(57)【要約】【課題】  【解決手段】  本発明では生物学的活性のある多置換ベンゼン化合物及びその調製方法と応用を開示する。本発明の化合物は良好な生物学的活性及び腫瘍細胞の増殖を抑制するための活性があり、リード化合物として新規薬の開発に用いられることができ、胃がん、卵巣がん、肺がんまたは前立腺がんを治療するための薬を含む抗腫瘍薬の調製に用いられる。本発明の合成方法は原材料の源が広く、取り扱いやすく、ルートが短く、反応条件が温和であり、コストが安く、産業化上の潜在的価値がある。【特許請求の範囲】
【請求項１】
構成式が下記の式Iまたは式I’に示すことを特徴とする生物学的活性のある多置換ベンゼン化合物
2021513526.tif 000096
式の中、
Xは炭素、硫黄または酸素、
R1はC1-16アルキル、C2-16アルケニルまたはC2-10アルキニル、
R2は水素、ハロゲン、C1-16アルキル、C2-16アルケニルまたはC2-10アルキニル、またはハロゲン、C1-26アルキル、ハロゲン化C1-3アルキル、O-C1-3アルキル、ヒドロキシ、アミノ、ニトロ、シアノ、アルデヒド及びエステル基の中のグループの0〜5個に置換されたアリール、またはハロゲン、C1-26アルキル、ハロゲン化C1-3アルキル、O-C1-3アルキル、ヒドロキシ、アミノ、ニトロ、シアノ、アルデヒド及びエステル基の中のグループの0〜5個に置換されたヘテロアリールである。
前記のヘテロアリールはN、S及びOの中のヘテロ原子の1〜3種を含む3〜10メタヘテロアリールである。
R3はC1-6アルデヒド基、C2-6アシル、-COOHまたはヒドロキシルに置換されたC1-6アルキル、-CH2O-C1-6アルキルまたは-CO2-C1-6アルキル、
R4とR7は共に独立して水素、C1-20アルキル、C2-36アルケニルまたはC2-10アルキニルから選出されたもの、またはハロゲン、ハロゲン化C1-3アルキル、O-C1-3アルキル、C1-25アルキル、ヒドロキシ、アミノ、ニトロ、シアノ、アルデヒド及びエステル基の中のグループの0〜5個に置換されたアリール、
R5とR6は共に独立してから選出されたものである水素、C1-6アルキルまたはC1-6シリコンベースである。
構成式Iの中の破線はR4がXとC含む他の原子により連結し、またはR4がXと連結しないことを表す。
構成式I’で、XとC1の間の破線はXとC1の間に単結合または二重結合が形成すること、R4とXの間の破線はR4がXとC含む他の原子により連結し、またはR4がXと連結しないことを表す。
【請求項２】
下記のことを特徴とする請求項1に記載の生物学的活性のある多置換ベンゼン化合物
式の中、
Xは炭素、硫黄または酸素、
R1はC1-4アルキル、C2-4アルケニルまたはC3-7アルキニル、
R2は水素、ハロゲン、C1-4アルキル、C2-4アルケニルまたはC3-7アルキニル、またはハロゲン、C1-26アルキル、ハロゲン化C1-3アルキル、O-C1-3アルキル、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アルデヒド基及びエステルグループの中のグループの0〜5個に置換されたアリール、またはハロゲン、C1-6アルキル、ハロゲン化C1-3アルキル、O-C1-3アルキル、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アルデヒド基及びエステルグループの中のグループの0〜5個に置換されたヘテロアリール、
R3はC1-6アルデヒド基、C2-6アシル、-COOHまたはヒドロキシルに置換されたC1-4アルキル、-CH2O-C1-4アルキルまたは-CO2-C1-6アルキル、
R4とR7は共に独立して水素、C1-20アルキル、C2-36アルケニルまたはC2-10アルキニルから選出されたもの、またはハロゲン、ハロゲン化C1-3アルキル、O-C1-3アルキル、C1-25アルキル、ヒドロキシ、アミノ、ニトロ、シアノ、アルデヒド及びエステル基の中のグループの0〜5個に置換されたアリール、
R5とR6は望ましくは水素またはC1-4アルキルから選出されたものである。
【請求項３】
下記のことを特徴とする請求項1に記載の生物学的活性のある多置換ベンゼン化合物
式の中、
Xは炭素、硫黄または酸素、
R1はC1-3アルキル、アクリルまたはC3-4アルキニル、
R2は水素、ハロゲン、C1-4アルキル、アクリルまたはC3-7アルキニル、またはハロゲン、メチル、メトキシ、C2-26アルキル、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アルデヒド基及びエステルグループの中のグループの0〜5個に置換されたアリール、またはハロゲン、C1-6アルキル、ハロゲン化C1-3アルキル、O-C1-3アルキル、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アルデヒド基及びエステルグループの中の0〜5個に置換されたヘテロアリールである。
前記のヘテロアリールはN、S及びOの中のヘテロ原子の1〜3種を含む5〜6メタヘテロアリールである。
R3はC1-3アルデヒド基、C2-4アシル、-COOHまたはヒドロキシルに置換されたC1-4アルキル、-CH2O-C1-4アルキルまたは-CO2-C1-4アルキル、
R4とR7は共に独立して水素、C1-17アルキル、C2-36アルケニル、C2-10アルキニルから選出されたもの、またはハロゲン、メトキシ、C1-25アルキル、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アルデヒド基及びエステルグループの中のグループの0〜5個に置換されたアリール、
R5とR6は共に独立して水素またはメチルから選出されたものである。
【請求項４】
下記のことを特徴とする請求項1に記載の生物学的活性のある多置換ベンゼン化合物
式の中、
Xは炭素、硫黄または酸素、
R1はC1-3アルキル、アクリルまたはC3-4アルキニル、
R2は水素、ハロゲン、C1-4アルキル、アクリルまたはC3-7アルキニル、またはハロゲン、メチル、メトキシ、C2-26アルキル、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アルデヒド基及びエステルグループの中のグループの0〜5個に置換されたアリール、
R3はC1-3アルデヒド基、アセチル、-COOHまたはヒドロキシルに置換されたC1-4アルキル、-CH2O-C1-4アルキルまたは-CO2-C1-4アルキル、
R4とR7は共に独立して水素、C1-17アルキル、C2-36アルケニルまたはC2-10アルキニルから選出されたもの、またはハロゲン、メトキシ、C1-25アルキル、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アルデヒド基及びエステルグループの中のグループの0〜5個に置換されたアリール、
R5とR6は共に独立して水素またはメチルから選出されたものである。
【請求項５】
下記のことを特徴とする請求項1に記載の生物学的活性のある多置換ベンゼン化合物
式の中、
Xは炭素、硫黄または酸素、
R1はC1-3アルキル、アクリルまたはC3-4アルキニル、
R2は水素、ハロゲン、C1-4アルキル、アクリルまたはC3-7アルキニル、またはハロゲン、メチル、メトキシ、C2-26アルキル、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アルデヒド基及びエステルグループの中のグループの0〜5個に置換されたアリール、またはハロゲン、C1-6アルキル、ハロゲン化C1-3アルキル、O-C1-3アルキル、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アルデヒド基及びエステルグループの中のグループの0〜5個に置換されたヘテロアリールである。
前記のヘテロアリールはS及びOの中のヘテロ原子の1〜3種を含む5〜6メタヘテロアリールである。
R3はホルムアルデヒドベース、アセチル、-COOHまたはヒドロキシルに置換されたC1-2アルキル、-CH2O-C1-2アルキルまたは-CO2-C1-4アルキル、
R4とR7は共に独立して水素、C1-17アルキル、C2-36アルケニルまたはC2-10アルキニルから選出されたもの、またはハロゲン、メトキシ、C1-25アルキル、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アルデヒド基及びエステルグループの中のグループの0〜5個に置換されたアリール、
R5とR6は共に独立して水素またはメチルから選出されたものである。
【請求項６】
下記のことを特徴とする請求項1に記載の生物学的活性のある多置換ベンゼン化合物
2021513526.tif 000097
2021513526.tif 000098
2021513526.tif 000099
2021513526.tif 000100
【請求項７】
合成のルートが下記に示すことを特徴とする請求項1〜6いずれかに記載の生物学的活性のある多置換ベンゼン化合物の調製方法
2021513526.tif 000101
その中、
Yはハロゲン、R8は水素またはC1-6アルキルである。
Xが炭素である場合、化合物IIはアルキルオレフィン、アリールオレフィン、アロマティクス、置換されたアロマティクス、ヘテロ芳香族またはに置換されたヘテロ芳香族であり、スチレン、アルキルに置換されたスチレン、ハロゲンに置換されたスチレン、ジフェニルエチレン、ナフタレン、1-フェニル-1,3-ブタジエン、ベンゼン、ナフタレン、トルエン、エチルベンゼン、アニソール、フェネチルエーテル、2,4,6-トリメトキシベンゼン、1,2,4-トリメトキシベンゼン、1,5-ジメトキシナフタレン、フラン、ピラン、チオフェン、エストロンの派生によるオレフィンまたはコレステロールの派生によるオレフィンを含む。
Xが硫黄である場合、化合物IIはチオール化合物であり、メチルメルカプタン、エタンチオール、イソアミルメルカプタンまたはベンジルメルカプタンを含む。
Xが酸素である場合、化合物IIはアルコール化合物であり、メタノール、エタノール、イソプロパノール、ブタノール、アリルアルコール、プロパルギルアルコール、イソアミルアルコール、ベンジルアルコール、置換されたベンジルアルコール、2-臭素-2-プロペン-1-オール、1-ビニール-フェネチルアルコール、ゲラニオールまたはデヒドロエピアンドロステロンを含む。
具体的な合成過程は下記のステップを含む。
（１）化合物VII、アルカリの1〜5当量及び化合物VIの1〜3当量を有機溶剤に入れ、30〜180℃までに加熱して攪拌して5〜24時間に反応させるようにしてからろ過し、溶剤を蒸し除き、分離と精製により中間体Vを取得する。
（２）化合物Vを化合物IVの1〜3当量、ヨウ化第一銅の5%当量、ジトリフェニルホスフィンパラジウムジクロリドの30%当量及びヨウ化ナトリウムの0.5当量と有機溶剤に混合し、室温で5〜24時間に攪拌してカップリングにより中間体IIIを取得する。
（３）中間体Vまたは中間体IIIを化合物IIと有機溶剤に混合し、80〜180℃までに加熱して5〜24時間に反応するようにしてから溶剤を蒸し除き、分離と精製により化合物IまたはI’を取得する。
【請求項８】
下記のことを特徴とする請求項7に記載の調製方法
前記のアルカリは共に水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸カルシウム、重炭酸ナトリウム、重炭酸カリウム、ナトリウムtert-ブトキシド、カリウムtert-ブトキシド、リン酸カリウム、リン酸水素カリウム、炭酸セシウム、炭酸リチウム、ピリジン、トリエチルアミン、トリブチルアミンから選出された一種以上のものである。
前記の有機溶剤は共にメタノール、エタノール、イソプロパノール、テトラヒドロフラン、1,4-ジオキサン、酢酸エチル、シクロヘキサン、トルエン、キシレン、エチルベンゼン、クロロベンゼン、マロドロベンゼン、ジクロロメタン、ジクロロエタン、クロロホルム、四塩化炭素、アセトニトリル、アセトン、N、N-ジメチルアセトアミド、N、N-ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド及び水から選出された一種以上のものである。
【請求項９】
請求項1〜6いずれかに記載の抗腫瘍薬の調製に用いられ、生物学的活性のある多置換ベンゼン化合物。
【請求項１０】
請求項1〜6いずれかに記載の胃がん、卵巣がん、肺がんまたは前立腺がんを治療するための薬の調製に用いられ、生物学的活性のある多置換ベンゼン化合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は薬化学分野、具体的に生物学的活性のある多置換ベンゼン化合物及びその調製方法と応用に関わる。
【背景技術】
【０００２】
腫瘍は人間及び他の哺乳類の最も主要な死亡原因の一であり、細胞増殖が正常な細胞増殖に制御されないことを特徴とする。中国で、抗腫瘍薬の生産と開発で大きな進歩を遂げたが、製品がはるかに臨床上の日増しに成長する需要に満たすことができなく、輸入に依頼するものが多いので、抗腫瘍薬の開発と生産に関する市場上の潜在力が依然として巨大である。従来の化学療法薬は臨床上で治療効果が顕著であるが、特異性が低く、選択性が弱く、顕著な毒性と副作用につながり、重大な腫瘍多剤耐性が生じやすく、臨床上の応用が制限されているので、ずっと以来、安全、有効な抗腫瘍薬が医薬業界が追求する目標となっている。
【０００３】
ベンゼン環は有機化学で最も重要な構成ユニットの一であり、取り替えられる水素原子の6つがあるので、ベンゼンが医薬、農薬、プラスチック及び有機電子デバイス分野で多くの派生物を有する。それと同時に、多くの天然活性化合物の基本骨格及び多くの薬理活性を有する複素環式化合物のシントンとして、ベンゼン環は薬化学で重要な役割も果たすものである。
【０００４】
普通、多置換ベンゼン化合物は強い生物学的活性があり、その生物学的活性が抗真菌活性、抗炎症活性、抗腫瘍活性、抗酸化活性、抗リウマチ活性及び抗血小板活性などを含む。例えば、ケルセチンは顕著にがんプロモーターを抑制する作用があり、インビトロでの悪性細胞の生長及びエールリッヒ腹水腫瘍細胞DNA、RNA及びたんぱく質の合成を抑制できる。また、ヘマトミック酸メチルエステルは顕著にXWLC-05、HepG2及びMCF-7細胞の増殖を抑制する作用がある。
【０００５】
従来、多置換ベンゼン化合物の合成方法は主に求電子置換 (フリーデル・クラフツアルキル化及びフーリエアシル化など)、求核置換及びカップリング反応を含む置換反応である。前記の方法は厳しい反応条件、高価な試薬または環境に有害な金属触媒が必要である上、プロセスが煩雑であり、反応領域に高い選択性がない。
【０００６】
よって、薬調製用多置換ベンゼン環化合物のシリーズを開発、合成したり、調製方法を簡単にしたりして、大規模で抗腫瘍などの薬調製用多置換ベンゼン環化合物を取得することは重要な意義がある。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は従来の技術の不足に応じて生物学的活性のある多置換ベンゼン化合物を提供することを目的にする。この化合物は腫瘍細胞増殖活性を抑制する作用があり、抗腫瘍薬の調製に用いられることができる。
【０００８】
本発明は前記の生物学的活性のある多置換ベンゼン化合物の調製方法を提供することも目的にする。この調製方法は原材料の源が広く、取り扱いやすく、ルートが短く、反応条件が温和であり、コストが安く、産業化上の潜在的価値がある。
【０００９】
本発明は前記の生物学的活性のある多置換ベンゼン化合物の応用を提供することも目的にする。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明の目的は下記のソリューションで達成する。
【００１１】
下記の式Iまたは式I’に示す化学構成式がある生物学的活性のある多置換ベンゼン化合物。
2021513526.tif 000002
【００１２】
構成式IはR4、R7、X及びそれらを連結する炭素原子がベンゼン環と環となり、ベンゾ環状化合物を構成することを表す。
【００１３】
構成式I’はR4、R7、X及びそれらを連結する炭素原子がベンゼン環と環の代わりにベンジル化合物、ベンジルエーテル化合物または硫化ベンジル化合物を構成することを表す。
【００１４】
構成式Iの中の破線はR4がXとC含む他の原子により連結すること、またはR4がXと連結しないことを表す。
【００１５】
構成式I’で、XとC1の間の破線はXとC1の間に単結合または二重結合が形成することを表す。R4とXの間の破線はR4がXとC含む他の原子により連結すること、またはR4がXと連結しないことを表す。
【００１６】
その中、前記のベンゾ化合物は下記の構成式のいずれかがある化合物である。
2021513526.tif 000003
【００１７】
構成式の中の破線はR4とC2原子がC含む他の原子により連結し、またはR4とC2が連結しないことを表す。
【００１８】
前記のベンジル化合物は下記の構成式がある化合物である。
2021513526.tif 000004
【００１９】
構成式の中、C1とC2原子の間の破線はC1とC2原子の間に単結合または二重結合があることを表す。R4とC2原子の間の破線はR4とC2原子がC含む他の原子により連結すること、またはR4とC2が連結しないことを表す。
【００２０】
前記のベンジルエーテル化合物は下記の構成式がある化合物である。
2021513526.tif 000005
【００２１】
前記の硫化ベンジル化合物は下記の構成式がある化合物である。
2021513526.tif 000006
【００２２】
式の中、Xは炭素、硫黄または酸素、R1はC1-16アルキル、C2-16アルケニルまたはC2-10アルキニル、R2は水素、ハロゲン、C1-16アルキル、C2-16アルケニルまたはC2-10アルキニル、またはハロゲン、C1-26アルキル、ハロゲン化C1-3アルキル、O-C1-3アルキル、ヒドロキシ、アミノ、ニトロ、シアノ、アルデヒド及びエステル基の中のグループの0〜5個に置換されたアリール、またはハロゲン、C1-26アルキル、ハロゲン化C1-3アルキル、O-C1-3アルキル、ヒドロキシ、アミノ、ニトロ、シアノ、アルデヒド及びエステル基の中のグループの0〜5個に置換されたヘテロアリールである。
【００２３】
前記のヘテロアリールはN、S及びOの中のヘテロ原子の1〜3種を含む3〜10メタヘテロアリールである。
【００２４】
R3はC1-6アルデヒド基、C2-6アシル、-COOHまたはヒドロキシルに置換されたC1-6アルキル、-CH2O-C1-6アルキルまたは-CO2-C1-6アルキルである。
【００２５】
R4とR7は独立して水素、C1-20アルキル、C2-36アルケニルまたはC2-10アルキニル、またはハロゲン、ハロゲン化C1-3アルキル、O-C1-3アルキル、C1-25アルキル、ヒドロキシ、アミノ、ニトロ、シアノ、アルデヒド及びエステル基の中のグループの0〜5個に置換されたアリールから選出されたものである。
【００２６】
R5とR6は共に独立して水素、C1-6アルキルまたはC1-6シリコンベースから選出されたものである。
【００２７】
望ましくは、式の中、Xは炭素、硫黄または酸素、R1はC1-4アルキル、C2-4アルケニルまたはC3-7アルキニル、R2は水素、ハロゲン、C1-4アルキル、C2-4アルケニルまたはC3-7アルキニル、またはハロゲン、C1-26アルキル、ハロゲン化C1-3アルキル、O-C1-3アルキル、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アルデヒド基及びエステルグループの中のグループの0〜5個に置換されたアリール、またはハロゲン、C1-6アルキル、ハロゲン化C1-3アルキル、O-C1-3アルキル、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アルデヒド基及びエステルグループの中のグループの0〜5個に置換されたヘテロアリール、R3はC1-6アルデヒド基、C2-6アシル、-COOHまたはヒドロキシルに置換されたC1-4アルキル、-CH2O-C1-4アルキルまたは-CO2-C1-6アルキル、R4とR7は共に独立してから選出されたものである水素、C1-20アルキル、C2-36アルケニルまたはC2-10アルキニル、またはハロゲン、ハロゲン化C1-3アルキル、O-C1-3アルキル、C1-25アルキル、ヒドロキシ、アミノ、ニトロ、シアノ、アルデヒド及びエステル基の中のグループの0〜5個に置換されたアリールである。
【００２８】
R5とR6は共に望ましく水素またはC1-4アルキルから選出されたものである。
【００２９】
更に望ましくは、式の中、Xは炭素、硫黄または酸素、R1はC1-3アルキル、アクリルまたはC3-4アルキニル、R2は水素、ハロゲン、C1-4アルキル、アクリルまたはC3-7アルキニル、またはハロゲン、メチル、メトキシ、C2-26アルキル、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アルデヒド基及びエステルグループの中のグループの0〜5個に置換されたアリール、またはハロゲン、C1-6アルキル、ハロゲン化C1-3アルキル、O-C1-3アルキル、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アルデヒド基及びエステルグループの中の0〜5個に置換されたヘテロアリールである。
【００３０】
前記のヘテロアリールはN、S及びOの中のヘテロ原子の1〜3種を含む5〜6メタヘテロアリールである。
【００３１】
R3はC1-3アルデヒド基、C2-4アシル、-COOHまたはヒドロキシルに置換されたC1-4アルキル、-CH2O-C1-4アルキルまたは-CO2-C1-4アルキルである。
【００３２】
R4とR7は共に独立して水素、C1-17アルキル、C2-36アルケニル、C2-10アルキニル、またはハロゲン、メトキシ、C1-25アルキル、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アルデヒド基及びエステルグループの中のグループの0〜5個に置換されたアリールから選出されたものである。
【００３３】
R5とR6は共に独立して水素またはメチルから選出されたものである。
【００３４】
より一歩に望ましくは、式の中、Xは炭素、硫黄または酸素、R1はC1-3アルキル、アクリルまたはC3-4アルキニル、R2は水素、ハロゲン、C1-4アルキル、アクリルまたはC3-7アルキニル、またはハロゲン、メチル、メトキシ、C2-26アルキル、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アルデヒド基及びエステルグループの中のグループの0〜5個に置換されたアリール、R3はC1-3アルデヒド基、アセチル、-COOHまたはヒドロキシルに置換されたC1-4アルキル、-CH2O-C1-4アルキルまたは-CO2-C1-4アルキル、R4とR7は共に独立して水素、C1-17アルキル、C2-36アルケニルまたはC2-10アルキニル、またはハロゲン、メトキシ、C1-25アルキル、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アルデヒド基及びエステルグループの中のグループの0〜5個に置換されたアリールから選出されたものである。
【００３５】
R5とR6は共に独立して水素またはメチルから選出されたものである。
【００３６】
より一歩に望ましくは、式の中、Xは炭素、硫黄または酸素、R1はC1-3アルキル、アクリルまたはC3-4アルキニル、R2は水素、ハロゲン、C1-4アルキル、アクリルまたはC3-7アルキニル、またはハロゲン、メチル、メトキシ、C2-26アルキル、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アルデヒド基及びエステルグループの中のグループの0〜5個に置換されたアリール、またはハロゲン、C1-6アルキル、ハロゲン化C1-3アルキル、O-C1-3アルキル、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アルデヒド基及びエステルグループの中のグループの0〜5個に置換されたヘテロアリールである。
【００３７】
前記のヘテロアリールはS及びOの中の1〜3個のヘテロ原子を含む5〜6メタヘテロアリールである。
【００３８】
R3はホルムアルデヒドベース、アセチル、-COOHまたはヒドロキシルに置換されたC1-2アルキル、-CH2O-C1-2アルキルまたは-CO2-C1-4アルキル、R4とR7は共に独立して水素、C1-17アルキル、C2-36アルケニル、C2-10アルキニル、またはハロゲン、メトキシ、C1-25アルキル、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アルデヒド基及びエステルグループの中のグループの0〜5個に置換されたアリールから選出されたものである。
【００３９】
R5とR6は共に独立して水素またはメチルから選出されたものである。
【００４０】
更に具体的に望ましくは、前記の生物学的活性のある多置換ベンゼン化合物は下記の化合物から選出されたいずれかである。
2021513526.tif 000007
2021513526.tif 000008
2021513526.tif 000009
2021513526.tif 000010
【００４１】
具体的に、本発明では前記に関わるグループに対して下記の定義を与える。
【００４２】
アルキル： 1〜26個の炭素原子のあるストレートチェーン、ブランチチェーンまたは環状のアルキルのことであり、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、tert-ブチル、sec-ブチル、ペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、シクロプロパンまたはシクロヘキサンを含み、望ましくは炭素原子の1〜4個のストレートチェーンまたはブランチチェーンのあるアルキルのことであり、特に望ましくはメチル、エチルまたはイソプロピルのことである。
【００４３】
ハロゲン：フッ素、塩素、臭素またはヨウ素のことである。
【００４４】
ハロゲン化アルキル：一つ以上のハロゲンに置換されたアルキル、具体的にモノハロゲン化アルキルまたはポリハロゲン化アルキル（ハロゲン化アルキルを含む）のことであり、モノハロゲン化アルキルとはアルキルに一つのハロゲン原子のあることであり、ポリハロゲン化アルキルとはアルキに二つ以上のハロゲン原子のあることであり、具体的にフルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、クロロメチル、ジクロロメチル、トリクロロメチル、ペンタフルオロエチル、ヘプタフルオロプロピル、ジフルオロクロロメチル、ジクロロフルオロメチル、 ジフルオロエチル、ジフルオロプロピル、ジクロロエチルまたはジクロロプロピルを含む。
【００４５】
C2-16アルケニル：炭素原子数が2〜16であり、少なくとも1つの炭素-炭素二重結合を含むストレートチェーンまたはブランチチェーン飽和炭化水素のことであり、ビニール、アクリル、ブテニルまたはヘキセニルを含む。
【００４６】
C2-10アルキニル：炭素原子数が2〜10であり、少なくとも1つの炭素-炭素三重結合を含むストレートチェーンまたはブランチチェーン飽和炭化水素のことであり、エチニル、プロピニル、ブチニルまたはペンチニルを含む。
【００４７】
C1-6アルデヒド基：炭素原子数が1〜6であり、少なくとも1つの炭素-炭素三重結合を含むストレートチェーンまたはブランチチェーン飽和炭化水素のことであり、ホルムアルデヒドベース、アセトアルデヒドまたはカプロンアルデヒドを含む。
【００４８】
アリール：環部に6〜14個の炭素原子のある単環または二環式芳香族炭化水素基のことであり、非芳香族炭化水素環と縮合する芳香族環のことであり、具体的にフェニル、インダン、ナフチルまたは四水素ナフチルを含む。
【００４９】
ヘテロアリール：窒素、酸素及び硫黄の環ヘテロ原子の中の1〜3個を含む3〜10員の複素環のことであり、飽和、部分的飽和または不飽和の芳香族、単環グループ、縮合環グループまたはブリッジグループを含み、具体的にフラン、ピロール、ピロリジン、ピラゾール、イミダゾール、トリアゾール、イソトリアゾール、テトラゾール、チアジアゾール、イソチアゾール、オキサジアゾール、ピリジン、ピペリジン、ピラジン、オキサゾール、イソキサゾール、ピラジン 、ピリダジン、ピリミジン、ピペラジン、ピロリジン、ピロリドン、モルホリン、トリアジン、オキサジン、テトラヒドロフラン、テトラヒドロチオフェン、テトラヒドロチラン、テトラヒドロピラン、1,4-ジオキサン、1,4-オキサチオラン、インダゾール、キノリン、インドール、8-アザビシクロ[3.2.1]オクタンまたは2,3-ジヒドロベンゾフランまたはチアゾールを含む。
【００５０】
ルコキシ：1〜6個の炭素原子のストレートチェーンまたはブランチチェーンのあるアルコキシのことであり、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシ、イソブトキシ、tert-ブトキシ、sec-ブトキシ、ペンチルオキシ、ネオペンチルオキシまたはヘキシルオキシを含み、望ましくは炭素原子の1〜4個のストレートチェーンまたはブランチチェーンのあるアルコキシ、特に望ましくはメトキシである。
【００５１】
上記の生物学的活性のある多置換ベンゼン化合物はアミノ及びカルボキシルの中の一種以上、またはアミノまたはカルボキシルと似るグループの存在により、酸及び・またはアルカリ塩を形成でき、特に望ましくは前記の生物学的活性のある多置換ベンゼン化合物の生物学有効性及び性質を保つ薬用塩である。
【００５２】
上記のいずれかの前記の生物学的活性のある多置換ベンゼン化合物の調製方法及び具体的な合成のルートは下記に示す。
2021513526.tif 000011
【００５３】
その中、Yはハロゲン、望ましくは臭素原子、R8は水素またはC1-6アルキルである。
【００５４】
Xが炭素である場合、化合物IIはアルキルオレフィン、アリールオレフィン、アロマティクス、置換されたアロマティクス、ヘテロ芳香族または置換されたヘテロ芳香族であり、スチレン、アルキルに置換されたスチレン、ハロゲンに置換されたスチレン、ジフェニルエチレン、ナフタレン、1-フェニル-1,3-ブタジエン、ベンゼン、ナフタレン、トルエン、エチルベンゼン、アニソール、フェネチルエーテル、2,4,6-トリメトキシベンゼン、1,2,4-トリメトキシベンゼン、1,5-ジメトキシナフタレン、フラン、ピラン、チオフェン、エストロンの派生によるオレフィンまたはコレステロールの派生によるオレフィンを含む。
【００５５】
Xが硫黄である場合、化合物IIはチオール化合物であり、メチルメルカプタン、エタンチオール、イソアミルメルカプタンまたはベンジルメルカプタンを含む。
【００５６】
Xが酸素である場合、化合物IIはアルコール化合物であり、メタノール、エタノール、イソプロパノール、ブタノール、アリルアルコール、プロパルギルアルコール、イソアミルアルコール、ベンジルアルコール、置換されたベンジルアルコール、2-臭素-2-プロペン-1-オール、1-ビニール-フェネチルアルコール、ゲラニオールまたはデヒドロエピアンドロステロンを含む。
【００５７】
具体的に、化合物VIIと化合物Vがカップリング反応を発生して化合物Vを取得し、化合物Vが更にカップリングを行って非末端アルキニルエーテル化合物IIIを取得する。次に、化合物Vまたは化合物IIIが転位反応を発生し、化合物IIにキャッチされ、化合物IまたはI’を取得する。
【００５８】
具体的なプロセスは下記のステップを含む。
【００５９】
（１）化合物VII、アルカリの1〜5当量及び化合物VIの1〜3当量を有機溶剤に入れ、加熱、攪拌してカップリング反応を行ってからろ過を行って溶剤を蒸し除き、分離と精製により中間体Vを取得する。
【００６０】
（２）化合物Vと化合物IVの1〜3当量、ヨウ化第一銅の5%当量、ジトリフェニルホスフィンパラジウムジクロリドの30%当量及びヨウ化ナトリウムの0.5当量を有機溶剤に混合し、攪拌してから更にカップリングを行って中間体IIIを取得する。
【００６１】
（３）中間体Vまたは中間体IIIを化合物IIを有機溶剤に混合し、加熱して転位反応を行ってから溶剤を蒸し除き、分離と精製により化合物IまたはI’ を取得する。
【００６２】
望ましくは、ステップ（1）、（2）で、前記のアルカリが共に水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸カルシウム、重炭酸ナトリウム、重炭酸カリウム、ナトリウムtert-ブトキシド、カリウムtert-ブトキシド、リン酸カリウム、リン酸水素カリウム、炭酸セシウム、炭酸リチウム、ピリジン、トリエチルアミン、トリブチルアミンの中の一種以上である。
【００６３】
更に望ましくは、ステップ（1）、（2）で、前記のアルカリが炭酸カリウムまたはカリウムtert-ブトキシドである。
【００６４】
望ましくは、ステップ（1）で、前記のカップリング反応の温度が30〜80℃、時間が5〜24hである。
【００６５】
望ましくは、ステップ（2）で、前記の攪拌による更になるカップリングは室温における5〜24hの攪拌である。
【００６６】
望ましくは、ステップ（3）で、前記の転位反応の温度が80〜180℃、時間が5〜24hである。
【００６７】
望ましくは、ステップ（1）〜（3）で、前記の有機溶剤は共にメタノール、エタノール、イソプロパノール、テトラヒドロフラン、1,4-ジオキサン、酢酸エチル、シクロヘキサン、トルエン、キシレン、エチルベンゼン、クロロベンゼン、マロドロベンゼン、ジクロロメタン、ジクロロエタン、クロロホルム、四塩化炭素、アセトニトリル、アセトン、N、N-ジメチルアセトアミド、N、N-ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド及び水の中の一種以上である。
【００６８】
更に望ましくは、ステップ（1）〜（3）で、前記の有機溶剤は共にクロロベンゼンまたはアセトニトリルである。
【００６９】
望ましくは、前記の分離精製の方法はシリカゲルカラムクロマトグラフィー、再結晶、薄層クロマトグラフィー分離、調製クロマトグラフィー分離または蒸留を含む。
【００７０】
上記のいずれかの前記の生物学的活性のある多置換ベンゼン化合物は抗腫瘍薬の調製（胃がん、卵巣がん、肺がんまたは前立腺がんを治療するための薬の調製を含む）に用いられる。
【００７１】
従来の技術と比べてみると、本発明は下記の長所及び有益効果がある。
【００７２】
（１）本発明の化合物は良好な生物学的活性及び腫瘍細胞の増殖を抑制するための活性があり、腫瘍細胞に対する抑制作用が天然物としてのゴシポールI-A9の以上にあり、またはそれと同一であり、リード化合物として新規薬の開発及び抗腫瘍薬、胃がん薬、卵巣がん薬肺がん薬または前立腺がん薬の調製に用いられることができる。
【００７３】
（２）本発明の調製方法は原材料の源が広く、取り扱いやすく、合成のルートが短く、反応条件が温和であり、コストが安く、量産に適する。
【発明を実施するための形態】
【００７４】
次に実施例と結び合わせて本発明のソリューションについて詳細に説明するが、本発明の保護範囲及び実施方式はそれに限られるものではない。
【００７５】
具体的な実施例で、別途に説明するほかに、関係の材料は市販品または本分野技術者が普通の実験で調製できるものであり、塩が化合物で既知の製塩方法で調製できるものである。
【００７６】
具体的な実施例で、活性比較用天然物としてのゴシポールI-A9は構成式が下記のとおりである。
2021513526.tif 000012
【実施例１】
【００７７】
2-メチル-3-（プロプ-2-イン-1-イルオキシ）-4H-ピラン-4-オン（化合物V-1）の調製合成のルートは下記に示す。
2021513526.tif 000013
【００７８】
具体的な合成ステップは下記のとおりである。
【００７９】
15g化合物VII-1メチルマルトール、炭酸カリウムの3当量及び臭化プロパルギルの1.2当量をアセトニトリルの300mlに入れ、80℃までに加熱して12時間に反応させるようにしてからショートシリカゲルカラムでろ過し、減圧して溶剤を蒸し除き、カラムクロマトグラフィーにより化合物V-1の17.2gを取得し、歩留まりが88%である。
【実施例２】
【００８０】
5,6-ジヒドロキシ-7-メチル-1-フェニル-2,3-2水素-1H-インデン-4-カルバルデヒド（化合物I-2）の調製合成のルートは下記に示す。
2021513526.tif 000014
【００８１】
具体的な合成ステップは下記のとおりである。
【００８２】
化合物V-1の0.25mmol、P-メチルスチレンの3.5当量及びクロロベンゼンの1mlをシュレックチューブに入れ、窒素ガスに保護されて150℃までに加熱して13hに反応し、室温になるようにして、乾燥までに回転させ、カラムを経るようにし、黄色の固体の50.1mg、即ち化合物I-2を取得し、歩留まりが71%である。
【実施例３】
【００８３】
1-（3-臭素フェニル）-5,6-ジヒドロキシ-7-メチル-2,3-2水素-1H-インデン-4-カルバルデヒド（化合物I-10）の調製合成のルートは下記に示す。
2021513526.tif 000015
【００８４】
具体的な合成ステップは下記のとおりである。
【００８５】
化合物V-1の0.25mmol、M-ブロモスチレンの3.5当量及びクロロベンゼンの1mlをシュレックチューブに入れ、窒素ガスに保護されて150℃までに加熱して13hに反応し、室温になるようにして、乾燥までに回転させ、カラムを経るようにし、黄色の固体の45mg、即ち化合物I-10を取得し、歩留まりが52%である。
【実施例４】
【００８６】
6-（（3,4-2水素-2H-ピラン-5-イル）メチル）-2,3-ジヒドロキシ-4-メチルベンズアルデヒド（化合物I-14）の調製合成のルートは下記に示す。
2021513526.tif 000016
【００８７】
具体的な合成ステップは下記のとおりである。
【００８８】
化合物V-1の0.25mmol、3,4-2水素-2H-ピランの3.5当量及びクロロベンゼンの1mlをシュレックチューブに入れ、窒素ガスに保護されて180℃までに加熱して5hに反応し、室温になるようにし、乾燥までに回転させ、カラムを経るようにし、黄色の固体の24mg、即ち化合物I-14を取得し、歩留まりが38%である。
【実施例５】
【００８９】
5,6-ジヒドロキシ-7-イソプロピル-1-フェニル-2,3-2水素-1H-インデン-4-カルバルデヒド（化合物I-50）の調製。
2021513526.tif 000017
【００９０】
化合物VII-2イソプロピルマルトールの6.8g、炭酸カリウムの3当量及び臭化プロパルギルの1.2当量をアセトニトリルの150mlに入れ、80℃までに加熱して5時間に反応させるようにしてからショートシリカゲルカラムでろ過し、減圧して溶剤を蒸し除き、カラムクロマトグラフィーにより化合物V-2の8.0gを取得し、歩留まりが94%である。
【００９１】
化合物V-2の0.2mmol、スチレンの3.5当量及びクロロベンゼンの1mlをシュレックチューブに入れ、窒素ガスに保護されて150℃までに加熱して13hに反応し、室温になるようにし、乾燥までに回転させ、カラムを経るようにして黄色の固体I-50の30mgを取得し、歩留まりが50%である。
【実施例６】
【００９２】
5,6-ジヒドロキシ-4-メチル-8H-インデノ[2,1-b]チオフェン-7-ホルムアルデヒド（化合物I-54）の調製合成のルートは下記に示す。
2021513526.tif 000018
【００９３】
具体的な合成ステップは下記のとおりである。
【００９４】
（１）窒素ガスに保護されて、V-1の1mmol、ヨウ化第一銅の0.05mmol及びジトリフェニルホスフィンパラジウムジクロリドの0.03mmol、テトラヒドロフラン（THF）20ml、トリエチルアミンの2ml及び化合物IV-1の1.2mmolを相次ぎに50mlのシュレックチューブに入れ、TLC検出反応が完全になるまで30℃で攪拌して反応するようにし、ろ過し、乾燥するまで回転させ、乾式法でサンプルを設置してカラムを経て、ミディアムイエローの油状物（化合物III-1）の126mgを取得し、歩留まりが51%である。
【００９５】
（２）化合物III-1の0.25mmol及びクロロベンゼンの1mlをシュレックチューブに入れ、窒素ガスに保護されて80℃までに加熱して24hに反応し、室温になるようにし、乾燥までに回転させ、カラムを経るようにし、黄色の固体の38mg、即ち化合物I-54を取得し、歩留まりが60%である。
【実施例７】
【００９６】
1-（5,6-ジヒドロキシ-1-フェニル-7-（（プロプ-2-イン-1-イルオキシ）メチル）-2,3-2水素-1H-インデン-4-イル）エチル-1-オン（化合物I-A1）の調製合成のルートは下記に示す。
2021513526.tif 000019
【００９７】
具体的な合成ステップは下記のとおりである。
【００９８】
（１）化合物VII-3の0.8g、炭酸カリウムの4.0当量及び臭化プロパルギルの2.0当量をアセトニトリルの15mlに入れ、80℃までに加熱して12時間に反応させるようにしてからショートシリカゲルカラムでろ過し、減圧して溶剤を蒸し除き、カラムクロマトグラフィーにより化合物V-3の0.64gを取得し、歩留まりが54%である。
【００９９】
（２）化合物V-3の0.25mmol 、スチレンの3.5当量及びクロロベンゼンの1mlをシュレックチューブに入れ、窒素ガスに保護されて150℃までに加熱して13hに反応し、室温になるようにして、乾燥までに回転させ、カラムを経るようにし、黄色の固体の25mg、即ち化合物I-A1を取得し、歩留まりが30%である。
【実施例８】
【０１００】
（3S、8S、9S、10R、13R、14S、17R）-10,13-ジメチル-17-（（R）-6-メチルヘプタ-2-イル）-2,3,4,7,8,9 ,10,11,12,13,14,15,16,17-テトラ水素1H-シクロペンタ[a]フェナントレン-3-イル4-（（R）-4-ホルミル-5,6-ジヒドロキシ-7-メチル- 2,3-2水素-1H-インデン-1-イル）安息香酸メチル（化合物I-68）の調製合成のルートは下記に示す。
2021513526.tif 000020
【０１０１】
具体的な合成ステップは下記のとおりである。
【０１０２】
コレステロールの0.2mmolの派生によるP-ビニル安息香酸、化合物V-1の3.0当量及びクロロベンゼンの1mlをシュレックチューブに入れ、窒素ガスに保護されて150℃までに加熱して13hに反応し、室温になるようにして、乾燥までに回転させ、カラムを経るようにし、黄色の固体の56mg、即ち化合物I-68を取得し、歩留まりが41%である。
【実施例９】
【０１０３】
1-（（4-臭素フェニル）エチニル）-5,6-ジヒドロキシ-7-メチル-2,3-2水素-1H-インデン-4-カルバルデヒド（化合物I-70）の調製合成のルートは下記に示す。
2021513526.tif 000021
【０１０４】
具体的な合成ステップは下記のとおりである。
【０１０５】
化合物V-1の0.25mmol、1-臭素-4ブテンアセチレンの3.5当量及びクロロベンゼンの1mlをシュレックチューブに入れ、窒素ガスに保護されて150℃までに加熱して13hに反応し、室温になるようにして、乾燥までに回転させ、カラムを経るようにし、黄色の固体の56mg、即ち化合物I-70を取得し、歩留まりが60%である。
【実施例１０】
【０１０６】
2,3-ジヒドロキシ-6-（メトキシメチル）-4-メチルベンズアルデヒド（化合物I-19）の調製合成のルートは下記に示す。
2021513526.tif 000022
【０１０７】
具体的な合成ステップは下記のとおりである。
【０１０８】
化合物V-1の0.25mmol、メタノールの3.5当量及びトルエンの1mlシュレックチューブに入れ、窒素ガスに保護されて120℃までに加熱して20hに反応し、室温になるようにし、乾燥までに回転させ、カラムを経るようにし、黄色の固体の20mg、即ち化合物I-19を取得し、歩留まりが40%である。
【実施例１１】
【０１０９】
6-（（ベンジルオキシ）メチル）-2,3-ジヒドロキシ-4-メチルベンズアルデヒド（化合物I-21）の調製合成のルートは下記に示す。
2021513526.tif 000023
【０１１０】
具体的な合成ステップは下記のとおりである。
【０１１１】
化合物V-1の0.25mmol、ベンジルアルコールの3.5当量及びクロロベンゼンの1mlをシュレックチューブに入れ、窒素ガスに保護されて150℃までに加熱して13hに反応し、室温になるようにして、乾燥までに回転させ、カラムを経るようにし、黄色の固体の47mg、即ち化合物I-21を取得し、歩留まりが64%である。
【実施例１２】
【０１１２】
2-（（ベンジルオキシ）メチル）-3-臭素-5,6-ジヒドロキシ-4-メチルベンズアルデヒド（化合物I-A8）の調製合成のルートは下記に示す。
2021513526.tif 000024
【０１１３】
具体的な合成ステップは下記のとおりである。
【０１１４】
化合物I-21の0.2mmolを塩化メチレンの0.5mlと酢酸の0.5mlの混合溶剤に溶け込み、ゆっくり液体臭素の2.0当量を入れてから室温で10hに反応させるようにし、チオ硫酸ナトリウムを入れて急冷させ、塩化メチレンで抽出し、相次ぎに飽和重炭酸ナトリウム溶液及び飽和生理食塩水で洗浄し、乾燥までに回転させ、カラムを経るようにし、黄色の固体41mg、即ち化合物I-A8を取得し、歩留まりが58%である。
【実施例１３】
【０１１５】
2'-（（ベンジルオキシ）メチル）-3'-ホルミル-4'、5'-ジヒドロキシ-6'-メチル- [1,1’-ビフェニル] -4-カルボン酸メチルエステル（化合物I-77）の調製合成のルートは下記に示す。
2021513526.tif 000025
【０１１６】
具体的な合成ステップは下記のとおりである。
【０１１７】
（１）窒素ガスに保護されてV-1の1mmol、ヨウ化第一銅の0.05mmol、ジトリフェニルホスフィンパラジウムジクロリドの0.03mmol、THFの20ml、トリエチルアミンの2ml及び化合物IV-1の1.2mmolを相次ぎに50mlのシュレックチューブに入れ、TLC検出反応が完全になるまで室温で攪拌して反応するようにし、ろ過し、乾燥するまで回転させ、乾式法でサンプルを設置してカラムを経て、ミディアムイエローの油状物（化合物III-2）の233mgを取得し、歩留まりが78%である。
【０１１８】
（２）化合物III-2の0.2mmol 、ベンジルアルコールの3.5当量及びクロロベンゼンの1mlをシュレックチューブに入れ、窒素ガスに保護されて150℃までに加熱して13hに反応し、室温になるようにして、乾燥までに回転させ、カラムを経るようにし、黄色の固体の29mg、即ち化合物I-77を取得し、歩留まりが35%である。
【実施例１４】
【０１１９】
6-（（（（3S、8R、9S、10R、13S、14S）-10,13-ジメチル-17-オキソ-2,3,4,7,8,9,10,11,12,13,14,15,16,17テトラヒドロ-1H-シクロペンタ[a]フェナントレン-3-イル）酸素）メチル）-2,3-ジヒドロキシ-4-メチルベンゼン（化合物I-83）の調製合成のルートは下記に示す。
2021513526.tif 000026
【０１２０】
具体的な合成ステップは下記のとおりである。
【０１２１】
デヒドロエピアンドロステロンの0.2mmol、化合物V-1の3.0当量及びクロロベンゼンの1mlをシュレックチューブに入れ、窒素ガスに保護されて150℃までに加熱して13hに反応し、室温になるようにして、乾燥までに回転させ、カラムを経るようにし、黄色の固体の48mg、即ち化合物I-83を取得し、歩留まりが52%である。
【実施例１５】
【０１２２】
3'-ホルミル-4'、5'-ジヒドロキシ-2'-（（イソペンチルオキシ）メチル）-6'-メチル- [1,1’-ビフェニル]-4-ホルムアルデヒド（化合物I-86）の調製合成のルートは下記に示す。
2021513526.tif 000027
【０１２３】
具体的な合成ステップは下記のとおりである。
【０１２４】
（１）窒素ガスに保護されて化合物V-1の1mmol、ヨウ化第一銅の0.05mmol、ジトリフェニルホスフィンパラジウムジクロリドの0.03mmol、THFの20ml、トリエチルアミンの2ml及び化合物IV-3の1.2mmolを相次ぎに50mlのシュレックチューブに入れ、TLC検出反応が完全になるまで室温で攪拌して反応するようにし、ろ過し、乾燥するまで回転させ、乾式法でサンプルを設置してカラムを経て、ミディアムイエローの油状物（化合物III-3）の185mgを取得し、歩留まりが69%である。
【０１２５】
（２）化合物III-6の0.25mmol、イソアミルアルコールの3.5当量及びクロロベンゼンの1mlをシュレックチューブに入れ、窒素ガスに保護されて150℃までに加熱して13hに反応し、室温になるようにして、乾燥までに回転させ、カラムを経るようにし、黄色の固体の49mg、即ち化合物I-86を取得し、歩留まりが68%である。
【実施例１６】
【０１２６】
2,3-ジヒドロキシ-6-（（（4-メトキシベンジル）オキシ）メチル）-4-メチルベンズアルデヒド（化合物I-87）の調製合成のルートは下記に示す。
2021513526.tif 000028
【０１２７】
具体的な合成ステップは下記のとおりである。
【０１２８】
化合物V-1の6.3g、P-メトキシベンジルアルコールの3.5当量及びクロロベンゼンの80mlをシュレックチューブに入れ、窒素ガスに保護されて150℃までに加熱して13hに反応し、室温になるようにして、乾燥までに回転させ、カラムを経るようにし、黄色の固体の6.0g、即ち化合物I-87を取得し、歩留まりが51%である。
【実施例１７】
【０１２９】
2-（（ベンジルオキシ）メチル）-3-（（（tert-ブチルジメチルシリル）酸素）メチル）-5,6-ジヒドロキシ-4-メチルベンズアルデヒド (化合物I-89) の調製合成のルートは下記に示す。
2021513526.tif 000029
【０１３０】
具体的な合成ステップは下記のとおりである。
【０１３１】
（１）1mmolメチルマルトール（化合物VII-1）、炭酸カリウムの3当量及び臭化プロパルギルの1.2当量（化合物VI-4）をアセトニトリルの5mlに入れ、80℃までに加熱して12時間に反応させるようにしてからショートシリカゲルカラムでろ過し、減圧して溶剤を蒸し除き、カラムクロマトグラフィーにより化合物V-4の154mgを取得し、歩留まりが50%である。
【０１３２】
（２）化合物V-4の0.25mmol、ベンジルアルコールの3.5当量及びクロロベンゼンの1mlをシュレックチューブに入れ、窒素ガスに保護されて150℃までに加熱して13hに反応し、室温になるようにして、乾燥までに回転させ、カラムを経るようにし、黄色の固体の40mg、即ち化合物I-89を取得し、歩留まりが38%である。
【実施例１８】
【０１３３】
3-アリル-2-（（ベンジルオキシ）メチル）-5,6-ジヒドロキシ-4-イソプロピルベンズアルデヒド（化合物I-91）の調製合成のルートは下記に示す。
2021513526.tif 000030
【０１３４】
具体的な合成ステップは下記のとおりである。
【０１３５】
（１）化合物V-2の8.0g、ヨウ化第一銅の0.1eq、ヨウ化ナトリウムの0.5eq、アセトンの120ml、化合物IV-4の1.2eq及び炭酸カリウムの3.0eqを相次ぎに250mlの丸底フラスコに入れ、TLC検出反応が完全になるまで室温で攪拌して反応するようにし、ろ過し、乾燥するまで回転させ、乾式法でサンプルを設置してカラムを経て、ミディアムイエローの油状物（化合物III-4）の8.2gを取得し、歩留まりが85%である。
【０１３６】
（２）化合物III-4の5.2g、ベンジルアルコールの3.5当量及びクロロベンゼンの1mlをシュレックチューブに入れ、窒素ガスに保護されて150℃までに加熱して13hに反応し、室温になるようにして、乾燥までに回転させ、カラムを経るようにし、黄色の固体の3.35g、即ち化合物I-91を取得し、歩留まりが40%である。
【実施例１９】
【０１３７】
4,5-ジヒドロキシ-6-メチル-4'-ニトロ-2-（2,4,6-トリメトキシベンジル）- [1,1’-ビフェニル]-3-ホルムアルデヒド（化合物I-42）の調製合成のルートは下記に示す。
2021513526.tif 000031
【０１３８】
具体的な合成ステップは下記のとおりである。
【０１３９】
（１）窒素ガスに保護されて化合物V-1の1mmol、ヨウ化第一銅の0.05mmol、ジトリフェニルホスフィンパラジウムジクロリドの0.03mmol、THFの20ml、トリエチルアミンの2ml及び1.2mmol 化合物IV-5を相次ぎに50mlのシュレックチューブに入れ、TLC検出反応が完全になるまで室温で攪拌して反応するようにし、ろ過し、乾燥するまで回転させ、乾式法でサンプルを設置してカラムを経て、ミディアムイエローの油状物（化合物III-5）の191mgを取得し、歩留まりが67%である。
【０１４０】
（２）化合物III-5の0.2mmol、メシチレンの3.5当量及びクロロベンゼンの1mlをシュレックチューブに入れ、窒素ガスに保護されて150℃までに加熱して13hに反応し、室温になるようにして、乾燥までに回転させ、カラムを経るようにし、黄色の固体の70mg、即ち化合物I-42を取得し、歩留まりが76%である。
【実施例２０】
【０１４１】
6-エチル-4,5-ジヒドロキシ-2-（2,4,6-トリメトキシベンジル-[1,1’-ビフェニル]-3-ホルムアルデヒド（化合物I-44）の調製合成のルートは下記に示す。
2021513526.tif 000032
【０１４２】
具体的な合成ステップは下記のとおりである。
【０１４３】
（１）窒素ガスに保護されて化合物V-4の1mmol、ヨウ化第一銅の0.05mmol、ジトリフェニルホスフィンパラジウムジクロリドの0.03mmol、THFの20ml、トリエチルアミンの2ml及び1.2mmol ヨードベンゼンを相次ぎに50mlのシュレックチューブに入れ、TLC検出反応が完全になるまで室温で攪拌して反応するようにし、ろ過し、乾燥するまで回転させ、乾式法でサンプルを設置してカラムを経て、ミディアムイエローの油状物（化合物III-6）の180mgを取得し、歩留まりが71%である。
【０１４４】
（２）化合物III-6の0.2mmol、メシチレンの3.5当量及びクロロベンゼンの1mlをシュレックチューブに入れ、窒素ガスに保護されて150℃までに加熱して13hに反応し、室温になるようにして、乾燥までに回転させ、カラムを経るようにし、黄色の固体の56mg、即ち化合物I-44を取得し、歩留まりが65%である。
【実施例２１】
【０１４５】
6-（（1,5- ジメトキシナフタレン-2-イル）メチル）-2,3-ジヒドロキシ-4-メチルベンズアルデヒド（化合物I-43）の調製合成のルートは下記に示す。
2021513526.tif 000033
【０１４６】
具体的な合成ステップは下記のとおりである。
【０１４７】
化合物V-1の0.25mmol、1,5-ジメトキシナフタレンの3.5当量及びクロロベンゼンの1mlをシュレックチューブに入れ、窒素ガスに保護されて150℃までに加熱して13hに反応し、室温になるようにして、乾燥までに回転させ、カラムを経るようにし、黄色の固体の25mg、即ち化合物I-43を取得し、歩留まりが28%である。
【実施例２２】
【０１４８】
3-（フラン-2-イル）-5,6-ジヒドロキシ-4-メチル-2-（2,4,6-トリメトキシベンジル）ベンズアルデヒド（化合物I-A6）の調製合成のルートは下記に示す。
2021513526.tif 000034
【０１４９】
具体的な合成ステップは下記のとおりである。
【０１５０】
（１）窒素ガスに保護されて化合物V-1の1mmol、ヨウ化第一銅の0.05mmol、ジトリフェニルホスフィンパラジウムジクロリドの0.03mmol、THFの20ml、トリエチルアミンの2ml及び1.2mmol 2-ヨウ素フランを相次ぎに50mlのシュレックチューブに入れ、TLC検出反応が完全になるまで室温で攪拌して反応するようにし、ろ過し、乾燥するまで回転させ、乾式法でサンプルを設置してカラムを経て、ミディアムイエローの油状物（化合物III-7）の194mgを取得し、歩留まりが41%である。
【０１５１】
（２）化合物III-7の0.16mmol、メシチレンの3.5当量及びクロロベンゼンの1mlをシュレックチューブに入れ、窒素ガスに保護されて150℃までに加熱して13hに反応し、室温になるようにして、乾燥までに回転させ、カラムを経るようにし、黄色の固体の14mg、即ち化合物I-A6を取得し、歩留まりが22%である。
【実施例２３】
【０１５２】
4,5-ジヒドロキシ-2-（（イソペンチルオキシ）メチル）-6-メチル- [1,1’-ビフェニル]-3-ホルムアルデヒド（化合物I-79）の調製合成のルートは下記に示す。
2021513526.tif 000035
【０１５３】
具体的な合成ステップは下記のとおりである。
【０１５４】
（１）窒素ガスに保護されて化合物V-1の1mmol、ヨウ化第一銅の0.05mmol、ジトリフェニルホスフィンパラジウムジクロリドの0.03mmol、THFの20ml、トリエチルアミンの2ml及びヨードベンゼンの1.2mmolを相次ぎに50mlのシュレックチューブに入れ、TLC検出反応が完全になるまで室温で攪拌して反応するようにし、ろ過し、乾燥するまで回転させ、乾式法でサンプルを設置してカラムを経て、ミディアムイエローの油状物（化合物III-8）の178mgを取得し、歩留まりが74%である。
【０１５５】
（２）化合物III-8の0.25mmol、イソアミルメルカプタンの3.5当量及びクロロベンゼンの1mlをシュレックチューブに入れ、窒素ガスに保護されて150℃までに加熱して13hに反応し、室温になるようにして、乾燥までに回転させ、カラムを経るようにし、黄色の固体の23mg、即ち化合物I-79を取得し、歩留まりが27%である。
【実施例２４】
【０１５６】
2,3,6,7-テトラヒドロキシ-4,5-ジメチル-9,10-ジヒドロフェナントレン-1,8-ジカルバルデヒド（化合物I-22）の調製合成のルートは下記に示す。
2021513526.tif 000036
【０１５７】
具体的な合成ステップは下記のとおりである。
【０１５８】
化合物V-1の0.25mmol及びクロロベンゼンの1mlをシュレックチューブに入れ、窒素ガスに保護されて150℃までに加熱して13hに反応し、室温になるようにして、乾燥までに回転させ、カラムを経るようにし、黄色の固体の31mg、即ち化合物I-22を取得し、歩留まりが75%である。
【実施例２５】
【０１５９】
3-（（1H-インデン-3-イル）メチル）-5,6-ジヒドロキシ-2,4-ジメチルベンズアルデヒド（化合物I-95）の調製合成のルートは下記に示す。
2021513526.tif 000037
【０１６０】
具体的な合成ステップは下記のとおりである。
【０１６１】
化合物V-1の0.25mmol、1-メチレン-2の3.5当量、3-2水素インデン及びクロロベンゼンの1mlをシュレックチューブに入れ、窒素ガスに保護されて150℃までに加熱して13hに反応し、室温になるようにして、乾燥までに回転させ、カラムを経るようにし、黄色の固体の12mg、即ち化合物I-95を取得し、歩留まりが16%である。
【実施例２６】
【０１６２】
4-（ヒドロキシメチル）-7-メチル-1-フェニル-2,3-2水素-1H-インデン-5,6-ジオール（化合物I-98）の調製合成のルートは下記に示す。
2021513526.tif 000038
【０１６３】
具体的な合成ステップは下記のとおりである。
【０１６４】
化合物I-2の0.5mmolをメタノールの5mlを溶け込み、温度を0℃までに降下させ、水素化ホウ素ナトリウムの1.2当量を入れ、1時間に反応させるようにしてから飽和塩化アンモニウム溶液の10mlで急冷させ、回転してメタノールを除き、酢酸エチルで抽出し、有機相を併合し、乾燥するまで回転させ、石油エーテル：酢酸エチル=1：3（V/V）でカラムを経て、化合物I-98の95mgを取得し、歩留まりが70%である。
【実施例２７】
【０１６５】
2,3-ジヒドロキシ-6-（（（4-メトキシベンジル）オキシ）メチル）-4-トルイル酸（化合物I-99）の調製合成のルートは下記に示す。
2021513526.tif 000039
【０１６６】
具体的な合成ステップは下記のとおりである。
【０１６７】
化合物I-87の1mmolをゆっくり水酸化カリウム（3.0eq）及び過酸化水素（5.0eq）のメタノール（10ml）に点滴し、室温で4hに反応させるようにし、希塩酸で酸性までに中和し、酢酸エチルで抽出し、乾燥するまで回転させ、その剰余物をTHFテトラヒドロフランに溶け込み、Na2S2O4の飽和溶液2mlを入れ、室温で2hに反応させるようにし、希塩酸で酸性までに調合し、酢酸エチルで抽出し、乾燥するまで回転させ、白色固体の125mg、即ち化合物I-99を取得し、歩留まりが39%である。
【実施例２８】
【０１６８】
メチル2,3-ジメトキシ-6-（（（4-メトキシベンジル）オキシ）メチル）-4-メチル安息香酸メチル（化合物I-100）の調製合成のルートは下記に示す。
2021513526.tif 000040
【０１６９】
具体的な合成ステップは下記のとおりである。
【０１７０】
化合物I-99の0.2mmolをテトラヒドロフランの2mlに溶け込み、水酸化カリウム5.0eqの水溶液（0.5ml）を入れ、攪拌して硫酸ジメチルの10.0eqを入れ、原料の全部がなくなるまで室温で反応するようにし、希塩酸で中和し、アセテートで抽出し、乾燥までに回転させ、カラムを経るようにし、化合物I-100の33mgを取得し、歩留まりが46%である。
【０１７１】
本発明では、実施例1〜28の調製方法を参照して調製した他の具体的な望ましい化合物の構成及び特性評価データは下記のとおりである。
2021513526.tif 000041
2021513526.tif 000042
2021513526.tif 000043
2021513526.tif 000044
2021513526.tif 000045
2021513526.tif 000046
2021513526.tif 000047
2021513526.tif 000048
2021513526.tif 000049
2021513526.tif 000050
2021513526.tif 000051
2021513526.tif 000052
2021513526.tif 000053
2021513526.tif 000054
2021513526.tif 000055
2021513526.tif 000056
2021513526.tif 000057
2021513526.tif 000058
2021513526.tif 000059
2021513526.tif 000060
2021513526.tif 000061
2021513526.tif 000062
2021513526.tif 000063
2021513526.tif 000064
2021513526.tif 000065
2021513526.tif 000066
2021513526.tif 000067
2021513526.tif 000068
2021513526.tif 000069
2021513526.tif 000070
2021513526.tif 000071
2021513526.tif 000072
2021513526.tif 000073
2021513526.tif 000074
2021513526.tif 000075
2021513526.tif 000076
2021513526.tif 000077
2021513526.tif 000078
2021513526.tif 000079
2021513526.tif 000080
2021513526.tif 000081
2021513526.tif 000082
2021513526.tif 000083
2021513526.tif 000084
2021513526.tif 000085
2021513526.tif 000086
2021513526.tif 000087
2021513526.tif 000088
2021513526.tif 000089
2021513526.tif 000090
2021513526.tif 000091
【実施例２９】
【０１７２】
MKN45人胃がん細胞の増殖に対する化合物I-26、I-39、I-49、I-50、I-96及びI-97の影響の測定
【０１７３】
（１）細胞を植える
【０１７４】
元の培地を廃棄し、PBSの2mlで洗浄し、パンクレアチンの0.5mlで3minに消化するようにし、培地の2mlを入れて消化を終止させ、遠心分離管に移し、その200gに対する遠心分離を5minに行い、上清を廃棄し、培地の2mlを入れて均一になるまで5回に吹き打ち、細胞懸濁液の0.5mlを取ってEPチューブに入れ、計数を行う。96孔板を敷き、1孔にあたり細胞の2000個を植え、1種あたりの化合物に二重孔の3個により必要な細胞量及び細胞孔量を算出し、細胞計数により必要な細胞懸濁液量及び培地の希釈に必要な細胞数量を算出し、1孔にあたり細胞の2000個を植え、培地の100μlを板に敷き、均一になるまで吸い打ち、吐出ガンピペットで細胞を植え、インキュベーターに設置して培養する。
【０１７５】
（２）薬を入れる
【０１７６】
元の培地を吸い出して廃棄し、化合物母液を濃度が各々0、5、15、30、45、60μMである希釈液に希釈し、均一して混合し、吐出ガンピペット（その中の孔の3個を使用する）で1孔にあたり希釈液の100ulを吸い取り、96孔板を傾け、細胞に傷を付けないように希釈液をマークを付けた孔の3個に入れ、相次ぎに各濃度の希釈液をを入れてから均一になるまで3回程度に吹いたり吸ったりし、各化合物についてこれにより類推し、マークを付け、軽く2回に左右に揺れ、CO2インキュベーターに設置する。
【０１７７】
（３）MTT比色分析
【０１７８】
各化合物が48時間に細胞に作用するようにしてから検出を行う。クリーンベンチを15minに開けたままPBS温水浴で15minに加熱し、-20℃でMTTを取り出して光を避けて解凍し（MTT母液濃度5mg/ml）、培地と検出終濃度500μg/mlmTTの混合液を調製し（即ち体積比1:10でMTT培地との混合液を調製する）、ピペットで各々MTT溶液及び培地をVタンクに移して均一になるように混合し、吐出ガンピペットで1孔にあたりその100ulを入れてMTTに調製して96孔板に点滴する。37℃で適切な時間（1時間）に育て、MTTがTTC培地に還元するようにする（顕微鏡で観察すると、細胞に紫色の結晶があるが、薬を入れた細胞と薬を入れなかった細胞が顕著に違うとなると結構である）。真空ポンプに白色の吸引ヘッドを付けて上層の液体を吸い除き、薬の濃度が変わると、吸引ヘッドを交換し（即ち、3個にあたり吸引ヘッドを交換する）。インキュベーション時間が終了してからMTT混合液を吸い出して廃棄し、吐出ガンピペットで100ul/孔でDMSOを入れる。板及び床で10minに揺れる（顕微鏡で細胞の中の紫色の結晶の溶解が見えたら充分である）。
【０１７９】
マイクロプレートリーダーで550nmの波長で検出を行い、規程により各濃度の薬における細胞の生存率を算出し、散布図を作成し、MKN45人胃がん細胞増殖に対する各化合物のIC50結果（表1）を取得する。ゴシポールI-A9は比較サンプルである。
【表１】
2021513526.tif 000092
【０１８０】
表1によると、化合物I-26、I-39、I-49、I-50、I-96及びI-97はMKN45人胃がん細胞に対する顕著な抑制作用があり、その中、化合物I-39、I-49及びI-50は効果が比較品ゴシポールI-A9の以上にある。
【実施例３０】
【０１８１】
SKOV3人卵巣がん細胞増殖に対する化合物I-49、I-A2、I-A3及びI-A5の影響の測定
【０１８２】
（１）細胞を植える
【０１８３】
元の培地を廃棄し、PBSの2mlで洗浄し、パンクレアチンの0.5mlで3minに消化するようにし、培地の2mlを入れて消化を終止させ、遠心分離管に移し、その200gに対する遠心分離を5minに行い、上清を廃棄し、培地の2mlを入れて均一になるまで5回に吹き打ち、細胞懸濁液の0.5mlを取ってEPチューブに入れ、計数を行う。96孔板を敷き、1孔にあたり細胞の2000個を植え、各化合物が3回に重複することにより必要な細胞量及び細胞孔量を算出し、細胞計数により必要な細胞懸濁液量及び培地の希釈に必要な細胞数量を算出し、1孔にあたり細胞の2000個を植え、培地の100ulを板に敷き、均一になるまで吸い打ち、吐出ガンピペットで細胞を植え、インキュベーターに設置して培養する。
【０１８４】
（２）薬を入れる
【０１８５】
元の培地を吸い出して廃棄し、化合物母液を終濃度が各々0、1、2、4、8、16μMである希釈液に希釈し、均一して混合し、吐出ガンピペット（その中の孔の3個を使用する）で希釈液の100ulを吸い取り、96孔板を傾け、マークを付けた孔の3個に希釈された化合物混合液の100ulを入れ（細胞に傷を付けないように）、相次ぎに各濃度の希釈液（濃度が変わる場合に吸引ヘッドを交換すること）を入れてから均一になるまで3回程度に吹いたり吸ったりし、各化合物についてこれにより類推し、マークを付け、軽く2回に左右に揺れ、CO2インキュベーターに設置する。
【０１８６】
（３）MTT比色分析
【０１８７】
各化合物が48時間に細胞に作用するようにしてから検出を行う。クリーンベンチを15minに開けたままPBS温水浴で15minに加熱し、-20℃でMTTを取り出して光を避けて解凍し（MTT母液濃度5mg/ml）、培地と検出終濃度500μg/mlmTTの混合液を調製し（即ち体積比1:10でMTT培地との混合液を調製する）、Vタンクで均一に混合しる。吐出ガンピペットで1孔にあたりその100ulを入れてMTTを調製して96孔板に入れる。37℃で適切な時間（1時間）に育て、MTTがTTC培地に還元するようにする（顕微鏡で観察すると、細胞に紫色の結晶があるが、薬を入れた細胞と薬を入れなかった細胞が顕著に違うとなると結構である）。真空ポンプに白色の吸引ヘッドを付けて上層の液体を吸い除き、薬の濃度が変わると、吸引ヘッドを交換する（即ち、3個にあたり吸引ヘッドを交換する）。インキュベーション時間が終了してからMTT混合液を吸い出して廃棄し、吐出ガンピペットで100ul/孔でDMSOを入れる。板及び床で10minに揺れる（顕微鏡で細胞の中の紫色の結晶の溶解が見えたら充分である）。
【０１８８】
マイクロプレートリーダーで550nmの波長で検出を行い、規程により各濃度の薬における細胞の生存率を算出し、散布図を作成し、SKOV3 人卵巣がん細胞増殖に対する各化合物のIC50結果（表2）を取得する。ゴシポールI-A9は比較サンプルである。
【表２】
2021513526.tif 000093
【０１８９】
表2によると、化合物I-49、I-A2、I-A3及びI-A5はSKOV3 人卵巣がん細胞に対する顕著な抑制作用がある。その中、化合物I-49及びI-A3は効果が比較品ゴシポールI-A9の以上にあり、化合物I-A2及びI-A5は効果が比較品ゴシポールI-A9に近い。
【実施例３１】
【０１９０】
A549人肺がん細胞増殖に対する化合物I-28、I-29、I-45及びI-A4の影響の測定
【０１９１】
（１）細胞を植える
【０１９２】
元の培地を廃棄し、PBSの2mlで洗浄し、パンクレアチンの0.5mlで3minに消化するようにし、培地の2mlを入れて消化を終止させ、遠心分離管に移し、その200gに対する遠心分離を5minに行い、上清を廃棄し、培地の2mlを入れて均一になるまで5回に吹き打ち、細胞懸濁液の0.5mlを取ってEPチューブに入れ、計数を行う。96孔板を敷き、1孔にあたり細胞の2000個を植え、各化合物が3回に重複することにより必要な細胞量及び細胞孔量を算出し、細胞計数により必要な細胞懸濁液量及び培地の希釈に必要な細胞数量を算出し、1孔にあたり細胞の2000個を植え、培地の100ulを板に敷き、均一になるまで吸い打ち、吐出ガンピペットで細胞を植え、インキュベーターに設置して培養する。
【０１９３】
（２）薬を入れる
【０１９４】
元の培地を吸い出して廃棄し、化合物母液を終濃度が各々0、5、10、20、30、60、80μMである希釈液に希釈し、均一して混合しる。吐出ガンピペット（その中の孔の3個を使用する）で希釈液の100ulを吸い取り液、96孔板を傾け、マークを付けた孔の3個に希釈された化合物混合液の100ulを入れ（細胞に傷を付けないように）、相次ぎに各濃度の希釈液（濃度が変わる場合に吸引ヘッドを交換すること）を入れてから均一になるまで3回程度に吹いたり吸ったりし、各個の化合物についてそれにより類推し、マークを付け、軽く2回に左右に揺れ、CO2インキュベーターに設置する。
【０１９５】
（３）MTT比色分析
【０１９６】
各化合物が48時間に細胞に作用するようにしてから検出を行う。クリーンベンチを15minに開けたままPBS温水浴で15minに加熱し、-20℃でMTTを取り出して光を避けて解凍し（MTT母液濃度5mg/ml）、培地と検出終濃度500μg/mlmTTの混合液を調製し（即ち体積比1:10でMTT培地との混合液を調製する）、Vタンクで均一に混合しる。吐出ガンピペットで1孔にあたりその100ulを入れてMTTを調製して96孔板に入れる。37℃で適切な時間（1時間）に育て、MTTがTTC培地に還元するようにする（顕微鏡で観察すると、細胞に紫色の結晶があるが、薬を入れた細胞と薬を入れなかった細胞が顕著に違うとなると結構である）。真空ポンプに白色の吸引ヘッドを付けて上層の液体を吸い除き、薬の濃度が変わると、吸引ヘッドを交換する（即ち、3個にあたり吸引ヘッドを交換する）。インキュベーション時間が終了してからMTT混合液を吸い出して廃棄し、吐出ガンピペットで100ul/孔でDMSOを入れる。板及び床で10minに揺れる（顕微鏡で細胞の中の紫色の結晶の溶解が見えたら充分である）。
【０１９７】
マイクロプレートリーダーで550nmの波長で検出を行い、規程により各濃度の薬における細胞の生存率を算出し、散布図を作成し、A549人肺がん細胞増殖に対する各化合物のIC50結果（表3）を取得する。ゴシポールI-A9は比較サンプルである。
【表３】
2021513526.tif 000094
【０１９８】
表3によると、化合物I-28、I-29、I-45及びI-A4はA549人肺がん細胞に対する抑制作用があるが、効果が比較品ゴシポールI-A9より少し下手である。
【実施例３２】
【０１９９】
PC3人前立腺がん細胞増殖に対する化合物I-5、I-21、I-24、I-25、I-26、I-29、I-31、I-41、I-42、I-43、I-44、I-45、I-46、I-47、I-48、I-49、I-50、I-51、I-53、I-55、I-100、I-A2、I-A3、I-A5、I-A6及びI-A8の影響の測定
【０２００】
（１）細胞を植える
【０２０１】
元の培地を廃棄し、PBSの2mlで洗浄し、パンクレアチンの0.5mlで3minに消化するようにし、培地の2mlを入れて消化を終止させ、遠心分離管に移し、その200gに対する遠心分離を5minに行い、上清を廃棄し、培地の2mlを入れて均一になるまで5回に吹き打ち、細胞懸濁液の0.5mlを取ってEPチューブに入れ、計数を行う。96孔板を敷き、1孔にあたり細胞の2000個を植え、各化合物が3回に重複することにより必要な細胞量及び細胞孔量を算出し、細胞計数により必要な細胞懸濁液量及び培地の希釈に必要な細胞数量を算出し、1孔にあたり細胞の2000個を植え、培地の100ulを板に敷き、均一になるまで吸い打ち、吐出ガンピペットで細胞を植え、インキュベーターに設置して培養する。
【０２０２】
（２）薬を入れる
【０２０３】
元の培地を吸い出して廃棄し、化合物母液を終濃度が各々0、2、4、8、16、32μMである希釈液に希釈し、均一して混合しる。吐出ガンピペット（その中の孔の3個を使用する）で希釈液の100ulを吸い取り、96孔板を傾け、マークを付けた孔の3個に希釈された化合物混合液の100ulを入れ（細胞に傷を付けないように）、相次ぎに各濃度の希釈液（濃度が変わる場合に吸引ヘッドを交換すること）を入れてから均一になるまで3回程度に吹いたり吸ったりし、各化合物についてこれにより類推し、マークを付け、軽く2回に左右に揺れ、CO2インキュベーターに設置する。
【０２０４】
（３）MTT比色分析
【０２０５】
各化合物が48時間に細胞に作用するようにしてから検出を行う。クリーンベンチを15minに開けたままPBS温水浴で15minに加熱し、-20℃でMTTを取り出して光を避けて解凍し（MTT母液濃度5mg/ml）、培地と検出終濃度500μg/mlmTTの混合液を調製し（即ち体積比1:10でMTT培地との混合液を調製する）、Vタンクで均一に混合しる。吐出ガンピペットで1孔にあたりその100ulを入れてMTTを調製して96孔板に入れる。37℃で適切な時間（1時間）に育て、MTTがTTC培地に還元するようにする（顕微鏡で観察すると、細胞に紫色の結晶があるが、薬を入れた細胞と薬を入れなかった細胞が顕著に違うとなると結構である）。真空ポンプに白色の吸引ヘッドを付けて上層の液体を吸い除き、薬の濃度が変わると、吸引ヘッドを交換する（即ち、3個にあたり吸引ヘッドを交換する）。インキュベーション時間が終了してからMTT混合液を吸い出して廃棄し、吐出ガンピペットで100ul/孔でDMSOを入れる。板及び床で10minに揺れる（顕微鏡で細胞の中の紫色の結晶の溶解が見えたら充分である）。
【０２０６】
マイクロプレートリーダーで550nmの波長で検出を行い、規程により各濃度の薬における細胞の生存率を算出し、散布図を作成し、PC3人前立腺がん細胞増殖に対する各化合物のIC50結果（表4）を取得する。ゴシポールI-A9は比較サンプルである。
【表４】
2021513526.tif 000095
【０２０７】
表4によると、化合物I-5、I-21、I-24、I-25、I-26、I-29、I-31、I-41、I-42、I-43、I-44、I-45、I-46、I-47、I-48、I-49、I-50、I-51、I-53、I-55、I-100、I-A2、I-A3、I-A5、I-A6及びI-A8はPC3人前立腺がん細胞に対する顕著な抑制作用がある。その中、I-5、I-21、I-24、I-25、I-29、I-31、I-41、I-42、I-43、I-44、I-45、I-46、I-47、I-50、I-51、I-53、I-55、I-A2、I-A3、I-A5、I-A6及びI-A8を含む大部分の化合物は効果が比較品ゴシポールI-A9の以上にある。
【０２０８】
前記の実験結果によると、本発明による生物学的活性のある多置換ベンゼン化合物はがん細胞増殖を抑制する活性があるので、薬そして開発する潜在力があり、リード化合物として新型抗がん薬の開発に用いられることができる。
【０２０９】
上記の実施例は本発明の望ましい実施方式であるが、本発明の実施方式が上記の実施例に限られるものではなく、本発明の精神実質及び原理に違反しない他のすべての変更、修飾、代替、組合せまたは簡素化が同一の置換方式と認められ、共に本発明の保護範囲にある。
【国際調査報告】
2021513526.tif 000102
2021513526.tif 000103
2021513526.tif 000104
2021513526.tif 000105