(57)【要約】  ＲＡＳにおける活性化変異に関連する疾患の治療における使用のための、又はＲＡＳ活性の低減によって治療可能な疾患の治療における使用のための化合物は、式（Ｉ）の化合物、並びにその塩及びエステルから選択される。化合物は、がんを治療する際に特に有用である。    【化１】【選択図】図１
2021528368.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＲＡＳにおける活性化変異に関連する疾患の治療における使用のための、又はＲＡＳ活性の低減によって治療可能な疾患の治療における使用のための化合物であって、式（Ｉ）の化合物
【化１】
2021528368.tif 000014
並びにその塩及びエステルから選択される化合物
［式中、
Ｒ１は、１価のＨ、カルボキシ、ニトロ、スルホ、ハロゲン、アリール、シクロアルキル、ヘテロシクリル、ヘテロアリール、−（Ｃ１−Ｃ３）アルキル−アリール、−（Ｃ１−Ｃ３）アルキル−シクロアルキル、−（Ｃ１−Ｃ３）アルキル−ヘテロシクリル、−（Ｃ１−Ｃ３）アルキル−ヘテロアリール、Ｃ１−Ｃ８アルキル、Ｃ２−Ｃ８アルケニル、Ｃ２−Ｃ８アルキニル、又はＣ１−Ｃ７アルコキシであり、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ１−Ｃ５アルキル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、メタノイル、カルボキシ、ニトロ、シアノ、アミノ、カルバモイル、エチニル、−ＣＦ３、−ＣＦ２ＣＦ３、−ＯＣＦ３、−ＯＣＦ２ＣＦ３、又はスルホで置換されていてもよく、
Ｘ１は、２価の−（ＮＨ）−、−（ＣＨ２）−、−（ＮＨＣＨ２）−、−（ＣＨ２ＮＨ）−、−（Ｃ２Ｈ４）−、−（Ｃ２Ｈ２）−、−（Ｃ２）−、−Ｏ−、−Ｏ−（ＣＨ２）−、−（ＣＨ２）−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ−（ＣＨ２）−、又は−（ＣＨ２）−Ｓ−であり、ハロゲン、ヒドロキシ、−Ｒｘ、メタノイル、カルボキシ、ニトロ、シアノ、アミノ、カルバモイル、エチニル、−ＣＦ３、−ＣＦ２ＣＦ３、−ＯＣＦ３、−ＯＣＦ２ＣＦ３、又はスルホで置換されていてもよく、
Ｒｘは、Ｃ１−Ｃ８アルキル、Ｃ２−Ｃ８アルケニル、Ｃ２−Ｃ８アルキニル、又はＣ１−Ｃ７アルコキシであり、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ２−Ｃ４アルケニル、Ｃ２−Ｃ４アルキニル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、アリール、シクロアルキル、ヘテロシクリル、ヘテロアリール、メタノイル、カルボキシ、ニトロ、シアノ、アミノ、カルバモイル、エチニル、−ＣＦ３、−ＣＦ２ＣＦ３、−ＯＣＦ３、−ＯＣＦ２ＣＦ３、又はスルホで置換されていてもよく、
Ｒ２は、アリール、シクロアルキル、ヘテロシクリル、ヘテロアリール、−（Ｃ１−Ｃ３）アルキル−アリール、−（Ｃ１−Ｃ３）アルキル−シクロアルキル、−（Ｃ１−Ｃ３）アルキル−ヘテロシクリル、又は−（Ｃ１−Ｃ３）アルキル−ヘテロアリールであり、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ１−Ｃ１６アルキル、Ｃ２−Ｃ１６アルケニル、Ｃ２−Ｃ１６アルキニル、Ｃ１−Ｃ１５アルコキシ、メタノイル、カルボキシ、ニトロ、シアノ、アミノ、カルバモイル、エチニル、−ＣＦ３、−ＣＦ２ＣＦ３、−ＯＣＦ３、−ＯＣＦ２ＣＦ３、スルホ、−ＳＯ２−Ｒ３、−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ３、又は−Ｏ−Ｒ３で置換されていてもよく、
Ｒ３は、−ＮＲａＲｂ、アリール、シクロアルキル、ヘテロシクリル、ヘテロアリール、Ｃ１−Ｃ７アルキル、Ｃ２−Ｃ７アルケニル、Ｃ２−Ｃ７アルキニル、又はＣ１−Ｃ６アルコキシであり、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ１−Ｃ５アルキル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、メタノイル、カルボキシ、ニトロ、シアノ、アミノ、カルバモイル、エチニル、−ＣＦ３、−ＣＦ２ＣＦ３、−ＯＣＦ３、−ＯＣＦ２ＣＦ３、又はスルホで置換されていてもよく、
Ｒａは、１価のＨ、アリール、シクロアルキル、ヘテロシクリル、ヘテロアリール、Ｃ１−Ｃ７アルキル、Ｃ２−Ｃ７アルケニル、Ｃ２−Ｃ７アルキニル、又はＣ１−Ｃ６アルコキシであり、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ１−Ｃ５アルキル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、メタノイル、カルボキシ、ニトロ、シアノ、アミノ、カルバモイル、エチニル、−ＣＦ３、−ＣＦ２ＣＦ３、−ＯＣＦ３、−ＯＣＦ２ＣＦ３、又はスルホで置換されていてもよく、かつ、
Ｒｂは、１価のＨ、アリール、シクロアルキル、ヘテロシクリル、ヘテロアリール、Ｃ１−Ｃ７アルキル、Ｃ２−Ｃ７アルケニル、Ｃ２−Ｃ７アルキニル、又はＣ１−Ｃ６アルコキシであり、前記Ｈ、アリール、シクロアルキル、ヘテロシクリル、ヘテロアリール、Ｃ１−Ｃ７アルキル、Ｃ２−Ｃ７アルケニル、Ｃ２−Ｃ７アルキニル、又はＣ１−Ｃ６アルコキシは、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ１−Ｃ５アルキル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、メタノイル、カルボキシ、ニトロ、シアノ、アミノ、カルバモイル、エチニル、−ＣＦ３、−ＣＦ２ＣＦ３、−ＯＣＦ３、−ＯＣＦ２ＣＦ３、又はスルホで置換されていてもよく、
ここで、Ｒ２が、メタノイル、カルボキシ、アミノ、Ｃ１−Ｃ１６アルキル、Ｃ２−Ｃ１６アルケニル、Ｃ２−Ｃ１６アルキニル、Ｃ１−Ｃ１５アルコキシから選択される置換を含む場合、各置換基はハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ２−Ｃ４アルケニル、Ｃ２−Ｃ４アルキニル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、メタノイル、カルボキシ、ニトロ、シアノ、アミノ、−ＮＨ（Ｃ１−Ｃ４アルキル）、−Ｎ（Ｃ１−Ｃ４アルキル）（Ｃ１−Ｃ４アルキル）、カルバモイル、エチニル、−ＣＦ３、−ＣＦ２ＣＦ３、−ＯＣＦ３、−ＯＣＦ２ＣＦ３、スルホ、又は−Ｒｃで独立に置換されていてもよく、かつ、
Ｒｃは、選択ごとに同じでも異なってもよく、−ＣＯ−ＯＣＨ３、−ＣＯ−ＮＲｆＲｇ、−ＳＯ２−ＮＲｆＲｇ、−ＮＲｆＲｇ、−ＮＨ−ＣＯ−ＣＨ３、−ＮＨ−ＣＯ−ＮＲｆＲｇ、−ＮＨ−ＣＯ−ＯＣＨ３、アリール、シクロアルキル、ヘテロシクリル、ヘテロアリール、５〜７員の単環式ヘテロシクリル、５〜７員の単環式ヘテロアリール、テトラゾリル、トリアゾリル、イミダゾリル、ピロリル、ピロリジニル、ピペリジル、ピペラジニル、モルホリニル、ピリジル、ピラジニル、ピリミジニル、チエニル、フリル、ピラニル、ピラゾリル、イソチアゾリル、イソオキサゾリル、ピリダジニル、フラザニル、ピロリニル、イミダゾリジニル、イミダゾリニル、ピラゾリジニル、又はピラゾリニルであってもよく、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ２−Ｃ４アルケニル、Ｃ２−Ｃ４アルキニル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、アリール、シクロアルキル、ヘテロシクリル、ヘテロアリール、メタノイル、カルボキシ、ニトロ、シアノ、アミノ、カルバモイル、エチニル、−ＣＦ３、−ＣＦ２ＣＦ３、−ＯＣＦ３、−ＯＣＦ２ＣＦ３、又はスルホで置換されていてもよく、
Ｒｆは、選択ごとに同じでも異なってもよく、Ｈ又はＣ１−Ｃ４アルキルであってもよく、かつ、
Ｒｇは、選択ごとに同じでも異なってもよく、Ｈ又はＣ１−Ｃ４アルキルであってもよい］。
【請求項２】
【化２】
2021528368.tif 000015
ではない、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ１が、アリール、シクロアルキル、ヘテロシクリル、又はヘテロアリールであり、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ１−Ｃ５アルキル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、メタノイル、カルボキシ、ニトロ、シアノ、アミノ、カルバモイル、エチニル、−ＣＦ３、−ＣＦ２ＣＦ３、−ＯＣＦ３、−ＯＣＦ２ＣＦ３、又はスルホで置換されていてもよい、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ１が、
【化３】
2021528368.tif 000016
である、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
Ｘ１が、２価の−（ＮＨ）−、−（ＣＨ２）−、−Ｏ−、又は−Ｓ−であり、ハロゲン、ヒドロキシ、−Ｒｘ、メタノイル、カルボキシ、ニトロ、シアノ、アミノ、カルバモイル、エチニル、−ＣＦ３、−ＣＦ２ＣＦ３、−ＯＣＦ３、−ＯＣＦ２ＣＦ３、又はスルホで置換されていてもよい、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
Ｘ１が、−Ｎ（ＣＨ３）−、−Ｓ−、−Ｏ−、−Ｃ（ＣＨ３）２−、又は−Ｃ（ＨＣＨ３）−である、請求項１に記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ２が、アリール、シクロアルキル、ヘテロシクリル、ヘテロアリールであり、−ＳＯ２−Ｒ３、−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ３で置換されており、かつ、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ１−Ｃ１６アルキル、Ｃ２−Ｃ１６アルケニル、Ｃ２−Ｃ１６アルキニル、Ｃ１−Ｃ１５アルコキシ、メタノイル、カルボキシ、ニトロ、シアノ、アミノ、カルバモイル、エチニル、−ＣＦ３、−ＣＦ２ＣＦ３、−ＯＣＦ３、−ＯＣＦ２ＣＦ３、スルホ、−ＳＯ２−Ｒ３、−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ３、又は−Ｏ−Ｒ３でさらに置換されていてもよい、請求項１に記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ２が、
【化４】
2021528368.tif 000017
であり、
Ｒ９、Ｒ８及びＲ７はそれぞれ、Ｈ、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ１−Ｃ１６アルキル、Ｃ２−Ｃ１６アルケニル、Ｃ２−Ｃ１６アルキニル、Ｃ１−Ｃ１５アルコキシ、メタノイル、カルボキシ、ニトロ、シアノ、アミノ、カルバモイル、エチニル、−ＣＦ３、−ＣＦ２ＣＦ３、−ＯＣＦ３、−ＯＣＦ２ＣＦ３、スルホ、−ＳＯ２−Ｒ３、−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ３、又は−Ｏ−Ｒ３から独立に選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ２が、
【化５】
2021528368.tif 000018
であり、
Ｒ７が、Ｈ、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ１−Ｃ１６アルキル、Ｃ２−Ｃ１６アルケニル、Ｃ２−Ｃ１６アルキニル、Ｃ１−Ｃ１５アルコキシ、メタノイル、カルボキシ、ニトロ、シアノ、アミノ、カルバモイル、エチニル、−ＣＦ３、−ＣＦ２ＣＦ３、−ＯＣＦ３、−ＯＣＦ２ＣＦ３、スルホ、−ＳＯ２−Ｒ３、−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ３、又は−Ｏ−Ｒ３から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項１０】
以下の化合物：
【化６】
2021528368.tif 000019
2021528368.tif 000020
から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項１１】
請求項１に記載の化合物と薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物。
【請求項１２】
がんを治療するための医薬を調製するための、請求項１〜１１のいずれかに記載のいずれかの化合物の使用。
【請求項１３】
請求項１〜１２のいずれかに記載の化合物。
【請求項１４】
ＲＡＳにおける活性化変異に関連する疾患を治療する、又はＲＡＳ活性の低減によって治療可能な疾患を治療する方法であって、その治療を必要とする患者に請求項１〜１０のいずれかに記載の化合物を投与することを含む、前記方法。
【請求項１５】
患者が、ヒトである、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
疾患が、腫瘍又はがんである、請求項１４に記載の方法。
【請求項１７】
ペムブロリズマブ、ニボルマブ、ＡＳ１４１１又は金ナノ粒子にコンジュゲートしたＡＳ１４１１からなる群から選択される少なくとも１つのメンバーを投与することをさらに含む、請求項１４〜１６のいずれかに記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
政府の権利
本発明は、以下の米国政府支援：米国国立衛生研究所（ＮＩＨ）によって資金援助されたグラント番号ＲＲ０１８７３３を受けて行われた。米国政府は本発明に一定の権利を有する。
【０００２】
ＲＡＳは、ヒトがんにおいて最も一般的な腫瘍遺伝子である。３種のヒトＲＡＳ遺伝子アイソフォーム（ＫＲＡＳ、ＨＲＡＳ、又はＮＲＡＳ）のうちの１つにおける活性化変異が、すべてのがんの約４分の１に存在する（Hobbs GA, Der CJ, Rossman KL. RAS isoforms and mutations in cancer at a glance. J Cell Sci. 2016 Apr 1;129(7):1287-92）。ＫＲＡＳは、ＫＲＡＳ４Ａ及びＫＲＡＳ４Ｂと呼ばれる２種の選択的スプライシングフォームとしてもみられる。例えば、変異ＫＲＡＳは、膵管腺癌の９８％、結腸がんの５２％、及び肺腺癌の３２％にみられる（図１及びHobbs GA, Der CJ, Rossman KL. RAS isoforms and mutations in cancer at a glance. J Cell Sci. 2016 Apr 1;129(7):1287-92）。これらの３種のがんタイプだけでも、変異ＫＲＡＳをもつがんは、米国で毎年１７０，０００人超において診断され、１２０，０００人超の死亡をもたらすことを意味する（American Cancer Society. Cancer Facts and Figures 2017）。現在利用可能なＦＤＡ承認済みの直接的なＲＡＳタンパク質阻害剤はない。ＲＡＳの下流に位置するシグナル伝達を標的にする薬物が利用可能であるが、おそらくＲＡＳが複数のエフェクターを活性化する「ハブ」であり（図２Ａ）、いずれの単一経路（又は二経路さえ）も遮断する効果がないので、残念な臨床活性を示してきた。
【０００３】
ＲＡＳは、グアノシンヌクレオチド、ＧＴＰ又はＧＤＰに結合している場合に「オン」と「オフ」の間で切り換えるスイッチとして働くＧタンパク質である。がんでみられるＲＡＳ変異は、タンパク質をほとんどいつもオンにする（すなわち、ＧＴＰに結合させる）（Hobbs GA, Der CJ, Rossman KL. RAS isoforms and mutations in cancer at a glance. J Cell Sci. 2016 Apr 1;129(7):1287-92）。大部分の薬物標的は、酵素（基質結合部位）又はキナーゼ（ＡＴＰ結合部位）と同様に、低分子が標的とすることができる輪郭のはっきりした「ポケット」を有するタンパク質である。ＲＡＳは、そのようなポケットを欠いており、したがって直接に標的とすることはより困難である。
【０００４】
ＲＡＳ阻害剤は公知であるが、いずれも認可治療に至っていない。単一の特異的ＫＲＡＳ変異の阻害剤であるＫＲＡＳ（Ｇ１２Ｃ）は公知であり、これはＧ１２Ｃ変異をもつ１種の腫瘍細胞株を阻害することができ、１〜１０μＭの濃度で３０％のアポトーシスをもたらした（Ostrem JM, Peters U, Sos ML, Wells JA, Shokat KM. K-RAS(G12C) inhibitors allosterically control GTP affinity and effector interactions. Nature. 2013;503(7477):548-551）。さらに、Ｋｏｂｅ００６５及びＫｏｂｅ２６０２と呼ばれる２種の低分子ＲＡＳ阻害剤が、ＨＲＡＳでトランスフォームしたＮＩＨ  ３Ｔ３細胞の足場依存性及び非依存性の増殖を効果的に阻害し、２〜１０μＭの濃度でＩＣ５０を示した（Shima F, Yoshikawa Y, Ye M, et al. In silico discovery of small-molecule RAS inhibitors that display antitumor activity by blocking the RAS-effector interaction. Proc Natl Acad Sci U S A. 2013;110(20):8182-8187）。さらに最近になって、インビボ異種移植マウスがんモデルにおける有効性を示す低分子汎ＲＡＳが同定された（Welsch ME, Kaplan A, Chambers JM, et al. Multivalent Small-Molecule Pan-RAS Inhibitors. Cell. 2017;168(5):878-889.e29）。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】Hobbs GA, Der CJ, Rossman KL. RAS isoforms and mutations in cancer at a glance. J Cell Sci. 2016 Apr 1;129(7):1287-92
【非特許文献２】American Cancer Society. Cancer Facts and Figures 2017
【非特許文献３】Ostrem JM, Peters U, Sos ML, Wells JA, Shokat KM. K-RAS(G12C) inhibitors allosterically control GTP affinity and effector interactions. Nature. 2013;503(7477):548-551
【非特許文献４】Shima F, Yoshikawa Y, Ye M, et al. In silico discovery of small-molecule RAS inhibitors that display antitumor activity by blocking the RAS-effector interaction. Proc Natl Acad Sci U S A. 2013;110(20):8182-8187
【非特許文献５】Welsch ME, Kaplan A, Chambers JM, et al. Multivalent Small-Molecule Pan-RAS Inhibitors. Cell. 2017;168(5):878-889.e29
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００６】
ＲＡＳにおける活性化変異に関連する疾患の治療における使用のための、又はＲＡＳ活性の低減によって治療可能な疾患の治療における使用のための化合物は、式（Ｉ）の化合物
【０００７】
【化１】
2021528368.tif 000003
【０００８】
並びにその塩及びエステルから選択される。化合物は、がんを治療する際に特に有用である。
【０００９】
定義
本明細書で用いる場合（別段の指定がない限り）、「アルキル」という用語は、１価の直鎖状又は分岐状炭化水素鎖を意味する。例えば、「Ｃ１−Ｃ７アルキル」又は「Ｃ１−Ｃ４アルキル」という用語はそれぞれ、１〜７（例えば、１、２、３、４、５、６、又は７）又は１〜４（例えば、１、２、３、又は４）の炭素原子を有する直鎖状又は分岐状鎖の飽和炭化水素基を指す。Ｃ１−Ｃ７アルキル基の例としては、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉ−プロピル、ｎ−ブチル、ｓ−ブチル、ｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｓ−ペンチル、ｎ−ヘキシル、及びｎ−ヘプチル（n-septyl）が挙げられるが、これらに限定されない。Ｃ１−Ｃ４アルキル基の例としては、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉ−プロピル、ｎ−ブチル、ｓ−ブチル、及びｔ−ブチルが挙げられるが、これらに限定されない。
【００１０】
本明細書で用いる場合（別段の指定がない限り）、「アルケニル」という用語は、１又は２以上（例えば、１、２、３、又は４）の二重結合を含む１価の直鎖状又は分岐状炭化水素鎖を意味する。アルケニル基の例としては、ビニル、アリル、１−プロペニル、２−プロペニル、１−ブテニル、２−ブテニル、３−ブテニル、１−ペンテニル、２−ペンテニル、３−ペンテニル、４−ペンテニル、１−ヘキセニル、２−ヘキセニル、３−ヘキセニル、４−ヘキセニル、及び５−ヘキセニルが挙げられるが、これらに限定されない。
【００１１】
本明細書で用いる場合（別段の指定がない限り）、「アルコキシ」という用語は、酸素原子によって分子の残部に結合している上記のアルキル基（アルキル−Ｏ−）のうちの任意のものを意味する。アルコキシ基の例としては、メトキシ（ＭｅＯ−と示されることもある）、エトキシ、イソプロポキシ、プロポキシ、及びブチルオキシが挙げられるが、これらに限定されない。
【００１２】
本明細書で用いる場合（別段の指定がない限り）、「アルキニル」という用語は、１又は２以上（例えば、１、２、３、又は４）の三重結合を含み、鎖中に１又は２以上（例えば、１、２、３、又は４）の二重結合も含んでいてもよい１価の直鎖状又は分岐状炭化水素鎖を意味する。アルキニル基の例としては、エチニル、１−プロピニル、２−プロピニル、１−ブチニル、２−ブチニル、３−ブチニル、１−ペンチニル、２−ペンチニル、３−ペンチニル、４−ペンチニル、１−ヘキシニル、２−ヘキシニル、３−ヘキシニル、４−ヘキシニル、及び５−ヘキシニルが挙げられるが、これらに限定されない。
【００１３】
本明細書で用いる場合（別段の指定がない限り）、「アリール」という用語は、非置換の場合に１価の単環式又は二環式の５、６、７、８、９、１０、１１、又は１２員の芳香族炭化水素基を意味する。アリール基の例としては、フェニル、ナフチル、トリル、及びキシリルが挙げられるが、これらに限定されない。二環式アリールでは、一方又は両方の環が置換されていることがある。
【００１４】
本明細書で用いる場合（別段の指定がない限り）、「シクロアルキル」という用語は、１価の単環式又は二環式の３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、又は１２員の炭化水素基を意味する。環は、飽和又は部分不飽和とすることができる。シクロアルキル基の例としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチル、及びビシクロアルキル（例えば、［２．２．２］ビシクロオクタン又は［３．３．０］ビシクロオクタンなどのビシクロオクタン、［４．３．０］ビシクロノナンなどのビシクロノナン、及び［４．４．０］ビシクロデカン（デカリン）などのビシクロデカン、又はスピロ化合物）が挙げられるが、これらに限定されない。単環式シクロアルキルでは、環は芳香族でない。二環式シクロアルキルでは、一方の環が芳香族である場合、他方の環は芳香族でない。二環式シクロアルキルでは、一方又は両方の環が置換されていることがある。
【００１５】
本明細書で用いる場合（別段の指定がない限り）、「ハロゲン」という用語は、１価のＣｌ、Ｆ、Ｂｒ、又はＩを意味する。
【００１６】
本明細書で用いる場合（別段の指定がない限り）、「ヘテロアリール」という用語は、１価の単環式又は二環式の５、６、７、８、９、１０、１１、又は１２員の炭化水素基を意味し、１、２、３、４、５、又は６の炭素原子が、窒素、酸素、又は硫黄原子から独立に選択されるヘテロ原子によって置き換えられており、単環式又は二環式の環系が芳香族である。ヘテロアリール基の例としては、チエニル（又はチオフェニル）、フリル、インドリル、ピロリル、ピリジニル、ピラジニル、オキサゾリル、チアゾリル（thiaxolyl）、キノリニル、ピリミジニル、イミダゾリル、１−メチル−イミダゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、１Ｈ−ピラゾール−４−イル、１−Ｍｅ−ピラゾール−４−イル、ピリジン−３−イル、ピリジン−４−イル、３，５−ジメチルイソオキサゾリル、１Ｈ−ピロール−３−イル、３，５−ジ−Ｍｅ−ピラゾリル、及び１Ｈ−ピラゾール−４−イルが挙げられるが、これらに限定されない。二環式ヘテロアリールでは、一方の環がアリールである場合、他方の環はヘテロアリールである。二環式ヘテロアリールでは、一方又は両方の環は、１又は２以上のヘテロ原子を有することができる。二環式ヘテロアリールでは、一方又は両方の環が置換されていることがある。Ｎ−ヘテロアリールは、１又は２以上（例えば、１、２、３、４、５、又は６）のＮ原子を含むヘテロアリールを意味する。Ｎ−ヘテロアリールは、他のヘテロ原子も含むことができる。Ｏ−ヘテロアリールは、１又は２以上（例えば、１、２、３、４、５、又は６）のＯ原子を含むヘテロアリールを意味する。Ｏ−ヘテロアリールは、他のヘテロ原子も含むことができる。Ｓ−ヘテロアリールは、１又は２以上（例えば、１、２、３、４、５、又は６）のＳ原子を含むヘテロアリールを意味する。Ｓ−ヘテロアリールは、他のヘテロ原子も含むことができる。
【００１７】
本明細書で用いる場合（別段の指定がない限り）、「ヘテロシクリル」という用語は、１価の単環式又は二環式の５、６、７、８、９、１０、１１、又は１２員の炭化水素を意味し、１、２、３、４、５、又は６の炭素原子が、窒素原子、酸素原子、又は硫黄原子から独立に選択されるヘテロ原子によって置き換えられており、単環式又は二環式の環系が芳香族でない。ヘテロシクリル基の例としては、ベンゾジオキソリル、テトラヒドロピラニル、ピロリジニル（例えば、ピロリジン−１−イル、ピロリジン−２−イル、ピロリジン−３−イル、又はピロリジン−４−イル）、ピペラジニル（例えば、ピペラジン−１−イル、ピペラジン−２−イル、ピペラジン−３−イル、又はピペラジン−４−イル）、ピペリジニル（例えば、ピペラジン−１−イル、ピペラジン−２−イル、ピペラジン−３−イル、又はピペラジン−４−イル）、アゼパニル（例えば、アゼパン−１−イル、アゼパン−２−イル、アゼパン−３−イル、アゼパン−４−イル、又はアゼパン−５−イル）、アゾカニル（例えば、アゾカン−１−イル、アゾカン−２−イル、アゾカン−３−イル、アゾカン−４−イル、アゾカン−５−イル、アゾカン−６−イル、又はアゾカン−７−イル）、アゾナニル（例えば、１−アゾナニル）、及びモルホリニル（例えば、モルホリン−１−イル、モルホリン−２−イル、モルホリン−３−イル、又はモルホリン−４−イル）が挙げられるが、これらに限定されない。二環式ヘテロシクリルでは、一方の環が芳香族（例えば、単環式アリール又はヘテロアリール）である場合、他方の環は芳香族でない。二環式ヘテロシクリルでは、一方又は両方の環は、１又は２以上のヘテロ原子を有することができる。二環式ヘテロシクリルでは、一方又は両方の環が置換されていることがある。Ｎ−ヘテロシクリルは、１又は２以上（例えば、１、２、３、４、５、又は６）のＮ原子を含むヘテロシクリルを意味する。Ｎ−ヘテロシクリルは、他のヘテロ原子も含むことができる。Ｏ−ヘテロシクリルは、１又は２以上（例えば、１、２、３、４、５、又は６）のＯ原子を含むヘテロシクリルを意味する。Ｏ−ヘテロシクリルは、他のヘテロ原子も含むことができる。Ｓ−ヘテロシクリルは、１又は２以上（例えば、１、２、３、４、５、又は６）のＳ原子を含むヘテロシクリルを意味する。Ｓ−ヘテロシクリルは、他のヘテロ原子も含むことができる。
【００１８】
本明細書で用いる場合（別段の指定がない限り）、「ヘテロ原子」という用語は、窒素原子、酸素原子、又は硫黄原子から選択される原子を意味する。
【００１９】
本明細書で用いる場合（別段の指定がない限り）、「ヒドロキシ」又は「ヒドロキシル」という用語は、１価の−ＯＨ基の存在を示す。
【００２０】
本明細書で用いる場合（別段の指定がない限り）、「置換された」（例えば、置換アルキルにおいてみられる）という用語は、（１又は２以上の水素原子を有する）化学基の１又は２以上の水素原子を、指定された選択肢から選択される１又は２以上の非水素置換基で置き換えることができることを意味する。置き換えは、１又は２以上の位置で起こりうる。「置換されていてもよい」という用語は、（１又は２以上の水素原子を有する）化学基の１又は２以上の水素原子を置換することはできるが、置換する必要はないことを意味する。
【００２１】
本発明のいくつかの化合物は、１又は２以上のキラル中心を有することができ、１又は２以上のキラル中心のいずれかに対して光学活性及びラセミ体で存在し、単離することができる。いくつかの化合物は、多形を示すことがある。本発明の化合物は、いかなる光学活性、ラセミ体、又はその混合物も包含する。キラル中心が、化学構造においてその立体配置（すなわち、Ｒ又はＳ）を示していない場合、Ｒ、Ｓ又はラセミ体を表すものとみなされるべきである。構造式がキラル中心のキラリティーを指定することなく提示されている場合、Ｒ、Ｓ又はラセミ体を表すものとみなされるべきである。
【００２２】
別段の指定がない限り、炭素を含む基はすべて、１〜２０の炭素原子を含むことができる。
【００２３】
腫瘍及びがんとしては、固形、増殖異常性組織変化及びびまん性腫瘍が挙げられる。腫瘍及びがんの例としては、メラノーマ、リンパ腫、形質細胞腫、肉腫、神経膠腫、胸腺腫、白血病、乳がん、前立腺がん、結腸がん、肝がん、食道がん、脳がん、肺がん、卵巣がん、子宮内膜がん、膀胱がん、腎がん、子宮頸がん、肝癌、及び他の新生物が挙げられる。腫瘍及びがんのより多くの例については、例えばStedmanを参照のこと（Stedman, T.L. 2000. Stedman's medical dictionary. Lippincott Williams & Wilkins, Philadelphia. xxxvi, [127], 2098）。
【００２４】
「腫瘍を治療する」又は「がんを治療する」は、腫瘍又はがんの増殖及び／又は転移を著しく阻害することを意味する。増殖阻害は、腫瘍体積の低減又は転移の発生率の低減によって示すことができる。腫瘍増殖は、例えば（ダイヤル式ノギスで２次元測定値を得るなどの）慣例的な手順を介して腫瘍体積を調べることによって決定することができる。転移は、二次部位において腫瘍細胞がないか検査する又は生検腫瘍細胞の転移能をインビトロで試験することによって決定することができる。
【００２５】
「化学療法剤」は、ヒトにおけるがんを治療するために効果的に使用することができる化合物である。
【００２６】
「薬学的に許容される担体」としては、薬剤投与と適合性がある、あらゆる溶媒、分散媒、コーティング、抗細菌剤及び抗真菌剤、等張剤及び吸収遅延剤が挙げられる。そのような担体又は希釈剤の好ましい例としては、水、生理食塩水、リンゲル液及びデキストロース溶液、並びに固体賦形剤が挙げられる。補助的活性化合物を組成物に組み込むこともできる。
【００２７】
「医薬」、「治療組成物」及び「医薬組成物」を同義に使用して、対象において治療的効果を及ぼす化合物、物質、混合物又は調製物を示す。
【００２８】
本明細書で用いる場合、ＲＡＳは、ＫＲＡＳ、ＨＲＡＳ、ＮＲＡＳを含めて、遺伝子のすべてのフォームを指し、ＫＲＡＳは、ＫＲＡＳ４ＡとＫＲＡＳ４Ｂの両方を指す。
【図面の簡単な説明】
【００２９】
【図１】異なる種類のがんにおいて変異ＫＲＡＳの有病率を示すチャートである。
【図２Ａ】複数のエフェクターを活性化する「ハブ」としてのＲＡＳを示す説明図である。
【図２Ｂ】ＲＡＳがＲａｌＧＤＳタンパク質を結合させる経路を例示する図である。
【図３】腫瘍形成表現型Ｍｉａ  ＰａＣａ−２の低分子ＲＡＳ阻害剤Ｆ３による特異的阻害を示すグラフである。
【図４】腫瘍形成表現型Ａ５４９の低分子ＲＡＳ阻害剤Ｆ３による特異的阻害を示すグラフである。
【図５】Ｍｉａ  ＰａＣａ−２細胞のプラスチック上での２次元培養における正常な増殖／生存に及ぼす１０ｕＭのＦ３の効果を示すグラフである。
【図６】Ａ５４９細胞のプラスチック上での２次元培養における正常な増殖／生存に及ぼす１０ｕＭのＦ３の効果を示すグラフである。
【図７】Ｆ３が野生型ＲＡＳ駆動腫瘍細胞にも効果的であることを示すグラフである。
【図８】野生型ＲＡＳ駆動腫瘍細胞のプラスチック上での２次元培養における正常な増殖／生存を示すグラフである。
【図９】Ｆ３が高レベルのアノイキスを誘導したことを示すグラフである。
【図１０】３次元軟寒天薬物スクリーニングにおいて濃度６．６ｕＭで１２種の化合物（ＪＡＢ−６化合物）をＦ３と一緒に試験した結果を示す図である。
【図１１】３次元軟寒天薬物スクリーニングにおいて０．５ｕＭでＪＡＢ−６−１５８及びＪＡＢ−６−１６０を試験した結果を示す図である。
【図１２】ＤＭＳＯ（対照）、Ｆ３及びＪＡＢ−６−５で処置した悪性末梢神経鞘腫瘍細胞（ＭＰＮＳＴ腫瘍細胞）及びＭｉａ−Ｐａｃａ−２細胞の軟寒天中のコロニーを示す写真である。
【図１３】ＮＲＧマウスにおける細胞株ＮＣＩ−Ｈ４４１異種移植腫瘍を使用して、Ｆ３をインビボで試験した結果を示すグラフである。
【図１４】ＮＲＧマウスにおける細胞株Ｍｉａ−Ｐａｃａ−２異種移植腫瘍を使用して、Ｆ３をインビボで試験した結果を示すグラフである。
【図１５】ＮＲＧマウスにおける細胞株Ｍｉａ−Ｐａｃａ−２異種移植腫瘍を使用して、Ｆ３をインビボで試験した結果を示すグラフである。
【図１６】Ｆ３／Ｆ３ａ誘導体の組換えＫ−ＲＡＳタンパク質への直接結合を示すグラフである。
【図１７】ＣＤ１マウスにおけるインビボでのＲＡＳ阻害剤の血漿中濃度を示すグラフである。
【図１８】ＣＤ１マウスにおけるインビボでのＲＡＳ阻害剤の脳中濃度を示すグラフである。
【図１９】経口投与後のＣＤ１マウスにおけるインビボでのＲＡＳ阻害剤の血漿中濃度を示すグラフである。
【図２０】Ｆ３の肝機能に及ぼす効果を示すグラフである。
【図２１】Ｆ３の腎機能に及ぼす効果を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００３０】
本出願は、ＲＡＳのそのエフェクタータンパク質への結合を遮断するタンパク質間相互作用（ＰＰＩ）阻害剤である低分子の開発に基づいている。１００万を超える化合物のライブラリーをコンピュータで調査することによって、多くの潜在的阻害剤を同定した。トップクラスの潜在的阻害剤を得て、試験して、リード化合物を同定した。リード化合物の変形をインビトロとインビボの両方で調製し、試験し、これによって、ＲＡＳ阻害剤の大ファミリーが同定された。
【００３１】
ＲＡＬＧＤＳとの複合体におけるＨＲＡＳ構造は公知であったので、ＲＡＳのこのフォームをコンピュータでの調査に使用した。しかし、化合物の活性の試験は、はるかにより重要なＫ−ＲＡＳアイソフォームに対して行った。いずれにしても、異なるフォーム間の配列の大半は、高度に保存されており、ＲＡＳの異なるフォーム間の違いは、結合に対してあまり効果がないと思われる領域に位置しており、したがって化合物のＲＡＳの阻害に対する効果は、異なるフォーム間で著しく変動するとは予想されない。
【００３２】
同定された化合物は、ＲＡＳに直接結合し、そのエフェクター相互作用及びシグナル伝達活性を遮断する。それらは、正常細胞増殖及び生存を抑制することなく、ＲＡＳのトランスフォーミング活性を遮断する。さらに、それらは、アノイキスを（少なくとも部分的に）介して作用し、腫瘍形成をインビボで抑制することができる。
【００３３】
Ｈ−ＲＡＳ参照配列：MTEYKLVVVGAGGVGKSALTIQLIQNHFVDKYDPTIEDSYRKQVVIDGETCLLDILDTAGQEEYSAMRDQYMRTGEGFLCVFAINNTKSFEDIHQYREQIKRVKDSDDVPMVLVGNKCDLAARTVESRQAQDLARSYGIPYIETSAKTRQGVEDAFYTLVREIRQHK。
【００３４】
Ｋ−ＲＡＳ４Ｂ参照配列：MTEYKLVVVG AGGVGKSALT IQLIQNHFVD EYDPTIEDSY RKQVVIDGET CLLDILDTAG QEEYSAMRDQ YMRTGEGFLC VFAINNTKSF EDIHHYREQI KRVKDSEDVP MVLVGNKCDL PSRTVDTKQA QDLARSYGIP FIETSAKTRQ GVDDAFYTLV REIRKHKEKM SKDGKKKKKK SKTKCVIM。
【００３５】
ＲＡＳ参照配列のその結合相手であるＲａｌＧＥＦと接触している標的領域：ＩＬＥ  ２１、ＩＬＥ  ２４、ＧＬＮ  ２５、ＨＩＳ  ２７、ＶＡＬ  ２９、ＬＹＳ  ３１、ＡＳＰ  ３３、ＰＲＯ  ３４、ＴＨＲ  ３５、ＩＬＥ  ３６、ＧＬＵ  ３７、ＡＳＰ  ３８、ＳＥＲ  ３９、ＴＹＲ  ４０、ＡＲＧ  ４１、ＬＹＳ  ４２、ＬＥＵ  ５６、ＴＹＲ  ６４、ＭＥＴ  ６７。
【００３６】
ＲＡＳ参照配列の他の標的領域のためのポケット及び残基：ＧＬＹ  １３、ＧＬＹ  １５、ＬＹＳ  １６、ＳＥＲ  １７、ＡＬＡ  １８、ＬＥＵ  １９、ＩＬＥ  ２１、ＧＬＮ  ２２、ＨＩＳ  ２７、ＰＨＥ  ２８、ＶＡＬ  ２９、ＡＳＰ  ３０、ＬＹＳ  ３１、ＴＹＲ  ３２、ＡＳＰ  ３３、ＰＲＯ  ３４、ＴＨＲ  ３５、ＡＳＰ  ３８、ＴＹＲ  ４０、ＡＳＰ  ５７、ＡＬＡ  １４６。
【００３７】
図２Ｂは、ＲＡＳがＲａｌＧＤＳタンパク質を結合させ、それらを活性化する経路を示す。説明図では、Ｆ３は、ＲＡＳのそのエフェクタータンパク質への結合を遮断するＲＡＳ阻害剤を表す。
【００３８】
ＲＡＳ阻害剤は、光学異性体を含めて、式（Ｉ）の化合物、
【００３９】
【化２】
2021528368.tif 000004
【００４０】
並びにその塩及びエステルから選択される任意の化合物である。Ｒ１、Ｒ２及びＸ１は、以下の意味を有する。
【００４１】
Ｒ１は、１価のＨ、カルボキシ（−ＣＯ２Ｈ）、ニトロ（−ＮＯ２）、スルホ（−ＳＯ３Ｈ）、ハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、又はＩ）、アリール（例えば、フェニル）、シクロアルキル、ヘテロシクリル、ヘテロアリール（例えば、ピリジニル）、−（Ｃ１−Ｃ３）アルキル−アリール（例えば、−メチル−フェニル）、−（Ｃ１−Ｃ３）アルキル−シクロアルキル、−（Ｃ１−Ｃ３）アルキル−ヘテロシクリル、−（Ｃ１−Ｃ３）アルキル−ヘテロアリール、Ｃ１−Ｃ８アルキル（例えば、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、又はＣ８アルキル）、Ｃ２−Ｃ８アルケニル（例えば、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、又はＣ８アルケニル）、Ｃ２−Ｃ８アルキニル（例えば、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、又はＣ８アルキニル）、又はＣ１−Ｃ７アルコキシ（Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、又はＣ７アルコキシ）であり、アリール（例えば、フェニル）、シクロアルキル、ヘテロシクリル、ヘテロアリール（例えば、ピリジニル）、−（Ｃ１−Ｃ３）アルキル−アリール（例えば、−メチル−フェニル）、−（Ｃ１−Ｃ３）アルキル−シクロアルキル、−（Ｃ１−Ｃ３）アルキル−ヘテロシクリル、−（Ｃ１−Ｃ３）アルキル−ヘテロアリール、Ｃ１−Ｃ７アルキル、Ｃ２−Ｃ７アルケニル、Ｃ２−Ｃ７アルキニル、又はＣ１−Ｃ６アルコキシは、ハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、又はＩ）、ヒドロキシ（−ＯＨ）、Ｃ１−Ｃ５アルキル（例えば、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、又はＣ５アルキル）、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ（Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、又はＣ４アルコキシ）、メタノイル（methanoly）（−ＣＯＨ）、カルボキシ（−ＣＯ２Ｈ）、ニトロ（−ＮＯ２）、シアノ（−ＣＮ）、アミノ（−ＮＨ２）、カルバモイル（−ＣＯＮＨ２）、エチニル（−ＣＣＨ）、−ＣＦ３、−ＣＦ２ＣＦ３、−ＯＣＦ３、−ＯＣＦ２ＣＦ３、又はスルホ（−ＳＯ３Ｈ）の１又は２以上（例えば、０、１、２、３、４、５、又は６）で置換されていてもよい。
【００４２】
Ｘ１は、２価の−（ＮＨ）−、−（ＣＨ２）−、−（ＮＨＣＨ２）−、−（ＣＨ２ＮＨ）−、−（Ｃ２Ｈ４）−、−（Ｃ２Ｈ２）−、−（Ｃ２）−、−Ｏ−、−Ｏ−（ＣＨ２）−、−（ＣＨ２）−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ−（ＣＨ２）−、又は−（ＣＨ２）−Ｓ−であり、−（ＮＨ）−、−（ＣＨ２）−、−（ＮＨＣＨ２）−、−（ＣＨ２ＮＨ）−、−（Ｃ２Ｈ４）−、−（Ｃ２Ｈ２）−、−Ｏ−（ＣＨ２）−、−（ＣＨ２）−Ｏ−、−Ｓ−（ＣＨ２）−、又は−（ＣＨ２）−Ｓ−は、１又は２以上（例えば、０、１、２、３、又は４）のハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、又はＩ）、ヒドロキシ（−ＯＨ）、−Ｒｘ、メタノイル（−ＣＯＨ）、カルボキシ（−ＣＯ２Ｈ）、ニトロ（−ＮＯ２）、シアノ（−ＣＮ）、アミノ（−ＮＨ２）、カルバモイル（−ＣＯＮＨ２）、エチニル（−ＣＣＨ）、−ＣＦ３、−ＣＦ２ＣＦ３、−ＯＣＦ３、−ＯＣＦ２ＣＦ３、又はスルホ（−ＳＯ３Ｈ）で置換されていてもよい。
【００４３】
Ｒｘは、Ｃ１−Ｃ８アルキル（例えば、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、又はＣ８アルキル）、Ｃ２−Ｃ８アルケニル（例えば、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、又はＣ８アルケニル）、Ｃ２−Ｃ８アルキニル（例えば、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、又はＣ８アルキニル）、又はＣ１−Ｃ７アルコキシ（Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、又はＣ７アルコキシ）であり、Ｃ１−Ｃ８アルキル（例えば、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、又はＣ８アルキル）、Ｃ２−Ｃ８アルケニル（例えば、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、又はＣ８アルケニル）、Ｃ２−Ｃ８アルキニル（例えば、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、又はＣ８アルキニル）、又はＣ１−Ｃ７アルコキシ（Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、又はＣ７アルコキシ）は、１又は２以上（例えば、０、１、２、３、又は４）のハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、又はＩ）、ヒドロキシ（−ＯＨ）、Ｃ１−Ｃ４アルキル（例えば、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、又はＣ４アルキル）、Ｃ２−Ｃ４アルケニル（例えば、Ｃ２、Ｃ３、又はＣ４アルケニル）、Ｃ２−Ｃ４アルキニル（例えば、Ｃ２、Ｃ３、又はＣ４アルキニル）、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ（Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、又はＣ４アルコキシ）、アリール、シクロアルキル、ヘテロシクリル、ヘテロアリール、メタノイル（−ＣＯＨ）、カルボキシ（−ＣＯ２Ｈ）、ニトロ（−ＮＯ２）、シアノ（−ＣＮ）、アミノ（−ＮＨ２）、カルバモイル（−ＣＯＮＨ２）、エチニル（−ＣＣＨ）、−ＣＦ３、−ＣＦ２ＣＦ３、−ＯＣＦ３、−ＯＣＦ２ＣＦ３、又はスルホ（−ＳＯ３Ｈ）で置換されていてもよい。
【００４４】
Ｒ２は、アリール（例えば、フェニル）、シクロアルキル、ヘテロシクリル（例えば、ベンゾジオキソリル）、ヘテロアリール（例えば、ピリジニル）、−（Ｃ１−Ｃ３）アルキル−アリール（例えば、−メチル−フェニル）、−（Ｃ１−Ｃ３）アルキル−シクロアルキル、−（Ｃ１−Ｃ３）アルキル−ヘテロシクリル（例えば、−メチル−ベンゾジオキソリル）、又は−（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル−ヘテロアリールであり、アリール、シクロアルキル、ヘテロシクリル、ヘテロアリール（例えば、ピリジニル）、−（Ｃ１−Ｃ３）アルキル−アリール（例えば、−メチル−フェニル）、−（Ｃ１−Ｃ３）アルキル−シクロアルキル、−（Ｃ１−Ｃ３）アルキル−ヘテロシクリル（例えば、−メチル−ベンゾジオキソリル）、又は−（Ｃ１−Ｃ３）アルキル−ヘテロアリールは、ハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、又はＩ）、ヒドロキシ（−ＯＨ）、Ｃ１−Ｃ１６アルキル（例えば、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８、Ｃ９、Ｃ１０、Ｃ１１、Ｃ１２、Ｃ１３、Ｃ１４、Ｃ１５、又はＣ１６アルキル）、Ｃ２−Ｃ１６アルケニル（例えば、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８、Ｃ９、Ｃ１０、Ｃ１１、Ｃ１２、Ｃ１３、Ｃ１４、Ｃ１５、又はＣ１６アルケニル）、Ｃ２−Ｃ１６アルキニル（例えば、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８、Ｃ９、Ｃ１０、Ｃ１１、Ｃ１２、Ｃ１３、Ｃ１４、Ｃ１５、又はＣ１６アルキニル）、Ｃ１−Ｃ１５アルコキシ（Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８、Ｃ９、Ｃ１０、Ｃ１１、Ｃ１２、Ｃ１３、Ｃ１４、又はＣ１５アルコキシ）、メタノイル（−ＣＯＨ）、カルボキシ（−ＣＯ２Ｈ）、ニトロ（−ＮＯ２）、シアノ（−ＣＮ）、アミノ（−ＮＨ２）、カルバモイル（−ＣＯＮＨ２）、エチニル（−ＣＣＨ）、−ＣＦ３、−ＣＦ２ＣＦ３、−ＯＣＦ３、−ＯＣＦ２ＣＦ３、スルホ（−ＳＯ３Ｈ）、−ＳＯ２−Ｒ３、−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ３、又は−Ｏ−Ｒ３の１又は２以上（例えば、０、１、２、３、４、５、又は６）で置換されていてもよい。
【００４５】
Ｒ３は、−ＮＲａＲｂ、アリール、シクロアルキル（例えば、シクロヘプチル）、ヘテロシクリル（例えば、１−アゼパニル）、ヘテロアリール（例えば、ピリジニル）、Ｃ１−Ｃ７アルキル（例えば、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、又はＣ７アルキル）、Ｃ２−Ｃ７アルケニル（例えば、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、又はＣ７アルケニル）、Ｃ２−Ｃ７アルキニル（例えば、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、又はＣ７アルキニル）、又はＣ１−Ｃ６アルコキシ（Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、又はＣ６アルコキシ）であり、アリール、シクロアルキル（例えば、シクロヘプチル）、ヘテロシクリル（例えば、１−アゼパニル）、ヘテロアリール（例えば、ピリジニル）、Ｃ１−Ｃ７アルキル、Ｃ２−Ｃ７アルケニル、Ｃ２−Ｃ７アルキニル、又はＣ１−Ｃ６アルコキシは、ハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、又はＩ）、ヒドロキシ（−ＯＨ）、Ｃ１−Ｃ５アルキル（例えば、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、又はＣ５アルキル）、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ（Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、又はＣ４アルコキシ）、メタノイル（−ＣＯＨ）、カルボキシ（−ＣＯ２Ｈ）、ニトロ（−ＮＯ２）、シアノ（−ＣＮ）、アミノ（−ＮＨ２）、カルバモイル（−ＣＯＮＨ２）、エチニル（−ＣＣＨ）、−ＣＦ３、−ＣＦ２ＣＦ３、−ＯＣＦ３、−ＯＣＦ２ＣＦ３、又はスルホ（−ＳＯ３Ｈ）の１又は２以上（例えば、０、１、２、３、４、５、又は６）で置換されていてもよい。
【００４６】
Ｒａは、１価のＨ、アリール（例えば、フェニル）、シクロアルキル（例えば、シクロヘキシル）、ヘテロシクリル、ヘテロアリール（例えば、ピリジニル）、Ｃ１−Ｃ７アルキル（例えば、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、又はＣ７アルキル）、Ｃ２−Ｃ７アルケニル（例えば、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、又はＣ７アルケニル）、Ｃ２−Ｃ７アルキニル（例えば、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、又はＣ７アルキニル）、又はＣ１−Ｃ６アルコキシ（Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、又はＣ６アルコキシ）であり、Ｈ、アリール、シクロアルキル、ヘテロシクリル、ヘテロアリール（例えば、ピリジニル及び１−メチルイミダゾリル）、Ｃ１−Ｃ７アルキル、Ｃ２−Ｃ７アルケニル、Ｃ２−Ｃ７アルキニル、又はＣ１−Ｃ６アルコキシは、ハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、又はＩ）、ヒドロキシ（−ＯＨ）、Ｃ１−Ｃ５アルキル（例えば、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、又はＣ５アルキル）、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ（Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、又はＣ４アルコキシ）、メタノイル（−ＣＯＨ）、カルボキシ（−ＣＯ２Ｈ）、ニトロ（−ＮＯ２）、シアノ（−ＣＮ）、アミノ（−ＮＨ２）、カルバモイル（−ＣＯＮＨ２）、エチニル（−ＣＣＨ）、−ＣＦ３、−ＣＦ２ＣＦ３、−ＯＣＦ３、−ＯＣＦ２ＣＦ３、又はスルホ（−ＳＯ３Ｈ）の１又は２以上（例えば、０、１、２、３、４、５、又は６）で置換されていてもよい。
【００４７】
Ｒｂは、１価のＨ、アリール（例えば、フェニル）、シクロアルキル（例えば、シクロヘキシル）、ヘテロシクリル、ヘテロアリール（例えば、ピリジニル）、Ｃ１−Ｃ７アルキル（例えば、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、又はＣ７アルキル）、Ｃ２−Ｃ７アルケニル（例えば、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、又はＣ７アルケニル）、Ｃ２−Ｃ７アルキニル（例えば、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、又はＣ７アルキニル）、又はＣ１−Ｃ６アルコキシ（Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、又はＣ６アルコキシ）であり、Ｈ、アリール、シクロアルキル、ヘテロシクリル、ヘテロアリール（例えば、ピリジニル及び１−メチルイミダゾリル）、Ｃ１−Ｃ７アルキル、Ｃ２−Ｃ７アルケニル、Ｃ２−Ｃ７アルキニル、又はＣ１−Ｃ６アルコキシは、ハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、又はＩ）、ヒドロキシ（−ＯＨ）、Ｃ１−Ｃ５アルキル（例えば、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、又はＣ５アルキル）、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ（Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、又はＣ４アルコキシ）、メタノイル（−ＣＯＨ）、カルボキシ（−ＣＯ２Ｈ）、ニトロ（−ＮＯ２）、シアノ（−ＣＮ）、アミノ（−ＮＨ２）、カルバモイル（−ＣＯＮＨ２）、エチニル（−ＣＣＨ）、−ＣＦ３、−ＣＦ２ＣＦ３、−ＯＣＦ３、−ＯＣＦ２ＣＦ３、又はスルホ（−ＳＯ３Ｈ）の１又は２以上（例えば、０、１、２、３、４、５、又は６）で置換されていてもよい。
【００４８】
Ｒ２が、メタノイル（−ＣＯＨ）、カルボキシ（−ＣＯ２Ｈ）、アミノ（−ＮＨ２）、Ｃ１−Ｃ１６アルキル（例えば、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８、Ｃ９、Ｃ１０、Ｃ１１、Ｃ１２、Ｃ１３、Ｃ１４、Ｃ１５、又はＣ１６アルキル）、Ｃ２−Ｃ１６アルケニル（例えば、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８、Ｃ９、Ｃ１０、Ｃ１１、Ｃ１２、Ｃ１３、Ｃ１４、Ｃ１５、又はＣ１６アルケニル）、Ｃ２−Ｃ１６アルキニル（例えば、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８、Ｃ９、Ｃ１０、Ｃ１１、Ｃ１２、Ｃ１３、Ｃ１４、Ｃ１５、又はＣ１６アルキニル）、Ｃ１−Ｃ１５アルコキシ（Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８、Ｃ９、Ｃ１０、Ｃ１１、Ｃ１２、Ｃ１３、Ｃ１４、又はＣ１５アルコキシ）の１又は２以上での置換を含む場合、メタノイル（−ＣＯＨ）、カルボキシ（−ＣＯ２Ｈ）、アミノ（−ＮＨ２）、Ｃ１−Ｃ１６アルキル（例えば、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８、Ｃ９、Ｃ１０、Ｃ１１、Ｃ１２、Ｃ１３、Ｃ１４、Ｃ１５、又はＣ１６アルキル）、Ｃ２−Ｃ１６アルケニル（例えば、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８、Ｃ９、Ｃ１０、Ｃ１１、Ｃ１２、Ｃ１３、Ｃ１４、Ｃ１５、又はＣ１６アルケニル）、Ｃ２−Ｃ１６アルキニル（例えば、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８、Ｃ９、Ｃ１０、Ｃ１１、Ｃ１２、Ｃ１３、Ｃ１４、Ｃ１５、又はＣ１６アルキニル）、Ｃ１−Ｃ１５アルコキシ（Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８、Ｃ９、Ｃ１０、Ｃ１１、Ｃ１２、Ｃ１３、Ｃ１４、又はＣ１５アルコキシ）のそれぞれは、ハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、又はＩ）、ヒドロキシ（−ＯＨ）、Ｃ１−Ｃ４アルキル（例えば、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、又はＣ４アルキル）、Ｃ２−Ｃ４アルケニル（例えば、Ｃ２、Ｃ３、又はＣ４アルケニル）、Ｃ２−Ｃ４アルキニル（例えば、Ｃ２、Ｃ３、又はＣ４アルキニル）、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ（Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、又はＣ４アルコキシ）、メタノイル（−ＣＯＨ）、カルボキシ（−ＣＯ２Ｈ）、ニトロ（−ＮＯ２）、シアノ（−ＣＮ）、アミノ（−ＮＨ２）、−ＮＨ（Ｃ１−Ｃ４アルキル）（例えば、−ＮＨＣＨ２ＣＨ３）、−Ｎ（Ｃ１−Ｃ４アルキル）（Ｃ１−Ｃ４アルキル）（例えば、−Ｎ（ＣＨ３）２）、カルバモイル（−ＣＯＮＨ２）、エチニル（−ＣＣＨ）、−ＣＦ３、−ＣＦ２ＣＦ３、−ＯＣＦ３、−ＯＣＦ２ＣＦ３、スルホ（−ＳＯ３Ｈ）、又は−Ｒｃの１又は２以上（例えば、０、１、２、３、４、５、又は６）で独立に置換されていてもよい。
【００４９】
Ｒｃは、選択ごとに同じでも異なってもよく、−ＣＯ−ＯＣＨ３（メチルカルボキシ）、−ＣＯ−ＮＲｆＲｇ、−ＳＯ２−ＮＲｆＲｇ、−ＮＲｆＲｇ、−ＮＨ−ＣＯ−ＣＨ３、−ＮＨ−ＣＯ−ＮＲｆＲｇ、−ＮＨ−ＣＯ−ＯＣＨ３、アリール、シクロアルキル、ヘテロシクリル、ヘテロアリール、５〜７員の単環式ヘテロシクリル、５〜７員の単環式ヘテロアリール、テトラゾリル（例えば、５−テトラゾリル、２−テトラゾリル、又は１−テトラゾリル）、トリアゾリル（例えば、１−トリアゾリル、２−トリアゾリル、又は４−トリアゾリル）、イミダゾリル（例えば、１−イミダゾリル）、ピロリル（例えば、１−ピロリル）、ピロリジニル（例えば、１−ピロリジニル）、ピペリジル（例えば、１−ピペリジル）、ピペラジニル（例えば、１−ピペラジニル）、モルホリニル（例えば、４−モルホリニル）、ピリジル（例えば、２−ピリジル）、ピラジニル（例えば、２−ピラジニル）、ピリミジニル（例えば、４−ピリミジニル）、チエニル、フリル、ピラニル、ピラゾリル、イソチアゾリル、イソオキサゾリル、ピリダジニル、フラザニル、ピロリニル、イミダゾリジニル、イミダゾリニル、ピラゾリジニル、又はピラゾリニルであってもよく、−ＣＯ−ＯＣＨ３（メチルカルボキシ）、−ＣＯ−ＮＲｆＲｇ、−ＳＯ２−ＮＲｆＲｇ、−ＮＲｆＲｇ、−ＮＨ−ＣＯ−ＣＨ３、−ＮＨ−ＣＯ−ＮＲｆＲｇ、−ＮＨ−ＣＯ−ＯＣＨ３、アリール、シクロアルキル、ヘテロシクリル、ヘテロアリール、５〜７員の単環式ヘテロシクリル、５〜７員の単環式ヘテロアリール、テトラゾリル（例えば、５−テトラゾリル、２−テトラゾリル、又は１−テトラゾリル）、トリアゾリル（例えば、１−トリアゾリル、２−トリアゾリル、又は４−トリアゾリル）、イミダゾリル（例えば、１−イミダゾリル）、ピロリル（例えば、１−ピロリル）、ピロリジニル（例えば、１−ピロリジニル）、ピペリジル（例えば、１−ピペリジル）、ピペラジニル（例えば、１−ピペラジニル）、モルホリニル（例えば、４−モルホリニル）、ピリジル（例えば、２−ピリジル）、ピラジニル（例えば、２−ピラジニル）、ピリミジニル（例えば、４−ピリミジニル）、チエニル、フリル、ピラニル、ピラゾリル、イソチアゾリル、イソオキサゾリル、ピリダジニル、フラザニル、ピロリニル、イミダゾリジニル、イミダゾリニル、ピラゾリジニル、又はピラゾリニルは、ハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、又はＩ）、ヒドロキシ（−ＯＨ）、Ｃ１−Ｃ４アルキル（例えば、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、又はＣ４アルキル）、Ｃ２−Ｃ４アルケニル（例えば、Ｃ２、Ｃ３、又はＣ４アルケニル）、Ｃ２〜Ｃ４アルキニル（例えば、Ｃ２、Ｃ３、又はＣ４アルキニル）、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ（Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、又はＣ４アルコキシ）、アリール、シクロアルキル、ヘテロシクリル、ヘテロアリール、メタノイル（−ＣＯＨ）、カルボキシ（−ＣＯ２Ｈ）、ニトロ（−ＮＯ２）、シアノ（−ＣＮ）、アミノ（−ＮＨ２）、カルバモイル（−ＣＯＮＨ２）、エチニル（−ＣＣＨ）、−ＣＦ３、−ＣＦ２ＣＦ３、−ＯＣＦ３、−ＯＣＦ２ＣＦ３、又はスルホ（−ＳＯ３Ｈ）の１又は２以上（例えば、０、１、２、３、４、５、６、又は７）で置換されていてもよい。
【００５０】
Ｒｆは、選択ごとに同じでも異なってもよく、Ｈ又はＣ１−Ｃ４アルキル（例えば、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、又はＣ４アルキル）であってもよく。Ｒｇは、選択ごとに同じでも異なってもよく、Ｈ又はＣ１−Ｃ４アルキル（例えば、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、又はＣ４アルキル）であってもよい。
【００５１】
一態様において、式（Ｉ）の化合物は、Ｆ３を除外することができる：
【００５２】
【化３】
2021528368.tif 000005
【００５３】
好ましくは、Ｘ１は、ＲＸで置換されている−ＮＨ−、又は−（ＣＨ２）−である。好ましくは、Ｒ１は、１つのハロゲンでメタ置換されているアリール、アリール、Ｃ１アルキルでメタ置換されているアリール、１つのハロゲンでオルト置換されているアリール、−ＣＦ３でメタ置換されているアリール、Ｃ１アルキルでパラ置換されているアリール、Ｃ１アルコキシでメタ置換されているアリール、Ｃ１アルコキシでパラ置換されているアリール、Ｃ１アルキルでオルト置換されているアリール、１つのハロゲンでメタ置換されているアルキル−アリール、Ｃ３アルキル又はＣ４アルキルであり、好ましいハロゲンはＦである。好ましくは、Ｒ２は、ＳＯ２−Ｒ３でメタ置換され、Ｃ１アルキルでパラ置換されているアリール、ＳＯ２−Ｒ３でメタ置換されているアリール、−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ３でメタ置換され、Ｃ１アルキルでパラ置換されているアリール、アリール、アルキル−ヘテロシクリル（メチル−ベンゾジオキソリルなど）、ヘテロシクリル（ベンゾジオキソリルなど）、ＳＯ２−Ｒ３でメタ置換され、Ｃ１アルキルでオルト置換されているアリール、ＳＯ２−Ｒ３でメタ置換され、Ｃ３アルキルでパラ置換されているアリール、ＳＯ２−Ｒ３でメタ置換され、Ｃ２アルコキシでパラ置換されているアリール、ＳＯ２−Ｒ３でメタ置換され、−Ｏ（（ＣＨ２）２）−Ｎ（ＣＨ３）２でパラ置換されているアリール、ＳＯ２−Ｒ３でメタ置換され、Ｃ５アルキルでパラ置換されているアリール、ＳＯ２−Ｒ３でメタ置換され、−Ｏ（（ＣＨ２）３）−Ｎ（ＣＨ３）２でパラ置換されているアリール、ＳＯ２−Ｒ３でメタ置換され、−Ｏ（（ＣＨ２）６）−Ｎ（ＣＨ３）２でパラ置換されているアリール、ＳＯ２−Ｒ３でメタ置換され、−Ｏ（（ＣＨ２）８）−Ｎ（ＣＨ３）２でパラ置換されているアリール、ＳＯ２−Ｒ３でメタ置換され、−Ｏ（（ＣＨ２）４）−Ｎ（ＣＨ３）２でパラ置換されているアリール、又はＳＯ２−Ｒ３でメタ置換され、Ｃ２アルコキシでパラ置換されているアリールである。好ましくは、Ｒｘはメチルである。好ましくは、Ｒ３は、Ｃ４−７ヘテロシクリル、−ＮＲａＲｂ（ＲａはＣ２アルキルであり、ＲｂはＣ２アルキルである）、−ＮＲａＲｂ（ＲａはＣ３アルキルであり、ＲｂはＨである）、−ＮＲａＲｂ（Ｒａはシクロアルキルであり、ＲｂはＨである）、又は−ＮＲａＲｂ（Ｒａはシクロアリールであり、ＲｂはＨである）である。Ｒ１、Ｒ２、Ｘ１、Ｒｘ及びＲ３のこれらの好ましい選択の並べ替え及び組合せもすべて含まれる。
【００５４】
好ましくは、化合物は、ＲＡＳ配列、又はＲＡＳ配列の１若しくは２以上のアミノ酸と相互作用することができ、特に化合物は、（例えば、共有結合、イオン結合、ファンデルワールス力、疎水性相互作用、立体相互作用、親水性相互作用（hydrophylic interaction）、水素結合、又はその組合せを介して）ＲＡＳ参照配列における以下のアミノ酸の１又は２以上と相互作用するのに適している又は相互作用することができる：ＩＬＥ  ２１、ＩＬＥ  ２４、ＧＬＮ  ２５、ＨＩＳ  ２７、ＶＡＬ  ２９、ＬＹＳ  ３１、ＡＳＰ  ３３、ＰＲＯ  ３４、ＴＨＲ  ３５、ＩＬＥ  ３６、ＧＬＵ  ３７、ＡＳＰ  ３８、ＳＥＲ  ３９、ＴＹＲ  ４０、ＡＲＧ  ４１、ＬＹＳ  ４２、ＬＥＵ  ５６、ＴＹＲ  ６４、ＭＥＴ  ６７、ＧＬＹ  １３、ＧＬＹ  １５、ＬＹＳ  １６、ＳＥＲ  １７、ＡＬＡ  １８、ＬＥＵ  １９、ＩＬＥ  ２１、ＧＬＮ  ２２、ＨＩＳ  ２７、ＰＨＥ  ２８、ＶＡＬ  ２９、ＡＳＰ  ３０、ＬＹＳ  ３１、ＴＹＲ  ３２、ＡＳＰ  ３３、ＰＲＯ  ３４、ＴＨＲ  ３５、ＡＳＰ  ３８、ＴＹＲ  ４０、ＡＳＰ  ５７、又はＡＬＡ  １４６。
【００５５】
ＲＡＳにおける活性化変異に関連する又はＲＡＳ活性の低減によって治療可能な疾患としては、がん及び腫瘍、特に活性化ＲＡＳ変異を有すると同定されたものが挙げられる。患者由来の生検試料をＲＡＳ阻害剤で処置する前に、試料内の１又は２以上の変異ＲＡＳ遺伝子の検出などによって試験するのが望ましいことがある。図１は、変異ＫＲＡＳ遺伝子を有することがわかっている様々ながん及び腫瘍を記載している。ＲＡＳ阻害剤で治療することができる他の疾患としては、毛細血管奇形−ＡＶ奇形症候群、自己免疫性リンパ増殖症候群、心臓・顔・皮膚症候群、遺伝性歯肉線維腫症１型、神経線維腫症１型、ヌーナン症候群、コステロ症候群、レジウス症候群、及び多発性黒子症を伴うヌーナン症候群が挙げられる。
【００５６】
ＲＡＳ阻害剤は、医薬組成物として投与することができる。医薬組成物は、静脈内、皮内、皮下、経口、吸入、経皮、経粘膜、及び直腸投与を含めて、その所期の投与経路と適合性があるように製剤化される。投与後に、有効性についての試験、次に１又は２以上の投与及び試験ステップを行うことができる。
【００５７】
「薬学的に許容される担体」としては、薬剤投与と適合性がある、あらゆる溶媒、分散媒、コーティング、抗細菌剤及び抗真菌剤、等張剤及び吸収遅延剤、固体賦形剤などが挙げられる。そのような担体又は希釈剤の好ましい例としては、水、生理食塩水、リンゲル液及びデキストロース溶液が挙げられる。補助的活性化合物を組成物に組み込むこともできる。非経口投与に使用される溶液及び懸濁液としては、注射用水、生理食塩液、ポリエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコール又は他の合成溶媒などの無菌希釈剤；ベンジルアルコール又はメチルパラベンなどの抗細菌剤；アスコルビン酸又は重亜硫酸ナトリウムなどの抗酸化剤；アセテート、シトレート又はホスフェートなどの緩衝剤、及び塩化ナトリウム又はデキストロースなどの等張化剤を挙げることができる。ｐＨは、塩酸又は水酸化ナトリウムなどの酸又は塩基で調整することができる。非経口調製物を、ガラス又はプラスチックで作製されたアンプル、使い捨て注射器又は多回投与バイアルに封入することができる。
【００５８】
医薬組成物は、静脈内、皮内、皮下、経口、吸入、経皮、経粘膜、及び直腸投与を含めて、その所期の投与経路と適合性があるように製剤化される。非経口、皮内又は皮下適用に使用される溶液及び懸濁液としては、注射用水、生理食塩液、ポリエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコール又は他の合成溶媒などの無菌希釈剤；ベンジルアルコール又はメチルパラベンなどの抗細菌剤；アスコルビン酸又は重亜硫酸ナトリウムなどの抗酸化剤；アセテート、シトレート又はホスフェートなどの緩衝剤、及び塩化ナトリウム又はデキストロースなどの等張化剤を挙げることができる。ｐＨは、塩酸又は水酸化ナトリウムなどの酸又は塩基で調整することができる。
【００５９】
好ましい投与は、散剤、錠剤若しくはカプセル剤、経口溶液若しくは懸濁液、又は舌下若しくはバッカル錠を含む形態としての経口投与である。代替の投与形態としては、直腸坐剤、吸入、硬膜外、皮下、点鼻、経粘膜、及び皮内剤形が挙げられる。単位剤形による投与が好ましい。単位剤形の例としては、錠剤（例えば、舌下又はバッカル錠）、カプセル剤（例えば、硬ゼラチン及び軟ゼラチンカプセル剤）などの経口用組成物、経粘膜及び舌下用の貼付剤及びフィルム、予め測定した散剤小包及びサシェ、フレーバー付き及び／又は加糖の水性溶液又は懸濁液が挙げられる。好ましくは、経口単位剤形は、１日１回の投与量として存在する。賦形剤及びアジュバントもおそらく、経口及び非経口の両方で、単位剤形のいずれかに含有させることができる。
【００６０】
２〜３０、３〜２５、又は５〜１４の単位剤形、例えば６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１５、２０、４０、５０又は６０の単位剤形を含むキットなどの多重剤形を提供することができる。好ましくは、多重剤形は、２〜３０日、３〜２５日、又は７〜１４日、例えば４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、２０又は３０日の期間にわたる投与に十分な単位剤形を含む。
【００６１】
注射に適した医薬組成物は、無菌の注射溶液又は分散系の即時調製用の無菌の水性溶液又は分散系を含む。注射に適した医薬組成物に様々な賦形剤を含有させることができる。静脈内投与に好適な担体としては、生理食塩水、静菌性水、CREMOPHOR EL（登録商標）（BASF社; Parsippany, NJ）又はリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）が挙げられる。どの場合でも、組成物は無菌でなければならず、注射器を使用して投与するために流体であるべきである。そのような組成物は、製造及び貯蔵時に安定であるべきであり、細菌や真菌などの微生物による汚染から保護されなければならない。様々な抗細菌剤及び抗真菌剤、例えばパラベン、クロロブタノール、フェノール、アスコルビン酸、及びチメロサールは、微生物汚染を防止することができる。糖などの等張剤、マンニトール（manitol）、ソルビトールなどの多価アルコール、及び塩化ナトリウムを組成物に含めることができる。吸収を遅延させることができる組成物は、モノステアリン酸アルミニウムやゼラチンなどの作用剤を含む。無菌注射溶液は、適切な溶媒中、必要に応じて１種の成分又は複数の成分の組合せと共に、所要量の化合物を組込み、また他の治療成分を組み込んでもよく、次に滅菌を行うことによって調製することができる。無菌の注射溶液を調製するための無菌の固体を調製する方法としては、真空乾燥及び凍結乾燥して固体を得る方法が挙げられる。
【００６２】
局所適用は、皮膚に存在するがん及び潜在的に悪性の新生物、例えばメラノーマ、脂漏性角化症及び日光角化症に効果的でありうる。局所投与のための組成物は、クリーム剤又はローション剤の形をとることができる。
【００６３】
各タイプのＲＡＳ阻害剤化合物の適切な投与量レベルは、一般に患者の体重１ｋｇ当たり約０．０１〜５００ｍｇである。好ましくは、投与量レベルは、約０．１〜約２５０ｍｇ／ｋｇ、より好ましくは約０．５〜約１００ｍｇ／ｋｇである。好適な投与量レベルは、約０．０１〜２５０ｍｇ／ｋｇ、約０．０５〜１００ｍｇ／ｋｇ、又は約０．１〜５０ｍｇ／ｋｇとすることができる。この範囲内で、投与量は、０．０５〜０．５ｍｇ／ｋｇ、０．５〜５ｍｇ／ｋｇ又は５〜５０ｍｇ／ｋｇとすることができる。各タイプの医薬組成物を１日当たり１回又は２回など、１日当たり１〜４回のレジメンで投与することができるが、具体的な投与頻度はＲＡＳ阻害剤のインビボでの半減期に依存する。したがって、各ＲＡＳ阻害剤を１日に１回、週に１回、２又は３週間に１回、１か月に１回、又は６０〜９０日ごとに１回投与することができる。
【００６４】
しかし、いずれか特定の患者の具体的な用量レベル及び投与頻度は、変更することができ、使用する具体的な化合物の活性、その化合物の代謝安定性及び作用の長さ、年齢、体重、全身的健康状態、性別、食事、投与方法及び時期、排泄速度、薬物組合せ、特定の病態の重症度、並びに治療中の患者を含めて、様々な因子に依存する。
【００６５】
動物モデルにおいて効果的な投与量を示す本出願のデータを使用して、ヒトにおける効果的な投与量を決定することもできる。指針は、米国保健社会福祉省から入手可能である（“Guidance for Industry: Estimating the Maximum Safe Starting Dose in Initial Clinical Trials for Therapeutics in Adult Healthy Volunteers” (July 2005) by U.S. Department of Health and Human Services, Food and Drug Administration, Center for Drug Evaluation and Research CDER）。
【００６６】
ＲＡＳ阻害剤の投与を受ける対象は、身体の異なる部分、特にリンパ節へのがんの転移がないか患者を検査することによって、ＲＡＳ阻害剤ががんを治療するのに効果的であったかどうかを決定するために試験されることがある。生検、内視鏡検査、血液試験又はＸ線若しくはＣＴ走査などの画像診断試験などの任意の好適な診断試験を使用することができる。ＲＡＳ阻害剤の投与及びその後の試験を、所望の治療結果が達成されるまで繰り返すことができる。同様に、対象は、潜在的に悪性の腫瘍、がん又は新生物が効果的に治療されたかどうかを腫瘍、がん又は新生物のサイズの縮小、又は消失によって決定するために試験されることがある。
【００６７】
本明細書に記載されている医薬組成物は、他の治療上有効な化合物をさらに含んでもよく、並びに／又はがん及び腫瘍の治療に適した本明細書に記されている物理的技法と組み合わせて使用してもよい。よく使用される治療上有効な化合物の例としては、ビノレルビン（Navelbine（登録商標））、ミトマイシン（mytomycin）、カンプトテシン、シクロホスファミド（cyclyphosphamide）（Cytoxin（登録商標））、メトトレキセート、クエン酸タモキシフェン、５−フルオロウラシル、イリノテカン、ドキソルビシン、フルタミド、パクリタキセル（Taxol（登録商標））、ドセタキセル、ビンブラスチン、メシル酸イマチニブ（Gleevec（登録商標））、アントラサイクリン、レトロゾール、三酸化ヒ素（Trisenox（登録商標））、アナストロゾール、パモ酸トリプトレリン、オゾガマイシン、イリノテカン塩酸塩（Camptosar（登録商標））、生BCG（Pacis（登録商標））、酢酸ロイプロリドインプラント（Viadur）、ベキサロテン（Targretin（登録商標））、エキセメスタン（Aromasin（登録商標））、トポテカン塩酸塩（Hycamtin（登録商標））、ゲムシタビンHCL（Gemzar（登録商標））、ダウノルビシン塩酸塩（ダウノルビシンHCL（登録商標））、ゲムシタビンHCL（Gemzar（登録商標））、クエン酸トレミフェン（Fareston）、カルボプラチン（Paraplatin（登録商標））、シスプラチン（Platinol（登録商標）及びPlatinol-AQ（登録商標））、オキサリプラチン及び他のあらゆる白金含有オンコロジー薬、トラスツズマブ（Herceptin（登録商標））、ラパチニブ（Tykerb（登録商標））、ゲフィチニブ（gefitinb）（Iressa（登録商標））、セツキシマブ（Erbitux（登録商標））、パニツムマブ（Vectibix（登録商標））、テムシロリムス（Torisel（登録商標））、エベロリムス（Afinitor（登録商標））、バンデタニブ（Zactima（商標））、ベムラフェニブ（Zelboraf（商標））、クリゾチニブ（Xalkori（登録商標））、ボリノスタット（Zolinza（登録商標））、ベバシズマブ（Avastin（登録商標））、免疫療法、抗がん抗体、抗ヌクレオリン剤、放射線療法、温熱療法、遺伝子療法及び光線力学的療法が挙げられる。そのような作用剤又は治療を本明細書に記載されている１又は２以上のＲＡＳ阻害剤の前に、後に、又はそれと同時に投与することができる。特に好ましいのは、免疫療法（ＰＤ−１を遮断する免疫チェックポイント阻害剤であるペムブロリズマブ（pembrolizumab）又はニボルマブ（nivolumab）など）又は抗ヌクレオリン剤（ＡＳ１４１１又は金ナノ粒子にコンジュゲートしたＡＳ１４１１など）との投与である。
【００６８】
腫瘍、がん又は転移性がんを発症するおそれがあるいかなる哺乳類も、本明細書に記載されている方法によって治療することができる。ヒトは、治療に好ましい哺乳類である。治療することができる他の哺乳類としては、マウス、ラット、ヤギ、ヒツジ、ラクダ、ウシ、ウマ、及びイヌ又はネコなどのコンパニオンアニマルが挙げられる。治療を必要とする対象を、腫瘍又はがんの診断によって識別することができる。乳がん、卵巣がん、頸部がん、皮膚がん、肺がん、結腸がん、膵がん、結腸直腸がん、甲状腺がん、セミノーマ、メラノーマ、肉腫、膀胱がん、肝がん、腎がん、神経膠腫、骨髄がん（例えば、ＭＤＳ、ＩＭＦ、ＡＭＬ、又はＣＭＬ）又はリンパ障害（例えば、ＡＬＬ、ＮＨＬ、ホジキン細胞又はヘアリー細胞）を含めて、いかなる形態の腫瘍又はがんも治療することができる。転移性がんも治療することができる。特に転移を受けやすいがんとしては、肺がん、メラノーマ、結腸がん、腎細胞癌、前立腺がん、頸部がん、膀胱がん、直腸がん、食道がん、肝がん、口及び咽喉がん、多発性骨髄腫、卵巣がん、及び胃がんが挙げられる。治療は、転移性がんを経験している患者の治療とすることができる。がんを有するが、転移が確認されるより前の患者に、転移を予防するために治療を実施することもできる。同様に、潜在的に悪性の新生物を発症するおそれがあるいかなる哺乳類も、本明細書に記載されている方法によって治療することができる。
［実施例］
【実施例１】
【００６９】
化合物の合成
式Ｉの化合物は、まず、対応するアミンＲ１−ＮＨ２及びＲ２−ＮＨ２を調製し、次に環式無水物の形をしていてもよい二酸Ｘ１（ＣＨ２ＣＯＯＨ）２との逐次反応を行うことによって調製することができる。後続の実施例において、Ｒ１及びＲ２は、置換フェニル基を含む。第１の実施例において、置換フェニル基はそれぞれ、「Ａ」及び「Ｂ」で標識されている。
【００７０】
化合物Ｆ３の合成：
【００７１】
【化４】
2021528368.tif 000006
【００７２】
スルホンアミド断片の合成：
【００７３】
【化５】
2021528368.tif 000007
【００７４】
スキーム１．  Ｆ３スルホンアミド断片の合成
Ｆ３の合成は、スルホンアミド４（Ｆ３の環Ｂ）を構築することから始めた。スルホンアミドは、市販のスルホニルクロリド１を２当量のアミン２で処理することによって調製した。合成は、接触水素化条件下でニトロ３を還元することによって優れた全収率で完了した。２を好適な第二級又は第三級アミンで置き換えることによって、様々なスルホンアミド誘導体を調製した。
【００７５】
いくつかの類似体の場合、スルホニルクロリドは市販されておらず、ワンステップで調製した。例として、以下の化合物９の実験の部を参照のこと。化合物４は公知であり、改変された文献調製法によって調製した（Han, C. G.; Kim, J. U.; Yoon, J. H.; Lee, S. U.; Kim, N. D.; Jung, Y. S.; Lee, Y. H.; Park, S. J.; Shin, J. C.; Yang, J. W.  “2-Phenyl-4-[3-(substituted-sulfonyl)anilino]quinazoline derivative for the treatment of hepatitis C and preparative method thereof.” KR patent. KR 2012048223, May 15, 2012）。
【００７６】
実験の部：
１−（（２−メチル−５−ニトロフェニル）スルホニル）アゼパン３。０℃で７５ｍＬのＴＨＦ中２．５０ｇ（１０．６ｍｍｏｌ）のスルホニルクロリド１の溶液に、２．４ｍＬ（２．１ｇ、２１．２ｍｍｏｌ）のヘキサメチレンイミン２を滴下して加えた。得られた溶液を０℃で１．５時間、及び室温で２時間撹拌すると、その時点で、ＴＬＣによって、反応が完了したことが示された。９０ｍＬの水をゆっくり添加し、５分間撹拌することによって、反応を停止させた。分液し、水性相を酢酸エチル１００ｍＬずつで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、乾燥し（硫酸ナトリウム）、（酢酸エチルですすいだ）シリカゲルプラグで濾過した。溶媒を真空中で除去して、３．０４ｇ（９６％）の３を暗黄色油として得た。
【００７７】
３−（アゼパン−１−イルスルホニル）−４−メチルアニリン４。１２５ｍＬの酢酸エチル−メタノール１：１溶液中３．０４ｇ（１０．３ｍｍｏｌ）のアリールニトロ３の溶液に、４００ｍｇの１０％パラジウム炭素を注意深く添加した。懸濁液を水素ガス（バルーン）の雰囲気下で１６時間撹拌した。次いで、懸濁液を、（酢酸エチルですすいだ）セライトプラグで濾過し、真空中で濃縮して、２．８９ｇ（１００％）のアニリン４を無色油として得た。
【００７８】
他のアニリンは、合成されたか又は市販のいずれかのスルホニルクロリドから、アミン２の代わりに好適な第二級又は第三級アミンを使用することによって調製することができる。
【００７９】
Ｆ３及び関連誘導体の合成：
【００８０】
【化６】
2021528368.tif 000008
【００８１】
スキーム２．  Ｆ３及び関連誘導体の合成
スルホンアミド４を得た上で、Ｆ３の合成は、市販のイミノ二酢酸５をマイクロ波照射により無水酢酸と共に加熱することによって、反応性の環式無水物を生成することから始めた（Burke, M. D.; Dick, G. R.; Knapp, D. M.; Gillis, E. P.; Klubnick, J. A.  “Methods for forming protected organoboronic acids.”  US 20110201806 A1. Aug 18, 2011）。アニリン４を用いて開環すると、所望の酸（６）が好収率で得られた（Henry, D. W. “A facile synthesis of piperazines from primary amines.” J. Heterocyclic Chem. 1966, 3, 503-511、Yamaoka, N.; Kodama, H.; Izuhara, Y.; Miyata, T.; Meguro, K.  “Structure-activity relationships of new N-acylanthranilic acid derivatives as plasminogen activator inhibitor-1 inhibitors.”Chem.Pharm. Bull.. 2011, 59, 215-224）。Ｆ３の合成は、ＨＡＴＵ／ＴＥＡプロトコルを使用して、酸６をアニリン７とカップリングさせることによって完了した。本発明者らは、ＥＤＣＩが不十分な収率をもたらすことを見出した。また、アミド形成ステップにおけるアニリン４及び７を交換することができる（すなわち、アニリン４又は７を第１のステップにおいて使用することができる）。
【００８２】
実験の部：
２−（（２−（（３−（アゼパン−１−イルスルホニル）−４−メチルフェニル）アミノ）−２−オキソエチル）（メチル）アミノ）酢酸６。３ｍＬの無水酢酸中５００ｍｇ（３．４０ｍｍｏｌ）のイミノ二酢酸５の溶液を、マイクロ波照射により１５０℃で１時間撹拌した。室温に冷却した後、溶媒を真空中で除去し、粗中間体を高真空下にて５時間乾燥した。中間体を２０ｍＬのＴＨＦに溶解し、得られた溶液に、９１３ｍｇ（３．４０ｍｍｏｌ）のアニリン４を添加した。反応物を、マイクロ波照射により１００℃で４時間撹拌した。室温に冷却した後、混合物を、酢酸エチル、次いで酢酸エチル−メタノール１：１溶液ですすいだシリカゲルプラグで濾過した。酢酸エチル−メタノール１：１溶液を含む画分を真空中で濃縮して、３５０ｍｇの６（２６％）を淡褐色固体として得た。
【００８３】
Ｎ−（３−（アゼパン−１−イルスルホニル）−４−メチルフェニル）−２−（（２−（（３−フルオロフェニル）アミノ）−２−オキソエチル）（メチル）アミノ）−アセトアミドＦ３。４ｍＬのＤＭＦ中１５９ｍｇ（０．４００ｍｍｏｌ）の酸６及び０．０８ｍＬ（８９ｍｇ、０．８００ｍｍｏｌ）のアニリン７の溶液に、２２８ｍｇ（０．６００ｍｍｏｌ）のＨＡＴＵ、次いで０．１７ｍＬ（１２１ｍｇ、１．２０ｍｍｏｌ）のトリエチルアミンを添加した。反応溶液を１８時間撹拌し、次いで４０ｍＬの水で希釈した。５分間撹拌した後、溶液を酢酸エチル３０ｍＬずつで３回抽出した。合わせた有機層を水及びブラインで洗浄した。硫酸ナトリウムで脱水した後、溶媒を真空中で除去し、粗製物をシリカゲル（４ｇ、Combiflash、１１分かけて０→１００％ヘキサン−酢酸エチル）によるクロマトグラフィーにかけて、９３ｍｇ（４７％）のＦ３を白色泡状物として得た。
【００８４】
誘導体を調製するために開発された追加の化学反応：
ＪＡＢ−７−１６０の合成
ＪＡＢ−７−１６０、ＪＡＢ−７−１６０の同族体であるＪＡＢ−７−１５８及びＪＡＢ−７−１８１を含めて、いくつかの化合物を異なるプロトコルで調製した。これらは、高度に官能化されたアニリンを調製するものであった。
【００８５】
【化７】
2021528368.tif 000009
【００８６】
スキーム３．  ＪＡＢ−７−１６０の合成
合成は、アリールクロリド８をクロロスルホン酸中で終夜加熱して、スルホニルクロリド９を生成することから始めた（Kil, K.-E.; Poutiainen, P.; Zhang, Z.; Zhu, A.; Kuruppu, D.; Prabhakar, S.; Choi, J.-K.; Tannous, B. A.; Brownell, A.-L.  “Synthesis and evaluation of N-(methylthiophenyl)picolinamide derivatives as PET radioligands for metabotropic glutamate receptor subtype 4.” Bioorg. Med. Chem. Lett. 2016, 26, 133-139、Aono, T.; Endo, M. “2-Chloro-5-nitrobenzenesulfonamide.” JP patent. JP 60233051, Nov 19, 1985）。ヘキサメチレンイミン２で処理して、スルホンアミド１０を好収率で得た。反応を注意深くモニタリングすることが、アリールクロリドの置換を回避するために必要とされた。重要なステップにおいて、ナトリウムｔｅｒｔ−ブトキシドの存在下でアリールを市販の２−（ジメチルアミノ）エタノールで置換すると、アリールエーテル１１が好収率で得られた。合成は、アリールニトロを水素化し、次にＨＡＴＵ／ＴＥＡプロトコルを利用して、得られたアニリン（１２）を酸１３とカップリングすることによって完了した。アリールクロリド８の代わりに、アリールブロミドを使用してもよい（しかし、アリールフルオリドを使用することはできない）。
【００８７】
誘導体ＪＡＢ−７−１５８、ＪＡＢ−８−５４、ＪＡＢ−８−５５、ＪＡＢ−８−６０、ＪＡＢ−８−６３、及びＪＡＢ−８−６６を、同様の方法によって調製した。
【００８８】
実験の部：
２−クロロ−５−ニトロベンゼン−１−スルホニルクロリド９。３ｍＬのクロロスルホン酸（要注意）中１ｇ（６．３５ｍｍｏｌ）のアリールクロリド８の溶液を１２０℃で１８時間撹拌した。室温に冷却した後、反応物を１５０ｍＬの氷に注意深く滴下して加えた（発熱あり）。水性懸濁液を酢酸エチル７５ｍＬずつで３回抽出した。合わせた有機画分をブラインで洗浄し、乾燥し（硫酸ナトリウム）、真空中で濃縮した。残渣をシリカゲル（１２ｇ、Combiflash、１１分かけて０→５０％ヘキサン−酢酸エチル）によるクロマトグラフィーにかけて、６２０ｍｇ（３８％）の９を低融点の褐色固体として得た。
【００８９】
１−（（２−クロロ−５−ニトロフェニル）スルホニル）アゼパン１０。０℃で３０ｍＬのＴＨＦ中６２０ｍｇ（２．４２ｍｍｏｌ）のスルホニルクロリド９の溶液に、０．３０ｍＬ（２６４ｍｇ、２．６６ｍｍｏｌ）のヘキサメチレンイミン２、次いで０．３３ｍＬ（２４４ｍｇ、２．４２ｍｍｏｌ）のトリメチルアミンを添加した。得られた溶液を室温までゆっくり温めながら５時間撹拌した。ＴＬＣによって、反応が完了したことが示された。３０ｍＬの水をゆっくり添加し、５分間撹拌することによって、反応を停止させた。分液し、水性相を酢酸エチル４０ｍＬずつで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、乾燥し（硫酸ナトリウム）、真空中で濃縮した。残渣をシリカゲル（１２ｇ、Combiflash、１１分かけて０→２０％ヘキサン−酢酸エチル）によるクロマトグラフィーにかけて、６３６ｍｇ（５３％）の１０を黄色固体として得た。
【００９０】
２−（２−（アゼパン−１−イルスルホニル）−４−ニトロフェノキシ）−Ｎ，Ｎ−ジメチルエタンアミン１１。７ｍＬのＤＭＦ中９０ｍｇ（０．９４ｍｍｏｌ）のナトリウムｔｅｒｔ−ブトキシドの溶液に、０．０９ｍＬ（７６ｍｇ、０．８６ｍｍｏｌ）の２−（ジメチルアミノ）エタノールを滴下して加えた。３０分間撹拌した後、４ｍＬのＤＭＦ中３００ｍｇ（０．９４ｍｍｏｌ）のアリールクロリド１０の溶液を反応混合物に添加した。混合物を室温で１８時間撹拌し、次いで１５ｍＬの水を添加することによって停止させた。５分間撹拌した後、水性溶液を酢酸エチル１０ｍＬずつで３回抽出した。合わせた有機層を乾燥し（硫酸ナトリウム）、真空中で濃縮した。残渣をシリカゲル（４ｇ、Combiflash、１１分かけて０→５０％酢酸エチル−メタノール）によるクロマトグラフィーにかけて、２７５ｍｇ（７９％）の１１を褐色油として得た。
【００９１】
３−（アゼパン−１−イルスルホニル）−４−（２−（ジメチルアミノ）エトキシ）アニリン１２。誘導体を、４の調製について記載されている通りに調製した。２５０ｍｇ（０．６７２ｍｍｏｌ）のアリールニトロ１１から、２３６ｍｇ（１００％）の１２を濃シロップとして単離した。
【００９２】
２−（（２−（（３−フルオロフェニル）アミノ）−２−オキソエチル）（メチル）アミノ）酢酸１３。アニリン７をスルホンアミド誘導体の代わりに使用し、粗製物をクロマトグラフィー（シリカゲル、４ｇ、Combiflash、１１分かけて０→２０％ジクロロメタン−メタノール）によって精製した点以外は６の調製について記載されている通りに、誘導体を調製した。５６６ｍｇ（５．１０ｍｍｏｌ）のアニリン７から、５４１ｍｇ（４４％）の１３を褐色泡状物として単離した。
【００９３】
Ｎ−（３−（アゼパン−１−イルスルホニル）−４−（２−（ジメチルアミノ）エトキシ）フェニル）−２−（（２−（（３−フルオロフェニル）アミノ）−２−オキソエチル）−（メチル）アミノ）アセトアミド（ＪＡＢ−７−１６０）。誘導体を、Ｆ３の調製について記載されている通りに調製した。８７ｍｇ（２７％）のＪＡＢ−７−１６０を褐色固体として単離した。
【００９４】
ＪＡＢ−７−１８１の合成
【００９５】
【化８】
2021528368.tif 000010
【００９６】
スキーム４．  ＪＡＢ−７−１８１の合成
合成は、アリールブロミド１４をクロロスルホン酸中で終夜加熱して、スルホニルクロリド１５を生成することから始めた（Kil, K.-E.; Poutiainen, P.; Zhang, Z.; Zhu, A.; Kuruppu, D.; Prabhakar, S.; Choi, J.-K.; Tannous, B. A.; Brownell, A.-L.  “Synthesis and evaluation of N-(methylthiophenyl)picolinamide derivatives as PET radioligands for metabotropic glutamate receptor subtype 4.” Bioorg. Med. Chem. Lett. 2016, 26, 133-139、Aono, T.; Endo, M. “2-Chloro-5-nitrobenzenesulfonamide.” JP patent. JP 60233051, Nov 19, 1985）。ヘキサメチレンイミン２で処理して、スルホンアミド１６を許容される収率で得た。反応を注意深くモニタリングすることが、アリールブロミドの置換を回避するために必要とされた。重要なステップにおいて、アリールブロミド１６と１−ペンチンのパラジウム触媒クロスカップリング（薗頭カップリング）は、定量的収率で進行した。アリールニトロ及びアルキンの同時水素化後に、合成は、ＨＡＴＵ／ＴＥＡプロトコルを利用して、得られたアニリン（１８）を酸１３とカップリングすることによって完了した。
【００９７】
実験の部：
２−ブロモ−５−ニトロベンゼン−１−スルホニルクロリド１５。誘導体を、９の調製について記載されている通りに調製した。１．００ｇ（４．９５ｍｍｏｌ）のアリールニトロ１４から、６５０ｍｇ（４３％）の１５を低融点褐色固体として単離した。
【００９８】
１−（（２−ブロモ−５−ニトロフェニル）スルホニル）アゼパン１６。誘導体を、１０の調製について記載されている通りに調製した。６５０ｍｇ（２．１６ｍｍｏｌ）のスルホニルクロリド１５から、６４０ｍｇ（８１％）の１５を黄色固体として単離した。
【００９９】
１−（（５−ニトロ−２−（ペンタ−１−イン−１−イル）フェニル）スルホニル）アゼパン１７。３ｍＬのＴＨＦ−トリエチルアミン２：１溶液中１００ｍｇ（０．３０２ｍｍｏｌ）のアリールブロミド１６の溶液に、０．０４ｍＬ（２５ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）の１−ペンチン、３．０ｍｇ（０．１５ｍｍｏｌ）のヨウ化銅（Ｉ）及び１１ｍｇ（０．１５ｍｍｏｌ）のビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）ジクロリドを添加した。溶液を脱気し、次いでマイクロ波照射下で８０℃で２時間撹拌した。得られた溶液を室温で終夜撹拌し続け、次いで（酢酸エチルですすいだ）シリカゲルプラグで濾過した。溶媒を真空中で除去し、残渣をシリカゲル（４ｇ、Combiflash、１１分かけて０→１５％ヘキサン、酢酸エチル）によるクロマトグラフィーにかけて、１１１ｍｇ（１００％）の１７を褐色がかった油として得た。
【０１００】
３−（アゼパン−１−イルスルホニル）−４−ペンチルアニリン１８。誘導体を、４の調製について記載されている通りに調製した。１１１ｍｇ（０．３１７ｍｍｏｌ）のアリールニトロ１７から、１００ｍｇ（９７％）の１８を黄色半固体として単離した。
【０１０１】
Ｎ−（３−（アゼパン−１−イルスルホニル）−４−ペンチルフェニル）−２−（（２−（（３−フルオロフェニル）アミノ）−２−オキソエチル）（メチル）アミノ）アセトアミド（ＪＡＢ−７−１８１）。誘導体を、Ｆ３の調製について記載されている通りに調製した。１０５ｍｇ（０．３２４ｍｍｏｌ）のアニリン１８から、４９ｍｇ（２８％）のＪＡＢ−７−１８１を白色泡状物として単離した。
【０１０２】
Ｆ３に加えて、合成した化合物の構造を以下に示す：
【０１０３】
【化９】
2021528368.tif 000011
2021528368.tif 000012
【実施例２】
【０１０４】
化合物の試験
結合アッセイ
Ｆ３／Ｆ３ａ誘導体の組換えＫ−ＲＡＳタンパク質への直接結合。Ｔｈｅｒｍｏｆｌｕｏｒアッセイを行って、組換えＫ−ＲＡＳタンパク質と化合物Ｆ３の間又は組換えＫ−ＲＡＳタンパク質と化合物ＪＡＢ−６−５の間に直接相互作用を検出することができるかどうかをアッセイした。組換えＫ−ＲＡＳ１２ｖタンパク質にガンマＧＴＰＳを加え、結合アッセイにおいて化合物２００ｕＭ／タンパク質５ｕＭの比で使用した。対照化合物Ｃ４は、異なるタンパク質を標的とし、ＲＡＳを結合させるとは予想されなかった。結果は、３連で行われた３回のアッセイに由来するものである。著しい曲線のシフトがＦ３とＪＡＢ−６−５の両方で認められるが、Ｃ４では認められない。予測ｋＤは、曲線から推定することができる：５５．５℃で約２５ｕＭ。結果を図１６に示す。
【０１０５】
３次元軟寒天薬物スクリーニング（インビトロアッセイ）
固形腫瘍の大多数は、上皮細胞から生じる。身体の正常な上皮細胞は、基底膜構造体上で生存／増殖する。そのような細胞をインビトロで増殖させるために、細胞をコーティングされたプラスチック製組織培養容器で２次元培養する。プラスチックへの粘着は、基底膜上での自然な増殖と似ており、細胞に必須の生存シグナルを固体２次元表面とのインテグリン相互作用によりもたらす。これらの非がん細胞は、固体表面から離れて培地に懸濁されている場合、インテグリン生存シグナル伝達を失い、プログラム細胞死の１つのタイプであるアノイキスと呼ばれるプロセスによって死滅する。
【０１０６】
腫瘍細胞には、ＲＡＳなどの腫瘍遺伝子において後天性の変異がある。ＲＡＳにおける変異は、タンパク質の恒常的活性化を引き起こし、この帰結の１つとして、ＲＡＳシグナル伝達がインテグリン生存シグナルを補うので、腫瘍細胞の一部がインテグリン生存シグナルに依存しなくなる。したがって、腫瘍細胞はもはや基底膜上で２次元に増殖する必要がない。この特徴によって、腫瘍細胞は増殖して腫瘍になることが可能になる。また、そのような細胞が、インビトロで３次元培養系中において増殖することも可能になるが、正常細胞ではあり得ない。実際、３次元培養において増殖する能力は、動物において腫瘍を形成する能力と密接な相互関係がある（Colburn NH, Bruegge WF, Bates JR, Gray RH, Rossen JD, Kelsey WH, et al. Correlation of anchorage-independent growth with tumorigenicity of chemically transformed mouse epidermal cells. Cancer Res 1978;38:624-34）。
【０１０７】
したがって、腫瘍細胞の２次元における標準増殖は、必ずしもＲＡＳ機能障害を絶対に必要とするわけではないが、３次元における増殖は、実在の腫瘍と同様に必要とする。これは、ＲＡＳ阻害分子のアッセイが、標準２次元（完全にＲＡＳ依存性であるわけではない）よりも３次元（ＲＡＳ依存性）増殖条件下で増殖する細胞に対して行われている場合に最も感度がよいということを意味する。
【０１０８】
３次元培養の技術的プロセスは、培地中１．６％で融解寒天を調製し、血清を添加して１０％にすることを含む。この寒天培地を、１２ウェルプレートに１ウェル当たり１ｍｌ入れ、固化させる。これは底部寒天であり、ウェルに添加されたいかなる細胞も、プレートのプラスチック底部に触れるのを防止し、すべてが懸濁したままであることを確実にする。一方、残りの寒天培地ストックを４２℃で維持して、固化を防止する。次いで、標的細胞をトリプシン処理により単個細胞浮遊液とし、通常の培地／薬物組合せと混合する。次いで、２／３体積の融解寒天培地を添加し、混合物を底部寒天上に蒔く。寒天／培地は冷えるにつれて固化し、細胞を３次元環境に浮遊させる。典型的には、２週間以内に、腫瘍塊（コロニー）は、寒天に浮遊して生じる。コロニーの数、又はサイズさえも、倒立顕微鏡下で計数し、定量化して、腫瘍塊阻害をアッセイすることができる。
【０１０９】
Ｆ３、ＪＡＢ−６−１７６及びＪＡＢ−８−６０を含めて、合成された化合物を３次元軟寒天薬物スクリーニングで試験した。試験した化合物はすべて、３次元軟寒天増殖を抑制したが、通常の２次元増殖では効果がほとんどなかった。このことから、化合物は正常な非腫瘍細胞に対する毒性が低いことが示唆される。以下の表２に、様々な細胞株を挙げ、「備考」欄にＦ３を試験した結果を示す。細胞株はすべて、一般的な細胞株であり、ＡＴＣＣリポジトリから公的に入手可能である（www.atcc.org/en/Products/Cells_and_Microorganisms/Cell_Lines.aspx）。ＮＦ１ミュートは、ＮＦ１遺伝子（ＲＡＳの負の制御因子）の欠損を伴う細胞であり、ＲＡＳの野生型フォームの過剰活性化を引き起こす。同じことが、ＤＡＢ２ＩＰ欠損細胞にも当てはまる。ＥＧＦＲ＋＋＋細胞は、ＥＧＦＲ受容体を過剰発現させ、これによっても、野生型ＲＡＳの過剰活性化が生じる。
【０１１０】
【表１】
2021528368.tif 000013
【０１１１】
図３及び図４は、低分子ＲＡＳ阻害剤Ｆ３による腫瘍形成表現型の特異的阻害を示すグラフである。軟寒天中でのＡ５４９  Ｋ−ＲＡＳ駆動肺腫瘍細胞株及びＫ−ＲＡＳ駆動膵がん細胞株ＭｉａＰａＣａ−２の増殖に及ぼす低分子の効果を示す。０＝担体（ＤＭＳＯ）。Ｐ値は０．０５未満である。図５及び図６は、同じ細胞のプラスチック上での２次元培養における正常な増殖／生存に及ぼす１０ｕＭのＦ３の効果を示す。プラスチック上での正常な増殖に及ぼす薬物の効果に関する分析から、薬物は１０ｕＭでさえ、２次元における細胞増殖に効果がないことが示された。図７は、Ｆ３が野生型駆動腫瘍細胞に対しても効果的であることを示すグラフであり、図８は、同じ細胞のプラスチック上での２次元培養における正常な増殖／生存を示すグラフである。
【０１１２】
ＲＡＳ活性化は、アノイキスに対する抵抗性を導き、ＲＡＳ機能の阻害により、ＲＡＳでトランスフォームした細胞をアノイキスに対して再感作させる。ＲＡＳ／ＲａｌＧＤＳ経路は、ＲＡＳ媒介アノイキス抑制の重要な構成要素として意味づけられてきた。この効果を実証するために、Ｍｉａ−Ｐａｃａ−２細胞を、細胞付着を防止するためにポリＨＥＭＡで処理しておいた組織培養ウェルに蒔いた。４８時間後に、培養物をトリパンブルー色素排除により細胞死についてアッセイした。Ｆ３は高レベルのアノイキスを誘導することが見出された。図９は、これらの結果を示すグラフである。
【０１１３】
図１０は、３次元軟寒天薬物スクリーニングにおいて濃度６．６ｕＭで１２種の追加の化合物（ＪＡＢ−６化合物）をＦ３と一緒に試験した結果を示す。図１１は、同じアッセイにおいて０．５ｕＭでＪＡＢ−６−１５８及びＪＡＢ−６−１６０を試験した結果を示す。図１２は、ＤＭＳＯ（対照）、Ｆ３及びＪＡＢ−６−５で処置した悪性末梢神経鞘腫瘍細胞（ＭＰＮＳＴ腫瘍細胞）及びＭｉａ−Ｐａｃａ−２細胞の軟寒天中のコロニーを示す写真である。このデータから、式Ｉの化合物はすべて、ＲＡＳ機能を阻害するものと予想されることが実証される。
【０１１４】
異種移植マウスの腫瘍阻害（インビボアッセイ）
ＮＲＧマウスにおける細胞株異種移植腫瘍を使用して、化合物Ｆ３をインビボで試験した。使用した細胞株としては、Ｍｉａ−Ｐａｃａ−２（膵がん）、及びＮＣＩ−Ｈ４４１（肺がん）が挙げられる。試験によって、対照と比べて腫瘍体積が低減されたことが示された。ＮＣＩ−Ｈ４４１の結果を図１３に示す。Ｍｉａ−Ｐａｃａ−２の結果を図１４及び図１５に示す（ＤＭＳＯ／ＰＢＳ（担体）又はＦ３薬物の１２ｍｇ／ｋｇで３日ごとに処置したＮＲＧマウス）。Ｍｉａ−Ｐａｃａ−２では、Ｆ３処置動物において生じた腫瘍は、体積のおよそ半分であった（実験のＰ値は０．０１４であった）。
【０１１５】
薬物動態（インビボ）
ＲＡＳ阻害剤のクリアランス速度をインビボで決定するために、ＣＤ１マウスにＦ３を５ｍｇ／ｋｇで腹腔内注射した。経時的血漿中濃度を測定した。結果を図１７に示す。同様に、脳中濃度も測定した。結果を図１８に示す。３０ｍｇ／ｋｇで経口投与した後の血漿中濃度を測定した。結果を図１９に示す。
【０１１６】
毒性（インビボ）
Ｆ３で、予備的なインビボ毒性アッセイを行った。ＮＲＧマウスに１０ｍｇ／ｋｇの薬物を１日おきに２週間腹腔内注射した。痛み又は窮迫の明らかな徴候は認められず、体重減少も認められなかった。したがって、化合物は、このレベルでインビボにおいて特に毒性を示すことはないようである。
【０１１７】
肝毒性及び腎機能について試験するために、マウスにＦ３又は対照としてＤＭＳＯを注射し、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ（ＡＳＴ）の血中レベル及び血中尿素窒素（ＢＵＮ）を測定した。結果を図２０及び図２１に示す。
【０１１８】
（参考文献）
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【図１】
2021528368.tif 000021
【図２Ａ】
2021528368.tif 000022
【図２Ｂ】
2021528368.tif 000023
【図３】
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【図４】
2021528368.tif 000025
【図５】
2021528368.tif 000026
【図６】
2021528368.tif 000027
【図７】
2021528368.tif 000028
【図８】
2021528368.tif 000029
【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【国際調査報告】
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