(57)【要約】  本発明は、ヒトヘルペスウイルスによる感染症の処置、特にヒトサイトメガロウイルスによる感染症の処置におけるその使用のためのコロールファミリーに関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
サイトメガロウイルス、単純ヘルペスウイルス−１、単純ヘルペスウイルス−２、水痘帯状疱疹ウイルス、エプスタイン−バールウイルス、ロゼオロウイルスを含む群から選択されるヒトヘルペスウイルスによる感染症の処置での使用のための、式（Ｉ）：
【化１】
2021504485.tif 000025
［式中、
−Ｙ１及びＹ２は、同一又は異なり、−Ｈ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ３−、−ＮＯ２、−ＣＨＯ、−ＮＨ２、−ＮＨ３＋、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＯ−から選択され、
−Ａ１及びＡ２は、同一又は異なり、それぞれ独立して、式（ＩＩ）
【化２】
2021504485.tif 000026
のフェニル基、又は
式（ＩＩＩ）
【化３】
2021504485.tif 000027
のピリジニウム基、又は
式（ＩＶ）
【化４】
2021504485.tif 000028
の５員複素環を表し、
−式（ＩＩ）のＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５のそれぞれ；式（ＩＩＩ）のＲ１’、Ｒ２’、Ｒ４’及びＲ５’のそれぞれ；並びに式（ＩＶ）のＲ１’’、Ｒ２’’、及びＲ３’’のそれぞれは、
（ａ）．−Ｈ、−ＣＮ、−ＮＯ２、−ＣＨＯ、−ＳＯ３Ｈ、−ＯＨ、−ＳＨ、−Ｃ≡ＣＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、
（ｂ）．塩素原子、フッ素原子、臭素原子、又はヨウ素原子から選択されるハロゲン原子、
（ｃ）．（Ｃ１−Ｃ８）アルキル鎖、
（ｄ）．式−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｎ−Ｈ又は式−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｎ−ＣＨ３（式中、ｎは１、２、３、４又は５から選択される整数である）で示されるＰＥＧ鎖、
（ｅ）．−ＣＸ３（ここで、Ｘは塩素原子、フッ素原子、臭素原子又はヨウ素原子から選択されるハロゲン原子である）、
（ｆ）．−ＯＲａ、−ＮＲａＲｂ、−ＮＨＲａ、−ＣＯＯＲａ、−ＣＯＮＲａＲｂ、−ＣＯＮＨＲａ、−ＳＯ３Ｒａ、−ＳＯ２ＮＨＲａ、−ＣＯＲａ、−ＳＲａ、−Ｃ≡ＣＲａ（ここで、Ｒａ及びＲｂは、─（ＣＨ２─ＣＨ２─ＳＯ３Ｈ）、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル鎖、式−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｎ−Ｈ、若しくは式−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｎ−ＣＨ３（式中、ｎは、１、２、３、４又は５から選択される整数である）のＰＥＧ鎖から独立して選択される）、
（ｇ）．式
【化５】
2021504485.tif 000029
（式中、Ｒｃは−ＣＯＯＨ又は−ＳＯ３Ｈである）
で示される基、
（ｈ）．式
【化６】
2021504485.tif 000030
（式中、Ｒｄは（Ｃ１−Ｃ８）アルキル鎖、又は−（ＣＨ２）ｎＳＯ３−であり、ｎは、１、２、３、４又は５から選択される整数である）で示されるピリジニウム基
から互いに独立して選択され、
−式（ＩＩＩ）のＲ３’は、
−−Ｈ、−ＣＯＮＨ２、
−（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、
−式−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｎ−Ｈ又は式−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｎ−ＣＨ３（式中、ｎは、１、２、３、４、又は５から選択される整数である）で示されるＰＥＧ鎖、
−基−（ＣＨ２）ｎＳＯ３−（ここで、ｎは、１、２、３、４又は５から選択される整数である）、
−−ＯＲａ、−ＮＲａＲｂ、−ＮＨＲａ、−ＣＯＯＲａ、−ＣＯＮＲａＲｂ、−ＣＯＮＨＲａ、−ＣＯＲａ（ここで、Ｒａ及びＲｂは、─（ＣＨ２─ＣＨ２─ＳＯ３Ｈ）、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル鎖、式−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｎ−Ｈ、又は式−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｎ−ＣＨ３（式中、ｎは、１、２、３、４又は５から選択される整数である）で示されるＰＥＧ鎖から独立して選択される）
から選択され、
−式（ＩＶ）のＥは、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓｅ−、−ＮＨ−から選択され、
ただし、Ａ１又はＡ２の少なくとも１つが、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ１’、Ｒ２’、Ｒ４’又はＲ５’の位置に少なくとも１つのフッ素原子を有するものとする］
で示されるタイプＡ３又はＡ２Ｂのコロール、又はその医薬的に許容され得る塩、又はその光学異性体。
【請求項２】
Ａ１及び／又はＡ２が、式（ＩＩ１）、（ＩＩ２）、（ＩＩ３）、（ＩＩＩ１）、（ＩＩＩ２）、（ＩＶ１）又は（ＩＶ２）のうちの１つにより表される、請求項１に記載の使用のための式（Ｉ）のコロール。
【化７】
2021504485.tif 000031
［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ１’、Ｒ２’、Ｒ３’、Ｒ４’、Ｒ５’、Ｒ１’’、Ｒ２’’、Ｒ３’’及びＥは請求項１記載の意味である］。
【請求項３】
Ａ１及び／又はＡ２が、式（ＩＩ４）、式（ＩＩ５）、式（ＩＩ６）、式（ＩＩＩ３）、式（ＩＩＩ４）式（ＩＩＩ５）、又は式（ＩＶ３）：
【化８】
2021504485.tif 000032
［式中、Ｒ’及びＲ’’は、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５のうちの２つの異なる置換基、又はＲ１’、Ｒ２’、Ｒ４’及びＲ５’のうちの２つの異なる置換基をそれぞれ表し、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ１’、Ｒ２’、Ｒ３’、Ｒ４’、又はＲ５’は請求項１に記載の意味である］
から選択される１つの式により表される、請求項２に記載の使用のための式Ｉのコロール。
【請求項４】
Ａ１又はＡ２のうちの少なくとも１つが、
−式−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｎ−Ｈ又は式−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｎ−ＣＨ３（式中、ｎは、１、２、３、４又は５から選択される整数である）で示されるＰＥＧ鎖、
−式
【化９】
2021504485.tif 000033
（式中、Ｒｃは−ＣＯＯＨ又は−ＳＯ３Ｈである）で示される基、
−式
【化１０】
2021504485.tif 000034
（式中、Ｒｄは、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル鎖、又は−（ＣＨ２）ｎＳＯ３−であり、ｎは、１、２、３、４又は５から選択される整数である）で示されるピリジニウム基
から選択される、式（ＩＩ）のＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４若しくはＲ５のうちの、又は式（ＩＩＩ）のＲ１’、Ｒ２’、Ｒ４’若しくはＲ５’のうちの、又は式（ＩＶ）のＲ１’’、Ｒ２’’若しくはＲ３’’のうちの少なくとも１つの置換基を有する、請求項１〜３のいずれか一項に記載の使用のための式（Ｉ）のコロール。
【請求項５】
Ａ１及びＡ２が異なり、
−Ａ２が、請求項３に記載された式（ＩＩ４）、（ＩＩ５）、（ＩＩ６）、（ＩＩＩ３）、（ＩＩＩ４）、（ＩＩＩ５）、又は（ＩＶ３）で表され、
−Ａ１が、式（ＩＩ７）、式（ＩＩ８）、式（ＩＩ９）、式（ＩＩＩ６）、又は式（ＩＩＩ７）
【化１１】
2021504485.tif 000035
［式中、Ｒ’及びＲ”は、それぞれＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５の中の２つの異なる置換基、又はＲ１’、Ｒ２’、Ｒ４’及びＲ５’の中の２つの異なる置換基を表し、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ’、Ｒ”及びＲ３’は、
−（Ｃ１−Ｃ８）アルキル鎖、
−式−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｎ−Ｈ又は式−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｎ−ＣＨ３（式中、ｎは１、２、３、４又は５から選択される整数である）で示されるＰＥＧ鎖、
−式
【化１２】
2021504485.tif 000036
（式中、Ｒｃは−ＣＯＯＨ又は−ＳＯ３Ｈである）で示される基、
−式
【化１３】
2021504485.tif 000037
（式中、Ｒｄは、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル鎖、又は−（ＣＨ２）ｎＳＯ３−であり、ｎは、１、２、３、４又は５から選択される整数である）で示されるピリジニウム基
から独立して選択される］
で表されるものとする、請求項１〜４のいずれか一項に記載の使用のための式（Ｉ）のコロール。
【請求項６】
Ａ１及びＡ２が異なり、
−Ａ１が、請求項３に記載された式（ＩＩ４）、（ＩＩ５）、（ＩＩ６）、（ＩＩＩ３）、（ＩＩＩ４）、又は（ＩＩＩ５）により表され、
−Ａ２が、式（ＩＶ３）、又は請求項５に記載された式（ＩＩ７）、（ＩＩ８）、（ＩＩ９）、（ＩＩＩ６）、若しくは（ＩＩＩ７）により表される
請求項１〜４のいずれか一項に記載の使用のための式（Ｉ）のコロール。
【請求項７】
前記コロールが以下の化合物から選択される、請求項１〜６のいずれか一項に記載の使用のための式（Ｉ）のコロール。
【化１４】
2021504485.tif 000038
2021504485.tif 000039
2021504485.tif 000040
【請求項８】
ヒトサイトメガロウイルスによる感染症の処置における、請求項１〜７のいずれか一項に記載の使用のための式Ｉのコロールであって、前記感染症がヒトＣＭＶ感染によって引き起こされる肺炎、食道炎、胃炎、腸炎、網膜炎、肝炎、脳炎を含む群から選択される、前記コロール。
【請求項９】
ＨＩＶ感染者などの免疫不全患者、臓器移植を受けている患者又は妊婦におけるヒトサイトメガロウイルスの感染症の処置における、請求項１〜８のいずれか一項に記載の使用のための式Ｉのコロール。
【請求項１０】
ヒトサイトメガロウイルス感染症の処置で使用するための、
−請求項１〜７に記載されたコロール又はその医薬的に許容され得る塩、又はその光学異性体、
−ガンシクロビル、シドフォビル、又はホスカルネット、バルガンシクロビル、ブリンシドフォビル、レテルモビル、又は実験的抗ｈＣＭＶ薬から選択される抗ｈＣＭＶ薬の別の有効成分
によって形成されるアソシエーション。
【請求項１１】
前記他の抗ｈＣＭＶ薬が、化学リンカーによって前記コロールに結合される、請求項１０に記載のアソシエーション。
【請求項１２】
ヒトサイトメガロウイルスの感染症の処置における同時、個別、又は連続使用のための、
−請求項１〜７に記載されたコロール又はその医薬的に許容され得る塩、又は光学異性体、
−ガンシクロビル、シドフォビル、又はホスカルネット、バルガンシクロビル、ブリンシドフォビル、レテルモビル、又は実験的抗ｈＣＭＶ治療薬から選択される別の抗ｈＣＭＶ薬
を含む組合せ製品。
【請求項１３】
有効成分として請求項１〜７のいずれか一項に記載されたコロール又はその医薬的に許容され得る塩、又はその光学異性体、又は請求項１０及び請求項１１に記載されたアソシエーション並びに医薬的に許容され得る担体を含む、ヒトサイトメガロウイルスの感染症の処置における使用のための医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ヒトサイトメガロウイルスによる感染症の処置に使用するためのコロールファミリーに関する。
【０００２】
ヒトサイトメガロウイルス（ｈＣＭＶ）は、世界人口の６０〜８０％に感染するヘルペスウイルス科に属するウイルスである。
【０００３】
一次感染は、免疫正常者では一般に無症状であるか、単核球症候群に関連しているが、免疫が低下した者では重度の症候群を引き起こす（例えば、妊娠第１四半期やＨＩＶ陽性者のセロ・コンバージョンなど）。
【０００４】
すべてのヘルペスウイルスと同様に、一次感染後、ウイルスは、単球及びＣＤ３４＋前駆細胞で生涯潜伏状態で存続する。潜伏感染は、環境要因、免疫状態、ストレスレベルに左右される集団発生で再活性化する。ｈＣＭＶは、血液、唾液、尿、精液、及び母乳などの体液を通じて人から人へと広がる。ｈＣＭＶは、あらゆる年齢の人々に感染する一般的なウイルスである。ほとんどのｈＣＭＶ感染は無症状であり、これは、ｈＣＭＶに感染している人の大多数は兆候や症状が無いことを意味する。
【０００５】
しかしながら、妊娠の第１四半期に感染した妊婦はｈＣＭＶを胎児に感染させ、先天性ｈＣＭＶ感染を引き起こすことがある。先天性ｈＣＭＶ感染は、難聴を始めとして重度の発達障害や神経障害に至る問題を引き起こす可能性がある。米国では、ｈＣＭＶ感染が先天性奇形の第一の原因である。
【０００６】
現在、多くの以前からあるワクチンによるアプローチでは、ｈＣＭＶ感染に対し完全な防御を実現することはできない。現行の抗ｈＣＭＶ療法には、ウイルスＤＮＡ合成の不正なビルディングブロックとして作用することによりウイルス複製を阻害する、シドフォビルやガンシクロビルなどのヌクレオシド類似体による処置が含まれる。
【０００７】
しかしながら、これらの薬物には骨髄抑制や腎毒性などの副作用があり、長期又は反復処置中に抗ウイルス剤耐性ｈＣＭＶ株の出現に至る可能性がある。したがって、新規の作用機序を備えた非ヌクレオシドｈＣＭＶ阻害剤の開発は、抗ウイルス研究の重要な焦点領域である。新しい抗ウイルス薬を設計するための戦略は、抗ウイルス活性の範囲が広く、薬物耐性誘導をほとんど又はまったく伴わない、より選択的な化合物の開発を目指さなくてはならない。
【０００８】
Ｇｒｏｓら（Ａｃｓ  Ｉｎｆｅｃｔ．Ｄｉｓ．２０１５、１、３５０−３５６）は、コロールの５、１０、又は１５位のフェニル基のメタ位又はパラ位に置換基としてニトロ基を有するニトロコロールの潜在的な抗ウイルス活性を２０１５年に報告した。しかしながら、タイプＡ３のニトロコロールは、感染前に加えられた場合にのみ、感染したＭＲＣ５細胞の割合を減らすことができることが観察された。この化合物がｈＣＭＶの吸着と侵入の後に加えられた場合、ｈＣＭＶ感染に影響を与えることはないと思われる。
【０００９】
ところで、これらのニトロコロールは、満足のいく選択性指数、すなわちｈＣＭＶ感染のない細胞に対する化合物の細胞毒性と感染した細胞に対する前記化合物の細胞毒性との間で満足のいく比率を示していない。
【００１０】
これらの欠点を考慮に入れた上で、ｈＣＭＶ感染に使用され、ｈＣＭＶ感染の処置により優れた選択性指数を有する、独自の作用機序（ｍｏＡ）を備えた新薬の開発が依然として要望されている。
【００１１】
すべての予測に反して、本発明の発明者らは、コロールのメソ位である５位、１０位又は１５位にある基の置換基として少なくとも１つのフッ素原子を有するコロールファミリーが、ｈＣＭＶ感染後に宿主細胞で抗ｈＣＭＶ活性を示し、また著しく優れた選択性指数を示すことができることを観察した。
【００１２】
本発明の第一の対象は、サイトメガロウイルス、単純ヘルペスウイルス−１、単純ヘルペスウイルス−２、水痘帯状疱疹ウイルス、エプスタイン−バールウイルス、ロゼオロウイルスを含む群から選択されるヒトヘルペスウイルスによる感染症の処置に使用するための、式（Ｉ）：
【化１】
2021504485.tif 000002
［式中、
−Ｙ１及びＹ２は、同一又は異なり、それぞれ独立して、−Ｈ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ３−、−ＮＯ２、−ＣＨＯ、−ＮＨ２、−ＮＨ３＋、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＯ−から選択され、
−Ａ１及びＡ２は、同一又は異なり、それぞれ独立して、式（ＩＩ）
【化２】
2021504485.tif 000003
のフェニル基、又は
式（ＩＩＩ）
【化３】
2021504485.tif 000004
のピリジニウム基、又は
式（ＩＶ）
【化４】
2021504485.tif 000005
の５員複素環を表し、
−式（ＩＩ）のＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５のそれぞれ；式（ＩＩＩ）のＲ１’、Ｒ２’、Ｒ４’及びＲ５’のそれぞれ；並びに式（ＩＶ）のＲ１’’、Ｒ２’’、及びＲ３’’のそれぞれは、
（ａ）．−Ｈ、−ＣＮ、−ＮＯ２、−ＣＨＯ、−ＳＯ３Ｈ、−ＯＨ、−ＳＨ、−Ｃ≡ＣＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、
（ｂ）．塩素原子、フッ素原子、臭素原子、又はヨウ素原子から選択されるハロゲン原子、
（ｃ）．（Ｃ１−Ｃ８）アルキル鎖、
（ｄ）．式−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｎ−Ｈ又は式−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｎ−ＣＨ３（式中、ｎは１、２、３、４又は５から選択される整数である）で示されるＰＥＧ鎖、
（ｅ）．−ＣＸ３（ここで、Ｘは塩素原子、フッ素原子、臭素原子又はヨウ素原子から選択されるハロゲン原子である）、
（ｆ）．−ＯＲａ、−ＮＲａＲｂ、−ＮＨＲａ、−ＣＯＯＲａ、−ＣＯＮＨＲａ、−ＣＯＮＲａＲｂ、−ＳＯ３Ｒａ、−ＳＯ２ＮＨＲａ、−ＣＯＲａ、−ＳＲａ、−Ｃ≡ＣＲａ（ここで、Ｒａ及びＲｂは、─（ＣＨ２─ＣＨ２─ＳＯ３Ｈ）、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル鎖、式−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｎ−Ｈ、若しくは式−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｎ−ＣＨ３（式中、ｎは、１、２、３、４又は５から選択される整数である）のＰＥＧ鎖から独立して選択される）、
（ｇ）．式
【化５】
2021504485.tif 000006
（式中、Ｒｃは−ＣＯＯＨ又は−ＳＯ３Ｈである）
で示される基、
（ｈ）．式
【化６】
2021504485.tif 000007
（式中、Ｒｄは（Ｃ１−Ｃ８）アルキル鎖、又は−（ＣＨ２）ｎＳＯ３−であり、ｎは、１、２、３、４又は５から選択される整数である）で示されるピリジニウム基
から互いに独立して選択され、
−式（ＩＩＩ）のＲ３’は、
−−Ｈ、−ＣＯＮＨ２、
−（Ｃ１−Ｃ８）アルキル鎖、
−式−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｎ−Ｈ又は式−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｎ−ＣＨ３（式中、ｎは、１、２、３、４、又は５から選択される整数である）で示されるＰＥＧ鎖、
−基−（ＣＨ２）ｎＳＯ３−（ここで、ｎは、１、２、３、４又は５から選択される整数である）、
−−ＯＲａ、−ＮＲａＲｂ、−ＮＨＲａ、−ＣＯＯＲａ、−ＣＯＮＨＲａ、−ＣＯＮＲａＲｂ、−ＣＯＲａ（ここで、Ｒａ及びＲｂは、─（ＣＨ２─ＣＨ２─ＳＯ３Ｈ）、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル鎖、式−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｎ−Ｈ、又は式−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｎ−ＣＨ３（式中、ｎは、１、２、３、４又は５から選択される整数である）で示されるＰＥＧ鎖から独立して選択される）
から選択され、
−式（ＩＶ）のＥは、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓｅ−、−ＮＨ−から選択され、
ただし、Ａ１又はＡ２の少なくとも１つが、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ１’、Ｒ２’、Ｒ４’又はＲ５’の位置に少なくとも１つのフッ素原子を有するものとする］
で示されるタイプＡ３又はＡ２Ｂのコロール、又はその医薬的に許容され得る塩、又はその光学異性体を提供することである。
【００１３】
一実施形態によれば、本発明は、ヒトサイトメガロウイルス感染により誘発される肺炎、食道炎、胃炎、腸炎、網膜炎、肝炎、脳炎など、ヒトＣＭＶによる感染症の処置で使用するための、式（Ｉ）で示されるコロール又はその医薬的に許容され得る塩、又はその光学異性体を提供する。
【００１４】
より具体的には、本発明のコロールは、ＨＩＶ感染患者などの免疫不全患者、又は臓器移植を受けている患者又は妊婦におけるヒトサイトメガロウイルスの感染の処置に使用することができる。
【００１５】
ヒト網膜細胞培養において行われたインビトロ試験によれば、本発明のコロールは、低濃度であっても、細胞のｈＣＭＶ感染レベル及び感染細胞におけるウイルスＤＮＡ蓄積レベルを有意に減少させることができることが観察される。さらに、本発明のコロールは、Ｇｒｏｓら（２０１５）によって以前に報告されたニトロコロールの場合よりも良好な選択性指数を有する。
【００１６】
本発明によれば、「タイプＡ３のコロール」という用語は、Ａ１及びＡ２が同一であるコロールであることを意味する。言い換えると、タイプＡ３のコロールは、前記コロールのメソ位５、１０及び１５の３つの置換基が同一であるコロールである。
【００１７】
本発明によれば、「タイプＡ２Ｂのコロール」という用語は、Ａ２がＡ１とは異なるコロールであることを意味する。言い換えると、タイプＡ２Ｂのコロールは、メソ位５及び１５の置換基が同一であり、それらが前記コロールのメソ位１０の置換基とは異なるコロールである。
【００１８】
「（Ｃ１−Ｃ８）アルキル鎖」という用語は、１〜８の炭素を含有する飽和の直鎖又は分枝状炭化水素鎖であることを意味する。アルキルの代表的な例には、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソ−プロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、イソ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ｎ−ヘキシル、３−メチルヘキシル、２，２−ジメチルペンチル、２，３−ジメチルペンチル、ｎ−ヘプチル、ｎ−オクチルがあるが、これらに限定されるわけではない。
【００１９】
「ただし、Ａ１又はＡ２の少なくとも１つが、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ１’、Ｒ２’、Ｒ４’又はＲ５’の位置に少なくとも１つのフッ素原子を有するものとする」という語は、
−本発明のコロールがタイプＡ３のコロールであるとき、Ａ１及びＡ２が式（ＩＩ）のフェニル基である場合、Ａ１及びＡ２のそれぞれは、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、又はＲ５の位置に少なくとも１つのフッ素原子を有し、又はＡ１及びＡ２が式（ＩＩＩ）のピリジニウムである場合、Ｒ１’、Ｒ２’、Ｒ４’又はＲ５’の位置に少なくとも１つのフッ素原子を有すること、又は
−本発明のコロールがタイプＡ２Ｂのコロールであるとき、少なくともＡ１は、Ａ１が式（ＩＩ）のフェニル基である場合にはＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、又はＲ５の位置に、又はＡ１が式（ＩＩＩ）のピリジニウムである場合にはＲ１’、Ｒ２’、Ｒ４’又はＲ５’の位置に少なくとも１つのフッ素原子を有すること、又は
−本発明のコロールがタイプＡ２Ｂのコロールであるとき、少なくともＡ２は、Ａ２が式（ＩＩ）のフェニル基である場合にはＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、又はＲ５の位置に、又はＡ２が式（ＩＩＩ）のピリジニウムである場合にはＲ１’、Ｒ２’、Ｒ４’又はＲ５’の位置に少なくとも１つのフッ素原子を有すること
を意味する。
【００２０】
「医薬的に許容され得る塩」という語は、健全な医学的判断の範囲内で、過度の毒性、刺激、アレルギー反応などを伴うことなくヒト組織と接触した状態で使用するのに適した塩を指す。
【００２１】
本発明の式（Ｉ）のコロールの医薬的に許容され得る塩は、式（Ｉ）のコロールの生物学的有効性を保持し、ヒトにとって生物学的に望ましくないものではない塩を指す。
【００２２】
本発明によれば、本発明の化合物の医薬的に許容され得る塩は、本発明の化合物の医薬的に許容され得る有機又は無機の酸又は塩基の塩であり得る。
【００２３】
式（Ｉ）のコロールの医薬的に許容され得る塩は、前記コロールを当技術分野で周知の様々な有機及び無機の正の対イオン、例えばナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、アンモニウム、テトラアルキルアンモニウムなどと反応させることにより得ることができる。式（Ｉ）のコロールの医薬的に許容され得る塩は、前記コロールを医薬的に許容され得る酸と反応させることによっても得ることができる。具体例には、塩酸塩及び硫酸塩などの無機酸塩、ギ酸塩、トリフルオロ酢酸塩、酢酸塩、酒石酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、コハク酸塩及びメタンスルホン酸塩などの有機酸塩が含まれる。
【００２４】
「光学異性体」という語は、分子内の１つ以上の原子の周りの置換基の配置によって３次元的に異なる分子を指す。
【００２５】
本発明のタイプＡ２Ｂのコロールの実施形態によれば、Ａ１及びＡ２は両方とも、異なるように置換されている式ＩＩのフェニル基である。
【００２６】
本発明のタイプＡ２Ｂのコロールの別の実施形態では、Ａ１及びＡ２は両方とも、異なるように置換されている式ＩＩのピリジニウム基である。
【００２７】
本発明のコロールの実施形態において、Ａ１、Ａ２又はＲ３’が、−ＳＯ３基を有しないピリジニウム基であるとき、前記コロールは、Ｃｌ−、Ｂｒ−又はＩ−などの対イオンを含む。
【００２８】
本発明のコロール（又はその医薬的に許容され得る塩、又はその光学異性体）の実施形態によれば、置換基Ａ１及び／又はＡ２は、式（ＩＩ１）、（ＩＩ２）、（ＩＩ３）、（ＩＩＩ１）、（ＩＩＩ２）、（ＩＶ１）又は（ＩＶ２）
【化７】
2021504485.tif 000008
のうちの１つにより表される。
【００２９】
前記の式において、置換基Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ１’、Ｒ２’、Ｒ３’、Ｒ４’、Ｒ５’、Ｒ１’’、Ｒ２’’、Ｒ３’’及びＥは、上記の意味である。
【００３０】
したがって、この実施形態において、Ａ１及びＡ２の少なくとも一方又は両方は、（ＩＩ１）、（ＩＩ２）、（ＩＩ３）、（ＩＩＩ１）、（ＩＩＩ２）、（ＩＶ１）又は（ＩＶ２）から選択される。Ａ１及びＡ２は、同一でも異なっていてもよい。
【００３１】
本発明のコロールのより特定の実施形態によれば、Ａ１及び／又はＡ２は、式（ＩＩ４）、式（ＩＩ５）、式（ＩＩ６）、式（ＩＩＩ３）、式（ＩＩＩ４）、式（ＩＩＩ５）又は式（ＩＶ３）から選択される１つの式によって表される。
【化８】
2021504485.tif 000009
［式中、Ｒ’及びＲ’’は、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５のうちの２つの異なる置換基、又はＲ１’、Ｒ２’、Ｒ４’及びＲ５’のうちの２つの異なる置換基をそれぞれ表し、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ１’、Ｒ２’、Ｒ３’、Ｒ４’、又はＲ５’は前記の意味である］。
【００３２】
式（ＩＩ４）によれば、フッ素原子及びＲ’は、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４又はＲ５のうちの２つを表し、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４又はＲ５のうち残りの他の３つの置換基は水素である。
【００３３】
したがって、例えば、ＦがＲ１に対応し、Ｒ’がＲ２に対応する場合、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５は水素である。
【００３４】
式（ＩＩ５）によれば、フッ素原子、Ｒ’及びＲ’’は、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４又はＲ５のうちの３つを表し、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４又はＲ５のうち残りの他の２つの置換基は水素である。
【００３５】
したがって、例えば、Ｆ、Ｒ’及びＲ’’がそれぞれＲ１、Ｒ２及びＲ３に対応する場合、Ｒ４及びＲ５は水素である。
【００３６】
式（ＩＩＩ３）によれば、フッ素原子及びＲ’は、Ｒ１’、Ｒ２’、Ｒ４’又はＲ５’のうちの２つを表し、Ｒ１’、Ｒ２’、Ｒ４’又はＲ５’のうち残りの他の２つの置換基は水素である。
【００３７】
したがって、例えば、ＦがＲ１’に対応し、Ｒ’がＲ２’に対応する場合、Ｒ４’及びＲ５’は水素である。
【００３８】
式（ＩＩＩ４）によれば、フッ素原子、Ｒ’及びＲ”は、Ｒ１’、Ｒ２’、Ｒ４’又はＲ５’のうちの３つを表し、Ｒ１’、Ｒ２’、Ｒ４’又はＲ５’のうちの残りの（ｒｅａｍｉｎｇ）第四の置換基は水素である。
【００３９】
したがって、例えば、Ｆ、Ｒ’及びＲ’’がそれぞれＲ１’、Ｒ２’及びＲ４’に対応する場合、Ｒ５’は水素である。
【００４０】
したがって、この実施形態では、Ａ１及びＡ２の少なくとも一方又は両方は、式（ＩＩ４）、式（ＩＩ５）、式（ＩＩ６）、式（ＩＩＩ３）、式（ＩＩＩ４）、式（ＩＩＩ５）、又は式（ＩＶ３）から選択される。Ａ１及びＡ２は、同一でも異なっていてもよい。
【００４１】
本発明のコロールの実施形態によれば、Ａ１又はＡ２のうちの少なくとも１つは、
−式−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｎ−Ｈ又は式−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｎ−ＣＨ３（式中、ｎは、１、２、３、４又は５から選択される整数である）で示されるＰＥＧ鎖、
−式
【化９】
2021504485.tif 000010
（式中、Ｒｃは−ＣＯＯＨ又は−ＳＯ３Ｈである）で示される基、
−式
【化１０】
2021504485.tif 000011
（式中、Ｒｄは、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル鎖、又は−（ＣＨ２）ｎＳＯ３−であり、ｎは、１、２、３、４又は５から選択される整数である）で示されるピリジニウム基
から選択される、式（ＩＩ）のＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４若しくはＲ５のうちの、又は式（ＩＩＩ）のＲ１’、Ｒ２’、Ｒ４’若しくはＲ５’のうちの、又は式（ＩＶ）のＲ１’’、Ｒ２’’若しくはＲ３’’のうちの少なくとも１つの置換基を有する。
親水性である上記置換基が存在するおかげで、この実施形態のコロールも水溶性である。
【００４２】
特定の実施形態において、本発明のコロールは、タイプＡ３のコロール又はその医薬的に許容され得る塩、又はその光学異性体であって、式（Ｉ）のコロール上のＡ１及びＡ２は、式（ＩＩ４）、式（ＩＩ５）、式（ＩＩ６）、式（ＩＩＩ３）、式（ＩＩＩ４）、式（ＩＩＩ５）、又は式（ＩＶ３）から選択される１つの式によって表されるものとする。
【００４３】
別の特定の実施形態において、本発明のコロールはタイプＡ２Ｂのコロールであって、式（Ｉ）のコロール上のＡ１及びＡ２は異なり、
−Ａ２は、前記の式（ＩＩ４）、（ＩＩ５）、（ＩＩ６）、（ＩＩＩ３）、（ＩＩＩ４）、（ＩＩＩ５）、又は（ＩＶ３）で表され、
−Ａ１は、式（ＩＩ７）、式（ＩＩ８）、式（ＩＩ９）、式（ＩＩＩ６）、又は式（ＩＩＩ７）
【化１１】
2021504485.tif 000012
［式中、Ｒ’及びＲ”は、それぞれＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５の中の２つの異なる置換基、又はＲ１’、Ｒ２’、Ｒ４’及びＲ５’の中の２つの異なる置換基を表し、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ’、Ｒ”及びＲ３’は、
−（Ｃ１−Ｃ８）アルキル鎖、
−式−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｎ−Ｈ又は式−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｎ−ＣＨ３（式中、ｎは１、２、３、４又は５から選択される整数である）で示されるＰＥＧ鎖、
−式
【化１２】
2021504485.tif 000013
（式中、Ｒｃは−ＣＯＯＨ又は−ＳＯ３Ｈである）で示される基、
−式
【化１３】
2021504485.tif 000014
（式中、Ｒｄは、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル鎖、又は−（ＣＨ２）ｎＳＯ３−であり、ｎは、１、２、３、４又は５から選択される整数である）で示されるピリジニウム基
から独立して選択される］
で表されるものとする。
【００４４】
式（ＩＩ８）によれば、Ｒ’は、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５のいずれか１つの置換基であり得、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５の他の置換基は水素である。
【００４５】
式（ＩＩ９）によれば、Ｒ’及びＲ”は、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５の中の任意の２つの置換基を表し、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５の他の３つの置換基は水素である。
【００４６】
式（ＩＩＩ６）によれば、Ｒ’は、Ｒ１’、Ｒ２’、Ｒ４’及びＲ５’のうちのいずれか１つであり、Ｒ１’、Ｒ２’、Ｒ４’及びＲ５’の他の３つの置換基は水素である。
【００４７】
式（ＩＩＩ７）によれば、Ｒ’及びＲ”は、Ｒ１’、Ｒ２’、Ｒ４’及びＲ５’のうちの任意の２つの置換基であり得、Ｒ１’、Ｒ２’、Ｒ４’及びＲ５’の他の２つの置換基は水素である。
【００４８】
別の特定の実施形態において、本発明のコロールはタイプＡ２Ｂのコロールであって、式（Ｉ）のコロールのＡ１及びＡ２は異なり、
−Ａ１は、前記の式（ＩＩ４）、（ＩＩ５）、（ＩＩ６）、（ＩＩＩ３）、（ＩＩＩ４）、（ＩＩＩ５）で表され、
−Ａ２は、前記の式（ＩＶ３）、（ＩＩ７）、（ＩＩ８）、（ＩＩ９）、（ＩＩＩ６）、若しくは（ＩＩＩ７）で表されるものとする。
本発明のより特定の実施形態において、コロールは、以下の化合物：
【化１４】
2021504485.tif 000015
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2021504485.tif 000017
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又はその医薬的に許容され得る塩、又はその光学異性体から選択される。
【００４９】
特定の実施形態において、本発明は、網膜炎の処置での使用を目的とする、上記化合物Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｊ、Ｋ、Ｌ、Ｍうちの１つに関する。
【００５０】
本発明の別の対象は、ヒトサイトメガロウイルス感染症の処置での使用を目的とする、
−前記の式（Ｉ）のコロール又はその医薬的に許容され得る塩、又はその光学異性体、
−ガンシクロビル、シドフォビル、又はホスカルネット、バルガンシクロビル、ブリンシドフォビル、レテルモビル、又は任意の実験的抗ｈＣＭＶ薬から選択された別の抗ｈＣＭＶ薬の有効成分
によって形成されるアソシエーションに関する。
【００５１】
本発明において、用語「薬（剤）」及び「薬物」は交換可能である。
【００５２】
「有効成分」という用語は、薬の生物学的活性成分を意味するものとする。
【００５３】
市販の抗ｈＣＭＶ薬と本発明のコロールとのアソシエーションは、ｈＣＭＶ感染の処置において相乗的な治療効果を生み出すことができることが観察されている。この相乗効果は、本発明のコロールが、ガンシクロビルなどの実際に市販されている抗ｈＣＭＶ薬とは非常に異なる作用機序によってｈＣＭＶに反応を示すという事実に起因する可能性がある。
【００５４】
特定の実施形態において、本発明は、
−式Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｊ、Ｋ、Ｌ又はＭのコロール、
−ガンシクロビル、シドフォビル、ホスカルネット、バルガンシクロビル、ブリンシドフォビル、又はレテルモビルの有効成分
によって形成されるアソシエーションに関する。
【００５５】
前記アソシエーションの実施形態によれば、本発明のコロールは、化学リンカーによって別の抗ｈＣＭＶ有効成分に結合される。この化学リンカーは、インビボで切断可能であり得る。
【００５６】
本発明はまた、ヒトサイトメガロウイルス感染症の処置における同時、個別、又は連続使用のための
−前記の式（Ｉ）のコロール又はその医薬的に許容され得る塩、又はその光学異性体、
−ガンシクロビル、シドフォビル、又はホスカルネット、バルガンシクロビル、ブリンシドフォビル、レテルモビル、又は任意の実験的抗ｈＣＭＶ薬から選択される別の抗ｈＣＭＶ薬の有効成分
を含む組合せ製品に関する。
【００５７】
「同時使用」という用語は、同じ経路で同時に２つの有効成分を投与することを意味する。
【００５８】
「連続使用」という用語は、同じ経路により２つの有効成分を時間に関して連続的に投与することを意味する。
【００５９】
「個別使用」という用語は、異なる経路により同時に又は実質的に同時に２つの有効成分を投与することを意味する。
【００６０】
本発明の別の対象は、有効成分としての前記の式（Ｉ）のコロール又はその医薬的に許容され得る塩、又はその光学異性体、又は前記のアソシエーション、又は前記の組合せ製品、及び医薬的に許容され得る担体を含む、ヒトヘルペスウイルス、特にヒトサイトメガロウイルスの感染症の処置において使用するための医薬組成物に関する。
【００６１】
「医薬的に許容され得る担体」という用語は、一般に安全で非毒性であり、生物学的にもその他の点でも望ましくないものではない医薬組成物又は製剤の調製に有用な担体を意味し、ヒトの医薬用途に許容され得る担体を含む。担体は、基剤、媒質として、又は有効成分の希釈用としての役割を果たすことができる。本発明の医薬組成物の製剤化は、薬の製剤化に関する周知の先行技術に従って決定及び実施することができる。担体材料は、有機又は無機の不活性担体材料、例えば、経口投与又は注射に適したものであり得る。適切な担体には、水、ゼラチン、アラビアゴム、ラクトース、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、タルク、植物油、ポリアルキレングリコール、グリセリン及びワセリンが含まれる。着香料、防腐剤、安定剤、乳化剤、緩衝剤などの追加の添加剤を、医薬配合の認められた慣行に従って添加することもあり得る。
【００６２】
組成物は、錠剤、丸薬、粉末、ロゼンジ、サシェ、カシェ、エリキシル、懸濁液、乳濁液、溶液、シロップ、軟及び硬ゼラチンカプセル、坐剤、無菌注射溶液、並びに無菌包装粉末の形態であり得る。
【００６３】
本製剤化によると、本発明の医薬組成物は、経口経路又は注射によって投与することができる。
【００６４】
本発明はまた、ヒトサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）感染によって引き起こされる肺炎、食道炎、胃炎、腸炎、網膜炎、肝炎、脳炎などのヒトサイトメガロウイルスによる感染症を処置するための方法であって、
−ヒトＣＭＶ感染により引き起こされる肺炎、食道炎、胃炎、腸炎、網膜炎、肝炎、脳炎などのヒトサイトメガロウイルスによる感染に罹患している患者に上記の医薬組成物の医薬的有効量を投与する
段階を含む方法を提供する。
【００６５】
「医薬的有効量」という用語は、所望の治療効果をもたらすための医薬組成物中の医薬活性物質としての前記コロール又は前記組合せ製品の量を意味する。
【００６６】
本発明を、以下の図及び実施例によって説明する。
【図面の簡単な説明】
【００６７】
【図１】図１は、９６ウェルのプレートに播種したＡＲＰＥ−１９細胞に対する、異なる濃度（０．１、０．２５、０．５、０．７５、１．５、３．１、６．２５、１２．５、２５、５０μＭ）での化合物ＦＮＯ２Ｃｏｒ、ＴｐＮＯ２Ｃｏｒ（正の基準）、ＴＰＦＣｏｒの毒性を示す。Ｙ軸は、１ウェルあたりの生存細胞の正規化された数を示す。
【図２】図２Ａ及び図２Ｂはそれぞれ、ＡＲＰＥ−１９細胞におけるｈＣＭＶの正規化された感染率（図２Ａ）及び感染したＡＲＰＥ−１９細胞におけるｈＣＭＶの正規化された複製率（図２Ｂ）を示す。細胞を、感染後４日目にＭＯＩ（感染多重度）１０で、異なる濃度（０．０７、０．１５、０．３、０．６、１．２５、２．５、５、１０μＭ）の化合物ＦＮＯ２Ｃｏｒ、ＴｐＮＯ２Ｃｏｒ、ＴＰＦＣｏｒ、又はガンシクロビルにより処理する。
【図３】図３Ａ及び図３Ｂはそれぞれ、ＡＲＰＥ−１９細胞におけるｈＣＭＶの正規化された感染率（図３Ａ）及び感染したＡＲＰＥ−１９細胞におけるｈＣＭＶの正規化された複製率（図３Ｂ）を示す。細胞を、感染後１０日目にＭＯＩ（感染多重度）２で、異なる濃度（０．０７、０．１５、０．３、０．６、１．２５、２．５、５、１０μＭ）の化合物ＦＮＯ２Ｃｏｒ、ＴｐＮＯ２Ｃｏｒ、ＴＰＦＣｏｒ、又はガンシクロビルにより処理する。
【図４】図４Ａ、図４Ｂ、図４Ｃ、図４Ｄ、図４Ｅ、図４Ｆ、図４Ｇはそれぞれ、ガンシクロビル単独（図４Ａ）、又は化合物ＴＰＦＣｏｒ単独（図４Ｂ）、又は様々な比率（ｆ＝０．８（図４Ｃ）、ｆ＝０．６５（図４Ｄ）、ｆ＝０．５（図４Ｅ）、ｆ＝０．３５（図４Ｆ）、ｆ＝０．２（図４Ｇ））でのガンシクロビルと化合物ＴＰＦＣｏｒによる処置の組合せのＩＣ５０を示す。
【実施例】
【００６８】
１．材料及び方法
１．１  本発明のコロールの調製
すべての化学薬品と溶媒は分析グレードであり、さらに精製することなく使用した。シリカゲル６０（７０〜２３０及び２３０〜４００メッシュ、Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ）をカラムクロマトグラフィーに使用した。反応を、薄層クロマトグラフィー、ＵＶ−Ｖｉｓ分光法、及び質量分析によってモニターした。カラムでのクロマトグラフィー精製を、シリカゲル６０（７０〜２３０メッシュ、Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ）で実施した。１Ｈ  ＮＭＲスペクトルを、Ｂｒｕｋｅｒ  ＡＶ３００分光計（３００ＭＨｚ）で記録した。ＣＤＣｌ３を溶媒として使用し（指定されている場合を除く）、ＴＭＳを内部基準として使用した。化学シフト（δ）を、残留ＣＨＣｌ３（７．２６ｐｐｍ）に対するｐｐｍで表示する。すべてのデータをＴｏｐＳｐｉｎで処理した。ＭＡＬＤＩ／ＴＯＦ質量スペクトルを、Ｂｒｕｋｅｒ  Ｕｌｔｒａｆｌｅｘ  Ｅｘｔｒｅｍｅ  ＭＡＬＤＩタンデムＴＯＦ質量分析計で記録した。ＵＶ−ｖｉｓスペクトルを、溶媒としてＣＨ２Ｃｌ２、ＣＨＣｌ３又はＴＨＦを使用してＣａｒｙ  ５０分光光度計で測定した。
【００６９】
修正されたＰａｏｌｅｓｓｅの方法による一般的手順＃１（Ｐａｏｌｅｓｓｅら、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．２００１、６６（２）、５５０−５５６．）。
【００７０】
アルデヒド（４０．４ｍｍｏｌ）と蒸留したピロール（１２１ｍｍｏｌ）をＡｃＯＨ（５００ｍＬ）に溶解し、反応物を還流温度で３時間攪拌した。反応混合物を室温で冷却し、ＡｃＯＨを真空下で蒸発させた。粗生成物をクロマトグラフィーカラム（シリカ、ＣＨ２Ｃｌ２）で濾過した。コロールを含むすべての画分（緑色の画分）を合わせ、蒸発乾固させた。各化合物についての精製の詳細を以下に示す。
【００７１】
・５，１０，１５−Ｔｒｉｓ（４−ニトロフェニル）コロール（ＴｐＮＯ２Ｃｏｒとして設計）の調製。
このコロールを、４−ニトロベンズアルデヒドとピロールから出発して、一般的手順１で説明した要領で調製した。残留物をクロマトグラフィーカラム（アルミナ、ＣＨ２Ｃｌ２／ヘプタン、１／１、ｖ／ｖ）で精製して、純粋なコロール（４９２ｍｇ、５．５％）を得た。ＵＶ−Ｖｉｓ（ＤＣＭ）：λｍａｘ（ｎｍ）（εｘ  １０−３Ｌｍｏｌ−１ｃｍ−１）＝４４７（５３．４）、５９８（１８．７）。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、３００Ｋ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ（ｐｐｍ）：８．４１（ｍ、２Ｈ）、８．５８−８．７１（ｍ、１４Ｈ）、８．８７（ｍ、２Ｈ）、９．１４（ｍ、２Ｈ）。ＭＳ（ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ＝６６１．９２［Ｍ＋Ｈ］＋、Ｃ３７Ｈ２３Ｎ７Ｏ５の計算値は６６１．１７。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ＝６６０．１５［Ｍ−Ｈ］−、６６２．１４［Ｍ＋Ｈ］＋、Ｃ３７Ｈ２３Ｎ７Ｏ５の計算値６６１．１７。
【００７２】
・５，１０，１５−トリス（２−フルオロ−５−ニトロフェニル）コロール（ＦＮＯ２Ｃｏｒとして設計）の調製。
このコロールは、上記の式Ｂの化合物に対応する。
このコロールを、２−フルオロ−５−ニトロベンズアルデヒドとピロールから出発して、一般的手順１で説明した要領で調製した。残留物をＣＨＣｌ３／ヘプタン（３／１、ｖ／ｖ）から結晶化し、コロールを含む溶液をポルフィリン沈殿物から分離した。溶媒を真空下で除去し、粗生成物をＴＨＦ／ヘプタン１：２ｖ／ｖから結晶化して、純粋な暗緑色のコロール結晶を得た（７６．１ｍｇ、収率３．２％）。ＵＶ−Ｖｉｓ（ＴＨＦ）：λｍａｘ、（ｎｍ）（εｘ  １０−３Ｌｍｏｌ−１ｃｍ−１）４１８（１０３．２）、５７２、６１０、６４５。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）、δ（ｐｐｍ）：９．１１−９．００（ｍ、５Ｈ）、８．７３−８．６１（ｍ、５Ｈ）、８．５０−８．４７（ｍ、４Ｈ）、７．７１−７．６２（ｍ、３Ｈ）、−２．８３（ｂｒｓ、３Ｈ）。ＭＳ（ＭＡＬＤＩ／ＴＯＦ）：ｍ／ｚ  ７１５．００７［Ｍ］＋、Ｃ３７Ｈ２０Ｆ３Ｎ７Ｏ６の計算値７１５．１４。
【００７３】
修正されたＧｒｙｋｏの方法による一般的手順＃２（Ｇｒｙｋｏ、Ｄ．Ｔ．；Ｋｏｓｚａｒｎａ、Ｂ．Ｏｒｇ．Ｂｉｏｍｏｌ．Ｃｈｅｍ。、２００３、１（２）、３５０−３５７）。
【００７４】
アルデヒド（２０．０ｍｍｏｌ）を蒸留したピロール（３０．０ｍｍｏｌ）に室温で溶解し、次いでＴＦＡのＣＨ２Ｃｌ２溶液（２．０ｍＬ中１８μＬ）を加え、激しく攪拌した。１０分後、８００ｍＬのＣＨ２Ｃｌ２を加え、さらに１時間攪拌した。ＤＤＱ（２４．０ｍｍｏｌ）を加え、さらに１時間攪拌し、溶媒を真空下で除去した。粗生成物をクロマトグラフィーカラム（シリカ、ＣＨ２Ｃｌ２）で濾過した。各化合物についての精製の詳細を以下に示す。
【００７５】
・５，１０，１５−Ｔｒｉｓ（ペンタフルオロフェニル）コロール（ＴＰＦＣｏｒとして設計）の調製。
このコロールは、上記の式Ａの化合物に対応する。
このコロールを、ペンタフルオロベンズアルデヒドとピロールから出発して、一般的手順２で説明した要領で調製した。残留物を第二のカラムクロマトグラフィー（シリカ、トルエン／ヘプタン、８／２、ｖ／ｖ）により精製して、純粋な暗緑色のコロール結晶（２２８ｍｇ、４．３％収率）を得た。ＵＶ−Ｖｉｓ（ＴＨＦ）：λｍａｘ、（ｎｍ）（εｘ  １０−３Ｌｍｏｌ−１ｃｍ−１）４０７（１５０．１）、５６２（２３．９）、６０４（１２．４）。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）、δ（ｐｐｍ）：９．１０（ｄ、Ｊ＝４．２Ｈｚ、２Ｈ）、８．７９（ｄ、Ｊ＝４．８Ｈｚ、２Ｈ）、８．６０（４Ｈ）、２．８８（ｂｒｓ、３Ｈ）。１９Ｆ  ＮＭＲ（２８２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）１３７．２（２Ｆ），１３７．７（４Ｆ），１５２．２（２Ｆ），１５２．８（１Ｆ），１６１．５（４Ｆ），１６１．９（２Ｆ）。ＭＳ（ＭＡＬＤＩ／ＴＯＦ）：ｍ／ｚ  ７９６．９１［Ｍ＋Ｈ］＋、Ｃ３７Ｈ１１Ｆ１５Ｎ４の計算値７９６．０７。
【００７６】
１．２  ｈＣＭＶ感染
ＡＲＰＥ−１９ヒト網膜色素上皮細胞を、ｈＣＭＶ感染アッセイに使用した。
【００７７】
細胞を、フェノールレッド不含有のＤＭＥＭ（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）１０％ＳＶＦ、Ｐｅｎ−ｓｔｒｅｐ、１Ｘピルビン酸ナトリウム、１Ｘ  Ｇｌｕｔａｍａｘで成長させた。
【００７８】
ｈＣＭＶ感染プロトコル
ｈＣＭＶ感染を、９６ウェルプレートに播種されたＡＲＰＥ−１９細胞に対して、１又は２のＭＯＩ（感染多重度）及び７通りの濃度のＦＮＯ２Ｃｏｒ、ＴＰＦＣｏｒ、ＴｐＮＯ２Ｃｏｒで２度繰り返して実行した。
−Ｄ０：ＭＲＣ５／ＡＲＰＥ−１９細胞を、フェノールレッド不含有の２００μＬのＤＭＥＭ中、Ｃｏｒｎｉｎｇ  Ｇｌａｓｓ  Ｂｏｔｔｏｍ  ９６ウェルプレートに６ｋ／ウェルで播種した。
−Ｄ１：毒性試験のために、細胞をＦＮＯ２Ｃｏｒ、ＴｐＮＯ２Ｃｏｒ、ＴＰＦＣｏｒ（２倍希釈により５０〜０．１μＭ）で２度繰り返して処理した。
−Ｄ３：ＡＲＰＥ−１９細胞をガンシクロビル、ＦＮＯ２Ｃｏｒ、ＴｐＮＯ２Ｃｏｒ、ＴＰＦＣｏｒ（２倍希釈により５〜０．０７μＭ又は１０〜０．１５μＭ）で処理し、ＡＲＰＥ−１９細胞に対し、異なるＭＯＩ：ＭＯＩ１０又は２で２度繰り返して感染させた。
−Ｄ７：感染後４日目ＭＯＩ１０でのＡＲＰＥ−１９細胞を、室温で１０分間ホルマリンで固定した。細胞を、２００μＬのＰＢＳと１００μＬのＰＢＳ／Ｈｏｅｃｈｓｔ（登録商標）３３３４２（１／１０００）／ウェルで洗浄した。修正されたコンパートメント解析アルゴリズムを使用して、ハイコンテント定量化のためのデータ取得画像取得及び分析を、Ｔｈｅｒｍｏ  Ｃｅｌｌｏｍｉｃｓ  Ａｒｒａｙｓｃａｎ（商標）ＶＴＩ顕微鏡で実施するまで、９６ウェルプレートを暗所で４℃に維持した。
−Ｄ１３：感染後１０日目のＭＯＩ２でのＡＲＰＥ１９細胞を、固定し、前述の要領で画像の取得と分析を行った。
【００７９】
感染後４日目と１０日目（感染後２回）に、ウイルスと細胞株ごとのデータ取得をハイコンテントマイクロスコープによって行い、化合物濃度に応じて感染レベルとＤＮＡ複製を計算した。
【００８０】
１．３  毒性評価
ＡＲＰＥ−１９細胞に対する化合物ＦＮＯ２Ｃｏｒ又はＴＰＦＣｏｒの毒性を、６日間の処理後に評価した。ＦＮＯ２Ｃｏｒ及びＴＰＦＣｏｒの１０通りの濃度（５０、２５、１２．５、６．２５、３．１、１．５、０．７５、０．５、０．２５、０．１μＭ）について試験した。化合物ＴｐＮＯ２Ｃｏｒを正の対照として使用した。処理を行わなかった細胞培養を負の対照として使用した。
【００８１】
２．結果
２．１  細胞毒性
化合物ＦＮＯ２Ｃｏｒ、ＴＰＦＣｏｒ及びＴｐＮＯ２Ｃｏｒの細胞毒性を、１．３節で説明した方法に従って、ＡＲＰＥ−１９細胞に対し様々な濃度で評価した。ＴｐＮＯ２Ｃｏｒは正の基準として機能した。ＡＲＰＥ−１９細胞におけるこれら３つの化合物のＣＣ５０値を以下の表Ｉに示す。
【表１】
2021504485.tif 000019
【００８２】
ＴｐＮＯ２Ｃｏｒは細胞毒性を示さないことが既に知られている（Ｇｒｏｓら、２０１５）。図１と表Ｉは、化合物ＴＰＦＣｏｒの細胞毒性がＴｐＮＯ２Ｃｏｒの細胞毒性と類似しており、化合物ＦＮＯ２Ｃｏｒの細胞毒性がさらに低いことを示している。
【００８３】
これらの結果は、ＦＮＯ２Ｃｏｒ及びＴＰＦＣｏｒがヒト網膜色素上皮細胞に対して安全であることを示している。
【００８４】
２．２  抗ウイルス活性
化合物ＦＮＯ２Ｃｏｒ、ＴＰＦＣｏｒ、ＴｐＮＯ２Ｃｏｒ及び抗ｈＣＭＶ薬のガンシクロビルを、感染後４日目（図２Ａ、図２Ｂ）又は感染後１０日目（図３Ａ、図３Ｂ）に、ＡＲＰＥ−１９細胞培養液中の８通りの異なる濃度で評価し、ｈＣＭＶ感染の阻害についてのそれらの活性及びＡＲＰＥ−１９細胞におけるｈＣＭＶ複製の阻害についてのそれらの能力を評価した。感染後４日目（４ｄ  ＰＩ）に得られた結果を表ＩＩに示す。４ｄ  ＰＩにおけるこれらの化合物の選択性指数を表ＩＩＩに示す。
【表２】
2021504485.tif 000020
【表３】
2021504485.tif 000021
【００８５】
これらの結果は、化合物ＦＮＯ２ＣｏｒとＴＰＦＣｏｒが、健康な細胞のｈＣＭＶ感染と感染細胞でのｈＣＭＶ複製の両方を阻害することについて、わずか感染後４日目にはＴｐＮＯ２Ｃｏｒの場合よりも優れた選択性指標を既に有していることを示す。
【００８６】
感染後１０日目（１０ｄ  ＰＩ）に得られた結果を以下の表ＩＶに示す。１０ｄ  ＰＩにおけるこれらの化合物の選択性指数を表Ｖに示す。
【表４】
2021504485.tif 000022
【表５】
2021504485.tif 000023
【００８７】
感染後１０日目に、化合物ＦＮＯ２Ｃｏｒ及びＴＰＦＣｏｒは、細胞内のｈＣＭＶ感染を阻害することについてＴｐＮＯ２Ｃｏｒよりもはるかに優れた選択性指数を示す。
【００８８】
２．３相乗的な抗ウイルス活性
組合せ実験は、ガンシクロビルと化合物ＴＰＦＣｏｒの組合せを使用することにより実行される。
【００８９】
経験デザインは、Ｈｉｌｌモデル（Ｈｉｌｌ、１９１０）から誘導されたＳｔｒａｅｔｅｍａｎｓ  Ｒら（Ｂｉｏｍｅｔｒｉｃａｌ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ４７（２００５）３，２９９−３０８）に基づいている。
【００９０】
これは光線の設計に基づいており、各光線（ｆ）は２つの化合物を様々な比率で組み合わせたものである（表ＶＩ）。各化合物単独及び組合せのＩＣ５０の計算により、相互作用指数を計算することができる。結果を図４に示す。
【表６】
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【００９１】
このモデルによれば、１の相互作用指数（Ｉｒ）は、２つの化合物の相加性を意味し、１未満のＩｒは相乗作用を意味し、１を超えるＩｒは拮抗作用を意味する。
【００９２】
図４及び表ＶＩの結果は、ガンシクロビル及び本出願の化合物、例えば化合物ＴＰＦＣｏｒの併用が相乗的な抗ウイルス活性を生み出すことを示している。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【国際調査報告】
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