(57)【要約】本開示は、ＪＡＫ１経路阻害薬、ならびにサイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）、血球貪食性リンパ組織球症（ＨＬＨ）、マクロファージ活性化症候群（ＭＡＳ）及びＣＡＲ−Ｔ細胞関連の脳症（ＣＲＥＳ）などのサイトカイン関連疾患または障害を治療する際のその使用に関する。
2021513981.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
対象のサイトカイン関連疾患または障害を治療する方法であって、ＪＡＫ１経路阻害薬またはその薬学的に許容可能な塩を前記対象に投与することを含む、前記方法。
【請求項２】
前記ＪＡＫ１経路阻害薬またはその薬学的に許容可能な塩が、ＪＡＫ２、ＪＡＫ３、及びＴｙｋ２よりもＪＡＫ１に対して選択的である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記サイトカイン関連疾患または障害が、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）、血球貪食性リンパ組織球症（ＨＬＨ）、マクロファージ活性化症候群（ＭＡＳ）、またはＣＡＲ−Ｔ細胞関連の脳症（ＣＲＥＳ）である、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
前記サイトカイン関連疾患または障害が、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）である、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記サイトカイン関連疾患または障害が、血球貪食性リンパ組織球症（ＨＬＨ）である、請求項３に記載の方法。
【請求項６】
前記サイトカイン関連疾患または障害が、マクロファージ活性化症候群（ＭＡＳ）である、請求項３に記載の方法。
【請求項７】
前記マクロファージ活性化症候群（ＭＡＳ）が、全身型若年性特発性関節炎に関連する、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
前記サイトカイン関連疾患または障害が、ＣＡＲ−Ｔ細胞関連の脳症（ＣＲＥＳ）である、請求項３に記載の方法。
【請求項９】
前記ＪＡＫ１経路阻害薬が、｛１−｛１−［３−フルオロ−２−（トリフルオロメチル）イソニコチノイル］ピペリジン−４−イル｝−３［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］アゼチジン−３−イル｝アセトニトリルまたはその薬学的に許容可能な塩である、請求項１〜８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
前記ＪＡＫ１経路阻害薬が、｛１−｛１−［３−フルオロ−２−（トリフルオロメチル）イソニコチノイル］ピペリジン−４−イル｝−３［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］アゼチジン−３−イル｝アセトニトリルアジピン酸塩である、請求項１〜８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１】
前記ＪＡＫ１経路阻害薬が４−［３−（シアノメチル）−３−（３’，５’−ジメチル−１Ｈ，１’Ｈ−４，４’−ビピラゾール−１−イル）アゼチジン−１−イル］−２，５−ジフルオロ−Ｎ−［（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−メチルエチル］ベンズアミドまたはその薬学的に許容可能な塩である、請求項１〜８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１２】
前記ＪＡＫ１経路阻害薬が４−［３−（シアノメチル）−３−（３’，５’−ジメチル−１Ｈ，１’Ｈ−４，４’−ビピラゾール−１−イル）アゼチジン−１−イル］−２，５−ジフルオロ−Ｎ−［（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−メチルエチル］ベンズアミドリン酸塩である、請求項１〜８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３】
前記ＪＡＫ１経路阻害薬が（（２Ｒ，５Ｓ）−５−｛２−［（１Ｒ）−１−ヒドロキシエチル］−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｄ］チエノ［３，２−ｂ］ピリジン−１−イル｝テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）アセトニトリルまたはその薬学的に許容可能な塩である、請求項１〜８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
前記ＪＡＫ１経路阻害薬が（（２Ｒ，５Ｓ）−５−｛２−［（１Ｒ）−１−ヒドロキシエチル］−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｄ］チエノ［３，２−ｂ］ピリジン−１−イル｝テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）アセトニトリル一水和物である、請求項１〜８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５】
トシリズマブを前記対象に投与することをさらに含む、請求項１〜１４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１６】
コルチコステロイドを前記対象に投与することをさらに含む、請求項１〜１４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１７】
プレドニゾンを前記対象に投与することをさらに含む、請求項１〜１４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１８】
トシリズマブ及びコルチコステロイドを前記対象に投与することをさらに含む、請求項１〜１４のいずれか１項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本開示は、ＪＡＫ１経路阻害薬及びサイトカイン関連疾患または障害を治療する際のその使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
サイトカイン関連疾患または障害は、免疫の過剰な活性化を特徴とし、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）、血球貪食性リンパ組織球症（ＨＬＨ）、マクロファージ活性化症候群（ＭＡＳ）及びＣＡＲ−Ｔ細胞関連の脳症（ＣＲＥＳ）を含む。
【０００３】
サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）とは、超生理学的なレベルの免疫活性化によって引き起こされる炎症性サイトカインの過剰産生の直接的な結果であり、発熱、悪心、疲労、筋肉痛、倦怠感、低血圧、低酸素症、毛細血管漏出などの一連の臨床症状として現れ、それにより、潜在的な多臓器毒性をもたらす。
【０００４】
ＣＲＳは、例えば、がんなどの重篤な疾患状態に対する免疫療法の望まない副作用である。ＣＲＳを引き起こす可能性のある免疫療法には、モノクローナル抗体（ｍＡｂ）の投与、ごく最近ではがんに対する養子Ｔ細胞療法が含まれる。Ｌｅｅ  ｅｔ  ａｌ．Ｂｌｏｏｄ．２０１４，１２４（２）：１８８−１９５。例えば、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）Ｔ細胞療法は、改変されたＴ細胞を使用してがんを標的とし、特定の形態である難治性非ホジキンリンパ腫及び小児再発性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）での使用がＦＤＡによってすでに承認されている。
【０００５】
ＣＲＳに関与するサイトカインプロファイルには、主要な２つの細胞源が含まれる。それは、インターフェロンガンマ（ＩＦＮ）−γ、ＩＬ−２、ＩＬ−６、可溶性ＩＬ−６受容体（ＩＬ−６Ｒ）及び顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）を含むＴリンパ球由来サイトカインと、ＩＬ−１β、ＩＬ−６、ＩＬ−１２、ＩＬ−１８及び腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）−αなどの主に単球及び／またはマクロファージから分泌されるサイトカインである。Ｘｕ  ＸＪ，Ｔａｎｇ  ＹＭ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｌｅｔｔ．２０１４；３４３：１７２−８。  Ｚｈａｎｇ  Ｙ．，ｅｔ  ａｌ．Ｓｃｉ  Ｃｈｉｎａ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉ．２０１６；５９：３７９−８５。Ｂｒｅｎｔｊｅｎｓ  Ｒ．，ｅｔ  ａｌ．Ｍｏｌ  Ｔｈｅｒ．２０１０；１８：６６６−８。
【０００６】
ＣＲＳをもたらす過剰なサイトカイン応答の調節は、重要な臨床的便益をもたらす可能性を有している。例えば、ＩＬ−６受容体（ＩＬ−６Ｒ）に対する抗体であるトシリズマブは、重度のＣＲＳの発症率を低下させ、ＣＲＳでの使用は、ＦＤＡによって承認されている。しかしながら、トシリズマブの作用機序は、抗ＩＬ−６Ｒのみに限るものである。
【０００７】
血球貪食性リンパ組織球症（ＨＬＨ）は、過剰または制御されない免疫活性化のもう１つの症候群であり、主に出生から生後１８カ月の幼児が発症するが、成人も発症する場合がある。ＨＬＨには、一次性（家族性）または二次性のものがあり、これは他の感染性、悪性、リウマチ性または代謝性の条件において発症することを意味する。ＨＬＨの症状には、血球減少症、肝脾腫、及び発熱が含まれる。Ｓｃｈｒａｍ，Ａ．ａｎｄ  Ｂｅｒｌｉｎｅｒ，Ｎ．Ｂｌｏｏｄ．２００５．１２５（１９），２９０８−２９１４。
【０００８】
マクロファージ活性化症候群（ＭＡＳ）は、ＨＬＨと同様の様式で臨床的に呈し（さらに、二次性または後天的なＨＬＨと見なされる）、感染、リウマチ性疾患または悪性腫瘍に関連する炎症の増加により発症する。Ｂｏｒｇｉａ，Ｒ．Ｅ．ｅｔ  ａｌ．Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  Ｒｈｅｕｍａｔｏｌ．，２０１８，ｄｏｉ：１０．１００２／ａｒｔ．４０４１７（発表前）。ＭＡＳは、はじめは若年性特発性関節炎に関連すると記述されたが、小児期発症全身性エリテマトーデス（ｃＳＬＥ）などの他の疾患の合併症としてもますます認識されている。Ｓｈｉｍｉｚｕ  Ｍ．，ｅｔ  ａｌ．Ｃｌｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．２０１３  Ｆｅｂ；１４６（２）：７３−６。ＭＡＳの発症は、多数の炎症促進性サイトカインの実質的増加すなわち、サイトカインストームによって特徴づけられる。Ｂｏｒｇｉａ，Ｒ．Ｅ．ｅｔ  ａｌ．Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  Ｒｈｅｕｍａｔｏｌ．，２０１８，ｄｏｉ：１０．１００２／ａｒｔ．４０４１７（発表前）。ＭＡＳは高い死亡率、概して、小児の自己免疫病では８〜２２％、ｃＳＬＥを合併しているＭＡＳでは１０〜２２％を示す、重篤な状態である。Ｂｏｒｇｉａ，Ｒ．Ｅ．ｅｔ  ａｌ．Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  Ｒｈｅｕｍａｔｏｌ．，２０１８，ｄｏｉ：１０．１００２／ａｒｔ．４０４１７（発表前）。
【０００９】
ＣＡＲ−Ｔ細胞関連の脳症（ＣＲＥＳ）は、ＣＡＲ−Ｔ細胞療法に関連するＣＲＳに次いで２番目に一般的な有害事象である。ＣＲＥＳは通常、錯乱及びせん妄の症状を伴う中毒性脳症の状態、ならびに機会発作及び脳浮腫を特徴とする。ＣＲＥＳの症状は二相性で、細胞免疫療法の最初の５日以内及び／または３〜４週間後に生じ得る。病態生理学的機序には、ＣＡＲ−Ｔ細胞療法で治療された患者の脳へのサイトカインの受動拡散が含まれると考えられている。この機序の低下または排除は、そのような患者にとって有益であり得る。Ｎｅｅｌａｐｕ，ｅｔ  ａｌ．Ｎａｔ  Ｒｅｖ  Ｃｌｉｎ  Ｏｎｃｏｌ．２０１８，１５（１）４７−６２。
【００１０】
したがって、サイトカイン関連疾患または障害を治療するための新規治療法を開発する必要がある。本出願は、このニーズ及び他のニーズに対応するものである。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】抗ＣＤ３抗体誘発サイトカイン放出症候群の間に、血液区画内に化合物１を投与する際のＩＬ−６濃度の用量依存的阻害を示す（実施例Ｂを参照のこと）。
【図２Ａ】コンカナバリンＡ誘発サイトカイン放出症候群の間の化合物１の投与時におけるＴ細胞由来サイトカイン（すなわち、ＩＬ−６）の用量依存的阻害を示す（実施例Ｃを参照のこと）。ＩＬ−６の阻害を示す。
【図２Ｂ】コンカナバリンＡ誘発サイトカイン放出症候群の間の化合物１の投与時におけるＴ細胞由来サイトカイン（すなわち、ＩＦＮγ）の用量依存的阻害を示す（実施例Ｃを参照のこと）。ＩＦＮγの阻害を示す。
【図２Ｃ】コンカナバリンＡ誘発サイトカイン放出症候群の間の化合物１の投与時におけるＴ細胞由来サイトカイン（すなわち、ＧＭ−ＣＳＦ）の用量依存的阻害を示す（実施例Ｃを参照のこと）。ＧＭ−ＣＳＦの阻害を示す。
【図３Ａ】コンカナバリンＡ誘発サイトカイン放出症候群の間の化合物１の投与時における単球及び／またはマクロファージ由来サイトカイン（すなわち、ＩＬ−１２）の用量依存的阻害を示す（実施例Ｃを参照のこと）。ＩＬ−１２の阻害を示す。
【図３Ｂ】コンカナバリンＡ誘発サイトカイン放出症候群の間の化合物１の投与時における単球及び／またはマクロファージ由来サイトカイン（すなわち、ＩＬ−１β）の用量依存的阻害を示す（実施例Ｃを参照のこと）。ＩＬ−１βの阻害を示す。
【図３Ｃ】コンカナバリンＡ誘発サイトカイン放出症候群の間の化合物１の投与時における単球及び／またはマクロファージ由来サイトカイン（すなわち、ＩＬ−１８）の用量依存的阻害を示す（実施例Ｃを参照のこと）。ＩＬ−１８の阻害を示す。
【図４】サイトカインＩＬ−５がコンカナバリンＡ誘発サイトカイン放出症候群の間の化合物１の治療に対して無影響であることを示す（実施例Ｃを参照のこと）。
【発明の概要】
【００１２】
本明細書では、治療が必要な対象におけるサイトカイン関連疾患または障害を治療する方法を提供し、その方法には、その患者に治療上有効な量のＪＡＫ１経路阻害薬またはその薬学的に許容可能な塩を投与することが含まれる。
【００１３】
本明細書では、治療が必要な対象におけるサイトカイン関連疾患または障害を治療するためのＪＡＫ１経路阻害薬またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。
【００１４】
本明細書では、治療が必要な対象におけるサイトカイン関連疾患または障害を治療する際に用いる薬物を製造するためのＪＡＫ１経路阻害薬またはその薬学的に許容可能な塩の使用を提供する。
【発明の詳細な説明】
【００１５】
本発明では、とりわけ、治療が必要な対象におけるサイトカイン関連疾患または障害を治療する方法を提供し、その方法には、その対象に治療上有効な量のＪＡＫ１経路阻害薬またはその薬学的に許容可能な塩を投与することが含まれる。
【００１６】
本明細書に記載の方法は、ＪＡＫ１経路阻害薬、特にＪＡＫ１選択的阻害薬を利用する。ＪＡＫ１選択的阻害薬は、ＪＡＫ１活性を他のヤヌスキナーゼよりも優先的に阻害する化合物である。ＪＡＫ１は、調節不全の場合に、疾患状態をもたらし得るかまたはそれに寄与し得るような多くのサイトカイン及び成長因子のシグナル経路において中心的な役割を果たす。例えば、ＩＬ−６レベルは、関節リウマチで上昇し、この疾患において、ＩＬ−６は有害な効果があることが示唆されている（Ｆｏｎｅｓｃａ，ｅｔ  ａｌ．，Ａｕｔｏｉｍｍｕｎｉｔｙ  Ｒｅｖｉｅｗｓ，８：５３８−４２，２００９）。ＩＬ−６は少なくとも部分的にＪＡＫ１を介してシグナリングするので、ＩＬ−６は間接的にＪＡＫ１の阻害を介して存在し、潜在的な臨床的便益をもたらす（Ｇｕｓｃｈｉｎ，ｅｔ  ａｌ．Ｅｍｂｏ  Ｊ  １４：１４２１，１９９５；Ｓｍｏｌｅｎ，ｅｔ  ａｌ．Ｌａｎｃｅｔ  ３７１：９８７，２００８）。さらに、いくつかのがんにおいて、ＪＡＫ１は変異しており、恒常的に所望されない腫瘍細胞の増殖及び生存をもたらす（Ｍｕｌｌｉｇｈａｎ，Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  Ｕ  Ｓ  Ａ．１０６：９４１４−８，２００９；Ｆｌｅｘ，Ｊ  Ｅｘｐ  Ｍｅｄ．２０５：７５１−８，２００８）。他の自己免疫病及びがんにおいて、ＪＡＫ１を活性化する炎症性サイトカインの全身レベルが上昇することにより、その疾患及び／または関連症状にも寄与し得る。したがって、そのような疾患の患者は、ＪＡＫ１の阻害により恩恵を受け得る。ＪＡＫ１の選択的阻害薬は、他のＪＡＫキナーゼを阻害することによる不必要かつ潜在的な所望されない効果を回避する一方で、有益であり得る。
【００１７】
ＪＡＫ１経路阻害薬、具体的には化合物１（すなわち、｛１−｛１−［３−フルオロ−２−（トリフルオロメチル）イソニコチノイル］ピペリジン−４−イル｝−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］アゼチジン−３−イル｝アセトニトリル、表１を参照のこと）は、ＣＲＳ関連の炎症性サイトカインの非常に効果的な用量依存的な調節を達成する（例えば、実施例Ｂ及びＣならびに図１、２Ａ〜２Ｃ及び３Ａ〜３Ｃを参照のこと）。驚くべきことに、この治療特性は、複数の病原性サイトカインを含み、ＩＬ−６／ＩＬ−６Ｒ系のみに限ることではない（例えば、トシリズマブは異なる）。ＣＲＳの発病に臨床的に高い関連があるＴ細胞及び単球／マクロファージに由来するサイトカインを阻害することにより、有効性が達成される。さらに、ＪＡＫ１阻害薬化合物１に関連して本明細書に提示されたデータは、治療の利益が、広範なサイトカイン免疫抑制なしに達成されることを示している（ＩＬ−５レベルが変化しなかったことにより実証されている通り）（図４）。
【発明を実施するための形態】
【００１８】
いくつかの実施形態において、サイトカイン関連疾患または障害は、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）、血球貪食性リンパ組織球症（ＨＬＨ）、マクロファージ活性化症候群（ＭＡＳ）、またはＣＡＲ−Ｔ細胞関連の脳症（ＣＲＥＳ）である。
【００１９】
いくつかの実施形態において、サイトカイン関連疾患または障害は、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）である。
【００２０】
いくつかの実施形態において、サイトカイン関連疾患または障害は、血球貪食性リンパ組織球症（ＨＬＨ）である。
【００２１】
いくつかの実施形態において、サイトカイン関連疾患または障害は、マクロファージ活性化症候群（ＭＡＳ）である。いくつかの実施形態において、マクロファージ活性化症候群は、全身型若年性特発性関節炎に関連する。いくつかの実施形態において、マクロファージ活性化症候群は、小児全身性エリテマトーデスに関連する。
【００２２】
いくつかの実施形態において、サイトカイン関連疾患または障害は、ＣＡＲ−Ｔ細胞関連の脳症（ＣＲＥＳ）である。
【００２３】
いくつかの実施形態において、本出願は、対象のサイトカイン放出症候群を治療する方法を提供し、この方法は、その対象にＣＡＲ−Ｔ細胞療法及びＪＡＫ１経路阻害薬またはその薬学的に許容可能な塩を投与することを含む。いくつかの実施形態において、治療とは寛解または阻害することである。いくつかの実施形態において、治療とは予防することである。
【００２４】
いくつかの実施形態において、ＪＡＫ１経路阻害薬またはその薬学的に許容可能な塩は、ＣＡＲ−Ｔ細胞療法と同時に投与される。
【００２５】
いくつかの実施形態において、ＪＡＫ１経路阻害薬またはその薬学的に許容可能な塩は、ＣＡＲ−Ｔ細胞療法の投与後に投与される。
【００２６】
いくつかの実施形態において、ＣＡＲ−Ｔ細胞療法は、アキシカブタゲン・シロロイセルである。
【００２７】
いくつかの実施形態において、ＣＡＲ−Ｔ細胞療法は、チサゲンレクルユーセルである。
【００２８】
いくつかの実施形態において、対象はＢ細胞悪性腫瘍に罹っている。
【００２９】
いくつかの実施形態において、対象は、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、原発性縦隔大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、高悪性度Ｂ細胞リンパ腫、形質転換した濾胞性リンパ腫または急性リンパ芽球性白血病に罹っている。
【００３０】
いくつかの実施形態において、ＪＡＫ１経路阻害薬またはその薬学的に許容可能な塩は、ＪＡＫ２、ＪＡＫ３及びＴＹＫ２よりもＪＡＫ１に対して選択的である（すなわち、ＪＡＫ１選択的阻害薬）。例えば、本明細書に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩は、１種または複数種のＪＡＫ２、ＪＡＫ３及びＴＹＫ２よりもＪＡＫ１を優先的に阻害する。いくつかの実施形態において、化合物はＪＡＫ２よりもＪＡＫ１を優先的に阻害する（例えば、ＪＡＫ２／ＪＡＫ１  ＩＣ５０比＞１）。いくつかの実施形態において、化合物または塩は、ＪＡＫ２よりもＪＡＫ１に対して約１０倍選択的である。いくつかの実施形態において、化合物または塩は、１ｍＭ  ＡＴＰでＩＣ５０  を測定することによって計算すると、ＪＡＫ２よりもＪＡＫ１に対して約３倍、約５倍、約１０倍、約１５倍または約２０倍選択的である（例えば、実施例Ａを参照のこと）。
【００３１】
いくつかの実施形態において、ＪＡＫ１経路阻害薬は、表１の化合物またはその薬学的に許容可能な塩である。表１の化合物は、選択的ＪＡＫ１阻害薬である（ＪＡＫ２、ＪＡＫ３及びＴＹＫ２よりも選択的）。１ｍＭ  ＡＴＰで実施例Ａの方法により得られたＩＣ５０値を表１に示す。
【００３２】
【表１−１】
2021513981.tif 000003
【表１−２】
2021513981.tif 000004
【表１−３】
2021513981.tif 000005
【表１−４】
2021513981.tif 000006
【表１−５】
2021513981.tif 000007
【表１−６】
2021513981.tif 000008
【表１−７】
2021513981.tif 000009
【表１−８】
2021513981.tif 000010
【表１−９】
2021513981.tif 000011
【表１−１０】
2021513981.tif 000012
＋  平均≦１０ｎＭ（アッセイ条件については実施例Ａを参照のこと）
＋＋  平均≦１００ｎＭ（アッセイ条件については実施例Ａを参照のこと）
＋＋＋  平均≦３００ｎＭ（アッセイ条件については実施例Ａを参照のこと）
ａエナンチオマー１のデータ
ｂエナンチオマー２のデータ
【００３３】
いくつかの実施形態において、ＪＡＫ１経路阻害薬は、｛１−｛１−［３−フルオロ−２−（トリフルオロメチル）イソニコチノイル］ピペリジン−４−イル｝−３［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］アゼチジン−３−イル｝アセトニトリルまたはその薬学的に許容可能な塩である。
【００３４】
いくつかの実施形態において、ＪＡＫ１経路阻害薬は、｛１−｛１−［３−フルオロ−２−（トリフルオロメチル）イソニコチノイル］ピペリジン−４−イル｝−３［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］アゼチジン−３−イル｝アセトニトリルアジピン酸塩である。
【００３５】
｛１−｛１−［３−フルオロ−２−（トリフルオロメチル）イソニコチノイル］ピペリジン−４−イル｝−３［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］アゼチジン−３−イル｝アセトニトリル及びそのアジピン酸塩の合成及び調製は、米国特許出願第２０１１／０２２４１９０号（２０１１年３月９日出願）、米国特許出願第２０１３／００６００２６号（２０１２年９月６日出願）及び米国特許出願第２０１４／０２５６９４１号（２０１４年３月５日出願）で確認でき、これらの各出願は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【００３６】
いくつかの実施形態において、ＪＡＫ１経路阻害薬は、４−［３−（シアノメチル）−３−（３’，５’−ジメチル−１Ｈ，１’Ｈ−４，４’−ビピラゾール−１−イル）アゼチジン−１−イル］−２，５−ジフルオロ−Ｎ−［（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−メチルエチル］ベンズアミドまたはその薬学的に許容可能な塩である。
【００３７】
いくつかの実施形態において、ＪＡＫ１経路阻害薬は、４−［３−（シアノメチル）−３−（３’，５’−ジメチル−１Ｈ，１’Ｈ−４，４’−ビピラゾール−１−イル）アゼチジン−１−イル］−２，５−ジフルオロ−Ｎ−［（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−メチルエチル］ベンズアミドリン酸塩である。
【００３８】
４−［３−（シアノメチル）−３−（３’，５’−ジメチル−１Ｈ，１’Ｈ−４，４’−ビピラゾール−１−イル）アゼチジン−１−イル］−２，５−ジフルオロ−Ｎ−［（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−メチルエチル］ベンズアミド及びそのリン酸塩の合成及び調製は、例えば、米国特許出願第２０１４／０３４３０３０号（２０１４年５月１６日出願）で確認でき、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【００３９】
いくつかの実施形態において、ＪＡＫ１経路阻害薬は、（（２Ｒ，５Ｓ）−５−｛２−［（１Ｒ）−１−ヒドロキシエチル］−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｄ］チエノ［３，２−ｂ］ピリジン−１−イル｝テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）アセトニトリルまたはその薬学的に許容可能な塩である。
【００４０】
いくつかの実施形態において、ＪＡＫ１経路阻害薬は、（（２Ｒ，５Ｓ）−５−｛２−［（１Ｒ）−１−ヒドロキシエチル］−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｄ］チエノ［３，２−ｂ］ピリジン−１−イル｝テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）アセトニトリル  一水和物である。
【００４１】
（（２Ｒ，５Ｓ）−５−｛２−［（１Ｒ）−１−ヒドロキシエチル］−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｄ］チエノ［３，２−ｂ］ピリジン−１−イル｝テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）アセトニトリルの合成ならびにその無水物及び一水和物の形態のキャラクタリゼーションは、米国特許出願第２０１４／０１２１１９８号（２０１３年１０月３１日出願）及び米国特許出願第２０１５／０３４４４９７号（２０１５年４月２９日出願）で記載されており、これらの各出願は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【００４２】
いくつかの実施形態において、表１の化合物は、米国特許出願第２０１１／０２２４１９０号（２０１１年３月９日出願）、米国特許出願第２０１４／０３４３０３０号（２０１４年５月１６日出願）、米国特許出願第２０１４／０１２１１９８号（２０１３年１０月３１日出願）、米国特許出願第２０１０／０２９８３３４号（２０１０年５月２１日出願）、米国特許出願第２０１１／００５９９５１号（２０１０年８月３１日出願）、米国特許出願第２０１２／０１４９６８１号（２０１１年１１月１８日出願）、米国特許出願第２０１２／０１４９６８２号（２０１１年１１月１８日出願）、米国特許出願第２０１３／００１８０３４号（２０１２年６月１９日出願）、米国特許出願２０１３／００４５９６３号（２０１２年８月１７日出願）及び米国特許出願第２０１４／０００５１６６号（２０１３年５月１７日出願）で記載された合成方法によって調製され、これらの各出願は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【００４３】
いくつかの実施形態において、ＪＡＫ１経路阻害薬は、米国特許出願第２０１１／０２２４１９０号（２０１１年３月９日出願）、米国特許出願第２０１４／０３４３０３０号（２０１４年５月１６日出願）、米国特許出願第２０１４／０１２１１９８号（２０１３年１０月３１日出願）、米国特許出願第２０１０／０２９８３３４号（２０１０年５月２１日出願）、米国特許出願第２０１１／００５９９５１号（２０１０年８月３１日出願）、米国特許出願第２０１２／０１４９６８１号（２０１１年１１月１８日出願）、米国特許出願第２０１２／０１４９６８２号（２０１１年１１月１８日出願）、米国特許出願第２０１３／００１８０３４号（２０１２年６月１９日出願）、米国特許出願２０１３／００４５９６３号（２０１２年８月１７日出願）及び米国特許出願第２０１４／０００５１６６号（２０１３年５月１７日出願）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩から選択され、これらの各出願は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【００４４】
いくつかの実施形態において、ＪＡＫ１経路阻害薬は式Ｉの化合物
【化１】
2021513981.tif 000013
または、その薬学的に許容可能な塩であり、式中、
ＸはＮまたはＣＨであり、
ＬはＣ（＝Ｏ）またはＣ（＝Ｏ）ＮＨであり、
Ａは、フェニル、ピリジニル、またはピリミジニルであり、そのそれぞれは、１つまたは２つの独立して選択されたＲ１基で任意に置換されており、さらに
各Ｒ１は、独立して、フルオロまたはトリフルオロメチルである。
【００４５】
いくつかの実施形態において、式Ｉの化合物は、｛１−｛１−［３−フルオロ−２−（トリフルオロメチル）イソニコチノイル］ピペリジン−４−イル｝−３［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］アゼチジン−３−イル｝アセトニトリルまたはその薬学的に許容可能な塩である。
【００４６】
いくつかの実施形態において、式Ｉの化合物は、４−｛３−（シアノメチル）−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］アゼチジン−１−イル｝−Ｎ−［４−フルオロ−２−（トリフルオロメチル）フェニル］ピペリジン−１−カルボキサミドまたはその薬学的に許容可能な塩である。
【００４７】
いくつかの実施形態において、式Ｉの化合物は、［３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］−１−（１−｛［２−（トリフルオロメチル）ピリミジン−４−イル］カルボニル｝ピペリジン−４−イル）アゼチジン−３−イル］アセトニトリルまたはその薬学的に許容可能な塩である。
【００４８】
いくつかの実施形態において、ＪＡＫ１経路阻害薬は式ＩＩの化合物
【化２】
2021513981.tif 000014
または、その薬学的に許容可能な塩であり、式中、
Ｒ２は、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、Ｃ３−６シクロアルキル、またはＣ３−６シクロアルキル−Ｃ１−３アルキルであり、ここで、このＣ１−６アルキル、Ｃ３−６シクロアルキル及びＣ３−６シクロアルキル−Ｃ１−３アルキルは、フルオロ、−ＣＦ３及びメチルから独立して選択される１、２、または３つの置換基で任意に置換され、
Ｒ３はＨまたはメチルであり、
Ｒ４はＨ、ＦまたはＣｌであり、
Ｒ５はＨまたはＦであり、
Ｒ６はＨまたはＦであり、
Ｒ７はＨまたはＦであり、
Ｒ８はＨまたはメチルであり、
Ｒ９はＨまたはメチルであり、
Ｒ１０はＨまたはメチルであり、さらに
Ｒ１１はＨまたはメチルである。
【００４９】
いくつかの実施形態において、式ＩＩの化合物は、４−［３−（シアノメチル）−３−（３’，５’−ジメチル−１Ｈ，１’Ｈ−４，４’−ビピラゾール−１−イル）アゼチジン−１−イル］−２，５−ジフルオロ−Ｎ−［（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−メチルエチル］ベンズアミドまたはその薬学的に許容可能な塩である。
【００５０】
いくつかの実施形態において、ＪＡＫ１経路阻害薬は式ＩＩＩの化合物
【化３】
2021513981.tif 000015
または、その薬学的に許容可能な塩であり、式中、
Ｃｙ４は、ＣＮ、ＯＨ、Ｆ、Ｃｌ、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−３ハロアルキル、シアノ−Ｃ１−３アルキル、ＨＯ−Ｃ１−３アルキル、アミノ、Ｃ１−３アルキルアミノ及びジ（Ｃ１−３アルキル）アミノから独立して選択された１または２つの基で任意に置換されたテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン環であり、ここで、このＣ１−３アルキル及びジ（Ｃ１−３アルキル）アミノは、Ｆ、Ｃｌ、Ｃ１−３アルキルアミノスルホニル及びＣ１−３アルキルスルホニルから独立して選択された１、２または３つの置換基で任意に置換され、
Ｒ１２は、−ＣＨ２−ＯＨ、−ＣＨ（ＣＨ３）−ＯＨまたは−ＣＨ２−ＮＨＳＯ２ＣＨ３である。
【００５１】
いくつかの実施形態において、式ＩＩＩの化合物は、（（２Ｒ，５Ｓ）−５−｛２−［（１Ｒ）−１−ヒドロキシエチル］−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｄ］チエノ［３，２−ｂ］ピリジン−１−イル｝テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）アセトニトリルまたはその薬学的に許容可能な塩である。
【００５２】
いくつかの実施形態において、ＪＡＫ１経路阻害薬またはその薬学的に許容可能な塩は、遊離塩基基準で、１日に約１００ｍｇ〜約６００ｍｇの量が投与される。したがって、いくつかの実施形態において、選択的なＪＡＫ１経路阻害薬は、遊離塩基基準で、１日に約１００ｍｇ、約１５０ｍｇ、約２００ｍｇ、約２５０ｍｇ、約３００ｍｇ、約３５０ｍｇ、約４００ｍｇ、約４５０ｍｇ、約５００ｍｇ、約５５０ｍｇまたは約６００ｍｇの量が投与される。
【００５３】
いくつかの実施形態において、ＪＡＫ１経路阻害薬またはその薬学的に許容可能な塩は、遊離塩基基準で、１日に約２００ｍｇの量が投与される。
【００５４】
いくつかの実施形態において、ＪＡＫ１経路阻害薬またはその薬学的に許容可能な塩は、遊離塩基基準で、１日に約３００ｍｇの量が投与される。
【００５５】
いくつかの実施形態において、ＪＡＫ１経路阻害薬またはその薬学的に許容可能な塩は、遊離塩基基準で、１日に約４００ｍｇの量が投与される。
【００５６】
いくつかの実施形態において、ＪＡＫ１経路阻害薬またはその薬学的に許容可能な塩は、遊離塩基基準で、１日に約５００ｍｇの量が投与される。
【００５７】
いくつかの実施形態において、ＪＡＫ１経路阻害薬またはその薬学的に許容可能な塩は、遊離塩基基準で、１日に約６００ｍｇの量が投与される。
【００５８】
いくつかの実施形態において、ＪＡＫ１経路阻害薬またはその薬学的に許容可能な塩は、遊離塩基基準で、１日に１回約２００ｍｇの量が投与される。
【００５９】
いくつかの実施形態において、ＪＡＫ１経路阻害薬またはその薬学的に許容可能な塩は、遊離塩基基準で、１日に１回約３００ｍｇの量が投与される。
【００６０】
いくつかの実施形態において、ＪＡＫ１経路阻害薬またはその薬学的に許容可能な塩は、遊離塩基基準で、１日に１回約４００ｍｇの量が投与される。
【００６１】
いくつかの実施形態において、ＪＡＫ１経路阻害薬またはその薬学的に許容可能な塩は、遊離塩基基準で、１日に１回約５００ｍｇの量が投与される。
【００６２】
いくつかの実施形態において、ＪＡＫ１経路阻害薬またはその薬学的に許容可能な塩は、遊離塩基基準で、１日に１回約６００ｍｇの量が投与される。
【００６３】
いくつかの実施形態において、ＪＡＫ１経路阻害薬またはその薬学的に許容可能な塩は、そのＪＡＫ１経路阻害薬またはその薬学的に許容可能な塩をそれぞれ含む１種または複数種の徐放性剤形で投与される。
【００６４】
本明細書では、治療が必要な対象における対象のサイトカイン関連疾患または障害を治療する方法を提供し、この方法は、ＪＡＫ１経路阻害薬またはその薬学的に許容可能な塩を遊離塩基基準で、１日約１００ｍｇ〜６００ｍｇをその対象に投与することを含み、ここで、そのＪＡＫ１経路阻害薬またはその薬学的に許容可能な塩は、そのＪＡＫ１経路阻害薬またはその薬学的に許容可能な塩を含む１種または複数種の徐放性剤形で投与される。
【００６５】
本明細書に記載の実施形態は、その実施形態が多項従属クレームであるかのように、任意の好適な組み合わせで合わせられることが意図される（例えば、選択的なＪＡＫ１経路阻害薬及びその用量に関する実施形態、本明細書で開示される化合物の任意の塩形態に関する実施形態、サイトカイン関連疾患または障害の個々の種類に関する実施形態及び任意の組み合わせで合わされ得る組成物及び／または投与に関する実施形態）。
【００６６】
例えば、本明細書では、対象における、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）、血球貪食性リンパ組織球症（ＨＬＨ）、マクロファージ活性化症候群（ＭＡＳ）またはＣＡＲ−Ｔ細胞関連の脳症（ＣＲＥＳ）からなる群から選択されたサイトカイン関連疾患または障害を治療するための方法を提供し、この方法には、この対象に、｛１−｛１−［３−フルオロ−２−（トリフルオロメチル）イソニコチノイル］ピペリジン−４−イル｝−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］アゼチジン−３−イル｝アセトニトリルまたはその薬学的に許容可能な塩を遊離塩基基準で約２００ｍｇの用量で１日１回投与することを含み、ここで、この用量には、｛１−｛１−［３−フルオロ−２−（トリフルオロメチル）イソニコチノイル］ピペリジン−４−イル｝−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］アゼチジン−３−イル｝アセトニトリルまたはその薬学的に許容可能な塩をそれぞれ含む１種または複数種の徐放性剤形が含まれる。
【００６７】
徐放性剤形の｛１−｛１−［３−フルオロ−２−（トリフルオロメチル）イソニコチノイル］ピペリジン−４−イル｝−３［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］アゼチジン−３−イル｝アセトニトリルまたはその薬学的に許容可能な塩（表１、化合物１）は、米国特許２０１５／００６５４８４号（２０１４年８月６日出願）で確認でき、これは、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【００６８】
全ての可能な組み合わせは、単に簡潔にするために、本明細書において別々に示されていない。
【００６９】
本明細書に記載される化合物は、非対称であり得る（例えば、１つまたは複数の立体中心を有する）。他に示さない限り、エナンチオマー及びジアステレオマーなどの全ての立体異性体が意図される。非対称に置換された炭素原子を含む化合物は、光学活性形態、またはラセミ形態で単離され得る。光学的に不活性な出発物質から光学活性形態を調製する方法は、当技術分野において周知であり、例えば、ラセミ混合物の分割または立体選択的合成による。本明細書に記載する化合物中には、オレフィン、Ｃ＝Ｎ二重結合などの多くの幾何異性体も存在することができ、全てのそのような安定した異性体が本発明において企図される。本発明の化合物におけるシス及びトランスの幾何異性体が記載され、異性体の混合物として、または分離された異性の形態として単離され得る。
【００７０】
いくつかの実施形態において、化合物は、（Ｒ）配置を有する。いくつかの実施形態において、化合物は、（Ｓ）配置を有する。
【００７１】
化合物のラセミ混合物の分割は、当技術分野で周知である多数の方法のいずれかによって実行され得る。例示的な方法としては、光学活性の塩形成有機酸であるキラル分割酸を用いた分別再結晶が挙げられる。分別再結晶法に好適な分割剤は、例えば、酒石酸、ジアセチル酒石酸、ジベンゾイル酒石酸、マンデル酸、リンゴ酸、乳酸、またはβ−カンファースルホン酸などの様々な光学活性カンファースルホン酸のＤ形態及びＬ形態などの光学活性酸である。分別晶析法に好適な他の分割剤には、α−メチルベンジルアミンの立体異性的に純粋な形態（例えば、Ｓ及びＲ形態またはジアステレオマー的に純粋な形態）、２−フェニルグリシノール、ノルエフェドリン、エフェドリン、Ｎ−メチルエフェドリン、シクロヘキシルエチルアミン、１，２−ジアミノシクロヘキサンなどが含まれる。
【００７２】
ラセミ混合物の分割は、光学活性分割剤（例えば、ジニトロベンゾイルフェニルグリシン）を充填したカラム上に溶出させることでも実行することが可能である。好適な溶出溶媒組成物は、当業者によって決定され得る。
【００７３】
本明細書に記載される化合物には、互変異性の形態も含まれる。互変異性の形態は、隣接する二重結合と単結合の交換と、同時にプロトンが移動することによって得られる。互変異性の形態には、同じ実験式及び総電荷を有する異性体のプロトン化状態であるプロトトロピック互変異性体が含まれる。プロトトロピック互変異性体の例には、ケトン−エノール対、アミド−イミド酸対、ラクタム−ラクチム対、エナミン−イミン対ならびにプロトンがヘテロ環系の２つまたはそれ以上の位置を占めることが可能な環状形態、例えば、１Ｈ−イミダゾール、３Ｈ−イミダゾール、１Ｈ−１，２，４−トリアゾール、２Ｈ−１，２，４−トリアゾール及び４Ｈ−１，２，４−トリアゾール、１Ｈ−イソインドール及び２Ｈ−イソインドールならびに１Ｈ−ピラゾール及び２Ｈ−ピラゾールが含まれる。互変異性の形態は、平衡状態である場合があり、または適切な置換によって１つの形態に立体的に固定されている場合もある。
【００７４】
本明細書に記載の化合物には、本開示の同位体標識された化合物も含み得る。「同位体的」または「放射標識された」化合物とは、１種または複数種の原子が、通常天然に見られる（すなわち、天然に存在している）原子質量または質量数とは異なる原子質量または質量数を有する原子によって置き換えられている、または置換されている本開示の化合物である。本開示の化合物に組み込まれ得る好適な放射性核種には、２Ｈ（また、ジュウテリウムとしてＤともに記される）、３Ｈ（トリチウムとしてＴとも記される）、１１Ｃ、１３Ｃ、１４Ｃ、１３Ｎ、１５Ｎ、１５Ｏ、１７Ｏ、１８Ｏ、１８Ｆ、３５Ｓ、３６Ｃｌ、８２Ｂｒ、７５Ｂｒ、７６Ｂｒ、７７Ｂｒ、１２３Ｉ、１２４Ｉ、１２５Ｉ及び１３１Ｉが含まれるが限定されない。例えば、本開示の化合物中の１種または複数種の水素原子は、ジュウテリウム原子で置き換えられ得る（例えば、式（Ｉ）、（ＩＩ）、もしくは（ＩＩＩ）または表１の化合物のＣ１−６アルキル基の１つまたは複数の水素原子は、−ＣＤ３が−ＣＨ３に対して置換されるように、ジュウテリウム原子で任意に置換することが可能である）。本明細書で使用される「化合物」という用語は、名前が特定の立体異性体を示していない限り、示された構造に対する、全ての立体異性体、幾何異性体、互変異性体及び同位体を含むことを意味する。特定の１つの互変異性の形態として名前また構造で特定されている本明細書の化合物は、他に特定されていない限り、他の互変異性の形態を含むように意図される。
【００７５】
全ての化合物及びその薬学的に許容可能な塩は、水及び溶媒などの他の物質と一緒に確認され得る（例えば、水和物及び溶媒和物）または、単離され得る。
【００７６】
いくつかの実施形態において、本明細書に記載の化合物及びその塩は、実質的に単離される。「実質的に単離される」によって、化合物が、それが形成または検出された状況から少なくとも部分的にまたは実質的に分離されることが意味される。部分的な分離には、例えば、本明細書に記載の化合物中で濃縮された組成物を含むことが可能である。実質的な分離とは、本明細書に記載の化合物またはその塩の重量の少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９７％または少なくとも約９９％を含有する組成物を含むことが可能である。化合物及びその塩を単離する方法は、当技術分野において通例である。
【００７７】
本明細書で使用する「薬学的に許容可能な」という表現は、妥当な医学的判断の範囲内で、過度の毒性、刺激、アレルギー応答もしくはその他の問題または合併症なしに、ヒト及び動物の組織と接触させて使用するのに好適であり、合理的な効果／リスクの比に釣り合う化合物、材料、組成物及び／または剤形を指す。
【００７８】
本明細書で使用する「周囲温度」及び「室温」または「ｒｔ」という表現は、当技術分野で理解されており、概して、反応が行われる部屋の温度、例えば、約２０℃〜約３０℃の温度に近い温度、例えば反応温度を指す。
【００７９】
本発明には、本明細書に記載の化合物の薬学的に許容可能な塩も含まれる。本明細書で使用する「薬学的に許容可能な塩」は、開示されている化合物の誘導体であり、ここで、親化合物は、既存の酸または塩基部分をその塩形態に変換することによって改変されている。薬学的に許容可能な塩の例には、アミンなどの塩基性残基の無機塩または有機酸塩、カルボン酸などの酸性残基のアルカリ塩または有機塩などが含まれるが、これらに限定されない。本発明の薬学的に許容可能な塩には、例えば、非毒性の無機酸または有機酸から形成される親化合物の従来の非毒性塩が含まれる。本発明の薬学的に許容可能な塩は、従来の化学的方法により、塩基性部分または酸性部分を含む親化合物から合成することが可能である。概して、このような塩は、これらの化合物の遊離酸または塩基形態を、化学量論的な量の適切な塩基または酸と、水中もしくは有機溶媒中で、またはその２つの混合物中で反応させることにより調製され得る。概して、エーテル、酢酸エチル、アルコール（例えば、メタノール、エタノール、イソプロパノール、またはブタノール）またはアセトニトリル（ＡＣＮ）のような非水性溶媒が好ましい。好適な塩のリストは、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１７ｔｈ  ｅｄ．，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐａ．，１９８５，ｐ．１４１８及びＪｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ，６６，２  （１９７７）で確認でき、これらの各出願は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【００８０】
本明細書で用いられる場合、交換可能に使用される「対象」、「個体」または「患者」という用語は、哺乳動物、好ましくはマウス、ラット、他の齧歯類、ウサギ、イヌ、ネコ、ブタ、ウシ、ヒツジ、ウマまたは霊長類を含む任意の動物、最も好ましくはヒトとを指す。いくつかの実施形態において、「対象」、「個体」、または「患者」は、上述の治療を必要としている。
【００８１】
いくつかの実施形態において、阻害薬は、治療上有効な量で投与される。本明細書で使用される「治療上有効な量」という表現は、研究者、獣医師、医師または他の臨床医によって組織、系、動物、個体またはヒトにおいて求められている生物学的応答または薬物的応答を誘発する、活性化合物または医薬品の量を指す。いくつかの実施形態において、患者または個体に投与される化合物またはその薬学的に許容可能な塩の投与量は、約１ｍｇ〜約２ｇ、約１ｍｇ〜約１０００ｍｇ、約１ｍｇ〜約５００ｍｇ、約１ｍｇ〜約２００ｍｇ、約１ｍｇ〜約１００ｍｇ、約１ｍｇ〜５０ｍｇ、または約５０ｍｇ〜約５００ｍｇである。いくつかの実施形態において、化合物またはその薬学的に許容可能な塩の投与量は、約２００ｍｇである。
【００８２】
本明細書で使用される「治療する」または「治療」という用語は、（１）疾患を阻害すること、例えば、疾患、症状もしくは障害の病態もしくは総体症状を経験もしくは呈している個人において、疾患、症状もしくは障害を阻害すること（すなわち、病態及び／または総体症状のさらなる発症を抑止すること）、（２）疾患を寛解すること、例えば、疾患の重症度を低下するなど、疾患、症状もしくは障害の病態もしくは総体症状を経験もしくは呈している個人における疾患、症状もしくは障害を寛解すること（すなわち、病態及び／または総体症状の進行を食い止める）、または（３）疾患、症状もしくは障害になりやすいが、まだその疾患の病態もしくは総体症状を経験もしくは呈していない個人における疾患、症状もしくは障害を予防することの１つまたは複数を指す。いくつかの実施形態において、治療は、疾患を阻害または寛解することを指す。いくつかの実施形態において、治療とは、疾患を予防することである。
【００８３】
併用療法
本明細書に記載される方法は、１種または複数種の追加の治療薬を投与することをさらに含むことが可能である。１種または複数種の追加の治療薬は、同時にまたは連続して患者に投与することが可能である。
【００８４】
いくつかの実施形態において、追加の治療薬は、ＩＬ−６アンタゴニストまたは受容体アンタゴニストである。いくつかの実施形態において、ＩＬ−６受容体アンタゴニストはトシリズマブである。
【００８５】
いくつかの実施形態において、追加の治療薬は、ＭＣＰ−１の阻害薬である。いくつかの実施形態において、追加の治療薬は、ＭＩＰ１Ｂの阻害薬である。いくつかの実施形態において、追加の治療薬は、ＩＬ−２Ｒの阻害薬である。いくつかの実施形態において、追加の治療薬は、ＩＬ−１Ｒの阻害薬である。いくつかの実施形態において、追加の治療薬は、ＴＮＦ−αの阻害薬である。
【００８６】
いくつかの実施形態において、追加の治療薬は、抗ＣＤ２５抗体である。いくつかの実施形態において、抗ＣＤ２５抗体はダクリズマブである。
【００８７】
いくつかの実施形態において、追加の治療薬は、ＩＬ−１βのアンタゴニストである。
【００８８】
いくつかの実施形態において、追加の治療薬は、ＩＬ１受容体アンタゴニスト（ＩＬ１Ｒａ）である。いくつかの実施形態において、ＩＬ１受容体アンタゴニスト（ＩＬ１Ｒａ）はアナキンラである。
【００８９】
いくつかの実施形態において、追加の治療薬は、コルチコステロイドである。いくつかの実施形態において、コルチコステロイドは、プレドニゾンである。
【００９０】
いくつかの実施形態において、前述の追加の治療薬のいずれかは、コルチコステロイド（例えば、プレドニゾン）とさらに組み合わせて用いられる。
【００９１】
いくつかの実施形態において、追加の治療薬は、トシリズマブ及びコルチコステロイドを含む。いくつかの実施形態において、追加の治療薬は、トシリズマブ及びプレドニゾンを含む。
【００９２】
医薬品製剤及び剤形
医薬品として使用する場合、ＪＡＫ１経路阻害薬またはその薬学的に許容可能な塩は、医薬組成物の形態で投与することができる。これらの組成物は、製薬分野において周知の方法で調製されることができ、局所治療または全身治療のどちらが望ましいか、かつ治療される領域に応じて、様々な経路によって投与されることが可能である。投与は、局所的（経皮、上皮、眼ならびに鼻腔内、膣及び直腸の送達などの粘膜へのもの）、肺性の（例えば、噴霧器などによる散剤もしくはエアロゾルの吸入もしくはガス注入によるもの；気管内または鼻腔内のもの）、経口または非経口であり得る。非経口投与には、静脈内、動脈内、皮下、腹腔内、筋肉内もしくは注射、または注入、あるいは、くも膜下腔内または脳室内などの頭蓋内の投与が含まれる。非経口投与は、単回ボーラス投与の形態または例えば、連続灌流ポンプによるものであり得る。局所的投与用の医薬組成物及び製剤には、経皮パッチ、軟膏、ローション、クリーム、ゲル、ドロップ、坐薬、スプレー、液体、及び粉末が含まれ得る。従来の薬学的担体、水性基剤、粉末基剤、油性の基剤または増粘剤などは、必須であるまたは望ましい場合がある。
【００９３】
本発明には、１種または複数種の薬学的に許容可能な担体（賦形剤）と組み合わせて、活性成分として、本明細書に記載されるＪＡＫ１経路阻害薬またはその薬学的に許容可能な塩を含有する医薬組成物も含まれる。いくつかの実施形態において、組成物は、局所的投与に好適である。この組成物を作製する際に、典型的には活性成分は賦形剤と混合され、賦形剤によって希釈されるか、または例えば、カプセル、小袋、紙もしくは他の容器の形態のそのような担体に封入される。賦形剤が希釈剤として機能する場合、活性成分のための溶媒、担体または媒質として作用する固体、半固体または液体の材料であり得る。したがって、この組成物は、錠剤、丸剤、散剤、トローチ、小袋、カシェ剤、エリキシル剤、懸濁液、乳剤、溶液、シロップ、エアロゾル（固体媒体として、または液体媒体中）、例えば最大で１０重量％の活性化合物を含む軟膏剤、ソフトゼラチンカプセル、ハードゼラチンカプセル、坐薬、無菌注射液及び無菌包装散剤の形態であってもよい。
【００９４】
製剤を調製する際は、他の成分と組み合わせる前に、活性化合物を製粉して適切な粒径を提供することができる。活性化合物が、実質的に不溶性である場合、２００メッシュ未満の粒径に製粉され得る。活性化合物が実質的に水溶性である場合、粒径を製粉によって例えば、約４０メッシュに調整して、製剤中の実質的に均一な分布を提供することができる。
【００９５】
ＪＡＫ１経路阻害薬は、湿式製粉などの既知の製粉手順を用いて製粉され、錠剤形成に対して及び他の製剤型に対して適切な粒径を得ることができる。ＪＡＫ１選択的阻害薬の精密に分けられた（ナノ粒子）調製物は、当技術分野で周知である方法によって調製されることが可能であり、例えば、国際特許出願第ＷＯ２００２／０００１９６号を参照のこと。
【００９６】
好適な賦形剤のいくつかの例としては、ラクトース、デキストロース、スクロース、ソルビトール、マンニトール、デンプン、アカシアガム、リン酸カルシウム、アルギン酸塩、トラガカント、ゼラチン、ケイ酸カルシウム、微結晶セルロース、ポリビニルピロリドン、セルロース、水、シロップ及びメチルセルロースが挙げられる。その上、製剤には、タルク、ステアリン酸マグネシウム及び鉱物油などの潤滑剤、湿潤剤、乳化剤及び懸濁剤、メチルベンゾエート及びプロピルヒドロキシベンゾエートなどの保存剤、甘味料ならびに香味料を含み得る。本発明の組成物は、当技術分野において既知の方法を用いることにより、患者に投与した後に、活性成分の迅速な、徐放性、または遅延性の放出を提供するように製剤化され得る。
【００９７】
組成物は、単位剤形で製剤化され得て、各投与量には、約５〜約１０００ｍｇ（１ｇ）、より一般的には約１００〜約５００ｍｇの活性成分が含まれる。「単位剤形」という用語は、ヒト対象及び他の哺乳動物のための単位投薬量として好適な物理的に個別の単位を指し、各単位には、好適な薬学的賦形剤に関連して、所望の治療効果を生み出すために算出された、既定量の活性物質が含まれる。
【００９８】
いくつかの実施形態において、本発明の組成物には、約５〜約５０ｍｇの活性成分が含まれる。当業者には、これが、約５〜約１０、約１０〜約１５、約１５〜約２０、約２０〜約２５、約２５〜約３０、約３０〜約３５、約３５〜約４０、約４０〜約４５または約４５〜約５０ｍｇの活性成分を含む組成物の具体化であることは、理解されよう。
【００９９】
いくつかの実施形態において、本発明の組成物は、約５０〜約５００ｍｇの活性成分を含む。当業者には、これが、約５０〜約１００、約１００〜約１５０、約１５０〜約２００、約２００〜約２５０、約２５０〜約３００、約３５０〜約４００または約４５０〜約５００ｍｇの活性成分を含む組成物の具体化であることは、理解されよう。
【０１００】
いくつかの実施形態において、本発明の組成物は、約５００〜約１０００ｍｇの活性成分を含む。当業者には、これが、約５００〜約５５０、約５５０〜約６００、約６００〜約６５０、約６５０〜約７００、約７００〜約７５０、約７５０〜約８００、約８００〜約８５０、約８５０〜約９００、約９００〜約９５０または約９５０〜約１０００ｍｇの活性成分を含む組成物の具体化であることは、理解されよう。
【０１０１】
本発明の方法及び使用において、本明細書に記載の化合物の同様の投与量を用いることが可能である。
【０１０２】
活性化合物は、広範な投与量範囲にわたって有効であり得るので、概して薬学的に有効な量で投与される。しかしながら、実際に投与される化合物の量は、通常、治療される症状、選択した投与経路、実際に投与される化合物、個々の患者の年齢、体重及び応答、患者の症状の重症度などを含む関連状況に従い、医師によって決定されることは理解されよう。
【０１０３】
錠剤などの固体組成物を調製するために、主要な活性成分を薬学的賦形剤と混合して、本発明の化合物の均質な混合物を含有する固体の予備処方組成物を形成する。これらの予備処方組成物が均質物として言及される場合、活性成分は、典型的には組成物全体に均一に分散され、それによりこの組成物は、錠剤、丸剤及びカプセルなどの等しく有効な単位剤形に容易に細分され得る。さらに、この固体の予備処方は、例えば約０．１〜約１０００ｍｇの本発明の活性成分を含む、上述した種類の単位剤形に細分される。
【０１０４】
本発明の錠剤または丸剤は、コーティングまたは他の方法で混合することで、作用を遷延させる利点をもたらす剤形を提供することができる。例えば、この錠剤または丸剤は、内側の投与成分と外側の投与成分を含むことができ、外側の成分は、内側の成分に対して外被の形態になっている。これらの２つの構成成分は、腸溶性層によって分離できる。この腸溶性層は、胃で分解しないように機能して、さらに内側の構成成分を無傷で十二指腸に到達させたり、または遅延放出を可能にしたりする。様々な材料をそのような腸溶性層またはコーティングに用いることができ、そのような材料には、多くのポリマー酸、ならびにポリマー酸とセラック、セチルアルコール及びセルロースアセテートなどの材料との混合物が含まれる。
【０１０５】
本発明の化合物及び組成物を経口または注射により投与するために組み込まれ得る液体形態には、水溶液、好適に風味付けされたシロップ、水性または油性懸濁液と、綿実油、ゴマ油、ココナッツ油またはピーナッツ油などの食用油で風味付けされた乳剤と、エリキシル剤及び類似の薬学的溶媒とが含まれる。
【０１０６】
吸入またはガス注入のための組成物には、薬学的に許容可能な水性溶媒もしくは有機溶媒またはその混合物中の溶液及び懸濁液ならびに粉末が含まれる。液体組成物または固体組成物には、上述する通りの好適な薬学的に許容可能な賦形剤が含まれ得る。いくつかの実施形態において、組成物は、局所的効果または全身効果のために経口または鼻呼吸の経路により投与される。組成物は、不活性ガスを使用することで、噴霧され得る。噴霧される溶液は、噴霧デバイスから直接的に吸入され得るか、またはその噴霧デバイスを、顔面マスク、栓塞子もしくは断続的陽圧呼吸器に装着させ得る。溶液、懸濁液、または粉末の組成物は、適切な方法で製剤を送達するデバイスから経口的または経鼻的に投与され得る。
【０１０７】
局所的製剤は、１種または複数種の従来の担体を含み得る。いくつかの実施形態において、軟膏は、水と、例えば、流動パラフィン、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、プロピレングリコール、白色ワセリンなどから選択される１種または複数種の疎水性担体を含み得る。クリームの担体組成物は、水と、グリセロールと、例えば、グリセリンモノステアレート、ＰＥＧ−グリセリンモノステアレート、及びセチルステアリルアルコールなどの１種または複数種の他の構成成分との組み合わせに基づき得る。ゲルは、イソプロピルアルコール及び水を使用して、好適には、例えばグリセロール、ヒドロキシエチルセルロースなどの他の構成成分と組み合わせて製剤化され得る。いくつかの実施形態において、局所的製剤は、少なくとも約０．１、少なくとも約０．２５、少なくとも約０．５、少なくとも約１、少なくとも約２または少なくとも約５重量％の本明細書に記載される化合物を含む。局所的製剤は、例えば、乾癬または他の皮膚症状などの選択された適応症を治療するための指示書を任意に付けた１００ｇのチューブに好適に包装され得る。
【０１０８】
患者に投与される化合物または組成物の量は、投与されるもの、予防または治療などの投与の目的、患者の状態、投与の方法などに応じて変化するであろう。治療適用では、組成物は、疾患及びその合併症の症状を治癒または少なくとも部分的に抑止するのに十分な量で、すでにその疾患に罹患している患者に投与され得る。有効用量は、治療される疾患の症状、ならびに疾患の重症度、患者の年齢、体重、及び一般状態などの因子に基づいて担当の臨床医の判断に依存する。
【０１０９】
患者に投与される組成物は、上述した医薬組成物の形態であり得る。これらの組成物は、従来の殺菌技法によって殺菌され得るかまたは無菌濾過され得る。水溶液は、そのままで使用するために包装または凍結乾燥され得るが、凍結乾燥された調製物は、投与前に無菌の水性担体と組み合わされる。化合物調製物のｐＨは、典型的には３〜１１の間、より好ましくは５〜９の間、最も好ましくは７〜８の間であろう。特定の前述の賦形剤、担体または安定剤の使用によって、薬学的塩の製剤が得られることは理解されよう。
【０１１０】
本発明の化合物の治療量は、例えば、治療を行う特定の用途、化合物の投与方法、患者の健康及び症状ならびに処方する医師の判断に従って変動し得る。医薬組成物における本明細書に記載される化合物の比率または濃度は、投与量、化学的性質（例えば、疎水性）及び投与経路を含む多くの因子に応じて変化し得る。例えば、本明細書に記載の化合物は、非経口投与のために、約０．１〜約１０％ｗ／ｖの化合物を含む水性の生理的緩衝溶液で提供されることが可能である。いくつかの典型的な投与量の範囲は、１日当たり体重の約１μｇ／ｋｇ〜約１ｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態において、投与量の範囲は、１日当たり、体重の約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇである。投与量は、疾患または障害の種類及び進行の程度、特定の患者の全体的な健康状態、選択された化合物の相対的な生物学的有効性、賦形剤の配合及びその投与経路などの変数に依存する可能性がある。有効用量は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏまたは動物モデルの試験系に由来する用量反応曲線から外挿することが可能である。
【０１１１】
本発明の組成物は、化学療法薬、ステロイド、抗炎症性化合物または免疫抑制剤などの１種または複数種の追加の医薬品をさらに含むことが可能であり、その例は本明細書に収載している。
【０１１２】
キット
本発明には、例えば、ＣＲＳなどのサイトカイン関連疾患または障害を治療及び／または予防をする際に有用な医薬キットも含まれ、そのキットには、本明細書に記載される治療上有効な量の化合物を含む医薬組成物を含有する１種または複数種の容器も含まれる。そのようなキットは、必要に応じて、例えば、１種または複数種の薬学的に許容可能な担体を含む容器、追加の容器など、１種または複数種の様々な従来の医薬キット構成要素をさらに含むことができ、当業者には容易に明らかであろう。そのような構成成分の量を示す、挿入物としてもしくはラベルとしてのいずれかの説明書、投与のガイドライン及び／またはその構成成分を混合する際のガイドラインもこのキットに含まれ得る。
【実施例】
【０１１３】
本発明を、具体的な実施例によってより詳細に記載する。以下の実施例は、例示の目的のために提供され、いかなる様式でも本発明を限定するようには意図されるものではない。当業者は、本質的に同じ結果をもたらすように変更または修正され得る、様々な重要でないパラメータを容易に認識するであろう。実施例の化合物は、本明細書に記載される少なくとも１つのアッセイにより、ＪＡＫ阻害薬であることが判明している。
【０１１４】
実施例Ａ：Ｉｎ  ｖｉｔｒｏ  ＪＡＫキナーゼアッセイ
サイトカイン関連疾患または障害を治療するために用いられ得るＪＡＫ１経路阻害薬を、Ｐａｒｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  １９９９，２６９，９４−１０４で記載される以下のｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイに従い、ＪＡＫ標的の阻害活性について試験する。Ｎ末端Ｈｉｓタグを備えたヒトＪＡＫ１（ａ．ａ．８３７〜１１４２）、ＪＡＫ２（ａ．ａ．８２８〜１１３２）及びＪＡＫ３（ａ．ａ．７８１〜１１２４）の触媒ドメインを、昆虫細胞中でバキュロウイルスを用いて発現させ、精製する。ＪＡＫ１、ＪＡＫ２またはＪＡＫ３の触媒活性を、ビオチン化ペプチドのリン酸化の測定によってアッセイした。リン酸化ペプチドを均一系時間分解蛍光（ＨＴＲＦ）によって検出した。１００ｍＭのＮａＣｌ、５ｍＭのＤＴＴ及び０．１ｍｇ／ｍＬ（０．０１％）のＢＳＡを含む５０ｍＭのトリス（ｐＨ７．８）バッファー中の、酵素、ＡＴＰ及び５００ｎＭのペプチドを含む４０μＬの反応物において、各々のキナーゼについて化合物のＩＣ５０を測定する。１ｍＭのＩＣ５０測定について、反応中のＡＴＰ濃度は１ｍＭである。反応を室温で１時間行い、次いで２０μＬの４５ｍＭＥＤＴＡ、３００ｎＭのＳＡ−ＡＰＣ、６ｎＭのＥｕ−Ｐｙ２０のアッセイバッファー液（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ、Ｂｏｓｔｏｎ、ＭＡ）により停止した。ユウロピウム標識抗体への結合を４０分間行い、ＨＴＲＦシグナルをＦｕｓｉｏｎプレートリーダー（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ、Ｂｏｓｔｏｎ、ＭＡ）で測定した。表１の化合物をこのアッセイで試験したところ、表１で見られるＩＣ５０の値を有していることが示された。
【０１１５】
実施例Ｂ：Ｂａｌｂ／ｃマウスにおける抗ＣＤ３抗体誘発サイトカイン放出症候群
ＪＡＫ１経路阻害薬は、Ｆｅｒｒａｎ，Ｃ．ｅｔ  ａｌ．Ｃｌｉｎ．Ｅｘｐ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９９１，８６，５３７−５４３に記載されているｉｎ  ｖｉｖｏアッセイに従ってＣＲＳに対する有効性について試験することが可能である。具体的には、本研究では、ＢＡＬＢ／ｃマウスにおける抗ＣＤ３抗体誘発サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）を軽減または寛解する化合物の能力を試験することが可能である。抗体、クローン１４５−２Ｃ１１は、ＣＤ３マウス分子のε鎖に特異的なイムノグロビンＧ（ＩｇＧ）ハムスターＭｏＡｂである（Ｌｅｏ，Ｏ．ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１９８７，３４，１３７４）。１４５−２Ｃ１１による処理は、脾臓Ｔ細胞の表面に高親和性ＩＬ−２受容体を誘発し、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ−α）、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−６及びインターフェロン−ガンマ（ＩＦＮ−γ）などのいくつかのサイトカインの放出をもたらす（Ｆｅｒｒａｎ，ｅｔ  ａｌ．Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９９０，２０，５０９−５１５、及びＡｌｇｒｅ，Ｍ．ｅｔ  ａｌ．，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１９９０，７０７）。これらのサイトカインの放出は、動物の行動変化（例えば、不活動、立毛など）をもたらす。
【０１１６】
Ａ．材料及び方法
【表２】
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Ａ  表１の化合物１または｛１−｛１−［３−フルオロ−２−（トリフルオロメチル）イソニコチノイル］ピペリジン−４−イル｝−３［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］アゼチジン−３−イル｝アセトニトリル及びそのアジピン酸塩の合成及び調製は、米国特許出願第２０１１／０２２４１９０号（２０１１年３月９日出願）、米国特許出願第２０１３／００６００２６号（２０１２年９月６日出願）及び米国特許出願第２０１４／０２５６９４１号（２０１４年３月５日出願）で確認でき、これらの各出願は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【０１１７】
Ｂ  実験デザイン
本研究の主な目的は、ＪＡＫ１経路阻害薬（例えば、化合物１）が、ＢＡＬＢ／ｃマウスにおいて抗ＣＤ３抗体誘発サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）を軽減または寛解させる能力を試験することであった。このワンデイ研究には、計３２匹のＢＡＬＢ／ｃマウスを用いた。試験物質を投与する前に、動物を秤量して、本実験の間モニタした。０日目、抗ＣＤ３抗体投与の１時間前に、溶媒（０．５％メチルセルロース）または化合物１を、表１Ａに詳述した通り、グループ２〜４の動物に強制経口投与（ＰＯ）により、単回投与した。グループ１は未投与の対照として機能するので、処置は行わなかった。溶媒または化合物１による前処置の１時間後に、グループ２〜４の動物には、ＣＲＳを誘発するために、静脈内注射（ＩＶ）により１０μｇの抗ＣＤ３ε抗体（クローン１４５−２Ｃ１１）を投与した。抗ＣＤ３を投与した１．５時間後に、全動物をＣＯ２吸入により安楽死させた。心臓穿刺により、Ｋ２ＥＤＴＡ採血管に全血を収集して、血漿を処理するまで氷上で保管した。血漿を収集し、サイトカインマルチプレックスを行うまで−８０℃で保存した。
【０１１８】
【表３】
2021513981.tif 000017
【０１１９】
Ｃ．実験手順
Ｉ  試験物質の前処置
０日目に、表１Ａに示すように、動物に溶媒または試験物質または化合物１を投与した。グループ２には、０．１ｍＬ／２０ｇで、ＰＯにより溶媒（０．５％メチルセルロース）の単回投与を行った。グループ３には、０．１ｍＬ／２０ｇで、ＰＯにより６０ｍｇ／ｋｇの化合物１の単回投与を行った。グループ４には、０．１ｍＬ／２０ｇで、ＰＯにより１２０ｍｇ／ｋｇの化合物１の単回投与を行った。グループ１は未投与の対照として機能するので、処置は行わなかった。
【０１２０】
ＩＩ  抗ＣＤ３ε抗体の投与
試験物質投与の１時間後、抗ＣＤ３ε抗体（クローン１４５−２Ｃ１１）を静脈内注射によりグループ２〜４に投与した。グループ２〜４の各動物には、０．１ｍＬの抗ＣＤ３ε抗体１０μｇを投与した。
【０１２１】
ＩＩＩ  生存中のモニタリング
抗ＣＤ３抗体を投与した後は、発症した全身性炎症反応による苦痛の兆候について、動物を注意深くモニタした。起き上がれなかった動物、触ると冷たい動物または瀕死の動物は、安楽死させた。瀕死の動物をＣＯ２吸入により安楽死させ、血液を心臓穿刺により採取し、血漿を保存した。
【０１２２】
ＩＶ  屠殺
抗ＣＤ３抗体投与の１時間半後に、全動物を、ＣＯ２吸入により安楽死させた。
【０１２３】
Ｖ  サンプルの収集
屠殺に際し、心臓穿刺により各動物からＫ２ＥＤＴＡ採血管に全血を収集した。血液を遠心分離し、血漿をクライオバイアルに収集した。血漿を凍結し、下流のサイトカインマルチプレックスアッセイ用に−８０℃で保存した。
【０１２４】
ＶＩ  サイトカインマルチプレックス解析
血漿サンプルを氷上で解凍し、製造元のプロトコル（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ）に従いサイトカインマルチプレックスに使用する。
【０１２５】
Ｄ  結果
化合物１は、血液区画中のＩＬ−６濃度を用量依存的に阻害した（図１）。これは、以下の実施例Ｃで説明するＣｏｎ  Ａの前臨床モデルで観察された生物活性を確認するものとして役立つ。Ｓｉｄａｋの多重比較検定を組み込んだ一元配置分散分析（対応なし）（ＡＮＯＶＡ）を、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ  （ｖｅｒｓｉｏｎ  ４．００；ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ  Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ，ＵＳＡ）を用いて行った。ｐ＜０．０５の値を有意であると見なした。
【０１２６】
実施例Ｃ：コンカナバリンＡ誘発サイトカイン放出症候群
コンカナバリンＡ（Ｃｏｎ  Ａ）は、広範な炎症性サイトカインの放出ならびにＣＤ４及びＣＤ８  Ｔ細胞の増殖をもたらす選択的Ｔリンパ球マイトジェンである。Ｃｏｎ−Ａの注射が、サイトカイン放出症候群を誘発することが文献に示されており、サイトカイン放出症候群の治療の有効性を試験する際に用いるモデルとして役立つ（Ｇａｎｔｎｅｒ，Ｆ．ａｔ  ａｌ．Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ，１９９５，２１，１９０−１９８）。マイトジェン応答は、Ｔ細胞受容体の発現に依存する。動物は、発熱、倦怠感、低血圧、低酸素、毛細血管漏出及び潜在的な多臓器毒性などの行動変化を示す。
【０１２７】
Ａ  材料及び方法
【表４】
2021513981.tif 000018
【０１２８】
Ｂ  実験デザイン
特に、本研究では、選択的ＪＡＫ１阻害薬（例えば、化合物１、表１）が、ＢＡＬＢ／ｃマウスにおいてＣｏｎ  Ａ誘発サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）を軽減または寛解させる能力を試験する。本ワンデイ研究には、計４０匹のＢＡＬＢ／ｃマウスを用いた。試験物質を投与する前に、動物を秤量して本実験の間モニタした。０日目、Ｃｏｎ  Ａ投与の６０分前に、溶媒（０．５％メチルセルロース）または化合物１（６０及び１２０ｍｇ／ｋｇ）を、表２Ａに詳述した通り、グループ２〜４の動物に強制経口投与（ＰＯ）により、単回投与した。グループ１は未投与の対照として機能するので、処置は行わなかった。溶媒または化合物１による前処置の４５分後に、グループ２〜４の動物には、ＣＲＳを誘発するために、静脈内注射（ＩＶ）により２０ｍｇ／ｋｇのＣｏｎ  Ａを投与した。Ｃｏｎ  Ａを投与した２時間後に、全動物をＣＯ２吸入により安楽死させた。心臓穿刺により、Ｋ２ＥＤＴＡ採血管に全血を収集して、血漿を処理するまで氷上で保管した。血漿を収集し、サイトカインマルチプレックスを行うまで−８０℃で保存した。
【０１２９】
【表５】
2021513981.tif 000019
【０１３０】
Ｃ．実験手順
１日目
動物を秤量し、Ｃｏｎ−Ａの用量（２０ｍｇ／ｋｇ）を算出した。
溶媒及び化合物１は、対応する用量で調製した。
【０１３１】
０日目
Ｉ  試験物質の前処置
０日目に、表２Ａに示すように、動物に溶媒または化合物１を投与した。グループ１は未投与の対照として機能するので、処置は行わなかった。グループ２には、０．１ｍＬ／２０ｇで、ＰＯにより溶媒（０．５％メチルセルロース）の単回投与を行った。グループ３には、０．１ｍＬ／２０ｇで、ＰＯにより６０ｍｇ／ｋｇの化合物１の単回投与を行った。グループ４には、０．１ｍＬ／２０ｇで、ＰＯにより１２０ｍｇ／ｋｇの化合物１の単回投与を行った。
【０１３２】
ＩＩ  Ｃｏｎ−Ａの投与
試験物質投与の６０分後、Ｃｏｎ−Ａを静脈内注射によりグループ２〜４に投与した。グループ２〜４の各動物には、０．２ｍＬのＣｏｎ−Ａ  ２０ｍｇ／ｋｇを投与した。
【０１３３】
ＩＩＩ  生存中のモニタリング
Ｃｏｎ−Ａを投与した後は、発症した全身性炎症反応による苦痛の兆候について、動物を注意深くモニタした。
【０１３４】
ＩＶ  屠殺
Ｃｏｎ−Ａ投与の２時間後、全動物をＣＯ２吸入により安楽死させた。
【０１３５】
Ｖ  サンプルの収集
屠殺に際し、心臓穿刺により各動物からＫ２ＥＤＴＡ採血管に全血を収集した。血液を遠心分離し、血漿をクライオバイアルに収集した。血漿を凍結し、下流のサイトカインマルチプレックスアッセイ用に−８０℃で保存した。
【０１３６】
ＶＩ  サイトカインマルチプレックス解析
血漿サンプルを氷上で解凍し、製造元のプロトコル（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ）に従いサイトカインマルチプレックスに使用する。
【０１３７】
Ｄ  結果
化合物１は、血液区画中のＩＬ−６濃度を用量依存的に阻害した（図２Ａ）。このサイトカインは、ＣＲＳの病態生理に関連する鍵である。Ｔ細胞由来のＩＦＮγ及びＧＭ−ＣＳＦサイトカインも有意に阻害され、化合物１がトシリズマブにより制限された作用機序（抗ＩＬ−６Ｒのみ）を超える治療可能性を有することが示唆された（図２Ｂ及び２Ｃ）。
【０１３８】
単球及び／またはマクロファージ由来サイトカインも減少した。統計的に有意な用量依存的ＩＬ−１２の減少（図３Ａ）、ならびにＩＬ−１β（図３Ｂ）及びＩＬ−１８（図３Ｃ）による治療効果の傾向が見られ、ＪＡＫ１特異的阻害がＣＲＳの病理に関与する免疫細胞種を超える治療可能性を有することが示唆された。
【０１３９】
重要なことに、サイトカインＩＬ−５（図４）は化合物１の処置による影響を受けず、ＪＡＫ１に依存せずに、ＣＲＳの病理にも関与しない。このデータは、化合物１による有効性が、広範で非特異的な免疫抑制によって媒介されないことを示唆している。
【０１４０】
Ｓｉｄａｋの多重比較検定を組み込んだ一元配置分散分析（対応なし）（ＡＮＯＶＡ）を、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ  （ｖｅｒｓｉｏｎ  ４．００、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ、Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ  Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ、ＵＳＡ）を用いて行った。ｐ＜０．０５の値を有意であると見なした。
【０１４１】
実施例Ｄ：化合物１の徐放性製剤の調製
化合物１を含む徐放性錠剤を、以下の表に示す量である賦形剤とともに調製した。プロトコルＡは、ＳＲ１錠剤に用い、プロトコルＢはＳＲ２錠剤に用い、プロトコルＣはＳＲ３錠剤及び２５ｍｇ  ＳＲ錠剤に用い、プロトコルＤはＳＲ４錠剤に用いた。これらの手順は、米国特許出願第２０１５／００６５４８４号で開示されており、これは化合物１の徐放性剤形に関するものである。
【０１４２】
プロトコルＡ
ステップ１  化合物１のアジピン酸塩、微結晶セルロース、ヒプロメロース（メトセルＫ１００  ＬＶ及びメトセルＫ４Ｍ）ならびにラクトース一水和物を個別にふるいにかける。
ステップ２  ステップ１でふるいにかけた材料を好適なブレンダーに移して混合する。
ステップ３  ステップ２の混合物を好適な造粒機に移して混合する。
ステップ４  混合しながら精製水を加える。
ステップ５  ステップ４の顆粒を好適な乾燥機に移して、ＬＯＤが３％未満になるまで乾燥させる。
ステップ６  ステップ５の顆粒をふるいにかける。
ステップ７  好適なブレンダー中でステップ６の顆粒と、ふるいにかけたステアリン酸マグネシウムを混合する。
ステップ８  好適な回転式錠剤機でステップ７の最終混合物を圧縮する。
【０１４３】
プロトコルＢ
ステップ１  化合物１のアジピン酸塩、微結晶セルロース、ヒプロメロース及びアルファ化デンプンを個別にふるいにかける。
ステップ２  ステップ１でふるいにかけた材料を好適なブレンダーに移して混合する。
ステップ３  ステップ２の混合物を好適な造粒機に移して混合する。
ステップ４  混合しながら精製水を加える。
ステップ５  ステップ４の顆粒を好適な乾燥機に移して、ＬＯＤが３％未満になるまで乾燥させる。
ステップ６  ステップ５の顆粒をふるいにかける。
ステップ７  ポリオックス、ブチル化ヒドロキシトルエン及びコロイド状二酸化ケイ素を個別にふるいにかける。
ステップ８  ステップ６の顆粒及びステップ７の材料を好適なブレンダーに移して混合する。
ステップ９  ステップ８の材料に、ふるいにかけたステアリン酸マグネシウムを加えて、ブレンドを続ける。
ステップ１０  好適な回転式錠剤機でステップ９の最終混合物を圧縮する。
【０１４４】
プロトコルＣ
ステップ１  ラクトース一水和物、化合物１のアジピン酸塩、微結晶性セルロース及びヒプロメロースを好適なふるいで個別にふるいにかける。
ステップ２  ステップ１でふるいにかけた材料を好適なブレンダーに移して混合する。
ステップ３  ステップ２の混合物を好適な造粒機に移して混合する。
ステップ４  混合しながら精製水を加える。
ステップ５  好適なふるいで、湿った顆粒をふるいにかける。
ステップ６  ステップ５の顆粒を好適な乾燥機に移して、ＬＯＤが３％未満になるまで乾燥させる。
ステップ７  ステップ６の顆粒を製粉する。
ステップ８  好適なブレンダー中でステップ７の顆粒と、ふるいにかけたステアリン酸マグネシウムを混合する。
ステップ９  好適な回転式錠剤機でステップ８の最終混合物を圧縮する。
【０１４５】
プロトコルＤ
ステップ１  アルファ化デンプン、化合物１のアジピン酸塩、ヒプロメロース及び必要な微結晶セルロースの一部を好適なふるいで個別にふるいにかける。
ステップ２  ステップ１でふるいにかけた材料を好適なブレンダーに移して混合する。
ステップ３  ステップ２の混合物を好適な造粒機に移して混合する。
ステップ４  混合しながら精製水を加える。
ステップ５  好適なふるいで、湿った顆粒をふるいにかける。
ステップ６  ステップ５の顆粒を好適な乾燥機に移して、ＬＯＤが３％未満になるまで乾燥させる。
ステップ７  ステップ６の顆粒を製粉する。
ステップ８  微結晶性セルロースの残存部分及び炭酸水素ナトリウムの半分をふるいにかける。
ステップ９  ステップ７の製粉した顆粒及びステップ８の材料を好適なブレンダーに移して混合する。
ステップ１０  炭酸水素ナトリウムの残存部分をふるいにかけてステップ９の混合物と混合する。
ステップ１１  ステアリン酸マグネシウムをふるいにかけてステップ１０の混合物と混合する。
ステップ１２  好適な回転式錠剤機でステップ１１の最終混合物を圧縮する。
【０１４６】
ＳＲ１：１００ｍｇの徐放性錠剤の組成
【表６】
2021513981.tif 000020
ａアジピン酸塩の遊離塩基への換算係数は０．７９１１である。
ｂ造粒後に追加した。
ｃ処理中に除去した。
【０１４７】
ＳＲ２：１００ｍｇの徐放性錠剤の組成
【表７】
2021513981.tif 000021
ａアジピン酸塩の遊離塩基への換算係数は０．７９１１である。
ｂ造粒後に追加した。
ｃ処理中に除去した。
【０１４８】
ＳＲ３（１００ｍｇ）：１００ｍｇの徐放性錠剤の組成
【表８】
2021513981.tif 000022
ａアジピン酸塩の遊離塩基への換算係数は０．７９１１である。
ｂ造粒後に追加した。
ｃ処理中に除去した。
【０１４９】
ＳＲ４：１００ｍｇの徐放性錠剤の組成
【表９】
2021513981.tif 000023
ａアジピン酸塩の遊離塩基への換算係数は０．７９１１である。
ｂ造粒後に追加した。
ｃ処理中に除去した。
ｄ造粒前に一部を、造粒後にも一部を追加した。
【０１５０】
２５ｍｇ  ＳＲ：２５ｍｇの徐放性錠剤の組成
【表１０】
2021513981.tif 000024
ａアジピン酸塩の遊離塩基への換算係数は０．７９１１である。
ｂ造粒後に追加した。
ｃ処理中に除去した。
【０１５１】
本明細書で説明されるものに加えて、本発明の様々な修正は、前述の説明から当業者には明らかとなるであろう。そのような修正は、添付の特許請求の範囲内にも及ぶようにも意図されている。本出願において引用される全ての特許、特許出願及び刊行物を含む各参考文献は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【図１】
2021513981.tif 000025
【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図２Ｃ】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図３Ｃ】
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【図４】
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【国際調査報告】
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