(57)【要約】  本開示は一般に、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含むリポソームなどの送達媒体を含む、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸組成物、ならびに過剰増殖疾患（例えば、癌）および免疫系障害（例えば、炎症および関節リウマチなどの自己免疫疾患）を治療するためのポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸組成物を製造および使用する方法に関する。本開示の組成物には、治療剤の効果を増強する、または治療剤に関連する毒性を軽減する、１つまたは複数の治療剤との併用療法への用途もある。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む、組成物。
【請求項２】
前記ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸が、以下のもの：
（ａ）ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）；
（ｂ）ポリグルタミン酸化１０−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−１０−ホルミル−ＴＨＦ）；
（ｃ）ポリグルタミン酸化５，１０−メテニル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦ）；
（ｄ）ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ）；
（ｅ）ポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ）；
（ｆ）ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦ）；および
（ｇ）ポリグルタミン酸化５−ホルムイミノ−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦ）
からなる群より選択される、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸が、アルファカルボキシル基結合を有するグルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含む、請求項１または２に記載の組成物。
【請求項４】
前記ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸がテトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸である、請求項１〜３のいずれかに記載の組成物。
【請求項５】
前記ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸がペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸である、請求項１〜３のいずれかに記載の組成物。
【請求項６】
前記ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸がヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸である、請求項１〜３のいずれかに記載の組成物。
【請求項７】
（ａ）２個以上のグルタミル基がアルファカルボキシル基結合を有する、
（ｂ）テトラヒドロ葉酸のグルタミル基以外のグルタミル基がそれぞれアルファカルボキシル基結合を有する；または
（ｃ）２個以上のグルタミル基がガンマカルボキシル基結合を有する、
請求項１〜６のいずれかに記載の組成物。
【請求項８】
少なくとも１個のグルタミル基が、アルファカルボキシル基結合およびガンマカルボキシル基結合の両方を有する、請求項１〜７のいずれかに記載の組成物。
【請求項９】
（ａ）前記ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸の少なくとも２個のグルタミル基がＬ型である、
（ｂ）前記ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸のグルタミル基がそれぞれＬ型である、
（ｃ）前記ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸の少なくとも１個のグルタミル基がＤ型である、
（ｄ）テトラヒドロ葉酸のグルタミル基以外の前記ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸のグルタミル基がそれぞれＤ型である、または
（ｅ）前記ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸の少なくとも２個のグルタミル基がＬ型であり、少なくとも１個のグルタミル基がＤ型である、
請求項１〜８のいずれかに記載の組成物。
【請求項１０】
前記ポリグルタミン酸が直鎖である、請求項１〜９のいずれかに記載の組成物。
【請求項１１】
前記ポリグルタミン酸が分岐鎖である、請求項１〜９のいずれかに記載の組成物。
【請求項１２】
請求項１〜１１のいずれかに記載のポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む、リポソーム組成物（Ｌｐ−αＰＴＨＦ）。
【請求項１３】
前記ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸が、アルファカルボキシル基結合を有するＬ型のグルタミル基を含む、請求項１２に記載のＬαＰＰ組成物。
【請求項１４】
前記ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸のグルタミル基がそれぞれＬ型である、請求項１２または１３に記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物。
【請求項１５】
前記ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸の少なくとも１個のグルタミル基がＤ型である、請求項１２または１３に記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物。
【請求項１６】
前記リポソームが、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含むポリグルタミン酸化アルファポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む、請求項１２〜１５のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物。
【請求項１７】
前記ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸のグルタミル基のうち少なくとも１個がガンマカルボキシル基結合を有する、請求項１２〜１６のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物。
【請求項１８】
少なくとも１個のグルタミル基が、アルファカルボキシル基結合およびガンマカルボキシル基結合の両方を有する、請求項１２〜１７のいずれかに記載の組成物。
【請求項１９】
アルファカルボキシル基結合およびガンマカルボキシル基結合の両方を有するグルタミル基を２個、３個、４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含む、請求項１２〜１８のいずれかに記載の組成物。
【請求項２０】
前記リポソームが、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸、またはヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含むポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む、請求項１２〜１９のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物。
【請求項２１】
前記リポソームが、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸、またはヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含むポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む、請求項１２〜１９のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物。
【請求項２２】
前記ポリグルタミン酸が、直鎖または分岐鎖である、請求項１２〜２１のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物。
【請求項２３】
前記リポソームがペグ化されている（ＰαＬｐ−αＰＴＨＦ）、請求項１２〜２２のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物。
【請求項２４】
前記リポソームが、重量比（ｗ／ｗ）で少なくとも１％の前記ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む、または前記Ｌｐ−αＰＴＨＦを調製する工程で、ポリグルタミン酸化アルファＴＨＦの出発材料の少なくとも１％が前記αＰＴＨＦ中に被包（封入）される、請求項１２〜２３のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物。
【請求項２５】
前記リポソームが、２０ｎｍ〜５００ｎｍまたは２０ｎｍ〜２００ｎｍの範囲の直径を有する、請求項１２〜２４のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物。
【請求項２６】
前記リポソームが、８０ｎｍ〜１２０ｎｍの範囲の直径を有する、請求項１２〜２５のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物。
【請求項２７】
前記リポソームがリポソーム成分から形成されている、請求項１２〜２６のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物。
【請求項２８】
前記リポソーム成分が、アニオン性脂質および中性脂質のうちの少なくとも一方を含む、２７に記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物。
【請求項２９】
前記リポソーム成分が、ＤＳＰＥ；ＤＳＰＥ−ＰＥＧ；ＤＳＰＥ−ＰＥＧ−マレイミド；ＨＳＰＣ；ＨＳＰＣ−ＰＥＧ；コレステロール；コレステロール−ＰＥＧ；およびコレステロール−マレイミドからなる群より選択される少なくとも１つのものを含む、２７また２８に記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物。
【請求項３０】
前記リポソーム成分が、ＤＳＰＥ；ＤＳＰＥ−ＰＥＧ；ＤＳＰＥ−ＰＥＧ−ＦＩＴＣ；ＤＳＰＥ−ＰＥＧ−マレイミド；コレステロール；およびＨＳＰＣからなる群より選択される少なくとも１つのものを含む、請求項２７〜２９のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物。
【請求項３１】
１つまたは複数のリポソーム成分が立体安定剤をさらに含む、請求項２７〜３０のいずれか記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物。
【請求項３２】
前記立体安定剤が、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）；ポリ−Ｌ−リシン（ＰＬＬ）；モノシアロガングリオシド（ＧＭ１）；ポリ（ビニルピロリドン）（ＰＶＰ）；ポリ（アクリルアミド）（ＰＡＡ）；ポリ（２−メチル−２−オキサゾリン）；ポリ（２−エチル−２−オキサゾリン）；ホスファチジルポリグリセロール；ポリ［Ｎ−（２−ヒドロキシプロピル）メタクリルアミド］；両親媒性ポリ−Ｎ−ビニルピロリドン；Ｌ−アミノ酸ベースポリマー；オリゴグリセリン、ポリエチレングリコールおよびポリプロピレンオキシド含有コポリマー、ポロキサマー１８８、およびポリビニルアルコールからなる群より選択される少なくとも１つのものである、３１に記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物。
【請求項３３】
前記立体安定剤がＰＥＧであり、前記ＰＥＧが２００〜５０００ダルトンの数平均分子量（Ｍｎ）を有する、３２に記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物。
【請求項３４】
前記リポソームがアニオン性または中性である、請求項１２〜３３のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物。
【請求項３５】
前記リポソームがゼロ以下のゼータ電位を有する、請求項１２〜３３のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物。
【請求項３６】
前記リポソームが０〜−１５０ｍＶのゼータ電位を有する、請求項１２〜３３のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物。
【請求項３７】
前記リポソームが−３０〜−５０ｍＶのゼータ電位を有する、請求項１２〜３３のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物。
【請求項３８】
前記リポソームがカチオン性である、請求項１２〜３３のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物。
【請求項３９】
前記リポソームが、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸と水性の薬学的に許容可能な担体とを含む、内部空間を有する、請求項１２〜３８のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物。
【請求項４０】
前記薬学的に許容可能な担体が、デキストロース、マンニトール、グリセロール、塩化カリウム、塩化ナトリウムなどの等張化剤を１％超の濃度で含む、３９に記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物。
【請求項４１】
前記水性の薬学的に許容可能な担体がトレハロースである、３９に記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物。
【請求項４２】
前記薬学的に許容可能な担体が１％〜５０％のトレハロースを含む、４１に記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物。
【請求項４３】
前記薬学的に許容可能な担体が１％〜１５％のデキストロースを含む、請求項３９〜４２のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物。
【請求項４４】
前記リポソームの内部空間が、ＨＥＰＥＳ緩衝液中に懸濁させた５％のデキストロースを含む、請求項３９〜４３のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物。
【請求項４５】
前記薬学的に許容可能な担体が、濃度１〜２００ｍＭおよびｐＨ２〜８のＨＥＰＥＳ緩衝食塩水（ＨＢＳ）または類似物などの緩衝液を含む、請求項３９〜４４のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物。
【請求項４６】
前記薬学的に許容可能な担体が、合計濃度５０ｍＭ〜５００ｍＭの酢酸ナトリウムと酢酸カルシウムとを含む、請求項３９〜４５のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物。
【請求項４７】
前記リポソームの内部空間が、５〜８のｐＨもしくは６〜７のｐＨ、またはその間の任意の範囲のｐＨを有する、請求項１２〜４６のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物。
【請求項４８】
前記リポソームが、５００，０００分子未満または２００，０００分子未満の前記ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸分子を含む、請求項１２〜４７のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物。
【請求項４９】
前記リポソームが、１０〜１００，０００分子またはその間の任意の範囲のポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸分子を含む、請求項１２〜４８のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物。
【請求項５０】
ターゲティング部分をさらに含み、前記ターゲティング部分が、目的の標的細胞上の表面抗原に対して特異的親和性を有する、請求項１２〜４９のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物。
【請求項５１】
前記ターゲティング部分が、前記リポソームのＰＥＧおよび外側のうちの一方または両方と結合しており、任意選択で、ターゲティング部分が、前記リポソームのＰＥＧおよび外側のうちの一方または両方と共有結合により結合している、請求項５０に記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物。
【請求項５２】
前記ターゲティング部分がポリペプチドである、請求項５０または５１に記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物。
【請求項５３】
前記ターゲティング部分が抗体または抗体の抗原結合フラグメントである、請求項５０〜５２のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物。
【請求項５４】
前記ターゲティング部分が、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析を用いる測定で、０．５×１０−１０〜１０×１０−６の範囲の平衡解離定数（Ｋｄ）で表面抗原と結合する、請求項５０〜５３のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物。
【請求項５５】
前記ターゲティング部分が、葉酸受容体アルファ（ＦＲ−α）、葉酸受容体ベータ（ＦＲ−β）、および葉酸受容体デルタ（ＦＲ−δ）からなる群より選択される１つまたは複数の葉酸受容体と特異的に結合する、請求項５０〜５５のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物。
【請求項５６】
前記ターゲティング部分が、抗体、ヒト化抗体、抗体の抗原結合フラグメント、単鎖抗体、単一ドメイン抗体、二重特異的抗体、合成抗体、ペグ化抗体、および多量体抗体からなる群より選択される１つまたは複数のものを含む、請求項５０〜５６のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物。
【請求項５７】
各ペグ化リポソームが、１〜１０００または３０〜２００個のターゲティング部分を含む、請求項５０〜５６のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物。
【請求項５８】
免疫刺激剤、検出可能マーカー、およびマレイミドのうちの１つまたは複数のものをさらに含み、前記免疫刺激剤、前記検出可能マーカー、または前記マレイミドが、前記リポソームの前記ＰＥＧまたは外側と結合している、請求項３９〜５７のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物。
【請求項５９】
免疫刺激剤が、タンパク質免疫刺激剤、核酸免疫刺激剤、化学的免疫刺激剤、ハプテン、およびアジュバントからなる群より選択される少なくとも１つのものである、請求項５８に記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物。
【請求項６０】
前記免疫刺激剤が、フルオレセイン、フルオレセインイソチオシアネート（ＦＩＴＣ）、ＤＮＰ、ベータグルカン、ベータ−１，３−グルカン、ベータ−１，６−グルカン、レゾルビンＤ（例えば、Ｄｎ−６ＤＰＡもしくはＤｎ−３ＤＰＡ、レゾルビンＥ、またはＴシリーズレゾルビン）、および酸化型低密度リポタンパク質（例えば、ＯＸＰＡＣ、ＰＧＰＣ）、およびエリトラン脂質（例えば、Ｅ５５６４）などのトール様受容体（ＴＬＲ）調節剤からなる群より選択される少なくとも１つのものである、請求項５８または５９に記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物。
【請求項６１】
前記免疫刺激剤と前記検出可能なマーカーが同じものである、請求項５８〜６０のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物。
【請求項６２】
ハプテンをさらに含む、請求項５８〜６１のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物。
【請求項６３】
前記ハプテンが、フルオレセインまたはベータ−１，６−グルカンのうちの１つまたは複数のものを含む、請求項６２に記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物。
【請求項６４】
マンニトール、トレハロース、ソルビトール、およびスクロースからなる群より選択される少なくとも１つの凍結保護物質をさらに含む、請求項１２〜６３のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物。
【請求項６５】
請求項１〜６４のいずれかに記載の組成物を含む、標的化組成物。
【請求項６６】
請求項１〜４９のいずれかに記載の組成物を含む、非標的化組成物。
【請求項６７】
カルボプラチンおよび／またはペムブロリズマブをさらに含む、請求項１２〜６６のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物。
【請求項６８】
請求項１２〜６７のいずれかに記載のリポソームポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む、医薬組成物。
【請求項６９】
請求項１〜７のいずれかに記載のポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む、医薬組成物。
【請求項７０】
疾患の治療に使用する、請求項１〜６９のいずれかに記載の組成物。
【請求項７１】
疾患の治療のための薬物の製造への請求項１〜７０のいずれかに記載の組成物の使用。
【請求項７２】
治療または予防を必要とする対象の疾患または化学物質誘発性毒性を治療または予防する方法であって、請求項１〜７０のいずれかに記載の組成物を前記対象に投与することを含み、任意選択で、前記毒性がメトトレキセート治療に関連するものである、方法。
【請求項７３】
治療または予防を必要する対象の疾患または化学物質誘発性毒性を治療または予防する方法であって、請求項１２〜６９のいずれかに記載のリポソームポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸組成物を前記対象に投与することを含む、方法。
【請求項７４】
過剰増殖細胞を死滅させる方法であって、過剰増殖細胞を請求項１〜６９のいずれかに記載の組成物と接触させること、および任意選択で、前記細胞をさらにフルオラシル（ｆｌｕｏｒａｃｉｌ）（例えば、５ＦＵ）と接触させることを含む、方法。
【請求項７５】
過剰増殖細胞を死滅させる方法であって、過剰増殖細胞を、請求項１２〜６９のいずれかに記載のリポソームポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸組成物と接触させること、および任意選択で、前記細胞をさらにフルオラシル（ｆｌｕｏｒａｃｉｌ）（例えば、５ＦＵ）と接触させることを含む、方法。
【請求項７６】
前記過剰増殖細胞が、癌細胞、哺乳動物細胞、および／またはヒト細胞である、請求項７４または７５に記載の方法。
【請求項７７】
癌を治療する方法であって、癌を有するか、有するリスクのある対象に、請求項１〜６９のいずれかに記載の組成物を有効量投与することを含む、方法。
【請求項７８】
癌を治療する方法であって、癌を有するか、有するリスクのある対象に、請求項１２〜６８のいずれか記載のリポソームポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸組成物を有効量投与することを含む、方法。
【請求項７９】
前記方法が、癌を治療または予防し、前記癌が、例えば、肺癌、膵臓癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、頭頸部癌、胃癌、胃腸癌、結腸直腸癌、食道癌、子宮頸癌、肝臓癌、腎臓癌、胆管癌、胆嚢癌、膀胱癌、肉腫（例えば、骨肉腫）、脳癌、中枢神経系癌、および黒色腫などを含む非血液系腫瘍；ならびに、例えば、白血病、リンパ腫およびその他のＢ細胞悪性腫瘍、骨髄腫およびその他の形質細胞異常増殖症などの血液系腫瘍からなる群より選択される、請求項７７または７８に記載の方法。
【請求項８０】
前記方法が、癌を治療または予防し、前記癌が、肺癌、乳癌、結腸癌、膵臓癌、胃癌、膀胱癌、頭頸部癌、卵巣癌、および子宮頸癌からなる群より選択されるメンバーである、請求項７７または７８に記載の方法。
【請求項８１】
前記方法が、癌を治療または予防し、前記癌が、頭頸部癌、胃癌、骨肉腫（例えば、骨肉腫）、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、菌状息肉症（皮膚Ｔ細胞リンパ腫）絨毛癌、および絨毛腺腫、非白血性髄膜癌、軟部組織肉腫（類腱腫、侵襲性線維腫症、膀胱癌、ならびに中枢神経系（ＣＮＳ）リンパ腫から選択されるメンバーである、請求項７７または７８に記載の方法。
【請求項８２】
前記方法が、癌を治療または予防し、前記癌が、結腸直腸癌、乳癌、卵巣癌、肺癌、頭頸部癌、膵臓癌、胃癌、および中皮腫からなる群より選択されるメンバーである、請求項７７または７８に記載の方法。
【請求項８３】
癌を治療する方法であって、前記ターゲティング部分が結合する葉酸受容体を表面に発現する癌細胞を有するか、有するリスクのある対象に、請求項５０〜６６のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物を有効量投与することを含む、方法。
【請求項８４】
癌治療を受けているか、受けたことのある対象の維持療法であって、癌治療を受けているか、受けたことのある対象に、請求項１〜６９のいずれかに記載の組成物を有効量投与することを含む、維持療法。
【請求項８５】
癌治療を受けているか、受けたことのある対象の維持療法であって、癌治療を受けているか、受けたことのある対象に、請求項１２〜６９のいずれかに記載のリポソームポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸組成物を有効量投与することを含む、維持療法。
【請求項８６】
免疫系の障害を治療する方法であって、免疫系の障害を有するか、有するリスクのある対象に、請求項１〜６９のいずれかに記載の組成物を投与することを含み、任意選択で、前記免疫系の障害が、炎症（例えば、急性および慢性）、全身性炎症、関節リウマチ、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、クローン病、皮膚筋炎／多発性筋炎、全身性エリテマトーデス、および高安病、および乾癬から選択される、方法。
【請求項８７】
免疫系の障害を治療する方法であって、免疫系の障害を有するか、有するリスクのある対象に、請求項８〜６９のいずれかに記載のリポソームポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸組成物を有効量投与することを含み、任意選択で、前記免疫系の障害が、炎症（例えば、急性および慢性）、全身性炎症、関節リウマチ、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、クローン病、皮膚筋炎／多発性筋炎、全身性エリテマトーデス、および高安病、および乾癬から選択される、方法。
【請求項８８】
以下の治療方法：
（ａ）白血球減少症を有するか、有するリスクのある対象に、請求項１〜６９のいずれかに記載の組成物を有効量投与することを含む、白血球減少症の治療方法；
（ｂ）感染症を有するか、有するリスクのある対象に、請求項１〜６９のいずれかに記載の組成物を有効量投与することを含む、感染症の治療方法；
（ｃ）疾患、心血管疾患、または別の疾患を有するか、有するリスクのある対象に、請求項１〜６９のいずれかに記載の組成物を有効量投与することを含み、前記疾患が、アテローム性動脈硬化症、心血管疾患（ＣＶＤ）、冠動脈疾患、心筋梗塞、ストローク、代謝症候群、妊娠性絨毛性疾患、および子宮外妊娠から選択されるメンバーである、心血管疾患または代謝疾患の治療方法；
（ｄ）自己免疫疾患を有するか、有するリスクのある対象に、請求項１〜６９のいずれかに記載の組成物を有効量投与することを含む、自己免疫疾患の治療方法；
（ｅ）関節リウマチを有するか、有するリスクのある対象に、請求項１〜６９のいずれかに記載の組成物を有効量投与することを含む、関節リウマチの治療方法；
（ｆ）炎症を有するか、有するリスクのある対象に、請求項１〜６９のいずれかに記載の組成物を有効量投与することを含み、任意選択で、前記炎症が、急性、慢性、および／または全身性炎症である、炎症状態の治療方法；あるいは
（ｇ）皮膚疾患を有するか、有するリスクのある対象に、請求項１〜６９のいずれかに記載の組成物を有効量投与することを含む、皮膚疾患の治療方法。
【請求項８９】
感染症を治療する方法であって、感染症を有するか、有するリスクのある対象に、請求項１２〜６９のいずれかに記載のリポソームポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸組成物を有効量投与することを含む、方法。
【請求項９０】
葉酸受容体を発現する腫瘍にポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を送達する方法であって、前記腫瘍を有する対象に、請求項１〜６９のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物を前記腫瘍に治療有効量の前記ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸が送達される量で投与することを含む、方法。
【請求項９１】
請求項１２〜６９のいずれかに記載のリポソームポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸組成物を含むポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸組成物を調製する方法であって、溶液中でリポソーム成分とポリグルタミン酸化アルファ葉酸代謝拮抗薬とを含む混合物を形成することと；前記溶液中で前記混合物をホモジナイズしてリポソームを形成することと；前記混合物を処理して、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含むリポソームを形成することとを含む、方法。
【請求項９２】
請求項１２〜６９のいずれかに記載の組成物を調製する方法であって、溶液中でリポソーム成分とポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸とを含む混合物を形成することと；前記混合物を処理して、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸が封入および／または被包されているリポソームを形成することと；前記リポソームの表面にターゲティング部分を付与することとを含み、前記ターゲティング部分が、葉酸受容体アルファ（ＦＲ−α）、葉酸受容体ベータ（ＦＲ−β）、および葉酸受容体デルタ（ＦＲ−δ）のうちの少なくとも１つに対して特異的親和性を有する、方法。
【請求項９３】
前記処理する段階が、薄膜水和、押し出し、インライン混合、エタノール注入技術、凍結融解法、逆相蒸発法、動的高圧マイクロ流動化、マイクロ流体混合、二重エマルジョン、凍結乾燥二重エマルジョン、３Ｄプリンティング、膜コンタクター法、および撹拌のうちの１つまたは複数の段階を含む、請求項９２に記載の方法。
【請求項９４】
前記処理する段階が、押し出し、高圧マイクロ流動化、および／または超音波処理のうちの１つまたは複数の段階によって前記リポソームのサイズを変更する１つまたは複数の段階を含む、請求項９２に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
本開示は一般に、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸組成物を含むリポソームなどの送達媒体を含む、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸組成物、ならびに癌などの過剰増殖疾患、関節リウマチなどの免疫系障害、ＨＩＶおよびマラリアなどの感染症を含めた疾患を治療するためのその組成物を製造および使用する方法に関する。ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸組成物には、治療剤（１つもしくは複数）の効果を増強する、化学療法薬（例えば、５−フルオロウラシル）などの１つまたは複数の治療剤との併用療法への、または治療剤（１つもしくは複数）に関連する毒性副作用を軽減する「化学防御剤」としての（例えば、メトトレキセートなどの葉酸代謝拮抗薬との併用への）用途もある。
【０００２】
葉酸は、ヌクレオチド生合成およびＤＮＡ修復、ホモシステインの再メチル化（Ｈｃｙ）、ならびにＤＮＡ、タンパク質、および脂質のメチル化に関与する一炭素単位の移動を媒介する不可欠な補因子である。血液中の唯一の循環型の葉酸は、モノグルタミン酸であり、モノグルタミン酸葉酸は、細胞膜を通って輸送される唯一の形態の葉酸であり、モノグルタミン酸型のテトラヒドロ葉酸も同様に、細胞膜を横断して輸送される。細胞中に取り込まれると、細胞内のテトラヒドロ葉酸が酵素ホリルポリガンマグルタミン酸合成酵素（ＦＰＧＳ）によってポリグルタミン酸化される。ＦＰＧＳによるテトラヒドロ葉酸ポリグルタミン酸化は、以下の少なくとも２つの主要な治療目的を果たす：（１）ＤＨＦＲに対するテトラヒドロ葉酸の親和性を大幅に高める；および（２）テトラヒドロ葉酸（モノグルタミン酸）とは異なり、細胞排出ポンプによって細胞から容易に輸送されない、ポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸の蓄積を容易にする。
【０００３】
提供されるポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸組成物は、テトラヒドロ葉酸の治療効果を改善する戦略をもたらすものである。
【発明の概要】
【０００４】
本開示は一般に、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸（ＴＨＦ）組成物、ならびに癌などの過剰増殖疾患、炎症および関節リウマチなどの免疫系障害、ＨＩＶおよびマラリアなどの感染症を含めた疾患を治療するためのその組成物を製造および使用する方法に関する。ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸組成物には、治療剤（１つもしくは複数）の効果を増強する、化学療法薬（例えば、５−フルオロウラシル）などの１つもしくは複数の治療剤との併用療法への、または治療剤（１つもしくは複数）に関連する毒性副作用を軽減する「化学防御剤」としての（例えば、メトトレキセートなどの葉酸代謝拮抗薬との併用への）用途もある。
【０００５】
いくつかの実施形態では、本開示は、以下のものを提供する：
［１］  ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む組成物。
［２］  ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸が、
（ａ）ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）；
（ｂ）ポリグルタミン酸化１０−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−１０−ホルミル−ＴＨＦ）；
（ｃ）ポリグルタミン酸化５，１０−メテニル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦ）；
（ｄ）ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ）；
（ｅ）ポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ）；
（ｆ）ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦ）；および
（ｇ）ポリグルタミン酸化５−ホルムイミノ−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦ）
からなる群より選択される、項目［１］に記載の組成物。
［３］  ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸が、アルファカルボキシル基結合を有するグルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含む、項目［１］または［２］に記載の組成物。
［４］  ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸が、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸（例えば、［６Ｒ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦ、［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ、および／または［６Ｒ］−１０−ホルミル−ＴＨＦ）である、項目［１］〜［３］のいずれかに記載の組成物。
［５］  ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸が、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸（例えば、［６Ｒ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦ、［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ、および／または［６Ｒ］−１０−ホルミル−ＴＨＦ）である、項目［１］〜［３］のいずれかに記載の組成物。
［６］  ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸が、ヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸（例えば、［６Ｒ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦ、［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ、および／または［６Ｒ］−１０−ホルミル−ＴＨＦ）である、項目［１］〜［３］のいずれかに記載の組成物。
［７］（ａ）２個以上のグルタミル基がアルファカルボキシル基結合を有する、
（ｂ）テトラヒドロ葉酸のグルタミル基以外のグルタミル基がそれぞれアルファカルボキシル基結合を有する；または
（ｃ）２個以上のグルタミル基がガンマカルボキシル基結合を有する、
項目［１］〜［６］のいずれかに記載の組成物。
［８］  少なくとも１個のグルタミル基が、アルファカルボキシル基結合およびガンマカルボキシル基結合の両方を有する、項目［１］〜［７］のいずれかに記載の組成物。
［９］（ａ）ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸のグルタミル基のうち少なくとも２個がＬ型である、
（ｂ）ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸のグルタミル基がそれぞれＬ型である、
（ｃ）ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸のグルタミル基のうち少なくとも１個がＤ型である、
（ｄ）テトラヒドロ葉酸のグルタミル基以外のポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸のグルタミル基がそれぞれＤ型である、または
（ｅ）ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸のグルタミル基のうち少なくとも２個がＬ型であり、グルタミル基のうち少なくとも１個がＤ型である、
項目［１］〜［８］のいずれかに記載の組成物。
［１０］  ポリグルタミン酸が直鎖である、項目［１］〜［９］のいずれかに記載の組成物。
［１１］  ポリグルタミン酸が分岐鎖である、項目［１］〜［９］のいずれかに記載の組成物。
［１２］  項目［１］〜［１１］のいずれかに記載のポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む、リポソーム組成物（Ｌｐ−αＰＴＨＦ）；
［１３］  ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸が、アルファカルボキシル基結合を有するＬ型のグルタミル基を含む、項目［１２］に記載のＬαＰＰ組成物；
［１４］  ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸のグルタミル基がそれぞれＬ型である、項目［１２］または［１３］に記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［１５］  ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸のグルタミル基のうち少なくとも１個がＤ型である、項目［１２］または［１３］に記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［１６］  リポソームが、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含むポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む、項目［１２］〜［１５］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［１７］  ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸のグルタミル基のうち少なくとも１個がガンマカルボキシル基結合を有する、項目［１２］〜［１６］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［１８］  少なくとも１個のグルタミル基が、アルファカルボキシル基結合およびガンマカルボキシル基結合の両方を有する、項目［１２］〜［１７］のいずれかに記載の組成物；
［１９］  アルファカルボキシル基結合およびガンマカルボキシル基結合の両方を有するグルタミル基を２個、３個、４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含む、項目［１２］〜［１８］のいずれかに記載の組成物；
［２０］  リポソームが、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸、またはヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含むポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む、項目［１２］〜［１９］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［２１］  リポソームが、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸、またはヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含むポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む、項目［１２］〜［１９］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［２２］  ポリグルタミン酸が直鎖または分岐鎖である、項目［１２］〜［２１］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［２３］  リポソームがペグ化されている（ＰαＬｐ−αＰＴＨＦ）、項目［１２］〜［２２］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［２４］  リポソームが少なくとも１％重量比（ｗ／ｗ）のポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む、またはＬｐ−αＰＴＨＦを調製する工程で、ポリグルタミン酸化アルファＴＨＦの出発材料の少なくとも１％がαＰＴＨＦ中に被包（封入）される、項目［１２］〜［２３］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［２５］  リポソームが、２０ｎｍ〜５００ｎｍまたは２０ｎｍ〜２００ｎｍの範囲の直径を有する、項目［１２］〜［２４］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［２６］  リポソームが、８０ｎｍ〜１２０ｎｍの範囲の直径を有する、項目［１２］〜［２５］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［２７］  リポソームが、リポソーム成分から形成される、項目［１２］〜［２６］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［２８］  リポソーム成分が、少なくとも１つのアニオン性脂質および中性脂質を含む、項目［２７］に記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［２９］  リポソーム成分が、ＤＳＰＥ；ＤＳＰＥ−ＰＥＧ；ＤＳＰＥ−ＰＥＧ−マレイミド；ＨＳＰＣ；ＨＳＰＣ−ＰＥＧ；コレステロール；コレステロール−ＰＥＧ；およびコレステロール−マレイミドからなる群より選択される少なくとも１つのものを含む、項目［２７］または［２８］に記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［３０］  リポソーム成分が、ＤＳＰＥ；ＤＳＰＥ−ＰＥＧ；ＤＳＰＥ−ＰＥＧ−ＦＩＴＣ；ＤＳＰＥ−ＰＥＧ−マレイミド；コレステロール；およびＨＳＰＣからなる群より選択される少なくとも１つのものを含む、項目［２７］〜［２９］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［３１］  １つまたは複数のリポソーム成分が、立体安定剤をさらに含む、項目［２７］〜［３０］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［３２］  立体安定剤が、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）；ポリ−Ｌ−リシン（ＰＬＬ）；モノシアロガングリオシド（ＧＭ１）；ポリ（ビニルピロリドン）（ＰＶＰ）；ポリ（アクリルアミド）（ＰＡＡ）；ポリ（２−メチル−２−オキサゾリン）；ポリ（２−エチル−２−オキサゾリン）；ホスファチジルポリグリセロール；ポリ［Ｎ−（２−ヒドロキシプロピル）メタクリルアミド］；両親媒性ポリ−Ｎ−ビニルピロリドン；Ｌ−アミノ酸ベースポリマー；オリゴグリセリン、ポリエチレングリコールおよびポリプロピレンオキシド含有コポリマー、ポロキサマー１８８、およびポリビニルアルコールからなる群より選択される少なくとも１つのものである、項目［３１］に記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［３３］  立体安定剤がＰＥＧであり、ＰＥＧが２００〜５０００ダルトンの数平均分子量（Ｍｎ）を有する、項目［３２］に記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［３４］  リポソームがアニオン性または中性である、項目［１２］〜［３３］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［３５］  リポソームがゼロ以下のゼータ電位を有する、項目［１２］〜［３３］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［３６］  リポソームが０〜−１５０ｍＶのゼータ電位を有する、項目［１２］〜［３３］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［３７］  リポソームが−３０〜−５０ｍＶのゼータ電位を有する、項目［１２］〜［３３］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［３８］  リポソームがカチオン性である、項目［１２］〜［３３］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［３９］  リポソームが、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸と水性の薬学的に許容可能な担体とを含む内部空間を有する、項目［１２］〜［３８］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［４０］  薬学的に許容可能な担体が、デキストロース、マンニトール、グリセロール、塩化カリウム、塩化ナトリウムなどの等張化剤を１％超の濃度で含む、項目［３９］に記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［４１］  水性の薬学的に許容可能な担体がトレハロースである、項目［３９］に記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［４２］  薬学的に許容可能な担体が５重量％〜２０重量％のトレハロースを含む、項目［４１］に記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［４３］  薬学的に許容可能な担体が１重量％〜１５重量％のデキストロースを含む、項目［３９］〜［４２］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［４４］  リポソームの内部空間が、ＨＥＰＥＳ緩衝液中に懸濁させた５％のデキストロースを含む、項目［３９］〜［４３］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［４５］  薬学的に許容可能な担体が、１〜２００ｍＭの濃度および２〜８のｐＨであるＨＥＰＥＳ緩衝食塩水（ＨＢＳ）または類似物などの緩衝液を含む、項目［３９］〜［４４］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［４６］  薬学的に許容可能な担体が、合計濃度５０ｍＭ〜５００ｍＭの酢酸ナトリウムと酢酸カルシウムとを含む、項目［３９］〜［４５］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［４７］  リポソームの内部空間が、５〜８のｐＨもしくは６〜７のｐＨ、またはその間の任意の範囲のｐＨを有する、項目［１２］〜［４６］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［４８］  リポソームが、５００，０００分子未満または２００，０００分子未満のポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む、項目［１２］〜［４７］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［４９］  リポソームが、１０〜１００，０００分子またはその間の任意の範囲のポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸分子を含む、項目［１２］〜［４８］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［５０］  ターゲティング部分をさらに含み、ターゲティング部分が、目的の標的細胞上の表面抗原に対して特異的親和性を有する、項目［１２］〜［４９］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［５１］  ターゲティング部分が、リポソームのＰＥＧおよび外側のうちの一方または両方と結合しており、任意選択で、ターゲティング部分が、リポソームのＰＥＧおよび外側のうちの一方または両方と共有結合により結合している、項目［５０］に記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［５２］  ターゲティング部分がポリペプチドである、項目［５０］または［５１］に記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［５３］  ターゲティング部分が抗体または抗体の抗原結合フラグメントである、項目［５０］〜［５２］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［５４］  ターゲティング部分が、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析を用いる測定で０．５×１０−１０〜１０×１０−６の範囲の平衡解離定数（Ｋｄ）で表面抗原と結合する、項目［５０］〜［５３］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［５５］  ターゲティング部分が、葉酸受容体アルファ（ＦＲ−α）、葉酸受容体ベータ（ＦＲ−β）、および葉酸受容体デルタ（ＦＲ−δ）からなる群より選択される１つまたは複数の葉酸受容体と特異的に結合する、項目［５０］〜［５５］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［５６］  ターゲティング部分が、抗体、ヒト化抗体、抗体の抗原結合フラグメント、単鎖抗体、単一ドメイン抗体、二重特異的抗体、合成抗体、ペグ化抗体、および多量体抗体からなる群より選択される１つまたは複数のものを含む、項目［５０］〜［５６］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［５７］  各ペグ化リポソームが、ターゲティング部分を１〜１０００個または３０〜２００個含む、項目［５０］〜［５６］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［５８］  免疫刺激剤、検出可能マーカーおよびマレイミドのうちの１つまたは複数のものをさらに含み、免疫刺激剤、検出可能マーカー、またはマレイミドが、リポソームの前記ＰＥＧまたは外側と結合している、項目［３９］〜［５７］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［５９］  免疫刺激剤が、タンパク質免疫刺激剤、核酸免疫刺激剤、化学的免疫刺激剤、ハプテン、およびアジュバントからなる群より選択される少なくとも１つのものである、項目［５８］に記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［６０］  免疫刺激剤が、フルオレセイン、フルオレセインイソチオシアネート（ＦＩＴＣ）、ＤＮＰ、ベータグルカン、ベータ−１，３−グルカン、ベータ−１，６−グルカン；レゾルビン（例えば、Ｄｎ−６ＤＰＡもしくはＤｎ−３ＤＰＡ、などのレゾルビンＤ、レゾルビンＥ、またはＴシリーズレゾルビン）、ならびに酸化型低密度リポタンパク質（例えば、ＯＸＰＡＣ、ＰＧＰＣ）およびエリトラン脂質（例えば、Ｅ５５６４）などのトール様受容体（ＴＬＲ）調節剤からなる群より選択される少なくとも１つのものである、項目［５８］または［５９］に記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［６１］  免疫刺激剤と検出可能なマーカーが同じものである、項目［５８］〜［６０］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［６２］  ハプテンをさらに含む、項目［５８］〜［６１］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［６３］  ハプテンが、フルオレセインまたはベータ−１，６−グルカンのうちの１つまたは複数のものを含む、項目［６２］に記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［６４］  マンニトール、トレハロース、ソルビトール、およびスクロースからなる群より選択される少なくとも１つの凍結保護物質をさらに含む、項目［１２］〜［６３］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［６５］  項目［１］〜［６４］のいずれかに記載の組成物を含む、標的化組成物；
［６６］  項目［１］〜［４９］のいずれかに記載の組成物を含む、非標的化組成物；
［６７］  カルボプラチンおよび／またはペムブロリズマブをさらに含む、項目［１２］〜［６６］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［６８］  項目［１２］〜［６７］のいずれかに記載のリポソームポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸組成物を含む、医薬組成物；
［６９］  項目［１］〜［７］のいずれかに記載のポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む、医薬組成物；
［７０］  疾患の治療に使用する、項目［１］〜［６９］のいずれかに記載の組成物；
［７１］  疾患治療のための、ならびに／あるいは治療剤（１つもしくは複数）の効果を増強する、化学療法薬（例えば、５−フルオロウラシル）などの１つもしくは複数の治療剤との併用療法への、または治療剤（１つもしくは複数）に関連する毒性副作用を軽減する「化学防御剤」としての（例えば、メトトレキセートなどの葉酸代謝拮抗薬との併用への）使用のための薬物の製造への項目［１］〜［７０］のいずれかに記載の組成物の使用；
［７２］  治療または予防を必要とする対象の疾患を治療または予防する方法であって、対象に項目［１］〜［７０］のいずれかに記載の組成物を投与することを含む、方法；
［７３］  治療または予防を必要とする対象の疾患を治療または予防する方法であって、対象に項目［１２］〜［６９］のいずれかに記載のリポソームポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸組成物を投与することを含む、方法；
［７４］  過剰増殖細胞を死滅させる方法であって、過剰増殖細胞と項目［１］〜［６９］のいずれかに記載の組成物とを接触させることを含む、方法；
［７５］  過剰増殖細胞を死滅させる方法であって、過剰増殖細胞と項目［１２］〜［６９］のいずれかに記載のリポソームポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸組成物とを接触させることを含む、方法；
［７６］  過剰増殖細胞が、癌細胞、哺乳動物細胞、および／またはヒト細胞である、項目［７４］または［７５］に記載の方法；
［７７］  癌を治療する方法であって、癌を有するか、有するリスクのある対象に、項目［１］〜［６９］のいずれかに記載の組成物を有効量投与することを含む、方法；
［７８］  癌を治療する方法であって、癌を有するか、有するリスクのある対象に、項目［１２］〜［６８］のいずれかに記載のリポソームポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸組成物を有効量投与することを含む、方法；
［７９］  癌を治療または予防し、癌が、例えば、肺癌、膵臓癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、頭頸部癌、胃癌、胃腸癌、結腸直腸癌、食道癌、子宮頸癌、肝臓癌、腎臓癌、胆管癌、胆嚢癌、膀胱癌、肉腫（例えば、骨肉腫）、脳癌、中枢神経系癌、および黒色腫などを含む非血液系腫瘍；および、例えば、白血病、リンパ腫およびその他のＢ細胞悪性腫瘍、骨髄腫およびその他の形質細胞異常増殖症などの血液系腫瘍からなる群より選択される、項目［７７］または［７８］に記載の方法；
［８０］  癌を治療または予防し、癌が、肺癌、乳癌、結腸癌、膵臓癌、胃癌、膀胱癌、頭頸部癌、卵巣癌、および子宮頸癌からなる群より選択されるメンバーである、項目［７７］または［７８］に記載の方法；
［８１］  癌を治療または予防し、癌が、結腸直腸癌、肺癌、乳癌、頭頸部癌、および膵臓癌からなる群より選択されるメンバーである、項目［７７］または［７８］に記載の方法；
［８２］  癌を治療または予防し、癌が、結腸直腸癌、乳癌、卵巣癌、肺癌、頭頸部癌、膵臓癌、胃癌、および中皮腫からなる群より選択される、項目［７７］または［７８］に記載の方法；
［８３］  癌を治療する方法であって、ターゲティング部分が結合する葉酸受容体を表面に発現する癌細胞を有するか、有するリスクのある対象に、項目［５０］〜［６６］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物を有効量投与することを含む、方法；
［８４］  癌治療を受けているか、受けたことのある対象の維持療法であって、癌治療を受けているか、受けたことのある対象に、項目［１］〜［６９］のいずれかに記載の組成物を有効量投与することを含む、維持療法；
［８５］  癌治療を受けているか、受けたことのある対象の維持療法であって、癌治療を受けているか、受けたことのある対象に、項目［１２］〜［６９］のいずれかに記載のリポソームポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸組成物を有効量投与することを含む、維持療法；
［８６］  免疫系の障害を治療する方法であって、免疫系の障害を有するか、有するリスクのある対象に、項目［１］〜［６９］のいずれかに記載の組成物を有効量投与することを含み、任意選択で、免疫系の障害が、炎症（例えば、急性および慢性）、全身性炎症、関節リウマチ、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、クローン病、皮膚筋炎／多発性筋炎、全身性エリテマトーデス、および高安病、ならびに乾癬から選択される、方法；
［８７］  免疫系の障害を治療する方法であって、免疫系の障害を有するか、有するリスクのある対象に、項目［８］〜［６９］のいずれかに記載のリポソームポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸組成物を有効量投与することを含み、任意選択で、免疫系の障害が、炎症（例えば、急性および慢性）、全身性炎症、関節リウマチ、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、クローン病、皮膚筋炎／多発性筋炎、全身性エリテマトーデス、および高安病、ならびに乾癬から選択される、方法；
［８８］  以下の治療方法：
（ａ）白血球減少症を有するか、有するリスクのある対象に、項目［１］〜［６９］のいずれかに記載の組成物を有効量投与することを含む、白血球減少症の治療方法；
（ｂ）感染症を有するか、有するリスクのある対象に、項目［１］〜［６９］のいずれかに記載の組成物を有効量投与することを含む、感染症の治療方法；
（ｃ）感染症、心血管疾患、または別の疾患を有するか、有するリスクのある対象に、項目［１］〜［６９］のいずれかに記載の組成物を有効量投与することを含み、疾患が、アテローム性動脈硬化症、心血管疾患（ＣＶＤ）、冠動脈疾患、心筋梗塞、ストローク、代謝症候群、妊娠性絨毛性疾患、および子宮外妊娠から選択されるメンバーである、心血管疾患または代謝疾患の治療方法；
（ｄ）自己免疫疾患を有するか、有するリスクのある対象に、項目［１］〜［６９］のいずれかに記載の組成物を有効量投与することを含む、自己免疫疾患の治療方法；
（ｅ）関節リウマチを有するか、有するリスクのある対象に、項目［１］〜［６９］のいずれかに記載の組成物を有効量投与することを含む、関節リウマチの治療方法；
（ｆ）炎症を有するか、有するリスクのある対象に、項目［１］〜［６９］のいずれかに記載の組成物を有効量投与することを含み、任意選択で、炎症が、急性、慢性、および／または全身性炎症である、炎症状態の治療方法；あるいは
（ｇ）皮膚疾患を有するか、有するリスクのある対象に、項目［１］〜［６９］のいずれかに記載の組成物を有効量投与することを含む、皮膚疾患の治療方法；
［８９］  感染症を有するか、有するリスクのある対象に、項目［１２］〜［６９］のいずれかに記載のリポソームポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸組成物を有効量投与することを含む、感染症の治療方法；
［９０］  表面に葉酸受容体を発現している腫瘍にポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を送達する方法であって、腫瘍を有する対象に、項目［１］〜［６９］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物を、腫瘍に治療有効量のポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸が送達される量で投与することを含む、方法；
［９１］  項目［１２］〜［６９］のいずれかに記載のリポソームポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸組成物を含むポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸組成物を調製する方法であって、溶液中でリポソーム成分とポリグルタミン酸化アルファ葉酸代謝拮抗薬とを含む混合物を形成することと；溶液中で混合物をホモジナイズしてリポソームを形成することと；混合物を処理して、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含むリポソームを形成することとを含む、方法；
［９２］  項目［１２］〜［６９］のいずれかに記載の組成物を調製する方法であって、溶液中でリポソーム成分とポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸とを含む混合物を形成することと；溶液中で混合物をホモジナイズしてリポソームを形成することと；混合物を処理して、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸が封入および／または被包されるリポソームを形成することと；リポソームの表面にターゲティング部分を付与することとを含み、ターゲティング部分が、葉酸受容体アルファ（ＦＲ−α）、葉酸受容体ベータ（ＦＲ−β）および葉酸受容体デルタ（ＦＲ−δ）のうちの少なくとも１つに対して特異的親和性を有する、方法；
［９３］  処理する段階が、薄膜水和、押し出し、インライン混合、エタノール注入技術、凍結融解法、逆相蒸発法、動的高圧マイクロ流動化、マイクロ流体混合、二重エマルジョン、凍結乾燥二重エマルジョン、３Ｄプリンティング、膜コンタクター法、および撹拌のうちの１つまたは複数の段階を含む、項目［９２］に記載の方法；ならびに／あるいは
［９４］  前記処理する段階が、押し出し、高圧マイクロ流動化、および／または超音波処理のうちの１つまたは複数の段階によりリポソームのサイズを変更する１つまたは複数の段階を含む、項目［９２］に記載の方法。
【０００６】
いくつかの実施形態では、本開示は、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸のグルタミル残基のうち少なくとも２個がアルファカルボキシル基結合を有する、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸（αＰＴＨＦ）組成物を提供する。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦは、グルタミル基（テトラヒドロ葉酸中のグルタミル基を含む）を２〜２０個、２〜１５個、２〜１０個、２〜５個、または６個以上含む。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上含む。他の実施形態では、αＰＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基を含む。さらなる実施形態では、αＰＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを含む。さらなる実施形態では、αＰＴＨＦは、アルファ結合を有するグルタミル基を２個以上含む。いくつかの実施形態では、少なくとも１個のグルタミル基が、アルファ結合およびガンマ結合の両方を有する。
【０００７】
一実施形態では、αＰＴＨＦ組成物は、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基と結合した３個のグルタミル基からなる鎖（すなわち、テトラグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸）を含む。いくつかの実施形態では、テトラグルタミン酸化ＴＨＦは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上含む。他の実施形態では、テトラグルタミン酸化ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基を含む。さらなる実施形態では、テトラグルタミン酸化ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを含む。さらなる実施形態では、テトラグルタミン酸化ＴＨＦは、ガンマ結合を有するグルタミル基を２個以上含む。
【０００８】
一実施形態では、αＰＴＨＦ組成物は、テトラヒドロ葉酸のガンマグルタミル基と結合した４個のグルタミル基からなる鎖（例えば、α−ペンタグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸）を含む。いくつかの実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファＴＨＦは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上含む。他の実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基を含む。さらなる実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを含む。さらなる実施形態では、ペンタグルタミン酸化ＴＨＦは、ガンマ結合を有するグルタミル基を２個以上含む。
【０００９】
一実施形態では、αＰＴＨＦ組成物は、テトラヒドロ葉酸のガンマグルタミル基と結合した５個のグルタミル基からなる鎖（例えば、α−ヘキサグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸）を含む。いくつかの実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファＴＨＦは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上含む。他の実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基を含む。さらなる実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを含む。さらなる実施形態では、ヘキサグルタミン酸化ＴＨＦは、ガンマ結合を有するグルタミル基を２個以上含む。
【００１０】
さらなる実施形態では、本開示は、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸が充填（例えば、被包）されており、かつ／または別の方法でそれが付随しているリポソームなどの送達媒体を含む、組成物、ならびにポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を罹患（例えば、癌性）および／または標的細胞に送達するためのαＰＴＨＦ充填／付随送達媒体組成物（ＤＶ−αＰＴＨＦ）を製造および使用する方法を提供する。これらの組成物には、特に限定されないが、例えば、癌などの過剰増殖性疾患、炎症および関節リウマチなどの免疫系障害、ならびにＨＩＶおよびマラリアなどの感染症を含めた疾患を治療すること（例えば、治療または予防すること）を含む、用途がある。いくつかの実施形態では、ＤＶ−αＰＴＨＦ中のポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸は、グルタミル基（テトラヒドロ葉酸中のグルタミル基を含む）を２〜２０個、２〜１５個、２〜１０個、２〜５個、６個以上、または２１個以上含む。ＤＶ−αＰＴＨＦ充填／付随送達媒体組成物は、モノグルタミン酸状態で投与するテトラヒドロ葉酸（ＴＨＦ）の細胞毒性よりも細胞毒性の高いペイロード（例えば、ポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸）を優先的に送達することによって、癌細胞にテトラヒドロ葉酸を送達することの有効性および安全性を改善する。
【００１１】
いくつかの実施形態では、本開示は、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸が充填（例えば、被包）されており、かつ／または別の方法でそれが付随しているリポソームなどの送達媒体を含む組成物の、治療剤（１つもしくは複数）の効果を増強する、化学療法薬（例えば、５−フルオロウラシル）などの１つもしくは複数の治療剤との併用療法への、または治療剤（１つもしくは複数）に関連する毒性副作用を軽減する「化学防御剤」としての（例えば、メトトレキセートなどの葉酸代謝拮抗薬との併用への）使用を提供する。いくつかの実施形態では、ＤＶ−αＰＴＨＦ中のポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸は、グルタミル基（テトラヒドロ葉酸中のグルタミル基を含む）を２〜２０個、２〜１５個、２〜１０個、２〜５個、６個以上、または２１個以上含む。ＤＶ−αＰＴＨＦ充填／付随送達媒体組成物は、モノグルタミン酸状態で投与するテトラヒドロ葉酸（ＴＨＦ）の細胞毒性よりも細胞毒性の高いペイロード（例えば、ポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸）を優先的に送達することによって、癌細胞にテトラヒドロ葉酸を送達することの有効性および安全性を改善する。
【００１２】
さらなる実施形態では、本開示は、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸（αＰＴＨＦ）を含む組成物を提供する。
【００１３】
いくつかの実施形態では、本開示は、ポリグルタミン酸化アルファ５−ホルミル−ＴＨＦを含む組成物を提供する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファ５−ホルミル−ＴＨＦがポリグルタミン酸化アルファ［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦをポリグルタミン酸化した。いくつかの実施形態では、組成物は、ポリグルタミン酸化アルファ［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、ポリグルタミン酸化アルファ［６Ｒ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、グルタミル基（５−ホルミル−ＴＨＦ中のグルタミル基を含む）を２〜２０個、２〜１５個、２〜１０個、２〜５個、または２１個以上有するポリグルタミン酸化アルファ５−ホルミル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファ５−ホルミル−ＴＨＦは、アルファ結合を有するグルタミル基を１個、２個、３個、または４個以上含む。いくつかの実施形態では、組成物は、Ｌ型のグルタミル基を２個以上有するポリグルタミン酸化アルファ５−ホルミル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、組成物は、Ｄ型のグルタミル基を有するポリグルタミン酸化アルファ５−ホルミル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、組成物は、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを有する、ポリグルタミン酸化アルファ５−ホルミル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨＦ中のポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸は、アルファ結合を有するグルタミル基を２個以上含む。さらなる実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨＦ中のポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸は、アルファ結合およびガンマ結合の両方を有するグルタミル基を１個または複数個含む。いくつかの実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨＦ中のポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸は、アルファ結合およびガンマ結合の両方を有するグルタミル基を２〜１０個、またはその間の任意の範囲の個数含む。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファ５−ホルミル−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は直鎖である。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファ５−ホルミル−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【００１４】
いくつかの実施形態では、本開示は、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基と結合した３個のグルタミル基からなる鎖を含むポリグルタミン酸化アルファ５−ホルミル−ＴＨＦ（すなわち、テトラグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦ）を含む、組成物を提供する。いくつかの実施形態では、組成物は、テトラグルタミン酸化アルファ［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、テトラグルタミン酸化アルファ［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、テトラグルタミン酸化アルファ［６Ｒ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファ５−ホルミル−ＴＨＦは、アルファ結合を有するグルタミル基を１個、２個、または３個含む。いくつかの実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファ５−ホルミル−ＴＨＦは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上含む。他の実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファ５−ホルミル−ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基を含む。さらなる実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファ５−ホルミル−ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを含む。いくつかの実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファ５−ホルミル−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は直鎖である。いくつかの実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファ５−ホルミル−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【００１５】
いくつかの実施形態では、本開示は、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基と結合した４個のグルタミル基からなる鎖を含むポリグルタミン酸化アルファ５−ホルミル−ＴＨＦ（すなわち、ペンタグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦ）を含む、組成物を提供する。いくつかの実施形態では、組成物は、ペンタグルタミン酸化アルファ［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、ペンタグルタミン酸化アルファ［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、ペンタグルタミン酸化アルファ［６Ｒ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファ５−ホルミル−ＴＨＦは、アルファ結合を有するグルタミル基を１個、２個、３個、または４個含む。いくつかの実施形態では、ペンタグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上含む。他の実施形態では、ペンタグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基を含む。さらなる実施形態では、ペンタグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを含む。いくつかの実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファ５−ホルミル−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は直鎖である。いくつかの実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファ５−ホルミル−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【００１６】
いくつかの実施形態では、本開示は、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基と結合した５個のグルタミル基からなる鎖を含むポリグルタミン酸化アルファ５−ホルミル−ＴＨＦ（すなわち、ヘキサグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦ）を含む、組成物を提供する。いくつかの実施形態では、組成物は、ヘキサグルタミン酸化アルファ［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、ヘキサグルタミン酸化アルファ［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、ヘキサグルタミン酸化アルファ［６Ｒ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファ５−ホルミル−ＴＨＦは、アルファ結合を有するグルタミル基を１個、２個、３個、４個、または５個含む。いくつかの実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファ５−ホルミル−ＴＨＦは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上含む。他の実施形態では、ヘキサグルタミン酸化ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基を含む。さらなる実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファ５−ホルミル−ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを含む。いくつかの実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファ５−ホルミル−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は直鎖である。いくつかの実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファ５−ホルミル−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【００１７】
いくつかの実施形態では、本開示は、ポリグルタミン酸化アルファ５，１０−メテニル−ＴＨＦを含む組成物を提供する。いくつかの実施形態では、組成物は、ポリグルタミン酸化アルファ［６Ｒ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、ポリグルタミン酸化アルファ［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、ポリグルタミン酸化アルファ［６Ｓ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、グルタミル基（５，１０−メテニル−ＴＨＦ中のグルタミル基を含む）を２〜２０個、２〜１５個、２〜１０個、２〜５個、または２１個以上有するポリグルタミン酸化アルファ５，１０−メテニル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファ５，１０−メテニル−ＴＨＦは、アルファ結合を有するグルタミル基を１個、２個、３個、または４個以上含む。いくつかの実施形態では、組成物は、Ｌ型のグルタミル基を２個以上有するポリグルタミン酸化アルファ５−ホルミル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、組成物は、Ｄ型のグルタミル基を有するポリグルタミン酸化アルファ５，１０−メテニル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、組成物は、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを有する、ポリグルタミン酸化アルファ５，１０−メテニル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファ５，１０−メテニル−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は直鎖である。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファ５，１０−メテニル−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【００１８】
いくつかの実施形態では、本開示は、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基と結合した３個のグルタミル基からなる鎖を含むポリグルタミン酸化アルファ５，１０−メテニル−ＴＨＦ（すなわち、テトラグルタミン酸化５，１０−メテニル−ＴＨＦ）を含む、組成物を提供する。いくつかの実施形態では、組成物は、テトラグルタミン酸化アルファ［６Ｒ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、テトラグルタミン酸化アルファ［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、テトラグルタミン酸化アルファ［６Ｓ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファ５，１０−メテニル−ＴＨＦは、アルファ結合を有するグルタミル基を１個、２個、または３個含む。いくつかの実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファ５，１０−メテニル−ＴＨＦは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上含む。他の実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファ５，１０−メテニル−ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基を含む。さらなる実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファ５，１０−メテニル−ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを含む。いくつかの実施形態では、５，１０−メテニル−ＴＨＦテトラヒドロ葉酸のポリグルタミン酸鎖は直鎖である。いくつかの実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファ５，１０−メテニル−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【００１９】
いくつかの実施形態では、本開示は、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基と結合した４個のグルタミル基からなる鎖を含むポリグルタミン酸化アルファ５，１０−メテニル−ＴＨＦ（すなわち、ペンタグルタミン酸化５，１０−メテニル−ＴＨＦ）を含む、組成物を提供する。いくつかの実施形態では、組成物は、ペンタグルタミン酸化アルファ［６Ｒ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、ペンタグルタミン酸化アルファ［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、ペンタグルタミン酸化アルファ［６Ｓ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファ５，１０−メテニル−ＴＨＦは、アルファ結合を有するグルタミル基を１個、２個、３個、または４個含む。いくつかの実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファ５，１０−メテニル−ＴＨＦは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上含む。他の実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファ５，１０−メテニル−ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基を含む。さらなる実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファ５，１０−メテニル−ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを含む。いくつかの実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファ５，１０−メテニル−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は直鎖である。いくつかの実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファ５，１０−メテニル−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【００２０】
いくつかの実施形態では、本開示は、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基と結合した５個のグルタミル基からなる鎖を含むポリグルタミン酸化アルファ５，１０−メテニル−ＴＨＦ（すなわち、ヘキサグルタミン酸化５，１０−メテニル−ＴＨＦ）を含む、組成物を提供する。いくつかの実施形態では、組成物は、ヘキサグルタミン酸化アルファ［６Ｒ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、ヘキサグルタミン酸化アルファ［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、ヘキサグルタミン酸化アルファ［６Ｓ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファ５，１０−メテニル−ＴＨＦは、アルファ結合を有するグルタミル基を１個、２個、３個、４個、または５個含む。いくつかの実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファ５，１０−メテニル−ＴＨＦは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上含む。他の実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファ５，１０−メテニル−ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基を含む。さらなる実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファ５，１０−メテニル−ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを含む。いくつかの実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファ５，１０−メテニル−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は直鎖である。いくつかの実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファ５，１０−メテニル−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【００２１】
いくつかの実施形態では、本開示は、ポリグルタミン酸化アルファ５−メチル−ＴＨＦを含む組成物を提供する。いくつかの実施形態では、組成物は、ポリグルタミン酸化アルファ［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、ポリグルタミン酸化アルファ［６Ｒ，Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、ポリグルタミン酸化アルファ［６Ｒ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、グルタミル基（５−メチル−ＴＨＦ中のグルタミル基を含む）を２〜２０個、２〜１５個、２〜１０個、２〜５個、または２１個以上有するポリグルタミン酸化アルファ５−メチル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファ５−メチル−ＴＨＦは、アルファ結合を有するグルタミル基を１個、２個、３個、または４個以上含む。いくつかの実施形態では、組成物は、Ｌ型のグルタミル基を２個以上有するポリグルタミン酸化アルファ５−メチル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、組成物は、Ｄ型のグルタミル基を有するポリグルタミン酸化アルファ５−メチル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、組成物は、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを有する、ポリグルタミン酸化アルファ５−メチル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファ５−メチル−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は直鎖である。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファ５−メチル−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【００２２】
いくつかの実施形態では、本開示は、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基と結合した３個のグルタミル基からなる鎖を含むポリグルタミン酸化アルファ５−メチル−ＴＨＦ（すなわち、テトラグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦ）を含む、組成物を提供する。いくつかの実施形態では、組成物は、テトラグルタミン酸化アルファ［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、テトラグルタミン酸化アルファ［６Ｒ，Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、テトラグルタミン酸化アルファ［６Ｒ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファ５−メチル−ＴＨＦは、ガンマ結合を有するグルタミル基を１個、２個、または３個含む。いくつかの実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファ５−メチル−ＴＨＦは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上含む。他の実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファ５−メチル−ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基を含む。さらなる実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファ５−メチル−ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを含む。いくつかの実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファ５−メチル−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は直鎖である。いくつかの実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファ５−メチル−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【００２３】
いくつかの実施形態では、本開示は、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基と結合した４個のグルタミル基からなる鎖を含むポリグルタミン酸化アルファ５−メチル−ＴＨＦ（すなわち、ペンタグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦ）を含む、組成物を提供する。いくつかの実施形態では、組成物は、ペンタグルタミン酸化アルファ［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、ペンタグルタミン酸化アルファ［６Ｒ，Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、ペンタグルタミン酸化アルファ［６Ｒ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファ５−メチル−ＴＨＦは、ガンマ結合を有するグルタミル基を１個、２個、３個、または４個含む。いくつかの実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファ５−メチル−ＴＨＦは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上含む。他の実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファ５−メチル−ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基を含む。さらなる実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファ５−メチル−ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを含む。いくつかの実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファ５−メチル−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は直鎖である。いくつかの実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファ５−メチル−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【００２４】
いくつかの実施形態では、本開示は、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基と結合した５個のグルタミル基からなる鎖を含むポリグルタミン酸化アルファ５−メチル−ＴＨＦ（すなわち、ヘキサグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦ）を含む、組成物を提供する。いくつかの実施形態では、組成物は、ヘキサグルタミン酸化アルファ［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、ヘキサグルタミン酸化アルファ［６Ｒ，Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、ヘキサグルタミン酸化アルファ［６Ｒ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファ５−メチル−ＴＨＦは、アルファ結合を有するグルタミル基を１個、２個、３個、４個、または５個含む。いくつかの実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファ５−メチル−ＴＨＦは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上含む。他の実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファ５−メチル−ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基を含む。さらなる実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファ５−メチル−ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを含む。いくつかの実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファ５−メチル−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は直鎖である。いくつかの実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファ５−メチル−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【００２５】
いくつかの実施形態では、本開示は、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸ＴＨＦを含む組成物を提供する。いくつかの実施形態では、組成物は、ポリグルタミン酸化アルファ［６Ｓ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、ポリグルタミン酸化アルファ［６Ｒ，Ｓ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、ポリグルタミン酸化アルファ［６Ｒ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、グルタミル基（テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ中のグルタミル基を含む）を２〜２０個、２〜１５個、２〜１０個、２〜５個、または２１個以上有するポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸−ＴＨＦは、アルファ結合を有するグルタミル基を１個、２個、３個、または４個以上含む。いくつかの実施形態では、組成物は、Ｌ型のグルタミル基を２個以上有するポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸ＴＨＦを含む。他の実施形態では、組成物は、Ｄ型のグルタミル基を有するポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、組成物は、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを有する、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は直鎖である。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【００２６】
いくつかの実施形態では、本開示は、テトラヒドロ葉酸ＴＨＦのグルタミル基と結合した３個のグルタミル基からなる鎖を含むポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸ＴＨＦ（すなわち、テトラグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ）を含む、組成物を提供する。いくつかの実施形態では、組成物は、テトラグルタミン酸化アルファ［６Ｓ］テトラヒドロ葉酸ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、テトラグルタミン酸化アルファ［６Ｒ，Ｓ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、テトラグルタミン酸化アルファ［６Ｒ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸−ＴＨＦは、アルファ結合を有するグルタミル基を１個、２個、または３個含む。いくつかの実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸ＴＨＦは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上含む。他の実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基を含む。さらなる実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを含む。いくつかの実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は直鎖である。いくつかの実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【００２７】
いくつかの実施形態では、本開示は、ＴＨＦのグルタミル基と結合した４個のグルタミル基からなる鎖を含むポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸ＴＨＦ（すなわち、ペンタグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ）を含む、組成物を提供する。いくつかの実施形態では、組成物は、ペンタグルタミン酸化アルファ［６Ｓ］テトラヒドロ葉酸ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、ペンタグルタミン酸化アルファ［６Ｒ，Ｓ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、ペンタグルタミン酸化アルファ［６Ｒ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸−ＴＨＦは、アルファ結合を有するグルタミル基を１個、２個、３個、または４個含む。いくつかの実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファＴＨＦは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上含む。他の実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基を含む。さらなる実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを含む。いくつかの実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は直鎖である。いくつかの実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【００２８】
いくつかの実施形態では、本開示は、テトラヒドロ葉酸ＴＨＦのグルタミル基と結合した５個のグルタミル基からなる鎖を含むポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸ＴＨＦ（すなわち、ヘキサグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ）を含む、組成物を提供する。いくつかの実施形態では、組成物は、ヘキサグルタミン酸化アルファ［６Ｓ］テトラヒドロ葉酸ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、ヘキサグルタミン酸化アルファ［６Ｒ，Ｓ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、ヘキサグルタミン酸化アルファ［６Ｒ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸−ＴＨＦは、アルファ結合を有するグルタミル基を１個、２個、３個、４個、または５個含む。いくつかの実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸テトラヒドロ葉酸ＴＨＦは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上含む。他の実施形態では、ヘキサグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基を含む。さらなる実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを含む。いくつかの実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は直鎖である。いくつかの実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【００２９】
いくつかの実施形態では、本開示は、ポリグルタミン酸化アルファ５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む組成物を提供する。いくつかの実施形態では、組成物は、ポリグルタミン酸化アルファ［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、ポリグルタミン酸化アルファ［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、ポリグルタミン酸化アルファ［６Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、グルタミル基（５，１０−メチレン−ＴＨＦ中のグルタミル基を含む）を２〜２０個、２〜１５個、２〜１０個、２〜５個、または２１個以上有するポリグルタミン酸化アルファ５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファ５，１０−メチレン−ＴＨＦは、アルファ結合を有するグルタミル基を１個、２個、３個、または４個以上含む。いくつかの実施形態では、組成物は、Ｌ型のグルタミル基を２個以上有するポリグルタミン酸化アルファ５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、組成物は、Ｄ型のグルタミル基を有するポリグルタミン酸化アルファ５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、組成物は、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを有する、ポリグルタミン酸化アルファ５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファ５，１０−メチレン−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は直鎖である。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファ５，１０−メチレン−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【００３０】
いくつかの実施形態では、本開示は、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基と結合した３個のグルタミル基からなる鎖を含むポリグルタミン酸化アルファ５，１０−メチレン−ＴＨＦ（すなわち、テトラグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦ）を含む、組成物を提供する。いくつかの実施形態では、組成物は、テトラグルタミン酸化アルファ［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、テトラグルタミン酸化アルファ［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、テトラグルタミン酸化アルファ［６Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファ５，１０−メチレン−ＴＨＦは、アルファ結合を有するグルタミル基を１個、２個、または３個含む。いくつかの実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファ５，１０−メチレン−ＴＨＦは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上含む。他の実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファ５，１０−メチレン−ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基を含む。さらなる実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファ５，１０−メチレン−ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを含む。いくつかの実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファ５，１０−メチレン−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は直鎖である。いくつかの実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファ５，１０−メチレン−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【００３１】
いくつかの実施形態では、本開示は、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基と結合した４個のグルタミル基からなる鎖を含むポリグルタミン酸化アルファ５，１０−メチレン−ＴＨＦ（すなわち、ペンタグルタミン酸化１０−メチレン−ＴＨＦ）を含む、組成物を提供する。いくつかの実施形態では、組成物は、ペンタグルタミン酸化アルファ［６Ｒ］５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、ペンタグルタミン酸化アルファ［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、ペンタグルタミン酸化アルファ［６Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファ５，１０−メチレン−ＴＨＦは、アルファ結合を有するグルタミル基を１個、２個、３個、または４個含む。いくつかの実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファ５，１０−メチレン−ＴＨＦは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上含む。他の実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファ５，１０−メチレン−ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基を含む。さらなる実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファ５，１０−メチレン−ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを含む。いくつかの実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファ５，１０−メチレン−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は直鎖である。いくつかの実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファ５，１０−メチレン−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【００３２】
いくつかの実施形態では、本開示は、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基と結合した５個のグルタミル基からなる鎖を含むポリグルタミン酸化アルファ５，１０−メチレン−ＴＨＦ（すなわち、ヘキサグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦ）を含む、組成物を提供する。いくつかの実施形態では、組成物は、ヘキサグルタミン酸化アルファ［６Ｒ］５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、ヘキサグルタミン酸化アルファ［６Ｒ］５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、ヘキサグルタミン酸化アルファ［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、ヘキサグルタミン酸化アルファ［６Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、アルファヘキサグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦは、アルファ結合を有するグルタミル基を１個、２個、３個、４個、または５個含む。いくつかの実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファ５，１０−メチレン−ＴＨＦは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上含む。他の実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファ５，１０−メチレン−ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基を含む。さらなる実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファ５，１０−メチレン−ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを含む。いくつかの実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファ５，１０−メチレン−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は直鎖である。いくつかの実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファ５，１０−メチレン−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【００３３】
いくつかの実施形態では、本開示は、ポリグルタミン酸化アルファ５−ホルムイミノ−ＴＨＦを含む組成物を提供する。いくつかの実施形態では、組成物は、ポリグルタミン酸化アルファ［６Ｓ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、ポリグルタミン酸化アルファ［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、ポリグルタミン酸化アルファ［６Ｒ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、グルタミル基（５−ホルムイミノ−ＴＨＦ中のグルタミル基を含む）を２〜２０個、２〜１５個、２〜１０個、２〜５個、または２１個以上有するポリグルタミン酸化アルファ５−ホルムイミノ−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファ５−ホルムイミノ−ＴＨＦは、アルファ結合を有するグルタミル基を１個、２個、３個、または４個以上含む。いくつかの実施形態では、組成物は、Ｌ型のグルタミル基を２個以上有するポリグルタミン酸化アルファ５−ホルムイミノ−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、組成物は、Ｄ型のグルタミル基を有するポリグルタミン酸化アルファ５−ホルムイミノ−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、組成物は、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを有する、ポリグルタミン酸化アルファ５−ホルムイミノ−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファ５−ホルムイミノ−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は直鎖である。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファ５−ホルムイミノ−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【００３４】
一実施形態では、組成物は、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基と結合した３個のグルタミル基からなる鎖を含むポリグルタミン酸化アルファ５−ホルムイミノ−ＴＨＦ（すなわち、テトラグルタミン酸化５−ホルムイミノ−ＴＨＦ）を含む。いくつかの実施形態では、組成物は、テトラグルタミン酸化アルファ［６Ｓ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、テトラグルタミン酸化アルファ［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、テトラグルタミン酸化アルファ［６Ｒ］５−ホルムイミノ−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファ５−ホルムイミノ−ＴＨＦは、アルファ結合を有するグルタミル基を１個、２個、または３個含む。いくつかの実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファ５−ホルムイミノ−ＴＨＦは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上含む。他の実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファ５−ホルムイミノ−ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基を含む。さらなる実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファ５−ホルムイミノ−ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを含む。いくつかの実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファ５−ホルムイミノ−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は直鎖である。いくつかの実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファ５−ホルムイミノ−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【００３５】
一実施形態では、組成物は、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基と結合した４個のグルタミル基からなる鎖を含むポリグルタミン酸化アルファ５−ホルムイミノ−ＴＨＦ（すなわち、ペンタグルタミン酸化５−ホルムイミノ−ＴＨＦ）を含む。いくつかの実施形態では、組成物は、ペンタグルタミン酸化アルファ［６Ｓ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、ペンタグルタミン酸化アルファ［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、ペンタグルタミン酸化アルファ［６Ｒ］５−ホルムイミノ−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファ５−ホルムイミノ−ＴＨＦは、アルファ結合を有するグルタミル基を１個、２個、３個、または４個含む。いくつかの実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファ５−ホルムイミノ−ＴＨＦは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上含む。他の実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファ５−ホルムイミノ−ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基を含む。さらなる実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファ５−ホルムイミノ−ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを含む。いくつかの実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファ５−ホルムイミノ−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は直鎖である。いくつかの実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファ５−ホルムイミノ−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【００３６】
一実施形態では、組成物は、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基と結合した５個のグルタミル基からなる鎖を含むポリグルタミン酸化アルファ５−ホルムイミノ−ＴＨＦ（すなわち、ヘキサグルタミン酸化５−ホルムイミノ−ＴＨＦ）を含む。いくつかの実施形態では、組成物は、ヘキサグルタミン酸化アルファ［６Ｓ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、ヘキサグルタミン酸化アルファ［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、ヘキサグルタミン酸化アルファ［６Ｒ］５−ホルムイミノ−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファ５−ホルムイミノ−ＴＨＦは、アルファ結合を有するグルタミル基を１個、２個、３個、４個、または５個含む。いくつかの実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファ５−ホルムイミノ−ＴＨＦは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上含む。他の実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファ５−ホルムイミノ−ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基を含む。さらなる実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファ５−ホルムイミノ−ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを含む。いくつかの実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファ５−ホルムイミノ−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は直鎖である。いくつかの実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファ５−ホルムイミノ−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【００３７】
さらなる実施形態では、本開示は、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸が被包（充填）されたリポソーム（Ｌｐ−αＰＴＨＦ）を含む、組成物を提供する。
【００３８】
いくつかの実施形態では、本開示は、ポリグルタミン酸化アルファ５−ホルミル−ＴＨＦが被包（充填）されたリポソームを含む、組成物を提供する。いくつかの実施形態では、リポソームは、ポリグルタミン酸化アルファ［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ポリグルタミン酸化アルファ［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ポリグルタミン酸化アルファ［６Ｒ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、グルタミル基（５−ホルミル−ＴＨＦ中のグルタミル基を含む）を２〜２０個、２〜１５個、２〜１０個、２〜５個、または２１個以上有するポリグルタミン酸化アルファ５−ホルミル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファ５−ホルミル−ＴＨＦは、アルファ結合を有するグルタミル基を１個、２個、３個、または４個以上含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上有するポリグルタミン酸化アルファ５−ホルミル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、リポソームは、Ｄ型のグルタミル基を有するポリグルタミン酸化アルファ５−ホルミル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、リポソームは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを有する、ポリグルタミン酸化アルファ５−ホルミル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファ５−ホルミル−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は直鎖である。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファ５−ホルミル−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【００３９】
一実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨＦ組成物は、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基と結合した３個のグルタミル基からなる鎖を含むポリグルタミン酸化アルファ５−ホルミル−ＴＨＦ（すなわち、テトラグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦ）を含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、テトラグルタミン酸化アルファ［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、テトラグルタミン酸化アルファ［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、テトラグルタミン酸化アルファ［６Ｒ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファ５−ホルミル−ＴＨＦは、ガンマ結合を有するグルタミル基を１個、２個、または３個含む。いくつかの実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファ５−ホルミル−ＴＨＦは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上含む。他の実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファ５−ホルミル−ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基を含む。さらなる実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファ５−ホルミル−ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを含む。いくつかの実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファ５−ホルミル−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は直鎖である。いくつかの実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファ５−ホルミル−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【００４０】
一実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨＦ組成物は、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基と結合した４個のグルタミル基からなる鎖を含むポリグルタミン酸化アルファ５−ホルミル−ＴＨＦ（すなわち、ペンタグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦ）を含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ペンタグルタミン酸化アルファ［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ペンタグルタミン酸化アルファ［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ペンタグルタミン酸化アルファ［６Ｒ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファ５−ホルミル−ＴＨＦは、アルファ結合を有するグルタミル基を１個、２個、３個、または４個含む。いくつかの実施形態では、ペンタグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上含む。他の実施形態では、ペンタグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基を含む。さらなる実施形態では、ペンタグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを含む。いくつかの実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファ５−ホルミル−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は直鎖である。いくつかの実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファ５−ホルミル−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【００４１】
一実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨＦ組成物は、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基と結合した５個のグルタミル基からなる鎖を含むポリグルタミン酸化アルファ５−ホルミル−ＴＨＦ（すなわち、ヘキサグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦ）を含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ヘキサグルタミン酸化アルファ［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ヘキサグルタミン酸化アルファ［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ヘキサグルタミン酸化アルファ［６Ｒ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファ５−ホルミル−ＴＨＦは、アルファ結合を有するグルタミル基を１個、２個、３個、４個、または５個含む。いくつかの実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファ５−ホルミル−ＴＨＦは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上含む。他の実施形態では、ヘキサグルタミン酸化ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基を含む。さらなる実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファ５−ホルミル−ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを含む。いくつかの実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファ５−ホルミル−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は直鎖である。いくつかの実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファ５−ホルミル−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【００４２】
いくつかの実施形態では、本開示は、ポリグルタミン酸化アルファ５，１０−メテニル−ＴＨＦが被包（充填）されたリポソームを含む、組成物を提供する。いくつかの実施形態では、リポソームは、ポリグルタミン酸化アルファ［６Ｒ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ポリグルタミン酸化アルファ［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ポリグルタミン酸化アルファ［６Ｓ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、グルタミル基（５，１０−メテニル−ＴＨＦ中のグルタミル基を含む）を２〜２０個、２〜１５個、２〜１０個、２〜５個、または２１個以上有するポリグルタミン酸化アルファ５，１０−メテニル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファ５，１０−メテニル−ＴＨＦは、アルファ結合を有するグルタミル基を１個、２個、３個、または４個以上含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上有するポリグルタミン酸化アルファ５−ホルミル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、リポソームは、Ｄ型のグルタミル基を有するポリグルタミン酸化アルファ５，１０−メテニル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、リポソームは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを有する、ポリグルタミン酸化アルファ５，１０−メテニル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファ５，１０−メテニル−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は直鎖である。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファ５−ホルミル−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【００４３】
一実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨＦ組成物は、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基と結合した３個のグルタミル基からなる鎖を含むポリグルタミン酸化アルファ５，１０−メテニル−ＴＨＦ（すなわち、テトラグルタミン酸化５，１０−メテニル−ＴＨＦ）を含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、テトラグルタミン酸化アルファ［６Ｒ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、テトラグルタミン酸化アルファ［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、テトラグルタミン酸化アルファ［６Ｓ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファ５，１０−メテニル−ＴＨＦは、アルファ結合を有するグルタミル基を１個、２個、または３個含む。いくつかの実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファ５，１０−メテニル−ＴＨＦは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上含む。他の実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファ５，１０−メテニル−ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基を含む。さらなる実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファ５，１０−メテニル−ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを含む。いくつかの実施形態では、５，１０−メテニル−ＴＨＦテトラヒドロ葉酸のポリグルタミン酸鎖は直鎖である。いくつかの実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファ５，１０−メテニル−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【００４４】
一実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨＦ組成物は、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基と結合した４個のグルタミル基からなる鎖を含むポリグルタミン酸化アルファ５，１０−メテニル−ＴＨＦ（すなわち、ペンタグルタミン酸化５，１０−メテニル−ＴＨＦ）を含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ペンタグルタミン酸化アルファ［６Ｒ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ペンタグルタミン酸化アルファ［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ペンタグルタミン酸化アルファ［６Ｓ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファ５，１０−メテニル−ＴＨＦは、アルファ結合を有するグルタミル基を１個、２個、３個、または４個含む。いくつかの実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファ５，１０−メテニル−ＴＨＦは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上含む。他の実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファ５，１０−メテニル−ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基を含む。さらなる実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファ５，１０−メテニル−ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを含む。いくつかの実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファ５，１０−メテニル−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は直鎖である。いくつかの実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファ５，１０−メテニル−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【００４５】
一実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨＦ組成物は、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基と結合した５個のグルタミル基からなる鎖を含むポリグルタミン酸化アルファ５，１０−メテニル−ＴＨＦ（すなわち、ヘキサグルタミン酸化５，１０−メテニル−ＴＨＦ）を含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ヘキサグルタミン酸化アルファ［６Ｒ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ヘキサグルタミン酸化アルファ［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ヘキサグルタミン酸化アルファ［６Ｓ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファ５，１０−メテニル−ＴＨＦは、アルファ結合を有するグルタミル基を１個、２個、３個、４個、または５個含む。いくつかの実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファ５，１０−メテニル−ＴＨＦは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上含む。他の実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファ５，１０−メテニル−ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基を含む。さらなる実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファ５，１０−メテニル−ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを含む。いくつかの実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファ５，１０−メテニル−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は直鎖である。いくつかの実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファ５，１０−メテニル−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【００４６】
いくつかの実施形態では、本開示は、ポリグルタミン酸化アルファ５−メチル−ＴＨＦが被包（充填）されたリポソームを含む、組成物を提供する。いくつかの実施形態では、リポソームは、ポリグルタミン酸化アルファ［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ポリグルタミン酸化アルファ［６Ｒ，Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ポリグルタミン酸化アルファ［６Ｒ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、グルタミル基（５−メチル−ＴＨＦ中のグルタミル基を含む）を２〜２０個、２〜１５個、２〜１０個、２〜５個、または２１個以上有するポリグルタミン酸化アルファ５−メチル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファ５−メチル−ＴＨＦは、アルファ結合を有するグルタミル基を１個、２個、３個、または４個以上含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上有するポリグルタミン酸化アルファ５−メチル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、リポソームは、Ｄ型のグルタミル基を有するポリグルタミン酸化アルファ５−メチル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、リポソームは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを有する、ポリグルタミン酸化アルファ５−メチル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファ５−メチル−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は直鎖である。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファ５−メチル−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【００４７】
一実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨＦ組成物は、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基と結合した３個のグルタミル基からなる鎖を含むポリグルタミン酸化アルファ５−メチル−ＴＨＦ（すなわち、テトラグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦ）を含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、テトラグルタミン酸化アルファ［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、テトラグルタミン酸化アルファ［６Ｒ，Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、テトラグルタミン酸化アルファ［６Ｒ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファ５−メチル−ＴＨＦは、アルファ結合を有するグルタミル基を１個、２個、または３個含む。いくつかの実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファ５−メチル−ＴＨＦは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上含む。他の実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファ５−メチル−ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基を含む。さらなる実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファ５−メチル−ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを含む。いくつかの実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファ５−メチル−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は直鎖である。いくつかの実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファ５−メチル−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【００４８】
一実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨＦ組成物は、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基と結合した４個のグルタミル基からなる鎖を含むポリグルタミン酸化アルファ５−メチル−ＴＨＦ（すなわち、ペンタグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦ）を含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ペンタグルタミン酸化アルファ［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ペンタグルタミン酸化アルファ［６Ｒ，Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ペンタグルタミン酸化アルファ［６Ｒ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファ５−メチル−ＴＨＦは、アルファ結合を有するグルタミル基を１個、２個、３個、または４個含む。いくつかの実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファ５−メチル−ＴＨＦは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上含む。他の実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファ５−メチル−ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基を含む。さらなる実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファ５−メチル−ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを含む。いくつかの実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファ５−メチル−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は直鎖である。いくつかの実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファ５−メチル−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【００４９】
一実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨＦ組成物は、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基と結合した５個のグルタミル基からなる鎖を含むポリグルタミン酸化アルファ５−メチル−ＴＨＦ（すなわち、ヘキサグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦ）を含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ヘキサグルタミン酸化アルファ［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ヘキサグルタミン酸化アルファ［６Ｒ，Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ヘキサグルタミン酸化アルファ［６Ｒ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファ５−メチル−ＴＨＦは、アルファ結合を有するグルタミル基を１個、２個、３個、４個、または５個含む。いくつかの実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファ５−メチル−ＴＨＦは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上含む。他の実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファ５−メチル−ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基を含む。さらなる実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファ５−メチル−ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを含む。いくつかの実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファ５−メチル−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は直鎖である。いくつかの実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファ５−メチル−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【００５０】
いくつかの実施形態では、本開示は、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸ＴＨＦが被包（充填）されたリポソームを含む、組成物を提供する。いくつかの実施形態では、リポソームは、ポリグルタミン酸化アルファ［６Ｓ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ポリグルタミン酸化アルファ［６Ｒ，Ｓ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ポリグルタミン酸化アルファ［６Ｒ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、２〜２０個、２〜１５個、２〜１０個、２〜５個、または２１個以上，グルタミル基（テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ中のグルタミル基を含む）を有するポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸ＴＨＦは、アルファ結合を有するグルタミル基を１個、２個、３個、または４個以上含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上有するポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸ＴＨＦを含む。他の実施形態では、リポソームは、Ｄ型のグルタミル基を有するポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、リポソームは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを有する、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は直鎖である。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【００５１】
一実施形態では、Ｌｐ−αＰテトラヒドロ葉酸ＴＨＦ組成物は、テトラヒドロ葉酸ＴＨＦのグルタミル基と結合した３個のグルタミル基からなる鎖を含むポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸（すなわち、テトラグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸）を含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、テトラグルタミン酸化アルファ［６Ｓ］テトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、テトラグルタミン酸化アルファ［６Ｒ，Ｓ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、テトラグルタミン酸化アルファ［６Ｒ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸ＴＨＦは、アルファ結合を有するグルタミル基を１個、２個、または３個含む。いくつかの実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸ＴＨＦは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上含む。他の実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基を含む。さらなる実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを含む。いくつかの実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸のポリグルタミン酸鎖は直鎖である。いくつかの実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸のポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【００５２】
一実施形態では、Ｌｐ−αＰテトラヒドロ葉酸ＴＨＦ組成物は、テトラヒドロ葉酸ＴＨＦのグルタミル基と結合した４個のグルタミル基からなる鎖を含むポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸（すなわち、ペンタグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸）を含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ペンタグルタミン酸化アルファ［６Ｓ］テトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ペンタグルタミン酸化アルファ［６Ｒ，Ｓ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ペンタグルタミン酸化アルファ［６Ｒ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸ＴＨＦは、アルファ結合を有するグルタミル基を１個、２個、３個、または４個含む。いくつかの実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸ＴＨＦは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上含む。他の実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基を含む。さらなる実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを含む。いくつかの実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は直鎖である。いくつかの実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【００５３】
一実施形態では、Ｌｐ−αＰテトラヒドロ葉酸ＴＨＦ組成物は、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基と結合した５個のグルタミル基からなる鎖を含むポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸（すなわち、ヘキサグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸）を含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ヘキサグルタミン酸化アルファ［６Ｓ］テトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ヘキサグルタミン酸化アルファ［６Ｒ，Ｓ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ヘキサグルタミン酸化アルファ［６Ｒ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸ＴＨＦは、アルファ結合を有するグルタミル基を１個、２個、３個、４個、または５個含む。いくつかの実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸ＴＨＦは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上含む。他の実施形態では、ヘキサグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基を含む。さらなる実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを含む。いくつかの実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸のポリグルタミン酸鎖は直鎖である。いくつかの実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸のポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【００５４】
いくつかの実施形態では、本開示は、ポリグルタミン酸化アルファ５，１０−メチレン−ＴＨＦが被包（充填）されたリポソームを含む、組成物を提供する。いくつかの実施形態では、リポソームは、ポリグルタミン酸化アルファ［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ポリグルタミン酸化アルファ［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ポリグルタミン酸化アルファ［６Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、グルタミル基（５，１０−メチレン−ＴＨＦ中のグルタミル基を含む）を２〜２０個、２〜１５個、２〜１０個、２〜５個、または２１個以上有するポリグルタミン酸化アルファ５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファ５，１０−メチレン−ＴＨＦは、アルファ結合を有するグルタミル基を１個、２個、３個、または４個以上を含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上有するポリグルタミン酸化アルファ５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、リポソームは、Ｄ型のグルタミル基を有するポリグルタミン酸化アルファ５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、リポソームは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のグルタミルとを有する、ポリグルタミン酸化アルファ５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファ５，１０−メチレン−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は直鎖である。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファ５，１０−メチレン−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【００５５】
一実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨＦ組成物は、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基と結合した３個のグルタミル基からなる鎖を含むポリグルタミン酸化アルファ５，１０−メチレン−ＴＨＦ（すなわち、テトラグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦ）を含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、テトラグルタミン酸化アルファ［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、テトラグルタミン酸化アルファ［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、テトラグルタミン酸化アルファ［６Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファ５，１０−メチレン−ＴＨＦは、アルファ結合を有するグルタミル基を１個、２個、または３個含む。いくつかの実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファ５，１０−メチレン−ＴＨＦは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上含む。他の実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファ５，１０−メチレン−ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基を含む。さらなる実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファ５，１０−メチレン−ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを含む。いくつかの実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファ５，１０−メチレン−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は直鎖である。いくつかの実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファ５，１０−メチレン−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【００５６】
一実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨＦ組成物は、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基と結合した４個のグルタミル基からなる鎖を含むポリグルタミン酸化アルファ５，１０−メチレン−ＴＨＦ（すなわち、ペンタグルタミン酸化１０−メチレン−ＴＨＦ）を含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ペンタグルタミン酸化アルファ［６Ｒ］５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ペンタグルタミン酸化アルファ［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ペンタグルタミン酸化アルファ［６Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファ５，１０−メチレン−ＴＨＦは、アルファ結合を有するグルタミル基を１個、２個、３個、または４個含む。いくつかの実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファ５，１０−メチレン−ＴＨＦは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上含む。他の実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファ５，１０−メチレン−ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基を含む。さらなる実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファ５，１０−メチレン−ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを含む。いくつかの実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファ５，１０−メチレン−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は直鎖である。いくつかの実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファ５，１０−メチレン−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【００５７】
一実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨＦ組成物は、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基と結合した５個のグルタミル基からなる鎖を含むポリグルタミン酸化アルファ５，１０−メチレン−ＴＨＦ（すなわち、ヘキサグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦ）を含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ヘキサグルタミン酸化アルファ［６Ｒ］５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ヘキサグルタミン酸化アルファ［６Ｒ］５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ヘキサグルタミン酸化アルファ［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ヘキサグルタミン酸化アルファ［６Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファ５，１０−メチレン−ＴＨＦは、アルファ結合を有するグルタミル基を１個、２個、３個、４個、または５個含む。いくつかの実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファ５，１０−メチレン−ＴＨＦは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上含む。他の実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファ５，１０−メチレン−ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基を含む。さらなる実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファ５，１０−メチレン−ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを含む。いくつかの実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファ５，１０−メチレン−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は直鎖である。いくつかの実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファ５，１０−メチレン−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【００５８】
いくつかの実施形態では、本開示は、ポリグルタミン酸化アルファ５−ホルムイミノ−ＴＨＦが被包（充填）されたリポソームを含む、組成物を提供する。いくつかの実施形態では、リポソームは、ポリグルタミン酸化アルファ［６Ｓ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ポリグルタミン酸化アルファ［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ポリグルタミン酸化アルファ［６Ｒ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、グルタミル基（５−ホルムイミノ−ＴＨＦ中のグルタミル基を含む）を２〜２０個、２〜１５個、２〜１０個、２〜５個、または２１個以上有するポリグルタミン酸化アルファ５−ホルムイミノ−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファ５−ホルムイミノ−ＴＨＦは、アルファ結合を有するグルタミル基を１個、２個、３個、または４個以上含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上有するポリグルタミン酸化アルファ５−ホルムイミノ−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、リポソームは、Ｄ型のグルタミル基を有するポリグルタミン酸化アルファ５−ホルムイミノ−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、リポソームは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを有する、ポリグルタミン酸化アルファ５−ホルムイミノ−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファ５−ホルムイミノ−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は直鎖である。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファ５−ホルムイミノ−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【００５９】
一実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨＦ組成物は、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基と結合した３個のグルタミル基からなる鎖を含むポリグルタミン酸化アルファ５−ホルムイミノ−ＴＨＦ（すなわち、テトラグルタミン酸化５−ホルムイミノ−ＴＨＦ）を含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、テトラグルタミン酸化アルファ［６Ｓ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、テトラグルタミン酸化アルファ［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、テトラグルタミン酸化アルファ［６Ｒ］５−ホルムイミノ−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファ５−ホルムイミノ−ＴＨＦは、アルファ結合を有するグルタミル基を１個、２個、または３個含む。いくつかの実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファ５−ホルムイミノ−ＴＨＦは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上含む。他の実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファ５−ホルムイミノ−ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基を含む。さらなる実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファ５−ホルムイミノ−ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを含む。いくつかの実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファ５−ホルムイミノ−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は直鎖である。いくつかの実施形態では、テトラグルタミン酸化アルファ５−ホルムイミノ−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【００６０】
一実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨＦ組成物は、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基と結合した４個のグルタミル基からなる鎖を含むポリグルタミン酸化アルファ５−ホルムイミノ−ＴＨＦ（すなわち、ペンタグルタミン酸化５−ホルムイミノ−ＴＨＦ）を含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ペンタグルタミン酸化アルファ［６Ｓ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ペンタグルタミン酸化アルファ［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ペンタグルタミン酸化アルファ［６Ｒ］５−ホルムイミノ−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファ５−ホルムイミノ−ＴＨＦは、アルファ結合を有するグルタミル基を１個、２個、３個、または４個含む。いくつかの実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファ５−ホルムイミノ−ＴＨＦは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上含む。他の実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファ５−ホルムイミノ−ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基を含む。さらなる実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファ５−ホルムイミノ−ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを含む。いくつかの実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファ５−ホルムイミノ−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は直鎖である。いくつかの実施形態では、ペンタグルタミン酸化アルファ５−ホルムイミノ−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【００６１】
一実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨＦ組成物は、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基と結合した５個のグルタミル基からなる鎖を含むポリグルタミン酸化アルファ−５−ホルムイミノ−ＴＨＦ（すなわち、ヘキサグルタミン酸化５−ホルムイミノ−ＴＨＦ）を含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ヘキサグルタミン酸化アルファ［６Ｓ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ヘキサグルタミン酸化アルファ［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ヘキサグルタミン酸化アルファ［６Ｒ］５−ホルムイミノ−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファ５−ホルムイミノ−ＴＨＦは、アルファ結合を有するグルタミル基を１個、２個、３個、４個、または５個含む。いくつかの実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファ５−ホルムイミノ−ＴＨＦは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上含む。他の実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファ５−ホルムイミノ−ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基を含む。さらなる実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファ５−ホルムイミノ−ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを含む。いくつかの実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファ５−ホルムイミノ−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は直鎖である。いくつかの実施形態では、ヘキサグルタミン酸化アルファ５−ホルムイミノ−ＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【００６２】
いくつかの実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨＦ組成物はカチオン性である。いくつかの実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨＦリポソームはカチオン性であり、２０ｎｍ〜５００ｎｍ、２０ｎｍ〜２００ｎｍ、３０ｎｍ〜１７５ｎｍ、または５０ｎｍ〜１５０ｎｍの範囲、またはその間の任意の範囲の直径を有する。さらなる実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨＦリポソームはカチオン性であり、組成物は、８０ｎｍ〜１２０ｎｍの範囲、またはその間の任意の範囲の直径を有する。いくつかの実施形態では、カチオン性Ｌｐ−αＰＴＨＦ組成物は、少なくとも１％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、または７５％ｗ／ｗ超のポリグルタミン酸化アルファＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨＦを調製する工程で、少なくとも１％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％または７５％超のポリグルタミン酸化アルファＴＨＦの出発材料がカチオン性Ｌｐ−αＰＴＨＦ中に被包（封入）される。さらなる実施形態では、リポソームによって被包されるポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸は、リポソーム内のＨＥＰＥＳ緩衝液中に存在する。
【００６３】
他の実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨＦ組成物はアニオン性または中性である。いくつかの実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨＦリポソームは、アニオン性または中性であり、２０ｎｍ〜５００ｎｍ、２０ｎｍ〜２００ｎｍ、３０ｎｍ〜１７５ｎｍ、もしくは５０ｎｍ〜１５０ｎｍの範囲、またはその間の任意の範囲の直径を有する。さらなる実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨＦリポソームはアニオン性または中性であり、組成物は、８０ｎｍ〜１２０ｎｍの範囲またはその間の任意の範囲の直径を有する。いくつかの実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨＦリポソームは、アニオン性であり、２０ｎｍ〜５００ｎｍ、２０ｎｍ〜２００ｎｍ、３０ｎｍ〜１７５ｎｍ、もしくは５０ｎｍ〜１５０ｎｍの範囲、またはその間の任意の範囲の直径を有する。さらなる実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨＦリポソームはアニオン性であり、組成物は、８０ｎｍ〜１２０ｎｍの範囲、またはその間の任意の範囲の直径を有する。いくつかの実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨＦリポソームは、中性であり、２０ｎｍ〜５００ｎｍ、２０ｎｍ〜２００ｎｍ、３０ｎｍ〜１７５ｎｍ、もしくは５０ｎｍ〜１５０ｎｍの範囲、またはその間の任意の範囲の直径を有する。いくつかの実施形態では、アニオン性または中性のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物は、少なくとも１％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、または７５％ｗ／ｗ超のポリグルタミン酸化アルファＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨＦを調製する工程で、ポリグルタミン酸化アルファＴＨＦの出発材料の少なくとも１％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、または７５％ｗ／ｗ超が、アニオン性または中性のＬｐ−αＰＴＨＦ中に被包（封入）される。いくつかの実施形態では、アニオン性または中性Ｌｐ−αＰＴＨＦ組成物は、少なくとも１％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、または７５％ｗ／ｗ超のテトラグルタミン酸化アルファＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、アニオン性または中性のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物は、少なくとも１％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、または７５％ｗ／ｗ超のペンタグルタミン酸化アルファＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、アニオン性または中性のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物は、少なくとも１％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、または７５％ｗ／ｗ超のヘキサグルタミン酸化アルファＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、リポソームによって被包されるポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸は、リポソーム内のＨＥＰＥＳ緩衝溶液中に存在する。
【００６４】
さらなる実施形態では、リポソームポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸組成物はペグ化されている（ＰＬｐ−αＰＴＨＦ）。
【００６５】
いくつかの実施形態では、リポソームポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸組成物は標的化されていない（ＮＴＬｐ−αＰＴＨＦ）である。すなわち、ＮＴＬｐ−αＰＴＨＦ組成物は、目的の標的細胞の表面に発現するエピトープ（例えば、表面抗原のエピトープ）に対して特異的親和性を有さない。さらなる実施形態では、非標的化リポソームポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸組成物はペグ化されている（ＮＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ）。
【００６６】
他の実施形態では、リポソームポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸組成物は標的化されている（ＴＬｐ−αＰＴＨＦ）。すなわち、ＴＬｐ−αＰＴＨＦ組成物は、目的の標的細胞上のエピトープ（表面抗原）に対して特異的親和性を有するターゲティング部分を含む。いくつかの実施形態では、ＴＬｐ−αＰＴＨＦまたはＴＰＬｐ−αＰＴＨＦのターゲティング部分は、共有結合を介してリポソームと結合している。他の実施形態では、ＴＬｐ−αＰＴＨＦまたはＴＰＬｐ−αＰＴＨＦのターゲティング部分は、リポソームのＰＥＧおよび外側のうちの一方または両方と結合している。標的化リポソームポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸組成物（ＴＬｐ−αＰＴＨＦおよびＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ）は、ポリグルタミン酸化アルファ（例えば、α−ペンタグルタミン酸化および／またはα−ヘキサグルタミン酸化）テトラヒドロ葉酸を癌細胞などの標的細胞に特異的に送達することによって、テトラヒドロ葉酸の有効性および安全性プロファイルにさらなる改善をもたらす。いくつかの実施形態では、標的化リポソームポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸組成物はペグ化されている（ＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ）。いくつかの実施形態では、ＴＬｐ−αＰＴＨＦまたはＴＰＬｐ−αＰＴＨＦのターゲティング部分は、リポソームのＰＥＧおよび外側のうちの一方または両方と結合している。いくつかの実施形態では、ＴＬｐ−αＰＴＨＦまたはＴＰＬｐ−αＰＴＨＦのターゲティング部分は、共有結合を介してリポソームと結合している。ＴＬｐ−αＰＴＨＦおよび／またはＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ組成物のターゲティング部分の機能としては、特に限定されないが、ｉｎ  ｖｉｖｏまたはｉｎ  ｖｉｔｒｏでリポソームを目的の標的細胞に標的化すること；ターゲティング部分が特異的親和性を有する表面抗原と相互作用すること；および細胞にリポソームペイロード（αＰＴＨＦ）を送達することが挙げられる。好適なターゲティング部分は当技術分野で公知であり、特に限定されないが、抗体、抗原結合抗体フラグメント、足場タンパク質、ポリペプチド、およびペプチドが挙げられる。いくつかの実施形態では、ターゲティング部分はポリペプチドである。さらなる実施形態では、ターゲティング部分は、少なくとも３個、５個、１０個、１５個、２０個、３０個、４０個、５０個、または１００個のアミノ酸残基を含むポリペプチドである。
【００６７】
いくつかの実施形態では、ＴＬｐ−αＰＴＨＦまたはＴＰＬｐ−αＰＴＨＦのターゲティング部分は、抗体または抗原結合抗体フラグメントである。さらなる実施形態では、ターゲティング部分は、抗体、ヒト化抗体、抗体の抗原結合フラグメント、単鎖抗体、単一ドメイン抗体、二重特異的抗体、合成抗体、ペグ化抗体、および多量体抗体のうちの１つまたは複数のものを含む。いくつかの実施形態では、ＴＬｐ−αＰＴＨＦまたはＴＰＬｐ−αＰＴＨＦのターゲティング部分は、正常細胞または非腫瘍細胞と比較して、腫瘍細胞などの標的細胞に選択的に発現するエピトープに対して特異的親和性を有する。いくつかの実施形態では、ターゲティング部分は、腫瘍細胞上に存在するが、非腫瘍細胞上には存在しない、または接近し難い腫瘍細胞表面抗原上のエピトープに対して特異的親和性を有する。いくつかの実施形態では、ターゲティング部分は、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析を用いる測定で、０．５×１０−１０〜１０×１０−６の範囲の平衡解離定数（Ｋｄ）で目的のエピトープと結合する。
【００６８】
特定の実施形態では、ＴＬｐ−αＰＴＨＦまたはＴＰＬｐ−αＰＴＨＦターゲティング部分は、葉酸受容体と特異的に結合するポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ターゲティング部分は抗体または抗原結合抗体フラグメントである。いくつかの実施形態では、ターゲティング部分が結合する葉酸受容体は、葉酸受容体アルファ（ＦＲ−α、ＦＯＬＲ１）、葉酸受容体ベータ（ＦＲ−β、ＦＯＬＲ２）、および葉酸受容体デルタ（ＦＲ−δ、ＦＯＬＲ４）からなる群より選択される１つまたは複数の葉酸受容体と特異的に結合する。いくつかの実施形態では、ターゲティング部分が結合する葉酸受容体は、葉酸受容体アルファ（ＦＲ−α）である。いくつかの実施形態では、ターゲティング部分が結合する葉酸受容体は、葉酸受容体ベータ（ＦＲ−β）である。いくつかの実施形態では、ターゲティング部分はＦＲ−αおよびＦＲ−βと特異的に結合する。
【００６９】
さらなる実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨＦ組成物は、リポソームのＰＥＧおよび外側のうちの少なくとも一方に配置されている免疫刺激剤、検出可能マーカー、およびマレイミドのうちの１つまたは複数のものを含む。いくつかの実施形態では、リポソームαＰＴＨＦ組成物（例えば、Ｌｐ−αＰＴＨＦ、ＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＮＴＬｐ−αＰＴＨＦ、ＮＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＴＬｐ−αＰＴＨＦ、またはＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ）はカチオン性である。他の実施形態では、リポソームαＰＴＨＦ組成物（例えば、Ｌｐ−αＰＴＨＦ、ＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＮＴＬｐ−αＰＴＨＦ、ＮＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＴＬｐ−αＰＴＨＦ、またはＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ）はアニオン性または中性である。さらなる実施形態では、リポソームαＰＴＨＦ組成物（例えば、Ｌｐ−αＰＴＨＦ、ＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＮＴＬｐ−αＰＴＨＦ、ＮＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＴＬｐ−αＰＴＨＦ、またはＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ）のリポソームは、２０ｎｍ〜５００ｎｍ、２０ｎｍ〜２００ｎｍ、３０ｎｍ〜１７５ｎｍ、５０ｎｍ〜１５０ｎｍの範囲、またはその間の任意の範囲の直径を有する。いくつかの実施形態では、リポソーム−αＰＴＨＦ組成物のリポソームは、３０ｎｍ〜１７５ｎｍもしくは５０ｎｍ〜１５０ｎｍの範囲、またはその間の任意の範囲の直径を有する。さらなる実施形態では、リポソームαＰＴＨＦ組成物のリポソームは、８０ｎｍ〜１２０ｎｍの範囲またはその間の任意の範囲の直径を有する。いくつかの実施形態では、リポソームαＰＴＨＦ組成物はペグ化（例えば、ＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＮＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ、またはＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ）である。いくつかの実施形態では、リポソームαＰＴＨＦ組成物はターゲティング部分（例えば、ＴＬｐ−αＰＴＨＦまたはＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ）を含む。さらなる実施形態では、リポソームαＰＴＨＦ組成物は、ペグ化および標的化されている（例えば、ＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ）。いくつかの実施形態では、リポソームαＰＴＨＦ組成物は、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含むポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、リポソームαＰＴＨＦ組成物は、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、リポソームαＰＴＨＦ組成物は、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。他の実施形態では、リポソームαＰＴＨＦ組成物は、ヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。
【００７０】
いくつかの実施形態では、リポソーム組成物は、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含むポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸、および少なくとも１％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、または７５％ｗ／ｗ超のポリグルタミン酸化アルファＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨＦ組成物は、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含むポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸、および１％〜９８．５％ｗ／ｗのポリグルタミン酸化アルファＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含むポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含み、Ｌｐ−αＰＴＨＦを調製する工程で、ポリグルタミン酸化アルファＴＨＦの出発材料の少なくとも１％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、または７５％ｗ／ｗ超がＬｐ−αＰＴＨＦ中に被包（封入）される。
【００７１】
いくつかの実施形態では、リポソーム組成物は、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸、および少なくとも１％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、または７５％ｗ／ｗ超のテトラグルタミン酸化アルファＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨＦ組成物は、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸および１％〜９８．５％ｗ／ｗのテトラグルタミン酸化アルファＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含み、Ｌｐ−αＰＴＨＦを調製する工程で、テトラグルタミン酸化アルファＴＨＦの出発材料の少なくとも１％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、または７５％ｗ／ｗ超がＬｐ−αＰＴＨＦ中に被包（封入）される。
【００７２】
いくつかの実施形態では、リポソーム組成物は、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸、および少なくとも１％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、または７５％ｗ／ｗ超のペンタグルタミン酸化アルファＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨＦ組成物は、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸および１％〜９８．５％ｗ／ｗのペンタグルタミン酸化アルファＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含み、Ｌｐ−αＰＴＨＦを調製する工程で、ペンタグルタミン酸化アルファＴＨＦの出発材料の少なくとも１％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、または７５％ｗ／ｗ超がＬｐ−αＰＴＨＦ中に被包（封入）される。
【００７３】
いくつかの実施形態では、リポソーム組成物は、ヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸、および少なくとも１％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、または７５％ｗ／ｗ超のヘキサグルタミン酸化アルファＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨＦ組成物は、ヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸および１％〜９８．５％ｗ／ｗのヘキサグルタミン酸化アルファＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含み、Ｌｐ−αＰＴＨＦを調製する工程で、ペンタグルタミン酸化アルファＴＨＦの出発材料の少なくとも１％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、または７５％ｗ／ｗ超がＬｐ−αＰＴＨＦ中に被包（封入）される。
【００７４】
αＰＴＨＦが被包されているリポソームを含む、リポソーム組成物も提供される。いくつかの実施形態では、リポソーム組成物はペグ化αＰＴＨＦ組成物を含む。いくつかの実施形態では、リポソーム組成物は、ターゲティング部分と結合しているか、または別の方法でそれが付随している、αＰＴＨＦ組成物を含む。さらなる実施形態では、リポソーム組成物は、ペグ化されており、ターゲティング部分と結合しているか、または別の方法でそれが付随している、αＰＴＨＦ組成物を含む。いくつかの実施形態では、リポソーム組成物は、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含むαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソーム組成物は、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、リポソーム組成物は、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。他の実施形態では、リポソーム組成物は、ヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。
【００７５】
いくつかの実施形態では、リポソーム組成物は、リポソームαＰＴＨＦ（例えば、Ｌｐ−αＰＴＨＦ、ＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＮＴＬｐ−αＰＴＨＦ、ＮＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＴＬｐ−αＰＴＨＦ、およびＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ）を含む。いくつかの実施形態では、リポソームαＰＴＨＦは、ペグ化されている（例えば、ＮＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ、およびＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ）。いくつかの実施形態では、リポソームαＰＴＨＦは、癌細胞などの目的の標的細胞表面の抗原のエピトープに対して特異的親和性を有するターゲティング部分を含む（例えば、ＴＬｐ−αＰＴＨＦまたはＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ）。さらなる実施形態では、リポソーム組成物は、ペグ化されたリポソームαＰＴＨＦを含み、癌細胞などの目的の標的細胞の表面の抗原のエピトープに対して特異的親和性を有するターゲティング部分をさらに含む（例えば、ＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ）。いくつかの実施形態では、リポソーム組成物は、カチオン性であるリポソームαＰＴＨＦを含む。他の実施形態では、リポソーム組成物は、アニオン性または中性であるリポソームαＰＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、リポソーム組成物は、２０ｎｍ〜５００ｎｍ、２０ｎｍ〜２００ｎｍ、またはその間の任意の範囲の直径を有するリポソームαＰＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、リポソームαＰＴＨＦは、８０ｎｍ〜１２０ｎｍの範囲、またはその間の任意の範囲の直径を有する。
【００７６】
リポソームαＰＴＨＦなどの送達媒体を含むポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸（αＰＴＨＦ）を含む、医薬組成物も提供される。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、ペグ化αＰＴＨＦ組成物を含む。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、ターゲティング部分に連結したまたは別の方法でそれと結合したαＰＴＨＦ組成物を含む。さらなる実施形態では、医薬組成物は、ペグ化され、ターゲティング部分に連結したまたは別の方法でそれと結合したαＰＴＨＦ組成物を含む。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含むαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。他の実施形態では、医薬組成物は、ヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。
【００７７】
いくつかの実施形態では、医薬組成物は、リポソームαＰＴＨＦ（例えば、Ｌｐ−αＰＴＨＦ、ＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＮＴＬｐ−αＰＴＨＦ、ＮＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＴＬｐ−αＰＴＨＦ、およびＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ）を含む。いくつかの実施形態では、リポソームαＰＴＨＦ組成物は、ペグ化されている（例えば、ＮＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ、およびＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ）。いくつかの実施形態では、リポソームαＰＴＨＦは、癌細胞などの目的の標的細胞表面の抗原のエピトープに対して特異的親和性を有するターゲティング部分を含む（例えば、ＴＬｐ−αＰＴＨＦまたはＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ）。さらなる実施形態では、医薬組成物は、ペグ化されたリポソームαＰＴＨＦを含み、癌細胞などの目的の標的細胞の表面の抗原のエピトープに対して特異的親和性を有するターゲティング部分をさらに含む（例えば、ＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ）。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、カチオン性であるリポソームαＰＴＨＦを含む。他の実施形態では、医薬組成物は、アニオン性または中性であるリポソームαＰＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、医薬組成物は、２０ｎｍ〜５００ｎｍまたは２０ｎｍ〜５００ｎｍ、またはその間の任意の範囲の直径を有するリポソームαＰＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、リポソームαＰＴＨＦ組成物は、８０ｎｍ〜１２０ｎｍの範囲、またはその間の任意の範囲の直径を有する。
【００７８】
さらなる実施形態では、本開示は、細胞の活性化、ケモカイン産生、または代謝活性を調節する方法であって、細胞と、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸（αＰＴＨＦ）組成物を含む組成物とを接触させる段階を含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、接触させる細胞は哺乳動物細胞である。さらなる実施形態では、接触させる細胞はヒト細胞である。いくつかの実施形態では、接触させる細胞は過剰増殖細胞である。さらなる実施形態では、細胞は免疫細胞である。いくつかの実施形態では、この方法をｉｎ  ｖｉｖｏで実施する。他の実施形態では、この方法をｉｎ  ｖｉｔｒｏで実施する。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦは、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含む。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦ組成物は、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦ組成物は、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。他の実施形態では、αＰＴＨＦ組成物は、ヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。
【００７９】
さらなる実施形態では、本開示は、細胞の活性化、ケモカイン産生、または代謝活性を調節する方法であって、細胞と、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸（αＰＴＨＦ）組成物を含むリポソームとを接触させる段階を含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、接触させる細胞は哺乳動物細胞である。さらなる実施形態では、接触させる細胞はヒト細胞である。いくつかの実施形態では、接触させる細胞は過剰増殖細胞である。さらなる実施形態では、細胞は免疫細胞である。いくつかの実施形態では、この方法をｉｎ  ｖｉｖｏで実施する。他の実施形態では、この方法をｉｎ  ｖｉｔｒｏで実施する。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦは、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含む。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦ組成物は、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦ組成物は、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。他の実施形態では、αＰＴＨＦ組成物は、ヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。
【００８０】
さらなる実施形態では、本開示は、細胞を死滅させる方法であって、細胞と、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸（αＰＴＨＦ）組成物（例えば、本明細書のαＰＴＨＦ）を含む組成物とを接触させることを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、接触させる細胞は哺乳動物細胞である。さらなる実施形態では、接触させる細胞はヒト細胞である。いくつかの実施形態では、接触させる細胞は過剰増殖細胞である。さらなる実施形態では、過剰増殖細胞は、癌細胞である。さらなる実施形態では、接触させる癌細胞は、例えば、肺癌、膵臓癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、頭頸部癌、胃癌、胃腸癌、結腸直腸癌、食道癌、子宮頸癌、肝臓癌、腎臓癌、胆管癌、胆嚢癌、膀胱癌、肉腫（例えば、骨肉腫）、脳癌、中枢神経系癌、および黒色腫などを含む非血液系腫瘍；および、例えば、白血病、リンパ腫およびその他のＢ細胞悪性腫瘍、骨髄腫およびその他の形質細胞異形成症または悪液質などの血液系腫瘍からなる群より選択される癌から入手／誘導した細胞系由来の初代細胞または細胞である。さらなる実施形態では、接触させる癌細胞は、乳癌、頭頸部癌、肺癌、胃癌、骨肉腫、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、菌状息肉腫（皮膚Ｔ細胞性リンパ腫）絨毛癌、および絨毛腺腫、非白血性髄膜癌腫症、軟部肉腫（類腱腫、侵襲性線維腫症）、膀胱癌、中枢神経系（ＣＮＳ）リンパ腫からなる群より選択される癌から入手／誘導した細胞系由来の初代細胞または細胞である。さらなる実施形態では、癌細胞は、結腸直腸癌、乳癌、胃癌（例えば、胃癌）、膵臓癌、肝臓癌、肺癌（例えば、非小細胞肺癌および／または腺癌）、頭頸部癌、卵巣癌、胆嚢癌，および基底細胞癌から選択される癌から入手／誘導した細胞系由来の初代細胞または細胞である。特定の実施形態では、癌細胞は、結腸直腸癌から入手／誘導した細胞系由来の初代細胞または細胞である。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦは、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含む。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦは、グルタミル基を４個含む。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦは、グルタミル基を５個含む。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦは、グルタミル基を６個含む。いくつかの実施形態では、この方法をｉｎ  ｖｉｖｏで実施する。他の実施形態では、この方法をｉｎ  ｖｉｔｒｏで実施する。
【００８１】
さらなる実施形態では、本開示は、細胞を死滅させる方法であって、細胞と、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸（例えば、ＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＮＴＬｐ−αＰＴＨＦ、ＮＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＴＬｐ−αＰＴＨＦまたはＴＰＬｐ−αＰＴＨＦなどのＬｐ−αＰＴＨＦ）を含むリポソームと接触させる段階を含む、方法を提供する。さらなる実施形態では、接触させる過剰増殖細胞は、癌細胞である。さらなる実施形態では、癌細胞は、例えば、肺癌、膵臓癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、頭頸部癌、胃癌、胃腸癌、結腸直腸癌、食道癌、子宮頸癌、肝臓癌、腎臓癌、胆管癌、胆嚢癌、膀胱癌、肉腫（例えば、骨肉腫）、脳癌、中枢神経系癌、および黒色腫などを含む非血液系腫瘍；ならびに、例えば、白血病、リンパ腫およびその他のＢ細胞悪性腫瘍、骨髄腫およびその他の形質細胞異形成症または悪液質などの血液系腫瘍からなる群より選択される癌から入手／誘導した細胞系由来の初代細胞または細胞である。さらなる実施形態では、接触させる癌細胞は、乳癌、頭頸部癌、肺癌、胃癌、骨肉腫、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、菌状息肉腫（皮膚Ｔ細胞性リンパ腫）絨毛癌、および絨毛腺腫、非白血性髄膜癌腫症、軟部肉腫（類腱腫、侵襲性線維腫症）、膀胱癌、中枢神経系（ＣＮＳ）リンパ腫からなる群より選択される癌から入手／誘導した細胞系由来の初代細胞または細胞である。いくつかの実施形態では、癌細胞は、結腸直腸癌、乳癌、胃癌（例えば、胃癌）、膵臓癌、肝臓癌、肺癌（例えば、非小細胞肺癌および／または腺癌）、頭頸部癌、卵巣癌、胆嚢癌、および基底細胞癌から選択される癌から入手／誘導した細胞系由来の初代細胞または細胞である。特定の実施形態では、癌細胞は、結腸直腸癌から入手／誘導した細胞系由来の初代細胞または細胞である。いくつかの実施形態では、この方法をｉｎ  ｖｉｖｏで実施する。他の実施形態では、この方法をｉｎ  ｖｉｔｒｏで実施する。いくつかの実施形態では、リポソームは、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含むαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含むαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含むαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、グルタミル基を４個含むαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、グルタミル基を５個含むαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、グルタミル基を６個含むαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦは、ガンマ結合を有するグルタミル基を１個、２個、３個、または４個以上含む。
【００８２】
さらなる実施形態では、本開示は、癌を治療する方法であって、癌を有するか、有するリスクのある対象に、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む送達媒体（例えば、抗体免疫複合体またはリポソーム）を有効量投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、送達媒体は、抗体含有免疫複合体（例えば、完全長ＩｇＧ抗体、二重特異性抗体、またはｓｃＦｖを含む）である。いくつかの実施形態では、送達媒体はリポソーム（例えば、ＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＮＴＬｐ−αＰＴＨＦ、ＮＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＴＬｐ−αＰＴＨＦ、またはＴＰＬｐ−αＰＴＨＦなどのＬｐ−αＰＴＨＦ）である。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体はペグ化されている。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、ペグ化されていない。さらなる実施形態では、投与する送達媒体は、癌細胞の表面の抗原のエピトープに対して特異的親和性を有するターゲティング部分を含む。さらなる実施形態では、投与する送達媒体は、癌細胞表面の抗原のエピトープに対して特異的親和性を有するターゲティング部分を含む。さらなる実施形態では、送達媒体は、ＧＯＮＭＢ、ＴＡＣＳＴＤ２（ＴＲＯＰ２）、ＣＥＡＣＡＭ５、ＥＰＣＡＭ、葉酸受容体（例えば、葉酸受容体−α、葉酸受容体−β、または葉酸受容体−δ）、ムチン１（ＭＵＣ−１）、ＭＵＣ−６、ＳＴＥＡＰ１、メソテリン、ネクチン４、ＥＮＰＰ３、グアニリルシクラーゼＣ（ＧＣＣ）、ＳＬＣ４４Ａ４、ＮａＰｉ２ｂ、ＣＤ７０（ＴＮＦＳＦ７）、ＣＡ９（炭酸脱水酵素）、５Ｔ４（ＴＰＢＧ）、ＳＬＴＲＫ６、ＳＣ−１６、組織因子、ＬＩＶ−１（ＺＩＰ６）、ＣＧＥＮ−１５０２７、Ｐカドヘリン、フィブロネクチン外側ドメインＢ（ＥＤ−Ｂ）、ＶＥＧＦＲ２（ＣＤ３０９）、テネイシン、コラーゲンＩＶ、ペリオスチン、エンドセリン受容体、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３、ＥｒｂＢ４、ＥＧＦＲ、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３、ＦＧＦＲ４、ＦＧＦＲ６、ＩＧＦＲ−１、ＦＺＤ１、ＦＺＤ２、ＦＺＤ３、ＦＺＤ４、ＦＺＤ５、ＦＺＤ６、ＦＺＤ７、ＦＺＤ８、ＦＺＤ９、ＦＺＤ１０、ＳＭＯ、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ６、ＣＤ８、ＣＤ１１、ＣＤ１１ａ、ＣＤ１５、ＣＤ１８、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ２６、ＣＤ２７Ｌ、ＣＤ２８、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ３４、ＣＤ３７、ＣＤ３８、ＣＤ４０、ＣＤ４４、ＣＤ５６、ＣＤ７０、ＣＤ７４、ＣＤ７９、ＣＤ７９ｂ、ＣＤ９８、ＣＤ１０５、ＣＤ１３３、ＣＤ１３８、ｃｒｉｐｔｏ、ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＧＦ−２Ｒ、ＥｐｈＡ１  ａｎ  ＥｐｈＡ受容体、ＥｐｈＢ受容体、ＥｐｈＡ１、ＥｐｈＡ２、ＥｐｈＡ３、ＥｐｈＡ４、ＥｐｈＡ５、ＥｐｈＡ６、ＥｐｈＡ７、ＥｐｈＡ８、ＥｐｈＢ１、ＥｐｈＢ２、ＥｐｈＢ３、ＥｐｈＢ４、ＥｐｈＢ６、インテグリン（例えば、インテグリンαｖβ３、αｖβ５、またはαｖβ６）、Ｃ２４２抗原、Ａｐｏ２、ＰＳＧＲ、ＮＧＥＰ、ＰＳＣＡ、ＴＭＥＦＦ２、エンドグリン、ＰＳＭＡ、ＣａｎＡｇ、ＣＡＬＬＡ、ｃ−Ｍｅｔ、ＶＥＧＦＲ−１、ＶＥＧＦＲ−２、ＤＤＲ１、ＰＤＧＦＲアルファ、ＰＤＧＦＲベータ、ＴｒｋＡ、ＴｒｋＢ、ＴｒｋＣ、ＵＦＯ、ＬＴＫ、ＡＬＫ、Ｔｉｅ１、Ｔｉｅ２、ＰＴ��７、Ｒｙｋ、ＴＣＲ、ＮＭＤＡＲ、ＬＮＧＦＲ、およびＭｕＳＫからなる群より選択される細胞表面抗原のエピトープに対して特異的親和性を有する、ターゲティング部分を含む。いくつかの実施形態では、送達媒体は、ネオ抗原などの特定の対象の癌（腫瘍）に由来する、またはそれに発現していると判断される細胞表面抗原と特異的に結合するターゲティング部分を含む。いくつかの実施形態では、ターゲティング部分は、ネオ抗原などの対象の特定の腫瘍に由来する、またはそれに発現していると判断される細胞表面抗原と特異的に結合する。いくつかの実施形態では、ターゲティング部分は抗体または抗原結合抗体フラグメントである。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、−グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含むαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、グルタミル基を４個含むαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、グルタミル基を５個含むαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、グルタミル基を６個含むαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦは、（ａ）ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｂ）ポリグルタミン酸化１０−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−１０−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｃ）ポリグルタミン酸化５，１０−メテニル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦ）；（ｄ）ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ）；（ｅ）ポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ）；（ｆ）ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦ）；および（ｇ）ポリグルタミン酸化５−ホルムイミノ−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦ）から選択されるメンバーである。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦは、ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦである。さらなる実施形態では、αＰＴＨＦは、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦである。他の実施形態では、αＰＴＨＦは、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦである。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦは、ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦである。さらなる実施形態では、αＰＴＨＦは、［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦである。他の実施形態では、αＰＴＨＦは、［６Ｒ，Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦである。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦは、ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦである。さらなる実施形態では、αＰＴＨＦは、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦである。他の実施形態では、αＰＴＨＦは、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦである。いくつかの実施形態では、癌は、例えば、肺癌、膵臓癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、頭頸部癌、胃癌、胃腸癌、結腸直腸癌、食道癌、子宮頸癌、肝臓癌、腎臓癌、���管癌、胆嚢癌、膀胱癌、肉腫、脳癌、中枢神経系癌、および黒色腫などを含む非血液系腫瘍；および、例えば、白血病、リンパ腫およびその他のＢ細胞悪性腫瘍、骨髄腫、ならびにその他の形質細胞異形成症または悪液質などの血液系腫瘍からなる群より選択される。いくつかの実施形態では、癌は、乳癌、頭頸部癌、肺癌、胃癌、骨肉腫、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、菌状息肉腫（皮膚Ｔ細胞性リンパ腫）絨毛癌、および絨毛腺腫、非白血性髄膜症、軟部肉腫（類腱腫、侵襲性線維腫症）、膀胱癌、中枢神経系（ＣＮＳ）癌からなる群より選択される。いくつかの実施形態では、癌は、結腸直腸癌、乳癌、胃癌（例えば、胃癌）、膵臓癌、肝臓癌、肺癌（例えば、非小細胞肺癌および／または腺癌）、頭頸部癌、卵巣癌、胆嚢癌、および基底細胞癌からなる群より選択される。特定の実施形態では、癌は結腸直腸癌である。
【００８３】
さらなる実施形態では、本開示は、癌を治療する方法であって、癌を有するか、有するリスクのある対象に、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸（例えば、Ｌｐ−αＰＴＨＦ、例えばＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＮＴＬｐ−αＰＴＨＦ、ＮＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＴＬｐ−αＰＴＨＦ、またはＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ）などを含むリポソームを有効量投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、リポソームはペグ化されている。いくつかの実施形態では、リポソームは、ペグ化されていない。さらなる実施形態では、リポソームは、癌細胞表面の抗原のエピトープに対して特異的親和性を有するターゲティング部分を含む。さらなる実施形態では、リポソームは、ＧＯＮＭＢ、ＴＡＣＳＴＤ２（ＴＲＯＰ２）、ＣＥＡＣＡＭ５、ＥＰＣＡＭ、葉酸受容体（例えば、葉酸受容体−α、葉酸受容体−β、または葉酸受容体−δ）、ムチン１（ＭＵＣ−１）、ＭＵＣ−６、ＳＴＥＡＰ１、メソテリン、ネクチン４、ＥＮＰＰ３、グアニリルシクラーゼＣ（ＧＣＣ）、ＳＬＣ４４Ａ４、ＮａＰｉ２ｂ、ＣＤ７０（ＴＮＦＳＦ７）、ＣＡ９（炭酸脱水酵素）、５Ｔ４（ＴＰＢＧ）、ＳＬＴＲＫ６、ＳＣ−１６、組織因子、ＬＩＶ−１（ＺＩＰ６）、ＣＧＥＮ−１５０２７、Ｐカドヘリン、フィブロネクチン外側ドメインＢ（ＥＤ−Ｂ）、ＶＥＧＦＲ２（ＣＤ３０９）、テネイシン、コラーゲンＩＶ、ペリオスチン、エンドセリン受容体、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３、ＥｒｂＢ４、ＥＧＦＲ、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３、ＦＧＦＲ４、ＦＧＦＲ６、ＩＧＦＲ−１、ＦＺＤ１、ＦＺＤ２、ＦＺＤ３、ＦＺＤ４、ＦＺＤ５、ＦＺＤ６、ＦＺＤ７、ＦＺＤ８、ＦＺＤ９、ＦＺＤ１０、ＳＭＯ、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ６、ＣＤ８、ＣＤ１１、ＣＤ１１ａ、ＣＤ１５、ＣＤ１８、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ２６、ＣＤ２７Ｌ、ＣＤ２８、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ３４、ＣＤ３７、ＣＤ３８、ＣＤ４０、ＣＤ４４、ＣＤ５６、ＣＤ７０、ＣＤ７４、ＣＤ７９、ＣＤ７９ｂ、ＣＤ９８、ＣＤ１０５、ＣＤ１３３、ＣＤ１３８、ｃｒｉｐｔｏ、ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＧＦ−２Ｒ、ＥｐｈＡ１  ａｎ  ＥｐｈＡ受容体、ＥｐｈＢ受容体、ＥｐｈＡ１、ＥｐｈＡ２、ＥｐｈＡ３、ＥｐｈＡ４、ＥｐｈＡ５、ＥｐｈＡ６、ＥｐｈＡ７、ＥｐｈＡ８、ＥｐｈＢ１、ＥｐｈＢ２、ＥｐｈＢ３、ＥｐｈＢ４、ＥｐｈＢ６、インテグリン（例えば、インテグリンαｖβ３、αｖβ５、またはαｖβ６）、Ｃ２４２抗原、Ａｐｏ２、ＰＳＧＲ、ＮＧＥＰ、ＰＳＣＡ、ＴＭＥＦＦ２、エンドグリン、ＰＳＭＡ、ＣａｎＡｇ、ＣＡＬＬＡ、ｃ−Ｍｅｔ、ＶＥＧＦＲ−１、ＶＥＧＦＲ−２、ＤＤＲ１、ＰＤＧＦＲアルファ、ＰＤＧＦＲベータ、ＴｒｋＡ、ＴｒｋＢ、ＴｒｋＣ、ＵＦＯ、ＬＴＫ、ＡＬＫ、Ｔｉｅ１、Ｔｉｅ２、ＰＴＫ７、Ｒｙｋ、ＴＣＲ、ＮＭＤＡＲ、ＬＮＧＦＲ、およびＭｕｓｋからなる群より選択される細胞表面抗原のエピトープに対して特異的親和性を有する、ターゲティング部分を含む。これにはまた、癌幹細胞ターゲティング部分、例えばＣＤ３４、ＣＤ１３３およびＣＤ４４、ＣＤ１３８、ならびにＣＤ１５を標的化するものなどの使用が含まれる。いくつかの実施形態では、リポソームは、特定��対象の腫瘍に由来するか、それに発現することが明らかにされている細胞表面抗原のエピトープ、例えばネオ抗原などに対して特異的親和性を有する、ターゲティング部分を含む。いくつかの実施形態では、ターゲティング部分は、抗体または抗原結合抗体フラグメントである。いくつかの実施形態では、リポソームは、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含むαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソームは、（ａ）ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｂ）ポリグルタミン酸化１０−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−１０−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｃ）ポリグルタミン酸化５，１０−メテニル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦ）；（ｄ）ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ）；（ｅ）ポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ）；（ｆ）ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦ）；および（ｇ）ポリグルタミン酸化５−ホルムイミノ−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦ）から選択されるαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与するリポソームは、［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与するリポソームは、［６Ｒ，Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソーム組成物は、テトラグルタミン酸化αＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソーム組成物は、ペンタグルタミン酸化αＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソーム組成物は、ヘキサグルタミン酸化αＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソーム組成物のリポソームは、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含むαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソーム組成物のリポソームは、ガンマ結合を有するグルタミル基を１個、２個、３個、または４個以上含む、αＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、癌は、肺（例えば、非小肺癌）、膵臓癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、頭頸部癌、胃癌、消化管癌、結腸直腸癌、食道癌、子宮頸癌、肝臓癌、腎臓癌、胆管癌、胆嚢癌、膀胱癌、肉腫（例えば、骨肉腫）、脳腫瘍、中枢神経系癌、黒色腫、および血液悪性腫瘍（例えば、白血病またはリンパ腫）からなる群より選択される。さらなる実施形態では、癌細胞は、結腸直腸癌、乳癌、胃癌（例えば、胃癌）、膵臓癌、肝臓癌、肺癌（例えば、非小細胞肺癌および／または肺腺癌）、頭頸部癌、卵巣癌、胆嚢癌、および基底細胞癌から選択される癌から入手／誘導した細胞系由来の初代細胞または細胞である。特定の実施形態では、癌細胞は、結腸直腸癌から入手／誘導した細胞系由来の初代細胞または細胞である。
【００８４】
さらなる実施形態では、本開示は、癌を治療する方法であって、癌を有するか、有するリスクのある対象に、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸と、癌表面の抗原のエピトープに対して特異的親和性を有するターゲティング部分とを含むリポソームを含む、リポソーム組成物を有効量投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、リポソームは、ＧＯＮＭＢ、ＴＡＣＳＴＤ２（ＴＲＯＰ２）、ＣＥＡＣＡＭ５、ＥＰＣＡＭ、葉酸受容体（例えば、葉酸受容体−α、葉酸受容体−β、または葉酸受容体−δ）、ムチン１（ＭＵＣ−１）、ＭＵＣ−６、ＳＴＥＡＰ１、メソテリン、ネクチン４、ＥＮＰＰ３、グアニリルシクラーゼＣ（ＧＣＣ）、ＳＬＣ４４Ａ４、ＮａＰｉ２ｂ、ＣＤ７０（ＴＮＦＳＦ７）、ＣＡ９（炭酸脱水酵素）、５Ｔ４（ＴＰＢＧ）、ＳＬＴＲＫ６、ＳＣ−１６、組織因子、ＬＩＶ−１（ＺＩＰ６）、ＣＧＥＮ−１５０２７、Ｐカドヘリン、フィブロネクチン外側ドメインＢ（ＥＤ−Ｂ）、ＶＥＧＦＲ２（ＣＤ３０９）、テネイシン、コラーゲンＩＶ、ペリオスチン、エンドセリン受容体、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３、ＥｒｂＢ４、ＥＧＦＲ、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３、ＦＧＦＲ４、ＦＧＦＲ６、ＩＧＦＲ−１、ＦＺＤ１、ＦＺＤ２、ＦＺＤ３、ＦＺＤ４、ＦＺＤ５、ＦＺＤ６、ＦＺＤ７、ＦＺＤ８、ＦＺＤ９、ＦＺＤ１０、ＳＭＯ、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ６、ＣＤ８、ＣＤ１１、ＣＤ１１ａ、ＣＤ１５、ＣＤ１８、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ２６、ＣＤ２７Ｌ、ＣＤ２８、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ３４、ＣＤ３７、ＣＤ３８、ＣＤ４０、ＣＤ４４、ＣＤ５６、ＣＤ７０、ＣＤ７４、ＣＤ７９、ＣＤ７９ｂ、ＣＤ９８、ＣＤ１０５、ＣＤ１３３、ＣＤ１３８、ｃｒｉｐｔｏ、ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＧＦ−２Ｒ、ＥｐｈＡ１  ａｎ  ＥｐｈＡ受容体、ＥｐｈＢ受容体、ＥｐｈＡ１、ＥｐｈＡ２、ＥｐｈＡ３、ＥｐｈＡ４、ＥｐｈＡ５、ＥｐｈＡ６、ＥｐｈＡ７、ＥｐｈＡ８、ＥｐｈＢ１、ＥｐｈＢ２、ＥｐｈＢ３、ＥｐｈＢ４、ＥｐｈＢ６、インテグリン（例えば、インテグリンαｖβ３、αｖβ５、またはαｖβ６）、Ｃ２４２抗原、Ａｐｏ２、ＰＳＧＲ、ＮＧＥＰ、ＰＳＣＡ、ＴＭＥＦＦ２、エンドグリン、ＰＳＭＡ、ＣａｎＡｇ、ＣＡＬＬＡ、ｃ−Ｍｅｔ、ＶＥＧＦＲ−１、ＶＥＧＦＲ−２、ＤＤＲ１、ＰＤＧＦＲアルファ、ＰＤＧＦＲベータ、ＴｒｋＡ、ＴｒｋＢ、ＴｒｋＣ、ＵＦＯ、ＬＴＫ、ＡＬＫ、Ｔｉｅ１、Ｔｉｅ２、ＰＴＫ７、Ｒｙｋ、ＴＣＲ、ＮＭＤＡＲ、ＬＮＧＦＲ、およびＭｕＳＫからなる群より選択される細胞表面抗原のエピトープに対して特異的親和性を有する、ターゲティング部分を含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、特定の対象の癌（腫瘍）に由来するか、それに発現することが明らかにされている細胞表面抗原のエピトープ、例えばネオ抗原などに対して特異的親和性を有する、ターゲティング部分を含む。いくつかの実施形態では、ターゲティング部分は、抗体または抗原結合抗体フラグメントである。いくつかの実施形態では、リポソームは、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含むαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソームは、グルタミル基を４個含むαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソームは、グルタミル基を５個含むαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソームは、グルタミル基を６個含むαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソームは、（ａ）ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｂ）ポリグルタミン酸化１０−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−１０−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｃ）ポリグルタミン酸化５，１０−メテニル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦ）；（ｄ）ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ）；（ｅ）ポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ）；（ｆ）ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦ）；および（ｇ）ポリグルタミン酸化５−ホルムイミノ−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦ）から選択されるαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与するリポソームは、［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与するリポソームは、［６Ｒ，Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ガンマ結合を有するグルタミル基を１個、２個、３個、または４個以上含むαＰＴＨＦを含む。
【００８５】
いくつかの実施形態では、投与するリポソーム組成物は、ペグ化リポソーム（例えば、ＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ）を含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソーム組成物は、ペグ化されていないリポソームを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソーム組成物のリポソームは、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含むαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソームは、グルタミル基を４個含むαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソームは、グルタミル基を５個含むαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソームは、グルタミル基を６個含むαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソームは、（ａ）ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｂ）ポリグルタミン酸化１０−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−１０−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｃ）ポリグルタミン酸化５，１０−メテニル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦ）；（ｄ）ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ）；（ｅ）ポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ）；（ｆ）ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦ）；および（ｇ）ポリグルタミン酸化５−ホルムイミノ−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦ）から選択されるαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与するリポソームは、［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与するリポソームは、［６Ｒ，Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソーム組成物のリポソームは、ガンマ結合を有するグルタミル基を１個、２個、３個、または４個以上含む、αＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソーム組成物を投与して、肺癌（例えば、非小細胞）、膵臓癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、頭頸部癌、胃癌、消化管癌、結腸直腸癌、食道癌、子宮頸癌、肝臓癌、腎臓癌、胆管癌、胆嚢癌、膀胱癌、肉腫（例えば、骨肉腫）、脳腫瘍、中枢神経系癌、黒色腫、骨髄腫、���血病、およびリンパ腫からなる群より選択される癌を治療する。いくつかの実施形態では、リポソーム組成物を投与して、結腸直腸癌、乳癌、胃癌（例えば、胃癌）、膵臓癌、肝臓癌、肺癌（例えば、非小細胞肺癌および／または腺癌）、頭頸部癌、卵巣癌、胆嚢癌、および基底細胞癌からなる群より選択される癌を治療する。特定の実施形態では、リポソーム組成物を投与して、結腸直腸癌を治療する。
【００８６】
さらなる実施形態では、本開示は、癌を治療する方法であって、細胞表面に葉酸受容体を発現する癌を有するか、有するリスクのある対象に有効量のリポソーム組成物を投与することを含み、リポソーム組成物が、（ａ）ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸（αＰＴＨＦ）と、（ｂ）葉酸受容体に対して特異的親和性を有するターゲティング部分とを含む、リポソームを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、ターゲティング部分は、葉酸受容体アルファ（ＦＲ−α）、葉酸受容体ベータ（ＦＲ−β）、および／または葉酸受容体デルタ（ＦＲ−δ）に対して特異的結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、ターゲティング部分は、葉酸受容体アルファ（ＦＲ−α）、葉酸受容体ベータ（ＦＲ−β）、および／または葉酸受容体デルタ（ＦＲ−δ）に対して特異的結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、ターゲティング部分は、葉酸受容体アルファ（ＦＲ−α）および葉酸受容体ベータ（ＦＲ−β）に対して特異的結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、投与するリポソーム組成物は、ペグ化リポソーム（例えば、ＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ）を含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソーム組成物は、ペグ化されていないリポソームを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソーム組成物のリポソームは、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含むαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソームは、グルタミル基を４個含むαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソームは、グルタミル基を５個含むαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソームは、グルタミル基を６個含むαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソームは、（ａ）ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｂ）ポリグルタミン酸化１０−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−１０−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｃ）ポリグルタミン酸化５，１０−メテニル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦ）；（ｄ）ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ）；（ｅ）ポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ）；（ｆ）ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦ）；および（ｇ）ポリグルタミン酸化５−ホルムイミノ−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦ）から選択されるαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与するリポソームは、［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与するリポソームは、［６Ｒ，Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソーム組成物のリポソームは、ガンマ結合を含むグルタミル基を１個、２個、３個、または４個以上含む。いくつかの実施形態では、リポソーム組成物を投与して、例えば、肺癌、膵臓癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、頭頸部癌、胃癌、消化管癌、結腸直腸癌、食道癌、子宮頸癌、肝臓癌、腎臓癌、胆管癌、胆嚢癌、膀胱癌、肉腫（例えば、骨肉腫）、脳腫瘍、中枢神経系癌、および黒色腫などを含めた非血液悪性腫瘍；ならびに例えば、白血病、リンパ腫、およびその他のＢ細胞悪性腫瘍、骨髄腫およびその他形質細胞異形成または悪液質などの血液悪性腫瘍からなる群より選択される癌を治療する。いくつかの実施形態では、リポソーム組成物を投与して、乳癌、頭頸部癌、肺癌、胃癌、骨肉腫、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、菌状息肉症（皮膚Ｔ細胞リンパ腫）絨毛癌および絨毛腺腫、非白血性髄膜癌、軟部組織肉腫（類腱腫、侵襲性線維腫症、膀胱癌、ならびに中枢神経系（ＣＮＳ）リンパ腫からなる群より選択される癌を治療する。いくつかの実施形態では、リポソーム組成物を投与して、結腸直腸癌、乳癌、胃癌（例えば、胃癌）、膵臓癌、肝臓癌、肺癌（例えば、非小細胞肺癌および／または腺癌）、頭頸部癌、卵巣癌、胆嚢癌、および基底細胞癌からなる群より選択される癌を治療する。
【００８７】
さらなる実施形態では、本開示は、癌の維持療法の方法であって、癌治療を受けているか、受けたことのある対象に、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸（Ｌｐ−αＰＴＨＦ）を含むリポソームを含むリポソーム組成物を有効量投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、投与するリポソーム組成物は、ＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＮＴＬｐ−αＰＴＨＦ、ＮＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＴＬｐ−αＰＴＨＦ、またはＴＰＬｐ−αＰＴＨＦである。いくつかの実施形態では、投与するリポソーム組成物は、ペグ化リポソーム（例えば、ＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＮＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ、またはＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ）を含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソーム組成物は、標的化リポソーム（例えば、ＴＬｐ−αＰＴＨＦまたはＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ）を含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソーム組成物は、ペグ化されているリポソームを含み、ターゲティング部分（例えば、ＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ）を含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソーム組成物のリポソームは、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含むポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソームは、グルタミル基を４個含むαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソームは、グルタミル基を５個含むαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソームは、グルタミル基を６個含むαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソームは、（ａ）ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｂ）ポリグルタミン酸化１０−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−１０−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｃ）ポリグルタミン酸化５，１０−メテニル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦ）；（ｄ）ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ）；（ｅ）ポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ）；（ｆ）ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦ）；および（ｇ）ポリグルタミン酸化５−ホルムイミノ−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦ）から選択されるαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与するリポソームは、［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与するリポソームは、［６Ｒ，Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投���するリポソームは、ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソーム組成物のリポソームは、ガンマ結合を含むグルタミル基を１個、２個、３個、または４個以上含む。
【００８８】
さらなる実施形態では、本開示は、免疫系の障害を治療する方法であって、免疫系の障害を有するか、有するリスクのある対象に、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含むリポソーム（例えば、ＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＮＴＬｐ−αＰＴＨＦ、ＮＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＴＬｐ−αＰＴＨＦまたはＴＰＬｐ−αＰＴＨＦなどのＬｐ−αＰＴＨＦ）を含むリポソーム組成物を有効量投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、リポソーム組成物を投与して自己免疫疾患を治療する。さらなる実施形態では、リポソーム組成物を投与して関節リウマチを治療する。別の実施形態では、リポソーム組成物を投与して炎症を治療する。いくつかの実施形態では、投与するリポソーム組成物は、ペグ化リポソーム（例えば、ＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＮＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ、またはＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ）を含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソーム組成物は、目的の標的細胞（例えば、免疫細胞）上の表面抗原に対して特異的親和性を有するターゲティング部分を含む標的化リポソーム（例えば、ＴＬｐ−αＰＴＨＦまたはＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ）を含む。さらなる実施形態では、投与するリポソーム組成物は、ペグ化され、ターゲティング部分を含むリポソーム（例えば、ＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ）を含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソーム組成物のリポソームは、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含むポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソーム組成物は、グルタミル基を４個含むαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソームは、グルタミル基を５個含むαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソームは、グルタミル基を６個含むαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソームは、（ａ）ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｂ）ポリグルタミン酸化１０−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−１０−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｃ）ポリグルタミン酸化５，１０−メテニル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦ）；（ｄ）ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ）；（ｅ）ポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ）；（ｆ）ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦ）；および（ｇ）ポリグルタミン酸化５−ホルムイミノ−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦ）から選択されるαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの���施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与するリポソームは、［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与するリポソームは、［６Ｒ，Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソーム組成物のリポソームは、ガンマ結合を含むグルタミル基を１個、２個、３個、または４個以上含む。
【００８９】
本開示はまた、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を腫瘍および／または癌細胞に送達する方法であって、腫瘍を有する対象に、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸（Ｌ−αＰＴＨＦ）と、腫瘍細胞または癌細胞の表面抗原のエピトープに対して特異的結合親和性を有するターゲティング部分とを含む組成物を投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、投与するターゲティング部分は、送達媒体と結合している。いくつかの実施形態では、送達媒体は、抗体または抗体の抗原結合フラグメントである。さらなる実施形態では、送達媒体はリポソームである。いくつかの実施形態では、抗体、抗原結合抗体フラグメント、またはリポソームは、ペグ化されている。いくつかの実施形態では、投与する組成物は、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含むポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、投与する組成物は、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、投与する組成物は、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。他の実施形態では、投与する組成物は、ヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、投与する組成物は、（ａ）ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｂ）ポリグルタミン酸化１０−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−１０−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｃ）ポリグルタミン酸化５，１０−メテニル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦ）；（ｄ）ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ）；（ｅ）ポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ）；（ｆ）ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦ）；および（ｇ）ポリグルタミン酸化５−ホルムイミノ−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦ）から選択されるαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与する組成物は、ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与する組成物は、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与する組成物は、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与する組成物は、ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与する組成物は、［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与する組成物は、［６Ｒ，Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与する組成物は、ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与する組成物は、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与する組成物は、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルミル−Ｔ��Ｆを含む。
【００９０】
さらなる実施形態では、本開示は、リポソームポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸（αＰＴＨＦ）組成物を含むリポソーム組成物を調製する方法であって、溶液中でリポソーム成分およびαポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸を含む混合物を形成することと；前記溶液中で前記混合物をホモジナイズしてリポソームを形成することと；混合物を処理して、ポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸を含むリポソームを形成することとを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸は、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含む。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦ組成物は、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦ組成物は、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。他の実施形態では、αＰＴＨＦ組成物は、ヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸は、ガンマ結合を含むグルタミル基を１個、２個、３個、または４個以上含む。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦ組成物は、Ｄ型のグルタミル基を１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、または１１個以上含む。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦ組成物は、Ｌ型のグルタミル基を２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、または１１個以上含む。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦ組成物は、２個、３個、４個、５個、または６個以上のＬ型のグルタミル基と、１個、２個、３個、４個、５個、または６個以上のＤ型のグルタミル基とを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、（ａ）ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｂ）ポリグルタミン酸化１０−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−１０−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｃ）ポリグルタミン酸化５，１０−メテニル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦ）；（ｄ）ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ）；（ｅ）ポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ）；（ｆ）ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦ）；および（ｇ）ポリグルタミン酸化５−ホルムイミノ−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦ）から選択されるαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、組成物は、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、組成物は、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、組成物は、［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、組成物は、［６Ｒ，Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、組成物は、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与する組成物は、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。
【００９１】
一実施形態では、本開示は、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸組成物および／またはαＰＴＨＦ送達媒体、例えば本明細書に記載されるαＰＴＨＦもしくはαＰＴＨＦ免疫複合体（例えば、ＡＤＣ）を含むリポソームなどを含む、キットを提供する。
【図面の簡単な説明】
【００９２】
【図１Ａ−１Ｎ】アルファテトラヒドロ葉酸：アルファ５−１０メチレンＴＨＦ（図１Ａ）、アルファ５−１０メチレンＴＨＦジグルタミン酸（図１Ｂ）、アルファ５−１０メチレンＴＨＦトリグルタミン酸（図１Ｃおよび１Ｄ）、アルファ５−１０メチレンＴＨＦテトラグルタミン酸（図１Ｅおよび１Ｆ）、アルファ５−１０メチレンＴＨＦペンタグルタミン酸（図１Ｇおよび１Ｈ）、アルファ５−１０メチレンＴＨＦヘキサグルタミン酸（図１Ｉおよび１Ｊ）、アルファ５−１０メチレンＴＨＦヘプタグルタミン酸（図１Ｋおよび１Ｌ）、アルファ５−１０メチレンＴＨＦオクタグルタミン酸（図１Ｍおよび１Ｎ）、ならびに代表的アルファテトラヒドロ葉酸ポリグルタミン酸誘導体、テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ、１０ホルミルＴＨＦ、５ホルミルＴＨＦ、５−メチルＴＨＦ、５ホルムイミノＴＨＦ、５，１０メテニルＴＨＦ、および５，１０メチレンＴＨＦ（図１Ｏ〜１Ｑ）の代表的化学式を示す図である。図１Ｒ〜１Ｕは、アルファグルタミル骨格とガンマグルタミル分岐とを有する分岐鎖ポリグルタミン酸（図１Ｓ）、ガンマグルタミル骨格とアルファグルタミル分岐とを有する分岐鎖ポリグルタミン酸（図１Ｔ）、ならびにアルファグルタミル骨格とガンマグルタミル分岐およびアルファグルタミル分岐の両方とを有する分岐鎖ポリグルタミン酸（図１Ｕ）を含めた代表的分岐鎖５−１０メチレンＴＨＦポリグルタミン酸構造の描写を示す。
【図２】癌細胞株ＳＷ６２０（ＣＲＣ）、ＨＴ−２９（結腸癌）、Ｈ１８０６（トリプルネガティブ乳癌）、ＯＡＷ２８（卵巣癌）、Ｈ２９２（ＮＳＣＬＣ、腺癌サブタイプ）、およびＨ２３４２（ＮＳＣＬＣ、腺癌サブタイプ）への４８時間にわたる曝露後の、ペメトレキセドと比較した、リポソームペメトレキセドアルファ−Ｌヘキサグルタミン酸（リポソームａＧ６）およびその鏡像体のリポソームアルファ−Ｄヘキサグルタミン酸（リポソームａＤＧ６）の相対効力を示す。
【図３】ＮＣＩ  Ｈ２３４２非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、腺癌サブタイプ中での、遊離ペメトレキセドＬ−ガンマヘキサグルタミン酸（ｇＧ６）、リポソームペメトレキセドＬ−ガンマヘキサグルタミン酸（リポソームｇＧ６）、ペメトレキセド、および葉酸受容体アルファ標的化抗体（ＦＲ１Ａｂ）リポソームペメトレキセドＬ−ガンマヘキサグルタミン酸（リポソームｇＧ６−ＦＲ１Ａｂ）の、４８時間治療後の生存細胞のパーセンテージとして表した投与量反応関係の一例を示す。アルファポリグルタミン酸化ペメトレキセドを含む葉酸受容体アルファ標的化リポソームは、ＮＣＩ  Ｈ２３４２非小細胞肺癌細胞の標的化、および生存率の低減に成功することが予測される。
【図４】ＨＴ−２９（結腸癌）中での、遊離ペメトレキセドＬ−ガンマヘキサグルタミン酸（ｇＧ６）、リポソームペメトレキセドＬ−ガンマヘキサグルタミン酸（リポソームｇＧ６）、ペメトレキセド、および葉酸受容体アルファ標的化抗体（ＦＲ１Ａｂ）リポソームペメトレキセドＬ−ガンマヘキサグルタミン酸（リポソームｇＧ６−ＦＲ１Ａｂ）の４８時間での投与量反応関係の一例を示す。アルファポリグルタミン酸化ペメトレキセドを含む葉酸受容体アルファ標的化リポソームもまた、ＨＴ−２９（結腸癌）細胞の標的化、および生存率の低減に成功することが予測される。
【図５】リポソームペメトレキセドアルファ−Ｌヘキサグルタミン酸（Ｌｐｓ  Ｈｅｘａ  ａＧ６）、リポソームペメトレキセドアルファ−Ｄヘキサグルタミン酸（Ｌｐｓ  Ｈｅｘａ  ａＤＧ６）、およびペメトレキセドの４８時間曝露後のＨＣＣ１８０６トリプルネガティブ乳癌細胞に対する治療効果を示す。
【図６】リポソームペメトレキセドアルファ−Ｌヘキサグルタミン酸（ＬＰＳ  Ｈｅｘａ  ａＧ６）、リポソームペメトレキセドアルファ−Ｄヘキサグルタミン酸（ＬＰＳ  Ｈｅｘａ  ａＤＧ６）、およびペメトレキセドの４８時間曝露後のＯＡＷ２８卵巣癌細胞に対する治療効果を示す。
【図７】リポソームペメトレキセドアルファ−Ｌヘキサグルタミン酸（Ｌｐｓ  Ｈｅｘａ  ａＧ６）、リポソームペメトレキセドアルファ−Ｄヘキサグルタミン酸（Ｌｐｓ  Ｈｅｘａ  ａＤＧ６）の４８時間にわたるＨ２９２非小細胞肺癌細胞に対する治療効果をペメトレキセドと比較して示す。
【図８】リポソームペメトレキセドアルファ−Ｌヘキサグルタミン酸（リポソームａＧ６）、リポソームペメトレキセドアルファ−Ｄヘキサグルタミン酸（リポソームａＤＧ６）、およびペメトレキセドの１６〜１２８ｎＭの範囲の種々の投与レベルの４８時間にわたる曝露後のＨ２９２非小細胞肺癌細胞に対する治療効果を示す。試験した各投与量範囲内では、リポソームペメトレキセドａＧ６製剤は、ペメトレキセドと比較して、Ｈ２９２非小細胞肺癌細胞の抑制に優れている。
【図９】リポソームペメトレキセドアルファ−Ｌヘキサグルタミン酸（リポソームａＧ６）、リポソームペメトレキセドアルファ−Ｄヘキサグルタミン酸（リポソームａＤＧ６）、およびペメトレキセドの１６〜１２８ｎＭの範囲の種々の投与レベルの４８時間にわたる曝露後のＨＣＣ１８０６トリプルネガティブ乳癌細胞に対する治療効果を示す。試験した各投与量範囲では、リポソームペメトレキセドａＧ６製剤は、ＨＣＣ１８０６トリプルネガティブ乳癌細胞の抑制にペメトレキセドよりも優れている。
【図１０】リポソームペメトレキセドアルファ−Ｌヘキサグルタミン酸（リポソームａＧ６）、リポソームペメトレキセドアルファ−Ｄヘキサグルタミン酸（リポソームａＤＧ６）、およびペメトレキセドの一連の濃度での４８時間にわたる曝露後のＯＡＷ２８卵巣癌細胞に対する治療効果を示す。１２８ｎＭの投与量で、ペメトレキセドは、リポソームペメトレキセドａＧ６リポソーム製剤より効果的であるようにみえるが、３２ｎＭおよび６４ｎＭの投与量では、リポソーム製剤はペメトレキセドより優れた治療効果を有し、１６ｎＭでは、リポソームペメトレキセドａＧ６の治療効果は、ペメトレキセドと同程度である。
【図１１】リポソームペメトレキセドアルファ−Ｌヘキサグルタミン酸（リポソームａＧ６）、リポソームペメトレキセドアルファ−Ｄヘキサグルタミン酸（リポソームａＤＧ６）、およびペメトレキセドの、６４ｎＭ、１２８ｎＭ、および２６４ｎＭの分化しているヒト好中球に対する毒性を示す。図は、リポソームペメトレキセドａＧ６が、分化中のヒト好中球に対して、ペメトレキセドよりも有意に毒性が低いことを示す。
【図１２】リポソームペメトレキセドアルファ−Ｌヘキサグルタミン酸（リポソームａＧ６）、リポソームペメトレキセドアルファ−Ｄヘキサグルタミン酸（リポソームａＤＧ６）、およびペメトレキセドの対応する薬剤の１６〜１２８ｎＭの範囲の種々の投与レベルの４８時間にわたる曝露後の好中球（ＣＤ３４＋細胞から分化）に対する効果を示す。
【図１３】リポソームペメトレキセドアルファ−Ｌヘキサグルタミン酸（リポソームａＧ６）、リポソームペメトレキセドアルファ−Ｄヘキサグルタミン酸（リポソームａＤＧ６）、およびペメトレキセドの１６ｎＭ、３２ｎＭ、および６４ｎＭ、および１２８ｎＭの対応する薬剤への４８時間にわたる曝露後のＡＭＬ１２肝臓細胞に対する効果を示す。際立っている点は、試験した投与レベルのいずれのリポソーム薬剤でもリポソームペメトレキセドａＧ６での治療後、ＡＭＬ１２肝臓細胞に対して何ら毒性があるように思われないことである。これとは対照的に、ペメトレキセド治療では、試験したいずれの投与量でもＡＭＬ１２肝臓細胞数が約４０％減少する。
【図１４】リポソームペメトレキセドアルファ−Ｌヘキサグルタミン酸（リポソームａＧ６）、リポソームペメトレキセドアルファ−Ｄヘキサグルタミン酸（リポソームａＤＧ６）、およびペメトレキセドの１６ｎＭ、３２ｎＭ、および６４ｎＭ、および１２８ｎＭの対応する薬剤への４８時間にわたる曝露後のＣＣＤ８４１結腸上皮細胞に対する効果を示す。試験したいずれの濃度でも、試験した各リポソーム組成物で治療した後、ＣＣＤ８４１結腸上皮細胞数が約２０％以下減少したのに対し、ペメトレキセドでは、細胞数が約５０％以上減少する。
【図１５】ポリグルタミン酸化葉酸代謝拮抗薬、シスプラチン（ＣＤＤＰ）および２つの可能なａＧ６−シスプラチン複合体の構造を示す。ポリグルタミン酸化葉酸代謝拮抗薬のカルボキシル基と、シスプラチンとの間の鎖間および／または鎖内配位のｐＨ依存性形成は、酸性のｐＨのリソソーム（ｐＨ４〜５）に遭遇時および細胞内の塩化物イオンの存在時には、ａＧ６とシスプラチンの個別の分子に分解する可能性がある。
【図１６】血液学的パラメーター：白血球（ＷＢＣ）数、好中球数および血小板数に対する、４０ｍｇ／ｋｇおよび８０ｍｇ／ｋｇの週１回の４週間投与によるマウスのリポソームａＧ６治療の効果を示す。平均好中球、平均白血球または平均血小板数に明らかな減少は観察されなかった。
【図１７】マウスにリポソームａＧ６を４０ｍｇ／ｋｇおよび８０ｍｇ／ｋｇで週１回、４週間投与する治療がヘモグロビンおよび網赤血球数指数に及ぼす効果を示す。投与レベルの高い方が、平均ヘモグロビン濃度の減少が最小となる。それと同時に、平均網赤血球数指数のわずかな増加がみられる。
【図１８】マウスにリポソームａＧ６を４０ｍｇ／ｋｇおよび８０ｍｇ／ｋｇで週１回、４週間投与する治療が、血清アルブミンに加えて血清アスパラギン酸アミノ基転移酵素（ＡＳＴ）および血清アラニンアミノ基転移酵素（ＡＬＴ）を含む肝臓マーカーに及ぼす効果を示す。肝臓アミノ基転移酵素の平均ＡＳＴレベルにもまたは平均ＡＬＴレベルにも明らかな増加は認められず、平均アルブミンレベルの変化も観察されなかった。
【図１９】ＮＣＩ−Ｈ２９２（非小細胞肺癌）細胞を接種し、対照、ペメトレキセド、およびリポソームａＧ６の１６７ｍｇ／ｋｇを３週間に１回静脈内投与した免疫不全の雌Ｎｕ／Ｊマウス（６〜８週齢）の相対腫瘍体積を示す。これらの予備的データからわかるように、リポソームａＧ６は、ペメトレキセドと比較して低い腫瘍制御をもたらす。
【図２０Ａ−２０Ｆ】Ｈ２３４２（ＮＳＣＬＣ、腺癌サブタイプ）（図２０Ａ）、Ｈ２９２（ＮＳＣＬＣ、腺癌サブタイプ）（図２０Ｂ）、ＨＴ−２９（結腸癌）（図２０Ｃ）、ＨＣＣ１８０６（トリプルネガティブ乳癌）（図２０Ｄ）、ＭＣＦ７（ＥＲ＋乳癌）（図２０Ｅ）、およびＯＡＷ２８（卵巣癌）（図２０Ｆ）に対する４８時間にわたる、リポソームペメトレキセドアルファ−Ｌトリグルタメート（リポソームａＧ３）、リポソームペメトレキセドアルファ−Ｌペンタグルタメート（リポソームａＧ５）、リポソームペメトレキセドアルファ−Ｌオクタグルタメート（リポソームａＧ７）、およびリポソームペメトレキセドアルファ−Ｌヘキサグルタミン酸（ａＧ６）とアルファ−Ｌドデカグルタメート（ａＧ１２）の組み合わせ（リポソームａＧ６とａＧ１２）の投与量反応関係を示す。基本的には実施例１に記載した通りに、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（登録商標）（ＣＴＧ）発光細胞生存率アッセイにより細胞生存率を測定した。いずれの細胞系でもわかるように、各ポリグルタミン酸化ペメトレキセドリポソーム組成物の効力は、リポソーム媒体および空のリポソーム対照の効力を十分に上回るものであった。
【発明を実施するための形態】
【００９３】
本開示は一般に、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸組成物に関する。この組成物は、癌などの過剰増殖疾患に対するこれまでの治療に進歩をもたらす。ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸組成物の製造、送達および使用の方法も提供される。ポリグルタミン酸化アルファ組成物には、特に限定されないが、癌などの過剰増殖疾患、炎症および関節リウマチなどの免疫系の障害、ならびにＨＩＶおよびマラリアなどの感染症の治療（例えば、治療および／または予防）を含めた用途がある。ポリグルタミン酸化アルファ組成物には、治療剤の効果を増強する、化学療法薬（例えば、５−フルオロウラシル）などの１つまたは複数の治療剤との併用療法への、または治療剤に関連する毒性副作用を軽減する「化学防御剤」としての（例えば、メトトレキセートなどの葉酸代謝拮抗薬との併用への）用途もある。
【００９４】
Ｉ．定義
別途定義されない限り、本明細書で使用される技術および科学用語はいずれも、本開示が属する分野の当業者によって一般に理解されるものと同じ意味を有する。
【００９５】
実施形態が「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という言葉とともに本明細書に記載される場合は常に、「含む（ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ）」、「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｏｆ）」、および／または「から実質的になる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ  ｏｆ）」という用語で記載される別の類似の実施形態も提供されることが理解される。ただし、請求項で移行句として使用される場合、それぞれが別個に、かつ適切な法的文脈および事実の文脈で解釈されるべきである（例えば、請求項では、移行句「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」は、より開放的な語句であると見なされ、移行句「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｏｆ）」はより排他的であり、「から実質的になる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ  ｏｆ）」はこれらの中間的なものである）。
【００９６】
本明細書で使用される場合、単数形「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」は、特に明記されない限り、または複数の参照物が意図されないことが文脈から明らかでない限り、複数の指示対象を含む。
【００９７】
「Ａおよび／またはＢ」などの句で使用される「および／または」という用語は、本明細書では、ＡとＢの両方；ＡまたはＢ；Ａ（単独）；およびＢ（単独）を含むことが意図される。同様に、「Ａ、Ｂおよび／またはＣ」などの句で使用される「および／または」という用語は、以下の実施形態：Ａ、Ｂ、およびＣ；Ａ、Ｂ、またはＣ；ＡまたはＣ；ＡまたはＢ；ＢまたはＣ；ＡおよびＣ；ＡおよびＢ；ＢおよびＣ；Ａ（単独）；Ｂ（単独）；およびＣ（単独）をそれぞれ包含することが意図される。
【００９８】
見出しおよび小見出しは、便宜上、および／または公式の規則遵守のためにのみ使用されるものであって、対象技術を限定するものではなく、対象技術の記載の解釈に関連して言及されるものではない。対象開示の１つの見出しまたは１つの小見出しの下に記載される特徴は、種々の実施形態で、他の見出しまたは小見出しの下に記載される特徴と組み合わせ得る。さらに、単一の見出しまたは小見出しの下にある特徴が、諸実施形態で必ずしも全部が一緒に用いられるわけではない。
【００９９】
「テトラヒドロ葉酸」および「ＴＨＦ」という用語は、塩、酸、および／または遊離塩基形態のテトラヒドロ葉酸（例えば、テトラヒドロ葉酸二ナトリウム）を含めるのに互換的に使用される。別途明記されるか、文脈から疑いなく明白である場合を除いて、「ＴＨＦ」および「テトラヒドロ葉酸」は、一炭素置換ＴＨＦ誘導体を含めた天然および非天然のＴＨＦ形態を含む。特に、別途明記されるか、文脈から疑いなく明白である場合を除いて、「ＴＨＦ」および「テトラヒドロ葉酸」は、ＴＨＦのテトラヒドロプテリン成分のＣ−６原子に［６Ｒ］立体配置を有するジアステロマー（ｄｉａｓｔｅｒｏｍｅｒｉｃ）組成物、Ｃ−６原子に［６Ｓ］立体配置を有するジアステロマー（ｄｉａｓｔｅｒｏｍｅｒｉｃ）組成物、および／または［６，Ｒ，Ｓ］ジアステレオマーの混合物（例えば、１：１）を含む。特に明記されるか、文脈から疑いなく明白である場合を除いて、「ＴＨＦ」および「テトラヒドロ葉酸」は、（ａ）５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、［６Ｓ］、［６Ｒ，Ｓ］、または［６Ｒ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｂ）５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、［６Ｓ］、［６Ｒ，Ｓ］、または［６Ｒ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｃ）５，１０−メテニル−ＴＨＦ（例えば、［６Ｒ］、［６Ｒ，Ｓ］、または［６Ｓ］、−５，１０−メテニル−ＴＨＦ）；（ｄ）５−メチル−ＴＨＦ（例えば、［６Ｓ］、［６Ｒ，Ｓ］、または［６Ｒ］、−５−メチル−ＴＨＦ）；（ｅ）テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ（（２Ｓ）−２−｛［４−（｛［２−アミノ−４−オキソ−１，４，５，６，７，８−ヘキサヒドロプテリジン−６−イル］メチル｝アミノ）フェニル］ホルムアミド｝ペンタン二酸）（（例えば、［６Ｓ］、［６Ｒ，Ｓ］、および［６Ｒ，］−（（２Ｓ）−２−｛［４−（｛［２−アミノ−４−オキソ−１，４，５，６，７，８−ヘキサヒドロプテリジン−６−イル］メチル｝アミノ）フェニル］ホルムアミド｝ペンタン二酸））；（ｆ）５，１０−メチレン−ＴＨＦ（例えば、［６Ｒ］、［６Ｒ，Ｓ］、または［ＳＲ］、−５，１０−メチレン−ＴＨＦ）；および（ｇ）５−ホルムイミノ−ＴＨＦ（例えば、［６Ｓ］、［６Ｒ，Ｓ］、または［６Ｒ］、−５−ホルムイミノ−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、本開示は、（ａ）［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ；（ｂ）［６Ｒ］−５−ホルミル−ＴＨＦ；（ｃ）［６Ｒ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦ；（ｄ）［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ；（ｅ）［６Ｓ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ；（ｆ）［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦ；および（ｇ）［６Ｓ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦから選択されるＴＨＦジアステレオマーを含む、組成物を提供する。いくつかの実施形態では、本開示は、ＴＨＦジアステレオマー混合物（例えば、ジアステレオ異性体混合物［６Ｒ，Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ（１：１）および／またはジアステレオ異性体混合物［６Ｒ，Ｓ］−５−ＣＨＯ−ＴＨＦ（１：１）を含む組成物を提供する。ＴＨＦ塩を含む組成物は、様々なカチオン、例えばＮａ＋、Ｍｇ２＋、Ｋ＋、ＮＨ４＋、および／またはＣａ２＋などのいずれかをさらに含み得る。特定の実施形態では、塩は薬学的に許容可能な塩である。さらなる特定の実施形態では、ＴＨＦ塩はＮａ＋を含む。テトラヒドロ葉酸は、Ｌ−ガンマグルタミル基を１個含み、したがって、本開示の目的には、モノグルタミン酸化されていると見なされる。
【０１００】
「テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ」という用語は、具体的には、構造２−｛［４−（｛［（６Ｓ）−２−アミノ−４−オキソ−１，４，５，６，７，８−ヘキサヒドロプテリジン−６−イル］メチル｝アミノ）フェニル］ホルムアミド｝ペンタン二酸を有するＴＨＦ組成物を意味する。「テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ」は、本明細書では、テトラヒドロ葉酸（ＴＨＦ）の一種と呼ばれることもある。
【０１０１】
「ポリグルタミン酸」、「ポリグルタミン酸化」という用語、またはその変化形は、グルタミル基が２個以上結合した鎖を少なくとも１つ含む組成物を意味する。ポリグルタミン酸鎖は、直鎖または分岐鎖であり得る。直鎖ポリグルタミン酸鎖は、例えば、アルファカルボキシル基またはガンマカルボキシル基結合を含む、グルタミル基を含み得る。分岐ポリグルタミン酸鎖は、例えば、他のグルタミル基とのアルファカルボキシル基結合およびガンマカルボキシル基結合をともに含むグルタミル基を１個または複数個含み、それにより、ポリグルタミン酸の分岐点が生じる。代表的な分岐ポリグルタミン酸を図１Ｒ〜１Ｕに示す。ポリグルタミン酸鎖は、Ｎ末端グルタミル基と、１個または複数個のＣ末端グルタミル基とを含む。ポリグルタミン酸鎖のＮ末端グルタミル基は、そのアミノ基を介して別のグルタミル基と結合することはないが、そのカルボン酸基を介して１個または複数個のグルタミル基と結合する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸のＮ末端グルタミル基は、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基である。ポリグルタミン酸鎖のＣ末端グルタミル基は、そのアミノ基を介して別のグルタミル基と結合するが、そのカルボン酸基を介して別のグルタミル基と結合することはない。
【０１０２】
「ポリグルタミン酸化−テトラヒドロ葉酸」、「ポリグルタミン酸化−ＴＨＦ」、「ＴＨＦ−ＰＧ」、「ＰＴＨＦ」という用語およびその反復は、本明細書では、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基に加えて少なくとも１個のグルタミル基を含む、テトラヒドロ葉酸組成物（すなわち、ＴＨＦ−ＰＧｎ、式中、ｎ≧１）を意味するのに互換的に使用される。本明細書でαＰＴＨＦ（αＴＨＦ−ＰＧ）中のグルタミル基の数に言及する場合、それにはテトラヒドロ葉酸のグルタミル基を考慮に入れる。例えば、ＴＨＦのグルタミル基に加えてグルタミル残基を５個含むＴＨＦ−ＰＧ組成物は、本明細書では、ヘキサグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸またはテトラヒドロ葉酸ヘキサグルタミン酸と呼ぶ。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化−テトラヒドロ葉酸は、（ａ）ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦ；（ｂ）ポリグルタミン酸化１０−ホルミル−ＴＨＦ；（ｃ）ポリグルタミン酸化５，１０−メテニル−ＴＨＦ；（ｄ）ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦ；（ｅ）ポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸（（２Ｓ）−２−｛［４−（｛［２−アミノ−４−オキソ−１，４，５，６，７，８−ヘキサヒドロプテリジン−６−イル］メチル｝アミノ）フェニル］ホルムアミド｝ペンタン二酸）（（例えば、［６Ｓ］、［６Ｒ，Ｓ］、および［６Ｒ，］−（（２Ｓ）−２−｛［４−（｛［２−アミノ−４−オキソ−１，４，５，６，７，８−ヘキサヒドロプテリジン−６−イル］メチル｝アミノ）フェニル］ホルムアミド｝ペンタン二酸））；（ｆ）ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦ；および（ｇ）ポリグルタミン酸化５−ホルムイミノ−ＴＨＦから選択されるメンバーである。さらなる実施形態では、ポリグルタミン酸化−テトラヒドロ葉酸は、（ａ）ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ；（ｂ）ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−１０−ホルミル−ＴＨＦ；（ｃ）ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦ；（ｄ）ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ；（ｅ）ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ；（ｆ）ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦ；および（ｇ）ポリグルタミン酸［６Ｓ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦから選択されるメンバーである。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化−テトラヒドロ葉酸は［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦである。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化−テトラヒドロ葉酸は［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦである。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化−テトラヒドロ葉酸は［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦである。他の実施形態では、ポリグルタミン酸化−テトラヒドロ葉酸は、［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦジアステレオマー混合物、［６Ｒ，Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦジアステレオマー混合物、または［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦジアステレオマー混合物（例えば、重量比１：１）である。
【０１０３】
「アルファグルタミル基」、「アルファグルタミン酸」、および「アルファ結合」という用語は、これらがグルタミル基の結合に関する場合、アルファカルボキシル基結合を含むグルタミル基を意味する。いくつかの実施形態では、アルファ結合は、１個のグルタミル基のアルファカルボキシル基と第２のグルタミル基との間のアミド結合である。アルファ結合は、グルタミル基とテトラヒドロ葉酸中のグルタミル基との間の結合、またはグルタミル基と、テトラヒドロ葉酸中には存在しない第２のグルタミル基、例えばテトラヒドロ葉酸と結合したポリグルタミン酸鎖内のグルタミル基などとの間の結合であり得る。いくつかの実施形態では、提供されるポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸の「アルファグルタミル基」は、アルファカルボキシル基結合およびガンマカルボキシル基結合の両方を有する。いくつかの実施形態では、アルファグルタミル基はＬ型である。いくつかの実施形態では、アルファグルタミル基はＤ型である。いくつかの実施形態では、グルタミル基はＬ型である。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸中の１個または複数個のグルタミル基はＬ型であり、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸中の１個または複数個のグルタミル基はＤ型である。
【０１０４】
「ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸」、「α−ポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸」、「αＰＴＨＦ」、「ポリグルタミン酸化アルファ−テトラヒドロ葉酸」、「ポリグルタミン酸化アルファＴＨＦ」、「αＴＨＦ−ＰＧ」という用語およびその反復は、本明細書では、アルファカルボキシル基結合を有するグルタミル基を少なくとも１個含む、テトラヒドロ葉酸組成物（例えば、ＴＨＦ−ＰＧｎ、式中、ｎ≧１のαグルタミル基）を意味するのに互換的に使用される。本明細書でαＰＴＨＦ（αＴＨＦ−ＰＧ）中のグルタミル基の数に言及する場合、それにはテトラヒドロ葉酸のグルタミル基を考慮に入れる。例えば、ＴＨＦのグルタミル基に加えてグルタミル基を５個含み、そのグルタミル基のうち少なくとも１個がアルファカルボキシル結合を有するαＴＨＦ−ＰＧ組成物は、本明細書では、アルファヘキサグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸、ヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸、またはアルファテトラヒドロ葉酸ヘキサグルタミン酸と呼び得る。
【０１０５】
「ガンマグルタミル基」、「ガンマグルタミン酸」、および「ガンマ結合」という用語は、それらがグルタミル基の結合と関係がある場合、ガンマカルボキシル基結合を含むグルタミル基を意味する。いくつかの実施形態では、ガンマ結合とは、あるグルタミル基のガンマカルボキシル基と第二のグルタミル基との間のアミド結合のことである。ガンマ結合は、グルタミル基とテトラヒドロ葉酸のグルタミル基との間、テトラヒドロ葉酸中に存在するグルタミル基と第二のグルタミル基、例えばテトラヒドロ葉酸と結合しているポリグルタミン酸鎖内のグルタミル基などとの間のものであり得る。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸中の１個または複数個のガンマ結合グルタミル基は、Ｌ型である。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸中の１個または複数個のガンマ結合グルタミル基は、Ｄ型である。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸中の１個または複数個のガンマ結合グルタミル基はＬ型であり、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸中の１個または複数個のガンマ結合グルタミル基はＤ型である。
【０１０６】
本明細書で使用される場合、「単離された」という用語は、天然にはみられない形態の組成物を意味する。単離ポリグルタミン酸化アルファ組成物は、それらが天然にみられる形態ではなくなる程度に精製されたものを含む。いくつかの実施形態では、単離されているポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸は、実質的に純粋である。単離組成物は、天然ではそれと付随している物質、例えば、自然界に、または組成物を調製する環境（例えば、細胞培養物）中にみられる可能性のある、タンパク質および核酸などの他の細胞成分などを含まないか、実質的に含まない。ポリグルタミン酸化アルファ組成物は、希釈剤またはアジュバントとともに製剤化され、さらには、実用的な目的のために単離され得るものであり、例えば、診断または治療法に使用する場合は通常、ポリグルタミン酸化アルファ組成物を薬学的に許容可能な担体または希釈剤と混合する。いくつかの実施形態では、単離ポリグルタミン酸化アルファ組成物（例えば、アルファポリグルタミン酸およびアルファポリグルタミン酸を含むリポソームなどの送達媒体）は、１％未満または０．１％未満の望ましくないＤＮＡまたはタンパク質含有物を含む。いくつかの実施形態では、アルファポリグルタミン酸組成物（例えば、アルファポリグルタミン酸およびアルファポリグルタミン酸を含むリポソームなどの送達媒体）は「単離されている」。
【０１０７】
本明細書で使用される場合、「ターゲティング部分」という用語は、選択した標的、例えば、細胞、細胞型、組織、臓器、身体の領域、または区画、例えば、細胞、組織もしくは臓器の区画に対して親和性を増強する分子を意味する。ターゲティング部分は、多種多様な実体を含み得る。ターゲティング部分には、天然の分子、または組換えもしくは合成分子が含まれる。いくつかの実施形態では、ターゲティング部分は、抗体、抗原結合抗体フラグメント、二重特異性抗体またはその他の抗体ベースの分子もしくは化合物である。いくつかの実施形態では、ターゲティング部分は、アプタマー、アビマー、受容体結合リガンド、核酸、ビオチン−アビジン結合対、ペプチド、タンパク質、炭水化物、脂質、ビタミン、毒素、微生物の成分、ホルモン、受容体リガンドまたはこれらの任意の誘導体である。その他のターゲティング部分は当技術分野で公知であり、本開示に包含される。
【０１０８】
「特異的親和性」、「特異的に結合する」、および「増強された親和性」という用語は、抗体または抗原結合抗体フラグメントなどのターゲティング部分が、エピトープ、タンパク質、または標的分子に対して、標的エピトープを含む抗原と無関係なタンパク質を含む別の物質に対する場合よりも高頻度に、急速に、長期間、高い親和性で、またはこれらのいくつかの組み合わせで、エピトープ、タンパク質、または標的分子に対して反応または結合することを意味する。異なる種中の相同タンパク質間の配列同一性のため、特定の親和性は、いくつかの実施形態では、２つ以上の種中のタンパク質または標的分子上のエピトープを認識する結合物質を含む。同様に、異なるタンパク質のポリペプチド配列の特定の領域内の相同性のため、「特異的親和性」または「特異的結合」という用語は、２つ以上のタンパク質および／または標的分子上に存在するエピトープを認識する結合物質を含み得る。特定の実施形態では、第１の標的と特異的に結合するターゲティング部分は、第２の標的と特異的に結合してもしなくてもよいと理解される。したがって、「特異的親和性」は、排他的な結合、例えば、単一標的上のエピトープに対する結合を（含み得るが）必ずしも必要とするとは限らない。したがって、ターゲティング部分は、特定の実施形態では、２つ以上の標的上に存在するエピトープと特異的に結合し得る。特定の実施形態では、複数標的に、複数の標的上に存在するエピトープと特異的に結合する同じターゲティング部分が結合し得る。
【０１０９】
「エピトープ」という用語は、抗体などのターゲティング部分（すなわち、結合部分）によって認識され、特異的に結合され得る抗原の一部分を意味する。抗原がポリペプチドである場合、エピトープは、タンパク質の３次フォールディングによって並置された、連続するアミノ酸および不連続なアミノ酸の両方から形成され得る。連続するアミノ酸から形成されるエピトープは通常、タンパク質が変性しても保持されるが、３次フォールディングによって形成されるエピトープは通常、タンパク質が変性すると失われる。エピトープは通常、特有の空間的高次構造中に、少なくとも３個のアミノ酸、より一般的には少なくとも５個または８〜１０個のアミノ酸を含む。
【０１１０】
当該技術分野で公知の「標的に対する結合親和性」、「標的に対する結合」、「増強された親和性」などの表現、およびこれに類似した表現は、親和定数、例えば、所与の抗原濃度で結合および解離するターゲティング部分の量を決定することにより直接測定され得る、ターゲティング部分の特性を意味する。特に限定されないが、競合分析、平衡分析、およびマイクロ熱量分析、ならびに表面プラズモン共鳴相互作用に基づくリアルタイム相互作用分析（例えば、Ｂｉａｃｏｒｅ（登録商標）装置を用いるもの）などの別の方法を用いて、分子間相互作用を特徴付けることができる。これらの方法は、当業者に周知であり、例えば、Ｎｅｒｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｉｂｔｅｃｈ  １４：４６５−４７０（１９９６）、およびＪａｎｓｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２：８１８９−８１９７（１９９７）に記載されている。
【０１１１】
「送達媒体」という用語は通常、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸の細胞中への侵入を補助する、促進する、または容易にする役割を果たす、任意の組成物を意味する。このような送達媒体は当技術分野で公知であり、特に限定されないが、リポソーム、リポスフェア、ポリマー（例えば、ポリマー複合体）、ペプチド、抗体などのタンパク質（例えば、抗体薬物複合体（ＡＤＣ）などの免疫複合体、ならびに抗原結合抗体フラグメントおよびその誘導体）、細胞成分、環状オリゴ糖（例えば、シクロデキストリン）、ミセル、微粒子（例えば、マイクロスフェア）、ナノ粒子（例えば、脂質ナノ粒子、生分解性ナノ粒子、およびコアシェルナノ粒子）、ヒドロゲル、リポタンパク質粒子、ウイルス配列、ウイルス物質、または脂質もしくはリポソーム製剤、およびこれらの組み合わせがこれに含まれる。送達媒体は、ターゲティング部分と直接的または間接的に結合できる。いくつかの実施例では、ターゲティング部分は、高分子、タンパク質、ペプチド、モノクローナル抗体または脂肪酸脂質から選択される。
【０１１２】
「対象」は、ヒト、または特に限定されないが、イヌ、ネコ、ウマ、ヤギおよび霊長類、例えば、サルを含めた脊椎哺乳動物を意味する。したがって、本発明は、非ヒト対象の疾患または病態を治療するのにも使用できる。例えば、癌は、伴侶動物（例えば、ネコおよびイヌ）の死亡の主要な原因の１つである。本発明のいくつかの実施形態では、対象はヒトである。本開示では、「対象」および「患者」という用語は互換的に使用され、同じ意味を有する。一般に、最大投与量、すなわち、健全な医学的判断に従った最大安全投与量を使用するのが好ましい。
【０１１３】
本明細書で使用される「有効量」は、医学的に望ましい結果を得るのに十分な薬剤投与量を意味する。有効量は、所望の転帰、治療または予防する具体的病態、治療する対象の年齢および健康状態、病態の重症度、治療期間、同時または併用療法（もしあれば）の性質、具体的投与経路、および医療関係者の知識と専門的見解の範囲内にある類似の因子によって異なり得る。「有効量」は、示された目的と関連させて実験的に、ルーチンの方法で決定できる。癌の場合、薬剤の有効量は、癌細胞の数を減少させ；腫瘍の大きさを減少させ；癌細胞の周辺器官への浸潤を阻害し（すなわち、ある程度に遅くし、好ましくは止める）；腫瘍の転移を阻害し（すなわち、ある程度減速させ、好ましくは停止させ）；腫瘍の成長をある程度阻害し；かつ／または障害に関連する症状のうち１つもしくは複数のものをある程度緩和し得るものである。薬物が既存の癌細胞の増殖を防止し、かつ／または癌細胞を死滅させ得る限り、それは細胞増殖抑制性および／または細胞傷害性であり得る。癌治療では、例えば、生存期間、無進行生存（ＰＦＳ）期間、応答率（ＲＲ）、反応期間、および／または生活の質を評価することによって、ｉｎ  ｖｉｖｏ有効性を測定できる。
【０１１４】
「過剰増殖性障害」、「増殖性疾患」、および「増殖性障害」という用語は、本明細書では、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ、ｉｎ  ｖｉｖｏを問わず、腫瘍性または過形成性増殖などの望ましくない過剰のまたは異常な細胞の望ましくないまたは無制御の細胞増殖に関連して互換的に使用される。いくつかの実施形態では、増殖性疾患は、癌、腫瘍、および／または腫瘍転移の位置に関係なく、癌もしくは腫瘍疾患（良性または癌性を含む）および／または任意の腫瘍転移である。いくつかの実施形態では、増殖性疾患は、良性または悪性の腫瘍である。いくつかの実施形態では、増殖性疾患は、非癌性疾患である。いくつかの実施形態では、増殖性疾患は、過剰増殖病態、例えば過形成、線維症（特に、肺性線維症のほか、腎線維症などの他の型の線維症）、血管新生、乾癬、アテローム性動脈硬化症、および血管形成後の狭窄または再狭窄などの血管の平滑筋増殖などである。
【０１１５】
「癌」、「腫瘍」、または「悪性腫瘍」は、同義の用語として使用され、細胞の制御不能で異常な増殖、罹患細胞が局所的に、または血流およびリンパ系を介して身体の他の部分に拡散する（転移する）能力、ならびに／あるいは細胞型または疾患に関連することがわかっているいずれかの特徴的構造および／または分子的特徴を特徴とする、多数の細胞型あるいは疾患のいずれかを意味する。本明細書で使用される場合、「腫瘍」は、悪性または良性に関係なく、全ての新生細胞成長および増殖、ならびに全ての前癌および癌細胞および組織を意味する。「癌性腫瘍」、または「悪性細胞」は、特異的構造特性を有し、分化を欠き、浸潤および転移できる細胞と理解される。本明細書に提供されるαＰＴＨＦ組成物を用いて治療できる癌には、特に限定されないが、例えば、肺癌、膵臓癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、頭頸部癌、胃癌、胃腸癌、結腸直腸癌、食道癌、子宮頸癌、肝臓癌、腎臓癌、胆管癌、胆嚢癌、膀胱癌、肉腫（例えば、骨肉腫）、脳癌、中枢神経系癌、および黒色腫などを含む非血液系腫瘍；および、例えば、白血病、リンパ腫およびその他のＢ細胞悪性腫瘍、骨髄腫およびその他の形質細胞異形成症または悪液質などの血液系腫瘍が挙げられる。いくつかの実施形態では、癌は、結腸直腸癌、乳癌、胃癌（例えば、胃癌）、膵臓癌、肝臓癌、肺癌（例えば、非小細胞肺癌および／または腺癌）、頭頸部癌、卵巣癌、胆嚢癌、および基底細胞癌からなる群より選択される。
【０１１６】
αＰＴＨＦ組成物を用いて治療され得る他の型の癌および腫瘍は、本明細書で記載されているもの、または当該技術分野で公知のものである。「癌」、「癌性」、「細胞増殖性障害」、「増殖性障害」、および「腫瘍」という用語は、本明細書で言及される場合、相互に排他的なものではない。
【０１１７】
「治療すること」、「治療」、または「治療する」などの用語は、（ａ）診断された病態または障害の症状を治癒させる、抑制する、症状を軽減する、および／または進行を停止させる治療手段、ならびに（ｂ）標的とする疾患または病態の発現を防止する、および／または遅らせる予防または防止手段の両方を意味する。したがって、治療を必要とする対象には、既に癌、障害または疾患を有する対象、癌または病態を有するリスクのある対象、および感染または病態を予防するべき対象が含まれる。対象は、よく知られた医学的技術および診断技術を用いて、癌、感染症、免疫系障害、過剰増殖性疾患、または本明細書で言及される別の疾患もしくは障害「を有するリスクがある」ことが確認されている。特定の実施形態では、対象に、例えば、疾患または病態（例えば、癌、炎症、および関節リウマチ）に関連する症状の全面的、部分的、または一時的寛解または消失がみられる場合、対象は、本明細書に提供される方法によって良好に「治療された」ことになる。特定の実施形態では、「治療すること（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」または「治療（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」または「治療する（ｔｒｅａｔ）」という用語は、必ずしも患者によって識別可能であるとは限らない、増殖性障害の少なくとも１つの測定可能な物理的パラメーター、例えば腫瘍の成長などの改善を意味する。他の実施形態では、「治療すること（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」または「治療（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」または「治療する（ｔｒｅａｔ）」という用語は、例えば識別可能な症状の安定化によって物理的に、例えば、物理的パラメーターの安定化により生理学的に、またはその両方によって、増殖性障害の進行を抑制することを意味する。他の実施形態では、「治療すること（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」または「治療（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」または「治療する（ｔｒｅａｔ）」という用語は、腫瘍サイズ、腫瘍細胞の増殖もしくは生存、または癌細胞数の減少または安定化を意味する。治療は、αＰＴＨＦ組成物を単独で、または追加の治療剤と組み合わせて用いるものであり得る。
【０１１８】
「対象」、「患者」、および「動物」は、互換的に使用され、ヒト患者および非ヒト霊長類などの哺乳動物、ならびにウサギ、ラット、マウスなどの実験動物、ならびにその他の動物を意味する。動物には、あらゆる脊椎動物、例えば、哺乳動物、ならびにニワトリ、両生類、および爬虫類など非哺乳動物が含まれる。本明細書で使用される「哺乳動物」は、特に限定されないが、ヒトおよび非ヒト霊長動物、例えば、チンパンジーおよびその他の類人猿ならびにサル種；ウシ、ヒツジ、ブタ、ヤギ、ならびにウマなどの家畜動物；イヌならびにネコなどの飼育哺乳動物；マウス、ラット、モルモットなどの齧歯動物などの実験動物、ならびに当該技術分野で公知のその他の哺乳綱のメンバーを含めた哺乳綱の任意のメンバーを意味する。特定の実施形態では、対象はヒトである。
【０１１９】
「増殖性障害の治療」は、本明細書では、増殖性障害の対象の腫瘍サイズの維持または縮小、（部分的または全面的な）腫瘍退縮の誘導、腫瘍成長の阻害、および／または寿命の延長を包含するのに使用される。一実施形態では、増殖性障害は固形腫瘍である。このような腫瘍には、例えば、肺癌、膵臓癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、頭頸部癌、胃癌、胃腸癌、結腸直腸癌、食道癌、子宮頸癌、肝臓癌、腎臓癌、胆管癌、胆嚢癌、膀胱癌、肉腫（例えば、骨肉腫）、脳癌、中枢神経系癌、および黒色腫が挙げられる。一実施形態では、増殖性障害は血液系腫瘍である。このような血液系腫瘍には、例えば、白血病、リンパ腫およびその他のＢ細胞悪性腫瘍、骨髄腫、ならびに他の形質細胞異形成症または悪液質が挙げられる。
【０１２０】
本明細書で使用される「自己免疫疾患」という用語は、自己免疫反応によって生じる障害と定義される。自己免疫疾患は、自己抗原に対する不適切で過剰な反応の結果である。自己免疫疾患の例には、特に限定されないが、アジソン病、円形脱毛症、強直性脊椎炎、自己免疫性肝炎、自己免疫性耳下腺炎、クローン病、糖尿病（Ｉ型）、栄養障害型表皮水疱症、精巣上体炎、糸球体腎炎、グレーブス病、ギラン・バレー症候群、橋本病、溶血性貧血、全身性エリテマトーデス、多発性硬化症、重症筋無力症、尋常性天疱瘡、乾癬、リウマチ熱、炎症、および関節リウマチ、サルコイドーシス、強皮症、シェーグレン症候群、脊椎関節症、甲状腺炎、血管炎、白斑症、粘液水腫、悪性貧血、および潰瘍性大腸炎が特に挙げられる。
【０１２１】
「治療剤」という用語は、癌細胞または免疫細胞などの過剰増殖細胞と相互作用し、それにより、細胞の増殖性状態を抑え、かつ／または細胞を死滅させることができる、薬剤またはその誘導体を意味するのに使用される。治療剤の例には、特に限定されないが、化学療法剤、細胞傷害薬、白金系薬剤（例えば、シスプラチン、カルボプラチン、オキサリプラチン）、タキサン（例えば、タキソール（登録商標））、エトポシド、アルキル化剤（例えば、シクロホスファミド、イホスファミド）、代謝拮抗薬（例えば、テトラヒドロ葉酸（ＴＨＦ））、５−フルオロウラシル、ゲムシタビン、またはその誘導体）、抗腫瘍抗生物質（例えば、マイトマイシン、ドキソルビシン）、植物由来抗腫瘍薬剤（例えば、ビンクリスチン、ビンデシン、タキソール（登録商標））が挙げられる。このような薬剤には、特に限定されないが、抗癌剤トリメトレキサート、テモゾロミド、Ｓ−（４−ニトロベンジル）−６−チオイノシン（ＮＢＭＰＲ）、６−ベンジグアニジン（６−ＢＧ）、ビス−クロロニトロソ尿素（ＢＣＮＵ）およびカンプトテシン（商標）、またはそれらの任意の治療用誘導体がさらに挙げられる。本開示の方法による使用に適し得る治療剤のさらなる例には、特に限定されないが、抗再狭窄薬、促進性増殖剤または抗増殖剤、抗炎症薬、抗新生物薬、抗有糸分裂性薬、抗血小板作用薬、抗凝固剤、抗フィブリン薬、抗トロンビン薬、細胞増殖抑制性薬、抗生物質およびその他の抗感染薬、抗酵素薬、抗代謝薬、血管新生薬、細胞保護薬、アンギオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤、アンギオテンシンＩＩ受容体拮抗剤および／または心保護薬が挙げられる。「治療剤」はまた、上記薬剤の塩、酸、および遊離塩基型を意味する。
【０１２２】
本明細書で使用される「化学療法剤」という用語は、癌治療法との関連で使用される場合、癌細胞の死をもたらす、または癌細胞の増殖もしくは拡散を阻害する、任意の薬剤を意味する。このような化学療法剤の例には、アルキル化剤、抗生物質、代謝拮抗薬、植物由来薬、およびホルモンが挙げられる。いくつかの実施形態では、本開示のポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸組成物を化学療法剤と併用する。いくつかの実施形態では、化学療法剤は５‐フルオロウラシルである。いくつかの実施形態では、化学療法剤はシスプラチンである。いくつかの実施形態では、化学療法剤はカルボプラチンである。いくつかの実施形態では、化学療法剤はオキサリプラチンである。他の実施形態では、化学療法剤は、ゲムシタビンである。他の実施形態では、化学療法剤は、ドキソルビシンである。特定の実施形態では、化学療法剤は、ピリミジン類似体（例えば、５‐フルオロウラシル（５−ＦＵ）などのフルオロピリミジン）である。
【０１２３】
「代謝拮抗薬」という用語は、本明細書では、代謝物またはそのプロドラッグの利用を阻害する治療剤を意味する。代謝拮抗薬の例には、５−ＦＵ、ならびに５−ＦＵ代謝物および／またはプロドラッグ、例えば５−ＦＵＭＰ、５−ＦＵＤＰ、５−ＦｄＵＭＰ、カペシタビン、テガフール５−フルオロデオキシウリジン一リン酸塩など；ならびにシタラビン、およびネララビンなどのシタラビンプロドラッグ、５−アザシチジン、ゲムシタビン、メルカプトプリン、チオグアニン、アザチオプリン、アデノシン、ペントスタチン、エリトロヒドロキシノニルアデニン、およびクラドリビンが挙げられる。本開示の方法を実施するのに有用な代謝拮抗薬には、プリンまたはピリミジン類似体を含めたヌクレオシド類似体が挙げられる。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸組成物をフルオロピリミジン、５−フルオロウラシル、５−フルオロ−１−（オキソラン−２−イル）ピリミジン−２，４−ジオン、５−フルオロ−２’−デオキシシチジン、シタラビン、ゲムシタビン、トロキサシタビン、デシタビン、アザシチジン、プソイドイソシチジン、ゼブラリン、アンシタビン、ファザラビン、６−アザシチジン、カペシタビン、Ｎ４−オクタデシルシタラビン、エライジン酸シタラビン、フルダラビン、クラドリビン、クロファラビン、ネララビン、フォロデシン、およびペントスタチン、またはその誘導体からなる群より選択される代謝拮抗薬と組み合わせて使用する。１つの例では、ヌクレオシド類似体は、アデノシンデアミナーゼまたはシチジンデアミナーゼであるヌクレオシドデアミナーゼの基質である。いくつかの例では、ヌクレオシド類似体は、フルダラビン、シタラビン、ゲムシタビン、デシタビンおよびアザシチジンまたはそれらの誘導体から選択される。いくつかの例では、ヌクレオシド類似体は、５‐フルオロウラシルのＮ３−アルキル化類似体、１，４−オキサヘテロエパン部分を有する５‐フルオロウラシル誘導体、５‐フルオロウラシルおよびヌクレオシド類似体、シス−およびトランス−５−フルオロ−５，６−ジヒドロ−６−アルコキシウラシル、シクロペンタン５‐フルオロウラシル類似体、Ａ−ＯＴ−フルオロウラシル、Ｎ４−トリメトキシベンゾイル−５’−デオキシ−５−フルオロ−シチジンおよび５’−デオキシ−５−フルオロウリジン、１−ヘキシルカルバモイル−５‐フルオロウラシル、Ｂ−３８３９、ウラシル−１−（２−テトラヒドロフリル）−５‐フルオロウラシル、１−（２’−デオキシ−２’−フルオロ−β−Ｄ−アラビノフラノシル）−５−フルオロウラシル、ドキシフルリジン、５’−デオキシ−５−フルオロウリジン、１−アセチル−３−Ｏ−トルオイル−５‐フルオロウラシル、５‐フルオロウラシル−ｍ−ホルミルベンゼン−スルホナート（特開昭５５０５９１７３号）、Ｎ’−（２−フラニジル）−５‐フルオロウラシル（特開昭５３１４９９８５号）、ならびに１−（２−テトラヒドロフリル）−５‐フルオロウラシル、またはその誘導体から選択される。特定の実施形態では、代謝拮抗薬は、ピリミジン類似体またはピリミジン類似体プロドラッグ（例えば、フルオロピリミジン）である。特定の実施形態では、代謝拮抗���は５−フルオロウラシルである。
【０１２４】
本明細書で使用される「タキサン」とは、微小管の安定性、形成、および／または機能に干渉する、またはそれを崩壊させる抗癌剤のことである。タキサン剤には、パクリタキセルおよびドセタキセル、ならびにその誘導体が挙げられ、誘導体は、微小管に対してそれが由来するタキサンと同じ作用様式で機能する。特定の実施形態では、タキサンは、パクリタキセルもしくはドセタキセル、または薬学的に許容可能なパクリタキセルもしくはドセタキセルの塩、酸もしくは誘導体である。特定の実施形態では、タキサンは、パクリタキセル（タキソール（登録商標））、ドセタキセル（タキソテール（登録商標））、アルブミン結合パクリタキセル（ｎａｂ−パクリタキセル；アブラキサン（登録商標））、ＤＨＡ−パクリタキセル、またはＰＧ−パクリタキセルである。
【０１２５】
「薬学的に許容可能な担体」という用語は、医薬製剤中の有効成分以外で、対象に対し無毒性である成分を意味する。薬学的に許容可能な担体には、特に限定されないが、緩衝剤、担体、賦形剤、安定化剤、希釈剤、または保存剤が挙げられる。薬学的に許容可能な担体には、例えば、ヒトまたはその他の対象への投与に適し、適合性のある１つまたは複数の固体もしくは液体フィラー、希釈剤、または被包物質が挙げられる。
【０１２６】
本開示は一般に、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸（αＰＴＨＦ）組成物、ならびに癌などの過剰増殖疾患、関節リウマチなどの免疫系障害、ならびにＨＩＶおよびマラリアなどの感染症を含めた疾患を治療するための組成物の製造ならびに使用の方法に関する。ガンマポリグルタミン酸化組成物には、治療剤の効果を増強する、化学療法薬（例えば、５−フルオロウラシル）などの１つまたは複数の治療剤との併用療法への、または治療剤に関連する毒性副作用を軽減する「化学防御剤」としての（例えば、メトトレキセートなどの葉酸代謝拮抗薬との併用への）用途もある。
【０１２７】
いくつかの実施形態では、本開示は、以下のものを提供する：
［１］  ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む組成物。
［２］  ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸が、
（ａ）ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）；
（ｂ）ポリグルタミン酸化１０−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−１０−ホルミル−ＴＨＦ）；
（ｃ）ポリグルタミン酸化５，１０−メテニル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦ）；
（ｄ）ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ）；
（ｅ）ポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ）；
（ｆ）ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦ）；および
（ｇ）ポリグルタミン酸化５−ホルムイミノ−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦ）
からなる群より選択される、項目［１］に記載の組成物。
［３］  ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸が、アルファカルボキシル基結合を有するグルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含む、項目［１］または［２］に記載の組成物。
［４］  ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸がテトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸（例えば、［６Ｒ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦ、［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ、および／または［６Ｒ］−１０−ホルミル−ＴＨＦ）である、項目［１］〜［３］のいずれかに記載の組成物。
［５］  ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸がペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸（例えば、［６Ｒ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦ、［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ、および／または［６Ｒ］−１０−ホルミル−ＴＨＦ）である、項目［１］〜［３］のいずれかに記載の組成物。
［６］  ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸がヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸（例えば、［６Ｒ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦ、［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ、および／または［６Ｒ］−１０−ホルミル−ＴＨＦ）である、項目［１］〜［３］のいずれかに記載の組成物。
［７］（ａ）２個以上のグルタミル基がアルファカルボキシル基結合を有する、
（ｂ）テトラヒドロ葉酸のグルタミル基以外のグルタミル基がそれぞれアルファカルボキシル基結合を有する；または
（ｃ）２個以上のグルタミル基がガンマカルボキシル基結合を有する、
項目［１］〜［６］のいずれかに記載の組成物。
［８］（ａ）Ｃ末端グルタミル基およびテトラヒドロ葉酸のグルタミル基以外のグルタミル基がそれぞれアルファカルボキシル基結合を有する；または
（ｂ）Ｃ末端グルタミル基以外のグルタミル基がそれぞれアルファカルボキシル基結合を有する、
項目［１］〜［６］のいずれかに記載の組成物。
［９］  少なくとも１個のグルタミル基が、アルファカルボキシル基結合およびガンマカルボキシル基結合の両方を有する、項目［１］〜［８］のいずれかに記載の組成物；
［１０］（ａ）アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸のグルタミル基のうち少なくとも２個がＬ型である、
（ｂ）アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸のグルタミル基がそれぞれＬ型である、
（ｃ）アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸のグルタミル基のうち少なくとも１個がＤ型である、
（ｄ）テトラヒドロ葉酸のグルタミル基以外のアルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸のグルタミル基がそれぞれＤ型である、または
（ｅ）アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸のグルタミル基のうち少なくとも２個がＬ型であり、グルタミル基のうち少なくとも１個がＤ型である、
項目［１］〜［９］のいずれかに記載の組成物；
［１１］  ポリグルタミン酸が直鎖である、項目［１］〜［１０］のいずれかに記載の組成物；
［１２］  ポリグルタミン酸が分岐鎖である、項目［１］〜［１０］のいずれかに記載の組成物；
［１３］  項目［１］〜［１２］のいずれかに記載のアルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸を含む、リポソーム組成物（Ｌｐ−αＰＴＨＦ）；
［１４］  アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸が、アルファカルボキシル基結合を有するＬ型のグルタミル基を含む、項目［１３］に記載のＬαＰＰ組成物；
［１５］  アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸のグルタミル基がそれぞれＬ型である、項目［１３］または［１４］に記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［１６］  アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸のグルタミル基のうち少なくとも１個がＤ型である、項目［１３］または［１４］に記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［１７］  リポソームが、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含むアルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸を含む、項目［１３］〜［１６］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［１８］  アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸のグルタミル基のうち少なくとも１個がガンマカルボキシル基結合を有する、項目［１３］〜［１７］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［１９］  少なくとも１個のグルタミル基が、アルファカルボキシル基結合およびガンマカルボキシル基結合の両方を有する、項目［１３］〜［１８］のいずれかに記載の組成物；
［２０］  アルファカルボキシル基結合およびガンマカルボキシル基結合の両方を有するグルタミル基を２個、３個、４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含む、項目［１３］〜［１９］のいずれかに記載の組成物；
［２１］  リポソームが、アルファテトラグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸、アルファペンタグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸、またはアルファヘキサグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸を含むアルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸を含む、項目［１３］〜［２０］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［２２］  ポリグルタミン酸が直鎖または分岐鎖である、項目［１３］〜［２１］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［２３］  リポソームがペグ化されている（ＰαＬｐ−αＰＴＨＦ）、項目［１３］〜［２２］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［２４］  リポソームが少なくとも１重量％のアルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸を含む、またはＬｐ−αＰＴＨＦを調製する工程で、アルファポリグルタミン酸化ＴＨＦの出発材料の少なくとも１％がＬｐ−αＰＴＨＦ中に被包（封入）される、項目［１３］〜［２３］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［２５］  リポソームが、２０ｎｍ〜５００ｎｍまたは２０ｎｍ〜２００ｎｍの範囲の直径を有する、項目［１３］〜［２４］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［２６］  ポソームが、８０ｎｍ〜１２０ｎｍの範囲の直径を有する、項目［１３］〜［２５］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［２７］  リポソームが、リポソーム成分から形成される、項目［１３］〜［２６］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［２８］  リポソーム成分が、少なくとも１つのアニオン性脂質および中性脂質を含む、項目［２７］に記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［２９］  リポソーム成分が、ＤＳＰＥ；ＤＳＰＥ−ＰＥＧ；ＤＳＰＥ−ＰＥＧ−マレイミド；ＨＳＰＣ；ＨＳＰＣ−ＰＥＧ；コレステロール；コレステロール−ＰＥＧ；およびコレステロール−マレイミドからなる群より選択される少なくとも１つのものを含む、項目［２７］または［２８］に記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［３０］  リポソーム成分が、ＤＳＰＥ；ＤＳＰＥ−ＰＥＧ；ＤＳＰＥ−ＰＥＧ−ＦＩＴＣ；ＤＳＰＥ−ＰＥＧ−マレイミド；コレステロール；およびＨＳＰＣからなる群より選択される少なくとも１つのものを含む、項目［２７］〜［２９］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［３１］  １つまたは複数のリポソーム成分が、立体安定剤をさらに含む、項目［２７］〜［３０］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［３２］  立体安定剤が、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）；ポリ−Ｌ−リシン（ＰＬＬ）；モノシアロガングリオシド（ＧＭ１）；ポリ（ビニルピロリドン）（ＰＶＰ）；ポリ（アクリルアミド）（ＰＡＡ）；ポリ（２−メチル−２−オキサゾリン）；ポリ（２−エチル−２−オキサゾリン）；ホスファチジルポリグリセロール；ポリ［Ｎ−（２−ヒドロキシプロピル）メタクリルアミド］；両親媒性ポリ−Ｎ−ビニルピロリドン；Ｌ−アミノ酸ベースポリマー；オリゴグリセリン、ポリエチレングリコールおよびポリプロピレンオキシド含有コポリマー、ポロキサマー１８８、およびポリビニルアルコールからなる群より選択される少なくとも１つのものである、項目［３１］に記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［３３］  立体安定剤がＰＥＧであり、ＰＥＧが２００〜５０００ダルトンの数平均分子量（Ｍｎ）を有する、項目［３２］に記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［３４］  リポソームがアニオン性または中性である、項目［１３］〜［３３］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［３５］  リポソームがゼロ以下のゼータ電位を有する、項目［１３］〜［３３］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［３６］  リポソームが０〜−１５０ｍＶのゼータ電位を有する、項目［１３］〜［３３］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［３７］  リポソームが−３０〜−５０ｍＶのゼータ電位を有する、項目［１３］〜［３３］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［３８］  リポソームがカチオン性である、項目［１３］〜［３３］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［３９］  リポソームが、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸と、水性の薬学的に許容可能な担体とを含む内部空間を有する、項目［１３］〜［３８］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［４０］  薬学的に許容可能な担体が、デキストロース、マンニトール、グリセロール、塩化カリウム、塩化ナトリウムなどの等張化剤を１％超の濃度で含む、項目［３９］に記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［４１］  水性の薬学的に許容可能な担体がトレハロースである、項目［３９］に記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［４２］  薬学的に許容可能な担体が、５重量％〜２０重量％のトレハロースを含む、項目［４１］に記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［４３］  薬学的に許容可能な担体が、１重量％〜１５重量％のデキストロースを含む、項目［３９］〜［４２］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［４４］  リポソームの内部空間が、ＨＥＰＥＳ緩衝液中に懸濁させた５％のデキストロースを含む、項目［３９］〜［４３］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［４５］  薬学的に許容可能な担体が、１〜２００ｍＭの濃度および２〜８のｐＨのＨＥＰＥＳ緩衝食塩水（ＨＢＳ）または類似物などの緩衝液を含む、項目［３９］〜［４４］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［４６］  薬学的に許容可能な担体が、合計濃度５０ｍＭ〜５００ｍＭの酢酸ナトリウムと酢酸カルシウムとを含む、項目［３９］〜［４５］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［４７］  リポソームの内部空間が、５〜８のｐＨもしくは６〜７のｐＨ、またはその間の任意の範囲のｐＨを有する、項目［１３］〜［４６］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［４８］  リポソームが、５００，０００分子未満または２００，０００分子未満のアルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸を含む、項目［１３］〜［４７］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［４９］  リポソームが、１０〜１００，０００分子またはその間の任意の範囲のアルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸を含む、項目［１３］〜［４８］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［５０］  ターゲティング部分をさらに含み、ターゲティング部分が、目的の標的細胞上の表面抗原に対して特異的親和性を有する、項目［１３］〜［４９］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［５１］  ターゲティング部分が、リポソームのＰＥＧおよび外側のうちの一方または両方と結合しており、任意選択で、ターゲティング部分が、リポソームのＰＥＧおよび外側のうちの一方または両方と共有結合により結合している、項目［５０］に記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［５２］  ターゲティング部分がポリペプチドである、項目［５０］または［５１］に記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［５３］  ターゲティング部分が抗体または抗体の抗原結合フラグメントである、項目［５０］〜［５２］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［５４］  ターゲティング部分が、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析を用いる測定で０．５×１０−１０〜１０×１０−６の範囲の平衡解離定数（Ｋｄ）で表面抗原と結合する、項目［５０］〜［５３］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［５５］  ターゲティング部分が、葉酸受容体アルファ（ＦＲ−α）、葉酸受容体ベータ（ＦＲ−β）、および葉酸受容体デルタ（ＦＲ−δ）からなる群より選択される１つまたは複数の葉酸受容体と特異的に結合する、項目［５０］〜［５５］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［５６］  ターゲティング部分が、抗体、ヒト化抗体、抗体の抗原結合フラグメント、単鎖抗体、単一ドメイン抗体、二重特異的抗体、合成抗体、ペグ化抗体、および多量体抗体からなる群より選択される１つまたは複数のものを含む、項目［５０］〜［５６］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［５７］  各ペグ化リポソームが、ターゲティング部分を１〜１０００個または３０〜２００個含む、項目［５０］〜［５６］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［５８］  免疫刺激剤、検出可能マーカー、およびマレイミドのうちの１つまたは複数のものをさらに含み、免疫刺激剤、検出可能マーカー、またはマレイミドが、リポソームの前記ＰＥＧまたは外側と結合している、項目［３９］〜［５７］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［５９］  免疫刺激剤が、タンパク質免疫刺激剤、核酸免疫刺激剤、化学的免疫刺激剤、ハプテン、およびアジュバントからなる群より選択される少なくとも１つのものである、項目［５８］に記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［６０］  免疫刺激剤が、フルオレセイン、フルオレセインイソチオシアネート（ＦＩＴＣ）、ＤＮＰ、ベータグルカン、ベータ−１，３−グルカン、ベータ−１，６−グルカン；レゾルビン（例えば、Ｄｎ−６ＤＰＡもしくはＤｎ−３ＤＰＡ、などのレゾルビンＤ、レゾルビンＥ、またはＴシリーズレゾルビン）、ならびに酸化型低密度リポタンパク質（例えば、ＯＸＰＡＣ、ＰＧＰＣ）およびエリトラン脂質（例えば、Ｅ５５６４）などのトール様受容体（ＴＬＲ）調節剤からなる群より選択される少なくとも１つのものである、項目［５８］または［５９］に記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［６１］  免疫刺激剤と検出可能なマーカーが同じものである、項目［５８］〜［６０］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［６２］  ハプテンをさらに含む、項目［５８］〜［６１］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［６３］  ハプテンが、フルオレセインまたはベータ−１，６−グルカンのうちの１つまたは複数のものを含む、項目［６２］に記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［６４］内部空間、外側空間、または両方の内部空間にマンニトール；トレハロース；ソルビトール；およびスクロースからなる群より選択される少なくとも１つの凍結保護物質、マンニトール；トレハロース；ソルビトール；およびスクロースからなる群より選択される少なくとも１つの凍結保護物質をさらに含む、［１３］〜［６３］のいずれかによるＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［６５］  項目［１］〜［６４］のいずれかに記載の組成物を含む、標的化組成物；
［６６］  項目［１］〜［４９］のいずれかに記載の組成物を含む、非標的化組成物；
［６７］  カルボプラチンおよび／またはペムブロリズマブをさらに含む、項目［１３］〜［６６］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物；
［６８］  項目［１３］〜［６７］のいずれかに記載のリポソームアルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸組成物を含む、医薬組成物；
［６９］  項目［１］〜［８］のいずれかに記載のアルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸を含む、医薬組成物；
［７０］  疾患の治療に使用する、項目［１］〜［６９］のいずれかに記載の組成物；
［７１］  疾患治療のための薬物の製造への、項目［１］〜［７０］のいずれかに記載の組成物の使用；
［７２］  疾患治療のための、ならびに／あるいは治療剤（１つもしくは複数）の効果を増強する、化学療法薬（例えば、５−フルオロウラシル）などの１つもしくは複数の治療剤との併用療法への、または治療剤（１つもしくは複数）に関連する毒性副作用を軽減する「化学防御剤」としての（例えば、メトトレキセートなどの葉酸代謝拮抗薬との併用への）使用のための薬物の製造への［１］〜［７０］のいずれかの組成物の使用；
［７３］  治療または予防を必要とする対象の疾患を治療または予防する方法であって、対象に［１］〜［６９］のいずれかの組成物を投与することを含む、方法；
［７４］  治療または予防を必要とする対象の疾患を治療または予防する方法であって、対象に［１３］〜［６９］のいずれかに記載のリポソームポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸組成物を投与することを含む、方法；
［７５］  過剰増殖細胞を死滅させる方法であって、過剰増殖細胞と［１］〜［６９］のいずれかに記載の組成物とを接触させることを含む、方法；
［７６］  過剰増殖細胞を死滅させる方法であって、過剰増殖細胞と［１３］〜［６９］のいずれかに記載のリポソームポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸組成物とを接触させることを含む、方法；
［７７］  過剰増殖細胞が、癌細胞、哺乳動物細胞、および／またはヒト細胞である、項目［７５］または［７６］に記載の方法；
［７８］  癌を治療する方法であって、癌を有するか、有するリスクのある対象に、項目［１］〜［６９］のいずれかに記載の組成物を有効量投与することを含む、方法；
［７９］  癌を治療する方法であって、癌を有するか、有するリスクのある対象に、項目［１３］〜［６８］のいずれかに記載のリポソームポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸組成物を有効量投与することを含む、方法；
［８０］  癌を治療または予防し、癌が、例えば、肺癌、膵臓癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、頭頸部癌、胃癌、胃腸癌、結腸直腸癌、食道癌、子宮頸癌、肝臓癌、腎臓癌、胆管癌、胆嚢癌、膀胱癌、肉腫（例えば、骨肉腫）、脳癌、中枢神経系癌、および黒色腫などを含む非血液系腫瘍；ならびに、例えば、白血病、リンパ腫およびその他のＢ細胞悪性腫瘍、骨髄腫およびその他の形質細胞異常増殖症などの血液系腫瘍からなる群より選択される、項目［７８］または［７９］に記載の方法；
［８１］  癌を治療または予防し、癌が、肺癌、乳癌、結腸癌、膵臓癌、胃癌、膀胱癌、頭頸部癌、卵巣癌、および子宮頸癌からなる群より選択されるメンバーである、項目［７８］または［７９］に記載の方法；
［８２］  癌を治療または予防し、癌が、結腸直腸癌、肺癌、乳癌、頭頸部癌、および膵臓癌からなる群より選択されるメンバーである、項目［７８］または［７９］に記載の方法；
［８３］  癌を治療または予防し、癌が、結腸直腸癌、乳癌、卵巣癌、肺癌、頭頸部癌、膵臓癌、胃癌、および中皮腫からなる群より選択される、項目［７８］または［７９］に記載の方法；
［８４］  癌を治療する方法であって、ターゲティング部分が結合する葉酸受容体を表面に発現する癌細胞を有するか、有するリスクのある対象に、項目［５０］〜［６６］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物を有効量投与することを含む、方法；
［８５］  癌治療を受けているか、受けたことのある対象の維持療法であって、癌治療を受けているか、受けたことのある対象に、項目［１］〜［６９］のいずれかに記載の組成物を有効量の投与することを含む、維持療法；
［８６］  癌治療を受けているか、受けたことのある対象の維持療法であって、癌治療を受けているか、受けたことのある対象に、項目［１３］〜［６９］のいずれかに記載のリポソームポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸組成物を有効量投与することを含む、維持療法；
［８７］  免疫系の障害を治療する方法であって、免疫系の障害を有するか、有するリスクのある対象に、項目［１］〜［６９］のいずれかに記載の組成物を有効量投与することを含み、任意選択で、免疫系の障害が、炎症（例えば、急性および慢性）、全身性炎症、関節リウマチ、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、クローン病、皮膚筋炎／多発性筋炎、全身性エリテマトーデス、および高安病、ならびに乾癬から選択される、方法；
［８８］  免疫系の障害を治療する方法であって、免疫系の障害を有するか、有するリスクのある対象に、項目［１３］〜［６９］のいずれかに記載のリポソームポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸組成物を有効量投与することを含み、任意選択で、免疫系の障害が、炎症（例えば、急性および慢性）、全身性炎症、関節リウマチ、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、クローン病、皮膚筋炎／多発性筋炎、全身性エリテマトーデス、および高安病、ならびに乾癬から選択される、方法；
［８９］  以下の治療方法：
（ａ）白血球減少症を有するか、有するリスクのある対象に、項目［１］〜［６９］のいずれかに記載の組成物を有効量投与することを含む、白血球減少症の治療方法；
（ｂ）感染症を有するか、有するリスクのある対象に、項目［１］〜［６９］のいずれかに記載の組成物を有効量投与することを含む、感染症の治療方法；
（ｃ）感染症、心血管疾患、または別の疾患を有するか、有するリスクのある対象に、項目［１］〜［６９］のいずれかに記載の組成物を有効量投与することを含み、疾患が、アテローム性動脈硬化症、心血管疾患（ＣＶＤ）、冠動脈疾患、心筋梗塞、ストローク、代謝症候群、妊娠性絨毛性疾患、および子宮外妊娠から選択されるメンバーである、心血管疾患または代謝疾患の治療方法；
（ｄ）自己免疫疾患を有するか、有するリスクのある対象に、項目［１］〜［６９］のいずれかに記載の組成物を有効量投与することを含む、自己免疫疾患の治療方法；
（ｅ）関節リウマチを有するか、有するリスクのある対象に、項目［１］〜［６９］のいずれかに記載の組成物を有効量投与することを含む、関節リウマチの治療方法；
（ｆ）炎症を有するか、有するリスクのある対象に、項目［１］〜［６９］のいずれかに記載の組成物を有効量投与することを含み、任意選択で、炎症が、急性、慢性、および／または全身性炎症である、炎症状態の治療方法；あるいは
（ｇ）皮膚疾患を有するか、有するリスクのある対象に、項目［１］〜［６９］のいずれかに記載の組成物を有効量投与することを含む、皮膚疾患の治療方法；
［９０］  感染症を有するか、有するリスクのある対象に、項目［１３］〜［６９］のいずれかに記載のリポソームアルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸組成物を有効量投与することを含む、感染症の治療方法；
［９１］  表面に葉酸受容体を発現している腫瘍にポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を送達する方法であって、腫瘍を有する対象に、項目［１］〜［６９］のいずれかに記載のＬｐ−αＰＴＨＦ組成物を、腫瘍に治療有効量のアルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸が送達される量で投与することを含む、方法；
［９２］  項目［１３］〜［６９］のいずれかに記載のリポソームアルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸組成物を含むアルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸組成物を調製する方法であって、溶液中でリポソーム成分とポリグルタミン酸化アルファ葉酸代謝拮抗薬とを含む混合物を形成することと；溶液中で混合物をホモジナイズしてリポソームを形成することと；混合物を処理して、アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸を含むリポソームを形成することとを含む、方法；
［９３］  項目［１３］〜［６９］のいずれかに記載のリポソームアルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸組成物を含むアルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸を調製する方法であって、溶液中でリポソーム成分とアルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸とを含む混合物を形成することと；混合物を処理して、アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸を含むリポソームを形成することとを含む、方法、
［９４］  混合物を処理することが、溶液中で混合物をホモジナイズしてリポソームを形成することを含む、項目［９３］に記載の方法、
［９５］  項目［５１］〜［７０］のいずれかに記載の組成物を調製する方法であって、溶液中でリポソーム成分とアルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸とを含む混合物を形成することと；溶液中で混合物をホモジナイズしてリポソームを形成することと；混合物を処理して、アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸が封入および／または被包されるリポソームを形成することと；リポソームの表面にターゲティング部分を付与することとを含み、ターゲティング部分が、葉酸受容体アルファ（ＦＲ−α）、葉酸受容体ベータ（ＦＲ−β）および葉酸受容体デルタ（ＦＲ−δ）のうちの少なくとも１つに対して特異的親和性を有する、方法。
［９６］  項目［５１］〜［７０］のいずれかに記載の組成物を調製する方法であって、溶液中でリポソーム成分とアルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸とを含む混合物を形成することと；混合物を処理して、アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸が封入および／または被包されるリポソームを形成することと；リポソームの表面にターゲティング部分を付与することとを含み、ターゲティング部分が、葉酸受容体アルファ（ＦＲ−α）、葉酸受容体ベータ（ＦＲ−β）および葉酸受容体デルタ（ＦＲ−δ）のうちの少なくとも１つに対して特異的親和性を有する、方法。
［９７］  処理する段階が、溶液中で混合物をホモジナイズしてリポソームを形成することを含む、項目［９６］に記載の方法、
［９８］  処理する段階が、薄膜水和、押し出し、インライン混合、エタノール注入技術、凍結融解法、逆相蒸発法、動的高圧マイクロ流動化、マイクロ流体混合、二重エマルジョン、凍結乾燥二重エマルジョン、３Ｄプリンティング、膜コンタクター法、および撹拌のうちの１つまたは複数の段階を含む、項目［９３］に記載の方法；ならびに／あるいは
［９９］  前記処理する段階が、押し出し、高圧マイクロ流動化、および／または超音波処理のうちの１つまたは複数の段階によりリポソームのサイズを変更する１つまたは複数の段階を含む、項目［９６］〜［９８］のいずれかに記載の方法；ならびに／あるいは
［１００］  アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸の出発材料の少なくとも１％が、リポソーム中に被包または封入される、項目［９２］〜［９９］のいずれかに記載の方法。
【０１２８】
ＩＩ．ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸（αＰＴＨＦ）
本開示は、全般的には、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸（αＰＴＨＦ）組成物に関する。αＰＴＨＦ組成物は、アルファカルボキシル基結合を有するグルタミル基を少なくとも１個有する。これらの組成物は、Ｌ−ガンマポリグルタミン酸化型のテトラヒドロ葉酸（酵素ホリルポリ−ガンマ−によって産生される）とは構造的に異なるものである。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦ組成物は、グルタミル基（テトラヒドロ葉酸中のグルタミル基を含む）を２〜２０個、２〜１５個、２〜１０個、２〜５個、２〜６個、または６個以上含む。いくつかの実施形態では、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基以外のαＰＴＨＦ中のグルタミル基はそれぞれ、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、Ｃ末端グルタミル基以外のαＰＴＨＦ中のグルタミル基およびテトラヒドロ葉酸中のグルタミル基はそれぞれ、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、Ｃ末端グルタミル基以外のαＰＴＨＦ中のグルタミル基はそれぞれ、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦ中のグルタミル基のうち２個以上がガンマ結合を有する。いくつかの実施形態では、アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸の少なくとも１個のグルタミル基は、アルファカルボキシル基結合およびガンマカルボキシル基結合の両方を有する。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦ中のグルタミル基はそれぞれＬ型である。いくつかの実施形態では、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基以外のαＰＴＨＦ中のグルタミル基はＤ型である。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦは、２個以上のＬ型のグルタミル基と、１個または複数個のＤ型のグルタミル基とを含む。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は直鎖である（分岐鎖ではない）。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦのポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【０１２９】
いくつかの実施形態では、アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸は、ジグルタミン酸化されている。つまり、アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸は、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基に加えて追加のグルタミル基を１個含み（αＴＨＦ−ＰＧ１）、その追加のグルタミル基は、アルファ結合を介してテトラヒドロ葉酸中のグルタミル基と結合している。いくつかの実施形態では、アルファジグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸のグルタミル基はそれぞれＬ型である。他の実施形態では、アルファジグルタミン酸化ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基を含む。
【０１３０】
いくつかの実施形態では、アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸はトリグルタミン酸化されている。すなわち、アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸は、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基に加えて、２個の追加のグルタミル基を含む（αＴＨＦ−ＰＧ２）。いくつかの実施形態では、２個のそれぞれのグルタミル基は、アルファ結合を有する。他の実施形態では、２個の追加のグルタミル基のうちの１個は、アルファ結合を有し、他方のグルタミル基はガンマ結合を有する。いくつかの実施形態では、２個の追加のグルタミル基のうちの１個は、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、２個の追加のグルタミル基のうちの１個は、ガンマ結合を有する。いくつかの実施形態では、３個のグルタミル基のうちの２個は、アルファ結合を有する。他の実施形態では、３個のグルタミル基のうちの１個は、アルファ結合を有し、別のグルタミル基はガンマ結合を有する。いくつかの実施形態では、１個のグルタミル基は、アルファ結合およびガンマ結合の両方を有する。いくつかの実施形態では、アルファトリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸グルタミル基はそれぞれＬ型である。他の実施形態では、アルファトリグルタミン酸化ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基を含む。さらなる実施形態では、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基以外のアルファトリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸のグルタミル基はそれぞれＤ型である。さらなる実施形態では、トリグルタミン酸化ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを含む。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸鎖は直鎖である。他の実施形態では、ポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【０１３１】
いくつかの実施形態では、アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸はテトラグルタミン酸化されており、したがって、テトラヒドロ葉酸中のグルタミル基に加えて、３個の追加のグルタミル基を含む（αＴＨＦ−ＰＧ３）。いくつかの実施形態では、３個のそれぞれのグルタミル基は、アルファ結合を有する。他の実施形態では、３個の追加のグルタミル基のうちの１または２個は、アルファ結合を有し、残りの２または１個のグルタミル基は、それぞれ、ガンマ結合を有する。いくつかの実施形態では、３個の追加のグルタミル基のうちの２個のグルタミル基は、アルファ結合を有する。他の実施形態では、３個のグルタミル基のうちの１個は、アルファ結合を有し、別の追加のグルタミル基はガンマ結合を有する。他の実施形態では、３個の追加のグルタミル基のうちの１個は、アルファ結合およびガンマ結合を有する。他の実施形態では、４個のグルタミル基のうちの３個は、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、少なくとも１個のグルタミル基が、アルファ結合およびガンマ結合の両方を有する。いくつかの実施形態では、アルファテトラグルタミン酸化ＴＨＦは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上含む。さらなる実施形態では、アルファテトラグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸のグルタミル基はそれぞれＬ型である。他の実施形態では、アルファテトラグルタミン酸化ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基を含む。さらなる実施形態では、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基以外のアルファテトラグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸のグルタミル基はそれぞれＤ型である。さらなる実施形態では、テトラグルタミン酸化ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを含む。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸鎖は直鎖である。他の実施形態では、ポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【０１３２】
いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸は、ペンタグルタミン酸化されており（αＴＨＦ−ＰＧ４）、テトラヒドロ葉酸中のグルタミル基と結合した４個の追加のグルタミル基の鎖を含む。いくつかの実施形態では、鎖中の４個の追加のグルタミル基はそれぞれ、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、Ｃ末端グルタミル基以外の鎖中の４個の追加のグルタミル基はそれぞれ、アルファ結合を有する。他の実施形態では、４個の追加のグルタミル基のうちの１個、２個、または３個は、アルファ結合を有し、残りの３個、２個、または１個のグルタミル基は、それぞれ、ガンマ結合を介して、分子のグルタミル基と結合している。他の実施形態では、４個の追加のグルタミル基のうちの１または２個は、アルファ結合を有し、残りの非Ｃ末端グルタミル基は、ガンマ結合を介して、分子のグルタミル基と結合している。いくつかの実施形態では、少なくとも１個の追加のグルタミル基は、アルファ結合およびガンマ結合の両方を有する。いくつかの実施形態では、５個のグルタミル基のうちの少なくとも１個は、アルファ結合およびガンマ結合の両方を有する。いくつかの実施形態では、Ｃ末端グルタミル基以外の鎖中の５個のグルタミル基はそれぞれ、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、アルファペンタグルタミン酸化ＴＨＦは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上含む。さらなる実施形態では、アルファペンタグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸のグルタミル基はそれぞれＬ型である。他の実施形態では、アルファペンタグルタミン酸化ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基を含む。さらなる実施形態では、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基以外のアルファペンタグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸のグルタミル基はそれぞれＤ型である。さらなる実施形態では、ペンタグルタミン酸化ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを含む。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸鎖は直鎖である。他の実施形態では、ポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【０１３３】
いくつかの実施形態では、アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸は、ヘキサグルタミン酸化されており（αＴＨＦ−ＰＧ５）、テトラヒドロ葉酸中のグルタミル基と結合した５個の追加のグルタミル基の鎖を含む。いくつかの実施形態では、鎖中の５個の追加のグルタミル基はそれぞれ、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、Ｃ末端グルタミル基以外の鎖中の５個の追加のグルタミル基はそれぞれ、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、鎖中の５個の追加のグルタミル基のうちの４個は、アルファ結合を有する。他の実施形態では、５個の追加のグルタミル基のうちの１個、２個、３個、または４個は、アルファ結合を介して分子のグルタミル基と結合しており、残りの４個、３個、２個、または１個のグルタミル基は、それぞれ、ガンマ結合を介して、分子のグルタミル基と結合している。他の実施形態では、５個の追加のグルタミル基のうちの１個、２個、３個、または４個はアルファ結合を有し、残りの非Ｃ末端グルタミル基は、ガンマ結合を介して、分子のグルタミル基と結合している。いくつかの実施形態では、少なくとも１個の追加のグルタミル基は、アルファ結合およびガンマ結合の両方を有する。いくつかの実施形態では、６個のグルタミル基のうちの少なくとも１個は、アルファ結合およびガンマ結合の両方を有する。いくつかの実施形態では、Ｃ末端グルタミル基以外の鎖中の６個のグルタミル基はそれぞれ、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、６個のグルタミル基のうちの５個は、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、アルファヘキサグルタミン酸化ＴＨＦは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上含む。さらなる実施形態では、アルファヘキサグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸のグルタミル基はそれぞれＬ型である。いくつかの実施形態では、アルファヘキサグルタミン酸化ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基を含む。さらなる実施形態では、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基以外のアルファヘキサグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸のグルタミル基はそれぞれＤ型である。さらなる実施形態では、ヘキサグルタミン酸化ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを含む。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸鎖は直鎖である。他の実施形態では、ポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【０１３４】
いくつかの実施形態では、アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸は、ヘプタグルタメートされ（αＴＨＦ−ＰＧ６）、したがって、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基と結合した６個の追加のグルタミル基の鎖を含む。いくつかの実施形態では、６個の追加のグルタミル基はそれぞれ、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、Ｃ末端グルタミル基以外の鎖中の６個の追加のグルタミル基はそれぞれ、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、鎖中の６個の追加のグルタミル基のうちの５個は、アルファ結合を有する。他の実施形態では、６個の追加のグルタミル基のうちの１個、２個、３個、４個、または５個は、アルファ結合を有し、残りの５個、４個、３個、２個、または１個のグルタミル基は、それぞれ、ガンマ結合を有する。他の実施形態では、６個の追加のグルタミル基のうちの１個、２個、３個、４個、または５個は、アルファ結合を有し、残りの非Ｃ末端グルタミル基は、ガンマ結合を介して、分子のグルタミル基と結合している。いくつかの実施形態では、少なくとも１個の追加のグルタミル基は、アルファ結合およびガンマ結合の両方を有する。いくつかの実施形態では、７個のグルタミル基のうちの少なくとも１個は、アルファ結合およびガンマ結合の両方を有する。いくつかの実施形態では、Ｃ末端グルタミル基以外の鎖中の７個のグルタミル基はそれぞれ、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、７個のグルタミル基のうちの６個は、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、アルファヘプタグルタミン酸化ＴＨＦは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上含む。さらなる実施形態では、アルファヘプタグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸のグルタミル基はそれぞれＬ型である。他の実施形態では、アルファヘプタグルタミン酸化ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基を含む。さらなる実施形態では、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基以外のアルファヘプタグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸のグルタミル基はそれぞれＤ型である。さらなる実施形態では、ヘプタグルタミン酸化ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを含む。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸鎖は直鎖である。他の実施形態では、ポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【０１３５】
いくつかの実施形態では、アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸は、オクタグルタミン酸化されており（αＴＨＦ−ＰＧ７）、したがって、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基と結合した７個の追加のグルタミル基の鎖を含む。いくつかの実施形態では、Ｃ末端グルタミル基以外の鎖中の７個の追加のグルタミル基はそれぞれ、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、鎖中の７個の追加のグルタミル基のうちの６個は、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、７個の追加のグルタミル基はそれぞれ、アルファ結合を有する。他の実施形態では、７個の追加のグルタミル基のうちの１個、２個、３個、４個、５個、または６個は、アルファ結合を有し、残りの６、５個、４個、３個、２個、または１個のグルタミル基は、それぞれ、ガンマ結合を有する。他の実施形態では、７個の追加のグルタミル基のうちの１個、２個、３個、４個、５個、または６個は、アルファ結合を有し、残りの非Ｃ末端グルタミル基は、ガンマ結合を介して、分子のグルタミル基と結合している。いくつかの実施形態では、少なくとも１個の追加のグルタミル基は、アルファ結合およびガンマ結合の両方を有する。いくつかの実施形態では、８個のグルタミル基のうちの少なくとも１個は、アルファ結合およびガンマ結合の両方を有する。いくつかの実施形態では、Ｃ末端グルタミル基以外の８個のグルタミル基はそれぞれ、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、８個のグルタミル基のうちの７個は、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、アルファオクタグルタミン酸化ＴＨＦは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上含む。さらなる実施形態では、アルファオクタグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸のグルタミル基はそれぞれＬ型である。他の実施形態では、アルファオクタグルタミン酸化ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基を含む。さらなる実施形態では、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基以外のアルファオクタグルタミン酸化葉酸テトラヒドロ葉酸のグルタミル基はそれぞれＤ型である。さらなる実施形態では、オクタグルタミン酸化ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを含む。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸鎖は直鎖である。他の実施形態では、ポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【０１３６】
いくつかの実施形態では、アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸は、ノナグルタミン酸化されており（αＴＨＦ−ＰＧ８）、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基と結合した８個の追加のグルタミル基の鎖を含む。いくつかの実施形態では、Ｃ末端グルタミル基以外の鎖中の８個の追加のグルタミル基はそれぞれ、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、鎖中の８個の追加のグルタミル基のうちの７個は、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、８個の追加のグルタミル基はそれぞれ、アルファ結合を有する。他の実施形態では、８個の追加のグルタミル基のうちの１個、２個、３個、４個、５個、６個、または７個は、アルファ結合を有し、残りの７個、６個、５個、４個、３個、２個、または１個のグルタミル基は、それぞれ、ガンマ結合を有する。他の実施形態では、８個の追加のグルタミル基のうちの１個、２個、３個、４個、５個、６個、または７個は、アルファ結合を有し、残りの非Ｃ末端グルタミル基は、ガンマ結合を介して、分子のグルタミル基と結合している。いくつかの実施形態では、少なくとも１個の追加のグルタミル基は、アルファ結合およびガンマ結合の両方を有する。いくつかの実施形態では、９個のグルタミル基のうちの少なくとも１個は、アルファ結合およびガンマ結合の両方を有する。いくつかの実施形態では、Ｃ末端グルタミル基以外の９個のグルタミル基はそれぞれ、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、９個のグルタミル基のうちの８個は、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、アルファノナグルタミン酸化ＴＨＦは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上含む。さらなる実施形態では、アルファノナグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸のグルタミル基はそれぞれＬ型である。他の実施形態では、アルファノナグルタミン酸化ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基を含む。さらなる実施形態では、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基以外のアルファノナグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸のグルタミル基はそれぞれＤ型である。さらなる実施形態では、ノナグルタミン酸化ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを含む。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸鎖は直鎖である。他の実施形態では、ポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【０１３７】
いくつかの実施形態では、アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸は、デカグルタミン酸化されている（αＴＨＦ−ＰＧ９）（すなわち、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基と結合した９個の追加のグルタミル基の鎖を含む）。いくつかの実施形態では、９個の追加のグルタミル基はそれぞれ、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、Ｃ末端グルタミル基以外の鎖中の９個の追加のグルタミル基はそれぞれ、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、鎖中の９個の追加のグルタミル基のうちの８個は、アルファ結合を有する。他の実施形態では、９個の追加のグルタミル基のうちの１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、または８個は、アルファ結合を有し、残りの８個、７個、６個、５個、４個、３個、２個、または１個のグルタミル基は、それぞれ、ガンマ結合を有する。他の実施形態では、９個の追加のグルタミル基のうちの１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、または８個は、アルファ結合を有し、残りの非Ｃ末端グルタミル基は、ガンマ結合を介して、分子のグルタミル基と結合している。いくつかの実施形態では、少なくとも１個の追加のグルタミル基は、アルファ結合およびガンマ結合の両方を有する。いくつかの実施形態では、１０個のグルタミル基のうちの少なくとも１個は、アルファ結合およびガンマ結合の両方を有する。いくつかの実施形態では、Ｃ末端グルタミル基以外の１０個のグルタミル基はそれぞれ、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、１０個のグルタミル基のうちの９個は、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、アルファデカグルタミン酸化ＴＨＦは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上含む。さらなる実施形態では、アルファデカグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸のグルタミル基はそれぞれＬ型である。他の実施形態では、アルファデカグルタミン酸化ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基を含む。さらなる実施形態では、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基以外のアルファデカグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸のグルタミル基はそれぞれＤ型である。さらなる実施形態では、デカグルタミン酸化ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを含む。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸鎖は直鎖である。他の実施形態では、ポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【０１３８】
いくつかの実施形態では、アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸はウンデカグルタミン酸化されている（αＴＨＦ−ＰＧ１０）。いくつかの実施形態では、１０個の追加のグルタミル基はそれぞれ、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、Ｃ末端グルタミル基以外の鎖中の１０個の追加のグルタミル基はそれぞれ、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、鎖中の１０個の追加のグルタミル基のうちの９個は、アルファ結合を有する。他の実施形態では、１０個の追加のグルタミル基のうちの１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、または９個は、アルファ結合を有し、残りの９個、８個、７個、６個、５個、４個、３個、２個、または１個のグルタミル基は、それぞれ、ガンマ結合を有する。他の実施形態では、１０個の追加のグルタミル基のうちの１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、または９個は、アルファ結合を有し、残りの非Ｃ末端グルタミル基は、ガンマ結合を介して、分子のグルタミル基と結合している。いくつかの実施形態では、少なくとも１個の追加のグルタミル基は、アルファ結合およびガンマ結合の両方を有する。いくつかの実施形態では、１１個のグルタミル基のうちの少なくとも１個は、アルファ結合およびガンマ結合の両方を有する。いくつかの実施形態では、Ｃ末端グルタミル基以外の１１個のグルタミル基はそれぞれ、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、１１個のグルタミル基のうちの１０個は、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、アルファウンデカグルタミン酸化ＴＨＦは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上含む。さらなる実施形態では、アルファウンデカグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸のグルタミル基はそれぞれＬ型である。他の実施形態では、アルファウンデカグルタミン酸化ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基を含む。さらなる実施形態では、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基以外のアルファウンデカグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸のグルタミル基はそれぞれＤ型である。さらなる実施形態では、ウンデカグルタミン酸化ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを含む。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸鎖は直鎖である。他の実施形態では、ポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【０１３９】
いくつかの実施形態では、アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸はドデカグルタミン酸化されている（αＴＨＦ−ＰＧ１１）。いくつかの実施形態では、１１個の追加のグルタミル基はそれぞれ、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、Ｃ末端グルタミル基以外の鎖中の１１個の追加のグルタミル基はそれぞれ、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、鎖中の１１個の追加のグルタミル基のうちの１０個は、アルファ結合を有する。他の実施形態では、１１個の追加のグルタミル基のうちの１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、または１０個は、アルファ結合を有し、残りの１０個、９個、８個、７個、６個、５個、４個、３個、２個、または１個のグルタミル基は、それぞれ、ガンマ結合を有する。他の実施形態では、１１個の追加のグルタミル基のうちの１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、または１０個は、アルファ結合を有し、残りの非Ｃ末端グルタミル基は、ガンマ結合を介して、分子のグルタミル基と結合している。いくつかの実施形態では、少なくとも１個の追加のグルタミル基は、アルファ結合およびガンマ結合の両方を有する。いくつかの実施形態では、１２個のグルタミル基のうちの少なくとも１個は、アルファ結合およびガンマ結合の両方を有する。いくつかの実施形態では、Ｃ末端グルタミル基以外の１２個のグルタミル基はそれぞれ、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、１２個のグルタミル基のうちの１１個は、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、アルファドデカグルタミン酸化ＴＨＦは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上含む。さらなる実施形態では、アルファドデカグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸のグルタミル基はそれぞれＬ型である。他の実施形態では、アルファドデカグルタミン酸化ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基を含む。さらなる実施形態では、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基以外のアルファドデカグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸のグルタミル基はそれぞれＤ型である。さらなる実施形態では、ドデカグルタミン酸化ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを含む。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸鎖は直鎖である。他の実施形態では、ポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【０１４０】
いくつかの実施形態では、アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸はトリスカイデカグルタミン酸化されている（αＴＨＦ−ＰＧ１２）。いくつかの実施形態では、１２個の追加のグルタミル基はそれぞれ、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、Ｃ末端グルタミル基以外の鎖中の１２個の追加のグルタミル基はそれぞれ、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、鎖中の１２個の追加のグルタミル基のうちの１１個は、アルファ結合を有する。他の実施形態では、１２個の追加のグルタミル基のうちの１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、または１１個は、アルファ結合を有し、残りの１１個、１０個、９個、８個、７個、６個、５個、４個、３個、２個、または１個のグルタミル基は、それぞれ、ガンマ結合を有する。他の実施形態では、１２個の追加のグルタミル基のうちの１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、または１１個は、アルファ結合を有し、残りの非Ｃ末端グルタミル基は、ガンマ結合を介して、分子のグルタミル基と結合している。いくつかの実施形態では、少なくとも１個の追加のグルタミル基は、アルファ結合およびガンマ結合の両方を有する。いくつかの実施形態では、１３個のグルタミル基のうちの少なくとも１個は、アルファ結合およびガンマ結合の両方を有する。いくつかの実施形態では、Ｃ末端グルタミル基以外の１３個のグルタミル基はそれぞれ、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、１３個のグルタミル基のうちの１２個は、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、アルファトリスカイデカグルタミン酸化ＴＨＦは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上含む。さらなる実施形態では、アルファトリスカイデカグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸のグルタミル基はそれぞれＬ型である。他の実施形態では、アルファトリスカイデカグルタミン酸化ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基を含む。さらなる実施形態では、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基以外のアルファトリスカイデカグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸のグルタミル基はそれぞれＤ型である。さらなる実施形態では、トリスカイデカグルタミン酸化ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを含む。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸鎖は直鎖である。他の実施形態では、ポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【０１４１】
いくつかの実施形態では、アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸はテトラデカグルタミン酸化されている（αＴＨＦ−ＰＧ１３）。いくつかの実施形態では、１３個の追加のグルタミル基はそれぞれ、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、Ｃ末端グルタミル基以外の鎖中の１３個の追加のグルタミル基はそれぞれ、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、鎖中の１３個の追加のグルタミル基のうちの１２個は、アルファ結合を有する。他の実施形態では、１３個の追加のグルタミル基のうちの１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、または１２個は、アルファ結合を有し、残りの１２個、１１個、１０個、９個、８個、７個、６個、５個、４個、３個、２個、または１個のグルタミル基は、それぞれ、ガンマ結合を有する。他の実施形態では、１３個の追加のグルタミル基のうちの１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、または１２個は、アルファ結合を有し、残りの非Ｃ末端グルタミル基は、ガンマ結合を介して、分子のグルタミル基と結合している。いくつかの実施形態では、少なくとも１個の追加のグルタミル基は、アルファ結合およびガンマ結合の両方を有する。いくつかの実施形態では、１４個のグルタミル基のうちの少なくとも１個は、アルファ結合およびガンマ結合の両方を有する。いくつかの実施形態では、Ｃ末端グルタミル基以外の１４個のグルタミル基はそれぞれ、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、１４個のグルタミル基のうちの１３個は、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、アルファテトラデカグルタミン酸化ＴＨＦは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上含む。さらなる実施形態では、アルファテトラデカグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸のグルタミル基はそれぞれＬ型である。他の実施形態では、アルファテトラデカグルタミン酸化ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基を含む。さらなる実施形態では、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基以外のアルファテトラデカグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸のグルタミル基はそれぞれＤ型である。さらなる実施形態では、テトラデカグルタミン酸化ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを含む。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸鎖は直鎖である。他の実施形態では、ポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【０１４２】
いくつかの実施形態では、アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸はペンタデカグルタミン酸化されている（αＴＨＦ−ＰＧ１４）。いくつかの実施形態では、１４個の追加のグルタミル基はそれぞれ、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、Ｃ末端グルタミル基以外の鎖中の１４個の追加のグルタミル基はそれぞれ、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、鎖中の１４個の追加のグルタミル基のうちの１３個は、アルファ結合を有する。他の実施形態では、１４個の追加のグルタミル基のうちの１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、１２個、または１３個は、アルファ結合を有し、残りの１３個、１２個、１１個、１０個、９個、８個、７個、６個、５個、４個、３個、２個、または１個のグルタミル基は、それぞれ、ガンマ結合を有する。他の実施形態では、１４個の追加のグルタミル基のうちの１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、１２個、または１３個は、アルファ結合を有し、残りの非Ｃ末端グルタミル基は、ガンマ結合を介して、分子のグルタミル基と結合している。いくつかの実施形態では、少なくとも１個の追加のグルタミル基は、アルファ結合およびガンマ結合の両方を有する。いくつかの実施形態では、１５個のグルタミル基のうちの少なくとも１個は、アルファ結合およびガンマ結合の両方を有する。いくつかの実施形態では、Ｃ末端グルタミル基以外の１５個のグルタミル基はそれぞれ、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、１５個のグルタミル基のうちの１４個は、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、アルファペンタデカグルタミン酸化ＴＨＦは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上含む。さらなる実施形態では、アルファペンタデカグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸のグルタミル基はそれぞれＬ型である。他の実施形態では、アルファペンタデカグルタミン酸化ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基を含む。さらなる実施形態では、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基以外のアルファペンタデカグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸のグルタミル基はそれぞれＤ型である。さらなる実施形態では、ペンタデカグルタミン酸化ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを含む。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸鎖は直鎖である。他の実施形態では、ポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【０１４３】
いくつかの実施形態では、アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸はヘキサデカグルタミン酸化されている（αＴＨＦ−ＰＧ１５）。いくつかの実施形態では、１５個の追加のグルタミル基はそれぞれ、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、Ｃ末端グルタミル基以外の鎖中の１５個の追加のグルタミル基はそれぞれ、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、鎖中の１５個の追加のグルタミル基のうちの１４個は、アルファ結合を有する。他の実施形態では、１５個の追加のグルタミル基のうちの１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、１２個、１３個、または１４個は、アルファ結合を有し、残りの１４個、１３個、１２個、１１個、１０個、９個、８個、７個、６個、５個、４個、３個、２個、または１個のグルタミル基は、それぞれ、ガンマ結合を有する。他の実施形態では、１５個の追加のグルタミル基のうちの１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、１２個、１３個、または１４個は、アルファ結合を有し、残りの非Ｃ末端グルタミル基は、ガンマ結合を介して、分子のグルタミル基と結合している。いくつかの実施形態では、少なくとも１個の追加のグルタミル基は、アルファ結合およびガンマ結合の両方を有する。いくつかの実施形態では、１６個のグルタミル基のうちの少なくとも１個は、アルファ結合およびガンマ結合の両方を有する。いくつかの実施形態では、Ｃ末端グルタミル基以外の１６個のグルタミル基はそれぞれ、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、１６個のグルタミル基のうちの１５個は、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、アルファヘキサデカグルタミン酸化ＴＨＦは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上含む。さらなる実施形態では、アルファヘキサデカグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸のグルタミル基はそれぞれＬ型である。他の実施形態では、アルファヘキサデカグルタミン酸化ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基を含む。さらなる実施形態では、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基以外のアルファヘキサデカグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸のグルタミル基はそれぞれＤ型である。さらなる実施形態では、ヘキサデカグルタミン酸化ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを含む。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸鎖は直鎖である。他の実施形態では、ポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【０１４４】
いくつかの実施形態では、アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸はヘプタデカグルタミン酸化されている（αＴＨＦ−ＰＧ１６）。いくつかの実施形態では、１６個の追加のグルタミル基はそれぞれ、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、Ｃ末端グルタミル基以外の鎖中の１６個の追加のグルタミル基はそれぞれ、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、鎖中の１６個の追加のグルタミル基のうちの１５個は、アルファ結合を有する。他の実施形態では、１６個の追加のグルタミル基のうちの１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、１２個、１３個、１４個、または１５個は、アルファ結合を有し、残りの１５個、１４個、１３個、１２個、１１個、１０個、９個、８個、７個、６個、５個、４個、３個、２個、または１個のグルタミル基はそれぞれ、ガンマ結合を有する。他の実施形態では、１６個の追加のグルタミル基のうちの１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、１２個、１３個、１４個、または１５個は、アルファ結合を有し、残りの非Ｃ末端グルタミル基は、ガンマ結合を介して、分子のグルタミル基と結合している。いくつかの実施形態では、少なくとも１個の追加のグルタミル基は、アルファ結合およびガンマ結合の両方を有する。いくつかの実施形態では、１７個のグルタミル基のうちの少なくとも１個は、アルファ結合およびガンマ結合の両方を有する。いくつかの実施形態では、Ｃ末端グルタミル基以外の１７個のグルタミル基はそれぞれ、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、１７個のグルタミル基のうちの１６個は、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、アルファヘプタデカグルタミン酸化ＴＨＦは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上含む。さらなる実施形態では、アルファヘプタデカグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸のグルタミル基はそれぞれＬ型である。他の実施形態では、アルファヘプタデカグルタミン酸化ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基を含む。さらなる実施形態では、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基以外のアルファヘプタデカグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸のグルタミル基はそれぞれＤ型である。さらなる実施形態では、ヘプタデカグルタミン酸化ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを含む。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸鎖は直鎖である。他の実施形態では、ポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【０１４５】
いくつかの実施形態では、アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸はオクタデカグルタミン酸化されている（αＴＨＦ−ＰＧ１７）。いくつかの実施形態では、１７個の追加のグルタミル基はそれぞれ、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、Ｃ末端グルタミル基以外の鎖中の１７個の追加のグルタミル基はそれぞれ、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、鎖中の１７個の追加のグルタミル基のうちの１６個は、アルファ結合を有する。他の実施形態では、１７個の追加のグルタミル基のうちの１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、１２個、１３個、１４個、１５個、または１６個は、アルファ結合を有し、残りの１６個、１５個、１４個、１３個、１２個、１１個、１０個、９個、８個、７個、６個、５個、４個、３個、２個、または１個のグルタミル基は、それぞれ、ガンマ結合を有する。他の実施形態では、１７個の追加のグルタミル基のうちの１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、１２個、１３個、１４個、１５個、または１６個は、アルファ結合を有し、残りの非Ｃ末端グルタミル基は、ガンマ結合を介して、分子のグルタミル基と結合している。いくつかの実施形態では、少なくとも１個の追加のグルタミル基は、アルファ結合およびガンマ結合の両方を有する。いくつかの実施形態では、１８個のグルタミル基のうちの少なくとも１個は、アルファ結合およびガンマ結合の両方を有する。いくつかの実施形態では、Ｃ末端グルタミル基以外の１８個のグルタミル基はそれぞれ、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、１８個のグルタミル基のうちの１７個は、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、アルファオクタデカグルタミン酸化ＴＨＦは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上含む。さらなる実施形態では、アルファオクタデカグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸のグルタミル基はそれぞれＬ型である。他の実施形態では、アルファオクタデカグルタミン酸化ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基を含む。さらなる実施形態では、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基以外のアルファオクタデカグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸のグルタミル基はそれぞれＤ型である。さらなる実施形態では、オクタデカグルタミン酸化ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを含む。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸鎖は直鎖である。他の実施形態では、ポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【０１４６】
いくつかの実施形態では、アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸はエニアデカデカグルタミン酸化されている（αＴＨＦ−ＰＧ１８）。いくつかの実施形態では、１８個の追加のグルタミル基はそれぞれ、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、Ｃ末端グルタミル基以外の鎖中の１８個の追加のグルタミル基はそれぞれ、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、鎖中の１８個の追加のグルタミル基のうちの１７個は、アルファ結合を有する。他の実施形態では、１８個の追加のグルタミル基のうちの１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、１２個、１３個、１４個、１５個、１６個、または１７個は、アルファ結合を有し、残りの１７、１６個、１５個、１４個、１３個、１２個、１１個、１０個、９個、８個、７個、６個、５個、４個、３個、２個、または１個のグルタミル基は、それぞれ、ガンマ結合を有する。他の実施形態では、１８個の追加のグルタミル基のうちの１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、１２個、１３個、１４個、１５個、１６個、または１７個は、アルファ結合を有し、残りの非Ｃ末端グルタミル基は、ガンマ結合を介して、分子のグルタミル基と結合している。いくつかの実施形態では、少なくとも１個の追加のグルタミル基は、アルファ結合およびガンマ結合の両方を有する。いくつかの実施形態では、１９個のグルタミル基のうちの少なくとも１個は、アルファ結合およびガンマ結合の両方を有する。いくつかの実施形態では、Ｃ末端グルタミル基以外の１９個のグルタミル基はそれぞれ、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、１９個のグルタミル基のうちの１８個は、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、アルファエニアデカグルタミン酸化ＴＨＦは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上含む。さらなる実施形態では、アルファエニアデカグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸のグルタミル基はそれぞれＬ型である。他の実施形態では、アルファエニアデカグルタミン酸化ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基を含む。さらなる実施形態では、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基以外のアルファエニアデカグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸のグルタミル基はそれぞれＤ型である。さらなる実施形態では、エニアデカグルタミン酸化ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを含む。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸鎖は直鎖である。他の実施形態では、ポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【０１４７】
いくつかの実施形態では、アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸はイコシグルタミン酸化されている（αＴＨＦ−ＰＧ１９）。いくつかの実施形態では、１９個の追加のグルタミル基はそれぞれ、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、Ｃ末端グルタミル基以外の鎖中の１９個の追加のグルタミル基はそれぞれ、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、鎖中の１９個の追加のグルタミル基のうちの１８個は、アルファ結合を有する。他の実施形態では、１９個の追加のグルタミル基のうちの１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、１２個、１３個、１４個、１５個、１６個、１７個、または１８個は、アルファ結合を有し、残りの１８個、１７個、１６個、１５個、１４個、１３個、１２個、１１個、１０個、９個、８個、７個、６個、５個、４個、３個、２個、または１個のグルタミル基は、それぞれ、ガンマ結合を有する。他の実施形態では、１９個の追加のグルタミル基のうちの１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、１２個、１３個、１４個、１５個、１６個、１７個、または１８個は、アルファ結合を有し、残りの非Ｃ末端グルタミル基は、ガンマ結合を介して、分子のグルタミル基と結合している。いくつかの実施形態では、少なくとも１個の追加のグルタミル基は、アルファ結合およびガンマ結合の両方を有する。いくつかの実施形態では、２０個のグルタミル基のうちの少なくとも１個は、アルファ結合およびガンマ結合の両方を有する。いくつかの実施形態では、Ｃ末端グルタミル基以外の２０個のグルタミル基はそれぞれ、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、２０個のグルタミル基のうちの１９個は、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、アルファイコシグルタミン酸化ＴＨＦは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上含む。さらなる実施形態では、アルファイコシグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸のグルタミル基はそれぞれＬ型である。他の実施形態では、アルファイコシグルタミン酸化ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基を含む。さらなる実施形態では、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基以外のアルファイコシグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸のグルタミル基はそれぞれＤ型である。さらなる実施形態では、イコシグルタミン酸化ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを含む。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸鎖は直鎖である。他の実施形態では、ポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【０１４８】
いくつかの実施形態では、アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸はイコシカイヘナサグルタミン酸化されている（αＴＨＦ−ＰＧ２０）。いくつかの実施形態では、２０個の追加のグルタミル基はそれぞれ、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、Ｃ末端グルタミル基以外の鎖中の２０個の追加のグルタミル基はそれぞれ、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、鎖中の２０個の追加のグルタミル基のうちの１９個は、アルファ結合を有する。他の実施形態では、２０個の追加のグルタミル基のうちの１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、１２個、１３個、１４個、１５個、１６個、１７個、１８個、または１９個は、アルファ結合を有し、残りの１９個、１８個、１７個、１６個、１５個、１４個、１３個、１２個、１１個、１０個、９個、８個、７個、６個、５個、４個、３個、２個、または１個のグルタミル基は、それぞれ、ガンマ結合を有する。他の実施形態では、２０個の追加のグルタミル基のうちの１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、１２個、１３個、１４個、１５個、１６個、１７個、１８個、または１９個は、アルファ結合を有し、残りの非Ｃ末端グルタミル基は、ガンマ結合を介して、分子のグルタミル基と結合している。いくつかの実施形態では、少なくとも１個の追加のグルタミル基は、アルファ結合およびガンマ結合の両方を有する。いくつかの実施形態では、２１個のグルタミル基のうちの少なくとも１個は、アルファ結合およびガンマ結合の両方を有する。いくつかの実施形態では、Ｃ末端グルタミル基以外の２１個のグルタミル基はそれぞれ、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、２１個のグルタミル基のうちの２０個は、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、アルファイコシカイヘナグルタミン酸化ＴＨＦは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上含む。さらなる実施形態では、アルファイコシカイヘナグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸のグルタミル基はそれぞれＬ型である。他の実施形態では、アルファイコシカイヘナグルタミン酸化ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基を含む。さらなる実施形態では、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基以外のアルファイコシカイヘナグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸のグルタミル基はそれぞれＤ型である。さらなる実施形態では、イコシカイヘナグルタミン酸化ＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを含む。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸鎖は直鎖である。他の実施形態では、ポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【０１４９】
いくつかの実施形態では、アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸は、テトラヒドロ葉酸と結合した４〜７個のグルタミル基を含み（すなわち、αＴＨＦ−ＰＧｎ、ｎ＝４〜７）、４〜７個の結合グルタミル基はそれぞれ、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸は、テトラヒドロ葉酸と結合したグルタミル基を４〜７個含み（すなわち、αＴＨＦ−ＰＧｎ、ｎ＝４〜７）、Ｃ末端グルタミル基以外の４〜７個の結合グルタミル基はそれぞれ、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、４〜７個の結合グルタミル基はそれぞれ、Ｌ型である。他の実施形態では、４〜７個の結合グルタミル基はそれぞれ、Ｄ型である。他の実施形態では、４〜７個の結合グルタミル基は、Ｌ型およびＤ型である。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸鎖は直鎖である。他の実施形態では、ポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【０１５０】
一実施形態では、アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸はテトラグルタミン酸化されており、テトラヒドロ葉酸と結合したポリグルタミン酸鎖中の３個のグルタミル基はそれぞれ、アルファ結合を含む。一実施形態では、アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸は、テトラグルタミン酸化されており、Ｃ末端グルタミル基以外のテトラヒドロ葉酸と結合したポリグルタミン酸鎖中の３個のグルタミル基はそれぞれ、アルファ結合を含む。いくつかの実施形態では、４個のグルタミル基がそれぞれＬ型である。いくつかの実施形態では、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基以外のアルファテトラグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸中のグルタミル基はそれぞれＤ型である。他の実施形態では、アルファテトラグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸中の少なくとも２個のグルタミル基がＬ型であり、少なくとも１個のグルタミル基がＤ型である。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸鎖は直鎖である。他の実施形態では、ポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【０１５１】
一実施形態では、アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸は、ペンタグルタミン酸化されており、テトラヒドロ葉酸と結合したポリグルタミン酸鎖中の４個のグルタミル基はそれぞれ、アルファ結合を含む。一実施形態では、アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸は、ペンタグルタミン酸化されており、Ｃ末端グルタミル基以外のテトラヒドロ葉酸と結合したポリグルタミン酸鎖中の４個のグルタミル基はそれぞれ、アルファ結合を含む。いくつかの実施形態では、４個のグルタミル基はそれぞれＬ型である。いくつかの実施形態では、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基以外のアルファペンタグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸中のグルタミル基はそれぞれＤ型である。他の実施形態では、アルファペンタグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸中の少なくとも２個のグルタミル基がＬ型であり、少なくとも１個のグルタミル基がＤ型である。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸鎖は直鎖である。他の実施形態では、ポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【０１５２】
一実施形態では、アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸は、ヘキサグルタミン酸化されており、テトラヒドロ葉酸と結合したポリグルタミン酸鎖中の５個のグルタミル基はそれぞれ、アルファ結合を含む。一実施形態では、アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸は、ヘキサグルタミン酸化されており、Ｃ末端グルタミル基以外のテトラヒドロ葉酸と結合したポリグルタミン酸鎖中の５個のグルタミル基はそれぞれ、アルファ結合を含む。いくつかの実施形態では、５個のグルタミル基はそれぞれＬ型である。いくつかの実施形態では、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基以外のアルファヘキサグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸中のグルタミル基はそれぞれＤ型である。他の実施形態では、アルファヘキサグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸中の少なくとも２個のグルタミル基がＬ型であり、少なくとも１個のグルタミル基がＤ型である。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸鎖は直鎖である。他の実施形態では、ポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【０１５３】
別の実施形態では、アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸は、ヘプタグルタミン酸化されており、テトラヒドロ葉酸と結合したポリグルタミン酸鎖中の６個のグルタミル基はそれぞれ、アルファ結合を含む。別の実施形態では、アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸は、ヘプタグルタミン酸化されており、Ｃ末端グルタミル基以外のテトラヒドロ葉酸と結合したポリグルタミン酸鎖中の６個のグルタミル基はそれぞれ、アルファ結合を含む。いくつかの実施形態では、６個のグルタミル基はそれぞれＬ型である。いくつかの実施形態では、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基以外のアルファヘプタグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸中のグルタミル基はそれぞれＤ型である。他の実施形態では、アルファヘプタグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸中の少なくとも２個のグルタミル基がＬ型であり、少なくとも１個のグルタミル基がＤ型である。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸鎖は直鎖である。他の実施形態では、ポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【０１５４】
いくつかの実施形態では、アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸（αＰＴＨＦ）は、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基を含めて、合計１〜１５、１〜１０個、２〜１５個、２〜１０個、３〜１５個、３〜１０個、３〜６個、３〜５個、４〜１０個、４〜７個、または４〜６個、またはその間の任意の範囲のグルタミル基を含む。いくつかの実施形態では、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基以外のαＰＴＨＦ中のそれぞれのグルタミル基は、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、Ｃ末端グルタミル基およびテトラヒドロ葉酸のグルタミル基以外のαＰＴＨＦ中のそれぞれのグルタミル基は、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、Ｃ末端グルタミル基以外のαＰＴＨＦ中のそれぞれのグルタミル基は、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦ中のグルタミル基の１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、１２個、１３個、または１４個は、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦは、Ｌ型およびＤ型のグルタミル基を含む。さらなる実施形態では、αＰＴＨＦ中のグルタミル基の１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、１２個、１３個、または１４個は、アルファ結合を有し、１３個、１２個、１１個、１０個、９個、８個、７個、６個、５個、４個、３個、２個、１個、または０個のグルタミル基はそれぞれガンマ結合を有する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸のポリグルタミン酸構造中のグルタミル基はそれぞれＬ型である。いくつかの実施形態では、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基以外のαＰＴＨＦ中のグルタミル基はそれぞれＤ型である。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦ中のグルタミル基の１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、１２個、１３個、１４個、または１５個は、Ｌ型である。別の実施形態では、αＰＴＨＦ中のグルタミル基の１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、１２個、１３個、または１４個は、Ｄ型である。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸鎖は直鎖である。他の実施形態では、ポリグルタミン酸鎖は分岐鎖である。
【０１５５】
いくつかの実施形態では、アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸（αＰＴＨＦ）は、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基を含めて、合計２〜２０、２〜１５、２〜１０、２〜５個、またはその間の任意の範囲のグルタミル基を含む。いくつかの実施形態では、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基以外のαＰＴＨＦ中のそれぞれのグルタミル基は、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、Ｃ末端グルタミル基およびテトラヒドロ葉酸のグルタミル基以外のαＰＴＨＦ中のそれぞれのグルタミル基は、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、Ｃ末端グルタミル基以外のαＰＴＨＦ中のそれぞれのグルタミル基は、アルファ結合を有する。他の実施形態では、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、１２個、１３個、１４個、１５個、１６個、１７個、１８個、または１９個のグルタミル基は、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦは、ガンマ結合を有する２個以上のグルタミル基を含む。さらなる実施形態では、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基以外のαＰＴＨＦ中の１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、１２個、１３個、１４個、１５個、１６個、１７個、１８個、または１９個のグルタミル基は、アルファ結合を有し、１９、１８個、１７個、１６個、１５個、１４個、１３個、１２個、１１個、１０個、９個、８個、７個、６個、５個、４個、３個、２個、１個、または０個のグルタミル基はそれぞれガンマ結合を有する。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦ中のグルタミル基はそれぞれＬ型である。いくつかの実施形態では、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基以外のαＰＴＨＦ中のグルタミル基はそれぞれＤ型である。一実施形態では、αＰＴＨＦ中のグルタミル基の１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、１２個、１３個、１４個、１５個、１６個、１７個、１８個、１９個、または２０個は、Ｌ型である。別の実施形態では、αＰＴＨＦ中のグルタミル基の１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、１２個、１３個、１４個、１５個、１６個、１７個、１８個、または１９個は、Ｄ型である。
【０１５６】
いくつかの実施形態ではアルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸は、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基に加えて、合計１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、１２個、１３個、１４個、または１５個のグルタミル基を含む。さらなる実施形態では、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、１２個、１３個、１４個、または１５個の追加のグルタミル基は、アルファ結合を有する。さらなる実施形態では、アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸中の１４個、１３個、１２個、１１個、１０個、９個、８個、７個、６個、５個、４個、３個、２個、または１個のグルタミル基は、ガンマ結合を有する。いくつかの実施形態では、少なくとも１個のグルタミル基が、アルファ結合およびガンマ結合の両方を有する。いくつかの実施形態では、テトラヒドロ葉酸中のグルタミル基は、アルファ結合を有する。いくつかの実施形態では、テトラヒドロ葉酸中のグルタミル基は、アルファ結合およびガンマ結合の両方を有する。
【０１５７】
いくつかの実施形態では、アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸中の合計１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、１２個、１３個、１４個、または１５個のグルタミル基は、Ｌ型、Ｄ型、またはＬ型とＤ型である。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸のグルタミル基はそれぞれＬ型である。他の実施形態では、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基以外のポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸のグルタミル基はそれぞれＤ型である。代替的実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸のグルタミル基の少なくとも２個はＬ型であり、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸中のグルタミル基の少なくとも１個はＤ型である。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸中の１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、１２個、１３個、１４個、１５個、または１６個のグルタミル基は、Ｌ型である。他の実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸中の１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、１２個、１３個、または１４個のグルタミル基は、Ｄ型である。いくつかの実施形態では、少なくとも１個のグルタミル基が、アルファ結合およびガンマ結合の両方を有する。
【０１５８】
さらなる実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸は、２０〜１００個、２０〜７５個、２０〜５０個、２０〜４０個、２０〜３０個、２０〜２５個、または１０１個以上、またはその間の任意の範囲のグルタミル基を含む。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦのグルタミル基はそれぞれＬ型である。他の実施形態では、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基以外のαＰＴＨＦのグルタミル基はそれぞれＤ型である。代替的実施形態では、αＰＴＨＦ中のグルタミル基の少なくとも２個はＬ型であり、αＰＴＨＦ中のグルタミル基の少なくとも１個はＤ型である。いくつかの実施形態では、少なくとも１個のグルタミル基が、アルファ結合およびガンマ結合の両方を有する。
【０１５９】
さらなる実施形態では、提供される組成物は、アルファ結合を有するグルタミル基を１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１〜１０個、または１〜２０個含むαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦは、Ｌ型のグルタミル基を１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１〜１０個、または１〜２０個含む。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基を０個、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１〜１０個、または１〜２０個含む。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦは、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１〜１０個、または１〜２０個のＬ型のグルタミル基と、０個、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１〜１０個、または１〜２０個のＤ型のグルタミル基とを含む。他の実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸は、アルファ結合およびガンマ結合の両方を有する少なくとも１個のグルタミル基を含む。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸は、アルファ結合およびガンマ結合の両方を有するグルタミル基を１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１〜１０個、または１１個以上含む。
【０１６０】
いくつかの実施形態では、アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸は、アルファ結合を有するグルタミル基を少なくとも１個含み、ガンマ結合を有するグルタミル基を２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１〜１０個、１〜２０個、またはそれ以上含む。例えば、いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸は、Ｌ−アルファグルタミル基結合を１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１〜１０個含み、さらに、Ｌ−ガンマグルタミル基結合を１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、または１〜１０個含む。いくつかのさらなる実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸は、Ｌ−アルファグルタミル基結合を１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、または１〜１０個含み、さらに、Ｄ−ガンマグルタミル基結合を１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、または１〜１０個含む。追加のさらなる実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸は、Ｄ−アルファグルタミル基結合を１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、または１〜１０個含み、さらに、Ｄ−ガンマグルタミル基結合を１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、または１〜１０個含む。他のさらなる実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸は、Ｄ−ガンマグルタミル基結合を１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、または１〜１０個含み、さらに、Ｌ−ガンマグルタミル基結合を１個、２個、３個、４個、５個、６個、または１〜１０個含む。他の実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸は、アルファ結合およびガンマ結合の両方を有するグルタミル基を少なくとも１個含む。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸は、アルファ結合およびガンマ結合の両方を有するグルタミル基を１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１〜１０個、または１１個以上含む。
【０１６１】
いくつかの実施形態では、本明細書に提供されるαＰＴＨＦは、１個または複数個の追加のグルタミル基を追加することができる、すなわち、組成物は、ＦＰＧＳ（ホリルポリグルタミン酸シンテターゼ）の基質としての役割を果たすことができる。αＰＴＨＦのＦＰＧＳ（例えば、ヒトＦＰＧＳ、またはラット肝臓ＦＰＧＳ）に対する基質として作用する能力を測定する試薬およびアッセイと試薬は、容易に入手でき、ルーチンに実施できる。
【０１６２】
いくつかの実施形態では、本明細書に開示される裸のアルファＰＴＨＦ組成物（例えば、送達媒体と結合していないアルファＰＴＨＦ）は、同じ生理的条件下でのテトラヒドロ葉酸の取り込み速度と比較して肝臓細胞によって有意に遅い速度で取り込まれる。いくつかの実施形態では、裸のアルファＰＴＨＦ組成物の肝臓細胞取り込み速度は、テトラヒドロ葉酸の速度と比較して、３０％、２０％、１５％、または１０％未満である。さらなる実施形態では、本明細書に開示されるアルファＰＴＨＦ組成物の肝臓細胞からの流出（輸送）速度は、テトラヒドロ葉酸の速度と比べて、テトラヒドロ葉酸よりも有意に遅い速度（３０％、２０％、１５％、または１０％未満）で起こる。
【０１６３】
いくつかの実施形態では、本明細書に提供されるアルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸組成物は、過剰増殖細胞に対して、テトラヒドロ葉酸より高い細胞傷害性を有する。いくつかの実施形態では、過剰増殖細胞は癌細胞である。いくつかの実施形態では、過剰増殖細胞は、結腸直腸癌細胞、結腸癌細胞、乳癌細胞、または卵巣癌細胞である。いくつかの実施形態では、癌細胞は、中皮腫細胞または非小細胞肺癌細胞である。いくつかの実施形態では、細胞傷害性をｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイで測定する。いくつかの実施形態では、アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸はヘキサグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸である。
【０１６４】
いくつかの実施形態では、本明細書に提供されるアルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸組成物は、テトラヒドロ葉酸より低い毒性副作用を有する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供されるアルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸組成物は、非過剰増殖細胞に対して、テトラヒドロ葉酸よりも毒性が低いである。いくつかの実施形態では、本明細書に提供されるアルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸組成物は、好中球、肝臓細胞、または結腸上皮細胞に対して、テトラヒドロ葉酸よりも毒性が低い。いくつかの実施形態では、好中球は、ヒト好中球、分化しているヒト好中球、またはＣＤ３４＋細胞から分化した好中球である。いくつかの実施形態では、肝臓細胞は、ＡＭＬ１２肝臓細胞である。いくつかの実施形態では、結腸上皮細胞は、ＣＣＤ８４１結腸上皮細胞である。いくつかの実施形態では、毒性をｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイで測定する。いくつかの実施形態では、アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸はヘキサグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸である。
【０１６５】
いくつかの実施形態では、本明細書に提供されるアルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸組成物は、テトラヒドロ葉酸より低い毒性副作用を有する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供されるアルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸組成物は、ｉｎ  ｖｉｖｏアッセイで、テトラヒドロ葉酸よりも毒性副作用が少ない、またはその重症度が低い。いくつかの実施形態では、ｉｎ  ｖｉｖｏアッセイをｉｎ  ｖｉｖｏマウスモデルで実施する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供されるアルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸組成物は、テトラヒドロ葉酸よりも血液学的または肝臓毒性副作用が少ない、またはその重症度が低い。いくつかの実施形態では、血液学的副作用を平均好中球、平均白血球または平均血小板数により評価する。いくつかの実施形態では、血清アスパラギン酸アミノ基転移酵素（ＡＳＴ）、血清アラニンアミノ基転移酵素（ＡＬＴ）、および／または血清アルブミンレベルを測定することによって、肝臓毒性副作用を評価する。いくつかの実施形態では、ｉｎ  ｖｉｖｏアッセイは、４０ｍｇ／ｋｇまたは８０ｍｇ／ｋｇのアルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸組成物を週一回、４週間にわたって投与することを含む。いくつかの実施形態では、アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸はヘキサグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸である。
【０１６６】
いくつかの実施形態では、本明細書に提供されるアルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸組成物による治療は、ｉｎ  ｖｉｖｏマウスモデルで有意な血液学的または肝臓毒性副作用を誘導しない。いくつかの実施形態では、血液学的副作用を平均好中球、平均白血球または平均血小板数によって評価する。いくつかの実施形態では、肝臓毒性副作用を血清アスパラギン酸アミノ基転移酵素（ＡＳＴ）、血清アラニンアミノ基転移酵素（ＡＬＴ）、および／または血清アルブミンレベルを測定することによって評価する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供されるアルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸組成物は、平均好中球も平均白血球も平均血小板数を有意に低下させることはない。いくつかの実施形態では、本明細書に提供されるアルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸組成物は、血清アスパラギン酸アミノ基転移酵素（ＡＳＴ）および血清アラニンアミノ基転移酵素（ＡＬＴ）レベルを有意に上昇させることはない。いくつかの実施形態では、本明細書に提供されるアルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸組成物は、血清アルブミンレベルを有意に低下させることはない。いくつかの実施形態では、ｉｎ  ｖｉｖｏアッセイは、４０ｍｇ／ｋｇまたは８０ｍｇ／ｋｇのポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸組成物を週一回、４週間にわたって投与することを含む。いくつかの実施形態では、アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸はヘキサグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸である。
【０１６７】
いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦ組成物はフッ素原子を含まない。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦ組成物は４−フルオログルタミル基を含まない。
【０１６８】
ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸（αＰＴＨＦ）組成物およびその使用については、米国特許出願第６２／３７４，４５８号、同第６２／５８３，４３２号、同第６２／６２７，７４１号、同第６２／６３０，８２０号、および同第６２／６３０，８２１号、同第６２／６３０，８２４号、同第６２／６３０，８２５号、同第１５／６７５，６９５号、および同第１５／６７５，７０１号；国際出願ＰＣＴ／ＵＳ２０１７／０４６６６６号および国際出願ＰＣＴ／ＵＳ２０１７／０４６６６７号にさらに開示されており；上記出願それぞれの内容は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【０１６９】
Ａ．ポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸類似体および誘導体
本開示はまた、αＰＴＨＦ誘導体および類似体を包含する。本明細書に開示される組成物および方法は、酸化されているテトラヒドロ葉酸のありとあらゆる既知の誘導体または類似体に適用されると考えられる。いくつかの実施形態では、本開示の組成物および方法に従って調製および使用されるポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸類似体または誘導体組成物は、図１Ｉ〜１Ｊに図示されるものである。いくつかの実施形態では、類似体は、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基がテトラヒドロ葉酸分子の残りの部分とガンマペプチド結合を介して結合していない修飾型のテトラヒドロ葉酸に対応する。いくつかの実施形態では、類似体は、テトラヒドロ葉酸のグルタミル基がＤ型である異形のテトラヒドロ葉酸である。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化型のテトラヒドロ葉酸またはポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸類似体もしくは誘導体は、フッ素化されていない。
【０１７０】
さらなる実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸誘導体または類似体は、変種ポリグルタミン酸鎖を有する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸鎖は、グルタメート以外の天然または合成残基を１個または複数個含む。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸鎖は、アミド結合を含まないグルタミル基を１個または複数個含む。他の実施形態では、ポリグルタミン酸鎖の１個または複数個のグルタミル基が誘導体化されている。
【０１７１】
Ｂ．ＴＨＦ−ＰＧ合成
本明細書に提供されるテトラヒドロ葉酸ポリグルタミン酸組成物は、入手可能な試薬および合成中間体を用いて、以下の合成法により得られる。グルタミル残基のテトラヒドロ葉酸のグルタミル残基への付加は、当該技術分野で公知の合成法を用いて実施できる。いくつかの実施形態では、グルタミル残基をテトラヒドロ葉酸のグルタミル残基に連続的に付加する。さらなる実施形態では、当業者に公知の「クリックケミストリー」法またはその他のバイオコンジュゲート化学を用いて、テトラヒドロ葉酸のグルタミル残基にポリグルタミン酸を付加する。あるいは所望の長さのグルタミル残基のペプチドを作製し、テトラヒドロ葉酸のグルタミル残基を持たない前駆物質に付加できる。ペプチドは、当該技術分野で公知の方法を用いて作製できる。いくつかの実施形態では、最初のグルタミル残基をｗａｎｇレジンに結合させ、Ｆ−ｍｏｃ化学を用いる固相ペプチド合成により、追加のグルタミル残基を連続的に付加する。最後のグルタミル残基を付加した後、テトラヒドロ葉酸前駆物質をペプチドとカップリングし、その分子をレジンから切断する。
【０１７２】
テトラヒドロ葉酸のグルタミル残基へのグルタミル残基の付加は、当該技術分野で公知の合成方法を用いて達成できる。いくつかの実施形態では、テトラヒドロ葉酸のグルタミル残基にグルタミル残基を連続的に付加する。さらなる実施形態では、当業者に公知の「クリックケミストリー」法およびその他のバイオコンジュゲート化学を用いて、テトラヒドロ葉酸のグルタミル残基にポリグルタミン酸を付加する。あるいは所望の長さのグルタミル残基のペプチドを作製し、グルタミル残基を持たないテトラヒドロ葉酸の前駆物質に付加できる。ペプチドは、当該技術分野で公知の合成方法を用いて作製できる。いくつかの実施形態では、最初のグルタミル残基をｗａｎｇレジンに結合させ、Ｆ−ｍｏｃ化学を用いる固相ペプチド合成により、追加のグルタミル残基を連続的に付加する。最後のグルタミル残基を付加した後、テトラヒドロ葉酸前駆物質をペプチドとカップリングし、その分子をレジンから切断する。
【０１７３】
Ｃ．テトラヒドロ葉酸−ＰＧ複合体
本発明者らは、驚くべきことに、テトラヒドロ葉酸（αＰＴＨＦ）とほぼ同じ構造および化学的特徴を共有するポリグルタミン酸化葉酸代謝拮抗薬が、白金系化合物などの細胞毒性化合物を含めた治療剤を含む他の組成物と複合体を形成できることを発見した。したがって、いくつかの実施形態では、本開示は、αＰＴＨＦ（例えば、本明細書に開示されるαＰＴＨＦ）と治療剤またはその塩もしくは酸との複合体を提供する。
【０１７４】
いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦ／複合体は、αＰＴＨＦと治療剤とを含む。いくつかの実施形態では、治療剤は、化学療法剤などの細胞毒性化合物である。さらなる実施形態では、αＰＴＨＦ／複合体は、白金系化学療法剤などの白金系薬物（例えば、シスプラチン、カルボプラチン、およびオキサリプラチン）を含む。他の実施形態では、αＰＴＨＦ／複合体は、タキサン系化学療法剤（例えば、パクリタキセルおよびセタキセル）を含む。他の実施形態では、αＰＴＨＦ／複合体はシクロデキストリンを含む。さらなる実施形態では、αＰＴＨＦ／複合体は、リポソーム中に被包されている。
【０１７５】
いくつかの実施形態では、本開示は、αＰＴＨと治療剤またはその塩もしくは酸との複合体を含む、組成物を提供する。さらなる実施形態では、αＰＴＨＦ／治療剤複合体は、グルタミル基を２〜１５０個、２〜１００個、２〜７５個、２〜５０個、２〜２４個、２〜３０個、２〜２０個、２〜１９個、２〜１５個、２〜１０個、または２〜５個含む、１つまたは複数のαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦ／治療剤複合体は、グルタミル基を３〜１０個、３〜９個、３〜８個、もしくは３〜７、またはその間の任意の範囲の個数含む、１つまたは複数のαＰＴＨＦを含む。他の実施形態では、αＰＴＨＦ／治療剤複合体は、グルタミル基を４〜１０個、４〜９個、４〜８個、４〜７個、４〜６個、もしくは４〜５個、またはその間の任意の範囲の個数含む、１つまたは複数のαＰＴＨＦを含む。ある特定の実施形態では、複合体は、グルタミル基を３〜１０個含む、１つまたは複数のαＰＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、αＰＴＨＦ／治療剤複合体は、グルタミル基を３〜７個含む、１つまたは複数のαＰＴＨＦを含む。別の実施形態では、αＰＴＨＦ／治療剤複合体は、グルタミル基を５個含む、１つまたは複数のαＰＴＨＦを含む。別の実施形態では、αＰＴＨＦ／治療剤複合体は、グルタミル基を６個含む、１つまたは複数のαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、治療剤は、細胞毒性化合物、またはその塩もしくは酸である。さらなる実施形態では、治療剤は、化学療法剤、またはその塩もしくは酸である。別の実施形態では、治療剤は白金系薬物である。別の実施形態では、治療剤はタキサン系薬物である。さらなる実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／治療剤のモル比は、１〜１０：１の範囲である。いくつかの実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／治療剤のモル比は、１：１、２：１、３：１、４：１、５：１、６：１、７：１、８：１、９：１、１０：１、１１：１、１２：１、１３：１、１４：１、１５：１、１６：１、１７：１、１８：１、１９：１、２０：１、（２１〜５０）：１、または＞５０：１である。他の実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／治療剤のモル比は、１：１〜２０、１：１〜１０、もしくは１：２〜８、またはその間の任意の範囲である。いくつかの実施形態では、複合体中のαＰＰＴＨＦ／治療剤のモル比は、１：１、１：２、１：３、１：４、１：５、１：６、１：７、１：８、１：９、１：１０、１：１１、１：１２、１：１３、１：１４、１：１５、１：１６、１：１７、１：１８、１：１９、１：２０、１：（２１〜５０）、または１：＞５０超である。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦ／治療剤複合体は、（例えば、本明細書に記載される通りに、または当該技術分野で公知の別の方法で）リポソーム中に被包されている。
【０１７６】
代替的実施形態では、αＰＴＨＦ複合体は、αＰＴＨＦとシクロデキストリンとを含む。いくつかの実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ（例えば、αＰＴＨＦ塩）／シクロデキストリンのモル比は、１〜２０：１の範囲、またはその間の任意の範囲である。いくつかの実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／シクロデキストリンのモル比は、１〜１０：１の範囲、またはその間の任意の範囲である。さらなる実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／シクロデキストリンのモル比は、２〜８：１の範囲、またはその間の任意の範囲である。いくつかの実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／シクロデキストリンのモル比は、１：１、２：１、３：１、４：１、５：１、６：１、７：１、８：１、９：１、１０：１、１１：１、１２：１、１３：１、１４：１、１５：１、１６：１、１７：１、１８：１、１９：１、２０：１、（２１〜５０）：１、または＞５０：１である。他の実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／シクロデキストリンのモル比は、１：１〜２０、１：１〜１０、または１：２〜８の範囲、またはその間の任意の範囲である。いくつかの実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／シクロデキストリンのモル比は、１：１、１：２、１：３、１：４、１：５、１：６、１：７、１：８、１：９、１：１０、１：１１、１：１２、１：１３、１：１４、１：１５、１：１６、１：１７、１：１８、１：１９、１：２０、１：（２１〜５０）、または１：＞５０である。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦ／シクロデキストリン複合体は、（例えば、本明細書に記載される通りに、または当該技術分野で知られている別の方法で）リポソーム中に被包されている。
【０１７７】
いくつかの実施形態では、本開示は、αＰＴＨＦ／白金系化学療法剤複合体を含む組成物を提供する。いくつかの実施形態では、白金系化学療法剤は、シスプラチン、カルボプラチン、およびオキサリプラチン、またはその塩もしくは酸からなる群より選択される。他の実施形態では、αＰＴＨＦ／白金系化学療法剤複合体は、シスプラチン、カルボプラチン、オキサリプラチンの類似体、またはその塩もしくは酸を含む。いくつかの実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／白金系薬剤のモル比は、１〜２０：１の範囲、またはその間の任意の範囲である。いくつかの実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／白金系薬剤のモル比は、１〜１０：１の範囲、またはその間の任意の範囲である。さらなる実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／白金系薬剤のモル比は、２〜８：１の範囲、またはその間の任意の範囲である。いくつかの実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／白金系薬剤のモル比は、１：１、２：１、３：１、４：１、５：１、６：１、７：１、８：１、９：１、１０：１、１１：１、１２：１、１３：１、１４：１、１５：１、１６：１、１７：１、１８：１、１９：１、２０：１、（２１〜５０）：１、または＞５０：１である。他の実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／白金系薬剤のモル比は、１：１〜２０、１：１〜１０、または１：２〜８の範囲、またはその間の任意の範囲である。いくつかの実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／白金系薬剤のモル比は、１：１、１：２、１：３、１：４、１：５、１：６、１：７、１：８、１：９、１：１０、１：１１、１：１２、１：１３、１：１４、１：１５、１：１６、１：１７、１：１８、１：１９、１：２０、１：（２１〜５０）、または１：＞５０である。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦ／白金系薬剤複合体は、（例えば、本明細書に記載される通りに、または当該技術分野で知られている別の方法で）リポソーム中に被包されている。
【０１７８】
さらなる実施形態では、αＰＴＨＦ／白金系化学療法剤複合体は、シスプラチン、カルボプラチン、オキサリプラチンの類似体、またはその塩もしくは酸を含む。いくつかの実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／白金系類似体のモル比は、１〜２０：１の範囲、またはその間の任意の範囲である。いくつかの実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／白金系類似体のモル比は、１〜１０：１の範囲、またはその間の任意の範囲である。さらなる実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／白金系薬剤のモル比は、２〜８：１の範囲、またはその間の任意の範囲である。いくつかの実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／白金系類似体のモル比は、１：１、２：１、３：１、４：１、５：１、６：１、７：１、８：１、９：１、１０：１、１１：１、１２：１、１３：１、１４：１、１５：１、１６：１、１７：１、１８：１、１９：１、２０：１、（２１〜５０）：１、または＞５０：１である。他の実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／白金系類似体のモル比は、１：１〜２０、１：１〜１０、もしくは１：２〜８、またはその間の任意の範囲である。いくつかの実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／白金系類似体のモル比は、１：１、１：２、１：３、１：４、１：５、１：６、１：７、１：８、１：９、１：１０、１：１１、１：１２、１：１３、１：１４、１：１５、１：１６、１：１７、１：１８、１：１９、１：２０、１：（２１〜５０）、または１：＞５０である。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦ／白金系類似体複合体は、（例えば、本明細書に記載される通りに、または当該技術分野で知られている別の方法で）リポソーム中に被包されている。
【０１７９】
さらなる実施形態では、本開示は、αＰＴＨＦおよびシスプラチンまたはその塩もしくは酸を含む複合体を提供する。いくつかの実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／シスプラチン（またはシスプラチンの塩もしくは酸）のモル比は、１〜２０：１の範囲、またはその間の任意の範囲である。いくつかの実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／シスプラチン（またはシスプラチンの塩もしくは酸）のモル比は、１〜１０：１の範囲、またはその間の任意の範囲である。さらなる実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／シスプラチン（またはシスプラチンの塩もしくは酸）のモル比は、２〜８：１の範囲、またはその間の任意の範囲である。いくつかの実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／シスプラチン（またはシスプラチンの塩もしくは酸）のモル比は、１：１、２：１、３：１、４：１、５：１、６：１、７：１、８：１、９：１、１０：１、１１：１、１２：１、１３：１、１４：１、１５：１、１６：１、１７：１、１８：１、１９：１、２０：１、（２１〜５０）：１、または＞５０：１である。他の実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／シスプラチン（またはシスプラチンの塩もしくは酸）のモル比は、１：１〜２０、１：１〜１０、もしくは１：２〜８、またはその間の任意の範囲である。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦ／シスプラチン（またはシスプラチンの塩もしくは酸）のモル比は、１：１、１：２、１：３、１：４、１：５、１：６、１：７、１：８、１：９、１：１０、１：１１、１：１２、１：１３、１：１４、１：１５、１：１６、１：１７、１：１８、１：１９、１：２０、１：（２１〜５０）、または１：＞５０である。さらなる実施形態では、αＰＴＨＦ／シスプラチン（またはシスプラチンの塩もしくは酸）複合体は、（例えば、本明細書に記載される通りに、または当該技術分野で知られている別の方法で）リポソーム中に被包されている。
【０１８０】
別の実施形態では、本開示は、αＰＴＨＦおよびカルボプラチンまたはその塩もしくは酸を含む複合体を提供する。いくつかの実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／カルボプラチン（またはカルボプラチンの塩もしくは酸）のモル比は、１〜２０：１の範囲、またはその間の任意の範囲である。さらなる実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／カルボプラチン（またはカルボプラチンの塩もしくは酸）のモル比は、１〜１０：１の範囲、またはその間の任意の範囲である。さらなる実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／カルボプラチン（またはカルボプラチンの塩もしくは酸）のモル比は、２〜８：１の範囲、またはその間の任意の範囲である。いくつかの実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／カルボプラチン（またはカルボプラチンの塩もしくは酸）のモル比は、１：１、２：１、３：１、４：１、５：１、６：１、７：１、８：１、９：１、１０：１、１１：１、１２：１、１３：１、１４：１、１５：１、１６：１、１７：１、１８：１、１９：１、２０：１、（２１〜５０）：１、または＞５０：１である。他の実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／カルボプラチンのモル比は、１：１〜２０、１：１〜１０、もしくは１：２〜８、またはその間の任意の範囲である。いくつかの実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／カルボプラチン（またはカルボプラチンの塩もしくは酸）のモル比は、１：１、１：２、１：３、１：４、１：５、１：６、１：７、１：８、１：９、１：１０、１：１１、１：１２、１：１３、１：１４、１：１５、１：１６、１：１７、１：１８、１：１９、１：２０、１：（２１〜５０）、または１：＞５０である。さらなる実施形態では、αＰＴＨＦ／カルボプラチン（またはカルボプラチンの塩もしくは酸）複合体は、（例えば、本明細書に記載される通りに、または当該技術分野で知られている別の方法で）リポソーム中に被包されている。
【０１８１】
別の実施形態では、本開示は、αＰＴＨＦおよびオキサリプラチンまたはその塩もしくは酸を含む複合体を提供する。いくつかの実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／オキサリプラチン（またはオキサリプラチンの塩もしくは酸）のモル比は、１〜２０：１の範囲、またはその間の任意の範囲である。さらなる実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／オキサリプラチン（またはオキサリプラチンの塩もしくは酸）のモル比は、１〜１０：１の範囲、またはその間の任意の範囲である。さらなる実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／オキサリプラチン（またはオキサリプラチンの塩もしくは酸）のモル比は、２〜８：１の範囲、またはその間の任意の範囲である。いくつかの実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／オキサリプラチン（またはオキサリプラチンの塩もしくは酸）のモル比は、１：１、２：１、３：１、４：１、５：１、６：１、７：１、８：１、９：１、１０：１、１１：１、１２：１、１３：１、１４：１、１５：１、１６：１、１７：１、１８：１、１９：１、２０：１、（２１〜５０）：１、または＞５０：１である。他の実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／オキサリプラチン（またはオキサリプラチンの塩もしくは酸）のモル比は、１：１〜２０、１：１〜１０、もしくは１：２〜８、またはその間の任意の範囲である。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦ／オキサリプラチン（またはオキサリプラチンの塩もしくは酸）のモル比は、１：１、１：２、１：３、１：４、１：５、１：６、１：７、１：８、１：９、１：１０、１：１１、１：１２、１：１３、１：１４、１：１５、１：１６、１：１７、１：１８、１：１９、１：２０、１：（２１〜５０）、または１：＞５０である。さらなる実施形態では、αＰＴＨＦ／オキサリプラチン（またはオキサリプラチンの塩もしくは酸）複合体は、（例えば、本明細書に記載される通りに、または当該技術分野で知られている別の方法で）リポソーム中に被包されている。
【０１８２】
さらなる実施形態では、本開示は、αＰＴＨＦおよびネダプラチン、ヘプタプラチン、ロバプラチン、ストラトプラチン、パラプラチン、プラチノール、シクロプラチン、デキソルマプラチン、スピロプラチン、ピコプラチン、トリプラチン、テトラプラチン、イプロプラチン、オルマプラチン、ゼニプラチン、白金−トリアミン、サトラプラチン、エンロプラチン、ＪＭ２１６、ＮＫ１２１、ＣＩ９７３、ＤＷＡ２１１４Ｒ、ＮＤＤＰ、およびネダプラチン、またはこれらの塩もしくは酸からなる群より選択される白金系化学療法剤（「白金」）を含む複合体を提供する。他の実施形態では、αＰＴＨＦ／白金系化学療法剤複合体は、ネダプラチン、ヘプタプラチン、ロバプラチン、ストラトプラチン、パラプラチン、プラチノール、シクロプラチン、デキソルマプラチン、スピロプラチン、ピコプラチン、トリプラチン、テトラプラチン、イプロプラチン、オルマプラチン、ゼニプラチン、白金−トリアミン、サトラプラチン、エンロプラチン、ＪＭ２１６、ＮＫ１２１、ＣＩ９７３、ＤＷＡ２１１４Ｒ、ＮＤＤＰ、またはネダプラチンの類似体、またはこれらの塩もしくは酸を含む。いくつかの実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／白金（または白金の塩もしくは酸）のモル比は、１〜２０：１の範囲、またはその間の任意の範囲である。さらなる実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／白金（または白金の塩もしくは酸）のモル比は、１〜１０：１の範囲、またはその間の任意の範囲である。さらなる実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／白金（または白金の塩もしくは酸）のモル比は、２〜８：１の範囲、またはその間の任意の範囲である。いくつかの実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／白金（または白金の塩もしくは酸）のモル比は、１：１、２：１、３：１、４：１、５：１、６：１、７：１、８：１、９：１、１０：１、１１：１、１２：１、１３：１、１４：１、１５：１、１６：１、１７：１、１８：１、１９：１、２０：１、（２１〜５０）：１、または＞５０：１である。他の実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／白金（または白金の塩もしくは酸）のモル比は、１：１〜２０、１：１〜１０、もしくは１：２〜８、またはその間の任意の範囲である。いくつかの実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／白金（または白金の塩もしくは酸）のモル比は、１：１、１：２、１：３、１：４、１：５、１：６、１：７、１：８、１：９、１：１０、１：１１、１：１２、１：１３、１：１４、１：１５、１：１６、１：１７、１：１８、１：１９、１：２０、１：（２１〜５０）、または１：＞５０である。さらなる実施形態では、αＰＴＨＦ／白金（またはその塩もしくは酸または類似体）複合体は、（例えば、本明細書に記載される通りに、または当該技術分野で知られている別の方法で）リポソーム中に被包されている。
【０１８３】
いくつかの実施形態では、本開示は、αＰＴＨＦ／タキサン系化学療法剤（タキサン）複合体を含む組成物を提供する。いくつかの実施形態では、タキサン系化学療法剤は、パクリタキセル（ＰＴＸ）、ドセタキセル（ＤＴＸ）、ラロタキセル（ＬＴＸ）、およびカバジタキセル（ＣＴＸ）、またはその塩もしくは酸からなる群より選択される。いくつかの実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／タキサン系薬剤のモル比は、１〜２０：１の範囲、またはその間の任意の範囲である。さらなる実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／タキサン（またはタキサンの塩もしくは酸）のモル比は、１〜１０：１の範囲、またはその間の任意の範囲である。さらなる実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／タキサン（またはタキサンの塩もしくは酸）のモル比は、２〜８：１の範囲、またはその間の任意の範囲である。いくつかの実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／タキサン（またはタキサンの塩もしくは酸）のモル比は、１：１、２：１、３：１、４：１、５：１、６：１、７：１、８：１、９：１、１０：１、１１：１、１２：１、１３：１、１４：１、１５：１、１６：１、１７：１、１８：１、１９：１、２０：１、（２１〜５０）：１、または＞５０：１である。他の実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／タキサン（またはタキサンの塩もしくは酸）のモル比は、１：１〜２０、１：１〜１０、もしくは１：２〜８、またはその間の任意の範囲である。いくつかの実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／タキサン（またはタキサンの塩もしくは酸）のモル比は、１：１、１：２、１：３、１：４、１：５、１：６、１：７、１：８、１：９、１：１０、１：１１、１：１２、１：１３、１：１４、１：１５、１：１６、１：１７、１：１８、１：１９、１：２０、１：（２１〜５０）、または１：＞５０である。さらなる実施形態では、（例えば、本明細書に記載される通りに、または当該技術分野で知られている別の方法で）リポソーム中に被包されている。
【０１８４】
さらなる実施形態では、本開示は、αＰＴＨＦおよびパクリタキセル（ＰＴＸ）またはその塩もしくは酸を含む複合体を提供する。他の実施形態では、αＰＴＨＦ／タキサン系化学療法剤複合体は、パクリタキセル（ＰＴＸ）の類似体、またはその塩もしくは酸を含む。いくつかの実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／パクリタキセル（またはパクリタキセルの塩もしくは酸）のモル比は、１〜２０：１の範囲、またはその間の任意の範囲である。さらなる実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／パクリタキセル（またはパクリタキセルの塩もしくは酸）のモル比は、１〜１０：１の範囲、またはその間の任意の範囲である。さらなる実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／パクリタキセル（またはパクリタキセルの塩もしくは酸）のモル比は、２〜８：１の範囲、またはその間の任意の範囲である。いくつかの実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／パクリタキセル（またはパクリタキセルの塩もしくは酸）のモル比は、１：１、２：１、３：１、４：１、５：１、６：１、７：１、８：１、９：１、１０：１、１１：１、１２：１、１３：１、１４：１、１５：１、１６：１、１７：１、１８：１、１９：１、２０：１、（２１〜５０）：１、または＞５０：１である。他の実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／パクリタキセル（またはパクリタキセルの塩もしくは酸）のモル比は、１：１〜２０、１：１〜１０、もしくは１：２〜８、またはその間の任意の範囲である。いくつかの実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／パクリタキセル（またはパクリタキセルの塩もしくは酸）のモル比は、１：１、１：２、１：３、１：４、１：５、１：６、１：７、１：８、１：９、１：１０、１：１１、１：１２、１：１３、１：１４、１：１５、１：１６、１：１７、１：１８、１：１９、１：２０、１：（２１〜５０）、または１：＞５０である。さらなる実施形態では、αＰＴＨＦ／パクリタキセル（またはパクリタキセルの塩もしくは酸）複合体は、（例えば、本明細書に記載される通りに、または当該技術分野で知られている別の方法で）リポソーム中に被包されている。
【０１８５】
さらなる実施形態では、本開示は、αＰＴＨＦおよびドセタキセル（ＤＴＸ）またはその塩もしくは酸を含む複合体を提供する。他の実施形態では、αＰＴＨＦ／タキサン系化学療法剤複合体は、ドセタキセル（ＤＴＸ）の類似体、またはその塩もしくは酸を含む。いくつかの実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／ドセタキセル（またはドセタキセルの塩もしくは酸）のモル比は、１〜２０：１の範囲、またはその間の任意の範囲である。いくつかの実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／ドセタキセル（またはドセタキセルの塩もしくは酸）のモル比は、１〜１０：１の範囲、またはその間の任意の範囲である。さらなる実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／ドセタキセル（またはドセタキセルの塩もしくは酸）のモル比は、２〜８：１の範囲、またはその間の任意の範囲である。いくつかの実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／ドセタキセル（またはドセタキセルの塩もしくは酸）のモル比は、１：１、２：１、３：１、４：１、５：１、６：１、７：１、８：１、９：１、１０：１、１１：１、１２：１、１３：１、１４：１、１５：１、１６：１、１７：１、１８：１、１９：１、２０：１、（２１〜５０）：１、または＞５０：１である。他の実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／ドセタキセル（またはドセタキセルの塩もしくは酸）のモル比は、１：１〜２０、１：１〜１０、もしくは１：２〜８、またはその間の任意の範囲である。いくつかの実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／ドセタキセル（またはドセタキセルの塩もしくは酸）のモル比は、１：１、１：２、１：３、１：４、１：５、１：６、１：７、１：８、１：９、１：１０、１：１１、１：１２、１：１３、１：１４、１：１５、１：１６、１：１７、１：１８、１：１９、１：２０、１：（２１〜５０）、または１：＞５０である。さらなる実施形態では、αＰＴＨＦ／ドセタキセル（またはドセタキセルの塩もしくは酸）複合体は、（例えば、本明細書に記載される通りに、または当該技術分野で知られている別の方法で）リポソーム中に被包されている。
【０１８６】
さらなる実施形態では、本開示は、αＰＴＨＦおよびラロタキセル（ＬＴＸ）またはその塩もしくは酸を含む複合体を提供する。他の実施形態では、αＰＴＨＦ／タキサン系化学療法剤複合体は、ラロタキセル（ＬＴＸ）の類似体、またはその塩もしくは酸を含む。いくつかの実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／ラロタキセル（またはラロタキセルの塩もしくは酸）のモル比は、１〜２０：１の範囲、またはその間の任意の範囲である。さらなる実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／ラロタキセル（またはラロタキセルの塩もしくは酸）のモル比は、１〜１０：１の範囲、またはその間の任意の範囲である。さらなる実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／ラロタキセル（またはラロタキセルの塩もしくは酸）のモル比は、２〜８：１の範囲、またはその間の任意の範囲である。いくつかの実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／ラロタキセル（またはラロタキセルの塩もしくは酸）のモル比は、１：１、２：１、３：１、４：１、５：１、６：１、７：１、８：１、９：１、１０：１、１１：１、１２：１、１３：１、１４：１、１５：１、１６：１、１７：１、１８：１、１９：１、２０：１、（２１〜５０）：１、または＞５０：１である。他の実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／ラロタキセル（またはラロタキセルの塩もしくは酸）のモル比は、１：１〜２０、１：１〜１０、もしくは１：２〜８、またはその間の任意の範囲である。いくつかの実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／ラロタキセル（またはラロタキセルの塩もしくは酸）のモル比は、１：１、１：２、１：３、１：４、１：５、１：６、１：７、１：８、１：９、１：１０、１：１１、１：１２、１：１３、１：１４、１：１５、１：１６、１：１７、１：１８、１：１９、１：２０、１：（２１〜５０）、または１：＞５０である。さらなる実施形態では、αＰＴＨＦ／ラロタキセル（またはラロタキセルの塩もしくは酸）複合体は、（例えば、本明細書に記載される通りに、または当該技術分野で知られている別の方法で）リポソーム中に被包されている。
【０１８７】
さらなる実施形態では、本開示は、αＰＴＨＦおよびカバジタキセル（ＣＴＸ）またはその塩もしくは酸を含む複合体を提供する。他の実施形態では、αＰＴＨＦ／タキサン系化学療法剤複合体は、カバジタキセル（ＣＴＸ）の類似体、またはその塩もしくは酸を含む。いくつかの実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／カバジタキセル（またはカバジタキセルの塩もしくは酸）のモル比は、１〜２０：１の範囲、またはその間の任意の範囲である。さらなる実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／カバジタキセル（またはカバジタキセルの塩もしくは酸）のモル比は、１〜１０：１の範囲、またはその間の任意の範囲である。さらなる実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／カバジタキセル（またはカバジタキセルの塩もしくは酸）のモル比は、２〜８：１の範囲、またはその間の任意の範囲である。いくつかの実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／カバジタキセル（またはカバジタキセルの塩もしくは酸）のモル比は、１：１、２：１、３：１、４：１、５：１、６：１、７：１、８：１、９：１、１０：１、１１：１、１２：１、１３：１、１４：１、１５：１、１６：１、１７：１、１８：１、１９：１、２０：１、（２１〜５０）：１、または＞５０：１である。他の実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／カバジタキセル（またはカバジタキセルの塩もしくは酸）のモル比は、１：１〜２０、１：１〜１０、もしくは１：２〜８、またはその間の任意の範囲である。いくつかの実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／カバジタキセル（またはカバジタキセルの塩もしくは酸）のモル比は、１：１、１：２、１：３、１：４、１：５、１：６、１：７、１：８、１：９、１：１０、１：１１、１：１２、１：１３、１：１４、１：１５、１：１６、１：１７、１：１８、１：１９、１：２０、１：（２１〜５０）、または１：＞５０である。さらなる実施形態では、αＰＴＨＦ／カバジタキセル（またはカバジタキセルの塩もしくは酸）複合体は、（例えば、本明細書に記載される通りに、または当該技術分野で知られている別の方法で）リポソーム中に被包されている。
【０１８８】
さらなる実施形態では、本開示は、αＰＴＨＦおよび別の代謝拮抗薬、またはその塩もしくは酸を含む、複合体を提供する。代謝拮抗薬は、正常な生化学反応に必要な代謝物と類似しているが、細胞分裂などの１つまたは複数の細胞の正常機能に干渉する程度にそれとは異なる構造を有する化学物質である。いくつかの実施形態では、本開示は、αＰＴＨＦおよびテトラヒドロ葉酸（ＴＨＦ）、またはその塩もしくは酸を含む複合体を提供する。いくつかの実施形態では、本開示は、αＰＴＨＦ、およびゲムシタビン、フルオロウラシル、カペシタビン、葉酸代謝拮抗薬（例えば、テトラヒドロ葉酸、テトラヒドロ葉酸）、テガフール、シトシンアラビノシッド、チオグアニン、５−アザシチジン、６−メルカプトプリン、アザチオプリン、６−チオグアニン、ペントスタチン、リン酸フルダラビン、およびクラドリビン、ならびにそのいずれかの薬学的に許容可能な塩もしくは酸、または誘導体からなる群より選択される代謝拮抗薬を含む、複合体を提供する。いくつかの実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／代謝拮抗薬（または代謝拮抗薬の塩もしくは酸）のモル比は、１〜２０：１の範囲、またはその間の任意の範囲である。さらなる実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／代謝拮抗薬（または代謝拮抗薬の塩もしくは酸）のモル比は、１〜１０：１の範囲、またはその間の任意の範囲である。さらなる実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／代謝拮抗薬（または代謝拮抗薬の塩もしくは酸）のモル比は、２〜８：１の範囲、またはその間の任意の範囲である。いくつかの実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／代謝拮抗薬（または代謝拮抗薬の塩もしくは酸）のモル比は、１：１、２：１、３：１、４：１、５：１、６：１、７：１、８：１、９：１、１０：１、１１：１、１２：１、１３：１、１４：１、１５：１、１６：１、１７：１、１８：１、１９：１、２０：１、（２１〜５０）：１、または＞５０：１である。他の実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／代謝拮抗薬（または代謝拮抗薬の塩もしくは酸）のモル比は、１：１〜２０、１：１〜１０、もしくは１：２〜８、またはその間の任意の範囲である。いくつかの実施形態では、複合体中のαＰＴＨＦ／代謝拮抗薬（または代謝拮抗薬の塩もしくは酸、またはプロドラッグ）のモル比は、１：１、１：２、１：３、１：４、１：５、１：６、１：７、１：８、１：９、１：１０、１：１１、１：１２、１：１３、１：１４、１：１５、１：１６、１：１７、１：１８、１：１９、１：２０、１：（２１〜５０）、または１：＞５０である。さらなる実施形態では、αＰＴＨＦ／代謝拮抗薬（または代謝拮抗薬の塩もしくは酸、またはプロドラッグ）複合体は、（例えば、本明細書に記載される通りに、または当該技術分野で知られている別の方法で）リポソーム中に被包されている。
【０１８９】
さらなる実施形態では、本開示は、αＰＴＨＦ（例えば、本明細書に開示されるαＰＴＨＦ）とシクロデキストリンの複合体を提供する。シクロデキストリン（ＣＤ）は、複合体の形成を介して多数の薬物の物理化学的性質を改善することが示されている環状オリゴ糖のグループである。ＣＤは、α−（１，４）結合により結合した複数のＤ−グルコース単位から構成される環状オリゴ糖である。この環状構造によって疎水性の内部空洞が生じ、ＣＤが短い錐体形状になる。環の端部に多数のヒドロキシル基が位置しているため、ＣＤは親油にも水溶性にもなる。その結果、ＣＤは、多種多様な疎水性薬剤と複合体を形成し、それにより、これらの複合体化薬剤の物理化学的性質を変化させることができる。
【０１９０】
「シクロデキストリン」または「ＣＤ」という用語は一般に、別途明記されない限り、可変数の（α−１，４）結合Ｄ−グルコピラノシド単位を含み、テトラヒドロ葉酸−ＰＧと複合体を形成できる、親または誘導体化環状オリゴ糖を意味する。各シクロデキストリングルコピラノシドサブユニットは、２位と３位に二級ヒドロキシル基を有し、６位に一級ヒドロキシル基を有する。「親」、「非誘導体化」、または「不活性」シクロデキストリンという用語は、基本式Ｃ６Ｈ１２Ｏ６および追加の化学的置換のないグルコース構造を有するＤ−グルコピラノシド単位を含む、シクロデキストリンを意味する（例えば、６個のＤ−グルコピラノシド単位からなるα−シクロデキストリン、７個のＤ−グルコピラノシド単位からなるβ−シクロデキストリン、および８個のＤ−グルコピラノシド単位からなるα−シクロデキストリン）。ヒドロキシル基を他の官能基で誘導体化することによって、親シクロデキストリンの物理的および化学的性質を改変できる。シクロデキストリン内相に位置する任意の物質は、シクロデキストリンと「複合体化」している、またはシクロデキストリンと複合体（包接複合体）を形成していると言う。
【０１９１】
本明細書で使用される場合、シクロデキストリンがαＰＴＨＦと複合体を形成できる限り、αＰＴＨＦ／シクロデキストリン複合体のシクロデキストリン成分に特に制限はない。特定の実施形態では、シクロデキストリンは、αＰＴＨＦおよび／またはリポソーム被包物との複合体形成を容易にするため、イオン化可能な（例えば、弱塩基性および／または弱酸性の）官能基を有するよう誘導体化されている。
【０１９２】
シクロデキストリンのヒドロキシル基、例えばシクロデキストリン内相の反対側に向いているヒドロキシル基などをイオン化可能な化学基で修飾することにより、シクロデキストリンおよびシクロデキストリンと複合体化した治療剤の添加が容易になることが知られている。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦ／シクロデキストリン複合体のシクロデキストリンは、少なくとも２個、３個、４個、５個、６個、６個、７個、８個、９個、または１０個のイオン化可能な化学基で置換されたヒドロキシル基を有する。「荷電シクロデキストリン」という用語は、ヒドロキシル基のうちの１個または複数個が荷電部分で置換されたシクロデキストリンを意味する。このような部分は、それ自体荷電基であるか、または１つまたは複数の荷電部分で置換された有機部分（例えば、Ｃ１−Ｃ６アルキルまたはＣ１−Ｃ６アルキルエーテル部分）を含むものであり得る。
【０１９３】
いくつかの実施形態では、ＣＤ誘導体の「イオン化可能な」または「荷電」部分は弱イオン化可能である。弱イオン化可能な部分は、弱塩基性または弱酸性の部分である。弱塩基性官能基（Ｗ）は、約６．０〜９．０、６．５〜８．５、７．０〜８．０、７．５〜８．０、およびその間の任意の範囲（端点含む）のＣＨ３−ＷによるｐＫａを有する。同様に、弱酸性官能基（Ｘ）は、約３．０〜７．０、４．０〜６．５、４．５〜６．５、５．０〜６．０、５．０〜５．５、およびその間の任意の範囲（端点含む）のＣＨ３−Ｘによるｌｏｇ解離定数（ｐＫａ）を有する。代表的アニオン性部分には、特に限定されないが、カルボキシレート、カルボキシメチル、スクシニル、スルホニル、ホスフェート、スルホアルキルエーテル、サルフェートカーボネート、チオ炭酸塩、ジチオカーボネート、ホスフェート、ホスホネート、スルホネート、ニトレート、およびボレート基が挙げられる。代表的カチオン性部分には、特に限定されないが、アミノ、グアニジン、および四級アンモニウム基が挙げられる。
【０１９４】
別の実施形態では、誘導体化シクロデキストリンは、「ポリアニオン」または「ポリカチオン」である。ポリアニオンは、負電荷基を２個以上有し、それにより３単位以上の正味の負イオン電荷を生じる、誘導体化シクロデキストリンである。ポリカチオンは、正電荷基を２個以上有し、それにより３単位以上の正味の正イオン電荷を生じる、誘導体化シクロデキストリンである。
【０１９５】
別の実施形態では、誘導体化シクロデキストリンは、「荷電可能な両親媒性物質」である。「荷電可能」は、両親媒性物質がｐＨ４〜ｐＨ８またはｐＨ４〜８．５の範囲のｐＫを有することを意味する。したがって、荷電可能両親媒性物質は弱酸または塩基であり得る。本明細書の「両性」は、アニオン性およびカチオン性特性の両方のイオン化可能な基を有し、（ａ）少なくとも一方、任意選択で、両方のカチオン性およびアニオン性両親媒性物質が荷電可能で、４と８〜８．５との間のｐＫを有する少なくとも１つの電荷基を有し、（ｂ）ｐＨ４でカチオン電荷が優勢であり、かつ（ｃ）ｐＨ８〜８．５でアニオン電荷が優勢である、誘導体化シクロデキストリンを意味する。
【０１９６】
いくつかの実施形態では、「イオン化可能な」または「荷電」誘導体化シクロデキストリンは、全体的には、ポリイオン性であるか、両親媒性であるか、それ以外であるかを問わず、弱くイオン化可能である（例えば、約４．０〜８．５、４．５〜８．０、５．０〜７．５、５．５〜７．０、６．０〜６．５、およびその間の任意の範囲（両端含む）ののｐＫａｉを有する）。
【０１９７】
シクロデキストリンのいずれか１つ、いくつか、または全てのα−Ｄ−グルコピラノシド単位のうちのいずれか１つ、いくつか、または全てのヒドロキシル基は、本明細書に記載される通りにイオン化可能な化学基に改変できる。各シクロデキストリンヒドロキシル基は化学反応性が異なるため、改変部分と反応させることにより、位置および光学異性体の非晶質混合物を作製できる。あるいは、特定の化学によって、事前に改変したα−Ｄ−グルコピラノシド単位を反応させて、均一の生成物を形成させることができる。
【０１９８】
混合物中のシクロデキストリン誘導体で生じる集合体置換は、置換度と呼ばれる用語で説明される。例えば、置換度７を有する６−エチレンジアミノ−β−シクロデキストリンは、６−エチレンジアミノ−β−シクロデキストリン分子あたりのエチレンジアミノ基の数が７である、６−エチレンジアミノ−β−シクロデキストリンの異性体の分布から構成されるであろう。シクロデキストリン誘導体混合物の置換度は、質量分析法または核磁気共鳴分光法を用いて、ルーチンに測定できる。
【０１９９】
一実施形態では、シクロデキストリン内部から反対方向を向いた少なくとも１個のヒドロキシル部分をイオン化可能な化学基で置換する。例えば、少なくとも１つのα−Ｄ−グルコピラノシド単位のＣ２ヒドロキシル、Ｃ３ヒドロキシル、Ｃ６ヒドロキシル、Ｃ２ヒドロキシルとＣ３ヒドロキシル、Ｃ２とＣ６ヒドロキシル、Ｃ３とＣ６ヒドロキシル、およびＣ２−Ｃ３−Ｃ６ヒドロキシル３個全てをイオン化可能な化学基で置換する。任意のこのようなヒドロキシルの組み合わせも同様に、改変シクロデキストリン中の少なくとも２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、最大で全てのアルファ−Ｄ−グルコピラノシド単位を同様に組み合わせることができることに加えて、本明細書に記載されるいずれかの置換度と組み合わさっていてよい。このような誘導体の１つにスルホアルキルエーテルシクロデキストリン（ＳＡＥ−ＣＤ）がある。ベータシクロデキストリンのスルホブチルエーテル誘導体（ＳＢＥ−β−ＣＤ）は、親シクロデキストリンと比較して水溶解度が大幅に改善されていることが明らかにされている。
【０２００】
開示されるリポソーム組成物中で治療剤と複合体化され得る追加のシクロデキストリン誘導体には、γ−ＣＤ上の６−ヒドロキシ基がカルボキシチオアセテートエーテル結合に置き換わったスガマデクスまたはＯｒｇ−２５９６９、およびヒドロキシブテニル−β−ＣＤが挙げられる。代替形態のシクロデキストリンには、２，６−ジ−Ｏ−メチル−β−ＣＤ（ＤＩＭＥＢ）、２−ヒドロキシルプロピル−３−シクロデキストリン（ＨＰ−β−ＣＤ）、ランドムメチル化−β−シクロ−デキストリン（ＲＡＭＥＢ）、スルホブチルエーテルβ−シクロデキストリン（ＳＢＥ−β−ＣＤ）、およびスルホブチルエーテル−γ−シクロデキストリン（ＳＢＥαＣＤ）、スルホブチル化−β−シクロデキストリンナトリウム塩、（２−ヒドロキシプロピル）−アルファ−シクロデキストリン、（２−ヒドロキシプロピル）−β−シクロデキストリン、（２−ヒドロキシプロピル）−γ−シクロ−デキストリン、２，６−ジ−Ｏ−メチル）−β−シクロデキストリン（ＤＩＭＥＢ−５０ヘプタキス）、２，３，６−トリ−Ｏ−メチル）−β−シクロデキストリン（ＴＲＩＭＥＢヘプタキス）、メチル−β−シクロデキストリン、オクタキス（６−デオキシ−６−ヨード）−γ−シクロデキスリン（ｃｙｃｌｏｄｅｘｒｉｎ）、およびオクタキス（６−デオキシ−６−ブロモ）−γ−シクロデキスリンが挙げられる。
【０２０１】
いくつかの実施形態では、シクロデキストリンは、リポソーム内相中で捕捉されるシクロデキストリンの量が増えるよう高い水溶解度を有する。いくつかの実施形態では、シクロデキストリンの水溶解度は、少なくとも１０ｍｇ／ｍＬ、２０ｍｇ／ｍＬ、３０ｍｇ／ｍＬ、４０ｍｇ／ｍＬ、５０ｍｇ／ｍＬ、６０ｍｇ／ｍＬ、７０ｍｇ／ｍＬ、８０ｍｇ／ｍＬ、９０ｍｇ／ｍＬ、１００ｍｇ／ｍＬ、またはそれ以上である。いくつかの実施形態では、シクロデキストリンの水溶性は、１０〜１５０ｍｇ／ｍＬ、２０〜１００ｍｇ／ｍＬ、２０〜７５ｍｇ／ｍＬの範囲内、およびその間の任意の範囲（両端含む）内にある。
【０２０２】
いくつかの実施形態では、シクロデキストリンと、αＰＴＨＦおよび／またはシクロデキストリンと複合体化する他の治療剤との間の結合定数が大きいが好ましく、このような結合定数は、治療剤のサイズに基づきシクロデキストリン中のグルコース単位の数を選択することによって得られる（例えば、Ａｌｂｅｒｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｒｉｔ．Ｒｅｖ．Ｔｈｅｒａｐ．Ｄｒｕｇ  Ｃａｒｒｉｅｒ  Ｓｙｓｔ．１２：３１１−３３７（１９９５）；Ｓｔｅｌｌａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｏｘｉｃｏｌ．Ｐａｔｈｏｌ．３６：３０−４２（２００８を参照）。結合定数がｐＨに依存する場合には、リポソーム内相のｐＨで結合定数が大きくなるようシクロデキストリンを選択できる。その結果、シクロデキストリン存在下での治療剤の溶解度（名目上の溶解度）をさらに改善できる。いくつかの実施形態では、シクロデキストリンと治療剤との結合定数は、１００、２００、３００、４００、５００、６００、７００、８００、９００、１０００、またはそれ以上である。いくつかの実施形態では、シクロデキストリンと治療剤との結合定数は、１００〜１，２００、２００〜１，０００、３００〜７５０、およびその間の任意の範囲である。
【０２０３】
いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦ／シクロデキストリン複合体および／またはシクロデキストリン／治療剤複合体のシクロデキストリンは、誘導体化されていない。
【０２０４】
いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦ／シクロデキストリン複合体および／またはシクロデキストリン／治療剤複合体のシクロデキストリンは、誘導体化されている。さらなる実施形態では、複合体のシクロデキストリン誘導体は、式Ｉ：
【化１】
2021513525.tif 000002
の構造を有し、式中、
ｎは４、５、または６であり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、およびＲ９はそれぞれ独立に、−Ｈ、直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ８アルキレン基、または任意に置換されていてよい直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ６基であり、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、およびＲ９のうちの少なくとも１つは、直鎖または分岐Ｃ１−Ｃ８アルキレン（例えば、Ｃ１−Ｃ８−（アルキレン）−ＳＯ３−基）である。
【０２０５】
いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦ／シクロデキストリン複合体および／またはシクロデキストリン／治療剤複合体のシクロデキストリン誘導体は、式ＩＩ：
【化２】
2021513525.tif 000003
の構造を有し、式中、
ｎは４、５、または６であり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、およびＲ９はそれぞれ独立に、−Ｏ−または−Ｏ−（Ｃ２−Ｃ６アルキレン）−ＳＯ３−基であり；Ｒ１およびＲ２の少なくとも１つは独立に−Ｏ−（Ｃ２−Ｃ６アルキレン）−ＳＯ３−基であり；Ｓ１、Ｓ２、Ｓ３、Ｓ４、Ｓ５、Ｓ６、Ｓ７、Ｓ８、およびＳ９はそれぞれ独立に、薬学的に許容可能なカチオンである。さらなる実施形態では、薬学的に許容可能なカチオンは、Ｌｉ＋、Ｎａ＋、またはＫ＋などのアルカリ金属；Ｃａ２＋、またはＭｇ２＋などのアルカリ土類金属ならびにアンモニウムイオンおよび（Ｃ１−Ｃ６）−アルキルアミン、ピペリジン、ピラジン、（Ｃ１−Ｃ６）−アルカノールアミンおよび（Ｃ４−Ｃ８）−シクロアルカノールアミンのカチオンなどのアミンカチオンから選択される。いくつかの実施形態では、Ｒ１およびＲ２のうちの少なくとも１つは、独立に−Ｏ−（ＣＨ２）ｍＳＯ３−基である−Ｏ−（Ｃ２−Ｃ６アルキレン）−ＳＯ３−基であり、ｍは２〜６、好ましくは２〜４（例えば、−Ｏ−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｓ０３−または−Ｏ−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｓ０３−）であり；およびＳ１、Ｓ２、Ｓ３、Ｓ４、Ｓ５、Ｓ６、Ｓ７、Ｓ８、およびＳ９はそれぞれ独立に、Ｈまたは薬学的に許容可能なカチオンであり、これには、例えば、アルカリ金属（例えば、Ｌｉ＋、Ｎａ＋、Ｋ＋）、アルカリ土類金属（例えば、Ｃａ２＋、Ｍｇ２＋）、アンモニウムイオンならびに（Ｃ１−Ｃ６）−アルキルアミン、ピペリジン、ピラジン、（Ｃ１−Ｃ６）−アルカノールアミンおよび（Ｃ４−Ｃ８）−シクロアルカノールアミンのカチオンなどのアミンカチオンが挙げられる。
【０２０６】
いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦ／シクロデキストリン複合体および／またはシクロデキストリン／治療剤複合体のシクロデキストリン誘導体には、米国特許第６，１３３，２４８号、同第５，８７４，４１８号、同第６，０４６，１７７号、同第５，３７６，６４５号、同第５，１３４，１２７号、同第７，０３４，０１３号、同第６，８６９，９３９号；および国際公開第０２００５／１１７９１１号に開示されているシクロデキストリンがあり、上記文献の内容はそれぞれ、参照により本明細書に優先的に組み込まれる。
【０２０７】
いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦ／シクロデキストリン複合体および／またはシクロデキストリン／治療剤複合体のシクロデキストリン誘導体は、スルホアルキルエーテルシクロデキストリンである。いくつかの実施形態では、複合体のシクロデキストリン誘導体は、ＣＡＰＴＩＳＯＬ（登録商標）（ＣｙＤｅｘ  Ｐｈａｒｍａ．Ｉｎｃ．，Ｌｅｎｅｘａ，Ｋａｎｓａｓ）などのスルホブチルエーテル−３−シクロデキストリンである。スルホブチルエーテル−３−シクロデキストリンおよびその他のスルホアルキルエーテルシクロデキストリンの作製方法は当技術分野で公知である。
【０２０８】
いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦ／シクロデキストリン複合体および／またはシクロデキストリン／治療剤複合体のシクロデキストリン誘導体は、式ＩＩＩ：
【化３】
2021513525.tif 000004
の化合物であり、式中、Ｒは、
（ａ）（Ｈ）２１−Ｘまたは（−（ＣＨ２）４−ＳＯ３Ｎａ）Ｘ、およびｘ＝１．０〜１０．０、１．０〜５．０、６．０〜７．０、または８．０〜１０．０；
（ｂ）（Ｈ）２１−Ｘまたは（−（ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ３）Ｘ、およびｘ＝１．０〜１０．０、１．０〜５．０、６．０〜７．０、または８．０〜１０．０；
（ｃ）（Ｈ）２１−Ｘまたは（スルホアルキルエーテル）Ｘ、およびｘ＝１．０〜１０．０、１．０〜５．０、６．０〜７．０、または８．０〜１０．０；または
（ｄ）（Ｈ）２１−Ｘまたは（−（ＣＨ２）４−ＳＯ３Ｎａ）Ｘ、およびｘ＝１．０〜１０．０、１．０〜５．０、６．０〜７．０、または８．０〜１０．０である。
【０２０９】
さらなる実施形態では、αＰＴＨＦ／シクロデキストリン複合体および／またはシクロデキストリン／治療剤複合体は、（例えば、本明細書に記載のようにして、または当該技術分野で公知の別の方法で）リポソーム中に被包される。
【０２１０】
ＩＩＩ．αＰＴＨＦ送達媒体
代替的実施形態では、本開示は、αＰＴＨＦ送達システム、およびｉｎ  ｖｉｔｒｏまたはｉｎ  ｖｉｖｏでαＰＴＨＦのペイロードを細胞に送達するためのその使用を提供する。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦを送達媒体と複合体化するか、送達媒体中に組み込む。このような送達媒体は当技術分野で公知であり、特に限定されないが、リポソーム、リポスフェア、ポリマー、ペプチド、タンパク質、抗体（例えば、抗体−αＰＴＨＦ複合体などのＡＤＣ）、細胞成分、環状オリゴ糖（例えば、シクロデキストリン）、ナノ粒子（例えば、脂質ナノ粒子、生分解性ナノ粒子、およびコアシェルナノ粒子）、リポタンパク質粒子、およびその組み合わせが挙げられる。特定の実施形態では、送達媒体はリポソームである。他の特定の実施形態では、送達媒体は抗体または抗原結合抗体フラグメントである。
【０２１１】
Ａ．リポソーム
いくつかの実施形態では、本開示は、αＰＴＨＦ（例えば、本明細書に開示されるαＰＴＨＦ）が被包（すなわち、充填）されたリポソームを含む、リポソーム組成物を提供する。いくつかの実施形態では、リポソーム組成物中のリポソームは、グルタミル基（テトラヒドロ葉酸中のグルタミル基を含む）を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含むαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨＦ中のαＰＴＨＦは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上含む。他の実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨＦ中のαＰＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基を含む。さらなる実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨＦ中のαＰＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを含む。さらなる実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨＦ中のαＰＴＨＦは、ガンマカルボキシル結合を有するグルタミル基を２個以上含む。いくつかの実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨＦ中のポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸は、アルファカルボキシル結合およびガンマカルボキシル結合の両方を有するグルタミル基を少なくとも１個含む。いくつかの実施形態では、リポソーム組成物は、テトラグルタミン酸化ＴＨＦを含むリポソームを含む。いくつかの実施形態では、リポソーム組成物は、ペンタグルタミン酸化ＴＨＦを含むリポソームを含む。いくつかの実施形態では、リポソーム組成物は、ヘキサグルタミン酸化αＰＴＨＦ（Ｌｐ−αＰＴＨＦ）を含むリポソームを含む。いくつかの実施形態では、リポソーム組成物は、アニオン性または中性のリポソームを含む。いくつかの実施形態では、リポソーム組成物は、カチオン性のリポソームを含む。いくつかの実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨＦ組成物はペグ化されていない。いくつかの実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨＦ組成物は標的化されていない（ＮＴＬｐ−αＰＴＨＦ）。他の実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨＦ組成物は標的化されている（ＴＬｐ−αＰＴＨＦ）。いくつかの実施形態では、リポソーム組成物は、２０ｎｍ〜５００ｎｍの範囲、またはその間の任意の範囲の直径を有するリポソームを含む。いくつかの実施形態では、リポソーム組成物は、２０ｎｍ〜４００ｎｍの範囲、またはその間の任意の範囲の直径を有するリポソームを含む。いくつかの実施形態では、リポソーム組成物は、２０ｎｍ〜３００ｎｍの範囲、またはその間の任意の範囲の直径を有するリポソームを含む。いくつかの実施形態では、リポソーム組成物は、２０ｎｍ〜２００ｎｍの範囲、またはその間の任意の範囲の直径を有するリポソームを含む。さらなる実施形態では、リポソーム組成物は、２０ｎｍ〜１５０ｎｍの範囲、またはその間の任意の範囲のリポソームを含む。さらなる実施形態では、リポソーム組成物は、８０ｎｍ〜１２０ｎｍの範囲、またはその間の任意の範囲の直径を有するリポソームを含む。さらなる実施形態では、リポソームを調製する工程で、３０〜７０％、３０〜６０％、もしくは３０〜５０％ｗ／ｗ、またはその間の任意の範囲のαＰＴＨがＬｐ−αＰＴＨＦ中に被包（封入）される。いくつかの実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨＦ組成物は、少なくとも１％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７���％、７５％、または７５％ｗ／ｗ超のポリグルタミン酸化アルファＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームを調製する工程で、少なくとも１％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、または７５％ｗ／ｗ超のαＰＴＨＦがＬｐ−αＰＴＨＦ中に被包される。
【０２１２】
いくつかの実施形態では、提供されるリポソームは、その外側に配置された免疫刺激剤、検出可能マーカー、または両方をさらに含む。免疫刺激剤または検出可能なマーカーは、例えば、任意選択でリポソームの立体安定化成分との結合を含め、リポソームの外側とイオン結合または共有結合することができる。
【０２１３】
「免疫賦活薬」および「免疫賦活剤」としても知られる「免疫刺激剤」という用語は、免疫系のいずれかの成分の活性化または活性増大を誘導することにより免疫（既存の免疫応答を含む）を刺激する物質を意味する。これらの免疫刺激剤には、ハプテン、アジュバント、タンパク質免疫刺激剤、核酸免疫刺激剤、および化学的免疫刺激剤のうちの１つまたは複数が挙げられる。多くのアジュバントは、脂質Ａ、百日咳菌または結核菌由来タンパク質などの免疫応答を刺激するように設計された物質を含む。特定のアジュバントは、例えば、フロイント不完全アジュバントおよび完全アジュバント（Ｄｉｆｃｏ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｄｅｔｒｏｉｔ，Ｍｉｃｈ．）；Ｍｅｒｃｋアジュバント６５（Ｍｅｒｃｋ  ａｎｄ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｉｎｃ．，Ｒａｈｗａｙ，Ｎ．Ｊ．）；ＡＳ−２（ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ  Ｂｅｅｃｈａｍ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，ＰＡ．）；水酸化アルミニウムゲル（ミョウバン）またはアルミニウムリン酸塩などのアルミニウム塩；カルシウム、鉄、または亜鉛の塩；アシル化チロシンの不溶性の懸濁液；アシル化糖類；カチオンでまたはアニオンで誘導体化したポリサッカライド；ポリホスファゼン；生分解性マイクロスフェア；モノホスホリルリピドＡおよびｑｕｉｌ  Ａ；ＩＦＮアルファ、ＩＦＮアルファ、ＦＬＴ３リガンド；および免疫賦活性抗体（例えば、抗ＣＴＬＡ−４、抗ＣＤ２８、抗ＣＤ３）として商業的に入手可能である。ＧＭ−ＣＳＦ、インターロイキン２、７、１２、および１５などのサイトカイン、ならびにその他の類似した成長因子もアジュバントとして使用できる。好ましい実施形態では、免疫賦活薬は、フルオレセイン、ＤＮＰ、ベータグルカン、ベータ−１，３−グルカン、ベータ−１，６−グルカンからなる群より選択される少なくとも１つのものであり得る。さらなる好ましい実施形態では、免疫賦活薬は、トール様受容体（ＴＬＲ）調節剤である。さらなる実施形態では、トール様受容体（ＴＬＲ）調節剤は、酸化型低密度リポタンパク質（例えば、ＯＸＰＡＣ、ＰＧＰＣ）、エリトランリピド（例えば、Ｅ５５６４）、およびレゾルビンのうちの１つまたは複数のものである。いくつかの実施形態では、リポソームはフルオレセインイソチオシアネート（ＦＩＴＣ）を含み、ＦＩＴＣは、本発明者らの実験に基づけば、驚くべきことに免疫賦活薬および検出可能マーカーの両方の役割を果たす。
【０２１４】
いくつかの実施形態では、リポソームは検出可能マーカーを含む。検出可能マーカーには、例えば、当該技術分野で公知の任意の好適な手段、例えば、少なくとも、磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）、光学画像法、蛍光／発光画像法、および／または核画像法技術によって検出可能な放射性同位元素、蛍光化合物、生物発光化合物、化学発光化合物、金属キレート剤、酵素、色素、インク、磁性化合物、生体触媒、または顔料が挙げられる。
【０２１５】
いくつかの実施形態では、免疫刺激剤および／または検出可能マーカーをリポソームとの同時インキュベーションによって外側に結合させる。例えば、アビジン／ビオチン結合または金属キレート結合（例えば、Ｎｉ−ＮＴＡ）などの疎水性相互作用またはイオン結合によって、免疫刺激剤および／または検出可能マーカーをリポソーム膜に結合させ得る。あるいは、例えば、リポソーム成分またはＰＥＧである立体安定剤と共有結合させることなどにより、免疫刺激剤または検出可能マーカーをリポソームの外側に共有結合させ得る。
【０２１６】
いくつかの実施形態では、リポソームは、サイトゾルを含む目的の細胞内区画へのリポソームの取り込みを増大させる薬剤をさらに含む。
【０２１７】
いくつかの実施形態では、リポソームは、ミトコンドリア標的化薬剤を含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、トリフェニルホスホニウム（ＴＰＰ）を含む。ＴＰＰを用いたリポソームの表面官能化の方法と機序は、当技術分野で公知である（例えば、ｐｅｇスペーサー基を介して脂質アンカーと結合させ、ＴＰＰをステアリル基で修飾する（ステアリルトリフェニルホスホニウム（ＳＴＰＰ）））。いくつかの実施形態では、リポソームは、高密度オクタアルギニンを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、スフィンゴミエリンおよび／またはスフィンゴミエリン代謝物を含む。本発明のリポソームを処方するために使用されるスフィンゴミエリン代謝物は、例えば、セラミド、スフィンゴシンまたはスフィンゴシン１−ホスフェートを含み得る。いくつかの実施形態では、リポソームはローダミン１２３を含む。いくつかの実施形態では、リポソームはミトコンドリア透過性ペプチドを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、マイトフュージンペプチド、ミトコンドリアの標的化シグナルペプチド、およびアンテナペディアヘリックスＩＩＩホメオドメイン細胞膜透過性ペプチド（ＡＮＴ）（例えば、ＲＱＩＫＩＷＦＱＮＲＲＭＫＷＫＫＲＫＫＲＲＱＲＲＲ（配列番号１）、ＲＫＫＲＲＸＲＲＲＧＣ（式中、Ｘは任意の天然または非天然アミノ酸である）（配列番号２）、ＣＣＧＣＣＡＡＧＡＡＧＣＧ（配列番号３）、ＧＣＧＴＧＣＡＣＡＣＧＣＧＣＧＴＡＧＡＣＴＴＣＣＣＣＣＧＣＡＡＧＴＣＡＣＴＣＧＴＴＡＧＣＣＣＧＣＣＡＡＧＡＡＧＣＧＡＣＣＣＣＴＣＣＧＧＧＧＣＧＡＧＣＴＧＡＧＣＧＧＣＧＴＧＧＣＧＣＧＧＧＧＧＣＧＴＣＡＴ（配列番号４）、ＡＣＧＴＧＣＡＴＡＣＧＣＡＣＧＴＡＧＡＣＡＴＴＣＣＣＣＧＣＴＴＣＣＣＡＣＴＣＣＡＡＡＧＴＣＣＧＣＣＡＡＧＡＡＧＣＧＴＡＴＣＣＣＧＣＴＧＡＧＣＧＧＣＧＴＧＧＣＧＣＧＧＧＧＧＣＧＴＣＡＴＣＣＧＴＣＡＧＣＴＣ（配列番号５）、またはＡＣＴＴＣＣＣＣＣＧＣＡＡＧＴＣＡＣＴＣＧＴＴＡＧＣＣＣＧＣＣＡＡＧＡＡＧＣＧＡＣＣＣＣＴＣＣＧＧＧＧＣＧＡＧＣＴＧ（配列番号６））、またはそのミトコンドリア透過性フラグメントからなる群より選択されるミトコンドリア浸透剤を含む。
【０２１８】
いくつかの実施形態では、提供されるリポソーム組成物中のリポソームは、グアニジンリッチペプトイド、テトラグアニジウム、トリグアニジウム、ジグアニジウム、モノグアニジウム、グアニジンリッチポリカーバメート、ベータオリゴアルギニン、プロリンリッチデンドリマー、およびホスホニウム塩（例えば、メチルトリフェニルホスホニウムおよび／またはテトラフェニルホスホニウム）から選択されるミトコンドリア浸透剤を含む。
【０２１９】
いくつかの実施形態では、提供されるリポソーム組成物中のリポソームは、スフィンゴミエリンおよび／またはステアリルオクタアルギニンを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、スフィンゴミエリンおよび／またはステアリルオクタアルギニンを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ＤＯＰＥ、スフィンゴミエリン、ステアリルオクタアルギニンスフィンゴミエリンおよびステアリルオクタアルギニンを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ＤＯＰＥ、スフィンゴミエリン、ステアリルオクタアルギニンスフィンゴミエリンおよびステアリルオクタアルギニンを９：２：１のモル比で含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ＭＩＴＯポーター（登録商標）システムまたはその変形体を含む。
【０２２０】
いくつかの実施形態では、提供されるリポソーム組成物中のリポソームは、細胞膜を横断するリポソームの送達を容易にし、リポソームに対しエンドサイトーシス経路およびリソソームの過酷な環境をバイパスする能力を付与する、膜透過剤などの薬剤を含む。膜透過剤は当技術分野で公知であり、提供されるリポソーム組成物の製造および使用にルーチンに使用し、応用できる。いくつかの実施形態では、膜浸透剤／リソソームバイパス剤はクロロキンである。いくつかの実施形態では、膜透過剤は細胞透過性ペプチドである。いくつかの実施形態では、提供されるリポソーム組成物中のリポソームは、以下の群：ＲＫＫＲＲＱＲＲＲ（配列番号７）、ＧＲＫＫＲＲＱＲＲＲＴＰＱ（配列番号８）、ＹＧＲＫＫＲＲＱＲＲＲ（配列番号９）、ＡＡＶＡＬＬＰＡＶＬＬＡＬＬＡ（配列番号１０）、ＭＧＬＧＬＨＬＬＶＬＡＡＡＬＱ（配列番号１１）、ＧＡＬＦＬＧＦＬＧＡＡＧＳＴＭ（配列番号１２）、ＡＧＹＬＬＧＫＩＮＬＫＡＬＡＡＬＡＫＫＩＬ（配列番号１３）、ＲＶＩＲＶＷＦＱＮＫＲＣＫＤＫＫ（配列番号１４）、ＲＱＩＫＩＷＦＱＮＲＲＭＫＷＫＫ（配列番号１５）、ＧＬＦＥＡＩＡＧＦＩＥＮＧＷＥＧＭＩＤＧ（配列番号１６）、ＧＷＴＬＮＳＡＧＹＬＬＧＫＩＮ（配列番号１７）、ＲＳＱＳＲＳＲＹＹＲＱＲＱＲＳ（配列番号１８）、ＬＡＩＰＥＱＥＹ（配列番号１９）、ＬＧＩＡＥＱＥＹ（配列番号２０）、ＬＧＩＰＡＱＥＹ（配列番号２１）、ＬＧＩＰＥＡＥＹ（配列番号２２）、ＬＧＩＰＥＱＡＹ（配列番号２３）、ＬＧＩＡＥＡＥＹ（配列番号２４）、ＬＧＩＰＥＡＡＹ（配列番号２５）、ＬＧＩＡＥＱＡＹ（配列番号２６）、ＬＧＩＡＥＡＡＹ（配列番号２７）、ＬＬＩＩＬＲＲＲＩＲＫＱＡＨＡＨＳＫ（配列番号２８）、ＬＫＡＬＡＡＬＡＫＫＩＬ（配列番号２９）、ＫＬＡＬＫＬＡＬＫＡＬＫＡＡＬＫＬＡ（配列番号３０）、ＫＥＴＷＷＥＴＷＷＴＥＷＳＱＰＫＫＫＲＫＶ（配列番号３１）、ＤＨＱＬＮＰＡＦ（配列番号３２）、ＤＰＫＧＤＰＫＧ（配列番号３３）、ＶＴＶＴＶＴＶＴＶＴＧＫＧＤＰＫＰＤ（配列番号３４）、ＲＱＩＫＩＷＦＱＮＲＲＭＫＷＫＫ（配列番号３５）、ＧＲＫＫＲＲＱＲＲＲＰＰＱ（配列番号３６）、ＧＷＴＬＮＳＡＧＹＬＬＧＫＩＮＬＫＡＬＡＡＬＡＫＫＩＬ（配列番号３７）、ＧＲＫＫＲＲＱＲＲＲ（配列番号３８）、ＲＲＲＲＲＲＲ（配列番号３９）、ＲＲＲＲＲＲＲＲ（配列番号４０）、ＲＲＲＲＲＲＲＲＲ（配列番号４１）、ＲＲＲＲＲＲＲＲＲＲ（配列番号４２）、ＲＲＲＲＲＲＲＲＲＲＲ（配列番号４３）、およびＹＴＩＷＭＰＥＮＰＲＰＧＴＰＣＤＩＦＴＮＳＲＧＫＲＡＳＮＧＧＧＧ（Ｒ）ｎ（式中、Ｌ−および／またはＤ型でｎ＝２〜１５Ｒ）（配列番号４４）、またはこれらの細胞透過性フラグメントから選択される膜透過剤を含む。
【０２２１】
上で考察した通り、リポソームは、その循環血中での寿命を延長できる立体安定剤を含み得る。立体安定剤を組み込むこれらの実施形態では、立体安定剤は、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）；ポリ−Ｌ−リシン（ＰＬＬ）；モノシアロガングリオシド（ＧＭ１）；ポリ（ビニルピロリドン）（ＰＶＰ）；ポリ（アクリルアミド）（ＰＡＡ）；ポリ（２−メチル−２−オキサゾリン）；ポリ（２−エチル−２−オキサゾリン）；ホスファチジルポリグリセロール；ポリ［Ｎ−（２−ヒドロキシプロピル）メタクリルアミド］；両親媒性ポリ−Ｎ−ビニルピロリドン；Ｌ−アミノ酸ベースポリマー；オリゴグリセリン、ポリエチレングリコールおよびポリプロピレンオキシド含有コポリマー、ポロキサマー１８８、およびポリビニルアルコールからなる群より選択される少なくとも１つのメンバーであり得る。いくつかの実施形態では、立体安定剤または立体安定剤群はＰＥＧである。一実施形態では、立体安定剤はＰＥＧである。さらなる実施形態では、ＰＥＧは、２００〜５０００ダルトンの数平均分子量（Ｍｎ）を有する。これらのＰＥＧは、直鎖、分岐鎖、星形、または櫛形構造など任意の構造であり得、商業的に入手できる。
【０２２２】
いくつかの実施形態では、リポソーム組成物はペグ化リポソームを含む（ＰＬｐ−αＰＴＨＦ）。いくつかの実施形態では、リポソーム組成物中のペグ化リポソームは、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含むαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨＦ中のαＰＴＨＦは、Ｌ型のグルタミル基を２個以上含む。他の実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨＦ中のαＰＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基を含む。さらなる実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨＦ中のαＰＴＨＦは、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを含む。さらなる実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨＦ中のポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸は、アルファ結合を有するグルタミル基を２個以上含む。いくつかの実施形態では、少なくとも１個のグルタミル基が、アルファ結合およびガンマ結合の両方を有する。いくつかの実施形態では、リポソーム組成物は、ペンタグルタミン酸化ＴＨＦを含むペグ化リポソームを含む。さらなる実施形態では、リポソームは、Ｌ−ペンタグルタミン酸化ＴＨＦ、Ｄ−ペンタグルタミン酸化ＴＨＦ、またはＬ−およびＤ−ペンタグルタミン酸化ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソーム組成物は、ヘキサグルタミン酸化ＴＨＦを含むペグ化リポソームを含む。さらなる実施形態では、リポソームは、Ｌ−ヘキサグルタミン酸化αＰＴＨＦ、Ｄ−ヘキサグルタミン酸化ＴＨＦ、またはＬ−およびＤ−ヘキサグルタミン酸化ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソーム組成物は、アニオン性または中性のペグ化リポソームを含む。いくつかの実施形態では、リポソーム組成物は、カチオン性のペグ化リポソームを含む。いくつかの実施形態では、ＰＬｐ−αＰＴＨＦ組成物は標的化されていない（ＮＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ）。他の実施形態では、ＰＬｐ−αＰＴＨＦ組成物は標的化されている（ＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ）。いくつかの実施形態では、リポソーム組成物は、少なくとも１％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、または７５％ｗ／ｗ超のαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソーム組成物は、リポソームを調製する工程で、少なくとも１％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、または７５％ｗ／ｗ超のαＰＴＨＦがＰＬｐ−αＰＴＨＦ中に被包（封入）されるを含む、ペグ化リポソームを含む。いくつかの実施形態では、リポソーム組成物は、２０ｎｍ〜５００ｎｍの範囲の直径を有するペグ化リポソームを含む。いくつかの実施形態では、リポソーム組成物は、２０ｎｍ〜４００ｎｍの範囲の直径を有するペグ化リポソームを含む。いくつかの実施形態では、リポソーム組成物は、２０ｎｍ〜３００ｎｍの範囲の直径を有するペグ化リポソームを含む。いくつかの実施形態では、リポソーム組成物は、２０ｎｍ〜２００ｎｍの範囲の直径を有するペグ化リポソームを含む。さらなる実施形態では、リポソーム組成物は、８０ｎｍ〜１２０ｎｍの範囲の直径を有するペグ化リポソームを含む。
【０２２３】
いくつかの実施形態では、提供されるリポソーム組成物中のポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸の７０％超、８０％超、または９０％超がペンタグルタミン酸化されている。いくつかの実施形態では、提供されるリポソーム組成物中のポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸の７０％超、８０％超、または９０％超がヘキサグルタミン酸化されている。いくつかの実施形態では、組成物中のポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸の７０％超、８０％超、または９０％超が、グルタミル基を４〜１０個、４〜６個、または６個以上有する。
【０２２４】
いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦ組成物（例えば、ポリグルタミン酸と送達媒体、例えばポリグルタミン酸を含むリポソームなど）は、水溶液中に存在する。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦ組成物を体表面積１平方メートル（ｍ２）当たり０．００５〜５０００ｍｇ、またはその間の任意の範囲のαＰＴＨＦの投与量で、リポソーム組成物の形で投与する。さらなる実施形態では、αＰＴＨＦ組成物を体表面積１平方メートル当たり０．１〜１０００ｍｇ、またはその間の任意の範囲のαＰＴＨＦの投与量で、リポソーム組成物の形で投与する。
【０２２５】
（１）リポソーム組成物
リポソーム組成物中に含まれるリポソームの脂質および他の成分は、当該技術分野で公知の任意の脂質、脂質の組み合わせと比率、または脂質と他のリポソーム成分の組み合わせ、およびそのそれぞれの比率であり得る。ただし、当業者には、特に限定されないが、本明細書で考察するポリグルタミン酸化アルファＴＨＦなどの任意の特定の薬物のリポソーム被包は、有用で機能的なリポソーム製剤を得るための実質的にルーチンの実験を含み得ることが理解されよう。提供されるリポソームは一般に、任意のリポソーム構造、例えば、１つもしくは複数の脂質二重層によって外側の媒体から隔離された内部空間を有する構造、または膜が内部を隔離する親油性の中心部分を備えた半透膜を有する任意のマイクロカプセル構造を有し得る。脂質二重層は、親水性部（親水性部分）および疎水性部（疎水性部分）を特徴とする任意の構造の両親媒性分子であり得る。通常、二重層中の両親媒性分子は、２次元シートに配置され、そこでは、疎水性部分がシートの内側に向き、親水性部分が外側を向く。提供されるリポソームを形成する両親媒性分子は、既知の、または今後発見される任意の両親媒性分子（例えば、合成または天然起源の脂質または生体適合性脂質）であり得る。リポソームは、両親媒性ポリマーおよび界面活性剤、例えば、ポリマーソームおよびニオソームにより形成することができる。本開示の目的には、特に限定されないが、これらのリポソーム形成材料を「脂質」とも呼ぶ。
【０２２６】
本明細書に提供されるリポソーム組成物製剤は、液体または乾燥粉末もしくは乾燥ケーキなどの乾燥形態であり得る。乾燥粉末または乾燥ケーキは、例えば、凍結乾燥条件下で一次乾燥を実施したもの、または一次乾燥のみもしくは一次乾燥と二次乾燥の両方を実施したものであり得る。乾燥形態では、粉末またはケーキは、例えば、１％〜６％の水分、例えば、２％〜５％の水分または２％〜４％の水分を有し得る。乾燥法の１つの例として、凍結乾燥（ｌｙｏｐｈｉｌｉｚａｔｉｏｎ）（凍結乾燥（ｆｒｅｅｚｅ−ｄｒｙｉｎｇ）または凍結乾燥（ｃｒｙｏｄｅｓｓｉｃａｔｉｏｎ）とも呼ばれる）がある。本開示のいずれかの組成物および方法は、リポソーム、凍結乾燥リポソーム、または凍結乾燥リポソームから再構成したリポソームを含み得る。いくつかの実施形態では、開示される組成物および方法は、１つまたは複数の凍結乾燥保護剤または凍結保護物質を含む。これらの保護剤は通常、糖類（単糖、二糖、および多糖類）、多価アルコール、およびその誘導体、グリセロールもしくはポリエチレングリコール、トレハロース、マルトース、スクロース、グルコース、ラクトース、デキストラン、グリセロール、またはアミノグリコシドなどのポリヒドロキシ化合物である。さらなる実施形態では、凍結乾燥保護剤または凍結保護物質は、リポソームの外側、リポソームの内側、またはリポソームの外側および内側の溶液の最大１０％または最大２０％を占める。
【０２２７】
いくつかの実施形態では、リポソームは、その循環血中での寿命を延長する立体安定剤を含む。１つまたは複数の立体安定剤、例えば親水性高分子（ポリエチレングリコール（ＰＥＧ））、糖脂質（モノシアロガングリオシド（ＧＭ１））、またはその他のものなどが、リポソーム表面に直接隣接した空間を占め、他の高分子をこの空間から排除する。その結果、血漿オプソニンのリポソーム表面へのアクセスと結合が妨害され、したがって、マクロファージのこのようなリポソームとの相互作用、または任意の他の除去機序が阻害され、循環血中のリポソームの寿命が延長される。いくつかの実施形態では、立体安定剤または立体安定剤群は、ＰＥＧまたはＰＥＧを含む組み合わせである。さらなる実施形態では、立体安定剤は、ＰＥＧまたは２００〜５０００ダルトンの数平均分子量（Ｍｎ）を有するＰＥＧを含む組み合わせである。これらのＰＥＧは、直鎖、分岐鎖、星形、または櫛形構造など任意の構造であり得、商業的に入手できる。
【０２２８】
開示されるリポソームの直径は、特に限定されない。いくつかの実施形態では、リポソームは、例えば３０〜１５０ｎｍ（ナノメートル）の範囲の直径を有する。他の実施形態では、リポソームは、４０〜７０ｎｍの範囲の直径を有する。
【０２２９】
リポソームの特性は、リポソームの製造に使用する脂質の性質による影響を受ける。これまでに多種多様な脂質がリポソームの製造に使用されてきた。これらには、カチオン性、アニオン性および中性脂質が含まれる。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦを含むリポソームは、アニオン性または中性である。他の実施形態では、提供されるリポソームはカチオン性である。電荷（例えば、アニオン性、中性、またはカチオン性）の判定は、リポソームのゼータ電位を測定することによってルーチンで決定できる。リポソームのゼータ電位は、プラス、ゼロ、またはマイナスであり得る。いくつかの実施形態では、リポソームのゼータ電位はゼロ以下である。いくつかの実施形態では、リポソームのゼータ電位は０〜−１５０ｍＶの範囲である。別の実施形態では、リポソームのゼータ電位は−３０〜−５０ｍＶの範囲である。
【０２３０】
いくつかの実施形態では、カチオン性脂質を用いて、遺伝子導入剤としてよく使用されるカチオン性リポソームを製造する。カチオン性リポソーム上の正電荷が細胞表面の負電荷との相互作用を可能にする。カチオン性リポソームが細胞と結合した後、リポソームは、エンドサイトーシスによって細胞内部に輸送される。
【０２３１】
いくつかの好ましい実施形態では、中性〜アニオン性のリポソームが使用される。好ましい実施形態では、アニオン性リポソームを使用する。例えば、ＨＳＰＣなどの中性脂質とＰＥＧ−ＤＳＰＥなどのアニオン性脂質の混合物を使用することにより、正常細胞に非特異的に結合する可能性が低いアニオン性リポソームが形成される。腫瘍細胞に対する特異的結合は、例えば、葉酸受容体アルファ抗体、葉酸受容体ベータ抗体、および／または葉酸受容体葉酸受容体デルタ抗体を含めた葉酸受容体抗体などの腫瘍標的化抗体を用いて達成できる。
【０２３２】
一例として、脂質のうち少なくとも１つの（またはいくつかの）ものは、親水性部分と疎水性部分（通常、親水性頭部と疎水性尾部）とを有するものとして定義される両親媒性脂質である。疎水性部分は通常、疎水性相（例えば、二重層内）の方に向き、親水性部分は通常、水相（例えば、二重層の外側）の方に向く。親水性部分は、炭水化物、ホスフェート、カルボン酸、スルファト、アミノ、スルフヒドリル、ニトロ、ヒドロキシ、およびその他の類似の基などの極性基または荷電基を含み得る。疎水性部分は、特に限定されないが、長鎖飽和および不飽和脂肪族炭化水素基および１つまたは複数の芳香族、脂環式、または複素環基によって置換された基を含めた無極性基を含み得る。両親媒性化合物の例には、特に限定されないが、リン脂質、アミノ脂質およびスフィンゴ脂質が挙げられる。
【０２３３】
例えば、脂質は通常、リン脂質である。リン脂質には、特に限定されないが、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルグリセロール、ホスファチジルイノシトール、ホスファチジルセリンなどが挙げられる。コレステロール、スフィンゴミエリン、およびカルジオリピンなどの他の脂質膜成分も使用できることを理解されたい。
【０２３４】
本明細書に提供されるリポソームを含む脂質は、アニオン性および中性のリン脂質を含むアニオン性および中性（双性イオン性および極性を含む）脂質であり得る。中性脂質は、選択したｐＨで非荷電または中性の双性イオン形態で存在する。生理学的ｐＨでは、このような脂質には、例えば、ジオレオイルホスファチジルグリセロール（ＤＯＰＧ）、ジアシルホスファチジルコリン、ジアシルホスファチジルエタノールアミン、セラミド、スフィンゴミエリン、ケファリン、コレステロール、セレブロシド、およびジアシルグリセロールが挙げられる。双性イオン性脂質の例には、特に限定されないが、ジオレオイルホスファチジルコリン（ＤＯＰＣ）、ジミリストイルホスファチジルコリン（ＤＭＰＣ）、およびジオレオイルホスファチジルセリン（ＤＯＰＳ）が挙げられる。アニオン性脂質は、生理学的ｐＨで負に帯電している。これらの脂質には、特に限定されないが、ホスファチジルグリセロール、カルジオリピン、ジアシルホスファチジルセリン、ジアシルホスファチジン酸、Ｎ−ドデカノイルホスファチジルエタノールアミン、Ｎ−スクシニルホスファチジルエタノールアミン、Ｎ−グルタリルホスファチジルエタノールアミン、リシルホスファチジルグリセロール、パルミトイルオレオイルホスファチジルグリセロール（ＰＯＰＧ）、および中性脂質と結合したその他のアニオン性修飾基が挙げられる。
【０２３５】
本明細書では、アニオン性脂質と中性脂質をまとめて非カチオン性脂質と呼ぶ。このような脂質は、リンを含み得るが、そのように限定されるわけではない。非カチオン性脂質の例には、レシチン、リゾレシチン、ホスファチジルエタノールアミン、リゾホスファチジルエタノールアミン、ジオレオイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＯＰＥ）、ジパルミトイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＰＰＥ）、ジミリストイルホスホエタノールアミン（ＤＭＰＥ）、ジステアロイルホスファチジ１−エタノールアミン（ＤＳＰＥ）、パルミトイルオレオイルホスファチジルエタノールアミン（ＰＯＰＥ）、パルミトイルオレオイルホスファチジルコリン（ＰＯＰＣ）、卵ホスファチジルコリン（ＥＰＣ）、ジステアロイルホスファチジルコリン（ＤＳＰＣ）、ジオレオイルホスファチジルコリン（ＤＯＰＣ）、ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）、ジオレオイルホスファチジルグリセリン（ＤＯＰＧ）、ジパルミトイルホスファチジルグリセリン（ＤＰＰＧ）、パルミトイルオレヨールホスファチジルグリセリン（ＰＯＰＧ）、１６−０−モノメチルＰＥ、１６−０−ジメチルＰＥ、１８−１−ｔｒａｎｓ  ＰＥ、パルミトイルオレオイルホスファチジルエタノールアミン（ＰＯＰＥ）、１−ステアロイル−２−オレオイルホスファチジエタノールアミン（ＳＯＰＥ）、ホスファチジルセリン、ホスファチジルイノシトール、スフィンゴミエリン、セファリン、カルジオリピン、ホスファチジン酸、セレブロシド、ジセチルホスフェート、およびコレステロールが挙げられる。
【０２３６】
リポソームは、任意のリポソーム組み立て法を用い、当該技術分野で公知のリポソーム成分（ｌｉｐｏｓｏｍａｌ  ｃｏｍｐｏｎｅｎｔ）（リポソーム成分（ｌｉｐｏｓｏｍｅ  ｃｏｍｐｏｎｅｎｔ）とも呼ばれる）を使用して組み立て得る。リポソーム成分には、例えば、ＤＳＰＥ、ＨＳＰＣ、コレステロールなどの脂質、およびこれらの成分の誘導体が挙げられる。他の好適な脂質は、例えば、Ａｖａｎｔｉ  Ｐｏｌａｒ  Ｌｉｐｉｄｓ，Ｉｎｃ．（Ａｌａｂａｓｔｅｒ，Ａｌａｂａｍａ，ＵＳＡ）から商業的に入手できる。アニオン性リポソームの製造に適した入手可能な負電荷または中性電荷の脂質の一部のリストは、例えば、以下の少なくとも１つであり得る：ＤＬＰＣ、ＤＭＰＣ、ＤＰＰＣ、ＤＳＰＣ、ＤＯＰＣ、ＤＭＰＥ、ＤＰＰＥ、ＤＯＰＥ、ＤＭＰＡ・Ｎａ、ＤＰＰＡ・Ｎａ、ＤＯＰＡ・Ｎａ、ＤＭＰＧ・Ｎａ、ＤＰＰＧ・Ｎａ、ＤＯＰＧ・Ｎａ、ＤＭＰＳ・Ｎａ、ＤＰＰＳ・Ｎａ、ＤＯＰＳ・Ｎａ、ＤＯＰＥ−グルタリル・（Ｎａ）２、テトラミリストイルカルディオリピン・（Ｎａ）２、ＤＳＰＥ−ｍＰＥＧ−２０００・Ｎａ、ＤＳＰＥ−ｍＰＥＧ−５０００・Ｎａ、およびＤＳＰＥ−マレイミドＰＥＧ−２０００・Ｎａ。
【０２３７】
いくつかの実施形態では、本明細書に提供されるαＰＴＨＦ組成物は、カチオン性脂質を含むリポソームの形で製剤化される。一実施形態では、特に限定されないが、カチオン性脂質は、国際公開第２０１２／０４０１８４号、同第２０１１／１５３１２０号、同第２０１１／１４９７３３号、同第２０１１／０９０９６５号、同第２０１１／０４３９１３号、同第２０１１／０２２４６０号、同第２０１２／０６１２５９号、同第２０１２／０５４３６５号、同第２０１２／０４４６３８号、同第２０１０／０８０７２４号、同第２０１０／２１８６５号および同第２００８／１０３２７６号、米国特許第７，８９３，３０２号、同第７，４０４，９６９号、同第８，２８３，３３３号、米国特許出願公開第２０１０００３６１１５号、および同第２０１２０２０２８７１号に記載されているカチオン性脂質から選択され、上記文献はそれぞれ、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。別の実施形態では、カチオン性脂質は、特に限定されないが、国際公開第２０１２／０４０１８４号、同第２０１１／１５３１２０号、同第２０１／１１４９７３３号、同第２０１１／０９０９６５号、同第２０１１／０４３９１３号、同第２０１１／０２２４６０号、同第２０１２／０６１２５９号、同第２０１２／０５４３６５号、および同２０１２／０４４６３８号に記載されている式Ａから選択され得るものであり、上記文献はそれぞれ、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。さらに別の実施形態では、カチオン性脂質は、特に限定されないが、国際公開第２００８１０３２７６号の式ＣＬＩ〜ＣＬＸＸＩＸ、米国特許第７，８９３，３０２号の式ＣＬＩ〜ＣＬＸＸＩＸ、米国特許第７，４０４，９６９号の式ＣＬＩ〜ＣＬＸＸＸＸＩＩ、および米国特許出願公開第２０１０００３６１１５号の式Ｉ〜ＶＩから選択され得るものであり、上記文献はそれぞれ、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。非限定的な例として、カチオン性脂質は、（２０Ｚ，２３Ｚ）−Ｎ，Ｎ−ジメチルノナコサ−２０，２３−ジエン−１０−アミン、（１７Ｚ，２０Ｚ）−Ｎ，Ｎ−ジメミル−ヘキサコサ−１７，２０−ジエン−９−アミン、（１Ｚ，１９Ｚ）−Ｎ５Ｎ−ジメチルペンタコサ−１６、１９−ジエン−８−アミン、（１３Ｚ，１６Ｚ）−Ｎ，Ｎ−ジメチルドコサ−１３，１６−ジエン−５−アミン、（１２Ｚ，１５Ｚ）−Ｎ，Ｎ−ジメチルヘンイコサ−１２，１５−ジエン−４−アミン、（１４Ｚ，１７Ｚ）−Ｎ，Ｎ−ジメチルトリコサ−１４，１７−ジエン−６−アミン、（１５Ｚ，１８Ｚ）−Ｎ、Ｎ−ジメチルテトラコサ−１５，１８−ジエン−７−アミン、（１８Ｚ，２１Ｚ）−Ｎ，Ｎ−ジメチルヘプタコサ−１８，２１−ジエン−１０−アミン、（１５Ｚ，１８Ｚ）−Ｎ，Ｎ−ジメチルテトラコサ−１５，１８−ジエン−５−アミン、（１４Ｚ，１７Ｚ）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−トリコサ−１４，１７−ジエン−４−アミン、（１９Ｚ，２２Ｚ）−Ｎ，Ｎ−ジメイヒルオクタコサ−１９，２２−ジエン−９−アミン、（１８Ｚ，２１Ｚ）−Ｎ，Ｎ−ジメチルヘプタコサ−１８，２１−ジエン−８−アミン、（１７Ｚ，２０Ｚ）−Ｎ，Ｎ−ジメチルヘキサ−コサ−１７，２０−ジエン−７−アミン、（１６Ｚ，１���Ｚ）−Ｎ，Ｎ−ジメチルペンタコサ−１６，１９−ジエン−６−アミン、（２２Ｚ，２５Ｚ）−Ｎ，Ｎ−ジメチルヘントリアコンタ−２２，２５−ジエン−１０−アミン、（２１Ｚ，２４Ｚ）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−トリアコンタ−２１，２４−ジエン−９−アミン、（１８Ｚ）−Ｎ，Ｎ−ジメチルヘプタコサ−１８−エン−１０−アミン、（１７Ｚ）−Ｎ，Ｎ−ジメチルヘキサコサ−１７−エン−９−アミン、（１９Ｚ，２２Ｚ）−Ｎ，Ｎ−ジメチルオクタコサ−１９，２２−ジエン−７−アミン、Ｎ，Ｎ−ジメチルヘプタコサン−１０−アミン、（２０Ｚ，２３Ｚ）−Ｎ−エチル−Ｎ−メチルノナコサ−２０，２３−ジエン−１０−アミン、１−［（１１Ｚ，１４Ｚ）−１−ノニルイコサ−１１，１４−ジエン−１−イル］ピロリジン、（２０Ｚ）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−ヘプタコサ−２０−エン−１０−アミン、（１５Ｚ）−Ｎ，Ｎ−ジメチルエプタコサ−１５−エン−１０−アミン、（１４Ｚ）−Ｎ，Ｎ−ジメチルノナコサ−１４−エン−１０−アミン、（１７Ｚ）−Ｎ，Ｎ−ジメチルノナコサ−１７−エン−１０−アミン、（２４Ｚ）−Ｎ，Ｎ−ジメチルトリトリアコンタ−２４−エン−１０−アミン、（２０Ｚ）−Ｎ，Ｎ−ジメチルノナコサ−２０−エン−１０−アミン、（２２Ｚ）−Ｎ，Ｎ−ジメチルヘントリアコンタ−２２−エン−１０−アミン、（１６Ｚ）−Ｎ，Ｎ−ジメチルペンタコサ−１６−エン−８−アミン、（１２Ｚ，１５Ｚ）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−２−ノニルヘンイコサ−１２，１５−ジエン−１−アミン、（１３Ｚ，１６Ｚ）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−３−ノニルドコサ−１３，１６−ジエン−１−アミン、Ｎ，Ｎ−ジメチル−１−［（１Ｓ，２Ｒ）−２−オクチルシクロプロピル］エプタデカン−８−アミン、１−［（１Ｓ，２Ｒ）−２−ヘキシルシクロプロピル］−Ｎ，Ｎ−ジメチルノナデカン−１０−アミン、Ｎ，Ｎ−ジメチル−１−［（１Ｓ，２Ｒ）−２−オクチルシクロプロピル］ノナデカン−１０−アミン、Ｎ，Ｎ−ジメチル−２１−［Ｒ１Ｓ，２Ｒ）−２−オクチルシクロプロピル］ヘンイコサン−１０−アミン，Ｎ，Ｎ−ジメチル−１−［（１Ｓ，２Ｓ）−２−｛［（１Ｒ，２Ｒ）−２−ペンチルシクロプロピル］メチル｝シクロプロピル］ノナデカン−１０−アミン，Ｎ，Ｎ−ジメチル−１−［（１Ｓ，２Ｒ）−２−オクチルシクロプロピル］ヘキサデカン−８−アミン、Ｎ，Ｎ−ジメチル−［（１Ｒ，２Ｓ）−２−ウンデシル−シクロプロピル］テトラデカン−５−アミン、Ｎ，Ｎ−ジメチル−３−｛７−［（１Ｓ、２Ｒ）−２−オクチルシクロプロピル］ヘプチル｝ドデカン−１−アミン、１−［（１Ｒ，２Ｓ）−２−ヘプチルシクロプロピル］−Ｎ，Ｎ−ジメチルオクタデカン−９−アミン、１−［（１Ｓ，２Ｒ）−２−デシルシクロプロピル］−Ｎ，Ｎ−ジメチル−ペンタデカン−６−アミン、Ｎ，Ｎ−ジメチル−１−［（１Ｓ，２Ｒ）−２−オクチルシクロプロピル］ペンタデカン−８−アミン、Ｒ−−Ｎ，Ｎ−ジメチル−１−［（９Ｚ，１２Ｚ）−オクタデカ−９，１２−ジエン−１−イルオキシ］−３−（オクチルオキシ）プロパン−２−アミン、Ｓ−−Ｎ，Ｎ−ジメチル−１−［（９Ｚ，１２Ｚ）−オクタデカ−９，１２−ジエン−１−イルオキシ］−３−（オクチルオ���シ）プロパン−２−アミン、１−｛２−［（９Ｚ，１２Ｚ）−オクタデカ−９，１２−ジエン−１−イルオキシ］−１−［（オクチルオキシ）メチル］エチル｝ピロリジン、（２Ｓ）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−１−［（９Ｚ，１２Ｚ）−オクタデカ−９，１２−ジエン−１−イルオキシ］−３−［（５Ｚ−）−オクタ−５−エン−１−イルオキシ］プロパン−２−アミン、１−｛２−［（９Ｚ，１２Ｚ）−オクタデカ−９，１２−ジエン−１−イルオキシ］−１−［（オクチルオキシ）メチル］エチル｝アゼチジン、（２Ｓ）−１−（ヘキシルオキシ）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−３−［（９Ｚ，１２Ｚ）−オクタデカ−９，１２−ジエン−１−イルオキシ］プロパン−２−アミン、（２Ｓ）−１−（ヘプチルオキシ）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−３−［（９Ｚ，１２Ｚ）−オクタデカ−９，１２−ジエン−１−イルオキシ］プロパン−２−アミン、Ｎ，Ｎ−ジメチル−１−（ノニルオキシ）−３−［（９Ｚ，１２Ｚ）−オクタデカ−９，１２−ジエン−１−イルオキシ］プロパン−２−アミン、Ｎ，Ｎ−ジメチル−１−［（９Ｚ）−オクタデカ−９−エン−１−イルオキシ］−３−（オクチルオキシ）プロパン−２−アミン；（２Ｓ）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−１−［（６Ｚ，９Ｚ，１２Ｚ）−オクタデカ−６，９，１２−トリエン−１−イルオキシ］−３−（オクチルオキシ）プロパン−２−アミン、（２Ｓ）−１−［（１１Ｚ，１４Ｚ）−イコサ−１１，１４−ジエン−１−イルオキシ］−Ｎ，Ｎ−ジメチル−３−（ペンチルオキシ）プロパン−２−アミン、（２Ｓ）−１−（ヘキシルオキシ）−３−［（１１Ｚ，１４Ｚ）−イコサ−１１，１４−ジエン−１−イルオキシ］−Ｎ，Ｎ−ジメチルプロパン−２−アミン、１−［（１１Ｚ，１４Ｚ）−イコサ−１１，１４−ジエン−１−イルオキシ］−Ｎ，Ｎ−ジメチル１−３−（オクチルオキシ）プロパン−２−アミン、１−［（１３Ｚ，１６Ｚ）−ドコサ−１３，１６−ジエン−１−イルオキシ］−Ｎ，Ｎ−ジメチル−３−（オクチルオキシ）プロパン−２−アミン、（２Ｓ）−１−［（１３Ｚ，１６Ｚ）−ドコサ−１３，１６−ジエン−１−イルオキシ］−３−（ヘキシルオキシ）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−プロパン−２−アミン、（２Ｓ）−１−［（１３Ｚ）−ドコサ−１３−エン−１−イルオキシ］−３−（ヘキシルオキシ）−Ｎ，Ｎ−ジメチルプロパン−２−アミン、１−［（１３Ｚ）−ドコサ−１３−エン−１−イルオキシ］−Ｎ，Ｎ−ジメチル−３−（オクチルオキシ）プロパン−２−アミン、１−［（９Ｚ）−ヘキサデカ−９−エン−１−イルオキシ］−Ｎ，Ｎ−ジメチル−３−（オクチルオキシ）プロパン−２−アミン、（２Ｒ）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−Ｈ（１−メチルオクチル）オキシ］−３−［（９Ｚ，１２Ｚ）−オクタデカ−９，１２−ジエン−１−イルオキシ］プロパン−２−アミン、（２Ｒ）−１−［（３，７−ジメチルオクチル）オキシ］−Ｎ，Ｎ−ジメチル−３−Ｒ９Ｚ，１２Ｚ）−オクタデカ−９，１２−ジエン−１−イロキシルプロパン−２−アミン、Ｎ，Ｎ−ジメチル−１−（オクチルオキシ）−３−（｛８−［（１Ｓ，２Ｓ）−２−｛［（１Ｒ，２Ｒ）−２−ペンチルシクロプロピル］−メチル｝シクロプロピル］オクチル｝オキシ）プロパン−２−アミン、Ｎ���Ｎ−ジメチル−１−｛［−（２−オクリルシクロプロピル）オクチル］オキシ｝−３−（オクチルオキシ）プロパン−２−アミンおよび（１１Ｅ，２０Ｚ，２３Ｚ）−Ｎ，Ｎ−ジメチルノナコサ−１１，２０，２−トリエン−１０−アミン、あるいはその薬学的に許容可能な塩もしくは酸または立体異性体から選択され得る。
【０２３８】
一実施形態では、脂質は、切断可能な脂質、例えば国際公開第２０１２／１７０８８９号に記載されているものなどであり得、上記文献は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【０２３９】
カチオン性脂質は、当該技術分野で公知の方法を用いて、かつ／または国際公開第２０１２／０４０１８４号、同第２０１１／１５３１２０号、同第２０１１／１４９７３３号、同第２０１１／０９０９６５号、同第２０１／１０４３９１３号、同第２０１１／０２２４６０号、同第２０１２／０６１２５９号、同第２０１２／０５４３６５号、同第２０１２／０４４６３８号、同第２０１０／０８０７２４号、および同第２０１０／２１８６５号に記載されている通りに、ルーチンに合成することができ、上記文献は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【０２４０】
脂質誘導体は、例えば、少なくとも、１つまたは複数の立体安定剤および／または官能基のリポソーム成分への結合（好ましくは共有結合）を含み得るものであり、この結合後、立体安定剤および／または官能基はリポソーム成分の一部と見すべきである。官能基は、リポソーム成分とタンパク質などの別の部分とを結合させるために使用できる基を含む。このような官能基には、少なくともマレイミドが含まれる。これらの立体安定剤には、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）；ポリ−Ｌ−リシン（ＰＬＬ）；モノシアロガングリオシド（ＧＭ１）；ポリ（ビニルピロリドン）（ＰＶＰ）；ポリ（アクリルアミド）（ＰＡＡ）；ポリ（２−メチル−２−オキサゾリン）；ポリ（２−エチル−２−オキサゾリン）；ホスファチジルポリグリセロール；ポリ［Ｎ−（２−ヒドロキシプロピル）メタクリルアミド］；両親媒性ポリ−Ｎ−ビニルピロリドン；Ｌ−アミノ酸ベースポリマー；およびポリビニルアルコールからなる群のうちの少なくとも１つのものが含まれる。
【０２４１】
いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦ組成物を脂質−ポリカチオン複合体の形で製剤化する。脂質−ポリカチオン複合体の形成は、当該技術分野で公知の方法を用いて、かつ／または米国特許出願公開第２０１２０１７８７０２号に記載されている通りに達成され得るものであり、上記文献は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。非限定的な例として、ポリカチオンには、特に限定されないが、ポリリシン、ポリオルニチン、および／またはポリアルギニンなどのカチオン性ペプチドまたはポリペプチド、ならびに国際公開第２０１２／０１３３２６号に記載されているカチオン性ペプチドが挙げられ、上記文献は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。別の実施形態では、αＰＴＨＦを、特に限定されないが、コレステロールまたはジオレオイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＯＰＥ）などの中性脂質をさらに含む脂質−ポリカチオン複合体の形で製剤化する。
【０２４２】
リポソームの成分は、それと結合する任意の分子（例えば、化学薬品／試薬／タンパク質）を含むことができ、いくつかの実施形態では、提供されるリポソームの成分には、少なくとも、群ＤＳＰＥ、ＤＳＰＥ−ＰＥＧ、ＤＳＰＥ−マレイミド、ＨＳＰＣ；ＨＳＰＣ−ＰＥＧ；ＨＳＰＣ−マレイミド；コレステロール；コレステロール−ＰＥＧ；およびコレステロール−マレイミドから選択されるメンバーが含まれる。いくつかの実施形態では、提供されるリポソームの成分は、ＤＳＰＥ、ＤＳＰＥ−ＰＥＧ、ＤＳＰＥ−マレイミド、ＨＳＰＣ；ＨＳＰＣ−ＰＥＧ；ＨＳＰＣ−マレイミド；コレステロール；コレステロール−ＰＥＧ；およびコレステロール−マレイミドを含む。好ましい実施形態では、リポソームを構成するリポソーム成分は、ＤＳＰＥ；ＤＳＰＥ−ＦＩＴＣ；ＤＳＰＥ−マレイミド；コレステロール；およびＨＳＰＣを含む。
【０２４３】
さらなる実施形態では、本明細書に提供されるリポソーム組成物のリポソームは、酸化型リン脂質を含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ホスファチジルセリン、ホスファチジルイノシトール、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルコリン、および１−パルミトイル−２−アラキドノイル−ｓｎ−グリセロ−２−ホスフェートからなる群より選択されるメンバーの酸化型リン脂質を含む。いくつかの実施形態では、リン脂質は不飽和結合を有する。いくつかの実施形態では、リン脂質は、リン脂質を含むアラキドン酸である。さらなる実施形態では、リン脂質はｓｎ−２−酸素化されている。さらなる実施形態では、リン脂質は断片化されていない。
【０２４４】
いくつかの実施形態では、開示されるリポソーム組成物のリポソームは、酸化型１−パルミトイル−２−アラキドノイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホリルコリン（ＯｘＰＡＰＣ）を含む。本明細書で使用される「ｏｘＰＡＰＣ」という用語は、断片化または完全長酸素化ｓｎ−２残基を含む酸化型リン脂質の混合物を生じる１−パルミトイル−２−アラキドノイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホリルコリン（ＰＡＰＣ）の酸化によって生成する脂質を意味する。十分に特徴付けられている酸化的断片化種は、オメガアルデヒドまたはオメガカルボキシル基を有する５−炭素ｓｎ−２残基を含む。アラキドン酸残基の酸化により、エステル化イソプロスタンを含むリン脂質も生成する。ＯｘＰＡＰＣは、ＯｘＰＡＰＣ中に存在する酸化型生成物のなかでも特に、ＨＯｄｉＡ−ＰＣ、ＫＯｄｉＡ−ＰＣ、ＨＯＯＡ−ＰＣおよびＫＯＯＡ−ＰＣ種を含む。さらなる実施形態では、ｏｘＰＡＰＣは、エポキシイソプロスタン含有リン脂質である。さらなる実施形態では、ｏｘＰＡＰＣは、１−パルミトイル−２−（５，６−エポキシイソプロスタンＥ２）−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（５，６−ＰＥＩＰＣ）、１−パルミトイル−２−（エポキシシクロペンテノン）−ｓｎ−グリセロ−３−ホリルコリン（ＰＥＣＰＣ）、および／または１−パルミトイル−２−（エポキシ−イソプロスタンＥ２）−ｓｎ−グリセロ−４−ホスホコリン（ＰＥＩＰＣ）である。いくつかの実施形態では、リン脂質は不飽和結合を有する。いくつかの実施形態では、リン脂質は、リン脂質を含むアラキドン酸である。さらなる実施形態では、リン脂質は、ｓｎ−２−酸素化されている。さらなる実施形態では、リン脂質は、断片化されていない。
【０２４５】
いくつかの実施形態では、リポソームαＰＴＨＦ組成物は、ペグ化されている（すなわち、ペグ化リポソームポリグルタミン酸化アルファ（例えば、ペンタグルタミン酸化またはヘキサグルタミン酸化）葉酸代謝拮抗薬（ＰＬｐ−αＰＴＨＦまたはＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ））。いくつかの実施形態では、ＰＬｐ−αＰＴＨＦまたはＴＰＬｐ−αＰＴＨＦは水溶性である。すなわち、ＰＬｐ−αＰＴＨＦまたはＴＰＬｐ−αＰＴＨＦは、水溶液の形態である。
【０２４６】
いくつかの実施形態では、開示されるリポソーム組成物のリポソームは、１−パルミトイル−２−グルタロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＰＧＰＣ）；１−パルミトイル−２−（９’オキソ−ノナノイル）−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン；１−パルミトイル−２−アラキノドイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン；１−パルミトイル−２−ミリストイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン；１−パルミトイル−２−ヘキサデシル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン；１−パルミトイル−２−アゼラオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン；および１−パルミトイル−２−アセトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリンから選択される脂質を含む。さらなる実施形態では、リポソームはＰＧＰＣを含む。
【０２４７】
いくつかの実施形態では、リポソーム組成物を含む溶液のｐＨは、ｐＨ５〜８、もしくはｐＨ２〜６、２〜８、またはその間の任意の範囲である。いくつかの実施形態では、リポソーム組成物を含む溶液のｐＨは、ｐＨ５〜８、またはその間の任意の範囲である。いくつかの実施形態では、リポソーム組成物を含む溶液のｐＨは、ｐＨ６〜７、またはその間の任意の範囲である。いくつかの実施形態では、リポソーム組成物を含む溶液のｐＨは、６〜７．５、６．５〜７．５、６．７〜７．５、もしくは６．３〜７．０、またはその間の任意の範囲である。
【０２４８】
いくつかの実施形態では、リポソーム脂質二重層の少なくとも１つの成分は、官能化されている（または反応性である）。本明細書で使用される官能化成分は、試薬および部分を脂質に架橋するのに使用できる反応性基を含む成分である。脂質が官能化されると、それが形成するいずれのリポソームも官能化される。いくつかの実施形態では、反応性基は、架橋剤（またはその他の部分）と反応して架橋を形成するものである。リポソーム脂質二重層中の反応性基は、架橋剤と接触して別の部分（例えば、立体安定剤またはターゲティング部分）と架橋するのを可能にする、脂質上の任意の場所に配置される。いくつかの実施形態では、反応性基は、例えば、リン脂質などの脂質の頭部基中にある。いくつかの実施形態では、反応性基はマレイミド基である。マレイミド基は、特に限定されないが、ジチオトレイトール（ＤＴＴ）などのジチオール架橋剤の存在下で相互に架橋できる。
【０２４９】
上記のもの以外の他の官能化脂質、他の反応性基、および他の架橋剤の使用がさらに企図されることを理解されたい。マレイミド基に加えて、企図される反応性基の他の例には、特に限定されないが、他のチオール反応性基、１級または２級アミンなどのアミノ基、カルボキシル基、ヒドロキシル基、アルデヒド基、アルキン基、アジド基、カルボニル基、ハロアセチル（例えば、ヨードアセチル）基、イミドエステル基、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル、スルフヒドリル基、およびピリジルジスルフィド基が挙げられる。
【０２５０】
官能化および非官能化脂質は、Ａｖａｎｔｉ  Ｐｏｌａｒ  Ｌｉｐｉｄｓ（Ａｌａｂａｓｔｅｒ，ＡＬ）およびＬｉｐｏｉｄ  ＬＬＣ（Ｎｅｗａｒｋ，ＮＪ）を含めた市販品入手源から入手できる。
【０２５１】
（２）リポソーム内部空間
さらなる非限定的実施形態では、提供されるリポソームには内部空間がある。いくつかの実施形態では、内部空間は、特に限定されないが、水溶液を含む。いくつかの実施形態では、内部空間は、本明細書に提供されるαＰＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、リポソームの内部空間は、等張化剤を含む。いくつかの実施形態では。いくつかの実施形態では、等張化剤の濃度（重量％）は、０．１〜２０％、１〜２０％、０．５〜１５％、１〜１５％、もしくは１〜５０％、またはその間の任意の範囲である。いくつかの実施形態では、リポソームの内部空間は、糖（例えば、トレハロース、マルトース、スクロース、ラクトース、マンノース、マンニトール、グリセロール、デキストロース、フルクトース、など）を含む。さらなる実施形態では、糖の濃度（重量％）は、０．１〜２０％、１〜２０％、０．５〜１５％、１〜１５％、もしくは１〜５０％、またはその間の任意の範囲である。いくつかの実施形態では、リポソームの内部空間のｐＨは、ｐＨ２〜８、またはその間の任意の範囲である。いくつかの実施形態では、リポソーム組成物を含む溶液のｐＨは、ｐＨ５〜８、またはその間の任意の範囲である。いくつかの実施形態では、リポソーム組成物を含む溶液のｐＨは、ｐＨ６〜７、またはその間の任意の範囲である。いくつかの実施形態では、リポソーム組成物を含む溶液のｐＨは、６〜７．５、６．５〜７．５、６．７〜７．５、もしくは６．３〜７．０、またはその間の任意の範囲である。いくつかの実施形態では、内部空間は、緩衝液を含む。さらなる実施形態では、緩衝液は、ＨＥＰＥＳ、クエン酸塩、またはリン酸ナトリウム（例えば、第一リン酸ナトリウムおよび／または第二リン酸ナトリウム）から選択される緩衝液である。いくつかの実施形態では、緩衝液は、ＨＥＰＥＳである。いくつかの実施形態では、緩衝液は、クエン酸塩である。いくつかの実施形態では、緩衝液は、リン酸ナトリウム（例えば、第一リン酸ナトリウムおよび／または第二リン酸ナトリウム）である。いくつかの実施形態では、緩衝液は、１５〜２００ｍＭ、またはその間の任意の範囲の濃度である。さらなる実施形態では、緩衝液は、５〜２００ｍＭ、１５〜２００ｍＭ、５〜１００ｍＭ、１５〜１００ｍＭ、５〜５０ｍＭ、１５〜５０ｍＭ、５〜２５ｍＭ、５〜２０ｍＭ、５〜１５ｍＭ、またはその間の任意の範囲の濃度である。いくつかの実施形態では、緩衝液は、１５〜２００ｍＭ、またはその間の任意の範囲の濃度のＨＥＰＥＳである。いくつかの実施形態では、緩衝液は、１５〜２００ｍＭ、またはその間の任意の範囲の濃度のクエン酸塩である。いくつかの実施形態では、緩衝液は、１５〜２００ｍＭ、またはその間の任意の範囲の濃度のリン酸ナトリウムである。いくつかの実施形態では、リポソームの内部空間は、合計濃度５ｍＭ〜５００ｍＭもしくは５０ｍＭ〜５００ｍＭ、またはその間の任意の範囲の酢酸ナトリウムと酢酸カルシウムとを含む。
【０２５２】
いくつかの実施形態では、リポソームの内部空間は、トレハロースを含む。さらなる実施形態では、トレハロースの濃度（重量％）は、０．１〜２０％、１〜２０％、０．５〜１５％、１〜１５％、５〜２０％、もしくは１〜５０％、またはその間の任意の範囲である。さらなる実施形態では、トレハロースの濃度（重量％）は、１〜１５％またはその間の任意の範囲である。追加の実施形態では、トレハロースは、約５重量％〜２０重量％のトレハロースとして、または合計濃度５％〜２０％の１つもしくは複数の凍結乾燥保護剤もしくは凍結保護物質の任意の組み合わせとして存在する。いくつかの実施形態では、リポソーム組成物を含む溶液のｐＨは、６〜７．５、６．５〜７．５、６．７〜７．５、もしくは６．３〜７．０、またはその間の任意の範囲である。いくつかの実施形態では、内部空間は緩衝液を含む。いくつかの実施形態では、緩衝液は、ＨＥＰＥＳ、クエン酸塩、またはリン酸ナトリウム（例えば、第一リン酸ナトリウムおよび／または第二リン酸ナトリウム）から選択される。いくつかの実施形態では、緩衝液はＨＥＰＥＳである。いくつかの実施形態では、緩衝液はクエン酸塩である。いくつかの実施形態では、緩衝液はリン酸ナトリウム（例えば、第一リン酸ナトリウムおよび／または第二リン酸ナトリウム）である。いくつかの実施形態では、緩衝液は、１５〜２００ｍＭまたはその間の任意の範囲の濃度である。さらなる実施形態では、緩衝液は、５〜２００ｍＭ、１５〜２００ｍＭ、５〜１００ｍＭ、１５〜１００ｍＭ、５〜５０ｍＭ、１５〜５０ｍＭ、５〜２５ｍＭ、５〜２０ｍＭ、５〜１５ｍＭ、またはその間の任意の範囲の濃度である。いくつかの実施形態では、緩衝液は、１５〜２００ｍＭ、またはその間の任意の範囲の濃度のＨＥＰＥＳである。いくつかの実施形態では、緩衝液は、１５〜２００ｍＭまたはその間の任意の範囲の濃度のクエン酸塩である。いくつかの実施形態では、緩衝液は、１５〜２００ｍＭまたはその間の任意の範囲の濃度のリン酸ナトリウムである。さらなる実施形態では、リポソームの内部空間は、酢酸ナトリウムおよび／または酢酸カルシウムを含む。いくつかの実施形態では、リポソームの内部空間は、合計濃度５ｍＭ〜５００ｍＭもしくは５０ｍＭ〜５００ｍＭ、またはその間の任意の範囲の酢酸ナトリウムと酢酸カルシウムとを含む。
【０２５３】
いくつかの実施形態では、リポソームの内部空間は、デキストロースを含む。さらなる実施形態では、デキストロースの濃度（重量％）は、０．１〜２０％、１〜２０％、０．５〜１５％、１〜１５％、もしくは５〜２０％、またはその間の任意の範囲である。さらなる実施形態では、デキストロースの濃度（重量％）は、１〜１５％またはその間の任意の範囲である。さらなる実施形態では、デキストロースは、約５重量％〜２０重量％のデキストロースとして、または合計濃度５％〜２０％の１つもしくは複数の凍結乾燥保護剤もしくは凍結保護物質の任意の組み合わせとして存在する。いくつかの実施形態では、リポソーム組成物を含む溶液のｐＨは、６〜７．５、６．５〜７．５、６．７〜７．５、もしくは６．３〜７．０、またはその間の任意の範囲である。いくつかの実施形態では、内部空間は緩衝液を含む。いくつかの実施形態では、緩衝液は、ＨＥＰＥＳ、クエン酸塩、またはリン酸ナトリウム（例えば、第一リン酸ナトリウムおよび／または第二リン酸ナトリウム）から選択される。いくつかの実施形態では、緩衝液はＨＥＰＥＳである。いくつかの実施形態では、緩衝液はクエン酸塩である。いくつかの実施形態では、緩衝液は、リン酸ナトリウム（例えば、第一リン酸ナトリウムおよび／または第二リン酸ナトリウム）である。いくつかの実施形態では、緩衝液は、１５〜２００ｍＭまたはその間の任意の範囲の濃度である。またさらなる実施形態では、緩衝液は、５〜２００ｍＭ、１５〜２００ｍＭ、５〜１００ｍＭ、１５〜１００ｍＭ、５〜５０ｍＭ、１５〜５０ｍＭ、５〜２５ｍＭ、５〜２０ｍＭ、５〜１５ｍＭ、またはその間の任意の範囲の濃度である。いくつかの実施形態では、緩衝液は、１５〜２００ｍＭまたはその間の任意の範囲の濃度のＨＥＰＥＳである。いくつかの実施形態では、緩衝液は、１５〜２００ｍＭまたはその間の任意の範囲の濃度のクエン酸塩である。いくつかの実施形態では、緩衝液は、１５〜２００ｍＭまたはその間の任意の範囲の濃度のリン酸ナトリウムである。さらなる実施形態では、リポソームの内部空間は、酢酸ナトリウムおよび／または酢酸カルシウムを含む。いくつかの実施形態では、リポソームの内部空間は、合計濃度５ｍＭ〜５００ｍＭもしくは５０ｍＭ〜５００ｍＭ、またはその間の任意の範囲の酢酸ナトリウムと酢酸カルシウムとを含む。
【０２５４】
さらなる実施形態では、本開示は、αＰＴＨＦ（例えば、本明細書に開示されるαＰＴＨＦ）が被包（充填）されたリポソームを含む、リポソーム組成物を提供する。いくつかの実施形態では、リポソーム組成物中のリポソームは、グルタミル基（テトラヒドロ葉酸中のグルタミル基を含む）を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含むαＰＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨＦ中のαＰＴＨＦは、ガンマカルボキシル結合を有するグルタミル基を２個以上含む。いくつかの実施形態では、リポソーム組成物は、テトラグルタミン酸化ＴＨＦを含むリポソームを含む。いくつかの実施形態では、リポソーム組成物は、ペンタグルタミン酸化ＴＨＦを含むリポソームを含む。いくつかの実施形態では、リポソーム組成物は、ヘキサグルタミン酸化ＴＨＦを含むリポソームを含む。
【０２５５】
いくつかの実施形態では、標的化ペグ化リポソームポリグルタミン酸化アルファ（例えば、ペンタグルタミン酸化またはヘキサグルタミン酸化）テトラヒドロ葉酸は、内部空間を含むリポソームと；内部空間内に配置された水性αＰＴＨＦと；少なくとも１つの葉酸受容体に対して特異的親和性を有するタンパク質を含むターゲティング部分とを含み、ターゲティング部分がリポソームの外側に配置されている、媒体を含む。いくつかの実施形態では、媒体は水溶液である。いくつかの実施形態では、内部空間、外側空間（例えば、媒体）、または内部空間および媒体の両方が、上に挙げた１つまたは複数のリオプロテクタントまたは凍結保護物質を含む。いくつかの実施形態では、凍結保護物質は、マンニトール、トレハロース、ソルビトール、またはスクロースである。
【０２５６】
いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦが被包されているリポソーム（すなわち、ＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＴＬｐ−αＰＴＨＦ、およびＮＴＬｐ−αＰＴＨＦを含めたＬｐ−αＰＴＨＦ）は、５００，０００分子未満または２００，０００分子未満のαＰＴＨＦを含む内部空間を有する。いくつかの実施形態では、リポソーム内部空間は、１０〜１００，０００分子、またはその間の任意の範囲のαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソーム内部空間は、１０，０００〜１００，０００分子、またはその間の任意の範囲のαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ペグ化されておらず、５００，０００分子未満または２００，０００分子未満のαＰＴＨＦを含む内部空間を有する。いくつかの実施形態では、リポソームはペグ化されておらず、リポソームの内部空間は、１０〜１００，０００分子、またはその間の任意の範囲のαＰＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、リポソームは、ペグ化されておらず、リポソームの内部空間は、１０，０００〜１００，０００分子、またはその間の任意の範囲のαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、標的化されており、ペグ化されておらず（ＴＬｐ−αＰＴＨＦ）、５００，０００分子未満または２００，０００分子未満のαＰＴＨＦを含む内部空間を有する。いくつかの実施形態では、リポソームは、標的化されており、ペグ化されておらず、リポソームの内部空間は、１０〜１００，０００分子、またはその間の任意の範囲のαＰＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、リポソームは、標的化されており、ペグ化されておらず、リポソームの内部空間は、１０，０００〜１００，０００分子、またはその間の任意の範囲のαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、標的化されておらず、ペグ化されておらず（ＮＴＬｐ−αＰＴＨＦ）、５００，０００分子未満または２００，０００分子未満のαＰＴＨＦを含む内部空間を有する。いくつかの実施形態では、リポソームは、標的化もペグ化もされておらず、リポソームの内部空間は、１０〜１００，０００分子、またはその間の任意の範囲のαＰＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、リポソームは、標的化もペグ化もされておらず、リポソームの内部空間は、１０，０００〜１００，０００分子、またはその間の任意の範囲のαＰＴＨＦを含む。
【０２５７】
いくつかの実施形態では、リポソームは、グルタミル基を２〜１０個含むポリグルタミン酸化アルファが被包されており（すなわち、ＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＴＬｐ−αＰＴＨＦ、およびＮＴＬｐ−αＰＴＨＦを含めたＬｐ−αＰＴＨＦ）、グルタミル基を２〜１０個含むαＰＴＨＦを５００，０００分子未満または２００，０００分子未満含む、内部空間を有する。いくつかの実施形態では、リポソーム内部空間は、グルタミル基を２〜１０個含むαＰＴＨＦを１０〜１００，０００分子、またはその間の任意の範囲の分子数含む。さらなる実施形態では、リポソーム内部空間は、グルタミル基を２〜１０個含むαＰＴＨＦを１０，０００〜１００，０００分子、またはその間の任意の範囲の分子数含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ペグ化されておらず、グルタミル基を２〜１０個含むαＰＴＨＦを５００，０００分子未満または２００，０００分子含む内部空間を有する。いくつかの実施形態では、リポソームはペグ化されておらず、リポソームの内部空間は、グルタミル基を２〜１０個含むαＰＴＨＦを１０〜１００，０００分子、またはその間の任意の範囲の分子数含む。さらなる実施形態では、リポソームはペグ化されておらず、リポソームの内部空間は、グルタミル基を２〜１０個含むαＰＴＨＦを１０，０００〜１００，０００分子、またはその間の任意の範囲の分子数含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、標的化されており、ペグ化されておらず（ＴＬｐ−αＰＴＨＦ）、グルタミル基を２〜１０個含むαＰＴＨＦを５００，０００分子未満または２００，０００分子含む内部空間を有する。いくつかの実施形態では、リポソームは、標的化されており、ペグ化されておらず、リポソームの内部空間は、グルタミル基を２〜１０個含むαＰＴＨＦを１０〜１００，０００分子、またはその間の任意の範囲の分子数含む。さらなる実施形態では、リポソームは、標的化されており、ペグ化されておらず、リポソームの内部空間は、グルタミル基を２〜１０個含むαＰＴＨＦを１０，０００〜１００，０００分子、またはその間の任意の範囲の分子数含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、標的化もペグ化もされておらず（ＮＴＬｐ−αＰＴＨＦ）、グルタミル基を２〜１０個含むαＰＴＨＦを５００，０００分子未満または２００，０００分子含む内部空間を有する。いくつかの実施形態では、リポソームは、標的化もペグ化もされておらず、リポソームの内部空間は、グルタミル基を２〜１０個含むαＰＴＨＦを１０〜１００，０００分子、またはその間の任意の範囲の分子数含む。さらなる実施形態では、リポソームは、標的化もペグ化もされておらず、リポソームの内部空間は、グルタミル基を２〜１０個含むαＰＴＨＦを１０，０００〜１００，０００分子、またはその間の任意の範囲の分子数含む。
【０２５８】
いくつかの実施形態では、リポソームは、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸が被包されており（すなわち、ＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＴＬｐ−αＰＴＨＦ、およびＮＴＬｐ−αＰＴＨＦを含めたＬｐ−αＰＴＨＦ）、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を５００，０００分子未満または２００，０００分子未満含む内部空間を有する。いくつかの実施形態では、リポソーム内部空間は、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を１０〜１００，０００分子、またはその間の任意の範囲の分子数含む。いくつかの実施形態では、リポソーム内部空間は、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を１０，０００〜１００，０００分子、またはその間の任意の範囲の分子数含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ペグ化されておらず、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を５００，０００分子未満または２００，０００分子未満含む内部空間を有する。いくつかの実施形態では、リポソームはペグ化されておらず、リポソームの内部空間は、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を１０〜１００，０００分子、またはその間の任意の範囲の分子数含む。さらなる実施形態では、リポソームはペグ化されておらず、リポソームの内部空間は、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を１０，０００〜１００，０００分子、またはその間の任意の範囲の分子数含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、標的化されており、ペグ化されておらず（ＴＬｐ−αＰＴＨＦ）、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を５００，０００分子未満または２００，０００分子未満含む内部空間を有する。いくつかの実施形態では、リポソームは、標的化されており、ペグ化されておらず、リポソームの内部空間は、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を１０〜１００，０００分子、またはその間の任意の範囲の分子数含む。さらなる実施形態では、リポソームは、標的化されており、ペグ化されておらず、リポソームの内部空間は、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を１０，０００〜１００，０００分子、またはその間の任意の範囲の分子数含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、標的化もペグ化もされておらず（ＮＴＬｐ−αＰＴＨＦ）、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を５００，０００分子未満または２００，０００分子未満含む内部空間を有する。いくつかの実施形態では、リポソームは、標的化もペグ化もされておらず、リポソームの内部空間は、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を１０〜１００，０００分子、またはその間の任意の範囲の分子数含む。さらなる実施形態では、リポソームは、標的化もペグ化もされておらず、リポソームの内部空間は、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を１０，０００〜１００，０００分子、またはその間の任意の範囲の分子数含む。
【０２５９】
いくつかの実施形態では、リポソームは、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸が被包されており（すなわち、ＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＴＬｐ−αＰＴＨＦ、およびＮＴＬｐ−αＰＴＨＦを含めたＬｐ−αＰＴＨＦ）、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を５００，０００分子未満または２００，０００分子未満含む内部空間を有する。いくつかの実施形態では、リポソーム内部空間は、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を１０〜１００，０００分子、またはその間の任意の範囲の分子数含む。いくつかの実施形態では、リポソーム内部空間は、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を１０，０００〜１００，０００分子、またはその間の任意の範囲の分子数含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ペグ化されておらず、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を５００，０００分子未満または２００，０００分子未満含む内部空間を有する。いくつかの実施形態では、リポソームはペグ化されておらず、リポソームの内部空間は、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を１０〜１００，０００分子またはその間の任意の範囲の分子数含む。さらなる実施形態では、リポソームはペグ化されておらず、リポソームの内部空間は、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を１０，０００〜１００，０００分子、またはその間の任意の範囲の分子数含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、標的化されており、ペグ化されておらず（ＴＬｐ−αＰＴＨＦ）、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を５００，０００分子未満または２００，０００分子未満含む内部空間を有する。いくつかの実施形態では、リポソームは、標的化されており、ペグ化されておらず、リポソームの内部空間は、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を１０〜１００，０００分子、またはその間の任意の範囲の分子数含む。さらなる実施形態では、リポソームは、標的化されており、ペグ化されておらず、リポソームの内部空間は、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を１０，０００〜１００，０００分子、またはその間の任意の範囲の分子数含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、標的化もペグ化もされておらず（ＮＴＬｐ−αＰＴＨＦ）、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を５００，０００分子未満または２００，０００分子未満含む内部空間を有する。いくつかの実施形態では、リポソームは、標的化もペグ化もされておらず、リポソームの内部空間は、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を１０〜１００，０００分子、またはその間の任意の範囲の分子数含む。さらなる実施形態では、リポソームは、標的化もペグ化もされておらず、リポソームの内部空間は、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を１０，０００〜１００，０００分子、またはその間の任意の範囲の分子数含む。
【０２６０】
いくつかの実施形態では、リポソームは、ヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸が被包されており（すなわち、ＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＴＬｐ−αＰＴＨＦ、およびＮＴＬｐ−αＰＴＨＦを含めたＬｐ−αＰＴＨＦ）、ヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を５００，０００分子未満または２００，０００分子未満含む内部空間を有する。いくつかの実施形態では、リポソーム内部空間は、ヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を１０〜１００，０００分子、またはその間の任意の範囲の分子数含む。さらなる実施形態では、リポソーム内部空間は、ヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を１０，０００〜１００，０００分子、またはその間の任意の範囲の分子数含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ペグ化されておらず、ヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を５００，０００分子未満または２００，０００分子未満含む内部空間を有する。いくつかの実施形態では、リポソームはペグ化されておらず、リポソームの内部空間は、ヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を１０〜１００，０００分子、またはその間の任意の範囲の分子数含む。さらなる実施形態では、リポソームはペグ化されておらず、リポソームの内部空間は、ヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を１０，０００〜１００，０００分子、またはその間の任意の範囲の分子数含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、標的化されており、ペグ化されておらず（ＴＬｐ−αＰＴＨＦ）、ヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を５００，０００分子未満または２００，０００分子未満含む内部空間を有する。いくつかの実施形態では、リポソームは、標的化されており、ペグ化されておらず、リポソームの内部空間は、ヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を１０〜１００，０００分子、またはその間の任意の範囲の分子数含む。さらなる実施形態では、リポソームは、標的化されており、ペグ化されておらず、リポソームの内部空間は、ヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を１０，０００〜１００，０００分子、またはその間の任意の範囲の分子数含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、標的化もペグ化もされておらず（ＮＴＬｐ−αＰＴＨＦ）、ヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を５００，０００分子未満または２００，０００分子未満含む内部空間を有する。いくつかの実施形態では、リポソームは、標的化もペグ化もされておらず、リポソームの内部空間は、ヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を１０〜１００，０００分子、またはその間の任意の範囲の分子数含む。さらなる実施形態では、リポソームは、標的化もペグ化もされておらず、リポソームの内部空間は、ヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を１０，０００〜１００，０００分子、またはその間の任意の範囲の分子数含む。
【０２６１】
いくつかの実施形態では、本開示は、リポソームにαＰＴＨＦ、またはその塩もしくは酸と、１つまたは複数の薬学的に許容可能な水性担体とが被包されている、リポソームαＰＴＨＦ組成物を提供する。いくつかの実施形態では、リポソーム内部空間はトレハロースを含む。いくつかの実施形態では、リポソーム内部空間は、５重量％〜２０重量％のトレハロースを含む。いくつかの実施形態では、リポソーム内部空間は、濃度が１〜２００ｍＭ、ｐＨが２〜８のＨＢＳを含む。いくつかの実施形態では、リポソーム内部空間は、ｐＨが５〜８、またはその間の任意の範囲の値である。いくつかの実施形態では、リポソーム内部空間は、ｐＨが６〜７、またはその間の任意の範囲の値である。いくつかの実施形態では、リポソーム内部空間は、酢酸ナトリウムおよび酢酸カルシウムの総濃度が５０ｍＭ〜５００ｍＭ、またはその間の任意の範囲である。
【０２６２】
Ａ  ポリグルタミン酸化されていないポリグルタミン酸化可能な葉酸代謝拮抗薬
いくつかの実施形態では、リポソームαＰＴＨＦ（例えば、ＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＴＬｐ−αＰＴＨＦ、およびＮＴＬｐ−αＰＴＨＦを含めたＬｐ−αＰＴＨＦ）組成物は、αＰＴＨＦ（例えば、本明細書に開示されるαＰＴＨＦ）と、１つまたは複数のポリグルタミン酸化されていないポリグルタミン酸化可能な葉酸代謝拮抗薬組成物とを含む。
【０２６３】
いくつかの実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨＦ（例えば、ＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＴＬｐ−αＰＴＨＦ、およびＮＴＬｐ−αＰＴＨＦ）は、αＰＴＨＦ（例えば、本明細書に開示されるαＰＴＨＦ）とテトラヒドロ葉酸（ＴＨＦ）とを含む。いくつかの実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨＦ（すなわち、リポソームアルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸）は、アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸と、テトラヒドロ葉酸（ＴＨＦ）、メトトレキセート（ＭＴＸ）、ペメトレキセド（ＰＭＸ）、ロメトレキソール（ＬＭＸ）、ラルチトレキセド（ＲＴＸ）、プララトレキサート、ＡＧ２０３４、ＧＷ１８４３、アミノプテリン、およびＬＹ３０９８８７からなる群より選択されるポリグルタミン酸化可能な葉酸代謝拮抗薬とを含む。いくつかの実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨＦは、アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸とロメトレキソールとを含む。いくつかの実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨＦは、アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸とペメトレキセドとを含む。いくつかの実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨＦは、アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸とロイコボリンとを含む。いくつかの実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨＦは、アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸とトリアジン葉酸代謝拮抗薬誘導体（例えば、ＮＳＣ１２７７５５などのスルホニルフルオリドトリアジン）とを含む。いくつかの実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨＦは、ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ  アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸とセリンヒドロキシメチル基転移酵素（ＳＨＭＴ２）阻害剤とを含む。いくつかの実施形態では、ＳＨＭＴ２阻害剤は葉酸代謝拮抗薬（例えば、ポリグルタミン酸化可能な、またはポリグルタミン酸化不可能な葉酸代謝拮抗薬）である。いくつかの実施形態では、ＳＨＭＴ２阻害剤は葉酸代謝拮抗薬である。
【０２６４】
Ｂ  ポリグルタミン酸化不可能な葉酸代謝拮抗薬
いくつかの実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨＦ（例えば、ＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＴＬｐ−αＰＴＨＦ、およびＮＴＬｐ−αＰＴＨＦ）は、αＰＴＨＦ（例えば、本明細書に開示されるαＰＴＨＦ）と、いわゆる「ポリグルタミン酸化不可能な」葉酸代謝拮抗薬とを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、αＰＴＨＦと、葉酸回路代謝経路内の１つまたは複数の酵素を阻害するポリグルタミン酸化不可能な葉酸代謝拮抗薬とを含む。さらなる実施形態では、ポリグルタミン酸化不可能な葉酸代謝拮抗薬は、チミジル酸合成酵素（ＴＳ）、ジヒドロ葉酸還元酵素（ＤＨＦＲ）、グリシンアミドリボヌクレオチド（ＧＡＲ）トランスホルミラーゼ、およびアミノイミダゾールカルボキサミドリボヌクレオチド（ＡＩＣＡＲ）トランスホルミラーゼから選択される１つまたは複数の酵素を阻害する。いくつかの実施形態では、リポソームは、αＰＴＨＦと、ＤＨＦＲを阻害するポリグルタミン酸化不可能な葉酸代謝拮抗薬とを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、αＰＴＨＦと、ＴＳを阻害するポリグルタミン酸化不可能な葉酸代謝拮抗薬とを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、αＰＴＨＦと、ＧＡＲまたはＡＩＣＡＲトランスホルミラーゼを阻害するポリグルタミン酸化不可能な葉酸代謝拮抗薬とを含む。さらなる実施形態では、ポリグルタミン酸化不可能な葉酸代謝拮抗薬は、トリメトレキサート（ＴＭＱ）、ピリトレキシム（ＢＷ３０１Ｕ）、およびタロトレキシン（ＰＴ５２３）からなる群より選択される。さらなる実施形態では、ポリグルタミン酸化不可能な葉酸代謝拮抗薬は、ノラトレキセド（ＡＧ３３７）、プレビトレキセド（ＺＤ９３３１、ＢＧＣ９３３１）、およびＢＧＣ９４５（ＯＮＸ０８０１）からなる群より選択される。
【０２６５】
Ｃ  白金
いくつかの実施形態では、リポソームは、αＰＴＨＦ（Ｌｐ−αＰＴＨＦ、例えば、ＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＴＬｐ−αＰＴＨＦ、およびＮＴＬｐ−αＰＴＨＦなど）を含み、αＰＴＨＦ（例えば、本明細書に開示されるαＰＴＨＦ）と、白金系化学療法剤、またはその塩もしくは酸とを含む。いくつかの実施形態では、リポソームはαＰＴＨＦ／白金系薬剤複合体（例えば、セクションＩＩＣに記載されているもの）を含む。
【０２６６】
いくつかの実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨＦは、シスプラチン、カルボプラチン、およびオキサリプラチンからなる群より選択される白金系化学療法剤、またはその塩もしくは酸を含む。他の実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨＦは、シスプラチン、カルボプラチン、もしくはオキサリプラチンからなる群より選択される白金系化学療法剤の類似体、またはその塩もしくは酸を含む。
【０２６７】
いくつかの実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨＦは、αＰＴＨＦと、シスプラチン、またはその塩もしくは酸とを含む。いくつかの実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨＦは、αＰＴＨＦと、シスプラチン類似体、またはその塩もしくは酸とを含む。
【０２６８】
いくつかの実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨＦは、αＰＴＨＦと、カルボプラチン、またはその塩もしくは酸とを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、αＰＴＨＦと、カルボプラチン類似体、またはその塩もしくは酸とを含む。
【０２６９】
いくつかの実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨは、αＰＴＨＦと、オキサリプラチン、またはその塩もしくは酸とを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、αＰＴＨＦと、オキサリプラチン類似体、またはその塩もしくは酸とを含む。
【０２７０】
いくつかの実施形態では、リポソームは、αＰＴＨＦ（例えば、本明細書に開示されるαＰＴＨＦ）と、ネダプラチン、ヘプタプラチン、およびロバプラチン、ネダプラチン、ヘプタプラチン、およびロバプラチンからなる群より選択される白金系化学療法剤、またはその塩もしくは酸とを含む。いくつかの実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨＦは、αＰＴＨＦと、ネダプラチン、ヘプタプラチン、およびロバプラチンからなる群より選択される白金系化学療法剤の類似体、またはその塩もしくは酸とを含む。
【０２７１】
いくつかの実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨＦは、αＰＴＨＦと、ストラトプラチン、パラプラチン、プラチノール、シクロプラチン、デキソルマプラチン、スピロプラチン、ピコプラチン、トリプラチン、テトラプラチン、イプロプラチン、オルマプラチン、ゼニプラチン、白金−トリアミン、サトラプラチン、エンロプラチン、ＪＭ２１６、２５４Ｓ、ＮＫ１２１、ＣＩ９７３、ＤＷＡ２１１４Ｒ、ＮＤＤＰ、およびネダプラチン、またはこれらの塩もしくは酸からなる群より選択される白金系化学療法剤とを含む。いくつかの実施形態では、Ｌｐ−αＰＴＨＦは、αＰＴＨＦと、ストラトプラチン、パラプラチン、プラチノール、シクロプラチン、デキソルマプラチン、スピロプラチン、ピコプラチン、トリプラチン、テトラプラチン、イプロプラチン、オルマプラチン、ゼニプラチン、白金−トリアミン、サトラプラチン、エンロプラチン、ＪＭ２１６、２５４−Ｓ、ＮＫ１２１、ＣＩ９７３、ＤＷＡ２１１４Ｒ、ＮＤＤＰ、およびネダプラチン、またはこれらの塩もしくは酸からなる群より選択される白金系化学療法剤とを含む。
【０２７２】
いくつかの実施形態では、リポソーム組成物は、リポソームのＰＥＧまたは外側のうちの少なくとも一方に配置された免疫刺激剤、検出可能マーカー、およびマレイミドのうちの１つまたは複数のものをさらに含む、リポソームを含む。
【０２７３】
Ｄ  シクロデキストリン
さらなる実施形態では、αＰＴＨＦリポソームはαＰＴＨＦ（例えば、本明細書に開示されるαＰＴＨＦ）とシクロデキストリン（例えば、本明細書のセクションＩＩＣのシクロデキストリン）とを含む。
【０２７４】
いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦリポソームは、シクロデキストリンと治療剤によって形成された複合体を含む。いくつかの実施形態では、治療剤は、細胞傷害性化合物、またはその塩もしくは酸である。さらなる実施形態では、治療剤は、化学療法剤、またはその塩もしくは酸である。別の実施形態では、化学療法剤は白金系薬物である。別の実施形態では、化学療法剤はタキサン系薬物である。さらなる実施形態では、シクロデキストリン／治療剤複合体の治療剤は、ゲムシタビン、ゲムシタビン系治療剤、ドキソルビシン、葉酸代謝拮抗薬、葉酸代謝拮抗薬系化学療法剤、またはその塩もしくは酸、酸型もしくは遊離塩基型からなる群より選択されるメンバーである。さらなる実施形態では、複合体中のシクロデキストリン／治療剤のモル比は、１〜１０：１の範囲である。いくつかの実施形態では、複合体中のシクロデキストリン／治療剤のモル比は、１：１、２：１、３：１、４：１、５：１、６：１、７：１、８：１、９：１、１０：１、１１：１、１２：１、１３：１、１４：１、１５：１、１６：１、１７：１、１８：１、１９：１、２０：１、（２１〜５０）：１、または＞５０：１である。他の実施形態では、複合体中のシクロデキストリン／治療剤のモル比は、１：１〜２０、１：１〜１０、もしくは１：２〜８の範囲、またはその間の任意の範囲である。いくつかの実施形態では、複合体中のシクロデキストリン／治療剤のモル比は、１：１、１：２、１：３、１：４、１：５、１：６、１：７、１：８、１：９、１：１０、１：１１、１：１２、１：１３、１：１４、１：１５、１：１６、１：１７、１：１８、１：１９、１：２０、１：（２１〜５０）、または１：＞５０である。
【０２７５】
いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦリポソームは、αＰＴＨＦとシクロデキストリン／白金系化学療法剤複合体とを含む。いくつかの実施形態では、白金系化学療法剤は、シスプラチン、カルボプラチン、およびオキサリプラチン、またはその塩もしくは酸からなる群より選択される。他の実施形態では、シクロデキストリン／白金系化学療法剤複合体は、シスプラチン、カルボプラチン、オキサリプラチンの類似体、またはその塩もしくは酸を含む。いくつかの実施形態では、複合体中のシクロデキストリン／白金系薬剤のモル比は、１〜１０：１の範囲である。いくつかの実施形態では、複合体中のシクロデキストリン／白金系薬剤のモル比は、１：１、２：１、３：１、４：１、５：１、６：１、７：１、８：１、９：１、１０：１、１１：１、１２：１、１３：１、１４：１、１５：１、１６：１、１７：１、１８：１、１９：１、２０：１、（２１〜５０）：１、または＞５０：１である。他の実施形態では、複合体中のシクロデキストリン／白金系薬剤のモル比は、１：１〜２０、１：１〜１０、もしくは１：２〜８の範囲、またはその間の任意の範囲である。いくつかの実施形態では、複合体中のシクロデキストリン／白金系薬剤のモル比は、１：１、１：２、１：３、１：４、１：５、１：６、１：７、１：８、１：９、１：１０、１：１１、１：１２、１：１３、１：１４、１：１５、１：１６、１：１７、１：１８、１：１９、１：２０、１：（２１〜５０）、または１：＞５０である。
【０２７６】
いくつかの実施形態では、白金系化学療法剤は、シスプラチン、カルボプラチン、およびオキサリプラチン、またはその塩もしくは酸からなる群より選択される。他の実施形態では、シクロデキストリン／白金系化学療法剤複合体は、シスプラチン、カルボプラチン、オキサリプラチンの類似体、またはその塩もしくは酸を含む。いくつかの実施形態では、複合体中のシクロデキストリン／白金系薬剤のモル比は、１〜１０：１の範囲である。いくつかの実施形態では、複合体中のシクロデキストリン／白金系薬剤のモル比は、１：１、２：１、３：１、４：１、５：１、６：１、７：１、８：１、９：１、１０：１、１１：１、１２：１、１３：１、１４：１、１５：１、１６：１、１７：１、１８：１、１９：１、２０：１、（２１〜５０）：１、または＞５０：１である。他の実施形態では、複合体中のシクロデキストリン／白金系薬剤のモル比は、１：１〜２０、１：１〜１０、もしくは１：２〜８の範囲、またはその間の任意の範囲である。いくつかの実施形態では、シクロデキストリン／白金系薬剤のモル比は、１：１、１：２、１：３、１：４、１：５、１：６、１：７、１：８、１：９、１：１０、１：１１、１：１２、１：１３、１：１４、１：１５、１：１６、１：１７、１：１８、１：１９、１：２０、１：（２１〜５０）、または１：＞５０である。さらなる実施形態では、シクロデキストリン／白金系薬剤複合体は、（例えば、本明細書に記載される通りに、または当該技術分野で公知の別の方法で）リポソーム中に被包されている。
【０２７７】
さらなる実施形態では、本開示は、シクロデキストリンと、シスプラチン、またはその塩もしくは酸とを含む、複合体を提供する。いくつかの実施形態では、複合体中のシクロデキストリン／シスプラチン（またはシスプラチンの塩もしくは酸）のモル比は、１〜１０：１の範囲である。いくつかの実施形態では、複合体中のシクロデキストリン／シスプラチン（またはシスプラチンの塩もしくは酸）のモル比は、１：１、２：１、３：１、４：１、５：１、６：１、７：１、８：１、９：１、１０：１、１１：１、１２：１、１３：１、１４：１、１５：１、１６：１、１７：１、１８：１、１９：１、２０：１、（２１〜５０）：１、または＞５０：１である。他の実施形態では、複合体中のシクロデキストリン／シスプラチン（またはシスプラチンの塩もしくは酸）のモル比は、１：１〜２０、１：１〜１０、もしくは１：２〜８の範囲、またはその間の任意の範囲である。いくつかの実施形態では、シクロデキストリン／シスプラチン（またはシスプラチンの塩もしくは酸）のモル比は、１：１、１：２、１：３、１：４、１：５、１：６、１：７、１：８、１：９、１：１０、１：１１、１：１２、１：１３、１：１４、１：１５、１：１６、１：１７、１：１８、１：１９、１：２０、１：（２１〜５０）、または１：＞５０である。さらなる実施形態では、シクロデキストリン／シスプラチン（またはシスプラチンの塩もしくは酸）複合体は、（例えば、本明細書に記載される通りに、または当該技術分野で公知の別の方法で）リポソーム中に被包されている。
【０２７８】
別の実施形態では、本開示は、シクロデキストリンと、カルボプラチン、またはその塩もしくは酸とを含む、複合体を提供する。いくつかの実施形態では、複合体中のシクロデキストリン／カルボプラチン（またはカルボプラチンの塩もしくは酸）のモル比は、１〜１０：１の範囲である。いくつかの実施形態では、複合体中のシクロデキストリン／カルボプラチン（またはカルボプラチンの塩もしくは酸）のモル比は、１：１、２：１、３：１、４：１、５：１、６：１、７：１、８：１、９：１、１０：１、１１：１、１２：１、１３：１、１４：１、１５：１、１６：１、１７：１、１８：１、１９：１、２０：１、（２１〜５０）：１、または＞５０：１である。他の実施形態では、複合体中のシクロデキストリン／カルボプラチン（またはカルボプラチンの塩もしくは酸）のモル比は、１：１〜２０、１：１〜１０、もしくは１：２〜８の範囲、またはその間の任意の範囲である。いくつかの実施形態では、シクロデキストリン／カルボプラチン（またはカルボプラチンの塩もしくは酸）のモル比は、１：１、１：２、１：３、１：４、１：５、１：６、１：７、１：８、１：９、１：１０、１：１１、１：１２、１：１３、１：１４、１：１５、１：１６、１：１７、１：１８、１：１９、１：２０、１：（２１〜５０）、または１：＞５０である。さらなる実施形態では、シクロデキストリン／カルボプラチン（またはカルボプラチンの塩もしくは酸）複合体は、（例えば、本明細書に記載される通りに、または当該技術分野で公知の別の方法で）リポソーム中に被包されている。
【０２７９】
別の実施形態では、本開示は、シクロデキストリンと、オキサリプラチン、またはその塩もしくは酸とを含む、複合体を提供する。いくつかの実施形態では、複合体中のシクロデキストリン／オキサリプラチン（またはオキサリプラチンの塩もしくは酸）のモル比は、１〜１０：１の範囲である。いくつかの実施形態では、複合体中のシクロデキストリン／オキサリプラチン（またはオキサリプラチンの塩もしくは酸）のモル比は、１：１、２：１、３：１、４：１、５：１、６：１、７：１、８：１、９：１、１０：１、１１：１、１２：１、１３：１、１４：１、１５：１、１６：１、１７：１、１８：１、１９：１、２０：１、（２１〜５０）：１、または＞５０：１である。他の実施形態では、複合体中のシクロデキストリン／オキサリプラチン（またはオキサリプラチンの塩もしくは酸）のモル比は、１：１〜２０、１：１〜１０、もしくは１：２〜８の範囲、またはその間の任意の範囲である。いくつかの実施形態では、シクロデキストリン／オキサリプラチン（またはオキサリプラチンの塩もしくは酸）のモル比は、１：１、１：２、１：３、１：４、１：５、１：６、１：７、１：８、１：９、１：１０、１：１１、１：１２、１：１３、１：１４、１：１５、１：１６、１：１７、１：１８、１：１９、１：２０、１：（２１〜５０）、または１：＞５０である。さらなる実施形態では、シクロデキストリン／オキサリプラチン（またはオキサリプラチンの塩もしくは酸）複合体は、（例えば、本明細書に記載される通りに、または当該技術分野で公知の別の方法で）リポソーム中に被包されている。
【０２８０】
さらなる実施形態では、本開示は、シクロデキストリンおよびネダプラチン、ヘプタプラチン、ロバプラチン、ストラトプラチン、パラプラチン、プラチノール、シクロプラチン、デキソルマプラチン、スピロプラチン、ピコプラチン、トリプラチン、テトラプラチン、イプロプラチン、オルマプラチン、ゼニプラチン、白金−トリアミン、サトラプラチン、エンロプラチン、ＪＭ２１６、ＮＫ１２１、ＣＩ９７３、ＤＷＡ２１１４Ｒ、ＮＤＤＰ、およびネダプラチン、またはこれらの塩もしくは酸からなる群より選択される白金系化学療法剤を含む複合体を提供する。他の実施形態では、シクロデキストリン／白金系化学療法剤複合体は、ネダプラチン、ヘプタプラチン、ロバプラチン、ストラトプラチン、パラプラチン、プラチノール、シクロプラチン、デキソルマプラチン、スピロプラチン、ピコプラチン、トリプラチン、テトラプラチン、イプロプラチン、オルマプラチン、ゼニプラチン、白金−トリアミン、サトラプラチン、エンロプラチン、ＪＭ２１６、ＮＫ１２１、ＣＩ９７３、ＤＷＡ２１１４Ｒ、ＮＤＤＰ、またはネダプラチンの類似体、またはこれらの塩もしくは酸を含む。いくつかの実施形態では、複合体中のシクロデキストリン／オキサリプラチン（またはオキサリプラチンの塩もしくは酸）のモル比は、１〜１０：１の範囲である。いくつかの実施形態では、複合体中のシクロデキストリン／白金系化学療法剤（またはその塩もしくは酸もしくは類似体）のモル比は、１：１、２：１、３：１、４：１、５：１、６：１、７：１、８：１、９：１、１０：１、１１：１、１２：１、１３：１、１４：１、１５：１、１６：１、１７：１、１８：１、１９：１、２０：１、（２１〜５０）：１、または＞５０：１である。他の実施形態では、複合体中のシクロデキストリン／白金系化学療法剤（またはその塩もしくは酸もしくは類似体）のモル比は、１：１〜２０、１：１〜１０、もしくは１：２〜８の範囲、またはその間の任意の範囲である。いくつかの実施形態では、シクロデキストリン／白金系化学療法剤（またはその塩もしくは酸もしくは類似体）のモル比は、１：１、１：２、１：３、１：４、１：５、１：６、１：７、１：８、１：９、１：１０、１：１１、１：１２、１：１３、１：１４、１：１５、１：１６、１：１７、１：１８、１：１９、１：２０、１：（２１〜５０）、または１：＞５０である。さらなる実施形態では、シクロデキストリン／白金系化学療法剤（またはその塩もしくは酸または類似体）複合体は、（例えば、本明細書に記載される通りに、または当該技術分野で公知の別の方法で）リポソーム中に被包されている。
【０２８１】
いくつかの実施形態では、本開示は、シクロデキストリン／タキサン系化学療法剤複合体を含む組成物を提供する。いくつかの実施形態では、タキサン系化学療法剤は、パクリタキセル（ＰＴＸ）、ドセタキセル（ＤＴＸ）、ラロタキセル（ＬＴＸ）、およびカバジタキセル（ＣＴＸ）、またはその塩もしくは酸からなる群より選択される。いくつかの実施形態では、複合体中のシクロデキストリン／タキサン系薬剤のモル比は、１〜１０：１の範囲である。いくつかの実施形態では、複合体中のシクロデキストリン／タキサン系薬剤のモル比は、１：１、２：１、３：１、４：１、５：１、６：１、７：１、８：１、９：１、１０：１、１１：１、１２：１、１３：１、１４：１、１５：１、１６：１、１７：１、１８：１、１９：１、２０：１、（２１〜５０）：１、または＞５０：１である。他の実施形態では、複合体中のシクロデキストリン／タキサン系薬剤のモル比は、１：１〜２０、１：１〜１０、もしくは１：２〜８の範囲、またはその間の任意の範囲である。いくつかの実施形態では、シクロデキストリン／タキサン系薬剤のモル比は、１：１、１：２、１：３、１：４、１：５、１：６、１：７、１：８、１：９、１：１０、１：１１、１：１２、１：１３、１：１４、１：１５、１：１６、１：１７、１：１８、１：１９、１：２０、１：（２１〜５０）、または１：＞５０である。さらなる実施形態では、シクロデキストリン／タキサン系薬剤複合体は、（例えば、本明細書に記載される通りに、または当該技術分野で公知の別の方法で）リポソーム中に被包されている。
【０２８２】
さらなる実施形態では、本開示は、シクロデキストリンと、パクリタキセル（ＰＴＸ）、またはその塩もしくは酸とを含む、複合体を提供する。他の実施形態では、シクロデキストリン／タキサン系化学療法剤複合体は、パクリタキセル（ＰＴＸ）の類似体、またはその塩もしくは酸を含む。いくつかの実施形態では、複合体中のシクロデキストリン／パクリタキセル（またはパクリタキセルの塩もしくは酸）のモル比は、１〜１０：１の範囲である。いくつかの実施形態では、複合体中のシクロデキストリン／パクリタキセル（またはパクリタキセルの塩もしくは酸）のモル比は、１：１、２：１、３：１、４：１、５：１、６：１、７：１、８：１、９：１、１０：１、１１：１、１２：１、１３：１、１４：１、１５：１、１６：１、１７：１、１８：１、１９：１、２０：１、（２１〜５０）：１、または＞５０：１である。他の実施形態では、複合体中のシクロデキストリン／パクリタキセル（またはパクリタキセルの塩もしくは酸）のモル比は、１：１〜２０、１：１〜１０、もしくは１：２〜８の範囲、またはその間の任意の範囲である。いくつかの実施形態では、シクロデキストリン／パクリタキセル（またはパクリタキセルの塩もしくは酸）のモル比は、１：１、１：２、１：３、１：４、１：５、１：６、１：７、１：８、１：９、１：１０、１：１１、１：１２、１：１３、１：１４、１：１５、１：１６、１：１７、１：１８、１：１９、１：２０、１：（２１〜５０）、または１：＞５０である。さらなる実施形態では、シクロデキストリン／パクリタキセル（またはパクリタキセルの塩もしくは酸）複合体は、（例えば、本明細書に記載される通りに、または当該技術分野で公知の別の方法で）リポソーム中に被包されている。
【０２８３】
さらなる実施形態では、本開示は、シクロデキストリンと、ドセタキセル（ＤＴＸ）、またはその塩もしくは酸とを含む、複合体を提供する。他の実施形態では、シクロデキストリン／タキサン系化学療法剤複合体は、ドセタキセル（ＤＴＸ）の類似体、またはその塩もしくは酸を含む。いくつかの実施形態では、複合体中のシクロデキストリン／ドセタキセル（またはドセタキセルの塩もしくは酸）のモル比は、１〜１０：１の範囲である。いくつかの実施形態では、複合体中のシクロデキストリン／ドセタキセル（またはドセタキセルの塩もしくは酸）のモル比は、１：１、２：１、３：１、４：１、５：１、６：１、７：１、８：１、９：１、１０：１、１１：１、１２：１、１３：１、１４：１、１５：１、１６：１、１７：１、１８：１、１９：１、２０：１、（２１〜５０）：１、または＞５０：１である。他の実施形態では、複合体中のシクロデキストリン／ドセタキセル（またはドセタキセルの塩もしくは酸）のモル比は、１：１〜２０、１：１〜１０、もしくは１：２〜８の範囲、またはその間の任意の範囲である。いくつかの実施形態では、シクロデキストリン／ドセタキセル（またはドセタキセルの塩もしくは酸）のモル比は、１：１、１：２、１：３、１：４、１：５、１：６、１：７、１：８、１：９、１：１０、１：１１、１：１２、１：１３、１：１４、１：１５、１：１６、１：１７、１：１８、１：１９、１：２０、１：（２１〜５０）、または１：＞５０である。さらなる実施形態では、シクロデキストリン／ドセタキセル（またはドセタキセルの塩もしくは酸）複合体は、（例えば、本明細書に記載される通りに、または当該技術分野で公知の別の方法で）リポソーム中に被包されている。
【０２８４】
さらなる実施形態では、本開示は、シクロデキストリンと、ラロタキセル（ＬＴＸ）、またはその塩もしくは酸とを含む、複合体を提供する。他の実施形態では、シクロデキストリン／タキサン系化学療法剤複合体は、ラロタキセル（ＬＴＸ）の類似体、またはその塩もしくは酸を含む。いくつかの実施形態では、複合体中のシクロデキストリン／ラロタキセル（またはラロタキセルの塩もしくは酸）のモル比は、１〜１０：１の範囲である。いくつかの実施形態では、複合体中のシクロデキストリン／ラロタキセル（またはラロタキセルの塩もしくは酸）のモル比は、１：１、２：１、３：１、４：１、５：１、６：１、７：１、８：１、９：１、１０：１、１１：１、１２：１、１３：１、１４：１、１５：１、１６：１、１７：１、１８：１、１９：１、２０：１、（２１〜５０）：１、または＞５０：１である。他の実施形態では、複合体中のシクロデキストリン／ラロタキセル（またはラロタキセルの塩もしくは酸）のモル比は、１：１〜２０、１：１〜１０、もしくは１：２〜８の範囲、またはその間の任意の範囲である。いくつかの実施形態では、シクロデキストリン／ラロタキセル（またはラロタキセルの塩もしくは酸）のモル比は、１：１、１：２、１：３、１：４、１：５、１：６、１：７、１：８、１：９、１：１０、１：１１、１：１２、１：１３、１：１４、１：１５、１：１６、１：１７、１：１８、１：１９、１：２０、１：（２１〜５０）、または１：＞５０である。さらなる実施形態では、シクロデキストリン／ラロタキセル（またはラロタキセルの塩もしくは酸）複合体は、（例えば、本明細書に記載される通りに、または当該技術分野で公知の別の方法で）リポソーム中に被包されている。
【０２８５】
さらなる実施形態では、本開示は、シクロデキストリンと、カバジタキセル（ＣＴＸ）、またはその塩もしくは酸とを含む、複合体を提供する。他の実施形態では、シクロデキストリン／タキサン系化学療法剤複合体は、カバジタキセル（ＣＴＸ）の類似体、またはその塩もしくは酸を含む。いくつかの実施形態では、複合体中のシクロデキストリン／カバジタキセル（またはカバジタキセルの塩もしくは酸）のモル比は、１〜１０：１の範囲である。いくつかの実施形態では、複合体中のシクロデキストリン／カバジタキセル（またはカバジタキセルの塩もしくは酸）のモル比は、１：１、２：１、３：１、４：１、５：１、６：１、７：１、８：１、９：１、１０：１、１１：１、１２：１、１３：１、１４：１、１５：１、１６：１、１７：１、１８：１、１９：１、２０：１、（２１〜５０）：１、または＞５０：１である。他の実施形態では、複合体中のシクロデキストリン／カバジタキセル（またはカバジタキセルの塩もしくは酸）のモル比は、１：１〜２０、１：１〜１０、もしくは１：２〜８の範囲、またはその間の任意の範囲である。いくつかの実施形態では、シクロデキストリン／カバジタキセル（またはカバジタキセルの塩もしくは酸）のモル比は、１：１、１：２、１：３、１：４、１：５、１：６、１：７、１：８、１：９、１：１０、１：１１、１：１２、１：１３、１：１４、１：１５、１：１６、１：１７、１：１８、１：１９、１：２０、１：（２１〜５０）、または１：＞５０である。さらなる実施形態では、シクロデキストリン／カバジタキセル（またはカバジタキセルの塩もしくは酸）複合体は、（例えば、本明細書に記載される通りに、または当該技術分野で公知の別の方法で）リポソーム中に被包されている。
【０２８６】
シクロデキストリン／治療剤複合体のシクロデキストリンは、誘導体化されていてもされていなくてもよい。いくつかの実施形態では、シクロデキストリンは、誘導体化されている。さらなる実施形態では、シクロデキストリンは、誘導体化ベータシクロデキストリン（例えばヒドロキシプロピルベータシクロデキストリン（ＨＰ−ベータ−ＣＤ）、およびスルホブチルエーテルベータ−ＣＤ（（ＳＢＥ）−ベータ−シクロデキストリン））である。いくつかの実施形態では、シクロデキストリン／治療剤複合体のシクロデキストリンは、ヒドロキシ基の１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、もしくはそれを超える２−ヒドロキシルプロピル−３−基置換、またはヒドロキシ基の１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、もしくはそれを超えるスルホアルキルエーテル基置換を含む、誘導体化ベータシクロデキストリンである。さらなる実施形態では、シクロデキストリン／治療剤複合体のシクロデキストリンは、ヒドロキシ基の１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、もしくは１０個、またはそれを超えるスルホブチルエーテル基置換を含む、誘導体化ベータシクロデキストリンである。
【０２８７】
いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦリポソーム組成物中に含まれるシクロデキストリン／治療剤複合体のシクロデキストリンは、式Ｉ：
【化４】
2021513525.tif 000005
の誘導体化シクロデキストリンであり、式中、ｎは４、５、または６であり；Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、およびＲ９はそれぞれ独立に、−Ｈ、直鎖もしくは分岐鎖Ｃ１−Ｃ８アルキレン基、２−ヒドロキシルプロピル−３−基；または任意に置換されてもよい直鎖もしくは分岐鎖Ｃ１−Ｃ６基であり、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、およびＲ９のうちの少なくとも１つは、直鎖もしくは分岐鎖Ｃ１−Ｃ８アルキレン基または２−ヒドロキシルプロピル−３−基である。
【０２８８】
いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦリポソーム組成物中に含まれるシクロデキストリン／治療剤複合体のシクロデキストリンは、式ＩＩ：
【化５】
2021513525.tif 000006
の誘導体化シクロデキストリンであり、式中、ｎは４、５、または６であり；Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、およびＲ９はそれぞれ独立に、−Ｏ−または−Ｏ−（Ｃ２−Ｃ６アルキレン）−ＳＯ３−基であり；Ｒ１およびＲ２の少なくとも１つは独立に−Ｏ−（Ｃ２−Ｃ６アルキレン）−ＳＯ３−基であり；Ｓ１、Ｓ２、Ｓ３、Ｓ４、Ｓ５、Ｓ６、Ｓ７、Ｓ８、およびＳ９はそれぞれ独立に、−ＨもしくはＨ、または薬学的に許容可能なカチオンである。さらなる実施形態では、薬学的に許容可能なカチオンは、Ｌｉ＋、Ｎａ＋、またはＫ＋などのアルカリ金属；Ｃａ２＋またはＭｇ２＋などのアルカリ土類金属、ならびにアンモニウムイオン、ならびにアミンカチオン、例えば（Ｃ１−Ｃ６）−アルキルアミン、ピペリジン、ピラジン、（Ｃ１−Ｃ６）−アルカノールアミンおよび（Ｃ４−Ｃ８）−シクロアルカノールアミンのカチオンなどから選択される。
【０２８９】
いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦリポソームは、シクロデキストリン／治療剤複合体を１００〜１００，０００個含む。
【０２９０】
いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦ／シクロデキストリン複合体および／またはシクロデキストリン／治療剤複合体のシクロデキストリン誘導体化は、米国特許第６，１３３，２４８号、同第５，８７４，４１８号、同第６，０４６，１７７号、同第５，３７６，６４５号、同第５，１３４，１２７号、同第７，０３４，０１３号、同第６，８６９，９３９号；および国際公開第０２００５／１１７９１１号に開示されているシクロデキストリンであり、上記特許それぞれの内容は、参照により本明細書に優先的に組み込まれる。
【０２９１】
いくつかの実施形態では、シクロデキストリン／シクロデキストリン複合体のシクロデキストリン誘導体は、スルホアルキルエーテルシクロデキストリンである。いくつかの実施形態では、複合体のシクロデキストリン誘導体は、ＣＡＰＴＩＳＯＬ（登録商標）（ＣｙＤｅｘ  Ｐｈａｒｍａ．Ｉｎｃ．，Ｌｅｎｅｘａ，Ｋａｎｓａｓ）などのスルホブチルエーテル−３−シクロデキストリンである。スルホブチルエーテル−３−シクロデキストリンおよびその他のスルホアルキルエーテルシクロデキストリンの作製方法は、当技術分野で公知である。
【０２９２】
いくつかの実施形態では、シクロデキストリン／治療剤複合体および／またはシクロデキストリン誘導体は、式ＩＩＩ：
【化６】
2021513525.tif 000007
の化合物であり、式中、Ｒは、
（ｅ）（Ｈ）２１−Ｘまたは（−（ＣＨ２）４−ＳＯ３Ｎａ）Ｘ、およびｘ＝１．０〜１０．０、１．０〜５．０、６．０〜７．０、または８．０〜１０．０；
（ｆ）（Ｈ）２１−Ｘまたは（−（ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ３）Ｘ、およびｘ＝１．０〜１０．０、１．０〜５．０、６．０〜７．０、または８．０〜１０．０；
（ｇ）（Ｈ）２１−Ｘまたは（スルホアルキルエーテル）Ｘ、およびｘ＝１．０〜１０．０、１．０〜５．０、６．０〜７．０、または８．０〜１０．０；または
（ｈ）（Ｈ）２１−Ｘまたは（−（ＣＨ２）４−ＳＯ３Ｎａ）Ｘ、およびｘ＝１．０〜１０．０、１．０〜５．０、６．０〜７．０、または８．０〜１０．０である。
【０２９３】
αＰＴＨＦリポソーム中に含まれ、開示される方法に従って使用できるさらなるシクロデキストリンおよびシクロデキストリン／白金系治療複合体が、米国特許出願第６２／５８３，５４３号に開示されており、上記文献の内容は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【０２９４】
いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦリポソームは、シクロデキストリンおよび白金系化学療法剤、またはその塩の複合体を含む。いくつかの実施形態では、白金系化学療法剤はシスプラチンまたはシスプラチン類似体である。いくつかの実施形態では、白金系化学療法剤はカルボプラチンである。さらなる実施形態では、リポソーム組成物は、カルボプラチン、シスプラチン、オキサリプラチン、ストラトプラチン、ピコプラチン、トリプラチン、テトラプラチン、リポプラチン、ロバプラチン、オルマプラチン、ゼニプラチン、白金−トリアミン、サトラプラチン、エンロプラチン、ＪＭ２１６、２５４−Ｓ、ＮＫ１２１、ＣＩ９７３、ＤＷＡ２１１４Ｒ、ＮＤＤＰ、およびネダプラチンからなる群より選択されるメンバーである、白金系化学療法剤を含む。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦリポソームは、１００〜１００，０００個の白金系化学療法剤／ＣＤ複合体を含む。さらなる実施形態では、リポソーム組成物は、２０ｎｍ〜５００ｎｍまたは２０ｎｍ〜２００ｎｍ、またはその間の任意の範囲の直径を有するリポソームを含む。いくつかの実施形態では、組成物中のリポソームは、白金を１００〜１００，０００個含む。
【０２９５】
（３）標的化リポソーム
いくつかの実施形態では、本開示は、リポソームαＰＴＨＦ組成物を提供し、リポソームは、αＰＴＨＦと、ポソームのＰＥＧおよび外側の片方もしくは両方と結合したターゲティング部分とを含み、ターゲティング部分は、目的の標的細胞上の表面抗原に対して特異的親和性を有する。このようなリポソーム、例えば、リポソームの表面にある、または他の方法でリポソームと結合した１つまたは複数のターゲティング部分または生体内分布修飾剤を含むリポソームは一般に、本明細書では「標的化リポソーム」と呼ぶことがある。標的化リポソームのターゲティング部分は、目的の標的（例えば、目的の標的細胞の表面に発現した抗原標的）と特異的に結合できる任意の部分または薬剤であり得る。一実施形態では、標的化リポソームは、目的の標的細胞の表面の標的と特異的かつ選択的に結合し、標的化リポソームを内部移行させ、その細胞中で、リポソーム被包αＰＴＨＦ（例えば、ペンタグルタミン酸化アルファＴＨＦまたはヘキサグルタミン酸化アルファＴＨＦ）がその細胞傷害性効果を発揮する。さらなる実施形態では、標的細胞は、癌細胞、腫瘍細胞または転移性細胞である。いくつかの実施形態では、標的化リポソームは、ペグ化されている。
【０２９６】
「結合する」または「結合した」という用語は、例えば、共有結合、イオン結合（例えば、アビジン−ビオチン）、疎水性相互作用による結合、およびマレイミドなどの官能基、またはＰＥＧなどのリンカーを介した結合などの任意のタイプの結合を意味する。例えば、検出可能マーカー、立体安定剤、リポソーム、リポソーム成分、免疫刺激剤は、マレイミド官能基またはＰＥＧ−マレイミド基によって相互に直接結合し得る。
【０２９７】
ターゲティング部分の組成および起源は、本開示の範囲を限定するものではない。いくつかの実施形態では、リポソームと結合したターゲティング部分は、ポリペプチドまたはペプチド模倣体リガンドである。ペプチドおよびペプチド模倣体ターゲティング部分には、天然または改変ペプチド、例えば、ＤまたはＬペプチド；アルファ、ベータ、またはガンマペプチド；Ｎ−メチルペプチド；アザペプチド；１つまたは複数のアミドを有するペプチド、すなわち、ペプチド、１つまたは複数の尿素、チオ尿素、カルバメート、またはスルホニル尿素結合で置換された結合のペプチド；環状ペプチドを有するものが挙げられる。ペプチド模倣体とは、天然ペプチドに類似した所定の三次元構造にフォールディングすることが可能な分子のことである。いくつかの実施形態では、ペプチドまたはペプチド模倣体ターゲティング部分は、２〜５０アミノ酸長、例えば、５アミノ酸長、１０アミノ酸長、１５アミノ酸長、２０アミノ酸長、２５アミノ酸長、３０アミノ酸長、３５アミノ酸長、４０アミノ酸長、４５アミノ酸長、または５０アミノ酸長である。
【０２９８】
いくつかの実施形態では、ターゲティング部分ポリペプチドは、長さが４０アミノ酸残基である。他の実施形態では、ターゲティング部分ポリペプチドは、長さが少なくとも５０アミノ酸残基、６０アミノ酸残基、７５アミノ酸残基、１００アミノ酸残基、１２５アミノ酸残基、１５０アミノ酸残基、１７５アミノ酸残基、２００アミノ酸残基、２５０アミノ酸残基、または３００アミノ酸残基である。
【０２９９】
さらなる実施形態では、抗体または抗原結合抗体フラグメントなどのターゲティング部分ポリペプチドは、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析を用いる測定で、抗原と０．５×１０−１０〜１０×１０−６の範囲の平衡解離定数（Ｋｄ）で結合する。
【０３００】
いくつかの実施形態では、ターゲティング部分は抗体または抗体誘導体である。他の実施形態では、ターゲティング部分の結合ドメインは、抗体の抗原結合ドメインに由来するものではない。いくつかの実施形態では、ターゲティング部分は、ＤＡＲＰｉｎ、アフィリン、およびアルマジロリピート（例えば、国際出願第２０１６／１６４３０８号参照）、Ｚ−ドメイン（アフィボディ）、アドネクチン、リポカリン、アフィリン、アンチカリン、ノッチン、フィノマー、アトリマー、クニッツドメイン（例えば、国際公開第２００４／０６３３３７号参照）、ＣＴＬＡ４、またはアビマー（例えば、米国特許出願公開第２００４／０１７５７５６号、同第２００５／００５３９７３号、同第２００５／００４８５１２号、および同第２００６／０００８８４４号を参照）からなる群より選択される結合足場に由来するポリペプチドである。
【０３０１】
さらなる実施形態では、ターゲティング部分は、標的細胞の表面に発現した目的の細胞表面抗原のエピトープに対して特異的親和性を有する、抗体または抗体の抗原結合ドメインの誘導体である。いくつかの実施形態では、ターゲティング部分は完全長抗体である。いくつかの実施形態では、ターゲティング部分は抗体の抗原結合部分である。いくつかの実施形態では、ターゲティング部分はｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、ターゲティング部分はＦａｂである。いくつかの実施形態では、ターゲティング部分は、抗体の抗原結合ドメイン由来の結合ドメインを含む（例えば、ｓｃＦｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、およびＦｖフラグメント、ジスルフィド結合Ｆｖ（ｓｄＦｖ）、ＶＨおよびＣＨ１ドメインを含むＦｄフラグメント、ｓｃＦｖ、ミニボディ、ＢｉＴＥ、Ｔａｎｄａｂ、ダイアボディ（（ＶＬ−ＶＨ）２または（ＶＨ−ＶＬ）２）、単一ドメイン抗体（例えば、ナノボディなどのｓｄＡｂ（ＶＬまたはＶＨ）、およびラクダ類ＶＨＨドメイン）および抗体フラグメントから形成される多重特異的抗体が含まれる）。いくつかの実施形態では、ターゲティング部分は、抗体起源の１つまたは複数の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む。本開示の標的化リポソームに適した抗体ベースターゲティング部分の例には、完全長ヒト抗体、ヒト化抗体、キメラ抗体、抗体の抗原結合フラグメント、単鎖抗体、単一ドメイン抗体、二重特異的抗体、合成抗体、ペグ化抗体、および多量体抗体が挙げられる。提供される標的化リポソームの抗体は、上記特性の組み合わせを有し得る。例えば、ヒト化抗体は、抗原結合フラグメントであり得、ペグ化および多量体化されたものであり得る。
【０３０２】
「ヒト化抗体」という用語は、最小限の非ヒト（例えば、マウス）配列を含む特異的免疫グロブリン鎖、キメラ免疫グロブリン、またはそのフラグメントである諸形態の非ヒト（例えば、マウス）抗体を意味する。ヒト化抗体は通常、相補性決定領域（ＣＤＲ）由来の残基が、目的の特異性、親和性、および能力（例えば、Ｊｏｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３２１：５２２−５２５（１９８６）；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３３２：３２３−３２７（１９８８）；Ｖｅｒｈｏｅｙｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２３９：１５３４−１５３６（１９８８）参照）を有する非ヒト種（例えば、マウス、ラット、ウサギ、およびハムスター）のＣＤＲ由来の残基で置換されているヒト免疫グロブリンである。いくつかの例では、ヒト免疫グロブリンのＦｖフレームワーク領域（ＦＲ）残基が、目的の特異性、親和性、および能力を有する非ヒト種由来抗体の対応する残基で置換されている。ヒト化抗体は、Ｆｖフレームワーク領域および／または置換された非ヒト残基内のほかの残基の置換によりさらに改変して、抗体特異性、親和性、および／または能力を改善し、最適化することができる。ヒト化抗体は一般に、非ヒト免疫グロブリンに対応するＣＤＲ領域を全部または実質的に全部含む少なくとも１つ、通常２つまたは３つの可変ドメインを実質的に全部含み、ＦＲ領域の全体または実質的に全体がヒト免疫グロブリンコンセンサス配列のものである。ヒト化抗体はまた、免疫グロブリン定常領域またはドメイン（Ｆｃ）の少なくとも一部、通常、選択されたヒト免疫グロブリンのＦｃを含み得る。ヒト化抗体の作製に用いる方法の例が、米国特許第５，２２５，５３９号および同第５，６３９，６４１号に記載されている。
【０３０３】
さらなる実施形態では、ターゲティング部分は、目的の標的細胞の表面抗原上のエピトープに対して特異的親和性を有する。いくつかの実施形態では、標的細胞は癌細胞である。いくつかの実施形態では、標的細胞は腫瘍細胞である。他の実施形態では、標的細胞は免疫細胞である。
【０３０４】
いくつかの実施形態では、ターゲティング部分は、腫瘍細胞表面抗原上に発現したエピトープに対して特異的親和性を有する。「腫瘍細胞表面抗原」という用語は、癌などの特定の過剰増殖障害に共通する抗原を意味する。いくつかの実施形態では、ターゲティング部分は、腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）である腫瘍細胞表面抗原のエピトープに対して特異的親和性を有する。ＴＡＡは、腫瘍および一部の正常細胞の両方にみられる抗原である。ＴＡＡは、胎児発生の過程で、免疫系が未成熟で応答できない場合に正常細胞に発現し得るか、あるいは通常、正常細胞上に極めて低いレベルで存在し得るが、腫瘍細胞には正常細胞よりはるかに高いレベルで発現する。腫瘍の動的性質のために、いくつかの例では、腫瘍細胞は、特定のステージで特有の抗原を発現することがあり、それ以外の段階では、非腫瘍細胞にも発現する抗原を発現することもある。したがって、ＴＡＡのような特定のマーカーが含まれていることは、それが腫瘍特異的抗原と見なされることを排除するものではない。いくつかの実施形態では、ターゲティング部分は、腫瘍特異的抗原（ＴＳＡ）である腫瘍細胞表面抗原のエピトープに対して特異的親和性を有する。ＴＳＡとは、腫瘍細胞に特有であり、身体の他の細胞にはみられない抗原のことである。いくつかの実施形態では、ターゲティング部分は、特に限定されないが、原発性または転移性黒色腫、胸腺腫、リンパ腫、肉腫、肺癌（例えば、ＮＳＣＬＣまたはＳＣＬＣ）、肝臓癌、非ホジキンリンパ腫、ホジキンリンパ腫、白血病、多発性骨髄腫、神経膠芽腫、神経芽腫、子宮癌、子宮頸癌、腎臓癌、甲状腺癌、膀胱癌、腎臓癌、中皮腫、および乳癌、前立腺癌、卵巣癌、膵臓癌、肺癌、結腸癌などの腺癌、およびその他の当該技術分野で公知の癌を含めた癌の表面に発現する腫瘍細胞表面抗原のエピトープに対して特異的親和性を有する。いくつかの実施形態では、ターゲティング部分は、腫瘍微小環境中の細胞の表面に発現する細胞表面抗原（例えば、内皮細胞およびマクロファージにそれぞれ発現するＶＥＧＦＲおよびＴＩＥ１、またはＴＩＥ２などの抗原、あるいは癌関連線維芽細胞（ＣＡＦ）腫瘍浸潤性Ｔ細胞およびその他の白血球などの腫瘍間質細胞、ならびにマスト細胞、好酸球、および腫瘍関連マクロファージ（ＴＡＭ）を含めた骨髄性細胞に発現する抗原）のエピトープに対して特異的親和性を有する。
【０３０５】
いくつかの実施形態では、標的化リポソームαＰＴＨＦ組成物（例えばＴＬｐ−αＰＴＨＦまたはＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ）は、正常または非腫瘍細胞と比較して、腫瘍細胞上に存在するが非腫瘍細胞上には存在しないかまたはアクセスできない、癌細胞または腫瘍細胞などの標的細胞上で選択的／差次的に発現する癌または腫瘍細胞表面抗原のエピトープに対して特異的親和性を有する、ターゲティング部分を有する。例えば、いくつかの状況では、腫瘍抗原は、正常細胞および悪性癌細胞の両方の表面にあるが、腫瘍エピトープは、癌細胞でのみ露出している。さらなる例として、腫瘍細胞表面抗原は、癌細胞特異的エピトープを存在させる癌性状態で確認変化を受けることがある。特異的親和性を有するターゲティング部分は、本明細書に記載される、または当該技術分野で別の形で知られている標的化可能腫瘍細胞表面抗原上のエピトープに対して有用であり、開示される組成物および方法に包含される。いくつかの実施形態では、腫瘍細胞表面抗原を有する腫瘍細胞は癌細胞である。このような腫瘍細胞表面抗原の例には、特に限定されないが、葉酸受容体アルファ、葉酸受容体ベータ、および葉酸受容体デルタが挙げられる。
【０３０６】
さらなる実施形態では、ターゲティング部分は、抗体または抗原結合抗体フラグメントなどのポリペプチドターゲティング部分を含み、ターゲティング部分は葉酸受容体に対し結合特異性を有する。いくつかの実施形態では、ターゲティング部分は、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析を用いる測定で、０．５×１０−１０〜１０×１０−６の範囲の平衡解離定数（Ｋｄ）で葉酸受容体と結合する。いくつかの実施形態では、ターゲティング部分が結合する葉酸受容体は、葉酸受容体アルファ（ＦＲ−α）、葉酸受容体ベータ（ＦＲ−β）、および葉酸受容体デルタ（ＦＲ−δ）からなる群より選択される１つまたは複数の葉酸受容体と特異的に結合する。さらなる実施形態では、ターゲティング部分は、葉酸受容体アルファ、葉酸受容体ベータ、および／または葉酸受容体デルタからなる群より選択される少なくとも２つの抗原に対して特異的親和性を有する。別の実施形態では、ターゲティング部分は、葉酸受容体アルファ、葉酸受容体ベータ、および／または葉酸受容体デルタに対し、特異的親和性を有する。
【０３０７】
いくつかの実施形態では、ターゲティング部分は、結合時にターゲティング部分を内部移行させる細胞表面抗原のエピトープに対して特異的親和性を有する。結合時に抗体などの結合相手を内部移行させる多数の細胞表面抗原が当技術分野で公知であり、本明細書に開示される標的化リポソームαＰＴＨＦ組成物（例えばＴＬｐ−αＰＴＨＦまたはＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ）上に発現するターゲティング部分の結合標的となることが想定される。
【０３０８】
いくつかの実施形態では、ターゲティング部分は、ＧＯＮＭＢ、ＴＡＣＳＴＤ２（ＴＲＯＰ２）、ＣＥＡＣＡＭ５、ＥＰＣＡＭ、葉酸受容体（例えば、葉酸受容体−α、葉酸受容体−βまたは葉酸受容体−δ）、ムチン１（ＭＵＣ−１）、ＭＵＣ−６、ＳＴＥＡＰ１、メソテリン、ネクチン４、ＥＮＰＰ３、グアニリルシクラーゼＣ（ＧＣＣ）、ＳＬＣ４４Ａ４、ＮａＰｉ２ｂ、ＣＤ７０（ＴＮＦＳＦ７）、ＣＡ９（炭酸脱水酵素）、５Ｔ４（ＴＰＢＧ）、ＳＬＴＲＫ６、ＳＣ−１６、組織因子、ＬＩＶ−１（ＺＩＰ６）、ＣＧＥＮ−１５０２７、Ｐカドヘリン、フィブロネクチンエクストラドメインＢ（ＥＤ−Ｂ）、ＶＥＧＦＲ２（ＣＤ３０９）、テネイシン、コラーゲンＩＶ、ペリオスチン、エンドセリン受容体、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３、ＥｒｂＢ４、ＥＧＦＲ、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３、ＦＧＦＲ４、ＦＧＦＲ６、ＩＧＦＲ−１、ＦＺＤ１、ＦＺＤ２、ＦＺＤ３、ＦＺＤ４、ＦＺＤ５、ＦＺＤ６、ＦＺＤ７、ＦＺＤ８、ＦＺＤ９、ＦＺＤ１０、ＳＭＯ、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ６、ＣＤ８、ＣＤ１１、ＣＤ１１ａ、ＣＤ１５、ＣＤ１８、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ２６、ＣＤ２７Ｌ、ＣＤ２８、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ３４、ＣＤ３７、ＣＤ３８、ＣＤ４０、ＣＤ４４、ＣＤ５６、ＣＤ７０、ＣＤ７４、ＣＤ７９、ＣＤ７９ｂ、ＣＤ９８、ＣＤ１０５、ＣＤ１３３、ＣＤ１３８、ｃｒｉｐｔｏ、ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＧＦ−２Ｒ、ＥｐｈＡ１  ａｎ  ＥｐｈＡ受容体、ＥｐｈＢ受容体、ＥｐｈＡ１、ＥｐｈＡ２、ＥｐｈＡ３、ＥｐｈＡ４、ＥｐｈＡ５、ＥｐｈＡ６、ＥｐｈＡ７、ＥｐｈＡ８、ＥｐｈＢ１、ＥｐｈＢ２、ＥｐｈＢ３、ＥｐｈＢ４、ＥｐｈＢ６、インテグリン（例えば、インテグリンαｖβ３、αｖβ５、またはαｖβ６）、Ｃ２４２抗原、Ａｐｏ２、ＰＳＧＲ、ＮＧＥＰ、ＰＳＣＡ、ＴＭＥＦＦ２、エンドグリン、ＰＳＭＡ、ＣａｎＡｇ、ＣＡＬＬＡ、ｃ−Ｍｅｔ、ＶＥＧＦＲ−１、ＶＥＧＦＲ−２、ＤＤＲ１、ＰＤＧＦＲα、ＰＤＧＦＲβ、ＴｒｋＡ、ＴｒｋＢ、ＴｒｋＣ、ＵＦＯ、ＬＴＫ、ＡＬＫ、Ｔｉｅ１、Ｔｉｅ２、ＰＴＫ７、Ｒｙｋ、ＴＣＲ、ＮＭＤＡＲ、ＬＮＧＦＲ、およびＭｕＳＫからなる群より選択される細胞表面抗原のエピトープに対して特異的親和性を有する。いくつかの実施形態では、ターゲティング部分は、特定の対象の癌（腫瘍）に由来する、またはそれに発現していると判断されるネオ抗原などの細胞表面抗原上のエピトープに対して特異的親和性を有する。
【０３０９】
ターゲティング部分は、マンノース−６−ホスフェート受容体、トランスフェリン受容体、および細胞接着分子（ＣＡＭ）から選択される細胞表面抗原のエピトープに対して特異的親和性を有する。さらなる実施形態では、ターゲティング部分は、細胞間接着分子（ＩＣＡＭ）、血小板−内皮細胞接着分子（ＰＥＣＡＭ）、活性化白血球細胞接着分子（ＡＬＣＡＭ）、Ｂリンパ球細胞接着分子（ＢＬ−ＣＡＭ）、血管細胞接着分子（ＶＣＡＭ）、粘膜血管アドレシン細胞接着分子（ＭＡｄＣＡＭ）、ＣＤ４４、ＬＦＡ−２、ＬＦＡ−３、およびベイシジンからなる群より選択されるＣＡＭのエピトープに対して特異的親和性を有する。
【０３１０】
本明細書で考察するように、葉酸受容体（ＦＲ）は、還元型葉酸キャリア（ＲＦＣ）とは異なり、葉酸および葉酸代謝拮抗薬を細胞と結合させるのに異なる経路を利用する。いくつかの実施形態では、ターゲティング部分は葉酸受容体と特異的に結合する。さらなる実施形態では、ターゲティング部分は、葉酸受容体アルファ、葉酸受容体ベータ、および／または葉酸受容体デルタから選択される葉酸受容体と特異的に結合する。葉酸受容体に対する抗体は、当該技術分野で公知の技術を用いてルーチンに作製できる。さらに、多数の葉酸代謝拮抗薬受容体の配列が、パブリックドメインの状態にあり、かつ／または購入可能であり、容易に入手できる。
【０３１１】
葉酸受容体に対するマウス抗体は、本開示の標的化リポソームのターゲティング部分として使用できる抗体の例である。これらの抗体の配列は既知であり、例えば、米国特許第５，６４６，２５３号、同第８，３８８，９７２号、同第８，８７１，２０６号、同第９，１３３，２７５号、および国際出願ＰＣＴ／ＵＳ２０１１／０５６９６６号、および同ＰＣＴ／ＵＳ２０１２／０４６６７２号に記載されている。例えば、既にパブリックドメインの状態である配列に基づいて抗体の遺伝子を合成し、一過性発現ベクターに入れ、ＨＥＫ−２９３一過性発現系で抗体が産生されている。抗体は、完全抗体、Ｆａｂ、または本明細書で考察される、または当該技術分野で別の形で知られている種々の抗体変種のいずれかであり得る。
【０３１２】
いくつかの実施形態では、標的化リポソーム（例えば、ＴＬ−αＰＴＨＦまたはＴＰＬ−αＰＴＨＦ）は、その表面にターゲティング部分を１〜１，０００個、３０〜１，０００個、５０〜１，０００個、または１，０００個超含む。いくつかの実施形態では、標的化リポソームは、３０〜５００個、３０〜２５０個、もしくは３０〜２００個、またはその間の任意の範囲のターゲティング部分を含む。いくつかの実施形態では、標的化リポソームは、２２０個未満のターゲティング部分、２００個未満のターゲティング部分、または１７５個未満のターゲティング部分を含む。いくつかの実施形態では、ターゲティング部分は、（例えば、イオン相互作用またはＧＰＩアンカーを介して）リポソームの外側に共有結合している。
【０３１３】
いくつかの実施形態では、標的化リポソーム（例えばＴＬ−αＰＴＨＦまたはＴＰＬ−αＰＴＨＦ）の外側にある分子には、脂質、ターゲティング部分、立体安定剤（例えば、ＰＥＧ）、マレイミド、およびコレステロールが含まれる。いくつかの実施形態では、ターゲティング部分はマレイミド官能基を介して共有結合している。いくつかの実施形態では、ターゲティング部分は、リポソーム成分またはＰＥＧ分子などの立体安定剤と共有結合している。いくつかの実施形態では、リポソームの全ターゲティング部分が、ＰＥＧなどのリポソームの１つの成分と結合している。他の実施形態では、標的化リポソームの全ターゲティング部分が、リポソームの異なる成分と結合している。例えば、いくつかのターゲティング部分は脂質成分またはコレステロールと結合し、いくつかのターゲティング部分は立体安定剤（例えば、ＰＥＧ）と結合し、さらに他のターゲティング部分は検出可能マーカーまたは別のターゲティング部分と結合し得る。いくつかの実施形態では、標的化リポソーム（例えば、ＴＬ−αＰＴＨＦまたはＴＰＬ−αＰＴＨＦ）の外側は、リポソームのＰＥＧおよび外側の少なく一方に配置された免疫刺激剤、検出可能マーカー、およびマレイミドのうちの１つまたは複数のものをさらに含む。
【０３１４】
いくつかの実施形態では、標的化リポソーム（例えば、ＴＬ−αＰＴＨＦまたはＴＰＬ−αＰＴＨＦ）は、アニオン性または中性である。いくつかの実施形態では、標的化アニオン性または中性リポソームは、２０ｎｍ〜５００ｎｍもしくは２０ｎｍ〜２００ｎｍ、またはその間の任意の範囲の直径を有する。さらなる実施形態では、標的化アニオン性または中性リポソームは、８０ｎｍ〜１２０ｎｍまたはその間の任意の範囲の直径を有する。
【０３１５】
他の実施形態では、標的化リポソーム（例えば、ＴＬ−αＰＴＨＦまたはＴＰＬ−αＰＴＨＦ）は、カチオン性である。いくつかの実施形態では、標的化アニオン性または中性リポソームは、２０ｎｍ〜５００ｎｍもしくは２０ｎｍ〜５００ｎｍ、またはその間の任意の範囲の直径を有する。さらなる実施形態では、標的化アニオン性または中性リポソームは、８０ｎｍ〜１２０ｎｍまたはその間の任意の範囲の直径を有する。
【０３１６】
さらなる実施形態では、リポソーム組成物は、標的化リポソーム（例えば、ＴＬ−αＰＴＨＦまたはＴＰＬ−αＰＴＨＦ）と、３０〜７０％、３０〜６０％、もしくは３０〜５０％ｗ／ｗ、またはその間の任意の範囲のポリグルタミン酸化アルファＴＨＦとを含む。いくつかの実施形態では、標的化リポソームは、少なくとも１％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、または７５％ｗ／ｗ超のポリグルタミン酸化アルファＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、標的化リポソームを調製する工程で、ポリグルタミン酸化アルファＴＨＦの出発材料の少なくとも１％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、または７５％超が標的化リポソーム中に被包（封入）される。
【０３１７】
いくつかの実施形態では、標的化リポソーム組成物は、３０〜７０％、３０〜６０％、もしくは３０〜５０％ｗ／ｗ、またはその間の任意の範囲のテトラグルタミン酸化アルファＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、標的化リポソームは、少なくとも１％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、または７５％ｗ／ｗ超のテトラグルタミン酸化アルファＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、標的化リポソームを調製する工程で、テトラグルタミン酸化アルファＴＨＦの出発材料の少なくとも１％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％または７５％超が標的化リポソーム中に被包（封入）される。
【０３１８】
いくつかの実施形態では、標的化リポソーム組成物は、３０〜７０％、３０〜６０％、もしくは３０〜５０％ｗ／ｗ、またはその間の任意の範囲のペンタグルタミン酸化アルファＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、標的化リポソームは、少なくとも１％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、または７５％ｗ／ｗ超のペンタグルタミン酸化アルファＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、標的化リポソームを調製する工程で、ペンタグルタミン酸化アルファＴＨＦの出発材料の少なくとも１％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、または７５％超が標的化リポソーム中に被包（封入）される。
【０３１９】
いくつかの実施形態では、標的化リポソーム組成物は、３０〜７０％、３０〜６０％、もしくは３０〜５０％ｗ／ｗ、またはその間の任意の範囲のヘキサグルタミン酸化アルファＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、標的化リポソームは、少なくとも１％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、または７５％ｗ／ｗ超のヘキサグルタミン酸化アルファＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、標的化リポソームを調製する工程で、ヘキサグルタミン酸化アルファＴＨＦの出発材料の少なくとも１％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％または７５％超が標的化リポソーム中に被包（封入）される。
【０３２０】
ポリペプチドターゲティング部分とリポソーム表面分子を共有結合させる方法および技術については当技術分野で公知であり、ＴＬ−αＰＴＨＦまたはＴＰＬ−αＰＴＨＦリポソーム組成物の製造に容易に適用できる。
【０３２１】
非タンパク質性ターゲティング部分および他の組成物のリポソーム表面への化学的結合を用い得る。したがって、任意の連結もしくは結合法および／または当該技術分野で公知の任意の好適なリンカーを用いて、非タンパク質部分をリポソームに共有結合または非共有結合、包埋または吸着させ得る。このような架橋剤および架橋法の正確なタイプおよび化学的性質は、使用する親和性基のタイプおよびリポソームの性質に適合させるのが好ましい。ターゲティング部分を結合または吸着または連結させる方法は、当該技術分野でも周知である。例えば、いくつかの実施形態では、ターゲティング部分を、特に限定されないが、アミノ、ＳＨ、ヒドロキシル、アルデヒド、ホルミル、カルボキシル、Ｈｉｓタグ、またはその他のポリペプチドなどの極性基を介して界面の基と結合させ得る。さらに、ターゲティング部分を、特に限定されないが、スクシンイミジルコハク酸、塩化シアヌル、トシル活性化基、イミダゾール基、ＣＮＢｒ、ＮＨＳ、活性化ＣＨ、ＥＣＨ、ＥＡＨ、エポキシ、チオプロピル、活性化チオール、などの活性基を介して結合させ得る。さらに、ターゲティング部分を、特に限定されないが、架橋剤を含むかどうかを問わず疎水性結合（ファンデルワールス）または静電相互作用（例えば、二価のアニオン、ポリアニオン、ポリカチオンなど）を介して結合させ得る。
【０３２２】
（４）リポソームの製造
いくつかの実施形態では、本開示は、本明細書に開示されるリポソーム組成物の製造方法を提供する。一実施形態では、この方法は、（１）リポソーム成分；（２）ポリグルタミン酸化アルファ（例えばペンタグルタミン酸化またはヘキサグルタミン酸化）テトラヒドロ葉酸を含む混合物を水溶液中で形成することを含む。さらなる実施形態では、混合物は、ペグ化リポソーム成分を含む。次いで、混合物をホモジナイズして水溶液中でリポソームを形成する。さらに、混合物を膜に通して押し出し、水溶液のαＰＴＨＦを封入したリポソームを形成することができる。本開示のリポソーム成分は、官能化脂質およびターゲティング部分と結合した脂質、検出可能標識、および立体安定剤、またはこれら全てのいずれかのサブセットを含めた任意の脂質（コレステロールを含む）を含み得ることが理解される。さらに、水溶液の生理活性αＰＴＨＦは、リポソームの内部または外側について本明細書で考察される、または当該技術分野で別の形で知られている、例えば緩衝剤、塩、および凍結保護物質を含めた任意の試薬および化学薬品を含み得ることが留意される。
【０３２３】
いくつかの実施形態では、本開示は、本明細書に開示される標的化ペグ化リポソームαＰＴＨＦ（標的化ＰＬｐ−αＰＴＨＦ）または非標的化ＰＬｐ−αＰＴＨＦの製造方法を提供する。一実施形態では、この方法は、（１）リポソーム成分；（２）水溶液中のポリグルタミン酸化アルファ（例えばペンタグルタミン酸化またはヘキサグルタミン酸化）テトラヒドロ葉酸；および（３）ターゲティング部分を含む混合物を形成することを含む。その後、混合物をホモジナイズして水溶液中でリポソームを形成する。さらに、混合物を膜に通して押し出し、水溶液の標的化αＰＴＨＦを封入したリポソームを形成し得る。標的化ペグ化リポソーム成分は、官能化脂質およびターゲティング部分と結合した脂質、検出可能標識、および立体安定剤、またはこれら全てのいずれかのサブセットを含めた任意の脂質（コレステロールを含む）を含み得ることが理解される。さらに、標的化ペグ化リポソームは、リポソームの内部または外側について本明細書で考察される、または当該技術分野で別の形で知られている、例えば緩衝剤、塩、および凍結保護物質を含めた任意の試薬および化学薬品を含むことに留意される。
【０３２４】
上記の方法は、任意選択で、除去段階の後に組成物を凍結乾燥させて凍結乾燥組成物を形成する段階をさらに含む。上記のように、水溶液中の標的化ＰＴＰＬＡまたは非標的化ＰＴＰＬＡは、本明細書に記載される、または当該技術分野で別の形で知られている凍結保護物質を含む。組成物を凍結乾燥させるのであれば、凍結保護物質が好ましいと思われる。
【０３２５】
さらに、凍結乾燥段階の後、この方法は任意選択で、凍結乾燥段階の後組成物を溶媒に溶かすことによって凍結乾燥組成物を再構成する段階をさらに含む。再構成の方法は当技術分野で公知である。好ましい溶媒の１つが水である。他の好ましい溶媒には、生理食塩水および緩衝液が挙げられる。
【０３２６】
特定の代表的実施形態が本明細書で考察されるが、リポソームは、当該技術分野で公知のいずれの方法によっても製造できることが理解される。例えば、Ｇ．Ｇｒｅｇｏｒｉａｄｉｓ（ｅｄｉｔｏｒ），Ｌｉｐｏｓｏｍｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ｖｏｌ．１−３，１ｓｔ  ｅｄｉｔｉｏｎ，１９８３；２ｎｄ  ｅｄｉｔｉｏｎ，１９９３，ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ，４５  Ｂｏｃａ  Ｒａｔｏｎ，Ｆｌａを参照されたい。リポソーム組成物の製造に適した方法の例には、押し出し、逆相蒸発、超音波処理、溶媒（例えば、エタノール）注入、マイクロ流動化、界面活性剤透析；エーテル注入、および脱水／再水和が挙げられる。リポソームのサイズは、低圧押し出しに使用する膜の細孔径、またはマイクロ流動化に用いる通過の圧力および回数を制御することにより、または当該技術分野で公知の任意の他の適切な方法により、ルーチンに制御できる。
【０３２７】
αＰＴＨＦは一般に、リポソームの内側、すなわち、内側（内部）空間内に含まれている。一実施形態では、リポソームを取り囲む外側の媒体から置換アンモニウムを部分的に、または実質的に完全に除去する。このような除去は、当該技術分野で公知の任意の適切な手段（例えば、希釈、イオン交換クロマトグラフィー、サイズ排除クロマトグラフィー、透析、限外ろ過、および沈殿）によって達成できる。したがって、上記の方法または当該技術分野で公知の別の方法によるリポソーム組成物の製造方法は、任意選択で、例えばホモジナイゼーションまたは押し出し段階によるリポソームの形成後、リポソーム外部の水溶液中のαＰＴＨＦを除去する段階をさらに含む。
【０３２８】
他の実施形態では、本開示は、内部空間を含むリポソームと、内部空間に配置されたαＰＴＨＦと、リポソームの外側に結合した立体安定剤分子と、少なくとも１つの葉酸受容体に対して特異的親和性を有するタンパク質を含むターゲティング部分とを含み、葉酸受容体を選択的に標的とする、標的化ペグ化リポソームαＰＴＨＦ（ＰＬｐ−αＰＴＨＦ）を提供し、前記ターゲティング部分は、リポソームの立体安定剤および外側のうちの少なくとも一方と結合している。この実施形態の成分は、本開示の他の実施形態に記載されるものと同じであってもよい。例えば、標的化ペグ化リポソームαＰＴＨＦおよびＰＥＧであり得る立体安定剤は、本開示の他の部分に記載される通りのものである。
【０３２９】
いくつかの実施形態では、本開示は、封入および／または被包されたαＰＴＨＦを含むペグ化リポソームと、ターゲティング部分と、アミノ酸鎖とを含む標的化組成物を製造する方法であって、アミノ酸鎖が複数のアミノ酸を含み、ターゲティング部分が、少なくとも１つのタイプの葉酸受容体に対して特異的親和性を有し、特異的親和性が、少なくとも１つのタイプの葉酸受容体に対して０．５×１０−１０〜１０×１０−６分子［０．０５ｎＭ〜１０μＭ］の範囲の平衡解離定数（Ｋｄ）を含むと定義され、ターゲティング部分が、リポソームのＰＥＧおよび外側のうちの一方または両方と結合している方法を提供し、この方法は、溶液中でリポソーム成分とαＰＴＨＦとを含む混合物を形成することと；溶液中で混合物をホモジナイズしてリポソームを形成することと；混合物を処理して、αＰＴＨＦが封入および／または被包されたリポソームを形成することと；αＰＴＨＦが封入および／または被包されたリポソームの表面にターゲティング部分を付与することとを含み、ターゲティング部分が、葉酸受容体アルファ（ＦＲ−α）、葉酸受容体ベータ（ＦＲ−β）、および葉酸受容体デルタ（ＦＲ−δ）のうちの少なくとも１つに対して特異的親和性を有する。いくつかの実施形態では、この方法は、溶液中でリポソーム成分とアルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸とを含む混合物を形成することと；例えば混合物をホモジナイズして、または別の方法で処理してリポソームを形成することにより、アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸が封入および／または被包されたリポソームを形成することと；アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸が封入および／または被包されたリポソームの表面にターゲティング部分を付与することとを含み、ターゲティング部分が、葉酸受容体アルファ（ＦＲ−α）、葉酸受容体ベータ（ＦＲ−β）および葉酸受容体デルタ（ＦＲ−δ）のうちの少なくとも１つに対して特異的親和性を有する。いくつかの実施形態では、処理することは、薄膜水和、押し出し、インライン混合、エタノール注入技術、凍結融解法、逆相蒸発法、動的高圧マイクロ流動化、マイクロ流体混合、二重エマルジョン、凍結乾燥二重エマルジョン、３Ｄプリンティング、膜コンタクター法、および撹拌のうちの１つまたは複数のものを含み、粒子が形成された後、押し出しおよび超音波処理のうちの１つまたは複数のものにより粒子のサイズをさらに変更できる。いくつかの実施形態では、リポソームを調製する工程で、ポリグルタミン酸化アルファＴＨＦの出発材料の少なくとも１％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％または７５％超が標的化リポソーム中に被包（封入）される。いくつかの実施形態では、リポソームは、アニオン性または中性である。いくつかの実施形態では、ターゲティング部分は、葉酸受容体アルファ（ＦＲ−α）、葉酸受容体ベータ（ＦＲ−β）、および葉酸受容体デルタ（ＦＲ−δ）のうちの１つまたは複数に対して特異的親和性を有する。さらなる実施形態では、ターゲティング部分は、葉酸受容体アルファ（ＦＲ−α）および葉酸受容体ベータ（ＦＲ−β）に対して特異的結合親和性を有する。さらなる実施形態では、ターゲティング部分は、腫瘍細胞上に存在するが、非腫瘍細胞上には存在しないかアクセスできない腫瘍細胞表面抗原上のエピトープに対して特異的親和性を有する。
【０３３０】
また、リン脂質の組成を変化させることにより、または受容体もしくは対抗受容体をリポソーム中に挿入することにより、特定の細胞、臓器、または細胞オルガネラを標的とするようリポソームを製造できる。例えば、非イオン性界面活性剤の含有量を高くして製造したリポソームが、肝臓を標的化するのに使用されている（例えば、早川らの特開平４−２４４０１８；Ｋａｔｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｌ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．１６：９６０，（１９９３．）を参照）。また、大豆由来ステリルグリコシド混合物（ＳＧ）およびコレステロール（Ｃｈ）を有するジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）のリポソーム製剤が肝臓を標的とすることが示されている（Ｓｈｉｍｉｚｕ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｌ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．２０：８８１，１９９７）。
【０３３１】
Ｂ．抗体送達媒体
さらなる実施形態では、本開示は、抗体送達媒体（例えば、免疫複合体（ＡＤＣ））を提供する。いくつかの実施形態では、本開示は、式（Ａ）−（Ｌ）−（αＰＴＨＦ）を有する免疫複合体を提供し、式中、（Ａ）は、抗体または抗体の抗原結合フラグメントであり；（Ｌ）はリンカーであり；「（αＰＴＨＦ）」は本明細書に記載されるαＰＴＨＦ組成物であり；前記リンカー（Ｌ）は、（Ａ）を（αＰＴＨＦ）と結合させる。
【０３３２】
いくつかの実施形態では、抗体または抗原結合抗体フラグメントは、目的の細胞上の細胞表面抗原のエピトープ（例えば、本明細書に記載されるエピトープおよび／または抗原）に対して特異的親和性を有する。特定の実施形態では、抗体は、癌／腫瘍の細胞膜中または細胞膜上に（例えば、細胞表面に）発現する抗原標的と結合し、抗体は、（抗原）標的と結合後に細胞によって内部移行し、その後、αＰＴＨＦが細胞内で放出される。いくつかの実施形態では、抗体は完全長抗体である。
【０３３３】
（Ａ）−（Ｌ）−（αＰＴＨＦ）免疫複合体の抗体または抗原結合抗体フラグメントは、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、またはＩｇＭ抗体であり得る。異なるクラスの免疫グロブリンは、異なるよく知られたサブユニット構造および三次元配置を有する。特定の実施形態では、抗体はＩｇＧ抗体である。いくつかの実施形態では、抗体は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４抗体である。特定の実施形態では、抗体はＩｇＧ１抗体である。
【０３３４】
いくつかの実施形態では、（Ａ）は、抗体の抗原結合フラグメントである。いくつかの実施形態では、（Ａ）は、抗体の抗原結合フラグメントである。
【０３３５】
「リンカー」とは、化合物、通常はαＰＴＨＦなどの薬物を、抗体または抗体の抗原結合フラグメントと安定に共有結合で結合させることが可能な任意の化学的部分のことである。リンカーは、化合物または抗体にまだ活性がある条件下で、酸による切断、光による切断、ペプチダーゼによる切断、エステラーゼによる切断、およびジスルフィド結合切断を受けやすいか、これらに対して実質的に耐性を示すものであり得る。好適なリンカーは、当技術分野で公知であり、例えば、ジスルフィド基、チオエーテル基、酸に不安定な基、感光性基、ペプチダーゼに不安定な基、およびエステラーゼに不安定な基が挙げられる。リンカーにはまた、荷電リンカーおよびその親水性型が挙げられる。
【０３３６】
いくつかの実施形態では、リンカーは、切断可能リンカー、非切断可能リンカー、親水性リンカー、およびジカルボン酸系リンカーからなる群より選択される。別の実施形態では、リンカーは非切断可能リンカーである。別の実施形態では、リンカーは、Ｎ−スクシンイミジル４−（２−ピリジルジチオ）ペンタノエート（ＳＰＰ）；Ｎ−スクシンイミジル４−（２−ピリジルジチオ）ブタノエート（ＳＰＤＢ）またはＮ−スクシンイミジル４−（２−ピリジルジチオ）−２−スルホブタノエート（スルホ−ＳＰＤＢ）；Ｎ−スクシンイミジル４−（マレイミドメチル）シクロヘキサンカルボキシレート（ＳＭＣＣ）；Ｎ−スルホスクシンイミジル４−（マレイミドメチル）シクロヘキサンカルボキシレート（スルホＳＭＣＣ）；Ｎ−スクシンイミジル−４−（ヨードアセチル）アミノベンゾエート（ＳＩＡＢ）；およびＮ−スクシンイミジル［（Ｎ−マレイミドプロピオンアミド）テトラエチレングリコール］エステル（ＮＨＳ−ＰＥＧ４−マレイミド）からなる群より選択される。さらなる実施形態では、リンカーは、Ｎ−スクシンイミジル［（Ｎ−マレイミドピロピオンアミド）テトラエチレングリコール］エステル（ＮＨＳ−ＰＥＧ４−マレイミド）である。
【０３３７】
いくつかの実施形態では、当該技術分野で公知の技術を用いて、αポリグルタミン酸化ＴＨＦを免疫複合体の抗体または抗原結合抗体フラグメントに直接、またはリンカーを介して結合（連結）させる。このような１つまたは複数のαＰＴＨＦの結合は、共有結合、結合親和性、インターカレーション、配位結合、および複合体形成などの多数の化学的機序を含み得る。αＰＴＨＦと抗体または抗原結合抗体フラグメントの共有結合は、既存の側鎖の直接縮合または外部架橋分子の組み込みにより達成できる。多数の二価または多価の薬剤が、カルボジイミド、ジイソシアネート、グルタルアルデヒド、ジアゾベンゼン、およびヘキサメチレンジアミンなどのカップリング剤を用いて、ポリペプチドを他のタンパク質と結合させるのに有用である。このリストは、当該技術分野で公知の種々のカップリング剤を網羅することを意図するものではなく、むしろ、よく用いられる代表的カップリング剤を例示するものである。いくつかの実施形態では、抗体または抗原結合抗体フラグメントを誘導体化し、次いでαポリグルタミン酸化ＴＨＦと結合させる。あるいは、当該技術分野で公知の技術を用いて、αＰＴＨＦを誘導体化し、抗体または抗原結合抗体フラグメントと結合させることができる。
【０３３８】
いくつかの実施形態では、免疫複合体は、抗体または抗体の抗原結合フラグメントおよびグルタミル基（テトラヒドロ葉酸のグルタミル基を含む）を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上を含むαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、免疫複合体は、Ｌ型のグルタミル基を２個以上含むαＰＴＨＦを含む。他の実施形態では、免疫複合体は、Ｄ型のグルタミル基を含むαＰＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、免疫複合体は、Ｄ型のグルタミル基と、２個以上のＬ型のグルタミル基とを含む、αＰＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、免疫複合体は、ガンマカルボキシル結合を有するグルタミル基を２個以上含むαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、免疫複合体は、テトラグルタミン酸化αＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、免疫複合体は、ペンタグルタミン酸化αＰＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、免疫複合体は、Ｌ−ペンタグルタミン酸化αＰＴＨＦ、Ｄ−ペンタグルタミン酸化αＰＴＨＦ、またはＬ−およびＤ−ペンタグルタミンαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、免疫複合体は、ヘキサグルタミン酸化αＰＴＨＦ（Ｌｐ−αＰＴＨＦ）を含む。さらなる実施形態では、免疫複合体は、Ｌ−ヘキサグルタミン酸化αＰＴＨＦ、Ｄ−ヘキサグルタミン酸化αＰＴＨＦ、またはＬ−およびＤ−ヘキサグルタミン酸化αＰＴＨＦを含む。
【０３３９】
いくつかの実施形態では、抗体送達媒体組成物は、αＰＴＨＦと、ＧＯＮＭＢ、ＴＡＣＳＴＤ２（ＴＲＯＰ２）、ＣＥＡＣＡＭ５、ＥＰＣＡＭ、葉酸受容体（例えば、葉酸受容体−α、葉酸受容体−βまたは葉酸受容体−δ）、ムチン１（ＭＵＣ−１）、ＭＵＣ−６、ＳＴＥＡＰ１、メソテリン、ネクチン４、ＥＮＰＰ３、グアニリルシクラーゼＣ（ＧＣＣ）、ＳＬＣ４４Ａ４、ＮａＰｉ２ｂ、ＣＤ７０（ＴＮＦＳＦ７）、ＣＡ９（炭酸脱水酵素）、５Ｔ４（ＴＰＢＧ）、ＳＬＴＲＫ６、ＳＣ−１６、組織因子、ＬＩＶ−１（ＺＩＰ６）、ＣＧＥＮ−１５０２７、Ｐカドヘリン、フィブロネクチンエクストラドメインＢ（ＥＤ−Ｂ）、ＶＥＧＦＲ２（ＣＤ３０９）、テネイシン、コラーゲンＩＶ、ペリオスチン、エンドセリン受容体、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３、ＥｒｂＢ４、ＥＧＦＲ、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３、ＦＧＦＲ４、ＦＧＦＲ６、ＩＧＦＲ−１、ＦＺＤ１、ＦＺＤ２、ＦＺＤ３、ＦＺＤ４、ＦＺＤ５、ＦＺＤ６、ＦＺＤ７、ＦＺＤ８、ＦＺＤ９、ＦＺＤ１０、ＳＭＯ、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ６、ＣＤ８、ＣＤ１１、ＣＤ１１ａ、ＣＤ１５、ＣＤ１８、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ２６、ＣＤ２７Ｌ、ＣＤ２８、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ３４、ＣＤ３７、ＣＤ３８、ＣＤ４０、ＣＤ４４、ＣＤ５６、ＣＤ７０、ＣＤ７４、ＣＤ７９、ＣＤ７９ｂ、ＣＤ９８、ＣＤ１０５、ＣＤ１３３、ＣＤ１３８、ｃｒｉｐｔｏ、ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＧＦ−２Ｒ、ＥｐｈＡ１  ａｎ  ＥｐｈＡ受容体、ＥｐｈＢ受容体、ＥｐｈＡ１、ＥｐｈＡ２、ＥｐｈＡ３、ＥｐｈＡ４、ＥｐｈＡ５、ＥｐｈＡ６、ＥｐｈＡ７、ＥｐｈＡ８、ＥｐｈＢ１、ＥｐｈＢ２、ＥｐｈＢ３、ＥｐｈＢ４、ＥｐｈＢ６、インテグリン（例えば、インテグリンαｖβ３、αｖβ５、またはαｖβ６）、Ｃ２４２抗原、Ａｐｏ２、ＰＳＧＲ、ＮＧＥＰ、ＰＳＣＡ、ＴＭＥＦＦ２、エンドグリン、ＰＳＭＡ、ＣａｎＡｇ、ＣＡＬＬＡ、ｃ−Ｍｅｔ、ＶＥＧＦＲ−１、ＶＥＧＦＲ−２、ＤＤＲ１、ＰＤＧＦＲα、ＰＤＧＦＲβ、ＴｒｋＡ、ＴｒｋＢ、ＴｒｋＣ、ＵＦＯ、ＬＴＫ、ＡＬＫ、Ｔｉｅ１、Ｔｉｅ２、ＰＴＫ７、Ｒｙｋ、ＴＣＲ、ＮＭＤＡＲ、ＬＮＧＦＲ、およびＭｕＳＫからなる群より選択される細胞表面抗原のエピトープに対して特異的親和性を有する抗体または抗原結合抗体フラグメントとを含む。いくつかの実施形態では、送達媒体は、ネオ抗原などの特定の対象の癌（腫瘍）に由来する、またはそれに発現していると判断される細胞表面抗原のエピトープ対して特異的親和性を有するターゲティング部分を含む。
【０３４０】
いくつかの実施形態では、抗体送達媒体組成物は、αＰＴＨＦと、マンノース−６−ホスフェート受容体、トランスフェリン受容体、および細胞接着分子（ＣＡＭ）からなる群より選択される抗原のエピトープに対して特異的親和性を有する抗体または抗原結合抗体フラグメントとを含む。さらなる実施形態では、ターゲティング部分は、細胞間接着分子（ＩＣＡＭ）、血小板−内皮細胞接着分子（ＰＥＣＡＭ）、活性化白血球細胞接着分子（ＡＬＣＡＭ）、Ｂリンパ球細胞接着分子（ＢＬ−ＣＡＭ）、血管細胞接着分子（ＶＣＡＭ）、粘膜血管アドレシン細胞接着分子（ＭＡｄＣＡＭ）、ＣＤ４４、ＬＦＡ−２、ＬＦＡ−３、およびベイシジンからなる群より選択されるＣＡＭのエピトープに特異的親和性を有する。
【０３４１】
いくつかの実施形態では、抗体送達媒体組成物は、グルタミル基を１個、２個、３個、４個、５個、５〜１０個、または１１個以上含む。いくつかの実施形態では、抗体送達媒体組成物は、グルタミル基を１個、２個、３個、４個、５個、５〜１０個、または１１個以上含む。いくつかの実施形態では、抗体送達媒体組成物は、グルタミル基を１個、２個、３個、４個、５個、５〜１０個、または１１個以上含む。
【０３４２】
ＩＶ．医薬組成物および投与
いくつかの実施形態では、リポソーム組成物は、リポソームと担体、例えば薬学的に許容可能な担体とを含む、医薬組成物として提供される。提供される医薬組成物中に含まれる薬学的に許容可能な担体には、生理食塩水、等張性デキストロース、等張性スクロース、リンゲル液、およびハンクス液が挙げられる。いくつかの実施形態では、医薬組成物の保存安定に最適なｐＨを維持するため緩衝物質を添加する。いくつかの実施形態では、医薬組成物のｐＨは６．０〜７．５である。いくつかの実施形態では、ｐＨは６．３〜７．０である。さらなる実施形態では、ｐＨは６．５である。医薬組成物のｐＨは、リポソーム膜脂質の安定性および封入された物質の保持の両方を可能にするものであるのが理想的である。通常２〜２０ｍＭの濃度のヒスチジン、ヒドロキシエチルピペラジン−エチルスルホネート（ＨＥＰＥＳ）、モルホリポエチルスルホネート（ＭＥＳ）、コハク酸塩、酒石酸塩、およびクエン酸塩が代表的な緩衝物質である。他の好適な担体には、例えば、水、緩衝水溶液、０．４％ＮａＣｌ、および０．３％グリシンが挙げられる。タンパク質、炭水化物、またはポリマー安定剤および張度調節剤、例えば、ゼラチン、アルブミン、デキストラン、またはポリビニルピロリドンを添加できる。組成物の浸透圧は、グルコース、またはこれより活性の低いラクトース、スクロース、マンニトール、もしくはデキストリンなどの化合物を用いて、０．２５〜０．３５モル／ｋｇの生理学的レベルに調節できる。これらの組成物は、当該技術分野で公知の従来の滅菌技術を用いて（例えば、ろ過により）、ルーチンに滅菌できる。得られた水溶液は、使用のために包装するか、無菌条件下でろ過および凍結乾燥し、凍結乾燥製剤を投与前に無菌の水性媒体と混合することができる。
【０３４３】
提供される医薬リポソーム組成物はまた、生理学的条件に近づけるのに必要とされるその他の薬学的に許容され得る補助物質、例えばｐＨ調整剤および緩衝剤、ならびに浸透圧調整剤、例えば、酢酸ナトリウム、乳酸ナトリウム、塩化ナトリウム、塩化カリウム、および塩化カルシウムなどを含み得る。さらに、リポソーム懸濁液は、貯蔵時のフリーラジカルおよび脂質過酸化によるダメージから脂質を保護する脂質保護剤を含み得る。アルファトコフェロールなどの親油性フリーラジカル失活剤およびフェリオキサミンなどの水溶性イオン特異的キレート化剤が好適である。
【０３４４】
提供される流体医薬製剤中のリポソーム濃度は、必要に応じて広い範囲にわたって、例えば、通常約０．０５重量％未満、または少なくとも約２〜１０重量％から３０〜５０重量％程度まで変化せることができ、選択する具体的な投与方法に応じて、主として流体の体積および粘度によって選択される。例えば、濃度を高くして、治療に関連する流体量を減らし得る。これは、アテローム性動脈硬化症関連うっ血性心不全または重度高血圧の患者に特に望ましい。あるいは、刺激性脂質から構成されるリポソーム医薬組成物を低濃度に希釈して、投与部位での炎症を軽減し得る。
【０３４５】
いくつかの実施形態は、表面に葉酸受容体を発現している腫瘍にαＰＴＨＦの標的化ペグ化リポソーム製剤を送達する方法に関する。代表的方法は、本明細書に提供されるリポソーム医薬組成物を有効量の標的化ペグ化リポソームαＰＴＨＦが腫瘍に送達される量で投与する段階を含む。
【０３４６】
投与するリポソーム医薬組成物の量は、リポソーム内に封入する具体的なαＰＴＨＦ、治療する疾患状態、使用するリポソームのタイプ、および臨床医の判断によって決まる。投与するリポソーム医薬組成物の量は通常、治療有効量の特定の治療物質を送達するのに十分な量である。
【０３４７】
治療有効量を送達するのに必要なリポソーム医薬組成物の量は、薬物試験技術で一般的なｉｎ  ｖｉｔｒｏおよびｉｎ  ｖｉｖｏの常法により決定できる。例えば、Ｄ．Ｂ．Ｂｕｄｍａｎ，Ａ．Ｈ．Ｃａｌｖｅｒｔ，Ｅ．Ｋ．Ｒｏｗｉｎｓｋｙ（編）．Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，ＬＷＷ，２００３を参照されたい。種々の治療用組成物に対する治療有効投与量は、当業者に公知である。いくつかの実施形態では、医薬品リポソーム組成物を介して治療物質を送達し、ルーチンの非リポソーム製剤中の同じ量の治療物質の投与によって得られる活性と比較して、少なくとも同じか、これより高い活性がもたらされる。リポソーム医薬組成物の投与量は通常、例えば、体表面積１平方メートル（ｍ２）当たり約０．００５〜約５０００ｍｇの治療物質、ほとんどの場合、体表面積１ｍ２の当たり約０．１〜約１００ｍｇの治療物質の範囲内にある。
【０３４８】
例えば、対象が腫瘍を有する場合、有効量は、腫瘍体積または腫瘍量（例えば、腫瘍の画像処理により測定できる）を減少させる薬剤（例えばαＰＴＨＦ）の量であり得る。有効量はまた、血液もしくはその他の体液中、または組織（例えば、生検）中の癌細胞の存在および／または頻度により評価できる。腫瘍が組織または臓器の正常機能に影響を与える場合、有効量は、組織または臓器の正常機能を測定することによりルーチンに評価できる。いくつかの例では、有効量は、１つまたは複数、好ましくは全部の症状を軽減する、または消失させるのに必要な量である。
【０３４９】
αＰＴＨＦ組成物（例えば、ペンタグルタミン酸化またはヘキサグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸を含むリポソーム）を含む医薬組成物も提供される。医薬組成物は、試料リポソーム、好ましくはαＰＴＨＦを、好ましくは薬学的に許容可能な担体中に含む、無菌組成物である。
【０３５０】
別途明記されない限り、種々の投与経路が利用可能である。選択する具体的方法は、選択する具体的な活性薬剤、治療する具体的病態、および治療効果を得るのに必要な投与量によって決まる。提供される方法は、医学的に許容され、良質の医療のための原則に従う任意の既知の投与様式を用いて実施できる。いくつかの実施形態では、投与経路は注射である。さらなる実施形態では、注射は、筋肉内、皮下、静脈内、動脈内、腹腔内、関節腔内、硬膜外内、くも膜下腔内、静脈内、筋肉内、または胸骨内注射から選択される非経口経路によるものである。いくつかの実施形態では、投与経路は注入である。さらなる実施形態では、投与経路は、経口、経鼻、粘膜、舌下、気管内、眼部、直腸、腟、点眼、局所、経皮、肺性、または吸入である。
【０３５１】
本明細書に記載されるリポソームαＰＴＨＦ組成物などのαＰＴＨＦ含有治療用組成物は、例えば、単位投与量の注射などの従来法で静脈内に投与できる。本明細書に提供される治療用組成物に関連して使用される「単位投与量」という用語は、対象に対する単一投与量として適切な物理的に別個の単位を意味し、各単位は、例えば、担体または媒体などの必要とされる希釈剤と組み合わせて、所望の治療効果が得られるよう計算した所定量の活性物質を含む。特定の実施形態では、アダプターを含む治療用組成物を皮下に投与する。
【０３５２】
いくつかの実施形態では、α-ＰＴＨＦ組成物を剤形と適合性のある方法により、治療有効量で投与する。投与する量は、治療する対象、対象の系が有効成分を利用する能力、および所望の治療効果の程度によって決まる。投与に必要な有効成分の正確な量は、開業医の判断に依存し、各個体に特有のものである。ただし、全身投与に適した投与量範囲については本明細書に開示し、これは投与経路によって決まる。好適な投与計画も変化するものであるが、初回投与の後、それに続く注射またはその他の投与法によって、１時間または複数時間の間隔を空けて反復投与するのが典型的なものである。あるいは、血中濃度をｉｎ  ｖｉｖｏ療法に指定された範囲内に維持するのに十分な連続的静脈内注入が企図される。
【０３５３】
αＰＴＨＦ組成物は、良質の医療のための原則に従って、製剤化し、投与量を決定し、投与する。これに関連して考慮するべき因子には、治療する具体的な障害、治療する具体的な患者、個々の患者の臨床状態、障害の原因、薬剤送達部位、投与方法、投与スケジュール、およびその他の開業医に既知の因子が挙げられる。αＰＴＨＦ組成物の投与のための投与量範囲は、標的分子によって媒介される病徴が改善する所望の効果を得るのに十分な量である。投与量は、有害副作用、例えば過粘稠度症候群、肺水腫、うっ血性心不全、およびその他の当該技術分野で公知の有害副作用などを引き起こす量であってはならない。投与量は一般に、患者の年齢、重量、身長、体表面積、健康状態（例えば、腎機能および肝機能）、病状、性別、および疾患の程度によって異なり、当業者がルーチンに決定できる。投与量は、何らかの合併症が生じた場合に個々の医師によって調節され得る。
【０３５４】
治療および予防用途に効果的な投薬スケジュールおよび量、すなわち「投薬計画」は、疾患または障害の原因、ステージおよび重症度、治療する対象の身体的状態、年齢、ならびにαＰＴＨＦ組成物の送達部位および経路を含めた種々の要因によって決まる。αＰＴＨＦ組成物の治療効果および毒性は、細胞培養物または実験動物を用いて、標準的な医薬薬理学的および毒性学的方法によって測定できる。これらの方法によって得たデータを、ヒトに使用するための投与量範囲の処方に同じように用いることができる。さらに、既知の手順を用いて、治療指数（すなわち、集団の５０％に対して治療的に有効な投与量を集団の５０％に対する致死投与量で除した値（ＥＤ５０／ＬＤ５０））を容易に決定することができる。投与量は、ＥＤ５０を含み、毒性がほとんどまたは全くみられない濃度の範囲内であるのが好ましく、用いる剤形、患者の感受性、および投与経路に応じて、この範囲内で変化し得る。
【０３５５】
投与計画には、当該技術分野で公知の薬物動態学パラメーター、例えば薬物吸収速度、バイオアベイラビリティ、代謝、およびクリアランスなども考慮に入れる（例えば、Ｈｉｄａｌｇｏ−Ａｒａｇｏｎｅｓ，Ｊ．Ｓｔｅｒｏｉｄ  Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．５８：６１１−６１７（１９９６）；Ｇｒｏｎｉｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｈａｒｍａｚｉｅ  ５１：３３７−３４１（１９９６）；Ｆｏｔｈｅｒｂｙ，Ｃｏｎｔｒａｃｅｐｔｉｏｎ  ５４：５９−６９（１９９６）；およびＪｏｈｎｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．８４：１１４４−１１４６（１９９５）を参照されたい）。治療する各対象に対して臨床医が投与計画を決定することは、最先端技術の範囲内に十分収まるものである。さらに、対象が必要とし、耐容性を示す投与量および頻度に応じて、αＰＴＨＦ組成物の単回または複数回投与を実施できる。予防的および治療的処置の期間は、治療する具体的な疾患または病態によって決まる。急性期治療に適した疾患もあれば、長期間にわたる長期治療が必要な疾患もある。αＰＴＨＦ組成物を追加の治療剤とともに逐次的に、または同時に投与できる。
【０３５６】
いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦ組成物をリポソーム組成物として、体表面積１平方メートルの当たり約０．００５〜約５０００ｍｇのαＰＴＨＦ量、またはその間の任意の範囲の投与量で投与する。さらなる実施形態では、αＰＴＨＦ組成物をリポソーム組成物として、体表面積１平方メートルの当たり約０．１〜約１０００ｍｇのαＰＴＨＦ量、またはその間の任意の範囲の投与量で投与する。
【０３５７】
いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦ組成物を免疫複合体組成物として、１ｍｇ／ｋｇ〜５００ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ〜２５０ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ〜２００ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ〜１５０ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ〜１００ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ〜２５ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ〜２０ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ〜１５ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇ、または１ｍｇ／ｋｇ〜５ｍｇ／ｋｇ、またはその間の任意の範囲の投与量で投与する。
【０３５８】
別の実施形態では、αＰＴＨＦ組成物を１つまたは複数の追加の治療剤と組み合わせて投与する。
【０３５９】
いくつかの実施形態では、ＰＬｐ−αＰＴＨＦおよび／または標的化ＰＬｐ−αＰＴＨＦを注入組成物、注射組成物、非経口組成物、または局所組成物として調製する。さらなる実施形態では、注射は、腹腔内注射、直接腫瘍内注射、動脈内注射、および静脈内注射、皮下注射、筋肉注射、経皮および鼻腔内経路を介した送達のうちの１つまたは複数のものを含む。さらなる実施形態では、ＰＬｐ−αＰＴＨＦおよび／または標的化ＰＬｐ−αＰＴＨＦは液剤または懸濁剤である。ただし、注射前に液体媒体で溶液または懸濁液にするのに適した固体形態も本明細書に提供される。いくつかの実施形態では、標的化ペグ化リポソームαＰＴＨＦ組成物を、当該技術分野で公知の方法に従って腸溶性コート錠剤またはジェルカプセルとして製剤化される。
【０３６０】
いくつかの実施形態では、腫瘍内への緩徐で直接的なリポソームの持続的頭蓋内注入（例えば、対流強化輸送（ＣＥＤ））を用いて、標的化ペグ化リポソームαＰＴＨＦ製剤を中枢神経系の腫瘍に投与する。Ｓａｉｔｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ６４：２５７２−２５７９（２００４）；Ｍａｍｏｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｎｅｕｒｏ−Ｏｎｃｏｌｏｇｙ  ６８：１−９（２００４）を参照されたい。他の実施形態では、製剤を組織表面に直接適用する。また、ペグ化リポソームαＰＴＨＦ製剤の徐放、ｐＨ依存性放出、およびその他の特定の化学的または環境的条件による放出投与（例えば、蓄積注射および腐食性移植組織）が提供される。このような放出媒介組成物の例については、本明細書でさらに記載するか、当該技術分野で公知である。
【０３６１】
吸入による投与には、適切な噴霧剤、例えば、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、イクロロテトラフルオロエタン（ｉｃｈｌｏｒｏｔｅｔｒａｆｌｕｏｒｏｅｔｈａｎｅ）、二酸化炭素、またはその他の適切なガスを用いて、組成物を加圧パックまたは噴霧器からエアロゾル噴霧の形態で都合よく送達することができる。加圧エアロゾルの場合、計測量を送達するバルブを備えることによって投与単位を決定できる。
【０３６２】
組成物を全身に送達するのが望ましい場合、組成物を注入、例えば、ボーラス注入または持続注入による非経口投与用に製剤化できる。注入用の製剤を単位剤形で、例えば、アンプルまたは複数回投与用容器に入れて提供できる。医薬非経口製剤は、諸成分の水溶液を含む。水性の注射用懸濁剤は、懸濁剤の粘度を増大させる物質、例えば、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、ソルビトールまたはデキストランなどを含み得る。あるいは、リポソームの懸濁剤を油性懸濁剤として調製できる。好適な親油性の溶媒または媒体には、脂肪油、例えば、ゴマ油または合成脂肪酸エステル、例えばオレイン酸エチルまたはトリグリセリドが挙げられる。
【０３６３】
あるいは、非標的化または標的化ペグ化リポソームαＰＴＨＦは、使用前に好適な媒体、例えば無菌の発熱性物質非含有水で構成する、粉末形態または凍結乾燥形態であり得る。
【０３６４】
提供される組成物（例えば、αＰＴＨＦおよびαＰＴＨＦを含むリポソーム）を、例えば、ココアバターまたはその他のグリセリドなどの従来の坐剤基剤を含む、坐剤または停留浣腸剤などの直腸または膣用組成物として調製してもよい。
【０３６５】
使用および治療の方法
さらなる実施形態では、本開示は、αＰＴＨＦ（αＰＴＨＦ）組成物の使用方法を提供する。いくつかの実施形態では、アルファαＰＴＨＦ組成物（例えば、本明細書に開示されるαＰＴＨＦ）を用いて、疾患または障害を治療する。
【０３６６】
いくつかの実施形態では、本開示は、細胞を死滅させる方法であって、細胞と、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む組成物（例えば、本明細書に開示されるαＰＴＨＦ）とを接触させることを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦは、（ａ）ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｂ）ポリグルタミン酸化１０−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−１０−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｃ）ポリグルタミン酸化５，１０−メテニル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦ）；（ｄ）ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ）；（ｅ）ポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ）；（ｆ）ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦ）；および（ｇ）ポリグルタミン酸化５−ホルムイミノ−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦ）から選択される。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦは、ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、αＰＴＨＦは、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、αＰＴＨＦは、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦは、ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、αＰＴＨＦは、［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、αＰＴＨＦは、［６Ｒ，Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦは、ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、αＰＴＨＦは、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、αＰＴＨＦは、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、接触させる細胞は哺乳動物細胞である。さらなる実施形態では、接触させる細胞はヒト細胞である。いくつかの実施形態では、接触させる細胞は過剰増殖細胞である。さらなる実施形態では、過剰増殖細胞は、癌細胞である。またさらなる実施形態では、癌細胞は、例えば、肺癌、膵臓癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、頭頸部癌、胃癌、胃腸癌、結腸直腸癌、食道癌、子宮頸癌、肝臓癌、腎臓癌、胆管癌、胆嚢癌、膀胱癌、肉腫（例えば、骨肉腫）、脳癌、中枢神経系癌、および黒色腫などを含む非血液系腫瘍；および、例えば、白血病、リンパ腫およびその他のＢ細胞悪性腫瘍、骨髄腫およびその他の形質細胞異形成症または悪液質などの血液系腫瘍からなる群より選択される癌から入手／誘導した細胞系由来の初代細胞または細胞である。さらなる実施形態では、癌細胞は、結腸直腸癌、乳癌、胃癌（例えば、胃癌）、膵臓癌、肝臓癌、肺癌（例えば、非小細胞肺癌および／または腺癌）、頭頸部癌、卵巣癌、胆嚢癌、および基底細胞癌から選択される癌から入手／誘導した細胞系由��の初代細胞または細胞である。特定の実施形態では、癌細胞は、結腸直腸癌から入手／誘導した細胞系由来の初代細胞または細胞である。いくつかの実施形態では、この方法をｉｎ  ｖｉｖｏで実施する。他の実施形態では、この方法をｉｎ  ｖｉｔｒｏで実施する。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦ組成物は、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含む。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦ組成物は、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦ組成物は、ヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦ組成物は、Ｌポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦ組成物は、Ｄポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦ組成物は、ＬおよびＤポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。
【０３６７】
さらなる実施形態では、本開示は、細胞を死滅させる方法であって、細胞と、αＰＴＨＦを含むリポソーム（例えば、Ｌｐ−αＰＴＨＦ、例えば本明細書に開示されるＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＮＴＬｐ−αＰＴＨＦ、ＮＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＴＬｐ−αＰＴＨＦ、またはＴＰＬｐ−αＰＴＨＦなど）とを接触させることを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、リポソームはペグ化されている（例えば、ＰＬｐ−αＰＴＨＦおよびＮＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ）。いくつかの実施形態では、リポソームはその表面に、細胞表面の抗原のエピトープに対して特異的親和性を有するターゲティング部分を含む（例えば、ＴＬｐ−αＰＴＨＦおよびＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ）。さらなる実施形態では、リポソームは、ペグ化されており、その表面に、細胞表面の抗原と特異的に結合するターゲティング部分を含む（例えば、ＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ）。いくつかの実施形態では、リポソームはペグ化されていない（例えば、ＰＬｐ−αＰＴＨＦおよびＮＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ）。いくつかの実施形態では、ペグ化されていないリポソームはその表面に、細胞表面の抗原と特異的に結合するターゲティング部分を含む（例えば、ＴＬｐ−αＰＴＨＦおよびＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ）。いくつかの実施形態では、接触させる細胞は哺乳動物細胞である。さらなる実施形態では、接触させる細胞はヒト細胞である。さらなる実施形態では、接触させる細胞は過剰増殖細胞である。さらなる実施形態では、過剰増殖細胞は、癌細胞である。さらなる実施形態では、接触させる癌細胞は、肺癌（例えば、非小細胞）、膵臓癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、頭頸部癌、胃癌、胃腸癌、結腸直腸癌、食道癌、子宮頸癌、肝臓癌、腎臓癌、胆管癌、胆嚢癌、膀胱癌、肉腫（例えば、骨肉腫）、脳癌、中枢神経系癌、黒色腫、骨髄腫、白血病およびリンパ腫からなる群より選択される癌から入手／誘導した細胞系由来の初代細胞または細胞である。いくつかの実施形態では、接触させる癌細胞は、結腸直腸癌、乳癌、胃癌（例えば、胃癌）、膵臓癌、肝臓癌、肺癌（例えば、非小細胞肺癌および／または腺癌）、頭頸部癌、卵巣癌、胆嚢癌、および基底細胞癌からなる群より選択される癌から入手／誘導した細胞系由来の初代細胞または細胞である。特定の実施形態では、接触させる癌細胞は、結腸直腸癌から入手／誘導した細胞系由来の初代細胞または細胞である。いくつかの実施形態では、リポソームは、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含むαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、（ａ）ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｂ）ポリグルタミン酸化１０−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−１０−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｃ）ポリグルタミン酸化５，１０−メテニル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦ）；（ｄ）ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ）；（ｅ）ポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ）；（ｆ）ポリグルタミン��化５，１０−メチレン−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦ）；および（ｇ）ポリグルタミン酸化５−ホルムイミノ−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦ）から選択されるαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、リポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、リポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、リポソームは、［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、リポソームは、［６Ｒ，Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、リポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、リポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ペンタグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸を含む。他の実施形態では、リポソームは、アルファヘキサグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸を含む。
【０３６８】
いくつかの実施形態では、本開示は、過剰増殖細胞を死滅させる方法であって、過剰増殖細胞と、αＰＴＨＦ（例えば、本明細書に開示されるαＰＴＨＦ）を含む送達媒体（例えば、リポソームまたは抗体免疫複合体）とを接触させることを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、送達媒体は抗体（例えば、完全長ＩｇＧ抗体、二重特異性抗体、またはｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、送達媒体はリポソームである（例えば、Ｌｐ−αＰＴＨＦ、例えばＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＮＴＬｐ−αＰＴＨＦ、ＮＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＴＬｐ−αＰＴＨＦ、またはＴＰＬｐ−αＰＴＨＦなど）。いくつかの実施形態では、送達媒体は標的化されていない。他の実施形態では、送達媒体は標的化されており、その表面に、過剰増殖細胞表面の抗原のエピトープに対して特異的親和性を有するターゲティング部分を含む。さらなる実施形態では、送達媒体は、過剰増殖細胞表面の抗原のエピトープに対して特異的親和性を有し、抗原が、ＧＯＮＭＢ、ＴＡＣＳＴＤ２（ＴＲＯＰ２）、ＣＥＡＣＡＭ５、ＥＰＣＡＭ、葉酸受容体（例えば、葉酸受容体−α、葉酸受容体−β、または葉酸受容体−δ）、ムチン１（ＭＵＣ−１）、ＭＵＣ−６、ＳＴＥＡＰ１、メソテリン、ネクチン４、ＥＮＰＰ３、グアニリルシクラーゼＣ（ＧＣＣ）、ＳＬＣ４４Ａ４、ＮａＰｉ２ｂ、ＣＤ７０（ＴＮＦＳＦ７）、ＣＡ９（炭酸脱水酵素）、５Ｔ４（ＴＰＢＧ）、ＳＬＴＲＫ６、ＳＣ−１６、組織因子、ＬＩＶ−１（ＺＩＰ６）、ＣＧＥＮ−１５０２７、Ｐカドヘリン、フィブロネクチン外側ドメインＢ（ＥＤ−Ｂ）、ＶＥＧＦＲ２（ＣＤ３０９）、テネイシン、コラーゲンＩＶ、ペリオスチン、エンドセリン受容体、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３、ＥｒｂＢ４、ＥＧＦＲ、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３、ＦＧＦＲ４、ＦＧＦＲ６、ＩＧＦＲ−１、ＦＺＤ１、ＦＺＤ２、ＦＺＤ３、ＦＺＤ４、ＦＺＤ５、ＦＺＤ６、ＦＺＤ７、ＦＺＤ８、ＦＺＤ９、ＦＺＤ１０、ＳＭＯ、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ６、ＣＤ８、ＣＤ１１、ＣＤ１１ａ、ＣＤ１５、ＣＤ１８、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ２６、ＣＤ２７Ｌ、ＣＤ２８、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ３４、ＣＤ３７、ＣＤ３８、ＣＤ４０、ＣＤ４４、ＣＤ５６、ＣＤ７０、ＣＤ７４、ＣＤ７９、ＣＤ７９ｂ、ＣＤ９８、ＣＤ１０５、ＣＤ１３３、ＣＤ１３８、ｃｒｉｐｔｏ、ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＧＦ−２Ｒ、ＥｐｈＡ１  ａｎ  ＥｐｈＡ受容体、ＥｐｈＢ受容体、ＥｐｈＡ１、ＥｐｈＡ２、ＥｐｈＡ３、ＥｐｈＡ４、ＥｐｈＡ５、ＥｐｈＡ６、ＥｐｈＡ７、ＥｐｈＡ８、ＥｐｈＢ１、ＥｐｈＢ２、ＥｐｈＢ３、ＥｐｈＢ４、ＥｐｈＢ６、インテグリン（例えば、インテグリンαｖβ３、αｖβ５、またはαｖβ６）、Ｃ２４２抗原、Ａｐｏ２、ＰＳＧＲ、ＮＧＥＰ、ＰＳＣＡ、ＴＭＥＦＦ２、エンドグリン、ＰＳＭＡ、ＣａｎＡｇ、ＣＡＬＬＡ、ｃ−Ｍｅｔ、ＶＥＧＦＲ−１、ＶＥＧＦＲ−２、ＤＤＲ１、ＰＤＧＦＲアルファ、ＰＤＧＦＲベータ、ＴｒｋＡ、ＴｒｋＢ、ＴｒｋＣ、ＵＦＯ、ＬＴＫ、ＡＬＫ、Ｔｉｅ１、Ｔｉｅ２、ＰＴＫ７、Ｒｙｋ、ＴＣＲ、ＮＭＤＡＲ、ＬＮＧＦＲ、およびＭｕＳＫからなる群より選択される、ターゲティング部分を含む。いくつかの実���形態では、送達媒体は、特定の対象の癌（腫瘍）に由来する、またはそれに発現していると判断されるネオ抗原などの細胞表面抗原上のエピトープに対して特異的親和性を有する、ターゲティング部分を含む。いくつかの実施形態では、この方法をｉｎ  ｖｉｖｏで実施する。いくつかの実施形態では、この方法をｉｎ  ｖｉｔｒｏで実施する。いくつかの実施形態では、送達媒体は、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含むαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、送達媒体は、（ａ）ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｂ）ポリグルタミン酸化１０−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−１０−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｃ）ポリグルタミン酸化５，１０−メテニル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦ）；（ｄ）ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ）；（ｅ）ポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ）；（ｆ）ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦ）；および（ｇ）ポリグルタミン酸化５−ホルムイミノ−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦ）から選択されるαＰＴＨＦ  αＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、送達媒体は、ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、送達媒体は、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、送達媒体は、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、送達媒体は、ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、送達媒体は、［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、送達媒体は、［６Ｒ，Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、送達媒体は、ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、送達媒体は、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、送達媒体は、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、送達媒体は、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、送達媒体は、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。他の実施形態では、送達媒体は、アルファヘキサグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸を含む。
【０３６９】
特定の実施形態では、過剰増殖細胞を死滅させる方法は、αＰＴＨＦ（例えば、Ｌｐ−αＰＴＨＦ、例えば本明細書に開示されるＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＮＴＬｐ−αＰＴＨＦ、ＮＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＴＬｐ−αＰＴＨＦ、またはＴＰＬｐ−αＰＴＨＦなど）を含むリポソーム送達媒体を用いて実施する。いくつかの実施形態では、送達媒体は、非標的化リポソームである。いくつかの実施形態では、送達媒体はその表面に、過剰増殖細胞表面の抗原のエピトープに対して特異的親和性を有するターゲティング部分を含む（例えば、ＴＬｐ−αＰＴＨＦおよびＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ）。いくつかの実施形態では、送達媒体は、過剰増殖細胞表面の抗原のエピトープに対して特異的親和性を有するターゲティング部分を表面に含む、リポソームである（例えば、ＴＬｐ−αＰＴＨＦおよびＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ）。いくつかの実施形態では、送達媒体は、過剰増殖細胞表面の抗原のエピトープに対して特異的親和性を有するターゲティング部分を表面に含む、リポソームである。さらなる実施形態では、ターゲティング部分は、ＧＯＮＭＢ、ＴＡＣＳＴＤ２（ＴＲＯＰ２）、ＣＥＡＣＡＭ５、ＥＰＣＡＭ、葉酸受容体（例えば、葉酸受容体−α、葉酸受容体−β、または葉酸受容体−δ）、ムチン１（ＭＵＣ−１）、ＭＵＣ−６、ＳＴＥＡＰ１、メソテリン、ネクチン４、ＥＮＰＰ３、グアニリルシクラーゼＣ（ＧＣＣ）、ＳＬＣ４４Ａ４、ＮａＰｉ２ｂ、ＣＤ７０（ＴＮＦＳＦ７）、ＣＡ９（炭酸脱水酵素）、５Ｔ４（ＴＰＢＧ）、ＳＬＴＲＫ６、ＳＣ−１６、組織因子、ＬＩＶ−１（ＺＩＰ６）、ＣＧＥＮ−１５０２７、Ｐカドヘリン、フィブロネクチン外側ドメインＢ（ＥＤ−Ｂ）、ＶＥＧＦＲ２（ＣＤ３０９）、テネイシン、コラーゲンＩＶ、ペリオスチン、エンドセリン受容体、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３、ＥｒｂＢ４、ＥＧＦＲ、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３、ＦＧＦＲ４、ＦＧＦＲ６、ＩＧＦＲ−１、ＦＺＤ１、ＦＺＤ２、ＦＺＤ３、ＦＺＤ４、ＦＺＤ５、ＦＺＤ６、ＦＺＤ７、ＦＺＤ８、ＦＺＤ９、ＦＺＤ１０、ＳＭＯ、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ６、ＣＤ８、ＣＤ１１、ＣＤ１１ａ、ＣＤ１５、ＣＤ１８、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ２６、ＣＤ２７Ｌ、ＣＤ２８、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ３４、ＣＤ３７、ＣＤ３８、ＣＤ４０、ＣＤ４４、ＣＤ５６、ＣＤ７０、ＣＤ７４、ＣＤ７９、ＣＤ７９ｂ、ＣＤ９８、ＣＤ１０５、ＣＤ１３３、ＣＤ１３８、ｃｒｉｐｔｏ、ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＧＦ−２Ｒ、ＥｐｈＡ１、ＥｐｈＡ受容体、ＥｐｈＢ受容体、ＥｐｈＡ１、ＥｐｈＡ２、ＥｐｈＡ３、ＥｐｈＡ４、ＥｐｈＡ５、ＥｐｈＡ６、ＥｐｈＡ７、ＥｐｈＡ８、ＥｐｈＢ１、ＥｐｈＢ２、ＥｐｈＢ３、ＥｐｈＢ４、ＥｐｈＢ６、インテグリン（例えば、インテグリンαｖβ３、αｖβ５、またはαｖβ６）、Ｃ２４２抗原、Ａｐｏ２、ＰＳＧＲ、ＮＧＥＰ、ＰＳＣＡ、ＴＭＥＦＦ２、エンドグリン、ＰＳＭＡ、ＣａｎＡｇ、ＣＡＬＬＡ、ｃ−Ｍｅｔ、ＶＥＧＦＲ−１、ＶＥＧＦＲ−２、ＤＤＲ１、ＰＤＧＦＲアルファ、ＰＤＧＦＲベータ、ＴｒｋＡ、ＴｒｋＢ、ＴｒｋＣ、ＵＦＯ、ＬＴＫ、ＡＬＫ、Ｔｉｅ１、Ｔｉｅ２、ＰＴＫ７、Ｒｙｋ、ＴＣＲ、ＮＭＤＡＲ、ＬＮＧＦＲ、およびＭｕＳ��からなる群より選択される抗原のエピトープに対して特異的親和性を有する。いくつかの実施形態では、ターゲティング部分は、特定の対象の癌（腫瘍）に由来する、またはそれに発現していると判断されるネオ抗原などの細胞表面抗原上のエピトープに対して特異的親和性を有する。いくつかの実施形態では、リポソームはペグ化されている（例えば、ＰＬｐ−αＰＴＨＦおよびＮＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ）。さらなる実施形態では、リポソームは、ペグ化されており、過剰増殖細胞表面の抗原のエピトープに対して特異的親和性を有するターゲティング部分を表面に含む（例えば、ＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ）。他の実施形態、実施形態では、リポソームはペグ化されていない。いくつかの実施形態では、リポソームはペグ化されておらず、リポソームは、過剰増殖細胞表面の抗原のエピトープに対して特異的親和性を有するターゲティング部分を表面に含む（例えば、ＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ）。いくつかの実施形態では、リポソームは、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含むαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。他の実施形態では、リポソームは、ヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、（ａ）ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｂ）ポリグルタミン酸化１０−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−１０−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｃ）ポリグルタミン酸化５，１０−メテニル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦ）；（ｄ）ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ）；（ｅ）ポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ）；（ｆ）ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦ）；および（ｇ）ポリグルタミン酸化５−ホルムイミノ−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦ）から選択されるαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、リポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、リポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、リポソームは、［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、リポソームは、［６Ｒ，Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、リポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。他��実施形態では、リポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。
【０３７０】
さらなる実施形態では、本開示は、癌細胞の増殖を阻害する方法であって、癌細胞と、αＰＴＨＦ（例えば、本明細書に開示されるαＰＴＨＦ）を含む送達媒体（例えば、リポソームまたは抗体）とを接触させることを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、送達媒体は抗体（例えば、完全長ＩｇＧ抗体、二重特異性抗体、またはｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、送達媒体はリポソームである（例えば、Ｌｐ−αＰＴＨＦ、例えばＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＮＴＬｐ−αＰＴＨＦ、ＮＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＴＬｐ−αＰＴＨＦ、またはＴＰＬｐ−αＰＴＨＦなど）。いくつかの実施形態では、送達媒体は標的化されていない。いくつかの実施形態では、送達媒体は、標的化されており、癌表面の抗原のエピトープ細胞に対して特異的親和性を有するターゲティング部分を表面に含む。さらなる実施形態では、送達媒体は、ＧＯＮＭＢ、ＴＡＣＳＴＤ２（ＴＲＯＰ２）、ＣＥＡＣＡＭ５、ＥＰＣＡＭ、葉酸受容体（例えば、葉酸受容体−α、葉酸受容体−β、または葉酸受容体−δ）、ムチン１（ＭＵＣ−１）、ＭＵＣ−６、ＳＴＥＡＰ１、メソテリン、ネクチン４、ＥＮＰＰ３、グアニリルシクラーゼＣ（ＧＣＣ）、ＳＬＣ４４Ａ４、ＮａＰｉ２ｂ、ＣＤ７０（ＴＮＦＳＦ７）、ＣＡ９（炭酸脱水酵素）、５Ｔ４（ＴＰＢＧ）、ＳＬＴＲＫ６、ＳＣ−１６、組織因子、ＬＩＶ−１（ＺＩＰ６）、ＣＧＥＮ−１５０２７、Ｐカドヘリン、フィブロネクチン外側ドメインＢ（ＥＤ−Ｂ）、ＶＥＧＦＲ２（ＣＤ３０９）、テネイシン、コラーゲンＩＶ、ペリオスチン、エンドセリン受容体、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３、ＥｒｂＢ４、ＥＧＦＲ、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３、ＦＧＦＲ４、ＦＧＦＲ６、ＩＧＦＲ−１、ＦＺＤ１、ＦＺＤ２、ＦＺＤ３、ＦＺＤ４、ＦＺＤ５、ＦＺＤ６、ＦＺＤ７、ＦＺＤ８、ＦＺＤ９、ＦＺＤ１０、ＳＭＯ、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ６、ＣＤ８、ＣＤ１１、ＣＤ１１ａ、ＣＤ１５、ＣＤ１８、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ２６、ＣＤ２７Ｌ、ＣＤ２８、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ３４、ＣＤ３７、ＣＤ３８、ＣＤ４０、ＣＤ４４、ＣＤ５６、ＣＤ７０、ＣＤ７４、ＣＤ７９、ＣＤ７９ｂ、ＣＤ９８、ＣＤ１０５、ＣＤ１３３、ＣＤ１３８、ｃｒｉｐｔｏ、ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＧＦ−２Ｒ、ＥｐｈＡ１  ａｎ  ＥｐｈＡ受容体、ＥｐｈＢ受容体、ＥｐｈＡ１、ＥｐｈＡ２、ＥｐｈＡ３、ＥｐｈＡ４、ＥｐｈＡ５、ＥｐｈＡ６、ＥｐｈＡ７、ＥｐｈＡ８、ＥｐｈＢ１、ＥｐｈＢ２、ＥｐｈＢ３、ＥｐｈＢ４、ＥｐｈＢ６、インテグリン（例えば、インテグリンαｖβ３、αｖβ５、またはαｖβ６）、Ｃ２４２抗原、Ａｐｏ２、ＰＳＧＲ、ＮＧＥＰ、ＰＳＣＡ、ＴＭＥＦＦ２、エンドグリン、ＰＳＭＡ、ＣａｎＡｇ、ＣＡＬＬＡ、ｃ−Ｍｅｔ、ＶＥＧＦＲ−１、ＶＥＧＦＲ−２、ＤＤＲ１、ＰＤＧＦＲアルファ、ＰＤＧＦＲベータ、ＴｒｋＡ、ＴｒｋＢ、ＴｒｋＣ、ＵＦＯ、ＬＴＫ、ＡＬＫ、Ｔｉｅ１、Ｔｉｅ２、ＰＴＫ７、Ｒｙｋ、ＴＣＲ、ＮＭＤＡＲ、ＬＮＧＦＲ、およびＭｕＳＫからなる群より選択される細胞表面抗原のエピトープに対して特異的親和性を有するターゲティング部分を含む。いくつかの実施形態では、送達媒体は、特定の対象の癌（腫瘍���に由来する、またはそれに発現していると判断されるネオ抗原などの細胞表面抗原上のエピトープに対して特異的親和性を有する、ターゲティング部分を含む。いくつかの実施形態では、送達媒体は、癌表面の抗原のエピトープ細胞に対して特異的親和性を有する抗体である。いくつかの実施形態では、接触させる癌細胞は哺乳動物細胞である。さらなる実施形態では、接触させる癌細胞はヒト細胞である。さらなる実施形態では、接触させる癌細胞は、肺癌（例えば、非小細胞）、膵臓癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、頭頸部癌、胃癌、消化管癌、結腸直腸癌、食道癌、子宮頸癌、肝臓癌、腎臓癌、胆管癌、胆嚢癌、膀胱癌、肉腫（例えば、骨肉腫）、脳腫瘍、中枢神経系癌、黒色腫、骨髄腫、白血病、およびリンパ腫からなる群より選択される癌から入手／誘導した細胞系由来の初代細胞または細胞である。いくつかの実施形態では、接触させる癌細胞は、結腸直腸癌、乳癌、胃癌（例えば、胃癌）、膵臓癌、肝臓癌、肺癌（例えば、非小細胞肺癌および／または腺癌）、頭頸部癌、卵巣癌、胆嚢癌、および基底細胞癌からなる群より選択される癌から入手／誘導した細胞系由来の初代細胞または細胞である。特定の実施形態では、接触させる癌細胞は、結腸直腸癌から入手／誘導した細胞系由来の初代細胞または細胞である。いくつかの実施形態では、この方法をｉｎ  ｖｉｖｏで実施する。いくつかの実施形態では、この方法をｉｎ  ｖｉｔｒｏで実施する。いくつかの実施形態では、送達媒体は、上に挙げた細胞表面抗原のうちの１つのエピトープに対して特異的親和性を有する、抗体である。他の実施形態では、標的化媒体は、癌細胞表面のエピトープに対して特異的親和性を有するターゲティング部分を含む、リポソームである。他の実施形態では、標的化媒体は、上に挙げた細胞表面抗原のうちの１つのエピトープに対して特異的親和性を有するターゲティング部分を含む、リポソームである。いくつかの実施形態では、送達媒体は、ペグ化されているリポソームである。他の実施形態では、送達媒体は、ペグ化されていないリポソームである。いくつかの実施形態では、送達媒体は、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含むαＰＴＨＦ組成物を含む。いくつかの実施形態では、送達媒体は、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、送達媒体は、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。他の実施形態では、送達媒体は、ヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、送達媒体は、（ａ）ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｂ）ポリグルタミン酸化１０−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−１０−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｃ）ポリグルタミン酸化５，１０−メテニル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦ）；（ｄ）ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ）；（ｅ）ポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ）；���ｆ）ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦ）；および（ｇ）ポリグルタミン酸化５−ホルムイミノ−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦ）から選択されるαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、送達媒体は、ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、送達媒体は、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、送達媒体は、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、送達媒体は、ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、送達媒体は、［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、送達媒体は、［６Ｒ，Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、送達媒体は、ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、送達媒体は、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、送達媒体は、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。
【０３７１】
さらなる実施形態では、本開示は、癌細胞の増殖を阻害する方法であって、癌細胞と、αＰＴＨＦ（例えば、本明細書に開示されるαＰＴＨＦ）を含むリポソームとを接触させることを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、リポソームは標的化されていない。いくつかの実施形態では、リポソームは、標的化されており、癌表面の抗原のエピトープ細胞に対して特異的親和性を有するターゲティング部分を表面に含む。さらなる実施形態では、リポソームは、ＧＯＮＭＢ、ＴＡＣＳＴＤ２（ＴＲＯＰ２）、ＣＥＡＣＡＭ５、ＥＰＣＡＭ、葉酸受容体（例えば、葉酸受容体−α、葉酸受容体−β、または葉酸受容体−δ）、ムチン１（ＭＵＣ−１）、ＭＵＣ−６、ＳＴＥＡＰ１、メソテリン、ネクチン４、ＥＮＰＰ３、グアニリルシクラーゼＣ（ＧＣＣ）、ＳＬＣ４４Ａ４、ＮａＰｉ２ｂ、ＣＤ７０（ＴＮＦＳＦ７）、ＣＡ９（炭酸脱水酵素）、５Ｔ４（ＴＰＢＧ）、ＳＬＴＲＫ６、ＳＣ−１６、組織因子、ＬＩＶ−１（ＺＩＰ６）、ＣＧＥＮ−１５０２７、Ｐカドヘリン、フィブロネクチン外側ドメインＢ（ＥＤ−Ｂ）、ＶＥＧＦＲ２（ＣＤ３０９）、テネイシン、コラーゲンＩＶ、ペリオスチン、エンドセリン受容体、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３、ＥｒｂＢ４、ＥＧＦＲ、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３、ＦＧＦＲ４、ＦＧＦＲ６、ＩＧＦＲ−１、ＦＺＤ１、ＦＺＤ２、ＦＺＤ３、ＦＺＤ４、ＦＺＤ５、ＦＺＤ６、ＦＺＤ７、ＦＺＤ８、ＦＺＤ９、ＦＺＤ１０、ＳＭＯ、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ６、ＣＤ８、ＣＤ１１、ＣＤ１１ａ、ＣＤ１５、ＣＤ１８、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ２６、ＣＤ２７Ｌ、ＣＤ２８、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ３４、ＣＤ３７、ＣＤ３８、ＣＤ４０、ＣＤ４４、ＣＤ５６、ＣＤ７０、ＣＤ７４、ＣＤ７９、ＣＤ７９ｂ、ＣＤ９８、ＣＤ１０５、ＣＤ１３３、ＣＤ１３８、ｃｒｉｐｔｏ、ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＧＦ−２Ｒ、ＥｐｈＡ１  ａｎ  ＥｐｈＡ受容体、ＥｐｈＢ受容体、ＥｐｈＡ１、ＥｐｈＡ２、ＥｐｈＡ３、ＥｐｈＡ４、ＥｐｈＡ５、ＥｐｈＡ６、ＥｐｈＡ７、ＥｐｈＡ８、ＥｐｈＢ１、ＥｐｈＢ２、ＥｐｈＢ３、ＥｐｈＢ４、ＥｐｈＢ６、インテグリン（例えば、インテグリンαｖβ３、αｖβ５、またはαｖβ６）、Ｃ２４２抗原、Ａｐｏ２、ＰＳＧＲ、ＮＧＥＰ、ＰＳＣＡ、ＴＭＥＦＦ２、エンドグリン、ＰＳＭＡ、ＣａｎＡｇ、ＣＡＬＬＡ、ｃ−Ｍｅｔ、ＶＥＧＦＲ−１、ＶＥＧＦＲ−２、ＤＤＲ１、ＰＤＧＦＲアルファ、ＰＤＧＦＲベータ、ＴｒｋＡ、ＴｒｋＢ、ＴｒｋＣ、ＵＦＯ、ＬＴＫ、ＡＬＫ、Ｔｉｅ１、Ｔｉｅ２、ＰＴＫ７、Ｒｙｋ、ＴＣＲ、ＮＭＤＡＲ、ＬＮＧＦＲ、およびＭｕＳＫからなる群より選択される細胞表面抗原のエピトープに対して特異的親和性を有するターゲティング部分を含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、特定の対象の癌（腫瘍）に由来する、またはそれに発現していると判断されるネオ抗原などの細胞表面抗原上のエピトープに対して特異的親和性を有する、ターゲティング部分を含む。いくつかの実施形態では、接触させる癌細胞は哺乳動物細胞である。さらなる実施形態では、接触させる癌細胞はヒト細胞である。さらなる実施形態では、接触させる癌細胞は、肺癌（例えば、非小細胞���、膵臓癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、頭頸部癌、胃癌、消化管癌、結腸直腸癌、食道癌、子宮頸癌、肝臓癌、腎臓癌、胆管癌、胆嚢癌、膀胱癌、肉腫（例えば、骨肉腫）、脳腫瘍、中枢神経系癌、黒色腫、骨髄腫、白血病、およびリンパ腫からなる群より選択される癌から入手／誘導した細胞系由来の初代細胞または細胞である。いくつかの実施形態では、接触させる癌細胞は、結腸直腸癌、乳癌、胃癌（例えば、胃癌）、膵臓癌、肝臓癌、肺癌（例えば、非小細胞肺癌および／または腺癌）、頭頸部癌、卵巣癌、胆嚢癌、および基底細胞癌からなる群より選択される癌から入手／誘導した細胞系由来の初代細胞または細胞である。特定の実施形態では、接触させる癌細胞は、結腸直腸癌から入手／誘導した細胞系由来の初代細胞または細胞である。いくつかの実施形態では、この方法をｉｎ  ｖｉｖｏで実施する。いくつかの実施形態では、この方法をｉｎ  ｖｉｔｒｏで実施する。他の実施形態では、標的化媒体は、上に挙げた細胞表面抗原のうちの１つのエピトープに対して特異的親和性を有するターゲティング部分を含む、リポソームである。いくつかの実施形態では、リポソームはペグ化されている。他の実施形態では、リポソームはペグ化されていない。いくつかの実施形態では、リポソームは、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含むαＰＴＨＦ組成物を含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。他の実施形態では、リポソームは、ヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、（ａ）ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｂ）ポリグルタミン酸化１０−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−１０−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｃ）ポリグルタミン酸化５，１０−メテニル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦ）；（ｄ）ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ）；（ｅ）ポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ）；（ｆ）ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦ）；および（ｇ）ポリグルタミン酸化５−ホルムイミノ−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦ）から選択されるαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、リポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、リポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、リポソームは、［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含��。他の実施形態では、リポソームは、［６Ｒ，Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、リポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、リポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。
【０３７２】
さらなる実施形態では、本開示は、過剰増殖疾患を治療する方法であって、過剰増殖疾患を有するか、有するリスクのある対象にポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸（例えば、本明細書に開示されるαＰＴＨＦ）を含む送達媒体（例えば、抗体またはリポソーム）を有効量投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、送達媒体は抗体（例えば、完全長ＩｇＧ抗体、重特異性抗体、またはｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、送達媒体はリポソームである（例えば、Ｌｐ−αＰＴＨＦ、例えばＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＮＴＬｐ−αＰＴＨＦ、ＮＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＴＬｐ−αＰＴＨＦ、またはＴＰＬｐ−αＰＴＨＦなど）。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体はペグ化されている。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体はペグ化されていない。さらなる実施形態では、投与する送達媒体は、過剰増殖細胞表面の抗原のエピトープに対して特異的親和性を有するターゲティング部分を含む。さらなる実施形態では、送達媒体は、ＧＯＮＭＢ、ＴＡＣＳＴＤ２（ＴＲＯＰ２）、ＣＥＡＣＡＭ５、ＥＰＣＡＭ、葉酸受容体（例えば、葉酸受容体−α、葉酸受容体−β、または葉酸受容体−δ）、ムチン１（ＭＵＣ−１）、ＭＵＣ−６、ＳＴＥＡＰ１、メソテリン、ネクチン４、ＥＮＰＰ３、グアニリルシクラーゼＣ（ＧＣＣ）、ＳＬＣ４４Ａ４、ＮａＰｉ２ｂ、ＣＤ７０（ＴＮＦＳＦ７）、ＣＡ９（炭酸脱水酵素）、５Ｔ４（ＴＰＢＧ）、ＳＬＴＲＫ６、ＳＣ−１６、組織因子、ＬＩＶ−１（ＺＩＰ６）、ＣＧＥＮ−１５０２７、Ｐカドヘリン、フィブロネクチン外側ドメインＢ（ＥＤ−Ｂ）、ＶＥＧＦＲ２（ＣＤ３０９）、テネイシン、コラーゲンＩＶ、ペリオスチン、エンドセリン受容体、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３、ＥｒｂＢ４、ＥＧＦＲ、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３、ＦＧＦＲ４、ＦＧＦＲ６、ＩＧＦＲ−１、ＦＺＤ１、ＦＺＤ２、ＦＺＤ３、ＦＺＤ４、ＦＺＤ５、ＦＺＤ６、ＦＺＤ７、ＦＺＤ８、ＦＺＤ９、ＦＺＤ１０、ＳＭＯ、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ６、ＣＤ８、ＣＤ１１、ＣＤ１１ａ、ＣＤ１５、ＣＤ１８、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ２６、ＣＤ２７Ｌ、ＣＤ２８、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ３４、ＣＤ３７、ＣＤ３８、ＣＤ４０、ＣＤ４４、ＣＤ５６、ＣＤ７０、ＣＤ７４、ＣＤ７９、ＣＤ７９ｂ、ＣＤ９８、ＣＤ１０５、ＣＤ１３３、ＣＤ１３８、ｃｒｉｐｔｏ、ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＧＦ−２Ｒ、ＥｐｈＡ１  ａｎ  ＥｐｈＡ受容体、ＥｐｈＢ受容体、ＥｐｈＡ１、ＥｐｈＡ２、ＥｐｈＡ３、ＥｐｈＡ４、ＥｐｈＡ５、ＥｐｈＡ６、ＥｐｈＡ７、ＥｐｈＡ８、ＥｐｈＢ１、ＥｐｈＢ２、ＥｐｈＢ３、ＥｐｈＢ４、ＥｐｈＢ６、インテグリン（例えば、インテグリンαｖβ３、αｖβ５、またはαｖβ６）、Ｃ２４２抗原、Ａｐｏ２、ＰＳＧＲ、ＮＧＥＰ、ＰＳＣＡ、ＴＭＥＦＦ２、エンドグリン、ＰＳＭＡ、ＣａｎＡｇ、ＣＡＬＬＡ、ｃ−Ｍｅｔ、ＶＥＧＦＲ−１、ＶＥＧＦＲ−２、ＤＤＲ１、ＰＤＧＦＲアルファ、ＰＤＧＦＲベータ、ＴｒｋＡ、ＴｒｋＢ、ＴｒｋＣ、ＵＦＯ、ＬＴＫ、ＡＬＫ、Ｔｉｅ１、Ｔｉｅ２、ＰＴＫ７、Ｒｙｋ、ＴＣＲ、ＮＭＤＡＲ、ＬＮＧＦＲ、およびＭｕＳＫからなる群より選択される細胞表面抗原のエピトープに対して特異的親和性を有するターゲティング部分を含む。いくつかの実施形態では、送達媒体は、特定の対象の癌（腫瘍）に由来する、またはそれに発現していると判断されるネオ抗原などの細胞表面抗原上のエピトープに対して特異的親和性を有する、ターゲティング部分を含む。いくつかの実施形態では、ターゲティング部分は抗体または抗原結合抗体フラグメントである。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、過剰増殖細胞の細胞表面抗原のエピトープに対して特異的親和性を有するターゲティング部分を含まない。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含むαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。他の実施形態では、投与する送達媒体は、ヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、（ａ）ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｂ）ポリグルタミン酸化１０−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−１０−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｃ）ポリグルタミン酸化５，１０−メテニル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦ）；（ｄ）ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ）；（ｅ）ポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ）；（ｆ）ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦ）；および（ｇ）ポリグルタミン酸化５−ホルムイミノ−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦ）から選択されるαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、送達媒体は、ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、送達媒体は、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、送達媒体は、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、送達媒体は、ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、送達媒体は、［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、送達媒体は、［６Ｒ，Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、送達媒体は、ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、送達媒体は、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、送達媒体は、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、過剰増殖疾患は癌である。いくつかの実施形態では、過剰増殖疾患は自己免疫疾患（例えば、炎症および関節リウマチ）である。いくつかの実施形態では、過剰増殖疾患は、良性もしくは悪性腫瘍；��血病、血液またはリンパ系悪性腫瘍である。他の実施形態では、過剰増殖疾患は、神経、グリア、星状細胞、視床下部、腺、マクロファージ、上皮、間質、胞胚腔、炎症性、血管新生、および自己免疫疾患を含む免疫性障害からなる群より選択される。
【０３７３】
さらなる実施形態では、本開示は、過剰増殖疾患を治療する方法であって、過剰増殖疾患を有するか、有するリスクのある対象に、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含むリポソーム（例えば、Ｌｐ−αＰＴＨＦ、例えばＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＮＴＬｐ−αＰＴＨＦ、ＮＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＴＬｐ−αＰＴＨＦ、またはＴＰＬｐ−αＰＴＨＦなど）を有効量投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、リポソームはペグ化されている。いくつかの実施形態では、リポソームはペグ化されていない。さらなる実施形態では、リポソームは、過剰増殖細胞表面の抗原のエピトープに対して特異的親和性を有するターゲティング部分を含む。さらなる実施形態では、リポソームは、ＧＯＮＭＢ、ＴＡＣＳＴＤ２（ＴＲＯＰ２）、ＣＥＡＣＡＭ５、ＥＰＣＡＭ、葉酸受容体（例えば、葉酸受容体−α、葉酸受容体−β、または葉酸受容体−δ）、ムチン１（ＭＵＣ−１）、ＭＵＣ−６、ＳＴＥＡＰ１、メソテリン、ネクチン４、ＥＮＰＰ３、グアニリルシクラーゼＣ（ＧＣＣ）、ＳＬＣ４４Ａ４、ＮａＰｉ２ｂ、ＣＤ７０（ＴＮＦＳＦ７）、ＣＡ９（炭酸脱水酵素）、５Ｔ４（ＴＰＢＧ）、ＳＬＴＲＫ６、ＳＣ−１６、組織因子、ＬＩＶ−１（ＺＩＰ６）、ＣＧＥＮ−１５０２７、Ｐカドヘリン、フィブロネクチン外側ドメインＢ（ＥＤ−Ｂ）、ＶＥＧＦＲ２（ＣＤ３０９）、テネイシン、コラーゲンＩＶ、ペリオスチン、エンドセリン受容体、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３、ＥｒｂＢ４、ＥＧＦＲ、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３、ＦＧＦＲ４、ＦＧＦＲ６、ＩＧＦＲ−１、ＦＺＤ１、ＦＺＤ２、ＦＺＤ３、ＦＺＤ４、ＦＺＤ５、ＦＺＤ６、ＦＺＤ７、ＦＺＤ８、ＦＺＤ９、ＦＺＤ１０、ＳＭＯ、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ６、ＣＤ８、ＣＤ１１、ＣＤ１１ａ、ＣＤ１５、ＣＤ１８、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ２６、ＣＤ２７Ｌ、ＣＤ２８、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ３４、ＣＤ３７、ＣＤ３８、ＣＤ４０、ＣＤ４４、ＣＤ５６、ＣＤ７０、ＣＤ７４、ＣＤ７９、ＣＤ７９ｂ、ＣＤ９８、ＣＤ１０５、ＣＤ１３３、ＣＤ１３８、ｃｒｉｐｔｏ、ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＧＦ−２Ｒ、ＥｐｈＡ１  ａｎ  ＥｐｈＡ受容体、ＥｐｈＢ受容体、ＥｐｈＡ１、ＥｐｈＡ２、ＥｐｈＡ３、ＥｐｈＡ４、ＥｐｈＡ５、ＥｐｈＡ６、ＥｐｈＡ７、ＥｐｈＡ８、ＥｐｈＢ１、ＥｐｈＢ２、ＥｐｈＢ３、ＥｐｈＢ４、ＥｐｈＢ６、インテグリン（例えば、インテグリンαｖβ３、αｖβ５、またはαｖβ６）、Ｃ２４２抗原、Ａｐｏ２、ＰＳＧＲ、ＮＧＥＰ、ＰＳＣＡ、ＴＭＥＦＦ２、エンドグリン、ＰＳＭＡ、ＣａｎＡｇ、ＣＡＬＬＡ、ｃ−Ｍｅｔ、ＶＥＧＦＲ−１、ＶＥＧＦＲ−２、ＤＤＲ１、ＰＤＧＦＲアルファ、ＰＤＧＦＲベータ、ＴｒｋＡ、ＴｒｋＢ、ＴｒｋＣ、ＵＦＯ、ＬＴＫ、ＡＬＫ、Ｔｉｅ１、Ｔｉｅ２、ＰＴＫ７、Ｒｙｋ、ＴＣＲ、ＮＭＤＡＲ、ＬＮＧＦＲ、およびＭｕＳＫからなる群より選択される細胞表面抗原のエピトープに対して特異的親和性を有する、ターゲティング部分を有する。いくつかの実施形態では、リポソームは、特定の対象の癌（腫瘍）に由来する、またはそれに発現していると判断されるネオ抗原などの細胞表面抗原上のエピトープに対して特異的親和��を有する、ターゲティング部分を含む。いくつかの実施形態では、ターゲティング部分は抗体または抗原結合抗体フラグメントである。いくつかの実施形態では、リポソームは、過剰増殖細胞の細胞表面抗原のエピトープに対して特異的親和性を有するターゲティング部分を含まない。いくつかの実施形態では、リポソームは、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含むαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。他の実施形態では、リポソームは、ヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、（ａ）ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｂ）ポリグルタミン酸化１０−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−１０−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｃ）ポリグルタミン酸化５，１０−メテニル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦ）；（ｄ）ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ）；（ｅ）ポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ）；（ｆ）ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦ）；および（ｇ）ポリグルタミン酸化５−ホルムイミノ−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦ）から選択されるαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、リポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、リポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、リポソームは、［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、リポソームは、［６Ｒ，Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、リポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、リポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、Ｌポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、過剰増殖性障害は癌である。いくつかの実施形態では、過剰増殖性障害は自己免疫疾患（例えば、関節リウマチ）である。いくつかの実施形態では、過剰増殖性障害は、良性のまたは悪性腫瘍；白血病、血液学的またはリンパ系悪性腫瘍である。他の実施形態では、過剰増殖性障害は、神経、グリア、星状細胞、視床下部、腺、マクロファージ、上皮、間質、胞胚腔、炎症性、血管���生、および自己免疫疾患を含む免疫性障害からなる群より選択される。
【０３７４】
開示方法により治療できる代表的過剰増殖性障害には、特に限定されないが、良性で前癌性、および悪性細胞増殖に関連する障害が挙げられ、特に限定されないが、新生物および腫瘍（例えば、組織球腫、神経膠腫、星状細胞腫、骨腫）、癌（例えば、肺癌、小細胞肺癌、胃腸癌、腸癌、結腸直腸癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、精巣癌、肝臓癌、腎臓癌、膀胱癌、膵臓癌、脳癌、肉腫（例えば、骨肉腫、カポジ肉腫）、および黒色腫）、白血病、乾癬、骨疾患、線維増殖性障害（例えば、結合組織の）、およびアテローム性動脈硬化症がこれに含まれる。
【０３７５】
さらなる実施形態では、本開示は、癌を治療する方法であって、癌を有するか、有するリスクのある対象に、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸（例えば、本明細書に開示されるαＰＴＨＦ）を含む送達媒体（例えば、抗体またはリポソーム）を有効量投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、送達媒体は抗体（例えば、完全長ＩｇＧ抗体、二重特異性抗体、またはｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、送達媒体はリポソーム（例えば、ＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＮＴＬｐ−αＰＴＨＦ、ＮＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＴＬｐ−αＰＴＨＦ、またはＴＰＬｐ−αＰＴＨＦなどのＬｐ−αＰＴＨＦ）である。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体はペグ化されている。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体はペグ化されていない。さらなる実施形態では、投与する送達媒体は、癌細胞の表面の抗原のエピトープに対して特異的親和性を有するターゲティング部分を含む。さらなる実施形態では、送達媒体は、ＧＯＮＭＢ、ＴＡＣＳＴＤ２（ＴＲＯＰ２）、ＣＥＡＣＡＭ５、ＥＰＣＡＭ、葉酸受容体（例えば、葉酸受容体−α、葉酸受容体−β、または葉酸受容体−δ）、ムチン１（ＭＵＣ−１）、ＭＵＣ−６、ＳＴＥＡＰ１、メソテリン、ネクチン４、ＥＮＰＰ３、グアニリルシクラーゼＣ（ＧＣＣ）、ＳＬＣ４４Ａ４、ＮａＰｉ２ｂ、ＣＤ７０（ＴＮＦＳＦ７）、ＣＡ９（炭酸脱水酵素）、５Ｔ４（ＴＰＢＧ）、ＳＬＴＲＫ６、ＳＣ−１６、組織因子、ＬＩＶ−１（ＺＩＰ６）、ＣＧＥＮ−１５０２７、Ｐカドヘリン、フィブロネクチンエクストラドメインＢ（ＥＤ−Ｂ）、ＶＥＧＦＲ２（ＣＤ３０９）、テネイシン、コラーゲンＩＶ、ペリオスチン、エンドセリン受容体、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３、ＥｒｂＢ４、ＥＧＦＲ、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３、ＦＧＦＲ４、ＦＧＦＲ６、ＩＧＦＲ−１、ＦＺＤ１、ＦＺＤ２、ＦＺＤ３、ＦＺＤ４、ＦＺＤ５、ＦＺＤ６、ＦＺＤ７、ＦＺＤ８、ＦＺＤ９、ＦＺＤ１０、ＳＭＯ、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ６、ＣＤ８、ＣＤ１１、ＣＤ１１ａ、ＣＤ１５、ＣＤ１８、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ２６、ＣＤ２７Ｌ、ＣＤ２８、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ３４、ＣＤ３７、ＣＤ３８、ＣＤ４０、、ＣＤ４４、ＣＤ５６、ＣＤ７０、ＣＤ７４、ＣＤ７９、ＣＤ７９ｂ、ＣＤ９８、ＣＤ１０５、ＣＤ１３３、ＣＤ１３８、ｃｒｉｐｔｏ、ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＧＦ−２Ｒ、ＥｐｈＡ１  ａｎ  ＥｐｈＡ受容体、ＥｐｈＢ受容体、ＥｐｈＡ１、ＥｐｈＡ２、ＥｐｈＡ３、ＥｐｈＡ４、ＥｐｈＡ５、ＥｐｈＡ６、ＥｐｈＡ７、ＥｐｈＡ８、ＥｐｈＢ１、ＥｐｈＢ２、ＥｐｈＢ３、ＥｐｈＢ４、ＥｐｈＢ６、インテグリン（例えば、インテグリンαｖβ３、αｖβ５、またはαｖβ６）、Ｃ２４２抗原、Ａｐｏ２、ＰＳＧＲ、ＮＧＥＰ、ＰＳＣＡ、ＴＭＥＦＦ２、エンドグリン、ＰＳＭＡ、ＣａｎＡｇ、ＣＡＬＬＡ、ｃ−Ｍｅｔ、ＶＥＧＦＲ−１、ＶＥＧＦＲ−２、ＤＤＲ１、ＰＤＧＦＲα、ＰＤＧＦＲβ、ＴｒｋＡ、ＴｒｋＢ、ＴｒｋＣ、ＵＦＯ、ＬＴＫ、ＡＬＫ、Ｔｉｅ１、Ｔｉｅ２、ＰＴＫ７、Ｒｙｋ、ＴＣＲ、ＮＭＤＡＲ、ＬＮＧＦＲ、およびＭｕＳＫからなる群より選択される細胞表面抗原のエピトープに対して特異��親和性を有する、ターゲティング部分を含む。いくつかの実施形態では、送達媒体は、ネオ抗原などの特定の対象の癌（腫瘍）に由来する、またはそれに発現していると判断される細胞表面抗原上のエピトープ対して特異的親和性を有するターゲティング部分を含む。いくつかの実施形態では、ターゲティング部分は抗体または抗原結合抗体フラグメントである。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含むαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。他の実施形態では、投与する送達媒体は、ヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、（ａ）ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｂ）ポリグルタミン酸化１０−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−１０−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｃ）ポリグルタミン酸化５，１０−メテニル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦ）；（ｄ）ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ）；（ｅ）ポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ）；（ｆ）ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦ）；および（ｇ）ポリグルタミン酸化５−ホルムイミノ−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦ）から選択されるαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与する送達媒体は、［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与する送達媒体は、［６Ｒ，Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、癌は、肺癌（例えば、非小細胞肺癌）、膵臓癌、乳癌、卵巣癌、肺癌、前立腺癌、頭頸部癌、胃癌、胃腸癌、結腸癌、食道癌、子宮頸癌、腎臓癌、胆管癌、胆嚢癌、および血液系腫瘍（例えば、白血病またはリンパ腫）からなる群より選択される。
【０３７６】
さらなる実施形態では、本開示は、癌を治療する方法であって、癌を有するか、有するリスクのある対象に、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含むリポソーム（例えば、ＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＮＴＬｐ−αＰＴＨＦ、ＮＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＴＬｐ−αＰＴＨＦまたはＴＰＬｐ−αＰＴＨＦなどのＬｐ−αＰＴＨＦ）の有効量を投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、リポソームはペグ化されている。いくつかの実施形態では、リポソームはペグ化されていない。さらなる実施形態では、リポソームは、癌細胞の表面の抗原のエピトープに対して特異的親和性を有するターゲティング部分を含む。さらなる実施形態では、リポソームは、ＧＯＮＭＢ、ＴＡＣＳＴＤ２（ＴＲＯＰ２）、ＣＥＡＣＡＭ５、ＥＰＣＡＭ、葉酸受容体（例えば、葉酸受容体−α、葉酸受容体−βまたは葉酸受容体−δ）、ムチン１（ＭＵＣ−１）、ＭＵＣ−６、ＳＴＥＡＰ１、メソテリン、ネクチン４、ＥＮＰＰ３、グアニリルシクラーゼＣ（ＧＣＣ）、ＳＬＣ４４Ａ４、ＮａＰｉ２ｂ、ＣＤ７０（ＴＮＦＳＦ７）、ＣＡ９（炭酸脱水酵素）、５Ｔ４（ＴＰＢＧ）、ＳＬＴＲＫ６、ＳＣ−１６、組織因子、ＬＩＶ−１（ＺＩＰ６）、ＣＧＥＮ−１５０２７、Ｐカドヘリン、フィブロネクチンエクストラドメインＢ（ＥＤ−Ｂ）、ＶＥＧＦＲ２（ＣＤ３０９）、テネイシン、コラーゲンＩＶ、ペリオスチン、エンドセリン受容体、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３、ＥｒｂＢ４、ＥＧＦＲ、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３、ＦＧＦＲ４、ＦＧＦＲ６、ＩＧＦＲ−１、ＦＺＤ１、ＦＺＤ２、ＦＺＤ３、ＦＺＤ４、ＦＺＤ５、ＦＺＤ６、ＦＺＤ７、ＦＺＤ８、ＦＺＤ９、ＦＺＤ１０、ＳＭＯ、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ６、ＣＤ８、ＣＤ１１、ＣＤ１１ａ、ＣＤ１５、ＣＤ１８、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ２６、ＣＤ２７Ｌ、ＣＤ２８、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ３４、ＣＤ３７、ＣＤ３８、ＣＤ４０、ＣＤ４４、ＣＤ５６、ＣＤ７０、ＣＤ７４、ＣＤ７９、ＣＤ７９ｂ、ＣＤ９８、ＣＤ１０５、ＣＤ１３３、ＣＤ１３８、ｃｒｉｐｔｏ、ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＧＦ−２Ｒ、ＥｐｈＡ１  ａｎ  ＥｐｈＡ受容体、ＥｐｈＢ受容体、ＥｐｈＡ１、ＥｐｈＡ２、ＥｐｈＡ３、ＥｐｈＡ４、ＥｐｈＡ５、ＥｐｈＡ６、ＥｐｈＡ７、ＥｐｈＡ８、ＥｐｈＢ１、ＥｐｈＢ２、ＥｐｈＢ３、ＥｐｈＢ４、ＥｐｈＢ６、インテグリン（例えば、インテグリンαｖβ３、αｖβ５、またはαｖβ６）、Ｃ２４２抗原、Ａｐｏ２、ＰＳＧＲ、ＮＧＥＰ、ＰＳＣＡ、ＴＭＥＦＦ２、エンドグリン、ＰＳＭＡ、ＣａｎＡｇ、ＣＡＬＬＡ、ｃ−Ｍｅｔ、ＶＥＧＦＲ−１、ＶＥＧＦＲ−２、ＤＤＲ１、ＰＤＧＦＲα、ＰＤＧＦＲβ、ＴｒｋＡ、ＴｒｋＢ、ＴｒｋＣ、ＵＦＯ、ＬＴＫ、ＡＬＫ、Ｔｉｅ１、Ｔｉｅ２、ＰＴＫ７、Ｒｙｋ、ＴＣＲ、ＮＭＤＡＲ、ＬＮＧＦＲ、およびＭｕＳＫからなる群より選択される細胞表面抗原上のエピトープに対して特異的親和性を有する、ターゲティング部分を含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ネオ抗原などの特定の対象の癌（腫瘍）に由来する、またはそれに発現していると判断される細胞表面抗原上のエピトープ対して特異的親和性を有するターゲティング部分を含む。いく���かの実施形態では、ターゲティング部分は抗体または抗原結合抗体フラグメントである。いくつかの実施形態では、リポソームは、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含むαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。他の実施形態では、リポソームは、ヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソームは、（ａ）ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｂ）ポリグルタミン酸化１０−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−１０−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｃ）ポリグルタミン酸化５，１０−メテニル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦ）；（ｄ）ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ）；（ｅ）ポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ）；（ｆ）ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦ）；および（ｇ）ポリグルタミン酸化５−ホルムイミノ−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦ）から選択されるαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与するリポソームは、［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与するリポソームは、［６Ｒ，Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、癌は、肺癌（例えば、非小細胞肺癌）、膵臓癌、乳癌、卵巣癌、肺癌、前立腺癌、頭頸部癌、胃癌、胃腸癌、結腸癌、食道癌、子宮頸癌、腎臓癌、胆管癌、胆嚢癌、および血液系腫瘍（例えば、白血病またはリンパ腫）からなる群より選択される。
【０３７７】
さらなる実施形態では、本開示は、癌を治療する方法であって、癌を有するか、有するリスクのある対象に、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸（例えば、本明細書に開示されるαＰＴＨＦ）と、癌表面の抗原のエピトープに対して特異的親和性を有するターゲティング部分とを含むリポソームを含む、リポソーム組成物を有効量投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、リポソームは、ＧＯＮＭＢ、ＴＡＣＳＴＤ２（ＴＲＯＰ２）、ＣＥＡＣＡＭ５、ＥＰＣＡＭ、葉酸受容体（例えば、葉酸受容体−α、葉酸受容体−β、または葉酸受容体−δ）、ムチン１（ＭＵＣ−１）、ＭＵＣ−６、ＳＴＥＡＰ１、メソテリン、ネクチン４、ＥＮＰＰ３、グアニリルシクラーゼＣ（ＧＣＣ）、ＳＬＣ４４Ａ４、ＮａＰｉ２ｂ、ＣＤ７０（ＴＮＦＳＦ７）、ＣＡ９（炭酸脱水酵素）、５Ｔ４（ＴＰＢＧ）、ＳＬＴＲＫ６、ＳＣ−１６、組織因子、ＬＩＶ−１（ＺＩＰ６）、ＣＧＥＮ−１５０２７、Ｐカドヘリン、フィブロネクチン外側ドメインＢ（ＥＤ−Ｂ）、ＶＥＧＦＲ２（ＣＤ３０９）、テネイシン、コラーゲンＩＶ、ペリオスチン、エンドセリン受容体、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３、ＥｒｂＢ４、ＥＧＦＲ、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３、ＦＧＦＲ４、ＦＧＦＲ６、ＩＧＦＲ−１、ＦＺＤ１、ＦＺＤ２、ＦＺＤ３、ＦＺＤ４、ＦＺＤ５、ＦＺＤ６、ＦＺＤ７、ＦＺＤ８、ＦＺＤ９、ＦＺＤ１０、ＳＭＯ、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ６、ＣＤ８、ＣＤ１１、ＣＤ１１ａ、ＣＤ１５、ＣＤ１８、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ２６、ＣＤ２７Ｌ、ＣＤ２８、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ３４、ＣＤ３７、ＣＤ３８、ＣＤ４０、ＣＤ４４、ＣＤ５６、ＣＤ７０、ＣＤ７４、ＣＤ７９、ＣＤ７９ｂ、ＣＤ９８、ＣＤ１０５、ＣＤ１３３、ＣＤ１３８、ｃｒｉｐｔｏ、ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＧＦ−２Ｒ、ＥｐｈＡ１  ａｎ  ＥｐｈＡ受容体、ＥｐｈＢ受容体、ＥｐｈＡ１、ＥｐｈＡ２、ＥｐｈＡ３、ＥｐｈＡ４、ＥｐｈＡ５、ＥｐｈＡ６、ＥｐｈＡ７、ＥｐｈＡ８、ＥｐｈＢ１、ＥｐｈＢ２、ＥｐｈＢ３、ＥｐｈＢ４、ＥｐｈＢ６、インテグリン（例えば、インテグリンαｖβ３、αｖβ５、またはαｖβ６）、Ｃ２４２抗原、Ａｐｏ２、ＰＳＧＲ、ＮＧＥＰ、ＰＳＣＡ、ＴＭＥＦＦ２、エンドグリン、ＰＳＭＡ、ＣａｎＡｇ、ＣＡＬＬＡ、ｃ−Ｍｅｔ、ＶＥＧＦＲ−１、ＶＥＧＦＲ−２、ＤＤＲ１、ＰＤＧＦＲアルファ、ＰＤＧＦＲベータ、ＴｒｋＡ、ＴｒｋＢ、ＴｒｋＣ、ＵＦＯ、ＬＴＫ、ＡＬＫ、Ｔｉｅ１、Ｔｉｅ２、ＰＴＫ７、Ｒｙｋ、ＴＣＲ、ＮＭＤＡＲ、ＬＮＧＦＲ、およびＭｕＳＫからなる群より選択される細胞表面抗原のエピトープに対して特異的親和性を有する、ターゲティング部分を含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、特定の対象の癌（腫瘍）に由来する、またはそれに発現していると判断されるネオ抗原などの細胞表面抗原上のエピトープに対して特異的親和性を有する、ターゲティング部分を含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソーム組成物はペグ化リポソームを含む（例えば、ＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ）。いくつかの実施形態では、投与するリポソーム組成物は、ペグ化されていないリポソームを含む。いくつかの実施形態では、投与す���リポソーム組成物のリポソームは、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含むαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソーム組成物のリポソームは、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソーム組成物のリポソームは、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。他の実施形態では、投与するリポソーム組成物のリポソームは、ヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソームは、（ａ）ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｂ）ポリグルタミン酸化１０−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−１０−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｃ）ポリグルタミン酸化５，１０−メテニル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦ）；（ｄ）ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ）；（ｅ）ポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ）；（ｆ）ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦ）；および（ｇ）ポリグルタミン酸化５−ホルムイミノ−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦ）から選択されるαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソームはポリグルタミン酸を含み、投与するリポソームはｄ  ５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与するリポソームは、［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与するリポソームは、［６Ｒ，Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソーム組成物を投与して、肺癌、膵臓、乳癌、卵巣癌、肺癌、前立腺癌、頭頸部癌、胃癌、消化管癌、結腸癌、食道癌、子宮頸癌、腎臓癌、胆管癌、胆嚢癌、および血液悪性腫瘍からなる群より選択される癌を治療する。
【０３７８】
いくつかの実施形態では、リポソームは、腫瘍特異的抗原（ＴＳＡ）または腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）のエピトープに対して特異的親和性を有するターゲティング部分を含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、腫瘍分化抗原（例えば、ＭＡＲＴ１／ＭｅｌａｎＡ、ｇｐ１００（Ｐｍｅｌ１７）、チロシナーゼ、ＴＲＰ１、およびＴＲＰ２）、腫瘍特異的多系列抗原（例えば、ＭＡＧＥ１、ＭＡＧＥ３、ＢＡＧＥ、ＧＡＧＥ１、ＧＡＧＥ２、およびｐ１５）、過剰発現胎児性抗原（例えば、癌胎児抗原（ＣＥＡ））、過剰発現癌遺伝子または変異導入腫瘍抑制因子遺伝子産物（例えば、ｐ５３、Ｒａｓ、およびＨＥＲ２／ｎｅｕ）、染色体転座から生じたユニークな腫瘍抗原（例えば、ＢＣＲ−ＡＢＬ、Ｅ２Ａ−ＰＲＬ、Ｈ４−ＲＥＴ、ＩＧＨ−ＩＧＫ、およびＭＹＬ−ＲＡＲ）、ウイルス抗原（例えば、エプスタイン・バーウイルス抗原ＥＢＶＡ、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）抗原Ｅ６またはＥ７）、ＧＰ１００）、前立腺酸ホスファターゼ（ＰＡＰ）、前立腺特異的抗原（ＰＳＡ）、ＰＴＧＥＲ４、ＩＴＧＡ４、ＣＤ３７、ＣＤ５２、ＣＤ６２Ｌ（Ｌ−セレクチン）、ＣＸＣＲ４、ＣＤ６９、ＥＶＩ２Ｂ（ＣＤ３６１）、ＳＬＣ３９Ａ８、ＭＩＣＢ、ＬＲＲＣ７０、ＣＬＥＬＣ２Ｂ、ＨＭＨＡ１、ＬＳＴ１、およびＣＭＴＭ６（ＣＫＬＦＳＦ６）からなる群より選択される抗原のエピトープに対して特異的親和性を有する、ターゲティング部分を含む。
【０３７９】
いくつかの実施形態では、リポソームは、血液学的腫瘍抗原のエピトープに対して特異的親和性を有するターゲティング部分を含む。さらなる実施形態では、ターゲティング部分は、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ３０、ＣＤ１３８、ＣＤ３３、ＣＤ３８、ＣＤ１２３、ＣＳ１、ＲＯＲ１、Ｌｅｗｉｓγ、Ｉｇカッパ軽鎖、ＴＣＲ、ＢＣＭＡ、ＴＡＣＩ、ＢＡＦＦＲ（ＣＤ２６８）、ＣＡＬＬＡ、およびＮＫＧ２ＤＬリガンドからなる群より選択される血液学的腫瘍抗原のエピトープに対して特異的親和性を有する。いくつかの実施形態では、リポソームは、Ｂ細胞リンパ腫特異的イディオタイプ免疫グロブリン、またはＢ細胞分化抗原（例えば、ＣＤ１９、ＣＤ２０、およびＣＤ３７）のエピトープに対して特異的親和性を有するターゲティング部分を含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、多発性骨髄腫細胞上の抗原（例えば、ＣＳ１、ＣＤ３８、ＣＤ１３８、ＭＵＣ１、ＨＭ１．２４、ＣＹＰ１Ｂ１、ＳＰ１７、ＰＲＡＭＥ、ウイルムス腫瘍１（ＷＴ１）、およびヒートショックプロテインｇｐ９６）、または骨髄性細胞上の抗原（例えば、ＴＳＬＰＲおよびＩＬ−７Ｒ）のエピトープに対して特異的親和性を有するターゲティング部分を含む。
【０３８０】
いくつかの実施形態では、リポソームは、固形腫瘍抗原のエピトープに対して特異的親和性を有するターゲティング部分を含む。さらなる実施形態では、ターゲティング部分は、ジシアロガングリオシド（ＧＤ２）、ｏ−アセチルＧＤ２、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＥｒｂＢ２、ＶＥＧＦＲ２、ＦＡＰ、メソテリン、ＩＬ１３Ｒａ２（神経膠腫）、ｃＭＥＴ、ＰＳＭＡ、Ｌ１ＣＡＭ、ＣＥＡ、およびＥＧＦＲからなる群より選択される血液学的腫瘍抗原のエピトープに対して特異的親和性を有する。
【０３８１】
いくつかの実施形態では、リポソームは、ＣＤ１３７、ＰＤＬ１、ＣＴＬＡ４、ＣＤ４７、ＫＩＲ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ｂ（ＤＲ５）、ＴＩＭ３、ＰＤ１、ｃＭｅｔ、糖脂質Ｆ７７、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＨＬＡＡ２（ＮＹ−ＥＳＯ−１）、ＬＡＧ３、ＣＤ１３４（ＯＸ４０）、ＨＶＥＭ、ＢＴＬＡ、ＴＮＦＲＳＦ２５（ＤＲ３）、ＣＤ１３３、ＭＡＧＥ  Ａ３、ＰＳＣＡ、ＭＵＣ１、ＣＤ４４ｖ６、ＣＤ４４ｖ６／７、ＣＤ４４ｖ７／８、ＩＬ１１Ｒａ、ｅｐｈＡ２、ＣＡＩＸ、ＭＮＣＡＩＸ、ＣＳＰＧ４、ＭＵＣ１６、ＥＰＣＡＭ（ＥＧＰ２）、ＴＡＧ７２、ＥＧＰ４０、ＥｒｂＢ受容体ファミリー、ＥｒｂＢ２（ＨＥＲ２）、ＥｒｂＢ３／４、ＲＡＧＥ１、ＧＤ３、ＦＡＲ、Ｌｅｗｉｓγ、ＮＣＡＭ、ＨＬＡＡ１／ＭＡＧＥ１、ＭＡＧＥＡ１、ＭＡＧＥＡ３、ＭＡＧＥ−Ａ４、Ｂ７Ｈ３、ＷＴ１、ＭｅｌａｎＡ（ＭＡＲＴ１）、ＨＰＶＥ６、ＨＰＶＥ７、チログロブリン、チロシナーゼ、ＰＳＡ、ＣＬＬ１ＧＤ３、Ｔｎ  Ａｇ、ＦＬＴ３、ＫＩＴ、ＰＲＳＳ２１、ＣＤ２４、ＰＤＧＦＲ−β、ＳＳＥＡ４、プロスターゼ、ＰＡＰ、ＥＬＦ２Ｍ、ｅｐｈＢ２、ＩＧＦ１、ＩＧＦＩＩ、ＩＧＦＩ受容体、ＬＭＰ２、ｇｐ１００、ｂｃｒ−ａｂ１、フコシルＧＭ１、ｓＬｅ、ＧＭ３、ＴＧＳ５、葉酸受容体β、ＴＥＭ１（ＣＤ２４８）、ＴＥＭ７Ｒ、ＣＬＤＮ６、ＴＳＨＲ、ＧＰＲＣ５Ｄ、ＣＸＯＲＦ６１、ＣＤ９７、ＣＤ７ａ、ＨＬＥ、ＣＤ１７９ａ、ＡＬＫ、プリシアル酸、ＰＬＡＣ１、ＧｌｏｂｏＨ、ＮＹ−ＢＲ−１、ＵＰＫ２、ＨＡＶＣＲ１、ＡＤＲＢ３、ＰＡＮＸ３、ＧＰＲ２０、ＬＹ６Ｋ、ＯＲ５１Ｅ２、ＴＡＲＰ、ＬＡＧＥ１ａ、レグマイン、Ｅ７、ＥＴＶ６−ＡＭＬ、精子タンパク質１７、ＸＡＧＥ１、Ｔｉｅ２、ＭＡＤ−ＣＴ１、ＭＡＤ−ＣＴ２、Ｆｏｓ−関連する抗原１、ｐ５３、ｐ５３変異体、プロステイン、サバイビン、テロメラーゼ、ＰＣＴＡ１（ガレクチン８）、Ｒａｓ変異体、ｈＴＥＲＴ、肉腫転座切断点、ＭＬ−ＩＡＰ、ＥＲＧ（ＴＭＰＲＳＳ２  ＥＴＳ融合遺伝子）、ＮＡ１７、ＰＡＸ３、アンドロゲン受容体、サイクリンＢ１、ＭＹＣＮ、ＲｈｏＣ、ＴＲＰ２、ＣＹＰ１Ｂ１、ＢＯＲＩＳ、ＳＡＲＴ３、ＰＡＸ５、ＯＹ−ＴＥＳ１、ＬＣＫ、ＡＫＡＰ４、ＳＳＸ２、逆転写酵素、ＲＵ１、ＲＵ２、腸内カルボキシルエステラーゼ、好中球エラスターゼ、ｍｕｔ  ｈｓｐ７０−２、ＣＤ７９ａ、ＣＤ７９ｂ、ＣＤ７２、ＬＡＩＲ１、ＦＣＡＲ、ＬＩＬＲＡ２、ＣＤ３００ＬＦ、ＣＬＥＣ１２Ａ、ＢＳＴ２、ＥＭＲ２、ＬＹ７５、ＧＰＣ３、ＦＣＲＬＳ、ＩＧＬＬ１、ＴＳＰ−１８０、ＭＡＧＥ４、ＭＡＧＥ５、ＭＡＧＥ６、ＶＥＧＦＲ１、ＩＧＦ１Ｒ、肝細胞成長因子受容体、ｐ１８５ＥｒｂＢ２、ｐ１８０ＥｒｂＢ−３、ｎｍ−２３Ｈ１、ＣＡ１９−９、ＣＡ７２−４、ＣＡＭ１７．１、ＮｕＭａ、Ｋ−ｒａｓ、βカテニン、ＣＤＫ４、Ｍｕｍ１、ｐ１５、ｐ１６、４３−９Ｆ、５Ｔ４、７９１Ｔｇｐ７２、β−ヒト絨毛性ゴナドトロピン、ＢＣＡ２２５、ＢＴＡＡ、ＣＡ１２５、ＣＡ１５−３、ＣＡ２７．２９（ＢＣＡＡ）、ＣＡ１９５、ＣＡ２４２、ＣＡ−５０、ＣＡＭ４３、ＣＤ６８、ＣＯ−０２９、ＦＧＦ５、Ｇ２５０、ＨＴｇｐ−１７５、Ｍ３４４、ＭＡ５０、ＭＧ７−Ａｇ、ＭＯＶ１８、ＮＢ／７０Ｋ、ＮＹ−ＣＯ１、ＲＣＡＳ１、ＳＤＣＣＡＧ１６、Ｍ２ＢＰ、ＴＡＡＬ６、ＴＬＰ、およびＴＰＳ、神経膠腫関連抗原、α−フェトプロテイン（ＡＦＰ）、ＡＦＰのｐ２６フラグメント、レクチン反応性ＡＦＰ、およびＴＬＲ４からなる群より選択される抗原のエピトープに対して特異的親和性を有する、ターゲティング部分を含む。
【０３８２】
いくつかの実施形態では、リポソームは、ＰＤＧＦＲＡ、ＶＥＧＦＲ１、ＶＥＧＦＲ３、ニューロピリン１（ＮＲＰ１）、ニューロピリン２（ＮＲＰ２）、ベータセルリン、ＰＬＧＦ、ＲＥＴ（遺伝子導入中に再配列）、ＴＩＥ１、ＴＩＥ２（ＴＥＫ）、ＣＡ１２５、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ７、ＣＤ１０、ＣＤ１３、ＣＤ２５  ＣＤ３２、ＣＤ３２ｂ、ＣＤ４４（例えば、ＣＤ４４ｖ６）、ＣＤ４７、ＣＤ４９ｅ（インテグリンα５）、ＣＤ５４（ＩＣＡＭ）、ＣＤ５５、ＣＤ６４、ＣＤ７４、ＣＤ８０、ＣＤ９０、ＣＤ２００、ＣＤ１４７、ＣＤ１６６、ＣＤ２００、ＥＳＡ、ＳＨＨ、ＤＨＨ、ＩＨＨ、ｐａｔｃｈｅｄ  １（ＰＴＣＨ１）、スムーズンド（ＳＭＯ）、ＷＮＴ１、ＷＮＴ２Ｂ、ＷＮＴ３Ａ、ＷＮＴ４、ＷＮＴ４Ａ、ＷＮＴ５Ａ、ＷＮＴ５Ｂ、ＷＮＴ７Ｂ、ＷＮＴ８Ａ、ＷＮＴ１０Ａ、ＷＮＴ１０Ｂ、ＷＮＴ１６Ｂ、ＬＫＰ５、ＬＲＰ５、ＬＲＰ６、ＦＺＤ１、ＦＺＤ２、ＦＺＤ４、ＦＺＤ５、ＦＺＤ６、ＦＺＤ７、ＦＺＤ８、Ｎｏｔｃｈ、Ｎｏｔｃｈ１、Ｎｏｔｃｈ３、Ｎｏｔｃｈ４、ＤＬＬ４、Ｊａｇｇｅｄ、Ｊａｇｇｅｄ１、Ｊａｇｇｅｄ２、Ｊａｇｇｅｄ３、ＴＮＦＲＳＦ１Ａ（ＴＮＦＲ１、ｐ５５、ｐ６０）、ＴＮＦＲＳＦ１Ｂ（ＴＮＦＲ２）、ＴＮＦＲＳＦ６（Ｆａｓ、ＣＤ９５）、ＴＮＦＲＳＦ６Ｂ（ＤｃＲ３）、ＴＮＦＲＳＦ７（ＣＤ２７）、ＴＮＦＳＦ９（４１ＢＢリガンド）、ＴＮＦＲＳＦ８（ＣＤ３０）、ＴＮＦＲＳＦ１０Ａ（ＴＲＡＩＬＲ１、ＤＲ４）、ＴＮＦＲＳＦ１１Ａ（ＲＡＮＫ）、ＴＮＦＲＳＦ１２（ＴＷＥＡＫＲ）、ＴＮＦＲＳＦ１９Ｌ（ＫＥＬＴ）、ＴＮＦＲＳＦ１９（ＴＲＯＹ）、ＴＮＦＲＳＦ２１（ＤＲ６）、ＩＬＩＲＩ、１Ｌ１Ｒ２、ＩＬ２Ｒ、ＩＬ５Ｒ、ＩＬ６Ｒ、１Ｌ８Ｒ、ＩＬ１０Ｒ、ＩＬ１２Ｒ、ＩＬ１３Ｒ、ＩＬ１５Ｒ、ＩＬ１８Ｒ、ＩＬ１９Ｒ、ＩＬ２１Ｒ、ＩＬ２３Ｒ、ＸＡＧ１、ＸＡＧ３、ＲＥＧＩＶ、ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３、ＡＬＫ、ＡＬＫ１、ＡＬＫ７、ＡＬＣＡＭ、Ａｘｌ、ＴＧＦｂ、ＴＧＦｂ２、ＴＧＦｂ３、ＴＧＦＢＲ１、ＩＧＦＩＩＲ、ＢＭＰＲＩ、Ｎ−カドヘリン、Ｅ−カドヘリン、ＶＥ−カドヘリン、ガングリオシドＧＭ２、ガングリオシドＧＤ３、ＰＳＧＲ、ＤＣＣ、ＣＤＣＰ１、ＣＸＣＲ２、ＣＸＣＲ７、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５、ＣＣＲ７、ＣＣＲ１０、Ｃｌａｕｄｉｎ１、Ｃｌａｕｄｉｎ２、Ｃｌａｕｄｉｎ３、Ｃｌａｕｄｉｎ４、ＴＭＥＦＦ２、ニューレグリン、ＭＣＳＦ、ＣＳＦ、ＣＳＦＲ（ｆｍｓ）、ＧＣＳＦ、ＧＣＳＦＲ、ＢＣＡＭ、ＢＲＣＡ１、ＢＲＣＡ２、ＨＬＡ−ＤＲ、ＡＢＣＣ３、ＡＢＣＢ５、ＨＭ１．２４、ＬＦＡ１、ＬＹＮＸ、Ｓ１００Ａ８、Ｓ１００Ａ９、ＳＣＦ、フォンウィルブランド因子、ルイスＹ６受容体、ＣＡ  Ｇ２５０（ＣＡ９）、ＣＲＹＰＴＯ、ＶＬＡ５、ＨＬＡＤＲ、ＭＵＣｌ８、ムチンＣａｎＡｇ、ＥＧＦＬ７、インテグリンａｖｂ３、インテグリンα５βアクチビンＢｌα、ロイコトリエンＢ４受容体（ＬＴＢ４Ｒ）、ニューロテンシンＮＴ受容体（ＮＴＲ）、５Ｔ４癌胎児性抗原、テネイシンＣ、ＭＭＰ、ＭＭＰ２、ＭＭＰ７、ＭＭＰ９、ＭＭＰ１２、ＭＭＰ１４、ＭＭＰ２６、カテプシンＧ、ＳＵＬＦ１、ＳＵＬＦ２、ＭＥＴ、ＣＡ９、ＴＭ４ＳＦ１、シンデカ���（ＳＤＣｌ）、エフリンＢ４、ＴＥＭ１、ＴＧＦβ１、およびＴＧＦＢＲＩＩからなる群より選択される抗原のエピトープに対して特異的親和性を有する、ターゲティング部分を含む。
【０３８３】
いくつかの実施形態では、リポソームは、免疫系の障害（例えば、自己免疫障害および炎症性疾患）に関連する、または免疫応答の調節に関連する抗原のエピトープに対して特異的親和性を有する、ターゲティング部分を含む。いくつかの実施形態では、ターゲティング部分は、マクロファージ（ＣＤ４４を発現している）の表面に発現している細胞表面抗原のエピトープに対して特異的親和性を有する。
【０３８４】
いくつかの実施形態では、リポソームは、免疫抑制標的のエピトープに対して特異的親和性を有するターゲティング部分を含む。別の実施形態では、ＡＤは、ＩＬ１Ｒａ、ＩＬ６Ｒ、ＣＤ２６Ｌ、ＣＤ２８、ＣＤ８０、Ｆｃｇａｍｍａ  ＲＩＩＢからなる群より選択される免疫抑制標的のエピトープである。別の実施形態では、アダプター中のＡＤは、ＣＤ２５、ＣＤ２８、ＣＴＬＡ４、ＰＤ１、Ｂ７Ｈ１（ＰＤＬ１）、Ｂ７Ｈ４  ＴＧＦβ、ＴＮＦＲＳＦ４（ＯＸ４０）、ＴＮＦＲＳＦ５（ＣＤ４０）、ＴＮＦＲＳＦ９（４１ＢＢ、ＣＤ１３７）、ＴＮＦＲＳＦ１４（ＨＶＥＭ）、ＴＮＦＲＳＦ２５（ＤＲ３）、およびＴＮＦＲＳＦ１８（ＧＩＴＲ）から選択される免疫抑制標的のエピトープである。
【０３８５】
いくつかの実施形態では、リポソームは、ＩＬ１Ｒｂ、Ｃ３ＡＲ、Ｃ５ＡＲ、ＣＸＣＲ１、ＣＸＣＲ２、ＣＣＲ１、ＣＣＲ３、ＣＣＲ７、ＣＣＲ８、ＣＣＲ９、ＣＣＲ１０、ＣｈｅｍＲ２３、ＭＰＬ、ＧＰ１３０、ＴＬＲ２、ＴＬＲ３、ＴＬＲ４、ＴＬＲ５、ＴＬＲ７、ＴＬＲ８、ＴＬＲ９、ＴＲＥＭ１、ＴＲＥＭ２、ＣＤ４９ａ（インテグリンα１）、インテグリンａ５ｂ３、α４インテグリンサブユニット、Ａ４Ｂ７インテグリン、カテプシンＧ、ＴＮＦＲＳＦ３（ＬＴＢＲ）、ＴＮＦＲＳＦ６（Ｆａｓ、ＣＤ９５）、ＴＮＦＲＳＦ６Ｂ（ＤｃＲ３）、ＴＮＦＲＳＦ８（ＣＤ３０）、ＴＮＦＲＳＦ１１Ａ（ＲＡＮＫ）、ＴＮＦＲＳＦ１６（ＮＧＦＲ）、ＴＮＦＲＳＦ１９Ｌ（ＲＥＬＴ）、ＴＮＦＲＳＦ１９（ＴＲＯＹ）、ＴＮＦＲＳＦ２１（ＤＲ６）、ＣＤ１４、ＣＤ２３、ＣＤ３６、ＣＤ３６Ｌ、ＣＤ３９、ＣＤ９１、ＣＤ１５３、ＣＤ１６４、ＣＤ２００、ＣＤ２００Ｒ、Ｂ７１（ＣＤ８０）、Ｂ７２（ＣＤ８６）、Ｂ７ｈ、Ｂ７ＤＣ（ＰＤＬ２）、ＩＣＯＳ、ＩＣＯＳＬ、ＭＨＣ、ＣＤ、Ｂ７Ｈ２、Ｂ７Ｈ３、Ｂ７ｘ、ＳＬＡＭ、ＫＩＭ１、ＳＬＡＭＦ２、ＳＬＡＭＦ３、ＳＬＡＭＦ４、ＳＬＡＭＦ５、ＳＬＡＭＦ６、ＳＬＡＭＦ７、ＴＮＦＲＳＦ１Ａ（ＴＮＦＲ１、ｐ５５、ｐ６０）、ＴＮＦＲＳＦ１Ｂ（ＴＮＦＲ２）、ＴＮＦＲＳＦ７（ＣＤ２７）、ＴＮＦＲＳＦ１２（ＴＷＥＡＫＲ）、ＴＮＦＲＳＦ５（ＣＤ４０）、ＩＬ１Ｒ、ＩＬ２Ｒ、ＩＬ４Ｒａ、ＩＬ５Ｒ、ＩＬ６ＲＩＬ１５Ｒ、ＩＬ１７Ｒ、ＩＬ１７Ｒｂ、ＩＬ１７ＲＣ、ＩＬ２２ＲＡ、ＩＬ２３Ｒ、ＴＳＬＰＲ、Ｂ７ＲＰ１、ｃＫｉｔ、ＧＭＣＳＦ、ＧＭＣＳＦＲ、ＣＤ２、ＣＤ４、ＣＤ１１ａ、ＣＤ１８、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＣＤ８６、ＣＸＣＲ３、ＣＣＲ２、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５、ＣＣＲ８、ＲｈＤ、ＩｇＥ、およびＲｈからなる群より選択される抗原のエピトープに対して特異的親和性を有する、ターゲティング部分を含む。
【０３８６】
さらなる実施形態では、本開示は、癌を治療する方法であって、有効量のリポソーム組成物を、その細胞表面上に葉酸受容体を発現する癌を有するか、有するリスクのある対象に投与することを含み、リポソーム組成物が、（ａ）ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸（例えば、本明細書に開示されるαＰＴＨＦ）と、（ｂ）葉酸受容体に対して特異的結合親和性を有するターゲティング部分とを含むリポソームを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、ターゲティング部分は、葉酸受容体アルファ（ＦＲ−α）、葉酸受容体ベータ（ＦＲ−β）、および／または葉酸受容体デルタ（ＦＲ−δ）に対して特異的結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、ターゲティング部分は、葉酸受容体アルファ（ＦＲ−α）、葉酸受容体ベータ（ＦＲ−β）、および／または葉酸受容体デルタ（ＦＲ−δ）に対して特異的結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、ターゲティング部分は、葉酸受容体アルファ（ＦＲ−α）および葉酸受容体ベータ（ＦＲ−β）に対して特異的結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、投与するリポソーム組成物は、ペグ化リポソーム（例えば、ＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ）を含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソーム組成物は、ペグ化されていないリポソームを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソーム組成物のリポソームは、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含むαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソーム組成物のリポソームは、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、リポソーム組成物のリポソームは、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、リポソーム組成物のリポソームは、アルファヘキサグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソームは、（ａ）ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｂ）ポリグルタミン酸化１０−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−１０−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｃ）ポリグルタミン酸化５，１０−メテニル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦ）；（ｄ）ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ）；（ｅ）ポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ）；（ｆ）ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦ）；および（ｇ）ポリグルタミン酸化５−ホルムイミノ−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦ）から選択されるαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与するリポソームは、［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与するリポソームは、［６Ｒ，Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。
【０３８７】
いくつかの実施形態では、リポソーム組成物のリポソームは、グルタミル基を２個、３個、４個、５個、または６個以上含むαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソーム組成物のリポソームは、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソーム組成物のリポソームは、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソーム組成物のリポソームは、ヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、リポソーム組成物を投与して、上皮組織悪性腫瘍を治療する。いくつかの実施形態では、リポソーム組成物を投与して、肺癌、膵臓癌、乳癌、卵巣癌、肺癌、前立腺癌、頭頸部癌、胃癌、胃腸癌、結腸癌、食道癌、子宮頸癌、腎臓癌、胆管癌、胆嚢癌、および血液系腫瘍からなる群より選択される癌を治療する。
【０３８８】
いくつかの実施形態では、本開示は、肺癌（例えば、非小細胞肺癌）を治療する方法であって、肺癌を有するか、有するリスクのある対象に、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸（例えば、本明細書に開示されるαＰＴＨＦ）を含む送達媒体（例えば、抗体またはリポソーム）を有効量投与することを含む、方法を提供する。特定の実施形態では、癌は非小細胞肺癌である。いくつかの実施形態では、送達媒体は抗体（例えば、完全長ＩｇＧ抗体、二重特異性抗体、またはｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、送達媒体はリポソームである（例えば、ＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＮＴＬｐ−αＰＴＨＦ、ＮＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＴＬｐ−αＰＴＨＦ、またはＴＰＬｐ−αＰＴＨＦなどのＬｐ−αＰＴＨＦ）。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体はペグ化されている。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体はペグ化されていない。さらなる実施形態では、送達媒体は、その表面に、肺癌（例えば、非小細胞肺癌）細胞の表面の抗原のエピトープに対して特異的親和性を有するターゲティング部分を含む。さらなる実施形態では、送達媒体は、ムチン１、ネクチン４、ＮａＰｉ２ｂ、ＣＤ５６、ＥＧＦＲ、およびＳＣ−１６からなる群より選択される抗原のエピトープに対して特異的親和性を有するターゲティング部分を含む。いくつかの実施形態では、ターゲティング部分は抗体または抗体フラグメントである。さらなる実施形態では、送達媒体はリポソームであり、リポソームは、ムチン１、ネクチン４、ＮａＰｉ２ｂ、ＣＤ５６、ＥＧＦＲ、およびＳＣ−１６からなる群より選択される抗原のエピトープに対して特異的親和性を有するターゲティング部分を含む。さらなる実施形態では、送達媒体は、ムチン１、ネクチン４、ＮａＰｉ２ｂ、ＣＤ５６、ＥＧＦＲ、およびＳＣ−１６からなる群より選択される抗原のエピトープに対して特異的親和性を有するターゲティング部分を含む、ペグ化リポソームである。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含むαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、（ａ）ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｂ）ポリグルタミン酸化１０−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−１０−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｃ）ポリグルタミン酸化５，１０−メテニル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦ）；（ｄ）ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ）；（ｅ）ポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ）；（ｆ）ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦ）；および（ｇ）ポリグルタミン酸化５−ホルムイミノ−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦ）から選択されるαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与する送達媒体は、［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与する送達媒体は、［６Ｒ，Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。いくつか実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。他の実施形態では、投与する送達媒体は、ヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。
【０３８９】
いくつかの実施形態では、本開示は、膵臓癌を治療する方法であって、膵臓癌を有するか、有するリスクのある対象に、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸（例えば、本明細書に開示されるαＰＴＨＦ）を含む送達媒体（例えば、抗体（ＡＤＣ）またはリポソーム）を有効量投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、送達媒体は抗体（例えば、完全長ＩｇＧ抗体、二重特異性抗体、またはｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、送達媒体はリポソームである（例えば、ＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＮＴＬｐ−αＰＴＨＦ、ＮＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＴＬｐ−αＰＴＨＦ、またはＴＰＬｐ−αＰＴＨＦなどのＬｐ−αＰＴＨＦ）。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体はペグ化されている。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体はペグ化されていない。さらなる実施形態では、送達媒体は、その表面上に、膵臓癌細胞の表面の抗原のエピトープに対して特異的親和性を有するターゲティング部分を含む。さらなる実施形態では、送達媒体は、ＴＡＣＳＴＤ２（ＴＲＯＰ２）、ムチン１、メソテリン、グアニリルシクラーゼＣ（ＧＣＣ）、ＳＬＣ４４Ａ４、およびネクチン４からなる群より選択される抗原のエピトープに対して特異的親和性を有するターゲティング部分を含む。さらなる実施形態では、送達媒体はリポソームであり、リポソームは、ＴＡＣＳＴＤ２（ＴＲＯＰ２）、ムチン１、メソテリン、グアニリルシクラーゼＣ（ＧＣＣ）、ＳＬＣ４４Ａ４、およびネクチン４からなる群より選択される抗原のエピトープに対して特異的親和性を有するターゲティング部分を含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含むαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。他の実施形態では、投与する送達媒体は、ヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、（ａ）ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｂ）ポリグルタミン酸化１０−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−１０−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｃ）ポリグルタミン酸化５，１０−メテニル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦ）；（ｄ）ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ）；（ｅ）ポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ）；（ｆ）ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦ）；および（ｇ）ポリグルタミン酸化５−ホルムイミノ−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦ）から選択されるαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与する送達媒体は、［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与する送達媒体は、［６Ｒ，Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。
【０３９０】
さらなる実施形態では、本開示は、乳癌（例えば、トリプルネガティブ乳癌（エストロゲン受容体−、プロゲステロン受容体−、およびＨＥＲ２））を治療する方法であって、乳癌を有するか、有するリスクのある対象に、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸（例えば、本明細書に開示されるαＰＴＨＦ）を含む送達媒体（例えば、抗体またはリポソーム）の有効量投与することを含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含むリポソームである。いくつかの実施形態では、送達媒体は抗体（例えば、完全長ＩｇＧ抗体、二重特異性抗体、またはｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、送達媒体はリポソーム（例えば、ＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＮＴＬｐ−αＰＴＨＦ、ＮＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＴＬｐ−αＰＴＨＦ、またはＴＰＬｐ−αＰＴＨＦなどのＬｐ−αＰＴＨＦ）である。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体はペグ化されている。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体はペグ化されていない。さらなる実施形態では、送達媒体は、その表面上に、乳癌細胞の表面の抗原のエピトープに対して特異的親和性を有するターゲティング部分を含む。さらなる実施形態では、送達媒体は、ＬＩＶ−１（ＺＩＰ６）、ＥＧＦＲ、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３、ムチン１、ＧＯＮＭＢ、およびネクチン４からなる群より選択される抗原のエピトープに対して特異的親和性を有するターゲティング部分を含む。いくつかの実施形態では、ターゲティング部分は抗体または抗体フラグメントである。さらなる実施形態では、送達媒体はリポソームであり、リポソームは、ＬＩＶ−１（ＺＩＰ６）、ＥＧＦＲ、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３、ムチン１、ＧＯＮＭＢ、およびネクチン４からなる群より選択される抗原のエピトープに対して特異的親和性を有するターゲティング部分を含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含むαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、ヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、（ａ）ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｂ）ポリグルタミン酸化１０−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−１０−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｃ）ポリグルタミン酸化５，１０−メテニル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦ）；（ｄ）ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ）；（ｅ）ポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ）；（ｆ）ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦ）；および（ｇ）ポリグルタミン酸化５−��ルムイミノ−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦ）から選択されるαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与する送達媒体は、［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与する送達媒体は、［６Ｒ，Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。
【０３９１】
いくつかの実施形態では、本開示は、血液癌を治療する方法であって、血液癌を有するか、有するリスクのある対象に、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸（例えば、本明細書に開示されるαＰＴＨＦ）を含む送達媒体（例えば、抗体またはリポソーム）を有効量投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、送達媒体は抗体（例えば、完全長ＩｇＧ抗体、二重特異性抗体、またはｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、送達媒体はリポソーム（例えば、ＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＮＴＬｐ−αＰＴＨＦ、ＮＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＴＬｐ−αＰＴＨＦ、またはＴＰＬｐ−αＰＴＨＦなどのＬｐ−αＰＴＨＦ）である。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体はペグ化されている。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体はペグ化されていない。さらなる実施形態では、送達媒体は、その表面上に、血液癌細胞の表面の抗原のエピトープに対して特異的親和性を有するターゲティング部分を含む。さらなる実施形態では、送達媒体は、ＣＤ３０、ＣＤ７９ｂ、ＣＤ１９、ＣＤ１３８、ＣＤ７４、ＣＤ３７、ＣＤ１９、ＣＤ２２、ＣＤ３３、ＣＤ３４、およびＣＤ９８からなる群より選択される抗原のエピトープに対して特異的親和性を有するターゲティング部分を含む。さらなる実施形態では、送達媒体はリポソームであり、リポソームは、ＣＤ３０、ＣＤ７９ｂ、ＣＤ１９、ＣＤ１３８、ＣＤ７４、ＣＤ３７、ＣＤ１９、ＣＤ２２、ＣＤ３３、およびＣＤ９８からなる群より選択される抗原のエピトープに対して特異的親和性を有するターゲティング部分を含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含むαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。他の実施形態では、投与する送達媒体は、ヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、（ａ）ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｂ）ポリグルタミン酸化１０−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−１０−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｃ）ポリグルタミン酸化５，１０−メテニル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦ）；（ｄ）ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ）；（ｅ）ポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ）；（ｆ）ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦ）；および（ｇ）ポリグルタミン酸化５−ホルムイミノ−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦ）から選択されるαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与する送達媒体は、［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与する送達媒体は、［６Ｒ，Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。
【０３９２】
いくつかの実施形態では、本開示は、細胞表面の抗原の発現により識別可能な癌を有するか、有するリスクのある対象を治療する方法を提供する。したがって、いくつかの実施形態では、本開示は、癌を治療する方法であって、癌を有するか、有するリスクのある対象に、癌の表面抗原のエピトープに対して特異的親和性を有するターゲティング部分とポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸（例えば、本明細書に開示されるαＰＴＨＦ）とを含む送達媒体（例えば、抗体またはリポソーム）を有効量投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体はペグ化されている。いくつかの実施形態では、ターゲティング部分は抗体または抗体フラグメントである。さらなる実施形態では、送達媒体はリポソームである。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含むαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。他の実施形態では、投与する送達媒体は、ヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、（ａ）ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｂ）ポリグルタミン酸化１０−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−１０−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｃ）ポリグルタミン酸化５，１０−メテニル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦ）；（ｄ）ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ）；（ｅ）ポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ）；（ｆ）ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦ）；および（ｇ）ポリグルタミン酸化５−ホルムイミノ−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦ）から選択されるαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与する送達媒体は、［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与する送達媒体は、［６Ｒ，Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。
【０３９３】
いくつかの実施形態では、細胞表面の腫瘍特異的抗原または腫瘍関連抗原の発現により識別可能な癌、固形腫瘍、および／または転移を有するか、有するリスクのある対象に、開示される組成物（例えば、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含むリポソーム）を投与する。したがって、いくつかの実施形態では、本開示は、癌を治療する方法であって、細胞表面の腫瘍特異的抗原または腫瘍関連抗原の発現により識別可能な癌、固形腫瘍、および／または転移を有するか、有するリスクのある対象に、ターゲティング部分およびポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸（例えば、本明細書に開示されるαＰＴＨＦ）を含む送達媒体（例えば、リポソーム）を有効量投与することを含み、ターゲティング部分が、腫瘍特異的抗原または腫瘍関連抗原上のエピトープに対して特異的結合親和性を有する、方法を提供する。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体はリポソームである。さらなる実施形態では、リポソームはペグ化されている。さらなる実施形態では、送達媒体は、癌、固形腫瘍、および／または転移性細胞の表面上に発現した細胞表面抗原のエピトープに対して特異的親和性を有するターゲティング部分を含む。さらなる実施形態では、ターゲティング部分は、ＧＯＮＭＢ、ＴＡＣＳＴＤ２（ＴＲＯＰ２）、ＣＥＡＣＡＭ５、ＥＰＣＡＭ、葉酸受容体（例えば、葉酸受容体−α、葉酸受容体−βまたは葉酸受容体−δ）、ムチン１（ＭＵＣ−１）、ＭＵＣ−６、ＳＴＥＡＰ１、メソテリン、ネクチン４、ＥＮＰＰ３、グアニリルシクラーゼＣ（ＧＣＣ）、ＳＬＣ４４Ａ４、ＮａＰｉ２ｂ、ＣＤ７０（ＴＮＦＳＦ７）、ＣＡ９（炭酸脱水酵素）、５Ｔ４（ＴＰＢＧ）、ＳＬＴＲＫ６、ＳＣ−１６、組織因子、ＬＩＶ−１（ＺＩＰ６）、ＣＧＥＮ−１５０２７、Ｐカドヘリン、フィブロネクチンエクストラドメインＢ（ＥＤ−Ｂ）、ＶＥＧＦＲ２（ＣＤ３０９）、テネイシン、コラーゲンＩＶ、ペリオスチン、エンドセリン受容体、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３、ＥｒｂＢ４、ＥＧＦＲ、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３、ＦＧＦＲ４、ＦＧＦＲ６、ＩＧＦＲ−１、ＦＺＤ１、ＦＺＤ２、ＦＺＤ３、ＦＺＤ４、ＦＺＤ５、ＦＺＤ６、ＦＺＤ７、ＦＺＤ８、ＦＺＤ９、ＦＺＤ１０、ＳＭＯ、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ６、ＣＤ８、ＣＤ１１、ＣＤ１１ａ、ＣＤ１５、ＣＤ１８、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ２６、ＣＤ２７Ｌ、ＣＤ２８、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ３４、ＣＤ３７、ＣＤ３８、ＣＤ４０、ＣＤ４４、ＣＤ５６、ＣＤ７０、ＣＤ７４、ＣＤ７９、ＣＤ７９ｂ、ＣＤ９８、ＣＤ１０５、ＣＤ１３３、ＣＤ１３８、ｃｒｉｐｔｏ、ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＧＦ−２Ｒ、ＥｐｈＡ１  ａｎ  ＥｐｈＡ受容体、ＥｐｈＢ受容体、ＥｐｈＡ１、ＥｐｈＡ２、ＥｐｈＡ３、ＥｐｈＡ４、ＥｐｈＡ５、ＥｐｈＡ６、ＥｐｈＡ７、ＥｐｈＡ８、ＥｐｈＢ１、ＥｐｈＢ２、ＥｐｈＢ３、ＥｐｈＢ４、ＥｐｈＢ６、インテグリン（例えば、インテグリンαｖβ３、αｖβ５、またはαｖβ６）、Ｃ２４２抗原、Ａｐｏ２、ＰＳＧＲ、ＮＧＥＰ、ＰＳＣＡ、ＴＭＥＦＦ２、エンドグリン、ＰＳＭＡ、ＣａｎＡｇ、ＣＡＬＬＡ、ｃ−Ｍｅｔ、ＶＥＧＦＲ−１、ＶＥＧＦＲ−２、ＤＤＲ１、ＰＤＧＦＲα、ＰＤＧＦＲβ、ＴｒｋＡ、ＴｒｋＢ、ＴｒｋＣ、ＵＦＯ、ＬＴＫ、ＡＬＫ、Ｔｉｅ１、Ｔｉｅ２、ＰＴＫ７、Ｒｙｋ、ＴＣＲ、ＮＭＤＡＲ、ＬＮＧＦＲ、およびＭｕＳＫからなる群より選択される細胞表面抗原のエピトープに対する特異的親和性を有する。いくつかの実施形態では、送達媒体は、特定の対象の癌（腫瘍）に由来する、またはそれに発現していると判断されるネオ抗原などの細胞表面抗原上のエピトープに対して特異的親和性を有する、ターゲティング部分を含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含むαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。他の実施形態では、投与する送達媒体は、ヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸．いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、（ａ）ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｂ）ポリグルタミン酸化１０−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−１０−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｃ）ポリグルタミン酸化５，１０−メテニル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦ）；（ｄ）ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ）；（ｅ）ポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ）；（ｆ）ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦ）；および（ｇ）ポリグルタミン酸化５−ホルムイミノ−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦ）から選択されるαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与する送達媒体は、［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与する送達媒体は、［６Ｒ，Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。
【０３９４】
さらなる実施形態では、送達媒体はリポソームであり、リポソームは、ＧＯＮＭＢ、ＴＡＣＳＴＤ２（ＴＲＯＰ２）、ＣＥＡＣＡＭ５、ＥＰＣＡＭ、葉酸受容体（例えば、葉酸受容体−α、葉酸受容体−βまたは葉酸受容体−δ）、ムチン１（ＭＵＣ−１）、ＭＵＣ−６、ＳＴＥＡＰ１、メソテリン、ネクチン４、ＥＮＰＰ３、グアニリルシクラーゼＣ（ＧＣＣ）、ＳＬＣ４４Ａ４、ＮａＰｉ２ｂ、ＣＤ７０（ＴＮＦＳＦ７）、ＣＡ９（炭酸脱水酵素）、５Ｔ４（ＴＰＢＧ）、ＳＬＴＲＫ６、ＳＣ−１６、組織因子、ＬＩＶ−１（ＺＩＰ６）、ＣＧＥＮ−１５０２７、Ｐカドヘリン、フィブロネクチンエクストラドメインＢ（ＥＤ−Ｂ）、ＶＥＧＦＲ２（ＣＤ３０９）、テネイシン、コラーゲンＩＶ、ペリオスチン、エンドセリン受容体、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３、ＥｒｂＢ４、ＥＧＦＲ、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３、ＦＧＦＲ４、ＦＧＦＲ６、ＩＧＦＲ−１、ＦＺＤ１、ＦＺＤ２、ＦＺＤ３、ＦＺＤ４、ＦＺＤ５、ＦＺＤ６、ＦＺＤ７、ＦＺＤ８、ＦＺＤ９、ＦＺＤ１０、ＳＭＯ、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ６、ＣＤ８、ＣＤ１１、ＣＤ１１ａ、ＣＤ１５、ＣＤ１８、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ２６、ＣＤ２７Ｌ、ＣＤ２８、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ３４、ＣＤ３７、ＣＤ３８、ＣＤ４０、ＣＤ４４、ＣＤ５６、ＣＤ７０、ＣＤ７４、ＣＤ７９、ＣＤ７９ｂ、ＣＤ９８、ＣＤ１０５、ＣＤ１３３、ＣＤ１３８、ｃｒｉｐｔｏ、ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＧＦ−２Ｒ、ＥｐｈＡ１  ａｎ  ＥｐｈＡ受容体、ＥｐｈＢ受容体、ＥｐｈＡ１、ＥｐｈＡ２、ＥｐｈＡ３、ＥｐｈＡ４、ＥｐｈＡ５、ＥｐｈＡ６、ＥｐｈＡ７、ＥｐｈＡ８、ＥｐｈＢ１、ＥｐｈＢ２、ＥｐｈＢ３、ＥｐｈＢ４、ＥｐｈＢ６、インテグリン（例えば、インテグリンαｖβ３、αｖβ５、またはαｖβ６）、Ｃ２４２抗原、Ａｐｏ２、ＰＳＧＲ、ＮＧＥＰ、ＰＳＣＡ、ＴＭＥＦＦ２、エンドグリン、ＰＳＭＡ、ＣａｎＡｇ、ＣＡＬＬＡ、ｃ−Ｍｅｔ、ＶＥＧＦＲ−１、ＶＥＧＦＲ−２、ＤＤＲ１、ＰＤＧＦＲα、ＰＤＧＦＲβ、ＴｒｋＡ、ＴｒｋＢ、ＴｒｋＣ、ＵＦＯ、ＬＴＫ、ＡＬＫ、Ｔｉｅ１、Ｔｉｅ２、ＰＴＫ７、Ｒｙｋ、ＴＣＲ、ＮＭＤＡＲ、ＬＮＧＦＲ、およびＭｕＳＫからなる群より選択される細胞表面抗原に対して特異的親和性を有する、ターゲティング部分を含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、特定の対象の癌（腫瘍）に由来する、またはそれに発現していると判断されるネオ抗原などの細胞表面抗原上のエピトープに対して特異的親和性を有する、ターゲティング部分を含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含むαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、（ａ）ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｂ）ポリグルタミン酸化１０−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−１０−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｃ）ポリグルタミン酸化５，１０−メテニル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦ）；（ｄ）ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦ（例えば、ポリグ��タミン酸化［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ）；（ｅ）ポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ）；（ｆ）ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦ）；および（ｇ）ポリグルタミン酸化５−ホルムイミノ−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦ）から選択されるαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、リポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、リポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、リポソームは、［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、リポソームは、［６Ｒ，Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、リポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、リポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。他の実施形態では、投与する送達媒体は、ヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、Ｌポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、Ｄポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、ＬおよびＤポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。
【０３９５】
さらなる実施形態では、本開示は、癌を治療する方法であって、表面に葉酸受容体を発現している細胞を含む癌を有するか、有するリスクのある対象に、その表面に、葉酸受容体のエピトープに対して特異的親和性を有するターゲティング部分と、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸（例えば、本明細書に開示されるαＰＴＨＦ）とを含む送達媒体（例えば、抗体またはリポソーム）を有効量投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、ターゲティング部分は抗体または抗原結合抗体フラグメントである。さらなる実施形態では、ターゲティング部分は、葉酸受容体アルファ、葉酸受容体ベータ、または葉酸受容体デルタに対して特異的親和性を有する。本明細書に開示されるように、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む葉酸受容体標的化ペグ化リポソームは、正常細胞（すなわち、癌細胞とは異なり、積極的にリポソームを取り込まず、および／または葉酸受容体を発現しない細胞）と比較して、大量のポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を癌細胞、特に葉酸受容体を発現する癌細胞に送達できる。葉酸受容体を発現する任意の癌は、開示方法により治療され得る。一部癌は、初期段階で葉酸受容体を発現し、大部分の癌は、後期段階で葉酸受容体を発現し得ることに留意されたい。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体はリポソームである。さらなる実施形態では、リポソームはペグ化されている。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含むαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。他の実施形態では、投与する送達媒体は、ヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、（ａ）ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｂ）ポリグルタミン酸化１０−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−１０−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｃ）ポリグルタミン酸化５，１０−メテニル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦ）；（ｄ）ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ）；（ｅ）ポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ）；（ｆ）ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦ）；および（ｇ）ポリグルタミン酸化５−ホルムイミノ−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦ）から選択されるαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与する送達媒体は、［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与する送達媒体は、［６Ｒ，Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。
【０３９６】
さらなる実施形態では、本開示は、癌の維持療法のための方法であって、癌治療を受けているか、受けたことのある対象に、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含むリポソームを含む、リポソーム組成物（例えば、本明細書に開示されるαＰＴＨＦ）を有効量投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、投与するリポソーム組成物は、ＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＮＴＬｐ−αＰＴＨＦ、ＮＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＴＬｐ−αＰＴＨＦ、またはＴＰＬｐ−αＰＴＨＦである。いくつかの実施形態では、投与するリポソーム組成物は、ペグ化リポソーム（例えば、ＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＮＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ、またはＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ）を含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソーム組成物は、癌細胞の表面抗原のエピトープに対して特異的親和性を有するターゲティング部分を含む（例えば、ＴＬｐ−αＰＴＨＦまたはＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ）。いくつかの実施形態では、投与するリポソーム組成物は、ペグ化されているリポソームを含み、ターゲティング部分を含む（例えば、ＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ）。いくつかの実施形態では、投与するリポソーム組成物は、ターゲティング部分を含むリポソームを含み、ターゲティング部分を含まないリポソームをさらに含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソーム組成物は、ペグ化されているリポソームと、ペグ化されていないリポソームとを含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含むαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソーム組成物のリポソームは、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソーム組成物のリポソームは、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。他の実施形態では、投与するリポソーム組成物のリポソームは、ヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、（ａ）ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｂ）ポリグルタミン酸化１０−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−１０−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｃ）ポリグルタミン酸化５，１０−メテニル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦ）；（ｄ）ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ）；（ｅ）ポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ）；（ｆ）ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦ）；および（ｇ）ポリグルタミン酸化５−ホルムイミノ−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦ）から選択されるαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。��の実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与する送達媒体は、［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与する送達媒体は、［６Ｒ，Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。
【０３９７】
いくつかの実施形態では、本明細書に開示される１つまたは複数の方法によって治療される癌は、固形腫瘍リンパ腫である。固形腫瘍リンパ腫の例には、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、およびＢ細胞リンパ腫が挙げられる。
【０３９８】
いくつかの実施形態では、本明細書に開示される１つまたは複数の方法によって治療される癌は、骨癌、脳癌、乳癌、結腸直腸癌、結合組織癌、消化器系癌、子宮内膜癌、食道癌、眼癌、頭頸部癌、胃癌、上皮内腫瘍、黒色腫神経芽腫、非ホジキンリンパ腫、非小細胞肺癌、前立腺癌、網膜芽細胞腫、または横紋筋肉腫である。いくつかの実施形態では、本明細書に開示される１つまたは複数の方法によって治療される癌は、肺癌、膵臓癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、頭頸部癌、胃癌、消化管癌、結腸直腸癌、食道癌、子宮頸癌、肝臓癌、腎臓癌、胆管癌、胆嚢癌、膀胱癌、肉腫（例えば、骨肉腫）、脳腫瘍、中枢神経系癌、黒色腫、骨髄腫、白血病、およびリンパ腫からなる群より選択される。いくつかの実施形態では、本明細書に開示される１つまたは複数の方法によって治療される癌は、結腸直腸癌、乳癌、胃癌（例えば、胃癌）、膵臓癌、肝臓癌、肺癌（例えば、非小細胞肺癌および／または腺癌）、頭頸部癌、卵巣癌、胆嚢癌、および基底細胞癌からなる群より選択される。特定の実施形態では、本明細書に開示される１つまたは複数の方法によって治療される癌は、結腸直腸癌である。
【０３９９】
さらなる実施形態では、本開示は、癌を治療する方法であって、癌を有するか、有するリスクのある対象に、送達媒体およびポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む組成物を有効量投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、投与する組成物はペグ化送達媒体を含む。いくつかの実施形態では、投与する組成物は、癌細胞などの目的の標的細胞の表面の抗原のエピトープに対して特異的親和性を有するターゲティング部分を含む。いくつかの実施形態では、送達媒体は、抗体または抗原結合抗体フラグメントを含む。いくつかの実施形態では、組成物を投与して、肺癌、膵臓癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、頭頸部癌、胃癌、胃腸癌、結腸直腸癌、食道癌、子宮頸癌、肝臓癌、腎臓癌、胆管癌、胆嚢癌、膀胱癌、肉腫（例えば、骨肉腫）、脳癌、中枢神経系癌、黒色腫、骨髄腫、白血病およびリンパ腫から選択される癌を治療する。いくつかの実施形態では、組成物を投与して、肺癌、膵臓癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、頭頸部癌、胃癌、消化管癌、結腸直腸癌、食道癌、子宮頸癌、肝臓癌、腎臓癌、胆管癌、胆嚢癌、膀胱癌、肉腫（例えば、骨肉腫）、脳腫瘍、中枢神経系癌、黒色腫、骨髄腫、白血病、およびリンパ腫からなる群より選択される癌を治療する。いくつかの実施形態では、組成物を投与して、結腸直腸癌、乳癌、胃癌（例えば、胃癌）、膵臓癌、肝臓癌、肺癌（例えば、非小細胞肺癌および／または腺癌）、頭頸部癌、卵巣癌、胆嚢癌、および基底細胞癌からなる群より選択される癌を治療する。特定の実施形態では、組成物を投与して、結腸直腸癌を治療する。いくつかの実施形態では、投与する組成物は、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含む。いくつかの実施形態では、投与する組成物は、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、投与する組成物は、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。他の実施形態では、投与する組成物は、ヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、投与する組成物は、（ａ）ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｂ）ポリグルタミン酸化１０−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−１０−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｃ）ポリグルタミン酸化５，１０−メテニル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦ）；（ｄ）ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ）；（ｅ）ポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ）；（ｆ）ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦ）；および（ｇ）ポリグルタミン酸化５−ホルムイミノ−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦ）から選択されるαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与する組成物は、ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与する組���物は、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与する組成物は、ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦをペグ化した。さらなる実施形態では、投与する組成物は、［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与する組成物は、［６Ｒ，Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与する組成物は、ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦをペグ化した。さらなる実施形態では、投与する組成物は、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与する組成物は、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。
【０４００】
さらなる実施形態では、本開示は、癌を治療する方法であって、癌を有するか、有するリスクのある対象に、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含むリポソームを含む、リポソーム組成物（例えば、Ｌｐ−αＰＴＨＦ、ＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＮＴＬｐ−αＰＴＨＦ、ＮＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＴＬｐ−αＰＴＨＦ、またはＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ）を有効量投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、リポソーム組成物を投与して、肺癌、膵臓癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、頭頸部癌、胃癌、消化管癌、結腸直腸癌、食道癌、子宮頸癌、肝臓癌、腎臓癌、胆管癌、胆嚢癌、膀胱癌、肉腫（例えば、骨肉腫）、脳腫瘍、中枢神経系癌、黒色腫、骨髄腫、白血病、およびリンパ腫からなる群より選択される癌を治療する。いくつかの実施形態では、リポソーム組成物を投与して、結腸直腸癌、乳癌、胃癌（例えば、胃癌）、膵臓癌、肝臓癌、肺癌（例えば、非小細胞肺癌および／または腺癌）、頭頸部癌、卵巣癌、胆嚢癌、および基底細胞癌からなる群より選択される癌を治療する。特定の実施形態では、リポソーム組成物を投与して、結腸直腸癌を治療する。いくつかの実施形態では、投与するリポソーム組成物はペグ化リポソームを含む（例えば、ＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＮＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ、またはＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ）。いくつかの実施形態では、投与するリポソーム組成物のリポソームは、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含むαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソーム組成物のリポソームは、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソーム組成物のリポソームは、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。他の実施形態では、投与するリポソーム組成物のリポソームは、ヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、リポソーム組成物のリポソームは、（ａ）ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｂ）ポリグルタミン酸化１０−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−１０−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｃ）ポリグルタミン酸化５，１０−メテニル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦ）；（ｄ）ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ）；（ｅ）ポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ）；（ｆ）ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦ）；および（ｇ）ポリグルタミン酸化５−ホルムイミノ−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦ）から選択されるαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソーム組成物のリポソームは、ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、リポソーム組成物のリポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。他の実施形態では��リポソーム組成物のリポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソーム組成物のリポソームは、ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、リポソーム組成物のリポソームは、［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、リポソーム組成物のリポソームは、［６Ｒ，Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、リポソーム組成物のリポソームは、ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、リポソーム組成物のリポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、リポソーム組成物のリポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。
【０４０１】
さらなる実施形態では、本開示は、癌を治療する方法であって、癌を有するか、有するリスクのある対象に、標的化リポソームを含むリポソーム組成物（例えば、ＴＬｐ−αＰＴＨＦまたはＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ）を有効量投与することを含み、リポソーム組成物が、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸（Ｌｐ−αＰＴＨＦ）を含み、癌上の表面抗原（エピトープ）に対して特異的親和性を有するターゲティング部分をさらに含む、リポソームを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、リポソーム組成物を投与して、肺癌、膵臓癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、頭頸部癌、胃癌、消化管癌、結腸直腸癌、食道癌、子宮頸癌、肝臓癌、腎臓癌、胆管癌、胆嚢癌、膀胱癌、肉腫（例えば、骨肉腫）、脳腫瘍、中枢神経系癌、黒色腫、骨髄腫、白血病、およびリンパ腫からなる群より選択される癌を治療する。いくつかの実施形態では、リポソーム組成物を投与して、結腸直腸癌、乳癌、胃癌（例えば、胃癌）、膵臓癌、肝臓癌、肺癌（例えば、非小細胞肺癌および／または腺癌）、頭頸部癌、卵巣癌、胆嚢癌、および基底細胞癌からなる群より選択される癌を治療する。特定の実施形態では、リポソーム組成物を投与して、結腸直腸癌を治療する。いくつかの実施形態では、投与するリポソーム組成物はペグ化リポソームを含む（例えば、ＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ）。いくつかの実施形態では、リポソーム組成物のリポソームは、Ｌポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソーム組成物のリポソームは、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含むαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソーム組成物のリポソームは、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソーム組成物のリポソームは、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。他の実施形態では、投与するリポソーム組成物のリポソームは、ヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソームは、（ａ）ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｂ）ポリグルタミン酸化１０−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−１０−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｃ）ポリグルタミン酸化５，１０−メテニル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦ）；（ｄ）ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ）；（ｅ）ポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ）；（ｆ）ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦ）；および（ｇ）ポリグルタミン酸化５−ホルムイミノ−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦ）から選択されるαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与するリポソームは、［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与するリポソームは、［６Ｒ，Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。
【０４０２】
さらなる実施形態では、本開示は、癌を治療する方法であって、細胞表面に葉酸受容体を発現する癌を有するか、有するリスクのある対象に、標的化リポソームを含むリポソーム組成物（例えば、ＴＬｐ−αＰＴＨＦまたはＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ）を有効量投与することを含み、リポソーム組成物が、（ａ）ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸（αＰＴＨＦ）と、（ｂ）葉酸受容体に対して特異的結合親和性を有するターゲティング部分とを含む、リポソームを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、投与するリポソーム組成物はペグ化リポソームを含む（例えば、ＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ）。いくつかの実施形態では、ターゲティング部分は、葉酸受容体アルファ（ＦＲ−α）、葉酸受容体ベータ（ＦＲ−β）、および／または葉酸受容体デルタ（ＦＲ−δ）に対して特異的結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、ターゲティング部分は、葉酸受容体アルファ（ＦＲ−α）、葉酸受容体ベータ（ＦＲ−β）、および／または葉酸受容体デルタ（ＦＲ−δ）に対して特異的結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、ターゲティング部分は、葉酸受容体アルファ（ＦＲ後期受容体ベータ（ＦＲ−β）、および／または葉酸受容体デルタ（ＦＲ−δ）に対して特異的結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、ターゲティング部分は、葉酸受容体アルファ（ＦＲ−α）および葉酸受容体ベータ（ＦＲ−β）に対して特異的結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、リポソーム組成物を投与して、肺癌、膵臓、乳癌、卵巣癌、肺癌、前立腺癌、頭頸部癌、胃癌、消化管癌、結腸癌、食道癌、子宮頸癌、腎臓癌、胆管癌、胆嚢癌、および血液悪性腫瘍からなる群より選択される癌を治療する。いくつかの実施形態では、投与するリポソーム組成物のリポソームは、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含むαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソーム組成物のリポソームは、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソーム組成物のリポソームは、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。他の実施形態では、投与するリポソーム組成物のリポソームは、ヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソームは、（ａ）ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｂ）ポリグルタミン酸化１０−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−１０−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｃ）ポリグルタミン酸化５，１０−メテニル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦ）；（ｄ）ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ）；（ｅ）ポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ）；（ｆ）ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦ）；および（ｇ）ポリグルタミン酸化５−ホルムイミノ−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦ）から選択されるαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与するリポソームは、［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与するリポソームは、［６Ｒ，Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与するリポソームは、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。
【０４０３】
いくつかの実施形態では、本開示は、免疫系の障害（例えば、炎症および関節リウマチなどの自己免疫疾患）を治療する方法であって、免疫系の障害を有するか、有するリスクのある対象に、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸（例えば、本明細書に開示されるαＰＴＨＦ）を含む送達媒体（例えば、抗体またはリポソーム）を有効量投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、送達媒体は抗体（例えば、完全長ＩｇＧ抗体、二重特異性抗体、またはｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、送達媒体はリポソームである（例えば、Ｌｐ−αＰＴＨＦ、例えばＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＮＴＬｐ−αＰＴＨＦ、ＮＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＴＬｐ−αＰＴＨＦ、またはＴＰＬｐ−αＰＴＨＦなど）。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体はペグ化されている。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体はペグ化されていない。さらなる実施形態では、投与する送達媒体は、免疫系の障害に関連する免疫細胞表面の抗原のエピトープに対して特異的親和性を有するターゲティング部分を含む。いくつかの実施形態では、ターゲティング部分は抗体または抗原結合抗体フラグメントである。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含むαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。他の実施形態では、投与する送達媒体は、ヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、（ａ）ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｂ）ポリグルタミン酸化１０−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−１０−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｃ）ポリグルタミン酸化５，１０−メテニル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦ）；（ｄ）ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ）；（ｅ）ポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ）；（ｆ）ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦ）；および（ｇ）ポリグルタミン酸化５−ホルムイミノ−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦ）から選択されるαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与する送達媒体は、［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与する送達媒体は、［６Ｒ，Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、自己免疫疾患は炎症および関節リウマチである。
【０４０４】
いくつかの実施形態では、本開示は、感染症（例えば、ＨＩＶ）を治療する方法であって、感染症を有するか、有するリスクのある対象に、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸（例えば、本明細書に開示されるαＰＴＨＦ）を含む送達媒体（例えば、抗体またはリポソーム）を有効量投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、送達媒体は抗体（例えば、完全長ＩｇＧ抗体、二重特異性抗体、またはｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、送達媒体はリポソームである（例えば、Ｌｐ−αＰＴＨＦ、例えばＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＮＴＬｐ−αＰＴＨＦ、ＮＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ、ＴＬｐ−αＰＴＨＦ、またはＴＰＬｐ−αＰＴＨＦ）。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体はペグ化されている。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体はペグ化されていない。さらなる実施形態では、投与する送達媒体は、感染症に関連する病原体表面の抗原のエピトープに対して特異的親和性を有するターゲティング部分を含む。いくつかの実施形態では、ターゲティング部分は抗体または抗原結合抗体フラグメントである。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含むαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、テトラグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、ペンタグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。他の実施形態では、投与する送達媒体は、ヘキサグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、（ａ）ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｂ）ポリグルタミン酸化１０−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−１０−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｃ）ポリグルタミン酸化５，１０−メテニル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦ）；（ｄ）ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ）；（ｅ）ポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ）；（ｆ）ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦ）；および（ｇ）ポリグルタミン酸化５−ホルムイミノ−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦ）から選択されるαＰＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与する送達媒体は、［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与する送達媒体は、［６Ｒ，Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦを含む。さらなる実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。他の実施形態では、投与する送達媒体は、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを含む。
【０４０５】
いくつかの実施形態では、投与する送達媒体はリポソームである。さらなる実施形態では、リポソームはペグ化されている。さらなる実施形態では、送達媒体はその表面に、目的の標的細胞の表面の抗原と特異的に結合するターゲティング部分を含む。さらなる実施形態では、送達媒体は、ＧＯＮＭＢ、ＴＡＣＳＴＤ２（ＴＲＯＰ２）、ＣＥＡＣＡＭ５、ＥＰＣＡＭ、葉酸受容体（例えば、葉酸受容体−α、葉酸受容体−β、または葉酸受容体−δ）、ムチン１（ＭＵＣ−１）、ＭＵＣ−６、ＳＴＥＡＰ１、メソテリン、ネクチン４、ＥＮＰＰ３、グアニリルシクラーゼＣ（ＧＣＣ）、ＳＬＣ４４Ａ４、ＮａＰｉ２ｂ、ＣＤ７０（ＴＮＦＳＦ７）、ＣＡ９（炭酸脱水酵素）、５Ｔ４（ＴＰＢＧ）、ＳＬＴＲＫ６、ＳＣ−１６、組織因子、ＬＩＶ−１（ＺＩＰ６）、ＣＧＥＮ−１５０２７、Ｐカドヘリン、フィブロネクチン外側ドメインＢ（ＥＤ−Ｂ）、ＶＥＧＦＲ２（ＣＤ３０９）、テネイシン、コラーゲンＩＶ、ペリオスチン、エンドセリン受容体、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３、ＥｒｂＢ４、ＥＧＦＲ、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３、ＦＧＦＲ４、ＦＧＦＲ６、ＩＧＦＲ−１、ＦＺＤ１、ＦＺＤ２、ＦＺＤ３、ＦＺＤ４、ＦＺＤ５、ＦＺＤ６、ＦＺＤ７、ＦＺＤ８、ＦＺＤ９、ＦＺＤ１０、ＳＭＯ、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ６、ＣＤ８、ＣＤ１１、ＣＤ１１ａ、ＣＤ１５、ＣＤ１８、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ２６、ＣＤ２７Ｌ、ＣＤ２８、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ３４、ＣＤ３７、ＣＤ３８、ＣＤ４０、ＣＤ４４、ＣＤ５６、ＣＤ７０、ＣＤ７４、ＣＤ７９、ＣＤ７９ｂ、ＣＤ９８、ＣＤ１０５、ＣＤ１３３、ＣＤ１３８、ｃｒｉｐｔｏ、ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＧＦ−２Ｒ、ＥｐｈＡ１  ａｎ  ＥｐｈＡ受容体、ＥｐｈＢ受容体、ＥｐｈＡ１、ＥｐｈＡ２、ＥｐｈＡ３、ＥｐｈＡ４、ＥｐｈＡ５、ＥｐｈＡ６、ＥｐｈＡ７、ＥｐｈＡ８、ＥｐｈＢ１、ＥｐｈＢ２、ＥｐｈＢ３、ＥｐｈＢ４、ＥｐｈＢ６、インテグリン（例えば、インテグリンαｖβ３、αｖβ５、またはαｖβ６）、Ｃ２４２抗原、Ａｐｏ２、ＰＳＧＲ、ＮＧＥＰ、ＰＳＣＡ、ＴＭＥＦＦ２、エンドグリン、ＰＳＭＡ、ＣａｎＡｇ、ＣＡＬＬＡ、ｃ−Ｍｅｔ、ＶＥＧＦＲ−１、ＶＥＧＦＲ−２、ＤＤＲ１、ＰＤＧＦＲアルファ、ＰＤＧＦＲベータ、ＴｒｋＡ、ＴｒｋＢ、ＴｒｋＣ、ＵＦＯ、ＬＴＫ、ＡＬＫ、Ｔｉｅ１、Ｔｉｅ２、ＰＴＫ７、Ｒｙｋ、ＴＣＲ、ＮＭＤＡＲ、ＬＮＧＦＲ、およびＭｕＳＫからなる群より選択される細胞表面抗原のエピトープに対して特異的親和性を有する、ターゲティング部分を含む。いくつかの実施形態では、送達媒体は、特定の対象の癌（腫瘍）に由来する、またはそれに発現していると判断されるネオ抗原などの細胞表面抗原上のエピトープに対して特異的親和性を有する、ターゲティング部分を含む。
【０４０６】
さらなる実施形態では、送達媒体はリポソームであり、リポソームは、ＧＯＮＭＢ、ＴＡＣＳＴＤ２（ＴＲＯＰ２）、ＣＥＡＣＡＭ５、ＥＰＣＡＭ、葉酸受容体（例えば、葉酸受容体−α、葉酸受容体−β、または葉酸受容体−δ）、ムチン１（ＭＵＣ−１）、ＭＵＣ−６、ＳＴＥＡＰ１、メソテリン、ネクチン４、ＥＮＰＰ３、グアニリルシクラーゼＣ（ＧＣＣ）、ＳＬＣ４４Ａ４、ＮａＰｉ２ｂ、ＣＤ７０（ＴＮＦＳＦ７）、ＣＡ９（炭酸脱水酵素）、５Ｔ４（ＴＰＢＧ）、ＳＬＴＲＫ６、ＳＣ−１６、組織因子、ＬＩＶ−１（ＺＩＰ６）、ＣＧＥＮ−１５０２７、Ｐカドヘリン、フィブロネクチン外側ドメインＢ（ＥＤ−Ｂ）、ＶＥＧＦＲ２（ＣＤ３０９）、テネイシン、コラーゲンＩＶ、ペリオスチン、エンドセリン受容体、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３、ＥｒｂＢ４、ＥＧＦＲ、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３、ＦＧＦＲ４、ＦＧＦＲ６、ＩＧＦＲ−１、ＦＺＤ１、ＦＺＤ２、ＦＺＤ３、ＦＺＤ４、ＦＺＤ５、ＦＺＤ６、ＦＺＤ７、ＦＺＤ８、ＦＺＤ９、ＦＺＤ１０、ＳＭＯ、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ６、ＣＤ８、ＣＤ１１、ＣＤ１１ａ、ＣＤ１５、ＣＤ１８、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ２６、ＣＤ２７Ｌ、ＣＤ２８、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ３４、ＣＤ３７、ＣＤ３８、ＣＤ４０、ＣＤ４４、ＣＤ５６、ＣＤ７０、ＣＤ７４、ＣＤ７９、ＣＤ７９ｂ、ＣＤ９８、ＣＤ１０５、ＣＤ１３３、ＣＤ１３８、ｃｒｉｐｔｏ、ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＧＦ−２Ｒ、ＥｐｈＡ１  ａｎ  ＥｐｈＡ受容体、ＥｐｈＢ受容体、ＥｐｈＡ１、ＥｐｈＡ２、ＥｐｈＡ３、ＥｐｈＡ４、ＥｐｈＡ５、ＥｐｈＡ６、ＥｐｈＡ７、ＥｐｈＡ８、ＥｐｈＢ１、ＥｐｈＢ２、ＥｐｈＢ３、ＥｐｈＢ４、ＥｐｈＢ６、インテグリン（例えば、インテグリンαｖβ３、αｖβ５、またはαｖβ６）、Ｃ２４２抗原、Ａｐｏ２、ＰＳＧＲ、ＮＧＥＰ、ＰＳＣＡ、ＴＭＥＦＦ２、エンドグリン、ＰＳＭＡ、ＣａｎＡｇ、ＣＡＬＬＡ、ｃ−Ｍｅｔ、ＶＥＧＦＲ−１、ＶＥＧＦＲ−２、ＤＤＲ１、ＰＤＧＦＲアルファ、ＰＤＧＦＲベータ、ＴｒｋＡ、ＴｒｋＢ、ＴｒｋＣ、ＵＦＯ、ＬＴＫ、ＡＬＫ、Ｔｉｅ１、Ｔｉｅ２、ＰＴＫ７、Ｒｙｋ、ＴＣＲ、ＮＭＤＡＲ、ＬＮＧＦＲ、およびＭｕＳＫからなる群より選択される細胞表面抗原のエピトープに対して特異的親和性を有する、ターゲティング部分を含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、特定の対象の癌（腫瘍）に由来する、またはそれに発現していると判断されるネオ抗原などの細胞表面抗原上のエピトープに対して特異的親和性を有する、ターゲティング部分を含む。
【０４０７】
いくつかの実施形態では、本開示は、過剰増殖疾患の治療のための薬剤の製造への、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を含む組成物の使用を提供する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸は、グルタミル基を５個以上含む。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸は、ペンタグルタミン酸化またはヘキサグルタミン酸化されている。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸は、ポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸（ＴＨＦ）、テトラヒドロ葉酸（ＴＨＦ）である。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸はリポソーム中にある。いくつかの実施形態では、過剰増殖疾患は癌である。いくつかの実施形態では、癌は、肺（例えば、非小肺癌）、膵臓、乳癌、卵巣、肺、前立腺、頭頸部、胃、消化管、結腸、食道、子宮頸部、腎臓、胆管、胆嚢、および血液悪性腫瘍からなる群より選択される。いくつかの実施形態では、癌は膵臓癌である。いくつかの実施形態では、癌は乳癌である。いくつかの実施形態では、癌は膵臓癌である。いくつかの実施形態では、癌はトリプル陰性乳癌である。いくつかの実施形態では、癌は肺癌である。いくつかの実施形態では、癌は非小細胞肺癌である。いくつかの実施形態では、癌は白血病またはリンパ腫である。いくつかの実施形態では、過剰増殖疾患は自己免疫疾患である。いくつかの実施形態では、過剰増殖疾患は炎症および関節リウマチである。
【０４０８】
開示される方法は、本明細書で企図される組成物（例えば、ペンタグルタミン酸化アルファまたはヘキサグルタミン酸化アルファＴＨＦを含むリポソームなどのポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸組成物）の送達から便益を受ける可能性がある任意の対象に実施できる。哺乳動物対象、特にヒト対象が好ましい。いくつかの実施形態では、対象には、家庭用ペット（例えば、イヌ、ネコ、ウサギ、およびケナガイタチ）、家畜または農業動物（例えば、雌ウシ、ブタ、ヒツジ、ニワトリ、およびその他の家禽類）、純血種のウマなどのウマ、実験動物（例えば、マウス、ラット、およびウサギ）、およびその他の哺乳動物などの動物も含まれる。他の実施形態では、対象には、魚類およびその他の水生動物種が含まれる。
【０４０９】
薬剤を送達する対象は、正常な対象であり得る。あるいは、対象は、１つまたは複数の提供される組成物の送達によって診断できる、またはその送達による便益を受け得る病態を有するか、これを発現するリスクのある者であり得る。いくつかの実施形態では、このような病態には、癌（例えば、固形腫瘍癌または白血病などの非固形癌）が含まれる。いくつかの実施形態では、これらの病態（例えば、癌）は、本明細書に開示される標的化ペグ化リポソームポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸が特異的に結合し得る抗原を発現する細胞を含む。さらなる実施形態では、これらの抗原は、標的化ペグ化リポソームポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸と特異的に結合し、それを細胞内に内部移行させる。いくつかの実施形態では、標的化ペグ化リポソームポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸は、癌細胞の表面上に発現した葉酸受容体（例えば、葉酸受容体アルファ（ＦＲ−α）、葉酸受容体ベータ（ＦＲ−β）、および葉酸受容体デルタ（ＦＲ−δ））と特異的に結合する。
【０４１０】
提供される組成物で治療できる病態の診断を診断する試験は、当技術分野で公知であり、開業医によく知られている。特定の細胞型が葉酸受容体を発現するかどうかの判定は、商業的に入手できる抗体を用いて実施できる。これらの臨床検査には、特に限定されないが、顕微鏡による分析、培養依存性検査（培養物など）、および核酸検出試験が挙げられる。これらには、湿式マウント、染色増強顕微鏡法、免疫顕微鏡法（例えば、ＦＩＳＨ）、ハイブリダイゼーション顕微鏡法、粒子凝集試験、酵素結合免疫吸着アッセイ、尿スクリーニング検査、ＤＮＡプローブハイブリダイゼーション、および血清検査が含まれる。開業医は一般に、上記の臨床検査の実施に加えて、全病歴を取得し、精密身体検査を実施することになる。
【０４１１】
癌を有する対象は、例えば、検出可能な癌細胞を有する対象であり得る。癌を発現するリスクのある対象は、例えば、癌を発現する可能性が通常よりも高い対象であり得る。これらの対象には、例えば、癌を発症する可能性が高くなることが示されている遺伝子異常を有する対象、癌の家族性素質を有する対象、タバコ、アスベスト、またはその他の化学的毒素などの癌誘発剤（例えば、発癌性物質）に曝露した対象、および以前に癌の治療を受け、見かけの寛解にある対象が含まれる。
【０４１２】
いくつかの実施形態では、本開示は、表面に葉酸受容体を高い割合（例えば、細胞表面に葉酸受容体を発現していない細胞の少なくとも２倍、少なくとも３倍、少なくとも４倍、または少なくとも５倍の割合）で発現している腫瘍細胞に、葉酸受容体標的化ペグ化リポソームポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を選択的に送達する方法を提供する。いくつかの実施形態では、送達するペグ化リポソームは、ポリグルタミン酸化ＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、送達するペグ化リポソームは、Ｌ−ポリグルタミン酸化アルファＴＨＦを含む。いくつかの実施形態では、送達するペグ化リポソームは、Ｄ−ポリグルタミン酸化アルファＴＨＦを含む。
【０４１３】
i．併用療法
特定の実施形態では、本開示は、本明細書に記載されるポリグルタミン酸化アルファＴＨＦ組成物を少なくとも１つの追加の治療剤と組み合わせて投与することを提供する。追加の治療剤は、ポリグルタミン酸化アルファＴＨＦ組成物の投与の前に、それと同時に、および／またはその後に投与できる。追加の治療剤は、ポリグルタミン酸化アルファＴＨＦ送達媒体を含む溶液中に存在する、またはポリグルタミン酸化アルファＴＨＦ組成物を含む組成物とは別個の製剤中に存在する、ポリグルタミン酸化アルファＴＨＦ送達媒体と結合させる（例えば、ポリグルタミン酸化アルファＴＨＦとリポソーム中に同時被包させる）ことができる。また、ポリペプチドまたは薬剤および追加の治療剤を含む、医薬組成物が提供される。いくつかの実施形態では、少なくとも１つの追加の治療剤には、１つ、２つ、３つ、またはこれを超える追加の治療剤を含む。
【０４１４】
２つ以上の治療剤を含む併用療法では、異なる作用機序で作用する薬剤を使用することが多いが、これが必要とされるわけでない。異なる作用機序を有する薬剤を使用する併用療法では、相加的または相乗的効果が生じ得る。併用療法により、各薬剤の投与量を単剤療法で使用する場合よりも減らし、それにより、毒性副作用を抑え、かつ／またはポリペプチドもしくは薬剤の治療指数を増大させることが可能になる。併用療法により、耐性癌細胞が発生する可能性が低下し得る。いくつかの実施形態では、併用療法は、免疫反応に影響を及ぼす（例えば、反応を高める、または活性化する）治療剤および腫瘍／癌細胞に影響を及ぼす（例えば、抑制する、または死滅させる）治療剤を含む。
【０４１５】
いくつかの実施形態では、本開示は、癌を治療する方法であって、本明細書に開示される生物学的ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸組成物を有効量投与することを含むことを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を治療抗体と組み合わせて投与する。さらなる実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を抗ＣＤ抗体（例えば、リツキシマブ）または免疫チェックポイントタンパク質（例えば、ＣＴＬＡ４、ＰＤ１、ＰＤＬ１、およびＴＩＭ３）と結合する抗体と組み合わせて投与する。さらなる実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸をｆｃ融合タンパク質（例えば、エタネルセプト）と組み合わせて投与する。
【０４１６】
いくつかの実施形態では、本開示は、免疫系の障害を治療する方法であって、本明細書に開示されるポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸組成物と生物学的製剤とを有効量投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を治療抗体と組み合わせて投与する。さらなる実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸を抗ＴＮＦ抗体（例えば、アダリムマブ）と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸をｆｃ融合タンパク質（例えば、エタネルセプト）と組み合わせて投与する。
【０４１７】
本明細書に記載される方法のいくつかの実施形態では、本明細書に記載されるαＰＴＨＦ組成物と少なくとも１つの追加の治療剤の組み合わせは、相加的または相乗的結果をもたらす。いくつかの実施形態では、併用療法は、αＰＴＨＦまたは薬剤の治療指数の増大をもたらす。いくつかの実施形態では、併用療法は、追加の治療剤の治療指数の増大をもたらす。いくつかの実施形態では、併用療法は、αＰＴＨＦまたは薬剤の毒性および／または副作用の低下をもたらす。いくつかの実施形態では、併用療法は、追加の治療剤の毒性および／または副作用の低下をもたらす。
【０４１８】
本明細書に記載されるαＰＴＨＦ組成物と組み合わせて投与し得る治療剤には、化学療法剤が挙げられる。したがって、いくつかの実施形態では、本明細書に記載される方法または治療は、少なくとも１つの本明細書に記載されるαＰＴＨＦ組成物を化学療法剤と組み合わせて、または化学療法剤の混合物と組み合わせて投与することをさらに含む。いくつかの実施形態では、投与するαＰＴＨＦは、（ａ）ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｂ）ポリグルタミン酸化１０−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−１０−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｃ）ポリグルタミン酸化５，１０−メテニル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦ）；（ｄ）ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ）；（ｅ）ポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ）；（ｆ）ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦ）；および（ｇ）ポリグルタミン酸化５−ホルムイミノ−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦ）から選択される。αＰＴＨＦ組成物による治療は、化学療法剤の投与の前に、それと同時に、またはその後に実施することができる。併用投与には、単一の医薬製剤での同時投与、もしくは別個の製剤を用いる同時投与、またはいずれかの順序で実施するが、いずれの活性薬剤もその生物活性を同時に発揮できるよう一定の時間内で実施する逐次投与が含まれる。このような化学療法剤の調製および投与スケジュールは、製造業者の指示に従って、または熟練開業医が経験的に決定して、用いることができる。このような化学療法剤の調製および投与スケジュールは、Ｔｈｅ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ  Ｓｏｕｒｃｅ  Ｂｏｏｋ，sup.４ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，２００８，Ｍ．Ｃ．Ｐｅｒｒｙ，Ｅｄｉｔｏｒ，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，ＰＡにも記載されている。
【０４１９】
本発明に有用な化学療法剤には、特に限定されないが、チオテパおよびシクロホスファミド（シトキサン）などのアルキル化剤；ブスルファン、インプロスルファンおよびピポスルファンなどのスルホン酸アルキル；ベンゾドーパ、カルボコン、メツレドーパ、およびウレドーパなどのアジリジン；アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンフォスフォラミド、トリエチレンチオホスホラミドおよびトリメチロールメラミンを含むエチレンイミンおよびメチラメラミン；クロランブシル、クロルナファジン、クロロホスファミド、エストラムスチン、イホスフアミド、メクロレタミン、メクロレタミンオキシド塩酸塩、メルファラン、ノベンビチン、フェネステリン、プレドニムスチン、トロホスフアミド、ウラシルマスタードなどのナイトロジェンマスタード；カルムスチン、クロロゾトシン、ホテムスチン、ロムスチン、ニムスチン、ラニムスチンなどのニトロソウレア；アクラシノマイシン、アクチノマイシン、オースラマイシン、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カリチアマイシン、カラビシン、カルミノマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン、６−ジアゾ−５−オキソ−Ｌ−ノルロイシン、ドキソルビシン、エピルビシン、エソルビシン、イダルビシン、マルセロマイシン、マイトマイシン、ミコフェノール酸ノガラマイシン、オリボマイシン、ペプロマイシン、ポトフィロマイシン、ピューロマイシン、クエラマイシン、ロドルビシン、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメクス、ジノスタチン、ゾルビシンなどの抗生物質；テトラヒドロ葉酸および５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）などの代謝拮抗薬；デノプテリン、テトラヒドロ葉酸、プテロプテリン、トリメトレキサートなどの葉酸類似体；フルダラビン、６−メルカプトプリン、チアミプリン、チオグアニン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロクスウリジン、５−ＦＵなどのプリン類似体；カルステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトンなどのアンドロゲン；アミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタンなどの抗副腎物質；フォリン酸などの葉酸補充液；アセグラトン；アルドフォスファミドグリコシド；アミノレブリン酸；アムサクリン；ベストラブシル；ビサントレン；エダトラキセート；デフォファミン；デメコルチン；ジアジクオン；エルホルミチン；エリプチニウムアセテート；エトグルシド；ガリウムニトレート；ヒドロキシ尿素；レンティナン；ロニダミン；ミトグアゾン；ミトキサントロン；モピダモール；ニトラクリン；ペントスタチン；フェナメット；ピラルビシン；ポドフィリン酸；２−エチルヒドラジド；プロカルバジン；ＰＳＫ；ラゾキサン；シゾフィラン；スピロゲルマニウム；テヌアゾン酸；トリアジクオン；２，２’，２”−トリクロロトリエチルアミン；ウレタン；ビンデシン；ダカルバジン；マンノムスチン；ミトブロニトール；ミトラクトール；ピポブロマン；ガシトシン；アラビノシッド（Ａｒａ−Ｃ）；パクリタキセル（タキソール（登録商標））およびドセタキセル（タキソテール（登録商標））などのタキソイド；クロラムブシル；ゲムシタビン；６−チオグアニン；メルカプトプリン；シスプラチンおよびカルボプラチンなどの白金類似体；ビンブラスチン；白金；エトポシド（ＶＰ−１６）；イホスファミド；マイトマイシンＣ；ミトキサントロン；ビンクリスチン；ビノレルビン；ナベルビン；ノバントロン；テニポシド；ダウノマイシン；テトラヒドロ葉酸；イバンドロネート；ＣＰＴ１１；トポイソメラーゼ阻害剤ＲＦＳ２０００；ヂルルオロメチルオルニチン（ＤＭＦＯ）；レチノイン酸；エスペラマイシン；カペシタビン（ＸＥＬＯＤＡ（登録商標））；タモキシフェン、ラロキシフェン、アロマターゼ阻害性４（５）−イミダゾール、４−ヒドロキシタモキシフェン、トリオキシフェン、ケオキシフェン、ＬＹ１１７０１８、オナプリストン、およびトレミフェン（フェアストン（登録商標））などの抗ホルモン剤；フルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、ロイプロリド、およびゴセレリンなどの抗アンドロゲン剤；および上記のいずれかのものの薬学的に許容可能な塩、酸または誘導体が挙げられる。特定の実施形態では、追加の治療剤はシスプラチンである。特定の実施形態では、追加の治療剤はカルボプラチンである。他の実施形態では、追加の治療剤はオキサロプラチンである。特定の実施形態では、追加の治療剤はピリミジン類似体（例えば、５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）などのフルオロピリミジン）である。
【０４２０】
いくつかの実施形態では、本開示は、方法または治療であって、本明細書に記載されるαＰＴＨＦと、抗チューブリン剤、オーリスタチン、ＤＮＡマイナーグルーブバインダー、ＤＮＡ複製阻害剤、アルキル化剤（例えば、白金錯体、例えばシスプラチン、モノ（プラチナ）、ビス（プラチナ）、および三核白金錯体、およびカルボプラチンなど）、アントラサイクリン、抗生物質、葉酸代謝拮抗薬（例えば、ポリグルタミン酸化可能な葉酸代謝拮抗薬またはポリグルタミン酸化不可能な葉酸代謝拮抗薬）、抗有糸分裂（例えば、ビンカアルカロイド、例えばビンクリスチン、ビンブラスチン、ビノレルビン、またはビンデシンなど）、放射線増感剤、ステロイド、タキサン、トポイソメラーゼ阻害剤（例えば、ドキソルビシンＨＣｌ、ダウノルビシンシトレート、ミトキサントロンＨＣｌ、アクチノマイシンＤ、エトポシド、トポテカンＨＣｌ、テニポシド（ＶＭ−２６）、およびイリノテカン）、代謝拮抗薬、化学療法増感剤、デュオカルマイシン、エトポシド、フッ化ピリミジン、イオノフォア、レキシトロプシン、ニトロソウレア、プラチノール、プリン代謝拮抗薬、ＰＡＲＰ阻害剤、およびピューロマイシンから選択される少なくとも１つの追加の治療剤とを投与することを含む、方法または治療を提供する。ある特定の実施形態では、第二の治療剤は、アルキル化剤、代謝拮抗薬、抗有糸分裂性薬、トポイソメラーゼ阻害剤、または血管新生阻害剤である。いくつかの実施形態では、投与するαＰＴＨＦは、（ａ）ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｂ）ポリグルタミン酸化１０−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−１０−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｃ）ポリグルタミン酸化５，１０−メテニル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦ）；（ｄ）ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ）；（ｅ）ポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ）；（ｆ）ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦ）；および（ｇ）ポリグルタミン酸化５−ホルムイミノ−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦ）から選択される。
【０４２１】
特定の実施形態では、本明細書に提供される治療方法は、本明細書に記載されるαＰＴＨＦ組成物を葉酸代謝拮抗薬と組み合わせて投与することを含む。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦ組成物は、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含む。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦ組成物は、（ａ）ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｂ）ポリグルタミン酸化１０−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−１０−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｃ）ポリグルタミン酸化５，１０−メテニル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦ）；（ｄ）ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ）；（ｅ）ポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ）；（ｆ）ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦ）；および（ｇ）ポリグルタミン酸化５−ホルムイミノ−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦから選択される。いくつかの実施形態では、投与するαＰＴＨＦ組成物は、リポソーム中に被包されている。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦ組成物を葉酸代謝拮抗薬と別個に投与する。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦ組成物を葉酸代謝拮抗薬と同じ時間に（例えば、同時に、または連続的に）投与する。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦと葉酸代謝拮抗薬が同じリポソーム中に被包されている。
【０４２２】
特定の実施形態では、本明細書に提供される治療方法は、本明細書に記載されるαＰＴＨＦ組成物をメトトレキセート、またはメトトレキセート誘導体もしくは類似体と組み合わせて投与することを含む。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦ組成物は、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含む。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦ組成物は、（ａ）ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｂ）ポリグルタミン酸化１０−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−１０−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｃ）ポリグルタミン酸化５，１０−メテニル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦ）；（ｄ）ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ）；（ｅ）ポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ）；（ｆ）ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦ）；および（ｇ）ポリグルタミン酸化５−ホルムイミノ−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦ）から選択される。いくつかの実施形態では、投与するαＰＴＨＦ組成物はリポソーム中に被包されている。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦ組成物をメトトレキセートと別個に投与する。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦ組成物をメトトレキセートと同じ時間に（例えば、同時に、または連続的に）投与する。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦとメトトレキセートが同じリポソーム中に被包されている。
【０４２３】
特定の実施形態では、本開示は、ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦをメトトレキセートと組み合わせて投与することを含む。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦをメトトレキセート、またはメトトレキセート誘導体もしくは類似体と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、テトラグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦをメトトレキセートと組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、ペンタグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦをメトトレキセートと組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、（例えば、１つまたは複数のメトトレキセート関連毒性を軽減するため）ヘキサグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦをメトトレキセートの投与後に投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦをメトトレキセートと組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦをメトトレキセートと組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、テトラグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦをメトトレキセートと組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、ペンタグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦをメトトレキセートと組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、（例えば、１つまたは複数のメトトレキセート関連毒性を軽減するため）ヘキサグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦをメトトレキセートの投与後に投与する。いくつかの実施形態では、投与するポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦは、リポソーム中に被包されている。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦをメトトレキセートと別個に投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦをメトトレキセートと同じ時間に（例えば、同時に、または連続的に）投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦとメトトレキセートが同じリポソーム中に被包されている。
【０４２４】
特定の実施形態では、本開示は、ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦをメトトレキセート、またはメトトレキセート誘導体もしくは類似体と組み合わせて投与することを提供する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦをメトトレキセートと組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、テトラグルタミン酸化［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦをメトトレキセートと組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、ペンタグルタミン酸化［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦをメトトレキセートと組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、（例えば、１つまたは複数のメトトレキセート関連毒性を軽減するため）ヘキサグルタミン酸化［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦをメトトレキセートの投与後に投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦをメトトレキセートと組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、テトラグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦをメトトレキセートと組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、ペンタグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦをメトトレキセートと組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、（例えば、１つまたは複数のメトトレキセート関連毒性を軽減するため）ヘキサグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦをメトトレキセートの投与後に投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦはリポソーム中に被包されている。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦをメトトレキセートと別個に投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦをメトトレキセートと同じ時間に（例えば、同時に、または連続的に）投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦ組成物とメトトレキセートが同じリポソーム中に被包されている。
【０４２５】
特定の実施形態では、本開示は、ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦをメトトレキセートと組み合わせて投与することを提供する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦをメトトレキセートと組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、テトラグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦをメトトレキセートと組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、ペンタグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦをメトトレキセートと組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、（例えば、１つまたは複数のメトトレキセート関連毒性を軽減するため）ヘキサグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦをメトトレキセートの投与後に投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−ホルミル−ＴＨＦをメトトレキセートと組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、テトラグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦをメトトレキセートと組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、ペンタグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦをメトトレキセートと組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、（例えば、１つまたは複数のメトトレキセート関連毒性を軽減するため）ヘキサグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦをメトトレキセートの投与後に投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦは、リポソーム中に被包されている。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦをメトトレキセートと別個に投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦをメトトレキセートと同じ時間に（例えば、同時に、または連続的に）投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦ組成物とメトトレキセートが同じリポソーム中に被包されている。
【０４２６】
いくつかの実施形態では、本開示は、αＰＴＨＦを代謝拮抗薬と組み合わせて投与することを提供する。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦを代謝拮抗薬と別個に投与する。いくつかの実施形態では、αＰＴＨを代謝拮抗薬と同じ時間に（例えば、同時に、または連続的に）投与する。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦと代謝拮抗薬が同じリポソーム中に被包されている。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦをピリミジン類似体と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、投与するαＰＴＨＦは、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含む。いくつかの実施形態では、投与するαＰＴＨＦ組成物は、（ａ）ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｂ）ポリグルタミン酸化１０−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−１０−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｃ）ポリグルタミン酸化５，１０−メテニル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦ）；（ｄ）ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ）；（ｅ）ポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ）；（ｆ）ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦ）；および（ｇ）ポリグルタミン酸化５−ホルムイミノ−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦ）から選択される。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦをアンシタビン、アザシチジン、６−アザウリジン、カルモフール、シトシンアラビノシド、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロクスウリジン、および５−ＦＵからなる群より選択されるピリミジン類似体と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦをピリミジン類似体と別個に投与する。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦをピリミジン類似体と同じ時間に（例えば、同時に、または連続的に）投与する。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦとピリミジン類似体が同じリポソーム中に被包されている。特定の実施形態では、αＰＴＨＦを５−ＦＵと組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦを５−ＦＵと別個に投与する。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦを５−ＦＵと同じ時間に（例えば、同時に、または連続的に）投与する。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦと５−ＦＵが同じリポソーム中に被包されている。
【０４２７】
いくつかの実施形態では、本開示は、ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦを代謝拮抗薬と組み合わせて投与することを提供する。いくつかの実施形態では、投与するポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦ（例えば、［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦまたは［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦ）は、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含む。いくつかの実施形態では、テトラグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦ（例えば、［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦ）を代謝拮抗薬と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、ペンタグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦ（例えば、［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦ）を代謝拮抗薬と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、ヘキサグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦ（例えば、［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦ）を代謝拮抗薬と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを代謝拮抗薬と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを代謝拮抗薬と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦを代謝拮抗薬と別個に投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦを代謝拮抗薬と同じ時間に（例えば、同時に、または連続的に）投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦと代謝拮抗薬が同じリポソーム中に被包されている。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦをピリミジン類似体と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦをアンシタビン、アザシチジン、６−アザウリジン、カルモフール、シトシンアラビノシド、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロクスウリジン、および５−ＦＵからなる群より選択されるピリミジン類似体と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦをピリミジン類似体と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦをピリミジン類似体と組み合わせて投与する。特定の実施形態では、ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦを５−ＦＵと組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを５−ＦＵと組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを５−ＦＵと組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦをピリミジン類似体（例えば、５−ＦＵ、カペシタビン、またはテガフール）と別個に投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦをピリミジン類似体（例えば、５−ＦＵ、カペシタビン、またはテガフール）と同じ時間に（例えば、同時に、または連続的に）投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦとピリミジン類似体（例えば、５−ＦＵ、カペシタビン、またはテガフール）が同じリポソーム中に被包されている。特定の実施形態では、ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦを５−ＦＵと組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦを５−ＦＵと別個に投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦを５−ＦＵと同じ時間に（例えば、同時に、または連続的に）投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦと５−ＦＵが同じリポソーム中に被包されている。
【０４２８】
いくつかの実施形態では、本開示は、ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦと代謝拮抗薬と組み合わせて投与することを提供する。いくつかの実施形態では、投与するポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦ（例えば、［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦまたは［６Ｒ，Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ）は、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含む。いくつかの実施形態では、テトラグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦ（例えば、［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ）を代謝拮抗薬と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、ペンタグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦ（例えば、［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ）を代謝拮抗薬と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、ヘキサグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦ（例えば、［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ）を代謝拮抗薬と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを代謝拮抗薬と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを代謝拮抗薬と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦを代謝拮抗薬と別個に投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦを代謝拮抗薬と同じ時間に（例えば、同時に、または連続的に）投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦと代謝拮抗薬が同じリポソーム中に被包されている。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦをピリミジン類似体と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦをアンシタビン、アザシチジン、６−アザウリジン、カルモフール、シトシンアラビノシド、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロクスウリジン、および５−ＦＵからなる群より選択されるピリミジン類似体と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦをピリミジン類似体と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦをピリミジン類似体と組み合わせて投与する。特定の実施形態では、ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦを５−ＦＵと組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを５−ＦＵと組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを５−ＦＵと組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦをピリミジン類似体（例えば、５−ＦＵ、カペシタビン、またはテガフール）と別個に投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦをピリミジン類似体（例えば、５−ＦＵ、カペシタビン、またはテガフール）と同じ時間に（例えば、同時に、または連続的に）投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦとピリミジン類似体（例えば、５−ＦＵ、カペシタビン、またはテガフール）が同じリポソーム中に被包されている。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦを５−ＦＵと別個に投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦを５−ＦＵと同じ時間に（例えば、同時に、または連続的に）投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦと５−ＦＵが同じリポソーム中に被包されている。
【０４２９】
いくつかの実施形態では、本開示は、ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦを代謝拮抗薬と組み合わせて投与することを提供する。いくつかの実施形態では、投与するポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦまたは［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）は、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含む。いくつかの実施形態では、テトラグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）を代謝拮抗薬と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、ペンタグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）を代謝拮抗薬と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、ヘキサグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）を代謝拮抗薬と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを代謝拮抗薬と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを代謝拮抗薬と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦを代謝拮抗薬と別個に投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦを代謝拮抗薬と同じ時間に（例えば、同時に、または連続的に）投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦと代謝拮抗薬が同じリポソーム中に被包されている。
【０４３０】
いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦまたは［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）をピリミジン類似体と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、投与するポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦは、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含む。いくつかの実施形態では、テトラグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）をピリミジン類似体と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、ペンタグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）をピリミジン類似体と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、ヘキサグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）をピリミジン類似体と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦをアンシタビン、アザシチジン、６−アザウリジン、カルモフール、シトシンアラビノシド、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロクスウリジン、および５−ＦＵからなる群より選択されるピリミジン類似体と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、投与するピリミジン類似体はフルオロピリミジンである。いくつかの実施形態では、フルオロピリミジンは、カペシタビン、テガフール（例えば、ウラシル、ギメラシル、および／またはオテラシルの有無を問わないテガフール）、および５‐フルオロウラシル（５−ＦＵ）から選択される。いくつかの実施形態では、投与するフルオロピリミジンは５−ＦＵから選択される。いくつかの実施形態では、投与するフルオロピリミジンはカペシタビンである。いくつかの実施形態では、投与するフルオロピリミジンは、ウラシル、ギメラシル、および／またはオテラシルの有無を問わないテガフールである。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦをピリミジン類似体と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦをピリミジン類似体と組み合わせて投与する。特定の実施形態では、ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦを５−ＦＵと組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを５−ＦＵと組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを５−ＦＵと組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦをピリミジン類似体（例えば、５−ＦＵ、カペシタビン、またはテガフール）と別個に投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦをピリミジン類似体（例えば、５−ＦＵ、カペシタビン、またはテガフール）と同じ時間に（例えば、同時に、または連続的に）投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦとピリミジン類似体（例えば、５−ＦＵ、カペシタビン、またはテガフール）が同じリポソーム中に被包されている。特定の実施形態では、ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦを５−ＦＵと組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦを５−ＦＵと別個に投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦを５−ＦＵと同じ時間に（例えば、同時に、または連続的に）投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦと５−ＦＵが同じリポソーム中に被包されている。
【０４３１】
いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦを白金系薬剤（例えば、シスプラチン、カルボプラチン、およびオキサリプラチン）と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、投与するαＰＴＨＦは、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含む。いくつかの実施形態では、テトラグルタミン酸化αＰＴＨＦを白金系薬剤と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦを白金系薬剤と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、ヘキサグルタミン酸化αＰＴＨＦを白金系薬剤と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、投与するαＰＴＨＦは、（ａ）ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｂ）ポリグルタミン酸化１０−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−１０−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｃ）ポリグルタミン酸化５，１０−メテニル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦ）；（ｄ）ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ）；（ｅ）ポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ）；（ｆ）ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦ）；および（ｇ）ポリグルタミン酸化５−ホルムイミノ−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦから選択される。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦを白金系薬剤と別個に投与する。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦを白金系薬剤と同じ時間に（例えば、同時に、または連続的に）投与する。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦと白金系薬剤が同じリポソーム中に被包されている。特定の実施形態では、αＰＴＨＦ組成物をオキサリプラチンと組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦをオキサロプラチンと同じ時間に（例えば、同時に、または連続的に）投与する。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦとオキサロプラチンが同じリポソーム中に被包されている。
【０４３２】
いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦを白金系薬剤（例えば、シスプラチン、カルボプラチン、およびオキサリプラチン）およびピリミジン類似体と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、投与するαＰＴＨＦは、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含む。いくつかの実施形態では、投与するαＰＴＨＦはテトラグルタミン酸化αＰＴＨＦである。いくつかの実施形態では、投与するαＰＴＨＦはペンタグルタミン酸化αＰＴＨＦである。いくつかの実施形態では、投与するαＰＴＨＦはヘキサグルタミン酸化αＰＴＨＦである。いくつかの実施形態では、投与するピリミジン類似体は、アンシタビン、アザシチジン、６−アザウリジン、カルモフール、シトシンアラビノシド、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロクスウリジン、および５−ＦＵから選択される。いくつかの実施形態では、投与するピリミジン類似体はフルオロピリミジンである。いくつかの実施形態では、フルオロピリミジンは、カペシタビン、テガフール（例えば、ウラシル、ギメラシル、および／またはオテラシルの有無を問わないテガフール）、および５‐フルオロウラシル（５−ＦＵ）から選択される。いくつかの実施形態では、投与するフルオロピリミジンは５−ＦＵである。いくつかの実施形態では、投与するフルオロピリミジンはカペシタビンである。いくつかの実施形態では、投与するフルオロピリミジンは、ウラシル、ギメラシル、および／またはオテラシルの有無を問わないテガフールである。いくつかの実施形態では、投与するαＰＴＨＦは、（ａ）ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｂ）ポリグルタミン酸化１０−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−１０−ホルミル−ＴＨＦ）；（ｃ）ポリグルタミン酸化５，１０−メテニル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メテニル−ＴＨＦ）；（ｄ）ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ）；（ｅ）ポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−テトラヒドロ葉酸ＴＨＦ）；（ｆ）ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦ）；および（ｇ）ポリグルタミン酸化５−ホルムイミノ−ＴＨＦ（例えば、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルムイミノ−ＴＨＦから選択される。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦを白金系薬剤および／またはピリミジン類似体と別個に投与する。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦを白金系薬剤および／またはピリミジン類似体と同じ時間に（例えば、同時に、または連続的に）投与する。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦは、リポソーム中に被包されている。いくつかの実施形態では、（ａ）αＰＴＨＦと白金系薬剤が同じリポソーム中に被包されている、（ｂ）αＰＴＨＦとピリミジン類似体が同じリポソーム中に被包されている、（ｃ）白金系薬剤とピリミジン類似体が同じリポソーム中に被包されている、または（ｄ）αＰＴＨＦと白金系薬剤とピリミジン類似体が同じリポソーム中に被包されている。
【０４３３】
特定の実施形態では、αＰＴＨＦをオキサロプラチンおよび５−ＦＵと組み合わせて投与する（例えば、ＦＯＬＦＯＸ療法）。いくつかの実施形態では、投与するαＰＴＨＦは、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含む。いくつかの実施形態では、投与するαＰＴＨＦはテトラグルタミン酸化αＰＴＨＦである。いくつかの実施形態では、投与するαＰＴＨＦはペンタグルタミン酸化αＰＴＨＦである。いくつかの実施形態では、投与するαＰＴＨＦはヘキサグルタミン酸化αＰＴＨＦである。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦは、リポソーム中に被包されている。いくつかの実施形態では、（ａ）αＰＴＨＦとオキサロプラチンが同じリポソーム中に被包されている、（ｂ）αＰＴＨＦと５−ＦＵが同じリポソーム中に被包されている、（ｃ）オキサロプラチンと５−ＦＵが同じリポソーム中に被包されている、または（ｄ）αＰＴＨＦとオキサロプラチンと５−ＦＵが同じリポソーム中に被包されている。さらなる実施形態では、癌を有するか、有するリスクのある対象にαＰＴＨＦ、オキサロプラチンおよび５−ＦＵを投与する。いくつかの実施形態では、癌は、結腸直腸癌、乳癌、胃癌、膵臓癌、肝臓癌、肺癌（例えば、非小細胞肺癌および腺癌）、頭頸部癌、卵巣癌、および基底細胞癌から選択される。特定の実施形態では、癌は結腸直腸癌である。さらなる実施形態では、αＰＴＨＦをオキサロプラチン、５−ＦＵ、およびＶＥＧＦと結合する抗体（例えば、ベバシズマブ）と組み合わせて投与する。
【０４３４】
いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦを白金系薬剤（例えば、シスプラチン、カルボプラチン、およびオキサリプラチン）と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、投与する５，１０−メチレン−ＴＨＦ（例えば、［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦまたは［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦ）は、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含む。いくつかの実施形態では、投与する５，１０−メチレン−ＴＨＦ（例えば、［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦ）はテトラグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦである。いくつかの実施形態では、投与する５，１０−メチレン−ＴＨＦ（例えば、［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦ）はペンタグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦである。いくつかの実施形態では、投与する５，１０−メチレン−ＴＨＦ（例えば、［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦ）はヘキサグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦである。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを白金系薬剤と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを白金系薬剤と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、５，１０−メチレン−ＴＨＦを白金系薬剤と別個に投与する。いくつかの実施形態では、５，１０−メチレン−ＴＨＦを白金系薬剤と同じ時間に（例えば、同時に、または連続的に）投与する。いくつかの実施形態では、５，１０−メチレン−ＴＨＦと白金系薬剤が同じリポソーム中に被包されている。特定の実施形態では、５，１０−メチレン−ＴＨＦ組成物をオキサリプラチンと組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、５，１０−メチレン−ＴＨＦをオキサロプラチンと別個に投与する。いくつかの実施形態では、５，１０−メチレン−ＴＨＦをオキサロプラチンと同じ時間に（例えば、同時に、または連続的に）投与する。いくつかの実施形態では、５，１０−メチレン−ＴＨＦとオキサロプラチンが同じリポソーム中に被包されている。
【０４３５】
いくつかの実施形態では、５，１０−メチレン−ＴＨＦを白金系薬剤（例えば、シスプラチン、カルボプラチン、およびオキサリプラチン）およびピリミジン類似体と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、投与する５，１０−メチレン−ＴＨＦ（例えば、［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦまたは［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦ）は、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含む。いくつかの実施形態では、投与する５，１０−メチレン−ＴＨＦ（例えば、［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦ）はテトラグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦである。いくつかの実施形態では、投与する５，１０−メチレン−ＴＨＦ（例えば、［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦ）はペンタグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦである。いくつかの実施形態では、投与する５，１０−メチレン−ＴＨＦ（例えば、［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦ）はヘキサグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦである。いくつかの実施形態では、投与するピリミジン類似体は、アンシタビン、アザシチジン、６−アザウリジン、カルモフール、シトシンアラビノシド、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロクスウリジン、および５−ＦＵから選択される。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを白金系薬剤（例えば、シスプラチン、カルボプラチン、およびオキサリプラチン）およびピリミジン類似体と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦを白金系薬剤（例えば、シスプラチン、カルボプラチン、およびオキサリプラチン）およびピリミジン類似体と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、５，１０−メチレン−ＴＨＦを白金系薬剤および／またはピリミジン類似体と別個に投与する。いくつかの実施形態では、５，１０−メチレン−ＴＨＦを白金系薬剤および／またはピリミジン類似体と同じ時間に（例えば、同時に、または連続的に）投与する。いくつかの実施形態では、５，１０−メチレン−ＴＨＦは、リポソーム中に被包されている。いくつかの実施形態では、（ａ）５，１０−メチレン−ＴＨＦと白金系薬剤が同じリポソーム中に被包されている、（ｂ）５，１０−メチレン−ＴＨＦとピリミジン類似体が同じリポソーム中に被包されている、（ｃ）白金系薬剤とピリミジン類似体が同じリポソーム中に被包されている、または（ｄ）５，１０−メチレン−ＴＨＦと白金系薬剤とピリミジン類似体が同じリポソーム中に被包されている。
【０４３６】
特定の実施形態では、５，１０−メチレン−ＴＨＦをオキサロプラチンおよび５−ＦＵと組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、投与する５，１０−メチレン−ＴＨＦ（例えば、［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦまたは［６ＲＳ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦ）は、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含む。いくつかの実施形態では、投与する５，１０−メチレン−ＴＨＦ（例えば、［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦ）はテトラグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦである。いくつかの実施形態では、投与する５，１０−メチレン−ＴＨＦ（例えば、［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦ）はペンタグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦである。いくつかの実施形態では、投与する５，１０−メチレン−ＴＨＦ（例えば、［６Ｒ］−５，１０−メチレン−ＴＨＦ）はヘキサグルタミン酸化５，１０−メチレン−ＴＨＦである。いくつかの実施形態では、５，１０−メチレン−ＴＨＦは、リポソーム中に被包されている。いくつかの実施形態では、（ａ）５，１０−メチレン−ＴＨＦとオキサロプラチンが同じリポソーム中に被包されている、（ｂ）５，１０−メチレン−ＴＨＦと５−ＦＵが同じリポソーム中に被包されている、（ｃ）オキサロプラチンと５−ＦＵが同じリポソーム中に被包されている、または（ｄ）５，１０−メチレン−ＴＨＦとオキサロプラチンと５−ＦＵが同じリポソーム中に被包されている。さらなる実施形態では、癌を有するか、有するリスクのある対象に５，１０−メチレン−ＴＨＦ、オキサロプラチン、および５−ＦＵを投与する。さらなる実施形態では、癌を有するか、有するリスクのある対象に５，１０−メチレン−ＴＨＦ、オキサロプラチン、および５−ＦＵを投与する。いくつかの実施形態では、癌は結腸直腸癌、乳癌、胃癌（例えば、胃癌）、膵臓癌、肝臓癌、肺癌（例えば、非小細胞肺癌および／または腺癌）、頭頸部癌、卵巣癌、胆嚢癌、および基底細胞癌から選択される。特定の実施形態では、癌は結腸直腸癌である。さらなる実施形態では、５，１０−メチレン−ＴＨＦをオキサロプラチン、５−ＦＵ、およびＶＥＧＦと結合する抗体ＶＥＧＦ（例えば、ベバシズマブ）と組み合わせて投与する。
【０４３７】
いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦを白金系薬剤（例えば、シスプラチン、カルボプラチン、およびオキサリプラチン）と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、投与する５−メチル−ＴＨＦ（例えば、［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦまたは［６Ｒ，Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ）は、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含む。いくつかの実施形態では、投与する５−メチル−ＴＨＦ（例えば、［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ）はテトラグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦである。いくつかの実施形態では、投与する５−メチル−ＴＨＦ（例えば、［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ）はペンタグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦである。いくつかの実施形態では、投与する５−メチル−ＴＨＦ（例えば、［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ）はヘキサグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦである。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを白金系薬剤と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを白金系薬剤と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、５−メチル−ＴＨＦを白金系薬剤と別個に投与する。いくつかの実施形態では、５−メチル−ＴＨＦを白金系薬剤と同じ時間に投与する。いくつかの実施形態では、５−メチル−ＴＨＦと白金系薬剤が同じリポソーム中に被包されている。特定の実施形態では、５−メチル−ＴＨＦ組成物をオキサリプラチンと組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、５−メチル−ＴＨＦをオキサロプラチンと別個に投与する。いくつかの実施形態では、５−メチル−ＴＨＦをオキサロプラチンと同じ時間に（例えば、同時に、または連続的に）投与する。いくつかの実施形態では、５−メチル−ＴＨＦとオキサロプラチンが同じリポソーム中に被包されている。
【０４３８】
いくつかの実施形態では、５−メチル−ＴＨＦを白金系薬剤（例えば、シスプラチン、カルボプラチン、およびオキサリプラチン）およびピリミジン類似体と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、投与する５−メチル−ＴＨＦ（例えば、［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦまたは［６Ｒ，Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ）は、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含む。いくつかの実施形態では、投与する５−メチル−ＴＨＦ（例えば、［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ）はテトラグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦである。いくつかの実施形態では、投与する５−メチル−ＴＨＦ（例えば、［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ）はペンタグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦである。いくつかの実施形態では、投与する５−メチル−ＴＨＦ（例えば、［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ）はヘキサグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦである。いくつかの実施形態では、投与するピリミジン類似体は、アンシタビン、アザシチジン、６−アザウリジン、カルモフール、シトシンアラビノシド、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロクスウリジン、および５−ＦＵから選択される。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを白金系薬剤（例えば、シスプラチン、カルボプラチン、およびオキサリプラチン）およびピリミジン類似体と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦを白金系薬剤（例えば、シスプラチン、カルボプラチン、およびオキサリプラチン）およびピリミジン類似体と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、５−メチル−ＴＨＦを白金系薬剤および／またはピリミジン類似体と別個に投与する。いくつかの実施形態では、５−メチル−ＴＨＦを白金系薬剤および／またはピリミジン類似体と同じ時間に（例えば、同時に、または連続的に）投与する。いくつかの実施形態では、５−メチル−ＴＨＦは、リポソーム中に被包されている。いくつかの実施形態では、（ａ）５−メチル−ＴＨＦと白金系薬剤が同じリポソーム中に被包されている、（ｂ）５−メチル−ＴＨＦとピリミジン類似体が同じリポソーム中に被包されている、（ｃ）白金系薬剤とピリミジン類似体が同じリポソーム中に被包されている、または（ｄ）５−メチル−ＴＨＦと白金系薬剤とピリミジン類似体が同じリポソーム中に被包されている。
【０４３９】
特定の実施形態では、５−メチル−ＴＨＦをオキサロプラチンおよび５−ＦＵと組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、投与する５−メチル−ＴＨＦ（例えば、［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦまたは［６Ｒ，Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ）は、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含む。いくつかの実施形態では、投与する５−メチル−ＴＨＦ（例えば、［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ）はテトラグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦである。いくつかの実施形態では、投与する５−メチル−ＴＨＦ（例えば、［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ）はペンタグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦである。いくつかの実施形態では、投与する５−メチル−ＴＨＦ（例えば、［６Ｓ］−５−メチル−ＴＨＦ）はヘキサグルタミン酸化５−メチル−ＴＨＦである。いくつかの実施形態では、５−メチル−ＴＨＦは、リポソーム中に被包されている。いくつかの実施形態では、（ａ）５−メチル−ＴＨＦとオキサロプラチンが同じリポソーム中に被包されている、（ｂ）５−メチル−ＴＨＦと５−ＦＵが同じリポソーム中に被包されている、（ｃ）オキサロプラチンと５−ＦＵが同じリポソーム中に被包されている、または（ｄ）５−メチル−ＴＨＦとオキサロプラチンと５−ＦＵが同じリポソーム中に被包されている。さらなる実施形態では、癌を有するか、有するリスクのある対象に５−メチル−ＴＨＦ、オキサロプラチン、および５−ＦＵを投与する。いくつかの実施形態では、癌は、結腸直腸癌、乳癌、胃癌（例えば、胃癌）、膵臓癌、肝臓癌、肺癌（例えば、非小細胞肺癌および／または腺癌）、頭頸部癌、卵巣癌、胆嚢癌、および基底細胞癌から選択される。特定の実施形態では、癌は結腸直腸癌である。さらなる実施形態では、５−メチル−ＴＨＦをオキサロプラチン、５−ＦＵ、およびＶＥＧＦと結合する抗体（例えば、ベバシズマブ）と組み合わせて投与する。
【０４４０】
いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦを白金系薬剤（例えば、シスプラチン、カルボプラチン、およびオキサリプラチン）と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、投与する５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦまたは［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）は、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含む。いくつかの実施形態では、投与する５−ホルミル−ＴＨＦはテトラグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦである。いくつかの実施形態では、投与する５−ホルミル−ＴＨＦはペンタグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦである。いくつかの実施形態では、投与する５−ホルミル−ＴＨＦはヘキサグルタミン酸化５−ホルミル−ＴＨＦである。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを白金系薬剤と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを白金系薬剤と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、５−ホルミル−ＴＨＦを白金系薬剤と別個に投与する。いくつかの実施形態では、５−ホルミル−ＴＨＦを白金系薬剤と同じ時間に（例えば、同時に、または連続的に）投与する。いくつかの実施形態では、５−ホルミル−ＴＨＦと白金系薬剤が同じリポソーム中に被包されている。特定の実施形態では、５−ホルミル−ＴＨＦ組成物をオキサリプラチンと組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、５−ホルミル−ＴＨＦをオキサロプラチンと別個に投与する。いくつかの実施形態では、５−ホルミル−ＴＨＦをオキサロプラチンと同じ時間に（例えば、同時に、または連続的に）投与する。いくつかの実施形態では、５−ホルミル−ＴＨＦとオキサロプラチンが同じリポソーム中に被包されている。
【０４４１】
いくつかの実施形態では、５−ホルミル−ＴＨＦを白金系薬剤（例えば、シスプラチン、カルボプラチン、およびオキサリプラチン）およびピリミジン類似体と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、投与する５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦまたは［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）は、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含む。いくつかの実施形態では、投与する５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）は、グルタミル基を４個含む。いくつかの実施形態では、投与する５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）は、グルタミル基を５個含む。いくつかの実施形態では、投与する５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）は、グルタミル基を６個含む。さらなる実施形態では、投与するピリミジン類似体は、アンシタビン、アザシチジン、６−アザウリジン、カルモフール、シトシンアラビノシド、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロクスウリジン、および５−ＦＵから選択される。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを白金系薬剤（例えば、シスプラチン、カルボプラチン、およびオキサリプラチン）およびピリミジン類似体と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、ポリグルタミン酸化［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦを白金系薬剤（例えば、シスプラチン、カルボプラチン、およびオキサリプラチン）およびピリミジン類似体と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、５−ホルミル−ＴＨＦを白金系薬剤および／またはピリミジン類似体と別個に投与する。いくつかの実施形態では、５−ホルミル−ＴＨＦを白金系薬剤および／またはピリミジン類似体と同じ時間に（例えば、同時に、または連続的に）投与する。いくつかの実施形態では、５−ホルミル−ＴＨＦは、リポソーム中に被包されている。いくつかの実施形態では、（ａ）５−ホルミル−ＴＨＦと白金系薬剤が同じリポソーム中に被包されている、（ｂ）５−ホルミル−ＴＨＦとピリミジン類似体が同じリポソーム中に被包されている、（ｃ）白金系薬剤とピリミジン類似体が同じリポソーム中に被包されている、または（ｄ）５−ホルミル−ＴＨＦと白金系薬剤とピリミジン類似体が同じリポソーム中に被包されている。
【０４４２】
特定の実施形態では、５−ホルミル−ＴＨＦをオキサロプラチンおよび５−ＦＵと組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、投与する５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦまたは［６Ｒ，Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）は、グルタミル基を４個、５個、２〜１０個、４〜６個、または６個以上含む。いくつかの実施形態では、投与する５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）は、グルタミル基を４個含む。いくつかの実施形態では、投与する５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）は、グルタミル基を５個含む。いくつかの実施形態では、投与する５−ホルミル−ＴＨＦ（例えば、［６Ｓ］−５−ホルミル−ＴＨＦ）は、グルタミル基を６個含む。いくつかの実施形態では、５−ホルミル−ＴＨＦは、リポソーム中に被包されている。いくつかの実施形態では、（ａ）５−ホルミル−ＴＨＦとオキサロプラチンが同じリポソーム中に被包されている、（ｂ）５−ホルミル−ＴＨＦと５−ＦＵが同じリポソーム中に被包されている、（ｃ）オキサロプラチンと５−ＦＵが同じリポソーム中に被包されている、または（ｄ）５−ホルミル−ＴＨＦとオキサロプラチンと５−ＦＵが同じリポソーム中に被包されている。さらなる実施形態では、癌を有するか、有するリスクのある対象に５−ホルミル−ＴＨＦ、オキサロプラチンおよび５−ＦＵを投与する。いくつかの実施形態では、癌は、結腸直腸癌、乳癌、胃癌（例えば、胃癌）、膵臓癌、肝臓癌、肺癌（例えば、非小細胞肺癌および／または腺癌）、頭頸部癌、卵巣癌、胆嚢、および基底細胞癌から選択される。特定の実施形態では、癌は結腸直腸癌である。さらなる実施形態では、５−ホルミル−ＴＨＦをオキサロプラチン、５−ＦＵ、およびＶＥＧＦと結合する抗体（例えば、ベバシズマブ）と組み合わせて投与する。
【０４４３】
さらなる実施形態では、本明細書に提供される治療方法は、αＰＴＨＦ組成物をＶＥＧＦと結合する抗体（例えば、ベバシズマブ）と組み合わせて投与することを含む。いくつかの実施形態では、本開示は、αＰＴＨＦ組成物をＶＥＧＦと結合する抗体および５−ＦＵと組み合わせて投与することを提供する。いくつかの実施形態では、本開示は、αＰＴＨＦ組成物をＶＥＧＦと結合する抗体およびオキサロプラチンと組み合わせて投与することを提供する。さらなる実施形態では、本開示は、αＰＴＨＦ組成物をＶＥＧＦと結合する抗体、５−ＦＵ、およびオキサロプラチンと組み合わせて投与することを提供する。
【０４４４】
さらなる実施形態では、本明細書に提供される治療方法は、αＰＴＨＦ組成物をＥＧＦＲと結合する抗体（例えば、パニツムマブまたはセツキシマブ）と組み合わせて投与することを含む。いくつかの実施形態では、本開示は、αＰＴＨＦ組成物をＥＧＦＲと結合する抗体および５−ＦＵと組み合わせて投与することを提供する。いくつかの実施形態では、本開示は、αＰＴＨＦ組成物をＥＧＦＲと結合する抗体およびオキサロプラチンと組み合わせて投与することを提供する。さらなる実施形態では、本開示は、αＰＴＨＦ組成物をＥＧＦＲと結合する抗体、５−ＦＵ、およびオキサロプラチンと組み合わせて投与することを提供する。さらなる実施形態では、結腸直腸癌、乳癌、胃癌（例えば、胃癌）、膵臓癌、肝臓癌、肺癌（例えば、非小細胞肺癌および／または腺癌）、頭頸部癌、卵巣癌、胆嚢、または基底細胞癌を有するか、有するリスクのある対象にリポソーム組成物を投与する。さらなる実施形態では、結腸直腸癌を有するか、有するリスクのある対象にリポソーム組成物を投与する。
【０４４５】
特定の実施形態では、本明細書に提供される治療方法は、本明細書に記載されるαＰＴＨＦ組成物を５‐フルオロウラシル（５−ＦＵ）およびイリノテカン（ＦＯＬＦＩＲＩ．）と組み合わせて投与することを含む。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦ組成物は、リポソーム中に被包されている。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦ組成物と５−ＦＵがリポソーム中に被包されている。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦ組成物とイリノテカンがリポソーム中に被包されている。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦ組成物と５−ＦＵとイリノテカンが同じリポソーム中に被包されている。さらなる実施形態では、結腸直腸癌、乳癌、胃癌（例えば、胃癌）、膵臓癌、肝臓癌、肺癌（例えば、非小細胞肺癌および／または腺癌）、頭頸部癌、卵巣癌、胆嚢、または基底細胞癌から選択される癌を有するか、有するリスクのある対象にリポソーム組成物を投与する。さらなる実施形態では、結腸直腸癌を有するか、有するリスクのある対象にリポソーム組成物を投与する。特定の実施形態では、本開示は、本明細書に記載されるαＰＴＨＦ組成物をカペシタビンと組み合わせて投与することを提供する。いくつかの実施形態では、αＰＴＨＦ組成物は、リポソーム中に被包されている。いくつかの実施形態では、投与するαＰＴＨＦとカペシタビンが同じリポソーム中に被包されている。
【０４４６】
Ｖ．αＰＴＨＦ組成物を含むキット
本開示はまた、本明細書に記載されるαＰＴＨＦ組成物を含み、本明細書記載の方法を実施するために使用できるキットも提供し、特定の実施形態では、キットは、１つまたは複数の容器中に少なくとも１つの精製αＰＴＨＦ組成物を含む。
【０４４７】
いくつかの実施形態では、キットは、少なくとも１つのαＰＴＨＦ組成物（例えば、αＰＴＨＦリポソーム）または本明細書に開示されるその医薬製剤の投与量（例えば、療法または診断薬のために使用される）を含む。キットは、好適な梱包材料および／または組成物を使用するための指示書をさらに含み得る。キットはまた、組成物またはその医薬製剤を送達する手段、例えば注射用のシリンジ、または本明細書に記載される、および当業者に公知のその他の装置などを含む。当業者には、開示されるαＰＴＨＦ組成物を当該技術分野で周知の確立されたキット形式の１つに容易に組み込むことができることが容易に理解されよう。
【０４４８】
さらに、αＰＴＨＦ組成物と少なくとも１つの追加の治療剤とを含むキットが提供される。特定の実施形態では、第二の（またはそれ以上の）治療剤は代謝拮抗薬である。特定の実施形態では、第二の（またはそれ以上の）治療剤は化学療法剤である。
【０４４９】
以下の実施例は、例示することを意図するものであり、本開示を明示的にも暗黙的にも、何らかの方法、形状、または形態に限定することを意図するものではない。これらの実施例は使用し得るものの典型であり、これに代えて、当業者に公知の他の手順、方法、または技術を本開示の範囲から逸脱することなく用い得る。
【０４５０】
図１Ｂ〜１Ｎに、本開示に包含される代表的ポリグルタミン酸化アルファテトラヒドロ葉酸組成物の化学式を示す。
【０４５１】
（実施例）
実施例１：リポソームガンマポリグルタミン酸化ペメトレキセド組成物
方法：
ガンマヘキサグルタミン酸化ペメトレキセド（γＨｇＴＨＦ）リポソームの製造
簡潔に述べれば、以下の方法によってガンマヘキサグルタミン酸化ペメトレキセド（ｇＧＭ６）およびＤアルファヘキサグルタミン酸化ペメトレキセド（ｇＤＧＭ６）をリポソーム中に被包させた。最初に、約６５℃の温度で、リポソーム膜の脂質成分を秤取し、濃縮エタノール溶液として合わせた。この実施例では、使用した脂質は、水素添加大豆ホスファチジルコリン、コレステロール、およびＤＳＰＥ−ＰＥＧ−２０００（１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（ポリ−エチレングリコール）−２０００］）であった。ＨＳＰＣ：コレステロール：ＰＥＧ−ＤＳＰＥのモル比は約３：２：０．１５であった。次に、ｇＧＭ６またはｇＤＧＭ６をｐＨ６．５〜６．９で５％デキストロースに１００〜１５０ｍｇ／ｍｌの濃度で溶かした。薬液を６５℃に加熱した。小口径針を用いてエタノール脂質溶液をｇＧＭ６またはｇＤＧＭ６溶液に注入した。この段階では、磁気撹拌機を用いて薬液を十分に撹拌した。脂質が（脂質転移温度Ｔｍ＝５１℃〜５４℃より低い温度で達成されるゲル状態ではなく）液結晶状態になるよう混合を高温（６３℃から７２℃）で実施した。その結果、脂質が水和され、水性コア中にｇＧＭ６またはｇＤＧＭ６を含む多重二重（多層）小胞（ＭＴＨＦ）が形成された。
【０４５２】
フィルター押し出しを用いたＭＴＨＦの小型化
３回の積層（トラックエッチドポリカーボネート）メンブレン通過を用いて、高圧押し出しによりＭＴＨＦを所望サイズの単層（単一二重膜）小胞に細分化した。最初の通過は、細孔径２００ｎｍの２つの層からなる積層メンブレンで実施した。残りの２回の通過は、細孔径１００ｎｍの３つの層からなる積層メンブレンで実施した。押し出しでは、脂質膜の可塑性を確保するため、温度をＴｍ超に維持した。押し出しの結果、大型でサイズおよびラメラリティーが不均一なＭＴＨＦが、内部に薬物が隔離された小型で均一な（９０〜１２５ｎｍ）単層小胞（ＵＬＶ）に変化した。後方散乱検出器（９０°）を備えたＭａｌｖｅｒｎ  Ｚｅｔａｓｉｚｅｒ  Ｎａｎｏ  ＺＳ機器（Ｓｏｕｔｈｂｏｒｏｕｇｈ，ＭＡ）を用いて、石英マイクロキュベット中、２５℃で流体力学的サイズ（直径）を測定した。分析前、試料を製剤化マトリックスで５０倍に希釈した。
【０４５３】
リポソームの精製
ｇＧＭ６またはｇＤＧＭ６含有ＵＬＶを製造した後、少量のものにはカラムを、また大量のものには適切な緩衝液に対するタンジェンシャルフロー透析ろ過を用いて、余分なリポソーム遊離薬物を除去した。任意の緩衝液を使用できるが、この実施例では、使用した緩衝液は、５ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、１４５ｍＭ塩化ナトリウム、ｐＨ６．７であった。精製完了時、０．２２ミクロンフィルターを用いてろ過滅菌を実施した。
【０４５４】
アルファヘキサグルタミン酸化ペメトレキセド（αＨｇＴＨＦ）リポソームの製造
簡潔に述べれば、Ｌアルファヘキサグルタミン酸化ペメトレキセド（ａＧ６）およびＤアルファヘキサグルタミン酸化ペメトレキセド（ａＤＧ６）を以下の手順によりリポソーム中に被包させた。最初に、約６５℃の温度で、リポソーム膜の脂質成分を秤取し、濃縮エタノール溶液として合わせた。この実施例では、使用した脂質は、水素添加大豆ホスファチジルコリン、コレステロール、およびＤＳＰＥ−ＰＥＧ−２０００（１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（ポリエチレングリコール）−２０００］）であった。ＨＳＰＣ：コレステロール：ＰＥＧ−ＤＳＰＥのモル比は、約３：２：０．１５であった。次に、ａＧ６またはａＤＧ６を１５０ｍｇ／ｍｌの濃度でｐＨ６．５〜６．９の５％デキストロースに溶解した。薬液を６５℃に加熱した。小口径針を用いて、エタノール性脂質溶液をａＧ６またはａＤＧ６溶液に注入した。この段階では、磁気撹拌機を用いて薬液を十分に撹拌した。混合を高温で（６３℃〜７２℃）で実施し、脂質が液晶状態（脂質遷移温度Ｔｍ＝５１℃〜５４℃より低い温度で達成されるゲル状態ではなく）であることを確実にした。その結果、脂質は水和され、水性コア中にａＧ６またはａＤＧ６を含む多重二重層（多層）小胞（ＭＴＨＦ）が形成された。
【０４５５】
フィルター押し出しを用いたＭＴＨＦの小型化
３回の積層（トラックエッチドポリカーボネート）メンブレン通過を用いて、高圧押し出しによりＭＴＨＦを所望サイズの単層（単一二重層）小胞に細分化した。最初の通過は、細孔径２００ｎｍの２つの層からなる積層メンブレンで実施した。残りの２回の通過は、細孔径１００ｎｍの３つの層からなる積層メンブレンを通過させた。押し出しでは、脂質膜の可塑性を確保するため、温度をＴｍ超に維持した。押し出しの結果、大型でサイズおよびラメラリティーが不均一なＭＴＨＦが、内部に薬物が隔離された小型で均一な（９０〜１２５ｎｍ）単層小胞（ＵＬＶ）に変化した。後方散乱検出器（９０°）を備えたＭａｌｖｅｒｎ  Ｚｅｔａｓｉｚｅｒ  Ｎａｎｏ  ＺＳ測定器（Ｓｏｕｔｈｂｏｒｏｕｇｈ，ＭＡ）を用いて、石英マイクロキュベット中、２５℃で流体力学的サイズ（直径）を測定した。分析前、試料を製剤化マトリックス中で５０倍に希釈した。
【０４５６】
リポソームの精製
ａＧ６またはａＤＧ６含有ＵＬＶを製造した後、少量のものにはカラムを、または大量のものには適切な緩衝液に対するタンジェンシャルフロー透析ろ過を用いて、余分なリポソームｇＧ６を除去した。任意の緩衝溶液を使用できるが、この実施例では、使用緩衝液は、５ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、１４５ｍＭ塩化ナトリウム、ｐＨ６．７であった。精製完了時、０．２２ミクロンフィルターを用いてろ過滅菌を実施した。リポソーム誘導体の典型的な特性を下表に示す。
【表１】
2021513525.tif 000008
【０４５７】
アルファＨＧＰ（ヘキサグルタミン酸化ペメトレキセド）およびリポソームの投与量反応試験
基本的に上記の通りに調製したヘキサグルタミン酸化ペメトレキセドを含むリポソームを用いて、投与量反応試験を実施した。
【０４５８】
第３日（４８時間）および第４日（７２時間）、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（登録商標）（ＣＴＧ）発光細胞生存率アッセイにより細胞生存率を求めた。このアッセイは、内部に存在するＡＴＰを定量化することによって培養物中の生存細胞数を求め、次いでそれが、代謝的に活性な細胞の存在を示すものである。ＣＴＧアッセイでは、読み取りにルシフェラーゼを使用する。細胞生存率を評価するため、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（登録商標）発光細胞生存率アッセイを用いてペメトレキセド、ＨＧＰ、およびリポソームの種々の癌細胞増殖に対する投与量反応阻害を検討した。第０日、ヒト癌細胞を採取し、計数し、同じ細胞密度で播種した。第１日、各被験物質の一連の８つの希釈物を細胞に加えた。投与量反応曲線を作成し、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍを用いてフィッティングを実施し、各被験物質のＩＣ５０を算出した。ＩＣ５０が小さいほど細胞増殖阻害からみた被験物質の効力が高い。
【０４５９】
第０日、細胞を９６ウェルプレートの新鮮培地１００μｌに５×１０４細胞／ウェルの細胞密度で播種した。第１日、各被験物質の２倍系列希釈物を培地で８つ作製し、３回反復で細胞に添加した。さらに、対照として、３つのウェルの細胞を媒体（遊離薬物に対するＨＢＳまたはリポソームＨＧＰに対する空のリポソーム）単独で治療した。
【０４６０】
第３日および第４日、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒＧｌｏ（登録商標）試薬１００μｌを各ウェルに加え、室温で１５分間インキュベートした。各ウェルのルシフェラーゼ発光を記録した。さらに、培地を用いた８つの媒体２倍系列希釈物（ＨＢＳまたは空のリポソーム）を空のウェルに加え、バックグラウンド発光シグナルを得るためアッセイに含めた。読み取り値からそれぞれバックグラウンド発光シグナルを減算することによりルシフェラーゼシグナルを正規化した。
【０４６１】
ヒト正常初代骨髄ＣＤ３４＋細胞をＡＴＣＣから入手した（ＡＴＣＣカタログ番号ＰＣＳ−８００−０１２）。細胞を３７℃で１分間解凍し、次いで氷上に置いた。次いで、細胞をＳｔｅｍＳｐａｎ  ＳＦＥＭ（Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌ  Ｔｅｃｈ社カタログ番号９６５０）＋１０％加熱不活化ウシ胎仔血清（Ｃｏｒｎｉｎｇ社３５−０１５−ＣＶ）に再懸濁させた。細胞を９６ウェル培養プレートに２．５×１０４細胞／ウェルの密度で播種した。翌日、遠心分離により生細胞を収集し、好中球増殖培地（ＳｔｅｍＳｐａｎ  ＳＦＥＭ  ＋１０％加熱不活化ウシ胎仔血清＋１００ｎｇ／ｍｌヒト幹細胞因子（Ｓｉｇｍａ社カタログ番号Ｈ８４１６）、２０ｎｇ／ｍｌヒト顆粒球コロニー刺激因子（Ｓｉｇｍａ社カタログ番号Ｈ５５４１）、および１０ｎｇ／ｍｌヒト組換えＩＬ３（Ｓｉｇｍａ社ＳＲＰ３０９０）に２．５×１０４細胞／ウェルの密度で再懸濁させた。細胞を３７℃で１０日間インキュベートした。新鮮培地を２日毎に加えた。次いで、成熟好中球を収集し、９６ウェルプレートに１×１０４細胞／ウェルの密度で播種し、３７℃で一晩インキュベートした。翌日、被験物質または媒体を好中球増殖培地に再懸濁させ、プレートに加えた。次いで、細胞を３７℃で４８時間または７２時間インキュベートし、次いで、各時点でＣｅｌｌ  Ｔｉｔｅｒ  Ｇｌｏ  Ａｓｓａｙ（Ｐｒｏｍｅｇａカタログ番号Ｇ７５７２）を用いてアッセイした。
【０４６２】
細胞株ＡＭＬ１２（非癌性肝細胞）およびＣＣＤ８４１（非癌性結腸上皮細胞）に用いた方法は、癌細胞に用いた方法とほぼ同じである。
【０４６３】
結果
一連の投与量反応実験では、種々のタイプの癌、すなわち、ＨＴ−２９（結腸癌）、Ｈ２３４２（ＮＳＣＬＣ、腺癌サブタイプ）、Ｈ２９２（ＮＳＣＬＣ、腺癌サブタイプ）、ＳＷ６２０（ＣＲＣ）、Ｈ１８０６（トリプルネガティブ乳癌）、およびＯＡＷ２８（卵巣癌）を代表する６種の細胞株を試験した（図２）。治療は、２種の異なる被包されたリポソームアルファペメトレキセドヘキサグルタミン酸誘導体、すなわち、リポソームアルファＬヘキサグルタミン酸（リポソームａＧ６）、およびその鏡像であり、それに対応する鏡像異性体とも称される、リポソームアルファＤヘキサグルタミン酸（リポソームａＤＧ６）（とも呼ばれる）を用いる４８時間の曝露からなるものとした。
【０４６４】
４８時間を超える曝露後の相対効力を上記誘導体とペメトレキセドとで比較したものを図２に示す。この図に示されるように、各細胞株について、ペメトレキセドのＩＣ５０をリポソームアルファペメトレキセドヘキサグルタミン酸のＩＣ５０で除することにより、種々の誘導体を使用した治療の相対効力を計算した。この図に示されるように、いずれの細胞株でも、リポソームアルファペメトレキセドヘキサグルタミン酸の効力がペメトレキセドの効力を十分に上回っていた。一例として、ＮＳＣＬＣ細胞株Ｈ２９２を考察する。図に示されるように、リポソームアルファペメトレキセドヘキサグルタミン酸の効力は、ペメトレキセドの効力の５０倍以上であった。このことは、投与量２％以下のリポソームアルファペメトレキセドヘキサグルタミン酸でも投与量１００％のペメトレキセドと同じ治療効果が得られたことを示唆している。
【０４６５】
いくつかの場合で述べた通り、葉酸受容体アルファなどの抗体を用いてリポソーム送達媒体を標的化することによって、ペイロード取り込みの増大を達成できる。一例として、次の２つの実験では、既に上に記載した方法を用いて、リポソームＬガンマＧ６／Ｌｐｓ  Ｈｅｘａ  ｇＧ６を被包させた。次いで、ペメトレキセド、リポソームガンマペメトレキセドヘキサグルタミン酸誘導体（リポソームＬガンマＧ６／Ｌｐｓ  Ｈｅｘａ  ｇＧ６）、および葉酸受容体アルファ標的化リポソームＬガンマＧ６（リポソームｇＧ６−ＦＲ１Ａｂ）、遊離（非被包化）ＬガンマＧ６の非小細胞肺癌株（ＮＣＩ−Ｈ２３４２）および結腸直腸癌細胞（ＨＴ−２９）の代表的細胞株に対する細胞傷害活性をそれぞれ図３および図４に示すように試験した。これらのデータは、リポソームＬガンマペメトレキセドヘキサグルタミン酸および葉酸受容体アルファ標的化リポソームＬガンマペメトレキセドヘキサグルタミン酸がともに、両方の細胞株に対する効力がペメトレキセドよりも高いことを示す。全般的には、葉酸受容体アルファ抗体標的化リポソームが最も高い効力を示す。これとは対照的に、遊離ＬガンマＧ６は、細胞膜を効果的に通過できないため、最も効力が低い。
【０４６６】
乳癌、肺癌、および卵巣癌の代表的細胞株に対する細胞傷害活性をリポソームアルファペメトレキセドヘキサグルタミン酸誘導体（リポソームＬアルファＧ６／Ｌｐｓ  Ｈｅｘａ  ａＧ６およびリポソームＤアルファＧ６／Ｌｐｓ  Ｈｅｘａ  ａＤＧ６）とペメトレキセドとで比較した癌細胞生存率試験を図５〜７に示す。これらのデータは、リポソームアルファＬペメトレキセドヘキサグルタミン酸およびリポソームＤペメトレキセドヘキサグルタミン酸がともに、ペメトレキセドよりも効力が高いことを示している。さらに、効果の指標として、同じ細胞株で１６〜１２８ｎＭの範囲の種々の投与レベルで実施した実験の結果を図８〜１０に示す。これらの図に示されるように、これらの投与量範囲ではそれぞれ、リポソームアルファＬペメトレキセドヘキサグルタミン酸およびリポソームアルファＤペメトレキセドヘキサグルタミン酸の方が、肺癌および乳癌細胞株に対する癌細胞抑制作用の点でペメトレキセドよりも優れている。卵巣癌細胞株では、投与量１２８ｎＭのペメトレキセドは、リポソームアルファペメトレキセドヘキサグルタミン酸と同程度に効果的であるように思われるが、投与量３２ｎＭおよび６４ｎＭでは、リポソームアルファペメトレキセドヘキサグルタミン酸の方がペメトレキセドよりも優れた治療効果を示し、１６ｎＭでは、リポソームアルファペメトレキセドヘキサグルタミン酸もペメトレキセドも治療効果が低く、その程度はほぼ同じである。
【０４６７】
ペメトレキセドで治療した患者にみられる主な毒性は、好中球数（白血球の種類）を含めた血球数の減少の形で発現する骨髄抑制である。また、下痢および粘膜炎として発現する口腔および消化管の内層に対する何らかの有害作用、ならびにいくつかの例では、肝臓に対する有害作用がある。上記の毒性を評価するため、４８時間後に、リポソームアルファペメトレキセドヘキサグルタミン酸誘導体（ＬおよびＤ）およびペメトレキセドによる治療を、好中球に分化するＣＤ３４＋細胞，ＣＣＤ８４１結腸上皮細胞、およびＡＭＬ１２肝臓細胞で測定した。図１１に示すように、リポソームアルファペメトレキセドヘキサグルタミン酸はペメトレキセドとは対照的に、分化しているヒト好中球に対する毒性が有意に低い。このことは、１６ｎＭ〜１２８ｎＭの範囲の投与量では、リポソームアルファＬペメトレキセドヘキサグルタミン酸またはリポソームアルファＤペメトレキセドヘキサグルタミン酸で治療した後、好中球数がペメトレキセドよりも良好に保存されることによっても裏付けられる。際立っている点は、試験した投与量レベルでは、リポソームＬアルファペメトレキセドヘキサグルタミン酸で治療してもリポソームアルファＤペメトレキセドヘキサグルタミン酸で治療しても、肝臓細胞に何ら毒性がみられないように思われることである（図１３）。これとは対照的に、ペメトレキセドは、試験したいずれの投与量でも、肝臓細胞数の約４０％の減少を引き起こす。最後に、上皮結腸細胞の治療後にも同じ傾向がみられる（図１４）。この図に示されるように、ペメトレキセドは、試験したいずれの濃度でも、リポソームアルファＬペメトレキセドヘキサグルタミン酸およびリポソームアルファＤペメトレキセドヘキサグルタミン酸で治療した後の細胞数の減少が約２０％以下であるのに対して、約５０％以上である。
【０４６８】
実施例２：ポリグルタミン酸化葉酸代謝拮抗薬−シスプラチン複合体（ＰＧＰＤ）
方法：
葉酸代謝拮抗薬としても知られる葉酸類似体は、この７０年間、重要な抗癌治療剤とされてきた。このクラスの抗癌剤をこの状況で使用すると、重要な葉酸代謝経路の種々の酵素に干渉する。これにより、細胞内でピリミジンおよびプリン（ＤＮＡおよびＲＮＡ）合成の欠陥、アミノ酸グリシンおよびセリン代謝の欠陥、レドックス反応の欠陥、ならびにメチル化過程の欠陥が生じ得る。
【０４６９】
臨床診療では、ペメトレキセドおよびテトラヒドロ葉酸などの葉酸代謝拮抗薬をシスプラチンおよびカルボプラチンなどの白金薬剤と組み合わせて使用することが多い。この組み合わせにより効果が増強される。これに関して、本発明者らは、ポリグルタミン酸と白金薬剤とを特定の比で同時被包させ、所定の比の２種の抗癌剤、すなわち、ポリグルタミン酸化葉酸代謝拮抗薬と白金類似体の制御送達を容易にすることを試みた。驚くべきことに、本発明者らは、長い形状のポリグルタミン酸化葉酸代謝拮抗薬（例えば、ペンタグルタミン酸化葉酸代謝拮抗薬）が、高ｐＨで安定なシスプラチンと複合体を形成すること、およびこの複合体が低ｐＨでポリグルタミン酸とシスプラチンに解離することを発見した。多くの腫瘍細胞および腫瘍細胞環境中で、特に低酸素状況下では、低ｐＨになると考えられている。この発見を応用すれば、アルファポリグルタミン酸化ペメトレキセド（αＰＰＭＸ）とシスプラチンなどの治療剤との組み合わせを腫瘍細胞などの標的細胞に送達すること、および生理学的に適切な低ｐＨ条件での複合体からの薬物の放出を容易にすることが可能になる。
【０４７０】
ポリグルタミン酸化葉酸代謝拮抗薬−ＤＤＡＰ（シスプラチン）複合体（ＰＧＰＤ）の製造
ポリグルタミン酸化葉酸代謝拮抗薬−シスプラチンＤＤＡＰ複合体、アルファヘキサグルタミン酸（ａＧ６）、およびジアンミンジカルボン酸白金（ＤＤＡＰ）を使用した。複合体形成の工程は、塩素化白金化合物の存在およびｐＨ条件に左右される。複合体形成は、グルタミン酸の１個または２個のカルボキシル基に対する白金酸誘導体の求核攻撃によって達成した。簡潔に述べれば、複合体を以下の手順で形成した。最初に、活性化合物ＤＤＡＰを秤量し、５％デキストロースに溶かした。ＤＤＡ溶解段階の後、ａＧ６を秤取してＤＤＡＰ−Ｃａｐｓｉｓｏｌ（登録商標）（溶液）に加え、４５〜５５℃で１時間撹拌した。１ＮのＮａＯＨを用いて溶液のｐＨを６．５〜７．０に調節し、溶液を１〜２時間撹拌した。複合体の形成を目視で確認した。一方、ｐＨを３〜５の酸性ｐＨに調節すると、色が最初の色に戻り、ポリグルタミン酸化葉酸代謝拮抗薬とシスプラチンが脱複合体化したことがわかる。図１５に、観察されたポリグルタミン酸化葉酸代謝拮抗薬とシスプラチンとの間のｐＨ依存性複合体形成を説明すると考えられるシナリオを模式的に示す。
【０４７１】
ＨＰＬＣを用いて複合体形成を確認したところ、６．５〜７．５の高ｐＨで１つの大きなピークに一体化し、次いで、３〜５の低ｐＨで再出現する、２つの別個のピークがみられた。Ｃａｐｔｉｓｏｌを使用せずに実験を反復したところ、複合体形成がＣａｐｔｉｓｏｌ（登録商標）に依存しないことがわかった。
【０４７２】
ペンタグルタミン酸化ペメトレキセド−ＤＤＡＰ複合体（ＰＧＰＤ）リポソームの製造
簡潔に述べれば、ＰＧＰＤを以下の手順によりリポソーム中に被包させた。最初に、約６５℃の温度で、リポソーム膜の脂質成分を秤取し、濃縮エタノール溶液として合わせた。この実施例では、使用した脂質は、水素添加大豆ホスファチジルコリン、コレステロール、およびＤＳＰＥ−ＰＥＧ−２０００（１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（ポリエチレングリコール）−２０００］）であった。ＨＳＰＣ：コレステロール：ＰＥＧ−ＤＳＰＥのモル比は、約３：２：０．１５であった。次に、上記の通りにＰＧＰＤを調製した。ＰＧＰＤ薬液を６５℃まで加熱した。小口径針を用いて、エタノール脂質溶液をＰＧＰＤ溶液に注入した。この段階では、磁気撹拌機を用いて薬液を十分に撹拌した。脂質が液晶状態（脂質遷移温度Ｔｍ＝５１℃〜５４℃より低い温度で達成されるゲル状態ではなく）になるよう混合を高温（６３℃〜７２℃）で実施した。その結果、脂質が水和され、水性コア中にＰＧＰＤを含む多重二重層（多層）小胞（ＭＴＨＦ）が形成された。
【０４７３】
フィルター押し出しを用いたＭＴＨＦの小型化：
２回の積層（トラックエッチドポリカーボネート）メンブレン通過を用いて、高圧押し出しによりＭＴＨＦを所望サイズの単層（単一二重層）小胞に細分化した。積層メンブレンは、２００ｎｍの細孔径を有する２つの層および１００ｎｍの細孔径を有する６つの層を有する。押し出しでは、脂質膜の可塑性を確保するため、温度をＴｍ超に維持した。押し出しにより、大型でサイズおよびラメラリティーが不均一なＭＴＨＦが、内部に薬物が隔離された小型で均一な（１００〜１２０ｎｍ）単層小胞（ＵＬＶ）に変化した。後方散乱検出器（９０°）を備えたＭａｌｖｅｒｎ  Ｚｅｔａｓｉｚｅｒ  Ｎａｎｏ  ＺＳ測定器（Ｓｏｕｔｈｂｏｒｏｕｇｈ，ＭＡ）を用いて、石英マイクロキュベット中、２５℃で流体力学的サイズ（直径）を測定した。分析前、試料を製剤化マトリックスで５０倍に希釈した。
【０４７４】
リポソームの精製：
ＰＧＰＤ含有ＵＬＶを製造した後、少量のものにはカラムを、また大量のものには適切な緩衝液に対するタンジェンシャルフロー透析ろ過を用いて、余分なリポソームＰＧＰＤを除去した。当該技術分野で公知の多数の異なる緩衝液が使用することが可能であった、この実施例では、使用した緩衝液は、５ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、１４５ｍＭ塩化ナトリウム、ｐＨ６．７であった。精製完了時、０．２２ミクロンフィルターを用いてろ過滅菌を実施した。上記の手順により調製したリポソームは、直径が１１６．６ｎｍ、ＰＤＩが０．０８３、ゼータ電位が−２．０５ｍＶであることが明らかになった。
【０４７５】
実施例３：標的化リポソームポリグルタミン酸化ペメトレキセドの細胞送達
方法：
標的化ガンマヘキサグルタミン酸化ペメトレキセド（ＨＧＰ）リポソームの製造
基本的には実施例１で上に記載した手順に従って、ガンマＨＧＰ（ｇＧ６）をリポソーム中に被包させ、リポソームを小型化し、精製した。
【０４７６】
抗体コンジュゲーション：
脂質組成物にＤＳＰＥ−ＰＥＧ−マレイミドを添加することにより、活性化リポソームを調製した。
リポソームは、４種の異なる脂質：水素添加大豆ホスファチジルコリン（ＨＳＰＣ）、コレステロール、１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（ポリエチレングリコール）−２０００］（ＤＳＰＥ−ＰＥＧ−２０００）、および１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン−Ｎ−［マレイミド（ポリエチレングリコール）−２０００］（ＤＳＰＥ−ＰＥＧ−マレイミド）を３：２：０．１１２５：０．０３７５の比で含む。
【０４７７】
トラウト試薬（２−イミノチオラン）を用いてスルフヒドリル基を一級アミンと結合させることにより、抗体チオール化を実施した。抗体を０．９〜１．６ｍｇ／ｍｌの濃度でＰＢＳに懸濁させた。トラウト試薬（１４ｍＭ）を抗体溶液に１〜５ｍＭの最終濃度で加え、次いで、室温で１時間インキュベートした後、透析により除去した。チオール化抗体をリン酸脂質の割合６０ｇ／ｍｏｌで加えてリポソームを活性化し、反応混合物を室温で１時間および一晩インキュベートし、４ｕＬのシステインを用いて反応を終了させ、未紺綬ゲート抗体を透析により除去した。
【０４７８】
代表的な直接抗体−リポソームコンジュゲーション法およびポスト挿入抗体−リポソームコンジュゲーション法を以下に提供する。
【０４７９】
代表的抗体コンジュゲーション法１：直接コンジュゲーション
抗体、またはそのＦａｂもしくはｓｃＦｖなどのフラグメントをチオール反応性リポソーム上に直接コンジュゲーションできる。チオール反応性リポソームは、ＤＳＰＥ−ＰＥＧ−マレイミドを脂質組成物に添加することによって調製する。リポソームは、４種の異なる脂質：水素添加大豆ホスファチジルコリン（ＨＳＰＣ）、コレステロール、１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（ポリエチレングリコール）−２０００］（ＤＳＰＥ−ＰＥＧ−２０００）、および１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン−Ｎ−［マレイミド（ポリエチレングリコール）−２０００］（ＤＳＰＥ−ＰＥＧ−マレイミド）を３：２：０．１１２５：０．０３７５の比で含む。
【０４８０】
トラウト試薬（２−イミノチオラン）を用いてスルフヒドリル基を一級アミンと結合させることにより、抗体（またはそのＦａｂもしくはｓｃＦｖなどのフラグメント）のチオール化を実施する。抗体（またはそのフラグメント）を０．９〜１．６ｍｇ／ｍｌの濃度でＰＢＳに懸濁させる。トラウト試薬（１４ｍＭ）を抗体（またはそのフラグメント）溶液に１〜５ｍＭの最終濃度で加え、次いで、室温で１時間インキュベートした後、透析により除去した。チオール化抗体（またはそのフラグメント）をリン酸脂質の割合６０ｇ／ｍｏｌでチオール反応性リポソームに加え、反応混合物を室温で１時間、および４℃で一晩インキュベートした。Ｌ−システインを用いて反応を終了させ、未コンジュゲート抗体（またはそのフラグメント）を透析により除去した。
【０４８１】
抗体、またはそのＦａｂもしくはｓｃＦｖなどのフラグメントは、Ｃ末端にシステイン残基を含み、還元抗体（またはそのフラグメント）をチオール反応性リポソームとインキュベートすることにより、リポソーム上に直接コンジュゲートできる。システイン尾部を有する抗体（またはそのフラグメント）を１０〜２０ｍＭの還元剤（２−メルカプトエチルアミン、システイン、またはジチオエリスリトール）にｐＨ７未満で溶かし、還元する。サイズ排除クロマトグラフィーまたは透析により過剰の還元試薬を完全に除去する。精製し還元した抗体（またはそのフラグメント）をチオール反応性リポソームに直接コンジュゲートできる。
【０４８２】
代表的抗体複合化法２：ポスト挿入：
抗体、またはそのＦａｂもしくはｓｃＦｖなどのフラグメントは、Ｃ末端にシステイン残基を含み、「ポスト挿入」法によりリポソームにコンジュゲートし、その中に組み込むことができる。水溶液中に１０ｍｇ／ｍｌで溶かすことによってチオール反応性リポポリマー（ＤＳＰＥ−ＰＥＧ−マレイミドなど）のミセルを調製する。システイン尾部を有する抗体（またはそのフラグメント）を１０〜２０ｍＭの還元剤（２−メルカプトエチルアミン、システイン、またはジチオエリスリトール）にｐＨ７未満で溶かし、還元する。サイズ排除クロマトグラフィーまたは透析により過剰の還元試薬を完全に除去する。次いで、精製し還元した抗体（またはそのフラグメント）をチオール反応性リポポリマーのミセルとモル比１：４でインキュベートする。反応終了時、少量のシステイン（１ｍＭ）またはメルカプトエタノールによって過剰のマレイミド基をクエンチする。未コンジュゲート抗体（またはそのフラグメント）をサイズ排除クロマトグラフィーにより除去する。次いで、精製したコンジュゲートミセルをリポソームと３７℃または高温でインキュベートする。
【表２】
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【０４８３】
ＨＧＰ（ペンタグルタミン酸化ペメトレキセド）およびリポソームの投与量反応試験
第３日（４８時間）および第４日（７２時間）、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（登録商標）（ＣＴＧ）発光細胞生存率アッセイにより細胞生存率を求めた。このアッセイは、内部に存在するＡＴＰを定量化することによって培養物中の生存細胞数を求め、次いでそれが、代謝的に活性な細胞の存在を示すものである。ＣＴＧアッセイは、読み取りにルシフェラーゼを使用する。細胞生存率を評価するため、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（登録商標）発光細胞生存率アッセイを用いてペメトレキセド、ＨＧＰおよびリポソームの種々の癌細胞増殖に対する投与量反応阻害を検討した。第０日、ヒト癌細胞を採取、計数し、同じ細胞密度で播種した。第１日、各被験物質の一連の８つの希釈物を細胞に加えた。投与量反応曲線を作成し、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍを用いてフィッティングを実施し、各被験物質のＩＣ５０を算出した。ＩＣ５０が小さいほど、細胞増殖阻害からみた被験物質の効力が高いものとした。
【０４８４】
第０日、細胞を９６ウェルプレートの新鮮培地１００μｌに５×１０４細胞／ウェルの細胞密度で中に播種した。第１日、各被験物質の８つの２倍系列希釈物を培地で８つ作製し、３回反復で細胞に添加した。さらに、対照として、３つのウェルの細胞を媒体（遊離薬物に対するＨＢＳまたはリポソームＨＧＰに対する空のリポソーム）単独で治療した。
【０４８５】
第３日および第４日、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒＧｌｏ（登録商標）試薬１００μｌを各ウェルに加え、室温で１５分間インキュベートした。各ウェルのルシフェラーゼ発光を記録した。さらに、培地を用いた８つの媒体２倍系列希釈物（ＨＢＳまたは空のリポソーム）を空のウェルに加え、バックグラウンド発光シグナルを得るためアッセイに含めた。読み取り値からそれぞれバックグラウンド発光シグナルを減算することによりシフェラーゼシグナルを正規化した。
【０４８６】
ヒト正常初代骨髄ＣＤ３４＋細胞をＡＴＣＣから入手した（ＡＴＣＣカタログ番号ＰＣＳ−８００−０１２）。細胞を３７℃で１分間解凍し、次いで氷上に置いた。次いで、細胞をＳｔｅｍＳｐａｎ  ＳＦＥＭ（Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌ  Ｔｅｃｈ社カタログ番号９６５０）＋１０％加熱不活化ウシ胎仔血清（Ｃｏｒｎｉｎｇ社３５−０１５−ＣＶ）に再懸濁させた。細胞を９６ウェル培養プレートに２．５×１０４細胞／ウェルの密度で播種した。翌日、遠心分離により生細胞を収集し、好中球増殖培地（ＳｔｅｍＳｐａｎ  ＳＦＥＭ＋１０％加熱不活化ウシ胎仔血清＋１００ｎｇ／ｍｌヒト幹細胞因子（Ｓｉｇｍａ社カタログ番号Ｈ８４１６）、２０ｎｇ／ｍｌヒト顆粒球コロニー刺激因子（Ｓｉｇｍａカタログ番号Ｈ５５４１）、および１０ｎｇ／ｍｌヒト組換えＩＬ３（Ｓｉｇｍａ社ＳＲＰ３０９０）に２．５×１０４細胞／ウェルの密度で再懸濁させた。細胞を３７℃で１０日間インキュベートした。新鮮培地を２日毎に加えた。次いで、成熟好中球を収集し、９６ウェルプレートに１×１０４細胞／ウェルの密度で播種し、３７℃で一晩インキュベートした。翌日、被験物質または媒体を好中球増殖培地に再懸濁させ、プレートに加えた。次いで、細胞を３７℃で４８時間または７２時間インキュベートし、次いで、各時点でＣｅｌｌ  Ｔｉｔｅｒ  Ｇｌｏ  Ａｓｓａｙ（Ｐｒｏｍｅｇａカタログ＃Ｇ７５７２）を用いてアッセイした。
【０４８７】
細胞株ＡＭＬ１２（非癌性の肝臓細胞）およびＣＣＤ８４１（非癌性の結腸上皮細胞）に用いた方法は、癌細胞に用いた方法とほぼ同じである。
【０４８８】
結果：
腺癌サブタイプのＮＣＩ  Ｈ２３４２非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）に対する遊離ペメトレキセドガンマヘキサグルタミン酸（ｇＧ６）、（非標的化）リポソームガンマヘキサグルタミン酸（リポソームｇＧ６）、ペメトレキセド、および葉酸受容体アルファ標的化抗体（ＦＲ１Ａｂ）リポソームペメトレキセドガンマヘキサグルタミン酸（リポソームｇＧ６−ＦＲ１Ａｂ）の投与量反応関係を図３に示す。出力は、ルシフェラーゼ発光により測定した治療後４８時間の生存細胞のパーセンテージである。図３に示すように、遊離ペメトレキセドｇＧ６は、ＩＣ５０による測定では効力が最も低いように思われる。リポソームペメトレキセドｇＧ６およびリポソームペメトレキセドｇＧ６−ＦＲ１Ａｂはともに、効力がそれぞれ遊離ペメトレキセドの７倍および４０倍である。
【０４８９】
ＨＴ−２９結腸癌結腸癌細胞株の同様のデータを、細胞生存率をパーセンテージで表した図４に示す。この図に示されるように、遊離ペメトレキセドｇＧ６が最も効力が低いように思われる。この例では、リポソームペメトレキセドｇＧ６は、効力がペメトレキセドの２倍であり、リポソームペメトレキセドｇＧ６−ＦＲ１Ａｂは、効力が遊離ペメトレキセドの５倍である。
【０４９０】
実施例４：ｉｎ  ｖｉｖｏ試験
方法
マウスと用いた安全性試験
ペメトレキセドベースの治療に関連する主な毒性の一部は血液学的および肝臓毒性であるため、リポソームアルファＧ６（Ｌｐ−ａＧ６）の効果をｉｎ  ｖｉｖｏ（マウス）モデルで評価し、治療後の血液および肝臓の血液生化学検査パネルの変化を比較することが重要である。このデータを得るため、Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ（Ｂａｒ  Ｈａｒｂｏｒ，ＭＥ）から購入した健常雌Ｂａｌｂ／ｃマウス（６〜８週齢）を用いて初回投与量範囲試験を実施した。試験前、マウスの体重を測定し、体重により無作為化し、臨床的異常を観察し、グループに分けた（５匹／群）。１０ｍｇ／ｋｇから最大２００ｍｇ／ｋｇの投与量を検討してマウスの耐容量を特定した。治療剤を静脈内に週１回、４週間にわたって投与した。体重および詳細な臨床観察結果を毎日記録した。第２８日の試験終了時、マウスを安楽死させ、未治療対照マウス、ならびに４０ｍｇ／ｋｇリポソームａＧ６で治療したマウスおよび８０ｍｇ／ｋｇリポソームａＧ６で治療したマウスから血液および組織を採取した。包括的全血球算定（ＣＢＣ）には全血をＫ２−ＥＤＴＡ抗凝固剤チューブに収集し、包括的化学検査には血清を単離し、収集した日にＩＤＥＸＸ社（Ｗｅｓｔｂｒｏｏｋ，ＭＥ）に送った。
【０４９１】
結果
リポソームａＧ６を４０ｍｇ／ｋｇおよび８０ｍｇ／ｋｇの２種類の投与レベルで用いて週１回、４週間にわたって実施した治療では全般的に、優れた耐容性がみられ、未治療対照と比較して大きな体重差は認められなかった。血液学的パラメーターに対する効果をいくつか評価するため、４０ｍｇ／ｋｇおよび８０ｍｇ／ｋｇの２種類の投与レベルのリポソームａＧ６をともに週１回、４週間投与する治療を実施した後、白血球（ＷＢＣ）数、好中球数、および血小板数を測定した。図１６からわかるように、４週間にわたるリポソームａＧ６での治療後、治療個体に未治療対照個体と比較して平均好中球数、平均白血球数、および平均血小板数の明らかな減少はみられなかった。ヘモグロビンおよび網赤血球数指数を測定して、赤血球に対する影響を評価した。図１７に示すように、高い方の投与レベルで平均ヘモグロビン濃度の減少が最小であった。同時に、平均網赤血球数指数のわずかな増加がみられ、このことは、骨髄が赤血球産生の増大によって治療に反応したことを示唆している。全体として、４週間の治療後もマウスのヘモグロビンレベルが維持されることから、この効果は小さいとように思われる。以上のデータをまとめると、４０ｍｇ／ｋｇおよび８０ｍｇ／ｋｇで週１回の投与レベルでは、骨髄および関連する血液学的指数に対する影響がほとんどみられないことが示唆される。
【０４９２】
ペメトレキセドに関する別の懸念事項として、ペメトレキセドベースの治療法で治療した患者の一部に観察されている肝臓毒性がある。マウスの肝臓の健全な状態を評価するため、血清アルブミンに加えて、血清アスパラギン酸アミノ基転移酵素（ＡＳＴ）およびアラニンアミノ基転移酵素（ＡＬＴ）を含めた血液生化学検査値を測定した。図１８に示すように、リポソームａＧ６を用いて４０ｍｇ／ｋｇおよび８０ｍｇ／ｋｇの２種類の投与レベルでともに週１回、４週間にわたって治療してから４週間後、未治療対照と比較して肝臓アミノ基転移酵素の平均ＡＳＴおよび平均ＡＬＴレベルの明らかな昇はみられなかった。いずれの平均アルブミンレベルにも変化はみられなかった。以上のデータをまとめると、リポソームａＧ６の好ましい安全性プロファイルが示唆される。
【０４９３】
マウス異種移植片を用いた予備的パイロット有効性研究
リポソームアルファペメトレキセドＧ６（Ｌｐ−ａＧ６）による治療後に何らかの腫瘍制御があったかどうかを評価するため、パイロット研究を実施した。この試験では、免疫不全の雌ヌードマウス（Ｎｕ／Ｊ；６〜８週齢）をＪａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ（Ｂａｒ  Ｈａｒｂｏｒ，ＭＥ）から購入した。ＮＣＩ−Ｈ２９２（非小細胞肺癌）細胞を、１０％ウシ胎仔血清を補充したＲＰＭＩ培地中、３７℃、５％ＣＯ２のインキュベーター内で培養した。１×１０６細胞を各マウスの背側後部側腹皮下に接種した。腫瘍体積および体重を週２回モニターした。第０日、担腫瘍マウスを腫瘍体積で無作為化し、以下のグループ（１グループ当たり５匹）：対照、ペメトレキセド、およびリポソームａＧ６に分けた。ペメトレキセドを３週間に１回、１６７ｍｇ／ｋｇで静脈内に投与した。この３週間に１回、１６７ｍｇ／ｋｇというマウス投与量は、ＦＤＡ／ＥＭＡに承認されている３週間に１回、５００ｍｇ／ｍ２というヒトへの投与量および計画と同等のものである。リポソームａＧ６を週１回、４週間にわたって８０ｍｇ／ｋｇで静脈内に投与した。ノギスで腫瘍サイズを測定し、腫瘍量を以下の式：腫瘍体積＝０．５×（腫瘍の長さ）×（腫瘍の幅）２；相対的腫瘍体積＝（腫瘍堆積／第０日の腫瘍体積）×１００％を用いて算出した。この試験は未だ進行中であるが、予備的データを図１９に示す。この図には、リポソームａＧ６およびペメトレキセドによる治療後の相対腫瘍体積が示されている。これらの予備的データからわかるように、リポソームａＧ６はペメトレキセドよりも優れた腫瘍制御をもたらす。
【０４９４】
さらなる実施形態
本開示の非限定的実施形態では、アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸を含む組成物が提供される。
【０４９５】
直前の段落の組成物では、組成物は、ペンタグルタミン酸化またはヘキサグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸を含み得る。
【０４９６】
前の２つの段落のいずれかの組成物では、組成物は、ペンタグルタミン酸化またはヘキサグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸を含み得る、アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸を含み得る。
【０４９７】
非限定的な例のリポソームアルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸（Ｌ−αＰＴＨＦ）組成物は、前の３つの段落のいずれかの組成物を含んでよく、リポソームが任意選択でペグ化されていてよい（ＰＬ−αＰＴＨＦ）。
【０４９８】
直前の段落のＬ−αＰＴＨＦまたはＰＬ−αＰＴＨＦ組成物では、アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸は、ペンタグルタミン酸化またはヘキサグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸を含み得る。
【０４９９】
前の２つの段落のいずれかのＬ−αＰＴＨＦまたはＰＬ−αＰＴＨＦ組成物では、リポソームは、アニオン性または中性であり得る。
【０５００】
前の３つの段落のいずれかのＬ−αＰＴＨＦまたはＰＬ−αＰＴＨＦ組成物では、ターゲティング部分は、リポソームのＰＥＧおよび外側のうちの一方または両方と結合していてよく、ターゲティング部分は、目的の標的細胞上の表面抗原に対して特異的親和性を有し得る（ＴＬ−αＰＴＨＦまたはＴＰＬ−αＰＴＨＦ）。
【０５０１】
前の４つの段落のいずれかのＬ−αＰＴＨＦまたはＰＬ−αＰＴＨＦ組成物では、ターゲティング部分は、リポソームのＰＥＧおよび外側のうちの一方または両方と結合していてよく、ポリペプチドであり得る。
【０５０２】
前の５つの段落のいずれかのＬ−αＰＴＨＦまたはＰＬ−αＰＴＨＦ組成物では、ターゲティング部分は、リポソームのＰＥＧおよび外側のうちの一方または両方と結合していてよく、抗体または抗体のフラグメントであり得る。
【０５０３】
前の６つの段落のＬ−αＰＴＨＦまたはＰＬ−αＰＴＨＦ組成物は、免疫刺激剤、検出可能マーカー、およびマレイミドのうちの１つまたは複数のものが、リポソームのＰＥＧおよび外側のうちの少なくとも一方に配置され得る。
【０５０４】
前の７つの段落のいずれかのＬ−αＰＴＨＦまたはＰＬ−αＰＴＨＦ組成物では、ポリペプチドは、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析を用いる測定で、０．５×１０−１０〜１０×１０−６の範囲の平衡解離定数（Ｋｄ）で抗原と結合し得る。
【０５０５】
前の８つの段落のいずれかのＬ−αＰＴＨＦまたはＰＬ−αＰＴＨＦ組成物では、ポリペプチドは、葉酸受容体アルファ（ＦＲ−α）、葉酸受容体ベータ（ＦＲ−β）、および葉酸受容体デルタ（ＦＲ−δ）からなる群より選択される１つまたは複数の葉酸受容体と特異的に結合し得る。
【０５０６】
過剰増殖細胞を、前の９つの段落のいずれかのリポソームアルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸組成物と接触させることを含む、過剰増殖細胞を死滅させる代表的な非限定的方法。
【０５０７】
直前の段落の方法では、過剰増殖細胞は癌細胞である。
【０５０８】
癌を有するか、有するリスクのある対象に、前の段落１１から前の段落３までのいずれかの前の段落のアルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸組成物を有効量投与することを含む、癌を治療する方法の非限定的な例。
【０５０９】
直前の段落の方法では、癌は、肺癌、膵臓癌、乳癌、卵巣癌、肺癌、前立腺癌、頭頸部癌、胃癌、胃腸癌、結腸癌、食道癌、子宮頸癌、腎臓癌、胆管癌、胆嚢癌、および血液系腫瘍からなる群より選択される１つまたは複数のものであり得る。
【０５１０】
癌療法を受けているまたは受けたことがある対象に、前の段落１３〜前の段落５までのいずれかの前の段落のアルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸組成物を有効量投与することを含む、癌療法を受けているまたは受けたことがある対象の維持療法の非限定的な例。
【０５１１】
医薬組成物の非限定的な例は、セクションＩＶのいずれかのアルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸組成物を含み得る。
【０５１２】
免疫系の障害を治療する方法の非限定的な例は、免疫系の障害を有するか、有するリスクのある対象に、前の段落１４から前の段落６までのいずれかの前の段落のアルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸組成物を有効量投与することを含み得る。
【０５１３】
感染症を治療する方法の非限定的な例は、感染症を有するか、有するリスクのある対象に、前の段落１５から前の段落７までのいずれかの前の段落のアルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸組成物を有効量投与することを含み得る。
【０５１４】
表面に葉酸受容体を発現している腫瘍にアルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸を送達する方法の非限定的な例は、腫瘍を有する対象に、前の段落１６から前の段落前の段落８までのいずれかの前の段落のポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸を、アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸の治療有効量が腫瘍に送達される量で投与することを含み得る。
【０５１５】
前の段落１７から前の段落９までのいずれかの前の段落のアルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸組成物を含むリポソームアルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸組成物を調製する方法の非限定的な例は、溶液中でリポソーム成分、アルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸を含む混合物を形成することと；溶液中で混合物をホモジナイズしてリポソームを形成することと；混合物を処理して、ポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸を含むリポソームを形成することとを含む。
【０５１６】
医薬組成物の非限定的な例は、前の段落１８から前の段落１０までのいずれかのアルファポリグルタミン酸化テトラヒドロ葉酸組成物を含む。
【０５１７】
ここまで、本開示について様々ないくつかの実施形態を参照しながら記載してきたが、本開示の趣旨から逸脱することなく種々の修正を施し得ることを理解するべきである。したがって、本発明の範囲は、添付の特許請求の範囲、およびこのような特許請求の範囲が権利を受ける等価物の全範囲を参照して決定されるべきである。本願全体を通して、種々の刊行物が著者名および日付、または特許番号、特許公報番号により参照されている。これらの刊行物の開示は、本明細書で記載および特許請求される本発明の日付の時点での当業者により公知の最新技術をより十全に説明するために、その全体が参照により本願に組み込まれる。ただし、本願に文献が引用されても、そのような文献が本発明の先行技術であるということを承認するものと解釈されるべきではない。
【０５１８】
種々の新規化学物質、これらの化学物質を作製するための方法および装置については、のちの添付の特許請求の範囲に記載される。
【０５１９】
「発明を実施するための形態」のセクションは、「発明の概要」および「要約」のセクションとは異なり、特許請求の範囲を解釈するために用いることが意図されていることを理解されたい。「発明の概要」および「要約」のセクションは、本発明者が企図する本発明の代表的実施形態全体ではなく、そのうちの１つまたは複数のものが記載され得るものであり、したがって、決して本発明および添付の特許請求の範囲を限定することを意図するものではない。
【０５２０】
米国特許出願第６２／６２７，７０３号（２／７／２０１８出願）；米国特許出願第６２／６２７，７１４号（２／７／２０１８出願）；米国特許出願第６２／６２７，７１６号（２／７／２０１８出願）；米国特許出願第６２／６２７，７３１号（２／７／２０１８出願）；米国特許出願第６２／６２７，７４１号（２／７／２０１８出願）；米国特許出願第６２／６３０，６２９号（２／１４／２０１８出願）；米国特許出願第６２／６３０，６３４号（２／１４／２０１８出願）；米国特許出願第６２／６３０，６３７号（２／１４／２０１８出願）；米国特許出願第６２／６３０，６７１号（２／１４／２０１８出願）；米国特許出願第６２／６３０，７１３号（２／１４／２０１８出願）；米国特許出願第６２／６３０，７２８号（２／１４／２０１８出願）；米国特許出願第６２／６３０，７４４号（２／１４／２０１８出願）；米国特許出願第６２／６３０，８２０号（２／１４／２０１８出願）；米国特許出願第６２／６３０，８２５号（２／１４／２０１８出願）；米国特許出願第６２／６３６，２９４号（２／２８／２０１８出願）；米国特許出願第６２／６６２，３７４号（４／２５／２０１８出願）；米国特許出願第６２／７０２，７３２号（７／２４／２０１８出願）；米国特許出願第６２／７０２，５６１号（７／２４／２０１８出願）；米国特許出願第６２／７６４，９４３号（８／１７／２０１８出願）；および米国特許出願第６２／７６４，９５５号（８／１７／２０１８出願）の開示はそれぞれ、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【図１−１】
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【図１−２】
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【図１−３】
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【図１−４】
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【図１−５】
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【図１−６】
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【図１−７】
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【図１−８】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０Ａ】
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【図２０Ｂ】
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【図２０Ｃ】
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【図２０Ｄ】
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【図２０Ｅ】
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【図２０Ｆ】
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【手続補正書】
【提出日】令和2年10月26日(2020.10.26)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】配列表
【補正方法】追加
【補正の内容】
【配列表】
2021513525000001.app
【国際調査報告】
2021513525.tif 000073
2021513525.tif 000074