(57)【要約】  本発明は、少なくとも１つのリポソームを含む眼科用医薬組成物、および高い薬物対脂質比およびカプセル化効率で眼疾患を治療するための治療薬に関する。また、本明細書に開示される眼科用医薬組成物を使用して、加齢性黄斑変性または糖尿病性眼疾患を治療するための方法も提供される。
2021536474.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
徐放性眼科用医薬組成物であって、
（ａ）二重層膜を含む少なくとも１つのリポソームであって、前記二重層膜は、少なくとも１つの脂質を含む、リポソーム；  
（ｂ）捕捉剤；および
（ｃ）眼の病気を治療するための治療薬、
を含み、脂質に対する治療薬のモル比は０．２以上である、徐放性眼科用医薬組成物。
【請求項２】
前記リポソームの平均粒径が約５０ｎｍ〜５００ｎｍである、請求項１に記載の徐放性眼科用医薬組成物。
【請求項３】
前記二重層膜がコレステロールをさらに含む、請求項１に記載の徐放性眼科用医薬組成物。
【請求項４】
前記二重層膜中の前記コレステロールのモルパーセンテージが約１５〜約５５％である、請求項３に記載の徐放性眼科用医薬組成物。
【請求項５】
前記捕捉剤が、スクロースオクタ硫酸トリエチルアンモニウム、硫酸アンモニウム、リン酸アンモニウムおよびそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項１に記載の徐放性眼科用医薬組成物。
【請求項６】
前記スクロースオクタ硫酸トリエチルアンモニウムの濃度が約１０〜２００ｍＭである、請求項５に記載の徐放性眼科用医薬組成物。
【請求項７】
前記硫酸アンモニウムの濃度が約１００〜６００ｍＭである、請求項５に記載の徐放性眼科用医薬組成物。
【請求項８】
前記リン酸アンモニウムの濃度が約１００〜６００ｍＭである、請求項５に記載の徐放性眼科用医薬組成物。
【請求項９】
前記眼疾患を治療するための治療薬が受容体型チロシンキナーゼ阻害剤である、請求項１に記載の徐放性眼科用医薬組成物。
【請求項１０】
前記受容体型チロシンキナーゼ阻害剤が、スニチニブ、ニンテダニブ、アキシチニブ、イマチニブ、レンバチニブ、ソラフェニブ、バンデタニブ、レゴラフェニブおよびこれらの組合せから実質的になる群より選択される、請求項９に記載の徐放性眼科薬学的組成物。
【請求項１１】
前記眼疾患を治療するための治療薬が、約５０％より高いカプセル化効率でリポソーム中にカプセル化されている、請求項１に記載の徐放性眼科用医薬組成物。
【請求項１２】
前記眼疾患を治療するための方法であって、
徐放性眼科用医薬組成物を、それを必要とする対象に投与することを含み、前記眼科用医薬組成物は：
（ａ）二重層膜を含む少なくとも１つのリポソームであって、前記二重層膜は、少なくとも１つの脂質を含む、リポソーム；
（ｂ）捕捉剤；および
（ｃ）眼の病気を治療するための治療薬、
を含み、前記脂質に対する治療薬のモル比は、０．２以上である、方法。
【請求項１３】
前記対象の硝子体液中の治療薬の半減期が、前記対象の硝子体液中の遊離治療薬の半減期と比較して、少なくとも２倍、少なくとも５倍、少なくとも７．５倍、少なくとも１０倍、または少なくとも２０倍延長される、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記徐放性眼科用医薬組成物が、少なくとも１週間に１回、少なくとも２週間に１回、少なくとも１ヶ月に１回、または少なくとも３ヶ月に１回投与される、請求項１２に記載の方法。
【請求項１５】
前記徐放性眼科用医薬組成物が、注射または局所投与によって投与される、請求項１２に記載の方法。
【請求項１６】
前記注射が、硝子体内投与、脈絡膜上投与、網膜下投与または眼周囲投与を含む、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記局所投与が点眼剤または軟膏による、請求項１５に記載の方法。
【請求項１８】
前記眼疾患が加齢性黄斑変性または糖尿病性眼疾患である、請求項１２に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は２０１８年９月１０日に出願された米国特許出願第６２／７２９，０３８号の利益を主張し、その開示全体は、参照により本明細書に組み込まれる。
【０００２】
技術分野
本発明は、少なくとも１つの捕捉剤を使用して、脂質に対する高い薬物比および高い薬物カプセル化効率を有する徐放性眼科用医薬組成物に関する。眼科用医薬組成物の脂質に対する高い薬物比、高いカプセル化効率および徐放性プロファイルは、薬物投与の頻度を減少させ、対象のコンプライアンスを増加させ、治療結果を改善する。
【背景技術】
【０００３】
加齢黄斑変性症（ＡＭＤ）は、６０歳以上の人々における重度視力障害の主要原因である。ドライまたは湿性のいずれかとして記載されるＡＭＤには２つのサブタイプがある。８０％以上の対象にドライＡＭＤがみられ、これがウェットＡＭＤに進行し、重大な視力障害につながる可能性がある。ＡＭＤの病因はほとんど解明されておらず、遺伝的欠陥、酸化ストレス、炎症、脂質および炭水化物の代謝、ならびに環境因子が関与する多因子性である可能性が高い。ウェットＡＭＤの病態は、脈絡毛細管板からブルッフ膜を経て網膜色素上皮および光受容層への血管の増殖を特徴とする。最近の研究は、ＶＥＧＦ受容体チロシンキナーゼ阻害剤および／またはＰＤＧＦ受容体チロシンキナーゼ阻害剤を硝子体内注射することにより血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）および／または血小板由来成長因子（ＰＤＧＦ）経路を遮断することがＡＭＤの治療戦略の１つであることを示唆している。標的部位における受容体型チロシンキナーゼ阻害剤の治療濃度を維持し、硝子体内注射の頻度を最小限にすることが非常に望ましい。
【０００４】
薬物送達システムとしてのリポソームは、種々の薬物のための徐放性製剤を開発するために広く使用されてきた。リポソームへの薬物充填は受動的に（薬物はリポソーム形成の間にカプセル化される）、または遠隔／能動的に（リポソーム形成の間に膜貫通ｐＨ勾配またはイオン勾配を作り出し、次いで、薬物は、リポソーム形成の後に勾配から生成される駆動力によって充填される）（米国特許第５，１９２，５４９号および第５，９３９，０９６号）のいずれかで達成され得る。リポソームへの薬物充填の一般的な方法は文献において十分に実証されているが、少数の治療薬のみしか、高いカプセル化効率でリポソームに充填されていない。治療薬の物理的および化学的特性、例えば、親水性／疎水性特性、解離定数、溶解度および分配係数、脂質組成、捕捉剤、反応溶媒、および粒径を含むがこれらに限定されない種々の因子が、薬物対脂質比およびリポソームのカプセル化効率に影響を及ぼし得る（Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  Ｕ  Ｓ  Ａ．  ２０１４；  １１１（６）：  ２２８３−２２８８およびＤｒｕｇ  Ｍｅｔａｂ  Ｄｉｓｐｏｓ．２０１５；  ４３（８）：１２３６−４５）。
【０００５】
投与の頻度を減少させ、治療結果を改善するために、高い薬物対脂質比および高いカプセル化効率を有する徐放性眼科用製剤に対する満たされていない必要性が依然として存在する。本発明は、この必要性および他の必要性に対処する。
【発明の概要】
【０００６】
一実施形態では、徐放性眼科用医薬組成物が（ａ）二重層膜を含む少なくとも１つのリポソーム；（ｂ）捕捉剤；および（ｃ）眼疾患を治療するための治療薬を含み、二重層膜が少なくとも１つの脂質を含み、脂質に対する治療薬のモル比が約０．２以上である。
【０００７】
他の実施形態によれば、眼疾患を治療するための方法であって、本明細書に記載の徐放性眼科用医薬組成物を、それを必要とする対象に投与する工程を含む方法が提供される。例示的な実施形態では、眼疾患がＡＭＤまたは糖尿病性眼疾患である。
【０００８】
眼疾患の治療的および／または予防的処置のための医薬の製造における、本明細書に記載の徐放性眼科用医薬組成物の使用も提供される。
【０００９】
本明細書に記載の医薬組成物の治療有効量を含む、眼疾患を治療するための医薬がさらに提供される。
【００１０】
本特許で使用される用語「発明（invention）」、「発明（the invention）」、「本発明(this invention)」、および「本発明(the present invention)」は、本特許および以下の特許請求の範囲の主題のすべてを広く指すことを意図している。これらの用語を含む記述は、本明細書に記載される主題を限定するものではなく、以下の特許請求の範囲の意味または範囲を限定するものではないと理解されるべきである。この特許によってカバーされる本発明の実施形態は、この概要ではなく、以下の特許請求の範囲によって定義される。この概要は本発明の様々な態様の高レベルの概要であり、以下の詳細な説明のセクションでさらに説明される概念のいくつかを紹介する。この概要は、特許請求される主題の重要なまたは本質的な特徴を識別することを意図するものではなく、特許請求される主題の範囲を決定するために単独で使用されることを意図するものでもない。主題は、明細書全体、いくつかのまたはすべての図面、および各請求項の適切な部分を参照することによって理解されるべきである。
【００１１】
本発明の本質と利点とは以下の明細書および図面を参照しての説明から一層理解されよう。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】ウサギの硝子体液中の遊離スニチニブおよびリポソームのスニチニブ製剤ＡおよびＢの放出プロファイルを示す線グラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
発明の詳細な説明
上記および開示全体を通して使用されるように、以下の用語は本明細書中で別段の指示がない限り、単数形「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」は文脈が別段の指示がない限り、複数の参照を含む。
【００１４】
本明細書中のすべての数字は「約」によって修飾されたものとして理解され得る。本明細書中で使用されると、用語「約」は、指定された値の±１０％の範囲を指す。
【００１５】
「有効量」とは本明細書中で使用される場合、視力の変化、視力の暗い領域またはぼやけた領域、波状または歪んだように見える直線、低い光レベルでの読むことまたは詳細を見ることの困難さ、および眩しさに対する特別な感受性などの眼疾患（例えば、加齢性黄斑変性または糖尿病性眼疾患）の症状および徴候を減少させるための徐放性眼科用医薬組成物の用量を指す。「有効量」および「治療有効量」という用語は互換的に使用される。
【００１６】
本明細書で使用される「治療する」、「治療される」、または「治療」という用語は、予防的（preventative）（例えば、予防的(prophylactic)）、緩和的、および治癒的方法、使用または結果を含む。用語「治療(treatment)」または「治療(treatments)」は組成物または薬物を指すこともできる。本出願全体を通して、治療とは、眼疾患（例えば、加齢性黄斑変性症または糖尿病性眼疾患）の１つ以上の症状または徴候を軽減または遅延させる方法、または当技術分野で公知の技術によって検出される眼疾患の完全な改善を意味する。アート認知の方法は、加齢性黄斑変性または糖尿病性眼疾患およびそれらの症状を検出するために利用可能である。これらには視力検査、アムスラーグリッド検査、散瞳眼／眼底検査、光干渉断層撮影検査および蛍光眼底造影図が含まれるが、これらに限定されない。例えば、開示される方法は治療前の対象または対照対象と比較した場合に、対象において、加齢黄斑変性または糖尿病性眼疾患の１つ以上の症状が約１％減少する場合、治療であると考えられる。したがって、減少は、約１、５、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００％、またはその間の任意の量の減少であり得る。
【００１７】
本明細書で使用される「加齢黄斑変性」という用語は、既知または未知の様々な病因および原因の様々なタイプおよびサブタイプの加齢黄斑変性を包含する。
【００１８】
本明細書中で使用される用語「糖尿病性眼疾患」は、糖尿病性網膜症、糖尿病性黄斑浮腫、白内障および緑内障、または糖尿病によって引き起こされる任意の眼の状態を包含する。
【００１９】
用語「対象」は、加齢性黄斑変性症および／または糖尿病性眼疾患を含む眼疾患を患っている、または発症するリスクのある脊椎動物、または眼疾患の治療が必要であるとみなされる脊椎動物を指す。対象には、霊長類などの哺乳動物、より好ましくはヒトなどのすべての温血動物が含まれる。非ヒト霊長類も同様に対象である。対象という用語はネコ、イヌなどの飼いならされた動物、家畜（例えば、ウシ、ウマ、ブタ、ヒツジ、ヤギなど）および実験動物（例えば、マウス、ウサギ、ラット、アレチネズミ、モルモットなど）を含む。したがって、獣医学的使用および医学的製剤が、本明細書中で意図される。
【００２０】
リポソーム
用語「リポソーム」、「リポソームの」および関連する用語は、本明細書中で使用される場合、小胞を形成する１つ以上の二重層膜によって外部媒体から隔離された内部水性空間を特徴とする。特定の実施形態において、リポソームの内部水性空間は、トリグリセリドのような中性脂質、非水相（油相）、水−油エマルジョン、または非水相を含む他の混合物など、を実質的に含まない。リポソームの非限定的例には、平均直径が５０〜５００ｎｍ、５０〜４５０ｎｍ、５０〜４００ｎｍ、５０〜３５０ｎｍ、５０〜３００ｎｍ、５０〜２５０ｎｍ、５０〜２００ｎｍ、１００〜５００ｎｍ、１００〜４５０ｎｍ、１００〜４００ｎｍ、１００〜３５０ｎｍ、１００〜３００ｎｍ、１００〜２５０ｎｍまたは１００〜２００ｎｍの小さな単層小胞（ＳＵＶ）、大きな単層小胞（ＬＵＶ）、および多層小胞（ＭＬＶ）があり、これらは全て滅菌フィルターを通過することが可能である。
【００２１】
リポソームの二重層膜は典型的には少なくとも１つの脂質、すなわち、空間的に分離された疎水性および親水性ドメインを含む合成または天然起源の両親媒性分子によって形成される。脂質の例としては、リン脂質、ジグリセリド、ジ脂肪族（dialiphatic）糖脂質のようなジ脂肪族鎖脂質、スフィンゴミエリンおよびスフィンゴ糖脂質のような単一脂質、およびそれらの組合せが挙げられるが、これらに限定されない。本開示によるリン脂質の例としては、限定されるものではないが、１，２−ジラウロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＬＰＣ）、１，２−ジミリストイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＭＰＣ）、１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＰＰＣ）、１−パルミトイル−２−ステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＰＳＰＣ）、１−パルミトイル−２−オレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジルコリン（ＰＯＰＣ）、１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＳＰＣ）、１，２−ジオレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＯＰＣ）、水素化大豆ホスファチジルコリン（ＨＳＰＣ）、１，２−ジミリストイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホ−（１’−ｒａｃ−グリセロール）（ナトリウム塩）（ＤＭＰＧ）、１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホ−（１’−ｒａｃ−グリセロール）（ナトリウム塩）（ＤＰＰＧ）、１−パルミトイル−２−ステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホ−（１’−ｒａｃ−グリセロール）（ナトリウム塩）（ＰＳＰＧ）、１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホ−（１’−ｒａｃ−グリセロール）（ナトリウム塩）（ＤＳＰＧ）、１，２−ジオレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホ−（１’−ｒａｃ−グリセロール）（ＤＯＰＧ）、１，２−ジミリストイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホ−Ｌ−セリン（ナトリウム塩）（ＤＭＰＳ）、１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホ−Ｌ−セリン（ナトリウム塩）（ＤＰＰＳ）、１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホ−Ｌ−セリン（ナトリウム塩）（ＤＳＰＳ）、１，２−ジオレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホ−Ｌ−セリン（ＤＯＰＳ）、１，２−ジミリストイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスフェート（ナトリウム塩）（ＤＭＰＡ）、１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスフェート（ナトリウム塩）（ＤＰＰＡ）、１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスフェート（ナトリウム塩）（ＤＳＰＡ）、１，２−ジオレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスフェート（ナトリウム塩）（ＤＯＰＡ）、１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン（ＤＰＰＥ）、Ｎ−（カルボニル−メトキシポリエチレングリコール）−１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン（ＰＥＧ−ＤＰＰＥ）、１−パルミトイル−２−オレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン（ＰＯＰＥ）、１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン（ＤＳＰＥ）、Ｎ−（カルボニル−メトキシポリエチレングリコール）−１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホス���エタノールアミン（ＰＥＧ−ＤＳＰＥ）、１，２−ジオレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン（ＤＯＰＥ）、１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホ−（１’−ミオイノシトール）（アンモニウム塩）（ＤＰＰＩ）、１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホイノシトール（アンモニウム塩）（ＤＳＰＩ）、１，２−ジオレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホ−（１’−ミオイノシトール）（アンモニウム塩）（ＤＯＰＩ）、カルジオリピン、Ｌ−α−ホスファチジルコリン（ＥＰＣ）、およびＬ−α−ホスファチジルエタノールアミン（ＥＰＥ）などが挙げられる。いくつかの実施形態において、脂質は、１つ以上の上記脂質の脂質混合物、または１つ以上の上記脂質と、１つ以上の上記に列挙されていない他の脂質、膜安定剤または酸化防止剤との混合物である。
【００２２】
いくつかの実施形態では、二重層膜中の脂質のモルパーセントは約８５、８４、８３、８２、８１、８０、７９、７８、７７、７６、７５、７４、７３、７２、７１、７０、６９、６８、６７、６６、６５、６４、６３、６２、６１、６０、５９、５８、５７、５６、５５、５４、５３、５２、５１、５０、４９、４８、４７、４６、４５以下であるか、またはそれらの間の任意の値もしくは値の範囲（例えば、約４５〜８５％、約４５〜８０％、約４５〜７５％、約４５〜７０％、約５０〜８５％、約５０〜８０％、約５０〜７５％、約５０〜７０％、約５５〜８５％、約５５〜８０％、約５５〜７５％、または約５５〜７０％）である。
【００２３】
いくつかの実施形態では、二重層膜の脂質が第１の脂質と第２の脂質との混合物である。いくつかの実施形態では、第１の脂質はホスファチジルコリン（ＰＣ）、ＨＳＰＣ、ＤＯＰＣ、ＰＯＰＣ、ＤＳＰＣ、ＤＰＰＣ、ＤＭＰＣ、ＰＳＰＣおよびそれらの組み合わせから実質的になる群から選択され、第２の脂質はホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルグリセロール、ＰＥＧ−ＤＳＰＥ、ＤＰＰＧ、ＤＯＰＧおよびそれらの組み合わせから実質的になる群から選択される。他の実施形態では、二重層膜中の第一脂質のモルパーセントが約８４．９、８４．３、８４．１、８４、８３、８２、８１、８０、７９、７８、７７、７６、７５、７４、７３、７２、７１、７０、６９、６８、６７、６６、６５、６４、６３、６２、６１、６０、５９、５８、５７、５６、５５、５４、５３、５２、５１、５０、４９、４８、４７、４６、４５またはそれらの間の任意の値もしくは範囲（例えば、約４５〜８４，９％、約４５〜８０％、約４５〜７５％、約４５〜７０％、約５０〜８４．９％、約５０〜８０％、約５０〜７５％、約５０〜７０％または約５５〜７０％）であり、二重層膜中の第二脂質のモルパーセントは０．１〜約２０、１９、１８、１７、１６、１５、１４、１３、１２、１１、１０、９、８、７またはそれらの間の任意の値または範囲（例えば、約０．１〜２０％、約０．１〜１５％、約０．１〜１０％、約０．５〜２０％、約０．５〜１５％、約０．５〜１０％または約０．５〜７％）である。
【００２４】
リポソームの二重層膜は、さらにステロイド、好ましくはコレステロールの約５５モルパーセント未満を含む。特定の実施形態では、二重層膜中のステロイド（コレステロールなど）のモルパーセントが約１５〜５５％、約２０〜５５％、約２５〜５５％、約１５〜５０％、約２０〜５０％、約２５〜５０％、約１５〜４５％、約２０〜４５％、約２５〜４５％、約１５〜４０％、約２０〜４０％、または約２５〜４０％である。
【００２５】
例示的な一実施形態では、二重層膜中の脂質およびコレステロールのモルパーセントが約４５〜８５％：１５〜５５％、４５〜８０％：２０〜５５％または５０〜８５％：１５〜５０％である。別の例示的な実施形態では、二重層膜中の第１の脂質、第２の脂質およびコレステロールのモルパーセントは約４５〜８４．９％：０．１〜２０％：１５〜５５％、５０〜８０％：０．１％〜２０％：１５〜５０％または５５〜７５％：０．５〜２０％：２０〜４５％である。
【００２６】
リモートローディング
本明細書で使用される「リモートローディング」という用語は、多原子イオン勾配によって、リポソームの二重層膜を横切って外部媒体から内部水性空間に薬物を移動させる手順を含む薬物充填方法である。このような勾配は、少なくとも１つの多原子イオンをリポソームの内部水性空間に捕捉剤としてカプセル化し、カラム分離、透析または遠心分離などの公知の技術によって、リポソームの外部媒体をより低い多原子イオン濃度、例えば、純水、スクロース溶液および生理食塩水で外部媒体に置き換えることによって生成される。多原子イオン勾配が、リポソームの内部水性空間と外部媒体との間に生成され、治療薬をリポソームの内部水性空間に捕捉する。捕捉剤としての例示的な多原子イオンとしては硫酸塩、亜硫酸塩、リン酸塩、リン酸水素塩、モリブデン酸塩、炭酸塩および硝酸塩が挙げられるが、これらに限定されない。例示的な捕捉剤としては、硫酸アンモニウム、リン酸アンモニウム、モリブデン酸アンモニウム、スクロースオクタ硫酸アンモニウム、スクロースオクタ硫酸トリエチルアンモニウム、硫酸デキストラン、またはそれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。
【００２７】
一実施形態では、オクタ硫酸トリエチルアンモニウムの濃度が約１０〜２００ｍＭ、約５０〜約１５０ｍＭである。別の実施形態では、硫酸アンモニウムの濃度が約１００〜６００ｍＭ、約１５０〜約５００ｍＭ、約２００〜約４００ｍＭである。さらに別の実施形態では、リン酸アンモニウムの濃度が約１００〜約６００ｍＭ、約１５０〜約５００ｍＭ、約２００〜約４００ｍＭである。
【００２８】
本発明によれば、捕捉剤をカプセル化するリポソームは、現在知られているか、または後に開発される技術のいずれかによって調製することができる。例えば、ＭＬＶリポソームは捕捉剤を含む選択された脂質組成物の水和脂質フィルム、噴霧乾燥粉末または凍結乾燥ケーキによって直接形成することができ；ＳＵＶリポソームおよびＬＵＶリポソームは超音波処理、均質化、微小流動化または押出によってＭＬＶリポソームからサイズ分けすることができる。
【００２９】
医薬組成物
本発明は（ａ）二重層膜を含む少なくとも１つのリポソーム；（ｂ）捕捉剤；および（ｃ）眼疾患を治療するための治療薬を含み、この際、二重層膜が少なくとも１つの脂質を含み、脂質に対する治療薬のモル比が０．２以上である徐放性眼科用医薬組成物に関する。いくつかの実施形態では、脂質に対する治療薬のモル比が０．２以上約２０未満、約１５未満、約１０未満、約５未満である。
【００３０】
一実施形態では、徐放性医薬組成物が少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤、希釈剤、ビヒクル、担体、活性成分のための媒体、防腐剤、凍結保護剤またはそれらの組み合わせをさらに含む。例示的な一実施形態では、薬学的組成物中の二重層膜の重量パーセントは約０．１〜１５％であり；薬学的組成物中の捕捉剤の重量パーセントは約０．１〜１２％であり；薬学的組成物中の薬学的に許容される賦形剤（スクロース、ヒスチジン、塩化ナトリウムおよび超純水など）、希釈剤、ビヒクル、担体、活性成分のための媒体、防腐剤、凍結保護剤またはそれらの組み合わせの重量パーセントは約７５．０〜９９．９％である。
【００３１】
特定の実施形態では、眼疾患を治療するための治療薬が小分子（例えば、コルチコステロイドなどの抗炎症薬、またはＶＥＧＦもしくはＰＤＧＦとその同族受容体との間の相互作用を妨害する小分子）または核酸（例えば、ＶＥＧＦまたはＰＤＧＦに結合する核酸）である。一実施形態では、眼疾患を治療するための治療薬が眼疾患を治療するための受容体型チロシンキナーゼ阻害剤である。他の実施形態では、受容体型チロシンキナーゼ阻害剤として、限定されるものではないが、血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）受容体型チロシンキナーゼ阻害剤または血小板由来成長因子（ＰＤＧＦ）受容体型チロシンキナーゼ阻害剤が挙げられる。受容体型チロシンキナーゼ阻害剤の非限定的な例としては、スニチニブ、ニンテダニブ、アキシチニブ、イマチニブ、レンバチニブ、ソラフェニブ、バンデタニブ、およびレゴラフェニブが挙げられる。本発明の眼科用医薬組成物は半減期を延長し、標的部位における治療薬の治療濃度を維持し、したがって、治療効果を維持し、薬物投与の頻度を減少させる。
【００３２】
一態様では、特許請求される眼科用医薬組成物の徐放性プロファイルは、高い薬物（または治療薬）カプセル化効率による。医薬組成物のカプセル化効率は、少なくとも５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％または９０％である。
【００３３】
別の態様では、眼科用医薬組成物の徐放性プロファイルは、脂質に対するより高い薬物（または治療薬）モル比による。例示的な実施形態では、１つ以上の脂質に対する、眼疾患を治療するための治療薬のモル比は０．２０、０．２５、０．３、０．３５、あるいは０．２から１０、０．２から５、０．２から３、０．２から２．５、０．３から１０、０．３から５、０．３から３、０．３から２．５、０．３５から１０、０．３５から５、０．３５から３、または０．３５から２．５である。
【００３４】
さらに別の態様では、眼疾患を治療するための治療薬の半減期は、眼疾患を治療するための遊離治療薬の半減期と比較して、硝子体液において少なくとも２倍、少なくとも５倍、少なくとも７．５倍、少なくとも１０倍、または少なくとも２０倍延長される。
【００３５】
本発明はまた、眼疾患を治療する方法を提供し、該方法は本明細書に記載される徐放性眼科用医薬組成物の有効量を、それを必要とする対象に投与することを含み、それにより、対象における眼疾患の症状および／または徴候が低減される。眼疾患の非限定的な例としては、ＡＭＤおよび糖尿病性眼疾患が挙げられる。
【００３６】
本発明の一態様では、徐放性眼科用医薬組成物が硝子体内注射、脈絡膜上投与、網膜下投与または眼周囲投与などの注射用に製剤化される。徐放性眼科用医薬組成物はまた、局所投与のための点眼剤または軟膏として処方される。
【００３７】
本発明の徐放性眼科用医薬組成物の投与量は、実施形態に応じて当業者が決定することができる。単位用量または複数用量形態が企図され、各々は、特定の臨床設定において利点を提供する。本発明によれば、投与される徐放性眼科用医薬組成物の実際の量は、年齢、体重、治療される対象の状態、任意の既存の医学的状態、および医療専門家の裁量に従って変化し得る。
【００３８】
一実施形態では、本明細書に開示される徐放性眼科用医薬組成物が眼疾患を治療するための治療薬の有意な徐放性プロファイルを示す。例えば、治療薬は徐放性眼科用医薬組成物から減速またはより遅い速度で放出されるので、治療薬の治療濃度は少なくとも１６８時間、硝子体液などの標的部位で長期間にわたって維持される。徐放性眼科用医薬組成物は、投与頻度を週に１回、２週に１回、月に１回、２ヶ月に１回、３ヶ月に１回、４ヶ月に１回、５ヶ月に１回、または６ヶ月に１回に減少させるように開発される。
【実施例】
【００３９】
本発明の実施形態は、以下の実施例によって例示されるが、それらはその範囲に限定を課すものとして決して解釈されるべきではない。それどころか、本明細書の説明を読んだ後、本発明の精神から逸脱することなく当業者にそれ自体を示唆し得る、様々な他の実施形態、修正、およびそれらの同等物の対象となり得ることが明確に理解されるべきである。以下の実施例に記載される研究の間、特に断りのない限り、従来の手順に従った。
【００４０】
実施例１．捕捉剤を含有する空のリポソームの調製
空のリポソームを、脂質フィルム水和−押出法または溶媒注入法によって調製した。脂質膜水和法では、二重層膜成分（例えば、６６．７／３３．３のモルパーセントのＤＯＰＣ／コレステロール）を有機溶媒、例えば、クロロホルムおよびジクロロメタンに溶解した。有機溶媒をロータリーエバポレーター中、真空下で除去することにより、薄い脂質フィルムを形成した。乾燥脂質を、捕捉剤、３００ｍＭ硫酸アンモニウム（ＡＳ）中で、転移温度より高い温度で３０分間水和して、ＭＬＶを形成した。リン酸アンモニウム（ＡＰ）またはスクロースオクタ硫酸トリエチルアンモニウム（ＴＥＡ−ＳＯＳ）などの他の捕捉剤も使用した。溶媒注入法では、二重層膜成分（６６．７／３３．３のモルパーセントでのＤＯＰＣ／コレステロール）を有機溶媒に溶解し、次いで捕捉剤を含有する撹拌水溶液に注入してＭＬＶを形成した。押出後、カプセル化されていない捕捉剤を９．４％のスクロース溶液または０．９％のＮａＣｌに対する透析法または透析ろ過法によって除去して、空のリポソームの内側水相と外側水相との間に多原子イオン勾配を作り出した。
【００４１】
実施例２．リポソームのスニチニブ製剤の調製
１０．０ｍｇ／ｍＬのスニチニブ（ＬＣ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，  ＵＳＡ）、空のリポソーム（実施例１に従って調製した２０．０ｍＭの脂質を含む）、および４０ｍＭのヒスチジン緩衝液（ｐＨ７）を含む反応混合物を、４０℃で１５分間インキュベートした。Ｓｅｐｈａｄｅｘ（登録商標）  Ｇ−５０ファインゲル（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ，ＵＳＡ）または透析袋（Ｓｐｅｃｔｒｕｍ  Ｌａｂｓ，ＵＳＡ）を用いて、９．４％のスクロース液に対して反応混合物のカプセル化されていないスニチニブを除去し、リポソームのスニチニブ製剤を得た。カプセル化スニチニブ濃度およびリポソームのスニチニブ製剤の脂質濃度を、紫外／可視（ＵＶ／Ｖｉｓ）分光光度計を用いて測定し、リポソームのスニチニブ製剤の脂質に対する薬物モル比（Ｄ／Ｌ）を計算した。
【００４２】
カプセル化効率は、リポソームのスニチニブ製剤の脂質に対する薬物モル比（Ｄ／Ｌ）を、スニチニブの初期添加濃度を空のリポソームの脂質の初期添加濃度で割った、反応混合物の．名目上のＤ／Ｌと比較することによって計算した。粒度分布は動的光散乱装置（Ｚｅｔａｓｉｚｅｒ  Ｎａｎｏ−ＺＳ９０，  Ｍａｌｖｅｒｎ，  ＵＳＡ）により測定した。
【００４３】
捕捉剤として３００ｍＭ  ＡＳを使用して、リポソームのスニチニブ製剤は１．１８の最終Ｄ／Ｌ、９４．０％のカプセル化効率を有し、そしてリポソームの平均直径は、１８６．９ｎｍであった。
【００４４】
実施例３．種々の脂質組成物を用いたリポソームのスニチニブの調製
種々の二重層膜および種々の捕捉剤によって構成される空のリポソームを、実施例１に記載の方法に従って調製した。４．０ｍｇ／ｍＬのスニチニブまたはリンゴ酸スニチニブの初期充填濃度を、実施例２の手順に従って空のリポソームと混合した。表１は、異なる二重層膜および捕捉剤を有するリポソームの薬物充填プロファイルを示す。
【００４５】
【表１】
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【００４６】
実施例４．各種リポソーム受容体チロシンキナーゼ阻害剤製剤の調製
この実施例で使用したチロシンキナーゼ阻害剤には、アキシチニブ（ＬＣ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，  ＵＳＡ）およびメシル酸イマチニブ（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ，  ＵＳＡ）が含まれた。空のリポソームを実施例１に従って調製し、実施例２の充填手順に従って薬物を充填した。アキシチニブ充填研究のために、２ｍｇ／ｍＬのアキシチニブを含有する反応混合物、空のリポソーム（３００ｍＭ  ＡＳを含有する）および５０ｍＭクエンの酸緩衝液（ｐＨ  ４．０）を４０℃で３０分間インキュベートした。イマチニブ充填研究のために、２ｍｇ／ｍＬのメシル酸イマチニブを含有する反応混合物、空のリポソーム（３００ｍＭ  ＡＳを含有する）および２０ｍＭヒスチジン緩衝液（ｐＨ６．５）を２５℃で３０分間インキュベートした。カプセル化されていない薬物を、Ｓｅｐｈａｄｅｘ（登録商標）  Ｇ−５０ファインゲル（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ，ＵＳＡ）によって除去して、リポソームの受容体型チロシンキナーゼ阻害剤製剤を得た。リポソームの受容体型チロシンキナーゼ阻害剤製剤のＤ／Ｌ比を、実施例２の工程に従って計算した。表２は、異なる二重層膜および受容体型チロシンキナーゼ阻害剤を有するリポソームの薬物充填プロファイルを示す。
【００４７】
【表２】
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【００４８】
実施例５．リポソームスニチニブ製剤の徐放性プロファイル
ｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出システムを設定するために、（ａ）５０μＬの遊離スニチニブ、（ｂ）実施例２に従って調製した５０μＬのリポソームスニチニブ製剤Ａ（ＤＯＰＣ／コレステロール＝６６．７／３３．３および３００ｍＭのＡＳからなる二重層膜）、および（ｃ）実施例３に従って調製した５０μＬのリポソームのスニチニブ製剤Ｂ（ＨＳＰＣ／コレステロール＝６０／４０および７５ｍＭのＴＥＡ−ＳＯＳからなる二重層膜）を別々の透析バッグに入れた。各透析バッグは９５０μＬのウサギ硝子体液（Ｐｅｌ−Ｆｒｅｅｚ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ，  ＵＳＡ）を含み、次いで、透析バッグの両端を密封した。各透析バッグを、５０ｍＬの遠心管中のｐＨ７．４の２５ｍＬのＰＢＳに浸漬し、３７±１℃の水浴中で２４時間インキュベートした。インキュベーション後の指定された時点（１、２、４、６、２４、４８、１２２、１４６および１６８時間）で、各遠心管内の２５ｍＬのＰＢＳからの０．５ｍＬアリコートをサンプリングし、０．５ｍＬの新鮮なＰＢＳを添加して、サンプリングされたアリコートを補充した。各時点でのサンプリングしたアリコートの薬物濃度を高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）を用いて分析し、リポソーム組成物のｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出プロファイルを作成した。
【００４９】
図１を参照すると、遊離スニチニブ製剤からはスニチニブはすぐに透析バッグを通して放出され、６時間後にプラトーに達する一方、リポソームのスニチニブ製剤Ａからはスニチニブの２０％未満が１６８時間にわたって透析バッグを通して放出され、リポソームスニチニブ製剤Ｂからはスニチニブの１０％未満が１６８時間にわたって透析バッグを通して放出された。
【図１】
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【国際調査報告】
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