(57)【要約】  本発明は、Ｏ−ＧｌｃＮＡｃ加水分解酵素（ＯＧＡ）阻害剤に関する。本発明は、そのような化合物を含む医薬組成物、そのような化合物及び組成物を調製するプロセス並びにＯＧＡの阻害が有益である障害、例えばタウオパチー、特にアルツハイマー病又は進行性核上性麻痺及びタウ病変を伴う神経変性疾患、特にＣ９ＯＲＦ７２変異によって引き起こされる筋萎縮性側索硬化症又は前頭側頭葉型認知症を予防及び治療するための、そのような化合物及び組成物の使用も対象とする。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）
【化１】
2021528413.tif 000350
（式中、
ＲＡは、ピリジン−２−イル、ピリジン−３−イル、ピリジン−４−イル、ピリダジン−３−イル、ピリミジン−４−イル、ピリミジン−５−イル及びピラジン−２−イルからなる群から選択されるヘテロアリール基であるか；又はフェニルから選択されるアリール基であり；これらのそれぞれは、ハロ、シアノ、１、２又は３個の独立して選択されるハロ置換基で任意選択により置換されるＣ１〜４アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＮＲａＲａａ、ＮＲａＲａａ及び１、２又は３個の独立して選択されるハロ置換基で任意選択により置換されるＣ１〜４アルキルオキシからなる群からそれぞれ独立して選択される１、２又は３個の置換基で任意選択により置換され得；ここで、Ｒａ及びＲａａは、水素及び１、２又は３個の独立して選択されるハロ置換基で任意選択により置換されるＣ１〜４アルキルからなる群からそれぞれ独立して選択され；
ＬＡは、共有結合、−ＣＨ２−、−Ｏ−、−ＯＣＨ２−、−ＣＨ２Ｏ−、−ＮＨ−、−Ｎ（ＣＨ３）−、−ＮＨＣＨ２−及び−ＣＨ２ＮＨ−からなる群から選択され；
ｘは、１を表し；
Ｒは、Ｈ又はＣＨ３であり；及び
ＲＢは、式（ｂ−１）、（ｂ−２）又は（ｂ−３）
【化２】
2021528413.tif 000351
の二環式の基であり、ここで、
Ｒ１及びＲ２は、水素、フルオロ及びメチルからなる群からそれぞれ選択され；
Ｘ１、Ｘ２及びＸ３は、ＣＨ、ＣＦ又はＮをそれぞれ表し；
−Ｙ１−Ｙ２−は、
−Ｏ（ＣＨ２）ｍＯ−  （ｃ−１）；
−Ｏ（ＣＨ２）ｎ−  （ｃ−２）；−（ＣＨ２）ｎＯ−  （ｃ−３）；
−Ｏ（ＣＨ２）ｐＮＲ３−  （ｃ−４）；−ＮＲ３（ＣＨ２）ｐＯ−  （ｃ−５）；
−Ｏ（ＣＨ２）（ＣＯ）ＮＲ３−  （ｃ−６）；−ＮＲ３（ＣＯ）（ＣＨ２）Ｏ−  （ｃ−７）；
−（ＣＨ２）ｎＮＲ３（ＣＯ）−  （ｃ−８）；−（ＣＯ）ＮＲ３（ＣＨ２）ｎ−  （ｃ−９）；及び
−Ｎ＝ＣＨ（ＣＯ）ＮＲ３−  （ｃ−１０）
からなる群から選択される二価の基を形成し；ここで、
ｍは、１又は２であり；
ｎ及びｐは、それぞれ独立して、２又は３を表し；
各Ｒ３は、独立して、Ｈ又はＣ１〜４アルキルであり；
ＲＣは、フルオロ、メチル、ヒドロキシ、メトキシ、トリフルオロメチル及びジフルオロメチルからなる群から選択され；
ＲＤは、水素、フルオロ、メチル、ヒドロキシ、メトキシ、トリフルオロメチル及びジフルオロメチルからなる群から選択され；及び
ｙは、０、１又は２を表し；
但し、
ａ）ＲＣは、ピペリジンジイル環又はピロリジンジイル環の窒素原子に隣接する炭素原子に存在する場合、ヒドロキシ又はメトキシではなく；
ｂ）ＲＣ又はＲＤは、ＲＣが、Ｃ−ＲＤに隣接する炭素原子に存在する場合、ヒドロキシ又はメトキシから同時に選択され得ず；
ｃ）ＲＤは、ＬＡが−Ｏ−、−ＯＣＨ２−、−ＣＨ２Ｏ−、−ＮＨ−、−Ｎ（ＣＨ３）−、−ＮＨ（ＣＨ２）−又は（ＣＨ２）ＮＨ−である場合、ヒドロキシ又はメトキシではない）
の化合物又はその互変異性体若しくは立体異性形態或いはその薬学的に許容される付加塩又は溶媒和物。
【請求項２】
ＲＡは、ピリジン−２−イル、ピリジン−３−イル、ピリジン−４−イル、ピリダジン−３−イル、ピリミジン−４−イル、ピリミジン−５−イル及びピラジン−２−イルからなる群から選択されるヘテロアリール基であるか；又はフェニルから選択されるアリール基であり；これらのそれぞれは、ハロ、１、２又は３個の独立して選択されるハロ置換基で任意選択により置換されるＣ１〜４アルキル及び１、２又は３個の独立して選択されるハロ置換基で任意選択により置換されるＣ１〜４アルキルオキシからなる群からそれぞれ独立して選択される１、２又は３個の置換基で任意選択により置換され得る、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
ＬＡは、共有結合、−ＣＨ２−、−Ｏ−、−ＯＣＨ２−、−ＣＨ２Ｏ−及び−ＮＨＣＨ２−からなる群から選択される、請求項１又は２に記載の化合物。
【請求項４】
ＲＢは、式（ｂ−１）又は（ｂ−２）の二環式の基である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項５】
ＲＢは、式（ｂ−１）又は（ｂ−２）の二環式の基であり、ここで、Ｒ１は、水素、フルオロ及びメチルからなる群から選択され、Ｒ２は、水素又はフルオロであり、Ｘ１は、Ｎ又はＣＨであり、及びＸ２は、ＣＨである、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項６】
ＲＢは、式（ｂ−１）又は（ｂ−２）の二環式の基であり、ここで、Ｒ１は、水素、フルオロ及びメチルからなる群から選択され、Ｒ２は、水素又はフルオロであり、Ｘ１は、Ｎ又はＣＨであり、Ｘ２は、ＣＨであり、及び−Ｙ１−Ｙ２−は、（ｃ−１）、（ｃ−２）、（ｃ−４）及び（ｃ−６）からなる群から選択される二価の基を形成し、ここで、ｍは、２であり、ｎは、２又は３であり、及びｐは、２である、請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項７】
ＲＢは、
【化３】
2021528413.tif 000352
からなる群から選択される、請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項８】
ＲＤは、水素、フルオロ及びメチルからなる群から選択され；及びｙは、０又は１を表す、請求項１〜７のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項９】
ＲＡは、ピリジン−２−イル、ピリジン−３−イル、ピリジン−４−イル、ピリダジン−３−イル、ピリミジン−４−イル、ピリミジン−５−イル及びピラジン−２−イルからなる群から選択されるヘテロアリール基であり；これらのそれぞれは、ハロ、シアノ、１、２又は３個の独立して選択されるハロ置換基で任意選択により置換されるＣ１〜４アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＮＲａＲａａ、ＮＲａＲａａ及び１、２又は３個の独立して選択されるハロ置換基で任意選択により置換されるＣ１〜４アルキルオキシからなる群からそれぞれ独立して選択される１、２又は３個の置換基で任意選択により置換され得；ここで、Ｒａ及びＲａａは、水素及び１、２又は３個の独立して選択されるハロ置換基で任意選択により置換されるＣ１〜４アルキルからなる群からそれぞれ独立して選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項１０】
予防有効量又は治療有効量の、請求項１〜９のいずれか一項に記載の化合物及び薬学的に許容される担体を含む医薬組成物。
【請求項１１】
医薬組成物を調製する方法であって、薬学的に許容される担体を、予防有効量又は治療有効量の、請求項１〜９のいずれか一項に記載の化合物と混合することを含む方法。
【請求項１２】
医薬として使用するための、請求項１〜９のいずれか一項に記載の化合物又は請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
タウオパチー、特にアルツハイマー病、進行性核上性麻痺、ダウン症候群、前頭側頭葉認知症、家族性前頭側頭型認知症パーキンソニズム−１７、ピック病、大脳皮質基底核変性症及び嗜銀顆粒病からなる群から選択されるタウオパチー；又はタウ病変を伴う神経変性疾患、特にＣ９ＯＲＦ７２変異によって引き起こされる筋萎縮性側索硬化症若しくは前頭側頭葉認知症から選択される神経変性疾患の治療又は予防に使用するための、請求項１〜９のいずれか一項に記載の化合物又は請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
タウオパチー、特にアルツハイマー病、進行性核上性麻痺、ダウン症候群、前頭側頭葉認知症、家族性前頭側頭型認知症パーキンソニズム−１７、ピック病、大脳皮質基底核変性症及び嗜銀顆粒病からなる群から選択されるタウオパチー；又はタウ病変を伴う神経変性疾患、特にＣ９ＯＲＦ７２変異によって引き起こされる筋萎縮性側索硬化症若しくは前頭側頭葉認知症から選択される神経変性疾患からなる群から選択される障害を予防又は治療する方法であって、それを必要とする対象に、予防有効量又は治療有効量の、請求項１〜９のいずれか一項に記載の化合物又は請求項１０に記載の医薬組成物を投与することを含む方法。
【請求項１５】
Ｏ−ＧｌｃＮＡｃ加水分解酵素を阻害する方法であって、それを必要とする対象に、予防有効量又は治療有効量の、請求項１〜９のいずれか一項に記載の化合物又は請求項１０に記載の医薬組成物を投与することを含む方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、式（Ｉ）
【化１】
2021528413.tif 000002
（式中、基は、本明細書に定義されているとおりである）
で示される構造を有するＯ−ＧｌｃＮＡｃ加水分解酵素（ＯＧＡ）阻害剤に関する。本発明は、そのような化合物を含む医薬組成物、そのような化合物及び組成物を調製するプロセス並びにＯＧＡの阻害が有益である障害、例えばタウオパチー、特にアルツハイマー病又は進行性核上性麻痺及びタウ病変を伴う神経変性疾患、特にＣ９ＯＲＦ７２変異によって引き起こされる筋萎縮性側索硬化症又は前頭側頭葉型認知症を予防及び治療するための、そのような化合物及び組成物の使用も対象とする。
【背景技術】
【０００２】
Ｏ−ＧｌｃＮＡｃ化とは、Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミン残基がセリン残基及びスレオニン残基のヒドロキシル基に転移してＯ−ＧｌｃＮＡｃ化タンパク質を産生する、タンパク質の可逆的修飾である。１０００を超えるそのような標的タンパク質が真核生物の細胞質基質及び核の両方において確認されている。この修飾は、転写、細胞骨格プロセス、細胞周期、プロテアソーム分解及び受容体シグナリングを含む広範な細胞プロセスを調節すると考えられている。
【０００３】
Ｏ−ＧｌｃＮＡｃ転移酵素（ＯＧＴ）及びＯ−ＧｌｃＮＡｃ加水分解酵素（ＯＧＡ）は、Ｏ−ＧｌｃＮＡｃを標的タンパク質に付加（ＯＧＴ）又は標的タンパク質から除去（ＯＧＡ）すると説明されている２つのみのタンパク質である。ＯＧＡは、１９９４年に初めて脾臓標本から精製され、１９９８年に髄膜腫により発現する抗原として同定され、ＭＧＥＡ５と命名された。これは、細胞の細胞質基質コンパートメントにおいて単量体として９１６アミノ（１０２９１５ダルトン）からなるものである。これは、タンパク質の輸送及び分泌に重要であるＥＲ関連及びゴルジ体関連のグリコシル化プロセスと区別されるべきであり、これらは、ＯＧＡと異なり、至適ｐＨが酸性であるが、ＯＧＡは、中性ｐＨで最高活性を示す。
【０００４】
ＯＧＡの、２つのアスパラギン酸触媒中心を有する触媒領域は、２つの柔軟な領域が隣接しているその酵素のＮ末端部分に存在する。Ｃ末端部分は、ストークドメインが先行する推定ＨＡＴ（ヒストンアセチルトランスフェラーゼドメイン）からなる。ＨＡＴドメインが触媒的に活性であることは、依然として証明されていない。
【０００５】
Ｏ−ＧｌｃＮＡｃ化タンパク質並びにＯＧＴ及びＯＧＡ自体は、脳及びニューロンにおいて特に豊富であり、この修飾が中枢神経系において重要な役割を果たしていることを示唆している。実際、研究は、Ｏ−ＧｌｃＮＡｃ化がニューロンコミュニケーション、記憶形成及び神経変性疾患に寄与する重要な調節機構を表すことを確認した。さらに、ＯＧＴは、いくつかの動物モデルにおける胚形成に必須であり、ｏｇｔヌルマウスは、胚致死性であることが示されている。ＯＧＡは、哺乳動物の発達にも不可欠である。ＯＧＡホモ接合性ヌルマウスが生後２４〜４８時間を超えて生存しないことを２つの独立した研究が示している。Ｏｇａ欠失は、新生児におけるグリコーゲン動員の欠陥をもたらし、ホモ接合性ノックアウト胚に由来するＭＥＦにおいてゲノム不安定性関連細胞周期停止を引き起こした。ヘテロ接合動物は、成体期まで生存したが、転写及び代謝の両方において変化を示した。
【０００６】
Ｏ−ＧｌｃＮＡｃサイクリングにおける摂動は、糖尿病などの慢性代謝疾患及び癌に影響を及ぼすことが知られている。Ｏｇａヘテロ接合性は、Ａｐｃ−／＋マウス癌モデルにおける腸腫瘍発生を抑制し、Ｏｇａ遺伝子（ＭＧＥＡ５）は、立証されたヒト糖尿病感受性遺伝子座である。
【０００７】
さらに、Ｏ−ＧｌｃＮＡｃ修飾は、神経変性疾患の発症及び進行に関与するいくつかのタンパク質で確認されており、アルツハイマー病におけるタウによる神経原線維変化（ＮＦＴ）タンパク質の形成におけるＯ−ＧｌｃＮＡｃレベルの変動間の相関が示唆されている。さらに、パーキンソン病におけるアルファ−シヌクレインのＯ−ＧｌｃＮＡｃ化について報告されている。
【０００８】
中枢神経系において、タウの６つのスプライスバリアントが報告されている。タウは、第１７染色体上にコードされ、中枢神経系において発現するその最も長いスプライスバリアントが４４１アミノ酸から構成される。これらのアイソフォームは、２つのＮ末端インサート（エクソン２及び３）と微小管結合ドメイン内にあるエクソン１０によって異なる。エクソン１０は、以下に記載するようにタウを凝集しやすくする多重変異を有するため、タウオパチーにおいてかなり興味深いものである。タウタンパク質は、軸索区画に沿った細胞小器官の細胞内輸送の調節に重要なニューロン微小管細胞骨格に結合し、これを安定化する。したがって、タウは、軸索の形成及びそれらの完全性の維持において重要な役割を果たしている。さらに、樹状突起スパインの生理学的役割も示唆されている。
【０００９】
タウの凝集は、ＰＳＰ（進行性核上性麻痺）、ダウン症候群（ＤＳ）、ＦＴＬＤ（前頭側頭葉認知症）、ＦＴＤＰ−１７（前頭側頭型認知症パーキンソニズム−１７）、ピック病（ＰＤ）、ＣＢＤ（大脳皮質基底核変性症）、嗜銀顆粒病（ＡＧＤ）及びＡＤ（アルツハイマー病）などの種々のいわゆるタウオパチーの根底にある原因の１つである。さらに、タウ病変は、Ｃ９ＯＲＦ７２変異によって引き起こされる筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）又はＦＴＬＤのようなさらなる神経変性疾患を伴う。これらの疾患では、タウは、過剰なリン酸化によって翻訳後修飾され、これがタウを微小管から分離し凝集しやすくすると考えられる。Ｏ−ＧｌｃＮＡｃ残基を有するセリン又はトレオニン残基は，リン酸化を受けにくいため、タウのＯ−ＧｌｃＮＡｃ化は、リン酸化の程度を調節する。これは、タウを微小管から分離しにくくし、最終的に神経毒性及び神経細胞死をもたらす神経毒性のもつれへの凝集を減少させる。このメカニズムは、タウ関連認知症における病理を加速するために最近議論された脳内の相互接続回路に沿って、ニューロンによる放出されるタウ凝集体の細胞から細胞への広がりも低減し得る。実際、ＡＤ患者の脳から単離された過リン酸化タウは、Ｏ−ＧｌｃＮＡｃ化レベルの有意な低下を示した。
【００１０】
ＪＮＰＬ３タウトランスジェニックマウスに投与したＯＧＡ阻害剤は、明らかな副作用を生じることなく、ＮＦＴ形成及びニューロン損失を問題なく減少させた。この観察は、ＦＴＤにおいて見出される変異体タウの発現が誘導され得るタウオパチーの別のげっ歯類モデルにおいて確認されている（ｔｇ４５１０）。ＯＧＡの小分子阻害剤の投与は、タウ凝集の形成を減少させるのに有効であり、皮質の萎縮及び心室の拡大を弱めた。
【００１１】
さらに、アミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）のＯ−ＧｌｃＮＡｃ化は、可溶性ＡＰＰフラグメントを産生し、ＡＤ関連アミロイドベータ（Ａβ）形成を生じる切断を回避する非アミロイド形成経路を介するプロセシングに有利に作用する。
【００１２】
ＯＧＡの阻害によるタウのＯ−ＧｌｃＮＡｃ化の維持は、上記の神経変性疾患におけるタウのリン酸化及びタウの凝集を減少させ、それによって神経変性タウオパチー疾患の進行を減弱又は停止させる潜在的なアプローチを示す。
【００１３】
国際公開第２０１２／１１７２１９号パンフレット（Ｓｕｍｍｉｔ  Ｃｏｒｐ．ｐｌｃ．、２０１２年９月７日公開）は、ＯＧＡ阻害剤としてＮ−［［５−（ヒドロキシメチル）ピロリジン−２−イル］メチル］アルキルアミド誘導体及びＮ−アルキル−２−［５−（ヒドロキシメチル）ピロリジン−２−イル］アセトアミド誘導体を記載している。国際公開第２０１４／１５９２３４号パンフレット（Ｍｅｒｃｋ  Ｐａｔｅｎｔ  ＧＭＢＨ、２０１４年１０月２日公開）は、主に、１位がアセトアミド−チアゾリルメチル又はアセトアミドオキサゾリルメチル置換基で置換された４−フェニル又はベンジル−ピペリジン及びピペラジン化合物並びに化合物Ｎ−［５−［（３−フェニル−１−ピペリジル）メチル］チアゾール−２−イル］アセトアミドを開示しており；国際公開第２０１６／０３００４４３号パンフレット（Ａｓｃｅｎｅｕｒｏｎ  Ｓ．Ａ．、２０１６年３月３日公開）、国際公開第２０１７／１４４６３３号パンフレット及び国際公開第２０１７／０１１４６３９号パンフレット（Ａｓｃｅｎｅｕｒｏｎ  Ｓ．Ａ．、２０１７年８月３１日公開）は、ＯＧＡ阻害剤として１，４−二置換ピペリジン又はピペラジンを開示しており；国際公開第２０１７／１４４６３７号パンフレット（Ａｓｃｅｎｅｕｒｏｎ  Ｓ．Ａ、２０１７年８月３１日公開）は、より特に、ＯＧＡ阻害剤として４−置換１−［１−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）エチル］−ピペラジン誘導体；１−［１−（２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イル）エチル］−ピペラジン誘導体；１−［１−（２，３−ジヒドロベンゾフラン−６−イル）エチル］−ピペラジン誘導体；及び１−［１−（２，３−ジヒドロ−１，４−ベンゾジオキシン−６−イル）エチル］−ピペラジン誘導体を開示しており；国際公開第２０１７／１０６２５４号パンフレット（Ｍｅｒｃｋ  Ｓｈａｒｐ＆Ｄｏｈｍｅ  Ｃｏｒｐ．）は、ＯＧＡ阻害剤として置換Ｎ−［５−［（４−メチレン−１−ピペリジル）メチル］チアゾール−２−イル］アセトアミド化合物を記載している。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１４】
例えば、改善された効力、良好なバイオアベイラビリティ、薬物動態及び脳浸透性並びに／又はより良好な毒性プロファイルを有する、特性の有利なバランスを有するＯＧＡ阻害剤化合物が依然として必要とされている。したがって、これらの問題の少なくともいくつかを克服する化合物を提供することが本発明の目的である。
【課題を解決するための手段】
【００１５】
本発明は、式（Ｉ）
【化２】
2021528413.tif 000003
（式中、
ＲＡは、ピリジン−２−イル、ピリジン−３−イル、ピリジン−４−イル、ピリダジン−３−イル、ピリミジン−４−イル、ピリミジン−５−イル及びピラジン−２−イルからなる群から選択されるヘテロアリール基であるか；又はフェニルから選択されるアリール基であり；これらのそれぞれは、ハロ、シアノ、１、２又は３個の独立して選択されるハロ置換基で任意選択により置換されるＣ１〜４アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＮＲａＲａａ、ＮＲａＲａａ及び１、２又は３個の独立して選択されるハロ置換基で任意選択により置換されるＣ１〜４アルキルオキシからなる群からそれぞれ独立して選択される１、２又は３個の置換基で任意選択により置換され得；ここで、Ｒａ及びＲａａは、水素及び１、２又は３個の独立して選択されるハロ置換基で任意選択により置換されるＣ１〜４アルキルからなる群からそれぞれ独立して選択され；
ＬＡは、共有結合、−ＣＨ２−、−Ｏ−、−ＯＣＨ２−、−ＣＨ２Ｏ−、−ＮＨ−、−Ｎ（ＣＨ３）−、−ＮＨＣＨ２−及び−ＣＨ２ＮＨ−からなる群から選択され；
ｘは、１を表し；
Ｒは、Ｈ又はＣＨ３であり；及び
ＲＢは、式（ｂ−１）、（ｂ−２）又は（ｂ−３）
【化３】
2021528413.tif 000004
の二環式の基であり、ここで、
Ｒ１及びＲ２は、水素、フルオロ及びメチルからなる群からそれぞれ選択され；
Ｘ１、Ｘ２及びＸ３は、ＣＨ、ＣＦ又はＮをそれぞれ表し；
−Ｙ１−Ｙ２−は、
−Ｏ（ＣＨ２）ｍＯ−  （ｃ−１）；
−Ｏ（ＣＨ２）ｎ−  （ｃ−２）；−（ＣＨ２）ｎＯ−  （ｃ−３）；
−Ｏ（ＣＨ２）ｐＮＲ３−  （ｃ−４）；−ＮＲ３（ＣＨ２）ｐＯ−  （ｃ−５）；
−Ｏ（ＣＨ２）（ＣＯ）ＮＲ３−  （ｃ−６）；−ＮＲ３（ＣＯ）（ＣＨ２）Ｏ−  （ｃ−７）；
−（ＣＨ２）ｎＮＲ３（ＣＯ）−  （ｃ−８）；−（ＣＯ）ＮＲ３（ＣＨ２）ｎ−  （ｃ−９）；及び
−Ｎ＝ＣＨ（ＣＯ）ＮＲ３−  （ｃ−１０）
からなる群から選択される二価の基を形成し；ここで、
ｍは、１又は２であり；
ｎ及びｐは、それぞれ独立して、２又は３を表し；
各Ｒ３は、独立して、Ｈ又はＣ１〜４アルキルであり；
ＲＣは、フルオロ、メチル、ヒドロキシ、メトキシ、トリフルオロメチル及びジフルオロメチルからなる群から選択され；
ＲＤは、水素、フルオロ、メチル、ヒドロキシ、メトキシ、トリフルオロメチル及びジフルオロメチルからなる群から選択され；及び
ｙは、０、１又は２を表し；
但し、
ａ）ＲＣは、ピペリジンジイル環又はピロリジンジイル環の窒素原子に隣接する炭素原子に存在する場合、ヒドロキシ又はメトキシではなく；
ｂ）ＲＣ又はＲＤは、ＲＣが、Ｃ−ＲＤに隣接する炭素原子に存在する場合、ヒドロキシ又はメトキシから同時に選択され得ず；
ｃ）ＲＤは、ＬＡが−Ｏ−、−ＯＣＨ２−、−ＣＨ２Ｏ−、−ＮＨ−、−Ｎ（ＣＨ３）−、−ＮＨ（ＣＨ２）−又は（ＣＨ２）ＮＨ−である場合、ヒドロキシ又はメトキシではない）
の化合物、その互変異性体及び立体異性形態並びにその薬学的に許容される塩及び溶媒和物を対象とする。
【００１６】
本発明を例示するものとして、薬学的に許容される担体及び上記化合物のいずれかを含む医薬組成物がある。本発明の一例として、上記化合物のいずれか及び薬学的に許容される担体を混合することによって作製される医薬組成物がある。本発明を例示するものとして、医薬組成物を作製するプロセスであって、上記化合物のいずれか及び薬学的に許容される担体を混合することを含むプロセスがある。
【００１７】
本発明を例示するものとして、Ｏ−ＧｌｃＮＡｃ加水分解酵素（ＯＧＡ）の阻害によって媒介される障害を予防又は治療する方法であって、それを必要とする対象に、治療有効量の上記化合物又は医薬組成物のいずれかを投与することを含む方法がある。
【００１８】
本発明をさらに例示するものとして、ＯＧＡを阻害する方法であって、それを必要とする対象に、予防又は治療有効量の上記化合物又は医薬組成物のいずれかを投与することを含む方法がある。
【００１９】
本発明の一例は、タウオパチー、特にアルツハイマー病、進行性核上性麻痺、ダウン症候群、前頭側頭葉認知症、家族性前頭側頭型認知症パーキンソニズム−１７、ピック病、大脳皮質基底核変性症及び嗜銀顆粒病からなる群から選択されるタウオパチー；又はタウ病変を伴う神経変性疾患、特にＣ９ＯＲＦ７２変異によって引き起こされる筋萎縮性側索硬化症若しくは前頭側頭葉認知症から選択される神経変性疾患から選択される障害を予防又は治療する方法であって、それを必要とする対象に、予防又は治療有効量の上記化合物又は医薬組成物のいずれかを投与することを含む方法である。
【００２０】
本発明の別の例は、タウオパチー、特にアルツハイマー病、進行性核上性麻痺、ダウン症候群、前頭側頭型認知症、家族性前頭側頭型認知症パーキンソニズム−１７、ピック病、大脳皮質基底核変性症及び嗜銀顆粒病からなる群から選択されるタウオパチー；又はタウ病変を伴う神経変性疾患、特にＣ９ＯＲＦ７２変異によって引き起こされる筋萎縮性側索硬化症若しくは前頭側頭葉認知症から選択される神経変性疾患の予防又は治療において、それを必要とする対象に使用するための上記化合物のいずれかである。
【発明を実施するための形態】
【００２１】
本発明は、上記に定義したとおりの式（Ｉ）の化合物並びにその薬学的に許容される付加塩及び溶媒和物を対象とする。式（Ｉ）の化合物は、Ｏ−ＧｌｃＮＡｃ加水分解酵素（ＯＧＡ）の阻害剤であり、タウオパチー、特にアルツハイマー病、進行性核上性麻痺、ダウン症候群、前頭側頭葉認知症、家族性前頭側頭型認知症パーキンソニズム−１７、ピック病、大脳皮質基底核変性症及び嗜銀顆粒病からなる群から選択されるタウオパチーの予防若しくは治療に有用であり得るか；又はタウ病変を伴う神経変性疾患、特にＣ９ＯＲＦ７２変異によって引き起こされる筋萎縮性側索硬化症若しくは前頭側頭葉認知症から選択される神経変性疾患の予防若しくは治療に有用であり得る。
【００２２】
一実施形態では、本発明は、本明細書に記載の、式（Ｉ）（式中、
ＲＡは、ピリジン−２−イル、ピリジン−３−イル、ピリジン−４−イル、ピリダジン−３−イル、ピリミジン−４−イル、ピリミジン−５−イル及びピラジン−２−イルからなる群から選択されるヘテロアリール基であり；これらのそれぞれは、ハロ、シアノ、１、２又は３個の独立して選択されるハロ置換基で任意選択により置換されるＣ１〜４アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＮＲａＲａａ、ＮＲａＲａａ及び１、２又は３個の独立して選択されるハロ置換基で任意選択により置換されるＣ１〜４アルキルオキシからなる群からそれぞれ独立して選択される１、２又は３個の置換基で任意選択により置換され得；ここで、Ｒａ及びＲａａは、水素及び１、２又は３個の独立して選択されるハロ置換基で任意選択により置換されるＣ１〜４アルキルからなる群からそれぞれ独立して選択され；
ＬＡは、共有結合、−ＣＨ２−、−Ｏ−、−ＯＣＨ２−、−ＣＨ２Ｏ−、−ＮＨ−、−Ｎ（ＣＨ３）−、−ＮＨＣＨ２−及び−ＣＨ２ＮＨ−からなる群から選択され；
ｘは、１を表し；
Ｒは、Ｈ又はＣＨ３であり；及び
ＲＢは、式（ｂ−１）、（ｂ−２）又は（ｂ−３）
【化４】
2021528413.tif 000005
の二環式の基であり、ここで、
Ｒ１及びＲ２は、水素、フルオロ及びメチルからなる群からそれぞれ選択され；
Ｘ１、Ｘ２及びＸ３は、ＣＨ、ＣＦ又はＮをそれぞれ表し；
−Ｙ１−Ｙ２−は、
−Ｏ（ＣＨ２）ｍＯ−  （ｃ−１）；
−Ｏ（ＣＨ２）ｎ−  （ｃ−２）；−（ＣＨ２）ｎＯ−  （ｃ−３）；
−Ｏ（ＣＨ２）ｐＮＲ３−  （ｃ−４）；−ＮＲ３（ＣＨ２）ｐＯ−  （ｃ−５）；
−Ｏ（ＣＨ２）（ＣＯ）ＮＲ３−  （ｃ−６）；−ＮＲ３（ＣＯ）（ＣＨ２）Ｏ−  （ｃ−７）；
−（ＣＨ２）ｎＮＲ３（ＣＯ）−  （ｃ−８）；−（ＣＯ）ＮＲ３（ＣＨ２）ｎ−  （ｃ−９）；及び
−Ｎ＝ＣＨ（ＣＯ）ＮＲ３−  （ｃ−１０）
からなる群から選択される二価の基を形成し；ここで、
ｍは、１又は２であり；
ｎ及びｐは、それぞれ独立して、２又は３を表し；
各Ｒ３は、独立して、Ｈ又はＣ１〜４アルキルであり；
ＲＣは、フルオロ、メチル、ヒドロキシ、メトキシ、トリフルオロメチル及びジフルオロメチルからなる群から選択され；
ＲＤは、水素、フルオロ、メチル、ヒドロキシ、メトキシ、トリフルオロメチル及びジフルオロメチルからなる群から選択され；及び
ｙは、０、１又は２を表し；
但し、
ａ）ＲＣは、ピペリジンジイル環又はピロリジンジイル環の窒素原子に隣接する炭素原子に存在する場合、ヒドロキシ又はメトキシではなく；
ｂ）ＲＣ又はＲＤは、ＲＣが、Ｃ−ＲＤに隣接する炭素原子に存在する場合、ヒドロキシ又はメトキシから同時に選択され得ず；
ｃ）ＲＤは、ＬＡが−Ｏ−、−ＯＣＨ２−、−ＣＨ２Ｏ−、−ＮＨ−、−Ｎ（ＣＨ３）−、−ＮＨ（ＣＨ２）−又は−（ＣＨ２）ＮＨ−である場合、ヒドロキシ又はメトキシではない）
の化合物、その互変異性体及び立体異性形態並びにその薬学的に許容される塩及び溶媒和物を対象とする。
【００２３】
特定の実施形態では、本発明は、本明細書に記載の、式（Ｉ）（式中、ＲＡは、ピリジン−２−イル、ピリジン−３−イル、ピリジン−４−イル、ピリダジン−３−イル、ピリミジン−４−イル、ピリミジン−５−イル及びピラジン−２−イルからなる群から選択されるヘテロアリール基であるか；又はフェニルから選択されるアリール基であり；これらのそれぞれは、ハロ、１、２又は３個の独立して選択されるハロ置換基で任意選択により置換されるＣ１〜４アルキル及び１、２又は３個の独立して選択されるハロ置換基で任意選択により置換されるＣ１〜４アルキルオキシからなる群からそれぞれ独立して選択される１、２又は３個の置換基で置換され得る）の化合物、その互変異性体及び立体異性形態を対象とする。
【００２４】
特定の実施形態では、本発明は、本明細書に記載の、式（Ｉ）（式中、ＲＡは、ピリジン−２−イル、ピリジン−４−イル、ピリミジン−４−イル及びピラジン−２−イルからなる群から選択されるヘテロアリール基であるか；又はフェニルから選択されるアリール基であり；これらのそれぞれは、ハロ、１、２又は３個の独立して選択されるハロ置換基で任意選択により置換されるＣ１〜４アルキル及び１、２又は３個の独立して選択されるハロ置換基で任意選択により置換されるＣ１〜４アルキルオキシからなる群からそれぞれ独立して選択される１、２又は３個の置換基で置換され得る）の化合物、その互変異性体及び立体異性形態を対象とする。
【００２５】
さらなる実施形態では、本発明は、本明細書に記載の、式（Ｉ）（式中、ＲＡは、ピリジン−２−イル、ピリジン−４−イル、ピリミジン−４−イル及びピラジン−２−イルからなる群から選択されるヘテロアリール基（これらのそれぞれは、ハロ、１、２又は３個の独立して選択されるハロ置換基で任意選択により置換されるＣ１〜４アルキル及び１、２又は３個の独立して選択されるハロ置換基で任意選択により置換されるＣ１〜４アルキルオキシからなる群からそれぞれ独立して選択される１、２又は３個の置換基で置換され得る）であるか；又はフェニルから選択され、且つ１、２又は３個の独立して選択されるハロ置換基、特に１個のハロ置換基で任意選択により置換されるアリール基である）の化合物、その互変異性体及び立体異性形態を対象とする。
【００２６】
特定の実施形態では、本発明は、本明細書に記載の、式（Ｉ）（式中、ＲＡは、ピリジン−４−イル、ピリミジン−４−イル及びピラジン−２−イルからなる群から選択されるヘテロアリール基であり；これらのそれぞれは、ハロ、１、２又は３個の独立して選択されるハロ置換基で任意選択により置換されるＣ１〜４アルキル及び１、２又は３個の独立して選択されるハロ置換基で任意選択により置換されるＣ１〜４アルキルオキシからなる群からそれぞれ独立して選択される１、２又は３個の置換基で置換され得る）の化合物、その互変異性体及び立体異性形態並びにその薬学的に許容される塩及び溶媒和物を対象とする。
【００２７】
さらなる実施形態では、本発明は、本明細書に記載の、式（Ｉ）（式中、ＲＡは、ピリジン−４−イル、ピリミジン−４−イル及びピラジン−２−イルからなる群から選択されるヘテロアリール基であり；これらのそれぞれは、１、２又は３個の独立して選択されるハロ置換基で任意選択により置換されるＣ１〜４アルキル及び１、２又は３個の独立して選択されるハロ置換基で任意選択により置換されるＣ１〜４アルキルオキシからなる群からそれぞれ独立して選択される１、２又は３個の置換基で置換され得る）の化合物、その互変異性体及び立体異性形態並びにその薬学的に許容される塩及び溶媒和物を対象とする。
【００２８】
さらなる実施形態では、本発明は、本明細書に記載の、式（Ｉ）（式中、ＲＡは、ピリジン−４−イル又はピリミジン−４−イルであり、これらのそれぞれは、１、２又は３個の独立して選択されるハロ置換基で任意選択により置換されるＣ１〜４アルキル；及び１、２又は３個の独立して選択されるハロ置換基で任意選択により置換されるＣ１〜４アルキルオキシからなる群からそれぞれ独立して選択される１、２又は３個の置換基で置換され得る）の化合物、その互変異性体及び立体異性形態を対象とする。
【００２９】
さらなる実施形態では、本発明は、本明細書に記載の、式（Ｉ）（式中、ＲＡは、１、２又は３個の独立して選択されるハロ置換基、特に１個のハロ置換基で任意選択により置換されるフェニルである）の化合物、その互変異性体及び立体異性形態を対象とする。
【００３０】
さらなる実施形態では、本発明は、本明細書に記載の、式（Ｉ）（式中、ＬＡは、共有結合、−ＣＨ２−、−Ｏ−、−ＯＣＨ２−、−ＣＨ２Ｏ−及び−ＮＨＣＨ２−からなる群から選択される）の化合物、その互変異性体及び立体異性形態を対象とする。
【００３１】
別の実施形態では、本発明は、本明細書に記載の、式（Ｉ）（式中、ＬＡは、共有結合、−ＯＣＨ２−及び−ＮＨＣＨ２−からなる群から選択される）の化合物、その互変異性体及び立体異性形態を対象とする。
【００３２】
さらなる実施形態では、本発明は、本明細書に記載の、式（Ｉ）（式中、ＬＡは、−ＣＨ２−、−Ｏ−、−ＯＣＨ２−、−ＣＨ２Ｏ−、−ＮＨ−、−Ｎ（ＣＨ３）−、−ＮＨＣＨ２−及び−ＣＨ２ＮＨ−からなる群から選択される）の化合物、その互変異性体及び立体異性形態を対象とする。
【００３３】
別の実施形態では、本発明は、本明細書に記載の、式（Ｉ）（式中、ＬＡは、−ＣＨ２−、−Ｏ−、−ＯＣＨ２−、−ＣＨ２Ｏ−及び−ＮＨＣＨ２−からなる群から選択される）の化合物、その互変異性体及び立体異性形態を対象とする。
【００３４】
別の実施形態では、本発明は、本明細書に記載の、式（Ｉ）（式中、ＬＡは、−ＯＣＨ２−、−ＣＨ２Ｏ−及び−ＮＨＣＨ２−からなる群から選択される）の化合物、その互変異性体及び立体異性形態を対象とする。
【００３５】
さらに別の実施形態では、本発明は、本明細書に記載の、式（Ｉ）（式中、ＲＢは、式（ｂ−１）又は（ｂ−２）の二環式の基である）の化合物、その互変異性体及び立体異性形態を対象とする。
【００３６】
さらなる実施形態では、本発明は、本明細書に記載の、式（Ｉ）（式中、ＲＢは、式（ｂ−１）又は（ｂ−２）の二環式の基であり、ここで、Ｒ１は、水素、フルオロ及びメチルからなる群から選択され、Ｒ２は、水素又はフルオロであり、Ｘ１は、Ｎ又はＣＨであり、及びＸ２は、ＣＨである）の化合物、その互変異性体及び立体異性形態を対象とする。
【００３７】
さらなる実施形態では、本発明は、本明細書に記載の、式（Ｉ）（式中、ＲＢは、式（ｂ−１）又は（ｂ−２）の二環式の基であり、ここで、Ｒ１は、水素、フルオロ及びメチルからなる群から選択され、Ｒ２は、水素であり、Ｘ１は、Ｎ又はＣＨであり、及びＸ２は、ＣＨである）の化合物、その互変異性体及び立体異性形態を対象とする。
【００３８】
別の実施形態では、本発明は、本明細書に記載の、式（Ｉ）（式中、ＲＢは、式（ｂ−１）又は（ｂ−２）の二環式の基であり、ここで、Ｒ１は、水素、フルオロ及びメチルからなる群から選択され、Ｒ２は、水素又はフルオロであり、Ｘ１は、Ｎ又はＣＨであり、Ｘ２は、ＣＨであり、及び−Ｙ１−Ｙ２−は、（ｃ−１）、（ｃ−２）、（ｃ−４）及び（ｃ−６）からなる群から選択される二価の基を形成する）の化合物、その互変異性体及び立体異性形態を対象とする。
【００３９】
別の実施形態では、本発明は、本明細書に記載の、式（Ｉ）（式中、ＲＢは、式（ｂ−１）又は（ｂ−２）の二環式の基であり、ここで、Ｒ１は、水素、フルオロ及びメチルからなる群から選択され、Ｒ２は、水素であり、Ｘ１は、Ｎ又はＣＨであり、Ｘ２は、ＣＨであり、及び−Ｙ１−Ｙ２−は、（ｃ−１）、（ｃ−２）、（ｃ−４）及び（ｃ−６）からなる群から選択される二価の基を形成する）の化合物、その互変異性体及び立体異性形態を対象とする。
【００４０】
さらなる実施形態では、本発明は、本明細書に記載の、式（Ｉ）（式中、ＲＢは、式（ｂ−１）又は（ｂ−２）の二環式の基であり、ここで、Ｒ１は、水素、フルオロ及びメチルからなる群から選択され、Ｒ２は、水素又はフルオロであり、Ｘ１は、Ｎ又はＣＨであり、Ｘ２はＣＨであり、及び−Ｙ１−Ｙ２−は、（ｃ−１）、（ｃ−２）、（ｃ−４）及び（ｃ−６）からなる群から選択される二価の基を形成し、ここで、ｍは、２であり、ｎは、２又は３であり、及びｐは、２である）の化合物、その互変異性体及び立体異性形態を対象とする。
【００４１】
さらなる実施形態では、本発明は、本明細書に記載の、式（Ｉ）（式中、ＲＢは、式（ｂ−１）又は（ｂ−２）の二環式の基であり、ここで、Ｒ１は、水素、フルオロ及びメチルからなる群から選択され、Ｒ２は、水素であり、Ｘ１は、Ｎ又はＣＨであり、Ｘ２は、ＣＨであり、及び−Ｙ１−Ｙ２−は、（ｃ−１）、（ｃ−２）、（ｃ−４）及び（ｃ−６）からなる群から選択される二価の基を形成し、ここで、ｍは、２であり、ｎは、２又は３であり、及びｐは、２である）の化合物、その互変異性体及び立体異性形態を対象とする。
【００４２】
さらなる実施形態では、本発明は、本明細書に記載の、式（Ｉ）（式中、ＲＤは、水素、フルオロ及びメチルからなる群から選択される）の化合物、その互変異性体及び立体異性形態を対象とする。
【００４３】
さらなる実施形態では、本発明は、本明細書に記載の、式（Ｉ）（式中、ＲＤは、水素又はメチルである）の化合物、その互変異性体及び立体異性形態を対象とする。
【００４４】
さらなる実施形態では、本発明は、本明細書に記載の、式（Ｉ）（式中、ｙは、０又は１を表す）の化合物、その互変異性体及び立体異性形態を対象とする。
【００４５】
さらなる実施形態では、本発明は、本明細書に記載の、式（Ｉ）（式中、ｙは、０を表す）の化合物、その互変異性体及び立体異性形態を対象とする。
【００４６】
さらなる実施形態では、本発明は、本明細書に記載の、式（Ｉ）（式中、ｙは、１を表す）の化合物、その互変異性体及び立体異性形態を対象とする。
【００４７】
別の実施形態では、本発明は、本明細書に記載の、式（Ｉ）（式中、ＲＡは、ピリジン−４−イル、ピリミジン−４−イル及びピラジン−２−イルからなる群から選択されるヘテロアリール基であり；これらのそれぞれは、ハロ、１、２又は３個の独立して選択されるハロ置換基で任意選択により置換されるＣ１〜４アルキル及び１、２又は３個の独立して選択されるハロ置換基で任意選択により置換されるＣ１〜４アルキルオキシからなる群からそれぞれ独立して選択される１、２又は３個の置換基で置換され得；ＬＡは、共有結合、−ＣＨ２−、−Ｏ−、−ＯＣＨ２−、−ＣＨ２Ｏ−及び−ＮＨＣＨ２−からなる群から選択され；
ｘは、１を表し；
Ｒは、Ｈ又はＣＨ３であり；及び
ＲＢは、式（ｂ−１）又は（ｂ−２）の二環式の基であり、ここで、
Ｒ１及びＲ２は、水素、フルオロ及びメチルからなる群からそれぞれ選択され；
Ｘ１、Ｘ２及びＸ３は、ＣＨ、ＣＦ又はＮをそれぞれ表し；
−Ｙ１−Ｙ２−は、（ｃ−１）、（ｃ−２）、（ｃ−４）及び（ｃ−６）からなる群から選択される二価の基を形成し；ここで、
ｍは、１又は２であり；
ｎ及びｐは、それぞれ独立して、２又は３を表し；
各Ｒ３は、独立して、Ｈ又はＣ１〜４アルキルであり；
ＲＣは、フルオロ又はメチルであり；
ＲＤは、水素、フルオロ及びメチルからなる群から選択され；及び
ｙは、０又は１を表す）
の化合物、その互変異性体及び立体異性形態並びにその薬学的に許容される塩及び溶媒和物を対象とする。
【００４８】
さらなる実施形態では、本発明は、式（Ｉ）（式中、ＲＢは、
【化５】
2021528413.tif 000006
からなる群から選択される）の化合物、その互変異性体及び立体異性形態並びにその薬学的に許容される塩及び溶媒和物を対象とする。
【００４９】
さらなる実施形態では、本発明は、式（Ｉ）（式中、ＲＢは、
【化６】
2021528413.tif 000007
からなる群から選択される）の化合物、その互変異性体及び立体異性形態を対象とする。
【００５０】
さらなる実施形態では、本発明は、式（Ｉ）（式中、ＲＢは、（ｂ−１ａ）〜（ｂ−２ｂ）
【化７】
2021528413.tif 000008
のいずれか１つから選択される二環式の基である）の化合物、その互変異性体及び立体異性形態に関する。
【００５１】
さらなる実施形態では、本発明は、本明細書に記載の、式（Ｉ）（式中、
ＲＡは、Ｃ１〜４アルキル及びＣ１〜４アルキルオキシからなる群からそれぞれ独立して選択される１又は２個の置換基で任意選択により置換されるピリジン−４−イルであり；
ＬＡは、共有結合、−ＯＣＨ２−及び−ＮＨＣＨ２−からなる群から選択され；
ｘは、１を表し；
Ｒは、ＣＨ３であり；及び
ＲＢは、式（ｂ−１）又は（ｂ−２）の二環式の基であり、ここで、
Ｒ１及びＲ２は、水素、フルオロ及びメチルからなる群からそれぞれ選択され；
Ｘ１、Ｘ２及びＸ３は、ＣＨ、ＣＦ又はＮをそれぞれ表し；
−Ｙ１−Ｙ２−は、式（ｂ１−ｃ）又は（ｂ−１ｄ）
【化８】
2021528413.tif 000009
を形成し、
ＲＤは、水素であり；及び
Ｙは、０である）
の化合物、その互変異性体及び立体異性形態並びにその薬学的に許容される塩及び溶媒和物を対象とする。
【００５２】
定義
「ハロ」は、フルオロ、クロロ及びブロモを指すものとし；「Ｃ１〜４アルキル」は、１、２、３又は４個の炭素原子を有する直鎖状又は分枝状の飽和アルキル基、例えばそれぞれメチル、エチル、１−プロピル、２−プロピル、ブチル、１−メチル−プロピル、２−メチル−１−プロピル、１，１−ジメチルエチルなどを指すものとし；「Ｃ１〜４アルキルオキシ」は、エーテル基（ここで、Ｃ１〜４アルキルは、上で定義されたとおりである）を指すものとする。ＬＡに言及する場合、定義は、左から右に読まれるべきであり、リンカーの左部分がＲＡに結合し、リンカーの右部分がピロリジンジイル環又はピペリジンジイル環に結合する。したがって、例えば、ＬＡが−Ｏ−ＣＨ２−である場合、ＲＡ−ＬＡ−は、ＲＡ−Ｏ−ＣＨ２−である。ＲＣが２回以上存在する場合（可能な場合）、それは、ピロリジンジイル環又はピペリジンジイル環の同じ炭素原子に結合し得、それぞれの場合が異なり得る。
【００５３】
一般に、本発明において「置換された」という用語を使用するときには常に、他に指示がない限り又は文脈から明らかでない限り、「置換された」を使用する表現で示される原子上又は基上の１個以上の水素、特に１〜３個の水素、好ましくは１個又は２個の水素、より好ましくは１個の水素が、示されている群から選択される置換基で置き換えられていることを示すが、但し、通常の原子価を超えず、置換により化学的に安定な化合物、すなわち反応混合物から有用な程度の純度での単離及び治療剤への製剤化に十分に耐え得る堅牢な化合物が得られるものとする。
【００５４】
「対象」という用語は、本明細書で使用する場合、治療、観察又は実験の目的物となるか又は目的物となった動物、好ましくは哺乳動物、最も好ましくはヒトを指す。したがって、本明細書で使用する場合、「対象」という用語は、患者及び本明細書で定義する疾患又は病態を発症するリスクのある無症候の又は症状が出る前の個体を包含する。
【００５５】
「治療有効量」という用語は、本明細書で使用する場合、研究者、獣医師、医師又は他の臨床医によって求められている、組織系、動物又はヒトにおける生物学的又は医学的反応（治療されている疾患又は障害の症状の軽減を含む）を誘発する活性化合物又は医薬剤の量を意味する。「予防有効量」という用語は、本明細書で使用する場合、予防されている疾患又は障害の発症の可能性を実質的に低減する活性化合物又は薬剤の量を意味する。
【００５６】
本明細書で使用する場合、「組成物」という用語は、特定の成分を特定の量で含む生成物及び特定の成分の特定の量での組合せから直接的又は間接的に得られる任意の生成物を包含するものとする。
【００５７】
上記及び下記では、「式（Ｉ）の化合物」という用語は、その付加塩、溶媒和物及び立体異性体を含むものとする。
【００５８】
「立体異性体」又は「立体化学的異性形態」という用語は、上記又は下記で同義的に使用される。
【００５９】
本発明は、式（Ｉ）の化合物の全ての立体異性体を純粋な立体異性体として又は２種以上の立体異性体の混合物として含む。
【００６０】
エナンチオマーは、重ね合わせることができない互いの鏡像となっている立体異性体である。エナンチオマーの一対の１：１混合物は、ラセミ体又はラセミ混合物である。ジアステレオマー（又はジアステレオ異性体）は、エナンチオマーではない立体異性体であり、すなわち、それらは、鏡像の関係にない。化合物が二重結合を含有する場合、置換基は、Ｅ配置又はＺ配置であり得る。化合物が二置換シクロアルキル基を含有する場合、置換基は、シス配置又はトランス配置であり得る。したがって、本発明は、エナンチオマー、ジアステレオマー、ラセミ体、Ｅ異性体、Ｚ異性体、シス異性体、トランス異性体及びこれらの混合物を含む。
【００６１】
絶対配置は、カーン・インゴルド・プレローグ表示法に従って特定される。不斉原子における配置は、Ｒ又はＳで指定される。絶対配置が不明である分割化合物は、平面偏光を回転させる方向に応じて（＋）又は（−）で示すことができる。
【００６２】
特定の立体異性体が同定される場合、これは、前記立体異性体が他の異性体を実質的に含まない、すなわち他の異性体を５０％未満、好ましくは２０％未満、より好ましくは１０％未満、より一層好ましくは５％未満、特に２％未満、最も好ましくは１％未満のみ伴うことを意味する。したがって、式（Ｉ）の化合物が例えば（Ｒ）と特定される場合、これは、その化合物が実質的に（Ｓ）異性体を含まないことを意味し、式（Ｉ）の化合物が例えばＥと特定される場合、これは、その化合物が実質的にＺ異性体を含まないことを意味し、式（Ｉ）の化合物が例えばシスと特定される場合、これは、その化合物が実質的にトランス異性体を含まないことを意味する。
【００６３】
医薬で使用される場合、本発明の化合物の付加塩は、毒性のない「薬学的に許容される付加塩」を指す。しかしながら、他の塩が本発明による化合物又はその薬学的に許容される付加塩の調製に有用であることがある。本化合物の好適な薬学的に許容される付加塩としては、例えば、化合物の溶液を塩酸、硫酸、フマル酸、マレイン酸、コハク酸、酢酸、安息香酸、クエン酸、酒石酸、炭酸又はリン酸などの薬学的に許容される酸の溶液と混合することによって形成され得る酸付加塩が挙げられる。さらに、本発明の化合物が酸部分を有する場合、その薬学的に許容される好適な付加塩としては、アルカリ金属塩、例えばナトリウム塩又はカリウム塩、アルカリ土類金属塩、例えばカルシウム塩又はマグネシウム塩及び好適な有機配位子と形成される塩、例えば第四級アンモニウム塩を挙げることができる。
【００６４】
薬学的に許容される塩の製造に使用され得る代表的な酸としては、以下のものが挙げられるが、それらに限定されるものではない：酢酸、２，２−ジクロロ酢酸、アシル化アミノ酸、アジピン酸、アルギン酸、アスコルビン酸、Ｌ−アスパラギン酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、４−アセトアミド安息香酸、（＋）−樟脳酸、樟脳スルホン酸、カプリン酸、カプロン酸、カプリル酸、ケイ皮酸、クエン酸、シクラミン酸、エタン−１，２−ジスルホン酸、エタンスルホン酸、２−ヒドロキシ−エタンスルホン酸、ギ酸、フマル酸、ガラクタル酸、ゲンチジン酸、グルコヘプトン酸、Ｄ−グルコン酸、Ｄ−グルクロン酸、Ｌ−グルタミン酸、β−オキソ−グルタル酸、グリコール酸、馬尿酸、臭化水素酸、塩酸、（＋）−Ｌ−乳酸、（±）−ＤＬ−乳酸、ラクトビオン酸、マレイン酸、（−）−Ｌ−リンゴ酸、マロン酸、（±）−ＤＬ−マンデル酸、メタンスルホン酸、ナフタレン−２−スルホン酸、ナフタレン−１，５−ジスルホン酸、１−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸、ニコチン酸、硝酸、オレイン酸、オロト酸、シュウ酸、パルミチン酸、パモ酸、リン酸、Ｌ−ピログルタミン酸、サリチル酸、４−アミノ−サリチル酸、セバシン酸、ステアリン酸、コハク酸、硫酸、タンニン酸、（＋）−Ｌ−酒石酸、チオシアン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、トリフルオロメチルスルホン酸及びウンデシレン酸。薬学的に許容される付加塩の調製に使用することができる代表的な塩基としては、以下のものが挙げられるが、それらに限定されるものではない：アンモニア、Ｌ−アルギニン、ベネタミン、ベンザチン、水酸化カルシウム、コリン、ジメチルエタノール−アミン、ジエタノールアミン、ジエチルアミン、２−（ジエチルアミノ）−エタノール、エタノールアミン、エチレン−ジアミン、Ｎ−メチル−グルカミン、ヒドラバミン、１Ｈ−イミダゾール、Ｌ−リシン、水酸化マグネシウム、４−（２−ヒドロキシエチル）−モルホリン、ピペラジン、水酸化カリウム、１−（２−ヒドロキシエチル）−ピロリジン、第二級アミン、水酸化ナトリウム、トリエタノールアミン、トロメタミン及び水酸化亜鉛。
【００６５】
化合物の名称は、Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ａｂｓｔｒａｃｔｓ  Ｓｅｒｖｉｃｅ（ＣＡＳ）によって取り決められた命名規則又は国際純正・応用化学連合（ＩＵＰＡＣ）によって取り決められた命名規則に従って生成された。
【００６６】
最終化合物の調製
本発明による化合物は、一般に、それぞれが当業者に公知の一連の工程により調製することができる。具体的には、本化合物は、以下の合成方法に従って調製することができる。
【００６７】
式（Ｉ）の化合物は、当技術分野で知られる分割法に従って互いに分離することができるエナンチオマーのラセミ混合物の形態で合成することができる。式（Ｉ）のラセミ化合物は、好適なキラル酸との反応により、対応するジアステレオマー塩形態に変換することができる。その後、前記ジアステレオマー塩形態は、例えば、選択的又は分別結晶化により分離され、エナンチオマーは、アルカリでそれから遊離される。式（Ｉ）の化合物のエナンチオマー形態を分離する代替の方法には、キラル固定相を使用する液体クロマトグラフィーが含まれる。前記純粋な立体化学的異性形態は、適切な出発物質の対応する純粋な立体化学的異性形態から誘導することもできるが、但し、反応が立体特異的に起こることを条件とする。
【００６８】
実験手順１
式（Ｉ−ａ）の最終化合物は、反応スキーム（１）に従って式（ＩＩ）の中間体化合物を式（ＸＶ）の化合物と反応させることにより調製することができる。反応は、好適な反応不活性溶媒（例えば、ジクロロメタンなど）、金属水素化物（例えば、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム、シアノ水素化ホウ素ナトリウム又は水素化ホウ素ナトリウムなど）中で行われ、好適な塩基（例えば、トリエチルアミンなど）及び／又はルイス酸（例えば、チタンテトライソプロポキシド又は四塩化チタンなど）の存在を０℃又は室温又は１４０℃などの温度条件下で例えば１時間又は２４時間にわたって必要とし得る。反応スキーム（１）において、全ての変数は、式（Ｉ）のように定義される。
【化９】
2021528413.tif 000010
【００６９】
実験手順２
さらに、式（Ｉ−ａ）の最終化合物は、反応スキーム（２）に従って式（ＩＩ）の中間体化合物を式（ＸＶＩ）の化合物と反応させることにより調製することができる。反応は、好適な反応不活性溶媒（例えば、アセトニトリルなど）中、好適な塩基（例えば、トリエチルアミン又はジイソプロピルエチルアミン）、０℃、又は室温、又は７５℃などの温度条件下で例えば１時間又は２４時間行われる。反応スキーム（２）において、全ての変数は、式（Ｉ）のように定義され、ここで、ハロは、クロロ、ブロモ又はヨードである。
【化１０】
2021528413.tif 000011
【００７０】
実験手順３
さらに、式（Ｉ）（式中、Ｒは、ＣＨ３である）の最終化合物は、本明細書では（Ｉ−ｂ）と称し、反応スキーム（３）に従い、式（ＩＩ）の中間体化合物を式（ＸＶＩＩ）の化合物と反応させ、次に形成されたイミン誘導体を式（ＸＶＩＩＩ）の中間体化合物と反応させることによって調製することができる。反応は、好適な反応不活性溶媒（例えば、無水ジクロロメタンなど）中、ルイス酸（例えば、チタンテトライソプロポキシド又は四塩化チタンなど）、０℃又は室温などの温度条件下で例えば１時間又は２４時間行われる。反応スキーム（３）において、全ての変数は、式（Ｉ）のように定義され、ここで、ハロは、クロロ、ブロモ又はヨードである。
【化１１】
2021528413.tif 000012
【００７１】
実験手順４
さらに、式（Ｉ）の最終化合物（式中、ＬＡは、−ＮＨ−ＣＨ２−である）は、本明細書では（Ｉ−ｃ）と称し、反応スキーム（４）に従い、式（ＩＩＩ）の中間体化合物を式（Ｖ）の化合物と反応させることによって調製することができる。反応は、パラジウム触媒（例えば、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）、リガンド（例えば、２−ジシクロヘキシルホスフィノ−２’−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）ビフェニルなど）、塩基（例えば、ナトリウムｔｅｒｔ−ブトキシドなど）、好適な反応不活性溶媒（例えば、無水１，４−ジオキサンなど）の存在下、１００℃などの温度条件下で例えば４時間又は２４時間行われる。反応スキーム（４）において、全ての変数は、式（Ｉ）のように定義され、ここで、ハロは、クロロ、ブロモ又はヨードである。
【化１２】
2021528413.tif 000013
【００７２】
実験手順５
式（ＩＩ）の中間体化合物は、反応スキーム（５）に従い、式（ＩＶ）の中間体化合物の保護基を切断して調製することができる。反応スキーム（５）において、全ての変数は、式（Ｉ）のように定義され、ＰＧは、例えば、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）、エトキシカルボニル、ベンジル、ベンジルオキシカルボニル（Ｃｂｚ）などの窒素官能基の好適な保護基である。このような保護基を除去するための好適な方法は、当業者に広く知られており、以下に限定されるものではないが、Ｂｏｃ脱保護：反応不活性溶媒（例えば、ジクロロメタンなど）中、プロトン酸（例えば、トリフルオロ酢酸など）での処理；エトキシカルボニル脱保護：反応不活性溶媒（例えば、含水テトラヒドロフランなど）中、強塩基（例えば、水酸化ナトリウムなど）での処理；ベンジル脱保護：反応不活性溶媒（例えば、エタノールなど）中、好適な触媒（例えば、パラジウム炭素など）の存在下での接触水素化；ベンジルオキシカルボニル脱保護：反応不活性溶媒（例えば、エタノールなど）中、好適な触媒（例えば、パラジウム炭素など）の存在下での接触水素化を含む。
【化１３】
2021528413.tif 000014
【００７３】
実験手順６
式（ＩＶ−ａ）の中間体化合物は、反応スキーム（６）に従い、式（Ｖ）のハロ化合物と式（ＶＩ）の有機亜鉛化合物との「根岸カップリング」反応により調製することができる。反応は、好適な反応不活性溶媒（例えば、テトラヒドロフランなど）中及び適切な触媒（例えば、Ｐｄ（ＯＡｃ）２など）、遷移金属に好適なリガンド（例えば、２−ジシクロヘキシルホスフィノ−２’，６’−ジイソプロポキシビフェニル［ＣＡＳ：７８７６１８−２２−８］、例えば室温などの温度条件下で例えば１時間行われる。反応スキーム（６）において、全ての変数は、式（Ｉ）のように定義され、ＬＡは、結合又はＣＨ２であり、ハロは、好ましくは、ブロモ又はヨードである。ＰＧは、式（ＩＶ）のように定義される。
【化１４】
2021528413.tif 000015
【００７４】
実験手順７
式（ＶＩ）の中間体化合物は、反応スキーム（７）に従い、式（ＶＩＩ）のハロ化合物と亜鉛との反応により調製することができる。反応は、好適な反応不活性溶媒（例えば、テトラヒドロフランなど）中及び好適な塩（例えば、塩化リチウムなど）、例えば４０℃などの温度条件下で例えば連続流通反応器内において行われる。反応スキーム（７）において、全ての変数は、式（Ｉ）のように定義され、ＬＡは、結合又はＣＨ２であり、ハロは、好ましくは、ヨードである。ＰＧは、式（ＩＶ）のように定義される。
【化１５】
2021528413.tif 000016
【００７５】
実験手順８
式（ＩＶ）（式中、ＲＤは、Ｈである）の中間体化合物は、本明細書では（ＩＶ−ｂ）と称し、反応スキーム（８）に従い、式（ＶＩＩＩ）のアルケン化合物の水素化反応により調製することができる。反応は、好適な反応不活性溶媒（例えば、メタノールなど）中並びに好適な触媒（例えば、パラジウム炭素など）及び水素、例えば室温などの温度条件下で例えば３時間行われる。反応スキーム（８）において、全ての変数は、式（Ｉ）のように定義され、ＰＧは、式（ＩＶ）のように定義される。
【化１６】
2021528413.tif 000017
【００７６】
実験手順９
式（ＶＩＩＩ）の中間体化合物は、反応スキーム（９）に従い、式（ＩＸ）のアルケン化合物と式（Ｖ）のハロ誘導体との「鈴木カップリング」反応によって調製することができる。反応は、好適な反応不活性溶媒、例えば１，４−ジオキサン中及び好適な触媒（例えば、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）など）、好適な塩基（例えば、ＮａＨＣＯ３（飽和水溶液）など）、例えば１３０℃などの温度条件下で例えば３０分間、マイクロ波照射下で行われる。反応スキーム（９）において、全ての変数は、式（Ｉ）のように定義され、ハロは、好ましくは、ブロモ又はヨードであり、ＬＡは、結合であり、ＰＧは、式（ＩＶ）のように定義され、ＬＡは、結合であり、ＲＤはＨである。
【化１７】
2021528413.tif 000018
【００７７】
実験手順１０
式（ＩＶ−ｃ）の中間体化合物は、反応スキーム（１０）に従い、式（Ｘ）のヒドロキシ化合物と式（Ｖ）のハロ誘導体との反応によって調製することができる。反応は、好適な反応不活性溶媒（例えば、ジメチルホルムアミド又はジメチルスルホキシドなど）中及び好適な塩基（例えば、水素化ナトリウム又はカリウムｔｅｒｔ−ブトキシドなど）、例えば５０℃などの温度条件下で例えば４８時間行われる。反応スキーム（１０）において、全ての変数は、式（Ｉ）のように定義され、ＬＡ’は、結合又はＣＨ２であり、ハロは、好ましくは、クロロ、ブロモ又はフルオロである。ＰＧは、式（ＩＶ）のように定義される。
【化１８】
2021528413.tif 000019
【００７８】
実験手順１１
代わりに、式（ＩＶ−ｃ）の中間体化合物は、反応スキーム（１１）に従い、式（Ｘ）のヒドロキシ化合物と式（ＸＩ）のヒドロキシ誘導体との「光延反応」によって調製することができる。反応は、適当な反応不活性溶剤（例えば、トルエンなど）中、ホスフィン（例えば、トリフェニルホスフィンなど）、好適なカップリング剤（例えば、ＤＩＡＤ（ＣＡＳ：２４４６−８３−５）など）、例えば７０℃などの温度条件下で例えば１７時間行われる。反応スキーム（１１）において、全ての変数は、式（Ｉ）のように定義され、ＬＡ’は、結合又はＣＨ２であり、ハロは、好ましくは、クロロ、ブロモ又はフルオロである。ＰＧは、式（ＩＶ）のように定義される。
【化１９】
2021528413.tif 000020
【００７９】
実験手順１２
式（ＩＩＩ）の中間体化合物は、反応スキーム（１２）に従い、式（ＸＩ）の中間体化合物中の保護基を切断して調製することができる。反応は、好適な反応不活性溶媒（例えば、エタノールなど）中、ヒドラジン水和物の存在下、例えば８０℃などの温度条件下で例えば２時間行われる。反応スキーム（１２）において、全ての変数は、式（Ｉ）のように定義される。
【化２０】
2021528413.tif 000021
【００８０】
実験手順１３
式（ＸＩＩ）の中間体化合物は、反応スキーム（１３）に従い、式（ＸＩＩＩ）の中間体化合物をフタルイミドと反応させることによって調製することができる。反応は、好適な反応不活性溶媒（例えば、乾燥テトラヒドロフランなど）中、ホスフィン（例えば、トリフェニルホスフィンなど）、好適なカップリング剤（例えば、アゾジカルボン酸ジイソプロピルなど）の存在下、例えば室温などの温度条件下で例えば２４時間行われる。反応スキーム（１３）において、全ての変数は、式（Ｉ）のように定義される。
【化２１】
2021528413.tif 000022
【００８１】
実験手順１４
式（ＸＩＩＩ）の中間体化合物は、反応スキーム（１４）に従い、式（ＸＩＶ）の中間体化合物のアルコール基を脱保護することによって調製することができる。反応は、好適な反応不活性溶媒（例えば、乾燥テトラヒドロフランなど）中、フッ化物源（例えば、フッ化テトラブチルアンモニウムなど）の存在下、例えば室温などの温度条件下で例えば１６時間行われる。反応スキーム（１３）において、全ての変数は、式（Ｉ）のように定義され、ＰＧ１は、トリメチルシリル、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル、トリイソプロピルシリル又はｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリルからなる群から選択される。
【化２２】
2021528413.tif 000023
【００８２】
式（Ｖ）、（ＶＩＩ）、（ＩＸ）、（ＸＶ）、（ＸＶＩ）、（ＸＶＩＩ）及び（ＸＶＩＩＩ）の中間体は、商業的に入手可能であるか、又は当業者に知られた手順で調製することができる。
【００８３】
薬効薬理
本発明の化合物及びその薬学的に許容される組成物は、Ｏ−ＧｌｃＮＡｃ加水分解酵素（ＯＧＡ）を阻害し、したがってタウオパチーとしても知られるタウ病変を伴う疾患及びタウ封入体を有する疾患の治療又は予防において有用であり得る。このような疾患としては、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症及びパーキンソン認知症複合、嗜銀顆粒病、慢性外傷性脳症、大脳皮質基底核変性症、石灰沈着を伴うびまん性神経原線維変化病、ダウン症候群、家族性英国型認知症、家族性デンマーク型認知症、１７番染色体に連鎖しパーキンソニズムを伴う前頭側頭型認知症（ＭＡＰＴ変異に起因する）、前頭側頭葉変性症（一部の症例は、Ｃ９ＯＲＦ７２変異に起因する）、ゲルストマン・シュトロイスラー・シャインカー病、グアドループパーキンソン症候群、筋強直性ジストロフィー、脳の鉄沈着を伴う神経変性、ニーマン・ピック病Ｃ型、神経原線維変化を伴う非グアム型運動ニューロン病、ピック病、脳炎後パーキンソン症候群、プリオンタンパク質脳アミロイド血管症、進行性皮質下グリオーシス、進行性核上性麻痺、ＳＬＣ９Ａ６関連精神遅滞、亜急性硬化性全脳炎、神経原線維変化型認知症並びにグリア細胞球状封入体を伴う白質タウオパチーが挙げられるが、これらに限定されない。
【００８４】
本明細書で使用する場合、「治療」という用語は、疾患の進行を遅延、中断、阻止若しくは停止するか又は症状を軽減し得る全てのプロセスを指すものとするが、必ずしも全症状の完全な排除を示すものではない。本明細書で使用する場合、「予防」という用語は、疾患の発症を遅延、中断、阻止又は停止し得る全ての方法を指すものとする。
【００８５】
本発明は、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症／パーキンソン認知症複合、嗜銀顆粒病、慢性外傷性脳症、大脳皮質基底核変性症、石灰化を伴うびまん性神経原線維変化病、ダウン症候群、家族性イギリス型認知症、家族性デンマーク型認知症、１７番染色体に連鎖しパーキンソニズムを伴う前頭側頭型認知症（ＭＡＰＴ変異に金する）、前頭側頭葉変性症（一部の症例は、Ｃ９ＯＲＦ７２変異に起因する）、ゲルストマン・シュトロイスラー・シャインカー病、グアドループ型パーキンソニズム、筋緊張性ジストロフィー、脳内鉄沈着を伴う神経変性症、ニーマン・ピック病Ｃ型、非グアム型神経原線維変化を伴う運動ニューロン疾患、ピック病、脳炎後パーキンソニズム、プリオンタンパク質脳アミロイド血管症、進行性皮質下グリオーシス、進行性核上性麻痺、ＳＬＣ９Ａ６関連精神遅滞、亜急性硬化性全脳炎、神経原線維変化のみの認知症及びグリア細胞球状封入体を伴う白質タウオパチーからなる群から選択される疾患又は病態の治療又は予防に使用するための、一般式（Ｉ）による化合物、その立体異性形態又はその薬学的に許容される酸付加塩若しくは塩基付加塩にも関する。
【００８６】
本発明は、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症／パーキンソン認知症複合、嗜銀顆粒病、慢性外傷性脳症、大脳皮質基底核変性症、石灰化を伴うびまん性神経原線維変化病、ダウン症候群、家族性イギリス型認知症、家族性デンマーク型認知症、１７番染色体に連鎖しパーキンソニズムを伴う前頭側頭型認知症（ＭＡＰＴ変異に起因する）、前頭側頭葉変性症（一部の症例は、Ｃ９ＯＲＦ７２変異に起因する）、ゲルストマン・シュトロイスラー・シャインカー病、グアドループ型パーキンソニズム、筋緊張性ジストロフィー、脳内鉄沈着を伴う神経変性症、ニーマン・ピック病Ｃ型、非グアム型神経原線維変化を伴う運動ニューロン疾患、ピック病、脳炎後パーキンソニズム、プリオンタンパク質脳アミロイド血管症、進行性皮質下グリオーシス、進行性核上性麻痺、ＳＬＣ９Ａ６関連精神遅滞、亜急性硬化性全脳炎、神経原線維変化のみの認知症及びグリア細胞球状封入体を伴う白質タウオパチーからなる群から選択される疾患又は病態のリスクの治療、予防、改善、制御又は低減に使用するための、一般式（Ｉ）による化合物、その立体異性形態又はその薬学的に許容される酸付加塩若しくは塩基付加塩に関する。
【００８７】
特に、疾患若しくは病態は、タウオパチー、より特にアルツハイマー病、進行性核上性麻痺、ダウン症候群、前頭側頭葉認知症、パーキンソニズム−１７を伴う前頭側頭型認知症、ピック病、大脳皮質基底核変性症及び嗜銀顆粒病からなる群から選択されるタウオパチーから特に選択され得るか；又は疾患若しくは病態は、特にタウ病変を伴う神経変性疾患、より特にＣ９ＯＲＦ７２変異によって引き起こされる筋萎縮性側索硬化症若しくは前頭側頭葉認知症から選択される神経変性疾患であり得る。
【００８８】
アルツハイマー病及びタウオパチー疾患における発症前状態：
近年、米国（ＵＳ）国立老化研究所及び国際ワーキンググループは、発症前（無症候性）段階のＡＤをより明確に定義するためのガイドラインを提案した（Ｄｕｂｏｉｓ  Ｂ，ｅｔ  ａｌ．Ｌａｎｃｅｔ  Ｎｅｕｒｏｌ．２０１４；１３：６１４−６２９、Ｓｐｅｒｌｉｎｇ，ＲＡ，ｅｔ  ａｌ．Ａｌｚｈｅｉｍｅｒｓ  Ｄｅｍｅｎｔ．２０１１；７：２８０−２９２）。仮説モデルは、Ａβの蓄積及びタウ凝集が、明白な臨床的障害が発現する何年も前に始まることを前提とする。アミロイド蓄積、タウ凝集の上昇及びＡＤの発症の重要な危険因子は、年齢（すなわち６５歳以上）、ＡＰＯＥ遺伝子型及び家族歴である。臨床的に正常な７５歳より高齢の個体のおよそ３分の１は、アミロイド及びタウのＰＥＴ画像診断（タウについて現在あまり進んでいない）でＡβ又はタウの蓄積のエビデンスを示す。さらに、ＣＳＦ測定値においてＡベータレベルの減少が観察される一方、修飾を受けていないタウ及びリン酸化したタウのレベルは、ＣＳＦにおいて上昇している。類似の所見が大規模な剖検調査に見られ、早くも２０歳以下で脳内にタウ凝集体が検出されていることが示されている。アミロイド陽性（Ａβ＋）の臨床的に正常な個体は、一貫して他のバイオマーカーで「ＡＤ様中間形質」のエビデンスを示し、これには、機能的磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）と安静時機能的結合との両方における機能的ネットワーク活動の崩壊、フルオロデオキシグルコース１８Ｆ（ＦＤＧ）の代謝低下、皮質薄化及び萎縮の加速が含まれる。時系列データを積み上げると、やはり、Ａβ＋の臨床的に正常な個体は、認知機能低下並びに軽度認知障害（ＭＣＩ）及びＡＤ認知症への進行のリスクが増大していることが強く示されている。アルツハイマー病の科学界には、これらのＡβ＋の臨床的に正常な個体がＡＤ病理の連続体の初期段階を呈しているという意見の一致がある。したがって、Ａβの産生又はタウの凝集を減少させる治療剤の介入を、広範な神経変性が起こる前の病期で開始すると、より有効になりそうであると主張されてきた。多くの製薬会社は、現在、前駆性ＡＤにおけるＢＡＣＥの阻害を試験中である。
【００８９】
バイオマーカー研究の発展により、現在、最初の症状が発生する前の前臨床段階でのアルツハイマー病を特定することが可能である。前臨床アルツハイマー病に関する様々な問題、例えば定義及び用語、範囲、自然経過、進行のマーカー及び無症候段階での疾患の検出の倫理的重大性などは、全てＡｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ＆Ｄｅｍｅｎｔｉａ  １２（２０１６）２９２−３２３にレビューされている。
【００９０】
前臨床アルツハイマー病又はタウオパチーにおいて、個体は、２つのカテゴリーで識別され得る。ＰＥＴスキャンでアミロイドベータ又はタウ凝集のエビデンスがあるか、又はＣＳＦ  Ａベータ、タウ及びリン酸タウに変化のある、認知が正常な個体は、「アルツハイマー病のリスク状態にある無症候性（ＡＲ−ＡＤ）」又は「タウオパチーの無症候状態」であると定義される。家族性アルツハイマー病の完全浸透性優性常染色体の変異を有する個体は、「症状が出る前のアルツハイマー病」を有すると言われる。タウタンパク質内の優性常染色体の変異も同様に多様な形態のタウオパチーについて説明されている。
【００９１】
したがって、一実施形態では、本発明は、発症前アルツハイマー病、前駆性アルツハイマー病又はタウオパチーの様々な形態に見られるタウ関連の神経変性のリスクの制御又は低減に使用するための、一般式（Ｉ）による化合物、その立体異性形態又はその薬学的に許容される酸付加塩若しくは塩基付加塩にも関する。
【００９２】
上で既に述べたように、「治療」という用語は、必ずしも全症状の完全な排除を示すものではなく、上記の障害のいずれかの対症治療も指し得る。式（Ｉ）の化合物の有用性に鑑みて、上記の疾患のいずれか１つに罹患しているヒトを含む温血動物などの対象を治療する方法又は上記の疾患のいずれか１つに罹患しているヒトを含む温血動物などの対象を予防する方法が提供される。
【００９３】
前記方法は、式（Ｉ）の化合物、その立体異性形態、その薬学的に許容される付加塩又は溶媒和物の予防有効量又は治療有効量の、ヒトを含む温血動物などの対象への投与、すなわち全身投与又は局所投与、好ましくは経口投与を含む。
【００９４】
したがって、本発明は、上記の疾患のいずれかを予防及び／又は治療する方法であって、それを必要とする対象に、本発明による化合物の予防有効量又は治療有効量を投与することを含む方法にも関する。
【００９５】
本発明は、Ｏ−ＧｌｃＮＡｃ加水分解酵素（ＯＧＡ）の活性を調節する方法であって、それを必要とする対象に、本発明による及び特許請求の範囲で定義される化合物又は本発明による及び特許請求の範囲で定義される医薬組成物の予防有効量又は治療有効量を投与することを含む方法にも関する。
【００９６】
治療方法は、１日に１〜４回摂取する投薬計画で活性成分を投与することも含み得る。これらの治療方法では、本発明による化合物は、投与前に製剤化されることが好ましい。本明細書で下記に記載するように、好適な医薬製剤は、よく知られ、且つ容易に入手可能な成分を使用して既知の手順で調製される。
【００９７】
上記の障害のいずれか又はそれらの症状を治療又は予防するのに好適であり得る本発明の化合物は、単独で投与されるか、又は１種以上の追加の治療剤と併用して投与され得る。併用治療には、式（Ｉ）の化合物及び１種以上の追加の治療剤を含有する単一医薬投与製剤の投与並びに式（Ｉ）の化合物及び各追加の治療剤（それ自体個別の医薬投与製剤）の投与が含まれる。例えば、式（Ｉ）の化合物及び治療剤は、患者に錠剤若しくはカプセル剤などの単一経口投与組成物で一緒に投与されるか、又は各薬剤を個別の経口投与製剤で投与され得る。
【００９８】
当業者は、本明細書に記載の疾患又は病態の別の命名法、疾病分類及び分類体系に精通しているであろう。例えば、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｉｃ  ＡｓｓｏｃｉａｔｉｏｎのＤｉａｇｎｏｓｔｉｃ＆Ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ  Ｍａｎｕａｌ  ｏｆ  Ｍｅｎｔａｌ  Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓの第５版（ＤＳＭ−５（商標））は、神経認知障害群（ＮＣＤ）（重度及び軽度の両方）、特にアルツハイマー病による神経認知障害などの用語を使用している。このような用語は、本明細書に記載する疾患又は病態の一部の別の名称として当業者が使用する場合がある。
【００９９】
医薬組成物
本発明は、Ｏ−ＧｌｃＮＡｃ加水分解酵素（ＯＧＡ）の阻害が有益である疾患、例えばアルツハイマー病、進行性核上性麻痺、ダウン症候群、前頭側頭葉認知症、前頭側頭型認知症パーキンソニズム−１７、ピック病、大脳皮質基底核変性症、嗜銀顆粒病、筋萎縮性側索硬化症又はＣ９ＯＲＦ７２変異によって引き起こされる前頭側頭葉認知症を予防又は治療するための組成物も提供し、前記組成物は、治療有効量の式（Ｉ）の化合物及び薬学的に許容される担体又は希釈剤を含む。
【０１００】
活性成分を単独で投与することが可能であるが、それを医薬組成物として提供することが好ましい。したがって、本発明は、本発明による化合物を薬学的に許容される担体又は希釈剤とともに含む医薬組成物をさらに提供する。担体又は希釈剤は、組成物の他の成分と適合し、そのレシピエントに有害でないという意味で「許容される」ものでなければならない。
【０１０１】
本発明の医薬組成物は、薬学の技術分野においてよく知られた方法によって調製することができる。治療有効量の特定の化合物は、活性成分として、塩基形態又は付加塩態において、薬学的に許容される担体と組み合わされて均質な混合物にされるが、これは、投与に所望される製剤の形態に応じて多様な形態をとり得る。これらの医薬組成物は、好ましくは、経口、経皮又は非経口投与などの全身投与或いは吸入、鼻腔スプレー、点眼剤によるか又はクリーム、ゲル若しくはシャンプーなどによる局所投与に好適な単位剤形であることが望ましい。例えば、組成物を経口剤形に調製する際、例えば懸濁剤、シロップ剤、エリキシル剤及び液剤などの経口液体製剤の場合、水、グリコール類、油及びアルコールなど、又は散剤、丸剤、カプセル剤及び錠剤の場合、デンプン、糖、カオリン、滑沢剤、結合剤及び崩壊剤などの固体担体など、通常の医薬媒体のいずれかを使用することができる。錠剤及びカプセル剤は、その投与が容易であるため、最も有利な経口単位剤形であり、その場合、明らかに固体医薬担体が使用される。非経口組成物の場合、担体は、通常、滅菌水を少なくとも大部分含むことになるが、例えば溶解性を促進する他の成分が含まれ得る。例えば、担体が生理食塩水、グルコース溶液又は生理食塩水とグルコース溶液との混合物を含む注射用溶液を調製することができる。注射用懸濁剤も調製することができ、その場合、適切な液体担体及び懸濁化剤などが使用され得る。経皮投与に好適な組成物では、担体は、皮膚に重大な有害作用を引き起こさない任意の性質の少量の好適な添加剤と任意選択により組み合わせて、浸透促進剤及び／又は好適な湿潤剤を任意選択により含む。前記添加剤は、皮膚への投与を容易にすることができ、且つ／又は所望の組成物の調製に役立ち得る。これらの組成物は、様々な方法において、例えば経皮貼付剤、スポットオン製剤又は軟膏剤として投与することができる。
【０１０２】
投与を容易にし、投与量を均一にするために、前述の医薬組成物を単位剤形に製剤化することが特に有利である。本明細書及び特許請求の範囲で使用される単位剤形は、単位用量として好適な物理的に不連続な単位を指し、各単位は、必要な医薬担体と共同して所望の治療効果を生じるように算出された所定量の活性成分を含有する。そのような単位剤形の例としては、錠剤（割線入り錠剤又はコーティング錠を含む）、カプセル剤、丸剤、分包散剤、カシェ剤、注射用溶液又は懸濁液、小さじ量及び大さじ量など、並びにそれらを分割して複合したものがある。
【０１０３】
正確な投与量及び投与頻度は、当業者によく知られているように、使用される式（Ｉ）の特定の化合物、治療される特定の病態、治療される病態の重症度、特定の患者の年齢、体重、性別、障害の程度及び全身の健康状態並びにその個体が摂取している可能性がある他の医薬によって異なる。さらに、前記有効１日量は、治療対象の応答に応じて且つ／又は本発明の化合物を処方する医師の評価に応じて減少又は増加され得ることが明らかである。
【０１０４】
投与方法に応じて、医薬組成物は、有効成分を０．０５〜９９重量％、好ましくは０．１〜７０重量％、より好ましくは０．１〜５０重量％及び薬学的に許容される担体を１〜９９．９５重量％、好ましくは３０〜９９．９重量％、より好ましくは５０〜９９．９重量％含むことになるであろう（パーセンテージは、全て組成物の全重量に基づく）。
【０１０５】
本化合物は、経口、経皮若しくは非経口投与などの全身投与又は吸入、鼻腔スプレー、点眼剤を介したもの若しくはクリーム、ゲル若しくはシャンプーなどを介したものなどの局所投与に使用することができる。本化合物は、経口投与されるのが好ましい。正確な投与量及び投与頻度は、当業者によく知られているように、使用される式（Ｉ）の特定の化合物、治療される特定の病態、治療される病態の重症度、特定の患者の年齢、体重、性別、障害の程度及び全身の健康状態並びにその個体が摂取している可能性がある他の医薬によって異なる。さらに、前記有効１日量は、治療対象の応答に応じて且つ／又は本発明の化合物を処方する医師の評価に応じて減少又は増加され得ることが明らかである。
【０１０６】
単回剤形を製造するために担体材料と組み合わせることができる式（Ｉ）の化合物の量は、治療される疾患、哺乳動物種及び特定の投与方式に応じて変わるであろう。しかし、一般的な指針として、本発明の化合物についての好適な単位用量は、例えば、好ましくは０．１ｍｇ〜約１０００ｍｇの活性化合物を含有し得る。好ましい単位用量は、１ｍｇ〜約５００ｍｇである。より好ましい単位用量は、１ｍｇ〜約３００ｍｇである。より一層好ましい単位用量は、１ｍｇ〜約１００ｍｇである。このような単位用量は、７０ｋｇの成人の総投与量が、１回の投与につき対象の体重１ｋｇ当たり０．００１〜約１５ｍｇの範囲になるように、１日に２回以上、例えば１日に２回、３回、４回、５回又は６回投与することができるが、好ましくは１日に１回又は２回である。好ましい用量は、１回の投与当たり対象の体重１ｋｇ当たり０．０１〜約１．５ｍｇであり、そのような療法は、数週間又は数ヶ月間、場合により数年間にわたる可能性がある。しかし、当業者によく理解されているように、任意の特定の患者に対する特定の用量レベルは、使用する特定の化合物の活性、治療を受ける個体の年齢、体重、全身の健康状態、性別及び食事、投与時間及び投与経路、排泄率、以前投与された他の薬物並びに治療を受ける特定の疾患の重症度を含む様々な要因に依存することが理解されるであろう。
【０１０７】
典型的な用量は、１日１回若しくは１日複数回服用される１つの１ｍｇ〜約１００ｍｇ錠剤若しくは１ｍｇ〜約３００ｍｇ又は１日１回服用され、比較的高含有量の有効成分を含有する１つの徐放性カプセル剤若しくは錠剤であり得る。徐放効果は、異なるｐＨ値で溶解するカプセル材料により、浸透圧で徐々に放出するカプセルにより又は他の既知の任意の放出制御手段により得ることができる。
【０１０８】
当業者に明らかであろうように、これらの範囲外の投与量を使用することが必要となる場合があり得る。さらに、臨床医又は治療医は、個々の患者の応答に応じて治療を開始、中断、調整又は終了する方法及び時点を知っているであろうことにも留意されたい。
【０１０９】
本発明は、本発明による化合物、「リーフレット」とも呼ばれる処方情報、ブリスターパッケージ又はボトル及び容器を含むキットも提供する。さらに、本発明は、本発明による医薬組成物、「リーフレット」とも呼ばれる処方情報、ブリスターパッケージ又はボトル及び容器を含むキットを提供する。処方情報には、本発明による化合物又は医薬組成物の投与に関して患者への注意又は説明が含まれることが好ましい。特に、処方情報には、タウオパチーの予防及び／又は治療のために、それを必要とする対象において、本発明による化合物又は医薬組成物がどのように使用されるべきかについて、前記本発明による化合物又は医薬組成物の投与に関して患者への注意又は説明が含まれる。したがって、一実施形態では、本発明は、式（Ｉ）の化合物若しくはその立体異性形態、又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物、又は前記化合物を含む医薬組成物及びタウオパチーを予防又は治療するための説明書を含むキットオブパーツを提供する。本明細書に記載するキットは、特に、市販のための好適な医薬パッケージであり得る。
【０１１０】
上記の組成物、方法及びキットについて、当業者は、それぞれに使用するのに好ましい化合物が、上記で好ましいと記載されている化合物であることを理解するであろう。組成物、方法及びキットについてさらに一層好ましい化合物は、下記の非限定的な実施例で提供される化合物である。
【実施例】
【０１１１】
実験の部
以下では、用語「ｍ．ｐ．」は、融点を意味し、「ｍｉｎ」は、分を意味し、「ＡＣＮ」は、アセトニトリルを意味し、「ａｑ．」は、水性を意味し、「Ｂｏｃ」は、ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルを意味し、「ＤａｖｅＰｈｏｓ」は、２−ジシクロヘキシルホスフィノ−２’−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）ビフェニルを意味し、「ＤＩＡＤ」は、アゾジカルボン酸ジイソプロピルを意味し、「ＤＭＡＰ」は、４−（ジメチルアミノ）ピリジンを意味し、「ＤＭＦ」は、ジメチルホルムアミドを意味し、「ｒ．ｔ．」又は「ＲＴ」は、室温を意味し、「ｒａｃ」又は「ＲＳ」は、ラセミを意味し、「ｓａｔ．」は、飽和を意味し、「ＳＦＣ」は、超臨界流体クロマトグラフィーを意味し、「ＳＦＣ−ＭＳ」は、超臨界流体クロマトグラフィー／質量分析を意味し、「ＬＣ−ＭＳ」は、液体クロマトグラフィー／質量分析を意味し、「ＨＰＬＣ」は、高速液体クロマトグラフィーを意味し、「ｉ−ＰｒＯＨ」は、イソプロピルアルコールを意味し、「ＲＰ」は、逆相を意味し、「Ｒｔ」は、保持時間（分）を意味し、「［Ｍ＋Ｈ］＋」は、化合物の遊離塩基のプロトン化質量を意味し、「ｗｔ」は、重量を意味し、「ＴＨＦ」は、テトラヒドロフランを意味し、「Ｅｔ２Ｏ」は、ジエチルエーテルを意味し、「ＥｔＯＡｃ」は、酢酸エチルを意味し、「Ｅｔ３Ｎ」は、トリエチルアミンを意味し、「ＤＣＭ」は、ジクロロメタンを意味し、「ＭｅＯＨ」は、メタノールを意味し、「ｓａｔ」は、飽和を意味し、「ｓｏｌｔｎ」は、溶液を意味し、「ｓｏｌ．」は、溶液を意味し、「ＥｔＯＨ」は、エタノールを意味し、「ＴＦＡ」は、トリフルオロ酢酸を意味し、「２−ＭｅＴＨＦ」は、２−メチル−テトラヒドロフラン」を意味し、「ＮＭＰ」は、Ｎ−メチルピロリドンを意味し、「ＡＩＢＮ」は、２，２’−アゾビス（２−メチルプロピオニトリルを意味し、「ｍ−ＣＰＢＡ」は、３−クロ濾過安息香酸を意味し、「Ｐｄ（ＯＡｃ）２」又は「（ＯＡｃ）２Ｐｄ」は、酢酸パラジウム（ＩＩ）を意味し、「Ｐｄ２（ｄｂａ）３」は、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）を意味し、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４は、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）を意味し、「ＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）」は、［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）を意味し、「ＰｄＣｌ２（ＰＰｈ３）２」は、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）ジクロリドを意味し、「ＲｕＰｈｏｓ」は、２−ジシクロヘキシルホスフィノ−２’，６’−ジイソプロポキシビフェニルを意味し、「ｔ−ＢｕＸＰｈｏｓ」は、２−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルホスフィノ−２’，４’，６’−トリイソプロピルビフェニルを意味し、「ＴＭＳＣｌ」はトリメチルシリルクロリドを意味する。
【０１１２】
「ＲＳ」という表記が本明細書で示されている場合には常に、別途指示しない限り、その化合物は、示された中心でのラセミ混合物であることを意味する。一部の化合物では、中心の立体化学的配置は、混合物が分離された場合に「Ｒ」又は「Ｓ」と指定されており、一部の化合物では、化合物自体は、単一の立体異性体として単離され、鏡像異性的／ジアステレオ異性的に純粋であるが、絶対立体化学が未確定の場合、示された中心での立体化学的配置は、「＊Ｒ」又は「＊Ｓ」と指定されている。本明細書で報告している化合物のエナンチオマー過剰率は、超臨界流体クロマトグラフィー（ＳＦＣ）によるラセミ混合物の分析と、その後の分離されたエナンチオマーのＳＦＣ比較とにより決定した。
【０１１３】
フローケミストリー反応は、Ｖａｐｏｕｒｔｅｃ  Ｒ２＋Ｒ４ユニット中において、ベンダーによって提供される標準的な反応器を用いて行った。
【０１１４】
マイクロ波補助反応は、シングルモード式反応器：Ｉｎｉｔｉａｔｏｒ（商標）Ｓｉｘｔｙ  ＥＸＰマイクロ波反応器（Ｂｉｏｔａｇｅ  ＡＢ）又はマルチモード式反応器：ＭｉｃｒｏＳＹＮＴＨ  Ｌａｂｓｔａｔｉｏｎ（Ｍｉｌｅｓｔｏｎｅ，Ｉｎｃ．）で行った。
【０１１５】
薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）は、試薬級溶媒を使用して、シリカゲル６０  Ｆ２５４プレート（Ｍｅｒｃｋ）で行った。オープンカラムクロマトグラフィーは、標準的な技術を用いて、シリカゲル、粒径６０Å、メッシュ＝２３０〜４００（Ｍｅｒｃｋ）上で行った。
【０１１６】
自動フラッシュカラムクロマトグラフィーは、異なるフラッシュシステム、すなわちＡｒｍｅｎ  ＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔのＳＰＯＴ若しくはＬＡＦＬＡＳＨシステム、又はＩｎｔｅｒｃｈｉｍのＰｕｒｉＦｌａｓｈ（登録商標）４３０ｅｖｏシステム、又はＡｇｉｌｅｎｔの９７１−ＦＰシステム、又はＢｉｏｔａｇｅのＩｓｏｌｅｒａ  １ＳＶシステムの不規則シリカゲル、粒径１５〜４０μｍ（順相ディスポーザブルフラッシュカラム）上で即時接続型カートリッジを用いて行った。
【０１１７】
中間体の調製
中間体１の調製
【化２３】
2021528413.tif 000024
中間体３０（２．８４ｇ、９．７８ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（５０ｍＬ）溶液を撹拌し、この溶液にＡｍｂｅｒｌｙｓｔ（登録商標）１５水素形態（ＣＡＳ：３９３８９−２０−３、１１．１ｇ、負荷４．７ｍｅｑ／ｇ）をｒｔで添加した。この混合物を固相反応器中、ｒｔで１６時間振盪した。樹脂を濾過し、ＭｅＯＨで洗浄し（この画分は、廃棄した）、次いでＮＨ３のＭｅＯＨ溶液（７Ｎ）で洗浄した。濾液を減圧濃縮して、中間体１（１．２ｇ、６４％）を橙色油状物として得た。
【０１１８】
中間体２の調製
【化２４】
2021528413.tif 000025
中間体３１を出発物質として用い、中間体１の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体２を調製した。中間体２を逆相ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ、５μｍ、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液  ８０％、ＣＨ３ＣＮ  ２０％から、ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液  ６０％、ＣＨ３ＣＮ  ４０％への勾配）により精製した。
【０１１９】
中間体３の調製
【化２５】
2021528413.tif 000026
中間体３２を出発物質として用い、中間体１の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体３を調製した。中間体３を逆相ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ、５μｍ、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液  ８０％、ＣＨ３ＣＮ  ２０％から、ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液  ６０％、ＣＨ３ＣＮ  ４０％への勾配）により精製した。
【０１２０】
中間体４の調製
【化２６】
2021528413.tif 000027
中間体３３を出発物質として用い、中間体１の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体４を調製した。中間体４を逆相ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ、５μｍ、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液  ８０％、ＣＨ３ＣＮ  ２０％から、ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液  ６０％、ＣＨ３ＣＮ  ４０％への勾配）により精製した。
【０１２１】
中間体５の調製
【化２７】
2021528413.tif 000028
中間体３４（１３０ｍｇ、０．６９ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（１１ｍＬ）溶液にＰｄ／Ｃ１０％（７３．１ｍｇ、０．６９ｍｍｏｌ）をＮ２雰囲気下で添加した。この混合物を水素雰囲気下、ｒｔで１８時間撹拌した。反応混合物をｄｉｃａｌｉｔｅのパッドで濾過し、次いでパッドをエタノールですすいだ。濾液を合わせて減圧濃縮して、中間体５（１３０ｍｇ、９９％）を得た。
【０１２２】
中間体６の調製
【化２８】
2021528413.tif 000029
中間体３５を出発物質として用い、中間体１の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体６を調製した。
【０１２３】
中間体７の調製
【化２９】
2021528413.tif 000030
中間体３６を出発物質として用い、中間体１の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体７を調製した。
【０１２４】
中間体８の調製
【化３０】
2021528413.tif 000031
中間体３７を出発物質として用い、中間体１の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体８を調製した。
【０１２５】
中間体９の調製
【化３１】
2021528413.tif 000032
中間体３８を出発物質として用い、中間体１の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体９を調製した。
【０１２６】
中間体１０の調製
【化３２】
2021528413.tif 000033
中間体３９を出発物質として用い、中間体１の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体１０を調製した。
【０１２７】
中間体１１の調製
【化３３】
2021528413.tif 000034
ヒドラジン水和物（０．１３５ｍＬ、２．３８ｍｍｏｌ）を中間体５４（２４３ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（１０ｍＬ）溶液にｒｔで添加し、この混合物を８０℃で２時間撹拌した。溶媒を真空中で蒸発させ、こうして得られた残渣をＤＩＰＥでトリチュレートした。固形物を濾別し、濾液を減圧濃縮して残渣を得、これをフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ；ＮＨ３のＭｅＯＨ溶液（７Ｎ）／ＤＣＭ  ０／１００〜１０／９０）によって精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、中間体１１（１０６ｍｇ、６３％）を淡黄色の粘着性固体として得た。
【０１２８】
中間体１２の調製
【化３４】
2021528413.tif 000035
中間体５５を出発物質として用い、中間体１１の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体１２を調製した。
【０１２９】
中間体１３の調製
【化３５】
2021528413.tif 000036
中間体５６を出発物質として用い、中間体１１の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体１３を調製した。
【０１３０】
中間体１４の調製
【化３６】
2021528413.tif 000037
中間体５７を出発物質として用い、中間体１１の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体１４を調製した。
【０１３１】
中間体１５の調製
【化３７】
2021528413.tif 000038
中間体５８（２．２３ｇ、６．８４ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１５．８ｍＬ）溶液を撹拌し、この溶液にＨＣｌ（２５．６ｍＬ、１０２ｍｍｏｌ）を０℃で滴下した。この混合物を室温で１６時間撹拌した。溶媒を真空中で蒸発させ、こうして得られた残渣を逆相クロマトグラフィー：９５％［２５ｍＭ  ４ＨＣＯ３］−５％［アセトニトリル：ＭｅＯＨ（１：１）］から６３％［２５ｍＭ  ＮＨ４ＨＣＯ３］−３７％［アセトニトリル：ＭｅＯＨ（１：１）］により精製した。所望の画分を集め、６０℃で減圧濃縮した。アセトニトリル（１０ｍＬ×３回）を添加し、溶媒を真空中で蒸発させて、中間体１５（１．３ｇ、８７％）を黄色泡状物として得た。
【０１３２】
中間体１６の調製
【化３８】
2021528413.tif 000039
中間体４０（１８．２６ｇ、５９．９８ｍｍｏｌ）の２−ＭｅＴＨＦ（１８２．６ｍＬ）溶液を、窒素下でオーバーヘッド撹拌機を備えた４００ｍＬ反応器に仕込んだ。得られた透明な橙色溶液を０℃まで冷却し、内部温度を５℃未満に維持しながら、ＨＣｌ（１４９．９ｍＬ、５９９．８ｍｍｏｌ、４Ｍ溶液（１，４−ジオキサン中））を滴下した。反応混合物をこの温度で３０分間撹拌し、その後、２０℃に温めた。固形物（ビスＨＣｌ塩）が時間とともに結晶化した。２０℃で１時間後、スラリーを５０℃に温め、さらに２時間撹拌した。その後、内容物を０℃に冷却し、スラリーを濾別した。湿ったケーキを２−ＭｅＴＨＦ（５０ｍＬ）で洗浄し、真空下、５０℃で終夜乾燥させて、中間体１６（１６．１８ｇ、９７％、２×ＨＣｌ塩）を白色固体として得た。
【０１３３】
中間体１７の調製
【化３９】
2021528413.tif 000040
中間体４１を出発物質として用い、中間体１の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体１７を調製した。
【０１３４】
中間体１８の調製
【化４０】
2021528413.tif 000041
中間体４２を出発物質として用い、中間体１の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体１８を調製した。
【０１３５】
中間体１９の調製
【化４１】
2021528413.tif 000042
中間体４３を出発物質として用い、中間体１の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体１９を調製した。
【０１３６】
中間体３０の調製
【化４２】
2021528413.tif 000043
中間体６３（３．８ｇ、１３．１８ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（２５０ｍＬ）溶液をＨ−ｃｕｂｅ（登録商標）（Ｐｄ／Ｃ１０％、２サイクル、ｒｔ、完全Ｈ２、１ｍＬ／分）中で水素化した。溶媒を真空中で蒸発させて、中間体３０（２．７ｍｇ、７１％）を無色油状物として得、これをさらに精製することなく次の工程に使用した。
【０１３７】
中間体３１の調製
【化４３】
2021528413.tif 000044
中間体６４を出発物質として用い、中間体３０の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体３１を調製した。
【０１３８】
中間体３２の調製
【化４４】
2021528413.tif 000045
中間体６５を出発物質として用い、中間体３０の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体３２を調製した。
【０１３９】
中間体３３の調製
【化４５】
2021528413.tif 000046
中間体６６を出発物質として用い、中間体３０の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体３３を調製した。
【０１４０】
中間体３４の調製
【化４６】
2021528413.tif 000047
中間体６７を出発物質として用い、中間体１の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体３４を調製した。
【０１４１】
中間体３５の調製
【化４７】
2021528413.tif 000048
１−Ｂｏｃ−３−ヒドロキシピペリジン（ＣＡＳ：８５２７５−４５−２；１．５ｇ、７．４５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（６ｍＬ）溶液を０℃で撹拌し、この溶液に水素化ナトリウム（０．３０ｇ、７．４５ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を３０分間撹拌した。次いで、混合物をｒｔまで温め、２，６−ジメチル−４−クロロピリジン（ＣＡＳ：３５１２−７５−２；０．９５ｍＬ、７．４５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１ｍＬ）溶液を滴下した。混合物をｒｔで１６時間、次いで６０℃で６時間撹拌した。ｒｔに冷却した後、水を加え、混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過して、減圧濃縮した。残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン  ０／１００〜３０／７０）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、中間体３５（０．４２ｇ、１８％）を無色油状物として得た。
【０１４２】
中間体３６の調製
【化４８】
2021528413.tif 000049
脱酸素化１，４−ジオキサン（２１．４ｍＬ）中にＫ２ＣＯ３（２．０３ｇ、１４．７１ｍｍｏｌ）及び中間体６８（２．８ｇ、７．３５ｍｍｏｌ）を懸濁し、撹拌した懸濁液にトリメチルボロキシン（ＣＡＳ：８２３−９６−１；２．７４ｍＬ、１９．８５ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＯＡｃ）２（ＣＡＳ：３３７５−３１−３；０．１２４ｇ、０．５５ｍｍｏｌ）及びトリシクロヘキシルホスホニウムテトラフルオロボラート（ＣＡＳ：５８６５６−０４−５；０．４０６ｇ、１．１０ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物をＮ２雰囲気下、１００℃で４時間撹拌した。ｒｔまで冷却した後、混合物を水で洗浄し、ＤＣＭで抽出した。有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ；ＥｔＯＡｃ／ヘプタン  ０／１００〜３０／７０）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、中間体３６（２．６３ｇ、９９％）を暗褐色油状物として得た。
【０１４３】
中間体３７の調製
【化４９】
2021528413.tif 000050
１−Ｂｏｃ−３−ヒドロキシピペリジン（ＣＡＳ：８５２７５−４５−２）及び４−ブロモ−２−メトキシ−６−メチルピリジン（ＣＡＳ：１０８３１６９−００−９）を出発物質として用い、中間体３５の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体３７を調製した。
【０１４４】
中間体３８の調製
【化５０】
2021528413.tif 000051
（Ｓ）−１−Ｎ−Ｂｏｃ−３−ヒドロキシメチル−ピペリジン（ＣＡＳ：１４０６９５−８４−７）及び４−クロロ−２，６−ジメチルピリジン（ＣＡＳ：３５１２−７５−２）を出発物質として用い、中間体３５の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体３８を調製した。
【０１４５】
中間体３９の調製
【化５１】
2021528413.tif 000052
（Ｒ）−１−Ｎ−Ｂｏｃ−３−ヒドロキシメチル−ピペリジン（ＣＡＳ：１４０６９５−８５−８）及び４−クロロ−２，６−ジメチルピリジン（ＣＡＳ：３５１２−７５−２）を出発物質として用い、中間体３５の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体３９を調製した。
【０１４６】
中間体４０の調製
【化５２】
2021528413.tif 000053
オーバーヘッド撹拌機及び温度プローブを備えた４００ｍＬの反応器に４−ブロモ−２，６−ジメチルピリジン（２１ｇ、１１３ｍｍｏｌ）をＮ２雰囲気下においてｒｔで仕込んだ。次いで、中間体６９（３６６ｍＬ、１２４．４４ｍｍｏｌ、０．３４Ｍ溶液（ＴＨＦ中））のＴＨＦ溶液を添加し、続いてＮ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルエチレンジアミン（１８．６６ｍＬ、１２４．４ｍｍｏｌ）を添加し、Ｎ２のスパージング（５ｍｉｎ）によって内容物の脱気を行った。次いで、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）ジクロリド（ＣＡＳ：１３９６５−０３−２；１．５８８ｇ、２．２６３ｍｍｏｌ）を添加し、さらに５分間のＮ２スパージングによって再び内容物の脱気を行った。この後、反応混合物を５０℃に温め、この温度で１時間撹拌した。次いで、この反応混合物を２０℃に冷却し、３２％ａｑ．ＮＨ３及びｓａｔ．ＮＨ４Ｃｌ（２００ｍＬ）の１：１混合物で反応を停止させた。水（１００ｍＬ）を加え、続いてＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）を加えた。得られた二相溶液をｃｅｌｉｔｅ（登録商標）のパッドにより濾過し、パラジウム黒色残渣を除去した。次いで、相を分離し、水相をＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）で逆抽出した。有機抽出物をまとめてＭｇＳＯ４で乾燥させ、固形物を濾過し、溶媒を減圧下で乾燥するまで蒸留した。粗物質を順相カラムクロマトグラフィー（シリカ、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン  ０／１００〜５０／５０）により精製した。所望の画分を集め、減圧下で濃縮して、中間体４０（３４．４４ｇ、収率８９％）を橙色の油状物として得た。
【０１４７】
中間体４１の調製
【化５３】
2021528413.tif 000054
中間体６９及び４−ブロモ−２−メトキシ−６−メチルピリジン（ＣＡＳ：１０８３１６９−００−９）を出発物質として用い、中間体４０の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体４１を調製した。
【０１４８】
中間体４２の調製
【化５４】
2021528413.tif 000055
中間体７０（１．２１ｇ、１．４１ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（４．１１ｍＬ）溶液を撹拌し、この溶液に炭酸カリウム（３９０ｍｇ、２．８２ｍｍｏｌ）を加え、Ｎ２流で５分間脱酸素した。次いで、トリメチルボロキシン（０．５３ｍＬ、３．８１ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＯＡｃ）２（２３．７ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）及びトリシクロヘキシルホスホニウムテトラフルオロボラート（ＣＡＳ：５８６５６−０４−５；７７．９ｍｇ、０．２１１ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物をＮ２雰囲気下、１００℃で２時間撹拌した。冷却後、水を添加し、この混合物をＤＣＭで抽出した。有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ；ＥｔＯＡｃ／ヘプタン  ０／１００〜３０／７０）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、中間体４２（２１９ｍｇ、６９％）を暗褐色油状物として得、これをさらに精製することなく次の工程に使用した。
【０１４９】
中間体４３の調製
【化５５】
2021528413.tif 000056
中間体７１を出発物質として用い、中間体４２の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体４３を調製した。
【０１５０】
中間体５４の調製
【化５６】
2021528413.tif 000057
中間体７５（１６０ｍｇ、０．５７ｍｍｏｌ）、フタルイミド（９３ｍｇ、０．６３ｍｍｏｌ）及びトリフェニルホスフィン（２２６ｍｇ、０．８６ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（２０ｍＬ）中混合物を窒素下においてｒｔで撹拌した。次いで、ＤＩＡＤ（ＣＡＳ：２４４６−８３−５；０．１７ｍＬ、０．８６ｍｍｏｌ）を添加し、混合物をｒｔで終夜撹拌した。溶媒を真空下で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ；ＭｅＯＨ／ＤＣＭ  ０／１００〜５／９５）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、中間体５４（２４３ｍｇ、定量的）を黄色の粘着性固体として得た。
【０１５１】
中間体５５の調製
【化５７】
2021528413.tif 000058
中間体７６を出発物質として用い、中間体５４の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体５５を調製した。
【０１５２】
中間体５６の調製
【化５８】
2021528413.tif 000059
中間体７７を出発物質として用い、中間体３５の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体５６を調製した。
【０１５３】
中間体５７の調製
【化５９】
2021528413.tif 000060
中間体７８を出発物質として用い、中間体５４の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体５６を調製した。
【０１５４】
中間体５８の調製
【化６０】
2021528413.tif 000061
２’−（ジシクロヘキシルホスフィノ）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−［１，１’−ビフェニル］−２−アミン（３８．６ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（ＣＡＳ：５１３６４−５１−３：６４ｍｇ、０．０７ｍｍｏｌ）及びナトリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（２０２ｍｇ、２．１ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（３．９６ｍＬ）中混合物に４−クロロ−２，６−ジメチルピリジン（０．１７８ｍＬ、１．４ｍｍｏｌ）及び３−（アミノメチル）−１−Ｂｏｃ−ピペリジン（３６０ｍｇ、１．６８ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を密閉管中、１００℃で１８時間加熱した。反応混合物をｄｉｃａｌｉｔｅパッドで濾過し、ＤＣＭですすいだ。濾液を濃縮し、残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ：アンモニア（メタノール中）／ＤＣＭ  ０／１００〜５／９５）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、中間体５８（４４５ｍｇ、９９％）を油状物として得た。
【０１５５】
中間体５９の調製
【化６１】
2021528413.tif 000062
中間体６０を出発物質として用い、中間体１５の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体５９を調製した。
【０１５６】
中間体６０の調製
【化６２】
2021528413.tif 000063
３−（アミノメチル）−１−Ｂｏｃ−ピペリジン及び４−ブロモ−２−メトキシ−６−メチルピリジン（ＣＡＳ：１０８３１６９−００−９）を出発物質として用い、中間体５８の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体６０を調製した。
【０１５７】
中間体６１の調製
【化６３】
2021528413.tif 000064
中間体６２を出発物質として用い、中間体１５の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体６１を調製した。
【０１５８】
中間体６２の調製
【化６４】
2021528413.tif 000065
中間体７９（１．１６ｇ、２．９４ｍｍｏｌ）、Ｋ３ＰＯ４（１．２５ｇ、５．９ｍｍｏｌ）、２−ジシクロヘキシルホスフィノ−２’，４’，６’−トリイソプロピルビフェニル（ＣＡＳ：５６４４８３−１８−７；１４０ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）及びトリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（ＣＡＳ：５１３６４−５１−３：１３４ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）を１，４−ジオキサン（２５ｍＬ）中に懸濁し、撹拌した懸濁液にトリメチルボロキシン（０．４９ｍＬ、３．５３ｍｍｏｌ）をＮ２雰囲気下で添加した。この混合物を９５℃で終夜撹拌した。水及びＥｔＯＡｃを加えた。有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。粗製物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ；ＥｔＯＡｃ／ヘプタン  ０／１００〜５０／５０）により精製した。所望の画分を回収し、減圧濃縮して、中間体６２（１．１ｇ、９５％）を淡黄色の粘着性固体として得た。
【０１５９】
中間体６３の調製
【化６５】
2021528413.tif 000066
１，４−ジオキサン（２５．５ｍＬ）、次いでＮａ２ＣＯ３（２５．５ｍＬ、飽和水溶液）を密閉管中、Ｎ２雰囲気下で４−クロロ−２，６−ジメチルピリジン（１．９ｍＬ、１５ｍｍｏｌ）、５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−３，６−ジヒドロピリジン−１（２Ｈ）−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（ＣＡＳ：８８５６９３−２０−９；５．１ｇ、１６．５ｍｍｏｌ）及びＰｄ（ＰＰｈ３）４（１．０４ｇ、０．８９ｍｍｏｌ）の撹拌混合物に加えた。この混合物を１３０℃で３０分間、マイクロ波照射下で撹拌した。混合物を水で処理し、ＤＣＭで抽出した。有機層を分離し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン  ０／１００〜１００／０）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、中間体６３（３．６ｇ、８３％）を無色油状物として得た。
【０１６０】
中間体６４の調製
【化６６】
2021528413.tif 000067
５−（４，４，５，５−テトラメチル−１、３、２−ジオキサボラン−２−イル）−３，６−ジヒドロピリジン−１（２Ｈ）−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（ＣＡＳ：８８５６９３−２０−９）及び４−ブロモ−２−メトキシ−６−メチルピリジン（ＣＡＳ：１０８３１６９−００−９）を出発物質として用い、中間体６３の合成について説明したのと同様の手順に従い、中間体６４を調製した。
【０１６１】
中間体６５の調製
【化６７】
2021528413.tif 000068
中間体８０（４．５ｇ、１２．４ｍｍｏｌ）、トリメチルボロキシン（０．７６３ｍＬ、５．４６ｍｍｏｌ）及びＫ２ＣＯ３（０．８４ｇ、６．０６ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（８．８３ｍＬ）溶液を撹拌し、この溶液にＰｄ（ＯＡｃ）２（３４ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）及びトリシクロヘキシルホスホニウムテトラフルオロボラート（ＣＡＳ：５８６５６−０４−５；１１１．６ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ）を添加し、次いでこの混合物をＮ２流で５分間脱酸素した。この混合物をＮ２雰囲気下、１００℃で２時間撹拌した。冷却後、混合物を水で洗浄し、ＤＣＭで抽出した。有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ；ＥｔＯＡｃ／ヘプタン  ０／１００〜１５／８５）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、中間体６５（４．２５ｇ、８９％）を淡黄色油状物として得た。
【０１６２】
中間体６６の調製
【化６８】
2021528413.tif 000069
２−クロロ−４−ヨード−６−トリフルオロメチルピリジン（ＣＡＳ：２０５４４４−２２−０；３ｇ、９．７６ｍｍｏｌ）、５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−３，６−ジヒドロピリジン−１（２Ｈ）−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（ＣＡＳ：８８５６９３−２０−９；３．６２ｇ、１１．７１ｍｍｏｌ）及びＫ３ＰＯ４（６．２１ｇ、２９．３ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（６０ｍＬ）中混合物にｔｒａｎｓ−ビス（ジシクロヘキシルアミン）パラジウム（ＩＩ）アセテート（ＣＡＳ：６２８３３９−９６−８；１１４．２ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）を加え、この反応混合物をｒｔで１８時間撹拌した。反応物をｃｅｌｉｔｅ（登録商標）で濾過し、ｃｅｌｉｔｅ（登録商標）パッドを洗浄し、ＥｔＯＡｃですすぎ、合わせた濾液を真空中で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ；酢酸エチル／ヘプタン  ０／１００〜２０／８０）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、無色の油状物（３．４ｇ、中間体６６及び２−クロロ−６−トリフルオロメチルピリジルカップリング生成物を含む）を得た。この油状物を乾燥ＭｅＯＨ（５０ｍＬ）に溶解し、ナトリウムメトキシド（２．１４ｍＬ、９．３７ｍｍｏｌ、２５％ＭｅＯＨ溶液）を添加した。この混合物をｒｔで１６時間撹拌した。次いで、水を加え、所望の生成物をＤＣＭで抽出した。有機層を分離し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ；ＤＣＭ／ヘプタン  ２０／８０〜１００／０）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、中間体６６（３．１ｇ）を無色油状物として得た。
【０１６３】
中間体６７の調製
【化６９】
2021528413.tif 000070
５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボラン−２−イル）−３，６−ジヒドロピリジン−１（２Ｈ）−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（ＣＡＳ：８８５６９３−２０−９）及び２−クロロ−３，５−ジメチルピラジン（ＣＡＳ：３８５５７−７２−１）を出発物質として用い、中間体６３の合成について説明したのと同様の手順に従い、中間体６７を調製した。
【０１６４】
中間体６８の調製
【化７０】
2021528413.tif 000071
１−Ｂｏｃ−３−ヒドロキシピペリジン（ＣＡＳ：８５２７５−４５−２）及び２−クロロ−４−ヨード−６−（トリフルオロメチル）ピリジン（ＣＡＳ：２０５４４４−２２−０）を出発物質として用い、中間体３５の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体６８を調製した。
【０１６５】
中間体６９の調製
【化７１】
2021528413.tif 000072
３Ｓ−ヨードメチルピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（ＣＡＳ：３８４８２９−９９−６；４７．９ｇ、１４７．３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２９２．８ｍＬ）溶液を１．５ｍＬ／分の流量でＮ２下、４０℃において、活性亜鉛（１４．４５ｇ、２２１ｍｍｏｌ）を含有するカラムにポンプで通した。得られた溶液をＮ２雰囲気下、モレキュラーシーブ上に集めて、中間体６９を透明な淡褐色溶液として得た。この溶液をＴＨＦ（０．３４Ｍ）中のヨウ素に対して２回滴定し、そのまま次の工程で使用した。
【０１６６】
中間体７０の調製
【化７２】
2021528413.tif 000073
中間体６９（１．１当量；０．２６ｍＬ、０．３２Ｍ（ＴＨＦ中））をＮ２雰囲気下で２−クロロ−４−ヨード−６−（トリフルオロメトキシ）ピリジン（ＣＡＳ：１２２１１７１−９６−５；６８１ｍｇ、２．１ｍｍｏｌ）及びビス（トリ−ｔｅｒｔ−ブチルホスフィン）パラジウム（０）（５３ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）に添加した。この混合物をｒｔで１６時間撹拌した。次いで、さらなる中間体６９（１．１当量；０．２６ｍＬ、０．３２Ｍ（ＴＨＦ中））及びビス（トリ−ｔｅｒｔ−ブチルホスフィン）パラジウム（０）（５３ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）をＮ２雰囲気下で添加し、混合物を６５℃で３時間撹拌した。ｒｔに冷却した後、混合物をａｑ．ｓａｔ．ＮＨ４Ｃｌ及びＮＨ４ＯＨ（１：１）の混合物で処理し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ；ＥｔＯＡｃ／ヘプタン  ０／１００〜２０／８０）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、中間体７０（３３２．４ｍｇ、純度７７％）を淡黄色油状物として得、これをさらに精製することなく次の工程に使用した。上記の反応のためにＺｎを以下のように活性化した：ＴＭＳＣｌ（２．２ｍＬ）及び１−ブロモ−２−クロロエタン（０．５ｍＬ）のＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液を、１ｍＬ／分の流量でＺｎを含有するカラムに通した。
【０１６７】
中間体７１の調製
【化７３】
2021528413.tif 000074
中間体７１を、中間体６９及び２−クロロ−４−ヨード−６−（トリフルオロメチル）ピリジン（ＣＡＳ：２０５４４４−２２−０）を出発物質として用い、中間体７０の合成について記載したのと同様の手順に従って調製した。
【０１６８】
中間体７５の調製
【化７４】
2021528413.tif 000075
中間体８２のＴＨＦ（１３ｍＬ）溶液を撹拌し、この溶液にテトラブチルアンモニウムフルオリド水和物（ＣＡＳ：２２２０６−５７−１；１．１８ｇ、４．２４ｍｍｏｌ）をｒｔで添加した。この混合物をｒｔで８時間撹拌した。溶媒を真空中で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ；ＭｅＯＨ／ＤＣＭ  ０／１００〜１０／９０）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、中間体７５（５０９ｍｇ、８６％）を淡黄色の粘着性固体として得た。
【０１６９】
中間体７６の調製
【化７５】
2021528413.tif 000076
中間体８３を出発物質として用い、中間体７５の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体７６を調製した。
【０１７０】
中間体７７の調製
【化７６】
2021528413.tif 000077
中間体８４を出発物質として用い、中間体７５の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体７７を調製した。
【０１７１】
中間体７８の調製
【化７７】
2021528413.tif 000078
中間体８５を出発物質として用い、中間体７５の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体７８を調製した。
【０１７２】
中間体７９の調製
【化７８】
2021528413.tif 000079
３−（アミノメチル）−１−Ｂｏｃ−ピペリジン及び２−クロロ−４−ヨード−６−（トリフルオロメチル）ピリジン（ＣＡＳ：２０５４４４−２２−０）を出発物質として用い、中間体５８の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体７９を調製した。
【０１７３】
中間体８０の調製
【化７９】
2021528413.tif 000080
５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボラン−２−イル）−３，６−ジヒドロピリジン−１（２Ｈ）−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（ＣＡＳ：８８５６９３−２０−９）及び２−クロロ−４−ヨード−６−トリフルオロメチルピリジン（ＣＡＳ：２０５４４４−２２−０）を出発物質として用い、中間体６６の合成について説明したのと同様の手順に従い、中間体８０を調製した。
【０１７４】
中間体８２の調製
【化８０】
2021528413.tif 000081
２，３−ジヒドロ−［１，４］ジオキシノ［２，３−ｂ］ピリジン−６−カルボキシアルデヒド（ＣＡＳ：６１５５６８−２４−６；２３２ｍｇ、１．４ｍｍｏｌ）及びチタン（ＩＶ）イソプロポキシド（１．０３ｍＬ、３．５１ｍｍｏｌ）をｔｅｒｔ−ブチルジメチル［（３−ピペリジニル）メトキシ］シラン（ＣＡＳ：８７６１４７−５０−１、２６９ｍｇ、１．１７ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（３ｍＬ）溶液にｒｔで加え、反応混合物をｒｔで１８時間撹拌した。揮発物を真空蒸発させた。次いで、無水ＴＨＦ（３ｍＬ）を添加し、反応物を０℃に冷却し、臭化メチルマグネシウム（４．１８ｍＬ、５．８５ｍｍｏｌ、１．４Ｍ（ＴＨＦ中））を滴下し、反応混合物を０℃で１５分間、ｒｔで１５時間撹拌した。ＮＨ４Ｃｌ（ａｑ  ｓａｔ  ｓｏｌｔｎ）を加え、混合物をＤＣＭ（１０ｍＬ×３回）で抽出した。合わせた有機抽出物をＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧濃縮した。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ；ＥｔＯＡｃ／ヘプタン  ０／１００〜４０／６０）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、中間体８２（３４６ｍｇ、７５％）を無色の油状物として得た。
【０１７５】
中間体８３の調製
【化８１】
2021528413.tif 000082
ｔｅｒｔ−ブチルジメチル［（３−ピペリジニル）メトキシ］シラン（ＣＡＳ：８７６１４７−５０−１）及び２，３−ジヒドロベンゾフラン−６−カルボキシアルデヒド（ＣＡＳ：５５７４５−９６−５）を出発物質として用い、中間体８２の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体８３を調製した。
【０１７６】
中間体８４の調製
【化８２】
2021528413.tif 000083
ｔｅｒｔ−ブチルジメチル［（３−（Ｓ）−ピペリジニル）メトキシ］シラン及び２，３−ジヒドロ−［１，４］ジオキシノ［２，３−ｂ］ピリジン−６−カルボキシアルデヒドを出発物質として用い、中間体８２の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体８４を調製した。
【０１７７】
中間体８５の調製
【化８３】
2021528413.tif 000084
ｔｅｒｔ−ブチルジメチル［（３−（Ｒ）−ピペリジニル）メトキシ］シラン及び２，３−ジヒドロ−［１，４］ジオキシノ［２，３−ｂ］ピリジン−６−カルボキシアルデヒドを出発物質として用い、中間体８２の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体８４を調製した。
【０１７８】
中間体８６の調製
【化８４】
2021528413.tif 000085
１−（２，３−ジヒドロ−１，４−ベンゾジオキシン−６−イル）エテノン（２．１ｇ、１１．７８ｍｍｏｌ）を１−ブチル−３−メチルイミダゾリウムテトラフルオロボラート（ＣＡＳ１７４５０１−６５−６；７ｍＬ）に混合した混合物にＮ−フルオロ−Ｎ’−（クロロメチル）トリエチレンジアミンビス（テトラフルオロボラート）（ＣＡＳ１４０６８１−５５−６；１０．４３ｇ、２９．５ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を７０℃で１６時間加熱した。次いで、ｒｔに冷却し、水で処理し、ＥｔＯＡｃ（２×１５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を真空中で蒸発させて油状物を得、これをフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン  ０／１００〜１０／９０）により精製した。所望の画分を濃縮して、中間体８６（１．１ｇ、４８％）を白色固体として得た。
【０１７９】
中間体８７の調製
【化８５】
2021528413.tif 000086
中間体６（１００ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）の無水ＤＣＭ（２ｍＬ）溶液を撹拌し、この溶液にチタン（ＩＶ）イソプロポキシド（０．２２ｍＬ、０．７３ｍｍｏｌ）及び７−ホルミル−２Ｈ−ピリド［３，２−ｂ］［１，４］オキサジン−４（３Ｈ）−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（ＣＡＳ：１２８７３１２−６２−２；１５３．７ｍｇ、０．５８ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物をｒｔで２０時間攪拌した。次いで、反応物を０℃に冷却し、臭化メチルマグネシウム（１．７３ｍＬ、２．４３ｍｍｏｌ、１．４Ｍ（ＴＨＦ中））を滴下し、反応混合物を０℃で５分間、ｒｔで２時間撹拌した。次いで、ＮＨ４Ｃｌ（ａｑ  ｓａｔ  ｓｏｌｔｎ）を加え、生成物をＤＣＭで抽出した。有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させて、生成物８７（１００ｍｇ、４５％、ジアステレオ異性体の混合物）を黄色油状物として得た。
【０１８０】
中間体８８の調製
【化８６】
2021528413.tif 000087
中間体７及び７−ホルミル−２Ｈ−ピリド［３，２−ｂ］［１，４］オキサジン−４（３Ｈ）−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（ＣＡＳ：１２８７３１２−６２−２）を出発物質として用い、中間体８７の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体８８を調製した。
【０１８１】
中間体８９及び最終化合物１２５の調製
【化８７】
2021528413.tif 000088
中間体１１（１８８ｍｇ、０．６３ｍｍｏｌ）及び２−クロロ−４−ヨード−６−トリフルオロメチルピリジン（２０５４４４−２２−０）を出発物質として用い、生成物２１の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体８９を調製した。
【０１８２】
中間体９０及び最終化合物１２６の調製
【化８８】
2021528413.tif 000089
５−メチル−２，３−ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキシン−６−カルボン酸（ＣＡＳ：９２４８７１−４１−０；９５ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ）、Ｎ−［（ジメチルアミノ）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾロ−［４，５−ｂ］ピリジン−１−イルメチレン］−Ｎ−メチルメタニウムヘキサフルオロホスフェートＮ−オキシド（ＣＡＳ：１４８８９３−１０−１；３０７ｍｇ、０．８１ｍｍｏｌ）及びジイソプロピルエチルアミン（０．３３７ｍＬ、１．９６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２．５６ｍＬ）溶液を撹拌し、この溶液に中間体１６（１００ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物をＮ２雰囲気下、ｒｔで１６時間撹拌した。次いで、混合物をＮａＨＣＯ３の飽和水溶液で希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離し、塩水で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン  ０／１００〜１００／０）により精製した。所望の画分を集め、真空中で蒸発させ、残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＭｅＯＨ／ＤＣＭ  ０／１００〜１０／９０）により精製した。所望の分画を集め、溶媒を真空中で蒸発させて、中間体９０（８７ｍｇ、４７％）を無色の油状物として得た。
【０１８３】
中間体９１の調製
【化８９】
2021528413.tif 000090
中間体１６及び７−ホルミル−２Ｈ−ピリド［３，２−ｂ］［１，４］オキサジン−４（３Ｈ）−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（ＣＡＳ：１２８７３１２−６２−２）を出発物質として用い、生成物１の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体９１（カルバメートの混合物）を調製した。
【０１８４】
中間体９２及び最終化合物１２７の調製
【化９０】
2021528413.tif 000091
中間体１６（２×ＨＣｌ塩）及び中間体９３を出発物質として用い、生成物４３の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体９２を調製した。
【０１８５】
中間体９３の調製
【化９１】
2021528413.tif 000092
密閉管において、１，４−ジオキサン（２５ｍＬ）及び水（７．５ｍＬ）に溶解した中間体９４（５０８ｍｇ、２．６７ｍｍｏｌ）の溶液を撹拌し、この溶液にＮ２雰囲気下で過ヨウ素酸ナトリウム（２．９１ｇ、１３．６ｍｍｏｌ）、続いて、四酸化オスミウム（０．４７２ｍＬ、０．０３５ｍｍｏｌ、２．５％（ｔ−ＢｕＯＨ中））及び２，６−ジメチルピリジン（０．７１ｍＬ、６．１１ｍｍｏｌ）を加えた。混合物をｒｔで１６時間撹拌した。混合物を水で処理し、濾過し、ＥｔＯＡｃで洗浄した。ろ液を追加のＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ／ＤＣＭ  ０／１００〜１００／０）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、中間体９３（２３０ｍｇ、４５％）を白色固体として得た。
【０１８６】
中間体９４の調製
【化９２】
2021528413.tif 000093
密閉管において、７−ブロモ−４−メチル−２，３−ジヒドロ−４Ｈ−ピリド［３，２−ｂ］［１，４］オキサジン−３−オン（ＣＡＳ：１２２４５０−９７−９）の１，４−ジオキサン（７．５ｍＬ）溶液を撹拌し、この溶液にＮ２雰囲気下で炭酸カリウム（７．５ｍＬ、１０％ａｑ  ｓｏｌｔｎ）、続いて４，４，５，５−テトラメチル−２−ビニル−１，３，２−ジオキサボロラン（ＣＡＳ：７５９２７−４９−０；０．６５ｍＬ、３．８３ｍｍｏｌ）及びＰｄ（ＰＰｈ３）４（３６５ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を１５０℃で１５分間、マイクロ波照射下で撹拌した。混合物を水で処理し、ＤＣＭで抽出した。有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン  ０／１００〜１００／０）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、中間体９４（５１６ｍｇ、８７％）を白色固体として得た。
【０１８７】
中間体９５の調製
【化９３】
2021528413.tif 000094
中間体１６及び１−｛フロ［３，２−ｂ］ピリジン−６−イル｝エタン−１−オン（ＣＡＳ：１２０３４９９−００−６）を出発物質として用い、生成物２の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体９５を調製した。
【０１８８】
中間体９７の調製
【化９４】
2021528413.tif 000095
中間体９８（３４０ｍｇ、２．０７１ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（２０ｍＬ）中混合物に臭化メチルマグネシウム（２．０７１ｍＬ、２．９ｍｍｏｌ、１．４Ｍ（ＴＨＦ中））を０℃で添加した。添加の完了後、反応物をｒｔで１６時間撹拌した。１Ｍ  ａｑＨＣｌで混合物の反応を停止させ、３０分間撹拌し、次いで粗製物をｐＨ８までＮＨ４ＯＨで塩基性化した。溶液をＥｔＯＡｃ（２×５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、蒸発乾固して残渣を得、これをフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン  ０／１００〜２０／８０）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、中間体９７（１５０ｍｇ、４０％）を無色油状物として得た。
【０１８９】
中間体９８の調製
【化９５】
2021528413.tif 000096
中間体９９（４００ｍｇ、２．５７ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（７ｍＬ）に混合した混合物にシアン化トリメチルシリル（ＣＡＳ：７６７７−２４−９；１．２９ｍＬ、１０．３ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（０．９ｍＬ、６．４７ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を９０℃で２４時間撹拌した。混合物を冷却し、水で処理し、ＥｔＯＡｃ（２×１０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物をＭｇＳＯ４で乾燥し、溶媒を真空中で蒸発させて残渣を得、これをフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン  ０／１００〜３０／６０）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、中間体９８（３２０ｍｇ、７６％）を油状物として得た。
【０１９０】
中間体９９の調製
【化９６】
2021528413.tif 000097
５−フルオロ−２，３−ジヒドロフロ［２，３−ｂ］ピリジン（ＣＡＳ：１３５６５４２−４１−０；５００ｍｇ、３．６ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１５ｍＬ）に混合した混合物にメタ−クロ濾過安息香酸（８０６ｍｇ、４．７ｍｍｏｌ）をｒｔで添加した。この混合物を２５℃で３６時間撹拌した。溶媒を真空中で除去し、このようにして得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（シリカ；ＥｔＯＡｃ／ヘプタン  ０／１００〜３０／７０、次いでＤＶＭ／ＭｅＯＨ  ０／１００〜６／９４）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、中間体９９を得た（４００ｍｇ、７２％）を白色固体として得た。
【０１９１】
中間体１００の調製
【化９７】
2021528413.tif 000098
中間体１０１（１．６ｇ、５．７ｍｍｏｌ）をトルエン（１５ｍＬ）に混合した混合物にビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）ジクロリド（４００ｍｇ、０．５７ｍｍｏｌ）及びトリブチル（１−エトキシビニル）スズ（ＣＡＳ：９７６７４−０２−７；２．５ｍＬ、７．４ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を９２℃で１６時間加熱し、次いで粗製物を冷却し、２Ｎ  ＨＣｌ水溶液（５ｍＬ）で処理し、混合物を２時間撹拌した。粗製物をＮａＨＣＯ３の飽和水溶液で中和し、ＥｔＯＡｃで抽出し、合わせた有機層を真空中で蒸発させた。粗製物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２；ＭｅＯＨ／ＤＣＭ  ０／１００〜５／９５）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、中間体１００（８５０ｍｇ、７６％）を橙色固体として得た。
【０１９２】
中間体１０１の調製
【化９８】
2021528413.tif 000099
中間体１０２（５ｇ、１２．２ｍｍｏｌ）をｔ−ＢｕＯＨ（６．９１ｍＬ）に混合した混合物にカリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（２０６ｍｇ、１．８３ｍｍｏｌ）をｒｔで添加した。この混合物を９０℃で３時間加熱した。冷却後、溶媒を真空中で除去し、残渣を水に希釈した。水溶液をＥｔＯＡｃ（３×１２ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を塩水（２×１０ｍＬ）で洗浄し、分離し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮した。粗製物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ  ０／１００〜５／９５）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、中間体１０１（１．６ｇ、４７％）を白色固体として得た。
【０１９３】
中間体１０２の調製
【化９９】
2021528413.tif 000100
中間体１０３（８ｇ、１５．３ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１２０ｍＬ）に混合した混合物にフッ化テトラブチルアンモニウム（１５．３ｍＬ、１５ｍｍｏｌ、１Ｍ溶液（ＴＨＦ中））を加え、この混合物をｒｔで３時間撹拌した。水を加え、粗製物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機相を乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、真空中で蒸発させて油状物を得、これをカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ  ０／１００〜５／９５）により精製した。所望の画分を濃縮して、中間体１０２（５．８ｇ、９２％）を油状物として得た。
【０１９４】
中間体１０３の調製
【化１００】
2021528413.tif 000101
中間体１０４（６．１ｇ、１６．７ｍｍｏｌ）、（２−ブロモエトキシ）ジメチル−ｔｅｒｔ−ブチルシラン（４．４ｇｍ、１８．４ｍｍｏｌ）及びカリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（５．０８ｇ、３６．７８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１５ｍＬ）中混合物を９０℃で５時間加熱した。粗製物を冷却し、水で処理し、ＥｔＯＡｃ（２×２０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を真空中で蒸発させて残渣を得、これをカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン  ０／１００〜２０／８０）により精製した。所望の画分を減圧濃縮して、中間体１０３（８．１ｇ、９３％）を油状物として得た。
【０１９５】
中間体１０４の調製
【化１０１】
2021528413.tif 000102
３−フルオロ−５−ヒドロキシピリジン（２ｇ、１７．７ｍｍｏｌ）をＮａ２ＣＯ３（３０ｍＬ、ａｑ．ｓａｔ．ｓｏｌｔｎ．）及び水（１０ｍＬ）に溶解した溶液にＩ２（９．２ｇ、３６．２５ｍｍｏｌ）を加え、この混合物をｒｔで１６時間撹拌した。Ｎａ２Ｓ２Ｏ３の飽和水溶液で反応混合物の反応を停止させ、溶液ｐＨをＨＣｌ水溶液の添加によってｐＨ＝５に調節した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（３×７０ｍＬ）で抽出し、合わせた有機層をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空中で蒸発させて、中間体１０４（６．０２ｇ、９３％）を黄色固体として得た。
【０１９６】
中間体１０５の調製
【化１０２】
2021528413.tif 000103
中間体１０６を出発物質として用い、中間体１の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体１０５を調製した。
【０１９７】
中間体１０６の調製
【化１０３】
2021528413.tif 000104
（Ｓ）−１−Ｂｏｃ−３−（ヒドロキシメチル）ピペリジン（ＣＡＳ：１４０６９５−８４−７）及び４−ブロモ−２−メトキシ−６−メチルピリジン（ＣＡＳ：１０８３１６９−００−９）を出発物質として用い、中間体３５の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体１０６を調製した。
【０１９８】
中間体１０７の調製
【化１０４】
2021528413.tif 000105
塩化チオニル（６．５１ｍＬ、８９ｍｍｏｌ）を中間体１０８（４．０４ｇ、２２．３ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１５０ｍＬ）溶液に０℃で添加した。この混合物をｒｔで１２時間撹拌した。水（８０ｍＬ）を加え、混合物をＤＣＭ（８０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層を乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、真空中で蒸発させて、粗中間体１０７（３．５３ｇ、７９％）を褐色油状物として得、これをそのまま放置して固化させた。
【０１９９】
中間体１０８の調製
【化１０５】
2021528413.tif 000106
水素化ホウ素ナトリウム（３．５４ｇ、９４ｍｍｏｌ）を１−（２，３−ジヒドロ−［１，４］ジオキシノ［２，３−ｂ］ピリジン−６−イル）エテノン（ＣＡＳ：１２５４０４４−２５−１；４．５ｇ、２３．４ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（１０９ｍＬ）溶液に０℃で添加した。この混合物をｒｔで１０分間撹拌した。水を加え、混合物をＤＣＭ（８０ｍＬ×３）で抽出した。有機層を合わせ、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、減圧濃縮して、中間体１０８（４．０４ｍｇ、９５％）を淡黄色油状物として得た。
【０２００】
中間体１０９の調製
【化１０６】
2021528413.tif 000107
中間体１１０を出発物質として用い、中間体１の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体１０９を調製した。
【０２０１】
中間体１１０の調製
【化１０７】
2021528413.tif 000108
（Ｓ）−１−Ｂｏｃ−３−ヒドロキシピペリジン（ＣＡＳ：１４０６９５−８４−７）及び４−クロロメチル−２，６−ジメチルピリジン（ＣＡＳ：１０８３１６９−００−９）を出発物質として用い、中間体３５の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体１１０を調製した。
【０２０２】
中間体１１１の調製
【化１０８】
2021528413.tif 000109
中間体１１２を出発物質として用い、中間体１の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体１１１を調製した。
【０２０３】
中間体１１２の調製
【化１０９】
2021528413.tif 000110
（Ｒ）−１−Ｂｏｃ−３−ヒドロキシピペリジン（ＣＡＳ：１４０６９５−８４−７）及び４−クロロメチル−２，６−ジメチルピリジン（ＣＡＳ：１０８３１６９−００−９）を出発物質として用い、中間体３５の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体１１２を調製した。
【０２０４】
中間体１１３の調製
【化１１０】
2021528413.tif 000111
中間体１１４を出発物質として用い、中間体１の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体１１３を調製した。
【０２０５】
中間体１１４の調製
【化１１１】
2021528413.tif 000112
中間体１１５を出発物質として用い、中間体３０の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体１１４を調製した。
【０２０６】
中間体１１５の調製
【化１１２】
2021528413.tif 000113
５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボラン−２−イル）−３，６−ジヒドロピリジン−１（２Ｈ）−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（ＣＡＳ：８８５６９３−２０−９）及び４−クロロ−２，６−ジメチルピリジンを出発物質として用い、中間体６３の合成について説明したのと同様の手順に従い、中間体１１５を調製した。
【０２０７】
中間体１１６の調製
【化１１３】
2021528413.tif 000114
中間体１１７を出発物質として用い、中間体１の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体１１６を調製した。
【０２０８】
中間体１１７の調製
【化１１４】
2021528413.tif 000115
（Ｓ）−１−Ｂｏｃ−３−ヒドロキシメチル−ピペリジン（ＣＡＳ：１４０６９５−８４−７）及び４−クロロ−２，６−ジメチルピリジンを出発物質として用い、中間体３５の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体１１７を調製した。
【０２０９】
中間体１２０の調製
【化１１５】
2021528413.tif 000116
中間体１２１を出発物質として用い、中間体１０７の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体１２０を調製した。
【０２１０】
中間体１２１の調製
【化１１６】
2021528413.tif 000117
１−（２，３−ジヒドロ−［１，４］ジオキシノ［２，３−ｂ］ピリジン−７−イル）−エタノン（ＣＡＳ：１２５４０４４−１５−９）を出発物質として用い、中間体１０８の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体１２１を調製した。
【０２１１】
中間体１２３の調製
【化１１７】
2021528413.tif 000118
中間体１２４を出発物質として用い、中間体９３の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体１２３を調製した。
【０２１２】
中間体１２４の調製
【化１１８】
2021528413.tif 000119
中間体１２５を出発物質として用い、中間体９４の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体１２４を調製した。
【０２１３】
中間体１２５の調製
【化１１９】
2021528413.tif 000120
丸底フラスコ中で７−ブロモ−６−フルオロ−２Ｈ−ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン−３（４Ｈ）−オン（ＣＡＳ：１２６０８２９−３５−３；２．１ｇ、８．５３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（４４ｍＬ）懸濁液を撹拌し、この懸濁液にボランジメチルスルフィド錯体（１．６５ｍＬ、１７．４ｍｍｏｌ）を冷却器下且つＮ２雰囲気下で滴下した。この混合物を還流温度で２時間撹拌した。混合物を０℃で冷却し、メタノール（１２ｍＬ）を滴下した。混合物をｒｔで１時間撹拌した。溶媒を真空中で蒸発させた。粗製物をＴＨＦ（４４ｍＬ）に溶解し、０℃で冷却した。Ｂｏｃ−無水物（ＣＡＳ：２４４２４−９９−５；２．６５ｍＬ、１２．４ｍｍｏｌ）を一度に加え、続いてリチウムビス（トリメチルシリル）アミド（１２．１ｍＬ、１２．１ｍｍｏｌ、１Ｍ溶液（ＴＨＦ中））を滴下し、混合物を０℃で１時間及びｒｔで６０時間撹拌した。混合物をａｑ  ｓａｔＮＨ４Ｃｌで処理し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン  ０／１００〜７０／３０）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、中間体１２５（２．８ｇ、９９％）を黄色油状物として得た。
【０２１４】
中間体１２９の調製
【化１２０】
2021528413.tif 000121
中間体１３０を出発物質として用い、中間体１０７の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体１２９を調製した。
【０２１５】
中間体１３０の調製
【化１２１】
2021528413.tif 000122
中間体１００を出発物質として用い、中間体１０８の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体１３０を調製した。
【０２１６】
中間体４６及び４７の調製
【化１２２】
2021528413.tif 000123
中間体６３（３．２０ｇ、１１．１ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（６４．１ｍＬ）溶液を撹拌し、この溶液にＰｄ／Ｃ（１０％、１．１８ｇ、１．１１ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を室温で１６時間水素化した（大気圧）。この混合物をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）のパッドで濾過し、ＭｅＯＨで洗浄した。濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン  ０／１００〜８０／２０）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮した。残差をキラルＳＦＣ（固定相：ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＩＣ、５μｍ、２５０×３０ｍｍ、移動相：６５％ＣＯ２、３５％ｉ−ＰｒＯＨ（０．３％ｉ−ＰｒＮＨ２））により精製して、中間体４６（１．３０ｇ、４０％）及び中間体４７（１．４４ｇ、４４％）を得た。
【０２１７】
中間体１３１の調製
【化１２３】
2021528413.tif 000124
中間体４６（１．３０ｇ、４．４８ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（３４．４ｍＬ）溶液を、Ａｍｂｅｒｌｙｓｔ（登録商標）１５水素形態（ＣＡＳ：３９３８９−２０−３）を含有する閉鎖系反応器に加えた。この混合物を固相反応器において室温で１６時間振盪した。樹脂をＭｅＯＨで洗浄し（画分を廃棄した）、ＮＨ３（７Ｎ（ＭｅＯＨ中））（３４ｍＬ）を加えた。この混合物を固相反応器において２時間振盪した。樹脂を濾別し、ＮＨ３（７Ｎ（ＭｅＯＨ中））（３×３４ｍＬ；３０ｍｉｎ振盪）で洗浄した。濾液を減圧濃縮して、中間体１３１（８２０ｍｇ、９６％）を褐色油状物として得た。
【０２１８】
中間体１３２の調製
【化１２４】
2021528413.tif 000125
中間体４７を出発物質として用い、中間体１３１の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体１３２を調製した。
【０２１９】
中間体１３３の調製
【化１２５】
2021528413.tif 000126
ＮａＨ（６０％分散液（鉱油中）、２１９ｍｇ、５．４７ｍｍｏｌ）をＮ２雰囲気下、０℃でＮ−Ｂｏｃ−３−ヒドロキシピペリジン（ＣＡＳ：８５２７５−４５−２；１．００ｇ、４．９７ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１５ｍＬ）溶液に添加した。この混合物を０℃で３０分間撹拌し、２−クロロ−３，５−ジメチルピラジン（ＣＡＳ：３８５５７−７２−１；６２８μＬ、５．２２ｍｍｏｌ）を滴下した。反応混合物を６０℃で２０時間撹拌した。反応をＮＨ４Ｃｌ（ｓａｔ．）で停止させ、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、真空中で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ；ＥｔＯＡｃ／ヘプタン、０／１００〜４０／６０）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、中間体１３３を得た（９２０ｍｇ、６０％）を無色の油状物として得た。
【０２２０】
中間体１３４の調製
【化１２６】
2021528413.tif 000127
ＨＣｌ（４Ｍ（１，４−ジオキサン中）、５ｍＬ、２０ｍｍｏｌ）を中間体１３３（０．９５ｇ、３．０９ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（５ｍＬ）溶液に加えた。この反応混合物を室温で１６時間撹拌し、溶媒を真空中で蒸発させた。残渣をＤＣＭ及びＮａＨＣＯ３（ｓａｔ．）で処理した。生成物をＤＣＭ及びＥｔＯＨ（９／１）で抽出した。有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させて、中間体１３４（４００ｍｇ、６２％）を得た。
【０２２１】
中間体１３５の調製
【化１２７】
2021528413.tif 000128
Ｎ−Ｂｏｃ−３−ヒドロキシピペリジン（ＣＡＳ：８５２７５−４５−２）及び２，３，５−トリフルオロピリジン（ＣＡＳ：７６４６９−４１−５）を出発物質として用い、中間体１３３の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体１３５を調製した。
【０２２２】
中間体１３６の調製
【化１２８】
2021528413.tif 000129
中間体１３５を出発物質として用い、中間体１３４の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体１３６を調製した。
【０２２３】
中間体１３７の調製
【化１２９】
2021528413.tif 000130
Ｋ２ＣＯ３（２．３６ｇ、１７．１ｍｍｏｌ）を４−オキソピペリジン−１，３−ジカルボン酸１−ｔｅｒｔ−ブチル３−エチル（ＣＡＳ：９８９７７−３４−５；１．５５ｇ、５．７０ｍｍｏｌ）のアセトン（３０ｍＬ）溶液に添加し、この反応混合物を５０℃で２０時間撹拌した。混合物をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）のパッドにより濾過した。濾液をＥｔＯＡｃ及び水で希釈した。水相をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン、勾配３０／７０〜１００／０）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、中間体１３７（１．４ｇ、６３％）を得た。
【０２２４】
中間体１３８の調製
【化１３０】
2021528413.tif 000131
ＨＣｌ（６Ｍ、２０ｍＬ、１２０ｍｍｏｌ）を中間体１３７（１．３０ｇ；３．３３ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（６ｍＬ）溶液に加えた。この反応混合物を１２０℃で４日間撹拌した。反応混合物を冷却し、溶媒を真空中で蒸発させ、トルエンと共蒸発させて、中間体１３８・２ＨＣｌ（１．４ｇ、定量、純度７１％）を得た。
【０２２５】
中間体１３９の調製
【化１３１】
2021528413.tif 000132
二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（ＣＡＳ：２４４２４−９９−５；２．２５ｇ、１０．３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液を中間体１３８・２ＨＣｌ（１．５０ｇ、６．８７ｍｍｏｌ、純度７１％）のＴＨＦ（３０ｍＬ）及びＨ２Ｏ（１０ｍＬ）溶液に添加した。Ｎａ２ＣＯ３（２．１９ｇ、２０．６ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で１時間撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ及び水で希釈した。水相をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ；ＭｅＯＨ／ＤＣＭ、勾配０／１００〜０３／９７）により精製した。所望の画分を集め、真空中で蒸発させて、中間体１３９（０．９ｇ、４１％）を無色の油状物として得た。
【０２２６】
中間体１４０の調製
【化１３２】
2021528413.tif 000133
ＮａＢＨ４（２８．５ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）を中間体１３９（２００ｍｇ、０．６３ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（５ｍＬ）溶液に０℃で添加した。この反応混合物を室温で２時間撹拌し、ＮＨ４Ｃｌ（ｓａｔ．）で反応を停止させ、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、減圧濃縮して、中間体１４０（２００ｍｇ、９９％）を油状物として得、これをそのまま放置して結晶化させた。
【０２２７】
中間体１４１の調製
【化１３３】
2021528413.tif 000134
中間体１４０（２００ｍｇ、０．６２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３ｍＬ）溶液を撹拌し、この溶液にＮａＨ（６０％分散液（鉱油中）、３７．４ｍｇ、０．９４ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。この混合物を５分間撹拌し、ヨードメタン（７７．７μＬ、１．２５ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温に温め、１時間撹拌した。混合物をＮＨ４Ｃｌ（１０％）で希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させて、中間体Ｉ１４１（２０５ｍｇ、９８％）を油状物として得た。
【０２２８】
中間体１４２の調製
【化１３４】
2021528413.tif 000135
中間体１４１（２０５ｍｇ、０．６１ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１９．１ｍＬ）溶液を、Ａｍｂｅｒｌｙｓｔ（登録商標）１５水素形態（ＣＡＳ：３９３８９−２０−３；６５２ｍｇ、３．０７ｍｍｏｌ）を含有する閉鎖反応器に加えた。この反応混合物を固相反応器において室温で１６時間振盪した。樹脂をＭｅＯＨで洗浄し（画分は、廃棄した）、さらにＮＨ３（７Ｎ（ＭｅＯＨ中））で洗浄した。濾液を減圧濃縮して、中間体１４２（１４０ｍｇ、９７％）を淡褐色の油状物として得た。
【０２２９】
中間体１４３の調製
【化１３５】
2021528413.tif 000136
ＮａＢＨ４（２８．５ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）を中間体１３９（２００ｍｇ、０．６３ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（５ｍＬ）溶液に０℃で添加した。この反応混合物を室温で１６時間撹拌し、ＮＨ４Ｃｌ（ｓａｔ．溶液）で反応停止させたこの混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、減圧濃縮して、中間体１４３（２００ｍｇ、９９％）を油状物として得、これをそのまま放置して固化させた。
【０２３０】
中間体１４４の調製
【化１３６】
2021528413.tif 000137
中間体１４３（２００ｍｇ、０．６２ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（２０ｍＬ）溶液を、Ａｍｂｅｒｌｙｓｔ（登録商標）１５水素形態（ＣＡＳ：３９３８９−２０−３；６６４ｍｇ、３．１２ｍｍｏｌ）を含有する閉鎖反応器に加えた。この反応混合物を固相反応器において室温で１６時間振盪した。樹脂をＭｅＯＨで洗浄し（画分は、廃棄した）、さらにＮＨ３（７Ｎ（ＭｅＯＨ中））で洗浄した。濾液を減圧濃縮して、中間体１４４（１３５ｍｇ、９８％）を淡褐色油状物として得た。
【０２３１】
中間体１４５の調製
【化１３７】
2021528413.tif 000138
密閉管において、Ｎ２雰囲気下で５−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−３，６−ジヒドロ−２Ｈ−ピリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（ＣＡＳ：８８５６９３−２０−９；６９６ｍｇ、２．２５ｍｍｏｌ）及びＰｄ（ＰＰｈ３）４（１５６ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）の撹拌混合物に１，４−ジオキサン（７．０５ｍＬ）、４−ブロモ−２−（ジフルオロメチル）−６−メチルピリジン（ＣＡＳ：１２２６８００−１２−９；５００ｍｇ、２．２５ｍｍｏｌ）及びＮａ２ＣＯ３（飽和溶液、１０ｍＬ）を連続的に加えた。この反応混合物を１３０℃で３０分間、マイクロ波照射下で撹拌した。混合物を水で処理し、ＤＣＭで抽出した。有機層を乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空下で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ；ＥｔＯＡｃ／ＤＣＭ、０／１００〜５０／５０）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、中間体１４５（６８５ｍｇ、９４％）を得た。
【０２３２】
中間体１４６の調製
【化１３８】
2021528413.tif 000139
中間体１４５（６４９ｍｇ．２．００ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（１２．６ｍＬ）溶液にＮ２雰囲気下でＰｄ／Ｃ（１０％、２１３ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を室温で１８時間水素化した（大気圧）。反応混合物をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）のパッドにより濾過し、濾液を減圧濃縮して、中間体１４６（６０５ｍｇ、９３％）を無色油状物として得、これをそのまま放置して固化させた。
【０２３３】
中間体１４７の調製
【化１３９】
2021528413.tif 000140
ＨＣｌ（４Ｍ（１，４−ジオキサン中）、１２．４ｍＬ、４９．６ｍｍｏｌ）を中間体１４６（６００ｍｇ、１．８４ｍｍｏｌ）に加え、反応混合物を室温で３時間撹拌した。反応物を濃縮乾固させた。残渣を、ＭｅＯＨ、次いでＮＨ３（７Ｍ（ＭｅＯＨ中））で溶出するイオン交換クロマトグラフィー（ｉｓｏｌｕｔｅ  ＳＣＸ２カートリッジ）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、中間体１４７（３９５ｍｇ、９５％）を無色油状物として得た。
【０２３４】
中間体１４８の調製
【化１４０】
2021528413.tif 000141
４−クロロ−２，６−ジメチルピリジン−３−アミン（ＣＡＳ：３７６５２−１１−２）及び５−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−３，６−ジヒドロ−２Ｈ−ピリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（ＣＡＳ：８８５６９３−２０−９）を出発物質として用い、中間体１４５の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体１４８を調製した。
【０２３５】
中間体１４９の調製
【化１４１】
2021528413.tif 000142
中間体１４８を出発物質として用い、中間体１４６の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体１４９を調製した。
【０２３６】
中間体１５０の調製
【化１４２】
2021528413.tif 000143
ＤＣＭ（６ｍＬ）に中間体１４９（６００ｍｇ、１．９６ｍｍｏｌ）及びニトロシルテトラフルオロボラート（ＣＡＳ：６８８ｍｇ、５．８９ｍｍｏｌ）を混合し、この混合物を室温で１８時間撹拌した。溶媒を真空中で除去し、残渣をＭｅＯＨ、次いでＮＨ３（７Ｎ（ＭｅＯＨ中））で溶出する（３回）イオン交換クロマトグラフィー（ｉｓｏｌｕｔｅ  ＳＣＸ−２カートリッジ）により精製した。所望の画分を集め、溶媒を真空中で蒸発させた。生成物をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ、５μｍ、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３（０．２５％水溶液）／ＣＨ３ＣＮ、勾配９５／５〜７０／３０）により精製して、中間体１５０（１８０ｍｇ、２８％、純度６４％）を無色油状物として得た。
【０２３７】
中間体１５１の調製
【化１４３】
2021528413.tif 000144
密閉管において、１，４−ジオキサン（１５ｍＬ）中にＰｄ２ｄｂａ３（４５．３ｍｇ、４９．５μｍｏｌ）及びｔ−ＢｕＸＰｈｏｓ（６３．１ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）を懸濁し、撹拌した懸濁液にＮ２雰囲気下でＮａＯｔ−Ｂｕ（２３８ｍｇ、４２．４８ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を９５℃で５分間撹拌した。反応混合物に４−ブロモ−２−メトキシ−６−メチルピリジン（ＣＡＳ：１０８３１６９−００−９；２００ｍｇ、０．９９ｍｍｏｌ）及び（Ｓ）−（＋）−３−アミノ−１−Ｂｏｃ−ピペリジン（ＣＡＳ：６２５４７１−１８−３；２５８ｍｇ、１．２９ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（５ｍＬ）溶液をＮ２下、９５℃で添加した。反応混合物を１００℃で３０分間撹拌した。反応混合物をＮａＨＣＯ３（ｓａｔ．溶液）で希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン、勾配５／９５〜１００／０）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、中間体１５１（３１０ｍｇ、９４％）を淡黄色油状物として得た。
【０２３８】
中間体１５２の調製
【化１４４】
2021528413.tif 000145
ＨＣｌ（１．４Ｍ（１，４−ジオキサン中）、１．２１ｍＬ、４．８２ｍｍｏｌ）を０℃で中間体１５１（３１０ｍｇ、０．９６ｍｍｏｌ）に滴下した。この反応混合物を室温で１６時間撹拌し、溶媒を真空中で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＮＨ３（７Ｎ（ＭｅＯＨ中））／ＤＣＭ、勾配０／１００〜１０／９０）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、中間体１５２（１７０ｍｇ、８０％）を無色油状物として得た。
【０２３９】
中間体１５３の調製
【化１４５】
2021528413.tif 000146
４−フルオロアニリン（ＣＡＳ：３７１−４０−４；０．１４ｍＬ、１．４１ｍｍｏｌ）、（３Ｓ）−３−ホルミルピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（ＣＡＳ：１００８５６２−８７−５；２００ｍｇ．０．９４ｍｍｏｌ）及び酢酸（０．１２ｍＬ、２．０６ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１５ｍＬ）溶液を撹拌し、この溶液に室温でシアノ水素化ホウ素ナトリウム（ＣＡＳ：２５８９５−６０−７；１１０ｍｇ、１．４１ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を４０℃で１６時間撹拌し、溶媒を真空中で蒸発させた。ＮａＨＣＯ３（ｓａｔ．溶液）及びＥｔＯＡｃを加えた。水層をＥｔＯＡｃで抽出した（２回）。合わせた有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン、勾配０／１００〜２０／８０）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、中間体１５３（２６５ｍｇ、９２％）を淡黄色油状物として得た。
【０２４０】
中間体１５４の調製
【化１４６】
2021528413.tif 000147
中間体１５３（２６５ｍｇ、０．８６ｍｍｏｌ）をＨＣｌ（４Ｍ（１，４−ジオキサン中）、１．０７ｍＬ、４．３０ｍｍｏｌ）に溶解した。この反応混合物を室温で２時間撹拌し、溶媒を真空中で蒸発させた。残渣をＭｅＯＨ（１．５ｍＬ）に溶解し、Ａｍｂｅｒｌｙｓｔ（登録商標）Ａ２６水酸化物（ＣＡＳ：３９３３９−８５−０；１．１４ｇ、３．４４ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を、ｐＨが７になるまで室温で撹拌した。樹脂を濾過により除去し、溶媒を真空中で蒸発させた。所望の画分を集め、減圧濃縮して、中間体１５４（１７２ｍｇ、９６％）を淡黄色油状物として得た。
【０２４１】
中間体１５５の調製
【化１４７】
2021528413.tif 000148
（Ｓ）−（＋）−３−アミノ−１−Ｂｏｃ−ピペリジン（ＣＡＳ：６２５４７１−１８−３）及び４−フルオロベンズアルデヒド（ＣＡＳ：４５９−５７−４；０．４３ｍＬ、４．０３ｍｍｏｌ）を出発物質として用い、中間体１５３の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体１５５を調製した。
【０２４２】
中間体１５６の調製
【化１４８】
2021528413.tif 000149
中間体１５５を出発物質として用い、中間体１５４の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体１５６を調製した。
【０２４３】
中間体１５７の調製
【化１４９】
2021528413.tif 000150
４−ブロモ−２，６−ジメチルピリジン（ＣＡＳ：５０９３−７０−９；１．５５ｇ、８．３３ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（２５ｍＬ）に混合した混合物にｎ−ブチルリチウム（２．５Ｍ（ヘキサン中）、３．６７ｍＬ、９．４６ｍｍｏｌ）をＮ２雰囲気下、−７８℃で加えた。この反応混合物を−７８℃で３０分間撹拌し、４−（メトキシ（メチル）カルバモイル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（ＣＡＳ：１３９２９０−７０−３；２．５０ｇ、９．１６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５ｍＬ）溶液を−７８℃で添加した。反応混合物を−７８℃で１時間撹拌した。ＮＨ４Ｃｌ（ｓａｔ．溶液）を−７８℃で添加し、混合物をＥｔＯＡｃ（２×１０ｍＬ）で抽出した。有機層を乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過して、減圧濃縮した。粗混合物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン、勾配０／１００〜２０／８０）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、中間体化合物１５７（１．４４ｇ、５４％）を黄色油状物として得、これをそのまま放置して固化させた。
【０２４４】
中間体１５８の調製
【化１５０】
2021528413.tif 000151
中間体１５７（１．４４ｇ、４．５２ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１１１ｍＬ）中に混合した混合物にリチウムビス（トリメチルシリル）アミド溶液（１Ｍ、４．９８ｍＬ、４．９８ｍｍｏｌ）を−７８℃で添加した。この混合物を−１０℃で１時間撹拌し、次いで−７８℃に冷却した。Ｎ−フルオロベンゼンスルホンイミド（ＣＡＳ：１３３７４５−７５−２；１．５７ｇ、４．９８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１２．３ｍＬ）溶液を添加し、反応混合物を−７８℃で１時間撹拌し、次いで−５０℃で２時間撹拌した。ＮＨ４Ｃｌ（ｓａｔ．溶液）を加え、混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、真空中で蒸発させた。粗混合物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ、勾配０／１００〜７／９３、次いでＥｔＯＡｃ／ヘプタン、勾配０／１００〜１００／０）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、中間体１５８（９６３．７ｍｇ、４１％、純度６５％）を黄色油状物として得、これをそのまま放置して固化させた。
【０２４５】
中間体１５９の調製
【化１５１】
2021528413.tif 000152
中間体１５８（９６４ｍｇ、２．８７ｍｍｏｌ、純度６５％）をＭｅＯＨ（１９．３ｍＬ）中に混合した混合物にＮａＢＨ４（０．１３ｇ、３．４４ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。この反応混合物を室温で２時間撹拌し、ＮａＯＨ（１Ｍ）（２ｍＬ）で反応を停止させ、ＥｔＯＡｃ（２×３０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、減圧濃縮して、中間体１５９（１．０７ｇ、８１％、純度７３％）を淡黄色油状物として得た。
【０２４６】
中間体１６０の調製
【化１５２】
2021528413.tif 000153
クロロチオノギ酸Ｏ−フェニル（ＣＡＳ：１００５−５６−７；１．４３ｇ、８．２７ｍｍｏｌ）を中間体１５９（１．４０ｇ、４．１４ｍｍｏｌ、純度７３％）及びＤＭＡＰ（７５．８ｍｇ、０．６２ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（３３．６ｍＬ）中混合物に添加した。Ｅｔ３Ｎ（１．４４ｍＬ、１０．３ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を室温で７２時間撹拌した。Ｎａ４Ｃｌ（ｓａｔ．溶液）を添加し、この混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を塩水で洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、減圧濃縮した。粗混合物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ／ＤＣＭ、勾配０／１００〜１００／０、次いでＭｅＯＨ／ＤＣＭ、勾配０／１００〜１５／８５）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、中間体１６０（６２３ｍｇ、３２％）を淡黄色泡状物として得た。
【０２４７】
中間体１６１の調製
【化１５３】
2021528413.tif 000154
中間体１６０（６３０ｍｇ、１．３３ｍｍｏｌ）及びＡＩＢＮ（ＣＡＳ：７８−６７−１；２１．８ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）のトルエン（１９ｍＬ）中混合物に水素化トリブチルスズ（ＣＡＳ：６８８−７３−３；１．０７ｍＬ、３．９８ｍｍｏｌ）を加え、この反応混合物を１１０℃で２時間撹拌した。反応混合物を冷却し、溶媒を真空中で蒸発させた。粗混合物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＤＣＭ／ヘプタン、勾配０／１００〜１００／０、次いでＭｅＯＨ／ＤＣＭ、勾配０／１００〜１５／８５）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、中間体１６０（４５７．６ｍｇ、８８％、純度８２％）を淡黄色油状物として得た。
【０２４８】
中間体１６２の調製
【化１５４】
2021528413.tif 000155
中間体１６１（４５８ｍｇ、１．４２ｍｍｏｌ、純度８２％）をＤＣＭ（２．２９ｍＬ）に混合した混合物にＴＦＡ（０．９２ｍＬ；１２．０ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を室温で３時間撹拌し、溶媒を真空中で蒸発させて、中間体１６２・ＴＦＡ（２５０ｍｇ、４２％、純度８１％）を淡黄色油状物として得た。１５０ｍｇの中間体１６２・ＴＦＡをＮａＨＣＯ３（ｓａｔ．溶液）で中和し、ＤＣＭ（２×１０ｍＬ）で抽出し、さらにＭｅＯＨ及びＤＣＭ（２／８）で抽出した。有機層を乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、減圧濃縮して、中間体１６２（１００ｍｇ、３２％）を橙色油状物として得た。
【０２４９】
中間体１６３の調製
【化１５５】
2021528413.tif 000156
（Ｓ）−（＋）−３−アミノ−１−Ｂｏｃ−ピペリジン（ＣＡＳ：６２５４７１−１８−３；１１７ｍｇ、０．５８ｍｍｏｌ）及び２−メトキシ−６−メチルピリジン−４−カルバルデヒド（ＣＡＳ：９５１７９５−４３−０；１００ｍｇ、０．５８ｍｍｏｌ）をＣＨ３ＣＮ（３ｍＬ）に溶解した。この反応混合物を室温で３０分間撹拌し、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（３７１ｍｇ、１．７５ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を室温で１６時間撹拌した。混合物をＮａＨＣＯ３（ｓａｔ．、ａｑ．）及びＤＣＭで希釈した。水層をＤＣＭで抽出した（２回）。合わせた有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。粗混合物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン、勾配０／１００〜５０／５０）により精製して、中間体１６３（１６１ｍｇ、７７％）を得た。
【０２５０】
中間体１６４の調製
【化１５６】
2021528413.tif 000157
中間体１６３（１．００ｇ、２．８１ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（０．６４ｍＬ、３．６５ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１３ｍＬ）中混合物を撹拌し、この混合物に無水トリフルオロ酢酸（０．５ｍＬ、３．２３ｍｍｏｌ）をＮ２雰囲気下、室温で滴下した。この反応混合物を１６時間撹拌した。反応物をＨＣｌ（１Ｍ）で反応停止させ、ＤＣＭで抽出した。有機層をＮａＨＣＯ３（ｓａｔ．、ａｑ．）及び塩水で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。粗混合物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン、勾配０／１００〜３０／７０）により精製して、中間体１６４（１．１ｇ、８７％）を得た。
【０２５１】
中間体１６５の調製
【化１５７】
2021528413.tif 000158
中間体１６４（９００ｍｇ、１．９９ｍｍｏｌ）及びメチルボロン酸（ＣＡＳ：１３０６１−９６−６；３０４ｍｇ、４．９８ｍｍｏｌ）をＮ２雰囲気下でＮａ２ＣＯ３（６３３ｍｇ、５．９８ｍｍｏｌ）、１，４−ジオキサン（４．９８ｍＬ）及びＨ２Ｏ（１．２５ｍＬ）の撹拌溶液に添加した。ＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）・ＤＣＭ（８１．３ｍｇ、９９．６μｍｏｌ）を加え、１０５℃で１６時間撹拌した。追加量のメチルボロン酸（１．２５当量）、ＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）・ＤＣＭ（０．０２５当量）及びＮａ２ＣＯ３（１．５当量）をＮ２雰囲気下で添加した。反応混合物を１０５℃で１６時間撹拌した。混合物をＮａＨＣＯ３で希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。粗混合物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン、勾配０／１００〜２０／８０）により精製して、中間体１６５（６９０ｍｇ、８０％）を得た。
【０２５２】
中間体１６６の調製
【化１５８】
2021528413.tif 000159
ＨＣｌ（４Ｍ（１，４−ジオキサン中）、２．００ｍＬ、８．００ｍｍｏｌ）を０℃で中間体１６５（６９０ｍｇ、１．６０ｍｍｏｌ）に滴下した。この反応混合物を室温で１６時間撹拌し、溶媒を真空中で蒸発させた。粗混合物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、（ＭｅＯＨ／ＮＨ３）／ＤＣＭ、勾配０／１００〜１０／９０）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、中間体１６６（３１７ｍｇ、５９％）を得た。
【０２５３】
中間体１６７の調製
【化１５９】
2021528413.tif 000160
（Ｓ）−（＋）−３−アミノ−１−Ｂｏｃ−ピペリジン（ＣＡＳ：６２５４７１−１８−３）及び２，６−ジメチル−４−ピリジンカルボキシアルデヒド（ＣＡＳ：１８２０６−０６−９）を出発物質として用い、中間体１６３の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体１６７を調製した。
【０２５４】
中間体１６８の調製
【化１６０】
2021528413.tif 000161
ＨＣｌ（４Ｍ（１，４−ジオキサン中）、２．２６ｍＬ、９．０３ｍｍｏｌ）を０℃で中間体１６７（５７７ｍｇ、１．８１ｍｍｏｌ）に滴下した。この反応混合物を室温で１６時間撹拌し、溶媒を真空中で除去した。粗混合物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、（ＭｅＯＨ／ＮＨ３）／ＤＣＭ、勾配０／１００〜１０／９０の勾配）により精製して、中間体１６８（３２０ｍｇ、８０％）を得た。
【０２５５】
中間体１６９の調製
【化１６１】
2021528413.tif 000162
２−クロロ−３−ヒドロキシ−６−ヨード−ピリジン（ＣＡＳ：１８５２２０−６８−２；２０．０ｇ、７８．３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３００ｍＬ）溶液を撹拌し、この溶液に［１，３］−ジオキソラン−２−オン（ＣＡＳ：９６−４９−１；１．０３ｇ、１１７ｍｍｏｌ）及びＫ２ＣＯ３（１６．２ｇ、１１７ｍｍｏｌ）をＮ２雰囲気下、２０℃で少量ずつ加えた。この反応混合物を１００℃に加温し、１時間撹拌した。次いで、反応混合物を１５０℃に加温し、１時間撹拌した。反応混合物を室温に冷却し、追加量の［１，３］−ジオキソラン−２−オン（２．７６ｇ）及びＫ２ＣＯ３（５．４１ｇ）を添加した。反応混合物を１５０℃に加温し、１時間撹拌した。水を加え、生成物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、減圧濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン、勾配０／１００〜１００／０）により精製した。残渣に対し、同じ条件下で２回目の精製を行った。所望の画分を減圧濃縮して、中間体１６９（１０ｇ、４３％）を白色固体として得た。
【０２５６】
中間体１７０の調製
【化１６２】
2021528413.tif 000163
中間体１６９（５．００ｇ、１６．７ｍｍｏｌ）のトルエン（２００ｍＬ）溶液を撹拌し、この溶液にＫＯＨ（６．２６ｍＬ、２５．０ｍｍｏｌ）及び１８−クラウン−６（５３０ｍｇ、２．００ｍｍｏｌ）をＮ２雰囲気下、２０℃で少しずつ添加した。この反応混合物を１１０℃で５時間撹拌し、水で希釈し、生成物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、減圧濃縮した。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ；ＥｔＯＡｃ／ヘプタン、勾配０／１００〜１００／０）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、中間体１７０（３．０ｇ、６８％）を白色固体として得た。
【０２５７】
中間体１７１の調製
【化１６３】
2021528413.tif 000164
中間体１７０（５．００ｇ、１９．０ｍｍｏｌ）のトルエン（１１１ｍＬ）溶液を撹拌し、この溶液にトリブチル（１−エトキシビニル）スズ（ＣＡＳ：９７６７４−０２−７；７．８ｍＬ、２３．１ｍｍｏｌ）及びＰｄ（ＰＰｈ３）２Ｃｌ２（１３３ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を１２０℃で１２時間撹拌した。ＨＣｌ（２Ｍ（Ｈ２Ｏ中）、９５ｍＬ、９．５ｍｍｏｌ）を０℃で加え、混合物を室温で１２時間撹拌した。ＮａＨＣＯ３（ｓａｔ．、ａｑ．）を加え、有機層をＤＣＭで抽出した。合わせた有機層を乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、減圧濃縮した。粗混合物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ；ＥｔＯＡｃ／ヘプタン、勾配０／１００〜１００／０）により精製した。画分を集め、減圧濃縮して、中間体１７１（１．５ｇ、４４％）を褐色固体として得た。
【０２５８】
中間体１７２の調製
【化１６４】
2021528413.tif 000165
ＮａＢＨ４（１．２７ｇ、３３．５ｍｍｏｌ）を中間体１７１（１．５０ｇ、８．３７ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（３９．１ｍＬ）溶液に０℃で添加した。この反応混合物を室温で１０分間撹拌した。水を添加し、混合物をＤＣＭで抽出した。合わせた有機層を乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、減圧濃縮して、中間体１７２（１．５０ｇ、９９％）を無色油状物として得、これをさらに精製することなく次の工程に使用した。
【０２５９】
中間体１７３の調製
【化１６５】
2021528413.tif 000166
中間体１７０（１５．０ｇ、５７．０ｍｍｏｌ）、トリブチル（ビニル）スズ（ＣＡＳ：７４８６−３５−３；２９．９ｇ、９４．３ｍｍｏｌ）及びＰｄ（ＰＰｈ３）２Ｃｌ２（４００ｍｇ、０．５７ｍｍｏｌ）のトルエン（３００ｍＬ）中混合物を１２０℃で１６時間撹拌した。この反応混合物の反応をＣｓＦ（ａｑ．、２００ｍＬ）で停止させ、ＥｔＯＡｃ（３×６００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を塩水で洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、真空中で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、石油エーテル／ＥｔＯＡｃ、勾配１／０〜１０／４）により精製して、中間体１７３（７．５ｇ、８１％）を黄色油状物として得た。
【０２６０】
中間体１７４の調製
【化１６６】
2021528413.tif 000167
中間体１７３（７．５ｇ、４５．９ｍｍｏｌ）、４−メチルモルフォリンＮ−オキシド（ＣＡＳ：７５２９−２２−８；９．６９ｇ、８２．７ｍｍｏｌ）及びオスミウム（ＶＩ）酸カリウム二水和物（ＣＡＳ：１００２２−６６−９；１６９ｍｇ、０．４６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１００ｍＬ）、ＣＨ３ＣＮ（５０ｍＬ）及びＨ２Ｏ（２５ｍＬ）中混合物を室温で終夜撹拌した。この反応混合物の反応をＮａ２Ｓ２Ｏ３（ａｑ．）（１００ｍＬ）でさせ、ＥｔＯＡｃ（３×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を塩水で洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、真空中で蒸発させた。粗生成物をいかなる精製も行わずに次の工程で使用した。
【０２６１】
中間体１７５の調製
【化１６７】
2021528413.tif 000168
中間体１７４（７．００ｇ、３５．５ｍｍｏｌ）をＣＨ３ＣＮ（３０ｍＬ）及びＨ２Ｏ（３０ｍＬ）に混合し、この混合物に過ヨウ素酸ナトリウム（ＣＡＳ：７７９０−２８−５；１５．２ｇ、７１．０ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を室温で終夜撹拌し、水（５０ｍＬ）で反応を停止させ、ＥｔＯＡｃ（３×１５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を塩水で洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、真空中で蒸発させた。粗生成物を別の画分（２０．３ｍｍｏｌ）と合わせ、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、石油エーテル／ＥｔＯＡｃ、勾配１／０〜１／１）により精製して、中間体１７５（７．８４ｇ、８５％）を白色固体として得た。
【０２６２】
中間体１７６の調製
【化１６８】
2021528413.tif 000169
７−ブロモ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピリド［３，２−ｂ］［１，４］オキサジン（ＣＡＳ：３４９５０−８２−８；３．００ｇ、１４．０ｍｍｏｌ）及び二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（ＣＡＳ：２４４２４−９９−５；１．１当量）のＴＨＦ（６７．８ｍＬ）中混合物を撹拌し、この混合物にリチウムビス（トリメチルシリル）アミド（１Ｍ（ＴＨＦ中）、１．１当量）をＮ２雰囲気下、０℃で１０ｍｉｎかけて滴下した。この反応混合物を０℃で２時間撹拌し、追加量のＴＨＦ（１０ｍＬ）中のｂｏｃ−無水物（０．５２当量）を０℃で添加した。この反応混合物を０℃で１時間撹拌し、ＮＨ４Ｃｌ（ｓａｔ．）で処理し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空下で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２；ＥｔＯＡｃ／ＤＣＭ、勾配０／１００〜２／９８）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、中間体１７６（３．６６ｇ、８３％）をベージュ色固体として得た。
【０２６３】
中間体１７７の調製
【化１６９】
2021528413.tif 000170
Ｎ２雰囲気下、Ｋ２ＣＯ３（２９ｍＬ）及び１，４−ジオキサン（５７．９ｍＬ）の飽和水溶液中の中間体１７６（３．６６ｇ、１１．６ｍｍｏｌ）の脱酸素化溶液にＰｄ（ＰＰｈ３）４（０．６７ｇ、０．５８ｍｍｏｌ）、続いてビニルボロン酸ピナコールエステル（ＣＡＳ：７５９２７−４９−０；２．４６ｍＬ、１４．５ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を８０℃で１８時間撹拌した。混合物を水で処理し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空下で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２；ＥｔＯＡｃ／ＤＣＭ、勾配０／１００〜５／９５）により精製した。所望の画分を回収し、減圧濃縮して、中間体１７７（２．６９ｇ、８８％）を褐色固体として得た。
【０２６４】
中間体１７８の調製
【化１７０】
2021528413.tif 000171
中間体１７７（２．６９ｇ、１０．２ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（７９．３ｍＬ）及びＨ２Ｏ（３１．７ｍＬ）中混合物を撹拌し、この混合物に過ヨウ素酸ナトリウム（ＣＡＳ：７７９０−２８−５；４．９ｇ、２２．９ｍｍｏｌ）、続いて四酸化オスミウム（２．５％（ｔ−ＢｕＯＨ中）、１．８９ｍＬ、０．１４ｍｍｏｌ）をＮ２雰囲気下で加えた。この反応混合物を室温で４．５時間撹拌し、Ｎａ２Ｓ２Ｏ３（ｓａｔ．溶液）で処理し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空下で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２；ＥｔＯＡｃ／ヘプタン、勾配０／１００〜４０／６０）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、中間体１７８（１．９３ｇ、７１％）を白色固体として得た。
【０２６５】
中間体１７９の調製
【化１７１】
2021528413.tif 000172
ＮａＢＨ４（５５．５ｍｇ、１．４７ｍｍｏｌ）を中間体９７（１３３ｍｇ、０．７３ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（３ｍＬ）溶液に０℃で添加した。この反応混合物を室温で３０分間撹拌し、反応をＮＨ４Ｃｌ（ｓａｔ．、ａｑ．）で停止させた。この混合物をＤＣＭで抽出した。合わせた有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、減圧濃縮して、中間体１７９（１３０ｍｇ、９７％）を油状物で得た。
【０２６６】
中間体１８０の調製
【化１７２】
2021528413.tif 000173
チオニルクロリド（０．８ｍＬ、１１．０ｍｍｏｌ）を中間体１７９（５００ｍｇ、２．７３ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１２ｍＬ）溶液に０℃で添加した。この反応混合物を室温で２時間撹拌し、水で希釈し、ＤＣＭで抽出した。合わせた有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、真空中で蒸発させて、中間体１８０（５２０ｍｇ）を得、これを精製することなく次の工程で使用した。
【０２６７】
中間体１８１の調製
【化１７３】
2021528413.tif 000174
中間体１７８（１２６ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）及びＴｉ（Ｏｉ−Ｐｒ）４（ＣＡＳ：５４６−６８−９；０．２０ｍＬ、０．６８ｍｍｏｌ）を中間体１０（１００ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１．４７ｍＬ）溶液に添加し、この反応混合物を室温で１６時間撹拌した。反応混合物を０℃に冷却し、臭化メチルマグネシウム（１．４Ｍ溶液、１．６２ｍＬ、２．２７ｍｍｏｌ）を滴下した。この反応混合物を室温で２時間撹拌した。ＮＨ４Ｃｌ（ｓａｔ．溶液）を添加し、混合物をＤＣＭで抽出した。有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＮＨ３（７Ｍ（ＭｅＯＨ中））／ＤＣＭ、勾配０／１００〜１０／９０）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、中間体１８１（１４８．９ｍｇ、７０％）を黄色油状物として得た。
【０２６８】
中間体１８２の調製
【化１７４】
2021528413.tif 000175
中間体９及び中間体１７８を出発物質として用い、中間体１８１の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体１８２を調製した。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＮＨ３（７Ｍ（ＭｅＯＨ中））／ＤＣＭ、勾配０／１００〜１０／９０）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、中間体１８２（１５４ｍｇ、７３％）を黄色油状物として得た。
【０２６９】
中間体１８３の調製
【化１７５】
2021528413.tif 000176
（３Ｓ）−３−（ヒドロキシメチル）ピペリジン、Ｎ−Ｂｏｃ保護（ＣＡＳ：１４０６９５−８４−７；２．５ｇ、１１．６ｍｍｏｌ）、フタルイミド（ＣＡＳ：８５−４１−６；１．８８ｇ、１２．８ｍｍｏｌ）及びトリフェニルホスフィン（４．５７ｇ、１７．４ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（１３８ｍＬ）中混合物をＮ２雰囲気下で撹拌した。ＤＩＡＤ（ＣＡＳ：２４４６−８３−５；３．４５ｍＬ、１７．４ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を室温で終夜撹拌した。この混合物を水で希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン、勾配０／１００〜３０／７０）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、中間体１８３（３．９４ｇ、９９％）を黄色油状物として得た。
【０２７０】
中間体１８４の調製
【化１７６】
2021528413.tif 000177
中間体１８３（８３４ｍｇ；２．４２ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（１２ｍＬ）溶液を撹拌し、この溶液にＨＣｌ（４Ｍ（１，４−ジオキサン中）、６．７ｍＬ、２６．８ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を室温で４時間撹拌した。次いで、溶媒を真空中で蒸発させて、中間体１８４・ＨＣｌ（８０７．３ｍｇ）を白色固体として得、これをさらに精製することなく次の工程に使用した。
【０２７１】
中間体１８５の調製
【化１７７】
2021528413.tif 000178
中間体１８４・ＨＣｌ（８０２ｍｇ、２．８６ｍｍｏｌ）及び中間体１３０（５５９ｍｇ、２．５７ｍｍｏｌの無水ＣＨ３ＣＮ（２２．３ｍＬ）溶液を撹拌し、この溶液にＫ２ＣＯ３（１．１８ｇ、８．５７ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を７０℃で２日間撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、ｃｅｌｉｔｅ（登録商標）で濾過した。溶媒を真空下で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ；ＭｅＯＨ／ＤＣＭ、勾配０／１００〜１／９９）により精製した。所望の画分を集め、溶媒を真空下で蒸発させて、中間体１８５（６３８ｍｇ、５２％）を白色固体として得た。
【０２７２】
中間体１８６の調製
【化１７８】
2021528413.tif 000179
中間体１８５（６３８ｇ、１．５０ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（１２ｍＬ）溶液を撹拌し、この溶液にヒドラジン一水和物（０．２９ｍＬ、６．００ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を８０℃で１時間撹拌した。沈殿物をＤＩＰＥでトリチュレートし、濾過し、濾液を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、減圧濃縮した。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＮＨ３（７Ｎ（ＭｅＯＨ中））／ＤＣＭ、勾配０／１００〜４／９６）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、中間体１８６（３７８ｍｇ、８５％）を無色の油状物として得た。
【０２７３】
中間体１８７の調製
【化１７９】
2021528413.tif 000180
密閉管において、中間体１２５（５．００ｇ、１５．１ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（１００ｍＬ）溶液を撹拌し、この溶液にトリブチル（１−エトキシビニル）スズ（ＣＡＳ：９７６７４−０２−７；５．５９ｍＬ、１６．６ｍｍｏｌ）及びＰｄ（ＰＰｈ３）２Ｃｌ２（１．０６ｇ、１．５１ｍｍｏｌ）をＮ２雰囲気下で添加した。この反応混合物を終夜８０℃で撹拌した。次いで、ＨＣｌ（１Ｍ（Ｈ２Ｏ中）、７．５３ｍＬ）を加え、この混合物を室温で２０分間撹拌した。混合物をＮａＨＣＯ３（ｓａｔ．溶液）及び氷水で処理し、ＤＣＭで抽出した。有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン、勾配０／１００〜５０／５０）により精製した（２回）。所望の画分を集め、減圧濃縮した。残渣をＤＣＭに溶解し、ヘプタンでトリチュレートして、中間体１８７（１．９８ｇ、４５％）をクリーム色固体として得た。
【０２７４】
中間体１８８の調製
【化１８０】
2021528413.tif 000181
中間体１８７（１９５ｍｇ、０．６６ｍｍｏｌ）及びＴｉ（Ｏｉ−Ｐｒ）４（ＣＡＳ：５４６−６８−９；０．２３ｍＬ、０７９ｍｍｏｌ）を中間体１（１００ｍｇ、０．５３ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１．８６ｍＬ）溶液に添加した。この反応混合物を室温で１６時間撹拌し、０℃に冷却し、シアノ水素化ホウ素ナトリウム（ＣＡＳ：２５８９５−６０−７；７６．６ｍｇ、１．２２ｍｍｏｌ）を滴下した。この反応混合物を室温で２時間撹拌した。ＮＨ４Ｃｌ（ｓａｔ．溶液）を添加し、混合物をＤＣＭで抽出した。有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＮＨ３（７Ｎ（ＭｅＯＨ中））／ＤＣＭ、勾配０／１００〜１０／９０）によって精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、中間体１８８（７７．９ｍｇ、３２％）を黄色油状物として得た。
【０２７５】
中間体１８９の調製
【化１８１】
2021528413.tif 000182
中間体１８７及び中間体９を出発物質として用い、中間体１８８の合成について記載したのと同様の手順に従い、中間体１８９を調製した。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ、勾配０／１００〜１０／９０）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、中間体１８９（７９ｍｇ、３５％）を黄色油状物として得た。
【０２７６】
中間体１９０の調製
【化１８２】
2021528413.tif 000183
中間体１０７（１３０ｍｇ、０．６５ｍｍｏｌ）を中間体１６６（１８０ｍｇ、０．５４ｍｍｏｌ）及びＫ２ＣＯ３（１５０ｍｇ、１．０９ｍｍｏｌ）のＣＨ３ＣＮ（５ｍＬ）中混合物に添加した。反応混合物を７５℃で４８時間撹拌した。溶媒を除去し、粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ中、勾配０／１００〜４／９６）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、中間体１９０（１７１ｍｇ、６３％）を無色の油状物として得た。
【０２７７】
中間体１９１の調製
【化１８３】
2021528413.tif 000184
ＣＨ３ＣＮ（５００ｍＬ）中の２，４−ジブロモチアゾール（［ＣＡＳ  ４１７５−７７−３］、５０ｇ、２０５．８３ｍｍｏｌ）、Ｎ−［（２，４−ジメトキシフェニル）メチル］−２，４−ジメトキシ−ベンゼンメタンアミン（［ＣＡＳ２０７８１−２３−１］，６５．３３ｇ，２０５．８３ｍｍｏｌ）及びＮａ２ＣＯ３（６５．５１ｇ、６１８ｍｍｏｌ）を３６時間加熱した。この混合物を濃縮し、ＥｔＯＡｃ（１０００ｍＬ）に溶解した。混合物を水（５０ｍＬ）及び塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濃縮して粗生成物を得、これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル／ＥｔＯＡｃ  １００／０〜７０／３０）で精製して、中間体１９１（７０ｇ、７０％）を黄色固体として得た。
【０２７８】
中間体１９２の調製
【化１８４】
2021528413.tif 000185
中間体１９１（１５ｇ、３１．２９ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（２０ｍＬ）溶液に、温度が−７０℃を超えないような速度でＬＤＡ（３４．４２ｍＬ、３４．４２ｍｍｏｌ）を滴下した。得られた溶液を−７８℃で３０分間撹拌した。次いで、ＤＭＦ（２．５２ｇ、３４．４２ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（２０ｍＬ）溶液として滴下し、混合物を室温まで温めた。反応物を飽和ＮＨ４Ｃｌ（３０ｍＬ）で反応停止させた。混合物をＥｔＯＡｃ（２×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過した。粗製物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（石油エーテル／ＥｔＯＡｃ、１００／０〜８０／２０）で精製して、中間体１９２（８ｇ、４５％）を淡黄色固体として得た。
【０２７９】
中間体１９３の調製
【化１８５】
2021528413.tif 000186
中間体１９２（２００６．２３ｍｇ、３．９５ｍｍｏｌ）を、国際公開第２０１８／１０９２０２号パンフレットに記載の中間体（３Ｒ）−３４（７２９ｍｇ、３．５７ｍｍｏｌ）にＲＴで添加した。３０ｍｉｎ後、混合物にトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（１５１２．４３ｍｇ、７．１４ｍｍｏｌ）をＲＴで添加し、ＲＭをＲＴで４８時間撹拌した。粗製物をＮＨ３／Ｈ２Ｏで反応を停止し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。残渣を自動化フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、１０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ  ０／１００〜５／９５）により精製した。所望の画分を集め、真空下で濃縮して、中間体１９３（１．１ｇ、４４％）を粘着性固体として得た。
【０２８０】
中間体１９４の調製
【化１８６】
2021528413.tif 000187
中間体１９３（１０５０ｍｇ、１．５１ｍｍｏｌ）のＴＦＡ（２６．２５ｍＬ）中混合物を窒素雰囲気下、ＲＴで１．５時間撹拌した。溶媒を蒸発させ、混合物を水に取り、Ｋ２ＣＯ３で塩基性にし、ＤＣＭで抽出した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥し、濃縮した。残渣をシリカゲル、溶離液ＤＣＭ／ＭｅＯＨ（１００／０〜９０／１０）を用いたカラムにより精製した。純粋な画分を蒸発させ、中間体１９４（５２１ｇ、８７％）を白色固体として得た。
【０２８１】
中間体１９５の調製
【化１８７】
2021528413.tif 000188
中間体１９４（２０ｍｇ、０．０５１ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（１５ｍＬ）溶液を撹拌しながら、無水酢酸（７．７５ｍｇ、０．０７６ｍｍｏｌ）を滴下した。添加が完了した後、反応物を６０℃で２時間、次いで１１０℃で４時間加熱した。ＲＭを蒸発させ、水／０．５ｇのＮａＨＣＯ３／ＤＣＭに溶解した。有機層を分離し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濃縮した。残渣を、シリカゲル、溶離液：ＤＣＭ／ＭｅＯＨ（１００／０〜９５／５）を用いたカラムにより精製した。純粋な画分を濃縮して、中間体１９５（１３５ｍｇ、４１％）を淡黄色泡状物として得た。
【０２８２】
占有率試験用［３Ｈ］−リガンドの調製
【化１８８】
2021528413.tif 000189
国際公開第２０１８／１０９２０２号パンフレットに記載の化合物２８を以下のように［３Ｈ］で標識した：中間体１９５（４．１０ｍｇ、９．３８μｍｏｌ）及び炭素に担持されたパラジウム（１０％、１４．４ｍｇ）をＤＭＦ（０．２ｍＬ）に懸濁し、ＤＩＰＥＡ（１２μＬ、７０．６μｍｏｌ）を添加した。この懸濁液を３回脱気し、トリチウムガス（４．２Ｃｉ、初期圧力５２５ｍｂａｒ）雰囲気下、ＲＴで２時間４７ｍｉｎ撹拌した（最終圧力は、３１１ｍｂａｒであり、もはやガスの消費が観察されなかった）。溶媒を真空中で除去し、ＭｅＯＨ（０．３ｍＬ）を添加し、溶液を撹拌し、溶媒を再度真空下で除去することにより、不安定なトリチウムを交換した。このプロセスを２回繰り返した。最後に、十分に乾燥した固体をＥｔＯＨ（５ｍＬ）で抽出し、懸濁液を０．２μｍナイロン膜（Ｍａｃｈｅｒｅｙ−ＮａｇｅｌポリアミドシリンジフィルターＣＨＲＯＭＡＦＩＬ（登録商標）ＸｔｒａＰＡ−２０／２５）で濾過し、透明な溶液を得た。粗物質の放射化学純度（ＲＣＰ）は、以下のＨＰＬＣシステムを使用して５６％であると決定された：Ｗａｔｅｒｓ  Ａｔｌａｎｔｉｓ  Ｔ３、５μｍ、４．６×２５０ｍｍ；溶媒Ａ：水＋０．０５％ＴＦＡ、Ｂ：アセトニトリル＋０．０５％ＴＦＡ；０ｍｉｎ  ０％Ｂ；１０ｍｉｎ  ３０％Ｂ；１０．２〜１４．５ｍｉｎ  ９５％Ｂ；１５ｍｉｎ  ０％Ｂ；２５４ｎｍ；１．０ｍＬ／分；３０℃。
【０２８３】
粗生成物を以下のＨＰＬＣにより精製した：Ｗａｔｅｒｓ  Ａｔｌａｎｔｉｓ  Ｔ３、５μｍ、１０×２５０ｍｍ；溶媒Ａ：水＋０．１％ＴＦＡ；Ｂ：アセトニトリル＋０．１％ＴＦＡ；０ｍｉｎ  ０％Ｂ、１５ｍｉｎ  ４５％Ｂ；４．７ｍＬ／分；２５℃。目標化合物を９．５ｍｉｎで溶出し、固相抽出によってＨＰＬＣ溶媒混合物から単離した。したがって、ＨＰＬＣ溶液をＮａＨＣＯ３の水溶液で中和し、画分の体積をロータリーエバポレーターで一部減少させた。次いで、生成物をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  ＳｔｒａｔａＸカートリッジ（３３μｍポリマー系逆相、１００ｍｇ、３ｍＬ；８Ｂ−Ｓ１００−ＥＢ）で抽出し、これをＥｔＯＨ（５ｍＬ）で溶出した。抽出された生成物は、＞９９％のＲＣＰを示し、比放射能（ＳＡ）は、１０．７Ｃｉ／ｍｍｏｌ（３９６ＧＢｑ／ｍｍｏｌ、ＭＳにより決定）であると決定された。０．２５ｍＬのＥｔＯＨ中２５０μＣｉ（９．２５ＭＢｑ）（１ｍＣｉ／ｍＬ）及び５ｍＬのＥｔＯＨ中３８．８ｍＣｉの２つのバッチの［３Ｈ］−リガンドを単離した。
【０２８４】
最終化合物の調製
Ｅ１．生成物１の調製
【化１８９】
2021528413.tif 000190
中間体１（６０ｍｇ、０．３１５ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１．１ｍＬ）溶液を撹拌し、この溶液に２，３−ジヒドロ−［１，４］ジオキシノ［２，３−ｂ］ピリジン−６−カルボキシアルデヒド（６０ｍｇ、０．３１５ｍｍｏｌ）及びチタン（ＩＶ）イソプロポキシド（０．３１２ｍＬ、０．４４４ｍｍｏｌ）をＮ２雰囲気下、ｒｔで加えた。この混合物をｒｔで１６時間撹拌した。次いで、０℃で冷却し、臭化メチルマグネシウム（１．３ｍＬ、１．８３ｍｍｏｌ、１．４Ｍ（ＴＨＦ／トルエン中））を滴下した。混合物をこの温度で１５分間、ｒｔで１６時間撹拌した。混合物をｓａｔＮＨ４Ｃｌで処理し、ＤＣＭで希釈し、混合物を珪藻土のパッドにより濾過した。有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃ  ０／１００〜１０／９０）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、生成物１（１１０ｍｇ、９９％、ジアステレオ異性体の混合物）を淡黄色油状物として得た。
【０２８５】
Ｅ２．生成物２の調製
【化１９０】
2021528413.tif 000191
中間体１（１００ｍｇ、０．４４１ｍｍｏｌ）、中間体８６（８６．５ｍｇ、０．４４１ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（０．１８４ｍＬ、１．３２３ｍｍｏｌ）の１，２ジクロロエタン（１．７９ｍＬ）中混合物にチタン（ＩＶ）イソプロポキシド（０．１３ｍＬ、０．４４１ｍｍｏｌ）及びシアノ水素化ホウ素ナトリウム（３３．３ｍｇ、０．５３ｍｍｏｌ）をｒｔで連続的に添加した。この混合物を密閉管中、８０℃で１６時間撹拌した。混合物を水で処理し、ＤＣＭで希釈し、ｃｅｌｉｔｅ（登録商標）で濾過した。有機層を分離し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃ  ０／１００〜１０／９０）により精製した。所望の画分を集め、真空中で蒸発させて、残渣を得、これをＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ、５μｍ、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液  ９０％、ＣＨ３ＣＮ  １０％から、ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液  ０％、ＣＨ３ＣＮ  １００％への勾配）により再度精製した。所望の画分を集め、真空中で蒸発させて、生成物２（３５ｍｇ、２１％、ジアステレオ異性体の混合物）を白色固体として得た。
【０２８６】
Ｅ３．生成物３、４、５及び６の調製
【化１９１】
2021528413.tif 000192
中間体１（６５ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）、２，３−ジヒドロベンゾフラン−６−カルボキシアルデヒド（５５．７ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ）の無水ＤＣＭ（１．１８ｍＬ）溶液を撹拌し、この溶液にチタン（ＩＶ）イソプロポキシド（０．１５ｍＬ、０．５１ｍｍｏｌ）をＮ２雰囲気下、ｒｔで添加した。この混合物をｒｔで１６時間撹拌した。次いで、混合物を０℃で冷却し、臭化メチルマグネシウム（１．２２ｍＬ、１．７１ｍｍｏｌ、１．４Ｍ（ＴＨＦ／トルエン中））を滴下した。混合物をこの温度で１５分間、室温で２時間撹拌した。混合物をｓａｔ．ＮＨ４Ｃｌで処理し、ＤＣＭで抽出した。相をｃｅｌｉｔｅ（登録商標）により濾過し、次いで有機層を分離し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、アンモニアの７Ｎ  メタノール溶液／ＤＣＭ  ０／１００〜２／９８）により精製した。所望の画分を集め、溶媒を真空中で蒸発させて、ラセミジアステレオ異性体の混合物（９７ｍｇ、８４％）を得た。次いで、この混合物をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ、５μｍ、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液  ６０％、ＣＨ３ＣＮ  ４０％から、ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液  ４３％、ＣＨ３ＣＮ  ５７％への勾配）により精製した。所望の画分を集め、溶媒を一部減圧濃縮した。水相をＥｔＯＡｃで抽出し、分離し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させて、淡黄色油状物として生成物３（４５ｍｇ、３９％）を、また不純生成物３（４０ｍｇ）を得た。不純生成物３をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ、５μｍ、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５水溶液  ５４％、ＣＨ３ＣＮ  ４６％から、ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液  ３６％、ＣＨ３ＣＮ  ６４％への勾配）により精製した。所望の画分を集め、溶媒を一部減圧濃縮した。水相をＥｔＯＡｃで抽出し、分離し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させて、生成物４（３８．１ｍｇ、３４％）を無色油状物として得た。生成物４をキラルＳＦＣ（固定相：ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＡＤ−Ｈ、５μｍ、２５０×３０ｍｍ、移動相：ＣＯ２８５％、ｉＰｒＯＨ（０．３％ｉＰｒＮＨ２）１５％）により精製して２つの画分を得、これをＤＣＭに溶解し、ＮａＨＣＯ３で洗浄して、生成物５（１１ｍｇ）及び生成物６（１２ｍｇ）を全て淡黄色油状物として得た。
【０２８７】
Ｅ４．生成物７の調製
【化１９２】
2021528413.tif 000193
中間体２（１００ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）及び２，３−ジヒドロ−［１，４］ジオキシノ［２，３−ｂ］ピリジン−６−カルボキシアルデヒドを出発物質として用い、生成物１の合成について記載したのと同様の手順に従い、生成物７を調製した。生成物７をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ、５μｍ、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液  ６０％、ＣＨ３ＣＮ  ４０％から、ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液  ４３％、ＣＨ３ＣＮ  ５７％への勾配）により精製し、無色油状物として単離した（６２ｍｇ、３４％、ジアステレオ異性体の混合物）。
【０２８８】
Ｅ５．生成物８の調製
【化１９３】
2021528413.tif 000194
中間体３（８０ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）及び２，３−ジヒドロ−［１，４］ジオキシノ［２，３−ｂ］ピリジン−６−カルボキシアルデヒドを出発物質として用い、生成物１の合成について記載したのと同様の手順に従い、生成物８を調製した。生成物８をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ、５μｍ、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液  ６０％、ＣＨ３ＣＮ  ４０％から、ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液  ４３％、ＣＨ３ＣＮ  ５７％への勾配）により精製し、無色油状物として単離した（１１２ｍｇ、８４％、ジアステレオ異性体の混合物）。
【０２８９】
Ｅ６．生成物９の調製
【化１９４】
2021528413.tif 000195
中間体３（５７ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ）及び中間体８６を出発物質として用い、生成物２の合成について記載したのと同様の手順に従い、生成物９を調製した。生成物９をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ、５μｍ、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液  ４７％、ＣＨ３ＣＮ  ５３％から、ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液  ３０％、ＣＨ３ＣＮ  ７０％への勾配）により精製し、白色固体として単離した（３８ｍｇ、３８％、ジアステレオ異性体の混合物）。
【０２９０】
Ｅ７．生成物１０の調製
【化１９５】
2021528413.tif 000196
中間体４（１００ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ）及び２，３−ジヒドロ−［１，４］ジオキシノ［２，３−ｂ］ピリジン−６−カルボキシアルデヒドを出発物質として用い、生成物１の合成について記載したのと同様の手順に従い、生成物１０を調製した。生成物１０をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ、５μｍ、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液  ６０％、ＣＨ３ＣＮ  ４０％から、ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液  ４３％、ＣＨ３ＣＮ  ５７％への勾配）により精製し、無色油状物として単離した（６７ｍｇ、４１％、ジアステレオ異性体の混合物）。
【０２９１】
Ｅ８．生成物１１の調製
【化１９６】
2021528413.tif 000197
中間体４（１００ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ）及び中間体８６を出発物質として用い、生成物２の合成について記載したのと同様の手順に従い、生成物１１を調製した。生成物１１をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ、５μｍ、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液  ４７％、ＣＨ３ＣＮ  ５３％から、ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液  ３０％、ＣＨ３ＣＮ  ７０％への勾配）により精製し、無色油状物として単離した（３８ｍｇ、２２％、ジアステレオ異性体の混合物）。
【０２９２】
Ｅ９．生成物１２の調製
【化１９７】
2021528413.tif 000198
中間体５（６５ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）及び２，３−ジヒドロ−［１，４］ジオキシノ［２，３−ｂ］ピリジン−６−カルボキシアルデヒドを出発物質として用い、生成物１の合成について記載したのと同様の手順に従い、生成物１２を調製した。生成物１２をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ、５μｍ、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液  ５４％、ＣＨ３ＣＮ  ４６％から、ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液  ３６％、ＣＨ３ＣＮ  ６４％への勾配）により精製し、無色油状物として単離した（１０ｍｇ、８％、ジアステレオ異性体の混合物）。
【０２９３】
Ｅ１０．生成物１３の調製
【化１９８】
2021528413.tif 000199
中間体６（１００ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）及び中間体８６を出発物質として用い、生成物２の合成について記載したのと同様の手順に従い、生成物１３を調製した。生成物１３をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ、５μｍ、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液  ５４％、ＣＨ３ＣＮ  ４６％から、ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液  ３６％、ＣＨ３ＣＮ  ６４％への勾配）により精製し、無色油状物として単離した（５ｍｇ、３％、ジアステレオ異性体の混合物）。
【０２９４】
Ｅ１１．生成物１４の調製
【化１９９】
2021528413.tif 000200
密閉管において、中間体８７（６４ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（０．７６ｍＬ）溶液を撹拌し、この溶液にＬｉＯＨ（１１．８ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ）の水（０．７６ｍＬ）溶液を加えた。この混合物を８０℃で１６時間撹拌した。混合物を水で希釈し、ＤＣＭで抽出した。有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、アンモニアの７Ｍ  ＭｅＯＨ溶液／ＤＣＭ  ０／１００〜３０／７０）により精製した。残渣をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ、５μｍ、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液  ７５％、ＣＨ３ＣＮ  ２５％から、ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液  ５７％、ＣＨ３ＣＮ  ４３％への勾配）により精製した。残渣をＮａＨＣＯ３のａｑ  ｓａｔ溶液で希釈し、ＤＣＭで抽出した。有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させて、生成物１４（９ｍｇ、１７％、ジアステレオ異性体の混合物）を白色固体として得た。
【０２９５】
Ｅ１２．生成物１５の調製
【化２００】
2021528413.tif 000201
中間体７（１００ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ）及び中間体８６を出発物質として用い、生成物２の合成について記載したのと同様の手順に従い、生成物１５を調製した。生成物１５をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ、５μｍ、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液  ５４％、ＣＨ３ＣＮ  ４６％から、ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液  ３６％、ＣＨ３ＣＮ  ６４％への勾配）により精製し、無色油状物として単離した（２２．８ｍｇ、１３％、ジアステレオ異性体の混合物）。
【０２９６】
Ｅ１３．生成物１６及び１７の調製
【化２０１】
2021528413.tif 000202
中間体８８（１４０．９ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ、純度３７％）を出発物質として用い、生成物１４の合成について記載したのと同様の手順に従い、生成物１６及び生成物１７を調製した。生成物１６をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ、５μｍ、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液  ６０％、ＣＨ３ＣＮ  ４０％から、ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液  ４３％、ＣＨ３ＣＮ  ５７％への勾配）により２回精製し、無色油状物として単離した（２５．６ｍｇ、５９％、ジアステレオ異性体の混合物）。さらに、同じ精製から、生成物１７（１３ｍｇ、３０％、単一ジアステレオ異性体、ラセミ体）を無色油状物として単離した。
【０２９７】
Ｅ１４．生成物１８の調製
【化２０２】
2021528413.tif 000203
中間体８（１００ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ）及び２，３−ジヒドロ−［１，４］ジオキシノ［２，３−ｂ］ピリジン−６−カルボキシアルデヒドを出発物質として用い、生成物１の合成について記載したのと同様の手順に従い、生成物１８を調製した。生成物１８をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ、５μｍ、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液  ９０％、ＣＨ３ＣＮ  １０％から、ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液  ６５％、ＣＨ３ＣＮ  ３５％への勾配）により精製し、無色油状物として単離した（９．４ｍｇ、５％、ジアステレオ異性体の混合物）。
【０２９８】
Ｅ１５．生成物１９の調製
【化２０３】
2021528413.tif 000204
中間体９（２００ｍｇ、０．９１ｍｍｏｌ）及び２，３−ジヒドロ−［１，４］ジオキシノ［２，３−ｂ］ピリジン−６−カルボキシアルデヒドを出発物質として用い、生成物１の合成について記載したのと同様の手順に従い、生成物１９を調製した。生成物１９（２０９ｍｇ、６０％、ジアステレオ異性体の混合物）を無色油状物として単離した。
【０２９９】
Ｅ１６．生成物２０、１０８及び１０９の調製
【化２０４】
2021528413.tif 000205
中間体１０（２００ｍｇ、０．９１ｍｍｏｌ）及び２，３−ジヒドロ−［１，４］ジオキシノ［２，３−ｂ］ピリジン−６−カルボキシアルデヒドを出発物質として用い、生成物１の合成について記載したのと同様の手順に従い、生成物２０を調製した。生成物２０（２６３．３ｍｇ、７６％、ジアステレオ異性体の混合物）を無色油状物として単離した。生成物２０（２５０ｍｇ）をキラルＳＦＣ（固定相：ＣＨＩＲＡＣＥＬ  ＯＪ−Ｈ、５μｍ、２５０×３０ｍｍ、移動相：ＣＯ２  ７０％、ＭｅＯＨ（０．３％ｉＰｒＮＨ２）３０％）により精製して、生成物１０８（１１６ｍｇ、３３％）及び生成物１０９（１０７ｍｇ、３１％）を得た。
【０３００】
Ｅ１７．生成物２１の調製
【化２０５】
2021528413.tif 000206
４−ブロモ−２，６−ジメチルピリジン（６６．４ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（６ｍＬ）溶液にＮ２をバブリングした。次いで、Ｎ２をバブリングしながら、ナトリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（６８．６ｍｇ、０．７１ｍｍｏｌ）、２−ジシクロヘキシルホスフィノ−２’−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）ビフェニル（１４ｍｇ、０．０３６ｍｍｏｌ）及びトリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（１６．３ｍｇ、０．０１８ｍｍｏｌ）をｒｔで添加した。次いで、中間体１１（１０６ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ）を添加した。次いで、瓶に蓋をし、混合物を１００℃で終夜撹拌した。混合物をｒｔに冷却し、ＥｔＯＡｃ及び０．５ｍＬのＮＨ４Ｃｌｓａｔ．で希釈し、ｃｅｌｉｔｅ（登録商標）パッドで濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ；ＭｅＯＨ／ＤＣＭ  ０／１００〜１０／９０）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、粗生成物を得、これを９５％［６５ｍＭ  ＮＨ４ＯＡｃ＋ＡＣＮ（９０：１０）］−５％［ＡＣＮ］から６３％［６５ｍＭ  ＮＨ４ＯＡｃ＋ＡＣＮ（９０：１０）］−３７％［ＡＣＮ］への逆相によってさらに精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮した。残存するＮＨ４Ａｃを除去するために、生成物含有画分を８１％［Ｈ２Ｏ（２５ｍＭ  ＮＨ４ＨＣＯ３）−１９％［ＡＣＮ］から４５％［Ｈ２Ｏ（２５ｍＭ  ＮＨ４ＨＣＯ３）］−５５％［ＡＣＮ）］への逆相により再度精製した。所望の画分を集め、濃縮して、生成物２１（５０ｍｇ、３６％）を無色の粘着性固体として得た。この物質をＤＣＭに溶解し、２当量のＨＣｌ（４Ｎ（１，４−ジオキサン中））で処理した。溶媒を真空中で蒸発させ、生成物をジエチルエーテルでトリチュレートして、生成物２１（２×ＨＣｌ塩、４８ｍｇ、２９％）を白色固体として得た。
【０３０１】
Ｅ１８．生成物２２の調製
【化２０６】
2021528413.tif 000207
中間体１２（１５２ｍｇ、０．５７ｍｍｏｌ）及び４−ブロモ−２，６−ジメチルピリジンを出発物質として用い、生成物２１の合成について記載したのと同様の手順に従い、生成物２２を調製した。生成物２２（２×ＨＣｌ塩、１２６ｍｇ、５２％、ジアステレオ異性体の混合物）を白色固体として単離した。
【０３０２】
Ｅ１９．生成物２３の調製
【化２０７】
2021528413.tif 000208
中間体１１（１３２ｍｇ、０．４７ｍｍｏｌ）及び４−ブロモ−２−メトキシ−６−メチルピリジン（ＣＡＳ：１０８３１６９−００−９）を出発物質として用い、生成物２１の合成について記載したのと同様の手順に従い、生成物２３を調製した。生成物２３（２×ＨＣｌ塩、３０ｍｇ、１４％、ジアステレオ異性体の混合物）を白色固体として単離した。
【０３０３】
Ｅ２０．生成物２４、２５及び２６の調製
【化２０８】
2021528413.tif 000209
中間体１３（６８０ｍｇ、２．４ｍｍｏｌ）及び４−ブロモ−２−メトキシ−６−メチルピリジン（ＣＡＳ：１０８３１６９−００−９）を出発物質として用い、生成物２１の合成について記載したのと同様の手順に従い、生成物２４を調製した。生成物２４（６１３ｍｇ、６５％、ジアステレオ異性体の混合物）を粘着性固体として単離した。生成物２４（６０４ｍｇ、１．４７ｍｍｏｌ）をキラルＳＦＣ（固定相：ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＩＣ、５μｍ、２５０×３０ｍｍ、移動相：ＣＯ２  ５０％、ｉＰｒＯＨ（０．３％ｉＰｒＮＨ２）５０％）により精製して、生成物２５（２６７ｍｇ、４５％）及び生成物２６（２００ｍｇ、３４％）をいずれも粘着性固体として得た。生成物２５及び生成物２６をジエチルエーテルに溶解し、４当量のＨＣｌ（４Ｎ（ジエチルエーテル中））で処理した。溶媒を真空中で蒸発させ、生成物をジエチルエーテルでトリチュレートして、生成物２５（ＨＣｌ塩、１５７ｍｇ、２４％）及び生成物２６（０．６×ＨＣｌ塩、１２９ｍｇ、２１％）をいずれも白色固体として得た。
【０３０４】
Ｅ２１．生成物２７、２８及び２９の調製
【化２０９】
2021528413.tif 000210
中間体１４（６２７ｍｇ、２．２６ｍｍｏｌ）及び４−ブロモ−２−メトキシ−６−メチルピリジン（ＣＡＳ：１０８３１６９−００−９）を出発物質として用い、生成物２１の合成について記載したのと同様の手順に従い、生成物２７を調製した。生成物２７（６１３ｍｇ、７１％、ジアステレオ異性体の混合物）を橙色の粘着性固体として単離した。生成物２７（５９２ｍｇ、１．４７ｍｍｏｌ）をキラルＳＦＣ（固定相：ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＩＣ、５μｍ、２５０×３０ｍｍ、移動相：ＣＯ２  ５０％、ｉＰｒＯＨ（０．６％ｉＰｒＮＨ２）５０％）により精製して、生成物２８（２６７ｍｇ、４５％）及び生成物２９（２００ｍｇ、３４％）をいずれも粘着性固体として得た。
【０３０５】
Ｅ２２．生成物３０の調製
【化２１０】
2021528413.tif 000211
中間体１２（１５２ｍｇ、０．５７ｍｍｏｌ）及び４−ブロモ−２−メトキシ−６−メチルピリジン（ＣＡＳ：１０８３１６９−００−９）を出発物質として用い、生成物２１の合成について記載したのと同様の手順に従い、生成物３０を調製した。生成物３０（２×ＨＣｌ塩、１０５ｍｇ、４１％、ジアステレオ異性体の混合物）を白色固体として単離した。
【０３０６】
Ｅ２３．生成物３１、３２、３３、３４及び３５の調製
【化２１１】
2021528413.tif 000212
Ｋ３ＰＯ４（８２ｍｇ、０．３９ｍｍｏｌ）、２−ジシクロヘキシルホスフィノ−２’，４’，６’−トリイソプロピルビフェニル（１２．３ｍｇ、０．０２６ｍｍｏｌ）及びトリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（１１．８ｍｇ、０．０１３ｍｍｏｌ）を１，４−ジオキサン（５ｍＬ）に懸濁して撹拌し、この懸濁液に中間体８９（１１８ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ）及びトリメチルボロキシン（０．０４３ｍＬ、０．３１ｍｍｏｌ）を窒素下で添加した。この混合物を１００℃で撹拌した。２−ジシクロヘキシルホスフィノ−２’，４’，６’−トリイソプロピルビフェニル（６．１５ｍｇ、０．０１３ｍｍｏｌ）及びトリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（５．９ｍｇ、０．００６５ｍｍｏｌ）を窒素雰囲気下、ｒｔで混合物に添加した。水及びＥｔＯＡｃを加えた。有機層を分離し、有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ；ＥｔＯＡｃ／ヘプタン  ０／１００〜５０／５０）により精製した。所望の画分を回収し、減圧濃縮して、不純生成物３１（９０ｍｇ）を黄色固体として得た。不純生成物３１（９０ｍｇ）を７０％［２５ｍＭ  ＮＨ４ＨＣＯ３］−３０％［ＡＣＮ：ＭｅＯＨ  １：１］から２７％［２５ｍＭ  ＮＨ４ＨＣＯ３］−７３％［ＡＣＮ：ＭｅＯＨ  １：１］への逆相クロマトグラフィーにより精製した。所望の画分を集め、６０℃で濃縮した。ＡＣＮ（１０ｍＬ×３回）を添加し、６０℃で濃縮して、純粋な生成物３１（８３ｍｇ、７３％）を無色油状物として得た。生成物３１（８３ｍｇ）をキラルＳＦＣ（固定相：Ｌｕｘ  Ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ−４、５μｍ、２５０×２１．２ｍｍ、移動相：ＣＯ２  ７５％、ｉＰｒＯＨ（０．３％ｉＰｒＮＨ２）２５％）により精製して、生成物３２（１４ｍｇ、１７％）、生成物３３（１６ｍｇ、１９％）並びに生成物３４及び生成物３５の混合物２６ｍｇを得た。この混合物（２６ｍｇ）をキラルＳＦＣ（固定相：ＣＨＩＲＡＣＥＬ  ＯＪ−Ｈ、５μｍ、２５０×２０ｍｍ、移動相：ＣＯ２  ９０％、ＭｅＯＨ（０．３％ｉＰｒＮＨ２）１０％）により精製して、生成物３４（１３ｍｇ、１６％）及び生成物３５（１３ｍｇ、１６％）を得た。
【０３０７】
Ｅ２４．生成物３６の調製
【化２１２】
2021528413.tif 000213
中間体６１（８４．２ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）及び１−（２，３−ジヒドロ−ベンゾフラン−６−イル）−エタノン（ＣＡＳ：３７４７０６−０７−７）を出発物質として用い、生成物２の合成について記載したのと同様の手順に従い、生成物３６を調製した。生成物３６を７２％［６５ｍＭ  ＮＨ４ＯＡｃ＋ＡＣＮ（９０：１０）］−２８％［ＭｅＣＮ：ＭｅＯＨ（１：１）］から３６％［６５ｍＭ  ＮＨ４ＯＡｃ＋ＡＣＮ（９０：１０）］−６４％［ＭｅＣＮ：ＭｅＯＨ（１：１）］への逆相により精製した。所望の画分を集め、真空中、ＭｅＣＮ／水（１：１）で蒸発させた。次いで、残渣を水で希釈し、ＤＣＭで抽出して、生成物３６（２３ｍｇ）を無色の粘着性固体として得た。生成物をＤＣＭに溶解し、２当量のＨＣｌ（４Ｎ（ジオキサン中））で処理した。溶媒を真空中で蒸発させ、生成物をジエチルエーテルでトリチュレートし、濾過し、乾燥して、生成物３６（２×ＨＣｌ塩、１６．９ｍｇ、１１％）を白色固体として得た。
【０３０８】
Ｅ２５．生成物３７の調製
【化２１３】
2021528413.tif 000214
中間体１５（１１２ｍｇ、０．５１ｍｍｏｌ）及び中間体８６を出発物質として用い、生成物１の合成について記載したのと同様の手順に従い、生成物３７を調製した。生成物３７を８１％［２５ｍＭ  ＮＨ４ＨＣＯ３］−１９％［ＭｅＣＮ：ＭｅＯＨ（１：１）］から４５％［２５ｍＭ  ＮＨ４ＨＣＯ３］−５５％［ＭｅＣＮ：ＭｅＯＨ（１：１）］への逆相により精製した。ジエチルエーテルでトリチュレートした後、生成物３７（９ｍｇ、４％、ジアステレオ異性体の混合物）を白色泡状物として単離した。
【０３０９】
Ｅ２６．生成物３８の調製
【化２１４】
2021528413.tif 000215
中間体５９（１１２ｍｇ、０．５１ｍｍｏｌ）及び中間体８６を出発物質として用い、生成物１の合成について記載したのと同様の手順に従い、生成物３８を調製した。生成物３８を５９％［２５ｍＭ  ＮＨ４ＨＣＯ３］−４１％［ＭｅＣＮ：ＭｅＯＨ（１：１）］から１７％［２５ｍＭ  ＮＨ４ＨＣＯ３］−８３％［ＭｅＣＮ：ＭｅＯＨ（１：１）］への逆相により精製した。生成物３８（７３ｍｇ、３４％、ジアステレオ異性体の混合物）を無色油状物として単離した。生成物３８をＤＣＭに溶解し、２当量のＨＣｌ（４Ｎ（ジオキサン中））で処理した。溶媒を真空中で蒸発させ、生成物をジエチルエーテルでトリチュレートし、濾過し、乾燥して、生成物３８（１×ＨＣｌ塩、６９ｍｇ、３０％）を白色固体として得た。
【０３１０】
Ｅ２７．生成物３９の調製
【化２１５】
2021528413.tif 000216
密閉管にいて、中間体９０（７８ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２ｍＬ）溶液を撹拌し、この溶液に水素化リチウムアルミニウム（０．３１ｍＬ、０．３１ｍｍ、１ＭのＴＨＦ溶液）をＮ２雰囲気下、０℃で滴下した。この混合物を０℃で５分間、ｒｔで２時間撹拌した。混合物を０℃で冷却し、ＥｔＯＡｃ及びＮａ２ＳＯ４．１０Ｈ２Ｏで処理した。この混合物をｒｔで３０分間撹拌し、ｃｅｌｉｔｅ（登録商標）パッドにより濾過し、ＥｔＯＡｃで洗浄した。濾液を濃縮し、粗製物をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ、５μｍ、移動相：ＮＨ４ＣＯ３Ｈの１０ｍＭ水溶液ｐＨ９  ６０％、ＣＨ３ＣＮ  ４０％から、ＮＨ４ＣＯ３Ｈの１０ｍＭ水溶液ｐＨ９  ４３％、ＣＨ３ＣＮ  ５７％への勾配）により精製した。所望の画分を集め、溶媒を真空中で蒸発させた。残渣をジエチルエーテルに溶解し、４Ｎ  ＨＣｌ（１，４−ジオキサン中）で処理することによってそのＨＣｌ塩に変換した。形成された固体を濾過し、乾燥して、生成物３９（２×ＨＣｌ塩、１７．７ｍｇ、２０％）を白色泡状物として得た。
【０３１１】
Ｅ２８．生成物４０、４１及び４２の調製
【化２１６】
2021528413.tif 000217
中間体１６（１２４．４ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ、２×ＨＣｌ塩）及び中間体８６を出発物質として用い、生成物２の合成について記載したのと同様の手順に従い、生成物４０を調製した。生成物４０をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ、５μｍ、移動相：ＮＨ４ＣＯ３Ｈ／ＮＨ４ＯＨの０．１％水溶液ｐＨ９  ５４％、ＣＨ３ＣＮ  ４６％から、ＮＨ４ＣＯ３Ｈ／ＮＨ４ＯＨの０．１％水溶液ｐＨ９  ６４％、ＣＨ３ＣＮ  ３６％への勾配）により精製し、生成物４０（６５ｍｇ、４１％、ジアステレオ異性体の混合物）を油状物として得た。生成物４０をキラルＳＦＣ（固定相：Ｃｈｉｒａｌｃｅｌ  ＯＤ−Ｈ、５μｍ、２５０×２１．２ｍｍ、移動相：ＣＯ２  ８０％、ｉＰｒＯＨ（０．３％ｉＰｒＮＨ２）２０％）により精製して、生成物４１（２９ｍｇ、１８％）及び生成物４２（２４ｍｇ、１５％）をいずれも油状物として得た。次いで、生成物４１（２９ｍｇ）をＭｅＯＨ（１ｍＬ）に溶解し、ＨＣｌ（５ｍＬ、６Ｎ（ＭｅＯＨ中））で２時間処理した。溶媒を真空中で蒸発させ、生成物をジイソプロピルエーテルでトリチュレートし、濾過し、乾燥して、生成物４１（２×ＨＣｌ塩、３２ｍｇ）をクリーム色の固体として得た。次いで、生成物４２（２４ｍｇ）をＭｅＯＨ（１ｍＬ）に溶解し、ＨＣｌ（０．５５ｍＬ、６Ｎ（ＭｅＯＨ中））で２時間処理した。溶媒を真空中で蒸発させ、生成物をジイソプロピルエーテルでトリチュレートし、濾過し、乾燥して、生成物４２（２×ＨＣｌ塩、３２ｍｇ）をクリーム色の固体として得た。
【０３１２】
Ｅ２９．生成物４３の調製
【化２１７】
2021528413.tif 000218
密閉管において、中間体１６（９０ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ、２×ＨＣｌ塩）のＤＣＭ（１．７ｍＬ）懸濁液を撹拌し、この懸濁液にトリエチルアミン（０．１８ｍＬ、１．３３ｍｍｏｌ）、続いて２，３−ジヒドロ−［１，４］ジオキシノ［２，３−ｂ］ピリジン−６−カルボキシアルデヒド（５９ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）をＮ２雰囲気下で添加した。この混合物をｒｔで３０分間撹拌し、次いでトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（５９ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物をｒｔで１６時間撹拌した。混合物をｓａｔ  ＮａＨＣＯ３で処理し、ＤＣＭで抽出した。有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、７ＮのＮＨ３のＭｅＯＨ溶液／ＤＣＭ  ０／１００〜５／９５）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、生成物４３（９６ｍｇ、８４％）を淡黄色油状物として得た。
【０３１３】
Ｅ３０．生成物４４、４５及び４６の調製
【化２１８】
2021528413.tif 000219
中間体１６（９５ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ、２×ＨＣｌ塩）及び１−（２，３−ジヒドロ−［１，４］ジオキシノ［２，３−ｂ］ピリジン−６−イル）エテノン（ＣＡＳ：１２５４０４４−２５−１）を出発物質として用い、生成物２の合成について記載したのと同様の手順に従い、生成物４４を調製した。生成物４４をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ、５μｍ、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液  ７５％、ＣＨ３ＣＮ  ２５％から、ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液  ５７％、ＣＨ３ＣＮＣＮ  ４３％への勾配）により精製して、生成物４４（６２ｍｇ、４９％、ジアステレオ異性体の混合物）を無色油状物として得た。生成物４４（５０ｍｇ）をキラルＳＦＣ（固定相：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  ＩＧ、５μｍ、２５０×２１．２ｍｍ、移動相：ＣＯ２  ６０％、ｉＰｒＯＨ（０．３％ｉＰｒＮＨ２）４０％）により精製し、生成物４５（２４ｍｇ、１９％）及び生成物４６（２３ｍｇ、１８％）をいずれも黄色油状物として得た。
【０３１４】
Ｅ３１．生成物４７の調製
【化２１９】
2021528413.tif 000220
中間体１６（１００ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ、２×ＨＣｌ塩）及び中間体２，３−ジヒドロ−１−ベンゾフラン−６−カルバルデヒドを出発物質として用い、生成物１の合成について記載したのと同様の手順に従い、生成物４７を調製した。生成物４７をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ、５μｍ、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液  ９０％、ＣＨ３ＣＮ  １０％から、ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液  ６５％、ＣＨ３ＣＮ  ３５％への勾配）により精製して、生成物４７（６２ｍｇ、４９％、ジアステレオ異性体の混合物）をクリーム状の粘着性固体として得た。
【０３１５】
Ｅ３２．生成物４８の調製
【化２２０】
2021528413.tif 000221
中間体１６（８５ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）及び４−メチル−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−１，４−ベンゾオキサジン−７−カルバルデヒド（ＣＡＳ：１４１１０３−９３−７）を出発物質として用い、生成物４３の合成について記載したのと同様の手順に従い、生成物４８を調製した。生成物４８をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ、５μｍ、移動相：ＮＨ４ＣＯ３Ｈの１０ｍＭ水溶液ｐＨ９  ８１％、ＣＨ３ＣＮ  １９％から、ＮＨ４ＣＯ３Ｈの１０ｍＭ水溶液ｐＨ９  ６４％、ＣＨ３ＣＮ  ３６％への勾配）により精製して、生成物４８（３３ｍｇ、２２％）を無色油状物として得た。
【０３１６】
Ｅ３３．生成物４９の調製
【化２２１】
2021528413.tif 000222
中間体１６（１００ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ、２×ＨＣｌ）及び４−メチル−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−１，４−ベンゾオキサジン−７−カルバルデヒド（ＣＡＳ：１４１１０３−９３−７）を出発物質として用い、生成物１の合成について記載したのと同様の手順に従い、生成物４９を調製した。生成物４９をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ、５μｍ、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液  ６０％、ＣＨ３ＣＮ  ４０％から、ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液  ４３％、ＣＨ３ＣＮ  ５７％への勾配）により精製して、生成物４９を得、次いでこれをＭｅＯＨに溶解し、ＨＣｌ（６Ｎのｉ−ＰｒＯＨ溶液）で処理した。溶媒を真空中で蒸発させて、生成物４９（６０ｍｇ、３７％、２×ＨＣｌ塩、ジアステレオ異性体の混合物）を白色固体として得た。
【０３１７】
Ｅ３４．生成物５０、５１及び５２の調製
【化２２２】
2021528413.tif 000223
中間体９１（１６８ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ）を出発物質として用い、生成物１４の合成について記載したのと同様の手順に従い、生成物５０を調製した。生成物５０（８１ｍｇ、５９％、ジアステレオ異性体の混合物）を白色泡状物として単離した。生成物５０（７０ｍｇ）をキラルＳＦＣ（固定相：ＣＨＩＲＡＣＥＬ  ＯＪ−Ｈ、５μｍ、２５０×３０ｍｍ、移動相：ＣＯ２  ９０％、ＥｔＯＨ（０．３％ｉＰｒＮＨ２）１０％））により精製し、生成物５１（１９ｍｇ、１４％）及び生成物５２（２２ｍｇ、１６％）をいずれも淡黄色の泡状物として得た。
【０３１８】
Ｅ３５．生成物５３の調製
【化２２３】
2021528413.tif 000224
密閉管において、中間体９２（７４ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１ＭＬ）溶液を撹拌し、この溶液にボランジメチルスルフィド錯体（０．０５ｍＬ、０．５３ｍｍｏｌ）をＮ２雰囲気下で滴下した。この混合物を６０℃で２時間撹拌した。混合物を０℃で冷却し、ＭｅＯＨ（５ｍＬ）を添加した。この混合物をｒｔで１時間撹拌した。溶媒を真空中で蒸発させた。粗製物を密閉管中、Ｎ２雰囲気下においてＭｅＯＨ（１０ｍＬ）で溶解し、この混合物を７０℃で８時間撹拌した。溶媒を真空中で蒸発させた。粗生成物をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ、５μｍ、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液  ７５％、ＣＨ３ＣＮ  ２５％から、ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液  ５７％、ＣＨ３ＣＮ  ４３％への勾配）により精製した。所望の画分を集め、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させて、生成物５３（３１ｍｇ、７１％）を淡黄色の油状物として得た。
【０３１９】
Ｅ３６．生成物５４の調製
【化２２４】
2021528413.tif 000225
中間体１６（１６４ｍｇ、０．５９ｍｍｏｌ、２×ＨＣｌ塩）及び２−オキソ−１Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］［１，４］オキサジン−６−カルバルデヒド（ＣＡＳ：１４１７５５４−４３−８）を出発物質として用い、生成物４３の合成について記載したのと同様の手順に従い、生成物５４を調製した。生成物５４をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｓｕｎｆｉｒｅ  ＴＭ  Ｐｒｅｐ  Ｃ１８  ＯＢＤ  ３０×１００ｍｍ、５μｍ、移動相：ＨＣＯ２Ｈの０．１％Ｈ２Ｏ溶液  ６０％、ＣＨ３ＣＮ  ４０％から、ＨＣＯ２Ｈの０．１％Ｈ２Ｏ溶液  ４３％、ＣＨ３ＣＮ  ５７％への勾配）により精製して、２１ｍｇの残渣を得、これをＤＣＭに溶解し、ＮａＨＣＯ３（ａｑ．ｓａｔ．ｓｌｔｎ．）で洗浄した。有機層を分離し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、真空中で蒸発させて、生成物５４（１９．１ｍｇ、９％）を無色の粘着性油状物として得た。
【０３２０】
Ｅ３７．生成物５５の調製
【化２２５】
2021528413.tif 000226
中間体１６（２６１ｍｇ、０．９４ｍｍｏｌ、２×ＨＣｌ塩）及び３−オキソ−４Ｈ−ピリド［３，２−ｂ］［１，４］オキサジン−７−カルバルデヒドを出発物質として用い、生成物４３の合成について記載したのと同様の手順に従い、生成物５５を調製した。生成物５５をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ、５μｍ、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液  ７５％、ＣＨ３ＣＮ  ２５％から、ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液  ５７％、ＣＨ３ＣＮ  ４３％への勾配）により精製して残渣を得、これをＮａＨＣＯ３飽和水溶液及びＤＣＭで洗浄した。有機層を分離し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、真空中で蒸発させて、不純な生成物５５（５７．８ｍｇ、純度８０＆％）を白色固体として得た。この不純な生成物５５（５７．８ｍｇ、純度８０＆％）をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｓｕｎｆｉｒｅ  ＴＭ  Ｐｒｅｐ  Ｃ１８  ＯＢＤ  ３０×１００ｍｍ、５μｍ、移動相：ＨＣＯ２Ｈの０．１％Ｈ２Ｏ溶液  ５４％、ＣＨ３ＣＮ  ４６％から、ＨＣＯ２Ｈの０．１％Ｈ２Ｏ溶液  ３６％、ＣＨ３ＣＮ  ６４％への勾配）により精製して、生成物５５（２３ｍｇ、６．６％）を白色固体として得た。
【０３２１】
Ｅ３８．生成物５６の調製
【化２２６】
2021528413.tif 000227
生成物６２（９０ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ）を出発物質として用い、生成物５３の合成について記載したのと同様の手順に従い、生成物５６を調製した。生成物５６をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ、５μｍ、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液  ７５％、ＣＨ３ＣＮ  ２５％から、ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液  ５７％、ＣＨ３ＣＮ  ４３％への勾配）により精製した。所望の画分を集め、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させて、生成物５６（５４ｍｇ、６２％、ジアステレオ異性体の混合物）を淡黄色の油状物として得た。
【０３２２】
Ｅ３９．生成物５７の調製
【化２２７】
2021528413.tif 000228
中間体９５（４０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（２．５ｍＬ）溶液をＨ−Ｃｕｂｅ（登録商標）反応器（１ｍＬ／分、３５ｍｍ  Ｐｄ／Ｃ  １０％カートリッジ、全Ｈ２モード、ｒｔ、２５℃、１サイクル、５０℃、２サイクル）内で水素化した。溶媒を真空中で蒸発させ、粗生成物をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ、５μｍ、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液  ７５％、ＣＨ３ＣＮ  ２５％から、ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液  ５７％、ＣＨ３ＣＮ  ４３％への勾配）により精製した。所望の画分を集め、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させて、生成物５７（７．３ｍｇ、１８％、ジアステレオ異性体の混合物）を無色の油状物として得た。
【０３２３】
Ｅ４０．生成物５８の調製
【化２２８】
2021528413.tif 000229
中間体１６（９９ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）及び３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンズ［１，４］オキサジン−７−カルボキシアルデヒドを出発物質として用い、生成物１の合成について記載したのと同様の手順に従い、生成物５８を調製した。生成物５８（５５ｍｇ、３０％、ジアステレオ異性体の混合物）を淡黄色油状物として単離し、これをそのまま放置して固化させた。
【０３２４】
Ｅ４１．生成物５９、６０及び６１の調製
【化２２９】
2021528413.tif 000230
中間体１６（９１ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）及び２−オキソ−１Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］［１，４］オキサジン−６−カルバルデヒド（ＣＡＳ：１４１７５５４−４３−８）を出発物質として用い、生成物１の合成について記載したのと同様の手順に従い、生成物５９を調製した。生成物５９（９５ｍｇ、５６％、ジアステレオ異性体の混合物）を淡黄色泡状物として単離した。生成物５９（８０ｍｇ）をキラルＳＦＣ（固定相：ＣＨＩＲＡＣＥＬ  ＯＪ−Ｈ、５μｍ、２５０×３０ｍｍ、移動相：ＣＯ２  ９０％、ＥｔＯＨ（０．３％ｉＰｒＮＨ２）１０％）により精製して、生成物６０（３０ｍｇ、１８％）及び生成物６１（２４ｍｇ、１４％）をいずれも白色泡状物として得た。
【０３２５】
Ｅ４２．生成物６２の調製
【化２３０】
2021528413.tif 000231
中間体１６（１１６ｍｇ、０．５７ｍｍｏｌ）及び３−オキソ−４Ｈ−ピリド［３，２−ｂ］［１，４］オキサジン−７−カルバルデヒドを出発物質として用い、生成物１の合成について記載したのと同様の手順に従い、生成物６２を調製した。生成物６２（１０３ｍｇ、４５％、ジアステレオ異性体の混合物）を黄色油状物として単離した。
【０３２６】
Ｅ４３．生成物６３、６４及び６５の調製
【化２３１】
2021528413.tif 000232
中間体１７（１００ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ）及び２，３−ジヒドロ−［１，４］ジオキシノ［２，３−ｂ］ピリジン−６−カルバルデヒド（ＣＡＳ：６１５５６８−２４−６）を出発物質として用い、生成物１の合成について記載したのと同様の手順に従い、生成物６３を調製した。粗生成物６３をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ、５μｍ、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液  ６０％、ＣＨ３ＣＮ  ４０％から、ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液  ４３％、ＣＨ３ＣＮ  ５７％への勾配）により精製し、生成物６３（１０２ｍｇ、５９％、ジアステレオ異性体の混合物）、生成物６４（９．９ｍｇ、６％、単一ラセミジアステレオ異性体）及び生成物６５（３６ｍｇ、２１％、単一ラセミジアステレオ異性体）を全て無色の油状物として得た。
【０３２７】
Ｅ４４．生成物６６の調製
【化２３２】
2021528413.tif 000233
中間体１７（１００ｍｇ、０．４７ｍｍｏｌ）及び中間体８６を出発物質として用い、生成物２の合成について記載したのと同様の手順に従い、生成物６６を調製した。生成物６６をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ、５μｍ、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液  ４７％、ＣＨ３ＣＮ  ５３％から、ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液  ３０％、ＣＨ３ＣＮ  ７０％への勾配）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮した。このようにして得られた残渣をＥｔＯＡｃに溶解し、ＮａＨＣＯ３のａｑ  ｓａｔ  ｓｏｌで洗浄した。有機相を分離し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、減圧濃縮して、生成物６６（６１ｍｇ、３３％、ジアステレオ異性体の混合物）を無色油状物として得た。
【０３２８】
Ｅ４５．生成物６７の調製
【化２３３】
2021528413.tif 000234
中間体１８（１００ｍｇ、０．４６ｍｍｏｌ）及び２，３−ジヒドロ−［１，４］ジオキシノ［２，３−ｂ］ピリジン−６−カルバルデヒド（ＣＡＳ：６１５５６８−２４−６）を出発物質として用い、生成物１の合成について記載したのと同様の手順に従い、生成物６７を調製した。生成物６７をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ、５μｍ、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液  ５４％、ＣＨ３ＣＮ  ４６％から、ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液  ３６％、ＣＨ３ＣＮ  ６４％への勾配）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮した。このようにして得られた残渣をＥｔＯＡｃに溶解し、ＮａＨＣＯ３のａｑ  ｓａｔ  ｓｏｌで洗浄した。有機相を分離し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、減圧濃縮して、生成物６７（４５ｍｇ、２８％、ジアステレオ異性体の混合物）を無色油状物として得た。
【０３２９】
Ｅ４６．生成物６８の調製
【化２３４】
2021528413.tif 000235
中間体１９（１００ｍｇ、０．３９ｍｍｏｌ）及び中間体８６を出発物質として用い、生成物２の合成について記載したのと同様の手順に従い、生成物６８を調製した。生成物６８をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ、５μｍ、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液  ８０％、ＣＨ３ＣＮ  ２０％から、ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液  ６０％、ＣＨ３ＣＮ  ４０％への勾配）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、生成物６８（１７ｍｇ、１０％、ジアステレオ異性体の混合物）を無色油状物として得た。
【０３３０】
Ｅ４７．生成物６９の調製
【化２３５】
2021528413.tif 000236
中間体１９（１００ｍｇ、０．４６ｍｍｏｌ）及び２，３−ジヒドロ−［１，４］ジオキシノ［２，３−ｂ］ピリジン−６−カルバルデヒド（ＣＡＳ：６１５５６８−２４−６）を出発物質として用い、生成物１の合成について記載したのと同様の手順に従い、生成物６９を調製した。生成物６９をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ、５μｍ、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液  ６０％、ＣＨ３ＣＮ  ４０％から、ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液  ４３％、ＣＨ３ＣＮ  ５７％への勾配）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、生成物６９（１０ｍｇ、６％、ジアステレオ異性体の混合物）を無色油状物として得た。
【０３３１】
Ｅ６２．生成物９９の調製
【化２３６】
2021528413.tif 000237
中間体６１（１１０．３ｍｇ、０．４０４ｍｍｏｌ）及び中間体８６（９５ｍｇ、０．４８４ｍｍｏｌ）を出発物質として用い、生成物２の合成について記載したのと同様の手順に従い、生成物９９を調製した。生成物９９を４９％［２５ｍＭ  ＮＨ４ＨＣＯ３］−５１％［ＭｅＣＮ：ＭｅＯＨ（１：１）］から６％［２５ｍＭ  ＮＨ４ＨＣＯ３］−９４％［ＭｅＣＮ：ＭｅＯＨ（１：１）］への逆相により精製した。所望の画分を集め、６０℃で減圧濃縮した。ＡＣＮ（１０ｍＬ×３回）を添加し、溶媒を減圧濃縮して、生成物９９（６０ｍｇ、３２％、ジアステレオ異性体の混合物）を淡黄色泡状物として得た。生成物９９（６０ｍｇ）をＤＣＭ（２ｍＬ）に溶解し、ＨＣｌ（１，４−ジオキサン中）４Ｎ（２当量）を添加し、溶媒を減圧濃縮し、粗生成物をジエチルエーテルでトリチュレートし、固形物を濾過し、乾燥して、生成物９９（５９ｍｇ、２７％、２×ＨＣｌ塩）を白色固体として得た。
【０３３２】
Ｅ６３．生成物１１０の調製
【化２３７】
2021528413.tif 000238
中間体１０７（９０ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（３．６ｍＬ）溶液を撹拌し、この溶液に中間体１０５（１１７ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）及び炭酸カリウム（１８７ｍｇ、１．３５ｍｍｏｌ）をｒｔで添加した。この混合物を８０℃で終夜撹拌した。水を添加し、混合物をＤＣＭで抽出した。有機層を集め、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、減圧下で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ；アンモニアの７Ｎ  ＭｅＯＨ溶液／ＤＣＭ  ０／１００〜１０／９０）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、生成物１１０（１１０ｍｇ、６１％）を淡黄色油状物として得た。
【０３３３】
Ｅ６４．生成物１１１の調製
【化２３８】
2021528413.tif 000239
中間体１０９（９７ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）及び中間体１０７（８０ｍｇ、０．４ｍｍｏｌ）を出発物質として用い、生成物１１０の合成について記載したのと同様の手順に従い、生成物１１１を調製した。
【０３３４】
Ｅ６５．生成物１１２の調製
【化２３９】
2021528413.tif 000240
中間体１１１（９７ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）及び中間体１０７（８０ｍｇ、０．４ｍｍｏｌ）を出発物質として用い、生成物１１０の合成について記載したのと同様の手順に従い、生成物１１２を調製した。
【０３３５】
Ｅ６６．生成物１１３の調製
【化２４０】
2021528413.tif 000241
中間体１１３（１００ｍｇ、０．５２ｍｍｏｌ）及び中間体１０７（９５ｍｇ、０．４７ｍｍｏｌ）を出発物質として用い、生成物１１０の合成について記載したのと同様の手順に従い、生成物１１３を調製した。生成物１１３をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ、５μｍ、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液  ８０％、ＣＨ３ＣＮ  ２０％から、ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液  ６０％、ＣＨ３ＣＮ  ４０％への勾配）により精製した。所望の画分を集め、有機溶媒を真空中で蒸発させた。得られた水性画分にＥｔＯＡｃを加え、この混合物をＮａＨＣＯ３のｓａｔ  ｓｏｌで洗浄した。有機層を分離し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、減圧濃縮して、生成物１１３（１４２ｍｇ、８４％）を無色油状物として得た。
【０３３６】
Ｅ６７．生成物１１４の調製
【化２４１】
2021528413.tif 000242
中間体１１６（１５０ｍｇ、０．６８ｍｍｏｌ）及び中間体１０７（１２３ｍｇ、０．６１ｍｍｏｌ）を出発物質として用い、生成物１１０の合成について記載したのと同様の手順に従い、生成物１１４を調製した。
【０３３７】
Ｅ６８．生成物１３０、１３１及び１３２の調製
【化２４２】
2021528413.tif 000243
密閉管において、中間体１６（１０２ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ）及び２，３−ジヒドロ−［１，４］ジオキシノ［２，３−ｂ］ピリジン−７−カルバルデヒド（ＣＡＳ：９５８４９−２６−６；１０５ｍｇ、０．６４ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２．５ｍＬ）溶液を撹拌し、この溶液にＴｉ（Ｏｉ−Ｐｒ）４（ＣＡＳ：５４６−６８−９；４５０μＬ、１．５４ｍｍｏｌ）をＮ２雰囲気下で滴下した。この反応混合物を室温で４時間撹拌した。反応混合物を０℃に冷却し、臭化メチルマグネシウム（１．４Ｍ（ＴＨＦ中）、１．８ｍＬ、２．５２ｍｍｏｌ）を５ｍｉｎかけて滴下した。反応混合物を室温で１９時間撹拌した。混合物をＮＨ４Ｃｌ（ｓａｔ溶液）及びＤＣＭで処理した。混合物をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）パッドにより濾過し、ＤＣＭで洗浄した。濾液をＤＣＭで抽出した。合わせた有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２  アミノ官能化ＥｔＯＡｃ／ヘプタン、勾配０／１００〜１００／０）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、生成物１３０（１６１ｍｇ、８８％）を無色油状物として得た。キラルＳＦＣ（固定相：ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＡＤ−Ｈ、５μｍ、２５０×３０ｍｍ、移動相：ＣＯ２  ９０％、ＥｔＯＨ（０．３％ｉ−ＰｒＮＨ２）１０％）により精製して、生成物１３１（５８ｍｇ、３２％）及び生成物１３２（５１ｍｇ、２８％）を淡黄色油状物として得た。
【０３３８】
Ｅ６９．生成物１３３の調製
【化２４３】
2021528413.tif 000244
中間体１７１（９９．２ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ、純度９３％）及びＴｉ（Ｏｉ−Ｐｒ）４（ＣＡＳ：５４６−６８−９；２１８μＬ、０．７４ｍｍｏｌ）を中間体１３４・ＨＣｌ（１５０ｍｇ、０．６２ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（２１２μＬ、１．２３ｍｍｏｌ）のＤＣＥ（３ｍＬ）溶液に添加した。この反応混合物を８０℃で４時間撹拌し、室温に冷却し、シアノ水素化ホウ素ナトリウム（ＣＡＳ：２５８９５−６０−７；５８．０ｍｇ、０．９２ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を７２時間撹拌し、ＮａＨＣＯ３（ｓａｔ．溶液）で反応を停止させ、ＤＣＭで希釈した。エマルションをＣｅｌｉｔｅ（登録商標）パッドで濾過した。濾液をＤＣＭで抽出した。有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ、勾配０／１００〜０５／９５）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮した。ＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ、５μｍ、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３（０．２５％水溶液）／ＣＨ３ＣＮ、勾配８０／２０〜０／１００）により第２の精製を行った。所望の画分を集め、減圧濃縮した。残渣（４５ｍｇ）をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ、勾配０／１００〜５／９５）により精製して、生成物１３３（３５ｍｇ、１５％）を油状物として得た。
【０３３９】
Ｅ７０．生成物１３４の調製
【化２４４】
2021528413.tif 000245
中間体１７５（１７３ｍｇ、１．０３ｍｍｏｌ）及びＴｉ（Ｏｉ−Ｐｒ）４（ＣＡＳ：５４６−６８−９；４１５μＬ、１．４０ｍｍｏｌ）を中間体１３６（２００ｍｇ、０．９３ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（４ｍＬ）溶液に添加し、この反応混合物を室温で１８時間撹拌した。反応混合物を０℃に冷却し、臭化メチルマグネシウム（１．４Ｍ溶液、３．３３ｍＬ、４．６７ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を３時間撹拌した。反応をＭｅＯＨ及び水で停止させ、ＤＣＭで希釈した。エマルションをＣｅｌｉｔｅ（登録商標）パッドで濾過した。濾液をＮＨ４Ｃｌ（ｓａｔ．溶液）で希釈し、ＤＣＭで抽出した。有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ、勾配０／１００〜５／９５）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮した。ＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｃ１８  ５０×１００ｍｍ、５μｍ、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３（０．２５％水溶液）／ＣＨ３ＣＮ、勾配８０／２０〜０／１００）により第２の精製を行って、生成物１３４（２５９ｍｇ、７４％）を得た。
【０３４０】
Ｅ７１．生成物１３５の調製
【化２４５】
2021528413.tif 000246
中間体１３１及び中間体１７８を出発物質として用い、生成物１３４の合成について記載したのと同様の手順に従い、生成物１３５を調製した。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＮＨ３（７Ｎ（ＭｅＯＨ中））／ＤＣＭ、勾配０／１００〜０５／９５）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮した。ＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ、５μｍ、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３（０．２５％水溶液）／ＣＨ３ＣＮ、勾配６７／３３〜５０／５０）により第２の精製を行った。所望の画分を集め、減圧濃縮した。残渣（８０ｍｇ）をｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテルに溶解し、ＨＣｌ（２Ｍ（Ｅｔ２Ｏ中）、２６ｍＬ、５２ｍｍｏｌ）を撹拌しながら加えた。得られた沈殿物を濾過し、この化合物を減圧下、５０℃の炉内で乾燥させて、生成物１３５（８５ｍｇ、１３％）を得た。
【０３４１】
Ｅ７２．生成物１３６の調製
【化２４６】
2021528413.tif 000247
中間体６（１００ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ）の無水ＤＣＭ（１．９８ｍＬ）溶液に中間体１７５（９６．１ｍｇ、０．５８ｍｍｏｌ）及びＴｉ（Ｏｉ−Ｐｒ）４（ＣＡＳ：５４６−６８−９；０．２１ｍＬ、０．７３ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を室温で２０時間撹拌し、０℃に冷却し、臭化メチルマグネシウム（１．４Ｍ（ＴＨＦ中）、１．７３ｍＬ、２．４２ｍｍｏｌ）を滴下した。反応混合物を０℃で５分間、室温で２時間撹拌した。ＮＨ４Ｃｌ（ｓａｔ．溶液）を加え、生成物をＤＣＭで抽出した。有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＮＨ３（７Ｍ（ＭｅＯＨ中））／ＤＣＭ、勾配０／１００〜３０／７０）により精製した。残渣をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ、５μｍ、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３（０．２５％水溶液）／ＣＨ３ＣＮ、勾配９０／１０〜６５／３５）を用いて、生成物１３６（４０．６ｍｇ、２３％）を黄色油状物として得た。
【０３４２】
Ｅ７３．生成物１３７の調製
【化２４７】
2021528413.tif 000248
中間体１及び中間体１７８を出発物質として用い、生成物１３６の合成について記載したのと同様の手順に従い、生成物１３７を調製した。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＮＨ３（７Ｍ（ＭｅＯＨ中））／ＤＣＭ、勾配０／１００〜１０／９０）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で蒸発させて、化合物１３７（６０．４ｍｇ、３３％）を黄色油状物として得た。
【０３４３】
Ｅ７４．生成物１３８の調製
【化２４８】
2021528413.tif 000249
中間体１７５（６６．６ｍｇ、０．４０ｍｍｏｌ）及びＴｉ（Ｏｉ−Ｐｒ）４（ＣＡＳ：５４６−６８−９；０．１７ｍＬ、０．５８ｍｍｏｌ）を中間体７（１００ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ）の溶液に添加し、反応混合物を室温で１６時間撹拌した。反応混合物を０℃に冷却し、臭化メチルマグネシウム（１．４Ｍ溶液、１．３７ｍＬ、１．９２ｍｍｏｌ）を滴下した。この反応混合物を室温で２時間撹拌した。ＮＨ４Ｃｌ（ｓａｔ．溶液）を添加し、混合物をＤＣＭで抽出した。有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＮＨ３（７Ｍ（ＭｅＯＨ中））／ＤＣＭ、勾配０／１００〜１０／９０）によって精製した。所望の画分を収集し、減圧濃縮した。残渣をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ、５μｍ、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３（０．２５％水溶液）／ＣＨ３ＣＮ、勾配５４／４６〜３６／６４）により精製した。残渣をＥｔＯＡｃに溶解し、ＮａＨＣＯ３（ｓａｔ．溶液）で洗浄した。有機層を乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、減圧濃縮して、中間体１３８（９０．３ｍｇ、５６％）を無色油状物として得た。
【０３４４】
Ｅ７５．生成物１３９及び１４０の調製
【化２４９】
2021528413.tif 000250
中間体９及び中間体１７５を出発物質として用い、生成物１３８の合成について記載したのと同様の手順に従い、生成物１３９及び１４０を調製した。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＮＨ３（７Ｍ（ＭｅＯＨ中））／ＤＣＭ、勾配０／１００〜１０／９０）により精製した。キラルＳＦＣ（固定相：ＣＨＩＲＡＣＥＬ  ＯＪ−Ｈ、５μｍ、２５０×３０ｍｍ、移動相：ＣＯ２  ７０％、ＭｅＯＨ（０．３％ｉ−ＰｒＮＨ２）３０％）により精製して、画分Ａ（１０４ｍｇ）及び画分Ｂ（９７ｍｇ）を得た。画分Ａを逆相（固定相：ＹＭＣ−ａｃｔｕｓ  Ｔｒｉａｒｔ  Ｃ１８  １０μｍ、３０×１５０ｍｍ、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３（０．２％（水中））／ＣＨ３ＣＮ、勾配６５／３５〜３５／６５）によりさらに精製して、画分Ａ（６１ｍｇ）を得た。画分Ａ（６１ｍｇ）を減圧下５０℃で１６時間乾燥し、Ｅｔ２Ｏ（０．２ｍＬ）、続いて６Ｎ  ＨＣｌ−ＩＰＡ（０．２ｍＬ）を添加した。この混合物を室温で１６時間撹拌し、溶媒を減圧濃縮した。ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテルを添加し、混合物を１０分間超音波処理した。溶媒を減圧濃縮した。このプロセスを、固体が得られるまで繰り返し、これを真空下で乾燥させて、生成物１３９（５５．３ｍｇ、１３％）を得た。生成物１４０（９７ｍｇ、２３％）を、画分Ｂから出発する同様の手順に従って得た。
【０３４５】
Ｅ７６．生成物１４１、１４２、１４３及び１４４の調製
【化２５０】
2021528413.tif 000251
Ｔｉ（Ｏｉ−Ｐｒ）４（ＣＡＳ：５４６−６８−９；０．３０ｍＬ、１．０２ｍｍｏｌ）を中間体３（２５０ｍｇ、１．０２ｍｍｏｌ）及び中間体８６（２０１ｍｇ、１．０２ｍｍｏｌ）のＤＣＥ（４．１５ｍＬ）中混合物に室温で添加した。密閉管において、この反応混合物を８０℃で１６時間撹拌し、冷却し、シアノ水素化ホウ素ナトリウム（ＣＡＳ：２５８９５−６０−７；７７．２ｍｇ、１．２３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を１時間撹拌し、ＮａＨＣＯ３（ｓａｔ．溶液）で処理した。混合物をＤＣＭで希釈し、Ｃｅｌｉｔｅ（登録商標）により濾過した。有機層を乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃ、勾配０／１００〜１０／９０）により精製した。所望の画分を集め、真空中で蒸発させた。ＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ、５μｍ、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３（０．２５％水溶液）／ＣＨ３ＣＮ、勾配４７／５３〜３０／７０）により第２の精製を行って、生成物の混合物（２１０ｍｇ、４８％）を無色油状物として得た。キラルＳＦＣ（固定相：ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＡＤ−Ｈ、５μｍ、２５０×３０ｍｍ、移動相：ＣＯ２  ９６％、ｉ−ＰｒＯＨ（０．３％ｉ−ＰｒＮＨ２）４％）により精製して、生成物１４４（３３ｍｇ、８％）及び生成物１４１（３１ｍｇ、７％）並びに混合物（７４ｍｇ）を得た。混合物をキラルＳＦＣ（固定相：Ｃｈｉｒａｌｃｅｌ  ＯＤ−Ｈ、５μｍ、２５０×２１．２ｍｍ、移動相：ＣＯ２  ９４％、ｉ−ＰｒＯＨ（０．３％ｉ−ＰｒＮＨ２）６％）により精製して、生成物１４２（３４ｍｇ、８％）及び生成物１４３（３７ｍｇ、９％）を得た。生成物１４４をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ、５μｍ、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３（０．２５％水溶液）／ＣＨ３ＣＮ、勾配４７／５３〜３０／７０）により再度精製して、生成物１４４（２８ｍｇ、６％）を無色油状物として得た。
【０３４６】
Ｅ７７．生成物１４５の調製
【化２５１】
2021528413.tif 000252
密閉管において、中間体１８１（１４９ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（１．７ｍＬ）溶液を撹拌し、この溶液に水酸化リチウム（２６．６ｍｇ、１．１１ｍｍｏｌ）のＨ２Ｏ（１．７ｍＬ）溶液を添加した。この反応混合物を８０℃で１６時間撹拌した。混合物を水で希釈し、ＤＣＭで抽出した。有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＮＨ３（７Ｍ（ＭｅＯＨ中））／ＤＣＭ、勾配０／１００〜３０／７０）により精製した。ＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ、５μｍ、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３（０．２５％水溶液）／ＣＨ３ＣＮ、勾配７５／２５から５７／４３）により第２の精製を行った。残渣をＮａＨＣＯ３（ｓａｔ．溶液）で希釈し、ＤＣＭで抽出した。有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空下で蒸発させて、中間体１４５（３５．４ｇ、２９％）を無色油状物として得た。
【０３４７】
Ｅ７８．生成物１４６の調製
【化２５２】
2021528413.tif 000253
中間体１８２を出発物質として用い、生成物１４５の合成について記載したのと同様の手順に従い、生成物１４６を調製した。残渣をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ、５μｍ、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３（０．２５％水溶液）／ＣＨ３ＣＮ、勾配７５／２５〜５７／４３）により精製した。残渣をＮａＨＣＯ３（ｓａｔ．溶液）で処理し、ＤＣＭで抽出した。有機層を乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させて、生成物１４６（４１．５ｍｇ、収率３２％）を無色油状物として得た。
【０３４８】
Ｅ７９．生成物１４７の調製
【化２５３】
2021528413.tif 000254
生成物１４６（８２．３ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）を室温でＥｔ２Ｏ（３ｍＬ）に溶解し、ＨＣｌ（１Ｍ（Ｅｔ２Ｏ中）、２．３７ｍＬ、２．３７ｍｍｏｌ）を滴下した。この反応混合物を３０分間撹拌した。白色沈殿を濾過し、Ｅｔ２Ｏで洗浄し、５０℃で真空乾燥して、生成物１４７（１０４ｍｇ、６２％）を白色固形物として得た。
【０３４９】
Ｅ８０．生成物１４８の調製
【化２５４】
2021528413.tif 000255
中間体９７（３０．０ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）及びＴｉ（Ｏｉ−Ｐｒ）４（ＣＡＳ：５４６−６８−９；６０．６μＬ、０．２１ｍｍｏｌ）を中間体１（２６．３ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（０．７３ｍＬ）溶液に加え、この反応混合物を８０℃で１２時間撹拌した。反応混合物を室温に冷却し、シアノ水素化ホウ素ナトリウム（ＣＡＳ：２５８９５−６０−７；１２．１ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を２時間撹拌した。ＮａＨＣＯ３（ｓａｔ．溶液）を添加し、混合物をＤＣＭで抽出した。有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＮＨ３（７Ｍ（ＭｅＯＨ中））／ＤＣＭ、勾配０／１００〜３０／７０）により精製した。ＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ、５μｍ、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３（０．２５％水溶液）／ＣＨ３ＣＮ、勾配６７／３３〜５０／５０）により第２の精製を行った。所望の画分を集め、真空中で蒸発させて、生成物１４８（１０ｍｇ、２０％）を無色油状物として得た。
【０３５０】
Ｅ８１．生成物１４９の調製
【化２５５】
2021528413.tif 000256
中間体１０７（４０．０ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）のＣＨ３ＣＮ（１．６ｍＬ）溶液を撹拌し、この溶液に中間体１３１（４１．９ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）及びＫ２ＣＯ３（８３．１ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を８０℃で終夜撹拌した。水を加え、混合物をＤＣＭで抽出した。有機層を乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、真空中で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＮＨ３（７Ｎ（ＭｅＯＨ中））／ＤＣＭ、勾配０／１００〜１０／９０により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、生成物１４９（５５ｍｇ、７８％）を淡黄色油状物として得た。
【０３５１】
Ｅ８２．生成物１５０の調製
【化２５６】
2021528413.tif 000257
中間体１０７及び中間体１３２を出発物質として用い、生成物１４９の合成について記載したのと同様の手順に従い、生成物１５０を調製した。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＮＨ３（７Ｎ（ＭｅＯＨ中））／ＤＣＭ、勾配０／１００〜１０／９０により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、生成物１５０（４２ｍｇ、５９％）を淡黄色油状物として得た。
【０３５２】
Ｅ８３．生成物１５１の調製
【化２５７】
2021528413.tif 000258
中間体１２９及び中間体１を出発物質として用い、生成物１４９の合成について記載したのと同様の手順に従い、生成物１５１を調製した。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＮＨ３（７Ｎ（ＭｅＯＨ中））／ＤＣＭ、勾配０／１００〜１０／９０により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、中間体１５１（４０ｍｇ、４７％）を淡黄色油状物として得た。
【０３５３】
Ｅ８４．生成物１５２、１５３及び１５４の調製
【化２５８】
2021528413.tif 000259
ＤＩＰＥＡ（７０．５ｍＬ、４０９ｍｍｏｌ）を中間体９・２ＨＣｌ（２０．０ｇ、６８．２ｍｍｏｌ）のＣＨ３ＣＮ（２００ｍＬ）懸濁液にＮ２雰囲気下で滴下した。懸濁液は透明な溶液になり、中間体１２９（１５．６ｇ、７１．６ｍｍｏｌ）のＣＨ３ＣＮ（４０ｍＬ）溶液を滴下した。反応混合物を８０℃で２４時間攪拌した。溶媒を真空中で蒸発させた。残渣をＥｔＯＡｃで希釈し、Ｎａ２ＣＯ３（ｓａｔ．溶液）を添加した。有機層を分離し、廃棄した。有機相をＨＣｌ（１Ｎ）で処理した。２相を分離し、有機層を廃棄した。水層をＮａ２ＣＯ３（ｓａｔ．溶液）の添加により塩基性化した。有機層を乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、真空中で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ、勾配０／１００〜８／９２）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、中間体１５２（１８．５７ｇ、６８％）を得た。キラルＳＦＣ（固定相：ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＡＤ−Ｈ、５μｍ、２５０×３０ｍｍ、移動相：ＣＯ２  ８５％、ｉ−ＰｒＯＨ（０．３％ｉ−ＰｒＮＨ２）１５％）により精製して、生成物１５３（９．４５ｇ、３５％）及び生成物１５４（８．５１ｇ、３１％）を得た。生成物１５３を分取ＬＣ（固定相：不定形ＳｉＯＨ  ４０μｍ、１２０ｇ、移動相：ＮＨ４ＯＨ  ０．３％、ＤＣＭ  ９７％、ＭｅＯＨ  ３％）によりさらに精製して、生成物１５３（７．２ｇ、２６％）を得た。
【０３５４】
Ｅ８５．生成物１５５の調製
【化２５９】
2021528413.tif 000260
ＨＣｌ（２Ｎ（Ｅｔ２Ｏ中）、３５．９ｍＬ、７１．８ｍｍｏｌ）を生成物１５３（７．２０ｍｇ、１７．９ｍｍｏｌ）のＥｔ２Ｏ（８０ｍＬ）溶液に加えた。反応混合物を室温で１時間撹拌した。固形物を濾別し、Ｅｔ２Ｏで洗浄し、室温で５日間、５０℃で２４時間乾燥させて、生成物１５５（７．０５ｇ、８３％）を白色固体として得た。
【０３５５】
Ｅ８６．生成物１５６の調製
【化２６０】
2021528413.tif 000261
生成物１５４を出発物質として用い、生成物１５５の合成について記載したのと同様の手順に従い、生成物１５６を調製した。
【０３５６】
Ｅ８７．生成物１５７の調製
【化２６１】
2021528413.tif 000262
ＤＩＰＥＡ（０．１１ｍＬ、０．６５ｍｍｏｌ）を４−クロロ−２，６−ジメチルピリミジン（ＣＡＳ：４４７２−４５−１；６７．９ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）及び中間体１３（１２０ｍｇ、０．４３ｍｍｏｌ）のブタノール（７．８９ｍＬ）中混合物に添加した。反応混合物を１００℃で２０時間撹拌した。溶媒を除去した。残渣をＤＣＭに溶解し、ＮａＨＣＯ３（ｓａｔ．溶液）を添加した。層を分離し、水相をＤＣＭで抽出した。合わせた有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン、勾配０／１００〜５０／５０）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、赤色の油状物として得た（９３ｍｇ）。この物質をＤＣＭ中に取り、ＨＣｌ（４Ｎ（１，４−ジオキサン中）、８５μＬ）で処理した。溶媒を真空中で蒸発させ、生成物をＥｔ２Ｏでトリチュレートして、生成物１５７（８１ｍｇ、４４％）を淡赤色固体として得た。
【０３５７】
Ｅ８８．生成物１５８及び１５９の調製
【化２６２】
2021528413.tif 000263
中間体１０７（３２９ｍｇ、１．６５ｍｍｏｌ）をＣＨ３ＣＮ（１３．２ｍＬ）に溶解し、中間体１３１（３４５ｍｇ、１．８１ｍｍｏｌ）、続いてＫ２ＣＯ３（６８３ｍｇ、４．９５ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を８０℃で終夜撹拌した。水を加え、混合物をＤＣＭで抽出した。合わせた有機層を乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、真空中で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＮＨ３（７Ｎ（ＭｅＯＨ中））／ＤＣＭ、勾配０／１００〜１０／９０）により精製した。精製を３回繰り返した。所望の画分を集め、減圧濃縮した。キラルＳＦＣ（固定相：ＣＨＩＲＡＣＥＬ  ＯＪ−Ｈ、５μｍ、２５０×２０ｍｍ、移動相：ＣＯ２  ８５％、ＭｅＯＨ（０．３％ｉ−ＰｒＮＨ２）１５％）により精製して、画分Ａ（１７０ｍｇ）及び画分Ｂ（１７３ｍｇ）を得た。画分Ａ（１７０ｍｇ）及び画分Ｂ（１７３ｍｇ）を個々にＥｔ２Ｏ（０．２ｍＬ）で希釈し、６Ｎ  ＨＣｌ−ＩＰＡ（０．２ｍＬ）を加えた。この混合物を室温で１６時間撹拌した。溶媒を真空中で蒸発させた。ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテルを添加し、混合物を１０分間超音波処理した。溶媒を真空中で蒸発させた。固体が得られるまでこのプロセスを繰り返し、これを６日間真空乾燥して、生成物１５８（１６０ｍｇ、２３％）及び生成物１５９（１６３ｍｇ、２３％）を得た。
【０３５８】
Ｅ８９．生成物１６０及び１６１の調製
【化２６３】
2021528413.tif 000264
中間体１０７及び中間体１３２を出発物質として用い、生成物１５８及び１５９の合成について記載したのと同様の手順に従い、生成物１６０及び１６１を調製した。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＮＨ３（７Ｎ（ＭｅＯＨ中））／ＤＣＭ、勾配０／１００〜１０／９０）により精製した。精製を３回繰り返した。所望の画分を集め、減圧濃縮した。キラルＳＦＣ（固定相：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  ＩＣ、５μｍ、２５０×２１．２ｍｍ、移動相：ＣＯ２  ６５％、ｉ−ＰｒＯＨ（０．３％ｉ−ＰｒＮＨ２）３５％）により精製して、画分Ａ（１５２ｍｇ）及び画分Ｂ（１６２ｍｇ）を得た。画分ＢをキラルＳＦＣ（固定相：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  ＩＣ、５μｍ、２５０×２１．２ｍｍ、移動相：ＣＯ２  ６５％、ｉ−ＰｒＯＨ（０．３％ｉ−ＰｒＮＨ２）３５％）により再度精製して、１６０ｍｇを得た。画分Ａ（１５２ｍｇ）及び画分Ｂ（１６０ｍｇ）をＥｔ２Ｏ（０．２ｍＬ）で希釈し、６Ｎ  ＨＣｌ−ＩＰＡ（０．２ｍＬ）を加えた。これらの混合物を室温で１６時間撹拌した。溶媒を真空中で蒸発させた。ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテルを添加し、混合物を１０分間超音波処理した。溶媒を真空中で蒸発させた。このプロセスを、固体が得られるまで繰り返し、これを真空乾燥して、生成物１６０（１９７ｍｇ、３３％）及び生成物１６１（１７７ｍｇ、２９％）を淡黄色固体として得た。
【０３５９】
Ｅ９０．生成物１６２及び１６３の調製
【化２６４】
2021528413.tif 000265
中間体１０７及び中間体１１６を出発物質として用い、生成物１５８及び１５９の合成について記載したのと同様の手順に従い、生成物１６２及び１６３を調製した。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＮＨ３（７Ｎ（ＭｅＯＨ中））／ＤＣＭ、勾配０／１００〜１０／９０）により精製した。精製を３回繰り返した。所望の画分を集め、減圧濃縮した。キラルＳＦＣ（固定相：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  ＩＣ、５μｍ、２５０×２１．２ｍｍ、移動相：ＣＯ２  ７０％、ｉ−ＰｒＯＨ（０．３％ｉ−ＰｒＮＨ２）３０％）により精製して、生成物１６３（７０ｍｇ、３０％）及び生成物１６２（７０ｍｇ、３０％）を得た。生成物１６２をキラルＳＦＣ（固定相：ＣＨＩＲＡＣＥＬ  ＯＪ−Ｈ、５μｍ、２５０×２０ｍｍ、移動相：ＣＯ２  ８５％、ＭｅＯＨ（０．３％ｉ−ＰｒＮＨ２）１５％）により第２の精製をして、生成物１６２（６０ｍｇ、２５％）を得た。生成物１６３（７０ｍｇ）をＥｔ２Ｏ（０．１ｍＬ）で希釈し、６Ｎ  ＨＣｌ−ＩＰＡ（０．１ｍＬ）を加えた。この混合物を室温で１６時間撹拌した。溶媒を真空中で蒸発させた。ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテルを添加し、混合物を１０分間超音波処理した。溶媒を真空中で蒸発させた。このプロセスを、固体が得られるまで繰り返し、これを真空乾燥した。残渣をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ、５μｍ、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３（０．２５％水溶液）／ＣＨ３ＣＮ、勾配８０／２０〜０／１００）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮した。残渣をＥｔＯＡｃに溶解し、ＮａＨＣＯ３（ｓａｔ．溶液）で洗浄した。有機層を乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、減圧濃縮して、生成物１６３（１４ｍｇ、６％）を得た。同じ処理を生成物１６２（６０ｍｇ）に適用して、生成物１６２（２２ｍｇ、９％）を得た。
【０３６０】
Ｅ９１．生成物１６４及び１６５の調製
【化２６５】
2021528413.tif 000266
中間体１２９及び中間体１を出発物質として用い、生成物１５８及び１５９の合成について記載したのと同様の手順に従い、生成物１６４及び１６５を調製した。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＮＨ３（７Ｎ（ＭｅＯＨ中））／ＤＣＭ、勾配０／１００〜１０／９０）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮した。ＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ、５μｍ、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３（０．２５％水溶液）／ＣＨ３ＣＮ、勾配８０／２０〜６０／４０）により第２の精製を行った。所望の画分を集め、減圧濃縮した。残渣をＥｔＯＡｃに溶解し、ＮａＨＣＯ３（ｓａｔ．溶液）で洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、減圧濃縮して、画分Ａ（５７．１ｍｇ）及び画分Ｂ（４３．４ｍｇ）を無色油状物として得た。画分Ａ（５７．１ｍｇ）及び画分Ｂ（４３．４ｍｇ）をＥｔ２Ｏ（０．１ｍＬ）に溶解し、次いで７Ｎ  ＨＣｌ−ＩＰＡ（０．１ｍＬ）を添加した。これらの混合物を室温で１６時間撹拌した。溶媒を真空中で蒸発させた。ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテルを添加し、混合物を１０分間超音波処理した。溶媒を真空中で蒸発させた。このプロセスを、固体が得られるまで繰り返し、これを真空乾燥して、生成物１６４（４９ｍｇ、３０％）及び生成物１６５（６８ｍｇ、４２％）を得た。
【０３６１】
Ｅ９２．生成物１６６及び１６７の調製
【化２６６】
2021528413.tif 000267
中間体１０７及び中間体１０９を出発物質として用い、生成物１５８及び１５９の合成について記載したのと同様の手順に従い、生成物１６６及び１６７を調製した。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＮＨ３（７Ｎ（ＭｅＯＨ中））／ＤＣＭ、勾配０／１００〜１０／９０）により精製した（２回）。所望の画分を集め、減圧濃縮した。キラルＳＦＣ（固定相：ＣＨＩＲＡＣＥＬ  ＯＪ−Ｈ、５μｍ、２５０×２０ｍｍ、移動相：ＣＯ２  ８５％、ＭｅＯＨ（０．３％ｉ−ＰｒＮＨ２）１５％）により精製して、画分Ａ（３０ｍｇ）及び画分Ｂ（２６ｍｇ）を得た。画分Ａ（３０ｍｇ）及び画分Ｂ（２６ｍｇ）をＥｔ２Ｏ（０．１ｍＬ）に溶解し、７Ｎ  ＨＣｌ−ＩＰＡ（０．１ｍＬ）を加えた。これらの混合物を室温で１６時間撹拌した。溶媒を真空中で蒸発させた。ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテルを添加し、混合物を１０分間超音波処理した。溶媒を真空中で蒸発させた。固体が得られるまでこのプロセスを繰り返し、これを５０℃で７２時間真空乾燥して、生成物１６６（２６ｍｇ、１４％）及び生成物１６７（２８ｍｇ、１５％）を淡褐色固体として得た。
【０３６２】
Ｅ９３．生成物１６８、１６９及び１７０の調製
【化２６７】
2021528413.tif 000268
中間体１２９及び中間体１０９を出発物質として用い、生成物１５８及び１５９の合成について記載したのと同様の手順に従い、生成物１６８、１６９及び１７０を調製した。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＮＨ３（７Ｎ（ＭｅＯＨ中））／ＤＣＭ、勾配０／１００〜１０／９０）により精製した（２回）。所望の画分を集め、減圧濃縮した。残渣をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ、５μｍ、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３（０．２５％水溶液）／ＣＨ３ＣＮ、勾配８０／２０〜０／１００）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮した。残渣をＥｔＯＡｃに溶解し、ＮａＨＣＯ３（ｓａｔ．溶液）で洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、減圧濃縮して、生成物１６８（８８．４ｍｇ、３７％）を黄色油状物として得た。キラルＳＦＣ（固定相：ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＡＤ−Ｈ、５μｍ、２５０×３０ｍｍ、移動相：ＣＯ２  ８４％、ｉ−ＰｒＯＨ（０．３％ｉ−ＰｒＮＨ２）１６％）により精製して、画分Ａ（３７ｍｇ）及び画分Ｂ（３８ｍｇ）を得た。画分Ａ（３７ｍｇ）及び画分Ｂ（３８ｍｇ）をＥｔ２Ｏ（０．２ｍＬ）に溶解し、７Ｎ  ＨＣｌ−ＩＰＡ（０．２ｍＬ）を加えた。これらの混合物を室温で１６時間撹拌した。溶媒を真空中で蒸発させた。ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテルを添加し、混合物を１０分間超音波処理した。溶媒を真空中で蒸発させた。固体が得られるまでこのプロセスを繰り返し、これらを５０℃で５間真空乾燥して、生成物１６９（４１．９ｍｇ、１５％）及び生成物１７０（４３．６ｍｇ、１６％）を得た。
【０３６３】
Ｅ９４．生成物１７１の調製
【化２６８】
2021528413.tif 000269
Ｋ２ＣＯ３（２８３ｍｇ、２．０５ｍｍｏｌ）を中間体１８０（１３８ｍｇ、０．６８ｍｍｏｌ）及び中間体１３１（１３０ｍｇ、０．６８ｍｍｏｌ）のＣＨ３ＣＮ（４ｍＬ）中混合物に添加した。この反応混合物を７０℃で４８時間撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、Ｃｅｌｉｔｅ（登録商標）により濾過し、ＥｔＯＡｃで洗浄し、濾液を真空中で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＮＨ３（７Ｎ（ＭｅＯＨ中））／ＤＣＭ、勾配０／１００〜０４／９６）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、生成物１７１（１７０ｍｇ、７０％）を油状物として得た。
【０３６４】
Ｅ９５．生成物１７２の調製
【化２６９】
2021528413.tif 000270
中間体１４２及び中間体１０７を出発物質として用い、生成物１７１の合成について記載したのと同様の手順に従い、生成物１７２を調製した。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＮＨ３（７Ｎ（ＭｅＯＨ中））／ＤＣＭ、勾配０／１００〜０５／９５）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、生成物１７２（２００ｍｇ、８２％）を油状物として得た。
【０３６５】
Ｅ９６．生成物１７３の調製
【化２７０】
2021528413.tif 000271
中間体１４４及び中間体１０７を出発物質として用い、生成物１７１の合成について記載したのと同様の手順に従い、生成物１７３を調製した。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＮＨ３（７Ｎ（ＭｅＯＨ中））／ＤＣＭ、勾配０／１００〜０４／９６）により精製した。所望の画分を回収し、減圧濃縮して、生成物１７３（２００ｍｇ、収率９６％）を油状物として得た。
【０３６６】
Ｅ９７．生成物１７４、１７５、１７４．２ＨＣｌ及び１７５．２ＨＣｌの調製
【化２７１】
2021528413.tif 000272
中間体１２９（２００ｍｇ、０．９２ｍｍｏｌ）のＣＨ３ＣＮ（８ｍＬ）溶液を撹拌し、この溶液に中間体１６２（２０４ｍｇ、０．９２ｍｍｏｌ）及びＫ２ＣＯ３（３８１ｍｇ、２．７６ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を７５℃で３６時間撹拌し、水で処理し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、真空中で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ、勾配０／１００〜１０／９０）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、ラセミ混合物（１６５ｍｇ、４４％）を得た。この混合物をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ、５μｍ、移動相：［０．１％ＮＨ４ＣＯ３Ｈ／ＮＨ４ＯＨのｐＨ９水溶液］／ＣＨ３ＣＮ、勾配６７／３３〜５０／５０）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、生成物１７４（７８ｍｇ、２１％）及び生成物１７５（７３ｍｇ、２０％）を油状物として得た。塩酸塩を生成するために、ＨＣｌ（６Ｍ（ｉ−ＰｒＯＨ中）、０．５ｍＬ、３ｍｍｏｌ）を生成物１７４（７８ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ）に添加した。この反応混合物を１時間、室温で撹拌した。溶媒を真空中で蒸発させた。粗混合物をＤＩＰＥで処理し、２時間撹拌した。固体を濾過して生成物１７４．２ＨＣｌ（７２ｍｇ、７８％）を白色固体として得た。生成物１７５．２ＨＣｌを同様の手順に従って調製した。
【０３６７】
Ｅ．９８  生成物１７６、１７７、１７６．２ＨＣｌ及び１７７．２ＨＣｌの調製
【化２７２】
2021528413.tif 000273
中間体１０７及び中間体１６２を出発物質として用い、生成物１７４及び１７５の合成について記載したのと同様の手順に従い、生成物１７６及び１７７を調製した。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ、勾配０／１００〜１０／９０）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、ラセミ混合物（１３０ｍｇ、３６％）を得た。この混合物をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ、５μｍ、移動相：［０．１％ＮＨ４ＣＯ３Ｈ／ＮＨ４ＯＨのｐＨ９水溶液］／ＣＨ３ＣＮ、勾配６７／３３〜５０／５０）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、生成物１７６（６７ｍｇ、１８％）及び生成物１７７（５４ｍｇ、１５％）を油状物として得た。
【０３６８】
塩酸塩を生成するために、ＨＣｌ（６Ｍ（Ｅｔ２Ｏ中）、０．５ｍＬ、３．０ｍｍｏｌ）を生成物１７６（６２ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）のＥｔ２Ｏ（２ｍＬ）溶液に加えた。この反応混合物を室温で２時間撹拌し、溶媒を真空中で蒸発させた。残渣をＥｔ２Ｏで洗浄し（数回）、濾過し、真空乾燥して、生成物１７６．２ＨＣｌ（４４．６ｍｇ、６０％）を白色固体として得た。生成物１７７．２ＨＣｌを同様の手順に従って調製した。
【０３６９】
Ｅ９９．生成物１７８、１７９及び１８０の調製
【化２７３】
2021528413.tif 000274
Ｋ２ＣＯ３（７５３ｍｇ、５．４５ｍｍｏｌ）を中間体９（４００ｍｇ、１．８２ｍｍｏｌ）及び中間体１８０（３６６ｍｇ、１．８２ｍｍｏｌ）のＣＨ３ＣＮ（２５ｍＬ）中混合物に添加した。この反応混合物を７０℃で３６時間攪拌した。反応混合物を水で希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空下で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ、勾配０／１００〜５／９５）により精製した。所望の画分を集め、溶媒を真空中で蒸発させた。残渣をＤＩＰＥでトリチュレートし、固体を濾過して、生成物１７８（３７０ｍｇ、５０％）をクリーム色の固体として得た。生成物１７８をキラルＳＦＣ（固定相：ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＡＤ−Ｈ、５μｍ、２５０×３０ｍｍ、移動相：ＣＯ２  ８８％、ｉ−ＰｒＯＨ（０．３％ｉ−ＰｒＮＨ２）１２％）により精製して、画分Ａ（１３６ｍｇ）及び画分Ｂ（１６６ｍｇ）を得た。ＤＩＰＥ（３ｍＬ）を画分Ａ（１３６ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ）に加えた。この混合物を２４時間、室温で撹拌した。粗混合物を濾過して、生成物１７９（１１０ｍｇ、８１％）をクリーム色の固体として得た。ＨＣｌ（１Ｍ（Ｅｔ２Ｏ中、０．４５ｍＬ、０．４５ｍｍｏｌ）を画分Ｂ（１６６ｍｇ、０．４３ｍｍｏｌ）のＥｔ２Ｏ（５．２ｍＬ）溶液に加えた。この混合物を室温で３０分間撹拌した。粗混合物を濾過して、生成物１８０（８０ｍｇ、４１％）をクリーム色の固体として得た。
【０３７０】
Ｅ１００．生成物１８１の調製
【化２７４】
2021528413.tif 000275
Ｎ２を４−ブロモ−２，６−ジメチルピリジン（ＣＡＳ：５０９３−７０−９；１０７ｍｇ、０．５７ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（脱気、６ｍＬ）溶液にバブリングした。Ｎ２をバブリングしながら、ＮａＯｔ−Ｂｕ（１１０ｍｇ、１．１５ｍｍｏｌ）、ＤａｖｅＰｈｏｓ（１４．７ｍｇ、３７．３μｍｏｌ）及びＰｄ２ｄｂａ３（１５．８ｍｇ、１７．２μｍｏｌ）を室温で添加した。中間体１８６（１７８ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を密閉管において１００℃で終夜撹拌した。この反応混合物をＮＨ４Ｃｌで希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＮＨ３（７Ｍ（ＭｅＯＨ中））／ＤＣＭ、勾配０／１００〜２／９８）により精製した。所望の画分を回収し、減圧濃縮して、中間体１８１（８０ｍｇ、収率３５％）を黄色固体として得た。
【０３７１】
Ｅ１０１．生成物１８２の調製
【化２７５】
2021528413.tif 000276
４−ブロモ−２−メトキシ−６−メチルピリジン（ＣＡＳ：１０８３１６９−００−９）及び中間体１８６を出発物質として用い、生成物１８１の合成について記載したのと同様の手順に従い、生成物１８２を調製した。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＮＨ３（７Ｍ（ＭｅＯＨ中））／ＤＣＭ、勾配０／１００〜１／９９）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、中間体１８２（１４１ｍｇ、５９％）を黄色固体として得た。
【０３７２】
Ｅ１０２．生成物１８３及び１８４の調製
【化２７６】
2021528413.tif 000277
中間体１０７（５０．０ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）のＣＨ３ＣＮ（２ｍＬ）溶液を撹拌し、この溶液に中間体１０５（６５．１ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）及びＫ２ＣＯ３（１０４ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を８０℃で終夜撹拌した。水を加え、混合物をＤＣＭで抽出した。有機層を乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、真空中で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＮＨ３（７Ｍ（ＭｅＯＨ中））／ＤＣＭ、勾配０／１００〜１０／９０）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、ラセミ混合物を得た。キラルＳＦＣ（固定相：ＣＨＩＲＡＣＥＬ  ＯＪ−Ｈ、５μｍ、２５０×２０ｍｍ、移動相：ＣＯ２  ８０％、ＭｅＯＨ（０．３％ｉ−ＰｒＮＨ２）２０％）により精製して、生成物１８３（１７ｍｇ、１７％）及び生成物１８４（１１ｍｇ、１１％）を得た。
【０３７３】
Ｅ１０３．生成物１８５及び１８６の調製
【化２７７】
2021528413.tif 000278
中間体１５０（９０ｍｇ、０．４３ｍｍｏｌ）のＣＨ３ＣＮ（２．２５ｍＬ）溶液を撹拌し、この溶液に中間体１０７（９４．９ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）及びＫ２ＣＯ３（１７９ｍｇ、１．３０ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を８０℃で１８時間撹拌した。水を加え、混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機相を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、真空中で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ、勾配０／１００〜１０／９０）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮した。残渣をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ、５μｍ、移動相：［０．１％ＮＨ４ＣＯ３Ｈ／ＮＨ４ＯＨのｐＨ９水溶液］／ＣＨ３ＣＮ、勾配６７／３３〜５０／５０）により精製して、生成物１８５（８ｍｇ、５％）及び生成物１８６（２０ｍｇ、１２％）を得た。
【０３７４】
Ｅ１０４．生成物１８７の調製
【化２７８】
2021528413.tif 000279
中間体１４７及び中間体１２９を出発物質として用い、生成物１８５及び１８６の合成について記載したのと同様の手順に従い、生成物１８７を調製した。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ、勾配０／１００〜１０／９０）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮した。ＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ、５μｍ、移動相：［０．１％ＮＨ４ＣＯ３Ｈ／ＮＨ４ＯＨのｐＨ９水溶液］／ＣＨ３ＣＮ、勾配６７／３３〜５０／５０）により第２の精製を行った。所望の画分を集め、減圧濃縮して、生成物１８７（１４７ｍｇ、８２％）を淡黄色固体として得た。
【０３７５】
Ｅ１０５．生成物１８８の調製
【化２７９】
2021528413.tif 000280
中間体１４７及び中間体１０７を出発物質として用い、生成物１８５及び１８６の合成について記載したのと同様の手順に従い、生成物１８８を調製した。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ、勾配０／１００〜１０／９０）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮した。ＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ、５μｍ、移動相：［０．１％ＮＨ４ＣＯ３Ｈ／ＮＨ４ＯＨのｐＨ９水溶液］／ＣＨ３ＣＮ、勾配６７／３３〜５０／５０）により第２の精製を行った。所望の画分を集め、減圧濃縮して、生成物１８８（１０９ｍｇ、６３％）を淡黄色固体として得た。
【０３７６】
Ｅ１０６．生成物１８９の調製
【化２８０】
2021528413.tif 000281
中間体１５０（８０．０ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２．８１ｍＬ）溶液を撹拌し、この溶液に中間体１００（９０．９ｍｇ、０．４６ｍｍｏｌ）及びＴｉ（Ｏｉ−Ｐｒ）４（ＣＡＳ：５４６−６８−９；０．１７ｍＬ、０．５８ｍｍｏｌ）をＮ２雰囲気下、室温で添加した。この反応混合物を８０℃で終夜撹拌し、室温に冷却し、シアノ水素化ホウ素ナトリウム（ＣＡＳ：２５８９５−６０−７；２８．９ｍｇ、０．４６ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を８０℃で２４時間撹拌した。混合物を水で希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。残渣をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ、５μｍ、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３（０．２５％水溶液）／ＣＨ３ＣＮ、勾配６７／３３〜５０／５０）により精製した。生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ、勾配０／１００〜５／９５）によりさらに精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、生成物１８９（３０ｍｇ、２０％）を淡黄色固体として得た。
【０３７７】
Ｅ１０７．生成物１９０の調製
【化２８１】
2021528413.tif 000282
密閉管において、ＨＣｌ（４Ｍ（１，４−ジオキサン中）、０．４２ｍＬ、１．６８ｍｍｏｌ）を中間体１８８（７７．９ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（１．３ｍＬ）溶液に室温で添加した。反応混合物を室温で４時間撹拌し、減圧濃縮した。粗混合物をイオン交換クロマトグラフィー（ＩＳＯＬＵＴＥ  ＳＣＸ２カートリッジ）により精製した。生成物をＭｅＯＨ、次いでＮＨ３（７Ｎ（ＭｅＯＨ中））で溶出した。所望の画分を集め、減圧濃縮して、生成物１９０（４５．５ｍｇ、７４％）を白色固体として得た。
【０３７８】
Ｅ１０８．生成物１９１の調製
【化２８２】
2021528413.tif 000283
中間体１８９を出発物質として用い、生成物１９０の合成について記載したのと同様の手順に従い、生成物１９１を調製した。粗混合物をイオン交換クロマトグラフィー（ｉｓｏｌｕｔｅ  ＳＣＸ２カートリッジ）により精製した。生成物をＭｅＯＨ、次いでＮＨ３（７Ｎ（ＭｅＯＨ中））で溶出した。所望の画分を集め、減圧濃縮した。ＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ、５μｍ、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３（０．２５％水溶液）／ＣＨ３ＣＮ、勾配６７／３３〜５０／５０）により第２の精製を行って、生成物１９１（２０ｍｇ、３３％）を得た。
【０３７９】
Ｅ１０９．生成物１９２の調製
【化２８３】
2021528413.tif 000284
中間体１０７（９２．０ｍｇ、０．４６ｍｍｏｌ）を中間体１５２（８５ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ）及びＫ２ＣＯ３（１０６ｍｇ、０．７７ｍｍｏｌ）のＣＨ３ＣＮ（５ｍＬ）溶液に加えた。この反応混合物を６０℃で２０時間撹拌した。溶媒を除去し、粗生成物を逆相（［２５ｍＭ  ＮＨ４ＨＣＯ３］／［ＣＨ３ＣＮ／ＭｅＯＨ，１／１］、勾配７０／３０〜２７／７３）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮した。残渣（１３０ｍｇ）をＤＣＭに取り、ＨＣｌ（４Ｎ（１，４−ジオキサン中）、２当量）で処理した。溶媒を真空中で蒸発させ、生成物をＥｔ２Ｏでトリチュレートして、生成物１９２（１２８ｍｇ、７３％）を白色固体として得た。
【０３８０】
Ｅ１１０．生成物１９３の調製
【化２８４】
2021528413.tif 000285
中間体１２９（１１９ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ）を中間体１６８（１００ｍｇ、０．４６ｍｍｏｌ）及びＫ２ＣＯ３（１２６ｍｇ、０．９１ｍｍｏｌ）のＣＨ３ＣＮ（５ｍＬ）溶液に加えた。この反応混合物を７５℃で４８時間撹拌した。溶媒を除去し、粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ、勾配０／１００〜４／９６）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮した。生成物をＥｔ２Ｏでトリチュレートした。残渣（１４０ｍｇ）をＤＣＭに取り、ＨＣｌ（４Ｎ（１，４−ジオキサン中）、１当量）で処理した。溶媒を真空中で蒸発させ、生成物をＤＩＰＥでトリチュレートして、生成物１９３（１３２ｍｇ、６６％）を、ピンク色を帯びた固体として得た。
【０３８１】
Ｅ１１１．生成物１９４の調製
【化２８５】
2021528413.tif 000286
中間体１６８及び中間体１０７を出発物質として用い、生成物１９３の合成について記載したのと同様の手順に従い、生成物１９４を調製した。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ、勾配０／１００〜４／９６）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮し、生成物をＥｔ２Ｏでトリチュレートした。残渣（１２０ｍｇ）をＤＣＭに取り、ＨＣｌ（４Ｎ（１，４−ジオキサン中）、１当量）で処理した。溶媒を真空中で蒸発させ、生成物をＤＩＰＥでトリチュレートして、生成物１９４（１１５ｍｇ、５９％）を、ピンク色を帯びた固体として得た。
【０３８２】
Ｅ１１２．生成物１９５の調製
【化２８６】
2021528413.tif 000287
中間体１２９（１００ｍｇ、０．４６ｍｍｏｌ）を中間体１５４（７９．７ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ）及びＫ２ＣＯ３（１０６ｍｇ、０．７７ｍｍｏｌ）のＣＨ３ＣＮ（３．３ｍＬ）溶液に加えた。この反応混合物を７５℃で２４時間撹拌した。溶媒を除去し、粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン、勾配０／１００〜８０／２０）により精製した。逆相クロマトグラフィー（［０．１％ＨＣＯＯＨ］／［ＣＨ３ＣＮ／ＭｅＯＨ、勾配１／１］）９５／５〜６３／３７）により第２の精製を行った。所望の画分を集め、減圧濃縮して、生成物１９５（６３ｍｇ、４２％）を無色の油状物として得た。
【０３８３】
Ｅ１１３．生成物１９６の調製
【化２８７】
2021528413.tif 000288
中間体１５６及び中間体１２９を出発物質として用い、生成物１９５の合成について記載したのと同様の手順に従い、生成物１９６を調製した。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ、勾配０／１００〜４／９６）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮した。残渣（６２ｍｇ）をＤＣＭに取り、ＨＣｌ（４Ｎ（１，４−ジオキサン中）、１当量）で処理した。溶媒を真空中で蒸発させ、生成物をＥｔ２Ｏでトリチュレートして、生成物１９６（３８ｍｇ、２３％）を白色固体として得た。
【０３８４】
Ｅ１１４．生成物１９７の調製
【化２８８】
2021528413.tif 000289
中間体１０７及び中間体１５６を出発物質として用い、生成物１９５の合成について記載したのと同様の手順に従い、生成物１９７を調製した。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン、勾配０／１００〜２０／８０）により精製した。逆相クロマトグラフィー（［２５ｍＭ  ＮＨ４ＨＣＯ３］／［ＭｅＣＮ／ＭｅＯＨ、１／１］、勾配７２／２８〜３６／６４）により第２の精製を行った。所望の画分を集め、減圧濃縮した。残渣（６５ｍｇ）をＤＣＭに取り、ＨＣｌ（４Ｎ（１，４−ジオキサン中）、２当量）で処理した。溶媒を真空中で蒸発させ、生成物をＥｔ２Ｏでトリチュレートして、生成物１９７（４２ｍｇ、２０％）を白色固体として得た。
【０３８５】
Ｅ１１５．生成物１９８の調製
【化２８９】
2021528413.tif 000290
中間体１９０（１７１ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（０．９３ｍＬ）及びＨ２Ｏ（０．３４ｍＬ）の溶液を撹拌し、この溶液にＫ２ＣＯ３（１４３ｍｇ、１．０４ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を６０℃で６時間撹拌し、溶媒を真空中で蒸発させた。この混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。粗混合物を逆相（［２５ｍＭ  ＮＨ４ＨＣＯ３］／［ＣＨ３ＣＮ／ＭｅＯＨ、１／１］、勾配７２／２８〜３６／６４）により精製した。所望の画分を集め、減圧濃縮した。残渣（４５ｍｇ）をＤＣＭに取り、ＨＣｌ（４Ｎ（１，４−ジオキサン中）、１当量）で処理した。溶媒を真空中で蒸発させ、生成物をＥｔ２Ｏでトリチュレートして、生成物１９８（３２．７ｍｇ、２２％）を白色固体として得た。
【０３８６】
以下の化合物を、実験の部で例示した方法に従って調製した。塩形態が示されていない場合、その化合物は、遊離塩基として得た。「Ｅｘ．Ｎｏ．」は、実施例番号を指し、そのプロトコルに従って化合物を合成した。「Ｃｏ．Ｎｏ．」は、化合物番号を意味する。
【０３８７】
【表１】
2021528413.tif 000291
【０３８８】
【表２】
2021528413.tif 000292
【０３８９】
【表３】
2021528413.tif 000293
【０３９０】
【表４】
2021528413.tif 000294
【０３９１】
【表５】
2021528413.tif 000295
【０３９２】
【表６】
2021528413.tif 000296
【０３９３】
【表７】
2021528413.tif 000297
【０３９４】
【表８】
2021528413.tif 000298
【０３９５】
【表９】
2021528413.tif 000299
【０３９６】
【表１０】
2021528413.tif 000300
【０３９７】
【表１１】
2021528413.tif 000301
【０３９８】
【表１２】
2021528413.tif 000302
【０３９９】
【表１３】
2021528413.tif 000303
【０４００】
【表１４】
2021528413.tif 000304
【０４０１】
【表１５】
2021528413.tif 000305
【０４０２】
【表１６】
2021528413.tif 000306
【０４０３】
【表１７】
2021528413.tif 000307
【０４０４】
【表１８】
2021528413.tif 000308
【０４０５】
【表１９】
2021528413.tif 000309
【０４０６】
【表２０】
2021528413.tif 000310
【０４０７】
【表２１】
2021528413.tif 000311
【０４０８】
【表２２】
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【０４０９】
【表２３】
2021528413.tif 000313
【０４１０】
【表２４】
2021528413.tif 000314
【０４１１】
【表２５】
2021528413.tif 000315
【０４１２】
【表２６】
2021528413.tif 000316
【０４１３】
【表２７】
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【０４１４】
【表２８】
2021528413.tif 000318
【０４１５】
【表２９】
2021528413.tif 000319
【０４１６】
【表３０】
2021528413.tif 000320
【０４１７】
【表３１】
2021528413.tif 000321
【０４１８】
本明細書で提供される化合物中の塩の化学量論又は酸含量の値は、実験的に得られた値である。本明細書で報告する塩酸の含有量は、１Ｈ  ＮＭＲ積分及び／又は元素分析により決定された。
【０４１９】
分析の部
融点
値は、ピーク値であり、得られる値は、この分析法に通常付随する実験的不確実性を伴っている。
【０４２０】
ＤＳＣ８２３ｅ（Ａ）：いくつかの化合物について、融点をＤＳＣ８２３ｅ（Ｍｅｔｔｌｅｒ−Ｔｏｌｅｄｏ）装置で決定した。融点は、１０℃／分の温度勾配で測定した。最高温度を３００℃とした。値は、ピーク値である（Ａ）。
【０４２１】
Ｍｅｔｔｌｅｒ  Ｔｏｌｅｄｏ  ＭＰ５０（Ｂ）：いくつかの化合物について、融点をＭｅｔｔｌｅｒ  ＦＰ  ８１ＨＴ／ＦＰ９０装置上のオープンキャピラリーチューブ内で決定した。融点は、１℃／分、３℃／分、５℃／分又は１０℃／分の温度勾配で測定した。最高温度は、３００℃とした。融点は、デジタル表示装置から読み取った。
【０４２２】
ＬＣＭＳ
一般手順
高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）測定は、それぞれの方法に記載したＬＣポンプ、ダイオードアレイ検出器（ＤＡＤ）又はＵＶ検出器及びカラムを使用して行った。必要に応じて追加の検出器を含めた（下の方法の表を参照されたい）。
【０４２３】
カラムからの流れは、大気圧イオン源を装備した質量分析計（ＭＳ）に導入した。化合物の公称モノアイソトピック分子量（ＭＷ）及び／又は精密質量モノアイソトピック分子量の特定を可能にするイオンを得るために調整パラメータ（例えば、走査範囲、データ取込時間など）を設定することは、当業者の知識の範囲内である。データ取得は、適切なソフトウェアを用いて行った。
【０４２４】
化合物は、その実測保持時間（Ｒｔ）及びイオンで記載した。データの表に別に明記されていなければ、報告した分子イオンは、［Ｍ＋Ｈ］＋（プロトン化分子）及び／又は［Ｍ−Ｈ］−（脱プロトン化分子）に対応する。化合物を直接イオン化できなかった場合、付加体の種類を特定する（すなわち［Ｍ＋ＮＨ４］＋、［Ｍ＋ＨＣＯＯ］−、［Ｍ＋ＣＨ３ＣＯＯ］−など）。複数の同位体パターンを有する分子（Ｂｒ、Ｃｌなど）について、報告した値は、最低同位体質量について得られた値である。得られた結果の全ては、使用した方法に通常付随する実験上の不確実性を伴っていた。
【０４２５】
以下では、「ＳＱＤ」は、シングル四重極検出器であり、「ＭＳＤ」は、質量選択検出器であり、「ＱＴＯＦ」は、四重極飛行時間であり、「ｒｔ」は、室温であり、「ＢＥＨ」は、架橋エチルシロキサン／シリカハイブリッドであり、ＨＳＳ」は、高強度シリカであり、「ＣＳＨ」は、表面チャージハイブリッドであり、「ＵＰＬＣ」は、超高速液体クロマトグラフィーであり、「ＤＡＤ」は、ダイオードアレイ検出器である。
【０４２６】
【表３２】
2021528413.tif 000322
【０４２７】
【表３３】
2021528413.tif 000323
【０４２８】
【表３４】
2021528413.tif 000324
【０４２９】
【表３５】
2021528413.tif 000325
【０４３０】
【表３６】
2021528413.tif 000326
【０４３１】
【表３７】
2021528413.tif 000327
【０４３２】
【表３８】
2021528413.tif 000328
【０４３３】
【表３９】
2021528413.tif 000329
【０４３４】
【表４０】
2021528413.tif 000330
【０４３５】
【表４１】
2021528413.tif 000331
【０４３６】
【表４２】
2021528413.tif 000332
【０４３７】
【表４３】
2021528413.tif 000333
【０４３８】
【表４４】
2021528413.tif 000334
【０４３９】
旋光度
旋光度は、ナトリウムランプを備えたＰｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒ  ３４１旋光計で測定し、次のように報告した：［α］°（λ、ｃ  ｇ／１００ｍＬ、溶媒、Ｔ℃）。［α］λＴ＝（１００α）／（ｌ×ｃ）：式中、ｌは、経路長（単位：ｄｍ）であり、ｃは、温度Ｔ（℃）及び波長λ（単位：ｎｍ）における試料の濃度（単位：ｇ／１００ｍＬ）である。使用した光の波長が５８９ｎｍ（ナトリウムＤ線）である場合、代わりに記号Ｄが使用され得る。旋光度の符号（＋又は−）は、常に記載されるべきである。この式を使用する場合、濃度及び溶媒を旋光度の後の括弧内に常に記載する。旋光度は、度を用いて報告し、濃度の単位は、記載されない（ｇ／１００ｍＬであると推定される）。
【０４４０】
【表４５】
2021528413.tif 000335
【０４４１】
ＳＦＣＭＳ法
ＳＦＣ−ＭＳ法の一般手順
ＳＦＣ測定は、二酸化炭素（ＣＯ２）及びモディファイアを供給するバイナリポンプ、オートサンプラー、カラムオーブン、４００バールまで耐用する高圧フローセルを備えたダイオードアレイ検出器で構成される分析超臨界流体クロマトグラフィー（ＳＦＣ）システムを使用して行った。質量分析計（ＭＳ）が配置されている場合、カラムからの流れを（ＭＳ）に導入した。化合物の公称モノアイソトピック分子量（ＭＷ）の特定を可能にするイオンを得るために調整パラメータ（例えば、走査範囲、データ取込時間など）を設定することは、当業者の知識の範囲内である。データ取得は、適切なソフトウェアを用いて行った。
【０４４２】
【表４６】
2021528413.tif 000336
【０４４３】
【表４７】
2021528413.tif 000337
【０４４４】
【表４８】
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【０４４５】
【表４９】
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【０４４６】
【表５０】
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【０４４７】
【表５１】
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【０４４８】
【表５２】
2021528413.tif 000342
【０４４９】
ＮＭＲ
複数の化合物について、１Ｈ  ＮＭＲスペクトルを、３００ＭＨｚ  Ｕｌｔｒａｓｈｉｅｌｄマグネットを備えたＢｒｕｋｅｒ  Ａｖａｎｃｅ  ＩＩＩ、４００ＭＨｚで運転するＢｒｕｋｅｒ  ＤＰＸ−４００分光器、５００ＭＨｚで運転するＢｒｕｋｅｒ  Ａｖａｎｃｅ  Ｉ、３６０ＭＨｚで運転するＢｒｕｋｅｒ  ＤＰＸ−３６０又は６００ＭＨｚで運転するＢｒｕｋｅｒ  Ａｖａｎｃｅ  ６００分光器により、クロロホルム−ｄ（重水素化クロロホルム、ＣＤＣｌ３）又はＤＭＳＯ−ｄ６（重水素化ＤＭＳＯ、ジメチル−ｄ６スルホキシド）を溶媒として用いて記録した。化学シフト（δ）は、内部標準として使用したテトラメチルシラン（ＴＭＳ）に対する百万分率（ｐｐｍ）で報告する。
【０４５０】
【表５３】
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【０４５１】
薬理学的な実施例
１）ＯＧＡ−生化学アッセイ
このアッセイは、組換えヒト髄膜腫発現抗原５（ＭＧＥＡ５）（Ｏ−ＧｌｃＮＡｃアーゼ（ＯＧＡ）とも呼ばれる）によるフルオレセインモノ−β−Ｄ−Ｎ−アセチル−グルコサミン（ＦＭ−ＧｌｃＮＡｃ）の加水分解を阻害すること（Ｍａｒｉａｐｐａ  ｅｔ  ａｌ．２０１５，Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｊ  ４７０：２５５）に基づくものである。ＦＭ−ＧｌｃＮＡｃ（Ｍａｒｋｅｒ  Ｇｅｎｅ  ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、カタログ番号Ｍ１４８５）が加水分解されると、β−Ｄ−Ｎ−グルコサミンアセテート及びフルオレセインが形成される。フルオレセインの蛍光は、励起波長４８５ｎｍ及び発光波長５３８ｎｍで測定することができる。酵素活性が増加すると、蛍光シグナルが増加する。完全長ＯＧＡ酵素は、ＯｒｉＧｅｎｅから購入した（カタログ番号ＴＰ３２２４１１）。この酵素を２５ｍＭトリス．ＨＣｌ、ｐＨ７．３、１００ｍＭグリシン、１０％グリセリンに入れ、−２０℃で保管した。Ｔｈｉａｍｅｔ  Ｇ及びＧｌｃＮＡｃＳｔａｔｉｎを参照化合物として試験した（Ｙｕｚｗａ  ｅｔ  ａｌ．２００８  Ｎａｔｕｒｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ４：４８３、Ｙｕｚｗａ  ｅｔ  ａｌ．２０１２  Ｎａｔｕｒｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ８：３９３）。アッセイは、０．００５％  Ｔｗｅｅｎ−２０を添加した２００ｍＭクエン酸／リン酸緩衝液中で行った。Ｎａ２ＨＰＯ４２Ｈ２Ｏ（Ｓｉｇｍａ、＃Ｃ０７５９）３５．６ｇを水１Ｌに溶解して２００ｍＭ溶液を得た。クエン酸（Ｍｅｒｃｋ、＃１．０６５８０）１９．２ｇを水１Ｌに溶解して１００ｍＭ溶液を得た。リン酸ナトリウム溶液のｐＨをクエン酸溶液で７．２に調整した。反応を停止するための緩衝液は、５００ｍＭ炭酸緩衝液ｐＨ１１．０からなるものである。７３４ｍｇのＦＭ−ＧｌｃＮＡｃ  ７３４ｍｇをＤＭＳＯ  ５．４８ｍＬに溶解して２５０ｍＭ溶液を得、−２０℃で保管した。ＯＧＡは、濃度２ｎＭで、ＦＭ−ＧｌｃＮＡｃは、最終濃度１００ｕＭで使用した。希釈物は、アッセイ緩衝液に入れて調製した。
【０４５２】
化合物５０ｎｌをＤＭＳＯに溶解して、Ｂｌａｃｋ  Ｐｒｏｘｉｐｌａｔｅ（商標）３８４  Ｐｌｕｓアッセイプレート（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ、＃６００８２６９）に分注し、次にｆｌ−ＯＧＡ酵素混合物３μｌを添加した。プレートを室温で６０分間プレインキュベートし、次いでＦＭ−ＧｌｃＮＡｃ基質混合物２μｌを添加した。最終ＤＭＳＯ濃度は、１％を超さなかった。プレートを１０００ｒｐｍで１分間手短に遠心分離し、室温で６時間インキュベートした。反応を停止するために、停止緩衝液５μｌを添加し、プレートを再度１０００ｒｐｍで１分間遠心分離した。Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｆｌｕｏｒｏｓｋａｎ  Ａｓｃｅｎｔ又はＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ  ＥｎＶｉｓｉｏｎにおいて、励起波長４８５ｎｍ及び発光波長５３８ｎｍで蛍光を測定した。分析のため、最小二乗和法により、最良適合曲線をフィットさせる。これにより、ＩＣ５０値及びヒル係数が得られた。高対照（阻害剤なし）及び低対照（標準阻害剤の飽和濃度）を使用して、最小値及び最大値を決定した。
【０４５３】
２）ＯＧＡ−細胞アッセイ
Ｐ３０１Ｌ変異型ヒトタウ（アイソフォーム２Ｎ４Ｒ）に誘導可能なＨＥＫ２９３細胞をＪａｎｓｓｅｎで樹立した。Ｔｈｉａｍｅｔ−Ｇをプレートバリデーション（高対照）のため且つ参照化合物（参照ＥＣ５０アッセイバリデーション）としての両方に使用した。ＯＧＡの阻害を、以前に記述されているように（Ｄｏｒｆｍｕｅｌｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．２０１０  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ＆ｂｉｏｌｏｇｙ，１７：１２５０）、Ｏ−ＧｌｃＮＡｃ化残基を検出するモノクローナル抗体（ＣＴＤ１１０．６；Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ、＃９８７５）を使用して、Ｏ−ＧｌｃＮＡｃ化タンパク質を免疫細胞化学的（ＩＣＣ）に検出することによって評価する。ＯＧＡを阻害すると、Ｏ−ＧｌｃＮＡｃ化タンパク質レベルが増加することになり、その結果、実験ではシグナルが増加する。細胞核をＨｏｅｃｈｓｔで染色して、細胞培養の品質管理を行い、即時の化合物毒性があれば、そのおよその推定を行う。ＩＣＣ写真は、Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ  Ｏｐｅｒａ  Ｐｈｅｎｉｘプレート顕微鏡で画像化し、付属のソフトウェアＰｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ  Ｈａｒｍｏｎｙ  ４．１で定量化する。
【０４５４】
細胞を標準手順に従って高グルコースＤＭＥＭ（Ｓｉｇｍａ、＃Ｄ５７９６）中で増殖させた。細胞アッセイの２日前に細胞を分離し、計数し、アッセイ培地（ＧｌｃＮＡｃ化の基底レベルを低減するために低グルコース培地を使用する）１００μｌ中、細胞密度１２，０００細胞／ｃｍ２（４，０００細胞／ウェル）で、ポリ−Ｄ−リシン（ＰＤＬ）をコートした９６ウェル（Ｇｒｅｉｎｅｒ、＃６５５９４６）プレートに播種する（Ｐａｒｋ  ｅｔ  ａｌ．２０１４  Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ２８９：１３５１９）。化合物の試験日にアッセイプレートから培地を除去し、新鮮アッセイ培地９０μｌを補充した。化合物１０μｌを最終濃度１０倍でウェルに添加した。プレートを遠心分離し、直後に細胞インキュベーターに入れて６時間インキュベートした。ＤＭＳＯ濃度を０．２％に設定した。培地は、吸引を適用して廃棄する。細胞を染色するために、培地を除去し、細胞をＤ−ＰＢＳ（Ｓｉｇｍａ、＃Ｄ８５３７）１００μｌで１回洗浄した。次の工程から先では、特に言及しない限り、アッセイ体積は、常に５０μｌとし、インキュベーションは、撹拌せずに室温で行った。細胞を４％パラホルムアルデヒド（ＰＦＡ、Ａｌｐｈａ  ａｅｓａｒ、＃０４３３６８）ＰＢＳ溶液５０μｌ中に室温で１５分間固定した。次いで、ＰＦＡ  ＰＢＳ溶液を廃棄し、細胞を１０ｍＭ  トリス緩衝液（ＬｉｆｅＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、＃１５５６７−０２７）、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ（ＬｉｆｅＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、＃２４７４０−０１１０、０．１％  Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ（Ａｌｐｈａ  ａｅｓａｒ、＃Ａ１６０４６）、ｐＨ７．５（ＩＣＣ緩衝液）中で１回洗浄してから、同じ緩衝液中で１０分間透過化処理した。次に、５％ヤギ血清（Ｓｉｇｍａ、＃Ｇ９０２３）を含有するＩＣＣに試料を入れ、室温で４５〜６０分間ブロックする。次いで、試料を、一次抗体（市販品供給元からの１／１０００、上記参照）を用いて４℃で終夜インキュベートし、次にＩＣＣ緩衝液に入れて５分間３回洗浄した。試料を、二次蛍光抗体（１／５００希釈、Ｌｉｆｅｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、＃Ａ−２１０４２）を用いて、且つ核をＨｏｅｃｈｓｔ  ３３３４２で染色して、ＩＣＣ（Ｌｉｆｅｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、＃Ｈ３５７０）中１μｇ／ｍＬの最終濃度で１時間インキュベートした。分析前に試料をＩＣＣ系緩衝液中において５分間２回手作業で洗浄した。
【０４５５】
画像化は、２０×水浸対物レンズを使用し、１ウェル当たり９視野を記録するＰｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ  Ｐｈｅｎｉｘ  Ｏｐｅｒａを使用して実施する。４８８ｎｍでの強度読み出しをウェル中の全タンパク質のＯ−ＧｌｃＮＡｃ化レベルの尺度として使用する。化合物の潜在的毒性を評価するために、Ｈｏｅｃｈｓｔ染色を用いて核を計数した。ＩＣ５０値を、パラメトリック非線形回帰モデルフィッティングを用いて計算する。最大阻害として、２００ｕＭ濃度のＴｈｉａｍｅｔ  Ｇが各プレート上に存在する。さらに、Ｔｈｉａｍｅｔ  Ｇの濃度応答を各プレートで計算する。
【０４５６】
【表５４】
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【０４５７】
【表５５】
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【０４５８】
【表５６】
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【０４５９】
【表５７】
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【０４６０】
【表５８】
2021528413.tif 000348
【０４６１】
［３Ｈ］−リガンドを用いたエクスビボＯＧＡ占有率アッセイ
薬物処理及び組織標本
雄のＮＭＲＩマウス又はＣ５７Ｂｌ６ｊマウスをビヒクル又は化合物の経口（ｐ．ｏ．）投与により処置した。投与２４時間後に動物を屠殺した。脳を直ちに頭蓋から取り出し、半球を分離し、エクスビボＯＧＡ占有率アッセイのために、右半球をドライアイスで冷却した２−メチルブタン（−４０℃）中で急速に凍結した。厚さ２０μｍの線条体切片を、Ｌｅｉｃａ  ＣＭ  ３０５０  クリオスタット−ミクロトーム（Ｌｅｉｃａ、Ｂｅｌｇｉｕｍ）を用いて切り出し、顕微鏡スライド（ＳｕｐｅｒＦｒｏｓｔ  Ｐｌｕｓ  Ｓｌｉｄｅｓ、Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）に解凍して固定し、使用するまで−２０℃で保存した。解凍後、切片を冷気流下で乾燥させた。インキュベーション前に切片を洗浄しなかった。３ｎＭの［３Ｈ］−リガンドとの１０分間のインキュベーションを厳密に制御した。（化合物投与動物及びビヒクル投与動物からの）脳切片を全て並行してインキュベートした。インキュベーション後、過剰な［３Ｈ］−リガンドを氷冷緩衝液（ＰＢＳ  １×及び１％  ＢＳＡ）により１０分間で２回洗い落とした後、蒸留水中に迅速に浸漬した。次いで、切片を冷気流下で乾燥させた。
【０４６２】
定量的オートラジオグラフィー及びデータ分析
前脳領域の脳スライスの放射能を、Ｍ３ビジョン解析ソフトウェアを含むβイメージャー（Ｂｉｏｓｐａｃｅ  Ｌａｂ、Ｐａｒｉｓ）を用いて測定した。特異的結合を、Ｔｈｉａｍｅｔ−Ｇ（１０μＭ）処理切片で測定した全結合と非特異的結合との差として計算した。薬物処置した動物からの切片における特異的結合を、ビヒクル処置したマウスからの切片における結合に対して正規化して、薬物によるＯＧＡ占有率を算出した。
【０４６３】
【表５９】
2021528413.tif 000349
【国際調査報告】
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