(57)【要約】  ウイルス感染の治療のための様々な組成物が開示される。本組成物は、肝臓を指向する抗体コンストラクトであって、リンカーを介して、骨髄細胞アゴニスト、具体的にはＴＬＲ７アゴニストおよびＴＬＲ８アゴニストに結合されている抗体コンストラクトを含む。コンジュゲートの調製および使用の方法がさらに提供される。これは、ウイルス肝疾患などのウイルス感染を治療する方法を含む。【選択図】図１
2021506827.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ａ）ｉ）  肝臓細胞上の第１の抗原に特異的に結合する標的抗原結合ドメインであって、第１の抗原が、肝臓細胞抗原、または肝臓細胞に感染するウイルスに由来するウイルス抗原である、標的抗原結合ドメイン；および
ｉｉ）  標的抗原結合ドメインに共有結合的に結合しているＦｃ結合ドメイン；
を含む抗体コンストラクト、
ｂ）ＴＬＲ７アゴニストまたはＴＬＲ８アゴニストから選択される骨髄細胞アゴニスト；ならびに
ｃ）骨髄細胞アゴニストおよび抗体コンストラクトに共有結合的に結合しているリンカー
を含む、コンジュゲート。
【請求項２】
式（Ｉ）：
2021506827.tif 000225
［式中、
Ａは、抗体コンストラクトであり、
Ｌは、リンカーであり、
Ｄｘは、骨髄細胞アゴニストであり、
ｎは、１〜２０から選択され、
ｚは、１〜２０から選択される］
によって表される、請求項１に記載のコンジュゲート。
【請求項３】
第１の抗原が肝臓細胞抗原である、請求項１または２に記載のコンジュゲート。
【請求項４】
肝臓細胞抗原が、毛細胆管細胞、クッパー細胞、肝細胞またはそれらの任意の組合せ上に発現する、請求項１から３のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項５】
肝臓細胞抗原が肝細胞抗原である、請求項１から４のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項６】
肝臓細胞抗原が、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２、ＴＲＦ２、ＵＧＴ１Ａ１、ＳＬＣ２２Ａ７、ＳＬＣ１３Ａ５、ＳＬＣ２２Ａ１およびＣ９からなる群から選択される、請求項１から５のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項７】
肝臓細胞抗原が、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２およびＴＲＦ２からなる群から選択される、請求項１から６のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項８】
肝臓細胞抗原がＡＳＧＲ１である、請求項１から６のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項９】
肝臓細胞抗原が、ＨＢＶおよびＨＣＶからなる群から選択されるウイルスに感染した肝臓細胞上に発現する、請求項１から８のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項１０】
第１の抗原が、ＨＢＶおよびＨＣＶからなる群から選択されるウイルスに由来するウイルス抗原である、請求項１または２に記載のコンジュゲート。
【請求項１１】
ウイルス抗原がＨＢＶ抗原である、請求項１、２または１０のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項１２】
ウイルス抗原が、ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇまたはＨＢｅＡｇである、請求項１、２、１０または１１のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項１３】
ウイルス抗原がＨＢｓＡｇである、請求項１、２または１０〜１２のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項１４】
抗体コンストラクトが、肝臓細胞上の第２の抗原に特異的に結合する第２の抗原結合ドメインをさらに含み、第２の抗原が、第２の肝臓細胞抗原、または肝臓細胞に感染するウイルスに由来する第２のウイルス抗原である、請求項１から１３のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項１５】
第２の抗原結合が、肝臓細胞に感染するウイルスに由来する第２のウイルス抗原に特異的に結合する、請求項１４に記載のコンジュゲート。
【請求項１６】
第２の抗原結合ドメインが、Ｆｃ結合ドメインのＣ末端部において、抗体コンストラクトに共有結合的に結合している、請求項１４または１５に記載のコンジュゲート。
【請求項１７】
第２の抗原結合ドメインが、抗体コンストラクトの軽鎖のＣ末端部に共有結合的に結合している、請求項１４または１５に記載のコンジュゲート。
【請求項１８】
第２の肝臓抗原が、毛細胆管細胞、クッパー細胞、肝細胞またはそれらの組合せ上に発現する、請求項１４から１７のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項１９】
第２の肝臓抗原が肝細胞抗原である、請求項１４から１８のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項２０】
第２の肝臓細胞抗原が、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２、ＴＲＦ２、ＵＧＴ１Ａ１、ＳＬＣ２２Ａ７、ＳＬＣ１３Ａ５、ＳＬＣ２２Ａ１およびＣ９からなる群から選択される、請求項１４から１９のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項２１】
第２の肝臓細胞抗原が、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２およびＴＲＦ２からなる群から選択される、請求項１４から２０のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項２２】
第２のウイルス抗原が、ＨＢＶおよびＨＣＶからなる群から選択されるウイルスに由来する、請求項１４から１７のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項２３】
ウイルス抗原がＨＢＶ抗原である、請求項１４〜１７または２２のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項２４】
ウイルス抗原が、ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇまたはＨＢｅＡｇである、請求項１４から１７、２２または２３のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項２５】
ウイルス抗原がＨＢｓＡｇである、請求項１４〜１７または２２〜２４のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項２６】
第２の抗原結合ドメインが、第１の肝臓細胞抗原または第１のウイルス抗原に特異的に結合する、請求項１４から２５のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項２７】
第１の抗原が第２の抗原と異なる、請求項１４から２５のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項２８】
ｚが、２〜２０であり、骨髄細胞アゴニストの少なくとも１つがＴＬＲ７アゴニストである、請求項２から２７のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項２９】
骨髄細胞アゴニストがＴＬＲ７アゴニストである、請求項１から２７のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項３０】
ＴＬＲ７アゴニストが、イミダゾキノリンアミン、イミダゾキノリンアミン、チアゾキノリン、グアノシンアナログ、アデノシンアナログ、チミジンホモポリマー、ｓｓＲＮＡ、ＣｐＧ−Ａ、ポリＧ１０、ポリＧ３、ならびに分類Ｂである式（ＩＡ）、（ＩＢ）および（ＩＣ）の化合物からなる群から選択される、請求項２８または２９に記載のコンジュゲート。
【請求項３１】
ＴＬＲ７アゴニストが、ガーディキモド、イミキモド、レシキモド、ＧＳ−９６２０およびイミダゾキノリン８５２Ａからなる群から選択される、請求項２８または２９に記載のコンジュゲート。
【請求項３２】
ＴＬＲ７アゴニストが、イミダゾキノリン、イミダゾキノリンアミン、チアゾキノリン、アミノキノリン、アミノキナゾリン、ピリド［３，２−ｄ］ピリミジン−２，４−ジアミン、ピリミジン−２，４−ジアミン、２−アミノイミダゾール、１−アルキル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−アミン、テトラヒドロピリドピリミジン、ヘテロアロチアジアジド−２，２−ジオキシド、ベンゾナフチリジン、グアノシンアナログ、アデノシンアナログ、チミジンホモポリマー、ｓｓＲＮＡ、ＣｐＧ−Ａ、ポリＧ１０、ポリＧ３、ならびに分類Ｂである式（ＩＡ）、（ＩＢ）および（ＩＣ）の化合物からなる群から選択される、請求項２８または２９に記載のコンジュゲート。
【請求項３３】
ＴＬＲ７アゴニストが天然に存在しない化合物である、請求項２８から３２のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項３４】
ｚが、２〜２０であり、骨髄細胞アゴニストの少なくとも１つがＴＬＲ８アゴニストである、請求項２から２８のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項３５】
骨髄細胞アゴニストがＴＬＲ８アゴニストである、請求項１から２７のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項３６】
ＴＬＲ８アゴニストが、ベンゾアゼピン、ｓｓＲＮＡ、イミダゾキノリン、アミノキノリン、チアゾロキノロン、ならびに分類Ａである式（ＩＡ）、（ＩＢ）、（ＩＩＡ）、（ＩＩＢ）、（ＩＩＩＡ）および（ＩＩＩＢ）の化合物からなる群から選択される、請求項３４または３５に記載のコンジュゲート。
【請求項３７】
ＴＬＲ８アゴニストが、ＶＴＸ−２３３７、ＶＴＸ−２９４、レシキモドおよび化合物１．１〜１．６７またはそれらの塩からなる群から選択される、請求項３４または３５に記載のコンジュゲート。
【請求項３８】
ＴＬＲ８アゴニストが、化合物１．１〜１．６７またはそれらの塩から選択される、請求項３４または３５に記載のコンジュゲート。
【請求項３９】
ＴＬＲ８アゴニストが、ベンゾアゼピン、イミダゾキノリン、チアゾロキノリン、アミノキノリン、アミノキナゾリン、ピリド［３，２−ｄ］ピリミジン−２，４−ジアミン、ピリミジン−２，４−ジアミン、２−アミノイミダゾール、１−アルキル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−アミン、テトラヒドロピリドピリミジンまたはｓｓＲＮＡから選択される、請求項３４または３５に記載のコンジュゲート。
【請求項４０】
ＴＬＲ８アゴニストが天然に存在しない化合物である、請求項３４から３９のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項４１】
化合物−リンカー２．１〜２．３９、またはそれらの塩から選択される化合物−リンカーを含む、請求項１から２８のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項４２】
Ｆｃ結合ドメインがＩｇＧ領域である、請求項１から４１のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項４３】
Ｆｃ結合ドメインがＩｇＧ１  Ｆｃ領域である、請求項１から４２のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項４４】
Ｆｃ結合ドメインが、野生型ＩｇＧ領域のアミノ酸配列と比べて、ＩｇＧ領域中の１つまたは複数のアミノ酸置換を含むＦｃ結合ドメイン変異体である、請求項１から４３のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項４５】
Ｆｃ結合ドメイン変異体が、野生型ＩｇＧ領域と比べて、１つまたは複数のＦｃγ受容体に対して増大した親和性を有する、請求項４４に記載のコンジュゲート。
【請求項４６】
Ｆｃ結合ドメインが非抗体足場である、請求項１から４５のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項４７】
標的抗原結合ドメインが、免疫グロブリン重鎖可変領域またはその抗原結合断片、および免疫グロブリン軽鎖可変領域またはその抗原結合断片を含む、請求項１から４６のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項４８】
標的抗原結合ドメインが、単鎖可変領域断片（ｓｃＦｖ）を含む、請求項１から４７のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項４９】
第２の抗原結合ドメインが、免疫グロブリン重鎖可変領域またはその抗原結合断片、および免疫グロブリン軽鎖可変領域またはその抗原結合断片を含む、請求項１３から４８のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項５０】
第２の抗原結合ドメインが、単鎖可変領域断片（ｓｃＦｖ）を含む、請求項１３から４９のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項５１】
Ｆｃ結合ドメインが、
ａ）Ｆｃ結合ドメイン−標的結合ドメイン融合タンパク質として；または
ｂ）第２のリンカーを介するコンジュゲーションによって、
標的ドメインに共有結合的に結合している、請求項１から５０のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項５２】
抗体コンストラクトが、骨髄細胞アゴニストの存在下で、Ｆｃ結合ドメインのＦｃ受容体への結合に関するＫｄを有しており、骨髄細胞アゴニストの存在下でのＦｃ結合ドメインのＦｃ受容体への結合に関するＫｄが、骨髄細胞アゴニストの非存在下でのＦｃ結合ドメインのＦｃ受容体への結合に関するＫｄの約１００倍以下である、請求項１から５１のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項５３】
ｎが１であり、ｚが１〜８である、請求項２〜５２のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項５４】
請求項１から５３のいずれか一項に記載のコンジュゲートおよび薬学的に許容される担体を含む薬学的組成物。
【請求項５５】
肝臓ウイルス感染を有する対象を治療する方法であって、対象に、有効用量の請求項１から５３のいずれか一項に記載のコンジュゲート、または請求項５４に記載の薬学的組成物を投与することを含む、肝臓ウイルス感染を有する対象を治療する方法。
【請求項５６】
対象がＢ型肝炎感染を有する、請求項５５に記載の方法。
【請求項５７】
対象ががんを有していない、請求項５５または５６に記載の方法。
【請求項５８】
コンジュゲートが、全身投与される、請求項５５から５７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５９】
コンジュゲートが、静脈内、皮膚内、皮下に投与されるか、またはウイルス感染の部位に注入される、請求項５５から５８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６０】
薬学的有効量の請求項１から５３のいずれか一項に記載のコンジュゲート、または請求項５４に記載の薬学的組成物の薬学的に許容される投与量単位を含むキット。
【請求項６１】
疾患の治療における使用のための、請求項１から５３のいずれか一項に記載のコンジュゲートまたは請求項５４に記載の薬学的組成物。
【請求項６２】
肝臓のウイルス感染の治療における使用のための、請求項１から５３のいずれか一項に記載のコンジュゲートまたは請求項５４に記載の薬学的組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
相互参照
本出願は、そのそれぞれの全体が参照により本明細書に組み込まれている、２０１７年１２月１５日出願の、米国仮特許出願第６２／５９９，６３６号、２０１８年３月１９日出願の米国仮特許出願第６２／６４５，０５４号、および２０１８年９月１２日出願の米国仮特許出願第６２／７３０，４７３号の利益を主張する。
【背景技術】
【０００２】
世界中の数百万人の人々が、Ｂ型肝炎（ＨＢＶ）またはＣ型肝炎（ＨＣＶ）などの肝臓のウイルス感染を罹患している。これらの感染は、慢性のものであり、肝硬変および深刻な肝臓損傷に至る恐れがある。２０１５年には、１３０万人の個人が、ＨＢＶおよびＨＣＶ感染のために死亡した。これらの感染を治療するために抗ウイルス医薬を使用することができるが、治療は、常に有効ではない。これは、ＨＢＶなどのウイルスは、免疫学的無視または免疫寛容を実現して、自然免疫系による検出を逃れることができることが部分的な理由である。したがって、肝臓のウイルスを治療する代替戦略が必要とされている。
参照による組込み
【０００３】
本明細書において明記されている、刊行物、特許および特許出願はすべて、あたかも個々の刊行物、特許または特許出願のそれぞれが、具体的かつ個々に、参照により組み込まれて示されているかのごとく、同じ程度に参照により本明細書に組み込まれている。
【発明の概要】
【０００４】
様々な態様では、コンジュゲートは、ａ）ｉ）肝臓細胞上の第１の抗原に特異的に結合する標的抗原結合ドメインであって、第１の抗原が、肝臓細胞抗原、または肝臓細胞に感染するウイルスに由来するウイルス抗原である、標的抗原結合ドメイン、およびｉｉ）標的抗原結合ドメインに共有結合的に結合しているＦｃ結合ドメインを含む抗体コンストラクト、ｂ）ＴＬＲ７アゴニストまたはＴＬＲ８アゴニスト、例えば分類Ａまたは分類Ｂから選択される化合物から選択される骨髄細胞アゴニスト、およびｃ）骨髄細胞アゴニストおよび抗体コンストラクトに共有結合的に結合しているリンカーを含む。一部の態様では、本コンジュゲートは、式（Ｉ）：
2021506827.tif 000003
［式中、Ａは、抗体コンストラクトであり、Ｌは、リンカーであり、Ｄｘは、骨髄細胞アゴニストであり、ｎは、１〜２０から選択され、ｚは、１〜２０から選択される］
によって表される。
【０００５】
一部の態様では、第１の抗原は、肝臓細胞抗原である。一部の態様では、肝臓細胞抗原は、毛細胆管細胞、クッパー細胞、肝細胞またはそれらの任意の組合せ上に発現する。一部の態様では、肝臓細胞抗原は、肝細胞抗原である。一部の態様では、肝臓細胞抗原は、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２、ＴＲＦ２、ＵＧＴ１Ａ１、ＳＬＣ２２Ａ７、ＳＬＣ１３Ａ５、ＳＬＣ２２Ａ１およびＣ９からなる群から選択される。一部の態様では、肝臓細胞抗原は、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２およびＴＲＦ２からなる群から選択される。一部の態様では、肝臓細胞抗原は、ＨＢＶおよびＨＣＶからなる群から選択されるウイルスに感染した肝臓細胞上に発現する。
【０００６】
一部の態様では、第１の抗原は、ＨＢＶおよびＨＣＶからなる群から選択されるウイルスに由来するウイルス抗原である。一部の態様では、ウイルス抗原は、ＨＢＶ抗原である。一部の態様では、ウイルス抗原は、ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇまたはＨＢｅＡｇである。一部の態様では、ウイルス抗原は、ＨＢｓＡｇである。
【０００７】
一部の態様では、本抗体コンストラクトは、肝臓細胞上の第２の抗原に特異的に結合する第２の抗原結合ドメインをさらに含み、第２の抗原は、第２の肝臓細胞抗原、または肝臓細胞に感染するウイルスに由来する第２のウイルス抗原である。一部の態様では、第２の抗原結合は、肝臓細胞に感染するウイルスに由来する第２のウイルス抗原に特異的に結合する。一部の態様では、第２の抗原結合ドメインは、Ｆｃ結合ドメインのＣ末端部において、抗体コンストラクトに共有結合的に結合している。一部の態様では、第２の抗原結合ドメインは、抗体コンストラクトの軽鎖のＣ末端部に共有結合的に結合している。一部の態様では、第２の肝臓抗原は、毛細胆管細胞、クッパー細胞、肝細胞またはそれらの組合せ上に発現する。一部の態様では、第２の肝臓抗原は、肝細胞抗原である。一部の態様では、第２の肝臓細胞抗原は、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２、ＴＲＦ２、ＵＧＴ１Ａ１、ＳＬＣ２２Ａ７、ＳＬＣ１３Ａ５、ＳＬＣ２２Ａ１およびＣ９からなる群から選択される。一部の態様では、第２の肝臓細胞抗原は、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２およびＴＲＦ２からなる群から選択される。一部の態様では、第２のウイルス抗原は、ＨＢＶおよびＨＣＶからなる群から選択されるウイルスに由来するウイルスに由来する。一部の態様では、ウイルス抗原は、ＨＢＶ抗原である。一部の態様では、ウイルス抗原は、ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇまたはＨＢｅＡｇである。一部の態様では、ウイルス抗原は、ＨＢｓＡｇである。一部の態様では、第２の抗原結合ドメインは、第１の肝臓細胞抗原または第１のウイルス抗原に特異的に結合する。一部の態様では、第１の抗原は、第２の抗原とは異なる。
【０００８】
一部の態様では、骨髄細胞アゴニストは、ＴＬＲ７アゴニストである。一部の態様では、ＴＬＲ７アゴニストは、イミダゾキノリンアミン、イミダゾキノリンアミン、チアゾキノリン、グアノシンアナログ、アデノシンアナログ、チミジンホモポリマー、ｓｓＲＮＡ、ＣｐＧ−Ａ、ポリＧ１０およびポリＧ３からなる群から選択される。一部の態様では、ＴＬＲ７は、分類Ｂの化合物から選択される。一部の態様では、ＴＬＲ７アゴニストは、ガーディキモド、イミキモド、レシキモド、ＧＳ−９６２０およびイミダゾキノリン８５２Ａからなる群から選択される。
【０００９】
一部の場合、免疫刺激性コンジュゲートは、ＴＬＲ７アゴニストを含む。ある種の実施形態では、ＴＬＲ７アゴニストは、イミダゾキノリン、イミダゾキノリンアミン、チアゾキノリン、アミノキノリン、アミノキナゾリン、ピリド［３，２−ｄ］ピリミジン−２，４−ジアミン、ピリミジン−２，４−ジアミン、２−アミノイミダゾール、１−アルキル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−アミン、テトラヒドロピリドピリミジン、ヘテロアロチアジアジド−２，２−ジオキシド、ベンゾナフチリジン、グアノシンアナログ、アデノシンアナログ、チミジンホモポリマー、ｓｓＲＮＡ、ＣｐＧ−Ａ、ポリＧ１０およびポリＧ３から選択される。一部の態様では、ＴＬＲ７アゴニストは、イミダゾキノリン、イミダゾキノリンアミン、チアゾキノリン、アミノキノリン、アミノキナゾリン、ピリド［３，２−ｄ］ピリミジン−２，４−ジアミン、ピリミジン−２，４−ジアミン、２−アミノイミダゾール、１−アルキル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−アミン、テトラヒドロピリドピリミジン、ヘテロアロチアジアジド−２，２−ジオキシドまたはベンゾナフチリジンから選択されるが、グアノシンアナログ、アデノシンアナログ、チミジンホモポリマー、ｓｓＲＮＡ、ＣｐＧ−Ａ、ポリＧ１０およびポリＧ３以外である。一部の実施形態では、ＴＬＲ７アゴニストは、天然に存在しない化合物である。一部の態様では、ＴＬＲ７アゴニストは、ＴＮＦアルファ産生またはＩＦＮアルファ産生を測定するＰＢＭＣアッセイによって、１００ｎＭ以下のＥＣ５０値を有する。一部の態様では、ＴＬＲ７アゴニストは、ＴＮＦアルファ産生またはＩＦＮアルファ産生を測定するＰＢＭＣアッセイによって、５０ｎＭ以下のＥＣ５０値を有する。一部の実施形態では、ＴＬＲ７アゴニストは、ＴＮＦアルファ産生またはＩＦＮアルファ産生を測定するＰＢＭＣアッセイによって、１０ｎＭ以下のＥＣ５０値を有する。
【００１０】
一部の態様では、骨髄細胞アゴニストは、ＴＬＲ８アゴニストである。一部の態様では、ＴＬＲ８アゴニストは、ベンゾアゼピン、ｓｓＲＮＡ、イミダゾキノリン、アミノキノリンおよびチアゾロキノロンからなる群から選択される。一部の態様では、ＴＬＲ８は、分類Ａの化合物から選択される。一部の態様では、ＴＬＲ８アゴニストは、ＶＴＸ−２３３７、ＶＴＸ−２９４、レシキモドおよび化合物１．１〜１．６７からなる群から選択される。
【００１１】
一部の態様では、ＴＬＲ８アゴニストは、ベンゾアゼピン、イミダゾキノリン、チアゾロキノリン、アミノキノリン、アミノキナゾリン、ピリド［３，２−ｄ］ピリミジン−２，４−ジアミン、ピリミジン−２，４−ジアミン、２−アミノイミダゾール、１−アルキル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−アミン、テトラヒドロピリドピリミジンまたはｓｓＲＮＡである。一部の態様では、ＴＬＲ８アゴニストは、ベンゾアゼピン、イミダゾキノリン、チアゾロキノリン、アミノキノリン、アミノキナゾリン、ピリド［３，２−ｄ］ピリミジン−２，４−ジアミン、ピリミジン−２，４−ジアミン、２−アミノイミダゾール、１−アルキル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−アミン、テトラヒドロピリドピリミジンからなる群から選択され、他のｓｓＲＮＡである。一部の態様では、ＴＬＲ８アゴニストは、天然に存在しない化合物である。一部の態様では、ＴＬＲ８アゴニストは、ＴＮＦアルファ産生を測定するＰＢＭＣアッセイによって、５００ｎＭ以下のＥＣ５０値を有する。一部の態様では、ＴＬＲ８アゴニストは、ＴＮＦアルファ産生を測定するＰＢＭＣアッセイによって、１００ｎＭ以下のＥＣ５０値を有する。一部の態様では、ＴＬＲ８アゴニストは、ＴＮＦアルファ産生を測定するＰＢＭＣアッセイによって、５０ｎＭ以下のＥＣ５０値を有する。一部の態様では、ＴＬＲ８アゴニストは、ＴＮＦアルファ産生を測定するＰＢＭＣアッセイによって、１０ｎＭ以下のＥＣ５０値を有する。
【００１２】
一部の場合、免疫刺激性コンジュゲートは、本明細書において、複合型ＴＬＲ７／ＴＬＲ８アゴニストコンジュゲートまたはデュアルペイロードＴＬＲ７／ＴＬＲ８コンジュゲートとも称される、２つの異なるアゴニスト、すなわちＴＬＲ７骨髄細胞アゴニストおよびＴＬＲ８骨髄細胞アゴニストを含む。ＴＬＲ７アゴニストおよびＴＬＲ８アゴニストは、本明細書に記載されているアゴニストのいずれか１つとすることができる。
【００１３】
一部の態様では、Ｆｃ結合ドメインは、ＩｇＧ領域である。一部の態様では、Ｆｃ結合ドメインは、ＩｇＧ１  Ｆｃ領域である。一部の態様では、Ｆｃ結合ドメインは、野生型ＩｇＧ領域のアミノ酸配列と比べて、ＩｇＧ領域中の１つまたは複数のアミノ酸置換を含むＦｃ結合ドメイン変異体である。一部の態様では、Ｆｃ結合ドメイン変異体は、野生型ＩｇＧ領域と比べて、１つまたは複数のＦｃγ受容体に対する親和性が増大している。一部の態様では、Ｆｃ結合ドメインは、非抗体足場である。
【００１４】
一部の態様では、標的抗原結合ドメインは、免疫グロブリン重鎖可変領域またはその抗原結合断片、および免疫グロブリン軽鎖可変領域またはその抗原結合断片を含む。一部の態様では、標的抗原結合ドメインは、単鎖可変領域断片（ｓｃＦｖ）を含む。一部の態様では、第２の抗原結合ドメインは、免疫グロブリン重鎖可変領域またはその抗原結合断片、および免疫グロブリン軽鎖可変領域またはその抗原結合断片を含む。一部の態様では、第２の抗原結合ドメインは、単鎖可変領域断片（ｓｃＦｖ）を含む。一部の態様では、Ｆｃ結合ドメインは、ａ）Ｆｃ結合ドメイン−標的結合ドメイン融合タンパク質として、またはｂ）第２のリンカーを介するコンジュゲーションによって、標的ドメインに共有結合的に結合している。一部の態様では、本抗体コンストラクトは、骨髄細胞アゴニストの存在下で、Ｆｃ結合ドメインのＦｃ受容体への結合に関するＫｄを有しており、骨髄細胞アゴニストの存在下でのＦｃ結合ドメインのＦｃ受容体への結合に関するＫｄは、骨髄細胞アゴニストの非存在下でのＦｃ結合ドメインのＦｃ受容体への結合に関するＫｄの約１００倍以下である。
【００１５】
様々な態様では、薬学的組成物は、上述の実施形態のいずれかのコンジュゲート、および薬学的に許容される担体を含む。
【００１６】
様々な態様では、肝臓ウイルス感染を有する対象を治療する方法は、対象に、有効用量の前述の実施形態のいずれかのコンジュゲート、または前述の実施形態のいずれかの薬学的組成物を投与することを含む。一部の態様では、対象はＢ型肝炎感染を有する。一部の態様では、対象は、がんを有していない。一部の態様では、本コンジュゲートは、全身的に投与される。一部の態様では、本コンジュゲートは、静脈内、皮膚内、皮下に投与されるか、またはウイルス感染の部位に注入される。
【００１７】
様々な態様では、キットは、薬学的有効量の前述の実施形態のいずれかのコンジュゲートまたは前述の実施形態のいずれかの薬学的組成物の薬学的に許容される投与量単位を含む。
【００１８】
本開示の新規な特徴は、添付の特許請求の範囲に具体的に記載されている。本開示の特徴および利点の一層良好な理解は、本開示の原理を利用する例示的な態様を説明する以下の詳細説明、および以下の添付の図面を参照することにより得られる。
【図面の簡単な説明】
【００１９】
【図１】ＡＳＧＲ１ポジティブおよびＡＳＧＲ１ネガティブコントロール細胞の存在下での、ＰＢＭＣ−肝細胞共培養アッセイにおける、ＡＳＧＲ１−ＴＬＲ８アゴニストコンジュゲートの活性を例示する図である。
【図２】ＡＳＧＲ１−ＴＬＲ８アゴニストコンジュゲートは、ＴＮＦα産生によって測定すると、ＡＳＧＲ１を発現するＰＢＭＣおよびＨｅｐＧ２細胞の存在下で活性であったことを示すグラフである。
【図３】ＡＳＧＲ１−ＴＬＲ８アゴニストのシステインが操作されたコンジュゲートは、ＴＮＦα産生によって測定すると、ＡＳＧＲ１を発現するＰＢＭＣおよびＨｅｐＧ２の存在下で活性であったことを示すグラフである。
【図４】様々なリンカーを有するＡＳＧＲ１−ＴＬＲ８アゴニストコンジュゲートは、ＴＮＦα産生によって測定すると、ＡＳＧＲ１を発現するＰＢＭＣおよびＨｅｐＧ２の存在下で活性であったことを示すグラフである。
【図５】複合型ＴＬＲ８−ＴＬＲ７アゴニストコンジュゲートは、ＴＮＦα産生によって測定すると、ＡＳＧＲ１を発現するＰＢＭＣおよびＨｅｐＧ２の存在下で活性であったことを示すグラフである。
【図６Ａ−６Ｂ】ＴＬＲ８アゴニストとＴＬＲ７アゴニストのどちらも、サイトカイン産生によって測定すると、ＡＳＧＲ１を発現するＰＢＭＣおよびＨｅｐＧ２の存在下で、複合型ＴＬＲ８−ＴＬＲ７アゴニストコンジュゲート中で活性であったことを示す図である。図６Ａは、ＩＦＮα産生を示す。図６Ｂは、ＩＬ−１２の産生を示す。
【図６Ｃ】ＴＬＲ８アゴニストとＴＬＲ７アゴニストのどちらも、サイトカイン産生によって測定すると、ＡＳＧＲ１を発現するＰＢＭＣおよびＨｅｐＧ２の存在下で、複合型ＴＬＲ８−ＴＬＲ７アゴニストコンジュゲート中で活性であったことを示す図である。図６Ｃは、ＴＮＦα産生を示す。
【図７】ＡＳＧＲ１  ＴＬＲ８コンジュゲートによって作動されるＰＢＭＣによるＴＮＦα産生が、Ｆｃ依存的であることを示す図である。
【図８】低分子ＴＬＲ７およびＴＬＲ８化合物は、マーモット属（Ｍａｒｍｏｔａ）ＴＮＦα発現を誘発することを示す図である。
【図９】ＡＳＧＲ１−ＴＬＲ８アゴニストコンジュゲートは、マーモット属ＰＢＭＣを条件付きで活性化することを示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００２０】
定義
本開示の追加的な態様および利点は、本開示の例示的な態様が示されて、記載されている、以下の詳細説明から当業者に明白となろう。本開示は、認識される通り、他の態様および異なる態様が可能であり、そのいくつかの詳細は、本開示からすべてが逸脱することなく、様々な点で修正が可能である。したがって、本説明は、実際に例示的なものとして見なされるべきであり、限定として見なされるべきではない。
【００２１】
本明細書で使用する場合、「同一の」または「同一性」とは、ＤＮＡ、ＲＮＡ、ヌクレオチド、アミノ酸またはタンパク質配列と、別のＤＮＡ、ＲＮＡ、ヌクレオチド、アミノ酸またはタンパク質配列との間に類似性があることを指す。同一性は、第２の配列に対する第１の配列の配列同一性の百分率に関して表現することができる。参照ＤＮＡ配列に関するパーセント（％）配列同一性は、配列のアライン後の参照ＤＮＡ配列におけるＤＮＡヌクレオチドと同一の候補配列中のＤＮＡヌクレオチドの百分率とすることができる。参照アミノ酸配列に関してのパーセント（％）配列同一性は、配列のアライン後、および必要な場合、最大パーセント配列同一性を実現するためギャップを導入した後に、参照アミノ酸配列におけるアミノ酸残基と同一となる候補配列中のアミノ酸残基の百分率とすることができ、保存的置換のいずれもこの配列同一性の部分として考慮しない。
【００２２】
本明細書で使用する場合、用語「抗体」は、特異的抗原に特異的に結合する、または特異的抗原に対して免疫学的に反応性を示す免疫グロブリン分子を指す。抗体という用語は、例えば、遺伝的に操作されたポリクローナル、モノクローナル、およびそれらの抗原結合断片を含むことができる。抗体は、例えば、マウス、キメラ、ヒト化、ヘテロコンジュゲート、二重特異性、ダイアボディ、トリアボディまたはテトラボディとすることができる。抗原結合断片は、例えば、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆａｂ、Ｆｖ、ｒＩｇＧ、ｓｃＦｖ、ｈｃＡｂ（重鎖抗体）、単一ドメイン抗体、ＶＨＨ、ＶＮＡＲ、ｓｄＡｂまたはナノボディを含むことができる。
【００２３】
本明細書で使用する場合、「認識する」とは、抗原結合ドメインと抗原との間の特異的会合または特異的結合を指す。
【００２４】
本明細書で使用する場合、「特異的に結合する」などとは、抗原結合ドメインと様々な抗原との相互作用（すなわち、非特異的結合）と比べた、抗原結合ドメインと抗原との間の特異的会合または特異的結合を指す。一部の実施形態では、抗原を認識する、または抗原に特異的に結合する抗原結合ドメインは、＜＜１００ｎＭ、＜１０ｎＭ、＜１ｎＭ、＜０．１ｎＭ、＜０．０１ｎＭまたは＜０．００１ｎＭ（例えば、１０−８Ｍ以下、例えば１０−８Ｍ〜１０−１３Ｍ、例えば、１０−９Ｍ〜１０−１３Ｍ）となる解離定数（ＫＤ）を有する。
【００２５】
本明細書で使用する場合、「抗原」とは、宿主における免疫応答を誘発することができる抗原物質を指す。抗原は、タンパク質、多糖類、脂質または糖脂質とすることができ、これらは、Ｔ細胞またはＢ細胞などの免疫細胞によって認識され得る。１種または複数のこれらの抗原への免疫細胞の曝露により、速やかな細胞分裂および分化応答が誘発され、曝露されたＴ細胞およびＢ細胞のクローン形成がもたらされ得る。Ｂ細胞は、形質細胞へと分化することができ、ひいては、抗原に選択的に結合する抗体を産生することができる。
【００２６】
本明細書で使用する場合、「肝臓細胞抗原」とは、抗体または結合ドメインによって認識され得る肝臓細胞上に発現する抗原物質であって、他の組織に由来する細胞に比べて、非がん性肝臓細胞上に優先的に発現する抗原物質を指す。
【００２７】
本明細書で使用する場合、「ウイルス抗原」とは、ウイルス、ウイルス感染またはそれらの組合せに関連する抗原物質を指す。「肝臓細胞に感染するウイルスに由来するウイルス抗原」とは、肝臓細胞に罹患するまたは罹患したウイルスに関連する抗原物質であって、宿主における免疫応答の引き金となり得る抗原物質を指す。
【００２８】
本明細書で使用する場合、「抗体コンストラクト」とは、抗原結合ドメインおよびＦｃ結合ドメインを含むコンストラクトを指す。
【００２９】
本明細書で使用する場合、「抗原結合ドメイン」とは、抗原に特異的に結合することができる抗体または非抗体に由来する結合ドメインを指す。抗原結合ドメインは、所与のコンジュゲートまたは抗体コンストラクトに、抗原結合ドメインが１つより多く存在する場合、番号を付与することができる（例えば、第１の抗原結合ドメイン、第２の抗原結合ドメイン、第３の抗原結合ドメインなど）。同じコンジュゲートまたはコンストラクト中の異なる抗原結合ドメインは、同じ抗原を標的とすることができる（例えば、第１の抗原結合ドメインおよび第２の抗原は、コンジュゲートまたはコンストラクトの同じ肝臓細胞抗原に特異的に結合することができる）か、または異なる抗原を標的とすることができる（例えば、第１の抗原結合ドメインは、肝臓細胞抗原に特異的に結合することができ、第２の抗原結合ドメインは、コンジュゲートまたはコンストラクトの肝臓細胞に感染するウイルスに由来するウイルス抗原に特異的に結合することができる）。
【００３０】
本明細書で使用する場合、「Ｆｃ結合ドメイン」とは、抗体のＦｃ部分に由来するドメイン、またはＦｃガンマ受容体もしくはＦｃＲｎなどのＦｃ受容体に結合することができる非抗体分子に由来するドメインを指す。
【００３１】
本明細書で使用する場合、「標的抗原結合ドメイン」とは、抗原に特異的に結合するコンジュゲートまたはコンストラクトの抗原結合ドメインを指す。
【００３２】
本明細書で使用する場合、「骨髄細胞アゴニスト」とは、Ｔｏｌｌ様受容体７（ＴＬＲ７）、Ｔｏｌｌ様受容体８（ＴＬＲ８）またはそれらの組合せを作動させる化合物を指す。
【００３３】
本明細書で使用する場合、「コンジュゲート」とは、リンカーを介して、少なくとも１つの骨髄細胞アゴニストに結合している抗体コンストラクトを指す。
【００３４】
本明細書で使用する場合、「二重特異性抗体コンストラクト」とは、第２の抗原結合ドメインからさらになる抗体コンストラクトを指す。
【００３５】
本明細書で使用する場合、「二重特異性抗コンジュゲート」とは、第２の抗原結合ドメインからさらになる抗体コンストラクトを指し、それは、リンカーを介して少なくとも１つの骨髄細胞アゴニストに結合している。
【００３６】
本明細書で使用する場合、「肝臓細胞」とは、正常な肝臓組織に関連する任意のタイプの細胞を指す。例えば、肝臓細胞は、毛細胆管細胞、クッパー細胞、肝細胞、類洞内皮細胞または星型細胞とすることができる。
【００３７】
本明細書で使用する場合、「免疫細胞」とは、Ｔ細胞、Ｂ細胞、ＮＫ細胞、ＮＫＴ細胞または抗原提示細胞を指す。一部の実施形態では、免疫細胞は、Ｔ細胞、Ｂ細胞、ＮＫ細胞またはＮＫＴ細胞である。一部の実施形態では、免疫細胞は、抗原提示細胞である。一部の実施形態では、免疫細胞は、抗原提示細胞ではない。
【００３８】
本明細書で使用する場合、天然のＬ−鏡像異性体アミノ酸の略称は従来通りであり、以下：アラニン（Ａ、Ａｌａ）；アルギニン（Ｒ、Ａｒｇ）；アスパラギン（Ｎ、Ａｓｎ）；アスパラギン酸（Ｄ、Ａｓｐ）；システイン（Ｃ、Ｃｙｓ）；グルタミン酸（Ｅ、Ｇｌｕ）；グルタミン（Ｑ、Ｇｌｎ）；グリシン（Ｇ、Ｇｌｙ）；ヒスチジン（Ｈ、Ｈｉｓ）；イソロイシン（Ｉ、Ｉｌｅ）；ロイシン（Ｌ、Ｌｅｕ）；リジン（Ｋ、Ｌｙｓ）；メチオニン（Ｍ、Ｍｅｔ）；フェニルアラニン（Ｆ、Ｐｈｅ）；プロリン（Ｐ、Ｐｒｏ）；セリン（Ｓ、Ｓｅｒ）；スレオニン（Ｔ、Ｔｈｒ）；トリプトファン（Ｗ、Ｔｒｐ）；チロシン（Ｙ、Ｔｙｒ）；バリン（Ｖ、Ｖａｌ）とすることができる。別段の指定がない限り、Ｘは、任意のアミノ酸を示すことができる。一部の態様では、Ｘは、アスパラギン（Ｎ）、グルタミン（Ｑ）、ヒスチジン（Ｈ）、リジン（Ｋ）またはアルギニン（Ｒ）とすることができる。
【００３９】
用語「塩」または「薬学的に許容される塩」とは、当分野で周知の様々な有機および無機の対イオンに由来する塩を指す。薬学的に許容される酸付加塩は、無機酸および有機酸と形成され得る。塩が由来し得る無機酸としては、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などが含まれる。塩が由来し得る有機酸には、例えば、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、ピルビン酸、シュウ酸、マレイン酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、桂皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、サリチル酸などが含まれる。薬学的に許容される塩基付加塩は、無機塩基および有機塩基と形成され得る。塩が由来し得る無機塩基には、例えば、ナトリウム、カリウム、リチウム、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、鉄、亜鉛、銅、マンガン、アルミニウムなどが含まれる。塩類が由来し得る有機塩基には、例えば、天然に存在する置換アミン、環式アミン、塩基性イオン交換樹脂などを含めた、具体的には、イソプロピルアミン、トリメチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、トリプロピルアミンおよびエタノールアミンなどの一級、二級および三級アミン、置換アミンが含まれる。一部の実施形態では、薬学的に許容される塩基付加塩は、アンモニウム塩、カリウム塩、ナトリウム塩、カルシウム塩およびマグネシウム塩から選択される。
【００４０】
用語「Ｃｘ〜ｙ」は、アルキル、アルケニルまたはアルキニルなどの化学部分と関連して使用される場合、鎖中にｘ〜ｙ個の炭素を含有する基を含むことが意図される。例えば、用語「Ｃ１〜６アルキル」は、１〜６個の炭素を含有する直鎖アルキル基および分岐鎖アルキル基を含めた、置換または無置換の飽和炭化水素基を指す。用語−Ｃｘ〜ｙアルキレン−とは、アルキレン鎖中にｘ〜ｙ個の炭素を有する置換または無置換アルキレン鎖を指す。例えば、−Ｃ１〜６アルキレン−は、メチレン、エチレン、プロピレン、ブチレン、ペンチレンおよびヘキシレンから選択することができ、これらのいずれの１つも置換されていてもよい。
【００４１】
用語「Ｃｘ〜ｙアルケニル」および「Ｃｘ〜ｙアルキニル」は、長さが類似しており、上で記載したアルキルに置換している可能性がある、置換または無置換の不飽和脂肪族基を指すが、それぞれ、少なくとも１つの二重結合または三重結合を含有する。用語−Ｃｘ〜ｙアルケニレン−とは、アルケニレン鎖中にｘ〜ｙ個の炭素を有する置換または無置換アルケニレン鎖を指す。例えば、−Ｃ２〜６アルケニレン−は、エテニレン、プロペニレン、ブテニレン、ペンテニレンおよびヘキセニレンから選択することができ、これらのいずれの１つも置換されていてもよい。アルケニレン鎖は、アルケニレン鎖中に１つの二重結合、または１つより多い二重結合を有することができる。用語−Ｃｘ〜ｙアルキニレン−とは、アルケニレン鎖中にｘ〜ｙ個の炭素を有する置換または無置換アルキニレン鎖を指す。例えば、−Ｃ２〜６アルケニレン−は、エチニレン、プロピニレン、ブチニレン、ペンチニレンおよびヘキシニレンから選択することができ、これらのいずれの１つも置換されていてもよい。アルキニレン鎖は、アルキニレン鎖中に１つの三重結合、または１つより多い三重結合を有することができる。
【００４２】
「アルキレン」とは、分子の残りを、炭素および水素だけからなり、不飽和を含有せず、好ましくは１〜１２個の炭素原子を有するラジカル基に連結させる二価の炭化水素鎖、例えば、メチレン、エチレン、プロピレン、ブチレンなどを指す。アルキレン鎖は、単結合を介して分子の残りに、および単結合を介してラジカル基に結合している。アルキレン鎖の分子の残りおよびラジカル基への結合点は、それぞれ、末端炭素を介する。他の実施形態では、アルキレンは、１〜５個の炭素原子（すなわち、Ｃ１〜Ｃ５アルキレン）を含む。他の実施形態では、アルキレンは、１〜４個の炭素原子（すなわち、Ｃ１〜Ｃ４アルキレン）を含む。他の実施形態では、アルキレンは、１〜３個の炭素原子（すなわち、Ｃ１〜Ｃ３アルキレン）を含む。他の実施形態では、アルキレンは、１〜２個の炭素原子（すなわち、Ｃ１〜Ｃ２アルキレン）を含む。他の実施形態では、アルキレンは、１個の炭素原子（すなわち、Ｃ１アルキレン）を含む。他の実施形態では、アルキレンは、５〜８個の炭素原子（すなわち、Ｃ５〜Ｃ８アルキレン）を含む。他の実施形態では、アルキレンは、２〜５個の炭素原子（すなわち、Ｃ２〜Ｃ５アルキレン）を含む。他の実施形態では、アルキレンは、３〜５個の炭素原子（すなわち、Ｃ３〜Ｃ５アルキレン）を含む。本明細書において特に具体的に明記しない限り、アルキレン鎖は、本明細書に記載されている置換基などの、１つまたは複数のそのような置換基により置換されていてもよい。
【００４３】
「アルケニン」とは、分子の残りを、炭素および水素だけからなり、少なくとも１つの炭素−炭素二重結合を含有し、好ましくは２〜１２個の炭素原子を有するラジカル基に連結させる二価の炭化水素鎖を指す。アルケニレン鎖は、単結合を介して分子の残りに、および単結合を介してラジカル基に結合している。アルケニレン鎖の分子の残りおよびラジカル基への結合点は、それぞれ、末端炭素を介する。他の実施形態では、アルケニレンは、２〜５個の炭素原子（すなわち、Ｃ２〜Ｃ５アルケニレン）を含む。他の実施形態では、アルケニレンは、２〜４個の炭素原子（すなわち、Ｃ２〜Ｃ４アルケニレン）を含む。他の実施形態では、アルケニレンは、２〜３個の炭素原子（すなわち、Ｃ２〜Ｃ３アルケニレン）を含む。他の実施形態では、アルケニレンは、２個の炭素原子（すなわち、Ｃ２アルケニレン）を含む。他の実施形態では、アルケニレンは、５〜８個の炭素原子（すなわち、Ｃ５〜Ｃ８アルケニレン）を含む。他の実施形態では、アルケニレンは、３〜５個の炭素原子（すなわち、Ｃ３〜Ｃ５アルケニレン）を含む。本明細書において特に具体的に明記しない限り、アルケニレン鎖は、本明細書に記載されている置換基などの、１つまたは複数のそのような置換基により置換されていてもよい。
【００４４】
「アルキニレン」とは、分子の残りを、炭素および水素だけからなり、少なくとも１つの炭素−炭素三重結合を含有し、好ましくは２〜１２個の炭素原子を有するラジカル基に連結させる二価の炭化水素鎖を指す。アルキニレン鎖は、単結合を介して分子の残りに、および単結合を介してラジカル基に結合している。アルキニレン鎖の分子の残りおよびラジカル基への結合点は、それぞれ、末端炭素を介する。他の実施形態では、アルキニレンは、２〜５個の炭素原子（すなわち、Ｃ２〜Ｃ５アルキニレン）を含む。他の実施形態では、アルキニレンは、２〜４個の炭素原子（すなわち、Ｃ２〜Ｃ４アルケキニレン）を含む。他の実施形態では、アルキニレンは、２〜３個の炭素原子（すなわち、Ｃ２〜Ｃ３アルキニレン）を含む。他の実施形態では、アルキニレンは、２個の炭素原子（すなわち、Ｃ２アルキニレン）を含む。他の実施形態では、アルキニレンは、５〜８個の炭素原子（すなわち、Ｃ５〜Ｃ８アルキニレン）を含む。他の実施形態では、アルキニレンは、３〜５個の炭素原子（すなわち、Ｃ３〜Ｃ５アルキニレン）を含む。本明細書において特に具体的に明記しない限り、アルキニレン鎖は、本明細書に記載されている置換基などの、１つまたは複数のそのような置換基により置換されていてもよい。
【００４５】
「ヘテロアルキレン」とは、鎖中に少なくとも１個のヘテロ原子を含み、不飽和を含有せず、好ましくは１〜１２個の炭素原子、および１〜６個のヘテロ原子、例えば−Ｏ−、−ＮＨ−、−Ｓ−を有する、二価の炭化水素鎖を指す。ヘテロアルキレン鎖は、単結合を介して分子の残りに、および単結合を介してラジカル基に結合している。ヘテロアルキレン鎖の分子の残りおよびラジカル基への結合点は、鎖の末端炭素を介する。他の実施形態では、ヘテロアルキレンは、１〜５個の炭素原子および１〜３個のヘテロ原子を含む。他の実施形態では、ヘテロアルキレンは、１〜４個の炭素原子および１〜３個のヘテロ原子を含む。他の実施形態では、ヘテロアルキレンは、１〜３個の炭素原子および１〜２個のヘテロ原子を含む。他の実施形態では、ヘテロアルキレンは、１〜２個の炭素原子および１〜２個のヘテロ原子を含む。他の実施形態では、ヘテロアルキレンは、１個の炭素原子および１〜２個のヘテロ原子を含む。他の実施形態では、ヘテロアルキレンは、５〜８個の炭素原子および１〜４個のヘテロ原子を含む。他の実施形態では、ヘテロアルキレンは、２〜５個の炭素原子および１〜３個のヘテロ原子を含む。他の実施形態では、ヘテロアルキレンは、３〜５個の炭素原子および１〜３個のヘテロ原子を含む。本明細書において特に具体的に明記しない限り、ヘテロアルキレン鎖は、本明細書に記載されている置換基などの、１つまたは複数のそのような置換基により置換されていてもよい。
【００４６】
用語「炭素環」とは、本明細書で使用する場合、環の各原子が炭素である、飽和環、不飽和環または芳香族環を指す。炭素環には、３〜１０員の単環式環、６〜１２員の二環式環および６〜１２員の架橋環が含まれる。二環式炭素環の各環は、飽和環、不飽和環および芳香族環から選択することができる。例示的な実施形態では、芳香族環、例えばフェニルは、飽和環または不飽和環、例えば、シクロヘキサン、シクロペンタンまたはシクロヘキセンに縮合していてもよい。二環式炭素環には、価数が許容する、飽和環、不飽和環および芳香族二環式環のいかなる組合せも含まれる。二環式炭素環には、４−５縮合環系、５−５縮合環系、５−６縮合環系、６−６縮合環系、５−７縮合環系、６−７縮合環系、５−８縮合環系および６−８縮合環系などの環サイズのいずれの組合せも含まれる。例示的炭素環には、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘキセニル、アダマンチル、フェニル、インダニルおよびナフチルが含まれる。用語「不飽和炭素環」とは、少なくとも１つの不飽和度を有し、芳香族炭素環を除外する炭素環を指す。不飽和炭素環の例には、シクロヘキサジエン、シクロヘキセンおよびシクロペンテンが含まれる。
【００４７】
用語「複素環」とは、本明細書で使用する場合、１個または複数のヘテロ原子を含む、飽和環、不飽和環または芳香族環を指す。例示的ヘテロ原子としては、Ｎ、Ｏ、Ｓｉ、Ｐ、ＢおよびＳ原子が含まれる。複素環には、３〜１０員の単環式環、６〜１２員の二環式環および６〜１２員の架橋環が含まれる。二環式複素環には、価数が許容する、飽和環、不飽和環および芳香族二環式環のいかなる組合せも含まれる。例示的な実施形態では、芳香族環、例えばピリジルは、飽和環または不飽和環、例えば、シクロヘキサン、シクロペンタン、モルホリン、ピペリジンまたはシクロヘキセンに縮合していてもよい。二環式複素環には、４−５縮合環系、５−５縮合環系、５−６縮合環系、６−６縮合環系、５−７縮合環系、６−７縮合環系、５−８縮合環系および６−８縮合環系などの環サイズのいずれの組合せも含まれる。用語「不飽和複素環」とは、少なくとも１つの不飽和度を有し、芳香族複素環を除外する複素環を指す。不飽和複素環の例としては、ジヒドロピロール、ジヒドロフラン、オキサゾリン、ピラゾリンおよびジヒドロピリジンが含まれる。
【００４８】
用語「ヘテロアリール」は、芳香族単環構造、好ましくは５〜７員の環、より好ましくは５〜６員の環を含み、その環構造は、少なくとも１個のヘテロ原子、好ましくは１〜４個のヘテロ原子、より好ましくは１個または２個のヘテロ原子を含む。用語「ヘテロアリール」はまた、２つ以上の環を有する多環式環系であって、２個以上の炭素が、２つの隣接する環に共通しており、環の少なくとも１つが複素芳香族であり、例えば、他の環が、芳香族炭素環式もしくは非芳香族炭素環式、または芳香族複素環式もしくは非芳香族複素環式とすることができる、多環式環系も含む。ヘテロアリール基には、例えば、ピロール、フラン、チオフェン、イミダゾール、オキサゾール、チアゾール、ピラゾール、ピリジン、ピラジン、ピリダジンおよびピリミジンなどが含まれる。
【００４９】
用語「置換されている」とは、部分が、構造の１個または複数の炭素上、または置換可能なヘテロ原子、例えば−ＮＨ−上の水素を置き換える置換基を有することを指す。「置換」または「により置換されている」は、このような置換が、置換されている原子および置換基の許容される価数に従うこと、およびこの置換が、安定な化合物、すなわち、転位、環化、脱離などによって変換を自発的に受けない化合物になるという暗黙の前提を含むことが理解されよう。ある種の実施形態では、置換されているとは、部分が、単一炭素上の２個の水素原子をオキソ基、イミノ基またはチオオキソ基により置換しているなどの、同一炭素原子上の２個の水素原子を置き換える置換基を有することを指す。本明細書で使用する場合、用語「置換されている」は、有機化合物の許容されるすべての置換基を含むことが企図されている。広い態様では、許容される置換基は、有機化合物の、非環式および環式、分岐状および非分岐状の炭素環式ならびに複素環式の、芳香族置換基および非芳香族置換基を含む。許容される置換基は、１つまたは複数とすることができ、適切な有機化合物に対して同一または異なることができる。本開示の目的として、窒素などのヘテロ原子は、水素置換基、および／またはヘテロ原子の原子価を満足する、本明細書に記載されている有機化合物の任意の許容される置換基を有することができる。
【００５０】
一部の実施形態では、置換基は、本明細書に記載されている任意の置換基、例えば：ハロゲン、ヒドロキシ、オキソ（＝Ｏ）、チオオキソ（＝Ｓ）、シアノ（−ＣＮ）、ニトロ（−ＮＯ２）、イミノ（＝Ｎ−Ｈ）、オキシモ（＝Ｎ−ＯＨ）、ヒドラジノ（＝Ｎ−ＮＨ２）、−Ｒｂ−ＯＲａ、−Ｒｂ−ＯＣ（Ｏ）−Ｒａ、−Ｒｂ−ＯＣ（Ｏ）−ＯＲａ、−Ｒｂ−ＯＣ（Ｏ）−Ｎ（Ｒａ）２、−Ｒｂ−Ｎ（Ｒａ）２、−Ｒｂ−Ｃ（Ｏ）Ｒａ、−Ｒｂ−Ｃ（Ｏ）ＯＲａ、−Ｒｂ−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒａ）２、−Ｒｂ−Ｏ−Ｒｃ−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒａ）２、−Ｒｂ−Ｎ（Ｒａ）Ｃ（Ｏ）ＯＲａ、−Ｒｂ−Ｎ（Ｒａ）Ｃ（Ｏ）Ｒａ、−Ｒｂ−Ｎ（Ｒａ）Ｓ（Ｏ）ｔＲａ［ｔは１または２である］、−Ｒｂ−Ｓ（Ｏ）ｔＲａ［ｔは１または２である］、−Ｒｂ−Ｓ（Ｏ）ｔＯＲａ［ｔは１または２である］および−Ｒｂ−Ｓ（Ｏ）ｔＮ（Ｒａ）２［ｔは１または２である］；ならびにアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アラルキル、アラルケニル、アラルキニル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルキルアルキル、ヘテロアリールおよびヘテロアリールアルキルを含むことができ、これらのいずれも、アルキル、アルケニル、アルキニル、ハロゲン、ハロアルキル、ハロアルケニル、ハロアルキニル、オキソ（＝Ｏ）、チオオキソ（＝Ｓ）、シアノ（−ＣＮ）、ニトロ（−ＮＯ２）、イミノ（＝Ｎ−Ｈ）、オキシモ（＝Ｎ−ＯＨ）、ヒドラジン（＝Ｎ−ＮＨ２）、−Ｒｂ−ＯＲａ、−Ｒｂ−ＯＣ（Ｏ）−Ｒａ、−Ｒｂ−ＯＣ（Ｏ）−ＯＲａ、−Ｒｂ−ＯＣ（Ｏ）−Ｎ（Ｒａ）２、−Ｒｂ−Ｎ（Ｒａ）２、−Ｒｂ−Ｃ（Ｏ）Ｒａ、−Ｒｂ−Ｃ（Ｏ）ＯＲａ、−Ｒｂ−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒａ）２、−Ｒｂ−Ｏ−Ｒｃ−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒａ）２、−Ｒｂ−Ｎ（Ｒａ）Ｃ（Ｏ）ＯＲａ、−Ｒｂ−Ｎ（Ｒａ）Ｃ（Ｏ）Ｒａ、−Ｒｂ−Ｎ（Ｒａ）Ｓ（Ｏ）ｔＲａ［ｔは１または２である］、−Ｒｂ−Ｓ（Ｏ）ｔＲａ［ｔは１または２である］、−Ｒｂ−Ｓ（Ｏ）ｔＯＲａ［ｔは１または２である］および−Ｒｂ−Ｓ（Ｏ）ｔＮ（Ｒａ）２［ｔは１または２である］により置換されていてもよく、Ｒａはそれぞれ、水素、アルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、アリール、アラルキル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルキルアルキル、ヘテロアリールまたはヘテロアリールアルキルから独立して選択され、Ｒａはそれぞれ、価数が許すと、アルキル、アルケニル、アルキニル、ハロゲン、ハロアルキル、ハロアルケニル、ハロアルキニル、オキソ（＝Ｏ）、チオオキソ（＝Ｓ）、シアノ（−ＣＮ）、ニトロ（−ＮＯ２）、イミノ（＝Ｎ−Ｈ）、オキシモ（＝Ｎ−ＯＨ）、ヒドラジン（＝Ｎ−ＮＨ２）、−Ｒｂ−ＯＲａ、−Ｒｂ−ＯＣ（Ｏ）−Ｒａ、−Ｒｂ−ＯＣ（Ｏ）−ＯＲａ、−Ｒｂ−ＯＣ（Ｏ）−Ｎ（Ｒａ）２、−Ｒｂ−Ｎ（Ｒａ）２、−Ｒｂ−Ｃ（Ｏ）Ｒａ、−Ｒｂ−Ｃ（Ｏ）ＯＲａ、−Ｒｂ−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒａ）２、−Ｒｂ−Ｏ−Ｒｃ−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒａ）２、−Ｒｂ−Ｎ（Ｒａ）Ｃ（Ｏ）ＯＲａ、−Ｒｂ−Ｎ（Ｒａ）Ｃ（Ｏ）Ｒａ、−Ｒｂ−Ｎ（Ｒａ）Ｓ（Ｏ）ｔＲａ［ｔは１または２である］、−Ｒｂ−Ｓ（Ｏ）ｔＲａ［ｔは１または２である］、−Ｒｂ−Ｓ（Ｏ）ｔＯＲａ［ｔは１または２である］および−Ｒｂ−Ｓ（Ｏ）ｔＮ（Ｒａ）２［ｔは１または２である］に置換されていてもよく、Ｒｂはそれぞれ、直接結合、または直鎖もしくは分岐状アルキレン鎖、アルケニレン鎖またはアルキニレン鎖から独立して選択され、Ｒｃはそれぞれ、直鎖または分岐状アルキレン鎖、アルケニレン鎖またはアルキニレン鎖である。
【００５１】
置換基は、適切な場合、それ自体が置換され得ることが当業者によって理解されよう。「無置換」として具体的に明記しない限り、本明細書における化学部分を言う場合、置換されている変形体を含むことが理解される。例えば、「ヘテロアリール」基または部分を言う場合、置換されている変形体と無置換の変形体の両方を暗示的に含む。
【００５２】
炭素−炭素二重結合または炭素−窒素二重結合を有する化学実体は、Ｚ体またはＥ体（または、シス体もしくはトランス体）で存在することがある。さらに、一部の化学実体は、様々な互変異性体で存在することがある。別段の指定がない限り、本明細書に記載されている化学実体は、やはり、Ｅ体、Ｚ体および互変異性体のすべてを含むことが意図されている。
【００５３】
「互変異性体」は、ある分子の１個の原子から同一分子の別の原子へのプロトンのシフトが可能な分子を指す。本明細書において提示されている化合物は、ある種の実施形態では、互変異性体として存在する。互変異性が可能な状況では、互変異性体の化学平衡が存在するであろう。互変異性体の正確な比は、物理状態、温度、溶媒およびｐＨを含めた、いくつかの要因に依存する。互変異性平衡のいくつかの例には、以下が含まれる：
2021506827.tif 000004
【００５４】
言い回し「非経口投与」および「非経口的に投与した」は、本明細書で使用する場合、経腸および局所投与以外の、通常、注射による投与様式を意味し、非限定的に、静脈内、筋肉内、動脈内、髄腔内、嚢内、眼窩内、心内、皮内、腹腔内、経気管、皮下、表皮下、関節内、被膜下、クモ膜下、髄腔内および胸骨内注射および点滴を含む。
【００５５】
「薬学的に許容される」という言い回しは、妥当な医療的判断の範囲内で、過度の毒性、刺激、アレルギー反応もしくは他の問題、または合併症なしに、ヒトおよび動物の組織に接触させて使用するのに好適な、妥当な利益／リスク比に見合う化合物、物質、組成物および／または剤形を指すために本明細書において使用される。
【００５６】
言い回し「薬学的に許容される添加物」または「薬学的に許容される担体」は、本明細書で使用する場合、液体もしくは固体の充填剤、希釈剤、添加物、溶媒またはカプセル化材料などの、薬学的に許容される物質、組成物またはビヒクルを意味する。担体はそれぞれ、製剤の他の成分と適合可能であること、および患者に有害でないことという意味において、「許容される」ものでなければならない。薬学的に許容される担体として働くことができる物質の一部の例には、（１）ラクトース、グルコースおよびスクロースなどの糖類；（２）コーンスターチおよびバレイショデンプンなどのデンプン；（３）カルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロースおよび酢酸セルロースなどのセルロースおよびその誘導体；（４）粉末トラガカント；（５）麦芽；（６）ゼラチン；（７）タルク；（８）カカオ脂および坐剤用ワックスなどの添加物；（９）ピーナッツ油、綿実油、ベニバナ油、ゴマ油、オリーブ油、トウモロコシ油およびダイズ油などの油；（１０）プロピレングリコールなどのグリコール；（１１）グリセリン、ソルビトール、マンニトールおよびポリエチレングリコールなどのポリオール；（１２）オレイン酸エチルおよびラウリン酸エチルなどのエステル；（１３）寒天；（１４）水酸化マグネシウムおよび水酸化アルミニウムなどの緩衝化剤；（１５）アルギン酸；（１６）発熱物質不含水；（１７）等張性食塩水；（１８）リンゲル液、（１９）エチルアルコール；（２０）リン酸バッファー溶液；ならびに（２１）薬学的製剤に使用される他の非毒性適合物質が含まれる。
【００５７】
詳細な説明
Ｂ型肝炎およびＣ型肝炎などのウイルス性肝疾患は、ウイルス（それぞれ、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）およびＣ型肝炎（ＨＣＶ））によって引き起こされる感染症である。世界中の何百万もの人々が、肝硬変、肝臓損傷および肝不全に至る恐れがある、これらのタイプの肝臓のウイルス感染によって罹患している。ＨＢＶは、ヘパドナウイルス（Ｈｅｐａｄｎａｖｉｒｉｄａｅ）のウイルス科に属し、エンベロープ二本鎖ＤＮＡウイルスである。ＨＣＶは、フラビウイルス（Ｆｌａｖｉｖｉｒｉｄａｅ）のウイルス科に属し、小さなエンベロープポジティブセンス一本鎖ＲＮＡウイルスである。感染を治療するために抗ウイルス医薬を使用することができるが、それらは、常に有効ではない。したがって、ＨＢＶおよびＨＣＶ、ならびに他の肝臓のウイルス性感染を治療する代替戦略が必要とされている。
【００５８】
さらに、病原体関連分子パターン分子（Ｐａｔｈｏｇｅｎ−Ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐａｔｔｅｒｎ  ｍｏｌｅｃｕｌｅ：ＰＡＭＰ）などの免疫刺激性分子モチーフは、Ｔｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）、Ｎｏｄ様受容体、Ｃ−タイプレクチンおよびＲＩＧ−Ｉ−様受容体などの自然免疫系の受容体によって認識され得る。これらの受容体は、ウイルスなどの感染性因子に応答して、免疫系の活性化を促すことができる、膜貫通性のエンドソーム外タンパク質とすることができる。他のタンパク質ファミリーのように、ＴＬＲ７およびＴＬＲ８を含めた、様々なＴＬＲが多数、存在する。しかし、ＰＡＭＰシグナル伝達経路の全身性活性化は、サイトカイン症候群誘発性またはサイトカインストーム誘発性トキシックショック症候群による、生命を脅かす結果を有する恐れがあるので、ＰＡＭＰまたは干渉の他の機構の治療的使用は制限される恐れがある。したがって、ウイルスに対する免疫応答を増強する有効な戦略として、ＰＡＭＰおよびＤＡＭＰアゴニストの治療的な臨床的に関連性のある標的化された送達が必要とされている。
【００５９】
ここで記載されているコンジュゲートを利用して、Ｂ型肝炎およびＣ型肝炎などの肝疾患を引き起こすウイルスに対する、肝臓に局在する免疫応答を増強させることができる。本明細書において記載されているコンジュゲートは、リンカーを介して、少なくとも１つの骨髄細胞アゴニストに連結されている抗体コンストラクトを含む。一部の実施形態では、本コンジュゲートの抗体コンストラクトは、肝臓細胞抗原に特異的に結合する標的抗原結合ドメインを含むことができる。他の実施形態では、本コンジュゲートの抗体コンストラクトは、肝臓細胞に感染するウイルスに由来するウイルス抗原に特異的に結合する標的抗原結合ドメインを含むことができる。さらなる実施形態では、本コンジュゲートの抗体コンストラクトは、標的抗原結合ドメインに加えて、第２の抗原結合ドメインをさらに含む。第２の抗原結合ドメインは、肝臓細胞抗原、または肝臓細胞に感染するウイルスに由来するウイルス抗原に特異的に結合することができる。骨髄細胞アゴニストは、Ｔｏｌｌ様受容体７（ＴＬＲ７）アゴニスト、Ｔｏｌｌ様受容体８（ＴＬＲ８）アゴニストまたはそれらの組合せとすることができる。
【００６０】
抗体コンストラクト
本明細書に記載されているコンジュゲートは、抗体コンストラクトを含む。抗体コンストラクトは、１つまたは複数の抗原結合ドメインおよびＦｃ結合ドメインを含む。一部の実施形態では、抗体コンストラクトは、抗原に特異的に結合する抗原結合ドメイン、およびＦｃ結合ドメインを含む。抗体コンストラクトは、第１の抗原に特異的に結合する第１の抗原結合ドメイン、第２の抗原に特異的に結合する第２の抗原結合ドメイン、およびＦｃドメインを含むことができる。抗体コンストラクトは、第１の抗原に特異的に結合する標的抗原結合ドメイン、およびＦｃドメインを含むことができる。抗体コンストラクトは、第１の抗原に特異的に結合する標的抗原結合ドメイン、および第２の抗原に特異的に結合する第２の抗原結合ドメイン、およびＦｃドメインを含むことができる。抗体コンストラクトは、抗体であって、抗原に特異的に結合する抗原結合ドメイン、およびＦｃ結合ドメインを含む抗体を含むことができる。抗体コンストラクトは、二重特異性抗体であって、第１の抗原に特異的に結合する第１の抗原結合ドメイン、第２の抗原に特異的に結合する第２の抗原結合ドメイン、およびＦｃドメインを含む二重特異性抗体を含むことができる。抗体コンストラクトは、二重特異性抗体であって、第１の抗原に特異的に結合する標的抗原結合ドメイン、第２の抗原に特異的に結合する第２の抗原結合ドメイン、およびＦｃドメインを含む二重特異性抗体を含むことができる。
【００６１】
抗原結合ドメイン
抗原結合ドメインは、抗体または抗体断片の抗原−結合部分とすることができる。抗原結合ドメインは、抗原に特異的に結合する能力を保持することができる抗体の１つまたは複数の断片とすることができる。抗原結合ドメインは、任意の抗原結合断片とすることができる。抗原結合ドメインは、通常、単一抗原を認識する。抗体コンストラクトは、通常、例えば、１種または２種の抗原結合ドメインを含むが、さらに多くの抗原結合ドメインが抗体コンストラクトに含まれ得る。抗体コンストラクトは、各抗原結合ドメインが同じ抗原を認識する、２つの抗原結合ドメインを含むことができる。抗体コンストラクトは、各抗原結合ドメインが抗原上の同じエピトープを認識する、２つの抗原結合ドメインを含むことができる。抗体コンストラクトは、各抗原結合ドメインが同じ抗原上の異なるエピトープを認識する、２つの抗原結合ドメインを含むことができる。抗体コンストラクトは、各抗原結合ドメインが異なる抗原を認識することができる、２つの抗原結合ドメインを含むことができる。抗体コンストラクトは、各抗原結合ドメインが異なる抗原を認識することができる、３つの抗原結合ドメインを含むことができる。抗体コンストラクトは、抗原結合ドメインの２つが同じ抗原を認識することができる、３つの抗原結合ドメインを含むことができる。抗原結合ドメインは、抗原結合ドメインに対する支持フレームワークとなる足場中に存在し得る。抗原結合ドメインは、非抗体足場に存在することができる。抗原結合ドメインは、抗体足場または抗体様足場に存在することができる。抗体コンストラクトは、足場中に抗原結合ドメインを含むことができる。
【００６２】
抗体コンストラクトの抗原結合ドメインは、以下に限定されないが、抗体、または非抗体分子に由来するものを含めた、抗原に特異的に結合する任意のドメインから選択することができる。一部の実施形態では、抗体結合ドメインは、以下に限定されないが、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、組換え抗体もしくはそれらの機能的断片、例えば、重鎖可変ドメイン（ＶＨ）および軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆａｂ、Ｆｖ、ｒＩｇＧ、ｓｃＦｖ、ｈｃＡｂ（重鎖抗体）、単一ドメイン抗体、ＶＨＨ、ＶＮＡＲ、ｓｄＡｂまたはナノボディからを含めた、抗原に特異的に結合する抗体の任意のドメインから選択することができる。一部の実施形態では、抗原結合ドメインは、以下に限定されないが、ＤＡＲＰｉｎ、アフィマー、アビマー、ノッティン、モノボディ、リポカリン、アンチカリン、「Ｔ−ボディ」、アフィボディ、ペプチボディ、アフィニティークランプ、エクトドメイン、受容体エクトドメイン、受容体、リガンドまたはセンチリンなどの非抗体足場からを含めた、抗原に特異的に結合する非抗体分子の任意のドメインから選択することができる。
【００６３】
抗体コンストラクトの抗原結合ドメイン、例えば、モノクローナル抗体に由来する抗原結合ドメインは、軽鎖および重鎖を含むことができる。一態様では、モノクローナル抗体は、肝臓細胞の表面に存在する抗原に特異的に結合し、抗肝臓細胞抗原抗体の軽鎖、および抗肝臓細胞抗原抗体の重鎖を含み、これらは、肝臓細胞抗原に特異的に結合する抗原結合ドメインを形成する。
【００６４】
抗体コンストラクトの抗原結合ドメインは、肝臓細胞抗原、または肝臓細胞上で発現するウイルス抗原などの、第１の抗原に特異的に結合する標的抗原結合ドメインとすることができる。一部の実施形態では、第１の抗原は、肝臓細胞によって発現され得る。例えば、第１の抗原は、肝臓細胞抗原であり、分子マーカーは、他の正常組織に由来する細胞と比べて、肝臓細胞上に優先的に発現する。例えば、肝臓細胞抗原は、毛細胆管細胞、クッパー細胞、肝細胞、星型細胞またはそれらの組合せ上に発現することができる。肝臓細胞抗原は、肝臓細胞表面受容体とすることができる。肝臓細胞抗原は、肝細胞抗原とすることができる。一部の実施形態では、肝臓細胞抗原は、以下に限定されないが、アシアロ糖タンパク質受容体１（ＡＳＧＲ１）、アシアロ糖タンパク質受容体２（ＡＳＧＲ２）、トランスフェリン受容体２（ＴＲＦ２）、ＵＤＰグルクロノシルトランスフェラーゼ１ファミリー、ポリペプチドＡ１（ＵＧＴ１Ａ１）、溶質担体ファミリー２２のメンバー７（ＳＬＣ２２Ａ７）、溶質担体ファミリー１３のメンバー５（ＳＬＣ１３Ａ５）、溶質担体ファミリー２２のメンバー１（ＳＬＣ２２Ａ１）および補体成分９（Ｃ９）を含むことができる。一部の実施形態では、肝臓細胞抗原は、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２、ＴＲＦ２、ＵＧＴ１Ａ１、ＳＬＣ２２Ａ７、ＳＬＣ１３Ａ５、ＳＬＣ２２Ａ１およびＣ９からなる群から選択される。一部の実施形態では、肝臓細胞抗原は、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２、ＴＲＦ２、ＵＧＴ１Ａ１、ＳＬＣ２２Ａ７、ＳＬＣ１３Ａ５およびＳＬＣ２２Ａ１からなる群から選択される。一部の実施形態では、肝臓細胞抗原は、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２およびＴＲＦ２からなる群から選択される。
【００６５】
アシアロ糖タンパク質受容体１（ＡＳＧＲ１）は、受託番号ＮＰ＿００１１８４１４５．１またはＮＰ＿００１６６２．１に記載されているアミノ酸配列を有することができる。アシアロ糖タンパク質受容体２（ＡＳＧＲ２）は、受託番号ＮＰ＿００１１７２．１、ＮＰ＿００１１８８２８１．１、ＮＰ＿５５０４３４．１、ＮＰ＿５５０４３５．１またはＮＰ＿５５０４３６．１に記載されているアミノ酸配列を有することができる。トランスフェリン受容体２（ＴＲＦ２）は、受託番号ＮＰ＿００１１９３７８４．１またはＮＰ＿００３２１８．１に記載されているアミノ酸配列を有することができる。ＵＤＰグルクロノシルトランスフェラーゼ１ファミリー、ポリペプチドＡ１（ＵＧＴ１Ａ１）は、受託番号ＮＰ＿０００４５４．１に記載されているアミノ酸配列を有することができる。溶質担体ファミリー２２のメンバー７（ＳＬＣ２２Ａ７）は、受託番号ＮＰ＿００６６６３．２またはＮＰ＿６９６９６１．２に記載されているアミノ酸配列を有することができる。溶質担体ファミリー１３のメンバー５（ＳＬＣ１３Ａ５）は、受託番号ＮＰ＿００１１３７３１０．１、ＮＰ＿００１２７１４３８．１、ＮＰ＿００１２７１４３９．１またはＮＰ＿８０８２１８．１に記載されているアミノ酸配列を有することができる。溶質担体ファミリー２２のメンバー１（ＳＬＣ２２Ａ１）は、受託番号ＮＰ＿００３０４８．１またはＮＰ＿６９４８５７．１に記載されているアミノ酸配列を有することができる。補体成分９（Ｃ９）は、受託番号ＮＰ＿００１７２８．１に記載されているアミノ酸配列を有することができる。
【００６６】
標的抗原結合ドメインは、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２、ＴＲＦ２、ＵＧＴ１Ａ１、ＳＬＣ２２Ａ７、ＳＬＣ１３Ａ５、ＳＬＣ２２Ａ１およびＣ９からなる群から選択される抗原のアミノ酸配列に対して少なくとも８０％の同一性を構成するアミノ酸配列を有する、肝臓細胞抗原に特異的に結合することができる。標的抗原結合ドメインは、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２、ＴＲＦ２、ＵＧＴ１Ａ１、ＳＬＣ２２Ａ７、ＳＬＣ１３Ａ５およびＳＬＣ２２Ａ１からなる群から選択される抗原のアミノ酸配列に対して少なくとも８０％の同一性を構成するアミノ酸配列を有する、肝臓細胞抗原に特異的に結合することができる。標的抗原結合ドメインは、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２およびＴＲＦ２からなる群から選択される抗原のアミノ酸配列に対して少なくとも８０％の同一性を構成するアミノ酸配列を有する、肝臓細胞抗原に特異的に結合することができる。標的抗原結合ドメインは、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２、ＴＲＦ２、ＵＧＴ１Ａ１、ＳＬＣ２２Ａ７、ＳＬＣ１３Ａ５、ＳＬＣ２２Ａ１およびＣ９からなる群から選択される抗原のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、９０％、９５％、９８％または１００％の同一性を構成するアミノ酸配列を有する、肝臓細胞抗原に特異的に結合することができる。標的抗原結合ドメインは、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２、ＴＲＦ２、ＵＧＴ１Ａ１、ＳＬＣ２２Ａ７、ＳＬＣ１３Ａ５およびＳＬＣ２２Ａ１からなる群から選択される抗原のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、９０％、９５％、９８％または１００％の同一性を構成するアミノ酸配列を有する、肝臓細胞抗原に特異的に結合することができる。標的抗原結合ドメインは、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２およびＴＲＦ２からなる群から選択される抗原のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、９０％、９５％、９８％または１００％の同一性を構成するアミノ酸配列を有する、肝臓細胞抗原に特異的に結合することができる。
【００６７】
アシアロ糖タンパク質受容体１（ＡＳＧＲ１）は、受託番号ＮＰ＿００１１８４１４５．１またはＮＰ＿００１６６２．１に記載されているアミノ酸配列に対して９０％同一であるアミノ酸配列を有することができる。アシアロ糖タンパク質受容体２（ＡＳＧＲ２）は、受託番号ＮＰ＿００１１７２．１、ＮＰ＿００１１８８２８１．１、ＮＰ＿５５０４３４．１、ＮＰ＿５５０４３５．１またはＮＰ＿５５０４３６．１に記載されているアミノ酸配列に対して９０％同一であるアミノ酸配列を有することができる。トランスフェリン受容体２（ＴＲＦ２）は、受託番号ＮＰ＿００１１９３７８４．１またはＮＰ＿００３２１８．１に記載されているアミノ酸配列に対して９０％同一であるアミノ酸配列を有することができる。ＵＤＰグルクロノシルトランスフェラーゼ１ファミリー、ポリペプチドＡ１（ＵＧＴ１Ａ１）は、受託番号ＮＰ＿０００４５４．１に記載されているアミノ酸配列に対して９０％同一であるアミノ酸配列を有することができる。溶質担体ファミリー２２のメンバー７（ＳＬＣ２２Ａ７）は、受託番号ＮＰ＿００６６６３．２またはＮＰ＿６９６９６１．２に記載されているアミノ酸配列に対して９０％同一であるアミノ酸配列を有することができる。溶質担体ファミリー１３のメンバー５（ＳＬＣ１３Ａ５）は、受託番号ＮＰ＿００１１３７３１０．１、ＮＰ＿００１２７１４３８．１、ＮＰ＿００１２７１４３９．１またはＮＰ＿８０８２１８．１に記載されているアミノ酸配列に対して９０％同一であるアミノ酸配列を有することができる。溶質担体ファミリー２２のメンバー１（ＳＬＣ２２Ａ１）は、受託番号ＮＰ＿００３０４８．１またはＮＰ＿６９４８５７．１に記載されているアミノ酸配列に対して９０％同一であるアミノ酸配列を有することができる。補体成分９（Ｃ９）は、受託番号ＮＰ＿００１７２８．１記載されているアミノ酸配列に対して９０％同一であるアミノ酸配列を有することができる。
【００６８】
一部の実施形態では、肝臓細胞抗原は、ウイルスに感染する細胞上で発現することができる。ウイルスは、ＨＢＶまたはＨＣＶなどの肝炎ウイルスとすることができる。一部の実施形態では、ウイルスは、ＨＢＶであり、ＨＣＶではない。一部の実施形態では、ウイルスは、ＨＣＶである。
【００６９】
他の実施形態では、第１の抗原は、肝臓細胞に感染するウイルスに由来するウイルス抗原とすることができる。ウイルス抗原は、肝臓細胞がウイルスに感染すると、肝臓細胞上に発現する、ウイルスの分子マーカーとすることができる。例えば、ウイルス抗原は、ウイルスに感染した場合、毛細胆管細胞、クッパー細胞、肝細胞、星型細胞またはそれらの組合せ上に発現することができる。ウイルスは、肝炎ウイルスとすることができる。ウイルスは、ＨＢＶとすることができる。ウイルスは、ＨＣＶとすることができる。ウイルス抗原は、ウイルスに感染した非がん性肝臓細胞上に発現することができる。ウイルス抗原は、以下に限定されないが、ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇ、ＨＢｅＡｇ、Ｂ型肝炎ウイルスＤＮＡポリメラーゼまたはＨＢｘなどのＨＢＶの構成成分、ならびにコアタンパク質、Ｅ１およびＥ２、ＮＳ２、ＮＳ３、ＮＳ４Ａ、ＮＳ４Ｂ、ＮＳ５ＡまたはＮＳ５ＢなどのＨＣＶの構成成分を含むことができる。一部の実施形態では、ウイルス抗原は、ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇまたはＨＢｅＡｇである。一部の実施形態では、ウイルス抗原は、ＨＢｓＡｇである。
【００７０】
ＨＢａＡｇは、受託番号Ｑ７７３Ｓ４＿ＨＢＶに記載されているアミノ酸配列を有することができる。ＨＢｃＡｇは、受託番号Ｑ２Ｉ３６０＿ＨＢＶに記載されているアミノ酸配列を有することができる。ＨＢｅＡｇは、受託番号Ｐ０Ｃ５７３、Ｐ０Ｃ６２５、Ｑ０５４９５、Ｐ０Ｃ７６７、Ｐ０Ｃ６Ｈ２、Ｐ０Ｃ６９９、Ｐ０Ｃ６Ｇ９またはＰ０Ｃ６９２に記載されているアミノ酸配列を有することができる。
【００７１】
標的抗原結合ドメインは、肝臓細胞に感染するウイルスに由来するウイルス抗原であって、ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇ、ＨＢｅＡｇ、Ｂ型肝炎ウイルスＤＮＡポリメラーゼ、ＨＢｘ、コアタンパク質、Ｅ１およびＥ２、ＮＳ２、ＮＳ３、ＮＳ４Ａ、ＮＳ４Ｂ、ＮＳ５ＡおよびＮＳ５Ｂからなる群から選択される抗原のアミノ酸配列に対して少なくとも８０％の同一性を構成するアミノ酸配列を有するウイルス抗原に特異的に結合することができる。一部の実施形態では、ウイルス抗原は、ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇまたはＨＢｅＡｇである。一部の実施形態では、ウイルス抗原は、ＨＢｓＡｇである。標的抗原結合ドメインは、肝臓細胞に感染するウイルスに対するウイルス抗原であって、ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇ、ＨＢｅＡｇ、Ｂ型肝炎ウイルスＤＮＡポリメラーゼ、ＨＢｘ、コアタンパク質、Ｅ１およびＥ２、ＮＳ２、ＮＳ３、ＮＳ４Ａ、ＮＳ４Ｂ、ＮＳ５ＡおよびＮＳ５Ｂからなる群から選択される抗原のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、９０％、９５％、９８％または１００％の同一性を構成するアミノ酸配列を有するウイルス抗原に特異的に結合することができる。
【００７２】
抗体コンストラクトは、第２の抗原結合ドメインを有することができる。第２の抗原結合ドメインは、第１の抗原に特異的に結合することができる。第２の抗原結合ドメインは、第２の抗原に特異的に結合することができる。第２の抗原は、肝臓細胞によって発現され得る。例えば、第２の抗原は、肝臓細胞抗原とすることができる。肝臓細胞抗原は、他の正常組織に由来する細胞と比べると、肝臓細胞上に優先的に発現する分子マーカーとすることができる。例えば、肝臓細胞抗原は、毛細胆管細胞、クッパー細胞、肝細胞、星型細胞またはそれらの組合せ上に発現することができる。肝臓細胞抗原は、肝臓細胞表面受容体とすることができる。肝臓細胞抗原は、肝細胞抗原とすることができる。肝臓細胞抗原は、非がん性肝臓細胞上に発現することができる。肝臓細胞抗原は、ウイルスに感染した細胞上に発現することができる。ウイルスは、肝臓ウイルスとすることができる。ウイルスは、肝炎ウイルスとすることができる。ウイルスは、ＨＢＶとすることができる。ウイルスは、ＨＣＶとすることができる。
【００７３】
肝臓細胞抗原は、以下に限定されないが、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２、ＴＲＦ２、ＵＧＴ１Ａ１、ＳＬＣ２２Ａ７、ＳＬＣ１３Ａ５、ＳＬＣ２２Ａ１およびＣ９を含むことができる。一部の実施形態では、肝臓細胞抗原は、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２、ＴＲＦ２、ＵＧＴ１Ａ１、ＳＬＣ２２Ａ７、ＳＬＣ１３Ａ５、ＳＬＣ２２Ａ１およびＣ９からなる群から選択される。一部の実施形態では、肝臓細胞抗原は、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２、ＴＲＦ２、ＵＧＴ１Ａ１、ＳＬＣ２２Ａ７、ＳＬＣ１３Ａ５およびＳＬＣ２２Ａ１からなる群から選択される。一部の実施形態では、肝臓細胞抗原は、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２およびＴＲＦ２からなる群から選択される。
【００７４】
アシアロ糖タンパク質受容体１（ＡＳＧＲ１）は、受託番号ＮＰ＿００１１８４１４５．１またはＮＰ＿００１６６２．１に記載されているアミノ酸配列を有することができる。アシアロ糖タンパク質受容体２（ＡＳＧＲ２）は、受託番号ＮＰ＿００１１７２．１、ＮＰ＿００１１８８２８１．１、ＮＰ＿５５０４３４．１、ＮＰ＿５５０４３５．１またはＮＰ＿５５０４３６．１に記載されているアミノ酸配列を有することができる。トランスフェリン受容体２（ＴＲＦ２）は、受託番号ＮＰ＿００１１９３７８４．１またはＮＰ＿００３２１８．１に記載されているアミノ酸配列を有することができる。ＵＤＰグルクロノシルトランスフェラーゼ１ファミリー、ポリペプチドＡ１（ＵＧＴ１Ａ１）は、受託番号ＮＰ＿０００４５４．１に記載されているアミノ酸配列を有することができる。溶質担体ファミリー２２のメンバー７（ＳＬＣ２２Ａ７）は、受託番号ＮＰ＿００６６６３．２またはＮＰ＿６９６９６１．２に記載されているアミノ酸配列を有することができる。溶質担体ファミリー１３のメンバー５（ＳＬＣ１３Ａ５）は、受託番号ＮＰ＿００１１３７３１０．１、ＮＰ＿００１２７１４３８．１、ＮＰ＿００１２７１４３９．１またはＮＰ＿８０８２１８．１に記載されているアミノ酸配列を有することができる。溶質担体ファミリー２２のメンバー１（ＳＬＣ２２Ａ１）は、受託番号ＮＰ＿００３０４８．１またはＮＰ＿６９４８５７．１に記載されているアミノ酸配列を有することができる。補体成分９（Ｃ９）は、受託番号ＮＰ＿００１７２８．１に記載されているアミノ酸配列を有することができる。
【００７５】
第２の抗原結合ドメインは、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２、ＴＲＦ２、ＵＧＴ１Ａ１、ＳＬＣ２２Ａ７、ＳＬＣ１３Ａ５、ＳＬＣ２２Ａ１およびＣ９からなる群から選択される抗原のアミノ酸配列に対して少なくとも８０％の同一性を構成するアミノ酸配列を有する、肝臓細胞抗原に特異的に結合することができる。第２の抗原結合ドメインは、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２、ＴＲＦ２、ＵＧＴ１Ａ１、ＳＬＣ２２Ａ７、ＳＬＣ１３Ａ５およびＳＬＣ２２Ａ１からなる群から選択される抗原のアミノ酸配列に対して少なくとも８０％の同一性を構成するアミノ酸配列を有する、肝臓細胞抗原に特異的に結合することができる。第２の抗原結合ドメインは、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２およびＴＲＦ２からなる群から選択される抗原のアミノ酸配列に対して少なくとも８０％の同一性を構成するアミノ酸配列を有する、肝臓細胞抗原に特異的に結合することができる。第２の抗原結合ドメインは、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２、ＴＲＦ２、ＵＧＴ１Ａ１、ＳＬＣ２２Ａ７、ＳＬＣ１３Ａ５、ＳＬＣ２２Ａ１およびＣ９からなる群から選択される抗原のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、９０％、９５％、９８％または１００％の同一性を構成するアミノ酸配列を有する、肝臓細胞抗原に特異的に結合することができる。第２の抗原結合ドメインは、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２、ＴＲＦ２、ＵＧＴ１Ａ１、ＳＬＣ２２Ａ７、ＳＬＣ１３Ａ５およびＳＬＣ２２Ａ１からなる群から選択される抗原のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、９０％、９５％、９８％または１００％の同一性を構成するアミノ酸配列を有する、肝臓細胞抗原に特異的に結合することができる。第２の抗原結合ドメインは、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２およびＴＲＦ２からなる群から選択される抗原のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、９０％、９５％、９８％または１００％の同一性を構成するアミノ酸配列を有する、肝臓細胞抗原に特異的に結合することができる。
【００７６】
他の実施形態では、第２の抗原は、肝臓細胞に感染するウイルスに由来するウイルス抗原とすることができる。ウイルス抗原は、肝臓細胞がウイルスに感染すると、肝臓細胞上に発現する、ウイルスの分子マーカーとすることができる。例えば、ウイルス抗原は、ウイルスに感染した場合、毛細胆管細胞、クッパー細胞、肝細胞、星型細胞またはそれらの組合せ上に発現することができる。ウイルスは、肝臓ウイルスとすることができる。ウイルスは、肝炎ウイルスとすることができる。ウイルスは、ＨＢＶとすることができる。ウイルスは、ＨＣＶとすることができる。ウイルス抗原は、ウイルスに感染した非がん性肝臓細胞上に発現することができる。ウイルス抗原は、以下に限定されないが、ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇ、ＨＢｅＡｇ、Ｂ型肝炎ウイルスＤＮＡポリメラーゼまたはＨＢｘなどのＨＢＶの構成成分、ならびにコアタンパク質、Ｅ１およびＥ２、ＮＳ２、ＮＳ３、ＮＳ４Ａ、ＮＳ４Ｂ、ＮＳ５ＡまたはＮＳ５ＢなどのＨＣＶの構成成分を含むことができる。一部の実施形態では、ウイルス抗原は、ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇまたはＨＢｅＡｇである。一部の実施形態では、ウイルス抗原は、ＨＢｓＡｇである。第２の抗原結合ドメインは、肝臓細胞に感染するウイルスに由来するウイルス抗原であって、ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇ、ＨＢｅＡｇ、Ｂ型肝炎ウイルスＤＮＡポリメラーゼ、ＨＢｘ、コアタンパク質、Ｅ１およびＥ２、ＮＳ２、ＮＳ３、ＮＳ４Ａ、ＮＳ４Ｂ、ＮＳ５ＡおよびＮＳ５Ｂからなる群から選択される抗原のアミノ酸配列に対して少なくとも８０％の同一性を構成するアミノ酸配列を有するウイルス抗原に特異的に結合することができる。第２の抗原結合ドメインは、肝臓細胞に感染するウイルスに対するウイルス抗原であって、ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇ、ＨＢｅＡｇ、Ｂ型肝炎ウイルスＤＮＡポリメラーゼ、ＨＢｘ、コアタンパク質、Ｅ１およびＥ２、ＮＳ２、ＮＳ３、ＮＳ４Ａ、ＮＳ４Ｂ、ＮＳ５ＡおよびＮＳ５Ｂからなる群から選択される抗原のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、９０％、９５％、９８％または１００％の同一性を構成するアミノ酸配列を有するウイルス抗原に特異的に結合することができる。
【００７７】
Ｆｃ結合ドメイン
抗体コンストラクトは、Ｆｃ結合ドメインを含む。Ｆｃ結合ドメインは、１つまたは複数のＦｃ受容体（ＦｃＲ）に結合することができる構造である。ＦｃＲは、抗体のＦｃ結合ドメインに結合することができる。ＦｃＲは、抗原に結合した抗体のＦｃ結合ドメインに結合することができる。ＦｃＲは、ＦｃＲが認識する抗体のクラスに基づくクラス（例えば、ガンマ（γ）、アルファ（α）およびイプシロン（ε））へと組織化される。ＦｃαＲクラスは、ＩｇＡに結合し、いくつかのアイソフォーム、ＦｃαＲＩ（ＣＤ８９）およびＦｃαμＲを含む。ＦｃγＲクラスは、ＩｇＧに結合し、いくつかのアイソフォームである、ＦｃγＲＩ（ＣＤ６４）、ＦｃγＲＩＩＡ（ＣＤ３２ａ）、ＦｃγＲＩＩＢ（ＣＤ３２ｂ）、ＦｃγＲＩＩＩＡ（ＣＤ１６ａ）およびＦｃγＲＩＩＩＢ（ＣＤ１６ｂ）を含む。ＦｃγＲＩＩＩＡ（ＣＤ１６ａ）は、ＦｃγＲＩＩＩＡ（ＣＤ１６ａ）Ｆ１５８変異体またはＶ１５８変異体とすることができる。ＦｃγＲアイソフォームはそれぞれ、ＩｇＧ抗体のＦｃ結合ドメインに対する結合親和性が異なり得る。例えば、ＦｃγＲＩは、ＦｃγＲＩＩまたはＦｃγＲＩＩＩよりも大きな親和性で、ＩｇＧに結合することができる。ＩｇＧに対する特定のＦｃγＲアイソフォームの親和性は、ＩｇＧ抗体の位置ＣＨ２  ８４．４におけるグリカン（例えば、オリゴ糖）によって、一部、制御され得る。例えば、ＣＨ２  ８４．４グリカンを含有するフコースは、ＦｃγＲＩＩＩＡに対するＩｇＧ親和性を低下させることができる。さらに、Ｇ０グルカンは、ガラクトースおよび末端ＧｌｃＮＡｃ部分が欠如しているため、ＦｃγＲＩＩＩＡに対する親和性を増大させることができる。
【００７８】
ＦｃＲへのＦｃ結合ドメインの結合は、免疫応答を増強することができる。ＦｃＲに結合するＦｃ結合ドメインに起因し得るＦｃＲ媒介性シグナル伝達は、免疫細胞の成熟をもたらすことができる。ＦｃＲに結合するＦｃ結合ドメインに起因し得るＦｃＲ媒介性シグナル伝達は、樹状細胞（ＤＣ）の成熟をもたらすことができる。ＦｃＲに結合するＦｃ結合ドメインに起因し得るＦｃＲ媒介性シグナル伝達は、抗体に依存的な細胞傷害性をもたらす恐れがある。ＦｃＲに結合するＦｃ結合ドメインに起因し得るＦｃＲ媒介性シグナル伝達は、一層効率的な免疫細胞抗原の取り込みおよびプロセッシングをもたらすことができる。ＦｃＲに結合するＦｃ結合ドメインに起因し得るＦｃＲ媒介性シグナル伝達は、Ｔ細胞の増殖および活性化を促進することができる。ＦｃＲに結合するＦｃ結合ドメインに起因し得るＦｃＲ媒介性シグナル伝達は、ＣＤ８＋Ｔ細胞の増殖および活性化を促進することができる。ＦｃＲに結合するＦｃ結合ドメインに起因し得るＦｃＲ媒介性シグナル伝達は、Ｔ細胞応答の免疫細胞調節に影響を及ぼし得る。ＦｃＲに結合するＦｃ結合ドメインに起因し得るＦｃＲ媒介性シグナル伝達は、Ｔ細胞応答の免疫細胞調節に影響を及ぼすことができる。ＦｃＲに結合するＦｃ結合ドメインに起因し得るＦｃＲ媒介性シグナル伝達は、Ｔ細胞応答の樹状細胞調節に影響を及ぼすことができる。ＦｃＲに結合するＦｃ結合ドメインに起因し得るＦｃＲ媒介性シグナル伝達は、Ｔ細胞の機能的極性化（例えば、極性化は、ＴＨ１細胞応答の方向に向かうことができる）に影響を及ぼすことができる。
【００７９】
ＤＣのＦｃＲのプロファイルは、ＤＣが刺激に応答することができる能力に影響を及ぼし得る。例えば、大部分のＤＣは、ＣＤ３２ＡとＣＤ３２Ｂの両方を発現することができ、これらは、ＩｇＧ媒介性成熟およびＤＣの機能に対して反対の作用を有することができる：ＩｇＧのＣＤ３２Ａへの結合は、ＩｇＧのＣＤ３２Ｂ結合の後に、免疫受容体チロシンベース阻害モチーフ（ＩＴＩＭ）のリン酸化による阻害を媒介することができるＣＤ３２Ｂとは対照的に、ＤＣを成熟させて活性化することができる。したがって、これらの２つの受容体の活性は、ＤＣ活性化の閾値を確立することができる。ＩｇＧに対するこれらの受容体の機能的親和性の差異は、それらの機能的なバランスをシフトすることができる。したがって、ＦｃＲに結合するＦｃ結合ドメインの改変もまた、それらの機能的バランスをシフトすることができ、これにより、ＤＣ免疫応答の操作（活性の増強または阻害の増強の一方）を可能にする。
【００８０】
Ｆｃ結合ドメインのアミノ酸配列における修飾は、ＦｃＲがＦｃ結合ドメインを認識するのを改変することができる。しかし、このような修飾は、依然として、ＦｃＲ媒介性シグナル伝達を可能とすることができる。修飾は、Ｆｃ結合ドメイン（例えば、野生型）の残基におけるあるアミノ酸が、その残基において異なるアミノ酸の代わりに置換していることとすることができる。修飾は、ＦｃＲが、そうでない場合、結合することができないＦｃ結合ドメイン上の部位へのＦｃＲの結合を可能にすることができる。修飾により、Ｆｃ結合ドメインに対するＦｃＲの結合親和性が増大し得る。修飾により、Ｆｃ結合ドメインであって、ＦｃＲがそれに対する結合親和性を増大し得るＦｃ結合ドメイン上の部位へのＦｃＲの結合親和性が低下し得る。修飾により、Ｆｃ結合ドメインがＦｃＲに結合した後、その後のＦｃＲ媒介性シグナル伝達が増大し得る。
【００８１】
Ｆｃ結合ドメインは、天然に存在するものとすることができるか、または天然に存在するＦｃ結合ドメインの変異体とすることができ、野生型Ｆｃ結合ドメインの配列に比べて、少なくとも１つのアミノ酸の変化を含み得る。Ｆｃ結合ドメインにおけるアミノ酸の変化により、抗体コンストラクトまたはコンジュゲートは、野生型Ｆｃ結合ドメインと比べて、一層大きな親和性で、少なくとも１つのＦｃ受容体に結合することが可能になり得る。Ｆｃ結合ドメイン変異体は、天然アミノ酸配列または元のアミノ酸配列に対して、アミノ酸配列の、少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つまたは１０の修飾を有するが、４０以下、３５以下、３０以下、２５以下、２０以下、１５以下または１０以下の修飾を有するアミノ酸配列を含むことができる。Ｆｃ結合ドメイン変異体は、Ｆｃ受容体の結合を増大させる野生型ＩｇＧ１配列から修飾されたＩｇＧ１アイソフォームの配列を含むことができる。修飾は、Ｌ２３５Ｖ／Ｆ２４３Ｌ／Ｒ２９２Ｐ／Ｙ３００Ｌ／Ｐ３９６Ｌ（ＩｇＧ１ＶＬＰＬＬ）を含む、５つの異なるアミノ酸残基などにおいて、Ｆｃ結合ドメインの１つまたはもう１つのアミノ酸残基における置換を含むことができる。本明細書に記載されているアミノ酸残基の番号付けは、ＥＵ指標に準拠する。この修飾は、Ｆｃ結合ドメインを含むことができる抗体コンストラクトの一部に位置することができ、特に、Ｆｃ受容体に結合することができるＦｃ結合ドメインの一部に位置することができる。修飾は、Ｓ２３９Ｄ／Ｉ３３２Ｅ（ＩｇＧ１ＤＥ）を含む、Ｆｃ結合ドメインの２つの異なるアミノ酸残基などにおける、１つまたは複数のアミノ酸残基における置換を含むことができる。この修飾は、抗体のＦｃ結合ドメインを含む抗体配列の一部に位置することができ、特に、Ｆｃ受容体に結合することができるＦｃ結合ドメインの一部に位置する。修飾は、Ｓ２９８Ａ／Ｅ３３３Ａ／Ｋ３３４Ａ（ＩｇＧ１ＡＡＡ）を含む、Ｆｃ結合ドメインの３つの異なるアミノ酸残基などにおける、１つまたは複数のアミノ酸残基における置換を含むことができる。この修飾は、抗体のＦｃ結合ドメインを含む抗体配列の一部に位置することができ、特に、Ｆｃ受容体に結合することができるＦｃ結合ドメインの一部に位置することができる。
【００８２】
Ｆｃ結合ドメインへのＦｃ受容体の結合は、アミノ酸置換によって影響を受け得る。例えば、ＩｇＧ１ＶＬＰＬＬ修飾を含むＦｃ結合ドメイン変異体への一部のＦｃ受容体の結合は、Ｌ２３５Ｖ／Ｆ２４３Ｌ／Ｒ２９２Ｐ／Ｙ３００Ｌ／Ｐ３９６Ｌアミノ酸修飾の結果として、野性型と比べて増強され得る。しかし、ＩｇＧ１ＶＬＰＬＬ修飾を含むＦｃ結合ドメイン変異体への他のＦｃ受容体の結合は、Ｌ２３５Ｖ／Ｆ２４３Ｌ／Ｒ２９２Ｐ／Ｙ３００Ｌ／Ｐ３９６Ｌアミノ酸修飾によって野性型と比べて低下され得る。例えば、ＩｇＧ１ＶＬＰＬＬ修飾を含むＦｃ結合ドメイン変異体のＦｃγＲＩＩＩＡおよびＦｃγＲＩＩＡへの結合親和性は、野生型に比べて増強され得る一方、ＩｇＧ１ＶＬＰＬＬ修飾を含むＦｃ結合ドメイン異性体のＦｃγＲＩＩＢへの結合親和性は、野性型に比べて低下され得る。ＩｇＧ１ＤＥ修飾を含むＦｃ結合ドメイン変異体へのＦｃ受容体の結合は、Ｓ２３９Ｄ／Ｉ３３２Ｅアミノ酸修飾の結果として、野性型と比べて増強され得る。しかし、ＩｇＧ１ＤＥ修飾を含むＦｃ結合ドメイン変異体へのいくつかのＦｃ受容体の結合は、Ｓ２３９Ｄ／Ｉ３３２Ｅアミノ酸修飾によって、野性型と比べて、低下され得る。例えば、ＩｇＧ１ＤＥ修飾を含むＦｃ結合ドメイン変異体のＦｃγＲＩＩＩＡおよびＦｃγＲＩＩＢへの結合親和性は、野生型に比べて増強され得る。ＩｇＧ１ＡＡＡ修飾を含むＦｃ結合ドメイン変異体へのＦｃ受容体の結合は、Ｓ２９８Ａ／Ｅ３３３Ａ／Ｋ３３４Ａアミノ酸修飾の結果として、野性型と比べて増強され得る。しかし、ＩｇＧ１ＡＡＡ修飾を含むＦｃ結合ドメイン変異体へのいくつかのＦｃ受容体の結合は、Ｓ２９８Ａ／Ｅ３３３Ａ／Ｋ３３４Ａアミノ酸修飾によって、野性型と比べて低下され得る。ＩｇＧ１ＡＡＡ修飾を含むＦｃ結合ドメイン変異体のＦｃγＲＩＩＩＡへの結合親和性は、野生型に比べて増強され得る一方、ＩｇＧ１ＡＡＡ修飾を含むＦｃ結合ドメイン異性体のＦｃγＲＩＩＢへの結合親和性は、野性型に比べて低下され得る。
【００８３】
一部の実施形態では、ヒトＩｇＧ２抗体の重鎖は、位置１２７、２３２または２３３としてのシステインにおいて変異され得る。一部の実施形態では、ヒトＩｇＧ２抗体の軽鎖は、位置２１４におけるシステインにおいて変異され得る。ヒトＩｇＧ２抗体の重鎖および軽鎖における、システイン残基からセリン残基への変異が存在し得る。
【００８４】
抗体コンストラクトは、野性型アミノ酸配列、またはＦｃ結合ドメインをコードする修飾されたアミノ酸配列を有する、第１の結合ドメインおよび第２の結合ドメインを含むことができるが、野性型配列に由来するＦｃ結合ドメインの修飾は、Ｆｃ結合ドメインまたは抗原結合ドメインの結合および／または親和性を有意に改変することはない。例えば、第１の結合ドメインおよび第２の結合ドメイン（または、一部の場合、第３の結合ドメイン）を含み、かつＩｇＧ１ＶＬＰＬＬ、ＩｇＧ１ＤＥまたはＩｇＧ１ＡＡＡのＦｃ結合ドメイン修飾を有する抗体コンストラクトの結合および／または親和性は、野性型配列に比べて、Ｆｃ結合ドメインアミノ酸配列の修飾によって、有意に改変され得ない。野生型配列に由来するＦｃ結合ドメインの修飾は、第１の結合ドメイン、あるいは例えば、肝臓細胞抗原、または肝臓細胞に感染するウイルスに由来するウイルス抗原に結合する標的結合ドメインの結合および／もしくは親和性を改変し得ない。さらに、本明細書に記載されている結合ドメイン、例えば第１の結合ドメイン、第２の結合ドメイン（または、一部の場合、第３の結合ドメイン）、ならびにＩｇＧ１ＶＬＰＬＬ、ＩｇＧ１ＤＥおよびＩｇＧ１ＡＡＡから選択されるＦｃ結合ドメイン変異体の結合および／または親和性は、野性型抗体の結合および／または親和性と同等である。
【００８５】
Ｆｃ結合ドメインは、抗体に由来することができる。Ｆｃ結合ドメインは、ＩｇＧ抗体に由来することができる。Ｆｃ結合ドメインは、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２またはＩｇＧ４抗体に由来することができる。Ｆｃ結合ドメインは、抗体に由来するＦｃ結合ドメインに対して、少なくとも８０％同一とすることができる。Ｆｃ結合ドメインは、抗体のＦｃ結合ドメインの一部とすることができる。
【００８６】
抗体コンストラクトは、抗体におけるＦｃ結合ドメインを含むことができる。抗体コンストラクトは、足場におけるＦｃ結合ドメインを含むことができる。抗体コンストラクトは、抗体足場においてＦｃ結合ドメインを含むことができる。抗体コンストラクトは、非抗体足場において、Ｆｃ結合ドメインを含むことができる。抗体コンストラクトは、抗原結合ドメインに共有結合的に結合したＦｃ結合ドメインを含むことができる。
【００８７】
抗体コンストラクトは、抗原結合ドメインおよびＦｃ結合ドメインを含むことができ、Ｆｃ結合ドメインは、抗体結合ドメインに共有結合的に結合することができる。抗体コンストラクトは、標的抗原結合ドメインおよびＦｃ結合ドメインを含むことができ、Ｆｃ結合ドメインは、標的抗原結合ドメインに共有結合的に結合することができる。抗体コンストラクトは、抗原結合ドメインおよびＦｃ結合ドメインを含むことができ、Ｆｃ結合ドメインは、Ｆｃ結合ドメイン−抗原結合ドメイン融合タンパク質として、抗原結合ドメインに共有結合的に結合している。抗体コンストラクトは、抗原結合ドメインおよびＦｃ結合ドメインを含むことができ、Ｆｃ結合ドメインは、リンカーによって、抗体結合ドメインに共有結合的に結合している。抗体コンストラクトは、標的抗原結合ドメインおよびＦｃ結合ドメインを含むことができ、Ｆｃ結合ドメインは、Ｆｃ結合ドメイン−標的抗原結合ドメイン融合タンパク質として、標的抗原結合ドメインに共有結合的に結合している。抗体コンストラクトは、標的抗原結合ドメインおよびＦｃ結合ドメインを含むことができ、Ｆｃ結合ドメインは、リンカーを介して、標的抗原結合ドメインに共有結合的に結合している。
【００８８】
抗体
抗体コンストラクトは、抗原結合ドメインおよびＦｃ結合ドメインを含むことができる抗体を含むことができる。抗体分子は、２つの同一軽鎖タンパク質（軽鎖）および２つの同一の重鎖タンパク質（重鎖）からなることができ、すべてが、正確に位置したジスルフィド連結によって共有結合的に一緒に保持されている。軽鎖および重鎖のＮ末端領域は一緒になって、各抗体の抗原認識部位を形成することができる。構造的に、抗体の様々な機能は、離散性タンパク質ドメイン（すなわち、領域）に制限され得る。抗原を認識することができ、かつ抗原に結合することができる部位は、２つの重鎖および２つの軽鎖のＮ末端部における、可変重鎖領域および可変軽鎖領域内に存在し得る、３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）からなる。定常ドメインは、抗体の一般的なフレームワークを提供することができ、抗体の抗原への結合に直接、関与することはないが、抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）への抗体の関与などの、様々なエフェクター機能に関与し得る。
【００８９】
天然の軽鎖可変領域および重鎖可変領域のドメインは、同一の一般構造体を有することができ、各ドメインは、４つのフレームワーク領域を含むことができ、それらの領域の配列は、３つの超可変領域またはＣＤＲによって、いくらか保存されて連結され得る。４つのフレームワーク領域は、β−シートコンフォメーションを主にとることができ、ＣＤＲはループを形成して、β−シート構造に結合することができ、一部の態様では、β−シート構造の一部を形成することができる。各鎖におけるＣＤＲは、フレームワーク領域により非常に接近して保持され得、他の鎖に由来するＣＤＲと共に、抗原結合部位の形成に寄与することができる。
【００９０】
抗体コンストラクトの抗体は、任意のタイプの抗体を含んでもよく、これらは、様々なクラスの免疫グロブリン（ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｉｎ）、例えば、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧおよびＩｇＭに帰属することができる。いくつかの異なるクラスは、アイソタイプ、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１およびＩｇＡ２にさらに分類することができる。抗体は、軽鎖および重鎖、多くの場合、１つ超の鎖をさらに含むことができる。様々なクラスの免疫グロブリンに相当する重鎖定常領域（Ｆｃ）は、それぞれ、α、δ、ε、γおよびμとすることができる。軽鎖は、定常ドメインのアミノ酸配列に基づいて、カッパすなわちκ、およびラムダすなわちλのどちらか一方とすることができる。Ｆｃ領域は、Ｆｃ結合ドメインを含むことができる。Ｆｃ受容体は、Ｆｃ結合ドメインに結合することができる。コンジュゲートまた、以下に限定されないが、ｓｃＦｖ、Ｆａｂ、可変Ｆｃ断片、ドメイン抗体を含めた、任意の断片またはその組換え形態、および抗原に特異的に結合することができる任意の他のそれらの断片を含むことができる。
【００９１】
抗体は、抗原認識部分を含む抗体の一部、すなわち抗原などの標的に対する抗原認識部分、すなわちエピトープの認識および特異的結合をもたらすのに十分な抗体の抗原決定可変領域を指す抗原結合ドメインを含むことができる。抗体結合ドメインの例は、以下に限定されないが、Ｆａｂ、可変Ｆｖ断片および他の断片、断片の組合せ、または当業者に公知のまたは知ることが可能な断片のタイプを含むことができる。
【００９２】
抗体の抗原結合ドメインは、１つもしくは複数の軽鎖（ＬＣ）ＣＤＲ（ＬＣＤＲ）、および１つもしくは複数の重鎖（ＨＣ）ＣＤＲ（ＨＣＤＲ）、１つもしくは複数のＬＣＤＲ、または１つもしくは複数のＨＣＤＲを含むことができる。例えば、抗体の抗体結合ドメインは、以下：軽鎖相補性決定領域１（ＬＣＤＲ１）、軽鎖相補性決定領域２（ＬＣＤＲ２）または軽鎖相補性決定領域３（ＬＣＤＲ３）のうちの１つまたは複数を含むことができる。別の例の場合、抗体結合ドメインは、以下：重鎖相補性決定領域１（ＨＣＤＲ１）、重鎖相補性決定領域２（ＨＣＤＲ２）または重鎖相補性決定領域３（ＨＣＤＲ３）のうちの１つまたは複数を含むことができる。一部の実施形態では、抗体結合ドメインは、以下：軽鎖相補性決定領域１（ＬＣＤＲ１）、軽鎖相補性決定領域２（ＬＣＤＲ２）、軽鎖相補性決定領域３（ＬＣＤＲ３）、重鎖相補性決定領域１（ＨＣＤＲ１）、重鎖相補性決定領域２（ＨＣＤＲ２）および重鎖相補性決定領域３（ＨＣＤＲ３）のすべてを含む。特に明記しない限り、本明細書に記載されているＣＤＲは、ＩＭＧＴ（国際免疫遺伝学情報システム（ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ＩｍＭｕｎｏＧｅｎｅＴｉｃｓ  ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ  ｓｙｓｔｅｍ））に準拠して定義することができる。抗原結合ドメインは、抗体の重鎖しか含み得ない（例えば、抗体の任意の他の部分を含まない）。抗原結合ドメインは、抗体の重鎖の可変ドメインしか含み得ない。代替的に、抗原結合ドメインは、抗体の軽鎖のしか含み得ない。抗原結合ドメインは、抗体の可変軽鎖しか含み得ない。
【００９３】
抗体コンストラクトは、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２またはＦｖ断片などの抗体断片を含むことができる。本明細書において使用される抗体は、「ヒト化」とすることができる。非ヒト（例えば、マウス）抗体のヒト化形態は、インタクト（完全長）キメラ免疫グロブリン、免疫グロブリン鎖またはそれらの抗原結合断片（Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、または抗体の他の標的結合サブドメインなど）とすることができ、これらは、非ヒト免疫グロブリンから誘導される配列を含有することができる。一般に、ヒト化抗体は、少なくとも１つの、および通常、２つの可変ドメインの実質的にすべてを含むことができ、この場合、ＣＤＲ領域のすべてまたは実質的にすべてが、非ヒト免疫グロブリンのＣＤＲ領域に対応し、フレームワーク（ＦＲ）領域のすべてまたは実質的にすべてが、ヒト免疫グロブリン配列のフレームワーク領域となる。ヒト化抗体はまた、免疫グロブリン定常領域（Ｆｃ）の少なくとも一部、通常、ヒト免疫グロブリンコンセンサス配列の一部を含むことができる。
【００９４】
本明細書に記載されている抗体は、ヒト抗体とすることができる。本明細書で使用する場合、「ヒト抗体」は、例えば、ヒト免疫グロブリンのアミノ酸配列を有する抗体を含むことができ、ヒト免疫グロブリンライブラリから、または１種もしくは複数のヒト免疫グロブリンをトランスジェニックした動物であって、内因性免疫グロブリンを通常、発現しないトランスジェニックした動物から分離した抗体を含むことができる。ヒト抗体は、機能的に内因性の免疫グロブリンを発現することはできないが、ヒト免疫グロブリン遺伝子を発現することができる、トランスジェニックマウスを使用して生成することができる。選択したエピトープを認識する完全なヒト抗体は、誘導選択を使用して生成することができる。この手法では、選択された非ヒトモノクローナル抗体、例えばマウス抗体を使用して、同じエピトープを認識する完全なヒト抗体の選択を導く。
【００９５】
本明細書に記載されている抗体は、二重特異性抗体またはデュアル可変ドメイン抗体（ＤＶＤ）とすることができる。二重特異性およびＤＶＤ抗体は、モノクローナル、多くの場合、少なくとも２つの異なる抗原に対する結合特異性を有するヒト抗体またはヒト化抗体である。
【００９６】
本明細書に記載されている抗体は、誘導体化され得るか、またはそうでない場合、修飾され得る。例えば、誘導化抗体は、グリコシル化、アセチル化、ＰＥＧ化、リン酸化、アミド化、既知の保護基／ブロック基による誘導体化、タンパク質分解的開裂などにより修飾され得る。
【００９７】
本明細書に記載されている抗体は、肝臓細胞上に発現する抗原に特異的に結合することができる。例えば、抗体は、肝臓細胞抗原に特異的に結合することができる。肝臓細胞抗原は、毛細胆管細胞、クッパー細胞、肝細胞、星型細胞もしくは他の肝臓細胞タイプ、またはそれらの組合せ上に発現することができる。肝臓細胞抗原は、肝臓細胞表面受容体とすることができる。肝臓細胞抗原は、肝細胞抗原とすることができる。肝臓細胞抗原は、非がん性肝臓細胞上に発現することができる。肝臓細胞抗原は、ウイルスに感染した細胞上に発現することができる。ウイルスは、ＨＢＶまたはＨＣＶなどの肝炎ウイルスとすることができる。ウイルスは、ＨＢＶとすることができる。ウイルスは、ＨＣＶとすることができる。肝臓細胞抗原には、以下に限定されないが、アシアロ糖タンパク質受容体１（ＡＳＧＲ１）、アシアロ糖タンパク質受容体２（ＡＳＧＲ２）、トランスフェリン受容体２（ＴＲＦ２）、ＵＤＰグルクロノシルトランスフェラーゼ１ファミリー、ポリペプチドＡ１（ＵＧＴ１Ａ１）、溶質担体ファミリー２２のメンバー７（ＳＬＣ２２Ａ７）、溶質担体ファミリー１３のメンバー５（ＳＬＣ１３Ａ５）、溶質担体ファミリー２２のメンバー１（ＳＬＣ２２Ａ１）および補体成分９（Ｃ９）が含まれ得る。
【００９８】
他の実施形態では、抗体は、肝臓細胞に感染するウイルスに由来するウイルス抗原に結合することができる。ウイルス抗原は、ウイルスにより感染した場合、毛細胆管細胞、クッパー細胞、肝細胞、星型細胞もしくは他の肝臓細胞タイプ、またはそれらの組合せ上に発現することができる。ウイルスは、ＨＢＶまたはＨＣＶなどの肝炎ウイルスとすることができる。ウイルスは、ＨＢＶとすることができる。ウイルスは、ＨＣＶとすることができる。ウイルス抗原は、ウイルスに感染した非がん性肝臓細胞上に発現することができる。ウイルス抗原は、以下に限定されないが、ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇ、ＨＢｅＡｇ、Ｂ型肝炎ウイルスＤＮＡポリメラーゼまたはＨＢｘなどのＨＢＶの構成成分、ならびにコアタンパク質、Ｅ１およびＥ２、ＮＳ２、ＮＳ３、ＮＳ４Ａ、ＮＳ４Ｂ、ＮＳ５ＡまたはＮＳ５ＢなどのＨＣＶの構成成分を含むことができる。一部の実施形態では、ウイルス抗原は、ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇまたはＨＢｅＡｇである。一部の実施形態では、ウイルス抗原は、ＨＢｓＡｇである。
【００９９】
抗体コンストラクトは、少なくとも１つのアミノ酸残基に発生する修飾を有する抗体を含むことができる。修飾は、置換、付加、変異、欠失などとすることができる。抗体修飾は、非天然アミノ酸の挿入とすることができる。
【０１００】
抗体コンストラクトは、天然アミノ酸配列または元のアミノ酸配列に対して、アミノ酸配列の、少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つまたは１０の修飾を有するが、４０以下、３５以下、３０以下、２５以下、２０以下、１５以下または１０以下の修飾を有するアミノ酸配列の軽鎖を含むことができる。コンジュゲートまたは抗体コンストラクトは、天然アミノ酸配列または元のアミノ酸配列に対して、アミノ酸配列の、少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つまたは１０の修飾を有するが、４０以下、３５以下、３０以下、２５以下、２０以下、１５以下または１０以下の修飾を有するアミノ酸配列の重鎖を含むことができる。
【０１０１】
抗体コンストラクトは、ＩｇＧ１アイソタイプのＦｃドメインを含むことができる。抗体コンストラクトは、ＩｇＧ２アイソタイプのＦｃ結合ドメインを含むことができる。抗体コンストラクトは、ＩｇＧ３アイソタイプのＦｃ結合ドメインを含むことができる。抗体コンストラクトは、ＩｇＧ４アイソタイプのＦｃドメインを含むことができる。抗体コンストラクトは、２つ以上のアイソタイプに由来する定常領域を含むハイブリッドアイソタイプを有することができる。
【０１０２】
本明細書に記載されている抗体は、対応する野生型配列に対して少なくとも１つの定常領域媒介生物学的エフェクター機能を改変するよう修飾された配列を有することができる。例えば、一部の実施形態では、抗体は、非修飾抗体と比べて、少なくとも１つの定常領域媒介生物学的エフェクター機能を増大または低下させるよう、例えば、Ｆｃ受容体（ＦｃＲ）への結合を増大させるよう修飾することができる。ＦｃＲ結合は、例えば、ＦｃＲ相互作用に必要な特定領域における抗体の免疫グロブリン定常領域セグメントを変異させることにより、低下または増大させることができる。
【０１０３】
本明細書に記載されている抗体は、非修飾抗体に比べて、少なくとも１つの定常領域媒介生物学的エフェクター機能を獲得または改善するよう、例えば、ＦｃγＲ相互作用を増強するように修飾され得る。例えば、対応する野生型定常領域よりも高い親和性で、ＦｃγＲＩＩＡ、ＦｃγＲＩＩＢおよび／またはＦｃγＲＩＩＩＡに結合する定常領域を有する抗体は、本明細書に記載されている方法に準拠して生成することができる。
【０１０４】
抗体コンストラクトは、第１の結合ドメイン、第２の結合ドメインおよびＦｃドメインを含むことができ、第１の結合ドメインは、Ｆｃドメインに結合している。コンジュゲートまたは抗体コンストラクトは、第１の結合ドメイン、第２の結合ドメインおよびＦｃドメインを含むことができ、第２の結合ドメインは、Ｆｃドメインに結合している。第１の結合ドメインは、融合タンパク質としてＦｃドメインに結合することができる。第２の結合ドメインは、融合タンパク質としてＦｃドメインに結合することができる。第１の結合ドメインは、リンカーを介してＦｃドメインに結合することができる。第２の結合ドメインは、リンカーを介してＦｃドメインに結合することができる。
【０１０５】
融合タンパク質
第１の抗原結合ドメインおよび第２の抗原結合ドメイン（存在する場合）は、融合タンパク質としてＦｃドメインに結合することができる。第１の抗原結合ドメインは、Ｆｃ結合ドメインのＮ末端部において、Ｆｃ結合ドメインに結合することができ、第２の抗原結合ドメインは、Ｃ末端部において、Ｆｃ結合ドメインに結合することができる。第１の抗原結合ドメインは、Ｆｃ結合ドメインのＮ末端部において、Ｆｃ結合ドメインに結合することができ、第２の抗原結合ドメインは、ポリペプチドリンカーを介して、Ｃ末端部において、Ｆｃ結合ドメインに結合することができる。一部の実施形態では、ポリペプチドリンカーは、１０〜２５のアミノ酸の範囲であり、例えば、配列［Ｇ４Ｓ］ｎ［ｎ＝２〜５］を含むことができる。代替的に、第１の抗原結合ドメインは、Ｆｃ結合ドメインのＣ末端において、Ｆｃ結合ドメインに結合することができ、第２の抗原結合ドメインは、Ｎ末端において、Ｆｃ結合ドメインに結合することができる。第２の抗原結合ドメインおよびＦｃ結合ドメインは、抗体を含むことができ、第１の結合ドメインは、一本鎖可変断片（ｓｃＦｖ）を含むことができる。一本鎖可変断片は、抗体の重鎖可変ドメインおよび軽鎖可変ドメインを含むことができる。融合タンパク質の第１の抗原結合ドメインは、第１の抗原結合ドメインの一本鎖可変断片の重鎖可変ドメインにおいて、第２の抗原結合ドメインに結合することができる（ＨＬ配向）。代替的に、融合タンパク質の第１の抗原結合ドメインは、第１の結合ドメインの一本鎖可変断片の軽鎖可変ドメインにおいて、第２の抗原結合ドメインに結合することができる（ＬＨ配向）。いずれの配向でも、第１の抗原結合ドメインおよび第２の抗原結合ドメインは、ポリペプチドリンカーを介して結合することができる。一部の実施形態では、ポリペプチドリンカーは、長さが１５〜２５のアミノ酸と様々になり得、例えば、配列［Ｇ４Ｓ］ｎ［ｎ＝３〜５］］を含むことができる。
【０１０６】
代替的に、第１の抗原結合ドメインおよびＦｃ結合ドメインは、抗体を含むことができ、第２の抗原結合ドメインは、一本鎖可変断片（ｓｃＦｖ）を含むことができる。融合タンパク質の第２の抗原結合ドメインは、第１の抗原結合ドメインの一本鎖可変断片の重鎖可変ドメインにおいて、第１の抗原結合ドメインに結合することができる（ＨＬ配向）。代替的に、融合タンパク質の第２の抗原結合ドメインは、第１の抗原結合ドメインの一本鎖可変断片の軽鎖可変ドメインにおいて、第１の抗原結合ドメインに結合することができる（ＬＨ配向）。
【０１０７】
抗体コンストラクトは、第１の抗原結合ドメインおよび第２の抗原結合ドメインを含むことができ、第２の抗原結合ドメインは、第１の抗原結合ドメインに結合することができる。抗体コンストラクトは、軽鎖および重鎖を含む抗体を含むことができる。第１の抗原結合ドメインは、軽鎖および重鎖のＦａｂ断片を含むことができる。第２の抗原結合ドメインは、融合タンパク質として、軽鎖の一方のＣ末端またはＣ末端部において軽鎖に結合することができる。第２の抗原結合ドメインは、一本鎖可変断片（ｓｃＦｖ）を含むことができる。
【０１０８】
抗体コンストラクトは、第１の抗原結合ドメイン、第２の抗原結合ドメインおよびＦｃ結合ドメインを含むことができ、第１の抗原結合ドメインおよび第２の抗原結合ドメインは、融合タンパク質として、Ｆｃ結合ドメインに結合している。融合タンパク質の第２の抗原結合ドメインは、肝臓細胞上の第２の抗原に特異的に結合することができ、第２の抗原は、第２の肝臓細胞抗原、または肝臓細胞に感染するウイルスに由来する第２のウイルス抗原である。一部の実施形態では、融合タンパク質の第２の抗原結合ドメインは、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２、ＴＲＦ２、ＵＧＴ１Ａ１、ＳＣＬ２２Ａ７、ＳＣＬ１２Ａ５、ＳＬＣ２２Ａ１、Ｃ９からなる群から選択される抗原に特異的に結合することができる。融合タンパク質の第２の抗原結合ドメインは、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２、ＴＲＦ２、ＵＧＴ１Ａ１、ＳＣＬ２２Ａ７、ＳＣＬ１２Ａ５およびＳＬＣ２２Ａ１からなる群から選択される抗原に特異的に結合することができる。融合タンパク質の第２の抗原結合ドメインは、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２およびＴＲＦ２からなる群から選択される抗原に特異的に結合することができる。第２の肝臓細胞抗原は、ＡＳＧＲ１とすることができる。第２の肝臓細胞抗原は、ＡＳＧＲ２とすることができる。第２の肝臓細胞抗原は、ＴＲＦ２とすることができる。融合タンパク質の第２の抗原結合ドメインは、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２、ＴＲＦ２、ＵＧＴ１Ａ１、ＳＣＬ２２Ａ７、ＳＣＬ１２Ａ５、ＳＬＣ２２Ａ１およびＣ９からなる群から選択される抗原に対して少なくとも８０％の同一性を構成するアミノ酸配列を有する抗原に特異的に結合することができる。
【０１０９】
一部の実施形態では、融合タンパク質の第２の抗原結合ドメインは、ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇ、ＨＢｅＡｇ、Ｂ型肝炎ウイルスＤＮＡポリメラーゼ、ＨＢｘ、コアタンパク質、Ｅ１およびＥ２、ＮＳ２、ＮＳ３、ＮＳ４Ａ、ＮＳ４Ｂ、ＮＳ５ＡおよびＮＳ５Ｂからなる群から選択されるウイルス抗原に特異的に結合することができる。一部の実施形態では、融合タンパク質の第２の抗原結合ドメインは、ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇまたはＨＢｅＡｇに特異的に結合することができる。一部の実施形態では、融合タンパク質の第２の抗原結合ドメインは、ＨＢｓＡｇに特異的に結合することができる。
【０１１０】
融合タンパク質の第１の結合ドメインは、第１の抗原に特異的に結合することができ、第１の抗原は、肝臓細胞抗原、または肝臓細胞に感染するウイルスに由来するウイルス抗原である。一部の実施形態では、融合タンパク質の第１の抗原結合ドメインは、肝臓細胞抗原に特異的に結合することができる。融合タンパク質の第１の抗原結合ドメインは、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２、ＴＲＦ２、ＵＧＴ１Ａ１、ＳＣＬ２２Ａ７、ＳＣＬ１２Ａ５、ＳＬＣ２２Ａ１およびＣ９からなる群から選択される肝臓細胞抗原に特異的に結合することができる。融合タンパク質の第１の抗原結合ドメインは、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２、ＴＲＦ２、ＵＧＴ１Ａ１、ＳＣＬ２２Ａ７、ＳＣＬ１２Ａ５およびＳＬＣ２２Ａ１からなる群から選択される肝臓細胞抗原に特異的に結合することができる。融合タンパク質の第１の抗原結合ドメインは、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２およびＴＲＦ２からなる群から選択される肝臓細胞抗原に特異的に結合することができる。融合タンパク質の第１の抗原結合ドメインは、ＡＳＧＲ１に特異的に結合することができる。融合タンパク質の第１の抗原結合ドメインは、ＡＳＧＲ２に特異的に結合することができる。融合タンパク質の第１の抗原結合ドメインは、ＴＲＦ２に特異的に結合することができる。融合タンパク質の第１の抗原結合ドメインは、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２、ＴＲＦ２、ＵＧＴ１Ａ１、ＳＣＬ２２Ａ７、ＳＣＬ１２Ａ５、ＳＬＣ２２Ａ１およびＣ９からなる群から選択される抗原に対して少なくとも８０％の同一性を構成するアミノ酸配列を有する肝臓細胞抗原に特異的に結合することができる。融合タンパク質の第１の抗原結合ドメインは、ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇ、ＨＢｅＡｇ、Ｂ型肝炎ウイルスＤＮＡポリメラーゼ、ＨＢｘ、コアタンパク質、Ｅ１およびＥ２、ＮＳ２、ＮＳ３、ＮＳ４Ａ、ＮＳ４Ｂ、ＮＳ５ＡおよびＮＳ５Ｂからなる群から選択されるウイルス抗原に特異的に結合することができる。融合タンパク質の第１の抗原結合ドメインは、ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇまたはＨＢｅＡｇに特異的に結合することができる。融合タンパク質の第１の抗原結合ドメインは、ＨＢｓＡｇに特異的に結合することができる。融合タンパク質の第１の抗原結合ドメインは、ＨＢｃＡｇに特異的に結合することができる。融合タンパク質の第１の抗原結合ドメインは、ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇ、ＨＢｅＡｇ、Ｂ型肝炎ウイルスＤＮＡポリメラーゼ、ＨＢｘ、コアタンパク質、Ｅ１およびＥ２、ＮＳ２、ＮＳ３、ＮＳ４Ａ、ＮＳ４Ｂ、ＮＳ５ＡおよびＮＳ５Ｂからなる群から選択されるに抗原に対して少なくとも８０％の同一性を構成するアミノ酸配列を有するウイルス抗原に特異的に結合することができる。
【０１１１】
第１の抗原結合ドメインおよび第２の抗原結合ドメインはそれぞれ、異なる抗原に特異的に結合することができる。第１の抗原結合ドメインおよび第２の抗原結合ドメインはそれぞれ、同じ抗原の異なるエピトープに特異的に結合することができる。
【０１１２】
抗体コンストラクトは、第１の抗原結合ドメイン、第２の抗原結合ドメインおよびＦｃ結合ドメインを含むことができ、第２の抗原結合ドメインは、第１の抗原結合ドメインに結合することができる。第２の抗原結合ドメインは、融合タンパク質として、第１の抗原結合ドメインのＣ末端部に結合することができる。第１の抗原結合ドメインは、軽鎖を含むＦａｂ断片を含むことができ、第２の抗原結合ドメインは、融合タンパク質として、軽鎖のＣ末端部において結合することができる。融合タンパク質の第２の抗原結合ドメインは、一本鎖可変断片（ｓｃＦｖ）を含むことができる。融合タンパク質の第２の抗原結合ドメインは、第１の結合ドメインの一本鎖可変断片の重鎖可変ドメインにおいて、第１の抗原結合ドメインに結合することができる（ＨＬ配向）。代替的に、融合タンパク質の第２の抗原結合ドメインは、第１の結合ドメインの一本鎖可変断片の軽鎖可変ドメインにおいて、第１の抗原結合ドメインに結合することができる（ＬＨ配向）。ｓｃＦｖ配列を含むすべての融合配列は、特に示さない限り、ＨＬ配向で存在する（例えば、配列名は、軽重配向を示す、「（ＬＨ）」と列挙する）。
【０１１３】
抗体コンストラクトは、肝臓細胞抗原を標的とする第１の抗原結合ドメイン、および肝臓細胞に感染するウイルスに由来するウイルス抗原を標的とする第２の抗原結合ドメインを含むことができる。代替的に、抗体コンストラクトは、肝臓細胞に感染するウイルスに由来するウイルス抗原を標的とする第１の抗原結合ドメイン、および肝臓細胞抗原を標的とする第２の抗原結合ドメインを含むことができる。第１の抗原結合ドメインおよび第２の抗原結合ドメインは、Ｆｃ結合ドメインに結合することができる。第１の抗原結合ドメインは、Ｆｃ結合ドメインのＮ末端部において、Ｆｃ結合ドメインに結合することができ、第２の抗原結合ドメインは、Ｆｃ結合ドメインのＣ末端部において、Ｆｃ結合ドメインに結合する。代替的に、第２の抗原結合ドメインは、Ｆｃ結合ドメインのＮ末端部において、Ｆｃ結合ドメインに結合することができ、第１の抗原結合ドメインは、Ｆｃ結合ドメインのＣ末端部において、Ｆｃ結合ドメインに結合する。
【０１１４】
さらに、本明細書に記載されている抗体コンストラクトは、第１の抗原結合ドメインの抗原に対して、１０ｎＭ未満となる解離定数（Ｋｄ）を有することができる。抗体コンストラクトは、第２の抗原結合ドメインの抗原に対して、１０ｎＭ未満となる解離定数（Ｋｄ）を有することができる。抗体コンストラクトは、第１の抗原結合ドメインの抗原に対して、１ｎＭ未満、１００ｐＭ未満、１０ｐＭ未満、１ｐＭ未満または０．１ｐＭ未満の解離定数（Ｋｄ）を有することができる。抗体コンストラクトは、第２の抗原結合ドメインの抗原に対して、１ｎＭ未満、１００ｐＭ未満、１０ｐＭ未満、１ｐＭ未満または０．１ｐＭ未満の解離定数（Ｋｄ）を有することができる。
【０１１５】
本明細書において開示されている抗体コンストラクトは、非天然とすることができる、設計され得る、および／または操作され得る。本明細書において開示されている抗体コンストラクトは、抗原結合ドメインを含む、非天然の、設計されたおよび／または操作された足場とすることができる。本明細書において開示されている抗体コンストラクトは、非天然の、設計されたおよび／または操作された抗体とすることができる。抗体コンストラクトは、モノクローナル抗体を含むことができる。
【０１１６】
抗体コンストラクトは、ヒト抗体を含むことができる。抗体コンストラクトは、ヒト化抗体を含むことができる。抗体コンストラクトは、モノクローナルヒト化抗体を含むことができる。コンジュゲートおよび抗体コンストラクトは、組換え抗体を含むことができる。
【０１１７】
骨髄細胞アゴニスト
本明細書に記載されている抗体コンストラクトは、骨髄細胞アゴニストに結合して、コンジュゲートを形成する。骨髄細胞アゴニストは、直接作用または関節作用を実現することができる。ある種の実施形態では、骨髄細胞アゴニストは、抗体コンストラクトのＦｃ結合ドメインなどの抗体コンストラクトに結合することができる。骨髄細胞アゴニストは、抗ウイルス応答を直接または関節的に刺激する任意の化合物とすることができる。例えば、骨髄細胞アゴニストは、骨髄性細胞によるサイトカインの放出を引き起こすことによって、抗ウイルス応答を、直接刺激することができ、これによって、免疫細胞が活性化される。別の例として、骨髄細胞アゴニストは、骨髄細胞によるＩＬ−１０生成および分泌を抑制することによって、および／または制御性Ｔ細胞の活性を抑制することによって、免疫応答を間接的に刺激することができ、免疫細胞による抗ウイルス応答が向上する。骨髄細胞アゴニストによる免疫応答の刺激は、炎症誘発性サイトカインの上方調節、および／または免疫細胞の活性化の向上によって測定され得る。この作用は、コンジュゲートにより標的化される肝臓細胞と共に免疫細胞を共培養し、サイトカイン放出、ケモカイン放出、免疫細胞の増殖、免疫細胞活性化マーカーの上方調節および／またはＡＤＣＣを測定することによってｉｎ  ｖｉｔｒｏで測定することができる。ＡＤＣＣは、肝臓細胞、骨髄細胞および他の免疫細胞とのコンジュゲートを投与した後、共培養物中の残留するウイルスまたは感染細胞の比率を求めることによって測定することができる。
【０１１８】
ある種の実施形態では、骨髄細胞アゴニストは、ＴＬＲ７アゴニストおよび／またはＴＬＲ８アゴニストである。ある種の実施形態では、骨髄細胞アゴニストは、ＴＬＲ７アゴニストとすることができる。一部の実施形態では、骨髄アゴニストは、ＴＬＲ７を選択的に作動させて、ＴＬＲ８は作動させない。他の実施形態では、骨髄アゴニストは、ＴＬＲ８を選択的に作動させて、ＴＬＲ７は作動させない。
【０１１９】
ある種の実施形態では、ＴＬＲ７アゴニストは、イミダゾキノリン、イミダゾキノリンアミン、チアゾキノリン、グアノシンアナログ、アデノシンアナログ、チミジンホモポリマー、ｓｓＲＮＡ、ＣｐＧ−Ａ、ポリＧ１０およびポリＧ３からなる群から選択される。一部の実施形態では、ＴＬＲ７アゴニストは、ガーディキモド、イミキモド、レシキモド、ＧＳ−９６２０またはイミダゾキノリン８５２Ａからなる群から選択される。
【０１２０】
ある種の実施形態では、ＴＬＲ７アゴニストは、イミダゾキノリン、イミダゾキノリンアミン、チアゾキノリン、アミノキノリン、アミノキナゾリン、ピリド［３，２−ｄ］ピリミジン−２，４−ジアミン、ピリミジン−２，４−ジアミン、２−アミノイミダゾール、１−アルキル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−アミン、テトラヒドロピリドピリミジン、ヘテロアロチアジアジド−２，２−ジオキシド、ベンゾナフチリジン、グアノシンアナログ、アデノシンアナログ、チミジンホモポリマー、ｓｓＲＮＡ、ＣｐＧ−Ａ、ポリＧ１０およびポリＧ３から選択される。ある種の実施形態では、ＴＬＲ７アゴニストは、イミダゾキノリン、イミダゾキノリンアミン、チアゾキノリン、アミノキノリン、アミノキナゾリン、ピリド［３，２−ｄ］ピリミジン−２，４−ジアミン、ピリミジン−２，４−ジアミン、２−アミノイミダゾール、１−アルキル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−アミン、テトラヒドロピリドピリミジン、ヘテロアロチアジアジド−２，２−ジオキシドまたはベンゾナフチリジンから選択されるが、グアノシンアナログ、アデノシンアナログ、チミジンホモポリマー、ｓｓＲＮＡ、ＣｐＧ−Ａ、ポリＧ１０およびポリＧ３以外である。一部の実施形態では、ＴＬＲ７アゴニストは、天然に存在しない化合物である。ＴＬＲ７モジュレーターの例には、ＧＳ−９６２０、ＧＳＫ−２２４５０３５、イミキモド、レシキモド、ＤＳＲ−６４３４、ＤＳＰ−３０２５、ＩＭＯ−４２００、ＭＣＴ−４６５、ＭＥＤＩ−９１９７、３Ｍ−０５１、ＳＢ−９９２２、３Ｍ−０５２、リムトップ、ＴＭＸ−３０Ｘ、ＴＭＸ−２０２、ＲＧ−７８６３、ＲＧ−７７９５、ならびにＵＳ２０１６０１６８１６４（Ｊａｎｓｓｅｎ）、ＵＳ２０１５０２９９１９４（Ｒｏｃｈｅ）、ＵＳ２０１１００９８２４８（Ｇｉｌｅａｄ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）、ＵＳ２０１００１４３３０１（Ｇｉｌｅａｄ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）およびＵＳ２００９００４７２４９（Ｇｉｌｅａｄ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）に開示されている化合物が含まれる。一部の実施形態では、ＴＬＲ７アゴニストは、ＴＮＦアルファ産生またはＩＦＮアルファ産生を測定するＰＢＭＣアッセイによって、５００ｎＭ以下のＥＣ５０値を有する。一部の実施形態では、ＴＬＲ７アゴニストは、ＴＮＦアルファ産生またはＩＦＮアルファ産生を測定するＰＢＭＣアッセイによって、１００ｎＭ以下のＥＣ５０値を有する。一部の実施形態では、ＴＬＲ７アゴニストは、ＴＮＦアルファ産生またはＩＦＮアルファ産生を測定するＰＢＭＣアッセイによって、５０ｎＭ以下のＥＣ５０値を有する。一部の実施形態では、ＴＬＲ７アゴニストは、ＴＮＦアルファ産生またはＩＦＮアルファ産生を測定するＰＢＭＣアッセイによって、１０ｎＭ以下のＥＣ５０値を有する。
【０１２１】
ある種の実施形態では、骨髄細胞アゴニストは、ＴＬＲ８アゴニストとすることができる。ある種の実施形態では、ＴＬＲ８アゴニストは、ベンゾアゼピン、ｓｓＲＮＡ、イミダゾキノリン、チアゾロキノロンおよびアミノキノリンからなる群から選択される。ある種の実施形態では、ＴＬＲ８アゴニストは、ＶＴＸ−２３３７、ＶＴＸ−２９４およびレシキモドから選択される。
【０１２２】
ある種の実施形態では、ＴＬＲ８アゴニストは、ベンゾアゼピン、イミダゾキノリン、チアゾロキノリン、アミノキノリン、アミノキナゾリン、ピリド［３，２−ｄ］ピリミジン−２，４−ジアミン、ピリミジン−２，４−ジアミン、２−アミノイミダゾール、１−アルキル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−アミン、テトラヒドロピリドピリミジンまたはｓｓＲＮＡである。ある種の実施形態では、ＴＬＲ８アゴニストは、ベンゾアゼピン、イミダゾキノリン、チアゾロキノリン、アミノキノリン、アミノキナゾリン、ピリド［３，２−ｄ］ピリミジン−２，４−ジアミン、ピリミジン−２，４−ジアミン、２−アミノイミダゾール、１−アルキル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−アミン、テトラヒドロピリドピリミジンからなる群から選択され、ｓｓＲＮＡ以外である。一部の実施形態では、ＴＬＲ８アゴニストは、天然に存在しない化合物である。ＴＬＲ８アゴニストの例には、モトリモド、レシキモド、３Ｍ−０５１、３Ｍ−０５２、ＭＣＴ−４６５、ＩＭＯ−４２００、ＶＴＸ−７６３、ＶＴＸ−１４６３が含まれる。一部の実施形態では、ＴＬＲ８アゴニストは、ＴＮＦアルファ産生を測定するＰＢＭＣアッセイによって、５００ｎＭ以下のＥＣ５０値を有する。一部の実施形態では、ＴＬＲ８アゴニストは、ＴＮＦアルファ産生を測定するＰＢＭＣアッセイによって、１００ｎＭ以下のＥＣ５０値を有する。一部の実施形態では、ＴＬＲ８アゴニストは、ＴＮＦアルファ産生を測定するＰＢＭＣアッセイによって、５０ｎＭ以下のＥＣ５０値を有する。一部の実施形態では、ＴＬＲ８アゴニストは、ＴＮＦアルファ産生を測定するＰＢＭＣアッセイによって、１０ｎＭ以下のＥＣ５０値を有する。
【０１２３】
一部の実施形態では、ＴＬＲ８アゴニストは、実施例に示されている、化合物１．１〜１．２、１．４〜１．２０、１．２３〜１．２７、１．２９〜１．４６、１．４８および１．５０〜１．６７のいずれかである。
【０１２４】
他のＴＬＲ７アゴニストおよびＴＬＲ８アゴニストは、例えば、すべての目的のため、参照により本明細書に組み込まれている、ＷＯ２０１６１４２２５０、ＷＯ２０１７０４６１１２、ＷＯ２００７０２４６１２、ＷＯ２０１１０２２５０８、ＷＯ２０１１０２２５０９、ＷＯ２０１２０４５０９０、ＷＯ２０１２０９７１７３、ＷＯ２０１２０９７１７７、ＷＯ２０１７０７９２８３、ＵＳ２０１６０００８３７４、ＵＳ２０１６０１９４３５０、ＵＳ２０１６０２８９２２９、米国特許第６０４３２３８号、ＵＳ２０１８００８６７５５（Ｇｉｌｅａｄ）、ＷＯ２０１７２１６０５４（Ｒｏｃｈｅ）、ＷＯ２０１７１９０６６９（Ｓｈａｎｇｈａｉ  Ｄｅ  Ｎｏｖｏ  Ｐｈａｒｍａｔｅｃｈ）、ＷＯ２０１７２０２７０４（Ｒｏｃｈｅ）、ＷＯ２０１７２０２７０３（Ｒｏｃｈｅ）、ＷＯ２０１７００７１９４４（Ｇｉｌｅａｄ）、ＵＳ２０１４００４５８４９（Ｊａｎｓｓｅｎ）、ＵＳ２０１４００７３６４２（Ｊａｎｓｓｅｎ）、ＷＯ２０１４０５６９５３（Ｊａｎｓｓｅｎ）、ＷＯ２０１４０７６２２１（Ｊａｎｓｓｅｎ）、ＷＯ２０１４１２８１８９（Ｊａｎｓｓｅｎ）、ＵＳ２０１４０３５００３１（Ｊａｎｓｓｅｎ）、ＷＯ２０１４０２３８１３（Ｊａｎｓｓｅｎ）、ＵＳ２００８０２３４２５１（Ａｒｒａｙ  Ｂｉｏｐｈａｒｍａ）、ＵＳ２００８０３０６０５０（Ａｒｒａｙ  Ｂｉｏｐｈａｒｍａ）、ＵＳ２０１０００２９５８５（Ｖｅｎｔｉｒｘ  Ｐｈａｒｍａ）、ＵＳ２０１１００９２４８５（Ｖｅｎｔｉｒｘ  Ｐｈａｒｍａ）、ＵＳ２０１１０１１８２３５（Ｖｅｎｔｉｒｘ  Ｐｈａｒｍａ）、ＵＳ２０１２００８２６５８（Ｖｅｎｔｉｒｘ  Ｐｈａｒｍａ）、ＵＳ２０１２０２１９６１５（Ｖｅｎｔｉｒｘ  Ｐｈａｒｍａ）、ＵＳ２０１４００６６４３２（Ｖｅｎｔｉｒｘ  Ｐｈａｒｍａ）、ＵＳ２０１４００８８０８５（Ｖｅｎｔｉｒｘ  Ｐｈａｒｍａ）、ＵＳ２０１４０２７５１６７（Ｎｏｖｉｒａ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）およびＵＳ２０１３０２５１６７３（Ｎｏｖｉｒａ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）に開示されている。
【０１２５】
ある種の態様では、ＴＬＲ８アゴニストおよびＴＬＲ７アゴニストは、それぞれ、分類Ａまたは分類Ｂから選択される。分類Ａの化合物（ＴＬＲ８アゴニスト）の可変基および式は、分類Ａの化合物と表題が付けられた項目に記載されており、分類Ｂの化合物（ＴＬＲ７アゴニスト）の可変基および式は、その後の分類Ｂの化合物と表題が付けられた項目に記載されている。分類Ａの化合物および分類Ｂの化合物の式および可変基は、命名で重なることがあり、例えば、分類Ａと分類Ｂの両方の化合物に対して式ＩＡがある。しかし、可変基および式の記載は、これらの分類間で相互変換可能であることを意図するものではない。
【０１２６】
分類Ａの化合物であるＴＬＲ８アゴニスト
一部の態様では、本開示は、式（ＩＩＡ）の構造：
2021506827.tif 000005
または薬学的に許容されるその塩［式中、
2021506827.tif 000006
は、任意選択の二重結合を表し、
Ｌ１０は、−Ｘ１０−であり、
Ｌ２は、−Ｘ２−、−Ｘ２−Ｃ１〜６アルキレン−Ｘ２−、−Ｘ２−Ｃ２〜６アルケニレン−Ｘ２−および−Ｘ２−Ｃ２〜６アルキニレン−Ｘ２−から選択され、これらはそれぞれ、アルキレン、アルケニレンまたはアルキニレン上で１つまたは複数のＲ１２により置換されていてもよく、
Ｘ１０は、−Ｃ（Ｏ）−および−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）−＊から選択され、＊は、Ｘ１０がＲ５に結合していることを表し、
Ｘ２は、出現毎に、結合、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ１０）−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）−、−ＯＣ（Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）−、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）−、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）−、−Ｃ（ＮＲ１０）−、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（ＮＲ１０）−、−Ｃ（ＮＲ１０）Ｎ（Ｒ１０）−、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（ＮＲ１０）Ｎ（Ｒ１０）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−ＯＳ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）Ｏ−、−Ｓ（Ｏ）、−ＯＳ（Ｏ）２−、−Ｓ（Ｏ）２Ｏ、−Ｎ（Ｒ１０）Ｓ（Ｏ）２−、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ１０）−、−Ｎ（Ｒ１０）Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）−、−Ｎ（Ｒ１０）Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ１０）−および−Ｎ（Ｒ１０）Ｓ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）−から独立して選択され、
Ｒ１およびＲ２は、水素；ならびにＣ１〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニルおよびＣ２〜１０アルキニル［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）および−ＣＮから独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］から独立して選択され、
Ｒ４は、−ＯＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１０および−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１０；Ｃ１〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニル、Ｃ２〜１０アルキニル［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）、−ＣＮ、Ｃ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環から独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］；ならびにＣ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環から選択され、Ｒ４におけるＣ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環はそれぞれ、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）、−ＣＮ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニルおよびＣ２〜６アルキニルから独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよく、
Ｒ５は、不飽和Ｃ４〜８炭素環；二環式炭素環；および５−５縮合、５−６縮合および６−６縮合二環式複素環から選択され、Ｒ５は、置換されていてもよく、置換基は、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）および−ＣＮ；Ｃ１〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニル、Ｃ２〜１０アルキニル［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）、−ＣＮ、Ｃ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環から独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］；ならびにＣ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環から出現毎に独立して選択され、Ｒ５中のＣ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環はそれぞれ、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）、−ＣＮ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニルおよびＣ２〜６アルキニルから独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよく、
Ｒ１０は、水素、−ＮＨ２、−Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ２Ｃ６Ｈ５；ならびにＣ１〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニル、Ｃ２〜１０アルキニル、Ｃ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、−ＮＨ２、＝Ｏ、＝Ｓ、−Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ２Ｃ６Ｈ５、−ＮＨＣ（Ｏ）ＯＣＨ２Ｃ６Ｈ５、Ｃ１〜１０アルキル、−Ｃ１〜１０ハロアルキル、−Ｏ−Ｃ１〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニル、Ｃ２〜１０アルキニル、Ｃ３〜１２炭素環、３〜１２員の複素環およびハロアルキルから独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］から出現毎に独立して選択され、
Ｒ１２は、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１０、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）および−ＣＮ；Ｃ１〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニル、Ｃ２〜１０アルキニル［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１０、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）、−ＣＮ、Ｃ３〜１０炭素環および３〜１０員の複素環から独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］；ならびにＣ３〜１０炭素環および３〜１０員の複素環から出現毎に独立して選択され、Ｒ１２中のＣ３〜１０炭素環および３〜１０員の複素環はそれぞれ、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１０、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）、−ＣＮ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニル、Ｃ２〜６アルキニルから独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよく、
ベンゾアゼピンコア上の置換可能ないずれの炭素も、Ｒ１２から独立して選択される置換基によって置換されていてもよいか、または単一炭素原子上の２つの置換基が一緒になって、３〜７員の炭素環を形成する］
によって表されるＴＬＲ８アゴニストを提供する。
【０１２７】
一部の実施形態では、式（ＩＩＡ）の化合物は、式（ＩＩＢ）：
2021506827.tif 000007
または薬学的に許容されるその塩［式中、
Ｒ２０、Ｒ２１、Ｒ２２およびＲ２３は、水素、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）、−ＣＮ、Ｃ１〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニルおよびＣ２〜１０アルキニルから独立して選択され、
Ｒ２４およびＲ２５は、水素、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）、−ＣＮ、Ｃ１〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニルおよびＣ２〜１０アルキニルから独立して選択されるか、またはＲ２４およびＲ２５は一緒になって、置換されていてもよい飽和Ｃ３〜７炭素環を形成する］
によって表される。
【０１２８】
一部の実施形態では、Ｒ２０、Ｒ２１、Ｒ２２およびＲ２３は、水素、ハロゲン、−ＯＨ、−ＯＲ１０、−ＮＯ２、−ＣＮおよびＣ１〜１０アルキルから独立して選択され、Ｒ２０、Ｒ２１、Ｒ２２およびＲ２３は、それぞれ水素とすることができる。ある種の実施形態では、Ｒ２１は、ハロゲンである。ある種の実施形態では、Ｒ２１は水素である。ある種の実施形態では、Ｒ２１は、−ＯＲ１０である。例えば、Ｒ２１は−ＯＣＨ３とすることができる。
【０１２９】
一部の実施形態では、Ｒ２４およびＲ２５は、水素、ハロゲン、−ＯＨ、−ＮＯ２、−ＣＮおよびＣ１〜１０アルキルから独立して選択されるか、またはＲ２４およびＲ２５は一緒になって、置換されていてもよい飽和Ｃ３〜７炭素環を形成する。ある種の実施形態では、Ｒ２４およびＲ２５は、それぞれ水素である。他の実施形態では、Ｒ２４およびＲ２５は一緒になって、置換されていてもよい飽和Ｃ３〜５炭素環を形成し、置換基は、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）および−ＣＮ；ならびにＣ１〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニル、Ｃ２〜１０アルキニル［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）、−ＣＮ、Ｃ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環から独立して選択される１つまたは複数の置換基により独立して置換されていてもよい］から選択される。
【０１３０】
一部の実施形態では、Ｒ１は水素である。一部の実施形態では、Ｒ２は水素である。一部の実施形態では、Ｒ２は、−Ｃ（Ｏ）−である。
【０１３１】
一部の実施形態では、Ｌ１０は、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）−＊から選択される。ある種の実施形態では、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）−＊のＲ１０は、水素およびＣ１〜６アルキルから選択される。例えば、Ｌ１０は、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−＊とすることができる。
【０１３２】
一部の実施形態では、Ｒ５は、置換されていてもよい二環式炭素環である。ある種の実施形態では、Ｒ５は、置換されていてもよい８〜１２員の二環式炭素環である。Ｒ５は、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、−ＣＮ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニルおよびＣ２〜６アルキニルから独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されている、置換されていてもよい８〜１２員の二環式炭素環とすることができる。ある種の実施形態では、Ｒ５は、−ＯＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２および＝Ｏから独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されている、置換されていてもよい８〜１２員の二環式炭素環である。一部の実施形態では、Ｒ５は、置換されていてもよいインダンおよび置換されていてもよいテトラヒドロナフタレンである。Ｒ５は、以下：
2021506827.tif 000008
から選択することができ、これらのいずれの１つも置換されていてもよい。例えば、Ｒ５は、以下：
2021506827.tif 000009
から選択される。
【０１３３】
一部の実施形態では、Ｒ５は、置換されていてもよい不飽和Ｃ４〜８炭素環である。ある種の実施形態では、Ｒ５は、置換されていてもよい不飽和Ｃ４〜６炭素環である。ある種の実施形態では、Ｒ５は、置換されていてもよいＣ３〜１２炭素環および置換されていてもよい３〜１２員の複素環から独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい不飽和Ｃ４〜６炭素環である。Ｒ５は、置換されていてもよいフェニル、置換されていてもよい３〜１２員の複素環、置換されていてもよいＣ１〜１０アルキル、置換されていてもよいＣ２〜１０アルケニルおよびハロゲンから独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい不飽和Ｃ４〜６炭素環とすることができる。
【０１３４】
一部の実施形態では、Ｒ５は、置換されていてもよい５−５縮合、５−６縮合および６−６縮合二環式複素環から選択される。ある種の実施形態では、Ｒ５は、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−ＯＲ１０および置換されていてもよいＣ１〜１０アルキルから独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい５−５縮合、５−６縮合および６−６縮合二環式複素環である。ある種の実施形態では、Ｒ５は、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０により置換されていている、置換されていてもよい５−５縮合、５−６縮合および６−６縮合二環式複素環である。ある種の実施形態では、Ｒ５は、置換されていてもよい６−６縮合二環式複素環である。例えば、６−６縮合二環式複素環は、置換されていてもよいピリジン−ピペリジンであってもよい。一部の実施形態では、Ｌ１０は、縮合ピリジン−ピペリジンのピリジンの炭素原子に結合している。ある種の実施形態では、Ｒ５は、テトラヒドロキノリン、テトラヒドロイソキノリン、テトラヒドロナフチリジン、シクロペンタピリジンおよびジヒドロベンゾオキサボロールから選択され、これらのいずれの１つも、置換されていてもよい。Ｒ５は、置換されていてもよいテトラヒドロナフチリジンとすることができる。一部の実施形態では、Ｒ５は、以下：
2021506827.tif 000010
から選択される。
【０１３５】
一部の実施形態では、Ｒ５が置換されている場合、Ｒ５上の置換基は、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）および−ＣＮ；Ｃ１〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニル、Ｃ２〜１０アルキニル［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）、−ＣＮ、Ｃ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環から独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］；ならびにＣ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）、−ＣＮ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニルおよびＣ２〜６アルキニルから独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］から出現毎に独立して選択される。ある種の実施形態では、Ｒ５上の置換基は、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）および−ＣＮ；Ｃ１〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニル、Ｃ２〜１０アルキニル［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）、−ＣＮ、Ｃ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環から独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］から出現毎に独立して選択される。ある種の実施形態では、Ｒ５上の置換基は、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−ＮＯ２、＝Ｏおよび−ＣＮ；ならびにＣ１〜１０アルキル［ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＮＯ２、＝Ｏおよび−ＣＮから独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］から出現毎に独立して選択される。一部の実施形態では、Ｒ５は置換されていない。
【０１３６】
一部の実施形態では、Ｌ２は、−Ｃ（Ｏ）−および−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１０−から選択される。一部の実施形態では、Ｌ２は、−Ｃ（Ｏ）−である。一部の実施形態では、Ｌ２は、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１０−から選択される。−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１０−のＲ１０は、水素およびＣ１〜６アルキルから選択することができる。例えば、Ｌ２は、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−とすることができる。
【０１３７】
一部の実施形態では、Ｒ４は、−ＯＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１０および−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１０；Ｃ１〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニル、Ｃ２〜１０アルキニル［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）、−ＣＮ、Ｃ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環から独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］；ならびにＣ３〜１２炭素環および３〜１２員のもの［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）、−ＣＮ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニルおよびＣ２〜６アルキニルから独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］から選択される。一部の実施形態では、Ｒ４は、−ＯＲ１０および−Ｎ（Ｒ１０）２；ならびにＣ１〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニル、Ｃ２〜１０アルキニル、Ｃ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）、−ＣＮ、Ｃ１〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニルおよびＣ２〜１０アルキニルから独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］から選択される。ある種の実施形態では、Ｒ４は、−Ｎ（Ｒ１０）２である。−Ｎ（Ｒ１０）２のＲ１０は、置換されていてもよいＣ１〜６アルキルから出現毎に独立して選択されてもよい。一部の実施形態では、−Ｎ（Ｒ１０）２のＲ１０は、メチル、エチル、プロピルおよびブチルから出現毎に独立して選択され、これらのいずれの１つも、置換されていてもよい。例えば、Ｒ４は、
2021506827.tif 000011
とすることができる。ある種の実施形態では、−Ｌ２−Ｒ４は、
2021506827.tif 000012
である。
【０１３８】
一部の実施形態では、Ｒ１２は、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１０、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）および−ＣＮ；Ｃ１〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニル、Ｃ２〜１０アルキニル［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１０、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）、−ＣＮ、Ｃ３〜１０炭素環および３〜１０員の複素環から独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］；ならびにＣ３〜１０炭素環および３〜１０員の複素環［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１０、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）、−ＣＮ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニルおよびＣ２〜６アルキニルから独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］から出現毎に独立して選択される。ある種の実施形態では、Ｒ１２は、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１０、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）および−ＣＮ；ならびにＣ１〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニル、Ｃ２〜１０アルキニル［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１０、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）、−ＣＮ、Ｃ３〜１０炭素環および３〜１０員の複素環から独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］から出現毎に独立して選択される。
【０１３９】
一部の実施形態では、本化合物は、
2021506827.tif 000013
2021506827.tif 000014
および
2021506827.tif 000015
ならびにそれらのいずれか１つの塩から選択される。
【０１４０】
一部の態様では、本開示は、式（ＩＩＩＡ）の構造：
2021506827.tif 000016
または薬学的に許容されるその塩［式中、
2021506827.tif 000017
は、任意選択の二重結合を表し、
Ｌ１１は、−Ｘ１１−であり、
Ｌ２は、−Ｘ２−、−Ｘ２−Ｃ１〜６アルキレン−Ｘ２−、−Ｘ２−Ｃ２〜６アルケニレン−Ｘ２−および−Ｘ２−Ｃ２〜６アルキニレン−Ｘ２−から選択され、これらはそれぞれ、アルキレン、アルケニレンまたはアルキニレン上で１つまたは複数のＲ１２により置換されていてもよく、
Ｘ１１は、−Ｃ（Ｏ）−および−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）−＊から選択され、＊は、Ｘ１１がＲ６に結合していることを表し、
Ｘ２は、出現毎に、結合、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ１０）−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）−、−ＯＣ（Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）−、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）−、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）−、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）−、−Ｃ（ＮＲ１０）−、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（ＮＲ１０）−、−Ｃ（ＮＲ１０）Ｎ（Ｒ１０）−、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（ＮＲ１０）Ｎ（Ｒ１０）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−ＯＳ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）Ｏ−、−Ｓ（Ｏ）−、−ＯＳ（Ｏ）２−、−Ｓ（Ｏ）２Ｏ−、−Ｎ（Ｒ１０）Ｓ（Ｏ）２−、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ１０）−、−Ｎ（Ｒ１０）Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）−、−Ｎ（Ｒ１０）Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ１０）−および−Ｎ（Ｒ１０）Ｓ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）−から独立して選択され、
Ｒ１およびＲ２は、水素；Ｃ１〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニルおよびＣ２〜１０アルキニル［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）および−ＣＮから独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］から独立して選択され、
Ｒ４は、−ＯＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１０および−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１０；Ｃ１〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニル、Ｃ２〜１０アルキニル［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）、−ＣＮ、Ｃ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環から独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］；ならびにＣ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環から選択され、Ｒ４におけるＣ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環はそれぞれ、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）、−ＣＮ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニルおよびＣ２〜６アルキニルから独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよく、
Ｒ６は、フェニル、および５員または６員のヘテロアリールから選択され、これらのいずれの１つも、Ｒ７から選択される１つまたは複数の置換基により置換されており、Ｒ６は、Ｒ１２から独立して選択される１つまたは複数の追加の置換基によりさらに置換されていてもよく、
Ｒ７は、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−Ｃ１〜３アルキレン−ＮＨ（Ｒ１０）、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、−Ｃ１〜３アルキレン−ＮＨＣ（Ｏ）ＯＲ１１、−Ｃ１〜３アルキレン−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ１〜３アルキレン−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＲ１０、−Ｃ１〜３アルキレン−ＮＨＣ（Ｏ）−Ｃ１〜３アルキレン−Ｒ１０および３〜１２員の複素環［Ｒ１２から独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］から選択され、
Ｒ１０は、水素、−ＮＨ２、−Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ２Ｃ６Ｈ５；ならびにＣ１〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニル、Ｃ２〜１０アルキニル、Ｃ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、−ＮＨ２、＝Ｏ、＝Ｓ、−Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ２Ｃ６Ｈ５、−ＮＨＣ（Ｏ）ＯＣＨ２Ｃ６Ｈ５、Ｃ１〜１０アルキル、−Ｃ１〜１０ハロアルキル、−Ｏ−Ｃ１〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニル、Ｃ２〜１０アルキニル、Ｃ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環から独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］から出現毎に独立して選択され、
Ｒ１１は、Ｃ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環から選択され、これらはそれぞれ、Ｒ１２から独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよく、
Ｒ１２は、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１０、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）および−ＣＮ；Ｃ１〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニル、Ｃ２〜１０アルキニル［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１０、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）、−ＣＮ、Ｃ３〜１０炭素環および３〜１０員の複素環から独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］；ならびにＣ３〜１０炭素環および３〜１０員の複素環から出現毎に独立して選択され、Ｒ１２中のＣ３〜１０炭素環および３〜１０員の複素環はそれぞれ、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１０、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）、−ＣＮ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニルおよびＣ２〜６アルキニルから独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよく、
ベンゾアゼピンコア上の置換可能ないずれの炭素も、Ｒ１２から独立して選択される置換基によって置換されていてもよいか、または単一炭素原子上の２つの置換基が一緒になって、３〜７員の炭素環を形成する］によって表される化合物を提供する。一部の実施形態では、式（ＩＩＩＡ）の化合物は、式（ＩＩＩＢ）：
2021506827.tif 000018
または薬学的に許容されるその塩［式中、
Ｒ２０、Ｒ２１、Ｒ２２およびＲ２３は、水素、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）、−ＣＮ、Ｃ１〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニルおよびＣ２〜１０アルキニルから独立して選択され、
Ｒ２４およびＲ２５は、水素、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）、−ＣＮ、Ｃ１〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニルおよびＣ２〜１０アルキニルから独立して選択されるか、またはＲ２４およびＲ２５は一緒になって、置換されていてもよい飽和Ｃ３〜７炭素環を形成する］
によって表される。
【０１４１】
一部の実施形態では、Ｒ２０、Ｒ２１、Ｒ２２およびＲ２３は、水素、ハロゲン、−ＯＨ、−ＮＯ２、−ＣＮおよびＣ１〜１０アルキルから独立して選択される。ある種の実施形態では、Ｒ２０、Ｒ２１、Ｒ２２およびＲ２３は、それぞれ水素である。一部の実施形態では、Ｒ２４およびＲ２５は、水素、ハロゲン、−ＯＨ、−ＮＯ２、−ＣＮおよびＣ１〜１０アルキルから独立して選択されるか、またはＲ２４およびＲ２５は一緒になって、置換されていてもよい飽和Ｃ３〜７炭素環を形成する。ある種の実施形態では、Ｒ２４およびＲ２５は、それぞれ水素である。ある種の実施形態では、Ｒ２４およびＲ２５は一緒になって、置換されていてもよい飽和Ｃ３〜５炭素環を形成する。
【０１４２】
一部の実施形態では、Ｒ１は水素である。一部の実施形態では、Ｒ２は水素である。
【０１４３】
一部の実施形態では、Ｌ１１は、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）−＊から選択される。一部の実施形態では、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）−＊のＲ１０は、水素およびＣ１〜６アルキルから選択される。例えば、Ｌ１１は、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−＊とすることができる。
【０１４４】
一部の実施形態では、Ｒ６は、Ｒ７により置換されているフェニルであり、Ｒ６は、Ｒ１２から独立して選択される１つまたは複数の追加の置換基によりさらに置換されていてもよい。一部の実施形態では、Ｒ６は、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−Ｃ１〜３アルキレン−ＮＨ（Ｒ１０）、−Ｃ１〜３アルキレン−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１０および−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３；ならびに３〜１２員の複素環［これは、−ＯＨ、−Ｎ（Ｒ１０）２、−ＮＨＣ（Ｏ）（Ｒ１０）、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｏ（Ｒ１０）、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）２Ｒ１０および−Ｃ１〜３アルキレン−（Ｒ１０）から選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］から独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されているフェニルから選択され、Ｒ６は、Ｒ１２から独立して選択される１つまたは複数の追加の置換基によりさらに置換されていてもよい。例えば、Ｒ６は、
2021506827.tif 000019
から選択することができる。
【０１４５】
一部の実施形態では、Ｒ６は、Ｒ７から独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されている５員および６員のヘテロアリールから選択され、Ｒ６は、Ｒ１２から選択される１つまたは複数の追加の置換基によりさらに置換されていてもよい。ある種の実施形態では、Ｒ６は、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、−Ｃ１〜３アルキレン−ＮＨＣ（Ｏ）ＯＲ１０、−Ｃ１〜３アルキレン−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ１〜３アルキレン−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＲ１０および−Ｃ１〜３アルキレン−ＮＨＣ（Ｏ）−Ｃ１〜３アルキレン−（Ｒ１０）から独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されている５員および６員のヘテロアリール；ならびに−ＯＨ、−Ｎ（Ｒ１０）２、−ＮＨＣ（Ｏ）（Ｒ１０）、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｏ（Ｒ１０）、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）２Ｒ１０および−Ｃ１〜３アルキレン−（Ｒ１０）から選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい３〜１２員の複素環から選択され、Ｒ６は、Ｒ１２から独立して選択される１つまたは複数の追加の置換基によりさらに置換されていてもよい。Ｒ６は、置換されている、ピリジン、ピラジン、ピリミジン、ピリダジン、フラン、ピラン、オキサゾール、チアゾール、イミダゾール、ピラゾール、オキサジアゾール、オキサチアゾールおよびトリアゾールから選択することができ、Ｒ６は、Ｒ１２から独立して選択される１つまたは複数の追加の置換基によりさらに置換されていてもよい。一部の実施形態では、Ｒ６は、置換ピリジンであり、Ｒ６は、Ｒ１２から独立して選択される１つまたは複数の追加の置換基によりさらに置換されていてもよい。Ｒ６は、以下：
2021506827.tif 000020
の通り表すことができる。一部の実施形態では、Ｒ６は、置換ピリジンであり、Ｒ７は、−Ｃ１〜３アルキレン−ＮＨＣ（Ｏ）−Ｃ１〜３アルキレン−Ｒ１０である。ある種の実施形態では、Ｒ７は、−Ｃ１アルキレン−ＮＨＣ（Ｏ）−Ｃ１アルキレン−Ｒ１０である。ある種の実施形態では、Ｒ７は、−Ｃ１アルキレン−ＮＨＣ（Ｏ）−Ｃ１アルキレン−ＮＨ２である。一部の実施形態では、Ｒ６は、以下：
2021506827.tif 000021
から選択される。ある種の実施形態では、Ｒ６は、
2021506827.tif 000022
である。
【０１４６】
一部の実施形態では、Ｌ２は、−Ｃ（Ｏ）−および−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１０−から選択される。一部の実施形態では、Ｌ２は、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１０−から選択される。−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１０−のＲ１０は、水素およびＣ１〜６アルキルから選択することができる。例えば、Ｌ２は、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−とすることができる。一部の実施形態では、Ｌ２は、−Ｃ（Ｏ）−である。
【０１４７】
一部の実施形態では、Ｒ４は、−ＯＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１０および−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１０；Ｃ１〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニル、Ｃ２〜１０アルキニル［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）、−ＣＮ、Ｃ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環から独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］；ならびにＣ３〜１２炭素環および３〜１２員のもの［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）、−ＣＮ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニルおよびＣ２〜６アルキニルから独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］から選択される。一部の実施形態では、Ｒ４は、−ＯＲ１０および−Ｎ（Ｒ１０）２；ならびにＣ１〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニル、Ｃ２〜１０アルキニル、Ｃ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１０  −Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）、−ＣＮ、Ｃ１〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニルおよびＣ２〜１０アルキニルから選択される１つまたは複数の置換基により、出現毎に独立して置換されていてもよい］から選択される。ある種の実施形態では、Ｒ４は、−Ｎ（Ｒ１０）２である。−Ｎ（Ｒ１０）２のＲ１０は、置換されていてもよいＣ１〜６アルキルから出現毎に独立して選択されてもよい。一部の実施形態では、−Ｎ（Ｒ１０）２のＲ１０は、メチル、エチル、プロピルおよびブチルから出現毎に独立して選択され、これらのいずれも、置換されていてもよい。例えば、Ｒ４は、
2021506827.tif 000023
とすることができる。一部の実施形態では、−Ｌ２−Ｒ４は、
2021506827.tif 000024
である。
【０１４８】
一部の実施形態では、Ｒ１２は、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１０、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）および−ＣＮ；Ｃ１〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニル、Ｃ２〜１０アルキニル［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１０、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）、−ＣＮ、Ｃ３〜１０炭素環および３〜１０員の複素環から選択される１つまたは複数の置換基により出現毎に独立して置換されていてもよい］；ならびにＣ３〜１０炭素環および３〜１０員の複素環［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１０、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）、−ＣＮ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニルおよびＣ２〜６アルキニルから選択される１つまたは複数の置換基により、出現毎に独立して置換されていてもよい］から出現毎に独立して選択される。ある種の実施形態では、Ｒ１２は、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１０、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）および−ＣＮ；Ｃ１〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニル、Ｃ２〜１０アルキニル［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１０、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）、−ＣＮ、Ｃ３〜１０炭素環および３〜１０員の複素環から選択される１つまたは複数の置換基により、出現毎に独立して置換されていてもよい］から出現毎に独立して選択される。一部の実施形態では、本化合物は、
2021506827.tif 000025
2021506827.tif 000026
2021506827.tif 000027
2021506827.tif 000028
およびそれらのいずれか１つの塩から選択される。
【０１４９】
一部の態様では、本開示は、式（ＩＡ）の構造：
2021506827.tif 000029
または薬学的に許容されるその塩［式中、
2021506827.tif 000030
は、任意選択の二重結合を表し、
Ｌ１は、−Ｘ１−、−Ｘ２−Ｃ１〜６アルキレン−Ｘ２−Ｃ１〜６アルキレン−、−Ｘ２−Ｃ２〜６アルケニレン−Ｘ２−および−Ｘ２−Ｃ２〜６アルキニレン−Ｘ２−から選択され、これらはそれぞれ、アルキレン、アルケニレンまたはアルキニレン上で、１つまたは複数のＲ１２により置換されていてもよく、
Ｌ２は、−Ｘ２−、−Ｘ２−Ｃ１〜６アルキレン−Ｘ２−、−Ｘ２−Ｃ２〜６アルケニレン−Ｘ２−および−Ｘ２−Ｃ２〜６アルキニレン−Ｘ２−から選択され、これらはそれぞれ、アルキレン、アルケニレンまたはアルキニレン上で１つまたは複数のＲ１２により置換されていてもよく、
Ｘ１は、−Ｓ−＊、−Ｎ（Ｒ１０）−＊、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−＊、−ＯＣ（Ｏ）−＊、−ＯＣ（Ｏ）Ｏ−＊、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）−＊、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）＊、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）−＊、−ＣＲ１０２Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）−＊、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）−＊、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｏ−＊、−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）−＊、−Ｃ（ＮＲ１０）−＊、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（ＮＲ１０）−＊、−Ｃ（ＮＲ１０）Ｎ（Ｒ１０）−＊、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（ＮＲ１０）Ｎ（Ｒ１０）−＊、−Ｓ（Ｏ）２−＊、−ＯＳ（Ｏ）−＊、−Ｓ（Ｏ）Ｏ−＊、−Ｓ（Ｏ）、−ＯＳ（Ｏ）２−＊、−Ｓ（Ｏ）２Ｏ＊、−Ｎ（Ｒ１０）Ｓ（Ｏ）２−＊、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ１０）−＊、−Ｎ（Ｒ１０）Ｓ（Ｏ）−＊、−Ｓ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）−＊、−Ｎ（Ｒ１０）Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ１０）−＊および−Ｎ（Ｒ１０）Ｓ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）−＊から選択され、＊は、Ｘ１がＲ３に結合していることを表し、
Ｘ２は、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ１０）−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）−、−ＯＣ（Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）−、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）−、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）−、−Ｃ（ＮＲ１０）−、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（ＮＲ１０）−、−Ｃ（ＮＲ１０）Ｎ（Ｒ１０）−、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（ＮＲ１０）Ｎ（Ｒ１０）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−ＯＳ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）Ｏ−、−Ｓ（Ｏ）、−ＯＳ（Ｏ）２−、−Ｓ（Ｏ）２Ｏ、−Ｎ（Ｒ１０）Ｓ（Ｏ）２−、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ１０）−、−Ｎ（Ｒ１０）Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）−、−Ｎ（Ｒ１０）Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ１０）−および−Ｎ（Ｒ１０）Ｓ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）−から出現毎に独立して選択され、
Ｒ１およびＲ２は、水素；Ｃ１〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニルおよびＣ２〜１０アルキニル［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）および−ＣＮから独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］から独立して選択され、
Ｒ３は、置換されていてもよいＣ３〜１２炭素環および置換されていてもよい３〜１２員の複素環から選択され、Ｒ３上の置換基は、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）および−ＣＮ；Ｃ１〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニル、Ｃ２〜１０アルキニル［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）、−ＣＮ、Ｃ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環から独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］；ならびにＣ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環から出現毎に独立して選択され、Ｒ３におけるＣ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環はそれぞれ、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）、−ＣＮ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニルおよびＣ２〜６アルキニルから独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよく、
Ｒ４は、−ＯＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１０および−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１０；Ｃ１〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニル、Ｃ２〜１０アルキニル［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）、−ＣＮ、Ｃ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環から独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］；ならびにＣ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環から選択され、Ｒ４におけるＣ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環はそれぞれ、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）、−ＣＮ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニルおよびＣ２〜６アルキニルから独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよく、
Ｒ１０は、水素、−ＮＨ２、−Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ２Ｃ６Ｈ５；ならびにＣ１〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニル、Ｃ２〜１０アルキニル、Ｃ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＣＮ、−ＮＯ２、−ＮＨ２、＝Ｏ、＝Ｓ、−Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ２Ｃ６Ｈ５、−ＮＨＣ（Ｏ）ＯＣＨ２Ｃ６Ｈ５、Ｃ１〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニル、Ｃ２〜１０アルキニル、Ｃ３〜１２炭素環、３〜１２員の複素環およびハロアルキルから独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］から出現毎に独立して選択され、
Ｒ１２は、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１０、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）および−ＣＮ；Ｃ１〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニル、Ｃ２〜１０アルキニル［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１０、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）、−ＣＮ、Ｃ３〜１０炭素環および３〜１０員の複素環から独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］；ならびにＣ３〜１０炭素環および３〜１０員の複素環から出現毎に独立して選択され、Ｒ１２中のＣ３〜１０炭素環および３〜１０員の複素環はそれぞれ、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１０、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）、−ＣＮ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニルおよびＣ２〜６アルキニルから独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよく、
ベンゾアゼピンコア上の置換可能ないずれの炭素も、Ｒ１２から独立して選択される置換基によって置換されていてもよいか、または単一炭素原子上の２つの置換基が一緒になって、３〜７員の炭素環を形成する］によって表される化合物を提供する。一部の実施形態では、式（ＩＡ）の化合物は、式（ＩＢ）：
2021506827.tif 000031
または薬学的に許容されるその塩［式中、
Ｒ２０、Ｒ２１、Ｒ２２およびＲ２３は、水素、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）、−ＣＮ、Ｃ１〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニルおよびＣ２〜１０アルキニルから独立して選択され、
Ｒ２４およびＲ２５は、水素、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）、−ＣＮ、Ｃ１〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニルおよびＣ２〜１０アルキニルから独立して選択されるか、またはＲ２４およびＲ２５は一緒になって、置換されていてもよい飽和Ｃ３〜７炭素環を形成する］によって表される。
【０１５０】
一部の実施形態では、Ｒ２０、Ｒ２１、Ｒ２２およびＲ２３は、水素、ハロゲン、−ＯＨ、−ＮＯ２、−ＣＮおよびＣ１〜１０アルキルから独立して選択される。ある種の実施形態では、Ｒ２０、Ｒ２１、Ｒ２２およびＲ２３は、それぞれ水素である。
【０１５１】
一部の実施形態では、Ｒ２４およびＲ２５は、水素、ハロゲン、−ＯＨ、−ＮＯ２、−ＣＮおよびＣ１〜１０アルキルから独立して選択されるか、またはＲ２４およびＲ２５は一緒になって、置換されていてもよい飽和Ｃ３〜７炭素環を形成する。一部の実施形態では、Ｒ２４およびＲ２５は、それぞれ水素である。一部の実施形態では、Ｒ２４およびＲ２５は一緒になって、置換されていてもよい飽和Ｃ３〜５炭素環を形成する。
【０１５２】
一部の実施形態では、Ｒ１は水素である。一部の実施形態では、Ｒ２は水素である。
【０１５３】
一部の実施形態では、Ｌ１は、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）−＊、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ１０）−＊、−ＣＲ１０２Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）−＊および−Ｘ２−Ｃ１〜６アルキレン−Ｘ２−Ｃ１〜６アルキレン−から選択される。一部の実施形態では、Ｌ１は、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）−＊から選択される。ある種の実施形態では、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）−＊のＲ１０は、水素およびＣ１〜６アルキルから選択される。例えば、Ｌ１は、−ＮＨＣ（Ｏ）−＊とすることができる。一部の実施形態では、Ｌ１は、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ１０）−＊から選択される。ある種の実施形態では、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ１０）−＊のＲ１０は、水素およびＣ１〜６アルキルから選択される。例えば、Ｌ１は、−Ｓ（Ｏ）２ＮＨ−＊である。一部の実施形態では、Ｌ１は、−ＣＲ１０２Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）−＊である。ある種の実施形態では、Ｌ１は、−ＣＨ２Ｎ（Ｈ）Ｃ（Ｏ）−＊および−ＣＨ（ＣＨ３）Ｎ（Ｈ）Ｃ（Ｏ）−＊から選択される。
【０１５４】
一部の実施形態では、Ｒ３は、置換されていてもよいＣ３〜１２炭素環および置換されていてもよい３〜１２員の複素環から選択され、Ｒ３上の置換基は、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）および−ＣＮ；Ｃ１〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニル、Ｃ２〜１０アルキニル［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）、−ＣＮ、Ｃ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環から独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］；ならびにＣ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）、−ＣＮ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニルおよびＣ２〜６アルキニルから独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］から出現毎に独立して選択される。ある種の実施形態では、Ｒ３は、置換されていてもよいＣ３〜１２炭素環および置換されていてもよい３〜１２員の複素環から選択され、Ｒ３上の置換基は、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）および−ＣＮ；Ｃ１〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニル、Ｃ２〜１０アルキニル［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）、−ＣＮ、Ｃ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環から独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］から出現毎に独立して選択される。
【０１５５】
一部の実施形態では、Ｒ３は、置換されていてもよいアリールおよび置換されていてもよいヘテロアリールから選択される。一部の実施形態では、Ｒ３は、置換されていてもよいヘテロアリールである。Ｒ３は、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、−ＣＮ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニルおよびＣ２〜６アルキニルから独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されている、置換されていてもよいヘテロアリールとすることができる。ある種の実施形態では、Ｒ３は、置換されていてもよい６員のヘテロアリールから選択される。例えば、Ｒ３は、置換されていてもよいピリジンとすることができる。一部の実施形態では、Ｒ３は、置換されていてもよいアリールである。ある種の実施形態では、Ｒ３は、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、−ＣＮ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニルおよびＣ２〜６アルキニルから独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されている、置換されていてもよいアリールである。Ｒ３は、置換されていてもよいフェニルとすることができる。ある種の実施形態では、Ｒ３は、ピリジン、フェニル、テトラヒドロナフタレン、テトラヒドロキノリン、テトラヒドロイソキノリン、インダン、シクロプロピルベンゼン、シクロペンタピリジンおよびジヒドロベンゾオキサボロールから選択され、これらのいずれの１つも、置換されていてもよい。Ｒ３は、以下：
2021506827.tif 000032
から選択することができ、これらのいずれの１つも置換されていてもよい。例えば、Ｒ３は、
【０１５６】
2021506827.tif 000033
2021506827.tif 000034
から選択することができる。
【０１５７】
一部の実施形態では、Ｌ２は、−Ｃ（Ｏ）−および−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１０−から選択される。ある種の実施形態では、Ｌ２は、−Ｃ（Ｏ）−である。ある種の実施形態では、Ｌ２は、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１０−から選択される。−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１０−のＲ１０は、水素およびＣ１〜６アルキルから選択することができる。例えば、Ｌ２は、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−とすることができる。
【０１５８】
一部の実施形態では、Ｒ４は、−ＯＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１０および−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１０；Ｃ１〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニル、Ｃ２〜１０アルキニル［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）、−ＣＮ、Ｃ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環から独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］；ならびにＣ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）、−ＣＮ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニルおよびＣ２〜６アルキニルから独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］から選択される。
【０１５９】
一部の実施形態では、Ｒ４は、−ＯＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１０および−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１０；Ｃ１〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニル、Ｃ２〜１０アルキニル［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）、−ＣＮ、Ｃ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環から独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］から選択される。一部の実施形態では、Ｒ４は、−ＯＲ１０および−Ｎ（Ｒ１０）２；ならびにＣ１〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニル、Ｃ２〜１０アルキニル、Ｃ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）、−ＣＮ、Ｃ１〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニルおよびＣ２〜１０アルキニルから独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］から選択される。ある種の実施形態では、Ｒ４は、−Ｎ（Ｒ１０）２である。−Ｎ（Ｒ１０）２のＲ１０は、置換されていてもよいＣ１〜６アルキルから出現毎に独立して選択されてもよい。一部の実施形態では、−Ｎ（Ｒ１０）２のＲ１０は、メチル、エチル、プロピルおよびブチルから出現毎に独立して選択され、これらのいずれの１つも、置換されていてもよい。例えば、Ｒ４は、
2021506827.tif 000035
とすることができる。ある種の実施形態では、−Ｌ２−Ｒ４は、
2021506827.tif 000036
である。
【０１６０】
一部の実施形態では、Ｒ１２は、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１０、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）および−ＣＮ；Ｃ１〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニル、Ｃ２〜１０アルキニル［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１０、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）、−ＣＮ、Ｃ３〜１０炭素環および３〜１０員の複素環から独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］；ならびにＣ３〜１０炭素環および３〜１０員の複素環［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１０、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）、−ＣＮ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニルおよびＣ２〜６アルキニルから独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］から出現毎に独立して選択される。一部の実施形態では、Ｒ１２は、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１０、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）および−ＣＮ；Ｃ１〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニル、Ｃ２〜１０アルキニル［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１０、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）、−ＣＮ、Ｃ３〜１０炭素環および３〜１０員の複素環から独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］から出現毎に独立して選択される。
【０１６１】
一部の実施形態では、本化合物は、
2021506827.tif 000037
およびそれらのいずれか１つの塩から選択される。
【０１６２】
一部の態様では、本開示は、式（ＩＶＡ）の構造：
2021506827.tif 000038
または薬学的に許容されるその塩［式中、
2021506827.tif 000039
は、任意選択の二重結合を表し、
Ｌ１２は、−Ｘ３−、−Ｘ３−Ｃ１〜６アルキレン−Ｘ３−、−Ｘ３−Ｃ２〜６アルケニレン−Ｘ３−および−Ｘ３−Ｃ２〜６アルキニレン−Ｘ３−から選択され、これらはそれぞれ、アルキレン、アルケニレンまたはアルキニレン上で、Ｒ１２から独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよく、
Ｌ２２は、−Ｘ４−、−Ｘ４−Ｃ１〜６アルキレン−Ｘ４−、−Ｘ４−Ｃ２〜６アルケニレン−Ｘ４−および−Ｘ４−Ｃ２〜６アルキニレン−Ｘ４−から独立して選択され、これらはそれぞれ、アルキレン、アルケニレンまたはアルキニレン上で、Ｒ１０から独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよく、
Ｘ３およびＸ４は、結合、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ１０）−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）−、−ＯＣ（Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）−、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）−、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）−、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）−、−Ｃ（ＮＲ１０）−、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（ＮＲ１０）−、−Ｃ（ＮＲ１０）Ｎ（Ｒ１０）−、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（ＮＲ１０）Ｎ（Ｒ１０）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−ＯＳ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）Ｏ−、−Ｓ（Ｏ）−、−ＯＳ（Ｏ）２−、−Ｓ（Ｏ）２Ｏ−、−Ｎ（Ｒ１０）Ｓ（Ｏ）２−、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ１０）−、−Ｎ（Ｒ１０）Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）−、−Ｎ（Ｒ１０）Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ１０）−および−Ｎ（Ｒ１０）Ｓ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）−から出現毎に独立して選択され、
Ｒ１およびＲ２は、Ｌ３および水素；ならびにＣ１〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニルおよびＣ２〜１０アルキニル［これらはそれぞれ、Ｌ３、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）および−ＣＮから独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］から独立して選択され、
Ｒ４およびＲ８は、−ＯＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１０および−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１０；Ｃ１〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニル、Ｃ２〜１０アルキニル［これらはそれぞれ、Ｌ３、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）、−ＣＮ、Ｃ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環から独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］；ならびにＣ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環から独立して選択され、Ｒ４およびＲ８におけるＣ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環はそれぞれ、Ｌ３、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）、−ＣＮ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニルおよびＣ２〜６アルキニルから独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよく、
Ｒ１０は、Ｌ３、水素、−ＮＨ２、−Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ２Ｃ６Ｈ５；ならびにＣ１〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニル、Ｃ２〜１０アルキニル、Ｃ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＣＮ、−ＮＯ２、−ＮＨ２、＝Ｏ、＝Ｓ、−Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ２Ｃ６Ｈ５、−ＮＨＣ（Ｏ）ＯＣＨ２Ｃ６Ｈ５、Ｃ１〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニル、Ｃ２〜１０アルキニル、Ｃ３〜１２炭素環、３〜１２員の複素環およびハロアルキルから独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］から出現毎に独立して選択され、
Ｌ３は、リンカー部分であり、Ｒ１、Ｒ２およびＲ１０のうちの少なくとも１つは、Ｌ３であるか、またはＲ１、Ｒ２、Ｒ４、Ｒ８、Ｘ３およびＸ４から選択される基上の少なくとも１つの置換基は、Ｌ３であり、
Ｒ１２は、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１０、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）および−ＣＮ；Ｃ１〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニル、Ｃ２〜１０アルキニル［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１０、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）、−ＣＮ、Ｃ３〜１０炭素環および３〜１０員の複素環から独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］；ならびにＣ３〜１０炭素環および３〜１０員の複素環から出現毎に独立して選択され、Ｒ１２中のＣ３〜１０炭素環および３〜１０員の複素環はそれぞれ、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１０、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）、−ＣＮ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニル、Ｃ２〜６アルキニルから独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよく、
ベンゾアゼピンコア上の置換可能ないずれの炭素も、Ｒ１２から独立して選択される置換基によって置換されていてもよいか、または単一炭素原子上の２つの置換基が一緒になって、３〜７員の炭素環を形成する］によって表される化合物を提供する。一部の実施形態では、式（ＩＶＡ）の化合物は、式（ＩＶＢ）：
2021506827.tif 000040
または薬学的に許容されるその塩［式中、
Ｒ２０、Ｒ２１、Ｒ２２およびＲ２３は、水素、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）、−ＣＮ、Ｃ１〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニルおよびＣ２〜１０アルキニルから独立して選択され、
Ｒ２４およびＲ２５は、水素、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）、−ＣＮ、Ｃ１〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニルおよびＣ２〜１０アルキニルから独立して選択されるか、またはＲ２４およびＲ２５は一緒になって、置換されていてもよい飽和Ｃ３〜７炭素環を形成する］によって表される。
【０１６３】
一部の実施形態では、Ｒ１は、Ｌ３である。一部の実施形態では、Ｒ２は、Ｌ３である。
【０１６４】
一部の実施形態では、Ｌ１２は、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）−である。一部の実施形態では、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）−のＲ１０は、水素、Ｃ１〜６アルキルおよびＬ３から選択される。例えば、Ｌ１２は、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−とすることができる。
【０１６５】
一部の実施形態では、Ｒ８は、置換されていてもよい５員または６員のヘテロアリールである。Ｒ８は、Ｌ３により置換されている、置換されていてもよい５員または６員のヘテロアリールとすることができる。一部の実施形態では、Ｒ８は、Ｌ３により置換されている、置換されていてもよいピリジンである。
【０１６６】
一部の実施形態では、Ｌ２２は、−Ｃ（Ｏ）−および−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１０−から選択される。ある種の実施形態では、Ｌ２２は、−Ｃ（Ｏ）−である。ある種の実施形態では、Ｌ２２は、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１０−である。−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１０−のＲ１０は、水素、Ｃ１〜６アルキルおよび−Ｌ３から選択することができる。例えば、Ｌ２２は、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−とすることができる。
【０１６７】
一部の実施形態では、Ｒ４は、−ＯＲ１０および−Ｎ（Ｒ１０）２；ならびにＣ１〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニル、Ｃ２〜１０アルキニル、Ｃ３〜１２炭素環、３〜１２員の複素環、アリールおよびヘテロアリール［これらはそれぞれ、Ｌ３、ハロゲン、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ１０）、−ＣＮ、Ｃ１〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニルおよびＣ２〜１０アルキニルから独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］から選択される。一部の実施形態では、Ｒ４は、−Ｎ（Ｒ１０）２であり、−Ｎ（Ｒ１０）２のＲ１０は、Ｌ３および水素から選択され、−Ｎ（Ｒ１０）２の少なくとも１つのＲ１０は、Ｌ３である。
【０１６８】
一部の実施形態では、本化合物は、リンカーであるＬ３にさらに共有結合的に結合している。一部の実施形態では、Ｌ３は、非開裂性リンカーである。一部の実施形態では、Ｌ３は、開裂性リンカーである。Ｌ３は、リソソーム酵素により開裂可能とすることができる。一部の実施形態では、本化合物は、抗体コンストラクトに共有結合的に結合している。一部の実施形態では、本化合物は、場合によりリンカーを介して、標的指向性部分に共有結合的に結合している。一部の実施形態では、標的指向性部分または抗体コンストラクトは、腫瘍抗原に特異的に結合する。一部の実施形態では、抗体コンストラクトまたは標的指向性部分は、標的結合ドメインをさらに含む。
【０１６９】
一部の実施形態では、Ｌ３は、以下の式
2021506827.tif 000041
によって表され、式中、Ｌ４は、ペプチドのＣ末端を表し、Ｌ５は、結合、アルキレンおよびヘテロアルキレンから選択され、Ｌ５は、Ｒ３２から独立して選択される１つまたは複数の基により置換されていてもよく、ＲＸは、反応性部分であり、
Ｒ３２は、ハロゲン、−ＯＨ、−ＣＮ、−Ｏ−アルキル、−ＳＨ、＝Ｏ、＝Ｓ、−ＮＨ２、−ＮＯ２；およびＣ１〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニル、Ｃ２〜１０アルキニル［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＨ、−ＣＮ、−Ｏ−アルキル、−ＳＨ、＝Ｏ、＝Ｓ、−ＮＨ２、−ＮＯ２から独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］から出現毎に独立して選択される。一部の実施形態では、ＲＸは、脱離基を含む。一部の実施形態では、ＲＸは、マレイミドを含む。一部の実施形態では、Ｌ３は、抗体コンストラクトにさらに共有結合的に結合している。一部の実施形態では、本抗体コンストラクトは、腫瘍抗原を指向する。一部の実施形態では、本抗体コンストラクトは、標的結合ドメインをさらに含む。
【０１７０】
一部の実施形態では、Ｌ３は、以下の式
2021506827.tif 000042
によって表され、式中、Ｌ４は、ペプチドのＣ末端を表し、Ｌ５は、結合、アルキレンおよびヘテロアルキレンから選択され、Ｌ５は、Ｒ３２から独立して選択される１つまたは複数の基により置換されていてもよく、ＲＸ＊は、結合、コハク酸イミド部分、または抗体コンストラクトの残基に結合している加水分解されたコハク酸イミド部分を含み、ＲＸ＊上の
2021506827.tif 000043
は、抗体コンストラクトの残基への結合点を表し、
Ｒ３２は、ハロゲン、−ＯＨ、−ＣＮ、−Ｏ−アルキル、−ＳＨ、＝Ｏ、＝Ｓ、−ＮＨ２、−ＮＯ２；およびＣ１〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニル、Ｃ２〜１０アルキニル［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＨ、−ＣＮ、−Ｏ−アルキル、−ＳＨ、＝Ｏ、＝Ｓ、−ＮＨ２、−ＮＯ２から独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］から出現毎に独立して選択される。一部の実施形態では、Ｌ３のペプチドは、Ｖａｌ−ＣｉｔまたはＶａｌ−Ａｌａを含む。
一部の態様では、本開示は、以下：
2021506827.tif 000044
2021506827.tif 000045
2021506827.tif 000046
2021506827.tif 000047
から選択される化合物または塩、およびそれらのいずれか１つの塩を提供する。
【０１７１】
一部の態様では、本開示は、以下：
2021506827.tif 000048
2021506827.tif 000049
2021506827.tif 000050
2021506827.tif 000051
から選択される化合物または塩、およびそれらのいずれか１つの塩［式中、ＲＸ＊は、結合、コハク酸イミド部分、または抗体コンストラクトの残基に結合している加水分解されたコハク酸イミド部分であり、ＲＸ＊上の
2021506827.tif 000052
は、抗体コンストラクトの残基への結合点を表す］を提供する。
【０１７２】
一部の実施形態では、Ｌ３は、以下の式
2021506827.tif 000053
によって表され、式中、ＲＸは、反応性部分を含み、ｎ＝０〜９である。一部の実施形態では、ＲＸは、脱離基を含む。一部の実施形態では、ＲＸは、マレイミドを含む。一部の実施形態では、Ｌ３は、以下：
2021506827.tif 000054
の通り表され、式中、ＲＸ＊は、結合、コハク酸イミド部分、または抗体コンストラクトの残基に結合している加水分解されたコハク酸イミド部分を含み、ＲＸ＊上の
2021506827.tif 000055
は、抗体コンストラクトの残基への結合点を表し、ｎ＝０〜９である。
【０１７３】
一部の態様では、本開示は、以下：
2021506827.tif 000056
から選択される化合物または塩、およびそれらのいずれか１つの塩を提供する。
【０１７４】
一部の態様では、本開示は、以下：
2021506827.tif 000057
から選択される化合物または塩、およびそれらのいずれか１つの塩［式中、ＲＸ＊は、結合、コハク酸イミド部分、または抗体コンストラクトの残基に結合している加水分解されたコハク酸イミド部分を含み、ＲＸ＊上の
2021506827.tif 000058
は、抗体コンストラクトの残基への結合点を表す］を提供する。
【０１７５】
一部の実施形態では、ＲＸ＊は、スクシンアミド部分であり、抗体コンストラクトのシステイン残基に結合している。一部の実施形態では、ＲＸ＊は、加水分解されたスクシンアミド部分であり、抗体コンストラクトのシステイン残基に結合している。
【０１７６】
一部の態様では、本開示は、式：
2021506827.tif 000059
によって表されるコンジュゲートであって、抗体が、抗体コンストラクトであり、Ｄが、本明細書において開示されている分類Ａの化合物または塩であり、Ｌ３が、リンカー部分である、コンジュゲートを提供する。
【０１７７】
一部の態様では、本開示は、式：
2021506827.tif 000060
によって表されるコンジュゲートであって、抗体が、抗体コンストラクトであり、Ｄ−Ｌ３が、本明細書において開示されている分類Ａの化合物または塩である、コンジュゲートを提供する。
一部の態様では、本開示は、本明細書において開示されているコンジュゲート、および少なくとも１種の薬学的に許容される添加物を含む薬学的組成物を提供する。
【０１７８】
一部の実施形態では、コンジュゲートの平均ＤＡＲは、約２〜約８、または約１〜約３、または約３〜約５である。
【０１７９】
分類Ｂの化合物であるＴＬＲ７アゴニスト
一部の態様では、本開示は、式（ＩＡ）の構造：
2021506827.tif 000061
またはその塩［式中、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５は、水素；ならびにＣ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニルおよびＣ２〜６アルキニル［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＲ２０、−ＳＲ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｓ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ２０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ２０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ２０）および−ＣＮから独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］から独立して選択されるか、またはＲ３およびＲ１１は一緒になって、ハロゲン、−ＯＲ２０、−ＳＲ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｓ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ２０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ２０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ２０）および−ＣＮから独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい５〜１０員の複素環を形成し、
Ｒ６は、ハロゲン、−ＯＲ２０、−Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ２０、−Ｓ（Ｏ）Ｒ２０および−Ｓ（Ｏ）２Ｒ２０；ならびにＣ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニル、Ｃ２〜６アルキニル［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＲ２０、−ＳＲ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｓ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ２０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ２０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ２０）および−ＣＮから独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］から選択され、
Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９およびＲ１０は、水素およびハロゲン；ならびにＣ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニルおよびＣ２〜６アルキニル［これらはそれぞれ、ハロゲンから独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］から出現毎に独立して選択され、
Ｒ１１およびＲ１２は、水素、ハロゲン、−ＯＲ２０、−ＳＲ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｓ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ２０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ２０、−ＮＯ２および−ＣＮ；ならびにＣ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニルおよびＣ２〜６アルキニル［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＲ２０、−ＳＲ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｓ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ２０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ２０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ２０）、−ＣＮ、Ｃ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環から独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］から独立して選択されるか、またはＲ１１およびＲ１２は、一緒になって、ハロゲン、−ＯＲ２０、−ＳＲ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｓ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ２０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ２０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ２０）および−ＣＮから独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよいＣ３〜６炭素環を形成し、
Ｒ１３およびＲ１４は、水素、ハロゲン、−ＯＲ２０、−ＳＲ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｓ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ２０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ２０、−ＮＯ２および−ＣＮ；Ｃ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニルおよびＣ２〜６アルキニル［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＲ２０、−ＳＲ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｓ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ２０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ２０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ２０）、−ＣＮ、Ｃ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環から独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］；ならびにＣ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＲ２０、−ＳＲ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｓ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ２０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ２０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ２０）、−ＣＮ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニルおよびＣ２〜６アルキニルから独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］から出現毎に独立して選択され、
Ｒ１５は、ハロゲン、−ＯＲ２０、−ＳＲ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｓ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ２０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ２０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ２０）、−ＣＮ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニル、Ｃ２〜６アルキニル、Ｃ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、−ＮＨ２、＝Ｏ、＝Ｓ、−Ｃ１〜６アルキル、−Ｃ１〜６ハロアルキル、−Ｏ−Ｃ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニル、Ｃ２〜６アルキニル、Ｃ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環から独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］から出現毎に独立して選択され、
Ｒ１６は、水素；ならびにＣ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニル、Ｃ２〜６アルキニル、Ｃ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、−ＮＨ２、＝Ｏ、＝Ｓ、Ｃ１〜６アルキル、−Ｃ１〜６ハロアルキル、−Ｏ−Ｃ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニル、Ｃ２〜６アルキニル、Ｃ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環から独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］から選択され、
Ｒ２０は、水素；ならびにＣ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニル、Ｃ２〜６アルキニル、Ｃ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、−ＮＨ２、＝Ｏ、＝Ｓ、−Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ２Ｃ６Ｈ５、−ＮＨＣ（Ｏ）ＯＣＨ２Ｃ６Ｈ５、Ｃ１〜６アルキル、−Ｃ１〜６ハロアルキル、−Ｏ−Ｃ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニル、Ｃ２〜６アルキニル、Ｃ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環から独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］から出現毎に独立して選択され、
Ｘ１は、Ｏ、ＳまたはＮＲ１６であり、
Ｘ２は、Ｃ（Ｏ）またはＳ（Ｏ）２であり、
ｎは、１、２または３であり、
ｘは、１、２または３であり、
ｗは、０、１、２、３または４であり、
ｚは、０、１または２である］
によって表される化合物を提供する。
【０１８０】
ある種の実施形態では、式（ＩＡ）の化合物に関すると、Ｘ１はＯである。ある種の実施形態では、式（ＩＡ）の化合物に関すると、ｎは２である。ある種の実施形態では、式（ＩＡ）の化合物に関すると、ｘは２である。ある種の実施形態では、式（ＩＡ）の化合物に関すると、ｚは０である。ある種の実施形態では、式（ＩＡ）の化合物に関すると、ｚは１である。
【０１８１】
ある種の実施形態では、式（ＩＡ）の化合物は、式（ＩＢ）：
2021506827.tif 000062
またはその塩［式中、
Ｒ７’、Ｒ７”、Ｒ８’、Ｒ８”、Ｒ９’、Ｒ９”、Ｒ１０’およびＲ１０”は、水素およびハロゲン；ならびにＣ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニルおよびＣ２〜６アルキニル［これらはそれぞれ、ハロゲンから独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］から出現毎に独立して選択される］である。
【０１８２】
ある種の実施形態では、式（ＩＡ）の化合物は、式（ＩＣ）：
2021506827.tif 000063
またはその塩［式中、
Ｒ７’、Ｒ７”、Ｒ８’、Ｒ８”、Ｒ９’、Ｒ９”、Ｒ１０’およびＲ１０”は、水素およびハロゲン；ならびにＣ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニルおよびＣ２〜６アルキニル［これらはそれぞれ、ハロゲンから独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］から出現毎に独立して選択される］によって表される。
【０１８３】
ある種の実施形態では、式（ＩＡ）、（ＩＢ）もしくは（ＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩に関すると、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５は、水素；およびＣ１〜６アルキル［ハロゲン、−ＯＲ２０、−ＳＲ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｓ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ２０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ２０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ２０）および−ＣＮから独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］から独立して選択される。
【０１８４】
ある種の実施形態では、式（ＩＡ）、（ＩＢ）もしくは（ＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩に関すると、Ｒ１およびＲ２は、水素およびＣ１〜６アルキルから独立して選択される。ある種の実施形態では、式（ＩＡ）、（ＩＢ）もしくは（ＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩に関すると、Ｒ１およびＲ２は、それぞれ水素である。
【０１８５】
ある種の実施形態では、式（ＩＡ）、（ＩＢ）もしくは（ＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩に関すると、Ｒ３は、水素、および１つまたは複数のハロゲンにより置換されていてもよいＣ１〜６アルキルから選択される。
【０１８６】
ある種の実施形態では、式（ＩＡ）、（ＩＢ）もしくは（ＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩に関すると、Ｒ３は、水素である。
【０１８７】
ある種の実施形態では、式（ＩＡ）、（ＩＢ）もしくは（ＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩に関すると、Ｒ４は、水素、および１つまたは複数のハロゲンにより置換されていてもよいＣ１〜６アルキルから選択される。
【０１８８】
ある種の実施形態では、式（ＩＡ）、（ＩＢ）もしくは（ＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩に関すると、Ｒ４は、水素である。
【０１８９】
ある種の実施形態では、式（ＩＡ）、（ＩＢ）もしくは（ＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩に関すると、Ｒ５は、水素およびＣ１〜６アルキル［ハロゲン、−ＯＲ２０、−ＳＲ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｓ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ２０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ２０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ２０）および−ＣＮから独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］から選択される。ある種の実施形態では、式（ＩＡ）、（ＩＢ）もしくは（ＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩に関すると、Ｒ５は、水素である。
【０１９０】
ある種の実施形態では、式（ＩＡ）、（ＩＢ）もしくは（ＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩に関すると、Ｒ６は、ハロゲン、−ＯＲ２０および−Ｎ（Ｒ２０）２；ならびにＣ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニル、Ｃ２〜６アルキニル［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＲ２０、−ＳＲ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｓ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ２０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ２０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ２０）および−ＣＮから独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］から選択され、
Ｒ２０は、水素；ならびにＣ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニル、Ｃ２〜６アルキニル、Ｃ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、−ＮＨ２、＝Ｏ、＝Ｓ、−Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ２Ｃ６Ｈ５、−ＮＨＣ（Ｏ）ＯＣＨ２Ｃ６Ｈ５、Ｃ１〜６アルキル、−Ｃ１〜６ハロアルキル、−Ｏ−Ｃ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニル、Ｃ２〜６アルキニル、Ｃ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環から独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］から出現毎に独立して選択される。
【０１９１】
ある種の実施形態では、式（ＩＡ）、（ＩＢ）もしくは（ＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩に関すると、Ｒ６は、ハロゲン、−ＯＲ２０、−ＳＲ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｓ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ２０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ２０から独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよいＣ１〜６アルキルであり、
Ｒ２０は、水素；Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、−ＮＨ２、＝Ｏ、＝Ｓ、−Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ２Ｃ６Ｈ５、−ＮＨＣ（Ｏ）ＯＣＨ２Ｃ６Ｈ５、Ｃ１〜６アルキル、−Ｃ１〜６ハロアルキル、−Ｏ−Ｃ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニル、Ｃ２〜６アルキニル、Ｃ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環から独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］から出現毎に独立して選択される。
【０１９２】
ある種の実施形態では、式（ＩＡ）、（ＩＢ）もしくは（ＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩に関すると、Ｒ６は、−ＯＲ２０により置換されているＣ１〜６アルキルであり、
Ｒ２０は、水素、ならびにハロゲン、−ＯＨおよび−ＮＨ２から独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよいＣ１〜６アルキルから選択される。
【０１９３】
ある種の実施形態では、式（ＩＡ）、（ＩＢ）もしくは（ＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩に関すると、Ｒ７’、Ｒ７”、Ｒ８’、Ｒ８”、Ｒ９’、Ｒ９”、Ｒ１０’およびＲ１０”は、水素およびハロゲン；ならびにＣ１〜６アルキル［ハロゲンから独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］から出現毎に独立して選択される。
【０１９４】
ある種の実施形態では、式（ＩＢ）もしくは（ＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩に関すると、Ｒ７’およびＲ８’は、それぞれ水素である。ある種の実施形態では、式（ＩＢ）もしくは（ＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩に関すると、Ｒ７”およびＲ８”は、それぞれＣ１〜６アルキルである。ある種の実施形態では、式（ＩＢ）もしくは（ＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩に関すると、Ｒ７”およびＲ８”は、それぞれメチルである。
【０１９５】
ある種の実施形態では、式（ＩＢ）もしくは（ＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩に関すると、Ｒ９’、Ｒ９”、Ｒ１０’およびＲ１０”は、水素およびＣ１〜６アルキルから出現毎に独立して選択される。
【０１９６】
ある種の実施形態では、式（ＩＢ）もしくは（ＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩に関すると、Ｒ９’、Ｒ９”、Ｒ１０’およびＲ１０”は、それぞれ水素である。
【０１９７】
ある種の実施形態では、式（ＩＡ）、（ＩＢ）もしくは（ＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩に関すると、Ｒ１１およびＲ１２は、水素、ハロゲン、−ＯＲ２０、−ＳＲ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ２０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ２０；およびＣ１〜６アルキル［ハロゲン、−ＯＲ２０、−ＳＲ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ２０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ２０、Ｃ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環から独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］から独立して選択される。
【０１９８】
ある種の実施形態では、式（ＩＡ）もしくは（ＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩に関すると、Ｒ１３およびＲ１４は、水素、ハロゲン、−ＯＲ２０、−ＳＲ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ２０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ２０；およびＣ１〜６アルキル［ハロゲン、−ＯＲ２０、−ＳＲ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ２０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ２０、Ｃ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環から独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］から独立して選択される。
【０１９９】
ある種の実施形態では、式（ＩＡ）、（ＩＢ）もしくは（ＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩に関すると、Ｒ３およびＲ１１は一緒になって、置換されていてもよい５〜６員の複素環を形成する。
【０２００】
ある種の実施形態では、式（ＩＡ）、（ＩＢ）もしくは（ＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩に関すると、Ｒ１１およびＲ１２は一緒になって、置換されていてもよいＣ３〜６炭素環を形成する。
【０２０１】
ある種の実施形態では、式（ＩＡ）、（ＩＢ）もしくは（ＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩に関すると、Ｘ２は、Ｃ（Ｏ）である。
【０２０２】
ある種の実施形態では、本化合物は、
2021506827.tif 000064
またはそれらのいずれか１つの塩によって表される。
【０２０３】
ある種の態様では、本開示は、式（ＩＡ）、（ＩＢ）もしくは（ＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩、および薬学的に許容される添加物の薬学的組成物を提供する。
【０２０４】
ある種の実施形態では、式（ＩＡ）、（ＩＢ）もしくは（ＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩に関すると、これらの化合物または塩は、リンカーＬ３にさらに共有結合的に結合している。
【０２０５】
ある種の態様では、本開示は、式（ＩＩＡ）：
2021506827.tif 000065
またはその塩［式中、
Ｒ２およびＲ４は、水素；ならびにＣ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニルおよびＣ２〜６アルキニル［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＲ２０、−ＳＲ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｓ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ２０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ２０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ２０）および−ＣＮから独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］から独立して選択され、
Ｒ２１、Ｒ２３およびＲ２５は、水素；Ｃ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニルおよびＣ２〜６アルキニル［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＲ２０、−ＳＲ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｓ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ２０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ２０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ２０）および−ＣＮから独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］；ならびにＬ３から独立して選択されるか、またはＲ２３およびＲ１１は、一緒になって、ハロゲン、−ＯＲ２０、−ＳＲ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｓ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ２０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ２０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ２０）および−ＣＮから独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい５〜１０員の複素環を形成し、Ｒ２１、Ｒ２３およびＲ２５のうちの１つは、Ｌ３であり、
Ｒ６は、ハロゲン、−ＯＲ２０、−Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ２０、−Ｓ（Ｏ）Ｒ２０および−Ｓ（Ｏ）２Ｒ２０；ならびにＣ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニル、Ｃ２〜６アルキニル［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＲ２０、−ＳＲ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｓ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ２０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ２０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ２０）および−ＣＮから独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］から選択され、
Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９およびＲ１０は、水素およびハロゲン；ならびにＣ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニルおよびＣ２〜６アルキニル［これらはそれぞれ、ハロゲンから独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］から出現毎に独立して選択され、
Ｒ１１およびＲ１２は、水素、ハロゲン、−ＯＲ２０、−ＳＲ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｓ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ２０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ２０、−ＮＯ２および−ＣＮ；ならびにＣ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニルおよびＣ２〜６アルキニル［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＲ２０、−ＳＲ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｓ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ２０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ２０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ２０）、−ＣＮ、Ｃ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環から独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］から独立して選択されるか、またはＲ１１およびＲ１２は、一緒になって、ハロゲン、−ＯＲ２０、−ＳＲ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｓ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ２０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ２０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ２０）および−ＣＮから独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよいＣ３〜６炭素環を形成し、
Ｒ１３およびＲ１４は、水素、ハロゲン、−ＯＲ２０、−ＳＲ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｓ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ２０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ２０、−ＮＯ２、−ＣＮ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニルおよびＣ２〜６アルキニル［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＲ２０、−ＳＲ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｓ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ２０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ２０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ２０）、−ＣＮ、Ｃ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環から独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］；ならびにＣ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＲ２０、−ＳＲ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｓ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ２０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ２０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ２０）、−ＣＮ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニルおよびＣ２〜６アルキニルから独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］から出現毎に独立して選択され、
Ｒ１５は、ハロゲン、−ＯＲ２０、−ＳＲ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｓ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ２０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ２０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ２０）、−ＣＮ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニルおよびＣ２〜６アルキニル、Ｃ３〜１２炭素環ならびに３〜１２員の複素環［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、−ＮＨ２、＝Ｏ、＝Ｓ、−Ｃ１〜６アルキル、−Ｃ１〜６ハロアルキル、−Ｏ−Ｃ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニル、Ｃ２〜６アルキニル、Ｃ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環から独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］から出現毎に独立して選択され、
Ｒ１６は、水素；ならびにＣ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニル、Ｃ２〜６アルキニル、Ｃ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、−ＮＨ２、＝Ｏ、＝Ｓ、Ｃ１〜６アルキル、−Ｃ１〜６ハロアルキル、−Ｏ−Ｃ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニル、Ｃ２〜６アルキニル、Ｃ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環から独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］から選択され、
Ｒ２０は、水素；Ｃ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニル、Ｃ２〜６アルキニル、Ｃ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、−ＮＨ２、＝Ｏ、＝Ｓ、−Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ２Ｃ６Ｈ５、−ＮＨＣ（Ｏ）ＯＣＨ２Ｃ６Ｈ５、Ｃ１〜６アルキル、−Ｃ１〜６ハロアルキル、−Ｏ−Ｃ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニル、Ｃ２〜６アルキニル、Ｃ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環から独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］から出現毎に独立して選択され、
Ｌ３は、リンカーであり、
Ｘ１は、Ｏ、ＳまたはＮＲ１６であり、
Ｘ２は、Ｃ（Ｏ）またはＳ（Ｏ）２であり、
ｎは、１、２または３であり、
ｘは、１、２または３であり、
ｗは、０、１、２、３または４であり、
ｚは、０、１または２である］
によって表される化合物を提供する。
【０２０６】
ある種の実施形態では、式（ＩＩＡ）の化合物または塩に関すると、Ｘ１はＯである。ある種の実施形態では、式（ＩＩＡ）の化合物または塩に関すると、ｎは２である。ある種の実施形態では、式（ＩＩＡ）の化合物または塩に関すると、ｘは２である。ある種の実施形態では、式（ＩＩＡ）の化合物または塩に関すると、ｚは０である。ある種の実施形態では、式（ＩＩＡ）の化合物または塩に関すると、ｚは１である。
【０２０７】
ある種の実施形態では、式（ＩＩＡ）の化合物は、式（ＩＩＢ）または（ＩＩＣ）：
2021506827.tif 000066
またはその塩［式中、
Ｒ７’、Ｒ７”、Ｒ８’、Ｒ８”、Ｒ９’、Ｒ９”、Ｒ１０’およびＲ１０”は、水素およびハロゲン；ならびにＣ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニルおよびＣ２〜６アルキニル［これらはそれぞれ、ハロゲンから独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］から出現毎に独立して選択される］
によって表される。
【０２０８】
ある種の実施形態では、式（ＩＩＡ）、（ＩＩＢ）もしくは（ＩＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩に関すると、Ｒ２およびＲ４は、水素およびＣ１〜６アルキル［ハロゲン、−ＯＲ２０、−ＳＲ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｓ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ２０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ２０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ２０）および−ＣＮから独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］から独立して選択される。
【０２０９】
ある種の実施形態では、式（ＩＩＡ）、（ＩＩＢ）もしくは（ＩＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩に関すると、Ｒ２およびＲ４は、水素およびＣ１〜６アルキルから独立して選択される。ある種の実施形態では、式（ＩＩＡ）、（ＩＩＢ）もしくは（ＩＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩に関すると、Ｒ２およびＲ４はそれぞれ、水素である。
【０２１０】
ある種の実施形態では、式（ＩＩＡ）、（ＩＩＢ）もしくは（ＩＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩に関すると、Ｒ２３は、水素、および１つまたは複数のハロゲンにより置換されていてもよいＣ１〜６アルキルから選択される。ある種の実施形態では、式（ＩＩＡ）、（ＩＩＢ）もしくは（ＩＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩に関すると、Ｒ２３は、水素である。
【０２１１】
ある種の実施形態では、式（ＩＩＡ）、（ＩＩＢ）もしくは（ＩＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩に関すると、Ｒ２１は、水素、および１つまたは複数のハロゲンにより置換されていてもよいＣ１〜６アルキルから選択される。ある種の実施形態では、式（ＩＩＡ）、（ＩＩＢ）もしくは（ＩＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩に関すると、Ｒ２１は、水素である。
【０２１２】
ある種の実施形態では、式（ＩＩＡ）、（ＩＩＢ）もしくは（ＩＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩に関すると、Ｒ２１は、Ｌ３である。
【０２１３】
ある種の実施形態では、式（ＩＩＡ）、（ＩＩＢ）もしくは（ＩＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩に関すると、Ｒ２５は、水素およびＣ１〜６アルキル［ハロゲン、−ＯＲ２０、−ＳＲ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｓ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ２０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ２０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ２０）および−ＣＮから独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］から選択される。ある種の実施形態では、式（ＩＩＡ）、（ＩＩＢ）もしくは（ＩＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩に関すると、Ｒ２５は、水素である。
【０２１４】
ある種の実施形態では、式（ＩＩＡ）、（ＩＩＢ）もしくは（ＩＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩に関すると、Ｒ２５は、Ｌ３である。
【０２１５】
ある種の実施形態では、式（ＩＩＡ）、（ＩＩＢ）もしくは（ＩＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩に関すると、Ｒ６は、ハロゲン、−ＯＲ２０および−Ｎ（Ｒ２０）２；ならびにＣ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニル、Ｃ２〜６アルキニル［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＲ２０、−ＳＲ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｓ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ２０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ２０、−ＮＯ２、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ２０）および−ＣＮから独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］から選択され、
Ｒ２０は、水素；ならびにＣ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニル、Ｃ２〜６アルキニル、Ｃ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、−ＮＨ２、＝Ｏ、＝Ｓ、−Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ２Ｃ６Ｈ５、−ＮＨＣ（Ｏ）ＯＣＨ２Ｃ６Ｈ５、Ｃ１〜６アルキル、−Ｃ１〜６ハロアルキル、−Ｏ−Ｃ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニル、Ｃ２〜６アルキニル、Ｃ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環から独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］から出現毎に独立して選択される。
【０２１６】
ある種の実施形態では、式（ＩＩＡ）、（ＩＩＢ）もしくは（ＩＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩に関すると、Ｒ６は、ハロゲン、−ＯＲ２０、−ＳＲ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｓ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ２０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ２０から独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよいＣ１〜６アルキルであり、
Ｒ２０は、水素、−ＮＨ２、−Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ２Ｃ６Ｈ５；Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、−ＮＨ２、＝Ｏ、＝Ｓ、−Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ２Ｃ６Ｈ５、−ＮＨＣ（Ｏ）ＯＣＨ２Ｃ６Ｈ５、Ｃ１〜６アルキル、−Ｃ１〜６ハロアルキル、−Ｏ−Ｃ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニル、Ｃ２〜６アルキニル、Ｃ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環から独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］から出現毎に独立して選択される。
【０２１７】
ある種の実施形態では、式（ＩＩＡ）、（ＩＩＢ）もしくは（ＩＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩に関すると、Ｒ６は、−ＯＲ２０により置換されているＣ１〜６アルキルであり、
Ｒ２０は、水素、ならびにハロゲン、−ＯＨおよび−ＮＨ２から独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよいＣ１〜６アルキルから選択される。
【０２１８】
ある種の実施形態では、式（ＩＩＢ）もしくは（ＩＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩に関すると、Ｒ７’、Ｒ７”、Ｒ８’、Ｒ８”、Ｒ９’、Ｒ９”、Ｒ１０’およびＲ１０”は、水素およびハロゲン；ならびにＣ１〜６アルキル［ハロゲンから独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］から出現毎に独立して選択される。
【０２１９】
ある種の実施形態では、式（ＩＩＢ）もしくは（ＩＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩に関すると、Ｒ７’およびＲ８’は、水素である。
【０２２０】
ある種の実施形態では、式（ＩＩＢ）もしくは（ＩＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩に関すると、Ｒ７”およびＲ８”は、Ｃ１〜６アルキルである。
【０２２１】
ある種の実施形態では、式（ＩＩＢ）もしくは（ＩＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩に関すると、Ｒ７”およびＲ８”は、メチルである。
【０２２２】
ある種の実施形態では、式（ＩＩＢ）もしくは（ＩＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩に関すると、Ｒ９’、Ｒ９”、Ｒ１０’およびＲ１０”は、水素およびＣ１〜６アルキルから出現毎に独立して選択される。
【０２２３】
ある種の実施形態では、式（ＩＩＢ）もしくは（ＩＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩に関すると、Ｒ９’、Ｒ９”、Ｒ１０’およびＲ１０”は、それぞれ水素である。
【０２２４】
ある種の実施形態では、式（ＩＩＡ）、（ＩＩＢ）もしくは（ＩＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩に関すると、Ｒ１１およびＲ１２は、水素、ハロゲン、−ＯＲ２０、−ＳＲ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ２０および−ＯＣ（Ｏ）Ｒ２０；ならびにＣ１〜６アルキル［ハロゲン、−ＯＲ２０、−ＳＲ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ２０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ２０、Ｃ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環から独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］から独立して選択される。
【０２２５】
ある種の実施形態では、式（ＩＩＡ）もしくは（ＩＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩に関すると、Ｒ１３およびＲ１４は、水素、ハロゲン、−ＯＲ２０、−ＳＲ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ２０および−ＯＣ（Ｏ）Ｒ２０；ならびにＣ１〜６アルキル［ハロゲン、−ＯＲ２０、−ＳＲ２０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｎ（Ｒ２０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ２０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ２０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ２０、Ｃ３〜１２炭素環および３〜１２員の複素環から独立して選択される１つまたは複数の置換基により置換されていてもよい］から独立して選択される。
【０２２６】
ある種の実施形態では、式（ＩＩＡ）、（ＩＩＢ）もしくは（ＩＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩に関すると、Ｒ２３およびＲ１１は一緒になって、置換されていてもよい５〜６員の複素環を形成する。
【０２２７】
ある種の実施形態では、式（ＩＩＡ）、（ＩＩＢ）もしくは（ＩＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩に関すると、Ｒ１１およびＲ１２は一緒になって、置換されていてもよいＣ３〜６炭素環を形成する。
【０２２８】
ある種の実施形態では、式（ＩＩＡ）、（ＩＩＢ）もしくは（ＩＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩に関すると、Ｘ２は、Ｃ（Ｏ）である。
【０２２９】
ある種の実施形態では、式（ＩＩＡ）、（ＩＩＢ）もしくは（ＩＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩に関すると、Ｌ３は、開裂性リンカーである。ある種の実施形態では、式（ＩＩＡ）、（ＩＩＢ）もしくは（ＩＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩に関すると、Ｌ３は、リソソーム酵素によって開裂可能である。
【０２３０】
ある種の実施形態では、式（ＩＩＡ）、（ＩＩＢ）もしくは（ＩＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩に関すると、Ｌ３は、以下の式：
2021506827.tif 000067
［式中、
Ｌ４は、ペプチドのＣ末端を表し、Ｌ５は、結合、アルキレンおよびヘテロアルキレンから選択され、Ｌ５は、Ｒ３０から独立して選択される１つまたは複数の基により置換されていてもよく、ＲＸは、反応性部分であり、
Ｒ３０は、ハロゲン、−ＯＨ、−ＣＮ、−Ｏ−アルキル、−ＳＨ、＝Ｏ、＝Ｓ、−ＮＨ２、−ＮＯ２；ならびにＣ１〜Ｃ１０アルキル、Ｃ２〜Ｃ１０アルケニルおよびＣ２〜Ｃ１０アルキニル［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＨ、−ＣＮ、−Ｏ−アルキル、−ＳＨ、＝Ｏ、＝Ｓ、−ＮＨ２および−ＮＯ２から選択される１つまたは複数の置換基により出現毎に独立して置換されていてもよい］から出現毎に独立して選択される］
によって表される。
【０２３１】
ある種の実施形態では、式（ＩＩＡ）、（ＩＩＢ）もしくは（ＩＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩に関すると、ＲＸは、脱離基を含む。ある種の実施形態では、式（ＩＩＡ）、（ＩＩＢ）もしくは（ＩＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩に関すると、ＲＸは、マレイミドまたはアルファ−ハロカルボニルである。ある種の実施形態では、式（ＩＩＡ）、（ＩＩＢ）もしくは（ＩＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩に関すると、Ｌ３のペプチドは、Ｖａｌ−ＣｉｔまたはＶａｌ−Ａｌａを含む。
【０２３２】
ある種の実施形態では、式（ＩＩＡ）、（ＩＩＢ）もしくは（ＩＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩に関すると、Ｌ３は、以下の式：
2021506827.tif 000068
［式中、
ＲＸは、反応性部分を含み、
ｎは、０〜９である］によって表される。
【０２３３】
ある種の実施形態では、式（ＩＩＡ）、（ＩＩＢ）もしくは（ＩＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩に関すると、ＲＸは、脱離基を含む。ある種の実施形態では、式（ＩＩＡ）、（ＩＩＢ）もしくは（ＩＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩に関すると、ＲＸは、マレイミドまたはアルファ−ハロカルボニルである。ある種の実施形態では、式（ＩＩＡ）、（ＩＩＢ）もしくは（ＩＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩に関すると、Ｌ３は、抗体コンストラクトにさらに共有結合的に結合して、コンジュゲートを形成する。ある種の実施形態では、本開示は、以下の式：
2021506827.tif 000069
［式中、
抗体は、抗体コンストラクトであり、
ｎは、１〜２０であり、
Ｄは、式（ＩＡ）、（ＩＢ）または（ＩＣ）である分類Ｂの化合物のいずれか１つの化合物または塩であり、Ｌ３は、リンカー部分であるか、または
ＤーＬ３は、式（ＩＩＡ）、（ＩＩＢ）または（ＩＩＣ）である分類Ｂの化合物のいずれか１つの化合物または塩である］
によって表されるコンジュゲートを提供する。
【０２３４】
ある種の実施形態では、式（ＩＡ）、（ＩＢ）、（ＩＣ）、（ＩＩＡ）、（ＩＩＢ）および（ＩＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩のコンジュゲートの場合、ｎは、１〜８から選択される。ある種の実施形態では、式（ＩＡ）、（ＩＢ）、（ＩＣ）、（ＩＩＡ）、（ＩＩＢ）および（ＩＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩のコンジュゲートの場合、ｎは、２〜５から選択される。ある種の実施形態では、式（ＩＡ）、（ＩＢ）、（ＩＣ）、（ＩＩＡ）、（ＩＩＢ）および（ＩＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩のコンジュゲートの場合、ｎは、２である。
【０２３５】
ある種の実施形態では、式（ＩＩＡ）、（ＩＩＢ）および（ＩＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩に関すると、−Ｌ３は、以下の式：
2021506827.tif 000070
［式中、
Ｌ４は、ペプチドのＣ末端を表し、Ｌ５は、結合、アルキレンおよびヘテロアルキレンから選択され、Ｌ５は、Ｒ３０から独立して選択される１つまたは複数の基により置換されていてもよく、ＲＸ＊は、結合、コハク酸イミド部分、抗体コンストラクトの残基に結合している加水分解されたコハク酸イミド部分であり、ＲＸ＊上の
2021506827.tif 000071
は、抗体コンストラクトの残基への結合点を表し、
Ｒ３０は、ハロゲン、−ＯＨ、−ＣＮ、−Ｏ−アルキル、−ＳＨ、＝Ｏ、＝Ｓ、−ＮＨ２、−ＮＯ２；ならびにＣ１〜Ｃ１０アルキル、Ｃ２〜Ｃ１０アルケニルおよびＣ２〜Ｃ１０アルキニル［これらはそれぞれ、ハロゲン、−ＯＨ、−ＣＮ、−Ｏ−アルキル、−ＳＨ、＝Ｏ、＝Ｓ、−ＮＨ２および−ＮＯ２から選択される１つまたは複数の置換基により出現毎に独立して置換されていてもよい］から出現毎に独立して選択される］
によって表される。
【０２３６】
ある種の実施形態では、式（ＩＩＡ）、（ＩＩＢ）もしくは（ＩＩＣ）のいずれか１つの化合物または塩に関すると、ＲＸ＊は、スクシンアミド部分、加水分解されたスクシンアミド部分またはそれらの混合物であり、抗体コンストラクトのシステイン残基に結合している。
【０２３７】
ある種の実施形態では、式（ＩＩＡ）、（ＩＩＢ）および（ＩＩＣ）の化合物に関すると、−Ｌ３は、以下の式：
2021506827.tif 000072
［式中、
ＲＸ＊は、結合、コハク酸イミド部分、または抗体コンストラクトの残基に結合している加水分解されたコハク酸イミド部分であり、ＲＸ＊上の
2021506827.tif 000073
は、抗体コンストラクトの残基への結合点を表し、
ｎは、０〜９である］
によって表される。
【０２３８】
分類Ａおよび分類Ｂのコンジュゲート
ある種の実施形態では、本開示は、分類Ａである式（ＩＡ）、（ＩＢ）、（ＩＩＡ）、（ＩＩＢ）、（ＩＩＩＡ）および（ＩＩＩＢ）のいずれか１つの化合物のコンジュゲート、および薬学的に許容される添加物を含む薬学的組成物を提供する。ある種の実施形態では、本開示は、分類Bである式（ＩＡ）、（ＩＢ）または（ＩＣ）のいずれか１つの化合物のコンジュゲート、および薬学的に許容される添加物を含む薬学的組成物を提供する。ある種の実施形態では、本薬学的組成物の薬物対抗体比（ＤＡＲ）の平均値は、１〜８から選択される。
【０２３９】
ある種の実施形態では、本開示は、ＨＢＶまたはＨＣＶウイルス感染の治療方法であって、有効量の分類Ａである式（ＩＡ）、（ＩＢ）、（ＩＩＡ）、（ＩＩＢ）、（ＩＩＩＡ）および（ＩＩＩＢ）のいずれか１つの化合物のコンジュゲートまたはそれらの薬学的組成物を、それを必要とする対象に投与することを含むＨＢＶまたはＨＣＶウイルス感染の治療方法を提供する。ある種の実施形態では、本開示は、ＨＢＶまたはＨＣＶウイルス感染の治療方法であって、有効量の分類Ｂである式（ＩＡ）、（ＩＢ）もしくは（ＩＣ）のいずれか１つの化合物のコンジュゲートまたはそれらの薬学的組成物を、それを必要とする対象に投与することを含むＨＢＶまたはＨＣＶウイルス感染の治療方法を提供する。
【０２４０】
ある種の実施形態では、本開示は、ＨＢＶまたはＨＣＶに感染した肝臓細胞をｉｎ  ｖｉｖｏで死滅させる方法であって、ＨＢＶまたはＨＣＶに感染した肝臓細胞に、分類Ａである式（ＩＡ）、（ＩＢ）、（ＩＩＡ）、（ＩＩＢ）、（ＩＩＩＡ）および（ＩＩＩＢ）のいずれか１つの化合物のコンジュゲートまたはそれらの薬学的組成物を接触させることを含むＨＢＶまたはＨＣＶに感染した肝臓細胞をｉｎ  ｖｉｖｏで死滅させる方法を提供する。ある種の実施形態では、本開示は、ＨＢＶまたはＨＣＶに感染した肝臓細胞をｉｎ  ｖｉｖｏで死滅させる方法であって、ＨＢＶまたはＨＣＶに感染した肝臓細胞に、Ｂである（ＩＡ）、（ＩＢ）または（ＩＣ）のいずれか１つの化合物のコンジュゲートまたはそれらの薬学的組成物を接触させることを含むＨＢＶまたはＨＣＶに感染した肝臓細胞をｉｎ  ｖｉｖｏで死滅させる方法を提供する。
【０２４１】
ある種の実施形態では、本開示は、対象に、分類Ａである式（ＩＡ）、（ＩＢ）、（ＩＩＡ）、（ＩＩＢ）、（ＩＩＩＡ）および（ＩＩＩＢ）のいずれか１つの化合物のコンジュゲートまたはそれらの薬学的組成物を投与することを含む、治療のための方法を提供する。ある種の実施形態では、本開示は、対象に、分類Ｂである式（ＩＡ）、（ＩＢ）または（ＩＣ）のいずれか１つの化合物のコンジュゲートまたはそれらの薬学的組成物を投与することを含む、治療のための方法を提供する。
【０２４２】
ある種の実施形態では、本開示は、ＨＢＶまたはＨＣＶ感染の治療方法であって、分類Ａである式（ＩＡ）、（ＩＢ）、（ＩＩＡ）、（ＩＩＢ）、（ＩＩＩＡ）および（ＩＩＩＢ）のいずれか１つの化合物のコンジュゲートまたはそれらの薬学的組成物を、それを必要とする対象に投与することを含む、ＨＢＶまたはＨＣＶ感染の治療方法を提供する。ある種の実施形態では、本開示は、ＨＢＶまたはＨＣＶ感染の治療方法であって、分類Ｂである式（ＩＡ）、（ＩＢ）もしくは（ＩＣ）のいずれか１つの化合物のコンジュゲートまたはそれらの薬学的組成物を、それを必要とする対象に投与することを含む、ＨＢＶまたはＨＣＶ感染の治療方法を提供する。
【０２４３】
本開示は、本明細書に記載されているＨＢＶまたはＨＣＶなどのウイルス感染の治療方法において使用するための、分類Ａである式（ＩＡ）、（ＩＢ）、（ＩＩＡ）、（ＩＩＢ）、（ＩＩＩＡ）および（ＩＩＩＢ）のいずれか１つの化合物のコンジュゲートまたはそれらの薬学的組成物を提供する。本開示は、本明細書に記載されているＨＢＶまたはＨＣＶなどのウイルス感染の治療方法において使用するための、分類Ｂである式（ＩＡ）、（ＩＢ）または（ＩＣ）のいずれか１つの化合物のコンジュゲートまたはそれらの薬学的組成物を提供する。
【０２４４】
本開示は、以下の式の抗体コンジュゲート：
2021506827.tif 000074
［式中、
抗体は、抗体コンストラクトであり、
ｎは、１〜２０から選択され、
Ｌ３は、リンカーであり、
Ｄは、分類Ａである式（ＩＡ）、（ＩＢ）、（ＩＩＡ）、（ＩＩＢ）、（ＩＩＩＡ）および（ＩＩＩＢ）ならびに分類Ｂである式（ＩＡ）、（ＩＢ）または（ＩＣ）のうちのいずれか１つの化合物または化合物の塩から選択される］
を調製する方法であって、Ｄ−Ｌ３に抗体コンストラクトを接触させることを含む、抗体コンジュゲートを調製する方法を提供する。
【０２４５】
本開示は、以下の式の抗体コンジュゲート：
2021506827.tif 000075
［式中、
抗体は、抗体コンストラクトであり、
ｎは、１〜２０から選択され、
Ｌ３は、リンカーであり、
Ｄは、分類Ａである式（ＩＡ）、（ＩＢ）、（ＩＩＡ）、（ＩＩＢ）、（ＩＩＩＡ）および（ＩＩＩＢ）ならびに分類Ｂである式（ＩＡ）、（ＩＢ）または（ＩＣ）のうちのいずれか１つの化合物から選択される］
を調製する方法であって、
Ｌ３に抗体コンストラクトを接触させて、Ｌ３−抗体を形成すること、およびＬ３抗体にＤを接触させて、コンジュゲートを形成することを含む、抗体コンジュゲートを調製する方法を提供する。
【０２４６】
本明細書において開示されている化合物は、一部の実施形態では、様々な同位体に富む形態、例えば、２Ｈ、３Ｈ、１１Ｃ、１３Ｃおよび／または１４Ｃの含有量に富む形態で使用される。特定の一実施形態では、本化合物は、少なくとも１つの位置において重水素化されている。このような重水素化形態は、米国特許第５，８４６，５１４号および同第６，３３４，９９７号に記載されている手順によって作製することができる。米国特許第５，８４６，５１４号および同第６，３３４，９９７号に記載されている通り、重水素化は、代謝安定性およびまたは有効性を改善し、こうして、薬物の作用期間を増大させることができる。
【０２４７】
別途指定のない限り、本明細書において図示されている構造は、１個または複数の同位体として富む原子が存在することだけが異なる、化合物を含むことが意図される。例えば、重水素またはトリチウムによる水素の置き換え、または１３Ｃ−もしくは１４Ｃ−に富む炭素による炭素の置き換えを除く、本構造を有する化合物は、本開示の範囲内にある。
【０２４８】
本開示の化合物は、このような化合物を構成する１個または複数の原子に、非天然の比率の原子同位体を場合により含有する。例えば、本化合物は、例えば、重水素（２Ｈ）、トリチウム（３Ｈ）、ヨウ素−１２５（１２５Ｉ）または炭素−１４（１４Ｃ）などの同位体により標識されていてもよい。２Ｈ、１１Ｃ、１３Ｃ、１４Ｃ、１５Ｃ、１２Ｎ、１３Ｎ、１５Ｎ、１６Ｎ、１６Ｏ、１７Ｏ、１４Ｆ、１５Ｆ、１６Ｆ、１７Ｆ、１８Ｆ、３３Ｓ、３４Ｓ、３５Ｓ、３６Ｓ、３５Ｃｌ、３７Ｃｌ、７９Ｂｒ、８１Ｂｒ、１２５Ｉによる同位体置換のすべてが企図される。放射活性があるか否かに関わらず、本発明の化合物のすべての同位体の変形体が本発明の範囲内に包含される。
【０２４９】
ある種の実施形態では、本明細書において開示されている化合物は、１Ｈ原子の一部またはすべてが２Ｈ原子により置き換えられたものを有する。重水素含有化合物の合成方法は、当分野で公知であり、非限定例に過ぎない、以下の合成法を含む。
【０２５０】
重水素置換化合物は、Ｄｅａｎ，Ｄｅｎｎｉｓ  Ｃ．；編集者  Ｒｅｃｅｎｔ  Ａｄｖａｎｃｅｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  Ｒａｄｉｏｌａｂｅｌｅｄ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ  ｆｏｒ  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ａｎｄ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ．［Ｃｕｒｒ．，Ｐｈａｒｍ．Ｄｅｓ．、２０００年；６巻（１０号）中］２０００年、１１０頁；Ｇｅｏｒｇｅ  Ｗ．；Ｖａｒｍａ，Ｒａｊｅｎｄｅｒ  Ｓ．  Ｔｈｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  Ｒａｄｉｏｌａｂｅｌｅｄ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ  ｖｉａ  Ｏｒｇａｎｏｍｅｔａｌｌｉｃ  Ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａｔｅｓ、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ、１９８９年、４５巻（２１号）、６６０１〜２１頁；およびＥｖａｎｓ，Ｅ．Ａｎｔｈｏｎｙ．  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  ｒａｄｉｏｌａｂｅｌｅｄ  ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ、Ｊ．  Ｒａｄｉｏａｎａｌ．  Ｃｈｅｍ．,１９８１年、６４巻（１〜２号）、９〜３２頁に記載されているものなどの、様々な方法を使用して合成される。
【０２５１】
重水素化されている出発物質は、容易に入手可能であり、本明細書に記載されている合成方法を施すと、重水素含有化合物の合成をもたらす。多数の重水素含有試薬およびビルディングブロックが、Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．などの化学品供給業者から入手可能である。
【０２５２】
本発明の化合物はまた、例えば、化合物の多形、擬似多形、溶媒和物、水和物、非溶媒和物多形（無水物を含む）、立体構造多形およびアモルファス形態、ならびにそれらの混合物を含めた、同じタイプの活性を有する、そのような化合物の結晶形態およびアモルファス形態、薬学的に許容される塩、ならびにこれらの化合物の活性代謝産物を含む。
【０２５３】
本明細書において記載されている化合物の塩、特に薬学的に許容される塩が本開示に含まれる。酸性の十分な官能基、塩基性の十分な官能基、またはその両方の官能基を有する本開示の化合物は、いくつかの無機塩基、ならびに無機酸および有機酸のいずれかと反応して、塩を形成することができる。代替的に、四級窒素を有するなどの本質的に電荷を帯びている化合物は、適切な対イオン、例えば、臭化物、塩化物またはフッ化物などのハロゲン化物イオンと塩を形成することができる。
【０２５４】
本明細書において記載されている化合物は、一部の場合、ジアステレオマー、鏡像異性体または他の立体異性体として存在することがある。本明細書において提示されている化合物は、ジアステレオマー体、鏡像異性体およびエピマー体、ならびに適切なそれらの混合物のすべてを含む。立体異性体の分離は、クロマトグラフィーによって、またはジアステレオマーを形成させて、再結晶もしくはクロマトグラフィー、またはそれらの任意の組合せにより分離することによって行うことができる（本開示のため、参照により本明細書に組み込まれている、Ｊｅａｎ  Ｊａｃｑｕｅｓ、Ａｎｄｒｅ  Ｃｏｌｌｅｔ、Ｓａｍｕｅｌ  Ｈ．Ｗｉｌｅｎ、「Ｅｎａｎｔｉｏｍｅｒｓ、Ｒａｃｅｍａｔｅｓ  ａｎｄ  Ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎｓ」、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  Ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．、１９８１年）。立体異性体はまた、立体選択的合成によって得ることもできる。
【０２５５】
本明細書に記載されている方法および組成物は、アモルファス形態および結晶形態（多形としても知られている）の使用を含む。本明細書において記載されている化合物は、薬学的に許容される塩の形態にあってもよい。同様に、同じタイプの活性を有するこれらの化合物の活性代謝産物が、本開示の範囲に含まれている。さらに、本明細書において記載されている化合物は、非溶媒和形態、および水、エタノールなどの薬学的に許容される溶媒との溶媒和物形態で存在することができる。本明細書において提示されている化合物の溶媒和物形態もまた、本明細書において開示されていると見なされる。
【０２５６】
ある種の実施形態では、本明細書において記載されている化合物または化合物の塩は、抗体コンストラクトに結合されて、コンジュゲートを形成するプロドラッグであってもよい。用語「プロドラッグ」は、生理的条件下で、活性化合物、例えば、ＴＬＲ８アゴニストまたはＴＬＲ７アゴニストに変換される化合物を包含することが意図される。プロドラッグを作製するための方法の１つは、生理的条件下で加水分解される、または他の方法で開裂されて望ましい分子が現れる、１つまたは複数の選択された部分を含ませることである。他の実施形態では、プロドラッグは、宿主動物中の特異的標的細胞などの、宿主動物の酵素活性によって変換される。
【０２５７】
プロドラッグが、ｉｎ  ｖｉｖｏで代謝されて、本明細書に記載されている化合物を生成する、本明細書において記載されている化合物のプロドラッグ形態が、特許請求の範囲内に含まれる。一部の場合、本明細書において記載されている化合物の一部は、別の誘導体または活性化合物に対するプロドラッグとなり得る。
【０２５８】
ある種の実施形態では、ＴＬＲ８アゴニストまたはＴＬＲ７アゴニストなどの化合物は、保護基を有するプロドラッグとして修飾され、こうして、ＴＬＲ８アゴニストまたはＴＬＲ７アゴニストは、この保護基が取り除かれて活性化合物が現れる環境に到達するまで、活性が制限されているか、または不活性である。例えば、ＴＬＲ８アゴニストまたはＴＬＲ７アゴニストは、ＴＬＲ８受容体の活性部位への結合に関与するアミンにおいて共有結合的に修飾され、こうして、この化合物は、その修飾（プロドラッグ）形態では受容体の活性部位に結合することができない。そのような例では、保護基は、生理的条件下、例えば、送達部位、例えば細胞内または標的細胞に隣接する細胞外に特異的な酵素条件または酸性条件下で除去され得る。保護基は、リソソームのプロテアーゼ、例えばカテプシンおよびプラスミンの作用により、本明細書に記載されている化合物または塩のアミンから除去されることがある。これらのプロテアーゼは、ある種の腫瘍組織中に高レベルで存在することができる。保護基は、リソソーム酵素によって除去されることがある。リソソーム酵素は、例えば、カテプシンＢ、カテプシンＳ、β−グルクロニダーゼまたはβ−ガラクトシダーゼとすることができる。
【０２５９】
ある種の実施形態では、アミン保護基は、ＴＬＲ８受容体の残基を有する化合物のアミン基の結合を阻止する。アミン保護基は、細胞内の生理的条件下で除去可能となり得るが、細胞外ではアミンに共有結合的に結合した状態のままである。ＴＬＲ８受容体の残基を有する化合物のアミン基の結合を阻止または弱化させるために使用することができる保護基には、例えば、ペプチドおよびカルバメートが含まれる。
【０２６０】
本明細書において記載されている化合物の合成に有用な合成化学変換および方法は、当分野において公知であり、例えば、Ｒ．Ｌａｒｏｃｋ、Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ（１９８９年）；Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ  ａｎｄ  Ｐ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、第２版（１９９１年）；Ｌ．Ｆｉｅｓｅｒ  ａｎｄ  Ｍ．Ｆｉｅｓｅｒ、Ｆｉｅｓｅｒ  ａｎｄ  Ｆｉｅｓｅｒ’ｓ  Ｒｅａｇｅｎｔｓ  ｆｏｒ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ（１９９４年）；およびＬ．Ｐａｑｕｅｔｔｅ（編）、Ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ  ｏｆ  Ｒｅａｇｅｎｔｓ  ｆｏｒ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ（１９９５年）に記載されているものを含む。
【０２６１】
リンカー
本コンジュゲートは、少なくとも１つの骨髄アゴニストに抗体コンストラクトを結合させるリンカーを含む。リンカーは、例えば、開裂性リンカーまたは非開裂性リンカーとすることができる。本明細書に記載されているコンジュゲートおよび方法のリンカーは、コンジュゲートの活性部分（例えば、抗原結合ドメインまたはＦｃ結合ドメイン）の標的またはＦｃ受容体への結合に影響を及ぼさないことがある。コンジュゲートは複数のリンカーを含むことができる。これらのリンカーは、同じリンカーとすることができるか、または異なるリンカーとすることができる。
【０２６２】
当業者によって認識されている通り、リンカーは、１つの場所で骨髄細胞アゴニストへの共有結合性連結基、および別の位置でコンジュゲートの抗体コンストラクトへの共有結合性連結基を形成することによって、コンジュゲートの抗体コンストラクトに骨髄細胞アゴニストを連結する。共有結合性連結基は、リンカー上の官能基と、骨髄細胞アゴニストおよび抗体コンストラクト上の官能基との間の反応によって形成することができる。本明細書で使用する場合、「リンカー」という表現は、（ｉ）リンカーを骨髄細胞アゴニストに共有結合的に連結することが可能な官能基、およびリンカーを抗体コンストラクトに共有結合的に連結することが可能な官能基を含むことができるリンカーの非コンジュゲート形態；（ｉｉ）リンカーをコンジュゲートの抗体コンストラクトに共有結合的に連結することが可能な官能基を含むことができるリンカーであって、骨髄細胞アゴニストに共有結合的に連結させることができるリンカー、またはその反対となる部分コンジュゲート形態；および（ｉｉｉ）骨髄細胞アゴニストと抗体コンストラクトの両方に共有結合的に連結され得るリンカーの完全なコンジュゲート形態を含むことができる。一部の具体的な実施形態では、本明細書に記載されているコンジュゲート、すなわちリンカー上の官能基、およびリンカーとコンジュゲートの抗体コンストラクトとの間に形成された共有結合性連結基は、それぞれ、ＲｘおよびＬＫとして具体的に例示することができる。一実施形態は、肝臓細胞上で発現する肝臓抗原、ウイルス抗原、またはそれらの両方に特異的に結合する抗体コンストラクトに、リンカーが該抗体コンストラクトに共有結合的に連結する条件下で、本明細書に記載されているリンカーを接触させることにより形成されるコンジュゲートに関する。一実施形態は、本明細書に記載されているリンカーに、該リンカーが抗体コンストラクトに共有結合的に連結する条件下で接触させることにより形成されるコンジュゲートを作製する方法に関する。
【０２６３】
リンカーを介する結合は、コンジュゲート部分間のリンカーの取り込みを含むことができる。リンカーは、短い、可撓性である、剛直である、開裂可能である、開裂不可能である、親水性であるまたは疎水性であることができる。リンカーは、可撓部のセグメントまたは剛直部のセグメントなどの、異なる特性を有するセグメントを含有することができる。リンカーは、細胞外環境に化学的に安定とすることができる、例えば血流中で化学的に安定とすることができるか、または安定ではない連結基を含んでもよい。リンカーは、開裂するおよび／もしくは犠牲にするよう設計されている、またはそうではない場合、細胞内で特異的もしくは非特異的に分解する連結基を含むことができる。開裂性リンカーは、特定の部位において、酵素に感受性が高くなり得る（すなわち、酵素によって開裂可能である）。開裂性リンカーは、プロテアーゼなどの酵素によって開裂することができる。開裂性リンカーは、バリン−シトルリンペプチドまたはバリン−アラニンペプチドとすることができる。バリン−シトルリン含有リンカーまたはバリン−アラニン含有リンカーは、ペンタフルオロフェニル基を含有することができる。バリン−シトルリン含有リンカーまたはバリン−アラニン含有リンカーは、スクシミド（ｓｕｃｃｉｍｉｄｅ）基またはマレイミド基を含有することができる。バリン−シトルリン含有リンカーまたはバリン−アラニン含有リンカーは、パラアミノ安息香酸（ＰＡＢＡ）基を含有することができる。バリン−シトルリン含有リンカーまたはバリン−アラニン含有リンカーは、ＰＡＢＡ基およびペンタフルオロフェニル基を含有することができる。バリン−シトルリン含有リンカーまたはバリン−アラニン含有リンカーは、ＰＡＢＡ基およびコハク酸イミド基を含有することができる。バリン−シトルリン含有リンカーまたはバリン−アラニン含有リンカーは、ＰＡＢＡ基およびマレイミド基を含有することができる。非開裂性リンカーは、プロテアーゼに無反応性となり得る（すなわち、非開裂性である）。非開裂性リンカーは、マレイミド基を含むことができる。非開裂性リンカーは、コハク酸イミド基を含むことができる。非開裂性リンカーは、マレイミドカプロイルリンカーとすることができる。マレイミドカプロイルリンカーは、Ｎ−マレイミドメチルシクロヘキサン−１−カルボキシレートを含むことができる。マレイミドカプロイルリンカーは、コハク酸イミド基を含むことができる。マレイミドカプロイルリンカーは、ペンタフルオロフェニル基を含むことができる。
【０２６４】
リンカーは、マレイミドカプロイル基、および１つまたは複数のポリエチレングリコール分子との組合せとすることができる。リンカーは、マレイミド−ＰＥＧ４リンカーとすることができる。リンカーは、コハク酸イミド基を含有するマレイミドカプロイルリンカーと、１つまたは複数のポリエチレングリコール分子との組合せとすることができる。リンカーは、ペンタフルオロフェニル基を含有するマレイミドカプロイルリンカーと１つまたは複数のポリエチレングリコール分子との組合せとすることができる。リンカーは、ポリエチレングリコール分子に連結しているマレイミドを含有することができ、この場合、ポリエチレングリコールにより、リンカーは一層可撓性になり得るか、またはリンカーを長くするために使用することができる。リンカーは、（マレイミドカプロイル）−（バリン−シトルリン）−（パラ−アミノベンジルオキシカルボニル）リンカーとすることができる。リンカーはまた、アルキレン、アルケニレン、アルキニレン、ポリエーテル、ポリエステル、ポリアミド、ポリアミノ酸、ポリペプチド、開裂性ペプチドまたはアミノベンジルカルバメートとすることができる。リンカーは、一方の末端にマレイミドを、およびもう一方の末端にＮ−ヒドロキシスクシンイミジルエステルを含有することができる。リンカーは、Ｎ末端アミンがアセチル化されたリジン、およびバリン−シトルリン開裂部位を含有することができる。リンカーは、微生物のトランスグルタミナーゼによって作製される連結部とすることができ、この場合、この連結部は、グルタミン側鎖のアシル基とリジン鎖の一級アミンとの間の結合形成を酵素が触媒する結果として、アミン含有部分とグルタミンを含有するよう操作された部分との間に作製することができる。リンカーは、反応性一級アミンを含有することができる。リンカーは、ソルターゼＡリンカーとすることができる。ソルターゼＡリンカーは、ＬＸＰＴＧ認識モチーフ（配列番号１）をＮ末端ＧＧＧモチーフに融合して、生来のアミド結合を再生成させるソルターゼＡ酵素により作製することができる。したがって、作製されたリンカーは、ＬＸＰＴＧ認識モチーフ（配列番号１）に結合した部分と、Ｎ末端ＧＧＧモチーフに結合した部分とを連結することができる。リンカーは、１つの部分のアルコキサミンによりケトン基を修飾することによって形成されたオキシム結合と反応する別の部分の非天然アミノ酸の間に生成する連結部とすることができる。部分は、コンジュゲートの部分とすることができる。部分は、抗体などの抗体コンストラクトの部分とすることができる。部分は、骨髄細胞アゴニストの部分とすることができる。部分は、結合ドメインの部分とすることができる。リンカーは、無置換とすることができるか、または例えば、置換基により置換され得る。置換基は、例えば、ヒドロキシル基、アミノ基、ニトロ基、シアノ基、アジド基、カルボキシル基、カルボキシアルデヒド基、イミン基、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アルコキシ基、アシル基、アシルオキシ基、アミド基およびエステル基を含むことができる。
【０２６５】
本明細書に記載されているコンジュゲートでは、骨髄細胞アゴニストは、リンカーによって、コンジュゲートの抗体コンストラクトに連結している。骨髄細胞アゴニストをコンジュゲートの抗体コンストラクトに結合させるリンカーは、短い、長い、疎水性である、親水性である、可撓性であるまたは剛直であることができるか、またはそれぞれが独立して、上記の特性の１つまたは複数を有し、こうしてこのリンカーが、異なる特性を有するセグメントを含むことができる、セグメントから構成することができる。リンカーは、このリンカーが１つ超の骨髄細胞アゴニストを抗体コンストラクトの単一部位に共有結合的に連結するよう多価とすることができるか、または単一骨髄細胞アゴニストをコンジュゲートの抗体コンストラクトの単一部位に共有結合的に連結するよう一価とすることができる。
【０２６６】
多数の骨髄細胞アゴニストをコンジュゲートの抗体コンストラクトに連結させるために使用することができる例示的な多価リンカーが記載されている。例えば、Ｆｌｅｘｉｍｅｒ（登録商標）リンカー技術は、良好な物理化学特性を有するＤＡＲの高いコンジュゲートにすることができる可能性を有する。以下に示されている通り、Ｆｌｅｘｉｍｅｒ（登録商標）リンカー技術は、エステル結合の配列により、可溶性ポリアセタール骨格に薬物分子を取り込ませることに基づいている。本方法は、良好な物理化学特性を維持しながら、高度に搭載されたコンジュゲート（最大で２０のＤＡＲ）をもたらす。この方法は、以下のスキームに示されている骨髄細胞アゴニストを用いて利用することができる。
2021506827.tif 000076
【０２６７】
上のスキームに図示されているＦｌｅｘｉｍｅｒ（登録商標）リンカー技術を利用するため、脂肪族アルコールが骨髄細胞アゴニストに供され得るか、または導入され得る。次に、このアルコール部分は、アラニン部分にコンジュゲートされ、次に、Ｆｌｅｘｉｍｅｒ（登録商標）リンカーに合成により組み込まれる。コンジュゲートのリポソーム処理により、親アルコール含有薬物がｉｎ  ｖｉｔｒｏで放出される。
【０２６８】
例として、および非制限的に、本明細書に記載されているコンジュゲートに含まれ得るいくつかの開裂性リンカーおよび非開裂性リンカーが、以下に記載されている。
【０２６９】
開裂性リンカーは、ｉｎ  ｖｉｔｒｏおよびｉｎ  ｖｉｖｏで開裂可能となり得る。開裂性リンカーは、化学的にもしくは酵素に不安定な、または分解性連結基を含むことができる。開裂性リンカーは、細胞質での還元、リソソーム中での酸性条件への曝露、または細胞内での特異的プロテアーゼもしくは他の酵素による開裂など、骨髄アゴニストを遊離させる細胞内での過程に依存し得る。開裂性リンカーは、化学的または酵素によるどちらか一方の開裂可能な１つまたは複数の化学結合を組み込むことができる一方、リンカーの残りは、非開裂性となり得る。
【０２７０】
リンカーは、ヒドラゾン基および／またはジスルフィド基などの化学的不安定性基を含むことができる。化学的不安定性基を含むリンカーは、血漿といくつかの細胞質コンパートメントとの間の異なる特性を活用することができる。ヒドラゾン含有リンカーの場合の、骨髄細胞アゴニストの放出を促進することができる細胞内条件は、エンドソームおよびリソソームの酸性環境とすることができる一方、ジスルフィド含有リンカーは、高いチオール濃度、例えばグルタチオンを含有することができるサイトゾル中で還元され得る。化学的不安定性基を含有するリンカーの血漿中安定性は、化学的不安定性基の近傍の置換基を使用する立体障害の導入によって増大することができる。
【０２７１】
ヒドラゾンなどの酸不安定性基は、血液の中性ｐＨ環境（ｐＨ７．３〜７．５）における体循環の間は、無傷のままであり続けることができ、コンジュゲートが、細胞のわずかに酸性なエンドソーム（ｐＨ５．０〜６．５）およびリソソーム（ｐＨ４．５〜５．０）のコンパートメントに一旦、内在すると、加水分解を受けることができて、骨髄細胞アゴニストを放出することができる。このｐＨ依存的放出機構は、薬物の非特異性放出に関係し得る。リンカーのヒドラゾン基の安定性を増大させるため、リンカーは、化学修飾、例えば置換により変化させることができ、これにより、循環中の損失を最小限にしながら、リソソーム中での一層効率的な放出を実現する調節を行うことが可能となる。
【０２７２】
ヒドラゾン含有リンカーは、追加の酸不安定開裂部位および／または酵素不安定開裂部位などの、追加の開裂部位を含有することができる。例示的なヒドラゾン含有リンカーを含むコンジュゲートは、例えば、以下の構造：
2021506827.tif 000077
を含むことができ、式中、ＤおよびＡｂは、それぞれ、骨髄細胞アゴニストおよび抗体コンストラクトを表し、ｎは、抗体コンストラクトに連結している骨髄細胞アゴニスト−リンカーの数を表す。リンカー（Ｉｇ）などのある種のリンカーでは、リンカーは、２つの開裂性基、すなわちジスルフィド部分とヒドラゾン部分を含むことができる。このようなリンカーの場合、遊離非修飾骨髄細胞アゴニストの効果的な放出には、酸性ｐＨ、またはジスルフィド還元と酸性ｐＨが必要となり得る。（Ｉｈ）および（Ｉｉ）などのリンカーは、単一ヒドラゾン開裂部位の場合に効果的となり得る。
【０２７３】
リンカーに含ませることができる他の酸不安定性基には、シス−アコニチル含有リンカーが含まれる。シス−アコニチルの化学的性質は、酸性条件下、アミド結合に並置されたカルボン酸を使用して、アミド加水分解を加速することができる。
【０２７４】
開裂性リンカーはまた、ジスルフィド基を含むことができる。ジスルフィドは、生理的ｐＨにおいて熱力学的に安定となり得、細胞内への内部移行時に骨髄細胞アゴニストを放出するよう設計することができ、この場合、サイトゾルが、細胞外環境と比べて、かなり高い還元性環境をもたらすことができる。ジスルフィド結合の切断には、（還元型）グルタチオン（ＧＳＨ）などの細胞質チオール補助因子の存在が必要となり得、こうして、ジスルフィド含有リンカーは、循環中に妥当な程度に安定となり、サイトゾル中で骨髄細胞アゴニストを選択的に放出することができる。細胞内酵素であるタンパク質ジスルフィドイソメラーゼ、またはジスルフィド結合を開裂することが可能な類似酵素もまた、細胞内のジスルフィド結合の優先的開裂に寄与することができる。ＧＳＨ、または最も豊富な低分子量チオールであるシステインが血液循環中で約５μＭと濃度がかなり低いことに比べると、ＧＳＨは、０．５〜１０ｍＭの濃度範囲で細胞内に存在することができる。不規則な血流が、低酸素症をもたらす恐れがある腫瘍細胞は、還元酵素の活性の増大をもたらし、したがって、グルタチオン濃度を一層高くすることができる。ジスルフィド含有リンカーのｉｎ  ｖｉｖｏ安定性は、リンカーの化学修飾、例えばジスルフィド結合に隣接して立体障害を使用することによって増強することができる。
【０２７５】
例示的なジスルフィド含有リンカーを含むコンジュゲートは、以下の構造：
2021506827.tif 000078
を含むことができ、式中、ＤおよびＡｂは、それぞれ、骨髄細胞アゴニストおよび抗体コンストラクトを表し、ｎは、抗体コンストラクトに連結している骨髄細胞アゴニストリンカーの数を表し、Ｒは、例えば、水素またはアルキルから出現毎に独立して選択される。ジスルフィド結合に隣接する立体障害を増大させると、リンカーの安定性を増大させることができる。（Ｉｊ）および（Ｉｌ）などの構造は、１つまたは複数のＲ基をメチルなどの低級アルキルから選択すると、ｉｎ  ｖｉｖｏ安定性の向上を示し得る。
【０２７６】
使用することができる別のタイプのリンカーは、酵素によって特異的に開裂されるリンカーである。例えば、リンカーは、リソソーム酵素によって開裂することができる。このようなリンカーは、ペプチドをベースとすることができるか、または酵素の基質として働くことができるペプチド領域を含むことができる。ペプチドをベースとするリンカーは、化学的に不安定なリンカーよりも血漿および細胞外環境において安定性が高くなり得る。
【０２７７】
リソソームのタンパク質分解酵素は、内因性阻害剤および血液のｐＨの値がリソソームに比べると不利なほどに高いために、血中では非常に低い活性を有し得るので、ペプチド結合は、良好な血清安定性を有することができる。リソソームのプロテアーゼ、例えば、カテプシンおよび／またはプラスミンの作用のために、コンジュゲートから骨髄細胞アゴニストの放出が起こり得る。これらのプロテアーゼは、ある種の腫瘍組織中に高レベルで存在することができる。リンカーは、リソソーム酵素によって開裂可能となり得る。リソソーム酵素は、例えば、カテプシンＢ、β−グルクロニダーゼまたはβ−ガラクトシダーゼとすることができる。
【０２７８】
リンカーでは、開裂性ペプチドは、Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ、Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｌｅｕなどのテトラペプチド、またはＶａｌ−Ｃｉｔ、Ｖａｌ−ＡｌａおよびＰｈｅ−Ｌｙｓなどのジペプチドから選択することができる。ジペプチドは、ペプチドの組成に応じて、より長いペプチドに比べて、より低い疎水性を有し得る。様々なジペプチドをベースとする開裂性リンカーは、本明細書に記載されているコンジュゲートに使用することができる。
【０２７９】
酵素による開裂性リンカーは、骨髄細胞アゴニストと酵素による開裂部位を空間的に隔離する自壊性スペーサーを含むことができる。骨髄細胞アゴニストのペプチドリンカーへの直接結合は、骨髄細胞アゴニストのアミノ酸付加物のタンパク質分解による放出をもたらすことができ、これによって、その活性が損なわれる。自壊性スペーサーの使用により、アミド結合の加水分解時に、十分に活性な化学的に修飾されていない骨髄細胞アゴニストの脱離が可能になり得る。
【０２８０】
自壊性スペーサーの１つは、二官能性パラ−アミノベンジルアルコール基とすることができ、この基は、アミノ基を介してペプチドに連結し、アミド結合を形成することができる一方、アミン含有骨髄細胞アゴニストは、カルバメート官能基を介して、リンカーのベンジル位ヒドロキシル基に結合することができる（ＰＡＢＣ、すなわちｐ−アミドベンジルカルバメートが得られる）。得られた骨髄細胞アゴニスト前駆体は、プロテアーゼ媒介性開裂時に活性化されて、１，６−脱離反応がもたらされ、非修飾骨髄細胞アゴニスト、二酸化炭素およびリンカーの残骸物を放出することができる。以下のスキームは、ｐ−アミドベンジルカルバメートの断片化、および骨髄細胞アゴニストの放出を図示している：
2021506827.tif 000079
［式中、Ｘ−Ｄは、非修飾骨髄細胞アゴニストを表す］。
【０２８１】
酵素開裂性リンカーは、β−グルクロン酸をベースとするリンカーとすることができる。骨髄細胞アゴニストの容易な放出は、リソソーム酵素であるβ−グルクロニダーゼによるβ−グルクロニドグリコシド結合の開裂によって実現することができる。この酵素は、リソソーム内に豊富に存在することができ、一部の腫瘍タイプに過剰発現し得る一方、細胞外での酵素活性は低くなり得る。β−グルクロン酸をベースとするリンカーを使用して、β−グルクロニドの親水性性質のためにコンジュゲートが凝集を受ける傾向を回避することができる。ある種の実施形態では、β−グルクロン酸をベースとするリンカーは、抗体コンストラクトを疎水性骨髄細胞アゴニストに連結することができる。以下のスキームは、β−グルクロン酸をベースとするリンカーを含有するコンジュゲート（Ａｂ）の抗体コンストラクトからの骨髄細胞アゴニスト（Ｄ）の放出を図示している：
2021506827.tif 000080
【０２８２】
アウリスタチン、カンプトテシンおよびドキソルビシンアナログなどの薬物、ＣＢＩ副溝結合剤、ならびにプシムベリン（ｐｓｙｍｂｅｒｉｎ）を抗体に連結させるために有用な様々な開裂性のβ−グルクロン酸をベースとするリンカーが記載されている。これらのβ−グルクロン酸をベースとするリンカーはすべて、本明細書に記載されている骨髄細胞アゴニストを含むコンジュゲートに使用されてもよい。ある種の実施形態では、酵素開裂性リンカーは、β−ガラクトシドをベースとするリンカーである。β−ガラクトシドは、リソソーム内に豊富に存在する一方、細胞外での酵素活性は低い。
【０２８３】
さらに、フェノール基を含有する骨髄細胞アゴニストは、フェノール性酸素を介して、リンカーに共有結合的に結合することができる。このようなリンカーの１つは、ジアミノ−エタン「空間連結」を従来的な「ＰＡＢＯ」をベースとする自壊性基と共に使用して、フェノールを送達させる方法に依るものである。
【０２８４】
芳香族または脂肪族ヒドロキシル基を含む骨髄細胞アゴニストは、ＷＯ２０１５／０９５７５５に記載されている通り、メチレンカルバメート連結基に依る方法を使用するヒドロキシル基を介するリンカーに共有結合的に結合することができる。
【０２８５】
開裂性リンカーは、非開裂性部分またはセグメントを含むことができる、および／または開裂性セグメントもしくは部分を、それ以外の非開裂性リンカーに含ませて、これを開裂可能にすることができる。単なる例として、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）および関連ポリマーは、ポリマー骨格中に開裂可能な基を含むことができる。例えば、ポリエチレングリコールまたはポリマーリンカーは、ジスルフィド、ヒドラゾンまたはジペプチドなどの１つまたは複数の開裂可能な基を含むことができる。
【０２８６】
リンカーに含ませることができる他の分解可能な連結基は、ＰＥＧカルボン酸または活性化ＰＥＧカルボン酸と骨髄細胞アゴニストのアルコール基との反応により形成するエステル連結基を含むことができ、この場合、このようなエステル基は、生理的条件下で加水分解を受けて骨髄細胞アゴニストを放出することができる。加水分解により分解可能な連結基には、以下に限定されないが、カーボネート連結基；アミンとアルデヒドとの反応から得られるイミン連結基；アルコールとホスフェート基との反応により形成されるリン酸エステル連結基；アルデヒドとアルコールとの反応生成物であるアセタール連結基；ギ酸エステルとアルコールとの反応生成物であるオルトエステル連結基；および以下に限定されないが、ポリマーの末端部およびオリゴヌクレオチドの５’ヒドロキシル基におけるものを含めた、ホスホラミダイト基により形成されるオリゴヌクレオチド連結基が含まれ得る。
【０２８７】
リンカーは、酵素により開裂可能なペプチド部分、例えば構造式（ＩＶａ）、（ＩＶｂ）、（ＩＶｃ）または（ＩＶｄ）：
2021506827.tif 000081
またはその塩を含むリンカーを含むことができ、式中、ペプチドは、リソソーム酵素により開裂可能なペプチド（Ｎ→Ｃと例示されており、ペプチドは、アミノ「末端」およびカルボキシ「末端」を含む）を表し、Ｔは、エチレングリコール単位またはアルキレン鎖のうちの１つもしくは複数、またそれらの組合せを含むポリマーを表し、Ｒａは、水素、アルキル、スルホネートおよびメチルスルホネートから選択され、Ｒｙは、水素またはＣ１〜４アルキル−（Ｏ）ｒ−（Ｃ１〜４アルキレン）ｓ−Ｇ１またはＣ１〜４アルキル−（Ｎ）−［（Ｃ１〜４アルキレン）−Ｇ１］２であり、Ｒｚは、Ｃ１〜４アルキル−（Ｏ）ｒ−（Ｃ１〜４アルキレン）ｓ−Ｇ２であり、Ｇ１は、ＳＯ３Ｈ、ＣＯ２Ｈ、ＰＥＧ４−３２または糖部分であり、Ｇ２は、ＳＯ３Ｈ、ＣＯ２ＨまたはＰＥＧ４−３２部分であり、ｒは、０または１であり、ｓは、０または１であり、ｐは、０〜５の範囲の整数であり、ｑは、０または１であり、ｘは、０または１であり、ｙは、０または１であり、
2021506827.tif 000082
は、骨髄細胞アゴニストへのリンカーの結合点を表し、＊は、リンカーの残りへの結合点を表す。
【０２８８】
ある種の実施形態では、ペプチドは、トリペプチドまたはジペプチドから選択することができる。特定の実施形態では、ジペプチドは、Ｖａｌ−Ｃｉｔ；Ｃｉｔ−Ｖａｌ；Ａｌａ−Ａｌａ；Ａｌａ−Ｃｉｔ；Ｃｉｔ−Ａｌａ；Ａｓｎ−Ｃｉｔ；Ｃｉｔ−Ａｓｎ；Ｃｉｔ−Ｃｉｔ；Ｖａｌ−Ｇｌｕ；Ｇｌｕ−Ｖａｌ；Ｓｅｒ−Ｃｉｔ；Ｃｉｔ−Ｓｅｒ；Ｌｙｓ−Ｃｉｔ；Ｃｉｔ−Ｌｙｓ；Ａｓｐ−Ｃｉｔ；Ｃｉｔ−Ａｓｐ；Ａｌａ−Ｖａｌ；Ｖａｌ−Ａｌａ；Ｐｈｅ−Ｌｙｓ；Ｌｙｓ−Ｐｈｅ；Ｖａｌ−Ｌｙｓ；Ｌｙｓ−Ｖａｌ；Ａｌａ−Ｌｙｓ；Ｌｙｓ−Ａｌａ；Ｐｈｅ−Ｃｉｔ；Ｃｉｔ−Ｐｈｅ；Ｌｅｕ−Ｃｉｔ；Ｃｉｔ−Ｌｅｕ；Ｉｌｅ−Ｃｉｔ；Ｃｉｔ−Ｉｌｅ；Ｐｈｅ−Ａｒｇ；Ａｒｇ−Ｐｈｅ；Ｃｉｔ−Ｔｒｐ；およびＴｒｐ−Ｃｉｔまたはそれらの塩から選択することができる。
【０２８９】
本明細書に記載されているコンジュゲートに含まれ得る、構造式（ＩＶａ）によるリンカーの例示的な実施形態は、以下に例示されているリンカーを含むことができる（例示されている通り、このリンカーは、コンジュゲート中のリンカーを共有結合的に連結させるのに好適な基を含み、波線または連結されていない結合は、骨髄細胞アゴニストのための結合部位を示す）：
2021506827.tif 000083
2021506827.tif 000084
【０２９０】
本明細書に記載されているコンジュゲートに含まれ得る、構造式（ＩＶｂ）、（ＩＶｃ）または（ＩＶｄ）によるリンカーの例示的な実施形態は、以下に例示されているリンカーを含むことができる（例示されている通り、このリンカーは、リンカーをコンジュゲートに共有結合的に連結させるのに好適な基を含むことができ、波線は、骨髄細胞アゴニストのための結合部位を示す）：
2021506827.tif 000085
2021506827.tif 000086
2021506827.tif 000087
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2021506827.tif 000090
2021506827.tif 000091
【０２９１】
リンカーは、酵素開裂性糖部分、例えば構造式（Ｖａ）、（Ｖｂ）、（Ｖｃ）、（Ｖｄ）または（Ｖｅ）：
を含むリンカー
2021506827.tif 000092
2021506827.tif 000093
またはその塩を含有することができ、式中、ｑは、０または１であり、ｒは、０または１であり、Ｘ１は、ＣＨ２、ＯまたはＮＨであり、
2021506827.tif 000094
は、骨髄細胞アゴニストへのリンカーの結合点を表し、＊は、リンカーの残りへの結合点を表す。
【０２９２】
本明細書に記載されているコンジュゲートに含まれ得る、構造式（Ｖａ）によるリンカーの例示的な実施形態は、以下に例示されているリンカーを含むことができる（例示されている通り、このリンカーは、コンジュゲート中のリンカーを共有結合的に連結させるのに好適な基を含み、波線は、骨髄細胞アゴニストのための結合部位を示す）：
2021506827.tif 000095
2021506827.tif 000096
2021506827.tif 000097
【０２９３】
本明細書に記載されているコンジュゲートに含まれ得る、構造式（Ｖｂ）によるリンカーの例示的な実施形態は、以下に例示されているリンカーを含む（例示されている通り、このリンカーは、コンジュゲート中のリンカーを共有結合的に連結させるのに好適な基を含み、波線は、骨髄細胞アゴニストのための結合部位を示す）：
2021506827.tif 000098
2021506827.tif 000099
2021506827.tif 000100
2021506827.tif 000101
本明細書に記載されているコンジュゲートに含まれ得る、構造式（Ｖｃ）によるリンカーの例示的な実施形態は、以下に例示されているリンカーを含む（例示されている通り、このリンカーは、コンジュゲート中のリンカーを共有結合的に連結させるのに好適な基を含み、波線は、骨髄細胞アゴニストのための結合部位を示す）：
2021506827.tif 000102
2021506827.tif 000103
2021506827.tif 000104
2021506827.tif 000105
【０２９４】
本明細書に記載されているコンジュゲートに含まれ得る、構造式（Ｖｄ）によるリンカーの例示的な実施形態は、以下に例示されているリンカーを含む（例示されている通り、このリンカーは、コンジュゲート中のリンカーを共有結合的に連結させるのに好適な基を含み、波線は、骨髄細胞アゴニストのための結合部位を示す）：
2021506827.tif 000106
2021506827.tif 000107
【０２９５】
本明細書に記載されているコンジュゲートに含まれ得る、構造式（Ｖｅ）によるリンカーの例示的な実施形態は、以下に例示されているリンカーを含む（例示されている通り、このリンカーは、コンジュゲート中のリンカーを共有結合的に連結させるのに好適な基を含み、波線は、骨髄細胞アゴニストのための結合部位を示す）：
2021506827.tif 000108
【０２９６】
開裂性リンカーは、ある種の利点を実現することができるが、本明細書に記載されているコンジュゲートを含むリンカーは、開裂可能である必要はない。非開裂性リンカーの場合、骨髄細胞アゴニストの放出は、血漿とある細胞質コンパートメントとの間の特性の差異に依存することがない。骨髄細胞アゴニストの放出は、抗体を媒介とするエンドサイトーシスによりコンジュゲートが内部移行し、リソソームコンパートメントへ送達された後に起こることができ、このリソソームコンパートメントにおいて、コンジュゲートは、細胞内でのタンパク質分解により、アミノ酸のレベルにまで分解され得る。この過程は、骨髄細胞アゴニストの活性形態（誘導体）を放出することができ、これは、骨髄細胞アゴニスト、リンカーまたはその一部、および一部の例では、リンカーが共有結合的に結合しているアミノ酸残基によって形成される。非開裂性リンカーを有するコンジュゲートに由来する骨髄細胞アゴニスト誘導体は、親水性がより高く、膜透過性がより低くなり得、これにより、開裂性リンカーを有するコンジュゲートと比べると、バイスタンダー効果は一層低くなり、かつ非特異的毒性が低くなり得る。非開裂性リンカーを有するコンジュゲートは、血液循環中で、開裂性リンカーを有するコンジュゲートよりも大きな安定性を有することができる。非開裂性リンカーは、アルキレン鎖とすることができるか、または例えば、ポリアルキレングリコールポリマー、アミドポリマーをベースとするものなどのポリマーとすることができるか、またはアルキレン鎖、ポリアルキレングリコールおよび／またはアミドポリマーからなるセグメントを含むことができる。リンカーは、１〜６個のエチレングリコール単位を有するポリエチレングリコールセグメントを含有することができる。
【０２９７】
リンカーは、例えば、以下の製剤：
2021506827.tif 000109
またはそれらの塩による、ｉｎ  ｖｉｖｏにおける非開裂性リンカーとすることができ、式中、Ｒａは、水素、アルキル、スルホネートおよびメチルスルホネートから選択され、Ｒｘは、リンカーをコンジュゲートの抗体コンストラクトに共有結合的に連結することが可能な官能基を含む部分であり、
2021506827.tif 000110
は、骨髄細胞アゴニストへのリンカーの結合点を表す。
【０２９８】
本明細書に記載されているコンジュゲートに含まれ得る、構造式（ＶＩａ）〜（ＶＩｄ）によるリンカーの例示的な実施形態は、以下に例示されているリンカーを含む（例示されている通り、このリンカーは、コンジュゲート中のリンカーを共有結合的に連結させるのに好適な基を含み、
2021506827.tif 000111
は、コンジュゲート中の結合点を表す：
2021506827.tif 000112
【０２９９】
コンジュゲート中のリンカーを結合するために使用される結合基は、求電子的な性質があるものとすることができ、例えば、マレイミド基、活性化ジスルフィド、活性エステル（ＮＨＳエステルおよびＨＯＢｔエステル、ハロギ酸エステル、酸ハロゲン化物など）、ハロゲン化アルキルおよびハロゲン化ベンジル、例えばハロアセトアミド）を含む。本開示より使用することができる「自己安定化性」マレイミドおよび「架橋性ジスルフィド」に関連する技術も現れている。
【０３００】
コンジュゲーション条件下で自発的に加水分解して、安定性の改善されたコンジュゲート化学種を与える「自己安定性」マレイミド基の一例は、以下の概略図に図示されている。したがって、マレイミド結合基は、抗体コンストラクトのスルフヒドリルと反応して、中間コハク酸イミド環を与える。結合基の加水分解された（開環）形態は、血漿中タンパク質の存在下での脱コンジュゲーションに耐性がある。
2021506827.tif 000113
【０３０１】
生来存在するヒンジのジスルフィド結合の還元から誘導される一対のスルフヒドリル基を架橋する方法が開示されており、以下に模式的に図示されている。この方法の利点は、ＩｇＧの完全な還元（４つの対のスルフヒドリルが生成する）と、その後の４当量のアルキル化剤との反応によって、均質なＤＡＲ４コンジュゲートを合成することができることである。「架橋ジスルフィド」を含有するコンジュゲートもまた、安定性が向上する。
2021506827.tif 000114
【０３０２】
同様に、以下に図示されている通り、一対のスルフヒドリル基を架橋することができるマレイミド誘導体が開発されている。
2021506827.tif 000115
【０３０３】
結合部分は、以下の構造式（ＶＩＩａ）、（ＶＩＩｂ）または（ＶＩＩｃ）：
2021506827.tif 000116
またはそれらの塩を含有することができ、式中、Ｒｑは、Ｈまたは−Ｏ−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１１−ＣＨ３であり、ｘは、０または１であり、ｙは、０または１であり、Ｇ２は、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３Ｈまたは−ＣＨ２ＣＨ２Ｏ−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１１−ＣＨ３であり、Ｒｗは、−Ｏ−ＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３Ｈまたは−ＮＨ（ＣＯ）−ＣＨ２ＣＨ２Ｏ−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１２−ＣＨ３であり、＊は、リンカーの残りへの結合点を表す。
【０３０４】
本明細書に記載されているコンジュゲートに含まれ得る、構造式（ＶＩＩａ）および（ＶＩＩｂ）によるリンカーの例示的な実施形態は、以下に例示されているリンカーを含むことができる（例示されている通り、このリンカーは、コンジュゲート中のリンカーを共有結合的に連結させるのに好適な基を含むことができ、波線または連結されていない結合は、骨髄細胞アゴニストのための結合部位を示す）：
2021506827.tif 000117
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【０３０５】
本明細書に記載されているコンジュゲートに含まれ得る、構造式（ＶＩＩｃ）によるリンカーの例示的な実施形態には、以下に例示されているリンカーを含むことができる（例示されている通り、このリンカーは、コンジュゲート中のリンカーを共有結合的に連結させるのに好適な基を含むことができる）：
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【０３０６】
骨髄細胞アゴニスト−リンカーの例示的合成
骨髄細胞アゴニスト−リンカー化合物は、抗体コンストラクトに結合する前に、様々な方法によって合成されて、本明細書に記載されているコンジュゲートを形成することができる。例えば、スキームＢ１に示されている通り合成することができる。
スキームＢ１：
2021506827.tif 000124
アミド結合形成のために活性化させたＰＥＧ化されているカルボン酸（ｉ）を、適切に置換されているアミンを含有する骨髄細胞アゴニストと反応させて、中間アミドを得ることができる。活性化エステル（ｉｉ）の形成は、ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ）などのカップリング剤の存在下で、Ｎ−ヒドロキシコハク酸イミドまたはペンタフルオロフェノールなどの試薬を使用する、中間アミド含有カルボン酸を反応させて、化合物（ｉｉ）を得ることによって実現することができる。
【０３０７】
別の例として、骨髄細胞アゴニスト−リンカーは、スキームＢ２に示されている通り合成することができる。
スキームＢ２：
2021506827.tif 000125
【０３０８】
（ｉ）などの活性化カーボネートを適切に置換されているアミン含有骨髄細胞アゴニストと反応させて、カルバメート（ｉｉ）を得ることができ、このカルバメート（ｉｉ）は、Ｒ３エステル基の性質に基づいた標準法を使用して脱保護することができる。次に、得られたカルボン酸（ｉｉｉ）を、Ｎ−ヒドロキシコハク酸イミドまたはペンタフルオロフェノールなどの活性化剤とカップリングして、化合物（ｉｖ）を得ることができる。
【０３０９】
追加例として、骨髄細胞アゴニスト−リンカーは、スキームＢ３に示されている通り合成することができる。
スキームＢ３：
2021506827.tif 000126
【０３１０】
（ｉ−ａ）などの活性化カルボキン酸エステルは、適切に置換されているアミン含有骨髄細胞アゴニストと反応させると、アミド（ｉｉ）を得ることができる。代替的に、タイプ（ｉ−ｂ）のカルボン酸は、ジシクロヘキシカルボジミド（ｄｉｃｙｃｌｏｈｅｘｙｃａｒｂｏｄｉｉｍｄｅ）（ＤＣＣ）などのアミド結合形成剤の存在下で、適切に置換されているアミン含有骨髄細胞アゴニストとカップリングさせて、所望の骨髄細胞アゴニスト−リンカーを得ることができる。
【０３１１】
追加例として、骨髄細胞アゴニスト−リンカーは、スキームＢ４に示されている通り合成することができる。
スキームＢ４：
2021506827.tif 000127
【０３１２】
（ｉ）などの活性化カーボネートは、適切に置換されているアミン含有骨髄細胞アゴニストと反応させると、標的骨髄細胞アゴニストとして、カルバメート（ｉｉ）を得ることができる。
【０３１３】
追加例として、骨髄細胞アゴニスト−リンカーは、スキームＢ５に示されている通り合成することができる。
スキームＢ５：
2021506827.tif 000128
【０３１４】
（ｉ−ａ、ｉ−ｂ、ｉ−ｃ）などの活性化カルボン酸は、適切に置換されているアミン含有骨髄細胞アゴニストと反応させて、標的骨髄細胞アゴニストとして、アミド（ｉｉ−ａ、ｉｉ−ｂ、ｉｉ−ｃ）を得ることができる。
【０３１５】
これらの骨髄細胞アゴニスト−リンカーは、様々な方法によって作製することができる。当業者は、類似の方法により、または当業者に公知の他の方法を組み合わせることにより、これらの化合物を作製することが可能となり得ることを理解している。当業者は、適切な出発物質を使用し、必要に応じて合成経路を修正することにより、本明細書に記載されている類似の方法で作製することができることも理解される。出発物質および試薬は、市販供給業者から得ることができるか、または当業者に公知の情報源に準拠して合成することができるか、または本明細書に記載されている通り調製することができる。
コンジュゲート
【０３１６】
本明細書に記載されているコンジュゲートは、少なくとも１つの骨髄細胞アゴニストに結合している抗体コンストラクトおよび少なくとも１つのリンカーを含む。一部の態様では、本開示は、以下の式Ｉ：
2021506827.tif 000129
［式中、
Ａは、抗体コンストラクトであり、
Ｌは、リンカーであり、
Ｄｘは、骨髄細胞アゴニストであり、
ｎは、１〜２０から選択され、
ｚは、１〜２０から選択される］
によって表されるコンジュゲートを提供する。
【０３１７】
他の態様では、本開示は、少なくとも１つの骨髄細胞アゴニスト（例えば、化合物またはその塩）、抗体コンストラクトおよび少なくとも１つのリンカーを含むコンジュゲートであって、骨髄細胞アゴニストの各々が、リンカーを介して、抗体コンストラクトに連結されている、すなわち共有結合的に結合されているコンジュゲートを提供する。リンカーは、開裂性リンカーまたは非開裂性リンカーから選択することができる。一部の実施形態では、リンカーは開裂性である。代替実施形態では、リンカーは非開裂性である。リンカーは、本出願の上記の項目においてさらに記載されており、これらのいずれか１つが使用されて、抗体を本明細書に記載されている化合物に結合することができる。
【０３１８】
コンジュゲートでは、薬物搭載量は、変数ｚによって表される。変数ｚは、抗体コンストラクトあたりの骨髄細胞アゴニスト−リンカー分子の数、または変数ｎが１に等しい場合、抗体コンストラクトあたりの骨髄細胞アゴニストの数を表す。文脈に応じて、ｚは、平均薬物搭載量とも称される、抗体コンストラクトあたりの骨髄細胞アゴニスト（−リンカー）分子の平均数を表すことができる。変数ｚは、１〜２０、１〜５０または１〜１００の範囲とすることができる。一部のコンジュゲートでは、ｚは、好ましくは１〜８である。一部の好ましい実施形態では、ｐが平均薬物搭載量を表す場合、ｚは、約２〜約５の範囲である。一部の実施形態では、ｚは、約２、約３、約４または約５である。調製物中の抗体コンストラクトあたりの骨髄細胞アゴニストの数平均は、質量分光法、ＨＩＣ、ＥＬＩＳＡアッセイおよびＨＰＬＣなどの従来手段を特徴とすることができる。
【０３１９】
コンジュゲートは、抗体コンストラクト、骨髄細胞アゴニストおよびリンカーを含むことができる。コンジュゲートは、抗体コンストラクト、ＴＬＲ７アゴニストおよびリンカーを含むことができる。コンジュゲートは、抗体コンストラクト、ＴＬＲ８アゴニストおよびリンカーを含むことができる。コンジュゲートは、抗体コンストラクト、ＴＬＲ７／８アゴニストおよびリンカーを含むことができる。コンジュゲートは、抗体コンストラクト、ベンゾアゼピンＴＬＲ７および／またはＴＬＲ８アゴニスト、ならびにリンカーを含むことができる。コンジュゲートは、抗体コンストラクト、ｓｓＲＮＡ  ＴＬＲ７および／またはＴＬＲ８アゴニスト、ならびにリンカーを含むことができる。コンジュゲートは、抗体コンストラクト、イミダゾキノリンＴＬＲ７および／またはＴＬＲ８アゴニスト、ならびにリンカーを含むことができる。コンジュゲートは、抗体コンストラクト、チオゾロキノロンＴＬＲ７および／またはＴＬＲ８アゴニスト、ならびにリンカーを含むことができる。これらの実施例のいずれかにおいて、アゴニストおよびリンカーを述べる場合、複数のアゴニストおよび／またはリンカーを含む。
【０３２０】
一部の実施形態では、骨髄アゴニストは、化合物１．１〜１．２、１．４〜１．２０、１．２３〜１．２７、１．２９〜１．４６、１．４８および１．５０〜１．６７（実施例）から選択されるＴＬＲ８アゴニストである。一部の実施形態では、骨髄アゴニスト−リンカー化合物（リンカー−ペイロード）は、リンカー−ペイロード２．１〜２．１７またはリンカー−ペイロード２．２０〜２．３９（実施例）のいずれかから選択される。一部の実施形態では、骨髄細胞アゴニストは、それぞれ、分類Ａである式（ＩＡ）、（ＩＢ）、（ＩＩＡ）、（ＩＩＢ）、（ＩＩＩＡ）および（ＩＩＩＢ）、ならびに分類Ｂである式（ＩＡ）、（ＩＢ）または（ＩＣ）から選択されるＴＬＲ８またはＴＬＲ７アゴニストである。
【０３２１】
コンジュゲートは、野生型Ｆｃ結合ドメインを有する抗体コンストラクトを含むことができる。コンジュゲートは、Ｆｃ結合ドメイン変異体を有する抗体コンストラクトを含むことができる。コンジュゲートは、Ｆｃ結合ドメインのＦｃ受容体への結合を増大させる、Ｆｃ結合ドメイン変異体を有する抗体コンストラクトを含むことができる。Ｆｃ結合ドメイン変異体は、野生型ＩｇＧ１  Ｆｃ結合ドメインと比べて、Ｌ２３５Ｖ／Ｆ２４３Ｌ／Ｒ２９２Ｐ／Ｙ３００Ｌ／Ｐ３９６Ｌを含む５つの異なるアミノ酸残基、Ｓ２３９Ｄ／Ｉ３３２Ｅを含む２つの異なるアミノ酸残基、またはＳ２９８Ａ／Ｅ３３３Ａ／Ｋ３３４Ａを含む３つの異なるアミノ酸残基などの１つ超のアミノ酸残基において置換を含むことができる。本明細書に記載されているアミノ酸残基の番号付けは、ＥＵ指標に準拠している。
【０３２２】
リンカーは、本明細書に記載されているリンカーのうちの１つとすることができる。リンカーは、開裂性である、非開裂性である、親水性であるまたは疎水性であることができる。開裂性リンカーは、酵素に敏感となり得る。開裂性リンカーは、プロテアーゼなどの酵素によって開裂することができる。開裂性リンカーは、バリン−シトルリンまたはバリン−アラニンペプチドを含有するリンカーとすることができる。バリン−シトルリン含有リンカーまたはバリン−アラニン含有リンカーは、ペンタフルオロフェニル基を含有することができる。バリン−シトルリン含有リンカーまたはバリン−アラニン含有リンカーは、スクシミド基またはマレイミド基を含有することができる。バリン−シトルリン含有リンカーまたはバリン−アラニン含有リンカーは、ＰＡＢＡ基を含有することができる。バリン−シトルリン含有リンカーまたはバリン−アラニン含有リンカーは、ＰＡＢＡ基およびペンタフルオロフェニル基を含有することができる。バリン−シトルリン含有リンカーまたはバリン−アラニン含有リンカーは、ＰＡＢＡ基およびマレイミド基を含有することができる。バリン−シトルリン含有リンカーまたはバリン−アラニン含有リンカーは、ＰＡＢＡ基およびコハク酸イミド基を含有することができる。非開裂性リンカーは、プロテアーゼに無反応性となり得る。非開裂性リンカーは、マレイミド基を含むことができる。非開裂性リンカーは、マレイミドカプロイルリンカーとすることができる。マレイミドカプロイルリンカーは、Ｎ−マレイミドメチルシクロヘキサン−１−カルボキシレートを含むことができる。マレイミドカプロイルリンカーは、コハク酸イミド基を含むことができる。マレイミドカプロイルリンカーは、ペンタフルオロフェニル基を含むことができる。リンカーは、マレイミド基と１つまたは複数のポリエチレングリコール分子との組合せとすることができる。リンカーは、マレイミドカプロイル基、と１つまたは複数のポリエチレングリコール分子との組合せとすることができる。リンカーは、マレイミド−ＰＥＧ４リンカーとすることができる。リンカーは、コハク酸イミド基を含有するマレイミドカプロイルリンカーと、１つまたは複数のポリエチレングリコール分子との組合せとすることができる。リンカーは、ペンタフルオロフェニル基を含有するマレイミドカプロイルリンカーと１つまたは複数のポリエチレングリコール分子との組合せとすることができる。リンカーは、ポリエチレングリコール分子に連結しているマレイミドを含有することができ、この場合、ポリエチレングリコールにより、リンカーは一層可撓性になり得るか、またはリンカーを長くするために使用することができる。リンカーは、（マレイミドカプロイル）−（バリン−シトルリン）−（パラ−アミノベンジルオキシカルボニル）リンカーとすることができる。リンカーはまた、アルキレン、アルケニレン、アルキニレン、ポリエーテル、ポリエステル、ポリアミド、ポリアミノ酸、ポリペプチド、開裂性ペプチドおよび／またはアミノベンジルカルバメート基を含むことができる。リンカーは、一方の末端にマレイミドを、およびもう一方の末端にＮ−ヒドロキシスクシンイミジルエステルを含有することができる。リンカーは、Ｎ末端アミンがアセチル化されたリジン、およびバリン−シトルリン開裂部位を含有することができる。
【０３２３】
リンカーは、微生物のトランスグルタミナーゼによって作製される連結基を有することができ、この場合、この連結部は、グルタミン側鎖のアシル基とリジン鎖の一級アミンとの間の結合形成を酵素が触媒する結果として、アミン含有部分とグルタミンを含有するよう操作された部分との間に作製される。リンカーは、反応性一級アミンを含有することができる。リンカーは、ソルターゼＡリンカーとすることができる。ソルターゼＡリンカーは、ＬＸＰＴＧ認識モチーフ（配列番号１）をＮ末端ＧＧＧモチーフに融合して、生来のアミド結合を再生成させるソルターゼＡ酵素により結合され得る。したがって、作製されたリンカーは、ＬＸＰＴＧ認識モチーフ（配列番号１）に結合した部分と、Ｎ末端ＧＧＧモチーフに結合した部分とを連結することができる。リンカーは、１つの部分のアルコキサミンによりケトン基を修飾することによって形成されたオキシム結合と反応する別の部分の非天然アミノ酸の間に生成する連結部とすることができる。部分は、抗体コンストラクトとすることができる。部分は、結合ドメインとすることができる。部分は、抗体とすることができる。部分は、骨髄細胞アゴニストとすることができる。
【０３２４】
コンジュゲートは、標的抗原結合ドメインおよびＦｃ結合ドメインを含む抗体コンストラクトを含むことができる。標的抗原結合ドメインは、肝臓細胞上の第１の抗原に特異的に結合することができ、この場合、抗原とは、肝臓細胞抗原のことである。第１の抗原は、肝臓細胞によって発現され得る。例えば、第１の抗原は、肝臓細胞抗原とすることができる。肝臓細胞抗原は、他の正常組織に由来する細胞と比べて、肝臓細胞上に優先的に発現する分子マーカーとすることができる。例えば、肝臓細胞抗原は、毛細胆管細胞、クッパー細胞、肝細胞、星型細胞もしくは他の肝臓細胞タイプ、またはそれらの組合せ上に発現することができる。肝臓細胞抗原は、肝臓細胞表面受容体とすることができる。肝臓細胞抗原は、肝細胞抗原とすることができる。肝臓細胞抗原は、非がん性肝臓細胞上に発現することができる。肝臓細胞抗原は、ウイルスに感染した細胞上に発現することができる。ウイルスは、肝臓ウイルスとすることができる。ウイルスは、肝炎ウイルスとすることができる。ウイルスは、ＨＢＶとすることができる。ウイルスは、ＨＣＶとすることができる。肝臓細胞抗原は、以下に限定されないが、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２、ＴＲＦ２、ＵＧＴ１Ａ１、ＳＬＣ２２Ａ７、ＳＬＣ１３Ａ５、ＳＬＣ２２Ａ１およびＣ９を含むことができる。一部の実施形態では、肝臓細胞抗原は、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２、ＴＲＦ２、ＵＧＴ１Ａ１、ＳＬＣ２２Ａ７、ＳＬＣ１３Ａ５、ＳＬＣ２２Ａ１およびＣ９からなる群から選択される。一部の実施形態では、肝臓細胞抗原は、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２、ＴＲＦ２、ＵＧＴ１Ａ１、ＳＬＣ２２Ａ７、ＳＬＣ１３Ａ５およびＳＬＣ２２Ａ１からなる群から選択される。一部の実施形態では、肝臓細胞抗原は、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２およびＴＲＦ２からなる群から選択される。一部の実施形態では、標的抗原結合ドメインは、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２、ＴＲＦ２、ＵＧＴ１Ａ１、ＳＬＣ２２Ａ７、ＳＬＣ１３Ａ５、ＳＬＣ２２Ａ１およびＣ９からなる群から選択される抗原のアミノ酸配列に対して少なくとも８０％の同一性を構成するアミノ酸配列を有する、肝臓細胞抗原に特異的に結合することができる。標的抗原結合ドメインは、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２、ＴＲＦ２、ＵＧＴ１Ａ１、ＳＬＣ２２Ａ７、ＳＬＣ１３Ａ５、ＳＬＣ２２Ａ１およびＣ９からなる群から選択される抗原のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、９０％、９５％、９８％または１００％の同一性を構成するアミノ酸配列を有する、肝臓細胞抗原に特異的に結合することができる。他の実施形態では、第１の抗原は、肝臓細胞に感染するウイルスに由来するウイルス抗原である。ウイルス抗原は、肝臓細胞がウイルスに感染すると、肝臓細胞上に発現する、ウイルスの分子マーカーとすることができる。例えば、ウイルス抗原は、毛細胆管細胞、クッパー細胞、肝細胞、星型細胞もしくは他の肝臓細胞タイプ、またはそれらの組合せ上に発現することができる。ウイルスは、ＨＢＶまたはＨＣＶなどの肝炎ウイルスとすることができる。ウイルスは、ＨＢＶとすることができる。ウイルスは、ＨＣＶとすることができる。ウイルス抗原は、ウイルスに感染した非がん性肝臓細胞上に発現することができる。ウイルス抗原は、以下に限定されないが、ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇ、ＨＢｅＡｇ、Ｂ型肝炎ウイルスＤＮＡポリメラーゼまたはＨＢｘなどのＨＢＶの構成成分、ならびにコアタンパク質、Ｅ１およびＥ２、ＮＳ２、ＮＳ３、ＮＳ４Ａ、ＮＳ４Ｂ、ＮＳ５ＡまたはＮＳ５ＢなどのＨＣＶの構成成分を含むことができる。一部の実施形態では、ウイルス抗原は、ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇ、ＨＢｅＡｇ、Ｂ型肝炎ウイルスＤＮＡポリメラーゼまたはＨＢｘなどのＨＢＶの構成成分、ならびにコアタンパク質、Ｅ１およびＥ２、ＮＳ２、ＮＳ３、ＮＳ４Ａ、ＮＳ４Ｂ、ＮＳ５ＡまたはＮＳ５ＢなどのＨＣＶの構成成分からなる群から選択される。一部の実施形態では、ウイルス抗原は、ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇまたはＨＢｅＡｇである。一部の実施形態では、ウイルス抗原は、ＨＢｓＡｇである。一部の実施形態では、標的抗原結合ドメインは、肝臓細胞に感染するウイルスに由来するウイルス抗原であって、ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇ、ＨＢｅＡｇ、Ｂ型肝炎ウイルスＤＮＡポリメラーゼ、ＨＢｘ、コアタンパク質、Ｅ１およびＥ２、ＮＳ２、ＮＳ３、ＮＳ４Ａ、ＮＳ４Ｂ、ＮＳ５ＡおよびＮＳ５Ｂからなる群から選択される抗原のアミノ酸配列に対して少なくとも８０％の同一性を構成するアミノ酸配列を有するウイルス抗原に特異的に結合することができる。標的抗原結合ドメインは、肝臓細胞に感染するウイルスに対するウイルス抗原であって、ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇ、ＨＢｅＡｇ、Ｂ型肝炎ウイルスＤＮＡポリメラーゼ、ＨＢｘ、コアタンパク質、Ｅ１およびＥ２、ＮＳ２、ＮＳ３、ＮＳ４Ａ、ＮＳ４Ｂ、ＮＳ５ＡおよびＮＳ５Ｂからなる群から選択される抗原のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、９０％、９５％、９８％または１００％の同一性を構成するアミノ酸配列を有するウイルス抗原に特異的に結合することができる。
【０３２５】
骨髄細胞アゴニストの存在下で、コンジュゲートの第１の抗原結合ドメインが第１の抗原に結合する場合のＫｄは、骨髄細胞アゴニストの非存在下で、第１の抗原結合ドメインがコンジュゲートの第１の抗原に結合する場合のＫｄよりも、約２倍、約３倍、約４倍、約５倍、約６倍、約７倍、約８倍、約９倍、約１０倍、約１５倍、約２０倍、約２５倍、約３０倍、約３５倍、約４０倍、約４５倍、約５０倍、約６０倍、約７０倍、約８０倍、約９０倍、約１００倍、約１１０倍または約１２０倍、大きくなり得る。骨髄細胞アゴニストの存在下で、コンジュゲートの第１の抗原結合ドメインが第１の抗原に結合する場合のＫｄは、１０ｎＭ未満であり得る。骨髄細胞アゴニストの存在下で、コンジュゲートの第１の抗原結合ドメインが第１の抗原に結合する場合のＫｄは、１００ｎＭ未満、５０ｎＭ未満、２０ｎＭ未満、５ｎＭ未満、１ｎＭ未満または０．１ｎＭ未満とすることができる。
【０３２６】
コンジュゲートは、単一抗原に特異的に結合することが可能となり得る。コンジュゲートは、２つ以上の抗原に特異的に結合することが可能となり得る。コンジュゲートは、第２の抗原結合ドメインを含む抗体コンストラクトを含むことができる。第２の抗原結合ドメインは、第２の抗原に特異的に結合することができる。第２の抗原は、肝臓細胞によって発現され得る。例えば、第２の抗原は、肝臓細胞抗原とすることができる。肝臓細胞抗原は、他の正常組織に由来する細胞と比べて、肝臓細胞上に優先的に発現する分子マーカーとすることができる。例えば、肝臓細胞抗原は、毛細胆管細胞、クッパー細胞、肝細胞、星型細胞またはそれらの組合せ上に発現することができる。肝臓細胞抗原は、肝臓細胞表面受容体とすることができる。肝臓細胞抗原は、肝細胞抗原とすることができる。肝臓細胞抗原は、非がん性肝臓細胞上に発現することができる。肝臓細胞抗原は、ウイルスに感染した細胞上に発現することができる。ウイルスは、ＨＢＶまたはＨＣＶなどの肝炎ウイルスとすることができる。ウイルスは、ＨＢＶとすることができる。ウイルスは、ＨＣＶとすることができる。肝臓細胞抗原は、以下に限定されないが、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２、ＴＲＦ２、ＵＧＴ１Ａ１、ＳＬＣ２２Ａ７、ＳＬＣ１３Ａ５、ＳＬＣ２２Ａ１およびＣ９を含むことができる。一部の実施形態では、肝臓細胞抗原は、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２、ＴＲＦ２、ＵＧＴ１Ａ１、ＳＬＣ２２Ａ７、ＳＬＣ１３Ａ５、ＳＬＣ２２Ａ１およびＣ９からなる群から選択される。一部の実施形態では、肝臓細胞抗原は、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２、ＴＲＦ２、ＵＧＴ１Ａ１、ＳＬＣ２２Ａ７、ＳＬＣ１３Ａ５およびＳＬＣ２２Ａ１からなる群から選択される。一部の実施形態では、肝臓細胞抗原は、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２およびＴＲＦ２からなる群から選択される。第２の抗原結合ドメインは、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２、ＴＲＦ２、ＵＧＴ１Ａ１、ＳＬＣ２２Ａ７、ＳＬＣ１３Ａ５、ＳＬＣ２２Ａ１およびＣ９からなる群から選択される抗原のアミノ酸配列に対して少なくとも８０％の同一性を構成するアミノ酸配列を有する、肝臓細胞抗原に特異的に結合することができる。第２の抗原結合ドメインは、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２、ＴＲＦ２、ＵＧＴ１Ａ１、ＳＬＣ２２Ａ７、ＳＬＣ１３Ａ５、ＳＬＣ２２Ａ１およびＣ９からなる群から選択される抗原のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、９０％、９５％、９８％または１００％の同一性を構成するアミノ酸配列を有する、肝臓細胞抗原に特異的に結合することができる。
【０３２７】
他の実施形態では、第２の抗原は、肝臓細胞に感染するウイルスに由来するウイルス抗原とすることができる。ウイルス抗原は、肝臓細胞がウイルスに感染すると、肝臓細胞上に発現する、ウイルスの分子マーカーとすることができる。例えば、ウイルス抗原は、ウイルスに感染した場合、毛細胆管細胞、クッパー細胞、肝細胞、星型細胞またはそれらの組合せ上に発現することができる。ウイルスは、ＨＢＶまたはＨＣＶなどの肝炎ウイルスとすることができる。ウイルスは、ＨＢＶとすることができる。ウイルスは、ＨＣＶとすることができる。ウイルス抗原は、ウイルスに感染した非がん性肝臓細胞上に発現することができる。ウイルス抗原は、以下に限定されないが、ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇ、ＨＢｅＡｇ、Ｂ型肝炎ウイルスＤＮＡポリメラーゼまたはＨＢｘなどのＨＢＶの構成成分、ならびにコアタンパク質、Ｅ１およびＥ２、ＮＳ２、ＮＳ３、ＮＳ４Ａ、ＮＳ４Ｂ、ＮＳ５ＡまたはＮＳ５ＢなどのＨＣＶの構成成分を含むことができる。一部の実施形態では、ウイルス抗原は、ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇ、ＨＢｅＡｇ、Ｂ型肝炎ウイルスＤＮＡポリメラーゼまたはＨＢｘなどのＨＢＶの構成成分、ならびにコアタンパク質、Ｅ１およびＥ２、ＮＳ２、ＮＳ３、ＮＳ４Ａ、ＮＳ４Ｂ、ＮＳ５ＡまたはＮＳ５ＢなどのＨＣＶの構成成分からなる群から選択される。一部の実施形態では、ウイルス抗原は、ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇまたはＨＢｅＡｇである。一部の実施形態では、ウイルス抗原は、ＨＢｓＡｇである。一部の実施形態では、第２の抗原結合ドメインは、肝臓細胞に感染するウイルスに由来するウイルス抗原であって、ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇ、ＨＢｅＡｇ、Ｂ型肝炎ウイルスＤＮＡポリメラーゼ、ＨＢｘ、コアタンパク質、Ｅ１およびＥ２、ＮＳ２、ＮＳ３、ＮＳ４Ａ、ＮＳ４Ｂ、ＮＳ５ＡおよびＮＳ５Ｂからなる群から選択される抗原のアミノ酸配列に対して少なくとも８０％の同一性を構成するアミノ酸配列を有するウイルス抗原に特異的に結合することができる。第２の抗原結合ドメインは、肝臓細胞に感染するウイルスに対するウイルス抗原であって、ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇ、ＨＢｅＡｇ、Ｂ型肝炎ウイルスＤＮＡポリメラーゼ、ＨＢｘ、コアタンパク質、Ｅ１およびＥ２、ＮＳ２、ＮＳ３、ＮＳ４Ａ、ＮＳ４Ｂ、ＮＳ５ＡおよびＮＳ５Ｂからなる群から選択される抗原のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、９０％、９５％、９８％または１００％の同一性を構成するアミノ酸配列を有するウイルス抗原に特異的に結合することができる。
【０３２８】
骨髄細胞アゴニストの存在下で、コンジュゲートの第２の抗原結合ドメインが第２の抗原に結合する場合のＫｄは、骨髄細胞アゴニストの非存在下で、第２の抗原結合ドメインがコンジュゲートの第２の抗原に結合する場合のＫｄよりも、約２倍、約３倍、約４倍、約５倍、約６倍、約７倍、約８倍、約９倍、約１０倍、約１５倍、約２０倍、約２５倍、約３０倍、約３５倍、約４０倍、約４５倍、約５０倍、約６０倍、約７０倍、約８０倍、約９０倍、約１００倍、約１１０倍または約１２０倍大きくなり得る。骨髄細胞アゴニストの存在下で、コンジュゲートの第２の抗原結合ドメインが第２の抗原に結合する場合のＫｄは、１０ｎＭ未満であり得る。髄細胞アゴニストの存在下で、コンジュゲートの第２の抗原結合ドメインが第２の抗原に結合する場合のＫｄは、１００ｎＭ未満、５０ｎＭ未満、２０ｎＭ未満、５ｎＭ未満、１ｎＭ未満または０．１ｎＭ未満とすることができる。対照的に、骨髄細胞アゴニストの存在下で、コンジュゲートの第２の抗原結合ドメインが第２の抗原に結合する場合のＫｄは、第１の抗原結合ドメインが第１の抗原結合ドメインの抗原に結合している場合、１００ｎＭより大きいものとなり得る。骨髄細胞アゴニストの存在下で、コンジュゲートの第２の抗原結合ドメインが第２の抗原に結合する場合のＫｄは、第１の抗原結合ドメインが第１の抗原結合ドメインの抗原に結合している場合、１００ｎＭ超、２００ｎＭ超、３００ｎＭ超、４００ｎＭ超、５００ｎＭ超または１０００ｎＭ超となり得る。
【０３２９】
本コンジュゲートは、骨髄細胞アゴニストに連結している場合、ＦｃＲに結合することができるＦｃ結合ドメインを含む抗体コンストラクトを含むことができる。本コンジュゲートは、骨髄細胞アゴニストに連結している場合、ＦｃＲに結合して、ＦｃＲ媒介性シグナル伝達を開始することができるＦｃ結合ドメインを含むことができる。本コンジュゲートは、骨髄細胞アゴニストに連結されている場合、その抗原に結合することができる。本コンジュゲートは、骨髄細胞アゴニストに連結されている場合、その抗原に結合することができ、本コンジュゲートのＦｃ結合ドメインは、骨髄細胞アゴニストに連結されている場合、ＦｃＲに結合することができる。本コンジュゲートは、骨髄細胞アゴニストに連結されている場合、その抗原に結合することができ、本コンジュゲートのＦｃ結合ドメインは、骨髄細胞アゴニストに連結されている場合、ＦｃＲに結合して、ＦｃＲ媒介性シグナル伝達を開始することができる。骨髄細胞アゴニストに連結したＦｃ結合ドメインは、Ｆｃ結合ドメイン変異体とすることができる。Ｆｃ結合ドメイン変異体は、Ｌ２３５Ｖ／Ｆ２４３Ｌ／Ｒ２９２Ｐ／Ｙ３００Ｌ／Ｐ３９６Ｌを含む５つの異なるアミノ酸残基、Ｓ２３９Ｄ／Ｉ３３２Ｅを含む２つの異なるアミノ酸残基、またはＳ２９８Ａ／Ｅ３３３Ａ／Ｋ３３４Ａを含む３つの異なるアミノ酸残基などの１つ超のアミノ酸残基における置換を含むことができる。Ｆｃ結合ドメインがＦｃ受容体に結合する場合のＫｄは、Ｆｃ結合ドメインが骨髄細胞アゴニストに連結されている場合、骨髄細胞アゴニストへの連結がない場合での、Ｆｃ結合ドメインがＦｃ受容体に結合する場合のＫｄよりも、約２倍、約３倍、約４倍、約５倍、約６倍、約７倍、約８倍、約９倍、約１０倍、約１５倍、約２０倍、約２５倍、約３０倍、約３５倍、約４０倍、約４５倍、約５０倍、約６０倍、約７０倍、約８０倍、約９０倍、約１００倍、約１１０倍または約１２０倍大きくなり得る。Ｆｃ結合ドメインがＦｃ受容体に結合する場合のＫｄは、骨髄細胞アゴニストに連結されている場合、１０ｎＭ未満となり得る。Ｆｃ結合ドメインがＦｃ受容体に結合する場合のＫｄは、骨髄細胞アゴニストに連結されている場合、１００ｎＭ未満、５０ｎＭ未満、２０ｎＭ未満、５ｎＭ未満、１ｎＭ未満または０．１ｎＭ未満とすることができる。対照的に、Ｆｃ結合ドメインがＦｃ受容体に結合する場合のＫｄは、骨髄細胞アゴニストに連結されている場合、および第１の結合ドメインがその抗原に結合している場合、１００ｎＭ超となり得る。Ｆｃ結合ドメインがＦｃ受容体に結合する場合のＫｄは、骨髄細胞アゴニストに連結されている場合、および第１の結合ドメインがその抗原に結合している場合、１００ｎＭ超、２００ｎＭ超、３００ｎＭ超、４００ｎＭ超、５００ｎＭ超または１０００ｎＭ超とすることができる。
【０３３０】
コンジュゲートの骨髄細胞アゴニストは、ＴＲＬ７アゴニストおよび／またはＴＬＲ８アゴニストとすることができる。一部の実施形態では、骨髄細胞アゴニストは、ＴＬＲ７アゴニストである。一部の実施形態では、骨髄細胞アゴニストは、ＴＬＲ８アゴニストである。
【０３３１】
リンカーは、抗体コンストラクト、骨髄細胞アゴニストおよびリンカーの間での直接連結基によって、コンジュゲートの抗体コンストラクトおよび骨髄細胞アゴニストに結合することができる。直接連結基は、共有結合である。
【０３３２】
リンカーは、例えば、アミノ酸配列の末端、すなわちシステイン残基、改変されたシステイン残基、リジン残基、セリン残基、スレオニン残基、チロシン残基、アスパラギン酸残基、グルタミン酸残基、グルタミン残基、操作されたグルタミン残基、セレノシステイン残基、または非天然アミノ酸の側鎖などの好適な任意の部位において、抗体コンストラクトに結合することができる。非天然アミノ酸は、パラ−アジドメチル−ｌ−フェニルアラニン（ｐＡＭＦ）を含むことができる。結合部位はまた、ソルターゼＡリンカーの使用などによる、別の部分のアルコキサミン、およびタンパク質またはペプチドのＣ末端部における反応性一級アミンなどの反応性一級アミンによりケトン基を修飾することによって形成されるオキシム結合を含有する残基に存在することができ、上記のソルターゼＡリンカーは、ＬＸＰＴＧ認識モチーフ（配列番号１）をＮ末端ＧＧＧモチーフに融合して、生来のアミド結合を再生成させることによって生成され得る。したがって、生成されたリンカーは、ＬＸＰＴＧ認識モチーフ（配列番号１）に結合した部分と、Ｎ末端ＧＧＧモチーフに結合した部分とを連結することができる。
【０３３３】
結合は、様々なタイプの結合、例えば、以下に限定されないが、アミド結合、エステル結合、エーテル結合、炭素−窒素結合、炭素−炭素単結合、二重結合もしくは三重結合、ジスルフィド結合、またはチオエーテル結合のいずれかを介することができる。リンカーは、抗体コンストラクト（例えば、抗体）に連結し得る、少なくとも１つの官能基を有することができる。官能基の非限定例には、アミド結合、エステル結合、エーテル結合、カーボネート結合、カルバメート結合またはチオエーテル結合を形成するものを含むことができ、このような官能基は、例えば、アミノ基；カルボキシル基；アルデヒド基；アジド基；アルキン基およびアルケン基；ケトン；カーボネート；シアノ基およびスクシンイミジル基およびヒドロキシル基などの脱離基に結合しているカルボニル官能基とすることができる。
【０３３４】
リンカーは、抗体Ｆｃ領域またはドメインのヒンジシステインにおいて、抗体コンストラクトに結合することができる。リンカーは、軽鎖定常ドメインのリジンにおいて、抗体コンストラクトに結合することができる。リンカーは、軽鎖中の操作されたシステインにおいて、抗体コンストラクトに結合することができる。リンカーは、操作された軽鎖グルタミンにおいて、抗体コンストラクトに結合することができる。リンカーは、軽鎖に操作された非天然アミノ酸において、抗体コンストラクトに結合することができる。リンカーは、重鎖定常ドメインのリジンにおいて、抗体コンストラクトに結合することができる。リンカーは、重鎖中の操作されたシステインにおいて、抗体コンストラクトに結合することができる。リンカーは、操作された重鎖グルタミンにおいて、抗体コンストラクトに結合することができる。
リンカーは、重鎖に操作された非天然アミノ酸において、抗体コンストラクトに結合することができる。例えば、アミノ酸は、本明細書に記載されている抗体コンストラクトのアミノ酸配列に操作することができ、コンジュゲートのリンカーに結合することができる。操作されたアミノ酸は、既存のアミノ酸の配列に付加されてもよい。操作されたアミノ酸が、アミノ酸の配列の１つまたは複数の既存のアミノ酸の代わりに置換していてもよい。
【０３３５】
リンカーは、スルフヒドリル基を介して、抗体コンストラクトにコンジュゲートされ得る。リンカーは、一級アミンを介して、抗体コンストラクトにコンジュゲートされ得る。リンカーは、骨髄細胞アゴニストのアルコキサミンによりケトン基を修飾することによって形成されたオキシム結合と反応する抗体コンストラクトの非天然アミノ酸の間に生成する連結部とすることができる。リンカーが、本明細書に記載されている部位において抗体コンストラクトに結合している場合、コンジュゲートのＦｃドメインは、Ｆｃ受容体に結合することができる。リンカーが、本明細書に記載されている部位において抗体コンストラクトに結合している場合、コンジュゲートの抗原結合ドメインは、その抗原に結合することができる。リンカーが、本明細書に記載されている部位において抗体コンストラクトに結合している場合、コンジュゲートの結合ドメインは、その抗原に結合することができる。
【０３３６】
操作された反応性システイン残基を有する抗体は、結合ドメインを抗体に連結させるために使用することができる。リンカーは、ソルターゼＡリンカーを介して、抗体コンストラクトを結合ドメインに結合することができる。ソルターゼＡリンカーは、ＬＸＰＴＧ認識モチーフ（配列番号１）をＮ末端ＧＧＧモチーフに融合して、生来のアミド結合を再生成させるソルターゼＡ酵素により生成することができる。したがって、生成されたリンカーは、ＬＸＰＴＧ認識モチーフ（配列番号１）に結合した抗体コンストラクトと、Ｎ末端ＧＧＧモチーフに結合した結合ドメインとを連結することができる。結合ドメインは、直接連結基によってリンカーに結合することができる。直接連結基は、共有結合である。例えば、リンカーは、結合ドメインのアミノ酸配列の末端に結合することができるか、またはシステイン残基、改変されたシステイン残基、リジン残基、セリン残基、スレオニン残基、チロシン残基、アスパラギン酸残基、グルタミン酸残基、グルタミン残基、操作されたグルタミン残基、セレノシステイン残基または非天然アミノ酸の側鎖などの、結合ドメインへの側鎖修飾部に結合することができる。非天然アミノ酸は、パラ−アジドメチル−ｌ−フェニルアラニン（ｐＡＭＦ）を含むことができる。結合は、別の部分のアルコキサミン、およびタンパク質またはペプチドのＣ末端部における反応性一級アミンなどの反応性一級アミンでケトン基を修飾することによって形成されたオキシム結合を含有する残基にやはり存在し得る。結合は、いくつかの結合、例えば、以下に限定されないが、アミド結合、エステル結合、エーテル結合、炭素−窒素結合、炭素−炭素単結合、二重結合もしくは三重結合、ジスルフィド結合またはチオエーテル結合のいずれかを介することができる。リンカーは、結合ドメインに連結することができる、少なくとも１つの官能基を有することができる。官能基の非限定例は、アミド結合、エステル結合、エーテル結合、カーボネート結合、カルバメート結合またはチオエーテル結合を形成するものを含むことができ、このような官能基は、例えば、アミノ基；カルボキシル基；アルデヒド基；アジド基；アルキン基およびアルケン基；ケトン；カーボネート；シアノおよびスクシンイミジルおよびヒドロキシル基などの脱離基に結合しているカルボニル官能基とすることができる。アミノ酸は、結合ドメインのアミノ酸配列に操作され得る。操作されたアミノ酸は、既存のアミノ酸の配列に付加されてもよい。操作されたアミノ酸が、アミノ酸の配列の１つまたは複数の既存のアミノ酸の代わりに置換されていてもよい。リンカーは、スルフヒドリル基を介して、結合ドメインにコンジュゲートされ得る。リンカーは、一級アミンを介して、結合ドメインにコンジュゲートされ得る。結合ドメインは、コンジュゲートのＦｃドメインのＣ末端にコンジュゲートされ得る。
【０３３７】
操作された反応性システイン残基を有する抗体または抗体コンストラクトは、骨髄細胞アゴニストを抗体コンストラクトに連結させるために使用することができる。リンカーは、リンカーを介して、抗体コンストラクトを骨髄細胞アゴニストに結合することができる。リンカーは、ソルターゼＡリンカーを介して、抗体コンストラクトを骨髄細胞アゴニストに結合することができる。ソルターゼＡリンカーは、ＬＸＰＴＧ認識モチーフ（配列番号１）をＮ末端ＧＧＧモチーフに融合して、生来のアミド結合を再生成させるソルターゼＡ酵素により生成することができる。したがって、生成されたリンカーは、ＬＸＰＴＧ認識モチーフ（配列番号１）に結合した抗体と、Ｎ末端ＧＧＧモチーフに結合した骨髄細胞アゴニストとを連結することができる。リンカーは、骨髄細胞アゴニストのアルコキサミンによりケトン基を修飾することによって形成されたオキシム結合と反応する抗体の非天然アミノ酸の間に生成する連結部とすることができる。骨髄細胞アゴニストは、炭素環式環および複素環式環から選択される１つまたは複数の環を含むことができる。骨髄細胞アゴニストは、骨髄細胞アゴニスト上の環外炭素原子または窒素原子への結合によって、リンカーに共有結合的に結合し得る。リンカーは、骨髄細胞アゴニストの環外の窒素原子または炭素原子を介して、骨髄細胞アゴニストにコンジュゲートされ得る。
【０３３８】
リンカーアゴニスト複合体は、生理的条件下で解離して、活性アゴニストを生成することができる。
【０３３９】
リンカーは、骨髄細胞アゴニストとリンカーとの間での直接連結基によって、骨髄細胞アゴニストに結合され得る。リンカーは、ＴＬＲ８アゴニストとリンカーとの間での直接連結基によって、ＴＬＲ８アゴニストに結合され得る。リンカーは、ＴＬＲ７とリンカーとの間での直接連結基によって、ＴＬＲ７アゴニストに結合され得る。
【０３４０】
直接連結基は、共有結合とすることができる。例えば、リンカーは、抗体コンストラクトのアミノ酸配列の末端に結合することができるか、またはシステイン残基、改変されたシステイン残基、リジン残基、セリン残基、スレオニン残基、チロシン残基、アスパラギン酸残基、グルタミン酸残基、グルタミン残基、操作されたグルタミン残基、セレノシステイン残基または非天然アミノ酸の側鎖における例などの、抗体コンストラクトへの側鎖修飾部に結合することができる。非天然アミノ酸は、パラ−アジドメチル−ｌ−フェニルアラニン（ｐＡＭＦ）を含むことができる。結合はまた、ソルターゼＡリンカーの使用などによる、別の部分のアルコキサミン、およびタンパク質またはペプチドのＣ末端部における反応性一級アミンなどの反応性一級アミンによりケトン基を修飾することによって形成されたオキシム結合を含有する残基に存在することができ、上記のソルターゼＡリンカーは、ＬＸＰＴＧ認識モチーフ（配列番号１）をＮ末端ＧＧＧモチーフに融合して、生来のアミド結合を再生成させることによって生成され得る。したがって、生成されたリンカーは、ＬＸＰＴＧ認識モチーフ（配列番号１）に結合した部分と、Ｎ末端ＧＧＧモチーフに結合した部分とを連結することができる。結合は、いくつかの結合、例えば、以下に限定されないが、アミド結合、エステル結合、エーテル結合、炭素−窒素結合、炭素−炭素単結合、二重結合もしくは三重結合、ジスルフィド結合またはチオエーテル結合のいずれかを介することができる。リンカーは、抗体コンストラクトに連結することができる、少なくとも１つの官能基を有することができる。官能基の非限定例は、アミド結合、エステル結合、エーテル結合、カーボネート結合、カルバメート結合またはチオエーテル結合を形成するものを含むことができ、このような官能基は、例えば、アミノ基；カルボキシル基；アルデヒド基；アジド基；アルキン基およびアルケン基；ケトン；炭酸塩；シアノおよびスクシンイミジルおよびヒドロキシル基などの脱離基に結合しているカルボニル官能基とすることができる。
【０３４１】
一部の実施形態では、骨髄細胞アゴニスト−リンカーは、コハク酸イミド基を含有する非開裂性マレイミド−ＰＥＧ４リンカーを骨髄細胞アゴニスト−リンカーとコンジュゲートすることによって形成され得る。
【０３４２】
コンジュゲートの抗体コンストラクトは、抗ＡＳＧＲ１抗体を含むことができる。コンジュゲートの抗体コンストラクトは、抗ＡＳＧＲ２抗体を含むことができる。コンジュゲートの抗体コンストラクトは、抗ＴＲＦ２抗体を含むことができる。コンジュゲートの抗体コンストラクトは、抗ＵＧＴ１Ａ１抗体を含むことができる。コンジュゲートの抗体コンストラクトは、抗ＳＬＣ２２Ａ７抗体を含むことができる。コンジュゲートの抗体コンストラクトは、抗ＳＬＣ１３Ａ５抗体を含むことができる。コンジュゲートの抗体コンストラクトは、抗ＳＬＣ２２Ａ１抗体を含むことができる。コンジュゲートの抗体コンストラクトは、抗Ｃ９抗体を含むことができる。コンジュゲートの抗体コンストラクトは、抗ＨＢＶ抗原抗体を含むことができる。コンジュゲートの抗体コンストラクトは、抗ＨＣＶ抗原抗体を含むことができる。
【０３４３】
コンジュゲートでは、抗体コンストラクトは、その抗原に依然として結合することができるよう、および抗体コンストラクトのＦｃ結合ドメインが、ＦｃＲに依然として結合して、ＦｃＲ媒介性シグナル伝達をもたらすように、抗体コンストラクトが骨髄細胞アゴニストに連結され得る。コンジュゲートでは、連結が抗体コンストラクトの抗原結合ドメインがその抗原に結合する能力、抗体コンストラクトのＦｃ結合ドメインがＦｃＲに結合する能力、または抗体コンストラクトのＦｃ結合ドメインがＦｃＲに結合したことに起因するＦｃＲ媒介性シグナル伝達を妨害しないように、抗体コンストラクトは骨髄細胞アゴニストに連結され得る。コンジュゲートでは、連結が、骨髄細胞アゴニストがその受容体に結合する能力を妨害しないように、骨髄細胞アゴニストは抗体コンストラクトに連結され得る。コンジュゲートは、一層強い免疫刺激、およびコンジュゲート単独の構成成分よりも一層長い治療可能時間を生じることができる。
【０３４４】
本明細書において開示されているコンジュゲートの抗原に対する抗原結合ドメインの特異性は、骨髄細胞アゴニストの存在によって影響を受け得る。コンジュゲートの抗原結合ドメインは、骨髄細胞アゴニストの非存在下における抗原結合ドメインの抗原への特異性の、少なくとも約１０％、約２０％、約３０％、約４０％、約５０％、約６０％、約７０％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％または約１００％で、その抗原に結合することができる。
【０３４５】
本明細書において開示されているコンジュゲートのＦｃ受容体に対するＦｃ結合ドメインの特異性は、骨髄細胞アゴニストの存在によって影響を受け得る。コンジュゲートのＦｃ結合ドメインは、骨髄細胞アゴニストの非存在下におけるＦｃ結合ドメインのＦｃ受容体への特異性の、少なくとも約１０％、約２０％、約３０％、約４０％、約５０％、約６０％、約７０％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％または約１００％で、Ｆｃ受容体に結合することができる。
【０３４６】
本明細書において開示されているコンジュゲートの抗原に対する抗原結合ドメインの親和性は、骨髄細胞アゴニストの存在によって影響を受け得る。コンジュゲートの抗原結合ドメインは、骨髄細胞アゴニストの非存在下における抗原結合ドメインの抗原への親和性の少なくとも約１％、約５％、約１０％、約２０％、約３０％、約４０％、約５０％、約６０％、約７０％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％または約１００％で、抗原に結合することができる。
【０３４７】
本明細書において開示されているコンジュゲートのＦｃ受容体に対するＦｃ結合ドメインの親和性は、骨髄細胞アゴニストの存在によって影響を受け得る。コンジュゲートのＦｃ結合ドメインは、骨髄細胞アゴニストの非存在下におけるＦｃ結合ドメインのＦｃ受容体への親和性の少なくとも約１％、約５％、約１０％、約２０％、約３０％、約４０％、約５０％、約６０％、約７０％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％または約１００％で、Ｆｃ受容体に結合することができる。
【０３４８】
骨髄細胞アゴニストの存在下で、抗原結合ドメインがその抗原に結合する場合のＫｄは、骨髄細胞アゴニストの非存在下で抗原結合ドメインが抗体に結合する場合のＫｄよりも、約２倍、約３倍、約４倍、約５倍、約６倍、約７倍、約８倍、約９倍、約１０倍、約１５倍、約２０倍、約２５倍、約３０倍、約３５倍、約４０倍、約４５倍、約５０倍、約６０倍、約７０倍、約８０倍、約９０倍、約１００倍、約１１０倍または約１２０倍大きくなり得る。
【０３４９】
骨髄細胞アゴニストの存在下で、Ｆｃ結合ドメインがＦｃ受容体に結合する場合のＫｄは、骨髄細胞アゴニストの非存在下でＦｃ結合ドメインがＦｃ受容体に結合する場合のＫｄよりも、約２倍、約３倍、約４倍、約５倍、約６倍、約７倍、約８倍、約９倍、約１０倍、約１５倍、約２０倍、約２５倍、約３０倍、約３５倍、約４０倍、約４５倍、約５０倍、約６０倍、約７０倍、約８０倍、約９０倍、約１００倍、約１１０倍または約１２０倍大きくなり得る。
【０３５０】
親和性とは、ある分子、例えば抗体の単一結合部位とその分子の結合パートナー、例えば、抗原との間の非共有結合性相互作用を合計した強さとすることができる。親和性はまた、抗体または抗体コンストラクトのＦｃ結合ドメインとＦｃ受容体との間の相互作用の強度を測定することもできる。特に示さない限り、本明細書で使用する場合、「結合親和性」とは、結合対（例えば、抗体と抗原、またはＦｃ結合ドメインとＦｃ受容体）のメンバー間の１：１相互作用に反映する、固有の結合親和性を指すことができる。そのパートナーＹに対する分子Ｘの親和性は、解離定数（Ｋｄ）よって一般に表すことができる。親和性は、本明細書に記載されている方法を含めた、当分野において公知の一般方法によって測定することができる。結合親和性を測定するための特定の例示的なおよび例となる実施形態を以下に記載する。
【０３５１】
一部の実施形態では、本明細書において提供されている抗体または抗体コンストラクトは、約１μＭ、約１００ｎＭ、約１０ｎＭ、約５ｎＭ、約２ｎＭ、約１ｎＭ、約０．５ｎＭ、約０．１ｎＭ、約０．０５ｎＭ、約０．０１ｎＭもしくは約０．００１ｎＭ、またはそれ未満（例えば、１０−８Ｍ以下、例えば１０−８Ｍ〜１０−１３Ｍ、例えば１０−９Ｍ〜１０−１３Ｍ）となる解離定数（Ｋｄ）を有することができる。親和性の成熟した抗体は、１つまたは複数の相補性決定領域（ＣＤＲ）において、変成を有することがない親抗体と比べて、１つまたは複数のこのような変成を有する抗体とすることができ、このような変成は、抗原に対する抗体の親和性の改善をもたらす。これらの抗体は、約５×１０−９Ｍ、約２×１０−９Ｍ、約１×１０−９Ｍ、約５×１０−１Ｍ、約２×１０−９Ｍ、約１×１０−１０Ｍ、約５×１０−１１Ｍ、約１×１０−１１Ｍ、約５×１０−１２Ｍ、約１×１０−１２Ｍまたはそれ未満のＫｄを有する、それらの抗原に結合することができる。一部の実施形態では、コンジュゲートは、１つまたは複数の相補性決定領域において、変成のないコンジュゲートと比べて、少なくとも１．５倍、２倍、２．５倍、３倍、４倍、５倍、１０倍、２０倍またはそれより大きく親和性が増大し得る。
【０３５２】
Ｋｄは、任意の好適なアッセイによって測定することができる。例えば、Ｋｄは、放射標識抗原結合アッセイ（ＲＩＡ）によって測定することができる。例えば、Ｋｄは、表面プラズモン共鳴アッセイ（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）−２０００またはＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）−３０００を使用する）を使用して測定することができる。
【０３５３】
コンジュゲートのモル比は、コンジュゲートの調製物中の抗体コンストラクトにコンジュゲートされた骨髄細胞アゴニストの数平均を指す。モル比は、例えば、液体クロマトグラフィー／質量分光法（ＬＣ／ＭＳ）によって求めることができ、この場合、抗体コンストラクトにコンジュゲートされた骨髄細胞アゴニストの数が、直接、求まる。さらに、非限定例として、このモル比は、疎水性相互作用クロマトグラフィー（ＨＩＣ）のピーク面積に基づいて、エレクトロスプレーイオン化質量分析法に接続した液体クロマトグラフィー（ＬＣ−ＥＳＩ−ＭＳ）によって、ＵＶ／可視分光法によって、逆相ＨＰＬＣ（ＲＰ−ＨＰＬＣ）によって、またはマトリックス支援レーザー脱離／イオン化飛行時間型質量分析法（ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ−ＭＳ）によって求めることができる。
【０３５４】
一部の実施形態では、抗体コンストラクトに対する骨髄細胞アゴニストのモル比は、８未満とすることができる。他の実施形態では、抗体コンストラクトに対する骨髄細胞アゴニスト体のモル比は、８、７、６、５、４、３、２または１とすることができる。
【０３５５】
これらのコンジュゲートは、様々な方法によって作製することができる。当業者は、類似の方法により、または当業者に公知の他の方法を組み合わせることにより、これらの化合物を作製することが可能となり得ることを理解している。当業者は、適切な出発物質を使用し、必要に応じて合成経路を修正することにより、本明細書に記載されている類似の方法で作製することができることも理解される。出発物質および試薬は、市販供給業者から得ることができるか、または当業者に公知の情報源に準拠して合成することができるか、または本明細書に記載されている通り調製することができる。
【０３５６】
薬学的製剤
本明細書に記載されているコンジュゲートは、それを必要とする対象への投与向け薬学的組成物として有用である。薬学的組成物は、本明細書に記載されているコンジュゲート、ならびに１種または複数の薬学的に許容される担体、希釈剤、添加物、安定剤、分散剤、懸濁化剤および／または増粘剤を含むことができる。薬学的組成物は、本明細書に記載されている任意のコンジュゲートを含むことができる。薬学的組成物は、バッファー、抗生物質、ステロイド、炭水化物、薬物（例えば、化学療法薬）、放射線、ポリペプチド、キレート剤、アジュバントおよび／または保存剤をさらに含むことができる。
【０３５７】
薬学的組成物では、コンジュゲートは、平均薬物搭載量を有することができる。薬物搭載量ｐは、抗体コンストラクトあたりの骨髄細胞アゴニスト−リンカー分子の数平均、または、抗体コンストラクトあたりの骨髄細胞アゴニストの数である。変数ｚは、１〜２０または１〜１００の範囲とすることができる。一部のコンジュゲートでは、ｚは、好ましくは１〜８である。調製物中の抗体コンストラクトあたりの骨髄細胞アゴニストの数平均は、質量分光法、ＨＩＣ、ＥＬＩＳＡアッセイおよびＨＰＬＣなどの従来手段を特徴とすることができる。
【０３５８】
薬学的組成物は、添加物および補助剤を含む、１種または複数の生理的に許容される担体を使用して製剤化することができる。製剤は、選択される投与経路に応じて、改変することができる。本明細書に記載されているコンジュゲートを含む薬学的組成物は、例えば、該コンジュゲートを凍結乾燥する、該コンジュゲートを混合する、溶解する、乳化する、カプセル封入する、または捕捉することにより製造することができる。本薬学的組成物はまた、遊離塩基形態または薬学的に許容される塩形態で、本明細書に記載されているコンジュゲートを含むこともできる。
【０３５９】
本薬学的組成物を製剤化する方法は、本明細書に記載されているコンジュゲートのいずれかを、１種または複数の不活性な薬学的に許容される添加物または担体と共に製剤化し、固体、半固体または液体組成物を形成させることを含むことができる。固体組成物は、例えば、散剤、錠剤、分散性顆粒剤およびカプセル剤を含むことができ、一部の態様では、固体組成物は、非毒性の補助物質、例えば、湿潤剤または乳化剤、ｐＨ緩衝化剤、および他の薬学的に許容される添加剤をさらに含有する。代替的に、本明細書に記載されている組成物は、凍結乾燥され得るか、または使用前に好適なビヒクル、例えば滅菌発熱物質不含水を用いる再構成向き粉末形態にあることができる。
【０３６０】
本明細書に記載されているコンジュゲートの薬学的組成物は、それぞれ、活性成分として、少なくともコンジュゲートを含むことができる。活性成分は、例えば、コロイド状薬物−送達系（例えば、リポソーム、アルブミンマイクロスフィア、マイクロエマルション、ナノ粒子およびナノカプセル）またはマイクロエマルション中で、コアセルベーション技法によって、または界面重合（例えば、それぞれ、ヒドロキシメチルセルロースまたはゼラチンマイクロカプセルおよびポリ（メチルメタクリレート）マイクロカプセル）によって調製されるマイクロカプセルに捕捉され得る。
【０３６１】
本明細書に記載されている薬学的組成物は、多くの場合、治療される特定の適応症に必要な、１種超の活性化合物をさらに含むことができる。活性化合物は、互いに悪影響を及ぼさない相補的活性を有することができる。例えば、本薬学的組成物はまた、細胞毒性剤、サイトカイン、成長剤−阻害剤、抗ホルモン剤、抗血管新生剤および／または心臓保護剤を含むことができる。このような分子は、意図する目的に有効な量での組合せ中に存在することができる。
【０３６２】
本薬学的組成物および製剤は、殺菌され得る。殺菌は、滅菌濾過による濾過によって実施することができる。
【０３６３】
本明細書に記載されている薬学的組成物は、注射剤として投与するために製剤化することができる。注射用の製剤の非限定例は、油性ビヒクルまたは水性ビヒクル中の滅菌懸濁液剤、溶液剤またはエマルション剤を含むことができる。好適な油性ビヒクルは、以下に限定されないが、脂肪油もしくは合成脂肪酸エステル、またはリポソームなどの親油性溶媒またはビヒクルを含むことができる。水性注射懸濁液は、懸濁液の粘度を向上させる物質を含むことができる。懸濁液はまた、好適な安定剤を含むことができる。注射剤は、ボーラス注射または連続的注入向けに製剤化することができる。代替的に、本明細書に記載されている薬学的組成物は、凍結乾燥され得るか、または使用前に、好適なビヒクル、例えば滅菌発熱物質不含水を用いる再構成向き粉末形態とすることができる。
【０３６４】
非経口投与の場合、本コンジュゲートは、薬学的に許容される非経口ビヒクルと共に単位投与量の注射可能形態で製剤化され得る（例えば、文字（ｌｅｔｔｅｒ）溶液、懸濁液、エマルションを使用する）。このようなビヒクルは、本質的に非毒性であり、かつ非治療的なものとすることができる。ビヒクルは、水、食塩水、リンゲル液、デキストロース溶液および５％ヒト血清アルブミンとすることができる。不揮発性油およびオレイン酸エチルなどの非水性ビヒクルも使用することができる。リポソームは、担体として使用することができる。ビヒクルは、等張性および化学安定性（例えば、バッファーおよび保存剤）を増強する物質などの添加剤を少量含むことができる。
【０３６５】
徐放性調製物も調製することができる。徐放性調製物の例は、抗体を含有することができる、固体の疎水性ポリマーの半透性マトリックスを含むことができ、これらのマトリックスは、成形物品の形態（例えば、フィルムまたはマイクロカプセル）とすることができる。徐放性マトリックスの例は、ポリエステル、ヒドロゲル（例えば、ポリ（２−ヒドロキシエチル−メタクリレート）またはポリ（ビニルアルコール））、ポリラクチド、Ｌ−グルタミン酸とγエチル−Ｌ−グルタメートとの共重合体、非分解性エチレン−酢酸ビニル、分解性乳酸−グリコール酸共重合体（ＬＵＰＲＯＮ  ＤＥＰＯ（商標）（すなわち、乳酸−グリコール酸共重合体および酢酸リュープロリドからなる注射可能なマイクロスフィア）など）およびポリ−Ｄ−（−）−３−ヒドロキシ酪酸を含むことができる。
【０３６６】
本明細書に記載されている組成物の薬学的製剤は、コンジュゲートと薬学的に許容される担体、添加物および／または安定剤とを混合することによって、保管するために調製することができる。この製剤は、凍結乾燥製剤または水溶液剤とすることができる。許容される担体、添加物および／または安定剤は、使用される投与量および濃度において、レシピエントに非毒性とすることができる。許容される担体、添加物および／または安定剤は、リン酸塩、クエン酸塩および他の有機酸などのバッファー；アスコルビン酸およびメチオニンを含む抗酸化剤；保存剤、ポリペプチド；血清アルブミンまたはゼラチンなどのタンパク質；親水性ポリマー；アミノ酸；グルコース、マンノースまたはデキストリンを含む単糖類、二糖類および他の炭水化物；ＥＤＴＡなどのキレート剤；スクロース、マンニトール、トレハロースまたはソルビトールなどの糖類；ナトリウムなどの塩形成性対イオン；金属錯体；および／または非イオン性界面活性剤もしくはポリエチレングリコールを含むことができる。
【０３６７】
治療用途
本開示のコンジュゲート、薬学的組成物および方法は、以下に限定されないが、哺乳動物、ヒト、非ヒト哺乳動物、家畜動物（例えば、実験室動物、家庭用ペットまたは家禽）、非家畜動物（例えば、野生生物）、イヌ、ネコ、げっ歯類、マウス、ハムスター、ウシ、鳥類、ニワトリ、魚類、ブタ、ウマ、ヤギ、ヒツジ、ウサギおよびそれらの任意の組合せを含む、複数の様々な対象の治療に有用となり得る。
【０３６８】
本明細書に記載されているコンジュゲート、薬学的組成物および方法は、それを必要とする対象に投与することができる、治療剤として、例えば治療として有用となり得る。治療作用は、対象において、以下に限定されないが、その症候を含めた疾患状態の低減、抑制、寛解または根絶によって得ることができる。疾患または状態を有する、あるいは疾患もしくは状態を有し易いまたはこれらを有し始めている対象における治療作用は、その状態もしくは疾患、または前状態もしくは前疾患状態の低減、抑制、予防、寛解または根絶によって得ることができる。
【０３６９】
本明細書に記載されている方法を実施する際には、治療的有効量の本明細書に記載されているコンジュゲートまたは薬学的組成物を、多くの場合、状態もしくはその進行を治療および／または予防するために、それを必要とする対象に投与することができる。薬学的組成物は、免疫系、炎症応答、または他の生理作用などの、対象の生理学に影響を及ぼし得る。治療的有効量は、疾患の重症度、対象の年齢および相対的な健康、使用される化合物の力価および他の要因に応じて、幅広く様々となり得る。
【０３７０】
治療および／または治療することとは、疾患もしくは状態の治療または改善における任意の成功指数を指すことができる。処置することは、例えば、疾患もしくは状態の１つまたは複数の症状の重症度を軽減する、遅延させるまたは緩和することを含むことができるか、あるいは患者が経験する疾患、欠陥、障害もしくは有害状態などの頻度の低下を含むことができる。治療は、本明細書において、疾患もしくは状態のある程度のレベルの治療または改善をもたらす方法を指すために使用することができ、以下に限定されないが、状態の完全な予防を含めた、その終了に向かう結果の範囲を企図することができる。
【０３７１】
予防、予防することなどは、患者における、疾患または状態、例えばウイルス感染の予防を指すことができる。例えば、ウイルス感染に罹患するリスクのある個体が、本開示の方法により治療されて、ウイルスに後日に感染した状態にならない場合、この疾患は、その個体において、少なくともある期間にわたり予防されたことになる。
【０３７２】
治療的有効量は、その組成物が投与される個体に、有益な効果を実現する、またはそうでない場合、有害な有益性のない事象を低減するのに十分な、コンジュゲート、またはその薬学的組成物もしくは活性構成成分の量とすることができる。治療有効用量は、１つまたは複数の所望のまたは望ましい（例えば、有益な）作用であって、このために投与される作用を生じる用量とすることができ、このような投与は、所与の期間にわたり、１回または複数の回数で行われる。正確な用量は、治療の目的に依存し得、公知技法を使用して、当業者により突き止めることができる。
【０３７３】
治療に使用することができる、本明細書に記載されているコンジュゲートまたは薬学的組成物が製剤化されて、治療される障害、個々の患者の状態、コンジュゲートもしくは薬学的組成物の送達部位、投与方法および医師に公知の他の要因を考慮した医学行動規範と一致した様式で投与量が確立され得る。コンジュゲートまたは薬学的組成物は、本明細書に記載されている調製の記載に準拠して調製することができる。
【０３７４】
当業者は、本明細書に記載されている薬学的組成物またはコンジュゲートのそれを必要とする対象への投与の量、期間および頻度は、例えば、以下に限定されないが、対象の健康、患者の具体的な疾患または状態、患者の具体的な疾患もしくは状態のグレードまたはレベル、対象が現在投与を受けている、もしくは投与を受けた追加の治療剤などを含めた、いくつかの要因に依存することを理解していると思われる。
【０３７５】
本明細書に記載されている方法、コンジュゲートおよび薬学的組成物は、それを必要とする対象に投与するためのものとすることができる。多くの場合、コンジュゲートまたは薬学的組成物の投与は、投与経路を含むことができ、投与経路の非限定例は、静脈内、動脈内、皮下、硬膜下、筋肉内、頭蓋内、胸骨内、腫瘍内または腹腔内を含む。さらに、薬学的組成物またはコンジュゲートは、例えば、吸入、経口、皮膚、鼻腔内または髄腔内投与によって、追加的な投与経路により対象に投与することができる。
【０３７６】
本開示の薬学的組成物またはコンジュゲートは、それを必要とする対象に、最初の投与で、および１回または複数の追加投与で投与され得る。１回または複数の追加投与は、それを必要とする対象に、最初の投与の数分後、数時間後、数日後、数週間後または数か月後に投与することができる。追加投与のうちのいずれの１回も、それを必要とする対象に、最初の投与後の２１日以内、または１４日以内、１０日以内、７日以内、４日以内、または１日以内に投与することができる。１回または複数の投与は、１日あたり１回超、１週間あたり１回超、または１か月あたり１回超で行うことができる。コンジュゲートまたは薬学的組成物は、１〜７日間の期間にわたり、２１日間、１４日間、１０日間、７日間、４日間、または毎日の周期でそれを必要とする対象に投与することができる。
【０３７７】
投与量の増加および副作用の低減
ある種の実施形態では、本開示のコンジュゲートを使用すると、骨髄細胞アゴニスト単独でのレベルよりも、コンジュゲートの形態の骨髄細胞アゴニストの方が高いレベルで、コンジュゲートを投与することが可能となり得る。例えば、本コンジュゲートは、コンジュゲート中の抗体コンストラクトにコンジュゲートされていない状態で投与されるそのような骨髄細胞アゴニストに対する最大耐量よりも高いレベルで投与することができる。ある種の実施形態では、コンジュゲートの投与は、骨髄細胞アゴニストを単独として投与した場合よりも副作用が少ないことに関連し得る。
【０３７８】
疾患、条件など
本明細書において提示されているコンジュゲート、薬学的組成物および方法は、対象における複数の疾患、状態の治療、疾患もしくは状態の予防、またはそれを必要とする対象のための他の治療用途に有用となり得る。多くの場合、本明細書において提供されているコンジュゲート、抗体コンストラクト、薬学的組成物および方法は、Ｂ型肝炎およびＣ型肝炎などの肝臓のウイルス性疾患の治療に有用となり得る。
【０３７９】
本発明は、治療によってヒトまたは動物の身体を治療する方法において使用するための、本明細書において開示されている任意コンジュゲートをさらに提供する。治療法は、免疫系のモジュレート（例えば、刺激）によるなどの本明細書において開示されている任意の機構によるものとすることができる。本発明は、例えば、免疫応答を増強することを含む、免疫系の刺激または免疫療法に使用するための、本明細書において開示されている任意のコンジュゲートを提供する。本発明は、本明細書において開示されている任意の状態、例えばウイルス感染の予防または治療のための本明細書において開示されている任意のコンジュゲートをさらに提供する。本発明はまた、Ｂ型肝炎またはＣ型肝炎の感染をｉｎ  ｖｉｖｏで軽減するなどの、本明細書において開示されている任意の状態に対して、本明細書において開示されている任意の臨床的転帰を得るために、本明細書において開示されている任意のコンジュゲートを提供する。本発明はまた、本明細書において開示されている任意の状態を予防または治療するための医薬の製造における、本明細書において開示されている任意のコンジュゲートの使用を提供する。
【０３８０】
一般合成スキームおよび実施例
以下の合成スキームは、限定ではなく、例示目的で提示されている。以下の実施例は、本明細書に記載されている化合物を作製する様々な方法を例示する。当業者は、類似の方法により、または当業者に公知の他の方法を組み合わせることにより、これらの化合物を作製することが可能となり得ることが理解される。当業者は、適切な出発物質を使用し、必要に応じて合成経路を修正することにより、以下に記載されている類似の方法で作製することができることも理解される。一般に、出発物質および試薬は、市販供給業者から得ることができるか、または当業者に公知の情報源に準拠して合成することができるか、または本明細書に記載されている通り調製することができる。
【０３８１】
スキーム１
Ｃ−８カルボキサミドの合成
2021506827.tif 000130
アルデヒド（ｉ）を、高温で３−シアノ−２−（トリフェニルホスホリリデン）プロパン酸ｔｅｒｔ−ブチルなどの適切なＷｉｔｔｉｇ試薬と反応させて、オレフィン（ｉｉ）を得て、このオレフィン（ｉｉ）は、温酢酸中、鉄粉などの還元剤によりこのオレフィン（ｉｉ）を処理することによって還元的環化を受けてアゼピン（ｉｉｉ）が得られる。ＨＣｌなどの強酸を使用することによりＣ−４エステル基を脱保護すると化合物（ｉｖ）が得られ、次に、この化合物（ｉｖ）をＢＯＰ試薬などのカップリング剤を使用して置換アミンとカップリングする。化合物（ｖ）の２−アミノ置換基をｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基により保護する。得られた化合物（ｖｉ）をＴＨＦおよびメタノールの混合物中、ＬｉＯＨなどの試薬を用いて加水分解すると、化合物（ｖｉｉ）が得られる。ＨＢＴＵおよび三級アミン塩基などの公知の試薬を使用して、（ｖｉｉ）のＣ−８カルボン酸を、アミド基に変換する。ジクロロメタン中のＴＦＡなどの試薬を使用する化合物（ｖｉｉｉ）の酸媒介性脱保護により、目的化合物（ｉｘ）が得られる。
【０３８２】
スキーム２
Ｃ−８カルボキサミドの代替合成
2021506827.tif 000131
ＴＨＦおよび水の混合物中で、一酸化炭素、Ｐｄ（ＯＡｃ）２などのパラジウム触媒、および４，５−ビス（ジフェニルホスフィノ）−９，９−ジメチルキサンテン（キサントホス）などの配位子、およびリン酸カリウムなどの塩基などの、ハロゲン化アリールのカルボニル化に使用される標準条件下で（ｉ）を反応させて、カルボン酸（ｉｉ）を得る。次に、最終化合物への変換は、スキーム１に記載されている（ｖｉｉ→ｉｘ）ものと同様の方法で行うことができる。
【０３８３】
スキーム３
Ｃ−８アミンアナログの合成
2021506827.tif 000132
アルデヒド（ｉ）を、常温で３−シアノ−２−（トリフェニルホスホリリデン）プロパン酸エチルなどの適切なＷｉｔｔｉｇ試薬と反応させて、オレフィン（ｉｉ）を得て、このオレフィン（ｉｉ）は、温酢酸中、鉄粉などの還元剤によりこのオレフィン（ｉｉ）を処理することによって、還元的環化を受けてアゼピン（ｉｉｉ）が得られる。Ｂｏｃ無水物を使用することによってＣ−２アミン基を反応させると、化合物（ｉｉｉ）が得られ、この化合物（ｉｉｉ）を、次に、ＬｉＯＨなどのアルカリ金属水酸化物で鹸化すると、カルボン酸が得られ、これをＢＯＰ試薬などのカップリング剤を使用して置換アミンとカップリングすると、化合物（ｉｖ）が得られる。ＥＤＣＩ／ＨＯＢＴおよび三級アミン塩基などの公知の試薬を使用して、（ｖ）のＣ−８カルボン酸をアミド基に変換する。銅を媒介とするカップリングまたはパラジウムを触媒とするカップリング（ベンゾフェノンイミン／Ｐｄ（ＩＩ））などの標準法を使用してハロゲン−アミン交換を行うと、Ｃ−８アニリン（ｖｉ）を得ることができる。アシル化またはスルホニル化によるアミン（ｖｉ）の官能基化により、アニリド（Ｘ＝Ｃ）またはスルホンアミド（Ｘ＝ＳＯ）化合物（ｖｉｉ）が得られる。代替的に、化合物（ｖｉｉ）は、臭化物（ｖ）と適切に置換されているアミドまたはスルホンアミドとのパラジウムを媒介とするカップリングにより直接調製することができる。ジクロロメタン中のＴＦＡなどの試薬を使用する化合物（ｖｉｉ）の酸媒介脱保護により、目的化合物（ｖｉｉｉ）が得られる。
【０３８４】
スキーム４
リンカー−ペイロードの合成
リンカー−ペイロード（ＬＰ）は、様々な方法によって合成することができる。例えば、ＬＰ化合物は、スキーム４−１に示されている通り合成することができる。
スキーム４−１
2021506827.tif 000133
【０３８５】
アミド結合形成のために活性化させたＰＥＧ化されているカルボン酸（ｉ）を、適切に置換されているアミンを含有する免疫刺激性化合物と反応させて、中間アミドを得ることができる。活性化エステル（ｉｉ）の形成は、ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ）などのカップリング剤の存在下で、Ｎ−ヒドロキシコハク酸イミドまたはペンタフルオロフェノールなどの試薬を使用する、中間アミド含有カルボン酸を反応させて、化合物（ｉｉ）を得ることによって実現することができる。
【０３８６】
ＬＰは、スキーム４−２に示されている通り合成することができる。
スキーム４−２：
2021506827.tif 000134
【０３８７】
（ｉ）などの活性化カーボネートを適切に置換されているアミン含有免疫刺激性化合物と反応させて、カルバメート（ｉｉ）を得ることができ、このカルバメート（ｉｉ）は、Ｒ３エステル基の性質に基づいた標準法を使用して脱保護することができる。次に、得られたカルボン酸（ｉｉｉ）を、Ｎ−ヒドロキシコハク酸イミドまたはペンタフルオロフェノールなどの活性化剤とカップリングすることにより、化合物（ｉｖ）を得ることができる。
【０３８８】
ＬＰ化合物は、スキーム４−３に示されている通り合成することができる。
スキーム４−３：
2021506827.tif 000135
【０３８９】
（ｉ−ａ）などの活性化カルボキン酸エステルは、適切に置換されているアミン含有免疫ｍｏｄ刺激性（ｍｏｄｓｔｉｍｕｌａｔｏｒｙ）化合物と反応させると、アミド（ｉｉ）を得ることができる。代替的に、タイプ（ｉ−ｂ）のカルボン酸を、ジシクロヘキシカルボジミド（ＤＣＣ）などのアミド結合形成剤の存在下で、適切に置換されているアミンを含有する免疫刺激性化合物にカップリングして、所望のＬＰを得ることができる。
【０３９０】
ＬＰ化合物は、スキーム４−４に示されるものなどの様々な方法により合成することができる。
スキーム４−４：
2021506827.tif 000136
【０３９１】
（ｉ）などの活性化カーボネートは、適切に置換されているアミン含有免疫ｍｏｄ刺激性（ｍｏｄｓｔｉｍｕｌａｔｏｒｙ）化合物と反応させると、ＩＳＣ標的としてのカルバメート（ｉｉ）を得ることができる。
【０３９２】
ＬＰ化合物はまた、スキーム４−５に示されている通り合成することができる。
スキーム４−５
2021506827.tif 000137
【０３９３】
（ｉ−ａ、ｉ−ｂ、ｉ−ｃ）などの活性化カルボン酸は、適切に置換されているアミン含有免疫刺激性化合物と反応させて、標的がリンカー連結されたペイロード（ＬＰ）として、アミド（ｉｉ−ａ、ｉｉ−ｂ、ｉｉ−ｃ）を得ることができる。
【実施例】
【０３９４】
以下の実施例は、本開示の一部の実施形態をさらに記載するために含まれており、本開示の範囲を限定するために使用されるべきではない。
【０３９５】
実施例１
肝臓−特異的抗原を特定する一般方法
正常組織の発現データの大要、例えば、ＧＴＥｘなどのＲＮＡ−Ｓｅｑトランスクリプトームデータベース（ＲＮＡ−Ｓｅｑ  ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｏｍｉｃ  ｄａｔａｂａｓｅ）を使用し、組織タイプによって分離した一式の試料を作製する。次に、このデータベースを試験（所望の発現を有する組織）およびコントロール（望ましくない発現を有する組織）のサブセット（この場合、肝臓対他のすべての組織）に区分けし、Ｋｒｕｓｋａｌ−Ｗａｌｌｉｓ一元配置分散分析などの分散検定の解析を行い、２つの組の試料間で有意に特異的に発現する遺伝子を特定する。得られた遺伝子リストは、正常群と比較した場合、試験群では過剰発現しているが、全体として、個々の組織タイプにおいて、所望のものよりも高い発現を依然として有し得る例を含んでもよいので、２回目のフィルタリング工程を適用し、この場合、一式のコントロール組織における任意の特定の組織に対するそのような遺伝子の平均的な組織特異的発現が所望のカットオフを超える上記の遺伝子をさらなる解析から除外する。所望の場合、一式の試験における絶対最小平均発現量、一式のコントロールにおける絶対最大平均発現量および／または試験対コントロールの発現量比に基づいて、さらなるフィルタリング工程を適用して分類し、遺伝子の戻りを制限することができる。このように得られたリストから、最終的なフィルタリング工程を行い、所望の場合、タンパク質生成物の細胞局在化に基づいて、遺伝子を含ませるか、または除外する。例えば、細胞表面に発現したタンパク質、またはそれらのうち、単回膜貫通表面タンパク質しか含ませないことが望ましいことがある。最終リストを選択する場合、１つまたは複数の特定の疾患において、または肝臓細胞サブセットにおいて、抗原の発現パターンも追加的に考慮する。例えば、肝臓細胞のサブセットの場合、問題の抗原の発現を、入手可能な肝臓細胞サブセット（肝細胞、クッパー細胞または肝星細胞など）において比較し、これらの発現パターンに応じた考慮で、抗原を除く、残すまたは優先順位をつける。可能な場合、候補遺伝子の発現のタンパク質−レベルの確認は、Ｈｕｍａｎ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ａｔｌａｓにおいて見いだされるものなどの、入手可能な免疫組織化学データを精査することによって行う。
【０３９６】
実施例２
２−アミノ−Ｎ４，Ｎ４−ジプロピル−Ｎ８−（１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−７−イル）−３Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−４，８−ジカルボキサミドＴＦＡ塩（化合物１．１）の合成
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工程Ａ：中間体１．１ａの調製
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（トリフェニルホスホリリジン（ｔｒｉｐｈｅｎｙｌｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌｉｄｉｎｅ））酢酸ｔｅｒｔ−ブチル（４５．０ｇ、１１９ｍｍｏｌ、１．００当量）のＥｔＯＡｃ（２６０ｍＬ）溶液に、２５℃でブロモアセトニトリル（８．６０ｇ、７１．７ｍｍｏｌ、４．７８ｍＬ）を加えた。この反応物を８０℃で１６時間、加熱し、この時間の後に、ＴＬＣ（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝１０：１；Ｒｆ＝０．４）およびＬＣＭＳにより、この反応が完了したことが示された。この混合物を冷却して濾過し、ＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）により洗浄して濃縮すると、クルード中間体１．１ａが赤色固体として得られ、これを精製することなく直接、使用した。
【０３９７】
工程Ｂ：中間体１．１ｂの調製
2021506827.tif 000140
中間体１．１ａ（１１．４ｇ、５４．４ｍｍｏｌ、１．００当量）および４−ホルミル−３−ニトロ安息香酸メチル（２４．８ｇ、５９．８ｍｍｏｌ、１．１０当量）のトルエン（２００ｍＬ）溶液を２５℃で１８時間、撹拌した。ＴＬＣ（石油エーテル：ＥｔＯＡｃ＝１：２）により、この反応が完了したことが示され、この混合物を濃縮すると粗生成物が得られ、これをシリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル：ＥｔＯＡｃ＝１０：１〜８：１〜４：１）により精製すると、中間体１．１ｂ（１１．３ｇ）が黄色固体として得られた。1H NMR (CDCl3)  δ 8.86 (d, J = 1.3 Hz, 1H), 8.40 (dd, J = 7.9, 1.3 Hz, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.54 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 3.97-4.05 (m, 3H), 3.27 (s, 2H), 1.60 ppm (s, 9H).
【０３９８】
工程Ｃ：中間体１．１ｃの調製
2021506827.tif 000141
中間体１．１ｂ（２３．４ｇ、２０．３ｍｍｏｌ、１．００当量）の氷酢酸（２３０ｍＬ）溶液に、６０℃で鉄粉（６．７９ｇ、１２２ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を８５℃で３時間、撹拌した。ＴＬＣ（石油エーテル：ＥｔＯＡｃ＝１：２；Ｒｆ＝０．４３）によりこの反応が完了したことが示され、この混合物を冷却して濾過し、酢酸（１００ｍＬ×２）により洗浄して濃縮した。このクルード残留物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）により希釈し、水性ＮａＨＣＯ３（５０ｍＬ×３）で洗浄してＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過して濃縮した。この残留物をシリカゲルクロマトグラフィーによって精製すると、１５．９ｇの中間体１．１ｃが黄色固体として得られた。1H NMR (CDCl3)  δ 7.95 (s, 1H), 7.76 (dd, J = 8.2, 1.5 Hz, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.46 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 3.93 (s, 3H), 2.99 (s, 2H), 1.56 (s, 9H).
【０３９９】
工程Ｄ：中間体１．１ｄの調製
2021506827.tif 000142
ＨＣｌ／ジオキサン（１６０ｍＬ）中の中間体１．１ｃ（８．００ｇ、２５．３ｍｍｏｌ）の溶液を２５℃で１６時間、撹拌し、この時間の後に、ＬＣＭＳにより、反応が完了したことが示された。この混合物を濃縮すると、１２．５ｇの中間体１．１ｄが明黄色固体として得られ、これを精製することなく直接、使用した。1H NMR (DMSO-d6)  δ 13.43 (br s, 1H), 13.00 (br s, 1H), 10.20 (s, 1H), 9.22 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.85-7.92 (m, 2H), 7.78-7.83 (m, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.52 (s, 2H).
【０４００】
工程Ｅ：中間体１．１ｅの調製
2021506827.tif 000143
３．３ｇ（１１．１ｍｍｏｌ）の中間体１．１ｄを含有する６０ｍＬのＤＭＦ溶液に、０℃で５．０ｇ（１３．３ｍｍｏｌ）のＨＢＴＵおよび７．７ｍＬ（４４．４ｍｍｏｌ）のＤＩＰＥＡを加えた。５分後、２．２ｇ（２１．７ｍｍｏｌ）のジ−ｎ−プロピルアミンを加え、この反応物を室温で一晩、撹拌した。この反応物を２０ｍＬの飽和ＮＨ４Ｃｌ、次に２０ｍＬの水によりクエンチした。この混合物をＥｔＯＡｃ（３ｘ３０ｍＬ）により抽出し、合わせた有機抽出物をブライン（２ｘ）により洗浄し、次に、Ｎａ２ＳＯ４で脱水した。乾燥剤を除去して、ＥｔＯＡｃ溶液を濃縮した後、この残留物をシリカゲル（８０ｇカラム；０％〜２０％のメタノール／ＤＣＭ）上で精製すると、３．０ｇの中間体１．１ｅが得られた。1H NMR (CDCl3)  δ 7.92 (d, J=1.5 Hz, 1H), 7.86 (dd, J = 8.2, 1.5 Hz, 1H), 7.38 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.89 (s, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.39 (t, J=7.5 Hz, 4H), 3.22 (s, 2H), 1.68 (m, 4H), 0.91 (bs, 6H).  ESI, m/z 343 [M+H].
【０４０１】
工程Ｆ：中間体１．１ｆの調製
2021506827.tif 000144
１．８ｇ（５．３ｍｍｏｌ）の中間体１．１ｅを含有する３０ｍＬのジクロロメタン溶液を０℃に冷却し、２．２ｍＬ（７．９ｍｍｏｌ）のＴＥＡ、次に１．７ｇ（７．９ｍｍｏｌ）のＢｏｃ２Ｏにより処理した。この反応混合物を室温まで一晩、撹拌し、次に、１０ｍＬの水でクエンチした。これらの層を分離して、水をジクロロメタン（３ｘ３０ｍＬ）により逆抽出した。合わせた有機抽出物をブラインにより洗浄して、Ｎａ２ＳＯ４で脱水した。溶媒を除去し、残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（８０ｇカラム；０％から７５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）により精製すると、所望の中間体１．１ｆが白色固体として得られた。
【０４０２】
工程Ｇ：中間体１．１ｇの調製
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１０ｍＬのＴＨＦと水が１：１の混合物中の５００ｍｇ（１．１３ｍｍｏｌ）の中間体１．１ｆを含有する溶液を０℃に冷却し、１．７ｍＬ（１．７ｍｍｏｌ）の１Ｎ  ＬｉＯＨで処理した。１６時間、撹拌した後、氷のチップ、次いで、十分な５％のクエン酸溶液を加えて沈殿（ｐＨ約５．５）を行った。得られた混合物をＥｔＯＡｃにより３回、洗浄し、合わせた有機抽出物をブラインで洗浄して、Ｎａ２ＳＯ４で脱水した。この溶液を蒸発させると、４１９ｍｇの中間体１．１ｇが淡黄色固体として得られ、これを精製することなく使用した。
【０４０３】
工程Ｈ：化合物１．１の調製
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４３ｍｇ（０．１０ｍｍｏｌ）の中間体１．１ｆを含有する１．０ｍＬのＤＭＦ溶液に、４６ｍｇ（０．１２ｍｍｏｌ）のＨＡＴＵを加えた。この反応混合物を５分間、撹拌し、次に、３０ｍｇ（０．１２ｍｍｏｌ）の７−Ｎ−Ｂｏｃ−アミノ−１，２，３，４−テトラヒドロキノリンおよび０．０２２ｍＬ（０．２０ｍｍｏｌ）のＮＭＭにより処理した。この反応混合物を１６時間、撹拌し、次に、５ｍＬの飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液および５ｍＬの水で処理した。得られた混合物をＥｔＯＡｃにより３回、抽出し、合わせた有機物をブラインで洗浄し、次に、Ｎａ２ＳＯ４で脱水した。溶媒の蒸発の後、粗油状物を３ｍＬのＤＣＭに溶解し、次に０℃に冷却した。次に、この混合物に０．６ｍＬのＴＦＡを加えた。この混合物を４時間、撹拌して蒸発させ、得られた残留物を逆相クロマトグラフィーにより精製すると、化合物１．１のＴＦＡ塩が白色固体として得られた。1H NMR (CD3OD)  δ  7.96 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.85 (d, J=2.4 Hz, 1H), 7.79 (d, J=8.8Hz, 1H), 7.38 (d, J=7.5Hz, 1H), 7.25 (d, J=7.5Hz, 1H), 7.10 (s, 1H), 3.55 (t, J=7.5Hz, 6H), 3.33 (m, 2H), 2.90 (t, J=6.6Hz, 2H), 2.10 (m, 1H), 1.69 (m, 4H), 0.77 (bs, 6H).  LCMS [M+H] = 460.25.
【０４０４】
実施例３
骨髄アゴニストベンアゼピン（Ｂｅｎａｚｅｐｉｎｅ）化合物
表１は、骨髄アゴニストであるベンゾアゼピン化合物を示す。化合物１．２〜１．６７は、中間体１．１ｆおよび適切に置換されているアミン、または当業者に公知の他の方法を使用することにより、化合物１．１（実施例２）の合成に使用した方法と同様の方法で調製することができる。
表1:化合物1.1〜1.67
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【０４０５】
実施例４
８−置換アニリドの合成
２−アミノ−８−（ニコチンアミド）−Ｎ，Ｎ−ジプロピル−３Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−４−カルボキサミド（化合物１．６２）の調製
2021506827.tif 000179
工程Ａ：化合物１．６２の調製
４６ｍｇ（０．１０ｍｍｏｌ）のｔｅｒｔ−ブチル（８−ブロモ−４−（ジプロピルカルバモイル）−３Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−２−イル）カルバメートのＤＭＦ（５ｍＬ）溶液に、６５ｍｇ（０．２０ｍｍｏｌ）のＣｓ２ＣＯ３および１５ｍｇ（０．１２ｍｍｏｌ）のニコチンアミドを加えた。次に、この溶液を脱気して、１８ｍｇ（０．２当量）のＢｒｅｔｔＰｈｏｓ  Ｐｄ  Ｇ３および１１ｍｇ（０．２当量）のＢｒｅｔｔＰｈｏｓにより処理して、９０℃で１２時間、加熱した。この反応混合物を冷却して、分取ＨＰＬＣによりクロマトグラフィーにかけると、６ｍｇの所望のカップリングした脱保護化合物が、オフホワイト色の固体として得られた。1H NMR (DMSO-d6) δ 10.4 (s, 1H), 9.10 (d, J=1.6Hz, 1H), 8.76 (d, J=8.0Hz, 1H), 8.28 (d, J=8.0Hz, 1H), 7.55 (m, 1H), 7.52 (s, 1H), 7.36 (d, J=8.2Hz, 1H), 7.27 (d, J=8.0Hz, 1H), 6.80 (bs, 1H), 6.68 (s, 1H), 3.44 (m, 4H), 2.69 (m, 1H), 1.54 (m, 4H), 0.89 (bs, 6H).  LCMS (M+H) = 406.2.
【０４０６】
実施例５
８−置換スルホンアミドの合成
２−アミノ−Ｎ，Ｎ−ジプロピル−８−（Ｎ−（ピリジン−３−イル）スルファモイル）−３Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−４−カルボキサミド（化合物１．６３）の調製
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工程Ａ：化合物１．６３の調製
４６０ｍｇ（１．０ｍｍｏｌ）のｔｅｒｔ−ブチル（８−ブロモ−４−（ジプロピルカルバモイル）−３Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−２−イル）カルバメートを含有する５０ｍＬのジオキサン溶液に、２１０ｍｇ（２．０ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンおよび１４０ｍｇ（１．２ｍｍｏｌ）のベンジルチオールを加えた。次に、この溶液を脱気して、１８０ｍｇ（０．２０ｍｍｏｌ）のＰｄ２（ｄｂａ）３および１１６ｍｇ（０．２０ｍｍｏｌ）のキサントホスにより処理して、９０℃で６時間、加熱した。この反応混合物を冷却し、セライトに通して濾過し、次に、逆相クロマトグラフィーによってクロマトグラフィーにかけると、２５０ｍｇの所望のチオールエーテルが得られ、これを直ちにＤＣＭ（２０ｍｌ）および酢酸（０．５ｍｌ）に溶解した。得られた溶液を氷水浴中で冷却し、１，３−ジクロロ−５，５−ジメチ（ｄｉｍｅｔｈｙ）２−イミダゾリジンジオン（１９７ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）を加えた。２時間後、この混合物をＤＣＭおよびブラインにより抽出し、有機物を乾燥して蒸発させた。この残留物をＭｅＣＮに溶解し、０℃で１−メチル−１Ｈ−イミダゾールおよび３−アミノピリジンにより処理して、２時間かけて室温まで撹拌した。この溶液をブラインにより抽出して、Ｎａ２ＳＯ４で脱水した。次に、この残留物を４ｍＬのＤＣＭに溶解し、１ｍＬのＴＦＡにより処理して、２時間、撹拌した。溶媒の蒸発および逆相ＨＰＬＣによる精製によって、３０ｍｇの所望の化合物１．６３が得られた。1H NMR (DMSO-d6) δ 10.5 (bs, 1H), 8.32 (s, 1H), 8.25 (d, J=2.0Hz, 1H), 7.54 (d, 8.0Hz, 1H), 7.52 (d, J=8.0Hz, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.22 (dd, J=8.0, 2.0Hz, 1H), 7.07 (m, 2H), 6.73 (s, 1H), 3.30 (m, 4H), 2.95 (s, 2H), 2.11 (s, 1H), 1.54 (m, 4H), 0.85 (bs, 6H).   LCMS (M+H) = 442.1.
【０４０７】
実施例６
リンカー−修飾ペイロード（ＬＰ）の合成：
４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサンアミド）−３−メチルブタンアミド）−５−ウレイドペンタンアミド）ベンジル（（５−（２−アミノ−４−（ジプロピル−カルバモイル）−３Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−８−カルボキサミド）ピリジン−３−イル）メチル）カルバメート（化合物−リンカー２．１）の調製
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工程Ａ：化合物２．１の調製
2021506827.tif 000182
１．０ｍＬのＤＭＦおよび３２μＬ（０．１８ｍｍｏｌ）のＤＩＰＥＡ中の４０ｍｇ（０．０７ｍｍｏｌ）の２−アミノ−Ｎ８−（５−（アミノメチル）ピリジン−３−イル）−Ｎ４，Ｎ４−ジプロピル−３Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−４，８−ジカルボキサミドを含有する溶液に、５４ｍｇ（０．０７ｍｍｏｌ）のＭＣ−Ｖａｌ−Ｃｉｔ−ＰＡＢ−ＰＮＰ（ＣＡＳ番号１５９８５７−８１−５）を加えた。この反応混合物を１６時間、撹拌し、次に、逆相クロマトグラフィー（ＴＦＡを含まない）によって直接、精製した。不純物のないフラクションを凍結乾燥すると、６０ｍｇ（７１％）の所望の生成物が得られ、これを５ｍＬのＤＣＭに溶解し、１ｍＬのＴＦＡにより室温で処理した。この混合物を４５分間、撹拌し、次に蒸発させた。得られた残留物を逆相クロマトグラフィー（ＴＦＡを含まない）によって精製すると、３４ｍｇ（６２％）の化合物−リンカー２．１が白色固体として得られた。1H NMR (CD3OD)  δ  8.81 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.58 (m, 2H), 7.45 (d, J=8.2 Hz, 2H), 7.33 (d, J=8.4Hz, 2H), 6.91 (s, 1H), 6.75 (s, 2H), 5.08 (s, 2H), 4.49 (m, 1H), 4.39 (m, 2H), 4.14 (d, J=6.5Hz, 1H), 3.47 (t, J=7.1Hz, 2H), 3.42 (m, 4H), 3.15 (m, 1H), 3.10 (m, 1H), 2.27 (t, J=7.4Hz, 2H), 2.05 (m, 1H), 1.88 (m, 1H), 1.75-1.52 (m, 13H), 1.31 (m, 2H), 0.97 (t, J=6.5Hz, 6H).  LCMS [M+H] = 1033.
【０４０８】
実施例７
リンカー−骨髄アゴニストを有する修飾ペイロード（ＬＰ）の合成：
２−アミノ−Ｎ８−（５−（（６−（４−（（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）メチル）シクロヘキサン−１−カルボキサミド）ヘキサンアミド）メチル）ピリジン−３−イル）−Ｎ４，Ｎ４−ジプロピル−３Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−４，８−ジカルボキサミド（化合物−リンカー２．２）の調製
2021506827.tif 000183
工程Ａ：化合物２．２の調製
2021506827.tif 000184
２．０ｍＬのＤＣＭおよび１５μＬ（０．１１ｍｍｏｌ）のトリエチルアミン中の６０ｍｇ（０．１１ｍｍｏｌ）の２−アミノ−Ｎ８−（５−（アミノメチル）ピリジン−３−イル）−Ｎ４，Ｎ４−ジプロピル−３Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−４，８−ジカルボキサミドを含有する溶液に、５０ｍｇ（０．１１ｍｍｏｌ）のＮ−スクシンイミジル６−［［４−（マレイミドメチル）シクロヘキシル］カルボキサミド］カプロエート（ＣＡＳ番号１２５５５９−００−４）を加えた。この反応混合物を１６時間、撹拌し、次に、逆相クロマトグラフィー（ＴＦＡを含まない）によって直接、精製した。不純物のないフラクションを凍結乾燥すると、所望の生成物が得られ、これを５ｍＬのＤＣＭに溶解し、１ｍＬのＴＦＡにより室温で処理した。この混合物を２時間、撹拌し、次に、蒸発させた。得られた残留物を逆相クロマトグラフィー（ＴＦＡを含まない）によって精製すると、４９ｍｇの化合物−リンカー２．２が白色固体として得られた。1H NMR (CD3OD)  δ  8.78 (s, 1H), 8.25 (s, 2H), 7.70 (d, J=1.8Hz, 1H), 7.58 (dd, J=1.8, 8.1Hz, 1H), 7.46 (d, J=8.3Hz, 1H), 6.91 (s, 1H), 6.77 (s, 2H), 4.42 (s, 2H), 3.43 (m, 4H), 3.13 (t, J=6.9Hz, 2H), 2.85 (d, J=16.6Hz, 1H), 2.29 (t, J=7.3Hz, 2H), 2.05 (m, 1H), 1.8-1.6 (m, 12H), 1.51 (m, 1H), 1.37 (m, 4H), 1.11-0.84 (m, 9H).  LCMS (M+H) = 767.
【０４０９】
実施例８
リンカー−修飾ペイロード（ＬＰ）の合成：
実施例８Ａ：２−アミノ−Ｎ８−（５−（（６−（４−（（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）メチル）シクロヘキサン−１−カルボキサミド）ヘキサンアミド）メチル）ピリジン−３−イル）−Ｎ４，Ｎ４−ジプロピル−３Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−４，８−ジカルボキサミド（化合物−リンカー２．３）の調製
2021506827.tif 000185
５８ｍｇ（０．１０ｍｍｏｌ）の化合物１．３５および３０ｍｇ（０．１ｍｍｏｌ）の２，５−ジオキソピロリジン−１−イル６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノエートを含有する２ｍＬのＤＣＭ溶液を０．０７ｍＬ（０．４ｍｍｏｌ）のＤＩＰＥＡにより処理し、この反応物を室温で４時間、撹拌した。この反応混合物を後処理することなく逆相クロマトグラフィーによって精製すると、２８ｍｇの化合物−リンカー２．３が白色固体として得られた。1H NMR (CD3OD) δ 8.81 (d, J=2.3Hz, 1H), 8.19 (d, J=1.9Hz, 1H), 8.08 (t, J=2.1Hz, 1H), 7.90 (m, 2H), 7.64 (dd, J=1.9, 8.1Hz, 1H), 7.25-7.15 (m, 5H), 7.06 (s, 1H), 6.77 (s, 2H), 4.62-4.57 (m, 3H), 4.39 (s, 2H), 3.45-3.40 (m, 4H), 3.39 (t, J=7.5Hz, 2H), 3.10 (m, 1H), 2.90 (m, 1H), 2.16 (t, J=7.5Hz, 2H), 1.70 (m, 4H), 1.50 (m, 4H), 1.10 (m, 4H), 0.95 (m, 6H).  LCMS (M+H) = 775.8.
以下の化合物−リンカー２．４〜２．７は、化合物１．３５と適切に置換されているリンカー基とを反応させることにより、上の化合物−リンカー２．３に関して記載されている方法と同様の方法で調製することができた。
【０４１０】
化合物−リンカー２．４
（Ｓ）−２−アミノ−Ｎ８−（５−（（２−（６−（４−（（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）メチル）シクロヘキサン−１−カルボキサミド）ヘキサンアミド）−３−フェニルプロパンアミド）メチル）ピリジン−３−イル）−Ｎ４，Ｎ４−ジプロピル−３Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−４，８−ジカルボキサミド
2021506827.tif 000186
ＬＣ−ｓｍｃｃから白色固体を得る。1H NMR (CD3OD) δ 8.79 (d, J=2.0Hz, 1H), 8.17 (d, J=2.0Hz, 1H), 8.09 (t, J=2.0Hz, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.69 (m, 1H), 7.55 (m, 1H), 7.25-7.15 (m, 5H), 6.96 (s, 1H), 6.79 (s, 2H), 4.62-4.57 (m, 1H), 4.38 (s, 2H), 3.45-3.40 (m, 6H), 3.14 (m, 1H), 3.05 (t, J=7.5Hz, 2H), 2.90 (m, 1H), 2.18 (t, J=7.5Hz, 2H), 2.10 (m, 1H), 1.80-1.60 (m, 10H), 1.50-1.30 (m, 6H), 1.20-1.10 (m, 3H), 0.95 (m, 6H).  LCMS (M+H) = 914.9.
【０４１１】
化合物−リンカー２．５
（Ｓ）−２−アミノ−Ｎ８−（５−（４−ベンジル−２４−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３，６，２２−トリオキソ−９，１２，１５，１８−テトラオキサ−２，５，２１−トリアザテトラコシル）ピリジン−３−イル）−Ｎ４，Ｎ４−ジプロピル−３Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−４，８−ジカルボキサミド
2021506827.tif 000187
ｍａｌ−ＰＥＧ４−ＮＨＳから白色固体を得る。1H NMR (CD3OD) δ 8.91 (d, J=2.0Hz, 1H), 8.24 (d, J=2.0Hz, 1H), 8.15 (t, J=2.0Hz, 1H), 8.01-7.98 (m, 2H), 7.72 (d, 8.0Hz, 1H), 7.25-7.15 (m, 5H), 7.12 (s, 1H), 6.78 (s, 2H), 4.60 (m, 1H), 4.43 (s, 2H), 3.73 (t, J=7.5Hz, 2H), 3.70-3.40 (m, 20H), 3.39 (s, 2H), 3.15 (m, 1H), 2.95 (m, 1H), 2.45 (t, J=7.5Hz, 2H), 1.70 (q, J=7.5Hz, 4H), 0.97-0.91 (m, 6H).  LCMS (M+H) = 980.9.
【０４１２】
化合物−リンカー２．６
（Ｓ）−２−アミノ−Ｎ８−（５−（（２−（４−（４−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）フェニル）ブタンアミド）−３−フェニルプロパンアミド）メチル）ピリジン−３−イル）−Ｎ４，Ｎ４−ジプロピル−３Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−４，８−ジカルボキサミド、トリフルオロ酢酸塩
2021506827.tif 000188
ＳＭＰＢ  ＮＨＳエステルから白色固体を得る。1H NMR (CD3OD) δ 8.95 (d, J=2.0Hz, 1H), 8.63 (d, J=2.0Hz, 1H), 8.28 (s, 1H), 8.24 (m, 2H), 7.98 (m, 2H), 7.70 (d, J=9.0Hz, 1H), 7.25-7.15 (m, 9H), 7.16 (s, 1H), 6.94 (s, 2H), 4.60 (m, 1H), 4.51-4.37 (m, 2H),  3.15 (m, 1H), 2.91 (m, 1H), 2.51 (t, J=7.5Hz, 2H), 2.22 (m, 2H), 1.81 (t, J=7.5Hz, 2H), 1.70 (q, J=7.5Hz, 4H), 0.95 (m, 6H).  LCMS (M+H) = 823.8.
【０４１３】
化合物−リンカー２．７
４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサンアミド）−３−メチルブタンアミド）−５−ウレイドペンタンアミド）ベンジル（（Ｓ）−１−（（（５−（２−アミノ−４−（ジプロピルカルバモイル）−３Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−８−カルボキサミド）ピリジン−３−イル）メチル）アミノ）−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル）カルバメート
2021506827.tif 000189
ｍｃ−ＶＣ−ＰＡＢＡ−ＰＮＰから白色固体を得る。1H NMR (CD3OD) δ 8.78 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.89 (m, 2H), 7.64 (dd, J=1.9, 8.1Hz, 1H), 7.49 (d, J=8.0Hz, 2H), 7.25-7.15 (m, 7H), 7.06 (s, 1H), 6.77 (s, 2H), 4.96 (s, 2H), 4.48 (m, 1H), 4.49-4.34 (m, 3H), 4.14 (d, J=7.5Hz, 1H), 3.46-3.44 (m, 6H), 3.22 (m, 1H), 3.11 (m, 1H), 2.90 (m, 1H), 2.33-2.25 (m, 2H), 2.08 (m, 1H), 1.91 (m, 1H), 1.75-1.50 (m, 13H), 1.30 (m, 2H), 1.00-0.85 (m, 12H).  LCMS (M+H) = 1181.4.
【０４１４】
化合物−リンカー２．８
４−（（Ｒ）−２−（（Ｒ）−２−（５−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ペンタンアミド）−３−メチルブタンアミド）−５−ウレイドペンタンアミド）ベンジル（２−（１−（５−（２−アミノ−４−（ジプロピルカルバモイル）−３Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−８−カルボキサミド）ピリジン−２−イル）ピペリジン−４−カルボキサミド）エチル）カルバメート
2021506827.tif 000190
化合物１．６１およびｍｃ−ＶＣ−ＰＡＢＡ−ＰＮＰから白色固体を得る。1H NMR (CD3OD) δ 10.1 (s, 1H), 9.49 (s, 1H), 9.33 (bs, 2H), 7.88 (d, J=8.0Hz, 1H), 7.80 (s, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.61 (s, 1H), 7.45 (d, J=8.0Hz, 1H), 7.35 (d, J=8.0Hz, 1H), 7.02 (s, 1H), 6.85-6.80 (m, 2H), 6.75 (s, 1H), 4.25 m, 2H), 3.54-3.34 (m, 10H), 3.05 (s, 4H), 2.85-2.75 (m, 4H), 2.44 (m, 1H), 1.99 (m, 1H), 1.70-1.60 (m, 12H), 0.95 (bs, 6H).
【０４１５】
化合物−リンカー２．９
４−（（Ｒ）−２−（（Ｒ）−２−（５−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ペンタンアミド）−３−メチルブタンアミド）−５−ウレイドペンタンアミド）ベンジル（１−（５−（２−アミノ−４−（ジプロピルカルバモイル）−３Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−８−カルボキサミド）ピリジン−２−イル）ピペリジン−４−イル）カルバメート
2021506827.tif 000191
化合物１．５７およびｍｃ−ＶＣ−ＰＡＢＡ−ＰＮＰから白色固体を得る。1H NMR (CD3OD) δ 8.37 (d, J=2.5Hz, 1H), 7.88 (dd, J=8.0, 2.5Hz, 1H), 7.57-7.54 (m, 3H), 7.43 (d, J=8.0Hz, 1H), 7.31 (d, J=8.0Hz, 2H), 6.89 (s, 1H), 6.85-6.80 (m, 1H), 6.78 (s, 2H), 5.03 (s, 2H), 4.45 (m, 2H), 4.12 (m, 3H), 3.65 (m, 1H), 3.54 (t, J=7.5Hz, 2H), 3.44 (m, 4H), 3.20-2.96 (m, 4H), 2.26 (t, J=7.5Hz, 2H), 2.05 (m, 1H), 1.99-1.50  (m, 18H), 1.30 (m, 2H), 0.97 (t, J=7.5Hz, 6H), 0.89 (bs, 6H).
【０４１６】
化合物−リンカー２．２０
４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサンアミド）−３−メチルブタンアミド）−５−ウレイドペンタンアミド）ベンジル（２−（（（５−（２−アミノ−４−（ジプロピルカルバモイル）−３Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−８−カルボキサミド）ピリジン−３−イル）メチル）アミノ）−２−オキソエチル）カルバメート
2021506827.tif 000192
化合物１．６４およびｍｃ−ＶＣ−ＰＡＢＡ−ＰＮＰから白色固体を得る。1H NMR (CD3OD) δ 8.81 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.58 (m, 2H), 7.45 (d, J=8.2 Hz, 2H), 7.33 (d, J=8.4Hz, 2H), 6.91 (s, 1H), 6.75 (s, 2H), 4.96 (s, 2H), 4.48 (m, 1H), 4.49-4.34 (m, 3H), 4.14 (d, J=7.5Hz, 1H), 3.46-3.44 (m, 6H), 3.22 (m, 1H), 3.11 (m, 1H), 2.90 (m, 1H), 2.33-2.25 (m, 2H), 2.08 (m, 1H), 1.91 (m, 1H), 1.75-1.50 (m, 13H), 1.30 (m, 2H), 1.00-0.85 (m, 12H).  LCMS (M+H) = 1090.2.
【０４１７】
化合物−リンカー２．２１
２−アミノ−Ｎ８−（６−（４−（（２−（４−（（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）メチル）シクロヘキサン−１−カルボキサミド）エチル）カルバモイル）ピペリジン−１−イル）ピリジン−３−イル）−Ｎ４，Ｎ４−ジプロピル−３Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−４，８−ジカルボキサミド
2021506827.tif 000193
化合物１．６１およびスクシンイミジル４−（Ｎ−マレイミドメチル）シクロヘキサン−１−カルボキシレートから白色固体を得る。1H NMR (DMSO-d6) δ 10.1 (s, 1H), 8.46 (s, 1H), 8.61 (bs, 2H), 7.92 (dd, J=8.0, 2.5Hz, 1H), 7.81 (m, 1H), 7.72 (m, 1H), 7.61 (s, 1H), 7.53 (d, J=8.0Hz, 1H), 7.41 (d, J=8.0Hz, 2H), 7.03 (s, 2H), 6.85-6.80 (m, 2H), 6.78 (s, 1H), 4.25 (m, 2H), 3.65 (m, 1H), 3.54 (t, J=7.5Hz, 2H), 3.44 (m, 4H), 3.20-2.96 (m, 4H), 2.26 (t, J=7.5Hz, 2H), 2.05 (m, 1H), 1.99-1.50  (m, 18H), 1.30 (m, 2H), 0.97 (t, J=7.5Hz, 6H), 0.89 (bs, 6H). LCMS (M+H) = 794.5.
【０４１８】
実施例８Ｂ：４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサンアミド）−３−メチルブタンアミド）−５−ウレイドペンタンアミド）ベンジル（２−（４−（（３−（２−アミノ−４−（ジプロピルカルバモイル）−３Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−８−カルボキサミド）−７，８−ジヒドロ−１，６−ナフチリジン−６（５Ｈ）−イル）メチル）ベンズアミド）エチル）カルバメート（化合物−リンカー２．１０）の合成
2021506827.tif 000194
【０４１９】
工程Ａ：中間体７Ｂ−１の調製
2021506827.tif 000195
氷水浴中で冷却した３−ニトロ−５，６，７，８−テトラヒドロ−１，６−ナフチリジンジヒドロクロリド（１．０ｇ、３．９７ｍｍｏｌ）および４−（ブロモメチル）安息香酸ｔｅｒｔ−ブチル（１．１８ｇ、４．３６ｍｍｏｌ）の撹拌したＤＭＦ（４０ｍＬ）溶液に、ＴＥＡ（２．７６ｍＬ、１９．８ｍｍｏｌ）を滴下した。冷却槽を終えながら、得られた濁りのない溶液を一晩、撹拌した。ＬＣ−ＭＳにより、大部分が所望の生成物であり、ＳＭが少量残存していることが示された。この反応混合物を真空で濃縮し、残留物を水（４５ｍＬ）および飽和ＮａＨＣＯ３溶液（５ｍＬ）により希釈し、次にＥｔＯＡｃ（３ｘ）により抽出した。合わせた抽出物を脱水（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過して濃縮した。この残留物をシリカゲル上に吸収させて、フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ  Ｇｏｌｄ  ４０ｇ；乾式ロード、０〜２０％ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ）に精製すると、１．３２ｇのｔｅｒｔ−ブチル４−（（３−ニトロ−７，８−ジヒドロ−１，６−ナフチリジン−６（５Ｈ）−イル）メチル）ベンゾエートが、オレンジ色に着色したシロップ状物として得られた。1H NMR (DMSO-d6) δ 9.15 (d, J=2.5Hz, 1H), 8.36 (d, J=2.5Hz, 1H), 7.88 (d, J=8.0Hz, 2H), 7.49 (d, J=8.0Hz, 2H), 4.00 (s, 3H), 3.79 (s, 2H), 3.71 (s, 2H), 3.04 (m, 2H), 2.85 (m, 2H), 1.55 (s, 9H).
【０４２０】
工程Ｂ：中間体７Ｂ−２の調製
2021506827.tif 000196
ｔｅｒｔ−ブチル４−（（３−ニトロ−７，８−ジヒドロ−１，６−ナフチリジン−６（５Ｈ）−イル）メチル）ベンゾエート（１．３２ｇ、３．５７ｍｍｏｌ）の撹拌した２７ｍＬのＤＣＭ溶液に、室温で、ジオキサン中の４Ｍ  ＨＣｌ（９ｍＬ、３６．０ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を３時間、撹拌し、次に減圧下で濃縮した。残留物を真空中で乾燥すると、明黄色固体が得られ、この固体をさらに精製することなく、直接、使用した。1H NMR (CD3OD) δ 9.33 (d, J=2.5Hz, 1H), 8.53 (d, J=2.5Hz, 1H), 8.19 (d, J=8.0Hz, 2H), 7.72 (d, J=8.0Hz, 2H), 4.82 (m, 2H), 4.66 (m, 2H), 4.61 (s, 2H), 3.44 (m, 2H).
【０４２１】
工程Ｃ：中間体７Ｂ−３の調製
2021506827.tif 000197
氷水浴中で冷却した、４−（（３−ニトロ−７，８−ジヒドロ−１，６−ナフチリジン−６（５Ｈ）−イル）メチル）安息香酸ジヒドロクロリド（１．２８ｇ、３．３２ｍｍｏｌ）、（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチル（２−アミノエチル）カルバメート塩酸塩（１．０６０ｇ、３．３２ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（４．６５ｍｌ、２６．６ｍｍｏｌ）の撹拌した３０ｍＬのＤＣＭ溶液に、２，４，６−トリプロピル−１，３，５，２，４，６−トリオキサトリホスフィナン２，４，６−トリオキシド（Ｔ３Ｐ（登録商標）；３．０ｍｌ、５．０ｍｍｏｌ）を滴下した。冷却槽を終えながら、混合物を一晩、撹拌した。この反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ３とＥｔＯＡｃとの間に分配した。水層をＥｔＯＡｃ（２ｘ）により抽出し、合わせた有機抽出物をブラインで洗浄してＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過して濃縮すると、２．２ｇの所望の生成物がオレンジ色から赤色の固体として得られた。
【０４２２】
工程Ｄ：中間体７Ｂ−４の調製
2021506827.tif 000198
酢酸（３０ｍＬ）／水（３ｍＬ）中の（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチル（２−（４−（（３−ニトロ−７，８−ジヒドロ−１，６−ナフチリジン−６（５Ｈ）−イル）メチル）ベンズアミド）エチル）カルバメート（２．０ｇ、３．５ｍｍｏｌ）および鉄（１．９３０ｇ、３４．６ｍｍｏｌ）の混合物を５０℃で４５分間、撹拌した。この反応混合物を、室温まで冷却し、濾過して濃縮した。この残留物を飽和ＮａＨＣＯ３（９０ｍＬ）およびＥｔＯＡｃ（９０ｍＬ）により希釈した。この沈殿物を採集して水およびＥｔＯＡｃにより洗浄し、真空で乾燥すると、１．９ｇの黄色−褐色固体が得られ、これを１：１のＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨに懸濁して、シリカゲル上に吸収させた。フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ  Ｇｏｌｄ  ８０ｇ；乾式ロード、ＣＨ２Ｃｌ２中Ｂを０〜５０％のグラジエント、Ｂ：８０：１８：２  ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ／濃ＮＨ４ＯＨ）により精製すると、１．１２ｇの所望の生成物がオフホワイト色の固体として得られた。
【０４２３】
工程Ｅ：中間体７Ｂ−５の調製
2021506827.tif 000199
２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−４−（ジプロピルカルバモイル）−３Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−８−カルボン酸（３５０ｍｇ、０．８１５ｍｍｏｌ）の撹拌したＤＭＦ（５ｍＬ）溶液に、室温でＨＡＴＵ（３４１ｍｇ、０．８９６ｍｍｏｌ）を加えた。この反応物を１５分間、撹拌した後、ＤＭＦ（１１ｍＬ）中の６６９ｍｇ（１．２２ｍｍｏｌ）の（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチル（２−（４−（（３−アミノ−７，８−ジヒドロ−１，６−ナフチリジン−６（５Ｈ）−イル）メチル）ベンズアミド）エチル）カルバメートを加えた。この反応物を３５分間、撹拌した後、０．４２７ｍＬ（２．４４ｍｍｏｌ）のヒューニッヒ塩基を加えた。得られた黄色溶液を１８時間、撹拌し、次に、真空で濃縮した。残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ  Ｇｏｌｄ  ４０ｇ；乾式ロード、ＣＨ２Ｃｌ２中Ｂを０〜５０％のグラジエント、Ｂ：８０：１８：２  ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ／濃ＮＨ４ＯＨ）により精製すると、４３５ｍｇの所望の生成物が明黄色固体として得られた。
【０４２４】
工程Ｆ：中間体７Ｂ−６の調製
2021506827.tif 000200
ｔｅｒｔ−ブチル（８−（（６−（４−（（２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）エチル）カルバモイル）ベンジル）−５，６，７，８−テトラヒドロ−１，６−ナフチリジン−３−イル）カルバモイル）−４−（ジプロピルカルバモイル）−３Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−２−イル）カルバメート（４３５ｍｇ、０．４５４ｍｍｏｌ）の撹拌した３．６ｍＬのＤＭＦ溶液に、室温で、０．９０ｍＬ（９．１ｍｍｏｌ）のピペリジンを加えた。この反応物を１時間、撹拌し、次に濃縮した。残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ  Ｇｏｌｄ  ２４ｇ；ＣＨ２Ｃｌ２中Ｂを０〜５０％のグラジエント、Ｂ：８０：１８：２  ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ／濃ＮＨ４ＯＨ）により精製すると、２４１ｍｇの所望の生成物が明黄色固体として得られた。
【０４２５】
工程Ｇ：化合物−リンカー２．１０の調製
2021506827.tif 000201
窒素下、氷水浴中で冷却したＤＭＦ（３．４ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル（８−（（６−（４−（（２−アミノエチル）カルバモイル）ベンジル）−５，６，７，８−テトラヒドロ−１，６−ナフチリジン−３−イル）カルバモイル）−４−（ジプロピルカルバモイル）−３Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−２−イル）カルバメート（８０ｍｇ、０．１０９ｍｍｏｌ）およびヒューニッヒ塩基（０．０５７ｍＬ、０．３２６ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサンアミド）−３−メチルブタンアミド）−５−ウレイドペンタンアミド）ベンジル（４−ニトロフェニル）カーボネート（８０ｍｇ、０．１０９ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２ｍＬ）溶液を滴下した。冷却槽を終えながら、この反応物を一晩、撹拌した。次に、この反応混合物を濃縮し、残留物を飽和ＮａＨＣＯ３により中和し、逆相カラム（Ｇｏｌｄ  Ｃ１８  ３０ｇ；水中の５〜６０％ＣＨ３ＣＮ、ＴＦＡを含まず）によって精製した。フラクションをプールして濃縮すると、１００ｍｇのオフ黄色固体が得られ、これを５０ｍＬのＤＣＭに直接、溶解し、１０ｍＬのＴＦＡにより処理した。得られた溶液を１時間、撹拌し、次に減圧下で濃縮した。この残留物を真空中で乾燥し、飽和ＮａＨＣＯ３で中和して逆相カラムクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ  Ｇｏｌｄ  Ｃ１８  ３０ｇ；水中の５〜７０％ＭｅＣＮとなるグラジエント、ＴＦＡを含まず）により精製した。主要フラクションを合わせて凍結乾燥すると、２２ｍｇのオフホワイト色の固体が得られた。1H NMR (CD3OD) δ 8.67 (d, J=2.5Hz, 1H), 7.91 (d, J=2.5Hz, 1H), 7.80 (d, J=8.0Hz, 1H), 7.69 (d, J=2.5Hz, 1H), 7.58-7.50 (m, 5H), 7.45 (d, J=8.0Hz, 1H), 7.26 (d, J=8.5Hz, 2H), 6.89 (s, 1H), 6.77 (s, 2H), 5.04 (s, 2H), 4.90 (m, 1H),  4.14 (d, J=7.5Hz, 1H), 3.81 (s, 2H), 3.69 (s, 2H), 3.51-3.40 (m, 8H), 3.34 (m, 2H), 3.22 (m, 1H), 3.11 (m, 2H), 2.97 (m, 2H), 2.90 (m, 3H), 2.25 (t, J=7.5Hz, 2H), 2.06 (m, 1H), 1.88 (m, 1H), 1.75-1.52 (m, 12H), 1.28 (m, 2H), 0.95 (t, J=7.5Hz, 6H), 0.89 (bs, 6H).  LCMS (M+H) = 1235.9.
【０４２６】
実施例８Ｃ：４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサンアミド）−３−メチルブタンアミド）−５−ウレイドペンタンアミド）ベンジル（２−（４−（（３−（２−アミノ−４−（ジプロピルカルバモイル）−３Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−８−カルボキサミド）−７，８−ジヒドロ−１，６−ナフチリジン−６（５Ｈ）−イル）メチル）ベンズアミド）エチル）カルバメート（化合物−リンカー２．１１）の合成
2021506827.tif 000202
【０４２７】
工程Ａ：化合物−リンカー２．１１の調製
2021506827.tif 000203
８４．５ｍｇ（０．１１５ｍｍｏｌ）のｔｅｒｔ−ブチル（８−（（６−（４−（（２−アミノエチル）カルバモイル）ベンジル）−５，６，７，８−テトラヒドロ−１，６−ナフチリジン−３−イル）カルバモイル）−４−（ジプロピルカルバモイル）−３Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−２−イル）カルバメート（上の工程Ｆから）、２，５−ジオキソピロリジン−１−イル４−（（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）メチル）シクロヘキサン−１−カルボキシレート（３８．３ｍｇ、０．１１５ｍｍｏｌ）およびヒューニッヒ塩基（０．０４０ｍＬ、０．２２９ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２．５ｍＬ）溶液を室温で１６時間、撹拌した。この反応混合物を濃縮乾固し、残留物を逆相カラムクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ  Ｇｏｌｄ  Ｃ１８  １００ｇ；水中の５〜７０％ＭｅＣＮとなるグラジエント、ＴＦＡを含まず）により精製した。所望のフラクションをプールして濃縮すると、７９ｍｇの所望の生成物が黄色固体として得られ、これを、続いて室温で２．５ｍＬのＤＣＭに溶解し、次にＴＦＡ（５００μＬ、６．４９ｍｍｏｌ）で処理した。１時間後、この反応混合物を濃縮し、この残留物を真空中で乾燥し、飽和ＮａＨＣＯ３で中和して逆相カラムクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ  Ｇｏｌｄ  Ｃ１８  １００ｇ；水中の５〜６０％  ＭｅＣＮとなるグラジエント、ＴＦＡを含まず）により精製した。主要フラクションをプールして濃縮した。残留物をＭｅＣＮ／水から凍結乾燥すると、２５ｍｇの所望の生成物がオフホワイト色の固体として得られた。1H NMR (CD3OD) δ 8.67 (d, J=2.5Hz, 1H), 7.91 (d, J=2.5Hz, 1H), 7.80 (d, J=8.0Hz, 1H), 7.68 (d, J=2.5Hz, 1H), 7.55 (dd, J=2.0, 8.0Hz, 1H), 7.53 (d, J=8.0Hz, 2H), 7.45 (d, J=8.0Hz, 1H), 6.89 (s, 1H), 6.77 (s, 2H), 4.57 (s, 1H), 3.81 (s, 2H),  3.49-3.38 (m, 8H), 3.00 (m, 2H), 2.90 (m, 2H), 2.84 (m, 1H), 2.11 (m, 1H), 1.88 (m, 1H), 1.70-1.58 (m, 8H), 1.39 (m, 2H), 1.0-0.89 (m, 10H).  LCMS (M+H) = 856.8.
【０４２８】
実施例８Ｄ：パーフルオロフェニル４−（（３−（（２−（４−（（３−（２−アミノ−４−（ジプロピルカルバモイル）−３Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−８−カルボキサミド）−７，８−ジヒドロ−１，６−ナフチリジン−６（５Ｈ）−イル）メチル）ベンズアミド）エチル）チオ）−２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）メチル）シクロヘキサン−１−カルボキシレートトリスＴＦＡ塩（化合物−リンカー２．１２）の合成
2021506827.tif 000204
【０４２９】
化合物−リンカー２．１２の調製
2021506827.tif 000205
３ｍＬの１：１のアセトニトリル／水中の２−アミノ−Ｎ４，Ｎ４−ジプロピル−Ｎ８−（６−（４−（（２−（ピリジン−２−イルジスルファニル）エチル）カルバモイル）ベンジル）−５，６，７，８−テトラヒドロ−１，６−ナフチリジン−３−イル）−３Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−４，８−ジカルボキサミド（１００ｍｇ、０．０９０ｍｍｏｌ）（トリＴＦＡ塩）および３，３’，３”−ホスファントリルトリプロピオン酸塩酸塩（３８．９ｍｇ、０．１３６ｍｍｏｌ）の溶液を室温で０．５時間、撹拌した。この反応混合物を真空中で濃縮乾固すると、黄色泡状固体の中間体７Ｄ−１が得られ、これをさらになんら精製することなく、直接、使用した。上のスキームに従い、この中間体を最終化合物−リンカー２．１２に変換した。1H NMR (CD3OD) δ 8.77 (d, J=2.0Hz, 1H), 8.22 (d, J=2.5Hz, 1H), 8.00-7.95 (m, 3H), 7.10 (s, 1H),  4.57 (bs, 2H), 4.47 (bs, 2H), 4.11 (dd, J=9.0, 3.5Hz, 1H), 3.76-3.62 (m, 3H), 3.45-3.35 (m, 4H), 3.40-3.35 (m, 4H), 3.24-3.18 (m, 4H), 2.98 (m, 1H), 2.71 (m, 1H), 2.54 (d, J=3.5Hz, 0.5H), 2.50 (d, J=3.5Hz, 0.5H),  2.15 (m, 2H), 1.83-1.79 (m, 2H), 1.74-1.64 (m, 6H), 1.55-1.45 (m, 2H), 1.17-1.10 (m, 2H), 0.96 (bs, 3H), 0.91 (bs, 3H).  LCMS (M+H) = 1057.7.
【０４３０】
実施例８Ｅ：４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサンアミド）−３−メチルブタンアミド）−５−ウレイドペンタンアミド）ベンジル３−（２−アミノ−４−（ジプロピルカルバモイル）−７−メトキシ−３Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−８−カルボキサミド）−７，８−ジヒドロ−１，６−ナフチリジン−６（５Ｈ）−カルボキシレート（化合物−リンカー２．１４）の調製
2021506827.tif 000206
２−アミノ−４−（ジプロピルカルバモイル）−３Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−８−カルボン酸および市販のｔｅｒｔ−ブチル３−アミノ−７，８−ジヒドロ−１，６−ナフチリジン−６（５Ｈ）−カルボキシレート（ＣＡＳ番号３５５８１９−０２−２）を使用して、化合物１．１と同様の方法で調製した。
1H NMR (DMSO-d6) δ 12.1 (s, 1H), 10.4 (s, 1H), 10.0 (s, 1H), 9.14 (s, 1H), 8.73 (d, J=2.4Hz, 1H), 8.08 (d, J=7.6Hz, 2H), 7.80 (d, J=8.8Hz, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.60 (d, J=8.4Hz, 2H), 7.41 (s, 1H), 7.34 (d, J=8.8Hz, 2H), 7.03 (s, 1H), 7.00 (s, 1H), 5.99 (bs, 1H), 5.07 (s, 2H), 4.65 (m, 4H), 4.40 (m, 2H), 4.21 (m, 2H), 3.97 (s, 3H), 3.74 (bt, 2H), 3.37 (t, J=6.8Hz, 5H), 3.29 (s, 2H), 3.11-2.95 (m, 4H), 2.22-1.95 (m, 4H), 1.60-1.15 (m, 12H), 0.88 (d, J=7.0Hz, 6H), 0.82 (d, J=7.0Hz, 6H). LCMS [M+H] = 1090.5.
【０４３１】
実施例８Ｆ：４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサンアミド）−３−メチルブタンアミド）−５−ウレイドペンタンアミド）ベンジル３−（２−アミノ−４−（ジプロピルカルバモイル）−７−メトキシ−３Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−８−カルボキサミド）−７，８−ジヒドロ−１，６−ナフチリジン−６（５Ｈ）−カルボキシレート（化合物−リンカー２．１５）の調製
2021506827.tif 000207
２−アミノ−４−（ジプロピルカルバモイル）−７−メトキシ−３Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−８−カルボン酸から始めて、化合物１．１と同様の方法で調製した。
【０４３２】
実施例８Ｇ：４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサンアミド）−３−メチルブタンアミド）−５−ウレイドペンタンアミド）ベンジル３−（２−アミノ−４−（ジプロピルカルバモイル）−７−フルオロ−３Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−８−カルボキサミド）−７，８−ジヒドロ−１，６−ナフチリジン−６（５Ｈ）−カルボキシレート（化合物−リンカー２．１６）の調製
2021506827.tif 000208
２−アミノ−４−（ジプロピルカルバモイル）−７−フルオロ−３Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−８−カルボン酸から始めて、化合物１．１と同様の方法で調製した。
1H NMR (DMSO-d6) δ 12.2 (s, 1H), 10.8 (s, 1H), 10.0 (s, 1H), 9.89 (s, 1H), 9.27 (s, 1H), 8.66 (s, 1H), 8.08 (d, J=2.4Hz, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.80 (d, J=8.8Hz, 2H), 7.70-7.64 (m, 2H), 7.60 (d, J=8.4Hz, 1H), 7.34 (d, J=8.8Hz, 2H), 7.02 (s, 1H), 7.00 (s, 2H), 5.99 (bs, 1H), 5.07 (s, 2H), 4.65 (m, 4H), 4.40 (m, 2H), 4.21 (m, 2H), 3.73 (bt, 2H), 3.36 (m, 5H), 3.29 (s, 2H), 3.11-2.95 (m, 4H), 2.22-1.95 (m, 4H), 1.60-1.15 (m, 12H), 0.88 (d, J=7.0Hz, 6H), 0.82 (d, J=7.0Hz, 6H). LCMS [M+H] = 1079.5.
【０４３３】
実施例８Ｈ：４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサンアミド）−３−メチルブタンアミド）−５−ウレイドペンタンアミド）ベンジル（３−（４−（（３−（２−アミノ−４−（ジプロピルカルバモイル）−３Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−８−カルボキサミド）−７，８−ジヒドロ−１，６−ナフチリジン−６（５Ｈ）−イル）メチル）ベンズアミド）−２，２−ジフルオロプロピル）カルバメート（化合物−リンカー２．１７）の調製
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化合物１．１と同様の方法で調製した。
表２は、化合物−リンカー２．１〜２．２１を示す。
表2:化合物-リンカー2.1〜2.21
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表３は、化合物−リンカー２．２３〜２．３８を示している。これらの化合物リンカーは、当分野における知識と組み合わせて、本明細書に記載されている方法を使用して作製することができる。
表3:化合物-リンカー2.23〜2.38
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【０４３４】
実施例９
リンカーを介して、抗体コンストラクトを骨髄細胞アゴニストに連結する。
この実施例は、リンカーを介して、抗体コンストラクトを骨髄細胞アゴニストに連結させてコンジュゲートを形成する様々な方法を示している。
【０４３５】
マレイミドカプロイル）−（バリン−シトルリン）−（パラ−アミノベンジルオキシカルボニル）リンカーまたはジスルフィドリンカー（例えば、式Ｉｇ〜Ｉｌに開示されている）などのリンカーをまず、骨髄細胞アゴニストに結合させて、骨髄細胞アゴニスト−リンカー化合物を形成することができる。続いて、骨髄細胞アゴニスト−リンカーを抗体コンストラクトにコンジュゲートする。
【０４３６】
リンカーは、抗体コンストラクトに結合され、この場合、このリンカーは、リンカー−抗体コンストラクトを形成するジスルフィドリンカー（例えば、式Ｉｇ〜Ｉｌ中）またはヒドラゾンリンカーである。続いて、抗体コンストラクトに連結させたリンカーに、骨髄細胞アゴニストをコンジュゲートする。
【０４３７】
実施例１０
リジンをベースとするバイオコンジュゲーション
抗体コンストラクトを、約２ｍｇ／ｍＬ〜約１０ｍｇ／ｍＬの濃度の適切なバッファー、例えば、リン酸塩、ホウ酸塩、ＰＢＳまたはＴｒｉｓ−酢酸塩に交換する。撹拌しながら、適切な当量数の骨髄細胞アゴニスト−リンカーを溶液として加える。骨髄細胞アゴニスト−リンカーコンストラクトの物理特性に応じて、共溶媒を骨髄細胞アゴニスト−リンカーコンストラクトの添加前に導入して、溶解を促進することができる。観察される反応性に応じて、この反応物を２時間〜約１２時間、室温で撹拌する。反応の進行をＬＣ−ＭＳによってモニタリングする。この反応が一旦、完了したと判断すると、適用可能な方法によって、残りの骨髄細胞アゴニスト−リンカーコンストラクトを除去し、リジン連結した骨髄細胞アゴニストコンジュゲートを所望の製剤用バッファーに交換する。
【０４３８】
リジン連結したコンジュゲートは、以下のスキーム３４（ＡＤＣ＝コンジュゲート；ＡＴＡＣ＝骨髄細胞アゴニスト−リンカー）を使用し、１０ｍｇの抗体コンストラクト（ｍＡｂ）および１０当量の骨髄細胞アゴニスト−リンカーから始めて合成する。モノマー含有量と薬物−抗体比は、本明細書に記載されている方法によって求めることができる。
2021506827.tif 000217
【０４３９】
実施例１１
鎖間ジスルフィドへのシステインをベースとするバイオコンジュゲーション
抗体を、適切な当量数の還元剤、例えばジチオスレイトールまたはトリス（２−カルボキシエチル）ホスフィンを含む、約２ｍｇ／ｍＬ〜約１０ｍｇ／ｍＬの濃度の適切なバッファー、例えば、リン酸塩、ホウ酸塩、ＰＢＳまたはＴｒｉｓ−酢酸塩に交換する。得られた溶液を適量の時間および温度で撹拌し、所望の還元を行う。撹拌しながら、骨髄細胞アゴニスト−リンカーコンストラクトを溶液として加える。骨髄細胞アゴニスト−リンカーコンストラクトの物理特性に応じて、共溶媒を骨髄細胞アゴニスト−リンカーコンストラクトの添加前に導入して、溶解を促進させる。観察される反応性に応じて、この反応物を約１時間〜約１２時間、室温で撹拌する。反応の進行を液体クロマトグラフィー−質量分析法（ＬＣ−ＭＳ）によってモニタリングする。反応が一旦完了したと判断すると、残存した遊離免疫刺激性化合物−リンカーコンストラクトを適用可能な方法により除去し、コンジュゲートを所望の製剤用バッファーに交換する。このようなシステインをベースとするコンジュゲートは、以下のスキーム３５に記載されている条件を使用し、１０ｍｇの抗体コンストラクト（ｍＡｂ）および７当量の化合物−リンカーから始めて合成する。モノマー含有量と薬物−抗体比は、本明細書に記載されている方法によって求めることができる。
スキーム３５：
2021506827.tif 000218
【０４４０】
実施例１２
操作された／部位特異的システインへのコンジュゲーション
抗体コンストラクトを、約２ｍｇ／ｍＬ〜約１０ｍｇ／ｍＬの濃度の適切なバッファー、例えば、リン酸塩、ＨＥＰＥＳ、ホウ酸塩、ＰＢＳまたはＴｒｉｓ−酢酸塩に交換する。この溶液に、適切な当量数（１０〜約４０）の適切な還元剤、例えば、ジチオスレイトールまたはトリス（２−カルボキシエチル）ホスフィンを加える。次に、観察される反応性に応じて、この反応物を約１時間〜約１２時間、室温でインキュベートする。次に、還元済み抗体コンストラクトを、約２ｍｇ／ｍＬ〜約１０ｍｇ／ｍＬの濃度の適切なバッファー、例えば、リン酸塩、ＨＥＰＥＳ、ホウ酸塩、ＰＢＳまたはＴｒｉｓ−酢酸塩に交換する（既に記載した還元剤を除去するため）。この溶液に、適切な当量数（１０〜約４０）の適切な酸化剤、例えば、デヒドロアスコルビン酸を加える。次に、観察される反応性に応じて、この反応物を約１時間〜約５時間、室温でインキュベートする。
撹拌しながら、骨髄細胞アゴニスト−リンカーコンストラクトを溶液として加える。化合物−リンカーコンストラクトの物理特性に応じて、化合物−リンカーコンストラクトの添加前に、共溶媒を導入して、溶解を促進することができる。観察される反応性に応じて、この反応物を２時間〜約１２時間、室温で撹拌する。反応の進行をＬＣ−ＭＳ、疎水性相互作用クロマトグラフィーまたは他の適切な手段によってモニタリングする。この反応が一旦、完了したと判断すると、適用可能な方法によって、残りの骨髄細胞アゴニスト−リンカーコンストラクトを除去し、部位特異的システイン連結したコンジュゲートを所望の製剤用バッファーに交換する。
【０４４１】
部位特異的システイン連結したコンジュゲートは、以下のスキームに記載されている条件を使用して、１０ｍｇの抗体コンストラクト（ｍＡｂ）および７当量の化合物−リンカーから始めて合成する。モノマー含有量および薬物−抗体比は、本明細書に記載されている方法および当分野で公知の方法によって求めることができる。
2021506827.tif 000219
【０４４２】
実施例１３
Ｋｄ値の決定
Ｋｄは、約１０の反応単位（ＲＵ）で固定化されている抗原ＣＭ５チップを用いて、２５℃でＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）−２０００またはＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）−３０００（ＢＩＡｃｏｒｅ，Ｉｎｃ．、Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ、Ｎ．Ｊ．）を使用する表面プラズモン共鳴アッセイを使用して測定する。手短に述べると、供給業者の指示書に従って、カルボキシメチル化デキストランバイオセンサーチップ（ＣＭ５、ＢＩＡＣＯＲＥ，Ｉｎｃ．）をＮ−エチル−Ｎ’−（３−ジメチルアミノプロピル）−カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ）およびＮ−ヒドロキシコハク酸イミド（ＮＨＳ）により活性化する。抗原を１０ｍＭ酢酸ナトリウム（ｐＨ４．８）で５μｇ／ｍＬ（約０．２μＭ）まで希釈した後、５μＬ／分の流速で注入し、約１０の反応単位（ＲＵ）の結合タンパク質にする。抗原の注射後に、１Ｍエタノールアミンを注入して未反応基を保護する。動力学測定に関すると、Ｆａｂまたはコンジュゲート（０．７８ｎＭ〜５００ｎＭ）の２倍の段階希釈液を約２５μＬ／分の流速で、２５℃で０．０５％ポリソルベート２０（ＴＷＥＥＮ−２０（商標））界面活性剤（ＰＢＳＴ）を含むＰＢＳ中に注入する。結合速度（ｋｏｎ）および解離速度（ｋｏｏｆｆ）は、結合および解離センサーグラムを同時適合することにより、単純な１対１ラングミュア結合モデル（ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）評価ソフトウェア、バージョン３．２）を使用して算出する。平衡解離定数（Ｋｄ）は、ｋｏｆｆ／ｋｏｎの比として算出する。例えば、Ｃｈｅｎら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２９３巻：８６５〜８８１頁（１９９９年）を参照されたい。結合速度が、表面プラズモン共鳴アッセイによって、１０６Ｍ−１  ｓ−１を超える場合、結合速度は、流動停止を備えた分光光度計（ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｍｅｔｅｒ）（Ａｖｉｖ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）、または撹拌キュベットを備えた８０００−ｓｅｒｉｅｓ  ＳＬＭ−ＡＭＩＮＣＯ（商標）分光光度計（ＴｈｅｒｍｏＳｐｅｃｔｒｏｎｉｃ）などの分光計で測定される、漸増濃度の抗原の存在下、ＰＢＳ（ｐＨ７．２）中、２５℃で、２０ｎＭの抗抗原抗体（Ｆａｂ形態またはコンジュゲート形態）の蛍光放出強度（励起＝２９５ｎｍ；放出＝３４０ｎｍ、１６ｎｍの帯域通過）の増大または低下を測定する蛍光消光技法を使用することによって求めることができる。
【０４４３】
実施例１４
モル比の決定
この実施例は、モル比を求める方法の１つを例示する。Ａｇｉｌｅｎｔ１２９０  Ｉｎｆｉｎｉｔｙ  ＵＨＰＬＣシステムを接続したＡｇｉｌｅｎｔ  Ｄｕａｌ  Ｊｅｔ  Ｓｔｒｅａｍ  ＥＳＩ源を装備した、Ａｇｉｌｅｎｔ６５５０  ｉＦｕｎｎｅｌ  Ｑ−ＴＯＦなどのＬＣ／ＭＳに１マイクログラムのコンジュゲートを注入する。生データを得て、極大エントロピーデコンボリューションアルゴリズムを使用して、ＢｉｏＣｏｎｆｉｒｍを含むＡｇｉｌｅｎｔ  ＭａｓｓＨｕｎｔｅｒ  Ｑｕａｌｉｔａｔｉｖｅ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  Ｓｏｆｔｗａｒｅなどのソフトウェアによりデコンボリューションする。インタクトなコンジュゲートの平均質量を、このソフトウェアによって算出し、これは、算出に、２５％時の上部ピーク高さを使用することができる。次に、このデータをＡｇｉｌｅｎｔモル比計算機などの別のプログラムにインポートし、骨髄細胞アゴニスト：コンジュゲートのモル比を算出する。
【０４４４】
実施例１５
モル比を決定するさらなる方法
モル比を決定する別の方法は以下のとおりである。最初に、５ｍｇ／ｍＬのコンジュゲートの溶液１０μＬを、接続したＴＯＳＯＨ  ＴＳＫｇｅｌブチル−ＮＰＲ  ＴＭ疎水性相互作用クロマトグラフィー（ＨＩＣ）カラム（粒子サイズ２．５μＭ、４．６ｍｍｘ３５ｍｍ）を据え付けたＨＰＬＣシステムに注入する。次に、１８分間の過程をかけて、移動相のグラジエントを移動相Ａ１００％から移動相Ｂ１００％まで１２分間かけて実施し、次いで、移動相Ａ１００％で、６分間、再度、平衡にする方法を行う。流速を０．８ｍＬ／分とし、検出器を２８０ｎＭに設定する。移動相Ａは、１．５Ｍ硫酸アンモニウム、２５ｍＭリン酸ナトリウム（ｐＨ７）とする。移動相Ｂは、２５ｍＭリン酸ナトリウム中の２５％イソプロパノール（ｐＨ７）とする。実施後、クロマトグラムを積分し、測定したピーク面積を合計することによりモル比を求める。
【０４４５】
実施例１６
例示的ＡＳＧＲ１抗体の生成
ヒトＩｇＧ１抗体を生成するため、ＡＳＧＲ１  ４Ａ２重鎖および軽鎖ＤＮＡを個別の発現ベクターにクローニングした。重鎖ベクターコンストラクトおよび軽鎖ベクターコンストラクトを一過的にＥｘｐｉＣＨＯ（商標）系に共発現させて、４Ａ２  ＩｇＧ１抗体を生成した。取得したＥｘｐｉＣＨＯ（商標）の上清からのタンパク質をＧＥ  ＡＫＴＡ  Ｐｕｒｅ（商標）系のプロテインＡカラムを使用して精製して均質にし、分析用ＨＰＬＣ−ＳＥＣを使用して純度を確認した。必要な場合、分取ＳＥＣカラムでさらなる精製を行い、凝集物を除去した。ＡＳＧＲ１  ７２Ｇ９および１７６Ｈ４  ＩｇＧ１抗体を同じ方法で生成した。４Ａ２、７２Ｇ９および１７６Ｈ４抗体に関する重鎖および軽鎖の配列は、すべての目的のため、その全体が参照により本明細書に組み込まれている、ＷＯ２０１７／０５８９４４に記載されている。
【０４４６】
実施例１７
Ｆｃドメイン変異を有する例示的ＡＳＧＲ１抗体の生成
４Ａ２  Ｆｃ変異体は、実施例１６に記載されているものと同様の方法で生成した。ヒトＩｇＧ１ヌルＦｃドメインは、以下の変異を含んだ：ＥＵ番号付けに基づくＬ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７ＡおよびＫ３２２Ａ。ＩｇＧ１  ＳＥＬＦドメインは、以下の変異を含んだ：ＥＵ番号付けに基づくＳ２６７ＥおよびＬ３２８Ｆ。ＬＦ変異体は、Ｌ３２８Ｆ変異を含んだ。ＩｇＧ１  ＳＥＬＦとＬＦコンストラクトはどちらも、Ｋ３２２Ａ変異をやはり含んで、ＦｃｇＲ結合に影響を及ぼすことなく、ＣＤＣ機能を無効化した。以下のコンストラクトを生成した：
ａ．  ４Ａ２  ＩｇＧ１  ＳＥＬＦ  Ｋ３２２Ａ
ｂ．  ４Ａ２  ＩｇＧ１  ＬＦ  Ｋ３２２Ａ
ｃ．  ４Ａ２  ＩｇＧ１ヌル
ｄ．  ４Ａ２  ＩｇＧ１ヌルＳＥＬＦ
ｅ．  ４Ａ２  ＩｇＧ１ヌルＬ３２８Ｆ
【０４４７】
実施例１８
例示的なシステイン操作されたＡＳＧＲ１抗体の生成
システイン操作された２つの変異体（４Ａ２  ＩｇＧ１  Ａ１１４Ｃ−ＨＣおよび４Ａ２  ＩｇＧ１  Ｖ２０５Ｃ−ＬＣ）も生成し、このタンパク質を上記の実施例１５と同様の方法で生成した。４Ａ２  ＩｇＧ１  Ａ１１４Ｃ−ＨＣは、ＥＵ番号付けに基づくと１１４位における重鎖にアラニンからシステインへの変異を含んだ。４Ａ２  Ｖ２０５Ｃ−ＬＣは、２０５位における軽鎖にバリンからシステインへの変異を含んだ。結合データにより、Ｆｃ変異体の変異およびシステイン操作された変異体は、ＡＳＧＲ１への結合に影響を及ぼさなかった。
【０４４８】
実施例１９
ＥＬＩＳＡ  ＦｃｇＲ結合アッセイを使用する、システイン操作されたＡＳＧＲ１  ４Ａ２の例示的抗体の特徴づけ
１×ＰＢＳに希釈した０．１ｕｇ／ｍｌで、様々な組換えＦｃｇ受容体（ヒトおよびマーモット属）５０ｕｌでＥＬＩＳＡプレートをコーティングした。一晩のインキュベート後、このプレートを洗浄用バッファー（１ＸＰＢＳ＋０．０５％  Ｔｗｅｅｎ２０）で洗浄し、ブロッキング用バッファー（ＰＢＳ中の１％脱脂乳）でブロッキングし、室温で１時間、インキュベートした。次に、ＥＬＩＳＡプレートを洗浄用バッファーで洗浄し、ＡＳＧＲ１試験試料（ネイキッドｍＡｂまたはシステイン操作されたＡｂ）を１００ｕｇ／ｍｌの濃度から３倍に希釈して加えた。次に、このプレートを室温で１時間、インキュベートし、洗浄用バッファーで３×、再度、洗浄した。次に、１：１０００倍に希釈したＨＲＰヤギ抗ヒトＦｃ抗体１００ｕｌを各ウェルに加え、さらに１時間、インキュベートした。このプレートを洗浄用バッファーで４×洗浄した。次に、呈色させるため、５０ｕｌのＴＭＢ  ＥＬＩＳＡ基質を加え、２Ｍ硫酸５０ｕｌを添加することにより、反応を停止させた。次に、プレートリーダーで、このプレートを４５０ｎｍの波長で読み取った。
【０４４９】
４Ａ２  ＩｇＧ１およびシステイン操作された変異体（実施例１８を参照されたい）を様々なヒトおよびマーモット属Ｆｃｇ受容体（ヒトＦｃｇＲ２ａ、ヒトＦｃｇＲ２ｂ、マーモット属ＦｃｇＲ１、マーモット属ＦｃｇＲ２ｂおよびマーモット属ＦｃｇＲ３ａ）間で比較した場合、結合親和性はすべて類似しており、システイン操作された変異体のために導入したシステイン変異は、ＦｃｇＲ結合に影響をしないことを示した（データは図示せず）。
【０４５０】
実施例２０
ヒトＦｃｇＲ１受容体に結合するＡＳＧＲ１  ４Ａ２コンジュゲートの特徴づけ
Ｏｃｔｅｔ  Ｒｅｄ９６（商標）機器を使用して、ヒトＦｃγＲ１相互作用解析のため４Ａ２  ＩｇＧ１およびコンジュゲートを解析した。コンジュゲートは、２．１４コンジュゲート（２．１４コンジュゲートとは、平均ＤＡＲが３〜５の間を有する、鎖間ジスルフィド結合を介して、抗体にコンジュゲートされた２．１４化合物リンカーを指す。Ａ１１４ＣまたはＶ２０５Ｃと明記されている場合、２．１４コンジュゲートは、導入されたシステインを介して、約２の平均ＤＡＲを有する、抗体にコンジュゲートされている２．１４化合物リンカーである。特に明記されていない限り、このコンジュゲート抗体は、４Ａ２抗体である）とした。抗体またはコンジュゲートを、抗ヒトＦｃバイオセンサーに固定化し、ＰＢＳ中の１．２ｎＭ〜１μＭの範囲の様々な濃度のＦｃγＲ１モノマーと共にインキュベートした。この実験は５工程を使用して行った：（１）ベースライン取得（６０秒）；（２）抗ヒトＦｃバイオセンサー上に抗体またはコンジュゲートをロード（１２０秒）；（３）２回目のベースライン取得（６０秒）；（４）ｋｏｎ測定のための相互作用性タンパク質の結合（１２０秒）；および（５）ｋｏｆｆ測定のための相互作用性ＦｃγＲ１の解離（３００秒）。相互作用性モノマーＦｃγＲ１は、３倍濃度シリーズを５〜６つの濃度で使用した。Ｏｃｔｅｔ  Ｄａｔａ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ  ９．０  （ＦｏｒｔｅＢｉｏ）（商標）を使用してデータを解析し、１：１結合モデルに適合させた。平衡解離定数（ＫＤ）は、ｋｏｎ対ｋｏｆｆの比によって算出した。以下の表からわかる通り、ＳＥＬＦ、ＬＦ変異を含有するコンジュゲートは、野生型Ｆｃおよびネイキッド抗体とのコンジュゲートと類似したＫＤを有した。ヌルＦｃ変異を含有するコンジュゲートだけが、ヒトＦｃγＲ１に対して非常に弱い結合を有した。データは、以下の表４に示されている：
表4
2021506827.tif 000220
【０４５１】
実施例２１
コンジュゲーション前後のＦｃｇＲへのＡＳＧＲ１  ４Ａ２コンジュゲート結合の特徴づけ
１×ＰＢＳに希釈した０．１ｕｇ／ｍｌで、様々な組換えＦｃｇ受容体（ヒトおよびマーモット属）５０ｕｌでＥＬＩＳＡプレートをコーティングした。一晩のインキュベート後、このプレートを洗浄用バッファー（１ＸＰＢＳ＋０．０５％  Ｔｗｅｅｎ２０）で洗浄し、ブロッキング用バッファー（ＰＢＳ中の１％脱脂乳）でブロッキングし、室温で１時間、インキュベートした。次に、ＥＬＩＳＡプレートを洗浄用バッファーで洗浄し、ＡＳＧＲ１試験試料（ネイキッドｍＡｂまたはコンジュゲート）を１００ｕｇ／ｍｌの濃度から３倍に希釈して加えた。次に、このプレートを室温で１時間、インキュベートし、洗浄用バッファーで３×、再度、洗浄した。次に、１：１０００倍に希釈したＨＲＰヤギ抗ヒトＦｃ抗体１００ｕｌを各ウェルに加え、さらに１時間、インキュベートした。このプレートを洗浄用バッファーで４×洗浄した。次に、呈色させるため、５０ｕｌのＴＭＢ  ＥＬＩＳＡ基質を加え、２Ｍ硫酸５０ｕｌを添加することにより反応を停止させた。次に、プレートリーダーで、このプレートを４５０ｎｍの波長で読み取った。各タンパク質に関する結合曲線をコンジュゲーション前後で比較した。表５は、ネイキッド４Ａ２  Ｆｃ変異体およびこれらのＦｃ変異体の２．１４コンジュゲートを３種のマーモット属ＦｃｇＲ（Ｒ１、Ｒ２ｂおよびＲ３ａ）と比較したものである。これらのデータは、結合は類似しており、このことは、ＴＬＲ８低分子アゴニストの抗体へのコンジュゲーションは、４Ａ２  ＩｇＧ１またはそのＦｃ変異体のマーモット属Ｆｃガンマ受容体への結合を改変しなかったことを暗示していることを示した。表６に示されている通り、様々なヒトＦｃｇＲ（Ｒ１、Ｒ２１、Ｒ２ｂおよびＲ３）への結合に関して同様のことがやはり観察された。ＴＬＲ８アゴニスト（化合物１．５０）を４Ａ２またはそのＦｃ変異体にコンジュゲートしても、ヒトＦｃｇＲへの結合には有意に影響しなかった。一般に、コンジュゲートＦｃ変異体は、ＥＬＩＳＡアッセイに基づくと、ヒトおよびウッドチャックのＦｃｇＲＩおよびＦｃｇＲ３への結合は類似していることを示した。しかし、ＦｃヌルバックグラウンドにおけるＳＥＬＦおよびＬＦ変異だけが、ヒトＦｃｇＲ２ｂへの結合を回復し、マーモット属ＦｃｇＲ２ｂへの結合は回復しなかった。
表5
2021506827.tif 000221
表6
2021506827.tif 000222
【０４５２】
実施例２２
ＰＢＭＣ−肝細胞共培養アッセイにおけるコンジュゲート活性アッセイ
ＰＢＭＣ−肝細胞共培養アッセイは、以下の通り行った：ＰＢＭＣは、密度勾配遠心分離法によってヒト血液から単離し、完全ＲＰＭＩ中に再懸濁させて、９６ウェル平底マイクロタイタープレート（１２５，０００／ウェル）にプレート培養した。次に、滴定濃度のＡＳＧＲ１−ＴＬＲ８アゴニストコンジュゲートと共に、ＡＳＧＲ１ポジティブＨｅｐＧ２細胞またはＡＳＧＲ１ネガティブＳＫＢＲ３細胞（２５，０００／ウェル）を加えた。ＡＳＧＲ１−ＴＬＲ８アゴニストコンジュゲートは、２．１４コンジュゲートであった。一晩の培養後、上清を採取し、ＴＮＦαレベルをアルファＬＩＳＡによって求めた。
【０４５３】
図１を参照すると、ＴＮＦα産生によって測定したところ、ＡＳＧＲ１−ＴＬＲ８アゴニストコンジュゲートは、ＡＳＧＲ１ポジティブ肝細胞株では活性であったが、ＡＳＧＲ１ネガティブ乳がん細胞株では活性ではなかった。
【０４５４】
実施例２３
ＰＢＭＣによるＴＮＦα産生を免疫刺激性コンジュゲートによって誘発された。
ＰＢＭＣは、フィコール勾配遠心法によってヒト血液から単離し、ｃＲＰＭＩ中に再懸濁させて、９６ウェル平底マイクロタイタープレート（１２５，０００／ウェル）にプレート培養した。次に、ＨｅｐＧ２（ＡＳＧＲ１＋）細胞（２５，０００／ウェル）を、滴定濃度のＡＳＧＲ１−ＴＬＲ８コンジュゲート、またはコントロールとして非コンジュゲート親抗体と一緒に加えた。一晩の培養後、上清を採取し、ＴＮＦαレベルをアルファＬＩＳＡによって求めた。図２は、ＡＳＧＲ１−ＴＬＲ８  ２．１４コンジュゲートが、ＡＳＧＲ１を発現する肝細胞系の存在下で、ヒトＰＢＭＣを活性化することを例示している。
【０４５５】
実施例２４
ＰＢＭＣによるＴＮＦα産生は、システイン操作されたコンジュゲートによって誘発された。
ＰＢＭＣは、フィコール勾配遠心法によってヒト血液から単離し、ｃＲＰＭＩ中に再懸濁させて、９６ウェル平底マイクロタイタープレート（１２５，０００／ウェル）にプレート培養した。次に、滴定濃度の２．１４コンジュゲート、２．１４システイン操作されたコンジュゲート（２．１４システイン操作されたコンジュゲートは、約２となる平均ＤＡＲを有しており、導入されたシステイン残基を介してコンジュゲートされている）またはコントロールとして非コンジュゲート親抗体と共に、ＨｅｐＧ２（ＡＳＧＲ１＋）細胞（２５，０００／ウェル）、を加えた。一晩の培養後、上清を採取し、ＴＮＦαレベルをアルファＬＩＳＡによって求めた。図３によって示されている通り、ＡＳＧＲ１システインが操作されたコンジュゲートは、ＡＳＧＲ１を発現する肝細胞株の存在下で、ヒトＰＢＭＣを活性化する。
【０４５６】
実施例２５
ＰＢＭＣによるＴＮＦα産生は、様々なリンカーを有するＴＬＲ８コンジュゲートによって誘発された。
ＰＢＭＣを、フィコール勾配遠心法によってヒト血液から単離し、ｃＲＰＭＩ中に再懸濁させて、９６ウェル平底マイクロタイタープレート（１２５，０００／ウェル）にプレート培養した。次に、ＨｅｐＧ２（ＡＳＧＲ１＋）細胞（２５，０００／ウェル）を、異なるリンカーを有する滴定濃度のＡＳＧＲ１−ＴＬＲ８コンジュゲート、またはコントロールとして非コンジュゲート親抗体と一緒に加えた。一晩の培養後、上清を採取し、ＴＮＦαレベルをアルファＬＩＳＡによって求めた。脚注中のコンジュゲート番号は、表３における化合物−リンカーを指す。これらの結果より、ＡＳＧＲ１−ＴＬＲ８コンジュゲートは、開裂性リンカーおよび非開裂性リンカーを含めた、様々なリンカー変形体により強力な活性を示すことが実証される。ＥＣ５０によって測定される大きさおよび力価のどちらも、リンカーの選択によって改変することができる。図４を参照されたい。
【０４５７】
実施例２６
ＰＢＭＣによるＴＮＦα産生は、複合型ＴＬＲ８−ＴＬＲ７コンジュゲートによって誘発された。
ＰＢＭＣは、フィコール勾配遠心法によってヒト血液から単離し、ｃＲＰＭＩ中に再懸濁させて、９６ウェル平底マイクロタイタープレート（１２５，０００／ウェル）にプレート培養した。次に、ＨｅｐＧ２（ＡＳＧＲ１＋）細胞（２５，０００／ウェル）を、滴定濃度の様々な比のＴＬＲ８：ＴＬＲ７アゴニストペイロードを有するＡＳＧＲ１コンジュゲートと一緒に加えた。一晩の培養後、上清を採取し、ＴＮＦαレベルをアルファＬＩＳＡによって求めた。コンジュゲートは、２．１４  ＴＬＲ８コンジュゲートおよびＴＬＲ７  ２．３９コンジュゲート（すなわち、鎖間ジスルフィドを介して、平均４のＤＡＲを有する、ＡＳＧＲ１  ４Ａ２抗体にコンジュゲートされた２．３９化合物リンカー）とした。図５は、複合型ＴＬＲ８−ＴＬＲ７  ＡＳＧＲ１コンジュゲートが、肝細胞の共培養において、ヒトＰＢＭＣからＴＮＦ−ａ産生を誘発することを示す。
【０４５８】
この実施例および実施例２７に使用したＴＬＲ７化合物−リンカーを以下に示す。
2021506827.tif 000223
【０４５９】
実施例２７
ＰＢＭＣによるサイトカイン産生は、複合型ＴＬＲ８−ＴＬＲ７コンジュゲートによって誘発された。
デュアルペイロードＴＬＲ８−ＴＬＲ７  ＡＳＧＲ１コンジュゲートは、肝細胞の共培養においてヒトＰＢＭＣからサイトカイン産生を誘発する。ＰＢＭＣを、フィコール勾配遠心法によってヒト血液から単離し、ｃＲＰＭＩ中に再懸濁させて、９６ウェル平底マイクロタイタープレート（１２５，０００／ウェル）にプレート培養した。次に、ＨｅｐＧ２（ＡＳＧＲ１＋）細胞（２５，０００／ウェル）を、滴定濃度の様々な比のＴＬＲ８：ＴＬＲ７アゴニストペイロードを有するＡＳＧＲ１コンジュゲートと一緒に加えた。一晩の培養後、上清を採取し、ＴＮＦα、ＩＬ０１２ｐ４０およびＩＦＮａレベルをアルファＬＩＳＡによって求めた。これらの結果より、ＴＬＲリガンドは、混合型コンジュゲートにおいて、ＴＬＲ７活性化によりＩＦＮａ、ならびにＴＬＲ８活性化によってＴＮＦａおよびＩＬ１２  ｐ４０産生に活性であったことが実証される。図６Ａ〜Ｃを参照されたい。
【０４６０】
実施例２８
ＡＳＧＲ１コンジュゲートによって誘発されたＰＢＭＣによるＴＮＦα産生は、Ｆｃ依存的である。
ヒトＰＢＭＣのＡＳＧＲ１コンジュゲート活性化は、Ｆｃ依存的である。ＰＢＭＣは、フィコール勾配遠心法によってヒト血液から単離し、ｃＲＰＭＩ中に再懸濁させて、９６ウェル平底マイクロタイタープレート（１２５，０００／ウェル）にプレート培養した。次に、ＨｅｐＧ２（ＡＳＧＲ１＋）細胞（２５，０００／ウェル）を、異なるＦｃ領域を有する滴定濃度の２．１４コンジュゲート、またはコントロールとして非コンジュゲート親抗体と一緒に加えた。一晩の培養後、上清を採取し、ＴＮＦαレベルをアルファＬＩＳＡによって求めた。これらの結果より、ＡＳＧＲ１−ＴＬＲ８コンジュゲートの場合、ＦｃｇＲ２に対する親和性の向上は、活性をさらに向上させること、およびＦｃｇＲ２親和性の向上は、ＦｃｇＲ１およびＦｃｇＲ３の結合の非存在下で活性化を支持することができることが実証される。図７を参照されたい。
【０４６１】
実施例２９
ＴＬＲ７およびＴＬＲ８低分子は、マーモット属ＴＮＦα発現を誘発する。
全ＲＮＡは、製造業者のプロトコールに準拠して、ＲＮｅａｓｙ（登録商標）Ｍｉｎｉ  ｋｉｔ（Ｑｉａｇｅｎ、Ｍａｒｙｌａｎｄ、ＭＤ）を使用して、刺激させたウッドチャックＰＢＭＣから抽出した。手短に述べると、細胞をペレット化し、６００ｕｌのＲＬＴバッファーに再懸濁した。この試料をボルテックスし、次に、ＱＩＡｓｈｒｅｄｄｅｒカラムに通した。ＲＮＡは、上清から抽出し、３０ｕＬの体積で溶出させた。ＲＮＡ純度は、Ｎａｎｏｄｒｏｐ  ｏｎｅ分光光度計（Ｔｈｅｒｍｏｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、Ｗａｌｔｈａｍ、ＭＡ、米国）を使用して評価した（Ａ２６０／Ａ２８０）。ゲノムＤＮＡの除去に関しては、ＤＮａｓｅ反応用バッファー中、２単位のＤＮａｓｅ  Ｉ（ＲＮａｓｅ−不含）（Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｂｉｏｌａｂｓ、Ｉｐｓｗｉｃｈ、ＭＡ米国）と共に、３７℃で１０分間、８００ｎｇのＲＮＡをインキュベートした。この反応のインキュベートを７５℃で１０分間、終わらせた。ｃＤＮＡは、製造業者のプロトコールに準拠し、ＲＴ−ＰＣＲ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、Ｃａｒｌｓｂａｄ、ＣＡ、米国）について、Ｓｕｐｅｒｓｃｒｉｐｔ  ＩＩＩ  Ｆｉｒｓｔ  Ｓｔｒａｎｄ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  Ｓｙｓｔｅｍを使用して生成した。
【０４６２】
各ＴａｑＭａｎプライマーペアに対するオリゴヌクレオチドダイマーの生成を、製造業者の指示書に従い、融解曲線解析によるＰｏｗｅｒ  ＳＹＢＲ（登録商標）Ｇｒｅｅｎ  ＰＣＲ  Ｍａｓｔｅｒ−Ｍｉｘ（Ｆｏｓｔｅｒ  Ｃｉｔｙ、ＣＡ、Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）を使用して評価した。オリゴヌクレオチドダイマーの生成をもたらしたプライマーを設計し、ウッドチャックＴＮＦａに関して試験した。使用したフォワードプライマーおよびリバースプライマーは、それぞれ、以下：５’ＣＣＴＧＣＡＡＡＣＧＧＧＣＴＡＴＡＣＣＴＴ３’および５’ＧＴＧＴＧＧＧＴＧＡＧＧＡＧＣＡＣＧＴＡ３’であった。使用したプローブは、５’６ＦＡＭ−ＣＡＧＣＣＴＴＧＧＣＣＣＴＴＧＡＡＧＡＧＧＡＣＣＴ−ＴＡＭ３’であった。リアルタイムＰＣＲアッセイはすべて、製造業者のプロトコールに従い、ＴａｑＭａｎ（登録商標）Ｆａｓｔ  Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ  ＰＣＲ  ＭａｓｔｅｒＭｉｘ（２ｘ）、Ｎｏ  ＡｍｐＥｒａｓｅ  ＵＮＧ（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）を使用して行った。反応あたり、１ｕＬのｃＤＮＡ試料をアッセイした。反応はそれぞれ、９５℃、２０秒間を１サイクル、次いで、９５℃で３秒間および６０℃で３０秒間を５０サイクルからなった。リアルタイムＰＣＲは、ＴＮＦα  ｃＤＮＡ標準品、テンプレートなしコントロールおよび試験試料を含んだウッドチャックＴＮＦα遺伝子について行った。リアルタイムＰＣＲ反応はすべて、Ｓｔｅｐ  ｏｎｅ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ、Ｖｅｒｓｉｏｎ  ２．３（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）を使用するＳｔｅｐ  ｏｎｅ  Ｐｌｕｓ  Ｆａｓｔ  Ｒｅａｌ−Ｔｉｍｅ  ＰＣＲシステムで行った。Ｓｔｅｐ  ｏｎｅ  Ｓｏｆｔｗａｒｅを使用してデータを解析し、各試料に関するＣｔ値を生成した。
【０４６３】
合成したウッドチャックＴＮＦα  ｃＤＮＡ標準品を使用して、Ｃｔ対コピー数の対数をプロットした標準曲線を生成した。次に、各データ点に対するＣｔ値を求め、標準曲線に正規化してコピー数を得た。様々なＴＬＲ７および８化合物に対して、１ｎｇのｍＲＮＡあたりのコピー数をプロットしたものを生成した（図８を参照されたい）。この図は、ＴＬＲ７およびＴＬＲ８によるウッドチャックＴＮＦα遺伝子の活性化が強力であることを示す。ＴＬＲ８低分子は、化合物１．５０であり、ＴＬＲ７低分子は、
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である。
【０４６４】
実施例３０
ＡＳＧＲ１  ＴＬＲ８コンジュゲートは、標的細胞の存在下で、マーモット属ＰＢＭＣを条件付きで活性化する。
ｉＱ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ（カタログ番号ＩＱＢ−ＷＰＢ１０２）から購入したウッドチャック末梢血単核球細胞（ｗＰＢＭＣ）を解凍し、ＨｅｐＧ２細胞、ＳＫ−ＢＲ−３細胞と５：１の比で、またはそれら自体を２４ウェルプレートに沈着させて、１０％  ＦＢＳ  ＲＰＭＩを含有する培地中、３００ｎＭで、２．１４コンジュゲート（ｃｏｎｊｇｕａｔｅ）、ネイキッド抗体または化合物１．５０の段階希釈液と一緒にし、２４時間、一緒にインキュベートした。インキュベート後、ｗＰＢＭＣを溶解し、Ｑｉａｇｅｎ  ＲＮｅａｓｙキットを使用して全ＲＮＡを精製した。
【０４６５】
全ＲＮＡは、製造業者のプロトコールに準拠して、ＲＮｅａｓｙ（登録商標）Ｍｉｎｉ  ｋｉｔ（Ｑｉａｇｅｎ、Ｍａｒｙｌａｎｄ、ＭＤ）を使用して、刺激させたウッドチャックＰＢＭＣから抽出した。手短に述べると、細胞をペレット化し、６００ｕｌのＲＬＴバッファーに再懸濁した。この試料をボルテックスし、次に、ＱＩＡｓｈｒｅｄｄｅｒカラムに通した。ＲＮＡは、上清から抽出し、３０ｕＬ体積で溶出させた。ＲＮＡ純度は、Ｎａｎｏｄｒｏｐ  ｏｎｅ分光光度計（Ｔｈｅｒｍｏｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、Ｗａｌｔｈａｍ、ＭＡ、米国）を使用して評価した（Ａ２６０／Ａ２８０）。ゲノムＤＮＡの除去に関しては、ＤＮａｓｅ反応用バッファー中、２単位のＤＮａｓｅ  Ｉ（ＲＮａｓｅ−不含）（Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｂｉｏｌａｂｓ、Ｉｐｓｗｉｃｈ、ＭＡ米国）と共に、３７℃で１０分間、８００ｎｇのＲＮＡをインキュベートした。この反応のインキュベートを７５℃で１０分間、終わらせた。ｃＤＮＡは、製造業者のプロトコールに準拠し、ＲＴ−ＰＣＲ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、Ｃａｒｌｓｂａｄ、ＣＡ、米国）について、Ｓｕｐｅｒｓｃｒｉｐｔ  ＩＩＩ  Ｆｉｒｓｔ  Ｓｔｒａｎｄ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  Ｓｙｓｔｅｍを使用して生成した。
【０４６６】
各ＴａｑＭａｎプライマーペアに対するオリゴヌクレオチドダイマーの生成を、製造業者の指示書に従い、融解曲線解析によるＰｏｗｅｒ  ＳＹＢＲ（登録商標）Ｇｒｅｅｎ  ＰＣＲ  Ｍａｓｔｅｒ−Ｍｉｘ（Ｆｏｓｔｅｒ  Ｃｉｔｙ、ＣＡ、Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）を使用して評価した。オリゴヌクレオチドダイマーの生成をもたらしたプライマーを設計し、ウッドチャックＴＮＦａに関して試験した。使用したフォワードプライマーおよびリバースプライマーは、それぞれ、以下：５’ＣＣＴＧＣＡＡＡＣＧＧＧＣＴＡＴＡＣＣＴＴ３’および５’ＧＴＧＴＧＧＧＴＧＡＧＧＡＧＣＡＣＧＴＡ３’であった。使用したプローブは、５’６ＦＡＭ−ＣＡＧＣＣＴＴＧＧＣＣＣＴＴＧＡＡＧＡＧＧＡＣＣＴ−ＴＡＭ３’であった。リアルタイムＰＣＲアッセイはすべて、製造業者のプロトコールに従い、ＴａｑＭａｎ（登録商標）Ｆａｓｔ  Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ  ＰＣＲ  ＭａｓｔｅｒＭｉｘ（２ｘ）、Ｎｏ  ＡｍｐＥｒａｓｅ  ＵＮＧ（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）を使用して行った。反応あたり、１ｕＬのｃＤＮＡ試料をアッセイした。反応はそれぞれ、９５℃、２０秒間を１サイクル、次いで、９５℃で３秒間および６０℃で３０秒間を５０サイクルからなった。リアルタイムＰＣＲは、ＴＮＦα  ｃＤＮＡ標準品、テンプレートなしコントロールおよび試験試料を含んだウッドチャックＴＮＦα遺伝子について行った。リアルタイムＰＣＲ反応はすべて、Ｓｔｅｐ  ｏｎｅ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ、Ｖｅｒｓｉｏｎ  ２．３（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）を使用するＳｔｅｐ  ｏｎｅ  Ｐｌｕｓ  Ｆａｓｔ  Ｒｅａｌ−Ｔｉｍｅ  ＰＣＲシステムで行った。Ｓｔｅｐ  ｏｎｅ  Ｓｏｆｔｗａｒｅを使用してデータを解析し、各試料に関するＣｔ値を生成した。
【０４６７】
コンジュゲートにより処理した試料の各々に対するＣｔ値を生成し、標準曲線からコピー数を求めた。コントロール試料に対するコピー数を、様々な細胞処理に対してプロットした。マーモット属ＴＮＦα遺伝子の活性化は、ＡＳＲＧ１＋標的細胞（ＨｅｐＧ２）およびＰＢＭＣが存在するときだけ観察される。ＳＫＢＲ３（ＡＳＧＲ１ネガティブ細胞株）とマーモット属ＰＢＭＣ、またはマーモット属ＰＢＭＣ単独は、ＴＮＦα遺伝子を活性化しなかった。図９を参照されたい。
【０４６８】
実施例３１
ＡＳＧＲ１コンジュゲート
この実施例は、Ｂ型肝炎を治療するためのＡＳＧＲ１コンジュゲートの使用を記載する。ＡＳＧＲ１に特異的に結合する標的結合ドメインおよび標的結合ドメインに共有結合的に結合しているＦｃ結合ドメインを含む抗体コンストラクト、ＴＬＲ７アゴニスト、ならびに抗体コンストラクトにＴＬＲ７アゴニストを共有結合的に結合させたリンカーを含むコンジュゲートを生成する。
【０４６９】
ＡＳＧＲ１コンジュゲートは、Ｂ型肝炎ウイルス感染を有する対象に投与する。対象は、ヒトまたは非ヒト動物とすることができる。ＡＳＧＲ１コンジュゲートは、Ｂ型肝炎ウイルスに対する免疫応答を亢進する。
【０４７０】
実施例３２
ＡＳＧＲ１コンジュゲート
この実施例は、Ｂ型肝炎を治療するためのデュアルペイロードＴＬＲ８−ＴＬＲ７  ＡＳＧＲ１コンジュゲートの使用を記載する。ＡＳＧＲ１に特異的に結合する標的結合ドメインおよび標的結合ドメインに共有結合的に結合しているＦｃ結合ドメインを含む抗体コンストラクト、ＴＬＲ７アゴニスト、および抗体コンストラクトにＴＬＲ７アゴニストを共有結合的に結合させたリンカー、ならびにＴＬＲ８アゴニスト、およびＴＬＲ８アゴニストを抗体コンストラクトに共有結合的に結合させたリンカーを含むコンジュゲートを生成する。
【０４７１】
ＡＳＧＲ１コンジュゲートは、Ｂ型肝炎ウイルス感染を有する対象に投与する。対象は、ヒトまたは非ヒト動物とすることができる。ＡＳＧＲ１コンジュゲートは、Ｂ型肝炎ウイルスに対する免疫応答を亢進する。
【０４７２】
実施例３３
ＡＳＧＲ２コンジュゲート
この実施例は、対象における、Ｂ型肝炎を治療するためのＡＳＧＲ２コンジュゲートの使用を記載する。ＡＳＧＲ２に特異的に結合する標的結合ドメインおよび標的結合ドメインに共有結合的に結合しているＦｃ結合ドメインを含む抗体コンストラクト、ＴＬＲ７アゴニスト、ならびに抗体コンストラクトにＴＬＲ７アゴニストを共有結合的に結合させたリンカーを含むコンジュゲートを生成する。
【０４７３】
ＡＳＧＲ２コンジュゲートは、Ｂ型肝炎ウイルス感染を有する対象に投与する。対象は、ヒトまたは非ヒト動物とすることができる。ＡＳＧＲ２コンジュゲートは、Ｂ型肝炎ウイルスに対する免疫応答を亢進する。
【０４７４】
実施例３４
ＴＲＦ２コンジュゲート
この実施例は、対象における、Ｂ型肝炎を治療するためのＴＲＦ２コンジュゲートの使用を記載する。ＴＲＦ２に特異的に結合する標的結合ドメインおよび標的結合ドメインに共有結合的に結合しているＦｃ結合ドメインを含む抗体コンストラクト、ＴＬＲ７アゴニスト、ならびに抗体コンストラクトにＴＬＲ７アゴニストを共有結合的に結合させたリンカーを含むコンジュゲートを生成する。
【０４７５】
ＴＲＦ２コンジュゲートは、Ｂ型肝炎ウイルス感染を有する対象に投与する。対象は、ヒトまたは非ヒト動物とすることができる。ＴＲＦ２コンジュゲートは、Ｂ型肝炎ウイルスに対する免疫応答を亢進する。
【０４７６】
実施例３５
ＡＳＧＲ１コンジュゲート
この実施例は、対象における、Ｂ型肝炎を治療するためのＡＳＧＲ１コンジュゲートの使用を記載する。ＡＳＧＲ１に特異的に結合する標的結合ドメインおよび標的結合ドメインに共有結合的に結合しているＦｃ結合ドメインを含む抗体コンストラクト、ＴＬＲ８アゴニスト、ならびに抗体コンストラクトにＴＬＲ８アゴニストを共有結合的に結合させたリンカーを含むコンジュゲートを生成する。
【０４７７】
ＡＳＧＲ１コンジュゲートは、Ｂ型肝炎ウイルス感染を有する対象に投与する。対象は、ヒトまたは非ヒト動物とすることができる。ＡＳＧＲ１コンジュゲートは、Ｂ型肝炎ウイルスに対する免疫応答を亢進する。
【０４７８】
実施例３６
ＡＳＧＲ２コンジュゲート
この実施例は、対象における、Ｂ型肝炎を治療するためのＡＳＧＲ２コンジュゲートの使用を記載する。ＡＳＧＲ２に特異的に結合する標的結合ドメインおよび標的結合ドメインに共有結合的に結合しているＦｃ結合ドメインを含む抗体コンストラクト、ＴＬＲ８アゴニスト、ならびに抗体コンストラクトにＴＬＲ８アゴニストを共有結合的に結合させたリンカーを含むコンジュゲートを生成する。
【０４７９】
ＡＳＧＲ２コンジュゲートは、Ｂ型肝炎ウイルス感染を有する対象に投与する。対象は、ヒトまたは非ヒト動物とすることができる。ＡＳＧＲ２コンジュゲートは、Ｂ型肝炎ウイルスに対する免疫応答を亢進する。
【０４８０】
実施例３７
ＴＲＦ２コンジュゲート
この実施例は、対象における、Ｂ型肝炎を治療するためのＴＲＦ２コンジュゲートの使用を記載する。ＴＲＦ２に特異的に結合する標的結合ドメインおよび標的結合ドメインに共有結合的に結合しているＦｃ結合ドメインを含む抗体コンストラクト、ＴＬＲ８アゴニスト、ならびに抗体コンストラクトにＴＬＲ８アゴニストを共有結合的に結合させたリンカーを含むコンジュゲートを生成する。
【０４８１】
ＴＲＦ２コンジュゲートは、Ｂ型肝炎ウイルス感染を有する対象に投与する。対象は、ヒトまたは非ヒト動物とすることができる。ＴＲＦ２コンジュゲートは、Ｂ型肝炎ウイルスに対する免疫応答を亢進する。
【０４８２】
実施例３８
ＡＳＧＲ１コンジュゲート
この実施例は、対象における、Ｃ型肝炎を治療するためのＡＳＧＲ１コンジュゲートの使用を記載する。ＡＳＧＲ１に特異的に結合する標的結合ドメインおよび標的結合ドメインに共有結合的に結合しているＦｃ結合ドメインを含む抗体コンストラクト、ＴＬＲ７アゴニスト、ならびに抗体コンストラクトにＴＬＲ７アゴニストを共有結合的に結合させたリンカーを含むコンジュゲートを生成する。
【０４８３】
ＡＳＧＲ１コンジュゲートは、Ｃ型肝炎ウイルス感染を有する対象に投与する。対象は、ヒトまたは非ヒト動物とすることができる。ＡＳＧＲ１コンジュゲートは、Ｃ型肝炎ウイルスに対する免疫応答を亢進する。
【０４８４】
実施例３９
ＡＳＧＲ２コンジュゲート
この実施例は、対象における、Ｃ型肝炎を治療するためのＡＳＧＲ２コンジュゲートの使用を記載する。ＡＳＧＲ２に特異的に結合する標的結合ドメインおよび標的結合ドメインに共有結合的に結合しているＦｃ結合ドメインを含む抗体コンストラクト、ＴＬＲ７アゴニスト、ならびに抗体コンストラクトにＴＬＲ７アゴニストを共有結合的に結合させたリンカーを含むコンジュゲートを生成する。
【０４８５】
ＡＳＧＲ２コンジュゲートは、Ｃ型肝炎ウイルス感染を有する対象に投与する。対象は、ヒトまたは非ヒト動物とすることができる。ＡＳＧＲ２コンジュゲートは、Ｃ型肝炎ウイルスに対する免疫応答を亢進する。
【０４８６】
実施例４０
ＴＲＦ２コンジュゲート
この実施例は、対象における、Ｃ型肝炎を治療するためのＴＲＦ２コンジュゲートの使用を記載する。ＴＲＦ２に特異的に結合する標的結合ドメインおよび標的結合ドメインに共有結合的に結合しているＦｃ結合ドメインを含む抗体コンストラクト、ＴＬＲ７アゴニスト、ならびに抗体コンストラクトにＴＬＲ７アゴニストを共有結合的に結合させたリンカーを含むコンジュゲートを生成する。
【０４８７】
ＴＲＦ２コンジュゲートは、Ｃ型肝炎ウイルス感染を有する対象に投与する。対象は、ヒトまたは非ヒト動物とすることができる。ＴＲＦ２コンジュゲートは、Ｃ型肝炎ウイルスに対する免疫応答を亢進する。
【０４８８】
実施例４１
ＡＳＧＲ１コンジュゲート
この実施例は、対象における、Ｃ型肝炎を治療するためのＡＳＧＲ１コンジュゲートの使用を記載する。ＡＳＧＲ１に特異的に結合する標的結合ドメインおよび標的結合ドメインに共有結合的に結合しているＦｃ結合ドメインを含む抗体コンストラクト、ＴＬＲ８アゴニスト、ならびに抗体コンストラクトにＴＬＲ８アゴニストを共有結合的に結合させたリンカーを含むコンジュゲートを生成する。
【０４８９】
ＡＳＧＲ１コンジュゲートは、Ｃ型肝炎ウイルス感染を有する対象に投与する。対象は、ヒトまたは非ヒト動物とすることができる。ＡＳＧＲ１コンジュゲートは、Ｃ型肝炎ウイルスに対する免疫応答を亢進する。
【０４９０】
実施例４２
ＡＳＧＲ２コンジュゲート
この実施例は、対象における、Ｃ型肝炎を治療するためのＡＳＧＲ２コンジュゲートの使用を記載する。ＡＳＧＲ２に特異的に結合する標的結合ドメインおよび標的結合ドメインに共有結合的に結合しているＦｃ結合ドメインを含む抗体コンストラクト、ＴＬＲ８アゴニスト、ならびに抗体コンストラクトにＴＬＲ８アゴニストを共有結合的に結合させたリンカーを含むコンジュゲートを生成する。
【０４９１】
ＡＳＧＲ２コンジュゲートは、Ｃ型肝炎ウイルス感染を有する対象に投与する。対象は、ヒトまたは非ヒト動物とすることができる。ＡＳＧＲ２コンジュゲートは、Ｃ型肝炎ウイルスに対する免疫応答を亢進する。
【０４９２】
実施例４３
ＴＲＦ２コンジュゲート
この実施例は、対象における、Ｃ型肝炎を治療するためのＴＲＦ２コンジュゲートの使用を記載する。ＴＲＦ２に特異的に結合する標的結合ドメインおよび標的結合ドメインに共有結合的に結合しているＦｃ結合ドメインを含む抗体コンストラクト、ＴＬＲ８アゴニスト、ならびに抗体コンストラクトにＴＬＲ８アゴニストを共有結合的に結合させたリンカーを含むコンジュゲートを生成する。
【０４９３】
ＴＲＦ２コンジュゲートは、Ｃ型肝炎ウイルス感染を有する対象に投与する。対象は、ヒトまたは非ヒト動物とすることができる。ＴＲＦ２コンジュゲートは、Ｃ型肝炎ウイルスに対する免疫応答を亢進する。
【０４９４】
実施例４４
Ｂ型肝炎ウイルス抗原コンジュゲート
この実施例は、対象における、Ｂ型肝炎を治療するためのＢ型肝炎ウイルス抗原コンジュゲートの使用を記載する。Ｂ型肝炎表面ウイルス抗原に特異的に結合する標的結合ドメインおよび標的結合ドメインに共有結合的に結合しているＦｃ結合ドメインを含む抗体コンストラクト、ＴＬＲ７アゴニスト、ならびに抗体コンストラクトにＴＬＲ７アゴニストを共有結合的に結合させたリンカーを含むコンジュゲートを生成する。
【０４９５】
Ｂ型肝炎ウイルス抗原コンジュゲートは、Ｂ型肝炎ウイルス感染を有する対象に投与する。対象は、ヒトまたは非ヒト動物とすることができる。Ｂ型肝炎ウイルス抗原コンジュゲートは、Ｂ型肝炎ウイルスに対する免疫応答を亢進する。
【０４９６】
実施例４５
Ｂ型肝炎ウイルス抗原コンジュゲート
この実施例は、対象における、Ｂ型肝炎を治療するためのＢ型肝炎ウイルス抗原コンジュゲートの使用を記載する。Ｂ型肝炎表面ウイルス抗原に特異的に結合する標的結合ドメインおよび標的結合ドメインに共有結合的に結合しているＦｃ結合ドメインを含む抗体コンストラクト、ＴＬＲ８アゴニスト、ならびに抗体コンストラクトにＴＬＲ８アゴニストを共有結合的に結合させたリンカーを含むコンジュゲートを生成する。
【０４９７】
Ｂ型肝炎ウイルス抗原コンジュゲートは、Ｂ型肝炎ウイルス感染を有する対象に投与する。対象は、ヒトまたは非ヒト動物とすることができる。Ｂ型肝炎ウイルス抗原コンジュゲートは、Ｂ型肝炎ウイルスに対する免疫応答を亢進する。
【０４９８】
実施例４６
Ｃ型肝炎ウイルス抗原コンジュゲート
この実施例は、対象における、Ｃ型肝炎を治療するためのＣ型肝炎ウイルス抗原コンジュゲートの使用を記載する。Ｃ型肝炎ウイルス抗原に特異的に結合する標的結合ドメインおよび標的結合ドメインに共有結合的に結合しているＦｃ結合ドメインを含む抗体コンストラクト、ＴＬＲ７アゴニスト、ならびに抗体コンストラクトにＴＬＲ７アゴニストを共有結合的に結合させたリンカーを含むコンジュゲートを生成する。
【０４９９】
Ｃ型肝炎ウイルス抗原コンジュゲートは、Ｃ型肝炎ウイルス感染を有する対象に投与する。対象は、ヒトまたは非ヒト動物とすることができる。Ｃ型肝炎ウイルス抗原コンジュゲートは、Ｃ型肝炎ウイルスに対する免疫応答を亢進する。
【０５００】
実施例４７
Ｃ型肝炎ウイルス抗原コンジュゲート
この実施例は、対象における、Ｃ型肝炎を治療するためのＣ型肝炎ウイルス抗原コンジュゲートの使用を記載する。Ｃ型肝炎ウイルス抗原に特異的に結合する標的結合ドメインおよび標的結合ドメインに共有結合的に結合しているＦｃ結合ドメインを含む抗体コンストラクト、ＴＬＲ８アゴニスト、ならびに抗体コンストラクトにＴＬＲ８アゴニストを共有結合的に結合させたリンカーを含むコンジュゲートを生成する。
【０５０１】
Ｃ型肝炎ウイルス抗原コンジュゲートは、Ｃ型肝炎ウイルス感染を有する対象に投与する。対象は、ヒトまたは非ヒト動物とすることができる。Ｃ型肝炎ウイルス抗原コンジュゲートは、Ｃ型肝炎ウイルスに対する免疫応答を亢進する。
【０５０２】
実施例４８
ＰＢＭＣによるＴＮＦα発現は、骨髄細胞アゴニストコンジュゲートによって誘発される。
この実施例は、骨髄細胞アゴニストコンジュゲートが、肝臓細胞抗原を発現する細胞の存在下で、ＰＢＭＣによって、炎症誘発性サイトカインであるＴＮＦαの産生を増大させることができることを示している。
【０５０３】
ＰＢＭＣは、標準法によってウッドチャック血液から分離する。手短に述べると、ＰＢＭＣは、フィコール勾配遠心法によって単離し、ＲＰＭＩ中に再懸濁させて、９６ウェル平底マイクロタイタープレート（約１２５，０００／ウェル）にプレート培養した。次に、ヒト肝臓抗原（例えば、ＡＳＧＲ２）を発現する組換え細胞（例えば、ＨＥＫ）（約２５，０００／ウェル）を、滴定濃度のコンジュゲート、またはコントロールとして非コンジュゲート親抗体と一緒に加える。このコンジュゲートは、ＴＬＲ８ベンゾアゼピンアゴニストにコンジュゲートした肝臓細胞抗原に対する抗体を含む。一晩の培養後、上清を採取し、ＴＮＦαレベルをアルファＬＩＳＡによって求める。ＴＮＦαの発現は、コンジュゲートの存在下で増大する。
【０５０４】
実施例４９
慢性ウッドチャック肝炎ウイルス感染モデル
この実施例は、ウッドチャックにおいて、慢性ウッドチャック肝炎ウイルス（ＷＨＶ）感染を治療するためのＡＳＧＲ１またはＡＳＧＲ２コンジュゲートの使用を記載する。慢性ＷＨＶ感染を有するウッドチャックを、抗ＡＳＧＲ１もしくは抗ＡＳＧＲ２抗体がコンジュゲートされているＴＬＲ８ベンゾアゼピンアゴニストを含む抗ＡＳＧＲ１または抗ＡＳＧＲ２抗体、コントロールコンジュゲート、またはＴＬＲ８ベンゾアゼピンアゴニスト単独で静脈内治療する。ウッドチャックの各群は３〜５匹の動物を有する。抗ＡＳＧＲ１または抗ＡＳＧＲ２抗体は、対応するウッドチャックタンパク質に結合する。抗ＡＳＧＲ１または抗ＡＳＧＲ２コンジュゲート、コントロールコンジュゲートまたはＴＬＲ８ベンゾアゼピンアゴニストの漸増用量を投与し、ＷＨＶ  ＤＮＡまたはＷＨＶ表面抗原のレベルをモニタリングする。抗ＡＳＧＲ１またはＡＳＧＲ２コンジュゲートは、ＷＨＶに対する免疫応答を亢進する。
【０５０５】
実施例５０
慢性ウッドチャック肝炎ウイルス感染モデル
この実施例は、ウッドチャックにおいて、慢性ウッドチャック肝炎ウイルス（ＷＨＶ）感染を治療するための抗ウッドチャック肝炎コンジュゲートの使用を記載する。慢性ＷＨＶ感染を有するウッドチャックを、抗ＷＨＶ表面抗原抗体をコンジュゲートしたＴＬＲ８ベンゾアゼピンアゴニストを含む抗ＷＨＶコンジュゲート、コントロールコンジュゲート、またはＴＬＲ８ベンゾアゼピンアゴニスト単独で静脈内治療する。ウッドチャックの各群は３〜５匹の動物を有する。抗ＷＨＶコンジュゲート、コントロールコンジュゲートまたはＴＬＲ８ベンゾアゼピンアゴニストの漸増用量を投与し、ＷＨＶ  ＤＮＡまたはＷＨＶ表面抗原のレベルをモニタリングする。抗ＷＨＶコンジュゲートは、ＷＨＶに対する免疫応答を亢進する。
【０５０６】
本開示の態様が本明細書に示されて、記載されているが、このような態様が単なる例として提示されていることは、当業者に明白である。本開示から逸脱することなく、多数の変形、変更および置き換えが、今や、当業者に思いつくであろう。本開示の実施に、本明細書に記載されている本開示の態様に対する様々な代替を使用することができることを理解すべきである。以下の特許請求の範囲は、本開示の範囲を規定すること、およびこれらにより、これらの特許請求の範囲内の方法および構造、ならびにそれらの等価物が、包含されることが意図されている。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６Ａ】
2021506827.tif 000231
【図６Ｂ】
2021506827.tif 000232
【図６Ｃ】
2021506827.tif 000233
【図７】
2021506827.tif 000234
【図８】
2021506827.tif 000235
【図９】
2021506827.tif 000236
【配列表】
2021506827000001.app
【国際調査報告】
2021506827.tif 000237
2021506827.tif 000238
2021506827.tif 000239
2021506827.tif 000240
2021506827.tif 000241
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2021506827.tif 000243