(57)【要約】本明細書の開示は、概して、ハンチントン病を治療するまたはその発症を阻害する方法に関する。この方法は、ハンチントン病を有するかまたは有するリスクのある対象を選択すること、及び、対象においてハンチントン病を治療するのにまたはその発症を阻害するのに有効な条件下で、本明細書に記載の１つ以上の遺伝子またはそれらがコードするタンパク質の１つ以上の調節因子を対象に投与することを含む。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ハンチントン病を治療するまたはその発症を阻害する方法であって、
ハンチントン病を有するかまたは有するリスクのある対象を選択すること；ならびに
前記選択した対象に、ＢＭＰ２、ＬＩＮＧＯ１、ＭＡＧ、ＮＫＸ２−２、ＮＲ２Ｅ１、ＮＴＲＫ３、ＯＬＩＧ２、ＳＥＲＰＩＮＥ２、ＳＩＲＴ２、及びＴＣＦ７Ｌ２からなる群から選択されるグリア細胞分化調節遺伝子またはそれらがコードするタンパク質の１つ以上の調節因子を、前記対象においてハンチントン病を治療するのにまたはその発症を阻害するのに有効な条件下で投与すること
を含む、前記方法。
【請求項２】
前記１つ以上の調節因子が、Ｈｈ−Ａｇ１．１、Ｈｈ−Ａｇ１．２、Ｈｈ−Ａｇ１．３、Ｈｈ−Ａｇ１．４、Ｈｈ−Ａｇ１．５、２−アミノ−４−（３，４−（メチレンジオキシ）ベンジルアミノ）−６−（３−メトキシフェニル）ピリミジン（２−ＡＭＢＭＰ）、クルクミン、シンバスタチン、オピシヌマブ、ＧＳＫ−２４９３２０、ラウリル硫酸ナトリウム、レパグリニド、アルチラチニブ、ｃｈｅｍｂｌ２００７４２１、ＰＬＸ−３３９７ラディシコール、チロキシン、エントレクチニブ、ＬＯＸＯ−１０１、ＣＥＰ−２５６３、レスタウルチニブ、ＰＬＸ−７４８６、ＡＺＤ−６９１８、ＡＺＤ−７４５１  ミドスタウリン、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
ハンチントン病を治療するまたはその発症を阻害する方法であって、
ハンチントン病を有するかまたは有するリスクのある対象を選択すること；ならびに
前記選択した対象に、ＦＡ２Ｈ、ＧＡＬ３ＳＴ１、ＭＡＧ、ＭＢＰ、ＭＹＲＦ、ＮＦＡＳＣ、ＯＬＩＧ２、ＯＭＧ、ＰＬＬＰ、ＰＯＵ３Ｆ２、ＳＩＲＴ２、ＳＬＣ８Ａ３、ＴＣＦ７Ｌ２、ＴＦ、及びＵＧＴ８からなる群から選択される有髄化関連遺伝子またはそれらがコードするタンパク質の１つ以上の調節因子を、前記対象においてハンチントン病を治療するのにまたはその発症を阻害するのに有効な条件下で投与すること
を含む、前記方法。
【請求項４】
前記１つ以上の調節因子が、２−アミノ−４−（３，４−（メチレンジオキシ）ベンジルアミノ）−６−（３−メトキシフェニル）ピリミジン（２−ＡＭＢＭＰ）、クルクミン、シンバスタチン、ＧＳＫ−２４９３２０、ラウリル硫酸ナトリウム、レパグリニド、シクロスポリン、インターフェロンβ−１Ａ、プレドニゾン、ケルセチン、ルチン、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
ハンチントン病を治療するまたはその発症を阻害する方法であって、
ハンチントン病を有するかまたは有するリスクのある対象を選択すること；ならびに
前記選択した対象に、ＦＡ２Ｈ、ＧＬＩ３、ＬＩＮＧＯ１、ＭＹＲＦ、ＮＫＸ２−２、ＯＬＩＧ１、ＯＬＩＧ２、ＯＭＧ、ＳＩＲＴ２、ＳＬＣ８Ａ３、ＳＯＸ１０、及びＴＣＦ７Ｌ２からなる群から選択されるオリゴデンドロサイト分化遺伝子またはそれらがコードするタンパク質の１つ以上の調節因子を、前記対象においてハンチントン病を治療するのにまたはその発症を阻害するのに有効な条件下で投与すること
を含む、前記方法。
【請求項６】
前記１つ以上の調節因子が、Ｈｈ−Ａｇ１．１、Ｈｈ−Ａｇ１．２、Ｈｈ−Ａｇ１．３、Ｈｈ−Ａｇ１．４、Ｈｈ−Ａｇ１．５、２−アミノ−４−（３，４−（メチレンジオキシ）ベンジルアミノ）−６−（３−メトキシフェニル）ピリミジン（２−ＡＭＢＭＰ）、クルクミン、シンバスタチン、オピシヌマブ、ラウリル硫酸ナトリウム、レパグリニド、ベムラフェニブ、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
ハンチントン病を治療するまたはその発症を阻害する方法であって、
ハンチントン病を有するかまたは有するリスクのある対象を選択すること；ならびに
前記選択した対象に、ＢＭＰ２、ＬＩＮＧＯ１、ＭＡＧ、ＭＹＣ、ＮＫＸ２−２、ＮＲ２Ｅ１、ＮＴＲＫ３、ＯＬＩＧ２、ＳＥＲＰＩＮＥ２、ＳＩＲＴ２、ＳＯＸ１０、ＴＣＦ７Ｌ２、ＴＦ、及びＺＣＣＨＣ２４からなる群から選択されるグリア新生調節遺伝子またはそれらがコードするタンパク質の１つ以上の調節因子を、前記対象においてハンチントン病を治療するのにまたはその発症を阻害するのに有効な条件下で投与すること
を含む、前記方法。
【請求項８】
前記１つ以上の調節因子が、Ｈｈ−Ａｇ１．１、Ｈｈ−Ａｇ１．２、Ｈｈ−Ａｇ１．３、Ｈｈ−Ａｇ１．４、Ｈｈ−Ａｇ１．５、２−アミノ−４−（３，４−（メチレンジオキシ）ベンジルアミノ）−６−（３−メトキシフェニル）ピリミジン（２−ＡＭＢＭＰ）、クルクミン、シンバスタチン、オピシヌマブ、ＧＳＫ−２４９３２０、ラウリル硫酸ナトリウム、ベムラフェニブ、レパグリニド、ナドロパリンカルシウム、４'−ヒドロキシタモキシフェン、アザシチジン、チオグアニン、アシビン、アドゼレシン、アミホスチン、アミノプテリン、抗生物質、ビゼレシン、ブロモクリプチン、ブリオスタチン、カルシトリオール、ジエチルスチルベストロール、エルサミトルシン、エストロン、葉酸、グルタミン、ヒポキサンチン、イマチニブ、シルモスチン、メラトニン、メチルプレドニゾロン、Ｎ−メチル−ｎ−ニトロソウレア、ノボビオシン、Ｃｈｅｍｂｌ３５４８２、ホルボールミリステートアセテート、プレドニゾン、キナプリル、ボリノスタット、スリンダック、トロンビン、チロトロピン、βニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸ナトリウム、トログリタゾン、ベラパミル、Ｃｈｅｍｂｌ１０００１４、Ｃｈｅｍｂｌ１２１３４９２、絨毛性ゴナドトロピン、ペリリルアルコール、ＡＭＧ−９００、アリセルチブ、ダイナシクリブ、ロニシクリブ、テモゾロミド、プレキサセルチブ、アルチラチニブ、ｃｈｅｍｂｌ２００７４２１、ＰＬＸ−３３９７、ラジシコラ、チロキシン、エントレクチニブ、ＬＯＸＯ−１０１、ＣＥＰ−２５６３、レスタウルチニブ、ＰＬＸ−７４８６、ＡＺＤ−６９１８、ＡＺＤ−７４５１、ミドスタウリン、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
ハンチントン病を治療するまたはその発症を阻害する方法であって、
ハンチントン病を有するかまたは有するリスクのある対象を選択すること；ならびに
前記選択した対象に、ＦＡ２Ｈ、ＧＡＬ３ＳＴ１、ＭＡＧ、ＭＢＰ、ＭＹＲＦ、ＮＦＡＳＣ、ＯＬＩＧ２、ＯＭＧ、ＰＬＬＰ、ＰＯＵ３Ｆ２、ＳＩＲＴ２、ＳＬＣ８Ａ３、ＴＣＦ７Ｌ２、ＴＦ、及びＵＧＴ８からなる群から選択されるニューロン被鞘遺伝子またはそれらがコードするタンパク質の１つ以上の調節因子を、前記対象においてハンチントン病を治療するのにまたはその発症を阻害するのに有効な条件下で投与すること
を含む、前記方法。
【請求項１０】
前記１つ以上の調節因子が、２−アミノ−４−（３，４−（メチレンジオキシ）ベンジルアミノ）−６−（３−メトキシフェニル）ピリミジン（２−ＡＭＢＭＰ）、クルクミン、シンバスタチン、ＧＳＫ−２４９３２０、シクロスポリン、インターフェロンβ−１Ａ、プレドニゾン、ケルセチン、ルチン、ラウリル硫酸ナトリウム、レパグリニド、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
ハンチントン病を治療するまたはその発症を阻害する方法であって、
ハンチントン病を有するかまたは有するリスクのある対象を選択すること；ならびに
前記選択した対象に、ＡＬＣＡＭ、ＢＣＬ１１Ｂ、ＤＳＣＡＭ、ＦＯＸＤ１、ＧＡＳ１、ＧＬＩ３、ＨＯＸＡ１、ＨＯＸＡ２、ＭＮＸ１、ＮＦＡＳＣ、ＰＬＸＮＣ１、ＰＲＫＣＱ、ＰＴＰＲＯ、ＲＯＢＯ２、ＳＥＭＡ６Ｂ、ＵＮＣ５Ａ、ＶＡＸ１、及びＷＮＴ７Ｂからなる群から選択される軸索ガイダンス遺伝子またはそれらがコードするタンパク質の１つ以上の調節因子を、前記対象においてハンチントン病を治療するのにまたはその発症を阻害するのに有効な条件下で投与すること
を含む、前記方法。
【請求項１２】
前記１つ以上の調節因子が、２−アミノ−４−（３，４−（メチレンジオキシ）ベンジルアミノ）−６−（３−メトキシフェニル）ピリミジン（２−ＡＭＢＭＰ）、クルクミン、シンバスタチン、フルオロウラシル、ＣＥＰ−２５６３、スタウロスポリン、Ｃｈｅｍｂｌ３６９５０７、デクスホスホセリン、チクロピジン、ＧＳＫ−６９０６９３、ソトラスタウリン、（７Ｓ）−ヒドロキシル−スタウロスポリン、ミドスタウリン、ケルセチン、ブリオスタチン、酢酸ソトラスタウリン、インゲノールメブテート、カルボプラチン、パクリタキセル、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
ハンチントン病を治療するまたはその発症を阻害する方法であって、
ハンチントン病を有するかまたは有するリスクのある対象を選択すること；ならびに
前記選択した対象に、ＡＬＣＡＭ、ＢＣＬ１１Ｂ、ＤＳＣＡＭ、ＦＯＸＤ１、ＧＡＳ１、ＧＬＩ３、ＨＯＸＡ１、ＨＯＸＡ２、ＭＮＸ１、ＮＦＡＳＣ、ＰＬＸＮＣ１、ＰＲＫＣＱ、ＰＴＰＲＯ、ＲＯＢＯ２、ＳＥＭＡ６Ｂ、ＵＮＣ５Ａ、ＶＡＸ１、及びＷＮＴ７Ｂからなる群から選択されるニューロン突起ガイダンス遺伝子またはそれらがコードするタンパク質の１つ以上の調節因子を、前記対象においてハンチントン病を治療するのにまたはその発症を阻害するのに有効な条件下で投与すること
を含む、前記方法。
【請求項１４】
前記１つ以上の調節因子が、２−アミノ−４−（３，４−（メチレンジオキシ）ベンジルアミノ）−６−（３−メトキシフェニル）ピリミジン（２−ＡＭＢＭＰ）、クルクミン、シンバスタチン、フルオロウラシル、ＣＥＰ−２５６３、スタウロスポリン、Ｃｈｅｍｂｌ３６９５０７、デクスホスホセリン、チクロピジン、ＧＳＫ−６９０６９３、ソトラスタウリン、（７Ｓ）−ヒドロキシル−スタウロスポリン、ミドスタウリン、ケルセチン、ブリオスタチン、酢酸ソトラスタウリン、インゲノールメブテート、カルボプラチン、パクリタキセル、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
ハンチントン病を治療するまたはその発症を阻害する方法であって、
ハンチントン病を有するかまたは有するリスクのある対象を選択すること；ならびに
前記選択した対象に、ＡＤＧＲＢ１、ＡＬＣＡＭ、ＢＣＬ１１Ｂ、ＣＡＣＮＡ１Ａ、ＤＳＣＡＭ、ＦＯＸＤ１、ＧＡＳ１、ＧＬＩ３、ＨＯＸＡ１、ＨＯＸＡ２、ＬＩＮＧＯ１、ＬＲＲＣ４Ｃ、ＭＡＧ、ＭＢＰ、ＭＮＸ１、ＮＦＡＳＣ、ＮＲ２Ｅ１、ＮＴＮＧ１、ＮＴＲＫ３、ＯＭＧ、ＰＬＸＮＣ１、ＰＯＵ３Ｆ２、ＰＲＫＣＱ、ＰＴＰＲＯ、ＲＯＢＯ２、ＳＥＭＡ６Ｂ、ＳＬＩＴＲＫ２、ＳＬＩＴＲＫ３、ＳＮＡＰ９１、ＵＮＣ５Ａ、ＶＡＸ１、及びＷＮＴ７Ｂからなる群から選択される軸索新生遺伝子またはそれらがコードするタンパク質の１つ以上の調節因子を、前記対象においてハンチントン病を治療するのにまたはその発症を阻害するのに有効な条件下で投与すること
を含む、前記方法。
【請求項１６】
前記１つ以上の調節因子が、２−アミノ−４−（３，４−（メチレンジオキシ）ベンジルアミノ）−６−（３−メトキシフェニル）ピリミジン（２−ＡＭＢＭＰ）、クルクミン、シンバスタチン、オピシヌマブ、ＧＳＫ−２４９３２０、シクロスポリン、インターフェロンβ−１Ａ、プレドニゾン、ケルセチン、ルチン、フルオロウラシル、ＣＥＰ−２５６３、スタウロスポリン、Ｃｈｅｍｂｌ３６９５０７、デクスホスホセリン、チクロピジン、ＧＳＫ−６９０６９３、ソトラスタウリン、（７Ｓ）−ヒドロキシル−スタウロスポリン、ミドスタウリン、ブリオスタチン、酢酸ソトラスタウリン、インゲノールメブテート、カルボプラチン、パクリタキセル、プレガバリン、ベラパミル、ベプリジル、セレコキシブ、ニソルジピン、ガバペンチン、ガバペンチンエナカルビル、エルペトリジン、アタガバリン、ベプリジル塩酸塩、イマガバリン、アルチラチニブ、ｃｈｅｍｂｌ２００７４２１、ＰＬＸ−３３９７、ラジシコラ、チロキシン、エントレクチニブ、Ｌｏｘｏ−１０１、ＣＥＰ−２５６３、レスタウルチニブ、ＰＬＸ−７４８６、ＡＺＤ−６９１８、ＡＺＤ−７４５１、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
ハンチントン病を治療するまたはその発症を阻害する方法であって、
ハンチントン病を有するかまたは有するリスクのある対象を選択すること；ならびに
前記選択した対象に、ＡＤＧＲＢ１、ＡＬＣＡＭ、ＢＣＬ１１Ｂ、ＣＡＣＮＡ１Ａ、ＤＳＣＡＭ、ＦＯＸＤ１、ＧＡＳ１、ＧＬＩ３、ＨＯＸＡ１、ＨＯＸＡ２、ＬＩＮＧＯ１、ＬＲＲＣ４Ｃ、ＭＡＧ、ＭＢＰ、ＭＮＸ１、ＮＥＦＭ、ＮＦＡＳＣ、ＮＲ２Ｅ１、ＮＴＮＧ１、ＮＴＲＫ３、ＯＭＧ、ＰＬＸＮＣ１、ＰＯＵ３Ｆ２、ＰＲＫＣＱ、ＰＴＰＲＯ、ＲＯＢＯ２、ＲＴＮ４ＲＬ２、ＳＥＭＡ６Ｂ、ＳＬＩＴＲＫ２、ＳＬＩＴＲＫ３、ＳＮＡＰ９１、ＵＮＣ５Ａ、ＶＡＸ１、及びＷＮＴ７Ｂからなる群から選択される軸索発達遺伝子またはそれらがコードするタンパク質の１つ以上の調節因子を、前記対象においてハンチントン病を治療するのにまたはその発症を阻害するのに有効な条件下で投与すること
を含む、前記方法。
【請求項１８】
前記１つ以上の調節因子が、２−アミノ−４−（３，４−（メチレンジオキシ）ベンジルアミノ）−６−（３−メトキシフェニル）ピリミジン（２−ＡＭＢＭＰ）、クルクミン、シンバスタチン、オピシヌマブ、デクスホスホセリン、フルオロウラシル、ＣＥＰ−２５６３、スタウロスポリン、Ｃｈｅｍｂｌ３６９５０７、ＧＳＫ−２４９３２０、チクロピジン、ＧＳＫ−６９０６９３、ソトラスタウリン、（７Ｓ）−ヒドロキシル−スタウロスポリン、ミドスタウリン、ケルセチン、ブリオスタチン、ソトラスタウリン酢酸、インゲノールメブテート、カルボプラチン；パクリタキセル、プレガバリン、ベラパミル、ベプリジル、セレコキシブ、ニソルジピン、ガバペンチン、ガバペンチンエナカルビル、エルペトリジン、アタガバリン、塩酸ベプリジル、イマガバリン、アルチラチニブ、ｃｈｅｍｂｌ２００７４２１、ＰＬＸ−３３９７、ラジシコラ、チロキシン、エントレチチニブ、Ｌｏｘｏ−１０１、ＣＥＰ−２５６３、レスタウルチニブ、ＰＬＸ−７４８６、ＡＺＤ−６９１８、ＡＺＤ−７４５１、シクロスポリン、インターフェロンβ−１Ａ、プレドニゾン、ルチン、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
ハンチントン病を治療するまたはその発症を阻害する方法であって、
ハンチントン病を有するかまたは有するリスクのある対象を選択すること；ならびに
前記選択した対象に、ＡＤＧＲＢ１、ＡＬＣＡＭ、ＢＣＬ１１Ｂ、ＣＡＣＮＡ１Ａ、ＣＡＭＫ２Ａ、ＤＳＣＡＭ、ＥＨＤ３、ＦＯＸＤ１、ＧＡＳ１、ＧＬＩ３、ＨＯＸＡ１、ＨＯＸＡ２、ＫＡＮＫ１、ＬＩＮＧＯ１、ＬＲＲＣ４Ｃ、ＭＡＧ、ＭＢＰ、ＭＮＸ１、ＮＥＤＤ４Ｌ、ＮＥＵＲＬ１、ＮＦＡＳＣ、ＮＲ２Ｅ１、ＮＴＮＧ１、ＮＴＲＫ３、ＯＭＧ、ＰＣＤＨ１５、ＰＬＸＮＣ１、ＰＯＵ３Ｆ２、ＰＲＫＣＱ、ＰＴＰＲＯ、ＲＯＢＯ２、ＳＥＭＡ６Ｂ、ＳＧＫ１、ＳＬＩＴＲＫ２、ＳＬＩＴＲＫ３、ＳＮＡＰ９１、ＳＮＸ１０、ＵＧＴ８、ＵＮＣ５Ａ、ＶＡＸ１、及びＷＮＴ７Ｂからなる群から選択される細胞突起形態形成遺伝子またはそれらがコードするタンパク質の１つ以上の調節因子を、前記対象においてハンチントン病を治療するのにまたはその発症を阻害するのに有効な条件下で投与すること
を含む、前記方法。
【請求項２０】
前記１つ以上の調節因子が、２−アミノ−４−（３，４−（メチレンジオキシ）ベンジルアミノ）−６−（３−メトキシフェニル）ピリミジン（２−ＡＭＢＭＰ）、クルクミン、シンバスタチン、オピシヌマブ、ＧＳＫ−２４９３２０、シクロスポリン、インターフェロンβ−１Ａ、プレドニゾン、ケルセチン、ルチン、デクスホスホセリン、フルオロウラシル、ＣＥＰ−２５６３、スタウロスポリン、Ｃｈｅｍｂｌ３６９５０７、チクロピジン、ＧＳＫ−６９０６９３、ソトラスタウリン、（７Ｓ）−ヒドロキシル−スタウロスポリン、ミドスタウリン、ブリオスタチン、酢酸ソトラスタウリン、インゲノールメブテート、カルボプラチン、パクリタキセル、プレガバリン、ベラパミル、ベプリジル、セレコキシブ、ニソルジピン、ガバペンチン、ガバペンチンエナカルビル、エルペトリジン、アタガバリン、ベプリジル塩酸塩、イマガバリン、アルチラチニブ、Ｃｈｅｍｂｌ２００７４２１、ＰＬＸ−３３９７、ラジシコラ、チロキシン、エントレクチニブ、Ｌｏｘｏ−１０１、ＣＥＰ−２５６３、レスタウルチニブ、ＰＬＸ−７４８６、ＡＺＤ−６９１８、ＡＺＤ−７４５１、ヒドロクロロチアジド、ｃｈｅｍｂｌ５４９９０６、ｃｈｅｍｂｌ５５０７９５、塩化ナトリウム、ＧＳＫ−６５０３９４、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
ハンチントン病を治療するまたはその発症を阻害する方法であって、
ハンチントン病を有するかまたは有するリスクのある対象を選択すること；ならびに
前記選択した対象に、ＡＤＧＲＢ１、ＡＤＧＲＬ３、ＢＣＡＮ、ＣＡＬＢ１、ＣＡＭＫ２Ａ、ＦＧＦ１４、ＬＲＲＴＩＭ１、ＮＣＤＮ、ＮＥＴＯ１、ＮＥＵＲＬ１、ＮＲ２Ｅ１、ＮＴＲＫ３、ＰＰＦＩＡ３、ＲＯＢＯ２、ＳＥＲＰＩＮＥ２、ＳＨＩＳＡ７、ＳＩＸ４、ＳＬＣ８Ａ３、ＳＬＩＴＲＫ２、ＳＬＩＴＲＫ３、及びＳＹＮＤＩＧ１からなる群から選択されるシナプス構造調節遺伝子もしくはシナプス活性調節遺伝子またはそれらがコードするタンパク質の１つ以上の調節因子を、前記対象においてハンチントン病を治療するのにまたはその発症を阻害するのに有効な条件下で投与すること
を含む、前記方法。
【請求項２２】
前記１つ以上の調節因子が、デクスホスホセリン、アルチラチニブ、ｃｈｅｍｂｌ２００７４２１、ＰＬＸ−３３９７、ラジシコラ、チロキシン、エントレクチニブ、Ｌｏｘｏ−１０１、ＣＥＰ−２５６３、レスタウルチニブ、ＰＬＸ−７４８６、ＡＺＤ−６９１８、ＡＺＤ−７４５１、ミドスタウリン、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
ハンチントン病を治療するまたはその発症を阻害する方法であって、
ハンチントン病を有するかまたは有するリスクのある対象を選択すること；ならびに
前記選択した対象に、ＢＣＡＮ、ＣＡＣＮＡ１Ａ、ＣＡＣＮＡ１Ｇ、ＣＡＬＢ１、ＣＡＭＫ２Ａ、ＣＨＲＮＡ４、ＦＧＦ１２、ＦＧＦ１４、ＧＲＩＡ２、ＧＲＩＡ４、ＧＲＩＤ２、ＧＲＩＫ４、ＫＣＮＤ２、ＬＲＲＴＭ１、ＭＢＰ、ＭＰＺ、ＮＣＤＮ、ＮＥＴＯ１、ＮＥＵＲＬ１、ＮＯＶＡ１、ＮＲ２Ｅ１、Ｐ２ＲＸ７、ＰＤＥ７Ｂ、ＰＬＣＬ１、ＰＰＦＩＡ３、ＲＡＰＧＥＦ４、ＲＧＳ８、ＲＩＴ２、Ｓ１ＰＲ２、ＳＥＲＰＩＮＥ２、ＳＨＩＳＡ７、ＳＬＣ１８Ａ１、ＳＬＣ１Ａ１、ＳＬＣ１Ａ２、ＳＬＣ８Ａ３、ＳＮＡＰ９１、ＳＮＰＨ、及びＳＹＴ６からなる群から選択されるシナプスシグナル伝達経路遺伝子またはそれらがコードするタンパク質の１つ以上の調節因子を、前記対象においてハンチントン病を治療するのにまたはその発症を阻害するのに有効な条件下で投与すること
を含む、前記方法。
【請求項２４】
前記１つ以上の調節因子が、プレガバリン、ベラパミル、ベプリジル、セレコキシブ、ニソルジピン、ガバペンチン、ガバペンチンエナカルビル、エルペトリジン、アタガバリン、ベプリジル塩酸塩、イマガバリン、シクロスポリン、インターフェロンβ−１Ａ、プレドニゾン、ケルセチン、ルチン、ニコチンポラクリレックス、タルブタール、ブタバルビタール、ブタルビタール、セコバルビタール、メタルビタール、チオペンタール；プリミドン、メホバルビタール、フェノバルビタール、バレニクリン、アモバルビタール、アプロバルビタール、ブテタール、ヘプタバルビタール、ヘキソバルビタール、バルビタール、ポザニクリン、シチシン、リバニクリン、エピバチジン、ｃｈｅｍｂｌ１８７６２１９、ｃｈｅｍｂｌ３１０３９８８、アトラクリウム、ｃｈｅｍｂｌ４９０１５３、ヘキサメトニウム、ｃｈｅｍｂｌ４０７２１７、ＴＣ−２２１６、ＡＢＴ−５６０、イスプロニクリン、ソフィニクリン、ＴＣ−６４９９、ＡＺＤ１４４６、ＣＰ−６０１９２７、デクスメカミラミン、ニコチン、バレニクリン酒石酸塩、メシル酸ベンズトロピン、ペントリニウム、ａｚｄ０３２８、ブラダニクリン、ペントバルビタール、ｃｈｅｍｂｌ１２０１１３５、デキセファロキサン、メカミラミン（ｃｈｅｍｂｌ２６７９３６）、ジアニクリン、アルチニクリン、トリメタファン、オレイン酸、テバニクリントシレート、ミバンパトル、ブテタール、（ｒ，ｓ）−ａｍｐａ、ｃｈｅｍｂｌ１２３１３２、アニラセタム、ｃｈｅｍｂｌ１３６８００、ｃｈｅｍｂｌ１２５５６４８、シクロチアジド、ｃｈｅｍｂｌ７７８６２、ｃｈｅｍｂｌ３３４９２０、ｃｈｅｍｂｌ１０９７９３９、ピラセタム、ｃｈｅｍｂｌ３２０６４２、ｃｈｅｍｂｌ２６５３０１、ｇｙｋｉ−５２４６６、ｎｂｑｘ、ｃｈｅｍｂｌ２２２４１８、テザンパネル、（ｓ）−ａｍｐａ、ｃｈｅｍｂｌ５９４８４０、ｃｈｅｍｂｌ１２１９１５、キスカル酸、ｃｈｅｍｂｌ３３７５７７、ｃｈｅｍｂｌ２７１３０、ｄｎｑｘ、ｃｈｅｍｂｌ３３３９６４、（ｓ）−ウィラルジイン、ｃｈｅｍｂｌ２８４７２、タランパネル、ペランパネル、イランパネル、ＣＸ１７３９、ダソランパネル、ベカンパネル、ファラムパトル、ｍｋ−８７７７、ゾナンパネル、ペントバルビタール、ｐｆ−０４９５８２４２、セルランパネル、ダルファンプリジン、グアニジン塩酸塩、テディサミル、ネリスピルジン、ｅｖｔ４０１、アデノシン三リン酸、ｃｈｅｍｂｌ３３５５５０、チェレリスリン、アセブトロール、モクロベミド、イベルメクチン、ｃｈｅｍｂ３７７２１９、ｃｈｅｍｂｌ２５５７８７、メチルクロチアジド、ｃｈｅｍｂｌ５５０６３７、オルトバナジン酸ナトリウム、ｃｈｅｍｂｌ２３３８３５２、ベンゾナテート、ＧＳＫ１４８２１６０、ＡＺＤ９０５６、ＣＥ２２４５３５、ジフィリン、ｃｈｅｍｂｌ４８４９２８、ジピリダモール、フラボキサート塩酸塩、ペントキシフィリン、キナクリン、ｃｈｅｍｂｌ２３１３６４６、ｃｈｅｍｂｌ５７０３５２、オザニモド、ｃｈｅｍｂｌ２２５１５５、ｃｈｅｍｂｌ１３６８７５８、フィンゴリモド塩酸塩、アミセリモド塩酸塩、レセルピン、ノルエピネフリン、ｃｈｅｍｂｌ１２６５０６、メタンフェタミン、ケ���ンセリン、テトラベナジン、Ｌ−グルタミン酸、ジヒドロカイニン酸、２ｓ，４ｒ−４−メチルグルタミン酸、ｏ−ベンジル−ｌ−セリン、ｃｈｅｍｂｌ１６２８６６９、テザンパネル、ドーモイ酸、ダイシハーバイン、カイニン酸、メサラミン、トピラマート、アスパラギン酸、クロザピン、アルコール、ハロペリドール、ワートマニン、オランザピン、ホルボールミリステートアセテート、リスペリドン、リドカイン、ミベフラジル二塩酸塩、トリメタジオン、シンナリジン、エトスクシミド、ゾニサミド、アナンダミド、ミベフラジル、ｃｈｅｍｂｌ１６８４９５４、フルナリジン、メスキシミド、フェンスクシミド、パラメタジオン、セレコキシブ、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
ハンチントン病を治療するまたはその発症を阻害する方法であって、
ハンチントン病を有するかまたは有するリスクのある対象を選択すること；ならびに
前記選択した対象に、ＡＤＧＲＢ１、ＢＣＡＮ、ＢＣＡＳ１、ＣＡＣＮＡ１Ａ、ＣＡＬＢ１、ＣＡＭＫ２Ａ、ＣＨＲＮＡ４、ＣＴＴＮＢＰ２、ＤＳＣＡＭ、ＧＲＩＡ２、ＧＲＩＤ１、ＧＲＩＤ２、ＧＲＩＫ４、ＨＣＮ２、ＫＣＮＤ２、ＬＧＩ３、ＬＲＲＣ４Ｃ、ＬＲＲＴＭ１、ＮＥＴＯ１、ＮＥＵＲＬ１、ＮＴＭ、Ｐ２ＲＸ７、ＰＣＤＨ１５、ＰＤＥ４Ｂ、ＰＰＦＩＡ３、ＰＲＩＭＡ１、ＰＲＫＣＱ、ＰＴＰＲＯ、ＲＡＰＧＥＦ４、ＳＥＲＰＩＮＥ２、ＳＨＩＳＡ７、ＳＬＣ１７Ａ８、ＳＬＣ１８Ａ１、ＳＬＣ１Ａ１、ＳＬＣ１Ａ２、ＳＬＣ８Ａ３、ＳＮＡＰ９１、ＳＮＰＨ、ＳＹＮＤＩＧ１、及びＳＹＴ６からなる群から選択されるシナプス遺伝子またはそれらがコードするタンパク質の１つ以上の調節因子を、前記対象においてハンチントン病を治療するのにまたはその発症を阻害するのに有効な条件下で投与すること
を含む、前記方法。
【請求項２６】
前記１つ以上の調節因子が、デクスホスホセリン、プレガバリン、ベラパミル、ベプリジル、セレコキシブ、ニソルジピン、ガバペンチン、ガバペンチンエナカルビル、エルペトリジン、アタガバリン、ベプリジル塩酸塩、イマガバリン、ミバンパトル、ブテタール、ブタバルビタール、ブタルビタール、タルブタール、セコバルビタール、メタルビタール、チオペンタール、プリミドン、メホバルビタール、フェノバルビタール、（ｒ，ｓ）−ａｍｐａ、ｃｈｅｍｂｌ１２３１３２、アニラセタム、ｃｈｅｍｂｌ１３６８００、ｃｈｅｍｂｌ１２５５６４８、シクロチアジド、ｃｈｅｍｂｌ７７８６２、ｃｈｅｍｂｌ３３４９２０、ｃｈｅｍｂｌ１０９７９３９、ピラセタム、ｃｈｅｍｂｌ３２０６４２、ｃｈｅｍｂｌ２６５３０１、ｇｙｋｉ−５２４６６、ｎｂｑｘ、ｃｈｅｍｂｌ２２２４１８、テザンパネル、アモバルビタール、アプロバルビタール、ヘプタバルビタール、ヘキソバルビタール、バルビタール、（ｓ）−ａｍｐａ、ｃｈｅｍｂｌ５９４８４０、ｃｈｅｍｂｌ１２１９１５、キスカル酸、ｃｈｅｍｂｌ３３７５７７、ｃｈｅｍｂｌ２７１３０、ｄｎｑｘ、ｃｈｅｍｂｌ３３３９６４、（ｓ）−ウィラルジイン、ｃｈｅｍｂｌ２８４７２、タランパネル、ペランパネル、イランパネル、ｃｘ１７３９、ダソランパネル、ベカンパネル、ファランパトル、ｍｋ−８７７７、ゾナンパネル、トピラマート、ペントバルビタール、ｐｆ−０４９５８２４２、セルランパネル、ニコチンポラクリレックス、バレニクリン、ブテタール、ポザニクリン、シチシン、リバニクリン、エピバチジン、ｃｈｅｍｂｌ１８７６２１９、ｃｈｅｍｂｌ３１０３９８８、アトラクリウム、ｃｈｅｍｂｌ４９０１５３、ヘキサメトニウム、ｃｈｅｍｂｌ４０７２１７、ＴＣ−２２１６、ＡＢＴ−５６０、イスプロニクリン、ソフィニクリン、ＴＣ−６４９９、ＡＺＤ１４４６、ｃｐ−６０１９２７、デクスメカミラミン、ニコチン、バレニクリン酒石酸塩、メシル酸ベンズトロピン、ペントリニウム、ＡＺＤ０３２８、ブラダニクリン、ペントバルビタール、ｃｈｅｍｂｌ１２０１１３５、デキセファロキサン、メカミラミン（ｃｈｅｍｂｌ２６７９３６）、ジアニクリン、アルチニクリン、トリメタファン、オレイン酸、テバニクリントシレート、ニコチンポラクリレックス、カルボプラチン、パクリタキセル、Ｌ−グルタミン酸、ダルファンプリジン、グアニジン塩酸塩、テディサミル、ネリスピルジン、ＥＶＴ４０１、アデノシン三リン酸、ｃｈｅｍｂｌ３３５５５０、チェレリスリン、アセブトロール、モクロベミド、イベルメクチン、ｃｈｅｍｂ３７７２１９、ｃｈｅｍｂｌ２５５７８７、メチルクロチアジド、ｃｈｅｍｂｌ５５０６３７、オルトバナジン酸ナトリウム、ｃｈｅｍｂｌ２３３８３５２、ベンゾナテート、ＧＳＫ１４８２１６０、ＡＺＤ９０５６、ＣＥ２２４５３５、レセルピン、ノルエピネフリン、ｃｈｅｍｂｌ１２６５０６、メタンフェタミン、ケタンセリン、テトラベナジン、ジヒドロカイニン酸、２Ｓ，４Ｒ−４−メチルグルタミン酸、Ｏ−ベンジル−Ｌ−セリン、ｃｈｅｍｂｌ１６２８６６９、テザンパネル、ドーモイ酸、ダイシハーバイン、カイニン酸、メサラミン、トピラマート、ＣＥＰ−２５６３、スタウロスポリン、Ｃｈｅｍｂｌ３６９５０７、デクスホスホセリン、チクロピジン、ＧＳＫ−６９０６９３、ソトラスタウリン、（７Ｓ）−ヒドロキシル−スタウロスポリン、ミドスタウリン、ケルセチン、ブリオスタチン、酢酸ソトラスタウリン、インゲノールメブテート、アデノシンリン酸、テオフィリン、ジフィリン、ペントキシフィリン、エンプロフィリン、イロプロスト、パパベリン、テオブロミン、イナムリノン、［ｒ］−メソプラム、ロフルミラスト、ピクラミラスト、ロリプラム、フィラミナスト、ｃｈｅｍｂｌ１２３０６１７、ｃｈｅｍｂｌ５１９８２７、シロミラスト、（−）−ロリプラム、クリサボロール、イブジラスト、アプレミラスト、ｃｈｅｍｂｌ５２１２０３、ｃｈｅｍｂｌ７４０７８、プロポキシフェン、ｃｄｐ８４０、フェニル酪酸ナトリウム、ｃｈｅｍｂｌ１２３２０８２、ジピリダモール、テオフィリングリシン酸ナトリウム、フラボキサート塩酸塩、アミノフィリン、レスベラトロール、カフェイン、オックストリフィリン、アンレキサノクス、エタゾラート、シロブラジン、ザテブラジン、ｃｈｅｍｂｌ２０５２０１９、ｃｈｅｍｂｌ３９５３３６、環状アデノシン一リン酸、アスパラギン酸、クロザピン、アルコール、ハロペリドール、ワートマニン、オランザピン、ホルボールミリステートアセテート、リスペリドン、リドカイン、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
ハンチントン病を治療するまたはその発症を阻害する方法であって、
ハンチントン病を有するかまたは有するリスクのある対象を選択すること；ならびに
前記選択した対象に、ＡＢＣＣ９、ＡＳＩＣ４、ＣＡＣＮＡ１Ａ、ＣＨＲＮＡ４、ＣＮＧＢ１、ＣＮＴＮ１、ＤＰＰ１０、ＤＰＰ６、ＦＧＦ１２、ＦＧＦ１４、ＨＣＮ２、ＫＣＮＤ２、ＫＣＮＪ９、ＫＣＮＱ１、ＫＣＮＳ３、ＮＡＬＣＮ、ＮＥＤＤ４Ｌ、ＮＫＡＩＮ４、Ｐ２ＲＸ７、ＰＴＧＥＲ３、ＳＥＲＰＩＮＥ２、ＳＧＫ１、ＳＬＣ１０Ａ４、ＳＬＣ１７Ａ８、ＳＬＣ１８Ａ１、ＳＬＣ２２Ａ３、ＳＬＣ２Ａ１３、ＳＬＣ５Ａ９、ＳＬＣ８Ａ３、及びＳＬＣ９Ａ７からなる群から選択される一価無機陽イオン輸送遺伝子またはそれらがコードするタンパク質の１つ以上の調節因子を、前記対象においてハンチントン病を治療するのにまたはその発症を阻害するのに有効な条件下で投与すること
を含む、前記方法。
【請求項２８】
前記１つ以上の調節因子が、ナミニジル、アデノシン三リン酸、グリブリド、サラカリム、ピナシジル水和物、ミノキシジル、プレガバリン、ベラパミル、ベプリジル、セレコキシブ、ニソルジピン、ガバペンチン、ガバペンチンエナカルビル、エルペトリジン、アタガバリン、ベプリジル塩酸塩、イマガバリン、ｃｈｅｍｂｌ５４９９０６、ｃｈｅｍｂｌ５５０７９５、塩化ナトリウム、ＧＳＫ−６５０３９４、ダルファンプリジン、グアニジン塩酸塩、テディサミル、ネリスピルジン、ｅｖｔ４０１；アデノシン三リン酸、ｃｈｅｍｂｌ３３５５５０、チェレリスリン、アセブトロール、モクロベミド、イベルメクチン、ｃｈｅｍｂ３７７２１９、ｃｈｅｍｂｌ２５５７８７、メチルクロチアジド、ｃｈｅｍｂｌ５５０６３７、オルトバナジン酸ナトリウム、ｃｈｅｍｂｌ２３３８３５２、ベンゾナテート、ＧＳＫ１４８２１６０、ＡＺＤ９０５６、ＣＥ２２４５３５、ヒドロクロロチアジド、ｃｈｅｍｂｌ１２２９８７５、ニコチンポラクリレックス、タルブタール、ブタバルビタール、ブタルビタール、セコバルビタール、メタルビタール、チオペンタール、プリミドン、メホバルビタール、フェノバルビタール、バレニクリン、アモバルビタール、アプロバルビタール、ブテタール、ヘプタバルビタール、ヘキソバルビタール、バルビタール、ポザニクリン、シチシン、リバニクリン、エピバチジン、ｃｈｅｍｂｌ１８７６２１９、ｃｈｅｍｂｌ３１０３９８８、アトラクリウム、ｃｈｅｍｂｌ４９０１５３、ヘキサメトニウム、ｃｈｅｍｂｌ４０７２１７、ｔｃ−２２１６、ａｂｔ−５６０、イスプロニクリン、ソフィニクリン、ｔｃ−６４９９、シロブラジン、ザテブラジン、ｃｈｅｍｂｌ２０５２０１９、ｃｈｅｍｂｌ３９５３３６、環状アデノシン一リン酸、ｃｈｅｍｂｌ９９９５１、フルピルチン、インダパミド、アジミリド、ｃｈｅｍｂｌ２０７０９５３、メフェナム酸、ｃｈｅｍｂｌ１９０７７１７、ニフルミン酸、ｃｈｅｍｂｌ２９８４７５、ｃｈｅｍｂｌ３４２３７５、ｃｈｅｍｂｌ３３２８２６、ドラセトロン、セレコキシブ、ネリスピルジン、エゾガビン、インドメタシン、タクロリムス、グアニジン塩酸塩、テディサミル、ダルファンプリジン、ピリメタミン、コバルト（ｉｉ）イオン ベラパミル ピリメタミン コバルト（ｉｉ）イオン、ジヒドロカイニン酸、ビマトプロスト、ジノプロストン、ミソプロストール、ベラプロスト、ｃｈｅｍｂｌ１６２８２６２、カルバサイクリン、シカプロスト、クロプロステノール（ｃｈｅｍｂｌ２２２０４０４）、エンプロスチル、フルプロステノール、イロプロスト、ジノプロスト、スルプロストン、トレプロスチニル、ｃｈｅｍｂｌ３５７８３４、ｃｈｅｍｂｌ１３１７８２３、ｃｈｅｍｂｌ５６５５９１、ｃｈｅｍｂｌ３５８６５３、ｓａｒｃｎｕ、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
ハンチントン病を治療するまたはその発症を阻害する方法であって、
ハンチントン病を有するかまたは有するリスクのある対象を選択すること；ならびに
前記選択した対象に、ＡＤＧＲＬ３、ＡＬＣＡＭ、ＢＣＡＮ、ＢＣＬ１１Ｂ、ＣＡＣＮＡ１Ａ、ＣＡＣＮＡ１Ｇ、ＣＡＬＢ１、ＣＡＭＫ２Ａ、ＣＨＲＮＡ４、ＣＴＴＮＢＰ２、ＤＳＣＡＭ、ＧＲＩＡ２、ＧＲＩＡ４、ＧＲＩＤ２、ＧＲＩＫ４、ＨＣＮ２、ＫＣＮＤ２、ＬＧＩ３、ＬＲＲＴＭ１、ＭＡＧ、ＭＢＰ、ＭＹＣ、ＮＣＡＭ２、ＮＣＤＮ、ＮＥＦＭ、ＮＥＵＲＬ１、ＮＦＡＳＣ、ＮＴＭ、ＰＤＥ４Ｂ、ＰＩＫ３Ｒ１、ＰＴＧＥＲ３、ＰＴＰＲＯ、ＲＡＰＧＥＦ４、ＲＧＳ８、ＲＯＢＯ２、ＳＧＫ１、ＳＩＲＴ２、ＳＬＣ１７Ａ８、ＳＬＣ１Ａ２、ＳＬＣ８Ａ３、ＳＮＡＰ９１、ＳＮＰＨ、ＳＹＮＤＩＧ１、及びＵＮＣ５Ａからなる群から選択されるニューロン突起遺伝子またはそれらがコードするタンパク質の１つ以上の調節因子を、前記対象においてハンチントン病を治療するのにまたはその発症を阻害するのに有効な条件下で投与すること
を含む、前記方法。
【請求項３０】
前記１つ以上の調節因子が、アデノシンリン酸、テオフィリン、ジフィリン、ペントキシフィリン、エンプロフィリン、イロプロスト、パパベリン、テオブロミン、イナムリノン、［ｒ］−メソプラム、ロフルミラスト、ピクラミラスト、ロリプラム、フィラミナスト、ｃｈｅｍｂｌ１２３０６１７、ｃｈｅｍｂｌ５１９８２７、シロミラスト、（−）−ロリプラム、クリサボロール、イブジラスト、アプレミラスト、ｃｈｅｍｂｌ５２１２０３、ｃｈｅｍｂｌ７４０７８、プロポキシフェン、ｃｄｐ８４０、フェニル酪酸ナトリウム、ｃｈｅｍｂｌ１２３２０８２、ジピリダモール、テオフィリングリシン酸ナトリウム、フラボキサート塩酸塩、アミノフィリン、レスベラトロール、カフェイン、オックストリフィリン、アンレキサノクス、エタゾラート、プレガバリン、ベラパミル、ベプリジル、セレコキシブ、ニソルジピン、ガバペンチン、ガバペンチンエナカルビル、エルペトリジン、アタガバリン、ベプリジル塩酸塩、イマガバリン、カルボプラチン、パクリタキセル、ｃｈｅｍｂｌ５４９９０６、ｃｈｅｍｂｌ５５０７９５、塩化ナトリウム、ＧＳＫ−６５０３９４、ダルファンプリジン、グアニジン塩酸塩、テディサミル、ネリスピルジン、Ｌ−グルタミン酸、ジヒドロカイニン酸、２Ｓ，４Ｒ−４−メチルグルタミン酸、Ｏ−ベンジル−Ｌ−セリン、ｃｈｅｍｂｌ１６２８６６９、メサラミン、フルオロウラシル、ミベフラジル二塩酸塩、トリメタジオン、シンナリジン、エトスクシミド、ゾニサミド、アナンダミド、ミベフラジル、ｃｈｅｍｂｌ１６８４９５４、フルナリジン、メスキシミド、フェンスクシミド、パラメタジオン、ニコチンポラクリレックス、タルブタール、ブタバルビタール、ブタルビタール、セコバルビタール、メタルビタール、チオペンタール、プリミドン、メホバルビタール、フェノバルビタール、バレニクリン、アモバルビタール、アプロバルビタール、ブテタール、ヘプタバルビタール、ヘキソバルビタール、バルビタール、ポザニクリン、シチシン、リバニクリン、エピバチジン、ｃｈｅｍｂｌ１８７６２１９、ｃｈｅｍｂｌ３１０３９８８、アトラクリウム、ｃｈｅｍｂｌ４９０１５３、ヘキサメトニウム、ｃｈｅｍｂｌ４０７２１７、ｔｃ−２２１６、ａｂｔ−５６０、イスプロニクリン、ソフィニクリン、ｔｃ−６４９９、ミバンパトル、（ｒ，ｓ）−ａｍｐａ、ｃｈｅｍｂｌ１２３１３２、アニラセタム、ｃｈｅｍｂｌ１３６８００、ｃｈｅｍｂｌ１２５５６４８、シクロチアジド、ｃｈｅｍｂｌ７７８６２、ｃｈｅｍｂｌ３３４９２０、ｃｈｅｍｂｌ１０９７９３９、ピラセタム、ｃｈｅｍｂｌ３２０６４２、ｃｈｅｍｂｌ２６５３０１、ｇｙｋｉ−５２４６６、ｎｂｑｘ、ｃｈｅｍｂｌ２２２４１８、テザンパネル、（ｓ）−ａｍｐａ、ｃｈｅｍｂｌ５９４８４０、ｃｈｅｍｂｌ１２１９１５、キスカル酸、ｃｈｅｍｂｌ３３７５７７、ｃｈｅｍｂｌ２７１３０、ｄｎｑｘ、ｃｈｅｍｂｌ３３３９６４、（ｓ）−ウィラルジイン、ｃｈｅｍｂｌ２８４７２、タランパネル、ペランパネル、イランパネル、ｃｘ１７３９、ダソランパネル、ベカンパネル、ファランパトル、ｍｋ−８７７７、ゾナンパネル、トピラマート、ペントバルビタール、ｐｆ−０４９５８２４２、セルランパネル、シクロチアジド、ｃｈｅｍｂｌ３３４９２０、ｃｈｅｍｂｌ１０９７９３９、ジョロウグモ毒素、ドーモイ酸、ダイシハーバイン、カイニン酸、２Ｓ，４Ｒ−４−メチルグルタミン酸、ｃｈｅｍｂｌ２３１３６４６、シクロスポリン、インターフェロンβ−１Ａ、プレドニゾン、ケルセチン、ルチン、ＧＳＫ−２４９３２０、シロブラジン、ザテブラジン、ｃｈｅｍｂｌ２０５２０１９、ｃｈｅｍｂｌ３９５３３６、環状アデノシン一リン酸、ラウリル硫酸ナトリウム、ビマトプロスト、ジノプロストン；ミソプロストール、ベラプロスト、ｃｈｅｍｂｌ１６２８２６２、カルバサイクリン、シカプロスト、クロプロステノール（ｃｈｅｍｂｌ２２２０４０４）、エンプロスチル、フルプロステノール、イロプロスト、ジノプロスト、スルプロストン、トレプロスチニル、ｃｈｅｍｂｌ３５７８３４、ｃｈｅｍｂｌ１３１７８２３、ｃｈｅｍｂｌ５６５５９１、ｃｈｅｍｂｌ３５８６５３、ナドロパリンカルシウム、４'−ヒドロキシタモキシフェン、アザシチジン、チオグアニン、アシビン、アドゼレシン、アミホスチン、アミノプテリン、抗生物質、ビゼレシン、ブロモクリプチン、ブリオスタチン、カルシトリオール、ジエチルスチルベストロール、エルサミトルシン、エストロン、葉酸、グルタミン、ヒポキサンチン、イマチニブ、シルモスチン、メラトニン、メチルプレドニゾロン、Ｎ−メチル−ｎ−ニトロソウレア、ノボビオシン、Ｃｈｅｍｂｌ３５４８２、ホルボールミリステートアセテート、キナプリル、ボリノスタット、スリンダク、トロンビン、甲状腺刺激ホルモン、ナトリウムβ−ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸、トログリタゾン、Ｃｈｅｍｂｌ１０００１４、Ｃｈｅｍｂｌ１２１３４９２、絨毛性ゴナドトロピン、ペリリルアルコール、ＡＭＧ−９００、アリセルチブ、ジナシクリブ、ロニシクリブ、テモゾロミド、プレキサセルチブ、ＰＦ−０４６９１５０２、プキチニブ、ＰＡ−７９９、イソプレナリン、ｓｆ−１１２６、ワートマニン、ｇｓｋ−２６３６７７１、ｄｓ−７４２３、オミパリシブ、レシリシブ、ｐｗｔ−３３５８７、ｒｇ−７６６６、ｖｓ−５５８４、コパンリシブ、ゲダトリシブ、ソノリシブ、アピトリシブ、タセリシブ、ピララリシブ（ｃｈｅｍｂｌ３３６０２０３）、ボクスタリシブ、ｚｓｔｋ−４７４、アルペリシブ、ｐｉ−１０３、ピララリシブ（ｃｈｅｍｂｌ３２１８５７５）、ｗｘ−０３７、ダクトリシブ、ｂｇｔ−２２６（ｃｈｅｍｂｌ３５４５０９６）、ピクトリシブ、ブパルリシブ、パヌリシブ、ｇｓｋ−１０５９６１５、ａｚｄ−６４８２、ブパルリシブ塩酸塩、ＬＹ−３０２３４１４、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
ハンチントン病を治療するまたはその発症を阻害する方法であって、
ハンチントン病を有するかまたは有するリスクのある対象を選択すること；ならびに
前記選択した対象に、ＢＭＰ４、ＣＣＮＤ１、ＣＣＮＤ２、ＤＯＣＫ１０、ＤＯＣＫ９、ＤＵＳＰ１５、ＥＮＰＰ４、ＥＰＡＳ１、ＥＰＨＢ１、ＥＲＢＢ３、ＥＶＩ２Ａ、ＥＶＩ２Ｂ、ＦＡ２Ｈ、ＧＪＢ１、ＨＡＰＬＮ２、ＨＳＰＡ２、ＩＤ３、ＬＧＩ３、ＭＢＰ、ＭＯＧ、ＭＹＣ、ＭＹＲＦ、ＮＦＡＳＣ、ＮＫＡＩＮ１、ＮＫＸ６−２、ＯＬＩＧ２、ＰＬＥＫＨＢ１、ＰＬＰ１、ＰＰＰ１Ｒ１６Ｂ、ＲＡＢ３３Ａ、ＲＡＳＧＥＦ１Ｂ、ＲＴＫＮ、ＳＩＲＴ２、ＳＬＣ１Ａ２、ＳＯＸ１０、ＳＴ１８、ＴＭＥＭ１２５、ＴＭＥＭ２、ＴＰＰＰ、ＴＳＰＡＮ１５、ＵＧＴ８、及びＡＡＴＫからなる群から選択されるＴＣＦ７Ｌ２標的遺伝子またはそれらがコードするタンパク質の１つ以上の調節因子を、前記対象においてハンチントン病を治療するのにまたはその発症を阻害するのに有効な条件下で投与すること
を含む、前記方法。
【請求項３２】
前記１つ以上の調節因子が、２−アミノ−４−（３，４−（メチレンジオキシ）ベンジルアミノ）−６−（３−メトキシフェニル）ピリミジン（２−ＡＭＢＭＰ）、クルクミン、シンバスタチン；三酸化ヒ素；アセトアミノフェン；ビタミンＥ；シタラビン；ゴシポール；ロニシクリブ；リボシクリブ；パルボシクリブ；メトトレキサート；ミコフェノール酸；ニフェジピン；タモキシフェン；トログリタゾン；ウラシル；アベマシクリブ；ブリシクリブ；アベマシクリブ；デシタビン；パルボシクリブ；ピロキサミド；シクロスポリン；インターフェロンβ−１ａ；プレドニゾン；ケルセチン；ルチン；ベムラフェニブ；ナドロパリンカルシウム；４'−ヒドロキシタモキシフェン；アザシチジン；チオグアニン；アシビシン；アドゼレシン；アミホスチン；アミノプテリン；抗生物質；ビゼレシン；ブロモクリプチン；ブリオスタチン；カルシトリオール；ジエチルスチルベストロール；エルサミトルシン；エストロン；葉酸；グルタミン；ヒポキサンチン；イマチニブ；インドメタシン；リチウム；シルモスチン；メラトニン；メチルプレドニゾロン；ｎ−メチル−ｎ−ニトロソウレア；ノボビオシン；ｃｈｅｍｂｌ３５４８２；ホルボールミリステートアセテート；キナプリル；ボリノスタット；スリンダク；トロンビン；甲状腺刺激ホルモン；ナトリウムβ−ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸；トログリタゾン；ベラパミル；ｃｈｅｍｂｌ１０００１４；ｃｈｅｍｂｌ１２１３４９２；ゴナドトロピン、絨毛性；ペリリルアルコール；ａｍｇ−９００；アリセルチブ；ジナシクリブ；テモゾロミド；プレキサセルチブ；ラウリル硫酸ナトリウム；ｌ−グルタミン酸；ジヒドロカイニン酸；２ｓ，４ｒ−４−メチルグルタミン酸；ｏ−ベンジル−ｌ−セリン；ｃｈｅｍｂｌ１６２８６６９；メサラミン；ピロキサミド；及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
ハンチントン病を治療するまたはその発症を阻害する方法であって、
ハンチントン病を有するかまたは有するリスクのある対象を選択すること；及び
前記選択した対象に、ＮＫＸ２．２→ＯＬＩＧ２→ＳＯＸ１０→ＭＹＲＦ調節カスケードに関与する遺伝子またはそれらがコードするタンパク質の１つ以上の調節因子を、前記対象においてハンチントン病を治療するのにまたはその発症を阻害するのに有効な条件下で投与すること
を含む、前記方法。
【請求項３４】
前記遺伝子が、ＮＫＸ２．２遺伝子またはそれがコードするタンパク質である、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
前記遺伝子が、ＯＬＩＧ２遺伝子またはそれがコードするタンパク質である、請求項３３に記載の方法。
【請求項３６】
前記遺伝子が、ＳＯＸ１０遺伝子またはそれがコードするタンパク質である、請求項３３に記載の方法。
【請求項３７】
前記遺伝子が、ＭＹＲＦ遺伝子またはそれがコードするタンパク質である、請求項３３に記載の方法。
【請求項３８】
前記１つ以上の調節因子が、ベムラフェニブからなる群から選択される、請求項３３に記載の方法。
【請求項３９】
前記投与することが、脳内送達、髄腔内送達、鼻腔内送達を用いて、または脳室への直接注入を介して実施される、請求項１、３、５、７、９、１１、１３、１５、１７、１９、２１、２３、２５、２７、２９、３１、または３３に記載の方法。
【請求項４０】
前記選択した対象にヒトグリア前駆細胞の調製物を投与すること
をさらに含む、請求項１、３、５、７、９、１１、１３、１５、１７、１９、２１、２３、２５、２７、２９、３１、または３３に記載の方法。
【請求項４１】
グリア前駆細胞の前記調製物が、星状細胞に偏向したグリア前駆細胞である、請求項４０に記載の方法。
【請求項４２】
前記調製物のグリア前駆細胞が、Ａ２Ｂ５＋、ＣＤ１４０ａ＋、及び／またはＣＤ４４＋である、請求項４０に記載の方法。
【請求項４３】
グリア前駆細胞の前記調製物を、対象の線条体、前脳、脳幹、及び／または小脳に投与する、請求項４０に記載の方法。
【請求項４４】
前記対象がヒトである、請求項１、３、５、７、９、１１、１３、１５、１７、１９、２１、２３、２５、２７、２９、３１、または３３に記載の方法。
【請求項４５】
前記グリア前駆細胞が、胎児組織由来である、請求項４０に記載の方法。
【請求項４６】
前記グリア前駆細胞が、胚性幹細胞由来である、請求項４０に記載の方法。
【請求項４７】
前記グリア前駆細胞が、人工多能性幹細胞由来である、請求項４０に記載の方法。
【請求項４８】
ハンチントン病を治療する、請求項１、３、５、７、９、１１、１３、１５、１７、１９、２１、２３、２５、２７、２９、３１、または３３に記載の方法。
【請求項４９】
ハンチントン病の発症を阻害する、請求項１、３、５、７、９、１１、１３、１５、１７、１９、２１、２３、２５、２７、２９、３１、または３３に記載の方法。
【請求項５０】
前記１つ以上の調節因子がアゴニストである、請求項１、３、５、７、９、１１、１３、１５、１７、１９、２１、２３、２５、２７、２９、３１、または３３に記載の方法。
【請求項５１】
前記１つ以上の調節因子がアンタゴニストである、請求項１、３、５、７、９、１１、１３、１５、１７、１９、２１、２３、２５、２７、２９、３１、または３３に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、２０１８年６月２１日に出願された米国仮特許出願第６２／６８８，１７４号の利益を主張するものであり、その全体が参照により本明細書に援用される。
【０００２】
分野
本出願は、ハンチントン病を治療するまたはその発症を阻害する方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
背景
ハンチントン病（ＨＤ）は、進行性の行動、認知、及び運動機能障害を特徴とする、致命的な常染色体優性神経変性疾患である。ＨＤは、ポリグルタミン拡張をコードするハンチンチン（ＨＴＴ）遺伝子の第１のエクソン内のＣＡＧトリヌクレオチドリピートによって引き起こされる。その発症年齢及び重症度は、このリピート拡張の長さに比例し、ＣＡＧの長さが３５を超えると、常に臨床疾患をもたらす。これは、変異ＨＴＴ（ｍＨＴＴ）の細胞内蓄積と凝集に関連しており、ニューロンの喪失をもたらす。ＨＤの病理は、進行性の線条体内中型有棘神経細胞（ＭＳＮ）喪失、及びその結果としての線条体の萎縮によって最も反映されるが、ＭＲＩ研究では、ＨＤは、症状発生前に出現し得る脱髄及び白質損失の早期出現によっても特徴付けられることが明らかになっている（Ｔａｂｒｉｚｉ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  Ｅｎｄｐｏｉｎｔｓ  ｆｏｒ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｔｒｉａｌｓ  ｉｎ  Ｐｒｅｍａｎｉｆｅｓｔ  ａｎｄ  Ｅａｒｌｙ  Ｈｕｎｔｉｎｇｔｏｎ'ｓ  Ｄｉｓｅａｓｅ  ｉｎ  ｔｈｅ  ＴＲＡＣＫ−ＨＤ  Ｓｔｕｄｙ：Ａｎａｌｙｓｉｓ  ｏｆ  ２４  Ｍｏｎｔｈ  Ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎａｌ  Ｄａｔａ，”  Ｔｈｅ  Ｌａｎｃｅｔ  Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ  １１：４２−５３（２０１２）（非特許文献1））。同様に、ＨＤのマウスモデルでの研究により、重要なミエリン形成遺伝子ＭＹＲＦの欠損（Ｈｕａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｍｕｔａｎｔ  Ｈｕｎｔｉｎｇｔｉｎ  Ｄｏｗｎｒｅｇｕｌａｔｅｓ  Ｍｙｅｌｉｎ  Ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ  Ｆａｃｔｏｒ−Ｍｅｄｉａｔｅｄ  Ｍｙｅｌｉｎ  Ｇｅｎｅ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ａｎｄ  Ａｆｆｅｃｔｓ  Ｍａｔｕｒｅ  Ｏｌｉｇｏｄｅｎｄｒｏｃｙｔｅｓ，”  Ｎｅｕｒｏｎ  ８５：１２１２−１２２６（２０１５）（非特許文献2）；Ｊｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｅａｒｌｙ  Ｗｈｉｔｅ  Ｍａｔｔｅｒ  Ａｂｎｏｒｍａｌｉｔｉｅｓ，Ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｖｅ  Ｂｒａｉｎ  Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｍｏｔｏｒ  Ｄｅｆｉｃｉｔｓ  ｉｎ  ａ  Ｎｏｖｅｌ  Ｋｎｏｃｋ−Ｉｎ  Ｍｏｕｓｅ  Ｍｏｄｅｌ  ｏｆ  Ｈｕｎｔｉｎｇｔｏｎ'ｓ  Ｄｉｓｅａｓｅ，”  Ｈｕｍａｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  ２４：２５０８−２５２７（２０１５）（非特許文献3））を伴う初期の髄鞘形成不全が明らかになっている（Ｔｅｏ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ  ａｎｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｍｙｅｌｉｎａｔｉｏｎ  Ｄｅｆｉｃｉｔｓ  Ｏｃｃｕｒ  Ｐｒｉｏｒ  ｔｏ  Ｎｅｕｒｏｎａｌ  ｌｏｓｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  ＹＡＣ１２８  ａｎｄ  ＢＡＣＨＤ  Ｍｏｄｅｌｓ  ｏｆ  Ｈｕｎｔｉｎｇｔｏｎ  Ｄｉｓｅａｓｅ，”  Ｈｕｍａｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  ２５：２６２１−２６３２（２０１６）（非特許文献4））。また、これらの観察結果は、ＨＤの病理が白質損失に関連していることを示唆しており、このことは次にミエリン産生オリゴデンドロサイトの機能不全を反映している可能性がある。
【０００４】
ＨＤの白質異常及び髄鞘形成不全を示唆するこれらのデータ、ならびにグリア置換がＨＤトランスジェニックマウスの症状を改善する可能性があることを示す並行研究（Ｂｅｎｒａｉｓｓ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｈｕｍａｎ  Ｇｌｉａ  ｃａｎ  Ｂｏｔｈ  Ｉｎｄｕｃｅ  ａｎｄ  Ｒｅｓｃｕｅ  Ａｓｐｅｃｔｓ  ｏｆ  Ｐｈｅｎｏｔｙｐｅ  ｉｎ  Ｈｕｎｔｉｎｇｔｏｎ  Ｄｉｓｅａｓｅ，”  Ｎａｔｕｒｅ  Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ  ７：１１７５８（２０１６）（非特許文献5））にもかかわらず、ヒトＨＤにおけるグリアの病理の細胞基盤や分子基盤はあまり研究されてこなかった。
【０００５】
本開示は、これらの、及び当技術分野における他の欠陥を克服することを目的とする。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Ｔａｂｒｉｚｉ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  Ｅｎｄｐｏｉｎｔｓ  ｆｏｒ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｔｒｉａｌｓ  ｉｎ  Ｐｒｅｍａｎｉｆｅｓｔ  ａｎｄ  Ｅａｒｌｙ  Ｈｕｎｔｉｎｇｔｏｎ'ｓ  Ｄｉｓｅａｓｅ  ｉｎ  ｔｈｅ  ＴＲＡＣＫ−ＨＤ  Ｓｔｕｄｙ：Ａｎａｌｙｓｉｓ  ｏｆ  ２４  Ｍｏｎｔｈ  Ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎａｌ  Ｄａｔａ，”  Ｔｈｅ  Ｌａｎｃｅｔ  Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ  １１：４２−５３（２０１２）
【非特許文献２】Ｈｕａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｍｕｔａｎｔ  Ｈｕｎｔｉｎｇｔｉｎ  Ｄｏｗｎｒｅｇｕｌａｔｅｓ  Ｍｙｅｌｉｎ  Ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ  Ｆａｃｔｏｒ−Ｍｅｄｉａｔｅｄ  Ｍｙｅｌｉｎ  Ｇｅｎｅ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ａｎｄ  Ａｆｆｅｃｔｓ  Ｍａｔｕｒｅ  Ｏｌｉｇｏｄｅｎｄｒｏｃｙｔｅｓ，”  Ｎｅｕｒｏｎ  ８５：１２１２−１２２６（２０１５）
【非特許文献３】Ｊｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｅａｒｌｙ  Ｗｈｉｔｅ  Ｍａｔｔｅｒ  Ａｂｎｏｒｍａｌｉｔｉｅｓ，Ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｖｅ  Ｂｒａｉｎ  Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｍｏｔｏｒ  Ｄｅｆｉｃｉｔｓ  ｉｎ  ａ  Ｎｏｖｅｌ  Ｋｎｏｃｋ−Ｉｎ  Ｍｏｕｓｅ  Ｍｏｄｅｌ  ｏｆ  Ｈｕｎｔｉｎｇｔｏｎ'ｓ  Ｄｉｓｅａｓｅ，”  Ｈｕｍａｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  ２４：２５０８−２５２７（２０１５）
【非特許文献４】Ｔｅｏ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ  ａｎｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｍｙｅｌｉｎａｔｉｏｎ  Ｄｅｆｉｃｉｔｓ  Ｏｃｃｕｒ  Ｐｒｉｏｒ  ｔｏ  Ｎｅｕｒｏｎａｌ  ｌｏｓｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  ＹＡＣ１２８  ａｎｄ  ＢＡＣＨＤ  Ｍｏｄｅｌｓ  ｏｆ  Ｈｕｎｔｉｎｇｔｏｎ  Ｄｉｓｅａｓｅ，”  Ｈｕｍａｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  ２５：２６２１−２６３２（２０１６）
【非特許文献５】Ｂｅｎｒａｉｓｓ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｈｕｍａｎ  Ｇｌｉａ  ｃａｎ  Ｂｏｔｈ  Ｉｎｄｕｃｅ  ａｎｄ  Ｒｅｓｃｕｅ  Ａｓｐｅｃｔｓ  ｏｆ  Ｐｈｅｎｏｔｙｐｅ  ｉｎ  Ｈｕｎｔｉｎｇｔｏｎ  Ｄｉｓｅａｓｅ，”  Ｎａｔｕｒｅ  Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ  ７：１１７５８（２０１６）
【発明の概要】
【０００７】
概要
本開示の第１の態様は、ハンチントン病を治療するまたはその発症を阻害する方法に関する。この方法は、ハンチントン病を有するかまたは有するリスクのある対象を選択すること、ならびに、選択した対象に、対象においてハンチントン病を治療するのにまたはその発症を阻害するのに有効な条件下で、ＢＭＰ２、ＬＩＮＧＯ１、ＭＡＧ、ＮＫＸ２−２、ＮＲ２Ｅ１、ＮＴＲＫ３、ＯＬＩＧ２、ＳＥＲＰＩＮＥ２、ＳＩＲＴ２、及びＴＣＦ７Ｌ２からなる群から選択されるグリア細胞分化調節遺伝子またはそれらがコードするタンパク質の１つ以上の調節因子を投与することを含む。
【０００８】
本開示の別の態様は、ハンチントン病を治療するまたはその発症を阻害する方法に関する。この方法は、ハンチントン病を有するかまたは有するリスクのある対象を選択すること、ならびに、選択した対象に、対象においてハンチントン病を治療するのにまたはその発症を阻害するのに有効な条件下で、ＦＡ２Ｈ、ＧＡＬ３ＳＴ１、ＭＡＧ、ＭＢＰ、ＭＹＲＦ、ＮＦＡＳＣ、ＯＬＩＧ２、ＯＭＧ、ＰＬＬＰ、ＰＯＵ３Ｆ２、ＳＩＲＴ２、ＳＬＣ８Ａ３、ＴＣＦ７Ｌ２、ＴＦ、及びＵＧＴ８からなる群から選択される有髄化関連遺伝子またはそれらがコードするタンパク質の１つ以上の調節因子を投与することを含む。
【０００９】
本開示の別の態様は、ハンチントン病を治療するまたはその発症を阻害する方法に関する。この方法は、ハンチントン病を有するかまたは有するリスクのある対象を選択すること、ならびに、選択した対象に、対象においてハンチントン病を治療するのにまたはその発症を阻害するのに有効な条件下で、ＦＡ２Ｈ、ＧＬＩ３、ＬＩＮＧＯ１、ＭＹＲＦ、ＮＫＸ２−２、ＯＬＩＧ１、ＯＬＩＧ２、ＯＭＧ、ＳＩＲＴ２、ＳＬＣ８Ａ３、ＳＯＸ１０、及びＴＣＦ７Ｌ２からなる群から選択されるオリゴデンドロサイト分化遺伝子またはそれらがコードするタンパク質の１つ以上の調節因子を投与することを含む。
【００１０】
本開示の別の態様は、ハンチントン病を治療するまたはその発症を阻害する方法に関する。この方法は、ハンチントン病を有するかまたは有するリスクのある対象を選択すること、ならびに、選択した対象に、対象においてハンチントン病を治療するのにまたはその発症を阻害するのに有効な条件下で、ＢＭＰ２、ＬＩＮＧＯ１、ＭＡＧ、ＭＹＣ、ＮＫＸ２−２、ＮＲ２Ｅ１、ＮＴＲＫ３、ＯＬＩＧ２、ＳＥＲＰＩＮＥ２、ＳＩＲＴ２、ＳＯＸ１０、ＴＣＦ７Ｌ２、ＴＦ、及びＺＣＣＨＣ２４からなる群から選択されるグリア新生調節遺伝子またはそれらがコードするタンパク質の１つ以上の調節因子を投与することを含む。
【００１１】
本開示の別の態様は、ハンチントン病を治療するまたはその発症を阻害する方法に関する。この方法は、ハンチントン病を有するかまたは有するリスクのある対象を選択すること、ならびに、選択した対象に、対象においてハンチントン病を治療するのにまたはその発症を阻害するのに有効な条件下で、ＦＡ２Ｈ、ＧＡＬ３ＳＴ１、ＭＡＧ、ＭＢＰ、ＭＹＲＦ、ＮＦＡＳＣ、ＯＬＩＧ２、ＯＭＧ、ＰＬＬＰ、ＰＯＵ３Ｆ２、ＳＩＲＴ２、ＳＬＣ８Ａ３、ＴＣＦ７Ｌ２、ＴＦ、及びＵＧＴ８からなる群から選択されるニューロン被鞘遺伝子またはそれらがコードするタンパク質の１つ以上の調節因子を投与することを含む。
【００１２】
本開示の別の態様は、ハンチントン病を治療するまたはその発症を阻害する方法に関する。この方法は、ハンチントン病を有するかまたは有するリスクのある対象を選択すること、ならびに、選択した対象に、対象においてハンチントン病を治療するのにまたはその発症を阻害するのに有効な条件下で、ＡＬＣＡＭ、ＢＣＬ１１Ｂ、ＤＳＣＡＭ、ＦＯＸＤ１、ＧＡＳ１、ＧＬＩ３、ＨＯＸＡ１、ＨＯＸＡ２、ＭＮＸ１、ＮＦＡＳＣ、ＰＬＸＮＣ１、ＰＲＫＣＱ、ＰＴＰＲＯ、ＲＯＢＯ２、ＳＥＭＡ６Ｂ、ＵＮＣ５Ａ、ＶＡＸ１、及びＷＮＴ７Ｂからなる群から選択される軸索ガイダンス遺伝子またはそれらがコードするタンパク質の１つ以上の調節因子を投与することを含む。
【００１３】
本開示の別の態様は、ハンチントン病を治療するまたはその発症を阻害する方法に関する。この方法は、ハンチントン病を有するかまたは有するリスクのある対象を選択すること、ならびに、選択した対象に、対象においてハンチントン病を治療するのにまたはその発症を阻害するのに有効な条件下で、ＡＬＣＡＭ、ＢＣＬ１１Ｂ、ＤＳＣＡＭ、ＦＯＸＤ１、ＧＡＳ１、ＧＬＩ３、ＨＯＸＡ１、ＨＯＸＡ２、ＭＮＸ１、ＮＦＡＳＣ、ＰＬＸＮＣ１、ＰＲＫＣＱ、ＰＴＰＲＯ、ＲＯＢＯ２、ＳＥＭＡ６Ｂ、ＵＮＣ５Ａ、ＶＡＸ１、及びＷＮＴ７Ｂからなる群から選択されるニューロン突起ガイダンス遺伝子またはそれらがコードするタンパク質の１つ以上の調節因子を投与することを含む。
【００１４】
本開示の別の態様は、ハンチントン病を治療するまたはその発症を阻害する方法に関する。この方法は、ハンチントン病を有するかまたは有するリスクのある対象を選択すること、ならびに、選択した対象に、対象においてハンチントン病を治療するのにまたはその発症を阻害するのに有効な条件下で、ＡＤＧＲＢ１、ＡＬＣＡＭ、ＢＣＬ１１Ｂ、ＣＡＣＮＡ１Ａ、ＤＳＣＡＭ、ＦＯＸＤ１、ＧＡＳ１、ＧＬＩ３、ＨＯＸＡ１、ＨＯＸＡ２、ＬＩＮＧＯ１、ＬＲＲＣ４Ｃ、ＭＡＧ、ＭＢＰ、ＭＮＸ１、ＮＦＡＳＣ、ＮＲ２Ｅ１、ＮＴＮＧ１、ＮＴＲＫ３、ＯＭＧ、ＰＬＸＮＣ１、ＰＯＵ３Ｆ２、ＰＲＫＣＱ、ＰＴＰＲＯ、ＲＯＢＯ２、ＳＥＭＡ６Ｂ、ＳＬＩＴＲＫ２、ＳＬＩＴＲＫ３、ＳＮＡＰ９１、ＵＮＣ５Ａ、ＶＡＸ１、及びＷＮＴ７Ｂからなる群から選択される軸索新生遺伝子またはそれらがコードするタンパク質の１つ以上の調節因子を投与することを含む。
【００１５】
本開示の別の態様は、ハンチントン病を治療するまたはその発症を阻害する方法に関する。この方法は、ハンチントン病を有するかまたは有するリスクのある対象を選択すること、ならびに、選択した対象に、対象においてハンチントン病を治療するのにまたはその発症を阻害するのに有効な条件下で、ＡＤＧＲＢ１、ＡＬＣＡＭ、ＢＣＬ１１Ｂ、ＣＡＣＮＡ１Ａ、ＤＳＣＡＭ、ＦＯＸＤ１、ＧＡＳ１、ＧＬＩ３、ＨＯＸＡ１、ＨＯＸＡ２、ＬＩＮＧＯ１、ＬＲＲＣ４Ｃ、ＭＡＧ、ＭＢＰ、ＭＮＸ１、ＮＥＦＭ、ＮＦＡＳＣ、ＮＲ２Ｅ１、ＮＴＮＧ１、ＮＴＲＫ３、ＯＭＧ、ＰＬＸＮＣ１、ＰＯＵ３Ｆ２、ＰＲＫＣＱ、ＰＴＰＲＯ、ＲＯＢＯ２、ＲＴＮ４ＲＬ２、ＳＥＭＡ６Ｂ、ＳＬＩＴＲＫ２、ＳＬＩＴＲＫ３、ＳＮＡＰ９１、ＵＮＣ５Ａ、ＶＡＸ１、及びＷＮＴ７Ｂからなる群から選択される軸索発達遺伝子またはそれらがコードするタンパク質の１つ以上の調節因子を投与することを含む。
【００１６】
本開示の別の態様は、ハンチントン病を治療するまたはその発症を阻害する方法に関する。この方法は、ハンチントン病を有するかまたは有するリスクのある対象を選択すること、ならびに、選択した対象に、対象においてハンチントン病を治療するのにまたはその発症を阻害するのに有効な条件下で、ＡＤＧＲＢ１、ＡＬＣＡＭ、ＢＣＬ１１Ｂ、ＣＡＣＮＡ１Ａ、ＣＡＭＫ２Ａ、ＤＳＣＡＭ、ＥＨＤ３、ＦＯＸＤ１、ＧＡＳ１、ＧＬＩ３、ＨＯＸＡ１、ＨＯＸＡ２、ＫＡＮＫ１、ＬＩＮＧＯ１、ＬＲＲＣ４Ｃ、ＭＡＧ、ＭＢＰ、ＭＮＸ１、ＮＥＤＤ４Ｌ、ＮＥＵＲＬ１、ＮＦＡＳＣ、ＮＲ２Ｅ１、ＮＴＮＧ１、ＮＴＲＫ３、ＯＭＧ、ＰＣＤＨ１５、ＰＬＸＮＣ１、ＰＯＵ３Ｆ２、ＰＲＫＣＱ、ＰＴＰＲＯ、ＲＯＢＯ２、ＳＥＭＡ６Ｂ、ＳＧＫ１、ＳＬＩＴＲＫ２、ＳＬＩＴＲＫ３、ＳＮＡＰ９１、ＳＮＸ１０、ＵＧＴ８、ＵＮＣ５Ａ、ＶＡＸ１、及びＷＮＴ７Ｂからなる群から選択される細胞突起形態形成遺伝子またはそれらがコードするタンパク質の１つ以上の調節因子を投与することを含む。
【００１７】
本開示の別の態様は、ハンチントン病を治療するまたはその発症を阻害する方法に関する。この方法は、ハンチントン病を有するかまたは有するリスクのある対象を選択すること、ならびに、選択した対象に、対象においてハンチントン病を治療するのにまたはその発症を阻害するのに有効な条件下で、ＡＤＧＲＢ１、ＡＤＧＲＬ３、ＢＣＡＮ、ＣＡＬＢ１、ＣＡＭＫ２Ａ、ＦＧＦ１４、ＬＲＲＴＩＭ１、ＮＣＤＮ、ＮＥＴＯ１、ＮＥＵＲＬ１、ＮＲ２Ｅ１、ＮＴＲＫ３、ＰＰＦＩＡ３、ＲＯＢＯ２、ＳＥＲＰＩＮＥ２、ＳＨＩＳＡ７、ＳＩＸ４、ＳＬＣ８Ａ３、ＳＬＩＴＲＫ２、ＳＬＩＴＲＫ３、及びＳＹＮＤＩＧ１からなる群から選択されるシナプス構造調節遺伝子もしくはシナプス活性調節遺伝子またはそれらがコードするタンパク質の１つ以上の調節因子を投与することを含む。
【００１８】
本開示の別の態様は、ハンチントン病を治療するまたはその発症を阻害する方法に関する。この方法は、ハンチントン病を有するかまたは有するリスクのある対象を選択すること、ならびに、選択した対象に、対象においてハンチントン病を治療するのにまたはその発症を阻害するのに有効な条件下で、ＢＣＡＮ、ＣＡＣＮＡ１Ａ、ＣＡＣＮＡ１Ｇ、ＣＡＬＢ１、ＣＡＭＫ２Ａ、ＣＨＲＮＡ４、ＦＧＦ１２、ＦＧＦ１４、ＧＲＩＡ２、ＧＲＩＡ４、ＧＲＩＤ２、ＧＲＩＫ４、ＫＣＮＤ２、ＬＲＲＴＭ１、ＭＢＰ、ＭＰＺ、ＮＣＤＮ、ＮＥＴＯ１、ＮＥＵＲＬ１、ＮＯＶＡ１、ＮＲ２Ｅ１、Ｐ２ＲＸ７、ＰＤＥ７Ｂ、ＰＬＣＬ１、ＰＰＦＩＡ３、ＲＡＰＧＥＦ４、ＲＧＳ８、ＲＩＴ２、Ｓ１ＰＲ２、ＳＥＲＰＩＮＥ２、ＳＨＩＳＡ７、ＳＬＣ１８Ａ１、ＳＬＣ１Ａ１、ＳＬＣ１Ａ２、ＳＬＣ８Ａ３、ＳＮＡＰ９１、ＳＮＰＨ、及びＳＹＴ６からなる群から選択されるシナプスシグナル伝達経路遺伝子またはそれらがコードするタンパク質の１つ以上の調節因子を投与することを含む。
【００１９】
本開示の別の態様は、ハンチントン病を治療するまたはその発症を阻害する方法に関する。この方法は、ハンチントン病を有するかまたは有するリスクのある対象を選択すること、ならびに、選択した対象に、対象においてハンチントン病を治療するのにまたはその発症を阻害するのに有効な条件下で、ＡＤＧＲＢ１、ＢＣＡＮ、ＢＣＡＳ１、ＣＡＣＮＡ１Ａ、ＣＡＬＢ１、ＣＡＭＫ２Ａ、ＣＨＲＮＡ４、ＣＴＴＮＢＰ２、ＤＳＣＡＭ、ＧＲＩＡ２、ＧＲＩＤ１、ＧＲＩＤ２、ＧＲＩＫ４、ＨＣＮ２、ＫＣＮＤ２、ＬＧＩ３、ＬＲＲＣ４Ｃ、ＬＲＲＴＭ１、ＮＥＴＯ１、ＮＥＵＲＬ１、ＮＴＭ、Ｐ２ＲＸ７、ＰＣＤＨ１５、ＰＤＥ４Ｂ、ＰＰＦＩＡ３、ＰＲＩＭＡ１、ＰＲＫＣＱ、ＰＴＰＲＯ、ＲＡＰＧＥＦ４、ＳＥＲＰＩＮＥ２、ＳＨＩＳＡ７、ＳＬＣ１７Ａ８、ＳＬＣ１８Ａ１、ＳＬＣ１Ａ１、ＳＬＣ１Ａ２、ＳＬＣ８Ａ３、ＳＮＡＰ９１、ＳＮＰＨ、ＳＹＮＤＩＧ１、及びＳＹＴ６からなる群から選択されるシナプス遺伝子またはそれらがコードするタンパク質の１つ以上の調節因子を投与することを含む。
【００２０】
本開示の別の態様は、ハンチントン病を治療するまたはその発症を阻害する方法に関する。この方法は、ハンチントン病を有するかまたは有するリスクのある対象を選択すること、ならびに、選択した対象に、対象においてハンチントン病を治療するのにまたはその発症を阻害するのに有効な条件下で、ＡＢＣＣ９、ＡＳＩＣ４、ＣＡＣＮＡ１Ａ、ＣＨＲＮＡ４、ＣＮＧＢ１、ＣＮＴＮ１、ＤＰＰ１０、ＤＰＰ６、ＦＧＦ１２、ＦＧＦ１４、ＨＣＮ２、ＫＣＮＤ２、ＫＣＮＪ９、ＫＣＮＱ１、ＫＣＮＳ３、ＮＡＬＣＮ、ＮＥＤＤ４Ｌ、ＮＫＡＩＮ４、Ｐ２ＲＸ７、ＰＴＧＥＲ３、ＳＥＲＰＩＮＥ２、ＳＧＫ１、ＳＬＣ１０Ａ４、ＳＬＣ１７Ａ８、ＳＬＣ１８Ａ１、ＳＬＣ２２Ａ３、ＳＬＣ２Ａ１３、ＳＬＣ５Ａ９、ＳＬＣ８Ａ３、及びＳＬＣ９Ａ７からなる群から選択される一価無機陽イオン輸送遺伝子またはそれらがコードするタンパク質の１つ以上の調節因子を投与することを含む。
【００２１】
本開示の別の態様は、ハンチントン病を治療するまたはその発症を阻害する方法に関する。この方法は、ハンチントン病を有するかまたは有するリスクのある対象を選択すること、ならびに、選択した対象に、対象においてハンチントン病を治療するのにまたはその発症を阻害するのに有効な条件下で、ＡＤＧＲＬ３、ＡＬＣＡＭ、ＢＣＡＮ、ＢＣＬ１１Ｂ、ＣＡＣＮＡ１Ａ、ＣＡＣＮＡ１Ｇ、ＣＡＬＢ１、ＣＡＭＫ２Ａ、ＣＨＲＮＡ４、ＣＴＴＮＢＰ２、ＤＳＣＡＭ、ＧＲＩＡ２、ＧＲＩＡ４、ＧＲＩＤ２、ＧＲＩＫ４、ＨＣＮ２、ＫＣＮＤ２、ＬＧＩ３、ＬＲＲＴＭ１、ＭＡＧ、ＭＢＰ、ＭＹＣ、ＮＣＡＭ２、ＮＣＤＮ、ＮＥＦＭ、ＮＥＵＲＬ１、ＮＦＡＳＣ、ＮＴＭ、ＰＤＥ４Ｂ、ＰＩＫ３Ｒ１、ＰＴＧＥＲ３、ＰＴＰＲＯ、ＲＡＰＧＥＦ４、ＲＧＳ８、ＲＯＢＯ２、ＳＧＫ１、ＳＩＲＴ２、ＳＬＣ１７Ａ８、ＳＬＣ１Ａ２、ＳＬＣ８Ａ３、ＳＮＡＰ９１、ＳＮＰＨ、ＳＹＮＤＩＧ１、及びＵＮＣ５Ａからなる群から選択されるニューロン突起遺伝子またはそれらがコードするタンパク質の１つ以上の調節因子を投与することを含む。
【００２２】
本開示の別の態様は、ハンチントン病を治療するまたはその発症を阻害する方法に関する。この方法は、ハンチントン病を有するかまたは有するリスクのある対象を選択すること、ならびに、選択した対象に、対象においてハンチントン病を治療するのにまたはその発症を阻害するのに有効な条件下で、ＢＭＰ４、ＣＣＮＤ１、ＣＣＮＤ２、ＤＯＣＫ１０、ＤＯＣＫ９、ＤＵＳＰ１５、ＥＮＰＰ４、ＥＰＡＳ１、ＥＰＨＢ１、ＥＲＢＢ３、ＥＶＩ２Ａ、ＥＶＩ２Ｂ、ＦＡ２Ｈ、ＧＪＢ１、ＨＡＰＬＮ２、ＨＳＰＡ２、ＩＤ３、ＬＧＩ３、ＭＢＰ、ＭＯＧ、ＭＹＣ、ＭＹＲＦ、ＮＦＡＳＣ、ＮＫＡＩＮ１、ＮＫＸ６−２、ＯＬＩＧ２、ＰＬＥＫＨＢ１、ＰＬＰ１、ＰＰＰ１Ｒ１６Ｂ、ＲＡＢ３３Ａ、ＲＡＳＧＥＦ１Ｂ、ＲＴＫＮ、ＳＩＲＴ２、ＳＬＣ１Ａ２、ＳＯＸ１０、ＳＴ１８、ＴＭＥＭ１２５、ＴＭＥＭ２、ＴＰＰＰ、ＴＳＰＡＮ１５、ＵＧＴ８、及びＡＡＴＫからなる群から選択されるＴＣＦ７Ｌ２標的遺伝子またはそれらがコードするタンパク質の１つ以上の調節因子を投与することを含む。
【００２３】
本開示の別の態様は、ハンチントン病を治療するまたはその発症を阻害する方法に関する。この方法は、ハンチントン病を有するかまたは有するリスクのある対象を選択すること、ならびに、選択した対象に、対象においてハンチントン病を治療するのにまたはその発症を阻害するのに有効な条件下で、ＮＫＸ２．２→ＯＬＩＧ２→ＳＯＸ１０→ＭＹＲＦ調節カスケードに関与する遺伝子またはそれらがコードするタンパク質の１つ以上の調節因子を投与することを含む。
【００２４】
本開示は、ｍＨＴＴを発現するヒトグリア前駆細胞（ｈＧＰＣ）の遺伝子発現パターンが細胞自律的分子病理を反映し得るかどうかを調べ、もしそうであれば、それがＨＤの白質疾患を予測し得るかどうかを調べる。両能性オリゴデンドロサイト−アストロサイトｈＧＰＣは、ハンチンチン変異胚またはその同胞対照のいずれかに由来するヒト胚性幹細胞（ｈＥＳＣ）から最初に生成された。次いで、蛍光活性化セルソーティング（ＦＡＣＳ）を使用して、ＧＰＣ選択的ＣＤ１４０ａの発現に基づいてこれらの細胞を分離し（参照によりその全体が本明細書に援用されるＳｉｍ  ｅｔ  ａｌ．，“ＣＤ１４０ａ  Ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｓ  ａ  Ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｈｉｇｈｌｙ  Ｍｙｅｌｉｎｏｇｅｎｉｃ，  Ｍｉｇｒａｔｉｏｎ−Ｃｏｍｐｅｔｅｎｔ  ａｎｄ  Ｅｆｆｉｃｉｅｎｔｌｙ  Ｅｎｇｒａｆｔｉｎｇ  Ｈｕｍａｎ  Ｏｌｉｇｏｄｅｎｄｒｏｃｙｔｅ  Ｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒ  Ｃｅｌｌｓ，”  Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．２９：９３４−９４１（２０１１）；Ｗａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｈｕｍａｎ  ｉＰＳＣ−Ｄｅｒｉｖｅｄ  Ｏｌｉｇｏｄｅｎｄｒｏｃｙｔｅ  Ｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒ  Ｃｅｌｌｓ  Ｃａｎ  Ｍｙｅｌｉｎａｔｅ  ａｎｄ  Ｒｅｓｃｕｅ  ａ  Ｍｏｕｓｅ  Ｍｏｄｅｌ  ｏｆ  Ｃｏｎｇｅｎｉｔａｌ  Ｈｙｐｏｍｙｅｌｉｎａｔｉｏｎ，”  Ｃｅｌｌ  Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌ  １２：２５２−２６４（２０１３））、続いて全トランスクリプトームＲＮＡ配列決定（ＲＮＡ−ｓｅｑ）分析によりそれらの遺伝子発現におけるｍＨＴＴ依存性変化を評価した。３つの異なるＨＤ胚に由来するｈＥＳＣから生成されたｈＧＰＣでは、アストログリア及びオリゴデンドログリアの両方の分化、ならびに下流のミエリン生合成に関連する重要な転写因子のコヒーレントセットが、ｍＨＴＴの関数として、対照に比べて有意に下方制御されていたことが明らかとなった。したがって、ＨＤ  ｈＥＳＣ由来のｈＧＰＣを新生児ミエリン欠損及び免疫不全ｓｈｉｖｅｒｅｒマウス（ＭＢＰｓｈｉ／ｓｈｉ）に移植した場合、得られたグリアキメラは、正常対照ｈＥＳＣに由来するｈＧＰＣを移植した同腹仔対照に比べて、より緩やかに、及びより不完全に有髄化した。さらに、ＨＤ  ｈＧＰＣで確立されたキメラは、正常な同胞ｈＧＰＣでキメラ化したマウスに比べて、星状細胞の形態形成に著しい遅延及び混乱を示した。総合すると、これらのデータは、ヒトＨＤにおける白質障害及びミエリン形成不全が、ニューロンの損失に続いて生じるというよりはむしろ、ｍＨＴＴ発現ｈＧＰＣの最終グリア分化における細胞自律的欠陥の結果である可能性があることを示唆しており、その発症はＨＤの病因及び神経学的徴候の中心であり得る。
【図面の簡単な説明】
【００２５】
【図１Ａ】ＨＤ  ｈＥＳＣ由来ｈＧＰＣが、遺伝子発現において顕著なｍＨＴＴ依存性変化を示すことを示す。ｒｖ２６，０００転写産物の発現に基づく主成分分析（ＰＣＡ）を示す。発現データは、分散を説明するために事後正規化を行った１００万あたりの転写産物（ＴＰＭ）として示す（参照によりその全体が本明細書に援用されるＲｉｓｓｏ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｎｏｒｍａｌｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ＲＮＡ−ｓｅｑ  Ｄａｔａ  Ｕｓｉｎｇ  Ｆａｃｔｏｒ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  ｏｆ  Ｃｏｎｔｒｏｌ  Ｇｅｎｅｓ  ｏｒ  Ｓａｍｐｌｅｓ，”  Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．３２：８９６−９０２（２０１４））。ＰＣＡプロットは、ＨＤ由来のヒトグリア前駆細胞（ｈＧＰＣ）のトランスクリプトーム全体にわたる明確な発現シグネチャを示す。
【図１Ｂ】ＨＤ  ｈＥＳＣ由来ｈＧＰＣが、遺伝子発現において顕著なｍＨＴＴ依存性変化を示すことを示す。３人の異なるＨＤ患者由来のｈＧＰＣを２人のドナー由来のプールしたｈＧＰＣと比較することによって得られる、差次的に発現する遺伝子（ＤＥＧ）（緑、下方制御；赤、上方制御；倍率変化［ＦＣ］＞２．０、ＦＤＲ  １％）のリストの共通部分を示すベン図である。次いで、３人のＨＤ患者が共有するＤＥＧのリストを、患者ＨＤ２０（ＧＥＮＥＡ２０由来）と通常の同胞のＣＴＲ１９（ＧＥＮＥＡ１９）で見出されたＤＥＧ（ＦＣ＞２．０、ＦＤＲ  １％）と交差させることによってフィルタリングし；このフィルタリング工程により、ｍＨＴＴ関連ＤＥＧの特異性をさらに高めた。灰色で強調表示した交差点は、プールした対照に比べて、すべてのＨＤ株が差次的に発現する遺伝子のセット全体を含む。
【図１Ｃ】ＨＤ  ｈＥＳＣ由来ｈＧＰＣが、遺伝子発現において顕著なｍＨＴＴ依存性変化を示すことを示す。疾患状態によるｈＧＰＣのクラスター化を示す図１Ｂで強調表示されている４２９ＤＥＧのＴＰＭ値に基づく発現ヒートマップを示す。樹状図は、３つのＨＤ−ＥＳＣ株（ＨＤ−１７、ＨＤ−１８、及びＨＤ−２０）と２つの一致する対照株（ＣＴＲ１９及びＣＴＲ０２）のｌｏｇ２−ＴＰＭ値から計算したユークリッド距離に基づく階層的クラスタリングを示す。
【図１Ｄ】ＨＤ  ｈＥＳＣ由来ｈＧＰＣが、遺伝子発現において顕著なｍＨＴＴ依存性変化を示すことを示す。図１Ｂで強調表示した４２９の交差ＤＥＧについての機能的アノテーション（遺伝子オントロジー：生物学的プロセス及び細胞成分、ボンフェローニ補正ｐ＜０．０１）のネットワーク表現を示す。遺伝子は、調節不全の方向を表す境界線色を有する丸いノードである（緑、下方制御；赤、上方制御）。角丸長方形ノードはアノテーションタームを表す。ノードは、程度によってサイズ化され、コミュニティ検出によって識別される密接に相互接続したモジュール（Ｍ１〜Ｍ３）によって色付けされる。モジュールごとに、重要度及び倍数の強化による上位３つのアノテーションを列挙する。選択した遺伝子ノードをラベル付けし、主要なｈＧＰＣ系統転写因子及びステージ調節タンパク質をコードする遺伝子が含む。
【図１Ｅ】ＨＤ  ｈＥＳＣ由来ｈＧＰＣが、遺伝子発現において顕著なｍＨＴＴ依存性変化を示すことを示す。Ｍ１で同定した６３個の保存したＤＥＧの発現ヒートマップである（（図１Ｄ）の紫色であり、グリア細胞の分化及び有髄化に関連するアノテーションが付いている。
【図１Ｆ】ＨＤ  ｈＥＳＣ由来ｈＧＰＣが、遺伝子発現において顕著なｍＨＴＴ依存性変化を示すことを示す。Ｍ２で同定した５６個の保存したＤＥＧ発現ヒートマップである（（図１Ｄ）の薄紫色であり、軸索ガイダンス及び軸索新生に関連するアノテーションが付いている。
【図１Ｇ】ＨＤ  ｈＥＳＣ由来ｈＧＰＣが、遺伝子発現において顕著なｍＨＴＴ依存性変化を示すことを示す。Ｍ３（図１Ｄでは黄色）で同定した６８個の保存したＤＥＧ発現ヒートマップであり、シナプス構造及びシナプスシグナル伝達の調節に関連するアノテーションが付いている。すべての差次的発現（ＤＥ）の結果は、１％ＦＤＲ及びＦＣ＞２であり；遺伝子オントロジー（ＧＯ）アノテーションの結果を、ｐ＜０．０１にボンフェローニ補正した。
【図２Ａ】プールした対照に対する、異なるＨＤ  ｈＥＳＣに由来するｈＧＰＣ間で差次的に発現する遺伝子を示す。プールした対照由来ＧＰＣ（図２Ａ、上方制御された遺伝子；図２Ｂ、下方制御された遺伝子）と比較した、各ＣＤ１４０ａ分類ＨＤ由来ＧＰＣ株（ＨＤ１７、ＨＤ１８、及びＨＤ２０）の比較から得られる差次的発現遺伝子の遺伝子セット交差プロットを示す。ＨＤ  ＧＰＣで差次的に発現する遺伝子は、１％ＦＤＲ及びＦＣ＞２．００で有意である。
【図２Ｂ】プールした対照に対する、異なるＨＤ  ｈＥＳＣに由来するｈＧＰＣ間で差次的に発現する遺伝子を示す。プールした対照由来ＧＰＣ（図２Ａ、上方制御された遺伝子；図２Ｂ、下方制御された遺伝子）と比較した、各ＣＤ１４０ａ分類ＨＤ由来ＧＰＣ株（ＨＤ１７、ＨＤ１８、及びＨＤ２０）の比較から得られる差次的発現遺伝子の遺伝子セット交差プロットを示す。ＨＤ  ＧＰＣで差次的に発現する遺伝子は、１％ＦＤＲ及びＦＣ＞２．００で有意である。
【図２Ｃ】プールした対照に対する、異なるＨＤ  ｈＥＳＣに由来するｈＧＰＣ間で差次的に発現する遺伝子を示す。対照由来ＡＰＣ（図２Ｃ、上方制御；図２Ｄ、下方制御）に対するＣＤ４４でソートしたＨＤ由来ＡＰＣ株（ＨＤ１７、ＨＤ１８、及びＨＤ２０）を示す。ＨＤ  ＡＰＣで差次的に発現する遺伝子は、５％ＦＤＲで有意である。どちらの場合も、２０対１９は、ＨＤ株ＨＤ２０（Ｇｅｎｅａ２０）とその同胞対照株ＣＴＲ１９（Ｇｅｎｅａ１９）の比較を示す。横棒は遺伝子セットの合計サイズを表し、縦棒は遺伝子セットの共通部分のサイズを表す。縦棒は、最初に共通部分の遺伝子セットの数、次いで共通部分のサイズの順に並ぶ。ドットは、各共通部分を含む遺伝子セットに相当する。
【図２Ｄ】プールした対照に対する、異なるＨＤ  ｈＥＳＣに由来するｈＧＰＣ間で差次的に発現する遺伝子を示す。対照由来ＡＰＣ（図２Ｃ、上方制御；図２Ｄ、下方制御）に対するＣＤ４４でソートしたＨＤ由来ＡＰＣ株（ＨＤ１７、ＨＤ１８、及びＨＤ２０）を示す。ＨＤ  ＡＰＣで差次的に発現する遺伝子は、５％ＦＤＲで有意である。どちらの場合も、２０対１９は、ＨＤ株ＨＤ２０（Ｇｅｎｅａ２０）とその同胞対照株ＣＴＲ１９（Ｇｅｎｅａ１９）の比較を示す。横棒は遺伝子セットの合計サイズを表し、縦棒は遺伝子セットの共通部分のサイズを表す。縦棒は、最初に共通部分の遺伝子セットの数、次いで共通部分のサイズの順に並ぶ。ドットは、各共通部分を含む遺伝子セットに相当する。
【図３Ａ】機能的アノテーションが、グリア分化、有髄化、及びシナプス伝達関連遺伝子の転写におけるＨＤ関連障害を明らかにしていることを示す。遺伝子オントロジー（ＧＯ）機能的アノテーションを、プールされた対照ｈＧＰＣに比べて、差次的に発現する３株のｍＨＴＴ  ｈＧＰＣでの４２９個の遺伝子（ＤＥＧ）に対して実施した（図１Ｂ〜１Ｃを参照のこと）。５０個の有意に関連するＧＯアノテーション用語（生物学的プロセス及び細胞成分、ボンフェローニ補正ｐ＜０．０１）は、ＴｏｐｐＣｌｕｓｔｅｒアノテーションツール（参照によりその全体が本明細書に援用されるＫａｉｍａｌ  ｅｔ  ａｌ．，“ＴｏｐｐＣｌｕｓｔｅｒ：ａ  Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  Ｇｅｎｅ  Ｌｉｓｔ  Ｆｅａｔｕｒｅ  Ａｎａｌｙｚｅｒ  ｆｏｒ  Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ  Ｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔ  Ｃｌｕｓｔｅｒｉｎｇ  ａｎｄ  Ｎｅｔｗｏｒｋ−ｂａｓｅｄ  Ｄｉｓｓｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，”  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．３８：Ｗ９６−Ｗ１０２（２０１０））。ネットワーク分析により、これらのＧＯ用語を、関連するＤＥＧとともに、３つの機能的に関連するモジュール（Ｍ１〜Ｍ３、図１Ｄを参照のこと）にグループ化した。ＧＯ用語ごとに、注釈付きのＤＥＧの数と、その用語に見出だされるヒトタンパク質コード遺伝子の総数が与えられると、期待値は一定の比率が想定される。エンリッチメントの倍数は、期待される数に対する、用語において見出されるＤＥＧの数の比率である。各機能モジュール内で、ＧＯ用語を最初にｐ値によってランク付けし、次いで倍率濃縮によってランク付けした。３つのＧＯ用語、ＧＯ：０００７２６８（化学シナプス伝達）、ＧＯ：００９８９１６（順行性シナプス間シグナル伝達）、及びＧＯ：００９９５３７（シナプス間シグナル伝達）を、モジュールＭ３内でそれぞれ３〜５にランク付けした。それらは、Ｍ３において２にランク付けされたＧＯ：００９９５３６（シナプスシグナル伝達）に関連する３８個のＤＥＧ内に含まれる３７個の同一セットの関連するＤＥＧを含んでいた。したがって、冗長性を減らすために、これらの３つのＧＯ用語を図から省略した。図３Ａは、各機能モジュールの上位５つのＧＯ用語を示す棒グラフである。関連するＤＥＧを、ＨＤ由来のｈＧＰＣに対する対照由来のｈＧＰＣの調節不全の方向に応じて色分けする（緑、下方制御；赤、上方制御）。
【図３Ｂ−１】機能的アノテーションが、グリア分化、有髄化、及びシナプス伝達関連遺伝子の転写におけるＨＤ関連障害を明らかにしていることを示す。遺伝子オントロジー（ＧＯ）機能的アノテーションを、プールされた対照ｈＧＰＣに比べて、差次的に発現する３株のｍＨＴＴ  ｈＧＰＣでの４２９個の遺伝子（ＤＥＧ）に対して実施した（図１Ｂ〜１Ｃを参照のこと）。５０個の有意に関連するＧＯアノテーション用語（生物学的プロセス及び細胞成分、ボンフェローニ補正ｐ＜０．０１）は、ＴｏｐｐＣｌｕｓｔｅｒアノテーションツール（参照によりその全体が本明細書に援用されるＫａｉｍａｌ  ｅｔ  ａｌ．，“ＴｏｐｐＣｌｕｓｔｅｒ：ａ  Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  Ｇｅｎｅ  Ｌｉｓｔ  Ｆｅａｔｕｒｅ  Ａｎａｌｙｚｅｒ  ｆｏｒ  Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ  Ｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔ  Ｃｌｕｓｔｅｒｉｎｇ  ａｎｄ  Ｎｅｔｗｏｒｋ−ｂａｓｅｄ  Ｄｉｓｓｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，”  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．３８：Ｗ９６−Ｗ１０２（２０１０））。ネットワーク分析により、これらのＧＯ用語を、関連するＤＥＧとともに、３つの機能的に関連するモジュール（Ｍ１〜Ｍ３、図１Ｄを参照のこと）にグループ化した。ＧＯ用語ごとに、注釈付きのＤＥＧの数と、その用語に見出だされるヒトタンパク質コード遺伝子の総数が与えられると、期待値は一定の比率が想定される。エンリッチメントの倍数は、期待される数に対する、用語において見出されるＤＥＧの数の比率である。各機能モジュール内で、ＧＯ用語を最初にｐ値によってランク付けし、次いで倍率濃縮によってランク付けした。３つのＧＯ用語、ＧＯ：０００７２６８（化学シナプス伝達）、ＧＯ：００９８９１６（順行性シナプス間シグナル伝達）、及びＧＯ：００９９５３７（シナプス間シグナル伝達）を、モジュールＭ３内でそれぞれ３〜５にランク付けした。それらは、Ｍ３において２にランク付けされたＧＯ：００９９５３６（シナプスシグナル伝達）に関連する３８個のＤＥＧ内に含まれる３７個の同一セットの関連するＤＥＧを含んでいた。したがって、冗長性を減らすために、これらの３つのＧＯ用語を図から省略した。図３Ｂは、上位にランク付けされた各用語の計算値及び関連するＤＥＧをリストした表である。関連するＤＥＧを、ＨＤ由来のｈＧＰＣに対する対照由来のｈＧＰＣの調節不全の方向に応じて色分けする（緑、下方制御；赤、上方制御）。
【図３Ｂ−２】図３Ｂ−１の説明を参照されたい。
【図３Ｂ−３】図３Ｂ−１の説明を参照されたい。
【図４Ａ】ＣＡＧ長の増加がオリゴデンドログリア遺伝子発現の減少と相関することを示す。３人の異なるＨＤ患者のそれぞれに由来するｈＧＰＣを２人の異なるドナー由来のプールされた対照ｈＧＰＣと比較することにより、ＤＥＧの共通部分で見出される４２９個のＤＥＧ（１％ＦＤＲ、ＦＣ＞２．０）の生カウントから計算されるＴＰＭ値に基づく発現ヒートマップを示す。行の側部の色は、各ＨＤ由来のｈＧＰＣ株とプールされた対照の遺伝子のＦＣ間のピアソンの相関係数（Ｒ）と、そのＨＤ株の対応するＣＡＧリピート数（ＨＤ１７＝４０×ＣＡＧ、ＨＤ１８＝４６×ＣＡＧ、及びＨＤ２０＝４８×ＣＡＧ）を示す。グリアの分化と有髄化に関与する転写因子と段階調節タンパク質をコードする選択遺伝子を列挙する。
【図４Ｂ】ＣＡＧ長の増加がオリゴデンドログリア遺伝子発現の減少と相関することを示す。図４Ａのヒートマップに示す４２９個のＤＥＧの、対応するｈＧＰＣ株のＣＡＧリピート数に対するそれぞれの倍率変化の回帰によって得られる線形適合線を含む組み合わせ散布図を示す。
【図４Ｃ】ＣＡＧ長の増加がオリゴデンドログリア遺伝子発現の減少と相関することを示す。３つのＨＤ株におけるＤＥＧのＦＣと、対応するＣＡＧ長との間の相関についてのピアソン係数（Ｒ）の分布を示すヒストグラムである。４２９個の遺伝子のうち２５５個（｜ピアソンのＲ｜＞０．７５）について、相関分析により、ＦＣの絶対的な大きさがＣＡＧリピート数とともに増加することが示され；これらの遺伝子のうち２２８個は、遺伝子発現レベルとＣＡＧリピート数の逆相関を示し、グリア遺伝子発現の低下に相関してリピートが長かった。
【図５Ａ】図５Ａ〜５Ｄは、ヒト及びマウスのグリアが、ＣＡＧ反復長の関数として調節不全の遺伝子において重複を示したことを示す。これらのｈＧＰＣ遺伝子とオントロジーの間には高度な重複があり、ｈＧＰＣではより長いＣＡＧリピート長で調節不全になり、マウス脳組織ではＣＡＧリピート長とともに調節不全になることがわかっている（その全体が参照として本明細書に援用されるＬａｎｇｆｅｌｄｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｉｎｔｅｇｒａｔｅｄ  Ｇｅｎｏｍｉｃｓ  ａｎｄ  Ｐｒｏｔｅｏｍｉｃｓ  Ｄｅｆｉｎｅ  Ｈｕｎｔｉｎｇｔｉｎ  ＣＡＧ  Ｌｅｎｇｔｈ−Ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  Ｎｅｔｗｏｒｋｓ  ｉｎ  Ｍｉｃｅ，”  Ｎａｔ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．１９：６２３−６３３（２０１６））。図５Ａは、ＨＤ由来ＣＤ１４０でソートしたＧＰＣから得られる差次的に発現する遺伝子（ＤＥＧ）の代表的なリストを示し、ＨＤ由来ＣＤ４４でソートしたＡＰＣを、マウスｍＨｔｔ対立遺伝子シリーズ（図５Ａ及び５Ｂ）ならびにその全体が参照により本明細書に援用される（Ｌａｎｇｆｅｌｄｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｉｎｔｅｇｒａｔｅｄ  Ｇｅｎｏｍｉｃｓ  ａｎｄ  Ｐｒｏｔｅｏｍｉｃｓ  Ｄｅｆｉｎｅ  Ｈｕｎｔｉｎｇｔｉｎ  ＣＡＧ  Ｌｅｎｇｔｈ−Ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  Ｎｅｔｗｏｒｋｓ  ｉｎ  Ｍｉｃｅ，”  Ｎａｔ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．１９：６２３−６３３（２０１６））由来の６か月齢のＱ１７５組織（図５Ｃ及び５Ｄ）の差次的発現結果と比較した。図５Ａ及び５Ｃのネットワークプロットは、ＣＤ１４０及びＣＤ４４  ＨＤ  Ｇｅｎｅａ由来ＤＥＧセット（黄色のノード）と、その全体が参照により本明細書に援用されるＬａｎｇｆｅｌｄｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｉｎｔｅｇｒａｔｅｄ  Ｇｅｎｏｍｉｃｓ  ａｎｄ  Ｐｒｏｔｅｏｍｉｃｓ  Ｄｅｆｉｎｅ  Ｈｕｎｔｉｎｇｔｉｎ  ＣＡＧ  Ｌｅｎｇｔｈ−Ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  Ｎｅｔｗｏｒｋｓ  ｉｎ  Ｍｉｃｅ，”  Ｎａｔ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．１９：６２３−６３３（２０１６）分析由来のＤＥＧセット（灰色のノード）間の有意なペアワイズセットの共通部分を示す（フィッシャーの直接確率検定、ｐ＜０．０５）。ノードのサイズは、各ノードの括弧内に示されているＤＥＧの総数に応じて決定される。ＨＤ  ＧｅｎｅａセットのＤＥＧの数は、マウスオルソログ遺伝子へＩＤ変換した後のものである。エッジの厚さは、遺伝子セットの共通部分の重要性を示し、−ｌｏｇ１０（フィッシャーの直接確率検定のｐ値）として計算される。エッジの色とラベルは、ペアワイズセットの共通部分にある遺伝子の数を示す。その全体が参照により本明細書に援用されるＬａｎｇｆｅｌｄｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｉｎｔｅｇｒａｔｅｄ  Ｇｅｎｏｍｉｃｓ  ａｎｄ  Ｐｒｏｔｅｏｍｉｃｓ  Ｄｅｆｉｎｅ  Ｈｕｎｔｉｎｇｔｉｎ  ＣＡＧ  Ｌｅｎｇｔｈ−Ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  Ｎｅｔｗｏｒｋｓ  ｉｎ  Ｍｉｃｅ，”  Ｎａｔ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．１９：６２３−６３３（２０１６）のみが、２つのＨＤ  Ｇｅｎｅａセットのいずれかと有意に重複したＤＥＧセットを示す。図５Ｂ及び５Ｄのドットプロットは、遺伝子オントロジー（ＧＯ）：それぞれ図５Ａ及び５ＣのＤＥＧセットの生物学的プロセスのアノテーション結果の比較を示す。ドットは、設定されたＤＥＧセットに対��る遺伝子比に従ってサイズを決定する。ドットの色は、ＧＯ用語との関連の重要性を表す。有意なアノテーション（ＢＨ補正ｐ＜０．０１）を有していたすべてのＤＥＧセットを示す。最も有意な共通部分は、対立遺伝子シリーズのＤＥＧと比較した、６か月齢の線条体Ｑ１７５試料のＣＤ１４０  ＤＥＧセットとＤＥＧの間で（ｐ＝１．１０Ｅ−０６；１５０遺伝子）、及びＣＤ１４０  ＤＥＧセットとＱ１７５組織に対する６か月齢Ｑ１７５小脳ＤＥＧの間で観察された（ｐ＝９．８６Ｅ−１３；８５遺伝子）。これらの共通部分には、グリア調節因子Ｎｋｘ２−２、Ｏｌｉｇ１、及びＯｌｉｇ２、ならびに有髄化、イオンチャネル活性、及びシナプス伝達に関与するタンパク質をコードする遺伝子が含まれていた。全体として、ＨＤ  Ｇｅｎｅａ  ＣＤ１４０  ＤＥＧ及び参照によりその全体が本明細書に援用されるＬａｎｇｆｅｌｄｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，  “Ｉｎｔｅｇｒａｔｅｄ  Ｇｅｎｏｍｉｃｓ  ａｎｄ  Ｐｒｏｔｅｏｍｉｃｓ  Ｄｅｆｉｎｅ  Ｈｕｎｔｉｎｇｔｉｎ  ＣＡＧ  Ｌｅｎｇｔｈ−Ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  Ｎｅｔｗｏｒｋｓ  ｉｎ  Ｍｉｃｅ，”  Ｎａｔ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．  １９：６２３−６３３  （２０１６）の脳由来のＤＥＧについて、同様の有意なアノテーションが多数観察され、グリア新生、有髄化、軸索発達、及びイオンチャネル活性を含む機能が示唆された。
【図５Ｂ】図５Ａの説明を参照されたい。
【図５Ｃ】図５Ａの説明を参照されたい。
【図５Ｄ】図５Ａの説明を参照されたい。
【図６】図６Ａ〜６Ｂは、グリア分化関連遺伝子が、ｍＨＴＴを発現するＧＰＣにおいて調節不全であることを示している。ＲＮＡ−ｓｅｑ分析によって同定する、ＨＤ由来ＧＰＣにおいて調節不全である選択された遺伝子の発現を、ＴａｑＭａｎ  Ｌｏｗ  Ｄｅｎｓｉｔｙ  Ａｒｒａｙ（ＴＬＤＡ）ＲＴ−ｑＰＣＲによって評価し、対照ＧＰＣの発現と比較した。発現データを、１８Ｓ及びＧＡＰＤＨ内在性対照に対して正規化した。３つのプールされたＨＤ  ＧＰＣ株（株ＧＥＮＥＡ１７及びＧＥＮＥＡ２０の場合はｎ＝３、ＧＥＮＥＡ１８の場合はｎ＝５、合計ｎ＝１１）と、２つのプールされた対照ＧＰＣ株（ＧＥＮＥＡ０２の場合はｎ＝６及びＧＥＮＥＡ１９の場合はｎ＝３、合計ｎ＝９）から計算される平均ｄｄＣｔ値及び標準誤差範囲を示す。ＨＤと対照ＧＰＣでの発現の差異を、対応ｔ検定と、それに続くＢｅｎｊａｍｉｎｉ−Ｈｏｃｈｂｅｒｇ（ＢＨ）多重検定補正（＊＊＊ｐ＜０．０１、＊＊ｐ＜０．０５、＊ｐ＜０．１）によって評価した。両方のアレイでアッセイした遺伝子を太字で強調表示している。ＴＬＤＡデータの分析は、ＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎＳｕｉｔｅソフトウェアｖ．１．１（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）で実行した。ＨＤ由来ＧＰＣにおいてＲＮＡ−ｓｅｑによって調節不全として同定される遺伝子の大部分は、ＴＬＤＡによってそのように確認された。図６Ａは、主要なＧＰＣ系統転写因子及び段階調節されたミエリン関連タンパク質をコードする遺伝子を示す。信頼性の低い反応の割合が高いことが指摘されていたＭＯＢＰとＭＯＧ以外の４４個の遺伝子を示す。図６Ｂは、ＩＰＡにおける上流調節因子の分析によって予測されるＴＣＦ７Ｌ２の転写標的を示す。信頼性の低い反応の割合が高い４つの遺伝子を除いて、合計４２の遺伝子を示す。
【図７】ＨＤ由来ｈＧＰＣがカリウムチャネル遺伝子の顕著な調節不全を示したことを示す。プールされた対照ｈＧＰＣに対する各ＨＤ由来ｈＧＰＣ株の差次的遺伝子発現の比較（ＦＤＲ  ５％、倍率変化閾値なし）は、３つのＨＤ由来株のうちの少なくとも２つで調節不全であった２５個のカリウムチャネル遺伝子を明らかにした。ＮＳ＝有意ではない。
【図８−１】図８Ａ〜８Ｎは、ｍＨＴＴを発現するヒトＧＰＣでキメラ化されたマウスにおいて有髄化が損なわれたことを示す。ヒトグリアキメラマウスを、ｓｈｉｖｅｒｅｒ  ｘ  ｒａｇ２宿主へのｈＧＰＣの新生児注射によって確立し、８、１３、及び１８週目に殺処分した。図８Ａ及び８Ｄは、対照ｈＧＰＣ（ＧＥＮＥＡ１９）によるミエリン塩基性タンパク質（ＭＢＰ）の発現が新生児移植後８週間までに明らかであったのに対し（図８Ａ）、ＨＤ由来のｍＨＴＴ発現ｈＧＰＣ（ＧＥＮＥＡ２０）を移植したマウスではその時点までにＭＢＰ免疫標識をほとんど示さないかまたはまったく示さなかったことを示す（図８Ｄ）。図８Ｂ及び８Ｅは、対照ｈＧＰＣを移植したマウスがロバストなミエリン産生を示した１３週間までに（図８Ｂ）、ＨＤ由来ＧＰＣの一致したレシピエントにおいてＭＢＰ発現の散在したアイランドのみが認められたことを示す（図８Ｅ）。図８Ｃ及び８Ｆは、ｍＨＴＴ  ＧＰＣキメラマウス（図８Ｆ）と比較して、対照ＧＰＣ由来の有髄化が１８週間までによりいっそうロバストになることを示している（図８Ｃ）。図８Ｇ〜８Ｉは、移植したヒトＧＰＣの密度が、評価したどの時点においても対照とｍＨＴＴ  ｈＧＰＣとの間で異なっていなかった（図８Ｇ）が、トランスフェリン（ＴＦ）＋オリゴデンドロサイトとして分化したそれらのｈＧＰＣの割合は、ｍＨＴＴ発現ｈＧＰＣ（図８Ｈ）の間で有意に低く、ｍＨＴＴ  ｈＧＰＣを移植したキメラにおいてより少ないＴＦ定義オリゴデンドロサイトをもたらした（図８Ｉ）ことを示す。図８Ｊ〜８Ｌは、ドナー由来オリゴデンドロサイトの中で、ヒトＴＦ及びＭＢＰのＭＢＰ共発現によって定義されるように、ミエリン形成性になった割合が、対照ｈＧＰＣよりもｍＨＴＴを移植したキメラ脳において有意に低かったことを示す（図８Ｊ）。同様に、ＭＢＰ発現を発達させたすべてのドナー細胞の画分は、ＨＤ由来ｈＧＰＣに比べて、対照を移植したマウスにおいて有意に高かった（図８Ｋ）。したがって、ＭＢＰ免疫染色切片で評価したミエリン輝度は、対照移植脳梁において、対応するｍＨＴＴ  ＧＰＣ移植白質に比べて有意に高かった（図８Ｌ）。図８Ｍ及び８Ｎは、移植したヒトＧＰＣの密度（図８Ｇ）も分布（図８Ｍ及び８Ｎ、ドットマップ）も、対照及びＨＤ由来ｈＧＰＣ間で有意に異ならなかったことを示し、ｍＨＴＴ  ｈＧＰＣを移植した脳における有髄化の欠損が、差次的移植ではなく、オリゴデンドログリアの分化及びミエリン形成の障害によるものであったことが示された。スケールバー、５０ｍｍ。値は平均±ＳＥＭとして表す。ボンフェローニ事後検定を使用した二元配置ＡＮＯＶＡによる＊＊ｐ＜０．０１及び＊＊＊ｐ＜０．００１。
【図８−２】図８−１の説明を参照されたい。
【図８−３】図８−１の説明を参照されたい。
【図９】図９Ａ〜９Ｈは、ｍＨＴＴ  ＧＰＣを移植した脳が軸索有髄化の減少及び遅延を示したことを示している。図９Ａ〜９Ｆは、ＧＥＮＥＡ２０由来ｍＨＴＴ発現ｈＧＰＣを移植したマウスに比べて、ＧＥＮＥＡ１９対照ｈＧＰＣを移植したマウス（図９Ａ〜９Ｃ）において、より大きなＭＢＰ発現及びより高い割合の被鞘軸索を示す、ｈＧＰＣを移植したｓｈｉｖｅｒｅｒ脳梁の共焦点画像である（図９Ｄ〜９Ｆ）。図９Ｄ'及び９Ｅ'は、ドナー由来ＭＢＰ＋オリゴデンドロサイトの直交視野を備えた共焦点ｚスタックを示す。図９Ｆ'は、より高倍率の図９Ｆを示し、被鞘軸索周囲のＭＢＰ免疫反応性を示している。図９Ｇ及び９Ｈは、全体的な（図９Ｇ）及びＭＢＰ＋ドナー由来オリゴデンドロサイトあたりの（図９Ｈ）ＭＢＰ被鞘ＮＦ＋宿主軸索の割合を示す。スケールバーは、２０ｍｍ（図９Ａ〜９Ｆ）及び５ｍｍ（図９Ａ'〜９Ｃ'）を表す。値は平均±ＳＥＭを表す。＊＊ｐ＜０．０１及び＊＊＊ｐ＜０．００１、ボンフェローニ事後検定を使用した２元配置ＡＮＯＶＡ。
【図１０】ＳＯＸ１０−ＭＹＲＦ形質導入がｍＨＴＴ  ＧＰＣにおけるミエリン遺伝子発現を回復させることを示している。この図は、以下の表１に概説するｑＰＣＲデータのグラフ表示を示す。                                                      ＳＯＸ１０及びＭＹＲＦを発現するバイシストロン性プラスミドで形質移入した後、正常（Ｇｅｎｅａ１９、黒いバー）及びｍＨＴＴ発現（Ｇｅｎｅａ２０、赤）ｈＧＰＣの両方において、１８Ｓに対して、及び選択されたオリゴネオジェニック遺伝子及びミエリン形成遺伝子の対照プラスミドを形質移入した細胞に対して正規化した発現値。以下のウェルチｔ検定比較：１）各株に個別に形質移入したＳＯＸ１０−ＭＹＲＦとＥＧＦＰ、有意性をアスタリスクで示す；または２）ＳＯＸ１０−ＭＹＲＦを形質移入したＧｅｎｅａ  ２０とＥＧＦＰ対照を形質移入したＧｅｎｅａ  １９（有意性をハッシュマークで示す）。＊／＃  ｐ＜０．０５．  ＊＊／＃＃  ｐ＜０．０１．；＊＊＊／＃＃＃  ｐ＜０．００１．；＊＊＊＊／＃＃＃＃  ｐ＜０．０００１．  †，コーディング配列に位置するプライマー；††，３'ＵＴＲに位置するプライマー。
【００２６】
（表１）ＳＯＸ１０−ＭＹＲＦ形質導入はｍＨＴＴ  ＧＰＣのミエリン遺伝子発現を回復させる
2021528445.tif 000002
これらのｑＰＣＲデータは、ＳＯＸ１０及びＭＹＲＦを発現するバイシストロン性プラスミドで形質移入した後、１８Ｓに対して、次いで対照プラスミドを形質移入した細胞に対して正規化した後の、通常ｈＧＰＣ及びｍＨＴＴ発現ｈＧＰＣにおける選択したオリゴネオジェニック遺伝子及びミエリン形成遺伝子の相対ｍＲＮＡレベルを反映するｄｄＣＴ値を示す。ウェルチｔ検定。†、コーディング配列に位置するプライマー††３'ＵＴＲに位置するプライマー。Ｅｎｄｏ：内在性遺伝子；ウイルス：ウイルス導入遺伝子産物。＊ｐ＜０．０５。
【００２７】
【図１１−１】図１１Ａ〜１１Ｍは、ＳＯＸ１０及びＭＹＲＦが、ｍＨＴＴ  ＧＰＣによってオリゴデンドロサイトの分化及びミエリン形成をレスキューしたことを示す。図１１Ａは、ドキシサイクリン（ＤＯＸ）によって誘発されるＳＯＸ１０及びＭＹＲＦの相互依存性過剰発現を可能にするドキシサイクリン調節性デュアルベクターレンチウイルス（ＬＶ）形質導入戦略を示し、ＣＤ４の同時発現により、ＳＯＸ１０−ＭＹＲＦ形質導入ｈＧＰＣのＦＡＣＳベースの免疫単離を可能にする。図１１Ｂ〜１１Ｄは、ｍＨＴＴ発現ｈＧＰＣにおけるＳＯＸ１０及びＭＹＲＦ過剰発現の効果が、１８０ＤＩＶ  ＧＥＮＥＡ２０由来ｈＧＰＣの一致するセットをＤＯＸ調節性レンチウイルスＳＯＸ１０／ＭＹＲＦで形質導入し、一致する対照培養物を未処理のままとする一方でいくつかの培養物をＤＯＸに曝露することによって評価したことを示す。ｉｎ  ｖｉｔｒｏでさらに１週間後、オリゴデンドロサイトスルファチドを認識するｍＡｂ  Ｏ４を使用して細胞を免疫染色した。ＤＯＸなしでは、ｍＨＴＴ  ｈＧＰＣは安定して維持され、検出可能なＯ４を発現していなかった（図１１Ｂ）。対照的に、上方制御されたＳＯＸ１０及びＭＹＲＦ発現を伴う、ＤＯＸで産生されたそれらのｍＨＴＴ  ｈＧＰＣ（図１１Ｃ）は、オリゴデンドロサイト分化の急激かつ有意な増加を示した（図１１Ｄ）。この図は、ＳＯＸ１０及びＭＹＲＦ発現のレスキューの存在下及び非存在下での、ＨＤ由来ｈＧＰＣのｉｎ  ｖｉｖｏでのミエリン形成能力を評価するために使用する実験計画を概説している。新生児免疫不全ｓｈｉｖｅｒｅｒマウスに移植する前に、すべての細胞をｉｎ  ｖｉｔｒｏでＤＯＸに一時的に曝露し、それによってＣＤ４発現を開始させ、ＦＡＣＳ分離できるようにした。９週齢において、移植されたマウスに、さらに４週間ＤＯＸを与えてＳＯＸ１０及びＭＹＲＦ発現を開始させるか（＋ＤＯＸ）、またはそのように処理しなかった（−ＤＯＸ、対照）。正常ＨＴＴ発現ｈＥＳＣ（ＧＥＮＥＡ１９）に由来するｈＧＰＣを新生児移植したＳｈｉｖｅｒｅｒマウスは、ｉｎ  ｖｉｖｏにおいて豊富なＭＢＰ発現及びオリゴデンドロサイト形態を１３週間まで発達させた。対照的に、ＨＤ  ｈＥＳＣ（ＧＥＮＥＡ２０［Ｇ２０］）から生成したｍＨＴＴ発現ｈＧＰＣを移植したマウスは、その時点までにほとんど検出可能なＭＢＰを生じなかった。図１１Ｈ及び１１Ｉは、９週齢で、いくつかのＧＥＮＥＡ２０  ｍＨＴＴ  ｈＧＰＣ移植マウスに経口ＤＯＸを与えてＳＯＸ１０及びＭＹＲＦ発現を誘発し（図１１Ｈ）、対応する対照にはｄｏｘを与えなかったことを示す（図１１Ｉ）。ＤＯＸ（＋）マウスは、移植した白質において有意な数のＭＢＰ＋ミエリン形成オリゴデンドロサイトを示した（図１１Ｈ）。図１１Ｊ及び１１Ｋは、その同じ時点までに、類似のドナー細胞移植（図１１Ｋ）にもかかわらず、ＤＯＸ（−）対照マウスのドナー細胞はＭＢＰ発現を生じなかったことを示す（図１１Ｊ）。図１１Ｌ及び１１Ｍは、ＳＯＸ１０／ＭＹＲＦを形質導入したＧＥＮＥＡ２０  ｈＧＰＣを移植したＤＯＸ（＋）マウスにおいて、ドナー由来のオリゴデンドロサイトが、ランヴィエ絞輪のロバストな形成を誘導したことを示し（図１���Ｌ）、これは節構造を典型的に表すＣａｓｐｒタンパク質に隣接するβＩＶスペクトリンのクラスタリングによって証拠付けされ（図１１Ｍ）、これは未処理のｓｈｉｖｅｒｅｒ脳には存在しない。スケールバーは、５０ｍｍ（図１１Ｂ、１１Ｃ、及び１１Ｆ〜１１Ｉ）、１ｍｍ（図１１Ｌ）、及び０．５ｍｍ（図１１Ｍ）を表す。値は平均±ＳＥＭを表す。＊＊＊ｐ＜０．００１（ｔ検定）。
【図１１−２】図１１−１の説明を参照されたい。
【図１２−１】図１２Ａ〜１２Ｐは、ｍＨＴＴ  ＧＰＣにおいて星状細胞の分化が遅延することを示す。図１２Ａ〜１２Ｃは、ｍＨＴＴグリアキメラにおいて星状細胞の分化が有意に遅延したことを示す。正常なＨＴＴ  ＧＥＮＥＡ１９由来のｈＧＰＣを新生児期に移植したマウスは、８週間までに有意なドナー由来ＧＦＡＰ＋星状細胞を発達させ始め（図１２Ａ）、１３週間までに確実に発達し始め（図１２Ｂ）、１８週間までに脳梁白質の密な星状細胞コロニーを形成した（図１２Ｃ）。対照的に、図１２Ｄ〜１２Ｆは、ＧＥＮＥＡ２０同胞ｈＥＳＣに由来するｍＨＴＴ発現ｈＧＰＣが星状細胞表現型をよりゆっくりと発達させ、８週間（図１２Ｄ）及び１３週間（図１２Ｅ）ではほとんど明らかなＧＦＡＰ発現がなく、１８週間で適度なＧＦＡＰ＋星状細胞成熟を示すに過ぎなかった（図１２Ｆ）。図１２Ｇ及び１２Ｈは、対照（図１２Ｇ）及びｍＨＴＴ発現（図１２Ｈ）星状細胞の成熟星状細胞形態を示し、これらは、ｍＨＴＴ星状細胞が、一般的には、それらの対照由来の対応物と同程度の放射相称を示すことができなかったという点で異なっていた。図１２Ｉは、すべてのドナー細胞中のＧＦＡＰ発現細胞の割合が、対照移植マウスよりもｍＨＴＴ  ｈＧＰＣ移植マウスにおいて一貫して低かったことを示す。図１２Ｊ〜１２Ｍは、３次元ＮｅｕｒｏＬｕｃｉｄａで追跡した細胞のショール分析を示し、図１２Ｏ及び図１２Ｐに平坦化して示し、正常ドナー星状細胞が、ｍＨＴＴを発現するアストログリアよりも、より大きな線維の複雑さ（図１２Ｊ）及びより多くの一次プロセス（図１２Ｋ）を示したが、平均及び最大線維長（図１２Ｌ及び１２Ｍ）がより短いことを明らかになった。図１２Ｎ〜１２Ｐは、体積占有率のファンイン半径分析（その全体が参照により本明細書に援用されるＤａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｆｏｒｍｏｔｅｒｏｌ，ａ  Ｌｏｎｇ−Ａｃｔｉｎｇ  β２  Ａｄｒｅｎｅｒｇｉｃ  Ａｇｏｎｉｓｔ，Ｉｍｐｒｏｖｅｓ  Ｃｏｇｎｔｉｖｅ  Ｆｕｎｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｐｒｏｍｏｔｅｓ  Ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ  Ｃｏｍｐｌｅｘｉｔｙ  ｉｎ  ａ  Ｍｏｕｓｅ  Ｍｏｄｅｌ  ｏｆ  Ｄｏｗｎ  Ｓｙｎｄｒｏｍｅ，”  Ｂｉｏｌ．Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ  ７５：１７９−１８８（２０１４））により、ｍＨＴＴ星状細胞ではグリアプロセスによって占有されていない領域が対照星状細胞に比べて有意により多いことが明らかになったことを示す（図１２Ｎ）。図１２Ｏ及び図１２Ｐの図は、それらの不連続なドメイン構造を示す。値は平均±ＳＥＭを表す。２元配置ＡＮＯＶＡとボンフェローニの事後検定（図１２Ｉ）、非線形回帰の比較（ｐ＜０．０００１）（図１２Ｊ）、及びスコアリングする全細胞にわたるマウスごとの平均値を比較する独立ｔ検定（図１２Ｋ〜１２Ｎ）による＊ｐ＜０．０５；＊＊ｐ＜０．０１；＊＊＊ｐ＜０．００１（ｎ＝４対照、７ｍＨＴＴマウス）。スケールバーは、２５ｍｍ（図１２Ａ〜１２Ｆ）及び１０ｍｍ（図１２Ｇ、１２Ｈ、１２Ｏ、及び１２Ｐ）を表す。
【図１２−２】図１２−１の説明を参照されたい。
【図１２−３】図１２−１の説明を参照されたい。
【図１３−１】図１３Ａ〜１３Ｅは、ｍＨＴＴを発現する星状細胞が、複雑さの減少及び不完全なドメイン構造を示すことを示す。図１３Ａは、新生児移植の１８週間後の、ヒトグリアキメラにおけるＧＦＡＰ免疫染色ヒト細胞のショール分析を示す。分岐順序の関数としての、各細胞株の放射状共通部分の非線形回帰曲線（Ｌｏｒｅｎｔｉｚａｎ曲線近似）を示す。対照（Ｎ＝７）とｍＨＴＴマウス（Ｎ＝１０）の比較；ｐ＜０．０００１。図１３Ｂは、正常ＨＴＴ対照株ＧＥＮＥＡ１９、及び無関係の正常ＨＴＴ  ｈｉＰＳ細胞株Ｃ２７の両方が、ｍＨＴＴ発現ＧＥＮＥＡ株であるＧＥＮＥＡ１８及びＧＥＮＥＡ２０よりも多くの一次プロセスを有することを示す。対照ＧＥＮＥＡ１９及びＣ２７は互いに違いはないが、ＧＥＮＥＡ１８とＧＥＮＥＡ２０の両方が対照とは有意に異なる（Ｄｕｎｎｅｔｔの事後検定による一元配置ＡＮＯＶＡ；ｐ＜０．０００１）。図１３Ｃは、２つの対照株Ｃ２７及びＧＥＮＥＡ１９に由来する星状細胞の線維分布が、いずれかのｍＨＴＴ株の線維分布よりも放射状に対称であることを示している。Ｄｕｎｎｅｔｔの事後検定を使用した一元配置ＡＮＯＶＡ、及び対照としてのＣ２７、ｐ＜０．０００１。ＧＥＮＥＡ１８とＧＥＮＥＡ２０はどちらも、Ｃ２７とは有意に異なる（ｐ＜０．０００１）。図１３Ａ〜１３Ｃ、対照：Ｃ２７、灰色；及びＧＥＮＥＡ１９、黒。ＨＤ由来：ＧＥＮＥＡ１８、オレンジ；ＧＥＮＥＡ２０、赤。図１３Ｄは、Ｃ２７由来の対照ｈＧＰＣを移植したマウス脳梁由来の星状細胞の平坦化された３次元冠状トレースを、ＧＥＮＥＡ１８由来のｈＧＰＣを移植したマウスの場合（図１３Ｅ）と比較して示す。スケール：図１３Ｄ、２５μｍ。
【図１３−２】図１３−１の説明を参照されたい。
【図１４Ａ】ＨＤ  ｈＥＳＣ由来のＣＤ４４＋アストログリアが、遺伝子発現においてｍＨＴＴ依存性の変化を示すことを示す。図１Ａと同様に実行したＰＣＡを示すが、ＣＤ４４でソートしたアストログリアとその前駆体を使用して、ＨＤ由来細胞と正常細胞の分離された発現シグネチャを検証する。
【図１４Ｂ】ＨＤ  ｈＥＳＣ由来のＣＤ４４＋アストログリアが、遺伝子発現においてｍＨＴＴ依存性の変化を示すことを示す。３人のＨＤ患者に由来するアストログリアをプールされた対照細胞と比較し、図１と同じ細胞株及び分析パイプラインを使用することによって得られるＤＥＧのリスト（緑、下方制御；赤、上方制御；ＦＤＲ５％）の共通部分を強調するベン図を示す。３人のＨＤ患者が共有するＤＥＧのリストを、同法ドナーであるＣＴＲ１９（ＧＥＮＥＡ１９）と比較して患者ＨＤ２０（ＧＥＮＥＡ２０）によって差次的に発現する遺伝子によってフィルタリングした。
【図１４Ｃ】ＨＤ  ｈＥＳＣ由来のＣＤ４４＋アストログリアが、遺伝子発現においてｍＨＴＴ依存性の変化を示すことを示す。疾患状態によるクラスター化を示す（図１４Ｂ）で強調表示された１１４ＤＥＧの未加工のカウントから計算したｌｏｇ２変換されたＴＰＭ値に基づくヒートマップを示す。
【図１４Ｄ】ＨＤ  ｈＥＳＣ由来のＣＤ４４＋アストログリアが、遺伝子発現においてｍＨＴＴ依存性の変化を示すことを示す。（図１４Ｂ）で強調表示された１１４個の共通部分ＤＥＧについての機能的アノテーション（遺伝子オントロジー：細胞成分、ＦＤＲ補正ｐ＜０．１）のネットワーク表現を示す。遺伝子は丸いノードとして指定される（緑、下方制御；赤、上方制御）；丸みを帯びた長方形のノードは、アノテーションタームを表す。ノードは次数でサイズ設定され、コミュニティ検出によって識別される相互接続モジュール（Ｍ１〜Ｍ４）としてグループ化される。色付きのモジュールごとに、上位３つのアノテーションをネットワークに一覧表示し、ラベル付けする。
【図１４Ｅ】ＨＤ  ｈＥＳＣ由来のＣＤ４４＋アストログリアが、遺伝子発現においてｍＨＴＴ依存性の変化を示すことを示す。Ｍ１で同定された１４個の保存ＤＥＧ（（図１４Ｄ）の黄色、これにはシナプス後及び受容体複合体成分に関連するアノテーションが付記されている）の発現ヒートマップを示す。
【図１４Ｆ】ＨＤ  ｈＥＳＣ由来のＣＤ４４＋アストログリアが、遺伝子発現においてｍＨＴＴ依存性の変化を示すことを示す。Ｍ２で同定された９つの保存ＤＥＧ（（図１４Ｄ）の灰色、核周辺及び初期エンドソーム成分にアノテーションが付記されている）のヒートマップを示す。
【図１４Ｇ】ＨＤ  ｈＥＳＣ由来のＣＤ４４＋アストログリアが、遺伝子発現においてｍＨＴＴ依存性の変化を示すことを示す。Ｍ３で同定された１１個の保存ＤＥＧ（（図１４Ｄ）の青色、原形質膜、細胞間結合、及びデスモソーム成分に関連するアノテーションが付記されている）のヒートマップを示す。
【図１４Ｈ】ＨＤ  ｈＥＳＣ由来のＣＤ４４＋アストログリアが、遺伝子発現においてｍＨＴＴ依存性の変化を示すことを示す。Ｍ４で同定された８ＤＥＧ（（図１４Ｄ）のオレンジ、細胞外マトリックス成分に関連するアノテーションが付記されている）のヒートマップを示す。
【発明を実施するための形態】
【００２８】
詳細な説明
本明細書の開示は、概して、ハンチントン病を治療するまたはその発症を阻害する方法に関する。この方法は、ハンチントン病を有するかまたは有するリスクのある対象を選択すること、及び、対象においてハンチントン病を治療するのにまたはその発症を阻害するのに有効な条件下で、表２または表３に記載の１つ以上の遺伝子またはそれらがコードするタンパク質の１つ以上の調節因子を対象に投与することを含む。
【００２９】
（表２）対照と比較したＨＤ由来  ｈＧＰＣＳにおける高濃度遺伝子
2021528445.tif 000003
2021528445.tif 000004
【００３０】
（表３）ＨＤ由来ｈＧＰＣＳにおいて対照に比べて下方制御される遺伝子
2021528445.tif 000005
2021528445.tif 000006
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2021528445.tif 000013
【００３１】
ハンチントン病は、壊滅的な精神医学的衰退及び認知衰退を伴う執拗に進行する運動障害を特徴とする常染色体優性神経変性疾患である。ハンチントン病は、線条体の主要な出力ニューロンであるＧＡＢＡ作動性中型有棘ニューロンの著しい喪失に関連する、新線条体の一貫した重度の萎縮に関連している。ハンチントン病は、ハンチンチン遺伝子（「ＨＴＴ」）の第１のエクソンにおける異常に長いＣＡＧリピート伸長を特徴とする。変異ハンチンチンタンパク質のコードされたポリグルタミン拡張は、その正常な機能とタンパク質間相互作用を破壊し、最終的には広範囲の神経病理をもたらし、新線条体で最も急速に明らかになる。
【００３２】
本明細書中で使用する場合、用語「グリア細胞」とは、支持及び栄養を提供し、恒常性を維持し、ミエリンを形成するかまたは有髄化を促進し、神経系におけるシグナル伝達に関与する非神経細胞の集団を指す。本明細書中で使用する「グリア細胞」は、オリゴデンドロサイトまたは星状細胞などのグリア系統の完全に分化した細胞、ならびにグリア前駆細胞を包含する。グリア前駆細胞は、オリゴデンドロサイト及び星状細胞などのグリア系統の細胞に分化する可能性のある細胞である。
【００３３】
本明細書中で使用する場合、「治療する」または「治療」とは、緩解；寛解；症状の軽減、または傷害、病理、もしくは病態を患者にとってより許容可能なものにすること；変性速度の遅延または減退；変性の最終時点での衰弱の抑制；または対象の心身の健康の改善などの任意の客観的または主観的パラメータを含む、傷害、病理、または病態の改善における成功の徴候を指す。症状の治療または改善は、身体検査、神経学的検査、及び／または精神医学的鑑定の結果を含む、客観的または主観的パラメータに基づくことができる。「治療」には、疾患、病態または障害に関連する症状または病態の発症を予防もしくは遅延させる、緩和する、または阻止もしくは阻害するためのグリア前駆細胞の投与が含まれる。「治療効果」とは、対象における疾患、疾患の症状、または疾患、病態もしくは障害の副作用を軽減、排除、または予防することを指す。治療は、予防的（疾患、病態もしくは障害の発症もしくは悪化を予防もしくは遅延させるための、またはそれらの臨床症状もしくは無症候性症状の発現を予防するための）、または疾患、病態もしくは障害の発現後の症状の治療的抑制もしくは緩和であり得る。
【００３４】
本明細書に記載の方法による治療に適した対象には、ハンチントン病を患っているか、または患うリスクのある任意の哺乳類対象が含まれる。例示的な哺乳類対象として、ヒト、マウス、ラット、モルモット、及び他の小さなげっ歯類、イヌ、ネコ、ヒツジ、ヤギ、及びサルが含まれる。一実施形態では、対象はヒトである。
【００３５】
本明細書に記載の方法で使用するための１つ以上の調節因子は、限定されないが、ペプチド、核酸分子、または小分子化合物であり得る。調節因子は、例えば、天然の、半合成の、または合成の薬剤であり得る。例えば、調節因子は、１つ以上の遺伝子の特定の機能を標的とする薬物であり得る。特定の実施形態では、１つ以上の調節因子は、アンタゴニストまたはアゴニストであり得る。
【００３６】
本発明の調節因子は、経口、非経口、例えば、皮下、静脈内、筋肉内、腹腔内、鼻腔内注入によって、または鼻、喉、及び気管支などの粘膜への塗布によって投与することができる。それらは、単独で、または好適な薬学的担体とともに投与してもよく、錠剤、カプセル、散剤、溶液、懸濁液、または乳剤などの固体または液体形態とすることができる。
【００３７】
本発明の調節因子は、経口投与、例えば、不活性希釈剤とともに、もしくは同化可能な食用担体とともに投与してもよく、またはそれらをハードもしくはソフトシェルカプセルに封入してもよく、またはそれらを錠剤に圧縮してもよく、またはそれらを食事療法の食糧に直接組み込んでもよい。経口治療投与の場合、これらの調節因子を、賦形剤とともに組み込み、錠剤、カプセル、エリキシル剤、懸濁液、シロップなどの形態で使用してもよい。そのような組成物及び調製物は、少なくとも０．１％の活性化合物を含有すべきである。当然のことながら、これらの組成物中の化合物の割合は様々に異なっていてもよく、好都合には、約２％〜約６０％の単位重量であってもよい。そのような治療上有用な組成物中の活性化合物の量は、適切な用量が得られる量とする。本発明による好ましい組成物は、経口投与単位が約１〜２５０ｍｇの活性化合物を含むように調製される。
【００３８】
錠剤、カプセルなどはまた、トラガカントガム、アカシア、コーンスターチ、またはゼラチンなどの結合剤；リン酸二カルシウムなどの賦形剤；コーンスターチ、ジャガイモ澱粉、アルギン酸などの崩壊剤；ステアリン酸マグネシウムなどの潤滑剤；及びスクロース、ラクトース、またはサッカリンなどの甘味料を含み得る。単位剤形がカプセルである場合、それは、上記のタイプの材料に加えて、脂肪油などの液体担体を含み得る。
【００３９】
様々な他の材料を、コーティング剤として、または投与単位の物理的形態を改変するために存在させてもよい。例えば、錠剤を、シェラック、砂糖、またはその両方でコーティングしてもよい。シロップは、有効成分に加えて、甘味料としてのスクロース、防腐剤としてのメチルパラベン及びプロピルパラベン、染料、ならびにチェリーまたはオレンジフレーバーなどの香味剤を含み得る。
【００４０】
これらの調節因子を、非経口的に投与してもよい。これらの調節因子の溶液または懸濁液を、水中でヒドロキシプロピルセルロースなどの界面活性剤と好適に混合して調製することができる。分散液はまた、グリセロール、液体ポリエチレングリコール、及び油中でのそれらの混合物中に調製することができる。例示的な油は、石油、動物、植物、または合成起源の油であり、例えば、ピーナッツ油、ダイズ油、または鉱油である。一般的に、水、生理食塩水、デキストロース水溶液及び関連する糖溶液、ならびにプロピレングリコールまたはポリエチレングリコールなどのグリコールは、特に注射可能な溶液にとって好ましい液体担体である。これらの調製物は、通常の保存条件及び使用条件下で、微生物の増殖を予防するための防腐剤を含有する。
【００４１】
注射用途に好適な医薬形態には、注入可能な無菌溶液または無菌分散液を即時調製するための無菌水溶液または無菌分散液及び無菌粉末が含まれる。すべての場合において、形態は、無菌でなければならず、容易に注射できる程度に流体でなければならない。これはまた、製造及び貯蔵の条件下で安定でなければならず、細菌または真菌などの微生物の汚染作用に対して保存されねばならない。担体は、例えば、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、及び液体ポリエチレングリコール）、それらの好適な混合物、ならびに植物油を含有する溶媒または分散媒であり得る。
【００４２】
本発明の調節因子はまた、エアロゾルの形態で気道に直接投与してもよい。エアロゾルとして使用するために、溶液または懸濁液中の本発明の化合物を、適切な噴射剤、例えば、プロパン、ブタン、またはイソブタンなどの炭化水素噴射剤と従来のアジュバントと一緒に加圧エアロゾル容器に包装してもよい。本発明の物質はまた、ネブライザーまたはアトマイザーなどの非加圧形態で投与してもよい。
【００４３】
ＤＮＡレベルで調節を行う場合は、遺伝子治療を使用して標的遺伝子をノックアウトまたは破壊してもよい。本明細書中で使用する場合、「ノックアウト」は、遺伝子ノックダウンであり得るか、または遺伝子は、レトロウイルス遺伝子導入を含むがこれに限定されない当技術分野で公知の点変異、挿入、欠失、フレームシフト、またはミスセンス変異などの変異によってノックアウトすることができる。
【００４４】
一実施形態では、１つ以上の調節因子は、ジンクフィンガーヌクレアーゼを介して、本明細書に記載の１つ以上の遺伝子の発現を抑制し得る。ジンクフィンガーヌクレアーゼ（ＺＦＮ）は、ジンクフィンガーＤＮＡ結合ドメインをＤＮＡ切断ドメインに融合することによって生成される人工制限酵素である。ジンクフィンガードメインは、所望のＤＮＡ配列を標的とするように改変することができ、これにより、ジンクフィンガーヌクレアーゼは複雑なゲノム内のユニークな配列を標的にすることができる（その全体が参照により本明細書に援用されるＵｒｎｏｖ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｇｅｎｏｍｅ  Ｅｄｉｔｉｎｇ  ｗｉｔｈ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄ  Ｚｉｎｃ  Ｆｉｎｇｅｒ  Ｎｕｃｌｅａｓｅｓ，”  Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｇｅｎｅｔ．１１：６３６−６４６（２０１０））。内在性のＤＮＡ修復機構を利用することにより、これらの試薬を使用して高等生物のゲノムを正確に変更することができる。
【００４５】
１つ以上の調節因子はまた、メガヌクレアーゼ及びＴＡＬエフェクターヌクレアーゼであってもよい（ＴＡＬＥＮ，Ｃｅｌｌｅｃｔｉｓ  Ｂｉｏｒｅｓｅａｒｃｈ）（その全体が参照により本明細書に援用されるＪｏｕｎｇ  ＆  Ｓａｎｄｅｒ，“ＴＡＬＥＮｓ：Ａ  Ｗｉｄｅｌｙ  Ａｐｐｌｉｃａｂｌｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ｆｏｒ  Ｔａｒｇｅｔｅｄ  Ｇｅｎｏｍｅ  Ｅｄｉｔｉｎｇ，”  Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．１４：４９−５５（２０１３））。ＴＡＬＥＮ（登録商標）は、二本鎖切断（ＤＳＢ）を導入するエンドヌクレアーゼの触媒ドメインに融合させた配列特異的認識のためのＴＡＬＥ  ＤＮＡ結合ドメインからなる。ＴＡＬＥＮ（登録商標）のＤＮＡ結合ドメインは、大きな認識部位（例えば１７ｂｐ）を高精度で標的化することができる。メガヌクレアーゼは、様々な単細胞生物、例えば、細菌、酵母、藻類、及びいくつかの植物オルガネラに由来する配列特異的エンドヌクレアーゼであり、天然の「ＤＮＡはさみ」である。メガヌクレアーゼは、１２〜３０塩基対の長い認識部位を有する。ネイティブのゲノムＤＮＡ配列（内在性遺伝子など）を標的化するために、天然のメガヌクレアーゼの認識部位を改変することができる。
【００４６】
別の実施形態では、１つ以上の調節因子は、ＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓ９誘導ヌクレアーゼである（その全体が参照により本明細書に援用されるＷｉｅｄｅｎｈｅｆｔ  ｅｔ  ａｌ．，“ＲＮＡ−Ｇｕｉｄｅｄ  Ｇｅｎｅｔｉｃ  Ｓｉｌｅｎｃｉｎｇ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  ｉｎ  Ｂａｃｔｅｒｉａ  ａｎｄ  Ａｒｃｈａｅａ，”  Ｎａｔｕｒｅ  ４８２：３３１−３３８（２０１２）；Ｚｈａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｍｕｌｔｉｐｌｅｘ  Ｇｅｎｏｍｅ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  Ｕｓｉｎｇ  ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，”  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ３３９（６１２１）：８１９−２３（２０１３）；及びＧａｊ  ｅｔ  ａｌ．，“ＺＦＮ，ＴＡＬＥＮ，ａｎｄ  ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ−ｂａｓｅｄ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  Ｇｅｎｏｍｅ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，”  Ｃｅｌｌ  ３１（７）：３９７−４０５（２０１３））。ＴＡＬＥＮ及びＺＦＮと同様に、ＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓ９干渉は、誘導ヌクレアーゼの二本鎖ＤＮＡ切断によって原核細胞及び真核細胞における遺伝子発現の配列特異的制御を可能にする遺伝子技術である。これは、細菌免疫系由来ＣＲＩＳＰＲ（クラスター化された規則的に間隔を空けたパリンドロームリピート）経路に基づいている。
【００４７】
本明細書に記載の１つ以上の遺伝子の調節はまた、アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）を使用して実施することができる。本明細書に記載の遺伝子の１つ以上を阻害するための適切な治療用ＡＳＯとして、アンチセンスＲＮＡ、ＤＮＡ、ＲＮＡ／ＤＮＡハイブリッド（例えば、ギャップマー）、及びそれらの化学的類似体、例えば、モルホリノ、ペプチド核酸オリゴマー、ロックド核酸からなるＡＳＯが挙げられる。ＲＮＡオリゴマー、ＰＮＡ、及びモルホリノを除いて、他のすべてのアンチセンスオリゴマーは、ＲＮａｓｅＨを介した標的切断のメカニズムを介して真核細胞で作用する。ＰＮＡとモルホリノは、相補的ＤＮＡ及びＲＮＡ標的に高い親和性と特異性で結合するため、ＲＮＡ翻訳機構の単純な立体障害を介して作用し、ヌクレアーゼ攻撃に対して完全に耐性があるように思われる。
【００４８】
「アンチセンスオリゴマー」とは、少なくとも約１０ヌクレオチド長のオリゴマーを含むアンチセンス分子または抗遺伝子剤を指す。実施形態では、アンチセンスオリゴマーは、少なくとも１５、１８、２０、２５、３０、３５、４０、または５０ヌクレオチドを含む。アンチセンスアプローチは、本明細書中で同定される遺伝子のポリヌクレオチド配列によってコードされるＲＮＡに相補的であるオリゴヌクレオチド（ＤＮＡ、ＲＮＡ、ＤＮＡ／ＲＮＡ、またはその化学修飾誘導体のいずれか）の設計を含む。アンチセンスＲＮＡを細胞に導入して、相補的ｍＲＮＡとの塩基対形成及びその翻訳またはその活性を物理的に妨害することにより、相補的ｍＲＮＡの翻訳または活性を阻害することができる。したがって、この効果は化学量論的である。絶対的な相補性は好ましくはあるが、必須ではない。本明細書中で言及する、ＲＮＡの部分に対する「相補的」な配列とは、ＲＮＡとハイブリダイズして安定な二本鎖を形成可能とするのに十分な相補性を有する配列を意味する。したがって、二本鎖アンチセンスポリヌクレオチド配列の場合、二本鎖ＤＮＡの一本鎖を試験してもよく、または三本鎖形成をアッセイしてもよい。ハイブリダイズする能力は、相補性の程度とアンチセンスポリヌクレオチド配列の長さの両方に依存する。一般的に、ハイブリダイズするポリヌクレオチド配列が長いほど、それが含む可能性のあるＲＮＡとの塩基のミスマッチが多くなり、それでも安定した二本鎖（または場合により三本鎖）を形成する。当業者であれば、ハイブリダイズした複合体の融点を決定するための標準的な手順を使用することにより、許容できる程度のミスマッチを確認することができる。
【００４９】
一実施形態では、１つ以上の調節因子は、本明細書に記載の１つ以上の遺伝子に特異的に結合し、その機能的発現を阻害するアンチセンスオリゴヌクレオチドである。例えば、二本鎖の安定性を高めるためのＡＳＯへの一般的な修飾には、５−メチル−ｄＣ、２−アミノ−ｄＡ、ロックド核酸、及び／またはペプチド核酸塩基の組み込みが含まれる。ヌクレアーゼ耐性を増強するための一般的な修飾には、通常のホスホジエステル結合のホスホロチオエートまたはホスホロジチオエート結合への変換、またはプロピン類似体塩基、２'−Ｏ−メチルもしくは２'−Ｏ−メチルオキシエチルＲＮＡ塩基の使用が含まれる。
【００５０】
低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）を使用するＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）は、本明細書に記載のように、対象における１つ以上の遺伝子を調節するために利用することができる転写後遺伝子サイレンシングの別の形態である。
【００５１】
したがって、一実施形態では、１つ以上の調節因子は、ｓｉＲＮＡである。ｓｉＲＮＡは、長さがおよそ２０〜２５ヌクレオチドの二本鎖合成ＲＮＡ分子であり、両端に２〜３ヌクレオチドの短い３'オーバーハングを有する。二本鎖ｓｉＲＮＡ分子は、標的ｍＲＮＡ分子の一部のセンス鎖とアンチセンス鎖を表す。ｓｉＲＮＡ分子は通常、開始コドンからおよそ５０〜１００ヌクレオチド下流のｍＲＮＡ標的の領域を標的とするように設計される。本発明のｓｉＲＮＡは、部分的に精製されたＲＮＡ、実質的に純粋なＲＮＡ、合成ＲＮＡ、または組換えにより産生されたＲＮＡ、ならびに１つ以上のヌクレオチドの付加、欠失、置換及び／または改変による、天然型ＲＮＡとは異なる改変型ＲＮＡを含み得る。そのような改変には、ヌクレアーゼ消化に対してｓｉＲＮＡを耐性にする修飾を含む、ｓｉＲＮＡの末端（複数可）またはｓｉＲＮＡの１つ以上の内部ヌクレオチドへの非ヌクレオチド物質の付加が含まれ得る。細胞に導入されると、ｓｉＲＮＡ複合体は、内在性ＲＮＡｉ経路を誘発し、標的ｍＲＮＡ分子の切断と分解をもたらす。安定性、特異性、及び有効性を高めるためのｓｉＲＮＡ組成物の様々な改良、例えば、ｓｉＲＮＡ分子の一方または両方の鎖への修飾ヌクレオシドまたはモチーフの組み込みが記載されており、本発明のこの態様による使用に適している（その全体が参照により本明細書に援用される、例えば、ＧｉｅｓｅらのＷＯ２００４／０１５１０７；ＭｃＳｗｉｇｇｅｎらのＷＯ２００３／０７０９１８；ＩｍａｎｉｓｈｉらのＷＯ１９９８／３９３５２；Ｊｅｓｐｅｒらの米国特許出願公開第２００２／００６８７０８号；Ｋａｎｅｋｏらの米国特許出願公開第２００２／０１４７３３２号；Ｂｈａｔらの米国特許出願公開第２００８／０１１９４２７号を参照のこと）。
【００５２】
別の実施形態では、１つ以上の調節因子は、エンドリボヌクレアーゼ（例えば、ＲＮａｓｅ  ＩＩＩまたはダイサー）による長い二本鎖ＲＮＡの切断から形成されるｓｉＲＮＡオリゴヌクレオチドの混合物を含むエンドリボヌクレアーゼ調製ｓｉＲＮＡ（ｅｓｉＲＮＡ）を含む。合成の長い二本鎖ＲＮＡを消化すると、すべて同じｍＲＮＡ配列を標的とする１８〜２５塩基の長さのｓｉＲＮＡの短い重複フラグメントが生成される。すべて同じｍＲＮＡ配列を標的とする多くの異なるｓｉＲＮＡの複合混合物は、サイレンシング効果の増加をもたらす。長い非コードＲＮＡを標的とするｅｓｉＲＮＡ技術の使用は、当技術分野に記載されている（その全体が参照により本明細書に援用されるＴｈｅｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  Ｈｕｍａｎ  Ｌｏｎｇ  Ｎｏｎｃｏｄｉｎｇ  Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｓ  ｂｙ  Ｅｎｄｏｒｉｂｏｎｕｃｌｅａｓｅ−Ｐｒｅｐａｒｅｄ  ｓｉＲＮＡｓ，”  Ｊ．Ｂｉｏｍｏｌ．Ｓｃｒｅｅｎ  ２０（８）：１０１８−１０２６（２０１５））。
【００５３】
１つ以上の調節因子はまた、短鎖または低分子ヘアピンＲＮＡであり得る。短鎖または低分子ヘアピンＲＮＡ分子は、機能的にはｓｉＲＮＡ分子に類似しているが、タイトなヘアピンターンを形成する長いＲＮＡ配列を含む。ｓｈＲＮＡは細胞機構によってｓｉＲＮＡに切断され、遺伝子発現は細胞ＲＮＡ干渉経路を介してサイレンシングされる。
【００５４】
本明細書に記載の遺伝子の１つ以上に特異的に結合する核酸アプタマーもまた、本発明の方法において有用である。核酸アプタマーは、一本鎖、部分的に一本鎖、部分的に二本鎖、または二本鎖ヌクレオチド配列であり、有利には複製可能なヌクレオチド配列であり、選択された非オリゴヌクレオチド分子または分子群をワトソン−クリック塩基対形成または三重鎖形成のメカニズムによって特異的に認識することができる。アプタマーには、ヌクレオチド、リボヌクレオチド、デオキシリボヌクレオチド、ヌクレオチド類似体、修飾ヌクレオチド、ならびに骨格修飾、分岐点、及び非ヌクレオチド残基、基、または架橋を含むヌクレオチドを含む、定義された配列セグメント及び配列が含まれるが、これらに限定されない。核酸アプタマーには、部分的及び完全に一本鎖及び二本鎖のヌクレオチド分子及び配列；合成ＲＮＡ、ＤＮＡ、及びキメラヌクレオチド；ハイブリッド；二本鎖；ヘテロ二本鎖；ならびにアプタマー分子または配列の全部または一部を増幅、転写、または複製するために必要な任意のリボヌクレオチド、デオキシリボヌクレオチド、またはそれらのキメラ対応物、及び／または対応する相補的配列、プロモーター、またはプライマーアニーリング配列が含まれる。
【００５５】
上記の実施形態では、１つ以上の調節因子は、対象への送達のために適切な送達ビヒクルまたは担体にパッケージしてもよい。適切な送達ビヒクルとして、ウイルス、ウイルス様粒子、細菌、バクテリオファージ、生分解性ミクロスフェア、微粒子、ナノ粒子、エクソソーム、リポソーム、コラーゲンミニペレット、及びコクリエートが挙げられるが、これらに限定されない。これら及び他の生物学的遺伝子送達ビヒクルは当業者に周知である（例えば、その全体が参照により本明細書に援用されるＳｅｏｗ  ａｎｄ  Ｗｏｏｄ，“Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｇｅｎｅ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｖｅｈｉｃｌｅｓ：  Ｂｅｙｏｎｄ  Ｖｉｒａｌ  Ｖｅｃｔｏｒｓ，”  Ｍｏｌ．Ｔｈｅｒａｐｙ  １７（５）：７６７−７７７（２００９）を参照のこと）。
【００５６】
一実施形態では、調節因子を、治療用発現ベクターにパッケージ化して送達しやすくする。適切な発現ベクターは当技術分野で周知であり、限定されないが、アデノウイルスベクター、アデノ随伴ウイルスベクター、レトロウイルスベクター、レンチウイルスベクター、またはヘルペスウイルスベクターなどのウイルスベクターが挙げられる。ウイルスベクターまたは他の適切な発現ベクターは、本発明の阻害性核酸分子（例えば、ｓｉＲＮＡ、ＡＳＯなど）をコードする配列と、阻害性配列を発現するための任意の適切なプロモーターを含む。適切なプロモーターとして、例えば、限定されないが、Ｕ６またはＨＩ  ＲＮＡ  ｐｏｌ  ＩＩＩプロモーター配列及びサイトメガロウイルスプロモーターが挙げられる。他の適切なプロモーターの選択は当業者の範囲内である。発現ベクターはまた、組織または細胞特異的な方法で阻害性核酸分子を発現させるための誘導性または調節可能なプロモーターを含み得る。
【００５７】
治療的阻害性核酸分子を保有する遺伝子治療ベクターは、例えば、静脈内注射、局所投与（その全体が参照により本明細書に援用されるＮａｂｅｌらの米国特許第５，３２８，４７０号）または定位的な注射によって対象に投与する（例えば、その全体が参照により本明細書に援用されるＣｈｅｎ  ｅｔ  ａｌ．  “Ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒａｐｙ  ｆｏｒ  Ｂｒａｉｎ  Ｔｕｍｏｒｓ：  Ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ｇｌｉｏｍａｓ  ｂｙ  Ａｄｅｎｏｖｉｒｕｓ  Ｍｅｄｉａｔｅｄ  Ｇｅｎｅ  Ｔｒａｎｓｆｅｒ  Ｉｎ  Ｖｉｖｏ，”  Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔ’ｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９１：３０５４−３０５７（１９９４）を参照のこと）。治療用ベクターの医薬調製物は、許容可能な希釈剤中に治療用ベクターを含むことができ、または治療用送達ビヒクルが埋め込まれている徐放性マトリックスを含むことができる。あるいは、完全な治療用送達ベクターが組換え細胞、例えばレトロウイルスベクターからインタクトで産生することができる場合、医薬調製物は、治療的送達系を産生する１つ以上の細胞を含み得る。遺伝子治療ベクターは通常、内在性転写因子に応答する構成的調節エレメントを利用する。
【００５８】
本開示の調節因子の送達のための別の適切なアプローチは、リポソーム送達ビヒクルまたはナノ粒子送達ビヒクルの使用を含む。
【００５９】
一実施形態では、その全体が参照により本明細書に援用されるＳｅｍｐｌｅ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｒａｔｉｏｎａｌ  Ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  Ｃａｔｉｏｎｉｃ  Ｌｉｐｉｄｓ  ｆｏｒ  ｓｉＲＮＡ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ，”  Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈ．２８：１７２−１７６（２０１０）及びＢｕｍｃｒｏｔらのＷＯ２０１１／０３４７９８、ＢｕｍｃｒｏｔらのＷＯ２００９／１１１６５８及びＢｕｍｃｒｏｔらのＷＯ２０１０／１０５２０９に記載されているように、阻害性核酸分子（例えば、ｓｉＲＮＡ分子）を含む医薬組成物または製剤を、脂質製剤にカプセル化して核酸−脂質粒子を形成する。ＡＳＯの送達に適した他の陽イオン性脂質担体として、限定されないが、以下が挙げられる：Ｎ−［１−（２，３−ジオレオイルオキシ）プロピル］−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルアンモニウムクロリド（ＤＯＴＭＡ）及びＮ−［１−（２，  ３−ジオレオイルオキシ）プロピル］−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルアンモニウムメチルサルフェート（ＤＯＴＡＰ）（その全体が参照により本明細書に援用されるＣｈａｎ  ｅｔ  ａｌ．，“Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ  Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ：Ｆｒｏｍ  Ｄｅｓｉｇｎ  ｔｏ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ，”  Ｃｌｉｎ．Ｅｘｐ．Ｐｈａｒｍ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．３３：５３３−５４０（２００６）を参照のこと）。
【００６０】
本発明の別の実施形態では、送達ビヒクルはナノ粒子である。様々なナノ粒子送達ビヒクルが当技術分野で公知であり、本発明の調節因子の送達に適している（その全体が参照により本明細書に援用される、例えば、ｖａｎ  Ｖｌｅｒｋｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｍｕｌｔｉ−ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  Ｐｏｌｙｍｅｒｉｃ  Ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ  ｆｏｒ  Ｔｕｍｏｕｒ−Ｔａｒｇｅｔｅｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ，”  Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖ．３（２）：２０５−２１６（２００６）を参照のこと）。適切なナノ粒子として、ポリ（βアミノエステル）（その全体が参照により本明細書に援用されるＳａｗｉｃｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，  “Ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｏｆ  Ｓｕｉｃｉｄｅ  ＤＮＡ  ｆｏｒ  Ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ  Ｏｖａｒｉａｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｌｌ  Ｔｈｅｒａｐｙ，”  Ａｄｖ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．Ｂｉｏｌ．６２２：２０９−２１９（２００８））、ポリエチレンイミン−ａｌｔ−ポリ（エチレングリコール）コポリマー（その全体が参照により本明細書に援用されるＰａｒｋ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｄｅｇｒａｄａｂｌｅ  Ｐｏｌｙｅｔｈｙｌｅｎｉｍｉｎｅ−ａｌｔ−Ｐｏｌｙ（ｅｔｈｙｌｅｎｅ  ｇｌｙｃｏｌ）  Ｃｏｐｏｌｙｍｅｒｓ  Ａｓ  Ｎｏｖｅｌ  Ｇｅｎｅ  Ｃａｒｒｉｅｒｓ，”  Ｊ．Ｃｏｎｔｒｏｌ  Ｒｅｌｅａｓｅ  １０５（３）：３６７−８０（２００５）及びＰａｒｋ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｉｎｔｒａｔｕｍｏｒａｌ  Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ａｎｔｉ−ＫＩＴＥＮＩＮ  ｓｈＲＮＡ−Ｌｏａｄｅｄ  ＰＥＩ−ａｌｔ−ＰＥＧ  Ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ  Ｓｕｐｐｒｅｓｓｅｄ  Ｃｏｌｏｎ  Ｃａｒｃｉｎｏｍａ  Ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ  Ｓｕｂｃｕｔａｎｅｏｕｓｌｙ  ｉｎ  Ｍｉｃｅ，”  Ｊ  Ｎａｎｏｓｃｉ．Ｎａｎｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １０（５）：３２８０−３（２０１０））、ポリ（ｄ，ｌ−ラクチド−コグリコリド）（その全体が参照により本明細書に援用されるＣｈａｎ  ｅｔ  ａｌ．，“Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ  Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ：Ｆｒｏｍ  Ｄｅｓｉｇｎ  ｔｏ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ，”Ｃｌｉｎ．Ｅｘｐ．Ｐｈａｒｍ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．３３：５３３−５４０（２００６））、及びリポソームに捕捉されたｓｉＲＮＡナノ粒子（その全体が参照により本明細書に援用されるＫｅｎｎｙ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｎｏｖｅｌ  Ｍｕｌｔｉｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  Ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅ  Ｍｅｄｉａｔｅｓ  ｓｉＲＮＡ  Ｔｕｍｏｒ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ，Ｖｉｓｕａｌｉｚａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  Ｔｕｍｏｒ  Ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ  Ｉｎ  Ｖｉｖｏ，”  Ｊ．Ｃｏｎｔｒｏｌ  Ｒｅｌｅａｓｅ  １４９（２）：１１１−１１６  （２０１１））が挙げられるが、これらに限定されない。本発明での使用に適した他のナノ粒子送達ビヒクルとして、その全体が参照により本明細書に援用されるＰｒａｋａｓｈらの米国特許公開第２０１０／０２１５７２４号に開示されたマイクロカプセルナノチューブデバイスが挙げられる。
【００６１】
別の実施形態では、医薬組成物を、リポソーム送達ビヒクルに含有させる。用語「リポソーム」とは、球状の二重層または複数の二重層に配置された両親媒性脂質からなる小胞を意味する。リポソームは、親油性物質と水性内部から形成される膜を有する単層または多層の小胞である。水性部分は、送達する組成物を含有する。陽イオン性リポソームは、細胞壁に融合できるという利点を有する。非陽イオン性リポソームは、細胞壁と効率的に融合することはできないが、ｉｎ  ｖｉｖｏでマクロファージに取り込まれる。
【００６２】
リポソームのいくつかの利点として以下が挙げられる：それらの生体適合性と生分解性、広範囲の水溶性及び脂溶性薬物の取り込み；ならびにそれらがカプセル化された薬物を代謝と分解から保護すること。リポソーム製剤の調製における重要な考慮事項は、脂質の表面電荷、小胞のサイズ、及びリポソームの水性容量である。
【００６３】
リポソームは、有効成分を作用部位へ移動及び送達するうえで有用である。リポソーム膜は生体膜と構造的に類似しているため、リポソームを組織に投与すると、リポソームは細胞膜と融合し始め、リポソームと細胞の融合が進行するにつれて、リポソームの内容物は細胞に移って空となり、細胞内で活性薬剤が作用し得る。
【００６４】
本発明で使用するためのリポソームの調製方法として、その全体が参照により本明細書に援用されるＢａｎｇｈａｍ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｄｉｆｆｕｓｉｏｎ  ｏｆ  Ｕｎｉｖａｌｅｎｔ  Ｉｏｎｓ  Ａｃｒｏｓｓ  ｔｈｅ  Ｌａｍｅｌｌａｅ  ｏｆ  Ｓｗｏｌｌｅｎ  Ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｉｄｓ，”  Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１３：２３８−５２（１９６５）；Ｈｓｕの米国特許第５，６５３，９９６号；Ｌｅｅらの米国特許第５，６４３，５９９号；Ｈｏｌｌａｎｄらの米国特許第５，８８５，６１３号；Ｄｚａｕらの米国特許第５，６３１，２３７号；及びＬｏｕｇｈｒｅｙらの米国特許第５，０５９，４２１号に開示されている方法が挙げられる。
【００６５】
一態様では、ＢＭＰ２、ＬＩＮＧＯ１、ＭＡＧ、ＮＫＸ２−２、ＮＲ２Ｅ１、ＮＴＲＫ３、ＯＬＩＧ２、ＳＥＲＰＩＮＥ２、ＳＩＲＴ２、及びＴＣＦ７Ｌ２からなる群から選択されるグリア細胞分化調節遺伝子またはそれらがコードするタンパク質の１つ以上の調節因子を、選択した対象に、対象においてハンチントン病を治療するのにまたはその発症を阻害するのに有効な条件下で投与する。
【００６６】
これらの遺伝子の例示的な調節因子として、限定されないが、以下が挙げられる：合成非ペプチジル小分子、Ｈｈ−Ａｇ  １．１、及び関連分子Ｈｈ−Ａｇ  １．２、Ｈｈ−Ａｇ  １．３、Ｈｈ−Ａｇ  １．４、及びＨｈ  Ａｇ  １．５、これらはヘッジホッグシグナル伝達経路に影響を与える（その全体が参照により本明細書に援用されるＦｒａｎｋ−Ｋａｍｅｎｅｔｓｋｙ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｓｍａｌｌ−ｍｏｌｅｃｕｌｅ  Ｍｏｄｕｌａｔｏｒｓ  ｏｆ  Ｈｅｄｇｅｈｏｇ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ：Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｓｍｏｏｔｈｅｎｅｄ  Ａｇｏｎｉｓｔｓ  ａｎｄ  Ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ，”  Ｊ．Ｂｉｏｌ．１（２）：１０（２００２））、ならびに、限定されないが、その全体が参照により本明細書に援用されるＢｌａｇｏｄａｔｓｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，  “Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ｔｈｅ  Ｗｎｔ  Ｐａｔｈｗａｙｓ  ｆｏｒ  Ｔｈｅｒａｐｉｅｓ，”  Ｍｏｌ．  Ｃｅｌｌ  Ｔｈｅｒ．  ２：２８  （２０１４）に記載されるように、２−アミノ−４−（３，４−（メチレンジオキシ）ベンジルアミノ）−６−（３−メトキシフェニル）ピリミジン（２−ＡＭＢＭＰ）、クルクミン、及びシンバスタチンを含むＷｎｔシグナル伝達経路のアゴニスト；オピシヌマブ；ＧＳＫ−２４９３２０；ラウリル硫酸ナトリウム；レパグリニド；アルチラチニブ；ｃｈｅｍｂｌ２００７４２１；ＰＬＸ−３３９７；ラディシコール；チロキシン；エヌトレクチニブ；ＬＯＸＯ−１０１；ＣＥＰ−２５６３；レスタウルチニブ；ＰＬＸ−７４８６；ＡＺＤ−６９１８；ＡＺＤ−７４５１；ミドスタウリン；ならびにそれらの組み合わせ。
【００６７】
別の態様では、ＦＡ２Ｈ、ＧＡＬ３ＳＴ１、ＭＡＧ、ＭＢＰ、ＭＹＲＦ、ＮＦＡＳＣ、ＯＬＩＧ２、ＯＭＧ、ＰＬＬＰ、ＰＯＵ３Ｆ２、ＳＩＲＴ２、ＳＬＣ８Ａ３、ＴＣＦ７Ｌ２、ＴＦ、及びＵＧＴ８からなる群から選択される有髄化関連遺伝子またはそれらがコードするタンパク質の１つ以上の調節因子を、選択した対象に、対象においてハンチントン病を治療するのにまたはその発症を阻害するのに有効な条件下で投与する。
【００６８】
これらの遺伝子の例示的な調節因子として、限定されないが、その全体が参照により本明細書に援用されるＢｌａｇｏｄａｔｓｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ｔｈｅ  Ｗｎｔ  Ｐａｔｈｗａｙｓ  ｆｏｒ  Ｔｈｅｒａｐｉｅｓ，”  Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ  Ｔｈｅｒ．２：２８（２０１４）に記載されるように、２−アミノ−４−（３，４−（メチレンジオキシ）ベンジルアミノ）−６−（３−メトキシフェニル）ピリミジン（２−ＡＭＢＭＰ）、クルクミン、及びシンバスタチンを含むがこれらに限定されないＷｎｔシグナル伝達経路のアゴニスト；ＧＳＫ−２４９３２０；ラウリル硫酸ナトリウム；レパグリニド；シクロスポリン；インターフェロンβ−１Ａ；プレドニゾン；ケルセチン；及びルチン；ならびにそれらの組み合わせが挙げられる。
【００６９】
さらに別の態様では、ＦＡ２Ｈ、ＧＬＩ３、ＬＩＮＧＯ１、ＭＹＲＦ、ＮＫＸ２−２、ＯＬＩＧ１、ＯＬＩＧ２、ＯＭＧ、ＳＩＲＴ２、ＳＬＣ８Ａ３、ＳＯＸ１０、及びＴＣＦ７Ｌ２からなる群から選択されるオリゴデンドロサイト分化遺伝子またはそれらがコードするタンパク質の１つ以上の調節因子を、選択した対象に、対象においてハンチントン病を治療するのにまたはその発症を阻害するのに有効な条件下で投与する。
【００７０】
これらの遺伝子の例示的な調節因子として、限定されないが、以下が挙げられる：合成非ペプチジル小分子、Ｈｈ−Ａｇ  １．１、及び関連分子Ｈｈ−Ａｇ  １．２、Ｈｈ−Ａｇ  １．３、Ｈｈ−Ａｇ  １．４、及びＨｈ  Ａｇ  １．５、これらはヘッジホッグシグナル伝達経路に影響を与える（その全体が参照により本明細書に援用されるＦｒａｎｋ−Ｋａｍｅｎｅｔｓｋｙ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｓｍａｌｌ−ｍｏｌｅｃｕｌｅ  Ｍｏｄｕｌａｔｏｒｓ  ｏｆ  Ｈｅｄｇｅｈｏｇ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ：Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｓｍｏｏｔｈｅｎｅｄ  Ａｇｏｎｉｓｔｓ  ａｎｄ  Ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ，”  Ｊ．Ｂｉｏｌ．１（２）：１０（２００２））、ならびに、限定されないが、その全体が参照により本明細書に援用されるＢｌａｇｏｄａｔｓｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，  “Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ｔｈｅ  Ｗｎｔ  Ｐａｔｈｗａｙｓ  ｆｏｒ  Ｔｈｅｒａｐｉｅｓ，”  Ｍｏｌ．  Ｃｅｌｌ  Ｔｈｅｒ．  ２：２８  （２０１４）に記載されるように、２−アミノ−４−（３，４−（メチレンジオキシ）ベンジルアミノ）−６−（３−メトキシフェニル）ピリミジン（２−ＡＭＢＭＰ）、クルクミン、及びシンバスタチンを含むＷｎｔシグナル伝達経路のアゴニスト；オピシヌマブ；ラウリル硫酸ナトリウム；レパグリニド；ベムラフェニブ；ならびにそれらの組み合わせ。
【００７１】
さらなる態様では、ＢＭＰ２、ＬＩＮＧＯ１、ＭＡＧ、ＭＹＣ、ＮＫＸ２−２、ＮＲ２Ｅ１、ＮＴＲＫ３、ＯＬＩＧ２、ＳＥＲＰＩＮＥ２、ＳＩＲＴ２、ＳＯＸ１０、ＴＣＦ７Ｌ２、ＴＦ、及びＺＣＣＨＣ２４からなる群から選択されるグリア新生調節遺伝子またはそれらがコードするタンパク質の１つ以上の調節因子を、選択した対象に、対象においてハンチントン病を治療するのにまたはその発症を阻害するのに有効な条件下で投与する。
【００７２】
これらの遺伝子の例示的な調節因子として、限定されないが、以下が挙げられる：合成非ペプチジル小分子、Ｈｈ−Ａｇ  １．１、及び関連分子Ｈｈ−Ａｇ  １．２、Ｈｈ−Ａｇ  １．３、Ｈｈ−Ａｇ  １．４、及びＨｈ  Ａｇ  １．５、これらはヘッジホッグシグナル伝達経路に影響を与える（その全体が参照により本明細書に援用されるＦｒａｎｋ−Ｋａｍｅｎｅｔｓｋｙ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｓｍａｌｌ−ｍｏｌｅｃｕｌｅ  Ｍｏｄｕｌａｔｏｒｓ  ｏｆ  Ｈｅｄｇｅｈｏｇ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ：Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｓｍｏｏｔｈｅｎｅｄ  Ａｇｏｎｉｓｔｓ  ａｎｄ  Ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ，”  Ｊ．Ｂｉｏｌ．１（２）：１０（２００２））、ならびに、限定されないが、その全体が参照により本明細書に援用されるＢｌａｇｏｄａｔｓｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，  “Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ｔｈｅ  Ｗｎｔ  Ｐａｔｈｗａｙｓ  ｆｏｒ  Ｔｈｅｒａｐｉｅｓ，”  Ｍｏｌ．  Ｃｅｌｌ  Ｔｈｅｒ．  ２：２８  （２０１４）に記載されるように、２−アミノ−４−（３，４−（メチレンジオキシ）ベンジルアミノ）−６−（３−メトキシフェニル）ピリミジン（２−ＡＭＢＭＰ）、クルクミン、及びシンバスタチンを含むＷｎｔシグナル伝達経路のアゴニスト；オピシヌマブ；ＧＳＫ−２４９３２０；ラウリル硫酸ナトリウム；ベムラフェニブ；レパグリニド；ナドロパリンカルシウム；４'−ヒドロキシタモキシフェン；アザシチジン；チオグアニン；アシビン；アドゼレシン；アミホスチン；アミノプテリン；抗生物質；ビゼレシン；ブロモクリプチン；ブリオスタチン；カルシトリオール；ジエチルスチルベストロール；エルサミトルシン；エストロン；葉酸；グルタミン；ヒポキサンチン；イマチニブ；シルモスチン；メラトニン；メチルプレドニゾロン；Ｎ−メチル−ｎ−ニトロソウレア；ノボビオシン；Ｃｈｅｍｂｌ３５４８２；ホルボールミリステートアセテート；プレドニゾン；キナプリル；ボリノスタット；スリンダク；トロンビン；甲状腺刺激ホルモン；ナトリウムβ−ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸；トログリタゾン；ベラパミル；Ｃｈｅｍｂｌ１０００１４；Ｃｈｅｍｂｌ１２１３４９２；絨毛性ゴナドトロピン；ペリリルアルコール；ＡＭＧ−９００；アリセルチブ；ジナシクリブ；ロニシクリブ；テモゾロミド；プレキサセルチブ；アルチラチニブ；ｃｈｅｍｂｌ２００７４２１；ＰＬＸ−３３９７；ラディシコール；チロキシン；エヌトレクチニブ；ＬＯＸＯ−１０１；ＣＥＰ−２５６３；レスタウルチニブ；ＰＬＸ−７４８６；ＡＺＤ−６９１８；ＡＺＤ−７４５１；ミドスタウリン；ならびにそれらの組み合わせ。
【００７３】
本開示の別の態様では、ＦＡ２Ｈ、ＧＡＬ３ＳＴ１、ＭＡＧ、ＭＢＰ、ＭＹＲＦ、ＮＦＡＳＣ、ＯＬＩＧ２、ＯＭＧ、ＰＬＬＰ、ＰＯＵ３Ｆ２、ＳＩＲＴ２、ＳＬＣ８Ａ３、ＴＣＦ７Ｌ２、ＴＦ、及びＵＧＴ８からなる群から選択されるニューロン被鞘遺伝子またはそれらがコードするタンパク質の１つ以上の調節因子を、選択した対象に、対象においてハンチントン病を治療するのにまたはその発症を阻害するのに有効な条件下で投与する。
【００７４】
これらの遺伝子の例示的な調節因子として、限定されないが、その全体が参照により本明細書に援用されるＢｌａｇｏｄａｔｓｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ｔｈｅ  Ｗｎｔ  Ｐａｔｈｗａｙｓ  ｆｏｒ  Ｔｈｅｒａｐｉｅｓ，”  Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ  Ｔｈｅｒ．２：２８（２０１４）に記載されるように、２−アミノ−４−（３，４−（メチレンジオキシ）ベンジルアミノ）−６−（３−メトキシフェニル）ピリミジン（２−ＡＭＢＭＰ）、クルクミン、及びシンバスタチンを含むがこれらに限定されないＷｎｔシグナル伝達経路のアゴニスト；ＧＳＫ−２４９３２０；シクロスポリン；インターフェロンβ−１Ａ；プレドニゾン；ケルセチン；ルチン；ラウリル硫酸ナトリウム；レパグリニド；ならびにそれらの組み合わせが挙げられる。
【００７５】
別の態様では、ＡＬＣＡＭ、ＢＣＬ１１Ｂ、ＤＳＣＡＭ、ＦＯＸＤ１、ＧＡＳ１、ＧＬＩ３、ＨＯＸＡ１、ＨＯＸＡ２、ＭＮＸ１、ＮＦＡＳＣ、ＰＬＸＮＣ１、ＰＲＫＣＱ、ＰＴＰＲＯ、ＲＯＢＯ２、ＳＥＭＡ６Ｂ、ＵＮＣ５Ａ、ＶＡＸ１、及びＷＮＴ７Ｂからなる群から選択される軸索ガイダンス遺伝子またはそれらがコードするタンパク質の１つ以上の調節因子を、選択した対象に、対象においてハンチントン病を治療するのにまたはその発症を阻害するのに有効な条件下で投与する。
【００７６】
これらの遺伝子の例示的な調節因子として、限定されないが、その全体が参照により本明細書に援用されるＢｌａｇｏｄａｔｓｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ｔｈｅ  Ｗｎｔ  Ｐａｔｈｗａｙｓ  ｆｏｒ  Ｔｈｅｒａｐｉｅｓ，”  Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ  Ｔｈｅｒ．２：２８（２０１４）に記載されるように、２−アミノ−４−（３，４−（メチレンジオキシ）ベンジルアミノ）−６−（３−メトキシフェニル）ピリミジン（２−ＡＭＢＭＰ）、クルクミン、及びシンバスタチンを含むがこれらに限定されないＷｎｔシグナル伝達経路のアゴニスト；フルオロウラシル；ＣＥＰ−２５６３；スタウロスポリン；Ｃｈｅｍｂｌ３６９５０７；デクスホスホセリン；チクロピジン；ＧＳＫ−６９０６９３；ソトラスタウリン；（７Ｓ）−ヒドロキシル−スタウロスポリン；ミドスタウリン；ケルセチン；ブリオスタチン；酢酸ソトラスタウリン；インゲノールメブテート；カルボプラチン；パクリタキセル；ならびにそれらの組み合わせが挙げられる。
【００７７】
さらなる態様では、ＡＬＣＡＭ、ＢＣＬ１１Ｂ、ＤＳＣＡＭ、ＦＯＸＤ１、ＧＡＳ１、ＧＬＩ３、ＨＯＸＡ１、ＨＯＸＡ２、ＭＮＸ１、ＮＦＡＳＣ、ＰＬＸＮＣ１、ＰＲＫＣＱ、ＰＴＰＲＯ、ＲＯＢＯ２、ＳＥＭＡ６Ｂ、ＵＮＣ５Ａ、ＶＡＸ１、及びＷＮＴ７Ｂからなる群から選択されるニューロン突起ガイダンス遺伝子またはそれらがコードするタンパク質の１つ以上の調節因子を、選択した対象に、対象においてハンチントン病を治療するのにまたはその発症を阻害するのに有効な条件下で投与する。
【００７８】
これらの遺伝子の例示的な調節因子として、限定されないが、その全体が参照により本明細書に援用されるＢｌａｇｏｄａｔｓｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ｔｈｅ  Ｗｎｔ  Ｐａｔｈｗａｙｓ  ｆｏｒ  Ｔｈｅｒａｐｉｅｓ，”  Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ  Ｔｈｅｒ．２：２８（２０１４）に記載されるように、２−アミノ−４−（３，４−（メチレンジオキシ）ベンジルアミノ）−６−（３−メトキシフェニル）ピリミジン（２−ＡＭＢＭＰ）、クルクミン、及びシンバスタチンを含むがこれらに限定されないＷｎｔシグナル伝達経路のアゴニスト；フルオロウラシル；ＣＥＰ−２５６３；スタウロスポリン；Ｃｈｅｍｂｌ３６９５０７；デクスホスホセリン；チクロピジン；ＧＳＫ−６９０６９３；ソトラスタウリン；（７Ｓ）−ヒドロキシル−スタウロスポリン；ミドスタウリン；ケルセチン；ブリオスタチン；酢酸ソトラスタウリン；インゲノールメブテート；カルボプラチン；パクリタキセル；ならびにそれらの組み合わせが挙げられる。
【００７９】
別の態様では、選択した対象に、対象においてハンチントン病を治療するのにまたはその発症を阻害するのに有効な条件下で、ＡＤＧＲＢ１、ＡＬＣＡＭ、ＢＣＬ１１Ｂ、ＣＡＣＮＡ１Ａ、ＤＳＣＡＭ、ＦＯＸＤ１、ＧＡＳ１、ＧＬＩ３、ＨＯＸＡ１、ＨＯＸＡ２、ＬＩＮＧＯ１、ＬＲＲＣ４Ｃ、ＭＡＧ、ＭＢＰ、ＭＮＸ１、ＮＦＡＳＣ、ＮＲ２Ｅ１、ＮＴＮＧ１、ＮＴＲＫ３、ＯＭＧ、ＰＬＸＮＣ１、ＰＯＵ３Ｆ２、ＰＲＫＣＱ、ＰＴＰＲＯ、ＲＯＢＯ２、ＳＥＭＡ６Ｂ、ＳＬＩＴＲＫ２、ＳＬＩＴＲＫ３、ＳＮＡＰ９１、ＵＮＣ５Ａ、ＶＡＸ１、及びＷＮＴ７Ｂからなる群から選択される軸索新生遺伝子またはそれらがコードするタンパク質の１つ以上の調節因子を投与する。
【００８０】
これらの遺伝子の例示的な調節因子として、限定されないが、その全体が参照により本明細書に援用されるＢｌａｇｏｄａｔｓｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ｔｈｅ  Ｗｎｔ  Ｐａｔｈｗａｙｓ  ｆｏｒ  Ｔｈｅｒａｐｉｅｓ，”  Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ  Ｔｈｅｒ．２：２８（２０１４）に記載されるように、２−アミノ−４−（３，４−（メチレンジオキシ）ベンジルアミノ）−６−（３−メトキシフェニル）ピリミジン（２−ＡＭＢＭＰ）、クルクミン、及びシンバスタチンを含むがこれらに限定されないＷｎｔシグナル伝達経路のアゴニスト；オピシヌマブ；ＧＳＫ−２４９３２０；シクロスポリン；インターフェロンβ−１Ａ；プレドニゾン；ケルセチン；ルチン；フルオロウラシル；ＣＥＰ−２５６３；スタウロスポリン；Ｃｈｅｍｂｌ３６９５０７；デクスホスホセリン；チクロピジン；ＧＳＫ−６９０６９３；ソトラスタウリン；（７Ｓ）−ヒドロキシル−スタウロスポリン；ミドスタウリン；ブリオスタチン；酢酸ソトラスタウリン；インゲノールメブテート；カルボプラチン；パクリタキセル；プレガバリン；ベラパミル；ベプリジル；セレコキシブ；ニソルジピン；ガバペンチン；ガバペンチンエナカルビル；エルペトリジン；アタガバリン；ベプリジル塩酸塩；イマガバリン；アルチラチニブ；ｃｈｅｍｂｌ２００７４２１；ＰＬＸ−３３９７；ラジシコラ；チロキシン；エントレクチニブ；Ｌｏｘｏ−１０１；ＣＥＰ−２５６３；レスタウルチニブ；ＰＬＸ−７４８６；ＡＺＤ−６９１８；ＡＺＤ−７４５１；ならびにそれらの組み合わせが挙げられる。
【００８１】
別の態様では、選択した対象に、対象においてハンチントン病を治療するのにまたはその発症を阻害するのに有効な条件下で、ＡＤＧＲＢ１、ＡＬＣＡＭ、ＢＣＬ１１Ｂ、ＣＡＣＮＡ１Ａ、ＤＳＣＡＭ、ＦＯＸＤ１、ＧＡＳ１、ＧＬＩ３、ＨＯＸＡ１、ＨＯＸＡ２、ＬＩＮＧＯ１、ＬＲＲＣ４Ｃ、ＭＡＧ、ＭＢＰ、ＭＮＸ１、ＮＥＦＭ、ＮＦＡＳＣ、ＮＲ２Ｅ１、ＮＴＮＧ１、ＮＴＲＫ３、ＯＭＧ、ＰＬＸＮＣ１、ＰＯＵ３Ｆ２、ＰＲＫＣＱ、ＰＴＰＲＯ、ＲＯＢＯ２、ＲＴＮ４ＲＬ２、ＳＥＭＡ６Ｂ、ＳＬＩＴＲＫ２、ＳＬＩＴＲＫ３、ＳＮＡＰ９１、ＵＮＣ５Ａ、ＶＡＸ１、及びＷＮＴ７Ｂからなる群から選択される軸索発達遺伝子またはそれらがコードするタンパク質の１つ以上の調節因子を投与する。
【００８２】
これらの遺伝子の例示的な調節因子として、限定されないが、その全体が参照により本明細書に援用されるＢｌａｇｏｄａｔｓｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ｔｈｅ  Ｗｎｔ  Ｐａｔｈｗａｙｓ  ｆｏｒ  Ｔｈｅｒａｐｉｅｓ，”  Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ  Ｔｈｅｒ．２：２８（２０１４）に記載されるように、２−アミノ−４−（３，４−（メチレンジオキシ）ベンジルアミノ）−６−（３−メトキシフェニル）ピリミジン（２−ＡＭＢＭＰ）、クルクミン、及びシンバスタチンを含むがこれらに限定されないＷｎｔシグナル伝達経路のアゴニスト；オピシヌマブ；デクスホスホセリン；フルオロウラシル；ＣＥＰ−２５６３；スタウロスポリン；Ｃｈｅｍｂｌ３６９５０７；ＧＳＫ−２４９３２０；チクロピジン；ＧＳＫ−６９０６９３；ソトラスタウリン；（７Ｓ）−ヒドロキシル−スタウロスポリン；ミドスタウリン；ケルセチン；ブリオスタチン；酢酸ソトラスタウリン；及びインゲノールメブテート；カルボプラチン；パクリタキセル；プレガバリン；ベラパミル；ベプリジル；セレコキシブ；ニソルジピン；ガバペンチン；ガバペンチンエナカルビル；エルペトリジン；アタガバリン；ベプリジル塩酸塩；イマガバリン；アルチラチニブ；ｃｈｅｍｂｌ２００７４２１；ＰＬＸ−３３９７；ラジシコラ；チロキシン；エントレクチニブ；Ｌｏｘｏ−１０１；ＣＥＰ−２５６３；レスタウルチニブ；ＰＬＸ−７４８６；ＡＺＤ−６９１８；ＡＺＤ−７４５１；シクロスポリン；インターフェロンβ−１Ａ；プレドニゾン；ルチン；ならびにそれらの組み合わせが挙げられる。
【００８３】
本開示のさらなる態様では、選択した対象に、対象においてハンチントン病を治療するのにまたはその発症を阻害するのに有効な条件下で、ＡＤＧＲＢ１、ＡＬＣＡＭ、ＢＣＬ１１Ｂ、ＣＡＣＮＡ１Ａ、ＣＡＭＫ２Ａ、ＤＳＣＡＭ、ＥＨＤ３、ＦＯＸＤ１、ＧＡＳ１、ＧＬＩ３、ＨＯＸＡ１、ＨＯＸＡ２、ＫＡＮＫ１、ＬＩＮＧＯ１、ＬＲＲＣ４Ｃ、ＭＡＧ、ＭＢＰ、ＭＮＸ１、ＮＥＤＤ４Ｌ、ＮＥＵＲＬ１、ＮＦＡＳＣ、ＮＲ２Ｅ１、ＮＴＮＧ１、ＮＴＲＫ３、ＯＭＧ、ＰＣＤＨ１５、ＰＬＸＮＣ１、ＰＯＵ３Ｆ２、ＰＲＫＣＱ、ＰＴＰＲＯ、ＲＯＢＯ２、ＳＥＭＡ６Ｂ、ＳＧＫ１、ＳＬＩＴＲＫ２、ＳＬＩＴＲＫ３、ＳＮＡＰ９１、ＳＮＸ１０、ＵＧＴ８、ＵＮＣ５Ａ、ＶＡＸ１、及びＷＮＴ７Ｂからなる群から選択される細胞突起形態形成遺伝子またはそれらがコードするタンパク質の１つ以上の調節因子を投与する。
【００８４】
これらの遺伝子の例示的な調節因子として、限定されないが、その全体が参照により本明細書に援用されるＢｌａｇｏｄａｔｓｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ｔｈｅ  Ｗｎｔ  Ｐａｔｈｗａｙｓ  ｆｏｒ  Ｔｈｅｒａｐｉｅｓ，”  Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ  Ｔｈｅｒ．２：２８（２０１４）に記載されるように、２−アミノ−４−（３，４−（メチレンジオキシ）ベンジルアミノ）−６−（３−メトキシフェニル）ピリミジン（２−ＡＭＢＭＰ）、クルクミン、及びシンバスタチンを含むがこれらに限定されないＷｎｔシグナル伝達経路のアゴニスト；オピシヌマブ；ＧＳＫ−２４９３２０；シクロスポリン；インターフェロンβ−１Ａ；プレドニゾン；ケルセチン；ルチン；デクスホスホセリン；フルオロウラシル；ＣＥＰ−２５６３；スタウロスポリン；Ｃｈｅｍｂｌ３６９５０７；チクロピジン；ＧＳＫ−６９０６９３；ソトラスタウリン；（７Ｓ）−ヒドロキシル−スタウロスポリン；ミドスタウリン；ブリオスタチン；酢酸ソトラスタウリン；及びインゲノールメブテート；カルボプラチン；パクリタキセル；プレガバリン；ベラパミル；ベプリジル；セレコキシブ；ニソルジピン；ガバペンチン；ガバペンチンエナカルビル；エルペトリジン；アタガバリン；ベプリジル塩酸塩；イマガバリン；アルチラチニブ；Ｃｈｅｍｂｌ２００７４２１；ＰＬＸ−３３９７；ラジシコラ；チロキシン；エントレクチニブ；Ｌｏｘｏ−１０１；ＣＥＰ−２５６３；レスタウルチニブ；ＰＬＸ−７４８６；ＡＺＤ−６９１８；ＡＺＤ−７４５１；ヒドロクロロチアジド；ｃｈｅｍｂｌ５４９９０６；ｃｈｅｍｂｌ５５０７９５；塩化ナトリウム；ＧＳＫ−６５０３９４；ならびにそれらの組み合わせが挙げられる。
【００８５】
本開示の別の態様では、ＡＤＧＲＢ１、ＡＤＧＲＬ３、ＢＣＡＮ、ＣＡＬＢ１、ＣＡＭＫ２Ａ、ＦＧＦ１４、ＬＲＲＴＩＭ１、ＮＣＤＮ、ＮＥＴＯ１、ＮＥＵＲＬ１、ＮＲ２Ｅ１、ＮＴＲＫ３、ＰＰＦＩＡ３、ＲＯＢＯ２、ＳＥＲＰＩＮＥ２、ＳＨＩＳＡ７、ＳＩＸ４、ＳＬＣ８Ａ３、ＳＬＩＴＲＫ２、ＳＬＩＴＲＫ３、及びＳＹＮＤＩＧ１からなる群から選択されるシナプス構造調節遺伝子もしくはシナプス活性調節遺伝子またはそれらがコードするタンパク質の１つ以上の調節因子を、選択した対象に、対象においてハンチントン病を治療するのにまたはその発症を阻害するのに有効な条件下で投与する。
【００８６】
これらの遺伝子の例示的な調節因子として、限定されないが、デクスホスホセリン；アルチラチニブ；ｃｈｅｍｂｌ２００７４２１；ＰＬＸ−３３９７；ラジシコラ；チロキシン；エントレクチニブ；Ｌｏｘｏ−１０１；ＣＥＰ−２５６３；レスタウルチニブ；ＰＬＸ−７４８６；ＡＺＤ−６９１８；ＡＺＤ−７４５１；ミドスタウリン；及びそれらの組み合わせが挙げられる。
【００８７】
さらなる態様では、ＢＣＡＮ、ＣＡＣＮＡ１Ａ、ＣＡＣＮＡ１Ｇ、ＣＡＬＢ１、ＣＡＭＫ２Ａ、ＣＨＲＮＡ４、ＦＧＦ１２、ＦＧＦ１４、ＧＲＩＡ２、ＧＲＩＡ４、ＧＲＩＤ２、ＧＲＩＫ４、ＫＣＮＤ２、ＬＲＲＴＭ１、ＭＢＰ、ＭＰＺ、ＮＣＤＮ、ＮＥＴＯ１、ＮＥＵＲＬ１、ＮＯＶＡ１、ＮＲ２Ｅ１、Ｐ２ＲＸ７、ＰＤＥ７Ｂ、ＰＬＣＬ１、ＰＰＦＩＡ３、ＲＡＰＧＥＦ４、ＲＧＳ８、ＲＩＴ２、Ｓ１ＰＲ２、ＳＥＲＰＩＮＥ２、ＳＨＩＳＡ７、ＳＬＣ１８Ａ１、ＳＬＣ１Ａ１、ＳＬＣ１Ａ２、ＳＬＣ８Ａ３、ＳＮＡＰ９１、ＳＮＰＨ、及びＳＹＴ６からなる群から選択されるシナプスシグナル伝達経路遺伝子またはそれらがコードするタンパク質の１つ以上の調節因子を、選択した対象に、対象においてハンチントン病を治療するのにまたはその発症を阻害するのに有効な条件下で投与する。
【００８８】
これらの遺伝子の例示的な調節因子として、限定されないが、プレガバリン；ベラパミル；ベプリジル；セレコキシブ；ニソルジピン；ガバペンチン；ガバペンチンエナカルビル；エルペトリジン；アタガバリン；ベプリジル塩酸塩；イマガバリン；シクロスポリン；インターフェロンβ−１Ａ；プレドニゾン；ケルセチン；ルチン；ニコチンポラクリレックス；タルブタール；ブタバルビタール；ブタルビタール；セコバルビタール；メタルビタール；チオペンタール；プリミドン；メホバルビタール；フェノバルビタール；バレニクリン；アモバルビタール；アプロバルビタール；ブテタール；ヘプタバルビタール；ヘキソバルビタール；バルビタール；ポザニクリン；シチシン；リバニクリン；エピバチジン；ｃｈｅｍｂｌ１８７６２１９；ｃｈｅｍｂｌ３１０３９８８；アトラクリウム；ｃｈｅｍｂｌ４９０１５３；ヘキサメトニウム；ｃｈｅｍｂｌ４０７２１７；ＴＣ−２２１６；ＡＢＴ−５６０；イスプロニクリン；ソフィニクリン；ＴＣ−６４９９；ＡＺＤ１４４６；ＣＰ−６０１９２７；デクスメカミラミン；ニコチン；バレニクリン酒石酸塩；メシル酸ベンズトロピン；ペントリニウム；ａｚｄ０３２８；ブラダニクリン；ペントバルビタール；ｃｈｅｍｂｌ１２０１１３５；デキセファロキサン；メカミラミン（ｃｈｅｍｂｌ２６７９３６）；ジアニクリン；アルチニクリン；トリメタファン；オレイン酸；テバニクリントシレート；ミバンパトル；ブテタール；（ｒ，ｓ）−ａｍｐａ；ｃｈｅｍｂｌ１２３１３２；アニラセタム；ｃｈｅｍｂｌ１３６８００；ｃｈｅｍｂｌ１２５５６４８；シクロチアジド；ｃｈｅｍｂｌ７７８６２；ｃｈｅｍｂｌ３３４９２０；ｃｈｅｍｂｌ１０９７９３９；ピラセタム；ｃｈｅｍｂｌ３２０６４２；ｃｈｅｍｂｌ２６５３０１；ｇｙｋｉ−５２４６６；ｎｂｑｘ；ｃｈｅｍｂｌ２２２４１８；テザンパネル；（ｓ）−ａｍｐａ；ｃｈｅｍｂｌ５９４８４０；ｃｈｅｍｂｌ１２１９１５；キスカル酸；ｃｈｅｍｂｌ３３７５７７；ｃｈｅｍｂｌ２７１３０；ｄｎｑｘ；ｃｈｅｍｂｌ３３３９６４；（ｓ）−ウィラルジイン；ｃｈｅｍｂｌ２８４７２；タランパネル；ペランパネル；イランパネル；ＣＸ１７３９；ダソランパネル；ベカンパネル；ファラムパトル；ｍｋ−８７７７；ゾナンパネル；ペントバルビタール；ｐｆ−０４９５８２４２；セルランパネル；ダルファンプリジン；グアニジン塩酸塩；テディサミル；ネリスピルジン；ｅｖｔ４０１；アデノシン三リン酸；ｃｈｅｍｂｌ３３５５５０；チェレリスリン；アセブトロール；モクロベミド；イベルメクチン；ｃｈｅｍｂ３７７２１９；ｃｈｅｍｂｌ２５５７８７；メチルクロチアジド；ｃｈｅｍｂｌ５５０６３７；オルトバナジン酸ナトリウム；ｃｈｅｍｂｌ２３３８３５２；ベンゾナテート；ＧＳＫ１４８２１６０；ＡＺＤ９０５６、ＣＥ２２４５３５；ジフィリン；ｃｈｅｍｂｌ４８４９２８；ジピリダモール；フラボキサート塩酸塩；ペントキシフィリン；キナクリン；ｃｈｅｍｂｌ２３１３６４６；ｃｈｅｍｂｌ５７０３５２；オザニモド；ｃｈｅｍｂｌ２２５１５５；ｃｈｅｍｂｌ１３６８７５８；フィンゴリモド塩酸塩；アミセリモド塩酸塩；レセルピン；ノルエピネフリン；ｃｈｅｍｂｌ１２���５０６；メタンフェタミン；ケタンセリン；テトラベナジン；Ｌ−グルタミン酸；ジヒドロカイニン酸；２ｓ，４ｒ−４−メチルグルタミン酸；ｏ−ベンジル−ｌ−セリン；ｃｈｅｍｂｌ１６２８６６９；及びメサラミン；テザンパネル；ドーモイ酸；ダイシハーバイン；カイニン酸；メサラミン；トピラマート；アスパラギン酸；クロザピン；アルコール；ハロペリドール；ワートマニン；オランザピン；ホルボールミリステートアセテート；リスペリドン；リドカイン；プレガバリン；ガバペンチンエナカルビル；ミベフラジル二塩酸塩；トリメタジオン；シンナリジン；エトスクシミド；ゾニサミド；アナンダミド；ミベフラジル；ｃｈｅｍｂｌ１６８４９５４；フルナリジン；メスキシミド；ベプリジル塩酸塩；ガバペンチン；フェンスクシミド；パラメタジオン；アタガバリン；セレコキシブ；イマガバリン；ならびにそれらの組み合わせが挙げられる。
【００８９】
別の態様では、ＡＤＧＲＢ１、ＢＣＡＮ、ＢＣＡＳ１、ＣＡＣＮＡ１Ａ、ＣＡＬＢ１、ＣＡＭＫ２Ａ、ＣＨＲＮＡ４、ＣＴＴＮＢＰ２、ＤＳＣＡＭ、ＧＲＩＡ２、ＧＲＩＤ１、ＧＲＩＤ２、ＧＲＩＫ４、ＨＣＮ２、ＫＣＮＤ２、ＬＧＩ３、ＬＲＲＣ４Ｃ、ＬＲＲＴＭ１、ＮＥＴＯ１、ＮＥＵＲＬ１、ＮＴＭ、Ｐ２ＲＸ７、ＰＣＤＨ１５、ＰＤＥ４Ｂ、ＰＰＦＩＡ３、ＰＲＩＭＡ１、ＰＲＫＣＱ、ＰＴＰＲＯ、ＲＡＰＧＥＦ４、ＳＥＲＰＩＮＥ２、ＳＨＩＳＡ７、ＳＬＣ１７Ａ８、ＳＬＣ１８Ａ１、ＳＬＣ１Ａ１、ＳＬＣ１Ａ２、ＳＬＣ８Ａ３、ＳＮＡＰ９１、ＳＮＰＨ、ＳＹＮＤＩＧ１、及びＳＹＴ６からなる群から選択されるシナプス遺伝子またはそれらがコードするタンパク質の１つ以上の調節因子を、選択した対象に、対象においてハンチントン病を治療するのにまたはその発症を阻害するのに有効な条件下で投与する。
【００９０】
これらの遺伝子の例示的な調節因子として、限定されないが、デクスホスホセリン；プレガバリン；ベラパミル；ベプリジル；セレコキシブ；ニソルジピン；ガバペンチン；ガバペンチンエナカルビル；エルペトリジン；アタガバリン；ベプリジル塩酸塩；イマガバリン；ミバンパトル；ブテタール；ブタバルビタール；ブタルビタール；タルブタール；セコバルビタール；メタルビタール；チオペンタール；プリミドン；メホバルビタール；フェノバルビタール；（ｒ，ｓ）−ａｍｐａ；ｃｈｅｍｂｌ１２３１３２；アニラセタム；ｃｈｅｍｂｌ１３６８００；ｃｈｅｍｂｌ１２５５６４８；シクロチアジド；ｃｈｅｍｂｌ７７８６２；ｃｈｅｍｂｌ３３４９２０；ｃｈｅｍｂｌ１０９７９３９；ピラセタム；ｃｈｅｍｂｌ３２０６４２；ｃｈｅｍｂｌ２６５３０１；ｇｙｋｉ−５２４６６；ｎｂｑｘ；ｃｈｅｍｂｌ２２２４１８；テザンパネル；アモバルビタール；アプロバルビタール；ヘプタバルビタール；ヘキソバルビタール；バルビタール；（ｓ）−ａｍｐａ；ｃｈｅｍｂｌ５９４８４０；ｃｈｅｍｂｌ１２１９１５；キスカル酸；ｃｈｅｍｂｌ３３７５７７；ｃｈｅｍｂｌ２７１３０；ｄｎｑｘ；ｃｈｅｍｂｌ３３３９６４；（ｓ）−ウィラルジイン；ｃｈｅｍｂｌ２８４７２；タランパネル；ペランパネル；イランパネル；ｃｘ１７３９；ダソランパネル；ベカンパネル；ファランパトル；ｍｋ−８７７７；ゾナンパネル；トピラマート；ペントバルビタール；ｐｆ−０４９５８２４２；セルランパネル；ニコチンポラクリレックス；バレニクリン；バルビタール；ポザニクリン；シチシン；リバニクリン；エピバチジン；ｃｈｅｍｂｌ１８７６２１９；ｃｈｅｍｂｌ３１０３９８８；アトラクリウム；ｃｈｅｍｂｌ４９０１５３；ヘキサメトニウム；ｃｈｅｍｂｌ４０７２１７；ＴＣ−２２１６；ＡＢＴ−５６０；イスプロニクリン；ソフィニクリン；ＴＣ−６４９９；ＡＺＤ１４４６；ｃｐ−６０１９２７；デクスメカミラミン；ニコチン；バレニクリン酒石酸塩；メシル酸ベンズトロピン；ペントリニウム；ＡＺＤ０３２８；ブラダニクリン；ペントバルビタール；ｃｈｅｍｂｌ１２０１１３５；デキセファロキサン；メカミラミン（ｃｈｅｍｂｌ２６７９３６）；ジアニクリン；アルチニクリン；トリメタファン；オレイン酸；テバニクリントシレート；ニコチンポラクリレックス；カルボプラチン；パクリタキセル；Ｌ−グルタミン酸；ダルファンプリジン；グアニジン塩酸塩；テディサミル；ネリスピルジン；ＥＶＴ４０１；アデノシン三リン酸；ｃｈｅｍｂｌ３３５５５０；チェレリスリン；アセブトロール；モクロベミド；イベルメクチン；ｃｈｅｍｂ３７７２１９；ｃｈｅｍｂｌ２５５７８７；メチルクロチアジド；ｃｈｅｍｂｌ５５０６３７；オルトバナジン酸ナトリウム；ｃｈｅｍｂｌ２３３８３５２；ベンゾナテート；ＧＳＫ１４８２１６０；ＡＺＤ９０５６、ＣＥ２２４５３５；レセルピン；ノルエピネフリン；ｃｈｅｍｂｌ１２６５０６；メタンフェタミン；ケタンセリン；テトラベナジン；Ｌ−グルタミン酸；ジヒドロカイニン酸；２Ｓ，４Ｒ−４−メチルグルタミン酸；Ｏ−ベンジル−Ｌ−セリン；ｃｈｅｍｂｌ１６２８６６９；メサラミン；テザンパネル；ドーモイ酸；ダイシハーバイン；カイニン酸；メサラミン；トピラマート；ＣＥＰ−２５６３；スタウロスポリン；Ｃｈｅｍｂｌ３６９５０７；チクロピジン；ＧＳＫ−６９０６９３；ソトラスタウリン；（７Ｓ）−ヒドロキシル−スタウロスポリン；ミドスタウリン；ケルセチン；ブリオスタチン；酢酸ソトラスタウリン；インゲノールメブテート；アデノシンリン酸；テオフィリン；ジフィリン；ペントキシフィリン；エンプロフィリン；イロプロスト；パパベリン；テオブロミン；イナムリノン；［ｒ］−メソプラム；ロフルミラスト；ピクラミラスト；ロリプラム；フィラミナスト；ｃｈｅｍｂｌ１２３０６１７；ｃｈｅｍｂｌ５１９８２７；シロミラスト；（−）−ロリプラム；クリサボロール；イブジラスト；アプレミラスト；ｃｈｅｍｂｌ５２１２０３；ｃｈｅｍｂｌ７４０７８；プロポキシフェン；ｃｄｐ８４０；フェニル酪酸ナトリウム；ｃｈｅｍｂｌ１２３２０８２；ジピリダモール；テオフィリングリシン酸ナトリウム；フラボキサート塩酸塩；アミノフィリン；レスベラトロール；カフェイン；オックストリフィリン；アンレキサノクス；エタゾラート；シロブラジン；ザテブラジン；ｃｈｅｍｂｌ２０５２０１９；ｃｈｅｍｂｌ３９５３３６；環状アデノシン一リン酸；アスパラギン酸；クロザピン；アルコール；ハロペリドール；ワートマニン；オランザピン；ホルボールミリステートアセテート；リスペリドン；リドカイン；及びそれらの組み合わせが挙げられる。
【００９１】
さらに別の態様では、ＡＢＣＣ９、ＡＳＩＣ４、ＣＡＣＮＡ１Ａ、ＣＨＲＮＡ４、ＣＮＧＢ１、ＣＮＴＮ１、ＤＰＰ１０、ＤＰＰ６、ＦＧＦ１２、ＦＧＦ１４、ＨＣＮ２、ＫＣＮＤ２、ＫＣＮＪ９、ＫＣＮＱ１、ＫＣＮＳ３、ＮＡＬＣＮ、ＮＥＤＤ４Ｌ、ＮＫＡＩＮ４、Ｐ２ＲＸ７、ＰＴＧＥＲ３、ＳＥＲＰＩＮＥ２、ＳＧＫ１、ＳＬＣ１０Ａ４、ＳＬＣ１７Ａ８、ＳＬＣ１８Ａ１、ＳＬＣ２２Ａ３、ＳＬＣ２Ａ１３、ＳＬＣ５Ａ９、ＳＬＣ８Ａ３、及びＳＬＣ９Ａ７からなる群から選択される一価無機陽イオン輸送遺伝子またはそれらがコードするタンパク質の１つ以上の調節因子を、選択した対象に、対象においてハンチントン病を治療するのにまたはその発症を阻害するのに有効な条件下で投与する。
【００９２】
これらの遺伝子の例示的な調節因子として、限定されないが、ナミニジル；アデノシン三リン酸；グリブリド；サラカリム；ピナシジル水和物；ミノキシジル；プレガバリン；ベラパミル；ベプリジル；セレコキシブ；ニソルジピン；ガバペンチン；ガバペンチンエナカルビル；エルペトリジン；アタガバリン；ベプリジル塩酸塩；イマガバリン；ｃｈｅｍｂｌ５４９９０６；ｃｈｅｍｂｌ５５０７９５；塩化ナトリウム；ＧＳＫ−６５０３９４；ダルファンプリジン；グアニジン塩酸塩；テディサミル；ネリスピルジン；ｅｖｔ４０１；アデノシン三リン酸；ｃｈｅｍｂｌ３３５５５０；チェレリスリン；アセブトロール；モクロベミド；イベルメクチン；ｃｈｅｍｂ３７７２１９；ｃｈｅｍｂｌ２５５７８７；メチルクロチアジド；ｃｈｅｍｂｌ５５０６３７；オルトバナジン酸ナトリウム；ｃｈｅｍｂｌ２３３８３５２；ベンゾナテート；ＧＳＫ１４８２１６０；ＡＺＤ９０５６、ＣＥ２２４５３５；ヒドロクロロチアジド；ｃｈｅｍｂｌ１２２９８７５；ニコチンポラクリレックス；タルブタール；ブタバルビタール；ブタルビタール；セコバルビタール；メタルビタール；チオペンタール；プリミドン；メホバルビタール；フェノバルビタール；バレニクリン；アモバルビタール；アプロバルビタール；ブテタール；ヘプタバルビタール；ヘキソバルビタール；バルビタール；ポザニクリン；シチシン；リバニクリン；エピバチジン；ｃｈｅｍｂｌ１８７６２１９；ｃｈｅｍｂｌ３１０３９８８；アトラクリウム；ｃｈｅｍｂｌ４９０１５３；ヘキサメトニウム；ｃｈｅｍｂｌ４０７２１７；ｔｃ−２２１６；ａｂｔ−５６０；イスプロニクリン；ソフィニクリン；ｔｃ−６４９９；シロブラジン；ザテブラジン；ｃｈｅｍｂｌ２０５２０１９；ｃｈｅｍｂｌ３９５３３６；環状アデノシン一リン酸；ｃｈｅｍｂｌ９９９５１；フルピルチン；インダパミド；ベプリジル；アジミリド；ｃｈｅｍｂｌ２０７０９５３；メフェナム酸；ｃｈｅｍｂｌ１９０７７１７；ニフルミン酸；ｃｈｅｍｂｌ２９８４７５；ｃｈｅｍｂｌ３４２３７５；ｃｈｅｍｂｌ３３２８２６；ドラセトロン；セレコキシブ；ネリスピルジン；エゾガビン；インドメタシン；タクロリムス；グアニジン塩酸塩；テディサミル；ダルファンプリジン；ピリメタミン；コバルト（ｉｉ）イオン ベラパミル ピリメタミン コバルト（ｉｉ）イオン；ジヒドロカイニン酸；ビマトプロスト；ジノプロストン；ミソプロストール；ベラプロスト；ｃｈｅｍｂｌ１６２８２６２；カルバサイクリン；シカプロスト；クロプロステノール（ｃｈｅｍｂｌ２２２０４０４）；エンプロスチル；フルプロステノール；イロプロスト；ジノプロスト；スルプロストン；トレプロスチニル；ｃｈｅｍｂｌ３５７８３４；ｃｈｅｍｂｌ１３１７８２３；ｃｈｅｍｂｌ５６５５９１；ｃｈｅｍｂｌ３５８６５３；ｓａｒｃｎｕ；及びそれらの組み合わせが挙げられる。
【００９３】
本開示のさらなる態様では、ＡＤＧＲＬ３、ＡＬＣＡＭ、ＢＣＡＮ、ＢＣＬ１１Ｂ、ＣＡＣＮＡ１Ａ、ＣＡＣＮＡ１Ｇ、ＣＡＬＢ１、ＣＡＭＫ２Ａ、ＣＨＲＮＡ４、ＣＴＴＮＢＰ２、ＤＳＣＡＭ、ＧＲＩＡ２、ＧＲＩＡ４、ＧＲＩＤ２、ＧＲＩＫ４、ＨＣＮ２、ＫＣＮＤ２、ＬＧＩ３、ＬＲＲＴＭ１、ＭＡＧ、ＭＢＰ、ＭＹＣ、ＮＣＡＭ２、ＮＣＤＮ、ＮＥＦＭ、ＮＥＵＲＬ１、ＮＦＡＳＣ、ＮＴＭ、ＰＤＥ４Ｂ、ＰＩＫ３Ｒ１、ＰＴＧＥＲ３、ＰＴＰＲＯ、ＲＡＰＧＥＦ４、ＲＧＳ８、ＲＯＢＯ２、ＳＧＫ１、ＳＩＲＴ２、ＳＬＣ１７Ａ８、ＳＬＣ１Ａ２、ＳＬＣ８Ａ３、ＳＮＡＰ９１、ＳＮＰＨ、ＳＹＮＤＩＧ１、及びＵＮＣ５Ａからなる群から選択されるニューロン突起遺伝子またはそれらがコードするタンパク質の１つ以上の調節因子を、選択した対象に、対象においてハンチントン病を治療するのにまたはその発症を阻害するのに有効な条件下で投与する。
【００９４】
これらの遺伝子の例示的な調節因子として、限定されないが、アデノシンリン酸；テオフィリン；ジフィリン；ペントキシフィリン；エンプロフィリン；イロプロスト；パパベリン；テオブロミン；イナムリノン；［ｒ］−メソプラム；ロフルミラスト；ピクラミラスト；ロリプラム；フィラミナスト；ｃｈｅｍｂｌ１２３０６１７；ｃｈｅｍｂｌ５１９８２７；シロミラスト；（−）−ロリプラム；クリサボロール；イブジラスト；アプレミラスト；ｃｈｅｍｂｌ５２１２０３；ｃｈｅｍｂｌ７４０７８；プロポキシフェン；ｃｄｐ８４０；フェニル酪酸ナトリウム；ｃｈｅｍｂｌ１２３２０８２；ジピリダモール；テオフィリングリシン酸ナトリウム；フラボキサート塩酸塩；アミノフィリン；レスベラトロール；カフェイン；オックストリフィリン；アンレキサノクス；エタゾラート；プレガバリン；ベラパミル；ベプリジル；セレコキシブ；ニソルジピン；ガバペンチン；ガバペンチンエナカルビル；エルペトリジン；アタガバリン；ベプリジル塩酸塩；イマガバリン；カルボプラチン；パクリタキセル；ｃｈｅｍｂｌ５４９９０６；ｃｈｅｍｂｌ５５０７９５；塩化ナトリウム；ＧＳＫ−６５０３９４；ダルファンプリジン；グアニジン塩酸塩；テディサミル；ネリスピルジン；Ｌ−グルタミン酸；ジヒドロカイニン酸；２Ｓ，４Ｒ−４−メチルグルタミン酸；Ｏ−ベンジル−Ｌ−セリン；ｃｈｅｍｂｌ１６２８６６９；メサラミン；フルオロウラシル；プレガバリン；ガバペンチンエナカルビル；ミベフラジル二塩酸塩；トリメタジオン；シンナリジン；エトスクシミド；ゾニサミド；アナンダミド；ミベフラジル；ｃｈｅｍｂｌ１６８４９５４；フルナリジン；メスキシミド；ベプリジル塩酸塩；ガバペンチン；フェンスクシミド；パラメタジオン；アタガバリン；セレコキシブ；及びイマガバリン；ニコチンポラクリレックス；タルブタール；ブタバルビタール；ブタルビタール；セコバルビタール；メタルビタール；チオペンタール；プリミドン；メホバルビタール；フェノバルビタール；バレニクリン；アモバルビタール；アプロバルビタール；ブテタール；ヘプタバルビタール；ヘキソバルビタール；バルビタール；ポザニクリン；シチシン；リバニクリン；エピバチジン；ｃｈｅｍｂｌ１８７６２１９；ｃｈｅｍｂｌ３１０３９８８；アトラクリウム；ｃｈｅｍｂｌ４９０１５３；ヘキサメトニウム；ｃｈｅｍｂｌ４０７２１７；ｔｃ−２２１６；ａｂｔ−５６０；イスプロニクリン；ソフィニクリン；ｔｃ−６４９９；ミバンパトル；（ｒ，ｓ）−ａｍｐａ；ｃｈｅｍｂｌ１２３１３２；アニラセタム；ｃｈｅｍｂｌ１３６８００；ｃｈｅｍｂｌ１２５５６４８；シクロチアジド；ｃｈｅｍｂｌ７７８６２；ｃｈｅｍｂｌ３３４９２０；ｃｈｅｍｂｌ１０９７９３９；ピラセタム；ｃｈｅｍｂｌ３２０６４２；ｃｈｅｍｂｌ２６５３０１；ｇｙｋｉ−５２４６６；ｎｂｑｘ；ｃｈｅｍｂｌ２２２４１８；テザンパネル；（ｓ）−ａｍｐａ；ｃｈｅｍｂｌ５９４８４０；ｃｈｅｍｂｌ１２１９１５；キスカル酸；ｃｈｅｍｂｌ３３７５７７；ｃｈｅｍｂｌ２７１３０；ｄｎｑｘ；ｃｈｅｍｂｌ３３３９６４；（ｓ）−ウィラルジイン；ｃｈｅｍｂｌ２８４７２；タランパネル；ペランパネル；イランパネル；ｃｘ１７３９；ダソランパネル；ベカンパネル；ファランパトル；ｍｋ−８７７７；ゾナンパネル；トピラマート；ペントバルビタール；ｐｆ−０４９５８２４２；セルランパネル；シクロチアジド；ｃｈｅｍｂｌ３３４９２０；ｃｈｅｍｂｌ１０９７９３９；ジョロウグモ毒素；ドーモイ酸；ダイシハーバイン；カイニン酸；メサラミン；２Ｓ，４Ｒ−４−メチルグルタミン酸；ｃｈｅｍｂｌ２３１３６４６；シクロスポリン；インターフェロンβ−１Ａ；プレドニゾン；ケルセチン；ルチン；ＧＳＫ−２４９３２０；シロブラジン；ザテブラジン；ｃｈｅｍｂｌ２０５２０１９；ｃｈｅｍｂｌ３９５３３６；環状アデノシン一リン酸；ラウリル硫酸ナトリウム；ビマトプロスト；ジノプロストン；ミソプロストール；ベラプロスト；ｃｈｅｍｂｌ１６２８２６２；カルバサイクリン；シカプロスト；クロプロステノール（ｃｈｅｍｂｌ２２２０４０４）；エンプロスチル；フルプロステノール；イロプロスト；ジノプロスト；スルプロストン；トレプロスチニル；ｃｈｅｍｂｌ３５７８３４；ｃｈｅｍｂｌ１３１７８２３；ｃｈｅｍｂｌ５６５５９１；ｃｈｅｍｂｌ３５８６５３；ナドロパリンカルシウム；４'−ヒドロキシタモキシフェン；アザシチジン；チオグアニン；アシビン；アドゼレシン；アミホスチン；アミノプテリン；抗生物質；ビゼレシン；ブロモクリプチン；ブリオスタチン；カルシトリオール；ジエチルスチルベストロール；エルサミトルシン；エストロン；葉酸；グルタミン；ヒポキサンチン；イマチニブ；シルモスチン；メラトニン；メチルプレドニゾロン；Ｎ−メチル−ｎ−ニトロソウレア；ノボビオシン；Ｃｈｅｍｂｌ３５４８２；ホルボールミリステートアセテート；プレドニゾン；キナプリル；ボリノスタット；スリンダク；トロンビン；甲状腺刺激ホルモン；ナトリウムβ−ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸；トログリタゾン；ベラパミル；Ｃｈｅｍｂｌ１０００１４；Ｃｈｅｍｂｌ１２１３４９２；絨毛性ゴナドトロピン；ペリリルアルコール；ＡＭＧ−９００；アリセルチブ；ジナシクリブ；ロニシクリブ；テモゾロミド；プレキサセルチブ；ＰＦ−０４６９１５０２；プキチニブ；ＰＡ−７９９；イソプレナリン；ｓｆ−１１２６；ワートマニン；ｇｓｋ−２６３６７７１；ｄｓ−７４２３；オミパリシブ；レシリシブ；ｐｗｔ−３３５８７；ｒｇ−７６６６；ｖｓ−５５８４；コパンリシブ；ゲダトリシブ；ソノリシブ；アピトリシブ；タセリシブ；ピララリシブ（ｃｈｅｍｂｌ３３６０２０３）；ボクスタリシブ；ｚｓｔｋ−４７４；アルペリシブ；ｐｉ−１０３；ピララリシブ（ｃｈｅｍｂｌ３２１８５７５）；ｗｘ−０３７；ダクトリシブ；ｂｇｔ−２２６（ｃｈｅｍｂｌ３５４５０９６）；ピクトリシブ；ブパルリシブ；パヌリシブ；ｇｓｋ−１０５９６１５；ａｚｄ−６４８２；ブパルリシブ塩酸塩；ＬＹ−３０２３４１４；ならびにそれらの組み合わせが挙げられる。
【００９５】
別の態様では、ＢＭＰ４、ＣＣＮＤ１、ＣＣＮＤ２、ＤＯＣＫ１０、ＤＯＣＫ９、ＤＵＳＰ１５、ＥＮＰＰ４、ＥＰＡＳ１、ＥＰＨＢ１、ＥＲＢＢ３、ＥＶＩ２Ａ、ＥＶＩ２Ｂ、ＦＡ２Ｈ、ＧＪＢ１、ＨＡＰＬＮ２、ＨＳＰＡ２、ＩＤ３、ＬＧＩ３、ＭＢＰ、ＭＯＧ、ＭＹＣ、ＭＹＲＦ、ＮＦＡＳＣ、ＮＫＡＩＮ１、ＮＫＸ６−２、ＯＬＩＧ２、ＰＬＥＫＨＢ１、ＰＬＰ１、ＰＰＰ１Ｒ１６Ｂ、ＲＡＢ３３Ａ、ＲＡＳＧＥＦ１Ｂ、ＲＴＫＮ、ＳＩＲＴ２、ＳＬＣ１Ａ２、ＳＯＸ１０、ＳＴ１８、ＴＭＥＭ１２５、ＴＭＥＭ２、ＴＰＰＰ、ＴＳＰＡＮ１５、ＵＧＴ８、及びＡＡＴＫからなる群から選択されるＴＣＦ７Ｌ２標的遺伝子またはそれらがコードするタンパク質の１つ以上の調節因子を、選択した対象に、対象においてハンチントン病を治療するのにまたはその発症を阻害するのに有効な条件下で投与する。
【００９６】
これらの遺伝子の例示的な調節因子として、限定されないが、その全体が参照により本明細書に援用されるＢｌａｇｏｄａｔｓｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ｔｈｅ  Ｗｎｔ  Ｐａｔｈｗａｙｓ  ｆｏｒ  Ｔｈｅｒａｐｉｅｓ，”  Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ  Ｔｈｅｒ．２：２８（２０１４）に記載されている２−アミノ−４−（３，４−（メチレンジオキシ）ベンジルアミノ）−６−（３−メトキシフェニル）ピリミジン（２−ＡＭＢＭＰ）、クルクミン、及びシンバスタチンを含むがこれらに限定されないＷｎｔシグナル伝達経路のアゴニスト；三酸化ヒ素；アセトアミノフェン；ビタミンＥ；シタラビン；ゴシポール；ロニシクリブ；リボシクリブ；パルボシクリブ；メトトレキサート；ミコフェノール酸；ニフェジピン；タモキシフェン；トログリタゾン；ウラシル；アベマシクリブ；ブリシクリブ；アベマシクリブ；デシタビン；パルボシクリブ；ピロキサミド；シクロスポリン；インターフェロンβ−１ａ；プレドニゾン；ケルセチン；ルチン；ベムラフェニブ；ナドロパリンカルシウム；４'−ヒドロキシタモキシフェン；アザシチジン；チオグアニン；アシビシン；アドゼレシン；アミホスチン；アミノプテリン；抗生物質；ビゼレシン；ブロモクリプチン；ブリオスタチン；カルシトリオール；ジエチルスチルベストロール；エルサミトルシン；エストロン；葉酸；グルタミン；ヒポキサンチン；イマチニブ；インドメタシン；リチウム；シルモスチン；メラトニン；メチルプレドニゾロン；ｎ−メチル−ｎ−ニトロソウレア；ノボビオシン；ｃｈｅｍｂｌ３５４８２；ホルボールミリステートアセテート；プレドニゾン；キナプリル；ボリノスタット；スリンダク；トロンビン；甲状腺刺激ホルモン；ナトリウムβ−ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸；トログリタゾン；ベラパミル；ｃｈｅｍｂｌ１０００１４；ｃｈｅｍｂｌ１２１３４９２；ゴナドトロピン、絨毛性；ペリリルアルコール；ａｍｇ−９００；アリセルチブ；ジナシクリブ；テモゾロミド；プレキサセルチブ；ラウリル硫酸ナトリウム；ｌ−グルタミン酸；ジヒドロカイニン酸；２ｓ，４ｒ−４−メチルグルタミン酸；ｏ−ベンジル−ｌ−セリン；ｃｈｅｍｂｌ１６２８６６９；メサラミン；ピロキサミド；ならびにそれらの組み合わせが挙げられる。
【００９７】
本開示の最終態様では、ＮＫＸ２．２→ＯＬＩＧ２→ＳＯＸ１０→ＭＹＲＦ調節カスケードに関与する遺伝子またはそれらがコードするタンパク質の１つ以上の調節因子を、選択した対象に、対象においてハンチントン病を治療するのにまたはその発症を阻害するのに有効な条件下で投与する。
【００９８】
この経路における遺伝子の例示的な調節因子として、ベムラフェニブが挙げられるが、これに限定されない。
【００９９】
本発明の例示的な調節因子及びそれらの対応する遺伝子標的を、以下の表４に示す。
【０１００】
（表４）
2021528445.tif 000014
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【０１０１】
表４に列挙するすべての参考文献は、その全体が参照により本明細書に援用される。
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【０１０２】
一実施形態では、本明細書に記載の方法は、選択した対象にヒトグリア前駆細胞の調製物を投与することをさらに含む。
【０１０３】
ヒトグリア前駆細胞は、以下により詳細に記載するように、グリア細胞の任意の適切な供給源、例えば、限定されないが、ヒト人工多能性幹細胞（ｉＰＳＣ）、胚性幹細胞、胎児組織、及び／または星状細胞などに由来し得る。
【０１０４】
ｉＰＳＣは、体細胞などの非多能性細胞に由来する多能性細胞である。例えば、限定されないが、ｉＰＳＣは、組織、末梢血、臍帯血、及び骨髄に由来し得る（例えば、その全体が参照により本明細書に援用されるＣａｉ  ｅｔ  ａｌ．，  “Ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｈｕｍａｎ  Ｉｎｄｕｃｅｄ  Ｐｌｕｒｉｐｏｔｅｎｔ  Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌｓ  ｆｒｏｍ  Ｕｍｂｉｌｉｃａｌ  Ｃｏｒｄ  Ｍａｔｒｉｘ  ａｎｄ  Ａｍｎｉｏｔｉｃ  Ｍｅｍｂｒａｎｅ  Ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ  Ｃｅｌｌｓ，”  Ｊ．  Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ．  ２８５（１５）：１１２２２７−１１２３４  （２１１０）；Ｇｉｏｒｇｅｔｔｉ  ｅｔ  ａｌ．，  “Ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｉｎｄｕｃｅｄ  Ｐｌｕｒｉｐｏｔｅｎｔ  Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌｓ  ｆｒｏｍ  Ｈｕｍａｎ  Ｃｏｒｄ  Ｂｌｏｏｄ  Ｃｅｌｌｓ  ｗｉｔｈ  ｏｎｌｙ  Ｔｗｏ  Ｆａｃｔｏｒｓ：  Ｏｃｔ４  ａｎｄ  Ｓｏｘ２，”  Ｎａｔ．  Ｐｒｏｔｏｃｏｌ．  ５（４）：８１１−８２０  （２０１０）；Ｓｔｒｅｃｋｆｕｓｓ−Ｂｏｍｅｋｅ  ｅｔ  ａｌ．，  “Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ  Ｓｔｕｄｙ  ｏｆ  Ｈｕｍａｎ−Ｉｎｄｕｃｅｄ  Ｐｌｕｒｉｐｏｔｅｎｔ  Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌｓ  Ｄｅｒｉｖｅｄ  ｆｒｏｍ  Ｂｏｎｅ  Ｍａｒｒｏｗ  Ｃｅｌｌｓ，  Ｈａｉｒ  Ｋｅｒａｔｉｎｏｃｙｔｅｓ，  ａｎｄ  Ｓｋｉｎ  Ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓ，”  Ｅｕｒ．  Ｈｅａｒｔ  Ｊ．  ｄｏｉ：１０．１０９３／ｅｕｒｈｅａｒｔｊ／ｅｈｓ２０３  （Ｊｕｌｙ  １２，  ２０１２）；Ｈｕ  ｅｔ  ａｌ．，  “Ｅｆｆｉｃｉｅｎｔ  Ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｔｒａｎｓｇｅｎｅ−Ｆｒｅｅ  Ｉｎｄｕｃｅｄ  Ｐｌｕｒｉｐｏｔｅｎｔ  Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌｓ  ｆｒｏｍ  Ｎｏｒｍａｌ  ａｎｄ  Ｎｅｏｐｌａｓｔｉｃ  Ｂｏｎｅ  Ｍａｒｒｏｗ  ａｎｄ  Ｃｏｒｄ  Ｂｌｏｏｄ  Ｍｏｎｏｎｕｃｌｅａｒ  Ｃｅｌｌｓ，”  Ｂｌｏｏｄ  ｄｏｉ：１０．１１８２／ｂｌｏｏｄ−２０１０−０７−２９８３３１  （Ｆｅｂ．  ４，  ２０１１）；Ｓｏｍｍｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，  “Ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｈｕｍａｎ  Ｉｎｄｕｃｅｄ  Ｐｌｕｒｉｐｏｔｅｎｔ  Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌｓ  ｆｒｏｍ  Ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ  Ｂｌｏｏｄ  ｕｓｉｎｇ  ｔｈｅ  ＳＴＥＭＣＣＡ  Ｌｅｎｔｉｖｉｒａｌ  Ｖｅｃｔｏｒ，”  Ｊ．  Ｖｉｓ．  Ｅｘｐ．  ６８：ｅ４３２７  ｄｏｉ：１０．３７９１／４３２７  （２０１２）を参照のこと）。体細胞は、遺伝子操作を使用して胚性幹細胞のような状態に再プログラムされる。ｉＰＳＣの形成に適した例示的な体細胞として、線維芽細胞（例えば、その全体が参照により本明細書に援用されるＳｔｒｅｃｋｆｕｓｓ−Ｂｏｍｅｋｅ  ｅｔ  ａｌ．，  “Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ  Ｓｔｕｄｙ  ｏｆ  Ｈｕｍａｎ−Ｉｎｄｕｃｅｄ  Ｐｌｕｒｉｐｏｔｅｎｔ  Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌｓ  Ｄｅｒｉｖｅｄ  ｆｒｏｍ  Ｂｏｎｅ  Ｍａｒｒｏｗ  Ｃｅｌｌｓ，  Ｈａｉｒ  Ｋｅｒａｔｉｎｏｃｙｔｅｓ，  ａｎｄ  Ｓｋｉｎ  Ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓ，”  Ｅｕｒ．  Ｈｅａｒｔ  Ｊ．  ｄｏｉ：１０．１０９３／ｅｕｒｈｅａｒｔｊ／ｅｈｓ２０３（２０１２）を参照のこと）、例えば、皮膚試料または生検によって得られる皮膚線維芽細胞、滑膜組織由来の滑膜細胞、ケラチノサイト、成熟Ｂ細胞、成熟Ｔ細胞、���臓β細胞、メラノサイト、肝細胞、前皮細胞、頬細胞、または肺線維芽細胞が挙げられる。
【０１０５】
人工多能性幹細胞の産生方法は当技術分野で公知であり、一般的には、再プログラミング因子の組み合わせを体細胞内で発現させることを含む。ｉＰＳＣ産生を促進及び誘導する適切なリプログラミング因子には、Ｏｃｔ４、Ｋｌｆ４、Ｓｏｘ２、ｃ−Ｍｙｃ、Ｎａｎｏｇ、Ｃ／ＥＢＰα、Ｅｓｒｒｂ、Ｌｉｎ２８、及びＮｒ５ａ２の１つ以上が含まれる。特定の実施形態では、少なくとも２つの再プログラミング因子を体細胞内で発現させ、体細胞を首尾よく再プログラムする。他の実施形態では、少なくとも３つの再プログラミング因子を体細胞内で発現させ、体細胞を首尾よく再プログラミングする。
【０１０６】
ｉＰＳＣは、組み込み型ウイルスベクター（例えば、レンチウイルスベクター、誘導性レンチウイルスベクター、及びレトロウイルスベクター）、切除可能ベクター（例えば、トランスポゾン及びｌｏｘＰ導入レンチウイルスベクター）、及び非組み込み型ベクター（例えば、アデノウイルス及びプラスミドベクター）を使用して、細胞の再プログラミングを促進する遺伝子を送達することを含む、当技術分野で公知の方法によって誘導され得る（例えば、Ｔａｋａｈａｓｈｉ  ａｎｄ  Ｙａｍａｎａｋａ，  Ｃｅｌｌ  １２６：６６３−６７６  （２００６）；Ｏｋｉｔａ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎａｔｕｒｅ  ４４８：３１３−３１７  （２００７）；Ｎａｋａｇａｗａ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎａｔ．  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．  ２６：１０１−１０６  （２００７）；Ｔａｋａｈａｓｈｉ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｅｌｌ  １３１：１−１２  （２００７）；Ｍｅｉｓｓｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．  Ｎａｔ．  Ｂｉｏｔｅｃｈ．  ２５：１１７７−１１８１  （２００７）；Ｙｕ  ｅｔ  ａｌ．  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ３１８：１９１７−１９２０  （２００７）；Ｐａｒｋ  ｅｔ  ａｌ．  Ｎａｔｕｒｅ  ４５１：１４１−１４６  （２００８）；及びその全体が参照により本明細書に援用される米国特許出願公開第２００８／０２３３６１０を参照のこと）。ＩＰＳ細胞を生成するための他の方法として、その全体が参照により本明細書に援用されるＷＯ２００７／０６９６６６、ＷＯ２００９／００６９３０、ＷＯ２００９／００６９９７、ＷＯ２００９／００７８５２、ＷＯ２００８／１１８８２０、Ｉｋｅｄａらの米国特許出願公開第２０１１／０２００５６８号、Ｅｇｕｓａらの米国特許出願公開第２０１０／０１５６７７８号、Ｍｕｓｉｃｋらの米国特許出願公開第２０１２／０２７６０７０号、及びＮａｋａｇａｗａ，Ｓｈｉらの米国特許出願公開第２０１２／０２７６６３６号、Ｃｅｌｌ  Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌ  ３（５）：５６８−５７４  （２００８），  Ｋｉｍ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎａｔｕｒｅ  ４５４：６４６−６５０  （２００８），  Ｋｉｍ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｅｌｌ  １３６（３）：４１１−４１９  （２００９），  Ｈｕａｎｇｆｕ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎａｔ．  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．  ２６：１２６９−１２７５  （２００８），  Ｚｈａｏ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｅｌｌ  Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌ  ３：４７５−４７９  （２００８），  Ｆｅｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎａｔ．  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．  １１：１９７−２０３  （２００９）、及びＨａｎｎａ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｅｌｌ  １３３（２）：２５０−２６４  （２００８）に開示されている方法が挙げられる。
【０１０７】
上記のｉＰＳＣ生成方法は、再プログラミング効率を高めるか、または再プログラミング因子の代わりとなる小分子を含むように改変することができる。これらの小分子には、限定されないが、ＤＮＡメチルトランスフェラーゼ阻害剤５'−アザシチジン、ヒストンデアセチラーゼ阻害剤ＶＰＡ、及びＧ９ａヒストンメチルトランスフェラーゼ阻害剤ＢＩＸ−０１２９４などのエピジェネティック調節因子が、Ｌ型カルシウムチャネルアゴニストＢａｙＫ８６４４とともに含まれる。他の小分子再プログラミング因子として、ＴＧＦ−β阻害剤及びキナーゼ阻害剤（例えば、ケンパウロン）などのシグナル伝達経路を標的とする因子が挙げられる（その全体が参照により本明細書に援用されるＳｏｍｍｅｒ  ａｎｄ  Ｍｏｓｔｏｓｌａｖｓｋｙ，  “Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｉｎｄｕｃｅｄ  Ｐｌｕｒｉｐｏｔｅｎｔ  Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌｓ，”  Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌ  Ｒｅｓ．  Ｔｈｅｒ．  １：２６  ｄｏｉ：１０．１１８６／ｓｃｒｔ２６  （Ａｕｇｕｓｔ  １０，  ２０１０）による概説を参照のこと）。
【０１０８】
本明細書に記載の方法に適したグリア前駆細胞の高度に濃縮された調製物をｉＰＳＣから取得する方法は、その全体が参照により本明細書に援用されるＧｏｌｄｍａｎ及びＷａｎｇらのＷＯ２０１４／１２４０８７、ならびにＷａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，  “Ｈｕｍａｎ  ｉＰＳＣ−Ｄｅｒｉｖｅｄ  Ｏｌｉｇｏｄｅｎｄｒｏｃｙｔｅ  Ｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒｓ  Ｃａｎ  Ｍｙｅｌｉｎａｔｅ  ａｎｄ  Ｒｅｓｃｕｅ  ａ  Ｍｏｕｓｅ  Ｍｏｄｅｌ  ｏｆ  Ｃｏｎｇｅｎｉｔａｌ  Ｈｙｐｏｍｙｅｌｉｎａｔｉｏｎ，”  Ｃｅｌｌ  Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌ  １２（２）：２５２−２６４  （２０１３）に開示されている。
【０１０９】
別の実施形態では、ヒトグリア前駆細胞は、胚性幹細胞に由来する。ヒト胚性幹細胞は、組織置換療法に役立つ可能性のあるクローン／遺伝子組み換え細胞の事実上無制限の供給源を提供する。本開示の方法での使用に適した胚性細胞からグリア前駆細胞の高度に濃縮された調製物を得る方法は、その全体が参照により本明細書に援用されるＷａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，  “Ｈｕｍａｎ  ｉＰＳＣ−ｄｅｒｉｖｅｄ  ｏｌｉｇｏｄｅｎｄｒｏｃｙｔｅ  ｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒ  ｃｅｌｌｓ  ｃａｎ  ｍｙｅｌｉｎａｔｅ  ａｎｄ  ｒｅｓｃｕｅ  ａ  ｍｏｕｓｅ  ｍｏｄｅｌ  ｏｆ  ｃｏｎｇｅｎｉｔａｌ  ｈｙｐｏｍｙｅｌｉｎａｔｉｏｎ，”  Ｃｅｌｌ  Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌ  １２：２５２−２６４  （２０１３）に記載されている。
【０１１０】
別の実施形態では、ヒトグリア前駆細胞は、ヒト胎児組織に由来する。グリア前駆細胞は、その全体が参照により本明細書に援用されるＧｏｌｄｍａｎの米国特許出願公開第２００４００２９２６９号及び第２００３０２２３９７２号に記載されているように、プロモーター特異的分離技術を使用することにより、細胞の混合集団を含有する胎児脳組織から直接抽出することができる。この方法は、グリア前駆細胞で特異的に機能するプロモーターを選択すること、及び、前記プロモーターの制御下にあるマーカータンパク質をコードする核酸を混合細胞集団に導入することを含む。混合細胞集団はマーカータンパク質を発現することができ、マーカータンパク質を発現する細胞は細胞集団から分離され、分離された細胞はグリア前駆細胞である。ヒトグリア前駆細胞は、脳の心室または心室下帯から、または皮質下白質から単離することができる。
【０１１１】
細胞の混合集団からグリア前駆細胞を単離するために使用することができるグリア特異的プロモーターとして、ＣＮＰプロモーター（その全体が参照により本明細書に援用されるＳｃｈｅｒｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎｅｕｒｏｎ  １２：１３６３−７５（１９９４））、ＮＣＡＭプロモーター（その全体が参照により本明細書に援用されるＨｏｌｓｔ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ．  ２６９：２２２４５−５２  （１９９４））、ミエリン塩基性タンパク質プロモーター（その全体が参照により本明細書に援用されるＷｒａｂｅｔｚ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．  Ｒｅｓ．  ３６：４５５−７１（１９９３）、ＪＣウイルス最小コアプロモーター（その全体が参照により本明細書に援用されるＫｒｅｂｓ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｖｉｒｏｌ．  ６９：２４３４−４２  （１９９５））、ミエリン関連糖タンパク質プロモーター（その全体が参照により本明細書に援用されるＬａｓｚｋｉｅｗｉｃｚ  ｅｔ  ａｌ．，  “Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ  Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｍｙｅｌｉｎ−ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  Ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ  Ｇｅｎｅ  Ｃｏｒｅ  Ｐｒｏｍｏｔｅｒ，”  Ｊ．  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．  Ｒｅｓ．  ５０（６）：  ９２８−３６  （１９９７））、またはプロテオリピドタンパク質プロモーター（その全体が参照により本明細書に援用されるＣｏｏｋ  ｅｔ  ａｌ．，  “Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｒｏｄｅｎｔ  Ｍｙｅｌｉｎ  Ｐｒｏｔｅｏｌｉｐｉｄ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｇｅｎｅ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ，”  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．  Ｌｅｔｔ．  １３７（１）：  ５６−６０  （１９９２）；Ｗｉｇｈｔ  ｅｔ  ａｌ．，  “Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｍｕｒｉｎｅ  Ｍｙｅｌｉｎ  Ｐｒｏｔｅｏｌｉｐｉｄ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｇｅｎｅ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ，”  Ｊ．  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．  Ｒｅｓ．  ５０（６）：  ９１７−２７  （１９９７）；ａｎｄ  Ｃａｍｂｉ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．  Ｒｅｓ．  １９：１０５５−６０  （１９９４））が挙げられる。その全体が参照により本明細書に援用されるＧｏｌｄｍａｎらの米国特許第６，２４５，５６４号も参照のこと。
【０１１２】
胎児組織に由来するグリア前駆細胞集団は、最初に混合細胞集団からニューロンまたは神経前駆細胞を除去することによって濃縮することができる。混合細胞集団からニューロン前駆細胞を分離する場合、それらを、ＮＣＡＭ、ＰＳＡ−ＮＣＡＭ、またはニューロンまたは神経前駆細胞に特異的な任意の他の表面部分のそれらの表面発現に基づいて除去することができる。ニューロンまたは神経前駆細胞はまた、プロモーターベースの分離技術を使用して、混合細胞集団から分離し得る。混合細胞集団から神経細胞を分離するために使用することができるニューロンまたは神経前駆細胞特異的プロモーターとして、Ｔα１チューブリンプロモーター（その全体が参照により本明細書に援用されるＧｌｏｓｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．  １４：７３１９−３０  （１９９４））、Ｈｕプロモーター（その全体が参照により本明細書に援用されるＰａｒｋ  ｅｔ  ａｌ．，  “Ａｎａｌｙｓｉｓ  ｏｆ  Ｕｐｓｔｒｅａｍ  Ｅｌｅｍｅｎｔｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  ＨｕＣ  Ｐｒｏｍｏｔｅｒ  Ｌｅａｄｓ  ｔｏ  ｔｈｅ  Ｅｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ  Ｚｅｂｒａｆｉｓｈ  ｗｉｔｈ  Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ  Ｎｅｕｒｏｎｓ，”  Ｄｅｖ．  Ｂｉｏｌ．  ２２７（２）：  ２７９−９３  （２０００）、ＥＬＡＶプロモーター（その全体が参照により本明細書に援用されるＹａｏ  ｅｔ  ａｌ．，  “Ｎｅｕｒａｌ  Ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ  ｏｆ  ＥＬＡＶ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ：  Ｄｅｆｉｎｉｎｇ  ａ  Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａ  Ｐｒｏｍｏｔｅｒ  ｆｏｒ  Ｄｉｒｅｃｔｉｎｇ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｔｏ  ｔｈｅ  Ｎｅｒｖｏｕｓ  Ｓｙｓｔｅｍ，”  Ｊ．  Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．  ６３（１）：  ４１−５１  （１９９４））、ＭＡＰ−１Ｂプロモーター（その全体が参照により本明細書に援用されるＬｉｕ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｇｅｎｅ  １７１：３０７−０８  （１９９６））、またはＧＡＰ−４３プロモーターが挙げられる。構築物の核酸分子を複数の細胞に導入し、次いで細胞をソーティングするための技術は、その全体が参照により本明細書に援用されるＧｏｌｄｍａｎらの米国特許第６，２４５，５６４号、及びＧｏｌｄｍａｎらの米国特許出願公開第２００４００２９２６９号に記載されている。
【０１１３】
プロモーターベースのセルソーティングを使用して細胞の混合細胞集団からグリア前駆細胞を回収する代わりに、免疫分離手順を利用することができる。陽性免疫分離技術では、所望の細胞（すなわち、グリア前駆細胞）を、前駆細胞上に天然に存在するタンパク質性表面マーカーに基づいて単離する。例えば、表面マーカーＡ２Ｂ５は、グリア前駆細胞の初期に発現する初期マーカーである（その全体が参照により本明細書に援用されるＮｕｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，  “Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｍｕｌｔｉｐｏｔｅｎｔｉａｌ  Ｎｅｕｒａｌ  Ｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒ  Ｃｅｌｌｓ  ｆｒｏｍ  ｔｈｅ  Ａｄｕｌｔ  Ｈｕｍａｎ  Ｗｈｉｔｅ  Ｍａｔｔｅｒ，”  Ｓｏｃ．  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．  Ａｂｓｔｒ．  （２００１））。Ａ２Ｂ５に特異的な抗体を使用して、混合細胞型集団からグリア前駆細胞を分離することができる。同様に、表面マーカーＣＤ４４は、星状細胞ベースのグリア前駆細胞を識別する（その全体が参照により本明細書に援用されるＬｉｕ  ｅｔ  ａｌ．，  “ＣＤ４４  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  Ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｓ  Ａｓｔｒｏｃｙｔｅ−Ｒｅｓｔｒｉｃｔｅｄ  Ｐｒｅｃｕｒｓｏｒ  Ｃｅｌｌｓ，”  Ｄｅｖ．  Ｂｉｏｌ．  ２７６：３１−４６  （２００４））。ＣＤ４４結合マイクロビーズ技術を使用して、混合細胞型集団から星状細胞ベースのグリア前駆細胞を分離することができる。オリゴデンドロサイトベースのグリア前駆細胞は、ＰＤＧＦαＲ、ＰＤＧＦαＲ外部ドメインＣＤ１４０ａ、またはＣＤ９の発現に基づいて、混合細胞型集団から分離することができる。非グリア細胞型（例えば、ニューロン、炎症細胞など）のマーカーを発現する細胞を、グリア細胞の調製物から除去し、免疫分離技術を使用して、所望のグリア細胞型の調製物をさらに濃縮することができる。例えば、グリア前駆細胞集団は、好ましくは、ＰＳＡ−ＮＣＡＭマーカー及び／または神経系統の細胞の他のマーカーに対して陰性であり、１つ以上の炎症性細胞マーカーに対して陰性であり、例えば、ＣＤ１１マーカーに対して陰性であり、ＣＤ３２マーカーに対して陰性であり、及び／またはミクログリアのマーカーであるＣＤ３６マーカーに対して陰性である。例示的なマイクロビーズ技術として、ＭＡＣＳ（登録商標）マイクロビーズ、ＭＡＣＳ（登録商標）カラム、及びＭＡＣＳ（登録商標）セパレータが挙げられる。免疫分離の追加の例は、その全体が参照により本明細書に援用されるＷａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，  “Ｐｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅ  Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ，  Ｄｉｒｅｃｔ  Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ，  ａｎｄ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  Ｐｒｏｆｉｌｉｎｇ  ｏｆ  ａ  Ｔｅｌｏｍｅｒａｓｅ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇ  Ｓｕｂｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｈｕｍａｎ  Ｎｅｕｒａｌ  Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌｓ，  Ｕｓｉｎｇ  Ｓｏｘ２  Ｅｎｈａｎｃｅｒ−Ｄｉｒｅｃｔｅｄ  ＦＡＣＳ，”  Ｊ．  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．  ３０：１４６３５−１４６４８  （２０１０）；Ｋｅｙｏｕｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，  “Ｈｉｇｈ−Ｙｉｅｌｄ  Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｔｗｏ  Ｐｒｏｍｏｔｅｒ−Ｄｅｆｉｎｅｄ  Ｐｈｅｎｏｔｙｐｅｓ  ｏｆ  Ｎｅｕｒａｌ  Ｓｔｅ��  Ｃｅｌｌｓ  ｆｒｏｍ  ｔｈｅ  Ｆｅｔａｌ  Ｈｕｍａｎ  Ｂｒａｉｎ，”  Ｎａｔ．  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．  １９：８４３−８５０  （２００１）；及びＷｉｎｄｒｅｍ  ｅｔ  ａｌ．，  “Ｎｅｏｎａｔａｌ  Ｃｈｉｍｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｗｉｔｈ  Ｈｕｍａｎ  Ｇｌｉａｌ  Ｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒ  Ｃｅｌｌｓ  ｃａｎ  ｂｏｔｈ  Ｒｅｍｙｅｌｉｎａｔｅ  ａｎｄ  Ｒｅｓｃｕｅ  ｔｈｅ  Ｏｔｈｅｒｗｉｓｅ  Ｌｅｔｈａｌｌｙ  Ｈｙｐｏｍｙｅｌｉｎａｔｅｄ  Ｓｈｉｖｅｒｅｒ  Ｍｏｕｓｅ，”  Ｃｅｌｌ  Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌ  ２：５５３−５６５  （２００８）に記載されている。
【０１１４】
本明細書に記載の方法によれば、投与するヒトグリア前駆細胞の選択された調製物は、例えば、約８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、１００％のグリア前駆細胞を含む、少なくとも約８０％のグリア前駆細胞を含む。グリア前駆細胞の選択された調製物は、他の細胞型、例えば、ニューロンまたはニューロン系統の細胞、線維性星状細胞及び線維性星状細胞系統の細胞、ならびに多能性幹細胞（ＥＳ細胞など）を比較的欠いている可能性がある（例えば、２０、１５、１０、９、８、７、６、５、４、３、２、または１％未満を含む）。場合により、例示的な細胞集団は、グリア前駆細胞の実質的に純粋な集団である。
【０１１５】
投与する調製物のグリア前駆細胞は、場合により、目的の他のタンパク質を発現するように遺伝子改変することができる。例えば、グリア前駆細胞を改変して、治療用生体分子、外来性標的化部分、外来性マーカー（例えば、画像化の目的のための）などを発現させてもよい。調製物のグリア前駆細胞は、内在性の生体分子、標的化部分、及び／またはマーカーを過剰発現するように場合により改変することができる。
【０１１６】
投与する調製物のグリア前駆細胞は、星状細胞偏向グリア前駆細胞、オリゴデンドロサイト偏向グリア前駆細胞、偏向のないグリア前駆細胞、またはそれらの組み合わせであり得る。投与する調製物のグリア前駆細胞は、グリア細胞系統の１つ以上のマーカーを発現する。例えば、一実施形態では、投与する調製物のグリア前駆細胞は、Ａ２Ｂ５＋を発現し得る。別の実施形態では、投与する調製物のグリア前駆細胞は、ＰＤＧＦαＲマーカーに対して陽性である。ＰＤＧＦαＲマーカーは、場合によりＣＤ１４０ａなどのＰＤＧＦαＲ外部ドメインである。ＰＤＧＦαＲ及びＣＤ１４０ａは、オリゴデンドロサイト偏向グリア前駆細胞のマーカーである。別の実施形態では、投与する調製物のグリア前駆細胞は、ＣＤ４４＋である。ＣＤ４４は、星状細胞偏向グリア前駆細胞のマーカーである。別の実施形態では、投与する調製物のグリア前駆細胞は、ＣＤ９マーカーに対して陽性である。ＣＤ９マーカーは、場合によりＣＤ９外部ドメインである。一実施形態では、調製物のグリア前駆細胞は、Ａ２Ｂ５＋、ＣＤ１４０ａ＋、及び／またはＣＤ４４＋である。前述のグリア前駆細胞表面マーカーを使用して、投与前にグリア前駆細胞の調製物を同定、分離、及び／または濃縮することができる。
【０１１７】
投与するグリア前駆細胞調製物は、場合により、ＰＳＡ−ＮＣＡＭマーカー及び／または他の神経系統マーカーに対して陰性であり、及び／または１つ以上の炎症細胞マーカーに対して陰性であり、例えば、ＣＤ１１マーカーに対して陰性であり、ＣＤ３２マーカーに対して陰性であり、及び／またはＣＤ３６マーカー（ミクログリアのマーカー）に対して陰性である。場合により、グリア前駆細胞の調製物は、これらの追加のマーカーの任意の組み合わせまたはサブセットに対して陰性である。したがって、例えば、グリア前駆細胞の調製物は、これらの追加のマーカーの任意の１つ、２つ、３つ、または４つに対して陰性である。
【０１１８】
対象の線条体、前脳、脳幹、及び／または小脳に細胞を導入する適切な方法は、当業者に周知であり、本明細書に記載の注射、沈着、及び移植が含まれるが、これらに限定されない。
【０１１９】
一実施形態では、Ｇｏｌｄｍａｎらの米国特許第７，５２４，４９１号、Ｗｉｎｄｒｅｍ  ｅｔ  ａｌ．，  “Ｎｅｏｎａｔａｌ  Ｃｈｉｍｅｒｉｚａｔｉｏｎ  Ｗｉｔｈ  Ｈｕｍａｎ  Ｇｌｉａｌ  Ｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒ  Ｃｅｌｌｓ  Ｃａｎ  Ｂｏｔｈ  Ｒｅｍｙｅｌｉｎａｔｅ  ａｎｄ  Ｒｅｓｃｕｅ  ｔｈｅ  Ｏｔｈｅｒｗｉｓｅ  Ｌｅｔｈａｌｌｙ  Ｈｙｐｏｍｙｅｌｉｎａｔｅｄ  Ｓｈｉｖｅｒｅｒ  Ｍｏｕｓｅ，”  Ｃｅｌｌ  Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌ  ２：５５３−５６５  （２００８），  Ｈａｎ  ｅｔ  ａｌ．，  “Ｆｏｒｅｂｒａｉｎ  Ｅｎｇｒａｆｔｍｅｎｔ  ｂｙ  Ｈｕｍａｎ  Ｇｌｉａｌ  Ｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒ  Ｃｅｌｌｓ  Ｅｎｈａｎｃｅｓ  Ｓｙｎａｐｔｉｃ  Ｐｌａｓｔｉｃｉｔｙ  ａｎｄ  Ｌｅａｒｎｉｎｇ  Ａｄｕｌｔ  Ｍｉｃｅ，”  Ｃｅｌｌ  Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌ  １２：３４２−３５３  （２０１３），及びＷａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，  “Ｈｕｍａｎ  ｉＰＳＣｓ−Ｄｅｒｉｖｅｄ  Ｏｌｉｇｏｄｅｎｄｒｏｃｙｔｅ  Ｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒ  Ｃｅｌｌｓ  Ｃａｎ  Ｍｙｅｌｉｎａｔｅ  ａｎｄ  Ｒｅｓｃｕｅ  ａ  Ｍｏｕｓｅ  Ｍｏｄｅｌ  ｏｆ  Ｃｏｎｇｅｎｉｔａｌ  Ｈｙｐｏｍｙｅｌｉｎａｔｉｏｎ，”  Ｃｅｌｌ  Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌ  １２：２５２−２６４  （２０１３）に記載されているように、グリア前駆細胞を対象の複数の部位の両側に移植する。神経組織及び細胞を宿主の脳に移植するための方法は、その全体が参照により本明細書に援用されるＢｊｏｒｋｌｕｎｄ  ａｎｄ  Ｓｔｅｎｅｖｉ  （ｅｄｓ），  Ｎｅｕｒａｌ  Ｇｒａｆｔｉｎｇ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｍａｍｍａｌｉａｎ  ＣＮＳ，  Ｃｈ．  ３−８，  Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，  Ａｍｓｔｅｒｄａｍ  （１９８５）；Ｇａｇｅらの米国特許第５，０８２，６７０号；及びＷｅｉｓｓらの米国特許第６，４９７，８７２号に記載されている。一般的な手順として、実質内、脳梁内、脳室内、髄腔内、及び静脈内移植が挙げられる。
【０１２０】
実質内移植は、移植時に脳実質に並置されるように、宿主の脳内に組織を注入または沈着させることによって達成される。実質内移植の２つの主な手順は：１）宿主の脳実質内にドナー細胞を注射するか、または２）外科的手段によって空洞を調製して宿主の脳実質を露出させ、次いで移植片を空洞に沈着させることである（その全体が参照により本明細書に援用されるＢｊｏｒｋｌｕｎｄ  ａｎｄ  Ｓｔｅｎｅｖｉ  （ｅｄｓ），  Ｎｅｕｒａｌ  Ｇｒａｆｔｉｎｇ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｍａｍｍａｌｉａｎ  ＣＮＳ，  Ｃｈ．  ３，  Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，  Ａｍｓｔｅｒｄａｍ  （１９８５））。両方の方法は、移植時にドナー細胞と宿主脳組織との間に実質の並置を提供し、両方とも移植片と宿主脳組織との間の解剖学的統合を容易にする。これは、ドナー細胞が宿主の脳の不可欠な部分になり、宿主の寿命までの期間に生き残ることが必要な場合に重要である。
【０１２１】
グリア前駆細胞はまた、その全体が参照により本明細書に援用されるＧｏｌｄｍａｎらの米国特許出願公開第２００３０２２３９７２号に記載されているように、脳梁内に送達することができる。グリア前駆細胞はまた、前脳皮質下、特に脳梁の前部及び後部の原基に直接送達することができる。グリア前駆細胞はまた、小脳脚白質に送達して、主要な小脳及び脳幹路にアクセスすることができる。グリア前駆細胞はまた、脊髄に送達することもできる。
【０１２２】
あるいは、細胞を、室、例えば、脳室に配置してもよい。室の細胞の移植は、ドナー細胞の注射によって、または３０％コラーゲンなどの基質で細胞を増殖させて固形組織のプラグを形成し、次いでそれを室に移植して移植細胞の転位を予防することによって達成してもよい。硬膜下移植の場合、硬膜にスリットを入れた後、細胞を脳の表面に注射してもよい。
【０１２３】
グリア細胞送達のための適切な技術は、上記に記載されている。一実施形態では、グリア前駆細胞の前記調製物を、対象の線条体、前脳、脳幹、及び／または小脳に投与する。
【０１２４】
対象への細胞の送達は、神経系への直接の単一工程または複数工程の注射のいずれかを含み得る。成人及び胎児のオリゴデンドロサイト前駆細胞は移植レシピエントの脳内に広く分散するが、広範囲にわたる障害の場合、複数の注射部位を実行して治療を最適化することができる。注射は、場合により、脳梁のような白質路（例えば、前部及び後部の原基へ）、脊髄後柱、小脳脚、大脳脚などの中枢神経系の領域に向けられる。そのような注射は、定位脳手術などの正確な位置特定方法を使用して、場合により付随する画像化方法（例えば、高解像度ＭＲＩ画像化法）を使用して、片側または両側に行うことができる。当業者であれば、脳の領域が種によって様々に異なることを認識しており；しかしながら、当業者はまた、哺乳類種全体にわたる同等の脳領域を認識している。
【０１２５】
細胞移植は、場合により解離細胞として注入されるが、非解離細胞を局所配置することによって提供することもできる。いずれの場合も、細胞移植は、場合により許容可能な溶液を含む。そのような許容可能な解決策には、望ましくない生物活性及び汚染を回避する解決策が含まれる。適切な解決策として、適切な量の薬学的に許容される塩で製剤を等張性にすることが挙げられる。薬学的に許容される溶液の例として、生理食塩水、リンガー溶液、デキストロース溶液、及び培養培地が挙げられるが、これらに限定されない。溶液のｐＨは、好ましくは約５〜約８、より好ましくは約７〜約７．５である。
【０１２６】
解離した細胞移植の注射は、注射装置（例えば、カニューレ、針、または管）の入口経路、出口経路、または入口経路と出口経路の両方を横切って行われるストリーミング注射であり得る。自動化を使用して、入口と出口の速度、及び射出速度と量を均一にすることができる。
【０１２７】
対象に投与するグリア前駆細胞の数は、レシピエントのサイズ及び種、ならびに細胞置換を必要とする組織の体積に応じて、各投与（例えば、注射部位）で約１０２〜１０８の範囲であり得る。単一投与（例えば、注射）の用量は、移植レシピエント患者に対して、１０３〜１０５、１０４〜１０７、及び１０５〜１０８細胞の範囲、または合計中の任意の量とすることができる。
【０１２８】
ＣＮＳは免疫学的に特権的な部位であるため、異種を含む投与される細胞は生存でき、場合により、免疫抑制剤または免疫抑制剤の一般的レジメンは治療法で使用されない。しかしながら、場合により、免疫抑制剤を対象に投与してもよい。免疫抑制剤及びそれらの投与レジメンは当業者に公知であり、アザチオプリン、アザチオプリンナトリウム、シクロスポリン、ダルトロバン、グスペリムス三塩酸塩、シロリムス、及びタクロリムスなどの薬剤が挙げられる。用量範囲とレジメンの期間は、治療中の障害；拒絶の程度；使用する特定の免疫抑制剤の活性；対象の年齢、体重、健康全般、性別及び食事；投与時間；投与経路；使用する特定の免疫抑制剤の排出率；治療の期間と頻度；及び組み合わせて使用する薬剤によって様々に異なり得る。当業者であれば、免疫抑制の許容可能な用量及び持続時間を決定することができる。投与レジメンは、禁忌が生じる場合、または対象の状態が変化する場合において、個々の医師によって調整することができる。
【実施例】
【０１２９】
以下の実施例は、本開示の実施形態の実施を例示することを意図しているが、その範囲を限定することを意図するものではない。
【０１３０】
実施例の材料及び方法  ヒト胚性幹細胞（ｈＥＳＣ）由来ＧＰＣの産生。ＧＰＣは、前述のプロトコルを使用してヒト胚性幹細胞（ＥＳＣ）から生成し（その全体が参照により本明細書に援用されるＷａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，  “Ｈｕｍａｎ  ｉＰＳＣ−ｄｅｒｉｖｅｄ  Ｏｌｉｇｏｄｅｎｄｒｏｃｙｔｅ  Ｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒ  Ｃｅｌｌｓ  ｃａｎ  Ｍｙｅｌｉｎａｔｅ  ａｎｄ  Ｒｅｓｃｕｅ  ａ  Ｍｏｕｓｅ  Ｍｏｄｅｌ  ｏｆ  Ｃｏｎｇｅｎｉｔａｌ  Ｈｙｐｏｍｙｅｌｉｎａｔｉｏｎ，”  Ｃｅｌｌ  Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌ  １２：２５２−２６４  （２０１３）；Ｗｉｎｄｒｅｍ  ｅｔ  ａｌ．，  “Ｈｕｍａｎ  ｉＰＳＣ  Ｇｌｉａｌ  Ｍｏｕｓｅ  Ｃｈｉｍｅｒａｓ  Ｒｅｖｅａｌ  Ｇｌｉａｌ  Ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｉｏｎｓ  ｔｏ  Ｓｃｈｉｚｏｐｈｒｅｎｉａ，”  Ｃｅｌｌ  Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌ  ２１：１９５−２０８  （２０１７））、これは、その全体が参照により本明細書に援用されるＷａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，  “Ｈｕｍａｎ  ｉＰＳＣ−ｄｅｒｉｖｅｄ  Ｏｌｉｇｏｄｅｎｄｒｏｃｙｔｅ  Ｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒ  Ｃｅｌｌｓ  ｃａｎ  Ｍｙｅｌｉｎａｔｅ  ａｎｄ  Ｒｅｓｃｕｅ  ａ  Ｍｏｕｓｅ  Ｍｏｄｅｌ  ｏｆ  Ｃｏｎｇｅｎｉｔａｌ  Ｈｙｐｏｍｙｅｌｉｎａｔｉｏｎ，”  Ｃｅｌｌ  Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌ  １２：２５２−２６４  （２０１３）の補足実験手順の方法論の詳細に概説されている。細胞を１６０〜２４０の間で採取し、その時点で大部分は一般的に二分化能ＧＰＣマーカーＣＤ１４０ａを発現していたが、その一方で残りは主にＡ２Ｂ５＋／ＣＤ１４０ａ−未成熟星状細胞で構成されていた。ＳＳＥＡ４発現細胞は検出されなかった。ヒトＥＳ細胞は、ＧＥＮＥＡ，Ｉｎｃ．（Ｓｙｄｎｅｙ，Ａｕｓｔｒａｌｉａ）より、ＧＥＮＥＡ０２及び１９（正常ＨＴＴ：１５／１８ＣＡＧ）及びＧＥＮＥＡ１７、１８及び２０（それぞれ、ｍＨＴＴ：４０／１２、４６／１７及び４８／１７ＣＡＧ）として入手した（その全体が参照により本明細書に援用されるＢｒａｄｌｅｙ  ｅｔ  ａｌ．，  “Ｄｅｒｉｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｈｕｎｔｉｎｇｔｏｎ'ｓ  Ｄｉｓｅａｓｅ−Ａｆｆｅｃｔｅｄ  Ｈｕｍａｎ  Ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ  Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌ  Ｌｉｎｅｓ，”  Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌｓ  Ｄｅｖ  ２０：４９５−５０２  （２０１１））。ＧＥＮＥＡ０２及び１７は男性であり、ＧＥＮＥＡ１８、１９、及び２０は女性である。注目すべきことに、ＧＥＮＥＡ１９及び２０は、１人が正常、もう１人がＨＤである女性の同胞ペアとして寄贈され、派生した。Ｃ２７対照株は男性である。
【０１３１】
宿主。ホモ接合性ｓｈｉｖｅｒｅｒマウス（Ｔｈｅ  Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｂａｒ  Ｈａｒｂｏｒ，ＭＥ）を、Ｃ３ｈバックグラウンド（Ｔａｃｏｎｉｃ，Ｇｅｒｍａｎｔｏｗｎ，ＮＹ，ＵＳＡ）のホモ接合性ｒａｇ２  ｎｕｌｌ免疫不全マウスと交雑し（その全体が参照により本明細書に援用されるＳｈｉｎｋａｉ  ｅｔ  ａｌ．，“ＲＡＧ−２−ｄｅｆｉｃｉｅｎｔ  Ｍｉｃｅ  Ｌａｃｋ  Ｍａｔｕｒｅ  Ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ  Ｏｗｉｎｇ  ｔｏ  Ｉｎａｂｉｌｉｔｙ  ｔｏ  Ｉｎｉｔｉｔａｔｅ  Ｖ（Ｄ）Ｊ  Ｒｅａｒｒａｎｇｅｍｅｎｔ，”  Ｃｅｌｌ  ６８：８５５−８６７（１９９２））、ｓｈｉ／ｓｈｉ  ｘ  ｒａｇ２−／−ミエリン欠損免疫不全マウスを生成した（その全体が参照により本明細書に援用されるＷｉｎｄｒｅｍ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｎｅｏｎａｔａｌ  Ｃｈｉｍｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｗｉｔｈ  Ｈｕｍａｎ  Ｇｌｉａｌ  Ｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒ  Ｃｅｌｌｓ  Ｃａｎ  Ｂｏｔｈ  Ｒｅｍｙｅｌｉｎａｔｅ  ａｎｄ  Ｒｅｓｃｕｅ  ｔｈｅ  Ｏｔｈｅｒｗｉｓｅ  Ｌｅｔｈａｌｌｙ  Ｈｙｐｏｍｙｅｌｉｎａｔｅｄ  Ｓｈｉｖｅｒｅｒ  Ｍｏｕｓｅ，”  Ｃｅｌｌ  Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌ  ２：５５３−５６５（２００８））。マウスを、病原体フリーのコロニールームの温度と湿度が制御された飼育室内（６４〜７９°Ｆ；３０％〜７０％湿度）で１２：１２時間の光サイクルで維持した。マウスには、０．０２５％トリメトプリム／０．１２４％スルファメトキシゾール及びオートクレーブ処理した酸性水（ｐＨ２．５〜３．０）を含むＭｏｄ  ＬａｂＤｉｅｔ  ５Ｐ００を自由に与えた。
【０１３２】
単一細胞またはｈＥＳＣ由来ＧＰＣの小さなクラスターの懸濁液を、１００，０００細胞／ｍｌまでスピンダウンした。記載されているように、冷却することにより新生児を麻酔し、合計２００，０００細胞の脳梁に両側から移植した（その全体が参照により本明細書に援用されるＷｉｎｄｒｅｍ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｆｅｔａｌ  ａｎｄ  Ａｄｕｌｔ  Ｈｕｍａｎ  Ｏｌｉｇｏｄｅｎｄｒｏｃｙｔｅ  Ｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒ  Ｃｅｌｌ  Ｉｓｏｌａｔｅｓ  Ｍｙｅｌｉｎａｔｅ  ｔｈｅ  Ｃｏｎｇｅｎｉｔａｌｌｙ  Ｄｙｓｍｙｅｌｉｎａｔｅｄ  Ｂｒａｉｎ，”  Ｎａｔ．Ｍｅｄ．１０：９３−９７（２００４））。８、１２〜１３、または１８週齢で、移植されたマウスをペントバルビタールで麻酔し、次いで冷ＨＢＳＳ、続いて４％パラホルムアルデヒドで灌流固定した。脳を取り出し、冷パラホルムアルデヒドで２時間、後置した。
【０１３３】
すべての手順は、ロチェスター大学動物資源委員会（ＵＣＡＲ）により、プロトコル２００４−１２９の下で承認された。
【０１３４】
移植のための細胞調製。注射の前に、フローサイトメトリーを実施して、各培養物におけるＣＤ１４０ａの優勢を確認した。次いで、懸濁した細胞クラスターをウェルから回収し、スピンダウンし、少量のＣａ２＋／Ｍｇ２＋フリーのＨＢＳＳに再懸濁した。再懸濁したクラスターを１００ｍｍの細胞培養皿に移し、次いで１１番の外科用メスで切断して直径１００〜２００ｍｍの断片を得た。次いで、これらの断片を回収し、スピンダウンし、Ｃａ２＋／Ｍｇ２＋フリーのＨＢＳＳで洗浄し、そして濃度がおよそ１０５細胞／ｍｌのＣａ２＋／Ｍｇ２＋フリーのＨＢＳＳに再懸濁した。
【０１３５】
移植。Ｓｈｉｖｅｒｅｒ  ｘ  Ｒａｇ２  ｎｕｌｌ新生児マウスに対し、生後１日目または２日目に移植した。同腹仔の半分をダムから取り出し、加湿加温チャンバーに入れた。このために、ハンクス平衡塩類溶液で湿らせた無菌ガーゼで裏打ちされ、加熱ブロックで温められた無菌プラスチックボックスを使用した。次いで、注射しようとする仔マウスをポビドンヨードで拭き、氷と直接接触しないように無菌ガーゼで包み、次いでサイズに応じて２〜６分間凍結麻酔した。次いで、仔マウスを氷から取り出し、アルコールプレップパッドで洗浄し、次いで焼きたての成形粘土製のカスタマイズされた新生児マウスホルダーに置いた。仔マウスに対し、皮膚と頭蓋類骨を通して、吻側（ＡＰ＋１．０ｍｍ；ＭＬ±１．０ｍｍ、腹側１．０ｍｍ）と尾側（ＡＰ−１．０、ＭＬ±１．０ｍｍ、腹側０．９ｍｍ）の両方の脳梁に直接注射した。注射後、仔マウスをアルコールプレップパッドで洗浄し、回復させるために加温チャンバーに戻した。回復すると、同腹仔の第１の半分をダムに戻し、第２の半分を加湿チャンバーに入れた。仔マウスを２１〜２８日間、離乳させ、次いで群飼した。
【０１３６】
組織切片の免疫標識。脳を凍結保存し、ＯＣＴ（Ｔｉｓｓｕｅ−Ｔｅｋ  ＯＣＴ，Ｓａｋｕｒａ  Ｆｉｎｅｔｅｋ，Ｔｏｒｒａｎｃｅ，ＣＡ）に埋め込み、クリオスタットで矢状または冠状に２０ｍｍで切断した。ヒト細胞を、マウス抗ヒト核、クローン２３５−１、１：８００（ＭＡＢ１２８１；ＥＭＤ  Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ，Ｂｉｌｌｅｒｉｃａ，ＭＡ）で同定した。オリゴデンドロサイトを、ＭＢＰとラット抗ＭＢＰ（Ａｂ７３４９；Ａｂｃａｍ，Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，ＭＡ）を１：２５で用いて標識し、星状細胞を抗ヒト特異的ＧＦＡＰ（ＳＭＩ２１、１：１０００、Ｃｏｖａｎｃｅ，Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ，ＮＪ）で標識し、軸索をマウス抗ニューロフィラメント１：５０００（ＳＭＩ−３１１）または１：１０００（ＳＭＩ−３１２；Ｃｏｖａｎｃｅ，Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ，ＮＪ）で標識した。Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ二次抗体、ヤギ抗マウス及び抗ラット４８８、５６８、５９４、及び６４７を１：４００で使用した（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｃａｒｌｓｂａｄ，ＣＡ）。
【０１３７】
使用する抗体と希釈液。
【０１３８】
（表５）主要なリソース
2021528445.tif 000034
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【０１３９】
ＲＮＡ配列分析。記載されているように（その全体が参照により本明細書に援用されるＳｉｍ  ｅｔ  ａｌ．，“ＣＤ１４０ａ  Ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｓ  ａ  Ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｈｉｇｈｌｙ  Ｍｙｅｌｉｎｏｇｅｎｉｃ，Ｍｉｇｒａｔｉｏｎ−ｃｏｍｐｅｔｅｎｔ  ａｎｄ  Ｅｆｆｉｃｉｅｎｔｌｙ  Ｅｎｇｒａｆｔｉｎｇ  Ｈｕｍａｎ  Ｏｌｉｇｏｄｅｎｄｒｏｃｙｔｅ  ｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒ  Ｃｅｌｌｓ，”  Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．２９：９３４−９４１（２０１１））、遺伝子発現について評価するｈＧＰＣを、ＦＡＣＳ  Ａｒｉａ  ＩＩＩｕ（Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）（図３）を使用して、最初に細胞表面マーカーＣＤ１４０ａ（ＢＤ  ＰｈａｒＭｉｎｇｅｎ）に基づいて、蛍光標識細胞分取によってソーティングした。３人のＨＤ患者（ＨＤ系統１７［独立した細胞セットの調製物Ｎ＝５］、１８［Ｎ＝５］、及び２０［Ｎ＝６］を選定）及び２つの健康な対照（ＣＴＲ株０２［Ｎ＝６］、及び１９［Ｎ＝６］、ＨＤ２０の同胞を選定）に由来するヒト胚性幹（ＥＳ）細胞から産生され、ＦＡＣＳによるソーティングでＰＤＧＦＲａ陽性であるＧＰＣ株から、ｐｏｌｙＡ選択プロトコルによってｍＲＮＡを単離した。配列ライブラリを、Ｉｌｌｕｍｉｎａ  ＴｒｕＳｅｑ  ＲＮＡ  ｖ２キットを使用して調製し、Ｉｌｌｕｍｉｎａ  ＨｉＳｅｑ２５００シーケンサーで配列分析し、対照株ＣＴＲ０２を除くすべての細胞株で、サンプルあたりおよそ４，５００万の１００ｂｐシングルエンドリードを生成し、同様の深度で、ただし１２５ｂｐペアエンドリードモードで配列分析した。次いで、Ｔｒｉｍｍｏｍａｔｉｃ（その全体が参照により本明細書に援用されるＢｏｌｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｔｒｉｍｍｏｍａｔｉｃ：ａ  Ｆｌｅｘｉｂｌｅ  Ｔｒｉｍｍｅｒ  ｆｏｒ  Ｉｌｌｕｍｉｎａ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  Ｄａｔａ，”  Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ  ３０：２１１４−２１２０（２０１４））を使用して、アダプターと低品質の配列をトリミングすることにより、配列リードを前処理した。前処理の前後の読み取りの品質を、ＦａｓｔＱＣで評価した。次いで、前処理したリードを、Ｓｕｂｒｅａｄ  ｒｅａｄ  ａｌｉｇｎｅｒ（その全体が参照により本明細書に援用されるＬｉａｏ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｔｈｅ  Ｓｕｂｒｅａｄ  Ａｌｉｇｎｅｒ：Ｆａｓｔ，  Ａｃｃｕｒａｔｅ  ａｎｄ  Ｓｃａｌａｂｌｅ  Ｒｅａｄ  Ｍａｐｐｉｎｇ  ｂｙ  Ｓｅｅｄ−ａｎｄ−Ｖｏｔｅ，”  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．４１：ｅ１０８（２０１３））を用いて、ＲｅｆＳｅｑ  ＮＣＢＩ参照ヒトゲノムバージョンＧＲＣｈ３８に対してアライメントした（その全体が参照により本明細書に援用されるＰｒｕｉｔｔ  ｅｔ  ａｌ．，“ＮＣＢＩ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  （ＲｅｆＳｅｑ）：ａ  Ｃｕｒａｔｅｄ  Ｎｏｎ−Ｒｅｄｕｎｄａｎｔ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  Ｄａｔａｂａｓｅ  ｏｆ  Ｇｅｎｏｍｅｓ，  Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｓ  ａｎｄ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ，”  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．３５：Ｄ６１−Ｄ６５（２００７））。生の遺伝子カウントを、ｆｅａｔｕｒｅＣｏｕｎｔｓを含むＢＡＭアラインメントファイルから取得した（その全体が参照により本明細書に援用され��Ｌｉａｏ  ｅｔ  ａｌ．，“ｆｅａｔｕｒｅＣｏｕｎｔｓ：  ａｎ  Ｅｆｆｉｃｉｅｎｔ  Ｇｅｎｅｒａｌ  Ｐｕｒｐｏｓｅ  Ｐｒｏｇｒａｍ  ｆｏｒ  Ａｓｓｉｇｎｉｎｇ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  Ｒｅａｄｓ  ｔｏ  Ｇｅｎｏｍｉｃ  Ｆｅａｔｕｒｅｓ，”  Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ  ３０：９２３−９３０（２０１４））。
【０１４０】
ミエリン形成のＳＯＸ１０／ＭＹＲＦレスキュー。この一連の実験では、ＳＯＸ１０及びＭＹＲＦ転写産物を２つの別々のレンチウイルスベクター：ｐＴＡＮＫ−ＴＲＥ−ＭＹＲＦ−ＣＡＧ−ｒｔＴＡ３Ｇ−ＷＰＲＥ及びｐＴＡＮＫ−ＴＲＥ−Ｓｏｘ１０−Ｐ２Ａ−ＤＣ４−ＷＰＲＥにクローニングした。このＴｅｔ−Ｏｎ系では、選択マーカーＣＤ４の細胞表面発現には両方のウイルスからの発現が必要であるため、ＭＹＲＦ及びＳＯＸ１０導入遺伝子の共発現が保証される。水疱性口内炎ウイルスＧ糖タンパク質でシュードタイピングされたウイルス粒子を生成し、超遠心分離によって濃縮し、２９３ＨＥＫ細胞で滴定した。Ｇ２０  ｈＧＰＣ培養物に、グリア培地中で１．０ＭＯＩで感染させた。細胞をＨＢＳＳで洗浄し、１ｍｇ／ｍｌ  ＤＯＸ（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ−Ｓｉｇｍａ  Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）を添加したグリア培地で４日間維持した。次いで、記載するように、ｈＧＰＣを、ＭＡＣＳ（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ，Ｇｅｒｍａｎｙ）を使用してＣＤ４の膜発現用に選択した（その全体が参照により本明細書に援用されるＷｉｎｄｒｅｍ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｎｅｏｎａｔａｌ  Ｃｈｉｍｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｗｉｔｈ  Ｈｕｍａｎ  Ｇｌｉａｌ  Ｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒ  Ｃｅｌｌｓ  Ｃａｎ  Ｂｏｔｈ  Ｒｅｍｙｅｌｉｎａｔｅ  ａｎｄ  Ｒｅｓｃｕｅ  ｔｈｅ  Ｏｔｈｅｒｗｉｓｅ  Ｌｅｔｈａｌｌｙ  Ｈｙｐｏｍｙｅｌｉｎａｔｅｄ  Ｓｈｉｖｅｒｅｒ  Ｍｏｕｓｅ，”  Ｃｅｌｌ  Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌ  ２：５５３−５６５（２００８））。
【０１４１】
ｉｎ  ｖｉｔｒｏでのオリゴデンドロサイト分化のレスキュー。ＭＡＣＳで単離したＣＤ４＋細胞をグリア培地に一晩付着させた（その全体が参照により本明細書に援用されるＷａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｈｕｍａｎ  ｉＰＳＣ−ｄｅｒｉｖｅｄ  Ｏｌｉｇｏｄｅｎｄｒｏｃｙｔｅ  Ｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒ  Ｃｅｌｌｓ  ｃａｎ  Ｍｙｅｌｉｎａｔｅ  ａｎｄ  Ｒｅｓｃｕｅ  ａ  Ｍｏｕｓｅ  Ｍｏｄｅｌ  ｏｆ  Ｃｏｎｇｅｎｉｔａｌ  Ｈｙｐｏｍｙｅｌｉｎａｔｉｏｎ，”  Ｃｅｌｌ  Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌ  １２：２５２−２６４（２０１３））。ＤＯＸを、分化誘導を介して過剰発現条件で維持した。翌日、細胞をＨＢＳＳで１回洗浄し、分化培地（神経基底培地（ＧＩＢＣＯ）、１×Ｎ２（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ）、１×Ｂ２７（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ）、１×ＧｌｕｔａＭＡＸ（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ）、２０ｎｇ／ｍｌ  ＢＤＮＦ（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）、０．２ｍＭ  Ｌ−アスコルビン酸（Ｓｉｇｍａ）、６０ｎｇ／ｍｌ  Ｔ３（Ｓｉｇｍａ）、０．２ｍＭジブチルサイクリックＡＭＰ（Ｓｉｇｍａ）、１００ｎｇ／ｍｌビオチン（Ｓｉｇｍａ）、１×インスリン−トランスフェリン−セレン（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ）、１０ｎｇ／ｍｌ  ＮＴ３（Ｒ＆Ｄ）、及び１００ｎｇ／ｍｌ  ＩＧＦ１（Ｒ＆Ｄ）に転移させた。固定前に、培地を２週間おきに交換した。オリゴデンドロサイトの分化を、Ｏ４免疫染色によって定量化した。
【０１４２】
ｉｎ  ｖｉｔｒｏでのオリゴデンドロサイト分化のレスキュー。細胞を移植用に調製し、次いで新生児ｓｈｉｖｅｒｅｒマウスの脳梁の２つの部位に一側性に注射した。９週齢から開始して、移植しようとするマウスの半数に、水ボトル中のＤＯＸ（２ｍｇ／ｍｌ、５％スクロース水溶液）または通常の飲用水のいずれかを５週間にわたって投与した（その全体が参照により本明細書に援用されるＣｈｏｗ  ｅｔ  ａｌ．，“Ａ  Ｄｏｘｙｃｙｃｌｉｎｅ−Ｉｎｄｕｃｉｂｌｅ，  Ｔｉｓｓｕｅ−Ｓｐｅｃｉｆｉｃ  Ａｒｏｍａｔａｓｅ−Ｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇ  Ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ  Ｍｏｕｓｅ，”  Ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ  Ｒｅｓ．２１：４１５−４２８（２０１２））。次いで、対照マウスと実験マウスの両方を１３週齢で殺処分し、ＭＢＰとヒト核抗原の免疫標識のための調製を行い、次いで、記載されているように共焦点画像化してＭＢＰ発現オリゴデンドロサイトによる軸索被鞘を評価した。
【０１４３】
画像化及び定量的組織学。ヒト核の分布をマッピングするために、Ｎｉｋｏｎ  Ｄｉｇｉｔａｌ  Ｓｉｇｈｔ  ＣａｍｅｒａＤＳ−Ｆｉ１を搭載したＮｉｋｏｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  Ｎｉ−Ｅで切片を画像化し、Ｎｉｋｏｎ  ＮＩＳ  Ｅｌｅｍｅｎｔｓｖ４．５でカウントを記録した。低電力でのミエリンの分布を撮影するために、脳全体の切片をＬｅｉｃａ  ＬＭＤ６５００で画像化した。Ｎｉｋｏｎ  Ｃ２＋共焦点を使用してより高出力のミエリン被鞘の共焦点画像を取得し、１００倍の対物レンズで０．２ｍｍ工程を使用して画像を取得した。細胞型特異的マーカーの画像化は、Ｓｔｅｒｅｏ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｏｒソフトウェア（ＭＢＦ，Ｗｉｌｌｉｓｔｏｎ，ＶＴ）によって駆動されるＨａｍｍａｍａｔｓｕカメラを使用してＯｌｙｍｐｕｓ  ＢＸ５１で実施した。ショール分析に供した星状細胞のより高倍率の共焦点スタックを、Ｌｅｉｃａ  ＳＰ８共焦点を使用して得た。
【０１４４】
細胞の計数。脳梁におけるドナー細胞密度の定量化は、正中線から１ｍｍ外側の計数に基づいていた。ランダムに開始し、均一にサンプリングした脳の冠状切片を、ヒト核、ＤＡＰＩ、及び他の表現型特異的マーカー（Ｏｌｉｇ２、ｈＧＦＡＰ、ＴＦ及びＭＢＰ）で標識した。Ｏｌｉｇ２及びｈＧＦＡＰの定量化では、各セクションの関心領域を、Ｈａｍａｍａｔｓｕカメラを搭載したＯｌｙｍｐｕｓ  ＢＸ５１を使用して４０倍で画像化した。１ｍｍのステップサイズでＺスタックを得た。ＴＦ及びＭＢＰの定量化では、ＤＳ−Ｆｉ１カメラを搭載したＮｉｋｏｎ  Ｎｉ−Ｅ  Ｅｃｌｉｐｓｅ顕微鏡を使用して関心領域を２０倍で画像化した。０．７〜１ｍｍのステップサイズでＺスタックを得た。Ｎｉｋｏｎ  ＮＩＳ  Ｅｌｅｍｅｎｔｓ  ｖ．４．５で、各マウスの３つの等間隔の冠状切片にｚスタック画像を高強度で投影して、免疫標識細胞を計数した。
【０１４５】
星状細胞の形態計測。Ｓｈｉｖｅｒｅｒ×ｒａｇ２  ｎｕｌｌマウスを１８週齢で殺処分し、それらの白質星状細胞の形態を評価した。Ｂｒｅｇｍａ  −１．０ｍｍでのＶｉｂｒａｔｏｍｅにより、対照（ＧＥＮＥＡ１９）またはＨＤ（ＧＥＮＥＡ２０）ｈＧＰＣ移植マウスから厚さ１５０ｍｍの冠状切片を採取し、マウス抗ｈＧＦＡＰ中で４℃で１週間、次いでＡｌｅｘａ５６８ヤギ抗マウス抗血清で４時間インキュベートした。切片をスライドにマウントし、共焦点（Ｌｅｉｃａ  ＳＰ８）により１００倍で画像化した。Ｎｅｕｒｏｌｕｃｉｄａ  ３６０（ＭｉｃｒｏＢｒｉｇｈｔｆｉｅｌｄ，Ｉｎｃ．）を使用して画像をトレースし；すべてのトレースは、治療条件について盲検化された実験者によって行われた。
【０１４６】
細胞とそのプロセス全体を捉えるために、個々の星状細胞を、中深度の脳梁中央部から選択した。正中線の外側５００、１０００、及び１５００ｍｍにおいて、３細胞／切片及び３切片／脳として細胞を採取し、Ｎｅｕｒｏｌｕｃｉｄａによってショール分析を用いて分析した。移植された合計１４の新生児脳（ＧＥＮＥＡ１８，ｎ＝２１細胞／３脳；ＧＥＮＥＡ１９，３２細胞／４脳；ＧＥＮＥＡ２０，４２細胞／７脳）を評価し、６３個のトレースされたｍＨＴＴ星状細胞（ＧＥＮＥＡ１８及び２０由来）、及び３２個の対照（ＧＥＮＥＡ１９）星状細胞を得た。ショール分析では、５ｍｍの直径を連続的に増加させて配置した同心シェルを細胞体の中心に置き、細胞プロセスとシェルの共通部分の数を計数した（その全体が参照により本明細書に援用されるＳｈｏｌｌ，“Ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ  Ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｎｅｕｒｏｎｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｖｉｓｕａｌ  ａｎｄ  Ｍｏｔｏｒ  Ｃｏｒｔｉｃｅｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｃａｔ，”  Ｊ．Ａｎａｔ．８７：３８７−４０６（１９５３））。星状細胞線維の３Ｄアーキテクチャの評価及び定量的説明では、樹状突起トポロジーの研究で前述したようにＦａｎ−ｉｎ分析（ＭＢＦ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を使用した（その全体が参照により本明細書に援用されるＤａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｆｏｒｍｏｔｅｒｏｌ，  ａ  Ｌｏｎｇ−Ａｃｔｉｎｇ  β２  Ａｄｒｅｎｅｒｇｉｃ  Ａｇｏｎｉｓｔ，Ｉｍｐｒｏｖｅｓ  Ｃｏｇｎｔｉｖｅ  Ｆｕｎｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｐｒｏｍｏｔｅｓ  Ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ  Ｃｏｍｐｌｅｘｉｔｙ  ｉｎ  ａ  Ｍｏｕｓｅ  Ｍｏｄｅｌ  ｏｆ  Ｄｏｗｎ  Ｓｙｎｄｒｏｍｅ，”  Ｂｉｏｌ．Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ  ７５：１７９−１８８  （２０１４））。
【０１４７】
ミエリン輝度分析。前脳ミエリン形成を測定するために、ＭＢＰ免疫蛍光の測定に基づく輝度分析を使用した。記載したように、等間隔で均一にサンプリングした冠状切片をＭＢＰで染色し、Ｎｉｋｏｎ  Ｎｉ−Ｅ及びＮｉｋｏｎ  ＤＳ−Ｆｉ１カメラを使用して１０倍で画像を撮影した。脳梁を関心領域として選択し、平均強度値をＮＩＳ  Ｅｌｅｍｅｎｔｓ  ｖ．４．５を使用して取得した。
【０１４８】
組織学的データの統計解析。すべての分析は、Ｐｒｉｓｍ（登録商標）ｖ．７（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ）を使用して、二元配置ＡＮＯＶＡ及び事後ボンフェローニｔ検定を使用して行った。統計的有意性は、０．０５未満のＰ値とみなされた。有意性は、＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１及び＊＊＊ｐ＜０．００１として表した。グラフと図はＰｒｉｓｍ７で作成及び構築し、すべてのデータを平均±平均の標準誤差（ＳＥＭ）として示す。
【０１４９】
バイオインフォマティクス。ネイティブＲ関数（その全体が参照により本明細書に援用されるＲ  Ｃｏｒｅ  Ｔｅａｍ，“Ｒ：ａ  Ｌａｎｇｕａｇｅ  ａｎｄ  Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ  ｆｏｒ  Ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ  Ｃｏｍｐｕｔｉｎｇ，”  Ｒ  Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  Ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ  Ｃｏｍｐｕｔｉｎｇ  （２０１４））で生成された主成分と階層的クラスタリングプロットを調べた後、１つの誤ってクラスター化された外れ値サンプルを株ＨＤ１７（ＧＥＮＥＡ１７）から、ならびに株ＨＤ２０（ＧＥＮＥＡ２０）及びＣＴＲ１９（ＧＥＮＥＡ１９）の２つの外れ値を分析から除外した。低発現の転写産物を除外し、３つ以上のサンプルで少なくとも５リードのカウントを残した後、ＲＵＶＳｅｑを使用して計数データを正規化した（その全体が参照により本明細書に援用されるＲｉｓｓｏ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｎｏｒｍａｌｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ＲＮＡ−ｓｅｑ  Ｄａｔａ  Ｕｓｉｎｇ  Ｆａｃｔｏｒ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  ｏｆ  Ｃｏｎｔｒｏｌ  Ｇｅｎｅｓ  ｏｒ  Ｓａｍｐｌｅｓ，”  Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．３２：８９６−９０２（２０１４））。Ｒ  Ｂｉｏｃｏｎｄｕｃｔｏｒパッケージ（その全体が参照により本明細書に援用されるＧｅｎｔｌｅｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｂｉｏｃｏｎｄｕｃｔｏｒ：  Ｏｐｅｎ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｆｏｒ  Ｃｏｍｐｕｔａｔｉｏｎａｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ，”  Ｇｅｎｏｍｅ  Ｂｉｏｌ．５：Ｒ８０（２００４））を、分散を考慮するために使用した。ＲＵＶＳｅｑの文書に記載されているように、正規化を以下の３工程の手順で行った：１）ｅｄｇｅＲ（その全体が参照により本明細書に援用されるＲｏｂｉｎｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，“ｅｄｇｅＲ：ａ  Ｂｉｏｃｏｎｄｕｃｔｏｒ  Ｐａｃｋａｇｅ  ｆｏｒ  Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  ｏｆ  Ｄｉｇｉｔａｌ  Ｇｅｎｅ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  Ｄａｔａ，”  Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ  ２６：１３９−１４０（２０１０））及びＤＥＳｅｑ２（その全体が参照により本明細書に援用されるＬｏｖｅ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｍｏｄｅｒａｔｅｄ  Ｅｓｔｉｍａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｆｏｌｄ  Ｃｈａｎｇｅ  ａｎｄ  Ｄｉｓｐｅｒｓｉｏｎ  ｆｏｒ  ＲＮＡ−ｓｅｑ  Ｄａｔａ  ｗｉｔｈ  ＤＥＳｅｑ２，”  Ｇｅｎｏｍｅ  Ｂｉｏｌ．１５：５５０（２０１４））のＲ  Ｂｉｏｃｏｎｄｕｃｔｏｒパッケージ（両方の方法によって計算されるＦＤＲ調整済ｐ値＞０．７５を有する遺伝子が含まれる）による初回通過差次的発現解析によって陰性ｉｎ  ｓｉｌｉｃｏ対照遺伝子を決定し；２）次いで、陰性ｉｎ  ｓｉｌｉｃｏ対照遺伝子をＲＵＶＳｅｑのＲＵＶｇ関数で使用して、分散係数を計算し；及び３）第２通過差次的発現解析（１％ＦＤＲ及びｌｏｇ２倍率変化＞１）を実施し、元の生カウントを用いて、ｅｄｇｅＲパッケージとＤＥＳｅｑ２パッケージの両方に実装された多要素ＧＬＭモデルによってＲＵＶｇで計算された分散係数を調整して疾患調節不全遺伝子を決定する。
【０１５０】
低発現及び非発現転写産物の除外を伴うこの３工程の解析を使用して、各ＨＤ由来ｈＧＰＣ細胞株をプールされたＣＴＲ由来ｈＧＰＣと比較し、ＨＤ２０とＨＤ１９の同胞ペアを比較した。すべての比較において、ＲＵＶｇで計算された１つの分散係数を使用した。得られた差次的に発現する遺伝子の４つのリストの共通部分を、ＨＤ調節不全遺伝子の保存された代表的リストとみなした。３つすべてのＨＤ由来ＧＰＣ株の調節不全遺伝子の平均ＦＣ及びｐ値を取得するために、同じワークフローで同じ数の分散係数を使用して、プールされたＨＤとプールされたＣＴＲ株の差次的発現比較を実施した。
【０１５１】
差次的発現のすべての比較では、ｅｄｇｅＲとＤＥＳｅｑ２の間で一致した有意な結果のみを下流の分析で使用した。結果で報告された倍率変化とＦＤＲ調整済ｐ値は、ｅｄｇｅＲによって計算した。保存されたＨＤ調節不全遺伝子のセットの機能的アノテーションを、ＴｏｐｐＣｌｕｓｔｅｒを使用して実施した（その全体が参照により本明細書に援用されるＫａｉｍａｌ  ｅｔ  ａｌ．，“ＴｏｐｐＣｌｕｓｔｅｒ：  ａ  Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  Ｇｅｎｅ  Ｌｉｓｔ  Ｆｅａｔｕｒｅ  Ａｎａｌｙｚｅｒ  ｆｏｒ  Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ  Ｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔ  Ｃｌｕｓｔｅｒｉｎｇ  ａｎｄ  Ｎｅｔｗｏｒｋ−ｂａｓｅｄ  Ｄｉｓｓｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，”  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．３８：Ｗ９６−Ｗ１０２（２０１０））及びＩｎｇｅｎｕｉｔｙパスウェイ解析（ＩＰＡ）（ＱＩＡＧＥＮ）（その全体が参照により本明細書に援用されるＫｒａｍｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｃａｕｓａｌ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  Ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ  ｉｎ  Ｉｎｇｅｎｕｉｔｙ  Ｐａｔｈｗａｙ  Ａｎａｌｙｓｉｓ，”  Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ  ３０：５２３−５３０（２０１４））。
【０１５２】
遺伝子発現検証用のＴａｑＭａｎ  ＲＴ−ｑＰＣＲアレイ。抽出した全ＲＮＡを、ｒｉｂｏ−ＳＰＩＡベースの全トランスクリプトームベースの増幅（ＮｕＧｅｎ）を使用して増幅した。細胞型マーカー及び経路特異的遺伝子の発現を、４８遺伝子のＴａｑｍａｎ低密度アレイ（ＴＬＤＡ）（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）を使用したリアルタイムポリメラーゼ連鎖反応（ＲＴ−ＰＣＲ）によって評価した。転写産物発現の相対量をＤＤＣｔ分析によって計算し、発現データを内在性対照として１８Ｓ及びＧＡＰＤＨの平均に正規化した。ＨＤと対照ＧＰＣでの発現の違いは、対応ｔ検定と、それに続くＢｅｎｊａｍｉｎｉ−Ｈｏｃｈｂｅｒｇ（ＢＨ）手順による多重検定補正によって評価した（その全体が参照により本明細書に援用されるＢｅｎｊａｍｉｎｉ  ａｎｄ  Ｈｏｃｈｂｅｒｇ，“Ｃｏｎｔｒｏｌｌｉｎｇ  ｔｈｅ  Ｆａｌｓｅ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  Ｒａｔｅ：  ａ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｐｏｗｅｒｆｕｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ  ｔｏ  Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  Ｔｅｓｔｉｎｇ，”  Ｊ．Ｒ．Ｓｔａｔ．  Ｓｏｃ．Ｓｅｒｉｅｓ  Ｂ  Ｓｔａｔ．  Ｍｅｔｈｏｄｏｌ．５７：２８９−３００（１９９５））。ＴＬＤＡデータの分析は、Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓが提供するＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎＳｕｉｔｅソフトウェアバージョン１．１で実施した。
【０１５３】
ミエリン形成遺伝子発現のＳＯＸ１０／ＭＹＲＦレスキュー。ｍＨＴＴと正常同胞ｈＥＳＣ由来ｈＧＰＣの両方に、構成的プロモーターＥＦ１α（ｐＴＡＮＫ−ＥＦ１α−Ｓｏｘ１０−Ｐ２Ａ−Ｍｙｒｆ−Ｔ２Ａ−ＥＧＦＰ−ＷＰＲＥ）の制御下で、ＳＯＸ１０とＭＹＲＦのいずれかをタンデムに発現するプラスミド、またはＥＧＦＰのみを発現する対照プラスミド（ｐＴＡＮＫ−ＥＦ１α−ＥＧＦＰ−ＷＰＲＥ）を形質移入した。形質移入は、Ｎｕｃｌｅｏｆｅｃｔｏｒ（Ｌｏｎｚａ，Ｇｅｒｍａｎｙ）を使用し、製造元のプロトコルに従ってＣＡ２０５形質移入プログラムを使用してＰ３緩衝液中で実施した。潜在的なＳＯＸ１０及びＭＹＲＦ標的遺伝子のＲＴ−ｑＰＣＲのために、形質移入の７２時間後に細胞を回収した。Ｑｉａｇｅｎ  ＲＮｅａｓｙ  Ｍｉｃｒｏキット（Ｑｉａｇｅｎ，Ｇｅｒｍａｎｙ）を使用してＲＮＡを抽出した。ファーストストランドｃＤＮＡを、ＴａｑＭａｎ逆転写試薬（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）を使用して合成した。各反応に対して５ｎｇのＲＮＡ入力を使用し；これらは、ＦａｓｔＳｔａｒｔ  Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ  ＳｙｂｒＧｒｅｅｎ  Ｍａｓｔｅｒｍｉｘ（Ｒｏｃｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ，Ｇｅｒｍａｎｙ）を使用して、リアルタイムＰＣＲ機器（ＣＦＸ  Ｃｏｎｎｅｃｔ  Ｒｅａｌ−ＴｉｍｅＳｙｓｔｅｍサーモサイクラー；Ｂｉｏ−Ｒａｄ，ＵＳＡ）で実施した。Ｇ１９及びＧ２０由来ｈＧＰＣ由来のサンプルを、アッセイする各標的遺伝子についてそれぞれ３回ずつアッセイした（プライマーは以下の表６で入手可能）。
【０１５４】
（表６）リアルタイムＰＣＲに使用するプライマー
2021528445.tif 000042
各ＰＣＲの後に融解曲線分析を実施して、反応の特異性を確認し、すべてのサンプルで目的のピークを同定した。結果を、同じサンプル由来の１８Ｓ発現レベルに正規化した。
【０１５５】
データ及びソフトウェアの有用性。すべての生のＲＮＡ配列分析データは、ＧＥＯ、登録番号ＧＥＯ：ＧＳＥ１０５０４１に寄託されている。Ｒスクリプトとカウントマトリックスを含む完全な再現可能なワークフローもまた、寄託されている。すべての差次的発現データが、公的にアクセス可能なインタラクティブなラボベースのＷｅｂサイトにアップロードされており、その中で、差次的発現遺伝子セットのさらなる評価と調査が、関心のあるユーザーによって実施され得る。すべてのデータはＭｅｎｄｅｌｅｙ  Ｄａｔａにもアップロードされている。
【０１５６】
ネットワークの視覚化と分析。ＴｏｐｐＣｌｕｓｔｅｒアノテーションツールを、タームと遺伝子の関連付けをネットワークとして表すその機能のために使用した（その全体が参照により本明細書に援用されるＫａｉｍａｌ  ｅｔ  ａｌ．，“ＴｏｐｐＣｌｕｓｔｅｒ：ａ  Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  Ｇｅｎｅ  Ｌｉｓｔ  Ｆｅａｔｕｒｅ  Ａｎａｌｙｚｅｒ  ｆｏｒ  Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ  Ｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔ  Ｃｌｕｓｔｅｒｉｎｇ  ａｎｄ  Ｎｅｔｗｏｒｋ−Ｂａｓｅｄ  Ｄｉｓｓｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，”  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．３８：Ｗ９６−Ｗ１０２（２０１０））。アノテーション結果を、ＴｏｐｐＣｌｕｓｔｅｒ  Ｎｅｔｗｏｒｋ  Ｇｅｎｅｒａｔｏｒを使用して、ネットワークエッジを表す、タームと遺伝子の関連付けリストとしてエクスポートした。その後のすべてのネットワークの視覚化と分析では、タームと遺伝子の関連付けネットワークをＧｅｐｈｉグラフ視覚化ソフトウェアにインポートした（その全体が参照により本明細書に援用されるＪａｃｏｍｙ  ｅｔ  ａｌ．，“ＦｏｒｃｅＡｔｌａｓ２，ａ  Ｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓ  Ｇｒａｐｈ  Ｌａｙｏｕｔ  Ａｌｇｏｒｉｔｈｍ  ｆｏｒ  Ｈａｎｄｙ  Ｎｅｔｗｏｒｋ  Ｖｉｓｕａｌｉｚａｔｉｏｎ  Ｄｅｓｉｇｎｅｄ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｇｅｐｈｉ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ，”  ＰＬｏＳ  ＯＮＥ  ９：ｅ９８６７９（２０１４））。基本的なノードの中心性の尺度とノードの次数を計算し、ネットワークをデフォルトパラメータを使用してＦｏｒｃｅ  Ａｔｌａｓレイアウトで配置した。密接に相互接続されたノードモジュールを、ＣＤ１４０ａ由来の場合は１．３、ＣＤ４４由来アノテーションネットワークの場合は２．０のランダム化パラメータ及び解決パラメータを用いて、組込型コミュニティ検出アルゴリズム（その全体が参照により本明細書に援用されるＢｌｏｎｄｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｆａｓｔ  Ｕｎｆｏｌｄｉｎｇ  ｏｆ  Ｃｏｍｍｕｎｉｔｉｅｓ  ｉｎ  Ｌａｒｇｅ  Ｎｅｔｗｏｒｋｓ，”  ａｒＸｉｖ  ａｒＸｉｖ：０８０３．０４７６（２００８））により決定し、それによりコミュニティのグループ化と数の両方を最適化した。
【０１５７】
実施例１− ｍＨＴＴ  ＯＰＣは、グリア系統の進行の転写決定因子を下方制御する
ＨＤの病因におけるグリア転写異常の役割に対処するために、ハンチンチン変異体ｈＥＳＣに由来する二能性ｈＧＰＣによる差次的遺伝子発現を最初に評価した。そのために、ｍＨＴＴ発現胚盤胞に由来するｈＥＳＣの３つの異なる株（ＧＥＮＥＡ１７、ＧＥＮＥＡ１８、及びＧＥＮＥＡ２０；ＧＥＮＥＡ  Ｂｉｏｃｅｌｌｓ）及び２つの対照株（ＧＥＮＥＡ０２及びＧＥＮＥＡ１９）に由来するＧＰＣ（Ｂｒａｄｌｅｙ  ｅｔ  ａｌ．，  “Ｄｅｒｉｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｈｕｎｔｉｎｇｔｏｎ'ｓ  Ｄｉｓｅａｓｅ−Ａｆｆｅｃｔｅｄ  Ｈｕｍａｎ  Ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ  Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌ  Ｌｉｎｅｓ，”  Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌｓ  Ｄｅｖ  ２０：４９５−５０２  （２０１１））を生成し、精製した。前述の方法を使用してｈＥＳＣからＧＰＣを生成し（その全体が参照により本明細書に援用されるＷａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，“ＣＤ１３３／ＣＤ１４０ａ−Ｂａｓｅｄ  Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｄｉｓｔｉｎｃｔ  Ｈｕｍａｎ  Ｍｕｌｔｉｐｏｔｅｎｔ  Ｎｅｕｒａｌ  Ｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒ  Ｃｅｌｌｓ  ａｎｄ  Ｏｌｉｇｏｄｅｎｄｒｏｃｙｔｅ  Ｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒ  Ｃｅｌｌｓ，”  Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌｓ  ａｎｄ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ２２：２１２１−２１３１（２０１３）  、続いてＣＤ１４０ａベースのＦＡＣＳにより、結果として生じるＧＰＣ画分を単離した（＞９９％  ＣＤ１４０ａ＋）（その全体が参照により本明細書に援用されるＳｉｍ  ｅｔ  ａｌ．，“ＣＤ１４０ａ  Ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｓ  ａ  Ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｈｉｇｈｌｙ  Ｍｙｅｌｉｎｏｇｅｎｉｃ，  Ｍｉｇｒａｔｉｏｎ−Ｃｏｍｐｅｔｅｎｔ  ａｎｄ  Ｅｆｆｉｃｉｅｎｔｌｙ  Ｅｎｇｒａｆｔｉｎｇ  Ｈｕｍａｎ  Ｏｌｉｇｏｄｅｎｄｒｏｃｙｔｅ  Ｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒ  Ｃｅｌｌｓ，”  Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ２９：９３４−９４１（２０１１））。重要なことに、対照のうちの１つ（ＧＥＮＥＡ１９；１８  ＣＡＧ）は、ｍＨＴＴ発現株のうちの１つ（ＧＥＮＥＡ２０；４８  ＣＡＧ）の同胞であり；同じ両親から寄贈されたこれらの株は、同胞の女性の双子であった。
【０１５８】
ｍＨＴＴ及び対照ｈＧＰＣは、それぞれ１９０±１６日及び１７４±１４日の平均伝播時間後に安定して増殖するｈＧＰＣとして回収された。フローサイトメトリーにより、５４％±３．４％の正常細胞（ＧＥＮＥＡ０２及びＧＥＮＥＡ１９；ｎ＝１２培養実行）及び４４％±３．３％のハンチンチン変異細胞（ＧＥＮＥＡ１７、１８及び２０；ｎ＝１６）がこれらの時点でＣＤ１４０ａを発現していたことが明らかになった（平均±ＳＥＭ）。次いで、各培養物のＣＤ１４０ａ画分をＦＡＣＳによりほぼ純粋になるまで分離し、Ｉｌｌｕｍｉｎａ  ＨｉＳｅｑ  ２５００シーケンサーを使用してＲＮＡ配列分析を実施し、プールされた対照ｈＥＳＣ  ＧＰＣと比較して３つのＨＤ株由来のｈＧＰＣにおいて深刻な転写調節不全が示された。主成分分析（ＰＣＡ）により、ｍＨＴＴ発現及び対照ｈＧＰＣの明確な分離が示された（図１Ａ）。群として、２倍の変化（ＦＣ）カットオフと１％の偽発見率（ＦＤＲ）を使用して、対照と比較してｍＨＴＴ  ｈＧＰＣにおいて２３９個の遺伝子が上方制御され、５３０個の遺伝子が下方制御された（図１Ｂ）。得られた差次的発現遺伝子のリストをさらに洗練するために、次いでＧＥＮＥＡ２０（ｍＨＴＴ）由来のｈＧＰＣの差次的発現を同胞のＧＥＮＥＡ１９由来の対照と比較し、同胞の比較を全体的な比較に追加し；これは追加のフィルターとして機能し、プールされた対照ｈＧＰＣと比較して、すべてのＨＤ由来ｈＧＰＣ細胞株に由来するｈＧＰＣにおいて６４個の上方制御された遺伝子及び３６５個の下方制御された遺伝子からなる、より厳密に差次的に発現する遺伝子リストが得られた（図１Ｂ及び１Ｃ）。
【０１５９】
この遺伝子セットを使用し、ジーンオントロジー（ＧＯ）由来のアノテーションを用いて機能分析を実施し、これにより、５０個の有意に関連するＧＯアノテーションタームを同定し（生物学的プロセス及び細胞構成要素のＧＯドメインにおけるタームでのボンフェローニ補正ｐ＜０．０１）、これは、４２９個の差次的に調節された遺伝子のうちの１８７個を表していた（図２及び図３Ａ〜３Ｂ）。ネットワーク分析により、これらのアノテーションタームを、それらの関連遺伝子とともに、さらに３つの機能的に関連するモジュールにグループ化し、そのそれぞれを最も有意なアノテーションタームによって特徴付けた（図１Ｄ）。３つのモジュールは、（１）グリア細胞の分化及びミエリン形成、（２）軸索ガイダンス及び軸索新生、ならびにシナプス構造及びシナプスシグナル伝達の調節に関連する遺伝子及び機能を表していた（図１Ｄ）。第１及び第２のモジュールは、密接に相互接続され、また、ＳＯＸ１０、ＳＩＲＴ２、ＭＹＲＦ、ＮＫＸ２．２、ＴＣＦ７Ｌ２、ＯＬＩＧ１、及びＯＬＩＧ２を含む、重要なオリゴデンドロサイト系統転写因子のアレイ、ならびにＴＦ、ＭＢＰ、ＭＡＧ、ＯＭＧ、ＵＧＴ８、及びＦＡ２Ｈを含む、段階調節されるミエリン関連タンパク質を含んでいたが；これらはすべて、ＨＤ  ｈＧＰＣにおいて有意に下方制御された。第３のモジュールは、シナプス伝達の構成要素、特にＳＹＮＤＩＧ１、ＢＣＡＮ、ＮＥＴＯ１、及びＳＮＰＨの調節に関係する遺伝子、ならびにグルタミン酸受容体シグナル伝達タンパク質ＧＲＩＡ２、ＧＲＩＡ４、ＧＲＩＤ１、ＧＲＩＤ２、及びＧＲＩＫ４をコードする遺伝子、ならびにＫＣＮＤ２、ＫＣＮＪ９、ＫＣＮＱ１、及びＫＣＮＳ３によってコードされるカリウムチャネルが含まれ；これらのすべてが有意に下方制御された（図１Ｅ〜１Ｇ）。まとめると、これらのＨＤ調節不全遺伝子とそれらの関連機能は、ｈＧＰＣから成熟オリゴデンドログリアへの分化におけるＨＤ依存的抑制を示唆している。
【０１６０】
実施例２− ｍＨＴＴ  ｈＧＰＣはミエリン形成の転写決定因子を下方制御する
差次的発現分析によって明らかにされたように、オリゴデンドログリア分化及びミエリン生合成の両方に関連する転写因子の重要なセットが、ｍＨＴＴ発現の関数として有意かつ実質的に下方制御された。これらには、初期オリゴデンドログリア調節因子ＮＫＸ２．２、ＯＬＩＧ２、及びＳＯＸ１０が含まれていたが、これらはそれぞれ、ｍＨＴＴを発現するｈＧＰＣにおいて急激に下方制御された（図１Ｅ）。さらに、ｍＨＴＴ抑制オリゴデンドログリア系統転写因子の下流で、ｍＨＴＴ  ｈＧＰＣのミエリン調節因子ＭＹＲＦの発現レベルが急激に低下した。ＭＹＲＦは、ミエリン形成に必要な多数の遺伝子を協調的に活性化し（その全体が参照により本明細書に援用されるＢｕｊａｌｋａ  ｅｔ  ａｌ．，“ＭＹＲＦ  ｉｓ  ａ  Ｍｅｍｂｒａｎｅ−Ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ  Ｆａｃｔｏｒ  ｔｈａｔ  Ａｕｔｏｐｒｏｔｅｏｌｙｔｉｃａｌｌｙ  Ｃｌｅａｖｅｓ  ｔｏ  Ｄｉｒｅｃｔｌｙ  Ａｃｔｉｖａｔｅ  Ｍｙｅｌｉｎ  Ｇｅｎｅｓ，”  ＰＬｏＳ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  １１：ｅ１００１６２５（２０１３））、その産生は、マウスｍＨＴＴトランスジェニックオリゴデンドロサイトを欠損させることが指摘されている（その全体が参照により本明細書に援用されるＨｕａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｍｕｔａｎｔ  Ｈｕｎｔｉｎｇｔｉｎ  Ｄｏｗｎｒｅｇｕｌａｔｅｓ  Ｍｙｅｌｉｎ  Ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ  Ｆａｃｔｏｒ−Ｍｅｄｉａｔｅｄ  Ｍｙｅｌｉｎ  Ｇｅｎｅ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ａｎｄ  Ａｆｆｅｃｔｓ  Ｍａｔｕｒｅ  Ｏｌｉｇｏｄｅｎｄｒｏｃｙｔｅｓ，”  Ｎｅｕｒｏｎ  ８５：１２１２−１２２６（２０１５））。ヒトＥＳＣ由来ｈＧＰＣでは、ＭＹＲＦによって調節されるミエリン形成転写産物ＭＢＰ、ＭＡＧ、ＯＭＧ、ＰＬＰ１、及びＭＯＧは、すべて有意に下方制御された（図１Ｅ）。さらに、同胞ペア（ｍＨＴＴのＧＥＮＥＡ２０と正常ＨＴＴのＧＥＮＥＡ１９）に由来するｈＧＰＣの発現パターンを直接比較した場合、それらの間でのバックグラウンドの遺伝的変異は最小限であり、ここでもミエリン形成に関連する遺伝子のｍＨＴＴ  ｈＧＰＣにおける差次的下方制御が認められた。これらには、ＭＹＲＦ（ｍＨＴＴ  ｈＧＰＣにおいて−４．０４倍低い；ｌｏｇ２スケール）、ＭＡＧ（−６．７８）、ＭＢＰ（５．１４）、ＭＯＧ（−１０．３５）、ＯＭＧ（−５．１５）、及びＰＬＰ１（−２．２２）が含まれ、ＨＤ  ｈＧＰＣにおけるミエリン形成関連転写産物の広範な下方制御が示された。重要なことに、３つの異なるｍＨＴＴ  ｈＥＳＣ株であるＧＥＮＥＡ１７、ＧＥＮＥＡ１８、及びＧＥＮＥＡ２０（そのＨＴＴ遺伝子には、それぞれ４０、４６、及び４８個のＣＡＧリピートが存在している）に由来するｈＧＰＣのＲＮＡ発現パターンを比較すると、ＣＡＧリピートの長さが、これらの同じ分化関連遺伝子及びミエリン形成関連遺伝子の進行性の下方制御と強く相関していたことが認められた（図４Ａ〜４Ｃ）。重要なことに、これらの遺伝子とオントロジーの間には高度な重複があり、ｈＧＰＣではＣＡＧリピート長が長くなると調節不全になり、ＨＤトランスジェニックマウスではＣＡＧリピート長に伴って調節不全になることが明らかとなった（Ｌａｎｇｆｅｌｄｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｉｎｔｅｇｒａｔｅｄ  Ｇｅｎｏｍｉｃｓ  ａｎｄ  Ｐｒｏｔｅｏｍｉｃｓ  Ｄｅｆｉｎｅ  Ｈｕｎｔｉｎｇｔｉｎ  ＣＡＧ  Ｌｅｎｇｔｈ−Ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  Ｎｅｔｗｏｒｋｓ  ｉｎ  Ｍｉｃｅ，”  Ｎａｔ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．１９：６２３−６３３  （２０１６））（図５Ａ〜５Ｄ）。
【０１６１】
次いで、これらのＲＮＡ配列分析ベースの発現データを検証するために、ＴａｑＭａｎ低密度アレイ（ＴＬＤＡ）によるｑＲＴ−ＰＣＲを使用して、ｍＨＴＴと対照ｈＧＰＣ間のこれらの分化関連遺伝子の発現レベルを比較した。ＲＮＡ配列分析において、ｍＨＴＴ  ｈＧＰＣにおいて差次的に調節不全であると同定されたそれらの遺伝子の大部分は、そのように確認された（図６Ａ〜６Ｂ）。これらの遺伝子には、主要なオリゴデンドロサイト系統の転写因子ＭＹＲＦ、ＳＯＸ１０、及びＯＬＩＧ２、ならびにＰＬＰ１、ＭＯＧ、及びＭＢＰを含むそれらの下流のミエリン形成関連標的が含まれていた。この広範なミエリン形成関連遺伝子の下方制御に基づいて、ｍＨＴＴ  ｈＧＰＣによるミエリン生合成と維持の両方における有意な破壊が予測された。
【０１６２】
実施例３− ｍＨＴＴ関連分化停止抑制カリウムチャネル発現
ｍＨｔｔ発現によって最も差次的に調節不全になる、機能的に関連する遺伝子の中には、イオンチャネル及びトランスポーター、特にカリウムチャネルをコードする遺伝子があった。この大規模な遺伝子群には、ヒトゲノムの１１７の既知のメンバーが含まれ（その全体が参照により本明細書に援用されるＰｒｕｉｔｔ  ｅｔ  ａｌ．，“ＮＣＢＩ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  （ＲｅｆＳｅｑ）：Ａ  Ｃｕｒａｔｅｄ  Ｎｏｎ−Ｒｅｄｕｎｄａｎｔ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  Ｄａｔａｂａｓｅ  ｏｆ  Ｇｅｎｏｍｅｓ，Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｓ  ａｎｄ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ，”  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ３５：Ｄ６１−Ｄ６５（２００６））、そのうちの９３個はｈＧＰＣが検出可能に発現していた（データセット全体のうち、少なくとも３つのサンプルにおける生カウント＞５）。これらの中で、９３個の同定されたＫ＋  チャネル及びトランスポーター遺伝子のうちの２５個は、ＦＣ＞２．０のカットオフ及び５％ＦＤＲの閾値を使用して、プールされたｈＥＳＣ  ＧＰＣ対照に比べてＨＤ  ｈＧＰＣにおいて調節不全であり；これらのうちの２３個は、１％ＦＤＲでも優位に調節不全のままであった（図７）。これらの遺伝子は、多数の内向き整流性Ｋ＋チャネルを含んでいたが、その配位抑制により、ＨＤ脳のカリウム緩衝作用の破壊の根拠が示唆された（その全体が参照により本明細書に援用されるＴｏｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，“Ａｓｔｒｏｃｙｔｅ  Ｋｉｒ４．１  Ｉｏｎ  Ｃｈａｎｎｅｌ  Ｄｅｆｉｃｉｔｓ  Ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｅ  ｔｏ  Ｎｅｕｒｏｎａｌ  Ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ  ｉｎ  Ｈｕｎｔｉｎｇｔｏｎ'ｓ  Ｄｉｓｅａｓｅ  Ｍｏｄｅｌ  Ｍｉｃｅ，”  Ｎａｔ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ  １７：６９４−７０３（２０１４））。配位調節不全のＫ＋チャネル遺伝子のこの大きなセット内でさらに精密化し、優先順位を上げるために、追加のフィルタリングとしてＧＥＮＥＡ２０とＧＥＮＥＡ１９の同胞ペアの比較が含まれた。この最も厳密な分析により、４つの遺伝子（ＫＣＮＤ２、ＫＣＮＪ９、ＫＣＮＱ１、及びＫＣＮＳ３）が、プールされた対照と比較してすべてのＨＤ  ｈＧＰＣ株において、及びｍＨＴＴと正常ｈＥＳＣ由来ｈＧＰＣの同胞セット内の両方において、依然として強力かつ有意に下方制御されていた。まとめると、これらのＫ＋チャネル遺伝子の調節不全の発現は、安定した間質性Ｋ＋レベルを維持し、活動電位閾値を決定することにおけるそれらの役割を考えると、特別に重要である。このように、とりわけシナプスＫ＋のグリア再取り込みを仲介する役割を担うｈＧＰＣ  Ｋ＋チャネルのｍＨＴＴ関連抑制は、ＨＤの線条体ニューロンで観察されるニューロンの過興奮に因果関係がある可能性がある（その全体が参照により本明細書に援用されるＢｅｎｒａｉｓｓ  ｅｔ  ａｌ．，  “Ｈｕｍａｎ  Ｇｌｉａ  ｃａｎ  Ｂｏｔｈ  Ｉｎｄｕｃｅ  ａｎｄ  Ｒｅｓｃｕｅ  Ａｓｐｅｃｔｓ  ｏｆ  Ｐｈｅｎｏｔｙｐｅ  ｉｎ  Ｈｕｎｔｉｎｇｔｏｎ  Ｄｉｓｅａｓｅ．Ｎａｔｕｒｅ  Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ  ７：１１７５８（２０１６）；Ｓｈｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  Ｍｕｔａｎｔ  Ｈｕｎｔｉｎｇｔｉｎ  ｉｎ  Ｇｌｉａｌ  Ｃｅｌｌｓ  Ｃｏｎｔｒｉ��ｕｔｅｓ  ｔｏ  Ｎｅｕｒｏｎａｌ  Ｅｘｃｉｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ，”  Ｊ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ  １７１：１００１−１０１２（２００５）；Ｔｏｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，“Ａｓｔｒｏｃｙｔｅ  Ｋｉｒ４．１  Ｉｏｎ  Ｃｈａｎｎｅｌ  Ｄｅｆｉｃｉｔｓ  Ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｅ  ｔｏ  Ｎｅｕｒｏｎａｌ  Ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ  ｉｎ  Ｈｕｎｔｉｎｇｔｏｎ'ｓ  Ｄｉｓｅａｓｅ  Ｍｏｄｅｌ  Ｍｉｃｅ，”  Ｎａｔ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ  １７：６９４−７０３（２０１４））。
【０１６３】
グリア分化とＫ＋チャネル発現の同時調節不全、及び後者の前者への依存性を考慮して、ｍＨＴＴ発現の関数としてそれ自体が調節不全となる共通の上流調節因子が存在し得るかどうかが問われた。Ｉｎｇｅｎｕｉｔｙパスウェイ解析（ＩＰＡ）を使用して、ＴＣＦ７Ｌ２は、ＳＯＸ１０調節性ＫＣＮＢ１などの、Ｋ＋チャネル遺伝子発現を調節すると報告されているいくつかを含む多種多様なグリア分化関連遺伝子の正の調節因子として予測されたことが明らかとなり（その全体が参照により本明細書に援用されるＬｉｕ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｃｈｒｏｍａｔｉｎ  Ｌａｎｄｓｃａｐｅ  Ｄｅｆｉｎｅｄ  ｂｙ  Ｒｅｐｒｅｓｓｉｖｅ  Ｈｉｓｔｏｎｅ  Ｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎ  Ｄｕｒｉｎｇ  Ｏｌｉｇｏｄｅｎｄｒｏｃｙｔｅ  Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ，”  Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ  ３５：３５２−３６５（２０１５））、これは試験したＨＤ株の３つすべてに由来するｈＧＰＣにおいて下方制御された。これらのグリア分化関連遺伝子の中には、それらの対照と比較して、ｍＨＴＴグリアにおいてその発現が著しく欠損している多数の遺伝子があった（図６Ａ）。その上で、ＲＮＡ配列分析データセットを、ＴＣＦ７Ｌ２と、ＴＣＦ７Ｌ２によって調節される転写産物の両方について照会し、ＴＣＦ７Ｌ２が実際に正常なｈＧＰＣと比較してＨＤにおいて差次的に下方制御され、その一方でＴＣＦ７Ｌ２によって調節される遺伝子が同時に下方制御されたことが明らかとなった（図６Ｂ）。ＴＣＦ７Ｌ２は、グリア分化（特にオリゴデンドログリア分化）に強く関与しているため、これらの結果は、ＨＤにおけるグリア分化ブロックの細胞固有の性質をさらに強調するものであった。
【０１６４】
実施例４− ＨＤ  ｈＧＰＣはｉｎ  ｖｉｖｏでミエリン形成障害を示した
ｍＨＴＴ  ｈＧＰＣは、オリゴデンドロサイトの成熟とミエリン形成を象徴する遺伝子発現パターンの獲得に欠陥があるように思われたため、ＨＤ  ＧＰＣを移植したミエリン形成不全マウスが、正常な同胞からＧＰＣを移植したマウスと比較して有髄化能力が不足しているかどうかが問われた。この目的のために、それぞれ一致する培養物中の同胞の雌のＧＥＮＥＡ２０及びＧＥＮＥＡ１９株に由来するｍＨＴＴ発現ｈＧＰＣ及び対照ｈＧＰＣを、記載される両側半球注射による多部位注射プロトコルを使用して、免疫不全ｓｈｉｖｅｒｅｒマウスに新生児移植した。このプロトコルは、正常な多能性幹細胞由来または組織由来ｈＧＰＣを使用した場合に、宿主脳におけるドナー由来ミエリン形成のステレオタイプのパターンと時間経過をもたらす（その全体が参照により本明細書に援用されるＷａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，  “Ｈｕｍａｎ  ｉＰＳＣ−Ｄｅｒｉｖｅｄ  Ｏｌｉｇｏｄｅｎｄｒｏｃｙｔｅ  Ｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒ  Ｃｅｌｌｓ  ｃａｎ  Ｍｙｅｌｉｎａｔｅ  ａｎｄ  Ｒｅｓｃｕｅ  ａ  Ｍｏｕｓｅ  Ｍｏｄｅｌ  ｏｆ  Ｃｏｎｇｅｎｉｔａｌ  Ｈｙｐｏｍｙｅｌｉｎａｔｉｏｎ，”  Ｃｅｌｌ  Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌ  １２：２５２−２６４  （２０１３ｂ）；Ｗｉｎｄｒｅｍ  ｅｔ  ａｌ．，  “Ｎｅｏｎａｔａｌ  Ｃｈｉｍｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｗｉｔｈ  Ｈｕｍａｎ  Ｇｌｉａｌ  Ｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒ  Ｃｅｌｌｓ  ｃａｎ  Ｂｏｔｈ  Ｒｅｍｙｅｌｉｎａｔｅ  ａｎｄ  Ｒｅｓｃｕｅ  ｔｈｅ  Ｏｔｈｅｒｗｉｓｅ  Ｌｅｔｈａｌｌｙ  Ｈｙｐｏｍｙｅｌｉｎａｔｅｄ  Ｓｈｉｖｅｒｅｒ  Ｍｏｕｓｅ，”  Ｃｅｌｌ  Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌ  ２：５５３−５６５  （２００８））。この場合、非同質遺伝子（正常型及び変異型ハンチンチンに対する真の同質遺伝子系統はまだ報告されていない）であるが、この実験に対する同胞系統の使用は、遺伝的多様性を可能な限り最小限に抑えた。これらのペア系統とこのｉｎ  ｖｉｖｏモデルを使用して、移植マウスのオリゴデンドロサイト分化とミエリン形成パターンを、８、１３、及び１８週齢で評価した（ｎ＝３〜５マウス／時点、合計１２匹のＨＤ  ｈＧＰＣ移植マウス及び１０匹の対照ｈＧＰＣ移植マウス）。これらのマウスの脳を凍結切片化し、オリゴデンドログリア抗原とミエリン抗原の両方について免疫標識し、共焦点画像化して、ｉｎ  ｖｉｖｏでのＨＤ及び対照由来ｈＥＳＣ  ｈＧＰＣの分化及びミエリン形成効率を比較した。
【０１６５】
オリゴデンドログリア表現型マーカーとミエリンタンパク質産生の指標の両方の出現が、ＨＤ  ｈＧＰＣ移植動物と比較して対照ｈＧＰＣ移植マウスにおいて有意に早く生じたことが明らかとなった。軸方向に結合したミエリン塩基性タンパク質の発現は、新生児移植後８週間までに対照ｈＧＰＣを使用して明らかであったが、ＨＤ  ｈＧＰＣを移植したマウスは、その時点までに明らかなＭＢＰ免疫標識を示さなかった（図８Ａ及び８Ｄ）。１２〜１３週齢（対照ｈＧＰＣを移植したマウスがロバストなミエリン産生を示した時点）までに、ＨＤ  ＧＰＣの一致したレシピエントにおいて、未成熟オリゴデンドログリアが発現したＭＢＰの散在したアイランドのみが認められた（図８Ｂ及び８Ｅ）。ＨＤ  ＧＰＣを移植した白質の比較的遅延したミエリン形成は、少なくとも４か月間持続し；１８週間までに、対照ＧＰＣ移植マウスが密な脳梁及びカプセル化ミエリン形成を示した一方で、ＭＢＰで定義されたミエリン形成のコンフルエントな領域は、ｍＨＴＴ移植脳においてのみ生じていた（図８Ｃ及び８Ｆ）。したがって、トランスフェリン＋オリゴデンドロサイト（図８Ｈ及び８Ｉ）及びそれらの誘導体、ＭＢＰ＋ミエリン形成オリゴデンドロサイト（図８Ｊ及び８Ｋ）として分化したヒトドナー細胞の画分は、ＧＥＮＥＡ２０  ｍＨＴＴ  ＧＰＣを移植したマウスよりもＧＥＮＥＡ１９対照ＧＰＣを移植したマウスにおいて有意に高かった。同様に、ＭＢＰ免疫染色切片で評価したミエリン輝度は、対照ＧＰＣを移植した脳梁において、ｍＨＴＴ  ＧＰＣを移植した対応物に比べて、両方の時点で有意に高かった（図８Ｌ）。それにもかかわらず、ヒトＧＰＣによる生着の密度も分布も、対照細胞とＨＤ由来細胞との間で有意に異なってはいなかった（図８Ｇ、８Ｍ、８Ｎ）が、これは、ＨＤ  ｈＧＰＣを移植した脳におけるミエリン形成の欠損が、差次的な生着によるものではなく、ドナー細胞のオリゴデンドロサイト分化及びミエリン産生におけるｍＨＴＴ関連障害によるものであることを示している。
【０１６６】
ミエリン形成のｍＨＴＴ関連の遅延は、軸索ミエリン形成の速度と効率に有意な結果をもたらした。個々の脳梁軸索の高解像度共焦点画像化によって脳梁ミエリン形成を分析した場合、ｍＨＴＴ  ｈＧＰＣ移植脳において軸索被鞘が損なわれたことが明らかであった（図９Ａ〜９Ｆ）。１３週及び１８週の両方の時点で、ｍＨＴＴ  ｈＧＰＣキメラ脳は、より少ない有髄軸索を示し（図９Ｇ）；有髄化したこれらの軸索のより大きな割合が、視覚化された軸索の長さに沿って不完全に有髄化していたが、その一方で同定されたＭＢＰ＋ヒトオリゴデンドロサイトあたり、わずかな軸索が被鞘していた（図９Ｈ）。まとめると、これらのデータは、ｍＨＴＴ発現ｈＧＰＣに対してキメラ化されたｓｈｉｖｅｒｅｒマウスが、迅速に、または正常なｈＥＳＣ  ｈＧＰＣを移植したマウスと同様に有髄化することができず、軸索被鞘が不十分な比較的低髄鞘の動物を産生したことを示している。したがって、ｍＨＴＴ  ｈＧＰＣの発現特性によって示唆されるｍＨＴＴ関連分化ブロックは、オリゴデンドロサイト分化能力のそれらの相対的欠損によって反映され、ｉｎ  ｖｉｖｏでの髄鞘形成不全をもたらすように思われる。
【０１６７】
実施例５− ｉｎ  ｖｉｖｏでのミエリン遺伝子発現とミエリン形成は、ＳＯＸ１０及びＭＹＲＦによってレスキューすることができる
ミエリン合成の調節におけるＳＯＸ１０及びＭＹＲＦの優位性（その全体が参照により本明細書に援用されるＢｕｊａｌｋａ  ｅｔ  ａｌ．，“ＭＹＲＦ  ｉｓ  ａ  Ｍｅｍｂｒａｎｅ−Ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ  Ｆａｃｔｏｒ  ｔｈａｔ  Ａｕｔｏｐｒｏｔｅｏｌｙｔｉｃａｌｌｙ  Ｃｌｅａｖｅｓ  ｔｏ  Ｄｉｒｅｃｔｌｙ  Ａｃｔｉｖａｔｅ  Ｍｙｅｌｉｎ  Ｇｅｎｅｓ，”  ＰＬｏＳ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  １１：ｅ１００１６２５（２０１３）；Ｅｍｅｒｙ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｍｙｅｌｉｎ  Ｇｅｎｅ  Ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ  Ｆａｃｔｏｒ  ｉｓ  ａ  Ｃｒｉｔｉｃａｌ  Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌ  Ｒｅｇｕｌａｔｏｒ  Ｒｅｑｕｉｒｅｄ  ｆｏｒ  ＣＮＳ  Ｍｙｅｌｉｎａｔｉｏｎ，”  Ｃｅｌｌ  １３８：１７２−１８５  （２００９）；Ｌｏｐｅｚ−Ａｎｉｄｏ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ  Ｓｏｘ１０  Ｇｅｎｏｍｉｃ  Ｏｃｃｕｐａｎｃｙ  ｉｎ  Ｍｙｅｌｉｎａｔｉｎｇ  Ｇｌｉａ，”  Ｇｌｉａ  ６３：１８９７−１９１４（２０１５））及びミエリン遺伝子発現の末端エフェクターとしてのそれらの役割を考慮すると、データは、ＳＯＸ１０及びＭＹＲＦの転写活性化がＨＤの有髄化の欠損をレスキューするのに十分であり得ることを示唆した。その上で、次に、ｍＨＴＴ発現ｈＧＰＣにおけるＳＯＸ１０及びＭＹＲＦの強制発現が、ＭＡＧ、ＭＢＰ、及びミエリン生合成に関与する他の重要な遺伝子の発現をレスキューしたかどうかが問われた。この目的のために、ＳＯＸ１０及びＭＹＲＦの発現を、両方の遺伝子が構成的ＥＦ１ａプロモーターの制御下に置かれたバイシストロン性プラスミドを使用したプラスミド形質移入を介して、ｍＨＴＴ及び正常対照ｈＥＳＣ由来ｈＧＰＣ（それぞれＧＥＮＥＡ２０及びＧＥＮＥＡ１９）の両方において誘導した。次いで、ｑＰＣＲを使用して、ＳＯＸ１０−ＭＹＲＦ及び対照プラスミドを形質移入した細胞におけるそれらの発現を、ＭＡＧ、ＭＢＰ、ＭＯＧ、ＰＤＧＦＲＡ、ＰＬＰ１、ＴＦ、及びＬＩＮＧＯ１を含む下流のミエリン形成遺伝子の発現と比較した。ＳＯＸ１０−ＭＹＲＦの過剰発現は、形質移入したｍＨＴＴ  ｈＧＰＣにおけるほとんどのミエリン関連遺伝子の発現を実際にレスキューすることが明らかとなった（表１；図１０）。
【０１６８】
これらのデータに基づいて、次に、ＳＯＸ１０及びＭＹＲＦの過剰発現が下流のオリゴデンドロサイトの分化及びミエリン形成をレスキューするのに十分であるかどうかが問われた。この目的のために、ドキシサイクリン調節デュアルベクターレンチウイルス形質導入戦略を開発し、これにより、ドキシサイクリン（ＤＯＸ）によって引き起こされる、ＳＯＸ１０とＭＹＲＦの相互依存的な過剰発現と、ＣＤ４の同時発現により、ＳＯＸ１０−ＭＹＲＦを形質導入したｈＧＰＣのＦＡＣＳベースの免疫分離が可能になった（図１１Ａ）。ｍＨＴＴ発現ｈＧＰＣにおけるＳＯＸ１０とＭＹＲＦの過剰発現の効果を、最初に、１８０日のｉｎ  ｖｉｔｒｏ（ＤＩＶ）ＧＥＮＥＡ２０由来ｈＧＰＣの一致するセットに、ＤＯＸにより調節されるレンチウイルスＳＯＸ１０／ＭＹＲＦを形質導入し、次いで一致する対照培養物を未処理のままとしながら、いくつかの培養物をＤＯＸに曝露することによって評価した。ＤＯＸの非存在下で産生した細胞において、ＳＯＸ１０及びＭＹＲＦの発現は、形質導入していないＧＥＮＥＡ２０由来ｈＧＰＣの発現と異ならなかったことが確認された。ｉｎ  ｖｉｔｒｏでさらに１週間後、系統が制限された、主に有糸分裂後のヒトオリゴデンドロサイトが発現するＯ４によって認識されるオリゴデンドロサイトスルファチドについて細胞を免疫染色した。ＤＯＸの非存在下では、ｍＨＴＴ  ｈＧＰＣはそのまま維持され、検出可能なＯ４を発現しなかった。対照的に、ＳＯＸ１０及びＭＹＲＦ発現の上方制御を伴うＤＯＸ中で産生したｍＨＴＴ  ｈＧＰＣは、オリゴデンドロサイト分化の急激かつ有意な増加を示し、＞１５％がＯ４免疫反応性を発現した（図１１Ｂ〜１１Ｄ）。
【０１６９】
ＳＯＸ１０及びＭＹＲＦ発現の誘導が、ｉｎ  ｖｉｔｒｏでのｍＨＴＴ  ｈＧＰＣｓからのオリゴデンドロサイト分化をレスキューするのに十分であったと思われたため、ＳＯＸ１０とＭＹＲＦの発現がｉｎ  ｖｉｖｏでのミエリン形成をレスキューするのに同様に十分であったかどうかが次に問われた。この目的のために、ＣＤ４発現によってＳＯＸ１０とＭＹＲＦの同時発現が報告されるベクター系を使用して、ＧＥＮＥＡ２０由来のＨＤ  ｈＧＰＣに、上記のようにＤＯＸ調節レンチウイルスＳＯＸ１０／ＭＹＲＦを形質導入し、ＣＤ４で細胞をソーティングし、ＳＯＸ１０／ＭＹＲＦを形質導入したｍＨＴＴ  ｈＧＰＣを新生児ｓｈｉｖｅｒｅｒマウスに形質導入した。９週齢で、移植したマウスのいくつかに、ＳＯＸ１０及びＭＹＲＦ発現を誘発するためにＤＯＸを与え（経口的に、水中に自由に導入させた）、一方、他のマウスにはＤＯＸを与えず、それにより一致する対照として機能させた（図１１Ｅ）。１３週齢（正常ｈＧＰＣが一般的に有髄化を開始する一方で、未処理のｍＨＴＴ  ｈＧＰＣはまだ開始していない時点；図１１Ｆ及び１１Ｇ）において、マウスを殺処分し、それらの脳を切片化し、ＭＢＰについて免疫染色した。ドナー由来ｈＧＰＣのＳＯＸ１０及びＭＹＲＦを誘導させたＤＯＸ（＋）マウスが、生着させた宿主の白質に有意な数のＭＢＰ＋有髄化オリゴデンドロサイトを示したことが明らかとなった。定量的に、ＳＯＸ１０／ＭＹＲＦを形質導入したＤＯＸ調節ＧＥＮＥＡ２０  ＧＰＣを生着させたＤＯＸ（＋）マウスは、ロバストなミエリン形成を示した：ドナー細胞の２８．６％±０．８％（ｎ＝３マウス；平均±ＳＥＭ）が１３週間までにＭＢＰを発現し、一方、同一に生着させたＤＯＸ（−）マウス（ｎ＝６マウス）のドナー細胞は、検出可能なＭＢＰ発現を生じなかった（ｐ＜０．０００１）。比較として、正常なＧＥＮＥＡ１９由来ＧＰＣの１８．１％±２．１％（ｎ＝５）が同じ時点でＭＢＰを発現し、ＳＯＸ１０／ＭＹＲＦを形質導入したＨＤ  ｈＧＰＣが、ＭＢＰで定義されるｉｎ  ｖｉｖｏミエリン形成における正常なｈＧＰＣと少なくとも同程度に効率的であることが示された。
【０１７０】
ＳＯＸ１０／ＭＹＲＦを形質導入したＧＥＮＥＡ２０  ｈＧＰＣを生着させたＤＯＸ（＋）マウスでは、得られたオリゴデンドロサイトが、常在性ｓｈｉｖｅｒｅｒ軸索によるランヴィエ絞輪の形成を誘導するのに十分であることが証明され、それは、結節構造を特徴付けるＣＡＳＰＲ１に隣接するβＩＶ−スペクトリンの典型的なクラスター化を示した（図１１Ｌ及び１１Ｍ）。対照的に、その同じ時点までに、ＤＯＸ（−）対照マウスのドナー細胞は、ＭＢＰ発現を生じなかったが（図１１Ｈ〜１１Ｊ）、類似のドナー細胞が生着したにもかかわらず、明確に定義されたノードは観察されなかった（図１１Ｋ）。これらのデータから、ＳＯＸ１０とＭＹＲＦの強制発現が、ｍＨＴＴ発現ｈＧＰＣによるオリゴデンドロサイトの分化と有髄化の両方をレスキューするのに十分であることが示された。
【０１７１】
実施例７− ｍＨＴＴはｉｎ  ｖｉｖｏでヒトアストログリアの分化を欠損させる
ｈＧＰＣは、星状細胞とオリゴデンドロサイトを生じさせるため、オリゴデンドログリア系統の進行におけるｍＨＴＴ関連の欠損は、星状細胞−オリゴデンドロサイトの運命選択の上流のグリア分化への転写障害を示すＲＮＡ発現データとともに、星状細胞分化への類似の障害を示唆した。その上で、次に、ｍＨＴＴ発現ｈＧＰＣ（ＧＥＮＥＡ２０由来）を新生児期に注射したマウスが、正常ＨＴＴ同胞対照ｈＧＰＣ（ＧＥＮＥＡ１９）を注射したマウスと比較して、ｉｎ  ｖｉｖｏで星状細胞分化に何らかの差異を示すかどうかが問われた。そのために、ミエリン形成に対するＨＤ遺伝子型の影響について以前に調べた同じマウスを使用して、グリア線維性酸性タンパク質（ＧＦＡＰ）で定義された白質星状細胞の成熟に対するその影響を評価した。対照及びＨＤ  ｈＧＰＣを生着させたｓｈｉｖｅｒｅｒの脳を、種特異的抗ヒトＧＦＡＰ抗体を使用して、新生児移植後８、１３、及び１８週間で免疫染色した。
【０１７２】
生着したｈＧＰＣから星状細胞への成熟は、評価したＨＤ（ＧＥＮＥＡ２０）ｈＧＰＣを生着させた脳（ｎ＝合計１２、３つの時点にわたって）において、それらの対照（ＧＥＮＥＡ１９）ｈＧＰＣを生着させた対応物（ｎ＝１０）と比較して、著しく不足していたことがわかった。脳梁と内包の最も迅速かつ重度に生着させた白質区画に焦点を当てると、ＨＤ  ｈＧＰＣによるＧＦＡＰで定義された星状細胞の分化は、対照ＧＰＣのそれと比較して有意に減少し、１８週の観測点までその状態が続いたことが明らかとなった（図１２Ａ〜１２Ｆ）。この観察結果を定量的に検証するために、１３週と１８週の両方で殺処分したマウスの脳をスコアリングした。１３週目に、対照のｈＧＰＣ生着マウスは、顕著なＧＦＡＰ＋星状細胞の成熟を示し、それにより、脳梁のヒトドナー細胞の５．９％±０．５％がＧＦＡＰを発現した（ｎ＝４匹のマウス；スコアリングした合計２，６６９個のドナー細胞のうち、１７０個のＧＦＡＰ＋を含む）；対照的に、ｍＨＴＴ  ＧＰＣを生着させた脳梁において、ヒト細胞の３．３％±０．３％のみがＧＦＡＰ＋であった（ｎ＝５匹のマウス；２，１５３個のスコアリングしたドナー細胞のうち、６０個のＧＦＡＰ＋）（ｐ＝０．０２６）（図１２Ｉ）。１８週目までに、アストロサイト成熟のｍＨＴＴ依存性抑制は顕著なままであった；その時点までに、対照由来細胞の８．５％±１．０％がＧＦＡＰ＋星状細胞表現型を生じていた（ｎ＝３匹のマウス；２，４５２個のスコアリングしたドナー細胞のうち、２０９個のＧＦＡＰ＋）が、ｍＨＴＴを発現したヒトドナー細胞では４．９％±０．８％のみであった（ｎ＝４匹のマウス；３，５２２個のスコアリングしたドナー細胞のうち、１４７個のＧＦＡＰ＋）（ｐ＜０．００５）（図１２Ｉ）。まとめると、これらのデータは、ｍＨＴＴを発現するｈＥＳＣ  ＧＰＣによる星状細胞の分化が、正常のｈＥＳＣ  ＧＰＣと比較して有意に遅延することを示している（Ｆ＝１６．３１［１，１６自由度（ｄｆ）］、２元配置ＡＮＯＶＡ；ｐ＝０．０００９全体）。その結果、星状細胞の発達回路統合と成体機能がＨＤで欠損する可能性があると予想され得る。
【０１７３】
実施例８− ｍＨＴＴ  ＧＰＣ白質星状細胞は異常な線維分布及びドメインを生じる
ｍＨＴＴ  ｈＧＰＣを生着させたマウスで認められた星状細胞分化の減少及び遅延を考慮して、次に、成熟したＨＤの星状細胞によって生じた形態が正常であるかどうか、またはそれらの成熟した構造が、最終的により急速に生じる対照ｈＧＰＣ由来の対応物の構造と異なるかどうかが問われた。肉眼的評価からは、ｍＨＴＴ発現星状細胞と対照星状細胞の成熟星状細胞形態は、ｍＨＴＴを発現するＨＤ由来星状細胞が、一般的に、それらの対照由来対応物の放射相称度を示すことができなかったという点で、異なっていたことが明らかになった（図１２Ｇ及び１２Ｈ）。この観察結果を調査するために、ショール分析を使用して個々の星状細胞の形態の複雑さを評価し；ショール分析は、連続的により離れた半径に配置された同心円を用いた細胞プロセスの共通部分の数に基づいている（その全体が参照により本明細書に援用されるＳｈｏｌｌ，Ｄ．Ａ．，“Ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ  Ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｎｅｕｒｏｎｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｖｉｓｕａｌ  ａｎｄ  Ｍｏｔｏｒ  Ｃｏｒｔｉｃｅｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｃａｔ，”  Ｊ  Ａｎａｔ  ８７：３８７−４０６（１９５３））。１５０ｍｍ断片のｚスタックで抗ヒトＧＦＡＰ免疫染色細胞を画像化し、Ｎｅｕｒｏｌｕｃｉｄａ（ＭＢＦ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）でこれらを再構築することにより、２つの異なる系統のｍＨＴＴ  ｈＥＳＣ  ｈＧＰＣ（ＧＥＮＥＡ１８及びＧＥＮＥＡ  ２０）を生着させたマウスの白質におけるドナー由来星状細胞の線維構造を、２つの対照ｈＥＳＣ系統（Ｃ２７  ｉＰＳＣ及びＧＥＮＥＡ１９  ｈＥＳＣ、後者はＧＥＮＥＡ２０の同胞）に由来するｈＧＰＣを生着させたものと比較した。ショール分析からは、ｍＨＴＴを発現する星状細胞の線維の複雑さが、それらの同胞対照ｈＧＰＣに由来する星状細胞と比較して実質的に減少したことが明らかとなった（図１３Ａ〜１３Ｄ）。この効果は、ＧＥＮＥＡ２０  ｈＥＳＣに由来するｍＨＴＴ星状細胞をそれらの一致するＧＥＮＥＡ１９同胞に由来する正常な星状細胞と比較した場合に特に明白であった（図１２Ｊ〜１２Ｐ）。ｍＨＴＴ  ｈＧＰＣを生着させたキメラのヒト星状細胞は、正常なＧＰＣを生着させたマウスの星状細胞とは有意に異なり、線維ネットワークの複雑さが少なく（図１２Ｊ）、さらに少ないがより長いプロセスを特徴とする（図１２Ｋ〜１２Ｍ）。３次元Ｎｅｕｒｏｌｕｃｉｄａトレーシング（図１２Ｏ及び１２Ｐ）をＦａｎ−ｉｎ動径解析によってさらに評価し、各細胞の線維ドメインがその直接の体積環境を占める程度を評価した場合（その全体が参照により本明細書に援用されるＤａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，  “Ｆｏｒｍｏｔｅｒｏｌ，  Ａ  Ｌｏｎｇ−Ａｃｔｉｎｇ  Ｂｅｔａ２  Ａｄｒｅｎｅｒｇｉｃ  Ａｇｏｎｉｓｔ，  Ｉｍｐｒｏｖｅｓ  Ｃｏｇｎｉｔｉｖｅ  Ｆｕｎｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｐｒｏｍｏｔｅｓ  Ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ  Ｃｏｍｐｌｅｘｉｔｙ  ｉｎ  ａ  Ｍｏｕｓｅ  Ｍｏｄｅｌ  ｏｆ  Ｄｏｗｎ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ，”  Ｂｉｏｌ  Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ  ７５：１７９−１８８  （２０１４））、ｍＨＴＴ星状細胞は、対照由来の星状細胞よりもグリアプロセスによって占有されていない有意により多くの領域を示したことが明らかとなり（図１２Ｎ〜１２Ｐ）、不連続で不完全なドメイン構造が示された。
【０１７４】
星状細胞の形態におけるこれらのＨＤ関連の形態異常に付随する転写をよりよく理解するために、次に、ＨＤ由来と対照由来の星状細胞の遺伝子発現パターンを評価した。そのために、ＣＤ１４０ａで定義されたｈＧＰＣを標準プロトコルに従って生成し、次いで２０ｎｇ／ｍＬのＢＭＰ４を添加した血清含有培地に細胞を移行させることにより、星状細胞を分化させた。次いで、細胞をＣＤ４４に基づいてソーティングし、ＣＤ４４は、脳細胞の中で星状細胞とその付随する前駆細胞によって差次的に発現される（その全体が参照により本明細書に援用されるＣａｉ  ｅｔ  ａｌ．，“ＣＤ４４−Ｐｏｓｉｔｉｖｅ  Ｃｅｌｌｓ  ａｒｅ  Ｃａｎｄｉｄａｔｅｓ  ｆｏｒ  Ａｓｔｒｏｃｙｔｅ  Ｐｒｅｃｕｒｓｏｒ  Ｃｅｌｌｓ  ｉｎ  Ｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇ  Ｍｏｕｓｅ  Ｃｅｒｅｂｅｌｌｕｍ，”  Ｃｅｒｅｂｅｌｌｕｍ  １１：１８１−１９３（２０１２）；Ｌｉｕ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｃｈｒｏｍａｔｉｎ  Ｌａｎｄｓｃａｐｅ  Ｄｅｆｉｎｅｄ  ｂｙ  Ｒｅｐｒｅｓｓｉｖｅ  Ｈｉｓｔｏｎｅ  Ｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎ  Ｄｕｒｉｎｇ  Ｏｌｉｇｏｄｅｎｄｒｏｃｙｔｅ  Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ，”  Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ  ３５：３５２−３６５  （２０１５））。次いで、ＨＤ及び対照由来のＣＤ４４で定義された星状細胞の抽出ＲＮＡに対してＲＮＡ配列解析を実施し、これを、ＧＦＡＰの実質的に均一な発現によって確認した。この分析は、対照由来のＣＤ４４＋星状細胞と比較して、ｍＨＴＴを発現する星状細胞による遺伝子発現の有意差を明らかにした（図１４Ａ〜１４Ｃ）。ネットワーク分析からは、４つの個別のモジュールの差次的発現が明らかになったが、それは（１）シナプス、シナプス後部、及び受容体関連遺伝子；（２）エンドソーム転写産物；（３）デスモソーム及び細胞間結合遺伝子；ならびに細胞外マトリックス成分に関連する機能的オントロジーを含んでいた（図１４Ｄ〜１４Ｈ）。これらのうち、差次的に発現する遺伝子の最大のセットは、シナプス及び受容体の調節に関連するものであり；これらには、ｍＨＴＴを発現する星状細胞において対照と比較していずれも急激に下方制御されたＭＹＬ７及びＭＹＬＫ２、すなわちミオシン軽鎖−７、及びミオシン軽鎖キナーゼ−２を含む、線維の伸長及び運動性を調節する多くの遺伝子が含まれていた（図１４Ｅ）。重要なことに、グリアミオシンとそのキナーゼは、グリア線維の精緻化だけでなく、アストログリアのカルシウムシグナル伝達にも関与している（その全体が参照により本明細書に援用されるＣｏｔｒｉｎａ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｃｙｔｏｓｋｅｌｅｔａｌ  Ａｓｓｅｍｂｌｙ  ａｎｄ  ＡＴＰ  Ｒｅｌｅａｓｅ  Ｒｅｇｕｌａｔｅ  Ａｓｔｒｏｃｙｔｉｃ  Ｃａｌｃｉｕｍ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ，”  Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｏ．１８：８７９４−８８０４（１９９８））。ＨＤの星状細胞におけるそれらの不十分な発現は、ＨＤ星状細胞の異常な形態学的発達に寄与し得る（その全体が参照により本明細書に援用されるＫｈａｋｈ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｕｎｒａｖｅｌｌｉｎｇ  ａｎｄ  Ｅｘｐｌｏｉｔｉｎｇ  Ａｓｔｒｏｃｙｔｅ  Ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ  ｉｎ  Ｈｕｎｔｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｄｉｓｅａｓｅ，”  Ｔｒｅｎｄｓ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．���０：４２２−４３７（２０１７）；Ｏｃｔｅａｕ  ｅｔ  ａｌ．，“Ａｎ  Ｏｐｔｉｃａｌ  Ｎｅｕｒｏｎ−Ａｓｔｒｏｃｙｔｅ  Ｐｒｏｘｉｍｉｔｙ  Ａｓｓａｙ  ａｔ  Ｓｙｎａｐｔｉｃ  Ｄｉｓｔａｎｃｅ  Ｓｃａｌｅｓ，”  Ｎｅｕｒｏｎ  ９８：４９−６６（２０１８））が、その一方でＨＤの脳のグリアシンシチウム内の異常なシグナル伝達を予測し得る（その全体が参照により本明細書に援用されるＪｉａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  Ｃａｌｃｉｕｍ  ａｎｄ  Ｇｌｕｔａｍａｔｅ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  ｉｎ  Ｓｔｒｉａｔａｌ  Ａｓｔｒｏｃｙｔｅｓ  ｆｒｏｍ  Ｈｕｎｔｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｄｉｓｅａｓｅ  Ｍｏｄｅｌ  Ｍｉｃｅ，”  Ｊ．  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．  ３６：３４５３−３４７０（２０１６））。まとめると、これらのデータは、ＨＤが、星状細胞の分化及び機能の発達の欠損、ならびにオリゴデンドロサイトの成熟及び有髄化の障害に関連していることを強く支持するものである。
【０１７５】
実施例の考察
これらの実験は、ＨＤにおける白質の障害が、重要なグリア系統転写因子群をコードするｍＲＮＡが、ｍＨＴＴを発現するｈＧＰＣにおいて特異的に下方制御されるように影響を受けたｈＧＰＣにより、ｍＨＴＴ依存的に分化が遮断される結果として生じることを示唆している。特にオリゴデンドログリア分化のｍＨＴＴ関連阻害は、ＮＫＸ２．２、ＯＬＩＧ２、及びＳＯＸ１０の発現低下によって明らかになり、ＳＯＸ１０調節ミエリン調節因子ＭＹＲＦの発現低下を伴う。これによって有髄化が抑制されるが、これにはＭＡＧ及びＭＢＰなどのミエリン生合成に関連する重要なｍＲＮＡのＭＹＲＦ依存性転写が必要となる（その全体が参照により本明細書に援用されるＢｕｊａｌｋａ  ｅｔ  ａｌ．，“ＭＹＲＦ  ｉｓ  ａ  Ｍｅｍｂｒａｎｅ−Ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ  Ｆａｃｔｏｒ  ｔｈａｔ  Ａｕｔｏｐｒｏｔｅｏｌｙｔｉｃａｌｌｙ  Ｃｌｅａｖｅｓ  ｔｏ  Ｄｉｒｅｃｔｌｙ  Ａｃｔｉｖａｔｅ  Ｍｙｅｌｉｎ  Ｇｅｎｅｓ，”  ＰＬｏＳ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  １１：ｅ１００１６２５（２０１３）；Ｅｍｅｒｙ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｍｙｅｌｉｎ  Ｇｅｎｅ  Ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ  Ｆａｃｔｏｒ  ｉｓ  ａ  Ｃｒｉｔｉｃａｌ  Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌ  Ｒｅｇｕｌａｔｏｒ  Ｒｅｑｕｉｒｅｄ  ｆｏｒ  ＣＮＳ  Ｍｙｅｌｉｎａｔｉｏｎ，”  Ｃｅｌｌ  １３８：１７２−１８５（２００９））。興味深いことに、ＭＹＲＦの下方制御は、特に長いＣＡＧリピート（１５０Ｑ及び２５０Ｑ）を発現するＨＤトランスジェニックマウスの成熟オリゴデンドロサイトでも同様に認められている（その全体が参照により本明細書に援用されるＪｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｅａｒｌｙ  Ｗｈｉｔｅ  Ｍａｔｔｅｒ  Ａｂｎｏｒｍａｌｉｔｉｅｓ，Ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｖｅ  Ｂｒａｉｎ  Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｍｏｔｏｒ  Ｄｅｆｉｃｉｔｓ  ｉｎ  ａ  Ｎｏｖｅｌ  Ｋｎｏｃｋ−ｉｎ  Ｍｏｕｓｅ  Ｍｏｄｅｌ  ｏｆ  Ｈｕｎｔｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｄｉｓｅａｓｅ，”  Ｈｕｍ．Ｍｏｌ．Ｇｅｎｅｔ．２４：２５０８−２５２７（２０１５））。これらのデータは、ヒトでは、グリア分化におけるｍＨＴＴ関連遮断が以前に認識されていたよりも早い段階で発生し、星状細胞及びオリゴデンドロサイトを生成する二能性ｈＧＰＣにおいて明らかであることを示している。このように、ｍＨＴＴはＨＤの両方のグリア系統の発達を有意に阻害し、重要なことに、この発達停止は、ヒトＨＤを代表する４０〜４８ＱのＣＡＧリピート長を発現するヒトＧＰＣにおいて発生することが明らかとなった。
【０１７６】
ＨＤの白質欠損症におけるＮＫＸ２．２、ＯＬＩＧ２、及びＳＯＸ１０のｍＨＴＴ依存的抑制を示唆するこれらの発現データからは、ＳＯＸ１０及びＭＹＲＦの転写を過剰発現または活性化する試みが、この疾患の有髄化の欠損を軽減するのに十分であり得ることが示唆された。これにより、ｍＨＴＴを発現するｈＧＰＣにおけるＳＯＸ１０及びＭＹＲＦの強制発現が、ミエリン生合成に関与する重要な遺伝子の発現をレスキューし、ｉｎ  ｖｉｖｏでのＨＤ由来グリアによる有髄化を回復させたという事実が明らかとなった。このように、ＳＯＸ１０とＭＹＲＦの標的化された活性化または上方制御は、ＨＤにおけるｍＨＴＴを発現するオリゴデンドロサイトの有髄化能力を回復させる手段として役立つ可能性がある。
【０１７７】
ｍＨＴＴに関連するオリゴデンドロサイトの成熟と有髄化の欠損に加えて、星状細胞−オリゴデンドロサイトの運命選択の近位のＮＫＸ２．２及びＯＬＩＧ２ステージのできるだけ早い段階での所与のグリア転写の調節不全から予想されているように、星状細胞の分化も損なわれることが認められる。ＨＤ  ｈＧＰＣのそのような星状細胞の成熟の欠損は、ｍＨＴＴを発現するｈＧＰＣによる星状細胞の分化の遅延が、それぞれ星状細胞のガイダンスに依存する発達上のシナプス形成と回路形成を損なわせる可能性があるという点で、ＨＤ表現型が有意な発達成分を有している可能性があることを示唆している（その全体が参照により本明細書に援用されるＣｌａｒｋｅ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｇｌｉａ  Ｋｅｅｐ  Ｓｙｎａｐｓｅ  Ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ  Ｕｎｄｅｒ  Ｗｒａｐｓ，”  Ｃｅｌｌ  １５４：２６７−２６８（２０１３）；Ｕｌｌｉａｎ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｃｏｎｔｒｏｌ  ｏｆ  Ｓｙｎａｐｓｅ  Ｎｕｍｂｅｒ  ｂｙ  Ｇｌｉａ，”  Ｓｃｉｅｎｃｅ（Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ＮＹ）２９１：６５７−６６１（２００１））。さらに、星状細胞の成熟におけるそのような疾患依存性の遅延は、遅延（そして、局所星状細胞に対するオリゴデンドロサイトの代謝依存性を考えると、最終的にはＨＤの有髄化不全に寄与すると予想され得る（その全体が参照により本明細書に援用されるＡｍａｒａｌ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｍｅｔａｂｏｌｉｃ  ａｓｐｅｃｔｓ  ｏｆ  ｎｅｕｒｏｎ−ｏｌｉｇｏｄｅｎｄｒｏｃｙｔｅ−ａｓｔｒｏｃｙｔｅ  ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ，”  Ｆｒｏｎｔ  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ（Ｌａｕｓａｎｎｅ）４：５４（２０１３））。ＨＤ由来ｈＧＰＣによる星状細胞の成熟のレスキューがシナプスの発達と組織化に対するこれらの影響を軽減し得るかどうかはまだ分からないが；もしそうであるならば、オリゴデンドロサイトの分化のレスキューがＨＤの有髄化の欠損を軽減するのに十分であるように、星状細胞の置換がＨＤのシナプス病理をレスキューするのに十分であり得ると予測され得る。
【０１７８】
ニューラルネットワークの形成とシナプス構造への寄与に加えて、ｈＧＰＣと星状細胞の両方が、成体の間質性イオンの恒常性維持とニューロンの興奮性の調節の両方に密接に関与している。したがって、ｍＨＴＴを発現するｈＧＰＣの最終分化の停止が、グリアカリウムチャネルのいくつかのファミリーの広範な抑制に関連していることに注目することは興味深いことであった。これらには、とりわけＫＣＮＪ８及びＫＣＮＪ９を含むＫＣＮＪファミリーの内向き整流Ｋ＋チャネルが含まれていた。細胞へのカリウムの取り込みに関与する内向き整流Ｋ＋チャネルのこのｍＨＴＴ関連抑制は、シナプス放出されたＫ＋のグリア再取り込みを阻害することにより、ＨＤニューロンの過興奮に寄与し得る（その全体が参照により本明細書に援用されるＳｈｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  Ｍｕｔａｎｔ  Ｈｕｎｔｉｎｇｔｉｎ  ｉｎ  Ｇｌｉａｌ  Ｃｅｌｌｓ  Ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｅｓ  ｔｏ  Ｎｅｕｒｏｎａｌ  Ｅｘｃｉｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ，”  Ｊ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ  １７１：１００１−１０１２（２００５））。その点に関し、Ｋｈａｋｈらは、ＨＤのマウスモデルにおける内向き整流チャネルＫｉｒ４．１（ＫＣＮＪ１０）の星状細胞発現の欠損を報告しており（その全体が参照により本明細書に援用されるＴｏｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，“Ａｓｔｒｏｃｙｔｅ  Ｋｉｒ４．１  Ｉｏｎ  Ｃｈａｎｎｅｌ  Ｄｅｆｉｃｉｔｓ  Ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｅ  ｔｏ  Ｎｅｕｒｏｎａｌ  Ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ  ｉｎ  Ｈｕｎｔｉｎｇｔｏｎ'ｓ  Ｄｉｓｅａｓｅ  Ｍｏｄｅｌ  Ｍｉｃｅ，”  Ｎａｔ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ  １７：６９４−７０３（２０１４））、これは同様に、カリウムチャネル発現及びグリアＫ＋取り込みに対するグリア成熟の破壊の影響を反映している可能性がある。最終星状細胞成熟の前段階で停止したｍＨＴＴ発現ヒトＧＰＣでは、Ｋ＋チャネル転写産物の大規模なセットが協調的に抑制されていると考えられ、このことは、Ｋ＋チャネル遺伝子発現の共有の上流活性化因子の阻害を示唆している。これらのカリウムチャネル遺伝子の上流調節因子はまだ同定されていないが、ｍＨＴＴ依存性の最終グリア分化の抑制は、そうでなければニューロン活性を調節し、保護するであろうグリアカリウム恒常性メカニズムの発達の失敗につながる可能性があると考えることは合理的である。
【０１７９】
まとめると、これらの観察結果は、ＨＤ  ｈＧＰＣによる星状細胞の成熟の破壊が、ＨＤにおける神経回路網の発達と成体挙動の両方に大きな影響を与えると予想される可能性があることを示唆している。重要なことに、これらの発見の結果として、ｍＨＴＴを発現するｈＧＰＣを野生型または遺伝的に修正された対応物に置き換えるだけで、影響を受けたＨＤ脳に対して、機能的な星状細胞とオリゴデンドログリアを回復させ得る。この可能性は、先天性髄鞘形成不全のモデルにおいて、新生児に送達した野生型ｈＧＰＣが疾患型ｈＧＰＣを打ち負かす能力によって最初に示唆され（その全体が参照により本明細書に援用されるＷｉｎｄｒｅｍ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｎｅｏｎａｔａｌ  Ｃｈｉｍｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｗｉｔｈ  Ｈｕｍａｎ  Ｇｌｉａｌ  Ｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒ  Ｃｅｌｌｓ  ｃａｎ  Ｂｏｔｈ  Ｒｅｍｙｅｌｉｎａｔｅ  ａｎｄ  Ｒｅｓｃｕｅ  ｔｈｅ  Ｏｔｈｅｒｗｉｓｅ  Ｌｅｔｈａｌｌｙ  Ｈｙｐｏｍｙｅｌｉｎａｔｅｄ  Ｓｈｉｖｅｒｅｒ  Ｍｏｕｓｅ，”  Ｃｅｌｌ  Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌ  ２：５５３−５６５（２００８））、同様に、新生児グリア置換が、ＨＤトランスジェニックマウスのカリウム恒常性の欠損を修正するのに十分であることが指摘されている（その全体が参照により本明細書に援用されるＢｅｎｒａｉｓｓ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｈｕｍａｎ  Ｇｌｉａ  ｃａｎ  Ｂｏｔｈ  Ｉｎｄｕｃｅ  ａｎｄ  Ｒｅｓｃｕｅ  Ａｓｐｅｃｔｓ  ｏｆ  Ｐｈｅｎｏｔｙｐｅ  ｉｎ  Ｈｕｎｔｉｎｇｔｏｎ  Ｄｉｓｅａｓｅ．Ｎａｔｕｒｅ  Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ  ７：１１７５８（２０１６））。疾患型細胞に対する健常細胞のそのような競争上の優位性が成体のＨＤで生じ得るかどうかはまだ確立されていないが、これが実現可能であることが証明されれば、グリア置換のそのような戦略は、ＨＤにおける疾患改善のための現実的な治療手段を証明し得る。
【０１８０】
上記に開示した変形ならびに他の特徴及び機能、またはそれらの代替物は、多くの他の異なる系または用途に組み込み得ることは認識されたい。様々な現在は予見できないまたは予期しないその代替物、修正、変形、または改善が、その後、当業者によって行われてもよく、それらは以下の特許請求の範囲によって包含されることになることも意図される。
【図１Ａ】
2021528445.tif 000043
【図１Ｂ】
2021528445.tif 000044
【図１Ｃ】
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【図１Ｄ】
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【図１Ｅ】
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【図１Ｆ】
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【図１Ｇ】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図２Ｃ】
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【図２Ｄ】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ−１】
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【図３Ｂ−２】
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【図３Ｂ−３】
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【図４Ａ】
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【図４Ｂ】
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【図４Ｃ】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【図５Ｃ】
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【図５Ｄ】
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【図６】
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【図７】
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【図８−１】
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【図８−２】
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【図８−３】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１−１】
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【図１１−２】
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【図１２−１】
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【図１２−２】
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【図１２−３】
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【図１３−１】
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【図１３−２】
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【図１４Ａ】
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【図１４Ｂ】
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【図１４Ｃ】
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【図１４Ｄ】
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【図１４Ｅ】
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【図１４Ｆ】
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【図１４Ｇ】
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【図１４Ｈ】
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【国際調査報告】
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