(57)【要約】  本発明では、グルコース濃度に応じた薬剤の可逆的放出を可能にする、薬剤とグルコース感知タンパク質に結合し得る部分との新規の式（Ｉ）のコンジュゲートを記載する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）のコンジュゲート
Ｐ−［Ｌ１］ｍ−［Ａ１］ｏ−［Ｌ２］ｐ−［Ａ２］−［Ｌ３］−［Ａ３］−［Ｌ４］−Ｓ
（Ｉ）
［式中、Ｐは、インスリンまたはインスリン分泌刺激ペプチドであり、
Ｌ１およびＬ２は互いに独立に、１〜２５個の原子の鎖長を有するリンカーであり、
Ｌ３は、２または３個の原子の鎖長を有するリンカーであり、
Ｌ４は、１、２または３個の原子の鎖長を有するリンカーであり、
Ａ１は、５〜６員単環式環または９〜１２員二環式環であり、ここで、各環は独立に、飽和、不飽和、または芳香族炭素環式または複素環式環であり、各環は、少なくとも１個の置換基を有していてもよく、
Ａ２およびＡ３は互いに独立に、５〜６員単環式環または９〜１２員二環式環であり、ここで、各環は独立に、芳香族炭素環式または芳香族複素環式環であり、各環は、少なくとも１個の置換基を有していてもよく、
Ｓは、インスリン非依存性グルコース輸送体ＧＬＵＴ１に結合する糖類部分であり、
ｍ、ｏ、およびｐは互いに独立に、０または１である］
またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物。
【請求項２】
請求項１に記載の式（Ｉ）のコンジュゲート
Ｐ−［Ｌ１］ｍ−［Ａ１］ｏ−［Ｌ２］ｐ−［Ａ２］−［Ｌ３］−［Ａ３］−［Ｌ４］−Ｓ
（Ｉ）
［式中、Ｐは、インスリンまたはインスリン分泌刺激ペプチドであり、
Ｌ１およびＬ２は互いに独立に、１〜２５個の原子の鎖長を有するリンカーであり、
Ｌ３は、２または３個の原子の鎖長を有するリンカーであり、
Ｌ４は、１、２または３個の原子の鎖長を有するリンカーであり、
Ａ１は、５〜６員単環式環または９〜１２員二環式環であり、ここで、各環は独立に、飽和、不飽和、または芳香族炭素環式または複素環式環であり、各環は、少なくとも１個の置換基を有していてもよく、
Ａ２およびＡ３は互いに独立に、５〜６員単環式環または９〜１２員二環式環であり、ここで、各環は独立に、芳香族炭素環式または芳香族複素環式環であり、各環は、少なくとも１個の置換基を有していてもよく、
Ｓは、インスリン非依存性グルコース輸送体ＧＬＵＴ１に結合し、２、３、４、または６位を介してＬ４に結合する末端ピラノース部分を含む糖類部分であり、
ｍ、ｏ、およびｐは互いに独立に、０または１である］
またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物。
【請求項３】
Ｌ１およびＬ２は互いに独立に、（Ｃ１〜Ｃ２５）アルキレン、（Ｃ２〜Ｃ２５）アルケニレン、または（Ｃ２〜Ｃ２５）アルキニレンであり、ここで、１個またはそれ以上のＣ原子は、Ｏ、ＮＨ、ＮＨ−ＢＯＣ、Ｎ（Ｃ１〜４）アルキル、Ｓ、ＳＯ２、Ｏ−ＳＯ２、Ｏ−ＳＯ３、Ｏ−ＰＨＯ２またはＯ−ＰＯ３から選択されるヘテロ原子またはヘテロ原子部分によって置き換えられていてもよく、および／または１個またはそれ以上のＣ原子は、（Ｃ１〜４）アルキル、（Ｃ１〜４）アルキルオキシ、オキソ、カルボキシル、ハロゲンまたはリン含有基で置換されていてもよく、カルボキシル基は、遊離カルボン酸基またはカルボン酸Ｃ１〜Ｃ４アルキルエステルまたはカルボキサミドまたはモノ（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルもしくはジ（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルカルボキサミド基であってもよい、請求項１または２に記載の式（Ｉ）のコンジュゲート。
【請求項４】
Ａ２およびＡ３は互いに独立に、５〜６員単環式環、９〜１２員二環式環であり、ここで、各環は、芳香族炭素環式または芳香族複素環式環であり、各環は互いに独立に、非置換であるか、またはハロゲン、ＮＯ２、ＣＮ、ＣＦ３、−ＯＣＦ３、（Ｃ１〜４）アルキル、（Ｃ１〜４）アルコキシ、（Ｃ１〜４）アルキル−（Ｃ３〜７）シクロアルキル、（Ｃ３〜７）シクロアルキル、ＯＨ、ベンジル、−Ｏ−ベンジル、カルボキシル、（Ｃ１〜４）アルキル−カルボキシルエステル、カルボキサミド、−ＳＯ２Ｍｅ、ＮＨ２、ＮＨ−ＢＯＣまたはモノ（Ｃ１〜４）アルキル、もしくはジ（Ｃ１〜４）アルキルカルボキサミドから選択される１〜４個の置換基によって置換されている、請求項１〜３のいずれか１項に記載の式（Ｉ）のコンジュゲート。
【請求項５】
Ｌ３は、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＨまたは−ＮＨ−ＣＯ−から選択される、請求項１〜４のいずれか１項に記載の式（Ｉ）のコンジュゲート。
【請求項６】
Ａ２は芳香族複素環であり、Ａ３はフェニルであり、ここで、各環は、非置換であってもよいし、またはハロゲン、ＮＯ２、ＮＨ２、ＮＨ−ＢＯＣ、ＣＮ、（Ｃ１〜４）アルキル、（Ｃ１〜４）アルコキシ、ＯＨ、ＣＦ３、ＯＣＦ３、カルボキシル、（Ｃ１〜４）アルキル−カルボキシルエステル、カルボキサミド、またはモノ（Ｃ１〜４）アルキル、もしくはジ（Ｃ１〜４）アルキルカルボキサミドまたは−ＳＯ２−（Ｃ１〜４）−アルキルから選択される１〜４個の置換基を有していてもよい、請求項１〜５のいずれか１項に記載の式（Ｉ）のコンジュゲート。
【請求項７】
Ａ２は、フェニルであり、Ａ３は、芳香族複素環であり、ここで、各環は、非置換であってもよいし、またはハロゲン、ＮＯ２、ＮＨ２、ＮＨ−ＢＯＣ、ＣＮ、（Ｃ１〜４）アルキル、（Ｃ１〜４）アルコキシ、ＯＨ、ＣＦ３、ＯＣＦ３、カルボキシル、（Ｃ１〜４）アルキル−カルボキシルエステル、カルボキサミド、またはモノ（Ｃ１〜４）アルキル、もしくはジ（Ｃ１〜４）アルキルカルボキサミドまたは−ＳＯ２−（Ｃ１〜４）−アルキルから選択される１〜４個の置換基を有していてもよい、請求項１〜５のいずれか１項に記載の式（Ｉ）のコンジュゲート。
【請求項８】
Ａ２は、フェニルであり、Ａ３は、フェニルであり、ここで、各環は、非置換であってもよいし、またはハロゲン、ＮＯ２、ＮＨ２、ＮＨ−ＢＯＣ、ＣＮ、（Ｃ１〜４）アルキル、（Ｃ１〜４）アルコキシ、ＯＨ、ＣＦ３、ＯＣＦ３、カルボキシル、（Ｃ１〜４）アルキル−カルボキシルエステル、カルボキサミド、またはモノ（Ｃ１〜４）アルキル、もしくはジ（Ｃ１〜４）アルキルカルボキサミドまたは−ＳＯ２−（Ｃ１〜４）−アルキルから選択される１〜４個の置換基を有していてもよい、請求項１〜５のいずれか１項に記載の式（Ｉ）のコンジュゲート。
【請求項９】
基−Ａ２−Ｌ３−Ａ３−Ｌ４−は、
【化１】
2021504402.tif 000181
から選択され、ここで、各環は、非置換であってもよいし、またはハロゲン、ＮＨ２、ＮＨ−ＢＯＣ、ＣＮ、（Ｃ１〜４）アルキル、（Ｃ１〜４）アルコキシ、ＯＨ、ＣＦ３、ＯＣＦ３、カルボキシル、（Ｃ１〜４）アルキル−カルボキシルエステル、カルボキサミド、またはモノ（Ｃ１〜４）アルキル、もしくはジ（Ｃ１〜４）アルキルカルボキサミドまたは−ＳＯ２−（Ｃ１〜４）−アルキルから選択される１〜４個の置換基を有していてもよい、請求項１〜８のいずれか１項に記載の式（Ｉ）のコンジュゲート。
【請求項１０】
基−Ａ２−Ｌ３−Ａ３−Ｌ４−は、
【化２】
2021504402.tif 000182
から選択され、ここで、各環は、非置換であってもよいし、またはハロゲン、ＮＨ２、ＮＨ−ＢＯＣ、ＣＮ、（Ｃ１〜４）アルキル、（Ｃ１〜４）アルコキシ、ＯＨ、ＣＦ３、ＯＣＦ３、カルボキシル、（Ｃ１〜４）アルキル−カルボキシルエステル、カルボキサミド、またはモノ（Ｃ１〜４）アルキル、もしくはジ（Ｃ１〜４）アルキルカルボキサミドまたは−ＳＯ２−（Ｃ１〜４）−アルキルから選択される１〜４個の置換基を有していてもよい、請求項１〜８のいずれか１項に記載の式（Ｉ）のコンジュゲート。
【請求項１１】
基−Ａ２−Ｌ３−Ａ３−Ｌ４−は、
【化３】
2021504402.tif 000183
から選択され、ここで、各環は、非置換であってもよいし、またはハロゲン、ＮＯ２、ＮＨ２、ＮＨ−ＢＯＣ、ＣＮ、（Ｃ１〜４）アルキル、（Ｃ１〜４）アルコキシ、ＯＨ、ＣＦ３、ＯＣＦ３、カルボキシル、（Ｃ１〜４）アルキル−カルボキシルエステル、カルボキサミド、またはモノ（Ｃ１〜４）アルキル、もしくはジ（Ｃ１〜４）アルキルカルボキサミドまたは−ＳＯ２−（Ｃ１〜４）−アルキルから選択される１〜４個の置換基を有していてもよい、請求項１〜８のいずれか１項に記載の式（Ｉ）のコンジュゲート。
【請求項１２】
基−Ａ２−Ｌ３−Ａ３−Ｌ４−は、
【化４】
2021504402.tif 000184
から選択され、ここで、各環は、非置換であってもよいし、またはハロゲン、ＮＯ２、ＮＨ２、ＮＨ−ＢＯＣ、ＣＮ、（Ｃ１〜４）アルキル、（Ｃ１〜４）アルコキシ、ＯＨ、ＣＦ３、ＯＣＦ３、カルボキシル、（Ｃ１〜４）アルキル−カルボキシルエステル、カルボキサミド、またはモノ（Ｃ１〜４）アルキル、もしくはジ（Ｃ１〜４）アルキルカルボキサミドまたは−ＳＯ２−（Ｃ１〜４）−アルキルから選択される１〜４個の置換基を有していてもよい、請求項１〜８のいずれか１項に記載の式（Ｉ）のコンジュゲート。
【請求項１３】
基−Ａ２−Ｌ３−Ａ３−Ｌ４−は、
【化５】
2021504402.tif 000185
から選択され、ここで、各環は、非置換であってもよいし、またはハロゲン、ＮＯ２、ＮＨ２、ＮＨ−ＢＯＣ、ＣＮ、（Ｃ１〜４）アルキル、（Ｃ１〜４）アルコキシ、ＯＨ、ＣＦ３、ＯＣＦ３、カルボキシル、（Ｃ１〜４）アルキル−カルボキシルエステル、カルボキサミド、またはモノ（Ｃ１〜４）アルキル、もしくはジ（Ｃ１〜４）アルキルカルボキサミドまたは−ＳＯ２−（Ｃ１〜４）−アルキルから選択される１〜４個の置換基を有していてもよい、請求項１〜８のいずれか１項に記載の式（Ｉ）のコンジュゲート。
【請求項１４】
ｍは、１であり、ｏは、１であり、ｐは、１である、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の式（Ｉ）のコンジュゲート。
【請求項１５】
ｍは、１であり、ｏは、０であり、ｐは、０である、請求項１〜１４のいずれか１項に記載の式（Ｉ）のコンジュゲート。
【請求項１６】
Ｓは、末端ピラノース部分であり、Ｓは、３位を介してＬ４に結合している、請求項１〜１５のいずれか１項に記載の式（Ｉ）のコンジュゲート。
【請求項１７】
Ｓは、末端ピラノース部分であり、Ｓは、４位を介してＬ４に結合している、請求項１〜１６のいずれか１項に記載の式（Ｉ）のコンジュゲート。
【請求項１８】
Ｓは、末端ピラノース部分であり、Ｓは、６位を介してＬ４に結合している、請求項１〜１７のいずれか１項に記載の式（Ｉ）のコンジュゲート。
【請求項１９】
Ｓは、末端ピラノース部分であり、Ｓは、２位を介してＬ４に結合している、請求項１〜１８のいずれか１項に記載の式（Ｉ）のコンジュゲート。
【請求項２０】
Ｓは、式（ＩＩ）の骨格構造
【化６】
2021504402.tif 000186
［式中、１、２、３、４、５、および６は、ピラノース部分におけるＣ原子の位置を示し、
Ｒ１は、Ｈまたは保護基であり、
Ｓ１は、２、３、４、または６位を介してＬ４に結合している］を有する末端ピラノース部分Ｓ１である、請求項１〜１９のいずれか１項に記載の式（Ｉ）のコンジュゲート。
【請求項２１】
Ｓ１は、式（ＩＩＩ）：
【化７】
2021504402.tif 000187
［式中、Ｒ１は、Ｈまたはメチルもしくはアセチルなどの保護基であり、
Ｒ２およびＲ７は、ＯＲ８、またはＮＨＲ８またはＬ４への結合部位であり、ここで、Ｒ８は、Ｈまたはアセチルもしくはベンジルなどの保護基であり、
Ｒ３およびＲ４は、ＯＲ８またはＬ４への結合部位であり、ここで、Ｒ８は、Ｈまたはアセチルもしくはベンジルなどの保護基であるか、または
Ｒ１およびＲ２および／またはＲ３およびＲ４は、それらが結合しているピラノース環原子と一緒に、環式基、例えば、アセタールを形成しており、
Ｒ５およびＲ６は、Ｈであるか、またはそれらが結合している炭素原子と一緒に、カルボニル基を形成しており、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ７のうちの１個は、Ｌ４への結合部位である］を有する、請求項２０に記載の式（Ｉ）のコンジュゲート。
【請求項２２】
Ｓ１は、式（ＩＶａ）または（ＩＶｂ）：
【化８】
2021504402.tif 000188
［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、およびＲ７は、請求項１８または１９に記載のとおりに定義される］を有する、請求項２０または２１に記載の式（Ｉ）のコンジュゲート。
【請求項２３】
Ｓは、式（Ｖ）の構造：
−［Ｓ２］ｓ−Ｓ１
（Ｖ）
［式中、
Ｓ２は、特に、少なくとも１つのヘキソースまたはペントース部分を含む単糖または二糖部分であり、
Ｓ１は、請求項２０から２２において定義したとおりの末端ピラノース部分であり、
ｓは、０または１である］を有する、請求項１〜２２のいずれか１項に記載の式（Ｉ）のコンジュゲート。
【請求項２４】
Ｓ２は、式（ＶＩａ）または（ＶＩｂ）：
【化９】
2021504402.tif 000189
［式中、Ｒ１１は、Ｓ１への結合であり、
Ｒ１２およびＲ１７は、ＯＲ８またはＮＨＲ８またはＬ４への結合部位であり、ここで、Ｒ８は、Ｈまたはアセチルもしくはベンジルなどの保護基であり、
Ｒ１３およびＲ１４は、ＯＲ８またはＬ４への結合部位であり、ここで、Ｒ８は、Ｈまたはアセチルなどの保護基であり、
Ｒ１５およびＲ１６は、Ｈであるか、または一緒に、それらが結合している炭素原子と共に、カルボニル基を形成しているか、または
Ｒ１１およびＲ１２および／またはＲ１３およびＲ１４は、それらが結合している環原子と一緒に、アセタールなどの環式基を形成しており、
Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、およびＲ１７のうちの１個は、Ｌ４への結合部位である］を有する、請求項２３に記載の式（Ｉ）のコンジュゲート。
【請求項２５】
末端ピラノース部分Ｓ１は、グルコースおよびガラクトース誘導体から選択され、ここで、末端ピラノース部分Ｓ１は、２、３、４、または６位を介してＬ４に結合している、請求項２０〜２４のいずれか１項に記載の式（Ｉ）のコンジュゲート。
【請求項２６】
糖部分Ｓ２は、グルコースおよびガラクトースから選択されるピラノース部分である、請求項２３〜２５のいずれか１項に記載の式（Ｉ）のコンジュゲート。
【請求項２７】
インスリン非依存性グルコース輸送体ＧＬＵＴ１に対して１０〜５００ｎＭの親和性を有する、請求項１〜２６のいずれか１項に記載の式（Ｉ）のコンジュゲート。
【請求項２８】
周囲媒質におけるグルコース濃度に依存して、インスリン非依存性グルコース輸送体ＧＬＵＴ１に可逆的に結合する、請求項１〜２７のいずれか１項に記載の式（Ｉ）のコンジュゲート。
【請求項２９】
糖類部分Ｓが、単一の末端糖部分を含む、請求項１〜２８のいずれか１項に記載の式（Ｉ）のコンジュゲート。
【請求項３０】
医薬品において、特にヒト医薬品において使用するための、請求項１〜２９のいずれか１項に記載の式（Ｉ）のコンジュゲート。
【請求項３１】
グルコース代謝の調節不全と関連する、それに起因する、および／またはそれに随伴する障害の予防および／または処置において使用するための、請求項１〜２９のいずれか１項に記載の式（Ｉ）のコンジュゲート。
【請求項３２】
糖尿病、特に、２型糖尿病または１型糖尿病の予防および／または処置において使用するための、請求項１〜２９のいずれか１項に記載の式（Ｉ）のコンジュゲート。
【請求項３３】
活性作用物質としての請求項１〜２９のいずれか１項に記載の式（Ｉ）のコンジュゲートと、薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物。
【請求項３４】
グルコース代謝の調節不全と関連する、それに起因する、および／またはそれに随伴する障害を予防および／または処置する方法であって、請求項１〜２９のいずれか１項に記載の式（Ｉ）のコンジュゲートまたは請求項３３に記載の組成物を、それを必要とする対象に投与することを含む前記方法。
【請求項３５】
式（Ｉａ）の化合物
Ｒ−（Ｏ＝Ｃ）−［Ｌ１］ｍ−［Ａ１］ｏ−［Ｌ２］ｐ−［Ａ２］−［Ｌ３］−［Ａ３］−［Ｌ４］−Ｓ
（Ｉａ）
［式中、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３、Ｌ４、Ａ１、Ａ２、Ａ３、Ｓ、ｍ、ｏおよびｐは、請求項１〜２８のいずれか１項に記載のとおりに定義され、
Ｒは、Ｈ、ハロゲン、ＯＨ、Ｏ−アルキル−、無水物形成基または別の活性エステル形成基、例えば、４−ニトロフェニルエステル、スクシナートまたはＮ−ヒドロキシベンゾトリアゾールである］
またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物。
【請求項３６】
式（Ｉｂ）の化合物
［Ｌ１］ｍ−［Ａ１］ｏ−［Ｌ２］ｐ−［Ａ２］−［Ｌ３］−［Ａ３］−［Ｌ４］−Ｓ
（Ｉｂ）
［式中、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３、Ｌ４、Ａ１、Ａ２、Ａ３、Ｓ、ｍ、ｏおよびｐは、請求項１〜２９のいずれか１項に記載のとおりに定義される］
またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物。
【請求項３７】
糖類部分Ｓが、２、３、４、または６位を介してＬ４に結合している末端ピラノース部分を含む、請求項３６に記載の式（Ｉｂ）の化合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明では、グルコース濃度に応じた薬剤の可逆的放出を可能にする、薬剤とグルコース感知タンパク質に結合し得る部分との新規のコンジュゲートを記載する。
【背景技術】
【０００２】
過去数十年にわたって、疾患、特に１型または２型糖尿病に罹患している患者の数が劇的に増加している。教育および処置にもかかわらず、増加率は急上昇している。この疾患は、ゆっくり進展し、当初は、膵臓が、インスリン放出の増加によってインスリン感受性の低下を補償することができる。この段階では、インスリン感受性促進薬およびインスリン放出薬のような経口抗糖尿病薬が、この補償機構を支持することができるが、疾患を治癒させることはできない。そのため、この期間の後は、外部インスリンを注射しなければならない。
【０００３】
数種のインスリンが市販されており、それらは作用持続時間によって分類されている。低血糖の本質的な危険性は、非常に平坦なインスリンプロファイル（いわゆる基礎インスリン）によって抑制はされるが、これらの基礎インスリンによって、概念的に対処されるわけでも、最終的に克服されるわけでもない。
【０００４】
デポーからのグルコース依存性放出を達成して、膵臓による自然な放出を模倣する真のグルコース感知インスリンの開発がなお、糖尿病研究における「聖杯」の１つである。そのようなインスリンは、そこからインスリンがグルコース濃度依存的に放出され、最終的に、グルコース濃度が低下したら系によって再捕獲される局所デポー（例えば、非経口内）または可動デポー（血流）を生じさせるであろう。
【０００５】
血糖濃度はホルモン性制御下にある。グルカゴン、エピネフリン、ノルエピネフリン、コルチゾール、および甲状腺からのホルモンのような数種のホルモンはグルコースレベルの上昇を誘発する一方で、インスリンは、グルコースレベルを低下させる唯一のホルモンである。加えて、グルコースレベルはもちろん、食事のタイミングおよび組成、身体的なストレス、ならびに感染によって影響を受ける。
【０００６】
健常者では、空腹時血糖値は約５ｍＭ（９００ｍｇ／Ｌ）であり、食後数時間は、４０ｍＭへと上昇し得る。血糖が制御されていない糖尿病患者では、血糖値は、１〜３０ｍＭの間で変動し得て、高血糖（＞１０ｍＭ）と低血糖（＜３ｍＭ）との境界線の間を予測不可能に上下し得る。正確な血糖測定およびインスリンの滴定が可能であるにもかかわらず、低血糖はいまだ深刻な問題である。この問題は、グルコースレベルに影響を及ぼす薬剤のグルコース感受性および−応答性送達によって解決することができる。
【０００７】
薬物（小分子およびインスリンのようなタンパク質）を分解から保護して、半減期を延長する非グルコース感受性デポーが往々にして、医薬において使用される。インスリンでは、例えば、静止皮下デポー（ｓｔａｔｉｃ  ｓｕｂｃｕｔａｎｅｏｕｓ  ｄｅｐｏｔ）を実現することができる。インスリンは、不溶性六量体として貯蔵される。このデポーから、可溶性モノマーが、質量方程式の法則に従って血液に放出される。
【０００８】
追加の可能性は、アルブミンへの修飾インスリンの非共有結合である。非修飾インスリンはアルブミンに結合しないので、非共有結合性疎水性結合は、疎水性修飾によって（例えば、ミリスチン酸によって）可能になる。インスリンへの脂肪酸のカップリングは、インスリンを分解から保護することを可能にし、数時間までの半減期を数日までに劇的に延長する。
【０００９】
そのような循環デポー（ｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇ  ｄｅｐｏｔ）からのインスリンの放出は、質量方程式の法則によって説明することができ、インスリン量、アルブミンデポー、およびアルブミンへのインスリン誘導体の親和性と相関している。デポーは固定されるので、インスリンの量および親和性は、調節される必要がある。基礎インスリンの放出は制御されるが、放出は、グルコース非依存的である。
【００１０】
過去数十年以内に、グルコース感受性インスリンデポーを樹立するための努力は開始されていた。これらの努力は、３つの古典的な原理にまとめる、および割り当てることができる：
−  ボロン酸によるグルコースの化学的認識
−  レクチン（コンカナバリンＡ、小麦胚芽凝集素）などの炭水化物結合タンパク質によるグルコースの生化学的認識
−  グルコースオキシダーゼまたはヘキソキナーゼのようなグルコース変換酵素。この場合、結合親和性をシグナルとして使用することができる。多くの場合に、関連ｐＨシフトまたは電荷の変化が測定される。
【００１１】
これらの原理は、グルコース測定のために、またはシグナルを直接的または間接的なグルコース放出に変換するために使用することができる。実現するための４つの可能性を下に記載する。
−  インスリンの直接的な修飾
−  グルコース感知分子（ボロン酸−またはグルコースオキシダーゼをベースとする）で修飾されている合成細孔である、「グルコース応答性」ヒドロゲル。これらのゲルにインスリンが充填される。グルコースの存在下では、それらは膨張して、漏出性になり、最終的に、グルコースレベルが上昇すると、インスリンを放出する。
−  「デバイス−アプローチ」：この場合、インスリンレベルが、センサーによって測定されるにすぎない。
−  閉回路アプローチ：これは、技術的解決を説明するものである。センサーがグルコースレベルを測定する。シグナルが、非依存性インスリンデポー（例えば、ポンプ）に送信され、そのシグナルによって起動されて、非依存性インスリンデポーがインスリンを放出する。非依存性インスリンレザバーが起動されて、インスリンを放出するが、これは、センサーシグナルによって制御される。利点は、必ずしも体内にあるのではない大きなインスリンデポーであり得る。
【００１２】
いくつかの特許出願、例えば、特許文献１、特許文献２、または特許文献３が、グルコース感受性インスリン放出のために、アルブミンと組み合わせてボロン酸修飾インスリン誘導体を使用することを記載している。このアプローチで、フローティングインスリン／アルブミンデポーは、グルコース感知フローティングデポーへとさらに開発されるであろう。
【００１３】
グルコース感知インスリンに対する異なるアプローチが、特許文献４、特許文献５、特許文献６、特許文献７、特許文献８、または特許文献９に記載されている。これらの文献は、コンカナバリンＡおよび好ましくはマンノースを認識するグルコース結合タンパク質の同時投与を記載している。したがって、マンノース修飾インスリンをマンノースによって、デポーから放出することができる。加えて、コンカナバリンを必要とせずにマンノースの結合を担い得る固有のマンノース結合タンパク質が記載されている。
【００１４】
特許文献１０、特許文献１１、および特許文献１２に記載されているとおり、赤血球は、薬物を輸送するためのビヒクルとして、例えば、腫瘍飢餓、酵素置換および免疫療法のために使用されている。
【００１５】
非特許文献１は、コンカナバリンＡの可溶性コンジュゲートに結合したグルコシルポリ（エチレングリコール）インスリンのグルコース誘導性放出を開示しており、この際、インスリンは、Ｂ１アミノ基のところで、ポリ（エチレングリコール）スペーサーを用いて、糖の１位に連結される。
【００１６】
特許文献１３は、組織特異的疾患イメージングおよび放射線療法のための６８Ｇａ−ＤＯＴＡ標識糖のコンジュゲートを開示している。
【００１７】
特許文献１４は、赤血球上のグルコース輸送タンパク質に可逆的に結合するためのグルコース修飾インスリンを開示している。
【００１８】
薬物を赤血球の表面に結合することによる、古典的デポーとしての赤血球の使用は特許文献１５に記載されている。この場合、非常に高い親和性（ＫＤ＝６．２ｎＭ）で表面に結合するペプチドが記載されている。これらのペプチドは、例えば、移植医療において免疫調節のために使用される。
【００１９】
特許文献１６は、フロリジン誘導体を開示しており、これは、ＳＧＬＴ２阻害活性を阻害すると述べており、糖尿病およびその合併症などの代謝性疾患を処置するために使用される。
【００２０】
特許文献１７は、「グリコシド誘導体およびその使用」と標題されており、そこに開示の化合物は代謝障害の処置において使用することができると述べている。
【００２１】
特許文献１８は、「糖尿病および肥満を処置するためのＣ−アリールグリコシド化合物」と標題されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００２２】
【特許文献１】ＷＯ２００１／９２３３４
【特許文献２】ＷＯ２０１１／０００８２３
【特許文献３】ＷＯ２００３／０４８１９５
【特許文献４】ＷＯ２０１０／０８８２９４
【特許文献５】ＷＯ２０１０／８８３００
【特許文献６】ＷＯ２０１０／１０７５２０
【特許文献７】ＷＯ２０１２／０１５６８１
【特許文献８】ＷＯ２０１２／０１５６９２
【特許文献９】ＷＯ２０１５／０５１０５２
【特許文献１０】ＷＯ２０１５／１２１３４８
【特許文献１１】ＷＯ２０１４／１９８７８８
【特許文献１２】ＷＯ２０１３／１３９９０６
【特許文献１３】ＷＯ２０１２／１７７７０１
【特許文献１４】ＷＯ２０１７／１２４１０２
【特許文献１５】ＷＯ２０１３／１２１２９６
【特許文献１６】ＷＯ２０１０／０１２１５３
【特許文献１７】ＷＯ２０１０／０３１８１３
【特許文献１８】ＷＯ２００９／１２１９３９
【非特許文献】
【００２３】
【非特許文献１】Ｌｉｕら（Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ．  １９９７、８、６６４〜６７２）
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００２４】
本発明は、薬剤と糖類部分とを含む新規のコンジュゲートに関する。
【００２５】
さらに本発明は、医薬として使用するための、薬剤と糖類部分とを含む新規のコンジュゲートに関する。
【００２６】
さらに本発明は、血中グルコース濃度に依存して薬剤の放出をもたらす、薬剤と、インスリン依存性グルコース輸送体ＧＬＵＴ１に結合する糖類部分とを含む新規のコンジュゲートに関する。インスリン依存性グルコース輸送体ＧＬＵＴ１は、ヒト赤血球上に存在する。ＧＬＵＴ１へのグルコースの結合は、血糖濃度に基づき可逆的である。
【００２７】
一実施形態では、本発明のコンジュゲートは、空腹時条件下で見い出される例えば、１〜１０ｍＭの低いグルコース濃度でＧＬＵＴ１に結合する。これらの条件下では、活性作用物質の安定なフローティングデポーが形成される。食後に例えば、３０ｍＭ〜４０ｍＭへとグルコース濃度が上昇した後は、遊離グルコースがＧＬＵＴ１結合部位について競合し、コンジュゲートがグルコース濃度依存的に放出され、薬剤が、その作用を発揮することできるようになる。グルコース濃度が再び低下するにつれて、コンジュゲート分子はＧＬＵＴ１によって再捕獲される。したがって、望ましくない多量の遊離薬剤の存在が回避される。
【００２８】
本発明は、式（Ｉ）のコンジュゲート：
Ｐ−［Ｌ１］ｍ−［Ａ１］ｏ−［Ｌ２］ｐ−［Ａ２］−［Ｌ３］−［Ａ３］−［Ｌ４］−Ｓ
（Ｉ）
［式中、Ｐは、インスリンまたはインスリン分泌刺激ペプチドであり、
Ｌ１およびＬ２は互いに独立に、１〜２５個の原子の鎖長を有するリンカーであり、
Ｌ３は、２または３個の原子の鎖長を有するリンカーであり、
Ｌ４は、１、２または３個の原子の鎖長を有するリンカーであり、
Ａ１は、５〜６員単環式環または９〜１２員二環式環であり、ここで、各環は独立に、飽和、不飽和、または芳香族炭素環式または複素環式環であり、各環は、少なくとも１個の置換基を有していてもよく、
Ａ２およびＡ３は互いに独立に、５〜６員単環式環または９〜１２員二環式環であり、ここで、各環は独立に、芳香族炭素環式または芳香族複素環式環であり、各環は、少なくとも１個の置換基を有していてもよく、
Ｓは、インスリン非依存性グルコース輸送体ＧＬＵＴ１に結合する糖類部分であり、
ｍ、ｏ、およびｐは互いに独立に、０または１である］
またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物に関する。
【００２９】
本発明はまた、式（Ｉ）のコンジュゲート：
Ｐ−［Ｌ１］ｍ−［Ａ１］ｏ−［Ｌ２］ｐ−［Ａ２］−［Ｌ３］−［Ａ３］−［Ｌ４］−Ｓ
（Ｉ）
［式中、Ｐは、インスリンまたはインスリン分泌刺激ペプチドであり、
Ｌ１およびＬ２は互いに独立に、１〜２５個の原子の鎖長を有するリンカーであり、
Ｌ３は、２または３個の原子の鎖長を有するリンカーであり、
Ｌ４は、１、２または３個の原子の鎖長を有するリンカーであり、
Ａ１は、５〜６員単環式環または９〜１２員二環式環であり、ここで、各環は独立に、飽和、不飽和、または芳香族炭素環式または複素環式環であり、各環は、少なくとも１個の置換基を有していてもよく、
Ａ２およびＡ３は互いに独立に、５〜６員単環式環または９〜１２員二環式環であり、ここで、各環は独立に、芳香族炭素環式または芳香族複素環式環であり、各環は、少なくとも１個の置換基を有していてもよく、
Ｓは、インスリン非依存性グルコース輸送体ＧＬＵＴ１に結合し、２、３、４、または６位を介してＬ４に結合する末端ピラノース部分を含む糖類部分であり、
ｍ、ｏ、およびｐは互いに独立に、０または１である］
またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物に関する。
【００３０】
本発明の別の態様は、式（Ｉａ）および（Ｉｂ）の化合物：
Ｒ−（Ｏ＝Ｃ）−［Ｌ１］ｍ−［Ａ１］ｏ−［Ｌ２］ｐ−［Ａ２］−［Ｌ３］−［Ａ３］−［Ｌ４］−Ｓ
（Ｉａ）
［Ｌ１］ｍ−［Ａ１］ｏ−［Ｌ２］ｐ−［Ａ２］−［Ｌ３］−［Ａ３］−［Ｌ４］−Ｓ
（Ｉｂ）
［式中、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３、Ｌ４、Ａ１、Ａ２、Ａ３、Ｓ、ｍ、ｏ、およびｐは、上記で示したとおりに定義され、Ｒは、Ｈ、ハロゲン、ＯＨ、Ｏ−アルキル−、無水物形成基またはカップリング反応のための別の活性エステル形成基、例えば、４−ニトロフェニルエステル、スクシナートまたはＮ−ヒドロキシベンゾトリアゾールである］
またはその薬学的に許容される塩または溶媒和物である。
【００３１】
化合物（Ｉａ）および（Ｉｂ）は、式（Ｉ）のコンジュゲートを合成するための中間体として適している。
【００３２】
本発明の別の態様は、医薬品、特にヒト医薬品において使用するための、上記のとおりの式（Ｉ）のコンジュゲートである。
【００３３】
本発明の別の態様は、活性作用物質としての上記のとおりの式（Ｉ）のコンジュゲートと、薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物である。
【００３４】
本発明の別の態様は、上記のとおりの式（Ｉ）のコンジュゲートまたは組成物を、それを必要とする対象、特にヒト患者に投与することを含む、グルコース代謝の調節不全と関連する、それに起因する、および／またはそれに随伴する障害を予防および／または処置する方法である。
【００３５】
本発明の別の態様は、１型糖尿病または２型糖尿病を予防および／または処置する方法である。
【００３６】
本発明の式（Ｉ）のコンジュゲートは、血中グルコース濃度を直接的または間接的に低下させるインスリンまたはインスリン分泌刺激ペプチドである薬剤Ｐを含む。
【００３７】
本発明による「インスリン」という用語は、ヒトインスリン、ブタインスリン、またはその類似体、例えば、急速作用を有する食事インスリン（ｐｒａｎｄｉａｌ  ｉｎｓｕｌｉｎ）または長期作用を有する基礎インスリンを包含する。例えば、「インスリン」という用語は、組換えヒトインスリン、インスリングラルギン、インスリンデテミル、インスリングルリジン、インスリンアスパルト、インスリンリスプロなどを包含する。Ｐがインスリンである場合、アミノ基を介して、例えば、アミノ側鎖を介して、特に、インスリンＢ２９Ｌｙｓ残基のアミノ側鎖を介して、またはインスリンＢ１Ｐｈｅ残基のアミノ末端を介して結合して、式（Ｉ）のコンジュゲートを形成し得る。
【００３８】
さらに、薬剤は、ＧＬＰ−１などのインスリン分泌刺激ペプチド、エキセンジン−４などのエキセンジン、またはリキシセナチド、リラグルチドなどのＧＬＰ−１アゴニストであってもよい。
【００３９】
式（Ｉ）のコンジュゲートは、溶質輸送体ファミリー２、促進拡散型グルコース輸送体メンバー１（ｆａｃｉｌｉｔａｔｅｄ  ｇｌｕｃｏｓｅ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ  ｍｅｍｂｅｒ  １）（ＳＬＣ２Ａ１）としても公知のインスリン非依存性グルコース輸送体ＧＬＵＴ１に結合する糖類部分をさらに含む。ヒトタンパク質のアミノ酸配列は、ＮＰ＿００６５０７であり、これは、核酸配列ＮＭ＿００６５１６によってコードされる。ＧＬＵＴ１は、赤血球へのグルコースの拡散を促進する内在性膜タンパク質である。ＧＬＵＴ１の最大の発現は、赤血球の膜上で見い出される。
【００４０】
ＧＬＵＴ１との相互作用のために、式（Ｉ）のコンジュゲートは、ＧＬＵＴ１に結合するが、赤血球膜を通過しての輸送は妨げる部分を含む。ＧＬＵＴ１に結合する糖類部分は好ましくは、アノマー形態、特に、ピラノース部分などのアノマー６員環形態である。糖類部分は典型的には、アノマーＯ原子、さらにはヒドロキシ基または保護ヒドロキシ基をピラノース骨格の３位および４位に含む。一実施形態では、式（Ｉ）のコンジュゲートの糖類部分Ｓは、ピラノース骨格部分の２位、３位、４位、または６位を介して結合している末端ピラノース部分を含む。
【００４１】
さらに、本発明の一態様は、短いリンカーＬ３によって連結されていて、Ａ３が短いリンカーＬ４によって糖類部分に隣接している２個の芳香族環式残基Ａ２およびＡ３の導入が、グルコースと比較して、ＧＬＵＴ１への親和性の相当な上昇をもたらしている態様である。
【００４２】
したがって、本発明は、投与後に、グルコース濃度の関数として作用物質を放出／送達する赤血球ベースの循環デポーを形成する式（Ｉ）のコンジュゲートの形態で、薬剤を提供する。したがって、低いグルコース濃度（３ｍＭ未満）では、コンジュゲートの遊離非結合レベルを検出することができないか、または低い濃度でしか検出することはできないはずである。食後に血糖値が上昇すると、コンジュゲートが、循環デポーから血流に放出される。この放出は、グルコースと式（Ｉ）のコンジュゲートとの直接的な競合の結果である。したがって、放出は、質量方程式の法則によって説明され、グルコースレベルのごくわずかな変化に対しても自動調整される。同じことが、グルコースレベルが低下した場合の式（Ｉ）のコンジュゲートの再捕集プロセスにも当てはまるはずである。
【００４３】
これらの特徴は、従来技術からのグルコース感知デポーと比較して、本質的な利点を構成している。
【００４４】
本発明を用いることで、糖血症に関する従来技術のインスリンの欠点が減少する、または回避される。グルコース認識および関連放出／再捕集の制御は、単一分子内で実現されるであろう。これは、放出／再捕集の遅れを最小化する。グルコース感受性結合および−放出は、内因性輸送および認識プロセスとの相互作用によって制御される。赤血球におけるＧＬＵＴ１輸送に基づく生物学的認識システムは、生体によって常に再生される。
【００４５】
本発明の式（Ｉ）のコンジュゲートは、普遍的なグルコース輸送体ＧＬＵＴ１に結合し、これは、グルコースに対して、グルコース認識で往々にして使用されるタンパク質であるグルコースオキシダーゼと同じ範囲の結合親和性を有する。ＧＬＵＴ１は、赤血球で高度に発現され、これらの細胞の基礎供給を担っている。デポーのサイズは、赤血球グルコース供給に影響を及ぼすことなく、必要とされる薬剤の量を収容するために十分に大きい。
【００４６】
本発明の式（Ｉ）のコンジュゲートの親和性は、低い（例えば、＜３ｍＭ）グルコースレベルでの結合を保証する親和性ウィンドウの範囲内である。グルコースレベル（例えば、＞１０ｍＭ）の上昇と共に、それに応じて、式（Ｉ）のコンジュゲートが放出される。グルコースレベルの低下と共に、結合していない式（Ｉ）のコンジュゲートが輸送体によって再捕獲される。
【００４７】
放出は、質量方程式の法則に従っており、デポーのサイズ、負荷、およびＧＬＵＴ１に対する式（Ｉ）のコンジュゲートの親和性に依存する。デポーは固定されるので、遊離コンジュゲート画分は、ＧＬＵＴ１に対する親和性によって規定される。
【００４８】
ある特定の実施形態では、式（Ｉ）のコンジュゲートは、親和性測定によって、例えば、リガンド置換アッセイによって、ＭＳＴ（マイクロスケール熱泳動）技術によって決定されるとおり、インスリン非依存性グルコース輸送体ＧＬＵＴ１に対して１０〜５００ｎＭの親和性を有する。
【００４９】
本発明の式（Ｉ）のコンジュゲートでは、個々の構造部分Ｐ、Ａ１、Ａ２、Ａ３およびＳは、リンカーＬ１、Ｌ２、Ｌ３およびＬ４によって連結していてもよい。
【００５０】
存在する場合、Ｌ１およびＬ２は、１〜２５個の原子、特に３〜２０個の原子、３〜１０個の原子、または３〜６個の原子の鎖長を有するリンカーである。
【００５１】
一部の実施形態では、Ｌ１およびＬ２は互いに独立に、（Ｃ１〜Ｃ２５）アルキレン、（Ｃ２〜Ｃ２５）アルケニレン、または（Ｃ２〜Ｃ２５）アルキニレンであり、ここで、１個またはそれ以上のＣ原子が、Ｏ、ＮＨ、ＮＨ−ＢＯＣ、Ｎ（Ｃ１〜４）アルキル、Ｓ、ＳＯ２、Ｏ−ＳＯ２、Ｏ−ＳＯ３、Ｏ−ＰＨＯ２またはＯ−ＰＯ３から選択されるヘテロ原子またはヘテロ原子部分によって置き換えられていてもよく、および／または１個またはそれ以上のＣ原子が、（Ｃ１〜４）アルキル、（Ｃ１〜４）アルキルオキシ、オキソ、カルボキシル、ハロゲン、例えば、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、もしくはＩ、またはリン含有基で置換されていてもよい。カルボキシル基は、遊離カルボン酸基またはカルボン酸エステル、例えば、Ｃ１〜Ｃ４アルキルエステルまたはカルボキサミドまたはモノ（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルもしくはジ（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルカルボキサミド基であってもよい。リン含有基の例は、リン酸またはリン酸（Ｃ１〜４）アルキルエステル基である。
【００５２】
一実施形態では、リンカーＬ１は、−ＣＯ−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキレン−、−ＣＯ−（Ｃ１〜Ｃ４）ｘアルキレン−（−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｙ−（Ｃ２〜Ｃ６）アルキレンまたは−ＣＯ−（Ｃ１〜Ｃ４）ｘアルキレン−（Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２）ｙ−ＮＨ−ＣＯ−（Ｃ２〜Ｃ４）アルキレン−（Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２）ｚ−ＮＨ−ＣＯ−であり、ここで、ｘ、ｙおよびｚは互いに独立に、０、１、２、３または４であり、Ｌ１の鎖長は、２５個以下の原子である。
【００５３】
一実施形態では、リンカーＬ１は、−ＣＯ−（ＣＨ２）３−、−ＣＯ−（ＣＨ２）５−または−ＣＯ−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）２−ＣＨ２−ＣＨ２−である。
【００５４】
一実施形態では、リンカーＬ１は、−ＣＯ−ＣＨ２−（Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２）２−ＮＨ−ＣＯ−ＣＨ２−（Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２）２−ＮＨ−ＣＯ−である。
【００５５】
一実施形態では、リンカーＬ２は、−（Ｃ２〜Ｃ６）アルキレン−ＣＯ−ＮＨ−または−（Ｃ２〜Ｃ６）アルキレンである。
【００５６】
一実施形態では、リンカーＬ２は、−（ＣＨ２）２−ＣＯ−ＮＨ−、−（ＣＨ２）３−ＣＯ−ＮＨ−、−（ＣＨ２）３−または−ＣＨ２−ＣＨ２−である。
【００５７】
ある特定の実施形態では、リンカーＬ３は、２〜３個の原子の鎖長を有し、例えば、Ｌ３は、（Ｃ２〜Ｃ３）アルキレン、特に（Ｃ２）アルキレン基であってもよく、ここで、１個のＣ原子が、１個のヘテロ原子またはヘテロ原子部分によって、特にＯ、ＮＨ、Ｎ（Ｃ１〜４）アルキル、Ｓ、ＳＯ２、Ｏ−ＳＯ２、Ｏ−ＳＯ３、Ｏ−ＰＨＯ２またはＯ−ＰＯ３によって置き換えられていてもよいか、または１個のＣ原子がオキソによって置換されていてもよい。
【００５８】
別の実施形態では、リンカーＬ３は、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＨまたは−ＮＨ−ＣＯ−から選択される。
【００５９】
別の実施形態では、リンカーＬ３は、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−、−ＣＨ２−Ｏ−、−ＣＯ−Ｏ−または−ＣＯ−ＮＨから選択される。
【００６０】
別の実施形態では、リンカーＬ３は、−ＣＨ２−Ｏ−、−ＣＯ−Ｏ−、または−ＣＯ−ＮＨから選択される。
【００６１】
ある特定の実施形態では、リンカーＬ４は、１〜３または１〜２個の原子の鎖長を有する。例えば、Ｌ４は、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキレン、特に（Ｃ１〜２）アルキレン基であってもよく、ここで、１または２個のＣ原子が、ヘテロ原子またはヘテロ原子部分によって、特にＯ、ＮＨ、Ｎ（Ｃ１〜４）アルキル、Ｓ、ＳＯ２、Ｏ−ＳＯ２、Ｏ−ＳＯ３、Ｏ−ＰＨＯ２またはＯ−ＰＯ３によって置き換えられていてもよく、および／または１個のＣ原子が（Ｃ１〜４）アルキル、（Ｃ１〜４）アルキルオキシ、オキソ、カルボキシル、またはリン含有基で置換されていてもよい。
【００６２】
一実施形態では、リンカーＬ４は、−ＣＯ−Ｏ−である。別の実施形態では、リンカーＬ４は、−ＣＯ−ＮＨ−である。
【００６３】
本発明の式（Ｉ）のコンジュゲートは、少なくとも２個の環式芳香族基、特にＡ２およびＡ３を含む。本発明の一態様は、短いリンカーＬ３で相互に連結されていて、Ａ３が短いリンカーＬ４によって糖類部分Ｓに隣接している２個の環式基の存在が、グルコース輸送体ＧＬＵＴ１への糖類部分Ｓの結合親和性を有意に増強する態様である。環式基Ａ２およびＡ３は互いに独立に、５〜６員単環式環、９〜１２員二環式環であり、ここで、各環は、芳香族炭素環式または芳香族複素環式環であり、各環は互いに独立に、非置換であるか、またはハロゲン、ＮＯ２、ＣＮ、ＣＦ３、−ＯＣＦ３、（Ｃ１〜４）アルキル、（Ｃ１〜４）アルコキシ、（Ｃ１〜４）アルキル−（Ｃ３〜７）シクロアルキル、（Ｃ３〜７）シクロアルキル、ＯＨ、ベンジル、−Ｏ−ベンジル、カルボキシル、（Ｃ１〜４）アルキル−カルボキシルエステル、カルボキサミド、−ＳＯ２Ｍｅ、ＮＨ２、ＮＨ−ＢＯＣまたはモノ（Ｃ１〜４）アルキル、もしくはジ（Ｃ１〜４）アルキルカルボキサミドから選択される１〜４個の置換基によって置換されている。
【００６４】
さらなる一実施形態では、Ａ２および／またはＡ３は、芳香族複素環式環であり、ここで、１〜４個の環原子、例えば、１、２、３、または４個の環原子は、窒素、硫黄および／または酸素から選択され、環は、非置換であってもよいし、または上記のとおりの少なくとも１個の置換基を有していてもよい。
【００６５】
さらなる一実施形態では、Ａ２および／またはＡ３は互いに独立に、５〜６員芳香族単環式環（ここで、この環は、特に、ピラゾリジニル、イミダゾリジニル、トリアゾリジニル、フラニルから選択されるヘテロアルキル環であり、１〜４個の置換基を有していてもよい）、または９〜１２員芳香族二環式環（ここで、この環は、Ｎ、Ｏ、および／もしくはＳから選択される１〜４個の環原子を有するナフチル環またはヘテロアルキル環であり、１〜４個の置換基を有していてもよい）である。
【００６６】
別の実施形態では、Ａ２またはＡ３のうちの１個は、９〜１２員芳香族二環式環であり、ここで、この環は、Ｎ、Ｏ、および／またはＳから選択される１〜４個の環原子を有する複素環式環であり、ハロゲン、ＮＯ２、ＣＮ、ＣＦ３、−ＯＣＦ３、（Ｃ１〜４）アルキル、（Ｃ１〜４）アルコキシ、（Ｃ１〜４）アルキル−（Ｃ３〜７）シクロアルキル、（Ｃ３〜７）シクロアルキル、ＯＨ、ベンジル、−Ｏ−ベンジル、カルボキシル、（Ｃ１〜４）アルキル−カルボキシルエステル、カルボキサミド、−ＳＯ２Ｍｅ、ＮＨ２、ＮＨ−ＢＯＣまたはモノ（Ｃ１〜４）アルキル、もしくはジ（Ｃ１〜４）アルキルカルボキサミドから選択される１〜４個の置換基を有していてもよい。
【００６７】
別の実施形態では、Ａ２またはＡ３のうちの１個は、ベンゾイミダゾール、インダゾール、キノリン、イミダゾール、インドール、ピリジン、またはイソキノリンから選択され、ここで、この環は、ハロゲン、ＮＯ２、ＣＮ、ＣＦ３、−ＯＣＦ３、（Ｃ１〜４）アルキル、（Ｃ１〜４）アルコキシ、（Ｃ１〜４）アルキル−（Ｃ３〜７）シクロアルキル、（Ｃ３〜７）シクロアルキル、ＯＨ、ベンジル、−Ｏ−ベンジル、カルボキシル、（Ｃ１〜４）アルキル−カルボキシルエステル、カルボキサミド、−ＳＯ２Ｍｅ、ＮＨ２、ＮＨ−ＢＯＣまたはモノ（Ｃ１〜４）アルキル、もしくはジ（Ｃ１〜４）アルキルカルボキサミドから選択される１〜４個の置換基を有していてもよい。別の実施形態では、Ａ２および／またはＡ３は、ナフタレンである。
【００６８】
さらなる一実施形態では、Ａ１は、５〜６員単環式環（ここで、この環は、特に、ピロリジニル、ピラゾリジニル、イミダゾリジニル、トリアゾリジニル、フラニルから選択されるヘテロアルキル環であり、１〜４個の置換基を有していてもよい）、または９〜１２員芳香族二環式環（ここで、この環は、Ｎ、Ｏ、および／またはＳから選択される１〜４個の環原子を含むナフチル環またはヘテロアルキル環であり、１〜４個の置換基を有していてもよい）である。
【００６９】
さらなる一実施形態では、Ａ１は、フェニル、ピロリジニル、ピラゾリジニル、イミダゾリジニル、トリアゾリジニルから選択される。
【００７０】
さらなる一実施形態では、Ａ１は、１，２，３−トリアゾリジニルである。
【００７１】
実施形態のさらなる一群は、Ａ２が、芳香族複素環であり、Ａ３が、フェニルであり、ここで、各環が、非置換であってもよいし、またはハロゲン、ＮＯ２、ＮＨ２、ＮＨ−ＢＯＣ、ＣＮ、（Ｃ１〜４）アルキル、（Ｃ１〜４）アルコキシ、ＯＨ、ＣＦ３、ＯＣＦ３、カルボキシル、（Ｃ１〜４）アルキル−カルボキシルエステル、カルボキサミド、またはモノ（Ｃ１〜４）アルキル、もしくはジ（Ｃ１〜４）アルキルカルボキサミドまたは−ＳＯ２−（Ｃ１〜４）−アルキルから選択される１〜４個の置換基を有していてもよい式（Ｉ）のコンジュゲートである。
【００７２】
実施形態のさらなる一群は、Ａ２が、フェニルであり、Ａ３が、芳香族複素環であり、ここで、各環が、非置換であってもよいし、またはハロゲン、ＮＯ２、ＮＨ２、ＮＨ−ＢＯＣ、ＣＮ、（Ｃ１〜４）アルキル、（Ｃ１〜４）アルコキシ、ＯＨ、ＣＦ３、ＯＣＦ３、カルボキシル、（Ｃ１〜４）アルキル−カルボキシルエステル、カルボキサミド、またはモノ（Ｃ１〜４）アルキル、もしくはジ（Ｃ１〜４）アルキルカルボキサミドまたは−ＳＯ２−（Ｃ１〜４）−アルキルから選択される１〜４個の置換基を有していてもよい式（Ｉ）のコンジュゲートである。
【００７３】
実施形態のさらなる一群は、Ａ２が、フェニルであり、Ａ３が、フェニルであり、ここで、各環が、非置換であってもよいし、またはハロゲン、ＮＯ２、ＮＨ２、ＮＨ−ＢＯＣ、ＣＮ、（Ｃ１〜４）アルキル、（Ｃ１〜４）アルコキシ、ＯＨ、ＣＦ３、ＯＣＦ３、カルボキシル、（Ｃ１〜４）アルキル−カルボキシルエステル、カルボキサミド、またはモノ（Ｃ１〜４）アルキル、もしくはジ（Ｃ１〜４）アルキルカルボキサミドまたは−ＳＯ２−（Ｃ１〜４）−アルキルから選択される１〜４個の置換基を有していてもよい式（Ｉ）のコンジュゲートである。
【００７４】
実施形態のさらなる一群は、ｏが１である式（Ｉ）のコンジュゲートである。
【００７５】
実施形態のさらなる一群は、ｍが、１であり、ｏが、１であり、ｐが、１である式（Ｉ）のコンジュゲートである。
【００７６】
実施形態のさらなる一群は、ｏが、０であり、ｐが、０である式（Ｉ）のコンジュゲートである。
【００７７】
実施形態のさらなる一群は、ｍが、１であり、ｏが、０であり、ｐが、０である式（Ｉ）のコンジュゲートである。
【００７８】
実施形態のさらなる一群は、基−Ａ２−Ｌ３−Ａ３−Ｌ４−が、
【化１】
2021504402.tif 000002
［式中、各環は、非置換であってもよいし、またはハロゲン、ＮＨ２、ＮＨ−ＢＯＣ、ＣＮ、（Ｃ１〜４）アルキル、（Ｃ１〜４）アルコキシ、ＯＨ、ＣＦ３、ＯＣＦ３、カルボキシル、（Ｃ１〜４）アルキル−カルボキシルエステル、カルボキサミド、またはモノ（Ｃ１〜４）アルキル、もしくはジ（Ｃ１〜４）アルキルカルボキサミドまたは−ＳＯ２−（Ｃ１〜４）−アルキルから選択される１〜４個の置換基を有していてもよい］、
【００７９】
【化２】
2021504402.tif 000003
［式中、各環は、非置換であってもよいし、またはハロゲン、ＮＨ２、ＮＨ−ＢＯＣ、ＣＮ、（Ｃ１〜４）アルキル、（Ｃ１〜４）アルコキシ、ＯＨ、ＣＦ３、ＯＣＦ３、カルボキシル、（Ｃ１〜４）アルキル−カルボキシルエステル、カルボキサミド、またはモノ（Ｃ１〜４）アルキル、もしくはジ（Ｃ１〜４）アルキルカルボキサミドまたは−ＳＯ２−（Ｃ１〜４）−アルキルから選択される１〜４個の置換基を有していてもよい］から選択される式（Ｉ）のコンジュゲートである。
【００８０】
実施形態のさらなる一群は、基−Ａ２−Ｌ３−Ａ３−Ｌ４−が、
【化３】
2021504402.tif 000004
［式中、各環は、非置換であってもよいし、またはハロゲン、ＮＯ２、ＮＨ２、ＮＨ−ＢＯＣ、ＣＮ、（Ｃ１〜４）アルキル、（Ｃ１〜４）アルコキシ、ＯＨ、ＣＦ３、ＯＣＦ３、カルボキシル、（Ｃ１〜４）アルキル−カルボキシルエステル、カルボキサミド、またはモノ（Ｃ１〜４）アルキル、もしくはジ（Ｃ１〜４）アルキルカルボキサミドまたは−ＳＯ２−（Ｃ１〜４）−アルキルから選択される１〜４個の置換基を有していてもよい］から選択される式（Ｉ）のコンジュゲートである。
【００８１】
実施形態のさらなる一群は、基−Ａ２−Ｌ３−Ａ３−Ｌ４−が、
【化４】
2021504402.tif 000005
［式中、各環は、非置換であってもよいし、またはハロゲン、ＮＯ２、ＮＨ２、ＮＨ−ＢＯＣ、ＣＮ、（Ｃ１〜４）アルキル、（Ｃ１〜４）アルコキシ、ＯＨ、ＣＦ３、ＯＣＦ３、カルボキシル、（Ｃ１〜４）アルキル−カルボキシルエステル、カルボキサミド、またはモノ（Ｃ１〜４）アルキル、もしくはジ（Ｃ１〜４）アルキルカルボキサミドまたは−ＳＯ２−（Ｃ１〜４）−アルキルから選択される１〜４個の置換基を有していてもよい］から選択される式（Ｉ）のコンジュゲートである。
【００８２】
実施形態のさらなる一群は、基−Ａ２−Ｌ３−Ａ３−Ｌ４−が、
【化５】
2021504402.tif 000006
［式中、各環は、非置換であってもよいし、またはハロゲン、ＮＯ２、ＮＨ２、ＮＨ−ＢＯＣ、ＣＮ、（Ｃ１〜４）アルキル、（Ｃ１〜４）アルコキシ、ＯＨ、ＣＦ３、ＯＣＦ３、カルボキシル、（Ｃ１〜４）アルキル−カルボキシルエステル、カルボキサミド、またはモノ（Ｃ１〜４）アルキル、もしくはジ（Ｃ１〜４）アルキルカルボキサミドまたは−ＳＯ２−（Ｃ１〜４）−アルキルから選択される１〜４個の置換基を有していてもよい］から選択される式（Ｉ）のコンジュゲートである。
【００８３】
式（Ｉ）のコンジュゲートは、インスリン非依存性グルコース輸送体ＧＬＵＴ１に結合する糖類部分Ｓを含む。この糖類部分Ｓは、２、３、４または６位を介してＬ４に結合する末端ピラノース部分を含んでもよい。
【００８４】
一実施形態では、末端ピラノース部分は、３位を介してＬ４に結合している。
【００８５】
一実施形態では、末端ピラノース部分は、４位を介してＬ４に結合している。
【００８６】
一実施形態では、末端ピラノース部分は、６位を介してＬ４に結合している。
【００８７】
一実施形態では、末端ピラノース部分は、２位を介してＬ４に結合している。
【００８８】
一部の実施形態では、糖類部分Ｓは、式（ＩＩ）の骨格構造
【化６】
2021504402.tif 000007
［式中、１、２、３、４、５、および６は、ピラノース部分におけるＣ原子の位置を示し、
Ｒ１は、Ｈまたは保護基であり、
Ｓ１は、２、３、４、または６位を介してＬ４に結合している］を有する末端ピラノース部分Ｓ１を含んでもよい。
【００８９】
保護基は、当技術分野で公知の任意の適切な保護基、例えば、アセチルまたはベンゾイルなどのアシル基、メチルなどのアルキル基、ベンジルなどのアラルキル基、または４−メトキシベンジル（ＰＭＢ）であってもよい。
【００９０】
ＯＲ１は、糖類部分のＣ１にアルファまたはベータ位で存在することができる。
【００９１】
一部の実施形態では、Ｒ１は、メチル、エチル、ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ２、またはＣＨ２ＣＨ２−Ｓｉ−（ＣＨ３）３から選択される。
【００９２】
一部の実施形態では、末端ピラノース部分は、グルコース、ガラクトース、６−デオキシ−６−アミノ−グルコース、または２，６−ジデオキシ−２，６−ジアミノ−グルコース誘導体から選択することができ、ここで、末端ピラノース部分は、２、３、４、または６位を介して式（Ｉ）のコンジュゲートに結合している。
【００９３】
別の実施形態では、末端ピラノース部分Ｓ１は、式（ＩＩＩ）：
【化７】
2021504402.tif 000008
［式中、Ｒ１は、Ｈまたはメチルもしくはアセチルなどの保護基であり、
Ｒ２およびＲ７は、ＯＲ８、またはＮＨＲ８またはＬ４への結合部位であり、ここで、Ｒ８は、Ｈまたはアセチルもしくはベンジルなどの保護基であり、
Ｒ３およびＲ４は、ＯＲ８または式（Ｉ）のコンジュゲートへの結合部位であり、ここで、Ｒ８は、Ｈまたはアセチルもしくはベンジルなどの保護基であるか、または
Ｒ１およびＲ２および／またはＲ３およびＲ４は、それらが結合しているピラノース環原子と一緒に、環式基、例えば、アセタールを形成しており、
Ｒ５およびＲ６は、Ｈであるか、またはそれらが結合している炭素原子と一緒に、カルボニル基を形成しており、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ７のうちの１個は、Ｌ４への結合部位である］を有する。
【００９４】
式（ＩＩＩ）の末端ピラノース部分Ｓ１の別の実施形態では、Ｒ１は、Ｈである。式（ＩＩＩ）の末端ピラノース部分Ｓ１のさらなる実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ７は、ＯＲ８、またはＬ４への結合部位である。
【００９５】
式（ＩＩＩ）の末端ピラノース部分Ｓ１の別の実施形態では、ピラノース部分の６位および特に置換基Ｒ７は、Ｌ４への末端ピラノース部分Ｓ１の結合部位である。
【００９６】
式（ＩＩＩ）の末端ピラノース部分Ｓ１の別の実施形態では、ピラノース部分の２位および特に置換基Ｒ２は、Ｌ４への末端ピラノース部分Ｓ１の結合部位である。
【００９７】
式（ＩＩＩ）の末端ピラノース部分Ｓ１の別の実施形態では、ピラノース部分の３位および特に置換基Ｒ３は、Ｌ４への末端ピラノース部分Ｓ１の結合部位である。
【００９８】
式（ＩＩＩ）の末端ピラノース部分Ｓ１の別の実施形態では、ピラノース部分の４位および特に置換基Ｒ４は、Ｌ４への末端ピラノース部分Ｓ１の結合部位である。
【００９９】
特異的な実施形態では、ピラノース部分Ｓ１は、式（ＩＶａ）または（ＩＶｂ）：
【化８】
2021504402.tif 000009
［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、およびＲ７は、上記で示したとおりに定義される］を有する。
【０１００】
式（Ｉ）のコンジュゲートの糖類部分Ｓは、１個またはそれ以上、例えば、２、または３個の糖単位を含んでもよい。例えば、糖類部分は、式（Ｖ）の構造：
−［Ｓ２］ｓ−Ｓ１
（Ｖ）
［式中、
Ｓ２は、特に、少なくとも１つのヘキソースまたはペントース部分を含む単糖または二糖部分であり、
Ｓ１は、上記で定義したとおりの末端ピラノース部分であり、
ｓは、０または１である］を有する。
【０１０１】
糖部分Ｓ２は、特に、グルコースもしくはガラクトース誘導体から選択されるピラノース部分または特に、フルクトース誘導体から選択されるフラノース部分であってもよい。
【０１０２】
特異的な実施形態では、糖部分Ｓ２は、式（ＶＩａ）または（ＶＩｂ）：
【化９】
2021504402.tif 000010
［式中、Ｒ１１は、Ｓ１への結合であり、
Ｒ１２およびＲ１７は、ＯＲ８またはＮＨＲ８またはＬ４への結合部位であり、ここで、Ｒ８は、Ｈまたはアセチルもしくはベンジルなどの保護基であり、
Ｒ１３およびＲ１４は、ＯＲ８またはＬ４への結合部位であり、ここで、Ｒ８は、Ｈまたはアセチルなどの保護基であり、
Ｒ１５およびＲ１６は、Ｈであるか、または一緒に、それらが結合している炭素原子と共に、カルボニル基を形成しているか、または
Ｒ１１およびＲ１２および／またはＲ１３およびＲ１４は、それらが結合している環原子と一緒に、アセタールなどの環式基を形成しており、
Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、およびＲ１７のうちの１個は、Ｌ４への結合部位である］を有する。
【０１０３】
さらなる実施形態では、式（Ｉ）のコンジュゲートは、投与後には血液である周囲媒質におけるグルコース濃度に依存して、インスリン非依存性グルコース輸送体ＧＬＵＴ１に可逆的に結合する。さらなる一実施形態では、本発明の式（Ｉ）のコンジュゲートは、ＧＬＵＴ１に結合しても、細胞膜を通過して輸送されることはない。さらなる一実施形態では、糖類部分Ｓは、単一の末端糖部分を含む。よりさらなる実施形態では、糖類部分Ｓは、マンノース単位、特に、末端マンノース単位を含まない。
【０１０４】
項目
項目（ｉ）：式（Ｉ）のコンジュゲート
Ｐ−［Ｌ１］ｍ−［Ａ１］ｏ−［Ｌ２］ｐ−［Ａ２］−［Ｌ３］−［Ａ３］−［Ｌ４］−Ｓ
（Ｉ）
［式中、Ｐは、インスリンまたはインスリン分泌刺激ペプチドであり、
Ｌ１およびＬ２は互いに独立に、１〜２５個の原子の鎖長を有するリンカーであり、
Ｌ３は、２または３個の原子の鎖長を有するリンカーであり、
Ｌ４は、１、２または３個の原子の鎖長を有するリンカーであり、
Ａ１は、５〜６員単環式環または９〜１２員二環式環であり、ここで、各環は独立に、飽和、不飽和、または芳香族炭素環式または複素環式環であり、各環は、少なくとも１個の置換基を有していてもよく、
Ａ２およびＡ３は互いに独立に、５〜６員単環式環または９〜１２員二環式環であり、ここで、各環は独立に、芳香族炭素環式または芳香族複素環式環であり、各環は、少なくとも１個の置換基を有していてもよく、
Ｓは、インスリン非依存性グルコース輸送体ＧＬＵＴ１に結合し、２、３、４、または６位を介してＬ４に結合する末端ピラノース部分を含む糖類部分であり、
ｍ、ｏ、およびｐは互いに独立に、０または１である］
またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物。
【０１０５】
項目（ｉｉ）：糖類部分Ｓは、式（ＩＩ）の骨格構造
【化１０】
2021504402.tif 000011
［式中、１、２、３、４、５、および６は、ピラノース部分におけるＣ原子の位置を示し、
Ｒ１は、Ｈまたは保護基であり、
Ｓ１は、２、３、４、または６位を介してＬ４に結合している］を有する末端ピラノース部分Ｓ１を含んでもよい、項目（ｉ）に記載のコンジュゲート。
【０１０６】
項目（ｉｉｉ）：末端ピラノース部分は、グルコース、ガラクトース、６−デオキシ−６−アミノ−グルコース、または２，６−ジデオキシ−２，６−ジアミノ−グルコース誘導体から選択され、ここで、末端ピラノース部分は、２、３、４、または６位を介して式（Ｉ）のコンジュゲートに結合している、項目（ｉ）または項目（ｉｉ）に記載のコンジュゲート。
【０１０７】
項目（ｉｖ）：Ｒ１は、メチルである、項目（ｉｉ）に記載のコンジュゲート。
【０１０８】
項目（ｖ）：リンカーＬ４は、−ＣＯ−Ｏ−であるか、またはリンカーＬ４は、−ＣＯ−ＮＨ−である、項目（ｉ）〜（ｉｖ）のいずれか１項目に記載のコンジュゲート。
【０１０９】
項目（ｖｉ）：リンカーＬ３は、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−、−ＣＨ２−Ｏ−、−ＣＯ−Ｏ−または−ＣＯ−ＮＨから選択される、項目（ｉ）〜（ｖ）のいずれか１項目に記載のコンジュゲート。
【０１１０】
項目（ｖｉｉ）：リンカーＬ３は、−ＣＨ２−Ｏ−である、項目（ｉ）〜（ｖｉ）のいずれか１項目に記載のコンジュゲート。
【０１１１】
項目（ｖｉｉｉ）：Ａ２は、９〜１２員二環式環である、項目（ｉ）〜（ｖｉｉ）のいずれか１項目に記載のコンジュゲート。
【０１１２】
項目（ｉｘ）：Ａ２は、置換または非置換のベンゾイミダゾールである、項目（ｉ）〜（ｖｉｉｉ）のいずれか１項目に記載のコンジュゲート。
【０１１３】
項目（ｘ）：Ａ２は、置換または非置換フェニルである、項目（ｉ）〜（ｖｉｉ）のいずれか１項目に記載のコンジュゲート。
【０１１４】
項目（ｘｉ）：Ａ２は、置換または非置換イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンである、項目（ｉ）〜（ｖｉｉｉ）のいずれか１項目に記載のコンジュゲート。
【０１１５】
項目（ｘｉｉ）：Ａ２は、置換または非置換ピリジンである、項目（ｉ）〜（ｖｉｉ）のいずれか１項目に記載のコンジュゲート。
【０１１６】
項目（ｘｉｉｉ）：Ａ２は、置換または非置換チアジアゾールである、項目（ｉ）〜（ｖｉｉ）のいずれか１項目に記載のコンジュゲート。
【０１１７】
項目（ｘｉｖ）：Ａ３は、置換または非置換フェニルである、項目（ｉ）〜（ｘｉｉｉ）のいずれか１項目に記載のコンジュゲート。
【０１１８】
項目（ｘｖ）：Ａ３は、置換フェニルである、項目（ｉ）〜（ｘｉｖ）のいずれか１項目に記載のコンジュゲート。
【０１１９】
項目（ｘｖｉ）：基−Ａ２−Ｌ３−Ａ３−Ｌ４−は、
【化１１】
2021504402.tif 000012
［式中、各環は、非置換であってもよいし、またはハロゲン、ＮＯ２、ＮＨ２、ＮＨ−ＢＯＣ、ＣＮ、（Ｃ１〜４）アルキル、（Ｃ１〜４）アルコキシ、ＯＨ、ＣＦ３、ＯＣＦ３、カルボキシル、（Ｃ１〜４）アルキル−カルボキシルエステル、カルボキサミド、またはモノ（Ｃ１〜４）アルキル、もしくはジ（Ｃ１〜４）アルキルカルボキサミドまたは−ＳＯ２−（Ｃ１〜４）−アルキルから選択される１〜４個の置換基を有していてもよい］から選択される、項目（ｉ）〜（ｉｘ）、（ｘｉ）、（ｘｉｖ）または（ｘｖ）のいずれか１項目に記載のコンジュゲート。
【０１２０】
項目（ｘｖｉｉ）：基−Ａ２−Ｌ３−Ａ３−Ｌ４−は、
【化１２】
2021504402.tif 000013
［式中、各環は、非置換であってもよいし、またはハロゲン、ＮＯ２、ＮＨ２、ＮＨ−ＢＯＣ、ＣＮ、（Ｃ１〜４）アルキル、（Ｃ１〜４）アルコキシ、ＯＨ、ＣＦ３、ＯＣＦ３、カルボキシル、（Ｃ１〜４）アルキル−カルボキシルエステル、カルボキサミド、またはモノ（Ｃ１〜４）アルキル、もしくはジ（Ｃ１〜４）アルキルカルボキサミドまたは−ＳＯ２−（Ｃ１〜４）−アルキルから選択される１〜４個の置換基を有していてもよい］から選択される、項目（ｉ）〜（ｖｉｉ）、（ｘｉｉｉ）、（ｘｉｖ）、（ｘｖ）のいずれか１項目に記載のコンジュゲート。
【０１２１】
項目（ｘｖｉｉｉ）：置換基は、ハロゲン、（Ｃ１〜４）アルキル、（Ｃ１〜４）アルコキシまたはＯＨから選択される、項目（ｘｖｉ）または項目（ｘｖｉｉ）に記載のコンジュゲート。
【０１２２】
項目（ｘｉｘ）：Ｐは、インスリンペプチドである、項目（ｉ）〜（ｘｖｉｉｉ）のいずれか１項目に記載のコンジュゲート。
【０１２３】
項目（ｘｘ）：ｐは、１である、項目（ｉ）〜（ｘｉｘ）のいずれか１項目に記載のコンジュゲート。
【０１２４】
項目（ｘｘｉ）：ｍは、０であり、ｏは、０であり、ｐは、１である、項目（ｉ）〜（ｘｘ）のいずれか１項目に記載のコンジュゲート。
【０１２５】
項目（ｘｘｉｉ）：ｐは、１であり、リンカーＬ２は、エステルおよび／またはアミド官能基を含む、項目（ｉ）〜（ｘｘｉ）のいずれか１項目に記載のコンジュゲート。
【０１２６】
項目（ｘｘｉｉｉ）：ｐは、１であり、リンカーＬ２は、（Ｃ２〜Ｃ２４）アルキニレンである、項目（ｉ）〜（ｘｘｉ）のいずれか１項目に記載のコンジュゲート。
【０１２７】
項目（ｘｘｉｖ）：リンカーＬ２は、３〜１０個の原子、または３〜６個の原子の鎖長を有する、項目（ｉ）〜（ｘｘｉｉｉ）のいずれか１項目に記載のコンジュゲート。
【０１２８】
項目（ｘｘｖ）：リンカーＬ２は、−ＣＨ２−を含む、項目（ｉ）〜（ｘｘｉｖ）のいずれか１項目に記載のコンジュゲート。
【０１２９】
項目（ｘｘｖｉ）：リンカーＬ２は、２〜１６個の炭素原子を有する飽和アルキル鎖を含む、項目（ｉ）〜（ｘｘｖ）のいずれか１項目に記載のコンジュゲート。
【０１３０】
項目（ｘｘｖｉｉ）：リンカーＬ２および／またはリンカーＬ１は、−Ｃ（＝Ｏ）−を含む、項目（ｉ）〜（ｘｘｖｉ）のいずれか１項目に記載のコンジュゲート。
【０１３１】
項目（ｘｘｖｉｉｉ）：リンカーＬ２および／またはリンカーＬ１は、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−を含む、項目（ｉ）〜（ｘｘｖｉｉ）のいずれか１項目に記載のコンジュゲート。
【０１３２】
項目（ｘｘｉｘ）：リンカーＬ２は、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ２）２−を含む、項目（ｉ）〜（ｘｘｖｉｉｉ）のいずれか１項目に記載のコンジュゲート。
【０１３３】
項目（ｘｘｘ）：リンカーＬ２は、−Ｃ（＝Ｏ）−を含む、項目（ｉ）〜（ｘｘｉｘ）のいずれか１項目に記載のコンジュゲート。
【０１３４】
項目（ｘｘｘｉ）：Ｌ２は、−（ＣＨ２）３−Ｃ（＝Ｏ）−である、項目（ｉ）〜（ｘｘｉｉ）および（ｘｘｘ）のいずれか１項目に記載のコンジュゲート。
【０１３５】
項目（ｘｘｘｉｉ）：ｏは、１であり、Ａ１は、置換または非置換フェニルである、項目（ｉ）〜（ｘｘ）および（ｘｘｉｉ）〜（ｘｘｘｉ）のいずれか１項目に記載のコンジュゲート。
【０１３６】
項目（ｘｘｘｉｉｉ）：コンジュゲートの残りが結合しているＰ中のアミノ酸残基は、Ｐのペプチド鎖のＣ末端にある、項目（ｉ）〜（ｘｘｘｉｉ）のいずれか１項目に記載のコンジュゲート。
【０１３７】
項目（ｘｘｘｉｖ）：コンジュゲートの残りが結合しているＰ中のアミノ酸残基は、Ｐのペプチド鎖のＣ末端に対して末位から二番目の残基である、項目（ｉ）〜（ｘｘｘｉｉ）および（ｘｘｘｉｉｉ）のいずれか１項目に記載のコンジュゲート。
【０１３８】
項目（ｘｘｘｖ）：Ｐ中のリシン残基は、コンジュゲートの残りが結合しているＰ中の残基である、項目（ｉ）〜（ｘｘｘｉｖ）のいずれか１項目に記載のコンジュゲート。
【０１３９】
項目（ｘｘｘｖｉ）：Ｐ中のリシン残基は、モチーフ−ＹＴＰＫＴ−中のリシン残基である、項目（ｘｘｘｖ）に記載のコンジュゲート。
【０１４０】
項目（ｘｘｘｖｉｉ）：コンジュゲートの残りが結合しているＰ中のリシン残基は、Ｐのペプチド鎖のＣ末端に対して末位から二番目の残基である、項目（ｘｘｘｖ）または項目（ｘｘｘｖｉ）に記載のコンジュゲート。
【０１４１】
項目（ｘｘｘｖｉｉｉ）：コンジュゲートの残りが結合しているＰ中のリシン残基は、Ｐのペプチド鎖のＣ末端にある、項目（ｘｘｘｖ）に記載のコンジュゲート。
【０１４２】
項目（ｘｘｘｉｘ）：Ｐ中のフェニルアラニン残基は、コンジュゲートの残りが結合しているＰ中の残基である、項目（ｉ）〜（ｘｘｘｉｖ）のいずれか１項目に記載のコンジュゲート。
【０１４３】
項目（ｘｌ）：Ｐ中のフェニルアラニン残基は、モチーフＦＶＮＱ−におけるフェニルアラニン残基である、項目（ｘｘｘｉｘ）に記載のコンジュゲート。
【０１４４】
項目（ｘｌｉ）：コンジュゲートの残りが結合しているＰ中のフェニルアラニン残基は、Ｐのペプチド鎖のＮ末端にある、項目（ｘｘｘｉｘ）または項目（ｘｌ）に記載のコンジュゲート。
【０１４５】
項目（ｘｌｉｉ）：Ｐは、インスリンＢ２９Ｌｙｓ残基のアミノ側鎖を介して、またはインスリンＢ１Ｐｈｅ残基のアミノ末端を介して、コンジュゲートの残りに結合している、項目（ｉ）〜（ｘｌｉ）のいずれか１項目に記載のコンジュゲート。
【０１４６】
項目（ｘｌｉｉｉ）：ｍは、１であり、ｏは、１であり、ｐは、１である、項目（ｉ）〜（ｘｘ）および（ｘｘｉｉ）〜（ｘｌｉｉ）のいずれか１項目に記載のコンジュゲート。
【０１４７】
項目（ｘｌｉｖ）：Ａ１は、５員複素環である、項目（ｉ）〜（ｘｘ）および（ｘｘｉｉ）〜（ｘｌｉｉｉ）のいずれか１項目に記載のコンジュゲート。
【０１４８】
項目（ｘｌｖ）：Ａ１は、１，２，３−トリアゾールである、項目（ｉ）〜（ｘｘ）および（ｘｘｉｉ）〜（ｘｌｉｖ）のいずれか１項目に記載のコンジュゲート。
【０１４９】
項目（ｘｌｖｉ）：Ｌ１は、−Ｃ（＝Ｏ）−を含む、項目（ｉ）〜（ｘｘ）および（ｘｘｉｉ）〜（ｘｌｖ）のいずれか１項目に記載のコンジュゲート。
【０１５０】
項目（ｘｌｖｉｉ）：Ｌ１は、−（ＣＨ２）３−Ｃ（＝Ｏ）−である、項目（ｉ）〜（ｘｘ）および（ｘｘｉｉ）〜（ｘｌｖｉ）のいずれか１項目に記載のコンジュゲート。
【０１５１】
項目（ｘｌｖｉｉｉ）：Ｌ１は、−（ＣＨ２）３−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−を含む、項目（ｉ）〜（ｘｘ）および（ｘｘｉｉ）〜（ｘｌｉｉ）のいずれか１項目に記載のコンジュゲート。
【０１５２】
項目（ｘｌｉｘ）：Ｌ１および／またはＬ２は、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）２−Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−ＣＨ２−を含む、項目（ｉ）〜（ｘｌｖｉｉｉ）のいずれか１項目に記載のコンジュゲート。
【０１５３】
項目（ｌ）：Ａ１は、１，２，３−トリアゾールであり、Ｌ１は、−（ＣＨ２）５−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−を含むか、または−（ＣＨ２）３−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−を含む、項目（ｉ）〜（ｘｘ）および（ｘｘｉｉ）〜（ｘｌｖｉ）および（ｘｌｖｉｉ）〜（ｘｌｖｉｘ）のいずれか１項目に記載のコンジュゲート。
【０１５４】
項目（ｌｉ）：Ａ１は、１，２，３−トリアゾールであり、Ｌ１は、−（ＣＨ２）５−Ｃ（＝Ｏ）−を含むか、または−（ＣＨ２）３−Ｃ（＝Ｏ）−を含む、項目（ｉ）〜（ｘｘ）および（ｘｘｉｉ）〜（ｌ）のいずれか１項目に記載のコンジュゲート。
【０１５５】
項目（ｌｉｉ）：Ａ１は、ピラゾール環である、項目（ｉ）〜（ｘｘ）および（ｘｘｉｉ）〜（ｘｌｉｖ）および（ｘｌｖｉ）〜（ｘｌｖｉｘ）のいずれか１項目に記載のコンジュゲート。
【０１５６】
別の実施形態は、活性作用物質としての項目（ｉ）〜（ｌｉｉ）のいずれか１項目に記載のコンジュゲートと、医薬担体とを含む医薬組成物に関する。
【０１５７】
別の実施形態は、それを必要とする対象に、項目（ｉ）〜（ｌｉｉ）のいずれか１項目に記載のコンジュゲート、または活性作用物質としての項目（ｉ）〜（ｌｉｉ）のいずれか１項目に記載のコンジュゲートと医薬担体とを含む医薬組成物を投与することを含む、グルコース代謝の調節不全と関連する、それに起因する、および／またはそれに随伴する障害を予防および／または処置する方法に関する。
【０１５８】
別の実施形態は、式（Ｉａ）の化合物
Ｒ−（Ｏ＝Ｃ）−［Ｌ１］ｍ−［Ａ１］ｏ−［Ｌ２］ｐ−［Ａ２］−［Ｌ３］−［Ａ３］−［Ｌ４］−Ｓ
（Ｉａ）
［式中、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３、Ｌ４、Ａ１、Ａ２、Ａ３、Ｓ、ｍ、ｏおよびｐは、項目（ｉ）〜（ｌｉｉ）のいずれか１項目に記載のとおりに定義され、
Ｒは、Ｈ、ハロゲン、ＯＨ、Ｏ−アルキル−、無水物形成基または別の活性エステル形成基、例えば、４−ニトロフェニルエステル、スクシナートまたはＮ−ヒドロキシベンゾトリアゾールである］、
またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物に関する。
【０１５９】
別の実施形態は、式（Ｉｂ）の化合物
［Ｌ１］ｍ−［Ａ１］ｏ−［Ｌ２］ｐ−［Ａ２］−［Ｌ３］−［Ａ３］−［Ｌ４］−Ｓ
（Ｉｂ）
［式中、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３、Ｌ４、Ａ１、Ａ２、Ａ３、Ｓ、ｍ、ｏおよびｐは、項目（ｉ）〜（ｌｉｉ）のいずれか１項目に記載のとおりに定義される］
またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物に関する。
【０１６０】
実施形態の例
一実施形態は、式（Ｉ）のコンジュゲート
Ｐ−［Ｌ１］ｍ−［Ａ１］ｏ−［Ｌ２］ｐ−［Ａ２］−［Ｌ３］−［Ａ３］−［Ｌ４］−Ｓ
（Ｉ）
［式中、Ｐは、インスリンペプチドであり、
ｍおよびｏは両方とも、０であり、
ｐは、１であり、Ｌ２は、（Ｃ２〜Ｃ２４）飽和または不飽和炭化水素鎖であり、
Ｌ３は、−ＣＨ２−Ｏ−であり、
Ｌ４は、−ＣＯ−Ｏ−または−ＣＯ−ＮＨ−であり、
Ａ２は、置換または非置換ベンゾイミダゾールであり、
Ａ３は、置換フェニルであり、ここで、置換基は、ハロゲン、（Ｃ１〜４）アルキル、（Ｃ１〜４）アルコキシまたはＯＨから選択され、
Ｓは、インスリン非依存性グルコース輸送体ＧＬＵＴ１に結合する糖類部分であり、２、３、４、または６位を介してＬ４に結合している末端ピラノース部分を含む］
またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物に関する。
【０１６１】
一実施形態は、式（Ｉ）のコンジュゲート
Ｐ−［Ｌ１］ｍ−［Ａ１］ｏ−［Ｌ２］ｐ−［Ａ２］−［Ｌ３］−［Ａ３］−［Ｌ４］−Ｓ
（Ｉ）
［式中、Ｐは、インスリンペプチドであり、
ｍおよびｏは両方とも、０であり、
ｐは、１であり、Ｌ２は、（Ｃ２〜Ｃ２４）飽和または不飽和炭化水素鎖であり、
Ｌ３は、−ＣＨ２−Ｏ−であり、
Ｌ４は、−ＣＯ−Ｏ−または−ＣＯ−ＮＨ−であり、
Ａ２は、非置換フェニルであり、
Ａ３は、置換フェニルであり、ここで、置換基は、ハロゲン、（Ｃ１〜４）アルキル、（Ｃ１〜４）アルコキシまたはＯＨから選択され、
Ｓは、インスリン非依存性グルコース輸送体ＧＬＵＴ１に結合する糖類部分であり、２、３、４、または６位を介してＬ４に結合している末端ピラノース部分を含む］
またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物に関する。
【０１６２】
一実施形態は、式（Ｉ）のコンジュゲート
Ｐ−［Ｌ１］ｍ−［Ａ１］ｏ−［Ｌ２］ｐ−［Ａ２］−［Ｌ３］−［Ａ３］−［Ｌ４］−Ｓ
（Ｉ）
［式中、Ｐは、インスリンペプチドであり、
ｍおよびｏは両方とも、０であり、
ｐは、１であり、Ｌ２は、（Ｃ２〜Ｃ２４）飽和または不飽和炭化水素鎖であり、
Ｌ３は、−ＣＨ２−Ｏ−であり、
Ｌ４は、−ＣＯ−Ｏ−または−ＣＯ−ＮＨ−であり、
Ａ２は、置換または非置換ベンゾイミダゾールであり、
Ａ３は、置換フェニルであり、ここで、置換基は、ハロゲン、（Ｃ１〜４）アルキル、（Ｃ１〜４）アルコキシまたはＯＨから選択され、
Ｓは、２、３、４、または６位を介してＬ４に結合しているグルコースである］
またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物に関する。
【０１６３】
一実施形態は、式（Ｉ）のコンジュゲート
Ｐ−［Ｌ１］ｍ−［Ａ１］ｏ−［Ｌ２］ｐ−［Ａ２］−［Ｌ３］−［Ａ３］−［Ｌ４］−Ｓ
（Ｉ）
［式中、Ｐは、インスリンペプチドであり、
ｍおよびｏは両方とも、０であり、
ｐは、１であり、Ｌ２は、（Ｃ２〜Ｃ２４）飽和または不飽和炭化水素鎖であり、
Ｌ３は、−ＣＨ２−Ｏ−であり、
Ｌ４は、−ＣＯ−Ｏ−または−ＣＯ−ＮＨ−であり、
Ａ２は、非置換フェニルであり、
Ａ３は、置換フェニルであり、ここで、置換基は、ハロゲン、（Ｃ１〜４）アルキル、（Ｃ１〜４）アルコキシまたはＯＨから選択され、
Ｓは、２、３、４、または６位を介してＬ４に結合しているグルコースである］
またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物に関する。
【０１６４】
一実施形態は、式（Ｉ）のコンジュゲート
Ｐ−［Ｌ１］ｍ−［Ａ１］ｏ−［Ｌ２］ｐ−［Ａ２］−［Ｌ３］−［Ａ３］−［Ｌ４］−Ｓ
（Ｉ）
［式中、Ｐは、インスリンペプチドであり、
ｍおよびｏは両方とも、０であり、
ｐは、１であり、Ｌ２は、（Ｃ２〜Ｃ２４）飽和または不飽和炭化水素鎖であり、
Ｌ３は、−ＣＨ２−Ｏ−であり、
Ｌ４は、−ＣＯ−Ｏ−または−ＣＯ−ＮＨ−であり、
Ａ２は、置換または非置換ベンゾイミダゾールであり、
Ｌ２は、ベンゾイミダゾールの１位にある窒素原子を介してＡ２に結合しており、
Ａ３は、置換フェニルであり、ここで、置換基は、ハロゲン、（Ｃ１〜４）アルキル、（Ｃ１〜４）アルコキシまたはＯＨから選択され、
Ｓは、２、３、４、または６位を介してＬ４に結合しているグルコースである］
またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物に関する。
【０１６５】
一実施形態は、式（Ｉ）のコンジュゲート
Ｐ−［Ｌ１］ｍ−［Ａ１］ｏ−［Ｌ２］ｐ−［Ａ２］−［Ｌ３］−［Ａ３］−［Ｌ４］−Ｓ
（Ｉ）
［式中、Ｐは、インスリンペプチドであり、
ｍおよびｏは両方とも、０であり、
ｐは、１であり、Ｌ２は、−（ＣＨ２）ｆ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−を含み、ここで、ｆは、１〜８であり、
Ｌ３は、−ＣＨ２−Ｏ−であり、
Ｌ４は、−ＣＯ−Ｏ−または−ＣＯ−ＮＨ−であり、
Ａ２は、置換または非置換ベンゾイミダゾールであり、
Ｌ２は、ベンゾイミダゾールの１位にある窒素原子を介してＡ２に結合しており、
Ａ３は、置換フェニルであり、ここで、置換基は、ハロゲン、（Ｃ１〜４）アルキル、（Ｃ１〜４）アルコキシまたはＯＨから選択され、
Ｓは、２、３、４、または６位を介してＬ４に結合しているグルコースである］
またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物に関する。
【０１６６】
一実施形態は、式（Ｉ）のコンジュゲート
Ｐ−［Ｌ１］ｍ−［Ａ１］ｏ−［Ｌ２］ｐ−［Ａ２］−［Ｌ３］−［Ａ３］−［Ｌ４］−Ｓ
（Ｉ）
［式中、Ｐは、インスリンペプチドであり、
ｍは、１であり、Ｌ１は、−（ＣＨ２）ｆ−を含み、ここで、ｆは、１〜８であり；場合により、Ｌ１は、−（ＣＨ２）５−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−を含むか、または−（ＣＨ２）３−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−を含み；場合により、Ｌ１は、−（ＣＨ２）５−Ｃ（＝Ｏ）−を含むか、または−（ＣＨ２）３−Ｃ（＝Ｏ）−を含み、
ｏは、１であり、Ａ１は、トリアゾールであり、
ｐは、１であり、Ｌ２は、−（ＣＨ２）ｆ−を含み、ここで、ｆは、１〜８であり、
Ｌ３は、−ＣＨ２−Ｏ−であり、
Ｌ４は、−ＣＯ−Ｏ−または−ＣＯ−ＮＨ−であり、
Ａ２は、置換または非置換ベンゾイミダゾールであり、
Ｌ２は、ベンゾイミダゾールの１位にある窒素原子を介してＡ２に結合しており、
Ａ３は、置換フェニルであり、ここで、置換基は、ハロゲン、（Ｃ１〜４）アルキル、（Ｃ１〜４）アルコキシまたはＯＨから選択され、
Ｓは、２、３、４、または６位を介してＬ４に結合しているグルコースである］
またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物に関する。
【０１６７】
一実施形態は、式（Ｉ）のコンジュゲート
Ｐ−［Ｌ１］ｍ−［Ａ１］ｏ−［Ｌ２］ｐ−［Ａ２］−［Ｌ３］−［Ａ３］−［Ｌ４］−Ｓ
（Ｉ）
［式中、Ｐは、インスリンペプチドであり、
ｍ、ｏおよびｐはすべて、０であり、
Ｌ３は、−ＣＨ２−Ｏ−であり、
Ｌ４は、−ＣＯ−Ｏ−または−ＣＯ−ＮＨ−であり、
Ａ２は、置換または非置換イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンであり、
Ａ３は、置換フェニルであり、ここで、置換基は、ハロゲン、（Ｃ１〜４）アルキル、（Ｃ１〜４）アルコキシまたはＯＨから選択され、
Ｓは、２、３、４、または６位を介してＬ４に結合しているグルコースである］
またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物に関する。
【０１６８】
一実施形態は、式（Ｉ）のコンジュゲート
Ｐ−［Ｌ１］ｍ−［Ａ１］ｏ−［Ｌ２］ｐ−［Ａ２］−［Ｌ３］−［Ａ３］−［Ｌ４］−Ｓ
（Ｉ）
［式中、Ｐは、インスリンペプチドであり、
ｍおよびｏは両方とも、０であり、
ｐは、１であり、Ｌ２は、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−を含み、
Ｌ３は、−ＣＨ２−Ｏ−であり、
Ｌ４は、−ＣＯ−Ｏ−または−ＣＯ−ＮＨ−であり、
Ａ２は、置換または非置換チアジアゾールであり、
Ａ３は、置換フェニルであり、ここで、置換基は、ハロゲン、（Ｃ１〜４）アルキル、（Ｃ１〜４）アルコキシまたはＯＨから選択され、
Ｓは、２、３、４、または６位を介してＬ４に結合しているグルコースである］
またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物に関する。
【発明を実施するための形態】
【０１６９】
定義
「アルキル」は、直鎖または分枝炭素鎖を意味する。アルキル基は、非置換であっても、または置換されていてもよく、ここで、アルキル炭素の１個またはそれ以上の水素が、ハロゲンなどの置換基によって置き換えられていてもよい。アルキルの例には、メチル、トリフルオロメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、およびｎ−ヘキシルが含まれる。
【０１７０】
「アルキレン」は、両側で結合する直鎖または分枝炭素鎖を意味する。アルキレン基は、非置換であっても、または置換されていてもよい。
【０１７１】
「アリール」は、場合によりさらに置換されていてもよい、複素環式環を含む単環式または多環式または縮合芳香環から誘導される任意の置換基、例えば、フェニル、チオフェン、インドリル、ナフチル、ピリジルを指す。
【０１７２】
「アシル」は、構造Ｒ−（Ｃ＝Ｏ）−の化学官能基を意味し、ここで、Ｒは、アルキル、アリール、またはアラルキルである。
【０１７３】
「ハロゲン」は、フルオロ、クロロ、ブロモ、またはヨードを意味する。好ましくは、ハロゲンは、フルオロまたはクロロである。
【０１７４】
「５〜７員単環式環」は、最大数までの二重結合を含んでもよい５、６、または７個の環原子を有する環（芳香環または完全に飽和、部分的に飽和、または不飽和の非芳香環）を意味し、ここで、少なくとも１個の環原子から最大４個までの環原子が、硫黄（−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−を含む）、酸素および窒素（＝Ｎ（Ｏ）−を含む）からなる群から選択されるヘテロ原子によって置き換えられていてもよい。５〜７員環の例には、シクロペンタン、シクロヘキサン、およびベンゼンなどの炭素環、またはフラン、チオフェン、ピロール、ピロリン、イミダゾール、イミダゾリン、ピラゾール、トリアゾール、ピラゾリン、オキサゾール、オキサゾリン、イソオキサゾール、イソオキサゾリン、チアゾール、チアゾリン、イソチアゾール、イソチアゾリン、チアジアゾール、チアジアゾリン、テトラヒドロフラン、テトラヒドロチオフェン、ピロリジン、イミダゾリジン、ピラゾリジン、オキサゾリジン、イソオキサゾリジン、チアゾリジン、イソチアゾリジン、チアジアゾリジン、スルホラン、ピラン、ジヒドロピラン、テトラヒドロピラン、イミダゾリジン、ピリジン、ピリダジン、ピラジン、ピリミジン、ピペラジン、ピペリジン、モルホリン、テトラゾール、トリアゾール、トリアゾリジン、テトラゾリジン、ジアゼパム、アゼピン、もしくはホモピペラジンなどの複素環が含まれる。
【０１７５】
「９〜１２員二環式環」は、少なくとも１個の環原子が２つの環によって共有され、最大数までの二重結合を含んでもよい９〜１２個の環原子を有する二環の系（芳香環または完全に飽和、部分的に飽和もしくは不飽和の非芳香環）を意味し、ここで、少なくとも１個の環原子から最大６個までの環原子が硫黄（−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−を含む）、酸素および窒素（＝Ｎ（Ｏ）−を含む）からなる群から選択されるヘテロ原子によって置き換えられていてもよく、環が、炭素または窒素原子を介して分子の残りに連結されている。９〜１２員環の例には、ナフタレンなどの炭素環およびインドール、インドリン、ベンゾフラン、ベンゾチオフェン、ベンゾオキサゾール、ベンゾイソオキサゾール、ベンゾチアゾール、ベンズイソチアゾール、ベンゾイミダゾール、ベンゾイミダゾリン、キノリン、キナゾリン、ジヒドロキナゾリン、キノリン、ジヒドロキノリン、テトラヒドロキノリン、デカヒドロキノリン、イソキノリン、デカヒドロイソキノリン、テトラヒドロイソキノリン、ジヒドロイソキノリン、ベンゾアゼピン、プリン、またはプテリジンなどの複素環が含まれる。９〜１２員二環式環という用語にはまた、１，４−ジオキサ−８−アザスピロ［４．５］デカンなどの２つの環のスピロ構造、または８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクタンのような橋かけ複素環が含まれる。
【０１７６】
「保護基」という用語は、Ｔｈｅｏｄｏｒａ  Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ、Ｐｅｔｅｒ  Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、第３版、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆Ｓｏｎｃ，Ｉｎｃ．１９９９に記載されているとおりの糖化学の分野で公知のＯＨ基を保護するための化学的保護基を意味する。保護基の例は、アセチル、ベンジル、もしくはｐ−メトキシベンジル；または２個のヒドロキシ基を保護するためのイソプロピリデン基である。
【０１７７】
「脱離基」という用語は、当業者には公知であり、ハロゲン、Ｏ−ＳＯ２−Ｍｅ、Ｏ−ＳＯ２−ｐ−トリルのようなＳＮ１またはＳＮ２型の置換反応のための化学的脱離基を意味する。
【０１７８】
「無水物形成基」という用語は、それが結合しているカルボニル基と共に無水物を形成する化学基を意味する。一例は、前記カルボニル基をアセチル化する無水酢酸である。
【０１７９】
「活性エステル形成基」という用語は、それが結合しているカルボニル基と共に、アミド基を形成するアミノ基含有化合物とのカップリング反応について前記カルボニル基を活性化するエステルを形成する化学基を意味する。
【０１８０】
活性エステル形成基の例は、４−ニトロフェニルエステル、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）、１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾールまたはＮ−ヒドロキシスクシンイミド（ＨＯＳｕ）である。
【０１８１】
「薬学的に許容される」という用語は、動物および／またはヒトにおいて使用するためにＥＭＥＡ（欧州）および／またはＦＤＡ（ＵＳ）および／または任意の他の国家規制当局などの規制当局によって承認されていることを意味する。
【０１８２】
本発明の式（Ｉ）のコンジュゲートは、医薬品、例えば、動物用医薬品またはヒト用医薬品において使用するために適している。特に、式（Ｉ）のコンジュゲートは、ヒト用医薬品のために適している。グルコース依存性放出／再捕獲機構によって、式（Ｉ）のコンジュゲートは、グルコース機構の調節不全と関連する、それに起因する、および／またはそれに随伴する障害の予防および／または処置において使用するために、例えば、糖尿病、特に、１型または２型糖尿病の予防および／または処置において使用するために特に適している。
【０１８３】
本発明はまた、活性作用物質としての上記のとおりの式（Ｉ）のコンジュゲートと、薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物を提供する。
【０１８４】
「医薬組成物」という用語は、混合した場合に適合性であり、投与してもよい成分を含有する混合物を示す。医薬組成物は、１種またはそれ以上の医療用薬物を含む。加えて、医薬組成物は、活性または不活性成分とみなされるかどうかにかかわらず、溶媒、補助剤、皮膚軟化剤、膨張剤、安定剤、および他の成分などの１種またはそれ以上の薬学的に許容される担体を含んでもよい。
【０１８５】
本発明の式（Ｉ）のコンジュゲート、またはその塩を、医薬組成物の一部として許容される医薬担体と併せて投与する。「薬学的に許容される担体」は、共に投与される物質の治療特性を保持しながら、生理学的に許容される化合物または化合物の混合物である。標準的な許容される医薬担体およびそれらの製剤は、当業者に公知であり、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ、（第２０版）、Ａ．Ｒ．Ｇｅｎｎａｒｏ  Ａ．Ｒ．編、２０００、Ｌｉｐｐｅｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓに記載されている。例示的な薬学的に許容される担体の１つは、生理食塩水である。
【０１８６】
許容される医薬担体には、経口、直腸、経鼻、または非経口（皮下、筋肉内、静脈内、皮内、および経皮を含む）投与に適切な製剤で使用されるものが含まれる。本発明の化合物は典型的には、非経口投与されるであろう。
【０１８７】
「薬学的に許容される塩」という用語は、哺乳類において使用するために安全かつ有効である本発明の式（Ｉ）のコンジュゲートの塩を意味する。薬学的に許容される塩には、これに限定されないが、酸付加塩および塩基性塩が含まれ得る。酸付加塩の例には、塩化物、硫酸塩、硫酸水素塩、リン酸（水素）塩、酢酸塩、クエン酸塩、トシル酸塩、またはメシル酸塩が含まれる。塩基性塩の例には、無機カチオンとの塩、例えば、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、またはカルシウム塩などのアルカリ金属またはアルカリ土類金属塩、およびアミン塩などの有機カチオンとの塩が含まれる。薬学的に許容される塩のさらなる例は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ、（第２０版）、Ａ．Ｒ．Ｇｅｎｎａｒｏ  Ａ．  Ｒ．編、２０００、Ｌｉｐｐｅｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  ＷｉｌｋｉｎｓまたはＨａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ，  Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，  Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｕｓｅ、Ｐ．Ｈ．Ｓｔａｈｌ、Ｃ．Ｇ．Ｗｅｒｍｕｔｈ編、２００２（Ｖｅｒｌａｇ  Ｈｅｌｖｅｔｉｃａ  Ｃｈｉｍｉｃａ  Ａｃｔａ（Ｚｕｒｉｃｈ、スイス）およびＷｉｌｅｙ−ＶＣＨ（Ｗｅｉｎｈｅｉｍ、ドイツ）による共同出版）に記載されている。
【０１８８】
「溶媒和物」という用語は、本発明の式（Ｉ）のコンジュゲートまたはその塩と溶媒分子、例えば、有機溶媒分子および／または水との複合体を意味する。
【０１８９】
本発明の化合物は、「治療有効量」で投与されるであろう。この用語は、所望の効果を得るための式（Ｉ）のコンジュゲートの非毒性であるが、十分な量を指す。所望の生物学的効果を達成するために必要な式（Ｉ）のコンジュゲートの量は、いくつかの因子、例えば、選択された具体的な式（Ｉ）のコンジュゲート、意図されている使用、投与様式、および患者の臨床状態に依存する。当業者であれば、任意の個別の症例における適切な「有効」量を、ルーチン的な実験を使用して決定することもできる。
【０１９０】
本発明の医薬組成物は、非経口（例えば、皮下、筋肉内、皮内、または静脈内）、経口（ｏｒａｌ）、直腸、局所、および経口（ｐｅｒｏｒａｌ）（例えば、舌下）投与に適切なものであるが、最も適切な投与様式は、それぞれ個別の症例で、処置されるべき状態の性質および重症度に、ならびに各症例で使用される式（Ｉ）のコンジュゲートの性質に依存する。
【０１９１】
適切な医薬組成物は、それぞれが規定量の式（Ｉ）のコンジュゲートを含有する、バイアルもしくはアンプル内の別々の単位、例えば、カプセル剤、錠剤、および散剤の形態で；散剤もしくは顆粒剤として；水性もしくは非水性液体中の液剤または懸濁剤として；または水中油型もしくは油中水型乳剤としてであってもよい。これは、単回投与用の注射剤型で、例えば、ペン型で提供することができる。組成物は、すでに記述したとおり、活性成分および担体（１種またはそれ以上の追加の成分からなってよい）を接触させる工程を含む任意の適切な薬学的方法によって調製することができる。
【０１９２】
本発明の式（Ｉ）のコンジュゲートを、Ｒｏｔｅ  Ｌｉｓｔｅ  ２０１６に記述されているすべての薬物などの他の薬理学的に活性な化合物と、例えば、Ｒｏｔｅ  Ｌｉｓｔｅ  ２０１６、第１２章に記述されているすべての抗糖尿病薬と広く組み合わせることができる。
【０１９３】
特に、作用の相乗的な改善のために、活性成分の組み合わせを使用することができる。それらを、患者への活性成分の別々の投与によって、または複数の活性成分が１つの医薬製剤中に存在する配合剤の形態で適用することができる。活性成分を活性成分の別々の投与によって投与する場合、これを同時に、または連続的に行うことができる。
【０１９４】
式（Ｉ）のコンジュゲートを合成するための一般方法
式（Ｉ）のコンジュゲートおよびその中間体を合成するための一般方法を次のスキームに記載する：
【０１９５】
スキーム１：
６位での選択的修飾（例えば、６−Ｏ−ベンゾイル化）：
【化１３】
2021504402.tif 000014
【０１９６】
炭水化物の６位における置換基の導入は単純である。多くの炭水化物に適用可能な標準的な手順として、本発明者らは、部分的に保護されたピラノシド、例えば、標準的な手順を使用して対応する糖から直接的に調製することができるメチル−６−Ｏ−トルエンスルホニル−Ｄ−ピラノシド（Ｓ１−１）から出発する。安息香酸を脱プロトン化（例えば、ＮａＨ）し、対応するカルボキシラートを直接的に、糖類部分の脱離基と置換して、エステルＳ１−３を形成する。
【０１９７】
式Ｓ１−１の活性化炭水化物前駆体は、６位におけるアジド基の導入、およびその後の還元後に、６−アミノ−６−デオキシ誘導体（Ｓ１−４）を得るための構成単位として役立つ。そのような構成単位は、対応するアミド（Ｓ１−５）へと選択的に変換することができる。
【０１９８】
いずれの場合にも、アセタールを酸性条件下で切断すると、修飾された遊離糖Ｓ１−６を得ることができる。Ｒ１がアリル基である場合、脱保護を、メタノール中でＰｄ（ＩＩ）Ｃｌ２を用いて、または当業者に公知の他の脱保護方法を用いて行うと、式Ｓ１−６の化合物を得ることができる。Ｒ１がトリメチルシリルエチル基である場合、脱保護を酸性条件（例えば、トリフルオロ酢酸）下で行うと、式Ｓ１−６の化合物を得ることができる。
【０１９９】
ガラクトースを修飾するために、代替の経路を適用することができる。イソプロピリデンの直接的な導入は、６位が保護されていないままの二保護された誘導体Ｓ１−７をもたらす。これらを、活性化酸誘導体を使用して、対応するエステルに直接的に変換することができる。この場合、保護基の放出（塩酸のような酸性条件）によって、遊離糖誘導体Ｓ１−６が直接的に得られる。
【０２００】
スキーム２
２位における選択的修飾（例えば、２−Ｏ−ベンゾイル化、２−Ｎ−ベンゾイル化）：
【化１４】
2021504402.tif 000015
【０２０１】
化合物を、スキーム２に示されている一般合成経路によって調製することができる。出発物質は市販されていて、文献において公知であるか、または公知の方法によって調製することができる。例えば、１−メチル２−アセトアミド−２−デオキシ−α−Ｄ−グリコピラノシドは、Ｚｈｕら（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．２００６、７１、４６６〜４７９）によって以前に報告されたプロトコルによって合成された。還流下でのＮａＯＨ水溶液でのけん化によって、出発物質１−メチル２−アミノ−２−デオキシ−α−Ｄ−グリコピラノシドが得られた。
【０２０２】
位置選択的エステル化／ベンゾイル化（Ｘ＝Ｏ）を、Ｍｕｒａｍａｔｓｕら（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．２０１３、７８、２３３６〜２３４５）によって報告された方法（合成方法Ｄ）を使用し、Ｓｎ試薬を使用して実施して、主に２−ベンゾイル化誘導体Ｓ２−２を得た。１−メチル２−アミノ−２−デオキシ−α−Ｄ−グリコピラノシド（Ｘ＝Ｎ）の標準的な条件下でのアミド化（合成方法Ｌ）によって、純粋な２−アミド化生成物Ｓ２−２を得た。
【０２０３】
イソプロピリデン−α−Ｄ−ガラクトピラノシド誘導体Ｓ２−４を、２−ベンゾイル化ガラクトピラノシド誘導体を合成するための出発物質として使用した。６位の保護、続く、２位でのエステル化によって、保護された誘導体Ｓ２−６を得た。酸性条件下での切断によって、Ｓ２−７を得た。
【０２０４】
Ｒ１が上記のとおりの保護基である場合、化合物Ｓ２−２およびＳ２−７の切断をそれぞれ、スキーム１に記載のとおりに実施すると、式Ｓ２−３の化合物を得ることができる（実験部分の合成方法Ｎを参照されたい）。
【０２０５】
スキーム３
２、３、４および６位における非選択的修飾（例えば、Ｏ−ベンゾイル化）：
【化１５】
2021504402.tif 000016
【０２０６】
非選択的ベンゾイル化を方法Ｈ下で、４−ＤＭＡＰの存在下で、カップリング試薬としてジシクロヘキシルカルボジイミドを使用して実施した。粗製の反応生成物は、−Ｏ、３−Ｏ、４−Ｏおよび６−Ｏ−ベンゾイル化化合物の混合物を含有し、これを標準的な精製技法によって分離して、位置選択的に純粋なＳ３−１、Ｓ３−３、Ｓ３−５、およびＳ３−７を得た。
【０２０７】
Ｒ１が上記の保護基である場合、化合物Ｓ３−１、Ｓ３−３、Ｓ３−５およびＳ３−７の切断をそれぞれ、スキーム１に記載のとおりに実施すると、それぞれ式Ｓ３−２、Ｓ３−４、Ｓ３−６、およびＳ３−８の化合物を得ることができる（実験部分の合成方法Ｎを参照されたい）。
【０２０８】
スキーム４
２または３位における修飾（例えば、Ｏ−ベンゾイル化）：
【化１６】
2021504402.tif 000017
【０２０９】
文献には、Ｓ４−１のようなグルコピラノシドの選択的ベンゾイル化についてのいくつかの方法が記載されている。使用される炭水化物（グルコ−またはガラクトピラノシド）および条件に応じて、両方の位置に直接的に対処することができる。ＨＯＢｔ活性化安息香酸は、グルコピラノシドの２位で、およびガラクトピラノシドの３位で主にカップリングされる（Ｓ．Ｂｕｒｕｇｕｐａｌｌｉら、Ｏｒｇ．Ｂｉｏｍｏｌ．Ｃｈｅｍ．２０１６、１４、９７、Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｂｅｎｚｏｙｌｏｘｉｍｅｓ  ａｓ  ｂｅｎｚｏｙｌａｔｉｎｇ  ｒｅａｇｅｎｔｓ：ｂｅｎｚｏｙｌ−Ｏｘｙｍａ  ａｓ  ａ  ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  ｂｅｎｚｏｙｌａｔｉｎｇ  ｒｅａｇｅｎｔ；Ｓ．Ｋｉｍら、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．５０（１０）、１７５１〜２、１９８５、Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  ｂｅｎｚｏｙｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｄｉｏｌｓ  ｗｉｔｈ  １−（ｂｅｎｚｏｙｌｏｘｙ）ｂｅｎｚｏｔｒｉａｚｏｌｅ）。キラル（ベンゾテトラミゾール、両方の鏡像異性体が試験される）およびアキラル試薬の使用が、２および３位に選択的に対処するために調査されている（Ｇ．Ｘｉａｏら、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．２０１７、１３９、４３４６〜４３４９、Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  Ａｃｙｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅｓ  ｄｉｒｅｃｔｅｄ  ｂｙ  Ｃａｔｉｏｎ−ｎ  ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ；Ｇ．Ｈｕ  ａｎｄ  Ａ．Ｖａｓｅｌｌａ、Ｈｅｌｖｅｔｉｃａ  Ｃｈｉｍｉｃａ  Ａｃｔａ、８５（１２）、４３６９〜４３９１；２００２、Ｒｅｇｉｏｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  ｂｅｎｚｏｙｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ６−Ｏ−ｐｒｏｔｅｃｔｅｄ  ａｎｄ  ４，６−Ｏ−ｄｉｐｒｏｔｅｃｔｅｄ  ｈｅｘｏｐｙｒａｎｏｓｉｄｅｓ  ａｓ  ｐｒｏｍｏｔｅｄ  ｂｙ  ｃｈｉｒａｌ  ａｎｄ  ａｃｈｉｒａｌ  ｄｉｔｅｒｔｉａｒｙ  １，２−ｄｉａｍｉｎｅｓ）。本発明者らの手で、ジクロロメタンのような不活性な溶媒中でＨＯＢｔおよび（３−ジメチルアミノ−プロピル）−Ｎ’−エチルカルボジイミドを用いて、塩基性条件、例えば、トリエチルアミン下で式Ｓ４−１の４，６−保護グルコピラノシドを添加して、式Ｓ１−２の芳香族酸を活性化して、主に式Ｓ４−２の化合物を得た。塩化チオニルのような酸性条件またはＧｈｏｓｅｚ試薬のような中性条件を使用して酸塩化物としての式Ｓ１−２の芳香族酸を活性化させ、式Ｓ４−１のグルコピラノシドと反応させて、式Ｓ４−２およびＳ４−５の２−Ｏ−および３−Ｏ−ベンゾイル化化合物の混合物を得た。分離した化合物Ｓ４−２およびＳ４−５を、ジクロロメタン中のｐ−トルエン−スルホン酸、アセトニトリル中の塩酸（０．１Ｍ）、またはアセトニトリル中の触媒量の二塩化スズのような弱酸性条件を使用して、式Ｓ４−３およびＳ４−６の化合物に選択的に切断して、式Ｓ４−３およびＳ４−６の化合物を得た。Ｒ１が上記のような保護基である場合、化合物Ｓ４−３およびＳ４−６の切断をそれぞれ、スキーム１に記載のとおりに実施すると、それぞれ式Ｓ４−４およびＳ４−７の化合物を得ることができる（実験部分の合成方法Ｎを参照されたい）。
【０２１０】
スキーム５
２および６位における修飾（例えば、Ｏ−ベンジル化）：
【化１７】
2021504402.tif 000018
【０２１１】
メチル−Ｄ−グルコピラノシド（Ｓ５−１）から出発して、Ｈａｌがフルオロ、クロロ、ブロモ、またはヨージドのようなハライドである式Ｓ５−２の化合物でのベンジル化を、還流条件下で、トルエンのような溶媒中でジ−ｎ−ブチルスズオキシドのような有機スズ化合物を使用して、主に炭水化物分子の２位で、少量の副生成物では６位で行うと、式Ｓ５−３（主生成物）およびＳ５−６（副生成物）を得ることができる（Ｙ．Ｚｈｏｕら、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  ２０１３、２６９３〜２７００、Ｈａｌｉｄｅ  ｐｒｏｍｏｔｅｄ  ｏｒｇａｎｏｔｉｎ−ｍｅｄｉａｔｅｄ  ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ  ｂｅｎｚｙｌａｔｉｏｎ：ｍｅｃｈａｎｉｓｍ  ａｎｄ  ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ）。この有機スズ媒介ベンジル化での位置選択性は、アルファおよびベータメチルグルコピラノシドについてと同じである。Ｒ１が上記のとおりの保護基である場合、化合物Ｓ５−３およびＳ５−６の切断をそれぞれ、スキーム１に記載のとおりに実施すると、それぞれ式Ｓ５−４およびＳ５−７の化合物を得ることができる（実験部分の合成方法Ｎを参照されたい）。
【０２１２】
スキーム６
「クリックケミストリー」を使用してのインスリンへのカップリング（Ｃｕ触媒１，３−双極付加環化）：
【化１８】
2021504402.tif 000019
【０２１３】
化合物Ｓ６−２の合成は、塩基性条件下、例えば、ｐＨ１０で、化合物Ｓ６−１をインスリンと反応させることによって実施することができる。したがって、インスリンをジメチルホルムアミド−水混合物に溶解し、トリエチルアミンのような有機塩基によってｐＨ１０にする。低温（例えば、０℃）で、活性化アジド−ジオキソピロリジンＳ６−１を添加して、式Ｓ６−２の化合物を得る。
【０２１４】
Ｓ６−４の化合物は、アジド−アルキンまたはクリック付加環化としても公知の銅触媒［３＋２］−付加環化条件を使用して合成することができる。Ｓ６−２およびアルキンＳ６−３を、ＣｕＳＯ４×５Ｈ２Ｏ、トリス（３−ヒドロキシプロピルトリアゾリルメチル）アミン（ＴＨＰＴＡ）およびアスコルビン酸ナトリウムと反応させて、式Ｓ６−４の化合物を得る。
【０２１５】
スキーム７
ＴＳＴＵを使用してのインスリンへのカップリング：
【化１９】
2021504402.tif 000020
【０２１６】
式（Ｉ）の化合物を合成するための別の可能性は、式Ｓ７−１の化合物をＴＳＴＵのような酸活性化試薬で活性化して、ＮＨＳエステルＳ７−２を形成することである。ＮＨＳエステルＳ７−２のカップリングを、スキーム６に記載のとおりに実施すると、式Ｓ７−３の化合物を得ることができる。
【０２１７】
スキーム８
フェノール構成単位のアルキル化
【化２０】
2021504402.tif 000021
式（Ｉ）の化合物を合成するための別の可能性は、上記の方法を使用して合成することができる式Ｓ８−１のフェノール構成単位を、Ｓ８−１をＤＭＦのような非プロトン性溶媒中で、例えば炭酸カリウムのような塩基で脱プロトン化し、ＬＧがクロロ、ブロモ、ヨージド、メシル、トシルなどのような脱離基であるＳ８−２を添加することによってアルキル化して、式Ｓ８−３の化合物を得ることである。
【０２１８】
スキーム９
ベンジルアミンのアルキル化
【化２１】
2021504402.tif 000022
式（Ｉ）の化合物を合成する別の可能性は、上記の方法を使用して合成することができる式Ｓ９−１のベンジルアミンを、Ｓ９−１をＤＭＦのような非プロトン性溶媒中で、例えば炭酸カリウムのような塩基で脱プロトン化し、ＬＧがクロロ、ブロモ、ヨージド、メシル、トシルなどのような脱離基であるＳ９−２を添加することによってアルキル化して、式Ｓ９−３の化合物を得ることである。
【０２１９】
スキーム１０
アニリンのアルキル化
【化２２】
2021504402.tif 000023
式（Ｉ）の化合物を合成する別の可能性は、上記の方法を使用して合成することができる式Ｓ１０−１のアニリンを、例えば、ＤＭＦのような非プロトン性溶媒中、例えば炭酸カリウムのような塩基の存在下でのクロロギ酸イソブチルのような酸塩化物との反応または当業者に公知の他の方法によって、対応するＳ１０−２の酸を活性化することによってアルキル化して、式Ｓ１０−３の化合物を得ることである。
【０２２０】
略語：
【表１】
2021504402.tif 000024
【表２】
2021504402.tif 000025
【０２２１】
実験部分
クロマトグラフ法および分光法
ＴＬＣ／ＵＶ−ランプ
薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）を、シリカゲル６０Ｆ２５４でコーティングされたＭｅｒｃｋ製のガラスまたはアルミニウムプレート上で行った。化合物を、ＵＶランプ（Ｌａｍａｇ）を使用して異なる波長（２５４ｎｍおよび３６６ｎｍ）で検出した。
【０２２２】
ＵＶによって検出することができなかった化合物を、種々の方法：（ａ）エタノール中１０％Ｈ２ＳＯ４、（ｂ）１％ＫＭｎＯ４溶液、（ｃ）硫酸中のリンモリブデン酸−硫酸セリウム（ＩＶ）溶液（濃硫酸６ｍＬおよびＨ２Ｏ９４ｍＬ、リンモリブデン酸２．５ｇ、硫酸セリウム（ＩＶ）１ｇ）によって染色した。
【０２２３】
ＭＰＬＣ
順相クロマトグラフィーを、ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈコンビフラッシュ（登録商標）Ｒｆ（Ｔｅｌｅｄｙｎｅ  ＩＳＣＯ）を使用して行った。使用される勾配は、実施例の記載において示す。
【０２２４】
ＨＰＬＣ
分取逆相ＨＰＬＣには、Ａｇｉｌｅｎｔ  １２００分取ＨＰＬＣ機およびＡＥＫＴＡ（商標）Ａｖａｎｔ機を使用した。分離は、実施例の記載において示されている勾配を使用して行った。
【０２２５】
ＮＭＲ
４００ＭＨｚ：ＮＭＲスペクトルを、４００．１３ＭＨｚのプロトン周波数および１００．６１ＭＨｚの１３Ｃ−炭素周波数で作動するＢｒｕｋｅｒ  ＡＶＡＮＣＥ  ＩＩ  ４００分光計で記録した。機器には、５ｍｍ  ＢＢＯ室温プローブヘッドを装備した。
５００ＭＨｚ：ＮＭＲスペクトルを、５００．３０ＭＨｚのプロトン周波数および１２５．８２ＭＨｚの１３Ｃ−炭素周波数で作動するＢｒｕｋｅｒ  ＡＶＡＮＣＥ  ＩＩＩ  ５００分光計で記録した。機器には、５ｍｍ  ＴＣＩ低温プローブヘッドを装備した。
６００ＭＨｚ：ＮＭＲスペクトルを、６００．１０ＭＨｚのプロトン周波数および１５０．９１ＭＨｚの１３Ｃ−炭素周波数で作動するＢｒｕｋｅｒ  ＡＶＡＮＣＥ  ＩＩＩ  ６００分光計で記録した。機器には、５ｍｍ  ＴＸＩ室温プローブヘッドを装備した。
【０２２６】
ＬＣ／ＭＳ
保持時間および質量検出には、Ｗａｔｅｒｓ  Ａｃｑｕｉｔｙ  ＳＤＳ製のＬＣ／ＭＳ−システムを使用した。注入体積は０．５μｌであった。分子量は、モルあたりグラム［ｇ／ｍｏｌ］で、検出された質量は質量電荷比［ｍ／ｅ］で示されている。
【０２２７】
ＬＣ／ＭＳ−方法Ａ
勾配プログラム：２．０分でＨ２Ｏ９５％（ギ酸０．０５％）からアセトニトリル９５％（ギ酸０．０３５％）へ、２．６分までアセトニトリル９５％（ギ酸０．０３５％）、流速：０．９ｍＬ／分、カラム：２．１×５０ｍｍ  Ｗａｔｅｒｓ  ＡＣＱＵＩＴＹ  ＵＰＬＣ  ＢＥＨ  Ｃ１８  １．７μｍ、５５℃。
【０２２８】
ＬＣ／ＭＳ−方法Ｂ
勾配プログラム：２．０分でＨ２Ｏ９６％（トリフルオロ酢酸０．０５％）からアセトニトリル９５％へ、２．４分までアセトニトリル９５％、流速：１．０ｍＬ／分、カラム：２．１×２０ｍｍ  ＹＭＣ  Ｊ’ｓｐｈｅｒｅ  ＯＤＳＨ８０  ４μｍ、３０℃。
【０２２９】
ＬＣ／ＭＳ−方法Ｃ
勾配プログラム：１分でＨ２Ｏ９３％（トリフルオロ酢酸０．０５％）からアセトニトリル９５％（トリフルオロ酢酸０．０５％）へ、１．４５分までアセトニトリル９５％、流速：１．１ｍＬ／分、カラム：１０×２．０ｍｍ  ＬｕｎａＣ１８  ３μｍ。
【０２３０】
ＬＣ／ＭＳ−方法Ｄ
勾配プログラム：３．８分でＨ２Ｏ９８％（ギ酸０．０５％）からアセトニトリル９８％（ギ酸０．０３５％）へ、４．５分までアセトニトリル９８％（ギ酸０．０３５％）、流速：１．０ｍＬ／分、カラム：２．１×５０ｍｍ  Ｗａｔｅｒｓ  ＡＣＱＵＩＴＹ  ＵＰＬＣ  ＢＥＨ  Ｃ１８  １．７μｍ、５５℃。
【０２３１】
ＬＣ／ＭＳ−方法Ｅ：（実施例２１７〜２２０）
勾配プログラム：２．８分でＨ２Ｏ９８％（ギ酸０．１％）からアセトニトリル９８％（ギ酸０．１％）へ、４．８分までアセトニトリル９８％（ギ酸０．１％）、流速：１．０ｍＬ／分、カラム：４．６×５０ｍｍ  Ｘ−Ｓｅｌｅｃｔ  ＣＳＨ  Ｃ１８  ２．５μｍ、注入体積：５．０μＬ。
【０２３２】
ＥＬＳＤ条件：（実施例２１７〜２２０）
勾配プログラム：３．５分でＨ２Ｏ９８％（ＮＨ３０．０５％）からアセトニトリル１００％（ＮＨ３０．０５％）へ、４．５分までアセトニトリル１００％（ＮＨ３０．０５％）、流速：１．２ｍＬ／分、カラム：４．６×５０ｍｍ  Ｘ−Ｂｒｉｄｇｅ  Ｃ１８  ３．５μｍ；注入体積：０．２μＬ。
【０２３３】
ＬＣ／ＭＳ−方法Ｆ（インスリン）
勾配プログラム：８．３分でＨ２Ｏ８５％（ギ酸０．０５％）からアセトニトリル５０％（ギ酸０．０３５％）へ、８．５分までアセトニトリル５０％（ギ酸０．０３５％）からアセトニトリル９０％（ギ酸０．０３５％）へ、流速：０．５ｍＬ／分、カラム：２．１×１００ｍｍ  Ｗａｔｅｒｓ  ＡＣＱＵＩＴＹ  ＵＰＬＣ  ＰＥＰＴＩＤＥ  ＢＥＨ  Ｃ１８  ３００Ａ、１．７μｍ、４０℃。
【実施例】
【０２３４】
合成
方法Ａ：炭水化物−６−Ｏ−トシラートの６−Ｏ−ベンゾイル化
概要：
水素化ナトリウム（１７．２２ｍｇ、４３０．５８μｍｏｌ）を０℃で、アルゴン雰囲気下で、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）中の安息香酸（４３０．５８μｍｏｌ）の溶液に添加した。続いて、６−Ｏ−（トシル）−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド（１００ｍｇ、２８７．０５μｍｏｌ）を添加し、溶液を８０℃で１６時間にわたって撹拌した。反応をＬＣ／ＭＳによってモニターした。ＣＨ２Ｃｌ２（２５ｍＬ）を添加し、有機相をＨ２Ｏで２回洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、蒸発させた。
【０２３５】
実施例１
６−Ｏ−（４−ベンジルオキシベンゾイル）−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシド
【化２３】
2021504402.tif 000026
実施例１を４−ベンジルオキシ安息香酸（９８ｍｇ、４３０．６μｍｏｌ）および６−Ｏ−（トシル）−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド（１００ｍｇ、２８７．１μｍｏｌ）から、合成方法Ａに記載の手順に従って合成した。粗製の混合物を、ＨＰＬＣ（Ｗａｔｅｒｓ  ＳｕｎＦｉｒｅ  Ｐｒｅｐ  ＯＢＤ  Ｃ１８、５μｍ、５０×１００ｍｍ、溶離液：Ａ：Ｈ２Ｏ＋トリフルオロ酢酸０．１％およびＢ：アセトニトリル、流速１２０ｍＬ／分、勾配：０〜２分：Ｂ５％、２〜２．５分でＢ５％〜１５％、２．５〜１０．５分：Ｂ１５％〜６５％、１０．５〜１１分でＢ６５％〜９９％、１１〜１３分はＢ９９％）によって精製した。
収量: 66 mg (163.2 μmol, 57 %). 
LC/MS (ES-API): m/z = 405.20 [M + H]+; 計算値: 404.15; tR (λ = 220 nm): 1.61分 (LC/MS方法A).
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 7.92 (d, 2 H, AA'BB'系, C9-H), 7.46 (d, 2 H, C14-H), 7.40 (t, 2 H, C15-H), 7.34 (t, 1 H, C16-H), 7.15 (d, 2 H, AA'BB'系, C10-H), 5.19 (s, 2 H, OCH2), 4.51 (dd, 1 H, C6'-Ha), 4.27 (dd, 1 H, C6'-Hb), 4.11 (d, 1 H, C1'-H), 3.47 (dd, 1 H, C5'-H), 3.34 (s, 3 H, OCH3), 3.20 (dd, 1 H, C4'-H), 3.18 (dd, 1 H, C3'-H), 2.99 (dd, 1 H, C2'-H).
13C NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 165.25 (C7), 162.23 (C11), 136.40 (C13), 132.21 (C9), 128.48 (C15), 128.03 (C16), 127.85 (C14), 122.16 (C8), 114.84 (C10), 103.89 (C1'), 76.36 (C3'), 73.65 (C5'), 73.30 (C2'), 70.08 (C4'), 69.51 (C12), 63.90 (C6'), 55.85 (OCH3).
【０２３６】
方法Ｂ：１−Ｏ−アリルの切断：
概説（Ｂｉｏ．＆Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、２００５（１３）、１２１〜１３０）：
ＭｅＯＨ（２ｍＬ）中の６−Ｏ−（４−ベンジルオキシ−ベンゾイル）−アリル−α−Ｄ−グルコピラノシド（３５ｍｇ、８１．３１μｍｏｌ）の溶液に、塩化パラジウム（ＩＩ）（２．８８ｍｇ、１６．２６μｍｏｌ）をアルゴン雰囲気下で添加した。反応混合物を３時間、２５℃で撹拌し、反応をＬＣ／ＭＳによってモニターした。溶媒を蒸発させた。
【０２３７】
実施例４７
６−Ｏ−（４−（ベンジルオキシ−３−メトキシ−５−クロロ）−ベンゾイル）−Ｄ−グルコピラノース
【化２４】
2021504402.tif 000027
実施例４７を６−Ｏ−（４−ベンジルオキシ−ベンゾイル−３−メトキシ−５−クロロ）−アリル−α−Ｄ−グルコピラノシド（実施例９）（５０ｍｇ、１０１μｍｏｌ）から、合成方法Ｂに記載の手順に従って合成した。粗製の残留物をＨＰＬＣ（Ｗａｔｅｒｓ  ＳｕｎＦｉｒｅ  Ｐｒｅｐ  ＯＢＤ  Ｃ１８、５μｍ、５０×１００ｍｍ、溶離液：Ａ：Ｈ２Ｏ＋トリフルオロ酢酸０．１％およびＢ：アセトニトリル、流速１２０ｍＬ／分、勾配：０〜２分：Ｂ５％、２〜２．５分でＢ５％〜１０％、２．５〜１０．５分：Ｂ１０％〜７０％、１０．５〜１１分でＢ７０％〜９９％、１１〜１３分はＢ９９％）によって精製した。
収量: 15.4 mg (33.9 μmol, 34 %). 
LC/MS (ES-API): m/z = 453.17 [M - H]-; 計算値: 453.10; tR (λ = 220 nm): 1.57分 (LC/MS方法A).
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 7.52 (m, 6 H), 7.37 (m, 4 H), 6.67 (d br., J = 6.48 Hz, C1'-OH), 6.35 (d br., J = 4.52 Hz, C1'-OH), 5.21 (s br., 1 H, OH), 5.13 (s, 2 H, OCH2), 4.93 (s br., 1 H, OH), 4.77 (s br., 1 H, OH), 4.52 (m br., 2 H), 4.31 (m, 2 H), 3.94 (s, 3 H, OCH3), 3.87 (m, 1 H), 3.46 (m, 1 H), 3.17 (d br., J = 8.80 Hz, 1 H).
【０２３８】
方法Ｃ：１−Ｏ−トリメチルシリルエチルの切断
概要：
ＣＨ２Ｃｌ２（１．８ｍＬ）中の６−Ｏ−ベンゾイル−（２−（トリメチルシリル）エチル）−α−Ｄ−グルコピラノシド（１２２．２９μｍｏｌ）の溶液に、トリフルオロ酢酸（２００μｌ、２．６０ｍｍｏｌ）をアルゴン雰囲気下で添加した。反応混合物を１時間、２５℃で撹拌した。反応をＬＣ／ＭＳ−方法Ｂによってモニターした。最後に、反応混合物をアセトニトリルおよびＨ２Ｏで希釈し、凍結乾燥した。
【０２３９】
実施例５４
６−Ｏ−（４−ベンゾイルアミノ−２−メチル）−ベンゾイル）−Ｄ−グルコピラノース
【化２５】
2021504402.tif 000028
実施例５４を６−Ｏ−（４−（ベンゾイルアミノ−２−メチル）−ベンゾイル）−（２−（トリメチルシリル）エチル）−α−Ｄ−グルコピラノシド（６０ｍｇ、１１５．９μｍｏｌ）から、合成方法Ｃに記載の手順に従って合成した。
収量: 45 mg (107.8 μmol, 93 %). 
LC/MS (ES-API): m/z = 453.17 [M - H]-; 計算値: 453.10; tR (λ = 220 nm): 1.57分 (LC/MS方法A).
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 10.44 (s, 1 H, CO-NH), 7.94 (m, 2 H), 7.88 (m, 1 H), 7.77 (m, 2 H), 7.57 (m, 3 H), 6.63 (s br., C1-OH), 6.34 (s br., C1-OH), 4.94 (d, J = 3.42 Hz, 1 H, C1'-H), 4.48 (m, 2 H), 4.35 (d, J = 7.70 Hz, 1 H), 4.26 (m, 2 H), 3.90 (m, 1 H), 3.50 (s, 1 H), 3.45 (m, 1 H), 3.19 (m, 1 H), 2.94 (m, 1 H), 2.54 (s, 3 H, CH3).
【０２４０】
方法Ｄ：スズ誘導体を用いてのベンゾイル化
概説（ＪＯＣ  ２０１３  ７８（６）、２３３６〜４５；ＰＥＭＰの代わりにＤＩＰＥＡ）：
メチル−またはアリル−α−Ｄ−グリコピラノシド（０．５ｍｍｏｌ）を二塩化ジ−ｎ−ブチル−スズ（５０μｍｏｌ）と共に、テトラヒドロフラン（４ｍＬ）中で１０分間撹拌した。ヨウ化テトラブチルアンモニウム（２５０μｍｏｌ）、塩化ベンゾイル（６５０μｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（６５０μｍｏｌ）を添加し、反応混合物を２５℃で１６時間にわたって撹拌した。飽和塩化アンモニウム溶液を添加した。反応生成物を酢酸エチル（３×６ｍＬ）で抽出し、合わせた有機層をＨ２Ｏで洗浄し、最後に蒸発させた。
【０２４１】
実施例６５
２−Ｏ−（４−ベンジルオキシ−ベンゾイル）−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド
【化２６】
2021504402.tif 000029
実施例６５を４−ベンジルオキシ安息香酸（３２０．７ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ）およびメチル−α−Ｄ−グルコピラノシド（１９４．２ｍｇ、１ｍｍｏｌ）から、合成方法Ｄに記載の手順に従って合成した。生成物をＭＰＬＣ（シリカＳｉＯ２６０、溶離液ｎ−ヘプタン、酢酸エチル、流速３５ｍＬ／分、勾配：１１．５分で酢酸エチル０〜１００％）によって精製した。
収量: 380 mg (0.940 mmol, 94 %). 
LC/MS (ES-API): m/z = 405.26 [M + H]+; 計算値: 405.15; tR (λ = 220 nm): 1.57分 (LC/MS方法A).
1H-NMR (600 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 7.95 (d, J = 8.93 Hz, 2 H, AA'BB'系, C3-H), 7.47 (d, 2 H, C8-H), 7.40 (t, 3 H, C9-H), 7.35 (t, 1 H, C10-H), 7.15 (d, J = 8.93 Hz, 2 H, AA'BB'系, C4-H), 5.24 (d, 1 H, C3'-OH), 5.21 (s, 2 H, O-C6-H2), 5.16 (d, 1 H, C4'-OH), 4.85 (d, J = 3.67 Hz, 1 H, C1'-H), 4.62 (dd, J = 10.03, 3.67 Hz, 1 H, C2'-H), 4.57 (t, J = 5.93 Hz, 1 H, C6'-OH), 3.75 (td, J = 9.29, 5.62 Hz, 1 H, C3'-H), 3.68 (ddd, J = 11.65, 5.65, 1.77 Hz, 1 H, C6'-Ha), 3.51 (m, 1 H, C6'-Hb), 3.41 (dd, 1 H, C5'-H), 3.26 (s, 3 H, C1'-OCH3), 3.25 (m, 1 H, C4'-H)
13C NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 165.19 (C1), 121.96 (C2), 131.51 (C3), 114.74 (C4), 162.30 (C5), 69.48 (C6), 136.39 (C7), 127.76 (C8), 128.45 (C9), 127.98 (C10), 96.42 (C1'), 54.29 (OCH3), 73.95 (C2'), 70.53 (C3'), 70.16 (C4'), 72.69 (C5'), 60.60 (C6').
【０２４２】
方法Ｅ：保護ガラクトピラノシドの６−Ｏ−ベンゾイル化
概要：
ＣＨ２Ｃｌ２（７ｍＬ）およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）中の安息香酸（１．９２ｍｍｏｌ）の溶液に、１，２：３，４−ジ−Ｏ−イソプロピリデン−α−Ｄ−ガラクトピラノース（５００ｍｇ、１．９２ｍｍｏｌ）を０℃で、アルゴン雰囲気下で添加し、反応混合物を撹拌した。５分後に、Ｎ，Ｎ−４−ジメチルアミノ−ピリジン（４６．９４ｍｇ、３８４．１９μｍｏｌ）およびジシクロヘキシルカルボジイミド（３９６．４ｍｇ、１．９２ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を０℃でさらに１０分間放置し、次いで、２５℃にし、１６時間撹拌した。反応を２つの独立した方法、ＬＣ／ＭＳ（方法Ｂ）およびＴＬＣ（ｎ−ヘプタン／酢酸エチル＝２／１）によってモニターした。Ｈ２Ｏ（１０ｍＬ）を添加し、生成物をＣＨ２Ｃｌ２（２×５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、蒸発させた。
【０２４３】
ガラクトシドの脱保護：
概要：
６−Ｏ−アシル化ガラクトピラノース誘導体の合成
２Ｍ  ＨＣｌ（１．５９ｍＬ、３．１９ｍｍｏｌ）を６−Ｏ−（ベンゾイル）−１，２：３，４−ジ−Ｏ−イソプロピリデン−α−Ｄ−ガラクトピラノース（２１２．５３μｍｏｌ）に添加した。反応混合物を３日間にわたって２５℃で撹拌した。反応制御はＬＣ／ＭＳ−方法Ｂによって行った。反応混合物をＨ２Ｏで希釈し、凍結乾燥した。
【０２４４】
実施例８９
６−Ｏ−（４−ベンジルオキシ−ベンゾイル）−Ｄ−ガラクトピラノース
【化２７】
2021504402.tif 000030
実施例８９を４−ベンジルオキシ安息香酸（４３８．５ｍｇ、１．９２ｍｍｏｌ）および１，２：３，４−ジ−Ｏ−イソプロピリデン−α−Ｄ−ガラクトピラノース（５００ｍｇ、１．９２ｍｍｏｌ）から、合成方法Ｅの第１の工程に記載の手順に従って合成した。粗製の混合物を、ＭＰＬＣ（ＳｉＯ２６０、８０ｇ；Ａ：ｎ−ヘプタン；Ｂ：酢酸エチル；流速：６０ｍＬ／分；勾配：２分までＡ１００％、３２分までＢ０〜５０％、３７分までＢ５０％）を使用して精製した。脱保護を、合成方法Ｅに記載のとおりに、６−Ｏ−（４−ベンジルオキシ−ベンゾイル）−１，２：３，４−ジ−Ｏ−イソプロピリデン−α−Ｄ−ガラクトピラノース（１００ｍｇ、２１２．５μｍｏｌ）およびＨＣｌを用いて行った。粗製の混合物を、ＭＰＬＣ（ＳｉＯ２６０、２４ｇ；Ａ：ＣＨ２Ｃｌ２；Ｂ：ＭｅＯＨ；流速：３５ｍＬ／分；勾配：２分までＡ１００％、２２分までＢ０〜１００％、２９分までＢ１００％）を使用して精製した。
収量: 35 mg (89.7 μmol, 21 %). 
LC/MS (ES-API): m/z = 405.26 [M + H]+; 計算値: 405.15; tR (λ = 220 nm): 1.13分 (LC/MS方法A).
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 7.90 (d, 2 H, AA'BB'系), 7.40 (m, 5 H), 7.12 (d, 2 H, AA'BB'系), 6.60 (d br., C1-OH), 6.21 (d br., C1-OH), 5.19 (s, 2 H, OCH2), 4.98 (d, C1'-H), 4.59 (d, 1 H, OH), 4.50 (d, 1 H, OH), 4.30 (m, 2 H), 4.14 (m, 1 H), 3.75 (m, 1 H), 3.58 (m, 2 H), 3.26 (m, 1 H).
【０２４５】
方法Ｆ：メチル−６−アミノ−６−デオキシ−α−Ｄ−グルコピラノシドの６−Ｎ−ベンゾイル化
概要：
ＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）中の安息香酸（６４７μｍｏｌ）およびメチル−６−アミノ−６−デオキシ−α−Ｄ−グルコピラノシド（１２５ｍｇ、６４７μｍｏｌ）の溶液を撹拌した。ジシクロヘキシルカルボジイミド（２０４ｍｇ、９７０．５μｍｏｌ）を添加し、反応混合物を１５時間放置した。反応をＬＣ／ＭＳ−方法によってモニターした。溶媒を蒸発させた。
【０２４６】
実施例１０４
６−デオキシ−６−［（４−ベンジルオキシ−ベンゾイル）−アミノ］−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド
【化２８】
2021504402.tif 000031
実施例１０４を４−ベンジルオキシ安息香酸（１５０ｍｇ、６５７μｍｏｌ）およびメチル−６−アミノ−６−デオキシ−α−Ｄ−グルコピラノシド（１２７ｍｇ、６５７μｍｏｌ）から、合成方法Ｆに記載のとおりに合成した。粗製の混合物を、ＭＰＬＣ（ＳｉＯ２６０、２４ｇ；Ａ：ｎ−ヘプタン；Ｂ：酢酸エチル；流速：３５ｍＬ／分；勾配：１分までＡ１００％、１２．５分までＢ０〜１００％、１３分までＢ１００％）を使用して精製した。
収量: 83 mg (205.7 μmol, 31 %). 
LC/MS (ES-API): m/z = 405.26 [M + H]+; 計算値: 405.15; tR (λ = 220 nm): 1.13分 (LC/MS方法A).
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 8.31 (t, J = 5.69 Hz, 1 H, CO-NH), 7.83 (d, J = 8.80 Hz, 2 H, AA'BB'系), 7.40 (d, 2 H), 7.40 (t, 2 H), 7.33 (t, 1 H), 7.06 (d, J = 8.80 Hz, 2 H, AA'BB'系), 5.16 (s, 2 H, OCH2), 5.05 (d, J = 5.26 Hz, 1 H, OH), 4.80 (d, 1 H, OH), 4.71 (d, 1 H, OH), 4.51 (d, J = 3.67 Hz, 1 H, OH), 3.67 (ddd, J = 13.69, 5.38, 2.57 Hz, 1 H), 3.52 (m, 1 H), 3.23 (m, 2 H), 3.20 (m, 1 H), 3.19 (s, 3 H, C1'-OCH3), 2.96 (m, 1 H)
【０２４７】
方法Ｇ：塩化安息香酸でのメチル−α−Ｄ−グリコピラノシドのベンゾイル化
概要：
ＣＨ２Ｃｌ２（６ｍＬ）中の安息香酸（２６０．９μｍｏｌ）の溶液に、ＳＯ２Ｃｌ２（１ｍＬ）を添加し、混合物を１時間還流した。溶媒を真空中で蒸発させ、残留物をトルエン（３×）で共蒸留した。残留物をテトラヒドロフラン（３ｍＬ）に入れ、テトラヒドロフラン（５ｍＬ）中のメチル−α−Ｄ−グルコピラノシド（７５．９８ｍｇ、３９１．２８μｍｏｌ）の溶液に添加した。５分間撹拌した後に、水素化ナトリウム（２０．８７ｍｇ、５２１．７１μｍｏｌ）を添加し、反応混合物を１００℃で１６時間撹拌した。水を反応混合物に添加し、有機溶媒を蒸発させた。水相をＣＨ２Ｃｌ２（３×５ｍＬ）で抽出し、合わせた有機相を乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、蒸発させた。
【０２４８】
実施例１５３ａ
６−Ｏ−（４−ベンジルオキシ−３，５−ジクロロ−２−メトキシ−６−メチル−ベンゾイル）−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド
【化２９】
2021504402.tif 000032
実施例１５３ａを４−ベンジルオキシ−３，５−ジクロロ−２−メトキシ−６−メチル安息香酸（８９ｍｇ、２６１μｍｏｌ）およびメチル−α−Ｄ−グルコピラノシド（７６ｍｇ、３９１μｍｏｌ）から、合成方法Ｇに記載の手順に従って合成した。生成物を分取キラルＨＰＬＣ（Ｃｈｉｒａｌｃｅｌ  ＯＪ−Ｈ／８８、４．６×２６０ｍｍ、流速１ｍＬ／分、溶離液：ｎ−ヘプタン＋エタノール＋ＭｅＯＨ＝２＋１＋１）によって精製した。
収量: 61.4 mg (0.109 mmol, 42 %). 
LC/MS (ES-API): m/z = 561.11 [M - H + ギ酸]-; 計算値: 561.09; tR (λ = 220 nm): 1.80分 (LC/MS方法A).
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 7.55 (d, J=6.48 Hz, 2 H), 7.42 (m, 3 H), 5.21 (br d, J = 5.75 Hz, 1 H), 5.04 (s, 2 H), 4.86 (d, J = 5.14 Hz, 1 H), 4.79 (d, J = 6.36 Hz, 1 H), 4.62 (dd, J = 11.62, 1.83 Hz, 1 H), 4.55 (d, J = 3.55 Hz, 1 H), 4.36 (dd, J = 11.62, 5.87 Hz, 1 H), 3.83 (s, 3 H), 3.65 (m, 1 H), 3.40 (m, 1 H), 3.26 (s, 3 H), 3.21 (m, 1 H), 3.13 (m, 1 H), 2.67 (五重線, J = 1.92 Hz, 1 H), 2.33 (五重線, J = 1.81 Hz, 1 H), 2.29 (s, 3 H), 2.07 (s, 1 H).
【０２４９】
方法Ｈ
概要：
ＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（８ｍＬ）中の安息香酸（２．２７ｍｍｏｌ）の溶液に、アリル−Ｄ−グリコピラノシド（５００ｍｇ、２．２７ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン（５５．４５ｍｇ、４５４μｍｏｌ）およびジシクロヘキシルカルボジイミド（４６８．５ｍｇ、２．２７ｍｍｏｌ）を０℃で、アルゴン雰囲気下で添加し、反応混合物を５時間、０℃で撹拌し、次いで、２４時間、２５℃で放置した。Ｈ２Ｏを添加し、生成物をＣＨ２Ｃｌ２（２×２５ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせ、乾燥した（Ｎａ２ＳＯ４）。溶媒を蒸発させた。
【０２５０】
実施例１５７ａ
２−Ｏ−（４−ベンジルオキシ−ベンゾイルオキシ）−アリル−β−Ｄ−グルコピラノシド
【化３０】
2021504402.tif 000033
実施例１５７ａを４−ベンジルオキシ安息香酸（５１８．２ｍｇ、２．２７ｍｍｏｌ）およびアリル−β−Ｄ−グリコピラノシド（５００ｍｇ、２．２７ｍｍｏｌ）から、合成方法Ｈに記載の手順に従って合成した。粗製の生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ｎ−ヘプタン／酢酸エチル、１．精製：勾配：０〜２分：ｎ−ヘプタン１００％、２〜２５分：酢酸エチル０〜５０％、２５〜３５分：ｎ−ヘプタン／酢酸エチル５０／５０％；２．精製：勾配：０〜１５分：ｎ−ヘプタン／酢酸エチル５０／５０％から酢酸エチル１００％へ、１５〜１８分は酢酸エチル１００％）によって精製した。６−Ｏ−（４−ベンジルオキシ−ベンゾイル）−アリル−β−Ｄ−グルコピラノシド（実施例２）も、収率６％（６０ｍｇ）で単離され、例えば、１５７ａは収率６％で単離され、１５７ｂおよび１５７ｃについては、下の表を参照されたい。
収量: 57 mg (0.132 mmol, 6 %). 
LC/MS (ES-API): m/z = 373.1 [M - OAll]+; 計算値: 373.39; tR (λ = 220 nm): 0.80分 (LC/MS方法C).
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 7.92 (d, 2 H, AA'BB'系), 7.48 (d, 2 H, 芳香族H), 7.40 (t, 2 H, 芳香族H), 7.35 (t, 1 H, 芳香族H), 7.25 (d, 2 H, AA'BB'系), 5.74 (m, 1 H, CH=CH2), 5.29 (d, 1 H, OH), 5.20 (s, 2 H, OCH2), 5.08-5.19 (m, 2 H, OH, CH=CH2), 5.00 (m, 1 H, CH=CH2), 4.77 (dd, 1 H, C2'-H), 4.60 (t, 1 H, C6'-OH), 4.54 (d, 1H, C1'-H), 4.22 (m, 1 H, CH2-CH=CH2), 4.02 (m, 1 H, CH2-CH=CH2), 3.72 (dd, 1 H, C6'-Ha), 3.50 (m, 2 H, C6'-Hb, C5'-H), 3.22 (m, 2 H, C3'-H, C4'-H).
【０２５１】
方法Ｉ：１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）を使用しての４，６−Ｏ−ベンジリデン−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシドおよび安息香酸のカップリング
概要：
ＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）中の安息香酸（２７４．１μｍｏｌ）の溶液に、ＨＯＢｔ（４６．２ｍｇ、３０１．５μｍｏｌ）および（３−ジメチルアミノ−プロピル）−Ｎ’−エチルカルボジイミド（５７．８ｍｇ、３０１．５μｍｏｌ）をアルゴン雰囲気下で添加した。２５℃での２時間後に、４，６−Ｏ−ベンジリデン−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド（８５．１ｍｇ、３０１．５μｍｏｌ）およびトリエチルアミン（４２μｌ、３０１．５μｍｏｌ）を添加し、反応混合物を４０時間撹拌した。Ｈ２Ｏ（２５ｍＬ）を添加し、反応混合物をＣＨ２Ｃｌ２（２×２５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、蒸発させた。
【０２５２】
４，６−Ｏ−ベンジリデンアセタールの切断
概要：
二塩化スズ（３．７ｍｇ、１９μｍｏｌ）を、アセトニトリル（１０ｍＬ）中の２−Ｏ−ベンゾイル−４，６−Ｏ−ベンジリデン−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド（０．１９１ｍｍｏｌ）の溶液に、アルゴン雰囲気下で２５℃で添加した。２５℃での３０分後に、Ｈ２Ｏ（１０ｍＬ）を添加し、反応混合物を凍結乾燥した。
【０２５３】
別法では、脱保護はパラ−トルエンスルホン酸を使用して行うことができる：
４，６−Ｏ−ベンジリデン−３−Ｏ−ベンゾイル−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシドまたは４，６−Ｏ−ベンジリデン−２−Ｏ−ベンゾイル−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド（１７．４μｍｏｌ）をパラ−トルエンスルホン酸（２．９ｍｇ、１７．０μｍｏｌ）と共に、ＣＨ２Ｃｌ２（１ｍＬ）中で、２５℃で、１０分間撹拌した。反応混合物を蒸発させ、生成物をＨＰＬＣ（Ｍｅｒｃｋ  ＰｕｒｏｓｐｈｅｒｅＳｔａｒ  １８ｅ、７５×２５ｍｍ、３μｍ、溶離液：Ａ：Ｈ２Ｏ＋トリフルオロ酢酸０．０５％およびＢ：アセトニトリル＋トリフルオロ酢酸０．０５％、勾配：０〜１．２分：Ｂ２０％、２０ｍＬ／分、１．２〜１．７分はＢ２０％、３０ｍＬ／分、１．７〜７分：Ｂ２０〜９０％、３２ｍＬ／分、７〜９分でＢ９０〜１００％、３２ｍＬ／分、９〜１０分：Ｂ１００％、３２ｍＬ／分）によって精製した。
【０２５４】
実施例１６１
２−Ｏ−（４−（３−ｔ−ブチルオキシ−ベンジルオキシ）−３−クロロ−５−メトキシ−ベンゾイルオキシ）−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド
【化３１】
2021504402.tif 000034
実施例１６１を４−（３−ｔ−ブチルオキシ−ベンジルオキシ）−３−クロロ−５−メトキシ−安息香酸（１００ｍｇ、２７４μｍｏｌ）および４，６−Ｏ−ベンジリデン−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド（８５ｍｇ、３０１．５μｍｏｌ）から、合成方法Ｉに記載の手順に従って合成した。ＨＯＢｔカップリングからの残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ｎ−ヘプタン／酢酸エチル）によって精製した。勾配：０〜１分：ｎ−ヘプタン１００％、１〜１２分：酢酸エチル０〜３０％、１２〜１５分：酢酸エチル３０％、流速３０ｍＬ／分。ベンジリデン切断からの粗製の生成物をＨＰＬＣ（Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｐｒｅｐ−Ｃ１８  １０μｍ  ３０×２５０ｍｍ；Ａ：Ｈ２Ｏ＋トリフルオロ酢酸０．０５％；Ｂ：アセトニトリル＋トリフルオロ酢酸０．０５％；流速：７０ｍＬ／分；勾配：０〜２分はＢ５％、２〜２５分でＢ５％〜９５％；２５〜３０分はＢ９５％、３０〜３２分でＢ９５％〜１００％、２３〜３３分はＢ１００％）によって精製した。
収量: 28.9 mg (53.4 μmol, 28 %). 
LC/MS (ES-API): m/z = 585.4/587.3 [M - H + ギ酸]-; 計算値: 585.19; tR (λ = 220 nm): 2.30分 (LC/MS方法D).
1H-NMR (600 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 7.63 (d, J = 1.83 Hz, 1 H), 7.54 (d, J = 2.02 Hz, 1 H), 7.28 (t, J = 7.74 Hz, 1 H), 7.15 (d, J = 7.52 Hz, 1 H), 7.05 (d, J = 1.83 Hz, 1 H), 6.93 (d, J = 8.07 Hz, 1 H), 5.38 (m, 1 H, OH), 5.19 (d br., J = 5.50 Hz, 1 H, OH), 5.12 (s, 2 H, OCH2), 4.87 (d, J = 3.67 Hz, 1 H, C1'-H), 4.59 (m, 2 H, C6'-OH, C2'-H), 3.93 (m, 3 H, C1-OCH3), 3.76 (t br., J = 8.44, 8.44 Hz, 1 H), 3.68 (m, 1 H), 3.51 (dt, J = 11.87, 5.89 Hz, 1 H), 3.42 (m, 1 H), 3.30 (m, 1 H), 3.26 (s, 3 H), 1.27 (s, 9 H, O-C(CH3)3).
【０２５５】
方法Ｋ：塩化安息香酸での４，６−Ｏ−ベンジリデン−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシドのベンゾイル化
概要：
安息香酸（３６７．２μｍｏｌ）および塩化チオニル（２６８μｌ、３．６７ｍｍｏｌ）を６０℃で３０分間撹拌した。反応混合物を蒸発させ、残留物をＣＨ２Ｃｌ２（２ｍＬ）に溶解した。この溶液を、ＣＨ２Ｃｌ２（４ｍＬ）中の４，６−ベンジリデン−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド（１０３．７ｍｇ、３６７．２μｍｏｌ）およびトリエチルアミン（１５３．６μｌ、１．１ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。反応混合物を１６時間、２５℃で撹拌した。溶媒を蒸発させた。
【０２５６】
トリフルオロ酢酸を使用しての４，６−Ｏ−ベンジリデン基の切断
概要：
４，６−Ｏ−ベンジリデン−３−Ｏ−ベンゾイル−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシドまたは４，６−Ｏ−ベンジリデン−２−Ｏ−ベンゾイル−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド（３９．１μｍｏｌ）をトリフルオロ酢酸（１０当量、３３．５μｌ、３９１．４μｍｏｌ）と共にＣＨ２Ｃｌ２（１ｍＬ）中で２５℃で２時間撹拌した。反応混合物を凍結乾燥した。
【０２５７】
別法では、切断のために塩酸を使用することができる：
４，６−Ｏ−ベンジリデン−３−Ｏ−ベンゾイル−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド（１１７．３μｍｏｌ）または４，６−Ｏ−ベンジリデン−２−ベンゾイル−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシドを塩酸（２Ｍ、２ｍＬ）と共にアセトニトリル（２ｍＬ）中で２５℃で１６時間撹拌した。反応混合物を凍結乾燥し、生成物をＨＰＬＣ（Ｍｅｒｃｋ  Ｈｉｂａｒ  Ｌｉｃｈｒｏｓｐｈｅｒ  １００  ＲＰ−１８ｅ、１０μｍ、２５×２５０ｍｍ、流速６０ｍＬ／分；溶離液Ｈ２Ｏ＋トリフルオロ酢酸０．０５％およびアセトニトリル、０〜１．５分はアセトニトリル１０％；１．５〜１７分はアセトニトリル１０〜９０％、１７〜１８．５分はアセトニトリル９０％）によって精製した。
【０２５８】
実施例１６２ａおよび１６２ｂ
３−Ｏ−（４−ベンジルオキシ−２−メトキシ−６−メチル−ベンゾイルオキシ）−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシドおよび２−Ｏ−（４−ベンジルオキシ−２−メトキシ−６−メチル−ベンゾイルオキシ）−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド
【化３２】
2021504402.tif 000035
実施例１６２ａおよび１６２ｂを４−ベンジルオキシ−２−メトキシ−６−メチル安息香酸（１００ｍｇ、３６７μｍｏｌ）および４，６−Ｏ−ベンジリデン−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド（１０４ｍｇ、３６７μｍｏｌ）から、合成方法Ｋに記載の手順に従って合成し、ベンゾイル化反応からの２−Ｏおよび３−Ｏベンゾイル化生成物をＨＰＬＣ（Ｍｅｒｃｋ  Ｈｉｂａｒ  Ｌｉｃｈｒｏｓｐｈｅｒ  １００  ＲＰ−１８ｅ  １０μｍ、２５０×２５ｍｍ、溶離液：Ａ：Ｈ２Ｏ＋トリフルオロ酢酸０．０３７％およびＢ：アセトニトリル、流速６０ｍＬ／分、勾配：０〜２分：Ｂ５％、２〜２６．５分でＢ５％〜９５％、２６．５〜２８．５分：Ｂ９５％）によって単離した。トリフルオロ酢酸を使用しての脱保護の後に、粗製の生成物をＨＰＬＣ（Ｍｅｒｃｋ  Ｈｉｂａｒ  Ｌｉｃｈｒｏｓｐｈｅｒ  １００  ＲＰ−１８ｅ  １０μｍ  ２５０−２５、６０ｍＬ／分；溶離液Ｈ２Ｏ＋トリフルオロ酢酸０．０５％およびアセトニトリル、０〜１．５分はアセトニトリル１０％；１．５〜１７分でアセトニトリル１０〜９０％、１７〜１８．５分はアセトニトリル９０％）によって精製した。
【０２５９】
実施例１６２ａ：
収量: 23 mg (51.3 μmol, 23 %). 
LC/MS (ES-API): m/z = 449.29 [M + H]+; 計算値: 449.18; tR (λ = 220 nm): 1.89分 (LC/MS方法D).
1H-NMR (600 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 7.45 (d, J = 7.15 Hz, 2 H), 7.40 (t, J = 7.70 Hz, 2 H), 7.34 (t, J = 7.34 Hz, 1 H), 6.53 (d, J = 2.02 Hz, 1 H), 6.49 (d, J = 2.02 Hz, 1 H), 5.17 (t, J = 9.72 Hz, 1 H, C3'-H), 5.13 (s, 2 H, OCH2), 4.97 (s br., 1 H, OH), 4.73 (s br., 1 H, OH), 4.60 (d, J = 3.48 Hz, 1 H, C1'-H), 3.71 (s, 3 H, OCH3), 3.64 (dd, J = 11.74, 1.65 Hz, 1 H), 3.50 (dd, J = 11.55, 5.32 Hz, 1 H), 3.45 (ddd, J = 9.72, 5.32, 1.65 Hz, 1 H), 3.42 (dd, J = 10.09, 3.67 Hz, 1 H), 3.3 (m, 4 H), 2.26 (s, 3 H, CH3)
実施例１６２ｂ：
収量: 5 mg (5.2 μmol, 3 %). 
LC/MS (ES-API): m/z = 493.33 [M - H + ギ酸]-; 計算値: 493.19; tR (λ = 220 nm): 1.89分 (LC/MS方法D).
1H-NMR (600 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 7.45 (d, J = 7.15 Hz, 2 H), 7.40 (t, J = 7.70 Hz, 2 H), 7.34 (t, J = 7.70 Hz, 1 H), 6.56 (d, J = 1.83 Hz, 1 H, 芳香族H), 6.51 (d, J = 2.02 Hz, 1 H), 5.13 (s, 2 H, OCH2), 5.12 (s br., 2 H, OH), 4.83 (d, J = 3.67 Hz, 1 H, C1'-H), 4.60 (dd, J = 10.09, 3.67 Hz, 1 H), 4.56 (s br., 1 H, OH), 3.73 (s, 3 H, OCH3), 3.66 (dd, J = 11.37, 1.47 Hz, 1 H), 3.61 (dd, J = 9.35, 9.54 Hz, 1 H), 3.49 (dd, J = 11.74, 5.69 Hz, 1 H), 3.38 (ddd, J = 9.72, 5.50, 1.65 Hz, 1 H), 3.35 (m, 1 H), 3.29 (s, 3 H, C1-OCH3), 3.22 (dd, J = 9.35, 8.99 Hz, 1 H), 2.22 (s, 3 H, CH3).
【０２６０】
方法Ｌ：メチル−α−Ｄ−グルコサミンのベンゾイル化
概要：
Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１ｍＬ）中の安息香酸（３０４．８μｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１０６．５μｌ、６１０μｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（１３９．１ｍｇ、３６５．８μｍｏｌ）の溶液を１０間撹拌し、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）中のメチル−α−Ｄ−グルコサミン（７０ｍｇ、３０４．８μｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１０６．５μｌ、６１０μｍｏｌ）の懸濁液に添加した。反応混合物を２５℃で１時間撹拌した。溶媒を蒸発させた。
【０２６１】
実施例１７１
２−デオキシ−２−（４−ベンジルオキシ−３，５−ジクロロ−ベンゾイルアミノ）−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド
【化３３】
2021504402.tif 000036
実施例１７１を４−ベンジルオキシ−３，５−ジクロロ−安息香酸およびメチル−α−Ｄ−グルコサミンから、合成方法Ｌに記載の手順に従って合成した。粗製の生成物をＨＰＬＣ（Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｐｒｅｐ  Ｃ１８、１０μｍ、３０×２５０ｍｍ、流速７５ｍＬ／分、溶離液：Ｈ２Ｏおよびアセトニトリル、勾配：０〜１２．５分はＢ１０〜９０％、１２．５〜１５分はＢ９０％）によって精製した。
収量: 48 mg (101.8 μmol, 33 %). 
LC/MS (ES-API): m/z = 470.2/472.1 [M - H]-; 計算値: 470.07; tR (λ = 220 nm): 1.96分 (LC/MS方法D).
1H-NMR (600 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 8.51 (d, J = 7.9 Hz, 1 H), 8.06 (s, 2 H), 7.53 (m, 2 H), 7.44 - 7.34 (m, 3 H), 5.10 (s, 2 H), 5.05 (d, J = 5.5 Hz, 1 H), 4.83 (d, J = 5.7 Hz, 1 H), 4.65 (d, J = 3.5 Hz, 1 H), 4.54 (t, J = 5.7 Hz, 1 H), 3.86 (m, 1 H), 3.68 (m, 2 H), 3.50 (m, 1 H), 3.37 (m, 1 H), 3.25 (s, 3 H), 3.19 (m, 1 H).
【０２６２】
方法Ｍ  保護メチル−α−Ｄ−ガラクトシドのＣ２−ベンゾイル化
概要：
メチル−３，４−Ｏ−イソプロピリデン−α−Ｄ−ガラクトシドの６−Ｏ−シリル化
ＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）中のメチル−３，４−Ｏ−イソプロピリデン−α−Ｄ−ガラクトシド（５００ｍｇ、２．１３ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（４４６．３μｌ、３．２ｍｍｏｌ）、ジメチルアミノピリジン（５２．２ｍｇ、４２６．９μｍｏｌ）、およびｔ−ブチル−ジメチル−シリルクロリド（３２１．７ｍｇ、２．１３ｍｍｏｌ）の溶液をアルゴン雰囲気下で１６時間撹拌した。溶媒を蒸発させた。
【０２６３】
２−Ｏ−ベンゾイル化
安息香酸（３１５．６μｍｏｌ）および塩化チオニル（６８２．７μｌ、５．７４ｍｍｏｌ）を６０℃で１時間撹拌した。反応混合物を蒸発させ、残留物をＣＨ２Ｃｌ２（３ｍＬ）に溶解した。この溶液を、ＣＨ２Ｃｌ２（３ｍＬ）中のメチル−６−（ｔ−ブチル−ジメチルシリル）−３，４−Ｏ−イソプロピリデン−α−Ｄ−ガラクトシド（１００ｍｇ、２８６．９μｍｏｌ）およびトリエチルアミン（８７．１ｍｇ、８６０．８μｍｏｌ）の溶液に添加した。２５℃での２日間の後に、溶媒を蒸発させた。
【０２６４】
保護基の切断
６−ｔ−ブチル−ジメチルシリル−３，４−Ｏ−イソプロピリデン−２−ベンゾイル−メチル−α−Ｄ−ガラクトピラノシド（２７．４μｍｏｌ）、アセトニトリル（５００μｌ）および２Ｍ塩酸（５００μｌ、１．０ｍｍｏｌ）を２５℃で１６時間撹拌した。反応混合物を最後に凍結乾燥した。
【０２６５】
実施例１８８
２−Ｏ−（４−ベンジルオキシ−３，５−ジクロロ−２−メトキシ−ベンゾイル）−メチル−α−Ｄ−ガラクトピラノシド
【化３４】
2021504402.tif 000037
実施例１８８を４−ベンジルオキシ−３，５−ジクロロ−２−メトキシ−安息香酸およびメチル−３，４−Ｏ−イソプロピリデン−α−Ｄ−ガラクトシドから、合成方法Ｍに記載の手順に従って合成した。シリル化反応からの粗製の生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＭＰＬＣ、シリカ、ＳｉＯ２６０、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ、勾配：０〜５分：ＣＨ２Ｃｌ２１００％、５〜３０分：ＭｅＯＨ０〜５％、３０〜３５．５分：ＭｅＯＨ５％）によって精製した。２−ベンゾイル化反応からの粗製の生成物をＨＰＬＣ（Ｍｅｒｃｋ  Ｈｉｂａｒ  Ｌｉｃｈｒｏｓｐｈｅｒ  １００  ＲＰ−１８ｅ  １０μｍ  ２５０−２５、６０ｍＬ／分；溶離液：Ｈ２Ｏ＋トリフルオロ酢酸０．０５およびアセトニトリル、０〜２分：アセトニトリル５％、２．０〜２６．５分：アセトニトリル５〜９５％、２６．５〜２８．５分：アセトニトリル１００％）によって精製した。保護基の切断後に、生成物を凍結乾燥した。
収量: 13 mg (27.4 μmol, 定量). 
LC/MS (ES-API): m/z = 547.3/549.2/551.3 [M - H + ギ酸]-; 計算値: 547.10; tR (λ = 220 nm): 2.17分 (LC/MS方法D).
1H-NMR (600 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 7.88 (s, 1 H), 7.54 (d, J = 6.79 Hz, 2 H), 7.42 (m, 3 H), 5.12 (s, 2 H, OCH2), 5.10 (m, 1 H), 4.89 (d, J = 3.67 Hz, 1 H, OH), 4.80 (d, J = 4.58 Hz, 1 H, OH), 4.63 (t, J = 5.69, 1 H, C6'-OH), 3.40 (m, 1 H), 3.86 (s, 3 H, OCH3), 3,82 (m, 1 H), 3.64 (m, 1 H), 3.54 (m, 2 H, C6'-HaHb), 3.29 (m, 1 H), 3,28 (s, 3 H, C1'-OCH3).
【０２６６】
方法Ｎ  メチル−α−またはβ−Ｄ−グルコピラノシドの２−Ｏ−ベンジル化
概要：
トルエン（５ｍＬ）中のメチル−Ｄ−グルコピラノシド（３００ｍｇ、１．５４ｍｍｏｌ）および酸化ジ−ｎ−ブチル−スズ（４３１．７ｍｇ、１．７０ｍｍｏｌ）の溶液を１時間還流した。塩化ベンジル（２．３２ｍｍｏｌ）および臭化テトラブチルアンモニウム（２５４．１ｍｇ、７７２．５μｍｏｌ）を添加し、混合物を１００℃で１６時間撹拌した。反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ３溶液で希釈し、生成物を酢酸エチル（３×５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、蒸発させた。
【０２６７】
実施例１９２
２−Ｏ−（４−ベンジルオキシ−ベンジル）−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド
【化３５】
2021504402.tif 000038
実施例１９２を塩化４−ベンジルオキシ−ベンジルおよびメチル−α−Ｄ−グルコピラノシドから、合成方法Ｎに記載の手順に従って合成した。反応混合物を、ＨＰＬＣ（Ｗａｔｅｒｓ  ＳｕｎＦｉｒｅ  Ｐｒｅｐ  ＯＢＤ  Ｃ１８、５μｍ、５０×１００ｍｍ、溶離液：Ａ：Ｈ２Ｏ＋トリフルオロ酢酸０．１％およびＢ：アセトニトリル、流速１２０ｍＬ／分、勾配：０〜２．５分：Ｂ１０％、２．５〜１０．５分でＢ１０％〜１００％、１０．５〜１３分：Ｂ１００％）によって精製した。
収量: 67.3 mg (186.9 μmol, 17 %). 
LC/MS (ES-API): m/z = 435.15 [M - H + ギ酸]-; 計算値: 435.10; tR (λ = 220 nm): 1.50分 (LC/MS方法A).
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 7.44 (d, J = 7.62 Hz, 2 H), 7.38 (t, J = 6.85 Hz, 2 H), 7.33 (d, J = 6.85 Hz, 1 H), 7.28 (d, J = 8.38 Hz, 2 H), 6.98 (d, J = 8.68 Hz, 2 H), 5.10 (s, 2 H), 4.62-4.48 (m, 3 H), 3.61 (d, J = 11.12 Hz, 1 H), 3.51 (t, J = 9.18 Hz, 1 H), 3.42 (dd, J = 11.57, 5.58 Hz, 1 H), 3.28 (m, 2 H), 3.23 (s, 3 H), 3.13 (dd, J = 9.57, 3.46 Hz, 1 H), 3.07 (dd, J = 9.77, 8.57 Hz, 1 H).
【０２６８】
方法Ｏ  １−Ｏ−アリルの脱保護
概要：
エタノール（５ｍＬ）中の６−Ｏ−（４−ベンジルオキシ−ベンゾイル）−アリル−α−Ｄ−グルコピラノシド（５０ｍｇ、１１６．２μｍｏｌ）の溶液に、ジヒドリドテトラキス（トリフェニルホスフィン）ルテニウム（ＩＩ）（７．０４ｍｇ、５．８１μｍｏｌ）をアルゴン雰囲気下で添加し、反応混合物を９５℃で２時間撹拌した。反応をＬＣ／ＭＳ（方法Ａ）によってモニターした。パラ−トルエンスルホン酸（２ｍｇ、１１．６μｍｏｌ）を追加で添加し、反応混合物を９５℃で３時間撹拌し、パラ−トルエンスルホン酸（１５ｍｇ、１７４．０μｍｏｌ）を添加し、３時間、９５℃に加熱した後に、反応を停止した。反応混合物を蒸発させた。
【０２６９】
実施例１９５
６−Ｏ−（４−ベンジルオキシ−ベンゾイル）−エチル−Ｄ−グルコピラノシド
【化３６】
2021504402.tif 000039
実施例１９５を４−Ｏ−ベンジルオキシ−ベンゾイル−１−Ｏ−アリル−α−Ｄ−グルコピラノシド（実施例２）から、合成方法Ｏに記載の手順に従って合成した。反応混合物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＭＰＬＣ、シリカＳｉＯ２６０、１２ｇ、流速３０ｍＬ／分、溶離液  酢酸エチル／ＭｅＯＨ＝９：１）によって精製した。
収量: 17 mg (40.6 μmol, 35 %). 
LC/MS (ES-API): m/z = 463.21 [M - H + ギ酸]-; 計算値: 463.19 tR (λ = 220 nm): 1.64分 (LC/MS方法A).
αアノマー:
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 7.91 (m, 2 H, C3-H, AA'BB'系), 7.46 (d, 2 H, C8-H), 7.40 (t, 2 H, C9-H), 7.35 (t, 1 H, C10-H), 7.14 (d, 2 H, C4-H, AA'BB'系), 5.20 (s, 1 H, C4'-OH), 5.19 (s, 2 H, OC6-H2), 4.87 (d, 1 H, C3'-OH), 4.72 (d, 1 H, C2'-OH), 4.67 (d, J = 3.7 Hz, 1 H, C1'-H), 4.49 (m, 1 H, C6'-Ha), 4.25 (m, 1 H, C6'-Hb), 3.72 (m, 1 H, C5'-H), 3.63 (m, 2 H, C11-H2), 3.43 (m, 1 H, C3'-H), 3.23 (m, 1 H, C2'-H), 3.18 (m, 1 H, C4'-H), 1.14 (t, 3 H, C12-H3).
βアノマー：
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 7.90 (m, 2 H, C3-H, AA'BB'系), 7.46 (d, 2 H, C8-H), 7.40 (t, 2 H, C9-H), 7.35 (t, 1 H, C10-H), 7.14 (d, 2 H, C4-H, AA'BB'系), 5.22 (s, 1 H, C4'-OH), 5.19 (s, 2 H, OC6-H2), 5.06 (d, 1 H, C2'-OH), 5.05 (d, 1 H, C3'-OH), 4.50 (m, 1 H, C6'-Ha), 4.25 (m, 1 H, C6'-Hb), 4.19 (d, J = 7.8 Hz, 1 H, C1'-H), 3.49 (m, 2 H, C11-H2), 3.46 (m, 1 H, C5'-H), 3.19 (m, 1 H, C3'-H), 3.18 (m, 1 H, C4'-H), 2.98 (m, 1 H, C2'-H), 1.10 (t, 3 H, C12-H3).
【０２７０】
実施例２１７
６−Ｏ−（４−ベンジルオキシ−ベンゾイル）−メチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド
【化３７】
2021504402.tif 000040
工程−１：６−（４−ベンジルオキシ−ベンゾイル）−３，４−Ｏ−イソプロピリデン−メチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド
【化３８】
2021504402.tif 000041
ＣＨ２Ｃｌ２／Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１：１；６０ｍＬ）中の３，４−Ｏ−イソプロピリデン−メチル−α−Ｄ−ガラクトピラノシド（３ｇ、１２．８２ｍｍｏｌ）に、ジシクロヘキシルカルボジイミド（２．６４ｇ、１２．８２ｍｍｏｌ）、４−ベンジルオキシ安息香酸（２．９２ｇ、１２．８２ｍｍｏｌ）およびジメチルアミノピリジン（３１２ｍｇ、２．５６ｍｍｏｌ）を２５℃で添加し、１時間撹拌した。反応の完了後に、反応混合物を濾過し、得られた残留物をＣＨ２Ｃｌ２で洗浄した。収集した濾液を洗浄した（飽和ＮａＨＣＯ３水溶液、続いて、Ｈ２Ｏ）。分離した有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。粗製の化合物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＭＰＬＣ）によってｎ−ヘキサン中０〜５０％酢酸エチルで溶離して精製した。
収量: 4.5 g (79 %), 白色固体
LC/MS: m/z = 467.00 [M + Na]+; 計算値: 467.49 tR (λ = 220 nm): 1.96分 (LC/MS方法E).
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 7.92 (d, J = 8.80 Hz, 2 H), 7.44 - 7.47 (m, 2 H), 7.33 - 7.42 (m, 3 H), 7.14 (d, J = 8.80 Hz, 2 H), 5.35 (d, J = 4.89 Hz, 1 H), 5.18 (s, 2 H), 4.35 - 4.44 (m, 2 H), 4.19 (d, J = 5.38 Hz, 1 H), 4.15 (dd, J = 4.40, 7.34 Hz, 1 H), 4.10 (d, J = 8.31 Hz, 1 H), 3.98 (t, J = 6.11 Hz, 1 H), 3.34 (s, 3 H), 3.18 - 3.24 (m, 1 H), 1.40 (s, 3 H), 1.26 (s, 3 H).
【０２７１】
工程−２：６−Ｏ−（４−ベンジルオキシ−ベンゾイル）−メチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド：
【化３９】
2021504402.tif 000042
アセトニトリル（５０ｍＬ）中の６−Ｏ−（４−ベンジルオキシ−ベンゾイル）−３，４−Ｏ−イソプロピリデン−メチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（４．５ｇ、１０．１２ｍｍｏｌ）に、Ｈ２Ｏ（２０ｍＬ）中の２Ｍ  ＨＣｌ溶液（２０ｍＬ）を添加し、２５℃で１時間撹拌した。反応の完了後に、反応混合物を減圧下で蒸発させて、粗製の化合物を得た。粗製の化合物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＭＰＬＣ）によってＣＨ２Ｃｌ２中０〜５％ＭｅＯＨで溶離して精製した。
収量: 810 mg (20 %), オフホワイト固体
LC/MS: m/z = 427.00 [M + Na]+; 計算値: 427.42 tR (λ = 220 nm): 1.67分 (LC/MS方法E).
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 7.89 (d, J = 9.03 Hz, 2 H), 7.41 - 7.45 (m, 2 H), 7.37 (t, J = 7.22 Hz, 2 H), 7.32 (d, J = 7.22 Hz, 1 H), 7.11 (d, J = 9.03 Hz, 2 H), 5.16 (s, 2 H), 4.92 (d, J = 4.06 Hz, 1 H), 4.75 (d, J = 4.97 Hz, 1 H), 4.66 (d, J = 4.51 Hz, 1 H), 4.24 - 4.37 (m, 2 H), 4.03 (d, J = 6.77 Hz, 1 H), 3.72 (t, J = 6.32 Hz, 1 H), 3.64 - 3.68 (m, 1 H), 3.29 - 3.31 (m, 2 H), 3.28 (s, 3 H).
【０２７２】
実施例２１８
２−Ｏ−（４−ベンジルオキシ−ベンゾイル）−メチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド
【化４０】
2021504402.tif 000043
【０２７３】
工程−１：６−Ｏ−（ｔ−ブチル−ジメチル−シリルオキシ）−３，４−Ｏ−イソプロピリデン−メチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド
【化４１】
2021504402.tif 000044
ＣＨ２Ｃｌ２（１００ｍＬ）中の３，４−Ｏ−イソプロピリデン−メチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（７ｇ、２９．９１ｍｍｏｌ）に、トリエチルアミン（６．２ｍＬ、４４．８７ｍｍｏｌ）、ｔ−ブチル−ジメチル−シリルクロリド（４．５ｇ、２９．９１ｍｍｏｌ）およびジメチルアミノピリジン（７２９ｍｇ、５．９８０ｍｍｏｌ）を２５℃で添加し、１８時間撹拌した。反応の完了後に、反応混合物を減圧下で濃縮した。粗製の化合物をＭＰＬＣ（シリカ、ＣＨ２Ｃｌ２中０〜５％ＭｅＯＨで溶離）によって精製した。
収量: 8.2 g (78 %), 白色固体.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 5.24 (d, J = 4.89 Hz, 1 H), 4.06 (dd, J = 1.47, 5.38 Hz, 1 H), 4.01 (d, J = 7.83 Hz, 1 H), 3.87 - 3.92 (m, 1 H), 3.66 - 3.79 (m, 3 H), 3.34 (s, 3 H), 3.15 (dt, J = 5.14, 7.46 Hz, 1 H), 1.35 (s, 3 H), 1.21 (s, 3 H), 0.84 (s, 9 H), 0.03 (s, 6 H).
【０２７４】
工程−２：２−Ｏ−（４−ベンジルオキシ−ベンゾイル）−６−（ｔ−ブチル−ジメチル−シリルオキシ）−３，４−Ｏ−イソプロピリデン−メチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド
【化４２】
2021504402.tif 000045
０℃のＣＨ２Ｃｌ２（３０ｍＬ）中の４−ベンジルオキシ安息香酸（２．５ｇ、１０．９５ｍｍｏｌ）に、塩化オキサリル（１．９ｍＬ、２１．９０ｍｍｏｌ）を、続いて、触媒量のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．５ｍＬ）を添加し、混合物を２５℃で２時間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮すると、対応する酸塩化物が形成した。
【０２７５】
ＣＨ２Ｃｌ２（３０ｍＬ）中の４−ベンジルオキシ−ベンゾイルクロリド（２．６９ｇ、１０．９２ｍｍｏｌ）に、ＣＨ２Ｃｌ２（４０ｍＬ）中のトリエチルアミン（６．１ｍＬ、４３．８５ｍｍｏｌ）、ジメチルアミノピリジン（２６７ｍｇ、２．１９２ｍｍｏｌ）および６−（ｔ−ブチル−ジメチル−シリルオキシ）−３，４−Ｏ−イソプロピリデン−メチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（４．２ｇ、１２．０６ｍｍｏｌ）の混合物を２５℃で添加した。反応混合物を１時間撹拌した。反応の完了後に、反応混合物をＨ２Ｏで希釈し、ＣＨ２Ｃｌ２（３×）で抽出した。合わせた有機層を乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、減圧下で濃縮した。粗製の化合物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＭＰＬＣ）によってｎ−ヘキサン中０〜５０％酢酸エチルで溶離して精製した。
収量: 2.5 g (40 %), 白色固体.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 8.31 - 8.35 (m, 1 H), 8.05 (d, J = 8.80 Hz, 1 H), 7.89 - 7.93 (m, 1 H), 7.45 (d, J = 6.85 Hz, 2 H), 7.32 - 7.42 (m, 3 H), 7.13 (d, J = 8.80 Hz, 1 H), 5.24 (s, 1 H), 5.19 (s, 1 H), 5.16 - 5.20 (m, 1 H), 4.94 (t, J = 7.83 Hz, 1 H), 4.63 (t, J = 8.07 Hz, 1 H), 4.36 (d, J = 8.31 Hz, 1 H), 4.16 - 4.27 (m, 2 H), 3.90 - 3.98 (m, 1 H), 3.73 - 3.82 (m, 2 H), 3.34 (s, 3 H), 0.87 (s, 4 H), 0.85 (s, 5 H), 0.06 (s, 3 H), 0.05 (s, 3 H).
【０２７６】
工程−３：２−Ｏ−（４−ベンジルオキシ−ベンゾイル）−メチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド：
【化４３】
2021504402.tif 000046
アセトニトリル（３０ｍＬ）中の２−Ｏ−（４−ベンジルオキシ−ベンゾイル）−６−（ｔ−ブチル−ジメチル−シリルオキシ）−３，４−Ｏ−イソプロピリデン−メチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（２．５ｇ、４．８１９ｍｍｏｌ）の溶液に、２Ｍ  ＨＣｌ（１０ｍＬ）を添加した。混合物を２５℃で１時間撹拌した。反応の完了後に、反応混合物を減圧下で蒸発させて、粗製の化合物を得た。粗製の化合物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＭＰＬＣ）によってＣＨ２Ｃｌ２中０〜５％ＭｅＯＨで溶離して精製した。
収量: 1.3 g (66 %), オフホワイト固体.
LC/MS: m/z = 427.13 [M + Na]+; 計算値: 427.42 tR (λ = 220 nm): 1.64分 (LC/MS方法E).
1H NMR (400 MHz. DMSO-d6) δ [ppm] = 7.91 (d, J = 8.80 Hz. 2 H), 7.43 - 7.48 (m, 2 H), 7.39 (t, J = 7.34 Hz, 2 H), 7.33 - 7.36 (m, 1 H), 7.12 (d, J = 9.29 Hz, 2 H), 5.20 (s, 2 H), 5.04 (dd, J = 8.31, 9.78 Hz, 1 H), 4.96 (d, J = 6.36 Hz, 1 H), 4.73 (d, J = 4.40 Hz, 1 H), 4.65 (t, J = 5.62 Hz, 1 H), 4.38 (d, J = 8.31 Hz, 1 H), 3.74 (t, J = 3.67 Hz, 1 H), 3.66 (ddd, J = 3.42, 6.72, 9.90 Hz, 1 H), 3.51 - 3.59 (m, 2 H), 3.45 - 3.51 (m, 1 H), 3.31 (s, 3 H).
【０２７７】
実施例２１９
６−Ｏ−（４−ベンジルオキシ−ベンゾイル）−メチル−α−Ｄ−ガラクトピラノシド
【化４４】
2021504402.tif 000047
【０２７８】
工程−１：６−Ｏ−（４−ベンジルオキシ−ベンゾイル）−３，４−Ｏ−イソプロピリデン−メチル−α−Ｄ−ガラクトピラノシド：
【化４５】
2021504402.tif 000048
ＣＨ２Ｃｌ２／Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１：１；４０ｍＬ）中の３，４−Ｏ−イソプロピリデン−メチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（２ｇ、８．５３７ｍｍｏｌ）に、ＣＨ２Ｃｌ２（１．７５ｇ、８．５３７ｍｍｏｌ）、４−ベンジルオキシ安息香酸（１．９４ｇ、８．５３７ｍｍｏｌ）およびジメチルアミノピリジン（２０８ｍｇ、１．７０ｍｍｏｌ）を２５℃で添加し、混合物を１時間撹拌した。反応混合物を濾過し、得られた残留物をＣＨ２Ｃｌ２で洗浄した。収集した濾液を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液、続いて、Ｈ２Ｏで洗浄した。分離した有機層を乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、減圧下で濃縮した。粗製の化合物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＭＰＬＣ）によってｎ−ヘキサン中０〜５０％酢酸エチルで溶離して精製した。
収量：３ｇ（７９％）、白色の固体。
【０２７９】
工程−２：６−Ｏ−（４−ベンジルオキシ−ベンゾイル）−メチル−α−Ｄ−ガラクトピラノシド：
【化４６】
2021504402.tif 000049
アセトニトリル（３０ｍＬ）中の６−Ｏ−（４−ベンジルオキシ−ベンゾイル）−３，４−Ｏ−イソプロピリデン−メチル−α−Ｄ−ガラクトピラノシド（３ｇ、６．７５６ｍｍｏｌ）に、Ｈ２Ｏ（２０ｍＬ）中の２Ｍ  ＨＣｌ溶液（１４ｍＬ）を添加し、２５℃で１時間撹拌した。反応混合物を減圧下で蒸発させて、粗製の化合物を得た。粗製の化合物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＭＰＬＣ）によってＣＨ２Ｃｌ２中０〜５％ＭｅＯＨで溶離して精製した。
収量: 1.15 g (42 %), オフホワイト固体.
LC/MS: m/z = 426.95 [M + Na]+; 計算値: 427.42 tR (λ = 220 nm): 1.63分 (LC/MS方法E).
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 7.91 (d, J = 8.80 Hz, 2 H), 7.44 - 7.48 (m, 2 H), 7.40 (t, J = 7.27 Hz, 2 H), 7.32 - 7.37 (m, 1 H), 7.13 (d, J = 8.80 Hz, 2 H), 5.19 (s, 2 H), 4.70 (d, J = 4.16 Hz, 1 H), 4.62 (d, J = 4.52 Hz, 1 H), 4.59 (d, J = 3.30 Hz, 2 H), 4.26 - 4.38 (m, 2 H), 3.92 (dd, J = 4.10, 7.76 Hz, 1 H), 3.75 - 3.79 (m, 1 H), 3.53 - 3.64 (m, 2 H), 3.26 (s, 3 H).
【０２８０】
実施例２２０
２−Ｏ−（４−ベンジルオキシ−ベンゾイル）−メチル−α−Ｄ−ガラクトピラノシド
【化４７】
2021504402.tif 000050
【０２８１】
工程−１：６−（ｔ−ブチル−ジメチル−シリルオキシ）−３，４−Ｏ−イソプロピリデン−メチル−α−Ｄ−ガラクトピラノシド
【化４８】
2021504402.tif 000051
ＣＨ２Ｃｌ２（１００ｍＬ）中の３，４−Ｏ−イソプロピリデン−メチル−α−Ｄ−ガラクトピラノシド（６．５ｇ、２７．７５ｍｍｏｌ）に、トリエチルアミン（５．８ｍＬ、４１．６２ｍｍｏｌ）、ｔ−ブチル−ジメチル−シリル−クロリド（４．１６ｇ、２７．７５ｍｍｏｌ）およびジメチルアミノピリジン（６７７ｍｇ、５．５４９ｍｍｏｌ）を２５℃で添加し、１８時間撹拌した。反応の完了後に、反応混合物を減圧下で濃縮した。粗製の化合物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーによってＣＨ２Ｃｌ２中０〜５％ＭｅＯＨで溶離して精製した。
収量: 7.5 g (77 %), 白色固体.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 5.00 - 5.03 (m, 1 H), 4.50 (d, J = 3.42 Hz, 1 H), 4.14 (dd, J = 2.20, 5.62 Hz, 1 H), 3.96 (dd, J = 5.62, 7.58 Hz, 1 H), 3.80 - 3.85 (m, 1 H), 3.71 - 3.76 (m, 1 H), 3.61 - 3.67 (m, 1 H), 3.42 (dt, J = 3.67, 7.21 Hz, 1 H), 3.25 (s, 3 H), 1.36 (s, 3 H), 1.21 (s, 3 H), 0.84 (s, 9 H), 0.03 (s, 6 H).
【０２８２】
工程−２：２−Ｏ−（４−ベンジルオキシ−ベンゾイル）−６−（ｔ−ブチル−ジメチル−シリルオキシ）−メチル−α−Ｄ−ガラクトピラノシド
【化４９】
2021504402.tif 000052
０℃のＣＨ２Ｃｌ２（３０ｍＬ）中の４−ベンジルオキシ安息香酸（２．５ｇ、１０．９６ｍｍｏｌ）に、塩化オキサリル（２．２ｍＬ、２１．９２ｍｍｏｌ）を、続いて、触媒量のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．５ｍＬ）を添加した。反応混合物を２５℃で２時間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮すると、対応する酸塩化物が形成した。ＣＨ２Ｃｌ２（３０ｍＬ）中の４−ベンジルオキシ−ベンゾイルクロリド（２．７ｇ、１０．９５ｍｍｏｌ）に、ＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）中のトリエチルアミン（６．１ｍＬ、４３．８１ｍｍｏｌ）、ジメチルアミノピリジン（２６７ｍｇ、２．１８８ｍｍｏｌ）および６−（ｔ−ブチル−ジメチル−シリルオキシ）−３，４−Ｏ−イソプロピリデン−メチル−α−Ｄ−ガラクトピラノシド（４．２ｇ、１２．０３ｍｍｏｌ）の混合物を２５℃で添加し、反応混合物を１時間撹拌した。反応混合物をＨ２Ｏで希釈し、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。合わせた有機層を乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、減圧下で濃縮した。粗製の化合物をカラムクロマトグラフィーシリカ（ＭＰＬＣ）、（ｎ−ヘキサン中０〜５０％酢酸エチル）によって精製した。
収量: 4.5 g (72 %), オフホワイト固体.
LC/MS: m/z = 519.20 [M]+; 計算値: 518.69 tR (λ = 220 nm): 2.73分 (LC/MS方法E).
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 7.92 (d, J = 9.29 Hz, 2 H), 7.44 - 7.47 (m, 2 H), 7.39 (t, J = 7.34 Hz, 2 H), 7.30 - 7.36 (m, 1 H), 7.14 (d, J = 8.80 Hz, 2 H), 5.20 (s, 2 H), 4.93 (dd, J = 3.67, 8.07 Hz, 1 H), 4.85 (d, J = 3.42 Hz, 1 H), 4.39 (dd, J = 5.38, 7.83 Hz, 1 H), 3.92 - 4.35 (m, 3 H), 3.71 - 3.86 (m, 3 H), 3.28 (s, 3 H), 0.87 (s, 9 H), 0.06 (s, 6 H).
【０２８３】
工程−３：２−Ｏ−（４−ベンジルオキシ−ベンゾイル）−メチル−α−Ｄ−ガラクトピラノシド：
【化５０】
2021504402.tif 000053
アセトニトリル（５０ｍＬ）中の２−Ｏ−（４−ベンジルオキシ−ベンゾイル）−６−（ｔ−ブチル−ジメチル−シリルオキシ）−メチル−α−Ｄ−ガラクトピラノシド（４．５ｇ、８．６７５ｍｍｏｌ）に、２Ｍ  ＨＣｌ溶液（２０ｍＬ）を添加し、混合物を２５℃で１時間撹拌した。反応の完了後に、反応混合物を減圧下で蒸発させて、粗製の化合物を得た。粗製の化合物をＭＰＬＣ（シリカ、ＣＨ２Ｃｌ２．／ＭｅＯＨ３〜５％）によって精製した。
収量: 2.8 g (81 %), オフホワイト固体.
LC/MS: m/z = 427.05 [M + Na]+; 計算値: 427.42 tR (λ = 220 nm): 1.59分 (LC/MS方法E).
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 7.95 (d, J = 8.80 Hz, 2 H), 7.45 - 7.48 (m, 2 H), 7.40 (t, J = 7.34 Hz, 2 H), 7.31 - 7.37 (m, 1 H), 7.14 (d, J = 8.80 Hz, 2 H), 5.20 (s, 2 H), 4.99 - 5.04 (m, 2 H), 4.86 (d, J = 3.42 Hz, 1 H), 4.77 (d, J = 4.40 Hz, 1 H), 4.64 (t, J = 5.62 Hz, 1 H), 3.90 (ddd, J = 2.93, 6.60, 10.03 Hz, 1 H), 3.83 (d, J = 3.91 Hz, 1 H), 3.61 - 3.67 (m, 1 H), 3.48 - 3.60 (m, 2 H), 3.25 (s, 3 H).
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6; D2O交換) δ [ppm] = 7.91 (d, J = 8.78 Hz, 2 H), 7.38 - 7.43 (m, 2 H), 7.35 (t, J = 7.40 Hz, 2 H), 7.27 - 7.33 (m, 1 H), 7.08 (d, J = 8.78 Hz, 2 H), 5.14 (s, 2 H), 4.97 (dd, J = 3.51, 10.29 Hz, 1 H), 4.83 (d, J = 3.26 Hz, 1 H), 3.89 (dd, J = 2.89, 10.42 Hz, 1 H), 3.80 (d, J = 2.51 Hz, 1 H), 3.61 - 3.66 (m, 1 H), 3.50 - 3.54 (m, 2 H), 3.20 (s, 3 H).
【０２８４】
実施例２２１
２−デオキシ−２−アミノ−（３，５−ジクロロ−４−（（３−（（３，１２−ジオキソ−２，５，８，１４，１７−ペンタオキサ−１１−アザノナデカン−１９−イル）カルバモイル）ベンジル）オキシ）−２−メチルベンゾイル）−１−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド
【化５１】
2021504402.tif 000054
ＣＨ２Ｃｌ２（８０ｍＬ）中の実施例２０９（１２ｇ、２０．３ｍｍｏｌ）に、トリフルオロ酢酸２０ｍＬ（１２当量、２６０ｍｍｏｌ）を添加した。反応の完了後に（ＴＬＣ、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ＝８／１、Ｒｆ＝０．３）、反応混合物を減圧下で濃縮すると、対応する酸が形成した。
【０２８５】
上で得られた粗製の酸（２１０ｍｇ、０．４ｍｍｏｌ）およびメチル−１７−アミノ−１０−オキソ−３，６，１２，１５−テトラオキサ−９−アザヘプタデカノアートヒドロクロリドを、合成方法Ｌに記載の手順に従ってカップリングした。粗製の生成物を、ＭＰＬＣ（シリカ、ＳｉＯ２６０、３０ｇ、溶離液：ＣＨ２Ｃｌ２およびＭｅＯＨ、勾配：０〜５分：ＣＨ２Ｃｌ２１００％、５〜２０分：ＭｅＯＨ０〜１０％、２０〜３０分：ＭｅＯＨ１０％、３０〜４５分：ＭｅＯＨ１０〜２０％）を使用して精製した。
収量: 100 mg (331 μmol, 30 %). 
LC/MS (ES-API): m/z = 834.2/836.2 [M + H]+; 計算値: 834.2/836.2; tR (λ = 220 nm): 0.67分 (LC/MS方法C).
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 8.58 (t, J = 5.50, 5.50 Hz, 1 H), 8.41 (d, J = 8.19 Hz, 1 H), 8.02 (s, 1 H), 7.87 (d, J = 7.82 Hz, 1 H), 7.71 (d, J = 7.70 Hz, 1 H), 7.63 (br t, J = 5.69 Hz, 1 H), 7.53 (t, J = 7.64, 7.64 Hz, 1 H), 7.45 (s, 1 H), 5.06 (s, 2 H), 5.02 (d, J = 5.62 Hz, 1 H), 4.86 (d, J = 5.75 Hz, 1 H), 4.71 (d, J = 3.55 Hz, 1 H), 4.54 (t, J = 5.99 Hz, 1 H), 4.12 (s, 2 H), 3.88 (s, 2 H), 3.83 (m, 1 H), 3.66 (m, 1 H), 3.64 (s, 3 H), 3.60 - 315 (m, 26 H), 2.36 (s, 3 H).
【０２８６】
実施例２２２
２−デオキシ−２−アミノ−（３，５−ジクロロ−４−（（３−（１，１０−ジオキソ−５，８，１４，１７−テトラオキサ−２，１１−ジアザノナデカン−１９−オイック酸）ベンジル）オキシ）−２−メチルベンゾイル）−１−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド
【化５２】
2021504402.tif 000055
テトラヒドロフラン／ＭｅＯＨ（３：１）４ｍＬ中の実施例２２１（６０ｍｇ、７１μｍｏｌ）に、ＬｉＯＨ（２当量、Ｈ２Ｏ１ｍＬ中）を添加した。反応の完了後に（ＬＣ／ＭＳ方法Ｃ）、反応混合物をＤｏｗｅｘ  Ｍａｒａｔｈｏｎ  Ｈ＋で酸性化した。イオン交換体を濾別し、溶媒を減圧下で除去した。
収量: 59 mg (63.4 μmol, 88 %). 
LC/MS (ES-API): m/z = 820.2/822.2 [M + H]+; 計算値: 820.2/822.2; tR (λ = 220 nm): 0.63分 (LC/MS方法C).
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 8.63 (br. s, 1 H), 8.03 (s, 1 H), 7.87 (d, J = 7.70 Hz, 1 H), 7.71 (d, J = 7.52 Hz, 1 H), 7.63 (m, 1 H), 7.52 (t, J = 7.61, 7.61 Hz, 1 H), 7.44 (s, 1 H), 5.05 (m, 3 H), 4.73 (d, J = 3.48 Hz, 1 H), 4.53 (br. s, 1 H), 3.87 (m, 4 H), 3.79 (m, 1 H), 3.67 (br, m, 1 H), 3.60 - 3.15 (m, 28 H), 2.35 (s, 3 H).
【０２８７】
方法Ｐ  クリックケミストリーを使用してのインスリンへのカップリング
概要：
Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドおよびＨ２Ｏ中のアルキン（１．２当量）および４−アジド−ブタン−（ヒトインスリン−Ｂ２９Ｌｙｓ）−アミド（２０１７年１２月７日に公開されたＷＯ２０１７２０７７５４Ａ１の実施例１１１に記載；１当量）の溶液に、予備混合されたクリック試薬の混合物を、ＣｕＳＯ４×５Ｈ２Ｏ（０．５当量）、ＴＨＰＴＡ（０．８当量）、およびアスコルビン酸ナトリウム（１当量）の順序で添加した。反応混合物を２５℃で２時間撹拌し、凍結乾燥した。
【０２８８】
実施例２２３
【化５３】
2021504402.tif 000056
実施例２６３を、合成方法Ｐに記載のとおりに合成した。生成物をＨＰＬＣ（ＲＰ、Ｋｉｎｅｔｅｘ  Ｃ１８、１００Ａ、５μｍ、２１．１×２５０ｍｍ、流速６．２ｍＬ／分、溶離液：Ａ：Ｈ２Ｏ＋酢酸０．５％、Ｂ：アセトニトリル６０％＋Ｈ２Ｏ３９．５％＋酢酸０．５％、勾配：０〜１５分でＢ０〜２０％、１５〜１８９分でＢ２０％〜８０％、１８９〜１９０分でＢ８０％〜１００％、１９０〜２２０分はＢ１００％）によって精製した。
収量: 46 mg (7.1 μmol, 21 %), 白色粉末. 
LC/MS (ES-API): m/z = 1297.1 [M + 5 H]5+; 計算値: 1296.58 ; tR (λ= 215 nm): 5.65分 (LC/MS方法F).
【０２８９】
方法Ｑ  ＴＳＴＵを使用してのインスリンとのコンジュゲーション
概要：
インスリン（１当量）をアセトニトリル（３８ｍＬ）および水（２０ｍＬ）に溶解し、ｐＨをトリエチルアミンで１０．５に調節した。ジメチルホルムアミドおよびトリエチルアミン（２当量）に溶解した炭水化物誘導体の別の溶液に、Ｏ−（Ｎ−スクシンイミジル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボラート（ＴＳＴＵ、１当量）および４−ジメチルアミノピリジン（０．０５当量）を添加した。反応物を３０分間、室温で撹拌して、酸前駆体のＮ−ヒドロキシスクシンイミジルエステルを得、次いで、これをインスリン溶液に添加した。反応物を１時間、室温で撹拌し、その後、水で２００ｍＬの最終体積に希釈した。ｐＨを１Ｍ酢酸で６．５に調節し、粗製の混合物をＲＰ−クロマトグラフィー（Ｋｉｎｅｔｅｘ、５μｍ．Ｃ１８、１００Ａ、２１．１×２５０ｍｍ）によって精製した。精製画分を収集し、貯留し、凍結乾燥した（収率２６．５％、純度９０％）。
【０２９０】
中間体の合成：
２−［３，５−ジクロロ−４−ヒドロキシ−２−メチル−ベンゾイル］−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド
【化５４】
2021504402.tif 000057
アルゴン雰囲気下のＥｔＯＨ（５０ｍＬ）および酢酸エチル（５０ｍＬ）中の２−［４−ベンジルオキシ−３，５−ジクロロ−３−メチル−ベンゾイル］−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド（３．３７ｇ、５．８６ｍｍｏｌ、方法Ｌに記載の手順に従って合成）の溶液に、Ｐｄ−Ｃ１０％（水５０％）（６２３ｍｇ、５８５．６μｍｏｌ）を添加した。水素（０．２バール）を２時間添加した。反応をＬＣ／ＭＳによってモニターした。触媒を濾過し、反応混合物を蒸発させて、所望の生成物２．３３ｇ（５．６６ｍｍｏｌ、収率９７％）を得た。
【０２９１】
２−［３−クロロ−４−ヒドロキシ−２−メトキシ−ベンゾイル］−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド
【化５５】
2021504402.tif 000058
２−［３−クロロ−４−ヒドロキシ−２−メトキシ−ベンゾイル］−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシドを２−［４−ベンジルオキシ−３−クロロ−３−メトキシ−ベンゾイル］−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド（１．６５ｇ、２．９６ｍｍｏｌ）から、上記の手順に従って収率７０％で合成した。
【０２９２】
２−［３−クロロ−４−ヒドロキシ−２−メトキシ−ベンズアミジル］−メチル−α−Ｄ−グルコサミン
【化５６】
2021504402.tif 000059
アルゴン雰囲気下のＣＨ２Ｃｌ２（４４０ｍＬ）およびメタノール（４４０ｍＬ）中の２−［５−クロロ−４−（ベンジルオキシ）−３−メトキシ−ベンゾイル］−メチル−α−Ｄ−グルコサミン（５．８３ｇ、１２．４６ｍｍｏｌ、方法Ｌに記載の手順に従って合成）の溶液に、臭化亜鉛（１４０．４３ｍｇ、６２３．００μｍｏｌ）およびＰｄ−Ｃ１０％（水５０％）（１．３３ｇ、６２３．００μｍｏｌ）を添加した。水素を３０分間移流し、反応混合物を２．５時間撹拌した。反応をＬＣ／ＭＳによってモニターした。触媒を濾別し、メタノールおよび水で洗浄した。反応混合物を蒸発させて、所望の生成物を定量で得た。
【０２９３】
３，５−ジクロロ−４−ヒドロキシ−２−メチル−ベンズアミジル−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド
【化５７】
2021504402.tif 000060
３，５−ジクロロ−４−ヒドロキシ−２−メチル−ベンズアミジル−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシドを２−［４−ベンジルオキシ−３，５−ジクロロ−３−メチル−ベンゾイル］−メチル−α−Ｄ−グルコサミン（４．９９ｇ、１０．２６ｍｍｏｌ）から、上記の手順に従って、定量収率で合成した。
【０２９４】
追加の合成方法を下に記載する：
方法Ｒ  グルコピラノシド−またはグルコサミン−フェノール構成単位のアルキル化
概要：
２−［３，５−ジクロロ−４−ヒドロキシ−２−メチル−ベンゾイル］−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド（２６６ｍｇ、０．６７ｍｍｏｌ）、Ｎ−（５−（ブロモメチル）−２−メトキシフェニル）ペンタ−４−ｙｎアミド（１９８ｍｇ、０．６７ｍｍｏｌ）およびＫ２ＣＯ３（１０１．６４ｍｇ、７３５．４０μｍｏｌ）をＤＭＦ（２ｍＬ）に溶解し、２５℃で２時間撹拌した。反応をＬＣ／ＭＳによってモニターした。１６時間後に、酢酸エチルおよび水を反応混合物に添加した。有機相を酢酸エチルで２回抽出した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、蒸発させた。
【０２９５】
方法Ｓ  ベンジルアミンのアルキル化
概要：
ＤＭＦ（０．５ｍＬ）中の４−（（３−（アミノメチル）ベンジル）オキシ）−３，５−ジクロロ−２−メチルベンゾイル−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシドヒドロクロリド（１００ｍｇ、１６９．７０μｍｏｌ、方法Ｌに記載の手順に従って合成＊１５）の溶液に、Ｋ２ＣＯ３（７０．３６ｍｇ、５０９．０９μｍｏｌ）およびｔｅｒｔ−ブチル４−ブロモブタノアート（４５μｌ、２５４．５５μｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で２時間撹拌した。反応をＬＣ／ＭＳによってモニターした。室温での１６時間後に、反応混合物を蒸発させ、分取ＨＰＬＣ（ＹＭＣ−Ａｃｔｕｓ  Ｔｒｉａｒｔ  Ｐｒｅｐ  Ｃ１８−Ｓ  ２５０×３０  Ｓ−１０μｍ、１２ｎｍ、７０ｍＬ／分；０〜２分はＨ２Ｏ中５％アセトニトリル＋トリフルオロ酢酸０．０５％、２〜１０分はＨ２Ｏ中５〜１００％アセトニトリル＋トリフルオロ酢酸０．０５％、２０〜２２分：アセトニトリル１００％）によって精製して、所望の生成物１２ｍｇ（１８．８μｍｏｌ、収率１１％）を得た。
【０２９６】
方法Ｔ  アニリンのアルキル化
概要：
ＣＨ２Ｃｌ２（１ｍＬ）中の４−（（３−アミノベンジル）オキシ）−３，５−ジクロロ−２−メチルベンゾアート−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシドヒドロクロリド（１００ｍｇ、１８５．６０μｍｏｌ、方法Ｌに記載の手順に従って合成＊１５）および４−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−４−オキソブタン酸（３８．８０ｍｇ、２２２．７２μｍｏｌ）の懸濁液に、トリエチルアミン（７７．６１μｌ、５５６．７９μｍｏｌ）を添加し、反応混合物を０℃に冷却した。ＣＨ２Ｃｌ２（１ｍＬ）中のクロロギ酸イソブチル（４３．８７μｌ、３３４．０８μｍｏｌ）を１０分間かけて０℃で添加した。２５℃に加温した後に、反応混合物を１６時間撹拌した。反応混合物を蒸発させ、分取ＨＰＬＣ（Ｍｅｒｃｋ  Ｈｉｂａｒ  ＰｕｒｏｓｐｈｅｒＳＴＡＲ  ＲＰ−１８ｅ  ３μｍ  ２５×７５ｍｍ、０〜１分：Ｈ２Ｏ中５％アセトニトリル＋トリフルオロ酢酸０．０５％、１〜２０分はＨ２Ｏ中５〜１００％アセトニトリル＋トリフルオロ酢酸０．０５％、２０〜２２分：アセトニトリル１００％）によって精製して、所望の生成物１１ｍｇ（１６．７μｍｏｌ、収率９％）を得た。
【０２９７】
次の実施例を、上記の方法を使用して合成した：
【０２９８】
【表３】
2021504402.tif 000061
【表４】
2021504402.tif 000062
【表５】
2021504402.tif 000063
【表６】
2021504402.tif 000064
【表７】
2021504402.tif 000065
【表８】
2021504402.tif 000066
【表９】
2021504402.tif 000067
【表１０】
2021504402.tif 000068
【表１１】
2021504402.tif 000069
【表１２】
2021504402.tif 000070
【表１３】
2021504402.tif 000071
【表１４】
2021504402.tif 000072
【表１５】
2021504402.tif 000073
【表１６】
2021504402.tif 000074
【表１７】
2021504402.tif 000075
【表１８】
2021504402.tif 000076
【表１９】
2021504402.tif 000077
【表２０】
2021504402.tif 000078
【表２１】
2021504402.tif 000079
【表２２】
2021504402.tif 000080
【表２３】
2021504402.tif 000081
【表２４】
2021504402.tif 000082
【表２５】
2021504402.tif 000083
【表２６】
2021504402.tif 000084
【表２７】
2021504402.tif 000085
【表２８】
2021504402.tif 000086
【表２９】
2021504402.tif 000087
【表３０】
2021504402.tif 000088
【表３１】
2021504402.tif 000089
【表３２】
2021504402.tif 000090
【表３３】
2021504402.tif 000091
【表３４】
2021504402.tif 000092
【表３５】
2021504402.tif 000093
【表３６】
2021504402.tif 000094
【表３７】
2021504402.tif 000095
【表３８】
2021504402.tif 000096
【表３９】
2021504402.tif 000097
【表４０】
2021504402.tif 000098
【表４１】
2021504402.tif 000099
【表４２】
2021504402.tif 000100
【表４３】
2021504402.tif 000101
【表４４】
2021504402.tif 000102
【表４５】
2021504402.tif 000103
【表４６】
2021504402.tif 000104
【表４７】
2021504402.tif 000105
【表４８】
2021504402.tif 000106
【表４９】
2021504402.tif 000107
【表５０】
2021504402.tif 000108
【表５１】
2021504402.tif 000109
【表５２】
2021504402.tif 000110
【表５３】
2021504402.tif 000111
【表５４】
2021504402.tif 000112
【表５５】
2021504402.tif 000113
【表５６】
2021504402.tif 000114
【表５７】
2021504402.tif 000115
【表５８】
2021504402.tif 000116
【表５９】
2021504402.tif 000117
【表６０】
2021504402.tif 000118
【表６１】
2021504402.tif 000119
【表６２】
2021504402.tif 000120
【表６３】
2021504402.tif 000121
【表６４】
2021504402.tif 000122
【表６５】
2021504402.tif 000123
【表６６】
2021504402.tif 000124
【表６７】
2021504402.tif 000125
【表６８】
2021504402.tif 000126
【表６９】
2021504402.tif 000127
【表７０】
2021504402.tif 000128
【表７１】
2021504402.tif 000129
【表７２】
2021504402.tif 000130
【表７３】
2021504402.tif 000131
【表７４】
2021504402.tif 000132
【表７５】
2021504402.tif 000133
【表７６】
2021504402.tif 000134
【表７７】
2021504402.tif 000135
【表７８】
2021504402.tif 000136
【表７９】
2021504402.tif 000137
【表８０】
2021504402.tif 000138
【表８１】
2021504402.tif 000139
【表８２】
2021504402.tif 000140
【表８３】
2021504402.tif 000141
【表８４】
2021504402.tif 000142
【表８５】
2021504402.tif 000143
【表８６】
2021504402.tif 000144
【表８７】
2021504402.tif 000145
【表８８】
2021504402.tif 000146
【表８９】
2021504402.tif 000147
【表９０】
2021504402.tif 000148
【表９１】
2021504402.tif 000149
【表９２】
2021504402.tif 000150
【表９３】
2021504402.tif 000151
【表９４】
2021504402.tif 000152
【表９５】
2021504402.tif 000153
【表９６】
2021504402.tif 000154
【表９７】
2021504402.tif 000155
【表９８】
2021504402.tif 000156
【表９９】
2021504402.tif 000157
【表１００】
2021504402.tif 000158
【表１０１】
2021504402.tif 000159
【表１０２】
2021504402.tif 000160
【表１０３】
2021504402.tif 000161
【表１０４】
2021504402.tif 000162
【表１０５】
2021504402.tif 000163
【表１０６】
2021504402.tif 000164
【表１０７】
2021504402.tif 000165
【表１０８】
2021504402.tif 000166
【表１０９】
2021504402.tif 000167
【表１１０】
2021504402.tif 000168
【０２９９】
バイオアッセイ
１．  Ａ２７８０細胞におけるデオキシ−グルコース取り込みアッセイ：
手順
Ａ２７８０細胞への１４Ｃ  ２−デオキシ−Ｄ−グルコース輸送を測定するために、細胞を９６ウェルプレート（Ｃｙｔｏｓｔａｒ−Ｔ  Ｐｌａｔｅｓ  Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ、７０，０００細胞／１８０μｌ／ウェル）に完全培地（ＲＰＭＩ１６４０＋Ｇｌｕｔａｍａｘ（Ｌｉｆｅ  ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  ＃６１８７０））中で播種し、４８時間成長させた。４８時間後に、細胞をＫＲＢ（クレグス−リンゲル炭酸水素）バッファー１８０μＬで１回洗浄し、用量依存的に０〜１．１ｍＭ（最終よりも１１倍高い濃度）の試験化合物希釈物１０μＬまたは陰性対照としての１．１ｍＭサイトカラシンＢ溶液１０μＬをＫＲＢバッファー９０μＬに添加することによって刺激し、２０分間インキュベートした。化合物刺激の後に、１４Ｃ  ２−デオキシ−Ｄ−グルコースの輸送を、２−１４Ｃ［Ｕ］２−デオキシ−Ｄ−グルコース溶液５０μＬ（１０９．１μＭ  ２−デオキシ−Ｄ−グルコース（冷）および３３μＭ  ２−１４Ｃ［Ｕ］２−デオキシ−Ｄ−グルコース  ０．１μＣｉ／ウェル）を２０分間添加することによって開始した。輸送を、５０μＬ／ウェルの９６μＭサイトカラシンＢ溶液を添加することによって停止した。プレートを９６ウェルＷａｌｌａｃ  Ｍｉｃｒｏｂｅｔａデバイスで測定した。ｃｐｍ（カウント毎分）値を使用して、各実験内での試験化合物での阻害％値を決定した。第１の工程では、サイトカラシンＢ（強力なグルコース輸送体阻害薬）処理細胞によって生成された平均バックグラウンド値を処理細胞の平均値から差し引いた。平均値はすべて、三重反復試験から得た。阻害％の結果では、未処理細胞（ＫＲＢのみ）の平均値を１００％として設定した。他の平均値はすべて、これに対して計算した。ＩＣ５０を、各化合物についてそれぞれ７または１４の濃度での用量反応曲線の回帰分析によって得た。
【０３００】
結果の表：
【表１１１】
2021504402.tif 000169
【表１１２】
2021504402.tif 000170
【表１１３】
2021504402.tif 000171
【表１１４】
2021504402.tif 000172
【表１１５】
2021504402.tif 000173
【表１１６】
2021504402.tif 000174
【表１１７】
2021504402.tif 000175
【０３０１】
２．  グルコース置換アッセイ（ＡＴＰ測定）
【表１１８】
2021504402.tif 000176
【０３０２】
１ウェルあたり３０，０００のＡ２７８０ヒトがん細胞をＧｒｅｉｎｅｒ  ９６ウェルプレートに播種した。細胞を、１０％ＦＣＳおよび１１ｍＭグルコースを含むＲＰＭＩ  １６４０培地＋ＧｌｕｔａＭＡＸ（登録商標）中で、３７℃、５％ＣＯ２で増殖および培養した。４４時間後に、培養培地を取り換え、ＰＢＳで１回洗浄して、２時間、ＦＣＳ１％は含有するがグルコースは含まないＲＰＭＩ１６４０培地からなる飢餓培地にした。次いで、細胞をＫＲＢバッファーで洗浄し、続いて、ＫＲＢバッファー６０μＬ／ウェルおよび化合物またはＤＭＳＯ  １０Ｘ１０μＬからなる処理混合物を３７℃で２０分間インキュベートした。ロテノン１０μｌを０．５μＭの最終濃度まで混合物に添加した。細胞プレートを室温で２分間放置した。種々のグルコース濃度物２０μＬを混合物に添加した（典型的には、０．１〜１０ｍＭの範囲）。細胞をさらに１５分間、３７℃でインキュベートし、その後、製造者のガイダンスのもとにＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（登録商標）アッセイを用いて、ただし、室温での３０分間の平衡化工程は用いずに、ＡＴＰを測定した。簡単には、Ｃｅｌｌ−Ｔｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（登録商標）試薬１００μｌを、先行の反応混合物１００μｌをすでに含有するウェルに添加した。プレートを２分間、８００ｒｐｍで混合し、続いて、室温で１０分間インキュベートして、発光シグナルを安定化した。次いで、ルミネセンスをＴｅｋａｎ  Ｕｌｔｒａ  Ｅｖｏｌｕｔｉｏｎリーダーを用いて記録した。
【０３０３】
結果の表：
【表１１９】
2021504402.tif 000177
【表１２０】
2021504402.tif 000178
【表１２１】
2021504402.tif 000179
【０３０４】
３．  ＨＥＫ細胞におけるＮａｎｏＢＲＥＴベースのＧＬＵＴ１結合アッセイ
原理：
ｈＧＬＵＴ１タンパク質への化合物の結合を測定するために、新たに開発されたＰｒｏｍｅｇａ製のＮａｎｏＢＲＥＴプラットフォームを使用した。この技術では、結合は、Ｆｏｅｒｓｔｅｒ共鳴エネルギー移動を介して測定される。Ｆｏｅｒｓｔｅｒ共鳴エネルギー移動は、ドナーからアクセプターへの直接的な無放射（ｒａｄｉａｔｉｏｎ−ｆｒｅｅ）エネルギー移動に基づき、ドナーとアクセプターとがｎｍの距離内にある場合にのみ起こり得る。ドナーエネルギーとして、ナノルシフェラーゼの生物発光が使用され、したがって、この応用は、ＢＲＥＴ（生物発光共鳴エネルギー移動）と称される。ナノルシフェラーゼは、適切な基質が利用可能な場合に発光するタンパク質である。ホタルルシフェラーゼとは対照的に、ナノルシフェラーゼは、ＡＴＰ依存性ではなく、したがって、細胞エネルギー代謝を損なわない。
【０３０５】
ナノルシフェラーゼを、ＨｉＢｉｔタンパク質標識システム（Ｐｒｏｍｅｇａ）を使用してタンパク質相補性を介して、ＧＬＵＴ１に結合させた。タンパク質相補性を可能にするために、当初はＭｙｃ標識を使用するＧＬＵＴ４輸送体のためにＫａｎａｉら（Ｋａｎａｉ  Ｆ．、Ｎｉｓｈｉｏｋａ  Ｙ．、Ｈａｙａｓｈｉ  Ｈ．ら、Ｄｉｒｅｃｔ  Ｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｉｎｓｕｌｉｎ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ＧＬＵＴ４  Ｔｒａｎｓｌｏｃａｔｉｏｎ  ｔｏ  ｔｈｅ  Ｓｕｒｆａｃｅ  ｏｆ  Ｉｎｔａｃｔ  Ｃｅｌｌｓ  ｂｙ  Ｉｎｓｅｒｔｉｏｎ  ｏｆ  ａ  ｃ−ｍｙｃ  Ｅｐｉｔｏｐｅ  ｉｎｔｏ  ａｎ  Ｅｘｏｆａｃｉａｌ  ＧＬＵＴ４  Ｄｏｍａｉｎ．  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  １９９３；２６３（１９）：１４５２３−６）によって記載されたように、ナノルシフェラーゼの１１のアミノ酸のｓｍａｌｌ  ＨｉＢｉｔ部分が第１の細胞外ループに挿入された。ＨｉＢｉｔペプチド標識は、Ｐｒｏｍｅｇａから市販されていて、培地に添加されるいわゆるＬａｒｇｅ  Ｂｉｔタンパク質のためのランディングパッドとして使用される。Ｌａｒｇｅ  ＢｉｔはＨｉＢｉｔ標識について高い親和性を有するので、十分な官能性を有するナノルシフェラーゼに対するタンパク質相補性をもたらし、これが、ＮａｎｏＢＲＥＴアッセイシステムにおいてエネルギードナーとして使用される。
【０３０６】
ＨｉＢｉｔ標識ＧＬＵＴ１を発現するＨＥＫ細胞系を得るために、細胞に、テトラサイクリン誘導性プロモーターの後ろに置かれた適切な構築物（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ製のＦｌｉｐＩｎ  Ｔ−Ｒｅｘシステム、Ｋ６５０００１）をトランスフェクションし、細胞系を生成した。この細胞系を（１）標識ＧＬＵＴ１の正確な形質膜局在化、（２）ＧＬＵＴ１活性、（３）ＨｉＢｉｔ標識の細胞外アクセシビリティ、（４）グルコースを使用してのプラスの立体選択的ＢＲＥＴ干渉シグナル（Ｄ−グルコース［Ｓｉｇｍａ  Ｇ８７６９］はＢＲＥＴを減少させ、Ｌ−グルコース［Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｇ５５００］はＢＲＥＴに対して作用を有さない）についてチェックした。
【０３０７】
ＮａｎｏＢＲＥＴアクセプターとして、Ｓｉｅｂｅｎｅｉｃｈｅｒら（Ｓｉｅｂｅｎｅｉｃｈｅｒ  Ｈ．、Ｂａｕｓｅｒ  Ｍ．、Ｂｕｃｈｍａｎｎ  Ｂ．ら、Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｎｏｖｅｌ  ＧＬＵＴ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ．  Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ  ＆  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｌｅｔｔｅｒｓ  ２０１６；２６（７）：１７３２〜７；ｃｏｍｐｏｕｎｄ  ５３）によって記載されたＧＬＵＴ１阻害剤をアミノベンジル誘導体に還元し、フルオロフォアＮａｎｏＢＲＥＴ６１８（Ｐｒｏｍｅｇａ）にカップリングさせたが、これは、「Ｂａｙｅｒ＋ＮＢ６１８」と称される。
【０３０８】
細胞培養：
このアッセイでは、７５００細胞（ＨｉＢｉｔ標識ＧＬＵＴ１  ＨＥＫ細胞）を含む５０μｌを、３８４ポリ−Ｄ−リシンコーティング黒色μＣｌｅａｒプレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ）に、ＨｉＢｉｔ標識ＧＬＵＴ１タンパク質の誘導を誘導するために１０％テトラサイクリン非含有ＦＣＳ（ＰＡＮ  Ｐ３０−３６０２）および３００ｎｇ／ｍｌのドキシサイクリン（Ｓｉｇｍａ  ９８９１）を補充されたＤＭＥＭ（Ｇｉｂｃｏ  ６１９６６）培地中でプレーティングした。
【０３０９】
化合物およびアクセプター分子のインキュベーション
３７℃および１０％ＣＯ２での終夜のインキュベーションによって接着させた後に、培地をイメージング培地１０μｌ（ＰＢＳバッファー（Ｇｉｂｃｏ１４０４０）中の１％ＢＳＡ（Ｓｉｇｍａ  Ａ９５７６）、５ｍＭ  Ｈｅｐｅｓ（Ｇｉｂｃｏ  １５６３０）、０．３５ｍＭ炭酸水素Ｎａ（Ｇｉｂｃｏ  １１３６０−０３９）、１ｍＭピルビン酸Ｎａ（Ｇｉｂｃｏ  １１３６０））に取り換えた。Ｂａｙｅｒ＋ＮＢ６１８  ５μｌ（イメージング培地中、最終濃度７５ｎＭ）を添加し、プレートを１５分間、室温で静止インキュベートした。
【０３１０】
試験化合物の系列希釈物をイメージング培地中で調製し、１０μｌで、それぞれのウェルに添加した。変位のための陽性対照として、２００ｍＭ  Ｄ−グルコース（Ｓｉｇｍａ  Ｇ８７６９）と共にインキュベートされたウェルからの値を使用した。プレートを３０分間、室温で、振盪せずにインキュベートした。
【０３１１】
ルミネセンスの生成および蛍光の測定
ルミネセンスを生成するために、Ｎａｎｏ−Ｇｌｏ（登録商標）ＨｉＢｉＴ細胞外試薬（ＨｉＢｉｔタンパク質およびナノルシフェラーゼ基質を含有）を、Ｎａｎｏ−Ｇｌｏ（登録商標）ＨｉＢｉＴ細胞外試薬を示唆されている濃度の半分で使用したことを除いて供給業者が記載したとおりに調製した。この検出溶液は、提供されたバッファー中で作製した。検出試薬の添加後に、サンプルを振盪せずに３０分間インキュベートし、続いて、ルミネセンスおよび蛍光発光をＰＨＥＲＡｓｔａｒ  ＦＳＸ（ＢＭＧ  Ｌａｂｔｅｃｈ）で、適切な二重フィルター構成を使用して同時に測定した。このフィルター構成は、４６０ｎｍでピークに達するドナーシグナルを測定するための４５０〜８０ｎｍバンドパスフィルターと、６２１ｎｍでピークに達し、７００ｎｍ超えて続くＮａｎｏＢＲＥＴ  ６１８の蛍光発光を測定するために６１０ｎｍから開始するロングパスフィルターとから構成される。
【０３１２】
計算：
生のルミネセンスおよび蛍光値から、蛍光シグナルをルミネセンスシグナルで割った比であるＮａｎｏＢＲＥＴ比を計算した。平均値は、少なくとも二重反復試験から得た。
【０３１３】
パーセンテージでの阻害結果のために、化合物で処理されていない細胞の平均値を０％と設定した。２００ｍＭグルコースで処理された細胞の平均ＢＲＥＴ値を最大阻害のために使用した。他の平均値はすべて、これに対して計算した。
【０３１４】
ＩＣ５０値は、各化合物について１０の濃度（３０μＭから開始して２倍希釈系列を続ける）を測定することによって得られた用量反応曲線の変曲点から得られた。上の漸近線は、阻害が１２０％より高く、または８０％超に達する場合、１００％として記録された。下の漸近線は、出発値が−２０から２０％の間の阻害である場合、０％として記録された。飽和に達しない化合物では、ＩＣ５０は、試験された最高濃度よりも高いと記述された。
【０３１５】
測定を二重に２回行った。平均ＩＣ５０値をそれらの標準偏差と共に使用した。
【０３１６】
統計値：
次のアッセイ統計値を有するプレートからのデータを使用した：６〜８のＳ／Ｂ、０．７４から０．８３の間のＺ’値、およびＤ−グルコースについて５．３３±０．５６ｍＭのＩＣ５０（ｎ＝６）。
【０３１７】
結果の表：
【表１２２】
2021504402.tif 000180
【配列表】
2021504402000001.app
【国際調査報告】
2021504402.tif 000190
2021504402.tif 000191
2021504402.tif 000192