(57)【要約】  本発明は、磁気共鳴撮像（ＭＲＩ）において造影剤として使用するために適当な化合物を提供する。本発明の化合物は、同様な既知の化合物と比較して有利な性質を有するマンガン（ＩＩ）錯体である。
2021506901.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉの化合物またはそれらの塩もしくは溶媒和物：
【化１】
2021506901.tif 000036
（式中：
ｎは１から４の整数であり；
Ｒ１は、Ｃ１〜３アルキルまたは−（ＣＨ２）ｎ＋１−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲ２Ｒ３であり；
各Ｘは、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲ２Ｒ３または−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ３であり；
各Ｒ２は水素、Ｃ１〜４アルキルまたはアニオン性置換基であり；
各Ｒ３は、Ｃ１〜４アルキレンを介して任意選択で連結されたアニオン性置換基であり； 
Ｒ４は、ヒドロキシ、ハロ、アミノ、アミド、Ｃ１〜６アルキルおよびＣ１〜６ヒドロキシアルキルを含む群から独立に選択され、
ｍは０〜３である）。
【請求項２】
Ｒ１がＣ１〜３アルキルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ１がメチルである、請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ１がエチルである、請求項２に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ１が−（ＣＨ２）ｎ＋１−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲ２Ｒ３であり、ｎ、Ｒ２およびＲ３は、請求項１で定義された通りである、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
ｎが１である、請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項７】
ｎが２である、請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項８】
ｎが３である、請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項９】
ｎが４である、請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１０】
各Ｘが−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲ２Ｒ３である、請求項１〜９のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１１】
各Ｘが−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ３である、請求項１〜９のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１２】
各アニオン性置換基が、カルボキシレート、スルホネート、ホスフェートおよびホスホネートから選択される群を含む、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１３】
各アニオン性置換基がカルボキシレートを含む、請求項１２に記載の化合物。
【請求項１４】
前記カルボキシレートが、−ＣＨ２−を介してアミド窒素に連結されている、請求項１３に記載の化合物。
【請求項１５】
各アニオン性置換基がスルホネートを含む、請求項１２に記載の化合物。
【請求項１６】
前記スルホネートが、−ＣＨ２−ＣＨ２−を介してアミド窒素に連結されている、請求項１５に記載の化合物。
【請求項１７】
各アニオン性置換基が、テトラゾール、チアゾリジンジオン、ニトロメチルスルホニルフェニル、４−ニトロチオフェノール、ニトロメチルカルボキシフェニル、２，４−ジニトロフェノール、またはマロニトリルである、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１８】
各アニオン性置換基が同じである、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１９】
ｍが０である、請求項１〜１８のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２０】
各アニオン性置換基が、生理学的ｐＨ未満のｐＫａを有する、請求項１〜１９のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２１】
各アニオン性置換基が約７．５未満のｐＫａを有する、請求項１〜１９のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２２】
各アニオン性置換基が約６．０未満のｐＫａを有する、請求項２１に記載の化合物。
【請求項２３】
前記アニオン性置換基の各々が、９０％を超えて、生理学的ｐＨでアニオン性である、請求項１〜２２のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２４】
ラセミ混合物であるかまたはジアステレオマー的に純粋であるかのいずれかである、請求項１〜２３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２５】
ジアステレオマー的に純粋である、請求項１〜２３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２６】
以下の化合物から選択される、請求項１に記載の化合物。
【化２】
2021506901.tif 000037
【請求項２７】
哺乳動物への投与のために適当な形態で、生体適合性担体と一緒に、請求項１〜２６のいずれか一項に記載の式Ｉの化合物を含む医薬組成物。
【請求項２８】
１種または複数の薬学的に許容される賦形剤をさらに含む、請求項２７に記載の医薬組成物。
【請求項２９】
前記薬学的に許容される賦形剤が、緩衝剤、安定剤、抗酸化剤、オスモル濃度調節剤、ｐＨ調節剤、過剰のｃｈｅｌａｎｄ、および生理学的に許容されるイオンの弱い錯体から選択される、請求項２７または請求項２８に記載の医薬組成物。
【請求項３０】
（ｉ）請求項１〜２６のいずれか一項に記載の式Ｉの化合物または請求項２７〜２９のいずれか一項に記載の医薬組成物の、対象への投与；
（ｉｉ）前記化合物が分布した、前記対象または前記対象の部分からの磁気共鳴（ＭＲ）シグナルの検出；
（ｉｉｉ）前記検出されたシグナルからのＭＲ像および／またはＭＲスペクトルの生成
を含む方法。
【請求項３１】
請求項３０に記載の方法で使用するための、請求項１〜２６のいずれか一項に記載の式Ｉの化合物。
【請求項３２】
式ＩＩの化合物とマンガンの適当な供給源との反応を含む、請求項１〜２６のいずれか一項に記載の式Ｉの化合物を製造する方法：
【化３】
2021506901.tif 000038
（式中、Ｘ、Ｒ１、Ｒ４、ｍおよびｎの各々は、請求項１〜２６で様々に定義された通りである）。
【請求項３３】
前記マンガンの適当な供給源は、塩化マンガン（ＩＩ）である、請求項３２に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、磁気共鳴手順における造影剤としてのキレート化合物およびそれらの使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
磁気共鳴撮像（ＭＲＩ）は、身体の領域が選択された原子の核、特に水素の核により可視化される医用画像技法である。ＭＲＩシグナルは、可視化される核の周囲の環境に依存して、それらの縦向きおよび横向き緩和時間は、それぞれＴ１およびＴ２と称される。したがって、可視化される核がプロトンである場合には、ＭＲＩのシグナル強度は、プロトン密度およびプロトンの化学的環境などの要因に依存することとなる。
【０００３】
それらの化学構造中に常磁性金属イオンを含む造影剤は、撮像のコントラストを改善するためにＭＲＩで使用され得る。それらは、緩和時間およびその結果として像におけるコントラストに影響することにより役立つ。常磁性金属イオンＧｄ（ＩＩＩ）を含む造影剤は周知であり、市販のＧｄ（ＩＩＩ）キレートＯｍｎｉｓｃａｎ（商標）（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）、Ｄｏｔａｒｅｍ（商標）（Ｇｕｅｒｂｅｔ）、Ｇａｄａｖｉｓｔ（商標）（Ｂａｙｅｒ）およびＭａｇｎｅｖｉｓｔ（商標）（Ｂａｙｅｒ）を含む。それらは低分子量なので、脈管系に投与されたときに、それらは急速に細胞外区域（すなわち血液および間隙）に分布する。それらは比較的急速に身体から除去される。しかしながら、全てのＧｄ（ＩＩＩ）が、インビボでキレート内に錯体化されたままであるわけではなくて、遊離のＧｄ（ＩＩＩ）イオンが生物学的経路に干渉して毒性を誘発し得ることが知られている。
【０００４】
マンガン（ＩＩ）イオンは、高スピン数および長い電子緩和時間を有する常磁性種であり、Ｍｎ（ＩＩ）のポテンシャルに基づく高緩和度造影剤が文献で報告されている（Toth, E; Advances in Inorganic Chemistry, 2009, 61(09), 63−129）。Ｍｎ（ＩＩ）は、Ｇｄ（ＩＩＩ）より毒性の低い代替としても提案されている。しかしながら、既知のＭｎ（ＩＩ）キレートは、対応するＧｄ（ＩＩＩ）キレートと比較してはるかに安定性が低いことが証明されている。例えば、ＤＯＴＡのＭｎ（ＩＩ）キレート（ＭｎＤＯＴＡ）は、対応するＧｄ（ＩＩＩ）錯体と比較して安定性が数百倍低い（Drahos, B; Inorganic Chemistry, 2012(12), 1975−1986）。
【０００５】
したがって、解決されるべき重要な問題は、効果的な緩和特性を維持しながら、高い安定性を示す新規なマンガンキレートを得ることである。
【０００６】
ある比較的安定なマンガンキレートが、国際公開第２０１１０７３３７１号パンフレットに記載されている。そこに記載された分子設計は、高いキレート安定性および高い緩和度に有利であることを示している。これは、これらの化合物をＭＲＩ造影剤として使用するために非常に適したものにする。国際公開第２０１１０７３３７１号パンフレットの典型的化合物は、以下の構造（この後「Ｍｎプラットフォーム」と称される）を有する。
【０００７】
【化１】
2021506901.tif 000003
しかしながら、Ｍｎ（ＩＩ）キレートにはまだ改善の余地がある。
【発明の概要】
【０００８】
一態様において、本発明は、式Ｉの化合物またはそれらの塩もしくは溶媒和物に関する：
【０００９】
【化２】
2021506901.tif 000004
（式中：
ｎは１から４の整数であり；
Ｒ１はＣ１〜３アルキルまたは−（ＣＨ２）ｎ＋１−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲ２Ｒ３であり；
各Ｘは、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲ２Ｒ３または−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ３であり；
各Ｒ２は、水素、Ｃ１〜４アルキルまたはアニオン性置換基であり；
各Ｒ３は、Ｃ１〜４アルキレンを介して任意選択で連結されたアニオン性置換基であり；および、
Ｒ４は、ヒドロキシ、ハロ、アミノ、アミド、Ｃ１〜６アルキルおよびＣ１〜６ヒドロキシアルキルを含む群から独立に選択され、
ｍは０〜３である）。
【００１０】
別の態様で、本発明は、哺乳動物への投与のために適当な形態で、生体適合性担体と一緒に、本明細書で定義された式Ｉの化合物を含む医薬組成物に関する。
【００１１】
さらなる態様において、本発明は：
（ｉ）本明細書で定義された式Ｉの化合物または医薬組成物の対象への投与；
（ｉｉ）前記化合物が分布した、前記対象または前記対象の部分からの磁気共鳴（ＭＲ）シグナルの検出；
（ｉｉｉ）前記検出されたシグナルからのＭＲ像および／またはＭＲスペクトルの生成
を含む方法を提供する。
【００１２】
さらにさらなる態様において、本発明は、式ＩＩの化合物とマンガンの適当な供給源との反応を含む、本明細書で定義された式Ｉの化合物を製造する方法を提供する：
【００１３】
【化３】
2021506901.tif 000005
（式中、Ｘ、Ｒ１、Ｒ４、ｍおよびｎの各々は、本明細書において式Ｉについて様々に定義された通りである）。
【００１４】
本発明は、生理学的ｐＨで負電荷を維持するＭＲＩ造影剤として有用ないくつかのＭｎキレート構造を記載する。
【００１５】
本発明のＭｎキレートは、既存のＧｄ剤に対する有望な代替物を提示して、有意に改善された安全プロファイルを提供することができる。内在性金属イオンを使用することにより、患者の安全における有意の改善が達成することができ、一方、同時に組織における強いＭＲコントラストを維持することが予測される。
【００１６】
本発明の負に荷電したＭｎキレートは、それらの中性の対応物と比較して変更されたクレアランスプロファイルも提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１７】
【図１】Ｍｎキレート（％）を、１００倍過剰のＺｎＣｌ２の存在下でｐＨ＝４および４０℃における時間の関数として示す図である（円＝Ｍｎプラットフォーム、三角＝Ｍｎキレート１、正方形＝Ｍｎキレート２）。
【図２】Ｍｎキレート（％）を、１００倍過剰のＺｎＣｌ２の存在下でｐＨ＝５および４０℃における時間の関数として示す図である（円＝Ｍｎプラットフォーム、三角＝Ｍｎキレート１および正方形＝Ｍｎキレート２）。
【発明を実施するための形態】
【００１８】
特許請求される本発明の対象事項を、より明確におよび簡潔に記載および指摘するために、本明細書および請求項の全体を通して使用される特定の用語について、下で定義を示す。本明細書における特定の用語のいかなる典型的な具体例も、限定することがない例と考えられるべきである。
【００１９】
用語「を含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」または「を含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」は、本出願全体を通してそれらの従来の意味を有し、薬剤または組成物が、挙げられた必須の特徴または成分を有しなければならないが、それに加えて他のものも存在してもよいことを暗に意味する。用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」は、好ましいサブセットとして、組成物が挙げられた成分を有し、他の特徴または成分が存在しないことを意味する「から本質的になる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ  ｏｆ）」を含む。
【００２０】
本発明による「塩」は、鉱酸、例えば塩酸、臭化水素酸、リン酸、メタリン酸、硝酸および硫酸から誘導された塩など、および有機酸、例えば酒石酸、トリフルオロ酢酸、クエン酸、リンゴ酸、乳酸、フマル酸、安息酸、グリコール酸、グルコン酸、コハク酸、メタンスルホン酸、およびパラ−トルエンスルホン酸から誘導された塩などの生理学的に許容される酸添加塩を含む。
【００２１】
本発明による適当な「溶媒和物」は、エタノール、水、生理食塩水、生理学的緩衝剤およびグリコールから選択される。
【００２２】
用語「アルキル」は、単独または組み合わせで、一般式ＣｎＨ２ｎ＋１を有する直鎖のまたは分岐した鎖状アルキルラジカルを意味する。そのようなラジカルの例は、メチル、エチル、およびイソプロピルを含む。
【００２３】
本明細書における用語「アニオン性置換基」は、８未満のｐＫａを有する１価のラジカルを指す。そのような置換基は、当業者に共通の一般的知識である。用語「ｐＫａ」は、当技術分野におけるその通常の意味を持ち、すなわち酸解離定数（酸性度定数、または酸のイオン化定数としても知られている）を指し、溶液中における酸の強度の定量的測定である。例えば、ｐＫａが８未満の適当なアニオン性置換基の例について、読者はこの関連でＢｏｒｄｗｅｌｌのｐＫａ表を参照されたい：http;//www.chem.wisc.edu/areas/reich/pkatable/。
【００２４】
用語「ヒドロキシ」は、基−ＯＨを指す。
【００２５】
用語「ハロゲン」または「ハロ−」は、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素から選択される置換基を意味する。
【００２６】
本明細書における用語「アミノ」は、Ｒ’およびＲ’’が独立に水素またはアルキルである基−ＮＲ’Ｒ’’を指す。
【００２７】
用語「アミド」は、Ｒ’およびＲ’’が独立に水素またはアルキルである基−Ｃ（Ｏ）ＮＲ’Ｒ’’を指す。
【００２８】
用語「ヒドロキシアルキル」は、ヒドロキシル置換基を含む本明細書で定義されたアルキル基を指す。
【００２９】
式Ｉの化合物の一実施形態において、Ｒ１はＣ１〜３アルキルである。
【００３０】
式Ｉの化合物の一実施形態において、Ｒ１はメチルである。
【００３１】
式Ｉの化合物の一実施形態において、Ｒ１はエチルである。
【００３２】
式Ｉの化合物の一実施形態において、Ｒ１は、−（ＣＨ２）ｎ＋１−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲ２Ｒ３であり、ｎ、Ｒ２およびＲ３は請求項１で定義される。
【００３３】
式Ｉの化合物の一実施形態において、ｎは１である。
【００３４】
式Ｉの化合物の一実施形態において、ｎは２である。
【００３５】
式Ｉの化合物の一実施形態において、ｎは３である。
【００３６】
式Ｉの化合物の一実施形態において、ｎは４である。
【００３７】
式Ｉの化合物の一実施形態において、各Ｘは−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲ２Ｒ３である。
【００３８】
式Ｉの化合物の一実施形態において、各Ｘは−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ３である。
【００３９】
式Ｉの化合物の一実施形態において、各アニオン性置換基は、カルボキシレート、スルホネート、ホスフェートおよびホスホネートから選択される基を含む。
【００４０】
式Ｉの化合物の一実施形態において、各アニオン性置換基はカルボキシレートを含む。
【００４１】
式Ｉの化合物の一実施形態において、前記カルボキシレートは、−ＣＨ２−を介してアミド窒素に連結されている。
【００４２】
式Ｉの化合物の一実施形態において、各アニオン性置換基は、スルホネートを含む。式Ｉの化合物の一実施形態において、前記スルホネートは、−ＣＨ２−ＣＨ２−を介してアミド窒素に連結されている。
【００４３】
式Ｉの化合物の一実施形態において、各アニオン性置換基は、テトラゾール、チアゾリジンジオン、ニトロメチルスルホニルフェニル、４−ニトロチオフェノール、ニトロメチルカルボキシフェニル、２，４−ジニトロフェノール、またはマロニトリルである。
【００４４】
式Ｉの化合物の幾つかの実施形態において、各アニオン性置換基は同じである。
【００４５】
式Ｉの化合物の幾つかの実施形態において、各Ｒ２は同じである。
【００４６】
式Ｉの化合物の幾つかの実施形態において、各Ｒ３は同じである。
【００４７】
式Ｉの化合物の幾つかの実施形態において、各Ｘは同じである。式Ｉの化合物の一実施形態において、ｍは０である。
【００４８】
式Ｉの化合物の一実施形態において、各アニオン性置換基は、生理学的ｐＨ未満のｐＫａを有する。
【００４９】
式Ｉの化合物の一実施形態において、各アニオン性置換基は、約７．５未満のｐＫａを有する。
【００５０】
式Ｉの化合物の一実施形態において、各アニオン性置換基は、約６．０未満のｐＫａを有する。
【００５１】
式Ｉの化合物の一実施形態において、前記アニオン性置換基の各々は、９０％を超えて、生理学的ｐＨでアニオン性である。
【００５２】
一実施形態において、式Ｉの化合物は、ラセミ混合物であるかまたはジアステレオマー的に純粋であるかのいずれかである。
【００５３】
一実施形態において、式Ｉの化合物はジアステレオマー的に純粋である。
【００５４】
用語「カルボキシレート」は、置換基−ＣＯＯ−を指す。
【００５５】
用語「スルホネート」は、置換基−ＳＯ３−を指す。
【００５６】
用語「ホスフェート」は、置換基ＰＯ４３−を指す。
【００５７】
用語「ホスホネート」は、置換基−ＰＯ（ＯＨ）２を指す。
【００５８】
用語「テトラゾール」は、式ＣＨ２Ｎ４の４個の窒素原子および１個の炭素原子の５員環を指す。
【００５９】
用語「チアゾリジンジオン」は、以下の複素環置換基：
【００６０】
【化４】
2021506901.tif 000006
を指す。
【００６１】
用語「ニトロメチルスルホニルフェニル」は、以下の置換基：
【００６２】
【化５】
2021506901.tif 000007
を指す。
【００６３】
用語「４−ニトロチオフェノール」は、以下の置換基：
【００６４】
【化６】
2021506901.tif 000008
を指す。
【００６５】
用語「ニトロメチルカルボキシフェニル」は、以下の置換基：
【００６６】
【化７】
2021506901.tif 000009
を指す。
【００６７】
用語「２，４−ジニトロフェノール」は、以下の置換基：
【００６８】
【化８】
2021506901.tif 000010
を指す。
【００６９】
用語「マロニトリル」は、以下の置換基：
【００７０】
【化９】
2021506901.tif 000011
を指す。
【００７１】
一対のエナンチオマーの等モルの混合物は、本明細書では、「ラセミ混合物」と称される。
【００７２】
用語「エナンチオマー」は、エナンチオピュア化合物、すなわち光学活性分子の２つの鏡像形態の一方を指す。エナンチオマーは、それ故、１つの対掌性のみを有する化合物であり、用語「対掌性」は、対称性の内部平面を欠いて重ね合わせ可能な鏡像を有しない化合物のその性質を指す。最もしばしば化合物における対掌性の原因となる特徴は、不斉炭素原子の存在である。
【００７３】
用語「ジアステレオマー的に純粋な」は、化合物が１種のエナンチオマーを含む場合を指す。
【００７４】
本発明のある実施形態において、式Ｉの各基（本明細書では、「アーム」とも称される）−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ−Ｒ２Ｒ３（すなわち、基が−（ＣＨ２）ｎ＋１−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲ２Ｒ３である場合に、式Ｉそれ自体中におけるかまたはＲ１の部分の場合のように）は、以下のものから選択され得る。
【００７５】
【表１−１】
2021506901.tif 000012
【００７６】
【表１−２】
2021506901.tif 000013
【００７７】
上の表中のｐＫａ値は、ＤＭＳＯ中で見積もられていることが注意されるべきである。水がイオンにとってより良い溶媒であろうという根拠に基づいて、水中のｐＫａ値は、これより低いと予想されることが、当業者により認識されるであろう。
【００７８】
ある実施形態では、式Ｉの化合物は、上のアームの２つを含む（すなわち、Ｒ１がＣ１〜３アルキルである場合）。典型的なそのような化合物は、以下のようである。
【００７９】
【表２】
2021506901.tif 000014
【００８０】
他の実施形態では、式Ｉの化合物は、上のアームの３つを含む（すなわち、Ｒ１が−（ＣＨ２）ｎ＋１−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲ２Ｒ３である場合）。
【００８１】
式Ｉの化合物を得るためには、以下の一般化された手順が、使用され得る、および／または当業者に周知の方法を使用して容易に適合され得る。
【００８２】
【化１０】
2021506901.tif 000015
【００８３】
上のスキームで、Ｘ１は、ＣＨ３、４−炭素エステル、ニトリルまたはＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＨおよびＸであり、Ｒ１〜４、ｍおよびｎは、本明細書で式Ｉについて定義された通りである。
【００８４】
まとめると：
Ａ：２−クロロエチルアミンのトシル化はアジリジンを生ずる（Carrillo, Arkivoc, 2007）。
【００８５】
Ｂ：アミノブタン酸（Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ、カタログ５６−１２−２）のアジリジン化。一実施形態において、メチルアミンのアジリジン化は、アセトニトリルのみの中で進行する）。一実施形態において、このアミノ酸のために、ある種の塩基が使用されてアミンを活性化する。任意選択で酸官能基はエステル、ニトリルまたは他のカルボキシレート等価物として保護することができる。
【００８６】
Ｃ：２，６−ビス（クロロメチル）ピリジン（Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ、カタログ３０９９−２８−３）などの活性化されたピリジンを用いる環化。一実施形態において、このステップは、アセトニトリル中で塩基として炭酸カリウムを用いて行われる。
【００８７】
Ｄ：一実施形態における、濃硫酸を使用する脱トシル化。一実施形態において、このステップは定量的に進行する。
【００８８】
Ｅ：文献（Henig, J., Toth, E., Engelmann, J., Gottschalk, S., & Mayer, H. a.(2010). Inorganic Chemistry, 49(13), 6124−38）に記載された方法に基づく臭素化。
【００８９】
Ｆ：ポリアミンのアルキル化。一実施形態において、このステップは水溶液中で行われる。別の実施形態では、第二級ハロゲン化物が緩慢に反応する場合には（第一級ハロゲン化アルキルは速やかに進行する）、ビス−エステル（Ｅ）を合成して、有機溶媒に切り替えて、反応の速さを改善することが可能である。
【００９０】
Ｇ：ＭｎＣｌ２を使用する錯化。塩基を使用して過剰なＭｎを沈殿させる。
【００９１】
Ｈ：ペプチド試薬を用いてカルボキシレートを活性化する。一実施形態において、これらの試薬は、ＥＤＣＩおよび／またはＨＯＢＴである（欧州特許第２４５７９１４号明細書に記載されている）。適当なアミンとのカップリングで所望の式Ｉの化合物を生ずる。あるいは、遊離の末端アミンは、酸塩化物または活性化されたカルボキシレートとカップリングすることができる。
【００９２】
本発明の式Ｉの化合物は、例えば、現在市販のガドリニウムに基づくキレート造影剤と同様な適応症のためのインビボ造影剤として、使用を見出す。この用途のために、それらは、それ自体で本発明のさらなる態様を形成する医薬組成物として、対象に、適当に投与される。
【００９３】
「医薬組成物」は、本発明の化合物を、生体適合性担体と一緒に、哺乳動物への投与のために適当な形態で含む製剤である。「生体適合性担体」とは、流体、特に液体であり、その中に式Ｉの化合物が懸濁または溶解されて、その結果生じた組成物は、生理学的に許容される、すなわち哺乳動物の身体に毒性または過度の不快感がなく投与され得る（それは、用語「哺乳動物への投与のために適当な」の定義であると理解され得る）。
【００９４】
本発明の医薬組成物は、磁気共鳴（ＭＲ）のコントラスト媒体として、ヒトおよび非ヒト動物の身体の磁気共鳴撮像（ＭＲＩ）に使用するために適当である。
【００９５】
一実施形態において、本発明の医薬組成物は、１種または複数の薬学的に許容される賦形剤を含むこともできる。これらは、最終の組成物の製造、貯蔵または使用に干渉しないことが適当である。
【００９６】
適当な薬学的に許容される賦形剤の例は、緩衝剤、安定剤、抗酸化剤、オスモル濃度調節剤、ｐＨ調節剤、過剰のｃｈｅｌａｎｄおよび生理学的に許容されるイオンの弱い錯体を含むが、これらに限定されない。これらのおよび他の適当な賦形剤は、当業者に周知であると思われ、例えば、国際公開第１９９０００３８０４号パンフレット、欧州特許出願公開第０４６３６４４号明細書、欧州特許出願公開第０２５８６１６号明細書および米国特許第５８７６６９５号明細書にさらに記載されており、その内容は参照により本明細書に組み込まれる。一実施形態において、本発明の医薬組成物は、非経口投与、例えば注射のために適当な形態にある。本発明による医薬組成物は、それ故、完全に当技術分野内の様式で、生理学的に許容される賦形剤を使用して投与するために製剤化され得る。例えば、式Ｉの化合物は、任意選択で、薬学的に許容される賦形剤を添加されて、水性媒体中に懸濁または溶解されてもよく、生じた溶液または懸濁液は、次に滅菌される。
【００９７】
適当な緩衝剤の例はトロメタミン塩酸塩であるが、これに限定されない。
【００９８】
用語「過剰のｃｈｅｌａｎｄ」とは、遊離の常磁性イオン（マンガン）を除去することができるが、欧州特許出願公開第２９８８７５６号明細書に記載された本発明の錯体内に保持された常磁性イオン（マンガン）は除去しない任意の化合物と定義される。少量はヒトの健康にとって必須であるが、遊離のマンガンイオンに対する過剰な曝露は、パーキンソン病と類似の症状で「マンガン中毒」として知られている神経変性性障害を生ずることもある。しかしながら、造影剤として、Ｍｎ、ならびに他の金属にとって基本的な論点は、それらのキレート化の安定性にある。キレート化の安定性は、インビボにおける遊離の金属イオンの放出の可能性を反映する重要な性質である。常磁性キレートの製剤中における過剰のｃｈｅｌａｎｄの量と動物モデルにおいて蓄積された常磁性金属の量との間には相関があることが知られている（Sieber 2008 J Mag Res Imaging; 27(5): 955-62）。それ故、別の実施形態において、注射後における製剤からのＭｎの放出を低下させるかまたは防止するＭｎスカベンジャーとして作用し得る過剰のｃｈｅｌａｎｄの量が選択される。遊離のｃｈｅｌａｎｄの最適量は、適当な物理化学的性質（すなわち、粘度、溶解度およびオスモル濃度）および多すぎる遊離のｃｈｅｌａｎｄの場合における亜鉛の枯渇などの毒性の効果を回避する医薬組成物を生ずるであろう。米国特許第５８７６６９５号明細書は、特に過剰の特に遊離のＤＴＰＡの線状キレートを記載しており、これは、本発明の医薬組成物で使用するために適当な過剰のｃｈｅｌａｎｄの例であるが、これらに限定されない。この製剤化戦略は、Ｍａｇｎｅｖｉｓｔ（商標）、Ｖａｓｏｖｉｓｔ（商標）またはＰｒｉｍｏｖｉｓｔ（商標）などの製品のために使用されている。国際公開第２００９１０３７４４号パンフレットは、非常に小過剰の前記キレートおよびゼロ濃度の遊離のランタニドを有する、精密な量の遊離のキレートの添加に基づく同様な製剤戦略を記載している。
【００９９】
生理学的に許容されるイオンは、一実施形態において、カルシウムまたはナトリウム塩、例えば、塩化カルシウム、アスコルビン酸カルシウム、グルコン酸カルシウムまたは乳酸カルシウムなどを含む、生理学的に許容されるイオンから選択することができる。
【０１００】
非経口的に投与可能な形態は、滅菌されて、生理学的に許容されない薬剤を含まず、投与時における刺激または他の有害な効果を最小にする低オスモル濃度を有するべきであり、したがって、医薬組成物は、等張であるかまたは僅かに高張であるべきである。適当な媒体の例は、非経口溶液を投与するために常套的に使用される水性媒体、例えば、塩化ナトリウム注射液、リンゲル注射液、デキストロース注射液、デキストロースおよび塩化ナトリウム注射液、乳酸添加リンゲル注射液、およびRemington's Pharmaceutical Sciences, 22nd Edition (2006 Lippincott Williams & Wilkins)および国民医薬品集（The National Formulary）(https://books.google.com/books?id=O3qixPEMwssC&q=THE+NATIONAL+FORMULARY&dq=THE+NATIONAL+FORMULARY&hl=en&sa=X&ved=0CC8Q6AEwAGoVChMImfPHrdTqyAIVJfNyCh1RJw_E)に記載されたものなどの他の溶液を含むが、これらに限定されない。
【０１０１】
本発明の医薬組成物が非経口的に、すなわち注射により投与されるために、その調製は、有機溶媒の除去、生体適合性緩衝剤および任意の任意選択の賦形剤または緩衝剤などのさらなる成分の添加を含むステップをさらに含む。非経口投与のために、医薬組成物が滅菌されて非発熱性であることを確実にするステップも採用される必要がある。
【０１０２】
別の態様で、本発明は、ＭＲ像および／またはＭＲスペクトルの生成において、本明細書で定義された式Ｉの化合物の投与を含む方法を提供する。
【０１０３】
本発明の関係で適当と考えられる投与の方法および対象を、本明細書において上で医薬組成物と関連して説明した。式Ｉの化合物の投与は、好ましくは非経口的に、および最も好ましくは静脈内で行われる。静脈内経路は、対象の身体全体にわたって化合物を送達する最も効率的な手段を代表する。さらに、静脈内投与は、実質的な物理的介入または実質的な健康リスクを表さない。本発明の式Ｉの化合物は、好ましくは、上で定義された本発明の医薬組成物として投与される。本発明の方法は、本発明の化合物が予め投与された対象で行われるステップ（ｉｉ）〜（ｉｉｉ）を含むと理解することもできる。一実施形態において、該医薬組成物は、ＭＲ撮像（ＭＲＩ）の方法におけるコントラストを強化するために適当な量で投与される。ＭＲＩの方法についてのさらなる詳細について、読者は、例えば、"Magnetic Resonance Imaging: Physical and Biological Principles" (4th Edition 2015 Elsevier, Stewart Carlyle Bushong & Geoffrey Clarke, Eds.)中のChapter 27 "Contrast Agents and Magnetic Resonance Imaging"または"Contrast Agents I: Magnetic Resonance Imaging" (2002 Springer-Verlang, Werner Krause, Ed.）で教示されている当技術分野において共通の一般的知識を参照されたい。
【０１０４】
本発明の方法は、健常な対象における、またはあるいは、生物学的マーカーの異常な発現を伴う病理学的状態を有することが知られているかまたは疑われる対象における生物学的マーカーまたは過程を研究するために使用することもできる。病理学的状態を有することが知られているかまたは疑われる対象を撮像するために使用される場合、それは前記状態を診断するための方法で効用を有する。
【０１０５】
本発明の方法の「検出」ステップは、前記シグナルに敏感な検出器によって式Ｉの化合物により放出されたシグナルの検出を包含する。この検出ステップは、シグナルデータの取得と理解することもできる。
【０１０６】
本発明の方法の「発生」ステップは、取得されたシグナルデータに再構成アルゴリズムを適用してデータセットを生じさせるコンピューターにより行われる。次にこのデータセットが操作されて、シグナルの位置および／または量を示す１種または複数の像および／または１種または複数のスペクトルを生ずる。
【０１０７】
本発明の「対象」は、ヒトまたは動物の任意の対象であることができる。一実施形態において、本発明の対象は哺乳類である。一実施形態において、前記対象は、インビボの、完全な哺乳動物の身体である。別の実施形態において、本発明の対象はヒトである。
【０１０８】
この文書化された記載は、本発明を開示するために最良の様式を含む例を使用しており、任意の当業者が、任意のデバイスまたは系を作製および使用することおよび任意の組み込まれた方法を実施することを含む、本発明を実行することを可能にすることもできる。本発明の特許にされ得る範囲は、請求項により規定されており、当技術分野における当業者が思い浮かぶ他の例を含むこともある。そのような他の例は、それらが請求項の文字通りの言語と異ならない構造的要素を有するならば、またはそれらが、請求項の文字通りの言語と本質的でない相違を有する等価の構造的要素を含むならば、請求項の範囲内であることが意図されている。本文中で言及された全ての特許および特許出願は、引用により、それらの全体で本明細書に、あたかもそれらが個々に組み込まれたかのように組み込まれる。
【実施例】
【０１０９】
実施例の簡単な説明
実施例１は、典型的な本発明の化合物、Ｍｎキレート１を合成するための方法を記載する。
実施例２は、先行技術化合物、Ｍｎプラットフォームを合成するための方法を記載する。
実施例３は、いくつかのＭｎキレート化合物の緩和度ｒ１およびｒ２を測定するために使用された方法を記載する。
実施例４は、いくつかのＭｎキレート化合物とＺｎとのトランスメタル化を評価する方法を記載する。
実施例５は、実施例６の体内分布の検討で使用するためのＭｎキレート化合物の５４Ｍｎで標識されたバージョンを調製するために使用された方法を記載する。
【０１１０】
実施例で使用された略記号のリスト
ＡｃＮ      アセトニトリル
ｄ          日（複数を含む）
ＤＭＳＯ    ジメチルスルホキシド
ＥｔＯＡｃ  酢酸エチル
ＥＳＩ      エレクトロスプレーイオン化
ｈ          時間（複数を含む）
ＬＣＭＳ    質量スペクトル検出を備えた液体クロマトグラフィー
ＬＯＤ      検出限界
ＭＴＢＥ    メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル
ＭｅＣＮ    アセトニトリル
ＭｅＯＨ    メタノール
ＮＭＲ      核磁気共鳴
ＰＴＦＥ    ポリ（テトラフルオロエタン）
ｒｃｆ      相対遠心力
ＴＨＦ      テトラヒドロフラン
ＵＰＬＣ    超高速液体クロマトグラフィー
ｗｔ％      重量パーセント
【０１１１】
[実施例１]
Ｍｎキレート１の合成
実施例１（ｉ）：Ｎ，Ｎ’−（（メチルアザンジイル）ビス（エタン−２，１−ジイル））ビス（４−メチルベンゼンスルホンアミド）の合成
【０１１２】
【化１１】
2021506901.tif 000016
磁性撹拌棒を備えた１Ｌの丸底フラスコに、Ｎ−トシルアジリジン（４９ｇ、２４８ミリモル）およびＡｃＮ（４５０ｍＬ）を装入した。４１％メチルアミン水溶液（１２ｍＬ、１２１ミリモル）を加えて周囲温度で３６時間撹拌した。Ｎ−トシルアジリジンの第２のアリコート（１．７ｇ、８．６２ミリモル）を加えて、周囲温度で追加の４８時間撹拌した。溶媒を真空で除去して粗残留物をＥｔＯＨから再結晶して４５ｇ（８７％）の所望の生成物を白色固体として得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-D6, δ) 7.68 (4H, m), 7.36 (6H, m), 2.75 (4H, t), 2.38 (6H, s), 2.22 (4H, t), 1.93 (3H, s).
【０１１３】
実施例１（ｉｉ）：保護された環状２アームキレートの合成
【０１１４】
【化１２】
2021506901.tif 000017
還流凝縮器および機械的撹拌機を備えた１２Ｌの３つ口丸底フラスコに、Ｎ，Ｎ’−（（メチルアザンジイル）ビス（エタン−２，１−ジイル））ビス（４−メチルベンゼンスルホンアミド）（９３ｇ、２１８．５ミリモル）およびＡｃＮ（８．３Ｌ）を装入した。２，６−ビス（クロロメチル）ピリジン（３８．５ｇ、２１８．５ミリモル）を加えて生じた溶液を８０℃で１６時間加熱した。反応混合物を周囲温度に冷却して、溶媒を、結晶化が始まるまで真空で除去した。生じた結晶を真空濾過により捕集して８６．９ｇ（７５％）の所望の生成物を白色固体として得た（ＥＳＩ：ｍ／ｚ＝５３０（Ｍ＋Ｈ＋））。
【０１１５】
実施例１（ｉｉｉ）：脱保護された２アーム環状キレートの合成
【０１１６】
【化１３】
2021506901.tif 000018
機械的撹拌機を備えた１Ｌの３つ口丸底フラスコに、保護された環状２アームキレート（１５０ｇ、２８４ミリモル）および濃硫酸（２５０ｍＬ、４．６９ｍｏｌ）を装入して１００℃で１５時間加熱した。溶液を氷上に注いで、水中５０ｗｔ％ＮａＯＨを添加してｐＨを７．４に調節した結果、白色固体が形成された。ＡｃＮ（２００ｍＬ）を白色固体に加えて真空濾過により除去した。濾液を蒸発させて乾燥し、褐色の発泡体を得た。発泡体を水（２００ｍＬ）に溶解して、水酸化物形態にあるＡｍｂｅｒｌｉｔｅ  Ａ２６樹脂を用いて精製し、６１ｇ（９８％）の所望の生成物を黄褐色の固体として得た。1H NMR (400 MHz, CD3CN, δ) 7.56 (1H, m), 7.03 (2H, m), 3.76 (4H, s), 2.47 (4H, m), 2.19 (3H, s), 1.95 (4H, s).
【０１１７】
実施例１（ｉｖ）：保護された２アームＣ５キレートの合成
【０１１８】
【化１４】
2021506901.tif 000019
磁性撹拌棒を備えた５００ｍＬの丸底フラスコに、脱保護された２アーム環状キレート（２０．０ｇ、９０．８ミリモル；実施例１（ｉｉｉ））およびＡｃＮ（１６０ｍＬ）を装入した。ジイソプロピルエチルアミン（３８．７ｍＬ、２１７ミリモル）およびジメチル２−ブロモペンタンジオエート（４７．７ｇ、１９９．７ミリモル）を加えて、生じた溶液を６５℃で２０時間撹拌した。ジイソプロピルエチルアミン（９．７５ｍＬ、５４．６ミリモル）およびジメチル２−ブロモペンタンジオエート（１１．８ｇ、４９．４ミリモル）を加えて生じた溶液を６５℃で追加の１９時間撹拌した。溶媒を真空で除去すると赤色の油が残った。次に油を水（３００ｍＬ）に溶解してＥｔＯＡｃ（３００ｍＬ）で洗浄した。次にＥｔＯＡｃ層を水で抽出して（２×５０ｍＬ）、最初の水性層と合わせて水を真空で除去すると赤色の油が残り、それをさらに精製せずに使用した。
【０１１９】
実施例１（ｖ）：Ｍｎ２アームＣ５キレートの合成
【０１２０】
【化１５】
2021506901.tif 000020
磁性撹拌棒を備えた１Ｌの丸底フラスコに、保護されたＭｎ２アームＣ５キレート（４８．７ｇ、９０．８ミリモル）および水（４５０ｍＬ）を装入した。水酸化ナトリウム（２９．１ｇ、７２６ミリモル）を加えて周囲温度で２時間撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（２５０ｍＬ）で洗浄して層を分離した。水性層を再びＥｔＯＡｃ（２×１００ｍＬ）で洗浄して、水性層を捕集した。塩化マンガン四水和物（１９．６ｇ、９９ミリモル）を上記水溶液に加えた。ｐＨを６Ｍ  ＮａＯＨで７．１に調節して、周囲温度で１７時間および次に９０℃で２．５時間撹拌した。周囲温度に冷却した後、ｐＨを５０ｗｔ％ＮａＯＨ水溶液で１０．１に調節すると、微細な褐色沈殿が形成された。沈殿を、３０００ｒｃｆで２０分間の遠心分離により除去して、上清を捕集して真空で蒸発させて乾燥した。残留物にＭｅＯＨ（１２７ｍＬ）を加えて４０℃で１．５時間粉砕した。不溶の白色固体を３０００ｒｃｆで３０分間の遠心分離により除去した。上清を真空で蒸発させて乾燥するとオフホワイトの固体が生じ、それをＣ１８シリカゲル（水中３％ＡｃＮ）で精製して、３６．８ｇ（７５％）の所望の生成物をオフホワイトの固体として得た（ＥＳＩ：ｍ／ｚ＝５３４（Ｍ＋Ｈ＋））。
【０１２１】
実施例１（ｖｉ）：Ｍｎキレート１の合成
【０１２２】
【化１６】
2021506901.tif 000021
磁性撹拌棒を備えた２５ｍＬの２口丸底フラスコに、タウリン（０．２１７ｇ、１．７６ミリモル）および水（８．７ｍＬ）を装入した。生じた溶液のｐＨを、１．０Ｍ水酸化ナトリウム水溶液を使用して７に調節した。その後、Ｍｎ２アームＣ５キレート（０．５０３ｇ、０．８３ミリモル）を、続いてＥＤＣＩ−ＨＣｌ（０．３７４ｇ、８０．９８ミリモル）およびＨＯＢｔ水和物（０．０５ｇ、０．３５ミリモル）を加えた。周囲温度で１８時間撹拌しながら、必要なときに１．０Ｍ  ＨＣｌまたは１．０Ｍ  ＮａＯＨを添加して、ｐＨを６に維持した。反応溶液を真空で蒸発させて乾燥し、粗生成物をＣ１８シリカゲル（水中５％ＡｃＮから水中２０％ＡｃＮへ）で精製して、０．３３ｇ（５３％）の所望の生成物を無色のガラス状物として得た（ＥＳＩ：ｍ／ｚ＝７４８（Ｍ＋Ｈ＋））。
【０１２３】
[実施例２]
Ｍｎキレート２の合成
実施例２（ｉ）：メチル−２−ブロモ−６−（２，２，２−トリフルオロアセトアミド）ヘキサノエートの合成
【０１２４】
【化１７】
2021506901.tif 000022
Ｎ−ε−トリフルオロアセトアミド−Ｌ−リジン（２５ｇ）および臭化ナトリウム（３７．２ｇ）を、内部熱電対、機械的撹拌機、および粉体漏斗を備えたジャケット付きの３つ口反応容器に加えた。その後、固体を水（６９ｍＬ）およびＨＢｒ水溶液（２０．９ｍＬ、８．９Ｍ）に溶解した。粉体漏斗を除去して滴下漏斗に１６．５ｍＬの水に溶解しておいた亜硝酸ナトリウム（１２．８ｇ）を装入した。窒素導入口を備えた滴下漏斗を反応容器に加えた。反応の排ガスを亜硫酸ナトリウムの溶液に通した後、発煙フードに排出した。反応混合物を＜０℃に冷却して、次に亜硝酸ナトリウム溶液を、内部の反応温度が３℃を超えることがないような速度で、反応混合物にゆっくり添加した。滴下漏斗を除去して、濃硫酸（５．５ｍＬ）を予めロードしておいた別の滴下漏斗を反応容器に取り付けた。硫酸を、反応混合物に、内部の反応温度が５℃を超えないような速度で加えた。この添加に続いて、反応混合物を、Ｎ２で勢いよく曝気して溶解されているＢｒ２を除去した。２０分間室温で曝気した後、曝気を中止して、反応混合物を、８０ｍＬのメチル−ｔｅｒｔ−ブチルエーテル（ＭＴＢＥ）に分配した。混合物を急速に５分間撹拌して、次に相分離するに任せた。有機層を捕集して、水性層をＭＴＢＥの２つの追加の７０ｍＬのポーションで抽出した。合わせた有機層を、数ポーションの５％Ｎａ２ＳＯ３溶液で、殆ど無色になるまで洗浄して、次にその後塩水（１００ｍＬ）で洗浄して、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過して減圧下で濃縮して淡黄色の油を得て、それを高真空下で終夜さらに乾燥した。乾燥された材料をメタノール（３５０ｍＬ）に溶解してｐ−ＴｓＯＨ一水和物（０．３５ｇ）を添加した。混合物を６５℃で窒素下に、終夜加熱した。この時間の後、加熱を中止して反応混合物を室温に冷却するに任せた。反応混合物を減圧下で濃縮して、黄色の油を得て、その後それを、ＳｉＯ２（３３０ｇカラム、カラム体積の１２倍を超える５→５０％ＥｔＯＡｃ−ヘキサン）でフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。単離された生成物は２０．３ｇ（６２％）の殆ど無色の油であった。ＬＣＭＳ：ｔｒ＝３．７２分、（Ｍ−Ｈ）−  ３１８．３２０（カラム：Ｗａｔｅｒｓ  Ａｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣ  ＢＥＨ  Ｓｈｉｅｌｄ  ＲＰ１８、１．７μｍ、２．１×７５ｍｍ；チャンネルＡ：水中０．１％ギ酸；チャンネルＢ：ＭｅＣＮ中０．１％ギ酸；流量：１．０ｍＬ／分；プログラム：０．０〜０．５分、９８：２Ａ：Ｂ；０．５〜９．０分、９８：２Ａ：Ｂ→２:９８Ａ：Ｂ；９．０〜９．５分、２：９８Ａ：Ｂ；グラジエント：線形）
【０１２５】
実施例２（ｉｉ）：ビス−［４，１０］−（２−（メチル−６−（２，２，２−トリフルオロアセトアミド）ヘキサノエート））−ピラミン
【０１２６】
【化１８】
2021506901.tif 000023
脱保護された２アーム環状キレート（１．８３ｇ；実施例１（ｉｉｉ））を入れてあるフラスコに、無水ＭｅＣＮ（１７．１ｍＬ）を、続いてジイソプロピルエチルアミン（３．６ｍＬ）を加えて、その後メチル−２−ブロモ−６−（２，２，２−トリフルオロアセトアミド）ヘキサノエート（５．８７ｇ）を加えた。６５℃に維持された油浴中に、反応容器を１８時間入れておいた。この時間の後、３ｍＬのＭｅＣＮに溶解された追加の量のジイソプロピルエチルアミン（１．５ｍＬ）およびメチル−２−ブロモ−６−（２，２，２−トリフルオロアセトアミド）ヘキサノエート（２．９５ｇ）を反応混合物に加えた。反応混合物を、６５℃の油浴中で追加の１８時間撹拌を続けたままにした。この時間の後、反応混合物を減圧下で濃縮して、生じた残留物をＥｔＯＡｃ（４０ｍＬ）で寄せ集めて塩水（３０ｍＬ）で洗浄した。洗浄水溶液を２回分の追加のＥｔＯＡｃの２０ｍＬのポーションで逆抽出して、合わせた有機抽出物を乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過して、減圧下で濃縮した。残留物を水（２４ｍＬ）に溶解して穏やかに加熱した（６５℃の水浴）。混合物を水浴から取り出して、短時間で冷却し、次にジエチルエーテル（１０ｍＬ）を混合物に加えた。混合物を激しく振って、その後分液漏斗に移した。相を分離して、水性層をジエチルエーテルの２回分の追加の５ｍＬポーションで抽出した。その後、飽和塩化ナトリウム溶液（２４ｍＬ）を水性層に加えてから、水性層を３ポーションのＥｔＯＡｃ（各１５ｍＬ）で抽出した。合わせたＥｔＯＡｃ抽出物を乾燥して（Ｎａ２ＳＯ４）濾過し、減圧下で濃縮して５．７５ｇ（９８％）の生成物を油として得た。ＬＣＭＳ：ｔｒ＝６．８４分、（Ｍ＋Ｈ）＋＝６９９（カラム：Ｗａｔｅｒｓ  ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｓｈｉｅｌｄ  ＲＰ１８  ２．５μｍ  ４．６×５０ｍｍ；チャンネルＡ：水中０．１％ギ酸；チャンネルＢ：ＭｅＣＮ中の０．１％ギ酸；流量：１．０ｍＬ／分；プログラム：０．０〜１．０分、９８：２Ａ：Ｂ；１．０〜１２．０分、９８：２Ａ：Ｂ→０：１００Ａ：Ｂ；１２．０〜１６．０分、０：１００Ａ：Ｂ；グラジエント：線形）
【０１２７】
実施例２（ｉｉｉ）：ビス−［４，１０］−（２−（６−アンモニウム−カリウムヘキサノエート））−ピラミンビストリフルオロアセテートの合成
【０１２８】
【化１９】
2021506901.tif 000024
出発原料のビス−［４，１０］−（２−（メチル−６−（２，２，２−トリフルオロアセトアミド）ヘキサノエート））−ピラミン（８．９ｇ）を、ＫＯＨ水溶液（２７．１ｇ）の２ミリモル／ｇ溶液に加えて、４０℃の水浴中で１時間撹拌したままにした。この時間の後、メタノール（１０ｍＬ）を反応混合物に加えて可溶化を助け、反応混合物を室温で終夜撹拌し続けるままにした。反応混合物のｐＨを、６Ｍ  ＨＣｌで７に調節して、溶媒を減圧下で除去すると、カラメル色の半固体が生じた。残留物を、５０ｍＬの２ポーションの２−プロパノールで共蒸発させて、その後メタノール（２５ｍＬ）を加えて粉砕し、濾過して、固体を追加の５ｍＬの２ポーションのメタノールで洗浄した。濾液を減圧下で濃縮し、残留物を高真空下でさらに乾燥して、桃色の発泡体９．３ｇ（９３％）を得た。ＬＣＭＳ：ｔｒ＝４．９９分、（Ｍ＋Ｈ）＋＝４７９；（Ｍ−Ｈ）−４７７（カラム：Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｚｏｒｂａｘ  ＳＢ−Ａｑ、３×１００ｍｍ、３．５μｍ；チャンネルＡ：水中１０ｍＭのギ酸アンモニウム（ｐＨ６．４）；チャンネルＢ：ＭｅＣＮ；流量：１．０ｍＬ／分；プログラム：０．０〜１０．０分、１００：０Ａ：Ｂ→７０：３０Ａ：Ｂ；１０．０〜１０．５分、７０：３０Ａ：Ｂ→０：１００Ａ：Ｂ；１０．５〜１５．０分、０：１００Ａ：Ｂ；グラジエント：線形）。
【０１２９】
実施例２（ｉｖ）：（２Ｒ，３Ｒ）−２，３−ジアセトキシ−４−モルホリノ−４−オキソブタン酸の合成
【０１３０】
【化２０】
2021506901.tif 000025
（＋）−ジアセチル−Ｌ−酒石酸無水物（２．０ｇ）をＥｔＯＡｃ（４６ｍＬ）に溶解して、モルホリン（Ｘ）（０．８０ｍＬ）を加えた。混合物を封じて室温で１８時間撹拌したままにした。反応混合物を減圧下で濃縮すると、殆ど無色の発泡体が生じ、それを高真空でさらに乾燥した。反応収率は２．８５ｇであった（定量的）。ＬＣＭＳ：ｔｒ＝１．５５分、（Ｍ＋Ｈ）＋＝３０４（カラム：Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｚｏｒｂａｘ  ＳＢ−Ａｑ、３×１００ｍｍ、３．５μｍ；チャンネルＡ：水中１０ｍＭのギ酸アンモニウム（ｐＨ６．４）；チャンネルＢ：ＭｅＣＮ；流量：１．０ｍＬ／分；プログラム：０．０〜１０．０分、１００：０Ａ：Ｂ→７０：３０Ａ：Ｂ；１０．０〜１０．５分、７０：３０Ａ：Ｂ→０：１００Ａ：Ｂ；１０．５〜１５．０分、０：１００Ａ：Ｂ；グラジエント：線形）。
【０１３１】
実施例２（ｖ）：（２Ｒ，３Ｒ）−１−（（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ）−４−モルホリノ−１，４−ジオキソブタン−２，３−ジイルジアセテートの合成
【０１３２】
【化２１】
2021506901.tif 000026
（２Ｒ，３Ｒ）−２，３−ジアセトキシ−４−モルホリノ−４−オキソブタン酸（６．９３ｇ）のＥｔｏＡｃ（８０ｍＬ）中の溶液に、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（２．３０ｇ）を加えた。生じた溶液を０〜５℃に冷却した。ジシクロヘキシルカルボジイミド（４．７２ｇ）を、反応混合物に１ポーションで加え、続いて追加の１１ｍＬのＥｔＯＡｃを加えた。反応混合物を終夜室温に温まるに任せた。この時間の間に、反応が進んで均一な淡黄色溶液から無色の粘い懸濁液になった。反応混合物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で希釈して、粘い混合物を４０℃の水浴中で１時間撹拌した。この時間の後、温かい懸濁液を、０．４５μｍのＰＴＦＥフィルターを通して濾過し、固体を数ポーションのＥｔＯＡｃで洗浄した。固体を捕集して、ＥｔＯＡｃ（４００ｍＬ）に懸濁して、５０℃の水浴中で２時間加熱した。混合物をもう一度０．４５μｍのＰＴＦＥフィルターを通して濾過し、固体を数ポーションのＥｔＯＡｃで洗浄した。無色の濾液を減圧下で濃縮して、所望の生成物を得た：５．４９ｇ（６０％）。1H NMR (CDCl3) δ 6.00 (d. J = 3.0 Hz, 1H), δ 5.92 (d. J = 3.1 Hz, 1H), δ 3.81-3.47 (m., 8H), δ 2.85 (s., 4H), δ 2.22 (s., 3H), δ 2.20 (s., 3H).
【０１３３】
実施例２（ｖｉ）：キレート２の合成
【０１３４】
【化２２】
2021506901.tif 000027
（２Ｒ，３Ｒ）−１−（（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ）−４−モルホリノ−１，４−ジオキソブタン−２，３−ジイルジアセテートを、７０ｍＬのＭｅＣＮに４０℃で懸濁して、混合物を撹拌し、（２Ｒ，３Ｒ）−１−（（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ）−４−モルホリノ−１，４−ジオキソブタン−２，３−ジイルジアセテートを溶解するように努めた（（２Ｒ，３Ｒ）−１−（（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ）−４−モルホリノ−１，４−ジオキソブタン−２，３−ジイルジアセテートを殆ど完全に溶解するために、殆ど６０分かかった）。別の容器に、７５ｍＬの水中で、脱保護された２アーム環状キレート（４．４ｇ；実施例１（ｉｉｉ））の溶液を調製して、この溶液に、２．８７ｇの固体の重炭酸カリウムを加えた。混合物のｐＨは８．０であった。（２Ｒ，３Ｒ）−１−（（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ）−４−モルホリノ−１，４−ジオキソブタン−２，３−ジイルジアセテートのＭｅＣＮ中の溶液を滴下漏斗に移して、脱保護された２アーム環状キレートを含有する水性混合物にゆっくり加えた。反応混合物の温度は、室温の水浴を使用することにより維持した。大部分のＸを添加した後、反応混合物のｐＨは７．４であった。任意の残留する未溶解のＸをＭｅＣＮに懸濁して、反応混合物に直接加えた。２時間撹拌した後、反応混合物のｐＨは７．８で安定しており、反応混合物を、そのまま室温で７２時間撹拌し続けた。所定の時間の後、反応混合物を減圧下で濃縮して１２．１ｇの粗残留物を得た。残留物を１：１メタノール−水（１００ｍＬ）で寄せ集めた。混合物に炭酸カリウムを（７．９４ｇ）室温で加えた。この添加の後、混合物のｐＨは１２．２であった。反応混合物を室温で１８時間撹拌し続けた。この時間の後、反応混合物を減圧下で濃縮した。本発明者らは、生じた残留物にメタノール（５０ｍＬ）を加えて、懸濁液を数分間撹拌した後、０．４５μｍのＰＴＦＥフィルターに通して濾過した。捕集された固体を１０ｍＬの３ポーションのメタノールで洗浄して、次に合わせたメタノール濾液を減圧下で濃縮して、生じた残留物を高真空下に１６時間置いた。単離された残留物を２０ｍＬの１：１ＭｅＣＮ−Ｈ２Ｏ中に懸濁し、濾過して、濾液を６ｍＬのポーションで、ＲｅｄｉＳｅｐ  Ｒｆ  Ｇｏｌｄ  Ｃ１８Ａｑで逆相クロマトグラフィーにより繰り返して精製した（２７５ｇのカラム、カラム体積の２倍を超える１００％水）。２本のピークがカラム（２６５ｎｍ）から溶離して、後で溶離するピークを捕集して濃縮し、所望の生成物を黄色固体として得た：５．０６ｇ（７０％）。ＬＣＭＳ：ｔｒ＝２．４３分。（Ｍ＋Ｈ）＋＝７４３；（Ｍ−Ｈ）−７４１（カラム：Ｗａｔｅｒｓ  Ａｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣ  ＢＥＨ  Ｓｈｉｅｌｄ  ＲＰ１８  １．７μｍ、２．１×７５ｍｍ；チャンネルＡ：水中０．１％ギ酸；チャンネルＢ：ＭｅＣＮ中０．１％ギ酸；流量：０．８ｍＬ／分；プログラム：０．０〜０．５分、９８：２Ａ：Ｂ；０．５〜９．０分、９８：２Ａ：Ｂ→２：９８Ａ：Ｂ；グラジエント：線形）。
【０１３５】
実施例２（ｖｉｉ）：キレート２の代替的合成
【０１３６】
【化２３】
2021506901.tif 000028
出発原料のビス−［４，１０］−（２−（６−アンモニウム−カリウムヘキサノエート））−ピラミンビストリフルオロアセテート（１．０ｇ）を氷酢酸（５ｍＬ）に溶解する。固体の（３Ｒ，４Ｒ）−２，５−ジオキソテトラヒドロフラン−３，４−ジイルジアセテート（１．０ｇ）を加えて、混合物を４０℃で１８時間撹拌したままにする。所定の時間の後、酢酸を減圧下でトルエンとの共蒸発により除去する（３×５０ｍＬ）。生じた残留物を、１０ｍＬの１:１ＭｅＯＨ−Ｈ２Ｏに溶解して、水酸化カリウム（１．４ｇ）を加える。加水分解反応の進行は、ＨＰＬＣ−ＭＳによりモニターして、必要なときには追加のＫＯＨを加える。完結したら、反応混合物をＨＣｌ水溶液でｐＨ７．０に中和して、溶媒を減圧下で除去する。生じた残留物に、メタノール（３×１ｍＬ）を加えて粉砕して濾過する。濾液を減圧下で濃縮して、必要なときには、逆相Ｃ１８クロマトグラフィーにより精製を達成する。
【０１３７】
実施例２（ｖｉｉｉ）：Ｍｎキレート２の合成
【０１３８】
【化２４】
2021506901.tif 000029
出発原料のキレート２（２．９８ｇ）を水１６ｍＬに溶解した。溶液のｐＨを、濃ＨＣｌを注意深く添加することにより８．２に調節した。この時に、ＭｎＣｌ２・４Ｈ２Ｏ（１．１９ｇ）を反応混合物に加えると、混合物のｐＨは３．４に低下した。反応混合物のｐＨを２．７ＭのＫＯＨ水溶液の添加により６．５に調節した。反応混合物を、室温で３時間撹拌したままにした。この時間の後、反応混合物のｐＨを２．７Ｍ  ＫＯＨ水溶液の添加により１０に調節した。褐色の混合物を１時間撹拌して、次に全混合物を、０．４５μｍのＰＴＦＥフィルターに通して濾過した。濾液を減圧下で濃縮して、高真空下で１８時間さらに乾燥した。残留物を、１０ｍＬの水に溶解して、２バッチで、ＲｅｄｉＳｅｐ  Ｒｆ  Ｇｏｌｄ  Ｃ１８Ａｑで逆相クロマトグラフィーにより繰り返して精製した（２７５ｇのカラム；カラム体積の２倍を超える１００％水、次に、カラム体積の２倍を超える０％→５％ＭｅＣＮ−水、次にカラム体積の２倍の５％ＭｅＣＮ−水を保った）。所望の生成物は、カラム体積の４倍〜５倍で溶離した。所望の生成物を含有する分画を捕集して濃縮し、高真空下でさらに乾燥した。生成物は淡黄色の固体であった：１．３９ｇ（４３％）ＬＣＭＳ：ｔｒ＝２．８７分。（Ｍ＋Ｈ）＋＝７９６；（Ｍ−Ｈ）−＝７９４（カラム：Ｗａｔｅｒｓ  Ａｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣ  ＢＥＨ  Ｐｈｅｎｙｌ、１．７μｍ、２．１×７５ｍｍ；チャンネルＡ：２５ｍＭの酢酸アンモニウム水溶液；チャンネルＢ：ＭｅＣＮ；流量：１．０ｍＬ／分；プログラム：０．０〜５．０分、９５：５Ａ：Ｂ→８０：２０Ａ：Ｂ；５．０〜１０．０分、２０：８０Ａ：Ｂ→５：９５Ａ：Ｂ；１０．０〜１１．０分、５：９５Ａ：Ｂ；グラジエント：線形）。
【０１３９】
[実施例３]
Ｍｎプラットフォーム
実施例３（ｉ）：Ｎ，Ｎ’−（（メチルアザンジイル）ビス（エタン−２，１−ジイル））ビス（４−メチルベンゼンスルホンアミド）の合成
【０１４０】
【化２５】
2021506901.tif 000030
磁性撹拌棒を備えた１Ｌの丸底フラスコに、Ｎ−トシルアジリジン（４９ｇ、２４８ミリモル）およびＡｃＮ（４５０ｍＬ）を装入した。４１％水性メチルアミン（１２ｍＬ、１２１ミリモル）を加えて周囲温度で３６時間撹拌した。Ｎ−トシルアジリジン（１．７ｇ、８．６２ミリモル）の第２のアリコートを加えて周囲温度で追加の４８時間撹拌した。溶媒を真空で除去して、粗残留物をＥｔＯＨから再結晶して４５ｇ（８７％）の所望の生成物を白色固体として得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-D6, δ) 7.68 (4H, m), 7.36 (6H, m), 2.75 (4H, t), 2.38 (6H, s), 2.22 (4H, t), 1.93 (3H, s).
【０１４１】
実施例３（ｉｉ）：保護された環状２アームキレートの合成
【０１４２】
【化２６】
2021506901.tif 000031
還流凝縮器および機械的撹拌機を備えた１２Ｌの３つ口丸底フラスコに、Ｎ，Ｎ’−（（メチルアザンジイル）ビス（エタン−２，１−ジイル））ビス（４−メチルベンゼンスルホンアミド（９３ｇ、２１８．５ミリモル）およびＡｃＮ（８．３Ｌ）を装入した。２，６−ビス（クロロメチル）ピリジン（３８．５ｇ、２１８．５ミリモル）を加えて、生じた溶液を８０℃で１６時間加熱した。反応混合物を周囲温度に冷却して、結晶化が始まるまで溶媒を真空で除去した。生じた結晶を真空濾過により捕集して、８６．９ｇ（７５％）の所望の生成物を白色固体として得た（ＥＳＩ：ｍ／ｚ＝５３０（Ｍ＋Ｈ＋））。
【０１４３】
実施例３（ｉｉｉ）：保護されたＭｎ０−アームキレートの合成
【０１４４】
【化２７】
2021506901.tif 000032
磁性撹拌棒および還流凝縮器を備えた１００ｍＬの３つ口丸底フラスコに、保護された環状２アームキレート（４．５１ｇ、８．５３ミリモル）および濃硫酸（１８．０ｍＬ）を装入して、１００℃で１８時間加熱した。反応混合物を周囲温度に冷却して氷浴中に入れてから、５０％ＮａＯＨ水溶液でｐＨを９．９に調節した。生じた懸濁液を、２５０ｍＬの３つ口丸底フラスコに再び移して、無水炭酸カリウム（１１．７８ｇ、８５．２ミリモル）を加え、続いてＡｃＮ（２５ｍＬ）およびｔ−ブチルブロモアセテート（６．６４ｇ、３４．０ミリモル）を加えて、反応混合物を７０℃で３時間加熱した。反応混合物を周囲温度に冷却して、固体を真空濾過により除去した。濾液をＡｃＮ（３×５０ｍＬ）で抽出して、有機層を蒸発させて乾燥すると、暗褐色の油が生じ、それをＣ１８シリカゲル（１００％水から水中１００％ＡｃＮへ）で精製して、１．２８ｇ（３３％）の所望の生成物をオフホワイトの固体として得た。1H NMR (400 MHz, CD3CN, δ) 7.67 (1H, m), 7.12 (2H, m), 5.14 (2H, bs), 3.95 (4H, m), 3.44 (4H, m), 3.28 (6H, m), 3.16 (2H, m), 2.78 (3H, s), 1.42 (18H, s).
【０１４５】
実施例３（ｉｖ）：脱保護されたＭｎ０−アームキレートの合成
【０１４６】
【化２８】
2021506901.tif 000033
磁性撹拌棒および還流凝縮器を備えた１００ｍＬの３つ口丸底フラスコに、保護されたＭｎ０−アームキレート（１．２８ｇ、２．８５ミリモル）、ＡｃＮ（８．４ｍＬ）およびＴＨＦ（２１ｍＬ）を装入した。８８％ギ酸水溶液（２９．１ｍＬ、５５６ミリモル）を加えて、生じた溶液を６５℃で４時間加熱した。８８％ギ酸水溶液（２９．１ｍＬ、５５６ミリモル）の第２のアリコートを加えて、加熱を追加の９時間継続した。溶媒を真空で除去すると、黄色の油が生じ、それをさらに精製せずに使用した。1H NMR (400 MHz, CD3OD, δ) 7.74 (1H, m), 7.20 (2H, m), 4.07 (4H, m), 3.65 (4H, m), 2.91 (3H, s), 2.99 (4H, m), 1.92 (4H, m).
【０１４７】
実施例３（ｖ）：Ｍｎプラットフォームの合成
【０１４８】
【化２９】
2021506901.tif 000034
磁性撹拌棒を備えた２５０ｍＬの丸底フラスコに、脱保護されたＭｎ０−アームキレート（０．９５９ｇ、２．８５ミリモル）および塩化マンガン（ＩＩ）四水和物（１．１１９ｇ、５．６５ミリモル）を装入した。必要なときには、１．０Ｍ  ＮａＯＨおよび１．０Ｍ  ＨＣｌでｐＨを７．４に調節して、生じた溶液を周囲温度で１５．５時間撹拌した。次に、飽和炭酸ナトリウム水溶液でｐＨを１０に調節して、生じたオフホワイトの沈殿を真空濾過により除去した。濾液を濃縮して真空で乾燥し、Ｃ１８シリカゲル（１００％水から水中１０％ＡｃＮへ）で精製して、０．５１１ｇ（２ステップを通じて４６％）の所望の生成物を淡黄色固体として得た（ＥＳＩ：ｍ／ｚ＝３９０（Ｍ＋））。
【０１４９】
[実施例４]
ｒ１およびｒ２緩和度を測定する一般的方法
マンガンを含有するキレートを、水に５から０ｍＭ  Ｍｎの範囲の濃度で溶解した。次に、緩和時間Ｔ１およびＴ２を、Ｂｒuｋｅｒ  ｍｑ６０  ｒｅｌａｘｏｍｅｔｅｒを６０ＭＨｚおよび４０℃で使用して測定した。Ｍｎ濃度の関数として１／Ｔ１または１／Ｔ２の線形回帰（全ての場合にＲ２＞０．９９）は、それぞれｒ１またはｒ２の値を与えた。
【０１５０】
【表３】
2021506901.tif 000035
【０１５１】
表１中の値は水における緩和度である。ｒ１値は、ＭＲスキャナーにおいてキレートのＴ１（または正）コントラストを発生する能力を表し、一方、ｒ２値は、ＭＲスキャナーにおいてキレートのＴ２（または負）コントラストを発生する能力を表す。
【０１５２】
[実施例５]
Ｚｎとのトランスメタル化を評価する方法
Ｍｎキレートを、２００ｍＭのＺｎＣｌ２および１５ｍＭのギ酸アンモニウムを含有する水溶液に、ｐＨ＝４（図１）または５（図２）のいずれかで溶解した。生じた溶液を混合して４０℃でインキュベートして、アリコートを周期的にＨＰＬＣ−ＭＳ分析した。ＭｎおよびＺｎ含有キレートを、ＭＳにより同定して、２６５ｎｍにおける積分により測定された、溶液中に残存するＭｎ含有キレートのパーセントを、時間の関数としてプロットした。
【０１５３】
より遅いＺｎとのトランスメタル化（時間の関数としてより高いＭｎキレート（％））は、より安定なキレートと解釈した。
【図１】
2021506901.tif 000039
【図２】
2021506901.tif 000040
【国際調査報告】
2021506901.tif 000041
2021506901.tif 000042