(57)【要約】【課題】本発明は組織又は細胞チップの量産製造方法を提供する。【解決手段】該方法は、組織粒子、培養された細胞又は収集された剥離細胞（例えば、胸腹水剥離細胞）を成形装置で成形させることと、成形後の組織又は細胞を受容体パラフィン型に植え込み、又は金属板に接着させ、スライスし、組織又は細胞チップを得ることと、を含み、組織粒子は組織撹拌機で新鮮な組織、ホルマリン又はその他の溶媒（例えば、アルコール等）により固定された組織、又はパラフィン包埋された組織ブロックを粉砕することによって形成されることを特徴とする。製造方法は安価、便利、迅速、量産、成形多様化の利点を有し、新鮮な組織、固定組織、パラフィン包埋された組織、培養又は胸腹水等の剥離細胞に適用され、各病理科及び関連研究機関に普及できる。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
組織粒子、培養された細胞又は収集された剥離細胞を成形装置で成形させることと、
成形後の組織又は細胞を受容体パラフィン型に植え込み、スライスし、組織チップを得ることと、
を含み、
前記組織粒子は、組織撹拌機で新鮮な組織、ホルマリン又はその他の溶媒により固定された組織、又はパラフィン包埋された組織ブロックを粉砕することによって形成される、
ことを特徴とする組織チップの量産製造方法。
【請求項２】
前記組織撹拌機で撹拌した後の組織粒子の形状は不規則であるが、組織構造が維持されている、
ことを特徴とする請求項１に記載の組織チップの量産製造方法。
【請求項３】
前記組織粒子のサイズは０．０１ｃｍ〜０．３ｃｍである、
ことを特徴とする請求項１に記載の組織チップの量産製造方法。
【請求項４】
組織撹拌機でホルマリン又はその他の溶媒により固定された組織を粉砕して形成された組織粒子の成形方法は、
組織撹拌機でホルマリン又はその他の溶媒により固定された組織を粉砕して形成された組織粒子を収集し、綿布で包み、番号を付けた後に脱水とパラフィン浸透を行うことと、
組織チップ包埋装置を起動し、組織粒子を組織チップ包埋装置の加熱台に配置し、５０℃〜７０℃でその上のパラフィンを溶融させ、成形対象の組織粒子となることと、
成形管を組織チップ包埋装置の加熱台の凹溝内に入れることと、
組織粒子を成形管内に詰め込み、溶融したパラフィンを加えて成形管内の組織粒子間の隙間を充填することと、
組織粒子に満たされパラフィンで隙間が充填された成形管を加熱台から組織チップ包埋装置の冷却台に移動して重合し、成形後の組織コアが装着された成形管を取得し、番号を付けて保存し、使用する前に成形管を取り除き、成形後の組織コアを得ることと、
を含む、
ことを特徴とする請求項１に記載の組織チップの量産製造方法。
【請求項５】
前記成形後の組織又は細胞を受容体パラフィン型に植え込む方法は、
受容体パラフィン型をガラス板に配置し、５０℃〜７０℃の恒温槽に２０〜４０分放置し、受容体パラフィン型を柔らかくし、位置決め板又は位置決め用紙に対応する位置の組織又は細胞の番号を記録し、ガイド針で受容体パラフィン型の対応する位置に穿孔し、成形後の組織又は細胞を１つずつ植え込み、植え込み完了後に植え込み面をガラス板に向けるようにし、５０℃〜７０℃の恒温槽において１〜３時間重合し受容体パラフィン型とガラス板を同時に２〜６℃の冷蔵庫に置き、ガラス板を取り出し、組織又は細胞が植え込まれた受容体パラフィン型を取得し、ガラス板に平行である方向に沿ってスライスして組織チップを得ることを含む、
ことを特徴とする請求項１に記載の組織チップの量産製造方法。
【請求項６】
前記組織撹拌機でパラフィン包埋された組織ブロックを粉砕して形成された組織粒子の成形方法は、
組織撹拌機でパラフィン包埋された組織ブロックを粉砕して形成された組織粒子を収集し、成形管を組織チップ包埋装置の加熱台の凹溝内に入れることと、
組織粒子を成形管内に詰め込み、溶融したパラフィンを加えて成形管内の組織粒子間の隙間を充填することと、
組織粒子に満たされパラフィンで隙間が充填された成形管を加熱台から組織チップ包埋装置の冷却台に移動して重合し、成形後の組織コアが装着された成形管を取得し、番号を付けて保存し、使用する前に成形管を取り除き、成形後の組織コアを得ることと、
を含む、
ことを特徴とする請求項１に記載の組織チップの量産製造方法。
【請求項７】
前記組織撹拌機で新鮮な組織を粉砕して形成された組織粒子の成形方法は、
組織粒子をピペットで凹溝付きの弾性プラスチック板である新鮮な組織粒子成形板に移動し、新鮮な組織粒子を凹溝に吸い込ませ、新鮮な組織粒子成形板を−１５〜−２５℃の冷蔵庫に入れ、新鮮な組織の凍結柱を形成し、番号を付け、予備用とすることを含む、
ことを特徴とする請求項１に記載の組織チップの量産製造方法。
【請求項８】
前記成形後の組織又は細胞を金属板上に接着させる方法は、
位置決めポイントがマークされた金属板を冷蔵庫に入れ、成形後の組織又は細胞を取り出し、位置決め板に位置を記録し、成形後の組織又は細胞の一端に少量の包埋剤を塗布し、金属板の位置決めポイントに１つずつ接着させた後、包埋剤で成形後の組織又は細胞間の隙間を充填し、包埋剤と成形後の組織又は細胞とを一体に凍結し、凍結スライサーでスライスし、組織又は細胞チップを得ることを含む、
ことを特徴とする請求項１に記載の組織チップの量産製造方法。
【請求項９】
培養された細胞又は収集された剥離細胞を前記成形装置で成形させる方法は、
培養された細胞又は収集された剥離細胞に対して直接従来の方法を用いて固定、脱水及びパラフィン浸透を行い、成形管を組織チップ包埋装置の加熱台の凹溝内に入れ、パラフィン浸透後の細胞を成形管内に入れ、溶融したパラフィンを加えて隙間を充填することと、
成形管を加熱台から組織チップ包埋装置の冷却台に移動して重合し、成形後の細胞を取得し、番号を付けて保存することと、
を含む、
ことを特徴とする請求項１に記載の組織チップの量産製造方法。
【請求項１０】
前記成形管は長さ１〜２ｃｍ、直径０．１〜０．３ｃｍの円柱形プラスチック管であり、又は、前記成形管は長さ１〜２ｃｍ、幅０．１〜０．５ｃｍ、高さ０．１〜０．５ｃｍの直方体形状の成形管である、
ことを特徴とする請求項４、６又は９に記載の組織チップの量産製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は組織チップ製造の量産方法に関し、超高生産量の組織チップ製造に用いられ、組織チップ技術分野に属する。
【背景技術】
【０００２】
組織チップ技術は遺伝子チップ技術の発展と拡張であり、細胞チップ、プロテインチップ、抗体チップと同様に特別なバイオチップ技術に属する。組織チップ技術は数十個引いては数千個の様々な個体の臨床組織標本を、事前に設計された順序でスライドガラスに配列して、分析と研究を行うことができ、高スループットのマルチサンプル分析ツールである。組織チップ技術により研究者は同時に数百個引いては数千個の組織サンプルを同時に分析し、ある１つ又は複数の特定の遺伝子、又は関連する発現産物に関する研究を実施することができる。該技術は、ＤＮＡ、ＲＮＡ、タンパク質、抗体等の技術と組み合わせ、従来の病理技術、組織化学及び免疫組織化学技術と組み合わせることにより、遺伝子、遺伝子転写及び関連する発現産物の生物学的機能の３つのレベルにおいて研究することができる。これは、ヒトゲノミクスの研究と発展、特に遺伝子・タンパク質と疾患との関係の研究、疾患関連遺伝子の検証、新薬の開発とスクリーニング、新抗体の調製とスクリーニング、疾患の分子診断及び治療過程の追跡と予後等において実際の意味と幅広い将来性がある。
【０００３】
アメリカＣｌｏｎｔｅｃｈとＳｔｒａｔａｇｅｎｅ等のバイオテック会社はヒト及び動物の組織チップ製品の開発と販売を行っているが、数が少なく、価格が高く、種類が単一であり、医学研究や医薬品産業の研究開発のニーズを満たすことができない。２００１年４月、アメリカＬｉｆｅＳｐａｎバイオテック会社は正常組織と病変組織の遺伝子発現データベースを構築している。アメリカＴｉｓｓｕｅ  ｌｎｆｏｒｍａｃｔｉｃｓ会社は動物組織チップ技術により薬物毒性スクリーニングを実施し、新薬の作用部位を探索している。また、日本、イギリス等の国はいずれも国立臨床組織病理学データベースを構築している。
【０００４】
中国では、組織チップ技術に関する研究が急速に進んでいる。２００１年１０月、中国科学技術省は組織チップ技術を、西部地域開発のための「第十次五カ年計画」の重要なプロジェクトとして挙げ、西安で正式に掲げられている。該プロジェクトは７つのサブプロジェクトに分けられ、組織チップ技術、組織チップバイオインフォマティクスデータベース、自動化組織チップインスツルメント、自動分析装置、組織チップ関連技術及び試薬、組織チップ実際応用技術を含み、中国と世界の関連技術の同期発展のために基盤を築いている。
【０００５】
１０年余りの開発を経て、現在、組織チップの製造は主に機械化されたチップ製造機器を使用して遂行している。製造機器は操作台、特別なパンチサンプリング装置及び位置決めシステムを含む。パンチサンプリング装置はドナー組織パラフィンブロックをサンプリングし、同時に受容体パラフィン型をパンチングすることもでき、その孔径はサンプリングの直径と同じであり、両者はいずれも正確に位置決めすることができる。製造機器の位置決め装置は穿刺針又は受容体パラフィン型を線形移動させることにより、孔径、孔間隔、孔深さが完全に同じである組織マイクロアレイパラフィンブロックを製造することができる。スライスアシストシステムによりシリコン化とゲル化されたスライドガラスに移動し、固定して組織チップを形成する。様々なサンプル直径（０．２〜２．０ｍｍ）に応じて、１枚の４５ｍｍ×２５ｍｍのスライドガラスに４０〜２０００個以上の組織標本を配列することができる。一般的にはサンプル数に応じて、組織チップを低密度チップ（＜２００スポット）、中密度チップ（２００〜６００スポット）及び高密度チップ（＞６００スポット）に分けられる。一般的な組織チップに含まれている組織標本の数は５０〜８００である。様々な研究目的に応じて、チップ種類を腫瘍組織チップ、正常組織チップ、単一又は複合、特定の病理学種類等の数十種類の組織チップに分けられる。
【０００６】
ところが、上記方法により製造された組織チップには以下の不備がある。第１に、従来の組織チップの製造コストが非常に高い。特別な機器や設備（数十万人民元）を除き、１つの組織チップの製造費用は１万人民元以上であり、各１枚のスライスの単価は５０〜１００人民元である。第２に、既存のパラフィンブロックからのみサンプリングすることができ、組織源が制限されている。第３に、従来の設備と方法により製造されたチップは、元のパラフィンブロックからパンチサンプリングし、組織の厚さが限られており、組織の厚さが一致しないため、わずか約５０枚をスライスした後にチップスポットが失われ始める。第４に、高密度チップはスループットが大きいが、各１枚の組織のサイズが小さいため、組織構造に関する情報を提供することは困難である。第５に、パラフィン組織のみで組織チップを製造することができ、新鮮な組織と培養された細胞で組織チップを製造することができない。第６に、大規模な研究機関のみ、組織チップに関連する研究を行うための資金と条件があり、普及することは困難である。第７に、従来の組織チップの方法は量産できず、幅広い臨床的及び科学的研究のニーズを満たすことは困難である。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明の目的は簡単な組織チップの量産製造方法を開発し、低密度と中密度の組織チップを製造し、サンプルスループット、組織構造、新鮮な組織、ホルマリン又はアルコール等のその他の溶媒により固定された組織、パラフィン又はその他の支持剤で充填された組織及び培養された細胞等、特に組織チップの高生産量等の様々な要求を同時に考え、組織チップ技術の作用を十分に発揮させることである。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
上記目的を達成するために、本発明の技術的解決手段は組織又は細胞チップの量産製造方法を提供する。該方法は、組織粒子、培養された細胞又は収集された剥離細胞（例えば、胸腹水剥離細胞）を成形装置で成形させることと、成形後の組織又は細胞を受容体パラフィン型に植え込み又は金属板に接着し、スライスすることにより、組織又は細胞チップを得ることと、を含み、前記組織粒子は、組織撹拌機で新鮮な組織、ホルマリン又はその他の溶媒（例えば、アルコール等）により固定された組織、又はパラフィン包埋された組織ブロックを粉砕することによって形成されることを特徴とする。
【０００９】
前記組織撹拌機で撹拌した後の組織粒子の形状は不規則であるが、組織構造が維持されている。
【００１０】
好ましくは、前記組織粒子のサイズは０．０１ｃｍ〜０．３ｃｍである。
【００１１】
好ましくは、組織撹拌機でホルマリン又はその他の溶媒により固定された組織を粉砕して形成された組織粒子の成形方法は、組織撹拌機でホルマリン又はその他の溶媒により固定された組織を粉砕して形成された組織粒子を収集し、綿布で包み、番号を付けた後に脱水とパラフィン浸透を行うことと、組織チップ包埋装置を起動し、組織粒子を組織チップ包埋装置の加熱台に配置し、５０〜７０℃でその上のパラフィンを溶融させ、成形対象の組織粒子となることと、成形管を組織チップ包埋装置の加熱台の凹溝内に入れることと、組織粒子を成形管内に詰め込み、溶融したパラフィンを加えて成形管内の組織粒子間の隙間を充填することと、組織粒子に満たされパラフィンで隙間が充填された成形管を加熱台から組織チップ包埋装置の冷却台に移動して重合し、成形後の組織コアが装着された成形管を取得し、番号を付けて保存し、使用する前に成形管を取り除き、成形後の組織コアを得ることと、を含む。
【００１２】
より好ましくは、前記成形管は長さ１〜２ｃｍ、直径０．１〜０．３ｃｍの円柱形プラスチック管であり、又は、前記成形管は長さ１〜２ｃｍ、幅０．１〜０．５ｃｍ、高さ０．１〜０．５ｃｍの直方体形状の成形管である。
【００１３】
より好ましくは、前記成形管は長さ２ｃｍ、直径０．３ｃｍである。形状、サイズ及び内径が必要に応じて調整可能でもよい。
【００１４】
より好ましくは、前記組織コアの使用可能な長さは１ｃｍ〜１ｍであり、好ましくは２ｃｍであり、連続的に２０００枚にスライスできると推定される。
【００１５】
好ましくは、前記成形後の組織又は細胞を受容体パラフィン型に植え込む方法は、受容体パラフィン型をガラス板に配置し、５０〜７０℃の恒温槽に２０〜４０分放置し、受容体パラフィン型を柔らかくし、位置決め板又は位置決め用紙に対応する位置の組織又は細胞の番号を記録し、ガイド針で受容体パラフィン型の対応する位置に穿孔し、成形後の組織又は細胞を１つずつ植え込み、植え込み完了後に植え込み面をガラス板に向け、５０〜７０℃の恒温槽に置いて１〜５時間重合させ、受容体パラフィン型とガラス板を同時に２〜６℃の冷蔵庫に置き、ガラス板を取り出し、組織又は細胞が植え込まれた受容体パラフィン型を取得し、ガラス板に平行である方向に沿ってスライスして組織又は細胞チップを得ることを含む。
【００１６】
好ましくは、前記成形後の組織又は細胞を金属板上に接着させる方法は、位置決めポイントがマークされた金属板を冷蔵庫に置き、凍結成形後の組織又は細胞を取り出し、位置決め板に位置を記録し、成形後の組織又は細胞の一端に少量の包埋剤を塗布し、金属板の位置決めポイントに１つずつ接着させた後、包埋剤で成形後の組織又は細胞間の隙間を充填し、包埋剤と成形後の組織又は細胞とを一体に凍結し、凍結スライサーでスライスして、組織又は細胞チップを得ることを含む。
【００１７】
より好ましくは、必要に応じて様々に組み合わせした組織又は細胞を選択して受容体パラフィン型に植え込むことができる。
【００１８】
好ましくは、前記組織撹拌機でパラフィン包埋された組織ブロックを粉砕して形成された組織粒子の成形方法は、組織撹拌機でパラフィン包埋された組織ブロックを粉砕して形成された組織粒子を収集し、成形管を組織チップ包埋装置の加熱台の凹溝内に入れることと、組織粒子を成形管内に詰め込み、溶融したパラフィンを加えて成形管内の組織粒子間の隙間を充填することと、組織粒子に満たされパラフィンで隙間が充填された成形管を加熱台から組織チップ包埋装置の冷却台に移動して重合し、成形後の組織コアが装着された成形管を取得し、番号を付けて保存し、使用する前に成形管を取り除き、成形後の組織コアを得ることと、を含む。
【００１９】
好ましくは、前記組織撹拌機で新鮮な組織を粉砕して形成された組織粒子の成形方法は、組織粒子を凹溝付きの弾性プラスチック板である新鮮な組織粒子成形板に移動し、新鮮な組織粒子を凹溝に吸い込ませ、新鮮な組織粒子成形板を−１５〜−２５℃の冷蔵庫に置き、新鮮な組織の凍結柱を形成し、番号を付け、予備用とすることを含む。
【００２０】
より好ましくは、前記凹溝は長さ２ｃｍ、幅０．２ｃｍ〜０．５ｃｍ、高さ０．２ｃｍ〜０．５ｃｍである。
【００２１】
好ましくは、培養された細胞又は収集された剥離細胞を前記成形装置で成形させる方法は、培養された細胞又は収集された剥離細胞に対して直接従来の方法を用いて固定、脱水及びパラフィン浸透を行い、成形管を組織チップ包埋装置の加熱台の凹溝内に入れ、パラフィン浸透後の細胞を成形管内に入れ、溶融したパラフィンを加えて隙間を充填することと、成形管を加熱台から組織チップ包埋装置の冷却台に移動して重合させ、成形後の細胞を取得し、番号を付けて保存することと、を含む。
【００２２】
好ましくは、前記成形管は異なる形状と仕様を有してもよく、前記組織チップ包埋装置の凹溝は異なるサイズを有してもよい。
【００２３】
好ましくは、前記受容体パラフィンブロックは方形、円形又はその他の形状である。
【００２４】
本発明は１つの組織を一定の組織構造が維持されていることを基本とする組織粒子に粉砕し、さらにパラフィンの溶解しやすく、重合しやすい特性を利用し、まず少量のパラフィンで組織粒子を接着させ、成形後に円柱体等の形状に形成させ、組織チップを製造する組織コアとして予備用とする。又は新鮮な組織粒子成形板で凍結して成形し、新鮮な組織チップを製造する組織コアとして予備用とする。
【発明の効果】
【００２５】
本発明は安価、便利、迅速、生産量の大幅な向上、材料多様化、パラフィン組織に加えて新鮮な組織及び培養又は剥離細胞に使用可能であるという利点を有し、各病理科及び関連研究機関に普及できる。製造された組織コアの形状は制限されず、長尺状、長方形、方形、円柱形、円筒形に成形でき、組織コアと組織チップのサイズは必要に応じて決定可能であり、５０ｍｍ×２５ｍｍの面積において２０〜１００個の組織コアを配列することができ、研究のニーズを満たすことができる。免疫組織化学のポジティブコントロール用チップに組み合わせて製造することもでき、１〜１０個の組織コアを配列することができる。組織チップの高さも必要に応じて決定可能であり、高さ５ｍｍ〜２０ｍｍの組織チップにおいて５００〜２０００枚をスライスでき、従来の組織チップを５０枚にスライスする生産量よりはるかに高く、約１０〜４０倍である。従来の組織チップの製造方法はスライス過程において、組織コアが徐々に紛失する現象が発生するが、この方法により製造される組織チップは組織コアの長さが一致するため、後続のスライスが組織コアを紛失する状況が発生することない。２ｃｍ×２ｃｍ×０．２ｃｍの１枚の組織を例とする場合、従来の組織チップのサンプリング方法により、最大１０個のスポットを採取し、スポットごとに５０〜２００枚のチップに切ることで計算すると、５００〜２０００枚のチップを得ることができる。組織粒子に撹拌した後、２ｃｍ×０．３ｃｍ×０．３ｃｍの組織柱を５〜１０本得ることができ、合計で該組織を含む組織チップを１〜２万枚得ることができる。胎盤組織を例とする場合、組織量が十分であり、組織粒子に撹拌した後、１０００本の組織柱を迅速且つ便利に製造でき、胎盤組織を含む組織チップを２００万枚得ることができる。そのため、組織粒子の方法は組織チップの量産のボトルネックを突破し、高価な組織チップサンプリングマシンという設備を省き、そのコストは従来の製造方法よりはるかに低く、組織チップの普及及び応用のために便利な新しい方法を提供する。
【００２６】
本発明は安価、便利、迅速、量産、成形多様化の利点を有し、新鮮な組織、固定組織、パラフィン包埋組織、培養又は胸腹水等の剥離細胞に適用することができ、各病理科及び関連研究機関に普及できる。
【発明を実施するための形態】
【００２７】
以下、実施例に合わせて本発明の実施形態を明らか、完全に説明する。明らかに、下記実施例は本発明の一部の実施例を説明するためのものに過ぎず、本発明の範囲を制限するものではない。実施例に具体的な条件が明記されていない場合、従来の条件又はメーカーが推奨する条件により行われる。製造業者が明記されていない試薬又は器具は市販の一般的な製品と見なされる。前述の本発明の好ましい実施例に過ぎず、本発明を制限するものではなく、本発明の精神及び原則から逸脱しない限り、行われる如何なる修正、同等置換及び改良等はいずれも本発明の保護範囲内に含まれるべきである。
【００２８】
実施例１
組織チップの量産製造方法であって、具体的なステップは以下のとおりである。
【００２９】
ステップ１：病理組織を採取する時に必要な組織を残し、ホルマリンで固定し、番号を付け、組織撹拌機で粉砕して組織粒子を形成し、組織粒子を収集し、綿布で包み、病理科での一般的な組織処理プロセスに従って、番号を付けた後に脱水とパラフィン浸透を行う。
【００３０】
ステップ２：組織チップ包埋装置を起動し、組織粒子を組織チップ包埋装置の加熱台に配置し、６０℃で組織粒子上のパラフィンを溶融させ、成形待ち組織粒子を取得し、成形管を組織チップ包埋装置の加熱台の凹溝内に入れる。前記成形管は長さ２ｃｍ、直径０．３ｃｍの円柱形プラスチック管であり、成形待ち組織粒子を成形管内に詰め込み、少量の溶融したパラフィンを加え、組織粒子間の隙間を充填し、組織量に応じて１回で少なくとも５本の組織チップを製造する。
【００３１】
ステップ３：組織粒子に満たされパラフィンで隙間が充填された成形管を加熱台から組織チップ包埋装置の冷却台に移動して重合し、成形後の組織コアが装着された成形管を取得し、番号を付けて保存し、使用する前に成形管を取り除き、成形後の組織コアを得る。
【００３２】
ステップ４：５０ｍｍ×２５ｍｍの受容体パラフィン型をガラス板に配置し、５０℃の恒温槽内に３０ｍｉｎ放置し、チップの植え込み面を上に向け、受容体パラフィン型を柔らかくする。位置決め板又は位置決め用紙に対応する位置の組織の番号を記録し、ガイド針で受容体パラフィン型の対応する位置に穿孔し、成形後の組織又は細胞を１つずつ植え込む。
【００３３】
ステップ５：植え込み完了後、受容体パラフィン型の植え込み面をガラス板に向け、５６℃の恒温槽に同時に入れて６０分重合し、重合後に受容体パラフィン型とガラス板を同時に４℃の冷蔵庫に入れ、ガラス板を取り出し、組織又は細胞が植え込まれた受容体パラフィン型を取得し、ガラス板に平行である方向に沿ってスライスして組織チップを得る。同じ症例の５本の組織コアを５個の組織チップの製造に利用することができる。それにより１万枚のチップを得ることができる。
【００３４】
実施例２
組織チップの量産製造方法であって、具体的なステップは以下のとおりである。
【００３５】
ステップ１：病理組織を採取する時に必要な新鮮な組織を残し、番号を付け、「組織撹拌機」で組織粒子になるように撹拌する。
【００３６】
ステップ２：組織粒子をピペットで凹溝付きの弾性プラスチック板である新鮮な組織粒子成形板の凹溝内に移動し、凹溝は長さ２ｃｍ、幅０．３ｃｍ、深さ０．３ｃｍであり、新鮮な組織粒子成形板を−２０℃の冷蔵庫に入れ、組織粒子を新鮮な組織の凍結柱に凍結して成形させる。
【００３７】
ステップ３：新鮮な組織粒子成形板の弾性を利用し、成形された新鮮な組織コアを緩め、ピンセットで取り出し、番号を付け、新鮮な組織コアを凍結し、予備用とする。
【００３８】
ステップ４：５０ｍｍ×２５ｍｍの位置決めポイントがマークされた金属板を−２０℃の冷蔵庫に入れ、新鮮な組織コアを取り出し、位置決め板に位置を記録し、新鮮な組織コアの一端に少量の包埋剤（ＯＣＴ包埋剤、Ｓａｋｕｒａ  Ｆｉｎｅｔｅｋ  Ｊａｐａｎ  Ｃｏ，Ｌｔｄ，Ｔｏｋｙｏ、１３５−０００７）を塗布し、金属板の位置決めポイントに１つずつ接着させた後、包埋剤で新鮮な組織コア間の隙間を充填し、包埋剤と組織コアは完全な新鮮な組織チップに凍結され、凍結スライサーでスライスし、新鮮な組織チップを得る。同じ症例の２０本の組織コアを２０個の組織チップの製造に利用することができる。それにより４万枚のチップを得ることができる。
【００３９】
実施例３
【００４０】
組織チップの量産製造方法であって、具体的なステップは以下のとおりである。
【００４１】
ステップ１：遠心沈殿により胸水剥離細胞を取得し、直接従来の方法を用いてホルマリンで固定し、綿布で包み、病理科での一般的な組織処理プロセスに従って、脱水とパラフィン浸透を行う。
【００４２】
ステップ２：パラフィン浸透された剥離細胞を組織チップ包埋装置の加熱台に配置し、６２℃で組織粒子上のパラフィンを溶融させ、成形管を組織チップ包埋装置の加熱台の凹溝内に入れる。前記成形管は長さ２ｃｍ、幅０．２ｃｍ、高さ０．２ｃｍの直方体形状の成形管であり、パラフィン浸透後の細胞を成形管内に入れ、溶融したパラフィンを加えて隙間を充填し、細胞量に応じて１回で１０本の細胞チップを製造する。
【００４３】
ステップ３：成形管を加熱台から組織チップ包埋装置の冷却台に移動して重合し、成形後の細胞を取得し、番号を付けて保存する。
【００４４】
ステップ４：５０ｍｍ×２５ｍｍの受容体パラフィン型をガラス板に配置し、５２℃の恒温槽内に３０分放置し、チップ植え込み面を上に向け、受容体パラフィン型を柔らかくする。位置決め板又は位置決め用紙に対応する位置の細胞の番号を記録し、ガイド針で受容体パラフィン型の対応する位置に穿孔し、１本の成形後の細胞コア外層のプラスチック管を取り除き、異なる細胞コアを１つずつ受容体パラフィン型内に植え込む。
【００４５】
ステップ５：植え込み完了後、受容体パラフィン型の植え込み面をガラス板に向け、５６℃の恒温槽に同時に入れて６０分重合し、重合後に受容体パラフィン型とガラス板を同時に４℃の冷蔵庫に入れ、ガラス板を取り出し、細胞が植え込まれた受容体パラフィン型を取得し、ガラス板に平行である方向に沿ってスライスして細胞チップを得る。同じ症例の１０本の組織コアを１０個の細胞チップの製造に利用することができる。それにより２万枚のチップを得ることができる。
【国際調査報告】
2021518919.tif 000002
2021518919.tif 000003
2021518919.tif 000004
2021518919.tif 000005
2021518919.tif 000006