(57)【要約】本発明は、式（Ｉ）に示す化合物、又はその光学異性体、薬学的に許容可能な塩、水和物もしくは溶媒和物を開示し、そのうち、Ｒ１〜Ｒ１８は、それぞれ独立して、水素、重水素から選択され、且つ全てが水素ではない。本発明が提供する化合物及びその塩類、水和物又は溶媒和物は、ＦＡＫ阻害剤として抗癌薬の製造に用いることができる。また、本発明の化合物は、重水素化されていない対照化合物デファクチニブと比較して、代謝安定性及び薬物動態特性が著しく向上しており、使用において有望である。2021528370.tif 000046（Ｉ）【選択図】なし
2021528370.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）に示す化合物、又はその光学異性体、薬学的に許容可能な塩、水和物もしくは溶媒和物であって、
2021528370.tif 000039
（Ｉ）
Ｒ１〜Ｒ１８は、それぞれ独立して、水素、重水素から選択され、且つ全てが水素ではない化合物、又はその光学異性体、薬学的に許容可能な塩、水和物もしくは溶媒和物。
【請求項２】
前記化合物が式（ＩＩ）に示す構造を有することを特徴とする、請求項１に記載の化合物、又はその光学異性体、薬学的に許容可能な塩、水和物もしくは溶媒和物。
2021528370.tif 000040
（ＩＩ）
【請求項３】
前記化合物が式（ＩＩＩ）に示す構造を有することを特徴とする、請求項１に記載の化合物、又はその光学異性体、薬学的に許容可能な塩、水和物もしくは溶媒和物。
2021528370.tif 000041
（ＩＩＩ）
【請求項４】
前記化合物が式（ＩＶ）に示す構造を有することを特徴とする、請求項１に記載の化合物、又はその光学異性体、薬学的に許容可能な塩、水和物もしくは溶媒和物。
2021528370.tif 000042
（ＩＶ）
【請求項５】
前記化合物が式（Ｖ）に示す構造を有することを特徴とする、請求項１から４のいずれか１項に記載の化合物、又はその光学異性体、薬学的に許容可能な塩、水和物もしくは溶媒和物。
2021528370.tif 000043
（Ｖ）
【請求項６】
前記化合物が以下の化合物の１つであることを特徴とする、請求項１から５のいずれか１項に記載の化合物、又はその光学異性体、薬学的に許容可能な塩、水和物もしくは溶媒和物。
2021528370.tif 000044
2021528370.tif 000045
【請求項７】
前記薬学的に許容可能な塩が、前記化合物のリン酸塩、右旋性カンファースルホン酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、フッ化水素酸塩、硫酸塩、硝酸塩、ギ酸塩、酢酸塩、プロピオン酸塩、シュウ酸塩、マロン酸塩、コハク酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、乳酸塩、リンゴ酸塩、酒石酸塩、クエン酸塩、ピクリン酸塩、メタンスルホン酸塩、トルエンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、アスパラギン酸塩又はグルタミン酸塩であり、好ましくは塩酸塩であることを特徴とする、請求項１から６のいずれか１項に記載の化合物、又はその光学異性体、薬学的に許容可能な塩、水和物もしくは溶媒和物。
【請求項８】
請求項１から７のいずれか１項に記載の化合物、又はその光学異性体、薬学的に許容可能な塩、水和物もしくは溶媒和物の、癌治療の薬物の製造における使用。
【請求項９】
前記癌が膵臓癌、固形腫瘍、非小細胞肺癌、中皮腫、卵巣癌から選択されることを特徴とする、請求項８に記載の使用。
【請求項１０】
請求項１から７のいずれか１項に記載の化合物、又はその光学異性体、薬学的に許容可能な塩、水和物もしくは溶媒和物の、ＦＡＫ阻害剤の製造における使用。
【請求項１１】
癌治療の薬物であって、請求項１から７のいずれか１項に記載の化合物、又はその光学異性体、薬学的に許容可能な塩、水和物もしくは溶媒和物を活性成分とし、薬学的に許容可能な補助材料を加えて製造される製剤であることを特徴とする、癌治療の薬物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、重水素化デファクチニブ化合物及びその使用に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
デファクチニブ（Ｄｅｆａｃｔｉｎｉｂ、ＶＳ−６０６３）は、Ｖｅｒａｓｔｅｍ社によって開発され、経口投与により効果を発揮する選択的ＦＡＫ阻害剤であって、構造式は
2021528370.tif 000003
【０００３】
であり、現在臨床試験が進められている。
【０００４】
重水素化薬物とは、薬物分子中の一部の水素原子が重水素に置換されたものを指す。重水素は、薬物分子中の形状及び体積が水素に近いことから、重水素化薬物においては、通常、元の薬物の体外生物活性及び選択性が留保されている。また、Ｃ−Ｄ結合はＣ−Ｈ結合よりも安定しているため、重水素化薬物の代謝反応の過程でＣ−Ｄ結合が破断しにくく、半減期が延びる可能性がある。
【０００５】
しかし、生物システムの代謝過程は複雑であるため、薬物の生物体内での薬物動態特性は、様々な要因による影響を受け、複雑になる。重水素化薬物の薬物動態特性は、対応する非重水素化薬物と比較して、非常に偶然に且つ予測不能に変化する。また、ある部位は重水素化されても半減期を延ばすことができず、逆に半減期を短くする可能性があり（Ｓｃｏｔｔ  Ｌ．Ｈａｒｂｅｓｏｎ，Ｒｏｇｅｒ  Ｄ．Ｔｕｎｇ．Ｄｅｕｔｅｒｉｕｍ  ｉｎ  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ａｎｄ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，Ｐ４０５−４０６。）、その薬物動態特性が劣化してしまう。一方、薬物分子の特定位置の水素を重水素で置換することもまた非常に困難である。そのため、薬物の重水素化に適した部位はわかりにくく、重水素化の効果も予測できない。
【０００６】
従って、デファクチニブ化合物に対して重水素化を行い、より良好な薬物動態特性を備えた、投与量及び代謝産物の毒性や副作用が低減された重水素化薬物を得ることは、より効果的で安全な新薬を得るために重要である。
【発明の概要】
【０００７】
本発明の目的は、より良好な代謝安定性及び薬物動態特性を備えた、癌治療のための効果的且つ安全な新薬を提供することである。
【０００８】
本発明は、先ず、式（Ｉ）に示す化合物、又はその光学異性体、薬学的に許容可能な塩、水和物もしくは溶媒和物を提供し、
2021528370.tif 000004
【０００９】
（Ｉ）
Ｒ１〜Ｒ１８は、それぞれ独立して、水素、重水素から選択され、且つ全てが水素ではない。
【００１０】
さらに、前記化合物は式（ＩＩ）に示す構造を有する。
2021528370.tif 000005
【００１１】
（ＩＩ）
さらに、前記化合物は式（ＩＩＩ）に示す構造を有する。
2021528370.tif 000006
【００１２】
（ＩＩＩ）
さらに、前記化合物は式（ＩＶ）に示す構造を有する。
2021528370.tif 000007
【００１３】
（ＩＶ）
さらに、前記化合物は式（Ｖ）に示す構造を有する。
2021528370.tif 000008
【００１４】
（Ｖ）
さらに、前記化合物は以下の化合物の１つである。
2021528370.tif 000009
【００１５】
2021528370.tif 000010
【００１６】
さらに、前記薬学的に許容可能な塩は、前記化合物のリン酸塩、右旋性カンファースルホン酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、フッ化水素酸塩、硫酸塩、硝酸塩、ギ酸塩、酢酸塩、プロピオン酸塩、シュウ酸塩、マロン酸塩、コハク酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、乳酸塩、リンゴ酸塩、酒石酸塩、クエン酸塩、ピクリン酸塩、メタンスルホン酸塩、トルエンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、アスパラギン酸塩又はグルタミン酸塩であり、好ましくは塩酸塩である。
【００１７】
本発明は、前記化合物、又はその光学異性体、薬学的に許容可能な塩、水和物もしくは溶媒和物の、癌治療の薬物の製造における使用をさらに提供する。
【００１８】
さらに、前記癌は膵臓癌、固形腫瘍、非小細胞肺癌、中皮腫、卵巣癌から選択される。
【００１９】
本発明は、前記化合物、又はその光学異性体、薬学的に許容可能な塩、水和物もしくは溶媒和物の、ＦＡＫ阻害剤の製造における使用をさらに提供する。
【００２０】
本発明は癌治療の薬物をさらに提供し、前記薬物は前記化合物、又はその光学異性体、薬学的に許容可能な塩、水和物もしくは溶媒和物を活性成分とし、薬学的に許容可能な補助材料を加えて製造される製剤である。
【００２１】
実験により、本発明が提供する化合物及びその塩類、水和物又は溶媒和物は、ＦＡＫ阻害剤として抗癌薬の製造に用いることができると証明された。また、本発明の化合物は、重水素化されていない対照化合物デファクチニブと比較して、代謝安定性及び薬物動態特性が著しく向上しており、使用において有望である。
【００２２】
本明細書において、「重水素化」とは、化合物又は基における１つ又は複数の水素が重水素によって置換されることを指す。重水素化は、一置換、二置換、多置換又は全置換であってよい。他の好ましい例においては、重水素置換位置における重水素の重水素同位体含有量は、天然の重水素同位体含有量（０．０１５％）よりも多く、より好ましくは５０％以上、より好ましくは７５％以上、より好ましくは９５％以上、より好ましくは９７％以上、より好ましくは９９％以上、より好ましくは９９．５％以上である。
【００２３】
本明細書において、用語「本発明の化合物」とは、式（Ｉ）に示す化合物を指す。当該用語は、さらに、式（Ｉ）の化合物の各種光学異性体、薬学的に許容可能な塩、水和物又は溶媒和物を含む。
【００２４】
本明細書において、用語「薬学的に許容可能な塩」とは、本発明の化合物と酸又は塩基とで形成された、薬物としての使用に適した塩を指す。薬学的に許容可能な塩には、無機塩と有機塩が含まれる。一つの好ましい塩の種類としては、本発明の化合物と酸とで形成された塩がある。塩の形成に適した酸には、リン酸、右旋性カンファースルホン酸、塩酸、臭化水素酸、フッ化水素酸、硫酸、硝酸、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、マレイン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、ピクリン酸、メタンスルホン酸、トルエンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、アスパラギン酸又はグルタミン酸が含まれるが、これらに限定されない。
【００２５】
さらに、薬学的に許容可能な塩を形成する酸は塩酸である。
【００２６】
本明細書における薬学的に許容可能な補助材料とは、一定の生理活性を有するものの、当該成分の添加によって上記薬物組成物の疾病の治療過程における主導性が変わることはなく、補助的な効果のみが発揮されるものである。これらの補助的な効果は、当該成分の既知の活性を利用するに過ぎず、医薬分野において慣用されている補助的な治療法である。なお、上記補助成分を本発明の薬物組成物と組み合わせて使用する場合も、本発明の保護範囲に属する。
【００２７】
当然ながら、本発明の上記内容に基づき、当分野の一般的な技術的知識や慣用的手段に照らし、本発明の上記基本的な技術的思想を逸脱しないという前提において、他の様々な形態の修正、置換又は変更を行うことができる。
【００２８】
以下、実施例という形の具体的な実施形態によって、本発明の上記内容をさらに詳細に説明する。但し、これをもって、本発明の上記主題の範囲が以下の実施例に限定されると理解してはならない。本発明の上記内容に基づいて実現される技術は、いずれも本発明の範囲に属する。
【発明を実施するための形態】
【００２９】
本発明に使用される原料及び機器はすべて従来の製品であり、市販の製品を購入したものである。
【００３０】
以下の合成方法１又は２に記載のルートで、本発明の化合物を製造した。
【００３１】
合成方法１：
2021528370.tif 000011
【００３２】
合成方法２：
2021528370.tif 000012
【００３３】
実施例１．Ｎ−（トリデューテロメチル）−４−（（４−（（（３−（Ｎ−メチルメチルスルホニル）ピラジン−２−イル）メチル）アミノ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）ベンズアミド（化合物１）の合成
2021528370.tif 000013
【００３４】
（１）化合物ｔｅｒｔ−ブチル（４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（（３−（Ｎ−メチルメタンスルホンアミド）ピラジン−２−イル）メチル）アミノ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）ベンゾイル）（メチル）カルバメートの合成
2021528370.tif 000014
【００３５】
Ｎ−メチル−４−（（４−（（（３−（Ｎ−メチルメタンスルホニル）ピラジン−２−イル）メチル）アミノ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）ベンズアミド（２００．０ｍｇ，０．３９ｍｍｏｌ、即ち化合物１−１、成都恒匯化成医薬科技有限会社から購入）とＤＭＡＰ（１．３ｇ，１０．５７ｍｍｏｌ）を１０ｍＬのジクロロメタンに加え、（Ｂｏｃ）２Ｏ（１．７ｇ，７．８３ｍｍｏｌ）を滴下した。系を４５℃の油浴で２４ｈ還流させ反応させた。翌日、室温まで冷却し、ジクロロメタンとＨＣｌ（０．１Ｍ）溶液を加え、抽出し、その後静置して層分離させ、有機相を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧濾過後、回転蒸発により溶媒を除去し、カラムクロマトグラフィーで初期生成物を分離して、類白色の固体のｔｅｒｔ−ブチル（４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（（３−（Ｎ−メチルメタンスルホンアミド）ピラジン−２−イル）メチル）アミノ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）ベンゾイル）（メチル）カルバメート１３６．０ｍｇを得た。収率：４２．８％。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ８１１．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
【００３６】
（２）化合物ｔｅｒｔ−ブチル（４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（（３−（Ｎ−メチルメタンスルホンアミド）ピラジン−２−イル）メチル）アミノ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）（４−（メチルカルバモイル）フェニル）カルバメートの合成
2021528370.tif 000015
【００３７】
ｔｅｒｔ−ブチル（４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（（３−（Ｎ−メチルメタンスルホンアミド）ピラジン−２−イル）メチル）アミノ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）ベンゾイル）（メチル）カルバメート（１３６．０ｍｇ，０．１７ｍｍｏｌ）と、重水素化メチルアミン塩酸塩（１８９．０ｍｇ，２．６８ｍｍｏｌ）を秤取し、５ｍＬのアセトニトリルに加え、室温で撹拌した。そこにＤＢＵ（６１３．０ｍｇ，４．０３ｍｍｏｌ）をさらに加え、清澄化するまで徐々に溶解させた。その後、系を油浴に入れて、一晩還流させ反応させた。翌日、室温まで冷却し、回転蒸発により溶媒を除去した後、系にジクロロメタン及びＨＣｌ（０．１Ｍ）溶液を加え、激しく撹拌し、静置して層分離させ、精製水及び飽和食塩水それぞれで有機相を洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、回転蒸発により溶媒を除去し、Ｐｒｅｐ−ＴＬＣで分離精製して（ＰＥ／ＥＡ＝２：１）、白色の固体のｔｅｒｔ−ブチル（４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（（３−（Ｎ−メチルメタンスルホンアミド）ピラジン−２−イル）メチル）アミノ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）（４−（メチルカルバモイル）フェニル）カルバメート４２．０ｍｇを得た。収率：３５．３％。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ６１４．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
【００３８】
（３）化合物Ｎ−（トリデューテロメチル）−４−（（４−（（（３−（Ｎ−メチルメチルスルホニル）ピラジン−２−イル）メチル）アミノ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）ベンズアミド（化合物１）の合成
2021528370.tif 000016
【００３９】
ｔｅｒｔ−ブチル（４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（（３−（Ｎ−メチルメタンスルホンアミド）ピラジン−２−イル）メチル）アミノ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）（４−（メチルカルバモイル）フェニル）カルバメート（４２．０ｍｇ，０．０６ｍｍｏｌ）を２ｍＬのジクロロメタンに加え、室温で撹拌した（清澄化するまで溶解させることはできなかった）。その後、そこに０．１ｍＬのトリフルオロ酢酸を加えたところ、系が徐々に透明になって清澄化し、そのまま一晩室温で撹拌し反応させた。翌日、回転蒸発により溶媒を除去し、酢酸エチル及び飽和ＮａＨＣＯ３溶液を系に加え、激しく撹拌し、その後静置して層分離させ、測定したところ、水相のｐＨ値は約７〜８であった。有機層を水及び飽和食塩水それぞれで各２回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、回転蒸発により溶媒を除去して、類白色の固体のＮ−（トリデューテロメチル）−４−（（４−（（（３−（Ｎ−メチルメチルスルホニル）ピラジン−２−イル）メチル）アミノ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）ベンズアミド２４．０ｍｇを得た。収率：８０．０％。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ５１４．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
【００４０】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ９．８６（ｓ，１Ｈ），８．６９（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），８．５８（ｄ，Ｊ＝２．８Ｈｚ，１Ｈ），８．３２（ｓ，１Ｈ），８．１８（ｓ，１Ｈ），７．６７−７．５９（ｄｄ，Ｊ＝１９．６，８．８Ｈｚ，４Ｈ），７．４８−７．４５（ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ），５．００（ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，２Ｈ），３．２２（ｓ，３Ｈ），３．２０（ｓ，３Ｈ）。
【００４１】
実施例２．Ｎ−メチル−４−（（４−（（（３−（Ｎ−デューテロメチルメタンスルホンアミド）ピラジン−２−イル）メチル）アミノ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）ベンズアミド（化合物２）の合成
2021528370.tif 000017
【００４２】
（１）化合物Ｎ−デューテロメチルメタンスルホンアミドの合成
2021528370.tif 000018
【００４３】
メタンスルホニルクロリド（３．０ｇ，２６．１９ｍｍｏｌ）を秤取し、１００ｍＬの一口丸底フラスコに入れ、そこにジクロロメタンを加え（３０ｍＬ）、室温で撹拌して清澄化するまで溶解させた。その後、系を氷水浴に移し、降温・冷却しながら撹拌を続けた。１５ｍｉｎ後、系にゆっくりとトリエチルアミン（６．１ｇ，６０．２４ｍｍｏｌ）を添加し、添加終了後、系を保温しながら１０ｍｉｎ撹拌を続けた。次いで、系に、重水素化メチルアミン塩酸塩（２．０ｇ，２８．８１ｍｍｏｌ）を、回数を分けてゆっくりと加えた。完了後、氷浴を取り外し、系を室温に戻して一晩撹拌し反応させた。翌日、モニタリングにより反応の終了を確認し、回転蒸発により溶媒を除去し、系に酢酸エチル（３０ｍＬ）を加え、１０ｍｉｎ撹拌し、減圧濾過を行い、濾過ケークに対し少量の酢酸エチルで溶出を行った。濾液を合わせ、減圧濃縮により粗生成物を得た。その後カラムクロマトグラフィーで分離して、無色透明の油状液体のＮ−デューテロメチルメタンスルホンアミド２．１ｇを得た。収率：７１．４％。
【００４４】
（２）化合物Ｎ−（３−シアノピラジン−２−イル）−Ｎ−デューテロメチルメタンスルホンアミドの合成
2021528370.tif 000019
【００４５】
３−クロロピラジン−２−ニトリル（１．７ｇ，１２．４８ｍｍｏｌ）を秤取し、１００ｍＬの一口丸底フラスコに入れ、そこに４０ｍＬのアセトニトリルを加え、室温で撹拌して清澄化するまで溶解させた。その後、系に、炭酸セシウム（８．１ｇ，２４．９６ｍｍｏｌ）を、回数を分けてゆっくりと添加した。添加終了後、Ｎ−デューテロメチルメタンスルホンアミド（２．１ｇ，１８．７２ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（１０ｍＬ）に溶解させた溶液を系に滴下した。滴下終了後、系を８０℃の油浴に移し、還流させ撹拌して反応させた。３０ｍｉｎ後、ＴＬＣモニタリングにより、原料が完全に消費されたことを確認した。油浴を取り外し、系をそのまま室温まで冷却し、減圧濾過を行い、濾過ケークに対しアセトニトリル（１００ｍＬ）で複数回溶出を行った。濾液を合わせ、回転蒸発により溶媒を除去して粗生成物を得た。その後、カラムクロマトグラフィーで分離して、褐色の油状液体のＮ−（３−シアノピラジン−２−イル）−Ｎ−デューテロメチルメタンスルホンアミド１．１ｇを得た。収率：４２．３％。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ２３３．１（Ｍ＋Ｈ２Ｏ）＋。
【００４６】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ８．６５−８．６３（ｄｄ，Ｊ＝６．０，２．４Ｈｚ，２Ｈ），３．２６（ｓ，３Ｈ）。
【００４７】
（３）化合物Ｎ−（３−（アミノメチル）ピラジン−２−イル）−Ｎ−デューテロメチルメタンスルホンアミドの合成
2021528370.tif 000020
【００４８】
Ｎ−（３−シアノピラジン−２−イル）−Ｎ−デューテロメチルメタンスルホンアミド（４２ｍｇ，０．２０ｍｍｏｌ）を秤取し、２５ｍＬの一口丸底フラスコに入れ、４ｍＬのメタノール及び１ｍＬのアンモニア水を加え、室温で均一に撹拌した。その後、系にウェットのパラジウムカーボン（１０．０ｍｇ）を加え、系に対して水素ガス置換を行い、１０回繰り返した。完了後、系を室温で撹拌して反応させた。１ｈ後、モニタリングにより反応の終了を確認した。系に減圧濾過を行い、濾過ケークに対しメタノール（２５ｍＬ）を少量ずつ用いて複数回溶出を行い、濾液を合わせ、減圧濃縮により溶媒を除去し、メタノールを用いて、回転バンドにより系の残留水分を繰り返し除去し、淡黄褐色の油状液体のＮ−（３−（アミノメチル）ピラジン−２−イル）−Ｎ−デューテロメチルメタンスルホンアミドを得た。更なる精製はせずに、そのまま次の反応に使用した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ２２０．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【００４９】
（４）化合物ｔｅｒｔ−ブチル（４−（メチルカルバモイル）フェニル）カルバメートの合成
2021528370.tif 000021
【００５０】
４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）安息香酸（３．０ｇ，１２．６５ｍｍｏｌ）を秤取し、２５０ｍＬの一口丸底フラスコに入れ、そこに５０ｍＬのＤＭＦを加えて、室温で撹拌した。その後、系に、ＥＤＣＩ（４．８ｇ，２５．２９ｍｍｏｌ）、ＴＥＡ（４．５ｇ，４４．２８ｍｍｏｌ）、メチルアミン塩酸塩（１．３ｇ，１８．９８ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（１６．０ｍｇ，０．１３ｍｍｏｌ）を順に加えた。完了後、系を室温で一晩撹拌して反応させた。翌日、モニタリングにより、原料が完全に消費されたことを確認し、系に酢酸エチル（７０ｍＬ）及び水（５０ｍＬ）を加え、激しく撹拌し、静置して層分離させた後、水相を酢酸エチルで逆抽出し（２０ｍＬ＊３）、有機層を合わせ、水（２０ｍＬ＊３）及び飽和食塩水（３０ｍＬ）それぞれで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、回転蒸発により溶媒を除去して粗生成物を得た。その後、カラムクロマトグラフィーで分離して、類白色の固体のｔｅｒｔ−ブチル（４−（メチルカルバモイル）フェニル）カルバメート２．１ｇを得た。収率：６６．５％。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ２５１．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
【００５１】
（５）化合物４−アミノ−Ｎ−メチルベンズアミドトリフルオロ酢酸塩の合成
2021528370.tif 000022
【００５２】
ｔｅｒｔ−ブチル（４−（メチルカルバモイル）フェニル）カルバメート（５００ｍｇ，２．００ｍｍｏｌ）を秤取し、５０ｍＬの一口丸底フラスコに入れ、そこに１０ｍＬのジクロロメタンを加え、室温で撹拌した。その後、系にトリフルオロ酢酸（１ｍＬ）を加え、完了後、系を室温で一晩撹拌して反応させた。翌日、ＴＬＣにより、反応が終了したことが示された。濃縮により、溶媒及び過剰なトリフルオロ酢酸を除去し、系において完全に固体状になるまで、ジクロロメタンを用いて、回転バンドにより系の残留トリフルオロ酢酸を複数回除去し、類白色の固体の４−アミノ−Ｎ−メチルベンズアミドトリフルオロ酢酸塩（５１０ｍｇ）を得た。更なる精製はせずに、そのまま次の反応に使用した。
【００５３】
（６）化合物４−（（４−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）−Ｎ−メチルベンズアミドの合成
2021528370.tif 000023
【００５４】
２，４−ジクロロ−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン（４９９ｍｇ，２．３０ｍｍｏｌ）を秤取し、５０ｍＬの一口丸底フラスコに入れ、系に１，２−ジクロロエタン（５ｍＬ）及びｔｅｒｔ−ブタノール（５ｍＬ）を加え、室温で撹拌して清澄化するまで溶解させた。その後、系を氷水浴に移し、降温・冷却しながら撹拌を続けた。１５分後、系に臭化亜鉛（１．４ｇ，６．００ｍｍｏｌ）を加えた。完了後、系を氷水浴中で保温しながら３０ｍｉｎ撹拌を続けた。そして、系に前ステップで合成した４−アミノ−Ｎ−メチルベンズアミドトリフルオロ酢酸塩及びトリエチルアミン（６４８ｍｇ，６．４０ｍｍｏｌ）を添加した。添加終了後、氷浴を取り外し、系を室温で一晩撹拌して反応させた。翌日、モニタリングにより反応の終了を確認し、回転蒸発により溶媒を除去した後、系に酢酸エチル（３０ｍＬ）及び水（２０ｍＬ）を加え、激しく撹拌し、静置して層分離させた後、水層を酢酸エチルで逆抽出し（１０ｍＬ＊３）、有機相を合わせ、水（１５ｍＬ＊３）、飽和食塩水（１５ｍＬ）で順に洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧濃縮により粗生成物を得た。その後、カラムクロマトグラフィーで分離して、類白色の固体の４−（（４−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）−Ｎ−メチルベンズアミド２８０ｍｇを得た。収率：４２．３％。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ３３１．０（Ｍ＋Ｈ）＋。
【００５５】
（７）化合物Ｎ−メチル−４−（（４−（（（３−（Ｎ−デューテロメチルメタンスルホンアミド）ピラジン−２−イル）メチル）アミノ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）ベンズアミドの合成
2021528370.tif 000024
【００５６】
Ｎ−（３−（アミノメチル）ピラジン−２−イル）−Ｎ−デューテロメチルメタンスルホンアミド（６５．８ｍｇ，０．３０ｍｍｏｌ）を入れた２５ｍＬの一口丸底フラスコに、５ｍＬの１，２−ジクロロエタン及び５ｍＬのｔｅｒｔ−ブタノールを加え、室温で撹拌して清澄化するまで溶解させた。その後、系に４−（（４−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）−Ｎ−メチルベンズアミド（１００．０ｍｇ，０．３０ｍｍｏｌ）及びジイソプロピルエチルアミン（１１６．３ｍｇ，０．９０ｍｍｏｌ）を順に添加し、添加終了後、系を８０℃の油浴に移し、還流させ反応させた。８ｈ後、ＴＬＣモニタリングにより、原料が完全に消費されたことを確認した。加熱を停止し、系が室温まで冷却された後、回転蒸発により溶媒を除去して粗生成物を得た。その後、Ｐｒｅｐ−ＴＬＣにより分離精製して、類白色の固体のＮ−メチル−４−（（４−（（（３−（Ｎ−デューテロメチルメタンスルホンアミド）ピラジン−２−イル）メチル）アミノ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）ベンズアミド１２ｍｇを得た。収率：７．８％。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ５１４．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
【００５７】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ９．８３（ｓ，１Ｈ），８．６９（ｓ，１Ｈ），８．５９（ｓ，１Ｈ），８．３２（ｓ，１Ｈ），８．２０（ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ，１Ｈ），７．６８−７．６１（ｄｄ，Ｊ＝１４．４，８．４Ｈｚ，４Ｈ），７．４１−７．３９（ｔ，Ｊ＝４．４Ｈｚ，１Ｈ），５．０１（ｄ，Ｊ＝３．６Ｈｚ，２Ｈ），３．２０（ｓ，３Ｈ），２．７６（ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ，３Ｈ）。
【００５８】
実施例３．Ｎ−（トリデューテロメチル）−４−（（４−（（（３−（Ｎ−デューテロメチルメタンスルホンアミド）ピラジン−２−イル）メチル）アミノ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）ベンズアミド（化合物３）の合成
2021528370.tif 000025
【００５９】
（１）化合物ｔｅｒｔ−ブチル（４−（デューテロメチルカルバモイル）フェニル）カルバメートの合成
2021528370.tif 000026
【００６０】
４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）安息香酸（１．１ｇ，４．６４ｍｍｏｌ）を秤取し、１００ｍＬの一口丸底フラスコに入れ、２０ｍＬのＤＭＦを加え、室温で撹拌した。その後、系にＥＤＣＩ（１．３ｇ，６．９６ｍｍｏｌ）、ＴＥＡ（１．２ｇ，１１．６ｍｍｏｌ）、重水素化メチルアミン塩酸塩（３２７．２ｍｇ，４．６４ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（２８ｍｇ，０．２３ｍｍｏｌ）を順に加えた。完了後、系を室温で一晩撹拌して反応させた。翌日、モニタリングにより、原料が完全に消費されたことを確認し、系に酢酸エチル（３０ｍＬ）及び水（２０ｍＬ）を加え、激しく撹拌し、静置して層分離させた後、水相を酢酸エチルで逆抽出し（１５ｍＬ＊３）、有機層を合わせ、水（１５ｍＬ＊３）及び飽和食塩水（２０ｍＬ）それぞれで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、回転蒸発により溶媒を除去して粗生成物を得た。その後、カラムクロマトグラフィーで分離して、類白色の固体のｔｅｒｔ−ブチル（４−（デューテロメチルカルバモイル）フェニル）カルバメート９５３ｍｇを得た。収率：８１．２％。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ２５４．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
【００６１】
（２）化合物４−アミノ−Ｎ−デューテロメチルベンズアミドトリフルオロ酢酸塩の合成
2021528370.tif 000027
【００６２】
ｔｅｒｔ−ブチル（４−（デューテロメチルカルバモイル）フェニル）カルバメート（９５３．０ｍｇ，３．７６ｍｍｏｌ）を秤取し、５０ｍＬの一口丸底フラスコに入れ、そこに２０ｍＬのジクロロメタンを加え、室温で撹拌した。その後、系にトリフルオロ酢酸（５ｍＬ）を加え、完了後、系を室温で一晩撹拌して反応させた。翌日、ＴＬＣにより、反応が終了したことが示された。濃縮により溶媒及び過剰なトリフルオロ酢酸を除去し、系において完全に固体状になるまで、ジクロロメタンを用いて、回転バンドにより系の残留トリフルオロ酢酸を複数回除去した。類白色の固体の４−アミノ−Ｎ−デューテロメチルベンズアミドトリフルオロ酢酸塩（９４１ｍｇ）を得た。更なる精製はせずに、そのまま次の反応に使用した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ１５４．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【００６３】
（３）化合物４−（（４−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）−Ｎ−デューテロメチルベンズアミドの合成
2021528370.tif 000028
【００６４】
２，４−ジクロロ−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン（８９１．８ｍｇ，４．１１ｍｍｏｌ）を秤取し、１００ｍＬの一口丸底フラスコに入れ、系に１，２−ジクロロエタン（１０ｍＬ）及びｔｅｒｔ−ブタノール（１０ｍＬ）を加え、室温で撹拌して清澄化するまで溶解させた。その後、系を氷水浴に移し、降温・冷却しながら撹拌を続けた。１５分後、系に臭化亜鉛（２．３ｇ，１０．７１ｍｍｏｌ）を加えた。完了後、系を氷水浴中で保温しながら３０ｍｉｎ撹拌を続けた。そして、系に前ステップで合成した４−アミノ−Ｎ−デューテロメチルベンズアミドトリフルオロ酢酸塩及びトリエチルアミン（１．２ｇ，１１．４１ｍｍｏｌ）を添加した。添加終了後、氷浴を取り外し、系を室温で一晩撹拌して反応させた。翌日、モニタリングにより反応の終了を確認し、回転蒸発により溶媒を除去した後、系に酢酸エチル（５０ｍＬ）及び水（２０ｍＬ）を加え、激しく撹拌し、静置して層分離させた後、水層を酢酸エチルで逆抽出し（２０ｍＬ＊３）、有機相を合わせ、水（２０ｍＬ＊３）及び飽和食塩水（２０ｍＬ）それぞれで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧濃縮により粗生成物を得た。その後、カラムクロマトグラフィーで分離して、類白色の固体の４−（（４−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）−Ｎ−デューテロメチルベンズアミド４６７ｍｇを得た。収率：３９．２％。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ３３４．０（Ｍ＋Ｈ）＋。
【００６５】
（４）化合物Ｎ−デューテロメチル−４−（（４−（（（３−（Ｎ−デューテロメチルメタンスルホンアミド）ピラジン−２−イル）メチル）アミノ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）ベンズアミドの合成
2021528370.tif 000029
【００６６】
Ｎ−（３−（アミノメチル）ピラジン−２−イル）−Ｎ−デューテロメチルメタンスルホンアミド（４３．８ｍｇ，０．２０ｍｍｏｌ）を入れた２５ｍＬの一口丸底フラスコに、３ｍＬの１，２−ジクロロエタン及び３ｍＬのｔｅｒｔ−ブタノールを加え、室温で撹拌して清澄化するまで溶解させた。その後、系に４−（（４−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）−Ｎ−デューテロメチルベンズアミド（６６．７ｍｇ，０．２０ｍｍｏｌ）及びジイソプロピルエチルアミン（７７．６ｍｇ，０．６０ｍｍｏｌ）を順に添加し、添加終了後、系を８０℃の油浴に移し、還流させ撹拌して反応させた。８ｈ後、ＴＬＣモニタリングにより、原料が完全に消費されたことを確認した。加熱を停止し、系が室温まで冷却された後、回転蒸発により溶媒を除去して粗生成物を得た。その後、Ｐｒｅｐ−ＴＬＣによって分離精製し、類白色の固体のＮ−デューテロメチル−４−（（４−（（（３−（Ｎ−デューテロメチルメタンスルホンアミド）ピラジン−２−イル）メチル）アミノ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）ベンズアミド３５．５ｍｇを得た。収率：３４．４％。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ５１７．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
【００６７】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ９．８３（ｓ，１Ｈ），８．６９（ｄ，Ｊ＝２．８Ｈｚ，１Ｈ），８．５８（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），８．３１（ｓ，１Ｈ），８．１７（ｓ，１Ｈ），７．６７−７．６０（ｄｄ，Ｊ＝１５．４，８．６Ｈｚ，４Ｈ），７．４２−７．３９（ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ），５．００（ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，２Ｈ），３．２０（ｓ，３Ｈ）。
【００６８】
実施例４．Ｎ−デューテロメチル−４−（（４−（（（３−（Ｎ−デューテロメチルメタンスルホンアミド）ピラジン−２−イル）デューテロメチル）アミノ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）ベンズアミド（化合物５）の合成
2021528370.tif 000030
【００６９】
（１）化合物Ｎ−（３−（アミノデューテロメチル）ピラジン−２−イル）−Ｎ−デューテロメチルメタンスルホンアミドの合成
2021528370.tif 000031
【００７０】
Ｎ−（３−シアノピラジン−２−イル）−Ｎ−デューテロメチルメタンスルホンアミド（１００．０ｍｇ，０．４６ｍｍｏｌ）を秤取し、２５ｍＬの一口丸底フラスコに入れ、５ｍＬの重水素化メタノールを加え、室温で撹拌して清澄化するまで溶解させた。その後、系にウェットのパラジウムカーボン（重水処理を使用）（２０．０ｍｇ）及びトリエチルアミン（１８８．２ｍｇ，１．８６ｍｍｏｌ）を順に加え、系に重水素ガス置換を行い、１０回繰り返した。完了後、系を室温で撹拌して反応させた。７２ｈ後、モニタリングにより反応の終了を確認した。系に減圧濾過を行い、濾過ケークに対し重水素化メタノール（１０ｍＬ）を少量ずつ用いて複数回溶出を行い、濾液を合わせ、回転蒸発により溶媒を除去し、淡黄褐色の油状液体のＮ−（３−（アミノデューテロメチル）ピラジン−２−イル）−Ｎ−デューテロメチルメタンスルホンアミドを得た。更なる精製はせずに、そのまま次の反応に使用した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ２２２．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
【００７１】
（２）化合物Ｎ−デューテロメチル−４−（（４−（（（３−（Ｎ−デューテロメチルメタンスルホンアミド）ピラジン−２−イル）デューテロメチル）アミノ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）ベンズアミドの合成
2021528370.tif 000032
【００７２】
Ｎ−（３−（アミノデューテロメチル）ピラジン−２−イル）−Ｎ−デューテロメチルメタンスルホンアミド（２２．１ｍｇ，０．１０ｍｍｏｌ）を入れた２５ｍＬの一口丸底フラスコに、２ｍＬの１，２−ジクロロエタン及び２ｍＬのｔｅｒｔ−ブタノールを加え、室温で撹拌して清澄化するまで溶解させた。その後、系に４−（（４−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）−Ｎ−デューテロメチルベンズアミド（３３．４ｍｇ，０．１０ｍｍｏｌ）及びジイソプロピルエチルアミン（３０．６ｍｇ，０．３０ｍｍｏｌ）を順に添加し、添加終了後、系を８０℃の油浴に移し、還流させ反応させた。８ｈ後、ＴＬＣモニタリングにより、原料が完全に消費されたことを確認した。加熱を停止し、系が室温まで冷却された後、回転蒸発により溶媒を除去して粗生成物を得た。その後、Ｐｒｅｐ−ＴＬＣによって分離精製し、類白色の固体のＮ−デューテロメチル−４−（（４−（（（３−（Ｎ−デューテロメチルメタンスルホンアミド）ピラジン−２−イル）メチル）アミノ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）ベンズアミド８．１ｍｇを得た。収率：１５．６％。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ５１９．２（Ｍ＋Ｈ）＋。１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ９．８３（ｓ，１Ｈ），８．６９（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），８．５８（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），８．３１（ｓ，１Ｈ），８．１７（ｓ，１Ｈ），７．６７−７．６１（ｄｄ，Ｊ＝１５．２，８．８Ｈｚ，４Ｈ），７．３９（ｓ，１Ｈ），３．２０（ｓ，３Ｈ）。
【００７３】
以下の化合物を原料とし、化合物１〜３、５及び化合物３−３に類似の合成方法によって、本発明の化合物４、６〜１８を製造した：化合物Ａ、２−３、Ｂ、２−４、３−３、Ｎ−（３−（アミノメチル）ピラジン−２−イル）−Ｎ−メチルメタンスルホンアミド（参考文献：ＰＣＴ  Ｉｎｔ．Ａｐｐｌ．，２００８１２９３８０）、Ｎ−メチルメタンスルホンアミド、Ｎ−トリデューテロメチルメタンスルホンアミド、２，４−ジクロロ−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン、４−アミノ−３，５−ジデューテロ安息香酸（参考文献：Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｌａｂｅｌｌｅｄ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ  ａｎｄ  Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，５３（１１−１２），６６８−６７３；２０１０）、４−アミノ−２，６−ジデューテロ安息香酸（参考文献：Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｌａｂｅｌｌｅｄ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ  ａｎｄ  Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，５３（１１−１２），６６８−６７３；２０１０）。
【００７４】
以下、本発明の有益な効果を、試験例によって説明する。
【００７５】
試験例１．本発明の化合物の肝細胞ミクロソームにおける代謝安定性実験
第１ステップ：母液を以下の表１の成分比で調製した。
【００７６】
【表１】
2021528370.tif 000033
【００７７】
第２ステップ：２つの実験をそれぞれ以下のように進めた。
【００７８】
Ａ）還元型補酵素II（ＮＡＤＰＨ）を添加する：濃度が２０ｍｇ／ｍＬである肝ミクロソーム１０μＬ及び濃度が１０ｍＭであるＮＡＤＰＨ  ４０μＬをインキュベーション試験に加えた。肝ミクロソームの最終濃度は０．５ｍｇ／ｍＬ、ＮＡＤＰＨの最終濃度は１ｍＭであった。
【００７９】
Ｂ）ＮＡＤＰＨを添加しない：濃度が２０ｍｇ／ｍＬである肝ミクロソーム１０μＬ及び高純水４０μＬをインキュベーション試験に加えた。肝ミクロソームの最終濃度は０．５ｍｇ／ｍＬであった。
【００８０】
第３ステップ：２００μＭ濃度の陽性対照物質又は試験化合物４μＬを加えた後に、反応が開始した。本実験での陽性対照物質はベラパミル（Ｖｅｒａｐａｍｉｌ）とした。試験化合物の最終濃度は２μＭであった。
【００８１】
第４ステップ：０、１５、３０、４５、６０分の時点で、反応溶液からそれぞれ５０μＬを取り出した。反応液に４倍体積のアセトニトリルとＩＳ（１００ｎＭ濃度のアルプラゾラム（ａｌｐｒａｚｏｌａｍ）、２００ｎＭ濃度のラベタロール（ｌａｂｅｔａｌｏｌ）、２００ｎＭ濃度のカフェイン（ｃａｆｆｅｉｎｅ）及び２μＭ濃度のケトプロフェン（ｋｅｔｏｐｒｏｆｅｎ））を加えた。サンプルを３２２０グラムの重力で４０分間遠心機にかけた。上清液１００μＬに、１００μＬの高純水を加え、ＬＣ−ＭＳ／ＭＳで分析した。
【００８２】
第５ステップ：データ分析：抽出したイオンクロマトグラムからピーク面積を確定した。傾き値ｋは、親薬物の残存パーセントとインキュベーション時間曲線の自然対数の線形回帰によって決定した。
【００８３】
インビトロ半減期（ｉｎ  ｖｉｔｒｏ  ｔ１／２）は傾き値によって決定される。
2021528370.tif 000034
【００８４】
インビトロ固有クリアランス（ｉｎ  ｖｉｔｒｏ  ＣＬｉｎｔ、μＬ／ｍｉｎ／ｍｇを単位とする）は、以下の式（繰り返し測定の平均値）により、インビトロ半減期ｔ１／２（分間）から換算した。
2021528370.tif 000035
【００８５】
スケールアップ固有クリアランス（Ｓｃａｌｅ  ｕｐ  ＣＬｉｎｔ、ｍＬ／ｍｉｎ／ｋｇを単位とする）は、以下の式（繰り返し測定の平均値）により、インビトロ  ｔ１／２（分間）から換算した。
2021528370.tif 000036
【００８６】
マウス、ラット及びヒトの肝ミクロソームにおける代謝安定性の実験結果は表２を参照。
【００８７】
【表２】
2021528370.tif 000037
【００８８】
上記表に示すように、本発明の化合物１及び３の肝ミクロソームにおける代謝安定性は、いずれも非重水素化対照化合物デファクチニブよりも著しく向上したが、化合物２のラット及びヒトの肝ミクロソームにおける代謝安定性は、非重水素化対照化合物デファクチニブよりもやや劣っていた。本発明の化合物、特に化合物１、３は、より良好な代謝安定性を有することが示された。さらに、より良好な薬物動態、安全性及び有効性を有している可能性があり、以下の試験例においてさらに証明していく。
【００８９】
試験例２．本発明の化合物のラットにおける薬物動態
１）実験材料及び測定機器
ＬＣ−２０ＡＤ高速液体クロマトグラフシステム、日本ＳＨＩＭＡＤＺＵ（島津）社から購入
ＡＰＩ４０００トリプル四重極型質量分析計、アメリカＡｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍ社から購入
ＰｈｅｎｉｘＷｉｎｎｏｌｉｎ薬物動態ソフトウェア（Ｖｅｒｓｉｏｎ６．３）、米Ｃｅｒｔａｒａ社から購入
高速冷凍遠心機、Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃから購入
分析天秤、ザルトリウスから購入、ＳＥＣＵＲＡ２２５Ｄ−１ＣＮ
ＳＤラット、成都達碩実験動物有限会社から購入
Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）（Ｓｉｇｍａ）
カルボキシメチルセルロースナトリウム（ＣＭＣ−Ｎａ）及びヘパリン、成都科龍化工社から購入
２）実験方法及び結果
適量の薬物（プロトタイプ薬１０ｍｇに相当）を精密に秤取し、ＤＭＡ０．２５ｍｌを加えて溶解させた後、０．５％のＣＭＣ−Ｎａを５ｍｌまでゆっくりと加え、超音波及びボルテックスにより均一に混合した。調製した最終溶液を０．２ｍｌ取り、−２０℃で保存し、濃度測定に用いた。健康な成獣の雄のＳＤラット３匹（１８０〜２５０ｇ）を一晩絶食させた（飲水は自由）後に、強制経口により薬物を投与した。投与体積は５ｍｌ／ｋｇとした。投与前、及び投与後０．５、１、２、４、６、８、１２、２４ｈにおいて、眼窩後静脈叢から０．１ｍｌ採血し、４℃で５ｍｉｎ遠心機にかけて血漿を分離させ、−２０℃で保存し測定に備えた。次いで、ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ法により血漿中の測定対象化合物の濃度を測定した。
【００９０】
【表３】
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【００９１】
本発明の化合物は、非重水素化の対照化合物デファクチニブと比較して、より高いピーク血中濃度、より高い暴露量、より長い半減期を有しており、本発明が提供する化合物はより良好な薬物動態特性を有していることが分かる。癌治療における使用は有望である。
【００９２】
以上のように、本発明が提供する各種重水素化化合物及びその塩類、水和物又は溶媒和物は、ＦＡＫ阻害剤として抗癌薬の製造に用いることができる。また、本発明の化合物は、重水素化されていない対照化合物デファクチニブと比較して、代謝安定性及び薬物動態特性が著しく向上しており、使用において有望である。
【国際調査報告】
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