(57)【要約】がんなどの疾患の治療のためにＥ−セレクチン拮抗薬を使用して骨髄浸潤細胞（ＭＩＬ）を動員するための方法が、開示される。Ｅ−セレクチン拮抗薬により動員されるＭＩＬを使用してがんを治療または予防するための方法が、さらに開示される。本開示は、少なくとも一つのＥセレクチン拮抗薬またはそれを含む組成物を使用して、骨髄から腫瘍特異的で、プライミングされた骨髄浸潤リンパ球（ＭＩＬ）を動員するための方法、および動員されたＭＩＬを使用する、がんの治療もしくは予防方法に関する。
2021504403.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
がんを治療する、および／またはがんの再発を予防する方法であって、ここで前記方法が、患者に少なくとも一つのＥセレクチン拮抗薬を投与するステップを含み、投与される前記Ｅセレクチン拮抗薬の量が、前記患者のＭＩＬを末梢血液中に動員するのに十分である方法。
【請求項２】
がんを治療する、および／またはがんの再発を予防する方法であって、ここで前記方法が、
ドナー患者に少なくとも一つのＥセレクチン拮抗薬を、投与するステップであって、ここで投与される前記Ｅセレクチン拮抗薬の量が、前記ドナー患者のＭＩＬを末梢血液中に動員するのに十分であるステップ；
前記末梢血液からＭＩＬを回収するステップ；ならびに
ＭＩＬ細胞集団の少なくとも一部を、前記ドナー患者または第２の患者に移植するステップ、
を含む方法。
【請求項３】
がんを予防する方法であって、ここで前記方法が、
ドナー患者に少なくとも一つのＥセレクチン拮抗薬を投与するステップであって、ここで投与される前記Ｅセレクチン拮抗薬の量が、前記患者のＭＩＬを末梢血液中に動員するのに十分であるステップ；
前記末梢血液からＭＩＬを回収するステップ；ならびに
ＭＩＬ細胞集団の少なくとも一部を、被験体に移植するステップ、
を含む方法。
【請求項４】
回収したＭＩＬを、移植前にｅｘ  ｖｉｖｏで増殖させる、請求項２または３に記載の前記方法。
【請求項５】
前記少なくとも一つのＥセレクチン拮抗薬が、医薬組成物の形態である、請求項１から４のいずれか一項に記載の前記方法。
【請求項６】
前記医薬組成物が、少なくとも一つの追加の薬学的に許容可能な成分をさらに含む、請求項５に記載の前記方法。
【請求項７】
前記少なくとも一つのＥセレクチン拮抗薬が、シアリルルイスＸ（ｓＬｅｘ）およびｓＬｅｘ模倣物から選択される、請求項１から４のいずれか一項に記載の前記方法。
【請求項８】
前記少なくとも一つのＥセレクチン拮抗薬が、糖模倣物、抗体、ペプチド、ポリペプチド、ペプチド模倣物、およびアプタマーから選択される、請求項１から４のいずれか一項に記載の前記方法。
【請求項９】
前記少なくとも一つのＥセレクチン拮抗薬が、式（Ｉ）の化合物：
【化１３】
2021504403.tif 000016
式（Ｉ）の異性体、式（Ｉ）の互変異性体、およびこれらのいずれかの薬学的に許容可能な塩から選択される、請求項１から４のいずれか一項に記載の前記方法であって、
ここで、
Ｒ１はＣ１−Ｃ８アルキル基、Ｃ２−Ｃ８アルケニル基、Ｃ２−Ｃ８アルキニル基、Ｃ１−Ｃ８ハロアルキル基、Ｃ２−Ｃ８ハロアルケニル基、およびＣ２−Ｃ８ハロアルキニル基から選択され；
Ｒ２はＨ、−Ｍ、および−Ｌ−Ｍから選択され；
Ｒ３は−ＯＨ基、−ＮＨ２基、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｙ１基、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｙ１基、および−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨＹ１基から選択され、ここでＹ１は、Ｃ１−Ｃ８アルキル基、Ｃ２−Ｃ８アルケニル基、Ｃ２−Ｃ８アルキニル基、Ｃ１−Ｃ８ハロアルキル基、Ｃ２−Ｃ８ハロアルケニル基、Ｃ２−Ｃ８ハロアルキニル基、Ｃ６−Ｃ１８アリール基、およびＣ１−Ｃ１３ヘテロアリール基から選択され；
Ｒ４は−ＯＨ基、および−ＮＺ１Ｚ２基から選択され、ここで同一または異なってもよいＺ１およびＺ２は、それぞれ独立してＨ基、Ｃ１−Ｃ８アルキル基、Ｃ２−Ｃ８アルケニル基、Ｃ２−Ｃ８アルキニル基、Ｃ１−Ｃ８ハロアルキル基、Ｃ２−Ｃ８ハロアルケニル基、およびＣ２−Ｃ８ハロアルキニル基から選択され、ここでＺ１およびＺ２は一緒に環を形成してもよく；
Ｒ５はＣ３−Ｃ８シクロアルキル基から選択され；
Ｒ６は−ＯＨ基、Ｃ１−Ｃ８アルキル基、Ｃ２−Ｃ８アルケニル基、Ｃ２−Ｃ８アルキニル基、Ｃ１−Ｃ８ハロアルキル基、Ｃ２−Ｃ８ハロアルケニル基、およびＣ２−Ｃ８ハロアルキニル基から選択され；
Ｒ７は−ＣＨ２ＯＨ基、Ｃ１−Ｃ８アルキル基、Ｃ２−Ｃ８アルケニル基、Ｃ２−Ｃ８アルキニル基、Ｃ１−Ｃ８ハロアルキル基、Ｃ２−Ｃ８ハロアルケニル基、およびＣ２−Ｃ８ハロアルキニル基から選択され；
Ｒ８はＣ１−Ｃ８アルキル基、Ｃ２−Ｃ８アルケニル基、Ｃ２−Ｃ８アルキニル基、Ｃ１−Ｃ８ハロアルキル基、Ｃ２−Ｃ８ハロアルケニル基、およびＣ２−Ｃ８ハロアルキニル基から選択され；
Ｌはリンカー基から選択され；および
Ｍは−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）１−４ＮＨ２基、Ｃ１−Ｃ８アルキル基、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＹ２基、およびポリエチレングリコール、チアゾリル、またはクロメニルを含む部分から選択される非糖模倣部分であり、ここでＹ２はＣ１−Ｃ４アルキル基、Ｃ２−Ｃ４アルケニル基、およびＣ２−Ｃ４アルキニル基から選択される方法。
【請求項１０】
前記少なくとも一つのＥセレクチン拮抗薬が、式（Ｉａ）の化合物
【化１４】
2021504403.tif 000017
から選択される、請求項１から４のいずれか一項に記載の前記方法であって、ここでｎが１から１００の範囲の整数から選択される方法。
【請求項１１】
前記少なくとも一つのＥセレクチン拮抗薬が、式（ＩＩ）の化合物：  
【化１５】
2021504403.tif 000018
式（ＩＩ）の異性体、式（ＩＩ）の互変異性体、および前記化合物のいずれかの薬学的に許容可能な塩から選択される、請求項１から４のいずれか一項に記載の前記方法であって、
ここで、
Ｒ１はＨ基、Ｃ１−Ｃ８アルキル基、Ｃ２−Ｃ８アルケニル基、Ｃ２−Ｃ８アルキニル基、Ｃ１−Ｃ８ハロアルキル基、Ｃ２−Ｃ８ハロアルケニル基、およびＣ２−Ｃ８ハロアルキニル基から選択され；
Ｒ２は−ＯＨ基、−ＮＨ２基、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｙ１基、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｙ１基、および−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨＹ１基から選択され、ここでＹ１は、Ｃ１−Ｃ８アルキル基、Ｃ２−Ｃ８アルケニル基、Ｃ２−Ｃ８アルキニル基、Ｃ１−Ｃ８ハロアルキル基、Ｃ２−Ｃ８ハロアルケニル基、Ｃ２−Ｃ８ハロアルキニル基、Ｃ６−Ｃ１８アリール基およびＣ１−Ｃ１３ヘテロアリール基から選択され；
Ｒ３は−ＣＮ基、−ＣＨ２ＣＮ基および−Ｃ（＝Ｏ）Ｙ２基から選択され、ここでＹ２は、Ｃ１−Ｃ８アルキル基、Ｃ２−Ｃ８アルケニル基、Ｃ２−Ｃ８アルキニル基、−ＯＺ１基、−ＮＨＯＨ基、−ＮＨＯＣＨ３基、−ＮＨＣＮ基および−ＮＺ１Ｚ２基から選択され、ここで同一または異なってもよいＺ１およびＺ２は、独立してＨ基、Ｃ１−Ｃ８アルキル基、Ｃ２−Ｃ８アルケニル基、Ｃ２−Ｃ８アルキニル基、Ｃ１−Ｃ８ハロアルキル基、Ｃ２−Ｃ８ハロアルケニル基、およびＣ２−Ｃ８ハロアルキニル基から選択され、ここでＺ１およびＺ２は一緒に環を形成してもよく；
Ｒ４はＣ３−Ｃ８シクロアルキル基から選択され；
Ｒ５は独立して、Ｈ基、ハロ基、Ｃ１−Ｃ８アルキル基、Ｃ２−Ｃ８アルケニル基、Ｃ２−Ｃ８アルキニル基、Ｃ１−Ｃ８ハロアルキル基、Ｃ２−Ｃ８ハロアルケニル基、およびＣ２−Ｃ８ハロアルキニル基から選択され；
ｎは１から４の範囲の整数から選択され；および
Ｌはリンカー基から選択される方法。
【請求項１２】
前記少なくとも一つのＥセレクチン拮抗薬が、式（ＩＩａ）の化合物
【化１６】
2021504403.tif 000019
から選択される、請求項１から４のいずれか一項に記載の前記方法。
【請求項１３】
前記方法がさらに、前記患者へ、前記少なくとも一つのＥセレクチン拮抗薬の投与と共に、コロニー刺激因子を投与することを含む、請求項１から１２のいずれか一項に記載の前記方法。
【請求項１４】
前記患者が、化学療法および／または放射線療法を受けているか、または受ける予定である、請求項１から１３のいずれか一項に記載の前記方法。
【請求項１５】
前記化学療法が、ボルテゾミブおよび／またはゲムシタビンの投与を含む、請求項１４に記載の前記方法。
【請求項１６】
前記がんが、血液がんである、請求項１から１５のいずれか一項に記載の前記方法。
【請求項１７】
前記がんが、固形がんである、請求項１から１５のいずれか一項に記載の前記方法。
【請求項１８】
前記がんが、液性がん（ｌｉｑｕｉｄ  ｃａｎｃｅｒ）である、請求項１から１５のいずれか一項に記載の前記方法。
【請求項１９】
前記患者が、第１タイプのがんと診断されており、治療および／または予防するために実行する前記方法の対象の前記がんが、第２タイプのがんである、請求項１から１５のいずれか一項に記載の前記方法。
【請求項２０】
少なくとも一つのＥセレクチン拮抗薬によって骨髄から外に動員された、がん患者由来のＭＩＬを含む組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、米国特許法１１９条（ｅ）下で、２０１７年１１月３０日に出願された米国仮出願第６２／５９２，６８６号に基づく優先権を主張し、この仮出願は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００２】
本開示は、少なくとも一つのＥセレクチン拮抗薬またはそれを含む組成物を使用して、骨髄から腫瘍特異的で、プライミングされた骨髄浸潤リンパ球（ＭＩＬ）を動員するための方法、および動員されたＭＩＬを使用する、がんの治療もしくは予防方法に関する。
【０００３】
免疫療法は、腫瘍学における研究の主要な焦点になっている。例えば、長年の間、養子Ｔ細胞療法（ＡＣＴ）は、さまざまながんの治療法として用いられてきた。ＡＣＴは、腫瘍特異的Ｔ細胞の単離およびｅｘ  ｖｉｖｏ増殖を包含し、ワクチン接種のみによって得ることのできるＴ細胞より、多くの数のＴ細胞を獲得することができる。そして腫瘍特異的Ｔ細胞は、がん患者に注入され、がんを攻撃し、殺傷できるＴ細胞によって、残りの腫瘍を圧倒する能力をそれらの免疫系に与えるようにする。そのため、有効なＡＣＴは、腫瘍部位に移動し、効果的にそれらの標的を殺傷する能力を有する腫瘍特異的Ｔ細胞を活性化する能力を必要とする。たとえば、Ｎｏｏｎａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｄｏｐｔｉｖｅ  Ｔｒａｎｓｆｅｒ  ｏｆ  Ａｃｔｉｖａｔｅｄ  Ｍａｒｒｏｗ−Ｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｎｇ  Ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ  Ｉｎｄｕｃｅｓ  Ｍｅａｓｕｒｅａｂｌｅ  Ａｎｔｉｔｕｍｏｒ  Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｂｏｎｅ  Ｍａｒｒｏｗ  ｉｎ  Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  Ｍｙｅｌｏｍａ，Ｃａｎｃｅｒ，  Ｖｏｌ．  ７，  Ｉｓｓｕｅ  ２８８  （２０１５年５月１５日）を参照。
【０００４】
腫瘍学の研究において顕著なことは、腫瘍微小環境およびＴ細胞の相互作用である。がん細胞を効果的に見分けるおよび／または攻撃できるＴ細胞は、特に興味深い。なぜなら、例えば、それらが身体にがんに対する応答を迅速に開始させることができるためである。長い寿命を有するＴ細胞も、特に興味深い、なぜなら、例えば、それらが身体に長く続く防御を与えることができるからである。Ｔ細胞の有望なタイプの一つは、ＭＩＬである。ＭＩＬは、腫瘍抗原でプライミングしたＴ細胞である。ＭＩＬは、血液系腫瘍を患う患者、ならびに前立腺がん、乳がん、および肺がんのような固形腫瘍から生じる転移性疾患で発見される。血液系腫瘍および固形腫瘍の患者の骨髄における腫瘍特異的Ｔ細胞の存在は、養子Ｔ細胞療法（ＡＣＴ）を含む多くの療法にＭＩＬを使用する可能性を広げる。
【０００５】
Ｎｏｏｎａｎらによる研究は、以前、抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８  ｅｘ  ｖｉｖｏ活性化ＭＩＬが、いくつかの基本的な特性を有し、それらが優れたがん治療の候補であることを示していた。Ｎｏｏｎａｎは、ＭＩＬが活性化すると末梢血リンパ球と比較して有意な腫瘍特異性を示し、成熟多発性骨髄腫形質細胞およびそのクローン前駆体の両方に存在する広範囲の抗原を標的とし、多発性骨髄腫形質細胞を効果的に殺傷することを発見した。したがって、ＭＩＬはがんおよびがん性腫瘍を治療するための有望な腫瘍特異的アプローチのよい例である。
【０００６】
したがって、ＭＩＬを動員し、それらが髄から離れるよう誘導する方法において、満たされていない要求があり、ここでそれらは、例えばＣＡＲ  Ｔ細胞の発達のようなｅｘ  ｖｉｖｏ操作において使用されるか、自己もしくは同種の提供において使用され得る
【０００７】
加えて、ＡＣＴはがん治療の一つのオプションを提供するが、それは細胞のｅｘ  ｖｉｖｏ増殖を必要とし、ここでこの増殖は時間がかかり、患者にとって不便で、労働集約的である。
【０００８】
したがって、ｉｎ  ｖｉｖｏ治療のためにＭＩＬを動員する方法において、満たされていない要求がある。
【図面の簡単な説明】
【０００９】
【図１】図１Ａは、ＣＤ６２Ｌ＋ＣＤ４４−（ナイーブ）リンパ球の集団内のＣＤ８＋リンパ球のパーセンテージの代表的なグラフである。ＣＤ６２Ｌ＋ＣＤ４４−（ナイーブ）リンパ球は、対照として作用するＣＴ２６非免疫マウスから採取される骨髄試料および末梢血試料、ならびにＧＭＩ−１２７１、ＧＭＩ−１３５９、果粒球コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）、または生理食塩水の投与後の、ＣＴ２６免疫マウス中の骨髄試料および末梢血試料で発見される。
【００１０】
図１Ｂは、ＣＤ６２Ｌ＋ＣＤ４４＋(セントラルメモリーまたはＣＭ）リンパ球の集団内のＣＤ８＋リンパ球のパーセンテージの代表的なグラフである。ＣＤ６２Ｌ＋ＣＤ４４＋（セントラルメモリーまたはＣＭ）リンパ球は、対照として作用するＣＴ２６非免疫マウスから採取される骨髄試料および末梢血試料、ならびにＧＭＩ−１２７１、ＧＭＩ−１３５９、Ｇ−ＣＳＦ、または生理食塩水の投与後の、ＣＴ２６免疫マウス中の骨髄試料および末梢血試料で発見される。
【００１１】
図１Ｃは、ＣＤ６２Ｌ−ＣＤ４４＋（エフェクターメモリーまたはＥＭ）リンパ球の集団内のＣＤ８＋リンパ球のパーセンテージの代表的なグラフである。ＣＤ６２Ｌ−ＣＤ４４＋（エフェクターメモリーまたはＥＭ）リンパ球は、対照として作用するＣＴ２６非免疫マウスから採取される骨髄試料および末梢血試料、ならびにＧＭＩ−１２７１、ＧＭＩ−１３５９、Ｇ−ＣＳＦ、または生理食塩水の投与後の、ＣＴ２６免疫マウス中の骨髄試料および末梢血試料で発見される。
【００１２】
【図２】図２は、対照として作用するＣＴ２６非免疫マウスから採取される骨髄試料、およびＧＭＩ−１２７１、ＧＭＩ−１３５９、Ｇ−ＣＳＦ、または生理食塩水の投与後の、ＣＴ２６免疫マウス中の骨髄試料からの、ＣＤ８＋リンパ球の集団内のＩＦＮ＋リンパ球のパーセンテージの代表的なグラフである。
【００１３】
【図３】図３は、対照として作用するＣＴ２６非免疫マウスから採取される末梢血試料、およびＧＭＩ−１２７１、ＧＭＩ−１３５９、Ｇ−ＣＳＦ、または生理食塩水の投与後の、ＣＴ２６免疫マウス中の末梢血試料からの、ＣＤ８＋リンパ球の集団内のＩＦＮ＋リンパ球のパーセンテージの代表的なグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
下記で定義される用語は、全体として本明細書を参照することによって、より十分に定義される。本明細書で使用される用語は、当業者に周知であると考えられるが、本文書中に含まれる定義は、現在開示されている主題の説明を促進するために記載される。
【００１５】
長年の特許法の慣例に従って、特許請求の範囲を含む、本出願で使用される際、用語「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」は「一つまたはそれより多い」ことを指す。したがって、例えば、「細胞」への言及は、一つの細胞または複数の細胞等を含む。
【００１６】
本開示の全体を通じて、さまざまな実施形態を範囲のフォーマットで提示できる。数値範囲は、範囲を定義する数を含める。範囲のフォーマット中の記述は、単に便宜および簡潔さのためであることを理解されたい、そして本開示の範囲内で、柔軟性のない制限として解釈されるべきでない。したがって、範囲の記述は、可能な部分範囲すべておよびその範囲内の個々の数値を具体的に開示しているとみなされるべきである。例えば、１から６のような範囲の記述は、１から３、１から４、１から５、２から４、２から６、３から６など、ならびに例えば１、２、２．７、３．８、４、５．１、５．３、および６などのその範囲内の個々の数のような、具体的に開示される部分範囲を有するとみなされるべきである。これは範囲の幅に関係なく適用される。
【００１７】
Ｅセレクチン（ＣＤ６２Ｅ）は、活性化内皮細胞上で発現し、損傷部位への白血球動員において重要な役割を果たす細胞接着性分子である。用語「Ｅセレクチン拮抗薬」は、Ｅセレクチンの活性を阻害するか、Ｅセレクチンと一つまたはそれより多いＥセレクチンリガンドとの結合を阻害する（続いて、Ｅセレクチンの生物学的活性を阻害し得る）薬剤を意味する。用語「Ｅセレクチン拮抗薬」は、Ｅセレクチンのみの拮抗薬と、Ｅセレクチン、およびＰセレクチンまたはＬセレクチンのいずれかの拮抗薬と、Ｅセレクチン、ＰセレクチンおよびＬセレクチンの拮抗薬とを含む。Ｅセレクチン拮抗薬は、シアリルルイスａ（ｓＬｅａ）またはシアリルルイスＸ（ｓＬｅｘ）とＥセレクチンとの相互作用を阻害する、本明細書に記載されている糖模倣化合物を含む。Ｅセレクチン拮抗薬は、Ｅセレクチンの結合部位またはその近くに結合し、シアリルＬｅａ（ｓＬｅａ）またはシアリルＬｅｘ（ｓＬｅｘ）とのＥセレクチン相互作用を阻害する、抗体、ポリペプチド、ペプチド、ペプチド模倣物、およびアプタマーも含む。
【００１８】
用語「非糖模倣部分」は、炭水化物分子を模倣することを意図していない構造を有する部分を含む。非糖模倣部分は、Ｅセレクチン拮抗薬として活性でなくてもよい（そして、典型的には活性でない）。代わりに非糖模倣部分は、糖模倣物の溶解性、生物学的利用能、親油性および／または他の薬物様特性のような、少なくとも一つの特性を変化する目的のために一般的に非糖模倣部分に付加される部分である。
【００１９】
用語「患者」、「被験体」、「個体」などは、本明細書で互換的に使用され、ｉｎ  ｖｉｔｒｏまたはｉｎ  ｓｉｔｕのいずれであっても本明細書に記載の方法を受け入れる、任意の動物またはその細胞を指す。特定の非限定的な実施形態において、患者、被験体または個体はヒトである。
【００２０】
「療法」という用語は、疾患の抑制（その進行の遅延または抑止）、疾患の症状または副作用の軽減（緩和治療を含む）、および疾患の緩和（疾患の後退を引き起こす）を含む、疾患または状態の「治療」または「治療法」を指す。「療法」はまた、疾患の素因を有し得るが、まだ疾患の症状を経験または示さない被験体において、疾患または状態の発症を防止または遅延させることを含む、予防的治療を指す場合もある。
【００２１】
用語「治療法」は、疾患の進行の減速、中断、抑止、回復、または停止を意味し、それは疾患の徴候および症状すべての完全な排除を必ずしも必要としない。「治療法」は、疾患の素因を有し得るが、まだ疾患の症状を経験または示さない被験体において、疾患または状態の発症を防止または遅延させるための予防的治療法も含む。「治療法」は、さらに疾患または状態の寛解にあると考えられる被験体の疾患または状態の再燃または再発を予防または遅らせることを意味する。さらに治療法は、治療された患者の１００％で有効性を示す必要はなく、それどころか、用語「治療法」は、症状および臨床徴候が少なくとも改善を示すこととなるように、統計的に有意な割合の患者を、効果的に治療できることを意味することを意図している。当該技術者は、割合が様々な統計学的方法（例えば、信頼区間、それらのＰ値の決定、スチューデントのｔ検定、マン・ホイットニーのＵ検定など）を用いて統計的に有意であるかどうか、容易に確証することができる。信頼区間は、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％の信頼を有する。Ｐ値は、０．１、０．０５、０．０１、０．００５または０．０００１である。
【００２２】
用語「再発の予防」は、疾患もしくは状態が戻るリスクの低減および／または再発が起こるまでの時間を延ばすことを指す。
【００２３】
本明細書で使用される場合、「一緒に」は、薬剤が同時に投与されることを意味するために使用される。それらは同じ組成物または別々の組成物で投与され得る。「一緒に」とは対照的に、「順次に」は、一方の薬剤投与および他方の薬剤投与の間の間隔が、有意であることを意味するために本明細書で使用される。すなわち、最初に投薬する薬剤は、もはや２番目の薬剤および／または３番目の薬剤を投与する際、治療量で血流中に存在しないかもしれない。順次投与する場合、化合物は任意の順序で投与することができる。
【００２４】
簡潔に述べると、本明細書で提供されるのは、骨髄から骨髄浸潤リンパ球を動員するための、Ｅセレクチン拮抗薬である薬剤、薬剤を含む組成物、および薬剤を使用する方法である。これらの方法で使用され得る糖模倣化合物は、本明細書で記載されるようなＥセレクチン拮抗薬である。さらに、本明細書で開示される化合物は、ヘテロ二機能性、たとえばＣＸＣＲ４ケモカイン受容体拮抗薬に連結されたＥセレクチン拮抗薬であり得る。
【００２５】
Ｅセレクチンは、内皮細胞上で発現する接着性分子であり、対立する結合細胞の表面で発見される特定の炭水化物配列（シアリルＬｅｘおよびシアリルＬｅａ）に結合する。正常な血管系の大部分の内皮は、炎症性メディエーターによるタンパク質合成の刺激まではＥセレクチンを発現しない。デノボタンパク質合成の約３時間後、Ｅセレクチンは、その時炎症性応答の結果として発現する。対照的に、Ｅセレクチンは、血管を裏打ちする内皮細胞によって骨髄で恒常的に発現する。ここで、理論に拘束されることを望むものではないが、ＭＩＬは、Ｅセレクチンを含む接着性分子への結合によって、骨髄の血管性ニッチに存在すると考えられる。本開示において、骨髄からＭＩＬを動員するＥセレクチンの拮抗薬が提供される。このような拮抗薬は、小分子、抗体、アプタマー、ペプチド、および糖タンパク質を含むがこれらに限定されない。骨髄から動員される細胞由来のＭＩＬは、幅広い治療用途を有する。例えば、ＭＩＬは骨髄を離れて末梢に分布するように誘導され、ｉｎ  ｖｉｖｏで作用するか、ＣＡＲ  Ｔ細胞の操作などのｅｘ  ｖｉｖｏ操作のために収集される。
【００２６】
さらに、いくつかの個体は、年齢、疾患、および特定の遺伝的状態のためにプレリキサホル（ＡＭＤ−３１００）および／またはＧ−ＣＳＦの使用にうまく応答しないことが公知である。したがって、それらの先行技術の方法がＭＩＬを動員するのに効果がないことがわかっている限り、開示される方法は代替案を提供する。
【００２７】
いくつかの実施形態において、骨髄血管系の主要な接着性タンパク質であるＥセレクチンの阻害によって、ＭＩＬを動員するための方法を提供する。この方法は、少なくとも一つのＥセレクチン拮抗薬のみを使用することか、造血幹細胞を動員するために使用される他の薬剤と組み合わせて使用することを含み得る。造血細胞を動員し、したがってこれらの方法および他の方法に有用である、Ｅセレクチンの特定の小分子拮抗薬が本明細書に記載される。
【００２８】
いくつかの実施形態において、少なくとも一つのＥセレクチン拮抗薬が患者に投与される。いくつかの実施形態において、少なくとも一つのＥセレクチン拮抗薬が、寛解しているがん患者に投与される。いくつかの実施形態において、少なくとも一つのＥセレクチン拮抗薬をがんワクチンとして投与して、がん患者またはがん生存者のＭＩＬを刺激して再発を防止する。
【００２９】
いくつかの実施形態において、患者のＭＩＬを抹消血液に動員するのに十分な量で、患者へ少なくとも一つのＥセレクチン拮抗薬を投与することを含む、がんの治療および／またはがん再発の予防の方法を提供する。
【００３０】
いくつかの実施形態において、患者のＭＩＬを骨髄外（たとえば、抹消血液中）に動員するのに十分な量で、ドナー患者へ少なくとも一つのＥセレクチン拮抗薬を投与すること、ＭＩＬを回収すること（たとえばそれらを抹消血液から回収すること）、およびＭＩＬ細胞集団の少なくとも一部をドナー患者または別の患者へ移植することを含む、がんの治療および／またはがん再発の予防の方法を提供する。いくつかの実施形態において、ＭＩＬ細胞集団を、移植前にｅｘ  ｖｉｖｏで増殖させる。
【００３１】
いくつかの実施形態において、患者のＭＩＬを骨髄外（たとえば、抹消血液中）に動員するのに十分な量で、ドナー患者へ少なくとも一つのＥセレクチン拮抗薬を投与すること、ＭＩＬを回収すること（たとえばそれらを抹消血液から回収すること）、およびＭＩＬ細胞集団の少なくとも一部を被験体（たとえば非がん患者、ドナー患者と異なる形態またはタイプのがんに罹患している患者など）へ移植することを含む、がん予防の方法を提供する。いくつかの実施形態において、ＭＩＬ細胞集団を、移植前にｅｘ  ｖｉｖｏで増殖させる。
【００３２】
いくつかの実施形態において、少なくとも一つのＥセレクチン拮抗薬は、医薬組成物の形態である。いくつかの実施形態において、医薬組成物はさらに少なくとも一つの薬学的に許容可能な成分を含む。
【００３３】
少なくとも一つのＥセレクチン拮抗薬は、糖模倣物から選択され得る。いくつかの実施形態において、少なくとも一つのＥセレクチン拮抗薬は、シアリルルイスＸ（ｓＬｅｘ）およびｓＬｅｘ模倣物から選択される。いくつかの実施形態において、少なくとも一つのＥセレクチン拮抗薬は、Ｅセレクチンの糖模倣拮抗薬、Ｅセレクチン指向抗体、Ｅセレクチンに対するアプタマー、Ｅセレクチン指向ペプチドまたはポリペプチド、およびＥセレクチン指向ペプチド模倣物から選択される。
【００３４】
いくつかの実施形態において、コロニー刺激因子が、少なくとも一つのＥセレクチン拮抗薬とともにがん患者に投与される。
【００３５】
いくつかの実施形態において、がん患者は化学療法および／または放射線療法を受けているまたは受ける予定である。いくつかの実施形態において、化学療法はボルテゾミブおよび／またはゲムシタビンの投与を含む。いくつかの実施形態において、がんは血液がんである。いくつかの実施形態において、がんは固形がんである。いくつかの実施形態において、がんは液性がん（ｌｉｑｕｉｄ  ｃａｎｃｅｒ）である。
【００３６】
いくつかの実施形態において、患者は、第１タイプのがんと診断されており、治療または予防するために実行する方法の対象のがんは、第２タイプのがんである。
【００３７】
いくつかの実施形態において、少なくとも一つのＥセレクチン拮抗薬によって、骨髄外に動員されるＭＩＬを含む組成物が、開示される。
【００３８】
いくつかの実施形態において、がんの治療は少なくとも一つのＥセレクチン拮抗薬の投与に続くＭＩＬの動員（すなわち、ＭＩＬのｉｎ  ｖｉｖｏでの動員）によって提供される。いくつかの実施形態において、がんの再発は少なくとも一つのＥセレクチン拮抗薬の投与に続くＭＩＬの動員によって予防される。
【００３９】
いくつかの実施形態において、少なくとも一つのＥセレクチン拮抗薬は、式（Ｉ）の化合物：
【化１】
2021504403.tif 000003
式（Ｉ）の異性体、式（Ｉ）の互変異性体、およびこれらのいずれかの薬学的に許容可能な塩から選択され、
ここで、
Ｒ１はＣ１−Ｃ８アルキル基、Ｃ２−Ｃ８アルケニル基、Ｃ２−Ｃ８アルキニル基、Ｃ１−Ｃ８ハロアルキル基、Ｃ２−Ｃ８ハロアルケニル基、およびＣ２−Ｃ８ハロアルキニル基から選択され；
Ｒ２はＨ、−Ｍ、および−Ｌ−Ｍから選択され；
Ｒ３は−ＯＨ基、−ＮＨ２基、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｙ１基、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｙ１基、および−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨＹ１基から選択され、ここでＹ１は、Ｃ１−Ｃ８アルキル基、Ｃ２−Ｃ８アルケニル基、Ｃ２−Ｃ８アルキニル基、Ｃ１−Ｃ８ハロアルキル基、Ｃ２−Ｃ８ハロアルケニル基、Ｃ２−Ｃ８ハロアルキニル基、Ｃ６−Ｃ１８アリール基、およびＣ１−Ｃ１３ヘテロアリール基から選択され；
Ｒ４は−ＯＨ基、および−ＮＺ１Ｚ２基から選択され、ここで同一または異なってもよい、Ｚ１およびＺ２はそれぞれ独立してＨ基、Ｃ１−Ｃ８アルキル基、Ｃ２−Ｃ８アルケニル基、Ｃ２−Ｃ８アルキニル基、Ｃ１−Ｃ８ハロアルキル基、Ｃ２−Ｃ８ハロアルケニル基、およびＣ２−Ｃ８ハロアルキニル基から選択され、ここでＺ１およびＺ２は一緒に環を形成してもよく；
Ｒ５はＣ３−Ｃ８シクロアルキル基から選択され；
Ｒ６は−ＯＨ基、Ｃ１−Ｃ８アルキル基、Ｃ２−Ｃ８アルケニル基、Ｃ２−Ｃ８アルキニル基、Ｃ１−Ｃ８ハロアルキル基、Ｃ２−Ｃ８ハロアルケニル基、およびＣ２−Ｃ８ハロアルキニル基から選択され；
Ｒ７は−ＣＨ２ＯＨ基、Ｃ１−Ｃ８アルキル基、Ｃ２−Ｃ８アルケニル基、Ｃ２−Ｃ８アルキニル基、Ｃ１−Ｃ８ハロアルキル基、Ｃ２−Ｃ８ハロアルケニル基、およびＣ２−Ｃ８ハロアルキニル基から選択され；
Ｒ８はＣ１−Ｃ８アルキル基、Ｃ２−Ｃ８アルケニル基、Ｃ２−Ｃ８アルキニル基、Ｃ１−Ｃ８ハロアルキル基、Ｃ２−Ｃ８ハロアルケニル基、およびＣ２−Ｃ８ハロアルキニル基から選択され；
Ｌはリンカー基から選択され；および
Ｍは−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）１−４ＮＨ２基、Ｃ１−Ｃ８アルキル基、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＹ２基、およびポリエチレングリコール、チアゾリル、またはクロメニルを含む部分から選択される非糖模倣部分であり、ここでＹ２はＣ１−Ｃ４アルキル基、Ｃ２−Ｃ４アルケニル基、およびＣ２−Ｃ４アルキニル基から選択される。
【００４０】
いくつかの実施形態において、少なくとも一つのＥセレクチン拮抗薬は、式（Ｉ）の化合物から選択され、ここでＭはポリエチレングリコール、チアゾリル、またはクロメニルを含む非糖模倣部分である。いくつかの実施形態において、少なくとも一つのＥセレクチン拮抗薬は、式（Ｉ）の化合物から選択され、ここでＭはポリエチレングリコールを含む糖模倣部分である。
【００４１】
当業者によって認識されるように、フレーズ「式（Ｉ）の異性体、式（Ｉ）の互変異性体、およびこれらのいずれかの薬学的に許容可能な塩」は、水和物および溶媒和物を含む。
【００４２】
いくつかの実施形態において、少なくとも一つのＥセレクチン拮抗薬は、式（Ｉ）の化合物から選択され、ここで非糖模倣部分はポリエチレングリコールを含む。
【００４３】
いくつかの実施形態において、少なくとも一つのＥセレクチン拮抗薬は、式（ＩＩ）の化合物：
【化２】
2021504403.tif 000004
式（ＩＩ）の異性体、式（ＩＩ）の互変異性体、およびこれらのいずれかの薬学的に許容可能な塩から選択され、
ここで、
Ｒ１はＨ基、Ｃ１−Ｃ８アルキル基、Ｃ２−Ｃ８アルケニル基、Ｃ２−Ｃ８アルキニル基、Ｃ１−Ｃ８ハロアルキル基、Ｃ２−Ｃ８ハロアルケニル基、およびＣ２−Ｃ８ハロアルキニル基から選択され；
Ｒ２は−ＯＨ基、−ＮＨ２基、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｙ１基、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｙ１基、および−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨＹ１基から選択され、ここでＹ１は、Ｃ１−Ｃ８アルキル基、Ｃ２−Ｃ８アルケニル基、Ｃ２−Ｃ８アルキニル基、Ｃ１−Ｃ８ハロアルキル基、Ｃ２−Ｃ８ハロアルケニル基、Ｃ２−Ｃ８ハロアルキニル基、Ｃ６−Ｃ１８アリール基およびＣ１−Ｃ１３ヘテロアリール基から選択され；
Ｒ３は−ＣＮ基、−ＣＨ２ＣＮ基および−Ｃ（＝Ｏ）Ｙ２基から選択され、ここでＹ２は、Ｃ１−Ｃ８アルキル基、Ｃ２−Ｃ８アルケニル基、Ｃ２−Ｃ８アルキニル基、−ＯＺ１基、−ＮＨＯＨ基、−ＮＨＯＣＨ３基、−ＮＨＣＮ基および−ＮＺ１Ｚ２基から選択され、ここで同一または異なってもよいＺ１およびＺ２は、独立してＨ基、Ｃ１−Ｃ８アルキル基、Ｃ２−Ｃ８アルケニル基、Ｃ２−Ｃ８アルキニル基、Ｃ１−Ｃ８ハロアルキル基、Ｃ２−Ｃ８ハロアルケニル基、およびＣ２−Ｃ８ハロアルキニル基から選択され、ここでＺ１およびＺ２は一緒に環を形成してもよく；
Ｒ４はＣ３−Ｃ８シクロアルキル基から選択され；
Ｒ５は独立してＨ基、ハロ基、Ｃ１−Ｃ８アルキル基、Ｃ２−Ｃ８アルケニル基、Ｃ２−Ｃ８アルキニル基、Ｃ１−Ｃ８ハロアルキル基、Ｃ２−Ｃ８ハロアルケニル基、およびＣ２−Ｃ８ハロアルキニル基から選択され；
ｎは１から４の範囲の整数から選択され；および
Ｌはリンカー基から選択される。
【００４４】
当業者によって認識されるように、フレーズ「式（ＩＩ）の異性体、式（ＩＩ）の互変異性体、およびこれらのいずれかの薬学的に許容可能な塩」は、水和物および溶媒和物を含む。
【００４５】
いくつかの実施形態において、少なくとも一つのＥセレクチン拮抗薬は、式（ＩＩａ）の化合物：
【化３】
2021504403.tif 000005
から選択される。
【００４６】
いくつかの実施形態において、式Ｉおよび／または式ＩＩのリンカー基は独立して、スペーサー基を含む基から選択され、そのようなスペーサー基は、例えば、−（ＣＨ２）ｐ−および−Ｏ（ＣＨ２）ｐ−、ここでｐは１から３０の範囲の整数から選択される。いくつかの実施形態において、ｐは１から２０の範囲の整数から選択される。スペーサー基のほかの非限定的な例は、カルボニル基、および例えばアミド基のようなカルボニル含有基を含む。スペーサー基の非限定的な例は、
【化４】
2021504403.tif 000006
である。
【００４７】
いくつかの実施形態において、リンカー基は独立して、
【化５】
2021504403.tif 000007
から選択される。
【００４８】
例えば、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）および−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）ｐ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−のような他のリンカー基（ここでｐは１から３０の範囲の整数から選択されるか、またはｐは１から２０の範囲の整数から選択される）は、当業者および／または本開示の所有者によく知られている。
【００４９】
いくつかの実施形態において、少なくとも一つのリンカー基は、
【化６】
2021504403.tif 000008
である。
【００５０】
いくつかの実施形態において、少なくとも一つのリンカー基は、
【化７】
2021504403.tif 000009
である。
【００５１】
いくつかの実施形態において、少なくとも一つのリンカー基は、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）２ＮＨ−、−ＣＨ２ＮＨＣＨ２−、および−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＣＨ２−から選択される。いくつかの実施形態において、少なくとも一つのリンカー基は、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）２ＮＨ−である。
【００５２】
いくつかの実施形態において、少なくとも一つのＥセレクチン拮抗薬は、式（Ｉａ）の化合物：
【化８】
2021504403.tif 000010
から選択され、
ここで、ｎは１から１００の範囲の整数から選択される。いくつかの実施形態において、ｎは４、８、１２、１６、２０、２４、および２８から選択される。
【００５３】
いくつかの実施形態において、少なくとも一つのＥセレクチン拮抗薬は、米国特許第９，１０９，００２号で開示されるＥセレクチン拮抗薬から選択され、ここでこれは参照により本明細書に組み込まれる。いくつかの実施形態において、少なくとも一つのＥセレクチン拮抗薬は、ＧＭＩ−１２７１である。例えば、Ｐｒｉｃｅ  ｅｔ  ａｌ．，  “Ｄｏｒｍａｎｔ  ｂｒｅａｓｔ  ｃａｎｃｅｒ  ｍｉｃｒｏｍｅｔａｓｔａｓｅｓ  ｒｅｓｉｄｅ  ｉｎ  ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｂｏｎｅ  ｍａｒｒｏｗ  ｎｉｃｈｅｓ  ｔｈａｔ  ｒｅｇｕｌａｔｅ  ｔｈｅｉｒ  ｔｒａｎｓｉｔ  ｔｏ  ａｎｄ  ｆｒｏｍ  ｂｏｎｅ，”  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，  Ｖｏｌ．  ８（３４０），  Ｍａｙ  ２５，  ２０１６，  ［ＤＯＩ：１０．１１２６／ｓｃｉｔｒａｎｓｌｍｅｄ．ａａｄ４０５９］；  Ｄｕｔｔａ  ｅｔ  ａｌ．，  “Ｅ−Ｓｅｌｅｃｔｉｎ  Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  Ｍｉｔｉｇａｔｅｓ  Ｓｐｌｅｎｉｃ  ＨＳＣ  Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｍｙｅｌｏｐｏｉｅｓｉｓ  ｉｎ  Ｈｙｐｅｒｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌｅｍｉｃ  Ｍｉｃｅ  Ｗｉｔｈ  Ｍｙｏｃａｒｄｉａｌ  Ｉｎｆａｒｃｔｉｏｎ”，  Ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒ  Ｔｈｒｏｍｂ  Ｖａｓｃ  Ｂｉｏｌ  ［ＤＯＩ：  １０．１１６１／ＡＴＶＢＡＨＡ．１１６．３０７５１９］を参照。
【００５４】
いくつかの実施形態において、少なくとも一つのＥセレクチン拮抗薬は、以下の式の化合物：
【化９】
2021504403.tif 000011
【化１０】
2021504403.tif 000012
から選択される。
【００５５】
いくつかの実施形態において、少なくとも一つのＥセレクチン拮抗薬は、以下の式の化合物：
【化１１】
2021504403.tif 000013
【化１２】
2021504403.tif 000014
から選択される。
【００５６】
いくつかの実施形態において、少なくとも一つのＥセレクチン拮抗薬は、米国特許第８，４１０，０６６号およびＰＣＴ／ＵＳ２０１５／０６３１９１で開示されるＥセレクチン拮抗薬から選択され、ここでこれらは参照により本明細書に組み込まれる。いくつかの実施形態において、少なくとも一つのＥセレクチン拮抗薬は、ＧＭＩ−１３５９である。例えば、Ｓｔｅｅｌｅ，  Ｍａｒｉａ  Ｍ．  ｅｔ  ａｌ．，  “Ａ  ｓｍａｌｌ  ｍｏｌｅｃｕｌｅ  ｇｌｙｃｏｍｉｍｅｔｉｃ  ａｎｔａｇｏｎｉｓｔ  ｏｆ  Ｅ−ｓｅｌｅｃｔｉｎ  ａｎｄ  ＣＸＣＲ４  （ＧＭＩ−１３５９）  ｐｒｅｖｅｎｔｓ  ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ  ｔｕｍｏｒ  ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ  ａｎｄ  ｉｍｐｒｏｖｅｓ  ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ  ［ａｂｓｔｒａｃｔ］，”  Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  １０６ｔｈ  Ａｎｎｕａｌ  Ｍｅｅｔｉｎｇ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，  ２０１５  Ａｐｒ  １８−２２，  Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，  ＰＡ；  Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ  （ＰＡ）：  ＡＡＣＲ，  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ  ２０１５，  ７５（１５  Ｓｕｐｐｌ）：Ａｂｓｔｒａｃｔ  ｎｒ  ４２５．  ｄｏｉ：１０．１１５８／１５３８−７４４５．ＡＭ２０１５−４２５；  Ｇｒａｖｉｎａ，  Ｇｉｏｖａｎｎｉ  Ｌ．  ｅｔ  ａｌ．，  “Ｄｕａｌ  Ｅ−ｓｅｌｅｃｔｉｎ  ａｎｄ  ＣＸＣＲ４  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｒｅｄｕｃｅｓ  ｔｕｍｏｒ  ｇｒｏｗｔｈ  ａｎｄ  ｉｎｃｒｅａｓｅｓ  ｔｈｅ  ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ  ｔｏ  ｄｏｃｅｔａｘｅｌ  ｉｎ  ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  ｂｏｎｅ  ｍｅｔａｓｔａｓｅｓ  ｏｆ  ｐｒｏｓｔａｔｅ  ｃａｎｃｅｒ  ［ａｂｓｔｒａｃｔ］，”  Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  １０６ｔｈ  Ａｎｎｕａｌ  Ｍｅｅｔｉｎｇ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，  ２０１５  Ａｐｒ  １８−２２，  Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，  ＰＡ；  Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ  （ＰＡ）：  ＡＡＣＲ，  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ  ２０１５，  ７５（１５  Ｓｕｐｐｌ）：Ａｂｓｔｒａｃｔ  ｎｒ  ４２８．  ｄｏｉ：１０．１１５８／１５３８−７４４５．ＡＭ２０１５−４２８を参照、これらすべては参照により本明細書に組み込まれる。
【００５７】
式ＩＩの化合物（および部分構造、および特定の化合物）の合成は、米国特許第２０１７／０３０５９５１号に記載されているように実施可能であり、ここでこれは参照により本明細書に組み込まれる。
【００５８】
少なくとも一つの式（Ｉ）および／または式（ＩＩ）の化合物を含む医薬組成物もまた、提供される。このような医薬組成物は、本明細書でより詳細に記載される。これらの化合物および組成物は、本明細書に記載されている方法で使用可能である。
【００５９】
いくつかの実施形態において、少なくとも一つのＥセレクチン拮抗薬（例えば、式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物）、および／または、少なくとも一つのＥセレクチン拮抗薬（例えば、式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物）を含む医薬組成物は、骨髄外および循環血液中にＭＩＬを放出し、血液中のＭＩＬの保持を高める方法において使用可能である。
【００６０】
いくつかの実施形態において、少なくとも一つのＥセレクチン拮抗薬（例えば、式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物）、および／または、少なくとも一つのＥセレクチン拮抗薬（例えば、式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物）を含む医薬組成物は、がんの治療および／または予防のために本明細書に記載の方法において使用可能である。がんは、がん細胞が原発部位を離れ得るがんであり得る。原発部位は、例えば、固形組織（例えば乳房、前立腺、すい臓）または血流であり得る。
【００６１】
例えば、上記方法の１つの使用は、ＭＩＬの回収のためである。ＭＩＬは、例えば、高用量の化学療法治療後、必要になり得る。本明細書に記載の化合物は、例えば、循環血液中にＭＩＬを放出し、血液中のＭＩＬの保持を高めるために使用可能である。上記方法は、放出されるＭＩＬを回収するさらなるステップを含み得る。血液中に放出されているＭＩＬの回収のために様々な手法が、当該分野において公知である。例えば、アフェレーシスが利用され得る。
【００６２】
骨髄から循環血液へのＭＩＬの放出およびそれらの保持は、さまざまな用途がある。例えば、動員するＭＩＬは血液から収集することができる。そのような収集した細胞の使用は、ＭＩＬが抑制されるような方法で個体を治療する前の個体から、健康なＭＩＬを得ることである。治療後、個体は治療前に回収されたＭＩＬを利用する移植を受けることができる。これは、例えば個体が、ＭＩＬを損傷し得る化学療法プロトコルを受ける必要がある際に、有用である。
【００６３】
少なくとも一つ（すなわち一つまたはより多い）のコロニー刺激因子で個体を治療することがさらに望まれ得る。そのような因子は、例えば、少なくとも一つの上記記載の化合物の投与の前または同時に投与され得る。投与が同時である場合、配合物は単一の容器または二つ（またはより多い）の別の容器から投与され得る。適切なコロニー刺激因子の一例は、Ｇ−ＣＳＦである。Ｇ−ＣＳＦは、骨髄がより幹細胞を増殖および産生することを引き起こす。本明細書に記載の化合物は、ＭＩＬを循環血液中に放出することを助ける。本明細書に記載の化合物およびＧ−ＣＳＦの投与の組み合わせ（別々または一緒に）の結果として、骨髄中で産生され、循環血液中に放出されるＭＩＬは、上記に記載されているように回収され得る。そのような収集されるＭＩＬは、例えば、化学療法後、個体に投与され得る。Ｇ−ＣＳＦで治療した骨髄から健康なＭＩＬの動員および回収に対する本明細書に記載の化合物の適用は、たとえば移植に有用な細胞を提供する。
【００６４】
いくつかの実施形態において、少なくとも一つのＥセレクチン拮抗薬（例えば、式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物）、および／または、少なくとも一つのＥセレクチン拮抗薬（例えば、式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物）を含む医薬組成物は、腫瘍の転移の治療および／または予防のために本明細書に記載の方法で使用可能である。いくつかの実施形態において、ゲムシタビンのような少なくとも一つの追加の化学療法薬剤が、個体に投与される。
【００６５】
いくつかの実施形態において、少なくとも一つのＥセレクチン拮抗薬（例えば、式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物）、および／または、少なくとも一つのＥセレクチン拮抗薬（例えば、式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物）を含む医薬組成物は、細胞の接着または遊走が疾患において起こる炎症性疾患の治療および／または予防のための方法に使用され得る。
【００６６】
炎症性疾患の例は、アトピー性皮膚炎および乾癬のような炎症性皮膚疾患を含む。治療は、疼痛のような、その疾患またはそれと関連する合併症を（部分的または全体的に）低減し得る。治療は、炎症性疾患またはそれに関連する合併症などのための一つまたはより多い他の療法と合わせて使用可能である。
【００６７】
いくつかの実施形態において、少なくとも一つのＥセレクチン拮抗薬（例えば、式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物）、および／または、少なくとも一つのＥセレクチン拮抗薬（例えば、式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物）を含む医薬組成物は、少なくとも一つの本明細書で記載の疾患、障害および状態の治療するため、または少なくとも一つの本明細書で記載の疾患、障害および／もしくは状態の治療において使用する薬剤の調製もしくは製造のために使用可能である。これらの方法および使用の各々はより詳細に記載される。
【００６８】
したがって、特定の実施形態において、本明細書で記載の方法およびＥセレクチン拮抗薬は、血液系腫瘍および転移性疾患の治療において有用であり、特に化学療法および／もしくは放射線療法と合わせて、または化学療法および／もしくは放射線療法との補助療法として有用である。
【００６９】
いくつかの実施形態において、少なくとも一つのＥセレクチン拮抗薬（例えば、式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物）、および／または、少なくとも一つのＥセレクチン拮抗薬（例えば、式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物）を含む医薬組成物は、造血細胞を動員する一つまたはより多い他の薬剤と合わせて使用可能である。そのような薬剤は、例えばＧ−ＣＳＦ；ＡＭＤ−３１００または他のＣＸＣＲ４拮抗薬；ＧＲＯ−β  （ＣＸＣＬ２）およびＮ末端４アミノ切断型（ＳＢ−２５１３５３）；ＩＬ−８ＳＤＦ−１αペプチド類似物、ＣＴＣＥ−００２１およびＣＴＣＥ−０２１４；ならびにＳＤＦ１類似物であるＭｅｔ−ＳＤＦ−１βを含む（例えば、Ｐｅｌｕｓ、上記および本明細書に引用されている参考文献を参照）。一つまたはより多い他の動員する薬剤と合わせて少なくとも一つのＥセレクチン拮抗薬を投与する適切な治療レジメンは、当業者によって容易に決定され得る。
【００７０】
本明細に記載の方法の特定の実施形態において、個体はヒトまたは非ヒト動物である。本明細書に記載の治療の必要な個体は、本明細書に記載のがん疾患、がん障害、もしくはがん状態の症状または後遺症を示していてもよいし、がん疾患、がん障害、もしくはがん状態を発症するリスクがあってもよい。治療され得る非ヒト動物は、哺乳類、例えば非ヒト霊長類（例えば、サル、チンパンジー、ゴリラなど）、げっ歯類（例えば、ラット、マウス、アレチネズミ、ハムスター、フェレット、ウサギ）、ウサギ目、ブタ（ｓｗｉｎｅ）（例えば、ブタ（ｐｉｇ）、ミニブタ）、ウマ科、イヌ科、ネコ科、ウシ属、ならびにほかの飼育動物、家畜、および動物園の動物を含む。
【００７１】
疾患、もしくは障害、もしくは状態の治療または予防、ならびに適切な投薬レジメンの決定および調整（例えば、１用量当たりの化合物の量および／または投薬数、および投薬の頻度の調整）における本明細書に記載の化合物、薬剤または組成物の有効性が、医療および臨床における当業者によって容易に決定することができる。身体検査、臨床症状の評価および観察、ならびに分析試験および本明細書に記載の方法の実施を含む、ひとつまたは任意の診断方法の組み合わせが、個体の健康状態の観察のために使用可能である。
【００７２】
ＭＩＬの動員は、当業者が日常的に実践する方法および手法を使用して観察することが可能である。ＭＩＬは、特定の細胞表面マーカーの有無を識別することによって識別され得る。例えば、ＭＩＬの存在およびレベルは、ＣＤ８またはＣＤ４の細胞表面（すなわち、ＣＤ８＋またはＣＤ４＋細胞表面）における存在を検出する方法により決定され得る。
【００７３】
本明細書に記載の化合物は、ＭＩＬを動員する薬剤および治療薬における使用のための、ならびにＭＩＬを動員することが、有益である、またはＭＩＬ移植もしくは置換を回収することが、有益であるための、疾患または障害の治療または防止的（もしくは予防的）治療（例えば、疾患または疾患の一つもしくはより多い症状の発生あるいは悪化の可能性を低減する）のための医薬組成物を形成し得る。本明細書に記載の方法および賦形剤は、例示的であり決して制限するものではない。
【００７４】
本明細書に記載のＥセレクチン拮抗薬の用量は、被験体の状態、すなわち疾患のステージ、疾患によって引き起こされる症状の重症度、一般的な健康状態と同様に年齢、性別および体重ならびに医療における当業者に明らかな他の要因による可能性がある。同様に、疾患または障害の治療用の治療薬の用量は、医療における当業者によって理解されるパラメータによって決定され得る。
【００７５】
医薬組成物は、医療における当業者によって決定されるように、治療される疾患または障害に適切な方法で投与され得る。適切な用量および適切な期間および投与の頻度は、本明細書で議論されるような要因で決定される、この要因は、患者の状態、患者の疾患のタイプおよび重症度、有効成分の特定の剤形、ならびに投与の方法を含む。一般的に、適切な用量（または有効用量）および治療レジメンは、治療的および／または予防的利益（例えば、より頻繁な完全もしくは部分的な寛解、または長期の無病および／もしくは全生存、または症状の重症度の減少などの向上する臨床成果、あるいは上記に詳細に記載の他の利益）を提供するのに十分な量で、本明細書に記載の医薬組成物（複数可）を提供する。
【００７６】
本明細書に記載の医薬組成物を、有効量の化合物を効果的に輸送するいくつかのルートのいずれか一つによって、それを必要としている被験体に投与することが可能である。そのような投与ルートは、例えば、局所、経口、経鼻、髄腔内、経腸、口腔内、舌下、経皮、経直腸、経膣、点眼、結膜下、舌下、または非経口投与を包含する、ここで非経口投与は、皮下、静脈内、筋肉内、髄腔内、陰茎海綿体内、外耳道内（ｉｎｔｒａｍｅａｔａｌ）、または尿道内注射または注入を包含する。投与などのこれらのルートにより投与される組成物は、より詳細に本明細書に記載される。
【００７７】
医薬組成物は、生理学的に許容可能な賦形剤（薬学的に許容可能なまたは適切な賦形剤または担体）（すなわち、活性成分の活性に干渉しない無毒性物質）をさらに含む、無菌の水溶液、または無菌の非水溶液、懸濁液または乳濁液であり得る。そのような組成物は、固体、液体、または気体（エアロゾル）の形態であり得る。あるいは、本明細書に記載の組成物は、凍結乾燥物として処方され得るか、または本明細書に記載の化合物およびポリペプチドもしくはペプチドを、当業者に公知の技術を使用してリポソーム中に包むことが可能である。医薬組成物はまた、他の構成要素を包含することも可能であり、他の構成要素は、生物学的に活性または不活性であり得る。そのような構成要素は、緩衝液（例えば、中性緩衝生理食塩水またはリン酸緩衝生理食塩水）、炭水化物（例えば、グルコース、マンノース、スクロースまたはデキストラン）、マンニトール、タンパク質、ポリペプチドまたはグリシンなどのアミノ酸、抗酸化剤、ＥＤＴＡなどのキレート剤またはグルタチオン、安定化剤、色素、香料、および、懸濁化剤および／または保存料を含むがこれらに限定されない。
【００７８】
医薬組成物で使用される当業者に公知の任意の適切な賦形剤または担体は、本明細書に記載の組成物として利用され得る。治療用途の賦形剤は、周知であり、例えばＲｅｍｉｎｇｔｏｎ：  Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ  （Ｇｅｎｎａｒｏ，  ２１ｓｔ  Ｅｄ．  Ｍａｃｋ  Ｐｕｂ．  Ｃｏ．，  Ｅａｓｔｏｎ，  ＰＡ  （２００５））に記載されている。一般的に、賦形剤のタイプは、活性成分（複数可）の化学組成と同様に、投与方法に基づいて選択される。医薬組成物は、任意の適切な投与方法で処方され得、ここで投与方法は、例えば、局所、経口、経鼻、髄腔内、経腸、口腔内、舌下、経皮、経直腸、経膣、点眼、結膜下、舌下、または非経口投与を包含する、ここで非経口投与は、皮下、静脈内、筋肉内、髄腔内、陰茎海綿体内、外耳道内（ｉｎｔｒａｍｅａｔａｌ）、または尿道内注射または注入を包含する。非経口投与において、担体は、好ましくは、水、生理食塩水、アルコール、脂質、ワックス、または緩衝液を含む。経口投与において、マンニトール、ラクトース、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、サッカリン酸ナトリウム、タルカン、セルロース、カオリン、グリセリン、デンプンデキストリン、アルギン酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロース、エチルセルロース、グルコース、スクロース、および／または炭酸マグネシウムなどの上記賦形剤もしくは固形賦形剤または担体のいずれかが利用可能である。
【００７９】
医薬組成物（例えば、経口投与または注射による輸送用）は、液体の形態であり得る。液状の医薬組成物は、例えば以下の一つまたはそれより多くを含み得る：注射用水、食塩水、好ましくは生理食塩水、リンガー溶液、等張塩化ナトリウム、溶媒もしくは懸濁媒として利用可能な不揮発性油、ポリエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコールまたは他の溶媒などの無菌の希釈剤；抗菌薬；抗酸化剤；キレート剤；塩化ナトリウムまたはブドウ糖などの浸透圧を調整するための緩衝液および薬剤。非経口製剤は、ガラス製またはプラスチック製のアンプル、使い捨て型注射器または複数回投与用バイアルに封入することができる。生理食塩水の使用が好ましく、注射可能な医薬組成物は、好ましくは無菌である。
【００８０】
経口製剤において、本明細書に記載の少なくとも一つのＥセレクチン拮抗薬は、単独でまたは適切な添加剤と組み合わせて使用され得、そして例えば任意の一つまたはそれより多くの従来の添加剤、崩壊錠、潤滑剤、ならびに必要に応じて、希釈剤、緩衝剤、湿潤剤、保存料、着色料、および香料とともに錠剤、散剤、顆粒剤、またはカプセル剤を作製する。組成物は、胃の環境の低ｐＨから活性成分を保護する緩衝剤および／または腸溶コーティングを含んで処方され得る。組成物は、経口輸送のために例えば液状、固形もしくは半固形の製剤中の香料および／または腸溶コーティングとともに処方され得る。
【００８１】
経口製剤は、ゼラチンカプセルとして提供され得、このカプセルは、粉末担体を伴う活性化合物または生物学的製剤を包含し得る。同様の担体および希釈剤を使用して、圧縮錠剤を作製することが可能である。錠剤およびカプセルは、徐放性製品として製造することができ、一定時間にわたって、活性成分の継続的な放出を提供することができる。圧縮製剤は、任意の不快な味を覆い、そして大気から錠剤を保護するために糖コーティングもしくはフィルムコーティングされてもよいし、または消化管での選択的な崩壊のために腸溶コーティングをされてもよい。
【００８２】
医薬組成物は、持続放出または徐放のために処方され得る。そのような組成物は、一般的に周知の技術を使用して調製され得、そして例えば、経口、経直腸、もしくは皮下移植によって、または所望の標的部位での移植によって投与され得る。徐放性製剤は、担体マトリックス中に分散した、および／または速度制御膜によって囲まれるリザーバー中に含まれる活性の治療薬を含み得る。そのような製剤中の使用のための賦形剤は、生体適合性があり、かつ生分解性もあり得る；好ましくは、製剤は、比較的一定のレベルの活性構成要素の放出を提供する。徐放性製剤中に含まれる活性の治療薬の量は、移植部位、放出の速度および予想される持続時間、ならびに治療または予防する状態の性質に依存する。
【００８３】
本明細書に記載の医薬組成物は、乳化基材または水溶性基材などのさまざまな基材と混合することによって、坐薬として処方することができる。医薬組成物は、吸入により投与するエアロゾル製剤として調製され得る。組成物は、ジクロロジフルオロメタン、プロパン、窒素などのような加圧された許容可能な噴霧剤中に処方される。
【００８４】
少なくとも一つのＥセレクチン拮抗薬は、局所的に（例えば、経皮投与によって）投与され得る。局所製剤は、経皮パッチ、軟膏、ペースト、ローション、クリーム、ゲルなどの形態であり得る。局所製剤は、浸透剤、または増強剤（浸透増強剤とも呼ばれる）、増粘剤、希釈剤、乳化剤、分散助剤、または結合剤のうちの一つまたはより多くを含み得る。物理的浸透増強剤は、例えば、イオントフォレシスのような電気泳動技術、超音波の使用（または「フォノフォレシス」）などを含む。化学的浸透増強剤は、治療薬の投与前、投与とともに、または投与直後、のいずれかで投与される薬剤であり、化学的浸透増強剤は、皮膚、特に角質層の透過性を増加し、皮膚への薬剤の浸透を増強させる。追加の化学的および物理的な浸透増強剤は、例えば、Ｔｒａｎｓｄｅｒｍａｌ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｏｆ  Ｄｒｕｇｓ，  Ａ．  Ｆ．  Ｋｙｄｏｎｉｅｕｓ  （ＥＤ）  １９８７  ＣＲＬ  Ｐｒｅｓｓ；  Ｐｅｒｃｕｔａｎｅｏｕｓ  Ｐｅｎｅｔｒａｔｉｏｎ  Ｅｎｈａｎｃｅｒｓ，  ｅｄｓ．  Ｓｍｉｔｈ  ｅｔ  ａｌ．  （ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ，  １９９５）；  Ｌｅｎｎｅｒaｓ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｐｈａｒｍ．  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．  ５４：４９９−５０８  （２００２）；  Ｋａｒａｎｄｅ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｐｈａｒｍ．  Ｒｅｓ．  １９：６５５−６０  （２００２）；  Ｖａｄｄｉ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｉｎｔ．  Ｊ．  Ｐｈａｒｍ．  ９１：１６３９−５１  （２００２）；  Ｖｅｎｔｕｒａ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｄｒｕｇ  Ｔａｒｇｅｔ  ９：３７９−９３  （２００１）；  Ｓｈｏｋｒｉ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｉｎｔ．  Ｊ．  Ｐｈａｒｍ．  ２２８（１−２）：９９−１０７  （２００１）；  Ｓｕｚｕｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｂｉｏｌ．  Ｐｈａｒｍ．  Ｂｕｌｌ．  ２４：６９８−７００  （２００１）；  Ａｌｂｅｒｔｉ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｃｏｎｔｒｏｌ  Ｒｅｌｅａｓｅ  ７１：３１９−２７  （２００１）；  Ｇｏｌｄｓｔｅｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｕｒｏｌｏｇｙ  ５７：３０１−５  （２００１）；  Ｋｉｉｊａｖａｉｎｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｅｕｒ．  Ｊ．  Ｐｈａｒｍ．  Ｓｃｉ．  １０：９７−１０２  （２０００）；  および  Ｔｅｎｊａｒｌａ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｉｎｔ．  Ｊ．  Ｐｈａｒｍ．  １９２：１４７−５８  （１９９９）に記載される。
【００８５】
投与のルートは、皮内、筋肉内、腹腔内、静脈内、髄腔内、および皮下ルートを含むがこれらに限定されない。いくつかの実施形態において、化合物または組成物は、局所的に（すなわち、がん腫瘍の近く）投与される。いくつかの実施形態において、化合物または組成物のうちの一つまたはよりそれより多くは、異なる投与のルートを使用して投与される。
【００８６】
化合物または医薬組成物（複数可）は、同じであってもよいし異なっていてもよい、一つまたはより多い用量および治療レジメンにおいて投与されることができる。いくつかの実施形態において、化合物または組成物（複数可）のそれぞれは、一日一回約１ｍｇ／ｋｇから約５０ｍｇ／ｋｇの範囲の量で投与される。他の実施形態において、用量は、約１μｇ／ｋｇ、２５μｇ／ｋｇ、５０μｇ／ｋｇ、７５μｇ／ｋｇ、１００μｇ／ｋｇ、１２５μｇ／ｋｇ、１５０μｇ／ｋｇ、１７５μｇ／ｋｇ、２００μｇ／ｋｇ、２２５μｇ／ｋｇ、２５０μｇ／ｋｇ、２７５μｇ／ｋｇ、３００μｇ／ｋｇ、３２５μｇ／ｋｇ、３５０μｇ／ｋｇ、３７５μｇ／ｋｇ、４００μｇ／ｋｇ、４２５μｇ／ｋｇ、４５０μｇ／ｋｇ、４７５μｇ／ｋｇ、５００μｇ／ｋｇ、５２５μｇ／ｋｇ、５５０μｇ／ｋｇ、５７５μｇ／ｋｇ、６００μｇ／ｋｇ、６２５μｇ／ｋｇ、６５０μｇ／ｋｇ、６７５μｇ／ｋｇ、７００μｇ／ｋｇ、７２５μｇ／ｋｇ、７５０μｇ／ｋｇ、７７５μｇ／ｋｇ、８００μｇ／ｋｇ、８２５μｇ／ｋｇ、８５０μｇ／ｋｇ、８７５μｇ／ｋｇ、９００μｇ／ｋｇ、９２５μｇ／ｋｇ、９５０μｇ／ｋｇ、９７５μｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、２ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、４ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ、６ｍｇ／ｋｇ、７ｍｇ／ｋｇ、８ｍｇ／ｋｇ、９ｍｇ／ｋｇ、または１０ｍｇ／ｋｇを含むが、これに限定されない任意の用量であり得る。
【００８７】
いくつかの実施形態において、化合物または医薬組成物（複数可）は、一日一回、一日二回以上、一日ごと、二日ごとなどに、これらの量および範囲のいずれかで投与される。一つまたはより多い治療周期が、繰り返される可能性があり、周期の任意の数が、企図される。各化合物または医薬組成物における一日当たりの治療数および一用量当たりの量は、各周期間に変わり得る。
【００８８】
化合物、ポリペプチド、ペプチド、アプタマー、抗体および本明細書に記載のそれらの抗原結合フラグメントのうちの一つまたはより多くの単位用量でのキットが、通常経口または注射可能な用量において、提供される。そのようなキットは、単位用量を含む容器、標的の病的状態の治療における使用および治療上の付随する利点を記載している情報添付文書、ならびに必要に応じて組成物の輸送のための器具または装置を含み得る。
【００８９】
以下の実施例は、本発明の例示的な実施形態を提供する。当業者は、本発明の趣旨または範囲を変更することなしに実行できる多くの修正および変化を認識するであろう。そのような修正および変化は、本発明の範囲内に包含される。実施例は、決して本発明を制限するものではない。
【実施例】
【００９０】
本開示された実施例において、以下の物質および方法が使用された。
（００１）
化学物質：ＧＭＩ−１２７１（１００％  親（ｐａｒｅｎｔ）、純度９７％より上）を白色、結晶性物質として得た。ＧＭＩ−１２７１を−２０℃で遮光して保存した。化合物を、滅菌リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）中で処方し、ｐＨの値７．４および４ｍｇ／ｍｌの濃度で透明、無色の溶液を得た。投薬溶液を、最初の投与の１２時間前に調製し、４℃で治療の間遮光して保存した。
【００９１】
ＧＭＩ−１３５９（１００％  親、純度９７％より上）を白色、粒状粉末として得た。ＧＭＩ−１３５９を−２０℃で遮光して保存した。化合物を、滅菌（ＰＢＳ）中で処方し、ｐＨの値９．２および４ｍｇ／ｍｌの濃度で透明、無色の溶液を得た。投薬溶液を、最初の投与の１２時間前に調製し、４℃で治療の間遮光して保存した。
【００９２】
Ｇ−ＣＳＦ（０．３ｍｇ／ｍＬ）を透明、無色の保存溶液として得た。Ｇ−ＣＳＦを４℃で遮光して保存した。投薬溶液は、５％ブドウ糖で保存溶液を希釈して調製した。その結果、調製物は、ｐＨの値４．８および０．０１２８ｍｇ／ｍｌの濃度で透明、無色の溶液であった。投与製剤は、治療の間、毎日調製され、室温で保存され、光から保護された。
【００９３】
抗ＣＴＬＡ−４（７．３６ｍｇ／ｍＬ）を透明、無色の保存溶液として得た。抗ＣＴＬＡ−４を４℃で遮光して保存した。投薬溶液を、ＰＢＳで保存溶液を希釈して調製した。その結果、調製物は、ｐＨの値７および１ｍｇ／ｍｌの濃度で透明、無色の溶液であった。投与製剤は、治療の間、毎週新しく調製し、室温で保存され、光から保護した。
（００２）
動物および畜産：メスのＥｎｖｉｇｏ  Ｂａｌｂ／ｃマウス（ＢＡＬＢ／ｃＡｎＮＨｓｄ）が、本研究において使用された。それらは、実験の１日目に生後６から７週であった。動物は、照射されたＨａｒｌａｎ  ２９１８．１５  Ｒｏｄｅｎｔ  Ｄｉｅｔおよび水を適宜供給された。動物は、Ｂｉｏｂｕｂｂｌｅ（登録商標）クリーンルーム内のトウモロコシの穂軸の寝藁を備えたＩｎｎｏｖｉｖｅ使い捨て換気ケージに収容され、Ｈ．Ｅ．Ｐ．Ａフィルター処理された空気を１時間あたり１００回の完全な空気交換でバブル環境（ｂｕｂｂｌｅ  ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ）に供給した。治療、体重決定、および腫瘍測定のすべてが、バブル環境下で行われた。環境は、７０°±２°Ｆの温度範囲、および３０から７０％の湿度範囲で制御された。
（００３）
がん細胞調製：ＣＴ２６ＷＴ細胞を得た。それらは、ＲＰＭＩ１６４０培地中で培養した。ＲＰＭＩ１６４０培地は、１％の１００ｍＭピルビン酸ナトリウム、１％の１Ｍ  ＨＥＰＥＳバッファー、１％の４５％グルコース溶液で改変され、そして１０％非熱不活化ウシ胎児血清（ＦＢＳ）および１％の１００Ｘペニシリン／ストレプトマイシン／Ｌ−グルタミン（ＰＳＧ）が補充された。増殖環境は、５％ＣＯ２雰囲気、３７℃でインキュベーター中に維持した。増殖が完了した際、細胞（継代数  ３）を、０．２５％トリプシンＥＤＴＡ溶液を使用してトリプシン処理し、細胞を剥離し、トリプシンを完全な培養培地で希釈することにより不活性化し、任意の細胞凝集をピペッティングにより分離した。細胞を２００ｒｃｆで８分間４℃で遠心分離し、上清を吸引し、そしてペレットを冷ダルベッコリン酸緩衝生理食塩水（ＤＰＢＳ）中にピペッティングにより再懸濁させた。均一な細胞懸濁液の分取分をトリパンブルー溶液中に希釈し、Ｌｕｎａ自動セルカウンターを使用して数えた。移植前細胞生存率は９３％であった。細胞懸濁液は、２００ｒｃｆで８分間４℃で遠心分離した。上清を吸引し、そして細胞ペレットを冷無血清培地中に再懸濁させ、最終濃度２．５０Ｅ＋０６トリパン除去細胞／ｍＬで得た。細胞懸濁液を移植中氷上で維持した。
【００９４】
移植後、残った細胞の分取分をトリパンブルー溶液で希釈し、計数し、移植後細胞生存率を測定した（９２％）。
【００９５】
試験動物は、０．２ｍＬの無血清培地中に５．０Ｅ＋０５個の細胞を０日目に２７ゲージ（ｇａｕｇｅ）の針およびシリンジを使用して脇の下の高位（ちょうど前肢の下）の皮下に移植された。
【００９６】
ＣＴ−２６腫瘍モデルにおけるＭＩＬの検出および動員のためのプロトコル：ＧＭＩ−１２７１は、強力な、小分子、Ｅ−セレクチンの糖模倣拮抗薬である。ＧＭＩ−１３５９は、強力な、Ｅ−セレクチンおよびＣＸＣＲ４標的、小分子糖模倣二重拮抗薬である。ＧＭＩ−１２７１によるＥ−セレクチン阻害、またはＧＭＩ−１３５９によるＥ−セレクチンおよびＣＸＣＲ４の阻害いずれかのＭＩＬ動員における影響が、ＢＡＬＢ／ｃマウスにおいて検査された。このマウスは、抗ＣＴＬＡ−４Ｔ細胞チェックポイント抗体による同系のＣＴ２６結腸癌の拒絶を誘導されていた。実験プロトコルは、表１にまとめられている。
【表１】
2021504403.tif 000015
【００９７】
ＣＴ２６．ＷＴを移植した全マウスにおける抗ＣＴＬＡ−４での治療は、３日目に始まった。全マウスは、３，６，１０，１３および１７日目に腹腔内に投与された。全マウスは、治療当日に個々の体重によって投与された（０．２ｍｇ／２０ｇ）。
【００９８】
２５日目に、ＣＴＬＡ−４治療後の腫瘍がないマウスを、表１に示される４つの「腫瘍免疫」治療群に分配し、その結果、各群内の平均体重が、全平均の１０％以内になるようにした。
【００９９】
「免疫腫瘍」群１から４の治療は、２５日目に開始した。ビヒクルは、３日間１２時間ごとに腹腔内に投与された（２５から２７日目）。ＧＭＩ−１２７１およびＧＭＩ−１３５９は、３日間１２時間ごとに４０ｍｇ／ｋｇで腹腔内に投与された（２５から２７日目）。Ｇ−ＣＳＦは、３日間１２時間ごとに０．１２５ｍｇ／ｋｇで皮下投与された（２５から２７日目）。
【０１００】
「非免疫」群５は、同齢の、ナイーブ非担腫瘍マウスを配置した。
【０１０１】
検査薬剤の最終投与後１２時間で、群１から５における全マウス（「腫瘍免疫」群１から４の治療マウスおよび「非免疫」群５対照マウス）を、血液および骨髄収集のために安楽死させた。
【０１０２】
フローサイトメトリー解析を使用して、全血液および全骨髄試料におけるＣＤ８＋Ｔ細胞上のＣＤ６２ＬおよびＣＤ４４発現を測定した。２次解析は、３つの組織タイプにおけるＡＨ−１デキストラマー解析ならびにたまった血液および骨髄試料中のＩＦＮγ産生を含んでいた。試料は、オートサンプラー付き４つのレーザー、１４色のＡｔｔｕｎｅ  ＮｘＴフローサイトメーターを使用して得た。ＣＤ６２ＬおよびＣＤ４４のイベントは、ＣＤＳ＋Ｔ細胞上でゲート（ｇａｔｅｄ）された。
【０１０３】
（結果）
ＧＭＩ−１２７１、ＧＭＩ−１３５９、またはＧ−ＣＳＦを投与後、ＣＴ２６免疫マウス中のＣＤ８＋Ｔ細胞の分布が、解析された。図１Ａから１Ｃに示されるように、ＣＤ８＋Ｔ細胞の表現型は、抹消血液および骨髄試料で測定された。データは、Ｇ−ＣＳＦと対照的に、ＧＭＩ−１２７１およびＧＭＩ−１３５９での治療が、末梢血液中のナイーブ（図１Ａ）およびセントラルメモリー（ＣＭ）ＣＤ８＋Ｔ細胞（図１Ｂ）の両方を動員したことを示す。エフェクターメモリー（ＥＭ）ＣＤ８＋Ｔ細胞の再分布は、ＧＭＩ−１２７１、またはＧＭＩ−１３５９によって影響されない（図１Ｃ）。
【０１０４】
検査対象においてＩＦＮγを産生することを備えた骨髄中のＣＤ８＋リンパ球のパーセントも、検査された。図２に示すように、ＣＤ８＋ＭＩＬの機能活性が、照射されたＣＴ−２６腫瘍細胞、免疫優性ＣＴ−２６腫瘍抗原（ＡＨ１）、または生理食塩水（非刺激）でのｉｎ  ｖｉｔｒｏ刺激後のＩＦＮγ産生によって評価された。生理食塩水、ＧＭＩ−１２７１、およびＧＭＩ−１３５９で治療された腫瘍免疫化マウス由来のＭＩＬが、ＡＨ１および全腫瘍細胞の両方に応答するようプライミングされた。腫瘍免疫マウス由来の非刺激ＭＩＬまたは非免疫マウス由来の刺激ＣＤ８＋Ｔ細胞は、ＩＦＮγを産生しなかった。
【０１０５】
ＩＦＮγを産生することを備えた抹消血液中のＣＤ８＋リンパ球のパーセントも、同様に検査された。図３は、ＩＦＮγを産生するようプライミングされた抹消血液中のＣＤ８＋Ｔ細胞のパーセンテージが、生理食塩水またはＧ−ＣＳＦではなくＧＭＩ−１２７１、またはＧＭＩ−１３５９での治療後に著しく増加したことを示す。理論に拘束されることはないが、出願人は、これらの結果が、血液区画中への腫瘍プライミングＭＩＬの再分布のためであろうと考える。
【０１０６】
このように、本明細書の実験結果は、ＧＭＩ−１２７１（式（Ｉ）の化合物）、およびＧＭＩ−１３５９（式（ＩＩ）の化合物）のようなＥ−セレクチン拮抗薬の特有の使用を強調する。Ｅ−セレクチン拮抗薬の投与は、抹消血液中への腫瘍プライミングＭＩＬの動員または再分布をもたらす。
【０１０７】
上記記載の様々な実施形態が、合わさり、さらなる実施形態を提供することができる。本明細書中に参照されるおよび／またはアプリケーションデータシートに記載されている全米国特許、米国特許出願公開、米国特許出願、非米国特許、非米国特許出願、および非特許公開が、参照により、それら全体で、本明細書に組み込まれる。実施形態の局面は、必要に応じて、様々な特許、出願、および公開の考えを採用し、そしてさらに別の実施形態を提供するように修正することができる。
【０１０８】
上記の詳細な記載に照らし合わせて実施形態にこれらおよび他の変化を加えることができる。一般的に、以下の特許請求の範囲において、使用される用語は、特許請求の範囲を明細書および特許請求の範囲に開示される特定の実施形態に限定するように解釈されるべきではなく、すべての可能な実施形態およびそのような特許請求の範囲が権利を与えられる等価物の全範囲を含むように解釈されるべきである。したがって、特許請求の範囲は本開示によって限定されない。
【図１】
2021504403.tif 000020
【図２】
2021504403.tif 000021
【図３】
2021504403.tif 000022
【国際調査報告】
2021504403.tif 000023
2021504403.tif 000024
2021504403.tif 000025