(57)【要約】  ビパデナント、ＣＰＩ−４４４（シフォラデナント）、ＳＣＨ５８２６１、ＳＹＮ１１５、ＺＭ２４１３８５、ＳＣＨ４２０８１４、キサンチンスーパーファミリーＡ２ａＲアンタゴニスト又は関連するアデノシン受容体２ＡアンタゴニストなどのアデノシンＡ２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストの存在下で腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）を拡大培養する方法並びに癌などの疾患の処置における拡大培養されたＴＩＬの使用が本明細書に開示される。更に、癌などの疾患の処置における組成物及びその使用を含む、ＴＩＬ及びＡ２ａＲアンタゴニストの治療的組み合わせが本明細書に開示される。
2021512962.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から得られた腫瘍サンプルを複数の腫瘍断片に処理することにより、前記患者から切除された腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得ること；
（ｂ）前記腫瘍断片を閉鎖系に加えること；
（ｃ）ＩＬ−２及び任意選択によりＯＫＴ−３を含む細胞培養培地中で前記第１のＴＩＬ集団を培養することにより、第１の拡大培養を実施して、第２のＴＩＬ集団を生じさせることであって、前記第１の拡大培養は、第１のガス透過性表面積を提供する閉鎖容器内で実施され、前記第１の拡大培養は、前記第２のＴＩＬ集団を得るために約３〜１４日間にわたって実施され、前記第２のＴＩＬ集団は、前記第１のＴＩＬ集団より数において少なくとも５０倍多く、ステップ（ｂ）からステップ（ｃ）への移行は、前記系を開放せずに発生し、及び任意選択により、前記培地は、アデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストを含む、生じさせること；
（ｄ）前記第２のＴＩＬ集団の前記細胞培養培地に追加のＩＬ−２、ＯＫＴ−３及び抗原提示細胞（ＡＰＣ）を補充することにより、第２の拡大培養を実施して、第３のＴＩＬ集団を生じさせることであって、前記第２の拡大培養は、前記第３のＴＩＬ集団を得るために約７〜１４日間にわたって実施され、前記第３のＴＩＬ集団は、治療用ＴＩＬ集団であり、前記第２の拡大培養は、第２のガス透過性表面積を提供する閉鎖容器内で実施され、ステップ（ｃ）からステップ（ｄ）への移行は、前記系を開放せずに発生し、及び任意選択により、前記培地は、アデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストを含む、生じさせること；
（ｅ）ステップ（ｄ）から得られた前記治療用ＴＩＬ集団を回収することであって、ステップ（ｄ）からステップ（ｅ）への移行は、前記系を開放せずに発生する、回収すること；及び
（ｆ）ステップ（ｅ）からの前記回収されたＴＩＬ集団を輸注バッグに移すことであって、ステップ（ｅ）から（ｆ）への移行は、前記系を開放せずに発生する、移すこと；及び
（ｇ）前記最終的なＴＩＬ集団の治療有効部分を患者に投与すること
を含む方法。
【請求項２】
前記アデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストは、ビパデナント、ＣＰＩ−４４４（シフォラデナント）、ＳＣＨ５８２６１、ＺＭ２４１３８５、ＳＣＨ４２０８１４、ＳＹＮ１１５、８−ＣＳＣ、ＫＷ−６００２、Ａ２Ａ受容体アンタゴニスト１、ＡＤＺ４６３５、ＳＴ４２０６、ＫＦ２１２１３、ＳＣＨ４１２３４８、７ＭＭＧ−４９又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記Ａ２ａＲアンタゴニストは、ＣＰＩ−４４４（シフォラデナント）或いはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ又はそれらの組み合わせである、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
前記Ａ２ａＲアンタゴニストは、ＳＣＨ５８２６１或いはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ又はそれらの組み合わせである、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項５】
前記Ａ２ａＲアンタゴニストは、ＳＹＮ１１５或いはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ又はそれらの組み合わせである、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項６】
前記Ａ２ａＲアンタゴニストは、ＺＭ２４１３８５或いはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ又はそれらの組み合わせである、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項７】
前記Ａ２ａＲアンタゴニストは、ＳＣＨ４２０８１４或いはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ又はそれらの組み合わせである、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項８】
前記Ａ２ａＲアンタゴニストで前記患者を処置するステップを更に含み、第１の用量は、１日、２日、３日、４日、５日、６日、７日、８日、９日、１０日、１１日、１２日、１３日、１４日、１５日、１６日、１７日及び１８日からなる群から選択される、前記患者への前記第３のＴＩＬ集団の投与後の日に投与される、請求項１〜７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
前記患者から腫瘍を切除するステップ前に前記Ａ２ａＲアンタゴニストで前記患者を処置するステップを更に含む、請求項１〜８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
前記第１の細胞培養培地は、Ａ２ａＲアンタゴニストを含む、請求項１〜９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
前記Ａ２ａＲアンタゴニストは、ＣＰＩ−４４４（シフォラデナント）であり、及び前記Ａ２ａＲアンタゴニストは、キサンチンファミリーＡ２ａＲアンタゴニストである、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
前記Ａ２ａＲアンタゴニストは、前記第１の拡大培養中、毎日、２日ごと、３日ごと、４日ごと、５日ごと、６日ごと、７日ごと及び２週間ごとからなる群から選択される間隔で前記第１の細胞培養培地に添加される、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
前記Ａ２ａＲアンタゴニストは、前記第２の拡大培養中、毎日、２日ごと、３日ごと、４日ごと、５日ごと、６日ごと、７日ごと及び２週間ごとからなる群から選択される間隔で前記第２の細胞培養培地に添加される、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
前記Ａ２ａＲアンタゴニストは、前記細胞培養培地中において０．０１μｇ／ｍＬ〜５００μｇ／ｍＬの濃度を達成するのに十分な濃度で添加される、請求項１０〜１３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
前記Ａ２ａＲアンタゴニストは、前記細胞培養培地中において１μｇ／ｍＬ〜１００μｇ／ｍＬの濃度を達成するのに十分な濃度で添加される、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
ＩＬ−２は、前記第１の細胞培養培地中に約１０〜約６０００ＩＵ／ｍＬの初期濃度で存在する、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７】
ＩＬ−２は、前記第１の細胞培養培地中に約３０００ＩＵ／ｍＬの初期濃度で存在する、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
ＩＬ−２は、前記第１の細胞培養培地中に約８００〜約１１００ＩＵ／ｍＬの初期濃度で存在する、請求項１６に記載の方法。
【請求項１９】
ＩＬ−２は、前記第１の細胞培養培地中に約１０００ＩＵ／ｍＬの初期濃度で存在する、請求項１６に記載の方法。
【請求項２０】
ＩＬ−２は、前記第２の細胞培養培地中に約１０〜約６０００ＩＵ／ｍＬの初期濃度で存在する、請求項１〜１９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１】
ＩＬ−２は、前記第２の細胞培養培地中に約３０００ＩＵ／ｍＬの初期濃度で存在する、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
ＩＬ−２は、前記第２の細胞培養培地中に約８００〜約１１００ＩＵ／ｍＬの初期濃度で存在する、請求項２０に記載の方法。
【請求項２３】
ＩＬ−２は、前記第２の細胞培養培地中に約１０００ＩＵ／ｍＬの初期濃度で存在する、請求項２０に記載の方法。
【請求項２４】
ＩＬ−１５は、前記第１の細胞培養培地中に存在する、請求項１〜２３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２５】
ＩＬ−１５は、前記第１の細胞培養培地中に約５ｎｇ／ｍＬ〜約２０ｎｇ／ｍＬの初期濃度で存在する、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
ＩＬ−１５は、前記第２の細胞培養培地中に存在する、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２７】
ＩＬ−１５は、前記第２の細胞培養培地中に約５ｎｇ／ｍＬ〜約２０ｎｇ／ｍＬの初期濃度で存在する、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
ＩＬ−２１は、前記第１の細胞培養培地中に存在する、請求項１〜２７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２９】
ＩＬ−２１は、前記第１の細胞培養培地中に約５ｎｇ／ｍＬ〜約２０ｎｇ／ｍＬの初期濃度で存在する、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
ＩＬ−２１は、前記第２の細胞培養培地中に存在する、請求項１〜２９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３１】
ＩＬ−２１は、前記第２の細胞培養培地中に約５ｎｇ／ｍＬ〜約２０ｎｇ／ｍＬの初期濃度で存在する、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
ＯＫＴ−３抗体は、前記第２の細胞培養培地中に約１０ｎｇ／ｍＬ〜約６０ｎｇ／ｍＬの初期濃度で存在する、請求項１〜３１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３３】
ＯＫＴ−３抗体は、前記第２の細胞培養培地中に約３０ｎｇ／ｍＬの初期濃度で存在する、請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
前記第１の拡大培養は、ガス透過性容器を使用して実施される、請求項１〜３３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３５】
前記第２の拡大培養は、ガス透過性容器を使用して実施される、請求項１〜３４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３６】
前記第３のＴＩＬ集団を前記患者に投与する前に前記患者を骨髄非破壊的リンパ枯渇レジメンで処置するステップを更に含む、請求項１〜３５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３７】
前記骨髄非破壊的リンパ枯渇レジメンは、６０ｍｇ／ｍ２／日の用量で２日間にわたってシクロホスファミドを投与し、続いて２５ｍｇ／ｍ２／日の用量で５日間にわたってフルダラビンを投与するステップを含む、請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
前記患者への前記第３のＴＩＬ集団の投与の翌日に開始する漸減性ＩＬ−２レジメンで前記患者を処置するステップを更に含み、前記漸減性ＩＬ−２レジメンは、１日目に１８，０００，０００ＩＵ／ｍ２、２日目に９，０００，０００ＩＵ／ｍ２、且つ３日目及び４日目に４，５００，０００ＩＵ／ｍ２の用量で静脈内投与されるアルデスロイキンを含む、請求項１〜３７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３９】
前記第３のＴＩＬ集団を０．１０ｍｇ／日〜５０ｍｇ／日の用量で前記患者に投与した後、ペグ化ＩＬ−２で前記患者を処置するステップを更に含む、請求項１〜３８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４０】
前記患者への前記第３のＴＩＬ集団の投与の翌日に開始する高用量ＩＬ−２レジメンで前記患者を処置するステップを更に含む、請求項１〜３９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４１】
前記高用量ＩＬ−２レジメンは、許容量まで８時間ごとに１５分のボーラス静脈内注入として投与される６００，０００又は７２０，０００ＩＵ／ｋｇのアルデスロイキン又はそのバイオシミラー若しくは変異体を含む、請求項４０に記載の方法。
【請求項４２】
前記癌は、黒色腫、卵巣癌、子宮頸癌、肺癌、膀胱癌、乳癌、頭頸部癌、腎細胞癌、急性骨髄性白血病、結腸直腸癌、胆管癌及び肉腫からなる群から選択される、請求項１〜４１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４３】
前記癌は、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、トリプルネガティブ乳癌、黒色腫、頭頸部癌、膀胱癌、胃癌、マイクロサテライト高不安定性（ＭＳＩ−Ｈ）直腸結腸癌、ミスマッチ修復欠損（ｄＭＭＲ）直腸結腸癌、ホジキンリンパ腫、尿路上皮癌及び肝細胞癌からなる群から選択される、請求項１〜４２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４４】
前記患者から前記腫瘍を切除する前にＰＤ−１阻害剤又はＰＤ−Ｌ１阻害剤で前記患者を処置するステップを更に含む、請求項１〜４３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４５】
前記ＰＤ−１阻害剤又はＰＤ−Ｌ１阻害剤は、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、デュルバルマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー及び組み合わせからなる群から選択される、請求項４４に記載の方法。
【請求項４６】
前記患者から前記腫瘍を切除した後、ＰＤ−１阻害剤又はＰＤ−Ｌ１阻害剤で前記患者を処置するステップを更に含む、請求項１〜４５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４７】
前記ＰＤ−１阻害剤又はＰＤ−Ｌ１阻害剤は、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、デュルバルマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー及び組み合わせからなる群から選択される、請求項４６に記載の方法。
【請求項４８】
前記第３のＴＩＬ集団を前記患者に投与した後、ＰＤ−１阻害剤又はＰＤ−Ｌ１阻害剤で前記患者を処置するステップを更に含む、請求項１〜４７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４９】
前記ＰＤ−１阻害剤又はＰＤ−Ｌ１阻害剤は、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、デュルバルマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー及び組み合わせからなる群から選択される、請求項４８に記載の方法。
【請求項５０】
前記第１の細胞培養培地は、ＩＬ−４、ＩＬ−７又はそれらの組み合わせを更に含む、請求項１〜４９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５１】
前記第２の細胞培養培地は、ＩＬ−４、ＩＬ−７又はそれらの組み合わせを更に含む、請求項１〜５０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５２】
前記第１の拡大培養は、１１日以下の期間にわたって実施される、請求項１〜５１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５３】
前記第２の拡大培養は、１１日以下の期間にわたって実施される、請求項１〜５２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５４】
腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団を調製するためのプロセスであって、
（ａ）患者から得られた腫瘍サンプルを複数の腫瘍断片に処理することにより、前記患者から切除された腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｂ）前記腫瘍断片を閉鎖系に加えるステップ；
（ｃ）ＩＬ−２を含む細胞培養培地中で前記第１のＴＩＬ集団を培養することにより、第１の拡大培養を実施して、第２のＴＩＬ集団を生じさせるステップであって、前記第１の拡大培養は、第１のガス透過性表面積を提供する閉鎖容器内で実施され、前記第１の拡大培養は、前記第２のＴＩＬ集団を得るために約３〜１４日間にわたって実施され、前記第２のＴＩＬ集団は、前記第１のＴＩＬ集団より数において少なくとも５０倍多く、ステップ（ｂ）からステップ（ｃ）への移行は、前記系を開放せずに発生し、及び任意選択により、前記培地は、アデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストを含む、ステップ；
（ｄ）前記第２のＴＩＬ集団の前記細胞培養培地に追加のＩＬ−２、ＯＫＴ−３及び抗原提示細胞（ＡＰＣ）を補充することにより、第２の拡大培養を実施して、第３のＴＩＬ集団を生じさせるステップであって、前記第２の拡大培養は、前記第３のＴＩＬ集団を得るために約７〜１４日間にわたって実施され、前記第３のＴＩＬ集団は、治療用ＴＩＬ集団であり、前記第２の拡大培養は、第２のガス透過性表面積を提供する閉鎖容器内で実施され、ステップ（ｃ）からステップ（ｄ）への移行は、前記系を開放せずに発生し、及び任意選択により、前記培地は、アデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストを含む、ステップ；
（ｅ）ステップ（ｄ）から得られた前記治療用ＴＩＬ集団を回収するステップであって、ステップ（ｄ）からステップ（ｅ）への移行は、前記系を開放せずに発生する、ステップ；及び
（ｆ）ステップ（ｅ）からの前記回収されたＴＩＬ集団を輸注バッグに移すステップであって、ステップ（ｅ）から（ｆ）への移行は、前記系を開放せずに発生する、ステップ；及び
（ｇ）前記最終的なＴＩＬ集団の治療有効部分を患者に投与するステップ
を含むプロセス。
【請求項５５】
前記第１のＴＩＬ集団は、患者から切除された腫瘍から得られ、且つアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストを含む培地中で処理される、請求項５４に記載のプロセス。
【請求項５６】
前記アデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストは、ＣＰＩ−４４４（シフォラデナント）、ＳＣＨ５８２６１、ＺＭ２４１３８５、ＳＣＨ４２０８１４、ＳＹＮ１１５、８−ＣＳＣ、ＫＷ−６００２、Ａ２Ａ受容体アンタゴニスト１、ＡＤＺ４６３５、ビパデナント、ＳＴ４２０６、ＫＦ２１２１３、ＳＣＨ４１２３４８、７ＭＭＧ−４９又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項５４又は５５に記載のプロセス。
【請求項５７】
前記アデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストは、ＣＰＩ−４４４（シフォラデナント）又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせである、請求項５４〜５６のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項５８】
前記アデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストは、ＳＣＨ５８２６１又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせである、請求項５４〜５６のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項５９】
前記Ａ２ａＲアンタゴニストは、ＳＹＮ１１５又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせである、請求項５４〜５６のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項６０】
前記Ａ２ａＲアンタゴニストは、ＺＭ２４１３８５又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせである、請求項５４〜５６のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項６１】
前記Ａ２ａＲアンタゴニストは、ＳＣＨ４２０８１４又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせである、請求項５４〜５６のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項６２】
前記第１の細胞培養培地は、第２のアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストを含む、請求項５４〜６１のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項６３】
前記アデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストは、前記第１の拡大培養中、毎日、２日ごと、３日ごと、４日ごと、５日ごと、６日ごと、７日ごと及び２週間ごとからなる群から選択される間隔で前記第１の細胞培養培地に添加される、請求項５４〜６２のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項６４】
前記アデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストは、前記第２の拡大培養中、毎日、２日ごと、３日ごと、４日ごと、５日ごと、６日ごと、７日ごと及び２週間ごとからなる群から選択される間隔で前記第２の細胞培養培地に添加される、請求項５４〜６３のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項６５】
前記アデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストは、前記細胞培養培地中において０．０１μＭ〜１０００μＭの濃度を達成するのに十分な濃度で添加される、請求項５４〜６４のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項６６】
前記アデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストは、前記細胞培養培地中において１μｇ／ｍＬ〜１００μｇ／ｍＬの濃度を達成するのに十分な濃度で添加される、請求項５４〜６５のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項６７】
ＩＬ−２は、前記第１の細胞培養培地中に約１０〜約６０００ＩＵ／ｍＬの初期濃度で存在する、請求項５４〜６６のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項６８】
ＩＬ−２は、前記第１の細胞培養培地中に約３０００ＩＵ／ｍＬの初期濃度で存在する、請求項５４〜６７のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項６９】
ＩＬ−２は、前記第１の細胞培養培地中に約８００〜約１１００ＩＵ／ｍＬの初期濃度で存在する、請求項５４〜６８のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項７０】
ＩＬ−２は、前記第１の細胞培養培地中に約１０００ＩＵ／ｍＬの初期濃度で存在する、請求項５４〜６９のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項７１】
ＩＬ−２は、前記第２の細胞培養培地中に約１０〜約６０００ＩＵ／ｍＬの初期濃度で存在する、請求項５４〜７０のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項７２】
ＩＬ−２は、前記第２の細胞培養培地中に約３０００ＩＵ／ｍＬの初期濃度で存在する、請求項５４〜７１のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項７３】
ＩＬ−２は、前記第２の細胞培養培地中に約８００〜約１１００ＩＵ／ｍＬの初期濃度で存在する、請求項５４〜７２のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項７４】
ＩＬ−２は、前記第２の細胞培養培地中に約１０００ＩＵ／ｍＬの初期濃度で存在する、請求項５４〜７３のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項７５】
ＩＬ−１５は、前記第１の細胞培養培地中に存在する、請求項５４〜７４のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項７６】
ＩＬ−１５は、前記第１の細胞培養培地中に約５ｎｇ／ｍＬ〜約２０ｎｇ／ｍＬの初期濃度で存在する、請求項５４〜７５のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項７７】
ＩＬ−１５は、前記第２の細胞培養培地中に存在する、請求項５４〜７６のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項７８】
ＩＬ−１５は、前記第２の細胞培養培地中に約５ｎｇ／ｍＬ〜約２０ｎｇ／ｍＬの初期濃度で存在する、請求項５４〜７７のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項７９】
ＩＬ−２１は、前記第１の細胞培養培地中に存在する、請求項５４〜７８のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項８０】
ＩＬ−２１は、前記第１の細胞培養培地中に約５ｎｇ／ｍＬ〜約２０ｎｇ／ｍＬの初期濃度で存在する、請求項５４〜７９のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項８１】
ＩＬ−２１は、前記第２の細胞培養培地中に存在する、請求項５４〜８０のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項８２】
ＩＬ−２１は、前記第２の細胞培養培地中に約５ｎｇ／ｍＬ〜約２０ｎｇ／ｍＬの初期濃度で存在する、請求項５４〜８１のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項８３】
ＯＫＴ−３抗体は、前記第２の細胞培養培地中に約１０ｎｇ／ｍＬ〜約６０ｎｇ／ｍＬの初期濃度で存在する、請求項５４〜８２のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項８４】
ＯＫＴ−３抗体は、前記第２の細胞培養培地中に約３０ｎｇ／ｍＬの初期濃度で存在する、請求項５４〜８３のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項８５】
前記第１の拡大培養は、ガス透過性容器を使用して実施される、請求項５４〜８４のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項８６】
前記第２の拡大培養は、ガス透過性容器を使用して実施される、請求項５４〜８５のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項８７】
請求項５４〜８６のいずれか一項に記載のプロセスから得ることができる腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団。
【請求項８８】
癌の処置における使用のための、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団を含む医薬組成物であって、前記腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団は、請求項５４〜８７のいずれか一項に記載のプロセスによって得ることができ、前記医薬組成物は、前記第３のＴＩＬ集団を含む、医薬組成物。
【請求項８９】
アデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストと組み合わせた使用のためのものである、請求項８８に記載の癌の処置における使用のための医薬組成物。
【請求項９０】
アデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストと組み合わせた使用のためのものであり、前記アデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストは、前記患者への前記第３のＴＩＬ集団の投与の翌日に投与するためのものであり、前記アデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストは、各処置サイクルで毎日２回経口投与される、請求項８８に記載の癌の処置における使用のための医薬組成物。
【請求項９１】
アデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストと組み合わせた使用のためのものであり、前記アデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストは、前記患者からの腫瘍の切除のステップ前に投与するためのものであり、前記アデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストは、各処置サイクルで毎日２回経口投与するためのものである、請求項８８に記載の癌の処置における使用のための医薬組成物。
【請求項９２】
前記アデノシン２ａ受容体アンタゴニストは、ＣＰＩ−４４４（シフォラデナント）又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせである、請求項８８に記載の癌の処置における使用のための医薬組成物。
【請求項９３】
前記アデノシン２ａ受容体アンタゴニストは、少なくとも１４日間にわたって１日２回投与される、請求項９２に記載の癌の処置における使用のための医薬組成物。
【請求項９４】
前記アデノシン２ａ受容体アンタゴニストは、約１００ｍｇ〜約５００ｍｇの１日総用量で１日２回投与される、請求項９２に記載の癌の処置における使用のための医薬組成物。
【請求項９５】
前記アデノシン２ａ受容体アンタゴニストは、少なくとも１４日間にわたって約２００ｍｇの１日総用量で１日２回投与される、請求項９２に記載の癌の処置における使用のための医薬組成物。
【請求項９６】
骨髄非破壊的リンパ枯渇レジメンと組み合わせた使用のための、請求項８８に記載の癌の処置における使用のための医薬組成物。
【請求項９７】
前記患者に前記第３のＴＩＬ集団を投与する前の骨髄破壊的リンパ枯渇レジメンと組み合わせた使用のためのものである、請求項８８に記載の癌の処置における使用のための医薬組成物。
【請求項９８】
骨髄破壊的リンパ枯渇レジメンと組み合わせた使用のためのものであり、骨髄非破壊的リンパ枯渇レジメンは、前記第３のＴＩＬ集団を前記患者に投与する前に投与するためのものであり、前記骨髄非破壊的リンパ枯渇レジメンは、６０ｍｇ／ｍ２／日の用量で２日間にわたってシクロホスファミドを投与し、続いて２５ｍｇ／ｍ２／日の用量で５日間にわたってフルダラビンを投与するステップを含む、請求項８８に記載の癌の処置における使用のための医薬組成物。
【請求項９９】
漸減性ＩＬ−２レジメンと組み合わせた使用のためのものである、請求項８８に記載の癌の処置における使用のための医薬組成物。
【請求項１００】
前記患者への前記第３のＴＩＬ集団の投与の翌日に開始する漸減性ＩＬ−２レジメンと組み合わせた使用のためのものであり、前記漸減性ＩＬ−２レジメンは、１日目に１８，０００，０００ＩＵ／ｍ２、２日目に９，０００，０００ＩＵ／ｍ２、且つ３日目及び４日目に４，５００，０００ＩＵ／ｍ２の用量で静脈内投与されるアルデスロイキンを含む、請求項８８に記載の癌の処置における使用のための医薬組成物。
【請求項１０１】
ペグ化ＩＬ−２と組み合わせた使用のためのものである、請求項８８に記載の癌の処置における使用のための医薬組成物。
【請求項１０２】
０．１０ｍｇ／日〜５０ｍｇ／日の用量における前記患者への前記第３のＴＩＬ集団の投与後に投与されるペグ化ＩＬ−２と組み合わせた使用のためのものである、請求項８８に記載の癌の処置における使用のための医薬組成物。
【請求項１０３】
高用量ＩＬ−２レジメンと組み合わせた使用のためのものである、請求項８８に記載の癌の処置における使用のための医薬組成物。
【請求項１０４】
前記患者への前記第３のＴＩＬ集団の投与の翌日に開始する高用量ＩＬ−２レジメンと組み合わせた使用のためのものである、請求項８８に記載の癌の処置における使用のための医薬組成物。
【請求項１０５】
前記患者への前記第３のＴＩＬ集団の投与の翌日に開始する高用量ＩＬ−２レジメンと組み合わせた使用のためのものであり、前記高用量ＩＬ−２レジメンは、許容量まで８時間ごとに１５分のボーラス静脈内注入として投与される６００，０００又は７２０，０００ＩＵ／ｋｇのアルデスロイキン又はそのバイオシミラー若しくは変異体を含む、請求項８８に記載の癌の処置における使用のための医薬組成物。
【請求項１０６】
ＰＤ−１阻害剤又はＰＤ−Ｌ１阻害剤と組み合わせた使用のためのものである、請求項８８に記載の癌の処置における使用のための医薬組成物。
【請求項１０７】
ＰＤ−１阻害剤又はＰＤ−Ｌ１阻害剤と組み合わせた使用のためのものであり、前記ＰＤ−１阻害剤又はＰＤ−Ｌ１阻害剤は、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、デュルバルマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー及び組み合わせからなる群から選択される、請求項８８に記載の癌の処置における使用のための医薬組成物。
【請求項１０８】
ＰＤ−１阻害剤又はＰＤ−Ｌ１阻害剤と組み合わせた使用のためのものであり、前記ＰＤ−１阻害剤又はＰＤ−Ｌ１阻害剤は、前記患者からの前記腫瘍の切除前に投与される、請求項８８に記載の癌の処置における使用のための医薬組成物。
【請求項１０９】
前記患者からの前記腫瘍の切除前のＰＤ−１阻害剤又はＰＤ−Ｌ１阻害剤と組み合わせた使用のためのものであり、前記ＰＤ−１阻害剤又はＰＤ−Ｌ１阻害剤は、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、デュルバルマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー及び組み合わせからなる群から選択される、請求項８８に記載の癌の処置における使用のための医薬組成物。
【請求項１１０】
前記患者からの腫瘍の切除後のＰＤ−１阻害剤又はＰＤ−Ｌ１阻害剤と組み合わせた使用のためのものである、請求項８８に記載の癌の処置における使用のための医薬組成物。
【請求項１１１】
前記患者からの前記腫瘍の切除後のＰＤ−１阻害剤又はＰＤ−Ｌ１阻害剤と組み合わせた使用のためのものであり、前記ＰＤ−１阻害剤又はＰＤ−Ｌ１阻害剤は、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、デュルバルマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー及び組み合わせからなる群から選択される、請求項８８に記載の癌の処置における使用のための医薬組成物。
【請求項１１２】
前記患者に前記第３のＴＩＬ集団を投与した後に投与するためのＰＤ−１阻害剤又はＰＤ−Ｌ１阻害剤と組み合わせた使用のためのものである、請求項８８に記載の癌の処置における使用のための医薬組成物。
【請求項１１３】
前記患者に前記第３のＴＩＬ集団を投与した後に投与するためのＰＤ−１阻害剤又はＰＤ−Ｌ１阻害剤と組み合わせた使用のためのものであり、前記ＰＤ−１阻害剤又はＰＤ−Ｌ１阻害剤は、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、デュルバルマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー及び組み合わせからなる群から選択される、請求項８８に記載の癌の処置における使用のための医薬組成物。
【請求項１１４】
前記癌は、黒色腫、卵巣癌、子宮頸癌、肺癌、膀胱癌、乳癌、頭頸部癌、腎細胞癌、急性骨髄性白血病、結腸直腸癌、胆管癌及び肉腫からなる群から選択される、請求項８８〜１０９のいずれか一項に記載の癌の処置における使用のための医薬組成物。
【請求項１１５】
前記癌は、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、トリプルネガティブ乳癌、黒色腫、頭頸部癌、膀胱癌、胃癌、マイクロサテライト高不安定性（ＭＳＩ−Ｈ）直腸結腸癌、ミスマッチ修復欠損（ｄＭＭＲ）直腸結腸癌、ホジキンリンパ腫、尿路上皮癌及び肝細胞癌からなる群から選択される、請求項８８〜１１０のいずれか一項に記載の癌の処置における使用のための医薬組成物。
【請求項１１６】
前記アデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストは、ＣＰＩ−４４４（シフォラデナント）又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせである、請求項８８〜１１０のいずれか一項に記載の癌の処置における使用のための医薬組成物。
【請求項１１７】
前記アデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストは、ＳＣＨ５８２６１又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせである、請求項８８〜１１０のいずれか一項に記載の癌の処置における使用のための医薬組成物。
【請求項１１８】
前記アデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストは、ＳＹＮ１１５又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせである、請求項８８〜１１０のいずれか一項に記載の癌の処置における使用のための医薬組成物。
【請求項１１９】
前記アデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストは、ＺＭ２４１３６５又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせである、請求項８８〜１１０のいずれか一項に記載の癌の処置における使用のための医薬組成物。
【請求項１２０】
前記アデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストは、７ＭＭＧ又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせであり、ここで、Ｘは、Ｃであり、及びＲは、パラ−Ｆ、メタ−Ｆ、パラ−ＣＨ３、２，４−ジフルオロ、２，６−ジフルオロ、３，４−ジフルオロ、３，４−ジメトキシ、メタ−（２−メトキシエトキシ）、メタ−（１，３−ベンゾジオキソール）、パラ−Ｃｌ、パラ−ＣＦ３、パラ−ＣＮ及びパラ−ｔｅｒｔ−ブチルからなる群から選択される、請求項８８〜１１０のいずれか一項に記載の癌の処置における使用のための医薬組成物。
【請求項１２１】
前記アデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストは、７ＭＭＧ又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせであり、ここで、Ｘは、Ｎであり、及びＲは、パラ−Ｆ、メタ−Ｆ、オルト−Ｆ、パラ−Ｃｌ、メタ−ＣＦ３、２，４−ジフルオロ、２，６−ジフルオロ、３，４−ジフルオロ、メタ−（２−メトキシエトキシ）、メタ−（１，３−ベンゾジオキソール）、パラ−ＣＨ３及びメタ−ＯＣＨ３からなる群から選択される、請求項８８〜１１０のいずれか一項に記載の癌の処置における使用のための医薬組成物。
【請求項１２２】
腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）ＴＩＬ集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から得られた腫瘍サンプルを複数の腫瘍断片に処理することにより、前記患者から切除された腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得ること；
（ｂ）前記腫瘍断片を閉鎖系に加えること；
（ｃ）ＩＬ−２を含む細胞培養培地中で前記第１のＴＩＬ集団を培養することにより、第１の拡大培養を実施して、第２のＴＩＬ集団を生じさせることであって、前記第１の拡大培養は、第１のガス透過性表面積を提供する閉鎖容器内で実施され、前記第１の拡大培養は、前記第２のＴＩＬ集団を得るために約３〜１４日間にわたって実施され、前記第２のＴＩＬ集団は、前記第１のＴＩＬ集団より数において少なくとも５０倍多く、ステップ（ｂ）からステップ（ｃ）への移行は、前記系を開放せずに発生し、及び任意選択により、前記培地は、アデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストを含む、生じさせること；
（ｄ）前記第２のＴＩＬ集団の前記細胞培養培地に追加のＩＬ−２、ＯＫＴ−３及び抗原提示細胞（ＡＰＣ）を補充することにより、第２の拡大培養を実施して、第３のＴＩＬ集団を生じさせることであって、前記第２の拡大培養は、前記第３のＴＩＬ集団を得るために約７〜１４日間にわたって実施され、前記第３のＴＩＬ集団は、治療用ＴＩＬ集団であり、前記第２の拡大培養は、第２のガス透過性表面積を提供する閉鎖容器内で実施され、ステップ（ｃ）からステップ（ｄ）への移行は、前記系を開放せずに発生し、及び任意選択により、前記培地は、アデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストを含む、生じさせること；
（ｅ）ステップ（ｄ）から得られた前記治療用ＴＩＬ集団を回収することであって、ステップ（ｄ）からステップ（ｅ）への移行は、前記系を開放せずに発生する、回収すること；及び
（ｆ）ステップ（ｅ）からの前記回収されたＴＩＬ集団を輸注バッグに移すことであって、ステップ（ｅ）から（ｆ）への移行は、前記系を開放せずに発生する、移すこと；及び
（ｇ）前記最終的なＴＩＬ集団の治療有効部分を患者に投与すること
を含む方法。
【請求項１２３】
前記アデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストは、ＣＰＩ−４４４（シフォラデナント）、ＳＣＨ５８２６１、ＺＭ２４１３８５、ＳＣＨ４２０８１４、ＳＹＮ１１５、８−ＣＳＣ、ＫＷ−６００２、Ａ２Ａ受容体アンタゴニスト１、ＡＤＺ４６３５、ビパデナント、ＳＴ４２０６、ＫＦ２１２１３、ＳＣＨ４１２３４８、７ＭＭＧ−４９又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項１２２に記載の方法。
【請求項１２４】
前記アデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストは、ＣＰＩ−４４４（シフォラデナント）又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせである、請求項１２２に記載の方法。
【請求項１２５】
前記アデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストは、ＳＣＨ５８２６１又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせである、請求項１２２に記載の方法。
【請求項１２６】
前記アデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストは、ＳＹＮ１１５又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせである、請求項１２２に記載の方法。
【請求項１２７】
前記アデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストは、ＺＭ２４１３８５又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせである、請求項１２２に記載の方法。
【請求項１２８】
前記アデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストは、７ＭＭＧ又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせであり、ここで、Ｘは、Ｃであり、及びＲは、パラ−Ｆ、メタ−Ｆ、パラ−ＣＨ３、２，４−ジフルオロ、２，６−ジフルオロ、３，４−ジフルオロ、３，４−ジメトキシ、メタ−（２−メトキシエトキシ）、メタ−（１，３−ベンゾジオキソール）、パラ−Ｃｌ、パラ−ＣＦ３、パラ−ＣＮ及びパラ−ｔｅｒｔ−ブチルからなる群から選択される、請求項１２２に記載の方法。
【請求項１２９】
前記アデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストは、７ＭＭＧ又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせであり、ここで、Ｘは、Ｎであり、及びＲは、パラ−Ｆ、メタ−Ｆ、オルト−Ｆ、パラ−Ｃｌ、メタ−ＣＦ３、２，４−ジフルオロ、２，６−ジフルオロ、３，４−ジフルオロ、メタ−（２−メトキシエトキシ）、メタ−（１，３−ベンゾジオキソール）、パラ−ＣＨ３及びメタ−ＯＣＨ３からなる群から選択される、請求項１２２に記載の方法。
【請求項１３０】
前記アデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストは、ステップ（ｄ）の開始時に０．０１μｇ／ｍＬ〜５００μｇ／ｍＬの濃度で存在する、請求項１２２〜１２９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３１】
前記アデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストは、ステップ（ｄ）の開始時に０．０５μｇ／ｍＬ〜２００μｇ／ｍＬの濃度で存在する、請求項１３０に記載の方法。
【請求項１３２】
前記アデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストは、ステップ（ｄ）の開始時に約１００μｇ／ｍＬの濃度で存在する、請求項１３１に記載の方法。
【請求項１３３】
前記アデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストは、ステップ（ｄ）の全体を通して１μｇ／ｍＬ〜７５μｇ／ｍＬの濃度に維持される、請求項１２２〜１３２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３４】
前記アデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストは、ステップ（ｄ）の全体を通して５μｇ／ｍＬ〜５０μｇ／ｍＬの濃度に維持される、請求項１３３に記載の方法。
【請求項１３５】
前記アデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストは、ステップ（ｄ）の全体を通して約３０μｇ／ｍＬの濃度に維持される、請求項１３４に記載の方法。
【請求項１３６】
前記第３のＴＩＬ集団は、前記第２のＴＩＬ集団におけるＣＤ４＋ＴＩＬに対するＣＤ８＋ＴＩＬの参照比と比較して、ＣＤ４＋ＴＩＬに対するＣＤ８＋ＴＩＬの増加した比を示す、請求項１２２〜１３５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３７】
前記増加した比は、前記参照比より少なくとも５％大きい、請求項１３６に記載の方法。
【請求項１３８】
前記増加した比は、前記参照比より少なくとも１０％大きい、請求項１３７に記載の方法。
【請求項１３９】
前記増加した比は、前記参照比より少なくとも２０％大きい、請求項１３８に記載の方法。
【請求項１４０】
前記増加した比は、前記参照比より少なくとも３５％大きい、請求項１３９に記載の方法。
【請求項１４１】
前記増加した比は、前記参照比より少なくとも５０％大きい、請求項１４０に記載の方法。
【請求項１４２】
前記癌は、黒色腫、ブドウ膜（眼内）黒色腫、卵巣癌、子宮頸癌、肺癌、膀胱癌、乳癌、頭頸部癌（頭頸部扁平上皮癌）、腎細胞癌、結腸直腸癌、膵癌、神経膠芽腫、胆管癌及び肉腫からなる群から選択される、請求項１２２〜１４１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４３】
前記癌は、皮膚黒色腫、ブドウ膜（眼内）黒色腫、プラチナ耐性卵巣癌、膵管腺癌、骨肉腫、トリプルネガティブ乳癌、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、トリプルネガティブ乳癌、黒色腫、頭頸部癌、膀胱癌、胃癌、マイクロサテライト高不安定性（ＭＳＩ−Ｈ）直腸結腸癌、ミスマッチ修復欠損（ｄＭＭＲ）直腸結腸癌、ホジキンリンパ腫、尿路上皮癌及び肝細胞癌からなる群から選択される、請求項１２２〜１４２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４４】
アデノシン２ａ受容体アンタゴニストは、前記第１の培地及び前記第２の培地の両方に存在する、請求項１２２〜１４４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４５】
アデノシン２ａ受容体アンタゴニストは、前記第１の培地及び前記第２の培地の両方に存在する、請求項５４〜８６のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項１４６】
アデノシン２ａ受容体アンタゴニストは、前記第１の培地及び前記第２の培地の両方に存在する、請求項１〜２２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４７】
前記腫瘍は、切除され、且つ抗ＣＤ３抗体及びアデノシン２ａ受容体アンタゴニストを含有する培地に入れられる、請求項１〜２２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４８】
前記腫瘍は、切除され、且つ抗ＣＤ３抗体及びアデノシン２ａ受容体アンタゴニストを含有する培地に入れられる、請求項５４〜８６のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項１４９】
前記腫瘍は、切除され、且つ抗ＣＤ３抗体及びアデノシン２ａ受容体アンタゴニストを含有する培地に入れられる、請求項１２２〜１４４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５０】
前記患者をアデノシン２Ａ受容体アンタゴニストで処置する追加のステップは、ステップ（ａ）の開始時に追加される、請求項１２２に記載の方法。
【請求項１５１】
前記アデノシン２ａ受容体アンタゴニストは、ＣＰＩ−４４４（シフォラデナント）、ＳＣＨ５８２６１、ＺＭ２４１３８５、ＳＣＨ４２０８１４、ＳＹＮ１１５、８−ＣＳＣ、ＫＷ−６００２、Ａ２Ａ受容体アンタゴニスト１、ＡＤＺ４６３５、ビパデナント、ＳＴ４２０６、ＫＦ２１２１３、ＳＣＨ４１２３４８、７ＭＭＧ−４９又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項１５０に記載の方法。
【請求項１５２】
前記アデノシン２ａ受容体アンタゴニストは、ＣＰＩ−４４４（シフォラデナント）又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせである、請求項１５０に記載の方法。
【請求項１５３】
前記ＣＰＩ−４４４（シフォラデナント）は、１ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇの１日総用量で経口投与される、請求項１５２に記載の方法。
【請求項１５４】
前記ＣＰＩ−４４４（シフォラデナント）は、２００ｍｇの１日総用量で１日２回投与される、請求項１５３に記載の方法。
【請求項１５５】
前記ＣＰＩ−４４４（シフォラデナント）は、約１００ｍｇの１日総用量で１日２回投与される、請求項１５４に記載の方法。
【請求項１５６】
前記アデノシン２ａ受容体アンタゴニストは、１４日サイクルで毎日投与される、請求項１５２〜１５５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５７】
前記患者は、前記アデノシン２ａ受容体アンタゴニストの１つ以上のサイクルで処置される、請求項１５６に記載の方法。
【請求項１５８】
前記患者をアデノシン２Ａ受容体アンタゴニストで処置する追加のステップは、ステップ（ｆ）の開始時に追加される、請求項１２２に記載の方法。
【請求項１５９】
前記アデノシン２ａ受容体アンタゴニストは、ＣＰＩ−４４４（シフォラデナント）、ＳＣＨ５８２６１、ＺＭ２４１３８５、ＳＣＨ４２０８１４、ＳＹＮ１１５、８−ＣＳＣ、ＫＷ−６００２、Ａ２Ａ受容体アンタゴニスト１、ＡＤＺ４６３５、ビパデナント、ＳＴ４２０６、ＫＦ２１２１３、ＳＣＨ４１２３４８、７ＭＭＧ−４９又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項１５８に記載の方法。
【請求項１６０】
前記アデノシン２ａ受容体アンタゴニストは、ＣＰＩ−４４４（シフォラデナント）又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせである、請求項１５８に記載の方法。
【請求項１６１】
前記ＣＰＩ−４４４（シフォラデナント）は、約１ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇの１日総用量で経口投与される、請求項１６０に記載の方法。
【請求項１６２】
前記ＣＰＩ−４４４（シフォラデナント）は、約２００ｍｇの１日総用量で１日２回投与される、請求項１６１に記載の方法。
【請求項１６３】
前記ＣＰＩ−４４４（シフォラデナント）は、約１００ｍｇの１日総用量で１日２回投与される、請求項１６２に記載の方法。
【請求項１６４】
前記アデノシン２ａ受容体アンタゴニストは、１４日サイクルで毎日投与される、請求項１６０〜１６３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６５】
前記患者は、前記アデノシン２ａ受容体アンタゴニストの１つ以上のサイクルで処置される、請求項１６４に記載の方法。
【請求項１６６】
前記患者をアデノシン２Ａ受容体アンタゴニストで処置する追加のステップは、ステップ（ａ）の開始時に追加される、請求項１２２〜１４９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６７】
前記患者をアデノシン２Ａ受容体アンタゴニストで処置する追加のステップは、ステップ（ａ）の終了時に追加される、請求項１２２〜１４９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６８】
前記患者をアデノシン２Ａ受容体アンタゴニストで処置する追加のステップは、ステップ（ｆ）の開始時に追加される、請求項１２２〜１４９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６９】
前記患者をアデノシン２Ａ受容体アンタゴニストで処置する追加のステップは、ステップ（ｆ）の終了時に追加される、請求項１２２〜１４９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７０】
前記アデノシン２Ａ受容体アンタゴニストは、最初に静脈内に投与され、及びその後の用量は、経口投与される、請求項１６８又は１６９に記載の方法。
【請求項１７１】
前記アデノシン２Ａ受容体アンタゴニストは、ＣＰＩ−４４４（シフォラデナント）、ＳＣＨ５８２６１、ＺＭ２４１３８５、ＳＣＨ４２０８１４、ＳＹＮ１１５、８−ＣＳＣ、ＫＷ−６００２、Ａ２Ａ受容体アンタゴニスト１、ＡＤＺ４６３５、ビパデナント、ＳＴ４２０６、ＫＦ２１２１３、ＳＣＨ４１２３４８及び７ＭＭＧ−４９からなる群から選択される、請求項１６６〜１７０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７２】
第１のアデノシン２ａ受容体アンタゴニストは、前記第１及び第２のＴＩＬ培養培地中で使用され、且つ第２のアデノシン２ａ受容体アンタゴニストは、前記患者に投与される、請求項１２２〜１７１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７３】
前記第１及び第２のアデノシン２ａ受容体アンタゴニストは、同じである、請求項１７２に記載の方法。
【請求項１７４】
前記第１及び第２のアデノシン２ａ受容体アンタゴニストは、異なる、請求項１７２に記載の方法。
【請求項１７５】
前記第１のアデノシン２ａ受容体アンタゴニストは、キサンチンファミリーメンバーである、請求項１７２に記載の方法。
【請求項１７６】
前記第２のアデノシン２ａ受容体アンタゴニストは、ＣＰＩ−４４４（シフォラデナント）、ＳＣＨ５８２６１、ＺＭ２４１３８５、ＳＣＨ４２０８１４、ＳＹＮ１１５、８−ＣＳＣ、ＫＷ−６００２、Ａ２Ａ受容体アンタゴニスト１、ＡＤＺ４６３５、ビパデナント、ＳＴ４２０６、ＫＦ２１２１３、ＳＣＨ４１２３４８及び７ＭＭＧ−４９からなる群から選択される、請求項１７２に記載の方法。
【請求項１７７】
治療有効量の、（１）シスプラチン及び同時放射線療法；（２）セツキシマブ、その後の放射線療法；（３）カルボプラチン、５−フルオロウラシル及び同時放射線療法；（４）ヒドロキシ尿素、５−フルオロウラシル及び同時放射線療法；（５）シスプラチン、パクリタキセル及び同時放射線療法；（６）シスプラチン、注入５−フルオロウラシル及び同時放射線療法；（７）断続的に投与されるシスプラチン及び放射線療法；（８）ドセタキセル、シスプラチン、５−フルオロウラシル及び同時放射線療法；（９）パクリタキセル、シスプラチン、注入５−フルオロウラシル及び同時放射線療法；（１０）シスプラチン及び放射線療法、その後のシスプラチン、５−フルオロウラシル及び放射線療法；（１１）ドセタキセル及びシスプラチン、その後のシスプラチン及び放射線療法；（１２）シスプラチン、５−フルオロウラシル及びドセタキセル；（１３）シスプラチン及びドセタキセル；（１４）シスプラチン及びパクリタキセル；（１５）カルボプラチン及びパクリタキセル；（１６）シスプラチン及びセツキシマブ；（１７）シスプラチン及び５−フルオロウラシル；（１８）シスプラチン、ドセタキセル及びセツキシマブ；（１９）カルボプラチン、ドセタキセル及びセツキシマブ；（２０）シスプラチン及びゲムシタビン；（２１）ゲムシタビン及びビノレルビン；（２２）シスプラチン；（２３）カルボプラチン；（２４）パクリタキセル；（２５）ドセタキセル；（２６）５−フルオロウラシル；（２７）メトトレキサート；（２８）ゲムシタビン；（２９）カペシタビン；（３０）セツキシマブ；（３１）アファチニブ；（３２）ラパチニブ；並びに（３３）ネラチニブからなる群から選択される化学療法レジメンを投与するステップを更に含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１７８】
治療有効量の、（１）シスプラチン及び同時放射線療法；（２）セツキシマブ、その後の放射線療法；（３）カルボプラチン、５−フルオロウラシル及び同時放射線療法；（４）ヒドロキシ尿素、５−フルオロウラシル及び同時放射線療法；（５）シスプラチン、パクリタキセル及び同時放射線療法；（６）シスプラチン、注入５−フルオロウラシル及び同時放射線療法；（７）断続的に投与されるシスプラチン及び放射線療法；（８）ドセタキセル、シスプラチン、５−フルオロウラシル及び同時放射線療法；（９）パクリタキセル、シスプラチン、注入５−フルオロウラシル及び同時放射線療法；（１０）シスプラチン及び放射線療法、その後のシスプラチン、５−フルオロウラシル及び放射線療法；（１１）ドセタキセル及びシスプラチン、その後のシスプラチン及び放射線療法；（１２）シスプラチン、５−フルオロウラシル及びドセタキセル；（１３）シスプラチン及びドセタキセル；（１４）シスプラチン及びパクリタキセル；（１５）カルボプラチン及びパクリタキセル；（１６）シスプラチン及びセツキシマブ；（１７）シスプラチン及び５−フルオロウラシル；（１８）シスプラチン、ドセタキセル及びセツキシマブ；（１９）カルボプラチン、ドセタキセル及びセツキシマブ；（２０）シスプラチン及びゲムシタビン；（２１）ゲムシタビン及びビノレルビン；（２２）シスプラチン；（２３）カルボプラチン；（２４）パクリタキセル；（２５）ドセタキセル；（２６）５−フルオロウラシル；（２７）メトトレキサート；（２８）ゲムシタビン；（２９）カペシタビン；（３０）セツキシマブ；（３１）アファチニブ；（３２）ラパチニブ；並びに（３３）ネラチニブからなる群から選択される化学療法レジメンを投与するステップを更に含む、請求項１２２〜１７０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７９】
治療有効量のＰＤ−１阻害剤又はＰＤ−Ｌ１阻害剤を投与するステップを更に含む、請求項１２２〜１７０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８０】
前記ＰＤ−１阻害剤又はＰＤ−Ｌ１阻害剤は、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、デュルバルマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー及び組み合わせからなる群から選択される、請求項１７９に記載の方法。
【請求項１８１】
Ａ２ａＲアンタゴニストを投与するステップを更に含む、請求項１７９又は１８０に記載の方法。
【請求項１８２】
前記Ａ２ａＲアンタゴニストは、ＣＰＩ−４４４（シフォラデナント）、ＳＣＨ５８２６１、ＺＭ２４１３８５、ＳＣＨ４２０８１４、ＳＹＮ１１５、８−ＣＳＣ、ＫＷ−６００２、Ａ２Ａ受容体アンタゴニスト１、ＡＤＺ４６３５、ビパデナント、ＳＴ４２０６、ＫＦ２１２１３、ＳＣＨ４１２３４８、７ＭＭＧ−４９又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項１８１に記載の方法。
【請求項１８３】
前記Ａ２ａＲアンタゴニストは、ＣＰＩ−４４４（シフォラデナント）又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせである、請求項１８２に記載の方法。
【請求項１８４】
ＣＰＩ−４４４（シフォラデナント）又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせは、２５ｍｇ  ＢＩＤ、５０ｍｇ  ＢＩＤ、７５ｍｇ  ＢＩＤ、１００ｍｇ  ＢＩＤ、１２５ｍｇ  ＢＩＤ、１５０ｍｇ  ＢＩＤ、１７５ｍｇ  ＢＩＤ、２００ｍｇ  ＢＩＤ及び２２５ｍｇ  ＢＩＤからなる群から選択される用量で経口投与される、請求項１８３に記載の方法。
【請求項１８５】
ＣＰＩ−４４４は、２８日サイクルの最初の１４日間にわたり、約２００ｍｇの１日総用量で１日２回経口投与される、請求項１８３に記載の方法。
【請求項１８６】
ＣＰＩ−４４４（シフォラデナント）は、２８日サイクルの各日にわたり、約２００ｍｇの１日総用量で１日２回経口投与される、請求項１８３に記載の方法。
【請求項１８７】
治療有効量のＰＤ−１阻害剤又はＰＤ−Ｌ１阻害剤及びＡ２ａＲアンタゴニストを投与するステップを更に含む、請求項１２２〜１７０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８８】
前記ＰＤ−１阻害剤は、アテゾリズマブであり、及び前記Ａ２ａＲアンタゴニストは、ＣＰＩ−４４４又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせである、請求項１８７に記載の方法。
【請求項１８９】
前記ＰＤ−１阻害剤又はＰＤ−Ｌ１阻害剤は、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、デュルバルマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー及び組み合わせからなる群から選択される、請求項１８７に記載の方法。
【請求項１９０】
前記Ａ２ａＲアンタゴニストは、ＣＰＩ−４４４又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせである、請求項１８９に記載の方法。
【請求項１９１】
前記Ａ２ａＲアンタゴニストは、約２００ｍｇの１日総用量で１日２回経口投与される、請求項１９０に記載の方法。
【請求項１９２】
前記Ａ２ａＲ投与は、少なくとも２８日間にわたって継続される、請求項１９１に記載の方法。
【請求項１９３】
前記Ａ２ａＲ投与は、少なくとも１４日間にわたって継続される、請求項１９１に記載の方法。
【請求項１９４】
前記Ａ２ａＲ投与は、少なくとも７日間にわたって継続される、請求項１９１に記載の方法。
【請求項１９５】
Ａ２ａＲアンタゴニストは、腫瘍切除前に開始して継続的に投与される、請求項１〜５３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９６】
前記Ａ２ａＲアンタゴニストは、ＣＰＩ−４４４（シフォラデナント）又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせである、請求項１９５に記載の方法。
【請求項１９７】
Ａ２ａＲアンタゴニストは、腫瘍切除の２ヶ月前に開始して継続的に投与される、請求項１〜５３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９８】
Ａ２ａＲアンタゴニストは、腫瘍切除の１ヶ月より前に開始して継続的に投与される、請求項１〜５３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９９】
Ａ２ａＲアンタゴニストは、腫瘍切除の２週間より前に開始して継続的に投与される、請求項１〜５３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２００】
Ａ２ａＲアンタゴニストは、腫瘍切除の１週間より前に開始して継続的に投与される、請求項１〜５３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０１】
Ａ２ａＲアンタゴニストは、腫瘍切除の少なくとも１週間前に開始して継続的に投与される、請求項１〜５３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０２】
Ａ２ａＲアンタゴニストは、腫瘍切除の少なくとも２日前に開始して継続的に投与される、請求項１〜５３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０３】
前記Ａ２ａＲは、ＣＰＩ−４４４（シフォラデナント）又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせである、請求項１９０〜２０３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０４】
ＣＰＩ−４４４（シフォラデナント）又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせは、２５ｍｇ  ＢＩＤ、５０ｍｇ  ＢＩＤ、７５ｍｇ  ＢＩＤ、１００ｍｇ  ＢＩＤ、１２５ｍｇ  ＢＩＤ、１５０ｍｇ  ＢＩＤ、１７５ｍｇ  ＢＩＤ、２００ｍｇ  ＢＩＤ及び２２５ｍｇ  ＢＩＤからなる群から選択される用量で経口投与される、請求項２０３に記載の方法。
【請求項２０５】
前記用量は、１００ｍｇ  ＢＩＤである、請求項２０４に記載の方法。
【請求項２０６】
前記アデノシン２ａ受容体アンタゴニストは、
【化１】
2021512962.tif 000094
又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせである、請求項８８に記載の癌の処置における使用のための医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
[0001]  本国際出願は、２０１８年２月１３日に出願された米国仮特許出願第６２／６３０，０１０号、２０１８年３月２日に出願された米国仮特許出願第６２／６３７，６０３号及び２０１８年６月１３日に出願された米国仮特許出願第６２／６８４，６９８号に対する優先権の利益を主張し、これらの全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【０００２】
発明の分野
[0002]  ビパデナント、シフォラデナント（ＣＰＩ−４４４）、ＳＣＨ５８２６１、ＳＹＮ１１５、ＺＭ２４１３８５、ＳＣＨ４２０８１４、キサンチンスーパーファミリーＡ２ａＲアンタゴニスト又は関連するアデノシン受容体２ＡアンタゴニストなどのアデノシンＡ２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストの存在下で腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）を拡大培養する方法並びに癌などの疾患の処置における拡大培養されたＴＩＬの使用が本明細書に開示される。更に、癌などの疾患の処置における組成物及びその使用を含む、ＴＩＬ及びＡ２ａＲアンタゴニストの治療的組み合わせが本明細書に開示される。
【背景技術】
【０００３】
[0003]  腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）の養子自己移植を用いたかさ高い、抵抗性の癌の処置は、予後不良の患者に対する治療への強力なアプローチとなる。Gattinoni, et al., Nat. Rev. Immunol. 2006, 6, 383-393。ＴＩＬはＴ細胞が優勢であり、ＩＬ−２に基づくＴＩＬ拡大培養とそれに続く「急速拡大培養プロセス」（ＲＥＰ）とは、そのスピードと効率のためにＴＩＬ拡大培養のための好ましい方法となっている。Dudley, et al., Science 2002, 298, 850-54; Dudley, et al., J. Clin. Oncol. 2005, 23, 2346-57; Dudley, et al., J. Clin .Oncol. 2008, 26, 5233-39; Riddell, et al., Science 1992, 257, 238-41; Dudley, et al., J. Immunother. 2003, 26, 332-42。黒色腫におけるＴＩＬ療法に対する臨床応答を改善し、ＴＩＬ療法を他の種類の腫瘍に拡大培養するためのいくつかのアプローチが探求され、限られた成功を伴い、この分野は依然として課題となっている。Goff, et al., J. Clin. Oncol. 2016, 34, 2389-97; Dudley, et al., J. Clin. Oncol. 2008, 26, 5233-39; Rosenberg, et al., Clin. Cancer Res. 2011, 17, 4550-57。特定のサブセット（ＣＤ８＋Ｔ細胞など）を選択するため又は変異ＥＲＢＢ２ＩＰエピトープなどのドライバー変異若しくはＫＲＡＳ癌遺伝子におけるドライバー変異を標的とするため、拡大培養中のＴＩＬの選択に対して大いに焦点が当てられている。Tran, et al., N. Engl.J. Med.2016, 375, 2255-62;Tran, et al., Science 2014, 344, 641-45。しかし、そのような選択アプローチは、大規模臨床試験で有効性を示すように開発できたとしても、ＴＩＬ療法の実施期間、複雑さ及びコストを大幅に増大させ、異なる種類の癌におけるＴＩＬ療法の広範な使用の可能性を制限する。
【０００４】
[0004]  アデノシンＡ２Ａ（又はＡ２Ａ）受容体は、Ａ１、Ａ２Ｂ及びＡ３も含むＧタンパク質共役受容体のアデノシン受容体グループのメンバーであり、脾臓、胸腺、白血球、血小板、嗅球において高度に発現される。Ａ２ａ受容体の活性化をもたらす免疫微小環境における比較的高濃度でのアデノシンの存在は、腫瘍が免疫認識を回避できる負のフィードバックループを表すことが示されている。したがって、Ａ２Ａ受容体（Ａ２ＡＲ）アンタゴニストは、癌免疫療法のためのチェックポイント遮断の新規形態として注目されている。Leone, et al., Comp.Struct.Biotechnol.J.2015, 13, 265-272。固形腫瘍におけるアデノシンの免疫抑制性細胞外濃度は、μＭ範囲（通常濃度の１０〜２０倍）であることが知られており、Ａ２ＡＲアンタゴニストによって克服される必要がある。Blay, et al., Cancer Res.1997, 57, 2602-2605。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００５】
[0005]  本発明は、Ａ２ＡＲアンタゴニストなどのアデノシン受容体アンタゴニストが腫瘍からのＴＩＬの拡大培養に有用であり、ＴＩＬ療法と組み合わせた患者の処置に更に有用であるという予想外の発見を提供する。
【０００６】
発明の概要
[0006]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に投与するステップ
を含む方法を提供する。
【０００７】
[0007]  腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２及びアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３）抗体、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）並びに任意選択によりアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト及び第２のアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を患者に投与するステップ
を含む方法である。
【０００８】
[0008]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）を拡大培養する方法を提供する。
【０００９】
[0009]  本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）を拡大培養する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍サンプルを得ることであって、前記腫瘍サンプルは、第１のＴＩＬ集団を含む、得ること；
（ｂ）前記腫瘍サンプルを複数の腫瘍断片に処理すること；
（ｃ）前記腫瘍断片を閉鎖容器に加えること；
（ｄ）第１の細胞培養培地中で前記第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得ることであって、前記第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２及び少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストを含み、前記初期拡大培養は、少なくとも１００ｃｍ２のガス透過性表面積を提供する前記閉鎖容器内で実施され、前記初期拡大培養は、第２のＴＩＬ集団を得るために約７〜１４日間の第１の期間にわたって実施され、前記第２のＴＩＬ集団は、数において前記第１のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、ステップ（ｃ）からステップ（ｄ）への移行は、系を開放せずに発生する、得ること；
（ｅ）第２の細胞培養培地中で前記第２のＴＩＬ集団を拡大培養することであって、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３及び少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト並びに末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ、単核細胞（ＭＮＣ）としても知られる）を含み、前記拡大培養は、第３のＴＩＬ集団を得るために約７〜１４日間の第２の期間にわたって実施され、前記第３のＴＩＬ集団は、第２のＴＩＬ集団と比べて増加したエフェクターＴ細胞及び／又はセントラルメモリーＴ細胞サブ集団を示し、前記拡大培養は、少なくとも５００ｃｍ２のガス透過性表面積を提供する閉鎖容器内で実施され、ステップ（ｄ）からステップ（ｅ）への移行は、系を開放せずに発生する、拡大培養すること；
（ｆ）ステップ（ｅ）から得られた前記第３のＴＩＬ集団を回収することであって、ステップ（ｅ）からステップ（ｆ）への移行は、前記系を開放せずに発生する、回収すること；及び（ｇ）
（ｇ）ステップ（ｆ）からの前記回収された前記ＴＩＬ集団を輸注バッグに移すことであって、ステップ（ｆ）から（ｇ）への前記移行は、系を開放せずに発生する、移すこと
を含む。
【００１０】
[0010]  一部の実施形態において、この方法は、インビトロ又はエクスビボ方法である。
【００１１】
[0011]  一部の実施形態において、この方法は、ステップ（ｆ）におけるFresenius Kabi製のLOVO系などの細胞処理系を介する回収を更に含む。用語「LOVO細胞処理系」は、滅菌及び／又は閉鎖系環境において、回転膜又は回転フィルターなどの膜又はフィルターを通して、細胞を含む溶液を送り出すことができ、ペレット化せずに上清又は細胞培養液を除去する連続フロー及び細胞処理を可能にする、あらゆる販売業者によって製造された機器又は装置も指す。ある場合には、細胞処理系は、閉鎖無菌系で細胞分離、洗浄、流体交換、濃縮及び／又は他の細胞処理ステップを実施することができる。
【００１２】
[0012]  一部の実施形態において、閉鎖型容器は、Ｇコンテナ及びXuri細胞培養バッグからなる群から選択される。
【００１３】
[0013]  一部の実施形態において、ステップ（ｇ）の輸注バッグは、HypoThermosol含有輸注バッグである。
【００１４】
[0014]  一部の実施形態において、ステップ（ｄ）の第１の期間及びステップ（ｅ）の第２の期間は、１０日、１１日又は１２日の期間内にそれぞれ個別に実施される。
【００１５】
[0015]  一部の実施形態において、ステップ（ｄ）の第１の期間及びステップ（ｅ）の前記第２の期間は、１１日の期間内にそれぞれ個別に実施される。
【００１６】
[0016]  一部の実施形態において、ステップ（ａ）〜（ｇ）は、約２５日〜約３０日の期間内に実施される。
【００１７】
[0017]  一部の実施形態において、ステップ（ａ）〜（ｇ）は、約２０日〜約２５日の期間内に実施される。
【００１８】
[0018]  一部の実施形態において、ステップ（ａ）〜（ｇ）は、約２０日〜約２２日の期間内に実施される。
【００１９】
[0019]  一部の実施形態において、ステップ（ａ）〜（ｇ）は、２２日以内に実施される。
【００２０】
[0020]  一部の実施形態において、ステップ（ｃ）〜（ｆ）は、単一の容器内で実施され、ステップ（ｃ）〜（ｆ）を単一の容器内で実施すると、ステップ（ｃ）〜（ｆ）を複数の容器内で実施した場合に比べて、切除された腫瘍毎に生じるＴＩＬ収率が増加する結果となる。
【００２１】
[0021]  一部の実施形態において、ＰＢＭＣは、系を開放せずにステップ（ｅ）の第２の期間中にＴＩＬに加えられる。
【００２２】
[0022]  一部の実施形態において、前記第３のＴＩＬ集団から得られたエフェクターＴ細胞及び／又はセントラルメモリーＴ細胞は、前記第２の細胞集団から得られるエフェクターＴ細胞及び／又はセントラルメモリーＴ細胞と比べて、ＣＤ２７＋の発現、ＣＤ２８＋の発現、より長いテロメア、ＣＤ５７発現の増加及びＣＤ５６発現の減少からなる群から選択される１つ以上の特徴を呈する。
【００２３】
[0023]  一部の実施形態において、第３のＴＩＬ集団から得られたエフェクターＴ細胞及び／又はセントラルメモリーＴ細胞は、第２の細胞集団から得られるエフェクターＴ細胞及び／又はセントラルメモリーＴ細胞と比べて、ＣＤ５７発現の増加及びＣＤ５６発現の減少を呈する。
【００２４】
[0024]  一部の実施形態において、微生物汚染のリスクは、開放系と比較して低減される。
【００２５】
[0025]  一部の実施形態において、ステップ（ｇ）からのＴＩＬは、患者に注入される。一部の実施形態において、ステップ（ｇ）からのＴＩＬは、アデノシンＡ２Ａ受容体アンタゴニストと組み合わせて患者に注入される。一部の実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、ＣＰＩ−４４４又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせである。一部の実施形態において、アデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストは、ＣＰＩ−４４４、ＳＣＨ５８２６１、ＺＭ２４１３８５、ＳＣＨ４２０８１４、ＳＹＮ１１５、８−ＣＳＣ、ＫＷ−６００２、Ａ２Ａ受容体アンタゴニスト１、ＡＤＺ４６３５、ビパデナント、ＳＴ４２０６、ＫＦ２１２１３、ＳＣＨ４１２３４８、７ＭＭＧ−４９又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせからなる群から選択される。
【００２６】
[0026]  本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で患者の癌を処置する方法も提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍サンプルを得るステップであって、前記腫瘍サンプルは、第１のＴＩＬ集団を含む、ステップ；
（ｂ）前記腫瘍サンプルを複数の腫瘍断片に処理するステップ；
（ｃ）前記腫瘍断片を閉鎖容器に加えるステップ；
（ｄ）第１の細胞培養培地中で前記第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、前記第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２及び少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストを含み、前記初期拡大培養は、少なくとも１００ｃｍ２のガス透過性表面積を提供する前記閉鎖容器内で実施され、前記初期拡大培養は、第２のＴＩＬ集団を得るために約７〜１４日間の第１の期間にわたって実施され、前記第２のＴＩＬ集団は、数において前記第１のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、ステップ（ｃ）からステップ（ｄ）への移行は、系を開放せずに発生する、ステップ；
（ｅ）第２の細胞培養培地中で前記第２のＴＩＬ集団を拡大培養するステップであって、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３及び少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト並びに末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を含み、前記拡大培養は、第３のＴＩＬ集団を得るために約７〜１４日間の第２の期間にわたって実施され、前記第３のＴＩＬ集団は、第２のＴＩＬ集団と比べて増加したエフェクターＴ細胞及び／又はセントラルメモリーＴ細胞サブ集団を示し、前記拡大培養は、少なくとも５００ｃｍ２のガス透過性表面積を提供する閉鎖容器内で実施され、ステップ（ｄ）からステップ（ｅ）への移行は、系を開放せずに発生する、ステップ；
（ｆ）ステップ（ｅ）から得られた前記第３のＴＩＬ集団を回収するステップであって、ステップ（ｅ）からステップ（ｆ）への移行は、前記系を開放せずに発生する、ステップ；
（ｇ）ステップ（ｆ）からの前記回収されたＴＩＬ集団を輸注バッグに移すステップであって、ステップ（ｆ）から（ｇ）への前記移行は、系を開放せずに発生する、ステップ；及び
（ｈ）ステップ（ｇ）の前記輸注バッグからの治療有効量のＴＩＬ細胞を前記患者に投与するステップ
を含む。
【００２７】
[0027]  一部の実施形態において、ステップ（ｈ）の前記輸注バッグからの治療有効量のＴＩＬ細胞は、アデノシンＡ２Ａ受容体アンタゴニストと組み合わせて患者に投与される。一部の実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、ＣＰＩ−４４４又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせである。一部の実施形態において、アデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストは、ＣＰＩ−４４４、ＳＣＨ５８２６１、ＺＭ２４１３８５、ＳＣＨ４２０８１４、ＳＹＮ１１５、８−ＣＳＣ、ＫＷ−６００２、Ａ２Ａ受容体アンタゴニスト１、ＡＤＺ４６３５、ビパデナント、ＳＴ４２０６、ＫＦ２１２１３、ＳＣＨ４１２３４８、７ＭＭＧ−４９又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせからなる群から選択される。
【００２８】
[0028]  一部の実施形態において、本発明は、癌処置における使用のための腫瘍浸潤リンパ球集団も含み、そのＴＩＬ集団は、（ｂ）患者から得られた腫瘍試料を処理するステップであって、前記腫瘍試料は、複数の腫瘍断片に切除される第１のＴＩＬ集団を含む、ステップ；（ｃ）前記腫瘍断片を閉鎖型容器に加えるステップ；（ｄ）第１の細胞培養培地中で前記第１のＴＩＬ集団の初めの拡大培養を実施して、第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、前記第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２を含み、前記初めの拡大培養は、少なくとも１００ｃｍ２のガス透過性表面積を提供する前記閉鎖型容器内で実施され、前記初めの拡大培養は、第２のＴＩＬ集団を得るために約７〜１４日間の第１の期間内に実施され、前記第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、ステップ（ｃ）からステップ（ｄ）への移行は、系を開放せずに発生する、ステップ；（ｅ）前記第２のＴＩＬ集団を第２の細胞培養培地中で拡大培養するステップであって、前記第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３及び少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト並びに末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を含み、前記拡大培養は、第３のＴＩＬ集団を得るために約７〜１４日間の第２の期間内に実施され、前記第３のＴＩＬ集団は、第２のＴＩＬ集団と比べてエフェクターＴ細胞及び／又はセントラルメモリーＴ細胞のサブ集団の増加を示し、前記拡大培養は、少なくとも５００ｃｍ２のガス透過性表面積を提供する閉鎖型容器内で実施され、ステップ（ｄ）からステップ（ｅ）への移行は、系を開放せずに発生する、ステップ；（ｆ）ステップ（ｅ）から得られた前記第３のＴＩＬ集団を回収するステップであって、ステップ（ｅ）からステップ（ｆ）への移行は、系を開放せずに発生する、ステップ；（ｇ）ステップ（ｆ）からの前記回収されたＴＩＬ集団を輸注バッグに移すステップであって、ステップ（ｆ）から（ｇ）への前記移行は、系を開放せずに発生する、ステップを含む方法から得られる。一部の実施形態において、本方法は、患者から腫瘍試料を得る最初のステップ（ａ）であって、前記腫瘍試料は、第１のＴＩＬ集団を含む、最初のステップ（ａ）を含む。一部の実施形態において、ＴＩＬ集団は、ステップ（ｇ）の前記輸注バッグから治療有効量で投与するためのものである。
【００２９】
[0029]  一部の実施形態において、第３のＴＩＬ集団は、アデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストを含む培地又は製剤中に維持される。一部の実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、ＣＰＩ−４４４又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせである。一部の実施形態において、アデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストは、ＣＰＩ−４４４、ＳＣＨ５８２６１、ＺＭ２４１３８５、ＳＣＨ４２０８１４、ＳＹＮ１１５、８−ＣＳＣ、ＫＷ−６００２、Ａ２Ａ受容体アンタゴニスト１、ＡＤＺ４６３５、ビパデナント、ＳＴ４２０６、ＫＦ２１２１３、ＳＣＨ４１２３４８、７ＭＭＧ−４９又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせからなる群から選択される。
【００３０】
[0030]  一部の実施形態において、ステップ（ｈ）で治療有効量のＴＩＬ細胞を投与する前に骨髄非破壊的リンパ枯渇レジメンが患者に投与されている。一部の実施形態において、ＴＩＬ集団は、骨髄非破壊的リンパ枯渇レジメンを受けた患者への投与のためのものである。
【００３１】
[0031]  一部の実施形態において、骨髄非破壊的リンパ枯渇レジメンは、６０ｍｇ／ｍ２／日の用量で２日間にわたるシクロホスファミドの投与、それに続く２５ｍｇ／ｍ２／日の用量で５日間にわたるフルダラビンの投与のステップを含む。
【００３２】
[0032]  一部の実施形態において、本方法は、ステップ（ｈ）で前記患者にＴＩＬ細胞を投与した翌日に開始する高用量ＩＬ−２レジメンで患者を処置するステップを更に含む。一部の実施形態において、ＴＩＬ集団は、高用量ＩＬ−２レジメン前の投与のためのものである。一部の実施形態において、ＴＩＬ集団は、高用量ＩＬ−２レジメンの開始１日前の投与のためのものである。
【００３３】
[0033]  一部の実施形態において、高用量ＩＬ−２レジメンは、許容量まで８時間毎に１５分ボーラス静脈内注入として投与される６００，０００又は７２０，０００ＩＵ／ｋｇを含む。
【００３４】
[0034]  一部の実施形態において、前記第３のＴＩＬ集団から得られたエフェクターＴ細胞及び／又はセントラルメモリーＴ細胞は、前記第２の細胞集団から得られるエフェクターＴ細胞及び／又はセントラルメモリーＴ細胞と比べて、ＣＤ２７＋の発現、ＣＤ２８＋の発現、より長いテロメア、ＣＤ５７発現の増加及びＣＤ５６発現の減少からなる群から選択される１つ以上の特徴を呈する。
【００３５】
[0035]  一部の実施形態において、第３のＴＩＬ集団から得られたエフェクターＴ細胞及び／又はセントラルメモリーＴ細胞は、第２の細胞集団から得られるエフェクターＴ細胞及び／又はセントラルメモリーＴ細胞と比べて、ＣＤ５７発現の増加及びＣＤ５６発現の減少を呈する。
【００３６】
[0036]  本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）を拡大培養する方法も提供し、その方法は、（ａ）処理された腫瘍断片を閉鎖系に加えるステップ；（ｂ）第１の細胞培養培地中で前記第１のＴＩＬ集団の第１の拡大培養を実施して、第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、前記第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２及び少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストを含み、前記第１の拡大培養は、第１のガス透過性表面積を提供する閉鎖型容器内で実施され、前記第１の拡大培養は、第２のＴＩＬ集団を得るために約３〜１４日間の第１の期間内に実施され、前記第２のＴＩＬ集団は、数において前記第１のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、ステップ（ａ）からステップ（ｂ）への移行は、系を開放せずに発生する、ステップ；（ｃ）前記第２のＴＩＬ集団を第２の細胞培養培地中で拡大培養するステップであって、前記第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３及び少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト並びに抗原提示細胞を含み、前記拡大培養は、第３のＴＩＬ集団を得るために約７〜１４日間の第２の期間内に実施され、前記第３のＴＩＬ集団は、第２のＴＩＬ集団と比べてエフェクターＴ細胞及び／又はセントラルメモリーＴ細胞のサブ集団の増加を示し、前記拡大培養は、第２のガス透過性表面積を提供する閉鎖型容器内で実施され、ステップ（ｂ）からステップ（ｃ）への移行は、系を開放せずに発生する、ステップ；（ｄ）ステップ（ｃ）から得られた前記第３のＴＩＬ集団を回収するステップであって、ステップ（ｃ）からステップ（ｄ）への移行は、系を開放せずに発生する、ステップ；及び（ｅ）ステップ（ｄ）からの前記回収されたＴＩＬ集団を輸注バッグに移すステップであって、ステップ（ｄ）から（ｅ）への前記移行は、系を開放せずに発生する、ステップを含む。
【００３７】
[0037]  一部の実施形態において、本方法は、凍結保存プロセスを使用して、回収されたＴＩＬ集団を含む輸注バッグを凍結保存するステップを更に含む。一部の実施形態において、凍結保存プロセスは、回収されたＴＩＬ集団とCS10培地との比の比率１：１を使用して実施される。
【００３８】
[0038]  一部の実施形態において、方法は、第１のＴＩＬ培養培地へのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストの添加を更に含む。一部の実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、ＣＰＩ−４４４又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせである。一部の実施形態において、アデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストは、ＣＰＩ−４４４、ＳＣＨ５８２６１、ＺＭ２４１３８５、ＳＣＨ４２０８１４、ＳＹＮ１１５、８−ＣＳＣ、ＫＷ−６００２、Ａ２Ａ受容体アンタゴニスト１、ＡＤＺ４６３５、ビパデナント、ＳＴ４２０６、ＫＦ２１２１３、ＳＣＨ４１２３４８、７ＭＭＧ−４９又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせからなる群から選択される。
【００３９】
[0039]  一部の実施形態において、方法は、第２のＴＩＬ培養培地へのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストの添加を更に含む。一部の実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、ＣＰＩ−４４４又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせである。一部の実施形態において、アデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストは、ＣＰＩ−４４４、ＳＣＨ５８２６１、ＺＭ２４１３８５、ＳＣＨ４２０８１４、ＳＹＮ１１５、８−ＣＳＣ、ＫＷ−６００２、Ａ２Ａ受容体アンタゴニスト１、ＡＤＺ４６３５、ビパデナント、ＳＴ４２０６、ＫＦ２１２１３、ＳＣＨ４１２３４８、７ＭＭＧ−４９又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせからなる群から選択される。
【００４０】
[0040]  一部の実施形態において、抗原提示細胞は、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）である。一部の実施形態において、抗原提示細胞は、人工抗原提示細胞である。
【００４１】
[0041]  一部の実施形態において、ステップ（ｄ）の採取は、LOVO細胞処理系を使用して実施される。
【００４２】
[0042]  一部の実施形態において、複数の断片は、約５０個の断片を含み、各断片は、約２７ｍｍ３の容積を有する。一部の実施形態において、複数の断片は、約１３００ｍｍ３〜約１５００ｍｍ３の総容積を有する約３０〜約６０個の断片を含む。一部の実施形態において、複数の断片は、約１３５０ｍｍ３の総容積を有する約５０個の断片を含む。一部の実施形態において、複数の断片は、約１ｇ〜約１．５ｇの総質量を有する約５０個の断片を含む。
【００４３】
[0043]  一部の実施形態において、第２の細胞培養培地は、Ｇコンテナ及びXuri細胞培養バッグからなる群から選択される容器内に提供される。
【００４４】
[0044]  一部の実施形態において、ステップ（ｅ）の輸注バッグは、HypoThermosol含有輸注バッグである。
【００４５】
[0045]  一部の実施形態において、ステップ（ｂ）の第１の期間及びステップ（ｃ）の第２の期間は、１０日、１１日又は１２日の期間内にそれぞれ個別に実施される。一部の実施形態において、ステップ（ｂ）の第１の期間及びステップ（ｃ）の第２の期間は、１１日の期間内にそれぞれ個別に実施される。
【００４６】
[0046]  一部の実施形態において、ステップ（ａ）〜（ｅ）は、約２５日〜約３０日の期間内に実施される。一部の実施形態において、ステップ（ａ）〜（ｅ）は、約２０日〜約２５日の期間内に実施される。一部の実施形態において、ステップ（ａ）〜（ｅ）は、約２０日〜約２２日の期間内に実施される。一部の実施形態において、ステップ（ａ）〜（ｅ）は、２２日以内に実施される。一部の実施形態において、ステップ（ａ）〜（ｅ）及び凍結保存は、２２日以内に実施される。
【００４７】
[0047]  一部の実施形態において、ステップ（ｂ）〜（ｅ）は、単一の閉鎖系で実施され、ステップ（ｂ）〜（ｅ）を単一の容器内で実施すると、ステップ（ｂ）〜（ｅ）を複数の容器内で実施した場合に比べて、切除された腫瘍毎に生じるＴＩＬ収率が増加する結果となる。
【００４８】
[0048]  一部の実施形態において、抗原提示細胞は、系を開放せずにステップ（ｃ）の第２の期間中にＴＩＬに追加される。
【００４９】
[0049]  一部の実施形態において、前記第３のＴＩＬ集団から得られたエフェクターＴ細胞及び／又はセントラルメモリーＴ細胞は、前記第２の細胞集団から得られるエフェクターＴ細胞及び／又はセントラルメモリーＴ細胞と比べて、ＣＤ２７＋の発現、ＣＤ２８＋の発現、より長いテロメア、ＣＤ５７発現の増加及びＣＤ５６発現の減少からなる群から選択される１つ以上の特徴を呈する。
【００５０】
[0050]  一部の実施形態において、第３のＴＩＬ集団から得られたエフェクターＴ細胞及び／又はセントラルメモリーＴ細胞は、第２の細胞集団から得られるエフェクターＴ細胞及び／又はセントラルメモリーＴ細胞と比べて、ＣＤ５７発現の増加及びＣＤ５６発現の減少を呈する。
【００５１】
[0051]  一部の実施形態において、微生物汚染のリスクは、開放系と比較して低減される。
【００５２】
[0052]  一部の実施形態において、ステップ（ｅ）からのＴＩＬは、患者に注入される。
【００５３】
[0053]  一部の実施形態において、ステップ（ｅ）からのＴＩＬは、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体アンタゴニストと組み合わせて患者に注入される。一部の実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、ＣＰＩ−４４４又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせである。一部の実施形態において、アデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストは、ＣＰＩ−４４４、ＳＣＨ５８２６１、ＺＭ２４１３８５、ＳＣＨ４２０８１４、ＳＹＮ１１５、８−ＣＳＣ、ＫＷ−６００２、Ａ２Ａ受容体アンタゴニスト１、ＡＤＺ４６３５、ビパデナント、ＳＴ４２０６、ＫＦ２１２１３、ＳＣＨ４１２３４８、７ＭＭＧ−４９又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせからなる群から選択される。
【００５４】
[0054]  一部の実施形態において、本発明は、アデノシン２Ａ受容体アンタゴニスト（Ａ２ａＲ）を受けている患者に投与される、癌の処置における使用のための腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団も含む。一部の実施形態において、Ａ２ａＲは、経口投与される。一部の実施形態において、Ａ２ａＲは、最初に腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団と共投与され、更に経口投与される。一部の実施形態において、Ａ２ａＲは、１日１回経口投与される。一部の実施形態において、Ａ２ａＲは、１日２回経口投与される。一部の実施形態において、Ａ２ａＲは、１日３回経口投与される。一部の実施形態において、Ａ２ａＲは、ＣＰＩ−４４４又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせである。一部の実施形態において、アデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストは、ＣＰＩ−４４４、ＳＣＨ５８２６１、ＺＭ２４１３８５、ＳＣＨ４２０８１４、ＳＹＮ１１５、８−ＣＳＣ、ＫＷ−６００２、Ａ２Ａ受容体アンタゴニスト１、ＡＤＺ４６３５、ビパデナント、ＳＴ４２０６、ＫＦ２１２１３、ＳＣＨ４１２３４８、７ＭＭＧ−４９又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせからなる群から選択される。
【００５５】
[0055]  一部の実施形態において、方法は、ステップ（ａ）を実施する前にアデノシン２Ａ受容体アンタゴニスト（Ａ２ａＲ）で患者を処置することを更に含む。一部の実施形態において、患者は、少なくとも１日；２日；３日以上；７日；７日以上；１４日未満；１４日以上にわたって処置される。
【００５６】
[0056]  一部の実施形態において、閉鎖型容器は、単一のバイオリアクターを含む。一部の実施形態において、閉鎖型容器は、G-REX-10を含む。一部の実施形態において、閉鎖型容器は、G-REX-100を含む。一部の実施形態において、閉鎖型容器は、G-Rex 500を含む。一部の実施形態において、閉鎖型容器は、Xuri又はWave bioreactorガス透過性バッグを含む。
【００５７】
[0057]  一部の実施形態において、本開示は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）を治療用ＴＩＬ集団に拡大培養する方法も提供し、この方法は、
（ｂ）閉鎖系に腫瘍断片を加えることであって、腫瘍断片は、第１のＴＩＬ集団を含む、加えること；
（ｃ）ＩＬ−２及び少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストを含む細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団を培養することにより、第１の拡大培養を実施して、第２のＴＩＬ集団を生じさせることであって、第１の拡大培養は、第１のガス透過性表面積を提供する閉鎖型容器内で実施され、第１の拡大培養は、第２のＴＩＬ集団を得るために約３〜１４日間にわたって実施され、第２のＴＩＬ集団は、第１のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、ステップ（ｂ）からステップ（ｃ）への移行は、系を開放せずに発生する、生じさせること；
（ｄ）第２のＴＩＬ集団の細胞培養培地に追加のＩＬ−２、ＯＫＴ−３及び少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト並びに抗原提示細胞（ＡＰＣ）を補充することにより、第２の拡大培養を実施して、第３のＴＩＬ集団を生じさせることであって、第２の拡大培養は、第３のＴＩＬ集団を得るために約７〜１４日間にわたって実施され、第３のＴＩＬ集団は、第２のＴＩＬ集団と比べてエフェクターＴ細胞及び／又はセントラルメモリーＴ細胞の増加したサブ集団を含むＴ細胞治療用ＴＩＬ集団であり、第２の拡大培養は、第２のガス透過性表面積を提供する閉鎖型容器内で実施され、ステップ（ｃ）からステップ（ｄ）への移行は、系を開放せずに発生する、生じさせること；
（ｅ）ステップ（ｄ）から得られた治療用ＴＩＬ集団を回収することであって、ステップ（ｄ）からステップ（ｅ）への移行は、系を開放せずに発生する、回収すること；及び
（ｆ）ステップ（ｅ）からの回収されたＴＩＬ集団を輸注バッグに移すことであって、ステップ（ｅ）から（ｆ）への移行は、系を開放せずに発生する、移すこと
を含む。
【００５８】
[0058]  一部の実施形態において、本方法は、第１のステップとして、
（ａ）患者から得られた腫瘍サンプルを複数の腫瘍断片に処理することにより、患者から切除された腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得ること
も含む。
【００５９】
[0059]  一実施形態において、本方法は、インビトロ又はエクスビボ方法である。
【００６０】
[0060]  一部の実施形態において、本開示は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）を治療用ＴＩＬ集団に拡大培養する方法も提供し、この方法は、
（ａ）患者から得られた腫瘍サンプルを複数の腫瘍断片に処理することにより、患者から切除された腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得ること；
（ｂ）腫瘍断片を閉鎖系に加えること；
（ｃ）ＩＬ−２及び少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストを含む細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団を培養することにより、第１の拡大培養を実施して、第２のＴＩＬ集団を生じさせることであって、第１の拡大培養は、第１のガス透過性表面積を提供する閉鎖型容器内で実施され、第１の拡大培養は、第２のＴＩＬ集団を得るために約３〜１４日間にわたって実施され、第２のＴＩＬ集団は、第１のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、ステップ（ｂ）からステップ（ｃ）への移行は、系を開放せずに発生する、生じさせること；
（ｄ）第２のＴＩＬ集団の細胞培養培地に追加のＩＬ−２、ＯＫＴ−３及び任意選択により少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト並びに抗原提示細胞（ＡＰＣ）を補充することにより、第２の拡大培養を実施して、第３のＴＩＬ集団を生じさせることであって、第２の拡大培養は、第３のＴＩＬ集団を得るために約７〜１４日間にわたって実施され、第３のＴＩＬ集団は、第２のＴＩＬ集団と比べてエフェクターＴ細胞及び／又はセントラルメモリーＴ細胞の増加したサブ集団を含むＴ細胞治療用ＴＩＬ集団であり、第２の拡大培養は、第２のガス透過性表面積を提供する閉鎖型容器内で実施され、ステップ（ｃ）からステップ（ｄ）への移行は、系を開放せずに発生する、生じさせること；
（ｅ）ステップ（ｄ）から得られた治療用ＴＩＬ集団を回収することであって、ステップ（ｄ）からステップ（ｅ）への移行は、系を開放せずに発生する、回収すること；及び
（ｆ）ステップ（ｅ）からの回収されたＴＩＬ集団を輸注バッグに移すことであって、ステップ（ｅ）から（ｆ）への移行は、系を開放せずに発生する、移すこと
を含む。
【００６１】
[0061]  一実施形態において、本方法は、インビトロ又はエクスビボ方法である。
【００６２】
[0062]  一部の実施形態において、本方法は、凍結保存プロセスを使用して、ステップ（ｆ）からの回収されたＴＩＬ集団を含む輸注バッグを凍結保存するステップを更に含む。
【００６３】
[0063]  一部の実施形態において、凍結保存プロセスは、回収されたＴＩＬ集団と凍結保存培地との比の比率１：１を使用して実施される。一部の実施形態において、凍結保存培地は、ジメチルスルホキシドを含む。一部の実施形態において、凍結保存培地は、Cryostor CS10、HypoThermosol又はそれらの組み合わせからなる群から選択される。
【００６４】
[0064]  一部の実施形態において、抗原提示細胞は、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）である。
【００６５】
[0065]  一部の実施形態において、ＰＢＭＣは、照射され、且つ同種異系である。
【００６６】
[0066]  一部の実施形態において、ＰＢＭＣは、ステップ（ｄ）において９〜１４日目のいずれかに細胞培養物に加えられる。
【００６７】
[0067]  一部の実施形態において、抗原提示細胞は、人工抗原提示細胞である。
【００６８】
[0068]  一部の実施形態において、ステップ（ｅ）の回収は、LOVO細胞プロセスシステムを使用して実施される。
【００６９】
[0069]  一部の実施形態において、腫瘍断片は、複数の断片であり、約４〜約５０個の断片を含み、各断片は、約２７ｍｍ３の容積を有する。一部の実施形態において、複数の断片は、約１３００ｍｍ３〜約１５００ｍｍ３の総容積を有する約３０〜約６０個の断片を含む。一部の実施形態において、複数の断片は、約１３５０ｍｍ３の総容積を有する約５０個の断片を含む。一部の実施形態において、複数の断片は、約１ｇ〜約１．５ｇの総質量を有する約５０個の断片を含む。
【００７０】
[0070]  一部の実施形態において、細胞培養培地は、Ｇコンテナ及びXuri細胞培養バッグからなる群から選択される容器内に提供される。
【００７１】
[0071]  一部の実施形態において、ステップ（ｆ）の輸注バッグは、HypoThermosol含有輸注バッグである。
【００７２】
[0072]  一部の実施形態において、ステップ（ｃ）の第１の期間及びステップ（ｅ）の第２の期間は、１０日、１１日又は１２日の期間内にそれぞれ個別に実施される。一部の実施形態において、ステップ（ｃ）の第１の期間及びステップ（ｅ）の第２の期間は、１１日の期間内にそれぞれ個別に実施される。一部の実施形態において、ステップ（ａ）〜（ｆ）は、約２５日〜約３０日の期間内に実施される。一部の実施形態において、ステップ（ａ）〜（ｆ）は、約２０日〜約２５日の期間内に実施される。一部の実施形態において、ステップ（ａ）〜（ｆ）は、約２０日〜約２２日の期間内に実施される。一部の実施形態において、ステップ（ａ）〜（ｆ）は、２２日以内に実施される。一部の実施形態において、ステップ（ａ）〜（ｆ）及び凍結保存は、２２日以内に実施される。
【００７３】
[0073]  一部の実施形態において、ステップ（ｅ）からの回収された治療用ＴＩＬ集団中は、治療有効投与量のＴＩＬとなるのに十分なＴＩＬを含む。一部の実施形態において、治療上有効な投薬量となるのに十分なＴＩＬの数は、約２．３×１０１０〜約１３．７×１０１０個である。
【００７４】
[0074]  一部の実施形態において、ステップ（ｂ）〜（ｅ）は、単一の容器内で実施され、ステップ（ｂ）〜（ｅ）を単一の容器内で実施すると、ステップ（ｂ）〜（ｅ）を複数の容器内で実施した場合に比べて、切除された腫瘍毎に生じるＴＩＬ収率が増加する結果となる。
【００７５】
[0075]  一部の実施形態において、抗原提示細胞は、系を開放せずにステップ（ｄ）の第２の期間中にＴＩＬに追加される。
【００７６】
[0076]  一部の実施形態において、治療用ＴＩＬ集団中のエフェクターＴ細胞及び／又はセントラルメモリーＴ細胞は、第２の細胞集団から得られるエフェクターＴ細胞及び／又はセントラルメモリーＴ細胞と比べて、ＣＤ２７＋の発現、ＣＤ２８＋の発現、より長いテロメア、ＣＤ５７発現の増加及びＣＤ５６発現の減少からなる群から選択される１つ以上の特徴を呈する。
【００７７】
[0077]  一部の実施形態において、第３のＴＩＬ集団から得られたエフェクターＴ細胞及び／又はセントラルメモリーＴ細胞は、第２の細胞集団から得られるエフェクターＴ細胞及び／又はセントラルメモリーＴ細胞と比べて、ＣＤ５７発現の増加及びＣＤ５６発現の減少を呈する。
【００７８】
[0078]  一部の実施形態において、微生物汚染のリスクは、開放系と比較して低減される。
【００７９】
[0079]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に投与するステップであって、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、４−１ＢＢアゴニスト、ＯＸ４０アゴニスト、ＣＤ２７アゴニスト、ＧＩＴＲアゴニスト、ＨＶＥＭアゴニスト、ＣＤ９５アゴニスト及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、ステップ
を含む方法を提供する。
【００８０】
[0080]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に投与するステップであって、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、４−１ＢＢアゴニストであり、且つ４−１ＢＢアゴニストは、ウレルマブ、ウトミルマブ、ＥＵ−１０１並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、ステップ
を含む方法を提供する。
【００８１】
[0081]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストを含む第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に投与するステップであって、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、４−１ＢＢアゴニストであり、且つ４−１ＢＢアゴニストは、４−１ＢＢアゴニスト融合タンパク質である、ステップ
を含む方法を提供する。
【００８２】
[0082]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に投与するステップであって、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、４−１ＢＢアゴニスト融合タンパク質であり、且つ４−１ＢＢアゴニスト融合タンパク質は、（ｉ）第１の可溶性４−１ＢＢ結合ドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性４−１ＢＢ結合ドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性４−１ＢＢ結合ドメインを含み、Ｎ末端及び／又はＣ末端に追加のドメインを更に含み、追加のドメインは、Ｆｃ断片ドメイン及びヒンジドメインを含み、融合タンパク質は、構造Ｉ−Ａ又は構造Ｉ−Ｂによる二量体構造である、ステップ
を含む方法を提供する。
【００８３】
[0083]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に投与するステップであって、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、ＯＸ４０アゴニストであり、且つＯＸ４０アゴニストは、タボリキシズマブ、ＧＳＫ３１７４９９８、ＭＥＤＩ６４６９、ＭＥＤＩ６３８３、ＭＯＸＲ０９１６、ＰＦ−０４５１８６００、Creative Biolabs MOM-18455並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー及び組み合わせからなる群から選択される、ステップ
を含む方法を提供する。
【００８４】
[0084]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に投与するステップであって、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、ＯＸ４０アゴニストであり、且つＯＸ４０アゴニストは、ＯＸ４０アゴニスト融合タンパク質である、ステップ
を含む方法を提供する。
【００８５】
[0085]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に投与するステップであって、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、ＯＸ４０アゴニスト融合タンパク質であり、且つＯＸ４０アゴニスト融合タンパク質は、（ｉ）第１の可溶性ＯＸ４０結合ドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性ＯＸ４０結合ドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性ＯＸ４０結合ドメインを含み、Ｎ末端及び／又はＣ末端に追加のドメインを更に含み、追加のドメインは、Ｆｃ断片ドメイン及びヒンジドメインを含み、融合タンパク質は、構造Ｉ−Ａ又は構造Ｉ−Ｂによる二量体構造である、ステップ
を含む方法を提供する。
【００８６】
[0086]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に投与するステップであって、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、ＣＤ２７アゴニストであり、且つＣＤ２７アゴニストは、バルリルマブ又はそれらの断片、誘導体、変異体若しくはバイオシミラーである、ステップ
を含む方法を提供する。
【００８７】
[0087]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に投与するステップであって、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、ＣＤ２７アゴニストであり、且つＣＤ２７アゴニストは、ＣＤ２７アゴニスト融合タンパク質である、ステップ
を含む方法を提供する。
【００８８】
[0088]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に投与するステップであって、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、ＣＤ２７アゴニストであり、且つＣＤ２７アゴニスト融合タンパク質は、（ｉ）第１の可溶性ＣＤ２７結合ドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性ＣＤ２７結合ドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性ＣＤ２７結合ドメインを含み、Ｎ末端及び／又はＣ末端に追加のドメインを更に含み、追加のドメインは、Ｆｃ断片ドメイン及びヒンジドメインを含み、融合タンパク質は、構造Ｉ−Ａ又は構造Ｉ−Ｂによる二量体構造である、ステップ
を含む方法を提供する。
【００８９】
[0089]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に投与するステップであって、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、ＧＩＴＲアゴニストであり、且つＧＩＴＲアゴニストは、ＴＲＸ５１８、６Ｃ８、３６Ｅ５、３Ｄ６、６１Ｇ６、６Ｈ６、６１Ｆ６、１Ｄ８、１７Ｆ１０、３５Ｄ８、４９Ａ１、９Ｅ５、３１Ｈ６、２１５５、６９８、７０６、８２７、１６４９、１７１８、１Ｄ７、３３Ｃ９、３３Ｆ６、３４Ｇ４、３５Ｂ１０、４１Ｅ１１、４１Ｇ５、４２Ａ１１、４４Ｃ１、４５Ａ８、４６Ｅ１１、４８Ｈ１２、４８Ｈ７、４９Ｄ９、４９Ｅ２、４８Ａ９、５Ｈ７、７Ａ１０、９Ｈ６並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー及び組み合わせからなる群から選択される、ステップ
を含む方法を提供する。
【００９０】
[0090]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に投与するステップであって、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、ＧＩＴＲアゴニストであり、且つＧＩＴＲアゴニストは、ＧＩＴＲアゴニスト融合タンパク質である、ステップ
を含む方法を提供する。
【００９１】
[0091]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に投与するステップであって、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、ＧＩＴＲアゴニスト融合タンパク質であり、且つＧＩＴＲアゴニスト融合タンパク質は、（ｉ）第１の可溶性ＧＩＴＲ結合ドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性ＧＩＴＲ結合ドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性ＧＩＴＲ結合ドメインを含み、Ｎ末端及び／又はＣ末端に追加のドメインを更に含み、追加のドメインは、Ｆｃ断片ドメイン及びヒンジドメインを含み、融合タンパク質は、構造Ｉ−Ａ又は構造Ｉ−Ｂによる二量体構造である、ステップ
を含む方法を提供する。
【００９２】
[0092]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に投与するステップであって、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、ＨＶＥＭアゴニストである、ステップ
を含む方法を提供する。
【００９３】
[0093]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に投与するステップであって、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、ＨＶＥＭアゴニストであり、且つＨＶＥＭアゴニストは、ＨＶＥＭアゴニスト融合タンパク質である、ステップ
を含む方法を提供する。
【００９４】
[0094]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に投与するステップであって、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、ＨＶＥＭアゴニスト融合タンパク質であり、且つＨＶＥＭアゴニスト融合タンパク質は、（ｉ）第１の可溶性ＨＶＥＭ結合ドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性ＨＶＥＭ結合ドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性ＨＶＥＭ結合ドメインを含み、Ｎ末端及び／又はＣ末端に追加のドメインを更に含み、追加のドメインは、Ｆｃ断片ドメイン及びヒンジドメインを含み、融合タンパク質は、構造Ｉ−Ａ又は構造Ｉ−Ｂによる二量体構造である、ステップ
を含む方法を提供する。
【００９５】
[0095]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に投与するステップであって、患者への第３のＴＩＬ集団の投与の翌日に開始する、ＴＮＦＲＳＦアゴニストで患者を処置するステップを更に含み、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、４週間ごとに最大８サイクルまで０．１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で静脈内投与される、ステップ
を含む方法を提供する。
【００９６】
[0096]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に投与するステップであって、患者から腫瘍を切除するステップ前にＴＮＦＲＳＦアゴニストで患者を処置するステップを更に含み、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、４週間ごとに最大８サイクルまで０．１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で静脈内投与される、ステップ
を含む方法を提供する。
【００９７】
[0097]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に投与するステップであって、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、ウレルマブ、ウトミルマブ、ＥＵ−１０１、タボリキシズマブ、Creative Biolabs MOM-18455並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー及び組み合わせからなる群から選択される、ステップ
を含む方法を提供する。
【００９８】
[0098]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に投与するステップであって、第１の細胞培養培地は、第２のＴＮＦＲＳＦアゴニストを含む、ステップ
を含む方法を提供する。
【００９９】
[0099]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に投与するステップであって、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、初期拡大培養中、毎日、２日ごと、３日ごと、４日ごと、５日ごと、６日ごと、７日ごと及び２週間ごとからなる群から選択される間隔で第１の細胞培養培地に添加される、ステップ
を含む方法を提供する。
【０１００】
[00100]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に投与するステップであって、ＴＮＦＲＳＦアゴニスト及び少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストは、急速拡大培養中、毎日、２日ごと、３日ごと、４日ごと、５日ごと、６日ごと、７日ごと及び２週間ごとからなる群から選択される間隔で第２の細胞培養培地に添加される、ステップ
を含む方法を提供する。
【０１０１】
[00101]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に投与するステップであって、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、細胞培養培地中において０．１μｇ／ｍＬ〜１００μｇ／ｍＬの濃度を達成するのに十分な濃度で添加され、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストは、Ａ２ａＲシグナル伝達経路の機能的アンタゴニズムを達成するために添加される、ステップ
を含む方法を提供する。
【０１０２】
[00102]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に投与するステップであって、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、細胞培養培地中において２０μｇ／ｍＬ〜４０μｇ／ｍＬの濃度を達成するのに十分な濃度で添加される、ステップ
を含む方法を提供する。
【０１０３】
[00103]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に投与するステップであって、ＩＬ−２は、第１の細胞培養培地中に約１０〜約６０００ＩＵ／ｍＬの初期濃度で存在する、ステップ
を含む方法を提供する。
【０１０４】
[00104]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に投与するステップであって、ＩＬ−２は、第１の細胞培養培地中に約３０００ＩＵ／ｍＬの初期濃度で存在する、ステップ
を含む方法を提供する。
【０１０５】
[00105]  更なる実施形態において、第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に投与し、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストは、第１の細胞培養培地中に存在する。
【０１０６】
[00106]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に投与するステップ（請求項３１の方法）であって、ＩＬ−２は、第１の細胞培養培地中に約８００ＩＵ／ｍＬ〜約１１００ＩＵ／ｍＬの初期濃度で存在する、ステップ
を含む方法を提供する。
【０１０７】
[00107]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に投与するステップであって、ＩＬ−２は、第１の細胞培養培地中に約１０００ＩＵ／ｍＬの初期濃度で存在する、ステップ
を含む方法を提供する。
【０１０８】
[00108]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に投与するステップであって、ＩＬ−２は、第２の細胞培養培地中に約１０〜約６０００ＩＵ／ｍＬの初期濃度で存在する、ステップ
を含む方法を提供する。
【０１０９】
[00109]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に投与するステップであって、ＩＬ−２は、第２の細胞培養培地中に約３０００ＩＵ／ｍＬの初期濃度で存在する、ステップ
を含む方法を提供する。
【０１１０】
[00110]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に投与するステップであって、ＩＬ−２は、第２の細胞培養培地中に約８００ＩＵ／ｍＬ〜約１１００ＩＵ／ｍＬの初期濃度で存在する、ステップ
を含む方法を提供する。
【０１１１】
[00111]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に投与するステップであって、ＩＬ−２は、第２の細胞培養培地中に約１０００ＩＵ／ｍＬの初期濃度で存在し、且つＡ２ａＲアンタゴニストは、Ａ２ａＲ経路を介したシグナル伝達を減衰させるのに十分な濃度で存在する、ステップ
を含む方法を提供する。
【０１１２】
[00112]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に投与するステップであって、ＩＬ−１５は、第１の細胞培養培地中に存在する、ステップ
を含む方法を提供する。
【０１１３】
[00113]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に投与するステップであって、ＩＬ−１５は、第１の細胞培養培地中に約５ｎｇ／ｍＬ〜約２０ｎｇ／ｍＬの初期濃度で存在する、ステップ
を含む方法を提供する。
【０１１４】
[00114]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に投与するステップであって、ＩＬ−１５は、第２の細胞培養培地中に存在する、ステップ
を含む方法を提供する。
【０１１５】
[00115]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に投与するステップであって、ＩＬ−１５は、第２の細胞培養培地中に約５ｎｇ／ｍＬ〜約２０ｎｇ／ｍＬの初期濃度で存在する、ステップ
を含む方法を提供する。
【０１１６】
[00116]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に投与するステップであって、ＩＬ−２１は、第１の細胞培養培地中に存在する、ステップ
を含む方法を提供する。
【０１１７】
[00117]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に投与するステップであって、ＩＬ−２１は、第１の細胞培養培地中に約５ｎｇ／ｍＬ〜約２０ｎｇ／ｍＬの初期濃度で存在する、ステップ
を含む方法を提供する。
【０１１８】
[00118]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に投与するステップであって、ＩＬ−２１は、第２の細胞培養培地中に存在する、ステップ
を含む方法を提供する。
【０１１９】
[00119]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に投与するステップであって、ＩＬ−２１は、第２の細胞培養培地中に約５ｎｇ／ｍＬ〜約２０ｎｇ／ｍＬの初期濃度で存在する、ステップ
を含む方法を提供する。
【０１２０】
[00120]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に投与するステップであって、ＯＫＴ−３抗体は、第２の細胞培養培地中に約１０ｎｇ／ｍＬ〜約６０ｎｇ／ｍＬの初期濃度で存在する、ステップ
を含む方法を提供する。
【０１２１】
[00121]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に投与するステップであって、ＯＫＴ−３抗体は、第２の細胞培養培地中に約３０ｎｇ／ｍＬの初期濃度で存在する、ステップ
を含む方法を提供する。
【０１２２】
[00122]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に投与するステップであって、初期拡大培養は、ガス透過性容器を使用して実施される、ステップ
を含む方法を提供する。
【０１２３】
[00123]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に投与するステップであって、急速拡大培養は、ガス透過性容器を使用して実施される、ステップ
を含む方法を提供する。
【０１２４】
[00124]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に投与するステップであって、第３のＴＩＬ集団を患者に投与する前に患者を骨髄非破壊的リンパ枯渇レジメンで処置するステップを更に含む、ステップ
を含む方法を提供する。
【０１２５】
[00125]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に投与するステップであって、第３のＴＩＬ集団を患者に投与する前に患者を骨髄非破壊的リンパ枯渇レジメンで処置するステップを更に含み、骨髄非破壊的リンパ枯渇レジメンは、６０ｍｇ／ｍ２／日の用量で２日間にわたってシクロホスファミドを投与し、続いて２５ｍｇ／ｍ２／日の用量で５日間にわたってフルダラビンを投与するステップを含む、ステップ
を含む方法を提供する。
【０１２６】
[00126]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に投与するステップであって、患者への第３のＴＩＬ集団の投与の翌日に開始する漸減性ＩＬ−２レジメンで患者を処置するステップを更に含み、漸減性ＩＬ−２レジメンは、１日目に１８，０００，０００ＩＵ／ｍ２、２日目に９，０００，０００ＩＵ／ｍ２、且つ３日目及び４日目に４，５００，０００ＩＵ／ｍ２の用量で静脈内投与されるアルデスロイキンを含む、ステップ
を含む方法を提供する。
【０１２７】
[00127]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に投与するステップであって、第３のＴＩＬ集団を０．１０ｍｇ／日〜５０ｍｇ／日の用量で患者に投与した後、ペグ化ＩＬ−２で患者を処置するステップを更に含む、ステップ
を含む方法を提供する。
【０１２８】
[00128]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に投与するステップであって、患者への第３のＴＩＬ集団の投与の翌日に開始する高用量ＩＬ−２レジメンで患者を処置するステップを更に含む、ステップ
を含む方法を提供する。
【０１２９】
[00129]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に投与するステップであって、患者への第３のＴＩＬ集団の投与の翌日に開始する高用量ＩＬ−２レジメンで患者を処置するステップを更に含み、高用量ＩＬ−２レジメンは、許容量まで８時間ごとに１５分のボーラス静脈内注入として投与される６００，０００又は７２０，０００ＩＵ／ｋｇのアルデスロイキン又はそのバイオシミラー若しくは変異体を含む、ステップ
を含む方法を提供する。
【０１３０】
[00130]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に投与するステップであって、癌は、黒色腫、卵巣癌、子宮頸癌、肺癌、膀胱癌、乳癌、頭頸部癌、腎細胞癌、急性骨髄性白血病、結腸直腸癌、胆管癌及び肉腫からなる群から選択される、ステップ
を含む方法を提供する。
【０１３１】
[00131]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に投与するステップであって、癌は、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、トリプルネガティブ乳癌、二重抵抗性黒色腫及びブドウ膜（眼内）黒色腫からなる群から選択される、ステップ
を含む方法を提供する。
【０１３２】
[00132]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に投与するステップであって、患者から腫瘍を切除する前にＰＤ−１阻害剤又はＰＤ−Ｌ１阻害剤で患者を処置するステップを更に含む、ステップ
を含む方法を提供する。
【０１３３】
[00133]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に投与するステップであって、患者から腫瘍を切除する前にＰＤ−１阻害剤又はＰＤ−Ｌ１阻害剤で患者を処置するステップを更に含み、ＰＤ−１阻害剤又はＰＤ−Ｌ１阻害剤は、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、デュルバルマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー及び組み合わせからなる群から選択される、ステップ
を含む方法を提供する。
【０１３４】
[00134]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に投与するステップであって、患者から腫瘍を切除した後、アデノシン２ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストで患者を処置するステップを更に含む、ステップ
を含む方法を提供する。
【０１３５】
[00135]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に投与するステップであって、患者から腫瘍を切除した後、（１）ＰＤ−１阻害剤又はＰＤ−Ｌ１阻害剤、及び（２）アデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストで患者を処置するステップを更に含む、ステップ
を含む方法を提供する。
【０１３６】
[00136]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に投与するステップであって、患者から腫瘍を切除した後、ＰＤ−１阻害剤又はＰＤ−Ｌ１阻害剤で患者を処置するステップを更に含み、ＰＤ−１阻害剤又はＰＤ−Ｌ１阻害剤は、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、デュルバルマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー及び組み合わせからなる群から選択される、ステップ
を含む方法を提供する。
【０１３７】
[00137]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に投与するステップであって、第３のＴＩＬ集団を患者に投与した後、ＰＤ−１阻害剤又はＰＤ−Ｌ１阻害剤で患者を処置するステップを更に含む、ステップ
を含む方法を提供する。
【０１３８】
[00138]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に投与するステップであって、第３のＴＩＬ集団を患者に投与した後、ＰＤ−１阻害剤又はＰＤ−Ｌ１阻害剤で患者を処置するステップを更に含み、ＰＤ−１阻害剤又はＰＤ−Ｌ１阻害剤は、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、デュルバルマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー及び組み合わせからなる群から選択される、ステップ
を含む方法を提供する。
【０１３９】
[00139]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団を調製するためのプロセスであって、
（ｂ）第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；及び
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ
を含むプロセスを提供する。
【０１４０】
[00140]  一実施形態において、本発明は、
（ｂ）第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；及び
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ
を含むプロセスから得ることができる腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団を提供する。
【０１４１】
[00141]  一実施形態において、本発明は、癌の処置における使用のためのＴＩＬ集団を提供する。一実施形態において、本発明は、癌の処置における使用のための腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団を含む医薬組成物を提供し、ここで、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団は、
（ｂ）第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；及び
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ
を含むプロセスによって得ることができる。
【０１４２】
[00142]  一実施形態において、第１のＴＩＬ集団は、腫瘍から得られる。一実施形態において、腫瘍は、最初に患者から切除される。一実施形態において、第１のＴＩＬ集団は、患者から切除された腫瘍から得られる。一実施形態において、ＴＩＬ集団は、癌を有する患者に治療有効量で投与するためのものである。
【０１４３】
[00143]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団を拡大培養する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２を含み、初期拡大培養は、１１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３）抗体、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及びＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）任意選択により、ジメチルスルホキシドベースの培地で第３のＴＩＬ集団を凍結保存するステップ
を含む方法を提供する。
【０１４４】
[00144]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２及び少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストを含み、初期拡大培養は、１１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３）抗体、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及びＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を患者に投与するステップ
を含む方法を提供する。
【０１４５】
[00145]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２及び少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストを含み、初期拡大培養は、１１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３）抗体、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及びＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を患者に投与するステップ
を含み、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、４−１ＢＢアゴニスト、ＯＸ４０アゴニスト及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、方法を提供する。
【０１４６】
[00146]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２及び少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストを含み、初期拡大培養は、１１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３）抗体、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及びＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を患者に投与するステップ
を含み、
ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、４−１ＢＢアゴニスト、ＯＸ４０アゴニスト及びそれらの組み合わせからなる群から選択され、
ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、４−１ＢＢアゴニストであり、且つ４−１ＢＢアゴニストは、ウレルマブ、ウトミルマブ、ＥＵ−１０１、融合タンパク質並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー及び組み合わせからなる群から選択される、方法を提供する。
【０１４７】
[00147]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２及び少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストを含み、初期拡大培養は、１１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３）抗体、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及びＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を患者に投与するステップ
を含み、
ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、４−１ＢＢアゴニスト、ＯＸ４０アゴニスト及びそれらの組み合わせからなる群から選択され、
ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、ＯＸ４０アゴニストであり、且つＯＸ４０アゴニストは、タボリキシズマブ、ＧＳＫ３１７４９９８、ＭＥＤＩ６４６９、ＭＥＤＩ６３８３、ＭＯＸＲ０９１６、ＰＦ−０４５１８６００、Creative Biolabs MOM-18455並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー及び組み合わせからなる群から選択され、
ＯＸ４アゴニストは、ステップ（ｄ）の開始時に１μｇ／ｍＬ〜３０μｇ／ｍＬの濃度で存在する、方法を提供する。
【０１４８】
[00148]  一実施形態において、本発明は、前述の実施形態のいずれかの方法を提供し、ここで、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、ステップ（ｄ）の開始時に５μｇ／ｍＬ〜２０μｇ／ｍＬの濃度で存在する。
【０１４９】
[00149]  一実施形態において、本発明は、前述の実施形態のいずれかの方法を提供し、ここで、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、ステップ（ｄ）の開始時に約１０μｇ／ｍＬの濃度で存在する。
【０１５０】
[00150]  一実施形態において、本発明は、前述の実施形態のいずれかの方法を提供し、ここで、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、ステップ（ｄ）の全体を通して１μｇ／ｍＬ〜３０μｇ／ｍＬの濃度に維持される。
【０１５１】
[00151]  一実施形態において、本発明は、前述の実施形態のいずれかの方法を提供し、ここで、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、ステップ（ｄ）の全体を通して５μｇ／ｍＬ〜２０μｇ／ｍＬの濃度に維持される。
【０１５２】
[00152]  一実施形態において、本発明は、前述の実施形態のいずれかの方法を提供し、ここで、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、ステップ（ｄ）の全体を通して約１０μｇ／ｍＬの濃度に維持される。
【０１５３】
[00153]  一実施形態において、本発明は、前述の実施形態のいずれかの方法を提供し、ここで、１つのアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストは、ステップ（ｄ）の全体を通して少なくとも１ｎＭ、約１０ｎＭ、約５０ｎＭ、約６０ｎＭ、約７０ｎＭ、約８０ｎＭ、約８５ｎＭ、約９０ｎＭ、約９５ｎＭ、約１００ｎＭ、約１ｕＭ、約１０ｕＭ、約２５ｕＭ、約５０ｕＭ、約７５ｕＭ、約８０ｕＭ、約９０ｕＭ、約１００ｕＭ、約１２５ｕＭ、約１５０ｕＭ、約１７５ｕＭ、約２００ｕＭ、約２２５ｕＭ、約２５０ｕＭ、約２８０ｕＭ、約２７５ｕＭ、約２９０ｕＭ、約３００ｕＭ、５００ｕＭ未満、１０００ｕＭ未満、２０００ｕＭ未満、特定のＡ２ａＲアンタゴニストの溶解限度程度の濃度に維持される。
【０１５４】
[00154]  一実施形態において、本発明は、前述の実施形態のいずれかの方法を提供し、ここで、第３のＴＩＬ集団は、第２のＴＩＬ集団におけるＣＤ４＋ＴＩＬに対するＣＤ８＋ＴＩＬの参照比と比較して、ＣＤ４＋ＴＩＬに対するＣＤ８＋ＴＩＬの増加した比を示す。一実施形態において、増加した比は、参照比より少なくとも１％大きい、参照比より少なくとも２％大きい、参照比より少なくとも５％大きい、参照比より少なくとも１０％大きい、参照比より少なくとも１５％大きい、参照比より少なくとも２０％大きい、参照比より少なくとも２５％大きい、参照比より少なくとも３０％大きい、参照比より少なくとも３５％大きい、参照比より少なくとも４０％大きい、参照比より少なくとも４５％大きい及び参照比より少なくとも５０％大きいからなる群から選択される。一実施形態において、増加した比率は、参照比より５％〜８０％大きい。一実施形態において、増加した比率は、参照比より１０％〜７０％大きい。一実施形態において、増加した比率は、参照比より１５％〜６０％大きい。前述の実施形態の１つにおいて、参照比は、ＴＮＦＲＳＦアゴニストに対するレスポンダーである第３のＴＩＬ集団から得られる。
【０１５５】
[00155]  一実施形態では、本発明は、前述の実施形態のいずれかの方法を提供し、ここで、癌は、黒色腫、ブドウ膜（眼内）黒色腫、卵巣癌、子宮頸癌、肺癌、膀胱癌、乳癌、頭頸部癌（頭頸部扁平上皮癌）、腎細胞癌、結腸直腸癌、膵癌、神経膠芽腫、胆管癌及び肉腫からなる群から選択される。一実施形態では、本発明は、前述の実施形態のいずれかの方法を提供し、ここで、癌は、皮膚黒色腫、ブドウ膜（眼内）黒色腫、プラチナ耐性卵巣癌、膵管腺癌、骨肉腫、トリプルネガティブ乳癌、非小細胞肺癌からなる群から選択される。
【０１５６】
[00156]  一実施形態において、前述の実施形態のいずれかを以下の実施形態のいずれかと組み合わせ得る。
【０１５７】
[00157]  一実施形態において、プロセスは、インビトロ又はエクスビボのプロセスである。
【０１５８】
[00158]  一実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、４−１ＢＢアゴニスト、ＯＸ４０アゴニスト、ＣＤ２７アゴニスト、ＧＩＴＲアゴニスト、ＨＶＥＭアゴニスト、ＣＤ９５アゴニスト及びそれらの組み合わせからなる群から選択される。
【０１５９】
[00159]  一実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、４−１ＢＢアゴニストである。
【０１６０】
[00160]  一実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、４−１ＢＢアゴニストであり、且つ４−１ＢＢアゴニストは、ウレルマブ、ウトミルマブ、ＥＵ−１０１並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー及び組み合わせからなる群から選択される。
【０１６１】
[00161]  一実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、４−１ＢＢアゴニストであり、且つ４−１ＢＢアゴニストは、４−１ＢＢアゴニスト融合タンパク質である。
【０１６２】
[00162]  一実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、４−１ＢＢアゴニスト融合タンパク質であり、且つ４−１ＢＢアゴニスト融合タンパク質は、（ｉ）第１の可溶性４−１ＢＢ結合ドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性４−１ＢＢ結合ドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性４−１ＢＢ結合ドメインを含み、Ｎ末端及び／又はＣ末端に追加のドメインを更に含み、追加のドメインは、Ｆｃ断片ドメイン及びヒンジドメインを含み、融合タンパク質は、構造Ｉ−Ａ又は構造Ｉ−Ｂによる二量体構造である。
【０１６３】
[00163]  一実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、ＯＸ４０アゴニストである。
【０１６４】
[00164]  一実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、ＯＸ４０アゴニストであり、且つＯＸ４０アゴニストは、タボリキシズマブ、ＧＳＫ３１７４９９８、ＭＥＤＩ６４６９、ＭＥＤＩ６３８３、ＭＯＸＲ０９１６、ＰＦ−０４５１８６００、Creative Biolabs MOM-18455並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー及び組み合わせからなる群から選択される。
【０１６５】
[00165]  一実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、ＯＸ４０アゴニストであり、且つＯＸ４０アゴニストは、ＯＸ４０アゴニスト融合タンパク質である。
【０１６６】
[00166]  一実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、ＯＸ４０アゴニスト融合タンパク質であり、且つＯＸ４０アゴニスト融合タンパク質は、（ｉ）第１の可溶性ＯＸ４０結合ドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性ＯＸ４０結合ドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性ＯＸ４０結合ドメインを含み、Ｎ末端及び／又はＣ末端に追加のドメインを更に含み、追加のドメインは、Ｆｃ断片ドメイン及びヒンジドメインを含み、融合タンパク質は、構造Ｉ−Ａ又は構造Ｉ−Ｂによる二量体構造である。
【０１６７】
[00167]  一実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、ＣＤ２７アゴニストである。
【０１６８】
[00168]  一実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、ＣＤ２７アゴニストであり、且つＣＤ２７アゴニストは、バルリルマブ又はそれらの断片、誘導体、変異体若しくはバイオシミラーである。
【０１６９】
[00169]  一実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、ＣＤ２７アゴニストであり、且つＣＤ２７アゴニストは、ＣＤ２７アゴニスト融合タンパク質である。
【０１７０】
[00170]  一実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、ＣＤ２７アゴニストであり、且つＣＤ２７アゴニスト融合タンパク質は、（ｉ）第１の可溶性ＣＤ２７結合ドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性ＣＤ２７結合ドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性ＣＤ２７結合ドメインを含み、Ｎ末端及び／又はＣ末端に追加のドメインを更に含み、追加のドメインは、Ｆｃ断片ドメイン及びヒンジドメインを含み、融合タンパク質は、構造Ｉ−Ａ又は構造Ｉ−Ｂによる二量体構造である。
【０１７１】
[00171]  一実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、ＧＩＴＲアゴニストである。
【０１７２】
[00172]  一実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、ＧＩＴＲアゴニストであり、且つＧＩＴＲアゴニストは、ＴＲＸ５１８、６Ｃ８、３６Ｅ５、３Ｄ６、６１Ｇ６、６Ｈ６、６１Ｆ６、１Ｄ８、１７Ｆ１０、３５Ｄ８、４９Ａ１、９Ｅ５、３１Ｈ６、２１５５、６９８、７０６、８２７、１６４９、１７１８、１Ｄ７、３３Ｃ９、３３Ｆ６、３４Ｇ４、３５Ｂ１０、４１Ｅ１１、４１Ｇ５、４２Ａ１１、４４Ｃ１、４５Ａ８、４６Ｅ１１、４８Ｈ１２、４８Ｈ７、４９Ｄ９、４９Ｅ２、４８Ａ９、５Ｈ７、７Ａ１０、９Ｈ６並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー及び組み合わせからなる群から選択される。
【０１７３】
[00173]  一実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、ＧＩＴＲアゴニストであり、且つＧＩＴＲアゴニストは、ＧＩＴＲアゴニスト融合タンパク質である。
【０１７４】
[00174]  一実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、ＧＩＴＲアゴニスト融合タンパク質であり、且つＧＩＴＲアゴニスト融合タンパク質は、（ｉ）第１の可溶性ＧＩＴＲ結合ドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性ＧＩＴＲ結合ドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性ＧＩＴＲ結合ドメインを含み、Ｎ末端及び／又はＣ末端に追加のドメインを更に含み、追加のドメインは、Ｆｃ断片ドメイン及びヒンジドメインを含み、融合タンパク質は、構造Ｉ−Ａ又は構造Ｉ−Ｂによる二量体構造である。
【０１７５】
[00175]  一実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、ＨＶＥＭアゴニストである。
【０１７６】
[00176]  一実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、ＨＶＥＭアゴニストであり、且つＨＶＥＭアゴニストは、ＨＶＥＭアゴニスト融合タンパク質である。
【０１７７】
[00177]  一実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、ＨＶＥＭアゴニスト融合タンパク質であり、且つＨＶＥＭアゴニスト融合タンパク質は、（ｉ）第１の可溶性ＨＶＥＭ結合ドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性ＨＶＥＭ結合ドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性ＨＶＥＭ結合ドメインを含み、Ｎ末端及び／又はＣ末端に追加のドメインを更に含み、追加のドメインは、Ｆｃ断片ドメイン及びヒンジドメインを含み、融合タンパク質は、構造Ｉ−Ａ又は構造Ｉ−Ｂによる二量体構造である。
【０１７８】
[00178]  一実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、ウレルマブ、ウトミルマブ、ＥＵ−１０１、タボリキシズマブ、Creative Biolabs MOM-18455並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー及び組み合わせからなる群から選択される。
【０１７９】
[00179]  一実施形態において、第１の細胞培養培地は、第２のＴＮＦＲＳＦアゴニストを含む。
【０１８０】
[00180]  一実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、初期拡大培養中、毎日、２日ごと、３日ごと、４日ごと、５日ごと、６日ごと、７日ごと及び２週間ごとからなる群から選択される間隔で第１の細胞培養培地に添加される。
【０１８１】
[00181]  一実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、急速拡大培養中、毎日、２日ごと、３日ごと、４日ごと、５日ごと、６日ごと、７日ごと及び２週間ごとからなる群から選択される間隔で第２の細胞培養培地に添加される。
【０１８２】
[00182]  一実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、細胞培養培地中において０．１μｇ／ｍＬ〜１００μｇ／ｍＬの濃度を達成するのに十分な濃度で添加される。
【０１８３】
[00183]  一実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、細胞培養培地中において２０μｇ／ｍＬ〜４０μｇ／ｍＬの濃度を達成するのに十分な濃度で添加される。
【０１８４】
[00184]  ＴＮＦＲＳＦアゴニストの更なる詳細は、本明細書に提供される。
【０１８５】
[00185]  一実施形態において、ＩＬ−２は、第１の細胞培養培地中に約１０〜約６０００ＩＵ／ｍＬの初期濃度で存在する。
【０１８６】
[00186]  一実施形態において、ＩＬ−２は、第１の細胞培養培地中に約３０００ＩＵ／ｍＬの初期濃度で存在する。
【０１８７】
[00187]  一実施形態において、ＩＬ−２は、第１の細胞培養培地中に約８００ＩＵ／ｍＬ〜約１１００ＩＵ／ｍＬの初期濃度で存在する。
【０１８８】
[00188]  一実施形態において、ＩＬ−２は、第１の細胞培養培地中に約１０００ＩＵ／ｍＬの初期濃度で存在する。
【０１８９】
[00189]  一実施形態において、ＩＬ−２は、第２の細胞培養培地中に約１０〜約６０００ＩＵ／ｍＬの初期濃度で存在する。
【０１９０】
[00190]  一実施形態において、ＩＬ−２は、第２の細胞培養培地中に約３０００ＩＵ／ｍＬの初期濃度で存在する。
【０１９１】
[00191]  一実施形態において、ＩＬ−２は、第２の細胞培養培地中に約８００ＩＵ／ｍＬ〜約１１００ＩＵ／ｍＬの初期濃度で存在する。
【０１９２】
[00192]  一実施形態において、ＩＬ−２は、第２の細胞培養培地中に約１０００ＩＵ／ｍＬの初期濃度で存在する。
【０１９３】
[00193]  一実施形態において、ＩＬ−１５は、第１の細胞培養培地中に存在する。
【０１９４】
[00194]  一実施形態において、ＩＬ−１５は、第１の細胞培養培地中に約５ｎｇ／ｍＬ〜約２０ｎｇ／ｍＬの初期濃度で存在する。
【０１９５】
[00195]  一実施形態において、ＩＬ−１５は、第２の細胞培養培地中に存在する。
【０１９６】
[00196]  一実施形態において、ＩＬ−１５は、第２の細胞培養培地中に約５ｎｇ／ｍＬ〜約２０ｎｇ／ｍＬの初期濃度で存在する。
【０１９７】
[00197]  一実施形態において、ＩＬ−２１は、第１の細胞培養培地中に存在する。
【０１９８】
[00198]  一実施形態において、ＩＬ−２１は、第１の細胞培養培地中に約５ｎｇ／ｍＬ〜約２０ｎｇ／ｍＬの初期濃度で存在する。
【０１９９】
[00199]  一実施形態において、ＩＬ−２１は、第２の細胞培養培地中に存在する。
【０２００】
[00200]  一実施形態において、ＩＬ−２１は、第２の細胞培養培地中に約５ｎｇ／ｍＬ〜約２０ｎｇ／ｍＬの初期濃度で存在する。
【０２０１】
[00201]  一実施形態において、ＯＫＴ−３抗体は、第２の細胞培養培地中に約１０ｎｇ／ｍＬ〜約６０ｎｇ／ｍＬの初期濃度で存在する。
【０２０２】
[00202]  一実施形態において、ＯＫＴ−３抗体は、第２の細胞培養培地中に約３０ｎｇ／ｍＬの初期濃度で存在する。
【０２０３】
[00203]  一実施形態において、初期拡大培養は、ガス透過性容器を使用して実施される。
【０２０４】
[00204]  一実施形態において、急速拡大培養は、ガス透過性容器を使用して実施される。
【０２０５】
[00205]  一実施形態において、本発明は、癌の処置における使用のための腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団を提供し、ここで、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団は、本明細書に記載されるような本発明のプロセスによって得ることができる。
【０２０６】
[00206]  一実施形態において、本発明は、癌を処置する方法における使用のための腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団を含む医薬組成物を提供し、ここで、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団は、本明細書に記載されるような本発明のプロセスによって得ることができる。
【０２０７】
[00207]  一実施形態において、ＴＩＬ集団及び／又は医薬組成物は、ＴＮＦＲＳＦと組み合わせた癌の処置における使用のためのものである。
【０２０８】
[00208]  一実施形態において、本発明は、本明細書に記載されるような本発明のプロセスによって得ることができるＴＩＬ集団と、癌の処置における使用のためのＴＮＦＲＳＦとの組み合わせを提供する。
【０２０９】
[00209]  一実施形態において、ＴＩＬ集団及び／又は医薬組成物は、ＴＮＦＲＳＦアゴニストと組み合わせた癌の処置における使用のためのものであり、ここで、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、患者への第３のＴＩＬ集団の投与の翌日に投与するためのものであり、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、４週間ごとに最大８サイクルまで０．１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で静脈内投与される。
【０２１０】
[00210]  一実施形態において、ＴＩＬ集団及び／又は医薬組成物は、ＴＮＦＲＳＦアゴニストと組み合わせた癌の処置における使用のためのものであり、ここで、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、患者からの腫瘍の切除のステップ前に投与するためのものであり、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、４週間ごとに最大８サイクルまで０．１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で静脈内投与するためのものである。
【０２１１】
[00211]  一実施形態において、ＴＩＬ集団及び／又は医薬組成物は、骨髄非破壊的リンパ枯渇レジメンと組み合わせた癌の処置における使用のためのものである。
【０２１２】
[00212]  一実施形態において、ＴＩＬ集団及び／又は医薬組成物は、第３のＴＩＬ集団及び／又は第３のＴＩＬ集団を含む医薬組成物を患者に投与する前の骨髄非破壊的リンパ枯渇レジメンと組み合わせた癌の処置における使用のためのものである。
【０２１３】
[00213]  一実施形態において、ＴＩＬ集団及び／又は医薬組成物は、第３のＴＩＬ集団及び／又は第３のＴＩＬ集団を含む医薬組成物を患者に投与する前の骨髄非破壊的リンパ枯渇レジメンと組み合わせた癌の処置における使用のためのものであり、ここで、骨髄非破壊的リンパ枯渇レジメンは、６０ｍｇ／ｍ２／日の用量で２日間にわたってシクロホスファミドを投与し、続いて２５ｍｇ／ｍ２／日の用量で５日間にわたってフルダラビンを投与するステップを含む。骨髄非破壊的リンパ枯渇レジメンの更なる詳細は、本明細書において、例えば「化学療法による骨髄非破壊的リンパ枯渇」という見出しの下に提供される。
【０２１４】
[00214]  一実施形態において、ＴＩＬ集団及び／又は医薬組成物は、ＩＬ−２レジメンと組み合わせた癌の処置における使用のためのものである。
【０２１５】
[00215]  一実施形態において、ＩＬ−２レジメンは、漸減性ＩＬ−２レジメンである。
【０２１６】
[00216]  一実施形態において、ＴＩＬ集団及び／又は医薬組成物は、第３のＴＩＬ集団及び／又は第３のＴＩＬ集団を含む医薬組成物を患者に投与した翌日に開始する漸減性ＩＬ−２レジメンと組み合わせた癌の処置における使用のためのものであり、ここで、漸減性ＩＬ−２レジメンは、１日目に１８，０００，０００ＩＵ／ｍ２、２日目に９，０００，０００ＩＵ／ｍ２、且つ３日目及び４日目に４，５００，０００ＩＵ／ｍ２の用量で静脈内投与されるアルデスロイキンを含む。
【０２１７】
[00217]  一実施形態において、ＴＩＬ集団及び／又は医薬組成物は、ペグ化ＩＬ−２と組み合わせた癌の処置における使用のためのものである。
【０２１８】
[00218]  一実施形態において、ＴＩＬ集団及び／又は医薬組成物は、０．１０ｍｇ／日〜５０ｍｇ／日の用量において第３のＴＩＬ集団及び／又は第３のＴＩＬ集団を含む医薬組成物を患者に投与した後に投与されるペグ化ＩＬ−２と組み合わせた癌を処置する方法における使用のためのものである。
【０２１９】
[00219]  一実施形態において、ＴＩＬ集団及び／又は医薬組成物は、高用量ＩＬ−２レジメンと組み合わせた癌を処置する方法における使用のためのものである。
【０２２０】
[00220]  一実施形態において、ＴＩＬ集団及び／又は医薬組成物は、第３のＴＩＬ集団及び／又は第３のＴＩＬ集団を含む医薬組成物を患者に投与した翌日に開始する高用量ＩＬ−２レジメンと組み合わせた癌を処置する方法における使用のためのものである。
【０２２１】
[00221]  一実施形態において、ＴＩＬ集団及び／又は医薬組成物は、第３のＴＩＬ集団及び／又は第３のＴＩＬ集団を含む医薬組成物を患者に投与した翌日に開始する高用量ＩＬ−２レジメンと組み合わせた癌の処置における使用のためのものであり、ここで、高用量ＩＬ−２レジメンは、許容量まで８時間ごとに１５分のボーラス静脈内注入として投与される６００，０００又は７２０，０００ＩＵ／ｋｇのアルデスロイキン又はそのバイオシミラー若しくは変異体を含む。
【０２２２】
[00222]  一実施形態において、ＴＩＬ集団及び／又は医薬組成物は、癌の処置における使用のためのものであり、癌は、黒色腫、卵巣癌、子宮頸癌、肺癌、膀胱癌、乳癌、頭頸部癌、腎細胞癌、急性骨髄性白血病、結腸直腸癌、胆管癌及び肉腫からなる群から選択される。
【０２２３】
[00223]  一実施形態において、ＴＩＬ集団及び／又は医薬組成物は、癌の処置における使用のためのものであり、癌は、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、トリプルネガティブ乳癌、二重抵抗性黒色腫及びブドウ膜（眼内）黒色腫からなる群から選択される。
【０２２４】
[00224]  一実施形態において、ＴＩＬ集団及び／又は医薬組成物は、ＰＤ−１阻害剤又はＰＤ−Ｌ１阻害剤と組み合わせた癌の処置における使用のためのものである。
【０２２５】
[00225]  一実施形態において、ＴＩＬ集団及び／又は医薬組成物は、ＰＤ−１阻害剤又はＰＤ−Ｌ１阻害剤と組み合わせた癌の処置における使用のためのものであり、ここで、ＰＤ−１阻害剤又はＰＤ−Ｌ１阻害剤は、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、デュルバルマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー及び組み合わせからなる群から選択される。
【０２２６】
[00226]  一実施形態において、ＴＩＬ集団及び／又は医薬組成物は、ＰＤ−１阻害剤又はＰＤ−Ｌ１阻害剤と組み合わせた癌の処置における使用のためのものであり、ここで、ＰＤ−１阻害剤又はＰＤ−Ｌ１阻害剤は、患者から腫瘍を切除する前に投与するためのものである。
【０２２７】
[00227]  一実施形態において、ＴＩＬ集団及び／又は医薬組成物は、患者から腫瘍を切除する前のＰＤ−１阻害剤又はＰＤ−Ｌ１阻害剤と組み合わせた癌の処置における使用のためのものであり、ここで、ＰＤ−１阻害剤又はＰＤ−Ｌ１阻害剤は、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、デュルバルマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー及び組み合わせからなる群から選択される。
【０２２８】
[00228]  一実施形態において、ＴＩＬ集団及び／又は医薬組成物は、ＰＤ−１阻害剤又はＰＤ−Ｌ１阻害剤と組み合わせた癌を処置する方法における使用のためのものである。
【０２２９】
[00229]  一実施形態において、ＴＩＬ集団及び／又は医薬組成物は、ＰＤ−１阻害剤又はＰＤ−Ｌ１阻害剤と組み合わせた癌の処置における使用のためのものであり、ここで、ＰＤ−１阻害剤又はＰＤ−Ｌ１阻害剤は、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、デュルバルマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー及び組み合わせからなる群から選択される。
【０２３０】
[00230]  一実施形態において、ＴＩＬ集団及び／又は医薬組成物は、患者から腫瘍を切除した後のＰＤ−１阻害剤又はＰＤ−Ｌ１阻害剤と組み合わせた癌を処置する方法における使用のためのものである。
【０２３１】
[00231]  一実施形態において、ＴＩＬ集団及び／又は医薬組成物は、患者から腫瘍を切除した後のＰＤ−１阻害剤又はＰＤ−Ｌ１阻害剤と組み合わせた癌の処置における使用のためのものであり、ここで、ＰＤ−１阻害剤又はＰＤ−Ｌ１阻害剤は、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、デュルバルマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー及び組み合わせからなる群から選択される。
【０２３２】
[00232]  一実施形態において、ＴＩＬ集団及び／又は医薬組成物は、ＰＤ−１阻害剤又はＰＤ−Ｌ１阻害剤と組み合わせた癌の処置における使用のためのものであり、ここで、ＰＤ−１又はＰＤ−Ｌ１阻害剤は、第３のＴＩＬ集団及び／又は第３のＴＩＬ集団を含む医薬組成物を患者に投与した後の投与のためのものである。
【０２３３】
[00233]  一実施形態において、ＴＩＬ集団及び／又は医薬組成物は、患者に第３のＴＩＬ集団を投与した後の投与のためのＰＤ−１阻害剤又はＰＤ−Ｌ１阻害剤と組み合わせた癌の処置における使用のためのものであり、ここで、ＰＤ−１阻害剤又はＰＤ−Ｌ１阻害剤は、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、デュルバルマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー及び組み合わせからなる群から選択される。ＰＤ−１阻害剤及びＰＤ−Ｌ１阻害剤の更なる詳細は、本明細書において、例えば「ＰＤ−１及びＰＤ−Ｌ１阻害剤との組み合わせ」という見出しの下に記載される。一部の実施形態において、ＴＩＬ集団及び／又はＴＩＬ集団を含む医薬組成物は、本明細書、例えば「ＴＩＬの医薬組成物、投与量及び投与レジメン」及び「ＴＮＦＲＳＦアゴニストの医薬組成物、投与量及び投与レジメン」という見出しの下に記載されるような１つ以上の特徴を更に含む。
【０２３４】
図面の簡単な説明
[00234]  前述の概要及び以下の発明の詳細な説明は、添付の図面と併せて読むことでよりよく理解されるであろう。
【図面の簡単な説明】
【０２３５】
【図１】[00235]ＴＩＬ拡大培養及び処置プロセスを図示する。本発明のＡ２ＡＲアンタゴニスト（図１では「Ａ２ＡＲ」と表示）又はＴＮＦＲＳＦアゴニストは、プレＲＥＰ段階（図の上半分）又はＲＥＰ段階（図の下半分）の両方で使用され得、ＩＬ−２を各細胞培養物に添加するときに添加され得る。ステップ１は、１０個のG-Rex 10フラスコへの約４つの腫瘍断片の添加を指す。ステップ２では、およそ４０×１０６ＴＩＬ以上が入手される。ステップ３では、ＲＥＰのために３６個のG-Rex 100フラスコへの分割が生じる。ステップ４では、ＴＩＬを遠心分離によって回収する。新鮮ＴＩＬ生成物は、およそ４３日の合計プロセス時間後にステップ５で入手され、その時点でＴＩＬが患者に注入され得る。
【図２】[00236]本開示のＡ２ＡＲアンタゴニストで増殖されたＴＩＬを伴う使用のための処置プロトコルを示す。本開示のＴＮＦＲＳＦアゴニストは、ＴＩＬの投与後又は拡大培養プロセス中にも本明細書中に記載されるように治療中に使用され得る。
【図３】[00237]例示的なＴＩＬ拡大培養及び製造プロトコル（プロセス２Ａ）を示す。
【図４】[00238]プロセス２Ａで行われる例示的な方法のステップを示す。
【図５】[00239]例示的なＴＩＬ拡大培養プロトコルを示す。
【図６】[00240]フローサイトメトリーによる４−１ＢＢ＋細胞のパーセンテージによって評価される、Creative Biolabs（ＣＢ）及びBPS Biosciences（ＢＰＳ）４−１ＢＢアゴニスト抗体に対する結合親和性を示す。ＣＢ  ４−１ＢＢアゴニストは、最も高い結合親和性を示した。
【図７】[00241]平均蛍光強度（ＭＦＩ）によって評価される、Creative Biolabs（ＣＢ）及びBPS Biosciences（ＢＰＳ）４−１ＢＢアゴニスト抗体に対する結合親和性を示す。ＣＢ  ４−１ＢＢアゴニストは、最も高い結合親和性を示した。
【図８】[00242]抗４−１ＢＢアゴニスト抗体のＮＦ−κＢ経路活性化の評価の結果を示す。
【図９】[00243]フローサイトメトリーによるＯＸ４０＋細胞のパーセンテージによって評価される、Creative BiolabsＯＸ４０アゴニスト抗体に対する結合親和性を示す。
【図１０】[00244]平均蛍光強度（ＭＦＩ）によって評価される、Creative BiolabsＯＸ４０アゴニスト抗体に対する結合親和性を示す。
【図１１】[00245]Creative Biolabs抗ＯＸ４０アゴニスト抗体（示される５つの濃度で）と、市販の抗ＯＸ４０（クローンBer-ACT35）アゴニストとの同等の結合親和性を示す。各腫瘍の名称の最初の文字は、組織学を示す：Ｃ＝子宮頸部；Ｈ＝頭頸部（頭頸部扁平上皮癌）；Ｌ＝肺；及びＭ＝黒色腫。
【図１２】[00246]抗ＯＸ４０アゴニスト抗体のＮＦ−κＢ経路活性化の評価の結果を示す。ＯＸ４０レポーター細胞は、ＰＢＭＣフィーダー細胞の有無にかかわらず、１、２、４、８及び１６μｇ／ｍＬの濃度で抗ＯＸ４０単独又はアイソタイプコントロールのいずれかで２４時間処置された。細胞を、ワンステップ型ルシフェラーゼ試薬を使用して溶解し、ルシフェラーゼ活性をルミノメーターで測定した。
【図１３】[00247]プレＲＥＰ中の４−１ＢＢ及びＯＸ４０アゴニストの実験についての実験設計を示す。
【図１４】[00248]図２３の実験設計で使用された腫瘍組織学を示す。
【図１５】[00249]プレＲＥＰ中に使用される４−１ＢＢ及び抗ＯＸ４０アゴニストの、ＴＩＬの性能及び特性への影響を評価するために使用されるデータ分析戦略を示す。
【図１６】[00250]ＣＢ  ４−１ＢＢアゴニストを使用した細胞拡大培養の総細胞数の結果を示す（Ｎ＝３）。ＮＴ＝試験なし（対照）。ｐ値は、＞０．９９であった。
【図１７】[00251]ＣＢ  ＯＸ４０アゴニストを使用した細胞拡大培養の総細胞数の結果を示す（Ｎ＝５）。ＮＴ＝試験なし（対照）。ｐ値は、０．０６であった。
【図１８】[00252]ＣＢ  ４−１ＢＢアゴニスト及びＯＸ−４０アゴニストを使用した細胞拡大培養の総細胞数の結果を示す（Ｎ＝２）。ＮＴ＝試験なし（対照）
【図１９】[00253]ＣＢ  ４−１ＢＢアゴニストを使用した細胞拡大培養の総ＣＤ８＋細胞数の結果を示す（Ｎ＝３）。ｐ値は、０．５であった。
【図２０】[00254]ＣＢ  ＯＸ４０アゴニストを使用した細胞拡大培養の総ＣＤ８＋細胞数の結果を示す（Ｎ＝５）。ｐ値は、０．０３であった。
【図２１】[00255]ＣＢ  ４−１ＢＢアゴニスト及びＯＸ−４０アゴニストを使用した細胞拡大培養の総ＣＤ８＋細胞数の結果を示す（Ｎ＝２）。ＮＴ＝試験なし（対照）。
【図２２】[00256]ＣＢ  ４−１ＢＢアゴニストを使用した細胞拡大培養の総ＣＤ８＋／ＣＤ４＋細胞数比の結果を示す（Ｎ＝３）。ｐ値は、０．２であった。
【図２３】[00257]ＣＢ  ＯＸ４０アゴニストを使用した細胞拡大培養の総ＣＤ８＋／ＣＤ４＋細胞数比の結果を示す（Ｎ＝５）。ｐ値は、０．１２であった。
【図２４】[00258]ＣＢ  ４−１ＢＢアゴニスト及びＯＸ−４０アゴニストを使用した細胞拡大培養の総ＣＤ８＋／ＣＤ４＋細胞数比の結果を示す（Ｎ＝２）。ＮＴ＝試験なし（対照）。
【図２５】[00259]４−１ＢＢ又はＯＸ４０アゴニストの存在下で拡大培養されたプレＲＥＰ  ＴＩＬのＲＥＰ増殖の実験スキームを示す。
【図２６】[00260]ＣＢ  ４−１ＢＢアゴニストの存在下で拡大培養されたプレＲＥＰ  ＴＩＬの、プレＲＥＰ（ＮＴ）で処置されていないＴＩＬに対する、ＲＥＰで拡大培養されたＴＩＬの拡大倍数を示す。
【図２７】[00261]ＣＢ  ＯＸ４０アゴニストの存在下で拡大培養されたプレＲＥＰ  ＴＩＬの、プレＲＥＰ（ＮＴ）で処置されていないＴＩＬに対する、ＲＥＰで拡大培養されたＴＩＬの拡大倍数を示す。
【図２８】[00262]ＣＢ  ４−１ＢＢアゴニスト及びＣＢ  ＯＸ４０アゴニストの存在下で拡大培養されたプレＲＥＰ  ＴＩＬの、プレＲＥＰ（ＮＴ）で処置されていないＴＩＬに対する、ＲＥＰで拡大培養されたＴＩＬの拡大倍数を示す。
【図２９】[00263]ＲＥＰ段階中のＣＢ  ＯＸ４０アゴニストの評価のために使用される２１のＴＩＬ系統の組織学を示す。
【図３０】[00264]ＲＥＰ段階中のＣＢ  ＯＸ４０アゴニストの評価のための実験スキームを示す。
【図３１】[00265]ＯＸ４０アゴニスト性抗体の存在により、ＣＤ８＋ＴＩＬがＲＥＰ中に優先的に拡大培養されることを示す（ＣＤ３＋ＣＤ４＋細胞のパーセンテージとして示される）。
【図３２】[00266]ＯＸ４０アゴニスト性抗体の存在により、ＣＤ８＋ＴＩＬがＲＥＰ中に優先的に拡大培養されることを示す（ＣＤ３＋ＣＤ８＋細胞のパーセンテージとして示される）。
【図３３】[00267]非レスポンダーＴＩＬ系統では、抗ＯＸ４０処置後のＣＤ４＋サブセットにおいてＯＸ４０の下方制御が観察されなかったことを示す。
【図３４】[00268]非レスポンダー及びレスポンダーＴＩＬ系統におけるＣＢ  ＯＸ４０アゴニスト用量滴定の実験詳細を示す。
【図３５】[00269]レスポンダーＴＩＬ系統におけるＣＢ  ＯＸ４０アゴニスト用量滴定の結果を示す。
【図３６】[00270]非レスポンダーＴＩＬ系統におけるＣＢ  ＯＸ４０アゴニスト用量滴定の結果を示す。
【図３７】[00271]レスポンダーＬ４００５について比較可能なＴＣＲｖｂレパートリープロファイルを示す。
【図３８】[00272]レスポンダーＨ３００５について比較可能なＴＣＲｖｂレパートリープロファイルを示す。
【図３９】[00273]レスポンダーＭ１０２２について比較可能なＴＣＲｖｂレパートリープロファイルを示す。
【図４０】[00274]様々な条件下でのプレＲＥＰ及びＲＥＰ培養物へのＡ２ＡＲアンタゴニストの添加後に入手された黒色腫ＴＩＬに関する細胞数の結果を示す。
【図４１】[00275]様々な条件下でのプレＲＥＰ及びＲＥＰ培養物へのＡ２ＡＲアンタゴニストの添加後に入手された肺ＴＩＬ（第１の腫瘍）に関する細胞数の結果を示す。
【図４２】[00276]様々な条件下でのプレＲＥＰ及びＲＥＰ培養物へのＡ２ＡＲアンタゴニストの添加後に入手された肺ＴＩＬ（第２の腫瘍）に関する細胞数の結果を示す。
【図４３】[00277]様々な条件下でのプレＲＥＰ及びＲＥＰ培養物へのＡ２ＡＲアンタゴニストの添加後に入手された黒色腫ＴＩＬに関するＣＤ８＋及びＣＤ４＋サブセットのフローサイトメトリー分析を示す。
【図４４】[00278]様々な条件下でのプレＲＥＰ及びＲＥＰ培養物へのＡ２ＡＲアンタゴニストの添加後に入手された肺ＴＩＬ（第１の腫瘍）に関するＣＤ８＋及びＣＤ４＋サブセットのフローサイトメトリー分析を示す。
【図４５】[00279]様々な条件下でのプレＲＥＰ及びＲＥＰ培養物へのＡ２ＡＲアンタゴニストの添加後に入手された肺ＴＩＬ（第２の腫瘍）に関するＣＤ８＋及びＣＤ４＋サブセットのフローサイトメトリー分析を示す。
【図４６】[00280]様々な条件下でのプレＲＥＰ及びＲＥＰ培養物へのＡ２ＡＲアンタゴニストの添加後に黒色腫ＴＩＬから入手されたＥＬＩＳＡ及びＥＬＩｓｐｏｔの結果を示す。
【図４７】[00281]様々な条件下でのプレＲＥＰ及びＲＥＰ培養物へのＡ２ＡＲアンタゴニストの添加後に肺ＴＩＬ（第１の腫瘍）から入手されたＥＬＩＳＡ及びＥＬＩｓｐｏｔの結果を示す。
【図４８】[00282]様々な条件下でのプレＲＥＰ及びＲＥＰ培養物へのＡ２ＡＲアンタゴニストの添加後に肺ＴＩＬ（第２の腫瘍）から入手されたＥＬＩＳＡ及びＥＬＩｓｐｏｔの結果を示す。
【図４９】[00283]本開示のＡ２ＡＲアンタゴニストで増殖されたＴＩＬを伴う使用のための処置プロトコルを示す。本開示のＴＮＦＲＳＦアゴニストは、ＴＩＬの投与後又は拡大培養プロセス中にも本明細書中に記載されるように治療中に使用され得る。
【発明を実施するための形態】
【０２３６】
配列表の簡単な説明
[00284]  配列番号１は、ムロモナブの重鎖のアミノ酸配列である。
[00285]  配列番号２は、ムロモナブの軽鎖のアミノ酸配列である。
[00286]  配列番号３は、組換えヒトＩＬ−２タンパク質のアミノ酸配列である。
[00287]  配列番号４は、アルデスロイキンのアミノ酸配列である。
[00288]  配列番号５は、組換えヒトＩＬ−４タンパク質のアミノ酸配列である。
[00289]  配列番号６は、組換えヒトＩＬ−７タンパク質のアミノ酸配列である。
[00290]  配列番号７は、組換えヒトＩＬ−１５タンパク質のアミノ酸配列である。
[00291]  配列番号８は、組換えヒトＩＬ−２１タンパク質のアミノ酸配列である。
[00292]  配列番号９は、ヒト４−１ＢＢのアミノ酸配列である。
[00293]  配列番号１０は、マウス４−１ＢＢのアミノ酸配列である。
[00294]  配列番号１１は、４−１ＢＢアゴニストモノクローナル抗体ウトミルマブ（ＰＦ−０５０８２５６６）の重鎖である。
[00295]  配列番号１２は、４−１ＢＢアゴニストモノクローナル抗体ウトミルマブ（ＰＦ−０５０８２５６６）の軽鎖である。
[00296]  配列番号１３は、４−１ＢＢアゴニストモノクローナル抗体ウトミルマブ（ＰＦ−０５０８２５６６）の重鎖可変領域（ＶＨ）である。
[00297]  配列番号１４は、４−１ＢＢアゴニストモノクローナル抗体ウトミルマブ（ＰＦ−０５０８２５６６）の軽鎖可変領域（ＶＬ）である。
[00298]  配列番号１５は、４−１ＢＢアゴニストモノクローナル抗体ウトミルマブ（ＰＦ−０５０８２５６６）の重鎖ＣＤＲ１である。
[00299]  配列番号１６は、４−１ＢＢアゴニストモノクローナル抗体ウトミルマブ（ＰＦ−０５０８２５６６）の重鎖ＣＤＲ２である。
[00300]  配列番号１７は、４−１ＢＢアゴニストモノクローナル抗体ウトミルマブ（ＰＦ−０５０８２５６６）の重鎖ＣＤＲ３である。
[00301]  配列番号１８は、４−１ＢＢアゴニストモノクローナル抗体ウトミルマブ（ＰＦ−０５０８２５６６）の軽鎖ＣＤＲ１である。
[00302]  配列番号１９は、４−１ＢＢアゴニストモノクローナル抗体ウトミルマブ（ＰＦ−０５０８２５６６）の軽鎖ＣＤＲ２である。
[00303]  配列番号２０は、４−１ＢＢアゴニストモノクローナル抗体ウトミルマブ（ＰＦ−０５０８２５６６）の軽鎖ＣＤＲ３である。
[00304]  配列番号２１は、４−１ＢＢアゴニストモノクローナル抗体ウレルマブ（ＢＭＳ−６６３５１３）の重鎖である。
[00305]  配列番号２２は、４−１ＢＢアゴニストモノクローナル抗体ウレルマブ（ＢＭＳ−６６３５１３）の軽鎖である。
[00306]  配列番号２３は、４−１ＢＢアゴニストモノクローナル抗体ウレルマブ（ＢＭＳ−６６３５１３）の重鎖可変領域（ＶＨ）である。
[00307]  配列番号２４は、４−１ＢＢアゴニストモノクローナル抗体ウレルマブ（ＢＭＳ−６６３５１３）の軽鎖可変領域（ＶＬ）である。
[00308]  配列番号２５は、４−１ＢＢアゴニストモノクローナル抗体ウレルマブ（ＢＭＳ−６６３５１３）の重鎖ＣＤＲ１である。
[00309]  配列番号２６は、４−１ＢＢアゴニストモノクローナル抗体ウレルマブ（ＢＭＳ−６６３５１３）の重鎖ＣＤＲ２である。
[00310]  配列番号２７は、４−１ＢＢアゴニストモノクローナル抗体ウレルマブ（ＢＭＳ−６６３５１３）の重鎖ＣＤＲ３である。
[00311]  配列番号２８は、４−１ＢＢアゴニストモノクローナル抗体ウレルマブ（ＢＭＳ−６６３５１３）の軽鎖ＣＤＲ１である。
[00312]  配列番号２９は、４−１ＢＢアゴニストモノクローナル抗体ウレルマブ（ＢＭＳ−６６３５１３）の軽鎖ＣＤＲ２である。
[00313]  配列番号３０は、４−１ＢＢアゴニストモノクローナル抗体ウレルマブ（ＢＭＳ−６６３５１３）の軽鎖ＣＤＲ３である。
[00314]  配列番号３１は、ＴＮＦＲＳＦアゴニスト融合タンパク質のＦｃドメインである。
[00315]  配列番号３２は、ＴＮＦＲＳＦアゴニスト融合タンパク質のリンカーである。
[00316]  配列番号３３は、ＴＮＦＲＳＦアゴニスト融合タンパク質のリンカーである。
[00317]  配列番号３４は、ＴＮＦＲＳＦアゴニスト融合タンパク質のリンカーである。
[00318]  配列番号３５は、ＴＮＦＲＳＦアゴニスト融合タンパク質のリンカーである。
[00319]  配列番号３６は、ＴＮＦＲＳＦアゴニスト融合タンパク質のリンカーである。
[00320]  配列番号３７は、ＴＮＦＲＳＦアゴニスト融合タンパク質のリンカーである。
[00321]  配列番号３８は、ＴＮＦＲＳＦアゴニスト融合タンパク質のリンカーである。
[00322]  配列番号３９は、ＴＮＦＲＳＦアゴニスト融合タンパク質のリンカーである。
[00323]  配列番号４０は、ＴＮＦＲＳＦアゴニスト融合タンパク質のリンカーである。
[00324]  配列番号４１は、ＴＮＦＲＳＦアゴニスト融合タンパク質のリンカーである。
[00325]  配列番号４２は、ＴＮＦＲＳＦアゴニスト融合タンパク質のＦｃドメインである。
[00326]  配列番号４３は、ＴＮＦＲＳＦアゴニスト融合タンパク質のリンカーである。
[00327]  配列番号４４は、ＴＮＦＲＳＦアゴニスト融合タンパク質のリンカーである。
[00328]  配列番号４５は、ＴＮＦＲＳＦアゴニスト融合タンパク質のリンカーである。
[00329]  配列番号４６は、４−１ＢＢリガンド（４−１ＢＢＬ）アミノ酸配列である。
[00330]  配列番号４７は、４−１ＢＢＬポリペプチドの可溶性部分である。
[00331]  配列番号４８は、４−１ＢＢアゴニスト抗体４Ｂ４−１−１バージョン１の重鎖可変領域（ＶＨ）である。
[00332]  配列番号４９は、４−１ＢＢアゴニスト抗体４Ｂ４−１−１バージョン１の軽鎖可変領域（ＶＬ）である。
[00333]  配列番号５０は、４−１ＢＢアゴニスト抗体４Ｂ４−１−１バージョン２の重鎖可変領域（ＶＨ）である。
[00334]  配列番号５１は、４−１ＢＢアゴニスト抗体４Ｂ４−１−１バージョン２の軽鎖可変領域（ＶＬ）である。
[00335]  配列番号５２は、４−１ＢＢアゴニスト抗体Ｈ３９Ｅ３−２の重鎖可変領域（ＶＨ）である。
[00336]  配列番号５３は、４−１ＢＢアゴニスト抗体Ｈ３９Ｅ３−２の軽鎖可変領域（ＶＬ）である。
[00337]  配列番号５４は、ヒトＯＸ４０のアミノ酸配列である。
[00338]  配列番号５５は、マウスＯＸ４０のアミノ酸配列である。
[00339]  配列番号５６は、ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体タボリキシズマブ（ＭＥＤＩ−０５６２）の重鎖である。
[00340]  配列番号５７は、ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体タボリキシズマブ（ＭＥＤＩ−０５６２）の軽鎖である。
[00341]  配列番号５８は、ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体タボリキシズマブ（ＭＥＤＩ−０５６２）の重鎖可変領域（ＶＨ）である。
[00342]  配列番号５９は、ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体タボリキシズマブ（ＭＥＤＩ−０５６２）の軽鎖可変領域（ＶＬ）である。
[00343]  配列番号６０は、ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体タボリキシズマブ（ＭＥＤＩ−０５６２）の重鎖ＣＤＲ１である。
[00344]  配列番号６１は、ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体タボリキシズマブ（ＭＥＤＩ−０５６２）の重鎖ＣＤＲ２である。
[00345]  配列番号６２は、ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体タボリキシズマブ（ＭＥＤＩ−０５６２）の重鎖ＣＤＲ３である。
[00346]  配列番号６３は、ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体タボリキシズマブ（ＭＥＤＩ−０５６２）の軽鎖ＣＤＲ１である。
[00347]  配列番号６４は、ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体タボリキシズマブ（ＭＥＤＩ−０５６２）の軽鎖ＣＤＲ２である。
[00348]  配列番号６５は、ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体タボリキシズマブ（ＭＥＤＩ−０５６２）の軽鎖ＣＤＲ３である。
[00349]  配列番号６６は、ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体１１Ｄ４の重鎖である。
[00350]  配列番号６７は、ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体１１Ｄ４の軽鎖である。
[00351]  配列番号６８は、ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体１１Ｄ４の重鎖可変領域（ＶＨ）である。
[00352]  配列番号６９は、ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体１１Ｄ４の軽鎖可変領域（ＶＬ）である。
[00353]  配列番号７０は、ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体１１Ｄ４の重鎖ＣＤＲ１である。
[00354]  配列番号７１は、ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体１１Ｄ４の重鎖ＣＤＲ２である。
[00355]  配列番号７２は、ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体１１Ｄ４の重鎖ＣＤＲ３である。
[00356]  配列番号７３は、ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体１１Ｄ４の軽鎖ＣＤＲ１である。
[00357]  配列番号７４は、ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体１１Ｄ４の軽鎖ＣＤＲ２である。
[00358]  配列番号７５は、ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体１１Ｄ４の軽鎖ＣＤＲ３である。
[00359]  配列番号７６は、ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体１８Ｄ８の重鎖である。
[00360]  配列番号７７は、ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体１８Ｄ８の軽鎖である。
[00361]  配列番号７８は、ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体１８Ｄ８の重鎖可変領域（ＶＨ）である。
[00362]  配列番号７９は、ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体１８Ｄ８の軽鎖可変領域（ＶＬ）である。
[00363]  配列番号８０は、ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体１８Ｄ８の重鎖ＣＤＲ１である。
[00364]  配列番号８１は、ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体１８Ｄ８の重鎖ＣＤＲ２である。
[00365]  配列番号８２は、ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体１８Ｄ８の重鎖ＣＤＲ３である。
[00366]  配列番号８３は、ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体１８Ｄ８の軽鎖ＣＤＲ１である。
[00367]  配列番号８４は、ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体１８Ｄ８の軽鎖ＣＤＲ２である。
[00368]  配列番号８５は、ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体１８Ｄ８の軽鎖ＣＤＲ３である。
[00369]  配列番号８６は、ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体Ｈｕ１１９−１２２の重鎖可変領域（ＶＨ）である。
[00370]  配列番号８７は、ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体Ｈｕ１１９−１２２の軽鎖可変領域（ＶＬ）である。
[00371]  配列番号８８は、ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体Ｈｕ１１９−１２２の重鎖ＣＤＲ１である。
[00372]  配列番号８９は、ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体Ｈｕ１１９−１２２の重鎖ＣＤＲ２である。
[00373]  配列番号９０は、ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体Ｈｕ１１９−１２２の重鎖ＣＤＲ３である。
[00374]  配列番号９１は、ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体Ｈｕ１１９−１２２の軽鎖ＣＤＲ１である。
[00375]  配列番号９２は、ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体Ｈｕ１１９−１２２の軽鎖ＣＤＲ２である。
[00376]  配列番号９３は、ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体Ｈｕ１１９−１２２の軽鎖ＣＤＲ３である。
[00377]  配列番号９４は、ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体Ｈｕ１０６−２２２の重鎖可変領域（ＶＨ）である。
[00378]  配列番号９５は、ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体Ｈｕ１０６−２２２の軽鎖可変領域（ＶＬ）である。
[00379]  配列番号９６は、ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体Ｈｕ１０６−２２２の重鎖ＣＤＲ１である。
[00380]  配列番号９７は、ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体Ｈｕ１０６−２２２の重鎖ＣＤＲ２である。
[00381]  配列番号９８は、ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体Ｈｕ１０６−２２２の重鎖ＣＤＲ３である。
[00382]  配列番号９９は、ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体Ｈｕ１０６−２２２の軽鎖ＣＤＲ１である。
[00383]  配列番号１００は、ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体Ｈｕ１０６−２２２の軽鎖ＣＤＲ２である。
[00384]  配列番号１０１は、ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体Ｈｕ１０６−２２２の軽鎖ＣＤＲ３である。
[00385]  配列番号１０２は、ＯＸ４０リガンド（ＯＸ４０Ｌ）アミノ酸配列である。
[00386]  配列番号１０３は、ＯＸ４０Ｌポリペプチドの可溶性部分である。
[00387]  配列番号１０４は、ＯＸ４０Ｌポリペプチドの代替的可溶性部分である。
[00388]  配列番号１０５は、ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体００８の重鎖可変領域（ＶＨ）である。
[00389]  配列番号１０６は、ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体００８の軽鎖可変領域（ＶＬ）である。
[00390]  配列番号１０７は、ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体０１１の重鎖可変領域（ＶＨ）である。
[00391]  配列番号１０８は、ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体０１１の軽鎖可変領域（ＶＬ）である。
[00392]  配列番号１０９は、ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体０２１の重鎖可変領域（ＶＨ）である。
[00393]  配列番号１１０は、ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体０２１の軽鎖可変領域（ＶＬ）である。
[00394]  配列番号１１１は、ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体０２３の重鎖可変領域（ＶＨ）である。
[00395]  配列番号１１２は、ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体０２３の軽鎖可変領域（ＶＬ）である。
[00396]  配列番号１１３は、ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体の重鎖可変領域（ＶＨ）である。
[00397]  配列番号１１４は、ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体の軽鎖可変領域（ＶＬ）である。
[00398]  配列番号１１５は、ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体の重鎖可変領域（ＶＨ）である。
[00399]  配列番号１１６は、ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体の軽鎖可変領域（ＶＬ）である。
[00400]  配列番号１１７は、ヒト化ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体の重鎖可変領域（ＶＨ）である。
[00401]  配列番号１１８は、ヒト化ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体の重鎖可変領域（ＶＨ）である。
[00402]  配列番号１１９は、ヒト化ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体の軽鎖可変領域（ＶＬ）である。
[00403]  配列番号１２０は、ヒト化ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体の軽鎖可変領域（ＶＬ）である。
[00404]  配列番号１２１は、ヒト化ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体の重鎖可変領域（ＶＨ）である。
[00405]  配列番号１２２は、ヒト化ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体の重鎖可変領域（ＶＨ）である。
[00406]  配列番号１２３は、ヒト化ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体の軽鎖可変領域（ＶＬ）である。
[00407]  配列番号１２４は、ヒト化ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体の軽鎖可変領域（ＶＬ）である。
[00408]  配列番号１２５は、ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体の重鎖可変領域（ＶＨ）である。
[00409]  配列番号１２６は、ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体の軽鎖可変領域（ＶＬ）である。
[00410]  配列番号１２７は、ヒトＣＤ２７のアミノ酸配列である。
[00411]  配列番号１２８は、マカクＣＤ２７のアミノ酸配列である。
[00412]  配列番号１２９は、ＣＤ２７アゴニストモノクローナル抗体バルリルマブ（CDX-1127）の重鎖である。
[00413]  配列番号１３０は、ＣＤ２７アゴニストモノクローナル抗体バルリルマブ（CDX-1127）の軽鎖である。
[00414]  配列番号１３１は、ＣＤ２７アゴニストモノクローナル抗体バルリルマブ（CDX-1127）の重鎖可変領域（ＶＨ）である。
[00415]  配列番号１３２は、ＣＤ２７アゴニストモノクローナル抗体バルリルマブ（CDX-1127）の軽鎖可変領域（ＶＬ）である。
[00416]  配列番号１３３は、ＣＤ２７アゴニストモノクローナル抗体バルリルマブ（CDX-1127）の重鎖ＣＤＲ１である。
[00417]  配列番号１３４は、ＣＤ２７アゴニストモノクローナル抗体バルリルマブ（CDX-1127）の重鎖ＣＤＲ２である。
[00418]  配列番号１３５は、ＣＤ２７アゴニストモノクローナル抗体バルリルマブ（CDX-1127）の重鎖ＣＤＲ３である。
[00419]  配列番号１３６は、ＣＤ２７アゴニストモノクローナル抗体バルリルマブ（CDX-1127）の軽鎖ＣＤＲ１である。
[00420]  配列番号１３７は、ＣＤ２７アゴニストモノクローナル抗体バルリルマブ（CDX-1127）の軽鎖ＣＤＲ２である。
[00421]  配列番号１３８は、ＣＤ２７アゴニストモノクローナル抗体バルリルマブ（CDX-1127）の軽鎖ＣＤＲ３である。
[00422]  配列番号１３９は、ＣＤ２７リガンド（ＣＤ７０）アミノ酸配列である。
[00423]  配列番号１４０は、ＣＤ７０ポリペプチドの可溶性部分である。
[00424]  配列番号１４１は、ＣＤ７０ポリペプチドの代替的可溶性部分である。
[00425]  配列番号１４２は、ヒトＧＩＴＲ（ヒト腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリーメンバー１８（ＴＮＦＲＳＦ１８）タンパク質）のアミノ酸配列である。
[00426]  配列番号１４３は、マウスＧＩＴＲ（マウス腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリーメンバー１８（ＴＮＦＲＳＦ１８）タンパク質）のアミノ酸配列である。
[00427]  配列番号１４４は、米国特許第７，８１２，１３５号の配列番号６０に対応する、ＣＤＲ２にＮ（アスパラギン）を有する６Ｃ８ヒト化ＧＩＴＲアゴニストモノクローナル抗体の重鎖変異体ＨｕＮ６Ｃ８（グリコシル化）のアミノ酸配列である。
[00428]  配列番号１４５は、米国特許第７，８１２，１３５号の配列番号６１に対応する、ＣＤＲ２にＮ（アスパラギン）を有する６Ｃ８ヒト化ＧＩＴＲアゴニストモノクローナル抗体の重鎖変異体ＨｕＮ６Ｃ８（非グリコシル化）のアミノ酸配列である。
[00429]  配列番号１４６は、米国特許第７，８１２，１３５号の配列番号６２に対応する、ＣＤＲ２にＱ（グルタミン）を有する６Ｃ８ヒト化ＧＩＴＲアゴニストモノクローナル抗体の重鎖変異体ＨｕＱ６Ｃ８（グリコシル化）のアミノ酸配列である。
[00430]  配列番号１４７は、米国特許第７，８１２，１３５号の配列番号６３に対応する、ＣＤＲ２にＱ（グルタミン）を有する６Ｃ８ヒト化ＧＩＴＲアゴニストモノクローナル抗体の重鎖変異体ＨｕＱ６Ｃ８（非グリコシル化）のアミノ酸配列である。
[00431]  配列番号１４８は、米国特許第７，８１２，１３５号の配列番号５８に対応する、６Ｃ８ヒト化ＧＩＴＲアゴニストモノクローナル抗体の軽鎖のアミノ酸配列である。
[00432]  配列番号１４９は、ＧＩＴＲアゴニストモノクローナル抗体において配列番号１４４、配列番号１４５、配列番号１４６又は配列番号１４７のアミノ酸配列と共に任意選択により含まれ得る、リーダー配列のアミノ酸配列である。
[00433]  配列番号１５０は、ＧＩＴＲアゴニストモノクローナル抗体において配列番号１４８のアミノ酸配列と共に任意選択により含まれ得る、リーダー配列のアミノ酸配列である。
[00434]  配列番号１５１は、米国特許第７，８１２，１３５号の配列番号１に対応する、６Ｃ８ヒト化ＧＩＴＲアゴニストモノクローナル抗体の重鎖可変領域のアミノ酸配列である。
[00435]  配列番号１５２は、米国特許第７，８１２，１３５号の配列番号６６に対応する、６Ｃ８ヒト化ＧＩＴＲアゴニストモノクローナル抗体の重鎖可変領域のアミノ酸配列である。
[00436]  配列番号１５３は、米国特許第７，８１２，１３５号の配列番号２に対応する、６Ｃ８ヒト化ＧＩＴＲアゴニストモノクローナル抗体の軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。
[00437]  配列番号１５４は、米国特許第７，８１２，１３５号の配列番号３に対応する、６Ｃ８ヒト化ＧＩＴＲアゴニストモノクローナル抗体の重鎖ＣＤＲ１領域のアミノ酸配列である。
[00438]  配列番号１５５は、米国特許第７，８１２，１３５号の配列番号４に対応する、６Ｃ８ヒト化ＧＩＴＲアゴニストモノクローナル抗体の重鎖ＣＤＲ２領域のアミノ酸配列である。
[00439]  配列番号１５６は、米国特許第７，８１２，１３５号の配列番号１９に対応する、６Ｃ８ヒト化ＧＩＴＲアゴニストモノクローナル抗体の重鎖ＣＤＲ２領域のアミノ酸配列である。
[00440]  配列番号１５７は、米国特許第７，８１２，１３５号の配列番号５に対応する、６Ｃ８ヒト化ＧＩＴＲアゴニストモノクローナル抗体の重鎖ＣＤＲ３領域のアミノ酸配列である。
[00441]  配列番号１５８は、米国特許第７，８１２，１３５号の配列番号６に対応する、６Ｃ８ヒト化ＧＩＴＲアゴニストモノクローナル抗体の重鎖ＣＤＲ１領域のアミノ酸配列である。
[00442]  配列番号１５９は、米国特許第７，８１２，１３５号の配列番号７に対応する、６Ｃ８ヒト化ＧＩＴＲアゴニストモノクローナル抗体の重鎖ＣＤＲ２領域のアミノ酸配列である。
[00443]  配列番号１６０は、米国特許第７，８１２，１３５号の配列番号８に対応する、６Ｃ８ヒト化ＧＩＴＲアゴニストモノクローナル抗体の重鎖ＣＤＲ３領域のアミノ酸配列である。
[00444]  配列番号１６１は、米国特許第７，８１２，１３５号の配列番号２３に対応する、ＣＤＲ２にＮ（アスパラギン）を有する６Ｃ８キメラＧＩＴＲアゴニストモノクローナル抗体の重鎖変異体ＨｕＮ６Ｃ８（グリコシル化）のアミノ酸配列である。
[00445]  配列番号１６２は、米国特許第７，８１２，１３５号の配列番号２４に対応する、ＣＤＲ２にＱ（グルタミン）を有する６Ｃ８キメラＧＩＴＲアゴニストモノクローナル抗体の重鎖変異体ＨｕＱ６Ｃ８（非グリコシル化）のアミノ酸配列である。
[00446]  配列番号１６３は、米国特許第７，８１２，１３５号の配列番号２２に対応する、６Ｃ８キメラＧＩＴＲアゴニストモノクローナル抗体の軽鎖のアミノ酸配列である。
[00447]  配列番号１６４は、米国特許第８，７０９，４２４号のＧＩＴＲアゴニスト３６Ｅ５重鎖可変領域のアミノ酸配列である。
[00448]  配列番号１６５は、米国特許第８，７０９，４２４号のＧＩＴＲアゴニスト３６Ｅ５軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。
[00449]  配列番号１６６は、米国特許第８，７０９，４２４号のＧＩＴＲアゴニスト３Ｄ６重鎖可変領域のアミノ酸配列である。
[00450]  配列番号１６７は、米国特許第８，７０９，４２４号のＧＩＴＲアゴニスト３Ｄ６軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。
[00451]  配列番号１６８は、米国特許第８，７０９，４２４号のＧＩＴＲアゴニスト６１Ｇ６重鎖可変領域のアミノ酸配列である。
[00452]  配列番号１６９は、米国特許第８，７０９，４２４号のＧＩＴＲアゴニスト６１Ｇ６軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。
[00453]  配列番号１７０は、米国特許第８，７０９，４２４号のＧＩＴＲアゴニスト６Ｈ６重鎖可変領域のアミノ酸配列である。
[00454]  配列番号１７１は、米国特許第８，７０９，４２４号のＧＩＴＲアゴニスト６Ｈ６軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。
[00455]  配列番号１７２は、米国特許第８，７０９，４２４号のＧＩＴＲアゴニスト６１Ｆ６重鎖可変領域のアミノ酸配列である。
[00456]  配列番号１７３は、米国特許第８，７０９，４２４号のＧＩＴＲアゴニスト６１Ｆ６軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。
[00457]  配列番号１７４は、米国特許第８，７０９，４２４号のＧＩＴＲアゴニスト１Ｄ８重鎖可変領域のアミノ酸配列である。
[00458]  配列番号１７５は、米国特許第８，７０９，４２４号のＧＩＴＲアゴニスト１Ｄ８軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。
[00459]  配列番号１７６は、米国特許第８，７０９，４２４号のＧＩＴＲアゴニスト１７Ｆ１０重鎖可変領域のアミノ酸配列である。
[00460]  配列番号１７７は、米国特許第８，７０９，４２４号のＧＩＴＲアゴニスト１７Ｆ１０軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。
[00461]  配列番号１７８は、米国特許第８，７０９，４２４号のＧＩＴＲアゴニスト３５Ｄ８重鎖可変領域のアミノ酸配列である。
[00462]  配列番号１７９は、米国特許第８，７０９，４２４号のＧＩＴＲアゴニスト３５Ｄ８軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。
[00463]  配列番号１８０は、米国特許第８，７０９，４２４号のＧＩＴＲアゴニスト４９Ａ１重鎖可変領域のアミノ酸配列である。
[00464]  配列番号１８１は、米国特許第８，７０９，４２４号のＧＩＴＲアゴニスト４９Ａ１軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。
[00465]  配列番号１８２は、米国特許第８，７０９，４２４号のＧＩＴＲアゴニスト９Ｅ５重鎖可変領域のアミノ酸配列である。
[00466]  配列番号１８３は、米国特許第８，７０９，４２４号のＧＩＴＲアゴニスト９Ｅ５軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。
[00467]  配列番号１８４は、米国特許第８，７０９，４２４号のＧＩＴＲアゴニスト３１Ｈ６重鎖可変領域のアミノ酸配列である。
[00468]  配列番号１８５は、米国特許第８，７０９，４２４号のＧＩＴＲアゴニスト３１Ｈ６軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。
[00469]  配列番号１８６は、米国特許第８，７０９，４２４号のヒト化ＧＩＴＲアゴニスト３６Ｅ５重鎖可変領域のアミノ酸配列である。
[00470]  配列番号１８７は、米国特許第８，７０９，４２４号のヒト化ＧＩＴＲアゴニスト３６Ｅ５軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。
[00471]  配列番号１８８は、米国特許第８，７０９，４２４号のヒト化ＧＩＴＲアゴニスト３Ｄ６重鎖可変領域のアミノ酸配列である。
[00472]  配列番号１８９は、米国特許第８，７０９，４２４号のヒト化ＧＩＴＲアゴニスト３Ｄ６軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。
[00473]  配列番号１９０は、米国特許第８，７０９，４２４号のヒト化ＧＩＴＲアゴニスト６１Ｇ６重鎖可変領域のアミノ酸配列である。
[00474]  配列番号１９１は、米国特許第８，７０９，４２４号のヒト化ＧＩＴＲアゴニスト６１Ｇ６軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。
[00475]  配列番号１９２は、米国特許第８，７０９，４２４号のヒト化ＧＩＴＲアゴニスト６Ｈ６重鎖可変領域のアミノ酸配列である。
[00476]  配列番号１９３は、米国特許第８，７０９，４２４号のヒト化ＧＩＴＲアゴニスト６Ｈ６軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。
[00477]  配列番号１９４は、米国特許第８，７０９，４２４号のヒト化ＧＩＴＲアゴニスト６１Ｆ６重鎖可変領域のアミノ酸配列である。
[00478]  配列番号１９５は、米国特許第８，７０９，４２４号のヒト化ＧＩＴＲアゴニスト６１Ｆ６軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。
[00479]  配列番号１９６は、米国特許第８，７０９，４２４号のヒト化ＧＩＴＲアゴニスト１Ｄ８重鎖可変領域のアミノ酸配列である。
[00480]  配列番号１９７は、米国特許第８，７０９，４２４号のヒト化ＧＩＴＲアゴニスト１Ｄ８軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。
[00481]  配列番号１９８は、米国特許第８，７０９，４２４号のヒト化ＧＩＴＲアゴニスト１７Ｆ１０重鎖可変領域のアミノ酸配列である。
[00482]  配列番号１９９は、米国特許第８，７０９，４２４号のヒト化ＧＩＴＲアゴニスト１７Ｆ１０軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。
[00483]  配列番号２００は、米国特許第８，７０９，４２４号のヒト化ＧＩＴＲアゴニスト３５Ｄ８重鎖可変領域のアミノ酸配列である。
[00484]  配列番号２０１は、米国特許第８，７０９，４２４号のヒト化ＧＩＴＲアゴニスト３５Ｄ８軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。
[00485]  配列番号２０２は、米国特許第８，７０９，４２４号のヒト化ＧＩＴＲアゴニスト４９Ａ１重鎖可変領域のアミノ酸配列である。
[00486]  配列番号２０３は、米国特許第８，７０９，４２４号のヒト化ＧＩＴＲアゴニスト４９Ａ１軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。
[00487]  配列番号２０４は、米国特許第８，７０９，４２４号のヒト化ＧＩＴＲアゴニスト９Ｅ５重鎖可変領域のアミノ酸配列である。
[00488]  配列番号２０５は、米国特許第８，７０９，４２４号のヒト化ＧＩＴＲアゴニスト９Ｅ５軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。
[00489]  配列番号２０６は、米国特許第８，７０９，４２４号のヒト化ＧＩＴＲアゴニスト３１Ｈ６重鎖可変領域のアミノ酸配列である。
[00490]  配列番号２０７は、米国特許第８，７０９，４２４号のヒト化ＧＩＴＲアゴニスト３１Ｈ６軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。
[00491]  配列番号２０８は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト２１５５可変重鎖のアミノ酸配列である。
[00492]  配列番号２０９は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト２１５５可変軽鎖のアミノ酸配列である。
[00493]  配列番号２１０は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト２１５５ヒト化（ＨＣ１）重鎖のアミノ酸配列である。
[00494]  配列番号２１１は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト２１５５ヒト化（ＨＣ２）重鎖のアミノ酸配列である。
[00495]  配列番号２１２は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト２１５５ヒト化（ＨＣ３ａ）重鎖のアミノ酸配列である。
[00496]  配列番号２１３は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号のヒト化（ＨＣ３ｂ）ＧＩＴＲアゴニスト重鎖のアミノ酸配列である。
[00497]  配列番号２１４は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号のヒト化（ＨＣ４）ＧＩＴＲアゴニスト重鎖のアミノ酸配列である。
[00498]  配列番号２１５は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号の２１５５ヒト化（ＬＣ１）ＧＩＴＲアゴニスト軽鎖のアミノ酸配列である。
[00499]  配列番号２１６は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号の２１５５ヒト化（ＬＣ２ａ）ＧＩＴＲアゴニスト軽鎖のアミノ酸配列である。
[00500]  配列番号２１７は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号の２１５５ヒト化（ＬＣ２ｂ）ＧＩＴＲアゴニスト軽鎖のアミノ酸配列である。
[00501]  配列番号２１８は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号の２１５５ヒト化（ＬＣ３）ＧＩＴＲアゴニスト軽鎖のアミノ酸配列である。
[00502]  配列番号２１９は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト６９８可変重鎖のアミノ酸配列である。
[00503]  配列番号２２０は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト６９８可変軽鎖のアミノ酸配列である。
[00504]  配列番号２２１は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト７０６可変重鎖のアミノ酸配列である。
[00505]  配列番号２２２は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト７０６可変軽鎖のアミノ酸配列である。
[00506]  配列番号２２３は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト８２７可変重鎖のアミノ酸配列である。
[00507]  配列番号２２４は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト８２７可変軽鎖のアミノ酸配列である。
[00508]  配列番号２２５は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト１７１８可変重鎖のアミノ酸配列である。
[00509]  配列番号２２６は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト１７１８可変軽鎖のアミノ酸配列である。
[00510]  配列番号２２７は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト２１５５重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
[00511]  配列番号２２８は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト２１５５重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
[00512]  配列番号２２９は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト２１５５重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
[00513]  配列番号２３０は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト２１５５軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
[00514]  配列番号２３１は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト２１５５軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
[00515]  配列番号２３２は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト２１５５軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
[00516]  配列番号２３３は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト６９８及び７０６重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
[00517]  配列番号２３４は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト６９８及び７０６重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
[00518]  配列番号２３５は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト６９８及び７０６重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
[00519]  配列番号２３６は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト６９８軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
[00520]  配列番号２３７は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト６９８、７０６、８２７及び１６４９軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
[00521]  配列番号２３８は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト６９８、７０６、８２７及び１６４９軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
[00522]  配列番号２３９は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト７０６、８２７及び１６４９軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
[00523]  配列番号２４０は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト８２７及び１６４９重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
[00524]  配列番号２４１は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト８２７重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
[00525]  配列番号２４２は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト１６４９重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
[00526]  配列番号２４３は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト１７１８重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
[00527]  配列番号２４４は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト１７１８重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
[00528]  配列番号２４５は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト１７１８重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
[00529]  配列番号２４６は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト１７１８軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
[00530]  配列番号２４７は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト１７１８軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
[00531]  配列番号２４８は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト１７１８軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
[00532]  配列番号２４９は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト８２７及び１６４９重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
[00533]  配列番号２５０は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト１Ｄ７重鎖のアミノ酸配列である。
[00534]  配列番号２５１は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト１Ｄ７軽鎖のアミノ酸配列である。
[00535]  配列番号２５２は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト１Ｄ７可変重鎖のアミノ酸配列である。
[00536]  配列番号２５３は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト１Ｄ７可変軽鎖のアミノ酸配列である。
[00537]  配列番号２５４は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト１Ｄ７重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
[00538]  配列番号２５５は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト１Ｄ７重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
[00539]  配列番号２５６は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト１Ｄ７重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
[00540]  配列番号２５７は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト１Ｄ７軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
[00541]  配列番号２５８は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト１Ｄ７軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
[00542]  配列番号２５９は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト１Ｄ７軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
[00543]  配列番号２６０は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト３３Ｃ９重鎖のアミノ酸配列である。
[00544]  配列番号２６１は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト３３Ｃ９軽鎖のアミノ酸配列である。
[00545]  配列番号２６２は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト３３Ｃ９可変重鎖のアミノ酸配列である。
[00546]  配列番号２６３は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト３３Ｃ９可変軽鎖のアミノ酸配列である。
[00547]  配列番号２６４は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト３３Ｃ９重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
[00548]  配列番号２６５は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト３３Ｃ９重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
[00549]  配列番号２６６は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト３３Ｃ９重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
[00550]  配列番号２６７は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト３３Ｃ９軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
[00551]  配列番号２６８は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト３３Ｃ９軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
[00552]  配列番号２６９は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト３３Ｃ９軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
[00553]  配列番号２７０は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト３３Ｆ６重鎖のアミノ酸配列である。
[00554]  配列番号２７１は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト３３Ｆ６軽鎖のアミノ酸配列である。
[00555]  配列番号２７２は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト３３Ｆ６可変重鎖のアミノ酸配列である。
[00556]  配列番号２７３は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト３３Ｆ６可変軽鎖のアミノ酸配列である。
[00557]  配列番号２７４は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト３３Ｆ６重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
[00558]  配列番号２７５は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト３３Ｆ６重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
[00559]  配列番号２７６は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト３３Ｆ６重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
[00560]  配列番号２７７は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト３３Ｆ６軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
[00561]  配列番号２７８は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト３３Ｆ６軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
[00562]  配列番号２７９は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト３３Ｆ６軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
[00563]  配列番号２８０は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト３４Ｇ４重鎖のアミノ酸配列である。
[00564]  配列番号２８１は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト３４Ｇ４軽鎖のアミノ酸配列である。
[00565]  配列番号２８２は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト３４Ｇ４可変重鎖のアミノ酸配列である。
[00566]  配列番号２８３は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト３４Ｇ４可変軽鎖のアミノ酸配列である。
[00567]  配列番号２８４は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト３４Ｇ４重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
[00568]  配列番号２８５は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト３４Ｇ４重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
[00569]  配列番号２８６は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト３４Ｇ４重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
[00570]  配列番号２８７は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト３４Ｇ４軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
[00571]  配列番号２８８は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト３４Ｇ４軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
[00572]  配列番号２８９は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト３４Ｇ４軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
[00573]  配列番号２９０は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト３５Ｂ１０重鎖のアミノ酸配列である。
[00574]  配列番号２９１は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト３５Ｂ１０軽鎖のアミノ酸配列である。
[00575]  配列番号２９２は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト３５Ｂ１０可変重鎖のアミノ酸配列である。
[00576]  配列番号２９３は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト３５Ｂ１０可変軽鎖のアミノ酸配列である。
[00577]  配列番号２９４は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト３５Ｂ１０重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
[00578]  配列番号２９５は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト３５Ｂ１０重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
[00579]  配列番号２９６は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト３５Ｂ１０重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
[00580]  配列番号２９７は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト３５Ｂ１０軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
[00581]  配列番号２９８は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト３５Ｂ１０軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
[00582]  配列番号２９９は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト３５Ｂ１０軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
[00583]  配列番号３００は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４１Ｅ１１重鎖のアミノ酸配列である。
[00584]  配列番号３０１は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４１Ｅ１１軽鎖のアミノ酸配列である。
[00585]  配列番号３０２は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４１Ｅ１１可変重鎖のアミノ酸配列である。
[00586]  配列番号３０３は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４１Ｅ１１可変軽鎖のアミノ酸配列である。
[00587]  配列番号３０４は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４１Ｅ１１重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
[00588]  配列番号３０５は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４１Ｅ１１重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
[00589]  配列番号３０６は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４１Ｅ１１重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
[00590]  配列番号３０７は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４１Ｅ１１軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
[00591]  配列番号３０８は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４１Ｅ１１軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
[00592]  配列番号３０９は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４１Ｅ１１軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
[00593]  配列番号３１０は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４１Ｇ５重鎖のアミノ酸配列である。
[00594]  配列番号３１１は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４１Ｇ５軽鎖のアミノ酸配列である。
[00595]  配列番号３１２は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４１Ｇ５可変重鎖のアミノ酸配列である。
[00596]  配列番号３１３は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４１Ｇ５可変軽鎖のアミノ酸配列である。
[00597]  配列番号３１４は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４１Ｇ５重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
[00598]  配列番号３１５は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４１Ｇ５重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
[00599]  配列番号３１６は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４１Ｇ５重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
[00600]  配列番号３１７は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４１Ｇ５軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
[00601]  配列番号３１８は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４１Ｇ５軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
[00602]  配列番号３１９は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４１Ｇ５軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
[00603]  配列番号３２０は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４２Ａ１１重鎖のアミノ酸配列である。
[00604]  配列番号３２１は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４２Ａ１１軽鎖のアミノ酸配列である。
[00605]  配列番号３２２は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４２Ａ１１可変重鎖のアミノ酸配列である。
[00606]  配列番号３２３は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４２Ａ１１可変軽鎖のアミノ酸配列である。
[00607]  配列番号３２４は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４２Ａ１１重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
[00608]  配列番号３２５は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４２Ａ１１重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
[00609]  配列番号３２６は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４２Ａ１１重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
[00610]  配列番号３２７は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４２Ａ１１軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
[00611]  配列番号３２８は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４２Ａ１１軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
[00612]  配列番号３２９は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４２Ａ１１軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
[00613]  配列番号３３０は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４４Ｃ１重鎖のアミノ酸配列である。
[00614]  配列番号３３１は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４４Ｃ１軽鎖のアミノ酸配列である。
[00615]  配列番号３３２は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４４Ｃ１可変重鎖のアミノ酸配列である。
[00616]  配列番号３３３は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４４Ｃ１可変軽鎖のアミノ酸配列である。
[00617]  配列番号３３４は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４４Ｃ１重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
[00618]  配列番号３３５は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４４Ｃ１重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
[00619]  配列番号３３６は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４４Ｃ１重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
[00620]  配列番号３３７は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４４Ｃ１軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
[00621]  配列番号３３８は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４４Ｃ１軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
[00622]  配列番号３３９は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４４Ｃ１軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
[00623]  配列番号３４０は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４５Ａ８重鎖のアミノ酸配列である。
[00624]  配列番号３４１は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４５Ａ８軽鎖のアミノ酸配列である。
[00625]  配列番号３４２は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４５Ａ８可変重鎖のアミノ酸配列である。
[00626]  配列番号３４３は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４５Ａ８可変軽鎖のアミノ酸配列である。
[00627]  配列番号３４４は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４５Ａ８重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
[00628]  配列番号３４５は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４５Ａ８重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
[00629]  配列番号３４６は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４５Ａ８重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
[00630]  配列番号３４７は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４５Ａ８軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
[00631]  配列番号３４８は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４５Ａ８軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
[00632]  配列番号３４９は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４５Ａ８軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
[00633]  配列番号３５０は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４６Ｅ１１重鎖のアミノ酸配列である。
[00634]  配列番号３５１は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４６Ｅ１１軽鎖のアミノ酸配列である。
[00635]  配列番号３５２は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４６Ｅ１１可変重鎖のアミノ酸配列である。
[00636]  配列番号３５３は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４６Ｅ１１可変軽鎖のアミノ酸配列である。
[00637]  配列番号３５４は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４６Ｅ１１重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
[00638]  配列番号３５５は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４６Ｅ１１重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
[00639]  配列番号３５６は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４６Ｅ１１重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
[00640]  配列番号３５７は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４６Ｅ１１軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
[00641]  配列番号３５８は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４６Ｅ１１軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
[00642]  配列番号３５９は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４６Ｅ１１軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
[00643]  配列番号３６０は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４８Ｈ１２重鎖のアミノ酸配列である。
[00644]  配列番号３６１は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４８Ｈ１２軽鎖のアミノ酸配列である。
[00645]  配列番号３６２は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４８Ｈ１２可変重鎖のアミノ酸配列である。
[00646]  配列番号３６３は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４８Ｈ１２可変軽鎖のアミノ酸配列である。
[00647]  配列番号３６４は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４８Ｈ１２重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
[00648]  配列番号３６５は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４８Ｈ１２重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
[00649]  配列番号３６６は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４８Ｈ１２重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
[00650]  配列番号３６７は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４８Ｈ１２軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
[00651]  配列番号３６８は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４８Ｈ１２軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
[00652]  配列番号３６９は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４８Ｈ１２軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
[00653]  配列番号３７０は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４８Ｈ７重鎖のアミノ酸配列である。
[00654]  配列番号３７１は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４８Ｈ７軽鎖のアミノ酸配列である。
[00655]  配列番号３７２は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４８Ｈ７可変重鎖のアミノ酸配列である。
[00656]  配列番号３７３は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４８Ｈ７可変軽鎖のアミノ酸配列である。
[00657]  配列番号３７４は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４８Ｈ７重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
[00658]  配列番号３７５は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４８Ｈ７重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
[00659]  配列番号３７６は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４８Ｈ７重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
[00660]  配列番号３７７は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４８Ｈ７軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
[00661]  配列番号３７８は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４８Ｈ７軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
[00662]  配列番号３７９は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４８Ｈ７軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
[00663]  配列番号３８０は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４９Ｄ９重鎖のアミノ酸配列である。
[00664]  配列番号３８１は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４９Ｄ９軽鎖のアミノ酸配列である。
[00665]  配列番号３８２は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４９Ｄ９可変重鎖のアミノ酸配列である。
[00666]  配列番号３８３は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４９Ｄ９可変軽鎖のアミノ酸配列である。
[00667]  配列番号３８４は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４９Ｄ９重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
[00668]  配列番号３８５は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４９Ｄ９重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
[00669]  配列番号３８６は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４９Ｄ９重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
[00670]  配列番号３８７は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４９Ｄ９軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
[00671]  配列番号３８８は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４９Ｄ９軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
[00672]  配列番号３８９は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４９Ｄ９軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
[00673]  配列番号３９０は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４９Ｅ２重鎖のアミノ酸配列である。
[00674]  配列番号３９１は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４９Ｅ２軽鎖のアミノ酸配列である。
[00675]  配列番号３９２は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４９Ｅ２可変重鎖のアミノ酸配列である。
[00676]  配列番号３９３は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４９Ｅ２可変軽鎖のアミノ酸配列である。
[00677]  配列番号３９４は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４９Ｅ２重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
[00678]  配列番号３９５は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４９Ｅ２重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
[00679]  配列番号３９６は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４９Ｅ２重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
[00680]  配列番号３９７は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４９Ｅ２軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
[00681]  配列番号３９８は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４９Ｅ２軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
[00682]  配列番号３９９は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４９Ｅ２軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
[00683]  配列番号４００は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４８Ａ９重鎖のアミノ酸配列である。
[00684]  配列番号４０１は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４８Ａ９軽鎖のアミノ酸配列である。
[00685]  配列番号４０２は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４８Ａ９可変重鎖のアミノ酸配列である。
[00686]  配列番号４０３は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４８Ａ９可変軽鎖のアミノ酸配列である。
[00687]  配列番号４０４は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４８Ａ９重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
[00688]  配列番号４０５は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４８Ａ９重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
[00689]  配列番号４０６は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４８Ａ９重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
[00690]  配列番号４０７は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４８Ａ９軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
[00691]  配列番号４０８は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４８Ａ９軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
[00692]  配列番号４０９は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト４８Ａ９軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
[00693]  配列番号４１０は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト５Ｈ７重鎖のアミノ酸配列である。
[00694]  配列番号４１１は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト５Ｈ７軽鎖のアミノ酸配列である。
[00695]  配列番号４１２は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト５Ｈ７可変重鎖のアミノ酸配列である。
[00696]  配列番号４１３は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト５Ｈ７可変軽鎖のアミノ酸配列である。
[00697]  配列番号４１４は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト５Ｈ７重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
[00698]  配列番号４１５は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト５Ｈ７重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
[00699]  配列番号４１６は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト５Ｈ７重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
[00700]  配列番号４１７は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト５Ｈ７軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
[00701]  配列番号４１８は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト５Ｈ７軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
[00702]  配列番号４１９は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト５Ｈ７軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
[00703]  配列番号４２０は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト７Ａ１０重鎖のアミノ酸配列である。
[00704]  配列番号４２１は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト７Ａ１０軽鎖のアミノ酸配列である。
[00705]  配列番号４２２は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト７Ａ１０可変重鎖のアミノ酸配列である。
[00706]  配列番号４２３は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト７Ａ１０可変軽鎖のアミノ酸配列である。
[00707]  配列番号４２４は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト７Ａ１０重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
[00708]  配列番号４２５は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト７Ａ１０重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
[00709]  配列番号４２６は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト７Ａ１０重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
[00710]  配列番号４２７は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト７Ａ１０軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
[00711]  配列番号４２８は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト７Ａ１０軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
[00712]  配列番号４２９は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト７Ａ１０軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
[00713]  配列番号４３０は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト９Ｈ６重鎖のアミノ酸配列である。
[00714]  配列番号４３１は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト９Ｈ６軽鎖のアミノ酸配列である。
[00715]  配列番号４３２は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト９Ｈ６可変重鎖のアミノ酸配列である。
[00716]  配列番号４３３は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト９Ｈ６可変軽鎖のアミノ酸配列である。
[00717]  配列番号４３４は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト９Ｈ６重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
[00718]  配列番号４３５は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト９Ｈ６重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
[00719]  配列番号４３６は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト９Ｈ６重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
[00720]  配列番号４３７は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト９Ｈ６軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
[00721]  配列番号４３８は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト９Ｈ６軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
[00722]  配列番号４３９は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号のＧＩＴＲアゴニスト９Ｈ６軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
[00723]  配列番号４４０は、ＧＩＴＲリガンド（ＧＩＴＲＬ）アミノ酸配列である。
[00724]  配列番号４４１は、ＧＩＴＲＬポリペプチドの可溶性部分である。
[00725]  配列番号４４２は、ヒトＨＶＥＭ（ＣＤ２７０）のアミノ酸配列である。
[00726]  配列番号４４３は、ＨＶＥＭリガンド（ＬＩＧＨＴ）アミノ酸配列である。
[00727]  配列番号４４４は、ＬＩＧＨＴポリペプチドの可溶性部分である。
[00728]  配列番号４４５は、ＬＩＧＨＴポリペプチドの代替的可溶性部分である。
[00729]  配列番号４４６は、ＬＩＧＨＴポリペプチドの代替的可溶性部分である。
[00730]  配列番号４４７は、ヒトＣＤ９５アイソフォーム１のアミノ酸配列である。
[00731]  配列番号４４８は、ヒトＣＤ９５アイソフォーム２のアミノ酸配列である。
[00732]  配列番号４４９は、ヒトＣＤ９５アイソフォーム３のアミノ酸配列である。
[00733]  配列番号４５０は、ヒトＣＤ９５アイソフォーム４のアミノ酸配列である。
[00734]  配列番号４５１は、ＣＤ９５アゴニストモノクローナル抗体Ｅ０９の重鎖可変領域（ＶＨ）である。
[00735]  配列番号４５２は、ＣＤ９５アゴニストモノクローナル抗体Ｅ０９の軽鎖可変領域（ＶＬ）である。
[00736]  配列番号４５３は、ＣＤ９５アゴニストモノクローナル抗体Ｅ０９の重鎖ＣＤＲ１である。
[00737]  配列番号４５４は、ＣＤ９５アゴニストモノクローナル抗体Ｅ０９の重鎖ＣＤＲ２である。
[00738]  配列番号４５５は、ＣＤ９５アゴニストモノクローナル抗体Ｅ０９の重鎖ＣＤＲ３である。
[00739]  配列番号４５６は、ＣＤ９５アゴニストモノクローナル抗体Ｅ０９の軽鎖ＣＤＲ１である。
[00740]  配列番号４５７は、ＣＤ９５アゴニストモノクローナル抗体Ｅ０９の軽鎖ＣＤＲ２である。
[00741]  配列番号４５８は、ＣＤ９５アゴニストモノクローナル抗体Ｅ０９の軽鎖ＣＤＲ３である。
[00742]  配列番号４５９は、ＣＤ９５リガンド（ＣＤ９５Ｌ）アミノ酸配列である。
[00743]  配列番号４６０は、ＣＤ９５Ｌポリペプチドの可溶性部分である。
[00744]  配列番号４６１は、ＣＤ９５Ｌポリペプチドの代替的可溶性部分である。
[00745]  配列番号４６２は、ＣＤ９５Ｌポリペプチドの代替的可溶性部分である。
[00746]  配列番号４６３は、ＰＤ−１阻害剤ニボルマブの重鎖アミノ酸配列である。
[00747]  配列番号４６４は、ＰＤ−１阻害剤ニボルマブの軽鎖アミノ酸配列である。
[00748]  配列番号４６５は、ＰＤ−１阻害剤ニボルマブの重鎖可変領域（ＶＨ）アミノ酸配列である。
[00749]  配列番号４６６は、ＰＤ−１阻害剤ニボルマブの軽鎖可変領域（ＶＬ）アミノ酸配列である。
[00750]  配列番号４６７は、ＰＤ−１阻害剤ニボルマブの重鎖ＣＤＲ１アミノ酸配列である。
[00751]  配列番号４６８は、ＰＤ−１阻害剤ニボルマブの重鎖ＣＤＲ２アミノ酸配列である。
[00752]  配列番号４６９は、ＰＤ−１阻害剤ニボルマブの重鎖ＣＤＲ３アミノ酸配列である。
[00753]  配列番号４７０は、ＰＤ−１阻害剤ニボルマブの軽鎖ＣＤＲ１アミノ酸配列である。
[00754]  配列番号４７１は、ＰＤ−１阻害剤ニボルマブの軽鎖ＣＤＲ２アミノ酸配列である。
[00755]  配列番号４７２は、ＰＤ−１阻害剤ニボルマブの軽鎖ＣＤＲ３アミノ酸配列である。
[00756]  配列番号４７３は、ＰＤ−１阻害剤ペンブロリズマブの重鎖アミノ酸配列である。
[00757]  配列番号４７４は、ＰＤ−１阻害剤ペンブロリズマブの軽鎖アミノ酸配列である。
[00758]  配列番号４７５は、ＰＤ−１阻害剤ペンブロリズマブの重鎖可変領域（ＶＨ）アミノ酸配列である。
[00759]  配列番号４７６は、ＰＤ−１阻害剤ペンブロリズマブの軽鎖可変領域（ＶＬ）アミノ酸配列である。
[00760]  配列番号４７７は、ＰＤ−１阻害剤ペンブロリズマブの重鎖ＣＤＲ１アミノ酸配列である。
[00761]  配列番号４７８は、ＰＤ−１阻害剤ペンブロリズマブの重鎖ＣＤＲ２アミノ酸配列である。
[00762]  配列番号４７９は、ＰＤ−１阻害剤ペンブロリズマブの重鎖ＣＤＲ３アミノ酸配列である。
[00763]  配列番号４８０は、ＰＤ−１阻害剤ペンブロリズマブの軽鎖ＣＤＲ１アミノ酸配列である。
[00764]  配列番号４８１は、ＰＤ−１阻害剤ペンブロリズマブの軽鎖ＣＤＲ２アミノ酸配列である。
[00765]  配列番号４８２は、ＰＤ−１阻害剤ペンブロリズマブの軽鎖ＣＤＲ３アミノ酸配列である。
[00766]  配列番号４８３は、ＰＤ−Ｌ１阻害剤デュルバルマブの重鎖アミノ酸配列である。
[00767]  配列番号４８４は、ＰＤ−Ｌ１阻害剤デュルバルマブの軽鎖アミノ酸配列である。
[00768]  配列番号４８５は、ＰＤ−Ｌ１阻害剤デュルバルマブの重鎖可変領域（ＶＨ）アミノ酸配列である。
[00769]  配列番号４８６は、ＰＤ−Ｌ１阻害剤デュルバルマブの軽鎖可変領域（ＶＬ）アミノ酸配列である。
[00770]  配列番号４８７は、ＰＤ−Ｌ１阻害剤デュルバルマブの重鎖ＣＤＲ１アミノ酸配列である。
[00771]  配列番号４８８は、ＰＤ−Ｌ１阻害剤デュルバルマブの重鎖ＣＤＲ２アミノ酸配列である。
[00772]  配列番号４８９は、ＰＤ−Ｌ１阻害剤デュルバルマブの重鎖ＣＤＲ３アミノ酸配列である。
[00773]  配列番号４９０は、ＰＤ−Ｌ１阻害剤デュルバルマブの軽鎖ＣＤＲ１アミノ酸配列である。
[00774]  配列番号４９１は、ＰＤ−Ｌ１阻害剤デュルバルマブの軽鎖ＣＤＲ２アミノ酸配列である。
[00775]  配列番号４９２は、ＰＤ−Ｌ１阻害剤デュルバルマブの軽鎖ＣＤＲ３アミノ酸配列である。
[00776]  配列番号４９３は、ＰＤ−Ｌ１阻害剤アベルマブの重鎖アミノ酸配列である。
[00777]  配列番号４９４は、ＰＤ−Ｌ１阻害剤アベルマブの軽鎖アミノ酸配列である。
[00778]  配列番号４９５は、ＰＤ−Ｌ１阻害剤アベルマブの重鎖可変領域（ＶＨ）アミノ酸配列である。
[00779]  配列番号４９６は、ＰＤ−Ｌ１阻害剤アベルマブの軽鎖可変領域（ＶＬ）アミノ酸配列である。
[00780]  配列番号４９７は、ＰＤ−Ｌ１阻害剤アベルマブの重鎖ＣＤＲ１アミノ酸配列である。
[00781]  配列番号４９８は、ＰＤ−Ｌ１阻害剤アベルマブの重鎖ＣＤＲ２アミノ酸配列である。
[00782]  配列番号４９９は、ＰＤ−Ｌ１阻害剤アベルマブの重鎖ＣＤＲ３アミノ酸配列である。
[00783]  配列番号５００は、ＰＤ−Ｌ１阻害剤アベルマブの軽鎖ＣＤＲ１アミノ酸配列である。
[00784]  配列番号５０１は、ＰＤ−Ｌ１阻害剤アベルマブの軽鎖ＣＤＲ２アミノ酸配列である。
[00785]  配列番号５０２は、ＰＤ−Ｌ１阻害剤アベルマブの軽鎖ＣＤＲ３アミノ酸配列である。
[00786]  配列番号５０３は、ＰＤ−Ｌ１阻害剤アテゾリズマブの重鎖アミノ酸配列である。
[00787]  配列番号５０４は、ＰＤ−Ｌ１阻害剤アテゾリズマブの軽鎖アミノ酸配列である。
[00788]  配列番号５０５は、ＰＤ−Ｌ１阻害剤アテゾリズマブの重鎖可変領域（ＶＨ）アミノ酸配列である。
[00789]  配列番号５０６は、ＰＤ−Ｌ１阻害剤アテゾリズマブの軽鎖可変領域（ＶＬ）アミノ酸配列である。
[00790]  配列番号５０７は、ＰＤ−Ｌ１阻害剤アテゾリズマブの重鎖ＣＤＲ１アミノ酸配列である。
[00791]  配列番号５０８は、ＰＤ−Ｌ１阻害剤アテゾリズマブの重鎖ＣＤＲ２アミノ酸配列である。
[00792]  配列番号５０９は、ＰＤ−Ｌ１阻害剤アテゾリズマブの重鎖ＣＤＲ３アミノ酸配列である。
[00793]  配列番号５１０は、ＰＤ−Ｌ１阻害剤アテゾリズマブの軽鎖ＣＤＲ１アミノ酸配列である。
[00794]  配列番号５１１は、ＰＤ−Ｌ１阻害剤アテゾリズマブの軽鎖ＣＤＲ２アミノ酸配列である。
[00795]  配列番号５１２は、ＰＤ−Ｌ１阻害剤アテゾリズマブの軽鎖ＣＤＲ３アミノ酸配列である。
【０２３７】
発明の詳細な説明
[00796]  他に定義されない限り、本明細書中で使用される全ての技術的及び科学的用語は、本発明が属する当技術分野の当業者によって一般的に理解されるのと同じ意味を有する。本明細書で言及された全ての特許及び刊行物は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【０２３８】
定義
[00797]  本明細書で使用される「共投与」、「共投与すること」、「〜と組み合わせて投与される」、「〜と組み合わせて投与すること」、「同時（simultaneous）」及び「同時（concurrent）」という用語は、両方の活性医薬成分及び／又はそれらの代謝産物が同時に対象内に存在するための、２つ以上の活性医薬成分（本発明の好ましい実施形態において、例えば少なくとも１つのＴＮＦＲＳＦアゴニスト及び複数のＴＩＬ）の対象への投与を包含する。共投与には、別々の組成物中での同時投与、別々の組成物中での異なる時点における投与又は２つ以上の活性医薬成分が存在する組成物での投与が含まれる。別々の組成物での同時投与及び両方の薬剤が存在する組成物での投与が好ましい。
【０２３９】
[00798]  用語「急速拡大培養」は、１週間の期間にわたって少なくとも約３倍（又は４倍、５倍、６倍、７倍、８倍又は９倍）、より好ましくは１週間の期間にわたって少なくとも約１０倍（又は２０倍、３０倍、４０倍、５０倍、６０倍、７０倍、８０倍又は９０倍）又は最も好ましくは１週間の期間にわたって少なくとも約１００倍の抗原特異的ＴＩＬの数の増加を意味する。複数の急速拡大培養プロトコルを本明細書に記載する。
【０２４０】
[00799]  本明細書において「腫瘍浸潤リンパ球」又は「ＴＩＬ」とは、対象の血流を離れて腫瘍中に遊走した、当初白血球細胞として得られた細胞の集団を意味する。ＴＩＬとしては、限定はされないが、ＣＤ８＋細胞傷害性Ｔ細胞（リンパ球）、Ｔｈ１及びＴｈ１７  ＣＤ４＋  Ｔ細胞、ナチュラルキラー細胞、樹状細胞及びＭ１マクロファージが挙げられる。ＴＩＬは、初代及び二次ＴＩＬの両方を含む。「初代ＴＩＬ」は、本明細書に概説される通り患者組織サンプルから得られるものであり（「新鮮に回収された」と称されることもある）、且つ「二次ＴＩＬ」は、限定はされないが、バルクＴＩＬ及び拡大培養ＴＩＬ（「ＲＥＰ  ＴＩＬ」又は「ポストＲＥＰ  ＴＩＬ」）を含め、本明細書で考察する通り拡大培養された又は成長した任意のＴＩＬ細胞集団である。
【０２４１】
[00800]  本明細書において「細胞集団」（ＴＩＬを含む）は、共通の形質を共有する多数の細胞を意味する。一般に、集団は、概して数が１×１０６〜１×１０１０個の範囲であり、異なるＴＩＬ集団は異なる数を含む。例えば、ＩＬ−２の存在下での初代ＴＩＬの初期成長は、およそ１×１０８個の細胞のバルクＴＩＬ集団をもたらす。ＲＥＰ拡大培養は、概して１．５×１０９〜１．５×１０１０個の注入用の細胞集団が提供されるように行われる。
【０２４２】
[00801]  用語「セントラルメモリーＴ細胞」は、ヒトではＣＤ４５Ｒ０＋であり、且つＣＣＲ７（ＣＣＲ７ｈｉ）及びＣＤ６２Ｌ（ＣＤ６２ｈｉ）を構成的に発現するＴ細胞のサブセットを指す。セントラルメモリーＴ細胞の表面表現型には、ＴＣＲ、ＣＤ３、ＣＤ１２７（ＩＬ−７Ｒ）及びＩＬ−１５Ｒも含まれる。セントラルメモリーＴ細胞の転写因子には、ＢＣＬ−６、ＢＣＬ−６Ｂ、ＭＢＤ２及びＢＭＩ１が含まれる。セントラルメモリーＴ細胞はＴＣＲ惹起後にエフェクター分子としてＩＬ−２及びＣＤ４０Ｌを主に分泌する。セントラルメモリーＴ細胞は、血中のＣＤ４区画において優勢であり、ヒトではリンパ節及び扁桃腺において比例的に濃縮されている。
【０２４３】
[00802]  用語「抗ＣＤ３抗体」は、抗体又はその変異体、例えばモノクローナル抗体であって、成熟Ｔ細胞のＴ細胞抗原受容体におけるＣＤ３受容体に対して指向されたヒト、ヒト化、キメラ又はマウス抗体を含むものを指す。抗ＣＤ３抗体には、ムロモナブとしても知られるＯＫＴ−３が含まれる。抗ＣＤ３抗体には、Ｔ３及びＣＤ３εとしても知られるＵＨＣＴ１クローンも含まれる。他の抗ＣＤ３抗体には、例えば、オテリキシズマブ、テプリズマブ及びビジリズマブが含まれる。
【０２４４】
[00803]  用語「ＯＫＴ−３」（本明細書では「ＯＫＴ３」とも称される）は、成熟Ｔ細胞のＴ細胞抗原受容体中のＣＤ３受容体に対して指向されたヒト、ヒト化、キメラ又はマウス抗体を含む、モノクローナル抗体若しくはバイオシミラー又はその変異体を指し、ＯＫＴ−３（３０ｎｇ／ｍＬ、MACS GMP CD3 pure、Miltenyi Biotech, Inc., San Diego, CA, USA）及びムロモナブ又はそれらの変異体、保存的アミノ酸置換、グリコフォーム若しくはバイオシミラーなどの市販の形態を含む。ムロモナブの重鎖及び軽鎖のアミノ酸配列を表１に示す（配列番号１及び配列番号２）。
【０２４５】
【表１】
2021512962.tif 000003
【０２４６】
[00804]  用語「ＩＬ−２」（本明細書では「ＩＬ２」とも称される）は、インターロイキン−２として知られるＴ細胞成長因子を指し、ヒト及び哺乳動物の形態、保存的アミノ酸置換、グリコフォーム、バイオシミラー及びそれらの変異体を含む全ての形態のＩＬ−２を含む。ＩＬ−２は、例えば、Nelson, J. Immunol. 2004, 172, 3983-88及びMalek, Annu. Rev. Immunol. 2008, 26, 453-79に記載され、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。本発明における使用に適した組換えヒトＩＬ−２のアミノ酸配列を表２に示す（配列番号３）。例えば、ＩＬ−２という用語は、アルデスロイキン（PROLEUKIN、単回使用バイアルあたり２２００万ＩＵで複数の供給元から市販されている）並びにCellGenix, Inc., Portsmouth, NH, USA（CELLGRO GMP）又はProSpec-Tany TechnoGene Ltd., East Brunswick, NJ, USA（カタログ番号ＣＹＴ−２０９−ｂ）から市販で供給される組換えＩＬ−２の形態及び他の販売業者からの他の市販の同等物などのＩＬ−２のヒト組換え型を包含する。アルデスロイキン（デス−アラニル−１、セリン−１２５ヒトＩＬ−２）は、分子量およそ１５ｋＤａの非グリコシル化ヒト組換え型ＩＬ−２である。本発明における使用に適したアルデスロイキンのアミノ酸配列を表２に示す（配列番号４）。ＩＬ−２という用語は、本明細書に記載されているように、Nektar Therapeutics, South San Francisco, CA, USAから入手可能なペグ化ＩＬ２プロドラッグＮＫＴＲ−２１４を含む、ペグ化形態のＩＬ−２も包含する。本発明での使用に好適なＮＫＴＲ−２１４及びペグ化ＩＬ−２が米国特許出願公開第２０１４／０３２８７９１  Ａ１号及び国際公開第２０１２／０６５０８６  Ａ１号（これらの開示は、参照により本明細書に組み込まれる）に記載されている。本発明での使用に適したコンジュゲートＩＬ−２の代替形態は、米国特許第４，７６６，１０６号、同第５，２０６，３４４号、同第５，０８９，２６１号及び同第４９０２，５０２号に記載され、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。本発明における使用に適したＩＬ−２の製剤は、米国特許第６，７０６，２８９号に記載されており、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。
【０２４７】
【表２】
2021512962.tif 000004
【０２４８】
[00805]  用語「ＩＬ−４」（本明細書では「ＩＬ４」とも称される）は、インターロイキン４として知られるサイトカインを指し、これはＴｈ２  Ｔ細胞により、且つ好酸球、好塩基球及び肥満細胞により産生される。ＩＬ−４は、ナイーブヘルパーＴ細胞（Ｔｈ０細胞）からＴｈ２  Ｔ細胞への分化を調節する。Steinke and Borish, Respir. Res. 2001, 2, 66-70。ＩＬ−４によって活性化されると、Ｔｈ２  Ｔ細胞は続いてポジティブフィードバックループにおいて、更なるＩＬ−４を産生する。ＩＬ−４はまた、Ｂ細胞拡大培養及びクラスＩＩ  ＭＨＣ発現を刺激し、Ｂ細胞からのＩｇＥ及びＩｇＧ１発現へのクラス切り替えを誘導する。本発明における使用に適した組換えヒトＩＬ−４は、ProSpec-Tany TechnoGene Ltd., East Brunswick, NJ, USA（カタログ番号ＣＹＴ−２１１）及びThermoFisher Scientific, Inc., Waltham, MA, USA（ヒトＩＬ−１５組換えタンパク質、カタログ番号Ｇｉｂｃｏ  ＣＴＰ００４３）を含む複数の供給元から市販されている。本発明における使用に適した組換えヒトＩＬ−４のアミノ酸配列を表２に示す（配列番号５）。
【０２４９】
[00806]  用語「ＩＬ−７」（本明細書では「ＩＬ７」とも称される）は、インターロイキン７として知られるグリコシル化組織由来サイトカインを指し、これは間質及び上皮細胞並びに樹状細胞から入手し得る。Fry and Mackall, Blood 2002, 99, 3892-904。ＩＬ−７は、Ｔ細胞の発生を刺激することができる。ＩＬ−７は、胸腺内のＴ細胞発生及び末梢内での生存に重要な一連のシグナルにおいて、ＩＩＬ−７受容体アルファ及び一般的なガンマ鎖受容体からなるヘテロ二量体であるＩＬ−７受容体に結合する。本発明における使用に適した組換えヒトＩＬ−７は、ProSpec-Tany TechnoGene Ltd., East Brunswick, NJ, USA（カタログ番号ＣＹＴ−２５４）及びThermoFisher Scientific, Inc., Waltham, MA, USA（ヒトＩＬ−７組換えタンパク質、カタログ番号Ｇｉｂｃｏ  ＰＨＣ００７１）を含む複数の供給元から市販されている。本発明における使用に適した組換えヒトＩＬ−７のアミノ酸配列を表２に示す（配列番号６）。
【０２５０】
[00807]  用語「ＩＬ−１５」（本明細書では「ＩＬ１５」とも称される）は、インターロイキン−１５として知られるＴ細胞成長因子を指し、ヒト及び哺乳動物の形態、保存的アミノ酸置換、グリコフォーム、バイオシミラー及びそれらの変異体を含む全ての形態のＩＬ−１５を含む。ＩＬ−１５は、例えば、Fehniger and Caligiuri, Blood 2001, 97, 14-32に記載され、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。ＩＬ−１５は、β及びγシグナル伝達受容体サブユニットをＩＬ−２と共有する。組換えヒトＩＬ−１５は、分子量１２．８ｋＤａの１１４個のアミノ酸（及びＮ末端メチオニン）を含有する単一の非グリコシル化ポリペプチド鎖である。組換えヒトＩＬ−１５は、ProSpec-Tany TechnoGene Ltd., East Brunswick, NJ, USA（カタログ番号ＣＹＴ−２３０−ｂ）及びThermoFisher Scientific, Inc., Waltham, MA, USA（ヒトＩＬ−１５組換えタンパク質、カタログ番号３４−８１５９−８２）を含む複数の供給元から市販されている。本発明における使用に適した組換えヒトＩＬ−１５のアミノ酸配列を表２に示す（配列番号７）。
【０２５１】
[00808]  用語「ＩＬ−２１」（本明細書では「ＩＬ２１」とも称される）は、インターロイキン−２１として知られる多面発現性サイトカインタンパク質を指し、ヒト及び哺乳動物の形態、保存的アミノ酸置換、グリコフォーム、バイオシミラー及びそれらの変異体を含む全ての形態のＩＬ−２１を含む。ＩＬ−２１は、例えば、Spolski and Leonard, Nat. Rev. Drug. Disc. 2014, 13, 379-95に記載され、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。ＩＬ−２１は、主にナチュラルキラーＴ細胞及び活性化ヒトＣＤ４＋  Ｔ細胞によって産生される。組換えヒトＩＬ−２１は、分子量１５．４ｋＤａの１３２個のアミノ酸を含有する単一の非グリコシル化ポリペプチド鎖である。組換えヒトＩＬ−２１は、ProSpec-Tany TechnoGene Ltd., East Brunswick, NJ, USA（カタログ番号ＣＹＴ−４０８−ｂ）及びThermoFisher Scientific, Inc., Waltham, MA, USA（ヒトＩＬ−２１組換えタンパク質、カタログ番号１４−８２１９−８０）を含む複数の供給元から市販されている。本発明における使用に適した組換えヒトＩＬ−２１のアミノ酸配列を表２に示す（配列番号８）。
【０２５２】
[00809]  アデノシンＡ２Ａ受容体アンタゴニストは、「Ａ２ａＲアンタゴニスト」及び「Ａ２ＡＡｄｏＲアンタゴニスト」と称される。これらの受容体は、Ｇタンパク質共役受容体ファミリーに属し、アデノシンＡ１、アデノシンＡ２Ｂ及びアデノシンＡ３受容体サブファミリーと区別される。
【０２５３】
[00810]  「ＣＰＩ−４４４」という用語は、シフォラデナントとして知られる、化合物７−（５−メチルフラン−２−イル）−３−［［６−［［（３Ｓ）−オキソラン−３−イル］オキシメチル］ピリジン−２−イル］メチル］トリアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−５−アミンを指す。この化合物は「Ｖ８１４４４」としても知られる。分子式はＣ２０Ｈ２１Ｎ７Ｏ３である。本開示で使用される場合、「ＣＰＩ−４４４」又は「シフォラデナント」という用語は、それぞれ７−（５−メチルフラン−２−イル）−３−［［６−［［（３Ｓ）−オキソラン−３−イル］オキシメチル］ピリジン−２−イル］メチル］トリアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−５−アミンの薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶又はプロドラッグを包含する。
【０２５４】
[00811]  「ＳＣＨ５８２６１」という用語は、分子式Ｃ１８Ｈ１５Ｎ７Ｏを有する、化合物２−（フラン−２−イル）−７−フェネチル−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｅ］［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ｃ］ピリミジン−５−アミンを指す。本開示で使用される場合、「ＳＣＨ５８２６１」という用語は、２−（フラン−２−イル）−７−フェネチル−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｅ］［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ｃ］ピリミジン−５−アミンの薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶又はプロドラッグを包含する。
【０２５５】
[00812]  「ＳＹＮ１１５」という用語は、分子式Ｃ１９Ｈ２６Ｎ４Ｏ４Ｓを有する、化合物４−ヒドロキシ−Ｎ−［４−メトキシ−７−（４−モルホリニル）−２−ベンゾチアゾリル］−４−メチル−１−ピペリジンカルボキサミドを指す。本開示で使用される場合、「ＳＹＮ１１５」という用語は、４−ヒドロキシ−Ｎ−［４−メトキシ−７−（４−モルホリニル）−２−ベンゾチアゾリル］−４−メチル−１−ピペリジンカルボキサミドの薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶又はプロドラッグを包含する。
【０２５６】
[00813]  「ＺＭ２４１３８５」という用語は、分子式Ｃ１６Ｈ１５Ｎ７Ｏ２を有する、化合物４−（−２−［７−アミノ−２−｛２−フリル｝｛１，２，４｝トリアゾロ｛２，３−ａ｝｛１，３，５｝トリアジン−５−イル−アミノ］エチル）フェノールを指す。本開示で使用される場合、「ＺＭ２４１３８５」という用語は、４−（−２−［７−アミノ−２−｛２−フリル｝｛１，２，４｝トリアゾロ｛２，３−ａ｝｛１，３，５｝トリアジン−５−イル−アミノ］エチル）フェノールの薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶又はプロドラッグを包含する。
【０２５７】
[00814]  「７ＭＭＢ」という用語は、テンプレートで定義された化合物のファミリーを指し、ここで、Ｘは、Ｃであり、及びＲは、パラ−Ｆ、メタ−Ｆ、パラ−ＣＨ３、２，４−ジフルオロ、２，６−ジフルオロ、３，４−ジフルオロ、３，４−ジメトキシ、メタ−（２−メトキシエトキシ）、メタ−（１，３−ベンゾジオキソール）、パラ−Ｃｌ、パラ−ＣＦ３、パラ−ＣＮ及びパラ−ｔｅｒｔ−ブチルからなる群から選択され；ここで、Ｘは、Ｎであり、及びＲは、パラ−Ｆ、メタ−Ｆ、オルト−Ｆ、パラ−Ｃｌ、メタ−ＣＦ３、２，４−ジフルオロ、２，６−ジフルオロ、３，４−ジフルオロ、メタ−（２−メトキシエトキシ）、メタ−（１，３−ベンゾジオキソール）、パラ−ＣＨ３及びメタ−ＯＣＨ３からなる群から選択される。「７ＭＭＢ」という用語は、このテンプレート及び以下のアデノシン２Ａ受容体アンタゴニスト「７ＭＭＧ」のセクションで開示される属の薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶又はプロドラッグを包含する。
【０２５８】
[00815]  「インビボ」という用語は、哺乳動物対象の体内で起こる事象を指す。
【０２５９】
[00816]  「エクスビボ」という用語は、人工環境において哺乳動物対象の体の外側で起こる事象を指す。
【０２６０】
[00817]  「インビトロ」という用語は、試験系で起こる事象を指す。インビトロアッセイは、生存細胞又は死細胞が使用され得る細胞ベースのアッセイを包含し、無傷細胞が使用されない無細胞アッセイも包含し得る。
【０２６１】
[00818]  「有効量」又は「治療有効量」という用語は、疾患処置を含むが、これに限定されない、意図された用途を達成するのに十分な、本明細書に記載の化合物又は化合物の組み合わせの量を指す。治療有効量は、意図される用途（インビトロ又はインビボ）又は処置されている対象及び疾患状態（例えば、対象の体重、年齢及び性別）、疾患状態の重症度又は投与方法によって変動し得る。この用語は、標的細胞において特定の応答（例えば、血小板接着及び／又は細胞遊走の減少）を誘発する用量にも適用される。特定の用量は、選択された特定の化合物、従うべき投与レジメン、化合物が他の化合物と組み合わせて投与されるかどうか、投与のタイミング、それが投与される組織及び化合物が運ばれる物理的送達システムによって変動する。
【０２６２】
[00819]  「治療効果」は、その用語が本明細書で使用される場合、治療上の利益及び／又は予防上の利益を包含する。予防効果は、疾患若しくは状態の出現を遅らせるか若しくは排除すること、疾患若しくは状態の症状の発症を遅らせるか若しくは排除すること、疾患若しくは状態の進行を遅らせか、停止させるか若しくは逆行させること又はそれらの任意の組み合わせを含む。
【０２６３】
[00820]  「ＱＤ」、「ｑｄ」又は「ｑ．ｄ．」という用語は、１日に１回、１日１回又は毎日１回を意味する。「ＢＩＤ」、「ｂｉｄ」又は「ｂ．ｉ．ｄ．」という用語は、１日に２回、１日２回又は毎日２回を意味する。「ＴＩＤ」、「ｔｉｄ」又は「ｔ．ｉ．ｄ．」という用語は、１日に３回、１日３回又は毎日３回を意味する。「ＱＩＤ」、「ｑｉｄ」又は「ｑ．ｉ．ｄ．」という用語は、１日に４回、１日４回又は毎日４回を意味する。「ＱＷ」という用語は、週に１回を意味する。「Ｑ２Ｗ」という用語は、２週間に１回を意味する。「Ｑ３Ｗ」という用語は、３週間に１回を意味する。「Ｑ４Ｗ」という用語は、４週間に１回を意味する。
【０２６４】
[00821]  「薬学的に許容される塩」という用語は、当技術分野において公知の様々な有機及び無機対イオンから誘導される塩を指す。薬学的に許容される酸付加塩は、無機酸及び有機酸を用いて形成することができる。塩を誘導することができる好ましい無機酸には、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸及びリン酸が含まれる。塩を誘導することができる好ましい有機酸には、例えば、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、ピルビン酸、シュウ酸、マレイン酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、ケイ皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸及びサリチル酸が含まれる。薬学的に許容される塩基付加塩は、無機塩基及び有機塩基を用いて形成することができる。塩を誘導することができる無機塩基は、例えば、ナトリウム、カリウム、リチウム、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、鉄、亜鉛、銅、マンガン及びアルミニウムを含む。塩を誘導することができる有機塩基には、例えば、一級、二級及び三級アミン、天然に存在する置換アミンを含む置換アミン、環状アミン及び塩基性イオン交換樹脂が含まれる。具体例には、イソプロピルアミン、トリメチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、トリプロピルアミン、エタノールアミンが含まれる。一部の実施形態において、薬学的に許容される塩基付加塩は、アンモニウム塩、カリウム塩、ナトリウム塩、カルシウム塩及びマグネシウム塩から選択される。「共結晶」という用語は、当技術分野において公知のいくつかの共結晶形成剤から誘導される分子複合体を指す。塩と異なり、共結晶は、典型的には、共結晶と薬物との間の水素移動を伴わず、代わりに結晶構造中の共結晶形成体と薬物との間の水素結合、芳香環スタッキング又は分散力などの分子間相互作用を伴う。
【０２６５】
[00822]  「薬学的に許容される担体」又は「薬学的に許容される賦形剤」という用語は、ありとあらゆる溶媒、分散剤、コーティング、抗菌剤及び抗真菌剤、等張剤及び吸収遅延剤並びに不活性成分を含むものとする。活性医薬成分のためのかかる薬学的に許容される担体又は薬学的に許容される賦形剤の使用は、当技術分野において周知である。任意の従来の薬学的に許容される担体又は薬学的に許容される賦形剤が活性医薬成分と適合しない場合を除いて、本発明の治療用組成物におけるその使用が企図される。他の薬物などの追加の活性医薬成分も記載の組成物、プロセス及び方法に組み込むことができる。
【０２６６】
[00823]  「抗原」という用語は、免疫応答を誘導する物質を指す。一部の実施形態において、抗原は、主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）分子によって提示される場合、抗体又はＴ細胞受容体（ＴＣＲ）によって結合され得る分子である。本明細書で使用される場合、「抗原」という用語は、Ｔ細胞エピトープも包含する。抗原は、免疫系によって更に認識され得る。一部の実施形態において、抗原は、Ｂリンパ球及び／又はＴリンパ球の活性化をもたらす体液性免疫応答又は細胞性免疫応答を誘導することができる。一部の場合、これは、抗原がＴｈ細胞エピトープを含有するか又はそれに結合していることを要し得る。抗原は、１つ以上のエピトープ（例えば、Ｂエピトープ及びＴエピトープ）も有し得る。一部の実施形態において、抗原は、好ましくは、典型的には高度に特異的且つ選択的な態様で、その対応する抗体又はＴＣＲと反応し、その抗原によって誘導され得る多数の他の抗体又はＴＣＲとは反応しない。
【０２６７】
[00824]  １つ及び複数の「抗体」という用語は、免疫グロブリン全体及び任意の抗原結合断片（「抗原結合部分」）又はそれらの単鎖を指す。「抗体」は、ジスルフィド結合によって相互連結された少なくとも２つの重（Ｈ）鎖及び２つの軽（Ｌ）鎖を含む糖タンパク質又はその抗原結合部分を更に指す。各重鎖は、重鎖可変領域（本明細書ではＶＨと略す）及び重鎖定常領域で構成される。重鎖定常領域は、３つのドメイン、ＣＨ１、ＣＨ２及びＣＨ３で構成される。各軽鎖は、軽鎖可変領域（本明細書ではＶＬと略す）及び軽鎖定常領域で構成される。軽鎖定常領域は１つのドメイン、ＣＬで構成される。抗体のＶＨ及びＶＬ領域は、相補性決定領域（ＣＤＲ）又は超可変領域（ＨＶＲ）と称され、より保存された領域（フレームワーク領域（ＦＲ）と呼ばれる）に分散することができる、超可変性を有する領域に更に細分化され得る。各ＶＨ及びＶＬは、アミノ末端からカルボキシ末端に向かって、ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４の順に配置された３つのＣＤＲ及び４つのＦＲで構成される。重鎖及び軽鎖の可変領域は、抗原エピトープと相互作用する結合ドメインを含有する。抗体の定常領域は、免疫系の様々な細胞（例えば、エフェクター細胞）及び古典的補体系の第１の成分（Ｃｌｑ）を含む宿主組織又は因子への免疫グロブリンの結合を媒介し得る。
【０２６８】
[00825]  「モノクローナル抗体」、「ｍＡｂ」、「モノクローナル抗体組成物」という用語又はそれらの複数形は、単一分子組成の抗体分子の調製物を指す。モノクローナル抗体組成物は、特定のエピトープに対して単一の結合特異性及び親和性を示す。ＴＮＦＲＳＦ受容体に特異的なモノクローナル抗体は、試験対象に適切な抗原を注射し、次いで所望の配列又は機能的特徴を有する抗体を発現するハイブリドーマを分離するという当技術分野における知識及び技術を用いて作製することができる。モノクローナル抗体をコードするＤＮＡは、従来の手順を用いて（例えば、モノクローナル抗体の重鎖及び軽鎖をコードする遺伝子に特異的に結合することができるオリゴヌクレオチドプローブを使用することにより）容易に分離及び配列決定される。ハイブリドーマ細胞は、そのようなＤＮＡの好ましい供給源として働く。ＤＮＡは分離されると発現ベクター中に入れられ得、次いでこれを大腸菌（E. coli）細胞、サルＣＯＳ細胞、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞又は他の方法では免疫グロブリンタンパク質を産生しない骨髄腫細胞などの宿主細胞にトランスフェクトして、組換え宿主細胞中でモノクローナル抗体の合成を入手する。抗体の組換え産生は、以下により詳細に記載される。
【０２６９】
[00826]  本明細書で使用される場合、抗体の「抗原結合部分」又は「抗原結合断片」（又は単に「抗体部分」又は「断片」）という用語は、特異的に抗原に結合する能力を保持する抗体の１つ以上の断片を指す。抗体の抗原結合機能は全長抗体の断片によって行われ得ることが示されている。抗体の「抗原結合部分」という用語に包含される結合断片の例には、（ｉ）ＶＬ、ＶＨ、ＣＬ及びＣＨ１ドメインからなる一価断片である、Ｆａｂ断片；（ｉｉ）ヒンジ領域でジスルフィド架橋により連結された２つのＦａｂ断片を含む二価断片である、Ｆ（ａｂ’）２断片；（ｉｉｉ）ＶＨ及びＣＨ１ドメインからなるＦｄ断片；（ｉｖ）抗体の単一アームのＶＬ及びＶＨドメインからなるＦｖ断片、（ｖ）ＶＨ又はＶＬドメインからなり得る、ドメイン抗体（ｄＡｂ）断片（Ward, et al., Nature, 1989, 341, 544-546）；並びに（ｖｉ）単離された相補性決定領域（ＣＤＲ）が含まれる。更に、Ｆｖ断片の２つのドメイン、ＶＬ及びＶＨは別々の遺伝子によってコードされているが、それらは、組換え法を用いて、ＶＬ及びＶＨ領域ペアが単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）として知られる一価分子を形成する単一のタンパク質鎖として、それらが作製されることを可能にする、合成リンカーによって連結され得る；例えば、Bird, et al., Science 1988, 242, 423-426; and Huston, et al., Proc.Natl.Acad.Sci.USA 1988, 85, 5879-5883を参照されたい）。そのようなｓｃＦｖ抗体は、抗体の「抗原結合部分」又は「抗原結合断片」という用語内に包含されることも意図している。これらの抗体断片は、当業者に公知の従来技術を使用して入手され、断片は、無傷の抗体と同じ方法で有用性についてスクリーニングされる。
【０２７０】
[00827]  本明細書で使用される「ヒト抗体」という用語は、フレームワーク領域及びＣＤＲ領域の両方がヒト生殖細胞系免疫グロブリン配列に由来する可変領域を有する抗体を含むことを意図している。更に、抗体が定常領域を含有する場合、定常領域もヒト生殖細胞系免疫グロブリン配列に由来する。本発明のヒト抗体は、ヒト生殖細胞系免疫グロブリン配列によってコードされないアミノ酸残基（例えば、インビトロでのランダム若しくは部位特異的変異誘発又はインビボでの体細胞変異によって導入された変異）を含み得る。本明細書で使用される「ヒト抗体」という用語は、マウスなどの別の哺乳動物種の生殖細胞系に由来するＣＤＲ配列がヒトフレームワーク配列に移植されている抗体を含むことを意図しない。
【０２７１】
[00828]  「ヒトモノクローナル抗体」という用語は、フレームワーク領域及びＣＤＲ領域の両方がヒト生殖細胞系免疫グロブリン配列に由来する可変領域を有する単一の結合特異性を示す抗体を指す。一実施形態において、ヒトモノクローナル抗体は、トランスジェニック非ヒト動物、例えばトランスジェニックマウスから入手され、不死化細胞に融合したヒト重鎖導入遺伝子及び軽鎖導入遺伝子を含むゲノムを有するＢ細胞を含むハイブリドーマによって産生される。
【０２７２】
[00829]  本明細書で使用される「組換えヒト抗体」という用語は、（ａ）ヒト免疫グロブリン遺伝子のトランスジェニック若しくはトランス染色体である動物（マウスなど）又はそれから調製されたハイブリドーマ（以下で更に説明する）から分離された抗体、（ｂ）ヒト抗体を発現するように形質転換された宿主細胞、例えばトランスフェクトーマから分離された抗体、（ｃ）組換えコンビナトリアルヒト抗体ライブラリーから分離された抗体、及び（ｄ）ヒト免疫グロブリン遺伝子配列の他のＤＮＡ配列へのスプライシングを含む任意の他の手段により調製、発現、生成又は分離された抗体などの組換え手段によって調製、発現、生成又は分離された全てのヒト抗体を含む。そのような組換えヒト抗体は、フレームワーク領域及びＣＤＲ領域がヒト生殖細胞系免疫グロブリン配列に由来する可変領域を有する。しかし、特定の実施形態において、そのような組換えヒト抗体は、インビトロ変異誘発（又はヒトＩｇ配列についてトランスジェニックな動物を使用する場合、インビボ体細胞変異誘発）に供することができ、したがって、組換え抗体のＶＨ及びＶＬ領域のアミノ酸配列は、ヒト生殖細胞系のＶＨ及びＶＬ配列に由来し、それらに関係している一方、インビボでのヒト抗体生殖細胞系レパートリー内に天然には存在し得ない配列である。
【０２７３】
[00830]  本明細書で使用される場合、「アイソタイプ」とは、重鎖定常領域遺伝子によってコードされる抗体クラス（例えば、ＩｇＭ又はＩｇＧ１）を指す。
【０２７４】
[00831]  「抗原を認識する抗体」及び「抗原に特異的な抗体」という句は、本明細書において「抗原に特異的に結合する抗体」という用語と互換的に使用される。
【０２７５】
[00832]  「ヒト抗体誘導体」という用語は、抗体と別の活性医薬成分又は抗体とのコンジュゲートを含む、ヒト抗体の任意の変異形態を指す。「コンジュゲート」、「抗体−薬物コンジュゲート」、「ＡＤＣ」又は「イムノコンジュゲート」という用語は、別の治療部分にコンジュゲートされた抗体又はその断片を指し、これは、当技術分野で利用可能な方法を使用して本明細書に記載の抗体にコンジュゲートすることができる。
【０２７６】
[00833]  「ヒト化抗体」及び「ヒト化」という用語は、マウスなどの別の哺乳動物種の生殖細胞系に由来するＣＤＲ配列がヒトフレームワーク配列に移植されている抗体を指すことを意図する。ヒトフレームワーク配列内で更なるフレームワーク領域の改変がなされ得る。ヒト化形態の非ヒト（例えば、マウス）抗体は、非ヒト免疫グロブリンに由来する最小配列を含有するキメラ抗体である。ほとんどの部分について、ヒト化抗体は、レシピエントの超可変領域由来の残基が、所望の特異性、親和性及び能力を有する、マウス、ラット、ウサギ又は非ヒト霊長類などの非ヒト種の１５個の超可変領域（ドナー抗体）由来の残基によって置換されている、ヒト免疫グロブリン（レシピエント抗体）である。一部の例では、ヒト免疫グロブリンのＦｖフレームワーク領域（ＦＲ）残基は、対応する非ヒト残基によって置換されている。更に、ヒト化抗体は、レシピエント抗体にもドナー抗体にも見られない残基を含み得る。これらの改変は、抗体性能を更に改良するために行われる。一般的に、ヒト化抗体は、少なくとも１つ、典型的には２つの可変ドメインの実質的に全てを含み、ここで超可変ループの全て又は実質的に全てが非ヒト免疫グロブリンのものに対応し、ＦＲ領域の全て又は実質的に全てがヒト免疫グロブリン配列のものである。ヒト化抗体は、任意選択により、免疫グロブリン定常領域（Ｆｃ）の少なくとも一部、典型的にはヒト免疫グロブリンのものも含む。更なる詳細については、Jones, et al., Nature 1986, 321, 522-525；Riechmann, et al., Nature 1988, 332, 323-329；及びPresta, Curr.Op.Struct.Biol 1992, 2, 593-596を参照されたい。本明細書に記載のＴＮＦＲＳＦアゴニストは、エフェクター機能及び／又はＦｃＲ結合に改善（例えば、減少）を付与することも知られている任意のＦｃ変異体を使用するように改変され得る。Ｆｃ変異体は、例えば、国際公開第１９８８／０７０８９Ａ１号、同第１９９６／１４３３９Ａ１号、同第１９９８／０５７８７Ａ１号、同第１９９８／２３２８９Ａ１号、同第１９９９／５１６４２Ａ１号、同第９９／５８５７２Ａ１号、同第２０００／０９５６０Ａ２号、同第２０００／３２７６７Ａ１号、同第２０００／４２０７２Ａ２号、同第２００２／４４２１５Ａ２号、同第２００２／０６０９１９Ａ２号、同第２００３／０７４５６９Ａ２号、同第２００４／０１６７５０Ａ２号、同第２００４／０２９２０７Ａ２号、同第２００４／０３５７５２Ａ２号、同第２００４／０６３３５１Ａ２号、同第２００４／０７４４５５Ａ２号、同第２００４／０９９２４９Ａ２号、同第２００５／０４０２１７Ａ２号、同第２００５／０７０９６３Ａ１号、同第２００５／０７７９８１Ａ２号、同第２００５／０９２９２５Ａ２号、同第２００５／１２３７８０Ａ２号、同第２００６／０１９４４７Ａ１号、同第２００６／０４７３５０Ａ２号及び同第２００６／０８５９６７Ａ２号；及び米国特許第５，６４８，２６０号、同第５，７３９，２７７号、同第５，８３４，２５０号、同第５，８６９，０４６号、同第６，０９６，８７１号、同第６，１２１，０２２号、同第６，１９４，５５１号、同第６，２４２，１９５号、同第６，２７７，３７５号、同第６，５２８，６２４号、同第６，５３８，１２４号、同���６，７３７，０５６号、同第６，８２１，５０５号、同第６，９９８，２５３号；及び同第７，０８３，７８４号に開示されるアミノ酸置換のいずれか１つを含み得、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。
【０２７７】
[00834]  「キメラ抗体」という用語は、可変領域配列がマウス抗体に由来し、定常領域配列がヒト抗体に由来する抗体など、可変領域配列が１つの種に由来し、定常領域配列が別の種に由来する抗体を指すことを意図する。
【０２７８】
[00835]  「ダイアボディ」は、２つの抗原結合部位を有する小さい抗体断片である。断片は、同じポリペプチド鎖（ＶＨ−ＶＬ又はＶＬ−ＶＨ）内の軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）に接続された重鎖可変ドメイン（ＶＨ）を含む。同一鎖上の２つのドメイン間で対形成させるには短すぎるリンカーを使用することにより、そのドメインは、別の鎖の相補的ドメインと対形成し、２つの抗原結合部位を生成することを強いられる。ダイアボディは、例えば、欧州特許第４０４，０９７号、国際公開第９３／１１１６１号；及びBolliger, et al., Proc.Natl.Acad.Sci.USA 1993, 90, 6444-6448に更に十分に記載されている。
【０２７９】
[00836]  「グリコシル化」という用語は、抗体の改変誘導体を指す。アグリコシル化抗体は、グリコシル化を欠く。グリコシル化は、例えば、抗原に対する抗体の親和性を増加させるために改変することができる。そのような炭水化物改変は、例えば抗体配列内の１つ以上のグリコシル化部位を変えることによって達成することができる。例えば、１つ以上の可変領域フレームワークグリコシル化部位の除去をもたらし、それによってその部位でのグリコシル化を除去する、１つ以上のアミノ酸置換を行うことができる。米国特許第５，７１４，３５０号及び同第６，３５０，８６１号に記載されているように、アグリコシル化は、抗原に対する抗体の親和性を増加させ得る。追加的又は代替的に、減少したフコシル残基の量を有する低フコシル化抗体又は増加したバイセクティングＧｌｃＮａｃ構造を有する抗体など、グリコシル化の種類が変更された抗体を作製することができる。そのような改変されたグリコシル化パターンは、抗体の能力を増大させることが実証されている。そのような炭水化物改変は、例えば、グリコシル化機構を変えて宿主細胞中で抗体を発現させることによって達成することができる。グリコシル化機構が改変された細胞は、当技術分野において記載されており、本発明の組換え抗体を発現させ、それによって改変されたグリコシル化を有する抗体を産生するための宿主細胞として使用することができる。例えば、細胞株Ｍｓ７０４、Ｍｓ７０５及びＭｓ７０９は、フコシルトランスフェラーゼ遺伝子、ＦＵＴ８（アルファ（１，６）フコシルトランスフェラーゼ）を欠いているため、Ｍｓ７０４、Ｍｓ７０５及びＭｓ７０９細胞株で発現される抗体は、それらの炭水化物上でフコースを欠いている。Ｍｓ７０４、Ｍｓ７０５及びＭｓ７０９  ＦＵＴ８−／−細胞株は、２つの置換ベクターを使用して、ＣＨＯ／ＤＧ４４細胞中のＦＵＴ８遺伝子を標的とした破壊によって生成された（例えば、米国特許出願公開第２００４／０１１０７０４号又はYamane-Ohnuki, et al, Biotechnol.Bioeng., 2004, 87, 614-622を参照されたい）。別の例として、欧州特許第１，１７６，１９５号には、そのような細胞株で発現される抗体が、アルファ１，６結合関連酵素を減少させる又は排除することにより低フコシル化を示すように、フコシルトランスフェラーゼをコードする機能的に破壊されたＦＵＴ８遺伝子を有する細胞株が記載され、また、抗体のＦｃ領域に結合するＮ−アセチルグルコサミンにフコースを加える酵素活性の低いか又は酵素活性を有しない細胞株、例えばラット骨髄腫細胞株ＹＢ２／０（ＡＴＣＣ  ＣＲＬ  １６６２）も記載される。国際公開第０３／０３５８３５号には、Ａｓｎ（２９７）が連結した炭水化物にフコースを結合する能力が低下し、また、その宿主細胞で発現した抗体の低フコシル化をもたらす、変異体ＣＨＯ細胞株、Ｌｅｃ１３細胞が記載される（Shields, et al., J. Biol Chem.2002, 277, 26733-26740も参照されたい）。国際公開第９９／５４３４２号には、操作された細胞株で発現された抗体が、抗体のＡＤＣＣ活性の増加をもたらす増加したバイセクティングＧｌｃＮａｃ構造を示すように、糖タンパク質改変グリコシルトランスフェラーゼを発現するよう操作された細胞株（例えば、ベータ（１，４）−Ｎ−アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼＩＩＩ（ＧｎＴＩＩＩ））が記載される（Umana, et al., Nat.Biotech.1999, 17, 176-180も参照されたい）。代わりに、抗体のフコース残基は、フコシダーゼ酵素を使用して切断し得る。例えば、フコシダーゼであるアルファ−Ｌ−フコシダーゼは、Tarentino, et al., Biochem.1975, 14, 5516-5523に記載されるように、抗体由来のフコシル残基を除去する。
【０２８０】
[00837]  「ペグ化」とは、１つ以上のＰＥＧ基が抗体又は抗体断片に結合するようになる条件下において、典型的には、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）の反応性エステル又はアルデヒド誘導体などのＰＥＧと反応する修飾抗体若しくは融合タンパク質又はその断片を指す。ペグ化は、例えば、抗体の生物学的（例えば、血清）半減期を増加させ得る。好ましくは、ペグ化は、反応性ＰＥＧ分子（又は類似の反応性水溶性ポリマー）とのアシル化反応又はアルキル化反応を介して行われる。本明細書で使用される場合、「ポリエチレングリコール」という用語は、モノ（Ｃ１〜Ｃ１０）アルコキシ−若しくはアリールオキシ−ポリエチレングリコール又はポリエチレングリコール−マレイミドなどの他のタンパク質を誘導体化するために使用されているＰＥＧの形態のいずれも包含することを意図する。ペグ化タンパク質又は抗体は、非グリコシル化タンパク質又は抗体であり得る。ペグ化の方法は、当技術分野において公知であり、例えば欧州特許第０１５４３１６号及び第０４０１３８４号並びに米国特許第５，８２４，７７８号に記載されているように、本発明の抗体に適用することができ、そのそれぞれの開示は、参照により本明細書に組み込まれる。
【０２８１】
[00838]  「融合タンパク質」又は「融合ポリペプチド」という用語は、２つ以上の個々のタンパク質の特性を組み合わせたタンパク質を指す。そのようなタンパク質は、直接又はアミノ酸リンカーを介して共有結合した少なくとも２つの異種ポリペプチドを有する。融合タンパク質を形成するポリペプチドは、典型的にはＣ末端からＮ末端に連結しているが、Ｃ末端からＣ末端、Ｎ末端からＮ末端又はＮ末端からＣ末端に連結することもできる。融合タンパク質のポリペプチドは、任意の順序であり得、構成ポリペプチドのいずれか２つ以上又は両方を含み得る。この用語は、融合タンパク質を構成する抗原の保存的に改変された変異体、多型変異体、対立遺伝子、突然変異体、部分配列、種間同族体及び免疫原性断片を包含する。本開示の融合タンパク質は、成分抗原又はその免疫原性断片の更なるコピーも含み得る。融合タンパク質は、互いに結合し、ＩｇＧ  ＦｃドメインなどのＦｃドメインに更に結合した１つ以上の結合ドメインを含み得る。融合タンパク質は、モノクローナル抗体を模倣し、６つ以上の結合ドメインを提供するために、共に更に連結され得る。融合タンパク質は、当技術分野において公知であるように、組換え法によって産生され得る。融合タンパク質の調製は、当技術分野で公知であり、例えば国際公開第１９９５／０２７７３５Ａ１号、同第２００５／１０３０７７Ａ１号、同第２００８／０２５５１６Ａ１号、同第２００９／００７１２０Ａ１号、同第２０１０／００３７６６Ａ１号、同第２０１０／０１００５１Ａ１号、同第２０１０／０７８９６６Ａ１号、米国特許出願公開第２０１５／０１２５４１９Ａ１号及び同第２０１６／０２７２６９５Ａ１号並びに米国特許第８，９２１，５１９号に記載され、そのそれぞれの開示は、参照により本明細書に組み込まれる。
【０２８２】
[00839]  核酸又はタンパク質の部分に関して使用される場合の「異種」という用語は、その核酸又はタンパク質が、天然には互いに同じ関係では見出されない２つ以上の部分配列を含むことを示す。例えば、核酸は、典型的には組換え的に産生され、新しい機能性核酸を作成するように配置された無関係の遺伝子由来の２つ以上の配列、例えば１つの供給源からのプロモーター及び別の供給源からのコーディング領域又は異なる供給源からのコーディング領域を有する。同様に、異種タンパク質は、そのタンパク質が、天然には互いに同じ関係では見出されない２つ以上の部分配列を含むことを示す（例えば、融合タンパク質）。
【０２８３】
[00840]  「保存的アミノ酸置換」という用語は、抗体又は融合タンパク質の抗原への結合を無効にしないアミノ酸配列改変を意味する。保存的アミノ酸置換には、あるクラスのアミノ酸の同じクラスのアミノ酸での置換が含まれ、ここで、クラスは、例えば、標準Dayhoff頻度交換行列又はBLOSUM行列によって決定されるように、一般的な物理化学的アミノ酸側鎖特性及び天然に見られる相同タンパク質における高い置換頻度によって定義される。６つの一般的なクラスのアミノ酸側鎖が分類されており、クラスＩ（Ｃｙｓ）；クラスＩＩ（Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｐｒｏ、Ａｌａ、Ｇｌｙ）；クラスＩＩＩ（Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ）；クラスＩＶ（Ｈｉｓ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ）；クラスＶ（Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、Ｍｅｔ）；及びクラスＶＩ（Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ）を含む。例えば、Ａｓｎ、Ｇｌｎ又はＧｌｕなど、別のクラスＩＩＩ残基へのＡｓｐの置換は、保存的置換である。したがって、抗体中の予測される非必須アミノ酸残基は、好ましくは同じクラスからの別のアミノ酸残基で置換される。抗原結合を排除しないアミノ酸保存的置換を同定する方法は、当技術分野において周知である（例えば、Brummell, et al., Biochemistry 1993, 32, 1180-1187；Kobayashi, et al., Protein Eng.1999, 12, 879-884 (1999)；及びBurks, et al., Proc.Natl.Acad.Sci.USA 1997, 94, 412-417を参照されたい）。
【０２８４】
[00841]  ２つ以上の核酸又はポリペプチドに関連して、「配列同一性」、「パーセント同一性」及び「配列パーセント同一性」（又はそれらの同義語、例えば「９９％同一」）という用語は、配列同一性の一部として保存的アミノ酸置換を考慮せずに、最大限の対応について比較し、整合させた場合に（必要に応じてギャップを導入する）、同じであるか、同じヌクレオチド又はアミノ酸残基の特定のパーセンテージを有する、２つ以上の配列又は部分配列を指す。同一性パーセントは、配列比較ソフトウェア若しくはアルゴリズムを使用するか又は目視検査によって測定することができる。アミノ酸又はヌクレオチド配列のアラインメントを入手するために使用することができる様々なアルゴリズム及びソフトウェアが当技術分野において公知である。パーセント配列同一性を決定するための適切なプログラムには、例えば、米国政府の国立バイオテクノロジー情報センターのＢＬＡＳＴウェブサイトから入手可能なＢＬＡＳＴプログラム一式が含まれる。２つの配列間の比較は、ＢＬＡＳＴＮ又はＢＬＡＳＴＰアルゴリズムのいずれかを使用して実施することができる。ＢＬＡＳＴＮは核酸配列を比較するために使用される一方、ＢＬＡＳＴＰはアミノ酸配列を比較するために使用される。ALIGN、ALIGN-2（Genentech, South San Francisco, California）又はDNASTARから入手可能なMegAlignは、配列を整合するために使用することができる、公に入手可能な更なるソフトウェアプログラムである。当業者は、特定のアラインメントソフトウェアによって最大アラインメントのための適切なパラメーターを決定することができる。特定の実施形態において、アラインメントソフトウェアのデフォルトパラメータが使用される。
【０２８５】
[00842]  本発明の特定の実施形態は、抗体又は融合タンパク質の変異体を含む。本明細書で使用される「変異体」という用語は、参照抗体のアミノ酸配列内又はそれに隣接する特定の位置での１つ以上の置換、欠失及び／又は付加により、参照抗体のアミノ酸配列と異なる、アミノ酸配列を含む抗体又は融合タンパク質を包含するが、これに限定されるものではない。変異体は、参照抗体のアミノ酸配列と比較して、そのアミノ酸配列中に１つ以上の保存的置換を含み得る。保存的置換は、例えば、同様に荷電又は非荷電であるアミノ酸の置換を含み得る。変異体は、参照抗体の抗原に特異的に結合する能力を保持している。
【０２８６】
[00843]  核酸配列は、明示的に示される配列と同様に、その保存的に改変された変異体（例えば、縮重コドン置換）及び相補的配列も非明示的に包含する。具体的には、縮重コドン置換は、１つ以上の選択された（又は全ての）コドンの第３の位置が混合塩基及び／又はデオキシイノシン残基で置換されている配列を生成することによって達成され得る。Batzer, et al., Nucleic Acid Res.1991, 19, 5081；Ohtsuka, et al., J. Biol.Chem.1985, 260, 2605-2608；Rossolini, et al., Mol.Cell.Probes 1994, 8, 91-98。核酸という用語は、ｃＤＮＡ、ｍＲＮＡ、オリゴヌクレオチド及びポリヌクレオチドと互換的に使用される。
【０２８７】
[00844]  「バイオシミラー」という用語は、モノクローナル抗体又は融合タンパク質を含む生物学的産物を意味し、これは、臨床的に不活性な成分におけるわずかな違いにかかわらず、米国の認可された参照生物学的製品と高度に類似しており、製品の安全性、純度及び効力の点で、生物学的製品と参照製品との間に臨床的に有意義な違いはない。更に、類似の生物学的又は「バイオシミラー」医薬は、欧州医薬品庁により使用がすでに認可されている、別の生物学的医薬と類似の生物学的医薬である。「バイオシミラー」という用語は、他の国及び地域の規制機関によっても同義的に使用される。生物学的製剤又は生物学的医薬品は、細菌又は酵母などの生物学的供給源によって作製されるか又はそれに由来する医薬品である。それらは、ヒトインスリン又はエリスロポエチンなどの比較的小さい分子又はモノクローナル抗体などの複雑な分子からなり得る。例えば、参照モノクローナル抗体がリツキシマブである場合、リツキシマブに関して薬物規制当局によって承認されたバイオシミラーモノクローナル抗体は、リツキシマブ「に対するバイオシミラー」であるか又はリツキシマブの「そのバイオシミラー」である。欧州では、類似の生物学的又は「バイオシミラー」医薬は、欧州医薬品庁（ＥＭＡ）により使用がすでに認可されている、別の生物学的医薬と類似の生物学的医薬である。ヨーロッパにおける同様の生物学的用途の関連法的根拠は、改正された規則（ＥＣ）Ｎｏ７２６／２００４の第６条及び指令２００１／８３／ＥＣの第１０条（４）であり、したがって、ヨーロッパでは、バイオシミラーは、規則（ＥＣ）Ｎｏ７２６／２００４の第６条及び指令２００１／８３／ＥＣの第１０（４）条の下で認可され得るか、認可が承認され得るか、又は認可申請の対象であり得る。ヨーロッパでは、すでに認可されている元の生物学的医薬品は「参照医薬品」と呼ばれることがある。バイオシミラーと見なされる製品の要件のいくつかは、類似生物学的医薬品におけるＣＨＭＰガイドラインに概説されている。更に、モノクローナル抗体バイオシミラーに関するガイドラインを含む製品固有のガイドラインは、ＥＭＡによって製品ごとに提供され、そのウェブサイトに公開されている。本明細書に記載のバイオシミラーは、品質特性、生物学的活性、作用機序、安全性プロファイル及び／又は有効性として、参照医薬品と類似し得る。更に、バイオシミラーは、参照医薬品と同じ状態を処置するために使用されるか又は使用を意図され得る。したがって、本明細書に記載のバイオシミラーは、参照医薬品と類似した又は非常に類似した品質特性を有すると見なし得る。代わりに又は更に、本明細書に記載のバイオシミラーは、参照医薬品と類似した又は非常に類似した生物学的活性を有すると見なし得る。代わりに又は更に、本明細書に記載のバイオシミラーは、参照医薬品と類似した又は非常に類似した安全性プロファイルを有すると見なし得る。代わりに又は更に、本明細書に記載のバイオシミラーは、参照医薬品と類似した又は非常に類似した有効性を有すると見なし得る。本明細書に記載されるように、ヨーロッパにおけるバイオシミラーは、ＥＭＡによって認可されている参照医薬品と比較される。しかし、一部の場合、バイオシミラーは、特定の研究において欧州経済地域外で認可されている生物学的医薬品（ＥＥＡ非認可の「コンパレータ」）と比較され得る。そのような試験には、例えば、特定の臨床試験及びインビボ非臨床試験が含まれる。本明細書で使用される場合、「バイオシミラー」という用語は、非ＥＥＡ認可コンパレータと比較された又は比較され得る生物学的医薬品にも関する。特定のバイオシミラーは、抗体、抗体断片（例えば、抗原結合部分）及び融合タンパク質などのタンパク質である。タンパク質バイオシミラーは、ポリペプチドの機能に有意に影響を及ぼさない、アミノ酸構造にわずかな改変（例えば、アミノ酸の欠失、付加及び／又は置換を含む）を有するアミノ酸配列を有し得る。バイオシミラーは、その参照医薬品のアミノ酸配列に対して９７％以上、例えば９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み得る。バイオシミラーは、相違が医薬品の安全性及び／又は有効性において変化をもたらさないことを条件として、参照医薬品の翻訳後改変と異なる１つ以上の翻訳後改変、例えば、限定されるものではないが、グリコシル化、酸化、脱アミド化及び／又は切断を含み得る。バイオシミラーは、参照医薬品と同一又は異なるグリコシル化パターンを有し得る。排他的ではないが、特に、相違が参照医薬品に関する安全性の懸念に対処するか又は対処することを意図している場合、バイオシミラーは異なるグリコシル化パターンを有し得る。更に、バイオシミラーは、医薬品の安全性及び有効性が損なわれないならば、例えばその強度、医薬形態、製剤、賦形剤及び／又は提示において参照医薬品から逸脱し得る。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なる。バイオシミラーは、例えば、参照医薬品と比較した場合の薬物動態（ＰＫ）及び／又は薬力学（ＰＤ）プロファイルにおける相違を含み得るが、依然として承認されるか又は承認に適していると見なされるために、参照医薬品と十分に類似していると認められる。特定の状況において、バイオシミラーは、参照医薬品と比較して異なる結合特性を示し、ここで、異なる結合特性は、ＥＭＡなどの規制当局により、類似の生物学的製品としての認可に対する障壁ではないと見なされる。「バイオシミラー」という用語は、他の国及び地域の規制機関によっても同義的に使用される。
【０２８８】
[00845]  本明細書中で使用される場合、「４−１ＢＢアゴニスト」という用語は、４−１ＢＢ（ＣＤ１３７）抗原に特異的に結合する任意の抗体又はタンパク質を指し得る。「特異的に結合する」とは、結合分子が非４−１ＢＢ分子に対して本質的にバックグラウンド結合を示すことを意味する。４−１ＢＢアゴニストは、当技術分野で公知の任意の４−１ＢＢアゴニストであり得る。特に、それは、本明細書でより詳細に記載される４−１ＢＢアゴニストの１つである。しかし、４−１ＢＢに特異的に結合する単離された結合分子は、他の種からの４−１ＢＢ分子に対して交差反応性を有し得る。４−１ＢＢアゴニスト性抗体及びタンパク質は、例えば、Ｔ細胞上のヒト４−１ＢＢ（ｈ４−１ＢＢ又はｈＣＤ１３７）にも特異的に結合し得る。
【０２８９】
[00846]  本明細書中で使用される場合、「ＯＸ４０アゴニスト」という用語は、ＯＸ４０（ＣＤ１３４）抗原に特異的に結合する任意の抗体又はタンパク質を指し得る。「特異的に結合する」とは、結合分子が非ＯＸ４０分子に対して本質的にバックグラウンド結合を示すことを意味する。ＯＸ４０アゴニストは、当技術分野で公知の任意のＯＸ４０アゴニストであり得る。特に、それは、本明細書でより詳細に記載されるＯＸ４０アゴニストの１つである。しかし、ＯＸ４０に特異的に結合する単離された結合分子は、他の種からのＯＸ４０分子に対して交差反応性を有し得る。ＯＸ４０アゴニスト性抗体及びタンパク質は、例えば、Ｔ細胞上のヒトＯＸ４０（ｈＯＸ４０又はｈＣＤ１３４）にも特異的に結合し得る。
【０２９０】
[00847]  本明細書中で使用される場合、「ＣＤ２７アゴニスト」という用語は、ＣＤ２７抗原に特異的に結合する任意の抗体又はタンパク質を指し得る。「特異的に結合する」とは、結合分子が非ＣＤ２７分子に対して本質的にバックグラウンド結合を示すことを意味する。ＣＤ２７アゴニストは、当技術分野で公知の任意のＣＤ２７アゴニストであり得る。特に、それは、本明細書でより詳細に記載されるＣＤ２７アゴニストの１つである。しかし、ＣＤ２７に特異的に結合する単離された結合分子は、他の種からのＣＤ２７分子に対して交差反応性を有し得る。ＣＤ２７アゴニスト性抗体及びタンパク質は、例えば、Ｔ細胞上のヒトＣＤ２７（ｈＣＤ２７）にも特異的に結合し得る。
【０２９１】
[00848]  本明細書で使用される場合、「ＧＩＴＲアゴニスト」という用語は、ＧＩＴＲ（ＣＤ３５７）に特異的に結合する少なくとも１つの抗原結合部位を含有する分子を含む。「特異的に結合する」とは、結合分子が非ＧＩＴＲ分子に対して本質的にバックグラウンド結合を示すことを意味する。ＧＩＴＲアゴニストは、当技術分野で公知の任意のＧＩＴＲアゴニストであり得る。特に、それは、本明細書でより詳細に記載されるＧＩＴＲアゴニストの１つである。しかし、ＧＩＴＲに特異的に結合する単離された結合分子は、他の種からのＧＩＴＲ分子に対して交差反応性を有し得る。ＧＩＴＲアゴニスト性抗体及びタンパク質は、例えば、Ｔ細胞及び樹状細胞上のヒトＧＩＴＲ（ｈＧＩＴＲ）にも特異的に結合し得る。
【０２９２】
[00849]  本明細書で使用される場合、「ＨＶＥＭアゴニスト」という用語は、ＨＶＥＭ（ＣＤ２７０）に特異的に結合する少なくとも１つの抗原結合部位を含有する分子を含む。「特異的に結合する」とは、結合分子が非ＨＶＥＭ分子に対して本質的にバックグラウンド結合を示すことを意味する。ＨＶＥＭアゴニストは、当技術分野で公知の任意のＨＶＥＭアゴニストであり得る。特に、それは、本明細書でより詳細に記載されるＨＶＥＭアゴニストの１つである。しかし、ＨＶＥＭに特異的に結合する単離された結合分子は、他の種からのＨＶＥＭ分子に対して交差反応性を有し得る。ＨＶＥＭアゴニスト性抗体及びタンパク質は、例えば、Ｔ細胞上のヒトＨＶＥＭ（ｈＨＶＥＭ）に特異的にも結合し得る。
【０２９３】
[00850]  用語「血液悪性腫瘍」は、血液、骨髄、リンパ節及びリンパ系の組織を含むが、これらに限定されない、哺乳動物の癌及び造血系及びリンパ系組織の腫瘍を指す。血液悪性腫瘍は、「液体腫瘍」とも称される。血液悪性腫瘍には、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、慢性リンパ性リンパ腫（ＣＬＬ）、小リンパ性リンパ腫（ＳＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性単球性白血病（ＡＭｏＬ）、ホジキンリンパ腫及び非ホジキンリンパ腫が含まれるが、これらに限定されるものではない。用語「Ｂ細胞血液悪性腫瘍」は、Ｂ細胞に影響を及ぼす血液悪性腫瘍を指す。
【０２９４】
[00851]  用語「固形腫瘍」は、嚢胞又は液体領域を通常含まない異常な組織塊を指す。固形腫瘍は、良性又は悪性であり得る。用語「固形腫瘍癌」は、悪性、新生物性又は癌性の固形腫瘍を指す。固形腫瘍癌としては、肺癌、乳癌、前立腺癌、結腸癌、直腸癌及び膀胱癌などの肉腫、癌腫及びリンパ腫が挙げられるが、これらに限定されるものではない。固形腫瘍の組織構造は、柔組織（癌細胞）を含む相互依存的組織コンパートメント及び癌細胞が分散し支持微小環境を提供し得る支持間質細胞を含む。
【０２９５】
[00852]  本明細書で使用される「微小環境」という用語は、全体としての固形若しくは血液腫瘍微小環境又は微小環境内の細胞の個々のサブセットを指し得る。本明細書で使用される腫瘍微小環境は、Swartz, et al., Cancer Res., 2012, 72, 2473に記載されているように、「新生物性形質転換を促進し、腫瘍の成長及び浸潤をサポートし、腫瘍を宿主の免疫から保護し、治療抵抗性を培い、優勢な転移を成功させるニッチを提供する、細胞、可溶性因子、シグナル伝達分子、細胞外マトリックス及び機械的手がかり」の複合的な混合物を指す。腫瘍はＴ細胞によって認識されるべき抗原を発現するが、免疫系による腫瘍の排除は、微小環境による免疫抑制のため、希少である。
【０２９６】
[00853]  疑義を回避するために、本明細書では、本発明の特定の態様、実施形態又は例と併せて記載された特定の特徴（例えば、整数、特性、値、使用、疾患、式、化合物又は基）は、不適合でない限り、本明細書に記載の任意の他の態様、実施形態又は例にも適用可能であると理解されるべきであることを意図する。したがって、そのような特徴は、必要に応じて、本明細書で定義された定義、特許請求の範囲又は実施形態のいずれかと共に使用することができる。本明細書に開示されている全ての特徴（添付の請求項、要約及び図面を含む）及び／又はそのように開示されている任意の方法若しくはプロセスの全てのステップは、少なくとも一部の特徴及び／又はステップが相互に排他的である組み合わせを除いて、任意の組み合わせで組み合わせ得る。本発明は、開示された実施形態のいかなる詳細にも限定されるものではない。本発明は、本明細書に開示されている特徴（添付の請求項、要約及び図面を含む）の任意の新規なもの若しくは新規な組み合わせ又はそのように開示された任意の方法又はプロセスのステップの任意の新規なもの若しくは任意の新規な組み合わせに及ぶ。
【０２９７】
[00854]  用語「約」及び「およそ」は、統計的に意味のある値の範囲内を指す。かかる範囲は、所定の値又は範囲の一桁以内、好ましくは５０％以内、より好ましくは２０％以内、更により好ましくは１０％以内、更により好ましくは５％以内であり得る。用語「約」又は「およそ」に含まれる許容変動は、研究中の特定の系に依存し、当業者には容易に理解できる。更に、本明細書で使用される場合、用語「約」及び「およそ」は、寸法、サイズ、配合、パラメーター、形状及びその他の量及び特性が正確ではなく、且つ正確である必要がないことを意味するが、近似及び／又はより大きい又はより小さい場合があり、必要に応じて、公差、変換係数、四捨五入、測定誤差など、及び当業者に公知の他の因子を反映する。一般に、寸法、サイズ、製剤、パラメーター、形状又は他の量若しくは特性は、明示的にそうであると明記されているか否かにかかわらず、「約」又は「およそ」である。大きく異なるサイズ、形状及び寸法の実施形態が、記載された用語を引用する場合があることに留意されたい。
【０２９８】
[00855]  添付の特許請求の範囲で使用される場合、「を含む」、「から本質的になる」及び「からなる」という移行用語は、記載されていない追加の請求要素又はステップがある場合、それらが特許請求の範囲から除外されることに関して、元の形式及び修正された形式で、特許請求の範囲を定義する。用語「を含む」は、包括的又は無制限であることを意図しており、追加の引用されていない要素、方法、ステップ又は材料を除外するものではない。用語「からなる」は、特許請求の範囲で指定されたもの以外の任意の要素、ステップ又は材料を除外し、後者の場合、指定された材料に関連する通常の不純物を除外する。用語「から本質的になる」は、特許請求の範囲を特定の要素、ステップ又は材料及び請求された発明の基本的及び新規の特性に実質的に影響しないものに限定する。本発明を具体化する本明細書に記載の全ての組成物、方法及びキットは、代替実施形態において、「を含む」、「から本質的になる」及び「からなる」という移行用語のいずれかによってより具体的に定義され得る。
【０２９９】
アデノシン２Ａ受容体アンタゴニスト
[00856]  アデノシンは内因性のプリンヌクレオシドであり、代謝産物及び核酸のビルディングブロックとしての機能に加え、シグナル伝達及び調節分子としても働く。アデノシンは、Ｇタンパク質共役受容体（ＧＰＣＲ）のアデノシン受容体サブファミリーを使用して細胞によって検出される。アデノシン受容体の４つのグループ：Ａ１、Ａ２Ａ、Ａ２Ｂ及びＡ３が存在する。これらの受容体は周知であり、特徴付けられている。例えば、Fredholm et al.“International Union of Basic and Clinical Pharmacology.LXXXI.Nomenclature and Classification of Adenosine Receptors-An Update,”Pharmacol.Rev. 63:1-24 (2011)を参照されたい。一般に、アデノシンの静止細胞外濃度は、３０〜２００ｎＭの範囲であると考えられている。他の理由の中で、アデノシンの細胞外濃度は、損傷した細胞があるところで局所的に増加し、細胞内代謝産物を細胞外空間に放出し得る。細胞外アデノシンは、細胞表面アデノシン受容体へのアデノシンの結合によって検出される。
【０３００】
[00857]  アデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）は、大脳基底核の細胞を含む、様々な中枢神経系（ＣＮＳ）細胞の表面に見られる。Xu et al.,“Therapeutic potential of adenosine 2A receptor antagonists in Parkinson’s disease,”Pharmacol.Ther.105:267-310 (2005)。ＣＮＳに加えて、Ｔリンパ球、樹状細胞及びナチュラルキラー細胞を含む、いくつかのタイプの免疫細胞が細胞表面Ａ２ａＲを発現する。Ｔ細胞及びナチュラルキラー細胞のＡ２ａＲ活性化は免疫抑制を引き起こす。活性化はサイトカイン産生を減少させ、細胞増殖を遅らせる。多種多様なＡ２ａＲ結合化合物が公知である。これらの化合物は様々な効果を有し、受容体上の結合部位又は結合モードは異なり、ほとんどの場合、未知である。de Lera Ruiz et al., “Adenosine A2A Receptor as a Drug Discovery Target,”J. Med.Chem.57:3623-3650 (2014)。ただし、結合についてアデノシンと競合するＡ２ａＲ結合化合物は、アデノシン結合部位で結合すると推定されているが、他の結合部位が特徴付けられている。例えば、Sun et al.,“Crystal structure of the adenosine A2A receptor bound to an antagonist reveals a potential allosteric pocket,”Proc.Nat.Acad.Sci.114:2066-2071 (2017)を参照されたい。
【０３０１】
ビパデナント
[00858]  好ましい一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、ＢＩＩＢ０１４若しくはＶ２００６としても知られるビパデナント又はその薬学的に許容される塩、共結晶若しくはプロドラッグである。好ましい一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、３−［（４−アミノ−３−メチルフェニル）メチル］−７−（フラン−２−イル）トリアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−５−アミン又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、共結晶若しくはプロドラッグである。一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、ビパデナント又はその薬学的に許容される塩、共結晶若しくはプロドラッグである。好ましい一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、式：
【化１】
2021512962.tif 000005
の化合物又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、共結晶若しくはプロドラッグである。
【０３０２】
[00859]  本発明における使用に適したビパデナントは、Biovision, Inc.、Milpitas、CA、USA；MedKoo Biosciences, Inc.、Morrisville、NC、USA；及びMedChemExpress, Inc.、Monmouth Junction、NJ、USAを含む複数の供給元から市販されている。
【０３０３】
ＣＰＩ−４４４
[00860]  好ましい一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、シフォラデナント及びＶ８１４４４としても知られるＣＰＩ−４４４又はその薬学的に許容される塩、共結晶若しくはプロドラッグである。好ましい一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、７−（５−メチルフラン−２−イル）−３−［［６−［［（３Ｓ）−オキソラン−３−イル］オキシメチル］ピリジン−２−イル］メチル］トリアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−５−アミン又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、共結晶若しくはプロドラッグである。一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、シフォラデナント又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、共結晶若しくはプロドラッグである。好ましい一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、式：
【化２】
2021512962.tif 000006
の化合物又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、共結晶若しくはプロドラッグである。
【０３０４】
[00861]  本発明における使用に適したＣＰＩ−４４４は、Biovision, Inc.、Milpitas、CA、USA；MedKoo Biosciences, Inc.、Morrisville、NC、USA；及びMedChemExpress, Inc.、Monmouth Junction、NJ、USAを含む複数の供給元から市販されている。ＣＰＩ−４４４の合成方法は、例えば、Bamford et al.、米国特許第８，９８７，２７９号、「Triazolo 4,5-Dipyramidine Dervatives and Their Use as Purine Receptor Antagonists」に開示され、これは、参照によりその全体が組み込まれる。更なる方法は、米国特許第８，４５０，０３２号、米国特許第９，７６５，０８０号及び米国特許第９，３７６，４４３号でBamford et al.により開示され、これらは、それぞれその全体が参照により組み込まれる。
【０３０５】
ＳＣＨ−５８２６１
[00862]  好ましい一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、ＳＣＨ５８２６１又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、共結晶若しくはプロドラッグである。好ましい一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、２−（フラン−２−イル）−７−フェネチル−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｅ］［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ｃ］ピリミジン−５−アミン又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、共結晶若しくはプロドラッグである。好ましい一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、式：
【化３】
2021512962.tif 000007
の化合物又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、共結晶若しくはプロドラッグである。
【０３０６】
ＺＭ２４１３８５
[00863]  好ましい一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、ＺＭ２４１３８５又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、共結晶若しくはプロドラッグである。好ましい一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、４−［２−［［７−アミノ−２−（フラン−２−イル）−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］［１，３，５］トリアジン−５−イル］アミノ］エチル］フェノール又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、共結晶若しくはプロドラッグである。好ましい一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、式：
【化４】
2021512962.tif 000008
の化合物又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、共結晶若しくはプロドラッグである。
【０３０７】
ＳＣＨ−４２０８１４（プレラデナント）
[00864]  好ましい一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、ＳＣＨ−４２０８１４（プレラデナント）又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、共結晶若しくはプロドラッグである。好ましい一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、２−（フラン−２−イル）−７−（２−（４−（４−（２−（メトキシエトキシ）フェニル）ピペラジン−１−イル）エチル）−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｅ］［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ｃ］ピリミジン−５−アミン又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、共結晶若しくはプロドラッグである。好ましい一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、式：
【化５】
2021512962.tif 000009
の化合物又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、共結晶若しくはプロドラッグである。
【０３０８】
ＳＣＨ−４４２４１６
[00865]  好ましい一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、ＳＣＨ−４４２４１６又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、共結晶若しくはプロドラッグである。好ましい一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、５−アミノ−７−［３−（４−メトキシ）フェニルプロピル］−２−（２−フリル）−ピラゾロ［４，３−ｅ］−１，２，４−トリアゾロ［１，５−ｃ］ピリミジン又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、共結晶若しくはプロドラッグである。好ましい一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、２−（２−フラニル）−７−［３−（４−メトキシフェニル）プロピル］−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｅ］［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ｃ］ピリミジン−５−アミン；５−アミノ−７−（３−（４−メトキシフェニル）プロピル）−２−（２フリル）ピラゾロ［４，３−ｅ］−１，２，４−トリアゾロ［１，５−ｃ］ピリミジン又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、共結晶若しくはプロドラッグである。好ましい一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、式：
【化６】
2021512962.tif 000010
の化合物又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、共結晶若しくはプロドラッグである。
【０３０９】
[00866]  ＳＣＨ−４４２４１６はSigma-Aldrich Co.、St. Louis、MO、USAから市販されている。
【０３１０】
ＳＹＮ１１５（トザデナント）
[00867]  好ましい一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、ＳＹＮ１１５（トザデナント）又はその薬学的に許容される塩、共結晶若しくはプロドラッグである。好ましい一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、４−ヒドロキシ−Ｎ−（４−メトキシ−７−モルホリン−４−イル−１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）−４−メチルピペリジン−１−カルボキサミド又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、共結晶若しくはプロドラッグである。好ましい一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、式：
【化７】
2021512962.tif 000011
の化合物又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、共結晶若しくはプロドラッグである。
【０３１１】
８−ＣＳＣ
[00868]  ８−ＣＳＣは、キサンチンファミリーＡ２ａＲアンタゴニストである。好ましい一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、８−（３−クロロスチリル）カフェイン又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、共結晶若しくはプロドラッグである。好ましい一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、１，３，７−トリメチル−８−（３−クロロスチリル）キサンチン又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、共結晶若しくはプロドラッグである。好ましい一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、式：
【化８】
2021512962.tif 000012
の化合物又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、共結晶若しくはプロドラッグである。
【０３１２】
イストラデフィリン（ＫＷ−６００２）
[00869]  イストラデフィリンとしても知られるＫＷ−６００２は、キサンチンファミリーＡ２ａＲアンタゴニストである。好ましい一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、イストラデフィリン（ＫＷ−６００２）である。好ましい一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、８−［（Ｅ）−２−（３，４−ジメトキシフェニル）ビニル］−１，３−ジエチル−７−メチル−３，７−ジヒドロ−１Ｈ−プリン−２，６−ジオン又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、共結晶若しくはプロドラッグである。好ましい一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、式：
【化９】
2021512962.tif 000013
の化合物又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、共結晶若しくはプロドラッグである。
【０３１３】
Ａ２Ａ受容体アンタゴニスト１
[00870]  好ましい一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、Ａ２Ａ受容体アンタゴニスト１又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、共結晶若しくはプロドラッグである。好ましい一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン、ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン、６−アリールプリン並びにその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、共結晶及びプロドラッグからなる群から選択される。好ましい一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、式：
【化１０】
2021512962.tif 000014
の化合物又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、共結晶若しくはプロドラッグである。
【０３１４】
ＡＤＺ４６３５
[00871]  好ましい一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、ＡＤＺ４６３５又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、共結晶若しくはプロドラッグである。好ましい一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、６−（２−クロロ−６−メチルピリジン−４−イル）−５−（４−フルオロフェニル）−１，２，４−トリアジン−３−アミン又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、共結晶若しくはプロドラッグである。好ましい一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、式：
【化１１】
2021512962.tif 000015
の化合物又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、共結晶若しくはプロドラッグである。
【０３１５】
ＳＴ４２０６
[00872]  好ましい一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、ＳＴ４２０６又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、共結晶若しくはプロドラッグである。好ましい一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、４−［６−アミノ−９−メチル−８−（２Ｈ−１，２，３−トリアゾール−２−イル）−９Ｈ−プリン−２−イル］−２−ブタノン又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、共結晶若しくはプロドラッグである。好ましい一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、式：
【化１２】
2021512962.tif 000016
の化合物又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、共結晶若しくはプロドラッグである。
【０３１６】
ＫＦ２１２１３
[00873]  ＫＦ２１２１３は、キサンチンファミリーＡ２ａＲアンタゴニストである。好ましい一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、ＫＦ２１２１３又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、共結晶若しくはプロドラッグである。好ましい一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、８−［（Ｅ）−２−（４−メトキシ−２，３−ジメチルフェニル）エテニル］−１，３，７−トリメチルプリン−２，６−ジオン又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、共結晶若しくはプロドラッグである。好ましい一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、式：
【化１３】
2021512962.tif 000017
の化合物又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、共結晶若しくはプロドラッグである。
【０３１７】
ＳＣＨ４１２３４８
[00874]  好ましい一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、ＳＣＨ４１２３４８である。好ましい一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、（７−（２−（４−ジフルオロフェニル）−１−ピペラジニル）エチル）−２−（２−フラニル）−７Ｈ−ピラゾロ（４，３−ｅ）（１，２，４）トリアゾロ（１，５−ｃ）ピリミジン−５−アミン又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、共結晶若しくはプロドラッグである。好ましい一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、式：
【化１４】
2021512962.tif 000018
の化合物又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、共結晶若しくはプロドラッグである。
【０３１８】
７ＭＭＧファミリー
[00875]  好ましい一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、Ａ２ａＲアンタゴニストの７ＭＭＧファミリーのメンバーである。この化合物のファミリーは、次式：
【化１５】
2021512962.tif 000019
（式中、Ｘは、Ｃ又はＮのいずれかであり；ＸがＣである場合、Ｒは、パラ−Ｆ、メタ−Ｆ、パラ−ＣＨ３、２，４−ｄｉＦ、２，６−ｄｉＦ、３，４−ｄｉＦ、３，４−ｄｉＯＣＨ３、メタ−（２−メトキシエトキシ）、メタ−（１，３−ベンゾジオキソール）、パラ−Ｃｌ、パラ−ＣＦ３、パラ−ＣＮ及びパラ−ｔｅｒｔ−ブチルからなる群から選択され；ＸがＮである場合、Ｒは、パラ−Ｆ、メタ−Ｆ、オルト−Ｆ、パラ−Ｃｌ、メタ−ＣＦ３、２，４−ｄｉＦ、２，６−ｄｉＦ、３，４−ｄｉＦ、メタ−（２−メトキシエトキシ）、メタ−（１，３−ベンゾジオキソール）、パラ−ＣＨ３及びメタ−ＯＣＨ３からなる群から選択される）
又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、共結晶若しくはプロドラッグで定義される。
【０３１９】
[00876]  好ましい７ＭＭＧファミリーメンバーは、７ＭＭＧ−４９：
【化１６】
2021512962.tif 000020
である。好ましい一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、４−（ジエチルアミノ）−Ｎ−（４−メトキシ−７−モルホリノベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１−メチルシクロヘキサン−１−カルボキサミド又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、共結晶若しくはプロドラッグである。
【０３２０】
[00877]  一実施形態において、治療有効量のアデノシン受容体２Ａアンタゴニストは、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団を含む医薬組成物と組み合わせて、癌の処置のために患者に投与される。
【０３２１】
[00878]  一実施形態において、ＴＩＬ集団の急速拡大培養は、アデノシン２Ａ受容体アンタゴニストの存在下で実施され、ここで、アデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストは、シフォラデナント（ＣＰＩ−４４４）、ＳＣＨ５８２６１、ＺＭ２４１３８５、ＳＣＨ４２０８１４、ＳＹＮ１１５、８−ＣＳＣ、ＫＷ−６００２、Ａ２Ａ受容体アンタゴニスト１、ＡＤＺ４６３５、ビパデナント、ＳＴ４２０６、ＫＦ２１２１３、ＳＣＨ４１２３４８、７ＭＭＧ−４９、その薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶又はプロドラッグ及びそれらの組み合わせからなる群から選択される。
【０３２２】
[00879]  一実施形態において、患者は、腫瘍が患者から切除される前に、治療有効量のアデノシン受容体２Ａアンタゴニストで処置される。一実施形態において、患者は、患者から腫瘍を切除した後、治療有効量のアデノシン受容体２Ａアンタゴニストで処置される。一実施形態において、腫瘍が患者から切除される前から、ＴＩＬの産生及び製造中、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団を含む医薬組成物の投与中及びＴＩＬ製剤の投与後、患者は、アデノシン受容体２Ａアンタゴニストで継続的に処置される。更に別の実施形態において、複数サイクルのアデノシン受容体２Ａアンタゴニストが投与され得る。一実施形態において、複数サイクルの処置は、アデノシン受容体２Ａアンタゴニスト及び任意選択により追加のＴＩＬ投与を含む。
【０３２３】
[00880]  一部の実施形態において、患者は、治療有効量の、（１）シスプラチン及び同時放射線療法；（２）セツキシマブ、その後の放射線療法；（３）カルボプラチン、５−フルオロウラシル及び同時放射線療法；（４）ヒドロキシ尿素、５−フルオロウラシル及び同時放射線療法；（５）シスプラチン、パクリタキセル及び同時放射線療法；（６）シスプラチン、注入５−フルオロウラシル及び同時放射線療法；（７）断続的に投与されるシスプラチン及び放射線療法；（８）ドセタキセル、シスプラチン、５−フルオロウラシル及び同時放射線療法；（９）パクリタキセル、シスプラチン、注入５−フルオロウラシル及び同時放射線療法；（１０）シスプラチン及び放射線療法、その後のシスプラチン、５−フルオロウラシル及び放射線療法；（１１）ドセタキセル及びシスプラチン、その後のシスプラチン及び放射線療法；（１２）シスプラチン、５−フルオロウラシル及びドセタキセル；（１３）シスプラチン及びドセタキセル；（１４）シスプラチン及びパクリタキセル；（１５）カルボプラチン及びパクリタキセル；（１６）シスプラチン及びセツキシマブ；（１７）シスプラチン及び５−フルオロウラシル；（１８）シスプラチン、ドセタキセル及びセツキシマブ；（１９）カルボプラチン、ドセタキセル及びセツキシマブ；（２０）シスプラチン及びゲムシタビン；（２１）ゲムシタビン及びビノレルビン；（２２）シスプラチン；（２３）カルボプラチン；（２４）パクリタキセル；（２５）ドセタキセル；（２６）５−フルオロウラシル；（２７）メトトレキサート；（２８）ゲムシタビン；（２９）カペシタビン；（３０）セツキシマブ；（３１）アファチニブ；（３２）ラパチニブ；並びに（３３）ネラチニブからなる群から選択される化学療法レジメンを投与するステップを更に含むステップを有する本開示の方法を使用して処置され得る。
【０３２４】
[00881]  他の実施形態において、患者は、最初に（１）シスプラチン及び同時放射線療法；（２）セツキシマブ、その後の放射線療法；（３）カルボプラチン、５−フルオロウラシル及び同時放射線療法；（４）ヒドロキシ尿素、５−フルオロウラシル及び同時放射線療法；（５）シスプラチン、パクリタキセル及び同時放射線療法；（６）シスプラチン、注入５−フルオロウラシル及び同時放射線療法；（７）断続的に投与されるシスプラチン及び放射線療法；（８）ドセタキセル、シスプラチン、５−フルオロウラシル及び同時放射線療法；（９）パクリタキセル、シスプラチン、注入５−フルオロウラシル及び同時放射線療法；（１０）シスプラチン及び放射線療法、その後のシスプラチン、５−フルオロウラシル及び放射線療法；（１１）ドセタキセル及びシスプラチン、その後のシスプラチン及び放射線療法；（１２）シスプラチン、５−フルオロウラシル及びドセタキセル；（１３）シスプラチン及びドセタキセル；（１４）シスプラチン及びパクリタキセル；（１５）カルボプラチン及びパクリタキセル；（１６）シスプラチン及びセツキシマブ；（１７）シスプラチン及び５−フルオロウラシル；（１８）シスプラチン、ドセタキセル及びセツキシマブ；（１９）カルボプラチン、ドセタキセル及びセツキシマブ；（２０）シスプラチン及びゲムシタビン；（２１）ゲムシタビン及びビノレルビン；（２２）シスプラチン；（２３）カルボプラチン；（２４）パクリタキセル；（２５）ドセタキセル；（２６）５−フルオロウラシル；（２７）メトトレキサート；（２８）ゲムシタビン；（２９）カペシタビン；（３０）セツキシマブ；（３１）アファチニブ；（３２）ラパチニブ；並びに（３３）ネラチニブからなる群から選択される化学療法レジメン、続いて、本明細書に開示される任意の１つ以上の方法のステップで処置され得る。
【０３２５】
４−１ＢＢ（ＣＤ１３７）アゴニスト
[00882]  活性化Ｔ細胞で発現される誘導性共刺激受容体として最初に同定された４−１ＢＢ（ＣＤ１３７及びＴＮＦＲＳＦ９としても知られる）は、ＴＮＦＲＳＦの膜貫通糖タンパク質メンバーである。Watts, Annu.Rev. Immunol.2005, 23, 23-68。ＴＮＦＲＳＦは、腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリーである。しかし、４−１ＢＢはＴＮＦＲＳＦのメンバーの１つである。４−１ＢＢは、活性化Ｔリンパ球で発現され、ＣＤ４＋Ｔ細胞よりもＣＤ８＋で多く発現する、２型膜貫通型糖タンパク質である。４−１ＢＢは、樹状細胞、濾胞樹状細胞、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、顆粒球、炎症部位の血管壁の細胞、腫瘍血管系及びアテローム硬化性内皮でも発現される。４−１ＢＢを刺激するリガンド（４−１ＢＢＬ）は、活性化抗原提示細胞（ＡＰＣ）、骨髄系前駆細胞、造血幹細胞で発現される。４−１ＢＢは、活性化誘導Ｔ細胞共刺激分子である。４−１ＢＢを介したシグナル伝達は、生存遺伝子を上方制御し、細胞分裂を促進し、サイトカイン産生を誘導し、Ｔ細胞における活性化誘発性細胞死を防ぐ。現在の４−１ＢＢの理解は、発現が一般に活性化依存性であることを示し、活性化されたＮＫ及びＮＫ  Ｔ細胞（ＮＫＴ細胞）；調節性Ｔ細胞；濾胞ＤＣを含む樹状細胞（ＤＣ）；刺激されたマスト細胞、分化している骨髄細胞、単球、好中球、好酸球及び活性化Ｂ細胞を含む、免疫細胞の幅広いサブセットを包含する。４−１ＢＢは、ＣＤ８＋Ｔ細胞の増殖及びエフェクター機能を強く増強する。４−１ＢＢの架橋は、Ｔ細胞増殖、ＩＬ−２分泌生存及び細胞溶解活性を増強する。更に、抗４−１ＢＢモノクローナル抗体は強力な抗腫瘍特性を有し、これは、したがって、強力なＣＤ８＋Ｔ細胞活性化、ＩＦＮ−γ産生及び細胞溶解マーカー誘導能力の結果である。Vinay and Kwon, Mol.Cancer Therapeutics 2012, 11, 1062-70；Lee, et al., PLoS One, 2013, 8, e69677, 1-11。
【０３２６】
[00883]  Ｂ細胞受容体結合時、活性化正常ヒトＢ細胞上の４−１ＢＢとそのリガンドとの相互作用は、増殖を刺激し、生存率を増強する。Ｂ細胞リンパ腫における４−１ＢＢ結合の潜在的な影響は、少なくとも２つの発表された研究で調査されている。いくつかのタイプのヒト初代ＮＨＬサンプルの評価により、４−１ＢＢはリンパ腫細胞ではなく主に浸潤性Ｔ細胞上に発現したことが示された。Houot, et al., Blood, 2009, 114, 3431-38。リツキシマブ及びＮＫ細胞を含むＢリンパ腫細胞のインビトロ培養物に４−１ＢＢアゴニストを添加した結果、リンパ腫の死滅が増加した。Kohrt, et al., Blood, 2011, 117, 2423-32。更に、Ｂ細胞免疫表現型検査は、カニクイザルでＰＦ−０５０８２５６６を使用して、０．００１〜１００ｍｇ／ｋｇの用量で２つの実験において実施し、国際公開第２０１５／１１９９２３号に記載されるように、これらの実験において、末梢血Ｂ細胞数は変化しなかったか又は減少した。
【０３２７】
[00884]  ４−１ＢＢはナイーブＴ細胞の表面では検出されないが、活性化すると発現が増加する。４−１ＢＢが活性化されると、ＴＮＦＲ関連因子（ＴＲＡＦ）ファミリーの２つの生存促進性メンバーであるＴＲＡＦ１及びＴＲＡＦ２が４−１ＢＢ細胞質尾部に動員され、その結果、ＮＦｋＢと、Ｅｒｋ、Ｊｎｋ及びｐ３８  ＭＡＰキナーゼを含むマイトジェン活性化プロテイン（ＭＡＰ）キナーゼカスケードとが下流で活性化される。ＮＦｋＢの活性化は、Ｂｃｌ−２ファミリーの生存促進性メンバーであるＢｆｌ−１及びＢｅｌ−ＸＬの上方制御をもたらす。プロアポトーシスタンパク質Ｂｉｍは、ＴＲＡＦ１及びＥｒｋ依存的な方法で下方制御される。Sabbagh, et al., J. Immunol.2008, 180, 8093-8101。報告では、４−１ＢＢアゴニストモノクローナル抗体（ｍＡｂ）が共刺激分子の発現を増加させ、細胞溶解性Ｔリンパ球の応答を著しく増強し、それにより様々なモデルで抗腫瘍効果が得られることが示されている。４−１ＢＢアゴニストｍＡｂは、予防及び治療の設定並びに単剤療法と併用療法の両方の腫瘍モデルで有効性を示し、耐久性のある抗腫瘍保護Ｔ細胞メモリー応答を確立している。Lynch, et al., Immunol Rev., 2008, 222, 277-286。４−１ＢＢアゴニストは、様々な自己免疫モデルにおいて自己免疫反応も阻害する。Vinay, et al., J. Mol.Med.2006, 84, 726-36。
【０３２８】
[00885]  一実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、４−１ＢＢ（ＣＤ１３７）アゴニストである。４−１ＢＢアゴニストは、当技術分野で公知の任意の４−１ＢＢ結合分子であり得る。４−１ＢＢ結合分子は、ヒト又は哺乳類４−１ＢＢに結合できるモノクローナル抗体又は融合タンパク質であり得る。４−１ＢＢアゴニスト又は４−１ＢＢ結合分子は、免疫グロブリン分子の任意のアイソタイプ（例えば、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＡ及びＩｇＹ）、クラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１及びＩｇＡ２）又はサブクラスの免疫グロブリン重鎖を含み得る。４−１ＢＢアゴニスト又は４−１ＢＢ結合分子は、重鎖及び軽鎖の両方を有し得る。本明細書で使用される場合、結合分子という用語は、抗体（全長抗体を含む）、モノクローナル抗体（全長モノクローナル抗体を含む）、ポリクローナル抗体、多重特異性抗体（例えば、二重特異性抗体）、ヒト、ヒト化又はキメラ抗体並びに抗体断片、例えばＦａｂ断片、Ｆ（ａｂ’）断片、Ｆａｂ発現ライブラリーにより産生される断片、上記のいずれかのエピトープ結合断片及び４−１ＢＢに結合する抗体の操作された形態、例えばｓｃＦｖ分子も含む。一実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、完全ヒト抗体である抗原結合タンパク質である。一実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、ヒト化抗体である抗原結合タンパク質である。一部の実施形態において、本開示の方法及び組成物における使用のための４−１ＢＢアゴニストは、抗４−１ＢＢ抗体、ヒト抗４−１ＢＢ抗体、マウス抗４−１ＢＢ抗体、哺乳動物抗４−１ＢＢ抗体、モノクローナル抗４−１ＢＢ抗体、ポリクローナル抗４−１ＢＢ抗体、キメラ抗４−１ＢＢ抗体、抗４−１ＢＢアドネクチン、抗４−１ＢＢドメイン抗体、単鎖抗４−１ＢＢ断片、重鎖抗４−１ＢＢ断片、軽鎖抗４−１ＢＢ断片、抗４−１ＢＢ融合タンパク質及びそれらの断片、誘導体、コンジュゲート、変異体若しくはバイオシミラーを含む。アゴニスト性抗４−１ＢＢ抗体は、強い免疫応答を誘導することが知られている。Lee, et al., PLOS One 2013, 8, e69677。好ましい実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、アゴニスト性、抗４−１ＢＢヒト化又は完全ヒトモノクローナル抗体（即ち、単一細胞株に由来する抗体）である。一実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、ＥＵ−１０１（Eutilex Co. Ltd.）、ウトミルマブ若しくはウレルマブ又はそれらの断片、誘導体、コンジュゲート、変異体若しくはバイオシミラーである。好ましい一実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、ウトミルマブ又はウレルマブ又はそれらの断片、誘導体、コンジュゲート、変異体若しくはバイオシミラーである。
【０３２９】
[00886]  好ましい実施形態において、４−１ＢＢアゴニスト又は４−１ＢＢ結合分子は、融合タンパク質でもあり得る。好ましい実施形態において、三量体又は六量体４−１ＢＢアゴニスト（３つ又は６つのリガンド結合ドメインを有する）などの多量体４−１ＢＢアゴニストは、典型的には２つのリガンド結合ドメインを保有するアゴニスト性モノクローナル抗体と比較して、優れた受容体（４−１ＢＢＬ）のクラスター化及び内部細胞シグナル伝達複合体形成を誘導し得る。３つのＴＮＦＲＳＦ結合ドメイン及びＩｇＧ１−Ｆｃを含み、任意選択によりこれらの融合タンパク質の２つ以上を更に連結する、三量体（三価）又は六量体（又は六価）又はそれより大きい融合タンパク質は、例えば、Gieffers, et al., Mol.Cancer Therapeutics 2013, 12, 2735-47に記載される。
【０３３０】
[00887]  アゴニスト性４−１ＢＢ抗体及び融合タンパク質は、強い免疫応答を誘導することが知られている。好ましい実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、毒性を低減するのに十分な方法で４−１ＢＢ抗原に特異的に結合するモノクローナル抗体又は融合タンパク質である。一部の実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、抗体依存性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）、例えばＮＫ細胞の細胞傷害性を抑制する、アゴニスト性４−１ＢＢモノクローナル抗体又は融合タンパク質である。一部の実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、抗体依存性細胞食作用（ＡＤＣＰ）を抑制する、アゴニスト性４−１ＢＢモノクローナル抗体又は融合タンパク質である。一部の実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、補体依存性細胞毒性（ＣＤＣ）を抑制する、アゴニスト性４−１ＢＢモノクローナル抗体又は融合タンパク質である。一部の実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、Ｆｃ領域機能性を抑制する、アゴニスト性４−１ＢＢモノクローナル抗体又は融合タンパク質である。
【０３３１】
[00888]  一部の実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、高い親和性及びアゴニスト活性でヒト４−１ＢＢ（配列番号９）に結合することを特徴とする。一実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、ヒト４−１ＢＢ（配列番号９）に結合する結合分子である。一実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、マウス４−１ＢＢ（配列番号１０）に結合する結合分子である。４−１ＢＢアゴニスト又は結合分子が結合する４−１ＢＢ抗原のアミノ酸配列を表３に概括する。
【０３３２】
【表３】
2021512962.tif 000021
【０３３３】
[00889]  一部の実施形態において、記載される組成物、プロセス及び方法は、約１００ｐＭ以下のＫＤでヒト又はマウス４−１ＢＢに結合するか、約９０ｐＭ以下のＫＤでヒト又はマウス４−１ＢＢに結合するか、約８０ｐＭ以下のＫＤでヒト又はマウス４−１ＢＢに結合するか、約７０ｐＭ以下のＫＤでヒト又はマウス４−１ＢＢに結合するか、約６０ｐＭ以下のＫＤでヒト又はマウス４−１ＢＢに結合するか、約５０ｐＭ以下のＫＤでヒト又はマウス４−１ＢＢに結合するか、約４０ｐＭ以下のＫＤでヒト又はマウス４−１ＢＢに結合するか、又は約３０ｐＭ以下のＫＤでヒト又はマウス４−１ＢＢに結合する、４−１ＢＢアゴニストを含む。
【０３３４】
[00890]  一部の実施形態において、記載される組成物、プロセス及び方法は、約７．５×１０５  １／Ｍ・ｓ以上のｋａｓｓｏｃでヒト又はマウス４−１ＢＢに結合するか、約７．５×１０５  １／Ｍ・ｓ以上のｋａｓｓｏｃでヒト又はマウス４−１ＢＢに結合するか、約８×１０５  １／Ｍ・ｓ以上のｋａｓｓｏｃでヒト又はマウス４−１ＢＢに結合するか、約８．５×１０５  １／Ｍ・ｓ以上のｋａｓｓｏｃでヒト又はマウス４−１ＢＢに結合するか、約９×１０５  １／Ｍ・ｓ以上のｋａｓｓｏｃでヒト又はマウス４−１ＢＢに結合するか、約９．５×１０５  １／Ｍ・ｓ以上のｋａｓｓｏｃでヒト又はマウス４−１ＢＢに結合するか、又は約１×１０６  １／Ｍ・ｓ以上のｋａｓｓｏｃでヒト又はマウス４−１ＢＢに結合する、４−１ＢＢアゴニストを含む。
【０３３５】
[00891]  一部の実施形態において、記載される組成物、プロセス及び方法は、約２×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウス４−１ＢＢに結合するか、約２．１×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウス４−１ＢＢに結合するか、約２．２×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウス４−１ＢＢに結合するか、約２．３×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウス４−１ＢＢに結合するか、約２．４×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウス４−１ＢＢに結合するか、約２．５×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウス４−１ＢＢに結合するか、約２．６×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウス４−１ＢＢに結合するか、又は約２．７×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウス４−１ＢＢに結合するか、約２．８×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウス４−１ＢＢに結合するか、約２．９×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウス４−１ＢＢに結合するか、又は約３×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウス４−１ＢＢに結合する、４−１ＢＢアゴニストを含む。
【０３３６】
[00892]  一部の実施形態において、記載される組成物、プロセス及び方法は、約１０ｎＭ以下のＩＣ５０でヒト又はマウス４−１ＢＢに結合するか、約９ｎＭ以下のＩＣ５０でヒト又はマウス４−１ＢＢに結合するか、約８ｎＭ以下のＩＣ５０でヒト又はマウス４−１ＢＢに結合するか、約７ｎＭ以下のＩＣ５０でヒト又はマウス４−１ＢＢに結合するか、約６ｎＭ以下のＩＣ５０でヒト又はマウス４−１ＢＢに結合するか、約５ｎＭ以下のＩＣ５０でヒト又はマウス４−１ＢＢに結合するか、約４ｎＭ以下のＩＣ５０でヒト又はマウス４−１ＢＢに結合するか、約３ｎＭ以下のＩＣ５０でヒト又はマウス４−１ＢＢに結合するか、約２ｎＭ以下のＩＣ５０でヒト又はマウス４−１ＢＢに結合するか、又は約１ｎＭ以下のＩＣ５０でヒト又はマウス４−１ＢＢに結合する、４−１ＢＢアゴニストを含む。
【０３３７】
[00893]  好ましい実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、ＰＦ−０５０８２５６６又はＭＯＲ−７４８０としても知られるウトミルマブ又はその断片、誘導体、変異体若しくはバイオシミラーである。ウトミルマブはPfizer, Inc.から入手できる。ウトミルマブは、免疫グロブリンＧ２−ラムダ、抗［ヒト（Homo sapiens）ＴＮＦＲＳＦ９（腫瘍壊死因子受容体（ＴＮＦＲ）スーパーファミリーメンバー９、４−１ＢＢ、Ｔ細胞抗原ＩＬＡ、ＣＤ１３７）］、ヒト（Homo sapiens）（完全ヒト）モノクローナル抗体である。ウトミルマブのアミノ酸配列を表４に示す。ウトミルマブは、Ａｓｎ５９及びＡｓｎ２９２のグリコシル化部位；位置２２−９６（ＶＨ−ＶＬ）、１４３−１９９（ＣＨ１−ＣＬ）、２５６−３１６（ＣＨ２）及び３６２−４２０（ＣＨ３）の重鎖内ジスルフィド架橋；位置２２’−８７’（ＶＨ−ＶＬ）及び１３６’−１９５’（ＣＨ１−ＣＬ）の軽鎖内ジスルフィド架橋；ＩｇＧ２Ａアイソフォーム位置２１８−２１８、２１９−２１９、２２２−２２２及び２２５−２２５、ＩｇＧ２Ａ／Ｂアイソフォーム位置２１８−１３０、２１９−２１９、２２２−２２２及び２２５−２２並びにＩｇＧ２Ｂアイソフォーム位置２１９−１３０（２）、２２２−２２２及び２２５−２２５の鎖内重鎖−重鎖ジスルフィド架橋；ＩｇＧ２Ａアイソフォーム位置１３０−２１３’（２）、ＩｇＧ２Ａ／Ｂアイソフォーム位置２１８−２１３’及び１３０−２１３’並びにＩｇＧ２Ｂアイソフォーム位置２１８−２１３’（２）の鎖内重鎖−軽鎖ジスルフィド架橋を含む。ウトミルマブ並びにその変異体及び断片の調製並びに特性は、米国特許第８，８２１，８６７号；第８，３３７，８５０号；及び第９，４６８，６７８号並びに国際公開第２０１２／０３２４３３  Ａ１号に記載され、これらのそれぞれの開示は、参照により本明細書に組み込まれる。ウトミルマブの前臨床的特徴は、Fisher, et al., Cancer Immunolog. & Immunother.2012, 61, 1721-33に記載される。様々な血液学的及び固形腫瘍の適応症におけるウトミルマブの現在の臨床試験には、米国国立衛生研究所Clinicaltrials.gov識別子ＮＣＴ０２４４４７９３、ＮＣＴ０１３０７２６７、ＮＣＴ０２３１５０６６及びＮＣＴ０２５５４８１２が含まれる。
【０３３８】
[00894]  一実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、配列番号１１で示される重鎖及び配列番号１２で示される軽鎖を含む。一実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、それぞれ配列番号１１及び配列番号１２に示される配列を有する重鎖及び軽鎖又は抗原結合断片、Ｆａｂ断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、それらの変異体若しくはコンジュゲートを含む。一実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、それぞれ配列番号１１及び配列番号１２に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、それぞれ配列番号１１及び配列番号１２に示される配列とそれぞれ少なくとも９８％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、それぞれ配列番号１１及び配列番号１２に示される配列とそれぞれ少なくとも９７％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、それぞれ配列番号１１及び配列番号１２に示される配列とそれぞれ少なくとも９６％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、それぞれ配列番号１１及び配列番号１２に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一である重鎖及び軽鎖を含む。
【０３３９】
[00895]  一実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、ウトミルマブの重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。一実施形態において、４−１ＢＢアゴニスト重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号１３に示される配列を含み、４−１ＢＢアゴニスト軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号１４に示される配列及びその保存的アミノ酸置換を含む。一実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、それぞれ配列番号１３及び配列番号１４に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、それぞれ配列番号１３及び配列番号１４に示される配列とそれぞれ少なくとも９８％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、それぞれ配列番号１３及び配列番号１４に示される配列とそれぞれ少なくとも９７％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、それぞれ配列番号１３及び配列番号１４に示される配列とそれぞれ少なくとも９６％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、それぞれ配列番号１３及び配列番号１４に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、配列番号１３及び配列番号１４に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含むｓｃＦｖ抗体を含む。
【０３４０】
[00896]  一実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、それぞれ配列番号１５、配列番号１６及び配列番号１７に記載の配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにその保存的アミノ酸置換と、それぞれ配列番号１８、配列番号１９及び配列番号２０に記載の配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにそれらの保存的アミノ酸置換とを含む。
【０３４１】
[00897]  一実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、ウトミルマブに関して薬物規制当局によって承認された４−１ＢＢアゴニストバイオシミラーモノクローナル抗体である。一実施形態において、バイオシミラーモノクローナル抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤のアミノ酸配列に対して少なくとも９７％の配列同一性、例えば９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有し、参照医薬品又は参照生物学的製剤と比較して１つ以上の翻訳後改変を含む、アミノ酸配列を含む４−１ＢＢ抗体を含み、ここで、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、ウトミルマブである。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後改変は、グリコシル化、酸化、脱アミド化及び切断の１つ以上から選択される。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可された又は認可のために提出された４−１ＢＢアゴニスト抗体であり、４−１ＢＢアゴニスト抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤の製剤と異なる製剤で提供され、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、ウトミルマブである。４−１ＢＢアゴニスト抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合のＥＭＡなどの薬物規制当局によって認可されていることができる。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、ウトミルマブである。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、ウトミルマブである。
【０３４２】
【表４】
2021512962.tif 000022
【０３４３】
[00898]  好ましい実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、ＢＭＳ−６６３５１３及び２０Ｈ４．９．ｈ４ａとしても知られるモノクローナル抗体ウレルマブ又はその断片、誘導体、変異体若しくはバイオシミラーである。ウレルマブは、Bristol-Myers Squibb, Inc.及びCreative Biolabs, Inc.から入手できる。ウレルマブは、免疫グロブリンＧ４−カッパ、抗［ヒト（Homo sapiens）ＴＮＦＲＳＦ９（腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリーメンバー９、４−１ＢＢ、Ｔ細胞抗原ＩＬＡ、ＣＤ１３７）］、ヒト（Homo sapiens）（完全ヒト）モノクローナル抗体である。ウレルマブのアミノ酸配列を表５に示す。ウレルマブは、位置２９８（及び２９８’’）のＮ−グリコシル化部位；位置２２−９５（ＶＨ−ＶＬ）、１４８−２０４（ＣＨ１−ＣＬ）、２６２−３２２（ＣＨ２）及び３６８−４２６（ＣＨ３）（並びに位置２２’’−９５’’、１４８’’−２０４’’、２６２’’−３２２’’及び３６８’’−４２６’’）の重鎖内ジスルフィド架橋；位置２３’−８８’（ＶＨ−ＶＬ）及び１３６’−１９６’（ＣＨ１−ＣＬ）（並びに位置２３’’’−８８’’’及び１３６’’’−１９６’’’）の軽鎖内ジスルフィド架橋；位置２２７−２２７’’及び２３０−２３０’’の鎖内重鎖−重鎖ジスルフィド架橋；並びに位置１３５−２１６’及び１３５’’−２１６’’’の鎖内重鎖−軽鎖ジスルフィド架橋を含む。ウレルマブ並びにその変異体及び断片の調製及び特性は、米国特許第７，２８８，６３８号及び第８，９６２，８０４号に記載され、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。ウレルマブの前臨床的及び臨床的特徴は、http:/dx.doi.org/10.1158/1078-0432.CCR-16-1272で入手可能なSegal, et al., Clin.Cancer Res.2016に記載される。様々な血液学的及び固形腫瘍の適応症におけるウレルマブの現在の臨床試験には、米国国立衛生研究所Clinicaltrials.gov識別子ＮＣＴ０１７７５６３１、ＮＣＴ０２１１００８２、ＮＣＴ０２２５３９９２及びＮＣＴ０１４７１２１０が含まれる。
【０３４４】
[00899]  一実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、配列番号２１で示される重鎖及び配列番号２２で示される軽鎖を含む。一実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、それぞれ配列番号２１及び配列番号２２に示される配列を有する重鎖及び軽鎖又は抗原結合断片、Ｆａｂ断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、それらの変異体若しくはコンジュゲートを含む。一実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、それぞれ配列番号２１及び配列番号２２に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、それぞれ配列番号２１及び配列番号２２に示される配列とそれぞれ少なくとも９８％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、それぞれ配列番号２１及び配列番号２２に示される配列とそれぞれ少なくとも９７％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、それぞれ配列番号２１及び配列番号２２に示される配列とそれぞれ少なくとも９６％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、それぞれ配列番号２１及び配列番号２２に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一である重鎖及び軽鎖を含む。
【０３４５】
[00900]  一実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、ウレルマブの重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。一実施形態において、４−１ＢＢアゴニスト重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号２３に示される配列を含み、４−１ＢＢアゴニスト軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号２４に示される配列及びその保存的アミノ酸置換を含む。一実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、それぞれ配列番号２３及び配列番号２４に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、それぞれ配列番号２３及び配列番号２４に示される配列とそれぞれ少なくとも９８％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、それぞれ配列番号２３及び配列番号２４に示される配列とそれぞれ少なくとも９７％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、それぞれ配列番号２３及び配列番号２４に示される配列とそれぞれ少なくとも９６％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、それぞれ配列番号２３及び配列番号２４に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、配列番号２３及び配列番号２４に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含むｓｃＦｖ抗体を含む。
【０３４６】
[00901]  一実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、それぞれ配列番号２５、配列番号２６及び配列番号２７に記載の配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにその保存的アミノ酸置換と、それぞれ配列番号２８、配列番号２９及び配列番号３０に記載の配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにその保存的アミノ酸置換とを含む。
【０３４７】
[00902]  一実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、ウレルマブに関して薬物規制当局によって承認された４−１ＢＢアゴニストバイオシミラーモノクローナル抗体である。一実施形態において、バイオシミラーモノクローナル抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤のアミノ酸配列に対して少なくとも９７％の配列同一性、例えば９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有し、参照医薬品又は参照生物学的製剤と比較して１つ以上の翻訳後改変を含む、アミノ酸配列を含む４−１ＢＢ抗体を含み、ここで、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、ウレルマブである。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後改変は、グリコシル化、酸化、脱アミド化及び切断の１つ以上から選択される。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可された又は認可のために提出された４−１ＢＢアゴニスト抗体であり、４−１ＢＢアゴニスト抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤の製剤と異なる製剤で提供され、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、ウレルマブである。４−１ＢＢアゴニスト抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合のＥＭＡなどの薬物規制当局によって認可されていることができる。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、ウレルマブである。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、ウレルマブである。
【０３４８】
【表５】
2021512962.tif 000023
【０３４９】
[00903]  一実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、１Ｄ８、３Ｅｌｏｒ、４Ｂ４（BioLegend 309809）、Ｈ４−１ＢＢ−Ｍ１２７（BD Pharmingen 552532）、ＢＢＫ２（Thermo Fisher MS621PABX）、１４５５０１（Leinco Technologies B591）、ＡＴＣＣ番号ＨＢ−１１２４８として寄託され、米国特許第６，９７４，８６３号に開示されている細胞株によって産生される抗体、５Ｆ４（BioLegend 31 1503）、Ｃ６５−４８５（BD Pharmingen 559446）、米国特許出願公開第２００５／００９５２４４号に開示されている抗体、米国特許第７，２８８，６３８号に開示されている抗体（２０Ｈ４．９−ＩｇＧｌ（ＢＭＳ−６６３０３１）など）、同第６，８８７，６７３号に開示されている抗体（４Ｅ９又はＢＭＳ−５５４２７１など）、同第７，２１４，４９３号に開示されている抗体、同第６，３０３，１２１号に開示されている抗体、同第６，５６９，９９７号に開示されている抗体、同第６，９０５，６８５号に開示されている抗体（４Ｅ９又はＢＭＳ−５５４２７１など）、同第６，３６２，３２５号に開示されている抗体（１Ｄ８又はＢＭＳ−４６９４９２；３Ｈ３又はＢＭＳ−４６９４９７；又は３Ｅｌなど）、同第６，９７４，８６３号に開示されている抗体（５３Ａ２など）；同第６，２１０，６６９号に開示されている抗体（１Ｄ８、３Ｂ８又は３Ｅ１など）、同第５，９２８，８９３号に記載されている抗体、同第６，３０３，１２１号に開示されている抗体、同第６，５６９，９９７号に開示されている抗体、国際公開第２０１２／１７７７８８号、同第２０１５／１１９９２３号及び同第２０１０／０４２４３３号に開示されている抗体並びにそれらの断片、誘導体、コンジュゲート、変異体又はバイオシミラーからなる群から選択され、ここで、前述の特許又は特許出願公開のそれぞれの開示は、参照により本明細書に組み込まれる。
【０３５０】
[00904]  一実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、国際公開第２００８／０２５５１６  Ａ１号、同第２００９／００７１２０  Ａ１号、同第２０１０／００３７６６  Ａ１号、同第２０１０／０１００５１  Ａ１号及び同第２０１０／０７８９６６  Ａ１号；米国特許出願公開第２０１１／００２７２１８  Ａ１号、同第２０１５／０１２６７０９  Ａ１号、同第２０１１／０１１１４９４  Ａ１号、同第２０１５／０１１０７３４  Ａ１号及び同第２０１５／０１２６７１０  Ａ１号；並びに米国特許第９，３５９，４２０号、同第９，３４０，５９９号、同第８，９２１，５１９号及び同第８，４５０，４６０号に記載されている４−１ＢＢアゴニスト性融合タンパク質であり、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。
【０３５１】
[00905]  一実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、構造Ｉ−Ａ（Ｃ末端Ｆｃ抗体断片融合タンパク質）又は構造Ｉ−Ｂ（Ｎ末端Ｆｃ抗体断片融合タンパク質）に示される４−１ＢＢアゴニスト性融合タンパク質又はその断片、誘導体、コンジュゲート、変異体若しくはバイオシミラーである。
【化１７】
2021512962.tif 000024
構造Ｉ−Ａ及びＩ−Ｂにおいて、円柱は個々のポリペプチド結合ドメインを指す。構造Ｉ−Ａ及びＩ−Ｂは、例えば、４−１ＢＢＬ又は４−１ＢＢに結合する抗体に由来する、３つの直鎖状に連結されたＴＮＦＲＳＦ結合ドメインを含み、これは折り畳まれて三価タンパク質を形成し、次いで、ＩｇＧ１−Ｆｃ（ＣＨ３及びＣＨ２ドメインを含む）を介して第２の三価（triavelent）タンパク質に連結され、次いで、これはジスルフィド結合（小さい細長い楕円形）を介して２つの三価タンパク質を連結するために使用され、構造を安定化し、６つの受容体の細胞内シグナル伝達ドメイン及びシグナル伝達タンパク質をあわせてシグナル伝達複合体を形成できるアゴニストを提供する。円柱として示されるＴＮＦＲＳＦ結合ドメインは、例えば、親水性残基並びに柔軟性のためのＧｌｙ及びＳｅｒ配列並びに溶解性のためのＧｌｕ及びＬｙｓを含み得るリンカーにより接続されたＶＨ及びＶＬ鎖を含む、ｓｃＦｖドメインであり得る。de Marco, Microbial Cell Factories, 2011, 10, 44；Ahmad, et al., Clin. & Dev.Immunol.2012, 980250；Monnier, et al., Antibodies, 2013, 2, 193-208；又は本明細書の別の箇所に組み込まれた参考文献に記載されているものなどの任意のｓｃＦｖドメイン設計が使用され得る。この形態の融合タンパク質構造は、米国特許第９，３５９，４２０号、同第９，３４０，５９９号、同第８，９２１，５１９号及び同第８，４５０，４６０号に記載されており、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。
【０３５２】
[00906]  構造Ｉ−Ａの他のポリペプチドドメインのアミノ酸配列を表６に示す。Ｆｃドメインは、好ましくは、完全定常ドメイン（配列番号３１のアミノ酸１７〜２３０）、完全ヒンジドメイン（配列番号３１のアミノ酸１〜１６）又はヒンジドメインの一部（例えば、配列番号３１のアミノ酸４〜１６）を含む。Ｃ末端Ｆｃ抗体を接続するための好ましいリンカーは、追加的ポリペプチドの融合に適したリンカーを含む、配列番号３２〜配列番号４１に示される実施形態から選択され得る。
【０３５３】
【表６】
2021512962.tif 000025
【０３５４】
[00907]  構造Ｉ−Ｂの他のポリペプチドドメインのアミノ酸配列を表７に示す。構造Ｉ−ＢのようにＦｃ抗体断片がＴＮＲＦＳＦ融合タンパク質のＮ末端に融合される場合、Ｆｃモジュールの配列は好ましくは配列番号４２に示されるものであり、リンカー配列は好ましくは配列番号４３〜配列番号４５に示される実施形態から選択される。
【０３５５】
【表７】
2021512962.tif 000026
【０３５６】
[00908]  一実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−Ｂによる４−１ＢＢアゴニスト融合タンパク質は、ウトミルマブの可変重鎖及び可変軽鎖、ウレルマブの可変重鎖及び可変軽鎖、ウトミルマブの可変重鎖及び可変軽鎖、表８に記載されている可変重鎖及び可変軽鎖から選択される可変重鎖及び可変軽鎖、上記の可変重鎖及び可変軽鎖の任意の組み合わせ並びにそれらの断片、誘導体、コンジュゲート、変異体及びバイオシミラーからなる群から選択される１つ以上の４−１ＢＢ結合ドメインを含む。
【０３５７】
[00909]  一実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−Ｂによる４−１ＢＢアゴニスト融合タンパク質は、４−１ＢＢＬ配列を含む１つ以上の４−１ＢＢ結合ドメインを含む。一実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−Ｂによる４−１ＢＢアゴニスト融合タンパク質は、配列番号４６による配列を含む１つ以上の４−１ＢＢ結合ドメインを含む。一実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−Ｂによる４−１ＢＢアゴニスト融合タンパク質は、可溶性４−１ＢＢＬ配列を含む１つ以上の４−１ＢＢ結合ドメインを含む。一実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−Ｂによる４−１ＢＢアゴニスト融合タンパク質は、配列番号４７による配列を含む１つ以上の４−１ＢＢ結合ドメインを含む。
【０３５８】
[00910]  一実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−Ｂによる４−１ＢＢアゴニスト融合タンパク質は、それぞれ配列番号１３及び配列番号１４に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含むｓｃＦｖドメインである１つ以上の４−１ＢＢ結合ドメインを含み、ここで、ＶＨ及びＶＬドメインはリンカーによって接続されている。一実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−Ｂによる４−１ＢＢアゴニスト融合タンパク質は、それぞれ配列番号２３及び配列番号２４に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含むｓｃＦｖドメインである１つ以上の４−１ＢＢ結合ドメインを含み、ここで、ＶＨ及びＶＬドメインはリンカーによって接続されている。一実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−Ｂによる４−１ＢＢアゴニスト融合タンパク質は、表８に示されるＶＨ及びＶＬ配列とそれぞれ少なくとも９５％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含むｓｃＦｖドメインである１つ以上の４−１ＢＢ結合ドメインを含み、ここで、ＶＨ及びＶＬドメインはリンカーによって接続されている。
【０３５９】
【表８】
2021512962.tif 000027
【０３６０】
[00911]  一実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、（ｉ）第１の可溶性４−１ＢＢ結合ドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性４−１ＢＢ結合ドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性４−１ＢＢ結合ドメインを含む４−１ＢＢアゴニスト性単鎖融合ポリペプチドであり、Ｎ末端及び／又はＣ末端に追加のドメインを更に含み、ここで、追加のドメインは、Ｆａｂ又はＦｃ断片ドメインである。一実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、（ｉ）第１の可溶性４−１ＢＢ結合ドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性４−１ＢＢ結合ドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性４−１ＢＢ結合ドメインを含む４−１ＢＢアゴニスト性単鎖融合ポリペプチドであり、Ｎ末端及び／又はＣ末端に追加のドメインを更に含み、ここで、追加のドメインは、Ｆａｂ又はＦｃ断片ドメインであり、可溶性４−１ＢＢドメインのそれぞれは、ストーク領域（三量体化に寄与し、細胞膜まで一定の距離を提供するが、４−１ＢＢ結合ドメインの一部ではない）を欠き、第１及び第２のペプチドリンカーは、独立して３〜８アミノ酸長を有する。
【０３６１】
[00912]  一実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、（ｉ）第１の可溶性腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）スーパーファミリーサイトカインドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性ＴＮＦスーパーファミリーサイトカインドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性ＴＮＦスーパーファミリーサイトカインドメインを含む４−１ＢＢアゴニスト性単鎖融合ポリペプチドであり、ここで、可溶性ＴＮＦスーパーファミリーサイトカインドメインのそれぞれは、ストーク領域を欠き、第１及び第２のペプチドリンカーは、独立して３〜８アミノ酸長を有し、各ＴＮＦスーパーファミリーサイトカインドメインは４−１ＢＢ結合ドメインである。
【０３６２】
[00913]  一実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、前述のＶＬドメインのいずれかに連結された前述のＶＨドメインのいずれかを含む４−１ＢＢアゴニスト性ｓｃＦｖ抗体である。
【０３６３】
[00914]  一実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、BPS Bioscience４−１ＢＢアゴニスト抗体カタログ番号７９０９７−２であり、これはBPS Bioscience, San Diego, CA, USAから市販されている。一実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、Creative Biolabs４−１ＢＢアゴニスト抗体カタログ番号ＭＯＭ−１８１７９であり、これはCreative Biolabs, Shirley, NY, USAから市販されている。
【０３６４】
ＯＸ４０（ＣＤ１３４）アゴニスト
[00915]  ＯＸ４０受容体（ＯＸ４０）（ＴＮＦＲＳＦ４、ＣＤ１３４、ＡＣＴ−４及びＡＣＴ３５としても知られる）は、活性化ＣＤ４＋Ｔ細胞で発現するＴＮＦ受容体ファミリーのメンバーである（国際公開第９５／１２６７３号を参照されたい）。活性化Ｂ細胞及び樹状細胞上に存在する、ＯＸ４０Ｌ、ｇｐ３４又はＡＣＴ−４−リガンドと呼ばれるＯＸ４０リガンドを介してこの受容体をトリガーすると、免疫応答中のＣＤ４＋Ｔ細胞の増殖が促進され、ＣＤ４＋メモリーＴ細胞の形成に影響を与える。更に、ＯＸ４０−ＯＸ４０Ｌシステムは、活性化Ｔ細胞の内皮細胞への接着を媒介し、したがって活性化ＣＤ４＋Ｔ細胞を炎症部位に誘導する。
【０３６５】
[00916]  ＯＸ４０＋Ｔ細胞は、腫瘍浸潤リンパ球を含有する腫瘍病変内及び腫瘍細胞陽性流入領域リンパ節に存在することが示されている。Weinberg, et al., J. Immunol., 2000, 164, 2160-2169。マウスのいくつかの腫瘍モデルにおいて、腫瘍初回刺激中のＯＸ４０受容体のインビボでの結合が、対照で処置されたマウスと比較して腫瘍の出現を大幅に遅延させ、防止したことが示された。Weinberg, et al., J. Immunol., 2000, 164, 2160-2169。したがって、ＯＸ４０受容体結合剤を投与することによりＯＸ４０受容体を結合させることにより、哺乳動物の抗原に対する免疫応答を増強することが企図されている。（国際公開第１９９９／０４２５８５号；Weinberg, et al., J. Immunol., 2000, 164, 2160-2169）。前臨床試験では、抗ＯＸ４０モノクローナル抗体とＯＸ４０Ｌ−Ｆｃ融合タンパク質の両方を含むＯＸ４０アゴニストによる腫瘍を有する宿主の処置により、いくつかの前臨床モデルで腫瘍が退縮することが示された。Linch, et al., Front.Oncol.2015, 34, 1-14。
【０３６６】
[00917]  一実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、ＯＸ４０（ＣＤ１３４）アゴニストである。ＯＸ４０アゴニストは、当技術分野で公知の任意のＯＸ４０結合分子であり得る。ＯＸ４０結合分子は、ヒト又は哺乳類ＯＸ４０に結合できるモノクローナル抗体又は融合タンパク質であり得る。ＯＸ４０アゴニスト又はＯＸ４０結合分子は、免疫グロブリン分子の任意のアイソタイプ（例えば、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＡ及びＩｇＹ）、クラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１及びＩｇＡ２）又はサブクラスの免疫グロブリン重鎖を含み得る。ＯＸ４０アゴニスト又はＯＸ４０結合分子は、重鎖及び軽鎖の両方を有し得る。本明細書で使用される場合、結合分子という用語は、抗体（全長抗体を含む）、モノクローナル抗体（全長モノクローナル抗体を含む）、ポリクローナル抗体、多重特異性抗体（例えば、二重特異性抗体）、ヒト、ヒト化又はキメラ抗体並びに抗体断片、例えばＦａｂ断片、Ｆ（ａｂ’）断片、Ｆａｂ発現ライブラリーにより産生される断片、上記のいずれかのエピトープ結合断片及びＯＸ４０に結合する抗体の操作された形態、例えばｓｃＦｖ分子も含む。一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、完全ヒト抗体である抗原結合タンパク質である。一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、ヒト化抗体である抗原結合タンパク質である。一部の実施形態において、本開示の方法及び組成物における使用のためのＯＸ４０アゴニストは、抗ＯＸ４０抗体、ヒト抗ＯＸ４０抗体、マウス抗ＯＸ４０抗体、哺乳動物抗ＯＸ４０抗体、モノクローナル抗ＯＸ４０抗体、ポリクローナル抗ＯＸ４０抗体、キメラ抗ＯＸ４０抗体、抗ＯＸ４０アドネクチン、抗ＯＸ４０ドメイン抗体、単鎖抗ＯＸ４０断片、重鎖抗ＯＸ４０断片、軽鎖抗ＯＸ４０断片、抗ＯＸ４０融合タンパク質及びそれらの断片、誘導体、コンジュゲート、変異体若しくはバイオシミラーを含む。好ましい実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、アゴニスト性、抗ＯＸ４０ヒト化又は完全ヒトモノクローナル抗体（即ち、単一細胞株に由来する抗体）である。
【０３６７】
[00918]  好ましい実施形態において、ＯＸ４０アゴニスト又はＯＸ４０結合分子は、融合タンパク質でもあり得る。ＯＸ４０Ｌに融合したＦｃドメインを含むＯＸ４０融合タンパク質は、例えば、Sadun, et al., J. Immunother.2009, 182, 1481-89に記載されている。好ましい実施形態において、三量体又は六量体ＯＸ４０アゴニスト（３つ又は６つのリガンド結合ドメインを有する）などの多量体ＯＸ４０アゴニストは、典型的には２つのリガンド結合ドメインを保有するアゴニスト性モノクローナル抗体と比較して、優れた受容体（ＯＸ４０Ｌ）のクラスター化及び内部細胞シグナル伝達複合体形成を誘導し得る。３つのＴＮＦＲＳＦ結合ドメイン及びＩｇＧ１−Ｆｃを含み、任意選択によりこれらの融合タンパク質の２つ以上を更に連結する、三量体（三価）又は六量体（又は六価）又はそれより大きい融合タンパク質は、例えば、Gieffers, et al., Mol.Cancer Therapeutics 2013, 12, 2735-47に記載される。
【０３６８】
[00919]  アゴニスト性ＯＸ４０抗体及び融合タンパク質は、強い免疫応答を誘発することが知られている。Curti, et al., Cancer Res.2013, 73, 7189-98。好ましい実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、毒性を低減するのに十分な方法でＯＸ４０抗原に特異的に結合するモノクローナル抗体又は融合タンパク質である。一部の実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、抗体依存性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）、例えばＮＫ細胞の細胞傷害性を抑制する、アゴニスト性ＯＸ４０モノクローナル抗体又は融合タンパク質である。一部の実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、抗体依存性細胞食作用（ＡＤＣＰ）を抑制する、アゴニスト性ＯＸ４０モノクローナル抗体又は融合タンパク質である。一部の実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、補体依存性細胞毒性（ＣＤＣ）を抑制する、アゴニスト性ＯＸ４０モノクローナル抗体又は融合タンパク質である。一部の実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、Ｆｃ領域機能性を抑制する、アゴニスト性ＯＸ４０モノクローナル抗体又は融合タンパク質である。
【０３６９】
[00920]  一部の実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、高い親和性及びアゴニスト活性でヒトＯＸ４０（配列番号５４）に結合することを特徴とする。一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、ヒトＯＸ４０（配列番号５４）に結合する結合分子である。一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、マウスＯＸ４０（配列番号５５）に結合する結合分子である。ＯＸ４０アゴニスト又は結合分子が結合するＯＸ４０抗原のアミノ酸配列を表９に概括する。
【０３７０】
【表９】
2021512962.tif 000028
【０３７１】
[00921]  一部の実施形態において、記載される組成物、プロセス及び方法は、約１００ｐＭ以下のＫＤでヒト又はマウスＯＸ４０に結合するか、約９０ｐＭ以下のＫＤでヒト又はマウスＯＸ４０に結合するか、約８０ｐＭ以下のＫＤでヒト又はマウスＯＸ４０に結合するか、約７０ｐＭ以下のＫＤでヒト又はマウスＯＸ４０に結合するか、約６０ｐＭ以下のＫＤでヒト又はマウスＯＸ４０に結合するか、約５０ｐＭ以下のＫＤでヒト又はマウスＯＸ４０に結合するか、約４０ｐＭ以下のＫＤでヒト又はマウスＯＸ４０に結合するか、又は約３０ｐＭ以下のＫＤでヒト又はマウスＯＸ４０に結合する、ＯＸ４０アゴニストを含む。
【０３７２】
[00922]  一部の実施形態において、記載される組成物、プロセス及び方法は、約７．５×１０５  １／Ｍ・ｓ以上のｋａｓｓｏｃでヒト又はマウスＯＸ４０に結合するか、約７．５×１０５  １／Ｍ・ｓ以上のｋａｓｓｏｃでヒト又はマウスＯＸ４０に結合するか、約８×１０５  １／Ｍ・ｓ以上のｋａｓｓｏｃでヒト又はマウスＯＸ４０に結合するか、約８．５×１０５  １／Ｍ・ｓ以上のｋａｓｓｏｃでヒト又はマウスＯＸ４０に結合するか、約９×１０５  １／Ｍ・ｓ以上のｋａｓｓｏｃでヒト又はマウスＯＸ４０に結合するか、約９．５×１０５  １／Ｍ・ｓ以上のｋａｓｓｏｃでヒト又はマウスＯＸ４０に結合するか、又は約１×１０６  １／Ｍ・ｓ以上のｋａｓｓｏｃでヒト又はマウスＯＸ４０に結合する、ＯＸ４０アゴニストを含む。
【０３７３】
[00923]  一部の実施形態において、記載される組成物、プロセス及び方法は、約２×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウスＯＸ４０に結合するか、約２．１×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウスＯＸ４０に結合するか、約２．２×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウスＯＸ４０に結合するか、約２．３×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウスＯＸ４０に結合するか、約２．４×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウスＯＸ４０に結合するか、約２．５×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウスＯＸ４０に結合するか、約２．６×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウスＯＸ４０に結合するか、又は約２．７×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウスＯＸ４０に結合するか、約２．８×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウスＯＸ４０に結合するか、約２．９×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウスＯＸ４０に結合するか、又は約３×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウスＯＸ４０に結合する、ＯＸ４０アゴニストを含む。
【０３７４】
[00924]  一部の実施形態において、記載される組成物、プロセス及び方法は、約１０ｎＭ以下のＩＣ５０でヒト又はマウスＯＸ４０に結合するか、約９ｎＭ以下のＩＣ５０でヒト又はマウスＯＸ４０に結合するか、約８ｎＭ以下のＩＣ５０でヒト又はマウスＯＸ４０に結合するか、約７ｎＭ以下のＩＣ５０でヒト又はマウスＯＸ４０に結合するか、約６ｎＭ以下のＩＣ５０でヒト又はマウスＯＸ４０に結合するか、約５ｎＭ以下のＩＣ５０でヒト又はマウスＯＸ４０に結合するか、約４ｎＭ以下のＩＣ５０でヒト又はマウスＯＸ４０に結合するか、約３ｎＭ以下のＩＣ５０でヒト又はマウスＯＸ４０に結合するか、約２ｎＭ以下のＩＣ５０でヒト又はマウスＯＸ４０に結合するか、又は約１ｎＭ以下のＩＣ５０でヒト又はマウスＯＸ４０に結合する、ＯＸ４０アゴニストを含む。
【０３７５】
[00925]  一部の実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、ＭＥＤＩ０５６２又はＭＥＤＩ−０５６２としても知られるタボリキシズマブである。タボリキシズマブは、AstraZeneca, Incの子会社MedImmuneから入手できる。タボリキシズマブは、免疫グロブリンＧ１−カッパ、抗［ヒト（Homo sapiens）ＴＮＦＲＳＦ４（腫瘍壊死因子受容体（ＴＮＦＲ）スーパーファミリーメンバー４、ＯＸ４０、ＣＤ１３４）］、ヒト化及びキメラモノクローナル抗体である。タボリキシズマブのアミノ酸配列を表１０に示す。タボリキシズマブは、フコシル化複合二分岐ＣＨＯ型グリカンを伴い位置３０１及び３０１’’のＮ−グリコシル化部位；位置２２−９５（ＶＨ−ＶＬ）、１４８−２０４（ＣＨ１−ＣＬ）、２６５−３２５（ＣＨ２）及び３７１−４２９（ＣＨ３）（並びに位置２２’’−９５’’、１４８’’−２０４’’、２６５’’−３２５’’及び３７１’’−４２９’’）の重鎖内ジスルフィド架橋；位置２３’−８８’（ＶＨ−ＶＬ）及び１３４’−１９４’（ＣＨ１−ＣＬ）（並びに位置２３’’’−８８’’’及び１３４’’’−１９４’’’）の軽鎖内ジスルフィド架橋；位置２３０−２３０’’及び２３３−２３３’’の鎖内重鎖−重鎖ジスルフィド架橋；並びに位置２２４−２１４’及び２２４’’−２１４’’’の鎖内重鎖−軽鎖ジスルフィド架橋を含む。様々な固形腫瘍の適応症におけるタボリキシズマブの現在の臨床試験には、米国国立衛生研究所Clinicaltrials.gov識別子ＮＣＴ０２３１８３９４及びＮＣＴ０２７０５４８２が含まれる。
【０３７６】
[00926]  一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、配列番号５６で示される重鎖及び配列番号５７で示される軽鎖を含む。一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号５６及び配列番号５７に示される配列を有する重鎖及び軽鎖又は抗原結合断片、Ｆａｂ断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、それらの変異体若しくはコンジュゲートを含む。一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号５６及び配列番号５７に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号５６及び配列番号５７に示される配列とそれぞれ少なくとも９８％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号５６及び配列番号５７に示される配列とそれぞれ少なくとも９７％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号５６及び配列番号５７に示される配列とそれぞれ少なくとも９６％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号５６及び配列番号５７に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一である重鎖及び軽鎖を含む。
【０３７７】
[00927]  一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、タボリキシズマブの重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。一実施形態において、ＯＸ４０アゴニスト重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号５８に示される配列を含み、ＯＸ４０アゴニスト軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号５９に示される配列及びその保存的アミノ酸置換を含む。一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号５８及び配列番号５９に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号５８及び配列番号５９に示される配列とそれぞれ少なくとも９８％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号５８及び配列番号５９に示される配列とそれぞれ少なくとも９７％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号５８及び配列番号５９に示される配列とそれぞれ少なくとも９６％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号５８及び配列番号５９に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、配列番号５８及び配列番号５９に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含むｓｃＦｖ抗体を含む。
【０３７８】
[00928]  一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号６０、配列番号６１及び配列番号６２に記載の配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにその保存的アミノ酸置換と、それぞれ配列番号６３、配列番号６４及び配列番号６５に記載の配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにその保存的アミノ酸置換とを含む。
【０３７９】
[00929]  一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、タボリキシズマブに関して薬物規制当局によって承認されたＯＸ４０アゴニストバイオシミラーモノクローナル抗体である。一実施形態において、バイオシミラーモノクローナル抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤のアミノ酸配列に対して少なくとも９７％の配列同一性、例えば９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有し、参照医薬品又は参照生物学的製剤と比較して１つ以上の翻訳後改変を含む、アミノ酸配列を含むＯＸ４０抗体を含み、ここで、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、タボリキシズマブである。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後改変は、グリコシル化、酸化、脱アミド化及び切断の１つ以上から選択される。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可された又は認可のために提出されたＯＸ４０アゴニスト抗体であり、ＯＸ４０アゴニスト抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤の製剤と異なる製剤で提供され、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、タボリキシズマブである。ＯＸ４０アゴニスト抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合のＥＭＡなどの薬物規制当局によって認可されていることができる。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、タボリキシズマブである。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、タボリキシズマブである。
【０３８０】
【表１０】
2021512962.tif 000029
【０３８１】
[00930]  一部の実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは１１Ｄ４であり、これはPfizer, Inc.から入手可能な完全ヒト抗体である。１１Ｄ４の調製及び特性は、米国特許第７，９６０，５１５号；同第８，２３６，９３０号；及び同第９，０２８，８２４号に記載され、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。１１Ｄ４のアミノ酸配列を表１１に示す。
【０３８２】
[00931]  一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、配列番号６６で示される重鎖及び配列番号６７で示される軽鎖を含む。一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号６６及び配列番号６７に示される配列を有する重鎖及び軽鎖又は抗原結合断片、Ｆａｂ断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、それらの変異体若しくはコンジュゲートを含む。一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号６６及び配列番号６７に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号６６及び配列番号６７に示される配列とそれぞれ少なくとも９８％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号６６及び配列番号６７に示される配列とそれぞれ少なくとも９７％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号６６及び配列番号６７に示される配列とそれぞれ少なくとも９６％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号６６及び配列番号６７に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一である重鎖及び軽鎖を含む。
【０３８３】
[00932]  一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、１１Ｄ４の重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。一実施形態において、ＯＸ４０アゴニスト重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号６８に示される配列を含み、ＯＸ４０アゴニスト軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号６９に示される配列及びその保存的アミノ酸置換を含む。一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号６８及び配列番号６９に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号６８及び配列番号６９に示される配列とそれぞれ少なくとも９８％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号６８及び配列番号６９に示される配列とそれぞれ少なくとも９７％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号６８及び配列番号６９に示される配列とそれぞれ少なくとも９６％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号６８及び配列番号６９に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。
【０３８４】
[00933]  一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号７０、配列番号７１及び配列番号７２に記載の配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにその保存的アミノ酸置換と、それぞれ配列番号７３、配列番号７４及び配列番号７５に記載の配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにその保存的アミノ酸置換とを含む。
【０３８５】
[00934]  一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、１１Ｄ４に関して薬物規制当局によって承認されたＯＸ４０アゴニストバイオシミラーモノクローナル抗体である。一実施形態において、バイオシミラーモノクローナル抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤のアミノ酸配列に対して少なくとも９７％の配列同一性、例えば９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有し、参照医薬品又は参照生物学的製剤と比較して１つ以上の翻訳後改変を含む、アミノ酸配列を含むＯＸ４０抗体を含み、ここで、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、１１Ｄ４である。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後改変は、グリコシル化、酸化、脱アミド化及び切断の１つ以上から選択される。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可された又は認可のために提出されたＯＸ４０アゴニスト抗体であり、ＯＸ４０アゴニスト抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤の製剤と異なる製剤で提供され、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、１１Ｄ４である。ＯＸ４０アゴニスト抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合のＥＭＡなどの薬物規制当局によって認可されていることができる。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、１１Ｄ４である。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、１１Ｄ４である。
【０３８６】
【表１１】
2021512962.tif 000030
【０３８７】
[00935]  一部の実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは１８Ｄ８であり、これはPfizer, Inc.から入手可能な完全ヒト抗体である。１８Ｄ８の調製及び特性は、米国特許第７，９６０，５１５号；同第８，２３６，９３０号；及び同第９，０２８，８２４号に記載され、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。１８Ｄ８のアミノ酸配列を表１２に示す。
【０３８８】
[00936]  一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、配列番号７６で示される重鎖及び配列番号７７で示される軽鎖を含む。一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号７６及び配列番号７７に示される配列を有する重鎖及び軽鎖又は抗原結合断片、Ｆａｂ断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、それらの変異体若しくはコンジュゲートを含む。一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号７６及び配列番号７７に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号７６及び配列番号７７に示される配列とそれぞれ少なくとも９８％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号７６及び配列番号７７に示される配列とそれぞれ少なくとも９７％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号７６及び配列番号７７に示される配列とそれぞれ少なくとも９６％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号７６及び配列番号７７に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一である重鎖及び軽鎖を含む。
【０３８９】
[00937]  一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、１８Ｄ８の重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。一実施形態において、ＯＸ４０アゴニスト重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号７８に示される配列を含み、ＯＸ４０アゴニスト軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号７９に示される配列及びその保存的アミノ酸置換を含む。一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号７８及び配列番号７９に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号７８及び配列番号７９に示される配列とそれぞれ少なくとも９８％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号７８及び配列番号７９に示される配列とそれぞれ少なくとも９７％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号７８及び配列番号７９に示される配列とそれぞれ少なくとも９６％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号７８及び配列番号７９に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。
【０３９０】
[00938]  一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号８０、配列番号８１及び配列番号８２に記載の配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにその保存的アミノ酸置換と、それぞれ配列番号８３、配列番号８４及び配列番号８５に記載の配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにその保存的アミノ酸置換とを含む。
【０３９１】
[00939]  一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、１８Ｄ８に関して薬物規制当局によって承認されたＯＸ４０アゴニストバイオシミラーモノクローナル抗体である。一実施形態において、バイオシミラーモノクローナル抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤のアミノ酸配列に対して少なくとも９７％の配列同一性、例えば９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有し、参照医薬品又は参照生物学的製剤と比較して１つ以上の翻訳後改変を含む、アミノ酸配列を含むＯＸ４０抗体を含み、ここで、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、１８Ｄ８である。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後改変は、グリコシル化、酸化、脱アミド化及び切断の１つ以上から選択される。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可された又は認可のために提出されたＯＸ４０アゴニスト抗体であり、ＯＸ４０アゴニスト抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤の製剤と異なる製剤で提供され、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、１８Ｄ８である。ＯＸ４０アゴニスト抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合のＥＭＡなどの薬物規制当局によって認可されていることができる。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、１８Ｄ８である。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、１８Ｄ８である。
【０３９２】
【表１２】
2021512962.tif 000031
【０３９３】
[00940]  一部の実施形態において、ＯＸ４０アゴニストはＨｕ１１９−１２２であり、これはGlaxoSmithKline plc.から入手可能なヒト化抗体である。Ｈｕ１１９−１２２の調製及び特性は、米国特許第９，００６，３９９号及び同第９，１６３，０８５号並びに国際公開第２０１２／０２７３２８号に記載され、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。Ｈｕ１１９−１２２のアミノ酸配列を表１３に示す。
【０３９４】
[00941]  一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、Ｈｕ１１９−１２２の重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。一実施形態において、ＯＸ４０アゴニスト重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号８６に示される配列を含み、ＯＸ４０アゴニスト軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号８７に示される配列及びその保存的アミノ酸置換を含む。一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号８６及び配列番号８７に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号８６及び配列番号８７に示される配列とそれぞれ少なくとも９８％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号８６及び配列番号８７に示される配列とそれぞれ少なくとも９７％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号８６及び配列番号８７に示される配列とそれぞれ少なくとも９６％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号８６及び配列番号８７に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。
【０３９５】
[00942]  一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号８８、配列番号８９及び配列番号９０に記載の配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにその保存的アミノ酸置換と、それぞれ配列番号９１、配列番号９２及び配列番号９３に記載の配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにその保存的アミノ酸置換とを含む。
【０３９６】
[00943]  一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、Ｈｕ１１９−１２２に関して薬物規制当局によって承認されたＯＸ４０アゴニストバイオシミラーモノクローナル抗体である。一実施形態において、バイオシミラーモノクローナル抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤のアミノ酸配列に対して少なくとも９７％の配列同一性、例えば９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有し、参照医薬品又は参照生物学的製剤と比較して１つ以上の翻訳後改変を含む、アミノ酸配列を含むＯＸ４０抗体を含み、ここで、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、Ｈｕ１１９−１２２である。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後改変は、グリコシル化、酸化、脱アミド化及び切断の１つ以上から選択される。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可された又は認可のために提出されたＯＸ４０アゴニスト抗体であり、ＯＸ４０アゴニスト抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤の製剤と異なる製剤で提供され、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、Ｈｕ１１９−１２２である。ＯＸ４０アゴニスト抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合のＥＭＡなどの薬物規制当局によって認可されていることができる。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、Ｈｕ１１９−１２２である。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、Ｈｕ１１９−１２２である。
【０３９７】
【表１３】
2021512962.tif 000032
【０３９８】
[00944]  一部の実施形態において、ＯＸ４０アゴニストはＨｕ１０６−２２２であり、これはGlaxoSmithKline PLC.から入手可能なヒト化抗体である。Ｈｕ１０６−２２２の調製及び特性は、米国特許第９，００６，３９９号及び同第９，１６３，０８５号並びに国際公開第２０１２／０２７３２８号に記載され、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。Ｈｕ１０６−２２２のアミノ酸配列を表１４に示す。
【０３９９】
[00945]  一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、Ｈｕ１０６−２２２の重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。一実施形態において、ＯＸ４０アゴニスト重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号９４に示される配列を含み、ＯＸ４０アゴニスト軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号９５に示される配列及びその保存的アミノ酸置換を含む。一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号９４及び配列番号９５に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号９４及び配列番号９５に示される配列とそれぞれ少なくとも９８％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号９４及び配列番号９５に示される配列とそれぞれ少なくとも９７％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号９４及び配列番号９５に示される配列とそれぞれ少なくとも９６％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号９４及び配列番号９５に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。
【０４００】
[00946]  一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号９６、配列番号９７及び配列番号９８に記載の配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにその保存的アミノ酸置換と、それぞれ配列番号９９、配列番号１００及び配列番号１０１に記載の配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにその保存的アミノ酸置換とを含む。
【０４０１】
[00947]  一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、Ｈｕ１０６−２２２に関して薬物規制当局によって承認されたＯＸ４０アゴニストバイオシミラーモノクローナル抗体である。一実施形態において、バイオシミラーモノクローナル抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤のアミノ酸配列に対して少なくとも９７％の配列同一性、例えば９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有し、参照医薬品又は参照生物学的製剤と比較して１つ以上の翻訳後改変を含む、アミノ酸配列を含むＯＸ４０抗体を含み、ここで、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、Ｈｕ１０６−２２２である。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後改変は、グリコシル化、酸化、脱アミド化及び切断の１つ以上から選択される。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可された又は認可のために提出されたＯＸ４０アゴニスト抗体であり、ＯＸ４０アゴニスト抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤の製剤と異なる製剤で提供され、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、Ｈｕ１０６−２２２である。ＯＸ４０アゴニスト抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合のＥＭＡなどの薬物規制当局によって認可されていることができる。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、Ｈｕ１０６−２２２である。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、Ｈｕ１０６−２２２である。
【０４０２】
【表１４】
2021512962.tif 000033
【０４０３】
[00948]  一部の実施形態において、ＯＸ４０アゴニスト抗体はＭＥＤＩ６４６９（９Ｂ１２とも称される）である。ＭＥＤＩ６４６９はマウスモノクローナル抗体である。Weinberg, et al., J. Immunother.2006, 29, 575-585。一部の実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、Weinberg, et al., J. Immunother.2006, 29, 575-585に記載されているように、Biovest Inc.（Malvern, MA, USA）に寄託された、９Ｂ１２ハイブリドーマによって産生される抗体であり、その開示は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。一部の実施形態において、抗体は、ＭＥＤＩ６４６９のＣＤＲ配列を含む。一部の実施形態において、抗体は、ＭＥＤＩ６４６９の重鎖可変領域配列及び／又は軽鎖可変領域配列を含む。
【０４０４】
[00949]  一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、Ｌ１０６ ＢＤ（Pharmingen Product #340420）である。一部の実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、抗体Ｌ１０６（BD Pharmingen Product #340420）のＣＤＲを含む。一部の実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、抗体Ｌ１０６（BD Pharmingen Product #340420）の重鎖可変領域配列及び／又は軽鎖可変領域配列を含む。一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストはＡＣＴ３５（Santa Cruz Biotechnology、カタログ番号２００７３）である。一部の実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、抗体ＡＣＴ３５（Santa Cruz Biotechnology、カタログ番号２００７３）のＣＤＲを含む。一部の実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、抗体ＡＣＴ３５（Santa Cruz Biotechnology、カタログ番号２００７３）の重鎖可変領域配列及び／又は軽鎖可変領域配列を含む。一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、マウスモノクローナル抗体抗ｍＣＤ１３４／ｍＯＸ４０（クローンＯＸ８６）であり、InVivoMAb, BioXcell Inc, West Lebanon, NHから市販されている。
【０４０５】
[00950]  一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、国際公開第９５／１２６７３号、同第９５／２１９２５号、同第２００６／１２１８１０号、同第２０１２／０２７３２８号、同第２０１３／０２８２３１号、同第２０１３／０３８１９１号及び同第２０１４／１４８８９５号；欧州特許第０６７２１４１号；米国特許出願公開第２０１０／１３６０３０号、同第２０１４／３７７２８４号、同第２０１５／１９０５０６号及び同第２０１５／１３２２８８号；並びに米国特許第７，５０４，１０１号、同第７，５５０，１４０号、同第７，６２２，４４４号、同第７，６９６，１７５号、同第７，９６０，５１５号、同第７，９６１，５１５号、同第８，１３３，９８３号、同第９，００６，３９９号及び同第９，１６３，０８５号（２０Ｅ５及び１２Ｈ３を含む）に記載されるＯＸ４０アゴニストから選択され、それぞれの開示は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【０４０６】
[00951]  一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、構造Ｉ−Ａ（Ｃ末端Ｆｃ抗体断片融合タンパク質）又は構造Ｉ−Ｂ（Ｎ末端Ｆｃ抗体断片融合タンパク質）に示されるＯＸ４０アゴニスト性融合タンパク質又はその断片、誘導体、コンジュゲート、変異体若しくはバイオシミラーである。構造Ｉ−Ａ及びＩ−Ｂの特性は、上記並びに米国特許第９，３５９，４２０号、同第９，３４０，５９９号、同第８，９２１，５１９号及び同第８，４５０，４６０号に記載され、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。構造Ｉ−Ａのポリペプチドドメインのアミノ酸配列を表６に示す。Ｆｃドメインは、好ましくは、完全定常ドメイン（配列番号３１のアミノ酸１７〜２３０）、完全ヒンジドメイン（配列番号３１のアミノ酸１〜１６）又はヒンジドメインの一部（例えば、配列番号３１のアミノ酸４〜１６）を含む。Ｃ末端Ｆｃ抗体を接続するための好ましいリンカーは、追加的ポリペプチドの融合に適したリンカーを含む、配列番号３２〜配列番号４１に示される実施形態から選択され得る。同様に、構造Ｉ−Ｂのポリペプチドドメインのアミノ酸配列を表７に示す。構造Ｉ−ＢのようにＦｃ抗体断片がＴＮＲＦＳＦ融合タンパク質のＮ末端に融合される場合、Ｆｃモジュールの配列は好ましくは配列番号４２に示されるものであり、リンカー配列は好ましくは配列番号４３〜配列番号４５に示される実施形態から選択される。
【０４０７】
[00952]  一実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−ＢによるＯＸ４０アゴニスト融合タンパク質は、タボリキシズマブの可変重鎖及び可変軽鎖、１１Ｄ４の可変重鎖及び可変軽鎖、１８Ｄ８の可変重鎖及び可変軽鎖、Ｈｕ１１９−１２２の可変重鎖及び可変軽鎖、Ｈｕ１０６−２２２の可変重鎖及び可変軽鎖、表１５に記載されている可変重鎖及び可変軽鎖から選択される可変重鎖及び可変軽鎖、上記の可変重鎖及び可変軽鎖の任意の組み合わせ並びにそれらの断片、誘導体、コンジュゲート、変異体及びバイオシミラーからなる群から選択される１つ以上のＯＸ４０結合ドメインを含む。
【０４０８】
[00953]  一実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−ＢによるＯＸ４０アゴニスト融合タンパク質は、ＯＸ４０Ｌ配列を含む１つ以上のＯＸ４０結合ドメインを含む。一実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−ＢによるＯＸ４０アゴニスト融合タンパク質は、配列番号１０２による配列を含む１つ以上のＯＸ４０結合ドメインを含む。一実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−ＢによるＯＸ４０アゴニスト融合タンパク質は、可溶性ＯＸ４０Ｌ配列を含む１つ以上のＯＸ４０結合ドメインを含む。一実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−ＢによるＯＸ４０アゴニスト融合タンパク質は、配列番号１０３による配列を含む１つ以上のＯＸ４０結合ドメインを含む。一実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−ＢによるＯＸ４０アゴニスト融合タンパク質は、配列番号１０４による配列を含む１つ以上のＯＸ４０結合ドメインを含む。
【０４０９】
[00954]  一実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−ＢによるＯＸ４０アゴニスト融合タンパク質は、それぞれ配列番号５８及び配列番号５９に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含むｓｃＦｖドメインである１つ以上のＯＸ４０結合ドメインを含み、ここで、ＶＨ及びＶＬドメインはリンカーによって接続されている。一実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−ＢによるＯＸ４０アゴニスト融合タンパク質は、それぞれ配列番号６８及び配列番号６９に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含むｓｃＦｖドメインである１つ以上のＯＸ４０結合ドメインを含み、ここで、ＶＨ及びＶＬドメインはリンカーによって接続されている。一実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−ＢによるＯＸ４０アゴニスト融合タンパク質は、それぞれ配列番号７８及び配列番号７９に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含むｓｃＦｖドメインである１つ以上のＯＸ４０結合ドメインを含み、ここで、ＶＨ及びＶＬドメインはリンカーによって接続されている。一実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−ＢによるＯＸ４０アゴニスト融合タンパク質は、それぞれ配列番号８６及び配列番号８７に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含むｓｃＦｖドメインである１つ以上のＯＸ４０結合ドメインを含み、ここで、ＶＨ及びＶＬドメインはリンカーによって接続されている。一実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−ＢによるＯＸ４０アゴニスト融合タンパク質は、それぞれ配列番号９４及び配列番号９５に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含むｓｃＦｖドメインである１つ以上のＯＸ４０結合ドメインを含み、ここで、ＶＨ及びＶＬドメインはリンカーによって接続されている。一実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−ＢによるＯＸ４０アゴニスト融合タンパク質は、表１５に示されるＶＨ及びＶＬ配列とそれぞれ少なくとも９５％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含むｓｃＦｖドメインである１つ以上のＯＸ４０結合ドメインを含み、ここで、ＶＨ及びＶＬドメインはリンカーによって接続されている。
【０４１０】
【表１５】
2021512962.tif 000034
【０４１１】
【表１６】
2021512962.tif 000035
【０４１２】
[00955]  一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、（ｉ）第１の可溶性ＯＸ４０結合ドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性ＯＸ４０結合ドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性ＯＸ４０結合ドメインを含むＯＸ４０アゴニスト性単鎖融合ポリペプチドであり、Ｎ末端及び／又はＣ末端に追加のドメインを更に含み、ここで、追加のドメインは、Ｆａｂ又はＦｃ断片ドメインである。一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、（ｉ）第１の可溶性ＯＸ４０結合ドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性ＯＸ４０結合ドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性ＯＸ４０結合ドメインを含むＯＸ４０アゴニスト性単鎖融合ポリペプチドであり、Ｎ末端及び／又はＣ末端に追加のドメインを更に含み、ここで、追加のドメインは、Ｆａｂ又はＦｃ断片ドメインであり、可溶性ＯＸ４０結合ドメインのそれぞれは、ストーク領域（三量体化に寄与し、細胞膜まで一定の距離を提供するが、ＯＸ４０結合ドメインの一部ではない）を欠き、第１及び第２のペプチドリンカーは、独立して３〜８アミノ酸長を有する。
【０４１３】
[00956]  一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、（ｉ）第１の可溶性腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）スーパーファミリーサイトカインドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性ＴＮＦスーパーファミリーサイトカインドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性ＴＮＦスーパーファミリーサイトカインドメインを含むＯＸ４０アゴニスト性単鎖融合ポリペプチドであり、ここで、可溶性ＴＮＦスーパーファミリーサイトカインドメインのそれぞれは、ストーク領域を欠き、第１及び第２のペプチドリンカーは、独立して３〜８アミノ酸長を有し、ＴＮＦスーパーファミリーサイトカインドメインはＯＸ４０結合ドメインである。
【０４１４】
[00957]  一部の実施形態において、ＯＸ４０アゴニストはＭＥＤＩ６３８３である。ＭＥＤＩ６３８３はＯＸ４０アゴニスト性融合タンパク質であり、米国特許第６，３１２，７００号に記載されているように調製することができ、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。
【０４１５】
[00958]  一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、前述のＶＬドメインのいずれかに連結された前述のＶＨドメインのいずれかを含むＯＸ４０アゴニスト性ｓｃＦｖ抗体である。
【０４１６】
[00959]  一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、Creative BiolabsＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体ＭＯＭ−１８４５５であり、これはCreative Biolabs, Inc., Shirley, NY, USAから市販されている。
【０４１７】
[00960]  一実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、BioLegend, Inc., San Diego, CA, USAから市販されているＯＸ４０アゴニスト性抗体クローンＢｅｒ−ＡＣＴ３５である。
【０４１８】
ＣＤ２７アゴニスト
[00961]  ＴＮＦＲＳＦ７としても知られるＣＤ２７は、ＣＤ４０、４−１ＢＢ及びＯＸ４０を含む他のＴＮＦＲＳＦメンバーと重複する活性を有する。ＣＤ２７は、Ｔ細胞の生存、活性化及びエフェクター機能に重要な役割を果たし、ＮＫ細胞の増殖及び細胞傷害活性においても役割を果たす。ＣＤ２７は、ナイーブＴ細胞を含むＴ細胞の大部分で構成的に発現される。ＣＤ２７のリガンドはＣＤ７０であり、これは、Ｔ細胞、Ｂ細胞及び樹状細胞に見られる。Oshima, et al., Int.Immunol.1998, 10, 517-26。ＣＤ２７は、ＣＤ４＋及びＣＤ８＋Ｔ細胞の増殖を促進し、ＣＤ２８後に作用してＴエフェクター細胞の生存を維持し、一次応答よりも二次応答に影響を与える。しかし、ＣＤ２７の活性化は、制御性Ｔ細胞の免疫抑制効果の増強を通した腫瘍増殖にも関連付けられている。Claus, et al., Cancer Res.2012, 72, 3664-76。他のデータは、ＣＤ２７の免疫刺激効果がこの腫瘍促進効果を上回り得ることを示している。Aulwurm, et al., Int.J. Cancer 2006, 118, 1728-35。マウスモデルでは、アゴニスト性ＣＤ２７モノクローナル抗体が抗腫瘍効果及び腫瘍免疫の誘導を示した。He, et al., J. Immunol.2013, 191, 4174-83。
【０４１９】
[00962]  一実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、ＣＤ２７アゴニストである。ＣＤ２７アゴニストは、当技術分野で公知の任意のＣＤ２７結合分子であり得る。ＣＤ２７結合分子は、ヒト又は哺乳類ＣＤ２７に結合できるモノクローナル抗体又は融合タンパク質であり得る。ＣＤ２７アゴニスト又はＣＤ２７結合分子は、免疫グロブリン分子の任意のアイソタイプ（例えば、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＡ及びＩｇＹ）、クラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１及びＩｇＡ２）又はサブクラスの免疫グロブリン重鎖を含み得る。ＣＤ２７アゴニスト又はＣＤ２７結合分子は、重鎖及び軽鎖の両方を有し得る。本明細書で使用される場合、結合分子という用語は、抗体（全長抗体を含む）、モノクローナル抗体（全長モノクローナル抗体を含む）、ポリクローナル抗体、多重特異性抗体（例えば、二重特異性抗体）、ヒト、ヒト化又はキメラ抗体並びに抗体断片、例えばＦａｂ断片、Ｆ（ａｂ’）断片、Ｆａｂ発現ライブラリーにより産生される断片、上記のいずれかのエピトープ結合断片及びＣＤ２７に結合する抗体の操作された形態、例えばｓｃＦｖ分子も含む。一実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、完全ヒト抗体である抗原結合タンパク質である。一実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、ヒト化抗体である抗原結合タンパク質である。一部の実施形態において、本開示の方法及び組成物における使用のためのＣＤ２７アゴニストは、抗ＣＤ２７抗体、ヒト抗ＣＤ２７抗体、マウス抗ＣＤ２７抗体、哺乳動物抗ＣＤ２７抗体、モノクローナル抗ＣＤ２７抗体、ポリクローナル抗ＣＤ２７抗体、キメラ抗ＣＤ２７抗体、抗ＣＤ２７アドネクチン、抗ＣＤ２７ドメイン抗体、単鎖抗ＣＤ２７断片、重鎖抗ＣＤ２７断片、軽鎖抗ＣＤ２７断片、抗ＣＤ２７融合タンパク質及びそれらの断片、誘導体、コンジュゲート、変異体若しくはバイオシミラーを含む。好ましい実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、アゴニスト性抗ＣＤ２７ヒト化又は完全ヒトモノクローナル抗体（即ち単一細胞株に由来する抗体）である。好ましい一実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、バルリルマブ又はそれらの断片、誘導体、コンジュゲート、変異体若しくはバイオシミラーである。
【０４２０】
[00963]  好ましい実施形態において、ＣＤ２７アゴニスト又はＣＤ２７結合分子は、融合タンパク質でもあり得る。好ましい実施形態において、三量体又は六量体ＣＤ２７アゴニスト（３つ又は６つのリガンド結合ドメインを有する）などの多量体ＣＤ２７アゴニストは、典型的には２つのリガンド結合ドメインを保有するアゴニスト性モノクローナル抗体と比較して、優れた受容体（ＣＤ２７Ｌ）のクラスター化及び内部細胞シグナル伝達複合体形成を誘導し得る。３つのＴＮＦＲＳＦ結合ドメイン及びＩｇＧ１−Ｆｃを含み、任意選択によりこれらの融合タンパク質の２つ以上を更に連結する、三量体（三価）又は六量体（又は六価）又はそれより大きい融合タンパク質は、例えば、Gieffers, et al., Mol.Cancer Therapeutics 2013, 12, 2735-47に記載される。
【０４２１】
[00964]  アゴニスト性ＣＤ２７抗体及び融合タンパク質は、強い免疫応答を誘発することが知られている。好ましい実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、毒性を低減するのに十分な方法でＣＤ２７抗原に特異的に結合するモノクローナル抗体又は融合タンパク質である。一部の実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、抗体依存性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）、例えばＮＫ細胞の細胞傷害性を抑制する、アゴニスト性ＣＤ２７モノクローナル抗体又は融合タンパク質である。一部の実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、抗体依存性細胞食作用（ＡＤＣＰ）を抑制する、アゴニスト性ＣＤ２７モノクローナル抗体又は融合タンパク質である。一部の実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、補体依存性細胞毒性（ＣＤＣ）を抑制する、アゴニスト性ＣＤ２７モノクローナル抗体又は融合タンパク質である。一部の実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、Ｆｃ領域機能性を抑制する、アゴニスト性ＣＤ２７モノクローナル抗体又は融合タンパク質である。
【０４２２】
[00965]  一部の実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、高い親和性及びアゴニスト活性でヒトＣＤ２７（配列番号１２７）に結合することを特徴とする。一実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、ヒトＣＤ２７（配列番号１２７）に結合する結合分子である。一部の実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、高い親和性及びアゴニスト活性でマカクＣＤ２７（配列番号１２８）に結合することを特徴とする。一実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、マカクＣＤ２７（配列番号１２８）に結合する結合分子である。ＣＤ２７アゴニスト又は結合分子が結合するＣＤ２７抗原のアミノ酸配列を表１６に概括する。
【０４２３】
【表１７】
2021512962.tif 000036
【０４２４】
[00966]  一部の実施形態において、記載される組成物、プロセス及び方法は、約１００ｐＭ以下のＫＤでヒト又はマウスＣＤ２７に結合するか、約９０ｐＭ以下のＫＤでヒト又はマウスＣＤ２７に結合するか、約８０ｐＭ以下のＫＤでヒト又はマウスＣＤ２７に結合するか、約７０ｐＭ以下のＫＤでヒト又はマウスＣＤ２７に結合するか、約６０ｐＭ以下のＫＤでヒト又はマウスＣＤ２７に結合するか、約５０ｐＭ以下のＫＤでヒト又はマウスＣＤ２７に結合するか、約４０ｐＭ以下のＫＤでヒト又はマウスＣＤ２７に結合するか、又は約３０ｐＭ以下のＫＤでヒト又はマウスＣＤ２７に結合する、ＣＤ２７アゴニストを含む。
【０４２５】
[00967]  一部の実施形態において、記載される組成物、プロセス及び方法は、約７．５×１０５  １／Ｍ・ｓ以上のｋａｓｓｏｃでヒト又はマウスＣＤ２７に結合するか、約７．５×１０５  １／Ｍ・ｓ以上のｋａｓｓｏｃでヒト又はマウスＣＤ２７に結合するか、約８×１０５  １／Ｍ・ｓ以上のｋａｓｓｏｃでヒト又はマウスＣＤ２７に結合するか、約８．５×１０５  １／Ｍ・ｓ以上のｋａｓｓｏｃでヒト又はマウスＣＤ２７に結合するか、約９×１０５  １／Ｍ・ｓ以上のｋａｓｓｏｃでヒト又はマウスＣＤ２７に結合するか、約９．５×１０５  １／Ｍ・ｓ以上のｋａｓｓｏｃでヒト又はマウスＣＤ２７に結合するか、又は約１×１０６  １／Ｍ・ｓ以上のｋａｓｓｏｃでヒト又はマウスＣＤ２７に結合する、ＣＤ２７アゴニストを含む。
【０４２６】
[00968]  一部の実施形態において、記載される組成物、プロセス及び方法は、約２×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウスＣＤ２７に結合するか、約２．１×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウスＣＤ２７に結合するか、約２．２×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウスＣＤ２７に結合するか、約２．３×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウスＣＤ２７に結合するか、約２．４×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウスＣＤ２７に結合するか、約２．５×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウスＣＤ２７に結合するか、約２．６×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウスＣＤ２７に結合するか、又は約２．７×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウスＣＤ２７に結合するか、約２．８×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウスＣＤ２７に結合するか、約２．９×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウスＣＤ２７に結合するか、又は約３×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウスＣＤ２７に結合する、ＣＤ２７アゴニストを含む。
【０４２７】
[00969]  一部の実施形態において、記載される組成物、プロセス及び方法は、約１０ｎＭ以下のＩＣ５０でヒト又はマウスＣＤ２７に結合するか、約９ｎＭ以下のＩＣ５０でヒト又はマウスＣＤ２７に結合するか、約８ｎＭ以下のＩＣ５０でヒト又はマウスＣＤ２７に結合するか、約７ｎＭ以下のＩＣ５０でヒト又はマウスＣＤ２７に結合するか、約６ｎＭ以下のＩＣ５０でヒト又はマウスＣＤ２７に結合するか、約５ｎＭ以下のＩＣ５０でヒト又はマウスＣＤ２７に結合するか、約４ｎＭ以下のＩＣ５０でヒト又はマウスＣＤ２７に結合するか、約３ｎＭ以下のＩＣ５０でヒト又はマウスＣＤ２７に結合するか、約２ｎＭ以下のＩＣ５０でヒト又はマウスＣＤ２７に結合するか、又は約１ｎＭ以下のＩＣ５０でヒト又はマウスＣＤ２７に結合する、ＣＤ２７アゴニストを含む。
【０４２８】
[00970]  好ましい実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、ＣＤＸ−１１２７又は１Ｆ５としても知られるモノクローナル抗体バルリルマブ又はその断片、誘導体、変異体又はバイオシミラーである。バルリルマブはCelldex Therapeutics, Inc.から入手できる。バルリルマブは、免疫グロブリンＧ１−カッパ、抗［ヒト（Homo sapiens）抗ＣＤ２７（ＴＮＦＲＳＦ７、腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリーメンバー７）］、ヒト（Homo sapiens）モノクローナル抗体である。バルリルマブのアミノ酸配列を表１７に示す。バルリルマブは、位置２９９及び２９９’’のＮ−グリコシル化部位；位置２２−９６（ＶＨ−ＶＬ）、１４６−２０２（ＣＨ１−ＣＬ）、２６３−３２３（ＣＨ２）及び３６９−４２７（ＣＨ３）（並びに位置２２’’−９６’’、１４６’’−２０２’’、２６３’’−３２３’’及び３６９’’−４２７’’）の重鎖内ジスルフィド架橋；位置２３’−８８’（ＶＨ−ＶＬ）及び１３４’−１９４’（ＣＨ１−ＣＬ）（並びに位置２３’’’−８８’’’及び１３４’’’−１９４’’’）の軽鎖内ジスルフィド架橋；位置２２８−２２８’’及び２３１−２３１’’の鎖内重鎖−重鎖ジスルフィド架橋；並びに位置２２２−２１４’及び２２２’’−２１４’’’の鎖内重鎖−軽鎖ジスルフィド架橋を含む。バルリルマブの調製及び特性は、国際公開第２０１６／１４５０８５  Ａ２号並びに米国特許出願公開第２０１１／０２７４６８５  Ａ１号及び同第２０１２／０２１３７７１  Ａ１号に記載され、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。バルリルマブを使用した臨床及び前臨床試験は、当技術分野で公知であり、例えばThomas, et al., OncoImmunology 2014, 3, e27255；Vitale, et al., Clin.Cancer Res.2012, 18, 3812-21；及びHe, et al., J. Immunol.2013, 191, 4174-83に記載されている。様々な血液学的及び固形腫瘍の適応症におけるバルリルマブの現在の臨床試験には、米国国立衛生研究所Clinicaltrials.gov識別子NCT01460134、NCT02543645、NCT02413827、NCT02386111及びNCT02335918が含まれる。
【０４２９】
[00971]  一実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、配列番号１２９で示される重鎖及び配列番号１３０で示される軽鎖を含む。一実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、それぞれ配列番号１２９及び配列番号１３０に示される配列を有する重鎖及び軽鎖又はその抗原結合断片、Ｆａｂ断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、変異体若しくはコンジュゲートを含む。一実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、それぞれ配列番号１２９及び配列番号１３０に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、それぞれ配列番号１２９及び配列番号１３０に示される配列とそれぞれ少なくとも９８％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、それぞれ配列番号１２９及び配列番号１３０に示される配列とそれぞれ少なくとも９７％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、それぞれ配列番号１２９及び配列番号１３０に示される配列とそれぞれ少なくとも９６％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、それぞれ配列番号１２９及び配列番号１３０に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一である重鎖及び軽鎖を含む。
【０４３０】
[00972]  一実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、バルリルマブの重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。一実施形態において、ＣＤ２７アゴニスト重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号１３１に示される配列を含み、ＣＤ２７アゴニスト軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号１３２に示される配列及びその保存的アミノ酸置換を含む。一実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、それぞれ配列番号１３１及び配列番号１３２に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、それぞれ配列番号１３１及び配列番号１３２に示される配列とそれぞれ少なくとも９８％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、それぞれ配列番号１３１及び配列番号１３２に示される配列とそれぞれ少なくとも９７％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、それぞれ配列番号１３１及び配列番号１３２に示される配列とそれぞれ少なくとも９６％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、それぞれ配列番号１３１及び配列番号１３２に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。
【０４３１】
[00973]  一実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、それぞれ配列番号１３３、配列番号１３４及び配列番号１３５に記載の配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにその保存的アミノ酸置換と、それぞれ配列番号１３６、配列番号１３７及び配列番号１３８に記載の配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、びにその保存的アミノ酸置換とを含む。
【０４３２】
[00974]  一実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、バルリルマブに関して薬物規制当局によって承認されたＣＤ２７アゴニストバイオシミラーモノクローナル抗体である。一実施形態において、バイオシミラーモノクローナル抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤のアミノ酸配列に対して少なくとも９７％の配列同一性、例えば９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有し、参照医薬品又は参照生物学的製剤と比較して１つ以上の翻訳後改変を含む、アミノ酸配列を含むＣＤ２７抗体を含み、ここで、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、バルリルマブである。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後改変は、グリコシル化、酸化、脱アミド化及び切断の１つ以上から選択される。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可された又は認可のために提出されたＣＤ２７アゴニスト抗体であり、ＣＤ２７アゴニスト抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤の製剤と異なる製剤で提供され、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、バルリルマブである。ＣＤ２７アゴニスト抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合のＥＭＡなどの薬物規制当局によって認可されていることができる。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、バルリルマブである。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、バルリルマブである。
【０４３３】
【表１８】
2021512962.tif 000037
【０４３４】
[00975]  一実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、構造Ｉ−Ａ（Ｃ末端Ｆｃ抗体断片融合タンパク質）又は構造Ｉ−Ｂ（Ｎ末端Ｆｃ抗体断片融合タンパク質）に示されるＣＤ２７アゴニスト性融合タンパク質又はその断片、誘導体、コンジュゲート、変異体若しくはバイオシミラーである。構造Ｉ−Ａ及びＩ−Ｂの特性は、上記並びに米国特許第９，３５９，４２０号、同第９，３４０，５９９号、同第８，９２１，５１９号及び同第８，４５０，４６０号に記載され、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。構造Ｉ−Ａのポリペプチドドメインのアミノ酸配列を表６に示す。Ｆｃドメインは、好ましくは、完全定常ドメイン（配列番号３１のアミノ酸１７〜２３０）、完全ヒンジドメイン（配列番号３１のアミノ酸１〜１６）又はヒンジドメインの一部（例えば、配列番号３１のアミノ酸４〜１６）を含む。Ｃ末端Ｆｃ抗体を接続するための好ましいリンカーは、追加的ポリペプチドの融合に適したリンカーを含む、配列番号３２〜配列番号４１に示される実施形態から選択され得る。同様に、構造Ｉ−Ｂのポリペプチドドメインのアミノ酸配列を表７に示す。構造Ｉ−ＢのようにＦｃ抗体断片がＴＮＲＦＳＦ融合タンパク質のＮ末端に融合される場合、Ｆｃモジュールの配列は好ましくは配列番号４２に示されるものであり、リンカー配列は好ましくは配列番号４３〜配列番号４５に示される実施形態から選択される。
【０４３５】
[00976]  一実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−ＢによるＣＤ２７アゴニスト融合タンパク質は、バルリルマブの可変重鎖及び可変軽鎖並びにその断片、誘導体、コンジュゲート、変異体及びバイオシミラーからなる群から選択される１つ以上のＣＤ２７結合ドメインを含む。
【０４３６】
[00977]  一実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−ＢによるＣＤ２７アゴニスト融合タンパク質は、ＣＤ７０（ＣＤ２７Ｌ）配列（表１８）を含む１つ以上のＣＤ２７結合ドメインを含む。一実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−ＢによるＣＤ２７アゴニスト融合タンパク質は、配列番号１３９による配列を含む１つ以上のＣＤ２７結合ドメインを含む。一実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−ＢによるＣＤ２７アゴニスト融合タンパク質は、可溶性ＣＤ７０配列を含む１つ以上のＣＤ２７結合ドメインを含む。一実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−ＢによるＣＤ２７アゴニスト融合タンパク質は、配列番号１４０による配列を含む１つ以上のＣＤ２７結合ドメインを含む。一実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−ＢによるＣＤ２７アゴニスト融合タンパク質は、配列番号１４１による配列を含む１つ以上のＣＤ２７結合ドメインを含む。
【０４３７】
[00978]  一実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−ＢによるＣＤ２７アゴニスト融合タンパク質は、それぞれ配列番号１３１及び配列番号１３２に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含むｓｃＦｖドメインである１つ以上のＣＤ２７結合ドメインを含み、ここで、ＶＨ及びＶＬドメインはリンカーによって接続されている。
【０４３８】
【表１９】
2021512962.tif 000038
【０４３９】
[00979]  一実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、（ｉ）第１の可溶性ＣＤ２７結合ドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性ＣＤ２７結合ドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性ＣＤ２７結合ドメインを含むＣＤ２７アゴニスト性単鎖融合ポリペプチドであり、Ｎ末端及び／又はＣ末端に追加のドメインを更に含み、ここで、追加のドメインは、Ｆａｂ又はＦｃ断片ドメインである。一実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、（ｉ）第１の可溶性ＣＤ２７結合ドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性ＣＤ２７結合ドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性ＣＤ２７結合ドメインを含むＣＤ２７アゴニスト性単鎖融合ポリペプチドであり、Ｎ末端及び／又はＣ末端に追加のドメインを更に含み、ここで、追加のドメインは、Ｆａｂ又はＦｃ断片ドメインであり、可溶性ＣＤ２７結合ドメインのそれぞれは、ストーク領域（三量体化に寄与し、細胞膜まで一定の距離を提供するが、ＣＤ２７結合ドメインの一部ではない）を欠き、第１及び第２のペプチドリンカーは、独立して３〜８アミノ酸長を有する。
【０４４０】
[00980]  一実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、（ｉ）第１の可溶性腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）スーパーファミリーサイトカインドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性ＴＮＦスーパーファミリーサイトカインドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性ＴＮＦスーパーファミリーサイトカインドメインを含むＣＤ２７アゴニスト性単鎖融合ポリペプチドであり、ここで、可溶性ＴＮＦスーパーファミリーサイトカインドメインのそれぞれは、ストーク領域を欠き、第１及び第２のペプチドリンカーは、独立して３〜８アミノ酸長を有し、ＴＮＦスーパーファミリーサイトカインドメインはＣＤ２７結合ドメインである。
【０４４１】
[00981]  一実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、米国特許出願公開第２０１４／０１１２９４２  Ａ１号、同第２０１１／０２７４６８５  Ａ１号若しくは同第２０１２／０２１３７７１  Ａ１号又は国際公開第２０１２／００４３６７  Ａ１号に記載されるＣＤ２７アゴニストであり、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。
【０４４２】
[00982]  一実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、前述のＶＬドメインのいずれかに連結された前述のＶＨドメインのいずれかを含むＣＤ２７アゴニスト性ｓｃＦｖ抗体である。
【０４４３】
ＧＩＴＲ（ＣＤ３５７）アゴニスト
[00983]  グルココルチコイド誘発性ＴＮＦＲ関連タンパク質（ＧＩＴＲ）は、腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリーメンバー１８（ＴＮＦＲＳＦ１８）、活性化誘導性ＴＮＦＲファミリー受容体（ＡＩＴＲ）及びＣＤ３５７としても知られる、共刺激チェックポイント分子である。ＧＩＴＲは、調節性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）及びエフェクターＴ細胞、Ｂ細胞、ＮＫ細胞及び抗原提示細胞を含む、いくつかの細胞タイプで発現している。Nocentini及びRiccardi, Eur.J. Immunol.2005, 35, 1016-1022。ＧＩＴＲは、その共役ＧＩＴＲリガンド（ＧＩＴＲＬ）によって活性化される。ＧＩＴＲは免疫応答の刺激において役割を果たし、ＧＩＴＲへの抗原結合タンパク質は、免疫応答を増加させることが望ましい様々なＧＩＴＲ関連の疾患又は障害の処置に有用である。Ko, et al., J. Exp.Med.2005, 202, 885-91；Shimizu, et al., Nature Immunology 2002, 3, 135-142；Cohen, et al., Cancer Res.2006, 66, 4904-12；Azuma, Crit.Rev. Immunol.2010, 30, 547-57。例えば、ＧＩＴＲを介したＴ細胞刺激は、Ｔｒｅｇ媒介性抑制を減弱し、ＣＤ４＋及びＣＤ８＋Ｔ細胞による腫瘍殺傷を増強する。ＧＩＴＲは、Ｔｒｅｇ（ＣＤ４＋ＣＤ２５＋又はＣＤ８＋ＣＤ２５＋細胞など）において構成的に発現され、これらの細胞が活性化されると更に上方制御される。Nocentini及びRiccardi, Eur.J. Immunol.2005, 35, 1016-1022。ＧＩＴＲは、ＣＤ４＋及びＣＤ８＋の両方のナイーブＴ細胞に対する共活性化シグナルであり、特にＴ細胞受容体（ＴＣＲ）刺激が最適以下である状況において、増殖及びエフェクター機能を誘導及び増強する。Schaer, et al., Curr.Opin.Immunol.2012, 24, 217-224。融合タンパク質及び抗ＧＩＴＲ抗体（アゴニスト抗体を含む）などの抗原結合ＧＩＴＲタンパク質によって引き起こされる増強された免疫応答は、癌、自己免疫疾患、炎症性疾患又は感染症の処置などの様々な免疫療法適用において注目を集めている。
【０４４４】
[00984]  一実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、ＧＩＴＲアゴニストである。ＧＩＴＲアゴニストは、当技術分野で公知の任意のＧＩＴＲ結合分子であり得る。ＧＩＴＲ結合分子は、ヒト又は哺乳類ＧＩＴＲに結合できるモノクローナル抗体又は融合タンパク質であり得る。ＧＩＴＲアゴニスト又はＧＩＴＲ結合分子は、免疫グロブリン分子の任意のアイソタイプ（例えば、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＡ及びＩｇＹ）、クラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１及びＩｇＡ２）又はサブクラスの免疫グロブリン重鎖を含み得る。ＧＩＴＲアゴニスト又はＧＩＴＲ結合分子は、重鎖及び軽鎖の両方を有し得る。本明細書で使用される場合、結合分子という用語は、抗体（全長抗体を含む）、モノクローナル抗体（全長モノクローナル抗体を含む）、ポリクローナル抗体、多重特異性抗体（例えば、二重特異性抗体）、ヒト、ヒト化又はキメラ抗体並びに抗体断片、例えばＦａｂ断片、Ｆ（ａｂ’）断片、Ｆａｂ発現ライブラリーにより産生される断片、上記のいずれかのエピトープ結合断片及びＯＸ４０に結合する抗体の操作された形態、例えばｓｃＦｖ分子も含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、完全ヒト抗体である抗原結合タンパク質である。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、ヒト化抗体である抗原結合タンパク質である。一部の実施形態において、本開示の方法及び組成物における使用のためのＧＩＴＲアゴニストは、抗ＧＩＴＲ抗体、ヒト抗ＧＩＴＲ抗体、マウス抗ＯＸ４０抗体、哺乳動物抗ＧＩＴＲ抗体、モノクローナル抗ＯＸ４０抗体、ポリクローナル抗ＯＸ４０抗体、キメラ抗ＯＸ４０抗体、抗ＯＸ４０アドネクチン、抗ＯＸ４０ドメイン抗体、単鎖抗ＯＸ４０断片、重鎖抗ＯＸ４０断片、軽鎖抗ＯＸ４０断片、抗ＯＸ４０融合タンパク質及びそれらの断片、誘導体、コンジュゲート、変異体若しくはバイオシミラーを含む。好ましい実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、アゴニスト性抗ＯＸ４０ヒト化又は完全ヒトモノクローナル抗体（即ち単一細胞株に由来する抗体）である。
【０４４５】
[00985]  好ましい実施形態において、ＧＩＴＲアゴニスト又はＧＩＴＲ結合分子は、融合タンパク質でもあり得る。好ましい実施形態において、三量体又は六量体ＧＩＴＲアゴニスト（３つ又は６つのリガンド結合ドメインを有する）などの多量体ＧＩＴＲアゴニストは、典型的には２つのリガンド結合ドメインを保有するアゴニスト性モノクローナル抗体と比較して、優れたＧＩＴＲ受容体のクラスター化及び内部細胞シグナル伝達複合体形成を誘導し得る。３つのＴＮＦＲＳＦ結合ドメイン及びＩｇＧ１−Ｆｃを含み、任意選択によりこれらの融合タンパク質の２つ以上を更に連結する、三量体（三価）又は六量体（又は六価）又はそれより大きい融合タンパク質は、例えば、Gieffers, et al., Mol.Cancer Therapeutics 2013, 12, 2735-47に記載される。
【０４４６】
[00986]  一部の実施形態において、抗ＧＩＴＲ抗体は、刺激剤、例えばＣＤ３抗体（ムロモナブ又はＯＫＴ３）の存在下でｈＧＩＴＲ（配列番号１４２）に高親和性で結合することを特徴とし、アゴニスト性であり、Ｔｒｅｇ細胞によるＴエフェクター細胞の抑制を無効にする。一実施形態において、ＧＩＴＲ結合分子は、ヒトＧＩＴＲ（配列番号１４２）に結合する。一実施形態において、ＧＩＴＲ結合分子は、マウスＧＩＴＲ（配列番号１４３）に結合する。ＧＩＴＲ結合分子が結合するＧＩＴＲ抗原のアミノ酸配列を表１９に概括する。
【０４４７】
【表２０】
2021512962.tif 000039
【０４４８】
[00987]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、完全ヒト抗体である抗原結合タンパク質である。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、ヒト化抗体である抗原結合タンパク質である。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、ヒトＧＩＴＲの活性を刺激する抗原結合タンパク質である。一実施形態において、ＧＩＴＲ結合分子は、完全ヒトＩｇＧ１抗体である抗原結合タンパク質である。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、Ｆｃガンマ受容体（ＦｃγＲ）に結合することができる抗原結合タンパク質である。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、抗原結合タンパク質のクラスターが形成されるように、Ｆｃガンマ受容体（ＦｃγＲ）に結合することができる抗原結合タンパク質である。
【０４４９】
[00988]  一部の実施形態において、記載される組成物、プロセス及び方法は、約１００ｐＭ以下のＫＤでヒト又はマウスＧＩＴＲに結合するか、約９０ｐＭ以下のＫＤでヒト又はマウスＧＩＴＲに結合するか、約８０ｐＭ以下のＫＤでヒト又はマウスＧＩＴＲに結合するか、約７０ｐＭ以下のＫＤでヒト又はマウスＧＩＴＲに結合するか、約６０ｐＭ以下のＫＤでヒト又はマウスＧＩＴＲに結合するか、約５０ｐＭ以下のＫＤでヒト又はマウスＧＩＴＲに結合するか、約４０ｐＭ以下のＫＤでヒト又はマウスＧＩＴＲに結合するか、又は約３０ｐＭ以下のＫＤでヒト又はマウスＧＩＴＲに結合する、ＧＩＴＲアゴニストを含む。
【０４５０】
[00989]  一部の実施形態において、記載される組成物、プロセス及び方法は、約７．５×１０５  １／Ｍ・ｓ以上のｋａｓｓｏｃでヒト又はマウスＧＩＴＲに結合するか、約７．５×１０５  １／Ｍ・ｓ以上のｋａｓｓｏｃでヒト又はマウスＧＩＴＲに結合するか、約８×１０５  １／Ｍ・ｓ以上のｋａｓｓｏｃでヒト又はマウスＧＩＴＲに結合するか、約８．５×１０５  １／Ｍ・ｓ以上のｋａｓｓｏｃでヒト又はマウスＧＩＴＲに結合するか、約９×１０５  １／Ｍ・ｓ以上のｋａｓｓｏｃでヒト又はマウスＧＩＴＲに結合するか、約９．５×１０５  １／Ｍ・ｓ以上のｋａｓｓｏｃでヒト又はマウスＧＩＴＲに結合するか、又は約１×１０６  １／Ｍ・ｓ以上のｋａｓｓｏｃでヒト又はマウスＧＩＴＲに結合する、ＧＩＴＲアゴニストを含む。
【０４５１】
[00990]  一部の実施形態において、記載される組成物、プロセス及び方法は、約２×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウスＧＩＴＲに結合するか、約２．１×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウスＧＩＴＲに結合するか、約２．２×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウスＧＩＴＲに結合するか、約２．３×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウスＧＩＴＲに結合するか、約２．４×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウスＧＩＴＲに結合するか、約２．５×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウスＧＩＴＲに結合するか、約２．６×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウスＧＩＴＲに結合するか、又は約２．７×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウスＧＩＴＲに結合するか、約２．８×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウスＧＩＴＲに結合するか、約２．９×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウスＧＩＴＲに結合するか、又は約３×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウスＧＩＴＲに結合する、ＧＩＴＲアゴニストを含む。
【０４５２】
[00991]  一部の実施形態において、記載される組成物、プロセス及び方法は、約１０ｎＭ以下のＩＣ５０でヒト又はマウスＧＩＴＲに結合するか、約９ｎＭ以下のＩＣ５０でヒト又はマウスＧＩＴＲに結合するか、約８ｎＭ以下のＩＣ５０でヒト又はマウスＧＩＴＲに結合するか、約７ｎＭ以下のＩＣ５０でヒト又はマウスＧＩＴＲに結合するか、約６ｎＭ以下のＩＣ５０でヒト又はマウスＧＩＴＲに結合するか、約５ｎＭ以下のＩＣ５０でヒト又はマウスＧＩＴＲに結合するか、約４ｎＭ以下のＩＣ５０でヒト又はマウスＧＩＴＲに結合するか、約３ｎＭ以下のＩＣ５０でヒト又はマウスＧＩＴＲに結合するか、約２ｎＭ以下のＩＣ５０でヒト又はマウスＧＩＴＲに結合するか、又は約１ｎＭ以下のＩＣ５０でヒト又はマウスＧＩＴＲに結合する、ＧＩＴＲアゴニストを含む。
【０４５３】
[00992]  好ましい実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、アゴニスト性抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体（即ち単一細胞株に由来する抗体）である。アゴニスト抗ＧＩＴＲ抗体は、強い免疫応答を誘導することが知られている。Cohen, et al., Cancer Res.2006, 66, 4904-12；Schaer, et al., Curr.Opin.Investig.Drugs 2010, 11, 1378-1386。好ましい実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、ＧＩＴＲ抗原に特異的に結合するモノクローナル抗体である。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、ＧＩＴＲ受容体遮断剤である。一部の実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、抗体依存性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）、例えばＮＫ細胞の細胞傷害性を抑制する、アゴニスト性抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体である。一部の実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、抗体依存性細胞食作用（ＡＤＣＰ）を抑制する、アゴニスト性抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体である。一部の実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、補体依存性細胞傷害作用（ＣＤＣ）を抑制する、アゴニスト性抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体である。
【０４５４】
[00993]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、６Ｃ８及びＣｈ−６Ｃ８−Ａｇｌｙとしても知られる、アゴニスト性抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体ＴＲＸ５１８（TolerRx, Inc.）である。ＴＲＸ５１８は、重鎖アスパラギン２９７がアラニンで置換され、Ｎ結合型グリコシル化が排除された、完全ヒト化ＩｇＧ１抗ヒトＧＩＴＲモノクローナル抗体であり、ＡＤＣＣ及びＣＤＣを含むＦｃ領域の機能を無効にする。Rosenzweig, et al., J. Clin.Oncol.2010, 28 (supplement; abstract e13028)；Jung, et al., Cur.Opin.Biotechnology 2011, 22,858-867。ＴＲＸ５１８のアミノ酸配列を表２０に示す。一部の実施形態において、ＧＩＴＲ結合分子は、抗ヒトＧＩＴＲモノクローナル抗体６Ｃ８又はその変異体である。６Ｃ８抗体は、免疫細胞、例えばヒトＴ細胞及び樹状細胞上の、ヒトＧＩＴＲに高い親和性で結合する、抗ＧＩＴＲ抗体である。好ましくは、そのような結合分子は、Ｔｒｅｇ細胞によるＴエフェクター細胞の抑制を無効にし、ＣＤ３などの刺激剤の存在下、インビトロで部分的に活性化された免疫細胞に対してアゴニスト性である。一部の実施形態において、ＧＩＴＲ結合分子は、抗マウスＧＩＴＲモノクローナル抗体２Ｆ８又はその変異体である。６Ｃ８及び２Ｆ８抗体並びにそれらの変異体の調製、特性及び使用は、米国特許第７，８１２，１３５号、同第８，３８８，９６７号；及び同第９，０２８，８２３号に記載され、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。
【０４５５】
[00994]  一実施形態において、アゴニスト性抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１４４、配列番号１４５、配列番号１４６及び配列番号１４７からなる群から選択される重鎖並びに配列番号１４８を含む軽鎖を含む。一実施形態において、アゴニスト性抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１４４、配列番号１４５、配列番号１４６及び配列番号１４７からなる群から選択される配列に対し９９％を超える配列同一性を有する重鎖並びに配列番号１４８に対し９９％を超える配列同一性を有する軽鎖を含む。一実施形態において、アゴニスト性抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１４４、配列番号１４５、配列番号１４６及び配列番号１４７からなる群から選択される配列に対し９８％を超える配列同一性を有する重鎖並びに配列番号１４８に対し９８％を超える配列同一性を有する軽鎖を含む。一実施形態において、アゴニスト性抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１４４、配列番号１４５、配列番号１４６及び配列番号１４７からなる群から選択される配列に対し９５％を超える配列同一性を有する重鎖並びに配列番号１４８に対し９５％を超える配列同一性を有する軽鎖を含む。一実施形態において、アゴニスト性抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１４４、配列番号１４５、配列番号１４６及び配列番号１４７からなる群から選択される配列に対し９０％を超える配列同一性を有する重鎖並びに配列番号１４８に対し９０％を超える配列同一性を有する軽鎖を含む。
【０４５６】
[00995]  一実施形態において、アゴニスト性抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１４９のリーダー配列を含み、配列番号１４４、配列番号１４５、配列番号１４６及び配列番号１４７からなる群から選択される配列を更に含む、重鎖を含む。一実施形態において、アゴニスト性抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１４８のリーダー配列を含み、配列番号１５０を含む配列を更に含む、軽鎖を含む。
【０４５７】
[00996]  一実施形態において、アゴニスト性抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体（ＴＲＸ５１８など）は、配列番号１５１及び配列番号１５２からなる群から選択される可変重鎖領域（ＶＨ）並びに配列番号１５３を含む可変軽鎖領域（ＶＬ）を含む。一実施形態において、アゴニスト性抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１５１のアミノ酸残基２０〜１３８及び配列番号１５２のアミノ酸残基２０〜１３８からなる群から選択される可変重鎖領域並びに配列番号１５３のアミノ酸残基２０〜１３８を含む可変軽鎖領域を含む。一実施形態において、アゴニスト性抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１５１のアミノ酸残基２０〜１３８及び配列番号１５２のアミノ酸残基２０〜１３８からなる群から選択される配列に対し９９％を超える配列同一性を有する可変重鎖領域並びに配列番号１５３のアミノ酸残基２０〜１３８を含む配列に対し９９％を超える配列同一性を有する可変軽鎖領域を含む。一実施形態において、アゴニスト性抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１５１のアミノ酸残基２０〜１３８及び配列番号１５２のアミノ酸残基２０〜１３８からなる群から選択される配列に対し９８％を超える配列同一性を有する可変重鎖領域並びに配列番号１５３のアミノ酸残基２０〜１３８を含む配列に対し９８％を超える配列同一性を有する可変軽鎖領域を含む。一実施形態において、アゴニスト性抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１５１のアミノ酸残基２０〜１３８及び配列番号１５２のアミノ酸残基２０〜１３８からなる群から選択される配列に対し９５％を超える配列同一性を有する可変重鎖領域並びに配列番号１５３のアミノ酸残基２０〜１３８を含む配列に対し９５％を超える配列同一性を有する可変軽鎖領域を含む。一実施形態において、アゴニスト性抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１５１のアミノ酸残基２０〜１３８及び配列番号１５２のアミノ酸残基２０〜１３８からなる群から選択される配列に対し９０％を超える配列同一性を有する可変重鎖領域並びに配列番号１５３のアミノ酸残基２０〜１３８を含む配列に対し９０％を超える配列同一性を有する可変軽鎖領域を含む。
【０４５８】
[00997]  一実施形態において、アゴニスト性抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１５４のアミノ酸配列を含む少なくとも１つのＣＤＲ１領域；配列番号１５５及び配列番号１５６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む少なくとも１つのＣＤＲ２領域；及び配列番号１５７のアミノ酸配列を含む少なくとも１つのＣＤＲ３領域を含むＶＨ領域；並びに配列番号１５８のアミノ酸配列を含む少なくとも１つのＣＤＲ１領域；配列番号１５９のアミノ酸配列を含む少なくとも１つのＣＤＲ２領域；及び配列番号１６０のアミノ酸配列を含む少なくとも１つのＣＤＲ３領域を含むＶＬ領域を含む。一実施形態において、本発明は、例えば、配列番号１５４、配列番号１５５、配列番号１５６、配列番号１５７、配列番号１５８、配列番号１５９及び配列番号１６０からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、６Ｃ８  ＣＤＲを含むポリペプチド配列をコードする単離された核酸分子を提供する。一実施形態において、アゴニスト性抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１５４、配列番号１５６及び配列番号１５７、配列番号１５８、配列番号１５９及び配列番号１６０のアミノ酸配列によって表される６つのＣＤＲを含む。一実施形態において、ＧＩＴＲに特異的に結合するＧＩＴＲ結合分子は、配列番号１５４、配列番号１５５及び配列番号１５７、配列番号１５８、配列番号１５９及び配列番号１６０のアミノ酸配列によって表される６つのＣＤＲを含む。一実施形態において、アゴニスト性抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１５８、配列番号１５９及び配列番号１６０からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む少なくとも１つのＣＤＲドメインを有するＶＬを含む。一実施形態において、アゴニスト性抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１５８、配列番号１５９及び配列番号１６０からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む少なくとも２つのＣＤＲドメインを有するＶＬを含む。一実施形態において、アゴニスト性抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１５８、配列番号１５９及び配列番号１６０のアミノ酸配列を含むＣＤＲドメインを有するＶＬを含む。一実施形態において、アゴニスト性抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１５４、配列番号１５５及び配列番号１５７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む少なくとも１つのＣＤＲドメインを有するＶＬを含む。一実施形態において、アゴニスト性抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１５４、配列番号１５５及び配列番号１５７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む少なくとも２つのＣＤＲドメインを有するＶＬを含む。一実施形態において、アゴニスト性抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１５４、配列番号１５５及び配列番号１５７のアミノ酸配列を含むＣＤＲドメインを有するＶＬを含む。一実施形態において、アゴニスト性抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１５４、配列番号１５６及び配列番号１５７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む少なくとも１つのＣＤＲドメインを有するＶＬを含む。一実施形態において、アゴニスト性抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１５４、配列番号１５６及び配列番号１５７からなる群から選択されるア���ノ酸配列を含む少なくとも２つのＣＤＲドメインを有するＶＬを含む。一実施形態において、アゴニスト性抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１５４、配列番号１５６及び配列番号１５７のアミノ酸配列を含むＣＤＲドメインを有するＶＬを含む。一実施形態において、アゴニスト性抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１５４（ＣＤＲ１）に示されるＣＤＲを含むＶＨドメインを含む。一実施形態において、アゴニスト性抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１５５（ＣＤＲ２、「Ｎ」変異体）に示されるＣＤＲを含むＶＨドメインを含む。一実施形態において、アゴニスト性抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１５６（ＣＤＲ３、「Ｑ」変異体）に示されるＣＤＲを含むＶＨドメインを含む。一実施形態において、アゴニスト性抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１５７（ＣＤＲ３）に示されるＣＤＲを含むＶＨドメインを含む。一実施形態において、アゴニスト性抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１５８（ＣＤＲ１）に示されるＣＤＲを含むＶＬドメインを含む。一実施形態において、アゴニスト性抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１５９（ＣＤＲ２）に示されるＣＤＲを含むＶＬドメインを含む。一実施形態において、アゴニスト性抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１６０（ＣＤＲ３）に示されるＣＤＲを含むＶＬドメインを含む。
【０４５９】
[00998]  一実施形態において、アゴニスト性抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、キメラ６Ｃ８モノクローナル抗体又はその抗原結合断片、誘導体、コンジュゲート若しくは変異体である。一実施形態において、アゴニスト性抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１６２及び配列番号１６３からなる群から選択される重鎖並びに配列番号１６１を含む軽鎖を含む。一実施形態において、アゴニスト性抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１６２及び配列番号１６３からなる群から選択される配列に対し９９％を超える配列同一性を有する重鎖並びに配列番号１６１に対し９９％を超える配列同一性を有する軽鎖を含む。一実施形態において、アゴニスト性抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１６２及び配列番号１６３からなる群から選択される配列に対し９８％を超える配列同一性を有する重鎖並びに配列番号１６１に対し９８％を超える配列同一性を有する軽鎖を含む。一実施形態において、アゴニスト性抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１６２及び配列番号１６３からなる群から選択される配列に対し９５％を超える配列同一性を有する重鎖並びに配列番号１６１に対し９５％を超える配列同一性を有する軽鎖を含む。一実施形態において、アゴニスト性抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１６２及び配列番号１６３からなる群から選択される配列に対し９０％を超える配列同一性を有する重鎖並びに配列番号１６１に対し９０％を超える配列同一性を有する軽鎖を含む。
【０４６０】
[00999]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、ＴＲＸ５１８又は６Ｃ８に関して薬物規制当局によって承認されたＧＩＴＲアゴニストバイオシミラーモノクローナル抗体である。一実施形態において、バイオシミラーモノクローナル抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤のアミノ酸配列に対して少なくとも９７％の配列同一性、例えば９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有し、参照医薬品又は参照生物学的製剤と比較して１つ以上の翻訳後改変を含む、アミノ酸配列を含むＧＩＴＲ抗体を含み、ここで、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、ＴＲＸ５１８又は６Ｃ８である。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後改変は、グリコシル化、酸化、脱アミド化及び切断の１つ以上から選択される。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可された又は認可のために提出されたＧＩＴＲアゴニスト抗体であり、ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤の製剤と異なる製剤で提供され、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、ＴＲＸ５１８又は６Ｃ８である。ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合のＥＭＡなどの薬物規制当局によって認可されていることができる。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、ＴＲＸ５１８又は６Ｃ８である。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、ＴＲＸ５１８又は６Ｃ８である。
【０４６１】
【表２１】
2021512962.tif 000040
【０４６２】
【表２２】
2021512962.tif 000041
【０４６３】
[001000]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、米国特許第８，７０９，４２４号；米国特許出願公開第２０１２／０１８９６３９  Ａ１号及び同第２０１４／０３４８８４１  Ａ１号及び国際公開第２０１１／０２８６８３  Ａ１号（Merck Sharp & Dohme Corp.）に記載のアゴニスト性抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体であり、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、３６Ｅ５、３Ｄ６、６１Ｇ６、６Ｈ６、６１Ｆ６、１Ｄ８、１７Ｆ１０、３５Ｄ８、４９Ａ１、９Ｅ５及び３１Ｈ６並びにその断片、変異体、誘導体又はバイオシミラーからなる群から選択されるアゴニスト性抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体である。これらの抗体の構造、特性及び調製は、米国特許第８，７０９，４２４号；米国特許出願公開第２０１２／０１８９６３９  Ａ１号及び同第２０１４／０３４８８４１  Ａ１号に記載され、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。
【０４６４】
[001001]  一部の実施形態において、アゴニスト性抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１６４、配列番号１６６、配列番号１６８、配列番号１７０、配列番号１７２、配列番号１７４、配列番号１７６、配列番号１７８、配列番号１８０、配列番号１８２、配列番号１８４、配列番号１８６、配列番号１８８、配列番号１９０、配列番号１９２、配列番号１９４、配列番号１９６、配列番号１９８、配列番号２００、配列番号２０２、配列番号２０４、配列番号２０６からなる群から選択される配列又はその変異体、断片若しくはバイオシミラーを含むヒト化重鎖可変ドメイン（ＶＨ）及び配列番号１６５、配列番号１６７、配列番号１６９、配列番号１７１、配列番号１７３、配列番号１７５、配列番号１７７、配列番号１７９、配列番号１８１、配列番号１８３、配列番号１８５、配列番号１８７、配列番号１８９、配列番号１９１、配列番号１９３、配列番号１９５、配列番号１９７、配列番号１９９、配列番号２０１、配列番号２０３、配列番号２０５、配列番号２０７からなる群から選択される配列又はその変異体、断片若しくはバイオシミラーを含むヒト化重鎖可変ドメイン（ＶＨ）を含む（表２１）。一部の実施形態において、アゴニスト性抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、重鎖定常領域を更に含み、ここで、重鎖定常領域は、γ１、γ２、γ３又はγ４ヒト重鎖定常領域又はその変異体を含む。一部の実施形態において、軽鎖定常領域は、ラムダ又はカッパヒト軽鎖定常領域を含む。
【０４６５】
[001002]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、３６Ｅ５、３Ｄ６、６１Ｇ６、６Ｈ６、６１Ｆ６、１Ｄ８、１７Ｆ１０、３５Ｄ８、４９Ａ１、９Ｅ５及び３１Ｈ６に関して薬物規制当局によって承認されたＧＩＴＲアゴニストバイオシミラーモノクローナル抗体である。一実施形態において、バイオシミラーモノクローナル抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤のアミノ酸配列に対して少なくとも９７％の配列同一性、例えば９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有し、参照医薬品又は参照生物学的製剤と比較して１つ以上の翻訳後改変を含む、アミノ酸配列を含むＧＩＴＲ抗体を含み、ここで、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、３６Ｅ５、３Ｄ６、６１Ｇ６、６Ｈ６、６１Ｆ６、１Ｄ８、１７Ｆ１０、３５Ｄ８、４９Ａ１、９Ｅ５及び３１Ｈ６である。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後改変は、グリコシル化、酸化、脱アミド化及び切断の１つ以上から選択される。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可された又は認可のために提出されたＧＩＴＲアゴニスト抗体であり、ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤の製剤と異なる製剤で提供され、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、３６Ｅ５、３Ｄ６、６１Ｇ６、６Ｈ６、６１Ｆ６、１Ｄ８、１７Ｆ１０、３５Ｄ８、４９Ａ１、９Ｅ５及び３１Ｈ６である。ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合のＥＭＡなどの薬物規制当局によって認可されていることができる。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、３６Ｅ５、３Ｄ６、６１Ｇ６、６Ｈ６、６１Ｆ６、１Ｄ８、１７Ｆ１０、３５Ｄ８、４９Ａ１、９Ｅ５及び３１Ｈ６である。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、３６Ｅ５、３Ｄ６、６１Ｇ６、６Ｈ６、６１Ｆ６、１Ｄ８、１７Ｆ１０、３５Ｄ８、４９Ａ１、９Ｅ５及び３１Ｈ６である。
【０４６６】
【表２３】
2021512962.tif 000042
【０４６７】
【表２４】
2021512962.tif 000043
【０４６８】
【表２５】
2021512962.tif 000044
【０４６９】
[001003]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号（Sanofi SA）及び国際公開第２０１１／０２８６８３  Ａ１号（Sanofi SA）に記載されるアゴニスト性抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体であり、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。一実施形態において、ＧＩＴＲ結合分子には、配列番号２０８、配列番号２１０、配列番号２１１、配列番号２１２、配列番号２１３、配列番号２１４、配列番号２１９、配列番号２２１、配列番号２２３及び配列番号２２５からなる群から選択される重鎖可変ドメイン（ＶＨ）並びに配列番号２０９、配列番号２１５、配列番号２１６、配列番号２１７、配列番号２１８、配列番号２２０、配列番号２２２、配列番号２２４及び配列番号２２６からなる群から選択される軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む、ヒトＧＩＴＲに結合するヒト化及びキメラ組換え抗体を含む、モノクローナル抗体並びにその変異体及び断片が含まれる（表２２）。一実施形態において、ＧＩＴＲ結合分子は、（ａ）配列番号２２７、配列番号２２８、配列番号２２９、配列番号２３３、配列番号２３４、配列番号２３５、配列番号２４０、配列番号２４１、配列番号２４２、配列番号２４３、配列番号２４４、配列番号２４５、配列番号２４９及びその保存的アミノ酸置換からなる群から選択される、１つ、２つ又は３つの重鎖ＣＤＲ、並びに（ｂ）配列番号２３０、配列番号２３１、配列番号２３２、配列番号２３６、配列番号２３７、配列番号２３８、配列番号２３９、配列番号２４６、配列番号２４７、配列番号２４８及びその保存的アミノ酸置換からなる群から選択される、１つ、２つ又は３つの軽鎖ＣＤＲを含むアゴニスト性抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体である（表２２）。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、２１５５、６９８、７０６、８２７、１６４９及び１７１８並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー及び組み合わせからなる群から選択されるアゴニスト性抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体である。
【０４７０】
[001004]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、２１５５、６９８、７０６、８２７、１６４９及び１７１８に関して薬物規制当局によって承認されたＧＩＴＲアゴニストバイオシミラーモノクローナル抗体である。一実施形態において、バイオシミラーモノクローナル抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤のアミノ酸配列に対して少なくとも９７％の配列同一性、例えば９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有し、参照医薬品又は参照生物学的製剤と比較して１つ以上の翻訳後改変を含む、アミノ酸配列を含むＧＩＴＲ抗体を含み、ここで、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、２１５５、６９８、７０６、８２７、１６４９及び１７１８である。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後改変は、グリコシル化、酸化、脱アミド化及び切断の１つ以上から選択される。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可された又は認可のために提出されたＧＩＴＲアゴニスト抗体であり、ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤の製剤と異なる製剤で提供され、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、２１５５、６９８、７０６、８２７、１６４９及び１７１８である。ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合のＥＭＡなどの薬物規制当局によって認可されていることができる。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、２１５５、６９８、７０６、８２７、１６４９及び１７１８である。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、２１５５、６９８、７０６、８２７、１６４９及び１７１８である。
【０４７１】
【表２６】
2021512962.tif 000045
【０４７２】
【表２７】
2021512962.tif 000046
【０４７３】
【表２８】
2021512962.tif 000047
【０４７４】
[001005]  好ましい実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、モノクローナル抗体１Ｄ７又はその断片、誘導体、変異体又はバイオシミラーである。１Ｄ７はAmgen, Inc.から入手できる。１Ｄ７の調製及び特性は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号に記載され、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。１Ｄ７のアミノ酸配列を表２３に示す。
【０４７５】
[001006]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、配列番号２５０で示される重鎖及び配列番号２５１で示される軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２５０及び配列番号２５１に示される配列を有する重鎖及び軽鎖又はその抗原結合断片、Ｆａｂ断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、変異体若しくはコンジュゲートを含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２５０及び配列番号２５１に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２５０及び配列番号２５１に示される配列とそれぞれ少なくとも９８％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２５０及び配列番号２５１に示される配列とそれぞれ少なくとも９７％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２５０及び配列番号２５１に示される配列とそれぞれ少なくとも９６％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２５０及び配列番号２５１に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一である重鎖及び軽鎖を含む。
【０４７６】
[001007]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、１Ｄ７の重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニスト重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号２５２に示される配列を含み、ＧＩＴＲアゴニスト軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号２５３に示される配列及びその保存的アミノ酸置換を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２５２及び配列番号２５３に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２５２及び配列番号２５３に示される配列とそれぞれ少なくとも９８％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２５２及び配列番号２５３に示される配列とそれぞれ少なくとも９７％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２５２及び配列番号２５３に示される配列とそれぞれ少なくとも９６％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２５２及び配列番号２５３に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。
【０４７７】
[001008]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２５４、配列番号２５５及び配列番号２５６に記載の配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにその保存的アミノ酸置換と、それぞれ配列番号２５７、配列番号２５８及び配列番号２５９に記載の配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにその保存的アミノ酸置換とを含む。
【０４７８】
[001009]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、１Ｄ７に関して薬物規制当局によって承認されたＧＩＴＲアゴニストバイオシミラーモノクローナル抗体である。一実施形態において、バイオシミラーモノクローナル抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤のアミノ酸配列に対して少なくとも９７％の配列同一性、例えば９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有し、参照医薬品又は参照生物学的製剤と比較して１つ以上の翻訳後改変を含む、アミノ酸配列を含むＧＩＴＲ抗体を含み、ここで、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、１Ｄ７である。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後改変は、グリコシル化、酸化、脱アミド化及び切断の１つ以上から選択される。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可された又は認可のために提出されたＧＩＴＲアゴニスト抗体であり、ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤の製剤と異なる製剤で提供され、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、１Ｄ７である。ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合のＥＭＡなどの薬物規制当局によって認可されていることができる。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、１Ｄ７である。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、１Ｄ７である。
【０４７９】
【表２９】
2021512962.tif 000048
【０４８０】
[001010]  好ましい実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、モノクローナル抗体３３Ｃ９又はその断片、誘導体、変異体又はバイオシミラーである。３３Ｃ９はAmgen, Inc.から入手できる。３３Ｃ９の調製及び特性は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号に記載され、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。３３Ｃ９のアミノ酸配列を表２４に示す。
【０４８１】
[001011]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、配列番号２６０で示される重鎖及び配列番号２６１で示される軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２６０及び配列番号２６１に示される配列を有する重鎖及び軽鎖又はその抗原結合断片、Ｆａｂ断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、変異体若しくはコンジュゲートを含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２６０及び配列番号２６１に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２６０及び配列番号２６１に示される配列とそれぞれ少なくとも９８％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２６０及び配列番号２６１に示される配列とそれぞれ少なくとも９７％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２６０及び配列番号２６１に示される配列とそれぞれ少なくとも９６％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２６０及び配列番号２６１に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一である重鎖及び軽鎖を含む。
【０４８２】
[001012]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、１Ｄ７の重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニスト重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号２６２に示される配列を含み、ＧＩＴＲアゴニスト軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号２６３に示される配列及びその保存的アミノ酸置換を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２６２及び配列番号２６３に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２６２及び配列番号２６３に示される配列とそれぞれ少なくとも９８％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２６２及び配列番号２６３に示される配列とそれぞれ少なくとも９７％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２６２及び配列番号２６３に示される配列とそれぞれ少なくとも９６％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２６２及び配列番号２６３に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。
【０４８３】
[001013]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２６４、配列番号２６５及び配列番号２６６に記載の配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにその保存的アミノ酸置換と、それぞれ配列番号２６７、配列番号２６８及び配列番号２６９に記載の配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにその保存的アミノ酸置換とを含む。
【０４８４】
[001014]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、３３Ｃ９に関して薬物規制当局によって承認されたＧＩＴＲアゴニストバイオシミラーモノクローナル抗体である。一実施形態において、バイオシミラーモノクローナル抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤のアミノ酸配列に対して少なくとも９７％の配列同一性、例えば９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有し、参照医薬品又は参照生物学的製剤と比較して１つ以上の翻訳後改変を含む、アミノ酸配列を含むＧＩＴＲ抗体を含み、ここで、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、３３Ｃ９である。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後改変は、グリコシル化、酸化、脱アミド化及び切断の１つ以上から選択される。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可された又は認可のために提出されたＧＩＴＲアゴニスト抗体であり、ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤の製剤と異なる製剤で提供され、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、３３Ｃ９である。ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合のＥＭＡなどの薬物規制当局によって認可されていることができる。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、３３Ｃ９である。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、３３Ｃ９である。
【０４８５】
【表３０】
2021512962.tif 000049
【０４８６】
[001015]  好ましい実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、モノクローナル抗体３３Ｆ６又はその断片、誘導体、変異体又はバイオシミラーである。３３Ｆ６はAmgen, Inc.から入手できる。３３Ｆ６の調製及び特性は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号に記載され、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。３３Ｆ６のアミノ酸配列を表２５に示す。
【０４８７】
[001016]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、配列番号２７０で示される重鎖及び配列番号２７１で示される軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２７０及び配列番号２７１に示される配列を有する重鎖及び軽鎖又はその抗原結合断片、Ｆａｂ断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、変異体若しくはコンジュゲートを含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２７０及び配列番号２７１に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２７０及び配列番号２７１に示される配列とそれぞれ少なくとも９８％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２７０及び配列番号２７１に示される配列とそれぞれ少なくとも９７％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２７０及び配列番号２７１に示される配列とそれぞれ少なくとも９６％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２７０及び配列番号２７１に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一である重鎖及び軽鎖を含む。
【０４８８】
[001017]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、３３Ｆ６の重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニスト重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号２７２に示される配列を含み、ＧＩＴＲアゴニスト軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号２７３に示される配列及びその保存的アミノ酸置換を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２７２及び配列番号２７３に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２７２及び配列番号２７３に示される配列とそれぞれ少なくとも９８％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２７２及び配列番号２７３に示される配列とそれぞれ少なくとも９７％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２７２及び配列番号２７３に示される配列とそれぞれ少なくとも９６％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２７２及び配列番号２７３に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。
【０４８９】
[001018]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２７４、配列番号２７５及び配列番号２７６に記載の配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにその保存的アミノ酸置換と、それぞれ配列番号２７７、配列番号２７８及び配列番号２７９に記載の配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにその保存的アミノ酸置換とを含む。
【０４９０】
[001019]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、３３Ｆ６に関して薬物規制当局によって承認されたＧＩＴＲアゴニストバイオシミラーモノクローナル抗体である。一実施形態において、バイオシミラーモノクローナル抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤のアミノ酸配列に対して少なくとも９７％の配列同一性、例えば９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有し、参照医薬品又は参照生物学的製剤と比較して１つ以上の翻訳後改変を含む、アミノ酸配列を含むＧＩＴＲ抗体を含み、ここで、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、３３Ｆ６である。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後改変は、グリコシル化、酸化、脱アミド化及び切断の１つ以上から選択される。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可された又は認可のために提出されたＧＩＴＲアゴニスト抗体であり、ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤の製剤と異なる製剤で提供され、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、３３Ｆ６である。ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合のＥＭＡなどの薬物規制当局によって認可されていることができる。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、３３Ｆ６である。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、３３Ｆ６である。
【０４９１】
【表３１】
2021512962.tif 000050
【０４９２】
[001020]  好ましい実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、モノクローナル抗体３４Ｇ４又はその断片、誘導体、変異体又はバイオシミラーである。３４Ｇ４はAmgen, Inc.から入手できる。３４Ｇ４の調製及び特性は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号に記載され、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。３４Ｇ４のアミノ酸配列を表２６に示す。
【０４９３】
[001021]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、配列番号２８０で示される重鎖及び配列番号２８１で示される軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２８０及び配列番号２８１に示される配列を有する重鎖及び軽鎖又はその抗原結合断片、Ｆａｂ断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、変異体若しくはコンジュゲートを含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２８０及び配列番号２８１に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２８０及び配列番号２８１に示される配列とそれぞれ少なくとも９８％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２８０及び配列番号２８１に示される配列とそれぞれ少なくとも９７％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２８０及び配列番号２８１に示される配列とそれぞれ少なくとも９６％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２８０及び配列番号２８１に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一である重鎖及び軽鎖を含む。
【０４９４】
[001022]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、３４Ｇ４の重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニスト重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号２８２に示される配列を含み、ＧＩＴＲアゴニスト軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号２８３に示される配列及びその保存的アミノ酸置換を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２８２及び配列番号２８３に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２８２及び配列番号２８３に示される配列とそれぞれ少なくとも９８％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２８２及び配列番号２８３に示される配列とそれぞれ少なくとも９７％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２８２及び配列番号２８３に示される配列とそれぞれ少なくとも９６％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２８２及び配列番号２８３に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。
【０４９５】
[001023]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２８４、配列番号２８５及び配列番号２８６に記載の配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにその保存的アミノ酸置換と、それぞれ配列番号２８７、配列番号２８８及び配列番号２８９に記載の配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにその保存的アミノ酸置換とを含む。
【０４９６】
[001024]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、３４Ｇ４に関して薬物規制当局によって承認されたＧＩＴＲアゴニストバイオシミラーモノクローナル抗体である。一実施形態において、バイオシミラーモノクローナル抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤のアミノ酸配列に対して少なくとも９７％の配列同一性、例えば９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有し、参照医薬品又は参照生物学的製剤と比較して１つ以上の翻訳後改変を含む、アミノ酸配列を含むＧＩＴＲ抗体を含み、ここで、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、３４Ｇ４である。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後改変は、グリコシル化、酸化、脱アミド化及び切断の１つ以上から選択される。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可された又は認可のために提出されたＧＩＴＲアゴニスト抗体であり、ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤の製剤と異なる製剤で提供され、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、３４Ｇ４である。ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合のＥＭＡなどの薬物規制当局によって認可されていることができる。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、３４Ｇ４である。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、３４Ｇ４である。
【０４９７】
【表３２】
2021512962.tif 000051
【０４９８】
[001025]  好ましい実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、モノクローナル抗体３５Ｂ１０又はその断片、誘導体、変異体又はバイオシミラーである。３５Ｂ１０はAmgen, Inc.から入手できる。３５Ｂ１０の調製及び特性は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号に記載され、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。３５Ｂ１０のアミノ酸配列を表２７に示す。
【０４９９】
[001026]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、配列番号２９０で示される重鎖及び配列番号２９１で示される軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２９０及び配列番号２９１に示される配列を有する重鎖及び軽鎖又はその抗原結合断片、Ｆａｂ断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、変異体若しくはコンジュゲートを含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２９０及び配列番号２９１に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２９０及び配列番号２９１に示される配列とそれぞれ少なくとも９８％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２９０及び配列番号２９１に示される配列とそれぞれ少なくとも９７％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２９０及び配列番号２９１に示される配列とそれぞれ少なくとも９６％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２９０及び配列番号２９１に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一である重鎖及び軽鎖を含む。
【０５００】
[001027]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、３５Ｂ１０の重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニスト重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号２９２に示される配列を含み、ＧＩＴＲアゴニスト軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号２９３に示される配列及びその保存的アミノ酸置換を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２９２及び配列番号２９３に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２９２及び配列番号２９３に示される配列とそれぞれ少なくとも９８％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２９２及び配列番号２９３に示される配列とそれぞれ少なくとも９７％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２９２及び配列番号２９３に示される配列とそれぞれ少なくとも９６％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２９２及び配列番号２９３に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。
【０５０１】
[001028]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２９４、配列番号２９５及び配列番号２９６に記載の配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにその保存的アミノ酸置換と、それぞれ配列番号２９７、配列番号２９８及び配列番号２９９に記載の配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにその保存的アミノ酸置換とを含む。
【０５０２】
[001029]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、３５Ｂ１０に関して薬物規制当局によって承認されたＧＩＴＲアゴニストバイオシミラーモノクローナル抗体である。一実施形態において、バイオシミラーモノクローナル抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤のアミノ酸配列に対して少なくとも９７％の配列同一性、例えば９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有し、参照医薬品又は参照生物学的製剤と比較して１つ以上の翻訳後改変を含む、アミノ酸配列を含むＧＩＴＲ抗体を含み、ここで、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、３５Ｂ１０である。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後改変は、グリコシル化、酸化、脱アミド化及び切断の１つ以上から選択される。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可された又は認可のために提出されたＧＩＴＲアゴニスト抗体であり、ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤の製剤と異なる製剤で提供され、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、３５Ｂ１０である。ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合のＥＭＡなどの薬物規制当局によって認可されていることができる。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、３５Ｂ１０である。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、３５Ｂ１０である。
【０５０３】
【表３３】
2021512962.tif 000052
【０５０４】
[001030]  好ましい実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、モノクローナル抗体４１Ｅ１１又はその断片、誘導体、変異体又はバイオシミラーである。４１Ｅ１１はAmgen, Inc.から入手できる。４１Ｅ１１の調製及び特性は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号に記載され、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。４１Ｅ１１のアミノ酸配列を表２８に示す。
【０５０５】
[001031]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、配列番号３００で示される重鎖及び配列番号３０１で示される軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３００及び配列番号３０１に示される配列を有する重鎖及び軽鎖又はその抗原結合断片、Ｆａｂ断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、変異体若しくはコンジュゲートを含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３００及び配列番号３０１に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３００及び配列番号３０１に示される配列とそれぞれ少なくとも９８％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３００及び配列番号３０１に示される配列とそれぞれ少なくとも９７％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３００及び配列番号３０１に示される配列とそれぞれ少なくとも９６％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３００及び配列番号３０１に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一である重鎖及び軽鎖を含む。
【０５０６】
[001032]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、４１Ｅ１１の重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニスト重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号３０２に示される配列を含み、ＧＩＴＲアゴニスト軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号３０３に示される配列及びその保存的アミノ酸置換を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３０２及び配列番号３０３に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３０２及び配列番号３０３に示される配列とそれぞれ少なくとも９８％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３０２及び配列番号３０３に示される配列とそれぞれ少なくとも９７％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３０２及び配列番号３０３に示される配列とそれぞれ少なくとも９６％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３０２及び配列番号３０３に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。
【０５０７】
[001033]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３０４、配列番号３０５及び配列番号３０６に記載の配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにその保存的アミノ酸置換と、それぞれ配列番号３０７、配列番号３０８及び配列番号３０９に記載の配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにその保存的アミノ酸置換とを含む。
【０５０８】
[001034]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、４１Ｅ１１に関して薬物規制当局によって承認されたＧＩＴＲアゴニストバイオシミラーモノクローナル抗体である。一実施形態において、バイオシミラーモノクローナル抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤のアミノ酸配列に対して少なくとも９７％の配列同一性、例えば９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有し、参照医薬品又は参照生物学的製剤と比較して１つ以上の翻訳後改変を含む、アミノ酸配列を含むＧＩＴＲ抗体を含み、ここで、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、４１Ｅ１１である。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後改変は、グリコシル化、酸化、脱アミド化及び切断の１つ以上から選択される。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可された又は認可のために提出されたＧＩＴＲアゴニスト抗体であり、ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤の製剤と異なる製剤で提供され、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、４１Ｅ１１である。ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合のＥＭＡなどの薬物規制当局によって認可されていることができる。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、４１Ｅ１１である。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、４１Ｅ１１である。
【０５０９】
【表３４】
2021512962.tif 000053
【０５１０】
[001035]  好ましい実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、モノクローナル抗体４１Ｇ５又はその断片、誘導体、変異体又はバイオシミラーである。４１Ｇ５はAmgen, Inc.から入手できる。４１Ｇ５の調製及び特性は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号に記載され、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。４１Ｇ５のアミノ酸配列を表２９に示す。
【０５１１】
[001036]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、配列番号３１０で示される重鎖及び配列番号３１１で示される軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３１０及び配列番号３１１に示される配列を有する重鎖及び軽鎖又はその抗原結合断片、Ｆａｂ断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、変異体若しくはコンジュゲートを含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３１０及び配列番号３１１に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３１０及び配列番号３１１に示される配列とそれぞれ少なくとも９８％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３１０及び配列番号３１１に示される配列とそれぞれ少なくとも９７％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３１０及び配列番号３１１に示される配列とそれぞれ少なくとも９６％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３１０及び配列番号３１１に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一である重鎖及び軽鎖を含む。
【０５１２】
[001037]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、４１Ｇ５の重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニスト重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号３１２に示される配列を含み、ＧＩＴＲアゴニスト軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号３１３に示される配列及びその保存的アミノ酸置換を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３１２及び配列番号３１３に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３１２及び配列番号３１３に示される配列とそれぞれ少なくとも９８％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３１２及び配列番号３１３に示される配列とそれぞれ少なくとも９７％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３１２及び配列番号３１３に示される配列とそれぞれ少なくとも９６％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３１２及び配列番号３１３に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。
【０５１３】
[001038]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３１４、配列番号３１５及び配列番号３１６に記載の配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにその保存的アミノ酸置換と、それぞれ配列番号３１７、配列番号３１８及び配列番号３１９に記載の配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにその保存的アミノ酸置換とを含む。
【０５１４】
[001039]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、４１Ｇ５に関して薬物規制当局によって承認されたＧＩＴＲアゴニストバイオシミラーモノクローナル抗体である。一実施形態において、バイオシミラーモノクローナル抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤のアミノ酸配列に対して少なくとも９７％の配列同一性、例えば９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有し、参照医薬品又は参照生物学的製剤と比較して１つ以上の翻訳後改変を含む、アミノ酸配列を含むＧＩＴＲ抗体を含み、ここで、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、４１Ｇ５である。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後改変は、グリコシル化、酸化、脱アミド化及び切断の１つ以上から選択される。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可された又は認可のために提出されたＧＩＴＲアゴニスト抗体であり、ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤の製剤と異なる製剤で提供され、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、４１Ｇ５である。ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合のＥＭＡなどの薬物規制当局によって認可されていることができる。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、４１Ｇ５である。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、４１Ｇ５である。
【０５１５】
【表３５】
2021512962.tif 000054
【０５１６】
[001040]  好ましい実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、モノクローナル抗体４２Ａ１１又はその断片、誘導体、変異体又はバイオシミラーである。４２Ａ１１はAmgen, Inc.から入手できる。４２Ａ１１の調製及び特性は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号に記載され、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。４２Ａ１１のアミノ酸配列を表３０に示す。
【０５１７】
[001041]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、配列番号３２０で示される重鎖及び配列番号３２１で示される軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３２０及び配列番号３２１に示される配列を有する重鎖及び軽鎖又はその抗原結合断片、Ｆａｂ断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、変異体若しくはコンジュゲートを含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３２０及び配列番号３２１に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３２０及び配列番号３２１に示される配列とそれぞれ少なくとも９８％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３２０及び配列番号３２１に示される配列とそれぞれ少なくとも９７％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３２０及び配列番号３２１に示される配列とそれぞれ少なくとも９６％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３２０及び配列番号３２１に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一である重鎖及び軽鎖を含む。
【０５１８】
[001042]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、４２Ａ１１の重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニスト重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号３２２に示される配列を含み、ＧＩＴＲアゴニスト軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号３２３に示される配列及びその保存的アミノ酸置換を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３２２及び配列番号３２３に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３２２及び配列番号３２３に示される配列とそれぞれ少なくとも９８％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３２２及び配列番号３２３に示される配列とそれぞれ少なくとも９７％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３２２及び配列番号３２３に示される配列とそれぞれ少なくとも９６％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３２２及び配列番号３２３に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。
【０５１９】
[001043]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３２４、配列番号３２５及び配列番号３２６に記載の配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにその保存的アミノ酸置換と、それぞれ配列番号３２７、配列番号３２８及び配列番号３２９に記載の配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにその保存的アミノ酸置換とを含む。
【０５２０】
[001044]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、４２Ａ１１に関して薬物規制当局によって承認されたＧＩＴＲアゴニストバイオシミラーモノクローナル抗体である。一実施形態において、バイオシミラーモノクローナル抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤のアミノ酸配列に対して少なくとも９７％の配列同一性、例えば９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有し、参照医薬品又は参照生物学的製剤と比較して１つ以上の翻訳後改変を含む、アミノ酸配列を含むＧＩＴＲ抗体を含み、ここで、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、４２Ａ１１である。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後改変は、グリコシル化、酸化、脱アミド化及び切断の１つ以上から選択される。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可された又は認可のために提出されたＧＩＴＲアゴニスト抗体であり、ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤の製剤と異なる製剤で提供され、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、４２Ａ１１である。ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合のＥＭＡなどの薬物規制当局によって認可されていることができる。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、４２Ａ１１である。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、４２Ａ１１である。
【０５２１】
【表３６】
2021512962.tif 000055
【０５２２】
[001045]  好ましい実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、モノクローナル抗体４４Ｃ１又はその断片、誘導体、変異体又はバイオシミラーである。４４Ｃ１はAmgen, Inc.から入手できる。４４Ｃ１の調製及び特性は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号に記載され、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。４４Ｃ１のアミノ酸配列を表３１に示す。
【０５２３】
[001046]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、配列番号３３０で示される重鎖及び配列番号３３１で示される軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３３０及び配列番号３３１に示される配列を有する重鎖及び軽鎖又はその抗原結合断片、Ｆａｂ断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、変異体若しくはコンジュゲートを含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３３０及び配列番号３３１に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３３０及び配列番号３３１に示される配列とそれぞれ少なくとも９８％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３３０及び配列番号３３１に示される配列とそれぞれ少なくとも９７％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３３０及び配列番号３３１に示される配列とそれぞれ少なくとも９６％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３３０及び配列番号３３１に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一である重鎖及び軽鎖を含む。
【０５２４】
[001047]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、４４Ｃ１の重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニスト重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号３３２に示される配列を含み、ＧＩＴＲアゴニスト軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号３３３に示される配列及びその保存的アミノ酸置換を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３３２及び配列番号３３３に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３３２及び配列番号３３３に示される配列とそれぞれ少なくとも９８％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３３２及び配列番号３３３に示される配列とそれぞれ少なくとも９７％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３３２及び配列番号３３３に示される配列とそれぞれ少なくとも９６％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３３２及び配列番号３３３に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。
【０５２５】
[001048]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３３４、配列番号３３５及び配列番号３３６に記載の配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにその保存的アミノ酸置換と、それぞれ配列番号３３７、配列番号３３８及び配列番号３３９に記載の配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにその保存的アミノ酸置換とを含む。
【０５２６】
[001049]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、４４Ｃ１に関して薬物規制当局によって承認されたＧＩＴＲアゴニストバイオシミラーモノクローナル抗体である。一実施形態において、バイオシミラーモノクローナル抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤のアミノ酸配列に対して少なくとも９７％の配列同一性、例えば９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有し、参照医薬品又は参照生物学的製剤と比較して１つ以上の翻訳後改変を含む、アミノ酸配列を含むＧＩＴＲ抗体を含み、ここで、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、４４Ｃ１である。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後改変は、グリコシル化、酸化、脱アミド化及び切断の１つ以上から選択される。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可された又は認可のために提出されたＧＩＴＲアゴニスト抗体であり、ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤の製剤と異なる製剤で提供され、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、４４Ｃ１である。ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合のＥＭＡなどの薬物規制当局によって認可されていることができる。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、４４Ｃ１である。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、４４Ｃ１である。
【０５２７】
【表３７】
2021512962.tif 000056
【０５２８】
[001050]  好ましい実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、モノクローナル抗体４５Ａ８又はその断片、誘導体、変異体又はバイオシミラーである。４５Ａ８はAmgen, Inc.から入手できる。４５Ａ８の調製及び特性は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号に記載され、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。４５Ａ８のアミノ酸配列を表３２に示す。
【０５２９】
[001051]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、配列番号３４０で示される重鎖及び配列番号３４１で示される軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３４０及び配列番号３４１に示される配列を有する重鎖及び軽鎖又はその抗原結合断片、Ｆａｂ断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、変異体若しくはコンジュゲートを含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３４０及び配列番号３４１に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３４０及び配列番号３４１に示される配列とそれぞれ少なくとも９８％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３４０及び配列番号３４１に示される配列とそれぞれ少なくとも９７％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３４０及び配列番号３４１に示される配列とそれぞれ少なくとも９６％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３４０及び配列番号３４１に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一である重鎖及び軽鎖を含む。
【０５３０】
[001052]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、４５Ａ８の重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニスト重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号３４２に示される配列を含み、ＧＩＴＲアゴニスト軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号３４３に示される配列及びその保存的アミノ酸置換を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３４２及び配列番号３４３に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３４２及び配列番号３４３に示される配列とそれぞれ少なくとも９８％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３４２及び配列番号３４３に示される配列とそれぞれ少なくとも９７％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３４２及び配列番号３４３に示される配列とそれぞれ少なくとも９６％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３４２及び配列番号３４３に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。
【０５３１】
[001053]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３４４、配列番号３４５及び配列番号３４６に記載の配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにその保存的アミノ酸置換と、それぞれ配列番号３４７、配列番号３４８及び配列番号３４９に記載の配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにその保存的アミノ酸置換とを含む。
【０５３２】
[001054]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、４５Ａ８に関して薬物規制当局によって承認されたＧＩＴＲアゴニストバイオシミラーモノクローナル抗体である。一実施形態において、バイオシミラーモノクローナル抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤のアミノ酸配列に対して少なくとも９７％の配列同一性、例えば９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有し、参照医薬品又は参照生物学的製剤と比較して１つ以上の翻訳後改変を含む、アミノ酸配列を含むＧＩＴＲ抗体を含み、ここで、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、４５Ａ８である。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後改変は、グリコシル化、酸化、脱アミド化及び切断の１つ以上から選択される。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可された又は認可のために提出されたＧＩＴＲアゴニスト抗体であり、ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤の製剤と異なる製剤で提供され、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、４５Ａ８である。ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合のＥＭＡなどの薬物規制当局によって認可されていることができる。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、４５Ａ８である。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、４５Ａ８である。
【０５３３】
【表３８】
2021512962.tif 000057
【０５３４】
[001055]  好ましい実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、モノクローナル抗体４６Ｅ１１又はその断片、誘導体、変異体又はバイオシミラーである。４６Ｅ１１はAmgen, Inc.から入手できる。４６Ｅ１１の調製及び特性は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号に記載され、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。４６Ｅ１１のアミノ酸配列を表３３に示す。
【０５３５】
[001056]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、配列番号３５０で示される重鎖及び配列番号３５１で示される軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３５０及び配列番号３５１に示される配列を有する重鎖及び軽鎖又はその抗原結合断片、Ｆａｂ断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、変異体若しくはコンジュゲートを含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３５０及び配列番号３５１に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３５０及び配列番号３５１に示される配列とそれぞれ少なくとも９８％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３５０及び配列番号３５１に示される配列とそれぞれ少なくとも９７％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３５０及び配列番号３５１に示される配列とそれぞれ少なくとも９６％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３５０及び配列番号３５１に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一である重鎖及び軽鎖を含む。
【０５３６】
[001057]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、４６Ｅ１１の重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニスト重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号３５２に示される配列を含み、ＧＩＴＲアゴニスト軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号３５３に示される配列及びその保存的アミノ酸置換を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３５２及び配列番号３５３に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３５２及び配列番号３５３に示される配列とそれぞれ少なくとも９８％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３５２及び配列番号３５３に示される配列とそれぞれ少なくとも９７％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３５２及び配列番号３５３に示される配列とそれぞれ少なくとも９６％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３５２及び配列番号３５３に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。
【０５３７】
[001058]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３５４、配列番号３５５及び配列番号３５６に記載の配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにその保存的アミノ酸置換と、それぞれ配列番号３５７、配列番号３５８及び配列番号３５９に記載の配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにその保存的アミノ酸置換とを含む。
【０５３８】
[001059]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、４６Ｅ１１に関して薬物規制当局によって承認されたＧＩＴＲアゴニストバイオシミラーモノクローナル抗体である。一実施形態において、バイオシミラーモノクローナル抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤のアミノ酸配列に対して少なくとも９７％の配列同一性、例えば９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有し、参照医薬品又は参照生物学的製剤と比較して１つ以上の翻訳後改変を含む、アミノ酸配列を含むＧＩＴＲ抗体を含み、ここで、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、４６Ｅ１１である。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後改変は、グリコシル化、酸化、脱アミド化及び切断の１つ以上から選択される。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可された又は認可のために提出されたＧＩＴＲアゴニスト抗体であり、ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤の製剤と異なる製剤で提供され、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、４６Ｅ１１である。ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合のＥＭＡなどの薬物規制当局によって認可されていることができる。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、４６Ｅ１１である。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、４６Ｅ１１である。
【０５３９】
【表３９】
2021512962.tif 000058
【０５４０】
[001060]  好ましい実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、モノクローナル抗体４８Ｈ１２又はその断片、誘導体、変異体又はバイオシミラーである。４８Ｈ１２はAmgen, Inc.から入手できる。４８Ｈ１２の調製及び特性は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号に記載され、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。４８Ｈ１２のアミノ酸配列を表３４に示す。
【０５４１】
[001061]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、配列番号３６０で示される重鎖及び配列番号３６１で示される軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３６０及び配列番号３６１に示される配列を有する重鎖及び軽鎖又はその抗原結合断片、Ｆａｂ断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、変異体若しくはコンジュゲートを含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３６０及び配列番号３６１に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３６０及び配列番号３６１に示される配列とそれぞれ少なくとも９８％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３６０及び配列番号３６１に示される配列とそれぞれ少なくとも９７％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３６０及び配列番号３６１に示される配列とそれぞれ少なくとも９６％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３６０及び配列番号３６１に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一である重鎖及び軽鎖を含む。
【０５４２】
[001062]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、４８Ｈ１２の重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニスト重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号３６２に示される配列を含み、ＧＩＴＲアゴニスト軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号３６３に示される配列及びその保存的アミノ酸置換を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３６２及び配列番号３６３に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３６２及び配列番号３６３に示される配列とそれぞれ少なくとも９８％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３６２及び配列番号３６３に示される配列とそれぞれ少なくとも９７％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３６２及び配列番号３６３に示される配列とそれぞれ少なくとも９６％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３６２及び配列番号３６３に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。
【０５４３】
[001063]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３６４、配列番号３６５及び配列番号３６６に記載の配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにその保存的アミノ酸置換と、それぞれ配列番号３６７、配列番号３６８及び配列番号３６９に記載の配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにその保存的アミノ酸置換とを含む。
【０５４４】
[001064]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、４８Ｈ１２に関して薬物規制当局によって承認されたＧＩＴＲアゴニストバイオシミラーモノクローナル抗体である。一実施形態において、バイオシミラーモノクローナル抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤のアミノ酸配列に対して少なくとも９７％の配列同一性、例えば９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有し、参照医薬品又は参照生物学的製剤と比較して１つ以上の翻訳後改変を含む、アミノ酸配列を含むＧＩＴＲ抗体を含み、ここで、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、４８Ｈ１２である。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後改変は、グリコシル化、酸化、脱アミド化及び切断の１つ以上から選択される。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可された又は認可のために提出されたＧＩＴＲアゴニスト抗体であり、ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤の製剤と異なる製剤で提供され、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、４８Ｈ１２である。ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合のＥＭＡなどの薬物規制当局によって認可されていることができる。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、４８Ｈ１２である。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、４８Ｈ１２である。
【０５４５】
【表４０】
2021512962.tif 000059
【０５４６】
[001065]  好ましい実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、モノクローナル抗体４８Ｈ７又はその断片、誘導体、変異体又はバイオシミラーである。４８Ｈ７はAmgen, Inc.から入手できる。４８Ｈ７の調製及び特性は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号に記載され、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。４８Ｈ７のアミノ酸配列を表３５に示す。
【０５４７】
[001066]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、配列番号３７０で示される重鎖及び配列番号３７１で示される軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３７０及び配列番号３７１に示される配列を有する重鎖及び軽鎖又はその抗原結合断片、Ｆａｂ断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、変異体若しくはコンジュゲートを含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３７０及び配列番号３７１に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３７０及び配列番号３７１に示される配列とそれぞれ少なくとも９８％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３７０及び配列番号３７１に示される配列とそれぞれ少なくとも９７％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３７０及び配列番号３７１に示される配列とそれぞれ少なくとも９６％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３７０及び配列番号３７１に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一である重鎖及び軽鎖を含む。
【０５４８】
[001067]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、４８Ｈ７の重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニスト重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号３７２に示される配列を含み、ＧＩＴＲアゴニスト軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号３７３に示される配列及びその保存的アミノ酸置換を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３７２及び配列番号３７３に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３７２及び配列番号３７３に示される配列とそれぞれ少なくとも９８％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３７２及び配列番号３７３に示される配列とそれぞれ少なくとも９７％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３７２及び配列番号３７３に示される配列とそれぞれ少なくとも９６％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３７２及び配列番号３７３に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。
【０５４９】
[001068]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３７４、配列番号３７５及び配列番号３７６に記載の配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにその保存的アミノ酸置換と、それぞれ配列番号３７７、配列番号３７８及び配列番号３７９に記載の配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにその保存的アミノ酸置換とを含む。
【０５５０】
[001069]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、４８Ｈ７に関して薬物規制当局によって承認されたＧＩＴＲアゴニストバイオシミラーモノクローナル抗体である。一実施形態において、バイオシミラーモノクローナル抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤のアミノ酸配列に対して少なくとも９７％の配列同一性、例えば９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有し、参照医薬品又は参照生物学的製剤と比較して１つ以上の翻訳後改変を含む、アミノ酸配列を含むＧＩＴＲ抗体を含み、ここで、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、４８Ｈ７である。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後改変は、グリコシル化、酸化、脱アミド化及び切断の１つ以上から選択される。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可された又は認可のために提出されたＧＩＴＲアゴニスト抗体であり、ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤の製剤と異なる製剤で提供され、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、４８Ｈ７である。ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合のＥＭＡなどの薬物規制当局によって認可されていることができる。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、４８Ｈ７である。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、４８Ｈ７である。
【０５５１】
【表４１】
2021512962.tif 000060
【０５５２】
[001070]  好ましい実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、モノクローナル抗体４９Ｄ９又はその断片、誘導体、変異体又はバイオシミラーである。４９Ｄ９はAmgen, Inc.から入手できる。４９Ｄ９の調製及び特性は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号に記載され、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。４９Ｄ９のアミノ酸配列を表３６に示す。
【０５５３】
[001071]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、配列番号３８０で示される重鎖及び配列番号３８１で示される軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３８０及び配列番号３８１に示される配列を有する重鎖及び軽鎖又はその抗原結合断片、Ｆａｂ断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、変異体若しくはコンジュゲートを含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３８０及び配列番号３８１に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３８０及び配列番号３８１に示される配列とそれぞれ少なくとも９８％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３８０及び配列番号３８１に示される配列とそれぞれ少なくとも９７％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３８０及び配列番号３８１に示される配列とそれぞれ少なくとも９６％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３８０及び配列番号３８１に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一である重鎖及び軽鎖を含む。
【０５５４】
[001072]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、４９Ｄ９の重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニスト重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号３８２に示される配列を含み、ＧＩＴＲアゴニスト軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号３８３に示される配列及びその保存的アミノ酸置換を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３８２及び配列番号３８３に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３８２及び配列番号３８３に示される配列とそれぞれ少なくとも９８％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３８２及び配列番号３８３に示される配列とそれぞれ少なくとも９７％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３８２及び配列番号３８３に示される配列とそれぞれ少なくとも９６％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３８２及び配列番号３８３に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。
【０５５５】
[001073]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３８４、配列番号３８５及び配列番号３８６に記載の配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにその保存的アミノ酸置換と、それぞれ配列番号３８７、配列番号３８８及び配列番号３８９に記載の配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにその保存的アミノ酸置換とを含む。
【０５５６】
[001074]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、４９Ｄ９に関して薬物規制当局によって承認されたＧＩＴＲアゴニストバイオシミラーモノクローナル抗体である。一実施形態において、バイオシミラーモノクローナル抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤のアミノ酸配列に対して少なくとも９７％の配列同一性、例えば９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有し、参照医薬品又は参照生物学的製剤と比較して１つ以上の翻訳後改変を含む、アミノ酸配列を含むＧＩＴＲ抗体を含み、ここで、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、４９Ｄ９である。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後改変は、グリコシル化、酸化、脱アミド化及び切断の１つ以上から選択される。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可された又は認可のために提出されたＧＩＴＲアゴニスト抗体であり、ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤の製剤と異なる製剤で提供され、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、４９Ｄ９である。ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合のＥＭＡなどの薬物規制当局によって認可されていることができる。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、４９Ｄ９である。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、４９Ｄ９である。
【０５５７】
【表４２】
2021512962.tif 000061
【０５５８】
[001075]  好ましい実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、モノクローナル抗体４９Ｅ２又はその断片、誘導体、変異体又はバイオシミラーである。４９Ｅ２はAmgen, Inc.から入手できる。４９Ｅ２の調製及び特性は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号に記載され、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。４９Ｅ２のアミノ酸配列を表３７に示す。
【０５５９】
[001076]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、配列番号３９０で示される重鎖及び配列番号３９１で示される軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３９０及び配列番号３９１に示される配列を有する重鎖及び軽鎖又はその抗原結合断片、Ｆａｂ断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、変異体若しくはコンジュゲートを含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３９０及び配列番号３９１に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３９０及び配列番号３９１に示される配列とそれぞれ少なくとも９８％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３９０及び配列番号３９１に示される配列とそれぞれ少なくとも９７％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３９０及び配列番号３９１に示される配列とそれぞれ少なくとも９６％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３９０及び配列番号３９１に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一である重鎖及び軽鎖を含む。
【０５６０】
[001077]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、４９Ｅ２の重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニスト重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号３９２に示される配列を含み、ＧＩＴＲアゴニスト軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号３９３に示される配列及びその保存的アミノ酸置換を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３９２及び配列番号３９３に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３９２及び配列番号３９３に示される配列とそれぞれ少なくとも９８％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３９２及び配列番号３９３に示される配列とそれぞれ少なくとも９７％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３９２及び配列番号３９３に示される配列とそれぞれ少なくとも９６％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３９２及び配列番号３９３に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。
【０５６１】
[001078]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３９４、配列番号３９５及び配列番号３９６に記載の配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにその保存的アミノ酸置換と、それぞれ配列番号３９７、配列番号３９８及び配列番号３９９に記載の配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにその保存的アミノ酸置換とを含む。
【０５６２】
[001079]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、４９Ｅ２に関して薬物規制当局によって承認されたＧＩＴＲアゴニストバイオシミラーモノクローナル抗体である。一実施形態において、バイオシミラーモノクローナル抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤のアミノ酸配列に対して少なくとも９７％の配列同一性、例えば９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有し、参照医薬品又は参照生物学的製剤と比較して１つ以上の翻訳後改変を含む、アミノ酸配列を含むＧＩＴＲ抗体を含み、ここで、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、４９Ｅ２である。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後改変は、グリコシル化、酸化、脱アミド化及び切断の１つ以上から選択される。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可された又は認可のために提出されたＧＩＴＲアゴニスト抗体であり、ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤の製剤と異なる製剤で提供され、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、４９Ｅ２である。ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合のＥＭＡなどの薬物規制当局によって認可されていることができる。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、４９Ｅ２である。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、４９Ｅ２である。
【０５６３】
【表４３】
2021512962.tif 000062
【０５６４】
[001080]  好ましい実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、モノクローナル抗体４８Ａ９又はその断片、誘導体、変異体又はバイオシミラーである。４８Ａ９はAmgen, Inc.から入手できる。４８Ａ９の調製及び特性は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号に記載され、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。４８Ａ９のアミノ酸配列を表３８に示す。
【０５６５】
[001081]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、配列番号４００で示される重鎖及び配列番号４０１で示される軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４００及び配列番号４０１に示される配列を有する重鎖及び軽鎖又はその抗原結合断片、Ｆａｂ断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、変異体若しくはコンジュゲートを含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４００及び配列番号４０１に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４００及び配列番号４０１に示される配列とそれぞれ少なくとも９８％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４００及び配列番号４０１に示される配列とそれぞれ少なくとも９７％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４００及び配列番号４０１に示される配列とそれぞれ少なくとも９６％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４００及び配列番号４０１に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一である重鎖及び軽鎖を含む。
【０５６６】
[001082]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、４８Ａ９の重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニスト重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号４０２に示される配列を含み、ＧＩＴＲアゴニスト軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号４０３に示される配列及びその保存的アミノ酸置換を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４０２及び配列番号４０３に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４０２及び配列番号４０３に示される配列とそれぞれ少なくとも９８％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４０２及び配列番号４０３に示される配列とそれぞれ少なくとも９７％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４０２及び配列番号４０３に示される配列とそれぞれ少なくとも９６％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４０２及び配列番号４０３に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。
【０５６７】
[001083]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４０４、配列番号４０５及び配列番号４０６に記載の配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにその保存的アミノ酸置換と、それぞれ配列番号４０７、配列番号４０８及び配列番号４０９に記載の配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにその保存的アミノ酸置換とを含む。
【０５６８】
[001084]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、４８Ａ９に関して薬物規制当局によって承認されたＧＩＴＲアゴニストバイオシミラーモノクローナル抗体である。一実施形態において、バイオシミラーモノクローナル抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤のアミノ酸配列に対して少なくとも９７％の配列同一性、例えば９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有し、参照医薬品又は参照生物学的製剤と比較して１つ以上の翻訳後改変を含む、アミノ酸配列を含むＧＩＴＲ抗体を含み、ここで、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、４８Ａ９である。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後改変は、グリコシル化、酸化、脱アミド化及び切断の１つ以上から選択される。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可された又は認可のために提出されたＧＩＴＲアゴニスト抗体であり、ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤の製剤と異なる製剤で提供され、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、４８Ａ９である。ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合のＥＭＡなどの薬物規制当局によって認可されていることができる。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、４８Ａ９である。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、４８Ａ９である。
【０５６９】
【表４４】
2021512962.tif 000063
【０５７０】
[001085]  好ましい実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、モノクローナル抗体５Ｈ７又はその断片、誘導体、変異体又はバイオシミラーである。５Ｈ７はAmgen, Inc.から入手できる。５Ｈ７の調製及び特性は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号に記載され、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。５Ｈ７のアミノ酸配列を表３９に示す。
【０５７１】
[001086]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、配列番号４１０で示される重鎖及び配列番号４１１で示される軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４１０及び配列番号４１１に示される配列を有する重鎖及び軽鎖又はその抗原結合断片、Ｆａｂ断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、変異体若しくはコンジュゲートを含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４１０及び配列番号４１１に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４１０及び配列番号４１１に示される配列とそれぞれ少なくとも９８％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４１０及び配列番号４１１に示される配列とそれぞれ少なくとも９７％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４１０及び配列番号４１１に示される配列とそれぞれ少なくとも９６％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４１０及び配列番号４１１に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一である重鎖及び軽鎖を含む。
【０５７２】
[001087]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、５Ｈ７の重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニスト重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号４１２に示される配列を含み、ＧＩＴＲアゴニスト軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号４１３に示される配列及びその保存的アミノ酸置換を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４１２及び配列番号４１３に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４１２及び配列番号４１３に示される配列とそれぞれ少なくとも９８％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４１２及び配列番号４１３に示される配列とそれぞれ少なくとも９７％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４１２及び配列番号４１３に示される配列とそれぞれ少なくとも９６％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４１２及び配列番号４１３に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。
【０５７３】
[001088]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４１４、配列番号４１５及び配列番号４１６に記載の配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにその保存的アミノ酸置換と、それぞれ配列番号４１７、配列番号４１８及び配列番号４１９に記載の配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにその保存的アミノ酸置換とを含む。
【０５７４】
[001089]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、５Ｈ７に関して薬物規制当局によって承認されたＧＩＴＲアゴニストバイオシミラーモノクローナル抗体である。一実施形態において、バイオシミラーモノクローナル抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤のアミノ酸配列に対して少なくとも９７％の配列同一性、例えば９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有し、参照医薬品又は参照生物学的製剤と比較して１つ以上の翻訳後改変を含む、アミノ酸配列を含むＧＩＴＲ抗体を含み、ここで、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、５Ｈ７である。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後改変は、グリコシル化、酸化、脱アミド化及び切断の１つ以上から選択される。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可された又は認可のために提出されたＧＩＴＲアゴニスト抗体であり、ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤の製剤と異なる製剤で提供され、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、５Ｈ７である。ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合のＥＭＡなどの薬物規制当局によって認可されていることができる。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、５Ｈ７である。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、５Ｈ７である。
【０５７５】
【表４５】
2021512962.tif 000064
【０５７６】
[001090]  好ましい実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、モノクローナル抗体７Ａ１０又はその断片、誘導体、変異体又はバイオシミラーである。７Ａ１０はAmgen, Inc.から入手できる。７Ａ１０の調製及び特性は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号に記載され、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。７Ａ１０のアミノ酸配列を表４０に示す。
【０５７７】
[001091]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、配列番号４２０で示される重鎖及び配列番号４２１で示される軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４２０及び配列番号４２１に示される配列を有する重鎖及び軽鎖又はその抗原結合断片、Ｆａｂ断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、変異体若しくはコンジュゲートを含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４２０及び配列番号４２１に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４２０及び配列番号４２１に示される配列とそれぞれ少なくとも９８％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４２０及び配列番号４２１に示される配列とそれぞれ少なくとも９７％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４２０及び配列番号４２１に示される配列とそれぞれ少なくとも９６％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４２０及び配列番号４２１に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一である重鎖及び軽鎖を含む。
【０５７８】
[001092]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、７Ａ１０の重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニスト重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号４２２に示される配列を含み、ＧＩＴＲアゴニスト軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号４２３に示される配列及びその保存的アミノ酸置換を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４２２及び配列番号４２３に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４２２及び配列番号４２３に示される配列とそれぞれ少なくとも９８％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４２２及び配列番号４２３に示される配列とそれぞれ少なくとも９７％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４２２及び配列番号４２３に示される配列とそれぞれ少なくとも９６％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４２２及び配列番号４２３に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。
【０５７９】
[001093]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４２４、配列番号４２５及び配列番号４２６に記載の配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにその保存的アミノ酸置換と、それぞれ配列番号４２７、配列番号４２８及び配列番号４２９に記載の配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにその保存的アミノ酸置換とを含む。
【０５８０】
[001094]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、７Ａ１０に関して薬物規制当局によって承認されたＧＩＴＲアゴニストバイオシミラーモノクローナル抗体である。一実施形態において、バイオシミラーモノクローナル抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤のアミノ酸配列に対して少なくとも９７％の配列同一性、例えば９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有し、参照医薬品又は参照生物学的製剤と比較して１つ以上の翻訳後改変を含む、アミノ酸配列を含むＧＩＴＲ抗体を含み、ここで、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、７Ａ１０である。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後改変は、グリコシル化、酸化、脱アミド化及び切断の１つ以上から選択される。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可された又は認可のために提出されたＧＩＴＲアゴニスト抗体であり、ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤の製剤と異なる製剤で提供され、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、７Ａ１０である。ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合のＥＭＡなどの薬物規制当局によって認可されていることができる。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、７Ａ１０である。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、７Ａ１０である。
【０５８１】
【表４６】
2021512962.tif 000065
【０５８２】
[001095]  好ましい実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、モノクローナル抗体９Ｈ６又はその断片、誘導体、変異体又はバイオシミラーである。９Ｈ６はAmgen, Inc.から入手できる。９Ｈ６の調製及び特性は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号に記載され、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。９Ｈ６のアミノ酸配列を表４１に示す。
【０５８３】
[001096]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、配列番号４３０で示される重鎖及び配列番号４３１で示される軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４３０及び配列番号４３１に示される配列を有する重鎖及び軽鎖又はその抗原結合断片、Ｆａｂ断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、変異体若しくはコンジュゲートを含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４３０及び配列番号４３１に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４３０及び配列番号４３１に示される配列とそれぞれ少なくとも９８％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４３０及び配列番号４３１に示される配列とそれぞれ少なくとも９７％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４３０及び配列番号４３１に示される配列とそれぞれ少なくとも９６％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４３０及び配列番号４３１に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一である重鎖及び軽鎖を含む。
【０５８４】
[001097]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、９Ｈ６の重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニスト重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号４３２に示される配列を含み、ＧＩＴＲアゴニスト軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号４３３に示される配列及びその保存的アミノ酸置換を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４３２及び配列番号４３３に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４３２及び配列番号４３３に示される配列とそれぞれ少なくとも９８％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４３２及び配列番号４３３に示される配列とそれぞれ少なくとも９７％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４３２及び配列番号４３３に示される配列とそれぞれ少なくとも９６％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４３２及び配列番号４３３に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。
【０５８５】
[001098]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４３４、配列番号４３５及び配列番号４３６に記載の配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにその保存的アミノ酸置換と、それぞれ配列番号４３７、配列番号４３８及び配列番号４３９に記載の配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにその保存的アミノ酸置換とを含む。
【０５８６】
[001099]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、９Ｈ６に関して薬物規制当局によって承認されたＧＩＴＲアゴニストバイオシミラーモノクローナル抗体である。一実施形態において、バイオシミラーモノクローナル抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤のアミノ酸配列に対して少なくとも９７％の配列同一性、例えば９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有し、参照医薬品又は参照生物学的製剤と比較して１つ以上の翻訳後改変を含む、アミノ酸配列を含むＧＩＴＲ抗体を含み、ここで、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、９Ｈ６である。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後改変は、グリコシル化、酸化、脱アミド化及び切断の１つ以上から選択される。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可された又は認可のために提出されたＧＩＴＲアゴニスト抗体であり、ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤の製剤と異なる製剤で提供され、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、９Ｈ６である。ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合のＥＭＡなどの薬物規制当局によって認可されていることができる。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、９Ｈ６である。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、９Ｈ６である。
【０５８７】
【表４７】
2021512962.tif 000066
【０５８８】
[001100]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、国際公開第２０１３／０３９９５４  Ａ１号及び同第２０１１／０２８６８３  Ａ１号；米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号、同第２０１２／０１８９６３９  Ａ１号及び同第２０１４／０３４８８４１  Ａ１号；並びに米国特許第７，８１２，１３５号、同第８，３８８，９６７号；及び同第９，０２８，８２３号に記載されるＧＩＴＲアゴニストであり、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４号及び国際公開第２０１５／０３１６６７  Ａ１号（Amgen, Inc.）に記載される構造及び調製によるアゴニスト性抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体であり、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、１Ｄ７、３３Ｃ９、３３Ｆ６、３４Ｇ４、３５Ｂ１０、４１Ｅ１１、４１Ｇ５、４２Ａ１１、４４Ｃ１、４５Ａ８、４６Ｅ１１、４８Ｈ１２、４８Ｈ７、４９Ｄ９、４９Ｅ２、４８Ａ９、５Ｈ７、７Ａ１０及び９Ｈ６からなる群から選択される、完全ヒトアゴニスト性抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体である。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、１Ｄ７、３３Ｃ９、３３Ｆ６、３４Ｇ４、３５Ｂ１０、４１Ｅ１１、４１Ｇ５、４２Ａ１１、４４Ｃ１、４５Ａ８、４６Ｅ１１、４８Ｈ１２、４８Ｈ７、４９Ｄ９、４９Ｅ２、４８Ａ９、５Ｈ７、７Ａ１０及び９Ｈ６からなる群から選択される抗体の配列に対して９９％を超えるアミノ酸配列同一性を有する、完全ヒトアゴニスト性抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体である。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、１Ｄ７、３３Ｃ９、３３Ｆ６、３４Ｇ４、３５Ｂ１０、４１Ｅ１１、４１Ｇ５、４２Ａ１１、４４Ｃ１、４５Ａ８、４６Ｅ１１、４８Ｈ１２、４８Ｈ７、４９Ｄ９、４９Ｅ２、４８Ａ９、５Ｈ７、７Ａ１０及び９Ｈ６からなる群から選択される抗体の配列に対して９８％を超えるアミノ酸配列同一性を有する、完全ヒトアゴニスト性抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体である。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号（その開示は、参照により本明細書に組み込まれる）に記載されるような、９Ｈ６ｖ３、５Ｈ７ｖ２、３３Ｃ９ｖ２、４１Ｇ５ｖ２及び７Ａ１０ｖ１からなる群から選択される、完全ヒトアゴニスト性抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体である。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号（その開示は、参照により本明細書に組み込まれる）に記載されるような、４４Ｃ１ｖ１、４５Ａ８ｖ１、４９Ｄ９ｖ１、４９Ｅ２ｖ１、４８Ａ９ｖ１、５Ｈ７ｖ１、５Ｈ７ｖ２、５Ｈ７ｖ３、５Ｈ７ｖ５、５Ｈ７ｖ７、５Ｈ７ｖ９、５Ｈ７ｖ１０、５Ｈ７ｖ１１、５Ｈ７ｖ１３、５Ｈ７ｖ１４、５Ｈ７ｖ１７、５Ｈ７ｖ１８、５Ｈ７ｖ１９、５Ｈ７ｖ２２、７Ａ１０ｖ１、７Ａ１０ｖ２、７Ａ１０ｖ３、７Ａ１０ｖ４、７Ａ１０ｖ５、９Ｈ６ｖ１、９Ｈ６ｖ２、９Ｈ６ｖ３、９Ｈ６ｖ４、９Ｈ６ｖ５、９Ｈ６ｖ６、３３Ｃ９ｖ１、３３Ｃ９ｖ２、３３Ｃ９ｖ３、３３Ｃ９ｖ４、３３Ｃ９ｖ５、４１Ｇ５ｖ１、４１Ｇ５ｖ２、４��Ｇ５ｖ３、４１Ｇ５ｖ４及び４１Ｇ５ｖ５からなる群から選択される、完全ヒトアゴニスト性抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体である。
【０５８９】
[001101]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、構造Ｉ−Ａ（Ｃ末端Ｆｃ抗体断片融合タンパク質）又は構造Ｉ−Ｂ（Ｎ末端Ｆｃ抗体断片融合タンパク質）に示されるＧＩＴＲアゴニスト性融合タンパク質又はその断片、誘導体、コンジュゲート、変異体若しくはバイオシミラーである。構造Ｉ−Ａ及びＩ−Ｂの特性は、上記並びに米国特許第９，３５９，４２０号、同第９，３４０，５９９号、同第８，９２１，５１９号及び同第８，４５０，４６０号に記載され、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。構造Ｉ−Ａのポリペプチドドメインのアミノ酸配列を表６に示す。Ｆｃドメインは、好ましくは、完全定常ドメイン（配列番号３１のアミノ酸１７〜２３０）、完全ヒンジドメイン（配列番号３１のアミノ酸１〜１６）又はヒンジドメインの一部（例えば、配列番号３１のアミノ酸４〜１６）を含む。Ｃ末端Ｆｃ抗体を接続するための好ましいリンカーは、追加的ポリペプチドの融合に適したリンカーを含む、配列番号３２〜配列番号４１に示される実施形態から選択され得る。同様に、構造Ｉ−Ｂのポリペプチドドメインのアミノ酸配列を表７に示す。構造Ｉ−ＢのようにＦｃ抗体断片がＴＮＲＦＳＦ融合タンパク質のＮ末端に融合される場合、Ｆｃモジュールの配列は好ましくは配列番号４２に示されるものであり、リンカー配列は好ましくは配列番号４３〜配列番号４５に示される実施形態から選択される。
【０５９０】
[001102]  一実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−ＢによるＧＩＴＲアゴニスト融合タンパク質は、ＴＲＸ５１８、６Ｃ８、３６Ｅ５、３Ｄ６、６１Ｇ６、６Ｈ６、６１Ｆ６、１Ｄ８、１７Ｆ１０、３５Ｄ８、４９Ａ１、９Ｅ５、３１Ｈ６、２１５５、６９８、７０６、８２７、１６４９、１７１８、１Ｄ７、３３Ｃ９、３３Ｆ６、３４Ｇ４、３５Ｂ１０、４１Ｅ１１、４１Ｇ５、４２Ａ１１、４４Ｃ１、４５Ａ８、４６Ｅ１１、４８Ｈ１２、４８Ｈ７、４９Ｄ９、４９Ｅ２、４８Ａ９、５Ｈ７、７Ａ１０、９Ｈ６並びにその断片、誘導体、コンジュゲート、変異体及びバイオシミラーの可変重鎖及び可変軽鎖からなる群から選択される１つ以上のＧＩＴＲ結合ドメインを含む。
【０５９１】
[001103]  一実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−ＢによるＧＩＴＲアゴニスト融合タンパク質は、ＧＩＴＲＬ配列（表４２）を含む１つ以上のＧＩＴＲ結合ドメインを含む。一実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−ＢによるＧＩＴＲアゴニスト融合タンパク質は、配列番号４４０による配列を含む１つ以上のＧＩＴＲ結合ドメインを含む。一実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−ＢによるＧＩＴＲアゴニスト融合タンパク質は、可溶性ＧＩＴＲＬ配列を含む１つ以上のＧＩＴＲ結合ドメインを含む。一実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−ＢによるＧＩＴＲアゴニスト融合タンパク質は、配列番号４４１による配列を含む１つ以上のＧＩＴＲ結合ドメインを含む。
【０５９２】
[001104]  一実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−ＢによるＧＩＴＲアゴニスト融合タンパク質は、上記表１８〜３９に示されるＶＨ及びＶＬＧＩＴＲ配列とそれぞれ少なくとも９５％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含むｓｃＦｖドメインである１つ以上のＧＩＴＲ結合ドメインを含み、ここで、ＶＨ及びＶＬドメインはリンカーによって接続されている。
【０５９３】
【表４８】
2021512962.tif 000067
【０５９４】
[001105]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、（ｉ）第１の可溶性ＧＩＴＲ結合ドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性ＧＩＴＲ結合ドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性ＧＩＴＲ結合ドメインを含むＧＩＴＲアゴニスト性単鎖融合ポリペプチドであり、Ｎ末端及び／又はＣ末端に追加のドメインを更に含み、ここで、追加のドメインは、Ｆａｂ又はＦｃ断片ドメインである。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、（ｉ）第１の可溶性ＧＩＴＲ結合ドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性ＧＩＴＲ結合ドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性ＧＩＴＲ結合ドメインを含むＧＩＴＲアゴニスト性単鎖融合ポリペプチドであり、Ｎ末端及び／又はＣ末端に追加のドメインを更に含み、ここで、追加のドメインは、Ｆａｂ又はＦｃ断片ドメインであり、可溶性ＧＩＴＲ結合ドメインのそれぞれは、ストーク領域（三量体化に寄与し、細胞膜まで一定の距離を提供するが、ＧＩＴＲ結合ドメインの一部ではない）を欠き、第１及び第２のペプチドリンカーは、独立して３〜８アミノ酸長を有する。
【０５９５】
[001106]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、（ｉ）第１の可溶性腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）スーパーファミリーサイトカインドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性ＴＮＦスーパーファミリーサイトカインドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性ＴＮＦスーパーファミリーサイトカインドメインを含むＧＩＴＲアゴニスト性単鎖融合ポリペプチドであり、ここで、可溶性ＴＮＦスーパーファミリーサイトカインドメインのそれぞれは、ストーク領域を欠き、第１及び第２のペプチドリンカーは、独立して３〜８アミノ酸長を有し、ＴＮＦスーパーファミリーサイトカインドメインはＧＩＴＲ結合ドメインである。
【０５９６】
[001107]  一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、前述のＶＬドメインのいずれかに連結された前述のＶＨドメインのいずれかを含むＧＩＴＲアゴニスト性ｓｃＦｖ抗体である。
【０５９７】
ＨＶＥＭ（ＣＤ２７０）アゴニスト
[001108]  ＴＮＦＲＳＦ１４及びＣＤ２７０としても知られるヘルペスウイルス侵入メディエーター（ＨＶＥＭ）は、単純ヘルペスウイルス１（ＨＳＶ−１）の受容体として最初に単離された。Montgomery, et al., Cell 1996, 87, 427-36。ＨＶＥＭは、ＴＮＦファミリーリガンドＬＩＧＨＴ及びリンホトキシンアルファホモトリマー（Ｌｔα３）に結合する。Mauri, et al., Immunity 1998, 8, 21-30。Ｔ細胞の活性化はＨＶＥＭ−ＬＩＧＨＴ相互作用を通して発生することができ、相互作用は、ＣＤ２８シグナル伝達とは無関係であるＴ細胞に共刺激シグナルを提供し、最適以下レベルのＣＤ３抗体（ＯＫＴ−３）の存在下で観察できる。Tamada, et al., J. Immunol.2000, 165, 4397-404；Harrop, et al., J. Biol.Chem.1998, 273, 27548-56；Tamada, et al., Nat.Med.2000, 6, 283-89；Yu, et al., Nat.Immunol.2004, 5, 141-49。ＨＶＥＭは、４つのシステインリッチドメイン（ＣＲＤ）で構成されている。del Rio, et al., J. Leukoc.Biol. 2010, 87, 223-35。ＣＲＤ２及びＣＲＤ３は、ＨＶＥＭを介してＴ細胞に共刺激シグナルを提供するＴＮＦＲＳＦリガンドＬＩＧＨＴを用いたＨＶＥＭ三量体化に必要である。対照的に、ＣＲＤ１及びＣＲＤ２は、共抑制Ｂ及びＴリンパ球アテニュエーター（ＢＴＬＡ）受容体並びにＣＤ１６０に単量体的様式で結合し、Ｔ細胞に抑制シグナルを提供する。ＨＶＥＭ−ＬＩＧＨＴ相互作用の研究は、それが主にＣＤ８＋Ｔ細胞に対してＣＤ２８非依存性共刺激効果を有するが、ＣＤ４＋Ｔ細胞にも影響を与えることを示唆している。Liu, et al., Int.Immunol.2003, 15, 861-70；Scheu, et al., J. Exp.Med.2002, 195, 1613-24。
【０５９８】
[001109]  一実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、ＨＶＥＭアゴニストである。ＨＶＥＭはＣＤ２７０及びＴＮＦＲＳＦ１４としても知られている。当技術分野で公知の任意のＨＶＥＭアゴニストが使用され得る。ＨＶＥＭ結合分子は、ヒト又は哺乳類ＨＶＥＭに結合できるモノクローナル抗体又は融合タンパク質であり得る。ＨＶＥＭアゴニスト又はＨＶＥＭ結合分子は、免疫グロブリン分子の任意のアイソタイプ（例えば、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＡ及びＩｇＹ）、クラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１及びＩｇＡ２）又はサブクラスの免疫グロブリン重鎖を含み得る。ＨＶＥＭアゴニスト又はＨＶＥＭ結合分子は、重鎖及び軽鎖の両方を有し得る。本明細書で使用される場合、結合分子という用語は、抗体（全長抗体を含む）、モノクローナル抗体（全長モノクローナル抗体を含む）、ポリクローナル抗体、多重特異性抗体（例えば、二重特異性抗体）、ヒト、ヒト化又はキメラ抗体並びに抗体断片、例えばＦａｂ断片、Ｆ（ａｂ’）断片、Ｆａｂ発現ライブラリーにより産生される断片、上記のいずれかのエピトープ結合断片及びＨＶＥＭに結合する抗体の操作された形態、例えばｓｃＦｖ分子も含む。一実施形態において、ＨＶＥＭアゴニストは、完全ヒト抗体である抗原結合タンパク質である。一実施形態において、ＨＶＥＭアゴニストは、ヒト化抗体である抗原結合タンパク質である。一部の実施形態において、本開示の方法及び組成物における使用のためのＨＶＥＭアゴニストは、抗ＨＶＥＭ抗体、ヒト抗ＨＶＥＭ抗体、マウス抗ＨＶＥＭ抗体、哺乳動物抗ＨＶＥＭ抗体、モノクローナル抗ＨＶＥＭ抗体、ポリクローナル抗ＨＶＥＭ抗体、キメラ抗ＨＶＥＭ抗体、抗ＨＶＥＭアドネクチン、抗ＨＶＥＭドメイン抗体、単鎖抗ＨＶＥＭ断片、重鎖抗ＨＶＥＭ断片、軽鎖抗ＨＶＥＭ断片、抗ＨＶＥＭ融合タンパク質及びそれらの断片、誘導体、コンジュゲート、変異体若しくはバイオシミラーを含む。好ましい実施形態において、ＨＶＥＭアゴニストは、アゴニスト性抗ＨＶＥＭヒト化又は完全ヒトモノクローナル抗体（即ち単一細胞株に由来する抗体）である。
【０５９９】
[001110]  好ましい実施形態において、ＨＶＥＭアゴニスト又はＨＶＥＭ結合分子は、融合タンパク質でもあり得る。好ましい実施形態において、三量体又は六量体ＨＶＥＭアゴニスト（３つ又は６つのリガンド結合ドメインを有する）などの多量体ＨＶＥＭアゴニストは、典型的には２つのリガンド結合ドメインを保有するアゴニスト性モノクローナル抗体と比較して、優れた受容体（ＨＶＥＭＬ）のクラスター化及び内部細胞シグナル伝達複合体形成を誘導し得る。３つのＴＮＦＲＳＦ結合ドメイン及びＩｇＧ１−Ｆｃを含み、任意選択によりこれらの融合タンパク質の２つ以上を更に連結する、三量体（三価）又は六量体（又は六価）又はそれより大きい融合タンパク質は、例えば、Gieffers, et al., Mol.Cancer Therapeutics 2013, 12, 2735-47に記載される。
【０６００】
[001111]  アゴニスト性ＨＶＥＭ抗体及び融合タンパク質は、強い免疫応答を誘発することが知られている。好ましい実施形態において、ＨＶＥＭアゴニストは、毒性を低減するのに十分な方法でＨＶＥＭ抗原に特異的に結合するモノクローナル抗体又は融合タンパク質である。一部の実施形態において、ＨＶＥＭアゴニストは、抗体依存性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）、例えばＮＫ細胞の細胞傷害性を抑制する、アゴニスト性ＨＶＥＭモノクローナル抗体又は融合タンパク質である。一部の実施形態において、ＨＶＥＭアゴニストは、抗体依存性細胞食作用（ＡＤＣＰ）を抑制する、アゴニスト性ＨＶＥＭモノクローナル抗体又は融合タンパク質である。一部の実施形態において、ＨＶＥＭアゴニストは、補体依存性細胞毒性（ＣＤＣ）を抑制する、アゴニスト性ＨＶＥＭモノクローナル抗体又は融合タンパク質である。一部の実施形態において、ＨＶＥＭアゴニストは、Ｆｃ領域機能性を抑制する、アゴニスト性ＨＶＥＭモノクローナル抗体又は融合タンパク質である。
【０６０１】
[001112]  一部の実施形態において、ＨＶＥＭアゴニストは、高い親和性及びアゴニスト活性でヒトＨＶＥＭ（配列番号４４２）に結合することを特徴とする。一実施形態において、ＨＶＥＭアゴニストは、ヒトＨＶＥＭ（配列番号４４２）に結合する結合分子である。ＨＶＥＭアゴニスト又は結合分子が結合し得るＨＶＥＭ抗原のアミノ酸配列を表４３に概括する。
【０６０２】
【表４９】
2021512962.tif 000068
【０６０３】
[001113]  一部の実施形態において、記載される組成物、プロセス及び方法は、約１００ｐＭ以下のＫＤでヒト又はマウスＨＶＥＭに結合するか、約９０ｐＭ以下のＫＤでヒト又はマウスＨＶＥＭに結合するか、約８０ｐＭ以下のＫＤでヒト又はマウスＨＶＥＭに結合するか、約７０ｐＭ以下のＫＤでヒト又はマウスＨＶＥＭに結合するか、約６０ｐＭ以下のＫＤでヒト又はマウスＨＶＥＭに結合するか、約５０ｐＭ以下のＫＤでヒト又はマウスＨＶＥＭに結合するか、約４０ｐＭ以下のＫＤでヒト又はマウスＨＶＥＭに結合するか、又は約３０ｐＭ以下のＫＤでヒト又はマウスＨＶＥＭに結合する、ＨＶＥＭアゴニストを含む。
【０６０４】
[001114]  一部の実施形態において、記載される組成物、プロセス及び方法は、約７．５×１０５  １／Ｍ・ｓ以上のｋａｓｓｏｃでヒト又はマウスＨＶＥＭに結合するか、約７．５×１０５  １／Ｍ・ｓ以上のｋａｓｓｏｃでヒト又はマウスＨＶＥＭに結合するか、約８×１０５  １／Ｍ・ｓ以上のｋａｓｓｏｃでヒト又はマウスＨＶＥＭに結合するか、約８．５×１０５  １／Ｍ・ｓ以上のｋａｓｓｏｃでヒト又はマウスＨＶＥＭに結合するか、約９×１０５  １／Ｍ・ｓ以上のｋａｓｓｏｃでヒト又はマウスＨＶＥＭに結合するか、約９．５×１０５  １／Ｍ・ｓ以上のｋａｓｓｏｃでヒト又はマウスＨＶＥＭに結合するか、又は約１×１０６  １／Ｍ・ｓ以上のｋａｓｓｏｃでヒト又はマウスＨＶＥＭに結合する、ＨＶＥＭアゴニストを含む。
【０６０５】
[001115]  一部の実施形態において、記載される組成物、プロセス及び方法は、約２×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウスＨＶＥＭに結合するか、約２．１×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウスＨＶＥＭに結合するか、約２．２×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウスＨＶＥＭに結合するか、約２．３×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウスＨＶＥＭに結合するか、約２．４×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウスＨＶＥＭに結合するか、約２．５×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウスＨＶＥＭに結合するか、約２．６×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウスＨＶＥＭに結合するか、又は約２．７×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウスＨＶＥＭに結合するか、約２．８×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウスＨＶＥＭに結合するか、約２．９×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウスＨＶＥＭに結合するか、又は約３×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウスＨＶＥＭに結合する、ＨＶＥＭアゴニストを含む。
【０６０６】
[001116]  一部の実施形態において、記載される組成物、プロセス及び方法は、約１０ｎＭ以下のＩＣ５０でヒト又はマウスＨＶＥＭに結合するか、約９ｎＭ以下のＩＣ５０でヒト又はマウスＨＶＥＭに結合するか、約８ｎＭ以下のＩＣ５０でヒト又はマウスＨＶＥＭに結合するか、約７ｎＭ以下のＩＣ５０でヒト又はマウスＨＶＥＭに結合するか、約６ｎＭ以下のＩＣ５０でヒト又はマウスＨＶＥＭに結合するか、約５ｎＭ以下のＩＣ５０でヒト又はマウスＨＶＥＭに結合するか、約４ｎＭ以下のＩＣ５０でヒト又はマウスＨＶＥＭに結合するか、約３ｎＭ以下のＩＣ５０でヒト又はマウスＨＶＥＭに結合するか、約２ｎＭ以下のＩＣ５０でヒト又はマウスＨＶＥＭに結合するか、又は約１ｎＭ以下のＩＣ５０でヒト又はマウスＨＶＥＭに結合する、ＨＶＥＭアゴニストを含む。
【０６０７】
[001117]  一実施形態において、ＨＶＥＭアゴニストは、国際公開第２００９／００７１２０  Ａ２号及び米国特許出願公開第２０１６／０１７６９４１  Ａ１号に記載されるＨＶＥＭアゴニストであり、そのそれぞれの開示は、参照により本明細書に組み込まれる。
【０６０８】
[001118]  一実施形態において、ＨＶＥＭアゴニストは、Miltenyi Biotech, Inc.（San Diego、CA 92121）から市販されているＨＶＥＭアゴニストクローンＲＥＡ２４７である。
【０６０９】
[001119]  一実施形態において、ＨＶＥＭアゴニストは、構造Ｉ−Ａ（Ｃ末端Ｆｃ抗体断片融合タンパク質）又は構造Ｉ−Ｂ（Ｎ末端Ｆｃ抗体断片融合タンパク質）に示されるＨＶＥＭアゴニスト性融合タンパク質又はその断片、誘導体、コンジュゲート、変異体若しくはバイオシミラーである。構造Ｉ−Ａ及びＩ−Ｂの特性は、上記並びに米国特許第９，３５９，４２０号、同第９，３４０，５９９号、同第８，９２１，５１９号及び同第８，４５０，４６０号に記載され、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。構造Ｉ−Ａのポリペプチドドメインのアミノ酸配列を表６に示す。Ｆｃドメインは、好ましくは、完全定常ドメイン（配列番号３１のアミノ酸１７〜２３０）、完全ヒンジドメイン（配列番号３１のアミノ酸１〜１６）又はヒンジドメインの一部（例えば、配列番号３１のアミノ酸４〜１６）を含む。Ｃ末端Ｆｃ抗体を接続するための好ましいリンカーは、追加的ポリペプチドの融合に適したリンカーを含む、配列番号３２〜配列番号４１に示される実施形態から選択され得る。同様に、構造Ｉ−Ｂのポリペプチドドメインのアミノ酸配列を表７に示す。構造Ｉ−ＢのようにＦｃ抗体断片がＴＮＲＦＳＦ融合タンパク質のＮ末端に融合される場合、Ｆｃモジュールの配列は好ましくは配列番号４２に示されるものであり、リンカー配列は好ましくは配列番号４３〜配列番号４５に示される実施形態から選択される。
【０６１０】
[001120]  一実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−ＢによるＨＶＥＭアゴニスト融合タンパク質は、ＬＩＧＨＴ（ＨＶＥＭリガンド）配列（表４４）を含む１つ以上のＨＶＥＭ結合ドメインを含む。一実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−ＢによるＨＶＥＭアゴニスト融合タンパク質は、配列番号４４３による配列を含む１つ以上のＨＶＥＭ結合ドメインを含む。一実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−ＢによるＨＶＥＭアゴニスト融合タンパク質は、可溶性ＬＩＧＨＴ配列を含む１つ以上のＨＶＥＭ結合ドメインを含む。一実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−ＢによるＨＶＥＭアゴニスト融合タンパク質は、配列番号４４４による配列を含む１つ以上のＨＶＥＭ結合ドメインを含む。一実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−ＢによるＨＶＥＭアゴニスト融合タンパク質は、配列番号４４５による配列を含む１つ以上のＨＶＥＭ結合ドメインを含む。一実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−ＢによるＨＶＥＭアゴニスト融合タンパク質は、配列番号４４６による配列を含む１つ以上のＨＶＥＭ結合ドメインを含む。
【０６１１】
[001121]  一実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−ＢによるＨＶＥＭアゴニスト融合タンパク質は、ＶＨ及びＶＬ領域を含むｓｃＦｖドメインである１つ以上のＨＶＥＭ結合ドメインを含み、ここで、ＶＨ及びＶＬドメインはリンカーによって接続されている。
【０６１２】
【表５０】
2021512962.tif 000069
【０６１３】
[001122]  一実施形態において、ＨＶＥＭアゴニストは、（ｉ）第１の可溶性ＨＶＥＭ結合ドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性ＨＶＥＭ結合ドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性ＨＶＥＭ結合ドメインを含むＨＶＥＭアゴニスト性単鎖融合ポリペプチドであり、Ｎ末端及び／又はＣ末端に追加のドメインを更に含み、ここで、追加のドメインは、Ｆａｂ又はＦｃ断片ドメインである。一実施形態において、ＨＶＥＭアゴニストは、（ｉ）第１の可溶性ＨＶＥＭ結合ドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性ＨＶＥＭ結合ドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性ＨＶＥＭ結合ドメインを含むＨＶＥＭアゴニスト性単鎖融合ポリペプチドであり、Ｎ末端及び／又はＣ末端に追加のドメインを更に含み、ここで、追加のドメインは、Ｆａｂ又はＦｃ断片ドメインであり、可溶性ＨＶＥＭ結合ドメインのそれぞれは、ストーク領域（三量体化に寄与し、細胞膜まで一定の距離を提供するが、ＨＶＥＭ結合ドメインの一部ではない）を欠き、第１及び第２のペプチドリンカーは、独立して３〜８アミノ酸長を有する。
【０６１４】
[001123]  一実施形態において、ＨＶＥＭアゴニストは、（ｉ）第１の可溶性腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）スーパーファミリーサイトカインドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性ＴＮＦスーパーファミリーサイトカインドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性ＴＮＦスーパーファミリーサイトカインドメインを含むＨＶＥＭアゴニスト性単鎖融合ポリペプチドであり、ここで、可溶性ＴＮＦスーパーファミリーサイトカインドメインのそれぞれは、ストーク領域を欠き、第１及び第２のペプチドリンカーは、独立して３〜８アミノ酸長を有し、ＴＮＦスーパーファミリーサイトカインドメインはＨＶＥＭ結合ドメインである。
【０６１５】
[001124]  一実施形態において、ＨＶＥＭアゴニストは、米国特許第７，１１８，７４２号に記載されるＨＶＥＭアゴニストであり、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。
【０６１６】
ＣＤ９５アゴニスト
[001125]  ＣＤ９５は、Ｆａｓ、ＡＰＯ−１及びＴＮＦＲＳＦ６とも呼ばれ、４−１ＢＢ、ＯＸ４０、ＧＩＴＲ、ＣＤ２７及びＨＶＥＭと異なり、デスドメインを含有する４５ｋＤａのタイプＩ膜貫通タンパク質である。Kischkel, et al., EMBO J.1995, 14, 5579-88；Krammer, Nature 2000, 407, 789-95。活性化Ｔ細胞上のＣＤ９５への誘導性ＣＤ９５リガンド（ＣＤ９５Ｌ）の結合は、アポトーシス性細胞死をもたらすため、通常、４−１ＢＢ、ＯＸ４０、ＧＩＴＲ、ＣＤ２７及びＨＶＥＭと同じ共刺激機能には関連付けられない。Strauss, et al., J. Exp.Med.2009, 206, 1379-93。しかし、ＣＤ９５は、一部の条件下でＴ細胞に対する抗アポトーシス及び共刺激効果を提供する二重機能受容体としても機能する。Paulsen, et al., Cell Death Differ.2011, 18, 619-31。ＣＤ９５結合は、用量依存的にＴＣＲ駆動シグナルの開始を制御し、ここで、高用量のＣＤ９５アゴニスト又は細胞性ＣＤ９５ＬサイレンスＴ細胞である一方、これらのアゴニストが低用量の場合、ＴＣＲ駆動Ｔ細胞の活性化及び増殖を強力に増強する。
【０６１７】
[001126]  一実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、ＣＤ９５アゴニスト又はＣＤ９５結合分子である。ＣＤ９５は、ＴＮＦＲＳＦ６、Ｆａｓ受容体（ＦａｓＲ）及びＡＰＯ−１としても知られている。当技術分野で公知の任意のＣＤ９５アゴニスト又は結合分子が使用され得る。ＣＤ９５結合分子は、ヒト又は哺乳類ＣＤ９５に結合できるモノクローナル抗体又は融合タンパク質であり得、本明細書の他の箇所に記載されているように、Ｔ細胞アポトーシス活性ではなく、Ｔ細胞アゴニスト活性に適切な濃度で使用され得る。ＣＤ９５アゴニスト又はＣＤ９５結合分子は、免疫グロブリン分子の任意のアイソタイプ（例えば、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＡ及びＩｇＹ）、クラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１及びＩｇＡ２）又はサブクラスの免疫グロブリン重鎖を含み得る。ＣＤ９５アゴニスト又はＣＤ９５結合分子は、重鎖及び軽鎖の両方を有し得る。本明細書で使用される場合、結合分子という用語は、抗体（全長抗体を含む）、モノクローナル抗体（全長モノクローナル抗体を含む）、ポリクローナル抗体、多重特異性抗体（例えば、二重特異性抗体）、ヒト、ヒト化又はキメラ抗体並びに抗体断片、例えばＦａｂ断片、Ｆ（ａｂ’）断片、Ｆａｂ発現ライブラリーにより産生される断片、上記のいずれかのエピトープ結合断片及びＣＤ９５に結合する抗体の操作された形態、例えばｓｃＦｖ分子も含む。一実施形態において、ＣＤ９５アゴニストは、完全ヒト抗体である抗原結合タンパク質である。一実施形態において、ＣＤ９５アゴニストは、ヒト化抗体である抗原結合タンパク質である。一部の実施形態において、本開示の方法及び組成物における使用のためのＣＤ９５アゴニストは、抗ＣＤ９５抗体、ヒト抗ＣＤ９５抗体、マウス抗ＣＤ９５抗体、哺乳動物抗ＣＤ９５抗体、モノクローナル抗ＣＤ９５抗体、ポリクローナル抗ＣＤ９５抗体、キメラ抗ＣＤ９５抗体、抗ＣＤ９５アドネクチン、抗ＣＤ９５ドメイン抗体、単鎖抗ＣＤ９５断片、重鎖抗ＣＤ９５断片、軽鎖抗ＣＤ９５断片、抗ＣＤ９５融合タンパク質及びそれらの断片、誘導体、コンジュゲート、変異体若しくはバイオシミラーを含む。好ましい実施形態において、ＣＤ９５アゴニストは、アゴニスト性抗ＣＤ９５ヒト化又は完全ヒトモノクローナル抗体（即ち単一細胞株に由来する抗体）である。
【０６１８】
[001127]  好ましい実施形態において、ＣＤ９５アゴニスト又はＣＤ９５結合分子は、融合タンパク質でもあり得る。好ましい実施形態において、三量体又は六量体ＣＤ９５アゴニスト（３つ又は６つのリガンド結合ドメインを有する）などの多量体ＣＤ９５アゴニストは、典型的には２つのリガンド結合ドメインを保有するアゴニスト性モノクローナル抗体と比較して、優れた受容体（ＣＤ９５Ｌ）のクラスター化及び内部細胞シグナル伝達複合体形成を誘導し得る。３つのＴＮＦＲＳＦ結合ドメイン及びＩｇＧ１−Ｆｃを含み、任意選択によりこれらの融合タンパク質の２つ以上を更に連結する、三量体（三価）又は六量体（又は六価）又はそれより大きい融合タンパク質は、例えば、Gieffers, et al., Mol.Cancer Therapeutics 2013, 12, 2735-47に記載される。
【０６１９】
[001128]  アゴニスト性ＣＤ９５抗体及び融合タンパク質は、強い免疫応答を誘発することが知られている。好ましい実施形態において、ＣＤ９５アゴニストは、毒性を低減するのに十分な方法でＣＤ９５抗原に特異的に結合するモノクローナル抗体又は融合タンパク質である。一部の実施形態において、ＣＤ９５アゴニストは、抗体依存性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）、例えばＮＫ細胞の細胞傷害性を抑制する、アゴニスト性ＣＤ９５モノクローナル抗体又は融合タンパク質である。一部の実施形態において、ＣＤ９５アゴニストは、抗体依存性細胞食作用（ＡＤＣＰ）を抑制する、アゴニスト性ＣＤ９５モノクローナル抗体又は融合タンパク質である。一部の実施形態において、ＣＤ９５アゴニストは、補体依存性細胞毒性（ＣＤＣ）を抑制する、アゴニスト性ＣＤ９５モノクローナル抗体又は融合タンパク質である。一部の実施形態において、ＣＤ９５アゴニストは、Ｆｃ領域機能性を抑制する、アゴニスト性ＣＤ９５モノクローナル抗体又は融合タンパク質である。
【０６２０】
[001129]  一部の実施形態において、ＣＤ９５アゴニストは、高い親和性及びアゴニスト活性でヒトＣＤ９５（配列番号４４７）に結合することを特徴とする。一実施形態において、ＣＤ９５アゴニストは、ヒトＣＤ９５（配列番号４４７）に結合する結合分子である。一実施形態において、ＣＤ９５アゴニストは、ヒトＣＤ９５（配列番号４４８）に結合する結合分子である。一実施形態において、ＣＤ９５アゴニストは、ヒトＣＤ９５（配列番号４４９）に結合する結合分子である。一実施形態において、ＣＤ９５アゴニストは、ヒトＣＤ９５（配列番号４５０）に結合する結合分子である。ＣＤ９５アゴニスト又は結合分子が結合し得るＣＤ９５抗原のアミノ酸配列を表４５に概括する。
【０６２１】
【表５１】
2021512962.tif 000070
【０６２２】
[001130]  一部の実施形態において、記載される組成物、プロセス及び方法は、約１００ｐＭ以下のＫＤでヒト又はマウスＣＤ９５に結合するか、約９０ｐＭ以下のＫＤでヒト又はマウスＣＤ９５に結合するか、約８０ｐＭ以下のＫＤでヒト又はマウスＣＤ９５に結合するか、約７０ｐＭ以下のＫＤでヒト又はマウスＣＤ９５に結合するか、約６０ｐＭ以下のＫＤでヒト又はマウスＣＤ９５に結合するか、約５０ｐＭ以下のＫＤでヒト又はマウスＣＤ９５に結合するか、約４０ｐＭ以下のＫＤでヒト又はマウスＣＤ９５に結合するか、又は約３０ｐＭ以下のＫＤでヒト又はマウスＣＤ９５に結合する、ＣＤ９５アゴニストを含む。
【０６２３】
[001131]  一部の実施形態において、記載される組成物、プロセス及び方法は、約７．５×１０５  １／Ｍ・ｓ以上のｋａｓｓｏｃでヒト又はマウスＣＤ９５に結合するか、約７．５×１０５  １／Ｍ・ｓ以上のｋａｓｓｏｃでヒト又はマウスＣＤ９５に結合するか、約８×１０５  １／Ｍ・ｓ以上のｋａｓｓｏｃでヒト又はマウスＣＤ９５に結合するか、約８．５×１０５  １／Ｍ・ｓ以上のｋａｓｓｏｃでヒト又はマウスＣＤ９５に結合するか、約９×１０５  １／Ｍ・ｓ以上のｋａｓｓｏｃでヒト又はマウスＣＤ９５に結合するか、約９．５×１０５  １／Ｍ・ｓ以上のｋａｓｓｏｃでヒト又はマウスＣＤ９５に結合するか、又は約１×１０６  １／Ｍ・ｓ以上のｋａｓｓｏｃでヒト又はマウスＣＤ９５に結合する、ＣＤ９５アゴニストを含む。
【０６２４】
[001132]  一部の実施形態において、記載される組成物、プロセス及び方法は、約２×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウスＣＤ９５に結合するか、約２．１×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウスＣＤ９５に結合するか、約２．２×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウスＣＤ９５に結合するか、約２．３×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウスＣＤ９５に結合するか、約２．４×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウスＣＤ９５に結合するか、約２．５×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウスＣＤ９５に結合するか、約２．６×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウスＣＤ９５に結合するか、又は約２．７×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウスＣＤ９５に結合するか、約２．８×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウスＣＤ９５に結合するか、約２．９×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウスＣＤ９５に結合するか、又は約３×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウスＣＤ９５に結合する、ＣＤ９５アゴニストを含む。
【０６２５】
[001133]  一部の実施形態において、記載される組成物、プロセス及び方法は、約１０ｎＭ以下のＩＣ５０でヒト又はマウスＣＤ９５に結合するか、約９ｎＭ以下のＩＣ５０でヒト又はマウスＣＤ９５に結合するか、約８ｎＭ以下のＩＣ５０でヒト又はマウスＣＤ９５に結合するか、約７ｎＭ以下のＩＣ５０でヒト又はマウスＣＤ９５に結合するか、約６ｎＭ以下のＩＣ５０でヒト又はマウスＣＤ９５に結合するか、約５ｎＭ以下のＩＣ５０でヒト又はマウスＣＤ９５に結合するか、約４ｎＭ以下のＩＣ５０でヒト又はマウスＣＤ９５に結合するか、約３ｎＭ以下のＩＣ５０でヒト又はマウスＣＤ９５に結合するか、約２ｎＭ以下のＩＣ５０でヒト又はマウスＣＤ９５に結合するか、又は約１ｎＭ以下のＩＣ５０でヒト又はマウスＣＤ９５に結合する、ＣＤ９５アゴニストを含む。
【０６２６】
[001134]  好ましい実施形態において、ＣＤ９５アゴニストは、モノクローナル抗体Ｅ０９又はその断片、誘導体、変異体又はバイオシミラーである。Ｅ０９の調製及び特性は、Chodorge, et al., Cell Death & Differ.2012, 19, 1187-95に記載される。Ｅ０９のアミノ酸配列を表４６に示す。
【０６２７】
[001135]  一実施形態において、ＣＤ９５アゴニストは、Ｅ０９の重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。一実施形態において、ＣＤ９５アゴニスト重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号４５１に示される配列を含み、ＣＤ９５アゴニスト軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号４５２に示される配列及びその保存的アミノ酸置換を含む。一実施形態において、ＣＤ９５アゴニストは、それぞれ配列番号４５１及び配列番号４５２に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＣＤ９５アゴニストは、それぞれ配列番号４５１及び配列番号４５２に示される配列とそれぞれ少なくとも９８％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＣＤ９５アゴニストは、それぞれ配列番号４５１及び配列番号４５２に示される配列とそれぞれ少なくとも９７％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＣＤ９５アゴニストは、それぞれ配列番号４５１及び配列番号４５２に示される配列とそれぞれ少なくとも９６％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＣＤ９５アゴニストは、それぞれ配列番号４５１及び配列番号４５２に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。
【０６２８】
[001136]  一実施形態において、ＣＤ９５アゴニストは、それぞれ配列番号４５３、配列番号４５４及び配列番号４５５に記載の配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにその保存的アミノ酸置換と、それぞれ配列番号４５６、配列番号４５７及び配列番号４５８に記載の配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにその保存的アミノ酸置換とを含む。
【０６２９】
[001137]  一実施形態において、ＣＤ９５アゴニストは、Ｅ０９に関して薬物規制当局によって承認されたＣＤ９５アゴニストバイオシミラーモノクローナル抗体である。一実施形態において、バイオシミラーモノクローナル抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤のアミノ酸配列に対して少なくとも９７％の配列同一性、例えば９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有し、参照医薬品又は参照生物学的製剤と比較して１つ以上の翻訳後改変を含む、アミノ酸配列を含むＣＤ９５抗体を含み、ここで、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、Ｅ０９である。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後改変は、グリコシル化、酸化、脱アミド化及び切断の１つ以上から選択される。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可された又は認可のために提出されたＣＤ９５アゴニスト抗体であり、ＣＤ９５アゴニスト抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤の製剤と異なる製剤で提供され、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、Ｅ０９である。ＣＤ９５アゴニスト抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合のＥＭＡなどの薬物規制当局によって認可されていることができる。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、Ｅ０９である。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、Ｅ０９である。
【０６３０】
【表５２】
2021512962.tif 000071
【０６３１】
[001138]  一実施形態において、ＣＤ９５アゴニストは、国際公開第２００９／００７１２０  Ａ２号及び米国特許出願公開第２０１６／０１７６９４１  Ａ１号に記載されるＣＤ９５アゴニストであり、そのそれぞれの開示は、参照により本明細書に組み込まれる。
【０６３２】
[001139]  一実施形態において、ＣＤ９５アゴニストは、構造Ｉ−Ａ（Ｃ末端Ｆｃ抗体断片融合タンパク質）又は構造Ｉ−Ｂ（Ｎ末端Ｆｃ抗体断片融合タンパク質）に示されるＣＤ９５アゴニスト性融合タンパク質又はその断片、誘導体、コンジュゲート、変異体若しくはバイオシミラーである。構造Ｉ−Ａ及びＩ−Ｂの特性は、上記並びに米国特許第９，３５９，４２０号、同第９，３４０，５９９号、同第８，９２１，５１９号及び同第８，４５０，４６０号に記載され、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。構造Ｉ−Ａのポリペプチドドメインのアミノ酸配列を表６に示す。Ｆｃドメインは、好ましくは、完全定常ドメイン（配列番号３１のアミノ酸１７〜２３０）、完全ヒンジドメイン（配列番号３１のアミノ酸１〜１６）又はヒンジドメインの一部（例えば、配列番号３１のアミノ酸４〜１６）を含む。Ｃ末端Ｆｃ抗体を接続するための好ましいリンカーは、追加的ポリペプチドの融合に適したリンカーを含む、配列番号３３〜配列番号４１に示される実施形態から選択され得る。同様に、構造Ｉ−Ｂのポリペプチドドメインのアミノ酸配列を表７に示す。構造Ｉ−ＢのようにＦｃ抗体断片がＴＮＲＦＳＦ融合タンパク質のＮ末端に融合される場合、Ｆｃモジュールの配列は好ましくは配列番号４２に示されるものであり、リンカー配列は好ましくは配列番号４３〜配列番号４５に示される実施形態から選択される。
【０６３３】
[001140]  一実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−ＢによるＣＤ９５アゴニスト融合タンパク質は、ＣＤ９５リガンド配列（表４７）を含む１つ以上のＣＤ９５結合ドメインを含む。一実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−ＢによるＣＤ９５アゴニスト融合タンパク質は、配列番号４５９による配列を含む１つ以上のＣＤ９５結合ドメインを含む。一実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−ＢによるＣＤ９５アゴニスト融合タンパク質は、可溶性ＬＩＧＨＴ配列を含む１つ以上のＣＤ９５結合ドメインを含む。一実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−ＢによるＣＤ９５アゴニスト融合タンパク質は、配列番号４６０による配列を含む１つ以上のＣＤ９５結合ドメインを含む。一実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−ＢによるＣＤ９５アゴニスト融合タンパク質は、配列番号４６１による配列を含む１つ以上のＣＤ９５結合ドメインを含む。一実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−ＢによるＣＤ９５アゴニスト融合タンパク質は、配列番号４６２による配列を含む１つ以上のＣＤ９５結合ドメインを含む。
【０６３４】
[001141]  一実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−ＢによるＣＤ９５アゴニスト融合タンパク質は、ＶＨ及びＶＬ領域を含むｓｃＦｖドメインである１つ以上のＣＤ９５結合ドメインを含み、ここで、ＶＨ及びＶＬドメインはリンカーによって接続されている。
【０６３５】
【表５３】
2021512962.tif 000072
【０６３６】
[001142]  一実施形態において、ＣＤ９５アゴニストは、（ｉ）第１の可溶性ＣＤ９５結合ドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性ＣＤ９５結合ドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性ＣＤ９５結合ドメインを含むＣＤ９５アゴニスト性単鎖融合ポリペプチドであり、Ｎ末端及び／又はＣ末端に追加のドメインを更に含み、ここで、追加のドメインは、Ｆａｂ又はＦｃ断片ドメインである。一実施形態において、ＣＤ９５アゴニストは、（ｉ）第１の可溶性ＣＤ９５結合ドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性ＣＤ９５結合ドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性ＣＤ９５結合ドメインを含むＣＤ９５アゴニスト性単鎖融合ポリペプチドであり、Ｎ末端及び／又はＣ末端に追加のドメインを更に含み、ここで、追加のドメインは、Ｆａｂ又はＦｃ断片ドメインであり、可溶性ＣＤ９５結合ドメインのそれぞれは、ストーク領域（三量体化に寄与し、細胞膜まで一定の距離を提供するが、ＣＤ９５結合ドメインの一部ではない）を欠き、第１及び第２のペプチドリンカーは、独立して３〜８アミノ酸長を有する。
【０６３７】
[001143]  一実施形態において、ＣＤ９５アゴニストは、（ｉ）第１の可溶性腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）スーパーファミリーサイトカインドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性ＴＮＦスーパーファミリーサイトカインドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性ＴＮＦスーパーファミリーサイトカインドメインを含むＣＤ９５アゴニスト性単鎖融合ポリペプチドであり、ここで、可溶性ＴＮＦスーパーファミリーサイトカインドメインのそれぞれは、ストーク領域を欠き、第１及び第２のペプチドリンカーは、独立して３〜８アミノ酸長を有し、ＴＮＦスーパーファミリーサイトカインドメインはＣＤ９５結合ドメインである。
【０６３８】
[001144]  一実施形態において、ＣＤ９５アゴニストは、前述のＶＬドメインのいずれかに連結された前述のＶＨドメインのいずれかを含むＣＤ９５アゴニスト性ｓｃＦｖ抗体である。
【０６３９】
腫瘍浸潤リンパ球を拡大培養する方法
[001145]  一実施形態において、本発明は、本開示のＴＮＦＲＳＦアゴニストのいずれかを使用してＴＩＬ集団を拡大培養する方法を提供し、この方法は、Jin, et al., J. Immunotherapy 2012, 35, 283-292に記載されているようなステップを含み、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。例えば、腫瘍を酵素培地に入れ、およそ１分間機械的に分離させ得る。次いで、混合物を５％ＣＯ２中３７℃で３０分間インキュベートし、次いでおよそ１分間再び機械的に破砕し得る。５％ＣＯ２中、３７℃で３０分間インキュベートした後、腫瘍を、３回目におよそ１分間機械的に破砕し得る。３回目の機械的破砕後、大きい組織片が存在する場合、５％ＣＯ２中、３７℃で更に３０分のインキュベーションを伴うか又は伴わず、１回又は２回の更なる機械的分離をサンプルに適用し得る。最終インキュベーションの終了時、細胞懸濁液が多数の赤血球又は死細胞を含有する場合、これらの細胞を除去するためにフィコールを用いた密度勾配分離を行うことができる。ＴＩＬ培養は、２４ウェルプレート（Costar２４ウェル細胞培養クラスター、平底；Corning Incorporated, Corning, NY）で開始され、各ウェルに、ＩＬ−２（６０００ＩＵ／ｍＬ；Chiron Corp., Emeryville, CA）を含む２ｍＬの完全培地（ＣＭ）中、１×１０６個の腫瘍消化細胞又はおよそ１〜８ｍｍ３のサイズの１つの腫瘍断片が播種され得る。ＣＭは、１０％ヒトＡＢ血清、２５ｍＭ  Ｈｅｐｅｓ及び１０ｍｇ／ｍＬゲンタマイシンを添加した、GlutaMAXを含むRoswell Park Memorial Institute（ＲＰＭＩ）1640緩衝液を含む。培養は、４０ｍＬ容量及び１０ｃｍ２のガス透過性シリコン底を有するガス透過性フラスコ（G-Rex 10；Wilson Wolf Manufacturing, New Brighton内で開始され得、各フラスコに、ＩＬ−２を含む１０〜４０ｍＬのＣＭ中、１０〜４０×１０６個の生存可能な腫瘍消化細胞又は５〜３０個の腫瘍断片が充填され得る。G-Rex 10及び２４ウェルプレートは、５％ＣＯ２中３７℃で、加湿インキュベーター内でインキュベートされ得、培養開始の５日後、培地の半分は、取り出され、新鮮なＣＭ及びＩＬ−２と交換され得、５日目後、培地の半分は、２〜３日ごとに交換され得る。本開示のＴＮＦＲＳＦアゴニストを使用して、本明細書の他の箇所に記載されるように、T-175フラスコ及びガス透過性バッグ又はガス透過性G-Rexフラスコを使用して、ＴＩＬの急速拡大培養プロトコル（ＲＥＰ）が行われ得る。T-175フラスコ中のＲＥＰでは、１×１０６個のＴＩＬが各フラスコ中の１５０ｍＬの培地に懸濁され得る。ＴＩＬは、３０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２及び３０ｎｇ／ｍＬの抗ＣＤ３抗体（ＯＫＴ−３）を添加した、ＣＭとＡＩＭ−Ｖ培地の１：１混合物（５０／５０培地）中で、本明細書に記載の比率で本開示のＴＮＦＲＳＦアゴニストと共に培養され得る。T-175フラスコは、５％ＣＯ２中３７℃でインキュベートされ得る。培地の半分は、５日目に、３０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２を含む５０／５０培地を用いて交換され得る。７日目に、２つのT-175フラスコからの細胞を３Ｌバッグ中で混合し、５％ヒトＡＢ血清を含む３００ｍＬのＡＩＭ−Ｖ及び３０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２を３００ｍＬのＴＩＬ懸濁液に添加し得る。各バッグ中の細胞数を毎日又は隔日で数えることができ、新鮮な培地を添加して細胞数を０．５〜２．０×１０６細胞／ｍＬに保ち得る。１００ｃｍ２のガス透過性シリコン底を有する５００ｍＬ容量のフラスコ（例えば、本明細書の他の箇所に記載されるように、G-Rex 100, Wilson Wolf Manufacturing）中のＲＥＰでは、５×１０６又は１０×１０６個のＴＩＬは、３０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２及び３０ｎｇ／ｍＬの抗ＣＤ３抗体（ＯＫＴ−３）を添加した、４００ｍＬの５０／５０培地中で、本明細書に記載の比率（例えば、１：１００）でＴＮＦＲＳＦアゴニストと共に培養され得る。G-Rex100フラスコは５％ＣＯ２下３７℃でインキュベートし得る。５日目に、２５０ｍＬの上清を取り出して遠心分離ボトルに入れ、１５００ｒｐｍ（４９１ｇ）で１０分間遠心分離し得る。入手したＴＩＬペレットを３０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２を含む１５０ｍＬの新鮮な５０／５０培地に再懸濁し、G-Rex 100フラスコに戻し添加し得る。ＴＩＬをG-Rex 100フラスコ中で連続的に拡大培養する場合、７日目に各G-Rex100中のＴＩＬは各フラスコに存在する３００ｍＬの培地に懸濁され、細胞懸濁液は、３つのG-Rex100フラスコに接種するために使用され得る、３つの１００ｍＬアリコートに分割され得る。次いで、５％ヒトＡＢ血清を含む約１５０ｍＬのＡＩＭ−Ｖ及び３０００ＵＩ／ｍＬのＩＬ−２を各フラスコに添加し得る。次いで、G-Rex100フラスコを５％ＣＯ２中３７℃でインキュベートし、４日後、３０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２を有する１５０ｍＬのＡＩＭ−Ｖを各G-Rex100フラスコに加え得る。この後、培養１４日目に細胞を回収することによってＲＥＰが完了され得る。
【０６４０】
[001146]  一実施形態において、癌を拡大培養又は処置する方法又はプロセスは、ＴＩＬが患者の腫瘍サンプルから得られるステップを含む。患者の腫瘍サンプルは、当技術分野において公知の方法を使用して入手され得る。例えば、ＴＩＬは、酵素的腫瘍消化物及び鋭的切開による腫瘍断片（サイズ約１〜約８ｍｍ３）から培養され得る。そのような腫瘍消化物は、酵素培地（例えば、Roswell Park Memorial Institute（ＲＰＭＩ）1640緩衝液、２ｍＭグルタメート、１０ｍｃｇ／ｍＬゲンタマイシン、３０Ｕｎｉｔ／ｍＬのＤＮａｓｅ及び１．０ｍｇ／ｍＬのコラゲナーゼ）中でのインキュベーション、続いて機械的分離（例えば、組織分離剤を使用）によって産生され得る。腫瘍消化物は、腫瘍を酵素培地中に置き、腫瘍を約１分間機械的に分離した後、続いて５％ＣＯ２下３７℃で３０分間インキュベートし、続いてごく小さい組織片しか存在しなくなるまで前述の条件下で機械的分離及びインキュベーションのサイクルを繰り返すことにより作製され得る。このプロセスの終了時、細胞懸濁液が多数の赤血球又は死細胞を含有する場合、これらの細胞を除去するためにFICOLL分岐親水性多糖を用いた密度勾配分離を行うことができる。米国特許出願公開第２０１２／０２４４１３３Ａ１号に記載されているものなど、当技術分野で公知の代替的方法を使用し得、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。前述の任意の方法は、ＴＩＬを拡大培養する方法若しくはプロセス又は癌を処置する方法のために、本明細書に記載の任意の実施形態において使用され得る。
【０６４１】
[001147]  一実施形態において、前述のように、T-175フラスコ及びガス透過性バッグを使用して（Tran, et al., J. Immunother.2008, 31, 742-51；Dudley, et al., J. Immunother.2003, 26, 332-42）又はガス透過性培養器具（G-Rexフラスコ、Wilson Wolf Manufacturing Corporation, New Brighton, MN, USAから市販）を使用して、ＴＩＬの急速拡大培養プロセスが実施され得る。T-175フラスコ中のＴＩＬ急速拡大培養では、１５０ｍＬの培地中に懸濁した１×１０６個のＴＩＬが各T-175フラスコに添加され得る。ＴＩＬは、ＴＩＬ１対ＴＮＦＲＳＦアゴニスト１００の比率で本開示のＴＮＦＲＳＦアゴニストと共に培養され得、細胞は、１ｍＬあたり３０００ＩＵ（国際単位）のＩＬ−２及び１ｍｌあたり３０ｎｇの抗ＣＤ３抗体（例えば、ＯＫＴ−３）を添加した、ＣＭとＡＩＭ−Ｖ培地の１：１混合物中で培養され得る。T-175フラスコは、５％ＣＯ２下３７℃でインキュベートされ得る。培地の半分は、５日目に、１ｍＬあたり３０００ＩＵのＩＬ−２を含む５０／５０培地を用いて交換され得る。７日目に、２つのT-175フラスコからの細胞を３Ｌバッグ中で混合し、５％ヒトＡＢ血清を含む３００ｍＬのＡＩＭ−Ｖ及び１ｍＬあたり３０００ＩＵのＩＬ−２を３００ｍｌのＴＩＬ懸濁液に添加した。各バッグ中の細胞数を毎日又は隔日で数え、新鮮な培地を添加して細胞数を０．５〜２．０×１０６細胞／ｍＬに保った。
【０６４２】
[001148]  一実施形態において、１００ｃｍ２のガス透過性シリコン底を有する５００ｍＬ容量のガス透過性フラスコ（G-Rex 100、Wilson Wolf Manufacturing Corporation, New Brighton, MN, USAから市販）中のＴＩＬ急速拡大培養では、５×１０６又は１０×１０６個のＴＩＬは、５％ヒトＡＢ血清、１ｍＬあたり３０００ＩＵのＩＬ−２及び１ｍＬあたり３０ｎｇの抗ＣＤ３（ＯＫＴ−３）を添加した、４００ｍＬの５０／５０培地中で、ＴＮＦＲＳＦアゴニストと共に培養され得る。G-Rex 100フラスコは５％ＣＯ２下３７℃でインキュベートし得る。５日目に、２５０ｍＬの上清を取り出して遠心分離ボトルに入れ、１５００ｒｐｍ（毎分回転数；４９１×ｇ）で１０分間遠心分離し得る。５％ヒトＡＢ血清、１ｍＬあたり３０００ＩＵのＩＬ−２を含む１５０ｍＬの新鮮培地にＴＩＬペレットを再懸濁し、元のG-Rex 100フラスコに戻し加え得る。G-Rex 100フラスコ内でＴＩＬを連続的に拡大培養するとき、７日目に各G-Rex 100のＴＩＬを、各フラスコ内に存在する３００ｍＬの培地に懸濁し得、且つ細胞懸濁液を３つの１００ｍＬアリコートに分割し得、それらを３つのG-Rex 100フラスコの播種に使用し得る。次に、５％ヒトＡＢ血清及び１ｍＬあたり３０００ＩＵのＩＬ−２を含む１５０ｍＬのＡＩＭ−Ｖを各フラスコに加え得る。G-Rex 100フラスコは、５％ＣＯ２下３７℃でインキュベートされ得、４日後、各G-Rex 100フラスコに１ｍＬあたり３０００ＩＵのＩＬ−２を含む１５０ｍＬのＡＩＭ−Ｖを加え得る。細胞は、培養１４日目に回収され得る。
【０６４３】
[001149]  一実施形態において、ＴＩＬは以下のように調製され得る。２ｍｍ３の腫瘍断片を、２ｍＭグルタミン（Mediatech, Inc.Manassas, VA）、１００Ｕ／ｍＬペニシリン（Invitrogen Life Technologies）、１００μｇ／ｍＬストレプトマイシン（Invitrogen Life Technologies）、５％熱不活性化ヒトＡＢ血清（Valley Biomedical, Inc.Winchester, VA）及び６００ＩＵ／ｍＬ  ｒｈＩＬ−２（Chiron, Emeryville, CA）を添加したＡＩＭ−Ｖ培地（Invitrogen Life Technologies, Carlsbad, CA）を含む完全培地（ＣＭ）中で培養する。固形腫瘍の酵素的消化のために、腫瘍標本をさいの目に切りRPMI-1640へ入れ、洗浄し、１５〜２２℃で５分間、８００ｒｐｍで遠心分離し、酵素的消化緩衝液（RPMI-1640中０．２ｍｇ／ｍＬコラゲナーゼ及び３０Ｕｎｉｔ／ｍｌのＤＮａｓｅ）に再懸濁し、続いて室温で一晩回転させる。断片から作製されたＴＩＬをＣＭ中で３〜４週間成長させ、新鮮に拡大培養させるか、又は１０％ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）を含む熱不活性化ＨＡＢ血清中で凍結保存し、研究時まで−１８０℃で保存し得る。腹水採取から入手した腫瘍関連リンパ球（ＴＡＬ）をＣＭ中２４ウェルプレートの３×１０６細胞／ウェルで播種した。低倍率倒立顕微鏡を使用して、ＴＩＬの増殖を隔日で検査した。
【０６４４】
[001150]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）を拡大培養する方法を含み、方法は、少なくとも１つのＴＩＬを含むＴＩＬ集団を本明細書に記載のＴＮＦＲＳＦアゴニストと接触させることを含み、ここで、前記ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、ＴＩＬの細胞表面上に発現された共刺激分子と特異的に結合する少なくとも１つの共刺激リガンドを含み、前記共刺激分子の前記共刺激リガンドとの結合は、ＴＩＬの増殖を誘導し、それによりＴＩＬを特異的に拡大培養する。
【０６４５】
[001151]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団を拡大培養させる方法であって、細胞培養培地中でＴＩＬ集団を１つ以上のＴＮＦＲＳＦアゴニストと接触させるステップを含む、方法を提供する。
【０６４６】
[001152]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団を拡大培養させる方法であって、細胞培養培地中でＴＩＬ集団を１つ以上のＴＮＦＲＳＦアゴニストと接触させるステップを含み、細胞培養培地中の１つ以上のＴＮＦＲＳＦアゴニストの濃度は、５０ｎｇ／ｍＬ、１００ｎｇ／ｍＬ、５００ｎｇ／ｍＬ、１μｇ／ｍＬ、５μｇ／ｍＬ、１０μｇ／ｍＬ、２０μｇ／ｍＬ、３０μｇ／ｍＬ、４０μｇ／ｍＬ、５０μｇ／ｍＬ、６０μｇ／ｍＬ、７０μｇ／ｍＬ、８０μｇ／ｍＬ、９０μｇ／ｍＬ及び１００μｇ／ｍＬからなる群から独立して選択される、方法を提供する。
【０６４７】
[001153]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団を拡大培養させる方法であって、細胞培養培地中でＴＩＬ集団を１つ以上のＴＮＦＲＳＦアゴニストと接触させるステップを含み、細胞培養培地は、初期濃度約３０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２及び初期濃度約３０ｎｇ／ｍＬのＯＫＴ−３抗体を更に含む、方法を提供する。
【０６４８】
[001154]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団を拡大培養させる方法であって、細胞培養培地中でＴＩＬ集団を１つ以上のサイトカインと接触させるステップを含み、細胞培養培地は、初期濃度約５０ｎｇ／ｍＬ〜５００ｎｇ／ｍＬのＩＬ−１５及び初期濃度約３０ｎｇ／ｍＬのＯＫＴ−３抗体を更に含む、方法を提供する。
【０６４９】
[001155]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団を拡大培養させる方法であって、細胞培養培地中でＴＩＬ集団を１つ以上のサイトカインと接触させるステップを含み、細胞培養培地は、初期濃度約５０ｎｇ／ｍＬ〜５００ｎｇ／ｍＬのＩＬ−１５、初期濃度約５０ｎｇ／ｍＬ〜５００ｎｇ／ｍＬのＩＬ−２１、初期濃度約３０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２及び初期濃度約３０ｎｇ／ｍＬのＯＫＴ−３抗体を更に含む、方法を提供する。
【０６５０】
[001156]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団を拡大培養させる方法であって、細胞培養培地中でＴＩＬ集団を１つ以上のＴＮＦＲＳＦアゴニストと接触させるステップを含み、細胞培養培地は、初期濃度約３０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２及び初期濃度約３０ｎｇ／ｍＬのＯＫＴ−３抗体を更に含み、１つ以上のＴＮＦＲＳＦアゴニストは、４−１ＢＢアゴニストを含む、方法を提供する。
【０６５１】
[001157]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団を拡大培養させる方法であって、細胞培養培地中でＴＩＬ集団を１つ以上のＴＮＦＲＳＦアゴニストと接触させるステップを含み、細胞培養培地は、初期濃度約３０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２及び初期濃度約３０ｎｇ／ｍＬのＯＫＴ−３抗体を更に含み、１つ以上のＴＮＦＲＳＦアゴニストは、ＯＸ４０アゴニストを含む、方法を提供する。
【０６５２】
[001158]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団を拡大培養させる方法であって、細胞培養培地中でＴＩＬ集団を１つ以上のＴＮＦＲＳＦアゴニストと接触させるステップを含み、細胞培養培地は、初期濃度約３０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２及び初期濃度約３０ｎｇ／ｍＬのＯＫＴ−３抗体を更に含み、１つ以上のＴＮＦＲＳＦアゴニストは、４−１ＢＢ及びＯＸ４０アゴニストを含む、方法を提供する。
【０６５３】
[001159]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団を拡大培養させる方法であって、細胞培養培地中でＴＩＬ集団を１つ以上のＴＮＦＲＳＦアゴニストと接触させるステップを含み、細胞培養培地は、初期濃度約３０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２及び初期濃度約３０ｎｇ／ｍＬのＯＫＴ−３抗体を更に含み、１つ以上のＴＮＦＲＳＦアゴニストは、ＣＤ２７アゴニストを含む、方法を提供する。
【０６５４】
[001160]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団を拡大培養させる方法であって、細胞培養培地中でＴＩＬ集団を１つ以上のＴＮＦＲＳＦアゴニストと接触させるステップを含み、細胞培養培地は、初期濃度約３０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２及び初期濃度約３０ｎｇ／ｍＬのＯＫＴ−３抗体を更に含み、１つ以上のＴＮＦＲＳＦアゴニストは、ＧＩＴＲアゴニストを含む、方法を提供する。
【０６５５】
[001161]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団を拡大培養させる方法であって、細胞培養培地中でＴＩＬ集団を１つ以上のＴＮＦＲＳＦアゴニストと接触させるステップを含み、細胞培養培地は、初期濃度約３０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２及び初期濃度約３０ｎｇ／ｍＬのＯＫＴ−３抗体を更に含み、１つ以上のＴＮＦＲＳＦアゴニストは、ＨＶＥＭアゴニストを含む、方法を提供する。
【０６５６】
[001162]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団を拡大培養させる方法であって、細胞培養培地中でＴＩＬ集団を１つ以上のＴＮＦＲＳＦアゴニストと接触させるステップを含み、細胞培養培地は、初期濃度約３０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２及び初期濃度約３０ｎｇ／ｍＬのＯＫＴ−３抗体を更に含み、１つ以上のＴＮＦＲＳＦアゴニストは、ＣＤ９５アゴニストを含む、方法を提供する。
【０６５７】
[001163]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団を拡大培養させる方法であって、細胞培養培地中でＴＩＬ集団を１つ以上のＴＮＦＲＳＦアゴニストと接触させるステップを含み、ＴＩＬ集団は、細胞培養培地中で７日間にわたって少なくとも５０倍となる、方法を提供する。
【０６５８】
[001164]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団を拡大培養させる方法であって、細胞培養培地中でＴＩＬ集団を１つ以上のＴＮＦＲＳＦアゴニストと接触させるステップを含み、ＴＩＬ集団は、細胞培養培地中で７日間にわたって少なくとも５０倍となり、拡大培養は、ガス透過性容器を使用して実施される、方法を提供する。
【０６５９】
[001165]  一実施形態において、ＲＥＰは、任意の適切な方法によって本開示のＴＮＦＲＳＦアゴニストを使用してガス透過性容器内で行うことができる。例えば、ＴＩＬは、インターロイキン−２（ＩＬ−２）又はインターロイキン−１５（ＩＬ−１５）の存在下で非特異的Ｔ細胞受容体刺激を用いて急速に拡大培養することができる。非特異的Ｔ細胞受容体刺激としては、例えば、約３０ｎｇ／ｍＬのＯＫＴ−３などの抗ＣＤ３抗体、モノクローナル抗ＣＤ３抗体（Ortho-McNeil、Raritan, NJ又はMiltenyi Biotech、Auburn, CAから市販されている）又はＵＨＣＴ−１（BioLegend、San Diego, CA, USAから市販されている）を挙げることができる。ＴＩＬは、任意選択により３００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２又はＩＬ−１５などのＴ細胞成長因子の存在下で任意選択によりヒト白血球抗原Ａ２（ＨＬＡ−Ａ２）結合ペプチド、例えば０．３μＭ  ＭＡＲＴ−１：２６−３５（２７Ｌ）又はｇｐｌ  ００：２０９−２１７（２１０Ｍ）などのベクターから発現させることができる、癌のエピトープなどのその抗原部分を含む１つ以上の抗原を用いてインビトロでＴＩＬを更に刺激することによって急速拡大培養させることができる。他の好適な抗原としては、例えば、ＮＹ−ＥＳＯ−１、ＴＲＰ−１、ＴＲＰ−２、チロシナーゼ癌抗原、ＭＡＧＥ−Ａ３、ＳＳＸ−２及びＶＥＧＦＲ２又はその抗原性部分を挙げることができる。ＴＩＬは、ＨＬＡ−Ａ２発現抗原提示細胞にパルスした癌の同じ１つ又は複数の抗原による再刺激によっても急速に拡大培養され得る。代わりに、ＴＩＬは、例えば、例として照射自己リンパ球によるか又は照射ＨＬＡ−Ａ２＋同種異系リンパ球及びＩＬ−２によって更に再刺激することができる。
【０６６０】
[001166]  一実施形態において、ＴＩＬを拡大培養させるための方法は、約５０００ｍＬ〜約２５０００ｍＬの細胞培養培地、約５０００ｍＬ〜約１００００ｍＬの細胞培養培地又は約５８００ｍＬ〜約８７００ｍＬの細胞培養培地を使用することを含み得る。一実施形態において、ＴＩＬを拡大培養させるための方法は、約１０００ｍＬ〜約２０００ｍＬの細胞培地、約２０００ｍＬ〜約３０００ｍＬの細胞培養培地、約３０００ｍＬ〜約４０００ｍＬの細胞培養培地、約４０００ｍＬ〜約５０００ｍＬの細胞培養培地、約５０００ｍＬ〜約６０００ｍＬの細胞培養培地、約６０００ｍＬ〜約７０００ｍＬの細胞培養培地、約７０００ｍＬ〜約８０００ｍＬの細胞培養培地、約８０００ｍＬ〜約９０００ｍＬの細胞培養培地、約９０００ｍＬ〜約１００００ｍＬの細胞培養培地、約１００００ｍＬ〜約１５０００ｍＬの細胞培養培地、約１５０００ｍＬ〜約２００００ｍＬの細胞培養培地又は約２００００ｍＬ〜約２５０００ｍＬの細胞培養培地を使用することを含み得る。一実施形態において、ＴＩＬ数の拡大には１種類以下の細胞培養培地が使用される。任意の好適な細胞培養培地、例えばＡＩＭ−Ｖ細胞培地（Ｌ−グルタミン、５０μＭ硫酸ストレプトマイシン及び１０μＭ硫酸ゲンタマイシン）細胞培養培地（Invitrogen、Carlsbad CA）を使用し得る。この点に関して、本発明の方法では有利には、ＴＩＬ数の拡大に必要な培地の量及び培地の種類の数が減少する。一実施形態において、ＴＩＬの数を拡大することは、３日又は４日に１回以下の頻度で細胞にフィードすることを含み得る。ガス透過性容器内の細胞数を増やすことは、細胞を拡大培養するのに必要なフィード頻度を減らすことによって細胞数を増やすのに必要な手順を単純化する。
【０６６１】
[001167]  一実施形態において、アデノシン２Ａ受容体アンタゴニストは、腫瘍断片と共に第１の培養培地に添加され、閉鎖系とされる。一実施形態において、アデノシン２Ａ受容体アンタゴニストは、ＣＰＩ−４４４又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグであり、アデノシン２Ａ受容体シグナル伝達を減衰させるのに十分な濃度で添加される。別の実施形態において、アデノシン２Ａ受容体アンタゴニストは、ＳＣＨ５８２６１又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグであり、アデノシン２Ａ受容体シグナル伝達を減衰させるのに十分な濃度で添加される。別の実施形態において、アデノシン２Ａ受容体アンタゴニストは、ＳＹＮ１１５又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグであり、アデノシン２Ａ受容体シグナル伝達を遮断するのに十分な濃度で添加される。別の実施形態において、アデノシン２Ａ受容体アンタゴニストは、ＺＭ２４１３８５又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグであり、アデノシン２Ａ受容体シグナル伝達を遮断するのに十分な濃度で添加される。別の実施形態において、アデノシン２Ａ受容体アンタゴニストは、ＳＣＨ４２０８１４又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグであり、アデノシン２Ａ受容体シグナル伝達を遮断するのに十分な濃度で添加される。別の実施形態において、アデノシン２Ａ受容体アンタゴニストは、７ＭＭＢファミリーＡ２ａＲ又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ、ファミリーメンバーであり、アデノシン２Ａ受容体シグナル伝達を遮断するのに十分な濃度で添加される。
【０６６２】
[001168]  一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、０．０１μＭ〜１０００μＭの濃度で第１の培養培地に添加される。一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、０．０１μＭ〜５００μＭの濃度で第１の培養培地に添加される。一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、０．０１μＭ〜１００μＭの濃度で第１の培養培地に添加される。一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、０．０１μＭ〜５０μＭの濃度で第１の培養培地に添加される。一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、０．０１μＭ〜５０μＭの濃度で第１の培養培地に添加される。一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、０．０１μＭ〜２５μＭの濃度で第１の培養培地に添加される。
【０６６３】
[001169]  一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、Ａ２ａＲ受容体が定常状態で少なくとも９５％占有される濃度で第１の培養培地に添加される。一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、Ａ２ａＲ受容体が定常状態で少なくとも８５％占有される濃度で第１の培養培地に添加される。一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、Ａ２ａＲ受容体が定常状態で少なくとも７５％占有される濃度で第１の培養培地に添加される。一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、Ａ２ａＲ受容体が定常状態で少なくとも５０％占有される濃度で第１の培養培地に添加される。
【０６６４】
[001170]  一部の実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、１０ｎＭ、２０ｎＭ、２５ｎＭ、３０ｎＭ、５０ｎＭ、６０ｎＭ、７５ｎＭ、８０ｎＭ、９０ｎＭ、１００ｎＭ、１２５ｎＭ、１５０ｎＭ、１７５ｎＭ、２００ｎＭ、２２５ｎＭ、２５０ｎＭ、２７５ｎＭ、３００ｎＭ、３２５ｎＭ、３７５ｎＭ、４００ｎＭ、４５０ｎＭ、５００ｎＭ、５５０ｎＭ、６００ｎＭ、６２５ｎＭ、６５０ｎＭ、６７５ｎＭ、７００ｎＭ、７２５ｎＭ、７５０ｎＭ、７７５ｎＭ、８００ｎＭ、８２５ｎＭ、８５０ｎＭ、８７５ｎＭ、９００ｎＭ、９２５ｎＭ、９５０ｎＭ、９７５ｎＭ、１０００ｎＭ、１１００ｎＭ、１２００ｎＭ、１３００ｎＭ、１４００ｎＭ、１５００ｎＭ、１６００ｎＭ、１７００ｎＭ、１８００ｎＭ、１９００ｎＭ、２０００ｎＭ、２．５μＭ、３μＭ、４μＭ、５μＭ、６μＭ、７μＭ、８μＭ、９μＭ、１０μＭ、１２．５μＭ、１５μＭ、１８μＭ、２０μＭ及び２５μＭからなる群から選択される１００，０００細胞あたりの濃度で第１の培養培地に添加される。
【０６６５】
[001171]  一部の実施形態において、第１の培養培地中の遊離アデノシンのＡ２ａＲアンタゴニストに対する比は、少なくとも１：５である。一部の実施形態において、第１の培養培地中の遊離アデノシンのＡ２ａＲアンタゴニストに対する比は、少なくとも１：５〜約１：１００である。一部の実施形態において、第１の培養培地中の遊離アデノシンのＡ２ａＲアンタゴニストに対する比は、少なくとも１：５〜約１：５０である。一部の実施形態において、第１の培養培地中の遊離アデノシンのＡ２ａＲアンタゴニストに対する比は、少なくとも１：５〜約１：２５である。一部の実施形態において、第１の培養培地中の遊離アデノシンのＡ２ａＲアンタゴニストに対する比は、約１：１０である。
【０６６６】
[001172]  一部の実施形態において、第１の細胞培養培地は、少なくとも２つのＡ２ａＲアンタゴニストを含む。更なる一実施形態において、第１のＡ２ａＲアンタゴニストは、ＣＰＩ−４４４又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグであり、第２のＡ２ａＲアンタゴニストは、キサンチンファミリーＡ２ａＲアンタゴニスト又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグである。
【０６６７】
[001173]  一実施形態において、アデノシン２Ａ受容体アンタゴニストは、腫瘍断片と共に第２の培養培地に添加され、閉鎖系とされる。一実施形態において、アデノシン２Ａ受容体アンタゴニストは、ＣＰＩ−４４４又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグであり、アデノシン２Ａ受容体シグナル伝達を遮断するのに十分な濃度で添加される。別の実施形態において、アデノシン２Ａ受容体アンタゴニストは、ＳＣＨ５８２６１又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグであり、アデノシン２Ａ受容体シグナル伝達を遮断するのに十分な濃度で添加される。別の実施形態において、アデノシン２Ａ受容体アンタゴニストは、ＳＹＮ１１５又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグであり、アデノシン２Ａ受容体シグナル伝達を遮断するのに十分な濃度で添加される。別の実施形態において、アデノシン２Ａ受容体アンタゴニストは、ＺＭ２４１３８５又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグであり、アデノシン２Ａ受容体シグナル伝達を遮断するのに十分な濃度で添加される。別の実施形態において、アデノシン２Ａ受容体アンタゴニストは、ＳＣＨ４２０８１４又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグであり、アデノシン２Ａ受容体シグナル伝達を遮断するのに十分な濃度で添加される。別の実施形態において、アデノシン２Ａ受容体アンタゴニストは、７ＭＭＢファミリーメンバー又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ、ファミリーメンバーであり、アデノシン２Ａ受容体シグナル伝達を遮断するのに十分な濃度で添加される。
【０６６８】
[001174]  一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、０．０１μＭ〜１０００μＭの濃度で第２の培養培地に添加される。一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、０．０１μＭ〜５００μＭの濃度で第２の培養培地に添加される。一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、０．０１μＭ〜１００μＭの濃度で第２の培養培地に添加される。一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、０．０１μＭ〜５０μＭの濃度で第２の培養培地に添加される。一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、０．０１μＭ〜５０μＭの濃度で第２の培養培地に添加される。一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、０．０１μＭ〜２５μＭの濃度で第２の培養培地に添加される。
【０６６９】
[001175]  一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、Ａ２ａＲ受容体が定常状態で少なくとも９５％占有される濃度で第２の培養培地に添加される。一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、Ａ２ａＲ受容体が定常状態で少なくとも８５％占有される濃度で第２の培養培地に添加される。一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、Ａ２ａＲ受容体が定常状態で少なくとも７５％占有される濃度で第２の培養培地に添加される。一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、Ａ２ａＲ受容体が定常状態で少なくとも５０％占有される濃度で第２の培養培地に添加される。
【０６７０】
[001176]  一部の実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、１０ｎＭ、２０ｎＭ、２５ｎＭ、３０ｎＭ、５０ｎＭ、６０ｎＭ、７５ｎＭ、８０ｎＭ、９０ｎＭ、１００ｎＭ、１２５ｎＭ、１５０ｎＭ、１７５ｎＭ、２００ｎＭ、２２５ｎＭ、２５０ｎＭ、２７５ｎＭ、３００ｎＭ、３２５ｎＭ、３７５ｎＭ、４００ｎＭ、４５０ｎＭ、５００ｎＭ、５５０ｎＭ、６００ｎＭ、６２５ｎＭ、６５０ｎＭ、６７５ｎＭ、７００ｎＭ、７２５ｎＭ、７５０ｎＭ、７７５ｎＭ、８００ｎＭ、８２５ｎＭ、８５０ｎＭ、８７５ｎＭ、９００ｎＭ、９２５ｎＭ、９５０ｎＭ、９７５ｎＭ、１０００ｎＭ、１１００ｎＭ、１２００ｎＭ、１３００ｎＭ、１４００ｎＭ、１５００ｎＭ、１６００ｎＭ、１７００ｎＭ、１８００ｎＭ、１９００ｎＭ、２０００ｎＭ、２．５μＭ、３μＭ、４μＭ、５μＭ、６μＭ、７μＭ、８μＭ、９μＭ、１０μＭ、１２．５μＭ、１５μＭ、１８μＭ、２０μＭ、２５μＭ、３０μＭ、３５μＭ、４０μＭ、４５μＭ及び５０μＭからなる群から選択される１００，０００細胞あたりの濃度で第２の培養培地に添加される。
【０６７１】
[001177]  一部の実施形態において、第２の培養培地中の遊離アデノシンのＡ２ａＲアンタゴニストに対する比は、少なくとも１：５である。一部の実施形態において、第２の培養培地中の遊離アデノシンのＡ２ａＲアンタゴニストに対する比は、少なくとも１：５〜約１：１００である。一部の実施形態において、第２の培養培地中の遊離アデノシンのＡ２ａＲアンタゴニストに対する比は、少なくとも１：５〜約１：５０である。一部の実施形態において、第２の培養培地中の遊離アデノシンのＡ２ａＲアンタゴニストに対する比は、少なくとも１：５〜約１：２５である。一部の実施形態において、第２の培養培地中の遊離アデノシンのＡ２ａＲアンタゴニストに対する比は、約１：１０である。
【０６７２】
[001178]  一実施形態において、アデノシン２ａ受容体アンタゴニストは、第１の拡大培養の培養培地に添加される。更なる一実施形態において、アデノシン２ａ受容体アンタゴニストは、第１の拡大培養の培養培地に添加され、アデノシン２Ａ受容体シグナル伝達を遮断するのに十分な濃度で存在する。一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、初期拡大培養中、毎日、２日ごと、３日ごと、４日ごと、５日ごと、６日ごと、７日ごと及び２週間ごとからなる群から選択される間隔で第１の細胞培養培地に添加される。
【０６７３】
[001179]  別の実施形態において、アデノシン２ａ受容体アンタゴニストは、第２の拡大培養の培養培地に添加される。更なる一実施形態において、アデノシン２ａ受容体アンタゴニストは、第２の拡大培養の培養培地に添加され、アデノシン２Ａ受容体シグナル伝達を減衰させるのに十分な濃度で存在する。更なる一実施形態において、アデノシン２ａ受容体アンタゴニストは、第２の拡大培養の培養培地に添加され、アデノシン２Ａ受容体シグナル伝達を遮断するのに十分な濃度で存在する。
【０６７４】
[001180]  一部の実施形態において、アデノシン２ａ受容体アンタゴニストは、第２のＴＩＬ集団に添加されて、第３のＴＩＬ集団を生成する。特定の一実施形態において、第２のＴＩＬ集団に添加されて第３のＴＩＬ集団を生成するアデノシン２ａ受容体アンタゴニストは、ＣＰＩ−４４４又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグである。別の実施形態において、第２のＴＩＬ集団に添加されて第３のＴＩＬ集団を生成するアデノシン２ａ受容体アンタゴニストは、ＳＣＨ５８２６１又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグである。別の実施形態において、第２のＴＩＬ集団に添加されて第３のＴＩＬ集団を生成するアデノシン２ａ受容体アンタゴニストは、ＳＹＮ１１５又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグである。別の実施形態において、第２のＴＩＬ集団に添加されて第３のＴＩＬ集団を生成するアデノシン２ａ受容体アンタゴニストは、ＺＭ２４１３８５又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグである。別の実施形態において、第２のＴＩＬ集団に添加されて第３のＴＩＬ集団を生成するアデノシン２ａ受容体アンタゴニストは、ＳＣＨ４２０８１４又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグである。別の実施形態において、第２のＴＩＬ集団に添加されて第３のＴＩＬ集団を生成するアデノシン２ａ受容体アンタゴニストは、７ＭＭＢファミリーメンバー又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグである。
【０６７５】
[001181]  一部の実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、最小のＣＮＳ浸透度を有する。
【０６７６】
[001182]  一実施形態において、急速拡大培養は、ガス透過性容器を使用して実施される。そのような実施形態は、細胞集団が約５×１０５細胞／ｃｍ２から１０×１０６〜３０×１０６細胞／ｃｍ２に拡大培養することを可能にする。一実施形態において、この拡大培養はフィードなしで発生する。一実施形態において、この拡大培養は、培地がガス透過性フラスコ内で約１０ｃｍの高さにある限り、フィードなしで発生する。一実施形態において、これは、フィードなしであるが、１つ以上のサイトカインの添加を伴う。一実施形態において、サイトカインを培地と混合する必要なく、サイトカインをボーラスとして添加することができる。そのような容器、装置及び方法は、当技術分野において公知であり、ＴＩＬの拡大培養に使用されており、米国特許出願公開第２０１４／０３７７７３９Ａ１号、国際公開第２０１４／２１００３６Ａ１号、米国特許出願公開第２０１３／０１１５６１７Ａ１号、国際公開第２０１３／１８８４２７Ａ１号、米国特許出願公開第２０１１／０１３６２２８Ａ１号、米国特許第８，８０９，０５０号、国際公開第２０１１／０７２０８８Ａ２号、米国特許出願公開第２０１６／０２０８２１６Ａ１号、米国特許出願公開第２０１２／０２４４１３３Ａ１号、国際公開第２０１２／１２９２０１Ａ１号、米国特許出願公開第２０１３／０１０２０７５Ａ１号、米国特許第８，９５６，８６０号、国際公開第２０１３／１７３８３５Ａ１号及び米国特許出願公開第２０１５／０１７５９６６Ａ１号に記載されているものを含み、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。そのようなプロセスは、Jin, et al., J. Immunotherapy 2012, 35, 283-292にも記載され、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。
【０６７７】
[001183]  一実施形態において、ガス透過性容器は、G-Rex 10フラスコ（Wilson Wolf Manufacturing Corporation, New Brighton, MN, USA）である。一実施形態において、ガス透過性容器は、１０ｃｍ２のガス透過性培養表面を含む。一実施形態において、ガス透過性容器は、４０ｍＬの細胞培養培地容量を含む。一実施形態において、ガス透過性容器は、２回の培地交換後、１億〜３億のＴＩＬを提供する。
【０６７８】
[001184]  一実施形態において、ガス透過性容器は、G-Rex 100フラスコ（Wilson Wolf Manufacturing Corporation, New Brighton, MN, USA）である。一実施形態において、ガス透過性容器は、１００ｃｍ２のガス透過性培養表面を含む。一実施形態において、ガス透過性容器は、４５０ｍＬの細胞培養培地容量を含む。一実施形態において、ガス透過性容器は、２回の培地交換後、１０億〜３０億のＴＩＬを提供する。
【０６７９】
[001185]  一実施形態において、ガス透過性容器は、G-Rex 100Mフラスコ（Wilson Wolf Manufacturing Corporation, New Brighton, MN, USA）である。一実施形態において、ガス透過性容器は、１００ｃｍ２のガス透過性培養表面を含む。一実施形態において、ガス透過性容器は、１０００ｍＬの細胞培養培地容量を含む。一実施形態において、ガス透過性容器は、培地交換なしで１０億〜３０億のＴＩＬを提供する。
【０６８０】
[001186]  一実施形態において、ガス透過性容器は、G-Rex 100Lフラスコ（Wilson Wolf Manufacturing Corporation, New Brighton, MN, USA）である。一実施形態において、ガス透過性容器は、１００ｃｍ２のガス透過性培養表面を含む。一実施形態において、ガス透過性容器は、２０００ｍＬの細胞培養培地容量を含む。一実施形態において、ガス透過性容器は、培地交換なしで１０億〜３０億のＴＩＬを提供する。
【０６８１】
[001187]  一実施形態において、ガス透過性容器は、G-Rex 24ウェルプレート（Wilson Wolf Manufacturing Corporation, New Brighton, MN, USA）である。一実施形態において、ガス透過性容器は、ウェルを有するプレートを含み、各ウェルは、２ｃｍ２のガス透過性培養表面を含む。一実施形態において、ガス透過性容器は、ウェルを有するプレートを含み、各ウェルは、８ｍＬの細胞培養培地容量を含む。一実施形態において、ガス透過性容器は、２回の培地交換後、１ウェルあたり２０００万〜６０００万個の細胞を提供する。
【０６８２】
[001188]  一実施形態において、ガス透過性容器は、G-Rex 6ウェルプレート（Wilson Wolf Manufacturing Corporation, New Brighton, MN, USA）である。一実施形態において、ガス透過性容器は、ウェルを有するプレートを含み、各ウェルは、１０ｃｍ２のガス透過性培養表面を含む。一実施形態において、ガス透過性容器は、ウェルを有するプレートを含み、各ウェルは、４０ｍＬの細胞培養培地容量を含む。一実施形態において、ガス透過性容器は、２回の培地交換後、１ウェルあたり１億〜３億個の細胞を提供する。
【０６８３】
[001189]  一実施形態において、第１及び／又は第２のガス透過性容器内の細胞培地は濾過されていない。濾過されていない細胞培地の使用は、細胞数を拡大培養させるために必要な手順を単純化し得る。一実施形態において、第１及び／又は第２のガス透過性容器内の細胞培地は、ベータ−メルカプトエタノール（ＢＭＥ）を欠いている。
【０６８４】
[001190]  一実施形態において、哺乳類から腫瘍組織試料を入手すること；細胞培地が中に入った第１のガス透過性容器内で腫瘍組織試料を培養すること；腫瘍組織試料からＴＩＬを入手すること；ＴＮＦＲＳＦアゴニストを使用して細胞培地が中に入った第２のガス透過性容器内でＴＩＬ数を約１４〜約４２日間、例えば約２８日間拡大することを含む本方法の所要期間である。
【０６８５】
[001191]  一実施形態において、急速拡大培養におけるＴＩＬとＴＮＦＲＳＦアゴニストとの比（細胞対モル）は、約１対２５、約１対５０、約１対１００、約１対１２５、約１対１５０、約１対１７５、約１対２００、約１対２２５、約１対２５０、約１対２７５、約１対３００、約１対３２５、約１対３５０、約１対５００、約１対１０００又は約１対１００００である。一実施形態において、急速拡大培養におけるＴＩＬ対ＴＮＦＲＳＦアゴニストの比は、１：５０〜１：３００である。一実施形態において、急速拡大培養におけるＴＩＬ対ＴＮＦＲＳＦアゴニストの比は、１：１００〜１：２００である。
【０６８６】
[001192]  一実施形態において、ＴＩＬとＴＮＦＲＳＦアゴニストの比（ＴＩＬ：ＴＮＦＲＳＦアゴニスト、細胞対モル）は、１：５、１：１０、１：１５、１：２０、１：２５、１：３０、１：３５、１：４０、１：４５、１：５０、１：５５、１：６０、１：６５、１：７０、１：７５、１：８０、１：８５、１：９０、１：９５、１：１００、１：１０５、１：１１０、１：１１５、１：１２０、１：１２５、１：１３０、１：１３５、１：１４０、１：１４５、１：１５０、１：１５５、１：１６０、１：１６５、１：１７０、１：１７５、１：１８０、１：１８５、１：１９０、１：１９５、１：２００、１：２２５、１：２５０、１：２７５、１：３００、１：３５０、１：４００、１：４５０、１：５００、１：１０００、１：５０００、１：１００００及び１：５００００からなる群から選択される。
【０６８７】
[001193]  一実施形態において、ＴＩＬはガス透過性容器内で拡大培養する。米国特許出願公開第２００５／０１０６７１７Ａ１号に記載されているものを含む、当技術分野で公知の方法、組成物及び装置を使用して、ＰＢＭＣを使用してＴＩＬを拡大培養するために、ガス透過性容器が使用されており、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。一実施形態において、ＴＩＬはガス透過性バッグ内で拡大培養する。一実施形態において、ＴＩＬは、Xuri Cell Expansion System W25（GE Healthcare）などのガス透過性バッグ内でＴＩＬを拡大培養する細胞拡大培養システムを使用して拡大培養される。一実施形態において、ＴＩＬは、Xuri Cell Expansion System W5（GE Healthcare）としても知られるWAVE Bioreactor Systemなど、ガス透過性バッグ内でＴＩＬを拡大培養する細胞拡大培養システムを使用して拡大培養される。一実施形態において、細胞拡大培養システムは、約１００ｍＬ、約２００ｍＬ、約３００ｍＬ、約４００ｍＬ、約５００ｍＬ、約６００ｍＬ、約７００ｍＬ、約８００ｍＬ、約９００ｍＬ、約１Ｌ、約２Ｌ、約３Ｌ、約４Ｌ、約５Ｌ、約６Ｌ、約７Ｌ、約８Ｌ、約９Ｌ、約１０Ｌ、約１１Ｌ、約１２Ｌ、約１３Ｌ、約１４Ｌ、約１５Ｌ、約１６Ｌ、約１７Ｌ、約１８Ｌ、約１９Ｌ、約２０Ｌ、約２５Ｌ及び約３０Ｌからなる群から選択される容積を有するガス透過性細胞バッグを含む。一実施形態において、細胞拡大培養システムは、５０〜１５０ｍＬ、１５０〜２５０ｍＬ、２５０〜３５０ｍＬ、３５０〜４５０ｍＬ、４５０〜５５０ｍＬ、５５０〜６５０ｍＬ、６５０〜７５０ｍＬ、７５０〜８５０ｍＬ、８５０〜９５０ｍＬ及び９５０〜１０５０ｍＬからなる群から選択される範囲の容積を有するガス透過性細胞バッグを含む。一実施形態において、細胞拡大培養システムは、１Ｌ〜２Ｌ、２Ｌ〜３Ｌ、３Ｌ〜４Ｌ、４Ｌ〜５Ｌ、５Ｌ〜６Ｌ、６Ｌ〜７Ｌ、７Ｌ〜８Ｌ、８Ｌ〜９Ｌ、９Ｌ〜１０Ｌ、１０Ｌ〜１１Ｌ、１１Ｌ〜１２Ｌ、１２Ｌ〜１３Ｌ、１３Ｌ〜１４Ｌ、１４Ｌ〜１５Ｌ、１５Ｌ〜１６Ｌ、１６Ｌ〜１７Ｌ、１７Ｌ〜１８Ｌ、１８Ｌ〜１９Ｌ及び１９Ｌ〜２０Ｌからなる群から選択される範囲の容積を有するガス透過性細胞バッグを含む。一実施形態において、細胞拡大培養システムは、０．５Ｌ〜５Ｌ、５Ｌ〜１０Ｌ、１０Ｌ〜１５Ｌ、１５Ｌ〜２０Ｌ、２０Ｌ〜２５Ｌ及び２５Ｌ〜３０Ｌからなる群から選択される範囲の容積を有するガス透過性細胞バッグを含む。一実施形態において、細胞拡大培養システムは、約３０分、約１時間、約２時間、約３時間、約４時間、約５時間、約６時間、約７時間、約８時間、約９時間、約１０時間、約１１時間、約１２時間、約２４時間、約２日、約３日、約４日、約５日、約６日、約７日、約８日、約９日、約１０日、約１１日、約１２日、約１３日、約１４日、約１５日、約１６日、約１７日、約１８日、約１９日、約２０日、約２１日、約２２日、約２３日、約２４日、約２５日、約２６日、約２７日及び約２８日の揺動時間を用いる。一実施形態において、細胞拡大培養システムは、３０分〜１時間、１時間〜１２時間、１２時間〜１日、１日〜７日、７日〜１４日、１４日〜２１日及び２１日〜２８日の揺動時間を用いる。一実施形態において、細胞拡大培養システムは、約２揺動／分、約５揺動／分、約１０揺動／分、約２０揺動／分、約３０揺動／分及び約４０揺動／分の揺動速度を用いる。一実施形態において、細胞拡大培養システムは、２揺動／分〜５揺動／分、５揺動／分〜１０揺動／分、１０揺動／分〜２０揺動／分、２０揺動／分〜３０揺動／分及び３０揺動／分〜４０揺動／分の揺動速度を用いる。一実施形態において、細胞拡大培養システムは、約２°、約３°、約４°、約５°、約６°、約７°、約８°、約９°、約１０°、約１１°及び約１２°の揺動角を用いる。一実施形態において、細胞拡大培養システムは、２°〜３°、３°〜４°、４°〜５°、５°〜６°、６°〜７°、７°〜８°、８°〜９°、９°〜１０°、１０°〜１１°及び１１°〜１２°の揺動角を用いる。
【０６８８】
[001194]  一実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストを使用してＴＩＬを拡大培養する方法は、ＴＩＬが優れた腫瘍反応性について選択されるステップを更に含む。当技術分野において公知の任意の選択方法を用いることができる。例えば、その開示が参照により本明細書に組み込まれる米国特許出願公開第２０１６／００１００５８Ａ１号に記載されている方法は、優れた腫瘍反応性に関するＴＩＬの選択に使用され得る。
【０６８９】
[001195]  一実施形態において、細胞培養培地はＯＫＴ−３抗体を更に含む。好ましい一実施形態において、細胞培養培地は、約３０ｎｇ／ｍＬのＯＫＴ−３抗体を含む。一実施形態において、細胞培養培地は、約０．１ｎｇ／ｍＬ、約０．５ｎｇ／ｍＬ、約１ｎｇ／ｍＬ、約２．５ｎｇ／ｍＬ、約５ｎｇ／ｍＬ、約７．５ｎｇ／ｍＬ、約１０ｎｇ／ｍＬ、約１５ｎｇ／ｍＬ、約２０ｎｇ／ｍＬ、約２５ｎｇ／ｍＬ、約３０ｎｇ／ｍＬ、約３５ｎｇ／ｍＬ、約４０ｎｇ／ｍＬ、約５０ｎｇ／ｍＬ、約６０ｎｇ／ｍＬ、約７０ｎｇ／ｍＬ、約８０ｎｇ／ｍＬ、約９０ｎｇ／ｍＬ、約１００ｎｇ／ｍＬ、約２００ｎｇ／ｍＬ、約５００ｎｇ／ｍＬ及び約１μｇ／ｍＬのＯＫＴ−３抗体を含む。一実施形態において、細胞培養培地は、０．１ｎｇ／ｍＬ〜１ｎｇ／ｍＬ、１ｎｇ／ｍＬ〜５ｎｇ／ｍＬ、５ｎｇ／ｍＬ〜１０ｎｇ／ｍＬ、１０ｎｇ／ｍＬ〜２０ｎｇ／ｍＬ、２０ｎｇ／ｍＬ〜３０ｎｇ／ｍＬ、３０ｎｇ／ｍＬ〜４０ｎｇ／ｍＬ、４０ｎｇ／ｍＬ〜５０ｎｇ／ｍＬ又は５０ｎｇ／ｍＬ〜１００ｎｇ／ｍＬのＯＫＴ−３抗体を含む。一実施形態において、細胞培養培地は、１０ｎｇ／ｍＬ〜６０ｎｇ／ｍＬのＯＫＴ−３抗体を含む。
【０６９０】
[001196]  一実施形態において、細胞培養培地は、ＩＬ−２を更に含む。好ましい一実施形態において、細胞培養培地は、約３０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２を含む。一実施形態において、細胞培養培地は、約５００ＩＵ／ｍＬ、約７００ＩＵ／ｍＬ、約８００ＩＵ／ｍＬ、約１０００ＩＵ／ｍＬ、約１１００ＩＵ／ｍＬ、約１２００ＩＵ／ｍＬ、約１５００ＩＵ／ｍＬ、約２０００ＩＵ／ｍＬ、約２５００ＩＵ／ｍＬ、約３０００ＩＵ／ｍＬ、約３５００ＩＵ／ｍＬ、約４０００ＩＵ／ｍＬ、約４５００ＩＵ／ｍＬ、約５０００ＩＵ／ｍＬ、約５５００ＩＵ／ｍＬ、約６０００ＩＵ／ｍＬ、約６５００ＩＵ／ｍＬ、約７０００ＩＵ／ｍＬ、約７５００ＩＵ／ｍＬ又は約８０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２を含む。一実施形態において、細胞培養培地は、５００〜１０００ＩＵ／ｍＬ、８００〜１２００ＩＵ／ｍＬ、１０００〜２０００ＩＵ／ｍＬ、２０００〜３０００ＩＵ／ｍＬ、３０００〜４０００ＩＵ／ｍＬ、４０００〜５０００ＩＵ／ｍＬ、５０００〜６０００ＩＵ／ｍＬ、６０００〜７０００ＩＵ／ｍＬ、７０００〜８０００ＩＵ／ｍＬ又は８０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２を含む。一実施形態において、細胞培養培地は、１０〜６０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２を含む。一実施形態において、細胞培養培地は、５００〜２０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２を含む。一実施形態において、細胞培養培地は、８００〜１１００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２を含む。
【０６９１】
[001197]  一実施形態において、細胞培養培地は、例えば、国際公開第２０１５／１８９３５６  Ａ１号及び同第２０１５／１８９３５６  Ａ１号に記載されるように、ＩＬ−１５を更に含み、そのそれぞれの開示は、参照により本明細書に組み込まれる。一実施形態において、細胞培養培地は、約０．１ｎｇ／ｍＬ、約０．５ｎｇ／ｍＬ、約１ｎｇ／ｍＬ、約２．５ｎｇ／ｍＬ、約５ｎｇ／ｍＬ、約７．５ｎｇ／ｍＬ、約１０ｎｇ／ｍＬ、約１５ｎｇ／ｍＬ、約２０ｎｇ／ｍＬ、約２５ｎｇ／ｍＬ、約３０ｎｇ／ｍＬ、約３５ｎｇ／ｍＬ、約４０ｎｇ／ｍＬ、約５０ｎｇ／ｍＬ、約６０ｎｇ／ｍＬ、約７０ｎｇ／ｍＬ、約８０ｎｇ／ｍＬ、約９０ｎｇ／ｍＬ、約１００ｎｇ／ｍＬ、約２００ｎｇ／ｍＬ、約５００ｎｇ／ｍＬ又は約１μｇ／ｍＬのＩＬ−１５を含む。一実施形態において、細胞培養培地は、０．１ｎｇ／ｍＬ〜１００ｎｇ／ｍＬ、２ｎｇ／ｍＬ〜５０ｎｇ／ｍＬ又は５ｎｇ／ｍＬ〜２５ｎｇ／ｍＬのＩＬ−１５を含む。一実施形態において、細胞培養培地は、１０ｎｇ／ｍＬ〜２０ｎｇ／ｍＬ、２０ｎｇ／ｍＬ〜３０ｎｇ／ｍＬ、３０ｎｇ／ｍＬ〜４０ｎｇ／ｍＬ、４０ｎｇ／ｍＬ〜５０ｎｇ／ｍＬ、５０ｎｇ／ｍＬ〜６０ｎｇ／ｍＬ、６０ｎｇ／ｍＬ〜７０ｎｇ／ｍＬ、７０ｎｇ／ｍＬ〜８０ｎｇ／ｍＬ、８０ｎｇ／ｍＬ〜９０又は９０ｎｇ／ｍＬ〜１００ｎｇ／ｍＬのＩＬ−１５を含む。
【０６９２】
[001198]  一実施形態において、細胞培養培地は、例えば、国際公開第２０１５／１８９３５６  Ａ１号及び同第２０１５／１８９３５６  Ａ１号に記載されるように、ＩＬ−２１を更に含み、そのそれぞれの開示は、参照により本明細書に組み込まれる。一実施形態において、細胞培養培地は、約０．１ｎｇ／ｍＬ、約０．５ｎｇ／ｍＬ、約１ｎｇ／ｍＬ、約２．５ｎｇ／ｍＬ、約５ｎｇ／ｍＬ、約７．５ｎｇ／ｍＬ、約１０ｎｇ／ｍＬ、約１５ｎｇ／ｍＬ、約２０ｎｇ／ｍＬ、約２５ｎｇ／ｍＬ、約３０ｎｇ／ｍＬ、約３５ｎｇ／ｍＬ、約４０ｎｇ／ｍＬ、約５０ｎｇ／ｍＬ、約６０ｎｇ／ｍＬ、約７０ｎｇ／ｍＬ、約８０ｎｇ／ｍＬ、約９０ｎｇ／ｍＬ、約１００ｎｇ／ｍＬ、約２００ｎｇ／ｍＬ、約５００ｎｇ／ｍＬ又は約１μｇ／ｍＬのＩＬ−２１を含む。一実施形態において、細胞培養培地は、０．１ｎｇ／ｍＬ〜１００ｎｇ／ｍＬ、２ｎｇ／ｍＬ〜５０ｎｇ／ｍＬ又は５ｎｇ／ｍＬ〜２５ｎｇ／ｍＬのＩＬ−２１を含む。一実施形態において、細胞培養培地は、１０ｎｇ／ｍＬ〜２０ｎｇ／ｍＬ、２０ｎｇ／ｍＬ〜３０ｎｇ／ｍＬ、３０ｎｇ／ｍＬ〜４０ｎｇ／ｍＬ、４０ｎｇ／ｍＬ〜５０ｎｇ／ｍＬ、５０ｎｇ／ｍＬ〜６０ｎｇ／ｍＬ、６０ｎｇ／ｍＬ〜７０ｎｇ／ｍＬ、７０ｎｇ／ｍＬ〜８０ｎｇ／ｍＬ、８０ｎｇ／ｍＬ〜９０又は９０ｎｇ／ｍＬ〜１００ｎｇ／ｍＬのＩＬ−２１を含む。
【０６９３】
[001199]  一実施形態において、細胞培養培地は、ＩＬ−４及び／又はＩＬ−７を更に含む。
【０６９４】
[001200]  一実施形態において、本発明のＴＮＦＲＳＦアゴニストは、Ｔ細胞を拡大培養させるために使用され得る。ＴＩＬの拡大培養について記載された本発明の任意の前述の実施形態は、Ｔ細胞の拡大培養にも適用され得る。一実施形態において、本発明のＴＮＦＲＳＦアゴニストは、ＣＤ８＋Ｔ細胞を拡大培養させるために使用され得る。一実施形態において、本発明のＴＮＦＲＳＦアゴニストは、ＣＤ４＋Ｔ細胞を拡大培養させるために使用され得る。一実施形態において、本発明のＴＮＦＲＳＦアゴニストは、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ−Ｔ）で形質導入されたＴ細胞を拡大培養させるために使用され得る。一実施形態において、本発明のＴＮＦＲＳＦアゴニストは、改変Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）を含むＴ細胞を拡大培養させるために使用され得る。ＣＡＲ−Ｔ細胞は、当技術分野において、例えばその開示が参照により本明細書に組み込まれる米国特許第７，０７０，９９５号、同第７，４４６，１９０号、同第８，３９９，６４５号、同第８，９１６，３８１号；及び同第９，３２８，１５６号において説明されているように、ＣＤ１９を含む任意の適切な抗原に対して標的化され得る。改変ＴＣＲ細胞は、当技術分野において、例えばその開示が参照により本明細書に組み込まれる米国特許第８，３６７，８０４号及び同第７，５６９，６６４号において説明されているように、ＮＹ−ＥＳＯ−１、ＴＲＰ−１、ＴＲＰ−２、チロシナーゼ癌抗原、ＭＡＧＥ−Ａ３、ＳＳＸ−２及びＶＥＧＦＲ２又はそれらの抗原部分を含む任意の適切な抗原に対して標的化され得る。
【０６９５】
[001201]  別の実施形態において、プロセス２Ａとして知られる例示的なＴＩＬ製造／拡大培養プロセスは、図３に概略的に示されている。特定の態様において、本方法は、対象／患者への投与時に複製サイクルを増加させることができるＴＩＬを産生し、したがって、成熟ＴＩＬ（即ち被験者／患者への投与前に更に多くの回数の複製を受けたＴＩＬ）を超える追加の治療上の利点を提供し得る。幼若ＴＩＬの特徴が、文献に記載されている。例えば、Donia, at al., Scandinavian Journal of Immunology, 75:157-167 (2012)；Dudley et al., Clin Cancer Res, 16:6122-6131 (2010)；Huang et al., J Immunother, 28(3):258-267 (2005)；Besser et al., Clin Cancer Res, 19(17):OF1-OF9 (2013)；Besser et al., J Immunother 32:415-423 (2009)；Robbins, et al., J Immunol 2004; 173:7125-7130；Shen et al., J Immunother, 30:123-129 (2007)；Zhou, et al., J Immunother, 28:53-62 (2005)；及びTran, et al., J Immunother, 31:742-751 (2008)であり、これらは、全て参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０６９６】
[001202]  本明細書において考察される通り、本発明は、患者への移植前に凍結保存ＴＩＬを再刺激することによりその代謝活性、ひいては相対的健康を増加させること及び前記代謝的健康の試験方法に関するステップを含み得る。一般的に本明細書に概説される通り、ＴＩＬは、一般的に患者サンプルから採取し、操作することにより、患者への移植前にその数が拡大される。一部の実施形態において、ＴＩＬは任意選択により、以下に考察する通り、遺伝的に操作され得る。
【０６９７】
[001203]  一部の実施形態において、ＴＩＬは凍結保存され得る。解凍後、ＴＩＬは、患者への注入前に、その代謝を高めるために再刺激され得る。
【０６９８】
[001204]  一部の実施形態において、ＴＩＬは、少なくとも１つのＡ２ａＲアンタゴニストを含む培地で凍結保存され得る。一部の実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、ＣＰＩ−４４４又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ又はそれらの組み合わせである。一部の実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、キサンチンファミリーＡ２ａＲアンタゴニスト又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ又はそれらの組み合わせである。一部の実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、ＣＰＩ−４４４、ＳＣＨ５８２６１、ＺＭ４２０８１４、ＳＹＮ１１５、８−ＣＳＣ、ＫＷ−６００２、Ａ２Ａ受容体アンタゴニスト１、ＡＤＺ４６３５、ビパデナント、ＳＴ４２０６、ＫＦ２１２１３、ＳＣＨ４１２３４８、７ＭＭＧ−７９又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせからなる群から選択される。
【０６９９】
[001205]  一部の実施形態において、以下並びに実施例及び図で詳細に考察する通り、第１の拡大培養（プレＲＥＰと称されるプロセスを含む）は、従来の拡大培養法と比較して、７〜１４日に短縮され、第２の拡大培養（ＲＥＰと称されるプロセスを含む）は、７〜１４日間に短縮される。
【０７００】
[001206]  図４は、例示的な２Ａプロセスを示す。図４で示すように且つ以下で更に詳細に説明されるように、一部の実施形態において、第１の拡大培養（ステップＢ）は１１日間に短縮され、第２の拡大培養（ステップＤ）は１１日間に短縮される。一部の実施形態において、下記並びに実施例及び図面で詳細に考察されるように、第１及び第２の拡大培養（ステップＢ及びステップＤ）の組み合わせは２２日間に短縮される。理解されるように、図４に示され且つ以下に説明されるプロセスは、例示的なものであり、本明細書で説明する方法は、説明したステップへの変更及び追加並びに任意の組み合わせを包含する。
【０７０１】
[001207]  実施例８は、例示的な２Ａプロセスを示す。表６２は、例示的なプロセス１Ｃの実施形態を例示的なプロセス２Ａの実施形態と比較する。
【０７０２】
[001208]  一般に、ＴＩＬは、初めは患者腫瘍サンプルから入手され（「初代ＴＩＬ」）、次に本明細書に記載される通りの更なる操作のためより大きい集団へと拡大培養され、任意選択により凍結保存され、本明細書に概説される通り再刺激され、且つ任意選択によりＴＩＬの健康の指標として表現型及び代謝パラメーターが判定される。
【０７０３】
[001209]  患者腫瘍サンプル、分野において公知の方法を用いて、概して外科的切除、針生検又は腫瘍とＴＩＬ細胞との混合物を含む他のサンプルを入手するための手段によって入手され得る。一般に、腫瘍サンプルは、原発腫瘍、浸潤性腫瘍又は転移性腫瘍を含めた任意の固形腫瘍からのものであり得る。腫瘍サンプルは、血液悪性腫瘍から入手された腫瘍などの液性腫瘍でもあり得る。固形腫瘍は、限定はされないが、乳癌、膵癌、前立腺癌、結腸直腸癌、肺癌、脳癌、腎癌、胃癌及び皮膚癌（限定はされないが、扁平上皮癌、基底細胞癌及び黒色腫を含む）を含めた任意の癌型のものであり得る。一部の実施形態において、有用なＴＩＬは、特に高レベルのＴＩＬを有すると報告されていることに伴い悪性黒色腫腫瘍から得られる。一部の実施形態において、腫瘍は約１．５ｃｍより大きく、約４ｃｍより小さい。一部の実施形態において、腫瘍は４ｃｍ未満である。
【０７０４】
[001210]  入手後、腫瘍サンプルは、一般的に鋭的な切離を用いて１〜約８ｍｍ３の小片に断片化され、約２〜３ｍｍ３が特に有用である。ＴＩＬは酵素的腫瘍消化物を使用してこれらの断片から培養される。そのような腫瘍消化物は、酵素培地（例えば、Roswell Park Memorial Institute（ＲＰＭＩ）1640緩衝液、２ｍＭグルタメート、１０ｍｃｇ／ｍＬゲンタマイシン、３０Ｕｎｉｔ／ｍＬのＤＮａｓｅ及び１．０ｍｇ／ｍＬのコラゲナーゼ）中でのインキュベーション、続いて機械的分離（例えば、組織分離剤を使用）によって産生され得る。腫瘍消化物は、腫瘍を酵素培地中に置き、腫瘍を約１分間機械的に分離した後、続いて５％ＣＯ２下３７℃で３０分間インキュベートし、続いてごく小さい組織片しか存在しなくなるまで前述の条件下で機械的分離及びインキュベーションのサイクルを繰り返すことにより作製され得る。このプロセスの終了時、細胞懸濁液が多数の赤血球又は死細胞を含有する場合、これらの細胞を除去するためにFICOLL分岐親水性多糖を用いた密度勾配分離を行うことができる。米国特許出願公開第２０１２／０２４４１３３Ａ１号に記載されているものなど、当技術分野で公知の代替的方法を使用し得、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。前述の任意の方法は、ＴＩＬを拡大培養する方法及びプロセス又は癌を処置する方法のために、本明細書に記載の任意の実施形態において使用され得る。
【０７０５】
[001211]  そのような一実施形態において、腫瘍処理培地は、アデノシン２Ａ受容体アンタゴニストを含有する。そのような特定の一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、ＣＰＩ−４４４、ＳＣＨ５８２６１、ＺＭ２４１３８５、ＳＣＨ４２０８１４、ＳＹＮ１１５、８−ＣＳＣ、ＫＷ−６００２、Ａ２Ａ受容体アンタゴニスト１、ＡＤＺ４６３５、ビパデナント、ＳＴ４２０６、ＫＦ２１２１３、ＳＣＨ４１２３４８、７ＭＭＧ−４９、その薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶又はプロドラッグ及びそれらの組み合わせからなる群から選択される。一実施形態において、腫瘍断片は、Ａ２ａＲ経路を介したシグナル伝達を制限するのに十分な濃度のアデノシン２Ａ受容体アンタゴニストを含む培地に入れられる。
【０７０６】
[001212]  一般に、回収された細胞懸濁液は「初代細胞集団」又は「新鮮に回収された」細胞集団と呼ばれる。
【０７０７】
[001213]  一実施形態において、ＴＩＬは初めに、患者から入手された酵素的腫瘍消化物及び腫瘍断片から培養することができる。
【０７０８】
[001214]  一部の実施形態において、ＴＩＬは腫瘍断片から得られる。一部の実施形態において、腫瘍断片は鋭的剥離で入手される。一部の実施形態において、腫瘍断片は約１ｍｍ３〜１０ｍｍ３である。一部の実施形態において、腫瘍断片は約１ｍｍ３〜８ｍｍ３である。一部の実施形態において、腫瘍断片は約１ｍｍ３である。一部の実施形態において、腫瘍断片は約２ｍｍ３である。一部の実施形態において、腫瘍断片は約３ｍｍ３である。一部の実施形態において、腫瘍断片は約４ｍｍ３である。一部の実施形態において、腫瘍断片は約５ｍｍ３である。一部の実施形態において、腫瘍断片は約６ｍｍ３である。一部の実施形態において、腫瘍断片は約７ｍｍ３である。一部の実施形態において、腫瘍断片は約８ｍｍ３である。一部の実施形態において、腫瘍断片は約９ｍｍ３である。一部の実施形態において、腫瘍断片は約１０ｍｍ３である。一部の実施形態において、腫瘍断片は約８〜２７ｍｍ３である。一部の実施形態において、腫瘍断片は約１０〜２５ｍｍ３である。一部の実施形態において、腫瘍断片は約１５〜２５ｍｍ３である。一部の実施形態において、腫瘍断片は約８〜２０ｍｍ３である。一部の実施形態において、腫瘍断片は約１５〜２０ｍｍ３である。一部の実施形態において、腫瘍断片は約８〜１５ｍｍ３である。一部の実施形態において、腫瘍断片は約８〜１０ｍｍ３である。
【０７０９】
[001215]  一部の実施形態において、腫瘍断片の数は、約４０個〜約５０個の腫瘍断片である。一部の実施形態において、腫瘍断片の数は、約４０個の腫瘍断片である。一部の実施形態において、腫瘍断片の数は、約５０個の腫瘍断片である。一部の実施形態において、腫瘍断片サイズは約８〜２７ｍｍ３であり、約５０個未満の腫瘍断片が存在する。
【０７１０】
[001216]  一部の実施形態において、ＴＩＬは腫瘍消化物から得られる。一部の実施形態において、腫瘍消化物は、酵素培地中、例えば限定はされないが、RPMI 1640、２ｍＭ  GlutaMAX、１０ｍｇ／ｍＬゲンタマイシン、３０Ｕ／ｍＬ  ＤＮａｓｅ及び１．０ｍｇ／ｍＬコラゲナーゼ中におけるインキュベーションと、それに続く機械的分離（GentleMACS、Miltenyi Biotec、Auburn, CA）によって作成した。腫瘍を酵素培地に置いた後、腫瘍を約１分間機械的に分離し得る。次に溶液を５％ＣＯ２下３７℃で３０分間インキュベートし、次にそれを再び約１分間機械的に破壊し得る。再び５％ＣＯ２下３７℃で３０分間インキュベートした後、腫瘍を３回目に約１分間機械的に破壊し得る。一部の実施形態において、３回目の機械的破壊後に大型の組織片が存在した場合、５％ＣＯ２下３７℃での更に３０分間のインキュベーションを伴う又は伴わない１回又は２回の更なる機械的分離をサンプルに適用した。一部の実施形態において、最終回のインキュベーションの終了時に細胞懸濁液が多数の赤血球又は死細胞を含有した場合、フィコールを使用した密度勾配分離を実施して、そうした細胞を除去し得る。
【０７１１】
[001217]  一部の実施形態において、腫瘍消化培地は、アデノシン２Ａ受容体アンタゴニストを含有する。そのような特定の一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、ＣＰＩ−４４４、ＳＣＨ５８２６１、ＺＭ２４１３８５、ＳＣＨ４２０８１４、ＳＹＮ１１５、８−ＣＳＣ、ＫＷ−６００２、Ａ２Ａ受容体アンタゴニスト１、ＡＤＺ４６３５、ビパデナント、ＳＴ４２０６、ＫＦ２１２１３、ＳＣＨ４１２３４８、７ＭＭＧ−４９、その薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶又はプロドラッグ及びそれらの組み合わせからなる群から選択される。
【０７１２】
[001218]  ステップＡにおける腫瘍断片の剥離又消化後、得られた細胞は、腫瘍及び他の細胞よりもＴＩＬの成長に有利な条件下で血清含有ＩＬ−２において培養される。一部の実施形態において、腫瘍消化物は、２ｍＬウェルにおいて、不活性化ヒトＡＢ血清を６０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２と共に含む培地中でインキュベートされる。この初代細胞集団は、数日、概して３〜１４日の期間にわたって培養され、それによりバルクＴＩＬ集団、概して約１×１０８個のバルクＴＩＬ細胞が得られる。一部の実施形態において、この初代細胞集団は、７〜１４日の期間にわたって培養され、それによりバルクＴＩＬ集団、概して約１×１０８個のバルクＴＩＬ細胞が得られる。一部の実施形態において、この初代細胞集団は、１０〜１４日の期間にわたって培養され、それによりバルクＴＩＬ集団、概して約１×１０８個のバルクＴＩＬ細胞が得られる。一部の実施形態において、この初代細胞集団は、約１１日の期間にわたって培養され、それによりバルクＴＩＬ集団、概して約１×１０８個のバルクＴＩＬ細胞が得られる。一部の実施形態において、この初代細胞集団は、約１１日の期間にわたって培養され、それによりバルクＴＩＬ集団、概して約２００×１０６個以下のバルクＴＩＬ細胞が得られる。
【０７１３】
[001219]  好ましい実施形態において、以下及び本明細書で説明するように、初期バルクＴＩＬ拡大培養ステップ（例えば、プレＲＥＰと称されるプロセスを含み得る図１４に示されるステップＢ）、その後の以下のステップＤの下及び本明細書に記載されているように、第２の拡大培養（ステップＤ、高速拡大培養プロトコル（ＲＥＰ）ステップと称されるプロセスを含む）、その後の任意選択の凍結保存及びその後の第２ステップＤ（再刺激ＲＥＰステップと称されるプロセスを含む）を使用してＴＩＬの拡大培養を実施することができる。このプロセスによって入手したＴＩＬは、任意選択により、本明細書に記載される通り表現型特徴及び代謝パラメーターが特徴付けられ得る。
【０７１４】
[001220]  実施形態において、ＴＩＬ培養は、２４ウェルプレートで、例えばCostar２４ウェル細胞培養クラスター、平底（Corning Incorporated、Corning, NYを使用して開始される場合、各ウェルには、ＩＬ−２（６０００ＩＵ／ｍＬ；Chiron Corp.、Emeryville, CA）を含む２ｍＬの完全培地（ＣＭ）中、１×１０６個の腫瘍消化物細胞又は１個の腫瘍断片を播種することができる。一部の実施形態において、腫瘍断片は約１ｍｍ３〜１０ｍｍ３である。
【０７１５】
[001221]  一部の実施形態において、ステップＢのＣＭは、１０％ヒトＡＢ血清、２５ｍＭ  ＨＥＰＥＳ及び１０ｍｇ／ｍＬゲンタマイシンを添加したGlutaMAX含有RPMI 1640からなる。培養が、４０ｍＬ容量及び１０ｃｍ２ガス透過性シリコン底のガス透過性フラスコ（例えば、G-Rex10；Wilson Wolf Manufacturing、New Brighton, MN）内で開始される実施形態において、各フラスコに、１０〜４０ｍＬのＩＬ−２含有ＣＭ中の１０〜４０×１０６個の腫瘍消化物生細胞又は５〜３０個の腫瘍断片を充填した。G-Rex10及び２４ウェルプレートのいずれも、加湿インキュベーターにおいて５％ＣＯ２下３７℃でインキュベートし、培養開始から５日後に培地の半分を取り出して、新鮮なＣＭ及びＩＬ−２を補充し、５日目以降は２〜３日毎に培地の半分を交換した。
【０７１６】
[001222]  一実施形態において、細胞培養培地は、ＩＬ−２を更に含む。好ましい一実施形態において、細胞培養培地は、約３０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２を含む。一実施形態において、細胞培養培地は、約１０００ＩＵ／ｍＬ、約１５００ＩＵ／ｍＬ、約２０００ＩＵ／ｍＬ、約２５００ＩＵ／ｍＬ、約３０００ＩＵ／ｍＬ、約３５００ＩＵ／ｍＬ、約４０００ＩＵ／ｍＬ、約４５００ＩＵ／ｍＬ、約５０００ＩＵ／ｍＬ、約５５００ＩＵ／ｍＬ、約６０００ＩＵ／ｍＬ、約６５００ＩＵ／ｍＬ、約７０００ＩＵ／ｍＬ、約７５００ＩＵ／ｍＬ又は約８０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２を含む。一実施形態において、細胞培養培地は、１０００〜２０００ＩＵ／ｍＬ、２０００〜３０００ＩＵ／ｍＬ、３０００〜４０００ＩＵ／ｍＬ、４０００〜５０００ＩＵ／ｍＬ、５０００〜６０００ＩＵ／ｍＬ、６０００〜７０００ＩＵ／ｍＬ、７０００〜８０００ＩＵ／ｍＬ又は８０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２を含む。
【０７１７】
[001223]  一部の実施形態において、実施例及び図で考察されているように、第１の拡大培養（プレＲＥＰと称されるプロセスを含む；ステップＢ）プロセスは３〜１４日間に短縮される。一部の実施形態において、実施例で考察し、図４及び５に示すように、ステップＢの第１の拡大培養は７〜１４日間に短縮される。一部の実施形態において、実施例で考察し、図４及び５に示すように、ステップＢの第１の拡大培養は１０〜１４日間に短縮される。一部の実施形態において、実施例で考察し、図４及び５に示すように、ステップＢの第１の拡大培養は１１日間に短縮される。
【０７１８】
[001224]  一部の実施形態において、ＩＬ−２、ＩＬ−７、ＩＬ−１５及びＩＬ−２１並びにそれらの組み合わせは、本明細書に記載のように、ステップＢプロセス中に含められ得る。
【０７１９】
[001225]  一部の実施形態において、ステップＢは閉鎖系バイオリアクターで実施される。一部の実施形態において、本明細書に記載される通り、ＴＩＬ拡大培養のために閉鎖系が用いられる。一部の実施形態において、単一のバイオリアクターが用いられる。一部の実施形態において、用いられる単一のバイオリアクターは、例えば、GREX-10又はGREX-100である。
【０７２０】
[001226]  一部の実施形態において、ステップＢからのバルクＴＩＬ集団は、当技術分野で公知であり且つ本明細書に記載される方法を使用して、直ちに凍結保存することができる。代わりに、バルクＴＩＬ集団は、以下で考察する通り、第２の拡大培養（ＲＥＰ）に供され、次に凍結保存され得る。
【０７２１】
[001227]  一部の実施形態において、ステップＢからのバルクＴＩＬ集団は、当技術分野で公知であり且つ本明細書に記載される方法を使用して、直ちに凍結保存することができる。そのような一実施形態において、凍結保存培地は、アデノシン２Ａ受容体アンタゴニストを含有する。そのような特定の一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、ＣＰＩ−４４４、ＳＣＨ５８２６１、ＺＭ２４１３８５、ＳＣＨ４２０８１４、ＳＹＮ１１５、８−ＣＳＣ、ＫＷ−６００２、Ａ２Ａ受容体アンタゴニスト１、ＡＤＺ４６３５、ビパデナント、ＳＴ４２０６、ＫＦ２１２１３、ＳＣＨ４１２３４８、７ＭＭＧ−４９、その薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶又はプロドラッグ及びそれらの組み合わせからなる群から選択される。一部の実施形態において、添加されるＡ２ａＲアンタゴニストの量は、少なくとも１ｎＭ、約１０ｎＭ、約５０ｎＭ、約６０ｎＭ、約７０ｎＭ、約８０ｎＭ、約８５ｎＭ、約９０ｎＭ、約９５ｎＭ、約１００ｎＭ、約１ｕＭ、約１０ｕＭ、約２５ｕＭ、約５０ｕＭ、約７５ｕＭ、約８０ｕＭ、約９０ｕＭ、約１００ｕＭ、約１２５ｕＭ、約１５０ｕＭ、約１７５ｕＭ、約２００ｕＭ、約２２５ｕＭ、約２５０ｕＭ、約２８０ｕＭ、約２７５ｕＭ、約２９０ｕＭ、約３００ｕＭ、５００ｕＭ未満、１０００ｕＭ未満、２０００ｕＭ未満、特定のＡ２ａＲアンタゴニストの溶解限度程度である。一部の実施形態において、凍結保存培地は、第１及び第２のＡ２ａＲアンタゴニストを含有する。更なる実施形態において、第１及び第２のＡ２ａＲアンタゴニストは同じであり、他の実施形態において、第１及び第２のＡ２ａＲアンタゴニストは、異なる。
【０７２２】
[001228]  一部の実施形態において、ステップＢからのバルクＴＩＬ集団は、当技術分野で公知であり且つ本明細書に記載される方法を使用して、直ちに凍結保存することができる。そのような一実施形態において、凍結保存培地は、アデノシン２Ａ受容体アンタゴニストを含有する。そのような特定の一実施形態において、凍結保存培地中の遊離アデノシンのＡ２ａＲアンタゴニストに対する比は、少なくとも１：５である。一部の実施形態において、凍結保存培地中の遊離アデノシンのＡ２ａＲアンタゴニストに対する比は、少なくとも１：５〜約１：１００である。一部の実施形態において、凍結保存培地中の遊離アデノシンのＡ２ａＲアンタゴニストに対する比は、少なくとも１：５〜約１：５０である。一部の実施形態において、凍結保存培地中の遊離アデノシンのＡ２ａＲアンタゴニストに対する比は、少なくとも１：５〜約１：２５である。一部の実施形態において、凍結保存培地中の遊離アデノシンのＡ２ａＲアンタゴニストに対する比は、約１：１０である。
【０７２３】
[001229]  一部の実施形態において、ステップＢのＴＩＬは貯蔵されず、ステップＢのＴＩＬはステップＤに直接進む。一部の実施形態において、本明細書に更に記載される通り、移行は閉鎖系で行われる。一部の実施形態において、閉鎖系は、アデノシン２Ａ受容体アンタゴニストを含む培地を含有する。
【０７２４】
[001230]  一部の実施形態において、ＴＩＬ細胞集団は採取及び初期バルク処理後（即ちステップＡ及びステップＢ後）に数が拡大される。これは、本明細書において第２の拡大培養と称され、当技術分野では一般的に急速拡大培養プロセス（ＲＥＰ）と称される拡大培養を含み得る。第２の拡大培養は、一般的に、フィーダー細胞、サイトカイン源及び抗ＣＤ３抗体を含め、幾つもの成分を含むガス透過性容器内の培養培地を使用して達成する。一部の実施形態において、第２の拡大培養は、第２の拡大培養で入手されるＴＩＬの数を増加させるためにスケールアップすることを含み得る。
【０７２５】
[001231]  一実施形態において、ＲＥＰ及び／又は第２の拡大培養は、本開示の方法を使用して、ガス透過性容器内で行うことができる。例えば、ＴＩＬは、インターロイキン−２（ＩＬ−２）又はインターロイキン−１５（ＩＬ−１５）の存在下で非特異的Ｔ細胞受容体刺激を用いて急速に拡大培養することができる。非特異的Ｔ細胞受容体刺激としては、例えば、約３０ｎｇ／ｍｌのＯＫＴ３、マウスモノクローナル抗ＣＤ３抗体（Ortho-McNeil、Raritan, NJ又はMiltenyi Biotech、Auburn, CAから市販されている）を挙げることができる。ＴＩＬは、任意選択により３００ＩＵ／ｍＬ  ＩＬ−２又はＩＬ−１５など、Ｔ細胞成長因子の存在下でヒト白血球抗原Ａ２（ＨＬＡ−Ａ２）結合ペプチド、例えば０．３μＭ  ＭＡＲＴ−１：２６−３５（２７Ｌ）又はｇｐｌ  ００：２０９−２１７（２１０Ｍ）など、任意選択によりベクターから発現させることのできる、１つ又は複数のエピトープなど、その抗原性部分を含めた癌の１つ以上の抗原によるインビトロでのＴＩＬの更なる刺激により、急速に拡大培養することができる。他の好適な抗原としては、例えば、ＮＹ−ＥＳＯ−１、ＴＲＰ−１、ＴＲＰ−２、チロシナーゼ癌抗原、ＭＡＧＥ−Ａ３、ＳＳＸ−２及びＶＥＧＦＲ２又はその抗原性部分を挙げることができる。ＴＩＬは、ＨＬＡ−Ａ２発現抗原提示細胞にパルスした癌の同じ１つ又は複数の抗原による再刺激によっても急速に拡大培養され得る。代わりに、ＴＩＬは、例えば、例として照射自己リンパ球によるか又は照射ＨＬＡ−Ａ２＋同種異系リンパ球及びＩＬ−２によって更に再刺激することができる。
【０７２６】
[001232]  一実施形態において、細胞培養培地は、ＩＬ−２を更に含む。好ましい一実施形態において、細胞培養培地は、約３０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２を含む。一実施形態において、細胞培養培地は、約１０００ＩＵ／ｍＬ、約１５００ＩＵ／ｍＬ、約２０００ＩＵ／ｍＬ、約２５００ＩＵ／ｍＬ、約３０００ＩＵ／ｍＬ、約３５００ＩＵ／ｍＬ、約４０００ＩＵ／ｍＬ、約４５００ＩＵ／ｍＬ、約５０００ＩＵ／ｍＬ、約５５００ＩＵ／ｍＬ、約６０００ＩＵ／ｍＬ、約６５００ＩＵ／ｍＬ、約７０００ＩＵ／ｍＬ、約７５００ＩＵ／ｍＬ又は約８０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２を含む。一実施形態において、細胞培養培地は、１０００〜２０００ＩＵ／ｍＬ、２０００〜３０００ＩＵ／ｍＬ、３０００〜４０００ＩＵ／ｍＬ、４０００〜５０００ＩＵ／ｍＬ、５０００〜６０００ＩＵ／ｍＬ、６０００〜７０００ＩＵ／ｍＬ、７０００〜８０００ＩＵ／ｍＬ又は８０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２を含む。
【０７２７】
[001233]  一実施形態において、細胞培養培地はＯＫＴ３抗体を含む。好ましい一実施形態において、細胞培養培地は、約３０ｎｇ／ｍＬのＯＫＴ３抗体を含む。一実施形態において、細胞培養培地は、約０．１ｎｇ／ｍＬ、約０．５ｎｇ／ｍＬ、約１ｎｇ／ｍＬ、約２．５ｎｇ／ｍＬ、約５ｎｇ／ｍＬ、約７．５ｎｇ／ｍＬ、約１０ｎｇ／ｍＬ、約１５ｎｇ／ｍＬ、約２０ｎｇ／ｍＬ、約２５ｎｇ／ｍＬ、約３０ｎｇ／ｍＬ、約３５ｎｇ／ｍＬ、約４０ｎｇ／ｍＬ、約５０ｎｇ／ｍＬ、約６０ｎｇ／ｍＬ、約７０ｎｇ／ｍＬ、約８０ｎｇ／ｍＬ、約９０ｎｇ／ｍＬ、約１００ｎｇ／ｍＬ、約２００ｎｇ／ｍＬ、約５００ｎｇ／ｍＬ及び約１μｇ／ｍＬのＯＫＴ３抗体を含む。一実施形態において、細胞培養培地は、０．１ｎｇ／ｍＬ〜１ｎｇ／ｍＬ、１ｎｇ／ｍＬ〜５ｎｇ／ｍＬ、５ｎｇ／ｍＬ〜１０ｎｇ／ｍＬ、１０ｎｇ／ｍＬ〜２０ｎｇ／ｍＬ、２０ｎｇ／ｍＬ〜３０ｎｇ／ｍＬ、３０ｎｇ／ｍＬ〜４０ｎｇ／ｍＬ、４０ｎｇ／ｍＬ〜５０ｎｇ／ｍＬ及び５０ｎｇ／ｍＬ〜１００ｎｇ／ｍＬのＯＫＴ３抗体を含む。ＯＫＴ３は、任意選択により、任意の特定の実施形態の組織培養培地中に０日目から存在し得ることが理解される。
【０７２８】
[001234]  一実施形態において、細胞培養培地は、アデノシン２ａ受容体アンタゴニストを含む。一実施形態において、細胞培養培地は、アデノシン２ａ受容体アンタゴニストを含み、Ａ２ａＲアンタゴニストは、ＣＰＩ−４４４、ＳＣＨ５８２６１、ＺＭ２４１３８５、ＳＣＨ４２０８１４、ＳＹＮ１１５、８−ＣＳＣ、ＫＷ−６００２、Ａ２Ａ受容体アンタゴニスト１、ＡＤＺ４６３５、ビパデナント、ＳＴ４２０６、ＫＦ２１２１３、ＳＣＨ４１２３４８、７ＭＭＧ−４９、その薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶又はプロドラッグ及びそれらの組み合わせからなる群から選択される。一部の実施形態において、添加されるＡ２ａＲアンタゴニストの量は、少なくとも１ｐＭ、約１０ｐＭ、約５０ｐＭ、約６０ｐＭ、約７０ｐＭ、約８０ｐＭ、約１００ｐＭ、約１２５ｐＭ、約１７５ｐＭ、約２００ｐＭ、約２５０ｐＭ、約３００ｐＭ、約３５０ｐＭ、約４００ｐＭ、約４５０ｐＭ、約５００ｐＭ、約６００ｐＭ、約７００ｐＭ、約８００ｐＭ、約９００ｐＭ、約１ｎＭ、約１０ｎＭ、約５０ｎＭ、約６０ｎＭ、約７０ｎＭ、約８０ｎＭ、約８５ｎＭ、約９０ｎＭ、約９５ｎＭ、約１００ｎＭ、約１ｕＭ、約１０ｕＭ、約２５ｕＭ、約５０ｕＭ、約７５ｕＭ、約８０ｕＭ、約９０ｕＭ、約１００ｕＭ、約１２５ｕＭ、約１５０ｕＭ、約１７５ｕＭ、約２００ｕＭ、約２２５ｕＭ、約２５０ｕＭ、約２８０ｕＭ、約２７５ｕＭ、約２９０ｕＭ、約３００ｕＭ、５００ｕＭ未満、１０００ｕＭ未満、２０００ｕＭ未満、特定のＡ２ａＲアンタゴニストの溶解限度程度である。他の実施形態において、細胞培養培地は、少なくとも１つのアデノシン２ａ受容体アンタゴニストを含む。また更なる実施形態において、細胞培養培地は、２つ以上のアデノシン２ａ受容体アンタゴニストを含む。
【０７２９】
[001235]  一部の実施形態において、細胞培養培地は、アデノシン２ｂ受容体アンタゴニストでもあるアデノシン２ａ受容体アンタゴニストを含む。一部の実施形態において、細胞培養培地は、少なくとも２つのアデノシン受容体アンタゴニスト（第１及び第２のアデノシン受容体アンタゴニスト）を含み、ここで、第１のアデノシン受容体アンタゴニストはＡ２ａＲアンタゴニストであり、第２のアデノシン受容体アンタゴニストはアデノシンＡ２ｂ受容体アンタゴニストである。一部の実施形態において、アデノシン受容体アンタゴニストは、Ａ２ａＲアンタゴニスト及びＡ２ｂＲアンタゴニストの両方である。
【０７３０】
[001236]  そのような特定の一実施形態において、細胞培養培地中の遊離アデノシンのＡ２ａＲアンタゴニストに対する比は、少なくとも１：５である。一部の実施形態において、細胞培養培地中の遊離アデノシンのＡ２ａＲアンタゴニストに対する比は、少なくとも１：５〜約１：１００である。一部の実施形態において、細胞培養培地中の遊離アデノシンのＡ２ａＲアンタゴニストに対する比は、少なくとも１：５〜約１：５０である。一部の実施形態において、細胞培養培地中の遊離アデノシンのＡ２ａＲアンタゴニストに対する比は、少なくとも１：５〜約１：２５である。一部の実施形態において、細胞培養培地中の遊離アデノシンのＡ２ａＲアンタゴニストに対する比は、約１：１０である。一部の実施形態において、細胞培養培地中の遊離アデノシンのＡ２ａＲアンタゴニストに対する比は、約１：５である。
【０７３１】
[001237]  一部の実施形態において、ＩＬ−２、ＩＬ−７、ＩＬ−１５及びＩＬ−２１並びにそれらの組み合わせは、本明細書に記載のように、ステップＤプロセスにおける第２の拡大培養中に含められ得る。
【０７３２】
[001238]  一部の実施形態において、第２の拡大培養は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３及び抗原提示フィーダー細胞を含む補充細胞培養培地中で実施され得る。
【０７３３】
[001239]  一部の実施形態において、抗原提示フィーダー細胞（ＡＰＣ）はＰＢＭＣである。一実施形態において、急速拡大培養及び／又は第２の拡大培養におけるＴＩＬとＰＢＭＣ及び／又は抗原提示細胞との比は、約１：２５、約１：５０、約１：１００、約１：１２５、約１：１５０、約１：１７５、約１：２００、約１：２２５、約１：２５０、約１：２７５、約１：３００、約１：３２５、約１：３５０、約１：３７５、約１：４００又は約１：５００である。一実施形態において、急速拡大培養及び／又は第２の拡大培養におけるＴＩＬとＰＢＭＣとの比は、１：５０〜１：３００である。一実施形態において、急速拡大培養及び／又は第２の拡大培養におけるＴＩＬとＰＢＭＣとの比は、１：１００〜１：２００である。
【０７３４】
[001240]  一実施形態において、ＲＥＰ及び／又は第２の拡大培養は、バルクＴＩＬを１５０ｍｌ培地中の１００倍又は２００倍過剰の不活性化フィーダー細胞、３０ｍｇ／ｍＬ  ＯＫＴ３抗ＣＤ３抗体及び３０００ＩＵ／ｍＬ  ＩＬ−２と混合してフラスコ内で実施される。細胞を別の成長チャンバに移すまで培地補充が行われる（一般的に新鮮培地による呼吸を介した３分の２の培地補充）。別の成長チャンバには、以下に更に十分に考察する通りのGRexフラスコ及びガス透過性容器が含まれる。
【０７３５】
[001241]  一部の実施形態において、第２の拡大培養（ＲＥＰプロセスとも称される）は、実施例及び図で考察されるように、７〜１４日間に短縮される。一部の実施形態において、第２の拡大培養は１１日間に短縮される。
【０７３６】
[001242]  一部の実施形態において、第２の拡大培養（ＲＥＰプロセスとも称される）は、アデノシン２Ａ受容体アンタゴニストを含む。アデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストは、ＣＰＩ−４４４、ＳＣＨ５８２６１、ＺＭ２４１３８５、ＳＣＨ４２０８１４、ＳＹＮ１１５、８−ＣＳＣ、ＫＷ−６００２、Ａ２Ａ受容体アンタゴニスト１、ＡＤＺ４６３５、ビパデナント、ＳＴ４２０６、ＫＦ２１２１３、ＳＣＨ４１２３４８、７ＭＭＧ−４９、その薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶又はプロドラッグ及びそれらの組み合わせからなる群から選択される。
【０７３７】
[001243]  一部の実施形態において、第２の拡大培養（ＲＥＰプロセスとも称される）は、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体アンタゴニストを含む。他の実施形態において、第２の拡大培養は、２つの異なるＡ２ａＲアンタゴニストを含み、ここで、第１のＡ２ａＲアンタゴニストは、ＣＰＩ−４４４、その薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶又はプロドラッグ及びそれらの組み合わせであり；第２のＡ２ａＲは、ＳＣＨ５８２６１、ＺＭ２４１３８５、ＳＣＨ４２０８１４、ＳＹＮ１１５、８−ＣＳＣ、ＫＷ−６００２、Ａ２Ａ受容体アンタゴニスト１、ＡＤＺ４６３５、ビパデナント、ＳＴ４２０６、ＫＦ２１２１３、ＳＣＨ４１２３４８、７ＭＭＧ−４９、その薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶又はプロドラッグ及びそれらの組み合わせからなる群から選択される。一実施形態において、第２の拡大培養（ＲＥＰプロセスとも称される）は、少なくとも１つのアデノシン２Ａ受容体アンタゴニストを含み、アデノシン２Ａアンタゴニストは、ＣＰＩ−４４４、その薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶又はプロドラッグ及びそれらの組み合わせである。
【０７３８】
[001244]  一実施形態において、ＲＥＰ及び／又は第２の拡大培養は、前述のようにT-175フラスコ及び気体透過性バッグ（Tran, et al., J. Immunother.2008, 31, 742-51；Dudley, et al., J. Immunother.2003, 26, 332-42）又はガス透過性培養器具（G-Rexフラスコ）を使用して実施され得る。T-175フラスコ中のＴＩＬ急速拡大培養及び／又は第２の拡大培養では、１５０ｍＬの培地中に懸濁した１×１０６個のＴＩＬが各T-175フラスコに添加され得る。ＴＩＬは、１ｍＬあたり３０００ＩＵのＩＬ−２及び１ｍｌあたり３０ｎｇの抗ＣＤ３を補充したＣＭ及びＡＩＭ−Ｖ培地の１：１混合物で培養され得る。T-175フラスコは、５％ＣＯ２下３７℃でインキュベートされ得る。培地の半分は、５日目に、１ｍＬあたり３０００ＩＵのＩＬ−２を含む５０／５０培地を用いて交換され得る。７日目に、２つのT-175フラスコからの細胞を３Ｌバッグ中で混合し、５％ヒトＡＢ血清を含む３００ｍＬのＡＩＭ−Ｖ及び１ｍＬあたり３０００ＩＵのＩＬ−２を３００ｍｌのＴＩＬ懸濁液に添加した。各バッグ中の細胞数を毎日又は隔日で数え、新鮮な培地を添加して細胞数を０．５〜２．０×１０６細胞／ｍＬに保った。
【０７３９】
[001245]  一実施形態において、ＲＥＰ及び／又は第２の拡大培養は、１００ｃｍのガス透過性シリコン底を有する５００ｍＬ容量のガス透過性フラスコ（G-Rex 100、Wilson Wolf Manufacturing Corporation, New Brighton, MN, USAから市販）中で実施され得、５×１０６又は１０×１０６個のＴＩＬは、５％ヒトＡＢ血清、１ｍＬあたり３０００ＩＵのＩＬ−２及び１ｍｌあたり３０ｎｇの抗ＣＤ３（ＯＫＴ３）を添加した、４００ｍＬの５０／５０培地中で、ＰＢＭＣと共に培養され得る。G-Rex 100フラスコは５％ＣＯ２下３７℃でインキュベートし得る。５日目、２５０ｍＬの上清を取り出して遠心ボトルに入れ、１５００ｒｐｍ（４９１×ｇ）で１０分間遠心し得る。５％ヒトＡＢ血清、１ｍＬあたり３０００ＩＵのＩＬ−２を含む１５０ｍＬの新鮮培地にＴＩＬペレットを再懸濁し、元のG-Rex 100フラスコに戻し加え得る。G-Rex 100フラスコ内でＴＩＬを連続的に拡大培養するときは、７日目に各G-Rex 100のＴＩＬを、各フラスコ内に存在する３００ｍＬの培地に懸濁し得、且つ細胞懸濁液を３つの１００ｍＬアリコートに分割し得、それらを３つのG-Rex 100フラスコの播種に使用し得る。次に、５％ヒトＡＢ血清及び１ｍＬあたり３０００ＩＵのＩＬ−２を含む１５０ｍＬのＡＩＭ−Ｖを各フラスコに加え得る。G-Rex 100フラスコは、５％ＣＯ２下３７℃でインキュベートされ得、４日後、各G-Rex1 OOフラスコに１ｍＬあたり３０００ＩＵのＩＬ−２を含む１５０ｍＬのＡＩＭ−Ｖを加え得る。細胞は、培養１４日目に回収され得る。
【０７４０】
[001246]  一実施形態において、ＲＥＰ及び／又は第２の拡大培養は、バルクＴＩＬを１５０ｍｌ培地中の１００倍又は２００倍過剰の不活性化フィーダー細胞、３０ｍｇ／ｍＬ  ＯＫＴ３抗ＣＤ３抗体及び３０００ＩＵ／ｍＬ  ＩＬ−２と混合してフラスコ内で実施される。細胞を別の成長チャンバに移すまで培地補充が行われる（一般的に新鮮培地による呼吸を介した３分の２の培地補充）。別の成長チャンバには、以下に更に十分に考察する通りのGRexフラスコ及びガス透過性容器が含まれる。
【０７４１】
[001247]  一実施形態において、ＲＥＰ及び／又は第２の拡大培養が実施され、これは優れた腫瘍応答性に関してＴＩＬを選択するステップを更に含む。当技術分野において公知の任意の選択方法を用いることができる。例えば、米国特許出願公開第２０１６／００１００５８  Ａ１号（この開示は、参照により本明細書に援用される）に記載される方法は、優れた腫瘍応答性に関するＴＩＬの選択に用いられ得る。
【０７４２】
[001248]  ＴＩＬのＲＥＰ及び／又は第２の拡大培養は、前述のようにT-175フラスコ及び気体透過性バッグ（Tran, et al., J. Immunother., 2008, 31, 742-751及びDudley, et al., J. Immunother., 2003, 26, 332-342）又はガス透過性G-Rexフラスコを使用して実施され得る。一部の実施形態において、ＲＥＰ及び／又は第２の拡大培養はフラスコを使用して実施される。一部の実施形態において、ＲＥＰはガス透過性G-Rexフラスコを使用して実施される。T-175フラスコにおけるＴＩＬ  ＲＥＰ及び／又は第２の拡大培養については、約１×１０６個のＴＩＬを約１５０ｍＬの培地中に懸濁し、これを各T-175フラスコに加える。ＴＩＬは、「フィーダー」細胞としての照射（５０Ｇｙ）された同種異系ＰＢＭＣと１対１００の比で培養し、及び細胞は、３０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２及び３０ｎｇ／ｍＬの抗ＣＤ３を補充したＣＭとＡＩＭ−Ｖ培地との１：１混合物（５０／５０培地）で培養した。T-175フラスコは５％ＣＯ２下３７℃でインキュベートする。一部の実施形態において、培地の半分は、５日目に３０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２を含む５０／５０培地を使用して交換される。一部の実施形態において、７日目、２つのT-175フラスコからの細胞を３Ｌバッグに合わせ、その３００ｍＬのＴＩＬ懸濁液に、５％ヒトＡＢ血清及び３０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２を含む３００ｍＬのＡＩＭ−Ｖを加える。毎日又は隔日で各バッグの細胞数をカウントし得、新鮮培地を加えて細胞数を約０．５〜約２．０×１０６細胞／ｍＬに保ち得る。
【０７４３】
[001249]  １００ｃｍ２ガス透過性シリコン底の５００ｍＬ容量フラスコ（G-Rex100、Wilson Wolf）中でのＴＩＬ  ＲＥＰ及び／又は第２の拡大培養について、３０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２及び３０ｎｇ／ｍＬの抗ＣＤ３を添加した４００ｍＬの５０／５０培地中で、約５×１０６又は１０×１０６個のＴＩＬを照射同種異系ＰＢＭＣと１対１００の比で培養する。G-Rex100フラスコは５％ＣＯ２下３７℃でインキュベートされる。一部の実施形態において、５日目に、２５０ｍＬの上清を取り出して遠心ボトルに入れ、１５００ｒｐｍ（４９１ｇ）で１０分間遠心する。次に３０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２を含む１５０ｍＬの新鮮５０／５０培地にＴＩＬペレットを再懸濁し、元のG-Rex100フラスコに加え戻し得る。ＴＩＬがG-Rex100フラスコ内で連続的に拡大培養される実施形態において、７日目に各G-Rex100内のＴＩＬを各フラスコ内に存在する３００ｍＬの培地に懸濁し、且つ細胞懸濁液を３つの１００ｍＬアリコートに分割し、それらを３つのG-Rex100フラスコの播種に使用される。次に、５％ヒトＡＢ血清及び３０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２を含む１５０ｍＬのＡＩＭ−Ｖを各フラスコに加える。G-Rex 100フラスコは５％ＣＯ２下３７℃でインキュベートされ、４日後、各G-Rex100フラスコに３０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２を含む１５０ｍＬのＡＩＭ−Ｖを加える。細胞は培養１４日目に回収される。
【０７４４】
[001250]  一実施形態において、本明細書に記載される第２の拡大培養手順（ステップＤ、ＲＥＰを含む）には、ＲＥＰ  ＴＩＬ拡大培養中及び／又は第２の拡大培養中に過剰量のフィーダー細胞が必要である。多くの実施形態において、フィーダー細胞は、健常供血者からの標準的な全血ユニットから得られる末梢血単核球（ＰＢＭＣ）である。ＰＢＭＣは、Ficoll-Paque勾配分離などの標準方法を用いて入手される。
【０７４５】
[001251]  一般に、同種異系ＰＢＭＣは、照射又は熱処理のいずれかにより不活性化され、実施例に記載されるようにＲＥＰ手順で使用され、照射同種異系ＰＢＭＣの複製不能を評価するために使用され得る。
【０７４６】
[001252]  一部の実施形態において、１４日目の生細胞の総数がＲＥＰの０日目及び／又は第２の拡大培養の０日目（即ち第２の拡大培養の開始日）に培養に移行した初期生細胞数より少ない場合、ＰＢＭＣは複製不能と見なされ、本明細書に記載のＴＩＬ拡大培養手順での使用が認められる。
【０７４７】
[001253]  一部の実施形態において、本明細書に記載された方法又は当技術分野で公知の方法に従ってＰＢＭＣが不活性化される。
【０７４８】
[001254]  一部の実施形態において、ＯＫＴ３及びＩＬ−２の存在下で培養された生細胞の総数が、７日目及び１４日目に、ＲＥＰの０日目及び／又は第２の拡大培養の０日目（即ち第２の拡大培養の開始日）に培養に移行した初期生細胞数から増加していない場合、ＰＢＭＣは複製不能と見なされ、本明細書に記載のＴＩＬ拡大培養手順での使用が認められる。一部の実施形態において、ＰＢＭＣは、３０ｎｇ／ｍｌのＯＫＴ３抗体及び３０００ＩＵ／ｍｌのＩＬ−２の存在下で培養される。
【０７４９】
[001255]  一部の実施形態において、ＯＫＴ３及びＩＬ−２の存在下で培養された生細胞の総数が、７日目及び１４日目に、ＲＥＰの０日目及び／又は第２の拡大培養の０日目（即ち第２の拡大培養の開始日）に培養に移行した初期生細胞数から増加していない場合、ＰＢＭＣは複製不能と見なされ、本明細書に記載のＴＩＬ拡大培養手順での使用が認められる。一部の実施形態において、ＰＢＭＣは、５〜６０ｎｇ／ｍｌのＯＫＴ３抗体及び１０００〜６０００ＩＵ／ｍｌのＩＬ−２の存在下で培養される。一部の実施形態において、ＰＢＭＣは、１０〜５０ｎｇ／ｍｌのＯＫＴ３抗体及び２０００〜５０００ＩＵ／ｍｌのＩＬ−２の存在下で培養される。一部の実施形態において、ＰＢＭＣは、２０〜４０ｎｇ／ｍｌのＯＫＴ３抗体及び２０００〜４０００ＩＵ／ｍｌのＩＬ−２の存在下で培養される。一部の実施形態において、ＰＢＭＣは、２５〜３５ｎｇ／ｍｌのＯＫＴ３抗体及び２５００〜３５００ＩＵ／ｍｌのＩＬ−２の存在下で培養される。
【０７５０】
[001256]  一実施形態において、人工抗原提示細胞は、ＰＢＭＣの代替として又はそれと組み合わせて、ＲＥＰ段階で使用される。
【０７５１】
[001257]  本明細書に記載の拡大培養方法は、一般に、当技術分野において公知の通り、高用量のサイトカイン、特にＩＬ−２を含む培養培地を使用する。
【０７５２】
[001258]  代わりに、ＴＩＬの急速拡大培養及び又は第２の拡大培養にサイトカインの組み合わせを使用することが更に可能であり、ＩＬ−２、ＩＬ−１５及びＩＬ−２１の２つ以上の組み合わせについては、概して国際公開第２０１５／１８９３５６号及び国際公開第２０１５／１８９３５７号（参照によりその全体が明示的に本明細書に組み込まれる）に概説される通りである。したがって、可能な組み合わせとしては、ＩＬ−２とＩＬ−１５、ＩＬ−２とＩＬ−２１、ＩＬ−１５とＩＬ−２１とＩＬ−２、ＩＬ−１５とＩＬ−２１が挙げられ、後者には多くの実施形態において特定の使用が見出される。これらの明細書に記載される通り、サイトカインの組み合わせを使用することは、特にリンパ球、詳細にはＴ細胞の生成に有利である。
【０７５３】
[001259]  一部の実施形態において、本明細書に記載の拡大培養方法で使用される培養培地（ＲＥＰを含む）は、抗ＣＤ３抗体も含む。抗ＣＤ３抗体をＩＬ−２と併用すると、ＴＩＬ集団においてＴ細胞活性化及び細胞分裂が誘導される。この効果は完全長抗体並びにＦａｂ及びＦ（ａｂ’）２断片で見ることができ、前者が概して好ましい；例えば、Tsoukas, et al., J.Immunol.1985, 135, 1719（参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）を参照されたい。
【０７５４】
[001260]  当業者は理解するであろう通り、本発明において使用が見出される好適な抗ヒトＣＤ３抗体は、限定はされないが、ネズミ科動物、ヒト、霊長類、ラット及びイヌ科動物抗体を含めた、様々な哺乳類からの抗ヒトＣＤ３ポリクローナル及びモノクローナル抗体を含め、幾つも存在する。特定の実施形態において、ＯＫＴ３抗ＣＤ３抗体が使用される（Ortho-McNeil、Raritan, NJ又はMiltenyi Biotech、Auburn, CAから市販されている）。
【０７５５】
[001261]  第２の拡大培養ステップ後、細胞は、回収することができる。一部の実施形態において、ＴＩＬは、１、２、３、４回又はそれ以上の第２の拡大培養ステップ後に回収される。
【０７５６】
[001262]  ＴＩＬは、例えば遠心によることを含め、任意の適切な且つ無菌の方法で回収することができる。ＴＩＬ回収方法は、当技術分野において周知であり、本プロセスと共に任意のかかる公知の方法を用いることができる。一部の実施形態において、ＴＩＬは自動化系を使用して回収される。一部の実施形態において、ＴＩＬは半自動化系を使用して回収する。一部の実施形態において、第２の拡大培養からのＴＩＬは半自動化装置を使用して回収される。一部の実施形態において、LOVOシステムが使用される（例えば、Benchmark Electronicsから市販）。一部の実施形態において、回収ステップは、ＴＩＬを洗浄すること、ＴＩＬを配合すること及び／又はＴＩＬを分取することを含む。一部の実施形態において、細胞は、任意選択により、回収後又は回収の一部として凍結される。
【０７５７】
[001263]  ステップＡ〜Ｅが完了した後、細胞は患者への投与における使用のため容器に移される。
【０７５８】
[001264]  一実施形態において、本開示のＡＰＣを使用して拡大培養したＴＩＬは、医薬組成物として患者に投与される。一実施形態において、医薬組成物は滅菌緩衝液中のＴＩＬの懸濁液である。本開示のＰＢＭＣを使用して拡大培養したＴＩＬは、当技術分野において公知の通りの任意の好適な経路によって投与され得る。一部の実施形態において、Ｔ細胞は単回動脈内又は静脈内注入として投与され、これは好ましくは約３０〜６０分間継続される。他の好適な投与経路としては、腹腔内、髄腔内及びリンパ内が挙げられる。
【０７５９】
[001265]  理解されるように、上記のステップＡ〜Ｆのいずれも、何度でも繰り返すことができ、上記と異なる順序で更に実施され得る。
【０７６０】
[001266]  一部の実施形態において、１つ以上の拡大培養ステップを最終製剤ステップＦ前に繰り返し得る。そのような追加の拡大培養ステップは、上記の第１及び／又は第２の拡大培養ステップの要素を含み得る（例えば、細胞培養培地に記載の成分を含む）。追加の拡大培養ステップは、追加の拡大培養ステップ前及び／又は中に細胞培養培地に補充される細胞培養培地中の追加の成分を含む追加の要素を更に含み得る。
【０７６１】
[001267]  更なる実施形態において、図１４及び上記の段落に記載されたいずれかの拡大培養ステップに、拡大培養ステップ中に生成された細胞が、製造／拡大培養プロセスの残りのステップに必要になるまで、保存のために当技術分野で公知の方法を使用して保存される、凍結保存ステップが先行又は後続し得る。一部の実施形態において、凍結保存培地は、少なくとも１つのアデノシン受容体２Ａアンタゴニストを含有する。
【０７６２】
[001268]  実施例８に記載されるＴＩＬ拡大培養方法の一部の実施形態において、ＴＩＬ拡大培養は、閉鎖系で行われる。一部の実施形態において、ＴＩＬ単離洗浄緩衝液（ＴＩＷＢ）は、アデノシン２Ａ受容体アンタゴニストを更に含む。一部の実施形態において、Ａ２ａＲは、ＣＰＩ−４４４、その薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶又はプロドラッグ及びそれらの組み合わせである。一部の実施形態において、ＴＩＷＢは、少なくとも１つのＡ２ａＲアンタゴニストを含む。一部の実施形態において、ＴＩＷＢは、ＣＰＩ−４４４、ＳＣＨ５８２６１、ＺＭ２４１３８５、ＳＣＨ４２０８１４、ＳＹＮ１１５、８−ＣＳＣ、ＫＷ−６００２、Ａ２Ａ受容体アンタゴニスト１、ＡＤＺ４６３５、ビパデナント、ＳＴ４２０６、ＫＦ２１２１３、ＳＣＨ４１２３４８、７ＭＭＧ−４９、その薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶又はプロドラッグ及びそれらの組み合わせからなる群から選択される少なくとも１つのＡ２ａＲアンタゴニストを含む。
【０７６３】
[001269]  実施例８に記載されるＴＩＬ拡大培養方法の一部の実施形態において、培養培地１（ＣＭ１）（少なくとも実施例８のステップ４．２で言及される）は、ＣＰＩ−４４４、ＳＣＨ５８２６１、ＺＭ２４１３８５、ＳＣＨ４２０８１４、ＳＹＮ１１５、８−ＣＳＣ、ＫＷ−６００２、Ａ２Ａ受容体アンタゴニスト１、ＡＤＺ４６３５、ビパデナント、ＳＴ４２０６、ＫＦ２１２１３、ＳＣＨ４１２３４８、７ＭＭＧ−４９、その薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶又はプロドラッグ及びそれらの組み合わせからなる群から選択される少なくとも１つのＡ２ａＲアンタゴニストを含む。一部の実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストの量は、Ａ２ａＲ  ＧＰＣＲ共役受容体を介したＡ２ａＲシグナル伝達を遮断するのに十分である。
【０７６４】
[001270]  実施例８に記載されるＴＩＬ拡大培養方法の一部の実施形態において、培養培地２（ＣＭ２）（少なくとも実施例８のステップ７．２で言及される）は、ＣＰＩ−４４４、ＳＣＨ５８２６１、ＺＭ２４１３８５、ＳＣＨ４２０８１４、ＳＹＮ１１５、８−ＣＳＣ、ＫＷ−６００２、Ａ２Ａ受容体アンタゴニスト１、ＡＤＺ４６３５、ビパデナント、ＳＴ４２０６、ＫＦ２１２１３、ＳＣＨ４１２３４８、７ＭＭＧ−４９、その薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶又はプロドラッグ及びそれらの組み合わせからなる群から選択される少なくとも１つのＡ２ａＲアンタゴニストを含む。
【０７６５】
[001271]  実施例８に記載されるＴＩＬ拡大培養方法の一部の実施形態において、照射フィーダー細胞（少なくとも実施例８のステップ９．７で言及される）は、ＣＰＩ−４４４、ＳＣＨ５８２６１、ＺＭ２４１３８５、ＳＣＨ４２０８１４、ＳＹＮ１１５、８−ＣＳＣ、ＫＷ−６００２、Ａ２Ａ受容体アンタゴニスト１、ＡＤＺ４６３５、ビパデナント、ＳＴ４２０６、ＫＦ２１２１３、ＳＣＨ４１２３４８、７ＭＭＧ−４９、その薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶又はプロドラッグ及びそれらの組み合わせからなる群から選択される少なくとも１つのＡ２ａＲアンタゴニストを含む。
【０７６６】
[001272]  実施例８に記載されるＴＩＬ拡大培養方法の一部の実施形態において、培養培地４（ＣＭ４）（少なくとも実施例８のステップ１３で言及される）は、ＣＰＩ−４４４、ＳＣＨ５８２６１、ＺＭ２４１３８５、ＳＣＨ４２０８１４、ＳＹＮ１１５、８−ＣＳＣ、ＫＷ−６００２、Ａ２Ａ受容体アンタゴニスト１、ＡＤＺ４６３５、ビパデナント、ＳＴ４２０６、ＫＦ２１２１３、ＳＣＨ４１２３４８、７ＭＭＧ−４９、その薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶又はプロドラッグ及びそれらの組み合わせからなる群から選択される少なくとも１つのＡ２ａＲアンタゴニストを含む。
【０７６７】
[001273]  一部の実施形態において、ＴＩＬ拡大培養方法は、プレＲＥＰ段階中、プレＲＥＰ状態の０、１、２又は３日目に、ＯＫＴ−３抗体を添加するステップを含み、その後、ＯＫＴ−３抗体は、ＲＥＰ段階の終了時まで培地中に残存する。
【０７６８】
[001274]  一実施形態において、本発明は、前述の方法のいずれかに従ってＴＩＬを拡大培養するためのキットを含む。
【０７６９】
ＴＩＬの医薬組成物、投与量及び投与レジメン
[001275]  一実施形態において、本開示のプロセス及び方法を使用して拡大培養したＴＩＬは、医薬組成物として患者に投与される。一実施形態において、医薬組成物は滅菌緩衝液中のＴＩＬの懸濁液である。本開示のプロセス及び方法を使用して拡大培養したＴＩＬは、当技術分野において公知の通りの任意の好適な経路によって投与され得る。好ましくは、ＴＩＬは単一の動脈内又は静脈内注入として投与され、これは好ましくはおよそ３０〜６０分続く。他の適切な投与経路には、腹腔内投与、髄腔内投与及びリンパ管内投与が含まれる。
【０７７０】
[001276]  任意の適切な用量のＴＩＬを投与することができる。好ましくは、特に癌が黒色腫である場合、平均が約７．８×１０１０ＴＩＬである約２．３×１０１０〜約１３．７×１０１０ＴＩＬが投与される。一実施形態において、約１．２×１０１０〜約４．３×１０１０のＴＩＬが投与される。
【０７７１】
[001277]  一部の実施形態において、本発明の医薬組成物中に提供されるＴＩＬの数は、約１×１０６、２×１０６、３×１０６、４×１０６、５×１０６、６×１０６、７×１０６、８×１０６、９×１０６、１×１０７、２×１０７、３×１０７、４×１０７、５×１０７、６×１０７、７×１０７、８×１０７、９×１０７、１×１０８、２×１０８、３×１０８、４×１０８、５×１０８、６×１０８、７×１０８、８×１０８、９×１０８、１×１０９、２×１０９、３×１０９、４×１０９、５×１０９、６×１０９、７×１０９、８×１０９、９×１０９、１×１０１０、２×１０１０、３×１０１０、４×１０１０、５×１０１０、６×１０１０、７×１０１０、８×１０１０、９×１０１０、１×１０１１、２×１０１１、３×１０１１、４×１０１１、５×１０１１、６×１０１１、７×１０１１、８×１０１１、９×１０１１、１×１０１２、２×１０１２、３×１０１２、４×１０１２、５×１０１２、６×１０１２、７×１０１２、８×１０１２、９×１０１２、１×１０１３、２×１０１３、３×１０１３、４×１０１３、５×１０１３、６×１０１３、７×１０１３、８×１０１３及び９×１０１３個である。一実施形態において、本発明の医薬組成物中に提供されるＴＩＬの数は、１ｘ１０６〜５ｘ１０６、５ｘ１０６〜１ｘ１０７、１ｘ１０７〜５ｘ１０７、５ｘ１０７〜１ｘ１０８、１ｘ１０８〜５ｘ１０８、５ｘ１０８〜１ｘ１０９、１ｘ１０９〜５ｘ１０９、５ｘ１０９〜１ｘ１０１０、１ｘ１０１０〜５ｘ１０１０、５ｘ１０１０〜１ｘ１０１１、５ｘ１０１１〜１ｘ１０１２、１ｘ１０１２〜５ｘ１０１２及び５ｘ１０１２〜１ｘ１０１３個の範囲内である。
【０７７２】
[001278]  一部の実施形態において、本発明の医薬組成物中に提供されるＴＩＬの濃度は、例えば、医薬組成物の１００％、９０％、８０％、７０％、６０％、５０％、４０％、３０％、２０％、１９％、１８％、１７％、１６％、１５％、１４％、１３％、１２％、１１％、１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、１％、０．５％、０．４％、０．３％、０．２％、０．１％、０．０９％、０．０８％、０．０７％、０．０６％、０．０５％、０．０４％、０．０３％、０．０２％、０．０１％、０．００９％、０．００８％、０．００７％、０．００６％、０．００５％、０．００４％、０．００３％、０．００２％、０．００１％、０．０００９％、０．０００８％、０．０００７％、０．０００６％、０．０００５％、０．０００４％、０．０００３％、０．０００２％又は０．０００１％ｗ／ｗ、ｗ／ｖ又はｖ／ｖより低い。
【０７７３】
[001279]  一部の実施形態において、本発明の医薬組成物中に提供されるＴＩＬの濃度は、医薬組成物の９０％、８０％、７０％、６０％、５０％、４０％、３０％、２０％、１９．７５％、１９．５０％、１９．２５％、１９％、１８．７５％、１８．５０％、１８．２５％、１８％、１７．７５％、１７．５０％、１７．２５％、１７％、１６．７５％、１６．５０％、１６．２５％、１６％、１５．７５％、１５．５０％、１５．２５％、１５％、１４．７５％、１４．５０％、１４．２５％、１４％、１３．７５％、１３．５０％、１３．２５％、１３％、１２．７５％、１２．５０％、１２．２５％、１２％、１１．７５％、１１．５０％、１１．２５％、１１％、１０．７５％、１０．５０％、１０．２５％、１０％、９．７５％、９．５０％、９．２５％、９％、８．７５％、８．５０％、８．２５％、８％、７．７５％、７．５０％、７．２５％、７％、６．７５％、６．５０％、６．２５％、６％、５．７５％、５．５０％、５．２５％、５％、４．７５％、４．５０％、４．２５％、４％、３．７５％、３．５０％、３．２５％、３％、２．７５％、２．５０％、２．２５％、２％、１．７５％、１．５０％、１２５％、１％、０．５％、０．４％、０．３％、０．２％、０．１％、０．０９％、０．０８％、０．０７％、０．０６％、０．０５％、０．０４％、０．０３％、０．０２％、０．０１％、０．００９％、０．００８％、０．００７％、０．００６％、０．００５％、０．００４％、０．００３％、０．００２％、０．００１％、０．０００９％、０．０００８％、０．０００７％、０．０００６％、０．０００５％、０．０００４％、０．０００３％、０．０００２％又は０．０００１％ｗ／ｗ、ｗ／ｖ又はｖ／ｖより高い。
【０７７４】
[001280]  一部の実施形態において、本発明の医薬組成物中に提供されるＴＩＬの濃度は、医薬組成物の約０．０００１％〜約５０％、約０．００１％〜約４０％、約０．０１％〜約３０％、約０．０２％〜約２９％、約０．０３％〜約２８％、約０．０４％〜約２７％、約０．０５％〜約２６％、約０．０６％〜約２５％、約０．０７％〜約２４％、約０．０８％〜約２３％、約０．０９％〜約２２％、約０．１％〜約２１％、約０．２％〜約２０％、約０．３％〜約１９％、約０．４％〜約１８％、約０．５％〜約１７％、約０．６％〜約１６％、約０．７％〜約１５％、約０．８％〜約１４％、約０．９％〜約１２％又は約１％〜約１０％ｗ／ｗ、ｗ／ｖ又はｖ／ｖの範囲内である。
【０７７５】
[001281]  一部の実施形態において、本発明の医薬組成物中に提供されるＴＩＬの濃度は、医薬組成物の約０．００１％〜約１０％、約０．０１％〜約５％、約０．０２％〜約４．５％、約０．０３％〜約４％、約０．０４％〜約３．５％、約０．０５％〜約３％、約０．０６％〜約２．５％、約０．０７％〜約２％、約０．０８％〜約１．５％、約０．０９％〜約１％、約０．１％〜約０．９％ｗ／ｗ、ｗ／ｖ又はｖ／ｖの範囲内である。
【０７７６】
[001282]  一部の実施形態において、本発明の医薬組成物中に提供されるＴＩＬの量は、１０ｇ、９．５ｇ、９．０ｇ、８．５ｇ、８．０ｇ、７．５ｇ、７．０ｇ、６．５ｇ、６．０ｇ、５．５ｇ、５．０ｇ、４．５ｇ、４．０ｇ、３．５ｇ、３．０ｇ、２．５ｇ、２．０ｇ、１．５ｇ、１．０ｇ、０．９５ｇ、０．９ｇ、０．８５ｇ、０．８ｇ、０．７５ｇ、０．７ｇ、０．６５ｇ、０．６ｇ、０．５５ｇ、０．５ｇ、０．４５ｇ、０．４ｇ、０．３５ｇ、０．３ｇ、０．２５ｇ、０．２ｇ、０．１５ｇ、０．１ｇ、０．０９ｇ、０．０８ｇ、０．０７ｇ、０．０６ｇ、０．０５ｇ、０．０４ｇ、０．０３ｇ、０．０２ｇ、０．０１ｇ、０．００９ｇ、０．００８ｇ、０．００７ｇ、０．００６ｇ、０．００５ｇ、０．００４ｇ、０．００３ｇ、０．００２ｇ、０．００１ｇ、０．０００９ｇ、０．０００８ｇ、０．０００７ｇ、０．０００６ｇ、０．０００５ｇ、０．０００４ｇ、０．０００３ｇ、０．０００２ｇ又は０．０００１ｇ以下である。
【０７７７】
[001283]  一部の実施形態において、本発明の医薬組成物中に提供されるＴＩＬの量は、０．０００１ｇ、０．０００２ｇ、０．０００３ｇ、０．０００４ｇ、０．０００５ｇ、０．０００６ｇ、０．０００７ｇ、０．０００８ｇ、０．０００９ｇ、０．００１ｇ、０．００１５ｇ、０．００２ｇ、０．００２５ｇ、０．００３ｇ、０．００３５ｇ、０．００４ｇ、０．００４５ｇ、０．００５ｇ、０．００５５ｇ、０．００６ｇ、０．００６５ｇ、０．００７ｇ、０．００７５ｇ、０．００８ｇ、０．００８５ｇ、０．００９ｇ、０．００９５ｇ、０．０１ｇ、０．０１５ｇ、０．０２ｇ、０．０２５ｇ、０．０３ｇ、０．０３５ｇ、０．０４ｇ、０．０４５ｇ、０．０５ｇ、０．０５５ｇ、０．０６ｇ、０．０６５ｇ、０．０７ｇ、０．０７５ｇ、０．０８ｇ、０．０８５ｇ、０．０９ｇ、０．０９５ｇ、０．１ｇ、０．１５ｇ、０．２ｇ、０．２５ｇ、０．３ｇ、０．３５ｇ、０．４ｇ、０．４５ｇ、０．５ｇ、０．５５ｇ、０．６ｇ、０．６５ｇ、０．７ｇ、０．７５ｇ、０．８ｇ、０．８５ｇ、０．９ｇ、０．９５ｇ、１ｇ、１．５ｇ、２ｇ、２．５、３ｇ、３．５、４ｇ、４．５ｇ、５ｇ、５．５ｇ、６ｇ、６．５ｇ、７ｇ、７．５ｇ、８ｇ、８．５ｇ、９ｇ、９．５ｇ又は１０ｇ超である。
【０７７８】
[001284]  好ましい実施形態において、本発明は、ＴＩＬ、Ａ２ＡＲアンタゴニスト及び任意選択により少なくとも１つのＴＮＦＲＳＦアゴニストの組み合わせを含む注射用医薬組成物及びそれらの組み合わせ並びに腫瘍内注射又は静脈内注入を含む注射に適した医薬賦形剤を提供する。組成物中の薬剤の成分及び量は、本明細書に記載の通りである。
【０７７９】
[001285]  注射による投与のために本発明の組成物が組み込まれ得る形態には、ゴマ油、コーン油、綿実油又はピーナッツ油並びにエリキシル剤、マンニトール、デキストロース又は滅菌水溶液及び同様の医薬ビヒクルを含む、水性若しくは油性懸濁液又はエマルジョンが含まれる。
【０７８０】
[001286]  生理食塩水中の水溶液も従来から注射に使用されている。エタノール、グリセロール、プロピレングリコール及び液体ポリエチレングリコール（及びそれらの適切な混合物）、シクロデキストリン誘導体及び植物油も使用され得る。適切な流動性は、例えば、分散する場合に必要な粒子サイズを維持するための、レシチンなどのコーティングの使用により且つ界面活性剤の使用により維持することができる。微生物の作用の防止は、様々な抗菌剤及び抗真菌剤、例えばパラベン、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸及びチメロサールによってもたらされ得る。
【０７８１】
[001287]  滅菌注射用溶液は、必要に応じて、上に列挙したような様々な他の成分と共に、適切な媒体中に必要量のＴＮＦＲＳＦアゴニスト及びＴＩＬの組み合わせを組み込み、続いて濾過滅菌することによって調製される。一般的に、分散液は、基本的な分散媒体と上に列挙したものからの必要な他の成分とを含有する滅菌ビヒクル中に様々な滅菌活性成分を組み込むことによって調製される。滅菌注射用溶液を調製するための滅菌粉末の場合、特定の望ましい調製方法は、活性成分に加えて任意の更なる所望の成分の粉末を、先に滅菌濾過したその溶液から得る、真空乾燥及び凍結乾燥法である。
【０７８２】
Ａ２ＡＲアンタゴニストの医薬組成物、投与量及び投与レジメン
[001288]  一部の実施形態において、本発明の医薬組成物中は、アデノシン２Ａ受容体アンタゴニストを含有する。一部の実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、ＣＰＩ−４４４、ＳＣＨ５８２６１、ＺＭ２４１３８５、ＳＣＨ４２０８１４、ＳＹＮ１１５、８−ＣＳＣ、ＫＷ−６００２、Ａ２Ａ受容体アンタゴニスト１、ＡＤＺ４６３５、ビパデナント、ＳＴ４２０６、ＫＦ２１２１３、ＳＣＨ４１２３４８、７ＭＭＧ−４９、その薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶又はプロドラッグ及びそれらの組み合わせからなる群から選択される。一部の実施形態において、Ａ２ＡＲアンタゴニストは、経口、静脈内、十二指腸内、非経口（静脈内、動脈内、皮下、筋肉内、血管内、腹腔内若しくは注入を含む）、局所（例えば、経皮適用）、直腸内、カテーテル若しくはステントによる局所送達、吸入、脂肪内又は髄腔内で投与される。米国特許第８，４５０，０３２号、米国特許第９，７６５，０８０号及び米国特許第９，３７６，４４３号（これらは、それぞれその全体が参照により組み込まれる）に記載されているものなどの医薬組成物は、Ａ２ＡＲアンタゴニストを投与するために利用され得る。
【０７８３】
[001289]  一部の実施形態において、Ａ２ＡＲアンタゴニストは、本明細書に開示されるようなＴＩＬ集団の医薬製剤と共投与される。一実施形態において、ＣＰＩ−４４４、その薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶又はプロドラッグ及びそれらの組み合わせは、本明細書に開示されるようなＴＩＬ集団の医薬製剤と共投与される。
【０７８４】
[001290]  本発明の医薬組成物において提供されるＴＩＬは、広い投与量範囲にわたって有効である。正確な投与量は、投与経路、化合物が投与される形態、処置されるべき対象の性別及び年齢、処置されるべき対象の体重並びに担当医の選好及び経験に依存するであろう。臨床的に確立されたＴＩＬの投与量も適切な場合に使用され得る。ＴＩＬの投与量など、本明細書の方法を使用して投与される医薬組成物の量は、処置されるヒト又は哺乳動物、疾患又は状態の重症度、投与速度、活性医薬成分の性質及び処方医の裁量に依存するであろう。
【０７８５】
[001291]  一部の実施形態において、ＴＩＬは単回投与で投与され得る。そのような投与は、注射、例えば静脈内注射によるものであり得る。一部の実施形態において、ＴＩＬは複数回投与で投与され得る。投与は、１年に１回、２回、３回、４回、５回、６回又は６回を超え得る。投与は、月に１回、２週間に１回、週に１回又は隔日に１回であり得る。ＴＩＬの投与は必要な限り継続し得る。
【０７８６】
[001292]  一部の実施形態において、ＴＩＬの有効投与量は、約１×１０６、２×１０６、３×１０６、４×１０６、５×１０６、６×１０６、７×１０６、８×１０６、９×１０６、１×１０７、２×１０７、３×１０７、４×１０７、５×１０７、６×１０７、７×１０７、８×１０７、９×１０７、１×１０８、２×１０８、３×１０８、４×１０８、５×１０８、６×１０８、７×１０８、８×１０８、９×１０８、１×１０９、２×１０９、３×１０９、４×１０９、５×１０９、６×１０９、７×１０９、８×１０９、９×１０９、１×１０１０、２×１０１０、３×１０１０、４×１０１０、５×１０１０、６×１０１０、７×１０１０、８×１０１０、９×１０１０、１×１０１１、２×１０１１、３×１０１１、４×１０１１、５×１０１１、６×１０１１、７×１０１１、８×１０１１、９×１０１１、１×１０１２、２×１０１２、３×１０１２、４×１０１２、５×１０１２、６×１０１２、７×１０１２、８×１０１２、９×１０１２、１×１０１３、２×１０１３、３×１０１３、４×１０１３、５×１０１３、６×１０１３、７×１０１３、８×１０１３及び９×１０１３個である。一部の実施形態において、ＴＩＬの有効投与量は、１ｘ１０６〜５ｘ１０６、５ｘ１０６〜１ｘ１０７、１ｘ１０７〜５ｘ１０７、５ｘ１０７〜１ｘ１０８、１ｘ１０８〜５ｘ１０８、５ｘ１０８〜１ｘ１０９、１ｘ１０９〜５ｘ１０９、５ｘ１０９〜１ｘ１０１０、１ｘ１０１０〜５ｘ１０１０、５ｘ１０１０〜１ｘ１０１１、５ｘ１０１１〜１ｘ１０１２、１ｘ１０１２〜５ｘ１０１２及び５ｘ１０１２〜１ｘ１０１３個の範囲内である。
【０７８７】
[001293]  一部の実施形態において、ＴＩＬの有効投与量は、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約４．３ｍｇ／ｋｇ、約０．１５ｍｇ／ｋｇ〜約３．６ｍｇ／ｋｇ、約０．３ｍｇ／ｋｇ〜約３．２ｍｇ／ｋｇ、約０．３５ｍｇ／ｋｇ〜約２．８５ｍｇ／ｋｇ、約０．１５ｍｇ／ｋｇ〜約２．８５ｍｇ／ｋｇ、約０．３ｍｇ〜約２．１５ｍｇ／ｋｇ、約０．４５ｍｇ／ｋｇ〜約１．７ｍｇ／ｋｇ、約０．１５ｍｇ／ｋｇ〜約１．３ｍｇ／ｋｇ、約０．３ｍｇ／ｋｇ〜約１．１５ｍｇ／ｋｇ、約０．４５ｍｇ／ｋｇ〜約１ｍｇ／ｋｇ、約０．５５ｍｇ／ｋｇ〜約０．８５ｍｇ／ｋｇ、約０．６５ｍｇ／ｋｇ〜約０．８ｍｇ／ｋｇ、約０．７ｍｇ／ｋｇ〜約０．７５ｍｇ／ｋｇ、約０．７ｍｇ／ｋｇ〜約２．１５ｍｇ／ｋｇ、約０．８５ｍｇ／ｋｇ〜約２ｍｇ／ｋｇ、約１ｍｇ／ｋｇ〜約１．８５ｍｇ／ｋｇ、約１．１５ｍｇ／ｋｇ〜約１．７ｍｇ／ｋｇ、約１．３ｍｇ／ｋｇｍｇ〜約１．６ｍｇ／ｋｇ、約１．３５ｍｇ／ｋｇ〜約１．５ｍｇ／ｋｇ、約２．１５ｍｇ／ｋｇ〜約３．６ｍｇ／ｋｇ、約２．３ｍｇ／ｋｇ〜約３．４ｍｇ／ｋｇ、約２．４ｍｇ／ｋｇ〜約３．３ｍｇ／ｋｇ、約２．６ｍｇ／ｋｇ〜約３．１５ｍｇ／ｋｇ、約２．７ｍｇ／ｋｇ〜約３ｍｇ／ｋｇ、約２．８ｍｇ／ｋｇ〜約３ｍｇ／ｋｇ又は約２．８５ｍｇ／ｋｇ〜約２．９５ｍｇ／ｋｇの範囲内である。
【０７８８】
[001294]  一部の実施形態において、ＴＩＬの有効投与量は、約１ｍｇ〜約５００ｍｇ、約１０ｍｇ〜約３００ｍｇ、約２０ｍｇ〜約２５０ｍｇ、約２５ｍｇ〜約２００ｍｇ、約１ｍｇ〜約５０ｍｇ、約５ｍｇ〜約４５ｍｇ、約１０ｍｇ〜約４０ｍｇ、約１５ｍｇ〜約３５ｍｇ、約２０ｍｇ〜約３０ｍｇ、約２３ｍｇ〜約２８ｍｇ、約５０ｍｇ〜約１５０ｍｇ、約６０ｍｇ〜約１４０ｍｇ、約７０ｍｇ〜約１３０ｍｇ、約８０ｍｇ〜約１２０ｍｇ、約９０ｍｇ〜約１１０ｍｇ又は約９５ｍｇ〜約１０５ｍｇ、約９８ｍｇ〜約１０２ｍｇ、約１５０ｍｇ〜約２５０ｍｇ、約１６０ｍｇ〜約２４０ｍｇ、約１７０ｍｇ〜約２３０ｍｇ、約１８０ｍｇ〜約２２０ｍｇ、約１９０ｍｇ〜約２１０ｍｇ、約１９５ｍｇ〜約２０５ｍｇ又は約１９８〜約２０７ｍｇの範囲内である。
【０７８９】
[001295]  有効量のＴＩＬは、鼻腔内及び経皮経路、動脈内注射によること、静脈内、腹腔内、非経口的、筋肉内、皮下、局所、移植若しくは腫瘍への直接注射によること又は吸入によることを含め、同様の有用性を有する薬剤について一般に認められている任意の投与方式により、単回用量又は複数回用量のいずれでも投与され得る。
【０７９０】
[001296]  一部の実施形態において、有効量のＴＩＬは、本明細書に開示される投与方法のいずれかによって単回投与又は複数回投与のいずれかで投与される。一部の実施形態において、Ａ２ＡＲアンタゴニスト又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせは、共投与される。一部の実施形態において、Ａ２ＡＲアンタゴニスト又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせは、経口で共投与される。一部の実施形態において、そのような経口共投与は、１日２回の投与で行われ得る。一部の実施形態において、Ａ２ＡＲアンタゴニスト又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグの経口用量は、１０ｍｇ  ＢＩＤ、２５ｍｇ  ＢＩＤ、５０ｍｇ  ＢＩＤ、７５ｍｇ  ＢＩＤ、１００ｍｇ  ＢＩＤ、１２５ｍｇ  ＢＩＤ、１５０ｍｇ  ＢＩＤ、１７５ｍｇ  ＢＩＤ、２００ｍｇ  ＢＩＤ、２２５ｍｇ  ＢＩＤ、２５０ｍｇ  ＢＩＤ、２７５ｍｇ  ＢＩＤ、３００ｍｇ  ＢＩＤ、３２５ｍｇ  ＢＩＤ及び３５０ｍｇ  ＢＩＤからなる群から選択される。一部の実施形態において、Ａ２ＡＲアンタゴニスト又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグの経口用量は、１０ｍｇ  ＱＤ、２５ｍｇ  ＱＤ、５０ｍｇ  ＱＤ、７５ｍｇ  ＱＤ、１００ｍｇ  ＱＤ、１２５ｍｇ  ＱＤ、１５０ｍｇ  ＱＤ、１７５ｍｇ  ＱＤ、２００ｍｇ  ＱＤ、２２５ｍｇ  ＱＤ、２５０ｍｇ  ＱＤ、２７５ｍｇ  ＱＤ、３００ｍｇ  ＱＤ、３２５ｍｇ  ＱＤ、３５０ｍｇ  ＢＩＤ、４００ｍｇ  ＢＩＤ及び５００ｍｇ  ＢＩＤからなる群から選択される。一部の実施形態において、Ａ２ＡＲアンタゴニスト又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグの有効投与量は、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約４．３ｍｇ／ｋｇ、約０．１５ｍｇ／ｋｇ〜約３．６ｍｇ／ｋｇ、約０．３ｍｇ／ｋｇ〜約３．２ｍｇ／ｋｇ、約０．３５ｍｇ／ｋｇ〜約２．８５ｍｇ／ｋｇ、約０．１５ｍｇ／ｋｇ〜約２．８５ｍｇ／ｋｇ、約０．３ｍｇ〜約２．１５ｍｇ／ｋｇ、約０．４５ｍｇ／ｋｇ〜約１．７ｍｇ／ｋｇ、約０．１５ｍｇ／ｋｇ〜約１．３ｍｇ／ｋｇ、約０．３ｍｇ／ｋｇ〜約１．１５ｍｇ／ｋｇ、約０．４５ｍｇ／ｋｇ〜約１ｍｇ／ｋｇ、約０．５５ｍｇ／ｋｇ〜約０．８５ｍｇ／ｋｇ、約０．６５ｍｇ／ｋｇ〜約０．８ｍｇ／ｋｇ、約０．７ｍｇ／ｋｇ〜約０．７５ｍｇ／ｋｇ、約０．７ｍｇ／ｋｇ〜約２．１５ｍｇ／ｋｇ、約０．８５ｍｇ／ｋｇ〜約２ｍｇ／ｋｇ、約１ｍｇ／ｋｇ〜約１．８５ｍｇ／ｋｇ、約１．１５ｍｇ／ｋｇ〜約１．７ｍｇ／ｋｇ、約１．３ｍｇ／ｋｇ  ｍｇ〜約１．６ｍｇ／ｋｇ、約１．３５ｍｇ／ｋｇ〜約１．５ｍｇ／ｋｇ、約２．１５ｍｇ／ｋｇ〜約３．６ｍｇ／ｋｇ、約２．３ｍｇ／ｋｇ〜約３．４ｍｇ／ｋｇ、約２．４ｍｇ／ｋｇ〜約３．３ｍｇ／ｋｇ、約２．６ｍｇ／ｋｇ〜約３．１５ｍｇ／ｋｇ、約２．７ｍｇ／ｋｇ〜約３ｍｇ／ｋｇ、約２．８ｍｇ／ｋｇ〜約３ｍｇ／ｋｇ又は約２．８５ｍｇ／ｋｇ〜約２．９５ｍｇ／ｋｇの範囲内である。一部の実施形態において、Ａ２ＡＲアンタゴニスト又はその薬学的に許容される��、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグは、約１ｍｇ〜約５００ｍｇ、約１０ｍｇ〜約３００ｍｇ、約２０ｍｇ〜約２５０ｍｇ、約２５ｍｇ〜約２００ｍｇ、約１ｍｇ〜約５０ｍｇ、約５ｍｇ〜約４５ｍｇ、約１０ｍｇ〜約４０ｍｇ、約１５ｍｇ〜約３５ｍｇ、約２０ｍｇ〜約３０ｍｇ、約２３ｍｇ〜約２８ｍｇ、約５０ｍｇ〜約１５０ｍｇ、約６０ｍｇ〜約１４０ｍｇ、約７０ｍｇ〜約１３０ｍｇ、約８０ｍｇ〜約１２０ｍｇ、約９０ｍｇ〜約１１０ｍｇ又は約９５ｍｇ〜約１０５ｍｇ、約９８ｍｇ〜約１０２ｍｇ、約１５０ｍｇ〜約２５０ｍｇ、約１６０ｍｇ〜約２４０ｍｇ、約１７０ｍｇ〜約２３０ｍｇ、約１８０ｍｇ〜約２２０ｍｇ、約１９０ｍｇ〜約２１０ｍｇ、約１９５ｍｇ〜約２０５ｍｇ又は約１９８〜約２０７ｍｇの範囲内である。
【０７９１】
[001297]  一部の実施形態において、患者は、腫瘍変異負荷（ＴＭＢ）又は腫瘍ゲノムの１コード領域あたりの変異の総数に基づいて、処置のために選択され、ここで、高ＴＭＢの腫瘍を有する患者が処置のために選択される。
【０７９２】
ＴＮＦＲＳＦアゴニストの医薬組成物、投与量及び投与レジメン
[001298]  一実施形態において、本発明は、本明細書に記載の疾患及び状態の処置における使用のための医薬組成物を提供する。好ましい実施形態において、本発明は、過剰増殖性疾患の処置に使用するための、下記のものを含む医薬組成物を提供する。好ましい実施形態において、本発明は、癌の処置に使用するための、下記のものを含む医薬組成物を提供する。
【０７９３】
[001299]  一部の実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニスト抗体製剤は、トリス塩酸塩、塩化ナトリウム、マンニトール、ペンテン酸、ポリソルベート８０、水酸化ナトリウム及び塩酸から選択される１つ以上の賦形剤を含む。
【０７９４】
[001300]  一実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、約５ｍｇ、約８ｍｇ、約１０ｍｇ、約２０ｍｇ、約２５ｍｇ、約５０ｍｇ、約７５ｍｇ、１００ｍｇ、約２００ｍｇ、約３００ｍｇ、約４００ｍｇ、約５００ｍｇ、約６００ｍｇ、約７００ｍｇ、約８００ｍｇ、約９００ｍｇ、約１０００ｍｇ、約１１００ｍｇ、約１２００ｍｇ、約１３００ｍｇ、約１４００ｍｇ、約１５００ｍｇ、約１６００ｍｇ、約１７００ｍｇ、約１８００ｍｇ、約１９００ｍｇ及び約２０００ｍｇからなる群から選択される用量を、注入によって対象に投与される。一実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、毎週投与される。一実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、２週間ごとに投与される。一実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、３週間ごとに投与される。一実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、毎月投与される。一実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、１２週間の期間にわたる４回の投与について、３週間ごとに投与される８ｍｇの用量で静脈内投与される。一実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、より低い初期用量で投与され、これは、その後の毎月投与される間隔で投与されるときに増加する。例えば、最初の注入で３００ｍｇのＴＮＦＲＳＦアゴニストを送達でき、その後の毎週の投与で２，０００ｍｇのＴＮＦＲＳＦアゴニストを８週間にわたって送達でき、その後、毎月の投与で２，０００ｍｇのＴＮＦＲＳＦアゴニストを送達できる。
【０７９５】
[001301]  ＴＮＦＲＳＦアゴニストの量は、処置されるヒト又は哺乳動物、疾患又は状態の重症度、投与速度、化合物の性質及び処方医の裁量に依存するであろう。しかし、それぞれの有効投与量は、単回投与又は分割投与で、約１〜約３５ｍｇ／ｋｇ／日など、１日あたり体重１ｋｇあたり約０．００１〜約１００ｍｇの範囲内である。７０ｋｇのヒトの場合、これは、約０．０５〜約２．５ｇ／日などの約０．０５〜７ｇ／日に達する。いくつかの場合、上記範囲の下限を下回る投与量レベルが十分量を超える可能性があり、他の場合、有害な副作用を引き起こすことなく、更により多くの用量を使用し得る（例えば、終日にわたる投与のために、そのようなより多くの用量をいくつかの小さい用量に分割することによって）。ＴＮＦＲＳＦアゴニストの投与量は、ｍｇ／ｋｇ体重の単位又はｍｇ／ｍ２体表面積の単位で提供され得る。一実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニスト及び第２のＴＮＦＲＳＦアゴニストは、ｍｇ／ｋｇ又はｍｇ／ｍ２で、約２０：１、約１９：１、約１８：１、約１７：１、約１６：１、約１５：１、約１４：１、約１３：１、約１２：１、約１１：１、約１０：１、約９：１、約８：１、約７：１、約６：１、約５：１、約４：１、約３：１、約２：１、約１：１、約１：２、約１：３、約１：４、約１：５、約１：６、約１：７、約１：８、約１：９、約１：１０、約１：１１、約１：１２、約１：１３、約１：１４、約１：１５、約１：１６、約１：１７、約１：１８、約１：１９及び約１：２０からなる群から選択される割合で送達される。
【０７９６】
[001302]  一部の実施形態において、ＴＩＬとＴＮＦＲＳＦアゴニストとの組み合わせは、単回投与で投与される。そのような投与は、ＴＮＦＲＳＦアゴニストを導入するために、注射、例えば静脈内注射によるものであり得る。
【０７９７】
[001303]  一部の実施形態において、ＴＩＬとＴＮＦＲＳＦアゴニストとの組み合わせは、複数回投与で投与される。好ましい実施形態において、ＴＩＬとＴＮＦＲＳＦアゴニストとの組み合わせは、複数回投与で投与される。ＴＮＦＲＳＦアゴニストの投与は、１日に１回、２回、３回、４回、５回、６回又は６回を超え得る。ＴＩＬ及びＴＮＦＲＳＦアゴニストの投与は、月に１回、２週間に１回、週に１回又は隔日に１回であり得る。
【０７９８】
[001304]  選択された実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、１、２、３、４、５、６、７、１４、２８日、２ヶ月、３ヶ月、６ヶ月、１２ヶ月又は２４ヶ月超にわたって投与される。いくつかの場合、必要な限り連続投与が達成され維持される。
【０７９９】
[001305]  一部の実施形態において、本明細書に開示される、ＴＮＦＲＳＦアゴニストの有効投与量は、約１ｍｇ〜約５００ｍｇ、約１０ｍｇ〜約３００ｍｇ、約２０ｍｇ〜約２５０ｍｇ、約２５ｍｇ〜約２００ｍｇ、約１０ｍｇ〜約２００ｍｇ、約２０ｍｇ〜約１５０ｍｇ、約３０ｍｇ〜約１２０ｍｇ、約１０ｍｇ〜約９０ｍｇ、約２０ｍｇ〜約８０ｍｇ、約３０ｍｇ〜約７０ｍｇ、約４０ｍｇ〜約６０ｍｇ、約４５ｍｇ〜約５５ｍｇ、約４８ｍｇ〜約５２ｍｇ、約５０ｍｇ〜約１５０ｍｇ、約６０ｍｇ〜約１４０ｍｇ、約７０ｍｇ〜約１３０ｍｇ、約８０ｍｇ〜約１２０ｍｇ、約９０ｍｇ〜約１１０ｍｇ、約９５ｍｇ〜約１０５ｍｇ、約１５０ｍｇ〜約２５０ｍｇ、約１６０ｍｇ〜約２４０ｍｇ、約１７０ｍｇ〜約２３０ｍｇ、約１８０ｍｇ〜約２２０ｍｇ、約１９０ｍｇ〜約２１０ｍｇ、約１９５ｍｇ〜約２０５ｍｇ又は約１９８〜約２０２ｍｇの範囲内である。一部の実施形態において、本明細書に開示されるＴＮＦＲＳＦアゴニストの有効投与量は、約２５ｍｇ、約５０ｍｇ、約７５ｍｇ、約１００ｍｇ、約１２５ｍｇ、約１５０ｍｇ、約１７５ｍｇ、約２００ｍｇ、約２２５ｍｇ又は約２５０ｍｇである。
【０８００】
[001306]  一部の実施形態において、本明細書に開示されるＴＮＦＲＳＦアゴニストの有効投与量は、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約４．３ｍｇ／ｋｇ、約０．１５ｍｇ／ｋｇ〜約３．６ｍｇ／ｋｇ、約０．３ｍｇ／ｋｇ〜約３．２ｍｇ／ｋｇ、約０．３５ｍｇ／ｋｇ〜約２．８５ｍｇ／ｋｇ、約０．１５ｍｇ／ｋｇ〜約２．８５ｍｇ／ｋｇ、約０．３ｍｇ〜約２．１５ｍｇ／ｋｇ、約０．４５ｍｇ／ｋｇ〜約１．７ｍｇ／ｋｇ、約０．１５ｍｇ／ｋｇ〜約１．３ｍｇ／ｋｇ、約０．３ｍｇ／ｋｇ〜約１．１５ｍｇ／ｋｇ、約０．４５ｍｇ／ｋｇ〜約１ｍｇ／ｋｇ、約０．５５ｍｇ／ｋｇ〜約０．８５ｍｇ／ｋｇ、約０．６５ｍｇ／ｋｇ〜約０．８ｍｇ／ｋｇ、約０．７ｍｇ／ｋｇ〜約０．７５ｍｇ／ｋｇ、約０．７ｍｇ／ｋｇ〜約２．１５ｍｇ／ｋｇ、約０．８５ｍｇ／ｋｇ〜約２ｍｇ／ｋｇ、約１ｍｇ／ｋｇ〜約１．８５ｍｇ／ｋｇ、約１．１５ｍｇ／ｋｇ〜約１．７ｍｇ／ｋｇ、約１．３ｍｇ／ｋｇｍｇ〜約１．６ｍｇ／ｋｇ、約１．３５ｍｇ／ｋｇ〜約１．５ｍｇ／ｋｇ、約２．１５ｍｇ／ｋｇ〜約３．６ｍｇ／ｋｇ、約２．３ｍｇ／ｋｇ〜約３．４ｍｇ／ｋｇ、約２．４ｍｇ／ｋｇ〜約３．３ｍｇ／ｋｇ、約２．６ｍｇ／ｋｇ〜約３．１５ｍｇ／ｋｇ、約２．７ｍｇ／ｋｇ〜約３ｍｇ／ｋｇ、約２．８ｍｇ／ｋｇ〜約３ｍｇ／ｋｇ又は約２．８５ｍｇ／ｋｇ〜約２．９５ｍｇ／ｋｇの範囲内である。一部の実施形態において、本明細書に開示されるＴＮＦＲＳＦアゴニストの有効投与量は、約０．３５ｍｇ／ｋｇ、約０．７ｍｇ／ｋｇ、約１ｍｇ／ｋｇ、約１．４ｍｇ／ｋｇ、約１．８ｍｇ／ｋｇ、約２．１ｍｇ／ｋｇ、約２．５ｍｇ／ｋｇ、約２．８５ｍｇ／ｋｇ、約３．２ｍｇ／ｋｇ又は約３．６ｍｇ／ｋｇである。
【０８０１】
[001307]  一部の実施形態において、本明細書に開示されるＴＮＦＲＳＦアゴニストの有効投与量は、約１ｍｇ〜約５００ｍｇ、約１０ｍｇ〜約３００ｍｇ、約２０ｍｇ〜約２５０ｍｇ、約２５ｍｇ〜約２００ｍｇ、約１ｍｇ〜約５０ｍｇ、約５ｍｇ〜約４５ｍｇ、約１０ｍｇ〜約４０ｍｇ、約１５ｍｇ〜約３５ｍｇ、約２０ｍｇ〜約３０ｍｇ、約２３ｍｇ〜約２８ｍｇ、約５０ｍｇ〜約１５０ｍｇ、約６０ｍｇ〜約１４０ｍｇ、約７０ｍｇ〜約１３０ｍｇ、約８０ｍｇ〜約１２０ｍｇ、約９０ｍｇ〜約１１０ｍｇ又は約９５ｍｇ〜約１０５ｍｇ、約９８ｍｇ〜約１０２ｍｇ、約１５０ｍｇ〜約２５０ｍｇ、約１６０ｍｇ〜約２４０ｍｇ、約１７０ｍｇ〜約２３０ｍｇ、約１８０ｍｇ〜約２２０ｍｇ、約１９０ｍｇ〜約２１０ｍｇ、約１９５ｍｇ〜約２０５ｍｇ又は約１９８〜約２０７ｍｇの範囲内である。一部の実施形態において、本明細書に開示されるＴＮＦＲＳＦアゴニストの有効投与量は、約２５ｍｇ、約５０ｍｇ、約７５ｍｇ、約１００ｍｇ、約１２５ｍｇ、約１５０ｍｇ、約１７５ｍｇ、約２００ｍｇ、約２２５ｍｇ又は約２５０ｍｇである。
【０８０２】
[001308]  一部の実施形態において、本明細書に開示される、ＴＮＦＲＳＦアゴニストの有効投与量は、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約４．３ｍｇ／ｋｇ、約０．１５ｍｇ／ｋｇ〜約３．６ｍｇ／ｋｇ、約０．３ｍｇ／ｋｇ〜約３．２ｍｇ／ｋｇ、約０．３５ｍｇ／ｋｇ〜約２．８５ｍｇ／ｋｇ、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約０．７ｍｇ／ｋｇ、約０．０７ｍｇ／ｋｇ〜約０．６５ｍｇ／ｋｇ、約０．１５ｍｇ／ｋｇ〜約０．６ｍｇ／ｋｇ、約０．２ｍｇ／ｋｇ〜約０．５ｍｇ／ｋｇ、約０．３ｍｇ／ｋｇ〜約０．４５ｍｇ／ｋｇ、約０．３ｍｇ／ｋｇ〜約０．４ｍｇ／ｋｇ、約０．７ｍｇ／ｋｇ〜約２．１５ｍｇ／ｋｇ、約０．８５ｍｇ／ｋｇ〜約２ｍｇ／ｋｇ、約１ｍｇ／ｋｇ〜約１．８５ｍｇ／ｋｇ、約１．１５ｍｇ／ｋｇ〜約１．７ｍｇ／ｋｇ、約１．３ｍｇ／ｋｇ〜約１．６ｍｇ／ｋｇ、約１．３５ｍｇ／ｋｇ〜約１．５ｍｇ／ｋｇ、約１．４ｍｇ／ｋｇ〜約１．４５ｍｇ／ｋｇ、約２．１５ｍｇ／ｋｇ〜約３．６ｍｇ／ｋｇ、約２．３ｍｇ／ｋｇ〜約３．４ｍｇ／ｋｇ、約２．４ｍｇ／ｋｇ〜約３．３ｍｇ／ｋｇ、約２．６ｍｇ／ｋｇ〜約３．１５ｍｇ／ｋｇ、約２．７ｍｇ／ｋｇ〜約３ｍｇ／ｋｇ、約２．８ｍｇ／ｋｇ〜約３ｍｇ／ｋｇ又は約２．８５ｍｇ／ｋｇ〜約２．９５ｍｇ／ｋｇの範囲内である。一部の実施形態において、本明細書に開示されるＴＮＦＲＳＦアゴニストは、約０．４ｍｇ／ｋｇ、約０．７ｍｇ／ｋｇ、約１ｍｇ／ｋｇ、約１．４ｍｇ／ｋｇ、約１．８ｍｇ／ｋｇ、約２．１ｍｇ／ｋｇ、約２．５ｍｇ／ｋｇ、約２．８５ｍｇ／ｋｇ、約３．２ｍｇ／ｋｇ又は約３．６ｍｇ／ｋｇである。
【０８０３】
[001309]  一部の実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１５０又は２００ｍｇ  ＢＩＤを含む、１０〜１０００ｍｇ  ＢＩＤの投与量で投与される。
【０８０４】
[001310]  一部の実施形態において、本発明の医薬組成物中に提供される、ＴＮＦＲＳＦアゴニスト及びそれらの組み合わせの濃度は、独立して、例えば医薬組成物の１００％、９０％、８０％、７０％、６０％、５０％、４０％、３０％、２０％、１９％、１８％、１７％、１６％、１５％、１４％、１３％、１２％、１１％、１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、１％、０．５％、０．４％、０．３％、０．２％、０．１％、０．０９％、０．０８％、０．０７％、０．０６％、０．０５％、０．０４％、０．０３％、０．０２％、０．０１％、０．００９％、０．００８％、０．００７％、０．００６％、０．００５％、０．００４％、０．００３％、０．００２％、０．００１％、０．０００９％、０．０００８％、０．０００７％、０．０００６％、０．０００５％、０．０００４％、０．０００３％、０．０００２％又は０．０００１％ｗ／ｗ、ｗ／ｖ又はｖ／ｖより低い。
【０８０５】
[001311]  一部の実施形態において、本発明の医薬組成物中に提供される、ＴＮＦＲＳＦアゴニスト及びそれらの組み合わせの濃度は、独立して、医薬組成物の９０％、８０％、７０％、６０％、５０％、４０％、３０％、２０％、１９．７５％、１９．５０％、１９．２５％、１９％、１８．７５％、１８．５０％、１８．２５％、１８％、１７．７５％、１７．５０％、１７．２５％、１７％、１６．７５％、１６．５０％、１６．２５％、１６％、１５．７５％、１５．５０％、１５．２５％、１５％、１４．７５％、１４．５０％、１４．２５％、１４％、１３．７５％、１３．５０％、１３．２５％、１３％、１２．７５％、１２．５０％、１２．２５％、１２％、１１．７５％、１１．５０％、１１．２５％、１１％、１０．７５％、１０．５０％、１０．２５％、１０％、９．７５％、９．５０％、９．２５％、９％、８．７５％、８．５０％、８．２５％、８％、７．７５％、７．５０％、７．２５％、７％、６．７５％、６．５０％、６．２５％、６％、５．７５％、５．５０％、５．２５％、５％、４．７５％、４．５０％、４．２５％、４％、３．７５％、３．５０％、３．２５％、３％、２．７５％、２．５０％、２．２５％、２％、１．７５％、１．５０％、１２５％、１％、０．５％、０．４％、０．３％、０．２％、０．１％、０．０９％、０．０８％、０．０７％、０．０６％、０．０５％、０．０４％、０．０３％、０．０２％、０．０１％、０．００９％、０．００８％、０．００７％、０．００６％、０．００５％、０．００４％、０．００３％、０．００２％、０．００１％、０．０００９％、０．０００８％、０．０００７％、０．０００６％、０．０００５％、０．０００４％、０．０００３％、０．０００２％又は０．０００１％ｗ／ｗ、ｗ／ｖ又はｖ／ｖより高い。
【０８０６】
[001312]  一部の実施形態において、医薬組成物中のＴＮＦＲＳＦアゴニストの濃度は、独立して、医薬組成物の約０．０００１％〜約５０％、約０．００１％〜約４０％、約０．０１％〜約３０％、約０．０２％〜約２９％、約０．０３％〜約２８％、約０．０４％〜約２７％、約０．０５％〜約２６％、約０．０６％〜約２５％、約０．０７％〜約２４％、約０．０８％〜約２３％、約０．０９％〜約２２％、約０．１％〜約２１％、約０．２％〜約２０％、約０．３％〜約１９％、約０．４％〜約１８％、約０．５％〜約１７％、約０．６％〜約１６％、約０．７％〜約１５％、約０．８％〜約１４％、約０．９％〜約１２％又は約１％〜約１０％ｗ／ｗ、ｗ／ｖ又はｖ／ｖの範囲内である。
【０８０７】
[001313]  一部の実施形態において、医薬組成物中のＴＮＦＲＳＦアゴニストの濃度は、独立して、医薬組成物の約０．００１％〜約１０％、約０．０１％〜約５％、約０．０２％〜約４．５％、約０．０３％〜約４％、約０．０４％〜約３．５％、約０．０５％〜約３％、約０．０６％〜約２．５％、約０．０７％〜約２％、約０．０８％〜約１．５％、約０．０９％〜約１％、約０．１％〜約０．９％ｗ／ｗ、ｗ／ｖ又はｖ／ｖの範囲内である。
【０８０８】
[001314]  一部の実施形態において、医薬組成物中のＴＮＦＲＳＦアゴニストの濃度は、独立して、１０ｇ、９．５ｇ、９．０ｇ、８．５ｇ、８．０ｇ、７．５ｇ、７．０ｇ、６．５ｇ、６．０ｇ、５．５ｇ、５．０ｇ、４．５ｇ、４．０ｇ、３．５ｇ、３．０ｇ、２．５ｇ、２．０ｇ、１．５ｇ、１．０ｇ、０．９５ｇ、０．９ｇ、０．８５ｇ、０．８ｇ、０．７５ｇ、０．７ｇ、０．６５ｇ、０．６ｇ、０．５５ｇ、０．５ｇ、０．４５ｇ、０．４ｇ、０．３５ｇ、０．３ｇ、０．２５ｇ、０．２ｇ、０．１５ｇ、０．１ｇ、０．０９ｇ、０．０８ｇ、０．０７ｇ、０．０６ｇ、０．０５ｇ、０．０４ｇ、０．０３ｇ、０．０２ｇ、０．０１ｇ、０．００９ｇ、０．００８ｇ、０．００７ｇ、０．００６ｇ、０．００５ｇ、０．００４ｇ、０．００３ｇ、０．００２ｇ、０．００１ｇ、０．０００９ｇ、０．０００８ｇ、０．０００７ｇ、０．０００６ｇ、０．０００５ｇ、０．０００４ｇ、０．０００３ｇ、０．０００２ｇ又は０．０００１ｇ以下である。
【０８０９】
[001315]  一部の実施形態において、医薬組成物中のＴＮＦＲＳＦアゴニストの濃度は、独立して、０．０００１ｇ超、０．０００２ｇ超、０．０００３ｇ超、０．０００４ｇ超、０．０００５ｇ超、０．０００６ｇ超、０．０００７ｇ超、０．０００８ｇ超、０．０００９ｇ超、０．００１ｇ超、０．００１５ｇ超、０．００２ｇ超、０．００２５ｇ超、０．００３ｇ超、０．００３５ｇ超、０．００４ｇ超、０．００４５ｇ超、０．００５ｇ超、０．００５５ｇ超、０．００６ｇ超、０．００６５ｇ超、０．００７ｇ超、０．００７５ｇ超、０．００８ｇ超、０．００８５ｇ超、０．００９ｇ超、０．００９５ｇ超、０．０１ｇ超、０．０１５ｇ超、０．０２ｇ超、０．０２５ｇ超、０．０３ｇ超、０．０３５ｇ超、０．０４ｇ超、０．０４５ｇ超、０．０５ｇ超、０．０５５ｇ超、０．０６ｇ超、０．０６５ｇ超、０．０７ｇ超、０．０７５ｇ超、０．０８ｇ超、０．０８５ｇ超、０．０９ｇ超、０．０９５ｇ超、０．１ｇ超、０．１５ｇ超、０．２ｇ超、０．２５ｇ超、０．３ｇ超、０．３５ｇ超、０．４ｇ超、０．４５ｇ超、０．５ｇ超、０．５５ｇ超、０．６ｇ超、０．６５ｇ超、０．７ｇ超、０．７５ｇ超、０．８ｇ超、０．８５ｇ超、０．９ｇ超、０．９５ｇ超、１ｇ超、１．５ｇ超、２ｇ超、２．５超、３ｇ超、３．５ｇ超、４ｇ超、４．５ｇ超、５ｇ超、５．５ｇ超、６ｇ超、６．５ｇ超、７ｇ超、７．５ｇ超、８ｇ超、８．５ｇ超、９ｇ超、９．５ｇ超又は１０ｇ超である。
【０８１０】
[001316]  他の非限定的な医薬組成物及びそれを調製するための方法が以下に記載される。
【０８１１】
他の医薬組成物
[001317]  医薬組成物は、本明細書に記載の組成物と、舌下、口腔、直腸、骨内、眼内、鼻腔内、硬膜外又は脊髄内投与に適した１つ以上の薬学的に許容される賦形剤とからも調製され得る。そのような医薬組成物の調製は、当技術分野で周知である。例えば、Anderson, Philip O.; Knoben, James E.; Troutman, William G, eds., Handbook of Clinical Drug Data, Tenth Edition, McGraw-Hill, 2002；及びPratt and Taylor, eds., Principles of Drug Action, Third Edition, Churchill Livingston, N.Y., 1990を参照されたく、このそれぞれは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【０８１２】
[001318]  ＴＩＬ、Ａ２ＡＲアンタゴニスト及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストの組み合わせの投与は、作用部位への化合物の送達を可能にする任意の方法によって達成され得る。これらの方法は、経口経路、十二指腸内経路、非経口注射（静脈内、動脈内、皮下、筋肉内、血管内、腹腔内若しくは注入を含む）、局所（例えば、経皮適用）、直腸投与、カテーテル若しくはステントによる局所送達又は吸入によるものを含む。化合物の組み合わせは、脂肪内又は髄腔内投与することもできる。
【０８１３】
[001319]  本発明は、キットも提供する。キットには、単独又は適切なパッケージ中で組み合わせた、直ちに投与できるＴＩＬの組み合わせ、Ａ２ＡＲアンタゴニスト及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニスト並びに使用説明書、臨床研究の議論及び副作用のリストを含み得る文書が含まれる。そのようなキットは、科学文献、添付文書、臨床試験結果及び／又はこれらの要約なども含み、これは、組成物の活性及び／又は利点を示す若しくは設定し、及び／又は用量、投与、副作用、薬物相互作用又は医療提供者にとって有用な他の情報を記載する。そのような情報は、様々な研究、例えばインビボモデルを含む実験動物を用いた研究及びヒトの臨床試験に基づく研究の結果に基づき得る。キットは、別の活性医薬成分を更に含み得る。選択された実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニスト及びＴＩＬ並びに別の活性医薬成分は、キット内の別々の容器に別々の組成物として提供される。選択された実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニスト及びＴＩＬからなる群から選択される分子は、キットの容器内に単一組成物として提供される。使用のための適切なパッケージ及び更なる物品（例えば、液体製剤のための計量カップ、空気への曝露を最小限に抑えるためのホイル包装など）は、当技術分野において公知であり、キットに含まれ得る。本明細書に記載のキットは、医師、看護師、薬剤師、処方医などを含む医療提供者に提供、販売及び／又は販売促進することができる。キットはまた、選択された実施形態において消費者に直接販売され得る。
【０８１４】
[001320]  上記のキットは、本明細書に記載の疾患及び状態の処置に使用するのが好ましい。好ましい実施形態において、キットは癌の処置における使用のためのものである。好ましい実施形態において、キットは固形腫瘍癌、リンパ腫及び白血病の処置における使用のためのものである。
【０８１５】
[001321]  好ましい実施形態において、本発明のキットは、本明細書に記載の癌のいずれかを含む癌の処置における使用のためのものである。
【０８１６】
癌を処置する方法
[001322]  本明細書に記載のＴＩＬ、Ａ２ＡＲアンタゴニスト及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストの組成物及び組み合わせは、過剰増殖性障害を処置するための方法において使用することができる。好ましい一実施形態において、それらは癌の処置における使用のためのものである。好ましい一実施形態において、本発明は、癌を処置する方法並びに癌を処置するためのＴＩＬ、Ａ２ＡＲアンタゴニスト及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストの組成物及び組み合わせを提供し、ここで、癌は、黒色腫、卵巣癌、子宮頸癌、肺癌、膀胱癌、乳癌、頭頸部癌、腎細胞癌、急性骨髄性白血病、結腸直腸癌及び肉腫からなる群から選択される。好ましい一実施形態において、本発明は、癌を処置する方法並びに癌を処置するためのＴＩＬ、Ａ２ＡＲアンタゴニスト及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストの組成物及び組み合わせを提供し、ここで、癌は、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）又はトリプルネガティブ乳癌、二重抵抗性黒色腫及びブドウ膜（眼内）黒色腫からなる群から選択される。好ましい一実施形態において、本発明は、癌をＴＩＬ、Ａ２ＡＲアンタゴニスト及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストとの組み合わせにより処置する方法であって、癌は、黒色腫、卵巣癌、子宮頸癌、肺癌、膀胱癌、乳癌、頭頸部癌（頭頸部扁平上皮癌）、腎細胞癌、急性骨髄性白血病、結腸直腸癌、胆管癌及び肉腫からなる群から選択される、方法を提供する。好ましい一実施形態において、本発明は、癌を処置するためのＴＩＬ、Ａ２ＡＲアンタゴニスト及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストの組成物及び組み合わせを提供し、ここで、癌は、黒色腫、卵巣癌、子宮頸癌、肺癌、膀胱癌、乳癌、頭頸部癌、腎細胞癌、急性骨髄性白血病、結腸直腸癌、胆管癌及び肉腫からなる群から選択される。好ましい一実施形態において、本発明は、癌をＴＩＬ、Ａ２ＡＲアンタゴニスト及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストで処置する方法であって、癌は、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、トリプルネガティブ乳癌、二重抵抗性黒色腫及びブドウ膜（眼内）黒色腫からなる群から選択される、方法を提供する。好ましい一実施形態において、本発明は、癌を処置するためのＴＩＬ、Ａ２ＡＲアンタゴニスト及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストの組成物及び組み合わせを提供し、ここで、癌は、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）又はトリプルネガティブ乳癌、二重抵抗性黒色腫及びブドウ膜（眼内）黒色腫からなる群から選択される。一実施形態において、ＴＩＬは、本明細書で説明するプロセスによって拡大培養される。
【０８１７】
[001323]  一部の実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く；第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に投与するステップ；
を含み、
癌は、黒色腫、卵巣癌、子宮頸癌、肺癌、膀胱癌、乳癌、頭頸部癌、腎細胞癌、急性骨髄性白血病、結腸直腸癌、胆管癌、肉腫、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）又はトリプルネガティブ乳癌、二重抵抗性黒色腫及びブドウ膜（眼内）黒色腫からなる群から選択される、方法を提供する。
【０８１８】
[001324]  一部の実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２を含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く；第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に投与するステップ；
を含み、
癌は、黒色腫、卵巣癌、子宮頸癌、肺癌、膀胱癌、乳癌、頭頸部癌、腎細胞癌、急性骨髄性白血病、結腸直腸癌、胆管癌、肉腫、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）又はトリプルネガティブ乳癌、二重抵抗性黒色腫及びブドウ膜（眼内）黒色腫からなる群から選択される、方法を提供する。
【０８１９】
[001325]  一部の実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２を含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に投与するステップ；
を含み、
癌は、ブドウ膜（眼内）黒色腫である、方法を提供する。
【０８２０】
[001326]  一実施形態において、本発明は、前述の方法のいずれかに従ってＴＩＬ集団で癌を処置するためのキットを含む。
【０８２１】
[001327]  示された疾患又は障害の処置、予防及び／又は管理における本明細書に記載の方法、化合物及び化合物の組み合わせの有効性は、当技術分野において公知の様々な動物モデルを使用して試験することができる。膵臓癌の処置の有効性を決定するためのモデルは、Herreros-Villanueva, et al., World J. Gastroenterol.2012, 18, 1286-1294に記載されている。乳癌の処置の有効性を決定するためのモデルは、例えば、Fantozzi, Breast Cancer Res.2006, 8, 212に記載がある。卵巣癌の処置の有効性を判断するためのモデルは、例えば、Mullany, et al., Endocrinology 2012, 153, 1585-92；及びFong, et al., J. Ovarian Res.2009, 2, 12に記載されている。黒色腫の処置の有効性を決定するためのモデルは、例えば、Damsky, et al., Pigment Cell & Melanoma Res.2010, 23, 853-859に記載がある。肺癌の処置の有効性を決定するためのモデルは、例えば、Meuwissen, et al., Genes & Development, 2005, 19, 643-664に記載がある。肺癌処置の有効性を決定するためのモデルは、例えば、Kim, Clin.Exp.Otorhinolaryngol.2009, 2, 55-60；及びSano, Head Neck Oncol.2009, 1, 32に記載がある。ＣＴ２６モデルを含む、結腸直腸癌の処置の有効性を判断するためのモデルは、Castle, et al., BMC Genomics, 2013, 15, 190；Endo, et al., Cancer Gene Therapy, 2002, 9, 142-148；Roth, et al., Adv.Immunol.1994, 57, 281-351；Fearon, et al., Cancer Res.1988, 48, 2975-2980に記載されている。
【０８２２】
ＩＬ−２の共投与
[001328]  一実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２及び任意選択によりＡ２ＡＲアンタゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く；第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び任意選択によりＡ２ＡＲアンタゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を、癌を有する患者に任意選択によりＡ２ＡＲアンタゴニストと組み合わせて投与するステップ；及び
（ｇ）ＩＬ−２レジメンを患者に任意選択によりＡ２ＡＲアンタゴニストと組み合わせて、投与するステップ
を含む方法を提供する。
【０８２３】
[001329]  一実施形態において、ＩＬ−２レジメンは、第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を投与した１日後から静脈に内投与され始める高用量ＩＬ−２レジメンを含み、高用量ＩＬ−２レジメンは、アルデスロイキン又はそのバイオシミラー若しくはそれらの変異体を含み、アルデロイキン又はそのバイオシミラー若しくは変異体が許容量まで８時間毎に１５分ボーラス静脈内注入を使用して、最大１４用量で、６００，０００又は７２０，０００ＩＵ／ｋｇ（患者の体重）の用量で投与される。９日間の休息後、このスケジュールを更に１４回、合計で最大２８回まで繰り返し得る。
【０８２４】
[001330]  一実施形態において、ＩＬ−２レジメンは、第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を投与した１日後から静脈に内投与され始める高用量ＩＬ−２レジメンを含み、高用量ＩＬ−２レジメンは、アルデスロイキン又はそのバイオシミラー若しくはそれらの変異体を含み、アルデロイキン又はそのバイオシミラー若しくは変異体が許容量まで８時間毎に１５分ボーラス静脈内注入を使用して、最大１４用量で、０．０３７ｍｇ／ｋｇ又は０．０４４ｍｇ／ｋｇ  ＩＵ／ｋｇ（患者の体重）の用量で投与される。９日間の休息後、このスケジュールを更に１４回、合計で最大２８回まで繰り返し得る。
【０８２５】
[001331]  一実施形態において、ＩＬ−２レジメンは、漸減性ＩＬ−２レジメンを含む。漸減性ＩＬ−２レジメンは、O’Day, et al., J. Clin.Oncol.1999, 17, 2752-61及びEton, et al., Cancer 2000, 88, 1703-9に記載されており、これらの開示は、参照により本明細書に組み込まれる。一実施形態において、漸減性ＩＬ−２レジメンは、１８×１０６ＩＵ／ｍ２の６時間にわたる静脈内投与、それに続く１８×１０６ＩＵ／ｍ２の１２時間にわたる静脈内投与、その後、１８×１０６ＩＵ／ｍ２の２４時間にわたる静脈内投与、その後、４．５×１０６ＩＵ／ｍ２の７２時間にわたる静脈内投与を含む。この処置サイクルは、最大４サイクル、２８日毎に繰り返され得る。一実施形態において、漸減性ＩＬ−２レジメンは、１日目の１８，０００，０００ＩＵ／ｍ２、２日目の９，０００，０００ＩＵ／ｍ２、３日目及び４日目の４，５００，０００ＩＵ／ｍ２を含む。
【０８２６】
[001332]  一実施形態において、ＩＬ−２レジメンは、０．１０ｍｇ／日〜５０ｍｇ／日の用量で、１、２、４、６、７、１４又は２１日毎にペグ化ＩＬ−２を投与することを含む。
【０８２７】
化学療法による骨髄非破壊的リンパ枯渇
[001333]  一実施形態において、本発明は、ＴＩＬ集団で癌を処置する方法を含み、ここで、患者は、本開示のＴＩＬの注入前及びＡ２ＡＲアンタゴニストによる処置前又はそれと同時に骨髄非破壊的化学療法で前処置される。一実施形態において、骨髄非破壊的化学療法は、２日間（ＴＩＬ注入の２７日前及び２６日前）のシクロホスファミド６０ｍｇ／ｋｇ／日及び５日間（ＴＩＬ注入の２７〜２３日前）のフルダラビン２５ｍｇ／ｍ２／日である。一実施形態において、本開示による骨髄非破壊的化学療法及びＴＩＬ注入（０日目）後、患者は、生理学的許容量まで８時間ごとに７２０，０００ＩＵ／ｋｇでＩＬ−２の静脈内注入を受ける。
【０８２８】
[001334]  実験的知見は、腫瘍特異的Ｔリンパ球の養子移入前のリンパ枯渇が、調節性Ｔ細胞及び免疫系の競合要素（「サイトカインシンク」）を排除することによって処置効果を高めるのに重要な役割を果たすことを示す。したがって、本発明の一部の実施形態は、本発明のプレＲＥＰ  ＴＩＬを導入する前に患者に対してリンパ枯渇ステップ（「免疫抑制コンディショニング」とも称される）を利用する。
【０８２９】
[001335]  一般的に、リンパ枯渇はフルダラビン又はシクロホスファミド（活性型はマホスファミドと称される）及びそれらの組み合わせの投与を使用して達成される。かかる方法については、Gassner, et al., Cancer Immunol.Immunother.2011, 60, 75-85、Muranski, et al., Nat.Clin.Pract.Oncol., 2006, 3, 668-681、Dudley, et al., J. Clin.Oncol.2008, 26, 5233-5239及びDudley, et al., J. Clin.Oncol.2005, 23, 2346-2357（これらは、全て参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）に記載されている。
【０８３０】
[001336]  一部の実施形態において、フルダラビンは、０．５μｇ／ｍｌ〜１０μｇ／ｍｌフルダラビンの濃度で投与される。一部の実施形態において、フルダラビンは、１μｇ／ｍｌフルダラビンの濃度で投与される。一部の実施形態において、フルダラビン処置は、１日、２日、３日、４日、５日、６日又は７日以上にわたって実施される。一部の実施形態において、フルダラビンは、１０ｍｇ／ｋｇ／日、１５ｍｇ／ｋｇ／日、２０ｍｇ／ｋｇ／日、２５ｍｇ／ｋｇ／日、３０ｍｇ／ｋｇ／日、３５ｍｇ／ｋｇ／日、４０ｍｇ／ｋｇ／日又は４５ｍｇ／ｋｇ／日の投薬量で投与される。一部の実施形態において、フルダラビン処置は、３５ｍｇ／ｋｇ／日で２〜７日間にわたって実施される。一部の実施形態において、フルダラビン処置は、３５ｍｇ／ｋｇ／日で４〜５日間にわたって実施される。一部の実施形態において、フルダラビン処置は、２５ｍｇ／ｋｇ／日で４〜５日間にわたって実施される。
【０８３１】
[001337]  一部の実施形態において、シクロホスファミドの活性型であるマホスファミドは、シクロホスファミドの投与により０．５μｇ／ｍＬ〜１０μｇ／ｍＬの濃度で入手される。一部の実施形態において、シクロホスファミドの活性型であるマホスファミドは、シクロホスファミドの投与により１μｇ／ｍＬの濃度で入手される。一部の実施形態において、シクロホスファミド処置は、１日、２日、３日、４日、５日、６日又は７日以上にわたって実施される。一部の実施形態において、シクロホスファミドは、１００ｍｇ／ｍ２／日、１５０ｍｇ／ｍ２／日、１７５ｍｇ／ｍ２／日、２００ｍｇ／ｍ２／日、２２５ｍｇ／ｍ２／日、２５０ｍｇ／ｍ２／日、２７５ｍｇ／ｍ２／日又は３００ｍｇ／ｍ２／日の投薬量で投与される。一部の実施形態において、シクロホスファミドは静脈内（即ちｉ．ｖ．）投与される。一部の実施形態において、シクロホスファミド処置は、３５ｍｇ／ｋｇ／日で２〜７日間にわたって実施される。一部の実施形態において、シクロホスファミド処置は、２５０ｍｇ／ｍ２／日、ｉ．ｖ．で、４〜５日間にわたって実施される。一部の実施形態において、シクロホスファミド処置は、２５０ｍｇ／ｍ２／日、ｉ．ｖ．で、４日間にわたって実施される。
【０８３２】
[001338]  一部の実施形態において、リンパ枯渇は、フルダラビン及びシクロホスファミドを共に患者に投与することによって行われる。一部の実施形態において、４日間にわたって、フルダラビンは２５ｍｇ／ｍ２／日、ｉ．ｖ．で投与され、シクロホスファミドは、２５０ｍｇ／ｍ２／日、ｉ．ｖ．で投与される。
【０８３３】
[001339]  一実施形態において、リンパ枯渇は、６０ｍｇ／ｍ２／日の用量で２日間のシクロホスファミドの投与と、それに続く２５ｍｇ／ｍ２／日の用量で５日間のフルダラビンの投与により実施される。
【０８３４】
ＰＤ−１及びＰＤ−Ｌ１阻害剤との組み合わせ
[001340]  プログラム死１（ＰＤ−１）は、Ｔ細胞、Ｂ細胞、ナチュラルキラー（ＮＫ）Ｔ細胞、活性化単球及び樹状細胞によって発現される２８８アミノ酸膜貫通型免疫チェックポイント受容体タンパク質である。ＣＤ２７９としても知られるＰＤ−１は、ＣＤ２８ファミリーに属し、ヒトでは第２染色体上のＰｄｃｄ１遺伝子によってコードされている。ＰＤ−１は、１つの免疫グロブリン（Ｉｇ）スーパーファミリードメイン、膜貫通領域並びに免疫受容体チロシンベース阻害モチーフ（ＩＴＩＭ）及び免疫受容体チロシンベーススイッチモチーフ（ＩＴＳＭ）を含有する細胞内ドメインから構成される。ＰＤ−１及びそのリガンド（ＰＤ−Ｌ１及びＰＤ−Ｌ２）は、Keir, et al., Annu.Rev. Immunol.2008, 26, 677-704に記載されるように、免疫寛容において重要な役割を果たすことが知られている。ＰＤ−１は、Ｔ細胞免疫応答を負に調節する阻害シグナルを提供する。ＰＤ−Ｌ１（Ｂ７−Ｈ１又はＣＤ２７４としても知られる）及びＰＤ−Ｌ２（Ｂ７−ＤＣ又はＣＤ２７３としても知られる）は、腫瘍細胞及び間質細胞で発現され、これは、ＰＤ−１を発現する活性化Ｔ細胞が遭遇し得、Ｔ細胞の免疫抑制をもたらす。ＰＤ−Ｌ１は、ヒト９番染色体上のＣｄ２７４遺伝子によってコードされる２９０アミノ酸の膜貫通タンパク質である。Topalian, et al., N. Eng.J. Med.2012, 366, 2443-54などに記載のものなどの最近の臨床研究で示されているように、ＰＤ−１阻害剤、ＰＤ−Ｌ１阻害剤及び／又はＰＤ−Ｌ２阻害剤の使用により、ＰＤ−１とそのリガンドＰＤ−Ｌ１及びＰＤ−Ｌ２との間の相互作用を遮断すると、免疫抵抗性を克服できる。ＰＤ−Ｌ１は多くの腫瘍細胞株に発現している一方、ＰＤ−Ｌ２は主に樹状細胞及びいくつかの腫瘍株に発現している。Ｔ細胞（活性化後にＰＤ−１を誘導的に発現する）に加えて、ＰＤ−１は、Ｂ細胞、ナチュラルキラー細胞、マクロファージ、活性化単球及び樹状細胞にも発現する。
【０８３５】
[001341]  本明細書に記載のＴＩＬ及びＴＮＦＲＳＦアゴニストの方法、組成物及び組み合わせは、プログラム死−１（ＰＤ−１）、プログラム死リガンド１（ＰＤ−Ｌ１）及び／又はプログラム死リガンド２（ＰＤ−Ｌ２）結合抗体、アンタゴニスト又は阻害剤（即ち遮断剤）とも更に組み合わされ得る。ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１及び／又はＰＤ−Ｌ２阻害剤は、ＴＩＬ拡大培養のプレＲＥＰ又はＲＥＰ段階中、本明細書に記載のＴＮＦＲＳＦアゴニストと併せて細胞培養で使用され得る。ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１及び／又はＰＤ−Ｌ２阻害剤は、腫瘍の外科的切除前又はＴＩＬの注入中又は注入後、ＴＮＦＲＳＦアゴニストと併せても使用され得る。例えば、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１アンタゴニスト及びＧＩＴＲアゴニストを含むアゴニスト性ＧＩＴＲ抗体及び組成物と併せてＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤を使用する適切な方法は、国際公開第２０１５／０２６６８４  Ａ１号に記載され、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。
【０８３６】
[001342]  一実施形態において、ＰＤ−１阻害剤は、当技術分野で公知の任意のＰＤ−１阻害剤又はＰＤ−１遮断剤であり得る。特に、それは、以下の段落でより詳細に記載されるＰＤ−１阻害剤又は遮断剤の１つである。「阻害剤」、「アンタゴニスト」及び「遮断剤」という用語は、ＰＤ−１阻害剤に関して本明細書において互換的に使用される。誤解を避けるために、抗体であるＰＤ−１阻害剤への本明細書における言及は、化合物又はその抗原結合断片、変異体、コンジュゲート若しくはバイオシミラーを指し得る。誤解を避けるために、本明細書におけるＰＤ−１阻害剤への言及は、小分子化合物又はその薬学的に許容される塩、エステル、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグも指し得る。
【０８３７】
[001343]  一部の実施形態において、本明細書に記載される組成物及び方法は、ＰＤ−１阻害剤を含む。一部の実施形態において、ＰＤ−１阻害剤は小分子である。好ましい実施形態において、ＰＤ−１阻害剤は、抗体（即ち抗ＰＤ−１抗体）、Ｆａｂ断片を含むその断片又はその単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）である。一部の実施形態において、ＰＤ−１阻害剤はポリクローナル抗体である。好ましい実施形態において、ＰＤ−１阻害剤は、モノクローナル抗体である。一部の実施形態において、ＰＤ−１阻害剤は、ＰＤ−１との結合について競合し、及び／又はＰＤ−１上のエピトープに結合する。一実施形態において、抗体は、ＰＤ−１との結合について競合し、及び／又はＰＤ−１上のエピトープに結合する。
【０８３８】
[001344]  一部の実施形態において、記載される組成物及び方法は、約１００ｐＭ以下のＫＤでヒトＰＤ−１に結合するか、約９０ｐＭ以下のＫＤでヒトＰＤ−１に結合するか、約８０ｐＭ以下のＫＤでヒトＰＤ−１に結合するか、約７０ｐＭ以下のＫＤでヒトＰＤ−１に結合するか、約６０ｐＭ以下のＫＤでヒトＰＤ−１に結合するか、約５０ｐＭ以下のＫＤでヒトＰＤ−１に結合するか、約４０ｐＭ以下のＫＤでヒトＰＤ−１に結合するか、約３０ｐＭ以下のＫＤでヒトＰＤ−１に結合するか、約２０ｐＭ以下のＫＤでヒトＰＤ−１に結合するか、約１０ｐＭ以下のＫＤでヒトＰＤ−１に結合するか、又は約１ｐＭ以下のＫＤでヒトＰＤ−１に結合する、ＰＤ−１阻害剤を含む。
【０８３９】
[001345]  一部の実施形態において、記載される組成物及び方法は、約７．５×１０５  １／Ｍ・ｓ以上のｋａｓｓｏｃでヒトＰＤ−１に結合するか、約７．５×１０５  １／Ｍ・ｓ以上のｋａｓｓｏｃでヒトＰＤ−１に結合するか、約８×１０５  １／Ｍ・ｓ以上のｋａｓｓｏｃでヒトＰＤ−１に結合するか、約８．５×１０５  １／Ｍ・ｓ以上のｋａｓｓｏｃでヒトＰＤ−１に結合するか、約９×１０５  １／Ｍ・ｓ以上のｋａｓｓｏｃでヒトＰＤ−１に結合するか、約９．５×１０５  １／Ｍ・ｓ以上のｋａｓｓｏｃでヒトＰＤ−１に結合するか、又は約１×１０６  １／Ｍ・ｓ以上のｋａｓｓｏｃでヒトＰＤ−１に結合する、ＰＤ−１阻害剤を含む。
【０８４０】
[001346]  一部の実施形態において、記載される組成物及び方法は、約２×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒトＰＤ−１に結合するか、約２．１×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒトＰＤ−１に結合するか、約２．２×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒトＰＤ−１に結合するか、約２．３×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒトＰＤ−１に結合するか、約２．４×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒトＰＤ−１に結合するか、約２．５×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒトＰＤ−１に結合するか、約２．６×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒトＰＤ−１に結合するか、又は約２．７×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒトＰＤ−１に結合するか、約２．８×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒトＰＤ−１に結合するか、約２．９×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒトＰＤ−１に結合するか、又は約３×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒトＰＤ−１に結合する、ＰＤ−１阻害剤を含む。
【０８４１】
[001347]  一部の実施形態において、記載される組成物及び方法は、約１０ｎＭ以下のＩＣ５０でヒトＰＤ−Ｌ１又はヒトＰＤ−Ｌ２のヒトＰＤ−１への結合を遮断又は阻害するか、約９ｎＭ以下のＩＣ５０でヒトＰＤ−Ｌ１又はヒトＰＤ−Ｌ２のヒトＰＤ−１への結合を遮断又は阻害するか、約８ｎＭ以下のＩＣ５０でヒトＰＤ−Ｌ１又はヒトＰＤ−Ｌ２のヒトＰＤ−１への結合を遮断又は阻害するか、約７ｎＭ以下のＩＣ５０でヒトＰＤ−Ｌ１又はヒトＰＤ−Ｌ２のヒトＰＤ−１への結合を遮断又は阻害するか、約６ｎＭ以下のＩＣ５０でヒトＰＤ−Ｌ１又はヒトＰＤ−Ｌ２のヒトＰＤ−１への結合を遮断又は阻害するか、約５ｎＭ以下のＩＣ５０でヒトＰＤ−Ｌ１又はヒトＰＤ−Ｌ２のヒトＰＤ−１への結合を遮断又は阻害するか、約４ｎＭ以下のＩＣ５０でヒトＰＤ−Ｌ１又はヒトＰＤ−Ｌ２のヒトＰＤ−１への結合を遮断又は阻害するか、約３ｎＭ以下のＩＣ５０でヒトＰＤ−Ｌ１又はヒトＰＤ−Ｌ２のヒトＰＤ−１への結合を遮断又は阻害するか、約２ｎＭ以下のＩＣ５０でヒトＰＤ−Ｌ１又はヒトＰＤ−Ｌ２のヒトＰＤ−１への結合を遮断又は阻害するか、又は約１ｎＭ以下のＩＣ５０でヒトＰＤ−Ｌ１又はヒトＰＤ−Ｌ２のヒトＰＤ−１への結合を遮断又は阻害する、ＰＤ−１阻害剤を含む。
【０８４２】
[001348]  一実施形態において、ＰＤ−１阻害剤は、ニボルマブ（Bristol-Myers Squibb Co.からオプジーボとして市販されている）又はそのバイオシミラー、抗原結合断片、コンジュゲート若しくは変異体である。ニボルマブは、ＰＤ−１受容体を遮断する完全ヒトＩｇＧ４抗体である。一実施形態において、抗ＰＤ−１抗体は、免疫グロブリンＧ４カッパ、抗（ヒトＣＤ２７４）抗体である。ニボルマブにはChemical Abstracts Service（ＣＡＳ）登録番号９４６４１４−９４−４が割り当てられており、５Ｃ４、ＢＭＳ−９３６５５８、ＭＤＸ−１１０６及びＯＮＯ−４５３８としても知られる。ニボルマブの調製及び特性は、米国特許第８，００８，４４９号及び国際公開第２００６／１２１１６８号に記載され、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。様々な形態の癌におけるニボルマブの臨床的安全性及び有効性は、Wang, et al., Cancer Immunol Res.2014, 2, 846-56；Page, et al., Ann.Rev. Med., 2014, 65, 185-202；及びWeber, et al., J. Clin.Oncology, 2013, 31, 4311-4318に記載され、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。ニボルマブのアミノ酸配列を表４８に示す。ニボルマブは、２２−９６，１４０−１９６、２５４−３１４、３６０−４１８、２２’’−９６’’、１４０’’−１９６’’、２５４’’−３１４’’及び３６０’’−４１８’’の重鎖内ジスルフィド結合；２３’−８８’、１３４’−１９４’、２３’’’−８８’’’及び１３４’’’−１９４’’’の軽鎖内ジスルフィド結合；１２７−２１４’、１２７’’−２１４’’’の重−軽鎖間ジスルフィド結合、２１９−２１９’’及び２２２−２２２’’の重−重鎖間ジスルフィド結合；並びに２９０、２９０’’のＮ−グリコシル化部位（Ｈ  ＣＨ２  ８４．４）を有する。
【０８４３】
[001349]  一実施形態において、ＰＤ−１阻害剤は、配列番号４６３で示される重鎖及び配列番号４６４で示される軽鎖を含む。一実施形態において、ＰＤ−１阻害剤は、それぞれ配列番号４６３及び配列番号４６４に示される配列を有する重鎖及び軽鎖又はその抗原結合断片、Ｆａｂ断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、変異体若しくはコンジュゲートを含む。一実施形態において、ＰＤ−１阻害剤は、それぞれ配列番号４６３及び配列番号４６４に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＰＤ−１阻害剤は、それぞれ配列番号４６３及び配列番号４６４に示される配列とそれぞれ少なくとも９８％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＰＤ−１阻害剤は、それぞれ配列番号４６３及び配列番号４６４に示される配列とそれぞれ少なくとも９７％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＰＤ−１阻害剤は、それぞれ配列番号４６３及び配列番号４６４に示される配列とそれぞれ少なくとも９６％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＰＤ−１阻害剤は、それぞれ配列番号４６３及び配列番号４６４に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一である重鎖及び軽鎖を含む。
【０８４４】
[001350]  一実施形態において、ＰＤ−１阻害剤は、ニボルマブの重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。一実施形態において、ＰＤ−１阻害剤重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号４６５に示される配列を含み、ＰＤ−１阻害剤軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号４６６に示される配列及びその保存的アミノ酸置換を含む。一実施形態において、ＰＤ−１阻害剤は、それぞれ配列番号４６５及び配列番号４６６に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＰＤ−１阻害剤は、それぞれ配列番号４６５及び配列番号４６６に示される配列とそれぞれ少なくとも９８％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＰＤ−１阻害剤は、それぞれ配列番号４６５及び配列番号４６６に示される配列とそれぞれ少なくとも９７％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＰＤ−１阻害剤は、それぞれ配列番号４６５及び配列番号４６６に示される配列とそれぞれ少なくとも９６％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＰＤ−１阻害剤は、それぞれ配列番号４６５及び配列番号４６６に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。
【０８４５】
[001351]  一実施形態において、ＰＤ−１阻害剤は、それぞれ配列番号４６７、配列番号４６８及び配列番号４６９に記載の配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにその保存的アミノ酸置換と、それぞれ配列番号４７０、配列番号４７１及び配列番号４７２に記載の配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにその保存的アミノ酸置換とを含む。一実施形態において、抗体は、前述の抗体のいずれかと同じＰＤ−１上のエピトープとの結合について競合し、及び／又はそれに結合する。
【０８４６】
[001352]  一部の実施形態において、患者は、腫瘍変異負荷（ＴＭＢ）又は腫瘍ゲノムの１コード領域あたりの変異の総数に基づいて、ＴＩＬ、ＰＤ−１阻害剤及びアデノシン２Ａ受容体アンタゴニストによる処置のために選択され、ここで、高ＴＭＢの腫瘍を有する患者が処置のために選択される。更に他の実施形態において、高ＴＭＢ腫瘍を有する患者は、腫瘍を切除する前にアデノシン２Ａ受容体アンタゴニストによる処置のために選択される。一部の実施形態において、高ＴＭＢを有する患者は、低ＴＭＢ腫瘍を有する患者よりも高用量のアデノシン２Ａ受容体アンタゴニストを投与される。
【０８４７】
[001353]  一実施形態において、ＰＤ−１阻害剤は、ニボルマブに関して薬物規制当局によって承認された抗ＰＤ−１バイオシミラーモノクローナル抗体である。一実施形態において、バイオシミラーは、参照医薬品又は参照生物学的製剤のアミノ酸配列に対して少なくとも９７％の配列同一性、例えば９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有し、参照医薬品又は参照生物学的製剤と比較して１つ以上の翻訳後改変を含む、アミノ酸配列を含む抗ＰＤ−１抗体を含み、ここで、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、ニボルマブである。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後改変は、グリコシル化、酸化、脱アミド化及び切断の１つ以上から選択される。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可された又は認可のために提出された抗ＰＤ−１抗体であり、抗ＰＤ−１抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤の製剤と異なる製剤で提供され、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、ニボルマブである。抗ＰＤ−１抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合のＥＭＡなどの薬物規制当局によって認可されていることができる。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、ニボルマブである。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、ニボルマブである。
【０８４８】
【表５４】
2021512962.tif 000073
【０８４９】
[001354]  別の実施形態において、ＰＤ−１阻害剤は、ペンブロリズマブ（Merck & Co., Inc.、Kenilworth, NJ, USAからKEYTRUDAとして市販されている）又はその抗原結合断片、コンジュゲート若しくは変異体を含む。ペンブロリズマブにはＣＡＳ登録番号１３７４８５３−９１−４が割り当てられ、ラムブロリズマブ、ＭＫ−３４７５及びＳＣＨ−９００４７５としても知られる。ペンブロリズマブは、免疫グロブリンＧ４、抗（ヒトタンパク質ＰＤＣＤ１（プログラム細胞死１））（ヒト−マウス（Mus musculus）モノクローナル重鎖）、ヒト−マウス（Mus musculus）モノクローナル軽鎖、二量体構造のジスルフィドを有する。ペンブロリズマブの構造は、免疫グロブリンＧ４、抗（ヒトプログラム細胞死１）；ヒト化マウスモノクローナルκ軽鎖二量体（２２６−２２６’’：２２９−２２９’’）−ビスジスルフィドを伴うヒト化マウスモノクローナル［２２８−Ｌ−プロリン（Ｈ１０−Ｓ＞Ｐ）］γ４重鎖（１３４−２１８’）−ジスルフィドとも記載され得る。ペンブロリズマブの特性、使用及び調製は、国際公開第２００８／１５６７１２  Ａ１号、米国特許第８，３５４，５０９号及び米国特許出願公開第２０１０／０２６６６１７  Ａ１号、同第２０１３／０１０８６５１  Ａ１号及び同第２０１３／０１０９８４３  Ａ２号に記載され、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。様々な形態の癌におけるペンブロリズマブの臨床的安全性及び有効性は、Fuerst, Oncology Times, 2014, 36, 35-36；Robert, et al., Lancet, 2014, 384, 1109-17；及びThomas, et al., Exp.Opin.Biol.Ther., 2014, 14, 1061-1064に記載される。ペンブロリズマブのアミノ酸配列を表４９に示す。ペンブロリズマブには、以下のジスルフィド架橋：２２−９６、２２’’−９６’’、２３’−９２’、２３’’’−９２’’’、１３４−２１８’、１３４’’−２１８’’’、１３８’−１９８’、１３８’’’−１９８’’’、１４７−２０３、１４７’’−２０３’’、２２６−２２６’’、２２９−２２９’’、２６１−３２１、２６１’’−３２１’’、３６７−４２５及び３６７’’−４２５’’並びに以下のグリコシル化部位（Ｎ）：Ａｓｎ−２９７及びＡｓｎ−２９７’’が含まれる。ペンブロリズマブはＦｃ領域に安定化Ｓ２２８Ｐ変異を有するＩｇＧ４／カッパアイソタイプであり；この変異をＩｇＧ４ヒンジ領域に挿入すると、ＩｇＧ４抗体で典型的に観察される半分子の形成が防止される。ペンブロリズマブは各重鎖のＦｃドメイン内のＡｓｎ２９７で不均一にグリコシル化されており、無傷の抗体の分子量はおよそ１４９ｋＤａである。ペンブロリズマブの主要なグリコフォームは、フコシル化アガラクト二分岐グリカン型（Ｇ０Ｆ）である。
【０８５０】
[001355]  一実施形態において、ＰＤ−１阻害剤は、配列番号４７３で示される重鎖及び配列番号４７４で示される軽鎖を含む。一実施形態において、ＰＤ−１阻害剤は、それぞれ配列番号４７３及び配列番号４７４に示される配列を有する重鎖及び軽鎖又はその抗原結合断片、Ｆａｂ断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、変異体若しくはコンジュゲートを含む。一実施形態において、ＰＤ−１阻害剤は、それぞれ配列番号４７３及び配列番号４７４に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＰＤ−１阻害剤は、それぞれ配列番号４７３及び配列番号４７４に示される配列とそれぞれ少なくとも９８％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＰＤ−１阻害剤は、それぞれ配列番号４７３及び配列番号４７４に示される配列とそれぞれ少なくとも９７％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＰＤ−１阻害剤は、それぞれ配列番号４７３及び配列番号４７４に示される配列とそれぞれ少なくとも９６％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＰＤ−１阻害剤は、それぞれ配列番号４７３及び配列番号４７４に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一である重鎖及び軽鎖を含む。
【０８５１】
[001356]  一実施形態において、ＰＤ−１阻害剤は、ペンブロリズマブの重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。一実施形態において、ＰＤ−１阻害剤重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号４７５に示される配列を含み、ＰＤ−１阻害剤軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号４７６に示される配列及びその保存的アミノ酸置換を含む。一実施形態において、ＰＤ−１阻害剤は、それぞれ配列番号４７５及び配列番号４７６に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＰＤ−１阻害剤は、それぞれ配列番号４７５及び配列番号４７６に示される配列とそれぞれ少なくとも９８％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＰＤ−１阻害剤は、それぞれ配列番号４７５及び配列番号４７６に示される配列とそれぞれ少なくとも９７％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＰＤ−１阻害剤は、それぞれ配列番号４７５及び配列番号４７６に示される配列とそれぞれ少なくとも９６％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＰＤ−１阻害剤は、それぞれ配列番号４７５及び配列番号４７６に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。
【０８５２】
[001357]  一実施形態において、ＰＤ−１阻害剤は、それぞれ配列番号４７７、配列番号４７８及び配列番号４７９に記載の配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにその保存的アミノ酸置換と、それぞれ配列番号４８０、配列番号４８１及び配列番号４８２に記載の配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにその保存的アミノ酸置換とを含む。一実施形態において、抗体は、前述の抗体のいずれかと同じＰＤ−１上のエピトープとの結合について競合し、及び／又はそれに結合する。
【０８５３】
[001358]  一実施形態において、ＰＤ−１阻害剤は、ペンブロリズマブに関して薬物規制当局によって承認された抗ＰＤ−１バイオシミラーモノクローナル抗体である。一実施形態において、バイオシミラーは、参照医薬品又は参照生物学的製剤のアミノ酸配列に対して少なくとも９７％の配列同一性、例えば９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有し、参照医薬品又は参照生物学的製剤と比較して１つ以上の翻訳後改変を含む、アミノ酸配列を含む抗ＰＤ−１抗体を含み、ここで、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、ペンブロリズマブである。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後改変は、グリコシル化、酸化、脱アミド化及び切断の１つ以上から選択される。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可された又は認可のために提出された抗ＰＤ−１抗体であり、抗ＰＤ−１抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤の製剤と異なる製剤で提供され、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、ペンブロリズマブである。抗ＰＤ−１抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合のＥＭＡなどの薬物規制当局によって認可されていることができる。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、ペンブロリズマブである。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、ペンブロリズマブである。
【０８５４】
【表５５】
2021512962.tif 000074
【０８５５】
[001359]  一実施形態において、ＰＤ−１阻害剤は、抗ｍ−ＰＤ−１クローンＪ４３（カタログ番号ＢＥ００３３−２）及びＲＭＰ１−１４（カタログ番号ＢＥ０１４６）（Bio X Cell, Inc.、West Lebanon, NH, USA）などの市販の抗ＰＤ−１モノクローナル抗体である。多くの市販の抗ＰＤ−１抗体が当業者に公知である。
【０８５６】
[001360]  一実施形態において、ＰＤ−１阻害剤は、米国特許第８，３５４，５０９号又は米国特許出願公開第２０１０／０２６６６１７  Ａ１号、同第２０１３／０１０８６５１  Ａ１号、同第２０１３／０１０９８４３  Ａ２号に開示される抗体であり、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。一実施形態において、ＰＤ−１阻害剤は、米国特許第８，２８７，８５６号、同第８，５８０，２４７号及び同第８，１６８，７５７号並びに米国特許出願公開第２００９／００２８８５７  Ａ１号、同第２０１０／０２８５０１３  Ａ１号、同第２０１３／００２２６００  Ａ１号及び同第２０１１／０００８３６９  Ａ１号に記載の抗ＰＤ−１抗体であり、これらの教示は、参照により本明細書に組み込まれる。別の実施形態において、ＰＤ−１阻害剤は、米国特許第８，７３５，５５３  Ｂ１号に開示の抗ＰＤ−１抗体であり、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。一実施形態において、ＰＤ−１阻害剤は、ＣＴ−０１１としても知られるピジリズマブであり、これは米国特許第８，６８６，１１９号に記載され、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。
【０８５７】
[001361]  一実施形態において、ＰＤ−１阻害剤は、米国特許第８，９０７，０５３号、同第９，０９６，６４２号及び同第９，０４４，４４２号並びに米国特許出願公開第２０１５／００８７５８１号に記載されているものなどの小分子又はペプチド若しくはペプチド誘導体；米国特許出願公開第２０１５／００７３０２４号に記載されているものなどの１，２，４−オキサジアゾール化合物及び誘導体；米国特許出願公開第２０１５／００７３０４２号に記載されているものなどの環状ペプチド模倣化合物及び誘導体；米国特許出願公開第２０１５／０１２５４９１号に記載されているものなどの環状化合物及び誘導体；国際公開第２０１５／０３３３０１号に記載されているものなどの１，３，４−オキサジアゾール及び１，３，４−チアジアゾール化合物及び誘導体；国際公開第２０１５／０３６９２７号及び同第２０１５／０４４９０号に記載されているものなどのペプチドベースの化合物及び誘導体又は米国特許出願公開第２０１４／０２９４８９８号に記載されているものなどの大環状ペプチドベースの化合物及び誘導体であり得；これらのそれぞれの開示は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【０８５８】
[001362]  一実施形態において、ＰＤ−Ｌ１又はＰＤ−Ｌ２阻害剤は、当技術分野で公知の任意のＰＤ−Ｌ１若しくはＰＤ−Ｌ２阻害剤、アンタゴニスト又は遮断剤であり得る。特に、それは、以下の段落でより詳細に記載されるＰＤ−Ｌ１若しくはＰＤ−Ｌ２阻害剤、アンタゴニスト又は遮断剤の１つである。「阻害剤」、「アンタゴニスト」及び「遮断剤」という用語は、ＰＤ−Ｌ１又はＰＤ−Ｌ２阻害剤に関して本明細書において互換的に使用される。誤解を避けるために、抗体であるＰＤ−Ｌ１又はＰＤ−Ｌ２阻害剤への本明細書における言及は、化合物又はその抗原結合断片、変異体、コンジュゲート若しくはバイオシミラーを指し得る。誤解を避けるために、本明細書におけるＰＤ−Ｌ１又はＰＤ−Ｌ２阻害剤への言及は、化合物又はその薬学的に許容される塩、エステル、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグを指し得る。
【０８５９】
[001363]  一部の実施形態において、本明細書に記載される組成物、プロセス及び方法は、ＰＤ−Ｌ１又はＰＤ−Ｌ２阻害剤を含む。一部の実施形態において、ＰＤ−Ｌ１又はＰＤ−Ｌ２阻害剤は小分子である。好ましい実施形態において、ＰＤ−Ｌ１又はＰＤ−Ｌ２阻害剤は、抗体（即ち抗ＰＤ−１抗体）、Ｆａｂ断片を含むその断片又はその単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）である。一部の実施形態において、ＰＤ−Ｌ１又はＰＤ−Ｌ２阻害剤はポリクローナル抗体である。好ましい実施形態において、ＰＤ−Ｌ１又はＰＤ−Ｌ２阻害剤は、モノクローナル抗体である。一部の実施形態において、ＰＤ−Ｌ１若しくはＰＤ−Ｌ２阻害剤は、ＰＤ−Ｌ１若しくはＰＤ−Ｌ２との結合について競合し、及び／又はＰＤ−Ｌ１若しくはＰＤ−Ｌ２上のエピトープに結合する。一実施形態において、抗体は、ＰＤ−Ｌ１若しくはＰＤ−Ｌ２との結合について競合し、及び／又はＰＤ−Ｌ１若しくはＰＤ−Ｌ２上のエピトープに結合する。
【０８６０】
[001364]  一部の実施形態において、本明細書で提供されるＰＤ−Ｌ１阻害剤は、化合物がＰＤ−Ｌ２受容体を含む他の受容体と結合又は相互作用するより実質的に低い濃度で化合物がＰＤ−Ｌ１と結合又は相互作用する点で、ＰＤ−Ｌ１に対して選択的である。特定の実施形態において、化合物は、ＰＤ−Ｌ２受容体に対するより少なくとも約２倍高い濃度、約３倍高い濃度、約５倍高い濃度、約１０倍高い濃度、約２０倍高い濃度、約３０倍高い濃度、約５０倍高い濃度、約１００倍高い濃度、約２００倍高い濃度、約３００倍高い濃度又は約５００倍高い濃度の結合定数で、ＰＤ−Ｌ１受容体に結合する。
【０８６１】
[001365]  一部の実施形態において、本明細書で提供されるＰＤ−Ｌ２阻害剤は、化合物がＰＤ−Ｌ１受容体を含む他の受容体と結合又は相互作用するより実質的に低い濃度で化合物がＰＤ−Ｌ２と結合又は相互作用する点で、ＰＤ−Ｌ２に対して選択的である。特定の実施形態において、化合物は、ＰＤ−Ｌ１受容体に対するより少なくとも約２倍高い濃度、約３倍高い濃度、約５倍高い濃度、約１０倍高い濃度、約２０倍高い濃度、約３０倍高い濃度、約５０倍高い濃度、約１００倍高い濃度、約２００倍高い濃度、約３００倍高い濃度又は約５００倍高い濃度の結合定数で、ＰＤ−Ｌ２受容体に結合する。
【０８６２】
[001366]  特定の理論に拘束されるものではないが、腫瘍細胞はＰＤ−Ｌ１を発現し、Ｔ細胞はＰＤ−１を発現すると考えられている。しかし、腫瘍細胞によるＰＤ−Ｌ１発現は、ＰＤ−１又はＰＤ−Ｌ１の阻害剤又は遮断剤の有効性には必要とされない。一実施形態において、腫瘍細胞はＰＤ−Ｌ１を発現する。別の実施形態において、腫瘍細胞はＰＤ−Ｌ１を発現しない。一部の実施形態において、本明細書に記載の方法及び組成物は、ＴＩＬと組み合わせた、本明細書に記載されるものなどのＰＤ−１及びＰＤ−Ｌ１抗体の組み合わせを含む。ＰＤ−１及びＰＤ−Ｌ１抗体及びＴＩＬの組み合わせの投与は、同時又は逐次的であり得る。
【０８６３】
[001367]  一部の実施形態において、記載される組成物及び方法は、約１００ｐＭ以下のＫＤでヒトＰＤ−Ｌ１及び／又はＰＤ−Ｌ２に結合するか、約９０ｐＭ以下のＫＤでヒトＰＤ−Ｌ１及び／又はＰＤ−Ｌ２に結合するか、約８０ｐＭ以下のＫＤでヒトＰＤ−Ｌ１及び／又はＰＤ−Ｌ２に結合するか、約７０ｐＭ以下のＫＤでヒトＰＤ−Ｌ１及び／又はＰＤ−Ｌ２に結合するか、約６０ｐＭ以下のＫＤ、約５０ｐＭ以下のＫＤでヒトＰＤ−Ｌ１及び／又はＰＤ−Ｌ２に結合するか、約４０ｐＭ以下のＫＤでヒトＰＤ−Ｌ１及び／又はＰＤ−Ｌ２に結合するか、又は約３０ｐＭ以下のＫＤでヒトＰＤ−Ｌ１及び／又はＰＤ−Ｌ２に結合する、ＰＤ−Ｌ１及び／又はＰＤ−Ｌ２阻害剤を含む。
【０８６４】
[001368]  一部の実施形態において、記載される組成物及び方法は、約７．５×１０５  １／Ｍ・ｓ以上のｋａｓｓｏｃでヒトＰＤ−Ｌ１及び／又はＰＤ−Ｌ２に結合するか、約８×１０５  １／Ｍ・ｓ以上のｋａｓｓｏｃでヒトＰＤ−Ｌ１及び／又はＰＤ−Ｌ２に結合するか、約８．５×１０５  １／Ｍ・ｓ以上のｋａｓｓｏｃでヒトＰＤ−Ｌ１及び／又はＰＤ−Ｌ２に結合するか、約９×１０５  １／Ｍ・ｓ以上のｋａｓｓｏｃでヒトＰＤ−Ｌ１及び／又はＰＤ−Ｌ２に結合するか、約９．５×１０５  １／Ｍ・ｓ以上のｋａｓｓｏｃでヒトＰＤ−Ｌ１及び／又はＰＤ−Ｌ２に結合するか、又は約１×１０６  １／Ｍ・ｓ以上のｋａｓｓｏｃでヒトＰＤ−Ｌ１及び／又はＰＤ−Ｌ２に結合する、ＰＤ−Ｌ１及び／又はＰＤ−Ｌ２阻害剤を含む。
【０８６５】
[001369]  一部の実施形態において、記載される組成物及び方法は、約２×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒトＰＤ−Ｌ１若しくはＰＤ−Ｌ２に結合するか、約２．１×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒトＰＤ−１に結合するか、約２．２×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒトＰＤ−１に結合するか、約２．３×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒトＰＤ−１に結合するか、約２．４×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒトＰＤ−１に結合するか、約２．５×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒトＰＤ−１に結合するか、約２．６×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒトＰＤ−１に結合するか、又は約２．７×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒトＰＤ−Ｌ１若しくはＰＤ−Ｌ２に結合するか、又は約３×１０−５  １／ｓ以下のｋｄｉｓｓｏｃでヒトＰＤ−Ｌ１若しくはＰＤ−Ｌ２に結合する、ＰＤ−Ｌ１及び／又はＰＤ−Ｌ２阻害剤を含む。
【０８６６】
[001370]  一部の実施形態において、記載される組成物及び方法は、約１０ｎＭ以下のＩＣ５０でヒトＰＤ−Ｌ１又はヒトＰＤ−Ｌ２のヒトＰＤ−１への結合を遮断又は阻害するか、約９ｎＭ以下のＩＣ５０でヒトＰＤ−Ｌ１又はヒトＰＤ−Ｌ２のヒトＰＤ−１への結合を遮断又は阻害するか、約８ｎＭ以下のＩＣ５０でヒトＰＤ−Ｌ１又はヒトＰＤ−Ｌ２のヒトＰＤ−１への結合を遮断又は阻害するか、約７ｎＭ以下のＩＣ５０でヒトＰＤ−Ｌ１又はヒトＰＤ−Ｌ２のヒトＰＤ−１への結合を遮断又は阻害するか、約６ｎＭ以下のＩＣ５０でヒトＰＤ−Ｌ１又はヒトＰＤ−Ｌ２のヒトＰＤ−１への結合を遮断又は阻害するか、約５ｎＭ以下のＩＣ５０でヒトＰＤ−Ｌ１又はヒトＰＤ−Ｌ２のヒトＰＤ−１への結合を遮断又は阻害するか、約４ｎＭ以下のＩＣ５０でヒトＰＤ−Ｌ１又はヒトＰＤ−Ｌ２のヒトＰＤ−１への結合を遮断又は阻害するか、約３ｎＭ以下のＩＣ５０でヒトＰＤ−Ｌ１又はヒトＰＤ−Ｌ２のヒトＰＤ−１への結合を遮断又は阻害するか、約２ｎＭ以下のＩＣ５０でヒトＰＤ−Ｌ１又はヒトＰＤ−Ｌ２のヒトＰＤ−１への結合を遮断又は阻害するか、又は約１ｎＭ以下のＩＣ５０でヒトＰＤ−１を阻害するか又はヒトＰＤ−Ｌ１若しくはヒトＰＤ−Ｌ２のヒトＰＤ−１への結合を遮断する、ＰＤ−Ｌ１及び／又はＰＤ−Ｌ２阻害剤を含む。
【０８６７】
[001371]  一実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、ＭＥＤＩ４７３６（AstraZeneca plc.の子会社、Medimmune, LLC、Gaithersburg、Marylandから市販されている）としても知られるデュルバルマブ又はその抗原結合断片、コンジュゲート若しくは変異体である。一実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、米国特許８，７７９，１０８号又は米国特許出願公開第２０１３／００３４５５９号に開示される抗体であり、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。デュルバルマブの臨床的有効性は、Page, et al., Ann.Rev. Med., 2014, 65, 185-202；Brahmer, et al., J. Clin.Oncol.2014, 32, 5s (supplement, abstract 8021)；及びMcDermott, et al., Cancer Treatment Rev., 2014, 40, 1056-64に記載される。デュルバルマブの調製及び特性は、米国特許第８，７７９，１０８号に記載され、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。デュルバルマブのアミノ酸配列を表５０に示す。デュルバルマブモノクローナル抗体は、２２−９６、２２’’−９６’’、２３’−８９’、２３’’’−８９’’’、１３５’−１９５’、１３５’’’−１９５’’’、１４８−２０４、１４８’’−２０４’’、２１５’−２２４、２１５’’’−２２４’’、２３０−２３０’’、２３３−２３３’’、２６５−３２５、２６５’’−３２５’’、３７１−４２９及び３７１’’−４２９’でのジスルフィド結合；並びにＡｓｎ−３０１及びＡｓｎ−３０１’’におけるＮ−グリコシル化部位を含む。
【０８６８】
[001372]  一実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、配列番号４８３で示される重鎖及び配列番号４８４で示される軽鎖を含む。一実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、それぞれ配列番号４８３及び配列番号４８４に示される配列を有する重鎖及び軽鎖又はその抗原結合断片、Ｆａｂ断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、変異体若しくはコンジュゲートを含む。一実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、それぞれ配列番号４８３及び配列番号４８４に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、それぞれ配列番号４８３及び配列番号４８４に示される配列とそれぞれ少なくとも９８％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、それぞれ配列番号４８３及び配列番号４８４に示される配列とそれぞれ少なくとも９７％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、それぞれ配列番号４８３及び配列番号４８４に示される配列とそれぞれ少なくとも９６％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、それぞれ配列番号４８３及び配列番号４８４に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一である重鎖及び軽鎖を含む。
【０８６９】
[001373]  一実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、デュルバルマブの重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。一実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害剤重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号４８５に示される配列を含み、ＰＤ−Ｌ１阻害剤軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号４８６に示される配列及びその保存的アミノ酸置換を含む。一実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、それぞれ配列番号４８５及び配列番号４８６に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、それぞれ配列番号４８５及び配列番号４８６に示される配列とそれぞれ少なくとも９８％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、それぞれ配列番号４８５及び配列番号４８６に示される配列とそれぞれ少なくとも９７％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、それぞれ配列番号４８５及び配列番号４８６に示される配列とそれぞれ少なくとも９６％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、それぞれ配列番号４８５及び配列番号４８６に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。
【０８７０】
[001374]  一実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、それぞれ配列番号４８７、配列番号４８８及び配列番号４８９に記載の配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにその保存的アミノ酸置換と、それぞれ配列番号４９０、配列番号４９１及び配列番号４９２に記載の配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにその保存的アミノ酸置換とを含む。一実施形態において、抗体は、前述の抗体のいずれかと同じＰＤ−Ｌ１上のエピトープとの結合について競合し、及び／又はそれに結合する。
【０８７１】
[001375]  一実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、デュルバルマブに関して薬物規制当局によって承認された抗ＰＤ−Ｌ１バイオシミラーモノクローナル抗体である。一実施形態において、バイオシミラーは、参照医薬品又は参照生物学的製剤のアミノ酸配列に対して少なくとも９７％の配列同一性、例えば９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有し、参照医薬品又は参照生物学的製剤と比較して１つ以上の翻訳後改変を含む、アミノ酸配列を含む抗ＰＤ−Ｌ１抗体を含み、ここで、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、デュルバルマブである。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後改変は、グリコシル化、酸化、脱アミド化及び切断の１つ以上から選択される。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可された又は認可のために提出された抗ＰＤ−Ｌ１抗体であり、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤の製剤と異なる製剤で提供され、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、デュルバルマブである。抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合のＥＭＡなどの薬物規制当局によって認可されていることができる。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、デュルバルマブである。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、デュルバルマブである。
【０８７２】
【表５６】
2021512962.tif 000075
【０８７３】
[001376]  一実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、ＭＳＢ００１０７１８Ｃ（Merck KGaA/EMD Seronoから市販されている）としても知られるアベルマブ又はその抗原結合断片、コンジュゲート若しくは変異体である。アベルマブの調製及び特性は、米国特許出願公開第２０１４／０３４１９１７  Ａ１号に記載され、その開示は、参照により本明細書に具体的に組み込まれる。アベルマブのアミノ酸配列を表５１に示す。アベルマブは、２２−９６、１４７−２０３、２６４−３２４、３７０−４２８、２２’’−９６’’、１４７’’−２０３’’、２６４’’−３２４’’及び３７０’’−４２８’’の重鎖内ジスルフィド結合（Ｃ２３−Ｃ１０４）；２２’−９０’、１３８’−１９７’、２２’’’−９０’’’及び１３８’’’−１９７’’’の軽鎖内ジスルフィド結合（Ｃ２３−Ｃ１０４）；２２３−２１５’及び２２３’’−２１５’’’の重−軽鎖内ジスルフィド結合（ｈ５−ＣＬ１２６）；２２９−２２９’及び２３２−２３２’’の重−重鎖内ジスルフィド結合（ｈ１１、ｈ１４）；３００、３００’’のＮ−グリコシル化部位（Ｈ  ＣＨ２  Ｎ８４．４）；フコシル化複合二分岐ＣＨＯ型グリカン；並びに４５０及び４５０’のＨ  ＣＨＳ  Ｋ２  Ｃ末端リジンクリッピングを有する。
【０８７４】
[001377]  一実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、配列番号４９３で示される重鎖及び配列番号４９４で示される軽鎖を含む。一実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、それぞれ配列番号４９３及び配列番号４９４に示される配列を有する重鎖及び軽鎖又はその抗原結合断片、Ｆａｂ断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、変異体若しくはコンジュゲートを含む。一実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、それぞれ配列番号４９３及び配列番号４９４に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、それぞれ配列番号４９３及び配列番号４９４に示される配列とそれぞれ少なくとも９８％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、それぞれ配列番号４９３及び配列番号４９４に示される配列とそれぞれ少なくとも９７％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、それぞれ配列番号４９３及び配列番号４９４に示される配列とそれぞれ少なくとも９６％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、それぞれ配列番号４９３及び配列番号４９４に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一である重鎖及び軽鎖を含む。
【０８７５】
[001378]  一実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、アベルマブの重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。一実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害剤重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号４９５に示される配列を含み、ＰＤ−Ｌ１阻害剤軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号４９６に示される配列及びその保存的アミノ酸置換を含む。一実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、それぞれ配列番号４９５及び配列番号４９６に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、それぞれ配列番号４９６及び配列番号４９６に示される配列とそれぞれ少なくとも９８％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、それぞれ配列番号４９５及び配列番号４９６に示される配列とそれぞれ少なくとも９７％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、それぞれ配列番号４９５及び配列番号４９６に示される配列とそれぞれ少なくとも９６％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、それぞれ配列番号４９５及び配列番号４９６に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。
【０８７６】
[001379]  一実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、それぞれ配列番号４９７、配列番号４９８及び配列番号４９９に記載の配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにその保存的アミノ酸置換と、それぞれ配列番号５００、配列番号５０１及び配列番号５０２に記載の配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにその保存的アミノ酸置換とを含む。一実施形態において、抗体は、前述の抗体のいずれかと同じＰＤ−Ｌ１上のエピトープとの結合について競合し、及び／又はそれに結合する。
【０８７７】
[001380]  一実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、アベルマブに関して薬物規制当局によって承認された抗ＰＤ−Ｌ１バイオシミラーモノクローナル抗体である。一実施形態において、バイオシミラーは、参照医薬品又は参照生物学的製剤のアミノ酸配列に対して少なくとも９７％の配列同一性、例えば９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有し、参照医薬品又は参照生物学的製剤と比較して１つ以上の翻訳後改変を含む、アミノ酸配列を含む抗ＰＤ−Ｌ１抗体を含み、ここで、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、アベルマブである。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後改変は、グリコシル化、酸化、脱アミド化及び切断の１つ以上から選択される。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可された又は認可のために提出された抗ＰＤ−Ｌ１抗体であり、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤の製剤と異なる製剤で提供され、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、アベルマブである。抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合のＥＭＡなどの薬物規制当局によって認可されていることができる。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、アベルマブである。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、アベルマブである。
【０８７８】
【表５７】
2021512962.tif 000076
【０８７９】
[001381]  一実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、ＭＰＤＬ３２８０Ａ又はＲＧ７４４６（Roche Holding AG、Basel、Switzerlandの子会社、Genentech, Inc.からTECENTRIQとして市販されている）としても知られるアテゾリズマブ又はその抗原結合断片、コンジュゲート若しくは変異体である。別の実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、米国特許第８，２１７，１４９号に記載の抗体であり、その開示は、本明細書における参照により具体的に組み込まれる。一実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、米国特許出願公開第２０１０／０２０３０５６  Ａ１号、同第２０１３／００４５２００  Ａ１号、同第２０１３／００４５２０１  Ａ１号、同第２０１３／００４５２０２  Ａ１号又は同第２０１４／００６５１３５  Ａ１号に記載の抗体であり、その開示は、本明細書における参照により具体的に組み込まれる。アテゾリズマブの調製及び特性は、米国特許第８，２１７，１４９号に記載され、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。アテゾリズマブのアミノ酸配列を表５２に示す。アテゾリズマブは、２２−９６、１４５−２０１、２６２−３２２、３６８−４２６、２２’’−９６’’、１４５’’−２０１’’、２６２’’−３２２’’及び３６８’’−４２６’’の重鎖内ジスルフィド結合（Ｃ２３−Ｃ１０４）；２３’−８８’、１３４’−１９４’、２３’’’−８８’’’及び１３４’’’−１９４’’’の軽鎖内ジスルフィド結合（Ｃ２３−Ｃ１０４）；２２１−２１４’及び２２１’’−２１４’’’の重−軽鎖内ジスルフィド結合（ｈ５−ＣＬ１２６）；２２７−２２７’’及び２３０−２３０’’の重−重鎖内ジスルフィド結合（ｈ１１、ｈ１４）；及び２９８及び２９８’のＮ−グリコシル化部位（Ｈ  ＣＨ２  Ｎ８４．４＞Ａ）を有する。
【０８８０】
[001382]  一実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、配列番号５０３で示される重鎖及び配列番号５０４で示される軽鎖を含む。一実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、それぞれ配列番号５０３及び配列番号５０４に示される配列を有する重鎖及び軽鎖又はその抗原結合断片、Ｆａｂ断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、変異体若しくはコンジュゲートを含む。一実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、それぞれ配列番号５０３及び配列番号５０４に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、それぞれ配列番号５０３及び配列番号５０４に示される配列とそれぞれ少なくとも９８％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、それぞれ配列番号５０３及び配列番号５０４に示される配列とそれぞれ少なくとも９７％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、それぞれ配列番号５０３及び配列番号５０４に示される配列とそれぞれ少なくとも９６％同一である重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、それぞれ配列番号５０３及び配列番号５０４に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一である重鎖及び軽鎖を含む。
【０８８１】
[001383]  一実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、アテゾリズマブの重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。一実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害剤重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号５０５に示される配列を含み、ＰＤ−Ｌ１阻害剤軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号５０６に示される配列及びその保存的アミノ酸置換を含む。一実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、それぞれ配列番号５０５及び配列番号５０６に示される配列とそれぞれ少なくとも９９％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、それぞれ配列番号５０５及び配列番号５０６に示される配列とそれぞれ少なくとも９８％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、それぞれ配列番号５０５及び配列番号５０６に示される配列とそれぞれ少なくとも９７％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、それぞれ配列番号５０５及び配列番号５０６に示される配列とそれぞれ少なくとも９６％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。一実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、それぞれ配列番号５０５及び配列番号５０６に示される配列とそれぞれ少なくとも９５％同一であるＶＨ及びＶＬ領域を含む。
【０８８２】
[001384]  一実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、それぞれ配列番号５０７、配列番号５０８及び配列番号５０９に記載の配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにその保存的アミノ酸置換と、それぞれ配列番号５１０、配列番号５１１及び配列番号５１２に記載の配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン並びにその保存的アミノ酸置換とを含む。一実施形態において、抗体は、前述の抗体のいずれかと同じＰＤ−Ｌ１上のエピトープとの結合について競合し、及び／又はそれに結合する。
【０８８３】
[001385]  一実施形態において、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、アテゾリズマブに関して薬物規制当局によって承認された抗ＰＤ−Ｌ１バイオシミラーモノクローナル抗体である。一実施形態において、バイオシミラーは、参照医薬品又は参照生物学的製剤のアミノ酸配列に対して少なくとも９７％の配列同一性、例えば９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有し、参照医薬品又は参照生物学的製剤と比較して１つ以上の翻訳後改変を含む、アミノ酸配列を含む抗ＰＤ−Ｌ１抗体を含み、ここで、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、アテゾリズマブである。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後改変は、グリコシル化、酸化、脱アミド化及び切断の１つ以上から選択される。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可された又は認可のために提出された抗ＰＤ−Ｌ１抗体であり、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、参照医薬品又は参照生物学的製剤の製剤と異なる製剤で提供され、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、アテゾリズマブである。抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合のＥＭＡなどの薬物規制当局によって認可されていることができる。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、アテゾリズマブである。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、ここで、１つ以上の賦形剤は、参照医薬品又は参照生物学的製剤に含まれる賦形剤と同一であるか又は異なり、参照医薬品又は参照生物学的製剤は、アテゾリズマブである。
【０８８４】
【表５８】
2021512962.tif 000077
【０８８５】
[001386]  一実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、米国特許出願公開第２０１４／０３４１９１７  Ａ１号に記載される抗体を含み、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。別の実施形態において、ＰＤ−Ｌ１への結合についてこれらの抗体のいずれかと競合する抗体も含まれる。一実施形態において、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、米国特許第７，９４３，７４３号に開示される、ＢＭＳ−９３５５５９としても知られるＭＤＸ−１１０５であり、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。一実施形態において、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、参照により本明細書に組み込まれる米国特許第７，９４３，７４３号に開示される抗ＰＤ−Ｌ１抗体から選択される。
【０８８６】
[001387]  一実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、INVIVOMAB抗ｍ−ＰＤ−Ｌ１クローン１０Ｆ．９Ｇ２（カタログ番号ＢＥ０１０１、Bio X Cell, Inc.、West Lebanon、NH、USA）などの市販のモノクローナル抗体である。一実施形態において、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、AFFYMETRIX EBIOSCIENCE（ＭＩＨ１）などの市販のモノクローナル抗体である。多くの市販の抗ＰＤ−Ｌ１抗体が当業者に公知である。
【０８８７】
[001388]  一実施形態において、ＰＤ−Ｌ２阻害剤は、BIOLEGEND 24F.10C12マウスＩｇＧ２ａ、κアイソタイプ（カタログ番号329602 Biolegend, Inc.、San Diego、CA）、SIGMA抗ＰＤ−Ｌ２抗体（カタログ番号SAB3500395、Sigma-Aldrich Co.、St. Louis、MO）などの市販のモノクローナル抗体又は当業者に公知の他の市販の抗ＰＤ−Ｌ２抗体である。
【０８８８】
Ａ２ａＲアンタゴニストの共投与
[001389]  一実施形態において、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得るステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を実施して第２のＴＩＬ集団を得るステップであって、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍多く、第１の細胞培養培地は、ＩＬ−２及びアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストを含み、初期拡大培養は、２１日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の急速拡大培養を実施して第３のＴＩＬ集団を得るステップであって、急速拡大培養の開始から７日後、第３のＴＩＬ集団は、数において第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、第２の細胞培養培地は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３）抗体、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）並びに任意選択によりアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト及び第２のアデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストを含み、急速拡大培養は、１４日以下の期間にわたって実施される、ステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）第３のＴＩＬ集団の治療有効部分を患者に投与するステップ
を含む方法である。
【０８８９】
[001390]  一部の実施形態において、本開示は、拡大培養した腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）を投与することを含む癌を有する対象を処置する方法も提供し、この方法は、
（ａ）対象から得られた腫瘍サンプルを複数の腫瘍断片に処理することにより、患者から切除された腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得ること；
（ｂ）腫瘍断片を閉鎖系に加えること；
（ｃ）ＩＬ−２を有する細胞培地で第１のＴＩＬ集団を培養することにより、第１の拡大培養を実施して、第２のＴＩＬ集団を生じさせることであって、第１の拡大培養は、第１のガス透過性表面積を提供する閉鎖型容器内で実施され、第１の拡大培養は、第２のＴＩＬ集団を得るために約３〜１４日間にわたって実施され、第２のＴＩＬ集団は、第１のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、ステップ（ｂ）からステップ（ｃ）への移行は、系を開放せずに発生する、生じさせること；
（ｄ）第２のＴＩＬ集団の細胞培養培地に追加のＩＬ−２、ＯＫＴ−３及び抗原提示細胞（ＡＰＣ）を補充することにより、第２の拡大培養を実施して、第３のＴＩＬ集団を生じさせることであって、第２の拡大培養は、第３のＴＩＬ集団を得るために約７〜１４日間にわたって実施され、第３のＴＩＬ集団は、第２のＴＩＬ集団と比べてエフェクターＴ細胞及び／又はセントラルメモリーＴ細胞の増加したサブ集団を含むＴ細胞治療用ＴＩＬ集団であり、第２の拡大培養は、第２のガス透過性表面積を提供する閉鎖型容器内で実施され、ステップ（ｃ）からステップ（ｄ）への移行は、系を開放せずに発生する、生じさせること；
（ｅ）ステップ（ｄ）から得られた治療用ＴＩＬ集団を回収することであって、ステップ（ｄ）からステップ（ｅ）への移行は、系を開放せずに発生する、回収すること；及び
（ｆ）ステップ（ｅ）からの回収されたＴＩＬ集団を輸注バッグに移すことであって、ステップ（ｅ）から（ｆ）への移行は、系を開放せずに発生する、移すこと；
（ｇ）凍結保存プロセスを使用して、ステップ（ｆ）からの回収されたＴＩＬ集団を含む輸注バッグを任意選択により凍結保存すること；及び
（ｈ）ステップ（ｇ）における輸注バッグから治療有効投与量の第３のＴＩＬ集団を患者に投与すること
を含む。
【０８９０】
[001391]  更なる実施形態において、癌を処置する方法は、患者への第３のＴＩＬ集団の投与の翌日に開始する、Ａ２ａＲアンタゴニストで患者を処置するステップを更に含む。
【０８９１】
[001392]  別の更なる実施形態において、癌を処置する方法は、患者から腫瘍を切除するステップ前にＡ２ａＲアンタゴニストで患者を処置するステップを更に含む。別の実施形態において、癌を処置する方法は、患者から腫瘍を切除するステップ前にＡ２ａＲアンタゴニストで患者を処置し、Ａ２ＡＲアンタゴニストで患者を継続的に処置するステップを更に含む。
【０８９２】
[001393]  一部の実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、ＣＰＩ−４４４又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ又はそれらの組み合わせである。
【０８９３】
[001394]  一実施形態において、ＣＰＩ−４４４又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ又はそれらの組み合わせは、約１００ｍｇの１日総用量で１日２回経口投与される。一実施形態において、ＣＰＩ−４４４は、約２００ｍｇの１日総用量で１日２回経口投与される。一実施形態において、ＣＰＩ−４４４は、約３００ｍｇの１日総用量で１日２回経口投与される。一部の実施形態において、ＣＰＩ−４４４は、約３５０ｍｇ、約４００ｍｇ、約４５０ｍｇ、約５００ｍｇ、約５２５ｍｇ、約５５０ｍｇ、約５７５ｍｇ、約６００ｍｇ、約６２５ｍｇ、約６５０ｍｇ、約６７５ｍｇ、約７００ｍｇ、約７５０ｍｇ、約８００ｍｇ、約８５０ｍｇ、約９００ｍｇ、約９２５ｍｇ、約９５０ｍｇ、約９７５ｍｇ、約１０００ｍｇの１日総用量で１日２回経口投与される。
【０８９４】
[001395]  一部の実施形態において、ＣＰＩ−４４４又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせは、２５ｍｇ  ＢＩＤ、５０ｍｇ  ＢＩＤ、７５ｍｇ  ＢＩＤ、１００ｍｇ  ＢＩＤ、１２５ｍｇ  ＢＩＤ、１５０ｍｇ  ＢＩＤ、１７５ｍｇ  ＢＩＤ、２００ｍｇ  ＢＩＤ及び２２５ｍｇ  ＢＩＤからなる群から選択される用量で経口投与される。
【０８９５】
[001396]  一部の実施形態において、ＣＰＩ−４４４又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせは、約１００ｍｇ  ＢＩＤで経口投与される。一部の実施形態において、ＣＰＩ−４４４又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせは、ＰＤ−１阻害剤又はＰＤ−Ｌ１阻害剤と組み合わせて、約１００ｍｇ  ＢＩＤで経口投与される。
【０８９６】
[001397]  一部の実施形態において、ＣＰＩ−４４４又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせは、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、デュルバルマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー及び組み合わせからなる群から選択されるＰＤ−１阻害剤又はＰＤ−Ｌ１阻害剤と組み合わせて、約１００ｍｇ  ＢＩＤで経口投与される。
【０８９７】
[001398]  一部の実施形態において、ＣＰＩ−４４４又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせは、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、デュルバルマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー及び組み合わせからなる群から選択されるＰＤ−１阻害剤又はＰＤ−Ｌ１阻害剤と組み合わせた、２５ｍｇ  ＢＩＤ、５０ｍｇ  ＢＩＤ、７５ｍｇ  ＢＩＤ、１００ｍｇ  ＢＩＤ、１２５ｍｇ  ＢＩＤ、１５０ｍｇ  ＢＩＤ、１７５ｍｇ  ＢＩＤ、２００ｍｇ  ＢＩＤ及び２２５ｍｇ  ＢＩＤからなる群から選択される用量の経口である。
【０８９８】
[001399]  一部の実施形態において、ＣＰＩ−４４４又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせは、アテゾリズマブと組み合わせた、２５ｍｇ  ＢＩＤ、５０ｍｇ  ＢＩＤ、７５ｍｇ  ＢＩＤ、１００ｍｇ  ＢＩＤ、１２５ｍｇ  ＢＩＤ、１５０ｍｇ  ＢＩＤ、１７５ｍｇ  ＢＩＤ、２００ｍｇ  ＢＩＤ及び２２５ｍｇ  ＢＩＤからなる群から選択される用量の経口である。
【０８９９】
[001400]  一部の実施形態において、ＣＰＩ−４４４又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせは、アテゾリズマブと組み合わせた、約１００ｍｇ  ＢＩＤの経口である。
【０９００】
[001401]  一部の実施形態において、ＣＰＩ−４４４又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせは、ニボルマブと組み合わせた、約１００ｍｇ  ＢＩＤの経口である。
【０９０１】
[001402]  一部の実施形態において、ＣＰＩ−４４４又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせは、２５ｍｇ  ＢＩＤ、５０ｍｇ  ＢＩＤ、７５ｍｇ  ＢＩＤ、１００ｍｇ  ＢＩＤ、１２５ｍｇ  ＢＩＤ、１５０ｍｇ  ＢＩＤ、１７５ｍｇ  ＢＩＤ、２００ｍｇ  ＢＩＤ及び２２５ｍｇ  ＢＩＤからなる群から選択される用量で経口投与される。更なる実施形態において、ＣＰＩ−４４４は、２８日サイクルの最初の１４日間にわたり、約２００ｍｇの１日総用量で１日２回経口投与される。一部の他の実施形態において、ＣＰＩ−４４４は、２８日サイクルの各日にわたり、約２００ｍｇの１日総用量で１日２回経口投与される。更に他の実施形態において、そのようなサイクルは、ＰＤ−１阻害剤又はＰＤ−Ｌ１阻害剤の投与と協調する。好ましい実施形態において、そのようなサイクルは、アテゾリズマブ並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー及び組み合わせの投与と協調する。他の実施形態において、そのようなサイクルは、ニボルマブ並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー及び組み合わせの投与と協調する。更なる実施形態において、そのようなサイクルは、ニボルマブ並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー及び組み合わせと、イピリムマブ並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー及び組み合わせとの両方の投与と協調する。
【０９０２】
[001403]  一部の実施形態において、ＣＰＩ−４４４又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせは、Ｔリンパ球関連抗原４阻害剤と組み合わせた、約１００ｍｇ  ＢＩＤの経口である。
【０９０３】
[001404]  一部の実施形態において、ＣＰＩ−４４４又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせは、イピリムマブと組み合わせた、約１００ｍｇ  ＢＩＤの経口である。
【０９０４】
[001405]  また更なる実施形態において、ＣＰＩ−４４４又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせは、イピリムマブ及びニボルマブと組み合わせた、約１００ｍｇ  ＢＩＤの経口である。
【０９０５】
[001406]  一部の実施形態において、Ａ２ａＲは、ＣＰＩ−４４４、ＳＣＨ５８２６１、ＺＭ２４１３８５、ＳＣＨ４２０８１４、ＳＹＮ１１５、８−ＣＳＣ、ＫＷ−６００２、Ａ２Ａ受容体アンタゴニスト１、ＡＤＺ４６３５、ビパデナント、ＳＴ４２０６、ＫＦ２１２１３、ＳＣＨ４１２３４８、７ＭＭＧ−４９、その薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶又はプロドラッグ及びそれらの組み合わせからなる群から選択される。
【０９０６】
[001407]  一部の実施形態において、癌を処置するための方法は、患者をアデノシン２Ａ受容体アンタゴニストで処置する追加のステップを更に含み、ステップ（ａ）の終了時に追加される。一部の実施形態において、Ａ２ａＲは、ＣＰＩ−４４４、ＳＣＨ５８２６１、ＺＭ２４１３８５、ＳＣＨ４２０８１４、ＳＹＮ１１５、８−ＣＳＣ、ＫＷ−６００２、Ａ２Ａ受容体アンタゴニスト１、ＡＤＺ４６３５、ビパデナント、ＳＴ４２０６、ＫＦ２１２１３、ＳＣＨ４１２３４８、７ＭＭＧ−４９、その薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶又はプロドラッグ及びそれらの組み合わせからなる群から選択される。好ましい実施形態において、Ａ２ａＲ受容体は、ＣＰＩ−４４４、その薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶又はプロドラッグ及びそれらの組み合わせである。
【０９０７】
[001408]  一部の実施形態において、癌を処置するための方法は、患者をアデノシン２Ａ受容体アンタゴニストで処置する追加のステップを更に含み、ステップ（ｆ）の開始時に追加される。一部の実施形態において、Ａ２ａＲは、ＣＰＩ−４４４、ＳＣＨ５８２６１、ＺＭ２４１３８５、ＳＣＨ４２０８１４、ＳＹＮ１１５、８−ＣＳＣ、ＫＷ−６００２、Ａ２Ａ受容体アンタゴニスト１、ＡＤＺ４６３５、ビパデナント、ＳＴ４２０６、ＫＦ２１２１３、ＳＣＨ４１２３４８、７ＭＭＧ−４９、その薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶又はプロドラッグ及びそれらの組み合わせからなる群から選択される。好ましい実施形態において、Ａ２ａＲ受容体は、ＣＰＩ−４４４、その薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶又はプロドラッグ及びそれらの組み合わせである。
【０９０８】
[001409]  一部の実施形態において、癌を処置するための方法は、患者をアデノシン２Ａ受容体アンタゴニストで処置する追加のステップを更に含み、ステップ（ｆ）の終了時に追加される。一部の実施形態において、Ａ２ａＲは、ＣＰＩ−４４４、ＳＣＨ５８２６１、ＺＭ２４１３８５、ＳＣＨ４２０８１４、ＳＹＮ１１５、８−ＣＳＣ、ＫＷ−６００２、Ａ２Ａ受容体アンタゴニスト１、ＡＤＺ４６３５、ビパデナント、ＳＴ４２０６、ＫＦ２１２１３、ＳＣＨ４１２３４８、７ＭＭＧ−４９、その薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶又はプロドラッグ及びそれらの組み合わせからなる群から選択される。好ましい実施形態において、Ａ２ａＲ受容体は、ＣＰＩ−４４４、その薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶又はプロドラッグ及びそれらの組み合わせである。
【０９０９】
[001410]  一部の実施形態において、癌を処置するための方法は、最初に静脈内に投与され、且つ後に経口投与されるアデノシン２Ａ受容体アンタゴニストを更に含む。
【０９１０】
[001411]  一部の実施形態において、癌を処置する方法は、治療有効量の、（１）シスプラチン及び同時放射線療法；（２）セツキシマブ、その後の放射線療法；（３）カルボプラチン、５−フルオロウラシル及び同時放射線療法；（４）ヒドロキシ尿素、５−フルオロウラシル及び同時放射線療法；（５）シスプラチン、パクリタキセル及び同時放射線療法；（６）シスプラチン、注入５−フルオロウラシル及び同時放射線療法；（７）断続的に投与されるシスプラチン及び放射線療法；（８）ドセタキセル、シスプラチン、５−フルオロウラシル及び同時放射線療法；（９）パクリタキセル、シスプラチン、注入５−フルオロウラシル及び同時放射線療法；（１０）シスプラチン及び放射線療法、その後のシスプラチン、５−フルオロウラシル及び放射線療法；（１１）ドセタキセル及びシスプラチン、その後のシスプラチン及び放射線療法；（１２）シスプラチン、５−フルオロウラシル及びドセタキセル；（１３）シスプラチン及びドセタキセル；（１４）シスプラチン及びパクリタキセル；（１５）カルボプラチン及びパクリタキセル；（１６）シスプラチン及びセツキシマブ；（１７）シスプラチン及び５−フルオロウラシル；（１８）シスプラチン、ドセタキセル及びセツキシマブ；（１９）カルボプラチン、ドセタキセル及びセツキシマブ；（２０）シスプラチン及びゲムシタビン；（２１）ゲムシタビン及びビノレルビン；（２２）シスプラチン；（２３）カルボプラチン；（２４）パクリタキセル；（２５）ドセタキセル；（２６）５−フルオロウラシル；（２７）メトトレキサート；（２８）ゲムシタビン；（２９）カペシタビン；（３０）セツキシマブ；（３１）アファチニブ；（３２）ラパチニブ；並びに（３３）ネラチニブからなる群から選択される化学療法レジメンを投与するステップを更に含む。
【０９１１】
[001412]  更に他の実施形態において、癌を処置する方法は、最初に、治療有効量の、（１）シスプラチン及び同時放射線療法；（２）セツキシマブ、その後の放射線療法；（３）カルボプラチン、５−フルオロウラシル及び同時放射線療法；（４）ヒドロキシ尿素、５−フルオロウラシル及び同時放射線療法；（５）シスプラチン、パクリタキセル及び同時放射線療法；（６）シスプラチン、注入５−フルオロウラシル及び同時放射線療法；（７）断続的に投与されるシスプラチン及び放射線療法；（８）ドセタキセル、シスプラチン、５−フルオロウラシル及び同時放射線療法；（９）パクリタキセル、シスプラチン、注入５−フルオロウラシル及び同時放射線療法；（１０）シスプラチン及び放射線療法、その後のシスプラチン、５−フルオロウラシル及び放射線療法；（１１）ドセタキセル及びシスプラチン、その後のシスプラチン及び放射線療法；（１２）シスプラチン、５−フルオロウラシル及びドセタキセル；（１３）シスプラチン及びドセタキセル；（１４）シスプラチン及びパクリタキセル；（１５）カルボプラチン及びパクリタキセル；（１６）シスプラチン及びセツキシマブ；（１７）シスプラチン及び５−フルオロウラシル；（１８）シスプラチン、ドセタキセル及びセツキシマブ；（１９）カルボプラチン、ドセタキセル及びセツキシマブ；（２０）シスプラチン及びゲムシタビン；（２１）ゲムシタビン及びビノレルビン；（２２）シスプラチン；（２３）カルボプラチン；（２４）パクリタキセル；（２５）ドセタキセル；（２６）５−フルオロウラシル；（２７）メトトレキサート；（２８）ゲムシタビン；（２９）カペシタビン；（３０）セツキシマブ；（３１）アファチニブ；（３２）ラパチニブ；並びに（３３）ネラチニブからなる群から選択される化学療法レジメンを投与するステップ、続いて、本明細書に開示される癌を処置する方法のステップ（ａ）を含む。
【０９１２】
[001413]  一部の実施形態において、処置される癌は、黒色腫、卵巣癌、子宮頸癌、肺癌、膀胱癌、乳癌、頭頸部癌、腎細胞癌、急性骨髄性白血病、結腸直腸癌、胆管癌及び肉腫からなる群から選択される。
【０９１３】
[001414]  一部の実施形態において、処置される癌は、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、トリプルネガティブ乳癌、黒色腫、頭頸部癌、膀胱癌、胃癌、マイクロサテライト高不安定性（ＭＳＩ−Ｈ）直腸結腸癌、ミスマッチ修復欠損（ｄＭＭＲ）直腸結腸癌、ホジキンリンパ腫、尿路上皮癌及び肝細胞癌からなる群から選択される。
【０９１４】
[001415]  一部の実施形態において、処置される癌又は処置のために選択される患者は、腫瘍変異負荷（ＴＭＢ）を測定、定量化又は分類し、処置される癌を優先的に選択するか、又は高ＴＭＢの腫瘍を有する患者を選択することによって識別される。ＴＭＢは、１メガベースあたりのコーディング体細胞変異の中央数を決定することによって評価され得る。好ましい実施形態において、処置される癌は高ＴＭＢ腫瘍である。一部の実施形態において、処置される癌は、ミスマッチ修復欠損（ＭＭＲｄ）である。一部の実施形態において、腫瘍変異負荷は、１メガベースあたり２を超えるコーディング体細胞変異；１メガベースあたり５を超えるコーディング体細胞変異；１メガベースあたり５〜１０のコーディング体細胞変異；１メガベースあたり約１０のコーディング体細胞変異；１メガベースあたり１０〜約２０のコーディング体細胞変異；１メガベースあたり約２０を超えるコーディング体細胞変異である。
【０９１５】
[001416]  本明細書では本発明の好ましい実施形態が示され説明されるが、そのような実施形態は例としてのみ提供されており、本発明の範囲を制限することを意図するものではない。本発明の実施において、本発明の記載された実施形態に対する様々な代替が採用され得る。
【０９１６】
Ａ２ａＲアンタゴニストによる前処置
[001417]  一実施形態において、ヒト対象は、腫瘍切除前にＡ２ａＲアンタゴニストで前処置される。一実施形態において、ヒト対象は、腫瘍が切除される前にＡ２ａＲアンタゴニスト又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ又はそれらの組み合わせで前処置される。一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニスト又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグは、約２００ｍｇの１日総用量で投与される。一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニスト又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグは、１日２回、１用量あたり１００ｍｇ、２００ｍｇの１日総用量で投与される。一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニスト又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグは、１日２回、１用量あたり１５０ｍｇ、３００ｍｇの１日総用量で投与される。一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニスト又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグは、腫瘍切除前に少なくとも１週間にわたって投与される。一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニスト又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグは、腫瘍切除前に約２週間にわたって投与される。一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニスト又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグは、腫瘍切除前に２週間を超えて投与される。一実施形態において、ヒト対象は、腫瘍が切除される前に、Ａ２ａＲアンタゴニストＣＰＩ−４４４又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ又はそれらの組み合わせで前処置される。一実施形態において、ＣＰＩ−４４４は、約２００ｍｇの１日総用量で投与される。一実施形態において、ＣＰＩ−４４４は、１日２回、１用量あたり１００ｍｇ、２００ｍｇの１日総用量で投与される。一実施形態において、ＣＰＩ−４４４は、１日２回、１用量あたり１５０ｍｇ、３００ｍｇの１日総用量で投与される。一実施形態において、ＣＰＩ−４４４は、腫瘍切除前に少なくとも１週間にわたって投与される。一実施形態において、ＣＰＩ−４４４は、腫瘍切除前に約２週間にわたって投与される。一実施形態において、ＣＰＩ−４４４は、腫瘍切除前に２週間を超えて投与される。
【０９１７】
[001418]  一実施形態において、ヒト対象は、腫瘍切除前にＡ２ａＲアンタゴニスト又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ又はそれらの組み合わせで前処置される。一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、腫瘍切除前に少なくとも１週間にわたって投与される。一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、腫瘍切除前に約２週間にわたって投与される。一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、腫瘍切除前に２週間を超えて投与される。
【０９１８】
[001419]  一実施形態において、ＣＰＩ−４４４は、本出願の他の箇所で開示されている用量／投与時間を使用して投与される。
【０９１９】
ＴＩＬ組成物が製造されている間のＡ２ａＲアンタゴニストによる処置
[001420]  一実施形態は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を処置する方法であって、（ａ）患者から得られた腫瘍サンプルを複数の腫瘍断片に処理することにより、患者から切除された腫瘍から第１のＴＩＬ集団を得ること；（ｂ）腫瘍断片を閉鎖系に加えること；（ｃ）ＩＬ−２を含む細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団を培養することにより、第１の拡大培養を実施して、第２のＴＩＬ集団を生じさせることであって、第１の拡大培養は、第１のガス透過性表面積を提供する閉鎖容器内で実施され、第１の拡大培養は、第２のＴＩＬ集団を得るために約３〜１４日間にわたって実施され、第２のＴＩＬ集団は、数において第１のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍多く、ステップ（ｂ）からステップ（ｃ）への移行は、系を開放せずに発生し、及び任意選択により、培地は、アデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストを含む、生じさせること；（ｄ）第２のＴＩＬ集団の細胞培養培地に追加的なＩＬ−２、ＯＫＴ−３及び抗原提示細胞（ＡＰＣ）を添加することにより、第２の拡大培養を実施して、第３のＴＩＬ集団を生じさせることであって、第２の拡大培養は、第３のＴＩＬ集団を得るために約７〜１４日間にわたって実施され、第３のＴＩＬ集団は、治療用ＴＩＬ集団であり、第２の拡大培養は、第２のガス透過性表面積を提供する閉鎖容器内で実施され、ステップ（ｃ）からステップ（ｄ）への移行は、系を開放せずに発生し、及び任意選択により、培地は、アデノシン２Ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニストを含む、生じさせること；（ｅ）ステップ（ｄ）から得られた治療用ＴＩＬ集団を回収することであって、ステップ（ｄ）からステップ（ｅ）への移行は、系を開放せずに発生する、回収すること；及び（ｆ）ステップ（ｅ）からの回収されたＴＩＬ集団を輸注バッグに移すことであって、ステップ（ｅ）から（ｆ）への移行は、系を開放せずに発生する、移すこと；及び（ｇ）最終的なＴＩＬ集団の治療有効部分を患者に投与することを含む方法である。一実施形態は、癌を処置する方法であり、ここで、Ａ２ａＲ受容体アンタゴニストは、ステップ（ａ）後、ステップ（ｃ）が完了する前に患者に投与される。一実施形態において、ヒト対象は、Ａ２ａＲアンタゴニストで処置され、これは腫瘍切除後に開始する。一部の実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、ＣＰＩ−４４４又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ又はそれらの組み合わせである。
【０９２０】
[001421]  一実施形態において、ＣＰＩ−４４４又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ又はそれらの組み合わせは、約２００ｍｇの１日総用量で１日２回経口投与される。一実施形態において、ＣＰＩ−４４４は、約２５０ｍｇの１日総用量で１日２回経口投与される。一実施形態において、ＣＰＩ−４４４は、約３００ｍｇの１日総用量で１日２回経口投与される。一部の実施形態において、ＣＰＩ−４４４又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせは、２５ｍｇ  ＢＩＤ、５０ｍｇ  ＢＩＤ、７５ｍｇ  ＢＩＤ、１００ｍｇ  ＢＩＤ、１２５ｍｇ  ＢＩＤ、１５０ｍｇ  ＢＩＤ、１７５ｍｇ  ＢＩＤ、２００ｍｇ  ＢＩＤ及び２２５ｍｇ  ＢＩＤからなる群から選択される用量で経口投与される。
【０９２１】
[001422]  一実施形態において、ＣＰＩ−４４４は、本出願の他の箇所で開示されている用量／投与時間を使用して投与される。
【０９２２】
[001423]  一部の実施形態において、Ａ２ａＲは、ＣＰＩ−４４４、ＳＣＨ５８２６１、ＺＭ２４１３８５、ＳＣＨ４２０８１４、ＳＹＮ１１５、８−ＣＳＣ、ＫＷ−６００２、Ａ２Ａ受容体アンタゴニスト１、ＡＤＺ４６３５、ビパデナント、ＳＴ４２０６、ＫＦ２１２１３、ＳＣＨ４１２３４８、７ＭＭＧ−４９、その薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶又はプロドラッグ及びそれらの組み合わせからなる群から選択される。
【０９２３】
Ａ２ａＲ発現の分析
[001424]  一実施形態において、新鮮な腫瘍及び新鮮な腫瘍消化物は、実施例１〜１４のものを含むが、これらに限定されない、本明細書に開示される手順に従って処理され得る。これらの手順は、様々な順序のステップで使用され得る。これらの様々な方法で産生された細胞は、フローサイトメトリーを含む様々な方法で分析され得る。一実施形態において、細胞は、ＣＤ３９の有無に基づいて分類され得る。一実施形態において、細胞は、ＣＤ７３の有無に基づいて分類され得る。一実施形態において、細胞は、Ａ２ａＲの有無に基づいて分類され得る。任意選択により、一実施形態において、他のアデノシン受容体の有無は、フローサイトメトリー又は当技術分野で公知の他の方法を使用して決定され得る。限定されるものではないが、免疫組織化学又はフローサイトメトリーなどの方法が使用され得る。
【０９２４】
[001425]  一部の実施形態において、処理された腫瘍消化物から直接入手されたＴＩＬを分析して、ＣＤ３９が発現しているかどうかを決定し得る。一実施形態において、処理された腫瘍消化物から直接入手されたＴＩＬを分析して、ＣＤ７３が発現しているかどうかを決定し得る。一実施形態において、処理された腫瘍消化物から直接入手されたＴＩＬを分析して、Ａ２ａＲが発現しているかどうかを決定し得る。一実施形態において、処理された腫瘍消化物から直接入手されたＴＩＬを分析して、ＴＩＭ３が発現しているかどうかを決定し得る。一実施形態において、処理された腫瘍消化物から入手されたＴＩＬを分析して、ＬＡＧ３、４−１ＢＢ、ＴＩＧＩＴ、ＣＤ３、ＣＤ１１ｃ、ＣＤ８、ＰＤ１及びＰＤ−Ｌ１のいずれか１つ以上が発現又は存在しているかどうかを決定し得る。
【０９２５】
[001426]  一実施形態において、処理された腫瘍消化物から入手されたＴＩＬを分析して、以下のマーカー：Ａ２ａＲ、ＣＤ３９、ＣＤ７３、ＣＤ４５ＲＡ、ＣＣＲ７、ＣＤ３、ＴＣＲ−アルファ／ベータ、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＸＣＲ３、ＣＤ５６、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＢＴＬＡ、ＫＬＲＧ１、ＣＤ１３７、ＣＤ１３４、ＣＤ３３、ＣＤ５７、ＣＤ２５、ＣＤ１２７、ＴＩＭ−３、ＬＡＧ−３、ＴＩＧＩＴ、ＲＡＧＥ及びＫｉ６７のいずれか１つ以上が発現又は存在しているかどうかを決定し得る。一実施形態において、ＣＤ１０７ａ、ＮＫＧ２Ｄ、ＫＩＲＳ、ケモカイン死受容体（Ｆａｓ、ＤＲ４）及び抗アポトーシス／プロオートファジータンパク質（ＢＣＬ−２、ＢＣＬ−ＸＬ、Ｂｉｍ、ＣＤ２００及びＬＣ３／ＨＭＧＢ１）を含む他のバイオマーカーも評価され得る。
【０９２６】
[001427]  更に別の実験において、急速拡大培養ステップ前に第１の培養ステップから入手したＴＩＬは、フローサイトメトリーを含む様々な方法で分析され得る。一実施形態において、細胞は、ＣＤ３９の有無に基づいて分類され得る。一実施形態において、細胞は、ＣＤ７３の有無に基づいて分類され得る。一実施形態において、細胞は、Ａ２ａＲの有無に基づいて分類され得る。任意選択により、一実施形態において、他のアデノシン受容体の有無は、フローサイトメトリー又は当技術分野で公知の他の方法を使用して決定され得る。これらのタンパク質のいずれか１つ以上の存在又は不存在を決定するために、限定されないが、免疫組織化学又はフローサイトメトリーなどの方法が使用され得る。
【０９２７】
[001428]  一実施形態において、急速拡大培養ステップ前に第１の培養ステップから入手されたＴＩＬを分析して、ＣＤ３９が発現しているかどうかを決定し得る。一実施形態において、急速拡大培養ステップ前に第１の培養ステップから入手されたＴＩＬを分析して、ＣＤ７３が発現しているかどうかを決定し得る。一実施形態において、急速拡大培養ステップ前に第１の培養ステップから入手されたＴＩＬを分析して、Ａ２ａＲが発現しているかどうかを決定し得る。一実施形態において、急速拡大培養ステップ前に第１の培養ステップから入手されたＴＩＬを分析して、ＴＩＭ３が発現しているかどうかを決定し得る。一実施形態において、急速拡大培養ステップ前に第１の培養ステップから入手されたＴＩＬを分析して、ＬＡＧ３、４−１ＢＢ、ＴＩＧＩＴ、ＣＤ３、ＣＤ１１ｃ、ＣＤ８、ＰＤ１及びＰＤ−Ｌ１のいずれか１つ以上が発現又は存在しているかどうかを決定し得る。
【０９２８】
[001429]  一実施形態において、急速拡大培養ステップ前に第１の培養ステップから入手されたＴＩＬを分析して、以下のマーカー：Ａ２ａＲ、ＣＤ３９、ＣＤ７３、ＣＤ４５ＲＡ、ＣＣＲ７、ＣＤ３、ＴＣＲ−アルファ／ベータ、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＸＣＲ３、ＣＤ５６、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＢＴＬＡ、ＫＬＲＧ１、ＣＤ１３７、ＣＤ１３４、ＣＤ３３、ＣＤ５７、ＣＤ２５、ＣＤ１２７、ＴＩＭ−３、ＬＡＧ−３、ＴＩＧＩＴ、ＲＡＧＥ及びＫｉ６７のいずれか１つ以上が発現又は存在しているかどうかを決定し得る。一実施形態において、ＣＤ１０７ａ、ＮＫＧ２Ｄ、ＫＩＲＳ、ケモカイン死受容体（Ｆａｓ、ＤＲ４）及び抗アポトーシス／プロオートファジータンパク質（ＢＣＬ−２、ＢＣＬ−ＸＬ、Ｂｉｍ、ＣＤ２００及びＬＣ３／ＨＭＧＢ１）を含む他のバイオマーカーも、十分な細胞が利用可能であれば評価され得る。
【０９２９】
[001430]  一実施形態において、プレＲＥＰ培養物はＡ２ａＲアンタゴニストを含有し得る。一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、７−（５−メチルフラン−２−イル）−３−［［６−［［（３Ｓ）−オキソラン−３−イル］オキシメチル］ピリジン−２−イル］メチル］トリアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−５−アミンとしても知られるＣＰＩ−４４４であり得る。一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、ＣＰＩ−４４４又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせであり得る。
【０９３０】
[001431]  一実施形態において、ＣＰＩ−４４４又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせは、約１０ｎＭ／１０，０００細胞、約１２ｎＭ／１０，０００細胞、約１５ｎＭ／１０，０００細胞、約２０ｎＭ／１０，０００細胞、約２５ｎＭ／１０，０００細胞、約３０ｎＭ／１０，０００細胞又は約５０ｎＭ／１０，０００細胞の濃度でプレＲＥＰ培地に添加され得る。一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、本明細書に開示される方法の１つ以上に従い、培養培地に添加され得る。
【０９３１】
[001432]  一実施形態において、ＣＰＩ−４４４又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせは、約１０ｎＭ／１０，０００細胞、約１２ｎＭ／１０，０００細胞、約１５ｎＭ／１０，０００細胞、約２０ｎＭ／１０，０００細胞、約２５ｎＭ／１０，０００細胞、約３０ｎＭ／１０，０００細胞又は約５０ｎＭ／１０，０００細胞の濃度で拡大培養又はＲＥＰ培地に添加され得る。一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、本明細書に開示される方法の１つ以上に従い、培養培地に添加され得る。一部の実施形態において、拡大培養は、産生スケールではなく研究スケールで実行され得る。一部の実施形態において、研究スケールのＴＩＬ拡大培養は、閉鎖系でなく開放系で実行され得る。
【０９３２】
[001433]  一実施形態において、フローサイトメトリーは、色素標識抗体を使用して実施され得る。一実施形態において、以下の色素標識抗体のいずれか１つ以上が使用され得る：ＡＰＣマウス抗ヒトＡ２ａＲ；ＦＩＴＣマウス抗ヒトＣＤ７３；及びＰＥ抗マウスＣＤ３９抗体。一実施形態において、前述の段落に列挙されたタンパク質のいずれか１つ以上に対する色素標識抗体が使用され得る。一実施形態において、任意の培養ステップ、腫瘍又は腫瘍消化物から入手したＴＩＬについて、前述の段落のいずれかに記載されているタンパク質のいずれか１つの存在又は発現を確認するために、色素標識抗体を用いたフローサイトメトリーが使用され得る。
【０９３３】
[001434]  一実施形態において、プレＲＥＰ及びポストＲＥＰのＴＩＬの表現型が比較され得る。一実施形態において、プレＲＥＰ培養培地及びＲＥＰ培養物がＡ２ａＲアンタゴニストを更に含む場合のプレＲＥＰ及びポストＲＥＰのＴＩＬの表現型が比較され得る。一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストは、ＣＰＩ−４４４又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶若しくはプロドラッグ及びそれらの組み合わせである。
【０９３４】
[001435]  一実施形態において、産生された細胞の総数が測定され、ＴＩＬの表現型が決定される。ＴＩＬの表現型は、限定されないが、フローサイトメトリーなどの方法を使用して決定され得る。段落［００１３９８］〜［００１４１４］で言及されるタンパク質のいずれか１つ以上は、表現型が評価されているものの中に存在し得る。特に、Ａ２ａＲの存在又は不存在が決定され得る。一実施形態において、ＣＰＩ−４４４の存在下又は不存在下でＴＩＬによって発現されるＡ２ａＲの総量が決定され得る。一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストの漸増用量を培養培地に添加し、Ａ２ａＲ発現の総量に対する結果として生じる効果が決定され得る。一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストの漸増用量が培養培地に添加され得、限定されるものではないが、実施例６に列挙されるようなＴＩＬ表面マーカープロファイル（フローサイトメトリーによるＴ細胞の活性化、増殖及び枯渇のモニタリング）に対する結果として生じる効果が決定され得る。
【０９３５】
[001436]  一実施形態において、本明細書に開示される方法のいずれか１つ以上によって得られるＴＩＬの表現型を使用して、入手したＴＩＬにおけるＣＤ４＋Ｔ細胞、ＣＤ８＋Ｔ細胞及びメモリーサブセットＴ細胞が同定され得る。更に、一実施形態において、活性化及び／又は抑制マーカーの発現レベルが決定され得る。一実施形態において、Ｔ細胞枯渇マーカーの発現のレベルが決定され得る。
【０９３６】
[001437]  一実施形態において、当業者に公知の方法を使用して免疫遺伝子サインが決定され得る。一実施形態において、ナノストリング法を使用して、培養培地中のＡ２ａＲアンタゴニストの存在下又は不存在下で入手されるＴＩＬの免疫遺伝子サインが決定され得る。
【０９３７】
[001438]  一実施形態において、フローサイトメトリーによるホスホ−ＣＲＥＢ分析を実施して、本明細書に開示される方法のいずれか１つ以上によって入手されるＴＩＬ集団におけるアデノシンシグナル伝達が測定され得る。
【０９３８】
[001439]  一実施形態において、標的細胞殺傷評価は、本明細書に開示される方法のいずれか１つ以上によって入手されるＴＩＬの細胞溶解能力を決定するための生物発光リダイレクトアッセイによって実施され得る。一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストを含有する培地から得られるＴＩＬの標的細胞殺傷能力は、Ａ２ａＲアンタゴニストを含まない培地から得られるＴＩＬの標的細胞殺傷能力と比較され得る。
【０９３９】
[001440]  一実施形態において、対照は、本明細書に開示される方法のいずれかから得られるＴＩＬであり得、ここで、プレＲＥＰ又はＲＥＰ培養培地は、Ａ２ａＲアゴニストを更に含む。一部の実施形態において、Ｔ細胞の活性化、抑制及び枯渇マーカーの発現レベルに対するＡ２ａＲアゴニストの効果が決定され得る。一部の実施形態において、培養培地中のＡ２ａＲアゴニストのインターフェロンガンマ産生に対する効果が決定され、培養培地中のＡ２ａＲアンタゴニストのインターフェロンガンマ産生に対する効果と比較され得る。一実施形態において、Ａ２ａＲアンタゴニストを用いたＴＩＬ培養条件で実施された同じ分析が、Ａ２ａＲアゴニストを用いたＴＩＬ培養条件で実施され得る。
【０９４０】
[001441]  本発明は、その様々なバージョンを参照して相当の詳細にわたり説明されてきたが、他のバージョンも可能である。したがって、添付の特許請求の範囲の精神及び範囲は、本明細書に含まれる好ましいバージョンの説明に限定されるべきではない。
【０９４１】
[001442]  読者の注意は、本明細書と同時に提出され、本明細書と共に公衆の閲覧に供される全ての書類及び文書に向けられ、その内容又は全てのそのような書面及び文書は、参照により本明細書に組み込まれる。本明細書に開示されている全ての特徴（添付の特許請求の範囲、要約及び図面をいずれも含む）は、特に明記されていない限り、同じ、同等又は同様の目的に役立つ代替的な特徴に置換され得る。したがって、特に明記しない限り、開示される各特徴は、同等又は類似の特徴の一般的なシリーズのほんの一例にすぎない。
【実施例】
【０９４２】
実施例
[001443]  本明細書に包含される実施形態は、以下の実施例を参照して説明される。これらの実施例は説明のみを目的として提供され、本明細書に包含される開示は、決してこれらの実施例に限定されると解釈されるべきではなく、むしろ本明細書に提供される教示の結果として明らかになるあらゆる変形を包含すると解釈されるべきである。
【０９４３】
実施例１  −  ＴＩＬを増殖し、増殖したＴＩＬを用いて癌を処置する方法
[001444]  ＴＩＬは、当技術分野において公知の方法及び本明細書に記載の任意の方法を用いて拡大培養することができる。例えば、ＴＩＬを拡大培養する方法を図１に示す。本明細書に記載されているように、ＴＮＦＲＳＦアゴニストを図１の方法に加え得る。ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、例えば、４−１ＢＢ又はＯＸ４０アゴニストであり得、ＴＩＬ増殖を促進するのに十分な濃度でプレＲＥＰ若しくはＲＥＰ段階中又は両方の段階中に添加され得る。ＴＩＬの拡大培養は、本明細書に記載の患者においてＴＮＦＲＳＦアゴニストと併用で癌を処置する任意の方法と更に組み合わされ得る。ＴＩＬを拡大培養するための及び拡大培養したＴＩＬで癌患者を処置するための方法を図２に示す。
【０９４４】
実施例２  −  ウトミルマブ又はウレルマブ及び１１Ｄ４／１８Ｄ８を使用してエクスビボで培養された固形腫瘍断片（複数の組織像）からＴＩＬを拡大培養する方法並びに４−１ＢＢ及び／又はＯＸ４０に対する抗体による活性化がＴＩＬの拡大培養及び機能に及ぼす影響
[001445]  ＴＩＬは、主に抗原経験（非ナイーブ）Ｔ細胞であり、免疫抑制微小環境に関連する全ての成人腫瘍で程度の差が見られるが、ＣＴＬＡ−４及びＰＤ−１を含む誘導チェックポイント受容体と同様に、損傷に関連する分子パターン分子（ＤＡＭＰ）の局所的蓄積が頻繁に関与している。Chacon, et al.,Clin.Cancer Res.2015,21,611-21;Joseph, et al.,Clin.Cancer Res.2011,17,4882-91。これらのマーカーは、ＴＩＭ３、ＬＡＧ３及びＴＩＧＩＴと同様に、消耗した表現型を定義する。このように、ＴＩＬ発現共刺激受容体は、ＴＩＬの運命及び拡大培養を修正する。ＴＩＬ上の４−１ＢＢ及びＯＸ４０の活性化により、ＩＬ−２単独で達成可能なもの以上に、腫瘍断片からのＴＩＬを拡大培養することができる。他の共刺激受容体の活性化及び／又はチェックポイント受容体の拮抗作用は、ＴＩＬ機能（生存、腫瘍免疫抑制の回避）、腫瘍断片からの遊出を更に増強し、インビトロ拡大培養を促進する。更に、これらのインビトロ研究では、これらの抗体を単独又はＴＩＬの養子移入と併用してインビトロで適用した場合の応答性を予測し得る。これらの２つの活性化共刺激分子（例えば、ＯＸ４０、１１Ｄ４又は１８Ｄ８及び４−１ＢＢ、ウトミルマブ又はウレルマブ）に特異的な免疫調節ｍＡｂは、そのような能力について試験できる。腫瘍断片内の共刺激受容体、４−１ＢＢ及びＯＸ４０の活性化は、腫瘍断片からのＴＩＬ遊出、増殖、メモリー表現型の促進及び創発Ｔ細胞の細胞傷害性を増強すると仮定される。この研究の主な目的は、（ａ）４−１ＢＢ及びＯＸ４０の組み合わせ又は（ｂ）抗４−１ＢＢ及び（ｃ）抗ＯＸ４０単独について特異的なｍＡｂが腫瘍断片からのＴＩＬの細胞毒性及びメモリー表現型の増殖を増加させるかどうかを判断することである。
【０９４５】
[001446]  （ａ）ＯＸ４０及び（ｂ）４−１ＢＢに特異的な各精製ｍＡｂ  １５ｍｇを使用する。様々な組織像の腫瘍は、市販の供給源から入手し得る。合計２０個の独立した患者の腫瘍を得る。腫瘍は、無菌ＨＢＳＳ又は別の適切な培地で出荷される。腫瘍は、無菌状態を維持するために層流フード内でのみ処理される。可能であれば（腫瘍の直径が０．５ｃｍを超える場合）、腫瘍の一部をＦＦＰＥのために処理し、及び／又は下流のＩＨＣ及び／又はＤＮＡ／ＲＮＡ分離のために凍結保存する。ＩＨＣによるバイオマーカー分析には、ＣＤ３、ＣＤ１１ｃ及びＰＤ１並びにＰＤ−Ｌ１が含まれる。可能な限り、自己血液サンプル（最大２０ｍＬ）を取得し、ＰＢＭＣを凍結保存する。全エクソーム配列決定が腫瘍について実行される場合、バンクされた自己ＰＢＭＣからのエクソーム配列決定は正常（即ち変異なし）として定義される。代わりに、腫瘍単細胞懸濁液を利用し得る。腫瘍は受領後に洗浄され、２〜３ｍｍの断片に分割し、６，０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２（組換え）単独、ＯＸ４０アゴニスト、抗４−１ＢＢアゴニスト及びＯＸ４０及び４−１ＢＢアゴニストの組み合わせで補充した培養培地を用い、２４ウェルプレート（１ウェルについて１断片）又は６ウェルプレート（１ウェルについて４断片）に３回反復して細胞培養に入れた。十分な腫瘍が利用できるいくつかの実験では、ＩＬ−２の滴定（６，０００、６００、６０及び０ＩＵのＩＬ−２）が試験される。ＩＬ−２のために賦形剤対照が使用される。各ｍＡｂの最終濃度は３０μｇ／ｍＬである。２４〜４８時間の培養後、２５０μＬの上清が各条件から収集され、その後のサイトカイン及びケモカイン濃度の分析のために−２０℃で保管される（ｐｇ／１０６細胞／２４時間）。ＴＩＬは、各条件から１１日目、２１日目及び／又は「プレＲＥＰ」の日に収集される（１サンプルあたり少なくとも５００，０００細胞）。ＴＩＬの２つのアリコートをペレット化し、１０μＬ未満のＰＢＳに再懸濁し、−８０℃で凍結する。収集される細胞が１０６未満の場合、遺伝子発現アレイのみが実行される。７日目に、「使用済み」培鳥銂菩蚈髧ꮁ駩뮎臣膀귧辇臣릟ꓩ릟鳥ꮁ볯邼볯邼볯떼볯趽臣ꦼ볯銈볯銂諥袁臣릟ꓩꦉ臣蒠ꓩ銂룤袁苣芀뷤ꢔ룦뾁鿥난臣膀菣ꮃ菣鞃菣莃苣릂苣莃苣ꒂ볯设臣낁胣ꮃ菣趃菣꾂苣醼볯邼苣릂菣ꂃ볯銂뷤ꢔ臣龁臣꺁뻥꺁苣ꒂ菣ꮂ苣뎃볯놂菣ꮂ苣뎃裥邞臣龁苣ꮁ裢銼볯莄臣鶿껧閁苣讂胣龮꣩ꆝ믤꺁볯麛苣薶臣讂迥ꦾ苣讖꟥馁苣꺁臣膍裥ꪁ藨趘雦螉臣ꦈ铧꾏菨ꪁꃥ袐胣鞼韦꺛臣붿諥꺁뷯ꆼ뷯銂鿥誤觧ꮁ뿨ꂊ臣讂胣뒼볯겼鿥誤觧꾁胣뒛臣醼볯ꖗ雩궶賦閁苣讂胣銼볯ꖗ鯧ꮁ胣閃菣벃苣ꒂ菣ꆃ菣ꪃ菣銂뷤ꢔ臣ꚁ胣辷듧麃迥辇胣龔귥螎胣내菨ꢡ鷩誏臣내菨薆藥ꮖꇨ뺏黥銂뇦骮臣讂胣ꖻ룤꺁菣벃苣벃臣ꮐ臣貂苣骼볯꒼볯閼볯ꆼ胣ꎼ볯늼볯膀볯꒼볯膀볯ꎼ볯銈苣ꮃ菣ꆂ볯馃菣뾂胣ꎼ볯钼胣ꎼ볯颼胣ꎼ볯ꎼ볯鎼胣ꎼ볯閼볯膀볯꒼볯鞼胣ꎼ볯銼볯膀볯꒼裢醼胣낼볯銈볯醼胣ꊼ볯겼볯膀볯겼볯Ꞽ볯膀볯꒼볯鎼볯膀볯꒼볯鎼볯膀볯꒼볯鎼胣ꎼ볯閼볯膀볯꒼볯閼胣ꎼ볯醼볯鞼胣뒼볯궼裢鎼胣겼볯Ꞽ裢鎼胣뒼볯Ꞽ볯뒼胣늼볯Ꞽ볯誏臣ꮼ뷯隼볯芀볯꒼볯邼볯膽胣꺼볯Ꞽ볯꒼胣ꮼ볯늼볯膀苣ꊃ苣ꒂ菣뮭迥릮뷤袼볯膽뷯膀볯늼볯覼迥뎁諦ꊂ菣袃菣랂苣込菣궃苣벃菣閃苣뢂菣뾂菣醃苣ꪳ볯ꊼ볯겼裢銼胣ꊼ볯겼裢뢼볯膀볯覽뷯膀볯꒼볯邼볯誏臣겼볯鎼볯ꢼ볯Ꞽ볯醼볯銂郥肂믤꺁菣ꒂ苣麃菣ꮂ菣节胣膍裥ꪁ듧麃臣ꦈ铧꾏菨ꞁ臣貂臣閩뻤閁苣讂胣내菨랂껥Ꞁ迥뎁裥ꆾ胦뒼듧麃臣내菨薆菣벃苣벃胣䞁慲穮浹⁥膀뷯뎼볯ꆼ볯鎼胣邽볯뒼볯뒼볯誏臣ꚼ볯뢼볯鎼臣鶁苣麁苣閩뻤閁苣讂胣뒼볯겼臣뚺꟨릊諥銂胣뚺꟨ꊂ菣뮂苣銂铧蒁臣몱껥馁苣芀뿨ꂊ臣ꮅ飧邝雦貁裥ꢔ迥붃臣膀볯膽볯떅듧袶賥貾臣龔裦閁苣龁藨趘듧麃蟦膿뛦膀볯芽볯趉뿨꺁藨趘臣覂铧邈臣貂臣ꪇ럥ꮅ飧ꪠ胣誏臣込迥꾁볯莽볯뢛郥내菨ꪠ볯ꦈ铧꾏菨ꪁꃥ袐볯貁鯥躏臣貂臣뒼볯겼臣놅鿥誤臣貂胣뺔蟥閁苣龁볯ꚼ볯銈돎苣겸껥馁苣芀臩낉臣내菨銂藥讉臣龁ꃥ袐胣鎁苣覂臣膀详떼뫤鞮苣뾽铧鞁臣膀뻥ꞁ껥財臣趁苣몁볤邭駧뺏裥邞볯뒼볯늼볯캶꾂菣벃菣뾂苣钃菣낂裥邞苣ꮐ苣覼臣ꒁ臣ꚁ볯꺼볯誏臣꒼볯ꆼ苣蚈鯩馁苣龁苣趇뗧鶿귥閁苣讂胣鞊볯꒼볯銈볯誏臣鞊볯뒼볯ꆼ裢钼迥꾁臣貂苣꺁뗧뾁郥辂臣ꞁ鳦릊胦袼믤许臣骮뻧覼臣뎦꿥閁苣龁ꃥ袐胣ꮅ飧궖觧릟ꓩꦉ룤꺁賦몤臣貂臣趽볯芽臣莿뫥銂룤銁苣讁胣袏臣袂苣뎩듧ꪁ铧辇迥鲿ꧨꆾ苣財臣꾏菨Ꞁ苣鲤꣨馁苣芀鿥誤볯ꖗ鯧ꮁ藨趘雦螉臣讦苣貂苣뒠郥膀臣貂苣銂鯥躏臣膀跥내菨뢇뿦늶臣龔裦貾臣膍裥ꪁ듧麃臣ꦈ铧꾏菨ꞁ臣讂ꃥ袐胣鶁苣覂臣몁볤邭裥邞迥뎁菣궃菣떂苣袃菣袃菣벃ꇨ뺏黥蚈黦꺁꿥ꆱ臣ꪁ苣袼臣꺁蓥袅ꃩ趽臣膀뫤覸臣貂苣覼胣ꦁ裥ꪁ鯨覅뷯ꆼ뷯醃菣ꮃ苣뾽铧鞁臣鎟觨鞁臣貾胣閃菣벃苣ꒂ菣ꆃ菣ꪃ菣蚈黦꾁胣뒼듧麃胣릨諧내菨膀菣꾂菣閃苣벃苣膀볯내菨誏臣꺼볯내菨꺁ꇨ뺏黥ꮁ蓧릂苣鎽臣讂胣鎁臣麃菣ꮂ菣꾁胣ꎼ볯醼볯莽胣ꎼ볯醼볯芽胣ꢼ볯ꆼ뷯貽뷯鎽뷯ꦼ볯膀볯꒼볯邼胣ꎼ볯颼볯膀볯꒼볯鎼胣ꎼ볯閼볯膀볯꒼볯隼迥뎁볯꒼볯邼苣ꮐ苣芀㰊䥄㹖胣邼볯钼볯醀⼼䥄㹖 嬠〰㐱㜴⁝钼裢醼볯ꊼ苣뒂菣릂菣膀볯뢼볯邼苣뒂菣릂菣誏臣鶁苣覂臣蒵臣袐苣鮁臣ꮅ飧궖觧릟ꓩꦉ臣꺁럦ꂊ臣覜諥Ꞁ苣閩뻤馁苣龁苣ꮁ뷤ꢔ臣貂臣몟뫦꾁胣ꖻ룤꺁苣蚁臣膦듧閁苣讂볯㲚牢ਾ菣ꆋꓥ릟ꓩ貾臣뒼볯겼闦꺁ꋥꂊ볯ꎼ볯钼迥뎁볯袏臣ꎼ볯颼볯㲉牢ਾ菣ꆋꓥ릟ꓩ貾臣뒼뷯薽뷯낕臣鮸냥㲑牢ਾ菣ꢂ菣Ꞃ苣뾂菣誏臣뒼뷯薽뷯ꮁ臣醁苣뒼듧麃ꋥ隮菣벃苣벃볯ꮼ뷯隼볯覼臣覤賥㲖牢ਾ菣ꢂ菣Ꞃ苣뾂菣込菣ꊃ菣벃볯蚈賥鞁臣ꢡ迧讞臣覤賥膀볯꒼볯鞼胣ꎼ볯銼볯膀볯꒼볯鞼胣ꎼ볯钼볯늼볯膀볯겼볯銈볯늼胣ꎼ볯늼볯膀볯뢼볯邼胣ꦼ볯꾼볯膀볯꒼볯閼볯ꆼ볯蚃菣ꆃ菣벃苣랕볯覼戼㹲뮃ꋥꂊ臣龁볯ꮼ듧麃볯ꎼ볯鎼猼灵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰銈⼼畳㹰볯ꎼ볯閼볯㲖畳⁰浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢볯㲋猯灵覼闦膀ꋥ隮迥뎁듦Ꞁ賥뚊藦㲋牢ਾ菣뒼듧麃臣誁臣讂듧麃蛥랂苣誃菣鶼臩뾂菣醃苣ꪳ迥꾁菣뎃藩隌苣뎃菣꾂돨것菣ꮃ볯设臣낁胣ꆼ볯뒼꿥ꖼ볯ꮼ볯꺁軦ꊴ髧覤賥㲖牢ਾ菣ꪃ菣ꒂ菣꾂菣뚺꟨ꊂ菣뮂苣ꮁ苣誂룦骮臣貂臣䎟䱔듦Ꞁ볯뚺꟨붃臣鞢諥㲠牢ਾ菣뒼볯겼볯ꮅ飧뚺꟨ꦉ胣뒼볯겼볯ꪇ럥ꮅ飧誏臣込迥꾁볯ꦼ볯込鯧貐藨趘藥릟ꓩꦉ臣誁臣讂볯ꚼ볯銈돎볯ꢼ볯Ꞽ볯醼铧龔臣鞢諥芀㰊䥄㹖胣邼볯钼볯醀⼼䥄㹖 嬠〰㐱㠴⁝龮ꇨ閁苣龁뿨ꂊ臣龮꣩꾁믤许臣ꮐ臣貂苣袼볯覼ꓥ낕臩鶼귥誏臣꾏菨ꪁ菣ꪂ苣钃菣벃菣銂郥骮臣讂臣膂臣ꚼ볯낼볯袏臣낖껩趇뗧ꮅ飧邝雦銂铧蒁臣ꢅ苣꾂苣벃菣超裥몱껥誏臣늼볯ꆼ볯薽뷯膀볯銼볯ꮅ飧궖觧릟ꓩ讖꟥銼볯鲀볯颼駦鎖뻥ꮁ鯥躏臣貂臣릟ꓩ誸룦꺁苣ꒂ菣ꮂ苣뎃迥뎁苣ꊃ苣ꒂ菣蚈黦膀볯鎼볯鞼韦꺛臣鶈鳦릟ꓩ讁苣随苣몇臣龁藨趘雦螉臣몁볤邭駧뺏裥邞胣袼볯覼菣ꒂ苣ꮃ菣鞃菣袃볯ꎼ볯₲뚼닎†볯꒼볯鎼ꃩ龟藩鞈뇦骮苣뾽铧鞁臣蚈鯩閁苣龁볯ꦼ볯꺁볯ꎼ볯꾂菣벃菣뾂苣鞃裥邞胣袼볯覼蟨놷볯뢛郥ꮅ飧ꮁ꿥馁苣낼볯銈볯醼臣誸雦뚈뻥銂ꫨ몙臣讂볯ꚼ볯銈돎臣颭鳥许臣꺁볯ꦼ볯ꢂ菣Ꞃ苣뾂菣龩菨ꮁ臣蒁臣邃菣꾂臣貂臣뒼볯겼臣뺯臣讂뷯ꆼ뷯꺁뷥뾟볯许꣨ꮁꛦ겪볯誏臣낼볯늼볯ꦼ볯ꎼ볯肃苣뢂苣릂菣ꮁ苣讂껦颭볯내菨꺁껦誂臣궖觧꺁裥邞胣ં䐼噉邀볯馼볯颼胣㲑䐯噉ਾ†せ㄰㐴崹†苣莃苣ꒂ菣ꦃ菣벃苣벃臣뢛臩꾁胣뺯뿥꺁臣讂볯鲤껥ꢁ꿥鲿臣ꪁ臣뒼ꓦ骮볯Ꚃ苣ꮃ苣꾂苣뎃ꃩ趽鋥鲤껥誏臣ꚬ迥颻ꃩ趽ꓦ骮볯銂뷤ꢔ臣ꚁ胣覜蓦Ꞁ臣ꒁ臣ꚁꓦ骮臣貂苣芀ꓨ낕臣醃菣ꆃ菣뾂菣꺁꿦莼臣꾁胣肸藥超뷧誏臣貺藥超뷧꺁裥ꎕ裥邞苣뾽铧馁苣芀苣钃苣麃菣麛룥蚈黦꾁胣ꎀ뛧겸껥鎖臣뢛雩銂ꧨꆾ臣讂臣膂臣ꦁ铧꾏菨ꪁꃥ袐臣뾽铧閁苣讂胣ꢅ臣꺁菣벃苣銂鯩袨臣蚈黦ꞁ臣讂胣ં䐼噉邀볯馼볯馼胣㲑䐯噉ਾ껥붖뻤鎼†裢ₒ뒼볯겼臣钼裢醼볯ꊼ胣꾼볯钼볯誏臣隻臣뒼볯ꚼ볯뎼볯ꆃ菣邃菣뢁臣궅蟩鎽菣겂菣覃苣뾽铧鞁臣ꆋꓥ릟ꓩ㲊牢ਾ†せ㄰㔴崰†볯銈볯ꊼ볯膀볯뢼볯邼胣ꎼ볯銼볯誏臣隻臣뒼볯ꚼ볯뎼볯ꆃ菣邃菣뢁臣邵郥覃菣ꒂ菣銂鳦馁苣讧胩ꦼ裢ꆼ臣궅蟩鎽黨袐苣뎃菣꾂돨ꮁ苣讂듦Ꞁ賥貁苣꾂苣鎃菣릟ꓩ몛뷥ꮅ飧궖觧袼ꓨ낕臣蒵맧较볯讁苣꺁藨趘뗦꒽菣뎃菣莐볯뒼볯겼볯꺁ꋥ隮臣龩菨ꮁ꿥馁苣놽鿩銂臣꺁껥붖뻤ꞁꓦ躨臣讂胣蒐藥辇뷤趞郥뾂菣醃苣ꪳ볯设臣낁胣钼裢醼볯ꊼ胣꾼볯钼볯誏臣ꎼ볯銼볯覼볯邼볯趽뷯꾁胣ꆬ臣袂臣ꪁ臩鲿韧骼苨ꮅ胣邵藨뒛藨貙胣ꖀ胦ꢪꯩꞀ駧股韧膀跥ꎷ駧膀菣ꪃ菣ꮃ菣겂菣ꎂ菣뎹駧膀蛨鎇볯늼뷯鎽駧뺏볯膀藨鎇駧誏臣肆菨貙臣覂藥讉臣龁藨趘臣뾽铧閁苣讂臣芁苣蚁胣颧胣ꪁ뗧钹菥꺁藨趘臣膀룥ꦲ臣鮾뗧邺臣覂藥讉臣讂胣蒴볯邼臣겋ꯧ鞁臣ꎂ胨꺁藨趘臣鞾苣貂苣袼룤風臣袂臣ꮁ胣ꦁ뿥钁臣ꮁ볯鲀볯ꮅ飧覼胣ꮅ飧꾁胣ꆄ迨ꢼ볯뎼볯袏臣ꖈ臣ꦁ臣龁鿥난臣ꦃ苣ꪂ菣袼楌湯볯ꮁ蟥랍臣貂苣芀藨趘臣膀蓧貏諧讅苣궶賦馁苣龁苣ꮁ뇥膵菣벃菣薆臣꺁臣ꚇ郧閁苣讂胣ꎻ苣誂臣膀藨趘跥내菨뢇뿦늶苣ꦈ铧鞁뻥讂胣ꮅ飧꾁迥颠뻥ꮁ듦蒵臣貂胣銼胣鎼뷯趽볯랕臣쎕薹韃ꯩ閁볯꺁雦螉臣蚈觥鞁胣隼볯邼볯邼볯떼볯趽볯꺁볯겼볯袼뗧鮏臣覼跥겋苣鲣藥鞁臣릟ꓩ릟鳥銂볯钼苣Ꞃ菣鞃菣벃菣袼볯Ꚃ苣ꮃ臣ꒁ臣ꚁ볯궖觧覼迥꾁볯Ꚃ苣ꮃ菣것菣袃볯醼苣Ꞃ菣ꮁ臣蒁臣钼雦螉볯ꮁ듧麃鿥誤臣ꖅ苣膀볯銈볯ꊼ볯₢ꢼ볯늼볯颍诧꺁뗧뾁郥辂臣銂볯麛ꇨ蚁臣ꢁ臣뺯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