(57)【要約】  本発明は、キナーゼ活性の阻害剤である、式(I)の化合物、上記化合物を含む医薬製剤、並びにウイルス感染症及びウイルス感染症により引き起こされるか又は増悪する疾患の治療及び予防におけるそれらの使用に関する。2021510711.tif 000230（式中、R1、R2、R3、R4a、R4b、R4c、R5、W、X、Y及びZは、本明細書中で定義される。）【選択図】  なし
2021510711.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式(I)の化合物又はその製薬上許容される塩
【化１】
2021510711.tif 000224
(式中、
WはCであり、XはCであり、YはNであり、ZはCであるか；
WはCであり、XはNであり、YはCであり、ZはCであるか；
WはCであり、XはNであり、YはCであり、ZはNであるか；
WはNであり、XはCであり、YはCであり、ZはNであるか；又は
WはNであり、XはCであり、YはCであり、ZはCであり；
R1は、C1-4アルコキシ、-C(=O)N(R1aR1b)、-S(=O)2-N(R1aR1b)、-S(=O)2-R1c又は-S(=O)-R1cであり、ここで
R1aは、C1-3アルキル、ハロC1-3アルキル、ヒドロキシC1-3アルキル、C1-3アルコキシC1-3アルキル、テトラヒドロピラニル若しくはテトラヒドロフラニルであり；R1bは、H若しくはC1-3アルキルであるか、又はR1aとR1bは、それらが結合している窒素と一緒になって4〜7員の環(この環は、環炭素原子及び場合により1個の環酸素原子を含有し、ここで該環は、a) C1-3アルキル、ハロ、C1-3アルコキシ、ヒドロキシ、ヒドロキシC1-3アルキル及びオキソから選択される同一であっても異なっていてもよい1又は2個の基で場合により置換されているか、又はb) 非置換の4〜6員のシクロアルカン環又は非置換の4〜6員の飽和複素環式環にオルト縮合又はスピロ縮合している)を形成しており；R1cは、C1-3アルキル、C1-3アルコキシ、ヒドロキシ、ヒドロキシC1-3アルキル又はC1-3アルコキシC1-3アルキルであり；
R2は、H、C1-3アルキル、ハロ又は-O-R2aであり、ここでR2aは、H又は非置換の直鎖C1-3アルキル鎖(ここで1又は2個の鎖炭素原子は、場合により酸素原子で置換されている)であり；
R3は、H又はハロであり；
またここで
i) R4aは、H、C1-3アルキル若しくはハロであり；R4bは、C1-3アルキル、シクロプロピル若しくはヒドロキシC1-2アルキルであるか、又はR4aとR4bは、それらが結合している炭素と一緒になって、環炭素原子及び場合により環酸素原子を含有する非置換の3〜6員の飽和環(ここで該環は、1個のC1-3アルキル基又は1個のヒドロキシC1-2アルキル基で場合により置換されている)を形成しており；R4cは、OH、ヒドロキシメチル又はヒドロキシエチルであるか；
ii) R4aは、H、C1-3アルキル、ハロ又はOHであり；R4bは、H、C1-3アルキル又はハロであり；R4cは、オキセタニル、テトラヒドロフラニル及びテトラヒドロピラニルからなるリストから選択される非置換の環であるか、あるいは
iii) R4aはHであり、且つR4bとR4cは、それらが結合している炭素と一緒になって、オキセタン、テトラヒドロフラン又はテトラヒドロピランからなるリストから選択される非置換の環を形成している；
のいずれかであり、
R5は、
a) 1位において場合によりC1-3アルキル基で置換されており、且つ5位において場合によりメチル基で置換されているイミダゾール-2-イル；又は
b) 5位において場合によりC1-3アルキル基で置換されており、且つ4位において場合によりメチル基で置換されているピラゾール-1-イル
である)。
【請求項２】
化合物が、式(Ia)による化合物又はその製薬上許容される塩：
【化２】
2021510711.tif 000225
(式中、
XはN又はCであり、YはN又はCであり、ZはN又はCであり；ここでX及びYは、両方がNではあり得ないか、又は両方がCではあり得ず；ZがNである場合、XはNであり且つYはCであり；
R1は、C1-4アルコキシ、-C(=O)N(R1aR1b)、-S(=O)2-N(R1aR1b)、-S(=O)2-R1c又は-S(=O)-R1cであり、ここで
R1aは、C1-3アルキル、ハロC1-3アルキル、ヒドロキシC1-3アルキル又はC1-3アルコキシC1-3アルキルであり；R1bは、H若しくはC1-3アルキルであるか、又はR1aとR1bは、それらが結合している窒素と一緒になって4〜7員の環(この環は、環炭素原子及び場合により1個の環酸素原子を含有し、ここで上記の環は、a) C1-3アルキル、ハロ、C1-3アルコキシ、ヒドロキシ及びオキソから選択される同一であっても異なっていてもよい1又は2個の基で場合により置換されているか、あるいはb) 非置換の4〜6員のシクロアルカン環又は非置換の4〜6員の飽和複素環式環にオルト縮合又はスピロ縮合している)を形成しており；
R1cは、C1-3アルキル、C1-3アルコキシ、ヒドロキシ、ヒドロキシC1-3アルキル又はC1-3アルコキシC1-3アルキルであり；
R2は、H、C1-3アルキル、クロロ又は-O-R2aであり、ここでR2aは、H又は非置換の直鎖C1-3アルキル鎖(ここで1又は2個の鎖炭素原子は、場合により酸素原子で置換されている)であり；
R3は、H又はフルオロであり、
R4aは、H又はメチルであり；
R4bは、C1-3アルキル又はヒドロキシC1-2アルキルであり；
R5は、
c) 1位において場合によりC1-3アルキル基で置換されており且つ5位において場合によりメチル基で置換されているイミダゾール-2-イル；又は
d) 5位において場合によりC1-3アルキル基で置換されており且つ4位において場合によりメチル基で置換されているピラゾール-1-イル
である)
である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
i) R4aが、H、C1-3アルキル若しくはフルオロであり；R4bが、C1-3アルキル、シクロプロピル若しくはヒドロキシC1-2アルキルであるか、又はR4aとR4bが、それらが結合している炭素と一緒になって、環炭素原子及び場合により環酸素原子を含有する非置換の3〜6員の飽和環(ここで該環は、1個のC1-3アルキル基又は1個のヒドロキシC1-2アルキル基で場合により置換されている)を形成しており；R4cが、OH、ヒドロキシメチル又はヒドロキシエチルであるか；
ii) R4aが、H、C1-3アルキル、フルオロ又はOHであり；R4bが、H、C1-3アルキル又はフルオロであり；R4cが、オキセタニル、テトラヒドロフラニル及びテトラヒドロピラニルからなるリストから選択される非置換の環であるか、
あるいは
iii) R4aがHであり、且つR4bとR4cが、それらが結合している炭素と一緒になって、オキセタン、テトラヒドロフラン又はテトラヒドロピランからなるリストから選択される非置換の環を形成している、
請求項１に記載の化合物又はその製薬上許容される塩。
【請求項４】
R2が、H、C1-3アルキル、クロロ又は-O-R2aであり、ここでR2aは、H又は非置換の直鎖C1-3アルキル鎖(ここで1又は2個の鎖炭素原子は、場合により酸素原子で置換されている)であり；且つR3がH又はフルオロである、請求項１若しくは請求項２に記載の化合物又はその製薬上許容される塩。
【請求項５】
WがCであり、XがNであり、ZがCであり、YがCである、請求項３若しくは請求項４に記載の化合物又はその製薬上許容される塩。
【請求項６】
XがNであり、ZがCであり、YがCである、請求項２に記載の化合物又はその製薬上許容される塩。
【請求項７】
R1が、-C(=O)N(R1aR1b)又は-S(=O)2-R1cである、請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物又はその製薬上許容される塩。
【請求項８】
R1が、-C(=O)N(R1aR1b)である、請求項７に記載の化合物又はその製薬上許容される塩。
【請求項９】
R1aが、ヒドロキシC1-3アルキル又はテトラヒドロピラニルである、請求項１〜８のいずれか一項に記載の化合物又はその製薬上許容される塩。
【請求項１０】
R1aがヒドロキシC1-3アルキルである、請求項９に記載の化合物又はその製薬上許容される塩。
【請求項１１】
R1aが、3-ヒドロキシ-1-プロピル、2-ヒドロキシ-1-エチル又は3-ヒドロキシ-2-プロピルである、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の化合物又はその製薬上許容される塩。
【請求項１２】
R1bが、C1-3アルキルである、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の化合物又はその製薬上許容される塩。
【請求項１３】
R1bが、メチル又はエチルである、請求項１２に記載の化合物又はその製薬上許容される塩。
【請求項１４】
R2が、C1-3アルキル、クロロ又は-O-R2aである、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の化合物又はその製薬上許容される塩。
【請求項１５】
R2が、C1-3アルキル、クロロ又はメトキシである、請求項１４に記載の化合物又はその製薬上許容される塩。
【請求項１６】
R3がHである、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の化合物又はその製薬上許容される塩。
【請求項１７】
R4aがメチルである、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の化合物又はその製薬上許容される塩。
【請求項１８】
R4bが、C1-3アルキルである、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の化合物又はその製薬上許容される塩。
【請求項１９】
R4aがメチルであり、且つR4bがメチルである、請求項１〜１８のいずれか一項に記載の化合物又はその製薬上許容される塩。
【請求項２０】
R5が、1位において場合によりC1-3アルキル基で置換されており、且つ5位において場合によりメチル基で置換されているイミダゾール-2-イルである、請求項１〜１９のいずれか一項に記載の化合物又はその製薬上許容される塩。
【請求項２１】
R5が1-メチル-1H-イミダゾール-2-イルである、請求項１〜２０のいずれか一項に記載の化合物又はその製薬上許容される塩。
【請求項２２】
以下のものからなる群から選択される、請求項１に記載の化合物又はその製薬上許容される塩：
2-クロロ-N-エチル-N-(2-ヒドロキシエチル)-5-(5-(1-ヒドロキシエチル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)ベンズアミド(化合物15)；
5-(5-(2-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-N-(3-ヒドロキシプロピル)-N,2-ジメチルベンズアミド(化合物17)；
N-エチル-N-(2-ヒドロキシエチル)-5-(5-(2-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-2-メトキシベンズアミド(化合物19)；
(S)-N-(1-ヒドロキシプロパン-2-イル)-5-(5-(2-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-2-メトキシ-N-メチルベンズアミド(化合物20)；
5-(5-(2-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-2-メトキシ-N-メチル-N-(テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)ベンズアミド(化合物21)；
(S)-N-(1-ヒドロキシプロパン-2-イル)-5-(5-(2-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-N,2-ジメチルベンズアミド(化合物22)；
(R)-(2-(ヒドロキシメチル)ピロリジン-1-イル)(5-(5-(2-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-2-メチルフェニル)メタノン(化合物25)；
(S)-(5-(5-(2-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-2-メチルフェニル)(3-ヒドロキシピロリジン-1-イル)メタノン(化合物29)；
5-(5-(2-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-N-(3-ヒドロキシプロピル)-2-メトキシ-N-メチルベンズアミド(化合物32)；及び
(R)-(2-(ヒドロキシメチル)ピロリジン-1-イル)(5-(5-(2-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-2-メトキシフェニル)メタノン(化合物36)；
N-エチル-N-(2-ヒドロキシエチル)-5-(5-(2-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-2-メチルベンズアミド(化合物38)；
N-(2-ヒドロキシエチル)-5-(5-(2-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-N,2-ジメチルベンズアミド(化合物43)；
5-(5-(2-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-N,2-ジメチル-N-(テトラヒドロフラン-3-イル)ベンズアミド(化合物59)；
5-(5-(2-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-N-(2-ヒドロキシプロピル)-N,2-ジメチルベンズアミド、異性体1(化合物62)；
5-(5-(2-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-N-(2-ヒドロキシプロピル)-N,2-ジメチルベンズアミド、異性体2(化合物63)；
2-クロロ-N-(2-ヒドロキシエチル)-5-(5-(2-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-N-メチルベンズアミド(化合物37)；
N-((S)-1-ヒドロキシプロパン-2-イル)-5-(5-(1-ヒドロキシプロピル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン3-イル)-N,2-ジメチルベンズアミド、異性体1(化合物80)；
N-((S)-1-ヒドロキシプロパン-2-イル)-5-(5-(1-ヒドロキシプロピル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン3-イル)-N,2-ジメチルベンズアミド、異性体2(化合物81)；
5-(5-(1-ヒドロキシブタン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-N-(3-ヒドロキシプロピル)-N,2-ジメチルベンズアミド、異性体1(化合物66)；及び
5-(5-(1-ヒドロキシブタン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-N-(3-ヒドロキシプロピル)-N,2-ジメチルベンズアミド、異性体2(化合物67)。
【請求項２３】
以下の構造：
【化３】
2021510711.tif 000226
の5-(5-(2-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-N-(3-ヒドロキシプロピル)-N,2-ジメチルベンズアミド(化合物17)である、請求項１に記載の化合物又はその製薬上許容される塩。
【請求項２４】
以下の構造：
【化４】
2021510711.tif 000227
のN-エチル-N-(2-ヒドロキシエチル)-5-(5-(2-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-2-メトキシベンズアミド(化合物19)である、請求項１に記載の化合物又はその製薬上許容される塩。
【請求項２５】
以下の構造：
【化５】
2021510711.tif 000228
の5-(5-(2-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-2-メトキシ-N-メチル-N-(テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)ベンズアミド(化合物21)である、請求項１に記載の化合物又はその製薬上許容される塩。
【請求項２６】
(S)-N-(1-ヒドロキシプロパン-2-イル)-5-(5-(2-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-N,2-ジメチルベンズアミド(化合物22)
【化６】
2021510711.tif 000229
である、請求項１に記載の化合物又はその製薬上許容される塩。
【請求項２７】
療法において使用するための、請求項１〜２６のいずれか一項に定義される化合物又はその製薬上許容される塩。
【請求項２８】
ウイルス感染症の治療において使用するための、請求項１〜２６のいずれか一項に定義される化合物又はその製薬上許容される塩。
【請求項２９】
ウイルス感染症により引き起こされるか又は増悪する疾患の治療において使用するための、請求項１〜２６のいずれか一項に定義される化合物又はその製薬上許容される塩。
【請求項３０】
前記疾患がCOPDである、請求項２９に記載の使用のための、請求項１〜２６のいずれか一項に定義される化合物又はその製薬上許容される塩。
【請求項３１】
ウイルス感染症を治療する方法であって、請求項１〜２６のいずれか一項に定義される化合物又はその製薬上許容される塩を、それを必要とする患者に投与することを含む、前記方法。
【請求項３２】
ウイルス感染症により引き起こされるか又は増悪する疾患を治療する方法であって、請求項１〜２６のいずれか一項に定義される化合物又はその製薬上許容される塩を、それを必要とする患者に投与することを含む、前記方法。
【請求項３３】
請求項１〜２６のいずれか一項に定義される化合物又はその製薬上許容される塩、及び製薬上許容される賦形剤を含む医薬製剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、キナーゼ活性の阻害剤である化合物、上記化合物を含む医薬製剤、並びにウイルス感染症及びウイルス感染症により引き起こされるか又は増悪する疾患の治療及び予防におけるそれらの使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
ピコルナウイルス科のエンテロウイルス属の一本鎖プラス鎖RNAウイルスは、極めて深刻な病気を引き起こし得る多数のヒト病原体を包含する。例としては、ポリオウイルス、コクサッキーBウイルス(無菌性髄膜炎、心筋炎、膵炎及び非特異的発熱性疾患)、エンテロウイルス‐A71(無菌性髄膜炎、脳炎及び灰白髄炎様麻痺)、エンテロウイルス‐D68(急性弛緩性脊髄炎)及びパレコウイルス(心筋炎及び脳炎)などが挙げられる。エンテロウイルス感染症(コクサッキーウイルスA24変異株及びエンテロウイルス70型)は、大部分の急性出血性結膜炎(AHC)の原因であり、1969年から、AHCの多数回の流行及び及び3回のパンデミックがあった(Yin-Murphyら, British Journal of Ophthalmology, 1986, 70、869；Nilssonら, Journal of Virology, 2008 82, 3061)。しかしながら、エンテロウイルス感染症を経験する人々の大部分が罹患する病気はそれほど深刻ではない。風邪は、最も頻繁に起こるヒトの病気の1つであり、ほとんどの場合、別種のエンテロウイルスである、30〜50％の風邪を引き起こすヒトライノウイルス(HRV)に関連している。
【０００３】
HRV複製の至適温度は33〜35℃であり、上気道感染(URTI)、及びほとんどの場合軽度であり且つ医療介入なしで回復する病気を示す。しかしながら、UTRIは合併症を有する可能性があり、HRVは、滲出性中耳炎(慢性病を含む)に罹患している7歳未満の子供の約40％の中耳において(Papadopoulusら, Paediatric Allergy and Immunology, 2006：17：514)、急性気管支炎に罹患している291人の患者の26％の痰において(Parkら Plos One, 2016, 11, e0165553)、急性副鼻腔炎に罹患している34人の患者のうち15人から得られた上顎吸引物及び擦過ブラシ(brushing)において(Pitkaerantaら, Journal of Clinical Microbiology, 1997, 35, 1791及びClinical Infectious Diseasess, 2001 33, 909)、及び慢性ライノ副鼻腔炎のための機能的内視鏡的副鼻腔手術を経験している患者の29％において(Abshiriniら, Jundishapur Journal of Microbiology, 2015, 8、e20068)検出された。
【０００４】
肺の大サイズの気道及び中サイズの気道の温度もまた、HRV複製を可能とし(McFadden ER Jr,ら, J. Appl. Physiol., 1985, 58、564)、特定の患者群においては、感染は極めて深刻な病気を引き起こし得る。5歳未満の子供においては、ライノウイルス感染は入院につながる場合が多く(4.8症例/1000人の子供：Millerら, Journal of Infectious Diseasess, 2007；195, 773)、病気の重篤度は、呼吸器合胞体ウイルス(RSV)感染由来の病気の重篤度に類似し(McMillanら, Pediatric Infectious Diseases Journal, 1993, 12, 321)、多くの場合、細気管支炎及び肺炎につながる(Kellnerら, Acta Paediatrica Scandinavica, 1989, 78、390；McMillanら, Pediatric Infectious Diseases Journal, 1993, 12, 321；El-Sahlyら, Clinical Infectious Diseasess, 2000、31, 96；Jartti and Korppi, Pediatric Allergy and Immunology, 2011, 22, 350)。Asnerらによる研究(Influenza and Other espiratory Viruses, 2014, 8, 436)において、HRV/エンテロウイルスに感染した子供の大多数は、根底にある免疫抑制又は心肺併存症を有し、またHRV感染症の結果がこれらの症状を有する患者にとって特に重大であり得ることは、十分に確立されている(Anzuetoら, Chest, 2003, 123, 1664；Rotbart, Antivir. Res. 2002, 53, 83)。例えば、ライノウイルス感染症を有する22人の骨髄抑制された移植レシピエントのうち7人は致死的な肺炎を発症した(Ghoshら, Clinical Infectious Diseasess, 1999, 29, 528)。
【０００５】
エンテロウイルス感染症はまた、一般的に、発疹性皮疹も伴う(手足口病、湿疹コクサッキウム(eczema coxsackium)及び他の非定型発疹症：Hubischら, Pediatric Infectious Diseases Journal, 2014, 33, e92；Kormanら, Journal of the American Academy of Dermatology, 2017, 76, 538；Dragoら, Future Microbiology, 2017 12, 171)。
【０００６】
HRVは、喘息の増悪(成人において約25％の増悪、及び子供において約50％の増悪、Nicholsonら, BMJ, 1993, 307, 982；Johnstonら, BMJ., 199, 310,1225)、慢性閉塞性肺疾患(COPD)の増悪(20〜26％ Seemungalら, Am. J. Respir. Crit. Care Med., 2001, 164, 1618；Papiら, Am. J. Respir. Crit. Care Med., 2006, 173, 1114)に通常関連するウイルスであり、いずれの場合も、実験的なライノウイルス曝露は疾患を増悪することが示された(Zambranoら, J Allergy Clin Immunol., 2003, 111, 1008；Malliaら, Am. J. Respir. Crit. Care Med., 2011, 183, 734)。またライノウイルス感染症は、多くの場合、気管支拡張症の増悪(16〜25％：Kapurら Arch Dis Child 2014, 99, 749；Gao et al Chest 2015, 147, 1635)及び嚢胞性線維症(CF)の増悪(Etherington, J. Cystic Fibrosis 2014, 13, 49；Flightら Thorax, 2014, 69, 247)にも関連する。COPDにおいて、ウイルス感染症に関連する場合、CF及び気管支拡張症の増悪はより重篤であり(Papiら Am. J. Respir. Crit. Care Med., 2006, 173, 1114；Etherington, J. Cystic Fibrosis, 2014, 13, 49；Kapurら, Arch Dis Child, 2014, 99, 749)、いずれの場合も、増悪は、疾患進行及び生存率の低下の一因となる(Liouら, Am J Epidemiol., 2001, 153, 345；Soler-Catalunaら, Thorax, 2005, 60、925；Robertsら, Intern Med J., 2012 42, 129)。COPDのライノウイルス誘導性の増悪の大部分は、その後二次的な細菌感染症(Malliaら, Am. J. Respir. Crit. Care Med., 2012, 186, 1117；Georgeら, Eur Respir J., 2014；87)を伴う。さらに、HRVによる感染は、乳幼児の免疫系を喘息の表現型に向け得る因子の1つである(D. J. Jacksonら, Am. J. Respir. Crit. Care Med., 2008, 178, 667)。
【０００７】
HRVの社会経済的影響は甚大であり、その治療は、多くの場合、抗生物質の不適切な使用を含む。風邪は、米国において年間で少なくとも2500万人の仕事の欠勤、及びほぼ同数の学校の欠席の主な原因であると推定されている(Rotbart, Antivir. Res., 2002 53, 83)。米国において、風邪及び喘息のみの関連の合併症から生じる直接コスト及び間接コストは年間400億ドルに上ると推定されている(A. M. Fendrickら, Arch. Intern. Med., 2003, 163, 487)。
【０００８】
150超の遺伝子型を含む3種のHRV(A、B及びC)が存在する。HRV-A及びHRV-Cは最も一般的に検出され、後者のHRV-Cは、少なくとも小児喘息患者集団においてはより病原性の群であると考えられている(Pirallaら, Journal of Clinical Virology, 2009, 45, 311；Bizzintinoら, Eur. Respir. J., 2011, 37, 1037)。またHRVは、細胞侵入を媒介する細胞受容体に基づいて、3つの広範な群に分けることもできる。HRVの主要な群(血清型HRV-A及びBの約90％)は、ヒト細胞内接着分子(ICAM-1)との相互作用を介して宿主細胞に侵入する。残りの約10％のHRV-A及びHRV-Bウイルスは少数群を含み、細胞侵入のために低密度リポタンパク質受容体を利用する。さらに最近発見されたHRV-C種は、ヒトカドヘリン関連ファミリーメンバー3(CDHR3)に結合し、侵入を促進する。HRVは、受容体媒介性エンドサイトーシスを引き起こすことによって細胞に侵入し、エンドソームにおいて脱殻が起こる。血清型間の差は、身体が交差免疫を起こすことを妨げるだけでなく、ワクチン及び他のウイルス特異的な予防法及び治療法の開発を大きく妨げた。
【０００９】
ネイキッドHRV RNAゲノム(約8kb)は、正20面体構造の、VP1〜VP4と表される4つの構造タンパク質(それぞれ60コピー)で構成されるキャプシドで囲まれており、直径約30nmのウイルス粒子を生成する。HRV複製は、ウイルスRNA-依存性RNAポリメラーゼ、並びに複数のウイルス及び宿主細胞由来のアクセサリータンパク質を必要とする。HRVゲノムは単一のポリタンパク質として翻訳され、これは翻訳後に、最初に、ウイルスによりコードされるプロテアーゼにより3つのタンパク質へと切断され、これら自体が切断されて少なくとも11のタンパク質を生じる。ウイルスゲノム複製は、感染後早ければ1時間以内に開始することが可能であり、細胞死の際の、ほぼ100万個の完全に組み立てられたウイルス粒子の放出は、細胞侵入後早ければ4時間以内に起こり得る。
【００１０】
現在、ヒトにおける使用のために認可されている、根底にあるHRV感染症を治癒するための医薬は存在しない。HRVを直接攻撃するための数度の試みは、幾つかの明るい見通しを示している。4-[2-[1-(6-メチル-3-ピリダジニル)-4-ピペリジニル]-エトキシ]ベンゾエート(別名「ピロダビル(pirodavir)」として公知)は、キャプシド結合阻害剤として機能することができるが、溶解性、内因性切断、及びコストによる問題が、HRVに対する上記薬剤の効用を損なっている。プレコナリル(Pleconaril)(PICOVIR)は、HRV複製の阻害において有効であることが示されたが、米国FDAにより、安全性に対する著しい懸念に言及して拒絶された。ルピントリビル(Rupintrivir)(ウイルス3Cプロテアーゼ阻害剤)は、ヒトにおける実験的HRV曝露研究においては有効であったが、天然のHRV感染症に対しては無効であった(Bauerら, Current Opinion in Virology, 2017, 24, 1)。特定のイミダゾピラジン類は、HRV及び他のウイルスに対する有効な抗ウイルス剤であると示唆されており；それらの作用機序は不明であるが、それらのサイクリン依存性キナーゼに対する効果によるものではないと示唆されている(Macleodらによる米国公開出願番号2011/0166147)。
【００１１】
上記の観点から、HRV及びエンテロウイルスに対する新たな治療薬の必要性が残されている。
【００１２】
他の相違点にも関わらず、プラス鎖RNAウイルスは、ウイルスゲノム複製のためRNA依存性RNA合成の単一の基礎的なステップに依存する。このステップはウイルス生活環のために必須であり、これらのウイルスは、多数の宿主タンパク質にさらに依存してRNA依存性RNAポリメラーゼ活性を開始及び維持することが知られている。宿主因子の相互作用なしには、ウイルスは複製/生存することができないであろう。従って、このクラスのウイルス感染症を阻害するための可能性のある治療的介入は、特にウイルス-宿主相互作用がウイルスゲノム複製に関するため、そのウイルス-宿主相互作用を遮断することでである。ウイルスには必須であるが、宿主には必須ではない宿主因子を操作することができれば、ウイルス増殖の有意な阻害を達成することができるであろう。さらに、重複性(redundancies)を有する宿主因子は、介入のための有望な標的となり得るであろう。このことは、多数のクラスのウイルスが一連の重複宿主因子の1つのみと相互作用する能力を進化させた場合に特に真実であろう。ウイルス複製を阻害するための潜在的な標的であると考えられる宿主タンパク質の1セットは、ホスファチジルイノシトール-4-キナーゼである。
【００１３】
ホスファチジルイノシトール-4-キナーゼ(PI4K)は、ホスファチジルイノシトールのリン酸化を触媒してホスファチジルイノシトール-4-リン酸(PI4P)を形成することにより、例えば膜融合、小胞輸送及び細胞シグナル伝達などの幾つかの細胞活動に関与する。配列、サイズ、組織、細胞局在及び機能などの幾つかの特性にわたって異なる、PI4Kの幾つかの公知のアイソフォームが存在する。
【００１４】
PI4Kの一種、ホスファチジルイノシトール(III型)-4-キナーゼ、ベータポリペプチド(PI4KIIIβ)(文献において、ホスファチジルイノシトール-4-キナーゼ(III)β、PtdIns 4-キナーゼ(III)β、PI4KB、Pi4kcb、及びPI4K92としても公知)は、主に、細胞小器官の構造的統合性を維持することが必要とされるゴルジ網においてPI4Pの局所集団を制御するために重要であると考えられている。この酵素は、核においても検出されている。最近の研究により、PI4KIIIβは、例えば、HRV、エンテロウイルス68及び71、ポリオウイルス、コクサッキーウイルス、C型肝炎ウイルス、ウシコブウイルス、アイチウイルス、風疹(rubella)及びその他などの幾つかのRNAウイルスのゲノム複製に関与していると示唆されている(例えば、van der Schaarら, Antimicrobial Agents and Chemotherapy, 57, 4971；Roulinら, Cell Host & Microbe, 2014, 16, 677；Melloら, Antimicrobial Agents and Chemotherapy 2014, 58,1546；Jun Sasakiら, EMBO J. 2011, 31, 754；Hsuら, CELL 2010、141, 799；Borawski, J. Virology 2009, 83,10058；Altan-Bonnetら, TIBS 2012, 37, 293を参照)。さらに、PI4KB触媒活性は、SARSコロナウイルス(重症急性呼吸器症候群に関与するウイルス)のスパイクタンパク質媒介性細胞侵入に必須であることが示されている(Yangら, J. Biol. Chem., 2012, 287, 8457)。SARSは、中国南部において始まった伝染病であり、2002年11月〜2003年7月の間に37ヵ国において8,448件の症例と774件の死亡に関与した。この大発生(outbreak)のマクロ経済的影響は、300億ドル〜1000億ドルであると推定された(Smith, Social Science & Medicine, 2006, 63, 3113)。PI4KBの阻害は、多くのRNAウイルス、特にプラス鎖RNAウイルスにおいてウイルス複製を実質的に低下させ得るであろうという共通認識が得られており、PI4KBを広範なスペクトルの抗ウイルス剤の開発における潜在的な標的として示唆している。さらに、PI4キナーゼは細菌の侵入及び複製に関与し、PI4KBは、細胞内の複製液胞を含むレジオネラへの細菌タンパク質の固定におけるPI4Pの役割を介して、レジオネラ・ニューモフィラ(Legionella pneumophila)感染に関与している(Claytonら PU PROGRESS IN LIPID RESEARCH 2013, 52 294)。従って、PI4KB阻害剤は、レジオネラ感染症に関連する急性肺損傷又は急性呼吸窮迫症候群に対する対抗策において有効である可能性があり、また恐らく、他の細胞内細菌感染症に対する治療として有効であり得る。
【００１５】
E.P. Keaneyら(Bioorg. Med. Chem. Lett., 24 (2014) 3714-3718)は、C型肝炎ウイルス感染症の可能性のある治療のためのPI4KIIIβ阻害剤としての2-アルキルオキサゾール誘導体について記載している。
【００１６】
I. Medrovaら(J. Med. Chem., 2017, 60(1), 100-118)は、ウイルス感染症の可能性のある治療のためのPI4KIIIβ阻害剤としての多数のイミダゾ[1,2-b]ピリダジン誘導体について記載している。
【００１７】
J. B. Shotwellは、「第27回抗ウイルス研究に関する国際会議(The 27th International Conference on Antiviral Research)」(米国ノースカロライナ州ラリーにおいて開催)に提出され、2014年5月12日に発表された「PI4KIIIβの新規な阻害剤クラスの化学的最適化：エンテロウイルス複製のための重要な宿主因子(Chemical Optimization of Novel Inhibitor Classes for PI4KIIIβ：A Critical Host Factor for Enterovirus Replication)」と題された一連のプレゼンテーションスライドにおいて、PI4KB受容体において活性な多数の化合物について記載した。これらのスライドは、主に経口投与用の化合物を対象としたものであり、ラットモデルにおける化合物GSK3180404A及び化合物GSK3159043Aの鼻腔内投与の肺に対する影響を示す、「既存の化学種をIN送達用に最適化した(Existing Chemotyopes were optimized for IN Delivery)」と題されたスライドを含んでいた。このスライドは、両化合物についての、肺組織における化合物の実質的な蓄積を示す。以下の「IN投与後に観察された鼻粘膜上皮の知見(Nasal Epithelian Findings Observed following IN dose)」と題されたスライドは、GSK3159043の鼻腔内投与から生じたラット鼻腔における潰瘍及びラット肺における細気管支上皮過形成を示す一連の組織画像を含む。
【００１８】
【化１】
2021510711.tif 000003
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１９】
【特許文献１】Macleodらによる米国公開出願番号2011/0166147
【非特許文献】
【００２０】
【非特許文献１】Yin-Murphyら, British Journal of Ophthalmology, 1986, 70、869
【非特許文献２】Nilssonら, Journal of Virology, 2008 82, 3061
【非特許文献３】Papadopoulusら, Paediatric Allergy and Immunology, 2006：17：514
【非特許文献４】Parkら Plos One, 2016, 11, e0165553
【非特許文献５】Pitkaerantaら, Journal of Clinical Microbiology, 1997, 35, 1791
【非特許文献６】Clinical Infectious Diseasess, 2001 33, 909
【非特許文献７】Abshiriniら, Jundishapur Journal of Microbiology, 2015, 8、e20068
【非特許文献８】McFadden ER Jr,ら, J. Appl. Physiol., 1985, 58、564
【非特許文献９】Millerら, Journal of Infectious Diseasess, 2007；195, 773
【非特許文献１０】McMillanら, Pediatric Infectious Diseases Journal, 1993, 12, 321
【非特許文献１１】Kellnerら, Acta Paediatrica Scandinavica, 1989, 78、390
【非特許文献１２】El-Sahlyら, Clinical Infectious Diseasess, 2000、31, 96
【非特許文献１３】Jartti and Korppi, Pediatric Allergy and Immunology, 2011, 22, 350
【非特許文献１４】Asnerら, Influenza and Other espiratory Viruses, 2014, 8, 436
【非特許文献１５】Anzuetoら, Chest, 2003, 123, 1664；Rotbart, Antivir. Res. 2002, 53, 83
【非特許文献１６】Ghoshら, Clinical Infectious Diseasess, 1999, 29, 528
【非特許文献１７】Hubischら, Pediatric Infectious Diseases Journal, 2014, 33, e92
【非特許文献１８】Kormanら, Journal of the American Academy of Dermatology, 2017, 76, 538
【非特許文献１９】Dragoら, Future Microbiology, 2017 12, 171
【非特許文献２０】Nicholsonら, BMJ, 1993, 307, 982
【非特許文献２１】Johnstonら, BMJ., 199, 310,1225
【非特許文献２２】Seemungalら, Am. J. Respir. Crit. Care Med., 2001, 164, 1618
【非特許文献２３】Papiら, Am. J. Respir. Crit. Care Med., 2006, 173, 1114
【非特許文献２４】Zambranoら, J Allergy Clin Immunol., 2003, 111, 1008
【非特許文献２５】Malliaら, Am. J. Respir. Crit. Care Med., 2011, 183, 73
【非特許文献２６】Kapurら Arch Dis Child 2014, 99, 749
【非特許文献２７】Gao et al Chest 2015, 147, 1635
【非特許文献２８】Etherington, J. Cystic Fibrosis 2014, 13, 49
【非特許文献２９】Flightら Thorax, 2014, 69, 247
【非特許文献３０】Liouら, Am J Epidemiol., 2001, 153, 345
【非特許文献３１】Soler-Catalunaら, Thorax, 2005, 60、925
【非特許文献３２】Robertsら, Intern Med J., 2012 42, 129
【非特許文献３３】Malliaら, Am. J. Respir. Crit. Care Med., 2012, 186, 1117
【非特許文献３４】Georgeら, Eur Respir J., 2014；87
【非特許文献３５】D. J. Jacksonら, Am. J. Respir. Crit. Care Med., 2008, 178, 667
【非特許文献３６】Rotbart, Antivir. Res., 2002 53, 83
【非特許文献３７】A. M. Fendrickら, Arch. Intern. Med., 2003, 163, 487
【非特許文献３８】Pirallaら, Journal of Clinical Virology, 2009, 45, 311
【非特許文献３９】Bizzintinoら, Eur. Respir. J., 2011, 37, 1037
【非特許文献４０】Bauerら, Current Opinion in Virology, 2017, 24, 1
【非特許文献４１】van der Schaarら, Antimicrobial Agents and Chemotherapy, 57, 4971
【非特許文献４２】Roulinら, Cell Host & Microbe, 2014, 16, 677
【非特許文献４３】Melloら, Antimicrobial Agents and Chemotherapy 2014, 58,1546
【非特許文献４４】Jun Sasakiら, EMBO J. 2011, 31, 754
【非特許文献４５】Hsuら, CELL 2010、141, 799
【非特許文献４６】Borawski, J. Virology 2009, 83,10058
【非特許文献４７】Altan-Bonnetら, TIBS 2012, 37, 293
【非特許文献４８】Yangら, J. Biol. Chem., 2012, 287, 8457
【非特許文献４９】Smith, Social Science & Medicine, 2006, 63, 3113
【非特許文献５０】Claytonら PU PROGRESS IN LIPID RESEARCH 2013, 52 294
【非特許文献５１】E.P. Keaneyら(Bioorg. Med. Chem. Lett., 24 (2014) 3714-3718
【非特許文献５２】I. Medrovaら(J. Med. Chem., 2017, 60(1), 100-118
【非特許文献５３】J. B. Shotwell, The 27th International Conference on Antiviral Research, Chemical Optimization of Novel Inhibitor Classes for PI4KIIIβ：A Critical Host Factor for Enterovirus Replication
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００２１】
強力なPI4KIIIβ阻害剤である化合物に対する必要性が存在する。また、選択的PI4KIIIβ阻害剤としても有用であり得る化合物に対する必要性も存在する。
【００２２】
特に、強力なPI4KIIIβ阻害剤であり、且つ、特に吸入経路又は鼻腔内経路により投与された場合、生体組織(例えば肺組織)中に実質的に蓄積しない化合物に対する必要性がある。このような化合物は、ウイルス感染症及びウイルス感染症により引き起こされるか又は増悪する疾患、特にHRV感染症の治療又は予防において有用であり得る。
【課題を解決するための手段】
【００２３】
本発明は、式(I)の化合物又はその製薬上許容される塩
【００２４】
【化２】
2021510711.tif 000004
(式中、R1、R2、R3、R4a、R4b、R4c、R5、W、X、Y及びZは、本明細書中に定義されている)
を対象とする。
【００２５】
式(I)の化合物は、PI4KIIIβの選択的阻害剤であることが示されており、ウイルス感染症及びウイルス感染症により引き起こされるか又は増悪する疾患の治療又は予防において有用であり得る。ウイルス感染症により特に引き起こされるか又は増悪する疾患としては、例えば、COPD、喘息、嚢胞性線維症、気管支拡張症及び鬱血性心不全などが挙げられる。さらに、ライノウイルス感染症により引き起こされるか又は増悪する疾患としては、細気管支炎、中耳炎、副鼻腔炎及び急性気管支炎などが挙げられる。同様に、ライノウイルス感染症は、子供、高齢者及び免疫抑制者において二次的な細菌感染症を引き起こし得る。このような二次的な細菌感染症は、肺炎を引き起こす可能性がある。
【００２６】
従って、本発明はさらに、ウイルス感染症及びウイルス感染症により引き起こされるか又は増悪する疾患の治療又は予防の方法を対象とする。この方法は、それを必要とする患者に、治療上有効量の式(I)の化合物又はその製薬上許容される塩を投与することを含む。
【００２７】
本発明はさらに、治療上有効量の式(I)の化合物又はその製薬上許容される塩及び1種以上の製薬上許容される賦形剤を含む医薬製剤を対象とする。
【００２８】
本発明はさらに、療法において使用するための、式(I)の化合物又はその製薬上許容される塩を対象とする。
【００２９】
本発明はさらに、ウイルス感染症及びウイルス感染症により引き起こされるか又は増悪する疾患の治療又は予防のための医薬の製造における、式(I)の化合物又はその製薬上許容される塩の使用を対象とする。
【発明を実施するための形態】
【００３０】
第1の態様によれば、本発明は、一般式(I)の化合物又はその製薬上許容される塩：
【００３１】
【化３】
2021510711.tif 000005
(式中、
WはCであり、XはCであり、YはNであり、ZはCであるか；
WはCであり、XはNであり、YはCであり、ZはCであるか；
WはCであり、XはNであり、YはCであり、ZはNであるか；
WはNであり、XはCであり、YはCであり、ZはNであるか；又は
WはNであり、XはCであり、YはCであり、ZはCであり；
R1は、C1-4アルコキシ、-C(=O)N(R1aR1b)、-S(=O)2-N(R1aR1b)、-S(=O)2-R1c又は-S(=O)-R1cであり、ここで
R1aは、C1-3アルキル、ハロC1-3アルキル、ヒドロキシC1-3アルキル、C1-3アルコキシC1-3アルキル、テトラヒドロピラニル若しくはテトラヒドロフラニルであり；R1bは、H若しくはC1-3アルキルであるか、又はR1aとR1bは、それらが結合している窒素と一緒になって4〜7員の環(この環は、環炭素原子及び場合により1個の環酸素原子を含有し、ここで上記の環は、a) C1-3アルキル、ハロ、C1-3アルコキシ、ヒドロキシ、ヒドロキシC1-3アルキル及びオキソから選択される同一であっても異なっていてもよい1又は2個の基で場合により置換されているか、又はb) 非置換の4〜6員のシクロアルカン環又は非置換の4〜6員の飽和複素環式環にオルト縮合又はスピロ縮合している)を形成しており；
R1cは、C1-3アルキル、C1-3アルコキシ、ヒドロキシ、ヒドロキシC1-3アルキル又はC1-3アルコキシC1-3アルキルであり；
R2は、H、C1-3アルキル、ハロ又は-O-R2aであり、ここでR2aは、H又は非置換の直鎖C1-3アルキル鎖(ここで1又は2個の鎖炭素原子は、場合により酸素原子で置換されている)であり；
R3は、H又はハロであり；
またここで
i) R4aは、H、C1-3アルキル若しくはハロであり；R4bは、C1-3アルキル、シクロプロピル若しくはヒドロキシC1-2アルキルであるか、又はR4aとR4bは、それらが結合している炭素と一緒になって、環炭素原子及び場合により環酸素原子を含有する非置換の3〜6員の飽和環(ここで上記環は、1個のC1-3アルキル基又は1個のヒドロキシC1-2アルキル基で場合により置換されている)を形成しており；R4cは、OH、ヒドロキシメチル又はヒドロキシエチルであるか；
ii) R4aは、H、C1-3アルキル、ハロ又はOHであり；R4bは、H、C1-3アルキル又はハロであり；R4cは、オキセタニル、テトラヒドロフラニル及びテトラヒドロピラニルからなるリストから選択される非置換の環であるか、あるいは
iii) R4aはHであり、且つR4bとR4cは、それらが結合している炭素と一緒になって、オキセタン、テトラヒドロフラン又はテトラヒドロピランからなるリストから選択される非置換の環を形成している；
のいずれかであり、
R5は、
a) 1位において場合によりC1-3アルキル基で置換されており且つ5位において場合によりメチル基で置換されているイミダゾール-2-イル；又は
b) 5位において場合によりC1-3アルキル基で置換されており且つ4位において場合によりメチル基で置換されているピラゾール-1-イル
である)
を提供する。
【００３２】
ある実施形態において、WはCであり、XはNであり、ZはCであり、YはCである。
【００３３】
さらなる実施形態において、R4cはOHである。
【００３４】
ある実施形態において、R2は、H、C1-3アルキル、クロロ又は-O-R2aであり、ここでR2aはH又は非置換の直鎖C1-3アルキル鎖(ここで1又は2個の鎖炭素原子は場合により酸素原子で置換されている)であり；且つR3はH又はフルオロである。
【００３５】
別の実施形態において、i) R4aはH、C1-3アルキル若しくはフルオロであり；R4bはC1-3アルキル、シクロプロピル若しくはヒドロキシC1-2アルキルであるか；又はR4aとR4bは、それらが結合している炭素と一緒になって、環炭素原子及び場合により環酸素原子を含有する非置換の3〜6員の飽和環(ここで上記環は、1個のC1-3アルキル基又は1個のヒドロキシC1-2アルキル基で場合により置換されている)を形成しており；R4cは、OH、ヒドロキシメチル又はヒドロキシエチルであり；
ii) R4aは、H、C1-3アルキル、フルオロ又はOHであり；R4bは、H、C1-3アルキル又はフルオロであり；R4cは、オキセタニル、テトラヒドロフラニル及びテトラヒドロピラニルからなるリストから選択される非置換の環であるか、あるいは
iii) R4aはHであり、且つR4bとR4cは、それらが結合している炭素と一緒になって、オキセタン、テトラヒドロフラン又はテトラヒドロピランからなるリストから選択される非置換の環を形成している。
【００３６】
ある実施形態において、本発明は、式(Ia)の化合物又はその製薬上許容される塩：
【００３７】
【化４】
2021510711.tif 000006
(式中、
XはN又はCであり、YはN又はCであり、ZはN又はCであり；ここでX及びYは、両方がNではあり得ないか、又は両方がCではあり得ず；ZがNである場合、XはNであり且つYはCであり；
R1は、C1-4アルコキシ、-C(=O)N(R1aR1b)、-S(=O)2-N(R1aR1b)、-S(=O)2-R1c又は-S(=O)-R1cであり、ここで
R1aは、C1-3アルキル、ハロC1-3アルキル、ヒドロキシC1-3アルキル若しくはC1-3アルコキシC1-3アルキルであり；R1bは、H若しくはC1-3アルキルであるか、又はR1aとR1bは、それらが結合している窒素と一緒になって、4〜7員の環(この環は、環炭素原子及び場合により1個の環酸素原子を含有し、ここで上記の環は、a) C1-3アルキル、ハロ、C1-3アルコキシ、ヒドロキシ及びオキソから選択される同一であっても異なっていてもよい1又は2個の基で場合により置換されているか、あるいはb) 非置換の4〜6員のシクロアルカン環又は非置換の4〜6員の飽和複素環式環にオルト縮合又はスピロ縮合している)を形成しており；
R1cは、C1-3アルキル、C1-3アルコキシ、ヒドロキシ、ヒドロキシC1-3アルキル又はC1-3アルコキシC1-3アルキルであり；
R2は、H、C1-3アルキル、クロロ又は-O-R2aであり、ここでR2aは、H又は非置換の直鎖C1-3アルキル鎖(ここで1又は2個の鎖炭素原子は場合により酸素原子で置換されている)であり；
R3は、H又はフルオロであり；
R4aは、H又はメチルであり；
R4bは、C1-3アルキル又はヒドロキシC1-2アルキルであり；
R5は、
a) 1位において場合によりC1-3アルキル基で置換されており、且つ5位において場合によりメチル基で置換されているイミダゾール-2-イル；又は
b) 5位において場合によりC1-3アルキル基で置換されており、且つ4位において場合によりメチル基で置換されているピラゾール-1-イル
である)
を提供する。
【００３８】
ある実施形態において、XはNであり、ZはCであり、YはCである。
【００３９】
ある実施形態において、化合物は、式(Ib)：
【００４０】
【化５】
2021510711.tif 000007
の化合物である。
【００４１】
別の実施形態において、化合物は、式(Ic)：
【００４２】
【化６】
2021510711.tif 000008
の化合物である。
【００４３】
ある実施形態において、R1は、-C(=O)N(R1aR1b)又は-S(=O)2-R1cである。さらなる実施形態において、R1は、-C(=O)N(R1aR1b)である。
【００４４】
ある実施形態において、R1aは、ヒドロキシC1-3アルキル又はテトラヒドロピラニルである。ある実施形態において、R1a は、ヒドロキシC1-3アルキルである。さらなる実施形態において、R1aは、3-ヒドロキシ-1-プロピル、2-ヒドロキシ-1-エチル、3-ヒドロキシ-2-プロピル又は4-テトラヒドロピラニルである。
【００４５】
ある実施形態において、R1bは、C1-3アルキルである。さらなる実施形態において、R1bは、メチル又はエチルである。
【００４６】
さらなる実施形態において、R1aはヒドロキシC1-3アルキルであり、且つR1bはC1-3アルキルである。さらなる実施形態において、R1aは3-ヒドロキシ-1-プロピルであり、且つR1bはC1-3アルキルである。さらなる実施形態において、R1aは3-ヒドロキシ-2-プロピルであり、且つR1bはC1-3アルキルである。さらなる実施形態において、R1aは3-ヒドロキシ-1-プロピルであり、且つR1bはメチルである。さらなる実施形態において、R1aは3-ヒドロキシ-2-プロピルであり、且つR1bはメチルである。さらなる実施形態において、R1aは2-ヒドロキシ-1-エチルであり、且つR1bはエチルである。さらなる実施形態において、R1aは3-ヒドロキシ-2-プロピルであり、且つR1bはメチルである。さらなる実施形態において、R1aは4-テトラヒドロピラニルであり、且つR1bはメチルである。
【００４７】
ある実施形態において、R1aとR1bは、それらが結合している窒素と一緒になって4〜7員の飽和環(この環は、環炭素原子及び場合により1個の環酸素原子を含有し、ここで上記環は、a) C1-3アルキル、ハロ、C1-3アルコキシ、ヒドロキシ、ヒドロキシC1-3アルキル及びオキソから選択される同一であっても異なっていてもよい1又は2個の基で場合により置換されているか、あるいはb) 非置換の4〜6員のシクロアルカン環又は非置換の4〜6員の飽和複素環式環にオルト縮合又はスピロ縮合している)を形成している。
【００４８】
ある実施形態において、R1aとR1bは、それらが結合している窒素と一緒になって、場合により置換されているピロリジン環を形成している。さらなる実施形態において、上記ピロリジン環は、C1-3アルキル、ヒドロキシ又はヒドロキシC1-3アルキルで置換されている。
【００４９】
ある実施形態において、R1cは、ヒドロキシC1-3アルキルである。さらなる実施形態において、R1cは、2-ヒドロキシ-1-エチルである。
【００５０】
ある実施形態において、R2は、C1-3アルキル、クロロ又は-O-R2aである。さらなる実施形態において、R2は、C1-3アルキル、クロロ又はメトキシである。
【００５１】
ある実施形態において、R3は、H又はフルオロであり；さらなる実施形態において、R3はHである。
【００５２】
ある実施形態において、R4aはメチルである。
【００５３】
ある実施形態において、R4bは、C1-3アルキルである。さらなる実施形態において、R4bは、メチル又はエチルである。さらなる実施形態において、R4bはメチルである。
【００５４】
ある実施形態において、R4aはメチルであり、且つR4bはメチルである。
【００５５】
ある実施形態において、R4aはC1-3アルキルであり、R4bはC1-3アルキルであり、R4cはOHである。さらなる実施形態において、R4aはメチルであり、R4bはメチルであり、R4cはOHである。
【００５６】
ある実施形態において、R5は、1位において場合によりC1-3アルキル基で置換されており、且つ5位において場合によりメチル基で置換されているイミダゾール-2-イルである。さらなる実施形態において、R5は、1-メチル-1H-イミダゾール-2-イルである。
【００５７】
ある実施形態において、化合物は、式(I)による化合物であり；
WはCであり、XはNであり、ZはCであり、YはCであり；
R1は、-C(=O)N(R1aR1b)又は-S(=O)2-R1cであり、ここでR1aはヒドロキシC1-3アルキルであり、且つR1bはC1-3アルキルであるか、又はR1aとR1bは、それらが結合している窒素と一緒になって、場合により置換されているピロリジン環を形成しており；R1cはヒドロキシC1-3アルキルであり；
R2は、C1-3アルキル、クロロ又は-O-R2aであり；
R3はHであり；
R4aはメチルであり；
R4bはC1-3アルキルであり；
R4cはOHであり；
R5は、1位において場合によりC1-3アルキル基で置換されており、且つ5位において場合によりメチル基で置換されているイミダゾール-2-イルである。
【００５８】
ある実施形態において、化合物は、式(I)による化合物であり：
WはCであり、XはNであり、ZはCであり、YはCであり；
R1は-C(=O)N(R1aR1b)であり、ここでR1aはヒドロキシC1-3アルキルであり且つR1bはC1-3アルキルであるか、又はR1aとR1bは、それらが結合している窒素と一緒になって、C1-3アルキル、ヒドロキシ又はヒドロキシC1-3アルキルで置換されている、場合により置換されているピロリジン環を形成しており；
R2は、C1-3アルキル、クロロ又はメトキシであり；
R3はHであり；
R4aはメチルであり；
R4bはメチルであり；
R4cはOHであり；
R5は1-メチル-1H-イミダゾール-2-イルである。
【００５９】
ある実施形態において、式(I)の化合物は、以下のものからなる群から選択される：
2-クロロ-N-エチル-N-(2-ヒドロキシエチル)-5-(5-(1-ヒドロキシエチル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)ベンズアミド(化合物15)；
5-(5-(2-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-N-(3-ヒドロキシプロピル)-N,2-ジメチルベンズアミド(化合物17)；
N-エチル-N-(2-ヒドロキシエチル)-5-(5-(2-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-2-メトキシベンズアミド(化合物19)；
(S)-N-(1-ヒドロキシプロパン-2-イル)-5-(5-(2-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-2-メトキシ-N-メチルベンズアミド(化合物20)；
5-(5-(2-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-2-メトキシ-N-メチル-N-(テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)ベンズアミド(化合物21)；
(S)-N-(1-ヒドロキシプロパン-2-イル)-5-(5-(2-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-N,2-ジメチルベンズアミド(化合物22)；
(R)-(2-(ヒドロキシメチル)ピロリジン-1-イル)(5-(5-(2-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-2-メチルフェニル)メタノン(化合物25)；
(S)-(5-(5-(2-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-2-メチルフェニル)(3-ヒドロキシピロリジン-1-イル)メタノン(化合物29)；
5-(5-(2-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-N-(3-ヒドロキシプロピル)-2-メトキシ-N-メチルベンズアミド(化合物32)；及び
(R)-(2-(ヒドロキシメチル)ピロリジン-1-イル)(5-(5-(2-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-2-メトキシフェニル)メタノン(化合物36)；
N-エチル-N-(2-ヒドロキシエチル)-5-(5-(2-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-2-メチルベンズアミド(化合物38)；
N-(2-ヒドロキシエチル)-5-(5-(2-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-N,2-ジメチルベンズアミド(化合物43)；
5-(5-(2-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-N,2-ジメチル-N-(テトラヒドロフラン-3-イル)ベンズアミド(化合物59)；
5-(5-(2-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-N-(2-ヒドロキシプロピル)-N,2-ジメチルベンズアミド、異性体1(化合物62)；
5-(5-(2-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-N-(2-ヒドロキシプロピル)-N,2-ジメチルベンズアミド、異性体2(化合物63)；
2-クロロ-N-(2-ヒドロキシエチル)-5-(5-(2-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-N-メチルベンズアミド(化合物37)；
N-((S)-1-ヒドロキシプロパン-2-イル)-5-(5-(1-ヒドロキシプロピル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-N,2-ジメチルベンズアミド、異性体1(化合物80)；
N-((S)-1-ヒドロキシプロパン-2-イル)-5-(5-(1-ヒドロキシプロピル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-N,2-ジメチルベンズアミド、異性体2(化合物81)；
5-(5-(1-ヒドロキシブタン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-N-(3-ヒドロキシプロピル)-N,2-ジメチルベンズアミド、異性体1(化合物66)；及び
5-(5-(1-ヒドロキシブタン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-N-(3-ヒドロキシプロピル)-N,2-ジメチルベンズアミド、異性体2(化合物67)；
又は上記のいずれかの製薬上許容される塩。
【００６０】
ある実施形態において、式(I)の化合物は、5-(5-(2-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-N-(3-ヒドロキシプロピル)-N,2-ジメチルベンズアミド(化合物17)又はその製薬上許容される塩
【００６１】
【化７】
2021510711.tif 000009
である。
【００６２】
ある実施形態において、式(I)の化合物は、N-エチル-N-(2-ヒドロキシエチル)-5-(5-(2-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-2-メトキシベンズアミド(化合物19)又はその製薬上許容される塩
【００６３】
【化８】
2021510711.tif 000010
である。
【００６４】
ある実施形態において、式(I)の化合物は、5-(5-(2-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-2-メトキシ-N-メチル-N-(テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)ベンズアミド(化合物21)又はその製薬上許容される塩
【００６５】
【化９】
2021510711.tif 000011
である。
【００６６】
ある実施形態において、式(I)の化合物は、(S)-N-(1-ヒドロキシプロパン-2-イル)-5-(5-(2-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-N,2-ジメチルベンズアミド(化合物22)又はその製薬上許容される塩
【化１０】
2021510711.tif 000012
である。
【００６７】
用語及び定義
「アルキル」は、非環式のアルカンからの水素原子の除去により誘導される一価の基である。例えば、C1-4アルキルは、1〜4個の炭素原子を含むアルキルである。アルキルは、直鎖であっても分岐鎖であってもよい。C1-4アルキルの例は、メチル、エチル、n-プロピル、n-ブチル、イソ-プロピル、イソ-ブチル、sec-ブチル及びtert-ブチルである。
【００６８】
アルコキシは、式「-O-R」の基であり、ここでRはアルキル(本明細書中上記に定義される)である。例えば、C1-4アルコキシは、1〜4個の炭素原子からなるアルコキシである。C1-4アルコキシの例は、メトキシ、エトキシ、n-プロポキシ、n-ブトキシ、イソ-プロポキシ、イソ-ブトキシ、sec-ブトキシ及びtert-ブトキシである。
【００６９】
ハロは、ハロゲン基、すなわちフルオロ、クロロ、ブロモ又はヨードを指す。
【００７０】
ハロアルキルは、1個以上のハロ(本明細書中上記に定義される)で置換されているアルキル(本明細書中上記に定義される)であり、このハロは同一であっても異なっていてもよい。例えば、ハロC1-3アルキルは、1〜3個の炭素原子からなるハロアルキルである。ハロC1-3アルキルの例は、モノフルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル及び1-クロロ-2-フルオロエチルである。
【００７１】
ヒドロキシアルキルは、1個以上のヒドロキシ置換基で置換されているアルキル(本明細書中上記に定義される)である。例えば、ヒドロキシC3アルキルは、式-(CH2)3OH(ここで「-」は、どの原子が式(I)の化合物に結合しているのかを示す)のヒドロキシC3アルキルである。
【００７２】
アルコキシアルキルは、1個以上のアルコキシ置換基で置換されているアルキル(本明細書中上記に定義される)である。例えば、C3アルコキシC2アルキルは、式-(CH2)2O(CH2)2CH3(ここで「-」は、どの原子が式(I)の化合物に結合しているのかを示す)のC3アルコキシC2アルキルである。
【００７３】
オキソは、式=Oの二価の基である。
【００７４】
4〜6員の飽和複素環式環は単環式であり、且つ環炭素原子と、窒素、酸素及び硫黄の群から選択される環ヘテロ原子とからなる。ある実施形態において、複素環式環は、1又は2個の環ヘテロ原子からなる。例は、ピロリジン、ジオキソラン、イミダゾリジン、ピラゾリジン、ピペリジン、ジオキサン、モルホリン、ジチアン、チオモルホリン及びピペラジンである。
【００７５】
4〜6員のシクロアルカン環は、いずれの環ヘテロ原子も含まず、飽和で単環式である。例は、シクロブタン、シクロペンタン及びシクロヘキサンである。
【００７６】
「オルト縮合環系」は、2個の原子と1つの結合のみを共有する2個の環、例えば
【００７７】
【化１１】
2021510711.tif 000013
を含む。
【００７８】
「スピロ縮合環系」は、同一の炭素に結合した2個の環、例えば：
【化１２】
2021510711.tif 000014
を含む。
【００７９】
基に関連して「置換されている」とは、基中の構成原子に結合している水素原子が置き換えられていることを示す。用語「置換されている」は、このような置換が、置換された原子及び置換基の許容される原子価に従い、且つ置換が安定な化合物をもたらす(すなわち、例えば転位、環化、又は脱離などの変換を自然には受けない化合物)という暗黙の仮定を含むことが理解されるべきである。特定の実施形態において、単一の原子は、このような置換が原子の許容される原子価に従う限り、2個以上の置換基で置換されていてもよい。好適な置換基は、それぞれの置換されている基又は場合により置換されている基について、本明細書中で定義されている。
【００８０】
「製薬上許容される」とは、健全な医学的判断の範囲内で、過剰な毒性、刺激、又は他の問題若しくは合併症を伴うことなくヒト及び動物の組織と接触させて使用するのに好適な、合理的な損益比に見合う化合物、物質、製剤及び剤形を指す。
【００８１】
本明細書及びそれに続く特許請求の範囲全体を通して、文脈が別段に必要としない限り、単語「含む(comprise)」、並びに「含む(comprises)」及び「含む(comprising)」などの変形は、言及される整数若しくはステップ又は整数の群の包含を意味するが、任意の他の整数若しくはステップ又は整数若しくはステップの群の除外は意味しないことが理解されるであろう。
【００８２】
式(I)及び式(Ia)の化合物並びにそれらの製薬上許容される塩は、固体形態又は液体形態で存在し得る。固体状態において、これらは、結晶形態又は非結晶形態で、又はその混合物として存在し得る。結晶形態において、当業者は、溶媒分子が結晶化中に結晶格子に組み込まれる、製薬上許容される溶媒和物が形成され得ることを認識するであろう。溶媒和物は、エタノール、イソプロピルアルコール、N,N-ジメチルホルムアミド(DMF)、ジメチルスルホキシド(DMSO)、酢酸、エタノールアミン、及び酢酸エチルなどの非水性溶媒を含んでいてもよく、又は溶媒和物は、結晶格子に組み込まれている溶媒として水を含んでいてもよい。水が結晶格子に組み込まれている溶媒である溶媒和物は、典型的には「水和物」と呼ばれる。水和物は、化学量論的水和物並びに可変量の水を含有する組成物を含む。
【００８３】
結晶形態で存在する式(I)及び式(Ia)の化合物並びにそれらの製薬上許容される塩(その様々な溶媒和物を含む)は、多形性(すなわち、異なる結晶構造で生じる能力)を示し得る。これらの異なる結晶形態は、典型的には、「多形」として知られている。本発明は、全てのこのような多形を含む。多形は、同じ化学組成を有するが、結晶性固体状態のパッキング、幾何学的配置、及び他の記述的特性において異なる。従って、多形は、形状、密度、硬度、変形能、安定性、及び溶解特性などの異なる物理的特性を有し得る。多形は、典型的には、異なる融点、IRスペクトル、及びX線粉末回折パターンを示し、これらは同定のために使用され得る。例えば、化合物の作製において使用される反応条件又は試薬を変更又は調整することにより、異なる多形が生成され得ることが理解されるであろう。例えば、温度、圧力、又は溶媒の変更は多形を生じさせ得る。さらに、1つの多形は特定の条件下で別の多形へと自然に変換し得る。
【００８４】
また本発明は、同位体で標識された化合物も包含し、これらの化合物は、1個以上の原子が自然において最も一般的に見られる原子質量又は質量数とは異なる原子質量又は質量数を有する原子で置き換えられているという事実を除いて、式(I)及び式(Ia)の化合物並びにそれらの製薬上許容される塩と同一である。本発明の化合物に組み込むことができる同位体の例としては、水素、炭素、窒素、酸素及びフッ素の同位体、例えば3H、11C、14C及び18Fなどが挙げられる。
【００８５】
式(I)及び式(Ia)による化合物は、1つ以上の不斉中心(キラル中心とも呼ばれる)を含有していてもよく、従って、個々のエナンチオマー、ジアステレオ異性体、若しくは他の立体異性体形態として、又はそれらの混合物として存在し得る。キラル中心(例えばキラル炭素原子)はまた、アルキル基などの置換基中にも存在し得る。式(I)中に、又は本明細書中に示される任意の化学構造中に存在するキラル中心の立体化学が特定されていない場合、その構造は、任意の立体異性体及びそれらの混合物全てを包含することが意図される。従って、1つ以上のキラル中心を含有する式(I)による化合物は、ラセミ体(ラセミ混合物及びラセミ化合物を含む)として、エナンチオマー的に富化された混合物として、又はエナンチオマー的に純粋な個々の立体異性体として使用することができる。
【００８６】
1つ以上の不斉中心を含有する式(I)及び式(Ia)による化合物の個々の立体異性体は、当業者に公知の方法により分割され得る。例えば、このような分割は、(1) ジアステレオ異性体の塩、複合体(錯体)若しくは他の誘導体の形成により、(2) 立体異性体特異的な試薬との選択的反応、例えば酵素的酸化若しくは還元により；又は(3) キラル環境における(例えば結合したキラルリガンドを有するシリカなどのキラル支持体上、又はキラル溶媒の存在下での)気体-液体クロマトグラフィー若しくは液体クロマトグラフィーによって行うことができる。所望の立体異性体が上記の分離手順の1つにより別の化学物質へと変換される場合、所望の形態を遊離させるためにさらなるステップが必要とされることが理解されるであろう。あるいは、特定の立体異性体を、光学活性な試薬、基質、触媒若しくは溶媒を用いた不斉合成により合成してもよく、又は1種のエナンチオマーを不斉転換により他種のエナンチオマーへと変換することにより合成してもよい。
【００８７】
本明細書における式(I)及び式(Ia)の化合物又はそれらの製薬上許容される塩との言及は、遊離塩基としての、又はその製薬上許容される塩としての式(I)及び式(Ia)の化合物それぞれを包含することを理解されたい。従って、一実施形態において、本発明は、式(I)の化合物を対象とする。別の実施形態において、本発明は、式(I)の化合物の製薬上許容される塩を対象とする。
【００８８】
製薬上許容される塩としては、とりわけ、Berge, J. Pharm. Sci., 1977, 66, 1-19に記載されているもの、又はP H Stahl及びC G Wermuth(編)、Handbook of Pharmaceutical Salts；Properties, Selection and Use, 第2版 Stahl/Wermuth：Wiley- VCH/VHCA, 2011に列挙されているものなどが挙げられる。
【００８９】
式(I)若しくは式(Ia)の化合物又はその製薬上許容される塩の調製において、例えば中間体としての製薬上許容されない塩も使用することができる。あるいは、式(I)及び式(Ia)の製薬上許容されない塩は、本明細書中に包含される。
【００９０】
好適な製薬上許容される塩としては、例えば、酸付加塩などが挙げられる。
【００９１】
このような酸付加塩は、式(I)又は式(Ia)の化合物(例えば塩基性アミン又は他の塩基性官能基を含む)と適切な酸との反応、場合により有機溶媒などの好適な溶媒中での反応により形成して塩を得ることが可能であり、この塩は、結晶化及び濾過を含む様々な方法により単離することができる。
【００９２】
塩は、式(I)又は式(Ia)の化合物の最終的な単離及び精製中にin situで調製することができる。式(I)又は式(Ia)の塩基性化合物が塩として単離される場合、この化合物の対応する遊離塩基形態は、例えば無機塩基又は有機塩基による塩の処理などの、当技術分野で公知の任意の好適な方法により調製することができる。
【００９３】
式(I)又は式(Ia)の化合物が2つ以上の塩基性部分を含む場合、塩形成の化学量論は、1、2又はそれ以上の当量の酸を含み得ることが理解されるであろう。このような塩は、1、2又はそれ以上の酸対イオンを含むであろう(例えば二塩酸塩)。化学量論形態及び非化学量論形態の、式(I)又は式(Ia)の化合物の製薬上許容される塩は本発明の範囲内に含まれ、例えば対イオンが2つ以上の酸性プロトンを含む場合、準化学量論塩を含む。
【００９４】
代表的な製薬上許容される酸付加塩としては、例えば、限定するものではないが、4-アセトアミドベンゾエート、酢酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスコルビン酸塩、アスパラギン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩(ベシル酸塩)、安息香酸塩、重硫酸塩、酒石酸水素塩、酪酸塩、エデト酸カルシウム、樟脳酸塩(camphorate)、樟脳スルホン酸塩(カンシル酸塩(camsylate))、カプリン酸塩(デカン酸塩)、カプロン酸塩(ヘキサン酸塩)、カプリル酸塩(オクタン酸塩)、桂皮酸塩、クエン酸塩、シクラミン酸塩、ジグルコン酸塩、2,5-ジヒドロキシベンゾエート、二コハク酸塩、ドデシル硫酸塩(エストレート(estolate))、エデト酸塩(エチレンジアミンテトラアセテート)、エストレート(estolate)(ラウリル硫酸塩)、エタン-1,2-ジスルホネート(エジシル酸塩)、エタンスルホネート(エシル酸塩(esylate))、ギ酸塩、フマル酸塩、ガラクタル酸塩(galactarate)(粘液酸塩(mucate))、ゲンチシン酸塩(2,5-ジヒドロキシベンゾエート)、グルコヘプトン酸塩(グルセプト酸塩)、グルコン酸塩、グルクロン酸塩、グルタミン酸塩、グルタル酸塩、グリセロリン酸塩、グリコール酸塩、ヘキシルレゾルシネート(hexylresorcinate)、馬尿酸塩、ヒドラバミン(N,N'-ジ(デヒドロアビエチル)-エチレンジアミン)、臭化水素酸塩、塩酸塩、ヨウ化水素酸塩、ヒドロキシナフトエート(hydroxynaphthoate)、イソ酪酸塩、乳酸塩、ラクトビオン酸塩、ラウリン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、マンデル酸塩、メタンスルホン酸塩(メシル酸塩)、メチル硫酸塩、粘液酸塩(mucate)、ナフタレン-1,5-ジスルホネート(ナパジシル酸塩(napadisylate))、ナフタレン-2-スルホネート (ナプシル酸塩(napsylate))、ニコチン酸塩、硝酸塩、オレイン酸塩、パルミチン酸塩、p-アミノベンゼンスルホネート、p-アミノサリチレート、パモ酸塩(エンボン酸塩)、パントテン酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、フェニルアセテート、フェニルエチルバルビツレート、リン酸塩、ポリガラクツロン酸塩、プロピオン酸塩、p-トルエンスルホン酸塩(トシル酸塩)、ピログルタミン酸塩、ピルビン酸塩、
サリチル酸塩、セバシン酸塩、ステアリン酸塩、塩基性酢酸塩(subacetate)、コハク酸塩、スルファミン酸塩、硫酸塩、タンニン酸塩、酒石酸塩、テオクル酸塩(8-クロロテオフィリネート)、チオシアン酸塩、トリエチオジド、ウンデカン酸塩、ウンデシレン酸塩、及び吉草酸塩などが挙げられる。
【００９５】
式(I)又は式(Ia)の化合物並びにそれらの塩及びそれらの製薬上許容される塩(式(I)又は式(Ia)の化合物及びそれらの製薬上許容される塩の溶媒和物(水和物を含む)、複合体(錯体)、多形、プロドラッグ、放射標識した誘導体及び立体異性体を含む)は、本明細書中以降「本発明の化合物」と呼ばれる。
【００９６】
一般的経路
本発明の化合物は、様々な方法で調製することができる。以下の反応スキーム及び本明細書中以降において、別段に記載されない限り、R1〜R5、R4a、R4b、R4c、R5、W、X、Y及びZは、第一態様において定義されるとおりである。明細書全体を通して、一般式は、ローマ数字(I)、(II)、(III)、(IV)等により示される。
【００９７】
式(I)への一般的経路
式(Ix)の化合物(すなわちR4aがHであり且つR4cがOHである式(I)の化合物)は、反応スキーム1に従って、溶媒(例えばTHF)中、(II)を好適なグリニャール試薬(例えば臭化メチルマグネシウム)で処理し、その後、溶媒(例えばメタノール)中、好適な酸(例えば1,4-ジオキサン中4M HCl)で脱保護することによって調製することができる。
【００９８】
【化１３】
2021510711.tif 000015
【００９９】
式(II)の化合物は、反応スキーム2に従って、触媒[例えばPdCl2(dppf)]及び塩基(例えばフッ化カリウム)の存在下に、溶媒(例えば1,4-ジオキサン及び水)中、式(III)の化合物を、ボロン酸エステル(例えば2-((2-メトキシ-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)フェニル)スルホニル)エタン-1-オール)で処理することによって調製することができる。
【０１００】
【化１４】
2021510711.tif 000016
【０１０１】
式(III)の化合物は、反応スキーム3に従って、式(IV)の化合物から、溶媒(例えばDCM)中、(IV)を好適な酸化剤(例えばDMP)で処理することによって調製することができる。
【０１０２】
【化１５】
2021510711.tif 000017
【０１０３】
式(IV)の化合物は、反応スキーム4に従って、式(V)の化合物から調製することができる。第1に、アミンを、適切なアミン保護基(例えば、DCM中で適切な試薬(例えばジ-tert-ブチルジカルボネート、DIPEA及びDMAP)による処理を経たtert-ブチルカルバメート)で保護する。第2に、溶媒(例えばエタノール)中、上記のエステルを、好適な還元剤(例えば水素化ホウ素ナトリウム)で第一級アルコールに還元する。
【０１０４】
【化１６】
2021510711.tif 000018
【０１０５】
式(V)の化合物は、反応スキーム5に従って、式(VI)の化合物(LがCl若しくはBrである式(VI)の化合物、又はLがCl及びBrである式(VI)の化合物の混合物)から、溶媒(例えばDMSO)中、アミン(例えば(3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)フェニル)メチルアミン)及び塩基(例えばDIPEA)による処理によって調製することができる。
【０１０６】
【化１７】
2021510711.tif 000019
【０１０７】
式(Ix')の化合物(すなわち、R4a及びR4bがC1-3アルキルであり、且つR4cがOHである式(I)の化合物)は、反応スキーム6に従って、触媒[例えばPdCl2(dppf)]の存在下に、塩基(例えば炭酸ナトリウム)を有する溶媒(例えば1,4-ジオキサン及び水)中、(VII)をボロン酸エステル(例えばN-(3-ヒドロキシプロピル)-2-メトキシ-N-メチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド)で処理することによって調製することができる。
【０１０８】
【化１８】
2021510711.tif 000020
【０１０９】
式(VII)の化合物は、式(V)の化合物から、反応スキーム7に従って、溶媒(例えばDCM)中、(V)をグリニャール試薬(例えば臭化メチルマグネシウム)で処理することによって調製することができる。(V)の調製については、スキーム5を参照されたい。
【０１１０】
【化１９】
2021510711.tif 000021
【０１１１】
式(VIa)の化合物(すなわち、WがCであり、XがNであり、YがCであり、ZがCであり、LがClである式(VI)の化合物(スキーム5を参照))は、反応スキーム8に従って調製することができる。第1に、式(VIII)の化合物は、溶媒(例えばエタノール)中で酸(例えばHCl)を用いて、エステル(例えばオキサロ酢酸ジエチルのナトリウム塩)と式(IX)の化合物とを、熱(例えば85℃)を加えて縮合させ、式(VIII)の化合物を得ることによって入手することができる。第2に、(VIII)を、塩素化試薬(例えばPOCl3)により、熱を加えて(例えば90℃で)処理し、式(X)の化合物を得る。溶媒(例えばDCM)中、式(X)の化合物を、ヨウ素源又は臭素源[例えばN-ヨードスクシンイミド(NIS)又はN-ブロモスクシンイミド(NBS)]で処理し、式(VIa)の化合物を得る。
【０１１２】
【化２０】
2021510711.tif 000022
【０１１３】
式(VIb)の化合物の混合物(すなわち、WがCであり、XがCであり、YがNであり、ZがCであり、且つLがCl及びBrである式(VI)の化合物(スキーム5を参照))は、反応スキーム9に従って、化合物(XI)から多数のステップで調製することができる。第1に、溶媒(例えばメタノール)中、式(XI)の化合物を、臭素化剤(例えばN-ブロモスクシンイミド)及び重炭酸ナトリウムで処理し、式(XII)の化合物を得る。第2に、式(XII)の化合物を、1-クロロプロパン-2-オンで高温にて(例えば90℃で)処理し、式(XIII)の化合物の混合物を得る。溶媒(例えばDMF)中の、例えばN-ヨードスクシンイミド又はN-ブロモスクシンイミドによる式(XIII)の化合物の混合物のヨウ素化又は臭素化により、式(VIb)の化合物の混合物を得る。
【０１１４】
【化２１】
2021510711.tif 000023
【０１１５】
式(VIc)の化合物(すなわち、WがCであり、XがNであり、YがCであり、ZがNであり、LがClである式(VI)の化合物(スキーム5を参照))は、反応スキーム10に従って、式(XIV)の化合物から多数のステップで調製することができる。第1に、式(XIV)の化合物をシアノギ酸メチルと反応させて、式(XV)の化合物を得ることができる。第2に、式(XV)の化合物を、溶媒(例えばDMSO)中でカルボニルジイミダゾールを用いて、あるいはナトリウムエトキシド及びエタノール中で炭酸ジエチルを用いて環化させ、式(XVI)の化合物を得ることができる。次いで、式(XVI)の化合物を、例えばPOCl3を用いて、熱を加えて(例えば90℃で)塩素化し、式(XVII)の化合物を得ることができる。溶媒(例えばDMF)中の、ヨウ素化(例えばN-ヨードスクシンイミドを用いた)又は臭素化(例えばN-ブロモスクシンイミドを用いた)により、式(VIc)の化合物が得られる。
【０１１６】
【化２２】
2021510711.tif 000024
【０１１７】
式(Ix")の化合物(すなわち、R4cがヒドロキシメチルである式(I)の化合物)は、反応スキーム11に従って、式(XVIII)の化合物から調製することができる。
【０１１８】
【化２３】
2021510711.tif 000025
【０１１９】
式(XVIIIa)の化合物(すなわち、WがCであり、XがNであり、YがCであり、ZがCである式(XVIII)の化合物)は、反応スキーム12に従って調製することができる。
【０１２０】
【化２４】
2021510711.tif 000026
【０１２１】
式(XVIIIb)の化合物(すなわち、WがNであり、XがCであり、YがCである式(XVIII)の化合物(スキーム11由来))は、式(XIX)の化合物から、反応スキーム13に従って調製することができる。
【０１２２】
【化２５】
2021510711.tif 000027
【０１２３】
あるいは、式(Ia)の化合物(スキーム1を参照)は、式(V)の化合物(スキーム4を参照)から、反応スキーム14に従って調製することができる。式(Ia)の化合物は、熟練した化学者によく知られている技術、例えばキラルHPLCを用いて、個々のエナンチオマーに分割することができる。
【０１２４】
【化２６】
2021510711.tif 000028
【０１２５】
式(Id)の化合物(すなわち、R4aとR4bが、それらが結合している炭素と一緒になって、C1-3アルキル基である1個の基Rで置換されているシクロプロパン環を形成している、一般式(I)の化合物)は、反応スキーム15に従って、式(XXa)の化合物から調製することができる。反応スキーム15において、PGは、tert-ブチルオキシカルボニルなどの保護基であり、[Si]は、TBDMSなどのシリコンベースのアルコール保護基である。
【０１２６】
【化２７】
2021510711.tif 000029
【０１２７】
式(Ie)の化合物(すなわち、R4aがHであり、且つR4bとR4cが、それらが結合している炭素と一緒になって非置換のテトラヒドロピラン環を形成している、式(I)の化合物)は、反応スキーム15に従って、式(XXI)の化合物から調製することができる。
【０１２８】
【化２８】
2021510711.tif 000030
【０１２９】
式(XXI)の化合物は、式(XXII)の化合物から、反応スキーム(16)に従って調製することができる。
【０１３０】
【化２９】
2021510711.tif 000031
【０１３１】
熟練した化学者であれば、式(I)の化合物が、最終ステップとしてのR1における合成によって調製することもできることを理解するであろう。反応スキーム17において、式(If)の化合物(すなわち、R1が-C(=O)N(R1aR1b)である式(I)の化合物)は、式(XXIII)の化合物から調製することができる。
【０１３２】
【化３０】
2021510711.tif 000032
【０１３３】
熟練した化学者であれば、式(I)の化合物は、当技術分野で公知の方法により他の式(I)の化合物に変換され得ることを理解するであろう。さらに、上記の反応スキームに記載されている中間体化合物を他の中間体に変換し、その後記載されている方法を用いて変換し、式(I)の化合物を得ることができる。適切な場合、式(I)の化合物は、例えば、保護/脱保護ステップの組み込みなどの、反応スキームに記載されている変換とは異なる順序を用いて調製され得ることも理解されるであろう。
【０１３４】
式(Ia)への一般的経路
式(Ix*)の化合物(すなわち、R4aがHである式(Ia)の化合物)は、反応スキーム1*に従って、溶媒(例えばTHF)中で、(IIa*)を好適なグリニャール試薬(例えば臭化メチルマグネシウム)で処理し、その後、溶媒(例えばメタノール)中、好適な酸(例えば1,4-ジオキサン中4M HCl)で脱保護することによって調製することができる。
【０１３５】
【化３１】
2021510711.tif 000033
【０１３６】
式(IIa*)の化合物は、反応スキーム2a*に従って、触媒(例えばPdCl2(dppf))及び塩基(例えばフッ化カリウム)の存在下に、溶媒(例えば1,4-ジオキサン及び水)中、式(IIIa*)の化合物をボロン酸エステル(例えば2-((2-メトキシ-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)フェニル)スルホニル)エタン-1-オール)で処理することによって調製することができる。
【０１３７】
【化３２】
2021510711.tif 000034
【０１３８】
式(III*)の化合物は、反応スキーム3*に従って、式(IV*)の化合物から、溶媒(例えばDCM)中、(IV*)を好適な酸化剤(例えばDMP)で処理することによって調製することができる。
【０１３９】
【化３３】
2021510711.tif 000035
【０１４０】
式(IV*)の化合物は、反応スキーム4*に従って、式(V*)の化合物から調製することができる。第1に、アミンを、適切なアミン保護基(例えば、DCM中で適切な試薬(例えばジ-tert-ブチルジカルボネート、DIPEA及びDMAP)による処理を経たtert-ブチルカルバメート)で保護する。第2に、上記のエステルを、溶媒(例えばエタノール)中、好適な還元剤(例えば水素化ホウ素ナトリウム)で第一級アルコールに還元する。
【０１４１】
【化３４】
2021510711.tif 000036
【０１４２】
式(V*)の化合物は、反応スキーム5*に従って、式(VI*)の化合物(LがCl又はBrである式(VI*)の化合物、又はLがCl及びBrである式(VI)の化合物の混合物)から、溶媒(例えばDMSO)中、アミン(例えば(3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)フェニル)メチルアミン)及び塩基(例えばDIPEA)を用いた処理により調製することができる。
【０１４３】
【化３５】
2021510711.tif 000037
【０１４４】
式(Ib*)の化合物(すなわち、R4a及びR4bがメチルである式(I*)の化合物)は、反応スキーム6に従って、触媒(例えばPdCl2(dppf))の存在下に、塩基(例えば炭酸ナトリウム)を含む溶媒(例えば1,4-ジオキサン及び水)中、(VII*)をボロン酸エステル(例えば、N-(3-ヒドロキシプロピル)-2-メトキシ-N-メチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド)で処理することによって調製することができる。
【０１４５】
【化３６】
2021510711.tif 000038
【０１４６】
式(VII*)の化合物は、式(V*)の化合物から、反応スキーム7*に従って、溶媒(例えばDCM)中、(V*)をグリニャール試薬(例えば臭化メチルマグネシウム)で処理することによって調製することができる。
【０１４７】
【化３７】
2021510711.tif 000039
【０１４８】
式(Via*)の化合物(すなわち、XがNであり、YがCであり、ZがCであり、LがClである式(VI*)の化合物(スキーム5*を参照))は、反応スキーム8*に従って調製することができる。第1に、式(VIII*)の化合物は、溶媒(例えばエタノール)中で酸(例えばHCl)を用いて、エステル(例えばオキサロ酢酸ジエチルのナトリウム塩)と式(IX*)の化合物とを、熱(例えば85℃)を加えて縮合させ、式(VIII*)の化合物を得ることによって入手することができる。第2に、(VIII*)を、塩素化試薬(例えばPOCl3)を用いて熱を加えて(例えば90℃で)処理すると、式(X*)の化合物が得られる。溶媒(例えばDCM)中、式(X*)の化合物をヨウ素源(例えばNIS)で処理すると、式(Via*)の化合物が得られる。
【０１４９】
【化３８】
2021510711.tif 000040
【０１５０】
式(VIb*)の化合物の混合物(すなわち、XがCであり、YがNであり、ZがCであり、LがCl及びBrである式(VI*)の化合物(スキーム5*を参照))は、反応スキーム9に従って、化合物(XI*)から多数のステップで調製することができる。第1に、式(XI*)の化合物を、溶媒(例えばメタノール)中、臭素化剤(例えばN-ブロモスクシンイミド)及び重炭酸ナトリウムで処理し、式(XII*)の化合物を得る。第2に、式(XII*)の化合物を、1-クロロプロパン-2-オンを用いて高温にて(例えば90℃で)処理し、式(XIII*)の化合物の混合物を得る。溶媒(例えばDMF)中、式(XIII*)の化合物の混合物を、例えばN-ヨードスクシンイミドでヨウ素化し、式(VIb*)の化合物の混合物を得る。
【０１５１】
【化３９】
2021510711.tif 000041
【０１５２】
式(Vic*)の化合物(すなわち、XがNであり、YがCであり、ZがNであり、LがClである、式(VI*)の化合物(スキーム5*を参照))は、式(XIV*)の化合物から、反応スキーム10*に従って、多数のステップで調製することができる。第1に、式(XIV*)の化合物をシアノギ酸メチルと反応させて、式(XV*)の化合物を得る。第2に、式(XV*)の化合物を、溶媒(例えばDMSO)中でカルボニルジイミダゾールを用いて、あるいはナトリウムエトキシド及びエタノール中で炭酸ジエチルを用いて環化させ、式(XVI*)の化合物を得る。次いで、式(XVI*)の化合物を、例えばPOCl3を用いて熱を加えて(例えば90℃で)塩素化し、式(XVII*)の化合物を得る。溶媒(例えばDMF)中、例えばN-ヨードスクシンイミドを用いたヨウ素化により、式(Vic*)の化合物が得られる。
【０１５３】
【化４０】
2021510711.tif 000042
【０１５４】
熟練した化学者であれば、式(Ia)の化合物は、当技術分野で公知の方法により他の式(Ia)の化合物に変換され得ることを理解するであろう。さらに、上記の反応スキームに記載されている中間体化合物は、他の中間体に変換され、その後記載されている方法を用いて変換され、式(Ia)の化合物を与える。式(Ia)の化合物は、反応スキームに記載されている変換(適切な場合、保護/脱保護ステップの組み込みを含む)とは異なる順序を用いて調製され得ることも理解されるであろう。
【０１５５】
使用法
本発明の化合物は、PI4KIIIβの強力な阻害剤であることが示されている。さらに、本発明の化合物は、PI4KIIIβの選択的阻害剤である。本発明の化合物は、ウイルス感染症及びウイルス感染症により引き起こされるか又は増悪する疾患の治療又は予防において有用であり得る。ウイルス感染症により特に引き起こされるか又は増悪する疾患としては、COPD、喘息、嚢胞性線維症、気管支拡張症、鬱血性心不全、急性呼吸窮迫症候群及び急性肺損傷などが挙げられる。さらに、ライノウイルス感染症により引き起こされるか又は増悪する疾患としては、細気管支炎、中耳炎、副鼻腔炎及び急性気管支炎などが挙げられる。同様に、ライノウイルス感染症は、子供、高齢者及び免疫抑制者において二次的な細菌感染症を引き起こし得る。このような二次的な細菌感染症は、肺炎を引き起こす可能性がある。
【０１５６】
疾患に関連して本明細書中で使用される「治療する(treat)」、「治療(treatment)」又は「治療する(treating)」は：(1)疾患又は疾患の1つ以上の生物学的徴候を改善すること、(2)(a)上記疾患につながるか若しくは上記疾患に関与する生物学的カスケード中の1つ以上のポイント、又は(b)疾患の1つ以上の生物学的徴候を妨げること、(3)疾患に伴う1つ以上の症状又は作用を軽減すること、或いは(4)疾患又は疾患の1つ以上の生物学的徴候の進行を遅らせることを意味する。
【０１５７】
本明細書で使用される「患者」は、ヒト(成人及び子供を含む)又は他の動物を指す。一実施形態において、「患者」はヒトを指す。
【０１５８】
本発明の化合物が、局所的に(例えば吸入により又は鼻腔内に)に投与され得ることが想定される。吸入は、吸入が口を通してであるか又は鼻腔を通してであるかに関わらず、患者の肺への投与を指す。一実施形態において、式(I)の化合物又はその製薬上許容される塩は、局所的に投与され得る。別の実施形態において、式(I)の化合物又はその製薬上許容される塩は、吸入により投与され得る。さらなる実施形態において、式(I)の化合物又はその製薬上許容される塩は、鼻腔内に投与され得る。さらなる実施形態において、式(I)の化合物又はその製薬上許容される塩は、眼内に投与され得る。さらなる実施形態において、式(I)の化合物又はその製薬上許容される塩は、耳から投与され得る。
【０１５９】
本発明の化合物は、1日当たり1回、又は多数回用量が所与の期間にわたって様々な時間間隔で投与される投与レジメンに従って投与することができる。例えば、複数回用量を1日当たり1、2、3又は4回投与することができる。一実施形態において、1回用量は1日1回投与される。さらなる実施形態において、1回用量は1日当たり2回投与される。用量は、所望の治療効果が達成されるまで、又は所望の治療効果を維持するために無期限に投与することができる。本発明の化合物についての好適な投与レジメンは、その化合物の薬物動態特性、例えば吸収、分布、及び半減期などによって決まり、これらは当業者により決定され得る。さらに、本発明の化合物についての好適な投与レジメン(このようなレジメンが投与される期間を含む)は、治療中の疾患、治療中の疾患の重症度、治療中の患者の年齢及び健康状態、治療対象の患者の病歴、併用療法の性質、所望の治療効果、並びに当業者の知識及び専門知識の範囲内にある同様の因子に応じて決定される。このような当業者は、好適な投与レジメンが、投与レジメンに対する個々の患者の応答を考慮して、又は個々の患者が変更を必要とするにつれて経時的に、調整を必要とし得るということをさらに理解するだろう。
【０１６０】
吸入投与のための典型的な1日用量は、全体重1kg当たり0.2μg〜0.02mg、例えば全体重1kg当たり0.5μg〜0.01mgである。例えば、吸入投与のための1日用量は、患者1人当たり20μg〜2.0mg(例えば患者1人当たり50μg〜1.0mg)であり得る。
【０１６１】
さらに、本発明の化合物は、プロドラッグとして投与することができる。本明細書で使用される本発明の化合物の「プロドラッグ」は機能的な誘導体であり、患者へ投与されると、本発明の化合物をin vivoで遊離させる。プロドラッグとしての本発明の化合物の投与は、当業者が以下のうちの1つ以上を行うことを可能にし得る：(a) in vivoでの化合物の活性の開始を改変すること；(b) in vivoでの化合物の作用期間を改変すること；(c) in vivoでの化合物の輸送又は分布を改変すること；(d) in vivoでの化合物の溶解度を改変すること；及び(e) 化合物により引き起こされる副作用又は他の問題を克服すること。プロドラッグを調製するために使用される典型的な機能的誘導体には、in vivoで化学的に又は酵素的に切断可能な化合物の修飾が含まれる。ホスフェート、アミド、エステル、チオエステル、カーボネート、及びカルバメートの調製を含むこのような修飾は、当業者には周知である。
【０１６２】
任意の特定の理論に拘泥するものではないが、本発明の化合物は、宿主細胞の酵素、PI4KIIIβの活性を阻害し、これにより宿主細胞内でウイルスが複製する能力を低下させることができると考えられている。多くのウイルスは、PI4Kを用いてホスファチジルイノシトール-4-リン酸(PI4P)に富む膜を作製し、これを複製プラットフォームとして使用することができる。ウイルス複製機構は、これらのプラットフォーム上で超分子複合体として構築され、PI4P脂質は、ウイルスRNAの合成を可能とするために役立つ。このような細胞内の脂質プラットフォームは、ウイルスが自身を効率的に複製するためにより好ましい環境を創り出す。ウイルスが、PI4K(特にPI4KIIIβ)を利用しこれらの脂質プラットフォームを作製してウイルス複製を促進する能力を破壊することにより、ウイルス感染症を治療及び/又は予防することができる。
【０１６３】
従って、さらなる態様によれば、本発明は、このようにして、ウイルス感染症を治療する方法であって、式(I)の化合物又はその製薬上許容される塩を、それを必要とする患者に投与することを含む、方法を提供する。
【０１６４】
さらなる態様によれば、本発明は、ウイルス感染症により引き起こされるか又は増悪する疾患を治療する方法であって、式(I)の化合物又はその製薬上許容される塩を、それを必要とする患者に投与することを含む、方法を提供する。
【０１６５】
さらなる態様によれば、本発明は、ウイルス感染症により引き起こされる二次的な細菌感染症を治療する方法であって、式(I)の化合物又はその製薬上許容される塩を、それを必要とする患者に投与することを含む、方法を提供する。
【０１６６】
さらなる態様によれば、本発明は、療法において使用するための、式(I)の化合物又はその製薬上許容される塩を提供する。
【０１６７】
さらなる態様によれば、本発明は、ウイルス感染症の治療において使用するための、式(I)の化合物又はその製薬上許容される塩を提供する。
【０１６８】
さらなる態様によれば、本発明は、ウイルス感染症により引き起こされるか又は増悪する疾患の治療において使用するための、式(I)の化合物又はその製薬上許容される塩を提供する。ある実施形態において、上記疾患は、COPD、嚢胞性線維症、気管支拡張症、喘息又は鬱血性心不全である。さらなる実施形態において、上記疾患は、COPD又は喘息である。なおさらなる実施形態において、上記疾患はCOPDである。
【０１６９】
さらなる態様によれば、本発明は、細菌感染症により引き起こされる二次的な細菌感染症の治療において使用するための、式(I)の化合物又はその製薬上許容される塩を提供する。
【０１７０】
さらなる態様によれば、本発明は、ウイルス感染症を治療するための医薬の製造における、式(I)の化合物又はその製薬上許容される塩の使用を提供する。
【０１７１】
さらなる態様によれば、本発明は、ウイルス感染症により引き起こされるか又は増悪する疾患を治療するための医薬の製造における、式(I)の化合物又はその製薬上許容される塩の使用を提供する。
【０１７２】
さらなる態様によれば、本発明は、ウイルス感染症により引き起こされる二次的な細菌感染症を治療するための医薬の製造における、式(I)の化合物又はその製薬上許容される塩の使用を提供する。
【０１７３】
ウイルス感染後に重篤な病気のリスクが高まる、免疫不全又は心肺併存症を有する患者などの特定の患者において、感染症が根を下ろすのを妨げ、これにより疾患(例えばCOPD、嚢胞性線維症、気管支拡張症、喘息又は鬱血性心不全)の増悪を回避するために、本発明の化合物を予防的に投与し得ることが想定される。「予防」は、絶対的な用語ではないことが理解されるであろう。医学において、「予防」は、疾患の尤度(可能性)又は重症度を実質的に低下させるため、又はこのような疾患の発症を遅延させるための、薬の予防的投与を指すことが理解される。高められた感染リスクが存在する場合、例えば冬場のHRVの場合、予防的投与が特に望ましい可能性がある。
【０１７４】
さらなる態様によれば、本発明は、ウイルス感染症を予防する方法であって、式(I)の化合物又はその製薬上許容される塩を、それを必要とする患者に投与することを含む、方法を提供する。
【０１７５】
さらなる態様によれば、本発明は、ウイルス感染症により引き起こされるか又は増悪する疾患を予防する方法であって、式(I)の化合物又はその製薬上許容される塩を、それを必要とする患者に投与することを含む、方法を提供する。ある実施形態において、上記疾患は、COPD、嚢胞性線維症、気管支拡張症、喘息又は鬱血性心不全である。さらなる実施形態において、上記疾患は、COPD又は喘息である。なおさらなる実施形態において、上記疾患はCOPDである。
【０１７６】
さらなる態様によれば、本発明は、ウイルス感染症を予防するための、式(I)の化合物又はその製薬上許容される塩を提供する。
【０１７７】
さらなる態様によれば、本発明は、ウイルス感染症により引き起こされるか又は増悪する疾患を予防するための、式(I)の化合物又はその製薬上許容される塩を提供する。ある実施形態において、上記疾患は、COPD、嚢胞性線維症、気管支拡張症、喘息又は鬱血性心不全である。さらなる実施形態において、上記疾患は、COPD又は喘息である。なおさらなる実施形態において、上記疾患はCOPDである。
【０１７８】
さらなる態様によれば、本発明は、ウイルス感染症を予防するための医薬の製造における、式(I)の化合物又はその製薬上許容される塩の使用を提供する。
【０１７９】
さらなる態様によれば、本発明は、ウイルス感染症により引き起こされるか又は増悪する疾患を予防するための医薬の製造における、式(I)の化合物又はその製薬上許容される塩の使用を提供する。ある実施形態において、上記疾患は、COPD、嚢胞性線維症、気管支拡張症、喘息又は鬱血性心不全である。さらなる実施形態において、上記疾患は、COPD又は喘息である。なおさらなる実施形態において、上記疾患はCOPDである。
【０１８０】
さらに、本発明の化合物は、健康なヒトがウイルス感染症の高められたリスクに曝される場合、例えばSARSの大流行中、又は数名の住民がHRV感染症に罹患した場合の看護若しくは介護の家庭環境において、健康なヒトに対して予防的に投与され得る。従って、さらなる態様によれば、本発明は、式(I)の化合物又はその製薬上許容される塩を、それを必要とするヒトに投与することを含む、ウイルス感染症を予防する方法を提供する。
【０１８１】
以下の実施形態は、医学的用途に関する上記態様のそれぞれに当てはまる。ある実施形態において、ウイルスは一本鎖RNAウイルスである。さらなる実施形態において、ウイルスはプラス鎖の一本鎖RNAウイルスである。ある実施形態において、ウイルス感染症は、ヒトライノウイルス(HRV)である。さらなる実施形態において、ウイルス感染症は、ウイルスにより引き起こされる疾患が風邪であるHRVである。さらなる実施形態において、ウイルス感染症は、ウイルスにより引き起こされる疾患が、細気管支炎、肺炎、中耳炎、副鼻腔炎又は急性気管支炎であるHRVである。さらなる実施形態において、二次的な細菌感染症は、肺炎を引き起こす。さらなる実施形態において、ウイルスにより増悪する疾患は、COPD、嚢胞性線維症、気管支拡張症、喘息又は鬱血性心不全である。さらなる実施形態において、HRVはHRV-Aである。さらなる実施形態において、HRVはHRV-Bである。さらなる実施形態において、HRVはHRV-Cである。さらなる実施形態において、式(I)の化合物は、肺のHRV感染を予防するためにHRVの鼻症状の発症時に投与され、これにより喘息増悪の頻度及び重症度を低下させる。さらなる実施形態において、式(I)の化合物は、肺のHRV感染を予防するためにHRVの鼻症状の発症時に投与され、これによりCOPD増悪の頻度及び重症度を低下させる。さらなる実施形態において、式(I)の化合物は、肺のHRV感染を予防するためにHRVの鼻症状の発症時に投与され、これにより嚢胞性線維症増悪の頻度及び重症度を低下させる。さらなる実施形態において、式(I)の化合物は、肺のHRV感染を予防するためにHRVの鼻症状の発症時に投与され、これにより鬱血性心不全増悪の頻度及び重症度を低下させる。
【０１８２】
ある実施形態において、ウイルス感染症は、疾患又は症状が重症急性呼吸器症候群(SARS)である、コロナウイルスである。
【０１８３】
製剤
【０１８４】
本発明の化合物は、通常、必ずというわけではないが、患者に対する投与の前に医薬製剤へと製剤化されるであろう。さらなる態様によれば、本発明は、式(I)の化合物又はその製薬上許容される塩、及び製薬上許容される賦形剤を含む医薬製剤を提供する。さらなる態様によれば、本発明は、式(I)の化合物又はその製薬上許容される塩を含む、ウイルス感染症を治療するための医薬製剤を提供する。さらなる態様によれば、本発明は、式(I)の化合物又はその製薬上許容される塩を含む、ウイルス感染症により引き起こされるか又は増悪する疾患を治療するための医薬製剤を提供する。さらなる態様によれば、本発明は、式(I)の化合物又はその製薬上許容される塩を含む、ウイルス感染症により引き起こされる二次的な細菌感染症を治療するための医薬製剤を提供する。さらなる態様によれば、本発明は、式(I)の化合物又はその製薬上許容される塩を含む、ウイルス感染症を予防するための医薬製剤を提供する。さらなる態様によれば、本発明は、式(I)の化合物又はその製薬上許容される塩を含む、ウイルス感染症により引き起こされるか又は増悪する疾患を予防するための医薬製剤を提供する。
【０１８５】
本明細書中で使用される「製薬上許容される賦形剤」は、医薬製剤に形又は稠度を与えることに関与する、製薬上許容される物質、組成物又はビヒクルを意味する。各賦形剤は、患者に投与されると本発明の化合物の有効性を実質的に低下させるであろう相互作用、及び製薬上許容されない医薬製剤をもたらすであろう相互作用が回避されるように、混合される場合に医薬製剤の他の成分と適合するものでなければならない。さらに、各賦形剤は、当然のことながら、製薬上許容される(例えば十分に高純度の)賦形剤でなければならない。
【０１８６】
本発明の化合物が、局所的に、例えば吸入により、鼻腔内に、経皮的に、眼内に又は耳から投与され得ることが想定される。
【０１８７】
さらなる態様によれば、本発明は、吸入による患者への投与に適合した剤形、例えば、乾燥散剤製剤、エアロゾル製剤、懸濁製剤又は溶液製剤としての剤形を対象とする。
【０１８８】
吸入による肺への送達のための乾燥散剤製剤は、典型的には、微細粉末としての本発明の化合物を、微細粉末としての1種以上の製薬上許容される賦形剤と共に含む。乾燥散剤における使用に特に適した製薬上許容される賦形剤は当業者に公知であり、例えば、ラクトース、デンプン、マンニトール、及び単糖、二糖、及び多糖などが挙げられる。微細粉末は、例えば、微粉化及び製粉によって調製することができる。一般的には、サイズを低下させた(例えば微粉化した)化合物は、(例えば、レーザー回折を用いて測定して)約1〜約10ミクロンのD50値により規定することができる。
【０１８９】
乾燥散剤は、複数回(未計量用量)の乾燥散剤形態の医薬を保管するのに適したリザーバーを有するリザーバー付き乾燥散剤吸入器(RDPI)を介して患者に投与することができる。RDPIは、典型的には、各医薬用量をリザーバーから計量して送達位置に送るための手段を含む。例えば、計量手段は計量カップを含んでいてよく、この計量カップは、リザーバーからカップに医薬を充填することができる第1の位置から、計量された医薬用量が吸入のために患者に利用可能になる第2の位置まで移動可能である。
【０１９０】
本発明による使用のための乾燥散剤製剤は、吸入デバイスを介して投与することができる。例として、このようなデバイスは、例えばゼラチン製のカプセル及びカートリッジ、又は例えば積層されたアルミ箔製のブリスターを包含し得る。様々な実施形態において、各カプセル、カートリッジ又はブリスターは、本明細書中に示される教示による製剤の用量を含有し得る。吸入デバイスの例としては、本明細書中に示されるデバイスの全てを含め、製剤の単位用量送達又は複数回用量送達用に意図されるデバイスなどを挙げることができる。例として、複数回用量送達の場合、製剤は予め計量されていてもよく(例えば、ディスカス(DISKUS)の場合、英国特許第2242134号、米国特許第6,032,666号、第5,860,419号、第5,873,360号、第5,590,645号、第6,378,519号及び第6,536,427号を参照、又はディスクヘイラー(Diskhaler)の場合、英国特許第2178965号、第2129691号及び第2169265号、米国特許第4,778,054号、第4,811,731号、第5,035,237号を参照))、あるいは使用の際に計量されてもよい(例えば、タービュヘイラー(Turbuhaler)の場合、欧州特許第69715号を参照、又は米国特許第6,321,747号に記載されているデバイスの場合)。単位用量デバイスの一例は、ロタヘイラー(ROTAHALER)(英国特許第2064336号を参照)である。一実施形態において、ディスカス吸入デバイスは、長さ方向に沿って間隔を置いた複数の陥凹部を有する基部シートとそこに剥離可能にシールされた蓋シートとから形成される細長いストリップを、複数の容器を画定するように含み、各容器はその中に、本化合物と場合により本明細書中に教示される他の賦形剤及び添加剤とを含有する吸入可能製剤を有する。剥離可能なシールは工業用シール(engineered seal)であり、一実施形態において、この工業用シールは密封シールである。好ましくは、上記のストリップは、ロール状に巻き取られるように十分に柔軟性がある。蓋シート及び基部シートは、好ましくは互いにシールされていない先端部分を有し、この先端部分の少なくとも一方は、巻き取り手段に結合するように構築されている。また好ましくは、基部シートと蓋シートの間の工業用シールは、それらの全幅にわたって広がる。この蓋シートは、好ましくは、基部シートから、基部シートの第1末端から長軸方向に剥離することができる。
【０１９１】
また乾燥散剤製剤は、上記製剤の2つの異なる成分の別々の格納を可能とする吸入デバイスで提供することもできる。従って、例えばWO 03/061743 A1、WO 2007/012871 A1、WO2007/068896、並びに米国特許第8,113,199号、第8,161,968号、第8,511,304号、第8,534,281号、第8,746,242号及び第9,333,310号に記載されているとおり、例えば、これらの成分は同時に投与可能であるが、例えば別個の医薬製剤として別々に保管される。
【０１９２】
一実施形態において、成分の別々の格納を可能とする吸入デバイスは、2つの剥離可能なブリスターストリップを有する吸入デバイスであり、各ストリップは、その長さに沿って配置されたブリスターポケット(例えば、各ブリスターストリップ内の複数の容器)中に、予め計量された用量を含有する(例えばELLIPTA)。前記デバイスは内部インデックス機構を有し、この内部インデックス機構は、デバイスが作動する毎に各ストリップのポケットを剥離開封し、各ストリップの各新たに露出された用量が、デバイスのマウスピースと連絡するマニホールドに近接するようにブリスターを配置する。患者がマウスピースで吸入するとき、各用量がその付属のポケットからマニホールドへと同時に引き出され、マウスピースを経由して患者の気道へと引き込まれる。異なる成分の別々の格納を可能とするさらなるデバイスは、Innovata社のデュオヘイラー(DUOHALER)である。さらに、同時送達に加えて、様々な構造の吸入デバイスが、デバイスからの医薬製剤(1種又は複数種)の連続送達又は別々の送達を提供する。
【０１９３】
あるいは、乾燥散剤は、複数回用量乾燥散剤吸入器(MDPI)において使用するためのカプセル(例えばゼラチン製カプセル又はプラスチック製カプセル)、カートリッジ、又はブリスターパックとして提供することができる。MDPIは、医薬が、複数の規定用量(又はその一部)の医薬を含有する(あるいは運ぶ)複数回用量パック中に含まれている吸入器である。乾燥散剤がブリスターパックとして提供される場合、MDPIは、医薬を乾燥散剤形態で格納するための複数のブリスターを含む。ブリスターは、典型的には、そこから医薬を放出することを容易にするため、規則的な様式で配置される。例えば、ブリスターは、円盤形のブリスターパック上に一般的には環状に配置されていてもよく、又はブリスターは(例えばストリップ又はテープを含む)細長い形状であってもよい。各カプセル、カートリッジ、又はブリスターは、例えば、200μg〜10mgの式(I)の化合物又はその製薬上許容される塩を含有し得る。
【０１９４】
エアロゾル剤は、本発明の化合物を液化噴射剤に懸濁又は溶解することによって形成することができる。好適な噴射剤としては、ハロカーボン類、炭化水素類、及び他の液化ガスが挙げられる。代表的な噴射剤としては、トリクロロフルオロメタン(噴射剤11)、ジクロロフルオロメタン(噴射剤12)、ジクロロテトラフルオロエタン(噴射剤114)、テトラフルオロエタン(HFA-134a)、1,1-ジフルオロエタン(HFA-152a)、ジフルオロメタン(HFA-32)、ペンタフルオロエタン(HFA-12)、ヘプタフルオロプロパン(HFA-227a)、ペルフルオロプロパン、ペルフルオロブタン、ペルフルオロペンタン、ブタン、イソブタン、及びペンタンなどが挙げられる。本発明の化合物を含むエアロゾル剤は、典型的には、計量用量吸入器(MDI)を介して患者に投与されるだろう。このようなデバイスは当業者に公知である。
【０１９５】
エアロゾル剤は、製剤の物理的安定性を改善するため、バルブ性能を改善するため、溶解性を改善するため、又は味を改善するために、典型的にはMDIと共に使用される、さらなる製薬上許容される賦形剤(例えば界面活性剤、滑沢剤、共溶媒及び他の賦形剤)を含有し得る。
【０１９６】
さらなる態様によれば、場合により界面活性剤及び/又は共溶媒と組み合わせて、式(I)の化合物又はその製薬上許容される塩と、噴射剤としてのフルオロカーボン又は水素含有クロロフルオロカーボンとを含む医薬エアロゾル製剤が提供される。
【０１９７】
ある実施形態によれば、噴射剤は、1,1,1,2-テトラフルオロエタン、1,1,1,2,3,3,3-ヘプタフルオロ-n-プロパン及びそれらの混合物から選択される。
【０１９８】
本発明の製剤は、好適な緩衝剤の添加により緩衝することができる。
【０１９９】
吸入器(inhaler)又は通気器(insufflator)において使用するための、例えばゼラチン製のカプセル及びカートリッジは、本発明の化合物及び好適な粉末基剤(例えばラクトース又はデンプン)の吸入のための粉末混合物を含有するように製剤化することができる。各カプセル又はカートリッジは、一般的に、200μg〜10mgの本発明の化合物を含有し得る。あるいは、本発明の化合物は、ラクトースなどの賦形剤を伴わずに提供され得る。
【０２００】
本発明による局所製剤中の本発明の化合物の割合は、調製される製剤の正確なタイプによって決まるが、一般的には、0.01〜10重量％の範囲内であろう。一般的には、大部分のタイプの調製物について、用いられる割合は、0.05〜1％、例えば0.1〜0.5％の範囲内であろう。
【０２０１】
エアロゾル製剤は、好ましくは、エアロゾルの各計量用量又は「パフ」が、20μg〜10mg、好ましくは20μg〜5mg、より好ましくは約20μg〜0.5mgの本発明の化合物を含有するように配置される。投与は、1日1回又は1日数回、例えば2、3、4又は8回(各回に例えば1、2又は3回用量を与える)であってよい。エアロゾル剤による総1日用量は、20μg〜2.0mg、例えば50μg〜1.0mgの範囲内であろう。吸入器又は通気器におけるカプセル及びカートリッジにより送達される総1日用量及び計量用量は、一般的に、エアロゾル製剤により送達される総1日用量及び計量用量の2倍であろう。
【０２０２】
懸濁エアロゾル製剤の場合、粒状(例えば、微粉化)薬物の粒径は、エアロゾル製剤の投与の際に実質的に全ての薬物の肺への吸入を可能とするようなものでなければならず、従って、100ミクロン未満、望ましくは20ミクロン未満、また特に1〜10ミクロン(例えば1〜5ミクロン、より好ましくは2〜3ミクロン)の範囲内であろう。
【０２０３】
本発明の製剤は、適切な容器中での、例えば超音波処理又は高せん断ミキサーを利用した、本発明の医薬及び化合物の、選択された噴射剤への分散又は溶解によって調製することができる。この方法は、望ましくは制御された湿度条件下で行われる。
【０２０４】
本発明によるエアロゾル製剤の化学的及び物理的安定性並びに薬学的な許容可能性は、当業者に周知の技術により決定することができる。このため、例えば、成分の化学的安定性は、例えば製品の長期保存後に、HPLCアッセイによって決定することができる。物理的安定性データは、他の従来の分析技術から、例えば、漏れ試験により、バルブ送達アッセイ(1作動当たりの平均射出重量)により、用量再現性アッセイ(1作動当たりの活性成分)により、またスプレー分布分析などにより得ることができる。
【０２０５】
本発明による懸濁エアロゾル製剤の安定性は、従来の技術により、例えば、バックライト散乱装置を用いて凝集粒度分布を測定することにより、又はカスケードインパクション若しくは「ツインインピンジャー(twin impinger)」分析法で粒度分布を測定することによって測定することができる。本明細書中で使用される「ツインインピンジャー」アッセイへの言及は、British Pharmacopaeia 1988、A204-207頁、付属書XVII Cにおいて定義されるとおり、「装置Aを用いた加圧吸入における放出用量の沈着の測定」を意味する。このような技術により、エアロゾル製剤の「吸入性画分(respirable fraction)」を計算することが可能となる。「吸入性画分(respirable fraction)」を計算するために用いられる1つの方法は、1作動当たり下流インピンジメントチャンバー中で回収される活性成分の量である「微粒子画分」(上記のツインインピンジャー法を用いて1作動当たりに送達される活性成分の総量のパーセントとして表される)を参照することによる方法である。
【０２０６】
用語「計量用量吸入器」すなわちMDIは、缶、缶を覆う固定キャップ及び上記キャップ内に位置する製剤計量バルブを含むユニットを意味する。MDIシステムは、好適なチャネリングデバイスを含む。好適なチャネリングデバイスは、例えば、バルブアクチュエータと円筒状又は円錐状の通路とを含み、この通路を通して、医薬を充填されたキャニスターから計量バルブを経由して患者の鼻又は口へと送達することができる(例えばマウスピースアクチュエータ)。
【０２０７】
MDIキャニスターは、一般的に、使用される噴射剤の蒸気圧に耐えることができる容器、例えばプラスチックボトル若しくはプラスチックコーティングされたガラスボトル又は好ましくは金属缶(例えば、場合により陽極酸化処理、ラッカーコーティング及び/又はプラスチックコーティングされていてもよいアルミニウム又はその合金の缶)(例えばWO96/32099を参照することにより本明細書に組み込まれる、ここで缶の内面の一部又は全部は、場合により1種以上の非フルオロカーボンポリマーと組み合わせて1種以上のフルオロカーボンポリマーでコーティングされている)を含み、この容器は計量バルブで密閉されている。キャップは、超音波溶接、ねじ込み継ぎ手又は圧着を介して缶上に固定することができる。本明細書中で教示されるMDIは、当技術分野の方法によって調製することができる(例えば、上記のByron及びWO96/32099を参照)。好ましくは、キャニスターはキャップアセンブリによって取り付けられ、薬物計量バルブは上記キャップ内に位置し、当該キャップは所定の位置に圧着されている。
【０２０８】
本発明の一実施形態において、缶の金属製内面は、フルオロポリマー(より好ましくは非フルオロポリマーとブレンドされたフルオロポリマー)でコーティングされている。本発明の別の実施形態において、缶の金属製内面は、ポリテトラフルオロエチレン(PTFE)とポリエーテルスルホン(PES)のポリマーブレンドでコーティングされている。本発明のさらなる実施形態において、缶の金属製内面の全体は、ポリテトラフルオロエチレン(PTFE)とポリエーテルスルホン(PES)のポリマーブレンドでコーティングされている。
【０２０９】
計量バルブは、1作動当たりに計量量の製剤を送達し、バルブを通した噴射剤の漏出を防止するためのガスケットを組み込むように設計されている。ガスケットは、例えば、低密度ポリエチレン、クロロブチル、ブロモブチル、EPDM、黒色及び白色ブタジエン-アクリロニトリルゴム、ブチルゴム及びネオプレンなどの任意の好適なエラストマー材料を含み得る。好適なバルブは、エアロゾル業界でよく知られている製造業者、例えば、Valois社(フランス)(例えばDF10、DF30、DF60)、Bespak plc社(イギリス)(例えばBK300、BK357)及び3M-Neotechnic Ltd社(イギリス)(例えばSPRAYMISER)から市販されている。
【０２１０】
様々な実施形態において、MDIは、他の構造(例えば、限定するものではないが、MDIを格納し収容するためのオーバーラップパッケージ、例えば、米国特許第6,119,853号；第6,179,118号；第6,315,112号；第6,352,152号；第6,390,291号；及び第6,679,374号に記載されているものなど；並びに用量カウンターユニット、例えば、限定するものではないが、米国特許第6,360,739号及び第6,431,168号に記載されているものなど)と併せて使用することもできる。
【０２１１】
充填キャニスターの商業生産用大規模バッチの調製のため、医薬エアロゾル製造の当業者によく知られている従来のバルク製造方法及びバルク製造機を用いることができる。このため、例えば、懸濁エアロゾル製剤を調製するための1つのバルク製造方法では、計量バルブをアルミニウム缶に圧着して空のキャニスターを形成する。粒子状医薬を充填容器に添加し、液化噴射剤を、任意選択の賦形剤と共に、充填容器を通して製造容器へと加圧充填する。薬物懸濁液を、充填機に再循環させる前に混合し、次いで、1アリコートの薬物懸濁液を、計量バルブを通してキャニスターに充填する。溶液エアロゾル製剤を調製するためのバルク製造方法の一例では、計量バルブをアルミニウム缶に圧着して空のキャニスターを形成する。液化噴射剤(任意選択の賦形剤と共に)と溶解させた医薬を、充填容器を通して製造容器に加圧充填する。
【０２１２】
代替的方法では、確実に製剤が蒸発しないように十分に低温の条件下で、1アリコートの液化製剤を開放キャニスターに添加し、その後計量バルブをキャニスターに圧着する。
【０２１３】
典型的には、医薬用途用に調製されたバッチにおいては、各充填キャニスターを、確認秤量し、バッチ番号をコードし、放出試験前に保管用のトレーに詰める。本発明の化合物を含む懸濁剤及び溶液剤は、ネブライザーを介して患者に投与することもできる。噴霧療法に利用される溶媒又は懸濁剤は、水、水性生理食塩水、アルコール又はグリコール(例えば、エタノール、イソプロピルアルコール、グリセロール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール)等又はそれらの混合物などの任意の製薬上許容される液体であってよい。生理食塩水溶液は、投与後に薬理学的活性をわずかに示すか又は全く示さない塩を利用する。アルカリ金属塩若しくはアンモニウムハロゲン塩などの有機塩(例えば、塩化ナトリウム、塩化カリウム)又はカリウム塩、ナトリウム塩及びアンモニウム塩などの有機塩、あるいは有機酸(例えば、アスコルビン酸、クエン酸、酢酸、酒石酸等)はいずれも、この目的のために使用することができる。
【０２１４】
他の製薬上許容される賦形剤を、懸濁剤又は溶液剤に添加してもよい。本発明の化合物は、無機酸(例えば、塩酸、硝酸、硫酸及び/又はリン酸)；有機酸(例えば、アスコルビン酸、クエン酸、酢酸及び酒石酸等)、錯化剤(例えばEDTA若しくはクエン酸及びその塩)；又は抗酸化剤(例えばビタミンE若しくはアスコルビン酸などの抗酸化剤)の添加によって安定化させることができる。これらは、式(I)の化合物又はその製薬上許容される塩を安定化させるために単独で又は一緒に使用することができる。塩化ベンザルコニウム又は安息香酸及びその塩などの保存剤を添加してもよい。特に懸濁剤の物理的安定性を改善するため、界面活性剤を添加してもよい。これらの界面活性剤としては、レシチン、ジナトリウムジオクチルスルホスクシネート、オレイン酸及びソルビタンエステルなどが挙げられる。
【０２１５】
鼻に投与するための製剤としては、加圧ポンプによって鼻に投与される加圧エアロゾル製剤及び水性製剤を挙げることができる。非加圧製剤であって、鼻腔への局所投与に適合した製剤が特に興味深い。好適な製剤は、この目的のための希釈剤又は担体として水を含有する。肺又は鼻に投与するための水性製剤は、従来の賦形剤(例えば緩衝剤、張性改変剤など)と共に提供することができる。また水性製剤は、噴霧によって鼻に投与することもできる。
【０２１６】
本発明の化合物は、流体ディスペンサー(例えば、分配ノズル又は分配オリフィスを有し、使用者がそのポンプ機構に力を加えるとそれを通して計量用量の流体製剤が分配される流体ディスペンサー)から送達するための流体製剤として製剤化することができる。このような流体ディスペンサーは、一般的に、複数回計量用量の流体製剤のリザーバーを備え、この用量は連続的なポンプの作動により分配可能である。分配ノズル又はオリフィスは、流体製剤を鼻腔へ噴霧分配するため、使用者の鼻孔に挿入するように構成することができる。上述のタイプの流体ディスペンサーはWO 05/044354に記載及び例示されており、その全体の内容が参照により本明細書に組み込まれる。ディスペンサーは、流体製剤を含有する容器に搭載された圧縮ポンプを有する流体排出デバイスを収容するハウジングを有する。ハウジングは、ハウジングに対して内側に動かすことができる少なくとも1つの指で操作できるサイドレバーを有し、このサイドレバーは、ハウジング中で上記容器を上方にカム(cam)してポンプを圧縮し、計量用量の製剤を、ポンプ軸からハウジングの経鼻ノズルを通してポンプアウトさせる。一実施形態において、流体ディスペンサーは、WO05/044354の図30〜40に示される一般的なタイプの流体ディスペンサーである。
【０２１７】
担体が固体である鼻腔内投与に適合した医薬製剤としては、鼻に接近して保持される粉末の容器から鼻腔を通した急速吸入によって投与される、例えば20〜500ミクロンの範囲内の粒径を有する粗粉末が挙げられる。鼻腔用スプレー又は点鼻薬として投与するための、担体が液体である好適な製剤としては、本発明の化合物の水溶液又は油溶液が挙げられる。
【０２１８】
ウイルス感染症により引き起こされるか又は増悪する疾患の幾つかは、皮膚障害(例えば、皮膚発疹)を生じさせ得る。経皮投与に適合した医薬製剤は、患者の表皮と長時間密着させたままにしておくことが意図される個別のパッチ剤として提供することができる。例えば、活性成分は、Pharmaceutical Research, 3(6)、318 (1986)に一般的に記載されるとおり、パッチ剤からイオン導入法によって送達することができる。
【０２１９】
局所投与に適合した医薬製剤は、軟膏剤、クリーム剤、懸濁剤、ローション剤、散剤、溶液剤、ペースト剤、ゲル剤、スプレー剤、エアロゾル剤又は油剤として製剤化することができる。
【０２２０】
軟膏剤、クリーム剤及びゲル剤は、例えば、好適な増粘剤及び/又はゲル化剤及び/又は溶媒の添加と共に、水性基剤又は油性基剤と共に製剤化することができる。従って、このような基剤としては、例えば、水及び/又は油(液体パラフィン又は植物油(例えばラッカセイ油若しくはヒマシ油)など)、あるいはポリエチレングリコールなどの溶媒が挙げられる。基剤の性質に応じて使用し得る増粘剤及びゲル化剤としては、軟パラフィン、ステアリン酸アルミニウム、セトステアリルアルコール、ポリエチレングリコール、羊脂、蜜蝋、カルボキシポリメチレン及びセルロース誘導体、並びに/又はモノステアリン酸グリセリル及び/若しくは非イオン性乳化剤などが挙げられる。
【０２２１】
ローション剤は、水性基剤又は油性基剤と共に製剤化することが可能であり、一般的には1種以上の乳化剤、安定化剤、分散剤、懸濁化剤又は増粘剤も含有するだろう。
【０２２２】
外用散剤は、任意の好適な粉末基剤、例えば、タルク、ラクトース又はデンプンを利用して形成することができる。点滴剤は、1種以上の分散剤、可溶化剤、懸濁化剤又は保存剤も含む水性基剤又は非水性基剤と共に製剤化することができる。
【０２２３】
局所用調製物は、患部への1日当たり1回以上の塗布により投与することが可能である。皮膚領域上で、密封包帯法を有利に使用することができる。連続送達又は長期送達は、接着リザーバー系によって達成することができる。
【０２２４】
眼内又は耳内の処置のため、製剤を、局所用軟膏剤又はクリーム剤として塗布することができる。軟膏剤として製剤化される場合、式(I)の化合物又はその製薬上許容される塩は、パラフィン性軟膏基剤又は水混和性軟膏基剤のいずれかと共に用いることができる。あるいは、式(I)の化合物又はその製薬上許容される塩を、水中油クリーム基剤又は油中水クリーム基剤を有するクリーム中で製剤化してもよい。
【０２２５】
非経口投与に適合した医薬製剤としては、抗酸化剤、緩衝剤、静菌剤及び製剤を意図される受容者の血液と等張にする溶質を含有し得る水性及び非水性滅菌注射溶液；並びに懸濁化剤及び増粘剤を含有し得る水性及び非水性滅菌懸濁剤が挙げられる。製剤は、単位用量容器又は複数回用量容器(例えば密封したアンプル及びバイアル)で提供することが可能であり、また使用直前に滅菌液体担体(例えば注射用水)の添加のみが必要とされる凍結-乾燥(凍結乾燥)状態で保存することができる。即席注射溶液剤及び懸濁液剤は、滅菌散剤、顆粒剤及び錠剤から調製することができる。
【０２２６】
ウイルス感染症、特にHRV感染症により増悪した喘息の治療のため、本発明の化合物又は医薬製剤は、コルチコステロイドなどの抗炎症剤又はその医薬製剤と一緒に投与することができる。例えば、本発明の化合物は、抗炎症剤(例えばコルチコステロイド)と一緒に、吸入用の乾燥散剤製剤のような単一の製剤として製剤化することができる。あるいは、本発明の化合物を含む医薬製剤は、抗炎症剤(例えばコルチコステロイド)を含む医薬製剤と組み合わせて、同時に又は連続的に投与することができる。例えば、本発明の化合物を含む医薬製剤と、抗炎症剤(例えばコルチコステロイド)を含むさらなる医薬製剤とは、それぞれ吸入を介した両製剤の同時投与に適したデバイス中に保持され得る。
【０２２７】
本発明の化合物と一緒に投与するのに適したコルチコステロイドとしては、フロ酸フルチカゾン、プロピオン酸フルチカゾン、ジプロピオン酸ベクロメタゾン(beclomethasone diproprionate)、ブデソニド、シクレソニド、フロ酸モメタゾン、トリアムシノロン、フルニソリド及びプレドニシロンなどが挙げられる。吸入を介して本発明の化合物と一緒に投与するのに適したコルチコステロイドとしては、フロ酸フルチカゾン、プロピオン酸フルチカゾン、ジプロピオン酸ベクロメタゾン(beclomethasone diproprionate)、ブデソニド、シクレソニド、フロ酸モメタゾン、及びフルニソリドなどが挙げられる。
【０２２８】
従って、さらなる態様によれば、本発明は、式(I)の化合物又はその製薬上許容される塩と1種以上の抗炎症剤(例えばコルチコステロイド)又はホスファチジルイノシトール-4,5-ビスホスフェート3-キナーゼ-デルタ(PI3Kδ)の阻害剤とを含む医薬製剤を提供する。
【０２２９】
さらなる態様によれば、本発明は、ウイルス感染症(例えばHRV)により増悪した喘息の治療方法を提供し、この方法は、治療上有効量の式(I)の化合物又はその製薬上許容される塩及び1種以上の抗炎症剤(例えばコルチコステロイド)を、それを必要とする対象に投与することを含む。
【０２３０】
さらなる態様によれば、本発明は、ウイルス感染症により増悪した喘息の治療において使用するための、式(I)の化合物又はその製薬上許容される塩及び1種以上の抗炎症剤(例えばコルチコステロイド)を提供する。
【０２３１】
さらなる態様によれば、本発明は、ウイルス感染症により増悪した喘息の治療のための医薬の製造における、式(I)の化合物又はその製薬上許容される塩及び1種以上の抗炎症剤(例えばコルチコステロイド)の使用を提供する。
【０２３２】
さらなる態様によれば、本発明は、ウイルス感染症(例えばHRV)により増悪した嚢胞性線維症の治療方法を提供し、この方法は、治療上有効量の式(I)の化合物又はその製薬上許容される塩及び1種以上の抗炎症剤(例えばコルチコステロイド)を、それを必要とする対象に投与することを含む。
【０２３３】
さらなる態様によれば、本発明は、ウイルス感染症により増悪した嚢胞性線維症の治療において使用するための、式(I)の化合物又はその製薬上許容される塩及び1種以上の抗炎症剤(例えばコルチコステロイド)を提供する。
【０２３４】
さらなる態様によれば、本発明は、ウイルス感染症により増悪した嚢胞性線維症の治療のための医薬の製造における、式(I)の化合物又はその製薬上許容される塩及び1種以上の抗炎症剤(例えばコルチコステロイド)の使用を提供する。
【０２３５】
さらなる態様によれば、本発明は、ウイルス感染症(例えばHRV)により増悪した鬱血性心不全の治療方法を提供し、この方法は、治療上有効量の式(I)の化合物又はその製薬上許容される塩及び1種以上の抗炎症剤(例えばコルチコステロイド)を、それを必要とする対象に投与することを含む。
【０２３６】
さらなる態様によれば、本発明は、ウイルス感染症により増悪した鬱血性心不全の治療において使用するための、式(I)の化合物又はその製薬上許容される塩及び1種以上の抗炎症剤(例えばコルチコステロイド)を提供する。
【０２３７】
さらなる態様によれば、本発明は、ウイルス感染症により増悪した鬱血性心不全の治療のための医薬の製造における、式(I)の化合物又はその製薬上許容される塩及び1種以上の抗炎症剤(例えばコルチコステロイド)の使用を提供する。
【０２３８】
以下の実施形態は、1種以上の抗炎症剤との組み合わせに関する上記の態様のそれぞれに当てはまる。
【０２３９】
ある実施形態において、医薬製剤は、1種の抗炎症剤を含む。
【０２４０】
一実施形態において、抗炎症剤はコルチコステロイドである。
【０２４１】
一実施形態において、コルチコステロイドは、フロ酸フルチカゾンである。
【０２４２】
一実施形態において、コルチコステロイドは、プロピオン酸フルチカゾンである。
【０２４３】
一実施形態において、抗炎症剤は、ホスファチジルイノシトール-4,5-ビスホスフェート3-キナーゼ-デルタ(PI3Kδ)の阻害剤、例えばネミラリシブである(Sriskantharajahら, Annals of the New York Academy of Sciences (2013)、1280、35；Cahnら, Pulmonary Pharmacology and Therapeutics, (2017)、46, 69；及びStarkら, Current Opinion in Pharmacology, (2015), 23, 82を参照)。
【０２４４】
本発明の化合物又は医薬製剤は、ウイルス感染症により増悪したCOPDの治療のための1種以上の気管支拡張剤、又はその医薬製剤と一緒に投与することができる。例えば、本発明の化合物は、吸入用の乾燥散剤製剤などの単一の製剤として、1種以上の気管支拡張剤と一緒に製剤化することができる。あるいは、本発明の化合物を含む医薬製剤は、1種以上の気管支拡張剤を含む医薬製剤と組み合わせて、同時に又は連続的に投与することができる。さらなる代替手段において、本発明の化合物と気管支拡張剤とを含む製剤は、さらなる気管支拡張剤を含む医薬製剤と組み合わせて投与することができる。例えば、本発明の化合物を含む医薬製剤と、1種以上の気管支拡張剤を含むさらなる医薬製剤とは、それぞれ吸入を介した両製剤の同時投与に適したデバイス中に保持され得る。
【０２４５】
本発明の化合物と一緒に投与するのに適した気管支拡張剤としては、β2-アドレナリン受容体アゴニスト及び抗コリン剤が挙げられる。β2-アドレナリン受容体アゴニストの例としては、例えば、ビランテロール、サルメテロール、サルブタモール、ホルモテロール、サルメファモール、フェノテロール、カルモテロール、エタンテロール、ナミンテロール、クレンブテロール、ピルブテロール、フレルブテロール、レプロテロール、バンブテロール、インダカテロール、テルブタリン及びそれらの塩、例えばサルメテロールのキシナホ酸(1-ヒドロキシ-2-ナフタレンカルボキシレート)塩、サルブタモールの硫酸塩又はホルモテロールのフマル酸塩などが挙げられる。抗コリン剤の例としては、ウメクリジニウム(例えば臭化物として)、イプラトロピウム(例えば臭化物として)、オキシトロピウム(例えば臭化物として)及びチオトロピウム(例えば臭化物として)が挙げられる。一実施形態において、本発明の化合物は、β2-アドレナリン受容体アゴニスト(例えばビランテロール)及び抗コリン剤(例えばウメクリジニウム)と一緒に投与することができる。
【０２４６】
さらなる態様によれば、本発明は、式(I)の化合物又はその製薬上許容される塩及び1種以上の気管支拡張剤を含む医薬製剤を提供する。
【０２４７】
さらなる態様によれば、本発明は、ウイルス感染症により増悪したCOPDの治療方法を提供し、この方法は、治療上有効量の式(I)の化合物又はその製薬上許容される塩及び1種以上の気管支拡張剤を、それを必要とする対象に投与することを含む。
【０２４８】
さらなる態様によれば、本発明は、ウイルス感染症により増悪したCOPDの治療において使用するための、式(I)の化合物又はその製薬上許容される塩及び1種以上の気管支拡張剤を提供する。
【０２４９】
さらなる態様によれば、本発明は、ウイルス感染症により増悪したCOPDの治療のための医薬の製造における、式(I)の化合物又はその製薬上許容される塩及び1種以上の気管支拡張剤の使用を提供する。
【０２５０】
以下の実施形態は、1種以上の気管支拡張剤との組み合わせに関連する上記の態様のそれぞれに当てはまる。
【０２５１】
ある実施形態において、1種以上の気管支拡張剤は、1種以上のβ2-アドレナリン受容体アゴニストを含む。
【０２５２】
ある実施形態において、1種以上の気管支拡張剤は、1種以上の抗コリン剤を含む。
【０２５３】
ある実施形態において、1種以上の気管支拡張剤は、1種以上のβ2-アドレナリン受容体アゴニスト及び1種以上の抗コリン剤を含む。
【０２５４】
ある実施形態において、1種以上の気管支拡張剤は、β2-アドレナリン受容体アゴニスト及び抗コリン剤を含む。
【０２５５】
ある実施形態において、1種以上の気管支拡張剤は、β2-アドレナリン受容体アゴニストである1種の気管支拡張剤を含む。
【０２５６】
ある実施形態において、1種以上の気管支拡張剤は、抗コリン剤である1種の気管支拡張剤を含む。
【０２５７】
ある実施形態において、β2-アドレナリン受容体アゴニストはビランテロールである。
【０２５８】
ある実施形態において、抗コリン剤はウメクリジニウムである。さらなる実施形態において、抗コリン剤は臭化ウメクリジニウムである。
【０２５９】
さらなる態様によれば、本発明は、a) 式(I)の化合物又はその製薬上許容される塩, b) 1種以上の気管支拡張剤、及びc) 1種以上の抗炎症剤を含む医薬製剤を提供する。
【０２６０】
さらなる態様によれば、本発明は、ウイルス感染症により増悪したCOPDの治療方法を提供し、この方法は、治療上有効量のa) 式(I)の化合物又はその製薬上許容される塩、 b) 1種以上の気管支拡張剤、及びc) 1種以上の抗炎症剤を、それを必要とする対象に投与することを含む。
【０２６１】
さらなる態様によれば、本発明は、ウイルス感染症により増悪したCOPDの治療において使用するための、a) 式(I)の化合物又はその製薬上許容される塩、b) 1種以上の気管支拡張剤、及びc) 1種以上の抗炎症剤を提供する。
【０２６２】
さらなる態様によれば、本発明は、ウイルス感染症により増悪したCOPDの治療のための医薬の製造における、a) 式(I)の化合物又はその製薬上許容される塩、b) 1種以上の気管支拡張剤、及びc) 1種以上の抗炎症剤の使用を提供する。
【０２６３】
以下の実施形態は、1種以上の気管支拡張剤及び1種以上の抗炎症剤との組み合わせに関連する上記の態様のそれぞれに当てはまる。
【０２６４】
ある実施形態において、1種以上の気管支拡張剤は、1種以上のβ2-アドレナリン受容体アゴニストを含む。
【０２６５】
ある実施形態において、1種以上の気管支拡張剤は、1種以上の抗コリン剤を含む。
【０２６６】
ある実施形態において、1種以上の気管支拡張剤は、1種以上のβ2-アドレナリン受容体アゴニスト及び1種以上の抗コリン剤を含む。
【０２６７】
ある実施形態において、1種以上の気管支拡張剤は、β2-アドレナリン受容体アゴニスト及び抗コリン剤を含む。
【０２６８】
ある実施形態において、1種以上の気管支拡張剤は、β2-アドレナリン受容体アゴニストである1種の気管支拡張剤を含む。
【０２６９】
ある実施形態において、1種以上の気管支拡張剤は、抗コリン剤である1種の気管支拡張剤を含む。
【０２７０】
ある実施形態において、β2-アドレナリン受容体アゴニストは、ビランテロールである。
【０２７１】
ある実施形態において、抗コリン剤はウメクリジニウムである。さらなる実施形態において、抗コリン剤は臭化ウメクリジニウムである。
【０２７２】
ある実施形態において、1種以上の抗炎症剤はコルチコステロイドである。
【０２７３】
さらなる実施形態において、コルチコステロイドはフロ酸フルチカゾンである。
【０２７４】
さらなる実施形態において、コルチコステロイドはプロピオン酸フルチカゾンである。
【０２７５】
さらなる実施形態において、1種以上の気管支拡張剤は、ビランテロール及びウメクリジニウムである。
【０２７６】
さらなる実施形態において、1種以上の気管支拡張剤は、ビランテロール及びウメクリジニウムの両方であり、1種以上の抗炎症剤はフロ酸フルチカゾンである。
【０２７７】
さらなる実施形態において、1種以上の気管支拡張剤は、ビランテロール及びウメクリジニウムの両方であり、1種以上の抗炎症剤はプロピオン酸フルチカゾンである。
【０２７８】
本発明の化合物は、公知のPI4KIIIβ阻害剤を上回る改善されたプロファイルを有し得、例えば、公知のPI4KIIIβ阻害剤と比較して、本発明の特定の化合物は、以下の特性の1つ以上を有し得る：
(i) より強力なPI4KIIIβ阻害活性；
(ii) 改善されたPI4KIIIβに対する選択性；
(iii) 酵素T1/2の増大；
(iv) 細胞能力(cell potency)の改善；
(v) 肺保持の改善
(vi) 溶解性の改善；及び/又は
(vii) 生体組織中で蓄積する化合物のレベルの低下。
【０２７９】
上記のとおり、投与される場合、公知のPI4KIIIβ阻害剤と比較して、低いレベルの本発明の化合物が生体組織中に蓄積し得る。特に、本発明の化合物は、脾臓において比較的低い蓄積レベルを有し得る。先の研究は、脾臓におけるPI4KIIIβ阻害剤の蓄積が不利であり得る(例えば、アポトーシスを引き起こし得る)ことを示した。
【０２８０】
支持化合物(Supporting compound)
以下の支持化合物は、当業者が本発明の化合物、製剤を調製及び使用し、本発明の方法を使用するためのガイダンスとして、本発明を例示する。本発明の特定の実施形態が記載されているが、当業者であれば、様々な変更及び変形がなされ得ることを理解するであろう。「調製は、他の調製と同様に、又は他の調製の一般的な方法により実施された」との言及は、例えば、時間、温度、後処理条件、試薬量の変更等の通常のパラメータの変動を包含し得る。
【０２８１】
金属水素化物(水素化ナトリウムを含む)及び有機金属試薬を含む反応は、別段に特定されない限り、アルゴン又は窒素下で実施される。
【０２８２】
以下の中間体及び支持化合物において、化合物の相対立体化学が特定されている場合、この立体化学は、化合物の名称及び構造の両方で示される。
【０２８３】
特定の以下の中間体及び支持化合物において、出発物質は、他の中間体又は化合物番号を参照することにより特定される。このことは、任意の特定の中間体又は支持化合物から得られる実際の物質(又は「バッチ」)が、本明細書中で例示されるその後のステップにおいて必ず使用されたことを示すものではない。
【０２８４】
別段に記載されない限り、出発物質は市販されていた。全ての溶媒及び市販の試薬は実験グレードのものであり、受領したとおりのまま使用した。
【０２８５】
絶対立体化学がわかっており、且つ化合物が単一エナンチオマーである場合、太線又は点線の楔形記号
【０２８６】
【化４１】
2021510711.tif 000043
【０２８７】
が適宜使用される。絶対立体化学はわからないが単一エナンチオマーであることはわかる場合、星印(*)が使用される。
【０２８８】
中間体及び支持化合物の名称は、「ChemBioDraw Ultra v12」又は「ACD Name Pro 6.02」内の化合物命名プログラムを用いて取得した。
【０２８９】
本明細書中で、これらの方法、スキーム及び実施例において使用される記号及び表現法は、現代の科学文献、例えばJournal of the American Chemical Societyにおいて使用されているものと一致している。
【０２９０】
略語
以下のリストは、本明細書中で使用される特定の略語及び記号の定義を提供する。このリストは包括的ではないが、本明細書中以下に定義されていない略語及び記号の意味は、当業者に容易に明らかであろうことが理解されるだろう。本発明の記載において、化学元素は、元素周期表に従って特定される。
2021510711.tif 000044
【実施例】
【０２９１】
LCMS法
方法A
カラム：Acquity BEH C18(50mmx2.1mm、1.7μm)。移動相：A：水中0.1％ギ酸；B：アセトニトリル中0.1％ギ酸。時間(分)/％B：0/3、0.4/3、2.0/98、3.4/98、3.5/3、4.0/3。カラム温度：35℃、流速：0.6mL/分。
【０２９２】
方法B
カラム：XBridge BEH C18(50mmx4.6mm、2.5μM)。移動相：A：5mM重炭酸アンモニウム；B：アセトニトリル。時間(分)/％B：0/5、0.5/5、1/15、3.3/98、5.2/98、5.5/5、6.0/5。カラム温度：35℃、流速：1.3mL/分。
【０２９３】
方法C
カラム：Acquity BEH C18(50mmx2.1mm、1.7μm)。移動相：A：水中0.1％ギ酸；B：アセトニトリル中0.1％ギ酸。時間(分)/％B：0/3、0.4/3、2.5/98、3.4/98、3.5/3、4.0/3。カラム温度：35℃、流速：0.6mL/分。
【０２９４】
方法D
カラム：XBridge BEH C18(50mmx4.6mm、2.5μM)。移動相：A：5mM重炭酸アンモニウム；B：アセトニトリル。時間(分)/％B：0/5、1.5/15、7/98、9/98、9.5/5、10/5。カラム温度：35℃、流速：1.3mL/分。
【０２９５】
方法E
カラム：Acquity BEH C18(50mmx2.1mm、1.7μm)。移動相：A：水中0.05％ギ酸；B：アセトニトリル中0.05％ギ酸。時間(分)/％B：0/3、0.4/3、3.2/98、3.8/98、4.2/3、4.5/3。カラム温度：35℃、流速：0.6mL/分。
【０２９６】
方法F
カラム：40℃のAcquity UPLC CSH C18カラム(50mmx2.1mm(内径)、1.7μm)。以下の溶媒を利用した：A=アンモニア溶液でpH10に調整した水中10mM重炭酸アンモニウム。B=アセトニトリル。時間(分)/％B：0/3、0.05/3、1.5/95、1.9/95、2.0/3。流速：1mL/分。MS：Waters ZQ。イオン化モード：交互スキャンポジティブ及びネガティブエレクトロスプレー。
【０２９７】
方法G
カラム：Acquity BEH C18(50mmx2.1mm、1.7μm)。移動相：A：水中0.1％ギ酸；B：アセトニトリル中0.1％ギ酸。時間(分)/％B：0/3、0.4/3、3.2/98、3.8/98、4.2/3、4.5/3。カラム温度：35℃、流速：0.6mL/分。
【０２９８】
方法H
カラム：Acquity BEH C18(50mmx2.1mm、1.7μm)。移動相：A：水中5mM重炭酸アンモニウム(pH10)；B：アセトニトリル。時間(分)/％B：0/3、0.4/3、2.5/98、3.4/98、3.5/3、4.0/3。カラム温度：35℃、流速：0.6mL/分。
【０２９９】
方法I
カラム：Acquity BEH C18(100mmx2.1mm、1.7μm)。移動相：A：水中0.05％TFA；B：アセトニトリル。時間(分)/％B：0/3、0.4/3、3.5/98、4.5/98、5.0/3、5.5/3。カラム温度：35℃、流速：0.45mL/分。
【０３００】
方法J
カラム：40℃のAcquity UPLC CSH C18(50mmx2.1mm(内径)、1.7μm)。以下の溶媒を利用した：A=水中ギ酸の0.1％v/v溶液。B=アセトニトリル中ギ酸の0.1％v/v溶液。時間(分)/％B：0/3、1.5/95、1.9/95、2.0/3。流速：1mL/分。MS：Waters ZQ. イオン化モード：交互スキャンポジティブ及びネガティブエレクトロスプレー。
【０３０１】
方法K
カラム：XSelect CSH C18(150mmx3.0mm、2.5μm)。移動相：A：水中0.05％TFA；B：100％アセトニトリル。時間(分)/％B：0/3、1/3、8/98、11/98、11.1/3、12/3。カラム温度：35℃、流速：0.7mL/分。
【０３０２】
方法L
カラム：BEH C18(100mmx2.1mm、1.7μm)。移動相：A：水中0.1％TFA、B：アセトニトリル中0.1％TFA。時間(分)/％B：0/3、8.5/100、9.0/100、9.5/3、10/3。カラム温度：50℃、流速：0.55mL/分。
【０３０３】
方法M
カラム：CSH C18(100mmx2.1mm(内径)、1.7μm)。移動相：A：水中ギ酸の0.1％v/v溶液；B：アセトニトリル中ギ酸の0.1％v/v溶液。時間(分)/％B：0/3、8.5/99.9、9/99.9、9.5/3、10/3。カラム温度：50℃。流速：0.8mL/分。
【０３０４】
質量分離自動分取HPLC(MDAP)
化合物の精製のために使用される質量分離自動分取HPLCのための方法は、以下に記載されている。溶媒溶出勾配は、溶媒A中0〜99％の溶媒Bにわたり、25分以下の時間をかけて実行する。
【０３０５】
全方法について(特定されない限り)：
DAD検出は210nm〜350nmであった。MS条件：MS：Waters ZQ
イオン化モード：交互スキャンポジティブ/ネガティブエレクトロスプレー
スキャン範囲：100〜1000AMU。スキャン時間：0.2秒又は0.50秒。スキャン間遅延：0.1秒又は0.2秒。
注入量：1mL又は3mL。
【０３０６】
方法A
カラム：周囲温度のXselect CSH C18カラム(150mmx30mm(内径)、5μm充填径)。以下の溶媒を利用した：
A=水中アンモニアでpH10に調整した10mM重炭酸アンモニウム。
B=アセトニトリル。
流速：40mL/分。
【０３０７】
方法B
カラム：周囲温度のXselect CSH C18 カラム(150mmx30mm(内径)、5μm充填径)。以下の溶媒を利用した：
A=水中ギ酸の0.1％v/v溶液
B=アセトニトリル中ギ酸の0.1％v/v溶液。
流速：40mL/分。
【０３０８】
中間体1
2-ブロモ-1-メチル-1H-イミダゾール
【０３０９】
【化４２】
2021510711.tif 000045
【０３１０】
窒素雰囲気下で、1-メチル-1H-イミダゾール(20g、244mmol)を無水THF(200mL)中に溶解した。この溶液を-78℃で撹拌し、n-BuLi(167mL、268mmol)を-78℃でゆっくりと滴下添加した。1時間後、無水THF(200mL)中のCBr4(97g、292mmol)溶液を加えた。この溶液を-78℃で2時間、室温で1時間撹拌した。反応混合物を飽和塩化アンモニウム水溶液(300mL)でクエンチし、酢酸エチル(2x200mL)で抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過して減圧下で蒸発させた。粗化合物を、石油エーテル中60％酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物を得た。LCMS(方法B)：rt=1.89、[M+H]+=161。
【０３１１】
中間体2
3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンゾニトリル
【０３１２】
【化４３】
2021510711.tif 000046
【０３１３】
IPA(120mL)及び水(120mL)中の(3-シアノフェニル)ボロン酸(16g、109mmol)、2-ブロモ-1-メチル-1H-イミダゾール(中間体1、15.8g、98mmol)及び炭酸ナトリウム(46.2g、436mmol)の混合物を撹拌し、窒素で20分間脱気し、その後PdCl2(dppf)-DCM付加物(4.45g、5.44mmol)を加え、密閉チューブ中130℃で18時間撹拌した。冷却後、反応混合物を酢酸エチル(300mL)で希釈し、水(300mL)で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過して減圧下で蒸発させた。粗化合物を、石油エーテル中70％酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物を得た。LCMS(方法C)：rt=0.57、[M+H]+=184。
【０３１４】
中間体3
(3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)フェニル)メタンアミン
【０３１５】
【化４４】
2021510711.tif 000047
【０３１６】
0℃において、メタノール(150mL)中7Mアンモニア中の3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンゾニトリル(中間体2、12g、65.5mmol)の混合物に、ラネーニッケル(5g、65.5mmol)を加えた。反応混合物を、水素圧(60psi)下に室温で24時間撹拌した。この反応混合物を、セライトパッドに通して濾過し、メタノール(300mL)で洗浄し、濾液を減圧下で濃縮した。反応を同一スケールで反復した。2バッチの粗物質を合わせ、中性アルミナクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物を得た。LCMS(方法D)：rt=2.91、[M+H]+=188。
【０３１７】
中間体4
エチル7-ヒドロキシ-2-メチルピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-カルボキシレート
【０３１８】
【化４５】
2021510711.tif 000048
【０３１９】
0℃において、エタノール(100mL)中のナトリウム(Z)-1,4-ジエトキシ-1,4-ジオキソブタ-2-エン-2-オレート(21.64g、103mmol)の溶液に、1,4-ジオキサン中4M HCl(28.3mL)を加え、その後5-メチル-1H-ピラゾール-3-アミン(10g、103mmol)を加えた。反応物を85℃に加熱し、3時間撹拌した。反応混合物を室温に冷却し、濃縮した。残留物をDCM中10％メタノール(200mL)中に溶解し、飽和重炭酸ナトリウム溶液(100mL)で洗浄した。有機層をブライン(50mL)で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過して減圧下で蒸発乾固した。残留物をジエチルエーテルで摩砕し、表題化合物を得た。LCMS(方法A)：rt=1.53、[M+H]+=222。
【０３２０】
中間体5
エチル7-クロロ-2-メチルピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-カルボキシレート
【０３２１】
【化４６】
2021510711.tif 000049
【０３２２】
エチル7-ヒドロキシ-2-メチルピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-カルボキシレート(中間体4、10g、45.2mmol)に、オキシ塩化リン(50mL、536mmol)を加え、反応物を90℃で24時間撹拌した。反応混合物を室温に冷却し、減圧下で濃縮した。残留物をDCM(100mL)中に溶解し、飽和重炭酸ナトリウム水溶液(60mL)を用いることによりpHを中性に調整した。有機層を水(100mL)、ブライン(100mL)で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過して濃縮した。残留物をDCM中10％メタノール(100mL)中に溶解し、シリカ(14g)上に吸着させ、次いでシリカクロマトグラフィー(50g)により精製し、石油エーテル中10％酢酸エチルで溶出した。生成物画分を合わせ、減圧下で蒸発させ、表題化合物を得た。LCMS(方法B)：rt=3.13、[M+H]+=240。
【０３２３】
中間体6
エチル7-クロロ-3-ヨード-2-メチルピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-カルボキシレート
【０３２４】
【化４７】
2021510711.tif 000050
【０３２５】
DCM(220mL)中のエチル7-クロロ-2-メチルピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-カルボキシレート(中間体5、15g、62.6mmol)の溶液に、酢酸(25mL)及びNIS(14.79g、65.7mmol)を加えた。反応物を28℃で6時間撹拌した。反応混合物をDCM(150mL)で希釈し、飽和チオ硫酸ナトリウム(2x90mL)、ブライン(60mL)で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過して濃縮し、表題化合物を得た。LCMS(方法A)：rt=2.24、[M+H]+=366。
【０３２６】
中間体7
エチル3-ヨード-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-カルボキシレート
【０３２７】
【化４８】
2021510711.tif 000051
【０３２８】
DMSO(50mL)中のDIPEA(14.33mL、82mmol)の溶液に、(3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)フェニル)メタンアミン(中間体3、5.38g、28.7mmol)及びエチル7-クロロ-3-ヨード-2-メチルピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-カルボキシレート(中間体6、10g、27.4mmol)を加え、反応物を16時間撹拌した。反応混合物を氷冷水(200mL)中に注ぎ入れ、固体を濾過し、水(50mL)で洗浄して真空下で乾燥し、表題化合物を得た。LCMS(方法A)：rt=1.79、[M+H]+=517。
【０３２９】
中間体8
4-ブロモ-1-メトキシ-2-(メチルスルホニル)ベンゼン
【０３３０】
【化４９】
2021510711.tif 000052
【０３３１】
70℃において、水(160mL)中の亜硫酸ナトリウム(16.55g、131mmol)及び重炭酸ナトリウム(11.03g、131mmol)の撹拌溶液に、1,4-ジオキサン(160mL)中の5-ブロモ-2-メトキシベンゼン-1-スルホニルクロリド(25g、88mmol)を加えた。反応混合物を70℃で1時間撹拌した。反応混合物を室温に冷却し、溶媒を減圧下で除去して、粗中間体を白色固体として得た。粗生成物をDMF(300mL)中に溶解し、ヨウ化メチル(10.95mL、175mmol)を室温で加え、混合物を室温で2時間撹拌した。反応混合物を氷冷水中に注ぎ入れ、酢酸エチル(300mL)で抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過して減圧下で乾燥した。粗化合物をn-ペンタン(100mL)で洗浄し、表題化合物を得た。LCMS(方法A)：rt=1.84、[M+H]+=265。
【０３３２】
中間体9
2-(4-メトキシ-3-(メチルスルホニル)フェニル)-4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン
【０３３３】
【化５０】
2021510711.tif 000053
【０３３４】
1,4-ジオキサン(150mL)中の4-ブロモ-1-メトキシ-2-(メチルスルホニル)ベンゼン(中間体8、15g、56.6mmol)及び4,4,4',4',5,5,5',5'-オクタメチル-2,2'-ビ(1,3,2-ジオキサボロラン)(21.55g、85mmol)の撹拌溶液に、酢酸カリウム(8.33g、85mmol)を室温で加えた。反応混合物をアルゴンで15分間脱気し、次いで、PdCl2(dppf)-DCM付加物(2.31g、2.83mmol)を、この反応混合物に室温で加え、再度アルゴン雰囲気下で15分間脱気した。反応混合物を100℃で3時間撹拌した。冷却後、反応混合物を、セライトパッドに通して濾過し、メタノール(50mL)で洗浄し、濾液を減圧下で濃縮した。粗生成物を、ヘキサン中20％酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物を得た。LCMS(方法E)：rt=2.16、[M+H]+=313。
【０３３５】
中間体10
エチル3-(4-メトキシ-3-(メチルスルホニル)フェニル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-カルボキシレート
【０３３６】
【化５１】
2021510711.tif 000054
【０３３７】
マイクロ波バイアル中で、2-(4-メトキシ-3-(メチルスルホニル)フェニル)-4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン(中間体9、680mg、2.179mmol)、エチル3-ヨード-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-カルボキシレート(中間体7、750mg、1.453mmol)、クロロ(2-ジシクロヘキシルホスフィノ-2',4',6'-トリイソプロピル-1,1'-ビフェニル)[2-(2'-アミノ-1,1'-ビフェニル)]パラジウム(II)(57.1mg、0.073mmol)及びフッ化カリウム(253mg、4.36mmol)を、1,4-ジオキサン(10mL)及び水(5mL)中に溶解し、このバイアルを密閉し、窒素で脱気した。反応物を80℃で16時間撹拌した。さらなるクロロ(2-ジシクロヘキシルホスフィノ-2',4',6'-トリイソプロピル-1,1'-ビフェニル)[2-(2'-アミノ-1,1'-ビフェニル)]パラジウム(II)(57.1mg、0.073mmol)、フッ化カリウム(253mg、4.36mmol)及び2-(4-メトキシ-3-(メチルスルホニル)フェニル)-4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン(中間体9、680mg、2.179mmol)を加え、反応物を80℃でさらに8時間撹拌した。さらなるクロロ(2-ジシクロヘキシルホスフィノ-2',4',6'-トリイソプロピル-1,1'-ビフェニル)[2-(2'-アミノ-1,1'-ビフェニル)]パラジウム(II)(57.1mg、0.073mmol)、フッ化カリウム(253mg、4.36mmol)及び2-(4-メトキシ-3-(メチルスルホニル)フェニル)-4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン(中間体9、680mg、2.179mmol)を加え、反応物を80℃でさらに16時間撹拌した。反応物を室温に冷却し、セライトに通して濾過し(3x20mL酢酸エチルで洗浄)、溶媒を真空中で除去した。反応混合物を酢酸エチル(50mL)と水(20mL)との間で分配し、有機相を分離し、疎水性フィルタに通して乾燥し、溶媒を真空中で除去した。シクロヘキサン中0〜100％酢酸エチルで20CVにわたり溶出するシリカクロマトグラフィー(120g)により精製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=1.04、[M+H]+=515。
【０３３８】
中間体11
(3-(4-メトキシ-3-(メチルスルホニル)フェニル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-イル)メタノール
【０３３９】
【化５２】
2021510711.tif 000055
【０３４０】
エチル3-(4-メトキシ-3-(メチルスルホニル)フェニル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-カルボキシレート(中間体10、180mg、0.313mmol)を、窒素雰囲気下に0℃でTHF(5mL)中に溶解し、水素化アルミニウムリチウム(THF中1M)(0.626mL、0.626mmol)を加え、次いで反応物をさらに3時間撹拌した。2M水酸化ナトリウム(5mL)の添加により反応物をクエンチし、さらに1時間撹拌した。有機相を酢酸エチル(3x10mL)で抽出し、この有機相を疎水性フィルタに通して乾燥し、溶媒を真空中で除去して表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.89、[M+H]+=533。
【０３４１】
中間体12
3-(4-メトキシ-3-(メチルスルホニル)フェニル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-カルバルデヒド
【０３４２】
【化５３】
2021510711.tif 000056
【０３４３】
(3-(4-メトキシ-3-(メチルスルホニル)フェニル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-イル)メタノール(中間体11、112mg、0.21mmol)をDCM(2.5mL)中に溶解し、二酸化マンガン(32mg、0.368mmol)を加え、反応物を室温で4時間撹拌した。さらなる二酸化マンガン(183mg、2.103mmol)を加え、反応物を室温でさらに16時間撹拌した。この反応混合物をセライトカートリッジに通して濾過し、DCM(3x5mL)で洗浄して溶媒を真空中で除去し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=1.0、[M+H]+=531。
【０３４４】
中間体13
エチル7-((tert-ブトキシカルボニル)(3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)-3-ヨード-2-メチルピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-カルボキシレート
【０３４５】
【化５４】
2021510711.tif 000057
【０３４６】
DCM(25mL)中のエチル2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-カルボキシレート(中間体7、3.8g、9.73mmol)の溶液に、DIPEA(5.1mL、29.2mmol)、DMAP(1.189g、9.73mmol)及びBoc-無水物(3.39mL、14.6mmol)を加え、反応物を室温で16時間撹拌した。反応混合物を、DCM(50mL)で希釈し、水(25mL)で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過して濃縮した。残留物をDCM(30mL)中に溶解し、シリカゲル(5g)上に吸収させ、石油エーテル中酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィー(15g)により精製し、表題化合物を得た。LCMS(方法G)：rt=2.14、[M+H]+=617。
【０３４７】
中間体14
tert-ブチル(5-(ヒドロキシメチル)-3-ヨード-2-メチルピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-7-イル)(3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)カルバメート
【０３４８】
【化５５】
2021510711.tif 000058
【０３４９】
エタノール(10mL)中のエチル7-((tert-ブトキシカルボニル)(3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)-3-ヨード-2-メチルピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-カルボキシレート(中間体13、500mg、0.811mmol)の溶液に、水素化ホウ素ナトリウム(92mg、2.433mmol)を加え、反応物を10℃で3時間撹拌した。反応混合物を1M HCl(5mL)でクエンチし、pHを6に調整し、その後濃縮した。残留物を酢酸エチル(25mL)中に溶解し、水(20mL)で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥して、濾過して濃縮し、表題化合物を得た。LCMS(方法H)：rt=2.01、[M+H]+=573。
【０３５０】
中間体15
tert-ブチル(5-ホルミル-3-ヨード-2-メチルピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-7-イル)(3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)カルバメート
【０３５１】
【化５６】
2021510711.tif 000059
【０３５２】
DMP(1752mg、4.13mmol)を、DCM(7.5mL)中のtert-ブチル(5-(ヒドロキシメチル)-3-ヨード-2-メチルピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-7-イル)(3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)カルバメート(中間体14、1306mg、2.274mmol)の撹拌溶液に1回で加えた。反応物を18時間撹拌したまま置いた。飽和亜硫酸ナトリウム水溶液(10mL)を加え、反応物を室温で2時間撹拌した。反応混合物を、DCM(150mL)と水(150mL)との間で分配した。有機層を分離し、水性層をさらなるDCM(2x50mL)で抽出した。合わせた有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液(100mL)、水(100mL)で洗浄し、疎水性フリットに通し、その後真空中で蒸発させた。残留物を最小量のDCM中に溶解し、シクロヘキサン中0〜50％酢酸エチル：エタノール(3：1(v/v))で溶出するシリカゲルクロマトグラフィー(120g)により精製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=1.27、[M+H]+=573。
【０３５３】
中間体16
1-メトキシ-2-(メチルスルホニル)ベンゼン
【０３５４】
【化５７】
2021510711.tif 000060
【０３５５】
窒素雰囲気下で0℃のDCM(1L)中の(2-メトキシフェニル)(メチル)スルファン(50g、324mmol)の撹拌溶液に、m-CPBA(140g、810mmol)を加えた。反応混合物を室温で2時間撹拌した。反応混合物をDCM(300mL)で希釈し、飽和炭酸ナトリウム水溶液(2x500mL)で洗浄した。水性層をDCM(200mL)で抽出した。合わせた有機物を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過して減圧下で蒸発させ、表題化合物を得た。LCMS(方法I)：rt=2.28、[M+H]+=187。
【０３５６】
中間体17
2-((2-メトキシフェニル)スルホニル)エタノール
【０３５７】
【化５８】
2021510711.tif 000061
【０３５８】
窒素雰囲気下で-78℃のTHF(250mL)中の1-メトキシ-2-(メチルスルホニル)ベンゼン(中間体16、25g、123mmol)の撹拌溶液に、n-ブチルリチウム(115mL、184mmol)を滴下添加し、反応混合物を-78℃で30分間撹拌し、次いで0℃に冷却した。パラホルムアルデヒド(73.6g、2450mmol)を少しずつ加え、次いで反応混合物を0℃で2時間撹拌した。この反応混合物を塩化アンモニウム溶液(120mL)でクエンチし、酢酸エチル(2x200mL)で抽出した。合わせた有機物をブライン(150mL)で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過して減圧下で蒸発させた。粗化合物をシリカゲル(4g)上に予め吸収させ、シリカゲルクロマトグラフィー(10gカラム、ヘキサン中80％酢酸エチル)により精製し、表題化合物を得た。LCMS(方法C)：rt=1.16、[M+H]+=217。
【０３５９】
中間体18
2-((5-ブロモ-2-メトキシフェニル)スルホニル)エタノール
【０３６０】
【化５９】
2021510711.tif 000062
【０３６１】
窒素雰囲気下で室温のDMF(100mL)中の2-((2-メトキシフェニル)スルホニル)エタノール(中間体17、10g、46.2mmol)の撹拌溶液に、再結晶化させたNBS(16.46g、92mmol)を加えた。反応混合物を50℃で18時間温めた。反応混合物を室温に冷却し、酢酸エチル(300mL)で希釈し、氷冷水(2x500mL)で洗浄した。有機層を分離し、水性層を再度酢酸エチル(300mL)で抽出した。合わせた有機層をブライン(300mL)で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過して減圧下で濃縮した。粗化合物をシリカゲル(10g)上に予め吸収させ、シリカゲルクロマトグラフィー(90gカラム、ヘキサン中40％酢酸エチル)により精製し、表題化合物を得た。LCMS(方法C)：rt=1.85、[M+H]+=295。
【０３６２】
中間体19
2-((2-メトキシ-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)フェニル)スルホニル)エタノール
【０３６３】
【化６０】
2021510711.tif 000063
【０３６４】
1,4-ジオキサン(150mL)中の2-((5-ブロモ-2-メトキシフェニル)スルホニル)エタノール(中間体18、10g、33.9mmol)の撹拌溶液に、4,4,4’,4’,5,5,5’,5’-オクタメチル-2,2’-ビ(1,3,2-ジオキサボロラン)(17.2g、67.8mmol)及び酢酸カリウム(9.98g、102mmol)を室温で加え、次いで反応混合物を窒素で15分間脱気した。PdCl2(dppf)-DCM付加物(2.77g、3.39mmol)を加え、反応混合物を密閉チューブ中で100℃にて3時間加熱した。この反応混合物をセライトパッド上で濾過し、このセライトを酢酸エチル(2x100mL)で洗浄した。合わせた有機物を減圧下で濃縮した。反応を同一スケールで反復した。2バッチの粗生成物を混合し、DCM(100mL)中に溶解した。混合物を木炭(5g)で処理し、10分間還流し、その後セライトパッド上で濾過した。このセライトをDCM(2x100mL)で洗浄した。合わせた有機物を減圧下で濃縮した。粗生成物を、シリカゲルクロマトグラフィー(石油エーテル中酢酸エチル)により精製し、表題化合物を得た。LCMS(方法C)：rt=2.17、[M+H]+=343。
【０３６５】
中間体20
tert-ブチル(5-ホルミル-3-(3-((2-ヒドロキシエチル)スルホニル)-4-メトキシフェニル)-2-メチルピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-7-イル)(3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)カルバメート
【０３６６】
【化６１】
2021510711.tif 000064
【０３６７】
マイクロ波バイアルに、1,4-ジオキサン(2mL)及び水(1mL)中のtert-ブチル(5-ホルミル-3-ヨード-2-メチルピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-7-イル)(3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)カルバメート(中間体15、487mg、0.851mmol)、2-((2-メトキシ-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)フェニル)スルホニル)エタン-1-オール(中間体19、415mg、1.03mmol)、PdCl2(dppf)(64mg、0.087mmol)及びフッ化カリウム(151mg、2.6mmol)を入れた。反応容器を密閉し、マイクロ波反応器中、100℃で合計1.5時間加熱した。反応混合物をセライトに通し、メタノール(50mL)で洗浄し、真空中で蒸発させた。残留物をDCM(30mL)中に溶解し、水(15mL)で分配した。有機層を分離し、水性層をさらなるDCM(2x20mL)で抽出した。合わせた有機層を疎水性フリットに通し、真空中で蒸発させた。残留物を、シクロヘキサン中50〜100％酢酸エチル：エタノール(3：1(v/v)、1％トリエチルアミン含有)で20CVにわたり溶出するシリカクロマトグラフィー(80g)により精製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=1.06、[M+H]+=661。
【０３６８】
中間体21
2-(3-ヨード-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-イル)プロパン-2-オール
【０３６９】
【化６２】
2021510711.tif 000065
【０３７０】
エチル3-ヨード-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-カルボキシレート(中間体7、275mg、0.533mmol)を、窒素下で0℃のTHF(5mL)中で撹拌した。臭化メチルマグネシウム(ジブチルエーテル中1M)(1.75mL、1.75mmol)を2分間かけて加え、混合物を室温に温め、次いで4.5時間置いた。反応混合物を水(2mL)でクエンチし、次いでDCM(50mL)と水(50mL)で分配した。有機相を回収し、水性相をDCM(50mL)で洗浄し、その後酢酸エチル(50mL)で洗浄した。合わせた有機層を疎水性フリットに通し、蒸発乾固した。残留物をDCM(2mL)中シリカゲルカラム(40g)上にロードし、シクロヘキサン中10〜60％酢酸エチル：エタノール(3：1(v/v)、1％トリエチルアミン含有)で溶出し、表題化合物を得た。LCMS(方法J)：rt=0.7、[M+H]+=503。
【０３７１】
中間体22
5-ブロモ-2-クロロ-N-(3-ヒドロキシプロピル)-N-メチルベンズアミド
【０３７２】
【化６３】
2021510711.tif 000066
【０３７３】
THF(100mL)中5-ブロモ-2-クロロ安息香酸(12.5g、53.1mmol)の撹拌溶液に、3-(メチルアミノ)プロパン-1-オール(5.21g、58.4mmol)、DIPEA(27.8mL、159mmol)及びHATU(22.2g、58.4mmol)を加え、反応混合物を室温で18時間撹拌した。反応混合物を水(100mL)で希釈し、酢酸エチル(200mL)で抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下で濃縮した。粗生成物をDCM(50mL)中に溶解し、シリカゲル(50g)上に予め吸収させ、シリカゲルクロマトグラフィー(150g、100％酢酸エチル)により精製し、表題化合物を得た。LCMS(方法K)：rt=5.30、[M+H]+=306。
【０３７４】
中間体23
2-クロロ-N-(3-ヒドロキシプロピル)-N-メチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド
【０３７５】
【化６４】
2021510711.tif 000067
【０３７６】
1,4-ジオキサン(100mL)中の5-ブロモ-2-クロロ-N-(3-ヒドロキシプロピル)-N-メチルベンズアミド(中間体22、10g、32.6mmol)の撹拌溶液に、4,4,4',4',5,5,5',5'-オクタメチル-2,2'-ビ(1,3,2-ジオキサボロラン)(9.69g、38.2mmol)、酢酸カリウム(9.60g、98mmol)を加え、反応物をアルゴンで30分間脱気した。PdCl2(dppf)-DCM付加物(0.266g、0.326mmol)を加え、混合物を20分間脱気した。反応混合物を100℃で18時間加熱した。反応混合物を室温に冷却し、セライトパッドに通して濾過し、DCM中10％メタノールで洗浄し、次いで減圧下で濃縮した。粗生成物をDCM(50mL)中に溶解し、フロリジル(50g)上に予め吸収させ、シリカゲルクロマトグラフィー(250g、石油エーテル中0〜100％酢酸エチル)により精製し、表題化合物を得た。LCMS(方法L)：rt=2.45、[M+H]+=354。
【０３７７】
中間体24
(S)-(5-ブロモ-2-メトキシフェニル)(3-ヒドロキシピロリジン-1-イル)メタノン
【０３７８】
【化６５】
2021510711.tif 000068
【０３７９】
DIPEA(1.134mL、6.49mmol)を、2-MeTHF(10mL)中の5-ブロモ-2-メトキシ安息香酸(500mg、2.164mmol)及びHATU(987mg、2.6mmol)の溶液に加え、この反応物を窒素下に撹拌したまま室温で30分間置いた。次いで、(S)-ピロリジン-3-オール(226mg、2.6mmol)を加え、反応物を撹拌したまま、DMF(5mL)を加えて室温で一晩置いた。反応混合物を減圧下で濃縮し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液(50mL)及び5％塩化リチウム溶液(50mL)で希釈し、酢酸エチル(2x100mL)で抽出した。合わせた有機層を疎水性フリットに通し、減圧下で濃縮し、窒素流下でさらに一晩乾燥した。残留物をDCM中にロードし、酢酸エチル中の酢酸エチル：エタノール(3：1(v/v)、1％トリエチルアミン含有)(0％、2CV；0〜100％、12CV)で溶出するシリカクロマトグラフィー(80g)により精製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.73、[M+H]+=300。
【０３８０】
中間体25
(S)-(3-ヒドロキシピロリジン-1-イル)(2-メトキシ-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)フェニル)メタノン
【０３８１】
【化６６】
2021510711.tif 000069
【０３８２】
(S)-(5-ブロモ-2-メトキシフェニル)(3-ヒドロキシピロリジン-1-イル)メタノン(中間体24、750mg、2.249mmol)、4,4,4',4',5,5,5',5'-オクタメチル-2,2'-ビ(1,3,2-ジオキサボロラン)(628mg、2.474mmol)、酢酸カリウム(662mg、6.75mmol)、PdCl2(dppf)(165mg、0.225mmol)、及び1,4-ジオキサン(6mL)を合わせ、排出-再充填による窒素下に置いた。この混合物を、マイクロ波反応器中、100℃で1時間加熱した。溶媒を減圧下で反応混合物から除去した。残留物を酢酸エチル(50mL)及び水(30mL)中に懸濁させ、セライトに通して濾過し、さらなる酢酸エチル(50mL)ですすいだ。この溶液をブライン(20mL)で希釈し、水性層をさらなる酢酸エチル(100mL)で洗浄し、合わせた有機層を疎水性フリットに通し、溶媒を減圧下で除去して表題化合物を得た。LCMS(方法J)：rt=0.85、[M+H]+=348。
【０３８３】
中間体26
tert-ブチル(5-(1-ヒドロキシエチル)-3-ヨード-2-メチルピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-7-イル)(3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)カルバメート
【０３８４】
【化６７】
2021510711.tif 000070
【０３８５】
tert-ブチル(5-ホルミル-3-ヨード-2-メチルピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-7-イル)(3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)カルバメート(中間体15、465mg、0.812mmol)をTHF(10mL)中に溶解し、-78℃に冷却した。臭化メチルマグネシウム(ジブチルエーテル中1M)(0.85mL、0.85mmol)を2分間にわたり滴下添加した。1時間45分後、臭化メチルマグネシウム(ジブチルエーテル中1M)(0.203mL、0.203mmol)を加え、混合物を-78℃でさらに3時間撹拌した。飽和塩化アンモニウム水溶液(5mL)及び水(10mL)を加え、混合物を室温に温めながら10分間撹拌した。DCM(20mL)を加え、混合物を移し、有機層を回収した。水性層をDCM(2x20mL)でさらに洗浄し、合わせた有機層を疎水性フリットに通し、蒸発乾固した。残留物を、DCM(1.5mL)中シリカゲルカラム上に湿充填(wet-loaded)し、シクロヘキサン中50〜60％酢酸エチルで30CVにわたり、その後シクロヘキサン中60〜85％酢酸エチルで10CVにわたり溶出した。生成物含有画分を合わせて蒸発乾固し、次いでジエチルエーテルで摩砕し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=1.2、[M+H]+=589。
【０３８６】
中間体27
5-ブロモ-N-(3-ヒドロキシプロピル)-2-メトキシ-N-メチルベンズアミド
【０３８７】
【化６８】
2021510711.tif 000071
【０３８８】
HATU(458.3mg、1.205mmol)及びDIPEA(0.655mL、3.75mmol)を、室温のTHF(10mL)中の5-ブロモ-2-メトキシ安息香酸(288.9mg、1.250mmol)の撹拌溶液に加えた。10分後、3-(メチルアミノ)プロパン-1-オール(0.146mL、1.500mmol)を加えた。2時間後、溶媒を真空中で除去し、得られた残留物を酢酸エチル(10mL)及び水(10mL)で希釈した。分離した水性相を酢酸エチル(2x10mL)でさらに抽出した。合わせた有機層を疎水性フリットに通し、溶媒を真空中で除去し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.78、[M+H]+=303。
【０３８９】
中間体28
N-(3-ヒドロキシプロピル)-2-メトキシ-N-メチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド
【０３９０】
【化６９】
2021510711.tif 000072
【０３９１】
4,4,4',4',5,5,5',5'-オクタメチル-2,2'-ビ(1,3,2-ジオキサボロラン)(1.114g、4.39mmol)、酢酸カリウム(1.077g、10.97mmol)、PdCl2(dppf).DCM付加物(0.299g、0.366mmol)及び1,4-ジオキサン(7mL)を合わせ、窒素下に置いた(真空/窒素間で3回循環させた)。1,4-ジオキサン(7mL)中の5-ブロモ-N-(3-ヒドロキシプロピル)-2-メトキシ-N-メチルベンズアミド(中間体27、1.7g、3.66mmol)の溶液を加え、混合物を、真空/窒素間で3回循環させた。次いで、反応物を、マイクロ波反応器中、100℃で90分間加熱した。冷却後、混合物を、セライトに通して濾過し、DCM(50mL)で洗浄し、溶媒を真空中で除去した。得られた残留物を、酢酸エチル(60mL)、水(60mL)及びブライン(20mL)中に溶解した。分離した水性層を酢酸エチル(2x30mL)で再抽出した。合わせた有機層を疎水性フリットに通し、溶媒を真空中で除去した。粗生成物を、シクロヘキサン中50〜100％酢酸エチルで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.89、[M+H]+=350。
【０３９２】
中間体29
5-ブロモ-N-エチル-N-(2-ヒドロキシエチル)-2-メトキシベンズアミド
【０３９３】
【化７０】
2021510711.tif 000073
【０３９４】
DIPEA(1.2mL、6.87mmol)及びHATU(980mg、2.58mmol)を、2-MeTHF(10mL)中の5-ブロモ-2-メトキシ安息香酸(500mg、2.164mmol)の撹拌溶液に加えた。15分後、2-(エチルアミノ)エタン-1-オール(0.25mL、2.56mmol)を加え、反応物を撹拌したまま一晩置いた。混合物を、酢酸エチル(50mL)と飽和重炭酸ナトリウム水溶液(50mL)との間で分配した。水性相を酢酸エチル(50mL)でさらに抽出した。合わせた有機相を飽和重炭酸ナトリウム水溶液(50mL)で洗浄し、溶媒を減圧下で除去した。残留物を、シクロヘキサン中0〜100％酢酸エチル：エタノール(3：1、1％トリエチルアミン含有)で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.8、[M+H]+=302。
【０３９５】
中間体30
N-エチル-N-(2-ヒドロキシエチル)-2-メトキシ-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド
【０３９６】
【化７１】
2021510711.tif 000074
【０３９７】
5-ブロモ-N-エチル-N-(2-ヒドロキシエチル)-2-メトキシベンズアミド(中間体29、1.2g、3.97mmol)、4,4,4',4',5,5,5',5'-オクタメチル-2,2'-ビ(1,3,2-ジオキサボロラン)(1.18g、4.65mmol)、PdCl2(dppf)(0.301g、0.411mmol)、酢酸カリウム(1.17g、11.92mmol)及び1,4-ジオキサン(8mL)を合わせ、排出及び再充填により窒素下に置いた。この混合物を、マイクロ波反応器中で100℃にて1.5時間加熱した。冷却後、反応混合物を、セライトに通して濾過し、メタノール(250mL)で洗浄し、溶媒を減圧下で除去した。残留物をDCM(30mL)中に再溶解し、水(30mL)で分配した。水性層をDCM(3x30mL)で再抽出し、合わせた有機抽出物を疎水性フリットに通して蒸発乾固し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt 0.92、[M+H]+=350。
【０３９８】
中間体31
5-ブロモ-2-クロロ-N-エチル-N-(2-ヒドロキシエチル)ベンズアミド
【０３９９】
【化７２】
2021510711.tif 000075
【０４００】
DIPEA(1.1mL、6.30mmol)及びHATU(1.05g、2.76mmol)を、2-MeTHF(10mL)中の5-ブロモ-2-クロロ安息香酸(509mg、2.162mmol)の撹拌溶液に加え、反応物を撹拌したまま室温で15分間置いた。2-(エチルアミノ)エタン-1-オール(0.25mL、2.56mmol)を加え、反応物を週末にかけて撹拌した。混合物を、酢酸エチル(50mL)と飽和重炭酸ナトリウム水溶液(50mL)との間で分配した。水性相を酢酸エチル(50mL)でさらに洗浄し、合わせた有機相を飽和重炭酸ナトリウム水溶液(50mL)で洗浄し、溶媒を減圧下で除去した。粗物質を、シクロヘキサン中20〜100％酢酸エチルで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製した。生成物含有画分を合わせて蒸発乾固した。残留物を、アンモニア溶液でpH10に調整した水中10mM重炭酸アンモニウム中の20〜60％アセトニトリル(0.01％アンモニア含有)で溶出する逆相カラムクロマトグラフィーでさらに精製し、表題化合物を得た。LCMS(方法E)：rt=0.85、[M+H]+=306。
【０４０１】
中間体32
2-クロロ-N-エチル-N-(2-ヒドロキシエチル)-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド
【０４０２】
【化７３】
2021510711.tif 000076
【０４０３】
4,4,4',4',5,5,5',5'-オクタメチル-2,2'-ビ(1,3,2-ジオキサボロラン)(462mg、1.819mmol)、5-ブロモ-2-クロロ-N-エチル-N-(2-ヒドロキシエチル)ベンズアミド(中間体31、453mg、1.478mmol)、PdCl2(dppf)(111mg、0.152mmol)及び酢酸カリウム(445mg、4.53mmol)を、1,4-ジオキサン(4mL)中で合わせた。混合物を脱気し、マイクロ波反応器中で100℃にて1時間加熱し、これを3回繰り返した。冷却後、この混合物を、セライトに通して濾過し、メタノール(100mL)で洗浄し、溶媒を真空中で除去した。残留物を、DCM(20mL)と水(10mL)との間で分配した。分離した水性層を、DCM(2x10mL)でさらに洗浄した。合わせた有機層を疎水性フリットに通し、溶媒を真空中で除去して表題化合物を得た。LCMS(方法D)：rt=1.05、[M+H]+= 354。
【０４０４】
中間体33
5-ブロモ-2-メトキシ-N-メチル-N-(テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)ベンズアミド
【０４０５】
【化７４】
2021510711.tif 000077
【０４０６】
HATU(1.391g、3.66mmol)及びDIPEA(1.72mL、9.85mmol)を、THF(10mL)中の5-ブロモ-2-メトキシ安息香酸(0.752g、3.25mmol)の撹拌懸濁液に加え、20分間撹拌した。N-メチルテトラヒドロ-2H-ピラン-4-アミン(0.382g、3.32mmol)を加え、反応混合物を撹拌したまま18時間置いた。溶媒を真空中で除去した。反応混合物をDCM(50mL)と水(50mL)との間で分配し、水性相をDCM(2x20mL)でさらに抽出し、有機相を疎水性フリットに通して濾過し、溶媒を真空中で除去した。残留物を最小量のDCM中に溶解し、シクロヘキサン中0〜100％酢酸エチル：エタノール(3：1、v/v)で溶出するシリカゲルクロマトグラフィー(120g)により精製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.89、[M+H]+=328。
【０４０７】
中間体34
2-メトキシ-N-メチル-N-(テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド
【０４０８】
【化７５】
2021510711.tif 000078
【０４０９】
5-ブロモ-2-メトキシ-N-メチル-N-(テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)ベンズアミド(中間体33、746mg、2.273mmol)、4,4,4',4',5,5,5',5'-オクタメチル-2,2'-ビ(1,3,2-ジオキサボロラン)(692mg、2.73mmol)、PdCl2(dppf).DCM(194mg、0.238mmol)、酢酸カリウム(664mg、6.77mmol)及び1,4-ジオキサン(10mL)を合わせ、マイクロ波反応器中、100℃にて1時間加熱した。反応混合物を、セライトに通して濾過し、溶媒を真空中で除去した。残留物を水(25mL)とDCM(25mL)との間で分配し、水性相をDCM(2x15mL)でさらに抽出し、有機相を疎水性フリットに通して濾過し、次いで蒸発乾固して表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=1.01、[M+H]+=376。
【０４１０】
中間体35
5-ブロモ-N-(3-ヒドロキシプロピル)-N,2-ジメチルベンズアミド
【０４１１】
【化７６】
2021510711.tif 000079
【０４１２】
DMF(4mL)中の5-ブロモ-2-メチル安息香酸(504mg、2.344mmol)、HATU(1053mg、2.77mmol)及びDIPEA(0.5mL、2.86mmol)を室温で30分間撹拌し、その後、3-(メチルアミノ)プロパン-1-オール(0.275mL、2.83mmol)を加えた。3時間後、混合物を、酢酸エチル(20mL)と水(15mL)との間で分配した。分離した水性層を酢酸エチル(15mL)でさらに抽出した。合わせた有機層を、5％塩化リチウム水溶液(2x10mL)、水(10mL)及びブライン(10mL)で洗浄した。有機層を疎水性フリットに通し、溶媒を真空中で除去した。粗物質を、シクロヘキサン中50〜100％酢酸エチルで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.80、[M+H]+=286。
【０４１３】
中間体36
N-(3-ヒドロキシプロピル)-N,2-ジメチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド
【０４１４】
【化７７】
2021510711.tif 000080
【０４１５】
酢酸カリウム(636mg、6.48mmol)、5-ブロモ-N-(3-ヒドロキシプロピル)-N,2-ジメチルベンズアミド(中間体35、685mg、2.154mmol)、4,4,4',4',5,5,5',5'-オクタメチル-2,2'-ビ(1,3,2-ジオキサボロラン)(663mg、2.61mmol)及びPdCl2(dppf)(131mg、0.179mmol)を、1,4-ジオキサン(5mL)中で合わせた。混合物を、真空と窒素との間で5回循環させることにより窒素下に置き、マイクロ波反応器中、100℃にて1時間加熱した。冷却後、溶媒を真空中で除去し、残留物をDCM(30mL)と水(20mL)との間で分配した。分離した水性層をDCM(2x20mL)でさらに洗浄し、合わせた有機層を疎水性フリットに通し、溶媒を真空中で除去して表題化合物を得た。LCMS(方法J)：rt=0.97、[M+H]+=334。
【０４１６】
中間体37
(S)-(5-ブロモ-2-クロロフェニル)(3-ヒドロキシピロリジン-1-イル)メタノン
【０４１７】
【化７８】
2021510711.tif 000081
【０４１８】
5-ブロモ-2-クロロ安息香酸(480mg、2.039mmol)及び(S)-ピロリジン-3-オール(178mg、2.039mmol)を用いて中間体33と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.73、[M+H]+=303。
【０４１９】
中間体38
(S)-(2-クロロ-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)フェニル)(3-ヒドロキシピロリジン-1-イル)メタノン
【０４２０】
【化７９】
2021510711.tif 000082
【０４２１】
(S)-(5-ブロモ-2-クロロフェニル)(3-ヒドロキシピロリジン-1-イル)メタノン(中間体37)を用いて中間体32と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.72、[M+H]+=352。
【０４２２】
中間体39
(S)-5-ブロモ-N-(1-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メトキシ-N-メチルベンズアミド
【０４２３】
【化８０】
2021510711.tif 000083
【０４２４】
5-ブロモ-2-メトキシ安息香酸(0.747g、3.23mmol)及び(S)-2-(メチルアミノ)プロパン-1-オール(0.321g、3.6mmol)を用いて中間体35と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.77、[M+H]+=302。
【０４２５】
中間体40
(S)-N-(1-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メトキシ-N-メチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド
【０４２６】
【化８１】
2021510711.tif 000084
【０４２７】
(S)-5-ブロモ-N-(1-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メトキシ-N-メチルベンズアミド(中間体39)を用いて中間体32と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.89、[M+H]+=350。
【０４２８】
中間体41
エチル3-ブロモ-7-クロロ-2-メチルピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-カルボキシレート
【０４２９】
【化８２】
2021510711.tif 000085
【０４３０】
NBSを用いて中間体6と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法J)：rt=1.11、[M+H]+=320。
【０４３１】
中間体42
エチル3-ブロモ-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-カルボキシレート
【０４３２】
【化８３】
2021510711.tif 000086
【０４３３】
エチル3-ブロモ-7-クロロ-2-メチルピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-カルボキシレート(中間体41、685mg、2.15mmol)、(3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)フェニル)メタンアミン(中間体3、443mg、2.365mmol)及びDIPEA(0.751mL、4.3mmol)を、DMSO(5mL)中、窒素下に80℃で3.5時間撹拌した。冷却後、混合物を氷冷水上に注ぎ、沈殿物を濾過により回収した。次いで、ケーキをDCM中に溶解し、減圧下で乾燥してジエチルエーテルで摩砕し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=1.06、[M+H]+=469。
【０４３４】
中間体42の代替的調製
エチル3-ブロモ-7-クロロ-2-メチルピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-カルボキシレート(中間体41、50g、157mmol)、(3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)フェニル)メタンアミン(中間体3、35.3g、188mmol)及びDIPEA(54.8mL、314mmol)を、DMSO(500mL)中、80℃で3時間撹拌した。冷却後、反応混合物を氷冷水中に注ぎ入れ、沈殿物を濾過により回収した。得られた固体をジエチルエーテル(500mL)で摩砕し、濾過して乾燥し、表題化合物を得た。LCMS(方法C)：rt=1.44、[M+H]+=469。
【０４３５】
中間体43
2-(3-ブロモ-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-イル)プロパン-2-オール
【０４３６】
【化８４】
2021510711.tif 000087
【０４３７】
エチル3-ブロモ-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-カルボキシレート(中間体42、1.76g、3.75mmol)を、THF(35mL)中、窒素下に0℃で撹拌した。メチルマグネシウムクロリド(THF中3M)(5.6mL、16.8mmol)を10分間かけて加え、混合物を0℃で30分間撹拌した。混合物を室温に温め、一晩撹拌した。反応混合物を、飽和塩化アンモニウム水溶液(5mL)でクエンチし、次いでDCM(100mL)と飽和塩化アンモニウム水溶液(100mL)とで分配した。有機相を回収し、水性相をDCM(2x25mL)で洗浄した。合わせた有機層を疎水性フリットに通し、蒸発乾固した。残留物を、THF(35mL)中、窒素下に0℃で撹拌した。メチルマグネシウムクロリド(THF中3M)(3.75mL、11.25mmol)を10分間かけて加え、混合物を0℃で40分間撹拌し、その後、これを室温で20分間撹拌した。反応混合物を、飽和塩化アンモニウム水溶液(5mL)でクエンチし、次いでDCM(100mL)と飽和塩化アンモニウム水溶液(100mL)とで分配した。有機相を回収し、水性相をDCM(2x25mL)で洗浄した。合わせた有機層を疎水性フリットに通し、減圧下で濃縮し、高真空ライン上で4日間乾燥して、表題化合物を得た。LCMS(方法J)：rt=0.65、[M+H]+= 455。
【０４３８】
中間体43の代替的調製
エチル3-ブロモ-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-カルボキシレート(中間体42、81g、173mmol)を、窒素下に5℃のDCM(300mL)及びTHF(100mL)中で撹拌した。メチルマグネシウムクロリド(THF中3M)(230mL、690mmol)を、45分間にわたり滴下添加し、内部温度を15℃未満に維持して、さらに10分間撹拌した。混合物を飽和塩化アンモニウム水溶液(400mL)でクエンチし、DCM(2L)と水(2L)との間で分配した。有機相を硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をDCM(500mL)及びTHF(250mL)中に溶解し、窒素下に0℃で冷却した。内部温度を10℃未満に維持しながら、メチルマグネシウムクロリド(THF中3M)(173mL、518mmol)を1時間にわたり滴下添加した。添加後、混合物を5℃で10分間撹拌した。この混合物を飽和塩化アンモニウム水溶液(400mL)でクエンチし、DCM(2L)と水(2L)との間で分配した。有機相を硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下で濃縮して、表題化合物を得た。LCMS(方法J)：rt=0.60、[M+H]+= 455。
【０４３９】
中間体44
(S)-5-ブロモ-N-(1-ヒドロキシプロパン-2-イル)-N,2-ジメチルベンズアミド
【０４４０】
【化８５】
2021510711.tif 000088
【０４４１】
5-ブロモ-2-メチル安息香酸(800mg、3.72mmol)及び(S)-2-(メチルアミノ)プロパン-1-オール(332mg、3.72mmol)を用いて中間体33と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.82、[M+H]+= 286。
【０４４２】
中間体45
(S)-N-(1-ヒドロキシプロパン-2-イル)-N,2-ジメチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド
【０４４３】
【化８６】
2021510711.tif 000089
【０４４４】
(S)-5-ブロモ-N-(1-ヒドロキシプロパン-2-イル)-N,2-ジメチルベンズアミド(中間体44)を用いて中間体32と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.92、[M+H]+= 334。
【０４４５】
中間体46
5-ブロモ-2-メトキシ-N,N-ジメチルベンズアミド
【０４４６】
【化８７】
2021510711.tif 000090
【０４４７】
5-ブロモ-2-メトキシ安息香酸(483mg、2.091mmol)及びジメチルアミン(THF中2M)(1.254mL、2.509mmol)を用いて中間体33と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.85、[M+H]+=258。
【０４４８】
中間体47
2-メトキシ-N,N-ジメチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド
【０４４９】
【化８８】
2021510711.tif 000091
【０４５０】
5-ブロモ-2-メトキシ-N,N-ジメチルベンズアミド(中間体46)を用いて中間体32と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=1.01、[M+H]+=306。
【０４５１】
中間体48
(R)-(5-ブロモ-2-クロロフェニル)(2-(ヒドロキシメチル)ピロリジン-1-イル)メタノン
【０４５２】
【化８９】
2021510711.tif 000092
【０４５３】
5-ブロモ-2-クロロ安息香酸(503mg、2.136mmol)及び(R)-ピロリジン-2-イルメタノールを用いて中間体33と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.89、[M+H]+=320。
【０４５４】
中間体49
(R)-(2-クロロ-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)フェニル)(2-(ヒドロキシメチル)ピロリジン-1-イル)メタノン
【０４５５】
【化９０】
2021510711.tif 000093
【０４５６】
(R)-(5-ブロモ-2-クロロフェニル)(2-(ヒドロキシメチル)ピロリジン-1-イル)メタノン(中間体48)を用いて中間体32と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.94、[M+H]+=366。
【０４５７】
中間体50
(R)-(5-ブロモ-2-メチルフェニル)(2-(ヒドロキシメチル)ピロリジン-1-イル)メタノン
【０４５８】
【化９１】
2021510711.tif 000094
【０４５９】
DMF(1mL)及びTHF(5mL)中の5-ブロモ-2-メチル安息香酸(534mg、2.483mmol)、HATU(1074mg、2.82mmol)及びDIPEA(0.520mL、2.98mmol)を室温で30分間撹拌し、このときに(R)-ピロリジン-2-イルメタノール(0.3mL、3.04mmol)を1回で加えた。反応物を18時間撹拌した。溶媒を真空中で除去した。残留物を酢酸エチル(40mL)中に溶解し、水(20mL)で分配した。有機層を分離し、5％塩化リチウム水溶液(2x10mL)、水(10mL)及びブライン(10mL)で洗浄した。次いで、有機層を疎水性フリットに通し、溶媒を真空中で除去した。残留物を最小量のDCM中に溶解し、シリカカラム(80g)上にロードし、シクロヘキサン中0〜100％酢酸エチル：エタノール(3：1(v/v)、1％トリエチルアミン含有)で12CVにわたり溶出し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.87、[M+H]+=298。
【０４６０】
中間体51
(R)-(2-(ヒドロキシメチル)ピロリジン-1-イル)(2-メチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)フェニル)メタノン
【０４６１】
【化９２】
2021510711.tif 000095
【０４６２】
(R)-(5-ブロモ-2-メチルフェニル)(2-(ヒドロキシメチル)ピロリジン-1-イル)メタノン(中間体50)を用いて中間体36と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=1.02、[M+H]+=346。
【０４６３】
中間体52
5-ブロモ-N-(2-ヒドロキシエチル)-2-メトキシ-N-メチルベンズアミド
【０４６４】
【化９３】
2021510711.tif 000096
【０４６５】
5-ブロモ-2-メトキシ安息香酸(400mg、1.731mmol)及び2-(メチルアミノ)エタン-1-オール(0.167mL、2.078mmol)を用いて中間体33と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.72、[M+H]+=288。
【０４６６】
中間体53
N-(2-ヒドロキシエチル)-2-メトキシ-N-メチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド
【０４６７】
【化９４】
2021510711.tif 000097
【０４６８】
5-ブロモ-N-(2-ヒドロキシエチル)-2-メトキシ-N-メチルベンズアミド(中間体52)を用いて中間体32と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.85、[M+H]+=336。
【０４６９】
中間体54
(5-ブロモ-2-メトキシフェニル)(3-ヒドロキシ-3-メチルピロリジン-1-イル)メタノン
【０４７０】
【化９５】
2021510711.tif 000098
【０４７１】
5-ブロモ-2-メトキシ安息香酸(503mg、2.177mmol)及び3-メチルピロリジン-3-オール(244mg、2.412mmol)を用いて中間体33と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.76、[M+H]+=314。
【０４７２】
中間体55
(3-ヒドロキシ-3-メチルピロリジン-1-イル)(2-メトキシ-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)フェニル)メタノン
【０４７３】
【化９６】
2021510711.tif 000099
【０４７４】
(5-ブロモ-2-メトキシフェニル)(3-ヒドロキシ-3-メチルピロリジン-1-イル)メタノン(中間体54)を用いて中間体32と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.91、[M+H]+=362。
【０４７５】
中間体56
(5-ブロモ-2-メトキシフェニル)(1,4-オキサゼパン-4-イル)メタノン
【０４７６】
【化９７】
2021510711.tif 000100
【０４７７】
5-ブロモ-2-メトキシ安息香酸(528mg、2.285mmol)及び1,4-オキサゼパン(272mg、2.69mmol)を用いて中間体33と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.87、[M+H]+=316。
【０４７８】
中間体57
(2-メトキシ-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)フェニル)(1,4-オキサゼパン-4-イル)メタノン
【０４７９】
【化９８】
2021510711.tif 000101
【０４８０】
(5-ブロモ-2-メトキシフェニル)(1,4-オキサゼパン-4-イル)メタノン(中間体56)を用いて中間体32と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=1.0、[M+H]+=362。
【０４８１】
中間体58
(S)-(5-ブロモ-2-メチルフェニル)(3-ヒドロキシピロリジン-1-イル)メタノン
【０４８２】
【化９９】
2021510711.tif 000102
【０４８３】
5-ブロモ-2-メチル安息香酸(493mg、2.293mmol)及び(S)-ピロリジン-3-オール(0.23mL、2.77mmol)を用いて中間体29と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.75、[M+H]+=284。
【０４８４】
中間体59
(S)-(3-ヒドロキシピロリジン-1-イル)(2-メチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)フェニル)メタノン
【０４８５】
【化１００】
2021510711.tif 000103
【０４８６】
(S)-(5-ブロモ-2-メチルフェニル)(3-ヒドロキシピロリジン-1-イル)メタノン(中間体58)を用いて中間体32と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.87、[M+H]+=332。
【０４８７】
中間体60
(S)-(5-ブロモ-2-メトキシフェニル)(3-メチルモルホリノ)メタノン
【０４８８】
【化１０１】
2021510711.tif 000104
【０４８９】
5-ブロモ-2-メトキシ安息香酸(505mg、2.186mmol)及び(S)-3-メチルモルホリン(251mg、2.481mmol)を用いて中間体50と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.92、[M+H]+=314。
【０４９０】
中間体61
(S)-(2-メトキシ-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)フェニル)(3-メチルモルホリノ)メタノン
【０４９１】
【化１０２】
2021510711.tif 000105
【０４９２】
(S)-(5-ブロモ-2-メトキシフェニル)(3-メチルモルホリノ)メタノン(中間体60)を用いて中間体32と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=1.04、[M+H]+=362。
【０４９３】
中間体62
(5-ブロモ-2-メチルフェニル)(3-ヒドロキシ-3-メチルピロリジン-1-イル)メタノン
【０４９４】
【化１０３】
2021510711.tif 000106
【０４９５】
5-ブロモ-2-メチル安息香酸(394mg、1.832mmol)及び3-メチルピロリジン-3-オール(222mg、2.199mmol)を用いて中間体33と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.81、[M+H]+=298。
【０４９６】
中間体63
(3-ヒドロキシ-3-メチルピロリジン-1-イル)(2-メチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)フェニル)メタノン
【０４９７】
【化１０４】
2021510711.tif 000107
【０４９８】
(5-ブロモ-2-メチルフェニル)(3-ヒドロキシ-3-メチルピロリジン-1-イル)メタノン(中間体62)を用いて中間体32と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.91、[M+H]+=346。
【０４９９】
中間体64
エチル7-((3-(1H-ピラゾール-1-イル)ベンジル)アミノ)-3-ブロモ-2-メチルピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-カルボキシレート
【０５００】
【化１０５】
2021510711.tif 000108
【０５０１】
(3-(1H-ピラゾール-1-イル)フェニル)メタンアミン(Sigma-Aldrich Inc.から入手可能)を用いて中間体42と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=1.21、[M+H]+=455。
【０５０２】
中間体65
エチル7-((3-(1H-ピラゾール-1-イル)ベンジル)アミノ)-3-ブロモ-2-メチルピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-カルボキシレート
【０５０３】
【化１０６】
2021510711.tif 000109
【０５０４】
エチル7-((3-(1H-ピラゾール-1-イル)ベンジル)アミノ)-3-ブロモ-2-メチルピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-カルボキシレート(中間体64)を用いて中間体43と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=1.20、[M+H]+= 441。
【０５０５】
中間体66
(R)-(5-ブロモ-2-メトキシフェニル)(2-(ヒドロキシメチル)ピロリジン-1-イル)メタノン
【０５０６】
【化１０７】
2021510711.tif 000110
【０５０７】
5-ブロモ-2-メトキシ安息香酸及び(R)-ピロリジン-2-イルメタノールを用いて中間体35と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.83、[M+H]+= 314。
【０５０８】
中間体67
(R)-(2-(ヒドロキシメチル)ピロリジン-1-イル)(2-メトキシ-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)フェニル)メタノン
【０５０９】
【化１０８】
2021510711.tif 000111
【０５１０】
(R)-(5-ブロモ-2-メトキシフェニル)(2-(ヒドロキシメチル)ピロリジン-1-イル)メタノン(中間体66)を用いて中間体36と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=1.02、[M+H]+=362。
【０５１１】
中間体68
5-ブロモ-2-クロロ-N-(2-ヒドロキシエチル)-N-メチルベンズアミド
【０５１２】
【化１０９】
2021510711.tif 000112
【０５１３】
THF中の5-ブロモ-2-クロロ安息香酸及び2-(メチルアミノ)エタン-1-オールを用いて中間体29と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.77、[M+H]+=294。
【０５１４】
中間体69
2-クロロ-N-(2-ヒドロキシエチル)-N-メチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド
【０５１５】
【化１１０】
2021510711.tif 000113
【０５１６】
中間体68を用いて中間体36と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.75、[M+H]+=340。
【０５１７】
中間体70
5-ブロモ-N-(2-ヒドロキシエチル)-N,2-ジメチルベンズアミド
【０５１８】
【化１１１】
2021510711.tif 000114
【０５１９】
5-ブロモ-2-メチル安息香酸及び2-(メチルアミノ)エタン-1-オールを用いて中間体29と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.76、[M+H]+=274。
【０５２０】
中間体71
N-(2-ヒドロキシエチル)-N,2-ジメチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド
【０５２１】
【化１１２】
2021510711.tif 000115
【０５２２】
中間体70を用いて中間体36と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.85、[M+H]+=320。
【０５２３】
中間体72
5-ブロモ-N-(2-ヒドロキシエチル)-N,2-ジメチルベンズアミド
【０５２４】
【化１１３】
2021510711.tif 000116
【０５２５】
THF中の5-ブロモ-2-メチル安息香酸及び2-(エチルアミノ)エタン-1-オールを用いて中間体29と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.84、[M+H]+=286。
【０５２６】
中間体73
N-エチル-N-(2-ヒドロキシエチル)-2-メチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド
【０５２７】
【化１１４】
2021510711.tif 000117
【０５２８】
中間体72を用いて中間体36と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.95、[M+H]+=334。
【０５２９】
中間体74
エチル2-(2-メチル-7-オキソ-4,7-ジヒドロピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-イル)アセテート
【０５３０】
【化１１５】
2021510711.tif 000118
【０５３１】
室温で、1,4-ジオキサン(150mL)中の5-メチル-1H-ピラゾール-3-アミン(25g、257mmol)の撹拌溶液に、ジエチル3-オキソペンタンジオエート(56.8mL、309mmol)を加え、その後、酢酸(7.37mL、129mmol)を加えた。反応混合物を100℃で6時間撹拌した。混合物を室温に冷却した。この固体を濾過により回収し、エチルエーテルで洗浄し、乾燥して、表題化合物を得た。LCMS(方法H)：rt=1.55、[M+H]+=236。
【０５３２】
中間体75
エチル2-(7-クロロ-2-メチルピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-イル)アセテート
【０５３３】
【化１１６】
2021510711.tif 000119
【０５３４】
0℃において、アセトニトリル(250mL)中のエチル2-(2-メチル-7-オキソ-4,7-ジヒドロピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-イル)アセテート(中間体74、22.5g、96mmol)の撹拌溶液に、DIPEA(33.4mL、191mmol)、N-メチルモルホリン(0.105mL、0.956mmol)及びPOCl3(17.83mL、191mmol)を加えた。反応混合物を、室温で24時間撹拌した。反応の完了後、混合物を濃縮し、その後、氷/水上に注いだ。混合物を重炭酸ナトリウムで中和し、酢酸エチル(2x300mL)で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過して減圧下で濃縮した。残留物をシリカクロマトグラフィー(ヘキサン中0〜20％酢酸エチル)により精製し、表題化合物を得た。LCMS(方法H)：rt=2.05、[M+H]+=254。
【０５３５】
中間体76
エチル2-(7-クロロ-3-ヨード-2-メチルピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-イル)アセテート
【０５３６】
【化１１７】
2021510711.tif 000120
【０５３７】
0℃において、DMF(160mL)中のエチル2-(7-クロロ-2-メチルピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-イル)アセテート(中間体75、8g、31.5mmol)の撹拌溶液に、N-ヨードスクシンイミド(7.09g、31.5mmol)を加えた。得られた反応混合物を室温で1時間撹拌した。反応混合物を氷冷水上に注ぎ、沈殿した固体を濾過により回収した。残留物を、シリカクロマトグラフィー(ヘキサン中0〜10％酢酸エチル)により精製し、表題化合物を得た。LCMS(方法H)：rt=2.43、[M+H]+=380。
【０５３８】
中間体77
エチル2-(3-ヨード-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-イル)アセテート
【０５３９】
【化１１８】
2021510711.tif 000121
【０５４０】
DMSO(50mL)中のエチル2-(7-クロロ-3-ヨード-2-メチルピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-イル)アセテート(中間体76、6g、15.81mmol)、(3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)フェニル)メタンアミン(中間体3、3.55g、18.97mmol)及びDIPEA(5.52mL、31.6mmol)の混合物を撹拌し、60℃で2時間加熱した。冷却後、反応混合物を氷冷水(300mL)上に注ぎ、沈殿した固体を濾過により回収し、次いで減圧下で乾燥して表題化合物を得た。LCMS(方法H)：rt=1.74、[M+H]+=531。
【０５４１】
中間体78
メチル2-メトキシ-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンゾエート
【０５４２】
【化１１９】
2021510711.tif 000122
【０５４３】
1,4-ジオキサン(200mL)中のメチル5-ヨード-2-メトキシベンゾエート(20g、68.5mmol)、ビス(ピナコラト)ジボロン(17.39g、68.5mmol)、酢酸カリウム(20.16g、205mmol)及びビス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(II)クロリド(3.85g、5.48mmol)の溶液/懸濁液を、窒素下で100℃にて加熱した。反応混合物を100℃で20時間撹拌し、その後冷却した。反応混合物を、セライトのパッドを通して濾過した。このパッドを酢酸エチル(250mL)で洗浄した。濾液に1M塩酸(250mL)を加えた。有機相をブライン(100mL)で洗浄し、その後硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒を真空中で除去した。これをDCM中に溶解し、シリカカートリッジ(750g)に適用し、シクロヘキサン中0〜50％酢酸エチルの勾配で9CVにわたり溶出した。所要の画分を合わせ、真空中で蒸発させて、表題化合物を得た。LCMS(方法J)：rt=1.16、[M+H]+=293。
【０５４４】
中間体79及び中間体80
エチル2-(3-ヨード-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-イル)プロパノエート及びエチル2-(3-ヨード-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-イル)-2-メチルプロパノエート
【０５４５】
【化１２０】
2021510711.tif 000123
【０５４６】
乾燥したバイアル中で、エチル2-(3-ヨード-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-イル)アセテート(中間体77、400mg、0.754mmol)を、THF(4.0mL)中、窒素下に0℃で撹拌した。ヨウ化メチル(0.05mL、0.8mmol)を加え、混合物を0℃で1分間撹拌し、その後、LiHMDS(THF中1M)(1.6mL、1.6mmol)を加えた。反応物を0℃で5分間撹拌し、次いで室温に温めた。15分後、反応混合物を飽和NH4Cl水溶液(2mL)で希釈し、5分間撹拌した。混合物を、DCM(20mL)及び水(20mL)で分液漏斗に移した。相を分配し、有機層を回収した。水性層をDCM(2x10mL)でさらに洗浄し、合わせた有機層をブライン(20mL)で洗浄し、疎水性フリットに通して濾過し、蒸発乾固した。粗物質をDCM(1mL)から28g KP-NHカラム上に湿充填し、シクロヘキサン中10〜50％酢酸エチル：エタノール(3：1、1％トリエチルアミン含有)で溶出した。サンプルを、pH10の緩衝された炭酸アンモニウム水中40〜90％アセトニトリルで溶出する逆相クロマトグラフィーでさらに精製した。各生成物を含有する画分を別々に合わせ、減圧下で濃縮し、真空オーブン中で週末にわたり乾燥し、所望の表題化合物を得た。中間体79：LCMS(方法F)：rt=1.16、[M+H]+=545。中間体80：LCMS(方法F)：rt=1.27、[M+H]+=559。
【０５４７】
中間体81
2-(3-ヨード-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-イル)プロパン-1-オール
【０５４８】
【化１２１】
2021510711.tif 000124
【０５４９】
エチル2-(3-ヨード-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-イル)プロパノエート(中間体79、87mg、0.160mmol)を、THF(1.5mL)中、窒素下に0℃で撹拌した。DIBAL-H(THF中1M)(0.5mL、0.5mmol)を滴下添加し、混合物を45分間撹拌した。この混合物を1Mロッシェル塩水溶液でクエンチし、30分間勢いよく撹拌した。混合物をDCM(10mL)と水(10mL)とで分離した。分離した水性相を、DCM(2x10mL)でさらに洗浄し、合わせた有機物を疎水性フリットに通し、減圧下で濃縮し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.99、[M+H]+=503。
【０５５０】
中間体82
2-(3-ヨード-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-イル)-2-メチルプロパン-1-オール
【０５５１】
【化１２２】
2021510711.tif 000125
【０５５２】
エチル2-(3-ヨード-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-イル)-2-メチルプロパノエート(中間体80)を用いて中間体81と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=1.12、[M+H]+=517。
【０５５３】
中間体83
(5-ブロモ-2-メトキシフェニル)(2-(ヒドロキシメチル)ピロリジン-1-イル)メタノン
【０５５４】
【化１２３】
2021510711.tif 000126
【０５５５】
THF中の5-ブロモ-2-メトキシ安息香酸及びピロリジン-2-イルメタノールを用いて中間体29と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.84、[M+H]+=314。
【０５５６】
中間体84
(2-(ヒドロキシメチル)ピロリジン-1-イル)(2-メトキシ-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)フェニル)メタノン
【０５５７】
【化１２４】
2021510711.tif 000127
【０５５８】
中間体83を用いて中間体36と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.96、[M+H]+=362。
【０５５９】
中間体85
(R)-5-ブロモ-N-(1-ヒドロキシプロパン-2-イル)-N,2-ジメチルベンズアミド
【０５６０】
【化１２５】
2021510711.tif 000128
【０５６１】
THF中の5-ブロモ-2-メトキシ安息香酸及び(R)-2-(メチルアミノ)プロパン-1-オールを用いて中間体29と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.82、[M+H]+=286。
【０５６２】
中間体86
(R)-N-(1-ヒドロキシプロパン-2-イル)-N,2-ジメチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド
【０５６３】
【化１２６】
2021510711.tif 000129
【０５６４】
中間体85を用いて中間体36と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.91、[M+H]+=334。
【０５６５】
中間体87
5-ブロモ-N-(1-ヒドロキシプロパン-2-イル)-N,2-ジメチルベンズアミド
【０５６６】
【化１２７】
2021510711.tif 000130
【０５６７】
THF中の5-ブロモ-2-メチル安息香酸及び2-(メチルアミノ)プロパン-1-オールを用いて中間体29と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.82、[M+H]+=286。
【０５６８】
中間体88
N-(1-ヒドロキシプロパン-2-イル)-N,2-ジメチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド
【０５６９】
【化１２８】
2021510711.tif 000131
【０５７０】
5-ブロモ-N-(1-ヒドロキシプロパン-2-イル)-N,2-ジメチルベンズアミド(中間体87)を用いて中間体36と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.91、[M+H]+= 334。
【０５７１】
中間体89
(5-ブロモ-2-メチルフェニル)(3-ヒドロキシピロリジン-1-イル)メタノン
【０５７２】
【化１２９】
2021510711.tif 000132
【０５７３】
THF中の5-ブロモ-2-メチル安息香酸及びピロリジン-3-オールを用いて中間体29と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.75、[M+H]+= 284。
【０５７４】
中間体90
(3-ヒドロキシピロリジン-1-イル)(2-メチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)フェニル)メタノン
【０５７５】
【化１３０】
2021510711.tif 000133
【０５７６】
(5-ブロモ-2-メチルフェニル)(3-ヒドロキシピロリジン-1-イル)メタノン(中間体89)を用いて中間体36と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.84、[M+H]+=332。
【０５７７】
中間体91
5-ブロモ-N-(1-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メトキシ-N-メチルベンズアミド
【０５７８】
【化１３１】
2021510711.tif 000134
【０５７９】
THF中の5-ブロモ-2-メトキシ安息香酸及び2-(メチルアミノ)プロパン-1-オールを用いて中間体29と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.76、[M+H]+=302。
【０５８０】
中間体92
N-(1-ヒドロキシプロパン2-イル)-2-メトキシ-N-メチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド
【０５８１】
【化１３２】
2021510711.tif 000135
【０５８２】
5-ブロモ-N-(1-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メトキシ-N-メチルベンズアミド(中間体91)を用いて中間体36と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.89、[M+H]+=350。
【０５８３】
中間体93及び中間体94
tert-ブチル(5-(1-ヒドロキシエチル)-3-ヨード-2-メチルピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-7-イル)(3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)カルバメート、異性体1及び異性体2
【０５８４】
【化１３３】
2021510711.tif 000136
【０５８５】
tert-ブチル(5-(1-ヒドロキシエチル)-3-ヨード-2-メチルピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-7-イル)(3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)カルバメート(中間体26、60mg、0.123mmol)を、Chiralpak AD-H (30mmx250mm、5μm)及び30mL/分の30％エタノール(0.2％イソプロピルアミン含有)/ヘプタン(0.2％イソプロピルアミン含有)の溶媒系を用いて分離し、キラルな表題化合物を得た。異性体1：LCMS(方法F)：rt=0.97、[M+H]+=489。キラルHPLC：rt 10.73、99.7％。異性体2：LCMS(方法F)：rt=0.97、[M+H]+= 489。キラルHPLC：rt 7.53、100％。
【０５８６】
中間体95
5-ブロモ-N,2-ジメチル-N-(テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)ベンズアミド
【０５８７】
【化１３４】
2021510711.tif 000137
【０５８８】
THF中の5-ブロモ-2-メチル安息香酸及びN-メチルテトラヒドロ-2H-ピラン-4-アミンを用いて中間体33と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.96、[M+H]+=312。
【０５８９】
中間体96
N,2-ジメチル-N-(テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド
【０５９０】
【化１３５】
2021510711.tif 000138
【０５９１】
5-ブロモ-N,2-ジメチル-N-(テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)ベンズアミド(中間体95)を用いて中間体32と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=1.06、[M+H]+=360。
【０５９２】
中間体97
2-メチルピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5,7(4H,6H)-ジオン
【０５９３】
【化１３６】
2021510711.tif 000139
【０５９４】
5-メチル-1H-ピラゾール-3-アミン(50g、515mmol)を、窒素雰囲気下でエタノール(500mL)中に溶解した。エタノール中のナトリウムエタノラート(334g、1030mmol)を加え、その後マロン酸ジエチル(86mL、566mmol)を加えた。反応混合物を80℃で4時間撹拌した。反応混合物を室温に冷却し、沈殿した固体を濾過により回収し、過剰のエタノール(1000mL)で洗浄し、乾燥して、表題化合物を得た。LCMS(方法B)：rt=0.48、[M+H]+=166。
【０５９５】
中間体98
5,7-ジクロロ-2-メチルピラゾロ[1,5-a]ピリミジン
【０５９６】
【化１３７】
2021510711.tif 000140
【０５９７】
2-メチルピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5,7(4H,6H)-ジオン(中間体97、35g、212mmol)をオキシ塩化リン(395ml、4239mmol)に加え、混合物を100℃で24時間加熱した。この混合物を室温に冷却し、過剰のオキシ塩化リンを減圧下で蒸留した。混合物をトルエン(2x200mL)と共蒸留した。粗生成物を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー(石油エーテル中20％酢酸エチル)により精製し、表題化合物を得た。LCMS(方法B)：rt=3.21、[M+H]+=201。
【０５９８】
中間体99
5,7-ジクロロ-3-ヨード-2-メチルピラゾロ[1,5-a]ピリミジン
【０５９９】
【化１３８】
2021510711.tif 000141
【０６００】
0℃のDCM(200mL)中の5,7-ジクロロ-2-メチルピラゾロ[1,5-a]ピリミジン(中間体98、15g、74.2mmol)の撹拌溶液に、酢酸(29.8mL、520mmol)を加え、その後NIS(16.70g、74.2mmol)を少しずつ加えた。得られた反応混合物を0℃で1時間撹拌した。10％亜硫酸ナトリウム水溶液(200mL)を加え、室温で30分間勢いよく撹拌した。DCM層を分離し、飽和チオ硫酸ナトリウム(300mL)、ブライン(200mL)、その後水(100mL)で洗浄して、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧下で濃縮し、表題化合物を得た。LCMS(方法E)：rt=2.37、[M+H]+=328。
【０６０１】
中間体100
5-クロロ-3-ヨード-2-メチル-N-(3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-7-アミン
【０６０２】
【化１３９】
2021510711.tif 000142
【０６０３】
DMSO(500mL)中の(3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)フェニル)メチルアミン(中間体3、31g、122mmol)、5,7-ジクロロ-3-ヨード-2-メチルピラゾロ[1,5-a]ピリミジン(中間体99、39.9g、122mmol)及びDIPEA(63.8mL、365mmol)の混合物を撹拌し、50℃で18時間加熱した。冷却後、反応混合物を、氷冷水(1500mL)上に注いだ。沈殿した固体を濾過により回収し、減圧下で乾燥し、表題化合物を得た。LCMS(方法C)：rt=2.19、[M+H]+=479。
【０６０４】
中間体101
tert-ブチル(5-クロロ-3-ヨード-2-メチルピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-7-イル)(3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)カルバメート
【０６０５】
【化１４０】
2021510711.tif 000143
【０６０６】
DCM(1000mL)中の5-クロロ-3-ヨード-2-メチル-N-(3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-7-アミン(中間体100、50g、96mmol)の撹拌溶液に、DIPEA(25.03mL、143mmol)、DMAP(1.167g、9.55mmol)及びジ-tert-ブチルジカルボネート(33.3mL、143mmol)を加えた。反応物を室温で3時間撹拌した。反応混合物をDCM(1000mL)で希釈し、水(1000mL)で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過して減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー(石油エーテル中80％酢酸エチル)により精製し、表題化合物を得た。LCMS(方法D)：rt=6.33、[M+H]+=579。
【０６０７】
中間体102
tert-ブチル(5-クロロ-3-(3-((2-ヒドロキシエチル)スルホニル)-4-メトキシフェニル)-2-メチルピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-7-イル)(3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)カルバメート
【０６０８】
【化１４１】
2021510711.tif 000144
【０６０９】
tert-ブチル(5-クロロ-3-ヨード-2-メチルピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-7-イル)(3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)カルバメート(中間体101、506mg、0.874mmol)、2-((2-メトキシ-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)フェニル)スルホニル)エタン-1-オール(中間体19、268mg、0.783mmol)、トリフェニルアルシン(13mg、0.042mmol)、PdCl2(PhCN)2(18mg、0.047mmol)及び炭酸ナトリウム(193mg、1.821mmol)を、1,4-ジオキサン(6mL)及び水(1.5mL)中で合わせた。混合物を窒素で1分間スパージし、80℃にて4時間加熱した。2-((2-メトキシ-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)フェニル)スルホニル)エタン-1-オール(中間体19、113mg、0.330mmol)、トリフェニルアルシン(13mg、0.042mmol)及びPdCl2(PhCN)2(18mg、0.047mmol)を加えた。混合物を窒素で1分間スパージし、その後80℃にて一晩加熱した。混合物を冷却し、減圧下で濃縮した。残留物を酢酸エチル(20mL)中でスラリー化し、セライトに通して濾過し、酢酸エチル(40mL)、その後DCM(40mL)で洗浄した。合わせた濾液を減圧下で濃縮してDCMを除去し、その後、水(40mL)で分配した。有機相を分離し、疎水性フリットに通し、減圧下で濃縮した。残留物をDMSO：メタノール(6mL、1：1)中に溶解し、MDAP(方法A)により精製した。生成物含有画分を合わせ、減圧下で濃縮し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=1.12、[M+H]+=667。
【０６１０】
中間体103
エチル2-(3-ヨード-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-イル)ブタノエート
【０６１１】
【化１４２】
2021510711.tif 000145
【０６１２】
ヨードエタンを用いて中間体79と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=1.24、[M+H]+=559。
【０６１３】
中間体104
2-(3-ヨード-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-イル)ブタン-1-オール
【０６１４】
【化１４３】
2021510711.tif 000146
【０６１５】
エチル2-(3-ヨード-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-イル)ブタノエート(中間体103)を用いて中間体81と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=1.05、[M+H]+=517。
【０６１６】
中間体105
3-(3-ブロモ-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-イル)ペンタン-3-オール
【０６１７】
【化１４４】
2021510711.tif 000147
【０６１８】
エチル3-ブロモ-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-カルボキシレート(中間体42、253mg、0.539mmol)を、THF(5mL)中、窒素下に0℃で撹拌した。臭化エチルマグネシウム(THF中1M)(2.4mL、2.4mmol)を5分間かけて加え、混合物を0℃で30分間撹拌し、次いで室温に温めた。2時間後、反応混合物を飽和塩化アンモニウム水溶液(2mL)でクエンチし、DCM(10mL)と飽和塩化アンモニウム水溶液(10mL)で分配した。有機相を回収し、水性相をDCM(2x5mL)で洗浄した。合わせた有機層を疎水性フリットに通し、蒸発乾固した。残留物を、THF(5mL)中、窒素下に0℃で撹拌した。臭化エチルマグネシウム(THF中1M)(1.6mL、1.6mmol)を5分間かけて加え、混合物を0℃で30分間撹拌した。混合物を、飽和塩化アンモニウム水溶液(2mL)でクエンチし、DCM(10mL)と飽和塩化アンモニウム水溶液(10mL)とで分配した。有機相を回収し、水性相をDCM(2x5mL)で洗浄した。合わせた有機層を疎水性フリットに通し、減圧下で濃縮した。残留物をメタノール：DMSO(2mL、1：1)中に溶解し、MDAP(方法A)により精製した。生成物含有画分を合わせて蒸発乾固し、真空オーブン中でさらに一晩乾燥し、表題化合物を得た。LCMS(方法J)：rt=0.80、[M+H]+=483。
【０６１９】
中間体106
3-ブロモ-N-メトキシ-N,2-ジメチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-カルボキサミド
【０６２０】
【化１４５】
2021510711.tif 000148
【０６２１】
THF(10mL)中のN,O-ジメチルヒドロキシルアミン塩酸塩(1.62g、16.61mmol)の懸濁液を、-10℃に冷却した。n-ブチルリチウム(ヘキサン中2.5M)(13mL、32.5mmol)を40分間にわたり滴下添加し、反応温度を5℃未満に維持した。次いで、混合物を氷浴中で15分間撹拌した。この溶液に、THF(10mL)中のエチル3-ブロモ-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-カルボキシレート(中間体42、1.5g、3.2mmol)をゆっくりと加えた。添加中、混合物の温度を0℃未満に維持した。添加が完了したら、混合物を(-8℃の)氷浴中で20分間撹拌し、その後室温に温め、1時間撹拌した。飽和塩化アンモニウム水溶液(20mL)を加え、混合物を30分間撹拌した。DCM(50mL)を加えた。この溶液を超音波処理し、分液漏斗に移した。残りの固体を水(50mL)とDCM(50mL)の混合物中に懸濁させ、超音波処理した。この混合物を分液漏斗に加えた。有機相を分離し、水性相をDCM(100mLx2)でさらに抽出した。合わせた有機物を疎水性フリットに通し、減圧下で濃縮した。残留物をDCM中に溶解し、シクロヘキサン中30〜100％酢酸エチル：エタノール(3：1(v/v)、1％トリエチルアミン含有)で10CVにわたり溶出するシリカクロマトグラフィーにより精製した。生成物含有画分を合わせ、減圧下で濃縮し、表題化合物を得た。LCMS(方法J)：rt=0.63、[M+H]+=484。
【０６２２】
中間体107
1-(3-ブロモ-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-イル)プロパン-1-オン
【０６２３】
【化１４６】
2021510711.tif 000149
【０６２４】
3-ブロモ-N-メトキシ-N,2-ジメチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-カルボキサミド(中間体106、530mg、1.094mmol)をTHF(20mL)中に溶解し、0℃に冷却した。臭化エチルマグネシウム(THF中1M)(2.7mL、2.7mmol)をゆっくりと加えた。20分後、混合物を飽和塩化アンモニウム水溶液(5mL)でクエンチし、10分間勢いよく撹拌した。このスラリーを、水(50mL)とDCM(50mL)との間で分配した。分離した水性相をさらなるDCM(2x50mL)で洗浄し、合わせた有機物を疎水性フリットに通し、減圧下で濃縮した。残留物を、(アンモニア溶液でpH10に調整した)水中10mM重炭酸アンモニウム中30〜85％アセトニトリルで25CVにわたり溶出する逆相クロマトグラフィー(C18、60g)により精製した。所望の生成物含有画分を合わせ、減圧下で濃縮した。残留物を、水中20〜50％アセトニトリル(0.1％ギ酸含有)で溶出する逆相クロマトグラフィー(C18、40g)により精製した。生成物含有画分を合わせ、飽和重炭酸ナトリウム水溶液を用いて中和し、次いでDCM(2x50mL)で抽出した。合わせた有機物を疎水性フリットに通し、減圧下で乾燥し、表題化合物を得た。LCMS(方法J)：rt=0.84、[M+H]+=453。
【０６２５】
中間体108及び109
1-(3-ブロモ-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-イル)プロパン-1-オール、異性体1及び異性体2
【０６２６】
【化１４７】
2021510711.tif 000150
【０６２７】
1-(3-ブロモ-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-イル)プロパン-1-オン(中間体107、164 mg、0.362mmol)を、THF(3mL)中、窒素下に0℃で撹拌した。DIBAL-H(THF中1M)(0.75mL、0.75mmol)を滴下添加し、混合物を90分間撹拌した。この混合物を、酒石酸カリウムナトリウム水溶液(1M)でクエンチし、1時間勢いよく撹拌した。この混合物を、DCM(20mL)と水(20mL)とで分離した。分離した水性相を、DCM(2x20mL)でさらに洗浄し、合わせた有機物を疎水性フリットに通し、減圧下で濃縮した。残留物を、水(0.1％ギ酸含有)中の10〜40％アセトニトリル(0.1％ギ酸含有)で10CVにわたり溶出する逆相クロマトグラフィー(C18、30g)により精製した。生成物含有画分を合わせ、飽和重炭酸ナトリウム水溶液を用いて塩基性化し、次いでDCM(2x50mL)を用いて抽出した。合わせた有機層を疎水性フリットに通し、減圧下で濃縮した。残留物を、ヘキサン(0.2％イソプロピルアミン含有)中30％エタノール(0.2％イソプロピルアミン含有)で溶出するChiralpak AD-Hカラム(30mmx250mm、5μm)を用いて精製し、表題化合物を得た。異性体1：LCMS(方法J)：rt=0.61、[M+H]+=455。キラルHPLC、rt 5.95、100％。異性体2：LCMS(方法J)：rt=0.61、[M+H]+=455。キラルHPLC、rt 9.02、100％。
【０６２８】
中間体110
1-(3-ブロモ-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-イル)エタン-1-オン
【０６２９】
【化１４８】
2021510711.tif 000151
【０６３０】
臭化メチルマグネシウムを用いて中間体107と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法J)：rt=0.73、[M+H]+=439。
【０６３１】
中間体111及び112
1-(3-ブロモ-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-イル)エタン-1-オール、異性体1及び異性体2
【０６３２】
【化１４９】
2021510711.tif 000152
【０６３３】
中間体108及び109と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。異性体1：LCMS(方法F)：rt=0.95、[M+H]+=441。キラルHPLC、rt 7.37、100％。異性体2：LCMS(方法F)：rt=0.95、[M+H]+=441。キラルHPLC、rt 11.07、99.4％。
【０６３４】
中間体113
tert-ブチル(5-アセチル-3-ブロモ-2-メチルピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-7-イル)(3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)カルバメート
【０６３５】
【化１５０】
2021510711.tif 000153
【０６３６】
1-(3-ブロモ-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-イル)エタン-1-オン(中間体110、358mg、0.815mmol)をTHF(10mL)中に懸濁した。DIPEA(0.21mL、1.202mmol)及びDMAP(10mg、0.082mmol)を加え、その後Boc-無水物(0.28mL、1.206mmol)を加えた。混合物を撹拌し、50℃にて1.5時間加熱した。反応物を周囲温度に冷却し、水(25mL)と酢酸エチル(25mL)とで希釈した。有機相を回収し、水性相を酢酸エチル(2x25mL)でさらに洗浄した。合わせた有機物を疎水性フリットに通し、蒸発乾固した。残留物を最小限のDCM(1.5mL)中に溶解し、40gシリカゲルカラム上に湿充填した。この生成物をシクロヘキサン中0〜50％エタノール：酢酸エチル(3：1、v/v、1％トリエチルアミン含有)で溶出した。生成物含有画分を合わせ、蒸発乾固し、次いで高真空下で2日間乾燥し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=1.35、[M+H]+=539。
【０６３７】
中間体114
tert-ブチル(3-ブロモ-5-(1-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)ビニル)-2-メチルピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-7-イル)(3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)カルバメート
【０６３８】
【化１５１】
2021510711.tif 000154
【０６３９】
tert-ブチル(5-アセチル-3-ブロモ-2-メチルピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-7-イル)(3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)カルバメート(中間体113、456mg、0.676mmol)を、DCM(5mL)及びトリエチルアミン(0.32mL、2.296mmol)中、窒素下に0℃で撹拌した。TBS-OTf(0.21mL、0.914mmol)を加え、混合物を周囲温度に温め、ここでこの混合物を4時間撹拌した。さらなるトリエチルアミン(0.3mL、2.152mmol)、次いでTBS-OTf(0.25mL、1.089mmol)を加え、混合物を一晩置いた。この混合物を、DCM(20mL)と水(20mL)との間で分配した。分離した水性相をDCM(2x10mL)で洗浄し、合わせた有機物を疎水性フリットに通し、減圧下で濃縮した。残留物を、シクロヘキサン中0〜50％酢酸エチルで溶出するシリカクロマトグラフィーにより精製した。残留物をDCMで摩砕し、高真空下で2日間乾燥し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=1.70、[M+H]+=653。
【０６４０】
中間体115
tert-ブチル(3-ブロモ-5-(1-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)シクロプロピル)-2-メチルピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-7-イル)(3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)カルバメート
【０６４１】
【化１５２】
2021510711.tif 000155
【０６４２】
ジエチル亜鉛(ヘプタン中1M)(0.795mL、0.795mmol)を、DCM(0.5mL)中、窒素下に0℃で撹拌した。DCM(0.5mL)中のTFA(0.061mL、0.795mmol)を極めてゆっくりと滴下添加し、混合物を10分間撹拌した。DCM(0.5mL)中のジヨードメタン(0.064mL、0.795mmol)を滴下添加した。5分間の撹拌後、DCM(2mL)中のtert-ブチル(3-ブロモ-5-(1-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)ビニル)-2-メチルピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-7-イル)(3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)カルバメート(中間体114、260mg、0.398mmol)を加えた。1時間後、混合物を周囲温度に温めた。6時間後、飽和塩化アンモニウム水溶液(1mL)を加え、混合物を30分間勢いよく撹拌した。飽和重炭酸ナトリウム水溶液(2mL)を加え、混合物をさらに30分間撹拌した。この混合物を、DCM(20mL)と飽和塩化アンモニウム水溶液(20mL)との間で分配した。分離した水性相をDCM(2x10mL)で洗浄し、合わせた有機物を疎水性フリットに通し、減圧下で濃縮した。粗物質を、tert-ブチル(3-ブロモ-5-(1-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)ビニル)-2-メチルピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-7-イル)(3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)カルバメート(中間体114、51mg、0.078mmol)で実施した類似の反応から得られた粗物質と合わせ、MDAP(方法A)により精製した。生成物含有画分を合わせ、減圧下で濃縮し、高真空下で乾燥し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=1.72、[M+H]+=667。
【０６４３】
中間体116
メチル2-メチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンゾエート
【０６４４】
【化１５３】
2021510711.tif 000156
【０６４５】
1,4-ジオキサン(500mL)中のメチル5-ブロモ-2-メチルベンゾエート(50g、218mmol)、ビス(ピナコラト)ジボロン(55.4g、218mmol)、酢酸カリウム(64.3g、655mmol)及びビス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(II)クロリド(12.26g、17.46mmol)を、窒素下で2時間100℃にて加熱した。冷却後、この混合物をセライトで濾過し、酢酸エチル(500mL)で洗浄した。1M塩酸水溶液(500mL)を濾液に加え、相を分配した。有機相を1M塩酸水溶液(250mL)、ブライン(250mL)で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、溶媒を真空中で除去した。粗物質を、シクロヘキサン中0〜50％酢酸エチルで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーによる精製に供し、表題化合物を得た。LCMS(方法J)：rt=1.34、[M+H]+=277。
【０６４６】
中間体117
メチル5-(5-(2-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-2-メチルベンゾエート
【０６４７】
【化１５４】
2021510711.tif 000157
【０６４８】
2-(3-ブロモ-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-イル)プロパン-2-オール(中間体43, 25.77g、56.6mmol)、メチル2-メチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンゾエート(中間体116、23.44g、85mmol)、リン酸カリウム(18.02g、85mmol)、XPhos(2.70g、5.66mmol)及びXPhos Pd G2(4.45g、5.66mmol)を、1,4-ジオキサン(300mL)及び水(100mL)中で合わせた。この混合物を、真空と窒素の間で3回循環させ、その後撹拌して100℃にて2時間加熱した。冷却後、混合物を、酢酸エチル(250mL)と2M塩酸水溶液(250mL)との間で分配した。分離した有機相を2M塩酸水溶液(250mL)で洗浄した。合わせた水性相を、1M水酸化ナトリウム水溶液で約pH10に塩基性化し、酢酸エチル(2x250mL)で抽出した。有機物をブライン(100mL)で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下で濃縮して表題化合物を得た。LCMS(方法J)：rt=0.78、[M+H]+=525。
【０６４９】
中間体118
5-(5-(2-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-2-メチル安息香酸
【０６５０】
【化１５５】
2021510711.tif 000158
【０６５１】
メチル5-(5-(2-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-2-メチルベンゾエート(中間体117、32.66g、62.3mmol)を、メタノール(300mL)中で撹拌した。10M水酸化ナトリウム水溶液(31.1mL、311mmol)を加え、反応混合物を50℃で6時間撹拌した。冷却後、酢酸エチル(500mL)及び水(500mL)を加え、相を分配した。有機相を1M水酸化ナトリウム水溶液(2x100mL)で洗浄した。合わせた水性相を、2M塩酸水溶液を用いて約pH5〜6に中和し、酢酸エチル(4x500mL)で抽出した。合わせた有機層を減圧下で濃縮し、表題化合物を得た。LCMS(方法J)：rt=0.65、[M+H]+=511。
【０６５２】
中間体119
メチル5-(5-(2-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-2-メトキシベンゾエート
【０６５３】
【化１５６】
2021510711.tif 000159
【０６５４】
1,4-ジオキサン(100mL)及び水(33.3mL)中の2-(3-ブロモ-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-イル)プロパン-2-オール(中間体43、10g、21.96mmol)、メチル2-メトキシ-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンゾエート(中間体78、9.62g、32.9mmol)、リン酸カリウム(6.99g、32.9mmol)、XPhos(1.047g、2.196mmol)及びXPhos Pd G2(1.728g、2.196mmol)を脱気した(真空/窒素x3)。反応混合物を、窒素下に100℃で2時間撹拌した。反応混合物を冷却し、酢酸エチル(250mL)と2M塩酸(200mL)との間で分離した。有機相を2M塩酸(100mL)で洗浄した。合わせた水性相を、1M水酸化ナトリウム水溶液でpH約10に塩基性化し、酢酸エチル(250mL)で抽出した。有機相をブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒を真空中で蒸発させて表題化合物を得た。LCMS(方法J)：rt=0.63、[M+H]+=541。
【０６５５】
中間体120
5-(5-(2-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-2-メトキシ安息香酸
【０６５６】
【化１５７】
2021510711.tif 000160
【０６５７】
メタノール(100mL)中のメチル5-(5-(2-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-2-メトキシベンゾエート(中間体119、13.55g、25.06mmol)の溶液に、1M水酸化ナトリウム水溶液(12.53mL、125mmol)を加え、反応混合物を50℃で6時間撹拌した。この反応混合物を冷却し、次いで酢酸エチル(200mL)と水(200mL)とで希釈し、その後濾過した。相を分離した。水性相を、2M塩酸を用いてpH約5〜6に中和し、その後酢酸エチルを用いて抽出した(3回)。水性相に、固体塩化ナトリウムを加えた。これを酢酸エチル(2x150mL)で抽出した。合わせた酢酸エチル抽出物を、硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒を真空中で蒸発させて、表題化合物を得た。LCMS(方法J)：rt=0.57、[M+H]+=527。
【０６５８】
中間体121
エチル2-(3-ヨード-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-イル)-2-(テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)アセテート
【０６５９】
【化１５８】
2021510711.tif 000161
【０６６０】
乾燥したバイアル中で、エチル2-(3-ヨード-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-イル)アセテート(中間体77、255mg、0.481mmol)を、THF(2mL)中、窒素下に0℃で撹拌した。4-ヨードテトラヒドロ-2H-ピラン(0.06mL、0.503mmol)を加え、混合物を0℃で1分間撹拌し、その後LiHMDS(THF中1M)(1mL、1mmol)を加えた。反応物を0℃で10分間撹拌し、次いで室温に温め、その後40℃にて2日間加熱した。反応混合物を飽和塩化アンモニウム水溶液(3mL)で希釈し、5分間撹拌した。このスラリーを、DCM(20mL)と水(20mL)とで分液漏斗に移した。相を分配し、有機層を回収した。水性層をDCM(20mL)でさらに洗浄し、合わせた有機層をブライン(20mL)で洗浄し、次いで疎水性フリットに通して濾過し、蒸発乾固した。残留物をDCM(1mL)からシリカゲルカラム(40g)上にロードし、シクロヘキサン中10〜60％エタノール：酢酸エチル(3：1、v/v、1％トリエチルアミン含有)で溶出した。生成物含有画分を合わせて蒸発乾固し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=1.14、[M+H]+=615。
【０６６１】
中間体122
3-ヨード-2-メチル-N-(3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)-5-((テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)メチル)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-7-アミン
【０６６２】
【化１５９】
2021510711.tif 000162
【０６６３】
エチル2-(3-ヨード-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-イル)-2-(テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)アセテート(中間体121、158mg、0.188mmol)を、THF(2mL)及び2M水酸化ナトリウム(水溶液)(1mL、2mmol)中に溶解し、密閉チューブ中110℃にて6時間加熱した。冷却後、DCM(20mL)及び水(20mL)を加え、水性層を、2MHCl水溶液でpH7に中和した。相を分配し、有機層を回収した。水性層をDCM(2x10mL)でさらに洗浄し、合わせた有機層を疎水性フリットに通して蒸発乾固し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=1.07、[M+H]+=543。
【０６６４】
中間体123
N-(3-ヒドロキシプロピル)-N-メチル-3-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド
【０６６５】
【化１６０】
2021510711.tif 000163
【０６６６】
3-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)安息香酸(245mg、0.988mmol)及びHATU(413mg、1.086mmol)並びにDIPEA(0.35mL、2.004mmol)を、THF(5mL)中、空気下で周囲温度にて撹拌した。10分後、3-(メチルアミノ)プロパン-1-オール(0.12mL、1.234mmol)を加え、混合物を一晩撹拌した。混合物を、飽和重炭酸ナトリウム水溶液(30mL)と酢酸エチル(20mL)との間で分配した。分離した水性相をさらなる酢酸エチル(2x20mL)で洗浄し、合わせた有機物をブライン(20mL)で洗浄した。有機層を疎水性フリットに通し、減圧下で濃縮した。粗物質を、シクロヘキサン中40〜100％酢酸エチル：エタノール(3：1、1％トリエチルアミン含有)で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物を得た。LCMS(方法J)：rt=0.93、[M+H]+=320。
【０６６７】
支持化合物
化合物1
1-(3-(4-メトキシ-3-(メチルスルホニル)フェニル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-イル)エタノール
【０６６８】
【化１６１】
2021510711.tif 000164
【０６６９】
3-(4-メトキシ-3-(メチルスルホニル)フェニル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-カルバルデヒド(中間体12、30mg、0.057mmol)をTHF(2.5mL)中に溶解し、0℃に冷却した。臭化メチルマグネシウム(ジエチルエーテル中3M)(0.1mL、0.3mmol)を滴下添加し、反応物を室温に温めて、さらに3時間撹拌した。さらなる臭化メチルマグネシウム(ジエチルエーテル中3M)(0.1mL、0.3mmol)を加え、反応物をさらに20時間撹拌した。1M HCl(10mL)の添加により反応物をクエンチし、その後酢酸エチル(3x10mL)で抽出した。合わせた有機相を、疎水性フリットに通して乾燥し、溶媒を真空中で除去した。残留物をMDAP(方法A)により精製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.94、[M+H]+=547。
【０６７０】
化合物2
2-((5-(5-(1-ヒドロキシエチル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-2-メトキシフェニル)スルホニル)エタン-1-オール
【０６７１】
【化１６２】
2021510711.tif 000165
【０６７２】
THF(3mL)中のtert-ブチル(5-ホルミル-3-(3-((2-ヒドロキシエチル)スルホニル)-4-メトキシフェニル)-2-メチルピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-7-イル)(3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)カルバメート(中間体20、100mg、0.151mmol)を、窒素下に0℃で撹拌し、このとき2-MeTHF(0.1mL)中の3.4M臭化メチルマグネシウムを1回で加えた。反応混合物を室温に冷却し、反応物を窒素下で1時間撹拌した。反応混合物を水(10mL)でクエンチし、窒素下で5分間撹拌した。溶媒を真空中で除去した。粗物質をDCM(20mL)中に溶解し、水(15mL)で分配した。有機層を分離し、水性層をさらなるDCM(2x20mL)で抽出した。合わせた有機層を疎水性フリットに通し、溶媒を真空中で除去した。粗物質をメタノール(3mL)中に溶解し、1,4-ジオキサン中4M HCl(2mL、8mmol)を加えた。反応物を窒素下に5時間撹拌した。溶媒を真空中で除去した。粗物質をメタノール：DMSO(2x1mL、1：1、v/v)中に溶解し、MDAP(方法A)により精製して、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.86、[M+H]+=577。
【０６７３】
下記の化合物を、以下のグリニャール試薬：
THF中1M臭化エチルマグネシウム、
THF中0.5M臭化シクロプロピルマグネシウム、
THF中1M臭化イソプロピルマグネシウム
を用いて、化合物2の調製と同様に作成した。
【０６７４】
【表１】
2021510711.tif 000166
【０６７５】
化合物6
2-(3-(3-((2-ヒドロキシエチル)スルホニル)-4-メトキシフェニル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-イル)プロパン-2-オール
【０６７６】
【化１６３】
2021510711.tif 000167
【０６７７】
IPA(1mL)中、2-((2-メトキシ-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)フェニル)スルホニル)エタン-1-オール(中間体19、121mg、0.354mmol)、炭酸ナトリウム(87mg、0.821mmol)、PdCl2(dppf)(19mg、0.026mmol)、水(1mL)及び2-(3-ヨード-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-イル)プロパン-2-オール(中間体21、136mg、0.271mmol)を合わせ、マイクロ波反応器中、120℃で1.5時間加熱した。反応混合物を、セライトに通して濾過し(DCMで洗浄)、蒸発乾固した。次いで、濾液を水(20mL)とDCM(20mL)との間で分配した。有機相を回収し、水性相をDCM(2x10mL)で洗浄した。合わせた有機層を疎水性フリットに通し、蒸発乾固した。残留物をDMSO：メタノール(2mL)中に溶解し、MDAP(方法A)により精製して、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.91、[M+H]+=591。
【０６７８】
化合物7
2-クロロ-5-(5-(2-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-N-(3-ヒドロキシプロピル)-N-メチルベンズアミド
【０６７９】
【化１６４】
2021510711.tif 000168
【０６８０】
IPA(1mL)中、2-クロロ-N-(3-ヒドロキシプロピル)-N-メチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド(中間体23、105mg、0.297mmol)、炭酸ナトリウム(69.6mg、0.657mmol)、PdCl2(dppf)-DCM(12.5mg、0.015mmol)、水(1mL)及び2-(3-ヨード-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-イル)プロパン-2-オール(中間体21、110mg、0.219mmol)を合わせ、マイクロ波反応器中、120℃で2時間加熱した。さらなる2-クロロ-N-(3-ヒドロキシプロピル)-N-メチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド(中間体23、105mg、0.297mmol)を加え、この反応物を、マイクロ波反応器中、120℃で2時間加熱した。反応混合物を、DCM(20mL)を用いてセライトに通して濾過した。濾液を水(20mL)で洗浄し、水性層をさらなるDCM(2x20mL)で抽出した。合わせた有機層を疎水性フリットに通し、溶媒を減圧下で除去した。残留物をメタノール：DMSO(0.6mL、1：1、v/v)中に溶解し、MDAP(方法A)により精製した。残留物をDCM(2mL)中にロードし、酢酸エチル：エタノール(3：1、v/v、1％トリエチルアミン含有)で溶出するシリカカートリッジ(1g)に通した。残留物をDCM(2mL)中にロードし、シクロヘキサン中の酢酸エチル：エタノール(3：1、v/v、1％トリエチルアミン含有)(0％、2CV；0〜100％、5CV；100％、7CV)で溶出するシリカクロマトグラフィー(4g)により精製して、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.98、[M+H]+=602。
【０６８１】
化合物8
(S)-(5-(5-(2-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-2-メトキシフェニル)(3-ヒドロキシピロリジン-1-イル)メタノン
【０６８２】
【化１６５】
2021510711.tif 000169
【０６８３】
(S)-(3-ヒドロキシピロリジン-1-イル)(2-メトキシ-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)フェニル)メタノン(中間体25)を用いて、化合物7と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.88、[M+H]+=596。
【０６８４】
化合物9
5-(5-(1-ヒドロキシエチル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-N-(3-ヒドロキシプロピル)-2-メトキシ-N-メチルベンズアミド
【０６８５】
【化１６６】
2021510711.tif 000170
【０６８６】
IPA(0.5mL)中のN-(3-ヒドロキシプロピル)-2-メトキシ-N-メチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド(中間体28、80mg、0.160mmol)、tert-ブチル(5-(1-ヒドロキシエチル)-3-ヨード-2-メチルピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-7-イル)(3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)カルバメート(中間体26、80mg、0.136mmol)、PdCl2(dppf)(9mg、0.012mmol)、炭酸ナトリウム(45mg、0.425mmol)及び水(0.5mL)を合わせ、マイクロ波反応器中、120℃で1.5時間加熱した。反応物をDCM(10mL)及び水(10mL)中に希釈し、相を分配した。有機層を回収し、水性層をDCM(2x10mL)でさらに洗浄し、合わせた有機物を疎水性フリットに通し、その後蒸発乾固した。残留物をDMSO：メタノール(1：1、v/v、1mL)中に溶解し、MDAP(方法A)により精製した。生成物含有画分を合わせて蒸発乾固した。残留物を、シクロヘキサン中50〜100％酢酸エチル：エタノール(3：1、v/v、1％トリエチルアミン含有)で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.87、[M+H]+=584。
【０６８７】
下記の化合物を、以下のボロン酸エステル：
2-クロロ-N-(3-ヒドロキシプロピル)-N-メチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド(中間体23)、
N-エチル-N-(2-ヒドロキシエチル)-2-メトキシ-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド(中間体30)
を用いて、化合物9の調製と同様の方法で調製した。
【０６８８】
【表２】
2021510711.tif 000171
【０６８９】
化合物12
5-(5-(1-ヒドロキシエチル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-2-メトキシ-N-メチル-N-(テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)ベンズアミド
【０６９０】
【化１６７】
2021510711.tif 000172
【０６９１】
tert-ブチル(5-(1-ヒドロキシエチル)-3-ヨード-2-メチルピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-7-イル)(3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)カルバメート(中間体26、70mg、0.119mmol)、2-メトキシ-N-メチル-N-(テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド(中間体34、77mg、0.143mmol)、PdCl2(dppf)(9mg、0.012mmol)、炭酸ナトリウム(41mg、0.387mmol)、IPA(2mL)及び水(1mL)を合わせ、マイクロ波反応器中、120℃で1.5時間加熱した。反応混合物をセライト上で濾過し、メタノール(100mL)で洗浄して、溶媒を真空中で除去した。残留物をDCM(20mL)中に溶解し、水(10mL)で分配した。有機層を分離し、水性層をさらなるDCM(2x10mL)で抽出した。合わせた有機層を疎水性フリットに通し、溶媒を真空中で除去した。残留物をメタノール(2mL)中に溶解し、1,4-ジオキサン中4M HCl(2mL)を加えた。反応混合物を、窒素下に室温で5時間撹拌した。溶媒を真空中で除去した。残留物を水(15mL)中に溶解し、2M水酸化ナトリウムで中和し、DCM(20mL)で分配した。有機層を分離し、水性層をさらなるDCM(2x20mL)で抽出した。合わせた有機層を疎水性フリットに通し、溶媒を真空中で除去した。サンプルをメタノール：DMSO(1mL、1：1、v/v)中に溶解し、MDAP(方法B)により精製した。溶媒を真空中で除去した。残留物を、酢酸エチル、次いでジエチルエーテルで摩砕し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.94、[M+H]+=610。
【０６９２】
下記の化合物を、化合物12の調製と同様の方法で(有機反応溶媒はIPA又は1,4-ジオキサン間で変更して)、且つ以下のボロン酸エステル：
N-(3-ヒドロキシプロピル)-N,2-ジメチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド(中間体36)、
(S)-(2-クロロ-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)フェニル)(3-ヒドロキシピロリジン-1-イル)メタノン(中間体38)、
2-クロロ-N-エチル-N-(2-ヒドロキシエチル)-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド(中間体32)、
(S)-N-(1-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メトキシ-N-メチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド(中間体40)
を用いて作成した。
【０６９３】
【表３】
2021510711.tif 000173
2021510711.tif 000174
【０６９４】
化合物17
5-(5-(2-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-N-(3-ヒドロキシプロピル)-N,2-ジメチルベンズアミド
【０６９５】
【化１６８】
2021510711.tif 000175
【０６９６】
N-(3-ヒドロキシプロピル)-N,2-ジメチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド(中間体36、542mg、0.813mmol)、2-(3-ブロモ-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-イル)プロパン-2-オール(中間体43、333mg、0.622mmol)、PdCl2(dppf)(47mg、0.064mmol)、炭酸ナトリウム(198mg、1.865mmol)、1,4-ジオキサン(3mL)及び水(1mL)を合わせ、マイクロ波反応器中、120℃で1.5時間加熱した。N-(3-ヒドロキシプロピル)-N,2-ジメチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド(中間体36、262mg、0.393mmol)及びPdCl2(dppf)(20mg、0.027mmol)を加え、反応混合物を、マイクロ波反応器中、120℃で1.5時間加熱した。反応物をDCM(20mL)及び水(20mL)中に希釈し、相を分配した。有機層を回収し、水性層をDCM(2x20mL)でさらに洗浄し、合わせた有機物を疎水性フリットに通し、次いで蒸発乾固した。残留物をDMSO：メタノール(4mL)中に溶解し、MDAP(方法A)により精製した。生成物含有画分を合わせ、蒸発乾固した。残留物を、シクロヘキサン中20〜100％酢酸エチル：エタノール(3：1、v/v、1％トリエチルアミン含有)で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製した。生成物含有画分を合わせ、蒸発乾固し、高真空ライン上で3日間にわたりさらに乾燥し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.96、[M+H]+=582。
【０６９７】
下記の化合物を、反応溶媒としての1,4-ジオキサン又はIPAのいずれか、及び以下のボロン酸エステル：
(S)-(2-クロロ-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)フェニル)(3-ヒドロキシピロリジン-1-イル)メタノン(中間体38)、
N-エチル-N-(2-ヒドロキシエチル)-2-メトキシ-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド(中間体30)、
(S)-N-(1-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メトキシ-N-メチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド(中間体40)、
N-(テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド(中間体34)、
(S)-N-(1-ヒドロキシプロパン-2-イル)-N,2-ジメチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド(中間体45)、
2-メトキシ-N,N-ジメチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド(中間体47)、
(R)-(2-クロロ-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)フェニル)(2-(ヒドロキシメチル)ピロリジン-1-イル)メタノン(中間体49)、
(R)-(2-(ヒドロキシメチル)ピロリジン-1-イル)(2-メチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)フェニル)メタノン(中間体51)、
N-(2-ヒドロキシエチル)-2-メトキシ-N-メチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド(中間体53)、
(3-ヒドロキシ-3-メチルピロリジン-1-イル)(2-メトキシ-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)フェニル)メタノン(中間体55)、
(2-メトキシ-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)フェニル)(1,4-オキサゼパン-4-イル)メタノン(中間体57)、
(S)-(3-ヒドロキシピロリジン-1-イル)(2-メチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)フェニル)メタノン(中間体59)、
(S)-(2-メトキシ-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)フェニル)(3-メチルモルホリノ)メタノン(中間体61)、
(3-ヒドロキシ-3-メチルピロリジン-1-イル)(2-メチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)フェニル)メタノン(中間体63)、
N-(3-ヒドロキシプロピル)-2-メトキシ-N-メチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド(中間体28)
を用いて、化合物17の調製と同様の方法で調製した：
【０６９８】
【表４】
2021510711.tif 000176
2021510711.tif 000177
2021510711.tif 000178
2021510711.tif 000179
【０６９９】
下記の化合物を、中間体65、及び反応溶媒としての1,4-ジオキサン又はIPAのいずれか、並びに100℃〜120℃の温度、及び以下のボロン酸エステル：
N-(3-ヒドロキシプロピル)-2-メトキシ-N-メチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド(中間体28)、
N-(3-ヒドロキシプロピル)-N,2-ジメチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド(中間体36)、
(R)-(2-(ヒドロキシメチル)ピロリジン-1-イル)(2-メチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)フェニル)メタノン(中間体51)
を用いて、化合物17の調製と同様の方法で調製した。
【０７００】
【表５】
2021510711.tif 000180
2021510711.tif 000181
【０７０１】
下記の化合物を、以下のボロン酸エステル：
(R)-(2-(ヒドロキシメチル)ピロリジン-1-イル)(2-メトキシ-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)フェニル)メタノン(中間体67)
を用いて、化合物17の調製と同様の方法で調製した。
【０７０２】
【表６】
2021510711.tif 000182
【０７０３】
化合物17の代替的調製
5-(5-(2-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-N-(3-ヒドロキシプロピル)-N,2-ジメチルベンズアミド
【０７０４】
【化１６９】
2021510711.tif 000183
【０７０５】
5-(5-(2-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-2-メチル安息香酸(中間体118、12g、23.5mmol)、3-(メチルアミノ)プロパン-1-オール(2.81mL、29.4mmol)及びDIPEA(8.21mL、47.0mmol)を、THF(100mL)中で撹拌した。HATU(11.17g、29.4mmol)及びDMF(10mL)を加え、混合物を窒素下に室温で3時間撹拌した。この混合物を、酢酸エチル(400mL)と飽和重炭酸ナトリウム水溶液(400mL)との間で分離した。水性相を、酢酸エチル(200mL)で再度抽出した。合わせた有機相をブライン(200mL)で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下で濃縮した。残留物を、酢酸エチル中0〜25％エタノールで5CVにわたり溶出し、酢酸エチル中25％エタノールで7CVにわたり溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーに供した。生成物含有画分を合わせ、真空中で蒸発させ、同じクロマトグラフィー法により、材料がHPLCにより>97.5％になるまで精製した。残留物をジエチルエーテルで摩砕し、溶媒を真空中で蒸発させた。酢酸エチル(40mL)を加え、混合物を室温で5日間撹拌した。結果として得られた白色固体を濾過により回収し、酢酸エチル(25mL)で洗浄し、真空中で40℃にて乾燥し、表題化合物を得た。LCMS(方法M)：rt=2.49、[M+H]+=582。δH (400MHz, d6-DMSO)(回転異性体混合物) 8.53 (t, J=6.5 Hz, 1H)、7.73 (s, 1H)、7.71-7.67 (m, 0.75H)、7.65 (s, 0.75H)、7.61 (d, J=1.3 Hz, 0.5H)、7.59-7.54 (m, 1H)、7.48-7.42 (m, 2H)、7.33-7.27 (m, 1H)、7.22 (d, J=1.0 Hz, 1H)、6.94 (d, J=1.0 Hz, 1H)、6.45 (s, 1H)、5.18(s, 1H)、4.70 (d, J=6.6 Hz, 2H)、4.47 (t, J=5.3 Hz, 0.5H)、4.34 (t, J=4.9 Hz, 0.5H)、3.70 (s, 3H)、3.56-3.46 (m, 2H)、3.28-3.20 (m, 2H)、3.00 (s, 1.5H)、2.82 (s, 1.5H)、2.58(s, 3H)、2.21 (app. d, J=5.1 Hz, 3H)、1.79-1.70 (m, 1H)、1.66-1.57 (m, 1H)、1.39 (s, 6H) ppm. δC (151MHz, d6-DMSO)(回転異性体混合物) 170.3、170.2、169.0、150.3、150.2、146.39、146.36、146.3、145.4、138.6、137.0、136.9、130.8、130.14、130.05、130.0、128.6、127.5、127.4、126.89、126.86、126.81、124.84、124.79、123.4、104.72、104.67、81.55、81.53、72.39、72.38、58.4、58.0、47.4、44.4、43.5、36.3、34.3、31.8、31.0、30.1、30.0、18.2、18.1、14.7、14.6 ppm. HRMS(ESI) C33H39N7O3+H+の計算値582.3193、実測値582.3190 [M+H]+。
【０７０６】
化合物22の代替的調製
(S)-N-(1-ヒドロキシプロパン-2-イル)-5-(5-(2-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-N,2-ジメチルベンズアミド
【０７０７】
【化１７０】
2021510711.tif 000184
【０７０８】
5-(5-(2-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-2-メチル安息香酸(中間体118、7.55g、14.79mmol)、(S)-2-(メチルアミノ)プロパン-1-オール(1.977g、22.18mmol)及びDIPEA(5.17mL、29.6mmol)を、THF(50mL)中で撹拌した。DMF(2.5mL)及びHATU(7.03g、18.48mmol)をこの混合物に加え、窒素下に室温で20時間撹拌した。この混合物を、酢酸エチル(200mL)と飽和重炭酸ナトリウム水溶液(200mL)との間で分配した。水性相を、酢酸エチル(100mL)を用いて抽出した。合わせた有機相をブライン(100mL)で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、溶媒を真空中で除去した。残留物を、シクロヘキサン中0〜100％酢酸エチルで溶出するKP-NH末端キャップシリカゲルカラムクロマトグラフィーに供した。この混合物を、水(10mM重炭酸アンモニウム/アンモニア)中5〜50％アセトニトリル(アンモニア含有)で溶出する逆相カラムクロマトグラフィーでさらに精製した。得られた残留物をメタノール中で摩砕し、その後ジエチルエーテル(50mL)で摩砕し、この中で混合物を30分間急速に撹拌した。溶媒を真空中で除去し、残留物を酢酸エチル(70mL)中に溶解し、24時間急速に撹拌した。この固体を濾過により回収し、酢酸エチルで洗浄し、真空中で40℃にて乾燥した。LCMS(方法M)：rt=2.56、[M+H]+= 582。 δH (400 MHz, d6-DMSO)(回転異性体混合物) 8.58-8.49 (m, 1H)、7.81 (d, J=8.1 Hz, 0.3H)、7.73 (s, 1H)、7.71-7.62 (m, 1H)、7.59-7.51 (m, 1.7H)、7.49-7.42 (m, 2H)、7.32-7.25 (m, 1H)、7.22 (s, 1H)、6.97-6.92 (m, 1H)、6.49-6.42 (m, 1H)、5.17 (s, 1H)、4.80 (t, J=5.3 Hz, 0.7H)、4.76 (t, J=5.5 Hz, 0.3H)、4.70 (d, J=6.2 Hz, 2H)、3.74-3.64 (m, 3.5H)、3.64-3.57 (m, 0. 5H)、3.53-3.39 (m, 1.3H)、3.29-3.23 (m, 0.7H)、2.90-2.84 (m, 2H)、2.68(s, 1H)、2.60-2.56 (m, 3H)、2.25-2.18(m, 3H)、1.41-1.35 (m, 6H)、1.10 (d, J=7.0 Hz, 1H)、1.06-1.00 (m, 2H) ppm. δC (176 MHz, d6-DMSO, 120℃) 170.2、168.3、149.8、146.1、146.0、145.0、137.9、137.2、130.7、130.2、129.3、128.0、127.1、126.6、126.50、126.47、124.5、122.6、104.8、81.2、71.8、62.0、44.5、33.5、29.5、17.5、13.8 ppm. HRMS(ESI) C33H39N7O3+H+の計算値582.3193、実測値582.3195 [M+H]+。
【０７０９】
化合物36の代替的調製
(R)-(2-(ヒドロキシメチル)ピロリジン-1-イル)(5-(5-(2-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-2-メトキシフェニル)メタノン
【０７１０】
【化１７１】
2021510711.tif 000185
【０７１１】
THF(100mL)中の5-(5-(2-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-2-メトキシ安息香酸(中間体120、3.0g、5.7mmol)、(R)-ピロリジン-2-イルメタノール(0.576g、5.7mmol)及びDIPEA(1.990mL、11.39mmol)の溶液/懸濁液に、HATU(2.71g、7.12mmol)を加えた。反応混合物を、窒素下に室温で20時間撹拌した。反応混合物を、酢酸エチル(200mL)と飽和重炭酸ナトリウム溶液(200mL)との間で分配した。有機相をブライン(100mL)で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒を真空中で除去した。残留物をDCM中に溶解し、シリカカートリッジ(120g)に適用し、酢酸エチル中0〜25％エタノールで5CVにわたり溶出し、酢酸エチル中25％エタノールで6CVにわたり溶出した。所要の画分を合わせ、真空中で蒸発させた。残留物をDMSO：メタノール(1：1v/v)中に溶解し、C18カートリッジ(120g)に適用して、水(10mM重炭酸アンモニウム/アンモニア含有)中5％アセトニトリル(アンモニア含有)に予め調整した。これを水(10mM重炭酸アンモニウム/アンモニア含有)中5〜40％アセトニトリル(アンモニア含有)の勾配で溶出した。生成物を溶出する間、勾配を水(10mM重炭酸アンモニウム/アンモニア含有)中29％アセトニトリル(アンモニア含有)で保持した。所要の画分を合わせ、真空中で蒸発させた。残留物をジエチルエーテルで摩砕し、溶媒を蒸発させた。この残留物に、酢酸エチル(25mL)及びメタノール(1mL)を加えた。この混合物を室温から45℃に温度循環させて6回戻し、その後撹拌したまま室温で18時間置いた。結果として得られた白色固体を濾過により回収し、酢酸エチル(25mL)で洗浄した。この固体を真空中で40℃にて20時間乾燥し、表題化合物を得た。LCMS(方法J)：rt=0.59, [M+H]+= 610. δH (700 MHz, DMSO-d6, 120℃) 7.94 (br s, 1H)、7.75 (s, 1H)、7.75 - 7.72 (m, 1H)、7.65 (br s, 1H)、7.58(br d, J=7.3 Hz, 1H)、7.50 - 7.47 (m, 1H)、7.47 - 7.42 (m, 1H)、7.16 - 7.14 (m, 1H)、7.16 - 7.13 (m, 1H)、6.95 (s, 1H)、6.44 (s, 1H)、4.74 (s, 2H)、4.18(br s, 1H)、3.85 (s, 3H)、3.75 - 3.71 (m, 1H)、3.70 (s, 3H)、3.51 - 3.42 (m, 1H)、3.39 - 3.15 (m, 2H)、2.56 (s, 3H)、1.96 - 1.71 (m, 2H)、2.04 - 1.68(m, 2H)、1.44 (s, 6H) ppm. δC NMR (176 MHz, DMSO-d6, 120℃) 168.11、166.71、152.36、149.48、146.05、146.01、144.77、137.90、130.71、128.70、127.90、127.35、127.05、126.65、126.56、126.44、126.43、125.52、122.51、111.87、104.61、81.02、71.72、61.77、58.17、55.49、47.62、44.49、33.51、29.45、26.86、23.05、13.61 ppm. HRMS(ESI) C34H39N7O4+H+の計算値610.3063、実測値610.3141 [M+H]+。
【０７１２】
化合物21の代替的調製
5-(5-(2-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-2-メトキシ-N-メチル-N-(テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)ベンズアミド
【０７１３】
【化１７２】
2021510711.tif 000186
【０７１４】
THF(50mL)中の5-(5-(2-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-2-メトキシ安息香酸(中間体120、2.35g、4.46mmol)及びDIPEA(1.6mL、9.16mmol)の溶液/懸濁液に、HATU(2.35g、6.18mmol)を加えた。混合物を室温で10分間撹拌し、N-メチルテトラヒドロ-2H-ピラン-4-アミン(0.514g、4.46mmol)を加えた。混合物を窒素下に室温で16時間撹拌した。反応混合物を、酢酸エチル(100mL)と飽和重炭酸ナトリウム水溶液(100mL)との間で分配した。水性相を、酢酸エチル(100mL)で再度抽出した。合わせた有機相をブライン(100mL)で洗浄し、疎水性フリットに通した。溶媒を減圧下で除去した。残留物を、シリカクロマトグラフィー(340g)により精製した。この化合物を、最小限のDCM(+数滴のメタノール)中に溶解し、注入によりカラムの頂部上にロードし、次いで酢酸エチル中0〜25％エタノールを用いて6CVにわたり溶出し、その後酢酸エチル中25％エタノールで6CVの間保持した。所望の生成物含有画分を合わせ、減圧下で濃縮した。材料のおよそ半分をDMSO：メタノール(1：1v/v)中に溶解し、C18カートリッジ(120g)に適用し、水(10mM重炭酸アンモニウム/アンモニア含有)中5％アセトニトリル(アンモニア含有)に予め調整し、次いで、水(10mM重炭酸アンモニウム/アンモニア含有)中5〜20％アセトニトリル(アンモニア含有)の勾配で6CVにわたり溶出し、その後、水(10mM重炭酸アンモニウム/アンモニア含有)中20〜60％アセトニトリル(アンモニア含有)の勾配で6CVにわたり溶出した。生成物を溶出する間、勾配を、水(10mM重炭酸アンモニウム/アンモニア含有)中47.5％アセトニトリル(アンモニア含有)で保持した。材料の残りの部分は、水(10mM重炭酸アンモニウム/アンモニア含有、(重炭酸イオン/NH3))中25〜55％アセトニトリル(アンモニア含有)の勾配を用いて、同様の方法で精製した。生成物を溶出する間、勾配を、水(10mM重炭酸アンモニウム/アンモニア含有)中45％アセトニトリル(アンモニア含有)で保持した。両精製から得られた純粋生成物含有画分を合わせ、減圧下で濃縮し、次いで真空中で24時間乾燥して、表題化合物を得た。LCMS(方法J)：rt=0.65, [M+H]+= 624. δH (600 MHz, d6-DMSO)(回転異性体混合物) 8.54-8.49 (m, 1H)、7.77-7.72 (m, 2H)、7.63 (d, J=1.8 Hz, 0.5H)、7.59-7.54 (m, 1H)、7.53 (d, J=2.2 Hz, 0.5H)、7.47-7.43 (m, 2H)、7.22 (s, 1H)、7.18-7.13 (m, 1H)、6.94 (s, 1H)、6.43 (s, 1H)、5.17 (s, 1H)、4.69 (d, J=6.2 Hz, 2H)、4.64-4.58(m, 0.5H)、3.98-3.91 (m, 1H)、3.90-3.85 (m, 0.5H)、3.82-3.75 (m, 3.5H)、3.70 (s, 3H)、3.57-3.50 (m, 0.5H)、3.43 (t, J=11.2 Hz, 1H)、3.12 (t, J=11.2 Hz, 0.5H)、3.00 (t, J=11.6 Hz, 0.5H)、2.88(s, 1.5H)、2.69 (s, 1.5H)、2.56 (ap. d, J=15.8 Hz, 3H)、1.89-1.72 (m, 2H)、1.59-1.51 (m, 1.5H)、1.42 (d, J=11.4 Hz, 0.5H)、1.39-1.33 (m, 6H) ppm. δC (151MHz, d6-DMSO)(回転異性体混合物) 168.80、168.77、168.1、167.9、152.50、152.47、150.0、149.9、146.4、146.34、146.26、145.18、145.16、138.6、130.8、129.2、128.9、128.6、127.5、126.89、126.87、126.80、126.7、126.6、126.5、125.9、123.4、111.6、111.4、104.7、104.5、81.4、81.3、72.4、72.3、66.5、66.3、66.2、55.7、55.4、54.9、54.8、49.4、44.4、34.3、30.5、30.3、30.09、30.07、
30.0、29.2、26.6、14.5、14.4 ppm. HRMS(ESI) calcd. for C35H41N7O4+H+ 624.3220、found 624.3294 [M+H]+。
【０７１５】
化合物37
2-クロロ-N-(2-ヒドロキシエチル)-5-(5-(2-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-N-メチルベンズアミド
【０７１６】
【化１７３】
2021510711.tif 000187
【０７１７】
マイクロ波バイアルに、2-(3-ブロモ-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-イル)プロパン-2-オール(中間体43、305mg、0.636mmol)、XPhos(32mg、0.067mmol)、XPhos Pd G2(53mg、0.067mmol)及びリン酸三カリウム(443mg、2.087mmol)を充填した。2-クロロ-N-(2-ヒドロキシエチル)-N-メチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド(中間体69)(446mg、0.788mmol)を、1,4-ジオキサン(7.5mL)中に溶解し、上記のマイクロ波バイアルに加え、その後水(2.5mL)を加えた。このバイアルを密閉し、マイクロ波中、100℃にて1.5時間加熱した。反応混合物を、水(25mL)で希釈し、DCM(25mL)で分配した。有機相を回収し、水性相をDCM(4x25mL)で洗浄した。有機相を合わせ、溶媒を疎水性フリットに通し、その後フロリジル層(深さ2cm)を有する第2の疎水性フリットに通した。このフロリジル層を酢酸エチル：エタノール(3：1、1％トリエチルアミン含有)(25mL)で洗浄した。濾液を蒸発乾固した。残留物を最小量のDMSO：メタノール(1：1、v/v)中に溶解し、MDAP(方法A)により精製した。関連の画分を合わせ、溶媒を除去した。残留物を、シクロヘキサン中30〜100酢酸エチル：エタノール(3：1、1％トリエチルアミン含有)で溶出するシリカカラムクロマトグラフィーにより精製した。関連の画分を合わせ、溶媒を除去した。残留物を最小量のジエチルエーテルで摩砕し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.96、[M+H]+=588。
【０７１８】
下記の化合物を、、以下のボロン酸エステル：
N-エチル-N-(2-ヒドロキシエチル)-2-メチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド(中間体73)、
(R)-N-(1-ヒドロキシプロパン-2-イル)-N,2-ジメチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド(中間体86)、
N-(1-ヒドロキシプロパン-2-イル)-N,2-ジメチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド(中間体88)、
(3-ヒドロキシピロリジン-1-イル)(2-メチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)フェニル)メタノン(中間体90)、
N-(1-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メトキシ-N-メチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド(中間体92)
を用いて、化合物37の調製と同様の方法で調製した。
【０７１９】
【表７】
2021510711.tif 000188
2021510711.tif 000189
【０７２０】
下記の化合物を、反応溶媒としての1,4-ジオキサン又はIPAのいずれか、並びに100℃〜140℃の温度、及び以下のボロン酸エステル：
N-(2-ヒドロキシエチル)-N,2-ジメチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド(中間体71)、
(2-(ヒドロキシメチル)ピロリジン-1-イル)(2-メトキシ-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)フェニル)メタノン(中間体84)、
N,2-ジメチル-N-(テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド(中間体96)、
を用いて、化合物17の調製と同様の方法で調製した。
【０７２１】
【表８】
2021510711.tif 000190
【０７２２】
下記の化合物を、中間体65、及び反応溶媒としての1,4-ジオキサン又はIPAのいずれか、並びに100℃〜140℃の温度、及び以下のボロン酸エステル：
N-(2-ヒドロキシエチル)-2-メトキシ-N-メチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド(中間体53)、
N-(2-ヒドロキシエチル)-N,2-ジメチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド(中間体71)、
2-クロロ-N-(2-ヒドロキシエチル)-N-メチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド(中間体69)、
(R)-(2-(ヒドロキシメチル)ピロリジン-1-イル)(2-メトキシ-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)フェニル)メタノン(中間体67)、
(S)-(3-ヒドロキシピロリジン-1-イル)(2-メチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)フェニル)メタノン(中間体59)、
(3-ヒドロキシ-3-メチルピロリジン-1-イル)(2-メトキシ-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)フェニル)メタノン(中間体55)、
(S)-(3-ヒドロキシピロリジン-1-イル)(2-メトキシ-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)フェニル)メタノン(中間体25)、
を用いて、化合物17の調製と同様の方法で調製した。
【０７２３】
【表９】
2021510711.tif 000191
2021510711.tif 000192
【０７２４】
化合物53
2-(3-(3-((2-ヒドロキシエチル)スルホニル)-4-メトキシフェニル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-イル)プロパン-1-オール
【０７２５】
【化１７４】
2021510711.tif 000193
【０７２６】
2-(3-ヨード-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-イル)プロパン-1-オール(中間体81)及び2-((2-メトキシ-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)フェニル)スルホニル)エタノール(中間体19)を用いて、化合物37と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法J)：rt=0.53、[M+H]+=591。
【０７２７】
化合物54
5-(5-(1-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-N-(3-ヒドロキシプロピル)-N,2-ジメチルベンズアミド
【０７２８】
【化１７５】
2021510711.tif 000194
【０７２９】
2-(3-ヨード-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-イル)プロパン-1-オール(中間体81)及びN-(3-ヒドロキシプロピル)-N,2-ジメチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド(中間体36)を用いて、化合物17と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.92、[M+H]+=582。
【０７３０】
化合物55
5-(5-(1-ヒドロキシ-2-メチルプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-N-(3-ヒドロキシプロピル)-N,2-ジメチルベンズアミド
【０７３１】
【化１７６】
2021510711.tif 000195
【０７３２】
2-(3-ヨード-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-イル)-2-メチルプロパン-1-オール(中間体82)及びN-(3-ヒドロキシプロピル)-N,2-ジメチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド(中間体36)を用いて、化合物17と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.99、[M+H]+=596。
【０７３３】
化合物56
2-(3-(3-((2-ヒドロキシエチル)スルホニル)-4-メトキシフェニル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-イル)-2-メチルプロパン-1-オール
【０７３４】
【化１７７】
2021510711.tif 000196
【０７３５】
2-(3-ヨード-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-イル)-2-メチルプロパン-1-オール(中間体82)及び2-((2-メトキシ-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)フェニル)スルホニル)エタノール(中間体19)を用いて、化合物17と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.95、[M+H]+=605。
【０７３６】
化合物57
2-クロロ-5-(5-(1-ヒドロキシエチル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-N-(3-ヒドロキシプロピル)-N-メチルベンズアミド、異性体1
【０７３７】
【化１７８】
2021510711.tif 000197
【０７３８】
tert-ブチル(5-(1-ヒドロキシエチル)-3-ヨード-2-メチルピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-7-イル)(3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)カルバメート、異性体1(中間体93)及び2-クロロ-N-(3-ヒドロキシプロピル)-N-メチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド(中間体23)を用いて、化合物37と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.95、[M+H]+=588。
【０７３９】
化合物58
2-クロロ-5-(5-(1-ヒドロキシエチル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-N-(3-ヒドロキシプロピル)-N-メチルベンズアミド、異性体2
【０７４０】
【化１７９】
2021510711.tif 000198
【０７４１】
tert-ブチル(5-(1-ヒドロキシエチル)-3-ヨード-2-メチルピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-7-イル)(3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)カルバメート、異性体2(中間体94)及び2-クロロ-N-(3-ヒドロキシプロピル)-N-メチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド(中間体23)を用いて、化合物37と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.95、[M+H]+=588。
【０７４２】
化合物59
5-(5-(2-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-N,2-ジメチル-N-(テトラヒドロフラン-3-イル)ベンズアミド
【０７４３】
【化１８０】
2021510711.tif 000199
【０７４４】
DMF(0.4mL)中の5-(5-(2-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-2-メチル安息香酸(中間体118、49mg、0.096mmol)、HATU(40.1mg、0.106mmol)及びDIPEA(0.034mL、0.192mmol)の溶液を、室温で20分間撹拌した。N-メチルテトラヒドロフラン-3-アミン(0.013mL、0.115mmol)を反応混合物に加え、室温で1時間撹拌し、その後一晩置いた。反応混合物をメタノール(0.6mL)で希釈し、MDAP(方法A)により精製した。適切な画分を合わせ、濃縮し、ジエチルエーテルで摩砕して、その後高真空下で乾燥し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=1.04、[M+H]+=594。
【０７４５】
下記の化合物を、以下のアミン類：
3-アミノプロパン-1-オール、
1-(メチルアミノ)プロパン-2-オール
を用いて、化合物59と同様の方法で調製した。
【０７４６】
【表１０】
2021510711.tif 000200
【０７４７】
化合物62及び化合物63
5-(5-(2-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-N-(2-ヒドロキシプロピル)-N,2-ジメチルベンズアミド、異性体1(化合物62)及び異性体2(化合物63)
【０７４８】
【化１８１】
2021510711.tif 000201
【０７４９】
化合物61を、0.2％イソプロピルアミン含有アセトニトリルで溶出するChiralpak AS-Hカラム(30mmx250mm、5μm)を用いて精製し、表題化合物を得た。異性体1：LCMS(方法F)：rt=0.98、[M+H]+=582。キラルHPLC：rt 6.85、100％。異性体2：LCMS(方法F)：rt=0.98、[M+H]+=582。キラルHPLC：rt 8.36、98.5％。
【０７５０】
化合物64
2-((2-メトキシ-5-(2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール2-イル)ベンジル)アミノ)-5-(テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)フェニル)スルホニル)エタン-1-オール
【０７５１】
【化１８２】
2021510711.tif 000202
【０７５２】
乾燥したバイアルに、2-(3,6-ジヒドロ-2H-ピラン-4-イル)-4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン(18mg、0.086mmol)、Pd XPhos G2(6mg、7.63μmol)、Pd/C(51mg、0.048mmol)、リン酸三カリウム(51mg、0.240mmol)及びtert-ブチル(5-クロロ-3-(3-((2-ヒドロキシエチル)スルホニル)-4-メトキシフェニル)-2-メチルピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-7-イル)(3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)カルバメート(中間体102、55mg、0.082mmol)を加えた。このバイアルをキャップし、窒素でパージした。水(0.2mL)及び1,4-ジオキサン(0.8mL)を加え、混合物を100℃にて45分間加熱した。この混合物を室温に冷却した。ギ酸アンモニウム(メタノール中1.25M)(0.659mL、0.824mmol)を加え、混合物を一晩撹拌した。混合物を40℃にて6時間加熱した。このバイアルを窒素でパージし、その内容物をセライトに通して濾過し、DCM(10mL)で洗浄した。濾液を水(10mL)で分配し、分離した水性相をDCM(2x10mL)で洗浄した。合わせた有機層を疎水性フリットに通し、減圧下で濃縮した。残留物を、tert-ブチル(5-クロロ-3-(3-((2-ヒドロキシエチル)スルホニル)-4-メトキシフェニル)-2-メチルピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-7-イル)(3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)カルバメート(中間体102、20mg、0.03mmol)で実施した類似の反応から得られた残留物と合わせ、メタノール(1.4mL)中に溶解し、塩酸(CPME中3M)(0.35mL、1.05mmol)を加えた。混合物を室温で一晩撹拌し、次いで40℃で7時間撹拌した。この混合物を、室温で週末にわたり静置した。飽和重炭酸ナトリウム水溶液(1mL)を加え、混合物を5分間撹拌した。DCM(2mL)を加え、混合物を分配した。分離した水性相をDCM(2x1mL)で洗浄し、合わせた有機物を疎水性フリットに通し、不活性ガス流下で濃縮した。残留物をDMSO：メタノール(0.5mL、1：1)中に溶解し、MDAP(方法A)により精製した。生成物含有画分を合わせ、減圧下で濃縮し、高真空ライン上で乾燥して、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.95、[M+H]+=617。
【０７５３】
化合物65
5-(5-(1-ヒドロキシブタン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-N-(3-ヒドロキシプロピル)-N,2-ジメチルベンズアミド
【０７５４】
【化１８３】
2021510711.tif 000203
【０７５５】
2-(3-ヨード-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-イル)ブタン-1-オール(中間体104)及びN-(3-ヒドロキシプロピル)-N,2-ジメチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド(中間体36)を用いて、化合物37と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.97、[M+H]+=596。
【０７５６】
化合物66及び67
5-(5-(1-ヒドロキシブタン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-N-(3-ヒドロキシプロピル)-N,2-ジメチルベンズアミド、異性体1(化合物66)及び異性体2(化合物67)
【０７５７】
【化１８４】
2021510711.tif 000204
【０７５８】
化合物65を、ヘプタン(0.2％イソプロピルアミン含有)中40％エタノール(0.2％イソプロピルアミン含有)で溶出するChiralpak AD-Hカラム(30mmx250mm、5μm)を用いて精製し、表題化合物を得た。異性体1：LCMS(方法J)：rt=0.58、[M+H]+=596。キラルHPLC：rt 9.41、100％。異性体2：LCMS(方法J)：rt=0.58、[M+H]+=596。キラルHPLC：rt 14.57、99.5％。
【０７５９】
化合物68
5-(5-(3-ヒドロキシペンタン-3-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-N-(3-ヒドロキシプロピル)-N,2-ジメチルベンズアミド
【０７６０】
【化１８５】
2021510711.tif 000205
【０７６１】
3-(3-ブロモ-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-イル)ペンタン-3-オール(中間体105)及びN-(3-ヒドロキシプロピル)-N,2-ジメチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド(中間体36)を用いて、化合物37と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法J)：rt=0.71、[M+H]+=610。
【０７６２】
化合物69
N-(3-ヒドロキシプロピル)-5-(5-(1-ヒドロキシプロピル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-N,2-ジメチルベンズアミド、異性体1
【０７６３】
【化１８６】
2021510711.tif 000206
【０７６４】
1-(3-ブロモ-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-イル)プロパン-1-オール、異性体1(中間体108)及びN-(3-ヒドロキシプロピル)-N,2-ジメチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド(中間体36)を用いて、化合物37と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法J)：rt=0.65、[M+H]+=582。
【０７６５】
化合物70
N-(3-ヒドロキシプロピル)-5-(5-(1-ヒドロキシプロピル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-N,2-ジメチルベンズアミド、異性体2
【０７６６】
【化１８７】
2021510711.tif 000207
【０７６７】
1-(3-ブロモ-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-イル)プロパン-1-オール、異性体2(中間体109)及びN-(3-ヒドロキシプロピル)-N,2-ジメチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド(中間体36)を用いて、化合物37と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法J)：rt=0.61、[M+H]+=582。
【０７６８】
化合物71
2-((5-(5-(1-ヒドロキシエチル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-2-メトキシフェニル)スルホニル)エタン-1-オール、異性体1
【０７６９】
【化１８８】
2021510711.tif 000208
【０７７０】
1-(3-ブロモ-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-イル)エタン-1-オール、異性体1(中間体111)及び2-((2-メトキシ-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)フェニル)スルホニル)エタノール(中間体19)を用いて、化合物37と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.87、[M+H]+=577。
【０７７１】
化合物72
2-((5-(5-(1-ヒドロキシエチル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-2-メトキシフェニル)スルホニル)エタン-1-オール、異性体2
【０７７２】
【化１８９】
2021510711.tif 000209
【０７７３】
1-(3-ブロモ-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-イル)エタン-1-オール、異性体2(中間体112)及び2-((2-メトキシ-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)フェニル)スルホニル)エタノール(中間体19)を用いて、化合物37と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.86、[M+H]+=577。
【０７７４】
化合物73
2-クロロ-5-(5-(1-ヒドロキシエチル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-N-(3-ヒドロキシプロピル)-N-メチルベンズアミド、異性体1
【０７７５】
【化１９０】
2021510711.tif 000210
【０７７６】
1-(3-ブロモ-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-イル)エタン-1-オール、異性体1(中間体111)及び2-クロロ-N-(3-ヒドロキシプロピル)-N-メチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド(中間体23)を用いて、化合物37と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.93、[M+H]+=588。
【０７７７】
化合物74
2-クロロ-5-(5-(1-ヒドロキシエチル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-N-(3-ヒドロキシプロピル)-N-メチルベンズアミド、異性体2
【０７７８】
【化１９１】
2021510711.tif 000211
【０７７９】
1-(3-ブロモ-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-イル)エタン-1-オール、異性体2(中間体112)及び2-クロロ-N-(3-ヒドロキシプロピル)-N-メチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド(中間体23)を用いて、化合物37と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.93、[M+H]+=588。
【０７８０】
化合物75
1-(3-(3-((2-ヒドロキシエチル)スルホニル)-4-メトキシフェニル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-イル)プロパン-1-オール、異性体1
【０７８１】
【化１９２】
2021510711.tif 000212
【０７８２】
1-(3-ブロモ-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-イル)プロパン-1-オール、異性体1(中間体108)及び2-((2-メトキシ-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)フェニル)スルホニル)エタノール(中間体19)を用いて、化合物37と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.91、[M+H]+=591。
【０７８３】
化合物76
1-(3-(3-((2-ヒドロキシエチル)スルホニル)-4-メトキシフェニル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-イル)プロパン-1-オール、異性体2
【０７８４】
【化１９３】
2021510711.tif 000213
【０７８５】
1-(3-ブロモ-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-イル)プロパン-1-オール、異性体2(中間体109)及び2-((2-メトキシ-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)フェニル)スルホニル)エタノール(中間体19)を用いて、化合物37と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.91、[M+H]+=591。
【０７８６】
化合物77
5-(5-(1-ヒドロキシプロピル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-2-メトキシ-N-メチル-N-(テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)ベンズアミド、異性体1
【０７８７】
【化１９４】
2021510711.tif 000214
【０７８８】
1-(3-ブロモ-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-イル)プロパン-1-オール、異性体1(中間体108)及び2-メトキシ-N-メチル-N-(テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド(中間体34)を用いて、化合物37と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法J)：rt=0.63、[M+H]+=624。
【０７８９】
化合物78
5-(5-(1-ヒドロキシプロピル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-2-メトキシ-N-メチル-N-(テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)ベンズアミド、異性体2
【０７９０】
【化１９５】
2021510711.tif 000215
【０７９１】
1-(3-ブロモ-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-イル)プロパン-1-オール、異性体2(中間体109)及び2-メトキシ-N-メチル-N-(テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド(中間体34)を用いて、化合物37と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法J)：rt=0.64、[M+H]+=624。
【０７９２】
化合物79
5-(5-(1-ヒドロキシシクロプロピル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-N-(3-ヒドロキシプロピル)-N,2-ジメチルベンズアミド
【０７９３】
【化１９６】
2021510711.tif 000216
【０７９４】
tert-ブチル(3-ブロモ-5-(1-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)シクロプロピル)-2-メチルピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-7-イル)(3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)カルバメート(中間体115、26mg、0.039mmol)、リン酸カリウム(24mg、0.113mmol)、XPhos(2mg、4.20μmol)、XPhos Pd G2(3mg、3.81μmol)及びN-(3-ヒドロキシプロピル)-N,2-ジメチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド(中間体36、25mg、0.053mmol)を、1,4-ジオキサン(0.4mL)及び水(0.133mL)中で合わせた。混合物を、密閉バイアル中で、60℃にて1時間45分間加熱した。XPhos Pd G2(3mg、3.81μmol)及びN-(3-ヒドロキシプロピル)-N,2-ジメチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド(中間体36、25mg、0.053mmol)を加えた。1時間後、反応温度を80℃に増加させた。2時間後、XPhos Pd G2(3mg、3.81μmol)及びN-(3-ヒドロキシプロピル)-N,2-ジメチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド(中間体36、25mg、0.053mmol)を加え、混合物を100℃にて1時間加熱した。この混合物を、水(10mL)と酢酸エチル(10mL)との間で分配した。分離した水性相を酢酸エチル(2x10mL)で洗浄し、合わせた有機物を疎水性フリットに通し、減圧下で濃縮した。残留物を1,4-ジオキサン(1.0mL)中に溶解し、その後HCl(1,4-ジオキサン中4M)(0.1mL)を加えた。混合物を室温で4日間撹拌した。飽和重炭酸ナトリウム水溶液(3mL)を加え、混合物を10分間撹拌した。水(10mL)及びDCM(10mL)を加え、相を分配した。分離した水性相をDCM(2x5mL)で洗浄し、合わせた有機層を疎水性フリットに通し、減圧下で濃縮した。残留物を、MDAP(方法A)により精製した。所望の生成物を含有する画分を合わせ、減圧下で濃縮し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.97、[M+H]+=580。
【０７９５】
化合物80
N-((S)-1-ヒドロキシプロパン-2-イル)-5-(5-(1-ヒドロキシプロピル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-N,2-ジメチルベンズアミド、異性体1
【０７９６】
【化１９７】
2021510711.tif 000217
【０７９７】
1-(3-ブロモ-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-イル)プロパン-1-オール、異性体1(中間体108)及び(S)-N-(1-ヒドロキシプロパン-2-イル)-N,2-ジメチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド(中間体45)を用いて、化合物37と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法J)：rt=0.62、[M+H]+=582。
【０７９８】
化合物81
N-((S)-1-ヒドロキシプロパン-2-イル)-5-(5-(1-ヒドロキシプロピル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-N,2-ジメチルベンズアミド、異性体2
【０７９９】
【化１９８】
2021510711.tif 000218
【０８００】
1-(3-ブロモ-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-イル)プロパン-1-オール、異性体2(中間体109)及び(S)-N-(1-ヒドロキシプロパン-2-イル)-N,2-ジメチル-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド(中間体45)を用いて、化合物37と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法J)：rt=0.61、[M+H]+=582。
【０８０１】
化合物82
5-(5-(2-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-N-(2-ヒドロキシプロピル)-2-メトキシ-N-メチルベンズアミド
【０８０２】
【化１９９】
2021510711.tif 000219
【０８０３】
5-(5-(2-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-2-メトキシ安息香酸(中間体120、65mg、0.101mmol)、HATU(47mg、0.124mmol)及びDIPEA(0.055mL、0.315mmol)を、THF(1mL)中、室温で5分間撹拌し、その後、1-(メチルアミノ)プロパン-2-オール(13mg、0.146mmol)を加えた。2時間後、さらなるHATU(12mg、0.032mmol)及びDIPEA(0.018mL、0.101mmol)を加えた。1.5時間後、反応混合物をMDAP(方法A)により精製した。生成物画分を合わせ、不活性ガス流下で乾燥し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.96、[M+H]+=598。
【０８０４】
化合物83及び84
5-(5-(2-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-N-(2-ヒドロキシプロピル)-2-メトキシ-N-メチルベンズアミド、異性体1(化合物83)及び異性体2(化合物84)
【０８０５】
【化２００】
2021510711.tif 000220
【０８０６】
化合物82を、ヘプタン(0.2％イソプロピルアミン含有)中30％エタノール(0.2％イソプロピルアミン含有)で溶出するChiralpak ICカラム(30mmx250mm、5μm)上で精製し、表題化合物を得た。異性体1：LCMS(方法F)：rt=0.94、[M+H]+=598。キラルHPLC：rt 28.8、100％。異性体2：LCMS(方法F)：rt=0.94、[M+H]+=598。キラルHPLC：rt 33.68、96.6％。
【０８０７】
化合物85
2-((2-メトキシ-5-(2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)-5-((テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)メチル)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)フェニル)スルホニル)エタン-1-オール
【０８０８】
【化２０１】
2021510711.tif 000221
【０８０９】
3-ヨード-2-メチル-N-(3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)-5-((テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)メチル)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-7-アミン(中間体122)及び2-((2-メトキシ-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)フェニル)スルホニル)エタノール(中間体19)を用いて、化合物9と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.94、[M+H]+=631。
【０８１０】
化合物86
2-(3-(3-((2-ヒドロキシエチル)スルホニル)-4-メトキシフェニル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-イル)ブタン-1-オール
【０８１１】
【化２０２】
2021510711.tif 000222
【０８１２】
2-(3-ヨード-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-イル)ブタン-1-オール(中間体104)及び2-((2-メトキシ-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)フェニル)スルホニル)エタノール(中間体19)を用いて、化合物37と同様の方法で調製し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.92、[M+H]+=605。
【０８１３】
化合物87
3-(5-(2-ヒドロキシプロパン-2-イル)-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-3-イル)-N-(3-ヒドロキシプロピル)-N-メチルベンズアミド
【０８１４】
【化２０３】
2021510711.tif 000223
【０８１５】
2-(3-ブロモ-2-メチル-7-((3-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンジル)アミノ)ピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-5-イル)プロパン-2-オール(中間体43、150mg、0.313mmol)、リン酸カリウム(165mg、0.777mmol)、ジシクロヘキシル(2',4',6'-トリイソプロピル-[1,1'-ビフェニル]-2-イル)ホスファン(12mg、0.025mmol)、XPhos Pd G2(22mg、0.028mmol)及びN-(3-ヒドロキシプロピル)-N-メチル-3-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ベンズアミド(中間体123、219mg、0.412mmol)を、マイクロ波バイアル中で合わせた。1,4-ジオキサン(1.8mL)及び水(0.6mL)を加え、バイアルを密閉し、混合物を、マイクロ波反応器中で100℃にて1時間加熱した。冷却後、二相反応混合物の有機層を、コットンウールに通して濾過し、MDAP(方法A)により直接精製した。得られた残留物を、飽和重炭酸ナトリウム水溶液(10mL)とDCM(5mL)との間で分配した。分離した水性相を、さらなるDCM(2x5mL)で洗浄した。有機物を合わせ、疎水性フリットに通し、不活性ガス流下で濃縮し、高真空下で40℃にて1日間乾燥し、表題化合物を得た。LCMS(方法F)：rt=0.94、[M+H]+ =568。
【０８１６】
生物学的アッセイ
a) PI4KB活性アッセイ
ヒトPI4KIII-ベータ13-828(D316-330)活性のin vitro阻害を、Promega製のADP-GLOキナーゼアッセイキットを用いることにより決定した。阻害剤を、100％DMSO中に1mMの濃度で溶解した。希釈液は、1対3連続ステップ希釈を用いて、100％DMSO中で調製した。11点滴定(titration)から得た60nLスタンプを、白色低容量384ウェルGreinerアッセイプレートに移し、このプレートにわたり最終DMSO濃度1％及び阻害剤の最高最終濃度10μMを確保した。PI4KIII-ベータアッセイは、25mM Hepes(pH7.5)(NaOH)、10mM MgCl2、0.5mM EGTA、0.1％Triton X-100、2mM TCEP、及び0.1mg/ml BSA、1mM ATP、60μMホスファチジルイノシトール、及び1.5nMヒトPI4K-ベータ13-828(D316-330)を、総量6μLで含んでいた。このアッセイを、酵素の添加により開始し、カバーし(covered)、室温で3時間インキュベートした。アッセイを、0.1％CHAPSを含有する6μl ADP-GLO試薬の添加により停止させ、未消費のATPを枯渇させた。このプレートを室温で60分間インキュベートし、その後0.1％CHAPSを含有する12μlのキナーゼ検出試薬を加えてADPをATPに変換し、ルシフェラーゼ及びルシフェリンを導入した。室温で40分間インキュベーションした後、BMG Labtech PHERAstar FSにおいて、以下の設定で発光シグナルを読み取った；ゲイン3600、焦点高さ13.7mm、測定間隔時間1秒、設定時間0.2秒。化合物のPI4K-ベータ活性の阻害効果を、4パラメーター用量応答式に適合させることにより、高(化合物無し)対照、及び低(酵素無し)対照に対する応答のIC50によって評価した。
【０８１７】
このアッセイにおいて試験した場合：全化合物が8.1以上の平均pIC50を与え；化合物1〜7、9〜11、14、15、17〜20、22〜29及び31〜87は、8.4以上の平均pIC50を与え；化合物17及び19は8.6の平均pIC50を与え；化合物21は、8.2の平均pIC50を与え；化合物22は、8.5の平均pIC50を与えた。
【０８１８】
b) 滞留時間アッセイ
キャリパー調整アッセイ(Caliper Conditioning assay)
化合物希釈液を、1対3連続ステップ希釈及び最高濃度1mMを用いて、100％DMSO中で調製した。12点滴定から得た200nLスタンプを、黒色384ウェルGreinerアッセイプレートに移し、上記プレート全体にわたる最終DMSO濃度1％、及び20μLの最終アッセイ体積中の阻害剤の最高最終濃度10μMを確保した。384ウェルアッセイプレートの1つのウェルに、10μLの2X酵素バッファーを、化合物と一緒に1時間予めインキュベートした。酵素を含まないバッファーを、100％阻害対照として使用した。10μLの2X基質溶液を加えて、最終濃度が2mM ATP及び1μM Bodipy-PIとなるようにアッセイを開始し、プレートを25℃で3時間インキュベートした。40μLのストップバッファーを添加することにより酵素反応を終了させ、各サンプル中に存在する基質(PI)と生成物(PIP)とを、LabChip 3000キャピラリー電気泳動装置のCALIPER LABCHIP 3000 Drug Discovery System(薬物発見システム)を用いて電気泳動的に分離し、励起については青色レーザー(480nm)、検出(CCD2)については緑色CCD(520nm)を用いて検出した。陰性対照サンプル(阻害剤の不存在下で0％阻害)及び陽性対照サンプル(酵素の不存在下で100％阻害)を、48の複製(1キャリパーシッパー(caliper sipper)当たり4複製)で構築し、これらを使用して各試験ウェル中の％阻害値を計算した。以下の式を用いてパーセント阻害(Pinh)を決定した：
Pinh=(PSR0％-PSRinh)/(PSR0％-PSR100％)x100
(式中、PSRinhは、阻害剤の存在下での積和比率(product sum ratio)であり、PSR0％は、阻害剤の不存在下での平均積和比率であり、PSR100％は、100％阻害対照サンプルにおける平均積和比率であり；阻害剤のIC50値は、XLfit 4ソフトウェア(IBDS)を用いて、阻害曲線(阻害剤濃度に対するPinh)を4パラメーターシグモイド用量応答モデルにフィッティングさせることによって決定される)。
【０８１９】
ジャンプ希釈
小エッペンドルフチューブ中で、5μLの2x酵素溶液(0.4μM〜0.8μM)を、5μL 2x化合物溶液(上記のとおりに2mM ATPにおいて決定された40〜120倍のIC50値を含む)と混合し、室温で1時間インキュベートした。2μLの酵素プレインキュベーション混合物を、2mM ATP及び1μM Bodipy-PIを含む800μLの基質ミックスと急速に混合することによって、アッセイを開始した。60μLの各サンプルを低容量Greiner 384ウェルプレートの中に移し、各サンプル中に存在する基質(PI)と生成物(PIP)とを、LabChip 3000キャピラリー電気泳動装置のCALIPER LABCHIP 3000 Drug Discovery System(薬物発見システム)を用いて電気泳動的に分離し、励起については青色レーザー(480nm)、検出(CCD2)については緑色CCD(520nm)を用いて、約8時間検出した(各ウェルから200測定値)。化合物の存在下におけるプログレス曲線(時間に対する％変換)を、化合物を含まない対照サンプルにおけるプログレス曲線と比較する。これらの曲線を、XLfitソフトウェアを用いてプログレス曲線式にフィッティングさせた：
[P]=Vs x t + ((Vi-Vs)/Kobs) x (1-exp(-Kobs x t))
(式中、Viは酵素の初速度であり、Vsは希釈阻害剤の存在下での定常状態速度であり、tは、希釈後の時間である)。
【０８２０】
観察されるVi値、Vs値及びKobs値は、阻害剤の性質(すなわち、強結合に対する急速平衡)によって決まる。初期アッセイ条件(酵素に対する化合物の相対濃度)に応じて、Viパラメータ及びVsパラメータを、予めフィッティングさせ及び/又はロックすることができる。遅延解離化合物>[E]については、初期酵素速度(急速希釈後)は、一般的にはロックされない；定常状態速度は、残留化合物の存在下における定常状態速度(IC50曲線から導出される)にロックすることができる。試験した幾つかの急速平衡化合物(1/2滞留(residence)<アッセイの分解能)>[E]については、初速度は、対応する化合物濃度におけるIC50曲線から導出される理論的％活性にロックすることが可能であり、定常状態速度は、対照に予めフィッティングさせることはできるがロックすることはできないであろう。残りの急速平衡化合物又は遅延解離化合物については、例えば、上記の戦略で適切なフィッティングを生成することができなかったときのような場合、Vi及びVsを予測はするが、対応する化合物濃度におけるIC50曲線から導出される理論的速度にロックはしない、別のアプローチをとることができる。
【０８２１】
このアッセイにおいて、化合物17は542分間の平均滞留時間を示し；化合物19は997分間の平均滞留時間を示し；化合物21は528分間の平均滞留時間を示し；化合物22は1666分間の平均滞留時間を示した。
【０８２２】
c) 細胞変性効果(CPE)アッセイプロトコル
PI4KB活性のin vitro阻害を、ヒトライノウイルスA型16株(HRVA16)による感染に応答した、HeLa Ohio細胞におけるATP枯渇の阻害の分析により決定した。Promega製のCellTiter-GLO試薬を用いて、ATPレベルを決定した。PI4KBを阻害する化合物はまた、ヒトライノウイルスの強力な阻害剤でもあり、ウイルスの感染及び複製により誘導されたCPEからHeLa Ohio細胞を保護することができる。保護された細胞はウイルス感染後も生存し続け、従ってより高いATPレベルを有する。
【０８２３】
化合物を、100％DMSO中に3mMの濃度まで溶解し、その後、1：3連続ステップ希釈を用いて、100％DMSO中で希釈液を調製した。10点滴定から得た0.5μLスタンプを、白色96ウェルGreiner組織培養平底プレート(655083)に移した。100％DMSOの0.5μLスタンプを、プレートのカラム11及び12の中にスタンプし、このプレート全体にわたる最終アッセイDMSO濃度0.33％及び化合物最高最終アッセイ濃度10μMを確保した。
【０８２４】
HeLa Ohio細胞を、37℃、培地(10％オーストラリア産ウシ胎児血清及び2mM glutamaxを添加したDMEM)中5％CO2で培養した。培養密度が>80％に達したときに細胞を継代した。このアッセイについて、剥離前に細胞を80〜90％の培養密度まで増殖させた。
【０８２５】
アッセイのため、細胞をPBSで洗浄し、37℃において、5mLに対して3mLのTrypLE Expressを用いて剥離することにより、細胞を剥離した。剥離した細胞を7mLの培地と混合し、300gで5分間遠心分離した。細胞ペレットを50mL培地中に再懸濁し、Beckman Coulter ViCellで計数した。細胞を6.6x104細胞/mLに希釈し、これらの細胞体積の一部を新たなチューブ中に取り出し、カラム12対照として使用した。HRVA16ストックを、残りの細胞懸濁液に適切な希釈で加えてウイルスストックとし、1のMOIを達成した。
【０８２６】
Multidrop Combiを用いて、1ウェル当たり150μLの細胞+ウイルス懸濁液を、カラム1〜11に加えた。マルチチャンネルピペットを用いて、1ウェル当たり150μLの別の細胞懸濁液を、カラム12に加えた。アッセイプレートを密封し、33℃、5％CO2で2日間インキュベートした。2日後、アッセイプレートをインキュベータから取り出し、室温と平衡にした。Thermo Scientific Multidrop Combiを用いて、全ウェルに60μLのCellTiter-Glo試薬を加えた。プレートを室温で20分間インキュベートし、その後Perkin Elmer Envisionで読み取った(設定：グリッパー高さ2.5、固定測定高さ(mm)6.5、プレートと検出器間の距離0、測定時間(秒) 0.1、グロー(Glow)(ct2)、補正率(0％))。
【０８２７】
PI4KB活性に対する本化合物の阻害効果を、4パラメーター用量応答式にフィッティングさせることによる、高(ウイルスなし、カラム12)対照及び低(ウイルスあり+阻害剤なし、カラム11)対照と比較した応答のIC50によって評価した。
【０８２８】
このアッセイにおいて試験した場合：全化合物は、7.2以上の平均pIC50を与え；化合物1〜8、10〜15及び17〜87は、7.6以上の平均pIC50を与え；化合物1、3、5、6、7、10〜12、14、15、17〜25、29、31、33〜37、39〜53、55〜59、61〜68、70、76、80〜82、84及び86は、8.4以上の平均pIC50を与え；化合物17及び19は、8.9の平均pIC50を与え；化合物21は、8.8の平均pIC50を与え；化合物22は、少なくとも9.1の平均pIC50を与えた。
【０８２９】
d) ヒトミクロソーム代謝安定性アッセイ
プロトコル概要
試験化合物(0.5μM)を、プールされた肝臓ミクロソームと一緒にインキュベートした。試験化合物を、45分間の実験にわたりインキュベートし、試験化合物をLC-MS/MSにより分析した。
【０８３０】
実験手順
プールされたヒト肝臓ミクロソームを、信頼できる商業的供給者、例えばCorning Life Sciencesから購入した。ミクロソーム(最終タンパク質濃度0.5mg/mL)、50mMリン酸バッファー(pH7.4)及びNADPH(最終濃度=1mM)を37℃でプレインキュベートし、その後試験化合物(最終基質濃度=0.5μM；最終DMSO濃度=0.25％)を添加して、反応を開始した。最終インキュベーション体積は500μLであった。試験した各化合物について、対照インキュベーションが含まれ、ここではNADPHの代わりに50mMリン酸バッファー(pH7.4)を加えた(マイナスNADPH)。各化合物種は2つの対照化合物を含んでいた。全てのインキュベーションは、各試験化合物について単独で(singularly)実施された。
【０８３１】
各化合物を45分間インキュベートし、インキュベートのサンプル(50μL)を、0分、5分、15分、30分及び45分の時点で採取した。対照(マイナスNADPH)は、45分の時点でのみサンプリングした。サンプルに対する内部標準を含む100μLアセトニトリルの添加により、反応を停止させた。停止させたサンプルを、4℃において2,500rpmで20分間遠心分離し、タンパク質を沈殿させた。
【０８３２】
定量分析
タンパク質沈殿の後、一般的LC-MS/MS条件を用いてサンプルを分析した。
【０８３３】
データ分析
時間に対するピーク面積比(化合物ピーク面積/内部標準ピーク面積)のプロットから、線の勾配を決定した。その後、以下の式を用いて固有クリアランスを計算し、次いでmL/分/gに変換した：
除去速度定数(k) = (-勾配)
半減期(t1/2)(分) = 0.693 ÷ k
固有クリアランス(CLint)(μL/分/mgタンパク質)=(Vx0.693) ÷ t1/2
(式中、V=インキュベーション体積μL/mgミクロソームタンパク質)。
【０８３４】
このアッセイにおいて試験した場合、化合物17の固有クリアランスは28.9mL/分/gであり；化合物19の固有クリアランスは11.6mL/分/gであり；化合物21の固有クリアランスは34.0mL/分/gであり；化合物22の固有クリアランスは33.7mL/分/gであった。
【０８３５】
e) 脾臓濃度アッセイ
化合物17、18、19、22及び23を、この脾臓蓄積アッセイにおいて試験した。化合物をラットに静脈内投与し、(経口的に又は肺を介して)吸入された用量の全てが吸収され、体循環が全用量に曝された場合に、脾臓中の化合物のレベルがどうなるのかを決定した。
【０８３６】
化合物17、19、22及び23を、Kleptose(水溶液、10％w/v)中の2％DMSO中で製剤化した。化合物18は、5：45：50比のDMSO：PEG200：水中で製剤化した。製剤を、単一の雄のWistar Hanラットに静脈内注入(1時間にわたり1mg/kg)として投与した。
【０８３７】
投与の開始12時間後、ラットを安楽死させて脾臓を回収した。およそ0.5gの脾臓のサンプルを採取し、4mL水中で均質化した。100μLの得られたホモジネートを、内部標準を含む300μLのアセトニトリルによるタンパク質沈殿により調製し、(同じ方法で調製した較正標準と共に)、加熱したエレクトロスプレー源を用いて陽イオン多重反応モニタリングモードで操作される逆相液体クロマトグラフィー-質量分析によりアッセイした。使用した液体クロマトグラフィーカラムは60℃のWaters Cortecs C18  2.7μm粒径、50x2.1mmカラムであり、勾配として操作される移動相は、1mL/分の流速で操作される(A) 0.1％ギ酸(水溶液)及び(B)アセトニトリル中0.1％ギ酸を利用した。
【０８３８】
全化合物は、30ng/g未満の脾臓中濃度を有していた。化合物17、19、22及び23は、7ng/g未満の脾臓中濃度を有していた。特に、化合物17は1.76ng/gの脾臓中濃度を有し、化合物22は5.54ng/gの脾臓中濃度を有していた。
【国際調査報告】
2021510711.tif 000231
2021510711.tif 000232