(57)【要約】  本発明は、一般式(I)の化合物;これらの化合物の製造方法;これらの化合物を含有する組成物;及びガンの治療のためにKRASタンパク質の阻害剤として使用するための化合物(I);を提供する。2021512131.tif 000820【選択図】なし
2021512131.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式(I)の化合物：
【化１】
2021512131.tif 000726
もしくはそれらの医薬的に許容できる塩であって、式中、
Aは-C(H)-又は窒素であり;
Bは、酸素、イオウ、NR6、又はC(R6)2であり;
Jは、3〜12個の環原子を有するヘテロ環であって、必要に応じて1、2、3、4、5、又は6個のR2で置換されていてもよく;
Kは、C6-C12アリールであるか、又は5〜12個の環原子を有するヘテロアリールであって、必要に応じて1、2、3、4、5、6、又は7個のR3で置換されていてもよく;
Wは、
【化２】
2021512131.tif 000727
からなる群から選ばれ、必要に応じて1、2、又は3個のR5で置換されていてもよく;
各R1は、C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル、C1-C6アルキル-ヒドロキシ、C1-C6アルコキシ、C1-C6アルキル-C1-C6アルコキシ、ヒドロキシ、C2-C6アルケニル、C2-C6アルキニル、ハロゲン、C1-C6ハロアルキル、シアノ、及び-N(R6)2からなる群から独立して選ばれ、あるいは2つのR1が、必要に応じて一緒になって3〜12個の環原子を有するヘテロ環又はC3-C6シクロアルキルを形成してもよく;
各R2は、C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル、ヒドロキシ、C1-C6アルキル-ヒドロキシ、C1-C6アルコキシ、ハロゲン、C1-C6ハロアルキル、シアノ、C1-C6アルキル-シアノ、及びオキソからなる群から独立して選ばれ、あるいは2つのR2が、必要に応じて一緒になって3〜12個の環原子を有するヘテロ環又はC3-C6シクロアルキルを形成してもよく;
各R3は、C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル、ヒドロキシ、C1-C6アルコキシ、ハロゲン、C1-C6ハロアルキル、-N(R6)2、オキソ、及びシアノからなる群から独立して選ばれ、あるいは2つのR3が、必要に応じて一緒になって3〜12個の環原子を有するヘテロ環又はC3-C6シクロアルキルを形成してもよく;
R4は-X-Y-Zであって、
Xは、存在しないか又は酸素、イオウ、及び-NR6-からなる群から選ばれ、
Yは、存在しないか又はC1-C6アルキレニルであり、そして
Zは、H、-N(R6)2、-C(O)-N(R6)2、-OR6、3〜12個の環原子を有するヘテロ環、5〜12個の環原子を有するヘテロアリール、及びC3-C6シクロアルキルから選ばれ、
R4は、必要に応じて1つ以上のR7で置換されていてもよく;
各R5は、C1-C6アルキル、ヒドロキシ、C1-C6アルコキシ、ハロゲン、及び-N(R6)2からなる群から独立して選ばれ;
各R6は、水素、ヒドロキシル、C1-C6アルコキシ、及びC1-C6アルキルからなる群から独立して選ばれ、あるいは2つのR6が、必要に応じて一緒になって3〜12個の環原子を有するヘテロ環又はC3-C6シクロアルキルを形成してもよく;
各R7は、独立的にR7’又はC1-C6アルキル-R7’であり、ここで各R7’は、C1-C6アルキル、ヒドロキシ、C1-C6アルコキシ、ハロゲン、-N(R6)2、3〜12個の環原子を有するヘテロ環、及びオキソからなる群から独立して選ばれ;そして
mは0、1、2、又は3である、
前記化合物もしくは塩。
【請求項２】
式(I)
【化３】
2021512131.tif 000728
〔式中、
Aは-C(H)-又は窒素であり;
Bは、酸素、イオウ、NR6、又はC(R6)2であり;
Jは、
【化４】
2021512131.tif 000729
からなる群から選ばれ、W’はWへの連結箇所を表しており、Jは、必要に応じて1、2、3、4、5、又は6個のR2で置換されていてもよく;
Kは、
【化５】
2021512131.tif 000730
からなる群から選ばれるか、あるいは
【化６】
2021512131.tif 000731
からなる群から選ばれ、Kは、必要に応じて1、2、3、4、5、6、又は7個のR3で置換されていてもよく;
Wは、
【化７】
2021512131.tif 000732
からなる群から選ばれ、必要に応じて1、2、又は3個のR5で置換されていてもよく;
各R1は、C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル、C1-C6アルキル-ヒドロキシ、C1-C6アルコキシ、C1-C6アルキル-C1-C6アルコキシ、ヒドロキシ、C2-C6アルケニル、C2-C6アルキニル、ハロゲン、C1-C6ハロアルキル、シアノ、及び-N(R6)2からなる群から独立して選ばれ、あるいは2つのR1が、必要に応じて一緒になって3〜12個の環原子を有するヘテロ環又はC3-C6シクロアルキルを形成してもよく;
各R2は、C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル、ヒドロキシ、C1-C6アルキル-ヒドロキシ、C1-C6アルコキシ、ハロゲン、C1-C6ハロアルキル、シアノ、C1-C6アルキル-シアノ、及びオキソからなる群から独立して選ばれ、あるいは2つのR2が、必要に応じて一緒になって3〜12個の環原子を有するヘテロ環又はC3-C6シクロアルキルを形成してもよく;
各R3は、C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル、ヒドロキシ、C1-C6アルコキシ、ハロゲン、C1-C6ハロアルキル、-N(R6)2、オキソ、及びシアノからなる群から独立して選ばれ、あるいは2つのR3が、必要に応じて一緒になって3〜12個の環原子を有するヘテロ環又はC3-C6シクロアルキルを形成してもよく;
R4は-X-Y-Zであって、
Xは、存在しないか又は酸素、イオウ、及び-NR6-からなる群から選ばれ、
Yは、存在しないか又はC1-C6アルキレニルであり、そして
Zは、H、-N(R6)2、-C(O)-N(R6)2、-OR6、3〜12個の環原子を有するヘテロ環、5〜12個の環原子を有するヘテロアリール、及びC3-C6シクロアルキルから選ばれ、
R4は、必要に応じて1つ以上のR7で置換されていてもよく;
各R5は、C1-C6アルキル、ヒドロキシ、C1-C6アルコキシ、ハロゲン、及び-N(R6)2からなる群から独立して選ばれ;
各R6は、水素、ヒドロキシル、C1-C6アルコキシ、及びC1-C6アルキルからなる群から独立して選ばれ、あるいは2つのR6が、必要に応じて一緒になって3〜12個の環原子を有するヘテロ環又はC3-C6シクロアルキルを形成してもよく;
各R7は、独立的にR7’又はC1-C6アルキル-R7’であり、ここで各R7’は、C1-C6アルキル、ヒドロキシ、C1-C6アルコキシ、ハロゲン、-N(R6)2、3〜12個の環原子を有するヘテロ環、及びオキソからなる群から独立して選ばれ;そして
mは0、1、2、又は3である〕
の化合物もしくはそれらの医薬的に許容できる塩。
【請求項３】
式(I)
【化８】
2021512131.tif 000733
〔式中、
Aは-C(H)-又は窒素であり;
Bは、酸素又はC(R6)2であり;
Jは
【化９】
2021512131.tif 000734
であって、W’はWへの連結箇所を表しており、Jは、必要に応じて1個のR2で置換されていてもよく;
Kは
【化１０】
2021512131.tif 000735
であるか、あるいは
【化１１】
2021512131.tif 000736
であって、Kは、必要に応じて1個又は2個のR3で置換されていてもよく;
Wは、
【化１２】
2021512131.tif 000737
からなる群から選ばれ;
各R1は、C1-C6アルキル、ハロゲン、C1-C6ハロアルキル、シアノ、及び-N(R6)2からなる群から独立して選ばれ;
R2はC1-C6アルキルであり;
各R3は、C1-C6アルキル、ヒドロキシ、ハロゲン、及びC1-C6ハロアルキルからなる群から独立して選ばれ;
R4は-X-Y-Zであって、
Xは、存在しないか又は酸素であり、
Yは、存在しないか又はC1-C6アルキレニルであり、そして
Zは、H、3〜12個の環原子を有するヘテロ環、及びC3-C6シクロアルキルから選ばれ、
R4は、必要に応じてR7で置換されていてもよく;
各R6は、水素、ヒドロキシル、C1-C6アルコキシ、及びC1-C6アルキルからなる群から独立して選ばれ、あるいは2つのR6が、必要に応じて一緒になって3〜12個の環原子を有するヘテロ環又はC3-C6シクロアルキルを形成してもよく;
各R7は、独立的にR7’又はC1-C6アルキル-R7’であり、ここで各R7’は、C1-C6アルキル及び-N(R6)2からなる群から独立して選ばれ;そして
mは0、1、2、又は3である〕
の化合物もしくはそれらの医薬的に許容できる塩。
【請求項４】
Kが
【化１３】
2021512131.tif 000738
からなる群から選ばれる、請求項2に記載の化合物もしくは塩。
【請求項５】
Kが
【化１４】
2021512131.tif 000739
からなる群から選ばれる、請求項2に記載の化合物もしくは塩。
【請求項６】
Kが
【化１５】
2021512131.tif 000740
である、請求項2に記載の化合物もしくは塩。
【請求項７】
Wが
【化１６】
2021512131.tif 000741
である、請求項2、4、または5に記載の化合物もしくは塩。
【請求項８】
Jが、必要に応じて
【化１７】
2021512131.tif 000742
で置換されていてもよい、請求項2、4、5、または6に記載の化合物もしくは塩。
【請求項９】
Jが
【化１８】
2021512131.tif 000743
からなる群から選ばれる、請求項2、4、5、6、または7に記載の化合物もしくは塩。
【請求項１０】
R4が
【化１９】
2021512131.tif 000744
【化２０】
2021512131.tif 000745
からなる群から選ばれる、請求項2、4、5、6、または7に記載の化合物もしくは塩。
【請求項１１】
R4が
【化２１】
2021512131.tif 000746
からなる群から選ばれる、請求項10に記載の化合物もしくは塩。
【請求項１２】
式(II)
【化２２】
2021512131.tif 000747
〔式中、
Aは-C(H)-又は窒素であり;
Jは
【化２３】
2021512131.tif 000748
であって、W’はWへの連結箇所を表しており、Jは、必要に応じて1つ以上のR2で置換されていてもよく;
Wは
【化２４】
2021512131.tif 000749
であり;
各R1は、C1-C6アルキル、ハロゲン、C1-C6ハロアルキル、シアノ、及び-N(R6)2からなる群から独立して選ばれ;
R2はC1-C6アルキルであり;
各R3は、C1-C6アルキル、ヒドロキシ、ハロゲン、及びC1-C6ハロアルキルからなる群から独立して選ばれ;
R4は-X-Y-Zであって、
Xは、存在しないか又は酸素であり、
Yは、存在しないか又はC1-C6アルキレニルであり、そして
Zは、H、3〜12個の環原子を有するヘテロ環、及びC3-C6シクロアルキルから選ばれ、R4は、必要に応じてR7で置換されていてもよく;
各R6は、水素、ヒドロキシル、C1-C6アルコキシ、及びC1-C6アルキルからなる群から独立して選ばれ、あるいは2つのR6が、必要に応じて一緒になって3〜12個の環原子を有するヘテロ環又はC3-C6シクロアルキルを形成してもよく;
各R7は、独立的にR7’又はC1-C6アルキル-R7’であり、ここで各R7’は、C1-C6アルキル及び-N(R6)2からなる群から独立して選ばれ;そして
各mは、独立的に0、1、2、又は3である〕
の化合物もしくはそれらの医薬的に許容できる塩。
【請求項１３】
【化２５】
2021512131.tif 000750
が
【化２６】
2021512131.tif 000751
からなる群から選ばれる、請求項12に記載の化合物もしくは塩。
【請求項１４】
R4が
【化２７】
2021512131.tif 000752
【化２８】
2021512131.tif 000753
からなる群から選ばれる、請求項12または13に記載の化合物もしくは塩。
【請求項１５】
R4が
【化２９】
2021512131.tif 000754
からなる群から選ばれる、請求項13または14に記載の化合物もしくは塩。
【請求項１６】
式(III)
【化３０】
2021512131.tif 000755
〔式中、
Jは
【化３１】
2021512131.tif 000756
であって、W’はWへの連結箇所を表しており、Jは、必要に応じて1つ以上のR2で置換されていてもよく;
Wは
【化３２】
2021512131.tif 000757
からなる群から選ばれ;
各R1は、C1-C6アルキル、ハロゲン、C1-C6ハロアルキル、シアノ、及び-N(R6)2からなる群から独立して選ばれ;
R2はC1-C6アルキルであり;
各R3は、C1-C6アルキル、ヒドロキシ、ハロゲン、及びC1-C6ハロアルキルからなる群から独立して選ばれ;
R4は-X-Y-Zであって、
Xは、存在しないか又は酸素であり、
Yは、存在しないか又はC1-C6アルキレニルであり、そして
Zは、H、3〜12個の環原子を有するヘテロ環、及びC3-C6シクロアルキルから選ばれ、
R4は、必要に応じてR7で置換されていてもよく;
各R6は、水素、ヒドロキシル、C1-C6アルコキシ、及びC1-C6アルキルからなる群から独立して選ばれ、あるいは2つのR6が、必要に応じて一緒になって3〜12個の環原子を有するヘテロ環又はC3-C6シクロアルキルを形成してもよく;
各R7は、独立的にR7’又はC1-C6アルキル-R7’であり、ここで各R7’は、C1-C6アルキル及び-N(R6)2からなる群から独立して選ばれ;そして
各mは、独立的に0、1、2、又は3である〕
の化合物もしくはそれらの医薬的に許容できる塩。
【請求項１７】
【化３３】
2021512131.tif 000758
が
【化３４】
2021512131.tif 000759
からなる群から選ばれる、請求項16に記載の化合物もしくは塩。
【請求項１８】
R4が
【化３５】
2021512131.tif 000760
【化３６】
2021512131.tif 000761
からなる群から選ばれる、請求項16または17に記載の化合物もしくは塩。
【請求項１９】
R4が
【化３７】
2021512131.tif 000762
からなる群から選ばれる、請求項18に記載の化合物もしくは塩。
【請求項２０】
式(IV)
【化３８】
2021512131.tif 000763
〔式中、
Jは
【化３９】
2021512131.tif 000764
であって、W’はWへの連結箇所を表しており、Jは、必要に応じて1つ以上のR2で置換されていてもよく;
Wは
【化４０】
2021512131.tif 000765
からなる群から選ばれ;
各R1は、C1-C6アルキル、ハロゲン、C1-C6ハロアルキル、シアノ、及び-N(R6)2からなる群から独立して選ばれ;
R2はC1-C6アルキルであり;
各R3は、C1-C6アルキル、ヒドロキシ、ハロゲン、及びC1-C6ハロアルキルからなる群から独立して選ばれ;
R4は-X-Y-Zであって、
Xは、存在しないか又は酸素であり、
Yは、存在しないか又はC1-C6アルキレニルであり、そして
Zは、H、3〜12個の環原子を有するヘテロ環、及びC3-C6シクロアルキルから選ばれ、
R4は、必要に応じてR7で置換されていてもよく;
各R6は、水素、ヒドロキシル、C1-C6アルコキシ、及びC1-C6アルキルからなる群から独立して選ばれ、あるいは2つのR6が、必要に応じて一緒になって3〜12個の環原子を有するヘテロ環又はC3-C6シクロアルキルを形成してもよく;
各R7は、独立的にR7’又はC1-C6アルキル-R7’であり、ここで各R7’は、C1-C6アルキル及び-N(R6)2からなる群から独立して選ばれ;そして
各mは、独立的に0、1、2、又は3である〕
の化合物もしくはそれらの医薬的に許容できる塩。
【請求項２１】
【化４１】
2021512131.tif 000766
が
【化４２】
2021512131.tif 000767
からなる群から選ばれる、請求項20に記載の化合物もしくは塩。
【請求項２２】
R4が
【化４３】
2021512131.tif 000768
【化４４】
2021512131.tif 000769
からなる群から選ばれる、請求項20又は21に記載の化合物もしくは塩。
【請求項２３】
R4が
【化４５】
2021512131.tif 000770
からなる群から選ばれる、請求項22に記載の化合物もしくは塩。
【請求項２４】
【化４６】
2021512131.tif 000771
【化４７】
2021512131.tif 000772
【化４８】
2021512131.tif 000773
【化４９】
2021512131.tif 000774
【化５０】
2021512131.tif 000775
【化５１】
2021512131.tif 000776
【化５２】
2021512131.tif 000777
【化５３】
2021512131.tif 000778
【化５４】
2021512131.tif 000779
【化５５】
2021512131.tif 000780
【化５６】
2021512131.tif 000781
【化５７】
2021512131.tif 000782
【化５８】
2021512131.tif 000783
【化５９】
2021512131.tif 000784
【化６０】
2021512131.tif 000785
【化６１】
2021512131.tif 000786
【化６２】
2021512131.tif 000787
【化６３】
2021512131.tif 000788
【化６４】
2021512131.tif 000789
【化６５】
2021512131.tif 000790
【化６６】
2021512131.tif 000791
【化６７】
2021512131.tif 000792
【化６８】
2021512131.tif 000793
【化６９】
2021512131.tif 000794
【化７０】
2021512131.tif 000795
【化７１】
2021512131.tif 000796
【化７２】
2021512131.tif 000797
【化７３】
2021512131.tif 000798
【化７４】
2021512131.tif 000799
【化７５】
2021512131.tif 000800
【化７６】
2021512131.tif 000801
【化７７】
2021512131.tif 000802
【化７８】
2021512131.tif 000803
【化７９】
2021512131.tif 000804
【化８０】
2021512131.tif 000805
【化８１】
2021512131.tif 000806
【化８２】
2021512131.tif 000807
【化８３】
2021512131.tif 000808
【化８４】
2021512131.tif 000809
【化８５】
2021512131.tif 000810
からなる群から選ばれる化合物もしくはそれらの医薬的に許容できる塩。
【請求項２５】
【化８６】
2021512131.tif 000811
【化８７】
2021512131.tif 000812
【化８８】
2021512131.tif 000813
【化８９】
2021512131.tif 000814
【化９０】
2021512131.tif 000815
【化９１】
2021512131.tif 000816
【化９２】
2021512131.tif 000817
【化９３】
2021512131.tif 000818
【化９４】
2021512131.tif 000819
からなる群から選ばれる化合物もしくはそれらの医薬的に許容できる塩。
【請求項２６】
1つ以上の水素原子が重水素原子で置き換えられている、請求項1〜25のいずれか一項に記載の化合物もしくはそれらの医薬的に許容できる塩。
【請求項２７】
請求項1〜26のいずれか一項に記載の化合物もしくはそれらの医薬的に許容できる塩及び医薬的に許容できる賦形剤を治療学的に有効な量にて含む、医薬組成物。
【請求項２８】
KRAS活性の阻害が求められる細胞と、有効量の、請求項1〜26のいずれか一項に記載の化合物もしくはそれらの医薬的に許容できる塩、または前記化合物もしくはもしくはそれらの医薬的に許容できる塩を含有する医薬組成物とを接触させることを含む、細胞においてKRAS活性を阻害するための方法。
【請求項２９】
ヒトにおける異常な細胞増殖を治療する方法であって、治療学的に有効な量の請求項1〜26のいずれか一項に記載の化合物もしくはそれらの医薬的に許容できる塩を哺乳類に投与することを含む前記方法。
【請求項３０】
異常な細胞増殖がガンである、請求項29に記載の方法。
【請求項３１】
ガンが、肺ガン、骨ガン、膵臓ガン、皮膚ガン、頭頚部ガン、皮膚もしくは眼球内黒色腫、子宮ガン、卵巣ガン、直腸ガン、肛門部ガン、胃ガン、結腸ガン、乳ガン、子宮ガン、卵管ガン、子宮内膜ガン、頸ガン、膣ガン、外陰ガン、ホジキン病、食道ガン、小腸ガン、内分泌系ガン、甲状腺ガン、副甲状腺ガン、副腎ガン、軟部組織肉腫、尿道ガン、陰茎ガン、前立腺ガン、慢性もしくは急性白血病、リンパ球性リンパ腫、膀胱ガン、腎臓もしくは尿管のガン、腎細胞ガン、腎孟ガン、中枢神経系(CNS)腫瘍、中枢神経系原発リンパ腫、脊髄軸腫瘍、脳幹グリオーマ、又は下垂体腺腫である、請求項30に記載の方法。
【請求項３２】
ガンが、肺ガン、結腸ガン、膵臓ガン、及び卵巣ガンである、請求項30に記載の方法。
【請求項３３】
ヒトにおける異常な細胞増殖を治療するのに有用な医薬を製造するための、請求項1〜26のいずれか一項に記載の化合物もしくはそれらの医薬的に許容できる塩の使用。
【請求項３４】
異常な細胞増殖がガンである、請求項33に記載の使用。
【請求項３５】
ガンが、肺ガン、骨ガン、膵臓ガン、皮膚ガン、頭頚部ガン、皮膚もしくは眼球内黒色腫、子宮ガン、卵巣ガン、直腸ガン、肛門部ガン、胃ガン、結腸ガン、乳ガン、子宮ガン、卵管ガン、子宮内膜ガン、頸ガン、膣ガン、外陰ガン、ホジキン病、食道ガン、小腸ガン、内分泌系ガン、甲状腺ガン、副甲状腺ガン、副腎ガン、軟部組織肉腫、尿道ガン、陰茎ガン、前立腺ガン、慢性もしくは急性白血病、リンパ球性リンパ腫、膀胱ガン、腎臓もしくは尿管のガン、腎細胞ガン、腎孟ガン、中枢神経系(CNS)腫瘍、中枢神経系原発リンパ腫、脊髄軸腫瘍、脳幹グリオーマ、又は下垂体腺腫である、請求項34に記載の使用。
【請求項３６】
ガンが、肺ガン、結腸ガン、膵臓ガン、及び卵巣ガンである、請求項34に記載の使用。
【請求項３７】
ガンがKRAS突然変異体と関係している、請求項30の方法または請求項34に記載の使用。
【請求項３８】
前記突然変異体がG12C突然変異体である、請求項37に記載の方法。
【請求項３９】
ガンの治療を必要とする患者においてガンを治療するための方法であって、
(a)ガンがKRAS突然変異体と関係していることを確認すること;及び
(b)治療学的に有効な量の請求項1〜26のいずれか一項に記載の化合物もしくはそれらの医薬的に許容できる塩を患者に投与すること;
を含む前記治療方法。
【請求項４０】
前記突然変異体がG12C突然変異体である、請求項39に記載の治療方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、KRASタンパク質の阻害剤として有用な新規のキナゾリン誘導体とピリドピリミジン誘導体に関する。本発明はさらに、哺乳類(特にヒト)の異常細胞増殖に対する処置においてこのような化合物を使用する方法、及び抗ガン剤としての医薬組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
キルステンラット肉腫腫瘍遺伝子ホモログ(KRAS)は、細胞の外側からの増殖のためのシグナルと細胞内の生存シグナルを統合する低分子量GTPアーゼである。こうした統合は、RasからGDPを除去して、細胞質中に高濃度で存在するGTPの参加を可能にする、グアニジン交換因子(GEF)の増殖因子媒介活性化を介して起こる。GTPヌクレオチドが結合すると、2つの無秩序なスイッチ領域(スイッチIとスイッチII)がヌクレオチドのガンマホスフェートと相互作用し、これによりRasが、遺伝子発現を変えるシグナリングカスケードを開始させるRas結合領域(RBD)を介してエフェクター酵素と相互作用することが可能となる。GTPアーゼ活性化タンパク質(GAP)が結合すると、GTPからGDPへの固有の転化が促進されてタンパク質が不活性状態となり、従ってシグナルが終結する〔Rajalingam,K., R.Schreck, U.R.Rapp and S.Albert(2007).“Ras oncogenes and their downstream targets”Biochim Biophys Acta 1773(8):1177-1195〕。
【０００３】
Rasは、タンパク質のGTP結合形を促進するよう機能するコドン12、13、及び61位置においてヒト腫瘍の最大20%にて突然変異する。ヒト腫瘍としては、結腸腫瘍、膵臓腫瘍、及び肺腫瘍などがあり、後者は全腫瘍の最大25〜30%にてKRAS突然変異を示し、全腫瘍の40%が、タバコの煙中の発ガン性物質によって促進されると考えられるG12C突然変異体を寄生させる。G12C突然変異体を含むKRASがMapk経路を活性化し、非小細胞肺ガン(NSCLC)の増殖と生存を促進する〔Prior,I.A.,P.D.Lewis and C.Mattos(2012).“A comprehensive survey of Ras mutations in cancer.”Cancer Res 72(10):2457-2467〕。
【０００４】
ヒト腫瘍におけるKRAS突然変異体の発見以来、そしてこれらタンパク質によるシグナリングを阻害することで、ガン表現型の阻害が引き起こされるということが発見されて以来、Ras阻害剤を見出すことがアカデミック界と産業界の両方から強く求められている〔(Feramisco,J.R.,R.Clark,G.Wong,N.Arnheim,R.Milley and F.McCormick(1985).“Transient reversion of ras oncogene-induced cell transformation by antibodies specific for amino acid 12 of ras protein.”Nature 314(6012):639-642.)及び(McCormick,F.(2015).“KRAS as a Therapeutic Target.”Clin Cancer Res 21(8):1797-1801)〕。KRASエフェクターBRafの特異的阻害剤を単独で使用すると、そしてこの特異的阻害剤と他の阻害剤とを組み合わせて使用すると、BRafが突然変異によって頻繁に活性化される黒色腫に対してMapk経路が著しいレスポンスを示した〔Flaherty,K.T.,I.Puzanov,K.B.Kim,A.Ribas,G.A.McArthur,J.A.Sosman,P.J.O’Dwyer,R.J.Lee,J.F.Grippo,K.Nolop and P.B.Chapman(2010).“Inhibition of mutated,activated BRAF in metastatic melanoma.”N Engl J Med 363(9):809-819〕。それにひきかえ一般的なMapk阻害剤は、ことによると正常組織に対する適切な治療指数がないか、あるいは他のRas経路による補償シグナリングがないために、KRAS突然変異体を含むガンに対して著しいレスポンスを示さなかった〔(Turk Turke,A.B.,Y.Song,C.Costa,R.Cook,C.L.Arteaga,J.M.Asara and J.A.Engelman(2012).“MEK inhibition leads to PI3K/AKT activation by relieving a negative feedback on ERBB receptors.”Cancer Res 72(13):3228-3237.e,Song et al.2012)及び(Janne,P.A.,M.M.van den Heuvel,F.Barlesi,M.Cobo,J.Mazieres,L.Crino,S.Orlov,F.Blackhall,J.Wolf,P.Garrido,A.Poltoratskiy,G.Mariani,D.Ghiorghiu,E.Kilgour,P.Smith,A.Kohlmann,D.J.Carlile,D.Lawrence,K.Bowen and J.Vansteenkiste(2017).“Selumetinib Plus Docetaxel Compared With Docetaxel Alone and Progression-Free Survival in Patients With KRAS-Mutant Advanced Non-Small Cell Lung Cancer:The SELECT-1 Randomized Clinical Trial.”Jama 317(18):1844-1853.)〕。
【０００５】
KRAS突然変異体と選択的に結合する化合物が強く求められている。正常組織に及ぼす強い影響が避けられるからであり、また抗腫瘍活性を生じさせるよう、腫瘍内のRasシグナリングの充分な阻害が得られるからである。最近、G12Cが、ガン細胞内で生化学的に循環を維持することが示されており、従って活性化を阻害する機会をつくり出している、と考えられている〔Hunter,J.C.,A.Manandhar,M.A.Carrasco,D.Gurbani,S.Gondi and K.D.Westover(2015).“Biochemical and Structural Analysis of Common Cancer-Associated KRAS Mutations.”Mol Cancer Res 23(9):1325-1335〕。G12Cにおける結合のためにシステイン置換を利用し、GDP-GTP交換を妨げる化合物が開示された〔Ostrem,J.M.,U.Peters,M.L.Sos,J.A.Wells and K.M.Shokat(2013).“K-Ras(G12C) inhibitors allosterically control GTP affinity and effector interactions.”Nature 503(7477):548-551〕。これにより、KRASを不活性な状態に固定するG12C結合化合物を利用することが、ガン治療に対する魅力的な手段となる。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Rajalingam,K., R.Schreck, U.R.Rapp and S.Albert (2007).“Ras oncogenes and their downstream targets”Biochim Biophys Acta 1773(8):1177-1195
【非特許文献２】Prior,I.A.,P.D.Lewis and C.Mattos (2012).“A comprehensive survey of Ras mutations in cancer.”Cancer Res 72(10):2457-2467
【非特許文献３】Feramisco,J.R., R.Clark, G.Wong, N.Arnheim, R.Milley and F.McCormick(1985). “Transient reversion of ras oncogene-induced cell transformation by antibodies specific for amino acid 12 of ras protein.”Nature 314(6012):639-642
【非特許文献４】McCormick,F.(2015).“KRAS as a Therapeutic Target.”Clin Cancer Res 21(8):1797-1801
【非特許文献５】Flaherty,K.T., I.Puzanov, K.B.Kim, A.Ribas, G.A.McArthur, J.A.Sosman, P.J.O’Dwyer, R.J.Lee, J.F.Grippo, K.Nolop and P.B.Chapman (2010). “Inhibition of mutated,activated BRAF in metastatic melanoma.”N Engl J Med 363(9):809-819
【非特許文献６】Turk Turke, A.B., Y.Song, C.Costa, R.Cook, C.L.Arteaga, J.M.Asara and J.A.Engelman (2012). “MEK inhibition leads to PI3K/AKT activation by relieving a negative feedback on ERBB receptors. ”Cancer Res 72(13):3228-3237.e,Song et al. 2012
【非特許文献７】Janne,P.A., M.M.van den Heuvel, F.Barlesi, M.Cobo, J.Mazieres, L.Crino, S.Orlov, F.Blackhall, J.Wolf, P.Garrido, A.Poltoratskiy, G.Mariani, D.Ghiorghiu, E.Kilgour, P.Smith, A.Kohlmann, D.J.Carlile, D.Lawrence, K.Bowen and J.Vansteenkiste (2017). “Selumetinib Plus Docetaxel Compared With Docetaxel Alone and Progression-Free Survival in Patients With KRAS-Mutant Advanced Non-Small Cell Lung Cancer:The SELECT-1 Randomized Clinical Trial. ”Jama 317(18):1844-1853
【非特許文献８】Hunter,J.C., A.Manandhar, M.A.Carrasco, D.Gurbani, S.Gondi and K.D.Westover (2015).“Biochemical and Structural Analysis of Common Cancer-Associated KRAS Mutations. ”Mol Cancer Res 23(9):1325-1335
【非特許文献９】Ostrem,J.M., U.Peters, M.L.Sos, J.A.Wells and K.M.Shokat (2013). “K-Ras(G12C) inhibitors allosterically control GTP affinity and effector interactions.”Nature 503(7477):548-551
【発明の概要】
【０００７】
種々の生物学的プロセスを調整することにその役割が与えられているとすると、KRASは、低分子阻害剤による調節のための魅力的な標的である。現在までに、有効なKRAS阻害剤は殆ど開発されておらず、臨床試験を始めているKRAS阻害剤もない。
【０００８】
以下に記載する本発明の化合物の実施態様のそれぞれは、組み合わされる実施態様と不整合ではないところの、本明細書に記載の本発明の化合物の他の任意の実施態様と組み合わせることができる。さらに、下記に本発明を説明している実施態様のそれぞれは、医薬的に許容できる本発明の化合物の塩を、本発明の範囲内に含まれるものとしてイメージしている。従って、“もしくはそれらの医薬的に許容できる塩”というフレーズは、本明細書に記載の全ての化合物についての説明において言外に含まれている。
【０００９】
本発明は、式(I)
【００１０】
【化１】
2021512131.tif 000003
【００１１】
〔式中、Aは-C(H)-又は窒素であり;
Bは、酸素、イオウ、NR6、又はC(R6)2であり;
Jは、3〜12個の環原子を有するヘテロ環であって、必要に応じて1、2、3、4、5、又は6個のR2で置換されていてもよく;
Kは、C6-C12アリールであるか、又は5〜12個の環原子を有するヘテロアリールであって、必要に応じて1、2、3、4、5、6、又は7個のR3で置換されていてもよく;
Wは、
【００１２】
【化２】
2021512131.tif 000004
【００１３】
からなる群から選ばれ、必要に応じて1、2、又は3個のR5で置換されていてもよく;
各R1は、C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル、C1-C6アルキル-ヒドロキシ、C1-C6アルコキシ、C1-C6アルキル-C1-C6アルコキシ、ヒドロキシ、C2-C6アルケニル、C2-C6アルキニル、ハロゲン、C1-C6ハロアルキル、シアノ、及び-N(R6)2からなる群から独立して選ばれ、あるいは2つのR1が、必要に応じて一緒になって3〜12個の環原子を有するヘテロ環又はC3-C6シクロアルキルを形成してもよく;
各R2は、C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル、ヒドロキシ、C1-C6アルキル-ヒドロキシ、C1-C6アルコキシ、ハロゲン、C1-C6ハロアルキル、シアノ、C1-C6アルキル-シアノ、及びオキソからなる群から独立して選ばれ、あるいは2つのR2が、必要に応じて一緒になって3〜12個の環原子を有するヘテロ環又はC3-C6シクロアルキルを形成してもよく;
各R3は、C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル、ヒドロキシ、C1-C6アルコキシ、ハロゲン、C1-C6ハロアルキル、-N(R6)2、オキソ、及びシアノからなる群から独立して選ばれ、あるいは2つのR3が、必要に応じて一緒になって3〜12個の環原子を有するヘテロ環又はC3-C6シクロアルキルを形成してもよく;
R4は-X-Y-Zであって、Xは、存在しないか又は酸素、イオウ、及び-NR6-からなる群から選ばれ、Yは、存在しないか又はC1-C6アルキレニルであり、そしてZは、H、-N(R6)2、-C(O)-N(R6)2、-OR6、3〜12個の環原子を有するヘテロ環、5〜12個の環原子を有するヘテロアリール、及びC3-C6シクロアルキルから選ばれ、R4は、必要に応じて1つ以上のR7で置換されていてもよく;
各R5は、C1-C6アルキル、ヒドロキシ、C1-C6アルコキシ、ハロゲン、及び-N(R6)2からなる群から独立して選ばれ;
各R6は、水素、ヒドロキシル、C1-C6アルコキシ、及びC1-C6アルキルからなる群から独立して選ばれ、あるいは2つのR6が、必要に応じて一緒になって3〜12個の環原子を有するヘテロ環又はC3-C6シクロアルキルを形成してもよく;
各R7は、独立的にR7’又はC1-C6アルキル-R7’であり、ここで各R7’は、C1-C6アルキル、ヒドロキシ、C1-C6アルコキシ、ハロゲン、-N(R6)2、3〜12個の環原子を有するヘテロ環、及びオキソからなる群から独立して選ばれ;そして
mは0、1、2、又は3である〕
の化合物もしくはそれらの医薬的に許容できる塩が提供される、という場合の実施態様を含む。
【００１４】
本発明はさらに、式(I)
【００１５】
【化３】
2021512131.tif 000005
【００１６】
〔式中、Aは-C(H)-又は窒素であり;
Bは、酸素、イオウ、NR6、又はC(R6)2であり;
Jは、3〜12個の環原子を有するヘテロ環であって、
【００１７】
【化４】
2021512131.tif 000006
【００１８】
からなる群から選ばれ、W’はWへの連結箇所を表しており、Jは、必要に応じて1、2、3、4、5、又は6個のR2で置換されていてもよく;
Kは、C6-C12アリールであって、
【００１９】
【化５】
2021512131.tif 000007
【００２０】
からなる群から選ばれるか、あるいは5〜12個の環原子を有するヘテロアリールであって、
【００２１】
【化６】
2021512131.tif 000008
【００２２】
からなる群から選ばれ、Kは、必要に応じて1、2、3、4、5、6、又は7個のR3で置換されていてもよく;
Wは、
【００２３】
【化７】
2021512131.tif 000009
【００２４】
からなる群から選ばれ、必要に応じて1、2、又は3個のR5で置換されていてもよく;
各R1は、C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル、C1-C6アルキル-ヒドロキシ、C1-C6アルコキシ、C1-C6アルキル-C1-C6アルコキシ、ヒドロキシ、C2-C6アルケニル、C2-C6アルキニル、ハロゲン、C1-C6ハロアルキル、シアノ、及び-N(R6)2からなる群から独立して選ばれ、あるいは2つのR1が、必要に応じて一緒になって3〜12個の環原子を有するヘテロ環又はC3-C6シクロアルキルを形成してもよく;
各R2は、C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル、ヒドロキシ、C1-C6アルキル-ヒドロキシ、C1-C6アルコキシ、ハロゲン、C1-C6ハロアルキル、シアノ、C1-C6アルキル-シアノ、及びオキソからなる群から独立して選ばれ、あるいは2つのR2が、必要に応じて一緒になって3〜12個の環原子を有するヘテロ環又はC3-C6シクロアルキルを形成してもよく;
各R3は、C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル、ヒドロキシ、C1-C6アルコキシ、ハロゲン、C1-C6ハロアルキル、-N(R6)2、オキソ、及びシアノからなる群から独立して選ばれ、あるいは2つのR3が、必要に応じて一緒になって3〜12個の環原子を有するヘテロ環又はC3-C6シクロアルキルを形成してもよく;
R4は-X-Y-Zであって、Xは、存在しないか又は酸素、イオウ、及び-NR6-からなる群から選ばれ、Yは、存在しないか又はC1-C6アルキレニルであり、そしてZは、H、-N(R6)2、-C(O)-N(R6)2、-OR6、3〜12個の環原子を有するヘテロ環、5〜12個の環原子を有するヘテロアリール、及びC3-C6シクロアルキルから選ばれ、R4は、必要に応じて1つ以上のR7で置換されていてもよく;
各R5は、C1-C6アルキル、ヒドロキシ、C1-C6アルコキシ、ハロゲン、及び-N(R6)2からなる群から独立して選ばれ;
各R6は、水素、ヒドロキシル、C1-C6アルコキシ、及びC1-C6アルキルからなる群から独立して選ばれ、あるいは2つのR6が、必要に応じて一緒になって3〜12個の環原子を有するヘテロ環又はC3-C6シクロアルキルを形成してもよく;
各R7は、独立的にR7’又はC1-C6アルキル-R7’であり、ここで各R7’は、C1-C6アルキル、ヒドロキシ、C1-C6アルコキシ、ハロゲン、-N(R6)2、3〜12個の環原子を有するヘテロ環、及びオキソからなる群から独立して選ばれ;そして
mは0、1、2、又は3である〕
の化合物もしくはそれらの医薬的に許容できる塩が提供される、という場合の実施態様を含む。
本発明はさらに、式(I)
【００２５】
【化８】
2021512131.tif 000010
【００２６】
〔式中、Aは-C(H)-又は窒素であり;
Bは、酸素又はC(R6)2であり;
Jは、3〜12個の環原子を有するヘテロ環であって、
【００２７】
【化９】
2021512131.tif 000011
【００２８】
からなる群から選ばれ、W’はWへの連結箇所を表しており、Jは、必要に応じて1個のR2で置換されていてもよく;
Kは、C6-C12アリールであって、
【００２９】
【化１０】
2021512131.tif 000012
【００３０】
であるか、あるいは5〜12個の環原子を有するヘテロアリールであって、
【００３１】
【化１１】
2021512131.tif 000013
【００３２】
からなる群から選ばれ、Kは、必要に応じて1個又は2個のR3で置換されていてもよく;
Wは、
【００３３】
【化１２】
2021512131.tif 000014
【００３４】
からなる群から選ばれ;
各R1は、C1-C6アルキル、ハロゲン、C1-C6ハロアルキル、シアノ、及び-N(R6)2からなる群から独立して選ばれ;
各R2はC1-C6アルキルであり;
各R3は、C1-C6アルキル、ヒドロキシ、ハロゲン、及びC1-C6ハロアルキルからなる群から独立して選ばれ;
R4は-X-Y-Zであって、Xは、存在しないか又は酸素であり、Yは、存在しないか又はC1-C6アルキレニルであり、そしてZは、H、3〜12個の環原子を有するヘテロ環、及びC3-C6シクロアルキルから選ばれ、R4は、必要に応じてR7で置換されていてもよく;
各R6は、水素、ヒドロキシル、C1-C6アルコキシ、及びC1-C6アルキルからなる群から独立して選ばれ、あるいは2つのR6が、必要に応じて一緒になって3〜12個の環原子を有するヘテロ環又はC3-C6シクロアルキルを形成してもよく;
各R7は、独立的にR7’又はC1-C6アルキル-R7’であり、ここで各R7’は、C1-C6アルキル及び-N(R6)2からなる群から独立して選ばれ;そして
mは0、1、2、又は3である〕
の化合物もしくはそれらの医薬的に許容できる塩が提供される、という場合の実施態様を含む。
【００３５】
留意しておかねばならないことは、上記の実施態様は、2つのR3置換基が一緒になって3〜12個の環原子を有するヘテロ環を形成するという場合の式(I)の化合物を含み、このとき前記3〜12個の環原子を有するヘテロ環がラクタムである、という点である。K(下記の例ではKはアリールであるが、Kはヘテロアリールであってもよい)に縮合する代表的なラクタムとしては
【００３６】
【化１３】
2021512131.tif 000015
【００３７】
等があるが、これらに限定されない。
上記の実施態様はさらに、Kが
【００３８】
【化１４】
2021512131.tif 000016
【００３９】
から選ばれる場合の式(I)の化合物及びそれらの医薬的に許容できる塩、Kが
【００４０】
【化１５】
2021512131.tif 000017
【００４１】
から選ばれる場合の式(I)の化合物及びそれらの医薬的に許容できる塩、Kが
【００４２】
【化１６】
2021512131.tif 000018
【００４３】
である場合の式(I)の化合物及びそれらの医薬的に許容できる塩、Wが
【００４４】
【化１７】
2021512131.tif 000019
【００４５】
である場合の式(I)の化合物及びそれらの医薬的に許容できる塩、Jが
【００４６】
【化１８】
2021512131.tif 000020
【００４７】
である場合の式(I)の化合物及びそれらの医薬的に許容できる塩、Jが
【００４８】
【化１９】
2021512131.tif 000021
【００４９】
から選ばれる場合の式(I)の化合物及びそれらの医薬的に許容できる塩、及び/又はR4が
【００５０】
【化２０】
2021512131.tif 000022
【００５１】
【化２１】
2021512131.tif 000023
【００５２】
からなる群から選ばれ、好ましくはR4が
【００５３】
【化２２】
2021512131.tif 000024
【００５４】
からなる群から選ばれる場合の式(I)の化合物及びそれらの医薬的に許容できる塩を含む、というケースがあることも留意しておかねばならない。
本発明はさらに、式(II)
【００５５】
【化２３】
2021512131.tif 000025
【００５６】
〔式中、
Aは-C(H)-又は窒素であり;
Jは
【００５７】
【化２４】
2021512131.tif 000026
【００５８】
であって、W’はWへの連結箇所を表しており、Jは、必要に応じて1つ以上のR2で置換されていてもよく;
Wは
【００５９】
【化２５】
2021512131.tif 000027
【００６０】
であり;
各R1は、C1-C6アルキル、ハロゲン、C1-C6ハロアルキル、シアノ、及び-N(R6)2からなる群から独立して選ばれ;
R2はC1-C6アルキルであり;
各R3は、C1-C6アルキル、ヒドロキシ、ハロゲン、及びC1-C6ハロアルキルからなる群から独立して選ばれ;
R4は-X-Y-Zであって、Xは、存在しないか又は酸素であり、Yは、存在しないか又はC1-C6アルキレニルであり、そしてZは、H、3〜12個の環原子を有するヘテロ環、及びC3-C6シクロアルキルから選ばれ、R4は、必要に応じてR7で置換されていてもよく;
各R6は、水素、ヒドロキシル、C1-C6アルコキシ、及びC1-C6アルキルからなる群から独立して選ばれ、あるいは2つのR6が、必要に応じて一緒になって3〜12個の環原子を有するヘテロ環又はC3-C6シクロアルキルを形成してもよく;
各R7は、独立的にR7’又はC1-C6アルキル-R7’であり、ここで各R7’は、C1-C6アルキル及び-N(R6)2からなる群から独立して選ばれ;そして
各mは、独立的に0、1、2、又は3である〕
に記載の化合物もしくはそれらの医薬的に許容できる塩等の実施態様を含む。
【００６１】
式(II)の化合物もしくはそれらの塩は、
【００６２】
【化２６】
2021512131.tif 000028
【００６３】
が
【００６４】
【化２７】
2021512131.tif 000029
【００６５】
からなる群から選ばれる場合の化合物もしくは塩を含む。
式(II)の化合物もしくは塩はさらに、R4が
【００６６】
【化２８】
2021512131.tif 000030
【００６７】
【化２９】
2021512131.tif 000031
【００６８】
からなる群から選ばれる場合の、好ましくはR4が
【００６９】
【化３０】
2021512131.tif 000032
【００７０】
からなる群から選ばれる場合の化合物もしくは塩を含む。
本発明はさらに、式(III)
【００７１】
【化３１】
2021512131.tif 000033
【００７２】
〔式中、Jは
【００７３】
【化３２】
2021512131.tif 000034
【００７４】
であって、W’はWへの連結箇所を表しており、Jは、必要に応じて1つ以上のR2で置換されていてもよく;
Wは
【００７５】
【化３３】
2021512131.tif 000035
【００７６】
からなる群から選ばれ;
各R1は、C1-C6アルキル、ハロゲン、C1-C6ハロアルキル、シアノ、及び-N(R6)2からなる群から独立して選ばれ;
R2はC1-C6アルキルであり;
各R3は、C1-C6アルキル、ヒドロキシ、ハロゲン、及びC1-C6ハロアルキルからなる群から独立して選ばれ;
R4は-X-Y-Zであって、Xは、存在しないか又は酸素であり、Yは、存在しないか又はC1-C6アルキレニルであり、そしてZは、H、3〜12個の環原子を有するヘテロ環、及びC3-C6シクロアルキルから選ばれ、R4は、必要に応じてR7で置換されていてもよく;
各R6は、水素、ヒドロキシル、C1-C6アルコキシ、及びC1-C6アルキルからなる群から独立して選ばれ、あるいは2つのR6が、必要に応じて一緒になって3〜12個の環原子を有するヘテロ環又はC3-C6シクロアルキルを形成してもよく;
各R7は、独立的にR7’又はC1-C6アルキル-R7’であり、ここで各R7’は、C1-C6アルキル及び-N(R6)2からなる群から独立して選ばれ;そして
各mは、独立的に0、1、2、又は3である〕
に記載の化合物もしくはそれらの医薬的に許容できる塩等の実施態様を含む。
【００７７】
式(III)の化合物もしくはそれらの塩は、
【００７８】
【化３４】
2021512131.tif 000036
【００７９】
が
【００８０】
【化３５】
2021512131.tif 000037
【００８１】
からなる群から選ばれる場合の化合物もしくはそれらの塩を含む。
式(III)の化合物もしくはそれらの塩はさらに、R4が
【００８２】
【化３６】
2021512131.tif 000038
【００８３】
【化３７】
2021512131.tif 000039
【００８４】
からなる群から選ばれる場合の、好ましくはR4が
【００８５】
【化３８】
2021512131.tif 000040
【００８６】
からなる群から選ばれる場合の化合物もしくはそれらの塩を含む。
本発明はさらに、式(IV)
【００８７】
【化３９】
2021512131.tif 000041
【００８８】
〔式中、Jは
【００８９】
【化４０】
2021512131.tif 000042
【００９０】
であって、W’はWへの連結箇所を表しており、Jは、必要に応じて1つ以上のR2で置換されていてもよく;
Wは
【００９１】
【化４１】
2021512131.tif 000043
【００９２】
からなる群から選ばれ;
各R1は、C1-C6アルキル、ハロゲン、C1-C6ハロアルキル、シアノ、及び-N(R6)2からなる群から独立して選ばれ;
R2はC1-C6アルキルであり;
各R3は、C1-C6アルキル、ヒドロキシ、ハロゲン、及びC1-C6ハロアルキルからなる群から独立して選ばれ;
R4は-X-Y-Zであって、Xは、存在しないか又は酸素であり、Yは、存在しないか又はC1-C6アルキレニルであり、そしてZは、H、3〜12個の環原子を有するヘテロ環、及びC3-C6シクロアルキルから選ばれ、R4は、必要に応じてR7で置換されていてもよく;
各R6は、水素、ヒドロキシル、C1-C6アルコキシ、及びC1-C6アルキルからなる群から独立して選ばれ、あるいは2つのR6が、必要に応じて一緒になって3〜12個の環原子を有するヘテロ環又はC3-C6シクロアルキルを形成してもよく;
各R7は、独立的にR7’又はC1-C6アルキル-R7’であり、ここで各R7’は、C1-C6アルキル及び-N(R6)2からなる群から独立して選ばれ;そして
各mは、独立的に0、1、2、又は3である〕
に記載の化合物もしくはそれらの医薬的に許容できる塩等の実施態様を含む。
【００９３】
式(IV)の化合物もしくはそれらの塩は、
【００９４】
【化４２】
2021512131.tif 000044
【００９５】
が
【００９６】
【化４３】
2021512131.tif 000045
【００９７】
からなる群から選ばれる場合の化合物もしくはそれらの塩を含む。
式(IV)の化合物もしくはそれらの塩はさらに、R4が
【００９８】
【化４４】
2021512131.tif 000046
【００９９】
【化４５】
2021512131.tif 000047
【０１００】
からなる群から選ばれる場合の、好ましくはR4が
【０１０１】
【化４６】
2021512131.tif 000048
【０１０２】
からなる群から選ばれる場合の化合物もしくはそれらの塩を含む。
さらに、本発明の実施態様は、
【０１０３】
【化４７】
2021512131.tif 000049
【０１０４】
【化４８】
2021512131.tif 000050
【０１０５】
【化４９】
2021512131.tif 000051
【０１０６】
【化５０】
2021512131.tif 000052
【０１０７】
【化５１】
2021512131.tif 000053
【０１０８】
【化５２】
2021512131.tif 000054
【０１０９】
【化５３】
2021512131.tif 000055
【０１１０】
【化５４】
2021512131.tif 000056
【０１１１】
【化５５】
2021512131.tif 000057
【０１１２】
【化５６】
2021512131.tif 000058
【０１１３】
【化５７】
2021512131.tif 000059
【０１１４】
【化５８】
2021512131.tif 000060
【０１１５】
【化５９】
2021512131.tif 000061
【０１１６】
【化６０】
2021512131.tif 000062
【０１１７】
【化６１】
2021512131.tif 000063
【０１１８】
【化６２】
2021512131.tif 000064
【０１１９】
【化６３】
2021512131.tif 000065
【０１２０】
【化６４】
2021512131.tif 000066
【０１２１】
【化６５】
2021512131.tif 000067
【０１２２】
【化６６】
2021512131.tif 000068
【０１２３】
【化６７】
2021512131.tif 000069
【０１２４】
【化６８】
2021512131.tif 000070
【０１２５】
【化６９】
2021512131.tif 000071
【０１２６】
【化７０】
2021512131.tif 000072
【０１２７】
【化７１】
2021512131.tif 000073
【０１２８】
【化７２】
2021512131.tif 000074
【０１２９】
【化７３】
2021512131.tif 000075
【０１３０】
【化７４】
2021512131.tif 000076
【０１３１】
【化７５】
2021512131.tif 000077
【０１３２】
【化７６】
2021512131.tif 000078
【０１３３】
【化７７】
2021512131.tif 000079
【０１３４】
【化７８】
2021512131.tif 000080
【０１３５】
【化７９】
2021512131.tif 000081
【０１３６】
【化８０】
2021512131.tif 000082
【０１３７】
【化８１】
2021512131.tif 000083
【０１３８】
【化８２】
2021512131.tif 000084
【０１３９】
【化８３】
2021512131.tif 000085
【０１４０】
【化８４】
2021512131.tif 000086
【０１４１】
【化８５】
2021512131.tif 000087
【０１４２】
【化８６】
2021512131.tif 000088
【０１４３】
からなる群から選ばれる化合物もしくはそれらの医薬的に許容できる塩を含む。
本発明の実施態様は、好ましくは
【０１４４】
【化８７】
2021512131.tif 000089
【０１４５】
【化８８】
2021512131.tif 000090
【０１４６】
【化８９】
2021512131.tif 000091
【０１４７】
【化９０】
2021512131.tif 000092
【０１４８】
【化９１】
2021512131.tif 000093
【０１４９】
【化９２】
2021512131.tif 000094
【０１５０】
【化９３】
2021512131.tif 000095
【０１５１】
【化９４】
2021512131.tif 000096
【０１５２】
からなる群から選ばれる化合物もしくはそれらの医薬的に許容できる塩を含む。
本発明のさらなる実施態様は、ここに記載の化合物もしくはそれらの医薬的に許容できる塩及び医薬的に許容できる賦形剤を、治療学的有効量にて含んでなる医薬組成物を含む。
【０１５３】
本発明のさらなる実施態様は、KRAS活性を阻害することが強く求められる細胞を、治療学的有効量の、ここに記載の化合物もしくはそれらの医薬的に許容できる塩、又は前記の化合物もしくは医薬的に許容できる塩を含有する医薬組成物と接触させることによって細胞中のKRAS活性を阻害する方法を含む。
【０１５４】
本発明のさらなる実施態様は、ガンに罹患している患者に、治療学的有効量の、ここに記載の化合物もしくはそれらの医薬的に許容できる塩を、単独にてあるいは1種以上の医薬的に許容できるキャリヤー、賦形剤、もしくは希釈剤と組み合わせて投与することを含む、ガンの治療方法を含む。
【０１５５】
本発明の実施態様はさらに、投与される化合物もしくはそれらの医薬的に許容できる塩の治療学的有効量が、一日当たり約0.01〜300mg/kg、あるいは一日当たり約0.1〜100mg/kgであるという治療方法を含む。
【０１５６】
本発明のさらなる実施態様は、哺乳類に、治療学的有効量のここに記載の化合物もしくはそれらの医薬的に許容できる塩を投与することを含む、哺乳類における異常な細胞増殖を治療する方法を含む。ある特定の実施態様では、異常な細胞増殖はガンであり、こうした実施態様の幾つかにおいては、ガンは、肺ガン、骨ガン、膵臓ガン、皮膚ガン、頭頚部ガン、皮膚もしくは眼球内黒色腫、子宮ガン、卵巣ガン、直腸ガン、肛門部ガン、胃ガン、結腸ガン、乳ガン、子宮ガン、卵管ガン、子宮内膜ガン、頸ガン、膣ガン、外陰ガン、ホジキン病、食道ガン、小腸ガン、内分泌系ガン、甲状腺ガン、副甲状腺ガン、副腎ガン、軟部組織肉腫、尿道ガン、陰茎ガン、前立腺ガン、慢性もしくは急性白血病、リンパ球性リンパ腫、膀胱ガン、腎臓もしくは尿管のガン、腎細胞ガン、腎孟ガン、中枢神経系(CNS)腫瘍、中枢神経系原発リンパ腫、脊髄軸腫瘍、脳幹グリオーマ、又は下垂体腺腫である。このようなガンは、KRAS関連のガンである場合がある。特に興味があるのは、肺ガン、結腸ガン、膵臓ガン、及び卵巣ガンである。
【０１５７】
本発明の実施態様はさらに、哺乳類における異常細胞増殖の治療に有用な薬剤を製造する上で、ここに記載の化合物を使用すること、あるいはそれらの医薬的に許容できる塩を使用することを含む。ある特定の実施態様では、異常な細胞増殖はガンであり、こうした実施態様の幾つかにおいては、ガンは、肺ガン、骨ガン、膵臓ガン、皮膚ガン、頭頚部ガン、皮膚もしくは眼球内黒色腫、子宮ガン、卵巣ガン、直腸ガン、肛門部ガン、胃ガン、結腸ガン、乳ガン、子宮ガン、卵管ガン、子宮内膜ガン、頸ガン、膣ガン、外陰ガン、ホジキン病、食道ガン、小腸ガン、内分泌系ガン、甲状腺ガン、副甲状腺ガン、副腎ガン、軟部組織肉腫、尿道ガン、陰茎ガン、前立腺ガン、慢性もしくは急性白血病、リンパ球性リンパ腫、膀胱ガン、腎臓もしくは尿管のガン、腎細胞ガン、腎孟ガン、中枢神経系(CNS)腫瘍、中枢神経系原発リンパ腫、脊髄軸腫瘍、脳幹グリオーマ、又は下垂体腺腫である。このようなガンは、KRAS関連のガンである場合がある。
【０１５８】
さらに、ガンの治療に関連して、本発明の実施態様は、(a)当該ガンがKRAS突然変異体に関連していることを確認すること;及び(b)ここに記載の化合物もしくは医薬的に許容できる塩又はそれらの医薬組成物を治療学的有効量にて患者に投与すること;を含む、ガンの治療を必要とする患者においてガンを治療する方法を含む。幾つかの実施態様では、KRAS突然変異体がRas突然変異体であるか、あるいはコドン12、13、及び/又は61にRas突然変異体を組み込む。
【０１５９】
定義
特に明記しない限り、本明細書とクレーム中に使用されている以下の用語は、下記に記載の意味を有する。本セクションに定義されている変数(例えばR、X、及びn等)は、本セクション内だけでの参照用であって、本定義セクションのほかで使用されるものと同じ意味を有するようには意図されていない。さらに、ここに定義の群の多くは、必要に応じて置換されていてもよい。本定義セクションにおける一般的な置換基のリストは代表的なものであり、本明細書及びクレーム内のほかの場所で定義されている置換基を限定するよう意図されてはいない。
ここで定義する“アルケニル”は、少なくとも2つの炭素原子と少なくとも1つの炭素-炭素二重結合からなるアルキル基を表す。代表的な例としては、エテニル、1-プロペニル、2-プロペニル、1-ブテニル、2-ブテニル、及び3-ブテニル等があるが、これらに限定されない。“アルケニレン”は、アルケニルの二価形を表す。
【０１６０】
“アルコキシ”は、アルキルが、好ましくはC1-C8アルキル、C1-C7アルキル、C1-C6アルキル、C1-C5アルキル、C1-C4アルキル、C1-C3アルキル、C1-C2アルキル、又はC1アルキルである場合の-O-アルキルを表す。
【０１６１】
“アルキル”は、1〜20個の炭素原子を有する直鎖基又は分岐鎖基〔“(C1-C20)アルキル”〕、好ましくは1〜12個の炭素原子を有する直鎖基又は分岐鎖基〔“(C1-C12)アルキル”〕、さらに好ましくは1〜8個の炭素原子を有する直鎖基又は分岐鎖基〔“(C1-C8)アルキル”〕、又は1〜6個の炭素原子を有する直鎖基又は分岐鎖基〔“(C1-C6)アルキル”〕、又は1〜4個の炭素原子を有する直鎖基又は分岐鎖基〔“(C1-C4)アルキル”〕を含む飽和脂肪族炭化水素基を表す。アルキル基の例としては、メチル、エチル、プロピル、2-プロピル、n-ブチル、イソブチル、tert-ブチル、ペンチル、及びネオペンチル等がある。アルキルは、無置換であっても置換されていてもよい。代表的な置換基としては、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロ脂環式、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、メルカプト、アルキルチオ、アリールチオ、シアノ、ハロゲン、カルボニル、チオカルボニル、O-カルバミル、N-カルバミル、O-チオカルバミル、N-チオカルバミル、C-アミド、N-アミド、C-カルボキシ、O-カルボキシ、ニトロ、シリル、アミノ、及び-NRxRy(式中、RxとRyは、例えば水素、アルキル、シクロアルキル、アリール、カルボニル、アセチル、スルホニル、トリフルオロメタンスルホニル、又は5員もしくは6員のヘテロ脂環式環である)などがある。“ハロアルキル”〔例えば(C1-C6)ハロアルキル〕は、1〜6個の炭素と1つ以上のハロゲン置換基を有するアルキル(例えば、-CF3や-CHF2)を表す。“アルキレン”はアルキルの二価形を表す。
【０１６２】
ここに定義の“アルキニル”は、少なくとも2つの炭素原子と少なくとも1つの炭素-炭素三重結合からなるアルキル基を表す。代表的な例としては、エチニル、1-プロピニル、2-プロピニル、1-ブチニル、2-ブチニル、及び3-ブチニル等がある。
【０１６３】
“アミノ”は、RxとRyが共に水素である場合の-NRxRyを表す。
“(C6-C12)アリール”は、完全に共役したπ電子系を有する、6〜12個の炭素原子を含む全て炭素の単環式基又は縮合環多環式基を表す。同様に、“(C5-C12)アリール”は、完全に共役したπ電子系を有する、5〜12個の炭素原子を含む全て炭素の単環式基又は縮合環多環式基を表す。アリール基の例としては、フェニル、ナフタレニル、及びアントラセニル等があるが、これらに限定されない。アリール基は、無置換であっても置換されていてもよい。代表的な置換基としては、ハロゲン、トリハロメチル、アルキル、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、メルカプト、アルキルチオ、アリールチオ、シアノ、ニトロ、カルボニル、チオカルボニル、C-カルボキシ、O-カルボキシ、O-カルバミル、N-カルバミル、O-チオカルバミル、N-チオカルバミル、C-アミド、N-アミド、スルフィニル、スルホニル、アミノ、及び-NRxRy(RxとRyは上記にて定義したとおりである)等がある。
【０１６４】
“(C6-C12)アリール”はさらに、それに縮合した炭素環やヘテロ環をさらに含めた、上記のアリール環及び環系を含む。例えば
【０１６５】
【化９５】
2021512131.tif 000097
【０１６６】
“シアノ”は-C≡N基を表す。シアノはCNと表示することができる。
“(C3-C10)シクロアルキル”は、3〜10員の全て炭素の単環式環基、3〜10員の全て炭素の二環式環基、5員/6員もしくは6員/6員の全て炭素の二環式縮合環基、又は多環式縮合環基(“縮合”環系とは、系内の各環が、隣り合った炭素原子対を系内の他の他の環と共有していることを意味する)を表し、ここで環の1つ以上が1つ以上の二重結合を含んでよいが、環のいずれも、完全に共役したπ電子系及び全て炭素の架橋環系をもたない。シクロアルキル基の例としては、シクロプロパン、シクロブタン、シクロペンタン、シクロペンテン、シクロヘキサン、シクロヘキサジエン、アダマンタン、シクロヘプタン、及びシクロヘプタトリエン等があるが、これらに限定されない。シクロアルキル基は、無置換であっても置換されていてもよい。代表的な置換基としては、アルキル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロ脂環式、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、メルカプト、アルキルチオ、アリールチオ、シアノ、ハロゲン、カルボニル、チオカルボニル、C-カルボキシ、O-カルボキシ、O-カルバミル、N-カルバミル、N-アミド、ニトロ、アミノ、及び-NRxRy(式中、RxとRyは上記にて定義したとおりである)等がある。
【０１６７】
“G12C”は、野生型KRAS中のポジション12におけるアミノ酸が、グリシン残基からシステイン残基に突然変異した場合の突然変異体を表す。
“ハロゲン”又は接頭辞“ハロ”は、フルオロ、クロロ、ブロモ、及びヨードを表す。好ましくは、ハロゲンはフルオロ又はクロロを表す。
【０１６８】
“ヘテロアルキル”は、1〜20個の炭素原子、好ましくは1〜12個の炭素原子、さらに好ましくは1〜8個の炭素原子、1〜6個の炭素原子、もしくは1〜4個の炭素原子を含む直鎖アルキル基又は分岐鎖アルキル基中の炭素原子の1つ、2つ、又は3つが、NRx、N、O、及びS(O)n(式中、nは0、1、又は2である)から選ばれるヘテロ原子で置き換えられている場合の基を表す。一般には1つより多いヘテロ原子が存在し、これらのヘテロ原子は互いに隣接していない。
【０１６９】
代表的なヘテロアルキルとしては、アルキルエーテル、第二アルキルアミン、第三アルキルアミン、アミド、及びアルキルスルフィド等がある。この基は、末端基であっても架橋基であってもよい。本明細書で使用しているノルマルチェイン(normal chain)とは、架橋基の文脈において使用される場合は、架橋基の2つの末端位置を連結する原子の直接的な鎖を表す。“アルキル”の場合と同様に、“ヘテロアルキル”上の代表的な置換基としては、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロ脂環式、ヒドロキシ、アルコキシアリールオキシ、メルカプト、アルキルチオ、アリールチオ、シアノ、ハロゲン、カルボニル、チオカルボニル、O-カルバミル、N-カルバミル、O-チオカルバミル、N-チオカルバミル、C-アミド、N-アミド、C-カルボキシ、O-カルボキシ、ニトロ、シリル、アミノ、及び-NRxRy(式中、RxとRyは、例えば水素、アルキル、シクロアルキル、アリール、カルボニル、アセチル、スルホニル、トリフルオロメタンスルホニル、又は5員もしくは6員のヘテロ脂環式環である)等がある。“ヘテロアルケニル”は、1つ以上の炭素-炭素二重結合を有するヘテロアルキルを表す。“ヘテロアルキレン”は、ヘテロアルキルの二価形を表す。“ヘテロアルケニレン”は、ヘテロアルケニルの二価形を表す。
【０１７０】
“ヘテロアリール”は、NRx、N、O、及びS(O)n(式中、nは0、1、又は2である)から選ばれる、1つ、2つ、3つ、もしくは4つの環ヘテロ原子を含む5〜12個の環原子で構成され、そして完全に共役したπ電子系を有する、単環式環基または縮合環基を表す。好ましいヘテロアリール基としては、上記の定義に従った(C2-C7)ヘテロアリールがある。無置換ヘテロアリール基の例としては、ピロール、フラン、チオフェン、イミダゾール、オキサゾール、チアゾール、ピラゾール、ピリジン、ピリミジン、キノリン、イソキノリン、プリン、テトラゾール、トリアジン、及びカルバゾール等があるが、これらに限定されない。ヘテロアリール基は、無置換であっても置換されていてもよい。代表的な置換基としては、アルキル、シクロアルキル、ハロゲン、トリハロメチル、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、メルカプト、アルキルチオ、アリールチオ、シアノ、ニトロ、カルボニル、チオカルボニル、スルホンアミド、C-カルボキシ、O-カルボキシ、スルフィニル、スルホニル、O-カルバミル、N-カルバミル、O-チオカルバミル、N-チオカルバミル、C-アミド、N-アミド、アミノ、及び-NRxRy(RxとRyは、上記にて定義したとおりである)等がある。医薬的に許容できるヘテロアリール基は、本発明の化合物に結び付けるのに十分に安定であり、医薬組成物に製剤されるのに充分に安定であり、そして投与を必要とする患者に引き続き投与されるのに充分に安定であるようなヘテロアリール基である。
代表的な単環式ヘテロアリール基の例としては、
【０１７１】
【化９６】
2021512131.tif 000098
【０１７２】
等があるが、これらに限定されない。
適切な縮合環ヘテロアリール基の例としては、
【０１７３】
【化９７】
2021512131.tif 000099
【０１７４】
【化９８】
2021512131.tif 000100
【０１７５】
等があるが、これらに限定されない。
“ヘテロサイクリル”は、N、O、及びS(O)n(式中、nは0、1、又は2である)から選ばれる、1つ、2つ、3つ、又は4つの環ヘテロ原子を含む3〜12個の環原子、及び1〜9個の炭素原子を有する単環式環系、スピロ環式環系、又は縮合環系を表す。これらの環はさらに、1つ以上の二重結合を有してよい。しかしながら、これらの環は、完全に共役したπ電子系をもたない。好ましいヘテロ環としては、上記の定義に従った(C2-C6)ヘテロ環がある。
【０１７６】
適切な飽和ヘテロ環式基の例としては、
【０１７７】
【化９９】
2021512131.tif 000101
【０１７８】
等があるが、これらに限定されない。
適切な部分不飽和ヘテロ環式基の例としては、
【０１７９】
【化１００】
2021512131.tif 000102
【０１８０】
等があるが、これらに限定されない。
適切な縮合ヘテロ環式基の例としては、
【０１８１】
【化１０１】
2021512131.tif 000103
【０１８２】
等があるが、これらに限定されない。
適切なセミ飽和縮合ヘテロ環式基の例としては、
【０１８３】
【化１０２】
2021512131.tif 000104
【０１８４】
等があるが、これらに限定されない。
適切なスピロ環式ヘテロ環式基の例としては、
【０１８５】
【化１０３】
2021512131.tif 000105
【０１８６】
等があるが、これらに限定されない。
ヘテロサイクリル基は、ハロゲン;低級アルキル;カルボキシ、エステル、ヒドロキシ、モノアルキルアミノ、もしくはジアルキルアミノで置換された低級アルキル;又はオキソ;から独立して選ばれる1つ又は2つの置換基で、必要に応じて置換されていてもよい。ヘテロ環はさらに、ヘテロ環上の非隣接炭素間のブリッジングを含めたブリッジングを含んでよく、このブリッジは、1〜2個の炭素原子、ならびにNRx、O、及びS(O)n(式中、nは0、1、又は2である)から選ばれる0〜1個のヘテロ原子を有する。
【０１８７】
“ヒドロキシ”又は“ヒドロキシル”は-OH基を表す。
“インビトロ”は、例えば、試験管や培地(これらに限定されない)のような人工的環境において行われる手順を表す。
【０１８８】
“インビボ”は、例えば、マウス、ラット、又はウサギ(これらに限定されない)のような生体内で行われる手順を表す。
“任意の(optional)”又は“必要に応じて(optionally)”は、引き続き記載されている事象もしくは状況が、起こってよいが、起こる必要はない、ということ、そしてその記載は、事象もしくは状況が起こる場合と、起こらない場合を含む、ということを意味する。例えば、“必要に応じてアルキル基で置換されていてもよいヘテロ環基”は、アルキル基が、存在してよいが、存在する必要はないということ、そしてその記載は、ヘテロ環基がアルキル基で置換されている状態、及びヘテロ環基がアルキル基で置換されていない状態を含む。
【０１８９】
“生命体”は、少なくとも1つの細胞で構成される、あらゆる生きている実体を表す。生命体は、例えば単独の真核細胞のような単純な場合もあり、哺乳類(ヒトを含む)のような複雑な場合もある。
【０１９０】
“医薬的に許容できる賦形剤”は、ある化合物の投与をより容易にするために、医薬組成物に加えられる不活性物質を表す。賦形剤の例としては、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、種々のタイプの糖と澱粉、セルロース誘導体、ゼラチン、植物油、及びポリエチレングリコール等があるが、これらに限定されない。
【０１９１】
本明細書で使用されている“医薬的に許容できる塩”とは、親化合物の生物学的な有効性と特性を保持する塩を表す。このような塩としては、(i)親化合物の遊離塩基と、例えば塩酸、臭化水素酸、硝酸、リン酸、硫酸、もしくは過塩素酸等の無機酸との、又は例えば酢酸、シュウ酸、D-リンゴ酸、L-リンゴ酸、マレイン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、p-トルエンスルホン酸、サリチル酸、酒石酸、クエン酸、コハク酸、もしくはマロン酸等の有機酸との反応によって得られる酸付加塩;あるいは(ii)親化合物中に存在する酸性プロトンが、例えばアルカリ金属イオン、アルカリ土類金属イオン、もしくはアルミニウムイオン等金属イオンで置き換えられるときに、又は例えばエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、トロメタミン、もしくはN-メチルグルカミン等の有機塩基と配位するときに形成される塩;等がある。
【０１９２】
“医薬組成物”は、本明細書に記載の化合物の1つ以上又はそれらの生理学的/医薬的に許容されうる塩、溶媒和物、水和物、もしくはプロドラッグと、生理学的/医薬的に許容されうるキャリヤーや賦形剤等の他の化学成分との混合物を表す。医薬組成物にする目的は、ある化合物の生命体への投与を容易にすることにある。
【０１９３】
本明細書で使用している“生理学的/医薬的に許容されうるキャリヤー”は、生命体に重大な炎症を引き起こさず、そして投与される化合物の生物学的な活性と特性を無効にしないキャリヤーもしくは希釈剤を表す。
【０１９４】
“治療学的有効量”は、治療される疾患の症状の1つ以上をある程度緩和する、投与しようとする化合物の量を表す。ガンの治療に関しての治療学的有効量は、下記の効果の少なくとも1つを有する量を表す:腫瘍の大きさを減少させること;腫瘍の転移を抑えること(すなわち、ある程度遅くすること、好ましくは止めること);腫瘍の増殖をある程度抑えること(すなわち、ある程度遅くすること、好ましくは止めること);及びガンに関連した1つ以上の症状をある程度緩和すること(あるいは、好ましくは取り除くこと)。
【０１９５】
“治療する(treat)”、“治療すること(treating)”、及び“治療(treatment)”は、メチルトランスフェラーゼ媒介性細胞障害及び/又はそれに付随する症状を緩和もしくは取り除く方法を表す。特にガンに関して言うと、これらの用語は単に、ガンに罹患した個人の平均余命が長くなるということ、あるいはガンの症状の1つ以上が減少するということを意味している。
【０１９６】
詳細な説明
本発明の化合物を合成するための一般的なスキームは、本明細書中の実施例セクションに記載されている。
【０１９７】
特に明記しない限り、本発明の化合物への言及は全て、本発明の化合物の塩、溶媒和物、水和物、及び錯体への言及を、ならびに本発明の化合物の塩の溶媒和物、水和物、及び錯体への言及を含み、このとき多形体、立体異性体、及びそれらの同位体標識バージョンを含む。
【０１９８】
医薬的に許容できる塩は、酸付加塩と塩基性塩を含む(二塩も含む)。適切な酸付加塩は、非毒性の塩を形成する酸から形成される。例としては、酢酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベシル酸塩、重炭酸塩/炭酸塩、重硫酸塩/硫酸塩、ホウ酸塩、カンシル酸塩、クエン酸塩、エジシル酸塩、エシル酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、グルセプチン酸塩、グルコン酸塩、グルクロン酸塩、ヘキサフルオロリン酸塩、ヒベンズ酸塩、塩酸塩/塩化物、臭化水素酸塩/臭化物、ヨウ化水素酸塩/ヨウ化物、イセチオン酸塩、乳酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、メシル酸塩、メチルスルホン酸塩、ナフチル酸塩、
2-ナプシル酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、オロチン酸塩、シュウ酸塩、パルミチン酸塩、パモ酸塩、リン酸塩/リン酸水素/リン酸二水素、サッカリン酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、トシル酸塩、及びトリフルオロ酢酸塩等がある。
【０１９９】
適切な塩基性塩は、非毒性塩を形成する塩基から形成される。例としては、アルミニウム塩、アルギニン塩、ベンザチン塩、カルシウム塩、コリン塩、ジエチルアミン塩、ジオラミン塩、グリシン塩、リシン塩、マグネシウム塩、メグルミン塩、オラミン塩、カリウム塩、ナトリウム塩、トロメタミン塩、及び亜鉛塩等がある。適切な塩に関してレビューするには、“Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection,and Use”by Stahl and Wermuth(Wiley-VCH,Weinheim,Germany,2002)(該文献の開示内容全てを参照により本明細書に含める)を参照のこと。
【０２００】
本発明の化合物の医薬的に許容できる塩は、該化合物と所望の酸もしくは塩基との溶液を必要に応じてミキシングすることによって容易に製造することができる。この塩は、溶液から沈殿して、これを濾過によって捕集することもできるし、あるいは溶媒を蒸発除去することによって回収することもできる。塩のイオン化の程度は、完全にイオン化された状態から殆どイオン化されていない状態まで、いろいろある。
【０２０１】
本発明の化合物は、非溶媒和形でも溶媒和形でも存在することがある。
‘溶媒和物’という用語は、本明細書では、本発明の化合物と1つ以上の医薬的に許容できる溶媒分子(例えばエタノール)を含んでなる分子錯体を表すために使用される。‘水和物’という用語は、溶媒が水であるときに使用される。本発明に従った医薬的に許容できる溶媒和物は、結晶化の溶媒が同位体で置き換えられた場合(例えば、D2O、d6-アセトン、又はd6-DMSO)の水和物と溶媒和物を含む。
【０２０２】
上記の溶媒和物とは対照的に、薬物やホストが、化学量論量又は非化学量論量にて存在する場合のクラスレートや薬物-ホスト含有錯体(drug-host inclusion complexes)等の錯体も、本発明の範囲内に含まれる。化学量論量又は非化学量論量にて存在してよい2種以上の有機及び/又は無機成分を含有する薬物の錯体も、本発明の範囲内に含まれる。こうして得られる錯体は、イオン化されていても、部分イオン化されていても、あるいはイオン化されていなくてもよい。このような錯体をレビューするには、“J.Pharm Sci,64(8),1269-1288 by Haleblian(August 1975)”(該文献の開示内容全てを参照により本明細書に含める)を参照のこと。
【０２０３】
本発明の化合物の多形体、プロドラッグ、及び異性体(光学異性体、幾何異性体、及び互変異性体を含む)も、本発明の範囲内に含まれる。
それ自体は薬理学的活性が殆どもしくは全くないが、患者に投与されると、例えば加水分解によって本発明の化合物に転化されうる本発明の化合物の誘導体。このような誘導体は、‘プロドラッグ’と呼ばれる。プロドラッグの使用に関するさらなる情報は、‘Prodrugs as Novel Delivery Systems,Vol.14,ACS Symposium Series(T Higuchi and W Stella)’及び‘Bioreversible Carriers in Drug Design,Pergamon Press,1987(ed.E B Roche,American Pharmaceutical Association)’(これら文献の開示内容全てを参照により本明細書に含める)に記載されている。本発明に従ったプロドラッグは、本発明の化合物中に存在する適切な官能基を、例えば“Design of Prodrugs”by H Bundgaard(Elsevier,1985)(該文献の開示内容全てを参照により本明細書に含める)に記載の‘プロモイエティ’として当業者に知られている特定のモイエティで置き換えることによって製造することができる。
【０２０４】
本発明に従ったプロドラッグの幾つかの例としては、(i)化合物がカルボン酸官能基(-COOH)を有する場合はそのエステルにする、例えば、水素を(C1-C8)アルキルで置き換える;(ii)化合物がアルコール官能基(-OH)を有する場合はそのエーテルにする、例えば、水素を(C1-C6)アルカノイルオキシメチルで置き換える;及び(iii)化合物が第一又は第二アミノ官能基〔-NH2又は-NHR(ここでRはHではない)〕を有する場合はそのアミドにする、例えば、1つ又は2つの水素を(C1-C10)アルカノイルで置き換える;などがある。前述の例および他のプロドラッグタイプの例に従った置き換え基のさらなる例は、上記の文献中に記載されている。
【０２０５】
最後に、ある特定の本発明の化合物は、それら自体が、他の本発明の化合物のプロドラッグとして作用することがある。
1つ以上の不斉炭素原子を含む本発明の化合物は、2つ以上の立体異性体として存在することができる。本発明に従った化合物が少なくとも1つのキラル中心を有する場合、該化合物は、それに応じてエナンチオマーとして存在することがある。化合物が2つ以上のキラル中心を有する場合、該化合物はさらにジアステレオマーとして存在することがある。同様に、本発明の化合物が、キラリティーが存在するシクロプロピル基や他の環式基、アルケニル基、又はアルケニレン基を有する場合は、シス/トランス(又はZ/E)幾何異性体が可能である。本発明の化合物が、例えば、ケト基、オキシム基、又は芳香族モイエティを有する場合は、互変異性が起こりうる。ある単一の化合物が2種以上の異性を示すことがある。
【０２０６】
本発明の化合物の全ての立体異性体、幾何異性体、及び互変異性体(2種以上の異性を示す化合物、及びこれらの1つ以上の混合物を含む)も、本発明の範囲内に含まれる。対イオンが光学的に活性である場合の酸付加塩や塩基性塩〔例えば、D-乳酸塩やL-リシン、又はラセミ体(例えば、DL-酒石酸塩やDL-アルギニン)〕も、本発明の範囲内に含まれる。
【０２０７】
シス／トランス異性体は、当業者によく知られている従来の技術(例えば、クロマトグラフィーや分別再結晶)によって分離することができる。個々のエナンチオマーの調製/単離のための従来の技法としては、適切な光学的純粋前駆体からのキラル合成、又は、例えば、キラル高圧液体クロマトグラフィー(HPLC)や超臨界液体クロマトグラフィー(SFC)を用いたラセミ体(又は塩もしくは誘導体のラセミ体)の分割が挙げられる。
【０２０８】
これとは別に、ラセミ体(又はラセミ前駆体)は、適切な光学活性化合物(例えばアルコールと反応させることもできるし、あるいは該化合物が酸性もしくは塩基性モイエティを有する場合は、酒石酸や1-フェニルエチルアミン等の酸又は塩基と反応させることもできる。こうして得られるジアステレオマー混合物は、クロマトグラフィー及び/又は分別再結晶によって分離することができ、ジアステレオ異性体の一方もしくは両方を、当業者によく知られている手段によって対応する純粋エナンチオマーに転化させることができる。
【０２０９】
立体異性集合体は、当業者に公知の従来の技法によって分離することができ、例えば、“Stereochemistry of Organic Compounds”by E L Eliel(Wiley,New York,1994)を参照のこと(該文献の開示内容全てを参照により本明細書に含める)。
【０２１０】
本発明はさらに、同じ原子番号を有するが、原子質量又は原子質量数が、自然界に通常見出される原子質量又は原子質量数とは異なる原子で1つ以上の原子が置き換えられている場合の、本発明の同位体標識化合物を含む。本発明の化合物中に組み込むのに適した同位体の例としては、水素の同位体(例えば、2Hや3H)、炭素の同位体(例えば、11C、13C、及び14C)、塩素の同位体(例えば36Cl)、フッ素の同位体(例えば18F)、ヨウ素の同位体(例えば、123Iや125I)、窒素の同位体(例えば、13Nや15N)、酸素の同位体(例えば、15O、17O、及び18O)、リンの同位体(例えば32P)、及びイオウの同位体(例えば35S)等が挙げられる。本発明の特定の同位体標識化合物(例えば、放射性同位元素を組み込んだ化合物)は、薬物/基質組織分布の研究において有用である。放射性同位体であるトリチウム(3H)と炭素-14(14C)は、組込みが容易であって迅速な検出手段であることから、この目的に対して特に有用である。より重い同位体(例えば、重水素2H))による置換は、代謝的安定性がより高くなることから特定の治療上の利点(例えば、インビボ半減期の増大や必要用量の減少)をもたらすことがあり、従って、場合によっては好ましいことがある。11C、18F、15O、及び13N等の陽電子放出同位体(例えば、)による置換は、基質受容体占有を調べるための陽電子放出断層撮影法(PET)研究において有用なことがある。
【０２１１】
本発明の同位体標識化合物は、一般には、当業者に公知の従来の技法によって、あるいは非標識試薬の代わりに適切な同位体標識試薬を使用して、本明細書に記載のプロセスと類似のプロセスによって調製することができる。
【０２１２】
本発明に従った医薬的に許容できる溶媒和物は、再結晶溶媒が同位体で置換されていてよい場合(例えば、D2O、d6-アセトン、又はd6-DMSO)の溶媒和物を含む。
医薬として使用するよう意図された本発明の化合物は、結晶生成物として、非晶質生成物として、あるいはこれらの混合物として投与することができる。本発明の化合物は、沈殿法、再結晶法、凍結乾燥法、噴霧乾燥法、又は蒸発乾燥法等の方法によって、例えば固体プラグ、粉末、又は皮膜として得ることができる。この目的に対しては、マイクロ波乾燥や高周波乾燥も使用することができる。
【０２１３】
本発明の化合物は、単独でも、本発明の1種以上の他の化合物と組み合わせても投与することができる。本発明の化合物は一般に、医薬的に許容できる1種以上の賦形剤と関連した製剤として投与される。“賦形剤”という用語は、ここでは本発明の化合物以外の任意の成分を表すために使用されている。賦形剤の選択は、かなりの程度まで、特定の投与方法、溶解性と安定性に及ぼす賦形剤の影響、及び剤形の特質等のファクターに依存する。
【０２１４】
本発明の化合物の送達に適した医薬組成物、及びそれらの調製方法は、当業者には明らかであろう。このような医薬組成物とそれらの調製方法は、例えば、‘Remington’s Pharmaceutical Sciences’,19thEdition(Mack Publishing Company,1995)(該文献の開示内容全てを参照により本明細書に含める)中に記載されている。
【０２１５】
経口投与
本発明の化合物は、経口で投与することができる。経口投与は、嚥下を伴ってもよいし(従って化合物が胃腸管に入る)、あるいは化合物が口から直接血流に入る口腔投与や舌下投与を使用することもできる。
【０２１６】
経口投与に適した製剤は、錠剤;粒子、液体、もしくは粉末を収容するカプセル;トローチ剤(液体充填を含む);チューズ;マルチ粒子やナノ粒子;ゲル;固溶体;リポソーム;皮膜(粘液接着剤を含む);オビュール;スプレー;等の固体製剤及び液体製剤を含む。
【０２１７】
液体製剤としては、懸濁液、溶液、シロップ、及びエリキシル剤等がある。このような製剤は、ソフトもしくはハードカプセル中フィラーとして使用することができ、一般には、キャリャー(例えば、水、エタノール、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、メチルセルロース、又は適切なオイル)ならびに1種以上の乳化剤及び/又は懸濁剤を含む。液体製剤はさらに、例えばサシェから固体を再構成することによって調製できる。
【０２１８】
本発明の化合物はさらに、“Expert Opinion in Therapeutic Patents,11(6),981-986”by Liang and Chen(2001)(該文献の開示内容全てを参照により本明細書に含める)に記載の剤形のような、速溶性で速崩壊性の剤形にて使用することもできる。
【０２１９】
錠剤剤形の場合、用量にもよるが、薬物が、剤形の1重量%〜80重量%を、より典型的には剤形の5重量%〜60重量%を構成する。薬物のほかに、一般に錠剤も崩壊剤を含有する。崩壊剤の例としては、グリコール酸澱粉ナトリウム、カルボキシメチルセルロースナトリウム、カルボキシメチルセルロースカルシウム、クロスカルメロースナトリウム、クロスポビドン、ポリビニルピロリドン、メチルセルロース、微晶質セルロース、低級アルキル置換ヒドロキシプロピルセルロース、澱粉、プレゼラチン化澱粉、及びアルギン酸ナトリウム等が挙げられる。崩壊剤は一般に、剤形の1重量%〜25重量%を、好ましくは5重量%〜20重量%を構成する。
【０２２０】
錠剤製剤に凝集特性を付与するために、一般には結合剤が使用される。適切な結合剤としては、微晶質セルロース、ゼラチン、糖類、ポリエチレングリコール、天然ガム、合成ガム、ポリビニルピロリドン、プレゼラチン化澱粉、ヒドロキシプロピルセルロース、及びヒドロキシプロピルメチルセルロース等がある。錠剤はさらに、ラクトース(一水和物、噴霧乾燥一水和物、及び無水物等)、マンニトール、キシリトール、デキストロース、スクロース、ソルビトール、微晶質セルロース、澱粉、及び二塩基性リン酸カルシウム二水和物等の希釈剤を含有してよい。
【０２２１】
錠剤はさらに、必要に応じて、ラウリル硫酸ナトリウムやポリソルベート80等の界面活性剤、及び二酸化ケイ素やタルク等の流動促進剤を含んでよい。界面活性剤や滑剤が存在する場合、界面活性剤は通常、錠剤の0.2重量%〜5重量%の量にて、滑剤は通常、錠剤の0.2重量%〜1重量%の量にて存在する。
【０２２２】
錠剤はさらに、一般には、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸亜鉛、ステアリルフマル酸ナトリウム、及びステアリン酸マグネシウムとラウリル硫酸ナトリウムとの混合物等の滑剤を含有する。
【０２２３】
滑剤は一般に、錠剤の0.25重量%〜10重量%の量にて、好ましくは錠剤の0.5重量%〜3重量%の量にて存在する。
他の従来の成分としては、酸化防止剤、着色剤、風味剤、保存剤、及び矯味剤等がある。
【０２２４】
代表的な錠剤は、最大で約80重量%の薬物、約10重量%〜約90重量%の結合剤、約0重量%〜約85重量%の希釈剤、約2重量%〜約10重量%の崩壊剤、及び約0.25重量%〜約10重量%の滑剤を含有する。
【０２２５】
錠剤ブレンドを直接もしくはローラーによって圧縮して錠剤を作製することができる。これとは別に、錠剤ブレンド又はブレンドの個々の部分を、錠剤化の前に、湿潤粒状化させたり、乾燥粒状化させたり、溶融粒状化させたり、溶融凝結させたり、あるいは押出したりすることができる。最終的な製剤は、1つ以上の層を含んでよく、またコーティングすることもできるし、そうしなくてもよく、あるいはカプセル封入することもできる。
【０２２６】
錠剤の処方は、“Pharmaceutical Dosage Forms:Tablets,Vol.1”by H.Lieberman and L.Lachman,Marcel Dekker,N.Y.,1980(ISBN 0-8247-6918-X)(該文献の開示内容全てを参照により本明細書に含める)に詳細に説明されている。
【０２２７】
経口投与用の固体製剤は、即時放出及び/又はa)調整放出となるように調剤することができる。調整放出製剤としては、遅延放出製剤、徐放出製剤、脈動放出製剤、制御放出製剤、標的放出製剤、及びプログラム化放出製剤等がある。
【０２２８】
適切な調整放出製剤が、米国特許第6,106,864号に記載されている。高エネルギー分散や浸透性被覆粒子等の他の適切な放出技術の詳細は、“Verma et al,Pharmaceutical Technology On-line,25(2),1-14(2001)”に記載されている。制御放出を達成するためにチューインガムを使用することがWO00/35298に記載されている。これら文献の開示内容全てを参照により本明細書に含める。
【０２２９】
非経口投与
本発明の化合物はさらに、血流中に、筋肉中に、又は内臓器官中に直接投与することができる。非経口投与のための適切な方法としては、静脈内投与、動脈内投与、腹腔内投与、くも膜下投与、脳室内投与、尿道内投与、胸骨内（intrasternal）、頭蓋内投与、筋内投与、及び皮下投与等がある。非経口投与のための適切な器具としては、ニードル(マイクロニードルを含む)インジェクター、ニードルフリーインジェクター、及び点滴用器具等がある。
【０２３０】
非経口製剤は、一般には、塩類、炭水化物、及び緩衝剤(好ましくは3〜6のpHにする)等の賦形剤を含有してよい水溶液であるが、用途によっては、無菌非水溶液として、あるいは適切なビヒクル(例えば、無菌ピロゲン非含有水)と併せて使用する乾燥形として適切に製剤することができる。
【０２３１】
無菌条件下での(例えば凍結乾燥による)非経口製剤の調製は、当業界によく知られている標準的な製薬技術を使用して容易に達成することができる。
非経口溶液の調製において使用される本発明の化合物の溶解性は、適切な製剤技法(例えば、溶解性増大剤の組み込み)を使用することによって高めることができる。非経口投与用の製剤は、即時放出及び/又は調整放出されるように製剤することができる。調整放出製剤としては、遅延放出製剤、徐放出製剤、脈動放出製剤、制御放出製剤、標的放出製剤、及びプログラム化放出製剤等がある。従って本発明の化合物は、活性化合物の調整放出をもたらす埋め込みデポーとして投与できるように、固体、半固体、もしくはチキソトロープ液体として製剤することができる。このような製剤の例としては、薬物被覆ステントやPGLAミクロスフィア等が挙げられる。
【０２３２】
局所投与
本発明の化合物はさらに、皮膚や粘膜に局所的に投与することもできる(すなわち、皮膚投与や経皮投与)。この目的に対する典型的な製剤としては、ゲル、ヒドロゲル、外用水薬、溶液、クリーム、軟膏、粉剤、ドレッシング剤、フォーム剤、フィルム剤、皮膚パッチ剤、ウェハー剤、埋め込み剤、スポンジ剤、繊維剤、包帯剤、及びマイクロエマルジョン剤等がある。リポソーム剤も使用することができる。代表的なキャリヤーとしては、アルコール、水、鉱油、液体ワセリン、白色ワセリン、グリセリン、ポリエチレングリコール、及びプロピレングリコール等がある。浸透エンハンサーを組み込むことができる。これについては、例えば“J.Pharm Sci,88(10),955-958”by Finnin and Morgan(October 1999)を参照のこと。局所投与の他の方法は、エレクトロポレーション、イオントフォレシス、フォノフォレシス、ソノフォレシス、及びマイクロニードル注射もしくはニードルフリー注射〔例えば、Powderject(商標)やBioject(商標)など〕によるデリバリーを含む。該文献の開示内容全てを参照により本明細書に含める。
【０２３３】
局所投与用の製剤は、即時放出及び/又は調整放出されるように製剤することができる。調整放出製剤としては、遅延放出製剤、徐放出製剤、脈動放出製剤、制御放出製剤、標的放出製剤、及びプログラム化放出製剤等がある。
【０２３４】
吸入投与/鼻腔内投与
本発明の化合物はさらに、一般には乾燥粉末の形で〔例えばラクトースとのドライブレンドという混合物として単独で、又は例えばリン脂質(例えばホスファチジルコリン)と混合した混合成分粒子として単独で〕乾燥粉末吸入器から鼻腔内投与もしくは吸入投与することができ、あるいは加圧容器、ポンプ、噴霧器、アトマイザー(霧状ミスト生成させるために電気流体力学を使用するアトマイザーが好ましい)、もしくはネブライザーからエアロゾルスプレーとして鼻腔内投与もしくは吸入投与することもでき、このとき1,1,1,2-テトラフルオロエタンや1,1,1,2,3,3,3-ヘプタフルオロプロパン等の適切な噴射剤を使用する場合と使用しない場合がある。鼻腔内使用の場合、粉末は生物接着剤(例えば、キトサンやシクロデキストリン)を含んでよい。
【０２３５】
加圧容器、ポンプ、噴霧器、アトマイザー、又はネブライザーは、例えば、エタノール、水性エタノール、又は活性化合物を分散させるための、活性化合物を可溶化させるための、もしくは活性化合物の放出を高めるための適切な代替薬剤;溶媒としての噴射剤;及び任意の界面活性剤(例えば、トリオレイン酸ソルビタン、オレイン酸、又はオリゴ乳酸等);を含む本発明の化合物の溶液もしくは懸濁液を収容する。
【０２３６】
乾燥粉末製剤又は懸濁液製剤にて使用する前に、薬物が、吸入によるデリバリーに適したサイズ(一般には5ミクロン未満)に微粒子化される。これは、スパイラルジェット微粉砕、流動床ジェット微粉砕、ナノ粒子を形成させるための超臨界流体プロセシング、高圧均質化、又は噴霧乾燥等の任意の適切な粉末化法によって達成することができる。
Tyc4  吸入器や注入器において使用するためのカプセル(例えば、ゼラチンやHPMCから造られる)、ブリスター、及びカートリッジは、本発明の化合物、適切な粉末ベース(例えば、ラクトースや澱粉)、及び効能調節剤(例えば、L-ロイシン、マンニトール、又はステアリン酸マグネシウム)の粉末混合物を収容するように製剤することができる。ラクトースは、無水物であっても一水和物の形態であってもよいが、好ましいのは後者である。他の適切な賦形剤としては、デキストラン、グルコース、マルトース、ソルビトール、キシリトール、フルクトース、スクロース、及びトレハロース等がある。
【０２３７】
霧状ミスト生成させるのに電気流体力学を利用するアトマイザーにおいて使用するための適切な溶液製剤は、一回の作動当たり1μg〜20μgの本発明の化合物を収容してよく、また作動量は、1μlから100μlまで変わってよい。典型的な溶液製剤は、本発明の化合物、プロピレングリコール、滅菌水、エタノール、及び塩化ナトリウムを含む。プロピレングリコールの代わりに使用できる代替溶媒としては、グリセロールやポリエチレングリコール等がある。
【０２３８】
吸入投与/鼻腔内投与用に意図された本発明の製剤に、適切な風味剤(例えば、メントールやレボメントール)又は甘味料(例えば、サッカリンやサッカリンナトリウム)を加えることができる。
【０２３９】
吸入投与/鼻腔内投与用の製剤は、例えばポリ(DL-乳酸-co-グリコール酸)(PGLA)を使用して、即時放出及び/又は調整放出となるように製剤することができる。調整放出製剤としては、遅延放出製剤、徐放出製剤、脈動放出製剤、制御放出製剤、標的放出製剤、及びプログラム化放出製剤等がある。
【０２４０】
乾燥粉末吸入器と乾燥粉末エアロゾルの場合、単位用量は、定量を送達する弁によって決まる。本発明に従った単位用量は、一般には、所望量の本発明の化合物を含有する定量もしくは“パフ”を投与するように準備される。全体としての日用量は、1回用量にて投与することもできるし、あるいはより一般的には、一日を通しての分割用量として投与することもできる。
【０２４１】
直腸投与/膣内投与
本発明の化合物は、例えば、坐剤、膣坐剤、もしくは浣腸剤の形で、直腸投与または膣内投与することができる。ココアバターが従来の坐剤ベースであるが、必要に応じて種々の代替品を使用することができる。直腸投与/膣内投与用の製剤は、即時放出及び/又は調整放出となるように製剤することができる。調整放出製剤としては、遅延放出製剤、徐放出製剤、脈動放出製剤、制御放出製剤、標的放出製剤、及びプログラム化放出製剤等がある。
【０２４２】
眼内投与
本発明の化合物はさらに、pH調整した等張性無菌塩水中の微粒子化懸濁液または微粒子化溶液の形で、眼や耳に直接投与することができる。眼内・耳内投与に適した他の製剤としては、軟膏;生分解性(例えば、吸収性ゲルスポンジやコラーゲン)または非生分解性(例えばシリコーン)のインプラント、ウエハー、レンズ、および粒状物;または小嚢システム(例えば、ニオソームやリポソーム);等がある。架橋ポリアクリル酸、架橋ポリビニルアルコール、架橋ヒアルロン酸、セルロースポリマー(例えば、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、もしくはメチルセルロース)、またはヘテロポリサッ例えばカライドポリマー(例えばゲランガム)等のポリマーを塩化ベンザルコニウム等の保存剤と共に組み込むことができる。このような製剤はさらに、イオントフォレシスによってデリバーすることができる。
【０２４３】
眼内投与/耳内投与用の製剤は、即時放出及び/又は調整放出となるように製剤することができる。調整放出製剤としては、遅延放出製剤、徐放出製剤、脈動放出製剤、制御放出製剤、標的放出製剤、及びプログラム化放出製剤等がある。
【０２４４】
他の技術
本発明の化合物は、溶解性、溶解速度、風味マスキング、バイオアベイラビリティ、及び/又は上記投与方式のいずれかにて使用する上での安定性を改良するために、シクロデキストリンとその適切な誘導体やポリエチレングリコール含有ポリマー等の可溶性高分子エンティティと組み合わせることができる。
【０２４５】
例えば薬物-シクロデキストリン錯体は一般に、ほとんどの剤形及び投与経路に対して有用であることがわかっている。包接錯体と非包接錯体の両方を使用することができる。薬物との直接錯形成に代わるものとして、シクロデキストリンを補助添加剤として、すなわちキャリヤー、希釈剤、または可溶化剤として使用することができる。これらの目的に対して最も一般的に使用されるのがα-シクロデキストリン、β-シクロデキストリン、及びγ-シクロデキストリンであり、これらの例が、PCT公開番号WO91/11172、WO94/02518、及びWO98/55148(これら特許文献の開示内容全てを参照により本明細書に含める)に記載されている。
【０２４６】
用量
投与される活性化合物の量は、治療される患者、障害もしくは疾病の重症度、投与速度、活性化合物の性質、及び処方する医師の判断に依存する。しかしながら、効果的な用量は一般に、1回用量もしくは分割用量にて、体重1kg当たり一日当たり約0.001〜約100mgの範囲であり、好ましくは約0.01〜約35mg/kg/日である。体重が70kgのヒトの場合、これは約0.07〜約7000mg/日であり、好ましくは約0.7〜約2500mg/日である。場合によっては、前記範囲の下限未満の用量レベルで充分であるかもしれない。一方、他のケースでは、有害な副作用を引き起こすことなくより多くの用量を使用することができ、このときより多い用量は一般に、一日全体にわたる投与のために幾つかのより少ない用量に分割される。
【０２４７】
キットオブパーツ
例えば、ある特定の疾患もしくは疾病を治療するためには、活性化合物の組み合わせを投与するのが望ましい場合があるので、2種以上の医薬組成物(それらのうちの少なくとも1種が本発明に従った化合物を含有する)を、医薬組成物の同時投与に好適なキットの形で適切に組み合わせることができる、ということも本発明の範囲内である。従って本発明のキットは、2種以上の個別の医薬組成物(このうちの少なくとも1種が本発明の化合物を含有する)、及び前記組成物を個別に保持するための手段(例えば、容器、分割ボトル、又は分割ホイルパケット等)を含む。このようなキットの例は、錠剤やカプセル等の包装に使用されるおなじみのブリスターパックである。
【０２４８】
本発明のキットは、異なる剤形(例えば、経口投与や非経口投与用)を投与するのに、個別の組成物を異なる投与間隔で投与するのに、あるいは個別の組成物を互いに対照しつつ滴定するのに特に適している。コンプライアンスを補助するために、キットは一般に投与指示書を含み、またキットには記憶補助物が用意されている。
【０２４９】
本明細書では、下記のような略語が使用されている:  Ac(アセチル);AcCl(塩化アセチル);AcOHまたはHOAc(酢酸);Ac2O(無水酢酸);aq.(水性);Boc又はboc(tert-ブトキシカルボニル);BOP〔(ベンゾトリアゾール-1-イルオキシ)トリス(ジメチルアミノ)ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート〕;B2pin2〔ビス(ピナコラート)ジボロン〕;ca.(約またはおよそ);CDCl3(重水素化クロロホルム);CH2Cl2及び/又はDCM(ジクロロメタン);DABCO(1,4-ジアザビシクロ[2,2,2]オクタン);DAST(三フッ化ジエチルアミノ硫黄);DBU(1,8-ジアザビシクロ[5,4,0]ウンデセ-7-エン);DCE(ジクロロエタン);DEA(ジエチルアミン);DIBALまたはDIBAL-H(水素化ジイソブチルアルミニウム);DIC(ジイソプロピルカルボジイミド);DIPEAまたはヒューニッヒ塩基(N,N-ジイソプロピルエチルアミン);DHP((ジヒドロピラン);DMA(ジメチルアセトアミド);DMF(ジメチルホルムアミド);DME(エチレングリコール);DMP(デス・マーチン・ペルヨージナン);DMAP(4-ジメチルアミノピリジン);DMSO(ジメチルスルホキシド);DMSO-d6(重水素化ジメチルスルホキシド);EDCまたはEDCl〔1-エチル-3-(3-ジメチルアミノプロピル)-カルボジイミド〕;Et(エチル);Et3NまたはTEA(トリエチルアミン);EtOH(エタノール);EtOAc(酢酸エチル);Et2O(ジエチルエーテル);gまたはgm(グラム);HATU〔2-(7-アザ-1H-ベンゾトリアゾール-1-イル)-1,1,3,3-テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート〕;HBTU〔o-(ベンゾトリアゾール-1-イル)-1,1,3,3-テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート〕;HFIP(1,1,1,3,3,3-ヘキサフルオロ-2-プロパノール);HMPT〔トリス(ジメチルアミノ)ホスフィン〕;HPLC(高速液体クロマトグラフィー);HOBT(1-ヒドロキシベンゾトリアゾール);hまたはhr(時間);iBu(イソブチル);IPA(イソプロピルアルコール);iPr(イソプロピル);iPrOAc(酢酸イソプロピル);KHMDS〔カリウムビス(トリメチルシリル)アミド〕;KOAc(酢酸カリウム);LAH(水素化リチウムアルミニウム);LCMS(液体クロマトグラフィー-質量分析法);LDA(リチウムジイソプロピルアミド);LiHMDS〔リチウムビス(トリメチルシリルアミド)〕;mCPBA(メタ-クロロペルオキシ安息香酸);Me(メチル);MeOH(メタノール);MeOD(重水素化メタノール);MeCN(アセトニトリル);mまたはmin(分);mg(ミリグラム);Ms(メチルスルホニル);MsCl(塩化メタンスルホニル);N(ノルマル);NBS(N-ブロムスクシンイミド);NCS(N-クロロスクシンイミド);NFSI(N-フルオロジベンゼンスルホンイミド);NMR(核磁気共鳴);nBu(n-ブチル);nBuLi(n-ブチルリチウム);nPr(n-プロピル);Pd/C(炭素担持パラジウム);Pd2(dba)3〔トリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(0)〕;Pd(dppf)Cl2〔[1,1’-ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン]ジクロロパラジウム(II)〕;Pd[P(o-tol)3]2〔ビス[トリス(2-メチルフェニル)ホスフィン]パラジウム〕;Ph(フェニル);PTSAまたはpTSA(p-トルエンスルホン酸);PPTS(p-トルエンスルホン酸ピリジニウム);Rt(保持時間);rt(室温);RuCl(p-シメン)[(R,R)-Ts-DPEN]〔[N-[(1R,2R)-2-(アミノ-kN)-1,2-ジフェニルエチル]-4-メチルベンゼンスルホンアミダト-kN]クロロ[(1,2,3,4,5,6-η)-1-メチル-4-(1-メチルエチル)ベンゼン]-ルテニウム〕;sまたはsec(秒);Selectfluor〔N-クロロメチル-N’-フルオロトリエチレンジアンモニウムビス(テトラフルオロボレート)〕;SEM(2-トリメチルシリルエトキシメトキシ);SFC(超臨界流体クロマトグラフィー);Si-Thiol(シリカ1-プロパンチオール);SK-CCO2-A〔2-(ジメチルアミノメチル)フェロセン-1-イル-パラジウム(II)クロリドジノルボニルホスフィン〕;T3P(無水プロピルホスホン酸);TBAF(フッ化テトラブチルアンモニウム);TBDMSCl(塩化t-ブチル-ジメチルシリル);TBMEまたはMTBE(tert-ブチルメチルエーテル);t-BuOH(2-メチル-2-プロパノール、tert-ブタノール、またはtert-ブチルアルコール);tBu-Xphos(2-ジ-tert-ブチルホスフィノ-2’-4’-6’-トリイソプロピルビフェニル);TDA-1〔トリス[2-(2-メトキシエトキシ)エチル]アミンまたはトリス(3,6-ジオキサヘプチル)アミン〕;TEA、NEt3、またはEt3N(トリエチルアミン);TFA(トリフルオロ酢酸);THF(テトラヒドロフラン);THP(テトラヒドロピラン);TLC(薄層クロマトグラフィー);TMS(トリメチルシリル);TMSCl(塩化トリメチルシリル);TMSCF3〔トリメチル(トリフルオロメチル)シラン〕;Tosまたはtosyl(4-トルエンスルホニル);TOSMIC(p-トルエンスルホニルメチルイソシアニド);UV(紫外線)。
【実施例】
【０２５０】
本明細書で使用する新規出発物質の反応と製造は全て従来どおりであり、適切な試薬、及びそれらの性能もしくは調製のための反応条件、ならびに所望の生成物を単離するための手順は当業者によく知られており、前述の文献及び該文献に記載の例と調製を参照すればよい。
【０２５１】
一般的な合成スキーム
一般的な合成プロセスにおいては、化合物IXで示される一般構造の化合物は、メソッドAに従って製造される。
【０２５２】
【化１０４】
2021512131.tif 000106
【０２５３】
化合物Iは、メタノール中アンモニアを使用して第一アミドに転化させることができ、次いでこの第一アミドとオルトギ酸トリエチルとの縮合反応により化合物IIIが得られる。化合物IIIは、BOP試薬とDBUの存在下にてアミンIVを使用して、あるいはBOP試薬とDBUの代わりにPOCl3を使用して化合物Vに転化させることができる。塩基(例えばCs2CO3)と溶媒(例えば、DMAやDMSO)の存在下にて化合物VI等の有効な求核試薬を使用して、化合物Vの求核性芳香族置換を行って化合物VIIを得ることができる。化合物VIが弱い求核試薬である場合は、KF等の添加剤を使用することができる。保護基はTFA等の酸を使用して除去することができ、次いでショッテン・バウマン条件下にて酸塩化物でアシル化して、化合物IXを得ることができる。R、R’、及びR”は、ここに記載の実施態様、スキーム、実施例、及び特許請求の範囲に定義のとおりである。
【０２５４】
一般的な合成プロセスにおいては、化合物XIXとXXで示される一般構造の化合物は、メソッドBに従って製造される。
【０２５５】
【化１０５】
2021512131.tif 000107
【０２５６】
第一アミドIIは、トリホスゲンを使用してジオンXに転化させることができる。ジオンXは、POCl3を使用してジクロリドに転化させることができ、引き続き塩基性条件下でアミンIVを使用して化合物XIIに転化させることができる。化合物XIは、塩基性条件下で酸素求核試薬または窒素求核試薬を使用して化合物XIIIまたはXIVに転化させることができる。化合物XIIIまたはXIVは、塩基性条件下で求核試薬VIを使用して化合物XVまたはXVIに転化させることができる。TFA等の酸を使用して保護基を除去して、化合物XVIIまたはXVIIIを得ることができ、次いでショッテン・バウマン条件下にて酸塩化物でアシル化して、化合物XIXまたはXXを得ることができる。R、R’、及びR”、R’”、R””、及びR””’は、ここに記載の実施態様、スキーム、実施例、及び特許請求の範囲に定義のとおりである。
【０２５７】
一般的な合成プロセスにおいては、化合物XXXIIIとXXXIVで示される一般構造の化合物は、メソッドCに従って製造される。
【０２５８】
【化１０６】
2021512131.tif 000108
【０２５９】
化合物XXIまたはXXIIは、塩基性条件下にて求核試薬VIを使用して化合物XXIIIまたはXXIVに転化させることができる。ニトロ基を還元して、それぞれ化合物XXVまたはXXVIを得ることができる。化合物XXVまたはXXVIは第一アミドに転化させることができ、次いでオルトギ酸トリエチルとの縮合反応により化合物XXVIIまたはXXVIIIを得ることができる。      
【０２６０】
化合物XXVIIまたはXXVIIIは、BOPとDBUの存在下でアミンIVを使用して化合物XXIXまたはXXXに転化させることができる。TFA等の酸を使用して保護基を除去して、化合物XXXIまたはXXXIIを得ることができ、次いでショッテン・バウマン条件下にて酸塩化物でアシル化して、化合物XXXIIIまたはXXXIVを得ることができる。R、R’、及びR”、R’”、R””、及びR””’は、ここに記載の実施態様、スキーム、実施例、及び特許請求の範囲に定義のとおりである。
【０２６１】
一般的な合成プロセスにおいては、化合物LIIIとLIVで示される一般構造の化合物は、メソッドDに従って製造される。
【０２６２】
【化１０７】
2021512131.tif 000109
【０２６３】
化合物XXXVまたはXXXVIは、塩基性条件下でアミンXXXVIIを使用して化合物XXXVIIIまたはXXXIXに転化させることができる。化合物XXXVIIIまたはXXXIXは、塩基性条件下でアクリル酸t-ブチルとパラジウム触媒を使用して、アルケンXLまたはXLIに転化させることができる。化合物XLまたはXLIは、オゾンを使用してアルデヒドXLIまたはXLIIに転化させることができる。アルデヒドXLIIまたはXLIIIにアリールリチウム化学種を加えると、第二アルコールXLVまたはXLVIが得られる。化合物XLVまたはXLVIは、ピリジン中無水酢酸を使用して化合物XLVIIまたはXLVIIIに転化させることができる。水素雰囲気下にてPd触媒を使用して化合物XLVIIまたはXLVIIIを水素化分解すると、化合物XLIXまたはLが得られる。TFA等の酸を使用して保護基を除去して、化合物LIまたはLIIを得ることができ、次いでショッテン・バウマン条件下にて酸塩化物でアシル化して、化合物LIIIまたはLIXを得ることができる。
【０２６４】
一般的な合成プロセスにおいては、化合物XIX、XX、LXVII、及びLXVIIIで示される一般構造の化合物は、メソッドEに従って製造される。
【０２６５】
【化１０８】
2021512131.tif 000110
【０２６６】
化合物XXIIIまたはXXIVは、酢酸の存在下にてシアン酸カリウムを使用して化合物LVまたはLVIに転化させることができる。これとは別に、メタノール中KOHを使用してエステルを加水分解し、得られたカルボン酸を、HATUと塩化アンモニウムを使用して第一アミドに転化させ、次いでチオホスゲン（トリホスゲン、triphosgene）を使用して環化して化合物LVまたはLVIを得ることができる。ジオンLVまたはLVIは、POCl3を使用して二塩化物LVIIまたはLVIIIに転化させることができる。塩化アリールLVIIまたはLVIIIを、DIEAの存在下にてアミンIVで置換して化合物LIXまたはLXを得ることができる。KFとDIEAの存在下にてDMSO等の極性溶媒中で、窒素求核試薬または酸素求核試薬を使用して求核性芳香族置換を行うと、化合物XV、XVI、LXIII、またはLXIVが得られる。酸性条件下で保護基を除去し、得られたアミンを、塩基性条件下にて酸塩化物を使用して化合物XIX、XX、LXVII、またはLXVIIIに転化させることができる。R、R’、及びR”、R’”、R””、及びR””’は、ここに記載の実施態様、スキーム、実施例、及び特許請求の範囲に定義のとおりである。
【０２６７】
一般的な合成プロセスにおいては、化合物LXXVIII及びLXXIXで示される一般構造の化合物は、メソッドGに従って製造される。
【０２６８】
【化１０９】
2021512131.tif 000111
【０２６９】
化合物LXIXは、BOP試薬とDBUの存在下にて、あるいはBOP試薬とDBUの代わりにPOCl3を使用して化合物LXXに転化させることができる。Cs2CO3等の塩基及びDNA等の溶媒の存在下にて、VIのような化合物による求核性芳香族置換を行ってLXXI等の化合物を得る。化合物LXXIは、DCM等の溶媒中m-CPBAを使用して、対応するスルホンLXXIIまたはスルホキシドLXXIIIに酸化することができる。THF等の適切な溶媒中にてLHMDS等の塩基の存在下でアルコールによる求核性芳香族置換を行って、化合物LXXIVを得ることができる。保護基は酸性条件下で除去することができ、得られたアミンは、塩基性条件下で酸塩化物を使用して化合物LXXVIIIに転化させることができる。これとは別に、スルホンLXXIIまたはスルホキシドLXIIIのアミンによる求核性芳香族置換は、tBuOH等の溶媒中にてDIPEA等の塩基の存在下で果たすことができる。保護基は酸性条件下で除去することができ、得られたアミンは、塩基性条件下で酸塩化物の存在下にて化合物LXXIXに転化させることができる。R、R’、及びR”、R’”、R””、及びR””’は、ここに記載の実施態様、スキーム、実施例、及び特許請求の範囲に定義のとおりである。
【０２７０】
一般的な合成プロセスにおいては、化合物LXXXIV及びLXXXで示される一般構造の化合物は、メソッドHに従って製造される。
【０２７１】
【化１１０】
2021512131.tif 000112
【０２７２】
化合物LXXIVとLXXVを、水素雰囲気下にて炭素担持パラジウム等の触媒の存在下で還元して、化合物LXXXとLXXXIを得ることができる。化合物LXXXとLXXXIは、酸性条件下で脱保護することができ、得られたアミンを、塩基性条件下にて酸塩化物の存在下で対応するアクリルアミドLXXXIV及びLXXXVに転化させることができる。R、R’、及びR”、R’”、R””、及びR””’は、ここに記載の実施態様、スキーム、実施例、及び特許請求の範囲に定義のとおりである。
【０２７３】
一般的な合成プロセスにおいては、化合物(VII)で示される一般構造の化合物は、メソッドIに従って製造される。
【０２７４】
【化１１１】
2021512131.tif 000113
【０２７５】
化合物LXXIを、PdCl(dppf)等の触媒及びNaBH4等の還元剤の存在下で水素化して、化合物LXXXVIを得ることができる。化合物LXXXVIは、DCM等の溶媒中にてm-CPBA等の酸化剤の存在下で、LXXXVIIのようなスルホンまたはLXXXVIIIのようなスルホキシドに酸化することができる。THF等の溶媒中にてLHMDS等の適切な塩基の存在下で、スルホンLXXXVIIまたはスルホキシドLXXXVIIIのアルコールによる求核性芳香族置換を行って、化合物LXXXを得ることができる。保護基は酸性条件下で除去することができ、得られたアミンは、塩基性条件下で酸塩化物を使用して化合物LXXXIVに転化させることができる。これとは別に、tBuOH等の溶媒中にてDIPEA等の塩基の存在下で、スルホンLXXXVIIまたはスルホキシドLXXXVIIIのアミンによる求核性芳香族置換を行って、化合物LXXXIを得ることができる。保護基は酸性条件下で除去することができ、得られたアミンは、塩基性条件下で酸塩化物の存在下で化合物LXXXIVに転化させることができる。R、R’、及びR”、R’”、R””、及びR””’は、ここに記載の実施態様、スキーム、実施例、及び特許請求の範囲に定義のとおりである。
【０２７６】
一般的な合成プロセスにおいては、化合物(XCIII)で示される一般構造の化合物は、メソッドKに従って製造される。
【０２７７】
【化１１２】
2021512131.tif 000114
【０２７８】
標準的なスズキカップリング条件下にて、LXXI等の化合物をLXXXIX等の化合物に転化させることができる。LXXXIX等の化合物は、DCM等の溶媒中にてm-CPBA等の酸化剤でXC等のスルホキシドに酸化することができる。化合物XCは、THF等の溶媒中にてLHMDS等の適切な塩基の存在下で、アルコールによる求核性芳香族置換により化合物XCIに転化させることができる。保護基は酸性条件下で除去することができ、得られたアミンは、塩基性条件下にて酸塩化物の存在で化合物XCIIIに転化させることができる。R、R’、及びR”、R’”は、ここに記載の実施態様、スキーム、実施例、及び特許請求の範囲に定義のとおりである。
【０２７９】
一般的な合成プロセスにおいては、化合物(LXVI)で示される一般構造の化合物は、メソッドLに従って製造される。
【０２８０】
【化１１３】
2021512131.tif 000115
【０２８１】
化合物XCIVは、塩基性条件下で求核試薬VIを使用して化合物XCVに転化させることができる。ニトロ基を還元して化合物XCVIが得られる。化合物XCVIは、K2CO3等の塩基の存在下にてCS2を使用してジチオンXCVIIIに転化させることができる。ジチオンXCVIIIは、NaOH等の塩基の存在下にてヨウ化メチルでアルキル化できる。IV等のアミンによる求核性芳香族置換を、DMA等の溶媒中でK2CO3等の塩基の存在下にて高温で行うと、化合物Cがえられる。化合物Cは、DCM等の溶媒中にてm-CPBA等の酸化剤によりCI等のスルホキシドに酸化することができる。化合物CIは、THF等の溶媒中にてLHMDS等の適切な塩基（base）の存在下で、アルコールによる求核性芳香族置換により化合物LXIIIに転化させることができる。保護基は除去することができ、得られたアミンを、塩基性条件下にて酸塩化物の存在下で化合物LXVIに転化させることができる。R、R’、及びR”、R’”は、ここに記載の実施態様、スキーム、実施例、及び特許請求の範囲に定義のとおりである。
【０２８２】
重要な合成中間体の製造
4-(8-クロロピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(4)の製造
工程1:
【０２８３】
【化１１４】
2021512131.tif 000116
【０２８４】
3-アミノ-2-クロロイソニコチン酸メチル(1)(180g、0.96モル)とメタノール(1.2リットル)をオートクレーブ中に混合して得た混合物に、アンンモニアガスを飽和するまでパージした。混合物を30℃で48時間撹拌した。粗反応混合物のアリコートをLC-MSにより分析し、反応が完了していることを確認した。混合物を濃縮して粗生成物を得、これをEtOAc(200ml)ですりつぶし、濾過し、得られたケークを捕集し、減圧乾燥して3-アミノ-2-クロロピリジン-4-カルボキサミド(2)を白色固体として得た(142g、収率86%)。
【０２８５】
【数１】
2021512131.tif 000117
【０２８６】
工程2:
【０２８７】
【化１１５】
2021512131.tif 000118
【０２８８】
3-アミノ-2-クロロイソニコチンアミド(2)(140g,0.816モル)をオルトギ酸トリエチル(1.5リットル)中に混合して得た混合物を16時間加熱還流した。混合物を25℃に冷却し、濾過した。得られたケークをEtOAc(2×100ml)で洗浄し、乾燥して8-クロロピリド[3,4-d]ピリミジン-4(3H)-オン(3)をオフホワイト色の固体として得た(110g、収率74%)。
【０２８９】
【数２】
2021512131.tif 000119
【０２９０】
工程3:
【０２９１】
【化１１６】
2021512131.tif 000120
【０２９２】
8-クロロピリド[3,4-d]ピリミジン-4(3H)-オン(3)(110g、0.61モル)をDMF(1.6リットル)中に混合して得た懸濁液を撹拌し、これにピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(135g、0.73モル)とBOP(402g、0.91モル)を加え、次いでDBU(184g、1.2モル)を加えた。得られた溶液を25℃で6時間撹拌した。粗反応混合物をLCMSでモニターし、出発物質の殆どが消費されたことを確認した。混合物を氷水(７リットル)で希釈し、EtOAc(4×1.5リットル)で抽出した。有機層を合わせて水(3×3リットル)とブライン(2リットル)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、そして濃縮して粗生成物を得た。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィーによって精製し、5%メタノール/DCMで溶離して4-(8-クロロピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(4)を淡黄色固体として得た(101g、収率47%)。
【０２９３】
【数３】
2021512131.tif 000121
【０２９４】
4-(8-クロロ-6-メチルピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(7)の製造
工程1:
【０２９５】
【化１１７】
2021512131.tif 000122
【０２９６】
8-クロロ-6-メチルピリド[3,4-d]ピリミジン-4(3H)-オン(6)(1.7g、収率95%)は、8-クロロピリド[3,4-d]ピリミジン-4(3H)-オン(3)を製造するのに使用した手順に従って製造した。
【０２９７】
【数４】
2021512131.tif 000123
【０２９８】
工程2:
【０２９９】
【化１１８】
2021512131.tif 000124
【０３００】
4-(8-クロロ-6-メチルピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(7)(1.7g、収率61%)は、4-(8-クロロピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(4) を製造するのに使用した手順に従って製造した。
【０３０１】
【数５】
2021512131.tif 000125
【０３０２】
8-クロロ-6-(トリフルオロメチル)ピリド[3,4-d]ピリミジン-4(3H)-オン(12)の製造
工程1:
【０３０３】
【化１１９】
2021512131.tif 000126
【０３０４】
2-クロロ-6-(トリフルオロメチル)ピリジン-3-アミン(8)(5.0g、25ミリモル)をアセトニトリル(60ml)中に混合して得た溶液にNBS(5.0g、28ミリモル)を加えた。混合物を撹拌しながら3時間加熱還流し、濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、そして石油エーテルで溶離して4-ブロモ-2-クロロ-6-(トリフルオロメチル)ピリジン-3-アミン(9)を赤色の半固体として得た(6.0g、収率86%)。
【０３０５】
【数６】
2021512131.tif 000127
【０３０６】
工程2:
【０３０７】
【化１２０】
2021512131.tif 000128
【０３０８】
4-ブロモ-2-クロロ-6-(トリフルオロメチル)ピリジン-3-アミン(9)(17.7g、64.2ミリモル)をTHF(500ml)中に混合して得た溶液に、窒素雰囲気下にて−78℃でBuLi(ヘキサン中2.5M、116ml、289ミリモル、4.5当量)を加えた。得られた混合物を−75℃で30分撹拌した。次いで、反応混合物中に二酸化炭素ガスを3時間吹き込んだ。反応混合物をNH4Cl飽和溶液(100ml)で急冷し、2NのHClを使用してpH5に調整し、水性層をEtOAc(3×200ml)で抽出した。この粗生成物にEtOAcと石油エーテルの混合物(石油エーテル:EtOAc=15:1、20ml)を加え、混合物を一晩静置した。黄色固体を捕集して3-アミノ-2-クロロ-6-(トリフルオロメチル)ピリジン-4-カルボン酸(10)を黄色固体として得た(3.0g、収率20%)。
【０３０９】
【数７】
2021512131.tif 000129
【０３１０】
工程3:
【０３１１】
【化１２１】
2021512131.tif 000130
【０３１２】
3-アミノ-2-クロロ-6-(トリフルオロメチル)ピリジン-4-カルボン酸(10)(2.5g、10ミリモル)、NH4Cl(723mg、13.5ミリモル)、HATU(5.1g、13ミリモル)、及びDIPEA(4.0g、31ミリモル)をDMF(10ml)中に混合して得た混合物を、窒素雰囲気下にて25℃で3時間撹拌した。LCMS分析により、反応が完了したことを確認した。反応混合物をLiCl水溶液で急冷し、EtOAcで抽出した(2×100ml)。EtOAc層を合わせてブライン(20ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濃縮し、フラッシュクロマトグラフィー(石油エーテル中EtOAc)により精製して、3-アミノ-2-クロロ-6-(トリフルオロメチル)ピリジン-4-カルボキサミド(11)を黄色固体として得た(2.3g、収率92%)。
【０３１３】
【数８】
2021512131.tif 000131
【０３１４】
工程4:
【０３１５】
【化１２２】
2021512131.tif 000132
【０３１６】
8-クロロ-6-(トリフルオロメチル)ピリド[3,4-d]ピリミジン-4(3H)-オン(12)(1.8g、収率70%)は、8-クロロピリド[3,4-d]ピリミジン-4(3H)-オン(3)を製造するのに使用した手順に従って製造した。
【０３１７】
【数９】
2021512131.tif 000133
【０３１８】
4-(6,8-ジクロロピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(16)の製造
工程1:
【０３１９】
【化１２３】
2021512131.tif 000134
【０３２０】
3-アミノ-2,6-ジクロロピリジン-4-カルボキサミド(13)(5g、0.024モル)とN,N-ジメチルホルムアミドジメチルアセタール(3.5g、0.03モル)が入った封管中にて、反応混合物を100℃で15分間加熱した。LCMSと1H-NMRにより、出発物質が消費され、3-アミノ-2,6-ジクロロ-N-((ジメチルアミノ)メチレン)イソニコチンアミドが形成されたことが確認された。粗反応混合物に1,4-ジオキサン(30ml)を加え、次いで炭酸セシウム(15.8g、0.05モル)を加えた。得られた反応混合物を100℃で4時間加熱した。TLC(40%EtOAc/ヘキサン)と1H-NMRにより、反応が完了したことが確認された。反応混合物を減圧にて濃縮した。得られた残留物を氷水(15ml)で希釈し、1NのHClで酸性にした(pH=2〜3)。得られた固体をブフナー漏斗を使用して濾過し、真空オーブン中にて60℃で4時間乾燥した。得られた淡黄色固体をTHF(30ml)ですりつぶし、減圧にて濾過し、真空オーブン中にて60℃で乾燥して、6,8-ジクロロピリド[3,4-d]ピリミジン-4-オール(14)を淡黄色固体として得た(3.5g、収率66%)。
【０３２１】
【数１０】
2021512131.tif 000135
【０３２２】
工程2:
【０３２３】
【化１２４】
2021512131.tif 000136
【０３２４】
6,8-ジクロロピリド[3,4-d]ピリミジン-4-オール(14)(1.0g、4.0ミリモル)にPOCl3(13ml)を加えた。混合物を105℃の油浴中に置き、一晩撹拌して褐色溶液を得た。LCMSにより、生成物をメチルエーテルとして得た(LCMS溶媒マトリックスはメタノールであった)。粗反応混合物を室温に冷却し、減圧にて溶媒を除去した。トルエン(10ml)を加え、減圧にて溶媒を除去した。このプロセスを繰り返して、4,6,8-トリクロロピリド[3,4-d]ピリミジン(15)を黒色固体として得、これを次の工程に直ちに使用した。
【０３２５】
工程3:
【０３２６】
【化１２５】
2021512131.tif 000137
【０３２７】
4,6,8-トリクロロピ1g、リド[3,4-d]ピリミジン(15)(1.1g、4.0ミリモル)をTHF(13ml)中に溶解し、引き続きピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(1.6g、8.7ミリモル)とDIEA(3.5ml、20ミリモル)で処理した。得られた褐色溶液を室温で一晩撹拌した。LCMSにより生成物だけであることが分かった。反応混合物を200mlのH2O中に加え、EtOAc(2×150ml)で抽出した。有機抽出物を合わせて10%NH4Cl(200ml)とブラインで洗浄し、MgSO4で乾燥し、濾過し、そして濃縮して褐色油状物を得た。TLC(50%EtOAc/ヘプタン)Rf0.7。粗生成物をDCM中に溶解し、25gシリカカラム(Biotage)上に添加し、10〜50%EtOAc/ヘプタンで溶離した。Rf0.7のスポットを単離し、4-(6,8-ジクロロピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(16)を黄色固体として得た(1.3g、収率85%)。
【０３２８】
【数１１】
2021512131.tif 000138
【０３２９】
4-(2,8-ジクロロピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(20)の製造
工程1:
【０３３０】
【化１２６】
2021512131.tif 000139
【０３３１】
磁気撹拌棒を装備した2リットルのフラスコに、3-アミノ-2-クロロイソニコチンアミド(17)(50g、292ミリモル)、THF(1リットル)、及びトリホスゲン(43g、146ミリモル)を加えた。フラスコの上に還流冷却器を取り付け、反応混合物を70℃で4時間加熱した。白色沈殿物が生成した。反応混合物を室温に冷却し、減圧にてTHFを除去した。酢酸エチル(1リットル)を加え、濾過により沈殿物を捕集して濃厚な白色固体を得た。濾過ケークを高温のEtOAc(3×1リットル)で洗浄し、乾燥して8-クロロピリド[3,4-d]ピリミジン-2,4(1H,3H)-ジオン(18)を白色固体として得た(55g、収率95%)。
【０３３２】
【数１２】
2021512131.tif 000140
【０３３３】
工程2:
【０３３４】
【化１２７】
2021512131.tif 000141
【０３３５】
磁気撹拌棒を装備した1リットルのフラスコに、8-クロロピリド[3,4-d]ピリミジン-2,4(1H,3H)-ジオン(18)(45g、228ミリモル)、ジエチルフェニルアミン(34.1g、228ミリモル)、及びPOCl3(600ml)を加えた。混合物を120℃で16時間加熱した。混合物を濃縮し、残留物をDCM(3×500ml)で希釈し、氷水中に慎重に注いだ。生成物をDCM(3×500ml)で抽出した。有機層を合わせて無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、そして濃縮して2,4,8-トリクロロピリド[3,4-d]ピリミジン(19)(粗製品55g)を得た。
【０３３６】
【数１３】
2021512131.tif 000142
【０３３７】
工程3:
【０３３８】
【化１２８】
2021512131.tif 000143
【０３３９】
磁気撹拌棒を装備した500mlの丸底フラスコに、2,4,8-トリクロロピリド[3,4-d]ピリミジン(19)(粗製品55g、228ミリモル)、ジオキサン(400ml)、DIPEA(58.9g、457ミリモル)、及びピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(38.2g、206ミリモル)を加えた。混合物を80℃で3時間加熱した。室温に冷却した後、反応混合物を濾過し、残留物をDCMで洗浄して4-(2,8-ジクロロピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(20)を得た(50g、収率57%、2工程)。
【０３４０】
【数１４】
2021512131.tif 000144
【０３４１】
4-[8-クロロ-6-(トリフルオロメチル)ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル]ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(22)の製造
工程1:
【０３４２】
【化１２９】
2021512131.tif 000145
【０３４３】
8-クロロ-6-(トリフルオロメチル)ピリド[3,4-d]ピリミジン-4(3H)-オン(12)(500mg、2ミリモル)をPOCl3(6ml)中に混合して得た混合物に、N,N-ジメチルアニリン(0.5ml)を加え、得られた混合物を110℃で1時間撹拌した。TLCにより、8-クロロ-6-(トリフルオロメチル)ピリド[3,4-d]ピリミジン-4(3H)-オン(12)が消費されたことを確認した。減圧にてPOCl3を除去し、粗製4,8-ジクロロ-6-(トリフルオロメチル)ピリド[3,4-d]ピリミジン(21)を次の工程に使用した。
【０３４４】
工程2:
【０３４５】
【化１３０】
2021512131.tif 000146
【０３４６】
4,8-ジクロロ-6-(トリフルオロメチル)ピリド[3,4-d]ピリミジン(21)(537mg、2ミリモル)をDMA(2.5ml)中に混合して得た溶液に、室温でピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(933mg、5.0ミリモル)を加え、得られた混合物を60℃で1時間撹拌した。LCMSにより反応が完了したことを確認した。粗反応混合物を室温に冷却し、NaHCO3飽和水溶液で慎重に希釈した。水性層をEtOAc(3×50ml)で抽出し、EtOAc層を合わせてブラインで洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィーを使用して精製し、そして石油エーテル中30%EtOAcで溶離して4-[8-クロロ-6-(トリフルオロメチル)ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル]ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(22)を黄色固体(700mg、収率84%)として得た。
【０３４７】
【数１５】
2021512131.tif 000147
【０３４８】
5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-オール(25)の製造
工程1:
【０３４９】
【化１３１】
2021512131.tif 000148
【０３５０】
この反応は2つの並行バッチにて行った。4-ブロモ-5-メチル-1H-インダゾール(23)(100mg、474ミリモル)をDCM(1リットル)中に混合して得た溶液を撹拌し、これにPPTS(12g、47ミリモル)を28℃で加え、次いでDHP(120g、1.4モル)を28℃で一度に加えた。添加後、得られた混合物を30℃で18時間撹拌した。TLC(EtOAc/石油エーテル、1:5)により出発物質が消費されたことを確認した。処理を完了させるために2つのバッチを合わせた。反応混合物をH2O(1.5リットル)で急冷し、層分離を起こさせ、水性層をDCM(1リットル)で抽出した。有機層を合わせてH2O(1リットル)とブライン(1リットル)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濃縮して乾燥させた。残留物を石油エーテル(300ml)ですりつぶして、4-ブロモ-5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール(24)をオフホワイト色の固体(223g、収率80%)として得た。
【０３５１】
【数１６】
2021512131.tif 000149
【０３５２】
工程2:
【０３５３】
【化１３２】
2021512131.tif 000150
【０３５４】
KOH(85.5g、1525ミリモル)をH2O(450ml)中に混合して得た溶液を29℃にてジオキサン(1.8リットル)に加え、次いで4-ブロモ-5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール(24)(150g、508ミリモル)、Pd2(dba)3(18.6g、20.3ミリモル)、及びt-Bu-Xphos(17.3g、40.6ミリモル)を加えた。得られた混合物を脱気し、窒素を3回補充した。得られた混合物を95℃で18時間加熱した。TLC(石油エーテル/EtOAc=4:1)により、出発物質が存在しないことを確認した。反応混合物を30℃に冷却し、溶媒を蒸発除去した。残留物をMTBE(500ml)とH2Oに分配した。水性層をMTBE(500ml)で抽出し、有機層を合わせて捨てた。2NのHClを使用して水相をpH=2〜3に調整し、EtOAc(2×1リットル)で抽出した。有機層を合わせてH2O(0.8リットル)とブライン(1リットル)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、溶媒を蒸発除去した。残留物を石油エーテル(500ml)ですりつぶして、5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-オール(25)をオフホワイト色の固体として得た(95g、収率80%)。
【０３５５】
【数１７】
2021512131.tif 000151
【０３５６】
3-メトキシナフタレン-1-オール(27)の製造
工程1:
【０３５７】
【化１３３】
2021512131.tif 000152
【０３５８】
ナフタレン-1,3-ジオール(26)(25g、156ミリモル)をメタノール(200ml)中に混合して得た溶液に、HClをジオキサン中に混合して得た溶液(4M塩酸100ml)を加え、得られた溶液を20℃で70時間撹拌した。LCMS分析により反応が完了したことを確認し、反応混合物を減圧にて濃縮した。残留物をシリカゲルを使用してフラッシュクロマトグラフィーで精製し、ヘプタン中10%EtOAcで溶離して、3-メトキシナフタレン-1-オール(27)を黄色固体として得た(13g、収率48%)。
【０３５９】
【数１８】
2021512131.tif 000153
【０３６０】
5-クロロ-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-オール(30)の製造
工程1:
【０３６１】
【化１３４】
2021512131.tif 000154
【０３６２】
4-ブロモ-5-クロロ-1H-インダゾール(28)(950mg、4.10ミリモル)をTHF(50ml)中に混合して得た溶液に、DHP(518mg、6.16ミリモル)とPPTS(103mg、0.410ミリモル)を加えた。混合物を50℃で20時間撹拌した。さらに0.5当量のDHP(173mg、2.05ミリモル)を加え、得られた混合物を50℃で16時間撹拌した。LCMSにより、出発物質が消費され、2種の位置異性体が形成されたことがわかった。溶媒を減圧にて除去した。粗生成物をシリカカラムクロマトグラフィー(20g、10%EtOAc/石油エーテル)で精製して、4-ブロモ-5-クロロ-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール(29)を白色固体として得た(850mg、収率66%)。
【０３６３】
【数１９】
2021512131.tif 000155
【０３６４】
工程2:
【０３６５】
【化１３５】
2021512131.tif 000156
【０３６６】
5-クロロ-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-オール(30)(590mg、収率92%)は、5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-オール(25)を製造するのに使用された手順に従って製造した。
【０３６７】
【数２０】
2021512131.tif 000157
【０３６８】
5-エチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-オール(38)の製造
工程1:
【０３６９】
【化１３６】
2021512131.tif 000158
【０３７０】
1-ブロモ-4-フルオロ-2-メトキシベンゼン(31)(24g、2.44ミリモル)をTHF(200ml)中に混合して得た溶液にLDA(64.4ml、129ミリモル、2M)を−78℃にて滴下し、混合物を1時間撹拌した。DMF(10.3g、140ミリモル)を5分で滴下し、反応混合物を−78℃でさらに45分撹拌した。反応混合物を塩酸(200ml、1M)を加えることでクエンチし、混合物を静置して20℃にし、次いでEtOAc(400ml)で希釈した。有機層をH2O(200ml)とブライン(200ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。粗生成物をシリカゲル上カラムクロマトグラフィー(1:10EtOAC/石油エーテル)により精製して、3-ブロモ-6-フルオロ-2-メトキシベンズアルデヒド(32)を黄色固体として得た(18g、収率66%)。
【０３７１】
【数２１】
2021512131.tif 000159
【０３７２】
工程2:
【０３７３】
【化１３７】
2021512131.tif 000160
【０３７４】
3-ブロモ-6-フルオロ-2-メトキシベンズアルデヒド(32)(5g、22ミリモル)とヒドラジン水和物(7ml)をDMSO(150ml)中に混合して得た混合物を130℃で16時間加熱した。LCMS分析によりほとんどが生成物であることがわかった。混合物をEtOAc(400ml)で希釈し、H2O(3×200ml)で洗浄した。有機層をNa2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー(石油エーテル/EtOAc=10/3)で精製して、5-ブロモ-4-メトキシ-1H-インダゾール(33)を黄色固体として得た(2.0g、収率41%)。
【０３７５】
【数２２】
2021512131.tif 000161
【０３７６】
工程3:
【０３７７】
【化１３８】
2021512131.tif 000162
【０３７８】
5-ブロモ-4-メトキシ-1H-インダゾール(33)(2g、8.8ミリモル)と3,4-ジヒドロ-2H-ピラン(1.5g、17.6ミリモル)をDCM(40ml)中に混合して得た混合物にトルエン-4-スルホン酸ピリジニウム(221mg、0.88ミリモル)を加え、混合物を40℃で4時間撹拌した。混合物を濃縮し、残留物をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、石油エーテル/EtOAc(10/1)で溶離して5-ブロモ-4-メトキシ-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール(34)を黄色固体として得た(2.2g、収率80%)。
【０３７９】
【数２３】
2021512131.tif 000163
【０３８０】
工程4:
【０３８１】
【化１３９】
2021512131.tif 000164
【０３８２】
5-ブロモ-4-メトキシ-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール(34)(2.2g、7.1ミリモル)、K2CO3(1.95g、14.1ミリモル)、及びビニルトリフルオロホウ酸カリウム(1.4g、11ミリモル)をDMF(30ml)中に混合して得た混合物にPd(dppf)Cl2(DCM錯体)(577mg、0.71ミリモル)を加え、窒素雰囲気下にて混合物を90℃で16時間撹拌した。LCMSにより殆どが生成物であることが確認された。混合物を濃縮し、残留物をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、石油エーテル/EtOAc(1/5)で溶離して5-エテニル-4-メトキシ-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール(35)を黄色固体として得た(1.3g、収率71%)。
【０３８３】
【数２４】
2021512131.tif 000165
【０３８４】
工程5:
【０３８５】
【化１４０】
2021512131.tif 000166
【０３８６】
5-エテニル-4-メトキシ-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール(35)(1.3g、5.0ミリモル)をメタノール(40ml)中に混合して得た混合物に10%Pd/C(130mg)を加え、混合物を水素雰囲気下にて20℃で4時間撹拌した。濾過と濃縮の後、5-エチル-4-メトキシ-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール(36)が黄色油状物として得られた(1.1g、収率84%)。
【０３８７】
【数２５】
2021512131.tif 000167
【０３８８】
工程6:
【０３８９】
【化１４１】
2021512131.tif 000168
【０３９０】
5-エチル-4-メトキシ-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール(36)(1.1g、4.2ミリモル)をDCM(5ml)中に混合して得た溶液にBBr3(10ml、1M)を−78℃で加え、混合物を20℃で4時間撹拌した。混合物にNaHCO3(飽和溶液、30ml)を加え、水性層をDCM(3×30ml)で抽出した。有機層を合わせてNa2SO4で乾燥し、濾過し、そして濃縮した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、石油エーテル/EtOAc(2/1)で溶離して5-エチル-1H-インダゾール-4-オール(37)を黄色固体として得た(450mg、収率66%)。
【０３９１】
【数２６】
2021512131.tif 000169
【０３９２】
工程7:
【０３９３】
【化１４２】
2021512131.tif 000170
【０３９４】
5-エチル-1H-インダゾール-4-オール(37)(440mg、2.7ミリモル)とDHP(456mg、5.4ミリモル)をTHF(20ml)中に混合して得た混合物にPPTS(69mg、0.27ミリモル)を加え、混合物を70℃で16時間撹拌した。混合物を濃縮し、残留物をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、石油エーテル/EtOAc(7/3)で溶離して5-エチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-オール(38)を黄色固体として得た(320mg、収率48%)。
【０３９５】
【数２７】
2021512131.tif 000171
【０３９６】
5-フルオロ-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-オール(41)の製造
工程1:
【０３９７】
【化１４３】
2021512131.tif 000172
【０３９８】
4-ブロモ-5-フルオロ-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール(40)(651mg、収率47%)は、4-ブロモ-5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール(24)を製造するのに使用された手順に従って製造した。
【０３９９】
【数２８】
2021512131.tif 000173
【０４００】
工程2:
【０４０１】
【化１４４】
2021512131.tif 000174
【０４０２】
5-フルオロ-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-オール(41)(461mg、収率90%)は、5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-オール(25)を製造するのに使用された手順に従って製造した。
【０４０３】
【数２９】
2021512131.tif 000175
【０４０４】
5-クロロ-6-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-オール(47)の製造
工程1:
【０４０５】
【化１４５】
2021512131.tif 000176
【０４０６】
濃塩酸(30ml)とH2O(30ml)を混合して得た溶液に2-ブロモ-4-フルオロ-6-メチルアニリン(42)(5g、24.5ミリモル)を加え、混合物を60〜70℃で1時間撹拌した。粗反応混合物を0〜5℃に冷却し、NaNO2(2.0g、29ミリモル)の水(10ml)溶液を加え、反応混合物を15分撹拌した。次いでこの混合物を、CuCl(3.6g、368ミリモル)とHCl(50ml)を混合して得た溶液に、70〜80℃にて30分で加えた。粗反応混合物を室温に冷却し、DCM(3×100ml)で抽出した。有機層を合わせてNs2SO4で乾燥し、濾過し、そして濃縮して1-ブロモ-2-クロロ-5-フルオロ-3-メチルベンゼン(43)を褐色液体として得た(4.5g、収率80%)。
【０４０７】
【数３０】
2021512131.tif 000177
【０４０８】
工程2:
【０４０９】
【化１４６】
2021512131.tif 000178
【０４１０】
2-ブロモ-3-クロロ-6-フルオロ-4-メチルベンズアルデヒド(44)(8.3g、収率57%)は、3-ブロモ-6-フルオロ-2-メトキシベンズアルデヒド(32) を製造するのに使用された手順に従って製造した。
【０４１１】
【数３１】
2021512131.tif 000179
【０４１２】
工程3:
【０４１３】
【化１４７】
2021512131.tif 000180
【０４１４】
4-ブロモ-5-クロロ-6-メチル-1H-インダゾール(45)(108mg、収率50%)は、5-ブロモ-4-メトキシ-1H-インダゾール(33) を製造するのに使用された手順に従って製造した。
【０４１５】
【数３２】
2021512131.tif 000181
【０４１６】
工程4:
【０４１７】
【化１４８】
2021512131.tif 000182
【０４１８】
4-ブロモ-5-クロロ-6-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール(46)(2.4g、収率59%)は、4-ブロモ-5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール(24) を製造するのに使用された手順に従って製造した(反応はTHF中50℃にて行った)。
【０４１９】
【数３３】
2021512131.tif 000183
【０４２０】
工程5:
【０４２１】
【化１４９】
2021512131.tif 000184
【０４２２】
5-クロロ-6-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-オール(47)(373mg、収率50%)は、5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-オール(25) を製造するのに使用された手順に従って製造した。
【０４２３】
【数３４】
2021512131.tif 000185
【０４２４】
5-ブロモ-6-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-オール(52)の製造
工程1:
【０４２５】
【化１５０】
2021512131.tif 000186
【０４２６】
1,2-ジブロモ-5-フルオロ-3-メチルベンゼン(49)(13g、収率88%)は、1-ブロモ-2-クロロ-5-フルオロ-3-メチルベンゼン(43) を製造するのに使用された手順に従って製造した(但し、HClとCuClの代わりにHBrとCuBrを使用した)。
【０４２７】
【数３５】
2021512131.tif 000187
【０４２８】
工程2:
【０４２９】
【化１５１】
2021512131.tif 000188
【０４３０】
2,3-ジブロモ-6-フルオロ-4-メチルベンズアルデヒド(50)(135g、収率96%)は、3-ブロモ-6-フルオロ-2-メトキシベンズアルデヒド(32) を製造するのに使用された手順に従って製造した。
【０４３１】
【数３６】
2021512131.tif 000189
【０４３２】
工程3:
【０４３３】
【化１５２】
2021512131.tif 000190
【０４３４】
4,5-ジブロモ-6-メチル-1H-インダゾール(51)(11.8g、収率98%)は、5-ブロモ-4-メトキシ-1H-インダゾール(33) を製造するのに使用された手順に従って製造した。
【０４３５】
【数３７】
2021512131.tif 000191
【０４３６】
工程4:
【０４３７】
【化１５３】
2021512131.tif 000192
【０４３８】
4,5-ジブロモ-6-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール(52)(8.2g、収率54%)は、4-ブロモ-5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール(24) を製造するのに使用された手順に従って製造した(但し、反応は、ジオキサン中90℃で行った)。
【０４３９】
【数３８】
2021512131.tif 000193
【０４４０】
工程5:
【０４４１】
【化１５４】
2021512131.tif 000194
【０４４２】
5-ブロモ-6-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-オール(53)(2.2g、収率33%)は、5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-オール(25) を製造するのに使用された手順に従って製造した。
【０４４３】
【数３９】
2021512131.tif 000195
【０４４４】
6-クロロ-5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-オール(61)の製造
工程1:
【０４４５】
【化１５５】
2021512131.tif 000196
【０４４６】
1-クロロ-5-フルオロ-2-メチル-4-ニトロベンゼン(54)(23.0g、121ミリモル)をEtOH/H2O(200ml、1:1)中に混合して得た溶液に、12MのHCl(10.1ml、121ミリモル)を加えた。混合物を80℃に加熱し、Fe(23.7g、425ミリモル)を30分で徐々に加えた。混合物を同じ温度で1時間撹拌した。LCMSにより、出発物質が消費されたこと、及び所望の生成物が形成されたことがわかった。次いで混合物を25℃に冷却し、EtOAc(300ml)で希釈し、NaHCO3飽和溶液でpH=8〜9に酸性化した。混合物を濾過し、層分離を起こさせ、水性層をEtOAc(2×300ml)で抽出した。有機層を合わせてブラインで洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧にて濃縮して4-クロロ-2-フルオロ-5-メチルアニリン(55)を黄色固体として得た(18.0g、収率93%)。
【０４４７】
【数４０】
2021512131.tif 000197
【０４４８】
工程2:
【０４４９】
【化１５６】
2021512131.tif 000198
【０４５０】
4-クロロ-2-フルオロ-5-メチルアニリン(55)(18.7g、117ミリモル)をDMF(150ml)中に混合して得た溶液にNBS(20.9g、117ミリモル)を0℃にて徐々に加えた。次いで混合物を25℃に加温し、1時間撹拌した。LCMSにより、出発物質が消費されて所望の生成物が形成されたことがわかった。混合物をNaHCO3飽和水溶液でクエンチし、EtOAc(2×200ml)で抽出した。有機層を合わせて水とブラインで洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、そして減圧にて濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(120g、石油エーテル/EtOAc=98:2)により精製して、2-ブロモ-4-クロロ-6-フルオロ-3-メチルアニリン(56)を黄色固体として得た(22.1g、収率79%)。
【０４５１】
【数４１】
2021512131.tif 000199
【０４５２】
工程3:
【０４５３】
【化１５７】
2021512131.tif 000200
【０４５４】
濃硫酸(62ml)をH2O(250ml)中に混合して得た溶液に、2-ブロモ-4-クロロ-6-フルオロ-3-メチルアニリン(56)(22.1g、93ミリモル)を加え、混合物を25℃で10分撹拌してから5℃に冷却した。次いで、NaNO2(7.1g、102ミリモル)をH2O(20ml)中に混合して得た混合物を滴下した。得られた混合物を5℃で20分撹拌し、KI(62g、370ミリモル)をH2O(50ml)中に混合して得た溶液に混合物を加え、得られた混合物を5℃で20分撹拌し、次いで18時間で25℃に加温した。TLC(石油エーテル)により、出発物質が消費されたことを確認した。混合物を水(150ml)でクエンチし、EtOAc(2×500ml)で抽出した。有機層を合わせてNa2SO3飽和水溶液とブラインで洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、そして減圧にて濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(120g、石油エーテル)により精製して、3-ブロモ-1-クロロ-5-フルオロ-4-ヨード-2-メチルベンゼン(57)を淡黄色固体として得た(18g、収率56%)。
【０４５５】
【数４２】
2021512131.tif 000201
【０４５６】
工程4:
【０４５７】
【化１５８】
2021512131.tif 000202
【０４５８】
3-ブロモ-1-クロロ-5-フルオロ-4-ヨード-2-メチルベンゼン(57)(17.5g、50.1ミリモル)をTHF(100ml)中に混合して得た溶液に、2.5MのBuLi(20ml、50ミリモル)を−100℃にて滴下した。混合物を同じ温度で30分撹拌した。次いで乾燥DMF(4.0g、55ミリモル)を加え、混合物を−100℃で20分撹拌した。TLC(石油エーテル)により、出発物質の殆どが消費されて所望の生成物が形成されたことを確認した。粗反応混合物を1NのHClでクエンチした。混合物に水を加え、水性層をEtOAc(2×150ml)で抽出した。有機層を合わせてH2Oで洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、そして減圧にて濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(120g、石油エーテル/EtOAc=97:3)により精製して、2-ブロモ-4-クロロ-6-フルオロ-3-メチルベンズアルデヒド(58)を黄色固体として得た(8.6g、収率68%)。
【０４５９】
【数４３】
2021512131.tif 000203
【０４６０】
工程5:
【０４６１】
【化１５９】
2021512131.tif 000204
【０４６２】
4-ブロモ-6-クロロ-5-メチル-1H-インダゾール(59)(6.7g、収率80%)は、5-ブロモ-4-メトキシ-1H-インダゾール(33) を製造するのに使用された手順に従って製造した(但し、反応は90℃で21時間行った)。
【０４６３】
【数４４】
2021512131.tif 000205
【０４６４】
工程6:
【０４６５】
【化１６０】
2021512131.tif 000206
【０４６６】
4-ブロモ-6-クロロ-5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール(60)(5.7g、収率73%)は、4-ブロモ-5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール(24) を製造するのに使用された手順に従って製造した(但し、反応はTHF中80℃で行った)。
【０４６７】
【数４５】
2021512131.tif 000207
【０４６８】
工程7:
【０４６９】
【化１６１】
2021512131.tif 000208
【０４７０】
6-クロロ-5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-オール(61)(5.2g、収率97%)は、5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-オール(25) を製造するのに使用された手順に従って製造した。
【０４７１】
【数４６】
2021512131.tif 000209
【０４７２】
5,6-ジメチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-オール(67)の製造
工程1:
【０４７３】
【化１６２】
2021512131.tif 000210
【０４７４】
1,2,4-トリメチル-5-ニトロベンゼン(62)(2.0g、12.1ミリモル)をトリフルオロ酢酸(24ml)中に混合して得た溶液に、NBS(1.2g、6.7ミリモル)と鉄(20mg、0.4ミリモル)を加えた。反応混合物を75℃で3日間加熱し、室温に自然冷却し、次いで減圧にて溶媒を除去した。得られた残留物をEtOAc中に溶解し、重炭酸ナトリウム飽和水溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧にて濃縮した。粗残留物をシリカゲルで精製し、0〜5%EtOAc/ヘプタンで溶離して、3-ブロモ-1,2,4-トリメチル-5-ニトロベンゼン(63)を白色固体として得た(1.4g、収率83%)。
【０４７５】
【数４７】
2021512131.tif 000211
【０４７６】
工程2:
【０４７７】
【化１６３】
2021512131.tif 000212
【０４７８】
3-ブロモ-1,2,4-トリメチル-5-ニトロベンゼン(63)(3.0g、12.5ミリモル)、亜鉛末(3.7g、56.1ミリモル)、及びトリエチルアミンHCl(9.4g、68.5ミリモル)をDMF(42ml)中に混合して得た懸濁液を105℃で一晩加熱した。反応混合物を室温に自然冷却し、セライトを介して濾過した。濾液をEtOAcで希釈し、有機層をブラインで2回洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧にて濃縮した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー(ISCO24gシリカ)により精製し、EtOAc/ヘプタン(0〜40%)で溶離して3-ブロモ-2,4,5-トリメチルアニリン(64)を褐色油状物(静置後に褐色固体となった)として得た(1.8g、収率66%)。
【０４７９】
【数４８】
2021512131.tif 000213
【０４８０】
工程3:
【０４８１】
【化１６４】
2021512131.tif 000214
【０４８２】
撹拌棒を取り付けたフラスコに、3-ブロモ-2,4,5-トリメチルアニリン(64)(1.8g、8.3ミリモル)、酢酸カリウム(974mg、9.9ミリモル)、及びクロロホルム(36ml)を加えた。混合物を撹拌しながら0℃に冷却した。冷却した混合物に無水酢酸(2.5g、25ミリモル)を2分で滴下した。反応混合物を25℃に加温し、1時間撹拌した。この時点で反応混合物の温度が60℃に上昇した。亜硝酸イソアミル(1.9g、2.2ml、16ミリモル)を加え、反応混合物を60℃で一晩撹拌した。粗反応混合物をNaHCO3飽和水溶液で洗浄した。減圧にて溶媒を除去し、粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー(ISCO40gシリカ)により精製し、EtOAc/ヘプタン(0〜30%)で溶離してN-アセチルインダゾールをオレンジ色固体として得た(1.5g)。この固体をTHF(8ml)と水(5ml)中に溶解し、0℃に冷却した。次いで、2MのNaOH(8.3ml)を加え、反応混合物を0℃で2時間撹拌した。粗反応混合物をEtOAcと水で希釈した。有機層をブラインで洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧にて濃縮し、そしてハウス・バキューム(house vacuum)下で一晩乾燥して4-ブロモ-5,6-ジメチル-1H-インダゾール(65)を褐色固体として得た(1.1g、収率59%)。
【０４８３】
【数４９】
2021512131.tif 000215
【０４８４】
工程4:
【０４８５】
【化１６５】
2021512131.tif 000216
【０４８６】
4-ブロモ-5,6-ジメチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール(66)(1.1g、収率76%)は、4-ブロモ-5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール(24)を製造するのに使用された手順に従って製造した(但し、反応はTHF中50℃で行った)。
【０４８７】
工程5:
【０４８８】
【化１６６】
2021512131.tif 000217
【０４８９】
5,6-ジメチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-オール(67)(463mg、収率51%)は、5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-オール(25) を製造するのに使用された手順に従って製造した。
【０４９０】
【数５０】
2021512131.tif 000218
【０４９１】
5-クロロ-6-フルオロ-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-オール(72)の製造
工程1:
【０４９２】
【化１６７】
2021512131.tif 000219
【０４９３】
3-ブロモ-5-フルオロ-2-メチルベンゼンアミン(68)(10g、49ミリモル)をIPA(70ml)中に混合して得た溶液にNCS(7.2g、54ミリモル)を加え、浅黒い溶液を80℃で2時間撹拌した。混合物を減圧にて濃縮し、粗生成物を、ISCOカートリッジ(220g)を使用してシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、EtOAc/ヘプタン(15:85)で溶離して3-ブロモ-4-クロロ-5-フルオロ-2-メチルアニリン(69)を黄色固体として得た(5.7g、収率49%)。
【０４９４】
【数５１】
2021512131.tif 000220
【０４９５】
工程2:
【０４９６】
【化１６８】
2021512131.tif 000221
【０４９７】
3-ブロモ-4-クロロ-5-フルオロ-2-メチルアニリン(69)(4g、16.8ミリモル)をAcOH(20ml)中に混合して得た溶液にNaNO2(1.5g、22ミリモル)を加えた。反応混合物を室温で7時間撹拌した。LCMS分析により、反応が完了したことを確認した。混合物を減圧にて濃縮し、粗生成物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーによって精製し、EtOAc/石油エーテル(20:80)で溶離して4-ブロモ-5-クロロ-6-フルオロ-1H-インダゾール(70)を黄色固体として得た(2.4g、収率57%)。
【０４９８】
【数５２】
2021512131.tif 000222
【０４９９】
工程3:
【０５００】
【化１６９】
2021512131.tif 000223
【０５０１】
4-ブロモ-5-クロロ-6-フルオロ-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール(71)(819mg、収率88%)は、4-ブロモ-5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール(24) を製造するのに使用された手順に従って製造した(但し、アセトニトリルを溶媒として使用した)。
【０５０２】
【数５３】
2021512131.tif 000224
【０５０３】
工程4:
【０５０４】
【化１７０】
2021512131.tif 000225
【０５０５】
5-クロロ-6-フルオロ-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-オール(72)(612mg、収率92%)は、5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-オール(25) を製造するのに使用された手順に従って製造した。
【０５０６】
【数５４】
2021512131.tif 000226
【０５０７】
3,5-ジメチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-オール(76)の製造
工程1:
【０５０８】
【化１７１】
2021512131.tif 000227
【０５０９】
3,5-ジメチル-1-[(4-メチルフェニル)スルホニル]-4-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)-1H-インダゾール(73)(450mg、1.1ミリモル)をEtOH(12ml)中に混合して得た溶液にmCPBA(273mg、1.6ミリモル)と水(6ml)を加えた。反応混合物を20℃で3時間撹拌した。LCMSにより反応が完了したことを確認した。粗反応混合物をEtOAc(30ml)で希釈し、NaHCO3飽和水溶液とブラインで洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。粗生成物をシリカゲル上で精製し、0〜90%EtOAc/石油エーテルで溶離して3,5-ジメチル-1-[(4-メチルフェニル)スルホニル]-1H-インダゾール-4-オール(74)を黄色固体として得た(370mg、収率100%)。
【０５１０】
【数５５】
2021512131.tif 000228
【０５１１】
工程2:
【０５１２】
【化１７２】
2021512131.tif 000229
【０５１３】
3,5-ジメチル-1-[(4-メチルフェニル)スルホニル]-1H-インダゾール-4-オール(74)(400mg、1.3ミリモル)をH2SO4(70%、10ml)中に混合して得た混合物を室温で48時間撹拌した。LCMS分析により、所望の化合物が生成し、幾らかの出発物質が残存していることが確認された。粗反応混合物を氷水で希釈し、NaOH水溶液でpH6に調整した。水性層をEtOAc(5×30ml)で抽出し、有機層を合わせて水で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。粗生成物をシリカゲル上で精製し、0〜55%EtOAc/石油エーテルで溶離して3,5-ジメチル-1H-インダゾール-4-オール(75)を黄色固体として得た(90mg、収率40%)。
【０５１４】
【数５６】
2021512131.tif 000230
【０５１５】
工程3:
【０５１６】
【化１７３】
2021512131.tif 000231
【０５１７】
3,5-ジメチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-オール(76)(80mg、収率61%)は、4-ブロモ-5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール(24)を製造するのに使用された手順に従って製造した(但し、反応はTHF中にて還流して行った)。
【０５１８】
【数５７】
2021512131.tif 000232
【０５１９】
5,7-ジフルオロ-6-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-オール(84)の製造
工程1:
【０５２０】
【化１７４】
2021512131.tif 000233
【０５２１】
2,3,5,6-テトラフルオロ-4-メチル安息香酸(77)(2.0g、9.6ミリモル)をSOCl2(10ml)中に混合して得た混合物を撹拌しながら2時間加熱還流した。粗反応混合物を濃縮し、減圧にて溶媒を除去した。粗生成物をメタノール(30ml)中に溶解し、反応混合物を室温で1時間撹拌した。粗反応混合物を濃縮し、粗生成物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーを使用して精製し、5%EtOAc/石油エーテルで溶離して2,3,5,6-テトラフルオロ-4-メチル安息香酸メチル(78)を無色油状物として得た(1.8g、収率84%)。
【０５２２】
【数５８】
2021512131.tif 000234
【０５２３】
工程2:
【０５２４】
【化１７５】
2021512131.tif 000235
【０５２５】
ナトリウム(146mg、6.4ミリモル)を乾燥メタノール(2ml)中に混合して得た溶液に、2,3,5,6-テトラフルオロ-4-メチル安息香酸メチル(78)(940mg、4.2ミリモル)とDMF(5ml)を加えた。得られた混合物を室温で1時間撹拌した。TLCにより、出発物質が消費されたことを確認した。反応混合物を1N塩酸で0℃にてクエンチし、水性層をEtOAc(2×30ml)で抽出した。有機抽出物を合わせてブラインで洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮して2,3,5-トリフルオロ-6-メトキシ-4-メチル安息香酸メチル(79)を無色油状物として得た(991mg、収率100%)。
【０５２６】
【数５９】
2021512131.tif 000236
【０５２７】
工程3:
【０５２８】
【化１７６】
2021512131.tif 000237
【０５２９】
2,3,5-トリフルオロ-6-メトキシ-4-メチル安息香酸メチル(79)(996mg、4.2ミリモル)を乾燥THF(10ml)中に混合して得た溶液に、LiAlH4(323mg、8.5ミリモル)を−10℃にて加えた。得られた混合物を−10℃で30分撹拌した。TLCにより、出発物質が全て消費されたことを確認した。反応混合物を1N塩酸で0℃にてクエンチし、水性層をEtOAc(2×20ml)で抽出した。EtOAc層を合わせて濃縮し、粗生成物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーを使用して精製し、12%EtOAc/石油エーテルで溶離して(2,3,5-トリフルオロ-6-メトキシ-4-メチルフェニル)メタノール(80)を白色固体として得た(680mg、収率78%)。
【０５３０】
【数６０】
2021512131.tif 000238
【０５３１】
工程4:
【０５３２】
【化１７７】
2021512131.tif 000239
【０５３３】
(2,3,5-トリフルオロ-6-メトキシ-4-メチルフェニル)メタノール(80)(680mg、3.3ミリモル)をTHF(30ml)中に混合して得た混合物にMnO2(2.9g、33ミリモル)を加え、得られた混合物を48℃で一晩撹拌した。反応混合物をセライトを介して濾過し、濾液を濃縮し、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィーを使用して精製し、2%EtOAc/石油エーテルで溶離して2,3,5-トリフルオロ-6-メトキシ-4-メチルベンズアルデヒド(81)を白色固体として得た(180mg、収率27%)。
【０５３４】
【数６１】
2021512131.tif 000240
【０５３５】
工程5:
【０５３６】
【化１７８】
2021512131.tif 000241
【０５３７】
5,7-ジフルオロ-4-メトキシ-6-メチル-1H-インダゾール(82)(512mg、収率29%)は、5-ブロモ-4-メトキシ-1H-インダゾール(33) を製造するのに使用された手順に従って製造した。
【０５３８】
【数６２】
2021512131.tif 000242
【０５３９】
工程6:
【０５４０】
【化１７９】
2021512131.tif 000243
【０５４１】
BBr3をDCM(5ml)中に混合して得た混合物を5,7-ジフルオロ-4-メトキシ-6-メチル-1H-インダゾール(82)(650mg、3.3ミリモル)に−40℃にて加えた。粗反応混合物を室温で1時間撹拌した。TLCにより、出発物質が全て消費されたことを確認した。反応混合物を、0℃にてNaHCO3飽和水溶液でクエンチした。水性層をEtOAc(3×50ml)で抽出し、有機層を合わせて水(50ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。粗生成物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーを使用して精製し、30%EtOAc/石油エーテルで溶離して5,7-ジフルオロ-6-メチル-1H-インダゾール-4-オール(83)を赤色固体として得た(279mg、収率46%)。
【０５４２】
【数６３】
2021512131.tif 000244
【０５４３】
工程7:
【０５４４】
【化１８０】
2021512131.tif 000245
【０５４５】
5,7-ジフルオロ-6-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-オール(84)(160mg、収率41%)は、4-ブロモ-5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール(24)を製造するのに使用された手順に従って製造した(但し、反応はTHF中にて還流して行った)。
【０５４６】
【数６４】
2021512131.tif 000246
【０５４７】
実施例の製造
以下の実施例はメソッドAに従って製造した:
1-(4-{8-[(5-メチル-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル}ピペラジン-1-イル)プロプ-2-エン-1-オン(実施例-1A)の製造
工程1:
【０５４８】
【化１８１】
2021512131.tif 000247
【０５４９】
5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-オールフェノール(25)(398mg、1.74ミリモル)、4-(8-クロロピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(4)(500mg、1.43ミリモル)、炭酸セシウム(931mg、2.86ミリモル)、及びDMA(3.6ml)をバイアルに加えた。混合物を脱気し、窒素をパージし、90℃にて砂浴中に置いた。4.5時間後、LCMSにより、殆どが生成物であって、アリールクロライドは存在しないことがわかった。反応混合物を室温に冷却し、水(50ml)中に滴下した。4-(8-{[5-メチル-1-(テトロヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(85)を白色固体として捕集した(720mg、収率92%)。
【０５５０】
【数６５】
2021512131.tif 000248
【０５５１】
工程2:
【０５５２】
【化１８２】
2021512131.tif 000249
【０５５３】
4-(8-{[5-メチル-1-(テトロヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(85)(1.1g、2.0ミリモル)をDCM(10ml)中に混合して得た溶液にTFA(2ml)を加えた。混合物を室温で4時間撹拌した。LCMSにより、出発物質が消費されて所望の生成物が形成されたことがわかった。減圧にて溶媒を除去して8-[(5-メチル-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-4-(ピペラジン-1-イル)ピリド[3,4-d]ピリミジン(86)を褐色油状物として得た(730mg、収率100%)。
【０５５４】
【数６６】
2021512131.tif 000250
【０５５５】
工程3:
【０５５６】
【化１８３】
2021512131.tif 000251
【０５５７】
8-[(5-メチル-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-4-(ピペラジン-1-イル)ピリド[3,4-d]ピリミジン(86)(500mg、1.38ミリモル)をNaHCO3飽和水溶液(50ml)とEtOAc(50ml)中に混合して得た溶液を撹拌し、これに塩化アクリロイル(125mg、1.38ミリモル)をEtOAc(20ml)中に混合して得た溶液を加えた。次いで混合物を室温で30分撹拌した。LCMSにより、出発物質が消費されて所望の生成物が形成されたことがわかった。有機層を分離した。水性層をEtOAc(2×80ml)で抽出した。有機層を合わせてNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧にて濃縮した。粗生成物を、BiotageC18カラム(30g)を使用するシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製し、25ml/分にて25〜40%アセトニトリル/H2O(0.1%NH3)勾配を使用して溶離して、1-(4-{8-[(5-メチル-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル}ピペラジン-1-イル)プロプ-2-エン-1-オン(実施例-1A)を黄色固体として得た(202mg、収率35%)。
【０５５８】
【数６７】
2021512131.tif 000252
【０５５９】
下記の製造において説明されている中間体は、実施例-18A、-19A、-27A、-28A、-32A、及び-33Aをもたらす。しかしながら、これらの実施例は、ニトリルが含まれることから先行実施例の合成範囲外であり、従ってこの製造は、ここでは完全性を明らかにするために記載されている。最終的な実施例をもたらすためのその後の化学はメソッドA実施例に類似しており、追加点や変更点(当業者であれば理解できるであろう)はごくわずかである。
【０５６０】
4-(6-シアノ-8-{[5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(88)の製造
工程1:
【０５６１】
【化１８４】
2021512131.tif 000253
【０５６２】
4-(6-クロロ-8-{[5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(87)(100mg、0.17ミリモル、メソッドAを使用して製造)、Zn(CN)2(40mg、0.34ミリモル)、dppf(19mg、0.034ミリモル)、及びPd2(dba)3(16mg、0.017ミリモル)をNMP(10ml)中に混合して得た混合物を、窒素雰囲気下でマイクロ波にて150℃で1.5時間加熱した。粗反応混合物のLCMAにより、出発物質が消費されて所望の生成物が形成されたことがわかった。冷却後、水(50ml)を加え、水性層をEtOAc(3×60ml)で抽出した。有機層を合わせてブラインで洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧にて濃縮した。粗生成物をシリカゲル(4g)を使用して精製し、4%メタノール/DCMで溶離して4-(6-シアノ-8-{[5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(88)を黄色固体として得た(95mg、収率97%)。
【０５６３】
【数６８】
2021512131.tif 000254
【０５６４】
下記の製造において説明されている中間体は、メソッドAに従って実施例38Aをもたらす。しかしながら、この実施例は、脱保護工程が含まれることから先行実施例の合成範囲外であり、従ってこの製造は、ここでは完全性を明らかにするために記載されている。最終的な実施例をもたらすためのその後の化学はメソッドA実施例に類似しており、追加点や変更点(当業者であれば理解できるであろう)はごくわずかである。
【０５６５】
1-[(3R)-4-{6-クロロ-8-[(5-クロロ-6-フルオロ-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル}-3-(ヒドロキシメチル)ピペラジン-1-イル]プロプ-2-エン-1-オン(実施例-38A)の製造
【０５６６】
【化１８５】
2021512131.tif 000255
【０５６７】
1-[(3R)-3-({[tert-ブチル(ジメチル)シリル]オキシ}メチル)-4-{8-[(5-クロロ-6-フルオロ-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル}ピペラジン-1-イル]プロプ-2-エン-1-オン(144)(300mg、0.474ミリモル)をTHF(20ml)中に混合して得た溶液にTBAFの溶液(THF中1.0M、0.95ml、0.95ミリモル)を0℃にて徐々に加えた。添加後、反応混合物を0〜5℃にてさらに2時間撹拌した。LCMS分析により、反応が完了したことを確認した。NaHCO3飽和水溶液(50ml)を加えた。混合物をEtOAc(50ml)で抽出した。有機層をブラインで洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濃縮した。粗残留物を、Xブリッジ(150×19mm、5μmカラム)を使用する分取HPLCによって精製し、28〜33%アセトニトリル/H2O(0.05%NH4OH)により20ml/分にて溶離して、1-[(3R)-4-{6-クロロ-8-[(5-クロロ-6-フルオロ-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル}-3-(ヒドロキシメチル)ピペラジン-1-イル]プロプ-2-エン-1-オン(実施例-38A)を得た(45mg、収率18%)。
【０５６８】
【数６９】
2021512131.tif 000256
【０５６９】
下記の製造において説明されている中間体は、メソッドAに従って実施例41Aをもたらす。しかしながら、この実施例は、アミノ化反応が含まれることから先行実施例の合成範囲外であり、従ってこの製造は、ここでは完全性を明らかにするために記載されている。最終的な実施例をもたらすためのその後の化学はメソッドA実施例に類似しており、追加点や変更点(当業者であれば理解できるであろう)はごくわずかである。
【０５７０】
4-(6-アミノ-8-{[5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(146)の製造
【０５７１】
【化１８６】
2021512131.tif 000257
【０５７２】
工程1:
4-(6-クロロ-8-{[5-クロロ-6-フルオロ-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(145)(300mg、0.485ミリモル)、Cs2CO3(484mg、1.46ミリモル)、(+/-)BINAP(31.5mg、0.0485ミリモル)、及びPd(OAc)2(5.73mg、0.0243ミリモル)をトルエン(9.7ml)中に混合して得た混合物にベンゾフェノンイミン(237mg、1.31ミリモル)を加えた。得られた褐色溶液を脱気し、窒素でパージし(3×)、100℃に予熱しておいた油浴中に置いた。粗反応混合物を100℃で24時間加熱した。反応混合物をLCMSにより分析して、生成物に転化されたことを確認した。粗反応混合物をEtOAc(20ml)と50%ブラインで希釈した。層を分離し、水性層をEtOAc(2×20ml)で抽出した。有機層を合わせてブラインで洗浄し、MgSO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。粗生成物をクロマトグラフィー(25gのSiO2、Biotage、10〜50%EtOAc/ヘプタン)によって精製して4-(6-[(ジフェニルメチリデン)アミノ]-8-{[5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチルを得た(295mg、収率80%)。
【０５７３】
【数７０】
2021512131.tif 000258
【０５７４】
工程2:
4-(6-[(ジフェニルメチリデン)アミノ]-8-{[5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(275mg、0.36ミリモル)をMeOH(1.8ml)とTHF(1.8ml)中に混合して得た溶液にH2O中50%NH2OH(0.21ml、3.6ミリモル)を加えた。24時間後、LCMS分析により、生成物への明確な転化が確認された。粗反応混合物を60mlのH2O中に滴下した。黄色の粘性物質が生成した。混合物をEtOAc(40ml)で希釈し、層を分離した。水性層をEtOAc(40ml)で抽出し、有機層を合わせてNaHCO3飽和水溶液とブラインで洗浄し、MgSO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。粗生成物を精製して(Biotage、10gのSiO2、5〜60%EtOAc/ヘプタン)4-(6-アミノ-8-{[5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(146)を白色固体として得た(84mg、収率39%)。
【０５７５】
【数７１】
2021512131.tif 000259
【０５７６】
下記表中の実施例は、メソッドA、ならびに、1-(4-{8-[(5-メチル-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル}ピペラジン-1-イル)プロプ-2-エン-1-オン(実施例-1A)、4-(6-シアノ-8-{[5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(88)、及び4-(6-アミノ-8-{[5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(146)を製造するのに使用された手順に従って製造された。下記の実施例は、実施例-1A、実施例88、及び実施例146を製造するのに使用した典型的な手順に対する重要な変更や置き換え(当業者であれば理解できるであろう)が無い形で行った。
【０５７７】
【化１８７】
2021512131.tif 000260
【０５７８】
【化１８８】
2021512131.tif 000261
【０５７９】
【化１８９】
2021512131.tif 000262
【０５８０】
【化１９０】
2021512131.tif 000263
【０５８１】
【化１９１】
2021512131.tif 000264
【０５８２】
【化１９２】
2021512131.tif 000265
【０５８３】
【化１９３】
2021512131.tif 000266
【０５８４】
【化１９４】
2021512131.tif 000267
【０５８５】
【化１９５】
2021512131.tif 000268
【０５８６】
【化１９６】
2021512131.tif 000269
【０５８７】
【化１９７】
2021512131.tif 000270
【０５８８】
【化１９８】
2021512131.tif 000271
【０５８９】
【化１９９】
2021512131.tif 000272
【０５９０】
下記の製造において説明されている中間体は、メソッドAに従って実施例-1、-2、及び-6をもたらす。しかしながら、これらの実施例は、フェノール脱保護反応が含まれることから先行実施例の合成範囲外であり、従って製造は、ここでは完全性を明らかにするために記載されている。最終的な実施例をもたらすためのその後の化学はメソッドA実施例に類似しており、追加点や変更点(当業者であれば理解できるであろう)はごくわずかである。
【０５９１】
1-(4-{8-[(3-ヒドロキシナフタレン-1-イル)オキシ]-6-(トリフルオロメチル)ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル}ピペラジン-1-イル)プロプ-2-エン-1-オン(実施例-1)の製造
工程1:
【０５９２】
【化２００】
2021512131.tif 000273
【０５９３】
4-{8-[(3-メトキシナフタレン-1-イル)オキシ]-6-(トリフルオロメチル)ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル}ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(89)(400mg,収率75%)は、溶媒をDMSOに置き換えたこと、及び反応混合物を60℃で1時間加熱したこと以外は、4-(8-{[5-メチル-1-(テトロヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(85)を製造するのに使用した手順に従って製造した。
【０５９４】
【数７２】
2021512131.tif 000274
【０５９５】
工程2:
【０５９６】
【化２０１】
2021512131.tif 000275
【０５９７】
8-[(3-メトキシナフタレン-1-イル)オキシ]-4-(ピペラジン-1-イル)-6-(トリフルオロメチル)ピリド[3,4-d]ピリミジン(90)(328mg,収率100%)は、8-[(5-メチル-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-4-(ピペラジン-1-イル)ピリド[3,4-d]ピリミジン(86)を製造するのに使用した手順に従って製造した。
【０５９８】
【数７３】
2021512131.tif 000276
【０５９９】
工程3:
【０６００】
【化２０２】
2021512131.tif 000277
【０６０１】
1-(4-{8-[(3-メトキシナフタレン-1-イル)オキシ]-6-(トリフルオロメチル)ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル}ピペラジン-1-イル)プロプ-2-エン-1-オン(91)(316mg,収率86%)は、1-(4-{8-[(5-メチル-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル}ピペラジン-1-イル)プロプ-2-エン-1-オン(実施例-1A)を製造するのに使用した手順に従って製造した。生成物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーで精製し、DCM中3%メタノールで溶離した。
【０６０２】
【数７４】
2021512131.tif 000278
【０６０３】
工程4:
【０６０４】
【化２０３】
2021512131.tif 000279
【０６０５】
BBr3をDCM(5ml)中に混合して得た溶液に、1-(4-{8-[(3-メトキシナフタレン-1-イル)オキシ]-6-(トリフルオロメチル)ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル}ピペラジン-1-イル)プロプ-2-エン-1-オン(91)(100mg,0.20ミリモル)を−60℃で加え、得られた混合物を0℃で1時間撹拌した。反応混合物をNaHCO3飽和水溶液でクエンチし、EtOAc(2×50ml)で抽出した。EtOAc層を合わせてブラインで洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。粗生成物を、Gemini-C18カラム(100×21.2mm,5μm)を使用して分取HPLCにより精製し、40〜50%アセトニトリル/H2O(0.1%ギ酸)勾配で溶離して、1-(4-{8-[(3-ヒドロキシナフタレン-1-イル)オキシ]-6-(トリフルオロメチル)ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル}ピペラジン-1-イル)プロプ-2-エン-1-オン(実施例-1)を淡黄色固体として得た(42mg,収率42%)。
【０６０６】
【数７５】
2021512131.tif 000280
【０６０７】
1-(4-{8-[(3-ヒドロキシナフタレン-1-イル)オキシ]-6-メチルピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル}ピペラジン-1-イル)プロプ-2-エン-1-オン(実施例-2)は、1-(4-{8-[(3-ヒドロキシナフタレン-1-イル)オキシ]-6-(トリフルオロメチル)ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル}ピペラジン-1-イル)プロプ-2-エン-1-オン(実施例-1)を製造するのに使用した手順に従って製造した。
【０６０８】
【化２０４】
2021512131.tif 000281
【０６０９】
下記の製造において説明されている中間体は、メソッドAに従って実施例-3をもたらす。しかしながら、実施例-3は、類似したライブラリー・フォーマット(a parallel library format)にて合成されており、従ってその製造は、ここでは完全性を明らかにするために記載されている。
【０６１０】
1-{4-[8-(2-クロロ-6-メチルフェノキシ)ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル]ピペラジン-1-イル}プロプ-2-エン-1-オン(実施例-3)の製造
【０６１１】
【化２０５】
2021512131.tif 000282
【０６１２】
工程1:
4-(8-クロロピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(4)をアセトニトリル中に混合して得た溶液(1.0ml,0.15M)を2-クロロ-6-メチルフェノール(180μモル)に加え、次いでK2CO3(300μモル)を加えた。反応容器を密閉し、100℃で16時間加熱した。溶媒を除去し、粗生成物(92)を分取TLCにより精製した。
【０６１３】
工程2:
DCMとTFAの溶液(7:1V/V,1.6ml)を4-[8-(2-クロロ-6-メチルフェノキシ)ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル]ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(92)(100μモル)に加え、反応混合物を2時間撹拌した。溶媒を減圧にて除去した。
【０６１４】
工程3:
塩化アクリロイルのDCM中0.1M溶液を調製し、この溶液1.0mlを、8-(2-クロロ-6-メチルフェノキシ)-4-(ピペラジン-1-イル)ピリド[3,4-d]ピリミジン(93)(100μモル)とDIEA(300μモル)をDCM(1.0ml)中に混合して得た溶液に加えた。反応混合物を30℃で1時間加熱し、LCMSにより反応が完了するまでモニターした。減圧にて溶媒を除去し、粗生成物を、Agela Durashell C18カラム(150×25mm,5μm)を使用して分取HPLCによって精製し、26〜66%アセトニトリル/水(0.05M NH4OH)勾配で35ml/分にて溶離して1-{4-[8-(2-クロロ-6-メチルフェノキシ)ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル]ピペラジン-1-イル}プロプ-2-エン-1-オン(実施例-3)を得た。
【０６１５】
【数７６】
2021512131.tif 000283
【０６１６】
下記の実施例は、一般的なメソッドBに従って製造した。
1-(4-{2-メトキシ-8-[(5-メチル-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル}ピペラジン-1-イル)プロプ-2-エン-1-オン(実施例-1B)の製造
工程1:
【０６１７】
【化２０６】
2021512131.tif 000284
【０６１８】
NaH(オイル中60%,48mg,1.2ミリモル)をTHF(6ml)中に混合して得た混合物にメタノール(70mg,2.2ミリモル)を加えた。本溶液を室温で30分撹拌した後、4-(2,8-ジクロロピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(20)を加えた。粗反応混合物を室温で16時間撹拌した。LCMSにより、所望の生成物が約80%であることを確認した。減圧にて溶媒を除去し、粗生成物をEtOAc(5ml)と水(4ml)で希釈した。層を分離し、水性層をEtOAc(2×8ml)で抽出した。有機層を合わせてNa2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。粗生成物を、分取TLCを使用して精製し、石油エーテル/EtOAc(2:1)で溶離して4-(8-クロロ-2-メトキシピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(94)を黄色固体として得た(244mg,収率58%)。
【０６１９】
【数７７】
2021512131.tif 000285
【０６２０】
工程2:
【０６２１】
【化２０７】
2021512131.tif 000286
【０６２２】
4-(2-メトキシ-8-{[5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(95)（138mg、収率37％）は、反応をDMSO中にて135℃で2時間行ったこと以外は、4-(8-{[5-メチル-1-(テトロヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(85)を製造するのに使用した手順に従って製造した。
【０６２３】
【数７８】
2021512131.tif 000287
【０６２４】
工程3:
【０６２５】
【化２０８】
2021512131.tif 000288
【０６２６】
2-メトキシ-8-[(5-メチル-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-4-(ピペラジン-1-イル)ピリド[3,4-d]ピリミジン(96)は、8-[(5-メチル-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-4-(ピペラジン-1-イル)ピリド[3,4-d]ピリミジン(86)を製造するのに使用した手順に従って製造した。溶媒を除去し、得られた粗生成物を次の工程に使用した。
【０６２７】
【数７９】
2021512131.tif 000289
【０６２８】
工程4:
【０６２９】
【化２０９】
2021512131.tif 000290
【０６３０】
1-(4-{2-メトキシ-8-[(5-メチル-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル}ピペラジン-1-イル)プロプ-2-エン-1-オン(実施例-1B)（32mg、収率30％）は、1-{4-[8-(2-クロロ-6-メチルフェノキシ)ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル]ピペラジン-1-イル}プロプ-2-エン-1-オン(実施例-3)を製造するのに使用した手順に従って製造した。粗生成物を、YMC-Actus Triant C18カラム(150×30mm,5μm)を使用して分取HPLCにより精製し、30〜50%アセトニトリル/水(0.05%アンモニア)で溶離した。
【０６３１】
【数８０】
2021512131.tif 000291
【０６３２】
1-(4-{2-[3-(ジメチルアミノ)アゼチジン-1-イル]-8-[(5-メチル-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル}ピペラジン-1-イル)プロプ-2-エン-1-オン(実施例-2B)の製造
工程1:
【０６３３】
【化２１０】
2021512131.tif 000292
【０６３４】
4-{8-クロロ-2-[3-(ジメチルアミノ)アゼチジン-1-イル]ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(97)（224mg、収率71％）は、塩基をCs2CO3に置き換えたこと以外は、4-(8-クロロ-2-メトキシピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(94)を製造するのに使用した手順に従って製造した。
【０６３５】
【数８１】
2021512131.tif 000293
【０６３６】
工程2:
【０６３７】
【化２１１】
2021512131.tif 000294
【０６３８】
4-(2-[3-(ジメチルアミノ)アゼチジン-1-イル]-8-{[5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(98)(163mg,収率51%)は、反応をDMSO中マイクロ波にて135℃で2時間行ったこと以外は、4-(8-{[5-メチル-1-(テトロヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(85)を製造するのに使用した手順に従って製造した。
【０６３９】
【数８２】
2021512131.tif 000295
【０６４０】
工程3:
【０６４１】
【化２１２】
2021512131.tif 000296
【０６４２】
N,N-ジメチル-1-{8-[(5-メチル-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-4-(ピペラジン-1-イル)ピリド[3,4-d]ピリミジン-2-イル}アゼチジン-3-アミン(99)は、8-[(5-メチル-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-4-(ピペラジン-1-イル)ピリド[3,4-d]ピリミジン(86)を製造するのに使用した手順に従って製造した。
【０６４３】
【数８３】
2021512131.tif 000297
【０６４４】
工程4:
【０６４５】
【化２１３】
2021512131.tif 000298
【０６４６】
1-(4-{2-[3-(ジメチルアミノ)アゼチジン-1-イル]-8-[(5-メチル-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル}ピペラジン-1-イル)プロプ-2-エン-1-オン(実施例-2B)(24mg,収率26%)は、1-{4-[8-(2-クロロ-6-メチルフェノキシ)ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル]ピペラジン-1-イル}プロプ-2-エン-1-オン(実施例-3)を製造するのに使用した手順に従って製造した。
【０６４７】
【数８４】
2021512131.tif 000299
【０６４８】
下記表の実施例は、メソッドBならびに1-(4-{2-メトキシ-8-[(5-メチル-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル}ピペラジン-1-イル)プロプ-2-エン-1-オン(実施例-1B)(エーテル)または1-(4-{2-[3-(ジメチルアミノ)アゼチジン-1-イル]-8-[(5-メチル-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル}ピペラジン-1-イル)プロプ-2-エン-1-オン(実施例-2B)(アミン)を製造するのに使用した手順、を使用して製造した。下記の実施例は、下記の実施例は、実施例-1Bまたは実施例-2Bを製造するのに使用した典型的な手順に対する重要な変更や置き換え(当業者であれば理解できるであろう)が無い形で行った。
【０６４９】
【化２１４】
2021512131.tif 000300
【０６５０】
【化２１５】
2021512131.tif 000301
【０６５１】
【化２１６】
2021512131.tif 000302
【０６５２】
【化２１７】
2021512131.tif 000303
【０６５３】
【化２１８】
2021512131.tif 000304
【０６５４】
下記の実施例は、一般的なメソッドCに従って製造した。
3-ニトロ-2-{[1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-5-(トリフルオロメチル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}ピリジン-4-カルボン酸メチル(102)の製造
工程1:
【０６５５】
【化２１９】
2021512131.tif 000305
【０６５６】
磁気撹拌棒を取り付けた100mlの圧力容器に、2-クロロ-3-ニトロピリジン-4-カルボン酸メチル(100)(605mg,2.8ミリモル)、1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-5-(トリフルオロメチル)-1H-インダゾール-4-オール(101)(800mg,2.8ミリモル)、DMAP(854mg,7.0ミリモル)、及びTHF(11.2ml)を加えた。フラスコをシールし、70℃で加熱した。3時間後に反応混合物をチェックし、所望の生成物への転化が十分に進んでいることを確認した。粗反応混合物をEtOAcで希釈し、有機層を水とブラインで洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。粗生成物を10gのシリカゲル(Biotageカラム)で精製し、25%EtOAc/ヘプタンで溶離して3-ニトロ-2-{[1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-5-(トリフルオロメチル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}ピリジン-4-カルボン酸メチル(102)をピンク色固体として得た(764mg,収率59%)。
【０６５７】
【数８５】
2021512131.tif 000306
【０６５８】
2-{[5-クロロ-6-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}-6-メチル-3-ニトロピリジン-4-カルボン酸メチル(104)の製造
工程1:
【０６５９】
【化２２０】
2021512131.tif 000307
【０６６０】
2-クロロ-6-メチル-3-ニトロピリジン-4-カルボン酸メチル(103)(340mg,1.5ミリモル)、5-クロロ-6-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-オール(47)(393mg,1.47ミリモル)、及びDMAP(450mg,3.7ミリモル)をテトラヒドロフラン(10ml)中に混合して得た混合物を70℃で一晩撹拌した。粗反応混合物をEtOAcで希釈し、引き続き水とブラインで洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮した。粗生成物をシリカゲル(ISCO 40gカートリッジ)で精製し、0〜100%EtOAc/ヘプタンで溶離して2-{[5-クロロ-6-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}-6-メチル-3-ニトロピリジン-4-カルボン酸メチル(104)をクリーム色固体として得た(627mg,収率92%)。
【０６６１】
【数８６】
2021512131.tif 000308
【０６６２】
1-(4-{8-[(5-メチル-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]キナゾリン-4-イル}ピペラジン-1-イル)プロプ-2-エン-1-オン(実施例-1C)の製造
工程1:
【０６６３】
【化２２１】
2021512131.tif 000309
【０６６４】
3-フルオロ-2-ニトロ安息香酸メチル(105)(2g,10ミリモル)をDMF(60ml)中に混合して得た溶液に、5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-オール(25)(2.33g,10ミリモル)とK2CO3(2.78g,20.1ミリモルを加えた。反応混合物を60℃で16時間撹拌した。LCMS分析により、反応が完了したことを確認した。水(100ml)を加え、混合物をEtOAc(2×10ml)で抽出した。有機層を合わせてブラインで洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、溶媒を蒸発除去した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、石油エーテル/EtOAc(1/1)で溶離して3-{[5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}-2-ニトロ安息香酸メチル(106)を得た(3.9g,収率90%)。
【０６６５】
【数８７】
2021512131.tif 000310
【０６６６】
工程2:
【０６６７】
【化２２２】
2021512131.tif 000311
【０６６８】
3-{[5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}-2-ニトロ安息香酸メチル(106)(4g,9.7ミリモル)をメタノール(60ml)中に混合して得た溶液に、水素雰囲気下にて10%Pd/C(500mg)を加えた。反応混合物を25℃で16時間撹拌した。LCMS分析により、反応が完了したことを確認した。粗反応混合物を濾過し、濾液を濃縮して8-((5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル)オキシ)キナゾリン-4(3H)-オン(107)を得た(3.5g,収率94%)。
【０６６９】
【数８８】
2021512131.tif 000312
【０６７０】
工程3:
【０６７１】
【化２２３】
2021512131.tif 000313
【０６７２】
封管にて、8-((5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル)オキシ)キナゾリン-4(3H)-オン(107)(1.5g,3.9ミリモル)をトリエトキシメタン(30ml)中に混合して得た溶液にNH4OAc(3.0g,39ミリモル)を加えた。反応混合物を撹拌しながら2日間加熱還流した。LCMS分析により、反応が完了したことを確認した。粗反応混合物の溶媒を蒸発除去した。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、DCM/メタノール(4/1)で溶離して8-((5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル)オキシ)キナゾリン-4(3H)-オン(108)(1.4g,収率95%)を得た。
【０６７３】
【数８９】
2021512131.tif 000314
【０６７４】
工程4:
【０６７５】
【化２２４】
2021512131.tif 000315
【０６７６】
8-((5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル)オキシ)キナゾリン-4(3H)-オン(108)(400mg,1.06ミリモル)をDMF(30ml)中に混合して得た溶液に、ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(396mg,2.1ミリモル)、DBU(485mg,3.2ミリモル)、及びBOP(705mg,1.6ミリモル)を加えた。粗反応混合物を25℃で4時間撹拌した。LCMS分析により、反応が完了したことを確認した。粗反応混合物を水(50ml)で希釈し、EtOAc(2×50ml)で抽出した。有機層を合わせてブラインで洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、溶媒を蒸発除去した。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、石油エーテル/EtOAc(1/1)で溶離して4-(8-((5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル)オキシ)キナゾリン-4イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(109)(480mg,収率83%)を得た。
【０６７７】
【数９０】
2021512131.tif 000316
【０６７８】
工程5:
【０６７９】
【化２２５】
2021512131.tif 000317
【０６８０】
4-(8-((5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル)オキシ)キナゾリン-4イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(109)(480mg,0.88ミリモル)を25%TFA/DCM(30ml)中に混合して得た溶液を25℃で3時間撹拌した。LCMS分析により、反応が完了したことを確認した。粗反応混合物を濃縮して8-((5-メチル-1H-インダゾール-4-イル)オキシ)-4-(ピペラジン-1-イル)キナゾリン(110)を得た(390mg,収率100%)。
【０６８１】
【数９１】
2021512131.tif 000318
【０６８２】
工程6:
【０６８３】
【化２２６】
2021512131.tif 000319
【０６８４】
8-((5-メチル-1H-インダゾール-4-イル)オキシ)-4-(ピペラジン-1-イル)キナゾリン(110)(300mg,0.83ミリモル)をEtOAc(20ml)中に混合して得た溶液にNaHCO3飽和溶液(20ml)を加えた。塩化アクリロイル(113mg,1.25ミリモル)のEtOAc(5ml)溶液を滴下した。添加後、反応混合物をさらに30分撹拌した。LCMS分析により、反応が完了したことを確認した。粗反応混合物をEtOAc(2×50ml)で抽出し、有機層を合わせてNa2SO4で乾燥し、溶媒を蒸発除去した。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、EtOAc/メタノール(9/1)で溶離して1-(4-{8-[(5-メチル-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]キナゾリン-4-イル}ピペラジン-1-イル)プロプ-2-エン-1-オン(実施例-1C)を得た(184mg,収率53%)。
【０６８５】
【数９２】
2021512131.tif 000320
【０６８６】
下記の製造において説明されている中間体は、メソッドCに従って実施例12Cをもたらす。しかしながら、この実施例は、ハロゲン化が含まれることから先行実施例の合成範囲外であり、従ってこの製造は、ここでは完全性を明らかにするために記載されている。最終的な実施例をもたらすためのその後の化学はメソッドC実施例に類似しており、追加点や変更点(当業者であれば理解できるであろう)はごくわずかである。
【０６８７】
2-アミノ-5-クロロ-3-{[1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}安息香酸メチル(111)の製造
【０６８８】
【化２２７】
2021512131.tif 000321
【０６８９】
8-((5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル)オキシ)キナゾリン-4(3H)-オン(107)(300mg,0.79ミリモル)をDMF(1.5ml)中に混合して得た溶液にNCS(110mg,0.83ミリモル)を加えた。粗反応混合物を50℃で3時間撹拌した。減圧にて溶媒を除去し、粗生成物をアセトニトリルですりつぶして白色固体を得た(212mg)。濾液を濃縮し、Xbridge(150×30mm,10μmカララム)を使用して分取HPLCにより精製し、58〜100%アセトニトリル/H2O(0.05%NH4OH)で25ml/分にて溶離して、さらに53mgの生成物を捕集した。全部合わせて2-アミノ-5-クロロ-3-{[1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}安息香酸メチル(111)を白色固体として捕集した(265mg,収率82%)。
【０６９０】
【数９３】
2021512131.tif 000322
【０６９１】
下記の製造において説明されている中間体は、メソッドCに従って実施例13Cをもたらす。しかしながら、この実施例は、ハロゲン化が含まれることから先行実施例の合成範囲外であり、従ってこの製造は、ここでは完全性を明らかにするために記載されている。最終的な実施例をもたらすためのその後の化学はメソッドC実施例に類似しており、追加点や変更点(当業者であれば理解できるであろう)はごくわずかである。
【０６９２】
2-アミノ-5-ブロモ-3-{[5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}安息香酸メチル(112)の製造
【０６９３】
【化２２８】
2021512131.tif 000323
【０６９４】
2-アミノ-5-ブロモ-3-{[5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}安息香酸メチル(112)(690mg,収率95%)は、2-アミノ-5-クロロ-3-{[1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}安息香酸メチル(111)を製造するのに使用した手順に従って製造した。
【０６９５】
【数９４】
2021512131.tif 000324
【０６９６】
下記の製造において説明されている中間体は、メソッドCに従って実施例14Cをもたらす。しかしながら、この実施例は、シアノ化が含まれることから先行実施例の合成範囲外であり、従ってこの製造は、ここでは完全性を明らかにするために記載されている。最終的な実施例をもたらすためのその後の化学はメソッドC実施例に類似しており、追加点や変更点(当業者であれば理解できるであろう)はごくわずかである。
【０６９７】
4-(6-シアノ-8-{[5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}キナゾリン-1-カルボン酸tert-ブチル(114)の製造
【０６９８】
【化２２９】
2021512131.tif 000325
【０６９９】
4-(6-ブロモ-8-{[5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}キナゾリン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(113,メソッドCに従って製造)(217mg,0.35ミリモル)、Zn(CN)2(65mg,0.56ミリモル)、及びPd(PPh3)4(40mg,0.035ミリモル)をDMF(6ml)中に混合して得た混合物を、窒素雰囲気下でマイクロ波にて120℃で5時間撹拌した。LCMSにより、所望の生成物への完全な転化が確認された。粗反応混合物を室温に冷却し、水(20ml)で希釈した。水性層をEtOAc(3×10ml)で抽出し、有機層を合わせて濃縮し、粗生成物をシリカゲルで精製し、10〜50%EtOAcで溶離して4-(6-シアノ-8-{[5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}キナゾリン-1-カルボン酸tert-ブチル(114)を白色固体として得た(214mg,収率88%)。TLC(50%EtOAc/石油エーテル) Rf 0.4；
【０７００】
【数９５】
2021512131.tif 000326
【０７０１】
下記の実施例は、メソッドC、ならびに1-(4-{8-[(5-メチル-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]キナゾリン-4-イル}ピペラジン-1-イル)プロプ-2-エン-1-オン(実施例-1C)を製造するのに使用した手順、を使用して製造した。下記の実施例は、実施例-1Cを製造するのに使用した典型的な手順に対する重要な変更や置き換え(当業者であれば理解できるであろう)が無い形で行った。
【０７０２】
【化２３０】
2021512131.tif 000327
【０７０３】
【化２３１】
2021512131.tif 000328
【０７０４】
【化２３２】
2021512131.tif 000329
【０７０５】
【化２３３】
2021512131.tif 000330
【０７０６】
【化２３４】
2021512131.tif 000331
【０７０７】
【化２３５】
2021512131.tif 000332
【０７０８】
【化２３６】
2021512131.tif 000333
【０７０９】
下記の製造において説明されている中間体は、メソッドAに従って実施例-4をもたらす。しかしながら、この実施例は、スルホンの形成が含まれることから先行実施例の合成範囲外であり、従ってこの製造は、ここでは完全性を明らかにするために記載されている。最終的な実施例をもたらすためのその後の化学はメソッドA実施例に類似しており、追加点や変更点(当業者であれば理解できるであろう)はごくわずかである。
【０７１０】
8-[(5-クロロ-6-メチル-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-4-[4-(エテニルスルホニル)ピペラジン-1-イル]ピリド[3,4-d]ピリミジン(実施例-4)の製造
【０７１１】
【化２３７】
2021512131.tif 000334
【０７１２】
8-[(5-クロロ-6-メチル-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-4-(ピペラジン-1-イル)ピリド[3,4-d]ピリミジン(115)(145mg,0.37ミリモル)をTHF(50ml)とEt3N(432mg,4.27ミリモル)中に混合して得た溶液を撹拌し、これに塩化エテンスルホニル(46.4mg,0.37ミリモル)のTHF(20ml)溶液を0〜5℃にて加えた。添加後、混合物を同じ温度で15分撹拌した。LCMS分析により、反応が完了したことを確認した。粗反応混合物を水(60ml)中に注ぎ込み、EtOAc(3×50ml)で抽出した。有機層を合わせてNa2SO4で乾燥し、濃縮して粗生成物を得た。粗生成物を、Gemini-C18カラム(100×21.2mm,5μm)を使用して分取HPLCにより精製し、40〜50%アセトニトリル/H2O(0.05%NH3)勾配で溶離して、8-[(5-クロロ-6-メチル-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-4-[4-(エテニルスルホニル)ピペラジン-1-イル]ピリド[3,4-d]ピリミジン(実施例-4)を白色粉末として得た(32mg,収率18%)。
【０７１３】
【数９６】
2021512131.tif 000335
【０７１４】
下記の製造において説明されている中間体は、メソッドAに類似した経路を介して実施例-5をもたらす。しかしながら、この実施例は、ビアリールアミン形成が含まれることから先行実施例の合成範囲外であり、従ってこの製造は、ここでは完全性を明らかにするために記載されている。
【０７１５】
1-(4-{8-[(5-メチル-1H-インダゾール-4-イル)アミノ]ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル}ピペラジン-1-イル)プロプ-2-エン-1-オン(実施例-5)の製造
工程1:
【０７１６】
【化２３８】
2021512131.tif 000336
【０７１７】
Pd[P(o-tol)3]2(7.3mg)とCyPF-t-Bu(1-ジシクロヘキシルホスフィノ-2-ジ-t-ブチルホスフィノエチルフェロセン)(5.6mg)を含有する2.5×10-3M触媒貯蔵液を、NaO-t-Bu(300mg,1.0ミリモル)のTHF溶液(2.0M)と4-ブロモ-5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール(24)(300mg,1.0ミリモル)との混合物に、マイクロ波バイアル中にて窒素雰囲気下で加えた。気密シリンジを介してアンモニア(ジオキサン中0.5M溶液10.2ml)を加えた。テフロンライニングしたキャップでバイアルをシールし、100℃で一晩保持した。粗反応混合物をEtOAcと水で希釈した。水性層をEtOAcで抽出した。有機相を合わせてブラインで洗浄し、減圧にて濃縮した。粗生成物を、シリカゲル(ISCO12gカラム)を使用して精製し、0〜65%EtOAc/ヘプタン勾配で溶離して、5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-アミン(116)を淡褐色固体として得た(209g,収率89%)。
【０７１８】
【数９７】
2021512131.tif 000337
【０７１９】
工程2:
【０７２０】
【化２３９】
2021512131.tif 000338
【０７２１】
5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-アミン(116)(195mg,0.6ミリモル)、4-(8-クロロピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(4)(129mg,0.6ミリモル)、及びSK-CCO2-A(24mg,0.04ミリモル,cas614753-51-4)をトルエン(10ml)中に混合して得た混合物にLiO-tBu(134mg,1.7ミリモル)のTHF溶液(1.0M)を加えた。得られた褐色溶液を窒素で3分パージし、100℃で18時間撹拌し、115℃でさらに2時間撹拌した。粗反応混合物を室温に冷却し、EtOAcとNH4Cl水溶液で希釈した。水性層をEtOAcで抽出し、有機層を合わせて減圧にて濃縮した。粗生成物をシリカゲル(ISCO24gカラム)で精製し、5〜10%イソプロパノール/EtOAc勾配で溶離して4-(8-((5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル)アミノ)ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(117)を得た(145mg,収率48%)。
【０７２２】
【数９８】
2021512131.tif 000339
【０７２３】
工程3:
【０７２４】
【化２４０】
2021512131.tif 000340
【０７２５】
N-(5-メチル-1H-インダゾール-4-イル)-4-(ピペラジン-1-イル)ピリド[3,4-d]ピリミジン-8-アミン(118)(97mg,収率100%)は、8-[(5-メチル-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-4-(ピペラジン-1-イル)ピリド[3,4-d]ピリミジン(86)を製造するのに使用した手順に従って製造した。
【０７２６】
【数９９】
2021512131.tif 000341
【０７２７】
工程4:
【０７２８】
【化２４１】
2021512131.tif 000342
【０７２９】
1-(4-{8-[(5-メチル-1H-インダゾール-4-イル)アミノ]ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル}ピペラジン-1-イル)プロプ-2-エン-1-オン(実施例-5)(32mg,収率29%)は、1-(4-{8-[(5-メチル-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル}ピペラジン-1-イル)プロプ-2-エン-1-オン(実施例-1A)を製造するのに使用した手順に従って製造した。粗生成物は、SFC(ZymorSPHER HADPカラム)を使用してメタノールで精製した。
【０７３０】
【数１００】
2021512131.tif 000343
【０７３１】
下記の実施例は、一般的なメソッドDに従って製造した。
1-(4-{8-[(5-メチル-1H-インダゾール-4-イル)メチル]キナゾリン-4-イル}ピペラジン-1-イル)プロプ-2-エン-1-オン(実施例-1D)の製造
工程1:
【０７３２】
【化２４２】
2021512131.tif 000344
【０７３３】
8-ブロモ-4-クロロキナゾリン(119)(2g,8ミリモル)、ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(1.7g,90ミリモル)、及びDIPEA(2.0g,16ミリモル)をBuOH(25ml)中に混合して得た混合物を90℃で6時間加熱した。減圧にて溶媒を除去し、粗生成物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーで精製し、0〜30%EtOAc/石油エーテルで溶離して、4-(8-ブロモキナゾリン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(120)を白色固体として得た(3.0g,収率90%)。
【０７３４】
【数１０１】
2021512131.tif 000345
【０７３５】
工程2:
【０７３６】
【化２４３】
2021512131.tif 000346
【０７３７】
4-(8-ブロモキナゾリン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(120)(1.0g,2.5ミリモル)、アクリル酸tert-ブチル(489mg,3.81ミリモル)、Pd(OAc)2(57mg,0.25ミリモル)、DABCO(57mg,0.51ミリモル)、及びK2CO3(351mg,2.54ミリモル)を乾燥DMF(12ml)中に混合して得た混合物を、窒素雰囲気下にて120℃で16時間加熱した。LCMS分析により、反応が完了したことを確認した。粗反応混合物を濃縮し、H2O(50ml)で希釈した。水性層をEtOAc(3×40ml)で抽出し、有機層を合わせてH2O(2×50ml)とブライン(50ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。粗生成物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーで精製し、0〜35%EtOAc/石油エーテルで溶離して、4-{8-[(1E)-3-tert-ブトキシ-3-オキソプロプ-1-エン-1-イル]キナゾリン-4-イル}ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(121)をオフホワイト色固体として得た(850mg,収率77%)。
【０７３８】
【数１０２】
2021512131.tif 000347
【０７３９】
工程3:
【０７４０】
【化２４４】
2021512131.tif 000348
【０７４１】
4-{8-[(1E)-3-tert-ブトキシ-3-オキソプロプ-1-エン-1-イル]キナゾリン-4-イル}ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(121)(700mg,1.59ミリモル)をDCM(35ml)とメタノール(35ml)中に混合して得た溶液を撹拌し、これにオゾンガスを−50℃にて吹き込んだ。約30分後、LCMS分析により出発物質が消費されたことを確認した。粗反応混合物中に、撹拌しながら窒素ガスを約20分吹き込み、次いでPPh3(625mg,2.4ミリモル)を加えた。得られた混合物を室温で1時間撹拌した。粗反応混合物を濃縮し、粗生成物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーで精製し、0〜40%EtOAc/石油エーテルで溶離して、4-(8-ホルミルキナゾリン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(122)を白色固体として得た(448mg,収率82%)。
【０７４２】
【数１０３】
2021512131.tif 000349
【０７４３】
工程4:
【０７４４】
【化２４５】
2021512131.tif 000350
【０７４５】
4-ブロモ-5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール(24)(940mg,3.2ミリモル)を乾燥THF(28ml)中に混合して得た溶液を撹拌し、これに2.4MのBuLi(1.6ml,3.8ミリモル)を−80℃で滴下した。得られた混合物を−80℃で40分撹拌した。次いで、4-(8-ホルミルキナゾリン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(122)(436mg,1.27ミリモル)を乾燥THF(5ml)中に混合して得た溶液を滴下した。得られた混合物を−80℃で3時間撹拌した。LCMS分析により、約50%の標的化合物が形成されたことがわかった。反応混合物をNH4Cl水溶液(20ml)でクエンチした。有機層を分離し、水性層をEtOAc(2×30ml)で抽出した。有機層を合わせてブライン(40ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。粗生成物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーで精製し、0〜60%EtOAc/石油エーテルで溶離して、4-(8-{ヒドロキシ[5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]メチル}キナゾリン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(123)を白色固体として得た(330mg,収率18%)。
【０７４６】
【数１０４】
2021512131.tif 000351
【０７４７】
工程5:
【０７４８】
【化２４６】
2021512131.tif 000352
【０７４９】
4-(8-{ヒドロキシ[5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]メチル}キナゾリン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(123)(120mg,0.22ミリモル)とAc2O(84mg,1.1ミリモル)をピリジン(8ml)中に混合して得た溶液を80℃で5時間撹拌した。LCMS分析により、反応が完了したことがわかった。減圧にて溶媒を除去して4-(8-{(アセチルオキシ)[5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]メチル}キナゾリン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(124)を油状物として得た(129mg,収率100%)。この粗生成物を、さらなる精製を行うことなく次の工程に使用した。
【０７５０】
【数１０５】
2021512131.tif 000353
【０７５１】
工程6:
【０７５２】
【化２４７】
2021512131.tif 000354
【０７５３】
4-(8-{(アセチルオキシ)[5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]メチル}キナゾリン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(124)(129mg,0.22ミリモル)、Et3N(65mg,0.64ミリモル)、及び10%Pd/C(30mg)をメタノール(25ml)中に混合して得た混合物を、水素雰囲気下で５時間撹拌した。LCMS分析により、反応が完了したことを確認した。粗反応混合物を濾過した。濾液を濃縮し、粗生成物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーで精製し、0〜30%EtOAc/石油エーテルで溶離して、4-(8-{[5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]メチル}キナゾリン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(125)を無色ガムとして得た(90mg,収率77%)。
【０７５４】
【数１０６】
2021512131.tif 000355
【０７５５】
工程7:
【０７５６】
【化２４８】
2021512131.tif 000356
【０７５７】
8-[(5-メチル-1H-インダゾール-4-イル)メチル]-4-(ピペラジン-1-イル)キナゾリン(126)(59mg,収率100%)は、8-[(5-メチル-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-4-(ピペラジン-1-イル)ピリド[3,4-d]ピリミジン(86)を製造するのに使用した手順に従って製造した。
【０７５８】
工程8:
【０７５９】
【化２４９】
2021512131.tif 000357
【０７６０】
1-(4-{8-[(5-メチル-1H-インダゾール-4-イル)メチル]キナゾリン-4-イル}ピペラジン-1-イル)プロプ-2-エン-1-オン(実施例-1D)(40mg,収率61%)は、1-(4-{8-[(5-メチル-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル}ピペラジン-1-イル)プロプ-2-エン-1-オン(実施例-1A) を製造するのに使用した手順に従って製造した。粗生成物を、Gemini-C18(100×21.2mm,5μmカラム)を使用して分取HPLCにより精製し、15〜25%アセトニトリル/H2O(0.1%ギ酸)で溶離した。
【０７６１】
【数１０７】
2021512131.tif 000358
【０７６２】
1-(4-{8-[(5-メチル-1H-インダゾール-4-イル)メチル]ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル}ピペラジン-1-イル)プロプ-2-エン-1-オン(実施例-2D)の製造
工程1:
【０７６３】
【化２５０】
2021512131.tif 000359
【０７６４】
4-{8-[(1E)-3-tert-ブトキシ-3-オキソプロプ-1-エン-1-イル]ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル}ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(127)(880mg,収率14%)は、4-{8-[(1E)-3-tert-ブトキシ-3-オキソプロプ-1-エン-1-イル]キナゾリン-4-イル}ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(121)を製造するのに使用した手順に従って製造した。
【０７６５】
【数１０８】
2021512131.tif 000360
【０７６６】
工程2:
【０７６７】
【化２５１】
2021512131.tif 000361
【０７６８】
4-(8-ホルミルピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル}ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(128)(630mg,収率64%)は、4-(8-ホルミルキナゾリン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(122)を製造するのに使用した手順に従って製造した。
【０７６９】
【数１０９】
2021512131.tif 000362
【０７７０】
工程3:
【０７７１】
【化２５２】
2021512131.tif 000363
【０７７２】
4-(8-{ヒドロキシ[5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]メチル}ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル}ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(129)(200mg,収率10%)は、4-(8-{ヒドロキシ[5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]メチル}キナゾリン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(123)を製造するのに使用した手順に従って製造した。
【０７７３】
【数１１０】
2021512131.tif 000364
【０７７４】
工程4:
【０７７５】
【化２５３】
2021512131.tif 000365
【０７７６】
4-(8-{(アセチルオキシ)[5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]メチル}ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル}ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(130)(130mg,収率70%)は、4-(8-{(アセチルオキシ)[5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]メチル}キナゾリン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(124)を製造するのに使用した手順に従って製造した。
【０７７７】
【数１１１】
2021512131.tif 000366
【０７７８】
工程5:
【０７７９】
【化２５４】
2021512131.tif 000367
【０７８０】
4-(8-{[5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]メチル}ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル}ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(131)(28mg,収率26%)は、4-(8-{[5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]メチル}キナゾリン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(125)を製造するのに使用した手順に従って製造した。
【０７８１】
【数１１２】
2021512131.tif 000368
【０７８２】
工程6:
【０７８３】
【化２５５】
2021512131.tif 000369
【０７８４】
8-[(5-メチル-1H-インダゾール-4-イル)メチル]-4-(ピペラジン-1-イル)ピリド[3,4-d]ピリミジン(132)(19mg,収率100%)は、8-[(5-メチル-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-4-(ピペラジン-1-イル)ピリド[3,4-d]ピリミジン(86)を製造するのに使用した手順に従って製造した。
【０７８５】
【数１１３】
2021512131.tif 000370
【０７８６】
工程7:
【０７８７】
【化２５６】
2021512131.tif 000371
【０７８８】
1-(4-{8-[(5-メチル-1H-インダゾール-4-イル)メチル]ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル}ピペラジン-1-イル)プロプ-2-エン-1-オン(実施例-2D)(6mg,収率19%)は、1-(4-{8-[(5-メチル-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル}ピペラジン-1-イル)プロプ-2-エン-1-オン(実施例-1A)を製造するのに使用した手順に従って製造した。
【０７８９】
【数１１４】
2021512131.tif 000372
【０７９０】
下記の実施例は、一般的なメソッドEに従って製造した。
1-(4-{8-[(5-クロロ-6-メチル-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-2-[3-(ジメチルアミノ)アゼチジン-1-イル]-6-メチルピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル}ピペラジン-1-イル)プロプ-2-エン-1-オン(実施例-1E)の製造
工程1:
【０７９１】
【化２５７】
2021512131.tif 000373
【０７９２】
3-アミノ-2-{[5-クロロ-6-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}-6-メチルピリジン-4-カルボン酸メチル(133)(424mg,0.98ミリモル)をAcOH(15ml)中に混合して得た溶液にKOCN(904mg,11.1ミリモル)の水(1ml)溶液を80℃にて加え、得られた黄色溶液を80℃で30分撹拌した。30分後、LCMSにより出発物質と生成物が認められた。出発物質が全て消費されるまで、追加の固体KOCNを(11ミリモルのアリコートにて)30分ごとに加えた。反応混合物を冷却し、水で希釈して懸濁液を得た。固体を濾過し、水で洗浄し、乾燥した。得られた固体をジエチルエーテルとDCMの混合物中に溶解し、濃縮し、水中スラリーにした。混合物を濾過し、乾燥して8-{[5-クロロ-6-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}-6-メチルピリド[3,4-d]ピリミジン-2,4(1H,3H)-ジオン(134)をクリーム色固体として得た(426mg,収率98%)。
【０７９３】
【数１１５】
2021512131.tif 000374
【０７９４】
工程2:
【０７９５】
【化２５８】
2021512131.tif 000375
【０７９６】
8-{[5-クロロ-6-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}-6-メチルピリド[3,4-d]ピリミジン-2,4(1H,3H)-ジオン(134)(426mg,0.96ミリモル)をPOCl3(6ml)とジメチルアニリン(0.05ml)中に混合して得た溶液を100℃で6時間撹拌した。粗反応混合物を濃縮し、トルエンと共に共沸させた。粗生成物に氷を加え、混合物を重炭酸ナトリウムで塩基性にした。粗生成物をDCM中に抽出し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮して2,4-ジクロロ-8-[(5-クロロ-6-メチル-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-6-メチルピリド[3,4-d]ピリミジン(135)を褐色泡状物として得た(278mg,収率73%)。
【０７９７】
【数１１６】
2021512131.tif 000376
【０７９８】
工程3:
【０７９９】
【化２５９】
2021512131.tif 000377
【０８００】
2,4-ジクロロ-8-[(5-クロロ-6-メチル-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-6-メチルピリド[3,4-d]ピリミジン(135)(278mg,0.70ミリモル)、ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(157mg,0.84ミリモル)、及びジイソプロピルエチルアミン(273mg,2.11ミリモル)をDCM(10ml)中に混合して得た溶液を一晩撹拌した。粗反応混合物を濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィー(12gISCOカートリッジ)を使用して精製し、EtOAc/ヘプタン(0〜100%)で溶離して4-{2-クロロ-8-[(5-クロロ-6-メチル-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-6-メチルピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル}ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(136)を褐色固体として得た(57mg,収率15%)。
【０８０１】
【数１１７】
2021512131.tif 000378
【０８０２】
工程4:
【０８０３】
【化２６０】
2021512131.tif 000379
【０８０４】
4-{2-クロロ-8-[(5-クロロ-6-メチル-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-6-メチルピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル}ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(136)(57mg,0.10ミリモル)、N,N-ジメチルアゼチジン-3-アミンジハイドロクロライド(109mg,0.63ミリモル)、DIEA(0.13ml,0.73ミリモル)、及びKF(12mg,0.21ミリモル)をDMSO(2ml)中に混合して得た混合物を115℃で5時間撹拌した。粗反応混合物を室温に冷却し、EtOAcで希釈し、水(2×)とブラインで洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮して4-{8-[(5-クロロ-6-メチル-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-2-[3-(ジメチルアミノ)アゼチジン-1-イル]-6-メチルピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル}ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(137)を褐色泡状物として得た(49mg,収率77%)。
【０８０５】
【数１１８】
2021512131.tif 000380
【０８０６】
工程5:
【０８０７】
【化２６１】
2021512131.tif 000381
【０８０８】
1-{8-[(5-クロロ-6-メチル-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-6-メチル-4-(ピペラジン-1-イル)ピリド[3,4-d]ピリミジン-2-イル}-N,N-ジメチルアゼチジン-3-アミン(138)(87mg,収率100%)は、8-[(5-メチル-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-4-(ピペラジン-1-イル)ピリド[3,4-d]ピリミジン(86)を製造するのに使用した手順に従って製造した。
【０８０９】
【数１１９】
2021512131.tif 000382
【０８１０】
工程6:
【０８１１】
【化２６２】
2021512131.tif 000383
【０８１２】
1-(4-{8-[(5-クロロ-6-メチル-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-2-[3-(ジメチルアミノ)アゼチジン-1-イル]-6-メチルピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル}ピペラジン-1-イル)プロプ-2-エン-1-オン(実施例-1E)(7mg,収率15%)は、1-(4-{8-[(5-メチル-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル}ピペラジン-1-イル)プロプ-2-エン-1-オン(実施例-1A)を製造するのに使用した手順に従って製造した。
【０８１３】
【数１２０】
2021512131.tif 000384
【０８１４】
下表に記載の実施例は、メソッドEならびに1-(4-{8-[(5-クロロ-6-メチル-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-2-[3-(ジメチルアミノ)アゼチジン-1-イル]-6-メチルピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル}ピペラジン-1-イル)プロプ-2-エン-1-オン(実施例-1E)を製造するのに使用した手順、を使用して製造した。下記の実施例は、実施例-1Eを製造するのに使用した典型的な手順に対する重要な変更や置き換え(当業者であれば理解できるであろう)が無い形で行った。
【０８１５】
【化２６３】
2021512131.tif 000385
【０８１６】
【化２６４】
2021512131.tif 000386
【０８１７】
【化２６５】
2021512131.tif 000387
【０８１８】
【化２６６】
2021512131.tif 000388
【０８１９】
【化２６７】
2021512131.tif 000389
【０８２０】
【化２６８】
2021512131.tif 000390
【０８２１】
【化２６９】
2021512131.tif 000391
【０８２２】
【化２７０】
2021512131.tif 000392
【０８２３】
下表の実施例は、メソッドEならびに1-(4-{8-[(5-クロロ-6-メチル-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-2-[3-(ジメチルアミノ)アゼチジン-1-イル]-6-メチルピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル}ピペラジン-1-イル)プロプ-2-エン-1-オン(実施例-1E)を製造するのに使用した手順を使用して、類似のライブラリー・フォーマット(library format)にて製造した。下記の実施例は、実施例-1Eを製造するのに使用した典型的な手順への重要な変更や置き換え(当業者であれば理解できるであろう)が無い形で行った。
【０８２４】
【化２７１】
2021512131.tif 000393
【０８２５】
【化２７２】
2021512131.tif 000394
【０８２６】
【化２７３】
2021512131.tif 000395
【０８２７】
【化２７４】
2021512131.tif 000396
【０８２８】
【化２７５】
2021512131.tif 000397
【０８２９】
さらなる中間体の製造:
3-クロロ-5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-オール(139)の製造
工程1:
【０８３０】
【化２７６】
2021512131.tif 000398
【０８３１】
4-ブロモ-5-メチル-1H-インダゾール(140)(3.0g,14.2ミリモル)をアセトニトリル(50ml)中に混合して得た溶液にNCS(2.1g,15.6ミリモル)を少量ずつ加えた。添加後、反応混合物を65℃で6時間加熱した。LCMSにより、生成物だけが得られたことを確認した。粗反応混合物を室温に冷却し、EtOAc(100ml)を加えた。有機層を1NのNaOH溶液(20ml)とブライン(50ml)で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧にて濃縮して4-ブロモ-3-クロロ-5-メチル-1H-インダゾール(141)を得た(3.3g,収率90%)。
【０８３２】
【数１２１】
2021512131.tif 000399
【０８３３】
工程2:
【０８３４】
【化２７７】
2021512131.tif 000400
【０８３５】
4-ブロモ-3-クロロ-5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール(142)(2.5g,収率56%)は、4-ブロモ-5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール(24)を製造するのに使用した手順に従って製造した。
【０８３６】
【数１２２】
2021512131.tif 000401
【０８３７】
工程3:
【０８３８】
【化２７８】
2021512131.tif 000402
【０８３９】
4-ブロモ-3-クロロ-5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール(142)(1.9g,5.8ミリモル)をDMF(60ml)中に混合して得た溶液を撹拌し、これに4,4,4’,4’,5,5,5’,5’-オクタメチル-2,2’-ビ(1,3,2-ジオキサボロラン)(2.2g,8.6ミリモル)、KOAc(1.7g,17.3ミリモル)、及びPd(dppf)Cl2(442mg,0.58ミリモル)を窒素雰囲気下で加えた。粗反応混合物を105℃で6時間撹拌した。LCMS分析により、生成物への転化が確認された。冷却後、水(50ml)を加え、混合物をEtOAc(2×50ml)で抽出した。有機層を合わせてブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧にて濃縮した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、EtOAc/石油エーテル(1/9)で溶離して3-クロロ-5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-4-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)-1H-インダゾール(143)を得た(1.3g,収率60%)。
【０８４０】
【数１２３】
2021512131.tif 000403
【０８４１】
工程4:
【０８４２】
【化２７９】
2021512131.tif 000404
【０８４３】
3-クロロ-5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-4-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)-1H-インダゾール(143)(1.3g,3.4ミリモル)をEtOH(30ml)中に混合して得た溶液にmCPBA(893mg,5.2ミリモル)とH2O(15ml)を加えた。反応混合物を20℃で16時間撹拌した。LCMS分析により、ほとんどが生成物であることを確認した。粗反応混合物をNaHCO310%溶液(10ml)で希釈し、水性層をEtOAc(2×50ml)で抽出した。有機層を合わせてブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧にて濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、EtOAc/石油エーテル(1/5)で溶離して3-クロロ-5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-オール(139)を得た(180mg,純度80%,収率20%)。
【０８４４】
【数１２４】
2021512131.tif 000405
【０８４５】
5,6-ジクロロ-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-オール(163)の製造
工程1:
【０８４６】
【化２８０】
2021512131.tif 000406
【０８４７】
3-ブロモ-1,2-ジクロロ-5-フルオロ-4-メチルベンゼン(147)(4.7g,18.3ミリモル)を水/BuOH(1/1,45ml)中に混合して得た混合物にKMnO4(8.7g,54.8ミリモル)を80℃にて加えた。混合物を90℃で一晩加熱した。さらに4.5gのKMnO4を加え、105℃で一晩撹拌した。混合物をEtOHで希釈し、セライトパッドを介して濾過した。濾液を減圧にて濃縮して白色固体を得、これをエーテル/水で希釈した。凍結乾燥器を使用して水性層を乾燥して白色固体(4.9g)を得た。白色固体をEtOAc/EtOH中に懸濁し、不溶性物質を濾過により除去した。濾液を濃縮して3.7g(収率70%)の2-ブロモ-3,4-ジクロロ-6-フルオロ安息香酸(148)を白色固体として得た。
【０８４８】
【数１２５】
2021512131.tif 000407
【０８４９】
工程2:
【０８５０】
【化２８１】
2021512131.tif 000408
【０８５１】
2-ブロモ-3,4-ジクロロ-6-フルオロ安息香酸(148)(2.2g,7.8ミリモル)をTHF(11ml)中に混合して得た溶液を、窒素雰囲気下にて0℃に冷却した。この混合物に、BH3・SMe2のTHF溶液(THF中2.0M,112ml,24.1ミリモル)を滴下した。ガスの発生が認められた。添加完了後、混合物を0℃でさらに1.5時間撹拌し、次いで70℃で18時間加熱した。粗反応混合物をLCMSにより分析し、所望の生成物が形成されたことがわかった。反応混合物を氷浴で冷却し、EtOHで慎重にクエンチした。反応混合物を濾過して不溶性物質を除去し、濃縮した。残留物をEtOAc(130ml)と酸性水(130ml)に分配した。有機層をNH4Cl飽和溶液で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濃縮して青白い固体を得た。これをカラムクロマトグラフィー(SiO2,ISCO,0〜30%EtOAc/ヘプタン)により精製して1.5g(収率71%)の(2-ブロモ-3,4-ジクロロ-6-フルオロフェニル)メタノール(149)を青白い固体として得た。
【０８５２】
【数１２６】
2021512131.tif 000409
【０８５３】
工程3:
【０８５４】
【化２８２】
2021512131.tif 000410
【０８５５】
(2-ブロモ-3,4-ジクロロ-6-フルオロフェニル)メタノール(149)(315mg,1.15ミリモル)をCHCl3(12ml)中に混合して得た溶液に、MnO2(700mg,8.05ミリモル)を少量ずつ加えた。混合物を20時間加熱還流した。LCMS分析により、出発物質が消費されたことを確認した。混合物を、セライトを介して濾過した。黒色濾液を濃縮して粗残留物を得、これをカラムクロマトグラフィー(SiO2,ISCO,0〜10%EtOAc/ヘプタン)により精製して215mg(収率68%)の2-ブロモ-3,4-ジクロロ-6-フルオロベンズアルデヒド(150)を白色固体として得た。
【０８５６】
【数１２７】
2021512131.tif 000411
【０８５７】
工程4:
【０８５８】
【化２８３】
2021512131.tif 000412
【０８５９】
2-ブロモ-3,4-ジクロロ-6-フルオロベンズアルデヒド(150)(761mg,2.80ミリモル)を入れたバイアルに、無水ヒドラジン(628mg,19.6ミリモル)とスルホラン(14ml)を加えた。得られた溶液を130℃で20時間加熱した。反応混合物を室温に冷却し、EtOAcで希釈した。反応混合物を水(2×)で洗浄した。有機層をNa2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィー(SiO2,ISCO,5〜50%EtOAc/ヘプタン)により精製して448mg(収率56%)の4-ブロモ-5,6-ジクロロ-1H-インダゾール(151)を白色固体として得た。
【０８６０】
【数１２８】
2021512131.tif 000413
【０８６１】
工程5:
【０８６２】
【化２８４】
2021512131.tif 000414
【０８６３】
4-ブロモ-5,6-ジクロロ-1H-インダゾール(151)(123mg,0.46ミリモル)をTHF(5ml)中に混合して得た溶液に、PPTS(8.1mg,0.03ミリモル)とDHP(156mg,1.85ミリモル)を加えた。反応混合物を50℃で5時間撹拌した。LCMS分析により、出発物質が完全に消費されて生成物に転化したことを確認した。反応混合物を濃縮し、残留物をEtOAcと水に分配した。有機層をブラインで洗浄し、濃縮し、残留物をカラムクロマトグラフィー(SiO2,ISCO,0〜25%EtOAc/ヘプタン)により精製して150mg(収率93%)の4-ブロモ-5,6-ジクロロ-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール(152)を白色固体として得た。
【０８６４】
【数１２９】
2021512131.tif 000415
【０８６５】
工程6:
【０８６６】
【化２８５】
2021512131.tif 000416
【０８６７】
4-ブロモ-5,6-ジクロロ-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール(152)(423mg,1.21ミリモル)とCsOH(543mg,3.63ミリモル)をジオキサン/水中に溶解し、これに触媒Pd2(dba)3(55.3mg)とリガンドtBu-XPhos(51.3mg)を加えた。反応混合物を窒素ストリームで脱気し、80℃で2.5時間加熱した。LCMS分析により、出発物質が消費されて所望の生成物が形成されたことを確認した。反応混合物をEtOAcとNH4Cl水溶液に分配した。水相を2NのHClでやや酸性にし、次いでEtOAcで抽出した。有機層を合わせてNa2SO4で乾燥し、濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィー(SiO2,ISCO,10〜90%EtOAc/ヘプタン)により精製して307mgの5,6-ジクロロ-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-オール(153)(収率88%,純度約80%)を褐色固体として得た。これをさらなる精製なしに次の工程に使用した。
【０８６８】
【数１３０】
2021512131.tif 000417
【０８６９】
6-クロロ-5-フルオロ-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-オール(157)の製造
工程1:
【０８７０】
【化２８６】
2021512131.tif 000418
【０８７１】
6-クロロ-4-フルオロ-1H-インダゾール(154)(606mg,3.55ミリモル)とPTSA一水和物(67.6mg,0.36ミリモル)をTHF中に混合して得た混合物にDHP(359mg,0.39ml,4.26ミリモル)を加え、反応混合物を2時間撹拌還流した。LCMS分析により、所望の生成物への転化を確認した。反応混合物をEtOAcで希釈し、水で洗浄した。有機層をNa2SO4で乾燥し、濃縮した。粗油状物をクロマトグラフィー(ISCO,SiO2,0〜100%DCM/ヘプタン)により精製して816mgの6-クロロ-4-フルオロ-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール(155)(収率90%)を無色油状物(ゆっくりと結晶化した)として得た。
【０８７２】
【数１３１】
2021512131.tif 000419
【０８７３】
工程2:
【０８７４】
【化２８７】
2021512131.tif 000420
【０８７５】
6-クロロ-4-フルオロ-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール(155)(273mg,1.07ミリモル)をTHF(10.7ml)中に混合して得た溶液に、LDAの溶液(THF中1.0M,1.5ml,1.5ミリモル)を−70℃にて加えた。得られた淡黄色反応混合物を同じ温度で1時間撹拌した。NFSI(473mg,1.5ミリモル)のTHF(1.5ml)溶液を滴下した。LCMS分析により、所望の生成物が形成され、出発物質が幾らか残存していることを確認した。反応混合物をNH4Cl飽和水溶液でクエンチし、EtOAcで抽出した。有機層をブラインで洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。粗生成物をクロマトグラフィー(SiO2,ISCO,0〜20%EtOAc/ヘプタン)により精製して6-クロロ-4,5-ジフルオロ-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール(156)を得た(152mg,収率52%)。
【０８７６】
【数１３２】
2021512131.tif 000421
【０８７７】
工程3:
【０８７８】
【化２８８】
2021512131.tif 000422
【０８７９】
6-クロロ-4,5-ジフルオロ-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール(156)(151mg,0.554ミリモル)、水(40μl,2.22ミリモル)、及びKOH(124mg,2.22ミリモル)をDMSO(1.85ml)中に混合して得た混合物を100℃で3.5時間撹拌した。LCMS分析により、出発物質の消費と所望の生成物の形成を確認した。EtOAcと水を加え、層分離を起こさせた。水性層を2N塩酸でやや酸性に調整した。水性層をEtOAcで抽出した。有機層を合わせてNa2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。残留物をクロマトグラフィー(SiO2,ISCO, 5〜65%EtOAc/ヘプタン)により精製して6-クロロ-5-フルオロ-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-オール(157)を白色固体として得た(110mg,収率73%)。
【０８８０】
【数１３３】
2021512131.tif 000423
【０８８１】
[(2S,4R)-4-フルオロ-1-メチルピロリジン-2-イル]メタノール(161)の製造
工程1:
【０８８２】
【化２８９】
2021512131.tif 000424
【０８８３】
(4S)-4-ヒドロキシ-L-プロリン酸メチル(19g,10ミリモル)とTEA(17.2g,170ミリモル)をTHF(400ml)中に混合して得た混合物に(Boc)2O(31.4g,7.58ミリモル)を0℃にて0.5時間で加えた。反応混合物を室温で16時間撹拌した。LCMS分析により、出発物質が消費されたことを確認した。反応混合物を分液漏斗に移し、500mlのEtOAcで希釈し、H2O(3×300ml)で洗浄した。有機層を合わせてNa2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮して(2S,4S)-4-ヒドロキシピロリジン-1,2-ジカルボン酸1-tert-ブチル2-メチル(159)(21g,収率65%)を得た。これをさらなる精製を施すことなく次の工程に使用した。
【０８８４】
【数１３４】
2021512131.tif 000425
【０８８５】
工程2:
【０８８６】
【化２９０】
2021512131.tif 000426
【０８８７】
(2S,4S)-4-ヒドロキシピロリジン-1,2-ジカルボン酸1-tert-ブチル2-メチル(159)(16.4g,20ミリモル)をDCM(400ml)中に混合して得た溶液にDAST(32.3g,201ミリモル)を−78℃で加えた。反応混合物を1時間撹拌し、次いで室温に加温し、さらに24時間撹拌した。LCMS分析により、所望の生成物への転化を確認した。NaHCO3飽和水溶液(300ml)を加えることによって反応混合物をクエンチした。反応混合物をEtOAc(3×300ml)で抽出した。有機層を合わせて無水Na2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー(SiO2,0〜10%EtOAc/石油エーテル)によって精製して(2S,4R)-4-フルオロピロリジン-1,2-ジカルボン酸1-tert-ブチル2-メチル(160)(10g,収率70%)を無色油状物として得た。
【０８８８】
【数１３５】
2021512131.tif 000427
【０８８９】
工程3:
【０８９０】
【化２９１】
2021512131.tif 000428
【０８９１】
(2S,4R)-4-フルオロピロリジン-1,2-ジカルボン酸1-tert-ブチル2-メチル(160)(6.92g,28ミリモル)をTHF(100ml)中に混合して得た溶液にLiAlH4(3.19mg,84ミリモル)を加え、反応混合物を室温で16時間撹拌した。LCMS分析により、所望の生成物の形成を確認した。混合物をNa2SO4・10H2Oで乾燥し、1時間撹拌した。混合物を濾過し、濃縮して[(2S,4R)-4-フルオロ-1-メチルピロリジン-2-イル]メタノール(161)を無色油状物として得た(3.7g,収率99%)。これをさらなる精製を施すことなく次の工程に使用した。
【０８９２】
【数１３６】
2021512131.tif 000429
【０８９３】
[(2S,4R)-4-フルオロ-1-メチルピロリジン-2-イル]メタノール(163)の製造
【０８９４】
【化２９２】
2021512131.tif 000430
【０８９５】
(2S,4S)-4-フルオロピロリジン-1,2-ジカルボン酸1-tert-ブチル2-メチル(162)(8.8g,36ミリモル)をTHF(400ml)中に混合して得た溶液に、LiAlH4(4.05mg,107ミリモル)を窒素雰囲気下にて20℃で少量ずつ加えた。2時間撹拌した後、NaHCO3飽和水溶液(8.2ml)を滴下して反応をクエンチした。EtOAc(500ml)を加え、混合物を濾過した。濾液をNa2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。粗残留物をフラッシュクロマトグラフィー(SiO2,9:1DCM/MeOH)によって精製して[(2S,4S)-4-フルオロ-1-メチルピロリジン-2-イル]メタノール(163)を得た(3.1g,収率65%)。
【０８９６】
【数１３７】
2021512131.tif 000431
【０８９７】
[(2S,4R)-4-メトキシ-1-メチルピロリジン-2-イル]メタノール(166)の製造
工程1:
【０８９８】
【化２９３】
2021512131.tif 000432
【０８９９】
(2S,4R)-4-ヒドロキシピロリジン-1,2-ジカルボン酸1-tert-ブチル2-メチル(164)(6g,24.5ミリモル)をCH3CN(120ml)中に混合して得た溶液にAg2O(17.0g,73.4ミリモル)とCH3I(27.76g,196ミリモル)を加えた。混合物を20℃で16時間撹拌した。LCMS分析により、所望の生成物が形成され、出発物質が幾らか残存していることがわかった。追加のCH3I(6.94g,49ミリモル)を加え、反応混合物を20℃でさらに16時間撹拌した。LCMS分析により、出発物質の消費が確認された。反応混合物を濾過した。濾液を濃縮し、フラッシュクロマトグラフィー(SiO2,8:1石油エーテル/EtOAc)によって精製して(2S,4R)-4-ヒドロキシピロリジン-1,2-ジカルボン酸1-tert-ブチル2-メチル(165)を無色油状物として得た(4.6g,収率73%)。
【０９００】
【数１３８】
2021512131.tif 000433
【０９０１】
工程2:
【０９０２】
【化２９４】
2021512131.tif 000434
【０９０３】
(2S,4R)-4-ヒドロキシピロリジン-1,2-ジカルボン酸1-tert-ブチル2-メチル(165)(1.6g,6.2ミリモル)をTHF(30ml)中に混合して得た溶液にLiAlH4(703mg,18.5ミリモル)を加え、混合物を80℃で3時間撹拌した。LCMS分析により、所望の生成物が形成されていることがわかった。反応混合物を室温に冷却した。Na2SO4・10H2Oを加え、混合物を10分撹拌した。混合物を濾過して[(2S,4R)-4-メトキシ-1-メチルピロリジン-2-イル]メタノール(166)を無色油状物として得た(0.85g,収率95%)。
【０９０４】
【数１３９】
2021512131.tif 000435
【０９０５】
[(2S,4S)-4-メトキシ-1-メチルピロリジン-2-イル]メタノール(169)の製造
工程1:
【０９０６】
【化２９５】
2021512131.tif 000436
【０９０７】
(2R,4S)-4-ヒドロキシピロリジン-1,2-ジカルボン酸1-tert-ブチル2-メチル(167)(3g,12.23ミリモル)をCH3CN(80ml)中に混合して得た溶液にAg2O(8.5g,36.7ミリモル)とCH3I(17.4g,122ミリモル)を加え、混合物を20℃で16時間撹拌した。LCMS分析により、出発物質が残存していることがわかった。さらにAg2O(4g)とCH3I(9g)を加え、反応混合物を20℃でさらに16時間撹拌した。LCMS分析により、出発物質の消費が確認された。反応混合物を濾過し、濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー(SiO2,1:1石油エーテル/EtOAc)によって精製して(2R,4S)-4-メトキシピロリジン-1,2-ジカルボン酸1-tert-ブチル2-メチル(168)を無色油状物として得た(2.5g,収率79%)。
【０９０８】
【数１４０】
2021512131.tif 000437
【０９０９】
工程2:
【０９１０】
【化２９６】
2021512131.tif 000438
【０９１１】
(2R,4S)-4-メトキシピロリジン-1,2-ジカルボン酸1-tert-ブチル2-メチル(168)(2g,7.71ミリモル)をTHF(80ml)中に混合して得た溶液にLiAlH4(879mg,23.1ミリモル)を加え、反応混合物を80℃で3時間撹拌した。LCMS分析により、所望の生成物への転化を確認した。20℃に冷却した後、Na2SO4・10H2Oを加え、混合物を10分撹拌した。混合物を濾過し、濃縮して[(2R,4S)-4-メトキシ-1-メチルピロリジン-2-イル]メタノール(169)を無色油状物として得た(1.1g,収率79%)。これをさらなる精製を施すことなく次の工程に使用した。
【０９１２】
【数１４１】
2021512131.tif 000439
【０９１３】
(3R,5S)-5-(ヒドロキシメチル)-1-メチルピロリジン-3-カルボニトリル(173)の製造
工程1:
【０９１４】
【化２９７】
2021512131.tif 000440
【０９１５】
(2S,4R)-4-シアノピロリジン-1,2-ジカルボン酸1-tert-ブチル2-メチル(170)(2g,7.86ミリモル)をDCM(10ml)中に混合して得た溶液にTFA(5ml)を加え、混合物を20℃で2時間撹拌した。LCMS分析により、生成物の形成が確認された。混合物を濃縮して(4R)-4-シアノ-L-プロリン酸メチル(171)を無色油状物として得た(2.11g,収率100%)。
【０９１６】
【数１４２】
2021512131.tif 000441
【０９１７】
工程2:
【０９１８】
【化２９８】
2021512131.tif 000442
【０９１９】
(4R)-4-シアノ-L-プロリン酸メチル(171)(2.11g,7.86ミリモル)とHCHO(4ml)をDCM(15ml)とTHF(5ml)中に混合して得た混合物にNaBH3CN(990mg,15.7ミリモル)を加え、混合物を25℃で16時間撹拌した。LCMS分析により、生成物の形成を確認した。H2O(50ml)を加え、混合物をDCM(3×100ml)で抽出した。有機層を合わせてブライン(10ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮して(4R)-4-シアノ-1-メチル-L-プロリン酸メチル(172)を黄色油状物として得た(1.32g,収率100%)。
【０９２０】
【数１４３】
2021512131.tif 000443
【０９２１】
工程3:
【０９２２】
【化２９９】
2021512131.tif 000444
【０９２３】
(4R)-4-シアノ-1-メチル-L-プロリン酸メチル(172)(1.32g,8.56ミリモル)をTHF(20ml)中に混合して得た溶液にLiAlH4(377mg,17.1ミリモル)を加え、混合物を50℃で16時間撹拌した。LCMS分析により、出発物質の消費と生成物の形成を確認した。H2O(10ml)を加え、混合物を10分撹拌した。混合物をEtOAc(3×20ml)で抽出した。有機層を合わせてNa2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮して(3R,5S)-5-(ヒドロキシメチル)-1-メチルピロリジン-3-カルボニトリル(173)を無色油状物として得た(472mg,収率39%)。これをさらなる精製を施すことなく次の工程に使用した。
【０９２４】
【数１４４】
2021512131.tif 000445
【０９２５】
[(3S)-3-フルオロ-1-メチルピロリジン-3-イル]メタノール(177)の製造
工程1:
【０９２６】
【化３００】
2021512131.tif 000446
【０９２７】
(3S)-1-(tert-ブトキシカルボニル)-3-フルオロピロリジン-3-カルボン酸(174)(WO2013072813)(1.25g,5.38ミリモル)を乾燥THF(18ml)中に混合して得た溶液に、窒素雰囲気下でBH3の溶液(THF中1.0M,17.2ml)を滴下して処理した。添加後、混合物を16LCMS時間加熱還流した。LCMS分析により、出発物質が全て消費されて、所望の生成物が形成されたことを確認した。反応混合物を25℃に冷却し、MeOH(10ml)を滴下した。混合物を2時間撹拌し、0℃に冷却し、次いで0.5M塩酸(3ml)で処理した。この溶液を0.5時間撹拌した。NaHCO3飽和水溶液を加えて、反応混合物をpH>7に調整した。混合物を濃縮してMeOHを除去した。残留物をH2O(30ml)で希釈し、EtOAc(3×20ml)で抽出した。有機層を合わせてブライン(30ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濃縮した。粗残留物をフラッシュクロマトグラフィー(SiO2,10〜70%EtOAc/石油エーテル)によって精製して(3S)-3-フルオロ-3-(ヒドロキシメチル)ピロリジン-1-カルボン酸tert-ブチル(175)を無色油状物として得た(1.1g,収率93%)。
【０９２８】
【数１４５】
2021512131.tif 000447
【０９２９】
工程2:
【０９３０】
【化３０１】
2021512131.tif 000448
【０９３１】
(3S)-3-フルオロ-3-(ヒドロキシメチル)ピロリジン-1-カルボン酸tert-ブチル(175)(1.09g,5.0ミリモル)を1,4-ジオキサン(4ml)中に混合して得た溶液を撹拌し、これにHCl(1,4-ジオキサン中4M,8ml)を0〜10℃にて加えた。得られた混合物を25℃で16時間撹拌した。LCMS分析により、出発物質が消費されたことを確認した。減圧にて溶媒を除去して塩化(3S)-3-フルオロ-3-(ヒドロキシメチル)ピロリジニウム(176)を白色固体として得た(740mg,収率95%)。
【０９３２】
【数１４６】
2021512131.tif 000449
【０９３３】
工程3:
【０９３４】
【化３０２】
2021512131.tif 000450
【０９３５】
塩化(3S)-3-フルオロ-3-(ヒドロキシメチル)ピロリジニウム(176)(740mg,4.76ミリモル)、ホルムアルデヒド水溶液(5ml)、及びギ酸(10ml)を封管中に入れて得た混合物を100℃で48時間加熱した。LCMS分析により、出発物質が全て消費され、所望の生成物が形成されたことを確認した。反応混合物を濃縮した。得られた残留物に濃塩酸(5ml)を加えた。混合物を2時間撹拌し、濃縮した。残留物にH2O(15ml)を加えた。混合物を固体K2CO3で慎重に塩基性にし、EtOAc(3×30ml)で抽出した。有機層を合わせてNa2SO4で乾燥し、濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー(SiO2,0〜15%MeOH/DCM)によって精製して、[(3S)-3-フルオロ-1-メチルピロリジン-3-イル]メタノール(177)を淡黄色油状物として得た(630mg,収率100%)。
【０９３６】
【数１４７】
2021512131.tif 000451
【０９３７】
[(3R)-3-フルオロ-1-メチルピロリジン-3-イル]メタノール(181)の製造
工程1:
【０９３８】
【化３０３】
2021512131.tif 000452
【０９３９】
(3R)-1-(tert-ブトキシカルボニル)-3-フルオロピロリジン-3-カルボン酸(178)(WO2013072813)(1.79g,7.65ミリモル)を乾燥THF(24ml)中に混合して得た溶液に、BH3の溶液(THF中1.0M,30ml)を窒素雰囲気下で滴下して処理した。添加後、混合物を16時間加熱還流した。LCMS分析により、出発物質が全て消費され、所望の生成物形成されたことを確認した。反応混合物を25℃に冷却し、MeOH(10ml)を滴下した。混合物を2時間撹拌し、0℃に冷却し、次いで0.5M塩酸(3ml)で処理した。得られた溶液を0.5時間撹拌した。NaHCO3飽和水溶液を加えて、反応混合物をpH>7に調整した。混合物を濃縮してMeOHを除去した。残留物をH2O(30ml)で希釈し、EtOAc(3×20ml)で抽出した。有機層を合わせてブライン(30ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濃縮した。粗残留物をフラッシュクロマトグラフィー(SiO2,10〜70%EtOAc/石油エーテル)によって精製して、(3R)-3-フルオロ-3-(ヒドロキシメチル)ピロリジン-1-カルボン酸tert-ブチル(179)を無色油状物として得た(1.33g,収率79%)。
【０９４０】
【数１４８】
2021512131.tif 000453
【０９４１】
工程2:
【０９４２】
【化３０４】
2021512131.tif 000454
【０９４３】
(3R)-3-フルオロ-3-(ヒドロキシメチル)ピロリジン-1-カルボン酸tert-ブチル(179)(1.33g,6.061ミリモル)を1,4-ジオキサン(5ml)中に混合して得た溶液を撹拌し、これにHCl(1,4-ジオキサン中4M,10ml)を0〜10℃にて加えた。得られた混合物を25℃で16時間撹拌した。LCMS分析により、出発物質が消費されたことを確認した。減圧にて溶媒を除去して塩化(3R)-3-フルオロ-3-(ヒドロキシメチル)ピロリジニウム(180)を白色固体として得た(892mg,収率95%)。
【０９４４】
【数１４９】
2021512131.tif 000455
【０９４５】
工程3:
【０９４６】
【化３０５】
2021512131.tif 000456
【０９４７】
塩化(3R)-3-フルオロ-3-(ヒドロキシメチル)ピロリジニウム(180)(892mg,5.73ミリモル)、ホルムアルデヒド水溶液(5ml)、及びギ酸(10ml)を封管中に入れて得た混合物を100℃で48時間加熱した。LCMS分析により、出発物質が全て消費され、所望の生成物が形成されたことを確認した。反応混合物を濃縮した。残留物に濃塩酸(5ml)を加えた。得られた混合物を2時間撹拌し、濃縮し、残留物にH2O(15ml)を加えた。混合物を固体K2CO3で慎重に塩基性にし、EtOAc(3×30ml)で抽出した。有機層を合わせてNa2SO4で乾燥し、濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー(SiO2,0〜15%MeOH/DCM)によって精製して、[(3R)-3-フルオロ-1-メチルピロリジン-3-イル]メタノール(181)を淡黄色油状物として得た(630mg,収率100%)。
【０９４８】
【数１５０】
2021512131.tif 000457
【０９４９】
[(3R)-3-フルオロ-1-メチルピペリジン-3-イル]メタノール(184)の製造
工程1:
【０９５０】
【化３０６】
2021512131.tif 000458
【０９５１】
(3R)-3-フルオロ-3-(ヒドロキシメチル)ピペリジン-1-カルボン酸tert-ブチル(182)(500mg,2.14ミリモル)をDCM(3ml)中に混合して得た溶液を撹拌し、これにHCl(1,4-ジオキサン中4M,3ml)を加え、得られた混合物を25℃で2時間撹拌した。LCMS分析により、出発物質が消費されたことを確認した。減圧にて溶媒を除去して塩化(3R)-3-フルオロ-3-(ヒドロキシメチル)ピペリジニウム(183)を白色固体として得た(360mg,収率99%)。
【０９５２】
【数１５１】
2021512131.tif 000459
【０９５３】
工程2:
【０９５４】
【化３０７】
2021512131.tif 000460
【０９５５】
塩化(3R)-3-フルオロ-3-(ヒドロキシメチル)ピペリジニウム(183)(360mg,2.12ミリモル)、ホルムアルデヒド水溶液(3ml)、及びギ酸(6ml)を封管中に入れて得た混合物を100℃で23時間加熱した。LCMS分析により、出発物質が消費されたことを確認した。反応混合物を濃縮した。残留物に濃塩酸(5ml)を加え、2時間撹拌し、混合物を濃縮した。残留物にH2O(30ml)を加えた。混合物を固体K2CO3で慎重に塩基性にし、10:1DCM/MeOH(3×30ml)で抽出した。有機層を合わせてNa2SO4で乾燥し、濃縮して[(3R)-3-フルオロ-1-メチルピペリジン-3-イル]メタノール(184)を淡黄色油状物として得た(220mg,収率70%)。
【０９５６】
【数１５２】
2021512131.tif 000461
【０９５７】
[(3S)-3-フルオロ-1-メチルピペリジン-3-イル]メタノール(187)の製造
工程1:
【０９５８】
【化３０８】
2021512131.tif 000462
【０９５９】
(3S)-3-フルオロ-3-(ヒドロキシメチル)ピペリジン-1-カルボン酸tert-ブチル(185)(500mg,2.14ミリモル)をDCM(3ml)中に混合して得た溶液を撹拌し、これにHCl(1,4-ジオキサン中4M,3ml)を加え、得られた混合物を25℃で2時間撹拌した。LCMS分析により、出発物質が消費されたことを確認した。減圧にて溶媒を除去して塩化(3S)-3-フルオロ-3-(ヒドロキシメチル)ピペリジニウム(186)を白色固体として得た(360mg,収率99%)。
【０９６０】
【数１５３】
2021512131.tif 000463
【０９６１】
工程2:
【０９６２】
【化３０９】
2021512131.tif 000464
【０９６３】
塩化(3S)-3-フルオロ-3-(ヒドロキシメチル)ピペリジニウム(186)(230mg,0.75ミリモル)、ホルムアルデヒド水溶液(2ml)、及びギ酸(4ml)を封管中に入れて得た混合物を100℃で23時間加熱した。LCMS分析により、出発物質が消費されたことを確認した。反応混合物を濃縮した。残留物に濃塩酸(5ml)を加え、2時間撹拌し、混合物を濃縮した。残留物にH2O(30ml)を加えた。混合物を固体K2CO3で慎重に塩基性にし、10:1DCM/MeOH(3×30ml)で抽出した。有機層を合わせてNa2SO4で乾燥し、濃縮して[(3S)-3-フルオロ-1-メチルピペリジン-3-イル]メタノール(187)を淡黄色油状物として得た(160mg,収率80%)。
【０９６４】
【数１５４】
2021512131.tif 000465
【０９６５】
[(3S,4S)-4-メトキシ-1-メチルピロリジン-3-イル]メタノール(190)の製造
工程1:
【０９６６】
【化３１０】
2021512131.tif 000466
【０９６７】
(3S,4S)-3-(ヒドロキシメチル)-4-メトキシピロリジン-1-カルボン酸tert-ブチル(188)(J.Med.Chem.2016,59,2005-2024)(1.85g,8.0ミリモル)を1,4-ジオキサン(5ml)中に混合して得た溶液を撹拌し、これにHCl(1,4-ジオキサン中4M,10ml)を0〜10℃にて加えた。添加後、混合物を20〜25℃にて16時間撹拌した。LCMS分析により、出発物質が消費されたことを確認した。減圧にて溶媒を除去して塩化(3S,4S)-3-(ヒドロキシメチル)-4-メトキシピロリジニウム(189)を褐色油状物として得た(1.34g,収率100%)。これをさらなる精製を施すことなく次の工程に使用した。
【０９６８】
【数１５５】
2021512131.tif 000467
【０９６９】
工程2:
【０９７０】
【化３１１】
2021512131.tif 000468
【０９７１】
塩化(3S,4S)-3-(ヒドロキシメチル)-4-メトキシピロリジニウム(189)(1.34g,8.0ミリモル)、ホルムアルデヒド水溶液(7ml)、及びギ酸(14ml)を封管中に入れて得た混合物を100℃で4日間加熱した。LCMS分析により、出発物質が消費され、生成物が形成されたことを確認した。反応混合物を25℃に冷却した。減圧にて溶媒を除去した。残留物に濃塩酸(10ml)を加え、混合物を2時間撹拌し、濃縮した。混合物をK2CO3水溶液で慎重に塩基性にし、DCM(3×50ml)で抽出した。有機層を合わせてNa2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮して[(3S,4S)-4-メトキシ-1-メチルピロリジン-3-イル]メタノール(190)を褐色油状物として得た(1.12g,収率96%)。
【０９７２】
【数１５６】
2021512131.tif 000469
【０９７３】
[(3R,4R)-4-メトキシ-1-メチルピロリジン-3-イル]メタノール(193)の製造
工程1:
【０９７４】
【化３１２】
2021512131.tif 000470
【０９７５】
(3R,4R)-3-(ヒドロキシメチル)-4-メトキシピロリジン-1-カルボン酸tert-ブチル(191)(J.Med.Chem.2016,59,2005-2024)(1.90g,8.22ミリモル)を1,4-ジオキサン(5ml)中に混合して得た溶液を撹拌し、これにHCl(1,4-ジオキサン中4M,10ml)を0〜10℃にて加えた。添加後、混合物を20〜25℃にて16時間撹拌した。LCMS分析により、出発物質が消費されたことを確認した。減圧にて溶媒を除去して粗製の塩化(3R,4R)-3-(ヒドロキシメチル)-4-メトキシピロリジニウム(192)を褐色油状物として得た(1.38g,収率100%)。これをさらなる精製を施すことなく次の工程に使用した。
【０９７６】
【数１５７】
2021512131.tif 000471
【０９７７】
工程2:
【０９７８】
【化３１３】
2021512131.tif 000472
【０９７９】
塩化(3R,4R)-3-(ヒドロキシメチル)-4-メトキシピロリジニウム(192)(1.38g,8.2ミリモル)、ホルムアルデヒド水溶液(7ml)、及びギ酸(14ml)を封管中に入れて得た混合物を100℃で4日間加熱した。LCMS分析により、出発物質が消費され、生成物が形成されたことを確認した。反応混合物を25℃に冷却した。減圧にて溶媒を除去した。残留物に濃塩酸(10ml)を加え、混合物を2時間撹拌し、濃縮した。混合物をK2CO3水溶液で慎重に塩基性にし、DCM(3×50ml)で抽出した。有機層を合わせてNa2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮して[(3R,4R)-4-メトキシ-1-メチルピロリジン-3-イル]メタノール(193)を褐色油状物として得た(1.12g,収率96%)。
【０９８０】
【数１５８】
2021512131.tif 000473
【０９８１】
(3R,4R)-4-メトキシ-1-メチルピロリジン-3-オール(196)の製造
工程1:
【０９８２】
【化３１４】
2021512131.tif 000474
【０９８３】
(3R,4R)-3,4-ジヒドロキシピロリジン-1-カルボン酸tert-ブチル(194)(400mg,1.97ミリモル)とCH3I(838mg,5.90ミリモル)をTHF(10ml)中に混合して得た混合物にLHMDS(2.95ml,2.95ミリモル,THF中1.0M)を加え、混合物を20℃で16時間撹拌した。LCMS分析により、所望の生成物が約50%、残留している出発物質が30%、そしてジメチル副生物が痕跡量存在していることがわかった。H2O(10ml)を加え、混合物をEtOAc(3×20ml)で抽出した。有機層を合わせてブライン(10ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。粗残留物をフラッシュクロマトグラフィー(SiO2,1:1石油エーテル/EtOAc)によって精製して、(3R,4R)-3-ヒドロキシ-4-メトキシピロリジン-1-カルボン酸tert-ブチル(195)を無色油状物として得た(140mg,収率33%)。
【０９８４】
【数１５９】
2021512131.tif 000475
【０９８５】
工程2:
【０９８６】
【化３１５】
2021512131.tif 000476
【０９８７】
(3R,4R)-3-ヒドロキシ-4-メトキシピロリジン-1-カルボン酸tert-ブチル(195)(140mg,0.64ミリモル)をTHF(10ml)中に混合して得た溶液にLiAlH4(49mg,1.29ミリモル)を加え、混合物を70℃で2時間撹拌した。LCMS分析により、生成物の形成が確認された。20℃に冷却した後、Na2SO4・10H2Oを加え、混合物を10分撹拌した。混合物を濾過して、(3R,4R)-4-メトキシ-1-メチルピロリジン-3-オール(196)を無色油状物として得た(70mg,収率83%)。
【０９８８】
【数１６０】
2021512131.tif 000477
【０９８９】
(3S,4S)-4-メトキシ-1-メチルピロリジン-3-オール(199)の製造
工程1:
【０９９０】
【化３１６】
2021512131.tif 000478
【０９９１】
(3S,4S)-3,4-ジヒドロキシピロリジン-1-カルボン酸tert-ブチル(197)(500mg,2.46ミリモル)とCH3I(1.05mg,7.38ミリモル)をTHF(10ml)中に混合して得た混合物にLHMDS(3.69ml,3.69ミリモル,THF中1.0M)を加え、混合物を20℃で16時間撹拌した。LCMS分析により、所望の生成物が約50%、残留している出発物質が30%、そしてジメチル副生物が痕跡量存在していることがわかった。H2O(10ml)を加え、混合物をEtOAc(3×20ml)で抽出した。有機層を合わせてブライン(10ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。粗残留物をフラッシュクロマトグラフィー(SiO2,1:1石油エーテル/EtOAc)によって精製して、(3S,4S)-3-ヒドロキシ-4-メトキシピロリジン-1-カルボン酸tert-ブチル(198)を無色油状物として得た(240mg,収率45%)。
【０９９２】
【数１６１】
2021512131.tif 000479
【０９９３】
工程2:
【０９９４】
【化３１７】
2021512131.tif 000480
【０９９５】
(3R,4R)-3-ヒドロキシ-4-メトキシピロリジン-1-カルボン酸tert-ブチル(199)(240mg,1.104ミリモル)をTHF(10ml)中に混合して得た溶液にLiAlH4(84mg,2.21ミリモル)を加え、混合物を70℃で16時間撹拌した。LCMS分析により、生成物の形成が確認された。20℃に冷却した後、Na2SO4・10H2Oを加え、混合物を10分撹拌した。混合物を濾過して、(3S,4S)-4-メトキシ-1-メチルピロリジン-3-オール(199)を無色油状物として得た(120mg,収率83%)。
【０９９６】
【数１６２】
2021512131.tif 000481
【０９９７】
6-フルオロ-5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-オール(202)の製造
工程1:
【０９９８】
【化３１８】
2021512131.tif 000482
【０９９９】
ジイソプロピルアミン(3.18g,31.5ミリモル)をTHF(100ml)中に混合して得た溶液に、n-BuLi(2.5M,10.5ml,26.25ミリモル)を窒素雰囲気下にて−70℃で滴下した。混合物を同じ温度で30分撹拌し、4,6-ジフルオロ-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール(200)(5g,21ミリモル)のTHF(3ml)溶液を−78℃で滴下した。0.5時間後、CH3I(5.96g,42ミリモル)を加えた。混合物を1時間撹拌した。混合物をNH4Cl飽和水溶液でクエンチし、EtOAc(3×200ml)で抽出した。有機層を合わせてNa2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー(SiO2,10:1石油エーテル/EtOAc)によって精製して、4,6-ジフルオロ-5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール(201)を白色固体として得た(2g,収率38%)。出発物質(200)を30%含有する、さらなる2gの混合フラクションを捕集した。
【１０００】
【数１６３】
2021512131.tif 000483
【１００１】
工程2:
【１００２】
【化３１９】
2021512131.tif 000484
【１００３】
4,6-ジフルオロ-5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール(201)(2g,7.93ミリモル)をDMSO(24ml)中に混合して得た溶液に、KOH(1.78g,31.7ミリモル)とH2O(571mg,31.7ミリモル)を加えた。混合物を100℃で6時間撹拌した。LCMS分析により、生成物の形成が確認された。反応混合物をH2O(30ml)でクエンチし、次いでEtOAc(3×50ml)で抽出した。有機層を合わせてブライン(30ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー(SiO2,2:1石油エーテル/EtOAc)によって精製して固体を得、これを5:1石油エーテル/EtOAcですりつぶして6-フルオロ-5-メチル-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-オール(202)を白色固体として得た(730,g,収率37%)。
【１００４】
【数１６４】
2021512131.tif 000485
【１００５】
(3S,4S)-4-メトキシ-1-メチルピロリジン-3-オール(207)の製造
工程1:
【１００６】
【化３２０】
2021512131.tif 000486
【１００７】
2,6-ジクロロ-3-フルオロピリジン-4-カルボン酸(203)(21.6g,103ミリモル)をSOCl2(75ml)中に混合して得た混合物を撹拌し、これにDMFを3滴加えた。混合物を80℃に加熱し、この温度で3時間加熱した。MeOHでのLCMS分析により、メチルエステルの形成が確認された。混合物を濃縮し、トルエンと共沸して粗製の2,6-ジクロロ-3-フルオロピリジン-4-カルボニルクロライド(204)を得た(23.5g,収率100%)。これを直ちに次の工程に使用した。
【１００８】
工程2:
【１００９】
【化３２１】
2021512131.tif 000487
【１０１０】
NaOH(18.5g,463ミリモル)のH2O(400ml)溶液に2-メチル-2-チオプソイドウレア硫酸塩(51.5g,185ミリモル)を0℃にて少量ずつ加えた。混合物を10分撹拌し、2,6-ジクロロ-3-フルオロピリジン-4-カルボニルクロライド(204)(23.5g,103ミリモル)の乾燥Et2O(300ml)溶液を滴下した。添加後、反応混合物を0〜5℃で30分撹拌した。LCMS分析により、出発物質が消費され、所望の生成物が形成されたことを確認した。混合物を分離した。水性層をEtOAc(2×300ml)で抽出した。有機層を合わせてH2O(2×200ml)とブライン(200ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濃縮して粗製のN-[(2,6-ジクロロ-3-フルオロピリジン-4-イル)カルボニル]カルバミミドチオ酸メチル(206)を黄色固体として得た(25.0g,収率86%)。これを、精製を施すことなく次の工程に直接使用した。
【１０１１】
【数１６５】
2021512131.tif 000488
【１０１２】
工程3:
【１０１３】
【化３２２】
2021512131.tif 000489
【１０１４】
N-[(2,6-ジクロロ-3-フルオロピリジン-4-イル)カルボニル]カルバミミドチオ酸メチル(206)(28.9g,102ミリモル)とCs2CO3(46.7g,143ミリモル)を乾燥DMF(150ml)中に混合して得た混合物を90℃で5時間撹拌した。LCMS分析により、出発物質が消費され、所望の生成物が形成されたことを確認した。混合物を25℃に冷却し、H2O(800ml)で希釈し、3MのHOAc水溶液を加えることによってpH<7の酸性にした。得られた固体を濾過によって捕集した。濾過ケークをH2O(3×100ml)で洗浄し、減圧乾燥した。粗生成物をEtOAc(60ml)中にて30分スラリーにしてから濾過した。固体を濾過により捕集し、乾燥して6,8-ジクロロ-2-(メチルスルファニル)ピリド[3,4-d]ピリミジン-4(3H)-オン(207)を淡黄色固体として得た(19.8g,収率74%)
【１０１５】
【数１６６】
2021512131.tif 000490
【１０１６】
実施例の製造:
下記の実施例は、一般的なメソッドGに従って製造した。
1-[4-(6-クロロ-8-[(5-クロロ-6-フルオロ-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-2-{[(2S)-1-メチルピロリジン-2-イル]メトキシ}ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-イル]プロプ-2-エン-1-オン(実施例1G)の製造
工程1:
【１０１７】
【化３２３】
2021512131.tif 000491
【１０１８】
6,8-ジクロロ-2-(メチルスルファニル)ピリド[3,4-d]ピリミジン-4(3H)-オン(207)(10.0g,38ミリモル)をPOCl3(70ml)中に混合して得た混合物を130℃で3時間加熱した。LCMS分析により、出発物質が消費されたことが確認された。混合物を25℃に冷却し、減圧にて溶媒を除去して、粗製の4,6,8-トリクロロ-2-(メチルスルファニル)ピリド[3,4-d]ピリミジン(208)を黄色固体として得た(11.0g,収率100%)。これを、さらなる精製を施すことなく次の工程に使用した。
【１０１９】
工程2:
【１０２０】
【化３２４】
2021512131.tif 000492
【１０２１】
4,6,8-トリクロロ-2-(メチルスルファニル)ピリド[3,4-d]ピリミジン(208)(10.7g,38.1ミリモル)を乾燥DMF(60ml)中に混合して得た懸濁液を撹拌し、これにDIPEA(246mg,1.91ミリモル)を0℃にて加え、次いでピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(8.52g,45.8ミリモル)を加えた。得られた混合物を20〜25℃で2時間撹拌した。LCMS分析により、出発物質の消費が確認された。混合物をH2O(500ml)で希釈し、30分撹拌し、次いで濾過した。濾過ケークをDCM(500ml)中に溶解した。混合物をH2O(2×400ml)とブライン(400ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。残留物をEtOAc(50ml)で1時間スラリーにし、次いで0℃に冷却した。固体を濾過によって捕集し、減圧乾燥して4-[6,8-ジクロロ-2-(メチルスルファニル)ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル]ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(209)を黄色固体として得た(12.6g,収率76%)。
【１０２２】
【数１６７】
2021512131.tif 000493
【１０２３】
工程3:
【１０２４】
【化３２５】
2021512131.tif 000494
【１０２５】
5-クロロ-6-フルオロ-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-オール(72)(4.19g,15.5ミリモル)、4-[6,8-ジクロロ-2-(メチルスルファニル)ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル]ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(209)(6.99g,16.3ミリモル)、及びCs2CO3(7.57g,23.2ミリモル)を乾燥DMA(50ml)中に混合して得た混合物を95℃で16時間加熱した。LCMS分析により、出発物質の消費が確認された。反応混合物を25℃に冷却し、H2O(300ml)で希釈し、EtOAc(3×200ml)で抽出した。有機層を合わせてH2O(2×200ml)とブライン(200ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濃縮した。粗残留物をフラッシュクロマトグラフィー(SiO2,0〜50%EtOAc/石油エーテル)によって精製して、4-[6-クロロ-8-{[5-クロロ-6-フルオロ-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}-2-(メチルスルファニル)ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル]ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(210)を黄色固体として得た(8.37g,収率81%)。
【１０２６】
【数１６８】
2021512131.tif 000495
【１０２７】
工程4:
【１０２８】
【化３２６】
2021512131.tif 000496
【１０２９】
4-[6-クロロ-8-{[5-クロロ-6-フルオロ-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}-2-(メチルスルファニル)ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル]ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(210)(9.33g,14ミリモル)をDCM(100ml)中に混合して得た溶液を撹拌し、これにm-CPBA(7.7mg,37.9ミリモル)を25℃で少量ずつ加えた。反応混合物を25℃で5時間撹拌した。LCMS分析により、反応が完了したことを確認した。反応混合物をDCM(100ml)で希釈し、NaHCO3飽和水溶液(200ml)、Na2SO3水溶液(100ml)、及びブライン(100ml)で逐次洗浄した。有機層を合わせてNa2SO4で乾燥し、濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー(SiO2,10〜80%EtOAc/石油エーテル)によって精製して、4-[6-クロロ-8-{[5-クロロ-6-フルオロ-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}-2-(メチルスルホニル)ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル]ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(211)を黄色固体として得た(7.5g,収率77%)。
【１０３０】
【数１６９】
2021512131.tif 000497
【１０３１】
工程6:
【１０３２】
【化３２７】
2021512131.tif 000498
【１０３３】
4-[6-クロロ-8-{[5-クロロ-6-フルオロ-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}-2-(メチルスルホニル)ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル]ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(211)(200mg,0.287ミリモル)と(S)-(1-メチルピロリジン-2-イル)メタノール(165mg,1.44ミリモル)をTHF(3ml)中に混合して得た溶液にLiHMDS(THF中1.0M,0.373ml,0.373ミリモル)を0℃で加え、混合物を室温で1時間撹拌した。LCMS分析により、反応が完了したことを確認した。反応混合物を、NH4Cl飽和水溶液を加えることによってクエンチした。反応混合物をEtOAc(3×30ml)で抽出した。有機層を合わせてNa2SO4で乾燥し、濃縮して溶媒を蒸発除去した。粗残留物をフラッシュクロマトグラフィー(SiO2,0〜10%MeOH/DCMによって精製して、4-(6-クロロ-8-{[5-クロロ-6-フルオロ-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}-2-{[(2S)-1-メチルピロリジン-2-イル]メトキシ}ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(212)を黄色固体として得た(200mg,収率95%)。
【１０３４】
【数１７０】
2021512131.tif 000499
【１０３５】
工程7:
【１０３６】
【化３２８】
2021512131.tif 000500
【１０３７】
4-(6-クロロ-8-{[5-クロロ-6-フルオロ-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}-2-{[(2S)-1-メチルピロリジン-2-イル]メトキシ}ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(212)(200mg,0.237ミリモル)をDCM(2ml)中に混合して得た混合物にHClの溶液(1,4-ジオキサン中4.0M,2ml)を加えた。反応混合物を周囲温度で4時間撹拌した。LCMS分析により、出発物質が全て消費されたことを確認した。混合物を濃縮し、溶媒を蒸発除去して6-クロロ-8-[(5-クロロ-6-フルオロ-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-2-{[(2S)-1-メチルピロリジン-2-イル]メトキシ}-4-(ピペラジン-1-イル)ピリド[3,4-d]ピリミジン(213)を黄色固体として得た(150mg,収率100%)。これを、さらなる精製を施すことなく次の工程に使用した。
【１０３８】
【数１７１】
2021512131.tif 000501
【１０３９】
工程8:
【１０４０】
【化３２９】
2021512131.tif 000502
【１０４１】
6-クロロ-8-[(5-クロロ-6-フルオロ-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-2-{[(2S)-1-メチルピロリジン-2-イル]メトキシ}-4-(ピペラジン-1-イル)ピリド[3,4-d]ピリミジン(213)(150mg,0.274ミリモル)をEtOAc(20ml)とNaHCO3飽和水溶液(20ml)中に混合して得た溶液に塩化アクリロイル(37.2mg,0.41ミリモル)を加え、混合物を室温で30分撹拌した。LCMS分析により、生成物への転化が確認された。混合物をEtOAc(3×20ml)で抽出し、有機層を合わせてNa2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。残留物を分取HPLC〔カラム:Gemini-C18;100×21.2mm,5μm;移動相:ACN-H2O(0.1%FA);勾配:15〜25%ACN;流量:25ml/分〕によって精製して、6-クロロ-8-[(5-クロロ-6-フルオロ-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-2-{[(2S)-1-メチルピロリジン-2-イル]メトキシ}-4-(ピペラジン-1-イル)ピリド[3,4-d]ピリミジン(実施例-1G)を白色固体として得た(23mg,収率14%)。
【１０４２】
【数１７２】
2021512131.tif 000503
【１０４３】
1-{4-(4-アクリロイルピペラジン-1-イル)-6-クロロ-8-[(5-クロロ-6-フルオロ-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]ピリド[3,4-d]ピリミジン-2-イル}-3-メチルアゼチジン-3-カルボニトリル(実施例2G)の製造
工程1:
【１０４４】
【化３３０】
2021512131.tif 000504
【１０４５】
4-[6-クロロ-8-{[5-クロロ-6-フルオロ-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}-2-(メチルスルホニル)ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル]ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(211)(900mg,1.29ミリモル)、塩化3-シアノ-3-メチルアゼチジニウム(343mg,2.58ミリモル)、及びDIPEA(668mg,5.17ミリモル,0.900ml)をt-BuOH(12.9ml,c=0.1M)中に混合して得たスラリーを、密閉された20ドラムバイアル中にて75℃で1時間加熱した。LCMS分析により、生成物の形成が確認された。減圧にて溶媒を除去した。残留物をEtOAcと水で希釈した。有機相をブラインで洗浄し、濃縮して溶媒を除去した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー(ISCO,24gSiO2,20〜60%EtOAc/ヘプタン)によって精製して、4-[6-クロロ-8-{[5-クロロ-6-フルオロ-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}-2-(3-シアノ-3-メチルアゼチジン-1-イル)ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル]ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(214)を青白い固体として得た(519mg,収率56%)。
【１０４６】
【数１７３】
2021512131.tif 000505
【１０４７】
工程2:
【１０４８】
【化３３１】
2021512131.tif 000506
【１０４９】
4-[6-クロロ-8-{[5-クロロ-6-フルオロ-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}-2-(3-シアノ-3-メチルアゼチジン-1-イル)ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル]ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(214)(100mg,0.140ミリモル)をDCM(0.52ml)中に混合して得た溶液にTFA(708mg,6.31ミリモル,0.475ml)を加えて褐色溶液を得、これを室温で40分撹拌した。LCMS分析により、生成物への転化が確認された。反応混合物を濃縮して溶媒を除去した。得られた固体をMTBEでスラリーにし、次いで遠心分離にかけた。溶媒をデカントし、固体を乾燥して1-{6-クロロ-8-[(5-クロロ-6-フルオロ-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-4-(ピペラジン-1-イル)ピリド[3,4-d]ピリミジン-2-イル}-3-メチルアゼチジン-3-カルボニトリル(215)を青白い固体として得た(131mg,収率100%)。
【１０５０】
【数１７４】
2021512131.tif 000507
【１０５１】
工程3:
【１０５２】
【化３３２】
2021512131.tif 000508
【１０５３】
1-{6-クロロ-8-[(5-クロロ-6-フルオロ-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-4-(ピペラジン-1-イル)ピリド[3,4-d]ピリミジン-2-イル}-3-メチルアゼチジン-3-カルボニトリル(215)(74.0mg,0.140ミリモル)とトリエチルアミン(46.8mg,0.46ミリモル,64μl)をDCM(1ml)中に混合して得た溶液に、塩化アクリロイル(12.7mg,0.140ミリモル,11.4μl)のDCM(0.3ml)溶液を−65℃で加えた。温度を1.5時間で−10℃に上昇させた。LCMS分析により、所望の生成物への転化と痕跡量の出発物質が確認された。反応混合物を濃縮して溶媒を除去した。残留物を、Phenomenex Luna Omega Polar C18カラム(21×250mm,5μm粒径)を組み込んだISCO ACCQPrep HP-125システムによる逆相分取HPLCによって、35ml/分の流量及び30〜75%MeCN/水(+1%AcOH)の25分勾配にて精製した。捕集したフラクションを凍結乾燥機で乾燥して、1-{4-(4-アクリロイルピペラジン-1-イル)-6-クロロ-8-[(5-クロロ-6-フルオロ-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]ピリド[3,4-d]ピリミジン-2-イル}-3-メチルアゼチジン-3-カルボニトリル(実施例2G)を青白いコットン状物として得た(32.1mg,収率46%)。
【１０５４】
【数１７５】
2021512131.tif 000509
【１０５５】
1-[4-(6-クロロ-8-[(5,6-ジクロロ-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-2-{[(3R,4R)-4-メトキシ-1-メチルピロリジン-3-イル]オキシ}ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-イル]プロプ-2-エン-1-オン(実施例-29G)の製造
工程1:
【１０５６】
【化３３３】
2021512131.tif 000510
【１０５７】
4-[6,8-ジクロロ-2-(メチルスルファニル)ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル]ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(209)、5,6-ジクロロ-1-(オキサン-2-イル)-1H-インダゾール-4-オール(153)、Cs2CO3(2.18g,6.69ミリモル)、及びDMA(12.1ml)をバイアルに加えた。混合物を窒素で脱気し、90℃で一晩撹拌した。LCMS分析により、出発物質が消費されて生成物が形成されたことを確認した。反応混合物を室温に冷却し、水を加えた。得られた沈殿物を濾過により捕集した。濾過ケークを水で充分に洗浄し、減圧にて50℃で一晩乾燥して4-[6-クロロ-8-{[5,6-ジクロロ-1-(オキサン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}-2-(メチルスルファニル)ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル]ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(216)をオフホワイト色の固体として得た(2.33g,収率77%)。これを、さらなる精製を施すことなく次の工程に直接使用した。
【１０５８】
【数１７６】
2021512131.tif 000511
【１０５９】
工程2:
【１０６０】
【化３３４】
2021512131.tif 000512
【１０６１】
4-[6-クロロ-8-{[5,6-ジクロロ-1-(オキサン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}-2-(メチルスルファニル)ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル]ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(216)(700mg,1.03ミリモル)をDCM(20.6ml)中に混合して得た溶液にm-CPBA(622mg,2.78ミリモル)を加えた。混合物を室温で2.5時間撹拌した。LCMS分析により、出発物質が消費されて所望の生成物が形成されたことを確認した。混合物をNaHCO3飽和水溶液で洗浄した。有機相を合わせてNa2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー(ISCO,12gのSiO2,40〜80%EtOAc/ヘプタン)により精製して、4-[6-クロロ-8-{[5,6-ジクロロ-1-(オキサン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}-2-(メタンスルホニル)ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル]ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(217)を青白い固体として得た(480mg,収率66%)。
【１０６２】
【数１７７】
2021512131.tif 000513
【１０６３】
工程3:
【１０６４】
【化３３５】
2021512131.tif 000514
【１０６５】
4-[6-クロロ-8-{[5,6-ジクロロ-1-(オキサン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}-2-(メタンスルホニル)ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル]ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(217)(1.57g,2.2ミリモル)と(3R,4R)-4-メトキシ-1-メチルピロリジン-3-オール(199)(491mg,3.74ミリモル)をTHF中に混合して得た溶液にLHMDS(3.74ml,3.74ミリモル,THF中1.0M)を加えた。得られた赤色溶液を40℃で20分撹拌した。LCMS分析により、出発物質が消費されたことを確認した。反応混合物をEtOAc(40ml)と水(15ml)で希釈した。層を分離した。水性層をEtOAc(40ml)で抽出した。有機層を合わせてNa2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー(ISCO,40gのSiO2,10%EtOH/EtOAc)によって精製して、4-(6-クロロ-8-{[5,6-ジクロロ-1-(オキサン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}-2-{[(3R,4R)-4-メトキシ-1-メチルピロリジン-3-イル]オキシ}ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル]ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(218)を得た(1.24g,収率72%)。
【１０６６】
【数１７８】
2021512131.tif 000515
【１０６７】
工程4:
【１０６８】
【化３３６】
2021512131.tif 000516
【１０６９】
4-(6-クロロ-8-{[5,6-ジクロロ-1-(オキサン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}-2-{[(3R,4R)-4-メトキシ-1-メチルピロリジン-3-イル]オキシ}ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル]ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(218)をHFIP中に混合して得た溶液を氷浴で0℃に冷却し、HClの溶液(0.33ml,1.31ミリモル,1,4-ジオキサン中4.0N)を加えた。得られた溶液を0℃でさらに10分撹拌してオレンジ色溶液を得、これを室温に自然加温した。1時間後、LCMS分析により、生成物への転化を確認した。粗反応混合物を0℃に冷却した。MTBE(5ml)を徐々に加えて白色沈殿物を得た。減圧にて溶媒を除去した。追加のMTBE(5ml)を加え、混合物を濃縮して6-クロロ-8-[(5,6-ジクロロ-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-2-{[(3R,4R)-4-メトキシ-1-メチルピロリジン-3-イル]オキシ}-4-(ピペラジン-1-イル)ピリド[3,4-d]ピリミジン(219)をオレンジ色固体として得た(90mg,収率100%)。これを、さらなる精製を施すことなく次の工程に使用した。
【１０７０】
【数１７９】
2021512131.tif 000517
【１０７１】
工程5:
【１０７２】
【化３３７】
2021512131.tif 000518
【１０７３】
6-クロロ-8-[(5,6-ジクロロ-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-2-{[(3R,4R)-4-メトキシ-1-メチルピロリジン-3-イル]オキシ}-4-(ピペラジン-1-イル)ピリド[3,4-d]ピリミジン(219)(89.6mg,0.13ミリモル)をHFIP(1.3ml)中に混合して得たスラリーにNaHCO3(109mg,1.3ミリモル)を加えた。得られた懸濁液を15時間撹拌して褐色溶液を得た。塩化アクリロイル(11μl,0.13ミリモル)を加えた。5分後、LCMS分析により、生成物への転化を確認した。反応混合物を濾過して不溶物を除去した。濾過ケークをEtOAcで洗浄した。有機層を合わせ、濃縮して溶媒を除去した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー(Biotage,10gのSiO2,2〜10%MeOH/DCM+0.1%NH3)によって精製して1-[4-(6-クロロ-8-[(5,6-ジクロロ-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-2-{[(3R,4R)-4-メトキシ-1-メチルピロリジン-3-イル]オキシ}ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-イル]プロプ-2-エン-1-オン(実施例-29G)を白色固体として得た(37mg,収率45%)。
【１０７４】
【数１８０】
2021512131.tif 000519
【１０７５】
1-[4-(6-クロロ-8-[(5-クロロ-6-フルオロ-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-2-{[(3R,4R)-4-メトキシ-1-メチルピロリジン-3-イル]オキシ}ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-イル]プロプ-2-エン-1-オン(実施例-24G)の製造
工程1:
【１０７６】
【化３３８】
2021512131.tif 000520
【１０７７】
(3R,4R)-4-メトキシ-1-メチルピロリジン-3-オール(199)(3.2g,24.4ミリモル)をTHF(25ml)中に混合して得た溶液を、氷浴で0℃に冷却した。LHMDSの溶液(THF中1.0M,24.4ml,24.4ミリモル)を滴下して淡黄色溶液を得た。0℃で30分後、この溶液を、4-[6-クロロ-8-{[5-クロロ-6-フルオロ-1-(オキサン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}-2-(メタンスルホニル)ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル]ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(211)(12.8g,18.8ミリモル)のTHF(50ml)溶液に、窒素雰囲気下にて0℃で滴下した。得られた赤色溶液を同じ温度で15分撹拌した。LCMS分析により、出発物質が全て消費されたことを確認した。混合物をEtOAcで希釈し、水とブラインで洗浄した。有機層を合わせてNa2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー(ISCO,300gのSiO2,100:0:0〜95:5:2DCM:MeOH:TEA)によって精製して4-(6-クロロ-8-{[5-クロロ-6-フルオロ-1-(オキサン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}-2-{[(3R,4R)-4-メトキシ-1-メチルピロリジン-3-イル]オキシ}ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(220)を黄色油状物として得た(6.9g,収率38%)。これをEt2Oと共沸させてオフホワイト色の固体を得た。
【１０７８】
【数１８１】
2021512131.tif 000521
【１０７９】
工程2:
【１０８０】
【化３３９】
2021512131.tif 000522
【１０８１】
4-(6-クロロ-8-{[5-クロロ-6-フルオロ-1-(オキサン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}-2-{[(3R,4R)-4-メトキシ-1-メチルピロリジン-3-イル]オキシ}ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(220)(50mg,0.07ミリモル)をHFIP(0.7ml)中に混合して得た溶液を0℃に冷却した。HClの溶液(1,4-ジオキサン中4M,0.1ml,0.4ミリモル)を加えて黄色溶液を得た。０℃にて10分後、オレンジ色溶液を室温に自然加温した。1時間後、LCMS分析により、出発物質の残留が確認された。追加のHCl(1,4-ジオキサン中4M,0.05ml)を加えた。さらに30分撹拌した後、LCMS分析により、出発物質の消費が確認された。固体NaHCO3(70.6mg,12ミリモル)を加え、混合物を18時間撹拌した。塩化アクリロイル(0.006ml,0.07ミリモル)を加えた。5分後、反応混合物をEtOAc(20ml)と水(20ml)で希釈した。層を分離し、水性層をEtOAc(20ml)で抽出した。有機層を合わせてブラインで洗浄し、MgSO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー(Biotage,10gのSiO2,2〜10%MeOH/DCM+0.1%NH4OH)によって精製して、1-[4-(6-クロロ-8-[(5-クロロ-6-フルオロ-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-2-{[(3R,4R)-4-メトキシ-1-メチルピロリジン-3-イル]オキシ}ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-イル]プロプ-2-エン-1-オン(実施例-24G)を白色固体として得た(20mg,収率50%)。
【１０８２】
【数１８２】
2021512131.tif 000523
【１０８３】
下表の実施例は、メソッドGならびに6-クロロ-8-[(5-クロロ-6-フルオロ-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-2-{[(2S)-1-メチルピロリジン-2-イル]メトキシ}-4-(ピペラジン-1-イル)ピリド[3,4-d]ピリミジン(実施例1G)、1-{4-(4-アクリロイルピペラジン-1-イル)-6-クロロ-8-[(5-クロロ-6-フルオロ-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]ピリド[3,4-d]ピリミジン-2-イル}-3-メチルアゼチジン-3-カルボニトリル(実施例2G)、1-[4-(6-クロロ-8-[(5-クロロ-6-フルオロ-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-2-{[(3R,4R)-4-メトキシ-1-メチルピロリジン-3-イル]オキシ}ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-イル]プロプ-2-エン-1-オン(実施例-24G)、及び1-[4-(6-クロロ-8-[(5,6-ジクロロ-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-2-{[(3R,4R)-4-メトキシ-1-メチルピロリジン-3-イル]オキシ}ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-イル]プロプ-2-エン-1-オン(実施例-29G)を製造するのに使用した手順を使用して製造された。下記の実施例は、実施例-1G、実施例-2G、実施例-24G、及び実施例-29Gを製造するのに使用した典型的な手順に対する重要な変更や置き換え(当業者であれば理解できるであろう)が無い形で行った。
【１０８４】
【化３４０】
2021512131.tif 000524
【１０８５】
【化３４１】
2021512131.tif 000525
【１０８６】
【化３４２】
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【１０８７】
【化３４３】
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【１０８８】
【化３４４】
2021512131.tif 000528
【１０８９】
【化３４５】
2021512131.tif 000529
【１０９０】
【化３４６】
2021512131.tif 000530
【１０９１】
【化３４７】
2021512131.tif 000531
【１０９２】
【化３４８】
2021512131.tif 000532
【１０９３】
【化３４９】
2021512131.tif 000533
【１０９４】
【化３５０】
2021512131.tif 000534
【１０９５】
【化３５１】
2021512131.tif 000535
【１０９６】
【化３５２】
2021512131.tif 000536
【１０９７】
【化３５３】
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【１０９８】
【化３５４】
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【１０９９】
【化３５５】
2021512131.tif 000539
【１１００】
下記の実施例は、一般的なメソッドHに従って製造した。
1-[4-(8-[(5-クロロ-6-フルオロ-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-2-{[(2S)-1-メチルピロリジン-2-イル]メトキシ}ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-イル]プロプ-2-エン-1-オン(実施例-1H)の製造
工程1:
【１１０１】
【化３５６】
2021512131.tif 000540
【１１０２】
4-(6-クロロ-8-{[5-クロロ-6-フルオロ-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}-2-{[(2S)-1-メチルピロリジン-2-イル]メトキシ}ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(212)(437mg,0.597ミリモル)をEtOH(10ml)中に混合して得た混合物にPd/C(10%組み込み,100mg)を加えた。H2のバルーン(balloon)を加え、混合物を一晩撹拌した。LCMS分析により、生成物への転化率が60%であることがわかった。DIPEA(0.21ml,1.19ミリモル)を加え、混合物をH2のバルーン下で一晩撹拌した。LCMS分析により、出発物質が消費され、生成物が形成されたことを確認した。反応混合物を濾過し、濃縮して溶媒を除去した。粗残留物をフラッシュクロマトグラフィー(ISCO,40gのSiO2,100:0:0〜95:5:2 DCM/MeOH/TEA)によって精製して、4-(8-{[5-クロロ-6-フルオロ-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}-2-{[(2S)-1-メチルピロリジン-2-イル]メトキシ}ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(222)をオフホワイト色の泡状物として得た(130mg,収率31%)。
【１１０３】
【数１８３】
2021512131.tif 000541
【１１０４】
工程2:
【１１０５】
【化３５７】
2021512131.tif 000542
【１１０６】
4-(8-{[5-クロロ-6-フルオロ-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}-2-{[(2S)-1-メチルピロリジン-2-イル]メトキシ}ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(222)(130mg,0.186ミリモル)をDCM(2.0ml)中に混合して得た溶液にTFA(213mg,0.139ml,1.86ミリモル)を加えた。反応混合物を一晩撹拌した。LCMS分析により、所望の生成物の形成を確認した。反応混合物を濃縮して溶媒を除去して8-[(5-クロロ-6-フルオロ-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-2-{[(2S)-1-メチルピロリジン-2-イル]メトキシ}-4-(ピペラジン-1-イル)ピリド[3,4-d]ピリミジン(223)を褐色のガムとして得た(159mg,収率100%)。これを、さらなる精製を施さずに次の工程に使用した。
【１１０７】
【数１８４】
2021512131.tif 000543
【１１０８】
工程3:
【１１０９】
【化３５８】
2021512131.tif 000544
【１１１０】
8-[(5-クロロ-6-フルオロ-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-2-{[(2S)-1-メチルピロリジン-2-イル]メトキシ}-4-(ピペラジン-1-イル)ピリド[3,4-d]ピリミジン(223)(236mg,0.265ミリモル)をDCM(2.0ml)中に混合して得たスラリーにDIPEA(192mg,0.258ml,1.48ミリモル)を加えた。混合物を−50℃に冷却し、これに塩化アクリロイル(19.6mg,0.212ミリモル,20μl)のDCM(0.3ml)溶液を滴下した。混合物を室温にゆっくり加温した。LCMS分析により、出発物質が消費されたことを確認した。混合物を水で洗浄した。有機層をNa2SO4で乾燥し、濾過し、そして濃縮した。Princeton HA-Morpholineカラム(150×21.1mm,粒径5μm)を組み込んだWaters SFC200 Glacierシステムを使用する分取SFCによって精製し、12〜60%MeCN/H2Oにより35℃で溶離して1-[4-(8-[(5-クロロ-6-フルオロ-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-2-{[(2S)-1-メチルピロリジン-2-イル]メトキシ}ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-イル]プロプ-2-エン-1-オン(実施例-1H)を白色固体として得た(13.9mg,収率12%)。
【１１１１】
【数１８５】
2021512131.tif 000545
【１１１２】
1-[4-(8-[(5,6-ジクロロ-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-2-{[(3R,4R)-4-メトキシ-1-メチルピロリジン-3-イル]オキシ}ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-イル]プロプ-2-エン-1-オン(実施例-19H)の製造
工程1:
【１１１３】
【化３５９】
2021512131.tif 000546
【１１１４】
4-(6-クロロ-8-{[5,6-ジクロロ-1-(オキサン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}-2-{[(3R,4R)-4-メトキシ-1-メチルピロリジン-3-イル]オキシ}ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(218)をTHF(7.3ml)中に混合して得た溶液に、NaBH4(47.1mg,1.25ミリモル)、PdCl2(dppf)(53.6mg,0.0733ミリモル)、及びTMEDA(0.187ml,1.25ミリモル)を窒素雰囲気下で加えた。得られた暗紫色溶液を室温で33時間撹拌した。LCMS分析により、出発物質が消費されたことを確認した。反応混合物を、セライトを介して濾過し、濃縮して溶媒を除去した。フラッシュクロマトグラフィー(ISCO,24gのSiO2,15%IPA/EtOAc)によって精製して300mgの物質を得た。分取HPLC(ISCO ACCQ Prep HP-125システム,Phenomenex Luna Omega Polar C18,21×250mm,粒径5μm,流量35ml/分,注入量1ml)によって物質を再度精製して、4-(8-{[5,6-ジクロロ-1-(オキサン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}-2-{[(3R,4R)-4-メトキシ-1-メチルピロリジン-3-イル]オキシ}ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(224)を白色コットン状物として得た(105mg,収率39%)。
【１１１５】
【数１８６】
2021512131.tif 000547
【１１１６】
工程2:
【１１１７】
【化３６０】
2021512131.tif 000548
【１１１８】
4-(8-{[5,6-ジクロロ-1-(オキサン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}-2-{[(3R,4R)-4-メトキシ-1-メチルピロリジン-3-イル]オキシ}ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(224)(101mg,0.138ミリモル)をHFIP(1.48ml)中に混合して得た溶液を0℃に冷却した。HClの溶液(1,4-ジオキサン中4.0M,0.346ml,1.38ミリモル)を滴下した。混合物を0℃でさらに10分、次いで室温で45分撹拌した。淡褐色溶液のLCMS分析により、所望の生成物の形成を確認した。粗反応混合物を0℃に冷却し、MTBE(5ml)をゆっくり加えて白色沈殿物を得た。減圧にて溶媒を除去した。追加のMTBE(5ml)を加え、次いで濃縮して8-[(5,6-ジクロロ-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-2-{[(3R,4R)-4-メトキシ-1-メチルピロリジン-3-イル]オキシ}-4-(ピペラジン-1-イル)ピリド[3,4-d]ピリミジン(225)を褐色油状物として得た(75.3mg,収率99%)。これを、さらなる精製を施すことなく次の工程に使用した。
【１１１９】
【数１８７】
2021512131.tif 000549
【１１２０】
工程3:
【１１２１】
【化３６１】
2021512131.tif 000550
【１１２２】
8-[(5,6-ジクロロ-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-2-{[(3R,4R)-4-メトキシ-1-メチルピロリジン-3-イル]オキシ}-4-(ピペラジン-1-イル)ピリド[3,4-d]ピリミジン(225)(75.3mg,0.138ミリモル)をHFIP(1.38ml)中に溶解した。固体NaHCO3(116mg,1.38ミリモル)を加え、混合物を室温で一晩撹拌した。得られた褐色スラリーに塩化アクリロイル(11.2μl,0.138ミリモル)を加えた。LCMS分析により、生成物への転化を確認した。粗反応混合物を濾過して白色固体を除去した。濾過ケークをEtOAcで洗浄し、減圧にて濾液を濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー(ISCO,12gのSiO2,2〜10%MeOH/DCM+0.1%NH3)によって精製して、1-[4-(8-[(5,6-ジクロロ-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-2-{[(3R,4R)-4-メトキシ-1-メチルピロリジン-3-イル]オキシ}ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-イル]プロプ-2-エン-1-オン(実施例-19H)を白色固体として得た(26.3mg,収率32%)。
【１１２３】
【数１８８】
2021512131.tif 000551
【１１２４】
下記表中の実施例は、メソッドA、ならびに1-(4-{8-[(5-クロロ-6-メチル-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-2-[3-(ジメチルアミノ)アゼチジン-1-イル]-6-メチルピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル}ピペラジン-1-イル)プロプ-2-エン-1-オン(実施例-1H)及び1-[4-(8-[(5,6-ジクロロ-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-2-{[(3R,4R)-4-メトキシ-1-メチルピロリジン-3-イル]オキシ}ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-イル]プロプ-2-エン-1-オン(実施例-19H)を製造するのに使用した手順を使用して製造された。下記の実施例は、実施例-1H及び実施例-19Hを製造するのに使用した典型的な手順に対する重要な変更や置き換え(当業者であれば理解できるであろう)が無い形で行った。
【１１２５】
【化３６２】
2021512131.tif 000552
【１１２６】
【化３６３】
2021512131.tif 000553
【１１２７】
【化３６４】
2021512131.tif 000554
【１１２８】
【化３６５】
2021512131.tif 000555
【１１２９】
【化３６６】
2021512131.tif 000556
【１１３０】
【化３６７】
2021512131.tif 000557
【１１３１】
【化３６８】
2021512131.tif 000558
【１１３２】
【化３６９】
2021512131.tif 000559
【１１３３】
【化３７０】
2021512131.tif 000560
【１１３４】
以下の実施例は、一般的なメソッドIに従って製造した。
(3R,5S)-5-[({8-[(5-クロロ-6-フルオロ-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-4-[4-(プロプ-2-エノイル)ピペラジン-1-イル]ピリド[3,4-d]ピリミジン-2-イル}オキシ)メチル]-1-メチルピロリジン-3-カルボニトリル(実施例1I)の製造
工程1:
【１１３５】
【化３７１】
2021512131.tif 000561
【１１３６】
4-[6-クロロ-8-{[5-クロロ-6-フルオロ-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}-2-(メチルスルファニル)ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル]ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(210)(35.0g,52.8ミリモル)を乾燥THF(595ml)中に混合して得た混合物を、窒素を20分吹き込むことによって脱気した。Pd(dppf)Cl2(3.86g,5.28ミリモル)、TMEDA(12.0g,14.8ml,100ミリモル)、及びNaBH4(3.51g,92.4ミリモル)を逐次加えた。混合物を油浴中50℃(内部温度40℃)で1.2時間撹拌した。LCMS分析により、出発物質が消費されたことを確認した。反応混合物を室温に冷却し、600mlのブラインと595mlのEtOAcを加えた。層を分離し、有機層を合わせてNa2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。粗残留物をフラッシュクロマトグラフィー(3:5:2 EtOAc/石油エーテル/DCM)によって精製して、4-[8-{[5-クロロ-6-フルオロ-1-(オキサン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}-2-(メチルスルファニル)ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル]ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(226)を淡黄色固体として得た(34g,収率100%)。
【１１３７】
【数１８９】
2021512131.tif 000562
【１１３８】
工程2:
【１１３９】
【化３７２】
2021512131.tif 000563
【１１４０】
4-[8-{[5-クロロ-6-フルオロ-1-(オキサン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}-2-(メチルスルファニル)ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル]ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(226)をDCM(30ml)中に混合して得た溶液を、氷浴で0℃に冷却した。この溶液にm-CPBA(1.92g,8.57ミリモル)を加えた(発熱反応が起きた)。得られた懸濁液を一晩撹拌した。LCMS分析により、スルホキシド中間体が残存していることがわかった。追加のm-CPBA(100mg,4.29ミリモル)を加えた。3時間後、LCMS分析により、所望の生成物への完全な転化が確認された。反応混合物をNaHCO3飽和水溶液で洗浄した。水性層をDCMで抽出した。有機層を合わせてブラインで洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー(ISCO,80gのSiO2,0〜100% EtOAc/ヘプタン)によって精製して、4-[8-{[5-クロロ-6-フルオロ-1-(オキサン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}-2-(メタンスルホニル)ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル]ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(227)を白色固体として得た(900mg,収率48%)。
【１１４１】
【数１９０】
2021512131.tif 000564
【１１４２】
工程3:
【１１４３】
【化３７３】
2021512131.tif 000565
【１１４４】
4-[8-{[5-クロロ-6-フルオロ-1-(オキサン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}-2-(メタンスルホニル)ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル]ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(227)(400mg,0.604ミリモル)と(3R,5S)-5-(ヒドロキシメチル)-1-メチルピロリジン-3-カルボニトリル(173)(169mg,1.21ミリモル)をTHF(10ml)中に混合して得た混合物にLHMDS(0.785ml,0.785ミリモル、THF中1.0M)を加えた。混合物を25℃で16時間撹拌した。LCMS分析により、生成物への転化が確認された。H2O(5ml)を加え、混合物をEtOAc(3×20ml)で抽出した。有機層を合わせてNa2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー(SiO2,2:3石油エーテル/EtOAc)によって精製して、4-(8-{[5-クロロ-6-フルオロ-1-(オキサン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}-2-{[(2S,4R)-4-シアノ-1-メチルピロリジン-2-イル]メトキシ}ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル]ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(228)を黄色油状物として得た(120mg,収率28%)。
【１１４５】
【数１９１】
2021512131.tif 000566
【１１４６】
工程4:
【１１４７】
【化３７４】
2021512131.tif 000567
【１１４８】
4-(8-{[5-クロロ-6-フルオロ-1-(オキサン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}-2-{[(2S,4R)-4-シアノ-1-メチルピロリジン-2-イル]メトキシ}ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル]ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(228)(120mg,0.166ミリモル)をDCM(3ml)中に混合して得た溶液にTFA(1.5ml)を加え、得られた混合物を25℃で2時間撹拌した。混合物を濃縮して(3R,5S)-5-[({8-[(5-クロロ-6-フルオロ-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-4-(ピペラジン-1-イル)ピリド[3,4-d]ピリミジン-2-イル}オキシ)メチル]-1-メチルピロリジン-3-カルボニトリル(229)を黄色油状物として得た(108mg,収率100%)。これを、精製せずに次の工程に使用した。
【１１４９】
【数１９２】
2021512131.tif 000568
【１１５０】
工程5:
【１１５１】
【化３７５】
2021512131.tif 000569
【１１５２】
(3R,5S)-5-[({8-[(5-クロロ-6-フルオロ-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-4-(ピペラジン-1-イル)ピリド[3,4-d]ピリミジン-2-イル}オキシ)メチル]-1-メチルピロリジン-3-カルボニトリル(229)(90mg,0.166ミリモル)をEtOAc(40ml)とNaHCO3飽和水溶液(40ml)中に混合して得た溶液に塩化アクリロイル(15mg,0.166ミリモル)を加え、混合物を20℃で30分撹拌した。LCMS分析により、出発物質が消費されたことを確認した。混合物をEtOAc(3×40ml)で抽出した。有機層を合わせてブライン(20ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。残留物を、C-18カラムでの分取HPLCによって精製し、MeCN/H2O(+0.05%ギ酸)で溶離して、(3R,5S)-5-[({8-[(5-クロロ-6-フルオロ-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-4-[4-(プロプ-2-エノイル)ピペラジン-1-イル]ピリド[3,4-d]ピリミジン-2-イル}オキシ)メチル]-1-メチルピロリジン-3-カルボニトリル(実施例1I)を白色固体として得た(5.5mg,収率6%)。
【１１５３】
【数１９３】
2021512131.tif 000570
【１１５４】
(3R,5S)-5-[({8-[(5-クロロ-6-フルオロ-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-4-[4-(プロプ-2-エノイル)ピペラジン-1-イル]ピリド[3,4-d]ピリミジン-2-イル}オキシ)メチル]-1-メチルピロリジン-3-カルボニトリル(実施例2I)の製造
工程1:
【１１５５】
【化３７６】
2021512131.tif 000571
【１１５６】
4-[8-{[5-クロロ-6-フルオロ-1-(オキサン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}-2-(メチルスルファニル)ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル]ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(226)(10.0g,15.9ミリモル)をDCM(100ml)中に混合して得た溶液を撹拌し、これにm-CPBA(純度85%,9.68g,47.6ミリモル)を5℃にて少量ずつ加えた。反応混合物を同温度で2時間撹拌した。LCMS分析により、所望の生成物の形成を確認した。混合物をDCM(100ml)で希釈し、NaHCO3(100ml)飽和水溶液、Na2SO3飽和水溶液(100ml)、及びブライン(100ml)で順次洗浄した。有機層を合わせてNa2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮して4-[8-{[5-クロロ-6-フルオロ-1-(オキサン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}-2-(メタンスルフィニル)ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル]ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(230)を淡黄色固体として得た(9.04g,収率86%)。これを、さらなる精製を施すことなく使用した。
【１１５７】
【数１９４】
2021512131.tif 000572
【１１５８】
工程2:
【１１５９】
【化３７７】
2021512131.tif 000573
【１１６０】
[(3S)-3-フルオロ-1-メチルピペリジン-3-イル]メタノール(187)(50mg,0.34ミリモル)をTHF(5ml)中に混合して得た溶液を撹拌し、これに4-[8-{[5-クロロ-6-フルオロ-1-(オキサン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}-2-(メタンスルフィニル)ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル]ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(230)(146mg,0.226ミリモル)とLHMDS(56.8mg,0.340ミリモル,THF中1.0M)を加えた。得られた混合物を25℃で1.5時間撹拌した。LCMS分析により、出発物質の消費を確認した。反応混合物を、NH4Cl飽和水溶液を加えることによってクエンチした。粗反応混合物をH2O(30ml)中に注ぎ込み、EtOAc(3×30ml)で抽出した。有機層を合わせて無水Na2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮して溶媒を除去した。粗残留物を逆相フラッシュクロマトグラフィー〔0〜100%MeCN/H2O(+0.05%FA)〕によって精製して、4-(8-{[5-クロロ-6-フルオロ-1-(オキサン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}-2-{[(3S)-3-フルオロ-1-メチルピペリジン-3-イル]メトキシ}ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(231)を白色固体として得た(50mg,収率20%)。
【１１６１】
【数１９５】
2021512131.tif 000574
【１１６２】
工程3:
【１１６３】
【化３７８】
2021512131.tif 000575
【１１６４】
4-(8-{[5-クロロ-6-フルオロ-1-(オキサン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}-2-{[(3S)-3-フルオロ-1-メチルピペリジン-3-イル]メトキシ}ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(231)(50mg,0.069ミリモル)をDCM(3ml)中に混合して得た溶液を撹拌し、これにTFA(1ml)を加え、得られた混合物を25℃で2時間撹拌した。LCMS分析により、生成物への完全な転化を確認した。減圧にて溶媒を除去して、8-[(5-クロロ-6-フルオロ-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-2-{[(3S)-3-フルオロ-1-メチルピペリジン-3-イル]メトキシ}-4-(ピペラジン-1-イル)ピリド[3,4-d]ピリミジン(232)を褐色ガムとして得た(37mg,収率100%)。
【１１６５】
【数１９６】
2021512131.tif 000576
【１１６６】
工程4:
【１１６７】
【化３７９】
2021512131.tif 000577
【１１６８】
8-[(5-クロロ-6-フルオロ-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-2-{[(3S)-3-フルオロ-1-メチルピペリジン-3-イル]メトキシ}-4-(ピペラジン-1-イル)ピリド[3,4-d]ピリミジン(232)(37mg,0.068ミリモル)をEtOAc(30ml)とNaHCO3飽和水溶液(30ml)中に混合して得た溶液に、塩化アクリロイル(6.14mg,0.0679ミリモル)のEtOAc(5ml)溶液を25℃にて滴下した。得られた混合物を25℃で10分撹拌した。LCMS分析により、出発物質が全て消費されたことを確認した。反応混合物を、数滴のMeOHを加えることによってクエンチした。混合物をEtOAc(3×30ml)で抽出した。有機層を合わせてNa2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮して溶媒を除去した。粗生成物を、Kromasil-C18カラム(100×21.2mm,粒径5μm)による分取HPLCによって精製し、20〜30%MeCN/H2O(+0.05%NH3)で溶離して、1-[4-(8-[(5-クロロ-6-フルオロ-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-2-{[(3S)-3-フルオロ-1-メチルピペリジン-3-イル]メトキシ}ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-イル]プロプ-2-エン-1-オン(実施例-2I)を白色固体として得た(15.2mg,収率37%)。
【１１６９】
【数１９７】
2021512131.tif 000578
【１１７０】
1-[4-(8-[(5-クロロ-6-フルオロ-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-2-{[(3R,4R)-4-メトキシ-1-メチルピロリジン-3-イル]オキシ}ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-イル]プロプ-2-エン-1-オン(実施例-10I)の製造
工程1:
【１１７１】
【化３８０】
2021512131.tif 000579
【１１７２】
4-[8-{[5-クロロ-6-フルオロ-1-(オキサン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}-2-(メタンスルホニル)ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル]ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(227)(236mg,0.356ミリモル)と(3R,4R)-4-メトキシ-1-メチルピロリジン-3-オール(199)(70mg,0.536ミリモル)の混合物にLHMDS(THF中1.0M,0.462ミリモル)を加え、混合物を25℃で2時間撹拌した。混合物をH2O(5ml)に加え、EtOAc(3×20ml)で抽出した。有機層を合わせてNa2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー(SiO2,20:1DCM/MeOH)によって精製して、4-(8-{[5-クロロ-6-フルオロ-1-(オキサン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}-2-{[(3R,4R)-4-メトキシ-1-メチルピロリジン-3-イル]オキシ}ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(233)を褐色固体として得た(120mg,収率47%)。
【１１７３】
【数１９８】
2021512131.tif 000580
【１１７４】
工程2:
【１１７５】
【化３８１】
2021512131.tif 000581
【１１７６】
4-(8-{[5-クロロ-6-フルオロ-1-(オキサン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}-2-{[(3R,4R)-4-メトキシ-1-メチルピロリジン-3-イル]オキシ}ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(233)(120mg,0.168ミリモル)をDCM(4ml)中に混合して得た溶液にTFA(2ml)を加えた。混合物を25℃で2時間撹拌した。混合物を濃縮して溶媒を除去して、8-[(5-クロロ-6-フルオロ-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-2-{[(3R,4R)-4-メトキシ-1-メチルピロリジン-3-イル]オキシ}-4-(ピペラジン-1-イル)ピリド[3,4-d]ピリミジン(234)を黄色油状物として得た(108mg,収率100%)。これを、さらなる精製を施すことなく次の工程に使用した。
【１１７７】
【数１９９】
2021512131.tif 000582
【１１７８】
工程3:
【１１７９】
【化３８２】
2021512131.tif 000583
【１１８０】
8-[(5-クロロ-6-フルオロ-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-2-{[(3R,4R)-4-メトキシ-1-メチルピロリジン-3-イル]オキシ}-4-(ピペラジン-1-イル)ピリド[3,4-d]ピリミジン(234)(89mg,0.15ミリモル)とNaHCO3飽和水溶液(40ml)を混合して得た溶液に塩化アクリロイル(17mg,0.186ミリモル)を加えた。混合物を20℃で30分撹拌した。混合物をEtOAc(3×40ml)で抽出した。有機層を合わせてブライン(20ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。残留物を、C18カラムによる分取HPLCによって精製し、20〜30%MeCN/H2O(+0.005%ギ酸)で溶離して、1-[4-(8-[(5-クロロ-6-フルオロ-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-2-{[(3R,4R)-4-メトキシ-1-メチルピロリジン-3-イル]オキシ}ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-イル]プロプ-2-エン-1-オン(実施例-10I)を白色固体として得た((6mg,収率6%)。
【１１８１】
【数２００】
2021512131.tif 000584
【１１８２】
下記表中の実施例は、メソッドI、ならびに1-(4-{8-[(5-クロロ-6-メチル-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-2-[3-(ジメチルアミノ)アゼチジン-1-イル]-6-メチルピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル}ピペラジン-1-イル)プロプ-2-エン-1-オン(実施例-1I)、1-[4-(8-[(5-クロロ-6-フルオロ-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-2-{[(3S)-3-フルオロ-1-メチルピペリジン-3-イル]メトキシ}ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-イル]プロプ-2-エン-1-オン(実施例-2I)、及び1-[4-(8-[(5-クロロ-6-フルオロ-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-2-{[(3R,4R)-4-メトキシ-1-メチルピロリジン-3-イル]オキシ}ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-イル]プロプ-2-エン-1-オン(実施例-10I)を製造するのに使用した手順を使用して製造された。下記の実施例は、実施例-1I及び実施例-2Iを製造するのに使用した典型的な手順に対する重要な変更や置き換え(当業者であれば理解できるであろう)が無い形で行った。
【１１８３】
【化３８３】
2021512131.tif 000585
【１１８４】
【化３８４】
2021512131.tif 000586
【１１８５】
【化３８５】
2021512131.tif 000587
【１１８６】
【化３８６】
2021512131.tif 000588
【１１８７】
【化３８７】
2021512131.tif 000589
【１１８８】
【化３８８】
2021512131.tif 000590
【１１８９】
【化３８９】
2021512131.tif 000591
【１１９０】
【化３９０】
2021512131.tif 000592
【１１９１】
【化３９１】
2021512131.tif 000593
【１１９２】
【化３９２】
2021512131.tif 000594
【１１９３】
【化３９３】
2021512131.tif 000595
【１１９４】
【化３９４】
2021512131.tif 000596
【１１９５】
【化３９５】
2021512131.tif 000597
【１１９６】
【化３９６】
2021512131.tif 000598
【１１９７】
【化３９７】
2021512131.tif 000599
【１１９８】
【化３９８】
2021512131.tif 000600
【１１９９】
【化３９９】
2021512131.tif 000601
【１２００】
【化４００】
2021512131.tif 000602
【１２０１】
【化４０１】
2021512131.tif 000603
【１２０２】
【化４０２】
2021512131.tif 000604
【１２０３】
【化４０３】
2021512131.tif 000605
【１２０４】
【化４０４】
2021512131.tif 000606
【１２０５】
【化４０５】
2021512131.tif 000607
【１２０６】
下記表中の実施例は、類似したライブラリー・フォーマットでのメソッド、ならびに1-(4-{8-[(5-クロロ-6-メチル-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-2-[3-(ジメチルアミノ)アゼチジン-1-イル]-6-メチルピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル}ピペラジン-1-イル)プロプ-2-エン-1-オン(実施例-1I)、1-[4-(8-[(5-クロロ-6-フルオロ-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-2-{[(3S)-3-フルオロ-1-メチルピペリジン-3-イル]メトキシ}ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-イル]プロプ-2-エン-1-オン(実施例-2I)、及び1-[4-(8-[(5-クロロ-6-フルオロ-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-2-{[(3R,4R)-4-メトキシ-1-メチルピロリジン-3-イル]オキシ}ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-イル]プロプ-2-エン-1-オン(実施例-10I)を製造するのに使用した手順に従って製造された。下記の実施例は、実施例-1I、実施例-2I、及び実施例-10Iを製造するのに使用した典型的な手順に対する重要な変更や置き換え(当業者であれば理解できるであろう)が無い形で行った。
【１２０７】
【化４０６】
2021512131.tif 000608
【１２０８】
【化４０７】
2021512131.tif 000609
【１２０９】
以下の実施例は、一般的なメソッドKに従って製造した。
1-[4-(8-[(5-クロロ-6-フルオロ-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-2-{[(3R,4R)-4-メトキシ-1-メチルピロリジン-3-イル]オキシ}-6-メチルピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-イル]プロプ-2-エン-1-オン(実施例-1K)の製造
工程1:
【１２１０】
【化４０８】
2021512131.tif 000610
【１２１１】
4-[6-クロロ-8-{[5-クロロ-6-フルオロ1-(オキサン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}-2-(メチルスルファニル)ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル]ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(235)(500mg,0.752ミリモル)、トリメチルボロキシン(236mg,1.88ミリモル)、K2CO3(311mg,2.26ミリモル)、及びPd(PPh3)4(86.9mg,0.0752ミリモル)を1,4-ジオキサン(10ml)とH2O(1ml)中に混合して得た混合物をN2で2分脱気した。反応混合物を、マイクロ波照射により100℃にて3時間加熱した。LCMS分析により、出発物質が消費されて所望の生成物が形成されたことを確認した。反応混合物を室温に冷却し、濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー(SiO2,0〜60%EtOAc/石油エーテル)によって精製して、4-[8-{[5-クロロ-6-フルオロ1-(オキサン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}-6-メチル-2-(メチルスルファニル)ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル]ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(236)を黄色固体として得た(340mg,収率70%)。
【１２１２】
【数２０１】
2021512131.tif 000611
【１２１３】
工程2:
【１２１４】
【化４０９】
2021512131.tif 000612
【１２１５】
4-[8-{[5-クロロ-6-フルオロ1-(オキサン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}-6-メチル-2-(メチルスルファニル)ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル]ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(236)(430mg,0.528ミリモル)をDCM(5ml)中に混合して得た溶液を撹拌し、これにm-CPBA(80%,114mg,0.528ミリモル)を加えた。4時間後、LCMS分析により、出発物質が消費されて生成物が形成されたことを確認した。混合物をNa2SO3(10ml)飽和水溶液でクエンチし、H2O(20ml)で希釈した。二相混合物を分離した。水性層をDCM(2×20ml)で抽出した。有機層を合わせてNaHCO3(20ml)飽和水溶液とブラインで洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー(SiO2,0〜100%EtOAc/石油エーテル)によって精製して、4-[8-{[5-クロロ-6-フルオロ1-(オキサン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}-2-(メタンスルフィニル)-6-メチルピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル]ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(237)を黄色油状物として得た(275mg,収率79%)。
【１２１６】
【数２０２】
2021512131.tif 000613
【１２１７】
工程3:
【１２１８】
【化４１０】
2021512131.tif 000614
【１２１９】
4-[8-{[5-クロロ-6-フルオロ-1-(オキサン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}-2-(メタンスルフィニル)-6-メチルピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル]ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(237)(267mg,0.404ミリモル)と(3R,4R)-4-メトキシ-1-メチルピロリジン-3-オール(199)(79.6mg,0.607ミリモル)を乾燥THF(4ml)中に混合して得た溶液を撹拌し、これにLHMDS(THF中1.0M,0.607ml,0.607ミリモル)を室温にて滴下した。混合物を室温で3時間撹拌した。LCMS分析により、出発物質が消費されて所望の生成物が形成されたことを確認した。混合物をNH4Cl(10ml)飽和水溶液でクエンチし、水性層をEtOAc(3×20ml)で抽出した。有機層を合わせてNa2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。粗残留物を逆相フラッシュクロマトグラフィー(0〜100%MeCN/H2O+0.05%ギ酸)によって精製して、4-(8-{[5-クロロ-6-フルオロ-1-(オキサン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}-2-{[(3R,4R)-4-メトキシ-1-メチルピロリジン-3-イル]オキシ}-6-メチルピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(238)を黄色固体として得た(120mg,収率41%)。
【１２２０】
【数２０３】
2021512131.tif 000615
【１２２１】
工程4:
【１２２２】
【化４１１】
2021512131.tif 000616
【１２２３】
4-(8-{[5-クロロ-6-フルオロ-1-(オキサン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}-2-{[(3R,4R)-4-メトキシ-1-メチルピロリジン-3-イル]オキシ}-6-メチルピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(238)(120mg,0.165ミリモル)をDCM(4ml)中に混合して得た溶液を撹拌し、これにTFA(2ml)を加えた。混合物を室温で5時間撹拌した。LCMS分析により、出発物質が消費されたことを確認した。反応混合物を濃縮して、8-[(5-クロロ-6-フルオロ-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-2-{[(3R,4R)-4-メトキシ-1-メチルピロリジン-3-イル]オキシ}-6-メチル-4-(ピペラジン-1-イル)ピリド[3,4-d]ピリミジン(239)を褐色油状物として得た(89.6mg,収率100%)。
【１２２４】
【数２０４】
2021512131.tif 000617
【１２２５】
工程5:
【１２２６】
【化４１２】
2021512131.tif 000618
【１２２７】
8-[(5-クロロ-6-フルオロ-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-2-{[(3R,4R)-4-メトキシ-1-メチルピロリジン-3-イル]オキシ}-6-メチル-4-(ピペラジン-1-イル)ピリド[3,4-d]ピリミジン(239)(89.6mg,0.136ミリモル)をDCM(4ml)中に混合して得た溶液を撹拌し、これにDIPEA(213mg,1.65ミリモル)を加えた。混合物を−40℃に冷却し、塩化アクリロイル(17.9mg,0.198ミリモル)のDCM(1ml)溶液を滴下した。添加後、混合物を同温度でさらに20分撹拌した。LCMS分析により、出発物質が消費されて所望の生成物が形成されたことを確認した。混合物をNaHCO3(20ml)飽和水溶液(20ml)でクエンチし、DCM(3×10ml)で抽出した。有機層を合わせてNa2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。粗残留物を逆相フラッシュクロマトグラフィー(0〜100%MeCN/H2O+0.05%ギ酸)によって精製して、1-[4-(8-[(5-クロロ-6-フルオロ-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-2-{[(3R,4R)-4-メトキシ-1-メチルピロリジン-3-イル]オキシ}-6-メチルピリド[3,4-d]ピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-イル]プロプ-2-エン-1-オン(実施例-1K)を白色固体として得た(11mg,収率11%)。
【１２２８】
【数２０５】
2021512131.tif 000619
【１２２９】
以下の実施例は、一般的なメソッドLに従って製造した。
1-[4-(8-[(5-クロロ-6-フルオロ-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-2-{[(3R,4R)-4-メトキシ-1-メチルピロリジン-3-イル]オキシ}キナゾリン-4-イル)ピペラジン-1-イル]プロプ-2-エン-1-オン(実施例1L)の製造
工程1:
【１２３０】
【化４１３】
2021512131.tif 000620
【１２３１】
3-フルオロ-2-ニトロベンゾニトリル(240)(4.0g,24.1ミリモル)と5-クロロ-6-フルオロ-1-(オキサン-2-イル)-1H-インダゾール-4-オール(72)(6.5g,24.1ミリモル)をDMA(20ml)中に混合して得た混合物を、N2雰囲気下にて100℃で1時間撹拌した。混合物を濃縮し、残留物をフラッシュクロマトグラフィー(SiO2,7:3石油エーテル/EtOAc)によって精製して、3-{[5-クロロ-6-フルオロ-1-(オキサン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}-2-ニトロベンゾニトリル(241)を黄色固体として得た(8.7g,収率87%)。
【１２３２】
【数２０６】
2021512131.tif 000621
【１２３３】
工程2:
【１２３４】
【化４１４】
2021512131.tif 000622
【１２３５】
3-{[5-クロロ-6-フルオロ-1-(オキサン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}-2-ニトロベンゾニトリル(241)(8.5g,20.4ミリモル)をEtOAc(200ml)中に混合して得た溶液にPd/C(10重量%,850mg)を加え、混合物を50℃で6時間撹拌した。混合物を濾過し、濾液を濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー(SiO2,1:1石油エーテル/EtOAc)によって精製して、2-アミノ-3-{[5-クロロ-6-フルオロ-1-(オキサン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}ベンゾニトリル(242)を白色固体として得た(6.6g,収率84%)。
【１２３６】
【数２０７】
2021512131.tif 000623
【１２３７】
工程3:
【１２３８】
【化４１５】
2021512131.tif 000624
【１２３９】
2-アミノ-3-{[5-クロロ-6-フルオロ-1-(オキサン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}ベンゾニトリル(242)(6.6g,17.2ミリモル)とK2CO3(7.1g,51.2ミリモル)をDMSO(40ml)中に混合して得た混合物にCS2(13g,171ミリモル)を加え、混合物を50℃で2時間撹拌した。混合物を水(300ml)中に注ぎ込み、25℃で30分撹拌し、濾過した。濾過ケークをH2O(50ml)で洗浄し、乾燥して、8-{[5-クロロ-6-フルオロ-1-(オキサン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}キナゾリン-2,4(1H,3H)-ジチオン(243)を黄色固体として得た(6.0g,収率76%)。
【１２４０】
【数２０８】
2021512131.tif 000625
【１２４１】
工程4:
【１２４２】
【化４１６】
2021512131.tif 000626
【１２４３】
8-{[5-クロロ-6-フルオロ-1-(オキサン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}キナゾリン-2,4(1H,3H)-ジチオン(243)(6.0g,13.0ミリモル)をNaOH水溶液(15ml,1M)中に混合して得た溶液にH2O(20ml)を加え、混合物を25℃で10分撹拌した。ヨウ化メチル(3.7g,1.6ml,25.9ミリモル)を加え、混合物を25℃で1時間撹拌した。黄色の固体が生成した。混合物を酢酸エチル(3×200ml)で抽出した。有機層を合わせてNa2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー(SiO2,4:1石油エーテル/EtOAc)によって精製して、8-{[5-クロロ-6-フルオロ-1-(オキサン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}-2,4-ビス(メチルスルファニル)キナゾリン(244)を黄色固体として得た(4.7g,収率74%)。
【１２４４】
【数２０９】
2021512131.tif 000627
【１２４５】
工程5:
【１２４６】
【化４１７】
2021512131.tif 000628
【１２４７】
8-{[5-クロロ-6-フルオロ-1-(オキサン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}-2,4-ビス(メチルスルファニル)キナゾリン(244)(2.0g,4.1ミリモル)とピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(1.5g,8.2ミリモル)をDMA(15ml)中に混合して得た混合物にK2CO3(562mg,4.1ミリモル)を加え、混合物を120℃で16時間撹拌した。混合物を濃縮し、残留物をフラッシュクロマトグラフィー(SiO2,3:2石油エーテル/EtOAc)によって精製して、4-[8-{[5-クロロ-6-フルオロ-1-(オキサン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}-2-(メチルスルファニル)キナゾリン-4-イル]ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(245)を黄色固体として得た(1.1g,収率41%)。
【１２４８】
【数２１０】
2021512131.tif 000629
【１２４９】
工程6:
【１２５０】
【化４１８】
2021512131.tif 000630
【１２５１】
4-[8-{[5-クロロ-6-フルオロ-1-(オキサン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}-2-(メチルスルファニル)キナゾリン-4-イル]ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(245)(1.0g,1.6ミリモル)をDCM(10ml)中に混合して得た溶液にm-CPBA(274mg,1.6ミリモル)を加え、混合物を20℃で2時間撹拌した。LCMS分析により、所望の生成物への転化を確認した。混合物をDCM(20ml)で希釈し、Na2SO3飽和水溶液(2×20ml)、NaHCO3飽和水溶液(20ml)、及びブライン(20ml)で洗浄した。有機層を合わせてNa2SO4で乾燥し、濾過し、そして濃縮して、4-[8-{[5-クロロ-6-フルオロ-1-(オキサン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}-2-(メタンスルフィニル)キナゾリン-4-イル]ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(246)を黄色固体として得た(960mg,収率94%)。
【１２５２】
【数２１１】
2021512131.tif 000631
【１２５３】
工程7:
【１２５４】
【化４１９】
2021512131.tif 000632
【１２５５】
4-[8-{[5-クロロ-6-フルオロ-1-(オキサン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}-2-(メタンスルフィニル)キナゾリン-4-イル]ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(246)(250mg,0.388ミリモル)と(3R,4R)-4-メトキシ-1-メチルピロリジン-3-オール(199)(67mg,0.504ミリモル)をTHF(5ml)中に混合して得た混合物にLiHMDS(0.5ml,0.5ミリモル,1M)を加え、混合物を25℃で1時間撹拌した。混合物を水(2ml)で希釈し、濃縮した。残留物を逆相フラッシュクロマトグラフィー(C18,40g,50%MeCN/H2O+0.1%ギ酸)によって精製して、4-(8-{[5-クロロ-6-フルオロ-1-(オキサン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}-2-{[(3R,4R)-4-メトキシ-1-メチルピロリジン-3-イル]オキシ}キナゾリン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(247)を白色固体として得た(130mg,収率47%)。
【１２５６】
【数２１２】
2021512131.tif 000633
【１２５７】
工程8:
【１２５８】
【化４２０】
2021512131.tif 000634
【１２５９】
4-(8-{[5-クロロ-6-フルオロ-1-(オキサン-2-イル)-1H-インダゾール-4-イル]オキシ}-2-{[(3R,4R)-4-メトキシ-1-メチルピロリジン-3-イル]オキシ}キナゾリン-4-イル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(247)(130mg,0.18ミリモル)をDCM(4ml)中に混合して得た溶液にTFA(2ml)を加え、混合物を25℃で2時間撹拌した。混合物を濃縮して、8-[(5-クロロ-6-フルオロ-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-2-{[(3R,4R)-4-メトキシ-1-メチルピロリジン-3-イル]オキシ}-4-(ピペラジン-1-イル)キナゾリン(248)を黄色油状物として得た(117mg,収率100%)。これを、さらなる精製を施すことなく次の工程に使用した。
【１２６０】
【数２１３】
2021512131.tif 000635
【１２６１】
工程9:
【１２６２】
【化４２１】
2021512131.tif 000636
【１２６３】
8-[(5-クロロ-6-フルオロ-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-2-{[(3R,4R)-4-メトキシ-1-メチルピロリジン-3-イル]オキシ}-4-(ピペラジン-1-イル)キナゾリン(248)(117mg,0.18ミリモル)をEtOAc(40ml)とNaHCO3飽和水溶液(40ml)中に混合して得た溶液に塩化アクリロイル(33mg,0.36ミリモル)を加え、混合物を25℃で30分撹拌した。混合物をEtOAc(3×40ml)で抽出した。有機層を合わせてNa2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。残留物を逆相フラッシュクロマトグラフィー(C18,0〜25%MeCN/H2O+0.1%ギ酸)によって精製して、1-[4-(8-[(5-クロロ-6-フルオロ-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-2-{[(3R,4R)-4-メトキシ-1-メチルピロリジン-3-イル]オキシ}キナゾリン-4-イル)ピペラジン-1-イル]プロプ-2-エン-1-オン(実施例1L)を白色固体として得た(16mg,収率15%)。
【１２６４】
【数２１４】
2021512131.tif 000637
【１２６５】
下表の実施例は、メソッドL、ならびに1-[4-(8-[(5-クロロ-6-フルオロ-1H-インダゾール-4-イル)オキシ]-2-{[(3R,4R)-4-メトキシ-1-メチルピロリジン-3-イル]オキシ}キナゾリン-4-イル)ピペラジン-1-イル]プロプ-2-エン-1-オン(実施例1L)を製造するのに使用した手順を使用して製造した。下記の実施例は、実施例-1Lを製造するのに使用した典型的な手順に対する重要な変更や置き換え(当業者であれば理解できるであろう)が無い形で行った。
【１２６６】
【化４２２】
2021512131.tif 000638
【１２６７】
さらなる中間体の製造:
(3R,4R)-1-エチル-4-メトキシピロリジン-3-オール(250)の製造
工程1:
【１２６８】
【化４２３】
2021512131.tif 000639
【１２６９】
(3R,4R)-3-ヒドロキシ-4-メトキシピロリジン-1-カルボン酸tert-ブチル(198)(1.3g,5.98ミリモル)をDCM(20ml)中に混合して得た溶液にHCl(10ml,1,4-ジオキサン中4M)を加え、混合物を20℃で2時間撹拌した。LCMS分析により、生成物への転化を確認した。混合物を濃縮・乾燥して(3R,4R)-4-メトキシピロリジン-3-オール塩酸塩(249)を白色固体として得た(919mg,収率100%)。これを、さらなる精製を施すことなく次の工程に使用した。
【１２７０】
【数２１５】
2021512131.tif 000640
【１２７１】
工程2:
【１２７２】
【化４２４】
2021512131.tif 000641
【１２７３】
(3R,4R)-4-メトキシピロリジン-3-オール塩酸塩(249)(100mg,0.651ミリモル)をMeOH(1.5ml)中に混合して得た溶液にアセトアルデヒド(40重量%)(0.754ml)を加え、0℃にてNaBH3CN(115mg,1.82ミリモル)を少しずつ加えた。混合物を0℃にてさらに5分撹拌し、次いで20℃にて2時間撹拌した。LCMS分析により、出発物質が消費されて生成物が形成されたことを確認した。1.0MのKOH水溶液を加えて、混合物をpH=9に調整した。混合物をDCM(5×40ml)で抽出した。有機層を合わせてブライン(10ml)で洗浄し、無水Na2SO4で乾燥し、濾過し、そして濃縮して(3R,4R)-1-エチル-4-メトキシピロリジン-3-オール(250)を黄色油状物として得た(68mg,収率72%)。これを、さらなる精製を施すことなく次の工程に使用した。
【１２７４】
【数２１６】
2021512131.tif 000642
【１２７５】
(3R,4R)-4-メトキシ-1-(プロパン-2-イル)ピロリジン-3-オール(251)の製造
【１２７６】
【化４２５】
2021512131.tif 000643
【１２７７】
(3R,4R)-4-メトキシピロリジン-3-オール塩酸塩(249)(100mg,0.651ミリモル)をMeOH(1.5ml)中に混合して得た溶液に、NaBH3CN(115mg,1.82ミリモル)を0℃にて少しずつ加えた。混合物を0℃にてさらに5分撹拌し、次いで20℃にて2時間撹拌した。LCMS分析により、出発物質が消費されて生成物が形成されたことを確認した。1.0MのKOH水溶液を加えて、混合物をpH=9に調整した。混合物をDCM(5×40ml)で抽出した。有機層を合わせてブライン(10ml)で洗浄し、無水Na2SO4で乾燥し、濾過し、そして濃縮して(3R,4R)-4-メトキシ-1-(プロパン-2-イル)ピロリジン-3-オール(251)を黄色油状物として得た(254mg,収率82%)。これを、さらなる精製を施すことなく次の工程に使用した。
【１２７８】
【数２１７】
2021512131.tif 000644
【１２７９】
(3R,4R)-4-メトキシ-1-(2-メトキシエチル)ピロリジン-3-オール(252)の製造
【１２８０】
【化４２６】
2021512131.tif 000645
【１２８１】
(3R,4R)-4-メトキシピロリジン-3-オール塩酸塩(249)(100mg,0.651ミリモル)と1-ブロモ-2-メトキシエタン(113mg,0814ミリモル)をMeCN(2ml)中に混合して得た溶液にK2CO3(180mg,1.3ミリモル)を20℃にて加えた。混合物を65℃で7時間撹拌した。LCMS分析により、出発物質が消費されて生成物が形成されたことを確認した。混合物にMeCN(10ml)とDCM(10ml)を加えた。混合物をNa2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮して(3R,4R)-4-メトキシ-1-(2-メトキシエチル)ピロリジン-3-オール(252)を黄色油状物として得た（102mg、収率90％、純度75％）。
【１２８２】
【数２１８】
2021512131.tif 000646
【１２８３】
(3R,4R)-4-エトキシ-1-メチルピロリジン-3-オール(253)の製造
工程1:
【１２８４】
【化４２７】
2021512131.tif 000647
【１２８５】
(3R,4R)-3,4-ジヒドロキシピロリジン-1-カルボン酸tert-ブチル(197)(1g,4.92ミリモル)とヨードエタン(2.3g,14.8ミリモル)をTHF(30ml)中に混合して得た混合物にLHMDS(7.38ml,7.38ミリモル,THF中1.0M)を加えた。混合物を25℃で16時間撹拌した。LCMS分析により、殆どが出発物質であることがわかった。混合物を50℃で48時間撹拌した。LCMS分析により、出発物質が消費されて生成物が形成されたことを確認した。反応混合物を室温に冷却した。反応混合物を水で洗浄した。有機層を合わせて無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。粗残留物をフラッシュクロマトグラフィー(SiO2,2:3石油エーテル/EtOAc)によって精製して、(3R,4R)-3-エトキシ-4-ヒドロキシピロリジン-1-カルボン酸tert-ブチル(253)を無色油状物として得た(435mg,収率38%)。
【１２８６】
【数２１９】
2021512131.tif 000648
【１２８７】
工程2:
【１２８８】
【化４２８】
2021512131.tif 000649
【１２８９】
(3R,4R)-3-エトキシ-4-ヒドロキシピロリジン-1-カルボン酸tert-ブチル(253)(435mg,1.88ミリモル)をTHF(15ml)中に混合して得た溶液にLAH(143mg,3.76ミリモル)を加え、混合物を70℃で3時間撹拌した。LCMS分析により、生成物が形成されていることを確認した。混合物を室温に冷却し、Na2SO4・10H2O(2g)を加えた。混合物を30分撹拌し、セライトを介して濾過した。濾液を濃縮して、(3R,4R)-4-エトキシ-1-メチルピロリジン-3-オール(254)を無色油状物として得た(215mg,収率79%)。
【１２９０】
【数２２０】
2021512131.tif 000650
【１２９１】
rac-(3R,4R)-4-メトキシ-1-メチルピロリジン-3-オール(257)の製造
工程1:
【１２９２】
【化４２９】
2021512131.tif 000651
【１２９３】
rac-(3R,4S)-3,4-ジヒドロキシピロリジン-1-カルボン酸tert-ブチル(255)(500mg,2.46ミリモル)とCH3I(1.05g,7.38ミリモル)をTHF(10ml)中に混合して得た混合物にLHMDS(3.69ml,3.69ミリモル,THF中1M)を加え、混合物を20℃で16時間撹拌した。LCMS分析により、生成物が約60%で出発物質が約30%残留しており、ジメチル化副生物が痕跡量存在していることを確認した。反応混合物にH2O(10ml)を加えた。反応混合物をEtOAc(3×20ml)で抽出した。有機層を合わせてブライン(10ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー(SiO2,1:1石油エーテル/EtOAc)によって精製して、rac-(3R,4S)-3-ヒドロキシ-4-メトキシピロリジン-1-カルボン酸tert-ブチル(256)を無色油状物として得た(260mg,収率49%)。
【１２９４】
【数２２１】
2021512131.tif 000652
【１２９５】
工程2:
【１２９６】
【化４３０】
2021512131.tif 000653
【１２９７】
rac-(3R,4S)-3-ヒドロキシ-4-メトキシピロリジン-1-カルボン酸tert-ブチル(256)(256mg,1.18ミリモル)を乾燥THF(5ml)中に混合して得た溶液を撹拌し、これにLAH(157mg,4.12ミリモル)を25℃にて加えた。得られた混合物を70℃で3時間撹拌した。LCMS分析により、出発物質が消費されて生成物が形成されたことを確認した。混合物を10℃に冷却し、Na2SO4・10H2O(2g)を加えた。混合物を20分撹拌し、セライトを介して濾過した。濾過液を濃縮して、rac-(3R,4S)-4-メトキシ-1-メチルピロリジン-3-オール(257)(130mg,収率84%)。
【１２９８】
【数２２２】
2021512131.tif 000654
【１２９９】
rac-(3S,4R)-4-エチル-1-メチルピロリジン-3-オール(259)の製造
【１３００】
【化４３１】
2021512131.tif 000655
【１３０１】
rac-(3S,4R)-4-エチルピロリジン-3-オール(258)(50mg,0.43ミリモル)(J.Med.Chem.2010,53,6730-6746)、ホルムアルデヒド水溶液(3ml)、及びギ酸(6ml)を封管中に入れて得た混合物を100℃で60時間撹拌した。LCMS分析により、出発物質が消費されて生成物が形成されたことを確認した。反応混合物を濃縮した。残留物に濃塩酸(30ml)を加えた。混合物を2時間撹拌してから濃縮した。残留物にH2O(30ml)を加え、混合物を固体K2CO3で慎重に塩基性にした。混合物を10:1DCM/MeOH(3×30ml)で抽出した。有機層を合わせてNa2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮して、rac-(3S,4R)-4-エチル-1-メチルピロリジン-3-オール(259)を淡黄色油状物として得た(505mg,収率93%)。
【１３０２】
【数２２３】
2021512131.tif 000656
【１３０３】
rac-(3S,4R)-4-シクロプロピル-1-メチルピロリジン-3-オール(261)の製造
【１３０４】
【化４３２】
2021512131.tif 000657
【１３０５】
rac-(3S,4R)-4-シクロプロピルピロリジン-3-オール(260)(532mg,4.18ミリモル)(J.Med.Chem.2010,53,6730-6746)を乾燥MeOH(10ml)中に混合して得た溶液を撹拌し、これにホルムアルデヒド(628mg,20.9ミリモル)とNaBH3CN(736mg,11.7ミリモル)を10℃にて加えた。得られた混合物を25℃で6時間撹拌した。LCMS分析により、出発物質が消費されて所望の生成物が形成されたことを確認した。反応混合物にNaHCO3飽和水溶液(10ml)を加えた。混合物をDCM(3×15ml)で抽出した。有機層を合わせてブライン(15ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮して、rac-(3S,4R)-4-シクロプロピル-1-メチルピロリジン-3-オール(261)を得た(591mg,収率100%)。これを、さらなる精製を施すことなく次の工程に使用した。
【１３０６】
【数２２４】
2021512131.tif 000658
【１３０７】
rac-(3S,4R)-1,4-ジメチルピロリジン-3-オール(263)の製造
【１３０８】
【化４３３】
2021512131.tif 000659
【１３０９】
rac-(3S,4R)-3-ヒドロキシ-4-メチルピロリジン-1-カルボン酸tert-ブチル(262)(469mg,2.33ミリモル)を乾燥THF(5ml)中に混合して得た溶液を撹拌し、これにLAH(310mg,8.16ミリモル)を25℃にて加えた。得られた混合物を70℃で3時間撹拌した。LCMS分析により、出発物質が消費されて生成物が形成されたことを確認した。混合物を10℃に冷却してからNa2SO4・10H2O(2g)を加えた。混合物を20分撹拌してからセライトを介して濾過した。濾液を濃縮して、rac-(3S,4R)-1,4-ジメチルピロリジン-3-オール(263)を得た(225mg,収率84%)。
【１３１０】
【数２２５】
2021512131.tif 000660
【１３１１】
rac-(3S,4S)-1,4-ジメチルピロリジン-3-オール(265)の製造
【１３１２】
【化４３４】
2021512131.tif 000661
【１３１３】
rac-(3S,4S)-3-ヒドロキシ-4-メチルピロリジン-1-カルボン酸tert-ブチル(264)(500mg,2.48ミリモル)を乾燥THF(8ml)中に混合して得た溶液を撹拌し、これにLAH(236mg,6.21ミリモル)を25℃にて加えた。得られた混合物を80℃で2時間撹拌した。LCMS分析により、出発物質が消費されて生成物が形成されたことを確認した。混合物を10℃に冷却してからNa2SO4・10H2O(2g)を加えた。混合物を20分撹拌してからセライトを介して濾過した。濾液を濃縮して、rac-(3S,4S)-1,4-ジメチルピロリジン-3-オール(265)を得た(230mg,収率80%)。
【１３１４】
【数２２６】
2021512131.tif 000662
【１３１５】
rac-(4R)-4-(2,2-ジフルオロエトキシ)-1-メチルピロリジン-3-オール(267)の製造
【１３１６】
【化４３５】
2021512131.tif 000663
【１３１７】
rac-(4R)-4-(2,2-ジフルオロエトキシ)ピロリジン-3-オール(266)(595mg,3.56ミリモル)をMeOH(10ml)中に混合して得た溶液に、ホルムアルデヒド水溶液(2ml)とNaBH3CN(626mg,9.97ミリモル)を0℃にて加えた。混合物を0℃でさらに5分、次いで20℃で1時間撹拌した。LCMS分析により、出発物質が消費されて生成物が形成されたことを確認した。H2O(10ml)を加え、混合物をDCM(3×20ml)で抽出した。有機層を合わせてブライン(20ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー(SiO2,0〜10%DCM/MeOH)によって精製して、rac-(4R)-4-(2,2-ジフルオロエトキシ)-1-メチルピロリジン-3-オール(267)を褐色油状物として得た(425mg,収率66%)。
【１３１８】
【数２２７】
2021512131.tif 000664
【１３１９】
rac-(3R,4R)-1,3-ジメチルピペリジン-4-オール(269)の製造
【１３２０】
【化４３６】
2021512131.tif 000665
【１３２１】
rac-(3R,4R)-3-メチルピペリジン-4-オール塩酸塩(268)(200mg,1.32ミリモル)をMeOH(1.5ml)とアセトアルデヒド(37〜40重量%)(0.781ml)中に混合して得た溶液にNaBH3CN(233mg,3.70ミリモル)を0℃にて少しずつ加えた。混合物を0℃でさらに5分、次いで20℃で2時間撹拌した。LCMS分析により、出発物質が消費されて生成物が形成されたことを確認した。1.0MのKOH水溶液を加えて、混合物をpH=9に調整した。混合物をDCM(5×40ml)で抽出した。有機層を合わせてブライン(10ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮して、rac-(3R,4R)-1,3-ジメチルピペリジン-4-オール(269)を黄色油状物として得た(150mg,収率90%)。
【１３２２】
【数２２８】
2021512131.tif 000666
【１３２３】
rac-(3R,4R)-1-(2-メトキシエチル)-3-メチルピペリジン-4-オール(270)の製造
【１３２４】
【化４３７】
2021512131.tif 000667
【１３２５】
rac-(3R,4R)-3-メチルピペリジン-4-オール塩酸塩(268)(100mg,0.659ミリモル)と1-ブロモ-2-メトキシエタン(110mg,0.791ミリモル)をMeCN(2ml)中に混合して得た溶液にK2CO3(164mg,1.19ミリモル)を20℃にて加えた。混合物を50℃で7時間撹拌した。LCMS分析により、出発物質が消費されて生成物が形成されたことを確認した。混合物を室温に冷却した。MeCN(10ml)とDCM(10ml)を加えた。混合物をNa2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮して、rac-(3R,4R)-1-(2-メトキシエチル)-3-メチルピペリジン-4-オール(270)を黄色油状物として得た(114mg,収率100%)。これを、さらなる精製を施すことなく次の工程に使用した。
【１３２６】
【数２２９】
2021512131.tif 000668
【１３２７】
5-メチル-5-アザスピロ[2.4]ヘプタン-7-オール(272)の製造
【１３２８】
【化４３８】
2021512131.tif 000669
【１３２９】
5-アザスピロ[2.4]ヘプタン-7-オール(271)(200mg,1.77ミリモル)を、MeOH(1.5ml)とアセトアルデヒド(37〜40重量%)(1.13ml)と酢酸(0.1ml)の混合物中に混合して得た溶液に、NaBH3CN(311mg,4.95ミリモル)を0℃にて少しずつ加えた。反応混合物を0℃でさらに5分、そして20℃で2時間撹拌した。LCMS分析により、出発物質が消費されて生成物が形成されたことを確認した。1.0MのKOH水溶液を加えて、混合物をpH=9に調整した。混合物をDCM(5×40ml)で抽出した。有機層を合わせてブライン(10ml)で洗浄し、無水Na2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮して、5-メチル-5-アザスピロ[2.4]ヘプタン-7-オール(272)を黄色油状物として得た(200mg,収率89%)。これを、さらなる精製を施すことなく次の工程に使用した。
【１３３０】
【数２３０】
2021512131.tif 000670
【１３３１】
(3R,4R)-1-メチルピロリジン-3,4-ジオール(273)の製造
【１３３２】
【化４３９】
2021512131.tif 000671
【１３３３】
(3R,4R)-3,4-ジヒドロキシピロリジン-1-カルボン酸tert-ブチル(197)(922mg,4.24ミリモル)をTHF(15ml)中に混合して得た溶液(c=0.28M)に、LAH(THF中2.0M,8.5ml,17.0ミリモル)をN2雰囲気下にて室温で加えた。ガスの発生が確認された。混合物を60℃で9時間撹拌した。0℃に冷却した後、THF(10ml)中H2O(0.65ml)を加え、わずかな発熱とガスの発生が認められた。15%NaOH水溶液(0.65ml)とH2O(1.95ml)を加えた。15分後、混合物を、セライトを介して濾過した。濾過ケークをTHFで充分に洗浄した。濾液を濃縮して、(3R,4R)-1-メチルピロリジン-3,4-ジオール(273)をオフホワイト色固体として得た(481mg,収率97%)。これを、さらなる精製を施すことなく次の工程に使用した。
【１３３４】
【数２３１】
2021512131.tif 000672
【１３３５】
2-メチル-2,3-ジヒドロ-1H-イソインドール-4-オール(275)の製造
【１３３６】
【化４４０】
2021512131.tif 000673
【１３３７】
2,3-ジヒドロ-1H-イソインドール-4-オール塩酸塩(274)(100mg,0.583ミリモル)をMeOH(5ml)中に混合して得た溶液に、ホルムアルデヒド水溶液(0.3ml)とNaBH3CN(293mg,4.66ミリモル)を0℃にて加えた。反応混合物を0℃でさらに5分、そして20℃で1時間撹拌した。LCMS分析により、出発物質が消費されて生成物が形成されたことを確認した。混合物をH2O(10ml)に加え、DCM(3×20ml)で抽出した。有機層を合わせてブライン(20ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー(SiO2,0〜10%MeOH/DCM)によって精製して、2-メチル-2,3-ジヒドロ-1H-イソインドール-4-オール(275)を白色固体として得た(80mg,収率98%)。
【１３３８】
【数２３２】
2021512131.tif 000674
【１３３９】
2-メチル-1,2,3,4-テトラヒドロイソキノリン-8-オール(277)の製造
【１３４０】
【化４４１】
2021512131.tif 000675
【１３４１】
1,2,3,4-テトラヒドロイソキノリン-8-オール(276)をMeOH(3ml)中に混合して得た溶液に、ホルムアルデヒド(151mg,5.03ミリモル)、NaBH3CN(177mg,2.82ミリモル)、及び酢酸(1ml)を0℃にて加えた。混合物を0℃で5分、次いで20℃で1時間撹拌した。LCMS分析により、出発物質が消費されて生成物が形成されたことを確認した。反応混合物をH2O(5ml)とNaHCO3飽和水溶液(2ml)との混合物中に注ぎ込み、DCM(3×20ml)で抽出した。有機層を合わせてブライン(5ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮して、2-メチル-1,2,3,4-テトラヒドロイソキノリン-8-オール(277)を黄色固体として得た(143mg,収率87%)。
【１３４２】
【数２３３】
2021512131.tif 000676
【１３４３】
(3R,4R)-4-メトキシ-1-(プロプ-2-イン-1-イル)ピロリジン-3-オール(278)の製造
【１３４４】
【化４４２】
2021512131.tif 000677
【１３４５】
(3R,4R)-4-メトキシピロリジン-3-オールトリフルオロアセテート(249)(200mg,0.23ミリモル)とK2CO3(236mg,1.71ミリモル)をMeCN(3ml)中に混合して得た溶液を撹拌し、これに3-クロロプロプ-1-イン(127mg,1.71ミリモル)を加えた。得られた混合物を16時間撹拌した。LCMS分析により、出発物質が消費されて生成物が形成されたことを確認した。反応混合物を濾過して濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー(SiO2,0〜8%MeOH/DCM)によって精製して、(3R,4R)-4-メトキシ-1-(プロプ-2-イン-1-イル)ピロリジン-3-オール(278)を黄色油状物として得た(85mg,収率32%)。
【１３４６】
【数２３４】
2021512131.tif 000678
【１３４７】
(3R,4R)-1-(ブト-3-イン-1-イル)-4-メトキシピロリジン-3-オール(279)の製造
【１３４８】
【化４４３】
2021512131.tif 000679
【１３４９】
(3R,4R)-4-メトキシピロリジン-3-オールトリフルオロアセテート(249)(550mg,2.38ミリモル)、KI(790mg,4.76ミリモル)、及びK2CO3(1.31g,9.52ミリモル)をアセトン(15ml)中に混合して得た混合物に、4-ブロモブト-1-イン(475mg,3.57ミリモル)を加えた。混合物を80℃で5時間撹拌した。LCMS分析により、所望の生成物が形成されたことを確認した。反応混合物を濾過して濃縮した。残留物を逆相フラッシュクロマトグラフィー(40g C18,5%MeCN/H2O+0.1%ギ酸)によって精製して、(3R,4R)-1-(ブト-3-イン-1-イル)-4-メトキシピロリジン-3-オール(279)を無色油状物として得た(360mg,収率70%)。
【１３５０】
【数２３５】
2021512131.tif 000680
【１３５１】
(3R,4R)-1-(2-{[tert-ブチル(ジメチル)シリル]オキシ}エチル)-4-メトキシピロリジン-3-オール(280)の製造
【１３５２】
【化４４４】
2021512131.tif 000681
【１３５３】
(3R,4R)-4-メトキシピロリジン-3-オールトリフルオロアセテート(249)(196mg,1.67ミリモル)をMeCN(15ml)中に混合して得た溶液に、(2-ブロモエトキシ)(tert-ブチル)ジメチルシラン(2.0g,8.37ミリモル)とEt3N(847mg,8.37ミリモル)を加えた。混合物を70℃で6時間撹拌した。LCMS分析により、所望の生成物への転化が確認された。溶媒を除去し、残留物を逆相フラッシュクロマトグラフィー(40g C18,20〜50%MeCN/H2O+0.1%ギ酸)によって精製して、(3R,4R)-1-(2-{[tert-ブチル(ジメチル)シリル]オキシ}エチル)-4-メトキシピロリジン-3-オール(280)を淡黄色油状物として得た(164mg,収率36%)。
【１３５４】
【数２３６】
2021512131.tif 000682
【１３５５】
1,6-ジメチル-4,5,6,7-テトラヒドロ-1H-ピラゾロ[3,4-c]ピリジン-3-オール(282)の製造
【１３５６】
【化４４５】
2021512131.tif 000683
【１３５７】
1-メチル-4,5,6,7-テトラヒドロ-1H-ピラゾロ[3,4-c]ピリジン-3-オールハイドロブロマイド(281)(Albany Molecular)(130mg,0.555ミリモル)、ホルムアルデヒド水溶液(1ml)、及びギ酸(3ml)を封管中に入れて得た混合物を90℃で19時間加熱した。LCMS分析により、出発物質の消費が確認された。反応混合物を濃縮した。濃塩酸(3ml)を加えた。反応混合物を2時間撹拌してから濃縮した。H2O(30ml)を加え、混合物を固体K2CO3で慎重に塩基性にした。混合物を10:1のDCM/MeOH(3×30ml)で抽出した。有機層を合わせてNa2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。粗残留物をKromasil-C18カラム(100×21.2mm,粒径5μm)による分取HPLCによって精製し、MeCN/H2O(+0.1%ギ酸)で溶離して、1,6-ジメチル-4,5,6,7-テトラヒドロ-1H-ピラゾロ[3,4-c]ピリジン-3-オール(282)を白色固体として得た(80mg,収率86%)。
【１３５８】
【数２３７】
2021512131.tif 000684
【１３５９】
rac-(3S,4R)-4-(ジフルオロメチル)-1-メチルピロリジン-3-オール(290)の製造
工程1:
【１３６０】
【化４４６】
2021512131.tif 000685
【１３６１】
rac-(1R,5S)-6-オキサ-3-アザビシクロ[3.1.0]ヘキサン-3-カルボン酸tert-ブチル(283)(7.6g,41ミリモル)とCuI(1.56g,8.2ミリモル)を乾燥THF(100ml)中に混合して得た懸濁液に、臭化ビニルマグネシウム(THF中1.0M,82.1ミリモル,82.1ml)を窒素雰囲気下にて−30℃で滴下した。3時間後、TLC分析(3:1石油エーテル/EtOAc)により、出発物質が消費されたことを確認した。反応混合物を、NH4Cl飽和水溶液(100ml)を加えることによってクエンチし、濾過した。濾液を分離し、水性層をEtOAc(2×100ml)で抽出した。有機層を合わせてブライン(100ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー(Biotage,SiO2,3:1石油エーテル/EtOAc)によって精製して黄色油状物(10g)を得、これをフラッシュクロマトグラフィー(Biotage,SiO2,3:1石油エーテル/EtOAc)によって再度精製して、rac-(3R,4S)-3-エテニル-4-ヒドロキシピロリジン-1-カルボン酸tert-ブチル(284)を淡黄色油状物として得た(7.2g,収率82%)。
【１３６２】
【数２３８】
2021512131.tif 000686
【１３６３】
工程2:
【１３６４】
【化４４７】
2021512131.tif 000687
【１３６５】
rac-(3R,4S)-3-エテニル-4-ヒドロキシピロリジン-1-カルボン酸tert-ブチル(284)(7.2g,33.8ミリモル)をTHF(100ml)中に混合して得た溶液に、NaH(鉱油中60%,2.7g,67.5ミリモル)を0℃にて加えた。反応混合物を0℃で1時間撹拌し、次いでBnBr(6.9g,40.5ミリモル)を加えた。添加後、反応混合物を25℃に加温し、この温度で16時間撹拌した。TLC分析(4:1石油エーテル/EtOAc))により、出発物質が消費されたことがわかった。反応混合物をH2O(100ml)で希釈し、EtOAc(2×200ml)で抽出した。有機層を合わせてブライン(100ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー(Biotage,SiO2,10〜25%EtOAc/石油エーテル)によって精製して、rac-(3S,4R)-3-(ベンジルオキシ)-4-エテニルピロリジン-1-カルボン酸tert-ブチル(285)を黄色油状物として得た(7.55g,収率74%)。
【１３６６】
【数２３９】
2021512131.tif 000688
【１３６７】
工程3:
【１３６８】
【化４４８】
2021512131.tif 000689
【１３６９】
rac-(3S,4R)-3-(ベンジルオキシ)-4-エテニルピロリジン-1-カルボン酸tert-ブチル(285)とNaIO4(11.7g,54.7ミリモル)をMeOH(90ml)とH2O(30ml)中に混合して得た溶液に、OsO4(63.3mg,0.25ミリモル)を0〜5℃にて加えた。反応混合物を0〜5℃でさらに2時間撹拌し、次いでゆっくりと25℃に加温した。25℃で16時間後、TLC分析(3:1石油エーテル/EtOAc)により、出発物質が消費されたことがわかった。反応混合物を濾過し、濾過ケークをEtOAcで洗浄した。濾液をロータリーエバポレーター(rotovap)で濃縮して、MeOHとEtOAcを除去した。水溶液をブライン(100ml)で希釈し、EtOAc(45ml)で抽出した。有機層を合わせてブライン(2×100ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー(SiO2,3:1〜10:1石油エーテル/EtOAc)によって精製して、rac-(3S,4R)-3-(ベンジルオキシ)-4-ホルミルピロリジン-1-カルボン酸tert-ブチル(286)を淡黄色油状物として得た(5.9g,収率78%)。
【１３７０】
【数２４０】
2021512131.tif 000690
【１３７１】
工程4:
【１３７２】
【化４４９】
2021512131.tif 000691
【１３７３】
rac-(3S,4R)-3-(ベンジルオキシ)-4-ホルミルピロリジン-1-カルボン酸tert-ブチル(286)(5.9g,19.3ミリモル)をDCM(120ml)中に混合して得た溶液に、内部反応温度を5℃未満に保持しつつDAST(9.34g,58ミリモル)を滴下した。添加後、反応混合物を0〜5℃でさらに2時間撹拌した。反応混合物を室温に加温し、17時間撹拌した。TLC分析(4:1石油エーテル/EtOAc)により、出発物質が消費されたことを確認した。反応混合物を氷水(40ml)でクエンチした。有機層を分離し、水性層のpH値を、Na2CO3飽和水溶液を加えることによって約8に調整した。水性混合物をDCM(2×60ml)で抽出した。有機層を合わせてNa2CO3飽和水溶液(40ml)とブライン(40ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー(Biotage,SiO2,10〜25%EtOAc/石油エーテル)によって精製して、rac-(3S,4R)-3-(ベンジルオキシ)-4-(ジフルオロメチル)ピロリジン-1-カルボン酸tert-ブチル(287)を淡黄色油状物として得た(5.0g,収率79%)。
【１３７４】
【数２４１】
2021512131.tif 000692
【１３７５】
工程5:
【１３７６】
【化４５０】
2021512131.tif 000693
【１３７７】
rac-(3S,4R)-3-(ベンジルオキシ)-4-(ジフルオロメチル)ピロリジン-1-カルボン酸tert-ブチル(287)(4.6g,15ミリモル)とPd(OH)2/C(10重量%組み込み,1.97g)をMeOH(80ml)中に混合して得た混合物を、50psiの水素雰囲気下にて50℃で17時間撹拌した。TLC分析(2:1石油エーテル/EtOAc)により、出発物質が消費されたことを確認した。反応混合物を濾過して濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー(SiO2,7:1〜4:1石油エーテル/EtOAc)によって精製して、rac-(3R,4S)-3-(ジフルオロメチル)-4-ヒドロキシピロリジン-1-カルボン酸tert-ブチル(288)を淡黄色油状物として得た(2.4g,収率72%)。
【１３７８】
【数２４２】
2021512131.tif 000694
【１３７９】
工程6:
【１３８０】
【化４５１】
2021512131.tif 000695
【１３８１】
rac-(3R,4S)-3-(ジフルオロメチル)-4-ヒドロキシピロリジン-1-カルボン酸tert-ブチル(288)(920mg,3.88ミリモル)をDCM(10ml)中に混合して得た溶液に、TFA(4ml)を25℃にて加えた。得られた混合物を25℃で2時間撹拌した。LCMS分析により、出発物質が消費されて生成物が形成されたことを確認した。反応混合物を濃縮してrac-(3S,4R)-4-(ジフルオロメチル)ピロリジン-3-オール(289)を得た(532mg,収率100%)。
【１３８２】
【数２４３】
2021512131.tif 000696
【１３８３】
工程7:
【１３８４】
【化４５２】
2021512131.tif 000697
【１３８５】
rac-(3S,4R)-4-(ジフルオロメチル)ピロリジン-3-オール(289)(532mg,3.88ミリモル)をMeOH(10ml)中に混合して得た溶液に、ホルムアルデヒド(582mg,19.4ミリモル)とNaBH3CN(683mg,10.9ミリモル)を10℃にて加えた。混合物を25℃で3時間撹拌した。LCMS分析により、出発物質が消費されて生成物が形成されたことを確認した。NaHCO3飽和水溶液(10ml)(10ml)を加え、混合物をDCM(3×15ml)で抽出した。有機層を合わせてブライン(15ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー(SiO2,0〜10%DCM/MeOH)によって精製して、rac-(4R)-4-(2,2-ジフルオロエトキシ)-1-メチルピロリジン-3-オール(290)を黄色油状物として得た(472mg,収率81%)。
【１３８６】
【数２４４】
2021512131.tif 000698
【１３８７】
(3R,4R)-1-tert-ブチル-4-メトキシピロリジン-3-オール(292)の製造
工程1:
【１３８８】
【化４５３】
2021512131.tif 000699
【１３８９】
(3R,4R)-4-メトキシピロリジン-3-オールハイドロクロライド(249)(617mg,2.67ミリモル)を乾燥アセトン(20ml)中に混合して得た溶液に4Åモレキュラーシーブ(1.0g)を加え、混合物を25℃で2時間撹拌した。LCMS分析により、所望の生成物の形成を確認した。混合物を、セライトプラグを介して濾過し、濾液を濃縮して、(3R,4R)-3-ヒドロキシ-4-メトキシ-1-(プロパン-2-イリデン)ピロリジン-1-イウムクロライド(291)を褐色ガムとして得た(700mg,収率96%)。
【１３９０】
【数２４５】
2021512131.tif 000700
【１３９１】
工程2:
【１３９２】
【化４５４】
2021512131.tif 000701
【１３９３】
(3R,4R)-3-ヒドロキシ-4-メトキシ-1-(プロパン-2-イリデン)ピロリジン-1-イウムクロライド(291)(800mg,5.1ミリモル)を乾燥THF(12ml)中に混合して得た溶液に、MeMgCl(THF中3.0M,11.8ml,35.4ミリモル)を窒素雰囲気下にて−20℃で加えた。得られた溶液を、18〜20℃で18時間撹拌した。LCMS分析により、所望の生成物が形成され、出発物質が痕跡量残存していることを確認した。反応混合物を、NH4Cl飽和水溶液(6ml)を加えることによってクエンチし、Na2CO3飽和水溶液を加えることによってpH値を約9に調整した。混合物をEtOAc(4×50ml)で抽出した。有機層を合わせてブラインで洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー(Biotage, 10〜45%MeOH/DCM + 0.1%NH4OH)によって精製して、(3R,4R)-1-tert-ブチル-4-メトキシピロリジン-3-オール(292)を黄色油状物として得た(150mg,収率17%)。
【１３９４】
【数２４６】
2021512131.tif 000702
【１３９５】
rac-(3S,4R)-1,4-ジメチルピペリジン-3-オール(294)の製造
【１３９６】
【化４５５】
2021512131.tif 000703
【１３９７】
rac-(3S,4R)-3-ヒドロキシ-4-メチルピペリジン-1-カルボン酸tert-ブチル(293)(500mg,2.32ミリモル)をTHF(7ml)中に混合して得た溶液にLAH(177mg,4.64ミリモル)を加えた。混合物を80℃に加熱し、この温度で2時間撹拌した。LCMS分析により、出発物質が消費されて所望の生成物が形成されたことを確認した。反応混合物を室温に冷却し、EtOAc(20ml)で希釈した。Na2SO4・10H2Oを加え、混合物を25℃で2時間撹拌した。混合物を濾過し、濾過ケークをEtOAcで洗浄した。濾液を濃縮してrac-(3S,4R)-1,4-ジメチルピペリジン-3-オール(294)を無色油状物として得た(201mg,収率70%)。
【１３９８】
【数２４７】
2021512131.tif 000704
【１３９９】
(3R,4R)-4-メトキシ-1-(2H3)メチルピロリジン-3-オール(295)の製造
【１４００】
【化４５６】
2021512131.tif 000705
【１４０１】
(3R,4R)-3-ヒドロキシ-4-メトキシピロリジン-1-カルボン酸tert-ブチル(249)(1.0g,4.6ミリモル)をTHF(15ml)中に混合して得た溶液を撹拌し、70℃に加熱し、LiAlD4(386mg,9.2ミリモル)を滴下した。混合物を70℃でさらに30分撹拌した。LCMS分析により、出発物質が消費されて所望の生成物が形成されたことを確認した。室温に冷却した後、この反応混合物を、200mgの(3R,4R)-3-ヒドロキシ-4-メトキシピロリジン-1-カルボン酸tert-ブチルを使用して得られた並行の反応混合物と合わせた。反応混合物を15%NaOH水溶液でクエンチし、濾過した。濾過ケークをEtOAcで洗浄した。合わせた濾液を濃縮して(3R,4R)-4-メトキシ-1-(2H3)メチルピロリジン-3-オール(295)を無色油状物として得た(690mg,収率93%)。
【１４０２】
【数２４８】
2021512131.tif 000706
【１４０３】
rac-(3S,4R)-1-メチル-4-(トリフルオロメチル)ピロリジン-3-オール(300)の製造
工程1:
【１４０４】
【化４５７】
2021512131.tif 000707
【１４０５】
還流冷却器を取り付けた100mlフラスコに、({[(1E)-3,3,3-トリフルオロプロプ-1-エン-1-イル]オキシ}メチル)ベンゼン(296)(2.0g,9.9ミリモル)とN-ベンジル-1-メトキシ-N-[(トリメチルシリル)メチル]メタンアミン(297)(12.2g,51.4ミリモル)を加えた。混合物を150℃に加熱し、TFAを、還流冷却器を通して3時間かけて滴下した。添加後、暗色の反応混合物を150℃でさらに1時間加熱した。LCMS分析により、出発物質が完全に消費されたことを確認した。反応混合物を室温に冷却し、フラッシュクロマトグラフィー(Biotage,10%EtOAc/石油エーテル)によって精製して、rac-(3S,4R)-1-ベンジル-3-(ベンジルオキシ)-4-(トリフルオロメチル)ピロリジン(298)を無色油状物として得た(3.1g,収率93%)。
【１４０６】
【数２４９】
2021512131.tif 000708
【１４０７】
工程2:
【１４０８】
【化４５８】
2021512131.tif 000709
【１４０９】
rac-(3S,4R)-1-ベンジル-3-(ベンジルオキシ)-4-(トリフルオロメチル)ピロリジン(298)(3.6g,10.7ミリモル)をMeOH(85ml)中に混合して得た溶液に、Pd(OH)2/C(2.26g,16.1ミリモル)とBoc2O(2.47g,11.3ミリモル)を加えた。混合物をH2の雰囲気下で16時間撹拌した。LCMS分析により、所望の生成物への転化率が約50%であることを確認した。追加バッチのPd(OH)2/C(2.26g,16.1ミリモル)を加え、混合物を、5気圧でのH2雰囲気下で16時間撹拌した。LCMS分析により、所望の生成物への転化率が約65%であることを確認した。反応混合物を、セライトを介して濾過し、濾液を濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー(ISCO,20〜50%EtOAc/石油エーテル)によって精製して、rac-(3S,4R)-3-ヒドロキシ-4-(トリフルオロメチル)ピロリジン-1-カルボン酸tert-ブチル(299)を無色油状物として得た(1.6g,収率58%)。この無色油状物は、静置すると固化して白色固体となった。
【１４１０】
【数２５０】
2021512131.tif 000710
【１４１１】
工程3:
【１４１２】
【化４５９】
2021512131.tif 000711
【１４１３】
rac-(3S,4R)-3-ヒドロキシ-4-(トリフルオロメチル)ピロリジン-1-カルボン酸tert-ブチル(299)をTHF(10ml)中に混合して得た溶液を撹拌し、これにLiAlH4(149mg,3.92ミリモル)を20〜25℃で少しずつ加えた(激しいガスの発生と発熱が認められた)。添加後、反応混合物を20〜25℃で5分撹拌してから80℃に加熱し、この温度で2時間撹拌した。LCMS分析により、出発物質が完全に消費されたことを確認した。反応混合物を室温に冷却した。Na2SO4・10H2O(300mg)を加え、混合物を10分撹拌した。混合物を濾過し、濾液を濃縮して、rac-(3S,4R)-1-メチル-4-(トリフルオロメチル)ピロリジン-3-オール(300)を無色油状物として得た(285mg,収率86%)。
【１４１４】
【数２５１】
2021512131.tif 000712
【１４１５】
5-フルオロ-2-メチル-1,2,3,4-テトラヒドロイソキノリン-8-オール(302)の製造
【１４１６】
【化４６０】
2021512131.tif 000713
【１４１７】
5-フルオロ-8-ヒドロキシ-3,4-ジヒドロイソキノリン-2(1H)-カルボン酸tert-ブチル(301)(200mg,0.75ミリモル)(US20170348313)をTHF(5ml)中に混合して得た溶液にLiAlH4(57mg,1.5ミリモル)を加えた。混合物を80℃で2時間撹拌した。LCMS分析により、出発物質が消費されて所望の生成物が形成されたことを確認した。混合物を室温に冷却し、Na2SO4・10H2O(8g)を加えた。混合物を10分撹拌し、濾過し、濃縮して、5-フルオロ-2-メチル-1,2,3,4-テトラヒドロイソキノリン-8-オール(302)を白色固体として得た(136mg,収率100%)。
【１４１８】
【数２５２】
2021512131.tif 000714
【１４１９】
2-シクロプロピル-1,2,3,4-テトラヒドロイソキノリン-5-オール(304)の製造
【１４２０】
【化４６１】
2021512131.tif 000715
【１４２１】
1,2,3,4-テトラヒドロイソキノリン-5-オール(303)(186mg,1.0ミリモル)と[(1-エトキシシクロプロピル)オキシ](トリメチル)シラン(210mg,1.2ミリモル)をMeOH(8ml)中に混合して得た混合物に、NaBH3CN(76mg,1.2ミリモル)とAcOH(73mg,1.2ミリモル)を加えた。混合物を、窒素雰囲気下にて60℃で4時間撹拌した。LCMS分析により、出発物質が消費されて生成物が形成されたことを確認した。混合物を濃縮した。残留物をDCM(80ml)で希釈し、NaHCO3飽和水溶液(2×20ml)とブライン(20ml)で洗浄した。有機層を合わせてNa2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー(SiO2,1/15のDCM/石油エーテル)によって精製して、2-シクロプロピル-1,2,3,4-テトラヒドロイソキノリン-5-オール(304)を黄色固体として得た(200mg,収率71%)。
【１４２２】
【数２５３】
2021512131.tif 000716
【１４２３】
生物学的実施例と生化学的アッセイ法
マススペクトロメトリー反応性アッセイ(Mass Spectrometry Reactivity Assay)(MSRA)
本発明において提示の化合物は、代表的化合物とKRAS G12Cとの共有結合付加体を検出すべくMSRAを使用すると、KRAS G12Cに共有結合することがわかる。
【１４２４】
GDPを組み込んだKRAS(1-169)G12C、C51S、及びC118Sを、タンパク質アッセイ緩衝液(25mM Hepes pH7.5,200mM NaCl,5%グリセロール)中に5μMの濃度にまで希釈し、20μlのタンパク質を96ウェルプレート中に移した。初期化合物原液は、所望のアッセイ濃度より100倍高い濃度にて生成させた。“K-Ras(G12C) inhibitors allosterically control GTP affinity and effector interactions; Ostrem JM,Peters U,Sos ML,Wells JA,Shokat KM;Nature.2013,Nov28;503(7477):548-51”を参照。
【１４２５】
DMSO中に溶解した代表的化合物を、96ウェルプレートにおける5μMKRASタンパク質を20μl含有する溶液中に100倍希釈して反応を開始させた。Mosquito(TPP Lab tech)液体ハンドリングロボットを使用して、化合物をタンパク質溶液に加えた。化合物の典型的な最終濃度は5μMまたは10μMであった。プレートをシェーカー上に室温で1分置き、シールし、室温で規定時間インキュベートした。5μlの反応混合物を10μlの0.2%ギ酸停止溶液に加え、充分に混合した。典型的な終点は、1分、15分、30分、及び60分であった。
【１４２６】
データは、Waters Acquity H-class UPLCシステム/Xevo G2-XS TOFマススペクトロメーターを使用して収集した。タンパク質を、Bruker Microtrapタンパク質カラムTR1/15109/03上にて液相中に注入した。次の緩衝液を使用してLC勾配を設定した:緩衝液A:0.2%ギ酸H2O;緩衝液B:0.2%ギ酸CAN。次のLC勾配を使用して、カラムからタンパク質を溶離した:0〜0.4分,10%B〜30%B;0.4分〜2.4分,90%B;2.5分,10%B;3分,10%B。初期データ解析は、データ取得の直後にMaxEntソフトウェアを使用して行った。
【１４２７】
標準的な自動処理機能を利用し、データ取得の直後にMexEntソフトウェアを使用して、未変性KRASタンパク質と変性KRASタンパク質のパーセント値を明らかにした。最も高いピークを100%と定義する一方、より小さなピークは、自動処理機能によって決定された数として割り当てた。KRAS GDPを組み込んだ未変性のKRAS(1-169)G12C、C51S、C80L、及びC118Sと代表的化合物とを使用して変性させたことに対応する変性パーセントを、エクセルデータ解析ソフトウェアにエクスポートした。
【１４２８】
代表的化合物の規定濃度における変性タンパク質のパーセントを、次の式を使用して算出した:変性率%=(変性ピークの数)/(変性ピーク+未変性ピークの合計数)。変性パーセント(Percent Modification;PM)と定義される値そしてPMの増大は、特定の化合物が、ある時点での特定の化合物濃度にて他の化合物より優れている、ということを示している。
【１４２９】
細胞活性アッセイ
本発明において提示の化合物は、ヒトのガン細胞株の処置に使用すると、GDP結合Rasの蓄積をもたらす。
【１４３０】
細胞環境におけるGDP結合KRAS G12Cの蓄積は、KRAS G12Cだけが、その活性GTP結合状態にあるときに、その下流のキナーゼRaf-1(MAPキナーゼ)に結合するという原理に基づいて測定した。この状態では、RasはRaf-1キナーゼのドメイン〔Ras結合ドメイン(RBD)と呼ばれる〕に結合した。
【１４３１】
10%ウシ胎仔血清と1%ペニシリン/ストレプトマイシンを補足したRPMI1640培地にてMIAPaCa-2細胞を培養した。細胞を96ウェル組織培養プレートに30,000細胞/ウェルの密度で供給し、16〜24時間接着させた。試験化合物は、DMSO中10mMストックとして調製し、3倍希釈スキームを使用して100%DMSO中に連続的に希釈した。完全生育培地に中間の5倍濃縮プレートを作製し、100μlの細胞に1ウェル当たり25μlを、最終濃度が0.3%DMSOとなるように加えた。代表的化合物の各濃度を2回分析した。ネガティブコントロールのウェルは、10μMにてコントロールインヒビターを含んだ細胞であり、ポジティブコントロールのウェルは、薬物を含まない、DMSOだけの細胞であった。プレートを、5%CO2にて37℃で6時間インキュベートした。処理に続いて、細胞を氷冷PBSで3回洗浄し、そしてプロテアーゼインヒビターを含んだ、1ウェル当たり115μlの氷冷 1X アッセイ/溶解.緩衝液を加えた(25mM HEPES,pH7.5,150mM NaCl,1%NP-40,10mM MgCl2,1mM EDTA,2%グリセロール)。溶解後、サンプルを−80℃にて凍結させた。
【１４３２】
Raf-1 RBD(LJIC-1988A1)を、PBS中において100ng/ウェルに希釈し、5μl/ウェルを、MSD高結合SECTORプレート上にスポット塗布した。プレートを、環状シェーカー上にて室温で1時間インキュベートした。プレートをPBS/0.05%Tween-20で洗浄し、解凍された溶解物サンプルを50μl/ウェル加え、次いでPBS/0.05%Tween-20中1%MSDブロッカー A(R93BA)を50μl加えた。プレートを環状シェーカー上で1時間インキュベートし、PBS/0.05%Tween-20で洗浄した。1:3000希釈のAnti-pan-Ras抗体(Cell Biolabs 244003)25μl/ウェルを1%MSDブロッカーA溶液中に加え、プレートを環状シェーカー上で1時間インキュベートし、PBS/0.05%Tween-20で洗浄した。SULFO-TAGヤギ抗マウス二次抗体(MSD R32AC)をMSDブロッカーA溶液中に1:500希釈し、25μl/ウェルにて加えた。プレートを環状シェーカー上で1時間インキュベートし、PBS/0.05%Tween-20で洗浄した。H2O中に1:3希釈したRead Buffer T(MSD R92TC)を150μl/ウェル加え、プレートをMeso Scale Discovery Sector Imager S600により読み取った。
【１４３３】
KRASシグナルを最大阻害とDMSO対照標準値に対して正規化し、用量反応曲線の4パラメーターフィットを使用してIC50値を生成させた。IC50値が低下するということは、該代表的化合物が、ガン細胞株の治療の特定の時点において、他の代表的化合物より高レベルのGDP結合KRAS G12Cの蓄積をもたらす、ということを示している。
【１４３４】
MSRAデータと細胞活性アッセイデータ
【１４３５】
【表１】
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【１４３６】
【表２】
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【１４３７】
【表３】
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【１４３８】
【表４】
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【１４３９】
【表５】
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【１４４０】
【表６】
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【１４４１】
【表７】
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【１４４２】
【表８】
2021512131.tif 000724
【１４４３】
【表９】
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【国際調査報告】
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