(57)【要約】  本発明は、式Ｉ：2021510699.tif 000048の新規クラスのテトラヒドロイソキノリン化合物及びそれを含む組成物に関する。本発明の化合物及び組成物を、癌の治療における医薬として使用することができる。【選択図】なし
2021510699.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ：
【化１】
2021510699.tif 000044
（式中、
Ｒ１は（Ｒｙ）ｋ１−（Ｙ１）ｎ１−（Ｘ１）ｍ１−Ｒｘ、（Ｒｙ）ｋ１−（Ｘ１）ｍ１−（Ｙ１）ｎ１−Ｒｘ又はハロゲン、例えばＯＲｘ又はＹ１Ｘ１Ｒｘ、より詳しくはＯＲｘであり、
Ｙ１はＣ（Ｏ）又はＳ（Ｏ）２、例えばＣ（Ｏ）であり、
Ｘ１はＮＨ又はＯであり、
ＲｙはＣ１〜４アルカンジイル、Ｃ２〜４アルケンジイル又はＣ２〜４アルキンジイル、例えば−ＣＨ２−であり、
ＲｘはＣ１〜４アルキル、Ｃ２〜４アルケニル、Ｃ２〜４アルキニル又はＨ、例えばＣＨ３又はＨであり、
ｋ１は０又は１であり、
ｎ１は０又は１であり、
ｍ１は０又は１であり、
Ｒ２はＨ、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ２〜４アルケニル、Ｃ２〜４アルキニル、ハロゲン、ＯＣ１〜４アルキル、ＯＣ２〜４アルケニル又はＯＣ２〜４アルキニル、例えばＨ、ＣＨ３又はＯＣＨ３、特にＨ又はＯＣＨ３、より詳しくはＨであり、
Ｒ３は−（ＣＨ２）ｎ３−Ｃ（Ｙ３）−（Ｘ３）ｍ３−（ＣＨ２）ｋ３−Ｒ３ａであり、
ｎ３は０〜２の範囲の整数、例えば０又は２であり、
Ｙ３はＳ又はＯ、例えばＯであり、
Ｘ３はＳ、ＮＨ又はＯ、例えばＮＨ又はＯ、特にＮＨであり、
ｍ３は０又は１であり、
ｋ３は０又は１であり、
Ｒ３ａはＣ１〜４アルキル、Ｃ２〜４アルケニル、Ｃ２〜４アルキニル、ＯＣ１〜４アルキル、ＯＣ２〜４アルケニル、ＯＣ２〜４アルキニル、Ｈｅｔ３、Ａｒ３、ＨｅｔＣｙｃ３又はＣｙｃ３、例えばＣ１〜４アルキル又はＨｅｔ３であり、
Ｈｅｔ３はＮ、Ｏ及びＳからなる群より選択される１つ以上のヘテロ原子を含む５員〜１０員の複素芳香環又は複素芳香環系、例えばオキサゾリル、チアゾリル、又はピリジニル、特にオキサゾール−４−イル、チアゾール−４−イル又はピリジン−４−イルであり、
Ａｒ３は６員〜１０員の芳香環又は芳香環系、例えばフェニル又はナフチルであり、
ＨｅｔＣｙｃ３は、Ｎ、Ｏ及びＳからなる群より選択される１つ以上のヘテロ原子を含む３員〜８員のヘテロシクリル、例えばピロリジニル、オキサゾリジニル、モルホリニルであり、
Ｃｙｃ３は３員〜８員のシクリル、例えばシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル又はシクロオクチルであり、
Ｒ４はハロゲン、ＯＣ１〜４アルキル、ＯＣ２〜４アルケニル、ＯＣ２〜４アルキニル、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ２〜４アルケニル又はＣ２〜４アルキニル、例えばハロゲン又はＣ１〜２アルキル、特にＣｌ、Ｆ又はＣ１〜２アルキル、より詳しくはＣｌ、Ｆ又はＣＨ３、更に詳しくはＣｌ又はＣＨ３、例えばＣＨ３であり、
Ｒ５は水素、ＯＣ１〜４アルキル、ＯＣ２〜４アルケニル、ＯＣ２〜４アルキニル、ＯＨ、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ２〜４アルケニル又はＣ２〜４アルキニルであり、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ２〜４アルケニル又はＣ２〜４アルキニルは、それぞれ独立して、１個〜３個のハロゲン、例えばＦ、特にＨ、Ｃ１〜２アルキル又はＯＣ１〜２アルキル、より詳しくはＣ１〜２アルキル又はＯＣ１〜２アルキル、更に詳しくはＣＨ３又はＯＣＨ３、例えばＣＨ３で任意に置換され、
Ｒ６はＨ、ＯＨ、ハロゲン又はＮＨ２、例えばＨ又はＯＨ、より詳しくはＨであり、
Ｒ７はＨ、ハロゲン、ＯＨ、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ２〜４アルケニル、Ｃ２〜４アルキニル、ＯＣ１〜４アルキル、ＯＣ２〜４アルケニル又はＯＣ２〜４アルキニル、例えばＨ、ＣＨ３又はＯＣＨ３、特にＨ又はＯＣＨ３、より詳しくはＨであり、
Ｒ８は−（ＣＨ２）ｎ８−（Ｃ（Ｏ））ｍ８−Ｒ８ａであり、
ｎ８は１〜２の整数、例えば２であり、ｍ８は０〜１の整数、例えば０であり、
Ｒ８ａはＯＨ、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ２〜４アルケニル、Ｃ２〜４アルキニル、ＯＣ１〜４アルキル、ＯＣ２〜４アルケニル、ＯＣ２〜４アルキニル、ＣＯ２−Ｃ１〜４アルキル、ＣＯ２−Ｃ２〜４アルケニル、ＣＯ２−Ｃ２〜４アルキニル、ハロゲン、ＣＯＮＨ２、ＣＮ、ＣＯＯＨ、−ＯＣＯ−Ｃ１〜４アルキル、−ＯＣＯ−Ｃ２〜４アルケニル、−ＯＣＯ−Ｃ２〜４アルキニル、−ＮＨＣＯ−Ｃ１〜４アルキル、−ＮＨＣＯ−Ｃ２〜４アルケニル、−ＮＨＣＯ−Ｃ２〜４アルキニル、ＮＨ２、ＮＨＣ１〜４アルキル、ＮＨＣ２〜４アルケニル、ＮＨＣ２〜４アルキニル、Ｎ（Ｃ１〜４アルキル）２、Ｎ（Ｃ２〜４アルケニル）２、Ｎ（Ｃ２〜４アルキニル）２、ＣＯＮＨＣ１〜４アルキル、ＣＯＮＨＣ２〜４アルケニル、ＣＯＮＨＣ２〜４アルキニル、ＣＯＮ（Ｃ１〜４アルキル）２、ＣＯＮ（Ｃ２〜４アルケニル）２、ＣＯＮ（Ｃ２〜４アルキニル）２、例えばＯＨ、ＯＣＨ３、ＣＯ２ＣＨ３、ハロゲン、ＣＯＮＨ２、ＣＮ及びＣＯＯＨ、特にＯＨ、ＯＣＨ３、ＣＯ２ＣＨ３、Ｆ、ＣＯＮＨ２、ＣＮ及びＣＯＯＨ、より詳しくはＯＨ、ＯＣＨ３及びＦ、更により詳しくはＯＨ及びＦ、例えばＯＨからなる群より選択される少なくとも１つの置換基で任意に置換された、５個又は６個の環員を有する芳香環又は複素芳香環であるか、又はＲ８ａは追加の任意に置換された環、複素環、芳香環又は複素芳香環、例えば、任意に置換された環、複素環又は複素芳香環と融合した５個又は６個の環員を有する芳香環又は複素芳香環である）の化合物、そのエナンチオマー及び薬学的に許容可能な塩。
【請求項２】
Ｒ８ａはフェニル環であり、ＯＨ、Ｃ１〜４アルキル、ＯＣ１〜４アルキル、ＣＯ２−Ｃ１〜４アルキル、ハロゲン、ＣＯＮＨ２、ＣＮ及びＣＯＯＨからなる群より選択される少なくとも１つの置換基、例えばＯＨ、ＯＣＨ３、ＣＯ２ＣＨ３、ハロゲン、ＣＯＮＨ２、ＣＮ及びＣＯＯＨ、特にＯＨ、ＯＣＨ３、ＣＯ２ＣＨ３、Ｆ、ＣＯＮＨ２、ＣＮ及びＣＯＯＨ、より詳しくはＯＨ、ＯＣＨ３及びＦ、更に詳しくはＯＨ及びＦ、例えばＯＨで任意に置換されている、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
前記フェニル環がメタ位で置換されている、請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ８ａが任意に置換されたピリジニル、インダニル、２，３−ジヒドロ−ベンゾフラン−５−イル、又はピリミジノ［１，２−ｂ］［１，２，４］トリアゾール−３−イルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
Ｙ３がＯであり、Ｘ３がＮＨである、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項６】
ｎ３が０であり、ｍ３が１である、請求項５に記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ３ａがオキサゾリル又はピリジニル、例えばオキサゾール−４−イル又はピリジン−４−イルである、請求項５又は６に記載の化合物。
【請求項８】
ｎ３が２であり、ｍ３が０である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項９】
ｋ３が１である、請求項５〜８のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｒ２がＨである、請求項１〜９のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｒ６及びＲ７がＨである、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１２】
以下から選択される、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の化合物。
【表１】
2021510699.tif 000045
2021510699.tif 000046
2021510699.tif 000047
【請求項１３】
少なくとも１つの請求項１〜１２のいずれか一項に記載の化合物と、薬学的に許容可能な担体とを含む医薬組成物。
【請求項１４】
医薬として使用される、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の化合物又は請求項１３に記載の組成物。
【請求項１５】
癌の治療に使用される、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の化合物又は請求項１３に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規クラスのテトラヒドロイソキノリン化合物及びそれを含む組成物に関する。本発明の化合物及び組成物（医薬組成物等）を、癌の治療における医薬として使用することができる。
【背景技術】
【０００２】
過去１０年〜１５年間の癌ゲノム配列決定の取り組みにより、ヒトの癌の発生及び維持を担う数多くの腫瘍遺伝子が同定された。５００を超える検証済みの癌遺伝子が同定されているにもかかわらず、ＨＲＡＳ、ＮＲＡＳ、及びＫＲＡＳの３つのＲＡＳ遺伝子は、依然としてヒト癌で最も頻繁に変異している腫瘍遺伝子ファミリーを構成する。
【０００３】
入力シグナルによってＲＡＳが「オン」になると、続いて他のタンパク質がオンになり、最終的には細胞の増殖、分化及び生存に関与する遺伝子がオンになる。ｒａｓ遺伝子の変異は、恒久的に活性化されたＲＡＳタンパク質の産生につながる場合がある。その結果、入力シグナルがなくても、細胞内で意図しない過度のシグナル伝達が発生する可能性がある。
【０００４】
これらのシグナルは細胞の増殖及び分裂をもたらすため、過度のＲＡＳシグナル伝達は最終的に癌につながる可能性がある。３つのＲＡＳ遺伝子（ＨＲａｓ、ＫＲａｓ、及びＮＲａｓ）は、ヒトの癌における最も一般的な腫瘍遺伝子であり、ＲＡＳを恒久的に活性化する変異は、全てのヒト腫瘍の２０％〜２５％で見られ、或る特定の種類の癌では最大９０％で見られる。
【０００５】
ＲＡＳ変異を持つ癌は腫瘍遺伝子の最初の発見から３０年以上経過しても、本質的には治療不能のままでであった。したがって、長年にわたり、ＲＡＳは「新薬の開発に繋がらない（undruggable）」と見なされていた。
【０００６】
ＨＲＡＳ、ＮＲＡＳ、及びＫＲＡＳのなかでもＫＲＡＳは最も頻繁に変異するＲＡＳアイソフォームであり、膵臓腺癌の９０％、結腸直腸癌の４５％、及び肺腺癌の３５％で変異していることが示されている。ＫＲＡＳ変異は、腫瘍原性の増加及び予後不良と関連している。
【０００７】
現在まで、抗癌剤として様々な種類の薬剤が使用されており、シスプラチンは最も一般的な薬剤の１つである。シスプラチンは、肉腫、一部の癌腫（例えば、小細胞肺癌、頭頸部の扁平上皮癌、及び卵巣癌）、リンパ腫、膀胱癌、子宮頸癌、及び生殖細胞腫瘍を含む様々な種類の癌の治療に使用されている。シスプラチンは或る種の癌（精巣癌等）で非常に効果的であるが、その使用を制限し得る多くの副作用を示す。さらに、シスプラチンに提唱されている作用機序によれば、ＤＮＡ複製を妨げ、理論上は発癌性である最も急速に増殖している細胞を死滅させるはずである。しかしながら、シスプラチンは、実際には発癌性細胞に対して選択的ではない。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
したがって、抗癌剤として作用し、同時に毒性が低い新規化合物を提供する必要性が依然として存在している。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明は、そのエナンチオマー及び薬学的に許容可能な塩を含む、式Ｉ及び／又は式ＩＩを有する新規クラスの化合物を提供する。本発明の化合物は、ＲＡＳタンパク質、特にＫＲＡＳタンパク質を選択的かつ効果的に阻害することにより、大腸癌、結腸癌、直腸癌、膵臓癌、乳癌、多発性骨髄腫、白血病、及び肺癌等の多様な癌の治療に有用な優れた抗癌剤となる。また、癌の治療に使用される既知の化合物と比べて、本発明の化合物は、より低い毒性を示す。
【００１０】
本発明の化合物は、式Ｉ：
【化１】
2021510699.tif 000003
（式中、
Ｒ１は（Ｒｙ）ｋ１−（Ｙ１）ｎ１−（Ｘ１）ｍ１−Ｒｘ、（Ｒｙ）ｋ１−（Ｘ１）ｍ１−（Ｙ１）ｎ１−Ｒｘ又はハロゲン、例えばＯＲｘ又はＹ１Ｘ１Ｒｘ、より詳しくはＯＲｘであり、
Ｙ１はＣ（Ｏ）又はＳ（Ｏ）２、例えばＣ（Ｏ）であり、
Ｘ１はＮＨ又はＯであり、
ＲｙはＣ１〜４アルカンジイル、Ｃ２〜４アルケンジイル又はＣ２〜４アルキンジイル、例えば−ＣＨ２−であり、
ＲｘはＣ１〜４アルキル、Ｃ２〜４アルケニル、Ｃ２〜４アルキニル又はＨ、例えばＣＨ３又はＨであり、
ｋ１は０又は１であり、
ｎ１は０又は１であり、
ｍ１は０又は１であり、
Ｒ２はＨ、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ２〜４アルケニル、Ｃ２〜４アルキニル、ハロゲン、ＯＣ１〜４アルキル、ＯＣ２〜４アルケニル又はＯＣ２〜４アルキニル、例えばＨ、ＣＨ３又はＯＣＨ３、特にＨ又はＯＣＨ３、より詳しくはＨであり、
Ｒ３は−（ＣＨ２）ｎ３−Ｃ（Ｙ３）−（Ｘ３）ｍ３−（ＣＨ２）ｋ３−Ｒ３ａであり、
ｎ３は０〜２の範囲の整数、例えば０又は２であり、
Ｘ３はＳ、ＮＨ又はＯ、例えばＮＨ又はＯ、特にＮＨであり、
Ｙ３はＳ又はＯ、例えばＯであり、
ｍ３は０又は１であり、
ｋ３は０又は１であり、
Ｒ３ａはＣ１〜４アルキル、Ｃ２〜４アルケニル、Ｃ２〜４アルキニル、ＯＣ１〜４アルキル、ＯＣ２〜４アルケニル、ＯＣ２〜４アルキニル、Ｈｅｔ３、Ａｒ３、ＨｅｔＣｙｃ３又はＣｙｃ３、例えばＣ１〜４アルキル又はＨｅｔ３であり、
Ｈｅｔ３はＮ、Ｏ及びＳからなる群より選択される１つ以上のヘテロ原子を含む５員〜１０員の複素芳香環又は複素芳香環系、例えばオキサゾリル、チアゾリル、又はピリジニル、特にオキサゾール−４−イル、チアゾール−４−イル又はピリジン−４−イルであり、
Ａｒ３は６員〜１０員の芳香環又は芳香環系、例えばフェニル又はナフチルであり、
ＨｅｔＣｙｃ３は、Ｎ、Ｏ及びＳからなる群より選択される１つ以上のヘテロ原子を含む３員〜８員のヘテロシクリル、例えばピロリジニル、オキサゾリジニル、モルホリニルであり、
Ｃｙｃ３は３員〜８員のシクリル、例えばシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル又はシクロオクチルであり、
Ｒ４はハロゲン、ＯＣ１〜４アルキル、ＯＣ２〜４アルケニル、ＯＣ２〜４アルキニル、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ２〜４アルケニル又はＣ２〜４アルキニル、例えばハロゲン又はＣ１〜２アルキル、特にＣｌ、Ｆ又はＣ１〜２アルキル、より詳しくはＣｌ、Ｆ又はＣＨ３、更に詳しくはＣｌ又はＣＨ３、例えばＣＨ３であり、
Ｒ５は水素、ＯＣ１〜４アルキル、ＯＣ２〜４アルケニル、ＯＣ２〜４アルキニル、ＯＨ、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ２〜４アルケニル又はＣ２〜４アルキニルであり、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ２〜４アルケニル又はＣ２〜４アルキニルは、それぞれ独立して、１個〜３個のハロゲン、例えばＦ、特にＨ、Ｃ１〜２アルキル又はＯＣ１〜２アルキル、より詳しくはＣ１〜２アルキル又はＯＣ１〜２アルキル、更に詳しくはＣＨ３又はＯＣＨ３、例えばＣＨ３で任意に置換され、
Ｒ６はＨ、ＯＨ、ハロゲン又はＮＨ２、例えばＨ又はＯＨ、より詳しくはＨであり、
Ｒ７はＨ、ハロゲン、ＯＨ、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ２〜４アルケニル、Ｃ２〜４アルキニル、ＯＣ１〜４アルキル、ＯＣ２〜４アルケニル又はＯＣ２〜４アルキニル、例えばＨ、ＣＨ３又はＯＣＨ３、特にＨ又はＯＣＨ３、より詳しくはＨであり、
Ｒ８は−（ＣＨ２）ｎ８−（Ｃ（Ｏ））ｍ８−Ｒ８ａであり、
ｎ８は１〜２の整数、例えば２であり、
ｍ８は０〜１の整数、例えば０であり、
Ｒ８ａはＯＨ、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ２〜４アルケニル、Ｃ２〜４アルキニル、ＯＣ１〜４アルキル、ＯＣ２〜４アルケニル、ＯＣ２〜４アルキニル、ＣＯ２−Ｃ１〜４アルキル、ＣＯ２−Ｃ２〜４アルケニル、ＣＯ２−Ｃ２〜４アルキニル、ハロゲン、ＣＯＮＨ２、ＣＮ、ＣＯＯＨ、−ＯＣＯ−Ｃ１〜４アルキル、−ＯＣＯ−Ｃ２〜４アルケニル、−ＯＣＯ−Ｃ２〜４アルキニル、−ＮＨＣＯ−Ｃ１〜４アルキル、−ＮＨＣＯ−Ｃ２〜４アルケニル、−ＮＨＣＯ−Ｃ２〜４アルキニル、ＮＨ２、ＮＨＣ１〜４アルキル、ＮＨＣ２〜４アルケニル、ＮＨＣ２〜４アルキニル、Ｎ（Ｃ１〜４アルキル）２、Ｎ（Ｃ２〜４アルケニル）２、Ｎ（Ｃ２〜４アルキニル）２、ＣＯＮＨＣ１〜４アルキル、ＣＯＮＨＣ２〜４アルケニル、ＣＯＮＨＣ２〜４アルキニル、ＣＯＮ（Ｃ１〜４アルキル）２、ＣＯＮ（Ｃ２〜４アルケニル）２、ＣＯＮ（Ｃ２〜４アルキニル）２、例えばＯＨ、ＯＣＨ３、ＣＯ２ＣＨ３、ハロゲン、ＣＯＮＨ２、ＣＮ及びＣＯＯＨ、特にＯＨ、ＯＣＨ３、ＣＯ２ＣＨ３、Ｆ、ＣＯＮＨ２、ＣＮ及びＣＯＯＨ、より詳しくはＯＨ、ＯＣＨ３及びＦ、更により詳しくはＯＨ及びＦ、例えばＯＨからなる群より選択される少なくとも１つの置換基で任意に置換された、５個又は６個の環員を有する芳香環又は複素芳香環であるか、又はＲ８ａは追加の任意に置換された環、複素環、芳香環又は複素芳香環、例えば、任意に置換された環、複素環又は複素芳香環と融合した５個又は６個の環員を有する芳香環又は複素芳香環である）の化合物、そのエナンチオマー又は薬学的に許容可能な塩である。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】腫瘍接触後の日数と体重との関係を示すグラフである。
【図２】腫瘍接触後の日数と体重との関係を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
定義
本文脈において、「Ｃ１〜４アルキル」という用語は、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉｓｏ−プロピル、ｎ−ブチル、ｉｓｏ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、及びｔｅｒｔ−ブチル等の、１個〜４個の炭素原子を有する直鎖又は分岐鎖の炭化水素基を意味することを意図している。
【００１３】
同様に、「Ｃ２〜４アルケニル」という用語は、２個〜４個の炭素原子を有し、二重結合を含む直鎖又は分岐鎖の炭化水素基を網羅することを意図している。アルケニル基の例は、ビニル、アリル、及びブテニルである。アルケニルの好ましい例は、ビニル及びアリル、特にアリルである。
【００１４】
本文脈において、「Ｃ２〜４アルキニル」という用語は、２個〜４個の炭素原子を有し、三重結合を含む直鎖又は分岐鎖の炭化水素基を意味することを意図している。Ｃ２〜４アルキニル基の例示的な例としては、アセチレン、プロピニル、ブチニルと並んで、これらの分岐形態が挙げられる。不飽和（三重結合）の位置は、炭素鎖に沿った任意の位置であり得る。当業者に知られているように、「Ｃ２〜４アルキニル」がジインとなるように、２つ以上の結合が不飽和であってもよい。
【００１５】
本文脈において、「Ｃ１〜４アルカンジイル」という用語は、メタンジイル、エタンジイル、プロパンジイル、又はブタンジイル等の１個〜４個の炭素原子を有する二価の直鎖又は分岐鎖の炭化水素基を意味することを意図している。
【００１６】
同様に、「Ｃ２〜４アルケンジイル」という用語は、２個〜４個の炭素原子を有し、二重結合を含む、二価の直鎖又は分岐鎖の炭化水素基を網羅することを意図している。
【００１７】
本文脈において、「Ｃ２〜４アルキンジイル」という用語は、２個〜４個の炭素原子を有し、三重結合を含む二価の直鎖又は分岐鎖の炭化水素基を意味することを意図している。
【００１８】
本明細書では、「ハロゲン」という用語は、フルオロ、クロロ、ブロモ、及びヨード、より詳しくは、フルオロ、クロロ、及びブロモを含む。
【００１９】
本文脈において、「芳香環又は芳香環系」という用語は、フェニル、ナフチル、１，２，３，４−テトラヒドロナフチル、アントラシル、フェナントラシル（phenanthracyl）、ピレニル、ベンゾピレニル、フルオレニル及びキサンテニル等の完全に又は部分的に芳香族の炭素環又は炭素環系を意味することを意図している。
【００２０】
「複素芳香環又は複素芳香環系」という用語は、１つ以上の炭素原子がヘテロ原子、例えば窒素（＝Ｎ−又は−ＮＨ−）、硫黄及び／又は酸素の原子で置き換えられている完全又は部分的に芳香族の炭素環又は炭素環系を意味することを意図している。かかる複素芳香環又は複素芳香環系の基の例は、オキサゾリル、イソキサゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、ピロリル、イミダゾリル、ピラゾリル、ピリジニル、ピリミジニル、ピラジニル、ピリダジニル、トリアジニル、クマリル、フリル、チエニル、キノリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾトリアゾリル、ベンゾジアゾリル、ベンゾオキサゾリル、フタラジニル、フタラニル、トリアゾリル、テトラゾリル、イソキノリル、アクリジニル、カルバゾリル、ジベンゾアゼピニル、インドリル、ベンゾピラゾリル及びフェノキサゾニルである。
【００２１】
本文脈において、「複素環又は複素環系」という用語は、炭素原子の１つ以上がヘテロ原子、例えば窒素（＝Ｎ−又は−ＮＨ−）、硫黄、及び／又は酸素の原子で置き換えられている非芳香族の炭素環又は炭素環系を意味することを意図している。かかる複素環基の例は、イミダゾリジン、ピペラジン、ヘキサヒドロピリダジン、ヘキサヒドロピリミジン、ジアゼパン、ジアゾカン、ピロリジン、ピペリジン、アゼパン、アゾカン、アジリジン、アジリン、アゼチジン、ピロリン、トロパン、オキサジナン（モルホリン）、アゼピン、ジヒドロアゼピン、テトラヒドロアゼピン、ヘキサヒドロアゼピン、オキサゾラン、オキサゼパン、オキサゾカン、チアゾラン、チアジナン、チアゼパン、チアゾカン、オキサゼタン、ジアゼタン、チアゼタン、テトラヒドロフラン、テトラヒドロピラン、オキセパン、テトラヒドロチオフェン、テトラヒドロチオピラン、チエパン、ジチアン、ジチエパン、ジオキサン、ジオキセパン、オキサチアン及びオキサチエパンである。
【００２２】
本文脈において、「任意に置換された」という用語は、問題の基が少なくとも１回置換され得ることを意味することを意図している。さらに、「任意に置換された」という用語は、問題の基が非置換であることも意味する場合がある。
【００２３】
本発明の化合物は、遊離形態又は薬学的に許容可能な塩の形態であり得る。本発明の文脈において、「薬学的に許容可能な塩」という用語は塩基又は酸のいずれかと共に形成される塩として理解され、得られる対イオンは本発明の化合物の毒性を大きく増大させない。
【００２４】
薬学的に許容可能な塩の例としては、塩酸塩、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩又は臭化水素酸塩等の無機酸塩、酢酸塩、フマル酸塩、シュウ酸塩、クエン酸塩、メタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩又はマレイン酸塩等の有機酸塩が挙げられる。また、化合物がカルボキシル基等の置換基を有する場合、塩基との塩（例えば、ナトリウム塩、カリウム塩等のアルカリ金属塩等、又はカルシウム塩等のアルカリ土類金属塩等）が言及され得る。
【００２５】
化合物
本発明の化合物は、式Ｉ：
【化２】
2021510699.tif 000004
（式中、
Ｒ１は（Ｒｙ）ｋ１−（Ｙ１）ｎ１−（Ｘ１）ｍ１−Ｒｘ、（Ｒｙ）ｋ１−（Ｘ１）ｍ１−（Ｙ１）ｎ１−Ｒｘ又はハロゲン、例えばＯＲｘ又はＹ１Ｘ１Ｒｘ、より詳しくはＯＲｘであり、
Ｙ１はＣ（Ｏ）又はＳ（Ｏ）２、例えばＣ（Ｏ）であり、
Ｘ１はＮＨ又はＯであり、
ＲｙはＣ１〜４アルカンジイル、Ｃ２〜４アルケンジイル又はＣ２〜４アルキンジイル、例えば−ＣＨ２−であり、
ＲｘはＣ１〜４アルキル、Ｃ２〜４アルケニル、Ｃ２〜４アルキニル又はＨ、例えばＣＨ３又はＨであり、
ｋ１は０又は１であり、
ｎ１は０又は１であり、
ｍ１は０又は１であり、
Ｒ２はＨ、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ２〜４アルケニル、Ｃ２〜４アルキニル、ハロゲン、ＯＣ１〜４アルキル、ＯＣ２〜４アルケニル又はＯＣ２〜４アルキニル、例えばＨ、ＣＨ３又はＯＣＨ３、特にＨ又はＯＣＨ３、より詳しくはＨであり、
Ｒ３は−（ＣＨ２）ｎ３−Ｃ（Ｙ３）−（Ｘ３）ｍ３−（ＣＨ２）ｋ３−Ｒ３ａであり、
ｎ３は０〜２の範囲の整数、例えば０又は２であり、
Ｙ３はＳ又はＯ、例えばＯであり、
Ｘ３はＳ、ＮＨ又はＯ、例えばＮＨ又はＯ、特にＮＨであり、
ｍ３は０又は１であり、
ｋ３は０又は１であり、
Ｒ３ａはＣ１〜４アルキル、Ｃ２〜４アルケニル、Ｃ２〜４アルキニル、ＯＣ１〜４アルキル、ＯＣ２〜４アルケニル、ＯＣ２〜４アルキニル、Ｈｅｔ３、Ａｒ３、ＨｅｔＣｙｃ３又はＣｙｃ３、例えばＣ１〜４アルキル又はＨｅｔ３であり、
Ｈｅｔ３はＮ、Ｏ及びＳからなる群より選択される１つ以上のヘテロ原子を含む５員〜１０員の複素芳香環又は複素芳香環系、例えばオキサゾリル、チアゾリル、又はピリジニル、特にオキサゾール−４−イル、チアゾール−４−イル又はピリジン−４−イルであり、
Ａｒ３は６員〜１０員の芳香環又は芳香環系、例えばフェニル又はナフチルであり、
ＨｅｔＣｙｃ３は、Ｎ、Ｏ及びＳからなる群より選択される１つ以上のヘテロ原子を含む３員〜８員のヘテロシクリル、例えばピロリジニル、オキサゾリジニル、モルホリニルであり、
Ｃｙｃ３は３員〜８員のシクリル、例えばシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル又はシクロオクチルであり、
Ｒ４はハロゲン、ＯＣ１〜４アルキル、ＯＣ２〜４アルケニル、ＯＣ２〜４アルキニル、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ２〜４アルケニル又はＣ２〜４アルキニル、例えばハロゲン又はＣ１〜２アルキル、特にＣｌ、Ｆ又はＣ１〜２アルキル、より詳しくはＣｌ、Ｆ又はＣＨ３、更に詳しくはＣｌ又はＣＨ３、例えばＣＨ３であり、
Ｒ５は水素、ＯＣ１〜４アルキル、ＯＣ２〜４アルケニル、ＯＣ２〜４アルキニル、ＯＨ、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ２〜４アルケニル又はＣ２〜４アルキニルであり、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ２〜４アルケニル又はＣ２〜４アルキニルは、それぞれ独立して、１個〜３個のハロゲン、例えばＦ、特にＨ、Ｃ１〜２アルキル又はＯＣ１〜２アルキル、より詳しくはＣ１〜２アルキル又はＯＣ１〜２アルキル、更に詳しくはＣＨ３又はＯＣＨ３、例えばＣＨ３で任意に置換され、
Ｒ６はＨ、ＯＨ、ハロゲン又はＮＨ２、例えばＨ又はＯＨ、より詳しくはＨであり、
Ｒ７はＨ、ハロゲン、ＯＨ、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ２〜４アルケニル、Ｃ２〜４アルキニル、ＯＣ１〜４アルキル、ＯＣ２〜４アルケニル又はＯＣ２〜４アルキニル、例えばＨ、ＣＨ３又はＯＣＨ３、特にＨ又はＯＣＨ３、より詳しくはＨであり、
Ｒ８は−（ＣＨ２）ｎ８−（Ｃ（Ｏ））ｍ８−Ｒ８ａであり、ｎ８は１〜２の整数、例えば２であり、
ｍ８は０〜１の整数、例えば０であり、
Ｒ８ａはＯＨ、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ２〜４アルケニル、Ｃ２〜４アルキニル、ＯＣ１〜４アルキル、ＯＣ２〜４アルケニル、ＯＣ２〜４アルキニル、ＣＯ２−Ｃ１〜４アルキル、ＣＯ２−Ｃ２〜４アルケニル、ＣＯ２−Ｃ２〜４アルキニル、ハロゲン、ＣＯＮＨ２、ＣＮ、ＣＯＯＨ、−ＯＣＯ−Ｃ１〜４アルキル、−ＯＣＯ−Ｃ２〜４アルケニル、−ＯＣＯ−Ｃ２〜４アルキニル、−ＮＨＣＯ−Ｃ１〜４アルキル、−ＮＨＣＯ−Ｃ２〜４アルケニル、−ＮＨＣＯ−Ｃ２〜４アルキニル、ＮＨ２、ＮＨＣ１〜４アルキル、ＮＨＣ２〜４アルケニル、ＮＨＣ２〜４アルキニル、Ｎ（Ｃ１〜４アルキル）２、Ｎ（Ｃ２〜４アルケニル）２、Ｎ（Ｃ２〜４アルキニル）２、ＣＯＮＨＣ１〜４アルキル、ＣＯＮＨＣ２〜４アルケニル、ＣＯＮＨＣ２〜４アルキニル、ＣＯＮ（Ｃ１〜４アルキル）２、ＣＯＮ（Ｃ２〜４アルケニル）２、ＣＯＮ（Ｃ２〜４アルキニル）２、例えばＯＨ、ＯＣＨ３、ＣＯ２ＣＨ３、ハロゲン、ＣＯＮＨ２、ＣＮ及びＣＯＯＨ、特にＯＨ、ＯＣＨ３、ＣＯ２ＣＨ３、Ｆ、ＣＯＮＨ２、ＣＮ及びＣＯＯＨ、より詳しくはＯＨ、ＯＣＨ３及びＦ、更により詳しくはＯＨ及びＦ、例えばＯＨからなる群より選択される少なくとも１つの置換基で任意に置換された、５個又は６個の環員を有する芳香環又は複素芳香環であるか、又はＲ８ａは追加の任意に置換された環、複素環、芳香環又は複素芳香環、例えば、任意に置換された環、複素環又は複素芳香環と融合した５個又は６個の環員を有する芳香環又は複素芳香環である）の化合物、そのエナンチオマー又は薬学的に許容可能な塩である。
【００２６】
一実施形態では、Ｒ８ａは、ＯＨ、Ｃ１〜４アルキル、ＯＣ１〜４アルキル、ＣＯ２−Ｃ１〜４アルキル、ハロゲン、ＣＯＮＨ２、ＣＮ、及びＣＯＯＨからなる群より選択される少なくとも１つの置換基で任意に置換されたフェニル環である。別の実施形態では、Ｒ８ａは、ＯＨ、ＯＣＨ３、ＣＯ２ＣＨ３、ハロゲン、ＣＯＮＨ２、ＣＮ、及びＣＯＯＨからなる群より選択される少なくとも１つの置換基で任意に置換されたフェニル環である。更なる実施形態では、Ｒ８ａは、ＯＨ、ＯＣＨ３、ＣＯ２ＣＨ３、Ｆ、ＣＯＮＨ２、ＣＮ、及びＣＯＯＨからなる群より選択される少なくとも１つの置換基で任意に置換されたフェニル環である。更に別の実施形態では、Ｒ８ａは、ＯＨ、ＯＣＨ３、及びＦからなる群より選択される少なくとも１つの置換基で任意に置換されたフェニル環である。その他の実施形態では、Ｒ８ａは、ＯＨ、及びＦからなる群より選択される少なくとも１つの置換基で任意に置換されたフェニル環である。また別の実施形態では、Ｒ８ａは、少なくとも１つのＯＨ基で任意に置換されたフェニル環である。
【００２７】
更なる実施形態では、少なくとも１つの置換基は、フェニル環をテトラヒドロイソキノリンコアに接続する位置に対してメタ位置にある。
【００２８】
Ｒ８ａはまた、ＯＨ、Ｃ１〜４アルキル、ＯＣ１〜４アルキル、ＣＯ２−Ｃ１〜４アルキル、ハロゲン、ＣＯＮＨ２、ＣＮ及びＣＯＯＨ、例えばＯＨ、ＯＣＨ３、ＣＯ２ＣＨ３、ハロゲン、ＣＯＮＨ２、ＣＮ及びＣＯＯＨ、特にＯＨ、ＯＣＨ３、ＣＯ２ＣＨ３、Ｆ、ＣＯＮＨ２、ＣＮ及びＣＯＯＨ、より詳しくはＯＨ、ＯＣＨ３及びＦ、更により詳しくはＯＨ及びＦ、例えばＯＨからなる群より選択される少なくとも１つの置換基で任意に置換された５員又は６員の複素芳香環であってもよい。一実施形態では、Ｒ８ａは、任意に置換されたピリジニル、インダニル、ジヒドロ−ベンゾフラニル、インドリニル又はトリアゾロピリミジニルである。更なる実施形態では、Ｒ８ａは、任意に置換されたピリジニル、任意に置換されたインダニル、又は任意に置換されたジヒドロ−ベンゾフラニルである。別の実施態様では、Ｒ８ａは、任意に置換されたインダニル、又は任意に置換されたピリジニルである。また別の実施形態では、Ｒ８ａはピリジニルである。
【００２９】
Ｒ３は−（ＣＨ２）ｎ３−Ｃ（Ｙ３）−（Ｘ３）ｍ３−（ＣＨ２）ｋ３−Ｒ３ａである。一実施形態では、Ｙ３はＯである。更なる実施形態では、Ｘ３はＮＨである。別の実施形態では、Ｙ３はＯであり、Ｘ３はＮＨである。これらの実施形態の更なるバリエーションでは、ｎ３は０である。これらの実施形態の別のバリエーションでは、ｍ３は１である。これらの実施形態の更に別のバリエーションでは、ｎ３は０であり、ｍ３は１である。これらの実施形態のまた別のバリエーションでは、Ｒ３ａは、オキサゾール−４−イル又はピリジン−４−イル等のオキサゾリル又はピリジニルである。
【００３０】
上記実施形態の異なるバリエーションでは、Ｙ３はＯであり、ｎ３は２であり、ｍ３は０である。
【００３１】
Ｒ３の異なる変種を有するこれらの実施形態の更に他のバリエーションでは、ｋ３は１である。
【００３２】
Ｒ１は、（Ｒｙ）ｋ１−（Ｙ１）ｎ１−（Ｘ１）ｍ１−Ｒｘ、（Ｒｙ）ｋ１−（Ｘ１）ｍ１−（Ｙ１）ｎ１−Ｒｘ又はハロゲンである。一実施形態では、Ｒ１はＯＲｘ又はＹ１Ｘ１Ｒｘである。更なる実施形態では、Ｒ１はＯＲｘである。更に他の実施形態では、Ｒ１はＯＣＨ３である。Ｙ１はＣ（Ｏ）又はＳ（Ｏ）２である。一実施形態では、Ｙ１はＣ（Ｏ）である。Ｘ１は、ＮＨ又はＯである。一実施形態では、Ｘ１は、ＮＨである。ｋ１は０又は１である。一実施形態では、ｋ１は０である。ｎ１は０又は１である。一実施形態では、ｎ１は１である。ｍ１は０又は１である。一実施形態では、ｎ１は１である。Ｒｘは、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ２〜４アルケニル、Ｃ２〜４アルキニル又はＨである。一実施形態では、ＲｘはＣＨ３又はＨである。更なる実施形態では、Ｒ１はＣ（Ｏ）ＮＨＲｘである。
【００３３】
Ｒ２は、Ｈ、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ２〜４アルケニル、Ｃ２〜４アルキニル、ハロゲン、ＯＣ１〜４アルキル、ＯＣ２〜４アルケニル、又はＯＣ２〜４アルキニルである。一実施形態では、Ｒ２は、Ｈ又はＯ−Ｃ１〜４アルキルである。別の実施形態では、Ｒ２はＨである。
【００３４】
Ｒ４は、ハロゲン、ＯＣ１〜４アルキル、ＯＣ２〜４アルケニル、ＯＣ２〜４アルキニル、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ２〜４アルケニル、又はＣ２〜４アルキニルである。一実施形態では、Ｒ４はハロゲン又はＣ１〜２アルキルである。更なる実施形態では、Ｒ４は、Ｃｌ、Ｆ、又はＣ１〜２アルキルである。更に他の実施形態では、Ｒ４は、Ｃｌ、Ｆ、又はＣＨ３である。別の実施形態では、Ｒ４は、Ｃｌ又はＣＨ３である。また別の実施形態では、Ｒ４はＣＨ３である。
【００３５】
Ｒ５は、水素、ＯＣ１〜４アルキル、ＯＣ２〜４アルケニル、ＯＣ２〜４アルキニル、ＯＨ、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ２〜４アルケニル、又はＣ２〜４アルキニルであり、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ２〜４アルケニル、又はＣ２〜４アルキニルは、それぞれ独立して、１〜３個のハロゲン、例えばＦで任意に置換される。一実施形態では、Ｒ５は、Ｈ、Ｃ１〜２アルキル、又はＯＣ１〜２アルキルである。更なる実施形態では、Ｒ５はＣ１〜２アルキル又はＯＣ１〜２アルキルである。更に他の実施形態では、Ｒ５はＣＨ３又はＯＣＨ３である。その他の実施形態では、Ｒ５はＣＨ３である。
【００３６】
Ｒ６は、Ｈ、ＯＨ、ハロゲン、又はＮＨ２である。一実施形態では、Ｒ６はＨ又はＯＨである。更なる実施形態では、Ｒ６はＨである。
【００３７】
Ｒ７は、Ｈ、ハロゲン、ＯＨ、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ２〜４アルケニル、Ｃ２〜４アルキニル、ＯＣ１〜４アルキル、ＯＣ２〜４アルケニル、又はＯＣ２〜４アルキニルである。一実施形態では、Ｒ７は、Ｈ、ＣＨ３、又はＯＣＨ３である。更なる実施形態では、Ｒ７はＨ又はＯＣＨ３である。別の実施形態では、Ｒ７はＨである。
【００３８】
本発明の特定の実施形態では、本発明の化合物は、式ＩＩ：
【化３】
2021510699.tif 000005
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、及びＲ７は上記に定義したとおりであり、フェニル環はＲ８ｂで少なくとも１回置換されており、Ｒ８ｂは、それぞれ独立して、ＯＨ、Ｃ１〜４アルキル、ＯＣ１〜４アルキル、ＣＯ２−Ｃ１〜４アルキル、ハロゲン、ＣＯＮＨ２、ＣＮ、及びＣＯＯＨからなる群より選択される）の化合物、そのエナンチオマー又は薬学的に許容可能な塩である。別の実施形態では、Ｒ８ｂは、それぞれ独立して、ＯＨ、ＯＣＨ３、ＣＯ２ＣＨ３、ハロゲン、ＣＯＮＨ２、ＣＮ及びＣＯＯＨからなる群より選択される。更なる実施形態では、Ｒ８ｂは、それぞれ独立して、ＯＨ、ＯＣＨ３、ＣＯ２ＣＨ３、Ｆ、ＣＯＮＨ２、ＣＮ及びＣＯＯＨからなる群より選択される。更に別の実施形態では、Ｒ８ｂは、それぞれ独立して、ＯＨ、ＯＣＨ３及びＦからなる群より選択される。その他の実施形態では、Ｒ８ｂは、それぞれ独立して、ＯＨ及びＦからなる群より選択される。また別の実施形態では、Ｒ８ｂはＯＨ基である。更なる実施形態では、少なくとも１つのＲ８ｂ置換基は、フェニル基が結合しているエチル−オキシ基に対してメタ位にある。
【００３９】
本発明の更なる実施形態では、本発明の化合物は、式ＩＩａ：
【化４】
2021510699.tif 000006
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、及びＲ７は上記に定義されるとおりであり、Ｒ８ｃは追加の任意に置換された環、複素環、芳香環、又は複素芳香環である）の化合物、そのエナンチオマー又は薬学的に許容可能な塩である。一実施形態では、Ｒ８ｃは、任意に置換された環、複素環、又は複素芳香環である。
【００４０】
本発明の更なる特定の実施形態では、本発明の化合物は、式ＩＩＩ：
【化５】
2021510699.tif 000007
（式中、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、及びＲ８ｂは上記に定義されるとおりである）の化合物、そのエナンチオマー又は薬学的に許容可能な塩である。更なる実施形態では、少なくとも１つのＲ８ｂ置換基は、フェニル基が結合しているエチル−オキシ基に対してメタ位にある。
【００４１】
好ましい実施形態では、本発明の化合物は、化合物１〜化合物６３、そのエナンチオマー、及び薬学的に許容可能な塩からなる群より選択される：
【００４２】
【表１】
2021510699.tif 000008
2021510699.tif 000009
2021510699.tif 000010
【００４３】
医薬製剤
本発明の化合物は、医薬としての使用を意図している。本発明の化合物は、原則として、それら自体で適用され得るが、好ましくは薬学的に受容可能な担体と共に製剤化される。薬学的に許容可能な担体は、各投与方法に適した不活性担体であり、従来の薬学的な調製物（錠剤、顆粒、カプセル剤、粉末、溶液、懸濁液、エマルジョン、注射剤、輸液剤等）に製剤化することができる。かかる担体として、例えば、薬学的に許容可能な結合剤、賦形剤、滑沢剤、崩壊剤等が言及され得る。注射液又は輸液として使用する場合、注射用蒸留水、生理食塩水、ブドウ糖水溶液を用いて製剤化することができる。
【００４４】
本発明の化合物の投与方法は特に限定されず、通常の経口又は非経口（静脈内、筋肉内、皮下、経皮、鼻腔内、経粘膜、経腸等）の投与方法を適用することができる。
【００４５】
本発明のテトラヒドロイソキノリン誘導体又はその薬学的に許容可能な塩の投与量は、有効成分として用いられる化合物の効力又は特性に応じて、薬理学的効果を発揮するのに十分な有効量の範囲で任意に設定され得る。投与量は、投与方法、患者の年齢、体重、状態に応じて変動する場合がある。
【００４６】
薬学的有用性
本発明の化合物は、癌の治療を意図している。したがって、一態様では、本発明は、癌の治療に使用される本発明による化合物又は組成物に関する。特にＲａｓ駆動性の癌において、Ｒａｓ遺伝子はヒトの癌細胞で同定された最初の腫瘍遺伝子である。一実施形態では、本発明は、その他のタイプの癌の中でも、白血病、リンパ腫、骨髄腫、結腸直腸癌、膵臓癌、乳癌、及び肺癌の治療に使用される本発明による化合物又は組成物に関する。
【００４７】
化合物の調製
本発明の置換テトラヒドロイソキノリンＬは、スキーム１に概説されているように、一般に８工程で調製される。
【化６】
2021510699.tif 000011
【００４８】
本発明による化合物の幾つかは、スキーム１に記載されているものからの保護／脱保護反応等の追加の合成変換を必要とする。これらの化合物を、スキーム１ｂに従って調製することができる。
【化７】
2021510699.tif 000012
【００４９】
スキーム１及びスキーム１ｂ
工程１では、エーテルＤは、光延反応（試薬Ｂ）（G. Liu. et al., Journal of Medicinal Chemistry 2007, 50, 3086-3100）又は当該技術分野で既知の適切な条件下での求核置換反応（試薬Ｃ）を用いてフェノールＡから調製される。Ｒ９は、Ｒ８が工程２、工程３及び／又は工程４の間に保護を必要とする置換基を含む場合には、Ｒ８の保護されたバージョンである。Ｒ９の一例は、ベンジルオキシ保護されたＲ８であってもよく、ここでＲ８は遊離ＯＨ置換基を含む。メタノール中の水素化ホウ素ナトリウムによるアルデヒドＤの還元（工程２）はアルコールＥをもたらし、次いでこれを、塩化チオニルを用いて塩化アルキルＦに変換する（工程３）。工程４では、求核試薬としてシアン化ナトリウムを用いる化合物Ｆの置換反応によりニトリルＧを得て、これは、Ｈ２及び１０％Ｐｄ／Ｃを触媒として用いてアミンＨに還元される（工程５）。ニトリルＧの水素化は、Ｒ８におけるＯＨ基のＲ９に保護基を持つ化合物のフェノール脱保護（スキーム１ｂ）を更に含む。この反応では添加剤として塩酸を用いることから、アミンＨが塩酸塩として得られる。工程６及び工程７には、既知のピクテ−スペングラー（Pictet-Spengler）反応が含まれ（A. Yokohama et al., Journal of Organic Chemistry 1999, 64, 611-617、R. Gitto et al., Journal of Medicinal Chemistry 2003, 46, 197-200）、ここで、アリールエチルアミンＨは種々の置換ベンズアルデヒドＩと縮合して対応するイミンＪを得て、これは還流トリフルオロ酢酸で処理する際に分子内環化を受けてテトラヒドロイソキノリンＫをラセミ混合物としてもたらす。ビシュラー−ナピエラルスキー（Bischler-Napieralski）反応（J. E. De Los Angeles. Journal of Medicinal Chemistry 1996, 39, 3701-3711、G. Fodor et al., Angewandte Chemie Int. Ed. 1972, 11, 919-920）を代わりに用いて、Ｒ１位又はＲ２位に電子求引基を持つテトラヒドロイソキノリンＫを合成する。工程８では、当該技術分野で既知の種々の合成戦略によってＲ３置換基が導入される。
【００５０】
本発明による化合物の幾つかは、スキーム１及びスキーム１ｂに記載されているものに代わる合成順序を必要とする。これらの化合物を、以下のスキーム２に従って調製することができる。
【００５１】
スキーム２
工程１では、フェノールＡは、適切なフェノール保護基ＰＧ８を用いて保護され、ここで、ＰＧ８はベンジル基であり得る。メタノール中の水素化ホウ素ナトリウムによるアルデヒドＢの還元（工程２）はアルコールＣをもたらし、次いでこれを、塩化チオニルを用いて塩化アルキルＤに変換する（工程３）。工程４では、求核試薬としてシアン化ナトリウムを用いる化合物Ｄの置換反応によりニトリルＥを得て、これは、Ｈ２及び１０％Ｐｄ／Ｃを触媒として用いてアミンＦに還元される（工程５）。この反応では塩酸を添加剤として用いることから、アミンＦは塩酸塩として得られる。ニトリルＥの水素化は、フェノールの脱保護を更に含む。工程６及び工程７には、既知のピクテ−スペングラー反応（A. Yokohama et al., Journal of Organic Chemistry 1999, 64, 611-617、R. Gitto et al., Journal of Medicinal Chemistry 2003, 46, 197-200）が含まれ、ここで、アリールエチルアミンＦは種々の置換ベンズアルデヒドＧと縮合して対応するイミンＨを得て、これは還流トリフルオロ酢酸で処理する際に分子内環化を受けてラセミ混合物としてテトラヒドロイソキノリンＩをもたらす。ビシュラー−ナピエラルスキー反応（J. E. De Los Angeles. Journal of Medicinal Chemistry 1996, 39, 3701-3711、G. Fodor et al., Angewandte Chemie Int. Ed. 1972, 11, 919-920）を代わりに用いて、Ｒ１位又はＲ２位に電子求引基を持つテトラヒドロイソキノリンＩを合成する。工程８では、アミンＩは適切な保護基ＰＧ３を使用して保護され、ここで、ＰＧ３はＢｏｃ保護基であり得る。フェノールのアルキル化は、工程９で光延反応（試薬Ｋ）（G. Liu. et al., Journal of Medicinal Chemistry 2007, 50, 3086-3100）又は当該技術分野で既知の適切な条件下での求核置換（試薬Ｌ）を用いて行われる。工程１０では、式Ｍのアミン基を酸性条件下で脱保護して、塩酸塩としてアミンＮを得る。工程１１では、当該技術分野で既知の種々の合成戦略によってＲ３置換基が導入される。
【化８】
2021510699.tif 000013
【００５２】
Ｒ８−ＯＨが表１に示す構成要素の１つである場合、それらを以下のスキーム３に従って調製することができる。
【化９】
2021510699.tif 000014
【化１０】
2021510699.tif 000015
【００５３】
工程１では、シアン化銅を用いて、２−（３−ブロモフェニル）エタノールＡを３−（２−ヒドロキシエチル）ベンゾニトリル１に変換する（国際公開第００／７８７０８号、実施例２３、２８頁〜２９頁に開示される方法を参照されたい）。次いで、化合物１を塩基性加水分解（工程２ａ）に供して安息香酸２を調製するか、又は酸加水分解（工程２ｂ）に供してベンズアミド３を合成する（国際公開第２００９／０５５０７７号、３８４頁、試薬調製１４を参照されたい）。
【００５４】
本発明による化合物の幾つかは、スキーム１、スキーム１ｂ及びスキーム２に記載されているものに代わる合成手順を必要とする。これらの化合物を、以下のスキーム４に従って調製することができる。
【化１１】
2021510699.tif 000016
【００５５】
本発明による化合物の幾つかは、スキーム４に記載されているものからの保護／脱保護反応等の追加の合成変換を必要とする。これらの化合物を、スキーム４ｂに従って調製することができる。
【化１２】
2021510699.tif 000017
【００５６】
スキーム４及びスキーム４ｂ
工程１では、化合物Ａを、当該技術分野で既知の種々の合成戦略を用いる求電子芳香族置換に供する。工程２では、アミンＢが適切なカップリング条件下で酸Ｃと反応して、アミドＤを得る。工程３及び工程４には、既知のビシュラー−ナピエラルスキー反応（J. E. De Los Angeles. Journal of Medicinal Chemistry 1996, 39, 3701-3711、G. Fodor et al., Angewandte Chemie Int. Ed. 1972, 11, 919-920）が含まれ、この反応を用いて、Ｒ１０位又はＲ２位に電子供与基を持たないテトラヒドロイソキノリンＦを合成する。オキシ塩化リンの存在下でのアミドＤの環化により、ジヒドロイソキノリンＥが得られ（工程３）、その後これを、水素化ホウ素ナトリウムを還元剤として用いて工程４でテトラヒドロイソキノリンＦに還元する。化合物Ｆはラセミ混合物として得られる。工程５では、アミンＦは適切な保護基ＰＧ３を用いて保護され、ここで、ＰＧ３はＢｏｃ保護基であり得る。工程６では、臭素原子であり得る置換基Ｒ１０が、当該技術分野で既知の種々の合成戦略によってＣＨ３ＯＣ（Ｏ）−基であり得る対応する置換基Ｒ１１に変換される。工程７では、式Ｈのアミン基を酸性条件下で脱保護してアミンＩを塩酸塩として得る。工程８では、当該技術分野で既知の種々の合成戦略を用いてＲ３置換基が導入される。工程９は、化合物Ｋを得るための低温での化合物ＪとＢＢｒ３との反応を含む（国際公開第２０１１／０１７１２５号、１１０頁、工程３）。フェノールのアルキル化は、工程１０で光延反応（試薬Ｌ）（G. Liu. et al., Journal of Medicinal Chemistry 2007, 50, 3086-3100）又は当該技術分野で既知の適切な条件下での求核置換（試薬Ｍ）を用いて行われる。工程１１では、置換基Ｒ１１は、従来技術で十分に記載されている種々の合成戦略によって対応する置換基Ｒ１に変換され、置換基Ｒ１の性質に応じて異なる工程が必要になる場合がある。化合物Ｏの水素化（スキーム４ｂ）は、Ｒ９に保護基を持つ化合物のフェノール脱保護を含む。
【００５７】
Ｒ３がＣ（Ｏ）ＮＨＲ３ａである場合、すなわち、ｎ３が０であり、Ｙ３がＯであり、Ｘ３がＮＨであり、ｍ３が１であり、ｋ３が０である場合、アミンＫ（スキーム１）又はアミンＮ（スキーム２）を、カップリング剤として１，１−カルボニルジイミダゾール及び適切な塩基（例えば、トリエチルアミン）を用いてＲ３ａＮＨ２とカップリングさせ、それぞれ対応する尿素Ｌ及び尿素Ｏを得る（国際公開第２０１５／０８９３３７号）。
【００５８】
Ｒ３＝Ｃ１〜２アルキル−Ｃ（Ｙ３）−（Ｘ３）ｍ３−（ＣＨ２）ｋ３−Ｒ３ａである場合、すなわち、ｎ３が１又は２である場合、アミンＬ（スキーム１）又はアミンＯ（スキーム２）は、Ｃｌ−Ｃ１〜２−アルキル−Ｃ（Ｙ３）−（Ｘ３）ｍ３−（ＣＨ２）ｋ３−Ｒ３ａ又はＢｒ−Ｃ１〜２−アルキル−Ｃ（Ｙ３）−（Ｘ３）ｍ３−（ＣＨ２）ｋ３−Ｒ３ａ、及び適切な塩基（例えばトリエチルアミン）を用いる求核置換により調製される。
【実施例】
【００５９】
実施例１−化合物１８の合成：１−（２，４−ジメチルフェニル）−７−（３−ヒドロキシフェネトキシ）−６−メトキシ−Ｎ−（オキサゾール−４−イルメチル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−カルボキサミド
【００６０】
工程１−２−（３−（ベンジルオキシ）フェニル）エタノールの合成
【化１３】
2021510699.tif 000018
【００６１】
乾燥ジメチルホルムアミド（４０ｍＬ）中の２−（３−ヒドロキシフェニル）エタノール（２．２ｇ、１５．６ｍｍｏｌ）の溶液に、炭酸カリウム（４．３ｇ、３１．１ｍｍｏｌ）を加えた。室温で１０分間撹拌した後、臭化ベンジル（１．９ｍＬ、１５．６ｍｍｏｌ）を加え、反応物を５０℃で撹拌した。２時間後、反応混合物を酢酸エチルと水との間で分離した。有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空下で濃縮して、黄色の油として生成物を得た（２．７ｇ、収率７７％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）  δ  ｐｐｍ  ７．３３〜７．４５（ｍ，５Ｈ）、７．２２〜７．２６（ｍ，１Ｈ）、６．８３〜６．８７（ｍ，３Ｈ）、５．０６（ｓ，２Ｈ）、３．８８（ｔ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，２Ｈ）、２．８５（ｔ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，２Ｈ）。
【００６２】
工程２−４−（３−（ベンジルオキシ）フェネトキシ）−３−メトキシベンズアルデヒドの合成
【化１４】
2021510699.tif 000019
【００６３】
乾燥テトラヒドロフラン（２５ｍＬ）中の２−（３−（ベンジルオキシ）フェニル）エタノール（１．５ｇ、６．６ｍｍｏｌ）の溶液に、４−ヒドロキシ−３−メトキシベンズアルデヒド（１．０ｇ、６．６ｍｍｏｌ）及びトリフェニルホスフィン（２．３ｇ、８．５ｍｍｏｌ）を加え、続いてアゾジカルボン酸ジイソプロピル（１．８ｍＬ、８．５ｍｍｏｌ）をゆっくりと加えた。反応物を室温で２時間撹拌した。溶媒を真空下で蒸発させ、残留物をシリカゲル上のカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘキサン＝２０：８０）により精製して、白色の固体として表題の化合物を得た（１．７ｇ、収率７２％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）  δ  ｐｐｍ  ９．８５（ｓ，１Ｈ）、７．３１〜７．４５（ｍ，７Ｈ）、７．２３（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ）、６．９４〜６．９６（ｍ，２Ｈ）、６．８６〜６．９０（ｍ，２Ｈ）、５．０６（ｓ，２Ｈ）、４．２８（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，２Ｈ）、３．９３（ｓ，３Ｈ）、３．１７（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，２Ｈ）。
【００６４】
工程３−（４−（３−（ベンジルオキシ）フェネトキシ）−３−メトキシフェニル）メタノールの合成
【化１５】
2021510699.tif 000020
【００６５】
メタノール（９３ｍＬ）中の４−（３−（ベンジルオキシ）フェネトキシ）−３−メトキシベンズアルデヒド（１．７ｇ、４．７ｍｍｏｌ）の溶液に、水素化ホウ素ナトリウム（０．７ｇ、１８．９ｍｍｏｌ）を少しずつ加えた。混合物を室温で１時間撹拌した。溶媒を真空下で蒸発させ、残留物に残っている過剰な試薬を水で分解し、酢酸エチルで抽出した。抽出物を水で洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して、無色の油として生成物を得た（１．６ｇ、収率９４％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）  δ  ｐｐｍ  ７．３０〜７．４５（ｍ，５Ｈ）、７．２１〜７．２６（ｍ，１Ｈ）、６．９４〜６．９６（ｍ，２Ｈ）、６．８３〜６．９０（ｍ，４Ｈ）、５．０６（ｓ，２Ｈ）、４．６２（ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，２Ｈ）、４．２１（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ）、３．８８（ｓ，３Ｈ）、３．１３（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ）。
【００６６】
工程４−１−（３−（ベンジルオキシ）フェネトキシ）−４−（クロロメチル）−２−メトキシベンゼンの合成
【化１６】
2021510699.tif 000021
【００６７】
乾燥トルエン（２４ｍＬ）中の（４−（３−（ベンジルオキシ）フェネトキシ）−３−メトキシフェニル）メタノール（１．６ｇ、４．４ｍｍｏｌ）の溶液に、塩化チオニル（０．４３ｍＬ、５．８ｍｍｏｌ）を滴加した。混合物を室温で４５分間撹拌し、次いで１．５時間還流した。溶媒を蒸発させて、粘稠な油として化合物を得て、これを精製せずにすぐに使用した。
【００６８】
工程５−２−（４−（３−（ベンジルオキシ）フェネトキシ）−３−メトキシフェニル）アセトニトリルの合成
【化１７】
2021510699.tif 000022
【００６９】
アセトニトリル（７２ｍＬ）中の１−（３−（ベンジルオキシ）フェネトキシ）−４−（クロロメチル）−２−メトキシベンゼン（１．７ｇ、４．４ｍｍｏｌ）の溶液に、シアン化ナトリウム（０．９ｇ、１７．８ｍｍｏｌ）及びヨウ化ナトリウム（０．９ｇ、６．２ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を還流で撹拌した。２時間後、反応混合物を酢酸エチルと水との間で分離した。抽出物を無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、溶媒を真空下で蒸発させた。残留物をシリカゲル上のカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘキサン＝２０：８０）によって精製して、黄色の油として表題の化合物を得た（１．２ｇ、収率７２％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）  δ  ｐｐｍ  ７．３１〜７．４５（ｍ，５Ｈ）、７．２１〜７．２５（ｍ，１Ｈ）、６．９４〜６．９５（ｍ，１Ｈ）、６．８５〜６．８９（ｍ，２Ｈ）、６．８３（ｓ，３Ｈ）、５．０６（ｓ，２Ｈ）、４．２０（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ）、３．８７（ｓ，３Ｈ）、３．６９（ｓ，２Ｈ）、３．１３（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ）。
【００７０】
工程６−３−（２−（４−（２−アミノエチル）−２−メトキシフェノキシ）エチル）フェノール塩酸塩の合成
【化１８】
2021510699.tif 000023
【００７１】
テトラヒドロフラン（１２ｍＬ）、メタノール（３５ｍＬ）及び濃ＨＣｌ（０．６３ｍＬ）中の２−（４−（３−（ベンジルオキシ）フェネトキシ）−３−メトキシフェニル）アセトニトリル（１．２ｇ、３．２ｍｍｏｌ）の溶液を、１０％Ｐｄ炭素（０．２４ｇ、２０％重量）の存在下にて、水素雰囲気下（１．５Ａｔｍ）、室温で振盪した。２４時間後、触媒を濾別し、メタノールで洗浄することにより、生成物を単離した。濾液を減圧下で蒸発させて、ベージュ色の固体として生成物を得た（１．０ｇ、収率９７％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）  δ  ｐｐｍ  ７．０９（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ）、６．８９〜６．９２（ｍ，２Ｈ）、６．７３〜６．８０（ｍ，３Ｈ）、６．６３（ｄｄ，Ｊ＝８．１，１．８Ｈｚ，１Ｈ）、４．１６（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ）、３．８３（ｓ，３Ｈ）、３．１５（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ）、２．９９（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ）、２．８９（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ）。
【００７２】
工程７−３−（２−（（１−（２，４−ジメチルフェニル）−６−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−７−イル）オキシ）エチル）フェノール２，２，２−トリフルオロ酢酸塩の合成
【化１９】
2021510699.tif 000024
【００７３】
工程７Ａ．３−（２−（４−（２−（（２，４−ジメチルベンジリデン）アミノ）エチル）−２−メトキシフェノキシ）エチル）フェノール
【化２０】
2021510699.tif 000025
【００７４】
メタノール（９ｍＬ）中の３−（２−（４−（２−アミノエチル）−２−メトキシフェノキシ）エチル）フェノール塩酸塩（０．７８ｇ、２．４ｍｍｏｌ）の溶液に、トリエチルアミン（２．６ｍＬ、１８．９ｍｍｏｌ）及び活性化分子篩を加えた後、トルエン（１５ｍＬ）中の２，４−ジメチルベンズアルデヒド（０．３５ｇ、２．４ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を還流で撹拌した。２時間後、反応混合物を無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、ジクロロメタンで希釈し、濾過し、真空下で濃縮して粗生成物を得て、これを工程Ｂの出発物質としてすぐに使用した。
【００７５】
工程７Ｂ．３−（２−（（１−（２，４−ジメチルフェニル）−６−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−７−イル）オキシ）エチル）フェノール２，２，２−トリフルオロ酢酸塩
【化２１】
2021510699.tif 000026
【００７６】
３−（２−（４−（２−（（２，４−ジメチルベンジリデン）アミノ）エチル）−２−メトキシフェノキシ）エチル）フェノールをトリフルオロ酢酸（２５ｍＬ）と混合した。反応物を還流で３時間撹拌した。反応混合物を水で希釈し、ジクロロメタンで抽出（３回）した。合わせた有機層を無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過して、真空下で濃縮した。残留物を逆相クロマトグラフィー（アセトニトリル＋０．１％ＴＦＡ／水＋０．１％ＴＦＡ  ０％→１００％勾配）により精製して、ベージュ色の固体として表題の生成物を得た（０．４８ｇ、収率３９％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）  δ  ｐｐｍ  ７．２２（ｓ，１Ｈ）、７．０８（ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ）、７．０２（ｔ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ）、６．９２（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ）、６．８８（ｓ，１Ｈ）、６．５４〜６．６１（ｍ，３Ｈ）、６．２０（ｓ，１Ｈ）、５．８４（ｓ，１Ｈ）、３．９３〜３．９８（ｍ，１Ｈ）、３．８６〜３．９０（ｍ，１Ｈ）、３．８４（ｓ，３Ｈ）、３．４７〜３．５８（ｍ，２Ｈ）、３．２０〜３．２８（ｍ，１Ｈ）、３．０６〜３．１３（ｍ，１Ｈ）、２．８０〜２．８３（ｍ，２Ｈ）、２．４８（ｓ，３Ｈ）、２．３４（ｓ，３Ｈ）。
【００７７】
工程８−１−（２，４−ジメチルフェニル）−７−（３−ヒドロキシフェネトキシ）−６−メトキシ−Ｎ−（オキサゾール−４−イルメチル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−カルボキサミドの合成
【化２２】
2021510699.tif 000027
【００７８】
乾燥ジメチルホルムアミド（０．３ｍＬ）中のオキサゾール−４−イルメタンアミン二塩酸塩（０．０８ｇ、０．４６ｍｍｏｌ）の懸濁液に、トリエチルアミン（０．１３ｍＬ）を加えた。混合物を室温で１０分間撹拌し、その後、カルボニルジイミダゾール（０．０４ｇ、０．２３ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で１時間撹拌し、その後、乾燥ジメチルホルムアミド（０．７ｍＬ）に溶解した３−（２−（（１−（２，４−ジメチルフェニル）−６−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−７−イル）オキシ）エチル）フェノール２，２，２−トリフルオロ酢酸塩（０．０６ｇ、０．１２ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を室温で撹拌した。４時間後、反応混合物を酢酸エチルと水との間で分離した。有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空下で濃縮した。残留物を逆相クロマトグラフィー（アセトニトリル／水  ０％→１００％勾配）により精製して、白色の固体として表題の生成物を得た（０．０２８ｇ、収率４６％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）  δ  ｐｐｍ  ７．８３（ｓ，１Ｈ）、７．５６（ｓ，１Ｈ）、７．０８（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．００（ｓ，１Ｈ）、６．８２（ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ）、６．５６〜６．７１（ｍ，５Ｈ）、６．３５（ｓ，１Ｈ）、６．２９（ｓ，１Ｈ）、６．１１（ｂｓ，１Ｈ）、５．２０（ｔ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，１Ｈ）、４．３７（ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，２Ｈ）、４．０７（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ）、３．８４（ｓ，３Ｈ）、３．６０（ｄｄ，Ｊ＝１４．４，５．６Ｈｚ，１Ｈ）、３．２９（ｄｄｄ，Ｊ＝１４．５，１２．４，４．３Ｈｚ，１Ｈ）、２．９１〜３．０１（ｍ，３Ｈ）、２．６１（ｄｄ，Ｊ＝１６．４，２．９Ｈｚ，１Ｈ）、２．４０（ｓ，３Ｈ）、２．２６（ｓ，３Ｈ）。
【００７９】
化合物１８に加えて、化合物３、化合物５〜化合物１３、化合物１６、化合物１７、化合物１９〜化合物２２、化合物２５、化合物２６、化合物２９、及び化合物４６〜化合物５３もスキーム１又はスキーム１ｂに従って調製することができる。化合物１、化合物２、化合物４、化合物１４、化合物１５、化合物２３、及び化合物５４〜化合物６３は、スキーム２に従って調製することができる。化合物２７、化合物３０、及び化合物３１は、スキーム２及びスキーム３に従って調製することができる。
【００８０】
実施例２−化合物３４：１−（２，４−ジメチルフェニル）−Ｎ２−（オキサゾール−４−イルメチル）−７−（２−（ピリジン−３−イル）エトキシ）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２，６（１Ｈ）−ジカルボキサミドの合成
【００８１】
工程１−２−（３−ブロモ−４−メトキシフェニル）エタンアミンの合成
【化２３】
2021510699.tif 000028
【００８２】
ジクロロメタン（４０ｍＬ）中の臭素（１．５４ｍＬ、３０ｍｍｏｌ）の溶液を、酢酸（４８ｍＬ）中の２−（４−メトキシフェニル）エタンアミン（２．２７ｇ、１５ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に滴加した。２時間後、反応混合物を真空下で濃縮し、残留物を逆相クロマトグラフィー（アセトニトリル／水  ０％→１００％勾配）で精製して、表題の生成物（９２０ｍｇ、収率４０％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）  δ  ｐｐｍ  ７．３３（ｄ，Ｊ＝１．５Ｈｚ，１Ｈ）、７．１３（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ）、７．１２（ｄｄ，Ｊ＝７．５，１．５Ｈｚ，１Ｈ）、５．１１（ｂｓ，２Ｈ）、３．８３（ｓ，３Ｈ）、２．９８（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ）、２．８３（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ）。
【００８３】
工程２−Ｎ−（３−ブロモ−４−メトキシフェネチル）−２，４−ジメチルベンズアミドの合成
【化２４】
2021510699.tif 000029
【００８４】
１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（２２６ｍｇ、１．１８ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１．０３ｍＬ、５．９０ｍｍｏｌ）を、乾燥Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中の２−（３−ブロモ−４−メトキシフェニル）エタンアミン（２２６ｍｇ、０．９８ｍｍｏｌ）、２，４−ジメチル安息香酸（１５１ｍｇ、０．９８ｍｍｏｌ）及び１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（１６０ｍｇ、１．１８ｍｍｏｌ）の溶液に加えた。２４時間後、反応混合物を酢酸エチルと水との間で分離した。有機層を無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空下で濃縮した。残留物を逆相クロマトグラフィー（アセトニトリル／水  ０％→１００％勾配）により精製して、淡黄色の固体として表題の生成物を得た（０．３２ｇ、収率９０％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）  δ  ｐｐｍ  ７．４３（ｄ，Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ）、７．１２〜７．２０（ｍ，２Ｈ）、６．９５〜７．０３（ｍ，２Ｈ）、６．８５（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ）、５．６４〜５．７８（ｍ，１Ｈ）、３．８８（ｓ，３Ｈ）、３．６５（ｄｄ，Ｊ＝１２．９，６．８Ｈｚ，２Ｈ）、２．８５（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ）、２．３７（ｓ，３Ｈ）、２．３１（ｓ，３Ｈ）。
【００８５】
工程３−６−ブロモ−１−（２，４−ジメチルフェニル）−７−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリンの合成
【化２５】
2021510699.tif 000030
【００８６】
乾燥アセトニトリル（７ｍＬ）中のＮ−（３−ブロモ−４−メトキシフェネチル）−２，４−ジメチルベンズアミド（０．３２ｇ、０．８８ｍｍｏｌ）の溶液に対してＰＯＣｌ３を加え、混合物を還流で撹拌した。４時間後、反応混合物を真空下で濃縮して、粗生成物を得て（２９８ｍｇ、収率９８％）、これを更に精製せずにすぐに使用した。
【００８７】
工程４−６−ブロモ−１−（２，４−ジメチルフェニル）−７−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリンの合成
【化２６】
2021510699.tif 000031
【００８８】
メタノール（１０ｍＬ）中の６−ブロモ−１−（２，４−ジメチルフェニル）−７−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン（２９８ｍｇ、０．８７ｍｍｏｌ）の溶液に、水素化ホウ素ナトリウム（３２８ｍｇ、８．６６ｍｍｏｌ）を少しずつ加えた。混合物を室温で２時間撹拌した。溶媒を真空下で蒸発させ、残留物に残っている過剰な試薬を水で分解し、酢酸エチルで抽出した。抽出物を水で洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して、ベージュ色の油として生成物を得た（３００ｍｇ、収率９９％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）  δ  ｐｐｍ  ７．２１（ｓ，１Ｈ）、６．９９（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ）、６．９８（ｄ，Ｊ＝１．５Ｈｚ，１Ｈ）、６．９２（ｄｄ，Ｊ＝７．５，１．５Ｈｚ，１Ｈ）、６．８５（ｓ，１Ｈ）、５．１９（ｓ，１Ｈ）、３．８３（ｓ，３Ｈ）、３．２５〜３．３５（ｍ，２Ｈ）、２．７５〜２．７９（ｍ，２Ｈ）、２．３４（ｓ，６Ｈ）、１．９１（ｂｓ，１Ｈ）。
【００８９】
工程５−ｔｅｒｔ−ブチル６−ブロモ−１−（２，４−ジメチルフェニル）−７−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−カルボン酸塩の合成
【化２７】
2021510699.tif 000032
【００９０】
水（３．８ｍＬ）中の６−ブロモ−１−（２，４−ジメチルフェニル）−７−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン（３００ｍｇ、０．８７ｍｍｏｌ）の撹拌懸濁液にＴＥＡ（０．６ｍＬ、４．３５ｍｍｏｌ）及びジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート（１９２ｍｇ、０．８７ｍｍｏｌ）を０℃（氷浴）で１滴ずつ加えた。混合物を室温で３０分間撹拌した。次いで、水を加え、生成物を酢酸エチルで抽出した。残留物をシリカゲル上のカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘキサン＝２０：８０）によって精製し、ベージュ色の固体として表題の化合物を得た（３６１ｍｇ、収率９３％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）  δ  ｐｐｍ  ７．２１（ｓ，１Ｈ）、６．９９（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ）、６．９８（ｄ，Ｊ＝１．５Ｈｚ，１Ｈ）、６．９２（ｄｄ，Ｊ＝７．５，１．５Ｈｚ，１Ｈ）、６．８５（ｓ，１Ｈ）、６．２８（ｓ，１Ｈ）、３．８３（ｓ，３Ｈ）、３．２４〜３．３４（ｍ，２Ｈ）、２．９０〜２．９３（ｍ，２Ｈ）、２．３４（ｓ，６Ｈ）、１．３８（ｓ，９Ｈ）
【００９１】
工程６−２−ｔｅｒｔ−ブチル６−メチル１−（２，４−ジメチルフェニル）−７−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２，６（１Ｈ）−ジカルボン酸塩の合成
【化２８】
2021510699.tif 000033
【００９２】
メタノール（８ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル６−ブロモ−１−（２，４−ジメチルフェニル）−７−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−カルボン酸塩（３６１ｍｇ、０．８１ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（５９ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（０．３４ｍＬ、２．４３ｍｍｏｌ）を１００℃にてＣＯ雰囲気下（１００ｐｓｉ）で撹拌した。５時間後、反応混合物を真空下で濃縮し、残留物をシリカゲル上のカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘキサン＝２０：８０）により精製して、ベージュ色の固体として表題の化合物を得た（３００ｍｇ、収率８７％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）  δ  ７．５９（ｓ，１Ｈ）、７．０７（ｓ，１Ｈ）、６．９２〜６．９８（ｍ，３Ｈ）、６．２８（ｓ，１Ｈ）、３．８９（ｓ，３Ｈ）、３．８３（ｓ，３Ｈ）、３．２４〜３．３４（ｍ，２Ｈ）、２．９０〜２．９３（ｍ，２Ｈ）、２．３４（ｓ，６Ｈ）、１．３８（ｓ，９Ｈ）。
【００９３】
工程７−１−（２，４−ジメチルフェニル）−７−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−６−カルボン酸メチル塩酸塩の合成
【化２９】
2021510699.tif 000034
【００９４】
ジオキサン（１．２ｍＬ）中の２−ｔｅｒｔ−ブチル６−メチル１−（２，４−ジメチルフェニル）−７−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２，６（１Ｈ）−ジカルボン酸塩（３００ｍｇ、０．７０ｍｍｏｌ）の溶液に対して、ジオキサン中のＨＣｌ  ４．０Ｍの溶液（４ｍＬ、１６．８ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を５５℃で撹拌した。２時間後、溶媒を真空下で蒸発させて、塩酸塩として粗生成物を得た（２５２ｍｇ、収率１００％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）  δ  ｐｐｍ  ７．５９（ｓ，１Ｈ）、７．０７（ｓ，１Ｈ）、６．９９（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ）、６．９８（ｄ，Ｊ＝１．５Ｈｚ，１Ｈ）、６．９２（ｄｄ，Ｊ＝７．５，１．５Ｈｚ，１Ｈ）、５．１９（ｓ，１Ｈ）、３．８９（ｓ，３Ｈ）、３．８３（ｓ，３Ｈ）、３．２５〜３．３５（ｍ，２Ｈ）、２．７５〜２．７９（ｍ，２Ｈ）、２．３４（ｓ，６Ｈ）。
【００９５】
工程８−１−（２，４−ジメチルフェニル）−７−メトキシ−２−（（オキサゾール−４−イルメチル）カルバモイル）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−６−カルボン酸メチルの合成
【化３０】
2021510699.tif 000035
【００９６】
乾燥ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）中のオキサゾール−４−イルメタンアミン二塩酸塩（３９８ｍｇ、２．８１ｍｍｏｌ）の懸濁液に、トリエチルアミン（０．７８ｍＬ、５．６ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で１０分間撹拌し、その後、カルボニルジイミダゾール（２５７ｍｇ、１．４ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で１時間撹拌し、その後、乾燥ジメチルホルムアミド（３．８ｍＬ）に溶解した１−（２，４−ジメチルフェニル）−７−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−６−カルボン酸メチル塩酸塩（２５２ｍｇ、０．７０ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を室温で撹拌した。４時間後、反応混合物を酢酸エチルと水との間で分離した。有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空下で濃縮した。残留物を逆相クロマトグラフィー（アセトニトリル／水  ０％→１００％勾配）により精製して、白色の固体として表題の生成物を得た（１８９ｍｇ、収率６０％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）  δ  ｐｐｍ  ７．９５（ｓ，１Ｈ）、７．６９（ｓ，１Ｈ）、７．５９（ｓ，１Ｈ）、７．０７（ｓ，１Ｈ）、６．９２〜６．９８（ｍ，３Ｈ）、６．２８（ｓ，１Ｈ）、６．０１（ｂｓ，１Ｈ）、４．１０（ｓ，２Ｈ）、３．８９（ｓ，３Ｈ）、３．８３（ｓ，３Ｈ）、３．４４〜３．５４（ｍ，２Ｈ）、２．９０〜２．９３（ｍ，２Ｈ）、２．３４（ｓ，６Ｈ）。
【００９７】
工程９−１−（２，４−ジメチルフェニル）−７−ヒドロキシ−２−（（オキサゾール−４−イルメチル）カルバモイル）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−６−カルボン酸メチルの合成
【化３１】
2021510699.tif 000036
【００９８】
無水ジクロロメタン（２．３ｍＬ）中の１−（２，４−ジメチルフェニル）−７−メトキシ−２−（（オキサゾール−４−イルメチル）カルバモイル）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−６−カルボン酸メチル（１８９ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）の溶液に、塩化メチレン（０．８４ｍＬ、０．８４ｍｍｏｌ）中の三臭化ホウ素１．０Ｍを−７８℃で滴加した。反応混合物を室温で一晩撹拌し、氷でクエンチした。得られた混合物を酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空下で濃縮して、褐色の固体として生成物を得た（１３５ｍｇ、収率７４％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）  δ  ｐｐｍ  ７．９５（ｓ，１Ｈ）、７．６９（ｓ，１Ｈ）、７．５３（ｓ，１Ｈ）、６．９２〜７．０３（ｍ，４Ｈ）、６．２８（ｓ，１Ｈ）、６．０１（ｂｓ，１Ｈ）、５．３５（ｂｓ，１Ｈ）、４．１０（ｓ，２Ｈ）、３．８９（ｓ，３Ｈ）、３．４４〜３．５４（ｍ，２Ｈ）、２．９０〜２．９３（ｍ，２Ｈ）、２．３４（ｓ，６Ｈ）。
【００９９】
工程１０−１−（２，４−ジメチルフェニル）−２−（（オキサゾール−４−イルメチル）カルバモイル）−７−（２−（ピリジン−３−イル）エトキシ）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−６−カルボン酸メチルの合成
【化３２】
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【０１００】
乾燥テトラヒドロフラン（１．２ｍＬ）中の２−（ピリジン−３−イル）エタノール（３８ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）の溶液に、１−（２，４−ジメチルフェニル）−７−ヒドロキシ−２−（（オキサゾール−４−イルメチル）カルバモイル）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−６−カルボン酸メチル（１３５ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）及びトリフェニルホスフィン（１０７ｍｇ、０．４ｍｍｏｌ）を加え、続いてジイソプロピルアゾジカルボン酸塩（８４μＬ、０．４ｍｍｏｌ）をゆっくりと加えた。反応物を室温で２時間撹拌した。溶媒を真空下で蒸発させ、残留物をシリカゲル上のカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘキサン＝２０：８０）により精製して、白色の固体として表題の化合物を得た（９０ｍｇ、収率５４％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）  δ  ｐｐｍ  ８．４１〜８．４３（ｍ，２Ｈ）、７．９５（ｓ，１Ｈ）、７．６７〜７．６９（ｍ，２Ｈ）、７．５９（ｓ，１Ｈ）、７．２５（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ）、７．０７（ｓ，１Ｈ）、６．９２〜６．９８（ｍ，３Ｈ）、６．２８（ｓ，１Ｈ）、６．０１（ｂｓ，１Ｈ）、４．２７（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ）、４．１０（ｓ，２Ｈ）、３．８９（ｓ，３Ｈ）、３．４４〜３．５４（ｍ，２Ｈ）、２．９３〜３．００（ｍ，４Ｈ）、２．３４（ｓ，６Ｈ）。
【０１０１】
工程１１−１−（２，４−ジメチルフェニル）−２−（（オキサゾール−４−イルメチル）カルバモイル）−７−（２−（ピリジン−３−イル）エトキシ）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−６−カルボン酸塩酸塩の合成
【化３３】
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【０１０２】
ＴＨＦ（８．３ｍＬ）及び水（８３０μＬ）中の１−（２，４−ジメチルフェニル）−２−（（オキサゾール−４−イルメチル）カルバモイル）−７−（２−（ピリジン−３−イル）エトキシ）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−６−カルボン酸メチル（９０ｍｇ、０．１６６ｍｍｏｌ）の溶液に対して、水酸化リチウム（８ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で撹拌した。２時間後に水（８ｍＬ）を加えて反応混合物を希釈した後、有機溶媒を真空下で蒸発させ、水性残留物を１Ｎ  ＨＣｌの添加により酸性化した（ｐＨ＝５）。酢酸エチルによる抽出を行って、塩酸塩として生成物を得た（９０ｍｇ、収率９６％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）  δ  ｐｐｍ  １１．０（ｂｓ，１Ｈ）、８．４１〜８．４３（ｍ，２Ｈ）、７．９５（ｓ，１Ｈ）、７．７５（ｓ，１Ｈ）、７．６７〜７．６９（ｍ，２Ｈ）、７．２５（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ）、７．１７（ｓ，１Ｈ）、６．９２〜６．９８（ｍ，３Ｈ）、６．２８（ｓ，１Ｈ）、６．０１（ｂｓ，１Ｈ）、４．２７（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ）、４．１０（ｓ，２Ｈ）、３．４４〜３．５４（ｍ，２Ｈ）、２．９０〜３．００（ｍ，４Ｈ）、２．３４（ｓ，６Ｈ）。
【０１０３】
工程１２−１−（２，４−ジメチルフェニル）−Ｎ２−（オキサゾール−４−イルメチル）−７−（２−（ピリジン−３−イル）エトキシ）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２，６（１Ｈ）−ジカルボキサミドの合成
【化３４】
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【０１０４】
１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（６１ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（８４μＬ、０．４８ｍｍｏｌ）を、乾燥Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中の塩化アンモニウム（４３ｍｇ、０．８ｍｍｏｌ）、１−（２，４−ジメチルフェニル）−２−（（オキサゾール−４−イルメチル）カルバモイル）−７−（２−（ピリジン−３−イル）エトキシ）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−６−カルボン酸塩酸塩（９０ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）及び１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（２２ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）の溶液に加えた。２４時間後、反応混合物を酢酸エチルと水との間で分離した。有機層を無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空下で濃縮した。残留物を逆相クロマトグラフィー（アセトニトリル／水  ０％→１００％勾配）により精製して、白色の固体として表題の生成物を得た（４９ｍｇ、収率５８％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）  δ  ｐｐｍ  ８．４１〜８．４３（ｍ，２Ｈ）、７．９５（ｓ，１Ｈ）、７．６７〜７．６９（ｍ，２Ｈ）、７．５７（ｓ，１Ｈ）、７．５０（ｂｓ，２Ｈ）、７．２５（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ）、６．９２〜６．９８（ｍ，３Ｈ）、６．２８（ｓ，１Ｈ）、６．０１（ｂｓ，１Ｈ）、４．２７（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ）、４．１０（ｓ，２Ｈ）、３．４４〜３．５４（ｍ，２Ｈ）、２．９０〜３．００（ｍ，４Ｈ）、２．３４（ｓ，６Ｈ）。
【０１０５】
化合物３４に加えて、化合物２４、化合物２８、化合物３２、化合物３３及び化合物３５〜化合物４５も、スキーム４又はスキーム４ｂに従って調製することができる。
【０１０６】
実施例３−腫瘍細胞株における活性
細胞株１番：Ａ５４９．ＫＲａｓＧ１２Ｓ発癌性変異を持つ肺癌細胞株
細胞株２番：Ｈ３５８．ＫＲａｓＧ１２Ｃ発癌性変異を持つ非小細胞肺癌株
細胞株３番：ＰＡＮＣ−１．ＫＲａｓＧ１２Ｄ発癌性変異を持つ膵臓細胞株の類上皮癌
細胞株４番：ＲＰＭＩ．ＫＲＡＳＧ１２Ａ発癌性変異を持つ骨髄腫細胞株
【０１０７】
細胞株は、ＦＢＳ１０％を補充したＤＭＥＭ又はＲＰＭＩ−１６４０で培養した。化合物の抗増殖効果を評価するため、細胞を組織培養マイクロプレートにそれぞれ１．８×１０３細胞／ｃｍ２、６．２×１０３細胞／ｃｍ２、７．８×１０３細胞／ｃｍ２、２１×１０３細胞／ｃｍ２、及び２×１０３細胞／ｃｍ２の密度で播種し、５％ＣＯ２の加湿雰囲気中でインキュベートした。２４時間後、ＤＭＳＯ１００％に溶解した化合物を、最終ＤＭＳＯ濃度０．５％に対して０．１μＭ〜５０μＭの範囲の異なる最終濃度で添加し、プレートを更に７２時間インキュベートした。インキュベーション後、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ９６（商標）水性非放射性細胞増殖アッセイ−ＭＴＳ（Promega＃Ｇ５４２１）を用いて、製造元の指示書に従って増殖を定量した。４９０ｎｍの吸光度の量は、生細胞の数に正比例する。吸光度を、ＢＭＧ  Ｆｌｕｏｓｔａｒ  Ｏｐｔｉｍａマイクロプレートリーダーで記録し、ビヒクルによる対照に対して正規化した。
【０１０８】
【表２】
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【０１０９】
化合物１〜化合物５３について示されるデータは、実験結果の中央値である。化合物５４〜化合物６３について示されるデータは、推定値及び／又は予備実験の結果に基づいている。
【０１１０】
実施例４−マウス異種移植片における活性
ＮＯＤ／ＳＣＩＤマウスにおける皮下ＮＣＩ−Ｈ３５８ヒト肺癌異種移植片モデルの治療における化合物１８の有効性の評価
【０１１１】
実験計画
平均腫瘍サイズが１４１ｍｍ３に達したときに治療を開始した。試験物質の投与及び各研究群の動物数を以下の実験計画表に示す。
【０１１２】
【表３】
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【０１１３】
担腫瘍マウスにおける体重変化の結果を図１に示す。群２（化合物１８、１０ｍｇ／ｋｇ）ではマウスの体重減少（ＢＷＬ）が１０％に達したのは１匹のみであったのに対し、群３（シスプラチン、３．５ｍｇ／ｋｇ）では４匹のマウスのＢＷＬが１０％以下になった。結果は、皮下ＮＣＩ−Ｈ３５８ヒト肺癌異種移植片モデルを持つマウスが、化合物１８の１０ｍｇ／ｋｇ  ｂ．ｉ．ｄに忍容性を示すことを示唆している。
【０１１４】
種々の群の腫瘍増殖曲線を図２に示す。
【０１１５】
群１（ビヒクル）の平均腫瘍体積は、接種後２４日目（ＰＧ−Ｄ２２、初回投薬後２２日目）で６３０ｍｍ３に達した。群２（化合物１８、１０ｍｇ／ｋｇ）の平均腫瘍体積は、ＰＧ−Ｄ２２で２３８ｍｍ３に達し、ＴＧＩは約６２％である。群３（シスプラチン、３．５ｍｇ／ｋｇ）の平均腫瘍体積は、ＰＧ−Ｄ２２で２３１ｍｍ３に達し、ＴＧＩは約６３％である。ビヒクル群と比較して、群２及び群３はいずれも有意な抗腫瘍効果を示す（群２  ｐ＝０．０２６、群３  ｐ＝０．０１９）。
【０１１６】
試験化合物１８は、皮下ＮＣＩ−Ｈ３５８ヒト肺癌異種移植片モデルにおいて有意な抗腫瘍活性を実証し、化合物１８の１０ｍｇ／ｋｇ  ｂ．ｉ．ｄ．は、担腫瘍マウスにとって安全である。
【０１１７】
実施例５：表面プラズモン共鳴を用いた平衡解離定数（ＫＤ）の決定
化合物１８のＫＤは８．８ｎＭである（Ｋａ＝１．１７×１０５Ｍ−１・ｓ−１；Ｋｄ＝１．０３×１０−３ｓ−１）
【０１１８】
ＫＤを決定するプロトコルは次のとおりである。
水に溶解した様々な濃度のＫＲａｓを、湿度４０％でベア（bare）金コーティングした（厚さ４７ｎｍ）ＰｌｅｘＡｒｒａｙナノキャプチャセンサーチップ（米国ワシントン州シアトルのPlexera Bioscience）に手作業で印刷した。各濃度を繰り返し印刷したところ、各スポットには０．２μＬのＫＲａｓ溶液が含まれていた。チップを湿度８０％で４℃にて一晩インキュベートし、１０×ＰＢＳＴで１０分間、１×ＰＢＳＴで１０分間、及び脱イオン水で２回、１０分間の濯ぎを行った。次いで、使用前、窒素流のもとで乾燥する前に、チップを水中の５％（重量／体積）脱脂乳で一晩ブロックし、１０×ＰＢＳＴで１０分間、１×ＰＢＳＴで１０分間、及び脱イオン水で２回、１０分間の洗浄を行った。ＳＰＲｉ測定を、ＰｌｅｘＡｒａｙ  ＨＴ（米国ワシントン州シアトルのPlexera Bioscience）で行った。コリメート光（６６０ｎｍ）は結合プリズムを通過し、ＳＰＲ活性金表面で反射して、ＣＣＤカメラで受信される。バッファー及びサンプルを、非拍動ピストンポンプによって結合プリズムに取り付けられた３０μＬフローセルに注入した。各測定サイクルには４つの工程、すなわち、ＰＢＳＴランニングバッファーを用いて２μＬ／ｓの一定速度で洗浄して安定したベースラインを得る工程、結合のため化合物１８を５μＬ／ｓで注入する工程、ＰＢＳＴを用いる２μＬ／ｓで３００秒間の表面洗浄工程、及び０．５％（体積／体積）Ｈ３ＰＯ４を用いる２μＬ／ｓで３００秒間の再生工程を含んだ。全ての測定を４℃で行った。結合及び洗浄後のシグナル変化（ＡＵ単位）をアッセイ値として記録する。ＳＰＲ画像で選択したタンパク質グラフト領域を分析し、選択した領域の平均反射率変動を時間の関数としてプロットした。リアルタイムの結合シグナルを記録し、データ分析モジュール（ＤＡＭ、米国ワシントン州シアトルのPlexera Bioscience）によって分析した。速度論分析を、ＢＩＡｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ４．１ソフトウェア（Biacore,Inc.）を用いて行った。
【０１１９】
実施例６：ＮＩＨ−Ｈ３５８細胞株の３Ｄ生存率アッセイにおける有効性試験
３Ｄ  ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（商標）細胞生存率アッセイを行うためのプロトコルは次のとおりである。
１日目：細胞プレーティング
それぞれの培地で細胞濃度を１×１０５細胞／ｍｌに調整する（細胞濃度は、データベース又は密度最適化アッセイに従って調整される）。細胞懸濁液３．５ｍＬ及び１％メチルセルロース６．５ｍＬを混合する。混合し、気泡が分散するのを待ってから、ピペッティングする。この工程により、０．６５％メチルセルロース溶液中の細胞懸濁液１０ｍｌが得られる。最終的な細胞密度のプレートマップに従って、細胞懸濁液９９．５μＬを９６ウェルプレートに加える。
２つの複製プレートを設定する。１つは０日目の読み取り用（Ｔ０）であり、もう１つはインキュベーターで培養して終了時に読み取る。
５％ＣＯ２を含む加湿インキュベーター内で３７℃にてプレートを一晩インキュベートする。
０日目：Ｔ０プレート読み取り及び化合物処理
Ｔ０プレートを取り、培養培地０．５μＬを各ウェルに加えてＴ０を読み取る。
各ウェルにＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（商標）試薬１００μｌを加える。
オービタルシェーカーで２分間内容物を混合し、細胞溶解を促進する。
プレートを室温で１０分間インキュベートして、発光シグナルを安定化させる。
ＥｎＶｉｓｉｏｎマルチラベルリーダーを使用して発光を記録する。
試験品希釈において示される濃度に試験品を希釈する。プレート接種マップに従って、化合物の２００倍希釈標準溶液をそれぞれ０．５μＬ加える。
７日目：７日間の化合物処理のプレート読み取り
各ウェルにＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（商標）試薬１００μＬを加える。
オービタルシェーカーで２分間内容物を混合し、細胞溶解を促進する。
プレートを室温で１０分間インキュベートして、発光シグナルを安定化させる。
ＥｎＶｉｓｉｏｎマルチラベルリーダーを用いて発光を記録する。
【０１２０】
【表４】
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【図１】
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【図２】
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【国際調査報告】
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