(57)【要約】本開示は、イノトロピックおよび／またはルシトロピック機能不全によって特徴づけられる疾患または状態の治療、緩和または予防においてアデノシンＡ2受容体アゴニストの効果を増強するための、および／またはアデノシンＡ2受容体機能障害によって特徴づけられる疾患または状態の治療、緩和または予防においてアデノシンＡ2受容体機能を増強するための、方法、使用および材料であって、これを必要とする患者、例えば心不全に罹患している患者にＰＤＥ１阻害剤の有効量を投与することを含む、方法、使用および材料を提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
イノトロピックおよび／またはルシトロピック機能不全によって特徴づけられる疾患または状態の治療、緩和または予防においてアデノシンＡ2受容体アゴニストの効果を増強する方法および／またはアデノシンＡ2受容体機能障害によって特徴づけられる疾患または状態の治療、緩和または予防においてアデノシンＡ2受容体機能を増強する方法であって、これを必要とする患者にＰＤＥ１阻害剤の有効量を投与することを含む、方法。
【請求項２】
ＰＤＥ１阻害剤が、
Ａ）  エナンチオマー、ジアステレオ異性体およびラセミ体を含む、遊離形態、塩形態またはプロドラッグ形態の、式Ｉ'：
【化１】
2021513518.tif 000018
［式中、
（ｉ）Ｒ1は、ＨまたはＣ1-4アルキル（例えば、メチル）であり；
（ｉｉ）Ｒ4は、ＨまたはＣ1-4アルキルであり、Ｒ2およびＲ3は、独立して、ＨまたはＣ1-4アルキル（例えば、Ｒ2およびＲ3は共にメチルであるか、またはＲ2はＨであり、Ｒ3はイソプロピルである）、アリール、ヘテロアリール、(場合によってはヘテロ)アリールアルコキシ、または(場合によってはヘテロ)アリールアルキルであるか；または
Ｒ2はＨであり、Ｒ3およびＲ4は一緒になってジ−、トリ−またはテトラメチレン架橋を形成し（好ましくはＲ3およびＲ4が一緒になってシス配置を有しており、例えば、Ｒ3およびＲ4を担持する炭素はそれぞれＲ配置およびＳ配置を有する）；
（ｉｉｉ）Ｒ5は、例えばハロアルキルで置換されている、置換ヘテロアリールアルキルであるか；または
Ｒ5は、式Ｉのピラゾロ部分の窒素の１つに結合しており、式Ａ：
【化２】
2021513518.tif 000019
（式中、Ｘ、ＹおよびＺは、独立して、ＮまたはＣであり、Ｒ8、Ｒ9、Ｒ11およびＲ12は、独立して、Ｈまたはハロゲン（例えば、ＣｌまたはＦ）であり、Ｒ10は、ハロゲン、アルキル、シクロアルキル、ハロアルキル（例えば、トリフルオロメチル）、アリール（例えば、フェニル）、ヘテロアリール（例えば、ハロゲンで置換されていてもよい、ピリジル（例えば、ピリジン−２−イル）、またはチアジアゾリル（例えば、１,２,３−チアジアゾール−４−イル））、ジアゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、アリールカルボニル（例えば、ベンゾイル）、アルキルスルホニル（例えば、メチルスルホニル）、ヘテロアリールカルボニル、またはアルコキシカルボニルである；ただし、Ｘ、ＹまたはＺが窒素である場合、それぞれ、Ｒ8、Ｒ9またはＲ10は存在しない）
で示される部分であり；
（ｉｖ）Ｒ6は、Ｈ、アルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル（例えば、ベンジル）、アリールアミノ（例えば、フェニルアミノ）、ヘテロアリールアミノ、Ｎ,Ｎ−ジアルキルアミノ、Ｎ,Ｎ−ジアリールアミノ、またはＮ−アリール−Ｎ−(アリールアルキル)アミノ（例えば、Ｎ−フェニル−Ｎ−(１,１'−ビフェン−４−イルメチル)アミノ)であり；
（ｖ）ｎは０または１であり；
（ｖｉ）ｎが１である場合、Ａは、−Ｃ(Ｒ13Ｒ14)−であり、
ここで、Ｒ13およびＲ14は、独立して、ＨまたはＣ1-4アルキル、アリール、ヘテロアリール、(場合によってはヘテロ)アリールアルコキシまたは(場合によってはヘテロ)アリールアルキルである］
で示される化合物；
Ｂ）  遊離形態、塩形態またはプロドラッグ形態の、式ＩＩ'：
【化３】
2021513518.tif 000020
［式中、
（ｉ）Ｘは、Ｃ1-6アルキレン（例えば、メチレン、エチレンまたはプロパ−２−イン−１−イレン）であり；
（ｉｉ）Ｙは、単結合、アルキニレン（例えば、−Ｃ≡Ｃ−）、アリーレン（例えば、フェニレン）またはヘテロアリーレン（例えば、ピリジレン）であり；
（ｉｉｉ）Ｚは、Ｈ、アリール（例えば、フェニル）、ヘテロアリール（例えば、ピリジル、例えば、ピリダ−２−イル）、ハロ（例えば、Ｆ、Ｂｒ、Ｃｌ）、ハロＣ1-6アルキル（例えば、トリフルオロメチル）、−Ｃ(Ｏ)−Ｒ1、−Ｎ(Ｒ2)(Ｒ3)、またはＮもしくはＯからなる群から選択される少なくとも１個の原子を含有していてもよいＣ3-7シクロアルキル（例えば、シクロペンチル、シクロヘキシル、テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル、またはモルホリニル）であり；
（ｉｖ）Ｒ1は、Ｃ1-6アルキル、ハロＣ1-6アルキル、−ＯＨまたは−ＯＣ1-6アルキル（例えば、−ＯＣＨ3）であり；
（ｖ）Ｒ2およびＲ3は、独立して、ＨまたはＣ1-6アルキルであり；
（ｖｉ）Ｒ4およびＲ5は、独立して、Ｈ、Ｃ1-6アルキルまたはアリール（例えば、フェニル）（これは、１個以上の、ハロで置換されていてもよい（例えば、フルオロフェニル、例えば、４−フルオロフェニル）、ヒドロキシで置換されていてもよい（例えば、ヒドロキシフェニル、例えば、４−ヒドロキシフェニルまたは２−ヒドロキシフェニル）またはＣ1-6アルコキシで置換されていてもよい）であり；
（ｖｉｉ）ここで、Ｘ、ＹおよびＺは、独立して、１個以上の、ハロ（例えば、Ｆ、ＣｌまたはＢｒ）、Ｃ1-6アルキル（例えば、メチル）、ハロＣ1-6アルキル（例えば、トリフルオロメチル）で置換されていてもよく、例えば、Ｚは、１個以上の、ハロ（例えば、６−フルオロピリダ−２−イル、５−フルオロピリダ−２−イル、６−フルオロピリダ−２−イル、３−フルオロピリダ−２−イル、４−フルオロピリダ−２−イル、４,６−ジクロロピリダ−２−イル）、ハロＣ1-6アルキル（例えば、５−トリフルオロメチルピリダ−２−イル）またはＣ1-6−アルキル（例えば、５−メチルピリダ−２−イル）で置換されている、ヘテロアリール、例えばピリジルであるか、またはＺは、１個以上のハロ（例えば、４−フルオロフェニル）で置換されている、アリール、例えばフェニルである］
で示される化合物；
Ｃ）  遊離形態または塩形態の、式ＩＩＩ'：
【化４】
2021513518.tif 000021
［式中、
（ｉ）Ｒ1は、ＨまたはＣ1-4アルキル（例えば、メチルまたはエチル）であり；
（ｉｉ）Ｒ2およびＲ3は、独立して、ＨまたはＣ1-6アルキル（例えば、メチルまたはエチル）であり；
（ｉｉｉ）Ｒ4は、ＨまたはＣ1-4アルキル（例えば、メチルまたはエチル）であり；
（ｉｖ）Ｒ5は、独立して、−Ｃ(＝Ｏ)−Ｃ1-6アルキル（例えば、−Ｃ(＝Ｏ)−ＣＨ3）およびＣ1-6−ヒドロキシアルキル（例えば、１−ヒドロキシエチル）から選択される１個以上の基で置換されていてもよいアリール（例えば、フェニル）であり；
（ｖ）Ｒ6およびＲ7は、独立して、Ｈ、または独立してＣ1-6アルキル（例えば、メチルまたはエチル）およびハロゲン（例えば、ＦまたはＣｌ）から選択される１個以上の基で置換されていてもよいアリール（例えば、フェニル）であり、例えば、非置換フェニル、または１個以上のハロゲン（例えば、Ｆ）で置換されているフェニル、または１個以上のＣ1-6アルキルおよび１個以上のハロゲンで置換されているフェニル、または１個のＣ1-6アルキルおよび１個のハロゲンで置換されているフェニル、例えば４−フルオロフェニルまたは３,４−ジフルオロフェニルまたは４−フルオロ−３−メチルフェニルであり；
（ｖｉ）ｎは、１、２、３または４である］
で示される化合物；または
Ｄ）  遊離形態または塩形態の、式ＩＶ'：
【化５】
2021513518.tif 000022
［式中、
（ｖｉ）Ｒ1は、Ｃ1-4アルキル（例えば、メチルまたはエチル）、または−ＮＨ(Ｒ2)であり、ここで、Ｒ2は、ハロ（例えば、フルオロ）で置換されていてもよいフェニル、例えば４−フルオロフェニルであり；
（ｖｉｉ）Ｘ、ＹおよびＺは、独立して、ＮまたはＣであり；
（ｖｉｉｉ）Ｒ3、Ｒ4およびＲ5は、独立して、ＨまたはＣ1-4アルキル（例えば、メチル）であるか；またはＲ3はＨであり、Ｒ4およびＲ5は一緒になってトリメチレン橋を形成し（好ましくはＲ4およびＲ5が一緒になってシス配置を有しており、例えば、Ｒ4およびＲ5を担持する炭素はそれぞれＲ配置およびＳ配置を有する）、
（ｉｘ）Ｒ6、Ｒ7およびＲ8は、独立して、
Ｈ、
Ｃ1-4アルキル（例えば、メチル）、
ヒドロキシで置換されているピリダ−２−イル、または
−Ｓ(Ｏ)2−ＮＨ2であり；
ただし、Ｘ、Ｙおよび／またはＺがＮである場合、それぞれ、Ｒ6、Ｒ7および／またはＲ8は存在せず；また、Ｘ、ＹおよびＺが全てＣである場合、Ｒ6、Ｒ7またはＲ8のうち少なくとも１つは、−Ｓ(Ｏ)2−ＮＨ2、またはヒドロキシで置換されているピリダ−２−イルである］
で示される化合物
のうちの１つである、請求項１記載の方法。
【請求項３】
ＰＤＥ１阻害剤が、
ａ）  遊離形態または薬学的に許容される塩形態、例えば一リン酸塩形態の(６ａＲ,９ａＳ)−５,６ａ,７,８,９,９ａ−ヘキサヒドロ−５−メチル−３−(フェニルアミノ)−２−((４−(６−フルオロピリジン−２−イル)フェニル)メチル)−シクロペント[４,５]イミダゾ[１,２−ａ]ピラゾロ[４,３−ｅ]ピリミジン−４(２Ｈ)−オン；
ｂ）  遊離形態または薬学的に許容される塩形態の７,８−ジヒドロ−２−(４−アセチルベンジル)−３−(４−フルオロフェニルアミノ)−５,７,７−トリメチル−[２Ｈ]−イミダゾ−[１,２−ａ]ピラゾロ[４,３−ｅ]ピリミジン−４(５Ｈ)−オン；および
ｃ）  遊離形態または薬学的に許容される塩形態の３−((４−フルオロフェニル)アミノ)−５,７,７−トリメチル−２−((２−メチルピリミジン−５−イル)メチル)−７,８−ジヒドロ−２Ｈ−イミダゾ[１,２−ａ]ピラゾロ[４,３−ｅ]ピリミジン−４(５Ｈ)−オン
から選択される、請求項１または２記載の方法。
【請求項４】
疾患または状態が、狭心症、脳卒中、腎不全、本態性高血圧症、肺高血圧症、二次性高血圧症、孤立性収縮期高血圧症、糖尿病関連高血圧症、アテローム性動脈硬化症関連高血圧症、腎血管性高血圧症、うっ血性心不全、炎症性疾患または障害、線維症、心肥大、血管リモデリング、結合組織疾患または障害（例えば、マルファン症候群）、慢性心不全、心筋虚血、心筋低酸素症、再灌流傷害、左室機能不全（例えば、心筋梗塞、心室拡張）、血管漏出（すなわち、低酸素症の結果として生じる））、筋ジストロフィー（例えば、デュシェンヌ型筋ジストロフィー）、または筋萎縮性側索硬化症、慢性心不全、心筋炎症、線維症、心筋虚血、心筋低酸素症、再灌流傷害、左室機能不全（例えば、心筋梗塞、心室拡張）、血管漏出（すなわち、低酸素症の結果として生じる）、急性血管炎症（すなわち、血管損傷の結果として生じる）、または心肥大である、いずれかの上記請求項に記載の方法。
【請求項５】
治療されるべき疾患または状態が心不全である、いずれかの上記請求項に記載の方法。
【請求項６】
ＰＤＥ１阻害剤が、アデノシンＡ2アゴニスト、βアドレナリン受容体アンタゴニスト（すなわち、β遮断薬）；ＡＣＥ阻害剤；ネプリライシン阻害剤；抗高リポタンパク血症薬（例えば、アリールオキシアルカン酸／フィブリン酸誘導体、レジン／胆汁酸捕捉剤、ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤、ニコチン酸誘導体、甲状腺ホルモンまたは甲状腺ホルモンアナログまたはそれらの組合せ）；抗動脈硬化症薬（例えば、ピリジノールカルバメート）；グアニル酸シクラーゼ活性化薬；抗血栓薬および／または線維素溶解薬（例えば、抗凝固薬、抗凝固薬アンタゴニスト、血小板凝集阻害薬、血栓溶解薬、血栓溶解薬アンタゴニスト）；血液凝固薬（例えば、血栓溶解薬アンタゴニストおよび抗凝固薬アンタゴニスト）；抗不整脈薬（例えば、ナトリウムチャネル遮断薬、再分極延長薬、カルシウムチャネル遮断薬）；抗高血圧薬（例えば、交感神経遮断薬、α／β遮断薬、α遮断薬、抗アンジオテンシンＩＩ薬、β遮断薬、カルシウムチャネル遮断薬、血管拡張薬）；アリールエタノールアミン誘導体；ベンゾチアジアジン誘導体；Ｎ−カルボキシアルキル(ペプチド／ラクタム）誘導体；ジヒドロピリジン誘導体；グアニジン誘導体；ヒドラジン／フタラジン；イミダゾール誘導体；四級アンモニウム化合物；レセルピン誘導体；スルホンアミド誘導体；血管収縮剤；利尿剤；強心薬；抗狭心症薬またはそれらの組合せから選択される別の治療薬と組み合わせて投与される、上記方法のいずれか。
【請求項７】
イノトロピックおよび／またはルシトロピック機能不全によって特徴づけられる疾患または状態の治療、緩和または予防においてアデノシンＡ2受容体アゴニストの効果を増強する方法を含み、アデノシンＡ2受容体アゴニストが、アデノシンＡ2B受容体アゴニストであり、該効果が、ＰＤＥ１によるｃＡＭＰの分解を阻害することによって環状ヌクレオチドのアデノシンＡ2媒介上昇を増強または延長することである、上記方法のいずれか。
【請求項８】
アデノシンＡ2受容体アゴニストが内在性アデノシンを含む、請求項７記載の方法。
【請求項９】
アデノシンＡ2受容体機能障害によって特徴づけられる疾患または状態の治療、緩和または予防においてアデノシンＡ2受容体機能を増強することを含み、該アデノシンＡ2受容体機能障害が、（ｉ）内在性アデノシンに対するアデノシンＡ2B受容体の反応性の低下および／または（ｉｉ）心臓損傷または心不全に応答した内在性アデノシンの放出および／または産生の低下によって特徴づけられる、いずれかの上記請求項に記載の方法。
【請求項１０】
ＰＤＥ１阻害剤が、０.０１ｍｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇの濃度で投与される、いずれかの上記請求項に記載の方法。
【請求項１１】
患者がヒトであり、ＰＤＥ１阻害剤が経口一日量１〜１０ｍｇで投与される、いずれかの上記請求項に記載の方法。
【請求項１２】
患者がヒトであり、ＰＤＥ１阻害剤が経口一日量０.５〜２０ｍｇ、例えば１〜１０ｍｇで投与され、ＰＤＥ１阻害剤が、
ａ）  遊離形態または薬学的に許容される塩形態、例えば一リン酸塩形態の(６ａＲ,９ａＳ)−５,６ａ,７,８,９,９ａ−ヘキサヒドロ−５−メチル−３−(フェニルアミノ)−２−((４−(６−フルオロピリジン−２−イル)フェニル)メチル)−シクロペント[４,５]イミダゾ[１,２−ａ]ピラゾロ[４,３−ｅ]ピリミジン−４(２Ｈ)−オン；
ｂ）  遊離形態または薬学的に許容される塩形態の７,８−ジヒドロ−２−(４−アセチルベンジル)−３−(４−フルオロフェニルアミノ)−５,７,７−トリメチル−[２Ｈ]−イミダゾ−[１,２−ａ]ピラゾロ[４,３−ｅ]ピリミジン−４(５Ｈ)−オン；および
ｃ）  遊離形態または薬学的に許容される塩形態の３−((４−フルオロフェニル)アミノ)−５,７,７−トリメチル−２−((２−メチルピリミジン−５−イル)メチル)−７,８−ジヒドロ−２Ｈ−イミダゾ[１,２−ａ]ピラゾロ[４,３−ｅ]ピリミジン−４(５Ｈ)−オン
から選択される、請求項１１記載の方法。
【請求項１３】
イノトロピックおよび／またはルシトロピック機能不全によって特徴づけられる疾患または状態の治療、緩和または予防におけるアデノシンＡ2受容体アゴニストの効果の増強、および／またはアデノシンＡ2受容体機能障害によって特徴づけられる疾患または状態の治療、緩和または予防におけるアデノシンＡ2受容体機能の増強において用いるための、単独の活性薬剤としての、または１つ以上のさらなる治療薬との医薬組合せにおける、ＰＤＥ１阻害剤。
【請求項１４】
方法１以降よび方法２以降から選択される方法、ならびに組合せ１以降から選択される医薬組合せを包含する、特に実施例を参照する、本明細書の先に記載の全ての方法およびプロダクト。
【請求項１５】
心毒性を治療、緩和または予防する方法であって、これを必要とする患者にＰＤＥ１阻害剤の有効量を投与することを含む、方法。
【請求項１６】
ＰＤＥ１阻害剤の投与が、アデノシンＡ2シグナル伝達を増強するのに有効な量で投与される、請求項１５記載の方法。
【請求項１７】
ＰＤＥ１阻害剤の投与が、アデノシンＡ2AまたはアデノシンＡ2Bの発現の増加を誘発する、請求項１６記載の方法。
【請求項１８】
心毒性が、心毒性治療または薬の投与の結果として生じる、請求項１５〜１７のいずれかに記載の方法。
【請求項１９】
心毒性治療または薬が、放射線療法および／または化学療法剤である、請求項１８記載の方法。
【請求項２０】
心毒性治療が化学療法剤である、請求項１９記載の方法。
【請求項２１】
化学療法剤が、ダウノルビシン、ドキソルビシン、エピルビシン、イダルビシン、バルルビシン、シクロホスファミド、イホスファミド、シスプラチン、カルムスチン、ブスルファン、クロルメチン、マイトマイシン、パクリタキセル、エトポシド、テニポシド、ビンカアルカロイド、フルオロウラシル、シタラビン、アムサクリン、クラドリビン、アスパラギナーゼ、トレチノインおよび／またはペントスタチンである、請求項２０記載の方法。
【請求項２２】
心毒性治療が放射線療法である、請求項１８記載の方法。
【請求項２３】
心毒性の治療、緩和または予防のための医薬組合せであって、ＰＤＥ１阻害剤の有効量と、例えばアンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤、アンジオテンシン受容体遮断薬（ＡＲＢ）、β遮断薬（例えば、カルベジロールまたはネビボロール）、および鉄キレート剤（例えば、デクスラゾキサン）から選択される、１つ以上のさらなる心保護薬を含む医薬組合せ。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本開示は、アデノシンＡ2シグナル伝達を例えば心臓組織中にて強化または増強させるため、例えば、心機能を増強させるため、内在性アデノシンを含むアデノシンＡ2アゴニストの影響を増強させるため、および心不全および障害されているかまたは不十分なアデノシンＡ2媒介経路が関与する疾患または障害を治療するための、ホスホジエステラーゼ１（ＰＤＥ１）の阻害剤の投与に関する。
【背景技術】
【０００２】
治療の観点から、ＰＤＥは、それらの構造が特異的かつ強力な小分子阻害剤の影響を受けやすく、細胞特異的発現が選択的な臓器標的化を提供するので、特に治療的に興味深い。ＰＤＥは１１種類のファミリーが同定されており、合計で１００種類を超えるアイソフォームがある。ＰＤＥ４、ＰＤＥ７およびＰＤＥ８はｃＡＭＰに対して非常に選択的であり、ＰＤＥ５、ＰＤＥ６およびＰＤＥ９はｃＧＭＰに対して選択的である。残りのＰＤＥは、生物学的条件および場合によってはアソフォームに依存する選択性をもって、両方を加水分解する。心臓および／または筋細胞はＰＤＥ６を除く全てのｍＲＮＡを発現し、ＰＤＥ１、ＰＤＥ２、ＰＤＥ３、ＰＤＥ４、ＰＤＥ５、ＰＤＥ８およびＰＤＥ９の機能的役割が同定されている。これらのＰＤＥのうちのいくつかのＰＤＥの阻害剤はＦＤＡ承認医薬品の形態でヒトにトランスレートされている。
【０００３】
ＰＤＥ１は、３種類のアイソフォーム１つとして発現し、ＰＤＥ１ＡおよびＰＤＥ１Ｃは心臓で見られ、ＰＤＥ１Ｂは主に脳で見られる。ＰＤＥ１Ａは、ｃＧＭＰに対してより選択的（ＫmがｃＡＭＰに対するよりも３３倍高い）であるが、ＰＤＥ１Ｃは、両方の環状ヌクレオチドに対して類似の親和性を有する。ＰＤＥ１は、心臓で恒常的に発現されており、サイクリックＡＭＰおよび／またはｃＧＭＰの両方を加水分解する。しかしながら、心血管調節におけるその役割についてはほとんど知られていない。げっ歯類の心臓は主に心臓組織でｃＧＭＰを非常に優先するＰＤＥ１Ａアイソフォームを発現するが、ヒトは主に心臓組織でｃＧＭＰおよびｃＡＭＰの両方に対して影響を与えるＰＤＥ１Ｃを発現する。マウスでは、非選択的ＰＤＥ１阻害がｃＧＭＰの増強をもって心肥大および線維症を弱めることが示されている。しかしながら、心臓で主にＰＤＥ１Ｃを発現するヒトなどの哺乳動物におけるＰＤＥ１阻害の心血管への影響を試験した研究はまだなく、ＰＤＥ１阻害の影響は、βアドレナリンまたはアデノシン刺激／遮断の後など、関連治療と組み合わせて研究されていない。
【０００４】
アデノシンは、多くの生理的プロセスを調節する内在性プリンヌクレオシドである。アデノシンによる細胞シグナル伝達は、４種類の既知アデノシン受容体サブタイプ（Ａ1、Ａ2A、Ａ2BおよびＡ3）を介して生じる。正常細胞からの細胞外アデノシン濃度は約３００ｎＭである；しかしながら、細胞損傷（例えば、炎症組織または虚血組織における）に応答して、これらの濃度は急速に上昇する（６００〜１,２００ｎＭ）。アデノシンは、細胞保護活性を有しており、低酸素症、虚血、および発作活動（seizure activity）のインスタンスの間組織損傷を予防または制限するのに役立つ。該アデノシン受容体サブタイプ（Ａ1、Ａ2A、Ａ2BおよびＡ3）はＧタンパク質共役受容体である。４種類の受容体サブタイプはまた、アデニル酸シクラーゼ活性を刺激または阻害するそれらの能力に基づいて分類される。Ａ1受容体およびＡ3受容体は阻害性Ｇタンパク質と結合し、ｃＡＭＰレベルを減少させるが、Ａ2アデノシン受容体は、Ｇsと結合し、アデニル酸シクラーゼ活性を刺激し、ｃＡＭＰレベルを増強する。アデノシンは、例えば上室頻拍（ＳＶＴ）のような不整脈を評価または治療するために、治療薬として使用される。しかしながら、アデノシンまたは非選択的もしくは部分選択的アデノシンアゴニストは、徐脈、血圧低下および心拍出量減少などの重大副作用を引き起こし得、該副作用は、主に抗アドレナリン作用をもたらすアデノシンＡ1受容体の刺激に関連していると思われる。虚血（血液供給の遮断に起因する酸素欠乏）による損傷の軽減ならびに心臓、肺および脳の急性損傷の治療に有用であり得る選択的アデノシンＡ2B受容体アゴニストは開発中であるが、まだ市販されていない。
【０００５】
アデノシン関連経路の調節は幅広い治療効果を提供することができる。Ａ2Aアデノシン受容体の活性化は心保護効果を有することが示されている。多くの一般的に処方されている抗癌剤は心毒性作用を有することが知られている。例えば、アントラサイクリンクラスの細胞増殖抑制性抗生物質（cytostatic antibiotics）は、心毒性を引き起こす化学療法剤の中で最もよく知られている。シクロホスファミド、イホスファミド、シスプラチン、カルムスチン、ブスルファン、クロルメチンおよびマイトマイシンのような他の化学療法剤もまた心毒性に関連している。この心毒性は、軽度の血圧変化、血栓症、心電図変化、不整脈、心筋炎、心膜炎、心筋梗塞、心筋症、心不全（左室不全）およびうっ血性心不全を包含する、心臓に関連する様々な状態を引き起こす。
【０００６】
心不全（ＨＦ）は世界中で推定３０００〜５０００万人の患者に影響を及ぼしている。近年の治療法の進歩にも関わらず、その有病率は増加しており、それは、一部には死亡率の低下に起因しているが、肥満、糖尿病、年齢などの主要な併存疾患のより高い発生率が原因でもある。現在、心血管疾患および障害（例えば、うっ血性心不全）、ならびに心機能不全または心筋症を引き起こし得る疾患および障害（例えば、デュシェンヌ型筋ジストロフィー）の治療に有効な方法に対するほとんど満たされていないニーズがある。
【０００７】
心臓の状態および機能不全の治療のための改善された治療用組成物および方法が緊急に必要とされている。
【発明の概要】
【０００８】
ＨＦにおける心機能不全の主要な要素は、機能的予備力を制限する環状３',５'−環状アデノシンおよびグアノシン一リン酸（ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ）と結びついたセカンドメッセンジャーシグナル伝達欠陥にある。サイクリックＡＭＰはプロテインキナーゼＡ（ＰＫＡ）、ならびに興奮収縮連関およびサルコメア機能を急激に増強するｃＡＭＰによって活性化される交換タンパク質（ＥＰＡＣ）を刺激する。サイクリックＧＭＰは、プロテインキナーゼＧを活性化することにより、このシグナル伝達のブレーキとして働く。どちらの環状ヌクレオチドも、関連する血管および線維芽細胞の活性を有しており、血管の緊張を低下させ、透過性および増殖を変化させ、線維症を抑制する。ｃＡＭＰの合成は、アデニリルシクラーゼによって提供され、ｃＧＭＰの合成はグアニリルシクラーゼによって提供される。これらの環状ヌクレオチドの分解（加水分解）は環状ヌクレオチドホスホジエステラーゼ（ＰＤＥ）によって行われる。ＰＤＥ１は、アテローム性動脈硬化症、心圧負荷ストレスおよび心不全などの慢性疾患状態において、ならびに硝酸薬への長期曝露に反応して、アップレギュレートすると考えられる。したがって、例えば本明細書に記載されているような、ＰＤＥ１阻害剤は、ＰＤＥ１が発現する心臓組織、血管組織および肺組織におけるｃＡＭＰ／ＰＫＡおよびｃＧＭＰ／ＰＫＧ媒介経路を調節することができる。
【０００９】
本発明者らは、ＰＤＥ１Ｃが心臓組織において優勢なＰＤＥ１アイソフォームである哺乳動物において、ＰＤＥ１阻害が、Ａ2Bアデノシンシグナル伝達に依存するがβアドレナリン受容体シグナル伝達に依存しない急性の陽性変力作用、変弛緩作用および動脈血管拡張作用を有することを見出した。これらの作用は、健康な心臓および不全心のどちらにおいても見られる。かくして、これまでの研究では、Ａ2BＲが肝細胞におけるＰＤＥ３Ｂ調節および肺気道上皮細胞におけるＰＤＥ４Ｄと結びつくことが確認されているだけであるため、Ａ2BＲシグナル伝達をＰＤＥ１に結び付ける本開示およびデータは新規で全く予想外である。
【００１０】
ＰＤＥ１阻害剤自体は刺激されていない心臓組織に対して比較的影響を及ぼさないが、該組織が内在性アデノシンおよび／またはアデノシンＡ2アゴニストによって刺激された場合には、ＰＤＥ１阻害剤は環状ヌクレオチド（この経路においては主にｃＡＭＰであると考えられる）の分解を阻害することによりＡ2BＲシグナル伝達を強化および増強させ得、それによりアデノシンＡ2B刺激による変力作用、変弛緩作用および動脈血管拡張作用を増強および延長し、結果として、不全心においてでさえ、動脈収縮期圧を変化させずに心拍出量を増加させる。したがって、アデノシンＰＤＥ１阻害剤の増強は、狭心症、脳卒中、腎不全、本態性高血圧症、肺高血圧症、二次性高血圧症、孤立性収縮期高血圧症、糖尿病関連高血圧症、アテローム性動脈硬化症関連高血圧症、腎血管性高血圧症、うっ血性心不全、炎症性疾患または障害、線維症、心肥大、血管リモデリング、結合組織疾患または障害（例えば、マルファン症候群）、慢性心不全、急性心不全、心筋虚血、心筋低酸素症、再灌流傷害、左室機能不全（例えば、心筋梗塞、心室拡張）、または血管漏出（すなわち、低酸素症の結果生じる）、筋ジストロフィー（例えば、デュシェンヌ型筋ジストロフィー）、および筋萎縮性側索硬化症、または変力性もしくは変弛緩性機能不全によって特徴付けられるこれらの障害のいずれか（例えば、変力性機能不全によって特徴付けられる心肥大）などのさまざまな心血管疾患および障害の治療に潜在的に有用であり。
【００１１】
さらにまた、ＰＤＥ１阻害剤は、アデノシンＡ2シグナル伝達の作用を選択的に増強させることにより、アデノシン受容体アゴニストの有効投与量を減らすため、アデノシンＡ2選択的、例えばアデノシンＡ2B選択的療法を与えるため、また、望ましくない副作用、例えば、徐脈、血圧低下および心拍出量減少などのアデノシンＡ1受容体活性に関連する副作用を最小限にするために、アデノシンまたは他の非選択的もしくは部分選択的アデノシン受容体アゴニストと組み合わせて使用することができる。例えば、いくつかの実施態様では、本開示は、低用量のアデノシンアゴニストをＰＤＥ１阻害剤と組み合わせて投与することによりアデノシンまたは他の非選択的もしくは部分選択的アデノシン受容体アゴニストの副作用を軽減する方法であって、アデノシンアゴニストの用量が、例えばアデノシンＡ1受容体活性に起因する副作用を引き起こすには低すぎるが、ＰＤＥ１阻害剤と組み合わせてアデノシンＡ2受容体刺激をもたらすのに有効である量である、方法を提供する。
【００１２】
したがって、別の胃実施態様では、ＰＤＥ１阻害剤（例えば、本明細書に記載されるような式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、ＩＸ、Ｘおよび／またはＸＩで示されるＰＤＥ１阻害剤）は、アデノシンＡ2機能不全によって特徴付けられるかまたはアデノシンＡ2刺激から恩恵を受ける疾患または状態の治療または予防のために投与することができ、ＰＤＥ１阻害剤の有効量をそれを必要とする患者に投与することを含む。例えば、アデノシンＡ2機能不全によって特徴付けられる疾患または状態は、慢性心不全；急性心不全；心筋梗塞の結果生じる心不全；炎症性障害（例えば、大腸炎、炎症性腸症候群、急性血管炎症、急性小腸炎、潰瘍性炎症）；鎌状赤血球症；多発性硬化症；脳卒中；外傷性脳損傷；アルツハイマー病；線維症；低酸素症；虚血；再灌流傷害；左室機能不全（例えば、心筋梗塞、心室拡張)；カフェイン離脱；急性肺損傷；低酸素症の結果生じる血管漏出；心筋虚血；睡眠障害；敗血症；過敏性腸症候群；皮膚圧迫（skin pressure）；潰瘍；または創傷治癒であり得る。
【００１３】
いくつかの実施態様では、本開示はまた、ＰＤＥ１阻害剤と、アデノシンＡ2アゴニスト；βアドレナリン受容体アンタゴニスト（すなわち、β遮断薬）；ＡＣＥ阻害剤；アンジオテンシン受容体遮断薬（ＡＲＢ）；抗高リポタンパク血症薬；抗動脈硬化症薬；抗血栓／血栓溶解薬；血液凝固薬；抗不整脈薬；抗高血圧薬；血管収縮剤；うっ血性心不全治療薬；抗狭心症薬；抗菌薬；ネプリライシン阻害剤、またはそれらの組合せから選択されるさらなる治療薬とを含む併用療法を提供する。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
開示の詳細な説明
本開示の方法で使用するための化合物
特定に実施態様では、本開示は、本明細書に記載の治療および予防の方法で使用するためのＰＤＥ１阻害剤が、下記の本出願人自身の公開公報に記載されているＰＤＥ１阻害剤から選択されることを提供する：ＵＳ２００８−０１８８４９２Ａ１、ＵＳ２０１０−０１７３８７８Ａ１、ＵＳ２０１０−０２７３７５４Ａ１、ＵＳ２０１０−０２７３７５３Ａ１、ＷＯ２０１０／０６５１５３、ＷＯ２０１０／０６５１５１、ＷＯ２０１０／０６５１５１、ＷＯ２０１０／０６５１４９、ＷＯ２０１０／０６５１４７、ＷＯ２０１０／０６５１５２、ＷＯ２０１１／１５３１２９、ＷＯ２０１１／１３３２２４、ＷＯ２０１１／１５３１３５、ＷＯ２０１１／１５３１３６、ＷＯ２０１１／１５３１３８、ＷＯ２０１２／１７１０１６、ＷＯ２０１３／１９２５５６、ＷＯ２０１４／１５１４０９、ＷＯ２０１５／１９６１８６、ＷＯ２０１６／０２２８２５、ＷＯ２０１６０２２８３６、ＷＯ２０１６／０２２８９３、ＷＯ２０１６／０４４６６７、ＵＳ９５４６１７５（それぞれの内容全体は出典明示によりその全体が本明細書の一部とされる）。
【００１５】
一の実施態様では、本発明は、本明細書に記載の治療および予防の方法で使用するためのＰＤＥ１阻害剤が、エナンチオマー、ジアステレオ異性体およびラセミ体を含む、遊離形態、塩形態またはプロドラッグ形態の、式Ｉ：
【化１】
2021513518.tif 000002
［式中、
（ｉ）Ｒ1は、ＨまたはＣ1-4アルキル（例えば、メチル）であり；
（ｉｉ）Ｒ4は、ＨまたはＣ1-4アルキルであり、Ｒ2およびＲ3は、独立して、ＨまたはＣ1-4アルキル（例えば、Ｒ2およびＲ3は共にメチルであるか、またはＲ2はＨであり、Ｒ3はイソプロピルである）、アリール、ヘテロアリール、(場合によってはヘテロ)アリールアルコキシ、または(場合によってはヘテロ)アリールアルキルであるか；または
Ｒ2はＨであり、Ｒ3およびＲ4は一緒になってジ−、トリ−またはテトラメチレン架橋を形成し（好ましくはＲ3およびＲ4が一緒になってシス配置を有しており、例えば、Ｒ3およびＲ4を担持する炭素はそれぞれＲ配置およびＳ配置を有する）；
（ｉｉｉ）Ｒ5は、例えばハロアルキルで置換されている、置換ヘテロアリールアルキルであるか；または
Ｒ5は、式Ｉのピラゾロ部分の窒素の１つに結合しており、式Ａ：
【化２】
2021513518.tif 000003
（式中、Ｘ、ＹおよびＺは、独立して、ＮまたはＣであり、Ｒ8、Ｒ9、Ｒ11およびＲ12は、独立して、Ｈまたはハロゲン（例えば、ＣｌまたはＦ）であり、Ｒ10は、ハロゲン、アルキル、シクロアルキル、ハロアルキル（例えば、トリフルオロメチル）、アリール（例えば、フェニル）、ヘテロアリール（例えば、ハロゲンで置換されていてもよい、ピリジル（例えば、ピリジン−２−イル）、またはチアジアゾリル（例えば、１,２,３−チアジアゾール−４−イル））、ジアゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、アリールカルボニル（例えば、ベンゾイル）、アルキルスルホニル（例えば、メチルスルホニル）、ヘテロアリールカルボニル、またはアルコキシカルボニルである；ただし、Ｘ、ＹまたはＺが窒素である場合、それぞれ、Ｒ8、Ｒ9またはＲ10は存在しない）
で示される部分であり；
（ｉｖ）Ｒ6は、Ｈ、アルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル（例えば、ベンジル）、アリールアミノ（例えば、フェニルアミノ）、ヘテロアリールアミノ、Ｎ,Ｎ−ジアルキルアミノ、Ｎ,Ｎ−ジアリールアミノ、またはＮ−アリール−Ｎ−(アリールアルキル)アミノ（例えば、Ｎ−フェニル−Ｎ−(１,１'−ビフェン−４−イルメチル)アミノ)であり；
（ｖ）ｎは０または１であり；
（ｖｉ）ｎが１である場合、Ａは、−Ｃ(Ｒ13Ｒ14)−であり、
ここで、Ｒ13およびＲ14は、独立して、ＨまたはＣ1-4アルキル、アリール、ヘテロアリール、(場合によってはヘテロ)アリールアルコキシまたは(場合によってはヘテロ)アリールアルキルである］
で示される化合物であることを提供する。
【００１６】
別の実施態様では、本発明は、本明細書に記載の治療および予防の方法で使用するためのＰＤＥ１阻害剤が、遊離形態、塩形態またはプロドラッグ形態の、式ＩＩ：
【化３】
2021513518.tif 000004
［式中、
（ｉ）Ｘは、Ｃ1-6アルキレン（例えば、メチレン、エチレンまたはプロパ−２−イン−１−イレン）であり；
（ｉｉ）Ｙは、単結合、アルキニレン（例えば、−Ｃ≡Ｃ−）、アリーレン（例えば、フェニレン）またはヘテロアリーレン（例えば、ピリジレン）であり；
（ｉｉｉ）Ｚは、Ｈ、アリール（例えば、フェニル）、ヘテロアリール（例えば、ピリジル、例えば、ピリダ−２−イル）、ハロ（例えば、Ｆ、Ｂｒ、Ｃｌ）、ハロＣ1-6アルキル（例えば、トリフルオロメチル）、−Ｃ(Ｏ)−Ｒ1、−Ｎ(Ｒ2)(Ｒ3)、またはＮもしくはＯからなる群から選択される少なくとも１個の原子を含有していてもよいＣ3-7シクロアルキル（例えば、シクロペンチル、シクロヘキシル、テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル、またはモルホリニル）であり；
（ｉｖ）Ｒ1は、Ｃ1-6アルキル、ハロＣ1-6アルキル、−ＯＨまたは−ＯＣ1-6アルキル（例えば、−ＯＣＨ3）であり；
（ｖ）Ｒ2およびＲ3は、独立して、ＨまたはＣ1-6アルキルであり；
（ｖｉ）Ｒ4およびＲ5は、独立して、Ｈ、Ｃ1-6アルキルまたはアリール（例えば、フェニル）（これは、１個以上の、ハロで置換されていてもよい（例えば、フルオロフェニル、例えば、４−フルオロフェニル）、ヒドロキシで置換されていてもよい（例えば、ヒドロキシフェニル、例えば、４−ヒドロキシフェニルまたは２−ヒドロキシフェニル）またはＣ1-6アルコキシで置換されていてもよい）であり；
（ｖｉｉ）ここで、Ｘ、ＹおよびＺは、独立して、１個以上の、ハロ（例えば、Ｆ、ＣｌまたはＢｒ）、Ｃ1-6アルキル（例えば、メチル）、ハロＣ1-6アルキル（例えば、トリフルオロメチル）で置換されていてもよく、例えば、Ｚは、１個以上の、ハロ（例えば、６−フルオロピリダ−２−イル、５−フルオロピリダ−２−イル、６−フルオロピリダ−２−イル、３−フルオロピリダ−２−イル、４−フルオロピリダ−２−イル、４,６−ジクロロピリダ−２−イル）、ハロＣ1-6アルキル（例えば、５−トリフルオロメチルピリダ−２−イル）またはＣ1-6−アルキル（例えば、５−メチルピリダ−２−イル）で置換されている、ヘテロアリール、例えばピリジルであるか、またはＺは、１個以上のハロ（例えば、４−フルオロフェニル）で置換されている、アリール、例えばフェニルである］
で示される化合物であることを提供する。
【００１７】
さらに別の実施態様では、本発明は、本明細書に記載の治療および予防の方法で使用するためのＰＤＥ１阻害剤が、遊離形態または塩形態の、式ＩＩＩ：
【化４】
2021513518.tif 000005
［式中、
（ｉ）Ｒ1は、ＨまたはＣ1-4アルキル（例えば、メチルまたはエチル）であり；
（ｉｉ）Ｒ2およびＲ3は、独立して、ＨまたはＣ1-6アルキル（例えば、メチルまたはエチル）であり；
（ｉｉｉ）Ｒ4は、ＨまたはＣ1-4アルキル（例えば、メチルまたはエチル）であり；
（ｉｖ）Ｒ5は、独立して、−Ｃ(＝Ｏ)−Ｃ1-6アルキル（例えば、−Ｃ(＝Ｏ)−ＣＨ3）およびＣ1-6−ヒドロキシアルキル（例えば、１−ヒドロキシエチル）から選択される１個以上の基で置換されていてもよいアリール（例えば、フェニル）であり；
（ｖ）Ｒ6およびＲ7は、独立して、Ｈ、または独立してＣ1-6アルキル（例えば、メチルまたはエチル）およびハロゲン（例えば、ＦまたはＣｌ）から選択される１個以上の基で置換されていてもよいアリール（例えば、フェニル）であり、例えば、非置換フェニル、または１個以上のハロゲン（例えば、Ｆ）で置換されているフェニル、または１個以上のＣ1-6アルキルおよび１個以上のハロゲンで置換されているフェニル、または１個のＣ1-6アルキルおよび１個のハロゲンで置換されているフェニル、例えば４−フルオロフェニルまたは３,４−ジフルオロフェニルまたは４−フルオロ−３−メチルフェニルであり；
（ｖｉ）ｎは、１、２、３または４である］
であることを提供する。
【００１８】
さらに別の実施態様では、本発明は、本明細書に記載の治療および予防の方法で使用するためのＰＤＥ１阻害剤が、遊離形態または塩形態の、式ＩＶ：
【化５】
2021513518.tif 000006
［式中、
（ｉ）Ｒ1は、Ｃ1-4アルキル（例えば、メチルまたはエチル）、または−ＮＨ(Ｒ2)であり、ここで、Ｒ2は、ハロ（例えば、フルオロ）で置換されていてもよいフェニル、例えば４−フルオロフェニルであり；
（ｉｉ）Ｘ、ＹおよびＺは、独立して、ＮまたはＣであり；
（ｉｉｉ）Ｒ3、Ｒ4およびＲ5は、独立して、ＨまたはＣ1-4アルキル（例えば、メチル）であるか；またはＲ3はＨであり、Ｒ4およびＲ5は一緒になってトリメチレン橋を形成し（好ましくはＲ4およびＲ5が一緒になってシス配置を有しており、例えば、Ｒ4およびＲ5を担持する炭素はそれぞれＲ配置およびＳ配置を有する）、
（ｉｖ）Ｒ6、Ｒ7およびＲ8は、独立して、
Ｈ、
Ｃ1-4アルキル（例えば、メチル）、
ヒドロキシで置換されているピリダ−２−イル、または
−Ｓ(Ｏ)2−ＮＨ2であり；
（ｖ）ただし、Ｘ、Ｙおよび／またはＺがＮである場合、それぞれ、Ｒ6、Ｒ7および／またはＲ8は存在せず；また、Ｘ、ＹおよびＺが全てＣである場合、Ｒ6、Ｒ7またはＲ8のうち少なくとも１つは、−Ｓ(Ｏ)2−ＮＨ2、またはヒドロキシで置換されているピリダ−２−イルである］
であることを提供する。
【００１９】
一の実施態様では、本発明は、炎症または炎症関連疾患もしくは障害の治療または予防のためのＰＤＥ１阻害剤の投与であって、該阻害剤が、遊離形態または薬学的に許容される塩形態の、下記の化合物：
【化６】
2021513518.tif 000007
である、投与を提供する。
【００２０】
さらに別の実施態様では、本発明は、炎症または炎症関連疾患もしくは障害の治療または予防のためのＰＤＥ１阻害剤の投与であって、該阻害剤が、遊離形態または薬学的に許容される塩形態の、下記の化合物：
【化７】
2021513518.tif 000008
である、投与を提供する。
【００２１】
さらに別の実施態様では、本発明は、炎症または炎症関連疾患もしくは障害の治療または予防のためのＰＤＥ１阻害剤の投与であって、該阻害剤が、遊離形態または薬学的に許容される塩形態の、下記の化合物：
【化８】
2021513518.tif 000009
である、投与を提供する。
【００２２】
さらに別の実施態様では、本発明は、炎症または炎症関連疾患もしくは障害の治療または予防のためのＰＤＥ１阻害剤の投与であって、該阻害剤が、遊離形態または薬学的に許容される塩形態の、下記の化合物：
【化９】
2021513518.tif 000010
である、投与を提供する。
【００２３】
一の実施態様では、上記式（例えば、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩおよび／またはＩＶ）のいずれかで示される選択的ＰＤＥ１阻害剤は、ｃＧＭＰのホスホジエステラーゼ媒介（例えば、ＰＤＥ１媒介、特にＰＤＥ１Ｂ媒介）加水分解を阻害する化合物であり、例えば、好ましい化合物は、遊離形態または塩形態で、固定化金属親和性粒子試薬ＰＤＥアッセイにおいて、１μＭ未満、好ましくは５００ｎＭ未満、好ましくは５０ｎＭ未満、好ましくは５ｎＭ未満のＩＣ50を有する。
【００２４】
他の実施態様では、本発明は、癌または腫瘍から選択される状態の治療のため；腫瘍細胞の増殖、移動および／または浸潤の阻害のため；および／または神経膠腫の治療のための、ＰＤＥ１阻害剤の投与であって、該阻害剤が、下記の化合物：
【化１０】
2021513518.tif 000011
である、投与を提供する。
【００２５】
特に明記されていない場合、または文脈から明確でない場合、本明細書において以下の用語は以下の意味を有する：
【００２６】
（ａ）本明細書で用いられる「選択的ＰＤＥ１阻害剤」は、他のＰＤＥアイソフォームの阻害よりもＰＤＥ１阻害に対して少なくとも１００倍選択性のあるＰＤＥ１阻害剤をいう。
【００２７】
（ｂ）本明細書で用いられる「アルキル」は、飽和または不飽和炭化水素部分、好ましくは飽和であり、好ましくは１〜６個の炭素原子を有し、直鎖または分枝鎖状であってもよく、例えばハロゲン（例えば、クロロまたはフルオロ）、ヒドロキシ、またはカルボキシで、モノ置換、ジ置換またはトリ置換されていてもよい。
【００２８】
（ｃ）本明細書で用いられる「シクロアルキル」は、飽和または不飽和非芳香族炭化水素部分、好ましくは飽和であり、好ましくは３〜９個の炭素原子を含んでおり、そのうちの少なくともいくつかは非芳香族単環式または二環式または架橋の環状構造を形成し、例えばハロゲン（例えば、クロロまたはフルオロ）、ヒドロキシまたはカルボキシで、置換されていてもよい。シクロアルキルがＮおよびＯおよび／またはＳから選択される１個以上の原子を含有していてもよい場合、該シクロアルキルはヘテロシクロアルキルであってもよい。
【００２９】
（ｄ）「ヘテロシクロアルキル」は、特記しない限り、特記しない限り、飽和または不飽和非芳香族炭化水素部分であり、好ましくは飽和であり、好ましくは３〜９個の炭素原子を含んでおり、そのうちの少なくともいくつかは非芳香族単環式または二環式または架橋の環状構造を形成し、ここで、少なくとも１個の炭素原子がＮ、ＯまたはＳに置き換えられており、該ヘテロシクロアルキルは、例えばハロゲン（例えば、クロロまたはフルオロ）、ヒドロキシまたはカルボキシで、置換されていてもよい。
【００３０】
（ｅ）本明細書で用いられる「アリール」は、単環式または二環式の芳香族炭化水素であり、好ましくはフェニルであり、好ましくは、例えばアルキル（例えば、メチル）、ハロゲン（例えば、クロロまたはフルオロ）、ハロアルキル（例えば、トリフルオロメチル）、ヒドロキシ、カルボキシ、またはさらなるアリールまたはヘテロアリール（例えば、ビフェニルまたはピリジルフェニル）で、置換されていてもよい。
【００３１】
（ｆ）本明細書で用いられる「ヘテロアリール」は、芳香族部分であり、ここで、該芳香環を形成する原子のうち１個以上は炭素ではなく硫黄または窒素であり、例えば、ピリジルまたはチアジアゾリルであり、例えばアルキル、ハロゲン、ハロアルキル、ヒドロキシまたはカルボキシで、置換されていてもよい。
【００３２】
（ｇ）参考を容易にするため、本開示化合物のピラゾロ−ピリミジン核上の原子は、特記しない限り、式Ｉに記載されているナンバリングに従ってナンバリングされている。
【００３３】
（ｈ）Ｅがフェニレンである場合、ナンバリングは、以下のとおりである：
【化１１】
2021513518.tif 000012
【００３４】
（ｉ）置換基が「エン」で終わる場合、例えばアルキレン、フェニレンまたはアリールアルキレンの場合、該置換基は別の２つの置換基を架橋するかまたは連結することが意図されていることが意図される。したがって、メチレンは−ＣＨ2−であることが意図されており、フェニレンは−Ｃ6Ｈ4−であることが意図されており、アリールアルキレンは、−Ｃ6Ｈ4−ＣＨ2−または−ＣＨ2−Ｃ6Ｈ4−であることが意図されている。
【００３５】
（ｊ）本開示化合物は、以下のとおりナンバリングされることが意図されている：
【化１２】
2021513518.tif 000013
【００３６】
本開示化合物、例えば、置換されている４,５,７,８−テトラヒドロ−２Ｈ−イミダゾ[１,２−ａ]ピロロ[３,４−ｅ]ピリミジンまたは４,５,７,８,９−ペンタヒドロ−２Ｈ−ピリミド[１,２−ａ]ピロロ[３,４−ｅ]ピリミジン、例えば、式Ｉ（式Ｉ−ＡおよびＩ−Ｂ）で示される化合物、または式ＩＩ（例えば、ＩＩ−ＡまたはＩＩ−Ｂ）で示される化合物は、遊離形態または塩形態で、例えば酸付加塩として、存在し得る。本明細書では、特記しない限り、「本開示化合物」などの用語は、化合物を任意の形態、例えば遊離形態または酸付加塩形態、または化合物が酸性置換基を含む場合は塩基付加塩形態を包含するものとして理解されるべきである。本開示化合物は、医薬品として使用を意図しており、したがって、薬学的に許容される塩が好ましい。薬学的使用に適していない塩は、例えば本開示遊離化合物またはそれらの薬学的に許容される塩の単離または精製に有用であり得、したがって、それらも含まれる。
【００３７】
本明細書に開示されている化合物のいずれかを包含する本開示化合物、例えば、置換されていてもよい４,５,７,８−テトラヒドロ−(所望により４−チオキソまたは４−イミノ)−(１Ｈまたは２Ｈ)−イミダゾ[１,２−ａ]ピラゾロ[４,３−ｅ]ピリミジンまたは４,５,７,８,９−ペンタヒドロ−(１Ｈまたは２Ｈ)−ピリミド[１,２−ａ]ピラゾロ[４,３−ｅ]ピリミジン化合物、例えば、(１または２および／または３および／または５)−置換４,５,７,８−テトラヒドロ−１Ｈ−イミダゾ[１,２−ａ]ピラゾロ[４,３−ｅ]ピリミジン、４,５,７,８−テトラヒドロ−２Ｈ−イミダゾ[１,２−ａ]ピラゾロ[４,３−ｅ]ピリミジン、４,５,７,８−テトラヒドロ−(１Ｈまたは２Ｈ)−ピリミド[１,２−ａ]ピラゾロ[４,３−ｅ]ピリミジン−４(５Ｈ)−イミン、７,８−ジヒドロ−１Ｈ−イミダゾ[１,２−ａ]ピラゾロ[４,３−ｅ]ピリミジン−４(５Ｈ)−チオンまたは７,８−ジヒドロ−２Ｈ−イミダゾ[１,２−ａ]ピラゾロ[４,３−ｅ]ピリミジン−４(５Ｈ)−チオン化合物、例えば、本明細書に記載の式ＩＩＩの化合物または式ＩＶの化合物は、遊離形態または塩形態で、例えば酸付加塩として、存在し得る。
【００３８】
本開示化合物は、いくつかの場合には、プロドラッグ形態で存在し得る。プロドラッグ形態は、体内で本開示化合物に変換する化合物である。例えば、本開示化合物がヒドロキシまたはカルボキシ置換基を含む場合、これらの置換基は、生理学的に加水分解可能で許容されるエステルを形成し得る。本明細書で用いられる場合、「生理学的に加水分解可能で許容されるエステル」とは、生理学的条件下で加水分解して、投与される用量でそれ自体が生理学的に許容される酸（ヒドロキシ置換基を有する本開示化合物の場合）またはアルコール（カルボキシ置換基を有する本開示化合物の場合）を得ることができる本開示化合物のエステルを意味する。したがって、本開示化合物がヒドロキシ基を含む場合、例えば化合物−ＯＨの場合、該化合物のアシルエステルプロドラッグ、すなわち、化合物−Ｏ−Ｃ(Ｏ)−Ｃ1-4アルキルは、体内で加水分解して、一方では生理学的に加水分解可能なアルコール（化合物−ＯＨ）を形成することができ、他方では酸（例えば、ＨＯＣ(Ｏ)−Ｃ1-4アルキル）を形成することができる。別法として、本開示化合物がカルボン酸を含む場合、例えば化合物−Ｃ(Ｏ)ＯＨの場合、該化合物の酸エステルプロドラッグ、化合物−Ｃ(Ｏ)Ｏ−Ｃ1-4アルキルは、加水分解して、化合物−Ｃ(Ｏ)ＯＨおよびＨＯ−Ｃ1-4アルキルを形成することができる。理解されるように、この用語は、このように従来の医薬品のプロドラッグの形態を包含する。
【００３９】
別の実施態様では、本開示は、また、遊離形態または薬学的に許容される塩形態の本開示化合物を薬学的に許容される担体と混合して含む医薬組成物を提供する。
【００４０】
別の実施態様では、本開示は、また、遊離形態、薬学的に許容される塩形態またはプロドラッグ形態の本開示化合物を薬学的に許容される担体と混合して含む医薬組成物を提供する。
【００４１】
いくつかの実施態様では、本開示化合物は、それらの代謝速度に影響を与えるように、例えばインビボでの半減期を増加させるように、改変され得る。いくつかの実施態様では、該化合物は、本明細書に開示されている化合物の代謝速度を低下させるために、重水素化またはフッ素化され得る。
【００４２】
さらに別の実施態様では、本明細書に開示されている化合物は、例えば、経口投与のための、例えば錠剤またはカプセル剤の形態の、または非経口投与のための、医薬組成物の形態であり得る。いくつかの実施態様では、該化合物は、持続放出を提供するために注射による投与のための長時間作用型デポー組成物の形態で提供される。いくつかの実施態様では、経口投与のための、またはデポーとしての、固体薬物は、活性化合物の遅延放出を提供するために、好適なポリマーマトリックス中に存在し得る。
【００４３】
本開示化合物の製造方法
本開示化合物およびそれらの薬学的に許容される塩は、本明細書に記載および例示された方法およびそれに類似する方法、ならびに化学技術分野で知られている方法によって製造され得る。このような方法としては以下のものが挙げられるが、これらに限定されない。市販されていない場合、これらのプロセスのための出発物質は、既知化合物の合成と同様または類似の技術をもしいて化学技術から選択される手順によって製造することができる。本開示化合物の製造の出発物質および方法は上記の出典明示により引用され本明細書の一部とされる特許出願に記載されている。
【００４４】
本開示化合物には、それらのエナンチオマー、ジアステレオ異性体およびラセミ体、ならびにそれらの多形体、水和物、溶媒和物および錯体が含まれる。本開示の範囲内のいくつかの個々の化合物は、二重結合を含んでいてもよい。本開示における二重結合の表現は、二重結合のＥ異性体およびＺ異性体の両方を含むことを意図している。さらに、本開示の範囲内のいくつかの化合物は、１つ以上の不斉中心を含んでいてもよい。本開示は、光学的に純粋な立体異性体のいずれかの使用、および立体異性体の組み合わせを含む。
【００４５】
また、本開示化合物は、それらの安定同位体および不安定同位体を包含することも意図されている。安定同位体とは、同じ種（すなわち元素）の豊富な核種と比較して、さらなる１個の中性子を含む非放射性同位体である。このような同位体を含む化合物の活性は維持されることが期待され、また、このような化合物は、非同位体アナログの薬物動態を測定するための有用性もあると考えられる。例えば、本開示化合物のある位置の水素原子を重水素（非放射性の安定同位体）に置き換えてもよい。公知の安定同位体の例としては、重水素、13Ｃ、15Ｎ、18Ｏが挙げられるが、これらに限定されない。別法として、同じ種（すなわち、元素）の豊富な核種と比較して、さらなる中性子を含む放射性同位体である不安定同位体、例えば、123Ｉ、131Ｉ、125Ｉ、11Ｃ、18Ｆが、Ｉ、ＣおよびＦの対応する豊富な種に置き換えられてもよい。本開示化合物の有用な同位体の別の例としては、11Ｃ同位体が挙げられる。これらの放射性同位体は、本開示化合物の放射性画像診断および／または薬物動態学的研究に有用である。
【００４６】
融点は無補正であり、(dec)は分解を示す。温度は摂氏（℃）で表記され；特記しない限り、操作は室温または周囲温度、すなわち１８〜２５℃の範囲の温度で行われる。クロマトグラフィーはシリカゲル上でのフラッシュクロマトグラフィーを意味し、薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）はシリカゲルプレート上で行われる。ＮＭＲデータは、主要な診断用プロトンのデルタ値を、内部標準物質としてのテトラメチルシラン（ＴＭＳ）に対する百万分の一（ｐｐｍ）単位で示したものである。シグナル形状については慣用の略号を使用する。結合定数（Ｊ）はＨｚで表記される。マススペクトル（ＭＳ）については、同位体分裂により複数のマススペクトルピークが発生する分子については、最も質量の小さい主イオンを報告する。溶媒混合物の組成は、体積％または体積比として表記される。ＮＭＲスペクトルが複雑な場合は、診断信号のみを報告する。
【００４７】
用語および略語：
ＢｕＬｉ  ＝  ｎ−ブチルリチウム
ＢｕtＯＨ  ＝  ｔｅｒｔ−ブチルアルコール、
ＣＡＮ  ＝  硝酸アンモニウムセリウム(ＩＶ)、
ＤＩＰＥＡ  ＝  ジイソプロピルエチルアミン、
ＤＭＦ  ＝  Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド、
ＤＭＳＯ  ＝  ジメチルスルホキシド、
Ｅｔ2Ｏ  ＝  ジエチルエーテル、
ＥｔＯＡｃ  ＝  酢酸エチル、
ｅｑｕｉｖ.＝  当量、
ｈ  ＝  時間、
ＨＰＬＣ  ＝高速液体クロマトグラフィー、
ＬＤＡ  ＝  リチウムジイソプロピルアミド
ＭｅＯＨ  ＝  メタノール、
ＮＢＳ  ＝  Ｎ−ブロモスクシンイミド
ＮＣＳ  ＝  Ｎ−クロロスクシンイミド
ＮａＨＣＯ3  ＝  重炭酸ナトリウム、
ＮＨ４ＯＨ  ＝  水酸化アンモニウム、
Ｐｄ2(ｄｂａ)3  ＝    トリス［ジベンジリデンアセトン］ジパラジウム(０)
ＰＭＢ  ＝  ｐ−メトキシベンジル、
ＰＯＣｌ3  ＝  オキシ塩化リン、
ＳＯＣｌ2  ＝  塩化チオニル、
ＴＦＡ  ＝  トリフルオロ酢酸、
ＴＦＭＳＡ  ＝  トリフルオロメタンスルホン酸
ＴＨＦ  ＝  テトラヒドロフラン。
【００４８】
本開示化合物の使用方法
本開示化合物は、例えばドーパミンおよび一酸化窒素（ＮＯ）のような環状ヌクレオチド合成の誘導剤の阻害またはレベル減少に起因するＰＤＥ１の発現の増加またはｃＧＭＰ／ＰＫＧまたはｃＡＭＰ／ＰＫＡ活性の発現の低下の結果としての、ｃＧＭＰ／ＰＫＧおよび／またはｃＡＭＰ／ＰＫＡシグナル伝達媒介経路の破壊または損傷によって特徴づけられる疾患の治療に有用である。この作用は、例えばＰＤＥ１を阻害することにより、ｃＧＭＰ／ＰＫＧまたはｃＡＭＰ／ＰＫＡシグナル伝達の減衰を逆転または防止し得る（例えば、それぞれｃＧＭＰまたはｃＡＭＰを増強し得る）と考えられる。したがって、本明細書に記載されているような好ましいＰＤＥ１阻害剤、例えば上記されているＰＤＥ１阻害剤の投与または使用は、様々な心血管疾患および障害の治療を提供するための潜在的な手段を提供し得る。
【００４９】
様々な実施態様において、本開示は、イノトロピック（inotropic）および／またはルシトロピック（lusitropic）機能不全によって特徴づけられる疾患または状態の治療、緩和または予防においてアデノシンＡ2受容体アゴニストの効果を増強する方法であって、これを必要とする患者にＰＤＥ１阻害剤の有効量を投与することを含む方法［方法１］を提供する。例えば、本開示は、方法１の以下の実施態様を提供する：
【００５０】
１.１  ＰＤＥ１阻害剤が、遊離形態または薬学的に許容される塩形態の、上記式Ｉ'、ＩＩ'、ＩＩＩ'またはＩＶ'のうちの１つである、方法１。
【００５１】
１.２  ＰＤＥ１阻害剤が、遊離形態または薬学的に許容される塩形態の、(６ａＲ,９ａＳ)−５,６ａ,７,８,９,９ａ−ヘキサヒドロ−５−メチル−３−(フェニルアミノ)−２−((４−(６−フルオロピリジン−２−イル)フェニル)メチル)−シクロペント[４,５]イミダゾ[１,２−ａ]ピラゾロ[４,３−ｅ]ピリミジン−４(２Ｈ)−オン：
【化１３】
2021513518.tif 000014
である、方法１または１.１。
【００５２】
１.３  ＰＤＥ１阻害剤が、遊離形態または薬学的に許容される塩形態の、７,８−ジヒドロ−２−(４−アセチルベンジル)−３−(４−フルオロフェニルアミノ)−５,７,７−トリメチル−[２Ｈ]−イミダゾ−[１,２−ａ]ピラゾロ[４,３−ｅ]ピリミジン−４(５Ｈ)−オン：
【化１４】
2021513518.tif 000015
である、方法１または１.１。
【００５３】
１.４  ＰＤＥ１阻害剤が、遊離形態または薬学的に許容される塩形態の、３−((４−フルオロフェニル)アミノ)−５,７,７−トリメチル−２−((２−メチルピリミジン−５−イル)メチル)−７,８−ジヒドロ−２Ｈ−イミダゾ[１,２−ａ]ピラゾロ[４,３−ｅ]ピリミジン−４(５Ｈ)−オン
【化１５】
2021513518.tif 000016
である、方法１または１.１。
【００５４】
１.５  疾患または状態が、狭心症、脳卒中、腎不全、本態性高血圧症、肺高血圧症、二次性高血圧症、孤立性収縮期高血圧症、糖尿病関連高血圧症、アテローム性動脈硬化症関連高血圧症、腎血管性高血圧症、うっ血性心不全、炎症性疾患または障害、線維症、心肥大、血管リモデリング、結合組織疾患または障害（例えば、マルファン症候群）、慢性心不全、心筋虚血、心筋低酸素症、再灌流傷害、左室機能不全（例えば、心筋梗塞、心室拡張）、血管漏出（すなわち、低酸素症の結果として生じる））、筋ジストロフィー（例えば、デュシェンヌ型筋ジストロフィー）、または筋萎縮性側索硬化症である、上記方法のいずれか。
【００５５】
１.６  治療されるべき疾患または状態が、慢性心不全、心筋炎症、線維症、心筋虚血、心筋低酸素症、再灌流傷害、左室機能不全（例えば、心筋梗塞、心室拡張）、血管漏出（すなわち、低酸素症の結果として生じる）、急性血管炎症（すなわち、血管損傷の結果として生じる）、または心肥大である、上記方法のいずれか。
【００５６】
１.７  治療されるべき疾患または状態が慢性心不全である、方法１.６。
【００５７】
１.８  治療されるべき疾患または状態が心筋炎症である、方法１.６。
【００５８】
１.９  治療されるべき疾患または状態が線維症である、方法１.６。
【００５９】
１.１０  治療されるべき疾患または状態が心筋虚血である、方法１.６。
【００６０】
１.１１  治療されるべき疾患または状態が心筋低酸素症である、方法１.６。
【００６１】
１.１２  治療されるべき疾患または状態が再灌流傷害である、方法１.６。
【００６２】
１.１３  治療されるべき疾患または状態が左室機能不全（例えば、心筋梗塞または心室拡張）である、方法１.６。
【００６３】
１.１４  治療されるべき疾患または状態が血管漏出（すなわち、血管損傷の結果として生じる）である、方法１.６。
【００６４】
１.１５  治療されるべき疾患または状態が心肥大である、方法１.６。
【００６５】
１.１６  ＰＤＥ１阻害剤が、虚血または低酸素症に起因する心臓組織への損傷のリスクを軽減するために投与される、上記方法のいずれか。
【００６６】
１.１７  ＰＤＥ１阻害剤が、アデノシンＡ1受容体刺激に起因する副作用のリスクを軽減するために投与される、上記方法のいずれか。
【００６７】
１.１８  ＰＤＥ１阻害剤が、アデノシンＡ2受容体アゴニストの有効用量を減少させるために投与される、上記方法のいずれか。
【００６８】
１.１９  ＰＤＥ１阻害剤が、アデノシンＡ2アゴニスト、βアドレナリン受容体アンタゴニスト（すなわち、β遮断薬）；ＡＣＥ阻害剤；ネプリライシン阻害剤；抗高リポタンパク血症薬（例えば、アリールオキシアルカン酸／フィブリン酸誘導体、レジン／胆汁酸捕捉剤（sequestrant）、ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤、ニコチン酸誘導体、甲状腺ホルモンまたは甲状腺ホルモンアナログまたはそれらの組合せ）；抗動脈硬化症薬（例えば、ピリジノールカルバメート）；グアニル酸シクラーゼ活性化薬；抗血栓薬および／または線維素溶解薬（例えば、抗凝固薬、抗凝固薬アンタゴニスト、血小板凝集阻害薬、血栓溶解薬、血栓溶解薬アンタゴニスト）；血液凝固薬（例えば、血栓溶解薬アンタゴニストおよび抗凝固薬アンタゴニスト）；抗不整脈薬（例えば、ナトリウムチャネル遮断薬、再分極延長薬、カルシウムチャネル遮断薬）；抗高血圧薬（例えば、交感神経遮断薬、α／β遮断薬、α遮断薬、抗アンジオテンシンＩＩ薬、β遮断薬、カルシウムチャネル遮断薬、血管拡張薬）；アリールエタノールアミン誘導体；ベンゾチアジアジン誘導体；Ｎ−カルボキシアルキル(ペプチド／ラクタム）誘導体；ジヒドロピリジン誘導体；グアニジン誘導体；ヒドラジン／フタラジン；イミダゾール誘導体；四級アンモニウム化合物；レセルピン誘導体；スルホンアミド誘導体；血管収縮剤；利尿剤；強心薬（inotropic agent）；抗狭心症薬またはそれらの組合せから選択される別の治療薬と組み合わせて投与される、上記方法のいずれか。
【００６９】
１.２０  ＰＤＥ１阻害剤が、アデノシンＡ2アゴニスト、βアドレナリン受容体アンタゴニスト（すなわち、β遮断薬）；ＡＣＥ阻害剤、カルシウムチャネル遮断薬；アンジオテンシン受容体遮断薬（ＡＲＢ）；ネプリライシン阻害剤またはそれらの組合せから選択されるさらなる治療薬と組み合わせて投与される、上記方法のいずれか。
【００７０】
１.２１  ＰＤＥ１阻害剤が、さらなる治療薬と同時に投与される、方法１.１９または１.２０のいずれか。
【００７１】
１.２２  ＰＤＥ１阻害剤が、さらなる治療薬の２４時間以内；所望によりさらなる治療薬の１２時間以内；所望によりさらなる治療薬の６時間以内；所望によりさらなる治療薬の３時間以内；所望によりさらなる治療薬の２時間以内；所望によりさらなる治療薬の１時間以内；所望によりさらなる治療薬の３０分間以内；所望によりさらなる治療薬の１５分間以内；所望によりさらなる治療薬の１０分間以内；所望によりさらなる治療薬の５分間以内；または所望によりさらなる治療薬の１分間以内に投与される、方法１.１９〜１.２１のいずれか。
【００７２】
１.２３  アデノシンＡ2受容体アゴニストが、アデノシンＡ2B受容体アゴニストである、上記方法のいずれか。
【００７３】
１.２４  アデノシンＡ2受容体アゴニストが、内在性アデノシンを含む、上記方法のいずれか；例えば、ＰＤＥ１阻害剤によって増強される唯一のアデノシンＡ2受容体アゴニストが内在性アデノシンである、上記方法のいずれか。
【００７４】
１.２５  アデノシンＡ2受容体アゴニストが、選択的アデノシンＡ2B受容体アゴニストを含む、上記方法のいずれか。
【００７５】
１.２６  アデノシンＡ2受容体アゴニストの効果の増強が、ＰＤＥ１によるｃＡＭＰの分解を阻害することによる環状ヌクレオチドのアデノシンＡ2媒介上昇の増強または延長に相当する、上記方法のいずれか。
【００７６】
１.２７  ＰＤＥ１阻害剤が、０.０１ｍｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇの濃度で投与される、上記方法のいずれか。
【００７７】
１.２８  患者が、心臓組織において優勢なＰＤＥ１としてＰＤＥ１Ｃを発現する哺乳動物、例えばイヌまたはヒトである、上記方法のいずれか。
【００７８】
１.２９  患者がヒトである、上記方法のいずれか。
【００７９】
１.３０  患者がヒトであり、ＰＤＥ１阻害剤が経口一日量１〜１０ｍｇで投与される、上記方法のいずれか。
【００８０】
１.３１  患者がヒトであり、ＰＤＥ１阻害剤が経口一日量０.５〜２０ｍｇ、例えば１〜１０ｍｇで投与され、ＰＤＥ１阻害剤が、
ａ．  遊離形態または薬学的に許容される塩形態、例えば一リン酸塩形態の(６ａＲ,９ａＳ)−５,６ａ,７,８,９,９ａ−ヘキサヒドロ−５−メチル−３−(フェニルアミノ)−２−((４−(６−フルオロピリジン−２−イル)フェニル)メチル)−シクロペント[４,５]イミダゾ[１,２−ａ]ピラゾロ[４,３−ｅ]ピリミジン−４(２Ｈ)−オン；
ｂ．  遊離形態または薬学的に許容される塩形態の７,８−ジヒドロ−２−(４−アセチルベンジル)−３−(４−フルオロフェニルアミノ)−５,７,７−トリメチル−[２Ｈ]−イミダゾ−[１,２−ａ]ピラゾロ[４,３−ｅ]ピリミジン−４(５Ｈ)−オン；および
ｃ．  遊離形態または薬学的に許容される塩形態の３−((４−フルオロフェニル)アミノ)−５,７,７−トリメチル−２−((２−メチルピリミジン−５−イル)メチル)−７,８−ジヒドロ−２Ｈ−イミダゾ[１,２−ａ]ピラゾロ[４,３−ｅ]ピリミジン−４(５Ｈ)−オン
から選択される、上記方法のいずれか。
【００８１】
１.３２  イノトロピックおよび／またはルシトロピック機能不全によって特徴づけられる疾患または状態が心不全である、方法１.３０。
【００８２】
本開示は、また、イノトロピックおよび／またはルシトロピック機能不全によって特徴づけられる疾患または状態の治療、緩和または予防においてアデノシンＡ2受容体アゴニストの効果を増強する方法において用いるための、例えば方法１以降のいずれかで用いるための、ＰＤＥ１阻害剤を提供する。
【００８３】
本開示は、また、イノトロピックおよび／またはルシトロピック機能不全によって特徴づけられる疾患または状態の治療、緩和または予防においてアデノシンＡ2受容体アゴニストの効果を増強するための医薬、例えば方法１以降のいずれかで用いるための医薬の製造におけるＰＤＥ１阻害剤の使用を提供する。
【００８４】
種々の実施態様では、本開示は、アデノシンＡ2受容体機能障害によって特徴づけられる疾患または状態の治療、緩和または予防においてアデノシンＡ2受容体機能を増強する方法であって、これを必要とする患者にＰＤＥ１阻害剤の有効量を投与することを含む方法［方法２］を提供する。例えば、本開示は、以下の方法を提供する：
【００８５】
２.１  アデノシンＡ2受容体機能障害がアデノシンＡ2B受容体機能障害である、方法２。
【００８６】
２.２  アデノシンＡ2受容体機能障害が、（ｉ）内在性アデノシンに対するアデノシンＡ2B受容体の反応性の低下および／または（ｉｉ）心臓損傷または心不全に応答した内在性アデノシンの放出および／または産生の低下によって特徴づけられる、上記方法のいずれか
【００８７】
２.３  ＰＤＥ１阻害剤が、遊離形態または薬学的に許容される塩形態の、上記式Ｉ'、ＩＩ'、ＩＩＩ'またはＩＶ'のうちの１つである、上記方法のいずれか。
【００８８】
２.４  ＰＤＥ１阻害剤が、
ａ．  遊離形態または薬学的に許容される塩形態、例えば一リン酸塩形態の(６ａＲ,９ａＳ)−５,６ａ,７,８,９,９ａ−ヘキサヒドロ−５−メチル−３−(フェニルアミノ)−２−((４−(６−フルオロピリジン−２−イル)フェニル)メチル)−シクロペント[４,５]イミダゾ[１,２−ａ]ピラゾロ[４,３−ｅ]ピリミジン−４(２Ｈ)−オン；
ｂ．  遊離形態または薬学的に許容される塩形態の７,８−ジヒドロ−２−(４−アセチルベンジル)−３−(４−フルオロフェニルアミノ)−５,７,７−トリメチル−[２Ｈ]−イミダゾ−[１,２−ａ]ピラゾロ[４,３−ｅ]ピリミジン−４(５Ｈ)−オン；および
ｃ．  ３−((４−フルオロフェニル)アミノ)−５,７,７−トリメチル−２−((２−メチルピリミジン−５−イル)メチル)−７,８−ジヒドロ−２Ｈ−イミダゾ[１,２−ａ]ピラゾロ[４,３−ｅ]ピリミジン−４(５Ｈ)−オン
から選択される、上記方法のいずれか。
【００８９】
２.５  治療されるべき疾患または状態が、慢性心不全、心筋炎症、線維症、心筋虚血、心筋低酸素症、再灌流傷害、左室機能不全（例えば、心筋梗塞、心室拡張）、血管漏出（すなわち、低酸素症の結果として生じる）、急性血管炎症（すなわち、血管損傷の結果として生じる）、または心肥大である、上記方法のいずれか。
【００９０】
２.６  治療されるべき疾患または状態が慢性心不全である、方法２.２。
【００９１】
２.７  治療されるべき疾患または状態が心筋炎症である、方法２.２。
【００９２】
２.８  治療されるべき疾患または状態が線維症である、方法２.２。
【００９３】
２.９  治療されるべき疾患または状態が心筋虚血である、方法２.２。
【００９４】
２.１０  治療されるべき疾患または状態が心筋低酸素症である、方法２.２。
【００９５】
２.１１  治療されるべき疾患または状態が再灌流傷害である、方法２.２。
【００９６】
２.１２  治療されるべき疾患または状態が左室機能不全（例えば、心筋梗塞または心室拡張）である、方法２.２。
【００９７】
２.１３  治療されるべき疾患または状態が血管漏出（すなわち、血管損傷の結果として生じる）である、方法２.２。
【００９８】
２.１４  治療されるべき疾患または状態が心肥大である、方法２.２。
【００９９】
２.１５  ＰＤＥ１阻害剤が、虚血または低酸素症に対して心臓組織をプレコンディションするためまたは心臓組織に保護を提供するために投与される、上記方法のいずれか。
【０１００】
２.１６  ＰＤＥ１阻害剤がアデノシンＡ2受容体アゴニストとともに投与される、上記方法のいずれか。
【０１０１】
２.１７  ＰＤＥ１阻害剤がアデノシンＡ2受容体アゴニストと同時に投与される、方法２.１３。
【０１０２】
２.１８  ＰＤＥ１阻害剤がアデノシンＡ2アゴニストの後に投与される、方法２.１３。
【０１０３】
２.１９  ＰＤＥ１阻害剤がアデノシンＡ2アゴニストの前に投与される、方法２.１３。
【０１０４】
２.２０  ＰＤＥ１阻害剤が、アデノシンＡ2アゴニストの２４時間以内；所望によりアデノシンＡ2アゴニストの１２時間以内；所望によりアデノシンＡ2アゴニストの６時間以内；所望によりアデノシンＡ2アゴニストの３時間以内；所望によりアデノシンＡ2アゴニストの２時間以内；所望によりアデノシンＡ2アゴニストの１時間以内；所望によりアデノシンＡ2アゴニストの３０分間以内；所望によりアデノシンＡ2アゴニストの１５分間以内；所望によりアデノシンＡ2アゴニストの１０分間以内；所望によりアデノシンＡ2アゴニストの５分間以内；または所望によりアデノシンＡ2アゴニストの１分間以内に投与される、方法２.１３〜２.１６のいずれか。
【０１０５】
２.２１  疾患または状態がアデノシンＡ2B受容体機能不全または機能低下によって特徴づけられる、上記方法のいずれか。
【０１０６】
２.２２  アデノシンＡ2アゴニストが選択的アデノシンＡ2Bアゴニストである、方法２.１３〜２.１８のいずれか。
【０１０７】
２.２３  ＰＤＥ１阻害剤が、βアドレナリン受容体アンタゴニスト（すなわち、β遮断薬）；ＡＣＥ阻害剤；ネプリライシン阻害剤；抗高リポタンパク血症薬（例えば、アリールオキシアルカン酸／フィブリン酸誘導体、レジン／胆汁酸捕捉剤、ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤、ニコチン酸誘導体、甲状腺ホルモンまたは甲状腺ホルモンアナログまたはそれらの組合せ）；抗動脈硬化症薬（例えば、ピリジノールカルバメート）；グアニル酸シクラーゼ活性化薬；抗血栓薬および／または線維素溶解薬（例えば、抗凝固薬、抗凝固薬アンタゴニスト、血小板凝集阻害薬、血栓溶解薬、血栓溶解薬アンタゴニスト）；血液凝固薬s（例えば、血栓溶解薬アンタゴニストおよび抗凝固薬アンタゴニスト）；抗不整脈薬（例えば、ナトリウムチャネル遮断薬、再分極延長薬、カルシウムチャネル遮断薬）；抗高血圧薬（例えば、交感神経遮断薬、α／β遮断薬、α遮断薬、抗アンジオテンシンＩＩ薬、β遮断薬、カルシウムチャネル遮断薬、血管拡張薬）；アリールエタノールアミン誘導体；ベンゾチアジアジン誘導体；Ｎ−カルボキシアルキル(ペプチド／ラクタム）誘導体；ジヒドロピリジン誘導体；グアニジン誘導体；ヒドラジン／フタラジン；イミダゾール誘導体；四級アンモニウム化合物；レセルピン誘導体；スルホンアミド誘導体；血管収縮剤；利尿剤；強心薬；抗狭心症薬またはそれらの組合せから選択される別の治療薬と組み合わせても投与される、方法２.１３〜２.１９のいずれか。
【０１０８】
２.２４  ＰＤＥ１阻害剤が、βアドレナリン受容体アンタゴニスト（すなわち、β遮断薬）；ＡＣＥ阻害剤、カルシウムチャネル遮断薬；アンジオテンシン受容体遮断薬（ＡＲＢ）；ネプリライシン阻害剤またはそれらの組合せから選択されるさらなる治療薬と組み合わせて投与される、上記方法のいずれか。
【０１０９】
２.２５  ＰＤＥ１阻害剤が０.０１ｍｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇの濃度で投与される、上記方法のいずれか。
【０１１０】
２.２６  ＰＤＥ１阻害剤が０.０１ｍｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇの濃度で投与される、上記方法のいずれか。
【０１１１】
２.２７  患者が、心臓組織において優勢なＰＤＥ１としてＰＤＥ１Ｃを発現する哺乳動物、例えばイヌまたはヒトである、上記方法のいずれか。
【０１１２】
２.２８  患者がヒトである、上記方法のいずれか。
【０１１３】
２.２９  患者がヒトであり、ＰＤＥ１阻害剤が経口一日量１〜１０ｍｇで投与される、上記方法のいずれか。
【０１１４】
２.３０  患者がヒトであり、ＰＤＥ１阻害剤が経口一日量０.５〜２０ｍｇ、例えば１〜１０ｍｇで投与され、ＰＤＥ１阻害剤が、
ａ．  遊離形態または薬学的に許容される塩形態、例えば一リン酸塩形態の(６ａＲ,９ａＳ)−５,６ａ,７,８,９,９ａ−ヘキサヒドロ−５−メチル−３−(フェニルアミノ)−２−((４−(６−フルオロピリジン−２−イル)フェニル)メチル)−シクロペント[４,５]イミダゾ[１,２−ａ]ピラゾロ[４,３−ｅ]ピリミジン−４(２Ｈ)−オン；
ｂ．  遊離形態または薬学的に許容される塩形態の７,８−ジヒドロ−２−(４−アセチルベンジル)−３−(４−フルオロフェニルアミノ)−５,７,７−トリメチル−[２Ｈ]−イミダゾ−[１,２−ａ]ピラゾロ[４,３−ｅ]ピリミジン−４(５Ｈ)−オン；および
ｃ．  ３−((４−フルオロフェニル)アミノ)−５,７,７−トリメチル−２−((２−メチルピリミジン−５−イル)メチル)−７,８−ジヒドロ−２Ｈ−イミダゾ[１,２−ａ]ピラゾロ[４,３−ｅ]ピリミジン−４(５Ｈ)−オン
から選択される、上記方法のいずれか。
【０１１５】
２.３１  アデノシンＡ2受容体機能障害によって特徴づけられる疾患または状態が心不全である、方法２.３０。
【０１１６】
本開示は、また、アデノシンＡ2受容体機能障害によって特徴づけられる疾患または状態の治療、緩和または予防においてアデノシンＡ2受容体機能を増強する方法において用いるための、例えば方法２以降のいずれかで用いるための、ＰＤＥ１阻害剤を提供する。
【０１１７】
本開示は、また、アデノシンＡ2受容体機能障害によって特徴づけられる疾患または状態の治療、緩和または予防においてアデノシンＡ2受容体機能を増強するための医薬、例えば方法２以降のいずれかで用いるための医薬の製造におけるＰＤＥ１阻害剤の使用を提供する。
【０１１８】
したがって、さらなる実施態様では、本開示は、化学療法剤の投与および／または放射線療法の結果として生じる心毒性を治療、緩和または予防する方法であって、これを必要とする患者にＰＤＥ１阻害剤の有効量を投与することを含む方法［方法３］を提供する。例えば、本開示は、以下の方法を提供する：
【０１１９】
３.１  ＰＤＥ１阻害剤が、例えば心筋細胞において、アデノシンＡ2シグナル伝達を増強するために有効な量で投与される、方法３。
【０１２０】
３.２  心毒性が化学療法剤の投与の結果として生じる、方法３または３.１。
【０１２１】
３.３  化学療法剤が、アントラサイクリン、ＨＥＲ２受容体遮断薬（例えば、トラスツズマブ）、抗代謝剤、アルキル化剤、チロシンキナーゼ阻害剤（ＴＫＩ）、血管新生抑制剤およびチェックポイント阻害剤から選択される、方法３.３。
【０１２２】
３.４  化学療法剤がアントラサイクリンである、方法３.２または３.３。
【０１２３】
３.５  アントラサイクリンが、ダウノルビシン、ドキソルビシン、エピルビシン、イダルビシン、サバルビシン、ピクサントロンおよびバルルビシンから選択される、方法３.５。
【０１２４】
３.６  アントラサイクリン化合物がドキソルビシンである、方法３.４。
【０１２５】
３.７  化学療法剤が、シクロホスファミド、イホスファミド、シスプラチン、カルムスチン、ブスルファン、クロルメチン、マイトマイシン、パクリタキセル、エトポシド、テニポシド、ビンカアルカロイド、フルオロウラシル、シタラビン、アムサクリン、クラドリビン、アスパラギナーゼ、トレチノインおよびペントスタチンから選択される、方法３.２。
【０１２６】
３.８  化学療法剤が、ヒト上皮増殖因子受容体２（ＨＥＲ２)／ｎｅｕのアンタゴニストである、方法３.２。
【０１２７】
３.９  化学療法剤が、ヒト上皮増殖因子受容体２（ＨＥＲ２)／ｎｅｕに対して特異的なモノクローナル抗体、例えばトラスツズマブである、方法３.７。
【０１２８】
３.１０  心毒性が、放射線療法の実施（化学療法剤の投与と組み合わせてもよい）の結果として生じる、いずれもの上記方法。
【０１２９】
３.１１  患者が、癌または腫瘍に罹患している、いずれもの上記方法。
【０１３０】
３.１２  患者が、聴神経腫瘍、星細胞腫、脊索腫、ＣＮＳリンパ腫、頭蓋咽頭腫、神経膠腫（例えば、脳幹神経膠腫、脳室上衣腫、混合膠腫、視神経膠腫）、上衣下膠腫、髄芽腫、髄膜腫、転移性脳腫瘍、乏突起神経膠腫、下垂体腫瘍、原始神経胚葉性腫瘍（ＰＮＥＴ）、シュワン腫、腺腫（例えば、好塩基性腺腫、好酸性腺腫、嫌色素性腺腫、副甲状腺腺腫、膵島細胞腺腫、線維腺腫）、子宮筋腫（線維性組織球腫）、線維腫、血管腫、脂肪腫（例えば、血管脂肪腫、骨髄脂肪腫、線維脂肪腫、紡錘細胞脂肪腫、褐色脂肪腫、非定型脂肪腫）、粘液腫、骨腫、前白血病、横紋筋腫（rhadomyoma）、乳頭腫、脂漏性角化症、皮膚付属器腫瘍、肝腺腫、腎尿細管腺腫、胆管腺腫、移行細胞乳頭腫、胞状奇胎、神経節神経腫、髄膜腫、神経鞘腫、神経線維腫、Ｃ細胞過形成、褐色細胞腫、インスリノーマ、ガストリノーマ、カルチノイド、ケモデクトーマ、パラガングリオーマ、母斑症、光線角化症、子宮頸部異形成、異形成（例えば、肺の異形成）、白斑症、血管腫、リンパ管腫、カルシノーマ（例えば、有棘細胞癌、類表皮癌、腺癌、ヘパトーマ、肝細胞、腎細胞癌、胆管細胞癌、移行上皮癌、胎児性癌、甲状腺癌、甲状腺髄様癌、気管支カルチノイド、燕麦細胞癌、膵島細胞癌、悪性カルチノイド）、肉腫（例えば、線維肉腫、粘液肉腫、脂肪肉腫、軟骨肉腫、骨肉腫、悪性線維性組織球腫、血管肉腫（hemangiosarcoma）、血管肉腫（angiosarcoma）、リンパ管肉腫、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、神経線維肉腫）、芽細胞腫（例えば、髄芽腫および膠芽腫、脳腫瘍の種類、網膜芽細胞腫、眼の網膜の腫瘍、骨芽細胞腫、骨腫瘍、神経芽腫）、胚細胞腫瘍、中皮腫、悪性皮膚付属器腫瘍、グラヴィッツ腫瘍、セミノーマ、神経膠腫、悪性髄膜腫、悪性シュワン腫、悪性褐色細胞腫、悪性パラガングリオーマ、メラノーマ、メルケル（mercell）細胞新生物、葉状嚢胞肉腫（cystosarcoma phylloides）、またはウィルムス腫瘍の１つ以上から選択される腫瘍に罹患している、いずれもの上記方法。
【０１３１】
３.１３  患者が、神経膠腫、骨肉腫、メラノーマ、白血病または神経芽腫に罹患している、いずれもの上記方法。
【０１３２】
３.１４  患者が、神経膠腫（例えば、脳室上衣腫、星細胞腫、乏突起神経膠腫、脳幹神経膠腫、視神経膠腫または混合膠腫、例えばオリゴアストロサイトーマ）に罹患している、いずれもの上記方法。
【０１３３】
３.１５  患者が星細胞腫（例えば、多形性膠芽腫（glioblastoma multiform）に罹患している、いずれもの上記方法。
【０１３４】
３.１６  患者が多形性膠芽腫に罹患している、いずれもの上記方法。
【０１３５】
３.１７  患者が癌に罹患している、いずれもの上記方法。
【０１３６】
３.１８  患者が白血病に罹患している、いずれもの上記方法。
【０１３７】
３.１９  患者が、リンパ腫、リンパ性白血病または骨髄性白血病に罹患している、いずれもの上記方法。
【０１３８】
３.２０  方法が、心毒性を治療および／または緩和するためである、いずれもの上記方法。
【０１３９】
３.２１  患者が、癌治療の心毒性に続発する顕性心不全に罹患しているかまたは該顕性心不全と診断されている、いずれもの上記方法。
【０１４０】
３.２２  患者が、心血管イメージングを用いて、例えば放射性核種イメージング、心エコー検査および／または核磁気共鳴画像法を用いて、癌治療の心毒性に続発する顕性心不全と診断されている、いずれもの上記方法。
【０１４１】
３.２３  患者が、左心室（ＬＶ）機能不全、うっ血性心不全（ＣＨＦ）、冠動脈攣縮、狭心症、心筋梗塞、不整脈、全身性高血圧（systemic hypertension）、心膜液貯留、肺線維症および肺高血圧症から選択される、化学療法および／または放射線療法の結果として生じる心臓状態に罹患している、いずれもの上記方法。
【０１４２】
３.２４  患者が、化学療法および／または放射線療法を受ける前に、例えば左心室（ＬＶ）機能不全、うっ血性心不全（ＣＨＦ）、冠動脈攣縮、狭心症、心筋梗塞、不整脈、全身性高血圧、心膜液貯留、肺線維症および肺高血圧症から選択される、既存の心血管疾患に罹患していた、いずれもの上記方法。
【０１４３】
３.２５  患者が、例えば鉄キレート剤（例えば、デクスラゾキサン）、アンジオテンシン受容体遮断薬（ＡＲＢ）、β遮断薬（例えば、カルベジロール、メトプロロールまたはネビボロール）、アンジオテンシン変換酵素阻害剤（ＡＣＥＩ）、スタチン、抗酸化剤（すなわち、ジヒドロミリセチン、バージンオリーブオイルからの抗酸化剤、ゴマ油、セサミン、サリドロシド、メラトニン、グルタチオン、コエンザイムＱ１０、ビタミン、ケルセチン、イソラムネチン、カンナビジオール、レスベラトロール）、Ｍｄｉｖｉ−１、メトホルミン、Ｎ−アセチルシステイン、フェネチルアミン、アミホスチン、プロスタサイクリン（ＰＧＩ２）、メロキシカム、ジアゾキシド、カルボキシマルトース鉄、レシチン化ヒト組換えスーパーオキシドジスムターゼ、グレリン、Ｌ−カルニチン、モルシドミン、ジドックス（didox）、α−リノレン酸およびニコランジルから選択される、さらなる心保護薬でも治療されていた、いずれもの上記方法。
【０１４４】
３.２６  患者が、例えばアンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤、アンジオテンシン受容体遮断薬（ＡＲＢ）、β遮断薬（例えば、カルベジロールまたはネビボロール）、および鉄キレート剤（例えば、デクスラゾキサン）から選択される、さらなる心保護薬でも治療されていた、いずれもの上記方法。
【０１４５】
３.２７  心毒性が、アデノシンＡ2シグナル伝達および／またはアデノシンＡ2受容体発現を阻害する化学療法剤の投与の結果として生じる、いずれもの上記方法。
【０１４６】
３.２８  ＰＤＥ１阻害剤が、経口一日量０.５〜１００ｍｇ、例えば１〜１０ｍｇで投与される、いずれもの上記方法。
【０１４７】
３.２９  ＰＤＥ１阻害剤が、
ａ．  遊離形態または薬学的に許容される塩形態、例えば一リン酸塩形態の(６ａＲ,９ａＳ)−５,６ａ,７,８,９,９ａ−ヘキサヒドロ−５−メチル−３−(フェニルアミノ)−２−((４−(６−フルオロピリジン−２−イル)フェニル)メチル)−シクロペント[４,５]イミダゾ[１,２−ａ]ピラゾロ[４,３−ｅ]ピリミジン−４(２Ｈ)−オン；
ｂ．  遊離形態または薬学的に許容される塩形態の７,８−ジヒドロ−２−(４−アセチルベンジル)−３−(４−フルオロフェニルアミノ)−５,７,７−トリメチル−[２Ｈ]−イミダゾ−[１,２−ａ]ピラゾロ[４,３−ｅ]ピリミジン−４(５Ｈ)−オン；および
ｃ．  ３−((４−フルオロフェニル)アミノ)−５,７,７−トリメチル−２−((２−メチルピリミジン−５−イル)メチル)−７,８−ジヒドロ−２Ｈ−イミダゾ[１,２−ａ]ピラゾロ[４,３−ｅ]ピリミジン−４(５Ｈ)−オン
から選択される、いずれもの上記方法。
【０１４８】
本開示は、また、心毒性を治療、緩和または予防する方法に用いるため、例えば方法３以降のいずれかにおいて用いるための、ＰＤＥ１阻害剤を提供する。
【０１４９】
本開示は、また、心毒性を治療、緩和または予防するための医薬、例えば方法３以降のいずれかにおいて用いるための医薬の製造におけるＰＤＥ１阻害剤の使用を提供する。
【０１５０】
ＰＤＥ１阻害剤との併用療法
いくつかの実施態様では、ＰＤＥ１阻害剤は、他の治療様式と組み合わせて投与される。したがって、上記の治療法に加えて、より多くの薬剤による心臓治療法を患者に提供することもできる。他の治療法の例としては、降圧薬、強心薬、抗血栓薬、血管拡張薬、ホルモン拮抗薬、変力薬（inotropes）、利尿剤、エンドセリン拮抗薬、カルシウムチャネル遮断薬、ホスホジエステラーゼ阻害薬、ＡＣＥ阻害剤、アンジオテンシン受容体２型拮抗薬およびサイトカイン遮断薬／阻害剤、およびＨＤＡＣ阻害剤が挙げられるが、これらに限定されない。併用療法の特定の形態には、ＰＤＥ１阻害剤の使用が含まれる。
【０１５１】
組合せは、ＰＤＥ１阻害剤および１つ以上のさらなる治療剤を含む単一の組成物または医薬製剤を投与することによって達成されてもよく、または２つの異なる組成物または製剤（ここで、一方の組成物はＰＤＥ１阻害剤を含み、他方の組成物は追加の治療剤または薬剤を含む）を別々に、同時に、または順次投与することによって達成されてもよい。ＰＤＥ１阻害剤を使用する治療は、数分から数週間の範囲の間隔で他の薬剤の投与に先行してもよいし、それに続いてもよい。他の薬剤および発現構築物が細胞に別々に適用される実施形態では、一般に、薬剤および発現構築物が依然として細胞に対して有利に合わせられた効果を発揮することができるように、各送達時の間に有意な期間が満了しないことを確実にするであろう。いくつかの実施態様では、典型的には、お互いに約１２〜２４時間以内、より好ましくはお互いに約６〜１２時間以内に、両方の様式を用いて細胞に接触させることが企図され、遅延時間は約１２時間のみであることが最も好ましい。しかしながら、いくつかの状況では、それぞれの投与の間に数日（２、３、４、５、６または７日）から数週間（１、２、３、４、５、６、７または８週間）が経過するような場合には、治療のための期間を大幅に延長することが望ましい場合がある。
【０１５２】
ＰＤＥ１阻害剤またはさらなる治療薬のいずれかを２回以上投与することが望まれることも考えられる。これに関して、様々な組み合わせを使用することができる。実例として、ＰＤＥ１阻害剤が「Ａ」であり、さらなる治療薬が「Ｂ」である場合、３回および４回の総投与に基づく以下の組み合わせが例示的である：
【表１】
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【０１５３】
本発明で用いることができる薬理学的治療薬の非限定的な例としては、アデノシンＡ2アゴニスト；βアドレナリン受容体アンタゴニスト（すなわち、β遮断薬）；ＡＣＥ阻害剤；アンジオテンシン受容体遮断薬（ＡＲＢ）；抗高リポタンパク血症薬；抗動脈硬化症薬；抗血栓／血栓溶解薬；血液凝固薬；抗不整脈薬；抗高血圧薬；血管収縮剤；うっ血性心不全治療薬；抗狭心症薬；抗菌薬；ネプリライシン阻害剤またはそれらの組合せが挙げられる。他の組み合わせも同様に企図される。いくつかの特定の薬剤を以下に記載する。
【０１５４】
アデノシンＡ2アゴニスト：  種々の実施態様では、本組合せおよび方法で用いられるアデノシンＡ2アゴニストは、アデノシンＡ2AアゴニストまたはアデノシンＡ2Bアゴニストのいずれかであり得る。Ａ2A受容体アゴニストとしては、アデノシン、ＣＧＳ２１６８０、ＡＴＬ−１４６ｅ、ＹＴ−１４６（すなわち、２−(１−オクチニル)アデノシン）、ＣＧＳ−２１６８０、ＤＰＭＡ（すなわち、Ｎ−６−(２−(３,５−ジメトキシフェニル)−２−(２−メチルフェニル)エチル)アデノシン）、レガデノソン、ＵＫ−４３２,０９７、リモネン、Ｎ−エチルカルボキシアミドアデノシン、ＣＶ−３１４６、ビノデノソンおよびＢＶＴ.１１５９５９が挙げられるが、これらに限定されない。Ａ2B受容体アゴニストとしては、(Ｓ)−ＰＨＰＮＥＣＡ、ＢＡＹ６０−６５８３、ＬＵＦ−５８３５、ＬＵＦ−５８４５、およびＮ−エチルカルボキシアミドアデノシンが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１５５】
β遮断薬：  β遮断薬とも称される種々のβアドレナリン受容体アンタゴニストは、現在、不全心によって引き起こされる有害な慢性的心筋刺激を排除するために臨床で使用されている。好ましいβアドレナリン受容体アンタゴニストとしては、メトプロロール、メトプロロールコハク酸塩、カルベジロール、アテノロール、プロプラノロール、アセブトロール、アセブトロールＨＣＬ、ベタキソロール、ベタキソロールＨＣＬ、ナドロール、タリノロール、ビソプロロール、ビソプロロールヘミフマル酸塩、カルテオロール、カルテオロールＨＣＬ、エスモロール、エスモロールＨＣＬ、ラベタロール、ラベタロールＨＣＬ、メトプロロール、メトプロロールコハク酸塩、メトプロロール酒石酸塩、ナドロール、ペンブトロール、ペンブトロール硫酸塩、ピンドロール、プロプラノロール、プロプラノロールＨＣＬ、ソタロール、ソタロールＨＣＬ、チモロールおよびチモロールマレイン酸水素塩またはそれらの薬学的に許容される塩が挙げられる。本発明に従って、βアドレナリン受容体アンタゴニストは、該薬剤について臨床的に許容される一日量で投与することができる。例えば、治療する状態、投与経路、患者の年齢、体重および状態に依存して、酒石酸塩またはコハク酸塩としてのメトプロロールの好適な一日量は約１００〜２００ｍｇであり、カルベジロールの場合は約５〜５０ｍｇである。
【０１５６】
抗高リポタンパク血症薬：  特定の実施態様において、本明細書において「抗高リポタンパク血症薬」として知られる、１つ以上の血中脂質および／またはリポタンパク質の濃度を低下させる薬剤の投与は、特にアテローム性動脈硬化症および血管組織の肥厚または閉塞の治療において、本発明による心血管療法と組み合わせることができる。特定の態様において、抗高リポタンパク血症薬は、アリールオキシアルカン酸／フィブリン酸誘導体、レジン／胆汁酸捕捉剤、ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤、ニコチン酸誘導体、甲状腺ホルモンまたは甲状腺ホルモンアナログ、その他の薬剤（miscellaneous agent）またはそれらの組合せを含み得る。
【０１５７】
ａ．アリールオキシアルカン酸／フィブリン酸誘導体：  アリールオキシアルカン酸／フィブリン酸誘導体の非限定的な例としては、ベクロブラート（beclobrate）、エンザフィブラート（enzafibrate）、ビニフィブラート（binifibrate）、シプロフィブラート、クリノフィブラート、クロフィブラート（アトロマイド−Ｓ（atromide-S））、クロフィブリン酸、エトフィブラート、フェノフィブラート、ゲムフィブロジル（ロビッド（lobid））、ニコフィブラート（nicofibrate）、ピリフィブラート（pirifibrate）、ロニフィブラート、シンフィブラート、およびテオフィブラートが挙げられる。
【０１５８】
ｂ．レジン／胆汁酸捕捉剤：  レジン／胆汁酸捕捉剤の非限定的な例としては、コレスチラミン（コリバル（cholybar）、クエストラン）、コレスチポール（コレスチド）およびポリデキシド（polidexide）が挙げられる。
【０１５９】
ｃ．ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤：  ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤の非限定的な例としては、ロバスタチン（メバコール）、プラバスタチン（プラバコール）、シンバスタチン（ゾコール）、アトロバスタチン（リピトール）またはロスバスタチン（クレストール）が挙げられる。
【０１６０】
ｄ．ニコチン酸誘導体：  ニコチン酸誘導体の非限定的な例としては、ニコチネート、アシピモックス（acepimox）、ニセリトロール、ニコクロナート、ニコモールおよびオキシニアク酸が挙げられる。
【０１６１】
ｅ．甲状腺ホルモンおよびアナログ：  甲状腺ホルモンおよびそのアナログの非限定的な例としては、エトロキサート（etoroxate）、チロプロプ酸およびチロキシンが挙げられる。
【０１６２】
ｆ．その他の抗高リポタンパク血症薬：  その他の抗高リポタンパク血症薬の非限定的な例としては、アシフラン、アザコレステロール、ベンフルオレックス、β−ベンザルブチルアミド、カルニチン、コンドロイチン硫酸、クロメストロン（clomestrone）、デタクストラン（detaxtran）、デキストラン硫酸ナトリウム、５,８,１１,１４,１７−エイコサペンタエン酸、エリタデニン、フラザボール、メグルトール、メリナミド、ミタトリエンジオール、オルニチン、γ−オリザノール、パンテチン、ペンタエリスリトール四酢酸エステル、α−フェニルブチルアミド、ピロザジル、プロブコール（ロレルコ）、β−シトステロール、スルトシル酸−ピペラジン塩、チアデノール、トリパラノールおよびキセンブシンが挙げられる。
【０１６３】
抗動脈硬化症薬：  抗動脈硬化症薬の非限定的な例としては、ピリジノールカルバメートが挙げられる。
【０１６４】
抗血栓薬および／または線維素溶解薬：  特定の実施態様では、血餅の除去または予防を助ける薬剤の投与は、特にアテローム性動脈硬化症および血管系（例えば、動脈）閉塞の治療において、モジュレーターの投与と組み合わせることができる。抗血栓薬および／または線維素溶解薬の非限定的な例としては、抗凝固薬、抗凝固薬アンタゴニスト、血小板凝集阻害薬、血栓溶解薬、血栓溶解薬アンタゴニストまたはそれらの組合せが挙げられる。
【０１６５】
特定の態様では、経口投与することができる抗血栓薬、例えばアスピリンおよびワルファリン（wafarin）（クマジン）が好ましい。
【０１６６】
ａ．抗凝固薬：  抗凝固薬の非限定的な例としては、アセノクマロール、アンクロッド、アニシンジオン、ブロミンジオン、クロリンジオン、クメタロール、シクロクマロール、デキストラン硫酸ナトリウム、ジクマロール、ジフェナジオン、エチルビスクムアセテート、エチリデンヂクマロール、フルインジオン、ヘパリン、ヒルジン、リアポラートナトリウム（lyapolate sodium）、オキサジジオン、ポリ硫酸ペントサン、フェニンジオン、フェンプロクモン、ホスビチン、ピコタミド、チオクロマロールおよびワルファリンが挙げられる。
【０１６７】
ｂ．血小板凝集阻害薬：  血小板凝集阻害薬の非限定的な例としては、アスピリン、デキストラン、ジピリダモール（ペルサンチン）、ヘパリン、スルフィンピラゾン（sulfinpyranone）（エンツレン（anturane））、チクロピジン（チクリッド）、クロピドグレル（clopidigrel）（プラビックス）およびチカグレロル（ブリリンタ）が挙げられる。
【０１６８】
ｃ．血栓溶解薬：  血栓溶解薬の非限定的な例としては、組織プラスミノーゲンアクチベーター（アクチバーゼ）、プラスミン、プロウロキナーゼ、ウロキナーゼ（アボキナーゼ）、ストレプトキナーゼ（ストレプターゼ）、アニストレプラーゼ／ＡＰＳＡＣ（エミナーゼ）が挙げられる。
【０１６９】
血液凝固薬：  患者が出血症状または出血の可能性の増大に苦しんでいる特定の実施態様では、血液凝固を増強し得る薬剤を使用することができる。血液凝固促進剤の非限定的な例としては、血栓溶解薬アンタゴニストおよび抗凝固薬アンタゴニストが挙げられる。
【０１７０】
ａ．抗凝固薬アンタゴニスト：  抗凝固薬アンタゴニストの非限定的な例としては、プロタミンおよびビタミンＫが挙げられる。
【０１７１】
ｂ．血栓溶解薬アンタゴニストおよび抗血栓薬：  血栓溶解薬アンタゴニストの非限定的な例としては、アミノカプロン酸（amiocaproic acid）（アミカール）およびトラネキサム酸（アムスタット（amstat））が挙げられる。抗血栓薬の非限定的な例としては、アナグレリド、アルガトロバン、シルスタゾール（cilstazol）、ダルトロバン、デフィブロチド、エノキサパリン、フラキシパリン、インドブフェン、ラモパラン（lamoparan）、オザグレル、ピコタミド、プラフィブリド、テデルパリン（tedelparin）、チクロピジンおよびトリフルサルが挙げられる。
【０１７２】
抗不整脈薬：  抗不整脈薬の非限定的な例としては、Ｉ群抗不整脈薬（ナトリウムチャネル遮断薬）、ＩＩ群抗不整脈薬（βアドレナリン遮断薬）、ＩＩ群抗不整脈薬（再分極延長薬）、ＩＶ群抗不整脈薬（カルシウムチャネル遮断薬）およびその他の抗不整脈薬が挙げられる。
【０１７３】
ａ．ナトリウムチャネル遮断薬：  ナトリウムチャネル遮断薬の非限定的な例としては、ＩＡ群、ＩＢ群およびＩＣ群抗不整脈薬が挙げられる。ＩＡ群抗不整脈薬の非限定的な例としては、ジソピラミド（ノルペース）、プロカインアミド（プロネスチル）およびキニジン（キニデックス）が挙げられる。ＩＢ群抗不整脈薬の非限定的な例としては、リドカイン（キシロカイン）、トカイニド（トノカード（tonocard））およびメキシレチン（メキシチール）が挙げられる。ＩＣ群抗不整脈薬の非限定的な例としては、エンカイニド（エンカイド）およびフレカイニド（タンボコール）が挙げられる。
【０１７４】
ｂ．再分極延長薬：  ＩＩＩ群抗不整脈薬としても知られている再分極を延長する薬剤の非限定的な例としては、アミオダロン（コルダロン）およびソタロール（ベータペース（betapace））が挙げられる。
【０１７５】
ｃ．カルシウムチャネル遮断薬／アンタゴニスト：  ＩＶ群抗不整脈薬としても知られているカルシウムチャネル遮断薬の非限定的な例としては、アリールアルキルアミン（例えば、ベプリジル、ジルチアゼム、フェンジリン、ガロパミル、プレニルアミン、テロジリン、ベラパミル）、ジヒドロピリジン誘導体（フェロジピン、イスラジピン、ニカルジピン、ニフェジピン、ニモジピン、ニソルジピン、ニトレンジピン）、ピペラジン（piperazinde）誘導体（例えば、シンナリジン、フルナリジン、リドフラジン）、またはその他のカルシウムチャネル遮断薬、例えばベンシクラン、エタフェノン、マグネシウム、ミベフラジルまたはペルヘキシリンが挙げられる。特定の実施態様では、カルシウムチャネル遮断薬は、長時間作用型ジヒドロピリジン（ニフェジピン型）カルシウムアンタゴニストを含む。
【０１７６】
ｄ．その他の抗不整脈薬：  その他の抗不整脈薬の非限定的な例としては、アデノシン（アデノカルド）、ジゴキシン（ラノキシン）、アセカイニド、アジマリン、アモプロキサン、アプリンジン、トシル酸ブレチリウム、ブナフチン、ブトベンジン、カポベン酸、シフェンリン、ジソピラニド（disopyranide）、ヒドロキニジン、インデカイニド、イプラトロピウム臭化物、リドカイン、ロラジミン、ロルカイニド、メオベンチン、モリシジン、ピルメノール、プラジマリン、プロパフェノン、ピリノリン、ポリガラクツロン酸キニジン、硫酸キニジンおよびビキジルが挙げられる。
【０１７７】
抗高血圧薬：  抗高血圧薬の非限定的な例としては、交感神経遮断薬、α／β遮断薬、α遮断薬、抗アンジオテンシンＩＩ薬、β遮断薬、カルシウムチャネル遮断薬、血管拡張薬およびその他の抗高血圧薬が挙げられる。
【０１７８】
ａ．α遮断薬：  αアドレナリン遮断薬またはαアドレナリンアンタゴニストとしても知られているα遮断薬の非限定的な例としては、アモスラロール、アロチノロール、ダピプラゾール、ドキサゾシン、メシル酸エルゴロイド、フェンスピリド、インドラミン、ラベタロール、ニセルゴリン、プラゾシン、テラゾシン、トラゾリン、トリマゾシンおよびヨヒンビンが挙げられる。特定の実施態様では、α遮断薬は、キナゾリン誘導体を含み得る。キナゾリン誘導体の非限定的な例としては、アルフゾシン、ブナゾシン、ドキサゾシン、プラゾシン、テラゾシンおよびトリマゾシンが挙げられる。
【０１７９】
ｂ．α／β遮断薬：  特定の実施態様では、抗高血圧薬は、αアドレナリンアンタゴニストおよびβアドレナリンアンタゴニストの両方である。α／β遮断薬の非限定的な例は、ラベタロール（ノルモジン、トランデート）を含む。
【０１８０】
ｃ．抗アンジオテンション（Anti-Angiotension）ＩＩ薬剤：  抗アンジオテンション（anti-angiotension）ＩＩ薬の非限定的な例としては、アンジオテンシン変換酵素阻害剤およびアンジオテンション（angiotension）ＩＩ受容体アンタゴニストが挙げられる。アンジオテンション（angiotension）変換酵素阻害剤（ＡＣＥ阻害剤）の非限定的な例としては、アラセプリル、エナラプリル（バソテック）、カプトプリル、シラザプリル、デラプリウ、エナラプリラット、ホシノプリル、リシノプリル、モベルトプリル、ペリンドプリル、キナプリル、ラミプリル、ベナゼプリル、モエキシプリル、トランドラプリルおよびそれらの薬学的に許容される塩が挙げられる。ＡＣＥ阻害剤の塩の例としては、有機酸または無機酸との酸付加塩が挙げられる。好適な有機カルボン酸としては、サリチル酸、マレイン酸、酒石酸、クエン酸、アジピン酸、ソルビン酸、マロン酸、１,４−ブタン二酸、リンゴ酸、ピバル酸、コハク酸、ニコチン酸、イソニコチン酸、フラン−２−カルボン酸、酢酸、安息香酸、脂肪酸、例えばラウリン酸、ミリスチン酸またはオレイン酸が挙げられ、また、好適な無機酸としては、例えば、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硝酸、硫酸および／またはリン酸が挙げられる。アンジオテンション（angiotension）ＩＩ受容体アンタゴニスト、ＡＮＧ受容体遮断薬またはＡＮＧ−ＩＩタイプ１受容体遮断薬（ＡＲＢＳ）としても知られているアンジオテンシンＩＩ受容体遮断薬の非限定的な例としては、アンジオカンデサルタン（angiocandesartan）、エプロサルタン、イルベサルタン、ロサルタンおよびバルサルタンまたはそれらの塩が挙げられる。
【０１８１】
ｄ．交感神経遮断薬：  交感神経遮断薬の非限定的な例としては、中枢性交感神経遮断薬または末梢性交感神経遮断薬が挙げられる。中枢神経系（ＣＮＳ）交感神経遮断薬としても知られている中枢性交感神経遮断薬の非限定的な例としては、クロニジン（カタプレス）、グアナベンズ（ワイテンシン（wytensin））、グアンファシン（テネックス）およびメチルドパ（アルドメット）が挙げられる。末梢性交感神経遮断薬の非限定的な例としては、ガングリオン遮断薬、アドレナリンニューロン遮断薬、βアドレナリン遮断薬またはα１アドレナリン遮断薬が挙げられる。ガングリオン遮断薬の非限定的な例としては、メカミラミン（インバーシン）およびトリメタファン（アルフォナード）が挙げられる。アドレナリンニューロン遮断薬の非限定的な例としては、グアネチジン（イスメリン）およびレセルピン（セルパシル）が挙げられる。βアドレナリン遮断薬の非限定的な例としては、アセニトロール（セクトラール）、アテノロール（テノルミン）、ベタキソロール（ケルロン（kerlone））、カルテオロール（カルトロール（cartrol））、ラベタロール（ノルモジン、トランダート）、メトプロロール（ロプレッサー）、ナダノール（nadanol）（コルガード（corgard））、ペンブトロール（レバトール）、ピンドロール（ビスケン）、プロプラノロール（インデラル）およびチモロール（ブロカドレン）が挙げられる。α１アドレナリン遮断薬の非限定的な例としては、プラゾシン（ミニプレス）、ドキサゾシン（カルジュラ）およびテラゾシン（ハイトリン）が挙げられる。
【０１８２】
ｅ．血管拡張薬：  特定の実施態様では、心血管治療薬は、血管拡張薬（例えば、脳血管拡張薬、冠血管拡張薬または末梢血管拡張薬）を含み得る。特定の好ましい実施態様では、血管拡張薬は冠血管拡張薬を含む。冠血管拡張薬の非限定的な例としては、アモトリフェン、ベンダゾール、ヘミコハク酸ベンフロジル（benfurodil hemisuccinate）、ベンジオダロン、クロラシジン、クロモナール、クロベンフロール、クロニトラート、ジラゼプ、ジピリダモール、ドロプレニラミン、エフロキサート、四硝酸エリスリチル、エタフェノン、フェンジリン、フロレジル（floredil）、ガングレフェン、ヘレストロール（herestrol）ビス(β−ジエチルアミノエチルエーテル)、ヘキソベンジン、トシル酸イトラミン、ケリン、リドフラニン、六硝酸マンニトール、メジバジン（medibazine）、ニコルグリセリン（nicorglycerin）、四硝酸ペンタエリスリトール、ペントリニトロール、ペルヘキシリン、ピメチリン（pimethylline）、トラピジル、トリクロミル、トリメタジジン、リン酸トロールニトラートおよびビスナジンが挙げられる。特定の態様では、血管拡張薬は、慢性治療血管拡張薬（chronic therapy vasodilator）または高血圧性緊急症血管拡張薬（hypertensive emergency vasodilator）を含み得る。慢性治療血管拡張薬の非限定的な例としては、ヒドララジン（アプレゾリン）およびミノキシジル（ロニテン）が挙げられる。高血圧性緊急症血管拡張薬の非限定的な例としては、ニトロプルシド（ニプリド（nipride））、ジアゾキシド（ハイパースタットＩＶ）、ヒドララジン（アプレゾリン）、ミノキシジル（ロニテン）およびベラパミルが挙げられる。
【０１８３】
ｆ．その他の抗高血圧薬：  その他の抗高血圧薬の非限定的な例としては、アジマリン、γ−アミノ酪酸、ブフェニオド、シクレタニン（cicletainine）、シクロシドミン、タンニン酸クリプテナミン、フェノルドパム、フロセキナン、ケタンセリン、メブタメート、メカミラミン、メチルドパ、メチル４−ピリジルケトンチオセミカルバゾン、ムゾリミン、パルギリン、ペンピジン、ピナシジル、ピペロキサン、プリマペロン、プロトベラトリン、ラウバシン、レシメトール、リルメニデン（rilmenidene）、サララシン、ニトロプルシド（nitrorusside）ナトリウム、チクリナフェン、カンシルさんトリメタファン、チロシナーゼおよびウラピジルが挙げられる。特定の態様では、抗高血圧薬は、アリールエタノールアミン誘導体、ベンゾチアジアジン誘導体、Ｎ−カルボキシアルキル(ペプチド／ラクタム)誘導体、ジヒドロピリジン誘導体、グアニジン誘導体、ヒドラジン／フタラジン、イミダゾール誘導体、第４級アンモニウム化合物、レセルピン誘導体またはスルホンアミド誘導体を含み得る。
【０１８４】
アリールエタノールアミン誘導体：  アリールエタノールアミン誘導体の非限定的な例としては、アモスラロール、ブフラロール、ジレバロール、ラベタロール、プロネタロール、ソタロールおよびスルフィナロールが挙げられる。
【０１８５】
ベンゾチアジアジン誘導体：  ベンゾチアジアジン誘導体の非限定的な例としては、アルチジド、ベンドロフルメチアジド、ベンゾチアジド、ベンジルヒドロクロロチアジド、ブチアジド、クロロチアジド、クロルタリドン、シクロペンチアジド、シクロチアジド、ジアゾキシド、エピチアジド、エチアジド、フェンキゾン、ヒドロクロロチアジド、ヒドロフルメチジド、メチクロチアジド、メチクラン、メトラゾン、パラフルチジド、ポリチジド（polythizide）、テトラクロルメチアジドおよびトリクロルメチアジドが挙げられる。
【０１８６】
Ｎ−カルボキシアルキル(ペプチド／ラクタム)誘導体：  Ｎ−カルボキシアルキル(ペプチド／ラクタム)誘導体の非限定的な例としては、アラセプリル、カプトプリル、シラザプリル、デラプリル、エナラプリル、エナラプリラット、ホシノプリル、リシノプリル、モベルトプリル、ペリンドプリル、キナプリルおよびラミプリルが挙げられる。
【０１８７】
ジヒドロピリジン誘導体：  ジヒドロピリジン誘導体の非限定的な例としては、アムロジピン、フェロジピン、イスラジピン、ニカルジピン、ニフェジピン、ニルバジピン、ニソルジピンおよびニトレンジピンが挙げられる。
【０１８８】
グアニジン誘導体：  グアニジン誘導体の非限定的な例としては、ベタニジン、デブリソキン、グアナベンズ、グアナクリン、グアナドレル、グアナゾジン、グアネチジン、グアンファシン、グアノクロール、グアノキサベンズおよびグアノキサンが挙げられる。
【０１８９】
ヒドラジン／フタラジン：  ヒドラジン／フタラジンの非限定的な例としては、ブドララジン、カドララジン、ジヒドララジン、エンドララジン、ヒドラカルバジン、ヒドララジン、フェニプラジン、ピルドララジンおよびトドララジンが挙げられる。
【０１９０】
イミダゾール誘導体：  イミダゾール誘導体の非限定的な例としては、クロニジン、ロフェキシジン、フェントラミン、チアメニジンおよびトロニジンが挙げられる。
【０１９１】
四級アンモニウム化合物：  四級アンモニウム化合物の非限定的な例としては、臭化アザメトニウム、塩化クロリソンダミン、ヘキサメトニウム、ビス(メチル硫酸)ペンタシニウム（pentacynium bis(methylsulfate)）、臭化ペンタメトニウム、ペントリニウム酒石酸塩、フェナクトロピニウムクロリドおよびメチル硫酸トリメチジニウムが挙げられる。
【０１９２】
レセルピン誘導体：  レセルピン誘導体の非限定的な例としては、ビエタセルピン、デセルピジン、レシナミン、レセルピンおよびシロシンゴピンが挙げられる。
【０１９３】
スルホンアミド誘導体：  スルホンアミド誘導体の非限定的な例としては、アンブシド、クロパミド、フロセミド、インダパミド、キネタゾン、トリパミドおよびキシパミドが挙げられる。
【０１９４】
血管収縮剤：  血管収縮剤は、一般的に、外科手術中に生じ得るショック時に血圧を上昇させるために使用される。抗低血圧剤としても知られている血管収縮剤の非限定的な例としては、アメジニウムメチル硫酸塩、アンジオテンシンアミド、ジメトフリン、ドーパミン、エチフェルミン、エチレフリン、ゲペフリン、メタラミノール、ミドドリン、ノルエピネフリン、フォレドリンおよびシネフリンが挙げられる。
【０１９５】
うっ血性心不全治療剤：  うっ血性心不全の治療のための薬剤の非限定的な例としては、抗アンジオテンション（angiotension）ＩＩ薬剤、後負荷−前負荷軽減治療（afterload-preload reduction treatment）、利尿剤および強心薬が挙げられる。
【０１９６】
ａ．後負荷−前負荷軽減：  特定の実施態様では、アンジオテンションアンタゴニストに耐えられない動物患者は併用療法で治療され得る。このような療法は、ヒドララジン（アプレゾリン）および二硝酸イソソルビド（イソルジル、ソルビトラート）の投与を合わせることができる。
【０１９７】
ｂ．利尿剤：  利尿剤の非限定的な例としては、チアジドまたはベンゾチアジアジン誘導体（例えば、アルチアジド、ベンドロフルメタジド（bendroflumethazide）、ベンゾチアジド、ベンジルヒドロクロロチアジド、ブチアジド、クロロチアジド、クロロチアジド、クロルタリドン、シクロペンチアジド、エピチアジド、エチアジド、エチアジド、フェンキゾン、ヒドロクロロチアジド、ヒドロフルメチアジド、メチクロチアジド、メチクラン、メトラゾン、パラフルチジド、ポリチジド、テトラクロロメチアジド、トリクロルメチアジド）、有機水銀（例えば、クロルメロドリン、メラルリド（meralluride）、メルカンファミド（mercamphamide）、メルカプトメリンナトリウム、マーキュマリル酸（mercumallylic acid）、マーキュマチリンナトリウム（mercumatilin dodium）、塩化第一水銀、マーサリル（mersalyl））、プテリジン（例えば、フルテレン（furtherene）、トリアムテレン）、プリン（例えば、アセフィリン、７−モルホリノメチルテオフィリン、パモブロム（pamobrom）、プロテオブロミン、テオブロミン）、ステロイド（アルドステロンアンタゴニスト（例えば、カンレノン、オレアンドリン、スピロノラクトン）を含む）、スルホンアミド誘導体（例えば、アセタゾラミド、アンブシド（ambuside）、アゾセミド、ブメタニド、ブタゾールアミド、クロルアミノフェナミド（chloraminophenamide）、クロフェナミド、クロパミド、クロレキソロン、ジフェニルメタン−４,４'−ジスルホンアミド、ジスルファミド、エトキシゾラミド、フロセミド、インダパミド、メフルシド、メタゾラミド、ピレタニド、キネタゾン、トラセミド、トリパミド、キシパミド）、ウラシル（例えば、アミノメトラジン、アミソメトラジン）、カルシウム保持性アンタゴニスト（例えば、アミロライド、トリアムテレン）またはその他の利尿薬、例えばアミノジン（aminozine）、アルブチン、クロラザニル、エタクリン酸、エトゾリン、ヒドラカルバジン、イソソルビド、マンニトール、メトカルコン、ムゾリミン、ペルヘキシリン、チクリナフェン（ticrnafen）および尿素が挙げられる。
【０１９８】
ｃ．強心薬：  強心剤としても知られている陽性強心薬（positive inotropic agent）の非限定的な例としては、アセフィリン、アセチルジギトキシン、２−アミノ−４−ピコリン、アムリノン、ヘミコハク酸ベンフロジル、ブクラデシン、セルベロシン（cerberosine）、カンフォタミド（camphotamide）、コンバラトキシン、シマリン、デノパミン、デスラノシド、ジギタリン、ジギタリス、ジギトキシン、ジゴキシン、ドブタミン、ドーパミン、ドペキサミン、エノキシモン、エリスロフレイン、フェナルコミン、ギタリン、ギトキシン、グリコシアミン、ヘプタミノール、ヒドラスチニン、イボパミン、ラナトシド、メタミバム（metamivam）、ミルリノン、ネリフォリン（nerifolin）、オレアンドリン、ウアバイン、オキシフェドリン、プレナルテロール、プロシラリジン、レシブホゲニン、シラレン、シラレニン、ストロファンチン、スルマゾール、テオブロミンおよびキサモテロールが挙げられる。特定の態様では、強心薬は、強心配糖体、βアドレナリンアゴニストまたはホスホジエステラーゼ阻害剤である。強心配糖体の非限定的な例としては、ジゴキシン（ラノキシン）およびジギトキシン（クリストジギン）が挙げられる。βアドレナリンアゴニストの非限定的な例としては、アルブテロール、バンブテロール、ビトルテロール、カルブテロール、クレンブテロール、クロルプレナリン、デノパミン、ジオキセテドリン、ドブタミン（ドブトレックス）、ドーパミン（イントロピン）、ドペキサミン、エフェドリン、エタフェドリン、エチルノルエピネフリン、フェノテロール、ホルモテロール、ヘキソプレナリン、イボパミン、イソエタリン、イソプロテレノール、マブテロール、メタプロテレノール、メトキシフェナミン、オキシフェドリン、ピルブテロール、プロカテロール、プロトキロール、レプロテロール、リミテロール、リトドリン、ソテレノール、テルブタリン、トレトキノール、ツロブテロールおよびキサモテロールが挙げられる。ホスホジエステラーゼ阻害剤の非限定的な例としては、アムリノン（イノコール）が挙げられる。
【０１９９】
ｄ．抗狭心症薬：  抗狭心症薬は、有機硝酸塩、カルシウムチャネル遮断薬、β遮断薬およびそれらの組合せを含み得る。ニトロ血管拡張薬としても知られている有機硝酸塩の非限定的な例としては、ニトログリセリン（ニトロビッド、ニトロスタット）、二硝酸イソソルビド（イソルジル、ソルビトラート）および硝酸アミル（アスピロール、バポロール）が挙げられる。
【０２００】
グアニル酸シクラーゼ刺激剤：  グアニル酸シクラーゼ刺激剤の非限定的な例としては、リオシグアットが挙げられる。
【０２０１】
ネプリライシン（ＮＥＰ）阻害剤：  一の実施態様では、本発明で使用するためのＮＥＰ阻害剤は、選択的ＮＥＰ阻害剤である。さらなる実施態様では、本発明で使用するためのＮＥＰ阻害剤は、ＡＣＥ阻害よりもＮＥＰ阻害に対して少なくとも３００倍の選択性を有する阻害剤である。さらなる実施態様において、本発明で使用するためのＮＥＰ阻害剤は、ＥＣＥ（エンドセリン変換酵素）阻害よりもＮＥＰ阻害に対して少なくとも１００倍の選択性を有する阻害剤である。さらに別の実施形態では、本発明で使用するためのＮＥＰ阻害剤は、ＡＣＥ阻害よりもＮＥＰ阻害に対して少なくとも３００倍の選択性およびＥＣＥ阻害よりもＮＥＰ阻害に対して１００倍の選択性を有する阻害剤である。
【０２０２】
別の実施態様では、本発明で使用するためのＮＥＰ阻害剤は、以下の特許、特許出願または非特許刊行物に開示されているＮＥＰ阻害剤である：ＥＰ−１０９７７１９Ｂ１、ＥＰ−５０９４４２Ａ、ＵＳ−４９２９６４１、ＥＰ−５９９４４４Ｂ、ＵＳ−７９８６８４、J. Med. Chem. (1993) 3821、ＥＰ−１３６８８３、ＵＳ−４７２２８１０、Curr. Pharm. Design (1996) 443、J. Med. Chem. (1993) 87、ＥＰ−８３０８６３、ＥＰ−７３３６４２、ＷＯ９６１４２９３、ＷＯ９４１５９０８、ＷＯ９３０９１０１、ＷＯ９１０９８４０、ＥＰ−５１９７３８、ＥＰ−６９００７０、Bioorg. Med. Chem. Lett. (1996) 65、ＥＰ−Ａ−０２７４２３４、Biochem. Biophys. Res. Comm. (1989) 58、Perspect. Med. Chem. (1993) 45、またはＥＰ−３５８３９８−Ｂ。これらの特許および刊行物の内容は、それらの全体として出典明示により本明細書の一部とする。別の実施態様では、本発明で使用するためのＮＥＰ阻害剤は、ＮＥＰ阻害剤ホスホラミドン、チオルファン、カンドキサトリラト、カンドキサトリル、またはChemical Abstract Service (CAS) Number 115406-23-0の化合物である。
【０２０３】
別の実施態様では、本発明で使用するためのＮＥＰ阻害剤は、ＵＳ２００６／００４１０１４Ａ１（その内容は全体として出典明示により本明細書の一部とする）に開示されているＮＥＰ阻害剤である。別の実施態様では、本発明で使用するためのＮＥＰ阻害剤は、ＵＳ特許５,２１７,９９６（その内容は全体として出典明示により本明細書の一部とする）に開示されているＮＥＰ阻害剤である。別の実施態様では、本発明で使用するためのＮＥＰ阻害剤は、ＵＳ特許８,５１３,２４４（その内容は全体として出典明示により本明細書の一部とする）に開示されているＮＥＰ阻害剤である。別の実施態様では、本発明で使用するためのＮＥＰ阻害剤は、ＵＳ特許５,２１７,９９６（その内容は全体として出典明示により本明細書の一部とする）に開示されているＮＥＰ阻害剤である。別の実施態様では、本発明で使用するためのＮＥＰ阻害剤は、ＵＳ特許出願公開２０１３／０３３０３６５（その内容は全体として出典明示により本明細書の一部とする）に開示されているＮＥＰ阻害剤である。別の実施態様では、本発明で使用するためのＮＥＰ阻害剤は、ＵＳ特許出願公開２０１６／００３８４９４（その内容は全体として出典明示により本明細書の一部とする）に開示されているＮＥＰ阻害剤である。
【０２０４】
したがって、種々の実施態様では、本開示は、また、例えば方法１以降のいずれかに従って、イノトロピックおよび／またはルシトロピック機能不全によって特徴づけられる疾患または状態の治療、緩和または予防においてアデノシンＡ2受容体アゴニストの効果を増強するため、または例えば方法２以降のいずれかに従って、アデノシンＡ2受容体機能障害によって特徴づけられる疾患または状態の治療、緩和または予防においてアデノシンＡ2受容体機能を増強するための医薬組合せであって、ＰＤＥ１阻害剤の有効量および１つ以上のさらなる治療薬を含む医薬組合せ［組合せ１］を提供する。
【０２０５】
１.１  ＰＤＥ１阻害剤および１つ以上のさらなる治療薬が、薬学的に許容される希釈剤または担体と組み合わせてまたは伴って、単一の投与剤形、例えば錠剤またはカプセル剤内にある、組合せ１。
【０２０６】
１.２  ＰＤＥ１阻害剤および１つ以上のさらなる治療薬が、例えば同時にまたは連続して投与するための説明書とともに、単一のパッケージ内にある、組合せ１。
【０２０７】
１.３  ＰＤＥ１阻害剤が、遊離形態または薬学的に許容される塩形態の、式Ｉ'、ＩＩ'、ＩＩＩ'、またはＩＶ'のうちの１つである、上記の組合せのいずれか。
【０２０８】
１.４  ＰＤＥ１阻害剤が、
ａ．  遊離形態または薬学的に許容される塩形態、例えば一リン酸塩形態の、(６ａＲ,９ａＳ)−５,６ａ,７,８,９,９ａ−ヘキサヒドロ−５−メチル−３−(フェニルアミノ)−２−((４−(６−フルオロピリジン−２−イル)フェニル)メチル)−シクロペント[４,５]イミダゾ[１,２−ａ]ピラゾロ[４,３−ｅ]ピリミジン−４(２Ｈ)−オン；
ｂ．  遊離形態または薬学的に許容される塩形態の７,８−ジヒドロ−２−(４−アセチルベンジル)−３−(４−フルオロフェニルアミノ)−５,７,７−トリメチル−[２Ｈ]−イミダゾ−[１,２−ａ]ピラゾロ[４,３−ｅ]ピリミジン−４(５Ｈ)−オン；および
ｃ．  ３−((４−フルオロフェニル)アミノ)−５,７,７−トリメチル−２−((２−メチルピリミジン−５−イル)メチル)−７,８−ジヒドロ−２Ｈ−イミダゾ[１,２−ａ]ピラゾロ[４,３−ｅ]ピリミジン−４(５Ｈ)−オン
から選択される、上記の組合せのいずれか。
【０２０９】
１.５  １つ以上のさらなる治療薬が、アデノシンＡ2アゴニスト、βアドレナリン受容体アンタゴニスト（すなわち、β遮断薬）；ＡＣＥ阻害剤；ネプリライシン阻害剤；抗高リポタンパク血症薬（例えば、アリールオキシアルカン酸／フィブリン酸誘導体、レジン／胆汁酸捕捉剤、ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤、ニコチン酸誘導体、甲状腺ホルモンまたは甲状腺ホルモンアナログまたはそれらの組合せ）；抗動脈硬化症薬（例えば、ピリジノールカルバメート）；グアニル酸シクラーゼ活性化薬；抗血栓薬および／または線維素溶解薬（例えば、抗凝固薬、抗凝固薬アンタゴニスト、血小板凝集阻害薬、血栓溶解薬、血栓溶解薬アンタゴニスト）；血液凝固薬s（例えば、血栓溶解薬アンタゴニストおよび抗凝固薬アンタゴニスト）；抗不整脈薬（例えば、ナトリウムチャネル遮断薬、再分極延長薬、カルシウムチャネル遮断薬）；抗高血圧薬（例えば、交感神経遮断薬、α／β遮断薬、α遮断薬、抗アンジオテンシンＩＩ薬、β遮断薬、カルシウムチャネル遮断薬、血管拡張薬）；アリールエタノールアミン誘導体；ベンゾチアジアジン誘導体；Ｎ−カルボキシアルキル(ペプチド／ラクタム）誘導体；ジヒドロピリジン誘導体；グアニジン誘導体；ヒドラジン／フタラジン；イミダゾール誘導体；四級アンモニウム化合物；レセルピン誘導体；スルホンアミド誘導体；血管収縮剤；利尿剤；強心薬；抗狭心症薬またはそれらの組合せから選択される、上記の組合せのいずれか。
【０２１０】
１.６  さらなる治療薬が、アデノシンＡ2アゴニスト、βアドレナリン受容体アンタゴニスト（すなわち、β遮断薬）；ＡＣＥ阻害剤、カルシウムチャネル遮断薬；アンジオテンシン受容体遮断薬（ＡＲＢ）；ネプリライシン阻害剤またはそれらの組合せから選択される、上記の組合せのいずれか。
【０２１１】
１.７  さらなる治療薬が、アデノシンＡ2アゴニストから選択される、上記の組合せのいずれか。
【０２１２】
１.８  さらなる治療薬が、ＣＧＳ２１６８０、ＡＴＬ−１４６ｅ、ＹＴ−１４６（すなわち、２−(１−オクチニル)アデノシン）、ＣＧＳ−２１６８０、ＤＰＭＡ（すなわち、Ｎ−６−(２−(３,５−ジメトキシフェニル)−２−(２−メチルフェニル)エチル)アデノシン）、レガデノソン（Regadenozone）、ＵＫ−４３２,０９７、リモネン、Ｎ−エチルカルボキシアミドアデノシン、ＣＶ−３１４６、ビノデノソンおよびＢＶＴ.１１５９５９から選択されるアデノシンＡ2アゴニスト、(Ｓ)−ＰＨＰＮＥＣＡ、ＢＡＹ６０−６５８３、ＬＵＦ−５８３５、またはＬＵＦ−５８４５である、上記の組合せのいずれか。
【０２１３】
１.９  さらなる治療薬が、選択的Ａ2Bアゴニストである、上記の組合せのいずれか。
【０２１４】
１.１０  さらなる治療薬が、(Ｓ)−ＰＨＰＮＥＣＡ、ＢＡＹ６０−６５８３、ＬＵＦ−５８３５、ＬＵＦ−５８４５、およびＮ−エチルカルボキシアミドアデノシンから選択される選択的Ａ2Bアゴニストである、上記の組合せのいずれか。
【０２１５】
１.１１  治療されるべき疾患または状態が、狭心症、脳卒中、腎不全、本態性高血圧症、肺高血圧症、二次性高血圧症、孤立性収縮期高血圧症、糖尿病関連高血圧症、アテローム性動脈硬化症関連高血圧症、腎血管性高血圧症、うっ血性心不全、炎症性疾患または障害、線維症、心肥大、血管リモデリング、結合組織疾患または障害（例えば、マルファン症候群）、慢性心不全、心筋虚血、心筋低酸素症、再灌流傷害、左室機能不全（例えば、心筋梗塞、心室拡張）、血管漏出（すなわち、低酸素症の結果として生じる））、筋ジストロフィー（例えば、デュシェンヌ型筋ジストロフィー）、または筋萎縮性側索硬化症である、上記の組合せのいずれか。
【０２１６】
１.１２  ＰＤＥ１阻害剤が、虚血または低酸素症に対してプレコンディションするためまたは心臓組織に保護を提供するために投与される、上記の組合せのいずれか。
【０２１７】
１.１３  さらに、βアドレナリン受容体アンタゴニスト（すなわち、β遮断薬）；ＡＣＥ阻害剤；ネプリライシン阻害剤；抗高リポタンパク血症薬（例えば、アリールオキシアルカン酸／フィブリン酸誘導体、レジン／胆汁酸捕捉剤、ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤、ニコチン酸誘導体、甲状腺ホルモンまたは甲状腺ホルモンアナログまたはそれらの組合せ）；抗動脈硬化症薬（例えば、ピリジノールカルバメート）；グアニル酸シクラーゼ活性化薬；抗血栓薬および／または線維素溶解薬（例えば、抗凝固薬、抗凝固薬アンタゴニスト、血小板凝集阻害薬、血栓溶解薬、血栓溶解薬アンタゴニスト）；血液凝固薬s（例えば、血栓溶解薬アンタゴニストおよび抗凝固薬アンタゴニスト）；抗不整脈薬（例えば、ナトリウムチャネル遮断薬、再分極延長薬、カルシウムチャネル遮断薬）；抗高血圧薬（例えば、交感神経遮断薬、α／β遮断薬、α遮断薬、抗アンジオテンシンＩＩ薬、β遮断薬、カルシウムチャネル遮断薬、血管拡張薬）；アリールエタノールアミン誘導体；ベンゾチアジアジン誘導体；Ｎ−カルボキシアルキル(ペプチド／ラクタム）誘導体；ジヒドロピリジン誘導体；グアニジン誘導体；ヒドラジン／フタラジン；イミダゾール誘導体；四級アンモニウム化合物；レセルピン誘導体；スルホンアミド誘導体；血管収縮剤；利尿剤；強心薬；または抗狭心症薬の１つ以上を含む、上記の組合せのいずれか。
【０２１８】
いくつかの実施態様では、本開示は、また、例えば方法３以降のいずれかに従って、心毒性を治療、緩和または予防するための医薬組合せであって、ＰＤＥ１阻害剤の有効量および１つ以上のさらなる心保護薬を含む医薬組合せ［組合せ２］を提供する。
【０２１９】
２.１  ＰＤＥ１阻害剤および１つ以上のさらなる治療薬が、薬学的に許容される希釈剤または担体と組み合わせてまたは伴って、単一の投与剤形、例えば錠剤またはカプセル剤内にある、組合せ２。
【０２２０】
２.２  ＰＤＥ１阻害剤および１つ以上のさらなる治療薬が、例えば同時にまたは連続して投与するための説明書とともに、単一のパッケージ内にある、組合せ２。
【０２２１】
２.３  ＰＤＥ１阻害剤が、遊離形態または薬学的に許容される塩形態の、式Ｉ'、ＩＩ'、ＩＩＩ'またはＩＶ'のうちの１つである、上記の組合せのいずれか。
【０２２２】
２.４  ＰＤＥ１阻害剤が、
ａ．  遊離形態または薬学的に許容される塩形態、例えば一リン酸塩形態の、(６ａＲ,９ａＳ)−５,６ａ,７,８,９,９ａ−ヘキサヒドロ−５−メチル−３−(フェニルアミノ)−２−((４−(６−フルオロピリジン−２−イル)フェニル)メチル)−シクロペント[４,５]イミダゾ[１,２−ａ]ピラゾロ[４,３−ｅ]ピリミジン−４(２Ｈ)−オン；
ｂ．  遊離形態または薬学的に許容される塩形態の７,８−ジヒドロ−２−(４−アセチルベンジル)−３−(４−フルオロフェニルアミノ)−５,７,７−トリメチル−[２Ｈ]−イミダゾ−[１,２−ａ]ピラゾロ[４,３−ｅ]ピリミジン−４(５Ｈ)−オン；および
ｃ．  ３−((４−フルオロフェニル)アミノ)−５,７,７−トリメチル−２−((２−メチルピリミジン−５−イル)メチル)−７,８−ジヒドロ−２Ｈ−イミダゾ[１,２−ａ]ピラゾロ[４,３−ｅ]ピリミジン−４(５Ｈ)−オン
から選択される、上記の組合せのいずれか。
【０２２３】
２.５  １つ以上のさらなる心保護薬が、鉄キレート剤（例えば、デクスラゾキサン）、アンジオテンシン受容体遮断薬（ＡＲＢ）、β遮断薬（例えば、カルベジロール、メトプロロールまたはネビボロール）、アンジオテンシン変換酵素阻害剤（ＡＣＥＩ）、スタチン、抗酸化剤（すなわち、ジヒドロミリセチン、バージンオリーブオイルからの抗酸化剤、ゴマ油、セサミン、サリドロシド、メラトニン、グルタチオン、コエンザイムＱ１０、ビタミン、ケルセチン、イソラムネチン、カンナビジオール、レスベラトロール）、Ｍｄｉｖｉ−１、メトホルミン、Ｎ−アセチルシステイン、フェネチルアミン、アミホスチン、プロスタサイクリン（ＰＧＩ２）、メロキシカム、ジアゾキシド、カルボキシマルトース鉄、レシチン化ヒト組換えスーパーオキシドジスムターゼ、グレリン、Ｌ−カルニチン、モルシドミン、ジドックス、α−リノレン酸およびニコランジルから選択される、上記の組合せのいずれか。
【０２２４】
２.６  １つ以上のさらなる心保護薬が、アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤、アンジオテンシン受容体遮断薬（ＡＲＢ）、β遮断薬（例えば、カルベジロールまたはネビボロール）、および鉄キレート剤（例えば、デクスラゾキサン）から選択される、上記の組合せのいずれか。
【０２２５】
本明細書で用いられる「ＰＤＥ１阻害剤」は、例えば固定化金属親和性粒子試薬ＰＤＥアッセイにおいて１μＭ未満、好ましくは７５０ｎＭ未満、より好ましくは５００ｎＭ未満、より好ましくは５０ｎＭ未満のＩＣ50を有する、ｃＧＭＰのホスホジエステラーゼ媒介（例えば、ＰＤＥ１媒介、特にＰＤＥ１Ｂ媒介）加水分解を選択的に阻害する化合物をいう。
【０２２６】
「本開示化合物」または「本開示のＰＤＥ１阻害剤」というフレーズまたは同様の用語は、本明細書に開示されている化合物の全て、例えば式Ｉ、式ＩＩ、式ＩＩＩ、式ＩＶ、式Ｖ、式ＶＩ、式ＶＩＩ、式ＶＩＩＩ、式ＩＸ、式Ｘ、または式ＸＩで示される化合物を包含する、。
【０２２７】
「治療」および「治療すること」という用語は、したがって、疾患の症状の予防および治療または改善、ならびに疾患の原因の治療を包含するものとして理解されるべきである。
【０２２８】
治療の方法について、「有効量」という用語は、特定の疾患または障害を治療するための治療上有効な量を包含することを意図している。
【０２２９】
本明細書で用いられる「プレコンディション」という用語は、血液供給の喪失または酸素に対する耐性を生み出すための心臓組織の治療を指すことを意図している。虚血性プレコンディショニングは、虚血の短いエピソードが繰り返されることにより、その後の虚血性発作から心筋を保護する固有のプロセスである。
【０２３０】
「患者」という用語は、ヒトまたは非ヒト（すなわち、動物）の患者を含む。特定の実施態様では、本開示は、ヒトおよび非ヒトの両方を包含する。別の実施形態では、本開示は非ヒトを包含する。他の実施形態では、この用語はヒトを包含する。
【０２３１】
本開示で使用される「含む」という用語は、制限がないこと（open-ended）を意図しており、追加の、記載されていない要素または方法のステップを除外するものではない。
【０２３２】
遊離形態または薬学的に許容される塩形態の、本開示化合物、例えば上記のような式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、ＩＸ、ＸおよびＸＩは、唯一の治療薬として使用することができるが、他の活性薬剤と組み合わせてまたは共投与のために使用することもできる。
【０２３３】
本開示を実施する際に使用される投薬量は、もちろん、例えば治療される特定の疾患または状態、使用される特定の開示化合物、投与方法、および望ましい治療法に応じて変化する。開示の化合物は、経口、非経口、経皮、または吸入を含む適切な経路で投与することができるが、好ましくは経口で投与する。一般的に、例えば上記の疾患の治療のための、満足のいく結果は、約０.０１から２.０ｍｇ／ｋｇのオーダーの用量での経口投与で得られることが示される。したがって、より大きな哺乳動物、例えばヒトでは、経口投与のための示された一日投与量は、約０.７５〜１５０ｍｇの範囲であり、好都合には、毎日１回または２〜４回の分割用量で投与されるか、または徐放形態で投与される。したがって、経口投与用の単位剤形は、例えば、薬学的に許容される希釈剤または担体と一緒に、開示化合物約０.２〜７５または１５０ｍｇ、例えば約０.２または２.０から５０、７５または１００ｍｇを含み得る。
【０２３４】
本開示化合物を含む医薬組成物は、慣用の希釈剤または賦形剤、および生薬技術（galenic art）で知られている技術を使用して調製することができる。したがって、経口剤形としては、錠剤、カプセル剤、液剤、懸濁液などが挙げられ得る。
【実施例】
【０２３５】
実施例１：  イヌ／ウサギ対マウス／ラットにおけるＰＤＥ１Ａ対ＰＤＥ１Ｃアイソフォーム発現
心筋で主にＰＤＥ１Ｃを発現する哺乳動物で実験モデルを確立するために、ヒト、イヌ、ウサギ、ラットおよびマウスでタンパク質および遺伝子発現を調べる。安楽死させた成体Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウス、Sprague Dawleyラット、雑種犬、ニュージーランド白ウサギから心臓組織を迅速に切除し、洗浄した後、液体窒素中で凍結する。ヒト心筋組織はUniversity of Pennsylvaniaの組織バンクから、ドナー対照心臓および末期心筋症心臓（摘出）から得た。心臓は、氷冷心筋保護液を用いて管理された外科的処置の下で採取され、氷上で輸送され、その後まもなく液体窒素中でスナップ冷凍された。次に、組織を、種特異的プライマーおよび抗体を用いて、ＰＤＥ１Ａ、１Ｂおよび１ＣのｍＲＮＡ発現およびタンパク質発現について分析する。
【０２３６】
ＴＲＩｚｏｌ試薬（Thermo Fisher Scientific Inc., Waltham, MA）を用いて、酸性グアニジニウムチオシアネート−フェノール−クロロホルム法により凍結組織からＲＮＡを抽出する。ＲＮＡ  １μｇを、Ｈｉｇｈ  Ｃａｐａｃｉｔｙ  ｃＤＮＡ  Ｒｅｖｅｒｓｅ  Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ  Ｋｉｔ（Thermo Fisher Scientific）およびＴ１００サーマルサイクラー（Bio-Rad Laboratories, Inc., Hercules, California）を用いてｃＤＮＡに逆転写する。リアルタイムＰＣＲは、ＣＦＸ３８４  Ｒｅａｌ−Ｔｉｍｅ  Ｓｙｓｔｅｍ（Bio-Rad Laboratories）を用いて、ＴａｑＭａｎ  Ｇｅｎｅ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  Ｍａｓｔｅｒ  Ｍｉｘ  ｏｒ  Ｐｏｗｅｒ  ＳＹＢＲ  Ｇｒｅｅｎ  ＰＣＲ  Ｍａｓｔｅｒ  Ｍｉｘ（Thermo Fisher Scientific）を用いて行う。ヒト、イヌ、ラットおよびマウスの組織のＰＣＲ分析のためにＴａｑＭａｎプライマー／プローブ（Thermo Fisher Scientific）を用いる。相対的なｍＲＮＡ発現レベルは、ΔΔＣｔ法により決定される。ウサギのプライマー配列は以下の通りである：ＰＤＥ１Ａ（Ｆ）５'−ＴＧＧＴＧＧＣＣＣＡＧＴＣＡＣＡＡＡＴＡ−３'（Ｒ）５'−ＡＡＴＧＧＴＧＧＴＴＧＡＡＣＴＧＣＴＴＧ−３'；ＰＤＥ１Ｂ（Ｆ）５'−ＣＴＧＴＣＧＧＡＧＡＴＣＧＡＧＧＴＣＴＴＧ−３'（Ｒ）５'−ＧＧＴＧＣＣＣＧＴＧＴＧＣＴＣＡＴＡＧ−３'；ＰＤＥ１Ｃ（Ｆ）５'−ＣＡＧＡＴＧＧＡＡＴＡＡＡＧＣＧＧＣＡＴＴＣ−３'（Ｒ）５'−ＧＧＣＡＡＧＧＴＧＡＧＡＣＧＡＣＴＴＧＴＡＧＡ−３'；ＧＡＰＤＨ（Ｆ）５'−ＴＧＧＴＧＡＡＧＧＴＣＧＧＡＧＴＧＡＡＣ−３'（Ｒ）５'−ＡＴＧＴＡＧＴＧＧＡＧＧＴＣＡＡＴＧＡＡＴＧＧ−３'。
【０２３７】
凍結した組織をホモジナイズし、ＲＩＰＡライシスバッファーで超音波洗浄する。遠心分離（ＸＸ、３０分）後、タンパク質濃度を、上清からＢＣＡアッセイ（Thermo Fisher Scientific）によって決定する。等量のタンパク質をトリス−グリシンゲル上にロードし、１００Ｖで７５〜９０分間走らせる。ゲルタンパク質を、Ｔｒａｎｓ−Ｂｌｏｔ  Ｔｕｒｂｏ  Ｔｒａｎｓｆｅｒ  Ｓｙｓｔｅｍ（Bio-Rad）を用いてセミドライブロッティングによってニトロセルロース膜に転写させる。膜を、４℃で一夜、一次抗体と一緒にインキュベートする。蛍光標識二次抗体（LI-COR, Inc., Lincoln, NE）および洗液と一緒にインキュベートした後、信号を、Ｏｄｙｓｓｅｙ  Ｉｍａｇｉｎｇ  Ｓｙｓｔｅｍ（LI-COR）を使用して検出する。抗体は以下の通りである：ＰＤＥ１Ａ（ｓｃ−５０４８０、Santa Cruz Biotechnology；ａｂ９６３３６、Abcam）、ＰＤＥ１Ｂ（ａｂ１８２５６５、Abcam）、ＰＤＥ１Ｃ（ｓｃ−３７６４７４、Santa Cruz Biotechnology；ａｂ１４６０２、Abcam）、ＧＡＰＤＨ（＃２１１８、Cell Signaling Technology；ａｂ９４８４、Abcam；ＩＭＧ−３０７３、Imgenex）。
【０２３８】
このようにして、ヒト、イヌ、ウサギの心筋は主にＰＤＥ１Ｃを発現し、ラットやマウスの心筋の発現プロファイルとは逆にＰＤＥ１Ａの発現量が少ないことが明らかになった。イヌでは心不全によって発現プロファイルは有意に変化しない。ヒト左心室（ＬＶ）は、転写産物レベルでは圧倒的にＰＤＥ１Ｃを発現するが、一部のＰＤＥ１Ａも存在している。タンパク質レベルでは、正常ではＰＤＥ１Ｃが優勢であり、末期心不全になるとＰＤＥ１Ａが増加する。ＰＤＥ１Ｂは、試験したどの種の心臓でも検出されないが、脳には存在する。
【０２３９】
実施例２：  大型哺乳動物（すなわち、イヌ）の正常・不全心におけるＰＤＥ１阻害のｉｎ  ｖｉｖｏ解析
ＰＤＥ１Ｃを発現する２匹の哺乳動物、イヌおよびウサギにおける強力なＰＤＥ１阻害剤（化合物１）の効果を正常心臓および不全心の両方で試験する研究が行われ、その結果をβアドレナリン調節と対比させた。これらの動物は、心筋組織のｍＲＮＡおよびタンパク質レベルでＰＤＥ１Ｃ＞＞ＰＤＥ１Ａを発現するので、選択された。
【０２４０】
化合物１（分子量＝６０５、(６ａＲ,９ａＳ)−２−(４−(６−フルオロピリジン−２−イル)ベンジル)−５−メチル−３−(フェニル−アミノ)−５,６ａ,７,８,９,９ａ−ヘキサヒドロシクロペンタ−[４,５]イミダゾ[１,２−ａ]ピラゾロ[４,３−ｅ]ピリミジン−４−(２Ｈ)−オン・一リン酸塩）［上記の(６ａＲ,９ａＳ)−５,６ａ,７,８,９,９ａ−ヘキサヒドロ−５−メチル−３−(フェニルアミノ)−２−((４−(６−フルオロピリジン−２−イル)フェニル)メチル)−シクロペント[４,５]イミダゾ[１,２−ａ]ピラゾロ[４,３−ｅ]ピリミジン−４(２Ｈ)−オン・一リン酸塩の別名］はIntra-Cellular Therapies, Inc.（New York, NY）によって合成された。完全長組換えｒ−ｈＰＤＥ１Ａ、１Ｂおよび１Ｃに対するそのＫiは、それぞれ３４、３８０および３７ｐＭであり、次に近いＰＤＥファミリー酵素であるＰＤＥ４Ｄ（Ｋi＝３３ｎＭ）と比較して１０００倍以上のＰＤＥ１アイソフォームに対する活性を有し、他のすべてのＰＤＥ酵素ファミリーと比較して１０4〜３×１０5倍の選択性を有する。以下の実施例で使用されるさらなる医薬品は、ドブタミン（Hospira Inc., Lake Forest, IL）、エスモロールＨＣｌ（Mylan, Rockford, IL）、ＭＲＳ１７５４（Tocris Bioscience, Bristol, UK）、およびＨｅｓｐａｎ（０.９％ＮａＣｌ中６％Ｈｅｔａｓｔａｒｃｈ、B. Braun Medical Inc., Bethlehem, PA）である。
【０２４１】
ｉｎ  ｖｉｖｏイヌ研究法
意識下圧力−容積血行動態解析のために、成犬雑種（２５〜３０ｋｇ；ｎ＝６）に左室ソノマイクロメーター、マイクロメーター、下大静脈カフオクルダー、ならびに動脈および静脈留置カテーテルを慢性的に装着する。犬は、２００ｂｐｍで２週間タキペーシング（tachypacing）によって拡張型心筋症を誘発する前と後の意識下状態で研究される。これらの犬は、経口および静脈内化合物１の効果、およびβ１アドレナリン刺激との相互作用を決定するために、別々の日に研究される。
【０２４２】
経口薬物投与：  化合物１（０.１〜１０ｍｇ／ｋｇ）をピーナッツバター中のゼラチンカプセル中で投与し、その後の１時間にわたって血行動態データを記録する。動物のサブセットにおいて、イヌに最初にドブタミンを１５分間（１０μｇ／ｋｇ／分）注入し、新たなベースラインを確立し、次いで化合物1の経口投与量を投与し、化合物１の投与の９０分後にドブタミンを併用療法として追加する。
【０２４３】
静脈内薬物投与：  化合物１を０.０５Ｍクエン酸リン酸緩衝液に溶解し、中心静脈カテーテルを介して１〜２分かけてボーラスとして投与する。試験では、０.０１ｍｇ／ｋｇおよび０.１ｍｇ／ｋｇの２つの用量を用い、後者は最初の用量の３０分後に投与された。
【０２４４】
静脈内血液をＫ２ＥＤＴＡチューブに入れ、２,０００ｇで１５分間遠心分離し、血漿をデカンテーションし、凍結保存する。化合物１のレベルは、迅速で感度の高い液体クロマトグラフィー−タンデム質量分析法（ＬＣ／ＭＳ−ＭＳ）によって評価される。化合物１の分析のために、１％のギ酸を含むアセトニトリルとの単一の液−液抽出ステップを用い、その後、Ｗａｔｅｒｓ  Ｏｓｔｒｏ  Ｐｌａｔｅｓを使用して脂質を除去するために真空濾過を行う。
【０２４５】
ＨＰＬＣ分離は、５０ｍｍ×３ｍｍ、２.７μｍの寸法のＡｓｃｅｎｔｉｓ（登録商標）  Ｅｘｐｒｅｓｓ  Ｐｈｅｎｙｌ  Ｈｅｘｙｌカラム上で、重水素化化合物１の内部標準物質を用いて行う。移動相は、０.２％ＮＨ３Ｈ２Ｏを含む５ｍＭ重炭酸アンモニウム中で４.５分間にわたる６０〜１００％メタノールの勾配液で構成され、０.８ｍＬ／分の流速でポンピングする。分析時間は４.５分であり、分析物および内部標準物質ともに２.０分前後で溶出した。化合物１の検出には、Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｒｅａｃｔｉｏｎｓ  ｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇ（ＭＲＭ）モードを使用する。ＭＳは陽イオン検出モードで操作される。定量的最適化の際に化合物１および内部標準物質に選択した前駆体から生成物へのイオン（Ｑ１→Ｑ３）は、それぞれ（ｍ／ｚ）５０８.１→３２１.１と５１３.１→３２５.１であった。検量線は、イヌ血漿サンプルマトリックス中の０.０２〜５００ｎｇ／ｍＬの範囲で直線的であった。血漿の定量下限（ＬＬＯＱ）は０.０２ｎｇ／ｍＬであった。
【０２４６】
初期用量滴定試験では、正常な意識のあるイヌに０.１〜１０ｍｇ／ｋｇ、ＰＯの範囲で化合物１を曝露し、薬力学的アッセイを実施した。投与１２０分後の１０ｍｇ  Ｐ.Ｏ.では、血漿中化合物１濃度は、正常イヌで１０３.９±８.５ｎｇ／ｍＬ、ＨＦイヌで１７８.４±１００.５ｎｇ／ｍＬである。正常イヌでは０.１ｍｇ／ｋｇ  ｉ.ｖ.で、血漿中の化合物１濃度は数分以内にピークとなり、１０分後に２１１.２±６０.７ｎｇ／ｍＬに、３０分後に９４.５±２１.２ｎｇ／ｍＬに低下した。不全のイヌでは、ＩＶ投与後の血漿中の化合物１濃度は、１０分後に４４１.４±９２.５ｎｇ／ｍＬ、３０分後に１８４.９±２８.９ｎｇ／ｍＬであった。
【０２４７】
正常および不全のイヌ心臓における急性ＰＤＥ１阻害による心血管機能の変化
急性ＰＤＥ１阻害の効果を評価するために、健常または不全心の無傷のイヌにおいて、圧力−容積関係の試験を行い、化合物１（１０ｍｇ／ｋｇ）の経口投与のベースラインおよびその２時間後の血行動態および心臓力学を解析した。対照イヌおよび心不全（ＨＦ）イヌの両方において、ＬＶ予圧（拡張末期容積）または収縮期血圧にはほとんど変化がなく、収縮力の増加（収縮末期エラスタンスの上昇）があった。正常イヌでは、化合物１は収縮期血圧を変化させることなく、心拍数を増加させ、全身の血管抵抗を減少させ、心拍出量を増加させた。収縮力の負荷不感応指標（ｄＰ／ｄｔmax／ＩＰおよびＰＲＳＷ）が増加した。圧力低下ピーク率（ｄＰ／ｄｔmin）および弛緩時定数（ｔａｕ）に反映される弛緩も改善した。同様の薬効が、特に収縮力と血管拡張において、ＨＦイヌでも観察された。心拍数の増加は、ＨＦ動物では鈍化した（２−ｗａｙ  ＡＮＯＶＡによる相互作用ではｐ＝０.０７）。このように、化合物１の正味の効果は、全身の血圧を変化させることなく、対照群では心拍出量を５０％（ＨＦ群では３２％）増加させることであった。
【０２４８】
静脈内化合物１は、正常およびＨＦの両方の条件で同様の効果をもたらすが、反応はより迅速で、５〜１０分後にピークとなった。０.０１ｍｇ／ｋｇ（１０分後の血漿中化合物１濃度２３.６±８.６ｎｇ／ｍＬ）では、心拍数以外のすべての反応は無視できる程度であった。しかしながら、０.１ｍｇ／ｋｇ（１０分後の血漿中化合物１濃度２１１.２±６０.７ｎｇ／ｍＬ）では、正のクロノトロピック、イノトロピック、ルシトロピックおよび血管拡張反応が認められ、１０ｍｇ／ｋｇ経口投与時と同様の心拍出量の純増が認めらた。これらの効果は心不全で再びわずかに軽減されたが、イノトロピー、ルシトロピーおよび血管拡張性は有意に改善されたままであった。
【０２４９】
ＰＤＥ１阻害の血行動態効果はドブタミンに相加的である
化合物１の急性心血管効果は、ｃＧＭＰ関連の反応ではなくｃＡＭＰ関連の反応を示唆している。これは、その正味の影響がβアドレナリン経路のドブタミンとの共活性化と重複しているかまたは増幅されているかどうかの疑問を提起した。１０μｇ／ｋｇ／分のドブタミンを、１０ｍｇ／ｋｇ化合物１を用いてまたは用いずにイヌに投与した。ドブタミンは、ＰＶループ面積を増加させ（脳卒中ワークを示している）、各ループの上隅を左にシフトさせた（収縮力の増加を示している）；化合物１を追加すると、両方がさらに強化された。これらの効果は相加的であることが観察された。これは、２−ｗａｙ  ＡＮＯＶＡから交互作用項を評価することによって定量化された。同様の結果が、対照および不全心で得られた。
【０２５０】
これらの動物から血漿を得、ｃＡＭＰおよびｃＧＭＰをＥＬＩＳＡによって測定する。ドブタミン（化合物１ではない）は正常イヌにおいて血漿中のｃＡＭＰを増強し、その上昇は化合物１の有無にかかわらず同様であった。ＨＦイヌでは、ｃＡＭＰはベースラインで上昇し、薬剤によって有意な変化はなかった（１−ｗａｙ  ＲＭＡＮＯＶＡ、ｐ＝０.３）が、併用すると有意に上昇した。血漿中ｃＧＭＰは、正常モデルおよびＨＦモデルのいずれの条件においても変化しなかった。
【０２５１】
ＰＤＥ１阻害の心血管効果はβアドレナリンシグナル伝達とは独立しているが、アデノシンＡ2B受容体シグナル伝達を必要とする。
サイクリックＡＭＰは、主に刺激性Ｇタンパク質（Ｇｓ）を介して活性化された膜貫通型アデニルシクラーゼによって生成され、心筋細胞ではβアドレナリン、アデノシン（主にＡ2B）、グルカゴン、プロスタノイド、ヒスタミン、セロトニンのすべてがＧｓと結合している。本研究では、βアドレナリン受容体とアデノシン受容体に焦点を当て、後者については、ｃＡＭＰ依存性の収縮力を直接刺激することが報告されているＡ2B受容体に焦点を当てた。麻酔したウサギに、選択的β１遮断薬エスモロールまたはアデノシンＡ2BＲ遮断薬ＭＲＳ−１７５４による前治療を伴ってまたは伴わずに、ボーラス静脈内化合物１を０.１ｍｇ／ｋｇ（イヌの結果に基づく用量）で投与する。イヌの場合と同様に、急性ＰＤＥ１阻害のみでは、収縮力の上昇（収縮期末期エラスターンスおよび負荷前リクルート可能な脳卒中ワークが５０％上昇）に起因して心拍出量が増加し、心拍数が緩やかに上昇し、全身抵抗が低下したが、収縮期血圧には変化はなかった。リラクゼーションの変化は控えめであり、ＬＶ予圧（拡張末期および容積）に変化はなかった；しかしながら、血管拡張薬と強心薬を組み合わせた反応は、心室／動脈結合比、Ｅｅｓ／Ｅａを２倍に増加させた。
【０２５２】
これらの実験を、βＡＲ受容体を遮断するためにエスモロールを投与した後に繰り返す。化合物１はもはやＨＲを増加させないが、その収縮作用および血管拡張作用はそのまま残っている。重要なことに、このエスモロール用量は１０μｇ／ｋｇ／分のドブタミンに対する心臓反応を効果的にブロックした。ウサギの別のセットにおいて、化合物１を、Ａ2BＲ遮断薬であるＭＲＳ−１７５４を用いてまたは用いずに投与する。これにより、心拍数、収縮力および血管拡張を含む化合物１に対する心血管応答のすべてが除去された。どちらの阻害剤の前処理も単独では、心血管血行動態に有意な影響を与えない。このように、βＡＲ遮断によって阻止もされる心拍数を除いて、化合物１によるＰＤＥ１阻害の急性心血管効果には、Ａ2BＲシグナル伝達ではなくβＡＲシグナル伝達が必要とされる。
【０２５３】
心拍数自体は心機能および血行動態に影響を与え、これは化合物１単独でまたはエスモロールもしくはＭＲＳ−１７５４と一緒に処置された動物の間で異なっていたので、追加の研究は、ウサギが心拍数を一定に固定するために洞結節速度よりも約２０％速く心房ペーシングされているように行われる。化合物１は、心拍数の変更を許可されている場合として、これらの条件の下でほぼ同じ応答を誘導し、これらの効果は再びエスモロールによって変更されないが、ＭＲＳ−１７５４によって完全にブロックされる。
【０２５４】
実施例２：  正常および不全の心臓における小型哺乳動物（すなわち、ウサギ）におけるＰＤＥ１阻害のｉｎ  ｖｉｖｏ解析
ｉｎ  ｖｉｖｏウサギ研究法
ニュージーランド白ウサギ（雄、２〜３ｋｇ）を３５ｍｇ／ｋｇのケタミンと５ｍｇ／ｋｇのキシラジンで鎮静化し、挿管および換気（Ｍｏｄｅｌ  ６８３、Harvard Apparatus, Holliston, MA）を行い、イソフルラン吸入（１〜２％）で麻酔を維持する。圧力−容積カテーテル（ＳＰＲ−８９４、Millar, Inc., Houston, TX）を総頸動脈を介して挿入し、ＬＶの頂点まで進め、２−Ｆｒペーシングカテーテルを右頸静脈を介して右心房に配置し、心房ペーシングを提供する。４−Ｆｒバーマンバルーンカテーテル（ＡＩ−０７１３４、Teleflex, Wayne, PA）を、静脈還流を一時的に閉塞し、プレロードの変動を防ぐために、大腿静脈を介して下大静脈（ＩＶＣ）に配置する。平行コンダクタンスは、高張性生理食塩水注入法によって決定される。ウサギに、動脈圧を安定化させるために処置中に生理食塩水中６％のヘタスターチを注入する。すべての医薬品を静脈内投与する：  Ａ）化合物１（０．１ｍｇ／ｋｇ）を、β１受容体アンタゴニストエスモロール（０.５ｍｇ／ｋｇボーラス注入後、０.０５ｍｇ／ｋｇ／分の連続注入）の事前注入を伴うかまたは伴わずに、１〜２分間にわたってボーラス注入として投与する。これらの用量はまた、βアドレナリン受容体遮断の有効性を実証するために、１０μｇ／ｋｇ／分のドブタミンに対して試験される。Ｂ）アデノシンＡ2B受容体アンタゴニストＭＲＳ１７５４（１ｍｇ／ｋｇ  ｉｖ）のボーラス注射を伴うかまたは伴わない、化合物１（０.１ｍｇ／ｋｇ）。
【０２５５】
静脈内血液をＫ２ＥＤＴＡチューブに入れ、２,０００ｇで１５分間遠心分離し、血漿をデカンテーションし、凍結保存する。化合物１のレベルを、迅速で感度の高い液体クロマトグラフィー−タンデム質量分析法（ＬＣ／ＭＳ−ＭＳ）によって評価する。化合物１の分析のために、１％のギ酸を含むアセトニトリルとの単一の液−液抽出ステップを用い、その後、Ｗａｔｅｒｓ  Ｏｓｔｒｏ  Ｐｌａｔｅｓを使用して脂質を除去するために真空濾過を行った。
【０２５６】
ＨＰＬＣ分離を、５０ｍｍ×３ｍｍ、２.７μｍの寸法のＡｓｃｅｎｔｉｓ（登録商標）  Ｅｘｐｒｅｓｓ  Ｐｈｅｎｙｌ  Ｈｅｘｙｌカラム上で、重水素化化合物１の内部標準物質を用いて行う。移動相は、０.２％ＮＨ３Ｈ２Ｏを含む５ｍＭ重炭酸アンモニウム中で４.５分にわたる６０〜１００％メタノールの勾配液で構成され、０.８ｍＬ／ｍｉｎの流速でポンピングする。分析時間は４.５分であり、分析物および内部標準物質ともに２.０分前後で溶出した。化合物１の検出には、Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｒｅａｃｔｉｏｎｓ  ｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇ  （ＭＲＭ）モードを使用する。ＭＳは陽イオン検出モードで操作される。定量的最適化の際に化合物１および内部標準物質に選択した前駆体から生成物へのイオン（Ｑ１→Ｑ３）は、それぞれ（ｍ／ｚ）５０８.１→３２１.１および５１３.１→３２５.１であった。検量線は、イヌ血漿サンプルマトリックス中の０.０２〜５００ｎｇ／ｍＬの範囲で直線的であった。血漿の定量下限（ＬＬＯＱ）は０.０２ｎｇ／ｍＬであった。
【０２５７】
ウサギへの０.１ｍｇ／ｋｇのｉ.ｖ.投与では、１５分後の血漿値は２１３±８８ｎｇ／ｍＬであった。マウスのｉ.ｖ.投与１５分後の血漿値は３３４±７４ｎｇ／ｍＬであった。治療レベルは１００〜３００ｎｇ／ｍＬであるため、Ｐ.Ｏ.については１２０分後、ｉ．ｖ．については２０分後に分析を行った（ウサギおよびマウスでは、速度論が速いためやや早い）。
【０２５８】
化合物１は、単離されたウサギ心筋細胞のｃＡＭＰを介した収縮力を増強する。
ＰＤＥ１阻害が心筋細胞の収縮およびカルシウムトランジェントに直接影響を与えるかどうかを試験するために、正常な成体ウサギ筋細胞を用いて研究を行う。対照として、イソプロテレノール（Ｉｓｏ、５０ｎＭ）を投与し、これは、サルコメア短縮およびピークＣａ2+の両方を増加させ、両方の崩壊時間を加速する。対照的に、化合物１は１ｍＭでも効果がない。広範囲のＰＤＥ阻害剤（ＩＢＭＸ、１００μＭ）の添加は、短縮および収縮／カルシウム崩壊速度を増加させたが、ピークカルシウムトランジェントを変化させなかった。ＰＤＥ１は、影響を与えるために十分なｃＡＭＰおよびＣａ2+を必要とするので、アデニル酸シクラーゼ活性化剤であるフォルスコリン（ＦＳＫ）に対して用量反応を行い、控えめではあるが有意なイノトロピック効果をもたらす最低用量（１μＭ）を決定した。この用量を最初に適用すると、化合物１の添加は、短縮およびリラクゼーション／カルシウム崩壊速度を有意に増加させる。ピークカルシウムトランジェントは依然として変化しない。
【０２５９】
化合物１＋ＦＳＫとＦＳＫとの同一期間のインキュベーションを比較して、時間制御試験を行う。これにより、化合物１によるサルコメア短縮の上昇はＦＳＫ単独での上昇を上回ることが確認される。ＦＳＫ単独、ＦＳＫ＋化合物１、およびＦＳＫ＋ＩＢＭＸを比較すると、選択的ＰＤＥ１阻害によるサルコメア短縮率の相対的上昇はＩＢＭＸの上昇の３１％である。しかしながら、カルシウムリラクゼーションについては、化合物１はＩＢＭＸで達成された最大値の６７％の時定数を短縮する。
【０２６０】
実施例３：  正常および不全心のマウスにおけるＰＤＥ１阻害のｉｎ  ｖｉｖｏ解析
化合物１は無傷のマウスでは急性心血管系への影響はない。
イヌ、ウサギおよびマウスの間のアイソフォームの不一致により、ｃＡＭＰのＰＤＥ１Ａの調節がＰＤＥ１Ｃと比較してはるかに少ないので、マウスが急性化合物１に類似した反応をしないかもしれないことが予測された。これを試験するために、マウスにイヌおよびウサギで使用されているものと同じかそれ以上の用量（０.１、０.５ｍｇ／ｋｇ）の静脈内ボーラスを投与し、ウサギと同様の調製物を用いて試験した。その結果により、高用量でも、ＰＤＥ１Ａを優勢に発現するマウスの心臓が有意な血行動態や心臓の変化を示さなかったことが示された。
【０２６１】
実施例４：  正常および不全心におけるＰＤＥ１阻害試験の比較と結論
実施例１〜３の試験は、我々の実験モデルでは、ヒトに存在する条件であるＬＶ心筋におけるＰＤＥ１Ｃの顕著な発現を必要とする、高度に選択的なＰＤＥ１阻害剤（化合物１）からの強力な心血管効果を明らかにした。主にＰＤＥ１Ａを発現するマウスでは無視できる反応が観察された。これは、大型哺乳動物におけるＰＤＥ１阻害による心血管効果についての初めての報告であり、この結果はトランスレーショナルな関連性があると考えられる。化合物１は、全身の血管拡張はあるが、最小限の静脈拡張を伴い、収縮力およびルシトロピー（１０μｇ／ｋｇ／分のドブタミンと同様）を増加させることが判明した。その結果、動脈収縮期血圧を変化させることなく、心拍出量が純増する。ｉｎ  ｖｉｖｏでのβＡＲ刺激とは異なり、ＰＤＥ１阻害は血漿ｃＡＭＰを上昇させず、その効果はβＡＲ遮断によって抑制されるのではなく、Ａ2BＲ阻害によって阻止される。これらの変化は心拍数の高速化と関連しているが、心不全によって心拍数の変化が鈍化し、エスモロールまたは定速ペーシングによって遮断されるため、それによって駆動されるものではないが、イノトロピック／血管拡張薬作用は持続する。ウサギの筋細胞のデータは、ＰＤＥ１がＡＣ刺激されたｃＡＭＰを制御して収縮およびカルシウムトランジェント崩壊の速度を変更することを示しているが、ピークカルシウムを変更しない；後者はまた、βＡＲ刺激とは異なる。以上のことから、化合物１のプロファイルおよびＨＦモデルにおけるその有効性は、臨床的な可能性を持つ新規のメカニズムを示している。
【０２６２】
化合物１はｉｎ  ｖｉｖｏでは血漿中の環状ヌクレオチドの変化を誘導しないが、ＡＣ刺激のプライミングのみでの筋細胞の短縮、リラクゼーションおよびカルシウム崩壊速度の増大は、ｃＡＭＰの標的化を支持している。化合物１を用いたｉｎ  ｖｉｖｏでのｃＡＭＰの血漿中上昇の欠如およびｉｎ  ｖｉｔｒｏでのピーク筋細胞カルシウムトランジェントの両方は、異なるｃＡＭＰコンパートメントがβＡＲ刺激とＰＤＥ１阻害との間で調節されていることをさらに支持している。このことは、ウサギモデルにおいてエスモロールが化合物１の効果を阻害しなかったことによって最も直接的に裏付けられている。ドブタミンおよびＰＤＥ３阻害剤のようなｃＡＭＰを増強するＨＦ療法は、歴史的に急性期には有用であったが、慢性的に使用すると有害であるため、これらの結果は重要である。βＡＲ受容体経路ではなくアデノシン受容体経路に関与する化合物１のプロファイルにより、ｃＡＭＰシグナルを共有しているにもかかわらず、異なる心血管系への影響が予測される。
【０２６３】
心臓は、Ａ1、Ａ2A、Ａ2BおよびＡ3を含む複数のアデノシン受容体を発現する。Ａ1ＲおよびＡ3Ｒの両方とも、抑制性のＧタンパク質（Ｇi,0）およびＧq/11シグナル伝達に結び付き、βＡＲ刺激を鈍らせる。対照的に、Ａ2AおよびＡ2Bは両方とも刺激性のＧｓ−ｃＡＭＰと結びついているが、前者による収縮の調節はＡ1Ｒ−抗アドレナリン作用を鈍らせることに関係しているかもしれないが、Ａ2BＲはより直接的な効果があると報告されている。これまでの研究では、虚血保護におけるＡ2BＲの重要性、およびヒト心不全における利益が報告されている。これまでの研究では、Ａ2BＲが肝細胞のＰＤＥ３Ｂ調節および肺気道上皮細胞のＰＤＥ４Ｄ調節に結びついていることしか確認されておらず、今回のＰＤＥ１との関連データは新規性が高い。
【０２６４】
ＰＤＥ１は筋細胞の可溶性画分に見られ、Ｔ管ミトコンドリア接合部を反映している可能性のある筋状の分布パターンを示す。化合物１（＋ＦＳＫ）からの筋細胞におけるカルシウム上昇のピークの欠如は、ＰＤＥ３およびＰＤＥ４によって知られているＬ型カルシウムチャネルから離れたＰＤＥ１の分布を支持している。Ａ2BＲはまた、血管組織および線維芽細胞においても見出され、ここでは、増殖、血管緊張を調節し、抗線維化シグナル伝達を提供する。興味深いことに、ＰＤＥ１阻害はｃＡＭＰおよびｃＧＭＰの両方が関与する経路を介して抗線維化作用も示し（本研究の注意点は、ラットおよびマウスを用いて行われたことである）、平滑筋の増殖に重要な役割を果たしている。このように、ＰＤＥ１阻害とＡ2B経路との関連は、急性期の血行動態にとどまらない意味合いを持っていると考えられる。
【０２６５】
実施例５：  ウサギ単離筋細胞におけるＰＤＥ３阻害と比較した化合物１の筋細胞収縮力およびカルシウムに対する効果
ウサギの筋細胞を単離して、心筋細胞の収縮および全細胞のＣａ2+トランジェントに対するＰＤＥ１阻害の効果を決定し、ＰＤＥ３阻害剤シロスタミド（Ｃｉｌ、１μＭ）との結果を比較した。Ｃｉｌで処理した細胞では、サルコメアの短縮率およびピークＣａ2+トランジェントが上昇し、それらの崩壊速度が加速されましたが、これは化合物１（１μＭ）では観察されなかった。
【０２６６】
βＡＲシグナル伝達の調節におけるＰＤＥ１およびＰＤＥ３の影響を比較するために、細胞を最初に非飽和量のイソプロテレノール（Ｉｓｏ）に曝露し、次にＩｓｏをＣｉｌまたは化合物１のいずれかと組み合わせて曝露した。予想されたように、Ｉｓｏはサルコメア短縮およびピークＣａ2+を増加させ、リラクゼーション時間を早めることができた。Ｃｉｌの添加は、さらにサルコメア短縮を増加させ（ｐ＝０.０００２）、ピークＣａ2+はベースラインよりも上昇したままであった（ｐ＝０.００１）。化合物１をＩｓｏに添加しても、サルコメア短縮はそれ以上変化せず、ピーク−Ｃａ2+はＩｓｏ前のベースラインと有意差がなかった。このことは、ＰＤＥ１はβＡＲシグナル伝達とは相互作用しないが、ＰＤＥ３は相互作用することを示している。
【０２６７】
βＡＲとは無関係にｃＡＭＰを増強する別のアプローチは、フォルスコリン（Ｆｓｋ）を用いてアデニル酸シクラーゼを直接刺激することである。依然として有意なイノトロピック作用（１μＭ）を生じる非飽和Ｆｓｋ用量を同定するために用量応答試験を実施した。ＦｓｋにＣｉｌを添加すると、サルコメア短縮、ピーク−Ｃａ2+トランジェント、およびＣａ2+トランジェントのより速い崩壊の増加をもたらした。ＦＳＫに化合物１を添加した場合、Ｃｉｌと同様にサルコメア短縮は増加したが、Ｃｉｌと比較して有意に少ないピークＣａ2+トランジェントの対応する増加は見られなかった。驚くべきことに、ＦＳＫと化合物１との組み合わせは、Ｃｉｌと同様にＣａ2+の崩壊速度を増加させた。
【０２６８】
最後に、Ｉｓｏ、Ｃｉｌ、化合物１、およびそれらの組み合わせの筋細胞のｃＡＭＰに対する効果を試験した。サルコメア短縮およびＣａ2+トランジェントの増加にもかかわらず、Ｉｓｏ、Ｃｉｌおよびそれらの組み合わせは、全細胞のｃＡＭＰを測定可能なほど増加させなかった。化合物１、またはＩｓｏと化合物１の組み合わせはどちらも増加させなかった。これは、βＡＲから局所的に生成されたｃＡＭＰを示す先行研究と一致しており、ＰＤＥ３によるその変調は、全細胞溶解物３２で容易に検出されていない局所的な細胞内ドメインで生じる。Ｆｓｋは、ｃＡＭＰの上昇をもたらし、Ｃｉｌの添加によって変化しないが、それは化合物１を添加することによって実質的に増加した。後者は、Ｆｓｋに広範なＰＤＥ阻害剤ＩＢＭＸを追加することによって評価されるように最大変化の約半分に達した。まとめると、これらのデータは、βＡＲによって調節されないがアデニル酸シクラーゼの直接の刺激で明らかにすることができるＰＤＥ１の調節の下で別のプールのｃＡＭＰを識別する。
【０２６９】
これらの研究では、ＰＤＥ１阻害効果とＰＤＥ３阻害効果に格差があることが明らかになった。ＰＤＥ３阻害は収縮およびピークＣａ2+トランジェントを増強し、βＡＲ刺激を増幅させるが、ＰＤＥ１阻害はそうではない。ＰＤＥ１阻害はＣａ2+を増加させずにＦｓｋ刺激によるｃＡＭＰおよび細胞短縮を増大させるが、ＰＤＥ３阻害は短縮とＣａ2+の両方を増大させるが、全細胞の測定可能なｃＡＭＰを増加させない。以上の結果から、βＡＲアゴニズムおよびＰＤＥ３阻害薬とは異なる化合物１の薬理学的プロファイルが明らかになっており、新たなメカニズムに関与するＨＦ臨床治療薬としての潜在的な有用性が示唆されている。
【０２７０】
本研究では、ＰＤＥ１によるミクロドメイン調節の証拠は、我々が筋細胞機能の刺激およびカルシウムの処理を刺激することを示したすべての用量で（同一濃度で）、Ｉｓｏ、Ｃｉｌ、またはＩｓｏ＋Ｃｉｌ刺激にもかかわらず、ほとんど変化を示さなかった全細胞のｃＡＭＰ測定によって提供された。Ｆｓｋは、それが直接アデニル酸シクラーゼを標的とするので、複数のコンパートメントでのｃＡＭＰ合成を刺激し、ここでは、我々は化合物１でさらに増加したｃＡＭＰの上昇を検出した；Ｉｓｏと化合物１の組み合わせは、ｃＡＭＰを変化させなかった。これは、ＰＤＥ１阻害によるｃＡＭＰの上昇はＦｓｋによって影響を受けたがβ−ＡＲ共刺激によっては影響を受けなかった成体マウス筋細胞のＦＲＥＴバイオセンサーを使用した先行研究と一致している。ＦｓｋとＦｓｋ＋Ｃｉｌと類似していると思われるこのｃＡＭＰは、異なるコンパートメントが関与していることが示唆された。
【０２７１】
ＰＤＥ１によって制御されるサブ細胞内のｃＡＭＰシグナル伝達コンパートメントの詳細は明らかにされていないが、本研究の結果は、βＡＲ活性化またはＰＤＥ３阻害によるｃＡＭＰ調節の違いを支持する実質的な証拠を提供するものである。ＰＤＥ１はＰＤＥ３阻害により生じるものとは異なり、βＡＲ刺激（ｉｎ  ｖｉｖｏおよびｉｎ  ｖｉｔｒｏ）を増強することができなかった。さらに、化合物１は全Ｃａ2+トランジェントを増強しなかったが、これはＩｓｏ刺激＋／−ＰＤＥ３阻害で観察される。Ｃａ2+の増加の欠如は、化合物１がＦｓｋと組み合わせた場合のように、細胞機能を増強した場合でも見られた。対照的に、ＰＤＥ３阻害は、機能およびＣａ2+の両方を増加させた。ＰＤＥ３阻害剤に関する以前の安全性の懸念はしばしば不整脈を含む筋細胞のＣａ2+を増加させることへの影響を指摘していたので、これは注目に値する。機能的な改善にもかかわらず、細胞内のＣａ2+の増加がないことは、ＰＤＥ１阻害が、おそらくサルコメアタンパク質のリン酸化を強化して筋フィラメントのカルシウム感受性を改善することを示唆している。さらにまた、ピークレベルがわずかに低下した場合でも、Ｃａ2+の減少速度を加速する化合物１の能力、これは、内部のＣａ2+リサイクルを調節し、細胞内のＣａ2+の流入を調節しないことを示唆している。
【国際調査報告】
2021513518.tif 000023
2021513518.tif 000024