(57)【要約】本開示は、通常ＧＣ−ＭＳ／ＭＳシステムで分析される非常に疎水性が高くかつ塩素系の化合物を含む、種々の試料中の農薬及びマイコトキシンのパネルを分析する、定量的で急速かつ信頼性の高いＬＣ−ＭＳ／ＭＳ法を提供する。当該方法は、単一の器具を使用して実施することができ、農薬及びマイコトキシンの、カンナビス産生物中におけるこれらの化合物に関して米国の州（例えば、カリフォルニア）及び他の国（例えば、カナダ）により特定されるアクションリミットよりはるかに低い濃度を検出及び定量化できる。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
トリプル四重極型質量分析計であって、
（ａ）エレクトロスプレーイオン化（ＥＳＩ）源であって、そこで前記トリプル四重極型質量分析計が、グループＡの多重反応モニタリング（ＭＲＭ）遷移：
８９０．５＞１４５．０（アベルメクチン）、
８９０．５＞５６７．２（アベルメクチン）、
８９０．５＞３０５．１（アベルメクチン）、
１８４．０＞４９．０（アセフェート）、
１８４．０＞９５．０（アセフェート）、
４０２．２＞３４３．１（アセキノシル）、
４０２．２＞１８９（アセキノシル）、
２０８．０＞１１６．０（アルディカーブ）、
２０８．０＞８９．０（アルディカーブ）、
３４３．０＞２７２．０（ボスカリド）、
３１６．９＞２６３．９（キャプタン）、
３１６．９＞２３５．９（キャプタン）、
３１８．９＞２６５．９（キャプタン）、
３１８．９＞２３７．９（キャプタン）、
４０９．０＞５９．１（クロルフェナピル）、
４０７．０＞５９．１（クロルフェナピル）、
４２４．０＞５９．１（クロルフェナピル）、
４２６．０＞５９．１（クロルフェナピル）、
３４９．９＞３２１．９（クロルピリホス）、
３１７．２＞１２１．０（シネリンＩ）、
３１７．２＞１０７．０（シネリンＩ）、
３１７．２＞１４９．０（シネリンＩ）、
３６１．２＞１４９．０（シネリンＩＩ）、
３６１．２＞２１３．０（シネリンＩＩ）、
３６３．０＞３０６．９（クマホス）、
３６３．０＞３３４．９（クマホス）、
３６３．０＞２２６．９（クマホス）、
４５３．１＞１９３．０（シフルトリン）、
４５１．１＞１２７．０（シフルトリン）、
４５１．１＞１９１．０（シフルトリン）、
４３５．１＞１９３．１（シペルメトリン）、
４３５．１＞１２７．０（シペルメトリン）、
４３３．１＞１２７．０（シペルメトリン）、
１６１．１＞４４．０（ダミノジッド）、
１６１．１＞４５．０（ダミノジッド）、
１６５．１＞１４７．０（ダミノジッド−Ｄ４）、
２２０．９＞１２７．０（ジクロルボス）、
３８８．１＞３０１．０（ジメトモーフ）、
３８８．１＞２７３．０（ジメトモーフ）、
３９４．２＞３５９．１（エトフェンプロックス）、
３０２．１＞５５．０（フェンヘキサミド）、
３０２．１＞９７．０（フェンヘキサミド）、
３０２．１＞２５６．０（フェノキシカルブ）、
４２２．２＞１３８．０（フェンピロキシメート）、
４３５．０＞２５０．０（フィプロニル）、
４３５．０＞３３０．０（フィプロニル）、
２４７．１＞１２６．０（フルジオキソニル）、
２４７．１＞１８０．０（フルジオキソニル）、
２９７．０＞４１．０（イマザリル）、
２６０．２＞２１３（イミダクロプリド−Ｄ４）、
３３１．０＞１６３．０（ジャスモリンＩ）、
３７５．２＞１６３．０（ジャスモリンＩＩ）、
３７５．２＞２１３．０（ジャスモリンＩＩ）、
３３１．０＞２８５．０（マラチオン）、
２８０．２＞２４８．１（メタラキシル）、
２４２．０＞１２７．０（メビンホス）、
２４２．０＞１０９．０（メビンホス）、
２２５．０＞１２７．０（メビンホス）、
２２５．０＞１０９．０（メビンホス）、
２９８．０＞７０．０（ミクロブタニルＤ９）、
２７６．２＞９８．０（ｎ−オクチルビシクロヘプテンジカルボキシイミド（ＭＧＫ−２６４））、
３８０．８＞１２７．０（ナレド）、
３８２．８＞１２７．０（ナレド）、
３８０．８＞１０９．０（ナレド）、
３１８．０＞１３３．０（ホスメット）、
３０１．２＞１２３（プラレトリン）、
３４４．１＞６９．０（プロピコナゾール）、
３４４．１＞１６１．０（プロピコナゾール）、
３２９．２＞１４３．０（ピレトリンＩ）、
３７３．２＞１４３．０（ピレトリンＩＩ）、
３７８．０＞１６０．０（ピリダベン−Ｄ１３）、
７４８．５＞９８．０（スピネトラム）、
７４８．５＞１４２．０（スピネトラム）、
７４６．５＞９８．０（スピノシンＤ）、
７４６．５＞１４２．０（スピノシンＤ）、
３７４．２＞２１６．０（スピロテトラマト）、
２９６．０＞２１５．０（チアメトキサム−Ｄ４）、
３４３．１＞１５１．０（チオファネートメチル）、及び
３４３．１＞２６８．０（チオファネートメチル）からなる群から選択される、多重ＭＲＭ遷移を検出するように構成される、前記エレクトロスプレーイオン化（ＥＳＩ）源、または、
（ｂ）大気圧化学イオン化（ＡＰＣＩ）源であって、そこで前記トリプル四重極型質量分析計が、グループＢのＭＲＭ遷移：
４３９．８＞３５．１（クロルデン）、
４４１．８＞３５．１（クロルデン）、
２７５．８＞３５．１（ＰＣＮＢ）、
２７３．８＞３５．１（ＰＣＮＢ）、
２７５．８＞２０１．９（ＰＣＮＢ）、
２１６．８＞３５．０（エトリジアゾール）、
２１８．８＞３５．０（エトリジアゾール）、
３４６．９＞７９．０（クロルフェナピル）、及び
３４８．９＞８１．０（クロルフェナピル）からなる群から選択される、ＭＲＭ遷移を検出するように構成される、前記大気圧化学イオン化（ＡＰＣＩ）源、または
（ｃ）前記ＥＳＩ源及び前記ＡＰＣＩ源、を含む、前記トリプル四重極型質量分析計。
【請求項２】
前記ＥＳＩ源を含む、請求項１に記載のトリプル四重極型質量分析計。
【請求項３】
前記ＡＰＣＩ源を含む、請求項１に記載のトリプル四重極型質量分析計。
【請求項４】
前記ＥＳＩ源及び前記ＡＰＣＩ源を含む、請求項１に記載のトリプル四重極型質量分析計。
【請求項５】
グループＣのＭＲＭ遷移：
１８４．０＞１４３．０（アセフェート）、
４０４．１＞３７２．０（アゾキシストロビン）、
１６１．１＞１４３．０（ダミノジッド）、
３０２．１＞８８．０（フェノキシカルブ）、
３０２．１＞１１６（フェノキシカルブ）、
２９７．０＞１５９．０（イマザリル）、
３３１．２＞１２１．０（ジャスモリンＩ）、
３３１．０＞１２７．０（マラチオン）、
１６３．１＞８８．０（メトミル）、
１６３．１＞１０６．０（メトミル）、及び
２７６．２＞２１０．０（ＭＧＫ−２６４）からなる群から選択される、ＭＲＭ遷移を検出するように更に構成される、請求項１〜４のいずれか一項に記載のトリプル四重極型質量分析計。
【請求項６】
グループＤのＭＲＭ遷移：
２２３．１＞９９．０（アセタミプリド）、
２２３．１＞１２６．０（アセタミプリド）、
４０４．１＞３４４．０（アゾキシストロビン）、
３０１．１＞１７０．０（ビフェナゼート）、
３０１．１＞１９８．０（ビフェナゼート）、
４４０．１＞１６６．１（ビフェントリン）、
４４０．１＞１８１．１（ビフェントリン）、
３４３．０＞１４０．０（ボスカリド）、
２０２．１＞１２７．０（カルバリル）、
２０２．１＞１４５．０（カルバリル）、
２２２．１＞１２３．０（カルボフラン）、
２２２．１＞１６５．０（カルボフラン）、
４８４．０＞２８５．９（クロラントラニリプロール）、
４８４．０＞４５２．９（クロラントラニリプロール）、
３４９．９＞９７．０（クロルピリホス）、
３０３．０＞１０２．０（クロフェンテジン）、
３０３．０＞１３８．０（クロフェンテジン）、
４３３．１＞１９１．１（シペルメトリン）、
２２０．９＞１０９．０（ジクロルボス）、
２３０．０＞１２５．０（ジメトエート）、
２３０．０＞１９９．０（ジメトエート）、
２４３．１＞１３１．０（エトプロホス）、
２４３．１＞１７３．０（エトプロホス）、
３９４．２＞１０７．１（エトフェンプロックス）、
３９４．２＞１７７．１（エトフェンプロックス）、
３６０．２＞５７．１（エトキサゾール）、
３６０．２＞１４１．０（エトキサゾール）、
４２２．２＞１３５．０（フェンピロキシメート）、
４２２．２＞３６６．１（フェンピロキシメート）、
２３０．１＞１７４．０（フロニカミド）、
２３０．１＞２０３．０（フロニカミド）、
３５３．１＞１６８．０（ヘキシチアゾクス）、
３５３．１＞２２８．０（ヘキシチアゾクス）、
２９７．０＞２０１．０（イマザリル）、
２５６．１＞１７５．０（イミダクロプリド）、
２５６．１＞２０９．０（イミダクロプリド）、
３１４．１＞２２２（クレソキシムメチル）、
３１４．１＞２３５．０（クレソキシムメチル）、
２８０．２＞１９２．１（メタラキシル）、
２２６．１＞１２１．０（メチオカルブ）、
２２６．１＞１６９．０（メチオカルブ）、
２８９．１＞７０．０（ミクロブタニル）、
２８９．１＞１２５．０（ミクロブタニル）、
２３７．１＞７２．０（オキサミル）、
２３７．１＞９０．０（オキサミル）、
２９４．１＞７０．０（パクロブトラゾール）、
２９４．１＞１２５．０（パクロブトラゾール）、
２６４．０＞１２４．９（パラチオンメチル）、
２６４．０＞２３１．９（パラチオンメチル）、
４０８．１＞１８３．０（ペルメトリン）、
４０８．１＞３５５．０（ペルメトリン）、
３１８．０＞１６０．０（ホスメット）、
３５６．２＞１１９．０（ピペロニルブトキシド）、
３５６．２＞１７７．０（ピペロニルブトキシド）、
３０１．２＞１３２．９（プラレトリン）、
３０１．２＞１６８．９（プラレトリン）、
３４２．１＞６９．０（プロピコナゾール）、
３４２．１＞１５９．０（プロピコナゾール）、
２１０．１＞１１１．０（プロポクスル）、
２１０．１＞１６８．０（プロポクスル）、
３２９．２＞１６１．０（ピレトリンＩ）、
３７３．２＞１６１．０（ピレトリンＩＩ）、
３６５．１＞１４７．０（ピリダベン）、
３６５．１＞３０９．０（ピリダベン）、
７３２．５＞９８．０（スピノシンＡ）、
７３２．５＞１４２．０（スピノシンＡ）、
２７３．１＞１８７．０（スピロメシフェン）、
２７３．１＞２５５．０（スピロメシフェン）、
３７４．２＞３０２．１（スピロテトラマト）、
２９８．３＞１００．１（スピロキサミン）、
２９８．３＞１４４．１（スピロキサミン）、
３０８．０＞７０．０（テブコナゾール）、
３０８．０＞１２５．０（テブコナゾール）、
２５３．０＞９９．０（チアクロプリド）、
２９２．０＞１８１．０（チアメトキサム）、
２９２．０＞２１１．０（チアメトキサム）、
４０９．１＞１８６．０（トリフロキシストロビン）、及び
４０９．１＞２０６．０（トリフロキシストロビン）からなる群から選択される、ＭＲＭ遷移を検出するように更に構成される、請求項１〜５のいずれか一項に記載のトリプル四重極型質量分析計。
【請求項７】
グループＥのＭＲＭ遷移：
２２１．１＞１７９（アトラジン−Ｄ５）、
３４３．０＞３０７．０（ボスカリド）、
２０９．２＞１５２．１（カルバリル−Ｄ７）、
３４９．９＞１９８（クロルピリホス）、
４５１．１＞２０６（シフルトリン）、
３０５．１＞９７．０（ダイアジノン）、
３０５．１＞１６９．０（ダイアジノン）、
３１５．２＞１７０．０（ダイアジノン−Ｄ１０）、
２２７．０＞１１５．０（ジクロルボス−Ｄ６）、
２３６．１＞２０５．０（ジメトエート−Ｄ６）、
２８０．２＞２２０．１（メタラキシル）、及び
２５３．０＞１２６．０（チアクロプリド）からなる群から選択される、ＭＲＭ遷移を検出するように更に構成される、請求項１〜６のいずれか一項に記載のトリプル四重極型質量分析計。
【請求項８】
グループＦのＭＲＭ遷移：
３１３．１＞２８５．０（マイコトキシンＢ１）、
３１３．１＞２６９．０（マイコトキシンＢ１）、
３１３．１＞２４１．０（マイコトキシンＢ１）、
３１５．１＞２８７．０（マイコトキシンＢ２）、
３１５．１＞２４３．０（マイコトキシンＢ２）、
３２９．１＞２４３．０（マイコトキシンＧ１）、
３２９．１＞２１４．０（マイコトキシンＧ１）、
３２９．１＞２００．０（マイコトキシンＧ１）、
３３１．１＞２４５．０（マイコトキシンＧ２）、
３３１．１＞１８９．０（マイコトキシンＧ２）、
４０４．１＞３５８．０（オクラトキシンＡ）、
４０４．１＞２３９．０（オクラトキシンＡ）、及び
４０４．１＞２２１．０（オクラトキシンＡ）からなる群から選択される、ＭＲＭ遷移を検出するように更に構成される、請求項１〜７のいずれか一項に記載のトリプル四重極型質量分析計。
【請求項９】
請求項１〜８のいずれか一項に記載のトリプル四重極型質量分析計を使用して、試料から１つ以上の質量スペクトルを生成することを含む、前記試料中の農薬を検出する方法。
【請求項１０】
前記試料がカンナビス試料である、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
試料中の農薬を検出する方法であって、
（ａ）液体クロマトグラフィーを介して前記試料から第１の分離流及び第２の分離流を得ることと、
（ｂ）エレクトロスプレーイオン化（ＥＳＩ）源を使用して、前記第１の分離流をイオン化して、第１のイオン化試料流を作製することと、
（ｃ）大気圧化学イオン化（ＡＰＣＩ）源を使用して、前記第２の分離流をイオン化して、第２のイオン化試料流を作製することと、
（ｄ）前記グループＡのＭＲＭ遷移からなる群から選択されるＭＲＭ遷移及び前記グループＢのＭＲＭ遷移からなる群から選択される、ＭＲＭ遷移を検出するように構成される、トリプル四重極型質量分析計を使用して質量スペクトルを作製することと、を含む、前記方法。
【請求項１２】
前記トリプル四重極型質量分析計が、グループＣのＭＲＭ遷移からなる群から選択される、ＭＲＭ遷移を検出するように更に構成される、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記トリプル四重極型質量分析計が、グループＤのＭＲＭ遷移からなる群から選択される、ＭＲＭ遷移を検出するように更に構成される、請求項１１または請求項１２の記載の方法。
【請求項１４】
前記トリプル四重極型質量分析計が、グループＥのＭＲＭ遷移からなる群から選択される、ＭＲＭ遷移を検出するように更に構成される、請求項１１〜１３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
前記トリプル四重極型質量分析計が、グループＦのＭＲＭ遷移からなる群から選択される、ＭＲＭ遷移を検出するように更に構成される、請求項１１〜１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６】
前記ＡＰＣＩ源が、空気、窒素、二酸化炭素及びアルゴンからなる群から選択される噴霧ガスを使用する、請求項１１〜１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７】
前記液体クロマトグラフィーが、中性または酸性添加剤を含まない移動相を含む、請求項１１〜１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８】
前記液体クロマトグラフィーが高速勾配及び低速勾配を含む、請求項１１〜１７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９】
前記試料が、更にメタノールで希釈したアセトニトリル抽出物である、請求項１１〜１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０】
前記試料がカンナビス試料である、請求項１１〜１９のいずれか一項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、２０１８年１月２３日出願の米国仮特許出願第６２／６２０，９６１号及び２０１８年３月１日出願の同第６２／６３７，３５０号の優先権を主張し、その全体を参照により組み込む。
【０００２】
本開示に引用される各参照文献は、その全体が本明細書に組み込まれる。
【０００３】
本開示は概ね、質量分析を使用して農薬を検出及び／または定量化するためのシステム及び方法に関する。
【背景技術】
【０００４】
質量分析（ＭＳ）は、未知の試料物質の元素組成を決定するための分析技術であり、定量的及び定性的の両方の用途を有する。例えば、ＭＳは、未知の化合物を同定すること、分子の元素の同位体組成を判定すること、その断片化を観察することにより特定の化合物の構造を決定すること、ならびに試料中の特定の化合物の量を定量化することに有用である。質量分析計は、試験試料をイオン化して、正に荷電した粒子のイオン流を形成することによって、通常作動する。それからイオン流は、質量分化を受けて（時間または空間で）、その質量対電荷（ｍ／ｚ）比に従ってイオン流の異なる粒子集団を分離する。その後、下流の質量分析計は、目的の分析データ（例えば、異なるイオン集団の相対濃度、生成物または断片イオンの質量対電荷比、及び他の潜在的に有用な分析データ）を計算するために、質量分化イオン集団の強度を検出することができる。
【０００５】
目的のイオン（「分析物イオン」）は、イオン流中で、実質的に分析物イオンと同じ名目上のｍ／ｚ比を有する他の望ましくないイオン集団（「干渉イオン」）と共存する場合がある。場合によっては、干渉イオンのｍ／ｚ比は、分析物イオンのｍ／ｚ比に十分近く、質量分析計の分解限界内に収まり、分析物イオンと干渉イオンを区別することができない。質量分析計の分解能の改善が、この種類の干渉（一般に、「同重体」または「スペクトル干渉」と称される）に対処するためのアプローチの１つである。しかし、高分解能の質量分析計は、抽出速度が遅く、イオン信号の損失が高い傾向があり、高感度の検出器を必要とする。達成可能な分解能の限界にも直面する。
【０００６】
そのうえ、ある特定の試料（例えば、カンナビス試料）の農薬分析は、マトリックス干渉の存在下によって妨げられる。カンナビスは、異なる部類（例えば、カンナビノイド、テルペン、炭化水素、糖、脂肪酸、フラボノイドなど）からの化合物を含有し、特に農薬の濃度と高濃度レベルの天然由来のカンナビノイド及びテルペンの間の大きな差のため、その存在は、可変信号イオン抑制及びマトリックス干渉につながる。
【０００７】
農薬を検出して定量化するための、改良したシステム及び方法の必要性が存在する。
【図面の簡単な説明】
【０００８】
【図１Ａ】１つの農薬パネルを検出及び／または定量化する方法のブロック図である。
【図１Ｂ】１つの農薬パネルを検出及び／または定量化する方法のブロック図である。
【図２】空気を噴霧ガスとする大気圧化学イオン化（ＡＰＣＩ）を使用して、タンデム質量分析法を介して農薬を検出及び／または定量化する方法のブロック図である。
【図３】液体クロマトグラフィー及びタンデム質量分析システムの概略図である。
【図４】クラウドコンピューティング環境の例のブロック図である。
【図５】例示の計算装置及び例示のモバイル計算装置のブロック図である。
【図６Ａ】ＨＳＩＤ（高温面誘発脱溶媒）の関数（Ａ）、及び源温度の関数（Ｂ）としてアバメクチン信号を示すグラフである。
【図６Ｂ】同上。
【図７−１】３８５．２＞１８９（Ａ、Ｃ）または、３８５．２＞３４３．１（Ｂ、Ｄ）で、多重反応モニタリング（ＭＲＭ）遷移を使用してアセキノシルの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１００ｐｐｂ（１０億分の１重量部）のアセキノシルを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。ＮＤ（検出されず）。Ｓ／Ｎ（信号ノイズ比）。
【図７−２】同上。
【図８】アセキノシルの前駆体（親）イオンの質量スキャンである。
【図９−１】Ａ〜Ｄは、４０２．２＞１８９（Ａ、Ｃ）または４０２．２＞３４３．１（Ｂ、Ｄ）のＭＲＭ遷移を使用してアセキノシルの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１００ｐｐｂのアセキノシルを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図９−２】同上。
【図１０−１】Ａは、アバメクチンの前駆体（親）イオンの質量スキャンである。Ｂ〜Ｅは、８９０．５＞５６７．２（Ｂ、Ｄ）または８９０．５＞３０５．１（Ｃ、Ｅ）のＭＲＭ遷移を使用してアバメクチンの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ｂ及びＣは、１００ｐｐｂのアバメクチンを含むカンナビス試料である。Ｄ及びＥは、空のカンナビス試料である。
【図１０−２】同上。
【図１０−３】同上。
【図１１−１】Ａ〜Ｄは、１００ｐｐｂのアルディカーブを含み、２０８＞８９（Ａ）、２０８＞１１６（Ｂ）、１１６＞７０（Ｃ）及び１１６＞８９（Ｄ）のＭＲＭ遷移を使用してアルディカーブの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。
【図１１−２】同上。
【図１２】Ａ〜Ｂは、ＭＲＭ遷移１６３．１＞８８を使用してメトミルの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａは、１００ｐｐｂのメトミルを含むカンナビス試料である。Ｂは、空のカンナビス試料である。
【図１３】Ａ〜Ｂは、ＭＲＭ遷移３１６．９＞２６３．９を使用してキャプタンの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａは、１００ｐｐｂのキャプタンを含むカンナビス試料である。Ｂは、空のカンナビス試料である。
【図１４−１】Ａは、クロルフェナピルの前駆体（親）イオンの質量スキャンである。Ｂ〜Ｅは、様々なＭＲＭ遷移で使用する、クロルフェナピルのアンモニウム（［Ｍ＋ＮＨ４］＋）付加物に関して得られた信号振幅を示す、クロマトグラムである。Ｂは４２６＞５９、Ｃは４２６＞２７１、Ｄは４２６＞３７６、Ｅは４２６＞４０９である。Ｆ〜Ｉは、様々なＭＲＭ遷移で使用する、プロトン化クロルフェナピル（［Ｍ＋Ｈ］＋）に関して得られた信号振幅を示す、クロマトグラムである。Ｆは４０９＞４１、Ｇは４０９＞５９、Ｈは４０９＞２７１、Ｉは４０９＞３７９である。Ｊ〜Ｋは、１００ｐｐｂのクロルフェナピルを含み、ＭＲＭ遷移４０９＞２７１（Ｊ）及び４０９＞３７９（Ｋ）を使用して得た、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ｌ〜Ｎは、１００ｐｐｂのクロルフェナピルを含み、ＭＲＭ遷移４０９＞５９（Ｌ）、４２６＞５９（Ｍ）及び４２６＞４０９（Ｎ）を使用して得た、カンナビス試料のクロマトグラムである。
【図１４−２】同上。
【図１４−３】同上。
【図１４−４】同上。
【図１４−５】同上。
【図１４−６】同上。
【図１４−７】同上。
【図１４−８】同上。
【図１５−１】Ａ〜Ｂは、ＭＲＭ遷移４０９．１＞１８６（Ａ）及び４０９．１＞２０６（Ｂ）を使用してトリフロキシストロビンの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ｃは、ＭＲＭ遷移４０９．１＞５９を使用してトリフロキシストロビン及びクロルフェナピルの存在を分析する、クロマトグラムである。
【図１５−２】同上。
【図１６−１】Ａは、ナレド（「ジブロム」とも称される）の同位体分布を示すグラフである。Ｂは、ナレドを含む試料の前駆体（親）の質量スキャンである。Ｃ〜Ｆは、１００ｐｐｂのナレドを含み、ＭＲＭ遷移３８０．８＞１２７（Ｃ）、３７８．８＞１２７（Ｄ）、３８０．８＞１０９（Ｅ）及び３７８．８＞１２７（Ｆ）を使用してナレドの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。
【図１６−２】同上。
【図１６−３】同上。
【図１６−４】同上。
【図１７−１】Ａ及びＢは、ダミノジッドのプロダクトイオンスキャンを示すグラフである。Ａは、高衝突エネルギー（ＣＥ）＝−３０Ｖである。Ｂは、低ＣＥ＝−１５Ｖである。Ｃ〜Ｅは、１００ｐｐｂのダミノジッドを含み、ＭＲＭ遷移１６１．１＞４４（Ｃ）、１６１．１＞１０１（Ｄ）及び１６１．１＞１４３（Ｅ）を使用してダミノジッドの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。
【図１７−２】同上。
【図１７−３】同上。
【図１８】Ａ〜Ｂは、ＭＲＭ遷移１８４＞１４３を使用してアセフェートの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａは、１００ｐｐｂのアセフェートを含むカンナビス試料である。Ｂは、空のカンナビス試料である。
【図１９】Ａ〜Ｂは、ＭＲＭ遷移２９７＞４１を使用してイマザリルの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａは、１００ｐｐｂのイマザリルを含むカンナビス試料である。Ｂは、空のカンナビス試料である。
【図２０−１】Ａ及びＢは、Ｎ−オクチルビシクロヘプテンジカルボキシイミド（ＭＧＫ−２６４）のプロダクトイオンスキャンである。Ａは、低ＣＥ＝−２５Ｖである。Ｂは、高ＣＥ＝−５０Ｖである。Ｃ〜Ｅは、１００ｐｐｂのＭＧＫ−２６４を含み、ＭＲＭ遷移２７６．２＞９８（Ｃ）、２７６．２＞１２１（Ｄ）及び２７６．２＞２１０（Ｅ）を使用してＭＧＫ−２６４の存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。
【図２０−２】同上。
【図２０−３】同上。
【図２１−１】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移３６１．２＞２１３（Ａ、Ｃ）及び３６１．２＞１０７（Ｂ、Ｄ）を使用してシネリンＩＩの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１０００ｐｐｂのシネリンＩＩを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図２１−２】同上。
【図２２】Ａ〜Ｂは、ＭＲＭ遷移３１７．２＞１４９を使用してシネリンＩの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａは、１０００ｐｐｂのシネリンＩを含むカンナビス試料である。Ｂは、空のカンナビス試料である。
【図２３−１】Ａ〜Ｆは、ＭＲＭ遷移３０２．１＞８８（Ａ、Ｃ）、３０２．１＞２５６（Ｂ、Ｄ）及び３０２．１＞１１６（Ｅ、Ｆ）を使用してフェノキシカルブの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ、Ｂ及びＥは、１００ｐｐｂのフェノキシカルブを含むカンナビス試料である。Ｃ、Ｄ及びＥは、空のカンナビス試料である。
【図２３−２】同上。
【図２３−３】同上。
【図２４−１】Ａ〜Ｆは、ＭＲＭ遷移３８８．１＞１６５（Ａ、Ｄ）、３８８．１＞２７３（Ｂ、Ｅ）及び３８８．１＞３０１（Ｃ、Ｆ）を使用してジメトモーフの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ、Ｂ及びＣは、１００ｐｐｂのジメトモルフを含むカンナビス試料である。Ｄ、Ｅ及びＦは、空のカンナビス試料である。
【図２４−２】同上。
【図２４−３】同上。
【図２５】Ａ〜Ｂは、ＭＲＭ遷移３０２．１＞５５を使用してフェンヘキサミドの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａは、１００ｐｐｂのフェンヘキサミドを含むカンナビス試料である。Ｂは、空のカンナビス試料である。
【図２６】Ａ〜Ｂは、ＭＲＭ遷移７４８.５＞９８を使用してスピネトラムの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａは、１００ｐｐｂのスピネトラムを含むカンナビス試料である。Ｂは、空のカンナビス試料である。
【図２７Ａ】全イオンクロマトグラム（ＴＩＣ）である。一般的な液体クロマトグラフィー勾配（固定勾配率）を使用して得られた、空のカンナビス試料のＴＩＣである。
【図２７Ｂ】全イオンクロマトグラム（ＴＩＣ）である。１００ｐｐｂの農薬を含むカンナビス試料のＴＩＣである。
【図２７Ｃ】全イオンクロマトグラム（ＴＩＣ）である。実施例１に記載した条件を使用して得られた空のカンナビス試料のＴＩＣである。実施例２も参照のこと。
【図２７Ｄ】種々の種類の液体クロマトグラフィー（ＬＣ）カラムのファン・デームテルの曲線を示すグラフである。
【図２７Ｅ】アゾキシストロビンの信号に対する流量の効果を示すグラフである。
【図２７Ｆ】アゾキシストロビンの信号に対する流量の効果を示すグラフである。
【図２８】Ａ〜Ｃは、１００ｐｐｂのマラチオンを含み、ＭＲＭ遷移３３１＞９９（Ａ）、３３１＞２８５（Ｂ）及び３３１＞１２７（Ｃ）を使用してマラチオンの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。
【図２９】Ａは、内径（ＩＤ）２．１ｍｍのＬＣカラムを使用してスピロキサミンの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ｂは、ＩＤ４．６ｍｍのカラムを使用してスピロキサミンの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。
【図３０−１】Ａは、１００％メタノールの溶出溶媒を使用するＬＣ法を介して処理された試料の、アセキノシルと関連するＭＲＭ遷移の強度を、時間の関数として示すグラフである。Ｂは、７５％メタノール：２５％アセトニトリルの溶出溶媒を使用するＬＣ法を介して処理された試料の、アセキノシルと関連するＭＲＭ遷移の強度を、時間の関数として示すグラフである。Ｃは、ＬＣ法で使用する有機溶出溶媒のメタノール濃度の割合の関数として、アセキノシル及びアバメクチンのＭＲＭ遷移信号強度を示すグラフである。
【図３０−２】同上。
【図３１】カンナビス試料の全体の農薬回収を示すグラフである。
【図３２】Ａ〜Ｂは、カンナビスマトリックス（Ａ）中及び溶媒（Ｂ）中のアゾキシストロビンの較正曲線である。
【図３３】Ａは、ペンタクロロニトロベンゼン（ＰＣＮＢ、キントゼン）の前駆体（親）の質量スキャンである。Ｂは、キントゼンの同位体分布を示すグラフである。
【図３４】Ａは、クロルデンの前駆体（親）イオンの質量スキャンである。Ｂは、クロルデンの同位体分布を示すグラフである。
【図３５】Ａは、クロルデンを含み、添加剤なしの移動相を使用するＬＣ法を用いて処理された試料の、前駆体（親）の質量スキャンである。Ｂは、クロルデンを含み、ギ酸を有する移動相を使用するＬＣ法を用いて処理された試料の、前駆体（親）の質量スキャンである。
【図３６】負イオンモードのＡＰＣＩ源を使用して得られた、キントゼンのプロダクトイオンスキャンである。
【図３７】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移２７５．８＞３５．１（Ａ、Ｃ）及び２７３．８＞３５．１（Ｂ、Ｄ）を使用してキントゼンの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１００ｐｐｂのキントゼンを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図３８】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移４３９．８＞３５．１（Ａ、Ｃ）及び４４１．８＞３５．１（Ｂ、Ｄ）を使用してクロルデンの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１００ｐｐｂのクロルデンを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図３９】負イオンモードでＡＰＣＩ源を使用して得られた、バックグラウンドスペクトルを示すグラフである。
【図４０Ａ】７２の農薬の定量／同定の両方のＭＲＭ遷移の感度に基づいて算出された、定量下限（ＬＯＱ）を示すグラフである。
【図４０Ｂ】７２の農薬の定量ＭＲＭ遷移の感度のみに基づいて算出された、ＬＯＱを示すグラフである。
【図４１】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移１６１．１＞１４３（Ａ、Ｃ）及び１６１．１＞４４（Ｂ、Ｄ）を使用してダミノジッドの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１００ｐｐｂのダミノジッドを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図４２】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移２３７．１＞７２（Ａ、Ｃ）及び２３７．１＞９０（Ｂ、Ｄ）を使用してオキサミルの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１００ｐｐｂのオキサミルを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図４３】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移２３０．１＞２０３（Ａ、Ｃ）及び２３０．１＞１７４（Ｂ、Ｄ）を使用してフロニカミドの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１００ｐｐｂのフロニカミドを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図４４】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移１８４＞１４３（Ａ、Ｃ）及び１８４＞４９（Ｂ、Ｄ）を使用してアセフェートの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１００ｐｐｂのアセフェートを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図４５】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移１６３．１＞８８（Ａ、Ｃ）及び１６３．１＞１０６（Ｂ、Ｄ）を使用してメトミルの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。図Ａ及び図Ｂは、１００ｐｐｂのメトミルを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図４６】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移２９２＞２１１（Ａ、Ｃ）及び２９２＞１８１（Ｂ、Ｄ）を使用してチアメトキサムの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１００ｐｐｂのチアメトキサムを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図４７】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移２５６．１＞２０９（Ａ、Ｃ）及び２５６．１＞１７５（Ｂ、Ｄ）を使用してイミダクロプリドの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１００ｐｐｂのイミダクロプリドを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図４８】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移２３０＞１２５（Ａ、Ｃ）及び２３０＞１９９（Ｂ、Ｄ）を使用してジメトエートの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１００ｐｐｂのジメトエートを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図４９】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移２２５＞１２７（Ａ、Ｃ）及び２２５＞１０９（Ｂ、Ｄ）を使用してメビンホスの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１００ｐｐｂのメビンホスを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図５０】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移２２３．１＞９９（Ａ、Ｃ）及び２２３．１＞１２６（Ｂ、Ｄ）を使用してアセタミプリドの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１００ｐｐｂのアセタミプリドを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図５１】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移２５３＞１２６（Ａ、Ｃ）及び２５３＞９０（Ｂ、Ｄ）を使用してチアクロプリドの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１００ｐｐｂのチアクロプリドを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図５２】Ａ〜Ｂは、ＭＲＭ遷移２９７＞１５９を使用してイマザリルの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａは、１００ｐｐｂのイマザリルを含むカンナビス試料である。Ｂは、空のカンナビス試料である。
【図５３】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移３４３．１＞１５１（Ａ、Ｃ）及び３４３．１＞２６８（Ｂ、Ｄ）を使用してチオファネートメチルの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１００ｐｐｂのチオファネートメチルを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図５４】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移２０８＞８９（Ａ、Ｃ）及び２０８＞１１６（Ｂ、Ｄ）を使用してアルディカーブの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１００ｐｐｂのアルディカーブを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図５５】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移２１０．１＞１６８（Ａ、Ｃ）及び２１０．１＞１１１（Ｂ、Ｄ）を使用してプロポクスルの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１００ｐｐｂのプロポクスルを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図５６】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移２２０．９＞１０９（Ａ、Ｃ）及び２２０．９＞１２７（Ｂ、Ｄ）を使用してジクロルボスの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１００ｐｐｂのジクロルボスを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図５７】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移２２２．１＞１２３（Ａ、Ｃ）及び２２２．１＞１６５（Ｂ、Ｄ）を使用して、カルボフランの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１００ｐｐｂのカルボフランを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図５８】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移２０２．１＞１２７（Ａ、Ｃ）及び２０２．１＞１４５（Ｂ、Ｄ）を使用してカルバリルの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１００ｐｐｂのカルバリルを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図５９】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移２９８．３＞１００．１（Ａ、Ｃ）及び２９８．３＞１４４．１（Ｂ、Ｄ）を使用してスピロキサミンの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１００ｐｐｂのスピロキサミンを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図６０】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移３８０．８＞１０９（Ａ、Ｃ）及び３８０．８＞１２７（Ｂ、Ｄ）を使用してナレド（「ジブロム」）の存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１００ｐｐｂのナレドを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図６１】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移２８０．２＞１９２．１（Ａ、Ｃ）及び２８０．２＞２４８．１（Ｂ、Ｄ）を使用してメタラキシルの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１００ｐｐｂのメタラキシルを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図６２】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移４８４＞２８５．９（Ａ、Ｃ）及び４８４＞４５２．９（Ｂ、Ｄ）を使用してクロラントラニリプロールの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１００ｐｐｂのクロラントラニリプロールを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図６３】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移３１８＞１３３（Ａ、Ｃ）及び３１８＞１６０（Ｂ、Ｄ）を使用してホスメットの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１００ｐｐｂのホスメットを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図６４】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移２６４＞１２４．９（Ａ、Ｃ）及び２６４＞２３１．９（Ｂ、Ｄ）を使用してメチルパラチオンの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１００ｐｐｂのメチルパラチオンを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図６５】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移４０４．１＞３４４（Ａ、Ｃ）及び４０４．１＞３７２（Ｂ、Ｄ）を使用してアゾキシストロビンの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１００ｐｐｂのアゾキシストロビンを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図６６】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移２２６．１＞１２１（Ａ、Ｃ）及び２２６．１＞１６９（Ｂ、Ｄ）を使用してメチオカルブの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１００ｐｐｂのメチオカルブを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図６７】Ａ〜Ｂは、ＭＲＭ遷移３１６．９＞２３５．９を使用してキャプタンの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａは、１０００ｐｐｂのキャプタンを含むカンナビス試料である。Ｂは、空のカンナビス試料である。
【図６８】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移３４３＞１４０（Ａ、Ｃ）及び３４３＞２７２（Ｂ、Ｄ）を使用してボスカリドの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１００ｐｐｂのボスカリドを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図６９】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移２４７．１＞１２６（Ａ、Ｃ）及び２４７．１＞１８０（Ｂ、Ｄ）を使用してフルジオキソニルの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１００ｐｐｂのフルジオキソニルを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図７０】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移２９４．１＞１２５（Ａ、Ｃ）及び２９４．１＞７０（Ｂ、Ｄ）を使用してパクロブトラゾールの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１００ｐｐｂのパクロブトラゾールを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図７１】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移３３１＞２８５（Ａ、Ｃ）及び３３１＞１２７（Ｂ、Ｄ）を使用してマラチオンの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１００ｐｐｂのマラチオンを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図７２】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移３８８．１＞２７３（Ａ、Ｃ）及び３８８．１＞３０１（Ｂ、Ｄ）を使用してジメトモルフの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１００ｐｐｂのジメトモルフを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図７３】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移２８９．１＞７０（Ａ、Ｃ）及び２８９．１＞１２５（Ｂ、Ｄ）を使用してミクロブタニルの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１００ｐｐｂのミクロブタニルを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図７４】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移３０１．１＞１７０（Ａ、Ｃ）及び３０１．１＞１９８（Ｂ、Ｄ）を使用してビフェナゼートの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１００ｐｐｂのビフェナゼートを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図７５】Ａ〜Ｂは、ＭＲＭ遷移３０２．１＞５５を使用してフェンヘキサミドの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａは、１００ｐｐｂのフェンヘキサミドを含むカンナビス試料である。Ｂは、空のカンナビス試料である。
【図７６】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移４３５＞２５０（Ａ、Ｃ）及び４３５＞３３０（Ｂ、Ｄ）を使用してフィプロニルの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１００ｐｐｂのフィプロニルを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図７７】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移３７４．２＞２１６（Ａ、Ｃ）及び３７４．２＞３０２．１（Ｂ、Ｄ）を使用してスピロテトラマトの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１００ｐｐｂのスピロテトラマトを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図７８】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移２４３．１＞１３１（Ａ、Ｃ）及び２４３．１＞１７３（Ｂ、Ｄ）を使用してエトプロホスの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１００ｐｐｂのエトプロホスを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図７９】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移３０２．１＞２５６（Ａ、Ｃ）及び３０２．１＞１１６（Ｂ、Ｄ）を使用してフェノキシカルブの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムであるＡ及びＢは、１００ｐｐｂのフェノキシカルブを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図８０】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移３１４．１＞２２２（Ａ、Ｃ）及び３１４．１＞２３５（Ｂ、Ｄ）を使用してクレソキシムメチルの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１００ｐｐｂのクレソキシムメチルを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図８１】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移３０８＞７０（Ａ、Ｃ）及び３０８＞１２５（Ｂ、Ｄ）を使用してテブコナゾールの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１００ｐｐｂのテブコナゾールを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図８２】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移３０５．１＞９７（Ａ、Ｃ）及び３０５．１＞１６９（Ｂ、Ｄ）を使用してダイアジノンの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１００ｐｐｂのダイアジノンを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図８３】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移７３２．５＞９８（Ａ、Ｃ）及び７３２．５＞１４２（Ｂ、Ｄ）を使用してスピノシンＡの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１００ｐｐｂのスピノシンＡを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図８４】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移３６３＞２２６．９（Ａ、Ｃ）及び３６３＞３０６．９（Ｂ、Ｄ）を使用してクマホスの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１００ｐｐｂのクマホスを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図８５】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移２７６．２＞９８（Ａ、Ｃ）及び２７６．２＞２１０．１（Ｂ、Ｄ）を使用してＭＧＫ−２６４の存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１００ｐｐｂのＭＧＫ−２６４を含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図８６】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移３０３＞１０２（Ａ、Ｃ）及び３０３＞１３８（Ｂ、Ｄ）を使用してクロフェンテジンの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１００ｐｐｂのクロフェンテジンを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図８７】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移３４２．１＞６９（Ａ、Ｃ）及び３４２．１＞１５９（Ｂ、Ｄ）を使用してプロピコナゾールの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１００ｐｐｂのプロピコナゾールを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図８８】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移３０１．２＞１３２．９（Ａ、Ｃ）及び３０１．２＞１６８．９（Ｂ、Ｄ）を使用してプラレトリンの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１００ｐｐｂのプラレトリンを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図８９】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移７４６．５＞９８（Ａ、Ｃ）及び７４６．５＞１４２（Ｂ、Ｄ）を使用してスピノシンＤの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１００ｐｐｂのスピノシンＤを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図９０】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移４５１．１＞１９１（Ａ、Ｃ）及び４５１．１＞４３４（Ｂ、Ｄ）を使用してシフルトリンの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１０００ｐｐｂのシフルトリンを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図９１】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移４０９．１＞１８６（Ａ、Ｃ）及び４０９．１＞２０６（Ｂ、Ｄ）を使用してトリフロキシストロビンの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１００ｐｐｂのトリフロキシストロビンを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図９２】Ａ〜Ｂは、ＭＲＭ遷移７４８.５＞１４２を使用してスピネトラムの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａは、１００ｐｐｂのスピネトラムを含むカンナビス試料である。Ｂは、空のカンナビス試料である。
【図９３】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移４２６＞４０９（Ａ、Ｃ）及び４２６＞５９．１（Ｂ、Ｄ）を使用してクロルフェナピルの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１０００ｐｐｂのクロルフェナピルを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図９４】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移４３３．１＞１２７（Ａ、Ｃ）及び４３３．１＞１９１．１（Ｂ、Ｄ）を使用してシペルメトリンの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１０００ｐｐｂのシペルメトリンを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図９５】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移４０８．１＞１８３（Ａ、Ｃ）及び４０８．１＞３５５（Ｂ、Ｄ）を使用してペルメトリンの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１００ｐｐｂのペルメトリンを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図９６】Ａ〜Ｂは、ＭＲＭ遷移３６１．２＞１４９を使用してシネリンＩＩの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａは、１０００ｐｐｂのシネリンＩＩを含むカンナビス試料である。Ｂは、空のカンナビス試料である。
【図９７】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移３７５．２＞１６３（Ａ、Ｃ）及び３７５．２＞２１３（Ｂ、Ｄ）を使用してジャスモリンＩＩの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１００ｐｐｂのジャスモリンＩＩを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図９８】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移３７３．２＞１６１（Ａ、Ｃ）及び３７３．２＞１４３（Ｂ、Ｄ）を使用してピレトリンＩＩの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１０００ｐｐｂのピレトリンＩＩを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図９９】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移３３１．２＞１６３（Ａ、Ｃ）及び３３１．２＞１２１（Ｂ、Ｄ）を使用してジャスモリンＩの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１０００ｐｐｂのジャスモリンＩを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図１００】Ａ〜Ｂは、ＭＲＭ遷移３１７．２＞１０７を使用してシネリンＩの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａは、１０００ｐｐｂのシネリンＩを含むカンナビス試料である。Ｂは、空のカンナビス試料である。
【図１０１】Ａ〜Ｃは、ＭＲＭ遷移３２９．２＞１４３（Ａ）及び３２９．２＞１６１（図Ｂ、Ｃ）を使用してピレトリンＩの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、５８０ｐｐｂのピレトリンＩを含むカンナビス試料である。Ｃは、空のカンナビス試料である。
【図１０２】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移３４９．９＞９７（Ａ、Ｃ）及び３４９．９＞３２１．９（Ｂ、Ｄ）を使用してクロルピリホスの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１００ｐｐｂのクロルピリホスを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図１０３】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移３５６．２＞１１９（Ａ、Ｃ）及び３５６．２＞１７７（Ｂ、Ｄ）を使用してピペロニルブトキシドの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１００ｐｐｂのピペロニルブトキシドを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図１０４】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移３５３．１＞１６８（Ａ、Ｃ）及び３５３．１＞２２８（Ｂ、Ｄ）を使用してヘキシチアゾクスの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１００ｐｐｂのヘキシチアゾクスを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図１０５】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移３６０．２＞５７．１（Ａ、Ｃ）及び３６０．２＞１４１（Ｂ、Ｄ）を使用してエトキサゾールの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１００ｐｐｂのエトキサゾールを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図１０６】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移２７３．１＞１８７（Ａ、Ｃ）及び２７３．１＞２５５（Ｂ、Ｄ）を使用してスピロメシフェンの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１００ｐｐｂのスピロメシフェンを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図１０７】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移４２２．２＞１３５（Ａ、Ｃ）及び４２２．２＞３６６．１（Ｂ、Ｄ）を使用してフェンピロキシメートの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１００ｐｐｂのフェンピロキシメートを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図１０８】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移３６５．１＞１４７（Ａ、Ｃ）及び３６５．１＞３０９（Ｂ、Ｄ）を使用してピリダベンの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１００ｐｐｂのピリダベンを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図１０９】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移８９０．５＞３０５．１（Ａ、Ｃ）及び８９０．５＞５６７．２（Ｂ、Ｄ）を使用してアバメクチンの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１００ｐｐｂのアバメクチンを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図１１０】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移３９４．２＞１０７．１（Ａ、Ｃ）及び３９４．２＞１７７．１（Ｂ、Ｄ）を使用してエトフェンプロックスの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１００ｐｐｂのエトフェンプロックスを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図１１１】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移４０２．２＞１８９（Ａ、Ｃ）及び４０２．２＞３４３．１（Ｂ、Ｄ）を使用してアセキノシルの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１００ｐｐｂのアセキノシルを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図１１２】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移４４０．１＞１６６．１（Ａ、Ｃ）及び４４０．１＞１８１．１（Ｂ、Ｄ）を使用してビフェントリンの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ及びＢは、１００ｐｐｂのビフェントリンを含むカンナビス試料である。Ｃ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【図１１３】Ａ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移３８０．８＞１２７（Ａ）、３７８．８＞１２７（Ｂ）、３８２．８＞１２７（Ｃ）及び３７８．８＞１０９（Ｄ）を使用してナレドの存在を分析する、１００ｐｐｂのナレド（ジブロム）を含むカンナビス試料のクロマトグラムである。
【図１１４−１】Ａ〜Ｈは、ＭＲＭ遷移３４２＞６９（Ａ、Ｃ）、３４２＞１５９（Ｂ、Ｄ）、３４４＞６９（Ｅ、Ｇ）及び３４４＞１６１（Ｆ、Ｈ）を使用してプロピコナゾールの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ａ、Ｂ、Ｅ及びＦは、１０ｐｐｂのプロピコナゾールを含むカンナビス試料である。Ｃ、Ｄ、Ｇ及びＨは、空のカンナビス試料である。Ｉ〜Ｊは、１００ｐｐｂのプロピコナゾールを含み、ＭＲＭ遷移３４２＞６９（Ｉ）及び３４２＞１５９（Ｊ）を使用してプロピコナゾールの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。Ｋ〜Ｌは、１００ｐｐｂのプロピコナゾールを含み、ＭＲＭ遷移３４４＞６９（Ｋ）及び３４４＞１６１（Ｌ）を使用してプロピコナゾールの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。
【図１１４−２】同上。
【図１１４−３】同上。
【図１１４−４】同上。
【図１１５−１】Ａ〜Ｈは、１０００ｐｐｂのクロルフェナピルを含み、ＭＲＭ遷移４２３．９＞５９（Ａ）、４０６．９＞５９（Ｂ）、４２５．９＞５９（Ｃ）、４２５．９＞４０８．９（Ｄ）、４０８．９＞５９（Ｅ）、４２３．９＞４０６．９（Ｆ）、４０８．９＞３７８．８（Ｇ）及び４０８．９＞２７０．９（Ｈ）を使用してクロルフェナピルの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。
【図１１５−２】同上。
【図１１５−３】同上。
【図１１５−４】同上。
【図１１６−１】Ａ〜Ｆは、１０００ｐｐｂのシフルトリンを含み、ＭＲＭ遷移４５１＞１９１（Ａ）、４５３＞１９３（Ｂ）、４５１＞１２７（Ｃ）、４５１＞２０６（Ｄ）、４５１＞４３４（Ｅ）及び４５３＞４３６（Ｆ）を使用してシフルトリンの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。
【図１１６−２】同上。
【図１１６−３】同上。
【図１１７−１】Ａ〜Ｅは、１０００ｐｐｂのシペルメトリンを含み、ＭＲＭ遷移４３５．１＞１９３．１（Ａ）、４３３．１＞１９１．１（Ｂ）、４３３．１＞１２７（Ｃ）、４３５．１＞１２７（Ｄ）及び４３３．１＞９１（Ｅ）を使用してシペルメトリンの存在を分析する、カンナビス試料のクロマトグラムである。
【図１１７−２】同上。
【図１１７−３】同上。
【図１１８】Ａは、プロトン付加分子イオンに基づくＭＲＭ遷移での、カンナビスマトリックス（左トレース）、及びカンナビスマトリックス中にて０．１μｇ／ｇの濃度でスパイク添加したアセキノシル（右トレース）の反応のオーバレイである。Ｂは、付加イオンに基づくＭＲＭ遷移での、カンナビスマトリックス（下方トレース）、及びカンナビスマトリックス中にて０．１μｇ／ｇの濃度でスパイク添加したアセキノシル（上方トレース）の反応のオーバレイである。
【図１１９−１】Ａ〜Ｆは、カンナビスマトリックス中にて０．０１μｇ／ｇの濃度でスパイク添加した農薬の代表的なセットのクロマトグラムである。Ａはオキサミル、Ｂはメタラキシル、Ｃはフェンピロキシメート、Ｄはミクロブタニル、Ｅはエトフェンプロックス、Ｆはアゾキシストロビンである。
【図１１９−２】同上。
【図１１９−３】同上。
【図１２０】ダイアジノン１００ｎｇ／ｍＬを含む、カンナビス花マトリックス抽出物中にスパイク添加した、濃度１００ｎｇ／ｍＬの１週間の注入にわたる長期安定性データである。
【図１２１】Ａ〜Ｄは、グラフは、カンナビス中の農薬に関してマトリックス適合した較正曲線の例を示す。Ａはミクロブタニル、Ｂはダイアジノン、Ｃはメタラキシル、Ｄはホスメットである。
【図１２２】Ａ〜Ｂは、１００ｐｐｂのアセフェートを含み、２つの抽出方法を使用して調製したカンナビス試料のクロマトグラムである。Ａはアセトニトリルである。Ｂは、５０：５０のアセトニトリルとメタノールである。
【図１２３】Ａ〜Ｂは、１００ｐｐｂのクロルフェナピルを含み、ＡＰＣＩ源を使用してイオン化したカンナビス試料のクロマトグラムである。Ａは、ＭＲＭ遷移３４６．９＞７９、Ｂは、ＭＲＭ遷移３４８．０９＞８１である。
【発明を実施するための形態】
【０００９】
いくつかの無極性及び塩素系農薬は、ＬＣ−ＭＳシステムで使われるエレクトロスプレーイオン源でイオン化するのが困難である。そのため、（例えば、植物原料中の）農薬の分析は通常、ガスクロマトグラフィー質量分析（ＧＣ−ＭＳ）及び液体クロマトグラフィー質量分析（ＬＣ−ＭＳ）方法を使用しなければならない。本開示は、農薬パネルに対して、例えばカンナビス産生物中のこれらの化合物に関する、例えば州の規制当局が設定したアクションリミットよりはるかに低い定量限界（ＬＯＱ）を提供する、単純で費用効果が高く、迅速かつ強力なＬＣ−ＭＳ／ＭＳ法を提供する。
【００１０】
実際に、開示する方法及び装置は、カンナビス植物材料を含む試料における農薬の検出及び／または定量化に関して特に有用である。本開示で特に明記しない限り、「カンナビス」とは、限定されないが、比較的高濃度のテトラヒドロカンナビノール（ＴＨＣ）を含むカンナビス植物（例えば、マリファナ）、ならびに低濃度のＴＨＣ及び高濃度のカンナビジオール（ＣＢＤ）を含むカンナビス植物（例えば、大麻）を含む、すべてのカンナビスを含む。カンナビス植物材料は、カンナビノイド、テルペン及び他の非カンナビノイド化合物などの構成成分を含む、複雑なマトリックスを含む。カンナビノイドは通常、１０〜２０％（１００，０００〜２００，０００百万分率（ｐｐｍ）に対応する）の範囲の量でカンナビス植物材料中に存在する。テルペン及び他の非カンナビノイド化合物も、約１０〜５，０００ｐｐｍの範囲で大量に存在する。しかし、ヒトの消費のための安全性及び／または規制当局によるアクションリミットの遵守を確実にするために、農薬の濃度は、０．００００１〜０．０００１０％（１００〜１，０００百万分率（ｐｐｂ）に対応する）の範囲の量で検出される必要がある。したがって、カンナビノイド、テルペン及び他の化合物などのマトリックス成分からの干渉は、カンナビス試料中の微量の農薬からの所望の信号を圧倒し、かき消す可能性がある。更に、ある特定の実施形態で、カンナビス抽出物を含む試料は、（例えば、マトリックス干渉のレベルを低減するために）１０倍に希釈される。したがって、これらのように希釈した試料中の少量の農薬の検出は、極めて感度が高い技術を必要とする。本明細書に記載の方法は、オレゴン州及びカリフォルニア州の規制当局で特定した種々のアクションリミットよりはるかに低いレベルで農薬を検出及び／または定量化するのに十分な感度を提供する。
【００１１】
そのうえ、このような規制パネルで見いだされる、ある特定の農薬は、ＥＳＩ（ＬＣベース機器でのＬＣ分離と組み合わせて実行される）を介して分析することができるが、いくつかは分析できない。具体的には、特に疎水性及び／または塩素系農薬（例えば、キントゼン（ペンタクロロニトロベンゼンとも称される）、クロルデン、エンドスルファンＩ、エンドサルファンＩＩ及びエトリジアゾール）は、ＥＳＩ技術または他の従来のＬＣ適合イオン化法を使用して分析できない。代わりに、通常ＧＣベースの技術を、これらの農薬を分析するために使用する。したがって、農薬のパネルの試料を試験するのに、一般的に、複数の質量分析器（ＬＣベース機器及びＧＣベース機器）での複数の実行を必要とし、試料の農薬検出及び／または定量化は高額かつ時間のかかるものとなる。
【００１２】
本明細書に記載の方法は、精度を制限し、従来の農薬検出方法がコストと時間のかかる工程となる、農薬の検出に関連する多くの課題を解決する。第１に、本方法は、農薬ごとに、ほとんどまたはまったくマトリックス干渉がない１つ以上のＭＲＭ遷移を使用し、アセキノシル及びプロピコナゾールのＬＯＱを、例えばそれぞれ２０倍ならびに５倍改善する。
【００１３】
第２に、開示する方法は、通常カンナビス試料中で低信号を有する農薬（例えば、アバメクチン、ナレド、ダミノジッド、ＭＧＫ−２６４）の検出を可能にする。
【００１４】
第３に、本方法は、高い試料処理量のために高速ＬＣ法を使用して、平衡時間を含め、実行時間を３０分から１８．５分にまで低減できる。
【００１５】
第４に、開示する方法は、満足な回収率を有する単純かつ高速の試料調製手順を含む。
【００１６】
第５に、開示する方法は、低プロトン親和力、したがって低イオン化効率を有する農薬（例えば、シペルメトリン、シフルトリン、キャプタン、ナレド、ペルメトリン及びピレトリン）を検出できる。
【００１７】
第６に、本方法は、ＡＰＣＩ源を使用して、高塩素系及び無極性農薬（例えば、ＰＣＮＢ、クロルデン）をイオン化し、これにより、ＧＣ−ＭＳを使用してこれらの農薬を検出する必要性を排除する。これによって、農薬及びマイコトキシンのパネルの分析が１つの器具（例えば、ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ  ＱＳＩＧＨＴ（登録商標）トリプル四重極ＬＣ−ＭＳ／ＭＳシステム）だけを使用して行うことが可能になり、ハードウェアを変える必要性がなくなる。
【００１８】
第７に、通常ＥＳＩ源を使用して分析されるクロルフェナピルでさえ、開示する方法は、ＥＳＩ源との使用で推奨されるＭＲＭ遷移だけでなく、ＡＰＣＩ源と共に使用できるＭＲＭ遷移も提供し、カンナビスマトリックス中のこの化合物の分析に関してＥＳＩ源より良好な感度を提供する、少ないマトリックス干渉及び少ないイオン抑制を提供する。
【００１９】
第８に、複雑なマトリックス中の農薬を試験することは、例えば、従来のＧＣ−ＭＳ及びＬＣ−ＭＳシステムを急速に汚す可能性があり、維持費及び中断時間を増加させて、生産性の低下につながる。したがって、いくつかの実施形態では、ＱＳｉｇｈｔシステムのＳＴＡＹＣＬＥＡＮ（商標）技術を使用する。この技術は、高温面誘発脱溶媒（ＨＳＩＤ（商標））を使用し、そこで、高温ガスの連続流が、堆積する可能性がある物を流し出す恒常的な洗浄剤として作用する。イオンがＨＳＩＤ界面からシステムの層流イオンガイドへ移され、次いで背景ガスの流れによって分析領域へ移動するので、軸方向電界は必要でない。このことは、ＱＳｉｇｈｔシステムが、これらの複雑なマトリックス中の農薬を分析する間、電界変動に影響されずに、定期的な保守のために停止することなく、高レベルの性能を一貫して提供することを意味する。
【００２０】
第９に、ＡＰＣＩまたはＥＳＩ源を利用する従来のＬＣ−ＭＳ／ＭＳ法は、ギ酸、ギ酸アンモニウムなどの添加剤を有する移動相を利用するＬＣ法を使用する。これらの添加剤は、試料の分析物のイオン化を支援すると考えられている。しかし、ある特定の実施形態では、本明細書に記載のＡＰＣＩ技術は、ある特定の添加剤（例えば、最大ですべての添加剤）を除外したＬＣ法を、ＡＰＣＩ源によってイオン化された分離流を作製するために使用するとき、ある特定の農薬の検出及び／または定量化限度が改善したという意外な発見を活用する。
【００２１】
具体的には、ある特定の非常に疎水性が高い、及び／または塩素系の農薬（例えば、クロルデン、キントゼン、エンドスルファンＩ、エンドスルファンＩＩ、エトリジアゾール）を検出及び／または定量化するために、試料は、酸性及び／または中性添加剤のない（例えば、いかなる添加剤もない）移動相を使用するＬＣ法を利用して処理されて、その後、ＡＰＣＩ源によってイオン化され得る。ある特定の実施形態では、中性添加剤（例えば、酢酸アンモニウム、例えば、ギ酸アンモニウム）を含むが、酸性添加剤を除外する移動相を使用するＬＣ法が、ＡＰＣＩと組み合わせて使用される。
【００２２】
特定の理論または観察に束縛されるものではないが、このような農薬がＡＰＣＩ源を用いて分析される場合に、いかなる添加剤もない移動相を用いるＬＣ法を使用すると、最も高い信号が観察されることがわかった。酢酸アンモニウムやギ酸アンモニウムなどの中性添加剤の添加は、信号を２分の１〜５分の１に低減することが認められた。ギ酸や酢酸などの酸性添加剤を使用したとき、ＡＰＣＩ源によってイオン化される塩素系農薬の信号は、２０分の１〜５０分の１に低減することがわかった。
【００２３】
ＭＲＭ遷移
本開示は、農薬ごとに１つ以上の特定のＭＲＭ遷移を提供する。本開示にて、ＭＲＭ遷移は、それぞれ「＞」または「／」で区分される、第１及び第２のｍ／ｚ値に対応する２つの数（例えば、３８５．２＞３４３．１または３８５．２／３４３．１）で特定される。すなわち、第１の値は前駆体イオンに対応し、第２の値は衝突セル中の前駆体イオンの断片化の後の生成イオンに対応する。質量分析計の感度に応じて、本開示で提供される遷移に関して、いくつかの変動の可能性がある（例えば、±０．１または±０．２）。したがって、例えば「３８５．２＞３４３．１」は、３８５．１＞３４３．１、３８５．０＞３４３．１、３８５．３＞３４３．１、３８５．４＞３４３．１、３８５．１＞３４３．２、３８５．０＞３４３．２、３８５．３＞３４３．２、３８５．４＞３４３．２、３８５．１＞３４３．３、３８５．０＞３４３．３、３８５．３＞３４３．３、３８５．４＞３４３．３、３８５．１＞３４３．０、３８５．０＞３４３．０、３８５．３＞３４３．０、３８５．４＞３４３．０、３８５．１＞３４２．９、３８５．０＞３４２．９、３８５．３＞３４２．９、及び３８５．４＞３４２．９のうちの１つ以上を含み得る。
【００２４】
開示する方法を用いて検出され得る農薬は、表１に列挙され、通常ＧＣ−ＭＳを使用して分析される農薬（太字）を含む。これらの農薬を検出するために用いる固有のＭＲＭ遷移を、表２Ａ及び表３に提供する。マイコトキシンを検出するために推奨されるＭＲＭ遷移を、表４に提供する。
【００２５】
以下の略記を、表２Ａ、表２Ｂ、表３及び表４で使用する。Ｑ１：第１の四重極、Ｑ２：第２の四重極、ＣＥ：衝突エネルギー、ＥＶ：電子ボルト及びＣＣＬ２：衝突セルレンズ２。表２Ｂ、表３及び表４で、「予測Ｒ．Ｔ．」（予測される保持時間）、「Δ時間」（全体±予測される保持時間からの保持時間中の変化）、「Ｒｅｓ」（四重極１及び四重極２の分解能設定、）及び「Ｒｅｓ＿Ｄｉｆｆ」（デフォルトユニット／ユニット分解能設定を使用しないときの分解能の差）と表示されたカラムは、ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ  ＱＳｉｇｈｔ  ＬＣ−ＭＳ／ＭＳシステムを使用するときのそれらのパラメータを指す。
【表１−１】
2021512292.tif 000002
【表１−２】
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【表１−３】
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【表２Ａ−１】
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【表２Ａ−２】
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【表２Ａ−３】
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【表２Ａ−４】
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【表２Ａ−５】
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【表２Ａ−６】
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【表２Ｂ−１】
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【表２Ｂ−２】
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【表２Ｂ−３】
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【表２Ｂ−４】
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【表２Ｂ−５】
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【表２Ｂ−６】
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【表２Ｃ−１】
2021512292.tif 000017
【表２Ｃ−２】
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【表２Ｄ−１】
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【表２Ｄ−２】
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【表３−１】
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【表３−２】
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【表４−１】
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【表４−２】
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【００２６】
カンナビス試料（通常、比較的高濃度のＴＨＣ濃度を含む植物）中の農薬を分析するための開示したシステム及び方法の使用が、以下の実施例に記載される。これらの実施例は、カンナビス抽出物のマトリックス効果及び同重体干渉（例えば、実施例６のアセキノシルを参照）に関連する、システム及び方法の利点を示す。しかし、開示したシステム及び方法は、マリファナ及び大麻生成物（例えば、花）、濃縮物（例えば、油、チンキ、抽出物）、食料（例えば、キャンディ（例えば、グミ、チョコレート）、料理油、焼いた食品、飲料、アイスクリーム）、局部作用剤（例えば、ゲル、軟膏、ローション）、植物試料（例えば、他の食用植物及び植物生成物（例えば、ハーブ、野菜、果物、食用花、スパイス、オリーブ油））、他の薬用植物及び植物生成物、喫煙できる他の植物及び植物生成物（例えば、タバコ、ミント、セージ）、環境試料（例えば、水）及び臨床試料（例えば、血清、尿）を含む、様々な試料中の農薬及びマイコトキシンを検出するために適用されることができる。既に述べた農薬の任意の組み合わせも分析され得る。
【００２７】
カンナビス中の農薬の分析
開示した方法の実施形態において、希釈による単純な有機溶媒抽出方法、推奨するＭＲＭ遷移、及び高効率の超高速液体クロマトグラフィー（ＵＨＰＬＣ）カラムによるＬＣ勾配を使用して、開示した方法は、マトリックス効果を回避するために使用でき、、通常ＧＣＭＳを使用して検出される非常に疎水性が高い及び塩素系農薬を含め、カンナビス試料中の農薬の検出を、吸入可能な産生物を含むカンナビス産生物に関して米国（例えば、カリフォルニア及びオレゴン）及び他の国（例えば、カナダ）で確立されている最低のアクションレベルよりはるかに低い低レベル（例えば、０．００５〜０．３μｇ／ｇ）で可能にする。マイコトキシンも検出できる。例えば、規制農薬及びマイコトキシンを含み、単純なアセトニトリル抽出方法を使用して抽出されるカンナビス試料で、すべての農薬及びマイコトキシンの回収率は、２０％未満の相対標準偏差（ＲＳＤ）で、７０〜１２０％の許容範囲内に収まる。
【００２８】
図１１９Ａ〜Ｆは、カンナビス花抽出物中に０．０１μｇ／ｇの低レベルでスパイク添加された農薬の代表的なセットに対する、優れた信号対雑音比のサンプルＭＲＭクロマトグラムを示す。
【００２９】
本開示で提供されるデータで示されるように、ＬＯＱは、カリフォルニアの現在の規制文書に列挙されている、すべてのカテゴリーＩＩの農薬及びマイコトキシンに関して、現在のカリフォルニアのアクションリミットよりはるかに低く、その２分の１〜６００分の１である。カンナビスマトリックスにおける各農薬及びマイコトキシンの、そのＬＯＱレベルでの反応ＲＳＤは、２０％未満だった。各分析物の保持時間は、２４時間にわたり±０．１分以内で再現可能だった。これにより、本方法が、十分以上に感度が高く、カリフォルニアが特定した規制限度で、カンナビス中の農薬及びマイコトキシン分析に関して再現可能なことが実証される。
【００３０】
ＥＩ源を備えるＧＣ−ＭＳを使用して、一般的に分析される農薬
いくつかの農薬（例えば、クロルフェナピル、シペルメトリン、シフルトリン、キャプタン、ナレド、ペルメトリン及びピレトリン）は低プロトン親和力を有し、ＥＳＩ源による低イオン化効率をもたらす。これらの農薬は通常、電子イオン化（ＥＩ）源を備えるＧＣ−ＭＳを使用して分析される。ＱＳｉｇｈｔ  ＬＣ−ＭＳ／ＭＳシステムにおけるような同軸加熱ガスによる加熱エレクトロスプレー源の使用は、加熱ガスのない従来のＥＳＩ源より非常に高いイオン化効率で、これらの農薬をイオン化する。加熱エレクトロスプレー源による推奨されるＭＲＭ遷移を使用すると、これらの農薬のＬＯＱは１０〜２５ｐｐｂの範囲内であり、例えば、それはカリフォルニア及び他の州のカンナビスに関するアクションリミットよりかなり低い。
【００３１】
例えば、ピレトリンは、昆虫の神経系を標的とすることによって強い殺虫力を有する、シロバナムシヨケギクから生成される有機化合物の一種である。キクの花から抽出される天然起源のピレトリンは、菊酸のエステル（ピレトリンＩ、シネリンＩ及びジャスモリンＩ）、及びピレトリン酸のエステル（ピレトリンＩＩ、シネリンＩＩ及びジャスモリンＩＩ）であり、その構造を以下に示す。
【化１】
2021512292.tif 000025
【００３２】
米国にて、ピレトリン抽出物は、ピレトリン全体の４５〜５５ｗ／ｗ％として標準化されており、市販のピレトリン標準では、ピレトリンＩ、ピレトリンＩＩ、シネリンＩ、シネリンＩＩ、ジャスモリンＩ及びジャスモリンＩＩの割合（％）は、それぞれ約５６．１％、２７．８％、５．７％、３．８％、４％及び２．６％である。カンナビス中のいくつかの化合物はピレトリンの構造によく似ており、したがって、カンナビス中のピレトリンの分析は、マトリックス干渉が原因で非常に困難である。推奨されるＭＲＭ遷移及びＬＣ勾配を利用する、ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ法による、ピレトリンＩ、ピレトリンＩＩ、シネリンＩ、シネリンＩＩ、ジャスモリンＩ及びジャスモリンＩＩのＬＯＱは、カンナビス花でそれぞれ０．１、０．１、０．０１、０．０３、０．０２５及び０．０１μｇ／ｇだった。
【００３３】
較正
従来の方法で、マトリックス適合した較正が、種々のマトリックス（例えば、食品マトリックス）中の農薬及び他の分析物のより正確な定量化のために実施される。ある特定の実施形態では、様々な濃度の溶媒に基づく分析標準の使用は、より実用的であり便利である。特に、種々の食品マトリックス中の農薬の定量化は、農薬及び他の分析物を含まない標準食品マトリックスを得ることが困難及び／または高価であり得るので、困難である。
【００３４】
ある特定の実施形態では、いくつかの農薬が、マトリックス効果のためイオン抑制を経験し得るので、同位体標識付き内部標準の混合物を、溶媒に基づく較正標準及び試料の両方に添加することができる（実施例１を参照）。この方法は、イオン抑制によるマトリックス中の農薬及び他の分析物の定量化での誤差を低減できる。
【００３５】
マトリックス効果からイオン抑制を低減する他の方法は、メタノールまたはアセトニトリルで更に試料抽出物を希釈することである（例えば、１．５〜５０倍に）。この方法は、イオン抑制を減らすことができるが、種々の食品マトリックス中の農薬の定量限界を上昇させることで、感度も低減させる可能性がある。ある特定の実施形態では、アセトニトリル抽出物は、更にメタノールで５０％希釈されて、ＬＣが強溶媒移動相としてメタノールを使用するとき、化合物をより早く溶出するための良好なピーク形状を得る。図１２５を参照。
【００３６】
液体クロマトグラフィー
ＡＰＣＩ源及び／またはＥＳＩ源による従来のＬＣ−ＭＳ／ＭＳ法は、添加剤（例えば、試料中の分析物のイオン化を支援するギ酸、ギ酸アンモニウム及び他の添加剤）を含有する、ＬＣ移動相を使用する。クロルデン、キントゼン、クロルフェナピル、エトリジアゾール、エンドスルファンＩ、エンドスルファンＩＩ、エトリジアゾール、クロルフェナピル、エトリジアゾール、及びＡＰＣＩ源で非常に疎水性が高いまたは塩素系の他の農薬などの分析物のイオン化を支援するためには、添加剤のないＬＣ移動相は、より良好な成果を提供する。しかし、ＥＳＩイオン化は、通常、ギ酸及び酢酸などの酸性添加剤及び／またはギ酸アンモニウム及び酢酸アンモニウムなどの中性添加剤のいずれかを必要とする。
【００３７】
ある特定の実施形態では、２つの逐次的なＬＣ−ＭＳ／ＭＳ法を使用することができ、そこで、第１のＬＣ分離法を使用して、ＥＳＩ源でイオン化される第１の分離流を作製し、第２のＬＣ分離法を使用して、ＡＰＣＩ源でイオン化した第２の分離流を作製する。このようにして、第１のＬＣ分離法は、酸性及び／または中性添加剤を使用してＥＳＩイオン化を支援する移動相を利用でき、一方で、第２のＬＣ法は、このようないかなる添加剤もなしで（例えば、いかなる酸性及び／または中性添加剤なしで、いかなる添加剤もなしで）移動相を使用できる。
【００３８】
ある特定の実施形態では、ＥＳＩ及びＡＰＣＩイオン化を用いて１回の注入からの試料の同時イオン化及び測定（例えば、正及び負の両方のイオンモードで）を可能にする、単一のＬＣ−ＭＳ／ＭＳ法を使用する。この方法では、単一のＬＣ法を使用して、試料からのＬＣカラム溶離液は、ＥＳＩ源によってイオン化される第１の分離流、及びＡＰＣＩ源を使用してイオン化される第２の分離流に分かれることができる。例えば、ＬＣカラム溶離液は、Ｔ継手を使用して、分析のためにＬＣ−ＭＳ／ＭＳシステム（例えば、ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒのＱＳｉｇｈｔシステムのような）に存在するＥＳＩ及びＡＰＣＩイオン源の両方に分かれ得る。ＬＣ−ＭＳ／ＭＳシステムは、イオン化モードと極性の間にごくわずかな混信または干渉を伴い、ＥＳＩ及びＡＰＣＩモードの両方で作動され得る。
【００３９】
上述のとおり、酸性及び／または中性添加剤のない（例えば、いかなる添加剤もない）移動相を利用するＬＣ法の使用は、ＡＰＣＩ源を用いる分析物の分析を可能にする。具体的には、ＡＰＣＩ源を使用する種々の塩素系農薬の分析において、添加剤が用いられないとき、信号が最も高く、酢酸アンモニウムやギ酸アンモニウムなどの中性添加剤の添加により、信号が２分の１〜５分の１に減少することがわかった。ＡＰＣＩ源でイオン化される塩素系農薬の信号は、ギ酸や酢酸などの酸性添加剤の添加で２０分の１〜５０分の１に低下する。したがって、ＥＳＩはイオン化及び分析物の分析の支援のためにいくつかのイオン添加剤の存在を必要とするので、ある特定の実施形態では、酢酸アンモニウムまたはギ酸アンモニウムなどの中性添加剤のある移動相を利用する、単一のＬＣ法を使用できる。本方法は、ＥＳＩ及びＡＰＣＩ源の両方が単一のＬＣ法で使用されるのを可能にする、妥協策を提供する。分析が１つのＬＣ注入だけで進むのを可能にすることによって、この方法は増加したスループットを提供する。
【００４０】
実施形態の例
図１は、本明細書に記載の方法に従って、（例えば、カンナビス植物材料を含む）試料の農薬（例えば、７２種の農薬）のパネルを検出及び／または定量化する、例示の工程１００を示す。工程１００で、試料１０２は、１つ以上のＬＣ法１０４により処理されて、第１及び第２の分離流を作製する。第１の分離流は、ＥＳＩ源１０６ａを使用してイオン化され、第１のイオン化試料流を生じる。タンデム質量分析法（例えば、トリプル四重極型質量分析法）が、第１のサブセット１０８ａの各農薬と関連するＭＲＭ遷移の強度を検出することによって、第１のイオン化試料流中のパネルの農薬の第１のサブセットを検出及び／または定量化するために使用される。第２の分離流は、ＡＰＣＩ源１０６ｂを使用してイオン化され、第２のイオン化試料流を生じる。タンデム質量分析法が、第２のサブセット１０８ｂの各農薬と関連するＭＲＭ遷移の強度を検出することによって、第２のイオン化試料流中のパネルの農薬の第２のサブセットを検出及び／または定量化するために使用される。各農薬は、農薬と関連する１つ以上のＭＲＭ遷移の検出強度に基づいて、検出（例えば、試料中に存在するとして確認される）及び／または定量化できる。このように２つの並行したＬＣ−ＭＳ／ＭＳ技術を適用することによって、完全なパネルの検出及び／または定量化の結果１１０が得られる。
【００４１】
図２は、ＡＰＣＩ源を備えるＬＣ−ＭＳ／ＭＳを使用して、試料中の１つ以上の農薬を検出及び／または定量化する例示の工程２００を示す。工程２００で、試料２０２はＬＣ法２０４を介して処理されて、分離流を生じる。分離流は、ＡＰＣＩ源及び噴霧ガスとして空気を使用して、イオン化される（２０６）。タンデム質量分析法（例えば、トリプル四重極型質量分析法）が、農薬と関連する１つ以上のＭＲＭ遷移の強度を検出するために使用される（２０８）。関連する１つ以上のＭＲＭ遷移の強度は、農薬を検出（例えば、試料中に存在するとして確認される）及び／または定量化するために使用できる（２１０）。
【００４２】
図３は、ある特定の実施形態で使用され、本明細書に記載のＬＣ−ＭＳ／ＭＳ技術を実施する、例示のＬＣ−ＭＳ／ＭＳシステム３００を示す。ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ３００は、ＬＣステージ３０２、イオン化源（例えば、ＥＳＩ源及び／またはＡＰＣＩ源）３０４、ならびに直列の２つの質量フィルタ３０６及び３１０と、それらの間の衝突セル３０８とを含む。ある特定の実施形態では、２つの質量フィルタ（Ｑ１及びＱ２）は四重極である。ある特定の実施形態では、衝突セルは、四重極（ｑ）（例えば、ＲＦ四重極）である。ある特定の実施形態では、ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ３００はトリプル四重極システムである。ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ３００は、イオンを検出するための検出器３１２を含む。
【００４３】
一態様において、液体クロマトグラフィータンデム質量分析法（ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ）を介して、試料中の農薬パネルの複数の農薬を検出及び／または定量化する方法は、（ａ）１つ以上の液体クロマトグラフィー（ＬＣ）法を使用して試料を処理して、第１の分離流及び第２の分離流を作製することと、（ｂ）エレクトロスプレーイオン化（ＥＳＩ）源を使用して第１の分離流をイオン化して、第１のイオン化試料流を作製することと、（ｃ）大気圧化学イオン化（ＡＰＣＩ）源を使用して第２の分離流をイオン化して、第２のイオン化試料流を作製することと、（ｄ）タンデム質量分析法（例えば、トリプル四重極型質量分析法）を介して、（ｉ）パネルの第１のサブセットの各農薬について、第１のイオン化試料流を使用して、農薬と関連する１つ以上の多重反応モニタリング（ＭＲＭ）遷移の強度と、（ｉｉ）パネルの第２のサブセットの各農薬について、第２のイオン化試料流を使用して、農薬と関連する１つ以上の多重反応モニタリング（ＭＲＭ）遷移の強度と、を検出して、それにより、農薬パネルの複数の農薬を検出及び／または定量化することと、を含む。
【００４４】
ある特定の実施形態では、試料は、カンナビス植物材料を含む（例えば、そこで、カンナビス植物材料は、例えば１０倍以上に希釈される）。ある特定の実施形態では、試料は食用材料（例えば、食品）を含む。ある特定の実施形態では、試料は植物材料を含む。
【００４５】
ある特定の実施形態では、試料は抽出物を含み、方法は、ベース試料と１つ以上の溶媒を混合すること、続いてベース試料を希釈すること、希釈したベース試料を濾過することを含む、抽出工程を使用して試料抽出物を作製することを含む。
【００４６】
ある特定の実施形態では、１つ以上の溶媒はメタノールを含む。ある特定の実施形態では、１つ以上の溶媒はアセトニトリル（例えば、アセトニトリル及び／またはギ酸含有アセトニトリル）を含む。ある特定の実施形態では、抽出手順は、１つ以上の溶媒でベース試料の希釈後に適用される、分散固相抽出処理を更に含む（例えば、ＰＳＡ（一級及び二級アミン）吸収剤、Ｃ１８、アルミナ黒鉛化炭素などを使用して、例えば、イオン抑制及びマトリックス干渉を低減する）。
【００４７】
ある特定の実施形態では、方法は、複数の農薬のうちの少なくとも一部の各農薬について、農薬と関連する１つ以上のＭＲＭ遷移の検出強度に基づき、試料中の農薬の濃度を定量化する（例えば、μｇ／ｇ）ことを含む（例えば、そこで試料はカンナビス植物材料を含む、及び／またはそこで農薬の濃度のＬＯＱはカリフォルニア及び／またはオレゴンのアクションレベルより低く、例えばその２分の１、１０分の１、２０分の１または５０分の１である）。
【００４８】
ある特定の実施形態では、複数の農薬のうちの少なくとも１つについて、試料中の農薬の濃度を定量化することは、溶媒に基づく分析較正標準（例えば、同位体標識付き内部標準）を使用することを含む。ある特定の実施形態では、方法は、較正標準及び／または試料に内部標準物質の混合物をスパイク添加することを含む（表１０を参照）。
【００４９】
ある特定の実施形態では、パネルは７２種の農薬を含む。いくつかの実施形態では、例えば、試料がカンナビス試料のとき、第１のサブセットは７０の農薬を含み、第２のサブセットは、クロルデン、クロルフェナピル及びキントゼン（ＰＣＮＢ）などの３つの農薬を含む。
【００５０】
ある特定の実施形態では、パネルの第１のサブセットは、１つ以上の高分子量及び／または熱的に不安定な農薬（例えば、アバメクチン）を含む。
【００５１】
ある特定の実施形態では、パネルの第１のサブセットは、アバメクチン、アセフェート、アセキノシル、アセタミプリド、アゾキシストロビン、ビフェナゼート、ビフェントリン、ボスカリド、キャプタン、カルバリル、クロラントラニリプロール、シネリンＩ、シネリンＩＩ、クロフェンテジン、シフルトリン、シペルメトリン、ダイアジノン、ジメトモーフ、エトキサゾール、フェンヘキサミド、フェンピロキシメート、フロニカミド、フルジオキソニル、ヘキシチアゾクス、イミダクロプリド、ジャスモリンＩ、ジャスモリンＩＩ、クレソキシムメチル、マラチオン、メタラキシル、メトミル、ミクロブタニル、ナレド、オキサミル、ペルメトリン、ホスメット、ピペロニルブトキシド、プラレトリン、プロピコナゾール、ピレトリンＩ、ピレトリンＩＩ、ピリダベン、スピネトラム、スピノサド、スピロメシフェン、スピロテトラマト、テブコナゾール、チアメトキサム及びトリフロキシストロビンからなる群から選択される１つ以上のカテゴリー２の農薬を含む。
【００５２】
ある特定の実施形態では、パネルの第１のサブセットは、アルディカーブ、カルボフラン、クロルフェナピル、クロルピリホス、クマホス、ダミノジッド、ＤＤＶＰ（ジクロルボス）、ジメトエート、エトプロップ（ホス）、エトフェンプロックス、フェノキシカルブ、フィプロニル、イマザリル、メチオカルブ、メチルパラチオン、メビンホス、パクロブトラゾール、プロポクスル、スピロキサミン、チアクロプリド、ＭＧＫ−２６４からなる群から選択される１つ以上のカテゴリー１の農薬を含む。
【００５３】
ある特定の実施形態では、パネルの第２のサブセットは、１つ以上の疎水性及び／または塩素系農薬を含む。
【００５４】
ある特定の実施形態では、パネルの第２のサブセットは、ペンタクロロニトロベンゼン、クロルデン、クロルフェナピル、エンドスルファンＩ、エンドスルファンＩＩ及びエトリジアゾールからなる群から選択される１つ以上の農薬を含む。
【００５５】
ある特定の実施形態では、パネルの第２のサブセットは、クロルデン、クロルフェナピル及び／またはキントゼン（ＰＣＮＢ）を含む。
【００５６】
ある特定の実施形態では、ステップ（ｃ）は、噴霧ガスとして空気及び／または窒素、アルゴン及び二酸化炭素などの他の気体を使用することを含む（例えば、試薬イオンとして作用し、クロルデン及び／またはキントゼンのイオン化を支援する、負に荷電した酸素イオンを生成するため）。
【００５７】
ある特定の実施形態では、ステップ（ａ）は、単一のＬＣ法を使用して試料を処理すること（例えば、及び単一のＬＣ法の溶離剤を第１の分離流及び第２の分離流に分けること）を含む。ある特定の実施形態では、単一のＬＣ法は、酢酸アンモニウム、ギ酸アンモニウム、水酸化アンモニウム及び炭酸アンモニウムなどの中性添加剤を有する移動相を使用する。ある特定の実施形態では、単一のＬＣ法は、酸性添加剤のない（例えば、ギ酸のない及び／または酢酸のない）移動相を使用する。ある特定の実施形態では、単一のＬＣは、農薬信号ピークとマトリックス干渉ピークの間のオーバーラップを最小化するために、高速勾配（例えば、１０〜２０％／分以上の有機物変化）及び低速勾配（例えば、１〜１０％／分（例えば、５〜６％）の有機物変化）を有する高速ＬＣ法を含む。
【００５８】
ある特定の実施形態では、ステップ（ａ）は、第１のＬＣ法を使用して試料を処理して、第１の分離流を作製し、第２のＬＣ法を使用して第２の分離流を作製すること、を含む。いくつかの実施形態では、第２のＬＣ法は、酢酸アンモニウム、ギ酸アンモニウム、水酸化アンモニウム及び炭酸アンモニウムなどの中性添加剤を有する移動相を使用する。いくつかの実施形態では、第２のＬＣ法は、酸性添加剤のない（例えば、ギ酸のない及び／または酢酸のない）移動相を使用する。いくつかの実施形態では、第２のＬＣ法は、いかなる中性及び／または酸性添加剤もない、移動相を使用する。ある特定の実施形態では、第１のＬＣ法及び／または第２のＬＣ法は、農薬信号ピークとマトリックス干渉ピークの間のオーバーラップを最小化するために、高速勾配（例えば、１０〜２０％／分以上の有機物変化）及び低速勾配（例えば、１〜１０％／分（例えば、５〜６％）の有機物変化）を有する高速ＬＣ法を含む。
【００５９】
ある特定の実施形態では、第１のサブセットの各農薬及び／または第２のサブセットの各農薬について、農薬と関連する１つ以上のＭＲＭ遷移のうちの少なくとも一部は、マトリックス干渉とは実質的に異なる。いくつかの実施形態では、試料はカンナビス植物材料を含み、マトリックス干渉は、カンナビノイド、テルペン及び／または他の非カンナビノイド化合物と関連する干渉などのカンナビスマトリックス干渉である。
【００６０】
ある特定の実施形態では、パネルの複数の農薬のうちの少なくとも一部のそれぞれに関して、１つ以上の関連するＭＲＭ遷移は、表２ＡのＭＲＭ遷移のうちの１つ以上を含む。
【００６１】
ある特定の実施形態では、パネルの複数の農薬のうちの少なくとも一部のそれぞれに関して、１つ以上の関連するＭＲＭ遷移は、表２ＣのＭＲＭ遷移のうちの１つ以上を含む。
【００６２】
ある特定の実施形態では、パネルの複数の農薬のうちの少なくとも一部のそれぞれに関して、１つ以上の関連するＭＲＭ遷移は、表２ＤのＭＲＭ遷移のうちの１つ以上を含む。
【００６３】
ある特定の実施形態では、パネルの複数の農薬のうちの少なくとも一部のそれぞれに関して、１つ以上の関連するＭＲＭ遷移は、表３のＭＲＭ遷移のうちの１つ以上を含む。
【００６４】
いくつかの実施形態では、ＬＣ−ＭＳ／ＭＳを使用して、試料中の１つ以上の農薬（例えば、非常に疎水性の高い及び／または塩素系農薬）濃度を検出及び／または定量化する方法は、（ａ）液体クロマトグラフィー（ＬＣ）法を用いて試料を処理して、分離流を作製することと、（ｂ）イオン化試料流を生じる噴霧ガスとして空気及び／または窒素、アルゴン及び二酸化炭素などの他の気体を使用するＡＰＣＩ源を用いて分離流をイオン化することと、（ｄ）タンデム質量分析法（例えば、トリプル四重極型質量分析法）を介して、１つ以上の農薬のうちの各農薬に関して、イオン化試料流を使用して、１つ以上の多重反応モニタリング（ＭＲＭ）遷移の強度を検出し、そこで各ＭＲＭ遷移は農薬と関連しており、それにより１つ以上の農薬を検出及び／または定量化することと、を含む。
【００６５】
ある特定の実施形態では、試料は、カンナビス植物材料を含む（例えば、そこで、カンナビス植物材料は、例えば１０倍以上に希釈される）。ある特定の実施形態では、試料は食用材料（例えば、食品）を含む。ある特定の実施形態では、試料は植物材料を含む。
【００６６】
ある特定の実施形態では、試料は抽出物であり、方法は、ベース試料と１つ以上の溶媒を混合する（例えば、希釈する）こと（例えば、及び、ベース試料を希釈することに続いて、希釈したベース試料を濾過すること）を含む、抽出工程を使用して試料抽出物を作製することを含む。ある特定の実施形態では、１つ以上の溶媒はメタノールを含む。ある特定の実施形態では、１つ以上の溶媒はアセトニトリル（例えば、アセトニトリル及び／またはギ酸含有アセトニトリル）を含む。ある特定の実施形態では、ＬＣが強溶媒移動相としてメタノールを使用するとき、アセトニトリル抽出物は、早く溶出する化合物の良好なピーク形状を得るために、メタノールで更に５０％以上希釈される。ある特定の実施形態では、抽出手順は、１つ以上の溶媒でベース試料の希釈後に適用される、分散固相抽出処理を更に含む（例えば、ＰＳＡ（一級及び二級アミン）吸収剤、Ｃ１８、アルミナ黒鉛化炭素などを使用して、例えば、イオン抑制及びマトリックス干渉を低減する）。
【００６７】
ある特定の実施形態では、方法は、１つ以上の農薬のうちの各農薬に関して、農薬と関連する１つ以上のＭＲＭ遷移の検出強度に基づき、試料中の農薬の濃度を定量化する（例えば、μｇ／ｇ）ことを含む（例えば、そこで試料はカンナビス植物材料を含む、及び／またはそこで農薬の濃度の定量下限（ＬＯＱ）は、農薬に関するカリフォルニアのアクションレベル及び／またはオレゴンのアクションレベルより低い（例えば、それの２分の１、１０分の１、２０分の１または５０分の１））。
【００６８】
ある特定の実施形態では、農薬のうちの少なくとも１つに関して、試料中の農薬の濃度を定量化することは、溶媒に基づく分析較正標準（例えば、同位体標識付き内部標準）を使用することを含む。ある特定の実施形態では、方法は、較正標準及び／または試料に、表６の内部標準物質の混合物をスパイク添加することを含む。
【００６９】
ある特定の実施形態では、１つ以上の農薬は、１つ以上の疎水性及び／または塩素系農薬を含む。ある特定の実施形態では、１つ以上の農薬は、ペンタクロロニトロベンゼン、クロルデン、クロルフェナピル、エンドスルファンＩ、エンドスルファンＩＩ及びエトリジアゾールからなる群から選択される１つ以上の農薬を含む。ある特定の実施形態では、１つ以上農薬は、クロルデン及び／またはキントゼン（また、ペンタクロロニトロベンゼンとも称される）を含む。
【００７０】
ある特定の実施形態では、ＬＣ法は、酢酸アンモニウム、ギ酸アンモニウム、水酸化アンモニウム及び炭酸アンモニウムなどの中性添加剤を有する移動相を使用する。ある特定の実施形態では、ＬＣ法は、酸性添加剤のない（例えば、ギ酸のない及び／または酢酸のない）移動相を使用する。特定の実施形態では、ＬＣ法は、いかなる中性及び／または酸性添加剤もない（例えば、いかなる添加剤もない）移動相を使用する。
【００７１】
ある特定の実施形態では、１つ以上の農薬のうちの少なくとも一部の各農薬に関して、農薬と関連する１つ以上のＭＲＭ遷移は、マトリックス干渉とは実質的に異なる。例えば、そこで、試料はカンナビス植物材料を含み、マトリックス干渉は、カンナビノイド、テルペン及び／または他の非カンナビノイド化合物と関連するカンナビスマトリックス干渉である。
【００７２】
ある特定の実施形態では、１つ以上農薬はクロルデンを含み、ステップ（ｄ）は、クロルデンと関連する１つ以上のＭＲＭ遷移の強度を検出することを含み、そこでクロルデンと関連する１つ以上のＭＲＭ遷移は、４３９．８＞３５遷移及び４４１．８＞３５遷移からなる群から選択される１つ以上を含む。
【００７３】
ある特定の実施形態では、１つ以上農薬はキントゼンを含み、ステップ（ｄ）は、キントゼンと関連する１つ以上のＭＲＭ遷移の強度を検出することを含み、そこでキントゼンと関連する１つ以上のＭＲＭ遷移は、２７５．８＞３５遷移、２７３．８＞３５遷移、２７５．８＞２０１．８遷移、及び２７３．８＞１９９．８遷移からなる群から選択される１つ以上を含む。
【００７４】
ある特定の実施形態では、１つ以上農薬はクロルフェナピルを含み、ステップ（ｄ）は、クロルフェナピルと関連する１つ以上のＭＲＭ遷移の強度を検出することを含み、そこでクロルフェナピルと関連する１つ以上のＭＲＭ遷移は、３４６．９＞７９遷移及び３４８．９＞８１遷移からなる群から選択される１つ以上の要素を含む。
【００７５】
ある特定の実施形態では、１つ以上農薬はエトリジアゾールを含み、ステップ（ｄ）は、エトリジアゾールと関連する１つ以上のＭＲＭ遷移の強度を検出することを含み、そこでエトリジアゾールと関連する１つ以上のＭＲＭ遷移は、２１６．８＞３５遷移及び２１８．８＞３５遷移からなる群から選択される１つ以上の要素を含む。
【００７６】
ある特定の実施形態では、ＬＣ法は、農薬信号ピークとマトリックス干渉ピークの間のオーバーラップを最小化するために、高速勾配（例えば、１０〜２０％／分以上の有機物変化）及び低速勾配（例えば、１〜１０％／分（例えば、５〜６％）の有機物変化）を有する高速ＬＣ法を含む。
【００７７】
別の態様にて、本開示は、本明細書に記載の方法のいずれか１つを実行するための、液体クロマトグラフィータンデム質量分析計（例えば、トリプル四重極型ＬＣ質量分析計）を含む、システムを提供する。
【００７８】
当業者であれば、添付の特許請求の範囲内の、上述の実施形態の多数の変形及び変更があることを理解するであろう。
【実施例】
【００７９】
実施例１。ハードウェア及びソフトウェア
以下の実施例にて、クロマトグラフィーによる分離を、ＰＥＲＫＩＮＥＬＭＥＲ（登録商標）ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ（登録商標）ＬＸ５０  ＵＨＰＬＣシステムで行い、検出を、２つの別個の注入口でそれぞれ作動する、２つのイオン化ＥＳＩ及びＡＰＣＩ源を備えるＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ  ＱＳＩＧＨＴ（登録商標）２２０ＭＳ／ＭＳ検出器を使用して達成した。すべての器具の制御、データ収集及びデータ処理は、Ｓｉｍｐｌｉｃｉｔｙ  ３Ｑ（商標）ソフトウェアプラットフォームを用いて実施した。
【００８０】
カンナビス試料の調製。約５ｇのカンナビス花を微粉砕し、１ｇの粉末化した混合物を、表６に示す内部標準溶液１０μＬを含む５０ｍＬの遠心分離管内に入れた。３つの１０ｍｍの鋼球を、５ｍＬのＬＣ−ＭＳグレードのアセトニトリルと共に管に加えた。管に蓋をして、Ｍｕｌｔｉ−Ｔｕｂｅ  Ｖｏｒｔｅｘ  Ｍｉｘｔｕｒｅに置き、１０分間ボルテックスして、次いで３０００回転／分で１０分間遠心分離した。溶媒を０．２２μｍのナイロンシリンジ−フィルタを使用して、５ｍＬのガラスアンバーバイアル内に濾過し、バイアルに蓋をして、ラベルを付けた。
【００８１】
ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析。抽出した試料０．５ｍＬを、２ｍＬのＨＰＬＣバイアル内に入れ、０．５ｍＬのＬＣ−ＭＳグレードのアセトニトリルで希釈して、混合した。３μＬのこの試料を、表５に示すＬＣ法及びＭＳ源条件を使用して、ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析のために注入した。
【表５−１】
2021512292.tif 000026
【表５−２】
2021512292.tif 000027
【００８２】
試料マトリックスに適合した較正標準。マトリックス適合した較正は、それがマトリックス効果を補うので、定量化のためのゴールドスタンダードである。マトリックス効果は、カンナビスのような複雑なマトリックスのＬＣ−ＭＳによる分析において一般的である。応答の減少または増加は、共溶出したマトリックス化合物が存在することによる、イオン化の間の分析物のイオン抑制による。試料マトリックス効果のため、マトリックス適合した較正曲線を定量化で使用し、空のカンナビス花抽出物、及び少なくとも７つ以上の異なる濃度レベルで、０．１〜１０００ｎｇ／ｍＬの範囲にわたる様々な濃度の農薬及びマイコトキシを含む、空のカンナビス花抽出物試料を注入することによって作成した。
【表６】
2021512292.tif 000028
【００８３】
図１２１のＡ〜Ｄは、４桁にわたるカンナビス抽出物中の農薬の較正曲線の代表例を示す。すべての農薬及びマイコトキシンの較正曲線は、試験したすべての分析物について０．９９より大きいＲ２の較正適合度で、線形であった。
【００８４】
実施例２。液体クロマトグラフィー法
図２７のＡは、一般的な（固定勾配率）液体クロマトグラフィー勾配を使用して、カンナビス植物材料を含む（空の）試料に関して１４分にわたって得られた、全イオンクロマトグラム（ＴＩＣ）を示すグラフである。図２７のＢは、１００ｐｐｂの農薬を含むカンナビス植物材料を含む、試料のＴＩＣを示すグラフである。図２７のＣは、上述の実施例１に記載されている例示のＬＣ法を使用して得られた、ＴＩＣを示すグラフである。図２７のＤは、種々のＬＣカラムのファン・デームテルの曲線である。
【００８５】
カラムの内径。カラムの内径（ＩＤ）は、応答及び植物試料中の種々の農薬を正確に検出及び／または定量化する能力を高めるように調整され得る。図２９のＡ及びＢは、ＩＤ２．１ｍｍのカラム及びＩＤ４．６ｍｍのカラムでそれぞれ測定された、スピロキサミン（及び、カンナビス植物材料）を含む農薬試料のＭＲＭ遷移の強度をプロットする。データは、より小さいＩＤのカラムはピーク形状を変形させ得ることを示し、これは、より小さいＩＤのカラムにカンナビスマトリックス成分を過荷重させることによると考えられる。
【００８６】
流量。流量は、ＬＣ法の性能、ならびに特定の農薬を検出及び／または定量化するために使用する質量分析測定で得られる信号に影響し得る、ＬＣパラメータである。図２７のＥ及びＦは、アゾキシストロビンを含む試料について測定したＭＲＭ遷移４０４．１＞３７２．１の強度をプロットするグラフである。図２７のＥは、流量０．５ｍＬ／分を使用したときのＭＲＭ遷移の強度を示す。得られたピーク幅及び信号振幅は、それぞれ０．１９分及び１．４７×１０６だった。図２７のＦは、流量０．８ｍＬ／分を使用したときのＭＲＭ遷移の強度を示す。得られたピーク幅及び信号振幅は、それぞれ０．１２分及び２．４１×１０６だった。流量０．５ｍＬ／分のＬＣ法のピーク幅は、流量０．８ｍＬ／分のＬＣ法で得られたピーク幅より１．５８倍大きかったが、０．８ｍＬ／分の方法によって得られた信号振幅は、０．５ｍＬ／分の方法より１．６４倍大きかった。したがって、０．８ｍＬ／分の改善した流量で、より狭くかつより大きい振幅ピークが得られた。種々の他の農薬について信号に対する流量の効果を試験し、この実施例で使用したＩＤ４．６ｍｍのカラムに関して、検出限界がすべての分析物において約５０％改善できたことが判明した。
【００８７】
溶出溶媒。図３０のＡ〜Ｃは、種々の農薬の反応にて、ＬＣ法で使用する有機溶出溶媒の効果に関する、データを示す。図３０のＡ及びＢは、２つの異なる有機溶媒組成物を使用するＬＣ法による分離後に、アセキノシルを含むカンナビス抽出物に関して測定したＭＲＭ遷移の強度をプロットする。図３０のＡは、有機溶出溶媒が１００％のメタノール溶媒であるときに得られたＭＲＭ遷移の強度を示し、図３０のＢは、有機溶出溶媒が７５％のメタノール及び２５％のアセトニトリルであるときに得られたＭＲＭ遷移の強度を示す。図３０のＣは、アセキノシル及びアバメクチンに関して観察された応答で、有機溶出溶媒中の種々の割合（％）のメタノールの効果を示す。
【００８８】
実施例３
カンナビス試料中の農薬の検出及び定量化が、開示する方法の実施形態を用いて示された。結果を、表７で特定される図に示す。追加の農薬の検出及び定量化を、実施例４〜実施例１７に記載する。
【表７−１】
2021512292.tif 000029
【表７−２】
2021512292.tif 000030
【００８９】
検出された農薬が極性及び無極性化合物の両方を含むので、１００％のアセトニトリルを、すべての分析物を試料抽出物から抽出するために使用した。カンナビスマトリックスは高度に疎水性であり、それを逆相ＬＣと適合させる水性移動相を有するカンナビス抽出物を更に希釈すると、沈殿のため、農薬のいくつかの低い回収率をもたらした。したがって、カンナビス抽出物は、農薬の高い回収率を達成して、マトリックス効果を低減するために、アセトニトリルで全体で１０倍に希釈される。しかし、逆相ＬＣ法は、カラムの極性化合物を良好に保持するのを助けるために、ＬＣ実行の開始時に水性移動相を使用する。ＬＣにアセトニトリル試料抽出物などの有機溶媒を注入すると、早く溶出する極性化合物の不良なクロマトグラフィーピークをもたらす。この問題を克服するために、３μＬの少ない試料注入量を、この実施例で報告される実験で使用した。
【００９０】
本実施例で記載されている実験は、カンナビス植物材料を含む試料中の様々な農薬の検出及び／または定量化での使用における、種々のＭＲＭ遷移の性能を評価した。特定の農薬と関連する特定のＭＲＭ遷移に関して、性能は、２つの異なる試料、すなわち（ｉ）カンナビス植物材料及び特定の農薬（特定の濃度のスパイク添加）を含む農薬試料ならびに（ｉｉ）カンナビス植物材料を含むが特定の農薬を含まない、空のカンナビス試料の、特定のＭＲＭ遷移の強度の変化を（溶出時間の関数として）測定することにより評価した。空のカンナビス試料中の振幅変動を有する農薬試料の測定中で観察される、１つ以上のピークの振幅を比較することによって、信号対雑音比（Ｓ／Ｎ）を、１つ以上のピークのそれぞれで算出した。
【００９１】
種々のＭＲＭ遷移に関して、定量限界（ＬＯＱ）も計算し、それらが関連する規制当局が特定した特定の農薬のアクションリミットと比較した。ＬＯＱは、列挙したすべてのカテゴリーＩＩの農薬及びマイコトキシンに関して、カリフォルニアのアクションリミットよりかなり低く、その２分の１〜６００分の１だった。カンナビスマトリックス中のそのＬＯＱレベルでの各農薬及びマイコトキシンの反応相対標準偏差（ＲＳＤ）は、２０％未満だった。各分析物の保持時間は、２４時間にわたり±０．１分以内で再現可能だった。これにより、本方法が、十分以上に感度が高く、カリフォルニア州が特定した規制限度にて、カンナビス中の農薬及びマイコトキシン分析に関して再現可能なことが実証される。
【００９２】
前述したように、カンナビスは、試験するのが難しいマトリックスであり、これは農薬の低濃度レベルにより更に困難となる。最高の分析の信頼度を確保するために、カンナビスマトリックス中で最小のマトリックス干渉を有するいくつかの農薬の複数のＭＲＭ遷移を、低濃度の検出のために決定した。例えば、アセキノシルは、溶媒標準中ではプロトン化分子イオンとして容易にイオン化することができるが、カンナビスマトリックスのプロトン化分子イオンに基づくＭＲＭ遷移は、カリフォルニアのアクションリミットより約５〜１０倍高い、０．５〜１μｇ／ｇの不良なＬＯＱを示した。したがって、イオン化の代わりのモード（例えば、付加物形成）に基づくＭＲＭ遷移を、マトリックス干渉を減らして、例えばカンナビスマトリックス中のアセキノシルのＬＯＱ０．０２５μｇ／ｇ（アクションリミットの１／４）を達成するために決定した。
【００９３】
実施例４。アベルメクチン
アバメクチンなどの高分子化合物、及びダミノジッドなどのいくつかの溶出の早い極性化合物は、ＧＣインジェクター中またはＧＣオーブン中で高温で分解するので、ＧＣＭＳを用いて低濃度で測定するのが難しい。これらの化合物はＥＳＩ源でイオン化され得るが、それらは、ＥＳＩ源の高温で分解する傾向もある（例えば、図６Ａ、図６Ｂを参照）。したがって、ＥＳＩ源及びＨＳＩＤ温度の好適な温度を、高分子量及び極性農薬の信号を最大化にするように決定した。
【００９４】
アバメクチンは、ガラス製品から移動相に浸出するナトリウム及びカリウムイオンから、ナトリウム及びカリウム付加物を形成する傾向もある。浸出するイオンの量を制御するのが難しいので、分析用のＱ１質量としてのアバメクチンに対するナトリウム付加物の使用は、許容できない反応変化をもたらすであろう。したがって、ナトリウムまたはカリウム付加物の形成を低減するために、制御された量のアンモニウム塩（酢酸塩またはギ酸塩）を移動相に加えて、アバメクチンのアンモニウム付加物を形成した。移動相におけるアンモニウム塩の使用、及び正しい温度条件は、アバメクチンに関して良好かつ再現可能な信号をもたらす。
【００９５】
図１０Ａは、Ｑ１スキャンモードでのアバメクチンの前駆体（親）イオンの質量スキャンである。図１０のＢ〜Ｅ及び図１０９のＡ〜Ｄは、１００ｐｐｂのアバメクチンを含むカンナビス試料（図１０のＢ、図１０のＤ、図１０９のＡ、図１０９のＢ）及び空のカンナビス試料（図１０のＣ、図１０のＥ、図１０９のＣ、図１０９のＤ）のアバメクチンと関連する、異なる２つのＭＲＭ遷移の強度を比較するクロマトグラムである。両方のＭＲＭ遷移は、ナトリウム付加物の代わりにアンモニウム付加物に対応する前駆体（親）質量を使用する。
【００９６】
ＭＲＭ遷移８９０．５＞５６７．２を使用すると（図１０のＢ、図１０のＤ、図１０９のＢ、図１０９のＤ）、信号対雑音比（Ｓ／Ｎ）比＝４１になる。ＭＲＭ遷移８９０．５＞３０５．１を使用すると（図１０のＣ、図１０のＥ、図１０９のＡ、図１０９のＣ）、Ｓ／Ｎ比＝６７になる。これらのＭＲＭ遷移を使用したアバメクチンのＬＯＱは約１０倍改善されて、約３０ｐｐｂになった。
【００９７】
実施例５。アセフェート
図１８のＡ〜Ｂ及び図４４のＡ〜Ｂは、１００ｐｐｂのアセフェートを含むカンナビス試料及び空のカンナビス試料の、アセフェートと関連する異なる２つＭＲＭ遷移の強度を比較するクロマトグラムである。ＭＲＭ遷移１８４＞１４３を使用することで（図１８のＡ、Ｂ）、Ｓ／Ｎ比＝５００になる。ＭＲＭ遷移１８４＞４９を使用することで（図４４のＡ、Ｂ）、Ｓ／Ｎ比＝９０になる。これらのＭＲＭ遷移は、アセフェートのＬＯＱを１０ｐｐｂまで改善できる。
【００９８】
実施例６。アセキノシル
アセキノシルは、溶媒標準のプロトン化分子イオンとして容易にイオン化され得るが、マトリックス干渉のため、カンナビスマトリックスのプロトン化分子イオンに基づくＭＲＭ遷移は０．５〜１μｇ／ｇの不良なＬＯＱになり、それは、アセキノシルに関するカリフォルニアのアクションリミットより約５〜１０倍高い。後述するように、イオン化の代替モード（例えば、付加物の形成）に基づくＭＲＭ遷移は、マトリックス干渉を低減して、ＬＯＱを約２５ｐｐｂにする。
【００９９】
図７のＡ〜Ｄは、１００ｐｐｂのアセキノシルを含むカンナビス試料及び空のカンナビス試料の、アセキノシルと関連する異なる２つのＭＲＭ遷移の強度を比較する４つのグラフである。図７のＢ及びＤは、アセキノシル及び空のカンナビス試料のＭＲＭ遷移３８５．２＞３４３．１の強度をそれぞれプロットする。大きな振幅強度ピークが図７のＢのグラフで観察される一方で、類似のピークも同時に図７のＤに示される空のカンナビス試料のデータに現れている。データは、このＭＲＭ遷移はカンナビスマトリックス干渉に支配されて、カンナビスマトリックス成分の存在下では、アセキノシルの検出及び／または定量化のために望ましくないことを示す。
【０１００】
図７のＡ及びＢは、アセキノシル及び空のカンナビス試料の他のＭＲＭ遷移３８５．２＞１８９．１の強度を比較する。図７Ａ及び図７Ｂに示されるデータに基づいて、Ｓ／Ｎ比＝２４が、ＭＲＭ遷移３８５．２＞１８９．１に対して決定された。これらの２つの遷移は、０．５〜１ｐｐｍの範囲でＬＯＱを提供するために決定された。
【０１０１】
図８は、様々な前駆体（親）イオンの質量を示す、アセキノシルの質量スキャンを示すグラフである。図９及び図１１１で提示するデータに示すように、４０２．２の前駆体（親）イオンに対応するＭＲＭ遷移は、高いＳ／Ｎ比をアセキノシルの検出及び／または定量化に提供する。ＭＲＭ遷移４０２．２＞１８９（図９のＡ、図９のＣ、図１１１のＡ、図１１１のＣ）は、Ｓ／Ｎ比＝６０を提供する。ＭＲＭ遷移４０２．２＞３４３．１の（図９Ｂ、図９Ｄ、図１１１Ｂ、図１１１Ｄ）は、Ｓ／Ｎ＝２０５を提供し、ＬＯＱの改善を例えば２５または４２ｐｐｂにする。
【０１０２】
実施例７。クロルフェナピル
クロルフェナピルの構造を以下に示す。
【化２】
2021512292.tif 000031
【０１０３】
ＥＳＩイオン化源
図１４は、様々な前駆体（親）イオンの質量を示す、クロルフェナピルの質量スキャンを示すグラフである。４０６．９及び４２３．９の質量値のピークは、それぞれ、プロトン化分子（［Ｍ＋Ｈ］＋）及びアンモニウム付加物（［Ｍ＋ＮＨ４］＋）に対応する。
【０１０４】
図１４のＢ〜Ｅは、前駆体（親）質量がクロルフェナピルのアンモニウム（［Ｍ＋ＮＨ４］＋）付加物に対応する、ＭＲＭ遷移の強度をプロットする。ＭＲＭ遷移４２６＞５９は、１．２×１０５の信号振幅を提供する（図１４のＢ）。ＭＲＭ遷移４２６＞２７１は、１．４２×１０４信号振幅を提供する（図１４のＣ）。ＭＲＭ遷移４２６＞３７９は、１．９９×１０４の信号振幅を提供する（図１４のＤ）。ＭＲＭ遷移４２６＞４０９は、３．７６×１０５の信号振幅を提供する（図１４のＥ）。
【０１０５】
図１４のＦ〜Ｉは、前駆体（親）質量がプロトン化したクロルフェナピル（［Ｍ＋Ｈ］＋）に対応する、ＭＲＭ遷移の強度をプロットする。図１４のＦは、ＭＲＭ遷移４０９＞４１の強度をプロットし、それは１．０３×１０４の信号振幅を提供する。図１４のＧは、ＭＲＭ遷移４０９＞５９の強度をプロットし、それは１．７６×１０５の信号振幅を提供する。図１４のＨは、ＭＲＭ遷移４０９＞２７１の強度をプロットし、それは２．５７×１０４の信号振幅を提供する。図１４のＩは、ＭＲＭ遷移４０９＞３７９の強度をプロットし、それは３．４２×１０４の信号振幅を提供する。
【０１０６】
図１４のＪ〜Ｎは、１０００ｐｐｂのクロルフェナピルを含むカンナビス試料のクロマトグラムである。図１４のＪ及びＫのクロマトグラムは、前に使用したＭＲＭ遷移４０９＞２７１を使用して得られ、それはＳ／Ｎ比＝１５（図１４のＪ）を提供し、４０９＞３７９（図１４のＫ）でＳ／Ｎ比＝２０を提供する。対照的に、図１４のＬ〜Ｎは、本明細書で開示する適切なＭＲＭ遷移を使用して得られたクロマトグラムであり、それは感度を３倍に改善できる。ＭＲＭ遷移４０９＞５９（図１４のＬ）は、Ｓ／Ｎ比＝５５を提供する。ＭＲＭ遷移４２６＞５９（図１４のＭ）は、Ｓ／Ｎ比＝７８を提供する。ＭＲＭ遷移４２６＞４０９（図１４のＮ）は、Ｓ／Ｎ比＝３７を提供する。
【０１０７】
ＬＣカラムの種類は、クロルフェナピルの同定に影響を与え得る。例えば、ビフェニルカラムの使用によって、トリフロキシストロビンがクロルフェナピルとして誤識別される場合がある。それは、これらの２つの化合物が共溶出し得るからである。基線分解のためにビフェニルカラムの代わりにＣ１８カラムを使用すれば、この問題に対処できる。図１５のＡ及びＢは、それぞれＭＲＭ遷移４０９．１＞１８６及び４０９．１＞２０６を使用して得られたクロマトグラムである。単一のピークが、それぞれ、これらのＭＲＭ遷移を使用して得られる。対照的に、２つのピークが、ＭＲＭ遷移４０９．１＞５９を使用して生じ（図１５のＣ）、第１の（先に生じている）ピークはトリフロキシストロビンに対応し、第２の（後で生じている）ピークはクロルフェナピルに対応する。
【０１０８】
図９３のＡ〜Ｄは、１００ｐｐｂのクロルフェナピルを含むカンナビス試料及び空のカンナビス試料のＭＲＭ遷移強度の測定を比較する。図９３のＡ及びＣは、１０００ｐｐｂのクロルフェナピルを含む農薬試料及び空のカンナビス試料のＭＲＭ遷移４２６＞４０９の強度をそれぞれ比較する。図９３のＢ及びＤは、１０００ｐｐｂのクロルフェナピルを含む農薬試料及び空のカンナビス試料のＭＲＭ遷移４２６＞５９．１の強度をそれぞれ比較する。ＬＯＱは、約６５０ｐｐｂだった。
【０１０９】
図１１５のＡ及びＢは、クロルフェナピルと関連して、マトリックス干渉を回避する、他のＭＲＭ遷移の強度測定を示す。図１１５のＡは、１００ｐｐｂのクロルフェナピルを含む農薬試料及び空のカンナビス試料のＭＲＭ遷移４２３．９＞５９の強度をプロットする。図１１５のＢは、１０００ｐｐｂのクロルフェナピルを含む農薬試料及び空のカンナビス試料のＭＲＭ遷移４０６．９＞５９の強度をプロットする。これらのＭＲＭ遷移の両方について、ピークが農薬試料の測定で観察されるが、空のカンナビス試料の測定の強度は比較的平坦である。ＭＲＭ遷移４２３．９＞５９はＳ／Ｎ比＝５１を提供し、ＭＲＭ遷移４０６．９＞５９はＳ／Ｎ比＝１４５を提供した。これらの遷移を使用したＬＯＱは、１００ｐｐｂだった。
【０１１０】
図１１５のＣ〜Ｆは、クロルフェナピルと関連するがマトリックス干渉を受ける種々のＭＲＭ遷移、具体的には、ＭＲＭ遷移４２５．９＞５９（図１１５のＣ）、ＭＲＭ遷移４２５．９＞４０８．９（図１１５のＤ）、ＭＲＭ遷移４０８．９＞５９（図１１５のＥ）、及びＭＲＭ遷移４２３．９＞４０６．９（図１１５のＦ）の強度測定を示す。図１１５のＧ及びＨは、１００ｐｐｂを含むカンナビス試料と空のカンナビス試料測定において、測定した異なる２つＭＲＭ遷移の強度を比較する。これらのＭＲＭ遷移は、図１１５のＡ及びＢに示すものより低い感度を提供することが確認された。図１１５のＧに示すＭＲＭ遷移４０８．９＞３７８．８は、Ｓ／Ｎ比＝３０を提供した。図１１５のＨは、ＭＲＭ遷移４０８．９＞２７０の強度をプロットし、それは最小のＳ／Ｎ比を提供する。これらの遷移を使用したＬＯＱは、１０００ｐｐｂだった。
【０１１１】
ＡＰＣＩイオン化源
クロルフェナピルは通常ＥＳＩ源を使用して分析されるが、ＡＰＣＩ源ならびにＭＲＭ遷移３４６．９＞７９及び３４８．９＞８１を使用すると、より良好なイオン化が達成され、マトリックス干渉は少なくなり、検出限界をおよそ２５ｐｐｂまで改善した。図１２３のＡ〜Ｂを参照。
【０１１２】
実施例８。シネリンＩ
図２２のＡ〜Ｂ及び図１００のＡ〜Ｂは、１０００ｐｐｂのシネリンＩを含むカンナビス試料及び空のカンナビス試料に関して、シネリンＩと関連する異なる２つのＭＲＭ遷移の強度を比較する。ＭＲＭ遷移３１７．２＞１４９を使用すると（図２２のＡ、図２２のＢ）、Ｓ／Ｎ比＝１８０だった。ＭＲＭ遷移３１７．２＞１０７を使用すると（図１００のＡ、図１１のＢ）、Ｓ／Ｎ比＝３８だった。ＬＯＱは、約１０ｐｐｂだった。
【０１１３】
実施例９。シネリンＩＩ
表８に示すシネリンＩＩの６つのＭＲＭ遷移を、マトリックス干渉について評価した。
【表８】
2021512292.tif 000032
【０１１４】
従来、溶媒試料（「溶媒中の信号」カラム）に対する最高の信号振幅を得るＭＲＭ遷移、この場合ＭＲＭ３を、シネリンＩＩを検出及び／または定量化するために使用するであろう。ＭＲＭ６は溶媒中の最低の信号を有しているにもかかわらず、ＭＲＭ６（３７５．２＞２１３．１）はマトリックス干渉を低減し、ＭＲＭ５（３７５．２＞１４９．１）も同様である。
【０１１５】
図２１のＡ〜Ｂ及び図９６のＡ〜Ｂは、１０００ｐｐｂのシネリンＩＩを含むカンナビス試料及び空のカンナビス試料に関して、シネリンＩＩと関連する異なる２つのＭＲＭ遷移の強度を比較する。ＭＲＭ遷移３６１．２＞２１３でＳ／Ｎ比＝２３だった（図２１のＡ、図２１のＢ）。ＭＲＭ遷移３６１．２＞１４９でＳ／Ｎ比＝３６だった（図９６のＡ、図９６のＢ）。ＬＯＱは、約３０ｐｐｂだった。
【０１１６】
図２１のＥ及びＦは、ある特定の遷移で存在する、問題となるマトリックス干渉効果を示す。図２１のＥ及びＦは、１０００ｐｐｂのシネリンＩＩを含むカンナビス試料及び空のカンナビス試料のＭＲＭ遷移３６１．２＞１０７の強度をそれぞれプロットする。２つの強度プロットはほとんど区別がつかず、この遷移がカンナビスマトリックスからのマトリックス干渉に支配されることを示す。したがって、この遷移を、カンナビス試料中のシネリンＩＩの低濃度分析で使用できない。
【０１１７】
実施例１０。シフルトリン
図１１６のＡ〜Ｆは、シフルトリンと関連する種々のＭＲＭ遷移を使用して得られたクロマトグラムである。図１１６のＡ及びＢは、シフルトリンと関係するがマトリックス干渉を受ける、種々のＭＲＭ遷移の強度測定値を示す。図１１６のＡは、１０００ｐｐｂのシフルトリンを含む農薬試料及び空のカンナビス試料のＭＲＭ遷移４５１＞４３４の強度をプロットする。図１１６のＢは、１０００ｐｐｂのシフルトリンを含む農薬試料及び空のカンナビス試料のＭＲＭ遷移４５３＞４３６の強度をプロットする。これらのＭＲＭ遷移は、マトリックス干渉を受ける（すなわち、農薬試料測定値に存在するピークは、空のカンナビス試料測定値にも存在する）。ＭＲＭ遷移４５１＞４３４は、Ｓ／Ｎ比＝１０を提供した。ＬＯＱは、約１０００ｐｐｂだった。
【０１１８】
図１１６のＣ及びＤは、シフルトリンと関連しており、マトリックス干渉を回避するが、低信号振幅を提供する、２つのＭＲＭ遷移における強度測定値を示す。図１１６のＣは、１０００ｐｐｂのシフルトリンを含む農薬試料及び空のカンナビス試料のＭＲＭ遷移４５１＞１２７の強度をプロットする。図１１６のＤは、１０００ｐｐｂのシフルトリンを含む農薬試料及び空のカンナビス試料のＭＲＭ遷移４５１＞２０６の強度をプロットする。これらのＭＲＭ遷移は、４５１＞１９１及び４５３＞１９３より低い振幅ピークを提供するが、依然としてマトリックス干渉を回避する（空のカンナビス試料測定値の強度は比較的平坦である）。ＭＲＭ遷移４５１＞１２７はＳ／Ｎ比＝２５を提供し、ＭＲＭ遷移４５１＞２０６はＳ／Ｎ比＝１６を提供した。ＬＯＱは、約４００ｐｐｂだった。
【０１１９】
図１１６のＥは、１０００ｐｐｂのシフルトリンを含む農薬試料及び空のカンナビス試料のＭＲＭ遷移４５１＞１９１の強度をプロットする。図１１６のＦは、１０００ｐｐｂのシフルトリンを含む農薬試料及び空のカンナビス試料のＭＲＭ遷移４５３＞１９３の強度をプロットする。これらのＭＲＭ遷移の両方について、ピークが農薬試料の測定で観察されるが、空のカンナビス試料の測定の強度は比較的平坦である。ＭＲＭ遷移４５１＞１９１はＳ／Ｎ比＝６６を提供し、ＭＲＭ遷移４５３＞１９３はＳ／Ｎ比＝３３を提供した。ＬＯＱは約１５０ｐｐｂであり、これらのＭＲＭ遷移を介して得られた。
【０１２０】
図９０のＡ〜Ｄも、１０００ｐｐｂのシフルトリンを含むカンナビス試料及び空のカンナビス試料測定のＭＲＭ遷移強度を比較する。図９０のＡ及びＣは、ＭＲＭ遷移４５１．１＞１９１の強度を比較し、図９０のＢ及びＤは、ＭＲＭ遷移４５１．１＞４３４の強度を比較する。ＬＯＱは、約６００ｐｐｂだった。
【０１２１】
実施例１１。シペルメトリン
図９４のＡ〜Ｄは、１０００ｐｐｂのシペルメトリンを含むカンナビス試料及び空のカンナビス試料測定のＭＲＭ遷移強度を比較する。図９４のＡ及びＣは、１０００ｐｐｂのシペルメトリンを含む農薬試料及び空のカンナビス試料のＭＲＭ遷移４３３．１＞１２７の強度をそれぞれ比較する。図９４のＢ及びＤは、１０００ｐｐｂのシペルメトリンを含む農薬試料及び空のカンナビス試料のＭＲＭ遷移４３３．１＞１９１．１の強度をそれぞれ比較する。ＬＯＱは、約１５０ｐｐｂだった。
【０１２２】
図１１７のＡ〜Ｄは、空のカンナビス試料及び１００ｐｐｂのシペルメトリンを含むカンナビス試料について測定したシペルメトリンと関連するＭＲＭ遷移の強度をプロットする。図１１７のＡ〜Ｄに示すＭＲＭ遷移は、カンナビスマトリックス成分からのマトリックス干渉を回避して、ＬＯＱ１００ｐｐｂを提供する。図１１７のＡはＭＲＭ遷移４３５．１＞１９３．１の強度をプロットし、それはＳ／Ｎ比＝１０５を提供する。図１１７のＢはＭＲＭ遷移４３３．１＞１９１．１の強度をプロットし、それはＳ／Ｎ比＝１００を提供する。図１１７のＣはＭＲＭ遷移４３３．１＞１２７の強度をプロットし、それはＳ／Ｎ比＝１１０を提供する。図１１７ＤはＭＲＭ遷移４３５．１＞１２７の強度をプロットし、それはＳ／Ｎ比＝３９を提供する。図１１７ＥはＭＲＭ遷移４３３．１＞９１、及び濃度１０００ｐｐｂのシペルメトリンを含む農薬試料の強度をプロットする。ＭＲＭ遷移４３３．１＞９１はマトリックス干渉を受け、Ｓ／Ｎ比＝２０を提供した。これらの遷移のＬＯＱは、５００ｐｐｂだった。
【０１２３】
実施例１２。ダミノジッド
図１７のＡ〜Ｂは、イオン質量約１６１の前駆体（親）での、ダミノジッドのプロダクトイオンスキャンである。図１７Ａは、高衝突エネルギー（ＣＥ）＝−３０Ｖのプロダクトイオンスキャンを示す。図１７Ｂは、低ＣＥ＝−１５Ｖのプロダクトイオンスキャンを示す。
【０１２４】
図１７のＣ〜Ｅは、１００ｐｐｂのダミノジッド（濃度１００ｐｐｂ）を含むカンナビス試料の３つの異なるＭＲＭ遷移の強度をプロットする。図１７のＣは、ＭＲＭ遷移１６１．１＞４４の強度をプロットし、Ｓ／Ｎ比＝１８０を決定した。図１７のＤは、ＭＲＭ遷移１６１．１＞１０１の強度をプロットし、Ｓ／Ｎ比＝４２を決定した。図１７Ｅは、ＭＲＭ遷移１６１．１＞１４３の強度をプロットし、Ｓ／Ｎ比＝３９０を決定した。したがって、ダミノジッドの測定値の感受性は、適切なＭＲＭ遷移を使用することで、４倍改善され得る。確定したＬＯＱは１１ｐｐｂの低さだった。
【０１２５】
図４１のＡ〜Ｄは、１００ｐｐｂのダミノジッドを含むカンナビス試料及び空のカンナビス試料測定のＭＲＭ遷移強度を比較する。図４１のＡ及びＣは、それぞれ１００ｐｐｂのダミノジッドを含む農薬試料及び空のカンナビス試料のＭＲＭ遷移１６１．１＞１４３の強度を比較する。図４１のＢ及びＤは、１００ｐｐｂのダミノジッドを含む農薬試料及び空のカンナビス試料のＭＲＭ遷移１６１．１＞４４の強度をそれぞれ比較する。ＬＯＱは、約１０．８ｐｐｂだった。
【０１２６】
実施例１３。ジメトモーフ
図２４のＡ〜Ｆ及び図７２のＡ〜Ｄで示すクロマトグラムは、１００ｐｐｂのジメトモーフ（濃度１００ｐｐｂ）を含むカンナビス試料及び空のカンナビス試料について、ジメトモーフと関連する様々なＭＲＭ遷移の強度を比較する。遷移のそれぞれについて、２つのピークが、１００ｐｐｂのジメトモーフを含むカンナビス試料の強度プロットで観察される（図２４のＡ〜Ｃ、図７２のＡ、図７２のＢ）。図２４のＡ及びＤは、ジメトモーフを含む試料及び空のカンナビス試料のＭＲＭ遷移３８８．１＞１６５の強度をそれぞれプロットする。第１の先に生じるピークはマトリックス干渉を受け（すなわち、同じ時点で対応するピークが、空のカンナビス試料中の強度プロットに存在する、図２４Ｄ）、Ｓ／Ｎ比＝３６１を提供した第２の後に生じるピークより低いＳ／Ｎ比（約１５）を提供する。
【０１２７】
図２４のＢ及びＥならびに図７２のＡ及びＣは、ジメトモーフを含む農薬試料及び空のカンナビス試料のＭＲＭ遷移３８８．１＞２７３の強度をそれぞれプロットする。いずれのピークも、マトリックス干渉を受けない。第１（先に生じる）ピークについて、Ｓ／Ｎ＝２１０、第２（後で生じる）ピークについて、Ｓ／Ｎ＝２５５と決定した。
【０１２８】
図２４のＣ及びＦならびに図７２のＢ及びＤは、ジメトモーフを含む農薬試料及び空のカンナビス試料のＭＲＭ遷移３８８．１＞３０１の強度をそれぞれプロットする。いずれのピークも、マトリックス干渉を受けない。第１（先に生じる）ピークについてＳ／Ｎ比＝８０７、第２（後で生じる）ピークについてＳ／Ｎ比＝１２５１と決定した。適切なＭＲＭ遷移を使用することにより、ジメトモーフの検出限界は１０倍改善されて、ＬＯＱが１０ｐｐｂになった。
【０１２９】
実施例１４。ナレド（「ジブロム」）
図１６のＡは、ナレドの計算した同位体分布を示すグラフであり、その構造を下に示す。
【化３】
2021512292.tif 000033
【０１３０】
図１６のＢは、ナレドを含む試料の前駆体（親）の質量スキャンである。図１６のＢで、Ｍ（ピーク３７８．７）、Ｍ＋２（ピーク３８０．７）、Ｍ＋４（ピーク３８２．７）及びＭ＋６（ピーク３８４．７）イオンの相対的な存在量は、それぞれ４２％、１００％、９１％及び３６％である。
【０１３１】
図１６のＣ〜Ｆ及び図１１３は、１００ｐｐｂのナレドを含むカンナビス試料について、ナレドと関連する様々なＭＲＭ遷移を使用して得られたクロマトグラムである。ＭＲＭ遷移３８０．８＞１２７（図１６のＣ）は、１．４４×１０４の信号（ピーク）振幅及びＳ／Ｎ比＝２５５を提供する。ＭＲＭ遷移３７８．８＞１２７（図１６のＤ）は、５．４６×１０３の信号振幅及びＳ／Ｎ比＝９６を提供する。ＭＲＭ遷移３８０．８＞１０９（図１６のＥ）を使用すると、３．５７×１０３の信号振幅及びＳ／Ｎ比＝６０を提供する。ＭＲＭ遷移３８２．８＞１２７（図１１３）は、１．３８×１０４の信号及びＳ／Ｎ比＝３００を提供する。ＭＲＭ遷移３７８．８＞１０９（図１６のＦ）は、１．６×１０３の信号及びＳ／Ｎ比＝１２３０を提供する。
【０１３２】
図６０のＡ及びＣは、ナレド（濃度１００ｐｐｂ）を含む農薬試料及び空のカンナビス試料のＭＲＭ遷移３８０．８＞１０９の強度をそれぞれ比較する。図６０のＢ及びＤは、１００ｐｐｂのナレドを含むカンナビス試料及び空のカンナビス試料のＭＲＭ遷移３８０．８＞１２７の強度をそれぞれ比較する。
【０１３３】
ＬＯＱは２３ｐｐｂの低さだった。
【０１３４】
実施例１５。Ｎ−オクチルビシクロヘプテンジカルボキシイミド（「ＭＧＫ−２６４」）
図２０のＡ及びＢは、ＭＧＫ−２６４のプロダクトイオンスキャンである。図２０のＡは、低衝突エネルギー＝−２５Ｖのプロダクトイオンスキャンを示す。図２０のＢは、高衝突エネルギー＝−５０Ｖのプロダクトイオンスキャンを示す。質量２１０．１及び質量９８で、主な断片イオンが観察された。図２０のＣ〜Ｅは、１００ｐｐｂのＭＧＫ−２６４を含むカンナビス試料の３つの異なるＭＲＭ遷移の強度をプロットする。ＭＲＭ遷移２７６．２＞９８を使用すると（図２０のＣ）、Ｓ／Ｎ比＝３００になる。ＭＲＭ遷移２７６．２＞１２１を使用すると（図２０のＤ）、Ｓ／Ｎ比＝５になる。ＭＲＭ遷移２７６．２＞２１０を使用すると（図２０のＥ）、Ｓ／Ｎ比＝１５００になるしたがって、１０倍以上のＳ／Ｎの改善を、適切なＭＲＭ遷移を使用することにより得ることができる。
【０１３５】
図８５のＡ〜Ｄは、１００ｐｐｂのＭＧＫ−２６４を含むカンナビス試料と空のカンナビス試料測定のＭＲＭ遷移強度を比較する。図８５のＡ及びＣはＭＲＭ遷移２７６．２＞９８の強度を比較し、図８５のＢ及びＤはＭＲＭ遷移２７６．２＞２１０．１の強度を比較する。ＬＯＱは、約１０ｐｐｂだった。
【０１３６】
実施例１６。プロピコナゾール
いくつかのカンナビス植物抽出物は、約３４２Ｄａの名目上のＱ１質量に基づくと、ＭＲＭ遷移について、他より低いレベルのマトリックス干渉を有する。以下の実施例は、両方の種類の抽出物におけるプロピコナゾールを検出するのに有用なＭＲＭ遷移を提供する。
【０１３７】
図８７のＡ〜Ｄは、１００ｐｐｂのプロピコナゾールを含む比較的低いマトリックス干渉を有するカンナビス試料と空のカンナビス試料の測定値のＭＲＭ遷移強度を比較する。図８７のＡ及びＣはＭＲＭ遷移３４２．１＞６９の強度を比較し、図８７のＢ及びＤはＭＲＭ遷移３４２．１＞１５９の強度を比較する。ＬＯＱは約１９ｐｐｂであり、それは最も低いカリフォルニアのアクションリミット１００ｐｐｂより５．３倍低い。
【０１３８】
図１１４のＡ〜Ｄは、名目上のＱ１の質量３４２に基づくとＭＲＭ遷移について高いマトリックス干渉を有し、１０ｐｐｂのプロピコナゾールを含むカンナビス試料と、空のカンナビス試料の測定値について、測定した２つの異なるＭＲＭ遷移の強度を比較する４つのグラフである。図１１４のＡはＭＲＭ遷移３４２＞６９の強度をプロットし、図１１４のＢはＭＲＭ遷移３４２＞１５９の強度をプロットし、図１１４のＤは空のカンナビス試料のＭＲＭ遷移３４２＞６９の強度をプロットする。ＭＲＭ遷移３４２＞６９及び３４２＞１５９の両方について、マトリックス干渉ピークが、図１１４のＣ及びＤに示すように、空のカンナビス試料測定に存在した。
【０１３９】
図１１４のＥ〜Ｈ（１０ｐｐｂのプロピコナゾール）は、マトリックス干渉を受けない２つのＭＲＭ遷移である３４４＞６９及び３４４＞１６１の強度を示す。図１１４のＥ及びＦはＭＲＭ遷移３４４＞６９の強度をプロットし、図１１４のＧ及びＨはＭＲＭ遷移３４４＞１６１の強度をプロットする。農薬試料測定に存在する強度ピーク（図１１４のＥ及びＦ）は、対応する空のカンナビス試料測定では観察されなかった（図１１４のＧ及びＨ）。ＬＯＱは、約１０ｐｐｂだった。
【０１４０】
図１１４のＩ〜Ｌは、１００ｐｐｂのプロピコナゾールを含むカンナビス試料と空のカンナビス試料測定の４つのＭＲＭ遷移強度測定値を比較する。図１１４のＩ〜Ｌのそれぞれは、特定のＭＲＭ遷移の強度測定値をプロットする。具体的には、ＭＲＭ遷移３４２＞６９、３４２＞１５９、３４４＞６９及び３４４＞１６１の測定値を、それぞれ図１１４のＩ、図１１４のＪ、図１１４のＫ及び図１１４のＬに示す。図１１４のＩ〜Ｌのそれぞれにて、第１のトレースは、１００ｐｐｂのプロピコナゾールを含む農薬試料について測定したＭＲＭ遷移の強度をプロットし、第２のトレースはＭＲＭ遷移の強度をプロットする。図１１４のＩ及びＪに示すように、農薬試料の測定に存在する強度ピークが空のカンナビス試料にも存在するので、ＭＲＭ遷移３４２＞６９及び３４２＞１５９はマトリックス干渉を受ける。対照的に、ＭＲＭ遷移３４４＞６９及び３４４＞１６１は、マトリックス干渉を受けない。図１１４のＫ及びＬに示すように、大きな信号ピークが農薬試料の測定で観察されるが、空のカンナビス試料の強度は比較すると最低限に変化する。
【０１４１】
実施例１７。キントゼン（ＰＣＮＢ）及びクロルデンでのＡＰＣＩ法
２つの非常に疎水性が高くかつ塩素系の農薬（キントゼン及びクロルデン）は、ＥＳＩ源を備えるＬＣ−ＭＳでは十分にイオン化しないので、従来ＧＣ−ＭＳで分析されている。この実施例は、キントゼン及びクロルデンをイオン化するためのＡＰＣＩ源の使用を記載する。この方法は、クロルフェナピルをイオン化するためにも使用できる。
【０１４２】
キントゼンの構造を以下に示す。
【化４】
2021512292.tif 000034
【０１４３】
キントゼンは、いかなる水素原子も含まず、したがって、イオンを形成するためにプロトンを得るまたはそれを失う、ＬＣ−ＭＳに適合する技術を用いてイオン化するのが難しい。キントゼンは更に、付加物を形成せず、プロトンを得ることも失うこともできない。代わりに、従来の方法は、キントゼンの検出及び／または定量化のために電子イオン化（ＥＩ）を備えるＧＣ−ＭＳに依存する。
【０１４４】
クロルデンは高塩素系で、タンパク質親和性が非常に低い。クロルデンには２つの形、すなわちシス形及びトランス形が存在する。クロルデンのこれらの２つの形の化学構造を、下に示す。
【化５】
2021512292.tif 000035
【０１４５】
本実施例で、キントゼン及びクロルデンは、噴霧ガスとして空気によりＡＰＣＩ源を使用してイオン化された。しかし、空気及び／または他の気体（例えば、窒素、アルゴン及び二酸化炭素）も使用できる。
【０１４６】
短いＬＣ勾配及びＱＳｉｇｈｔ  ＬＣ−ＭＳ／ＭＳシステムのＡＰＣＩ源を備える、速い６分のＬＣ−ＭＳ／ＭＳ法を使用して、１００ｐｐｂのいずれかの農薬を含むカンナビス試料中のキントゼン及びクロルデンのＬＯＱは、それぞれ１０ｐｐｇ及び３３ｐｐｇだった。
【０１４７】
図３３のＡ及びＢは、ＡＰＣＩを介して形成されるキントゼンイオンの同位体分布を示す。図３３のＡは、負のモードにてＡＰＣＩを介して得た、キントゼンの前駆体（親）の質量スキャンを示す。図３３のＡで、最低の質量（２７３．９）ピークは、［Ｍ−Ｃｌ＋Ｏ］−に対応する。ピーク２７３．９、ピーク２７５．９、ピーク２７７．８及びピーク２７９．９に対応するイオンの相対的な存在量は、それぞれ８０．４％、１００％、５１％及び１２％である。図３３のＢは、計算した同位体分布を示す。
【０１４８】
図３４のＡ及びＢは、ＡＰＣＩを介して形成されるクロルデンイオンの同位体分布を示す。図３４のＡは、ＡＰＣＩを介して得たクロルデンの前駆体（親）の質量スキャンを示す。図３４のＡにて、ピーク４３７．７（Ｍ）、ピーク４３９．７（Ｍ＋２）、ピーク４４１．６（Ｍ＋４）、ピーク４４３．８（Ｍ＋６）及びピーク４４５．７（Ｍ＋８）に対応するイオンの相対的な存在量は、それぞれ３４．５％、８８．８％、１００％、６４．４％及び２５．９％である。図３４のＢは、計算した分布を示す。
【０１４９】
本明細書に記載するように、ＬＣ法で使用する移動相の添加剤の存在は、開示するＡＰＣＩ技術を介してイオン化される分子で得られた信号のレベルに影響し得る。この実施例で、ＬＣ法の添加剤の存在の影響が、図３５のＡ及びＢでクロルデンに関して示される。図３５のＡは、添加剤のない移動相を使用したＬＣ法を用いて分離したクロルデンを含む、試料の前駆体（親）の質量スキャンをプロットする。図３５のＢは、ギ酸を有する移動相を使用したＬＣ法を用いて分離されたクロルデンを含む、試料の前駆体（親）の質量スキャンをプロットする。良好な信号が添加剤のないＬＣ法で観測されるが（図３５のＡ）、添加剤を有するＬＣ法でのクロルデンでは観察されなかった（図３５のＢ）。
【０１５０】
図３６は、キントゼンのプロダクトイオンスキャンを示すグラフである。グラフの種々のピークは、以下のイオンに対応する（関連ピークを括弧内に列挙する）：Ｃｌ３５−（３５．１）、Ｃｌ３７−（３７．１）、［Ｍ−Ｃｌ−Ｃ−ＮＯ２＋Ｏ−Ｏ］−（２０１．８）、［Ｍ−Ｃｌ−Ｃ−ＮＯ２＋Ｏ］−（２７１．８）、［Ｍ−Ｃｌ−ＮＯ２＋Ｏ］−（２２９．９）、［Ｍ−Ｃｌ−Ｃｌ＋Ｏ］−（２４０．９）、［Ｍ−Ｃｌ−ＮＯ＋Ｏ］−（２４５．９）、［Ｍ−Ｃｌ＋Ｏ］−（２７５．９）。ここで、Ｍはキントゼン（ペンタクロロニトロベンゼン）を表す。
【０１５１】
図３９は、低質量範囲１５〜１００にわたる負イオンモードでＡＰＣＩ源内に入る移動相の、バックグラウンドスペクトルを示すグラフである。
【０１５２】
いかなる特定の理論にも束縛されるものではないが、ＡＰＣＩ源によるキントゼンのイオン化の機構は、以下のとおりと考えられる。
Ｏ２  ＋  ｅ−  −＞Ｏ２−
Ｍ＋Ｏ２−＞［Ｍ−Ｃｌ＋Ｏ］−  −ＣｌＯ
（ここでＭはキントゼンを表す）
【０１５３】
いかなる特定の理論にも束縛されるものではないが、ＡＰＣＩ源によるクロルデンのイオン化の機構は、以下のとおりと考えられる。
Ｏ２  ＋  ｅ−  −＞Ｏ２−
Ｍ＋Ｏ２  −＞［Ｍ＋Ｏ２］−
（ここでＭはクロルデンを表す）
【０１５４】
図３７のＡ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移２７５．８＞３５．１（図３７のＡ、図３７のＣ）及び２７３．８＞３５．１（図３７のＢ、図３７のＤ）を使用してキントゼンの存在を分析した、カンナビス試料のクロマトグラムである。図３７のＡ及びＢは、１００ｐｐｂのキントゼンを含むカンナビス試料である。図３７のＣ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【０１５５】
図３８のＡ〜Ｄは、ＭＲＭ遷移２７５．８＞３５（図３８のＡ、図３８のＣ、同定）及び２７３．８＞３５（図３８のＢ、図３８のＤ、定量）を使用してクロルデンの存在を分析した、カンナビス試料のクロマトグラムである。図３８のＡ及びＢは、１００ｐｐｂのクロルデンを含むカンナビス試料である。図３８のＣ及びＤは、空のカンナビス試料である。
【０１５６】
実施例１８。長期安定性
カンナビス中の農薬及びマイコトキシン分析における長期安定性データを、２つのエレクトロスプレーイオン化源及び大気圧化学イオン化源（ＡＰＣＩ）を取り付けて、層流インタフェースによる加熱及び自己洗浄型清浄維持源と組み合わせた、トリプル四重極型質量分析計を使用して収集した。
【０１５７】
図１２０は、ジアジノン１００ｎｇ／ｍｌを含むカンナビス抽出物の長期応答（１週間）を示す。カンナビス中の農薬分析の長期安定性データは、大部分の農薬及びマイコトキシンの１週間の応答ＲＳＤが、１．５〜２０％の間にあることを示した。これらの結果は、ＬＣ−ＭＳ／ＭＳシステムの加熱自己洗浄型清浄維持源が、カンナビスなどの汚れをまき散らすマトリックス中の農薬及びマイコトキシン分析における、ＬＣ−ＭＳ／ＭＳによる方法の保全の必要性を低減することを実証する。市販の他のＬＣＭＳシステムによる、文献で公開されている大部分のＬＣ−ＭＳ／ＭＳ法は、長期安定性データを示していないか、質量分析計の感度を維持するために、毎日もしくはバッチの後、エレクトロスプレー源を洗浄しなければならなかったことを述べているかのいずれかである（Ｇｅｉｓ−Ａｓｔｅｇｇｉａｎｔｅ  ｅｔ  ａｌ，Ｊ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ．Ａ，１２５８，４３−５４，２０１２）。それらは更に、最初の数分間、及び最後のピークが溶出した後、ＭＳからのＬＣ流を方向転換して、ＬＣカラムから非保持の及び溶出の遅いマトリックス化合物によるＭＳ汚染を低減させる。この試験で、優れた長期安定性データは、最初の数分間、ならびに実行及びインオン源の周期的な洗浄の終了時に、ＭＳからのＬＣ流を方向転換せずに得られた。
【０１５８】
実施例１９。溶媒抽出による回収率試験
ＱｕＥＣｈＥＲＳは、高い含水量を有する果物及び野菜マトリックスからの、農薬などの低濃度の汚染物質の抽出のための方法である（Ａｎａｓｔａｓｓｉａｄｅｓ  ｅｔ  ａｌ，Ｊ．ＡＯＡＣ  Ｉｎｔ．８６（２），４１２−３１，２００３）。それは、果物及び野菜の糖及び他の化合物の効果的な除去による、これらの食品マトリックスからの広範な農薬の抽出を行う（Ｃｈｕｎｇ＆Ｃｈａｎ，Ｊ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ．Ａ，１２１７，４８１５−２４，２０１０、Ｃｕｎｈａ    ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｓｅｐ．Ｓｃｉ．３０（４），６２０−２６，２００７、Ｓａｐｏｚｈｉｎｉｋｏｖａ，Ｊ．Ａｇｒｉｃ．Ｆｏｏｄ  Ｃｈｅｍ．６２，３６８４−８９，２０１４、Ｗａｎｇ＆Ｃｈｅｕｎｇ，Ｊ．ＡＯＡＣ  Ｉｎｔ．９９（２），５３９−５７，２０１６、Ｖｉｌｌａｒ−Ｐｕｌｉｄｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔａｌａｎｔａ８５，１４１９−２７，２０１１）。それは、カンナビスに関するカリフォルニア及び他の州の監視リストに含まれるダミノジッドなどの非常に極性の高い農薬には適していない。ダミノジッドは非常に極性が高く、水相中に残存し、塩析ステップの間、有機溶媒中に分散しないので、ＱｕＥＣｈＥＲＳ抽出手順では効率的に抽出されない。ＱｕＥＣｈＥＲＳ抽出によるカンナビスマトリックスからのダミノジッドの回収率は、１０％未満と報告されている（Ｓｔｅｎｅｒｓｏｎ＆Ｏｄｅｎ，Ｃａｎｎ．Ｓｃｉ．＆Ｔｅｃｈ．１（１），４８−５３，２０１８）。更に、カンナビスマトリックスは概して、カンナビノイドやテルペンなどの疎水性化合物を含むので、ＱｕＥＣｈＥＲＳ抽出法は、塩析ステップの間、マトリックス化合物の多くを除去しない。様々なグループが、カンナビス抽出物からマトリックスを除去するために、ＰＳＡ及び他の吸着剤を利用するｄ−ＳＰＥステップによる、改良型のＱｕＥＣｈＥＲＳ方法を開発しようと試みている（例えば、Ｋｏｗｌａｓｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，ＬＣＧＣ３５（５）８−２２，２０１７；Ｗａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，ＬＣＧＣ３４（１０），２０−７，２０１６）。これらの化合物は、ｄ−ＳＰＥステップでＰＳＡ吸着剤と結合するため、それは不良な回収率になる。
【０１５９】
カンナビスマトリックスからの農薬の抽出におけるＱｕＥＣｈＥＲＳ方法の上述の欠点のため、我々は、カンナビスマトリックスからの農薬の抽出で単純なアセトニトリル系の溶媒抽出方法を使用した。強化したカンナビス花試料を作製して、農薬及びアフラトキシンの回収率を測定した。カンナビス花試料は、スパイク添加の前に、農薬の欠如を確認するために試験した。５つのカンナビス花試料に、２つの濃度（低及び高）の農薬（０．１及び１μｇ／ｇ）及びマイコトキシン（０．０２及び０．１μｇ／ｇ）標準でスパイク添加した。これらの２つの濃度は、カンナビス中の農薬及びマイコトキシンに関する、カリフォルニア及び他の州の規制限度に基づいて選択した。表９、表１０及び表１１は、２つの異なる濃度の全６６の農薬及び５つのマイコトキシンの絶対回収率が、５つのカンナビス花試料について、２０％未満のＲＳＤで、７０〜１２０％の許容範囲内にあったことを示す。３つの農薬について、それがＬＯＱ値以下だったので、回収率は低スパイク値で報告されなかった。
【表９−１】
2021512292.tif 000036
【表９−２】
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【表１０】
2021512292.tif 000038
【表１１−１】
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【表１１−２】
2021512292.tif 000040
【０１６０】
実施例２０。定量化
図３１は、分析された農薬における全体の回収範囲を示す棒グラフである。示すように、９３％の農薬の全体の回収値は、８０％〜１２０％の範囲だった（７２の農薬のうちの４９の全体の回収値は８０％〜１２０％の範囲で、７２の農薬のうちの１８の全体の回収値は６０％〜８０％の範囲だった）。これらの計算は、１０の内部標準だけの混合物の使用に基づいた。本明細書に開示される内部標準混合物の使用は、残りの５つの農薬（全体の回収値が６０％未満のもの）に関して、６０％〜１２０％の範囲の値まで回収率を改善する可能性を有する。例えば、図３２のＡ及びＢは、（ｉ）カンナビス植物材料（カンナビスマトリックス）を含む試料中、及び（ｉｉ）溶媒（カンナビス植物材料なし）中のそれぞれで、０．１〜１２０ｐｐｂの範囲の濃度のアゾキシストロビンの較正曲線を示す。
【０１６１】
上記の表９〜１１、ならびに図４０Ａ及び図４０Ｂは、この開示で分析された農薬の検出及び／または定量化の結果を要約する。図４０Ａ及び図４０Ｂは、異なる範囲内のＬＯＱが得られた、種々の数の農薬をプロットする。図４０Ａで、ＬＯＱは定量及び同定遷移の両方を使用して決定され、図４０Ｂで、ＬＯＱは定量遷移だけに基づいて決定された。
【０１６２】
カンナビス抽出物中のＥＰＡカテゴリーＩＩの農薬（中程度に有毒かつ中程度に刺激性）、ＥＰＡカテゴリーＩの農薬（非常に有毒かつ高度に刺激性）及びマイコトキシンのそれぞれに関する、定量限界（ＬＯＱ）及びＬＯＱ濃度での応答再現性を、表１２、表１３及び表１４にまとめる。ＬＯＱは、定量及び同定イオンの両方の信号（両方の信号対雑音比、Ｓ／Ｎ＞１０）を考慮し、生成イオン比が予測比の２０％の許容誤差範囲内にあるのを確実にすることにより、測定された。
【表１２−１】
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【表１２−２】
2021512292.tif 000042
【表１３】
2021512292.tif 000043
【表１４−１】
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【表１４−２】
2021512292.tif 000045
【０１６３】
実施例２１。コンピュータシステム及びネットワーク環境
図４で、本明細書に記載のシステム及び方法を提供する際に使用するネットワーク環境４００の実装形態を、示し記載する。ここで図４に示すように、簡便な概観で、例示のクラウドコンピューティング環境４００のブロック図を、示し記載する。クラウドコンピューティング環境４００は、１つ以上のリソースプロバイダ４０２ａ、４０２ｂ、４０２ｃ（まとめて、４０２）を含むことができる。各リソースプロバイダ４０２は、計算リソースを含むことができる。いくつかの実装形態では、計算リソースは、データを処理するために使用する、任意のハードウェア及び／またはソフトウェアを含むことができる。例えば、計算リソースは、アルゴリズム、コンピュータプログラム及び／またはコンピュータアプリケーションを実行することができる、ハードウェア及び／またはソフトウェアを含むことができる。いくつかの実装形態では、例示の計算リソースは、記憶及び読み出し能力を有するアプリケーションサーバ及び／またはデータベースを含むことができる。各リソースプロバイダ４０２は、クラウドコンピューティング環境４００中の他の任意のリソースプロバイダ４０２に接続することができる。いくつかの実装形態では、リソースプロバイダ４０２は、コンピュータネットワーク４０８上で接続することができる。各リソースプロバイダ４０２は、コンピュータネットワーク４０８上の１つ以上の計算装置４０４ａ、４０４ｂ、４０４ｃ（まとめて、４０４）に接続することができる。
【０１６４】
クラウドコンピューティング環境４００は、リソースマネージャ４０６を含むことができる。リソースマネージャ４０６は、コンピュータネットワーク４０８上でリソースプロバイダ４０２及び計算装置４０４に接続することができる。いくつかの実装形態では、リソースマネージャ４０６は、１つ以上の計算装置４０４に対する、１つ以上のリソースプロバイダ４０２による計算リソースの提供を容易にすることができる。リソースマネージャ４０６は、特定の計算装置４０４から計算リソースのリクエストを受信することができる。リソースマネージャ４０６は、計算装置４０４がリクエストした計算リソースを提供できる、１つ以上のリソースプロバイダ４０２を特定できる。リソースマネージャ４０６は、計算リソースを提供するリソースプロバイダ４０２を選択できる。リソースマネージャ４０６は、リソースプロバイダ４０２と特定の計算装置４０４の間の接続を容易にすることができる。いくつかの実装形態では、リソースマネージャ４０６は、特定のリソースプロバイダ４０２と特定の計算装置４０４の間の接続を確立することができる。いくつかの実装形態では、リソースマネージャ４０６は、特定の計算装置４０４を、リクエストされた計算リソースを有する特定のリソースプロバイダ４０２にリダイレクトすることができる。
【０１６５】
図５は、本開示に記載の技術を実施するために使用できる、計算装置５００及びモバイル計算装置５５０の実施例を示す。計算装置５００は、ラップトップ、デスクトップ、ワークステーション、個人用携帯情報端末、サーバ、ブレードサーバ、メインフレーム及び他の適切なコンピュータなどの、種々の形態のデジタルコンピュータを表すことを意図する。モバイル計算装置５５０は、個人用携帯情報端末、移動電話、スマートフォン及び他の類似の計算装置などの、種々の形態モバイル機器を表すことを意図とする。ここで示す要素、その接続及び関係、ならびにその機能は、単なる例示の例を意図しており、制限することを意図したものではない。
【０１６６】
計算装置５００は、プロセッサ５０２、メモリ５０４、記憶装置５０６、メモリ５０４及び複数の高速拡張ポート５１０に接続する高速インタフェース５０８、ならびに低速拡張ポート５１４及び記憶装置５０６に接続する低速インタフェース５１２を含む。プロセッサ５０２、メモリ５０４、記憶装置５０６、高速インタフェース５０８、高速拡張ポート５１０及び低速インタフェース５１２のそれぞれは、種々のバスを使用して相互に接続することができて、共通のマザーボード上にまたは必要に応じて他の方法で載置されることができる。プロセッサ５０２は、高速インタフェース５０８に連結するディスプレイ５１６などの外部入力／出力装置上のグラフィカルユーザインタフェース（ＧＵＩ）用のテキスト及び／またはグラフィック情報を表示するために、メモリ５０４内にまたは記憶装置５０６上に保存される命令を含む、計算装置５００内での実行のための命令を処理できる。他の実装形態では、複数のプロセッサ及び／または複数のバスを、必要に応じて複数のメモリ及び種々のメモリと共に使用することができる。更に複数の計算装置を接続することができ、各装置は、必要な動作の一部（例えば、サーババンク、一群のブレードサーバまたはマルチプロセッサシステムとして）を提供する。したがって、これらの用語を本明細書で使用する際、複数の機能が「プロセッサ」によって実行されるとして記載される場合、これは、複数の機能が、任意の数の計算装置（１つ以上）の任意の数のプロセッサ（１つ以上）により実行される実施形態を含む。更に、機能が「プロセッサ」によって実行されると記載される場合、これは、機能が、任意の数の計算装置（１つ以上）の任意の数のプロセッサ（１つ以上）により実行される実施形態を含む（例えば、分散した計算システムで）。
【０１６７】
メモリ５０４は、計算装置５００内に情報を格納する。いくつかの実装形態では、メモリ５０４は、揮発性メモリ装置（複数可）である。いくつかの実装形態では、メモリ５０４は、不揮発性メモリ装置（複数可）である。メモリ５０４は、磁気または光ディスクなどの別の形態のコンピュータ可読媒体でもよい。
【０１６８】
記憶装置５０６は、大容量記憶を計算装置５００に提供できる。いくつかの実装形態では、記憶装置５０６は、フロッピー（登録商標）ディスク装置、ハードディスク装置、光ディスク装置もしくはテープ装置、フラッシュメモリ、もしくは他の類似の固体記憶装置、またはストレージエリアネットワークもしくは他の構成の装置を含む一連の装置などのコンピュータ可読媒体であり得る、またはそれを含有することができる。命令は、情報媒体に格納することができる。命令は、１つ以上の処理装置（例えば、プロセッサ５０２）により実行されるとき、上述の方法など、１つ以上の方法を実行する。命令は、コンピュータまたは機械可読媒体（例えば、メモリ５０４、記憶装置５０６またはプロセッサ５０２上のメモリ）などの１つ以上の記憶装置（例えば、）によっても格納され得る。
【０１６９】
高速インタフェース５０８が計算装置５００の帯域消費型動作を管理できる一方で、低速インタフェース５１２は低帯域消費型動作を管理し得る。機能のこのような割当は、単なる例示である。いくつかの実装形態では、高速インタフェース５０８は、メモリ５０４、ディスプレイ５１６（例えば、グラフィックプロセッサまたはアクセラレータによって）に連結でき、及び種々の拡張カード（図示せず）を利用できる高速拡張ポート５１０に連結できる。いくつかの実装形態では、低速コントローラ５１２は、記憶装置５０６及び低速拡張ポート５１４に連結できる。低速拡張ポート５１４（それは、種々の通信ポート（例えば、ＵＳＢ、ＢＬＵＥＴＯＯＴＨ（登録商標）、Ｂｌｕｅｔｏｏｔｈ（登録商標）  Ｌｏｗ  Ｅｎｅｒｇｙ、イーサネット（登録商標）、無線イーサネット）を含むことができる）は、キーボード、ポインティング装置、スキャナまたはネットワーク装置（例えば、スイッチまたはルータ）などの１つ以上の入力／出力装置（例えば、）に連結できる（例えば、ネットワークアダプタによって）。
【０１７０】
計算装置５００は、図に示すようにいくつかの異なる形態で実装され得る。例えば、計算装置５００は、標準サーバ５２０として実装され得る、またはこのようなサーバの群にて複数回で実施され得る。更に、計算装置５００は、ラップトップコンピュータ５２２などのパーソナルコンピュータ中に実装され得る。計算装置５００は、ラックサーバシステム５２４の一部としても実装され得る。あるいは、計算装置５００の構成要素は、モバイル計算装置５５０などのモバイル装置（図示せず）の他の構成要素と組み合わせることができる。このような装置のそれぞれは、計算装置５００及びモバイル計算装置５５０のうちの１つ以上を含むことができて、全システムは、互いに通信する複数の計算装置から構成され得る。
【０１７１】
モバイル計算装置５５０は、他の構成要素の中でも、プロセッサ５５２、メモリ５６４、ディスプレイ５５４などの入力／出力装置、通信インタフェース５６６、及び送受信装置５６８を含むことができる。モバイル計算装置５５０は、マイクロドライブまたは他の装置などの記憶装置を備えて、追加の記憶装置を提供することができる。プロセッサ５５２、メモリ５６４、ディスプレイ５５４、通信インタフェース５６６及び送受信装置５６８のそれぞれは、種々のバスを用いて相互に接続することができ、構成要素のいくつかは、共通のマザーボード上にまたは必要に応じて他の方法で載置されることができる。
【０１７２】
プロセッサ５５２は、メモリ５６４に格納されている命令を含む、モバイル計算装置５５０内の命令を実行できる。プロセッサ５５２は、別個の及び複数のアナログならびにデジタルプロセッサを含む、チップのチップセットとして実装され得る。プロセッサ５５２は、例えば、ユーザインタフェースの制御、モバイル計算装置５５０によるアプリケーションの実行、及びモバイル計算装置５５０による無線通信などのモバイル計算装置５５０の他の構成要素の調整を提供できる。
【０１７３】
プロセッサ５５２は、ディスプレイ５５４と連結した制御インタフェース５５８及び表示インタフェース５５６を通してユーザと通信できる。ディスプレイ５５４は、例えば、ＴＦＴ（薄膜トランジスタ液晶）ディスプレイまたはＯＬＥＤ（有機発光ダイオード）ディスプレイ、または他の適切なディスプレイ技術でもよい。表示インタフェース５５６は、ディスプレイ５５４を駆動して、グラフィック及び他の情報をユーザに示す、適切な回路を含むことができる。制御インタフェース５５８は、ユーザからコマンドを受け取り、それをプロセッサ５５２への送信のために変換できる。更に、外部インタフェース５６２は、他の装置とモバイル計算装置５５０との近距離領域の通信を可能にするように、プロセッサ５５２との通信を提供できる。例えば、外部インタフェース５６２は、いくつかの実装形態では有線通信を提供でき、または他の実装形態では無線通信を提供でき、複数のインタフェースも使用できる。
【０１７４】
メモリ５６４は、モバイル計算装置５５０内に情報を格納する。メモリ５６４は、コンピュータ可読媒体（複数可）、揮発性メモリ装置（複数可）または不揮発性メモリ装置（複数可）のうちの１つ以上として実装され得る。拡張メモリ５７４も提供することができ、拡張インタフェース５７２を通してモバイル計算装置５５０に接続することができる。拡張インタフェース５７２は、例えば、ＳＤカード及び／またはＳＩＭＭ（シングル・イン・ライン・メモリ・モジュール）カードインタフェースを含むことができる。拡張メモリ５７４は、追加の記憶空間をモバイル計算装置５５０に提供できる、またはモバイル計算装置５５０のためのアプリケーションまたは他の情報を格納することもできる。具体的には、拡張メモリ５７４は、上述のプロセスを実行するまたは補う命令を含むことができ、セキュリティ保護された情報も含み得る。したがって、例えば、拡張メモリ５７４は、モバイル計算装置５５０のセキュリティモジュールとして提供されてもよく、モバイル計算装置５５０の安全な使用を可能にする命令でプログラムされてもよい。更に、安全なアプリケーションは、追加情報と共に、ＳＩＭＭカードを介して提供されてもよい（例えば、ＳＩＭＭカード上に識別情報をハッキングできない方法で配置すること）。
【０１７５】
メモリとしては、例えば、後述するように、フラッシュメモリ及び／またはＮＶＲＡＭメモリ（不揮発性ランダムアクセスメモリ）が挙げられ得る。いくつかの実装形態では、命令は、情報媒体に格納される。１つ以上の処理装置（例えば、プロセッサ５５２）により実行されるとき、命令は、上述のものなど１つ以上の方法を実行する。命令は、１つ以上のコンピュータまたは機械可読媒体（例えば、メモリ５６４、拡張メモリ５７４またはプロセッサ５５２上のメモリ）などの１つ以上の記憶装置によっても格納され得る。いくつかの実装形態では、命令は、例えば、送受信装置５６８または外部インタフェース５６２を介して伝搬信号で受信することができる。
【０１７６】
モバイル計算装置５５０は、必要な場合、デジタル信号処理回路を含むことができる、通信インタフェース５６６により無線で通信され得る。通信インタフェース５６６は、種々のモードまたはプロトコル、例えば、とりわけ、ＧＳＭ（登録商標）音声電話（グローバル・システム・フォー・モバイル・コミュニケーションズ）、ＳＭＳ（ショートメッセージ・サービス）、ＥＭＳ（拡張メッセージサービス）またはＭＭＳメッセージ発信（マルチメディア・メッセージサービス）、ＣＤＭＡ（符号分割多元接続）、ＴＤＭＡ（時分割多元接続）、ＰＤＣ（パーソナルデジタルセルラ）、ＷＣＤＭＡ（登録商標）（広帯域符号分割多重アクセス）、ＣＤＭＡ２０００またはＧＰＲＳ（汎用パケット無線サービス）の下で、通信を提供できる。例えば、このような通信は、高周波を使用して送受信装置５６８により生じる場合がある。更に、近距離通信が、例えば、ＢＬＵＥＴＯＯＴＨ（登録商標）、ＷＩ−ＦＩ（商標）または他のこのような送受信装置（図示せず）を使用して生じる場合がある。更に、ＧＰＳ（全地球測位システム）受信器モジュール５７０は、モバイル計算装置５５０に対して、追加のナビゲーション関連及び位置関連無線データを提供することができ、それらのデータは、モバイル計算装置５５０上で作動するアプリケーションによって必要に応じて使用され得る。
【０１７７】
モバイル計算装置５５０はまた、ユーザから音声情報を受け取って、それを使用可能なデジタル情報に変換し得る音声コーデック５６０を使用して、音声で通信できる。音声コーデック５６０は、同様に、例えば、モバイル計算装置５５０のハンドセットのスピーカーなどを介して、ユーザに対して可聴音を生成し得る。そのような音は、音声通話からの音を含んでもよく、記録した音（例えば、音声メッセージ、音楽ファイルなど）を含んでもよく、モバイル計算装置５５０上で作動するアプリケーションによって生成された音を含んでもよい。
【０１７８】
モバイル計算装置５５０は、図に示すように多くの異なる形で実装され得る。例えば、それは、移動電話５８０として実装され得る。それは、多機能電話５８２、パーソナル携帯情報機器または他の類似のモバイル機器の一部としても実装され得る。
【０１７９】
本明細書に記載のシステム及び技術の種々の実装形態は、デジタル電子回路、集積回路、特別設計ＡＳＩＣ（特定用途向け集積回路）、コンピュータハードウェア、ファームウェア、ソフトウェア及び／またはそれらの組み合わせで実現することができる。このような種々の実装形態は、プログラム可能なシステムで実行可能及び／または解釈可能である、１つ以上のコンピュータプログラムでの実装形態を含むことができ、プログラム可能なシステムは、専用または汎用であり得るプログラム可能なプロセッサと、それに連結されてデータと命令をやり取りする、記憶システム、少なくとも１つの入力装置及び少なくとも１つの出力装置を含む。
【０１８０】
これらのコンピュータプログラム（プログラム、ソフトウェア、ソフトウェアアプリケーションまたはコードとも呼ばれる）は、プログラム可能なプロセッサのための機械命令を含み、高レベル手順及び／またはオブジェクト指向プログラミング言語で、及び／またはアセンブリ／機械言語で実装できる。本明細書で使用する場合、「機械可読媒体」及び「コンピュータ可読媒体」は、プログラム可能なプロセッサへ機械命令及び／またはデータを提供するために使用する、任意のコンピュータプログラム製品、設備及び／または装置（例えば、磁気ディスク、光ディスク、メモリ、プログラム可能論理回路（ＰＬＤ））を意味し、機械可読信号として機械命令を受信する機械可読媒体を含む。「機械可読信号」という用語は、機械命令及び／またはデータをプログラム可能なプロセッサに提供するために使用する、任意の信号を意味する。
【０１８１】
ユーザとの対話を提供するために、本明細書に記載するシステム及び技術は、情報をユーザに表示するためのディスプレイ装置（例えば、ＣＲＴ（ブラウン管）またはＬＣＤ（液晶ディスプレイ）モニタ）、ならびにユーザが入力をコンピュータに提供できる、キーボード及びポインティング装置（例えば、マウスまたはトラックボール）を有するコンピュータ上で実施することができる。ユーザとの対話を提供するために、他の種類の装置も用いることができる。例えば、ユーザに提供されるフィードバックは、任意の形態の感覚フィードバック（例えば、視覚フィードバック、聴覚フィードバック、または触覚フィードバック）であり得て、ユーザからの入力は、音響入力、音声入力、または触覚入力を含む、任意の形で受信することができる。
【０１８２】
本明細書に記載するシステム及び技術は、バックエンド構成要素（例えば、データサーバとして）を備える、またはミドルウェア構成要素（例えば、アプリケーションサーバ）を備える、またはフロントエンド構成要素（例えば、ユーザが本明細書に記載のシステム及び技術の実装形態とやりとりすることができる、グラフィカルユーザインタフェースまたはウエブブラウザーを有するクライアントコンピュータ）、またはそのようなバックエンド、ミドルウェアまたはフロントエンド構成要素の任意の組み合わせを含む、計算システムにて実施され得る。システムの構成要素は、デジタルデータ通信（例えば、通信ネットワーク）の任意の形式または媒体によって相互接続できる。通信ネットワークの例としては、ローカルエリアネットワーク（ＬＡＮ）、広域ネットワーク（「ＷＡＮ」）及びインターネットが挙げられる。
【０１８３】
計算システムは、クライアント及びサーバを含むことができる。クライアント及びサーバは、通常、互いにリモートであり、一般的に通信ネットワークによって通信する。クライアントとサーバの関係は、対応するコンピュータ上で稼動し、かつ互いに対してクライアント−サーバ関係を有するコンピュータプログラムに基づいて生じる。
【０１８４】
いくつかの実装形態では、種々のモジュールは、切り離す、組み合わす、または１つもしくは複合モジュールに組み込むことができる。図で示すいかなるモジュールも、その中で示すソフトウェアアーキテクチャに本明細書に記載のシステムを制限することを意図しない。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６Ａ】
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【図６Ｂ】
2021512292.tif 000053
【図７−１】
2021512292.tif 000054
【図７−２】
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【図８】
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【図９−１】
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【図９−２】
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【図１０−１】
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【図１０−２】
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【図１０−３】
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【図１１−１】
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【図１１−２】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４−１】
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【図１４−２】
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【図１４−３】
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【図１４−４】
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【図１４−５】
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【図１４−６】
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【図１４−７】
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【図１４−８】
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【図１５−１】
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【図１５−２】
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【図１６−１】
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【図１６−２】
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【図１６−３】
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【図１６−４】
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【図１７−１】
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【図１７−２】
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【図１７−３】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０−１】
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【図２０−２】
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【図２０−３】
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【図２１−１】
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【図２１−２】
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【図２２】
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【図２３−１】
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【図２３−２】
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【図２３−３】
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【図２４−１】
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【図２４−２】
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【図２４−３】
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【図２５】
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【図２６】
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【図２７Ａ】
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【図２７Ｂ】
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【図２７Ｃ】
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【図２７Ｄ】
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【図２７Ｅ】
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【図２７Ｆ】
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【図２８】
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【図２９】
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【図３０−１】
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【図３０−２】
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【図３１】
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【図３２】
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【図３３】
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【図３４】
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【図３５】
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【図３６】
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【図３７】
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【図３８】
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【図３９】
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【図４０Ａ】
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【図４０Ｂ】
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【図４１】
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【図４２】
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【図４３】
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【図４４】
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【図４５】
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【図４６】
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【図４７】
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【図４８】
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【図４９】
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【図５０】
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【図５１】
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【図５２】
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【図５３】
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【図５４】
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【図５５】
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【図５６】
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【図５７】
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【図５８】
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【図５９】
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【図６０】
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【図６１】
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【図６２】
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【図６３】
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【図６４】
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【図６５】
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【図６６】
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【図６７】
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【図６８】
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【図６９】
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【図７０】
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【図７１】
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【図７２】
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【図７３】
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【図７４】
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【図７５】
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【図７６】
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【図７７】
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【図７８】
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【図７９】
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【図８０】
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【図８１】
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【図８２】
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【図８３】
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【図８４】
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【図８５】
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【図８６】
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【図８７】
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【図８８】
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【図８９】
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【図９０】
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【図９１】
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【図９２】
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【図９３】
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【図９４】
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【図９５】
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【図９６】
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【図９７】
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【図９８】
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【図９９】
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【図１００】
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【図１０１】
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【図１０２】
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【図１０３】
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【図１０４】
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【図１０５】
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【図１０６】
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【図１０７】
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【図１０８】
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【図１０９】
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【図１１０】
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【図１１１】
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【図１１２】
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【図１１３】
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【図１１４−１】
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【図１１４−２】
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【図１１４−３】
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【図１１４−４】
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【図１１５−１】
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【図１１５−２】
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【図１１５−３】
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【図１１５−４】
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【図１１６−１】
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【図１１６−２】
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【図１１６−３】
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【図１１７−１】
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【図１１７−２】
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【図１１７−３】
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【図１１８】
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【図１１９−１】
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【図１１９−２】
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【図１１９−３】
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【図１２０】
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【図１２１】
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【図１２２】
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【図１２３】
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【国際調査報告】
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