(57)【要約】  本発明は、急性および慢性疼痛の治療または予防に有用であるが、炎症および癌などの疼痛療法以外のＴｒｋＡの他の異常な活動にも有用である新規な式（１）のＴｒｋＡ阻害剤に関する。
2021504462.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（１）の化合物
【化１】
2021504462.tif 000030
（式中、
Ａ：それぞれ２〜４個の窒素原子および任意で１個の硫黄または酸素原子を含有する５員の単環式芳香族複素環または８〜１０員の二環式芳香族複素環であって、前記環が、任意に（ａ）１個以上のＣ１−Ｃ４アルキルもしくはアルケニル基、または（ｂ）１個以上のハロゲンまたはモノもしくはポリハロゲン化Ｃ１−Ｃ４アルキルもしくはアルケニル基を含有する、Ｃ１−Ｃ４アルキルもしくはアルケニル基で任意に置換された５もしくは６員のアルキル環またはアルケニル環もしくはアリール環で置換された、５員の単環式芳香族複素環または８〜１０員の二環式芳香族複素環、
Ｂ：１個以上のハロゲンまたはモノもしくはポリハロゲン化Ｃ１−Ｃ４アルキルもしくはアルケニル基を含むＣ１−Ｃ４アルキルもしくはアルケニル基で任意に置換されたメチレン−アリールまたはアリール環
Ｃ：５〜１０個の環原子、とりわけ、好ましくはＮ、Ｏ、およびＳであり、必要に応じて、残基Ｒ§で１回、２回、または３回置換されている１〜５個のヘテロ原子を有する単環式または二環式、飽和または一価不飽和もしくは多価不飽和または芳香族複素環
Ｒ§：−ＯＨ、−ＳＨ、−Ｃ１−Ｃ４アルキル、−Ｏ−Ｃ１−８アルキル、−Ｏ−Ｃ６−１４アリール、−Ｓ−Ｃ１−４アルキル、−Ｓ−Ｃ６−１４アリール、−ＳＯ−Ｃ１−４アルキル、−ＳＯ−Ｃ６−１４アリール、−ＳＯ２−Ｃ１−４アルキル、−ＳＯ２−Ｃ６−１４アリール、−ＳＯ３Ｈ、−ＯＳＯ２Ｃ１−８アルキル、−ＯＳＯ２Ｃ６−１４アリール、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＯＣ１−８アルキル、−（ＣＯ）Ｃ１−８アルキル、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＮＨＣ１−６アルキル、−ＣＯＮ（Ｃ１−６アルキル）２、−ＮＨ２、−ＮＨＣ１−６アルキル、−Ｎ（Ｃ１−６アルキル）２、−ＮＨＣ６−１４アリール、−ＮＨ−ヘタリール、−Ｎ（Ｃ６−１４アリール）２、−Ｎ（Ｃ１−６アルキル）（Ｃ６−１４アリール）、−Ｃ１−６アルキル、−Ｃ２−１２アルケニル、ハロゲン、−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨ２ＣＨ２ＳＨ、−ＣＨ２ＣＨ２ＳＣＨ３、−スルファモイル、アルキルスルファモイル、ジアルキルスルファモイル、−スルホ、ホスホノ、−ＣＮ、−ＮＯ２および／または−ＳＣＮ、
ならびにこれらの化合物の薬学的に適合する塩および溶媒和物）。
【請求項２】
Ｃが請求項１で定義された残基であり、ＡおよびＢが以下の通りである、請求項１に記載の化合物：
【表１】
2021504462.tif 000031
【表２】
2021504462.tif 000032
【請求項３】
Ｃがメチルピペラジニルである、請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
以下の構造を有する、請求項１〜３のいずれかに記載の化合物。
【化２】
2021504462.tif 000033
【請求項５】
Ｎ−［５−（３−フルオロフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］−６−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−（フェニルスルファニル）ピリミジン−４−アミン）である、請求項４に記載の化合物。
【化３】
2021504462.tif 000034
【請求項６】
（ａ）請求項１〜５のいずれかに記載の前記化合物および／またはその薬学的に許容される塩、ならびに（ｂ）薬学的に許容される賦形剤を含む、医薬組成物。
【請求項７】
局所、経口、非経口、皮膚、皮下、静脈内、および／または筋肉内投与のための形態における、請求項６に記載の医薬組成物。
【請求項８】
哺乳動物における疼痛を治療する方法で使用するための、請求項１〜５のいずれかに記載の化合物および／またはその薬理学的な塩。
【請求項９】
前記疼痛が、炎症性疼痛、神経因性疼痛、ならびに癌、手術、および骨折に関連する疼痛である、請求項８に記載の使用のための化合物。
【請求項１０】
前記疼痛が慢性および／または急性疼痛を含む、請求項８または９に記載の使用のための化合物。
【請求項１１】
哺乳動物における癌を治療する方法で使用するための、請求項１〜５のいずれかに記載の化合物および／またはその薬理学的な塩。
【請求項１２】
前記癌が、膵臓腫瘍、前立腺腫瘍、肺腫瘍、腎臓腫瘍、膀胱腫瘍、肝臓腫瘍、リンパ腫、白血病、食道腫瘍、卵巣腫瘍、口腔腫瘍、甲状腺腫瘍、子宮頸部腫瘍、頭頸部腫瘍、乳房腫瘍、神経芽細胞腫、胃腫瘍、結腸腫瘍、脳腫瘍、および皮膚腫瘍から選択される、請求項１１に記載の使用のための化合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＴｒｋＡ阻害剤であり、急性および慢性疼痛の治療または予防に有用であるが、炎症および癌などの疼痛療法以外のＴｒｋＡの他の異常な活動にも有用な式（１）の新規化合物に関する。
【背景技術】
【０００２】
物理的な原因に基づいて、疼痛は、３個のタイプ：侵害受容性、神経障害性、および混合型に分類できる。
【０００３】
侵害受容性疼痛は、侵害受容器によって検出される疼痛の用語である。侵害受容器は、皮膚の真下、腱、関節、および内臓で終端する自由神経終末である。侵害受容性疼痛は、典型的には、オピオイドおよびＮＳＡＩＤによる治療によく応答する。侵害受容性疼痛にはいくつかのタイプ：体性痛、内臓痛、および皮膚痛がある。内臓痛は、内臓に由来する。深部体性痛は、靭帯、腱、骨、血管、筋膜、および筋肉の侵害受容器の刺激によって開始され、鈍くうずき、限局性の疼痛が乏しい。例としては、捻挫および骨折が含まれる。表在性疼痛は、皮膚または他の表在性組織の侵害受容器の活性化によって開始され、鋭く、明確に定義され、はっきりと位置する。表在性の体性痛を生じる怪我の例としては、軽度の創傷および軽度（第１度）の火傷が含まれる。侵害受容性疼痛は、典型的には、持続時間が短く、損傷が回復すると終了する。侵害受容性疼痛の例には、術後疼痛、捻挫、骨折、火傷、隆起、あざ、および炎症性侵害受容性疼痛が含まれる。炎症性侵害受容性疼痛は、組織損傷およびその結果として生じる炎症過程に関連する。
【０００４】
神経因性疼痛は、末梢神経系および中枢神経系のニューロンへの損傷によって生じ、これらの系の感作を伴う。根本的な病因は、通常不可逆的であるため、神経因性疼痛のほとんどは慢性疼痛である。ほとんどの人は、神経因性疼痛を、発砲、灼熱感、チクチク感、刺すような感覚、電撃性、しびれ感、および持続性異痛症と説明する。神経因性疼痛の命名法は、病因によって神経系を開始する部位；例えば、中枢性脳卒中後疼痛、糖尿病末梢神経障害、帯状疱疹後（または帯状疱疹後）神経痛、末期癌性疼痛、幻肢痛に基づく。
【０００５】
混合型疼痛は、侵害受容性疼痛および神経因性疼痛の両方の共存によって特徴付けられる。例えば、筋肉痛は、中枢または末梢神経の感作をトリガーし、慢性的な腰痛、片頭痛、および筋筋膜痛につながる。
【０００６】
受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）は、細胞信号伝達に重要な役割を果たすタンパク質キナーゼのサブファミリーであり、神経活動に関連する種々のプロセスにも関与する。これらには、脊髄および疼痛信号が始まる末梢神経終末における疼痛伝達が含まれる。
【０００７】
チロシンキナーゼ受容体（Ｔｒｋ）ファミリーのメンバーは、ＲＴＫクラスの高親和性受容体であり、ニューロトロフィン（ＮＴ）と呼ばれる一群の可溶性成長因子によって活性化される。Ｔｒｋ受容体ファミリーは、３つのメンバー−ＴｒｋＡ、ＴｒｋＢ、およびＴｒｋＣを有する。中でもニューロトロフィンは、（ｉ）ＴｒｋＡを活性化する神経成長因子（ＮＧＦ）、（ｉｉ）ＴｒｋＢを活性化する脳由来神経栄養因子（ＢＮＤＦ）およびＮＴ−４／５、ならびに（ｉｉｉ）ＴｒｋＣを活性化するＮＴ３である。Ｔｒｋｓは、神経組織で広く発現しており、神経細胞の維持、信号伝達、および生存に関係している（Ｐａｔａｐｏｕｔｉａｎ，Ａ．ｅｔ  ａｌ，Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎｉｏｎ  Ｉｎ  Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，２００１，１１，２７２−２８０）。最近の文献では、ＮＧＦによるＴｒｋＡの活性化が特定のイオンチャネルの下流のアップレギュレーションをもたらし、炎症を経験する神経終末からの電気信号を増加させることにより疼痛を誘発するのに重要であることも示されている（例えば、ＶＲ−１，Ｗｉｎｓｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．Ｐａｉｎ  ２００１，８９，１８１；ｓｏｄｉｕｍ  ｃｈａｎｎｅｌｓ，Ｃｈｏｉ  ｅｔ  ａｌ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ａｎｄ  Ｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ２００１，２１，２６９５；ＡＳＩＣ，Ｍａｍｅｔ  ｅｔ  ａｌ．Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ２００３，２７８，４８９０７）。神経成長因子（ＮＧＦ）のＴｒｋＡへの結合は、ＴｒｋＡの二量化ならびにニューロンの発達および侵害受容に関連する下流の信号伝達経路の活性化をトリガーする（Ｋｈａｎ，Ｎ．ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ  ２０，１０６５７−８８（２０１５））。
【０００８】
各Ｔｒｋ受容体は、細胞外ドメイン（リガンド結合）、膜貫通領域、および細胞内ドメイン（キナーゼドメインを含む）を含有する。リガンドが結合すると、キナーゼドメインは、自己リン酸化を触媒し、下流の信号伝達経路をトリガーする。
【０００９】
過去１０年間で、Ｔｒｋ信号伝達と疼痛の誘発を関連付ける多くの科学的報告が発表されている。Ｔｒｋ／ニューロトロフィン経路の阻害剤は、疼痛の多くの前臨床動物モデルで有効であることが実証されている。例えば、拮抗的なＮＧＦおよびＴｒｋＡ抗体（例えば、ＲＮ−６２４）は、炎症性および神経因性疼痛の動物モデルおよびヒトの臨床試験において有効であることが示されている（Ｗｏｏｌｆ，Ｃ．Ｊ．ｅｔ  ａｌ．（１９９４）Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ  ６２，３２７−３３１；Ｚａｈｎ，Ｐ．Ｋ．ｅｔ  ａｌ．（２００４）Ｊ．Ｐａｉｎ５，１５７−１６３；ＭｃＭａｈｏｎ，Ｓ．Ｂ．ｅｔ  ａｌ．，（１９９５）Ｎａｔ．Ｍｅｄ．１，７７４−７８０；Ｍａ，Ｑ．Ｐ．ａｎｄ  Ｗｏｏｌｆ，Ｃ．Ｊ．（１９９７）Ｎｅｕｒｏｒｅｐｏｒｔ  ８，８０７−８１０；Ｓｈｅｌｔｏｎ，Ｄ．Ｌ．ｅｔ  ａｌ．（２００５）Ｐａｉｎ  １１６，８−１６；Ｄｅｌａｆｏｙ，Ｌ．ｅｔ  ａｌ．（２００３）Ｐａｉｎ  １０５，４８９−４９７；Ｌａｍｂ，Ｋ．ｅｔ  ａｌ．（２００３）Ｎｅｕｒｏｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ．Ｍｏｔｉｌ．１５，３５５−３６１；Ｊａｇｇａｒ，Ｓ．Ｉ．ｅｔ  ａｌ．（１９９９）Ｂｒ．Ｊ．Ａｎａｅｓｔｈ．８３，４４２−４４８）。加えて、文献では、炎症後、ＢＤＮＦレベルおよびＴｒｋＢ信号伝達が後根神経節で増加することが示され（Ｃｈｏ，Ｌ．ｅｔ  ａｌ．Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  １９９７，７４９，３５８）、いくつかの研究は、ＢＤＮＦ／ＴｒｋＢ経路を通る信号伝達を減少させる抗体がニューロンの過敏症および関連する疼痛を阻害することを示している（Ｃｈａｎｇ−Ｑｉ，Ｌ  ｅｔ  ａｌ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐａｉｎ  ２００８，４：２７）。ごく最近の記事では、ＴｒｋＡが癌および疼痛の有効な薬物標的であると報告されている（Ｎｏｒｍａｎ，Ｂ．Ｈ．ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．６０，６６−８８（２０１７））。さらに、ＴｒｋＡ阻害剤の疼痛抑制効果は、ｉｎ−ｖｉｔｒｏモデルで示されている（Ｎｗｏｓｕ，Ｌ．Ｎ．，ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｎ．Ｒｈｅｕｍ．Ｄｉｓ．ａｎｎｒｈｅｕｍｄｉｓ−２０１４−２０７２０３（２０１５）．ｄｏｉ：１０．１１３６／ａｎｎｒｈｅｕｍｄｉｓ−２０１４−２０７２０３；Ａｎｄｒｅｗｓ，Ｓ．Ｗ．，Ａｒｒａｙ  ｂｉｏｐｈａｒｍａ  Ａｖａｉｌａｂｌｅ  ａｔ：ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ａｒｒａｙｂｉｏｐｈａｒｍａ．ｃｏｍ／ｆｉｌｅｓ／６３１３／９８１０／８０２１／ＰｕｂＡｔｔａｃｈｍｅｎｔ５８７．ｐｄｆ）。最近の出版物は、機能喪失型ＴｒｋＡ変異体が先天性の疼痛に対する無感覚と関連していることを示している（Ｂａｋｒｉ，Ｆ．Ｇ．ｅｔ  ａｌ．Ｃｌｉｎ．Ｃａｓｅ  Ｒｅｐｏｒｔｓ  ４，９９７−１０００（２０１６））。
【００１０】
ＴｒｋＡおよびＴｒｋＢに対して非常に選択的である選択的Ｔｒｋチロシンキナーゼ阻害剤の報告はほとんどない。セファロンは、ＣＥＰ−７５１、ＣＥＰ−７０１（Ｇｅｏｒｇｅ，Ｄ．ｅｔ  ａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，１９９９，５９，２３９５−２４０１）およびＴｒｋ阻害剤として他のインドロカルバゾール類似体（ＷＯ０１１４３８０）について記載している。ＣＥＰ−７０１／７５１に関連するアルカロイドＫ２５２ａが膵炎のラットに注射されると、機械的過敏症を抑制できることが示された（Ｗｉｎｓｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐａｉｎ  ２００３，４，３２９）。
【００１１】
加えて、マクロファージに浸潤する腫瘍細胞は、末梢性疼痛線維上にあるＴｒｋＡを直接刺激することが示されている。マウスおよびラットの両方で様々な腫瘍モデルを使用して、モノクローナル抗体でＮＧＦを中和すると、モルヒネの最大許容用量と同等またはそれ以上の程度で癌関連の疼痛が阻害されることが実証された。加えて、ＢＤＮＦ／ＴｒｋＢ経路の活性化は、炎症性疼痛（Ｍａｔａｙｏｓｈｉ，Ｓ．，Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．２００５，５６９：６８５−９５）、神経因性疼痛（Ｔｈｏｍｓｏｎ，Ｓ．Ｗ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  １９９９，９６：７７１４−１８）、および外科的疼痛（Ｌｉ，Ｃ．−Ｑ．ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐａｉｎ，２００８，４（２８），１−１１）を含む様々なタイプの疼痛のモジュレータとして多くの研究に関係している。ＴｒｋＡおよびＴｒｋＢキナーゼは、ＮＧＦ駆動の生物学的応答のメディエータとして機能し得るため、ＴｒｋＡおよび／または他のＴｒｋキナーゼの阻害剤は、慢性疼痛状態の有効な治療を提供し得る。
【００１２】
最近の文献では、Ｔｒｋｓの過剰発現、活性化、増幅、および／または変異が、神経芽細胞腫（Ｂｒｏｄｅｕｒ，Ｇ．Ｍ．，Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｃａｎｃｅｒ  ２００３，３，２０３−２０１６）、卵巣癌（Ｄａｖｉｄｓｏｎ．Ｂ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．２００３９，２２４８−２２５９）、乳癌（Ｋｒｕｅｔｔｇｅｎ  ｅｔ  ａｌ，Ｂｒａｉｎ  Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ  ２００６，１６：３０４−３１０）、前立腺癌（Ｄｉｏｎｎｅ  ｅｔ  ａｌ，Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．１９９８，４（８）：１８８７−１８９８）、膵臓癌（Ｄａｎｇ  ｅｔ  ａｌ，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ  ２００６，２１（５）：８５０−８５８）、多発性骨髄腫（Ｈｕ  ｅｔ  ａｌ，Ｃａｎｃｅｒ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  ａｎｄ  Ｃｙｔｏｇｅｎｅｔｉｃｓ  ２００７，１７８：１−１０）、星状細胞腫および髄芽腫（Ｋｒｕｅｔｔｇｅｎ  ｅｔ  ａｌ，Ｂｒａｉｎ  Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ  ２００６，１６：３０４−３１０）、神経膠腫（Ｈａｎｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ２００７，２８（３）２２１−２２９）、肺腺癌（Ｐｅｒｅｚ−Ｐｉｎｅｒａ  ｅｔ  ａｌ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ａｎｄ  Ｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ２００７，２９５（１＆２），１９−２６）、大細胞神経内分泌腫瘍（Ｍａｒｃｈｅｔｔｉ  ｅｔ  ａｌ，Ｈｕｍａｎ  Ｍｕｔａｔｉｏｎ  ２００８，２９（５），６０９−６１６）、および結腸直腸癌（Ｂａｒｄｅｌｌｉ，Ａ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２００３，３００，９４９）を含む多くの癌に関連していることも示されている。癌の前臨床モデルでは、Ｔｒｋ阻害剤は、腫瘍成長の阻害および腫瘍転移の停止の両方に有効である。特に、Ｔｒｋ  Ａ、Ｂ、およびＣならびにＴｒｋ／Ｆｃキメラの非選択的小分子阻害剤は、腫瘍成長の阻害および腫瘍転移の停止の両方に有効であった（Ｎａｋａｇａｗａｒａ，Ａ．（２００１）Ｃａｎｃｅｒ  Ｌｅｔｔｅｒｓ  １６９：１０７−１１４；Ｍｅｙｅｒ，Ｊ．ｅｔ  ａｌ．（２００７）Ｌｅｕｋｅｍｉａ，１−１０；Ｐｉｅｒｏｔｔｉａ，Ｍ．Ａ．ａｎｄ  Ｇｒｅｃｏ  Ａ．，（２００６）Ｃａｎｃｅｒ  Ｌｅｔｔｅｒｓ  ２３２：９０−９８；Ｅｒｉｃ  Ａｄｒｉａｅｎｓｓｅｎｓ，Ｅ．ｅｔ  ａｌ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．（２００８）６８（２）３４６−３５１）（Ｔｒｕｚｚｉ  ｅｔ  ａｌ，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｖｅ  Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｙ  ２００８，１２８（８）：２０３１−２０４０。したがって、キナーゼのＴｒｋファミリーの阻害剤は、癌の治療に活用されると期待されている。
【００１３】
さらに、ニューロトロフィン／Ｔｒｋ経路の阻害は、炎症性疾患の前臨床モデルの治療に有効であることが示されている。例えば、ニューロトロフィン／Ｔｒｋ経路の阻害は、喘息を含む炎症性肺疾患の前臨床モデル（Ｆｒｅｕｎｄ−Ｍｉｃｈｅｌ，Ｖ；Ｆｒｏｓｓａｒｄ，Ｎ．；Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ＆Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ（２００８），１１７（１），５２−７６）、間質性膀胱炎（Ｈｕ  Ｖｉｖｉａｎ  Ｙ；ｅｔ．ａｌ．Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｕｒｏｌｏｇｙ（２００５），１７３（３），１０１６−２１）、潰瘍性大腸炎およびクローン病を含む炎症性腸疾患（Ｄｉ  Ｍｏｌａ，Ｆ．Ｆ，ｅｔ．ａｌ．，Ｇｕｔ（２０００），４６（５），６７０−６７８）、ならびにアトピー性皮膚炎などの炎症性皮膚疾患（Ｄｏｕ，Ｙ．−Ｃ．；ｅｔ．ａｌ．Ａｒｃｈｉｖｅｓ  ｏｆ  Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ（２００６），２９８（１），３１−３７）、湿疹および乾癬（Ｒａｙｃｈａｕｄｈｕｒｉ，Ｓ．Ｐ．；ｅｔ．ａｌ．Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｖｅ  Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｙ（２００４），１２２（３），８１２−８１９）に関係している。
【００１４】
炎症は、微生物または組織の損傷が、血管透過性の増加、内皮受容体のアップレギュレーション、そこから、周囲の組織に入る生得および適応免疫系の様々な細胞の排出の増加を生じさせる、様々な細胞型からのサイトカインおよびケモカインの放出を誘発するプロセスであり、炎症の古典的な事態、つまり発赤、腫れ、熱、および疼痛を著しく生じさせる。
【００１５】
炎症は、様々な内因性および外因性因子によってもたらされ得る、損傷による生きた組織の局所的な反応である。外因性因子には、物理的、化学的、および生物学的因子が含まれる。内因性因子には、炎症性メディエータ、抗原、および抗体が含まれる。内因性因子は、外因性損傷の影響下でしばしば発症する。しばしば、炎症反応に続いて、細胞膜の構造および浸透性が変化する。メディエータおよび抗原などの内因性因子は、炎症反応の性質およびタイプ、特に損傷領域でのその経過を定義する。組織損傷がメディエータの作成に限定されている場合、急性型の炎症が発症する。免疫反応もプロセスに関与している場合、抗原、抗体、および自己抗原の相互作用を通じて、長期的な炎症プロセスが発症する。様々な外因性因子、例えば、感染、損傷、および放射線は、生化学的反応を開始する細胞膜を損傷することによって、分子レベルでの炎症プロセスの経過を提供する。
【００１６】
疼痛状態の現在の治療計画は、非常に限定された範囲の薬理学的メカニズムを活用する化合物を利用する。化合物の１個のクラスであるオピオイドは、内因性エンドルフィン系を刺激する。モルヒネは、このクラスの例である。オピオイドクラスの化合物は、それらの使用を限定するいくつかの欠点、例えば、嘔吐および便秘の影響、ならびに呼吸能力への悪影響がある。それらの嗜癖の責任のためにそれらの使用も制限されている。ＣＯＸ−１またはＣＯＸ−２タイプの非ステロイド性抗炎症鎮痛剤である第２の主要クラスの鎮痛剤は、深刻な疼痛および炎症状態における不十分な有効性などの不利益もあり、長期間使用すると、ＣＯＸ−１阻害剤は、粘膜の潰瘍をもたらす。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１７】
したがって、疼痛および炎症状態の治療に有用な新しい活性剤が必要である。
【課題を解決するための手段】
【００１８】
本発明は、式（１）の化合物に関する。
【化１】
2021504462.tif 000003
（式中、
Ａ：それぞれ２〜４個の窒素原子および任意で１個の硫黄または酸素原子を含有する５員の単環式芳香族複素環または８〜１０員の二環式芳香族複素環であって、該環が、任意に（ａ）１個以上のＣ１−Ｃ４アルキルもしくはアルケニル基、または（ｂ）１個以上のハロゲンまたはモノもしくはポリハロゲン化Ｃ１−Ｃ４アルキルもしくはアルケニル基を含有する、Ｃ１−Ｃ４アルキルもしくはアルケニル基で任意に置換された５もしくは６員のアルキル環またはアルケニル環またはアリール環で置換された、５員の単環式芳香族複素環または８〜１０員の二環式芳香族複素環、
Ｂ：１個以上のハロゲンまたはモノもしくはポリハロゲン化Ｃ１−Ｃ４アルキルもしくはアルケニル基を含むＣ１−Ｃ４アルキルもしくはアルケニル基で任意に置換されたメチレン−アリールまたはアリール環
Ｃ：５〜１０個の環原子、とりわけ、好ましくはＮ、Ｏ、およびＳであり、必要に応じて、残基Ｒ§で１回、２回、または３回置換されている１〜５個のヘテロ原子を有する単環式または二環式、飽和または一価不飽和もしくは多価不飽和または芳香族複素環
Ｒ§：−ＯＨ、−ＳＨ、−Ｃ１−Ｃ４アルキル、−Ｏ−Ｃ１−８アルキル、−Ｏ−Ｃ６−１４アリール、−Ｓ−Ｃ１−４アルキル、−Ｓ−Ｃ６−１４アリール、−ＳＯ−Ｃ１−４アルキル、−ＳＯ−Ｃ６−１４アリール、−ＳＯ２−Ｃ１−４アルキル、−ＳＯ２−Ｃ６−１４アリール、−ＳＯ３Ｈ、−ＯＳＯ２Ｃ１−８アルキル、−ＯＳＯ２Ｃ６−１４アリール、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＯＣ１−８アルキル、−（ＣＯ）Ｃ１−８アルキル、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＮＨＣ１−６アルキル、−ＣＯＮ（Ｃ１−６アルキル）２、−ＮＨ２、−ＮＨＣ１−６アルキル、−Ｎ（Ｃ１−６アルキル）２、−ＮＨＣ６−１４アリール、−ＮＨ−ヘタリール、−Ｎ（Ｃ６−１４アリール）２、−Ｎ（Ｃ１−６アルキル）（Ｃ６−１４アリール）、−Ｃ１−６アルキル、−Ｃ２−１２アルケニル、ハロゲン、−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨ２ＣＨ２ＳＨ、−ＣＨ２ＣＨ２ＳＣＨ３、−スルファモイル、アルキルスルファモイル、ジアルキルスルファモイル、−スルホ、ホスホノ、−ＣＮ、−ＮＯ２および／または−ＳＣＮ、
ならびにこれらの化合物の薬学的に適合する塩、溶媒和物、活性代謝物、互変異性体、およびプロドラッグ）。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
本明細書で使用される場合、別段の指定がない限り、以下の定義が適用されるものとする。
【００２０】
「任意に置換された」という句は、「置換されたまたは非置換の」という句、または「（非）置換された」という用語と同義的に使用される。別段の指定がない限り、任意に置換された基は、その基の各置換可能な位置での置換基であり得、各置換基は、他から独立している。
【００２１】
「Ｃ１−Ｃ４アルキルまたはアルケニル」という用語は、非分岐および分岐の両方、ならびに飽和および不飽和の官能性脂肪族基を表す。特に、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、エテニル（ビニル）、プロペニル、またはブテニルを意味する。
【００２２】
「５または６員のアルキルまたはアルケニル環」は、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロペンテニル、またはシクロヘキセニルを意味する。アルキルまたはアルケニル環は、必要に応じて、１個もしくはいくつかのハロゲン置換基、またはそのモノもしくはポリハロゲン化誘導体を含むＣ１−Ｃ４アルキルもしくはアルケニル基で置換することができる。
【００２３】
「アリール」は、１〜５個のヘテロ原子（Ｎ、Ｏ、もしくはＳ）、好ましくは１、２、もしくは３個のヘテロ原子を有する複素芳香族系を含む、芳香族５〜６員の単環式炭素環式もしくは複素環式環系、または８〜１０員の二環式炭素環式もしくは複素環式環系を指す。
【００２４】
アリール環は、必要に応じて、１個もしくはいくつかのハロゲン置換基、またはそのモノもしくはポリハロゲン化誘導体を含むＣ１−Ｃ４アルキルもしくはアルケニル基で置換することができる。好ましいアリール基は、炭素環式環、例えば、フェニル、ベンジル、トリル、キシリル、またはナフチルである。好ましい「ヘテロ芳香環」または「ヘテロアリール」の例は、ピラジニル、ピリジニル、フラニル、チエニル、チアジニル、チオフェニル、ピリミジニル、イソキサゾリル、イソチアゾリル、オキサゾリル、チアゾリル、ピラゾリル、ピロリル、オキサジアゾリル、ピリジル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾチエニル、イミダゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、またはベンゾチアゾリルである。
【００２５】
「５員の単環式芳香族複素環または８〜１０員の二環式芳香族複素環は、それぞれ２〜４個、好ましくは２または３個の窒素原子および任意に１個の硫黄または酸素原子を含有する」は、例えば、イミダゾリル、ピラゾリル、トリアゾリル、ピラゾロ［１，５−］ピリジニル、ピラゾロピリミジニル、ベンゾイミダゾリル、イミダゾピリジニル、プリン、またはインドリル環を含む。
【００２６】
「ハロゲン」は、フッ素、塩素、臭素、またはヨウ素を意味する。
【００２７】
「モノまたはポリハロゲン化アルキルまたはアルケニル基」は、１個以上のハロゲン原子で置換されたアルキルまたはアルケニル基、例えば、ＣＨ２Ｆ、ＣＨＦ２、またはＣＦ３を意味する。
【００２８】
「５〜１４個の環原子、とりわけ、好ましくはＮ、Ｏ、およびＳであり、必要に応じて、残基Ｒ§で１回、２回、または３回置換されている１〜５個のヘテロ原子を有する単環式または二環式、飽和または一価不飽和もしくは多価不飽和または芳香族複素環」は、好ましくは以下の基：メチルピペラジニル、チエニル、ピリジニル、ピリミジニル、ピペラジニル、ピリジル、イソキサゾリル、ピペリジニル、ピラジニル、モルホリノ、ピロリル、トリアジニル、テトラゾリル、オキサゾリル、ベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソリル、インドリル、イミダゾリル、ピラゾリル、フラニルを含む。単環式または多環式芳香族複素環は、５〜１４個の環原子（「ヘテロアリール」または「ヘタリール」も示す）、好ましくは５〜１０個の環原子を有する環系を示し、１個以上の環原子は、炭素以外の元素、例えば、それ自体または組み合わせたＮ、Ｏ、またはＳである。好ましいヘテロアリールは、５または６個の環原子を含有する。ヘテロアリールは、必要に応じて、１個以上の環系で置換されてもよい。好適なヘテロアリールの例は、上述されている。
【００２９】
本発明の意味において、すべての残基は、残基の定義において別段の記載がない限り、互いに結合可能であると見なされる。その考えられるすべてのサブグループは、開示されていると見なされる。
【００３０】
本発明はまた、一般式（１）の化合物の生理学的に適合する塩に関する。生理学的に適合する塩は、通常通り、一般式（１）の塩基性化合物と無機または有機の塩または酸との反応により、および無機または有機の塩基による中和により得られる。塩酸、硫酸、硝酸、または臭化水素酸は、無機酸として好ましく使用され、例えば、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、乳酸、アミグダル酸、酒石酸、リンゴ酸、クエン酸、マロン酸、マレイン酸、フマル酸、コハク酸、アルギン酸、安息香酸、２−、３−、および４−アルキルオキシおよびアシルオキシ安息香酸、アスコルビン酸、Ｃ１−Ｃ３アルキルスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ニコチン酸、イソニコチン酸、ならびにアミノ酸は、有機酸としては使用される。例えば、アンモニア、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム溶液は、無機塩基として使用され、アルキルアミン、ピリジン、キノリン、イソキノリン、ピペラジン、およびそれらの誘導体、ならびにピコリン、キナルジン、またはピリミジンは、有機塩基として使用される。加えて、一般式（１）による化合物の生理学的に適合する塩は、ハロゲン化アルキルまたはハロゲン化アラルキルなどのアルキル化剤を用いて、基本的に既知の方法で置換基として３級アミノ基を有する物質を対応する四級アンモニウム塩に変換することによって得ることができる。
【００３１】
本発明はまた、薬学的に許容される塩、酸、塩基、およびエステルならびにそれらの活性代謝物を含む化合物の溶媒和物、および必要に応じて、プロドラッグ製剤を含む一般式（１）によるそれらの互変異性体に関する。ここでのプロドラッグ製剤は、酵素的、代謝的、または任意の他の方法での加水分解、酸化、または還元を含む単純な変換によって形成されるすべての物質を含む。好適なプロドラッグは、例えば、酵素的に切断可能なリンカー（例えば、カルバマート、ホスファート、Ｎ−グリコシド、またはジスルフィド基）を介して溶解改善物質（例えば、テトラエチレングリコール、糖類、ギ酸、またはグルクロン酸など）に結合した一般式（１）の物質を含有する。本発明による化合物のそのようなプロドラッグは、患者に適用することができ、このプロドラッグは、所望の薬理学的効果を得るために一般式（１）の物質に変換することができる。
【００３２】
「薬学的に許容される」という用語は、物質または組成物が、化学的および／もしくは毒物学的に、製剤を含む他の成分、ならびに／またはそれで治療される哺乳動物と適合することを示す。
【００３３】
本発明は、上記で定義した式（１）の化合物またはその薬学的に許容できる塩を含む医薬組成物をさらに提供する。一実施形態では、医薬組成物は、式（１）の化合物を、薬学的に許容できる賦形剤、希釈剤、または担体と一緒に含む。
【００３４】
本発明は、療法に使用するための式（１）の化合物またはその薬学的に許容できる塩をさらに提供する。
【００３５】
本発明による化合物は、異なる方法、例えば、局所的、経口的、非経口的、皮膚的、皮下的、静脈内、筋肉内、直腸内、または吸入により投与することができる。経口または静脈内投与が好ましい。化合物は、医師によって決定される期間にわたって、本発明による化合物の適応スペクトルに入る疾患のための療法を必要とする患者に与えられる。この化合物は、ヒトおよび他の哺乳動物の両方に投与することができる。
【００３６】
本発明による化合物の投与量は、年齢、体重、性別、疾患の重症度などのような患者固有のパラメータに基づいて医師によって決定される。投与量は、好ましくは０．００１ｍｇ／ｋｇ〜１０００ｍｇ／ｋｇ体重、好ましくは０．００１〜５００ｍｇ／ｋｇ体重、最も好ましくは０．００１〜１００ｍｇ／ｋｇ体重である。
【００３７】
投与の種類に対応して、医薬品は、好適には、例えば、溶液または懸濁液、単純な錠剤またはドラジェ、硬質または軟質のゼラチンカプセル、坐剤、卵巣、注射用製剤の形態で処方され、これらは、一般的な生薬法に従って調製される。
【００３８】
本発明による化合物は、必要に応じて、さらなる活性物質および医薬組成物に一般的な賦形剤、例えば−製造する製剤に応じて−タルカム、アラビアゴム、ラクトース、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、カカオバター、水性および非水性担体、動物または植物由来の脂肪体、パラフィン誘導体、グリコール（特にポリエチレングリコール）、様々な可塑剤、分散剤または乳化剤、薬学的に適合するガス（例えば、空気、酸素、二酸化炭素など）、防腐剤と一緒に処方することができる。
【００３９】
液体製剤を製造するために、塩化ナトリウム溶液、ＤＳＭＯ、エタノール、アセトン、ソルビトール、グリセリン、オリーブ油、アーモンド油、プロピレングリコール、またはエチレングリコールなどの添加剤および／もしくは溶媒を使用することができる。例えば、ＤＭＳＯは、有機溶媒であり、スルホキシドのクラスに属する。水および様々な有機溶媒と任意の比率で混和性である。ＤＭＳＯは、薬効（消炎作用および鎮痛作用）を特徴とする。
【００４０】
本発明のいくつかの化合物が溶解度が低く、（高度に）疎水性であることが認識されているため、可溶化剤が有用であり得る。可溶化剤は、非イオン性界面活性物質（界面活性剤）である。本発明によれば、好ましい可溶化剤は、ＰＥＧ水和ヒマシ油（Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ（登録商標）シリーズ）、Ｄ−トコフェロールポリエチレングリコール１０００−スクシナート（Ｋｏｌｌｉｐｈｏｒ（登録商標）ＴＰＧＳ）、ポリソルベート２０（Ｔｗｅｅｎ（登録商標）２０）、ポリソルベート８０（Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０）、ポリオキシエチル化１２−ヒドロキシステアリン酸（Ｋｏｌｌｉｐｈｏｒ（登録商標）ＨＳ  １５；Ｓｏｌｕｔｏｌ（登録商標）ＨＳ１５）、ソルビタンモノオレアート（Ｓｐａｎ（登録商標）２０）、ポロキサマー４０７（Ｋｏｌｌｉｐｈｏｒ（登録商標）Ｐ  ４０７）、ポロキサマー１８８（Ｋｏｌｌｉｐｈｏｒ（登録商標）Ｐ  １８８）、ＰＥＧ  ３００カプリル酸／カプリングリセリド（Ｓｏｆｔｉｇｅｎ（登録商標）７６７）、ＰＥＧ  ４００カプリル酸／カプリングリセリド（Ｌａｂｒａｓｏｌ（登録商標））、ＰＥＧ  ３００オレイン酸グリセリド（Ｌａｂｒａｆｉｌ（登録商標）Ｍ−１９４４ＣＳ）、ＰＥＧ  ３００リノール酸グリセリド（Ｌａｂｒａｆｉｌ（登録商標）Ｍ−２１２５ＣＳ）、ラウロイルポリオキシグリセリド（Ｇｅｌｌｕｓｉｒｅ（登録商標）４４／１４）、１，２，３−プロパントリオールオクタノアートを含むｎ−デカン酸エステル（Ｓｏｆｔｉｇｅｎ（登録商標）７６７）、ＰＥＧ  ３３０、４００、または１７５０のモノもしくはジ脂肪酸エステルから選択される。
【００４１】
ＰＥＧ水和ヒマシ油の市販製品は、例えば、ＰＥＧ７、ＰＥＧ２５、ＰＥＧ３５、ＰＥＧ４０、ＰＥＧ５０、およびＰＥＧ６０：Ｃｒｏｄｕｒｅｔ（商標）２５（Ｃｒｏｄａ）、Ｃｒｏｄｕｒｅｔ（商標）４０（Ｃｒｏｄａ）、Ｃｒｏｄｕｒｅｔ（商標）５０（Ｃｒｏｄａ）、Ｃｒｏｄｕｒｅｔ（商標）６０（Ｃｒｏｄａ）、Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ（登録商標）ＲＨ  ４０（ＢＡＳＦ）、Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ（登録商標）ＲＨ  ６０（ＢＡＳＦ）、Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ（登録商標）ＲＨ  ４１０（ＢＡＳＦ）、Ｋｏｌｌｉｐｈｏｒ  ＥＬまたはＣｒｅｍｏｐｈｏｒ  ＥＬ（ＢＡＳＦ）、Ｅｍｕｌｇｉｎ（登録商標）ＨＲＥ  ４０（ＢＡＳＦ）、Ｅｍｕｌｇｉｎ（登録商標）ＨＲＥ  ４５５（ＢＡＳＦ）、およびＥＭＡＲＯＬ  Ｈ４０（ＣＩＳＭＥ、イタリア）に基づいて知られている。本発明によれば、ＰＥＧ３５水和ヒマシ油（Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ（登録商標）ＥＬ）が特に好適である。
【００４２】
注入または注射用の溶液が使用される場合、それらは、好ましくは水溶液または懸濁液であり、例えば、活性物質それ自体、またはマンニトール、ラクトース、グルコース、アルブミンなどのような担体と一緒に含有する凍結乾燥した製剤から使用前にそれらを製造することが可能である。既製の溶液は、滅菌され、必要に応じて、賦形剤、例えば、浸透圧を調整するための防腐剤、安定剤、乳化剤、可溶化剤、緩衝液、および／または塩と混合される。滅菌は、必要に応じて、組成物を凍結乾燥できる小さな孔径を有するフィルタを使用した滅菌濾過により得ることができる。確実に無菌状態を維持するために、少量の抗生物質を追加することもできる。
【００４３】
さらに、吸入組成物は、例えば、エアロゾル、スプレーの形態で、または微粉化粉末として、好ましくは製造される。この目的のために、本発明による化合物は、薬学的に従来の溶媒中に溶解または懸濁され、特定の容量の過剰圧力により微粉化され、吸入される。手順は、同様に、吸入される固形物質で行われ、過剰な圧力によって微粉化され、吸入される。過剰な圧力によって作動する他のアプリケータもここに含まれる。
【００４４】
本発明は、治療上有効量の有効成分（式（１）の本発明による化合物）を、意図した投与に適し、欠点なく有効成分と相互作用する有機または無機の固体または液体の薬学的に適合する担体と一緒に含有する医薬製剤にも関する。
【００４５】
式（１）の化合物は、新規であると考えられ、本発明のさらなる態様として提供される。
【００４６】
本発明の化合物がＴｒｋＡ阻害剤として作用する能力は、本出願の例におけるアッセイにより実証されている。
【００４７】
ＴｒｋＡの阻害剤である特定の化合物は、炎症性疼痛、神経因性疼痛、ならびに癌、手術、および骨折に関連する疼痛を含む複数のタイプの疼痛の治療に特に有用である。
【００４８】
一実施形態では、式（１）の化合物は、哺乳動物の慢性および急性疼痛を含む疼痛の治療に有用である。
【００４９】
国際疼痛学会によって定義された急性疼痛は、疾患、炎症、または組織の損傷に起因する。このタイプの疼痛は、一般に、例えば、外傷または手術後に突然起こり、不安またはストレスを伴うことがある。原因は、通常、診断および治療でき、疼痛は、所与の期間および重症度に限られる。まれに、慢性化する可能性もある。
【００５０】
国際疼痛学会によって定義された慢性疼痛は、疾患自体を表すと広く考えられている。それは、環境的および心理的要因によってさらに悪化する可能性がある。慢性疼痛は、急性疼痛よりも長期間持続し、ほとんどの医療治療に耐性があり、一般に３か月以上持続する。慢性疼痛は、患者に深刻な問題を引き起こす可能性があり、しばしば引き起こしている。
【００５１】
式（１）の化合物はまた、哺乳動物における癌の治療または予防に有用である。治療または予防される癌のタイプの例は、膵臓腫瘍、前立腺腫瘍、肺腫瘍、腎臓腫瘍、膀胱腫瘍、肝腫瘍、リンパ腫、白血病（例、骨髄性白血病）、食道腫瘍、卵巣腫瘍、口腔腫瘍、甲状腺腫瘍、子宮頸部腫瘍、頭頸部腫瘍、乳房腫瘍、神経芽細胞腫、胃腫瘍、結腸腫瘍、脳腫瘍（例えば、膠芽腫または髄芽腫）、および皮膚腫瘍（例えば、黒色腫）である。
【００５２】
式（１）の化合物はまた、哺乳動物の炎症を治療するために有用である。
【００５３】
したがって、本発明はさらに、哺乳動物の疼痛を治療または予防する方法であって、該哺乳動物に、該疼痛を治療または予防するのに有効な量の式（１）の１個以上の化合物またはその薬学的に許容できる塩を投与することを含む、方法に関する。一実施形態では、疼痛は、慢性疼痛である。一実施形態では、疼痛は、急性疼痛である。一実施形態では、疼痛は、炎症性疼痛である。一実施形態では、疼痛は、神経因性疼痛である。一実施形態では、疼痛は、癌に関連する疼痛である。一実施形態では、疼痛は、手術に関連する疼痛である。一実施形態では、疼痛は、骨折に関連する疼痛である。一実施形態では、本方法は、哺乳動物の該疼痛を治療する方法を含む。一実施形態では、本方法は、哺乳動物の該疼痛を予防する方法を含む。
【００５４】
本発明はさらに、哺乳動物における炎症を治療または予防する方法であって、該哺乳動物に、該炎症を治療または予防するのに有効な量の式（１）の１個以上の化合物またはその薬学的に許容できる塩を投与することを含む、方法に関する。一実施形態では、本方法は、哺乳動物における該炎症を治療する方法を含む。一実施形態では、本方法は、哺乳動物における該炎症を予防する方法を含む。
【００５５】
本発明はさらに、哺乳動物における癌を治療または予防する方法であって、該哺乳動物に、該癌を治療または予防するのに有効な量の式（１）の１個以上の化合物またはその薬学的に許容できる塩を投与することを含む、方法に関する。
【００５６】
一実施形態では、本方法は、哺乳動物における該癌を治療する方法を含む。一実施形態では、本方法は、哺乳動物における該癌を予防する方法を含む。
【００５７】
式（１）の化合物は、単独療法として単独で投与されてもよく、または同じもしくは異なる作用機序により作動する１個以上の他の物質および／または治療に加えて投与することができる。例としては、抗炎症性化合物、ステロイド（例えば、デキサメタゾン、コルチゾン、およびフルチカゾン）、ＮＳＡＩＤなどの鎮痛剤（例えば、アスピリン、イブプロフェン、インドメタシン、およびケトプロフェン）、ならびにオピオイド（モルヒネなど）、ならびに化学療法薬が含まれる。これらの薬剤は、式（１）の１個以上の化合物とともに、同じまたは別々の剤形の一部として、同じまたは異なる投与経路を介して、および当業者に既知の標準的な薬務に従って同じまたは異なる投与スケジュールで投与され得る。
【００５８】
医学腫瘍学の分野では、各癌患者を治療するために、異なる治療形態の組み合わせを使用することが通常の慣行である。医学腫瘍学では、本発明の組成物に加えて、そのような併用治療の他の構成成分は、例えば、手術、放射線療法、化学療法、信号伝達阻害剤、および／またはモノクローナル抗体であり得る。
【００５９】
したがって、式（１）の化合物は、有糸分裂阻害剤、アルキル化剤、代謝拮抗剤、アンチセンスＤＮＡまたはＲＮＡ、挿入抗生物質、成長因子阻害剤、信号伝達阻害剤、細胞周期阻害剤、酵素阻害剤、レチノイド受容体モジュレータ、プロテアソーム阻害剤、トポイソメラーゼ阻害剤、生物学的応答修飾剤、抗ホルモン、血管新生阻害剤、細胞増殖抑制剤、抗アンドロゲン、標的抗体、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤、およびプレニルタンパク質トランスフェラーゼ阻害剤から選択される１個以上の薬剤と組み合わせて投与され得る。これらの薬剤は、式（１）の１個以上の化合物とともに、同じまたは別々の剤形の一部として、同じまたは異なる投与経路を介して、および当業者に既知の標準的な薬務に従って同じまたは異なる投与スケジュールで投与され得る。
【００６０】
本明細書で使用される場合、「治療する」または「治療」という用語は、治療的、予防的、緩和的、または防止的手段を指す。有益なまたは望ましい臨床結果には、検出可能か検出不能かにかかわらず、症状の軽減、疾患の程度の減少、疾患の状態の安定化（つまり、悪化しない）、疾患の進行の遅延または減速、疾患状態の改善または緩和、および寛解（部分的または全体的）が含まれるが、これらに限定されない。「治療」は、治療を受けない場合に予想される生存と比較して生存を引き延ばすことも意味し得る。治療を必要とする人には、すでにその状態であるか
障害を患っている人、ならびにその状
態であるか障害を起こしやすい人、またはその状態もしくは障害が予防されるべき人が含まれる。
【００６１】
一実施形態では、本明細書で使用される「治療」または「治療すること」という用語は、本明細書に記載の障害または状態（例えば、炎症性疼痛、神経因性疼痛、ならびに癌、手術、および骨折に関連する疼痛を含む複数のタイプの疼痛）に関連する症状の全体もしくは一部の軽減、またはこれらの症状のさらなる進行もしくは悪化の減速もしくは休止を意味する。
【００６２】
一実施形態では、本明細書で使用される「予防すること」という用語は、本明細書に記載の疾患または状態（例えば、炎症性疼痛、神経因性疼痛、ならびに癌、手術、および骨折に関連する疼痛を含む複数のタイプの疼痛）またはそれらの症状の全体または一部の発症、再発、または拡大の防止を意味する。
【００６３】
「有効量」および「治療有効量」という用語は、そのような治療を必要とする哺乳動物に投与した場合、（ｉ）特定の疾患、状態、もしくは障害を治療もしくは予防する、（ｉｉ）特定の疾患、状態、もしくは障害の１個以上の症状を減衰、改善、もしくは排除する、または（ｉｉｉ）本明細書に記載の特定の疾患、状態、もしくは障害の１個以上の症状の発症を防止もしくは遅延するのに十分な化合物の量を指す。そのような量に対応する式（１）の化合物の量は、特定の化合物、疾患状態、およびその重症度、治療を必要とする哺乳動物の同一性（例えば、体重）などの要因に応じて変動するが、それにもかかわらず、当業者は日常的に決定することができる。
【００６４】
本明細書で使用される場合、「哺乳動物」という用語は、本明細書に記載の疾患を有するか、または発症するリスクがある温血動物を指し、モルモット、イヌ、ネコ、ウマ、ウシ、ラット、マウス、ハムスター、およびヒトを含む霊長類を含むが、これらに限定されない。
【００６５】
式（１）による好ましい化合物は、以下である：
【表１】
2021504462.tif 000004
【表２】
2021504462.tif 000005
本発明による特に好ましい化合物は、以下である：
【化２】
2021504462.tif 000006
【００６６】
特に好ましいのは、ａ１（Ｎ−［５−（３−フルオロフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］−６−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−（フェニルスルファニル）ピリミジン−４−アミン）である。これは、上記の式（１）によれば、置換基Ａが（３−フルオロフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−イルであり、Ｂがフェニルであり、Ｃがメチルピペラジニルであることを意味する。
【化３】
2021504462.tif 000007
【００６７】
完全を期すために、式（１）の化合物に関連して上で与えられたすべての一般的な定義が、もちろん、それぞれの個々の好ましい化合物にも適用されることが言及されている。したがって、式（１）の化合物が言及される場合、前述の好ましい化合物のそれぞれも含まれる。
【００６８】
臨床試験の化合物は、例えば、多くの化合物が複数の分子標的を阻害し、これまでに知られていないか無視されているメカニズムを介して治療効果をもたらす可能性があるため、新薬設計の取り組みを開始するための豊富な情報源を提供する。この考えに従って、本発明者らは、臨床試験に入ったすべてのキナーゼおよび対応する阻害剤を採掘し、選択性決定機能（選択的化合物の合理的な設計のための重要な要素）に関してそれぞれのタンパク質結合部位を分析した。これらの分析に基づいて、標的化合物ペアのトロポミオシン受容体キナーゼＡ（ＴｒｋＡ）およびトザセルチブが、改良されたＴｒｋＡ阻害剤の設計の出発点として選択された。トザセルチブ（考案者：Ｖｅｒｔｅｘ  Ｐｈａｒｍａ）は、オーロラキナーゼＡ（ＡｕｒＡ）の臨床試験中であるが、癌および疼痛の有効な薬物標的であるＴｒｋＡも阻害している。しかしながら、ＴｒｋＡに対するトザセルチブの選択性は、それほど高くなく、その使用はいくつかの深刻な副作用、例えば、好中球減少症、下痢、粘膜炎を伴う。これらの副作用に沿って、ＡｕｒＡの阻害には好中球減少症および血液毒性などの一般的な副作用がある（Ｆａｌｃｈｏｏｋ，Ｇ．Ｓ．，Ｂａｓｔｉｄａ，Ｃ．Ｃ．＆Ｋｕｒｚｒｏｃｋ，Ｒ．Ａｕｒｏｒａ  ｋｉｎａｓｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｉｎ  ｏｎｃｏｌｏｇｙ  ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｔｒｉａｌｓ：Ｃｕｒｒｅｎｔ  ｓｔａｔｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｐｒｏｇｒｅｓｓ．Ｓｅｍｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．４２，８３２−８４８（２０１５））。したがって、本発明者らは、癌標的としてＡｕｒＡに対してもともと開発されたトザセルチブの選択性を、疼痛標的ＴｒｋＡに対して切り替えることを決定した。
【００６９】
改良されたＴｒｋＡ阻害剤自体の設計は、独自のｄｅ  ｎｏｖｏ設計プラットフォームと、独自のｉｎ  ｓｉｌｉｃｏツールによっても予測された選択性および活性の側面を考慮した多目的選択方式とを併用することで達成された。最初に、ＴｒｋＡ構造の選択性を決定する機能は、「選択性グリッド」と呼ばれる新規のアプローチによって識別され（上でも言及）、いくつかのＴｒｋＡ、Ａｕｒｏｒａ  ＡおよびＢ構造の原子系相互作用エネルギーグリッドは、標的固有のサブポケットの１個のコンテンツに富んだ表現に融合された。このステップでは、化合物の最適化のための３つの目的領域を強調した：ＴｒｋＡ選択性の２個の好ましい疎水性サブポケットがゲートキーパ残基に隣接して識別され、ＤＦＧモチーフのＡｓｐ残基とグリシンに富んだループ（Ｇ−ループ）のＰｈｅ残基との間に囲まれ、それぞれ、トザセルチブのシクロプロピル部分と重複するＴｒｋＡ選択性の１個の好ましくないポケットが識別された。識別された選択性決定領域は、その後、式１の２個の関数グループＡおよびＢが市販のドラッグライクフラグメントおよび逆合成ルールを使用して列挙される化合物ライブラリの設計を導いた。結果として得られたライブラリは、選択的で活性の高い化合物をフィルタリングする多目的化合物選択スキームを使用して優先順位を付けた。フィルタリングプロセスの主要な側面には、Ｉ）化合物の最終的な選択がスコアリングランクに基づいて自動化された様式（つまり、合成可能性基準の他にいかなる手動による選択なしで）で得られたこと、およびＩＩ）ＡｕｒＡに加えて高度に保存された大きな標的クラスのキナーゼが、主要なオフターゲットとして考慮されたことが含まれた。
【００７０】
詳細には、多目的化合物選択スキームには以下のステップが含まれた。まず、化合物の結合ポーズは、ドッキング計算によって生成した。ドッキングスコアが低い、配向が間違っている、またはキーの相互作用がないため、化合物を除去した。次のステップで、好ましくない選択性プロファイルを有する化合物を濾別した。これは、機械学習ベースの活動予測モデル（Ｍｅｒｇｅｔ，Ｂ．，Ｔｕｒｋ，Ｓ．，Ｅｉｄ，Ｓ．，Ｒｉｐｐｍａｎｎ，Ｆ．＆Ｆｕｌｌｅ，Ｓ．Ｐｒｏｆｉｌｉｎｇ  ｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｋｉｎａｓｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ：Ｔｏｗａｒｄ  ｔｈｅ  ｖｉｒｔｕａｌ  ａｓｓａｙ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．６０，４７４−４８５（２０１７））を介して達成され、これはＩ）無差別な化合物（つまり、２０キナーゼ以上に対して５００ｎＭのＩＣ５０で活性であると予測された）を除去するため、およびＩＩ）オーロラＡ、Ｂ、またはＣキナーゼに対して高活性（ＩＣ５０＜１０ｎＭ）であると予測される化合物を使用した。選択性フィルタリングは、ドッキングソリューションのスコアリングにＴｒｋＡ−Ａｕｒｏｒａの「選択性グリッド」を採用する構造ベースの手順によって補完した。残りの化合物は、２個の補完的な機械学習（ＭＬ）技術を使用して、最終的に高活性化合物に優先順位を付けた。Ｉ）すべての化合物は、フラグメントベースの一致分子ペア（ＭＭＰ）でトレーニングされ、化合物の活性の差を定量化する「ＭＭＰ／ＭＬ」アプローチによって評価した（Ｔｕｒｋ，Ｓ．，Ｍｅｒｇｅｔ，Ｂ．，Ｒｉｐｐｍａｎｎ，Ｆ．＆Ｆｕｌｌｅ，Ｓ．Ｃｏｕｐｌｉｎｇ  Ｍａｔｃｈｅｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐａｉｒｓ  ｗｉｔｈ  Ｍａｃｈｉｎｅ  Ｌｅａｒｎｉｎｇ  ｆｏｒ  ｖｉｒｔｕａｌ  ｃｏｍｐｏｕｎｄ  ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ，ｄｏｉ：１０．１０２１／ａｃｓ．ｊｃｉｍ．７ｂ００２９８）。ＩＩ）加えて、Ｐｈｅゲートキーパと相互作用する化合物は、ハイブリッドＱＭ／ＭＬパイプラインによってさらに評価した。このパイプラインは、高レベルの量子力学（ＱＭ）計算でトレーニングされ、リガンド−ゲートキーパの相互作用を定量化し、結合ポケット全体を考慮に入れて、フラグメント分子軌道計算を用いて第２のステップで上位ヒットを再スコアリングする。化合物の最終的な選択は、スコアリングランクに基づいて自動化された様式で得た（つまり、合成可能性基準の他にいかなる手動で選択することもなく）。全体として、採用されたパイプラインは、開始化合物であるトザセルチブと比較して、キノーム全体の選択性プロファイルが改良された新しい化合物シリーズのＴｒｋＡ阻害剤をもたらした。最も好ましい化合物ａ１は、ＴｒｋＡ（ｐＫｄ＝８．６）で非常に活性が高く、ナノモルの細胞効力（２６ｎＭ）およびキノームパネルで高い選択性を有する（選択性スコア＝０．０８＠１００ｎＭおよび活性遮断として３５％ｃｔｒｌ未満）（表１〜４）。これは、トザセルチブのシクロプロピルカルボキサミドテールを除去し、アミノ−５−メチルピラゾールを修飾することで達成された（ベストヒット：ａ１およびａ４）。
【００７１】
５員または６員のアルキル環またはアルケニルもしくはアリール環での置換（例えば、ａ１に存在するフッ素を介する）は、ＴｒｋＡ対ＡｕｒＡの選択性を達成するための重要なステップのようである。トザセルチブの類似体は、これまでのところ疼痛の治療に採用されていない。部分Ｂ（つまり、Ｎ−（４−アミノチオフェン）シクロプロピルカルボキサミド）を修飾すると、２個のヒット（ｂ７およびｂ８）が生じたが、ａ１と比較してキノームの選択性は低くなった。
【００７２】
特に好ましい化合物ａ１は、マウスでの薬物動態評価に供した。製剤は、ＤＭＳＯ中化合物ａ１をＣｒｅｍｏｐｈｏｒ（登録商標）シリーズ（例えば、Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ（登録商標）ＥＬ）の可溶化剤およびＮａＣｌと一緒に含有していた。これに関して、例６ならびに図２および図３を参照する。実験では、化合物ａ１が有毒であり得る特定の予想にもかかわらず、どの動物もいかなる有毒な兆候も示さなかったことが明確に示されている。したがって、少なくとも化合物ａ１が、今後の臨床試験の好適な候補であり得ることを結論付けた。
【図面の簡単な説明】
【００７３】
本発明は、以下を示す図に関してさらに説明される：
【図１】トザセルチブ類似体の一般的な合成経路
【実施例】
【００７４】
本発明は、本発明を限定すると解釈されない以下の例でさらに説明される。
例１：改良されたＴｒｋＡ活性を有するトザセルチブおよびトザセルチブ類似体の調製方法
トザセルチブ（ａ−ｄ）およびトザセルチブ類似体（Ｂ：ａ、ｅ−ｇ、Ａ：ａ、ｈ−ｊ）の調製の一般的な合成経路を図１に示す。
【００７５】
試薬および条件：（ａ）３−クロロペルオキシ安息香酸、ＤＣＭ、室温、３時間；（ｂ）Ｎ−（４−メルカプトフェニル）シクロプロパンカルボキサミド、ＴＥＡ、ＣＨ３ＣＮ、８０℃、３〜１０時間；（ｃ）５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−アミン、ＤＩＰＥＡ、ＤＭＦ、９５℃、１６時間；（ｄ）アミン（１−メチルピペラジンまたはモルホリン）、ＤＭＦ、ＤＩＰＥＡ、９０℃、６〜１２時間、（ｅ）対応するチオール、ＴＥＡ、ＣＨ３ＣＮ、８０℃、３〜１０時間；（ｆ）５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−アミン、ＤＩＰＥＡ、ジオキサン、９５℃、３〜６時間、（ｇ）アミン（１−メチルピペラジンまたはモルホリン）、ＤＭＦ、ＤＩＰＥＡ、９０℃、６〜１２時間；（ｈ）チオフェノール、ＴＥＡ、ＴＨＦ、５０℃；（ｉ）対応するアミン、ＤＩＰＥＡ、ジオキサン、９５℃、３〜６時間；（ｊ）アミン（１−メチルピペラジンまたはモルホリン）、ＤＭＦ、ＤＩＰＥＡ、９０℃、６〜１２時間。
【００７６】
化合物の構造およびバッチ純度（９０％以上）は、標準的な分析方法（ＬＣ／ＭＳおよびＮＭＲ）を使用して確認されている。
【００７７】
分析データ（ＮＭＲおよびＬＣ／ＭＳ）
トザセルチブ：Ｎ−［４−（｛４−［（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）アミノ］−６−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−２−イル｝スルファニル）フェニル］シクロプロパンカルボキサミド
【数１】
2021504462.tif 000008
参照２：Ｎ−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−６−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−（フェニルスルファニル）−ピリミジン−４−アミン
【数２】
2021504462.tif 000009
ａ１：Ｎ−［５−（３−フルオロフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］−６−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−（フェニルスルファニル）ピリミジン−４−アミン
【数３】
2021504462.tif 000010
ａ３：６−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−（フェニルスルファニル）−Ｎ−｛ピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−２−イル｝ピリミジン−４−アミン
【数４】
2021504462.tif 000011
ａ４：Ｎ−（５−シクロペンチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−６−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−（フェニルスルファニル）ピリミジン−４−アミン
【数５】
2021504462.tif 000012
ａ８：Ｎ−（５−ｔｅｒｔ−ブチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−６−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−（フェニルスルファニル）ピリミジン−４−アミン
【数６】
2021504462.tif 000013
ｂ１：２−［（２，５−ジメチルフェニル）スルファニル］−Ｎ−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−６−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−４−アミン
【数７】
2021504462.tif 000014
ｂ２：２−｛［（２，５−ジメチルフェニル）メチル］スルファニル｝−Ｎ−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−６−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−４−アミン
【数８】
2021504462.tif 000015
ｂ３：２−｛［（３，４−ジメチルフェニル）メチル］スルファニル｝−Ｎ−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−６−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−４−アミン
【数９】
2021504462.tif 000016
ｂ４：Ｎ−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−２−［（３−メチルフェニル）スルファニル］−６−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−４−アミン
【数１０】
2021504462.tif 000017
ｂ５：Ｎ−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−６−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−｛［３−（トリフルオロメチル）フェニル］スルファニル｝ピリミジン−４−アミン
【数１１】
2021504462.tif 000018
ｂ６：Ｎ−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−６−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−［（ナフタレン−１−イルメチル）スルファニル］ピリミジン−４−アミン
【数１２】
2021504462.tif 000019
ｂ７：２−｛［（４−フルオロフェニル）メチル］スルファニル｝−Ｎ−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−６−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−４−アミン
【数１３】
2021504462.tif 000020
ｂ８：Ｎ−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−２−｛［（４−メチルフェニル）メチル］スルファニル｝−６−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−４−アミン
【数１４】
2021504462.tif 000021
ｂ９：２−［（２，４−ジメチルフェニル）スルファニル］−Ｎ−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−６−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−４−アミン
【数１５】
2021504462.tif 000022
【００７８】
例２：一次スクリーニング
化合物は、ＤｉｓｃｏｖｅｒＸ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｆｒｅｍｏｎｔ，ＣＡ，ＵＳＡ（ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ｄｉｓｃｏｖｅｒｘ．ｃｏｍ／ｓｅｒｖｉｃｅｓ／ｄｒｕｇ−ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ−ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ−ｓｅｒｖｉｃｅｓ／ｋｉｎａｓｅ−ｐｒｏｆｉｌｉｎｇ／ｋｉｎｏｍｅｓｃａｎ）からのＫＩＮＯＭＥｓｃａｎ技術を使用して、ＴｒｋＡ（１０および１００ｎＭ）ならびにＡｕｒＡ（１００ｎＭおよび１μＭ）に対する一次スクリーニングでまずテストした。
【００７９】
結果は、対照の％（％Ｃｔｒｌ．＝（テスト化合物信号−陽性対照信号）／（ＤＭＳＯ信号−陽性対照信号））として報告した。ＫＩＮＯＭＥｓｃａｎは、固定化された活性部位向けリガンドと競合する化合物の能力を定量的に測定する活性部位向け競合結合アッセイである。
【表３】
2021504462.tif 000023
【化４】
2021504462.tif 000024
【００８０】
参照２は、トザセルチブと比較して、ＡｕｒＡに対する改良された選択性（つまり、ΔΔｐＫｄ＝１；表２）を有し、化合物部分Ａの修飾に加えて、シクロプロピルカルボキサミドテールの除去の寄与を示している。
【００８１】
例３：Ｋｄ測定
Ｋｄの測定は、ＫＩＮＯＭＥｓｃａｎ技術も採用するＤｉｓｃｏｖｅｒＸ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ（Ｆｒｅｅｍｏｎｔ，ＣＡ，ＵＳＡ）からのＫｄＥＬＥＣＴ製品サービスを介して行った。ここで、阻害剤結合定数（Ｋｄ値）は、重複する１１ポイントの用量応答曲線から計算される。
【表４】
2021504462.tif 000025
【００８２】
例４：選択性プロファイリング
選択性プロファイリングは、１００ｎＭ濃度の９７キナーゼのパネルの上で行った（Ｄｉｓｃｏｖｅｒ  ＸからのｓｃａｎＥＤＧＥアッセイパネル、これもＫＩＮＯＭＥｓｃａｎ技術を使用することでＫＩＴ（Ｄ８１６Ｖ）およびＫＩＴ（Ｖ５５９Ｄ、Ｔ６７０Ｉ）をＴｒｋＢおよびＴｒｋＣに置き換えた）。同じパネルを使用して、最高の化合物（ａ１）をさらに１μＭの濃度でプロファイルした。採用したプロファイリングパネルは、以下のキナーゼから成った：ＡＢＬ１（Ｔ３１５Ｉ）−リン酸化、ＡＢＬ１−非リン酸化、ＡＢＬ１−リン酸化、ＡＣＶＲ１Ｂ、ＡＤＣＫ３、ＡＫＴ１、ＡＫＴ２、ＡＬＫ、ＡＵＲＫＡ、ＡＵＲＫＢ、ＡＸＬ、ＢＭＰＲ２、ＢＲＡＦ、ＢＲＡＦ（Ｖ６００Ｅ）、ＢＴＫ、ＣＤＫ１１、ＣＤＫ２、ＣＤＫ３、ＣＤＫ７、ＣＤＫ９、ＣＨＥＫ１、ＣＳＦ１Ｒ、ＣＳＮＫ１Ｄ、ＣＳＮＫ１Ｇ２、ＤＣＡＭＫＬ１、ＤＹＲＫ１Ｂ、ＥＧＦＲ、ＥＧＦＲ（Ｌ８５８Ｒ）、ＥＰＨＡ２、ＥＲＢＢ２、ＥＲＢＢ４、ＥＲＫ１、ＦＡＫ、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３、ＦＬＴ３、ＧＳＫ３Ｂ、ＩＧＦ１Ｒ、ＩＫＫ−アルファ、ＩＫＫ−ベータ、ＩＮＳＲ、ＪＡＫ２（ＪＨ１ドメイン−触媒）、ＪＡＫ３（ＪＨ１ドメイン−触媒）、ＪＮＫ１、ＪＮＫ２、ＪＮＫ３、ＫＩＴ、ＬＫＢ１、ＭＡＰ３Ｋ４、ＭＡＰＫＡＰＫ２、ＭＡＲＫ３、ＭＥＫ１、ＭＥＫ２、ＭＥＴ、ＭＫＮＫ１、ＭＫＮＫ２、ＭＬＫ１、ｐ３８−アルファ、ｐ３８−ベータ、ＰＡＫ１、ＰＡＫ２、ＰＡＫ４、ＰＣＴＫ１、ＰＤＧＦＲＡ、ＰＤＧＦＲＢ、ＰＤＰＫ１、ＰＩＫ３Ｃ２Ｂ、ＰＩＫ３ＣＡ、ＰＩＫ３ＣＧ、ＰＩＭ１、ＰＩＭ２、ＰＩＭ３、ＰＫＡＣ−アルファ、ＰＬＫ１、ＰＬＫ３、ＰＬＫ４、ＰＲＫＣＥ、ＲＡＦ１、ＲＥＴ、ＲＩＯＫ２、ＲＯＣＫ２、ＲＳＫ２（Ｋｉｎ．Ｄｏｍ．１−Ｎ−末端）、ＳＮＡＲＫ、ＳＲＣ、ＳＲＰＫ３、ＴＧＦＢＲ１、ＴＩＥ２、ＴＲＫＡ、ＴＲＫＢ、ＴＲＫＣ、ＴＳＳＫ１Ｂ、ＴＹＫ２（ＪＨ１ドメイン−触媒）、ＵＬＫ２、ＶＥＧＦＲ２、ＹＡＮＫ３、ＺＡＰ７０。
【表５】
2021504462.tif 000026
【００８３】
例５：細胞アッセイ
２個の化合物ａ１およびｂ７を、ＰａｔｈＨｕｎｔｅｒ（登録商標）技術を使用した機能アッセイでさらにテストした（ＤｉｓｃｏｖｅｒＸ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、Ｆｒｅｅｍｏｎｔ、ＣＡ、ＵＳＡ；ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ｄｉｓｃｏｖｅｒｘ．ｃｏｍ／ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ−ｐｌａｔｆｏｒｍｓ／ｅｎｚｙｍｅ−ｆｒａｇｍｅｎｔ−ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔａｔｉｏｎ−ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ／ｃｅｌｌ−ｂａｓｅｄ−ｅｆｃ−ａｓｓａｙｓ／ｐｒｏｔｅｉｎ−ｐｒｏｔｅｉｎ−ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ／ｋｉｎａｓｅｓ−ｃｅｌｌ−ｂａｓｅｄ−（ｒｔｋ−ｃｔｋ））。このアッセイでは、完全長のヒトＴｒｋＡ受容体（つまり、リガンド結合ドメインおよびキナーゼドメインを含む）は、Ｐｒｏｌｉｎｋ（商標）（ＰＫ）と呼ばれる小さなペプチドエピトープとのＣ末端（細胞内）融合として表現される。さらに、ＳＨ２ドメイン含有タンパク質（つまり、Ｓｈｃ１）は、より大きな酵素アクセプター（ＥＡ）フラグメントと共発現される。アゴニストリガンド（β−ＮＧＦ）を添加することによるＴｒｋＡ受容体の活性化は、キナーゼの自己リン酸化とそれに続くＳｈｃ１−ＥＡタンパク質の結合につながる。その動員により、化学発光基質の添加によって検出される活性なβ−ガラクトシダーゼ酵素が生じる。８０濃度（つまり、０．０３μｇ／ｍｌ）のβ−ＮＧＦのＥＣを使用して、化合物の拮抗作用をテストした。ＥＣ８０アゴニストリガンド（β−ＮＧＦ）およびビヒクル（ＤＭＳＯ、最終濃度１％）それぞれの存在下で観察される最大および最小の応答に対してデータを正規化した。
【表６】
2021504462.tif 000027
【００８４】
例６：マウスにおける静脈内投与後の化合物ａ１の薬物動態評価
化合物ａ１は、ＴｒｋＡで非常に活性であり、設計の観点から最も重要なのは、選択されたオフターゲットＡｕｒＡに対する選択性が１０，０００倍改良している。ＴｒｋＡに対するナノモルの細胞効力は、急性および慢性疼痛、または炎症および癌などの異常なＴｒｋＡ活性に関連する他の状態の治療のための先進的なヒット化合物としての化合物ａ１の潜在的な価値を強調する。
【００８５】
化合物ａ１は、例１に従って、Ｅｎａｍｉｎｅ  Ｌｔｄ．社による契約に基づいて合成した。この研究では、Ｊ．Ｔ．Ｂａｋｅｒ（ドイツ）からのジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ＢＡＳＦ（ドイツ）からのＣｒｅｍｏｐｈｏｒ  ＥＬ（ポリオキシエチレングリセロールトリリシノレアート３５ヒマシ油）、およびＢ．Ｂｒａｕｎ（ドイツ）からの生理食塩水０．９％を使用した。高用量の化合物ａ１（９ｍＭ）を含む製剤および低用量の化合物ａ１（１．８ｍＭ）を含む製剤の２種類の製剤を調製した；表５および表６を参照。まず、１８．４６ｍｇの化合物ａ１（分子量４６１．５６ｇ／ｍｏｌ）を室温で４００μｌのＤＭＳＯ中に溶解することにより、ＤＭＳＯ中に化合物ａ１の１００ｍＭストック溶液を調製した。高用量のａ１を含む製剤は、９％のａ１−ＤＭＳＯストック溶液、１０％のＣｒｅｍｏｐｈｏｒ  ＥＬ、および８１％の生理食塩水を使用して調製した。低用量のａ１を含む製剤には、１．８％のａ１−ＤＭＳＯストック溶液、５％のＣｒｅｍｏｐｈｏｒ  ＥＬ、および９３．２％の生理食塩水が含有されていた；図２を参照。静脈内注射後に化合物ａ１が沈殿しないことを確認するために、両方の製剤を段階希釈でチェックした。
【表７】
2021504462.tif 000028
【００８６】
実験は、科学的な目的で使用される動物の保護に関するＥＵ指令８６／６０９／ＥＥＣに従って実施した。メスの成体Ｃ５７Ｂｌ／６マウス（６〜８週齢、体重２０ｇ）は、５ｍｇ／ｋｇ（低用量）および２５ｍｇ／ｋｇ（高用量）の化合物ａ１、またはビヒクル（化合物ａ１を含まない製剤）、または１ｍｌシリンジ（２９−Ｇ、Ｔｅｒｕｍｏ）を使用した１時間の静脈内（ｉ．ｖ．）注射による生理食塩水で処理した；表６を参照。注射後、マウスをそれらのホームケージに戻し、１時間後にイソフルランで麻酔した。末期血液サンプルは、１ｍｌのシリンジ（２０−Ｇ針、Ｂ．Ｂｒａｕｎ）を使用して収集した。血液は、直ちに１．３ｍｌのヘパリンコーティングされたチューブ（Ｓａｒｓｔｅｄｔ）に移した。１５００ｇで１５分間遠心分離することにより血漿を収集した。上清をドライアイス上の１．５ｍｌのチューブに入れ、−２０℃で保存した。
【００８７】
マウス血漿サンプル中の化合物ａ１の定量は、液体クロマトグラフィータンデム質量分析（ＬＣ−ＭＳ−ＭＳ）で実行した。
【表８】
2021504462.tif 000029
【００８８】
結果：ＬＣ−ＭＳ−ＭＳ分析により、３４０ｎＭおよび８６３ｎＭの５ｍｇ／ｋｇ（低用量）および２５ｍｇ／ｋｇ（高用量）それぞれで１時間処理したマウスの血漿中の化合物ａ１の平均濃度を確認した。驚くべきことに、どの動物も毒性のいかなる明らかな兆候も示さなかった（表６）。
【図１】
2021504462.tif 000035
【国際調査報告】
2021504462.tif 000036
2021504462.tif 000037
2021504462.tif 000038
2021504462.tif 000039
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