(57)【要約】  本発明は、式Iの化合物を調製する新規方法に関する。診断用組成物、並びに例えば、ポジトロン放出断層撮影(PET)による画像化を使用することによって、タウ凝集体に関連する障害及び異常、例えばアルツハイマー病(AD)及び他のタウオパチーの選択的検出におけるそれらの使用もまた開示される。
2021512064.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Iの化合物
【化１】
2021512064.tif 000034
を調製する方法であって、
A)式IIの化合物
【化２】
2021512064.tif 000035
(式中、Xは、H又はPGであり、
LGは、脱離基であり、
PGは、アミン保護基である)
を18Fフッ素化薬と反応させる工程、及び
B)任意選択で、XがPGである場合、保護基PGを切断する工程、及び
C)得られた式Iの化合物を、エタノール及び水を含む移動相を使用する高速液体クロマトグラフィー(HPLC)にかける工程
を含む、方法。
【請求項２】
XがPGであり、工程Bが存在せず、保護基PGが工程Aにおいて切断される、請求項1に記載の方法。
【請求項３】
XがPGであり、保護基PGが工程Bにおいて切断される、請求項1に記載の方法。
【請求項４】
移動相中のエタノールの水に対する比が、約5/95v/v〜約80/20v/vである、請求項1から3のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
移動相のpHが、約0〜約8、好ましくは約1〜約3である、請求項1から4のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
移動相が、アルカリ金属リン酸二水素、ジアルカリ金属リン酸水素、トリアルカリ金属リン酸塩、アルカリ金属酢酸塩、アルカリ金属ギ酸塩及びモノ/ジ/トリアルカリ金属クエン酸塩から好ましくは選択される緩衝液を更に含む、請求項1から5のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
高速液体クロマトグラフィー(HPLC)が、約50〜約400bar、好ましくは約50〜約250barの圧力下で行われる、請求項1から6のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
工程A、任意選択の工程B及び工程Cが、自動化合成機で実施される自動化方法である、請求項1から7のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
高速液体クロマトグラフィー(HPLC)により、式Iの化合物を含む画分が得られ、この画分が、工程D)滅菌濾過にかけられる、請求項1から8のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
工程Cの後に、式Iの化合物の固相抽出を含まず、好ましくは、工程Cの前又は後に式Iの化合物の固相抽出を含まない、請求項1から9のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
式Iの化合物が、工程Cの高速液体クロマトグラフィー(HPLC)の後にクロマトグラフィーにかけられず、好ましくは、式Iの化合物が、工程Cの高速液体クロマトグラフィー(HPLC)以外のクロマトグラフィーにかけられない、請求項1から10のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
請求項1から12のいずれか一項に記載の方法によって得ることができる式Iの化合物
【化３】
2021512064.tif 000036
及び任意選択で診断用に許容される担体、希釈剤、アジュバント又は賦形剤を含む診断用組成物。
【請求項１３】
診断に使用するための、請求項12に記載の組成物。
【請求項１４】
タウ凝集体の画像化に使用するための、特に、タウ凝集体のポジトロン放出断層撮影による画像化に使用するための、請求項12に記載の組成物。
【請求項１５】
障害が、アルツハイマー病(AD)、家族性AD、クロイツフェルト-ヤコブ病、パンチドランカー、ダウン症候群、ゲルストマン-シュトロイスラー-シャインカー病、封入体筋炎、プリオンタンパク質脳アミロイド血管症、外傷性脳損傷(TBI)、筋萎縮性側索硬化症、グアムのパーキンソニズム痴呆複合、神経原線維変化を伴う非グアム人運動ニューロン疾患、嗜銀顆粒性疾患、大脳皮質基底核変性症(CBD)、石灰化を伴うびまん性神経原線維変化、第17染色体に関連するパーキンソニズムを伴う前頭側頭型認知症、ハラーフォルデン-シュパッツ病、多系統萎縮症、ニーマン-ピック病C型、淡蒼球橋黒質変性症、ピック病(PiD)、進行性皮質下グリオーシス、進行性核上性麻痺(PSP)、亜急性硬化性全脳炎、もつれのみの認知症、脳炎後パーキンソニズム、筋緊張性ジストロフィー、タウ全脳炎、アストロサイトに関連するAD、特定のプリオン病(タウを伴うGSS)、LRRK2における突然変異、慢性外傷性脳炎、家族性英国型認知症、家族性デンマーク型認知症、前頭側頭葉変性症、グアドループ島パーキンソニズム、脳の鉄蓄積を伴う神経変性、SLC9A6関連精神遅滞、小球体グリア含有物を伴う白質タウオパチー、外傷性ストレス症候群、てんかん、レビー小体認知症(LBD)、アミロイドーシスを伴う遺伝性脳出血(オランダ型)、軽度認知機能障害(MCI)、多発性硬化症、パーキンソン病、不定型パーキンソニズム、HIV関連認知症、成人発症型糖尿病、老人性心臓アミロイドーシス、内分泌腫瘍、緑内障、眼性アミロイドーシス、原発性網膜変性症、黄斑変性(加齢黄斑変性(AMD)等)、視神経ドルーゼン、視神経症、視神経炎、格子状ジストロフィー、ハンチントン病、虚血性脳卒中及びADにおける精神異常;好ましくは、アルツハイマー病から選択される、請求項13又は14に記載の組成物。
【請求項１６】
注射によって投与される、請求項13から15のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１７】
タウ凝集体に関連する障害の診断に使用するため、又はタウオパチーの診断に使用するための組成物であって、特には、診断がポジトロン放出断層撮影によって行われる、請求項12に記載の組成物。
【請求項１８】
タウオパチーが、3Rタウオパチーである、請求項17に記載の組成物。
【請求項１９】
タウオパチーが、4Rタウオパチーである、請求項17に記載の組成物。
【請求項２０】
障害が、アルツハイマー病(AD)、家族性AD、クロイツフェルト-ヤコブ病、パンチドランカー、ダウン症候群、ゲルストマン-シュトロイスラー-シャインカー病、封入体筋炎、プリオンタンパク質脳アミロイド血管症、外傷性脳損傷(TBI)、筋萎縮性側索硬化症、グアムのパーキンソニズム痴呆複合、神経原線維変化を伴う非グアム人運動ニューロン疾患、嗜銀顆粒性疾患、大脳皮質基底核変性症(CBD)、石灰化を伴うびまん性神経原線維変化、第17染色体に関連するパーキンソニズムを伴う前頭側頭型認知症、ハラーフォルデン-シュパッツ病、多系統萎縮症、ニーマン-ピック病C型、淡蒼球橋黒質変性症、ピック病(PiD)、進行性皮質下グリオーシス、進行性核上性麻痺(PSP)、亜急性硬化性全脳炎、もつれのみの認知症、脳炎後パーキンソニズム、筋緊張性ジストロフィー、タウ全脳炎、アストロサイトに関連するAD、特定のプリオン病(タウを伴うGSS)、LRRK2における突然変異、慢性外傷性脳炎、家族性英国型認知症、家族性デンマーク型認知症、前頭側頭葉変性症、グアドループ島パーキンソニズム、脳の鉄蓄積を伴う神経変性、SLC9A6関連精神遅滞、小球体グリア含有物を伴う白質タウオパチー、外傷性ストレス症候群、てんかん、レビー小体認知症(LBD)、アミロイドーシスを伴う遺伝性脳出血(オランダ型)、軽度認知機能障害(MCI)、多発性硬化症、パーキンソン病、不定型パーキンソニズム、HIV関連認知症、成人発症型糖尿病、老人性心臓アミロイドーシス、内分泌腫瘍、緑内障、眼性アミロイドーシス、原発性網膜変性症、黄斑変性(加齢黄斑変性(AMD)等)、視神経ドルーゼン、視神経症、視神経炎、格子状ジストロフィー、ハンチントン病、虚血性脳卒中及びADにおける精神異常;好ましくは、アルツハイマー病から選択される、請求項17に記載の組成物。
【請求項２１】
障害が、アルツハイマー病(AD)である、請求項20に記載の組成物。
【請求項２２】
障害が、パーキンソン病又は不定型パーキンソニズムである、請求項20に記載の組成物。
【請求項２３】
障害が、進行性核上性麻痺(PSP)である、請求項20に記載の組成物。
【請求項２４】
障害が、ピック病(PiD)である、請求項20に記載の組成物。
【請求項２５】
タウ凝集体が、脳において又は眼において画像化される、請求項17から24のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２６】
タウ凝集体を画像化する方法、特に、タウ凝集体をポジトロン放出断層撮影により画像化する方法であって、有効量の請求項12に記載の組成物が患者に投与される、方法。
【請求項２７】
タウ凝集体に関連する障害又はタウオパチーを診断する方法であって、有効量の請求項12に記載の組成物が患者に投与され、特に、診断がポジトロン放出断層撮影によって行われる、方法。
【請求項２８】
タウオパチーが、3Rタウオパチーである、請求項27に記載の方法。
【請求項２９】
タウオパチーが、4Rタウオパチーである、請求項27に記載の方法。
【請求項３０】
障害が、アルツハイマー病(AD)、家族性AD、クロイツフェルト-ヤコブ病、パンチドランカー、ダウン症候群、ゲルストマン-シュトロイスラー-シャインカー病、封入体筋炎、プリオンタンパク質脳アミロイド血管症、外傷性脳損傷(TBI)、筋萎縮性側索硬化症、グアムのパーキンソニズム痴呆複合、神経原線維変化を伴う非グアム人運動ニューロン疾患、嗜銀顆粒性疾患、大脳皮質基底核変性症(CBD)、石灰化を伴うびまん性神経原線維変化、第17染色体に関連するパーキンソニズムを伴う前頭側頭型認知症、ハラーフォルデン-シュパッツ病、多系統萎縮症、ニーマン-ピック病C型、淡蒼球橋黒質変性症、ピック病(PiD)、進行性皮質下グリオーシス、進行性核上性麻痺(PSP)、亜急性硬化性全脳炎、もつれのみの認知症、脳炎後パーキンソニズム、筋緊張性ジストロフィー、タウ全脳炎、アストロサイトに関連するAD、特定のプリオン病(タウを伴うGSS)、LRRK2における突然変異、慢性外傷性脳炎、家族性英国型認知症、家族性デンマーク型認知症、前頭側頭葉変性症、グアドループ島パーキンソニズム、脳の鉄蓄積を伴う神経変性、SLC9A6関連精神遅滞、小球体グリア含有物を伴う白質タウオパチー、外傷性ストレス症候群、てんかん、レビー小体認知症(LBD)、アミロイドーシスを伴う遺伝性脳出血(オランダ型)、軽度認知機能障害(MCI)、多発性硬化症、パーキンソン病、HIV関連認知症、成人発症型糖尿病、老人性心臓アミロイドーシス、内分泌腫瘍、緑内障、眼性アミロイドーシス、原発性網膜変性症、黄斑変性(加齢黄斑変性(AMD)等)、視神経ドルーゼン、視神経症、視神経炎、格子状ジストロフィー、ハンチントン病、虚血性脳卒中及びADにおける精神異常;好ましくは、アルツハイマー病から選択される、請求項27に記載の方法。
【請求項３１】
障害が、アルツハイマー病(AD)である、請求項30に記載の方法。
【請求項３２】
障害が、パーキンソン病又は不定型パーキンソニズムである、請求項30に記載の方法。
【請求項３３】
障害が、進行性核上性麻痺(PSP)である、請求項30に記載の方法。
【請求項３４】
障害が、ピック病(PiD)である、請求項30に記載の方法。
【請求項３５】
タウ凝集体が、脳において又は眼において画像化される、請求項26から34のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３６】
タウ凝集体を画像化するため、特に、タウ凝集体をポジトロン放出断層撮影により画像化するための診断薬の製造のための、請求項12に記載の組成物の使用。
【請求項３７】
タウ凝集体に関連する障害を診断するため、又はタウオパチーを診断するための診断薬を製造するための請求項12に記載の組成物の使用であって、特に、診断がポジトロン放出断層撮影によって行われる、使用。
【請求項３８】
タウオパチーが、3Rタウオパチーである、請求項37に記載の使用。
【請求項３９】
タウオパチーが、4Rタウオパチーである、請求項37に記載の使用。
【請求項４０】
障害が、アルツハイマー病(AD)、家族性AD、クロイツフェルト-ヤコブ病、パンチドランカー、ダウン症候群、ゲルストマン-シュトロイスラー-シャインカー病、封入体筋炎、プリオンタンパク質脳アミロイド血管症、外傷性脳損傷(TBI)、筋萎縮性側索硬化症、グアムのパーキンソニズム痴呆複合、神経原線維変化を伴う非グアム人運動ニューロン疾患、嗜銀顆粒性疾患、大脳皮質基底核変性症(CBD)、石灰化を伴うびまん性神経原線維変化、第17染色体に関連するパーキンソニズムを伴う前頭側頭型認知症、ハラーフォルデン-シュパッツ病、多系統萎縮症、ニーマン-ピック病C型、淡蒼球橋黒質変性症、ピック病(PiD)、進行性皮質下グリオーシス、進行性核上性麻痺(PSP)、亜急性硬化性全脳炎、もつれのみの認知症、脳炎後パーキンソニズム、筋緊張性ジストロフィー、タウ全脳炎、アストロサイトに関連するAD、特定のプリオン病(タウを伴うGSS)、LRRK2における突然変異、慢性外傷性脳炎、家族性英国型認知症、家族性デンマーク型認知症、前頭側頭葉変性症、グアドループ島パーキンソニズム、脳の鉄蓄積を伴う神経変性、SLC9A6関連精神遅滞、小球体グリア含有物を伴う白質タウオパチー、外傷性ストレス症候群、てんかん、レビー小体認知症(LBD)、アミロイドーシスを伴う遺伝性脳出血(オランダ型)、軽度認知機能障害(MCI)、多発性硬化症、パーキンソン病、HIV関連認知症、成人発症型糖尿病、老人性心臓アミロイドーシス、内分泌腫瘍、緑内障、眼性アミロイドーシス、原発性網膜変性症、黄斑変性(加齢黄斑変性(AMD)等)、視神経ドルーゼン、視神経症、視神経炎、格子状ジストロフィー、ハンチントン病、虚血性脳卒中及びADにおける精神異常;好ましくは、アルツハイマー病から選択される、請求項37に記載の使用。
【請求項４１】
障害が、アルツハイマー病(AD)である、請求項40に記載の使用。
【請求項４２】
障害が、パーキンソン病又は不定型パーキンソニズムである、請求項40に記載の使用。
【請求項４３】
障害が、進行性核上性麻痺(PSP)である、請求項40に記載の使用。
【請求項４４】
障害が、ピック病(PiD)である、請求項40に記載の使用。
【請求項４５】
タウ凝集体が、脳において又は眼において画像化される、請求項36から44のいずれか一項に記載の使用。
【請求項４６】
分析参照としての請求項12に記載の組成物の使用。
【請求項４７】
インビトロスクリーニングツールとしての請求項12に記載の組成物の使用。
【請求項４８】
試料又は患者において、タウ凝集体に関連する障害の診断のためのデータを収集する方法であって、
(a)タウ凝集体を含有することが疑われる試料又は特定の身体部分若しくは身体領域を、式Iの化合物を含有する請求項12に記載の組成物と接触させる工程、
(b)式Iの化合物をタウ凝集体に結合させる工程、
(c)タウ凝集体に結合した式Iの化合物を検出する工程、及び
(d)任意選択で、タウ凝集体と結合する式Iの化合物の存在又は非存在を、試料又は特定の身体部分若しくは身体領域におけるタウ凝集体の存在又は非存在と相関付ける工程
を含む、方法。
【請求項４９】
組織及び/又は体液中のタウ凝集体の量を決定する方法であって、
(a)検査される組織及び/又は体液を代表する試料を用意する工程、
(b)試料を、式Iの化合物を含有する請求項12に記載の組成物を用いてタウ凝集体の存在について試験する工程、
(c)タウ凝集体に結合した式Iの化合物の量を決定する工程、並びに
(d)組織及び/又は体液中のタウ凝集体の量を計算する工程
を含む、方法。
【請求項５０】
患者におけるタウ凝集体に関連する障害の傾向を決定するためのデータを収集する方法であって、試料において又はインサイチュで式Iの化合物を含有する請求項12に記載の組成物のタウ凝集体への特異的結合を検出する工程を含み、検出する工程が、
(a)タウ凝集体を含有することが疑われる試料又は特定の身体部分若しくは身体領域を、タウ凝集体に特異的に結合する式Iの化合物を含有する、請求項12に記載の組成物と接触させる工程、
(b)式Iの化合物をタウ凝集体に結合させて、化合物/タウ凝集体複合体を形成する工程、
(c)化合物/タウ凝集体複合体の形成を検出する工程、
(d)任意選択で、化合物/タウ凝集体複合体の存在又は非存在を、試料又は特定の身体部分若しくは身体領域におけるタウ凝集体の存在又は非存在と相関付ける工程、及び
(e)任意選択で、化合物/タウ凝集体の量を、正常対照値と比較する工程
を含む、方法。
【請求項５１】
医薬で処置されたことがある、タウ凝集体に関連する障害を患う患者における残存障害をモニタリングするためのデータを収集する方法であって、
(a)タウ凝集体を含有することが疑われる試料又は特定の身体部分若しくは身体領域を、タウ凝集体に特異的に結合する式Iの化合物を含有する、請求項12に記載の組成物と接触させる工程、
(b)式Iの化合物をタウ凝集体に結合させて、化合物/タウ凝集体複合体を形成する工程、
(c)化合物/タウ凝集体複合体の形成を検出する工程、
(d)任意選択で、化合物/タウ凝集体複合体の存在又は非存在を、試料又は特定の身体部分若しくは身体領域におけるタウ凝集体の存在又は非存在と相関付ける工程、及び
(e)任意選択で、化合物/タウ凝集体の量を、正常対照値と比較する工程
を含む、方法。
【請求項５２】
タウ凝集体に関連する障害を患う、医薬で処置されている患者の応答性を予測するためのデータを収集する方法であって、
(a)タウ凝集体を含有することが疑われる試料又は特定の身体部分若しくは身体領域を、タウ凝集体に特異的に結合する式Iの化合物を含有する、請求項12に記載の組成物と接触させる工程、
(b)式Iの化合物をタウ凝集体に結合させて、化合物/タウ凝集体複合体を形成する工程、
(c)化合物/タウ凝集体複合体の形成を検出する工程、
(d)任意選択で、化合物/タウ凝集体複合体の存在又は非存在を、試料又は特定の身体部分若しくは身体領域におけるタウ凝集体の存在又は非存在と相関付ける工程、及び
(e)任意選択で、化合物/タウ凝集体の量を、正常対照値と比較する工程
を含む、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、例えば、ポジトロン放出断層撮影(PET)による画像化を使用する、タウ凝集体に関連する障害及び異常、例えばアルツハイマー病(AD)及び他のタウオパチーの選択的検出に用いることができる式Iの化合物を調製する新規方法に関する。得られた化合物を含む診断用組成物、並びに診断及び画像化におけるその使用も、本出願の主題である。
【背景技術】
【０００２】
アルツハイマー病は、脳内又は眼内におけるアミロイド-ベータ(Aβ)凝集体の異常沈着物の細胞外蓄積であるアミロイドプラークによって引き起こされると主に考えられる神経障害である。ADにおける他の主要な神経病理学的特質は、高リン酸化タウ(チューブリン関連ユニット)タンパク質、リン酸化タウ又は病理的タウ及びその配座異性体の凝集によって生じる細胞内神経原線維変化(NFT)である。ADのこの病理は、多くの神経変性タウオパチー、特に、特定のタイプの前頭側頭型認知症(FTD)と共通している。AD脳において、タウ病理(タウオパチー)はアミロイド病理よりも後に発生するが、いわゆるアミロイドカスケード仮説(Hardyら、Science 1992、256、184〜185頁、及び直近では、Musiekら、Nature Neurosciences 2015、18(6)、800〜806頁、「Three dimensions of the amyloid hypothesis: time, space and 'wingmen'」)の骨子を構成する、Aβタンパク質がADにおける原因物質であるという点はなお議論の対象である。
【０００３】
現在、ADを確定診断する唯一の方法は、生検又は個体の死後の剖検材料の組織学的分析によって脳組織におけるプラーク及びもつれを特定することである。AD以外に、タウは、他の(非AD)神経変性疾患において重要な役割を果たす。そのような非ADタウオパチーには、例えば、核上性麻痺(PSP)、ピック病(PiD)及び大脳皮質基底核変性症(CBD)が含まれる。
【０００４】
一般式Aの化合物は、タウ凝集体に関連する障害及び異常、例えばアルツハイマー病(AD)及び他のタウオパチーの選択的検出に有用であるとして提案されており、この化合物を製造する特定の方法が従来技術に記載されている。
【０００５】
【化１】
2021512064.tif 000003
【０００６】
GobbiらがWO2015/052105において開示した方法では、18Fの代わりにニトロ基を有する前駆体をマイクロ波装置中で[18F]フッ化物と反応させることによって式Aの化合物が得られた。合成工程後、式Aの化合物は、中でも、
1)メタノール及びトリエチルアミンの移動相を使用するHPLC、並びに
2)式Aの化合物を捕捉するための固相抽出カートリッジを使用する再構成、及び食塩水(水中0.9% NaCl)で希釈したエタノールによるカートリッジからのその後の溶出
を含む2工程手順によって精製された。
【０００７】
この方法は、式Aの化合物を26.1%の収率でもたらした。
【０００８】
Gobbiらは、J. Med. Chem. 2017、第60巻、7350〜7370頁に以下の2つの方法を更に記載している:
a)マイクロ波方法:[18F]フッ化物をカチオン交換カートリッジ上で捕捉し、活性をKryptofix(登録商標)/炭酸カリウム混合物で溶出した。アセトニトリルの添加後、混合物を高温で乾燥した。次いで、乾燥した[18F]フッ化物混合物を含むバイアルをマイクロ波装置に移し、400μL DMSO中前駆体分子(非保護ニトロ誘導体)0.5mgを添加した。バイアルをマイクロ波によって50Wで240秒間照射した。得られた溶液を希釈し、分取HPLC(C-18カラム、アセトニトリル/トリメチルアミン緩衝液、pH7.2)によって精製した。
生成物ピークを収集し、水で希釈し、C-18 Sep-Pak Plusカートリッジを通過させた。カートリッジを水で洗浄し、18F-標識生成物をエタノールで溶出し、食塩水溶液で希釈した。
b)熱による加熱方法:[18F]フッ化物をカチオン交換カートリッジ上で捕捉し、活性をKryptofix(登録商標)/炭酸カリウム混合物で溶出した。アセトニトリルの添加後、混合物を高温で乾燥した。400μL DMSO中前駆体分子(非保護ニトロ誘導体)0.5mgを添加し、溶液を160℃で10分間加熱した。得られた溶液を希釈し、分取HPLC(C-18カラム、アセトニトリル/トリメチルアミン緩衝液、pH7.2)によって精製した。
生成物ピークを収集し、水で希釈し、C-18 Sep-Pak Plusカートリッジを通過させた。カートリッジを水で洗浄し、18F-標識生成物をエタノールで溶出し、食塩水溶液で希釈した。
【０００９】
したがって、前述の従来技術における式Aの化合物の調製のための方法は、2つの精製/再構成工程を有し、この方法は、図1に示される通りのマイクロ波方法の場合、部分的にのみ自動化される。
【００１０】
従来技術に記載の方法のニトロ前駆体(及び主要副生成物)は、とりわけ、中性pHを有する水性緩衝液混合物が使用される場合、とりわけ精製(分取HPLC)のために使用されるエタノール、アセトニトリル及びアセトニトリル/水性緩衝液混合物への不十分な溶解性を有する。0.5〜0.7mgの前駆体のみが従来技術の例において使用された。
【００１１】
本発明の目的は、従来技術の方法よりも費用及び時間効率的である式Iの化合物を調製するための改善された方法(図2に略述される通り)を提供することである。加えて、方法の収率も改善されるべきである。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１２】
【特許文献１】WO2015/052105
【非特許文献】
【００１３】
【非特許文献１】Hardyら、Science 1992、256、184〜185頁
【非特許文献２】Musiekら、Nature Neurosciences 2015、18(6)、800〜806頁、「Three dimensions of the amyloid hypothesis: time, space and 'wingmen'」
【非特許文献３】Gobbiら、J. Med. Chem. 2017、第60巻、7350〜7370頁
【非特許文献４】Greene及びWuts、Protecting groups in Organic Synthesis、第3版、494〜653頁
【非特許文献５】Synthesis (1982)、85〜125頁、表2、Carey
【非特許文献６】Sundberg、Organische Synthese、(1995)、279〜281頁、表5.8
【非特許文献７】Netscher、Recent Res. Dev. Org. Chem.、2003、7、71〜83頁
【非特許文献８】Coenen、Fluorine-18 Labeling Methods: Features and Possibilities of Basic Reactions、(2006)
【非特許文献９】Schubiger P.A.、Friebe M.、Lehmann L.(編)、PET-Chemistry - The Driving Force in Molecular Imaging. Springer、Berlin Heidelberg、15〜50頁
【非特許文献１０】A.Andreadisら、Biochemistry 31、(1992)10626〜10633頁
【非特許文献１１】M. Tolnayら、IUBMB Life、55(6):299〜305頁、2003
【非特許文献１２】Remington's Pharmaceutical Sciences、第18版、Mack Publishing Company、Easton、PA、1990、1445頁
【非特許文献１３】P. J. Kocienski、Protecting Groups、第3版、2003
【非特許文献１４】Remington's Pharmaceutical Sciences、第15版、Mack Publishing Co.、New Jersey(1975)
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】Gobbiらによって選択された従来技術の方法の模式的概略図である。
【図２】本発明の方法の模式的概略図である。
【図３】GE Tracerlab FX合成機の構成である。
【図４】IBA Synthera合成機の構成である。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１５】
本発明は、以下の項目に関する:
1.式Iの化合物
【００１６】
【化２】
2021512064.tif 000004
【００１７】
を調製する方法であって、
A)式IIの化合物
【００１８】
【化３】
2021512064.tif 000005
【００１９】
(式中、Xは、H又はPGであり、
LGは、脱離基であり、
PGは、アミン保護基である)
を18Fフッ素化薬と反応させる工程、及び
B)任意選択で、XがPGである場合、保護基PGを切断する工程、及び
C)式Iの得られた化合物を、エタノール及び水を含む移動相を使用する高速液体クロマトグラフィー(HPLC)にかける工程
を含む、方法。
2.XがPGであり、工程Bが存在せず、保護基PGが工程Aにおいて切断される、項目1に従う方法。
3.XがPGであり、保護基PGが工程Bにおいて切断される、項目1に従う方法。
4.移動相中のエタノールの水に対する比が、約5/95v/v〜約80/20v/vである、項目1から3のいずれか1つに従う方法。
5.移動相のpHが、約0〜約8、好ましくは約1〜約3、より好ましくは約2〜約3.0、更により好ましくは約2.2〜約2.8である、項目1から4のいずれかに従う方法。
6.移動相が、アルカリ金属リン酸二水素、ジアルカリ金属リン酸水素、トリアルカリ金属リン酸塩、アルカリ金属酢酸塩、アルカリ土類金属酢酸塩、アルカリ土類金属ギ酸塩、モノ/ジ/トリアルカリ金属クエン酸塩から好ましくは選択される緩衝液を更に含む、項目1から5のいずれかに従う方法。
7.高速液体クロマトグラフィー(HPLC)が、約50〜約400bar、好ましくは約50〜約250barの圧力下で行われる、項目1から6のいずれか1つに従う方法。
8.工程A、任意選択の工程B及び工程Cが、自動化合成機で実施される自動化方法である、項目1から7のいずれか1つに従う方法。
9.高速液体クロマトグラフィー(HPLC)により、式Iの化合物を含む画分が得られ、この画分が、工程D)滅菌濾過にかけられる、項目1から8のいずれか1つに従う方法。
10.工程Cの後に、式Iの化合物の固相抽出を含まず、好ましくは、工程Cの前又は後に式Iの化合物の固相抽出を含まない、項目1から9のいずれか1つに従う方法。
11.式Iの化合物が、工程Cの高速液体クロマトグラフィー(HPLC)の後にクロマトグラフィーにかけられず、好ましくは、式Iの化合物が、工程Cの高速液体クロマトグラフィー(HPLC)以外のクロマトグラフィーにかけられない、項目1から10のいずれか1つに従う方法。
12.項目1から12のいずれか1つに従う方法によって得ることができる式Iの化合物
【００２０】
【化４】
2021512064.tif 000006
【００２１】
及び任意選択で診断用に許容される担体、希釈剤、アジュバント又は賦形剤を含む診断用組成物。
13.診断に使用するための、項目12に従う組成物。
14.タウ凝集体の画像化に使用するための、特に、タウ凝集体のポジトロン放出断層撮影による画像化に使用するための、項目12に従う組成物。
15.障害が、アルツハイマー病(AD)、家族性AD、クロイツフェルト-ヤコブ病、パンチドランカー、ダウン症候群、ゲルストマン-シュトロイスラー-シャインカー病、封入体筋炎、プリオンタンパク質脳アミロイド血管症、外傷性脳損傷(TBI)、筋萎縮性側索硬化症、グアムのパーキンソニズム痴呆複合、神経原線維変化を伴う非グアム人運動ニューロン疾患、嗜銀顆粒性疾患、大脳皮質基底核変性症(CBD)、石灰化を伴うびまん性神経原線維変化、第17染色体に関連するパーキンソニズムを伴う前頭側頭型認知症、ハラーフォルデン-シュパッツ病、多系統萎縮症、ニーマン-ピック病C型、淡蒼球橋黒質変性症、ピック病(PiD)、進行性皮質下グリオーシス、進行性核上性麻痺(PSP)、亜急性硬化性全脳炎、もつれのみの認知症、脳炎後パーキンソニズム、筋緊張性ジストロフィー、タウ全脳炎、アストロサイトに関連するAD、特定のプリオン病(タウを伴うGSS)、LRRK2における突然変異、慢性外傷性脳炎、家族性英国型認知症、家族性デンマーク型認知症、前頭側頭葉変性症、グアドループ島パーキンソニズム、脳の鉄蓄積を伴う神経変性、SLC9A6関連精神遅滞、小球体グリア含有物を伴う白質タウオパチー、外傷性ストレス症候群、てんかん、レビー小体認知症(LBD)、アミロイドーシスを伴う遺伝性脳出血(オランダ型)、軽度認知機能障害(MCI)、多発性硬化症、パーキンソン病、不定型パーキンソニズム、HIV関連認知症、成人発症型糖尿病、老人性心臓アミロイドーシス、内分泌腫瘍、緑内障、眼性アミロイドーシス、原発性網膜変性症、黄斑変性(加齢黄斑変性(AMD)等)、視神経ドルーゼン、視神経症、視神経炎及び格子状ジストロフィー;好ましくは、アルツハイマー病から選択される、項目13又は14に従う使用のための組成物。
16.障害が、ハンチントン病、虚血性脳卒中、ADにおける精神異常から選択される、項目13又は14に従う使用のための組成物。
17.注射によって投与される、項目13から16のいずれか1つに従う使用のための組成物。
18.特に診断がポジトロン放出断層撮影によって行われる場合の、タウ凝集体に関連する障害の診断に使用するため、又はタウオパチーの診断に使用するための、項目12に定義される通りの組成物。
19.タウオパチーが、3Rタウオパチーである、項目18に従う使用のための組成物。
20.タウオパチーが、4Rタウオパチーである、項目18に従う使用のための組成物。
21.障害が、アルツハイマー病(AD)、家族性AD、クロイツフェルト-ヤコブ病、パンチドランカー、ダウン症候群、ゲルストマン-シュトロイスラー-シャインカー病、封入体筋炎、プリオンタンパク質脳アミロイド血管症、外傷性脳損傷(TBI)、筋萎縮性側索硬化症、グアムのパーキンソニズム痴呆複合、神経原線維変化を伴う非グアム人運動ニューロン疾患、嗜銀顆粒性疾患、大脳皮質基底核変性症(CBD)、石灰化を伴うびまん性神経原線維変化、第17染色体に関連するパーキンソニズムを伴う前頭側頭型認知症、ハラーフォルデン-シュパッツ病、多系統萎縮症、ニーマン-ピック病C型、淡蒼球橋黒質変性症、ピック病(PiD)、進行性皮質下グリオーシス、進行性核上性麻痺(PSP)、亜急性硬化性全脳炎、もつれのみの認知症、脳炎後パーキンソニズム、筋緊張性ジストロフィー、タウ全脳炎、アストロサイトに関連するAD、特定のプリオン病(タウを伴うGSS)、LRRK2における突然変異、慢性外傷性脳炎、家族性英国型認知症、家族性デンマーク型認知症、前頭側頭葉変性症、グアドループ島パーキンソニズム、脳の鉄蓄積を伴う神経変性、SLC9A6関連精神遅滞、小球体グリア含有物を伴う白質タウオパチー、外傷性ストレス症候群、てんかん、レビー小体認知症(LBD)、アミロイドーシスを伴う遺伝性脳出血(オランダ型)、軽度認知機能障害(MCI)、多発性硬化症、パーキンソン病、不定型パーキンソニズムHIV関連認知症、成人発症型糖尿病、老人性心臓アミロイドーシス、内分泌腫瘍、緑内障、眼性アミロイドーシス、原発性網膜変性症、黄斑変性(加齢黄斑変性(AMD)等)、視神経ドルーゼン、視神経症、視神経炎及び格子状ジストロフィー;好ましくは、アルツハイマー病から選択される、項目18に従う使用のための組成物。
22.障害が、ハンチントン病、虚血性脳卒中及びADにおける精神異常から選択される、項目18に従う使用のための組成物。
23.障害が、アルツハイマー病(AD)である、項目21に従う使用のための組成物。
24.障害が、パーキンソン病又は不定型パーキンソニズムである、項目21に従う使用のための組成物。
25.障害が、進行性核上性麻痺(PSP)である、項目21に従う使用のための組成物。
26.障害が、ピック病(PiD)である、項目21に従う使用のための組成物。
27.タウ凝集体が、脳において又は眼において画像化される、項目18から26のいずれか1つに従う使用のための組成物。
28.タウ凝集体を画像化する方法、特に、タウ凝集体をポジトロン放出断層撮影により画像化する方法であって、有効量の項目12に定義される通りの組成物が患者に投与される、方法。
29.タウ凝集体に関連する障害又はタウオパチーを診断する方法であって、有効量の項目12に定義される通りの組成物が患者に投与され、特に、診断がポジトロン放出断層撮影によって行われる、方法。
30.タウオパチーが、3Rタウオパチーである、項目29に従う方法。
31.タウオパチーが、4Rタウオパチーである、項目29に従う方法。
32.障害が、アルツハイマー病(AD)、家族性AD、クロイツフェルト-ヤコブ病、パンチドランカー、ダウン症候群、ゲルストマン-シュトロイスラー-シャインカー病、封入体筋炎、プリオンタンパク質脳アミロイド血管症、外傷性脳損傷、筋萎縮性側索硬化症、グアムのパーキンソニズム痴呆複合、神経原線維変化を伴う非グアム人運動ニューロン疾患、嗜銀顆粒性疾患、大脳皮質基底核変性症、石灰化を伴うびまん性神経原線維変化、第17染色体に関連するパーキンソニズムを伴う前頭側頭型認知症、ハラーフォルデン-シュパッツ病、多系統萎縮症、ニーマン-ピック病C型、淡蒼球橋黒質変性症、ピック病、進行性皮質下グリオーシス、進行性核上性麻痺(PSP)、亜急性硬化性全脳炎、もつれのみの認知症、脳炎後パーキンソニズム、筋緊張性ジストロフィー、タウ全脳炎、アストロサイトに関連するAD、特定のプリオン病(タウを伴うGSS)、LRRK2における突然変異、慢性外傷性脳炎、家族性英国型認知症、家族性デンマーク型認知症、前頭側頭葉変性症、グアドループ島パーキンソニズム、脳の鉄蓄積を伴う神経変性、SLC9A6関連精神遅滞、小球体グリア含有物を伴う白質タウオパチー、外傷性ストレス症候群、てんかん、レビー小体認知症(LBD)、アミロイドーシスを伴う遺伝性脳出血(オランダ型)、軽度認知機能障害(MCI)、多発性硬化症、パーキンソン病、不定型パーキンソニズム、HIV関連認知症、成人発症型糖尿病、老人性心臓アミロイドーシス、内分泌腫瘍、緑内障、眼性アミロイドーシス、原発性網膜変性症、黄斑変性(加齢黄斑変性(AMD)等)、視神経ドルーゼン、視神経症、視神経炎及び格子状ジストロフィー;好ましくは、アルツハイマー病から選択される、項目29に従う方法。
33.障害が、ハンチントン病、虚血性脳卒中及びADにおける精神異常から選択される、項目29に従う方法。
34.障害が、アルツハイマー病(AD)である、項目32に従う方法。
35.障害が、パーキンソン病又は不定型パーキンソニズムである、項目32に従う方法。
36.障害が、進行性核上性麻痺(PSP)である、項目32に従う方法。
37.障害が、ピック病(PiD)である、項目32に従う方法。
38.タウ凝集体が、脳において又は眼において画像化される、項目28から37のいずれか1つに従う方法。
39.タウ凝集体を画像化するため、特に、タウ凝集体をポジトロン放出断層撮影により画像化するための診断薬の製造のための、項目12に定義される通りの組成物の使用。
40.タウ凝集体に関連する障害を診断するため、又はタウオパチーを診断するための診断薬を製造するための項目12に定義される通りの組成物の使用であって、特に、診断がポジトロン放出断層撮影によって行われる、使用。
41.タウオパチーが、3Rタウオパチーである、項目40に従う使用。
42.タウオパチーが、4Rタウオパチーである、項目40に従う使用。
43.障害が、アルツハイマー病(AD)、家族性AD、クロイツフェルト-ヤコブ病、パンチドランカー、ダウン症候群、ゲルストマン-シュトロイスラー-シャインカー病、封入体筋炎、プリオンタンパク質脳アミロイド血管症、外傷性脳損傷、筋萎縮性側索硬化症、グアムのパーキンソニズム痴呆複合、神経原線維変化を伴う非グアム人運動ニューロン疾患、嗜銀顆粒性疾患、大脳皮質基底核変性症、石灰化を伴うびまん性神経原線維変化、第17染色体に関連するパーキンソニズムを伴う前頭側頭型認知症、ハラーフォルデン-シュパッツ病、多系統萎縮症、ニーマン-ピック病C型、淡蒼球橋黒質変性症、ピック病、進行性皮質下グリオーシス、進行性核上性麻痺(PSP)、亜急性硬化性全脳炎、もつれのみの認知症、脳炎後パーキンソニズム、筋緊張性ジストロフィー、タウ全脳炎、アストロサイトに関連するAD、特定のプリオン病(タウを伴うGSS)、LRRK2における突然変異、慢性外傷性脳炎、家族性英国型認知症、家族性デンマーク型認知症、前頭側頭葉変性症、グアドループ島パーキンソニズム、脳の鉄蓄積を伴う神経変性、SLC9A6関連精神遅滞、小球体グリア含有物を伴う白質タウオパチー、外傷性ストレス症候群、てんかん、レビー小体認知症(LBD)、アミロイドーシスを伴う遺伝性脳出血(オランダ型)、軽度認知機能障害(MCI)、多発性硬化症、パーキンソン病、不定型パーキンソニズム、HIV関連認知症、成人発症型糖尿病、老人性心臓アミロイドーシス、内分泌腫瘍、緑内障、眼性アミロイドーシス、原発性網膜変性症、黄斑変性(加齢黄斑変性(AMD)等)、視神経ドルーゼン、視神経症、視神経炎及び格子状ジストロフィー;好ましくは、アルツハイマー病から選択される、項目40に従う使用。
44.障害が、ハンチントン病、虚血性脳卒中及びADにおける精神異常から選択される、項目40に従う使用。
45.障害が、アルツハイマー病(AD)である、項目43に従う使用。
46.障害が、パーキンソン病又は不定型パーキンソニズムである、項目43に従う使用。
47.障害が、進行性核上性麻痺(PSP)である、項目43に従う使用。
48.障害が、ピック病(PiD)である、項目43に従う使用。
49.タウ凝集体が、脳において又は眼において画像化される、項目39から48のいずれか1つに従う使用。
50.分析参照としての項目12に従う組成物の使用。
51.インビトロスクリーニングツールとしての項目12に従う組成物の使用。
52.試料又は患者において、タウ凝集体に関連する障害の診断のためのデータを収集する方法であって、
(a)タウ凝集体を含有することが疑われる試料又は特定の身体部分若しくは身体領域を、式Iの化合物を含有する項目12に定義される通りの組成物と接触させる工程、
(b)式Iの化合物をタウ凝集体に結合させる工程、
(c)タウ凝集体に結合した式Iの化合物を検出する工程、及び
(d)任意選択で、タウ凝集体と結合する式Iの化合物の存在又は非存在を、試料又は特定の身体部分若しくは身体領域におけるタウ凝集体の存在又は非存在と相関付ける工程
を含む、方法。
53.組織及び/又は体液中のタウ凝集体の量を決定する方法であって、
(a)検査される組織及び/又は体液を代表する試料を用意する工程、
(b)試料を、式Iの化合物を含有する項目12に定義される通りの組成物を用いてタウ凝集体の存在について試験する工程、
(c)タウ凝集体に結合した式Iの化合物の量を決定する工程、並びに
(d)組織及び/又は体液中のタウ凝集体の量を計算する工程
を含む、方法。
54.患者におけるタウ凝集体に関連する障害の傾向を決定するためのデータを収集する方法であって、試料において又はインサイチュで式Iの化合物を含有する項目12に定義される通りの組成物のタウ凝集体への特異的結合を検出する工程を含み、検出する工程が、
(a)タウ凝集体を含有することが疑われる試料又は特定の身体部分若しくは身体領域を、タウ凝集体に特異的に結合する式Iの化合物を含有する、項目12に定義される通りの組成物と接触させる工程、
(b)式Iの化合物をタウ凝集体に結合させて、化合物/タウ凝集体複合体を形成する工程、
(c)化合物/タウ凝集体複合体の形成を検出する工程、
(d)任意選択で、化合物/タウ凝集体複合体の存在又は非存在を、試料又は特定の身体部分若しくは身体領域におけるタウ凝集体の存在又は非存在と相関付ける工程、及び
(e)任意選択で、化合物/タウ凝集体の量を、正常対照値と比較する工程
を含む、方法。
55.医薬で処置されたことがある、タウ凝集体に関連する障害を患う患者における残存障害をモニタリングするためのデータを収集する方法であって、
(a)タウ凝集体を含有することが疑われる試料又は特定の身体部分若しくは身体領域を、タウ凝集体に特異的に結合する式Iの化合物を含有する、項目12に定義される通りの組成物と接触させる工程、
(b)式Iの化合物をタウ凝集体に結合させて、化合物/タウ凝集体複合体を形成する工程、
(c)化合物/タウ凝集体複合体の形成を検出する工程、
(d)任意選択で、化合物/タウ凝集体複合体の存在又は非存在を、試料又は特定の身体部分若しくは身体領域におけるタウ凝集体の存在又は非存在と相関付ける工程、及び
(e)任意選択で、化合物/タウ凝集体の量を、正常対照値と比較する工程
を含む、方法。
56.タウ凝集体に関連する障害を患う、医薬で処置されている患者の応答性を予測するためのデータを収集する方法であって、
(a)タウ凝集体を含有することが疑われる試料又は特定の身体部分若しくは身体領域を、タウ凝集体に特異的に結合する式Iの化合物を含有する、項目12に定義される通りの組成物と接触させる工程、
(b)式Iの化合物をタウ凝集体に結合させて、化合物/タウ凝集体複合体を形成する工程、
(c)化合物/タウ凝集体複合体の形成を検出する工程、
(d)任意選択で、化合物/タウ凝集体複合体の存在又は非存在を、試料又は特定の身体部分若しくは身体領域におけるタウ凝集体の存在又は非存在と相関付ける工程、及び
(e)任意選択で、化合物/タウ凝集体の量を、正常対照値と比較する工程
を含む、方法。
【００２２】
定義
「アルキル」という用語は、他に定義されない限り、1〜6個の炭素原子を含有する飽和直鎖状又は分枝状炭素鎖を指す。
【００２３】
「ハロ」又は「ハロゲン」は、F、Cl、Br及びIを表す。好ましくは、「ハロゲン」は、各出現において独立して、F、Cl及びBrから、より好ましくはF及びClから、更により好ましくはFから選択される。
【００２４】
本明細書において用いられる「アミン保護基」(PG)という用語は、予想される化学反応の間にアミン基を保護するのに好適な任意の保護基である。好適な保護基の例は、当業者に周知である。好適な保護基は、例えば、参照により本明細書に含まれる教科書Greene及びWuts、Protecting groups in Organic Synthesis、第3版、494〜653頁で論じられている。保護基は、カルバメート、アミド、イミド、N-アルキルアミン、N-アリールアミン、イミン、エナミン、ボラン、N-P保護基、N-スルフェニル、N-スルホニル及びN-シリルから選択することができる。保護基(PG)の特定の好ましい例は、カルボベンジルオキシ(Cbz)、(p-メトキシベンジル)オキシカルボニル(Moz若しくはMeOZ)、tert-ブチルオキシカルボニル(BOC)、9-フルオレニルメチルオキシカルボニル(FMOC)、ベンジル(Bn)、p-メトキシベンジル(PMB)、3,4-ジメトキシベンジル(DMPM)、p-メトキシフェニル(PMP)、トリフェニルメチル(トリチル)、メトキシフェニルジフェニルメチル(MMT)又はジメトキシトリチル(DMT)である。保護基PGのより好ましい例には、tert-ブチルオキシカルボニル(BOC)、ジメトキシトリチル(DMT)及びトリフェニルメチル(トリチル)が含まれる。保護基PGのより好ましい一例は、tert-ブチルオキシカルボニル(BOC)である。
【００２５】
「カルバメートアミン保護基」という用語は、*-CO-O基を含有するアミン保護基を指し、ここで、アスタリスクは、アミンへの結合を示す。例は、カルボベンジルオキシ(Cbz)、(p-メトキシベンジル)オキシカルボニル(Moz又はMeOZ)、tert-ブチルオキシカルボニル(BOC)及び9-フルオレニルメチルオキシカルボニル(FMOC)である。
【００２６】
本明細書において用いられる「脱離基」(LG)という用語は、任意の脱離基であり、別の原子又は原子団で置き換えられうる原子又は原子団を意味する。例は、例えば、Synthesis (1982)、85〜125頁、表2、Carey及びSundberg、Organische Synthese、(1995)、279〜281頁、表5.8、又はNetscher、Recent Res. Dev. Org. Chem.、2003、7、71〜83頁、スキーム1、2、10及び15他)に挙げられている。(Coenen、Fluorine-18 Labeling Methods: Features and Possibilities of Basic Reactions、(2006)、Schubiger P.A.、Friebe M.、Lehmann L.(編)、PET-Chemistry - The Driving Force in Molecular Imaging. Springer、Berlin Heidelberg、15〜50頁、特に:25頁スキーム4、28頁スキーム5、30頁表4、33頁図7)。好ましくは、「脱離基」(LG)は、ニトロ、ブロモ、ヨード、クロロ、トリアルキルアンモニウム、ヒドロキシル、ボロン酸、ヨードニウム、スルホン酸エステルからなる群から選択される。より好ましくは、「脱離基」(LG)は、ニトロ又はトリメチルアンモニウムである。トリアルキルアンモニウム又はヨードニウムを含有する化合物は、アニオンを更に含みうることが理解される。なおより好ましくは、「脱離基」(LG)は、ニトロである。別のより好ましい「脱離基」(LG)は、トリメチルアンモニウムである。
【００２７】
本明細書において用いられる「クラウンエーテル」という用語は、いくつかのエーテル基を含有する環で構成される化合物を意味する。より具体的には、「クラウンエーテル」という用語は、好ましくは、置換されていてもよく、環中に8〜16個の炭素原子並びにN、O及びSから選択される4〜8個のヘテロ原子を含有する単環式有機基を指す。1つ又は複数の任意選択の置換基の各々は、1〜15個の炭素原子並びに任意選択でN、O及びSから選択される1〜6個のヘテロ原子を含有する任意の有機基から独立して選択されてもよい。「クラウンエーテル」の好ましい例は、環中に10〜14個の炭素原子並びにN、O及びSから選択される5〜7個のヘテロ原子を含有する任意選択で置換された単環式環である。「クラウンエーテル」の例は、環中に12個の炭素原子並びにN及びOから選択される6個のヘテロ原子を含有する任意選択で置換された単環式環である。具体例には、18-クラウン-6、ジベンゾ-18-クラウン-6及びジアザ-18-クラウン-6が含まれる。
【００２８】
本明細書において用いられる「クリプタンド」という用語は、2個の窒素原子に結合した3つの鎖を有する、クラウンエーテルに関する多環式化合物のクラスに関する。周知の「クリプタンド」は、4,7,13,16,21,24-ヘキサオキサ-1,10-ジアザビシクロ[8.8.8]ヘキサコサン(Kryptofix(登録商標))である。
【００２９】
本明細書で使用されるタウは、多くの場合ニューロンにおいて見出される、高可溶性の微小管結合タンパク質を指し、主要な6種のアイソフォーム、切断又は欠失型、及び例えば、リン酸化、グリコシル化、糖化、プロリルイソメラーゼ化、ニトロ化、アセチル化、ポリアミン化、ユビキチン化、SUMO化及び酸化から生じる他の修飾形態が含まれる。本明細書で使用される病理的タウ又はタウ凝集体(神経原線維変化、NFT)は、対らせん状細線維及び直線線維を含有する高リン酸化タウタンパク質の不溶性の凝集体を指す。その存在は、AD及びタウオパチーとして公知の他の疾患の特質である。
【００３０】
タウ遺伝子は、16のエクソンを含有し、主要タウタンパク質アイソフォームは、これらのうちの11によってコードされている。エクソン10の選択的スプライシングにより、それぞれ3R及び4Rタウとして公知の、3つ(エクソン10欠失)又は4つ(エクソン10存在)の反復ドメインのいずれかを有するタウアイソフォームが生成される(A.Andreadisら、Biochemistry 31、(1992)10626〜10633頁;M. Tolnayら、IUBMB Life、55(6):299〜305頁、2003)。アルツハイマー病において、3R及び4Rアイソフォームの比は同程度である。これとは対照的に、一部のタウオパチーでは、2種のアイソフォームのうちの1種が優位に存在する。本明細書において、「3Rタウオパチー」という用語は、3Rアイソフォームが優位に存在するタウオパチー(ピック病(PiD)等)を指す。本明細書において、「4Rタウオパチー」という用語は、4Rアイソフォームが優位に存在するタウオパチー(進行性核上性麻痺(PSP)及び大脳皮質基底核変性症(CBD)等)を指す。
【００３１】
本発明の記載及び特許請求の範囲において本明細書以下で使用される場合、「薬学的に許容される塩」という用語は、本開示の化合物の非毒性誘導体に関し、ここで、親化合物は、その無機及び有機酸の塩を作製することによって修飾されている。無機酸には、塩酸、硝酸又は硫酸等の酸が含まれるが、これらに限定されない。有機酸には、脂肪酸、脂環酸、芳香族酸、芳香脂肪酸、及び複素環酸等のカルボン酸並びにスルホン酸が含まれるが、これらに限定されない。本発明の薬学的に許容される塩は、従来の化学方法によって、塩基性又は酸性部分を含有する親化合物から合成することができる。一般に、そのような塩は、水中若しくは有機溶媒中、又はこの2種の混合物中で、これらの化合物の遊離酸又は塩基形態を化学量論量の適切な塩基又は酸と反応させることによって調製できる。好適な塩の一覧は、その開示が参照により本明細書に組み込まれる、Remington's Pharmaceutical Sciences、第18版、Mack Publishing Company、Easton、PA、1990、1445頁に見出すことができる。
【００３２】
「薬学的に許容可能」又は「診断用に許容される」は、正しい医学判断の範囲内で、妥当な利益/リスク比に見合う過度の毒性、刺激、アレルギー反応又は他の問題若しくは合併症なしにヒト及び動物の組織と接触して使用するのに好適であるような化合物、材料、組成物及び/又は剤形を指すと定義される。
【００３３】
本発明における患者又は対象は、典型的には、動物、特に哺乳動物、より特にはヒトである。
【００３４】
「クロマトグラフィー」又は「液体クロマトグラフィー」は、化合物の混合物の分離のための方法を意味する。混合物は、液体に溶解され、「移動相」を介し「固定相」を通って移動する。分離は、移動相中の化合物と固定相との相互作用に基づく。そのような異なる相互作用により固定相への示差的保持がもたらされ、したがって、分離に作用する。クロマトグラフィーは、分取であっても又は分析用であってもよい。分取クロマトグラフィーの目的は、混合物の成分を分離することであり、したがって、精製の形態である。分析用クロマトグラフィーは、材料の小試料を用いて行われ、混合物中の化合物の割合を測定するために使用される。
【００３５】
「高速液体クロマトグラフィー(HPLC)」は、固定相の非常に小さい粒子(10μm以下)を使用し、十分高い圧力を適用することによって化合物を分離する液体クロマトグラフィーの形態である。HPLCシステムは、典型的には、移動相のリザーバ、ポンプ、注水機、分離カラム(固定相を含有する)及び検出器で構成される。放射性化合物の分離のために、好適なHPLCシステムは放射能検出器を備える。任意選択で、HPLCシステムは、追加の検出器、例えば、UV、光ダイオードアレイ、屈折率、伝導性、蛍光発光、質量分析器を有する。
【００３６】
「固相抽出(SPE)」は、2つ以上の別々の工程を含む試料調製及び/又は精製プロセスである。第1に、化合物は、溶媒の液体混合物に溶解又は懸濁され、液体試料は、固定(固)相を通過する。一部の化合物は、固定相で保持され、一方、他のものは通過する。第2の工程では、保持された化合物が、好適な溶媒で溶出される。任意選択で、固定相は、溶出工程の前に別の溶液で洗浄される。HPLC技術とは対照的に、使用される粒径は、はるかに大きく(例えば、10μm以下の典型的な粒径を有するHPLCと比較して25μm以上)、したがって、適用される圧力ははるかに小さい(HPLCの場合、圧力は典型的には50barを超える)。
【００３７】
「固相抽出カートリッジ(SPEカートリッジ)」は、SPEのための固定相を充填済みのシリンジ又は容器(例えば、Sep Pak(登録商標))である。
【００３８】
「滅菌濾過」は、マイクロフィルターを介した濾過によって溶液を滅菌するための方法である。マイクロフィルターは、例えば、約0.25μm以下、好ましくは約20nm〜約0.22μmの孔径を有するフィルターであり、これは、通常微生物を除去するために使用される。製造プロセスにおける精密濾過に使用される膜フィルターは、一般に、混合セルロースエステル、ポリテトラフルオロエチレン(PTFE)、ポリビニリデンフルオリド(PVDF)又はポリエーテルスルホン(PES)等の材料から作製される。
【００３９】
本明細書で使用される「自動化」は、好適な装置(合成機)による合成及び又は精製工程の実行を意味する。
【００４０】
「ラジオスカベンジャー」という用語は、放射線分解による分解速度を減少させる化合物を指す。好ましいラジオスカベンジャーには、アスコルビン酸及びその塩、並びにゲンチジン酸及びその塩が含まれる。より好ましいラジオスカベンジャーは、アスコルビン酸、アスコルビン酸ナトリウム及びその混合物である。
【００４１】
IBA Synthera、GE Fastlab、GE Tracerlab MX、GE Tracerlab FX、GE Tracerlab FX、Trasis AllinOne、ORA Neptis Perform、ORA Neptis Mosaic、ORA Neptis Plug、Scintomics GPR、Synthera、Comecer Taddeo、Raytest Synchrom、Sofie Elixys、Eckert&Ziegler Modular Lab、Sumitomo Heavy Industries F100 F200 F300、Siemens Exploraを含むがこれらに限定されない18F-放射性標識化のための好適な「合成機」が、当業者に周知である。
【００４２】
「放射化学純度」は、その述べられた化学形で存在する放射性核種の全活性の割合を意味する。典型的には、放射化学純度は、薄層クロマトグラフィー又はHPLCによって決定される。
【００４３】
「定義」の節で挙げた好ましい定義は、他に述べられない限り、本明細書に記載の実施形態のすべてに当てはまる。
【００４４】
本発明の方法
第1の態様では、本発明は、式Iの化合物を調製するための方法に向けられている。
【００４５】
【化５】
2021512064.tif 000007
【００４６】
本方法は、
A)式IIの化合物
【００４７】
【化６】
2021512064.tif 000008
【００４８】
(式中、Xは、H又はPGであり、
LGは、脱離基であり、
PGは、アミン保護基である)
を18Fフッ素化薬と反応させる工程、及び
B)任意選択で、XがPGである場合、保護基PGを切断する工程、及び
C)得られた式Iの化合物を、エタノール及び水の混合物を含む移動相を使用する高速液体クロマトグラフィー(HPLC)にかける工程
を含む。
【００４９】
式Iの好ましい化合物は、
【００５０】
【化７】
2021512064.tif 000009
【００５１】
からなる群から選択される。
【００５２】
式Iのより好ましい化合物は、
【００５３】
【化８】
2021512064.tif 000010
【００５４】
である。
【００５５】
式IIの好ましい化合物は、
【００５６】
【化９】
2021512064.tif 000011
【００５７】
からなる群から選択される。
【００５８】
式IIのより好ましい化合物は、
【００５９】
【化１０】
2021512064.tif 000012
【００６０】
からなる群から選択される。
【００６１】
これらの化合物において、PG及びLGは、「定義」の節で定義されている通りである。
【００６２】
式IIの更により好ましい化合物は、
【００６３】
【化１１】
2021512064.tif 000013
【００６４】
からなる群から選択され、
X-は、対イオン、例えば、ハロゲン、CF3SO3-及びCF3CO2-からなる群から選択される対イオンである。
【００６５】
工程A
工程A)は、式IIの化合物
【００６６】
【化１２】
2021512064.tif 000014
【００６７】
(式中、
Xは、H又はPGであり、
LGは、脱離基であり、
PGは、アミン保護基である)
を18Fフッ素化薬と反応させることを含む。
【００６８】
XがHである場合、式Iを有する化合物が得られる。XがPGである場合、式III
【００６９】
【化１３】
2021512064.tif 000015
【００７０】
を有する中間体化合物が得られる。
【００７１】
18Fフッ素化薬は、当業者に周知である。任意の好適な18F-フッ素化薬を用いることができる。典型例には、H18F、アルカリ又はアルカリ土類18Fフッ化物(例えば、K18F、Rb18F、Cs18F及びNa18F)が含まれる。任意選択で、18F-フッ素化薬をクリプタンド(例えば:4,7,13,16,21,24-ヘキサオキサ-1,10-ジアザビシクロ[8.8.8]-ヘキサコサン-Kryptofix(登録商標))又はクラウンエーテル(例えば:18-クラウン-6)等のキレート剤と組み合わせて使用できる。或いは、18F-フッ素化薬は、18Fのテトラアルキルアンモニウム塩又は18Fのテトラアルキルホスホニウム塩、例えば、18Fのテトラ(C1〜6アルキル)アンモニウム塩又は18Fのテトラ(C1〜6アルキル)ホスホニウム塩であってもよい。これらの例には、テトラブチルアンモニウム[18F]フッ化物及びテトラブチルホスホニウム[18F]フッ化物が含まれる。好ましくは、18F-フッ素化薬は、K18F、H18F、Cs18F、Na18F又はテトラブチルアンモニウム[18F]フッ化物である。更により好ましい実施形態では、18F-フッ素化薬は、K18Fである。別の好ましい実施形態では、18F-フッ素化薬は、テトラブチルアンモニウム[18F]フッ化物である。
【００７２】
18F-フッ素化は、典型的には、好ましくはアセトニトリル、ジメチルスルホキシド、ジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミド、アミルアルコール、tert-ブチルアルコール又はその混合物から選択される溶媒中で実施され、好ましくは、溶媒は、アセトニトリル若しくはDMSOを含有する、又はアセトニトリル若しくはDMSOである。他の溶媒もまた使用することができ、これらは当業者に周知である。溶媒は、水及び/又は他のアルコール、例えば、C1〜10直鎖状、分枝状又は環式アルカノールを共溶媒として更に含みうる。好ましい一実施形態では、18F放射性標識化を実施するための溶媒は、ジメチルスルホキシドを含有する。別の好ましい一実施形態では、18F放射性標識化を実施するための溶媒は、アセトニトリルを含有する。好ましい一実施形態では、18F放射性標識化を実施するための溶媒は、ジメチルスルホキシドである。別の好ましい実施形態では、18F放射性標識化を実施するための溶媒は、アセトニトリルである。
【００７３】
18F-フッ素化は、典型的には、最大約60分間行われる。好ましい反応時間は、最大約30分間である。更に好ましい反応時間は、最大約15分間である。典型的な反応時間は、約1〜15分間、好ましくは5〜15分間、より好ましくは10〜15分間である。
【００７４】
18F-フッ素化は、典型的には、従来の又はマイクロ波支持された加熱下、約60〜約200℃の温度で実施される。好ましい実施形態では、18F-フッ素化は、約100〜約180℃で実施される。より好ましい実施形態では、18F-フッ素化は、約100〜約160℃で実施される。好ましくは、18F-フッ素化は、従来の加熱下で実施される。従来の加熱は、マイクロ波を使用しない任意の加熱であると理解される。
【００７５】
出発材料の量は、特に限定されない。例えば、約0.5〜約50μmolの式IIの化合物を、1バッチの式Iの化合物の製造のために使用することができる。好ましい実施形態では、約2〜約25μmolの式IIの化合物が使用される。より好ましい実施形態では、約2.5〜約15μmolの式IIの化合物が使用される。一実施形態では、少なくとも約2μmolの式IIの化合物が使用される。好ましい実施形態では、少なくとも約2.5μmolの式IIの化合物が使用される。より好ましい実施形態では、少なくとも約3μmolの式IIの化合物が使用される。
【００７６】
典型的には、約0.5〜約10mgの式IIの化合物を、1バッチの式Iの化合物の製造のために使用することができる。好ましい実施形態では、約0.5〜約5mgの式IIの化合物が使用される。より好ましい実施形態では、約1〜約3mgの式IIの化合物が使用される。
【００７７】
XがPGである場合、式IIIを有する中間体化合物が得られる。保護基PGは、工程A又は任意選択のその後の工程Bのいずれかの間に切断されうる。
【００７８】
式IIIの好ましい化合物は、
【００７９】
【化１４】
2021512064.tif 000016
【００８０】
からなる群から選択される。
【００８１】
これらの化合物において、PGは、「定義」の節で定義されている通りである。
【００８２】
工程B
工程Bは、式IIIの化合物から保護基PGを切断して式Iの化合物を得ることを含む任意選択の工程である。当業者には明らかである通り、この工程は、工程Aが、Xが水素である式IIの化合物を用いて行われる場合、又は保護基PGが工程Aで既に切断されている場合、適用できない。
【００８３】
多様な保護基の切断のための反応条件が当業者に周知であり、そのいずれも参照により本明細書に含まれるGreene及びWutsによる教科書、Protecting groups in Organic Synthesis、第3版、494〜653頁、並びにP. J. Kocienskiによる教科書、Protecting Groups、第3版、2003に記載されているものから選択されうるが、これらに限定されない。
【００８４】
工程Bで用いられる条件は、切断される保護基に依存し、したがって、特に限定されない。
【００８５】
可能な反応条件には、i)約60〜約160℃での加熱、ii)酸の添加及び約0℃〜約160℃での加熱;又はiii)塩基の添加及び約0℃〜約160℃での加熱が含まれる。
【００８６】
好ましい酸は、塩酸、硫酸及びリン酸である。1つの好ましい酸は、硫酸である。別の好ましい酸は、リン酸である。別の好ましい酸は、塩酸である。好ましい塩基は、水酸化ナトリウム、水酸化カリウムである。
【００８７】
好ましい反応条件は、酸の添加及び約25℃〜160℃、好ましくは25℃〜120℃、より好ましくは90〜120℃での加熱である。好ましくは、反応混合物は、約1〜約20分間、より好ましくは約5〜約15分間加熱される。
【００８８】
所望の場合、工程A及びBは、同じ又は異なる反応ベッセルで実施することができる。好ましくは、工程A及びBは、同じ反応ベッセルで実施される。
【００８９】
所望の場合、工程Bの後に得られる溶液は、そのまま工程Cで使用することができる。或いは、溶液の組成を、HPLCを行うためにより適切であるように、適合することができる。例えば、緩衝液又は希釈剤を、工程Cの前に添加することができる。
【００９０】
好ましい希釈剤は、エタノール、水又はその組合せである。
【００９１】
加えて、溶液のpHを適合することができる。好ましい実施形態では、pHは、工程Cの前に、約6以下、より好ましくは約4以下、又は更により好ましくは約3以下に調整される。好ましい実施形態では、pHは、工程Cの前に、約0〜約6、より好ましくは約0〜約4、更により好ましくは約1〜3に調整される。
【００９２】
工程C
工程Cは、工程A、又は用いられる場合工程Bで得られた式Iの化合物が、エタノール及び水を含む移動相を使用するHPLCにかけられる工程である。
【００９３】
従来技術では、注入可能トレーサーに達するために2つのクロマトグラフ工程、すなわち、式Iの化合物のHPLCによる第1の精製及び次いでSPEによる再構成を用いることが必要であると仮定された。本発明者らは、驚くべきことに、エタノール及び水の混合物を移動相として使用した場合、固相抽出を介した化合物のその後の捕捉を省略することができることを見出した。したがって、精製及び調合のための単一のクロマトグラフ工程を使用することが可能である。これは、18Fがたった約110分の半減期を有するため、化合物Iの注入可能調合物に達する方法の速度が最も重要であるため、放射性フッ素付加の本場合において特に重要である。
【００９４】
本特許請求の方法は、従来の方法よりも速く、複雑性が低いため、式Iの化合物は、より高い崩壊補正収率で得ることができる。
【００９５】
移動相としてエタノール及び水の混合物の選択は、これらの2種の成分が、診断用に許容されるので、(従来技術で用いられるメタノール、アセトニトリル、トリエチルアミン及びトリメチルアミンとは異なり)それらが、患者に投与される組成物中に保持されうるという追加の利点を有する。したがって、移動相としてエタノール及び水の選択により、式Iの化合物の調製に必要とされる時間及び費用が大幅に減少し、並びに/又は従来技術の方法よりも高収率及び高放射化学純度がもたらされる。
【００９６】
本発明の方法は、好ましくは工程Cの後に、式Iの化合物の固相抽出を含まず、より好ましくは、本発明の方法は、工程Cの前又は後に式Iの化合物の固相抽出を含まない。
【００９７】
式Iの化合物は、好ましくは工程Cの高速液体クロマトグラフィー(HPLC)の後にクロマトグラフィーにかけられず、より好ましくは、式Iの化合物は、工程Cの高速液体クロマトグラフィー(HPLC)以外のクロマトグラフィーにかけられない。
【００９８】
HPLC方法において使用される移動相は、エタノール及び水を含む。更に、酸、塩基、緩衝液、塩及び/又はラジオスカベンジャー、並びに任意選択でその混合物が含有されうる。
【００９９】
エタノールの水に対する比は、特に限定されないが、好ましくは、約5/95v/v〜約80/20v/v、より好ましくは約5/95v/v〜約50/50v/v、更により好ましくは約5/95v/v〜約20/80v/vである。
【０１００】
移動相のpHは制限されないが、それは好ましくは、約0〜約8、好ましくは約0〜約6、より好ましくは約1〜約5、更により好ましくは約1〜約3、更により好ましくは約2.2〜約2.8である。
【０１０１】
可能な緩衝液は、アルカリ金属リン酸二水素、ジアルカリ金属リン酸水素、トリアルカリ金属リン酸塩、アルカリ金属酢酸塩、アルカリ土類金属酢酸塩、アルカリ土類金属ギ酸塩、モノ/ジ/トリアルカリ金属クエン酸塩から選択することができる塩を含むことができ、好ましいアルカリ及びアルカリ土類金属は、ナトリウム及びカリウムである。
【０１０２】
可能な塩基は、水酸化ナトリウム及び/又は水酸化カリウムでありうる。
【０１０３】
所望の場合、移動相のpHは、無機又は有機酸を使用して調整することができる。無機酸の例には、アスコルビン酸、クエン酸及び酢酸が含まれる。有機酸の例には、塩酸、硫酸及びリン酸、好ましくはリン酸が含まれる。
【０１０４】
ラジオスカベンジャーは、放射線分解による式Iの化合物の分解を減少させる化合物である。例には、アスコルビン酸及びアスコルビン酸塩、ゲンチジン酸及びゲンチジン酸塩が含まれる。更なる例には、クエン酸及びクエン酸塩が含まれる。より好ましいラジオスカベンジャーは、アスコルビン酸、アスコルビンナトリウム及びその混合物である。
【０１０５】
好ましくは、移動相は、約1〜約3のpHを有する約50〜約500mM緩衝液(例えば、アルカリリン酸二水素)、より好ましくは約1〜約3のpHを有する約50〜約250mM緩衝液(例えばアルカリリン酸二水素)、更により好ましくは約1〜約3のpHを有する約50〜約150mM緩衝液(例えば、アルカリリン酸二水素)を含む。
【０１０６】
好ましい移動相は、約5〜約20%v/vエタノール、約95〜約80%v/v水、約1〜約3のpHを有する約50〜約150mM緩衝液(例えば、アルカリリン酸二水素)及び任意選択でラジオスカベンジャーを含む。より好ましい移動相は、約5〜約20%v/vエタノール、約95〜約80%v/v水、約2.2〜約2.8のpHを有する約50〜約150mM緩衝液(例えば、アルカリリン酸二水素)及び任意選択でラジオスカベンジャーを含む。
【０１０７】
HPLC方法で使用するための固定相は周知であり、当業者によって適切に選択されうる。好ましい実施形態では、固定相は、「逆相」(RP)固定相である。
【０１０８】
RP-HPLC固定相の例には、C18、C8、フェニル、シアノ(例えば、シアノプロピル)、ペンタフルオロフェニル、アミノ(例えば、アミノプロピル)、アミド(例えば、C10〜24-アルカン-アミノプロピル)、フェニルヘキシル官能化樹脂又は混合相樹脂が含まれる。
【０１０９】
一実施形態では、HPLC固定相の粒径は、約1.6〜約15μmである。好ましい実施形態では、HPLC固定相の粒径は、約5〜約10μmである。別の実施形態では、HPLC固定相の粒径は、約10μmである。
【０１１０】
典型的には、HPLCカラムは、約2.0〜約50mmの直径及び約50〜約300mmの長さを有する。好ましい実施形態では、HPLCカラムは、約4.6〜約20mmの直径及び約150〜約250mmの長さを有する。より好ましい実施形態では、HPLCカラムは、10×250mmの寸法を有する。
【０１１１】
高速液体クロマトグラフィーにおいて用いられる流速は制限されず、約1〜約20mL/分、より典型的には約2〜約15mL/分、更により典型的には約2〜約7mL/分でありうる。
【０１１２】
高速液体クロマトグラフィーにおいて用いられる圧力は特に限定されず、約50〜約400bar、典型的には約50〜約250bar、より典型的には約50〜200barの範囲でありうる。
【０１１３】
一実施形態では、約1〜約500GBq[18F]フッ化物が、式Iの化合物の製造のために使用される。好ましい実施形態では、約50〜約500GBq[18F]フッ化物が、式Iの化合物の製造のために使用される。より好ましい実施形態では、約100〜約500GBq[18F]フッ化物が、式Iの化合物の製造のために使用される。更により好ましい実施形態では、約200〜約500GBq[18F]フッ化物が、式Iの化合物の製造のために使用される。
【０１１４】
一実施形態では、約10GBq以上の[18F]フッ化物が、式Iの化合物の製造のために使用される。好ましい実施形態では、約50GBq以上の[18F]フッ化物が、式Iの化合物の製造のために使用される。より好ましい実施形態では、約100GBq以上の[18F]フッ化物が、式Iの化合物の製造のために使用される。更により好ましい実施形態では、約200GBq以上の[18F]フッ化物が、式Iの化合物の製造のために使用される。
【０１１５】
一実施形態では、約10GBp以上の式Iの放射性標識化合物が得られる。好ましい実施形態では、約20GBp以上の式Iの放射性標識化合物が得られる。より好ましい実施形態では、約50GBp以上の式Iの放射性標識化合物が得られる。更により好ましい実施形態では、約100GBp以上の式Iの放射性標識化合物が得られる。
【０１１６】
一実施形態では、式Iの化合物は、少なくとも約90%の放射化学純度で得られる。好ましい実施形態では、式Iの化合物は、少なくとも約93%の放射化学純度で得られる。好ましい実施形態では、式Iの化合物は、少なくとも約95%の放射化学純度で得られる。より好ましい実施形態では、式Iの化合物は、少なくとも約98%の放射化学純度で得られる。
【０１１７】
任意選択の工程
エタノール及び水が移動相に含まれるため、式Iの化合物を含むHPLC画分は、所望の場合、注入可能調合物として直接使用することができる。或いは、式Iの化合物を含むHPLC画分は、更なる診断用に許容される成分、例えば、診断用に許容される担体、希釈剤、アジュバント又は賦形剤と混合して式Iの化合物の注入可能調合物を調製することができる。
【０１１８】
望ましい工程Dでは、滅菌濾過は、工程Cの後に行うことができる。更なる成分が添加される場合、滅菌濾過は、それらの添加の前又は後に行うことができる。
【０１１９】
一実施形態では、工程A、任意選択の工程B及び工程Cは、自動化合成デバイスを使用して実施される。そのような自動化合成デバイスの例には、IBA Synthera、GE Fastlab、GE Tracerlab MX、GE Tracerlab FX、GE Tracerlab FX、Trasis AllinOne、ORA Neptis Perform、ORA Neptis Mosaic、ORA Neptis Plug、Scintomics GPR、Synthera、Comecer Taddeo、Raytest Synchrom,、Sofie Elixys、Eckert&Ziegler Modular Lab、Sumitomo Heavy Industries F100 F200 F300及びSiemens Exploraが含まれるが、これらに限定されない。
【０１２０】
好ましい一方法は、
A)LG=ニトロであり、PG=Bocである式IIの化合物を、DMSO中、好ましくはK18F及びテトラブチルアンモニウム[18F]フッ化物から選択される[18F]-フッ素化薬と、約100〜約180℃、好ましくは約120〜約180℃、より好ましくは約140〜約160℃で反応させる工程であって、Boc保護基が放射性標識化条件下で切断される、工程、
C)エタノール/リン酸二水素ナトリウム緩衝液混合物(約5〜約20% EtOH)を使用して式Iの化合物をHPLC精製する工程であって、緩衝液が、約1〜約3、好ましくは約2.2〜約2.8のpHを有する工程、及び
D)所望の場合、式Iの化合物を含むHPLC画分を、患者への投与が意図される調合物の更なる診断用に許容される成分と混合する工程
を含む。所望の場合、HPLC画分は、調合物の更なる診断用に許容される成分との混合の前又は後に滅菌フィルターを通過させる。
【０１２１】
別の好ましい方法は、
A)LG=トリメチルアンモニウムであり、PG=トリチルである式IIの化合物を、DMSO中、好ましくはK18F及びテトラブチルアンモニウム[18F]フッ化物から選択される[18F]-フッ素化薬又はアセトニトリルと、約80〜約180℃、好ましくは約100〜約180℃で反応させる工程、
B)リン酸を添加し、約90〜約120℃で約1〜約15分間加熱する工程、
C)エタノール/リン酸二水素ナトリウム緩衝液混合物(約5〜約20% EtOH)を使用して式Iの化合物をHPLC精製する工程であって、緩衝液が、約1〜約3、好ましくは約2.2〜約2.8のpHを有する工程、及び
D)所望の場合、式Iの化合物を含むHPLC画分を、患者への投与が意図される調合物の更なる診断用に許容される成分と混合する工程
を含む。所望の場合、HPLC画分は、調合物の更なる診断用に許容される成分との混合の前又は後に滅菌フィルターを通過させる。
【０１２２】
他に指定されない限り、式I、II又はIIIの化合物中のすべての水素は、1Hであっても又は2H(重水素)であってもよい。
【０１２３】
本発明の方法は、式Iの化合物を含む診断用組成物を提供しうる。本方法の速度及び低い複雑性のため、18F-標識化合物Iの量は、従来の方法よりも高くなりうる。この方法はまた、高放射能レベル(例えば、少なくとも約20GBqの式Iの化合物、好ましくは少なくとも約50GBqの式Iの化合物、より好ましくは少なくとも約100GBqの式Iの化合物)で高放射化学純度(例えば、少なくとも約90%、好ましくは少なくとも約93%、より好ましくは少なくとも約95%、更により好ましくは少なくとも約98%)を有する式Iの化合物を提供する。
【０１２４】
本診断用組成物は、診断に使用するために好適である。それらは、タウ凝集体に関連する障害の診断又はタウ凝集体の画像化、特にポジトロン放出断層撮影(PET)を使用するタウ凝集体の画像化に特に好適である。
【０１２５】
診断用組成物
「診断用組成物」は、本発明において、式Iの化合物を含む組成物として定義される。インビボ適用について、診断用組成物は、ヒト等の哺乳動物への投与に好適な形態であるべきである。好ましくは、診断用組成物は、生理学的に許容される担体、希釈剤、アジュバント又は賦形剤を更に含む。患者への投与は、好ましくは、溶液としての組成物の注入によって実施される。そのような組成物は、任意選択で、溶媒、緩衝剤、診断用に許容される可溶化剤及び診断用に許容される安定剤又は抗酸化剤等の成分を更に含有してよい。
【０１２６】
診断用に許容される賦形剤は、薬学分野で周知であり、例えば、Remington's Pharmaceutical Sciences、第15版、Mack Publishing Co.、New Jersey(1975)に記載されている。診断用賦形剤は、標準的な医薬実務に関して選択することができる。賦形剤は、その受容者に有害でないという意味で許容可能でなくてはならない。
【０１２７】
好ましくは、診断用組成物は、エタノール及び水の総量に対して約1%v/v〜約20%v/vエタノールを含む。より好ましくは、診断用組成物は、エタノール及び水の総量に対して約1%v/v〜約15%v/vエタノールを含む。更により好ましくは、診断用組成物は、エタノール及び水の総量に対して約5%v/v〜約10%v/vエタノールを含む。上記成分に加えて、診断用組成物は水を含む。水の量は、組成物の総量が100%になるように選択される。
【０１２８】
式Iの化合物は、注射によって投与される。そのような投与の例には、化合物の静脈内、動脈内、腹腔内、くも膜下腔内、脳室内、尿道内、胸骨内、頭蓋内、筋肉内若しくは皮下投与及び/又は注入技術を使用することのうちの1種若しくは複数が含まれる。非経口投与について、化合物は、他の賦形剤を含有していてもよい無菌溶液の形態で使用されることが最良である。溶液は、必要であれば、好適に(好ましくは、3〜9のpH、より好ましくは、4.0〜8.5のpHに)緩衝化されるべきである。無菌条件下での好適な非経口調合物の調製は、当業者に周知の標準的な薬学技術によって容易に達成される。
【０１２９】
本発明の診断用組成物は、例えば、Remington's Pharmaceutical Sciences、第15版、Mack Publishing Co.、New Jersey(1975)に記載のように、それ自体当業者に公知の方法で調合することができる。
【０１３０】
検出可能に標識された式Iの化合物の用量は、当技術分野の医師には明らかであるように、投与されることになる正確な化合物、患者の体重、試料の大きさ及びタイプ、並びに他の不確定要素に依存して変動しうる。一般に、質量は、好ましくは、患者用量当たり約0.001μg〜約100μg、好ましくは患者用量当たり約0.01μg〜約50μgの範囲にありうる。放射性用量は、例えば、約100〜約600MBq、より好ましくは注入当たり約150〜約450MBq、更により好ましくは約150〜約200MBqでありうる。
【０１３１】
特に、一実施形態では、式Iの検出可能に標識された化合物で検出及びモニタリングすることができる疾患又は障害は、タウタンパク質凝集体、例えば、3R又は4Rタウオパチーと関連する疾患又は状態である。
【０１３２】
本発明の方法によって得られる検出可能に標識された化合物で検出及びモニタリングすることができる疾患又は状態には、タウオパチー等の神経変性障害が含まれる。検出及びモニタリングすることができる疾患及び状態の例は、神経原線維病変の形成に起因するか又はこれと関連する。これは、タウオパチーにおける主な脳病理である。疾患及び状態は、タウ及びアミロイド病理の同時存在を示す疾患又は状態を含む神経変性疾患又は状態の異種群を含む。タウ凝集体が関与する疾患の例は、一般にタウオパチーとして列挙され、これらには、アルツハイマー病(AD)、クロイツフェルト-ヤコブ病、パンチドランカー、ダウン症候群、ゲルストマン-シュトロイスラー-シャインカー病、封入体筋炎、プリオンタンパク質脳アミロイド血管症、外傷性脳損傷、筋萎縮性側索硬化症、グアムのパーキンソニズム痴呆複合、神経原線維変化を伴う非グアム人運動ニューロン疾患、嗜銀顆粒性疾患、大脳皮質基底核変性症、石灰化を伴うびまん性神経原線維変化、第17染色体に関連するパーキンソニズムを伴う前頭側頭型認知症、ハラーフォルデン-シュパッツ病、多系統萎縮症、ニーマン-ピック病C型、淡蒼球橋黒質変性症、ピック病、進行性皮質下グリオーシス、進行性核上性麻痺(PSP)、亜急性硬化性全脳炎、もつれのみの認知症、脳炎後パーキンソニズム、筋緊張性ジストロフィー、タウ全脳炎、アストロサイトに関連するAD、特定のプリオン病(タウを伴うGSS)、LRRK2における突然変異、慢性外傷性脳炎、家族性英国型認知症、家族性デンマーク型認知症、前頭側頭葉変性症、グアドループ島パーキンソニズム、脳の鉄蓄積を伴う神経変性、SLC9A6関連精神遅滞、小球体グリア含有物を伴う白質タウオパチー、外傷性ストレス症候群、てんかん、レビー小体認知症(LBD)、アミロイドーシスを伴う遺伝性脳出血(オランダ型)、軽度認知機能障害(MCI)、多発性硬化症、パーキンソン病、不定型パーキンソニズム、HIV関連認知症、成人発症型糖尿病、老人性心臓アミロイドーシス、内分泌腫瘍、緑内障、眼性アミロイドーシス、原発性網膜変性症、黄斑変性(加齢黄斑変性(AMD)等)、視神経ドルーゼン、視神経症、視神経炎及び格子状ジストロフィーが含まれるが、これらに限定されない。好ましくは、検出及びモニタリングすることができる疾患及び状態には
、アルツハイマー病(AD)、家族性AD、クロイツフェルト-ヤコブ病、パンチドランカー、ダウン症候群、ゲルストマン-シュトロイスラー-シャインカー病、封入体筋炎、プリオンタンパク質脳アミロイド血管症、外傷性脳損傷(TBI)、筋萎縮性側索硬化症、グアムのパーキンソニズム痴呆複合、神経原線維変化を伴う非グアム人運動ニューロン疾患、嗜銀顆粒性疾患、大脳皮質基底核変性症(CBD)、石灰化を伴うびまん性神経原線維変化、第17染色体に関連するパーキンソニズムを伴う前頭側頭型認知症、ハラーフォルデン-シュパッツ病、多系統萎縮症、ニーマン-ピック病C型、淡蒼球橋黒質変性症、ピック病(PiD)、進行性皮質下グリオーシス、進行性核上性麻痺(PSP)、亜急性硬化性全脳炎、もつれのみの認知症、脳炎後パーキンソニズム、筋緊張性ジストロフィー、タウ全脳炎、アストロサイトに関連するAD、特定のプリオン病(タウを伴うGSS)、LRRK2における突然変異、慢性外傷性脳炎、家族性英国型認知症、家族性デンマーク型認知症、前頭側頭葉変性症、グアドループ島パーキンソニズム、脳の鉄蓄積を伴う神経変性、SLC9A6関連精神遅滞及び小球体グリア含有物を伴う白質タウオパチー、より好ましくは、アルツハイマー病(AD)、クロイツフェルト-ヤコブ病、パンチドランカー、筋萎縮性側索硬化症、嗜銀顆粒性疾患、大脳皮質基底核変性症、第17染色体に関連するパーキンソニズムを伴う前頭側頭型認知症、ピック病、進行性核上性麻痺(PSP)、もつれのみの認知症、グアムのパーキンソニズム痴呆複合、ハラーフォルデン-シュパッツ病及び前頭側頭葉変性症が含まれる。好ましくは、疾患又は状態は、アルツハイマー病、パーキンソン病若しくは不定型パーキンソニズム、進行性核上性麻痺(PSP)、又はピック病(PiD)、より好ましくはアルツハイマー病である。
【０１３３】
本発明の方法によって得られる検出可能に標識された化合物で検出及びモニタリングすることができる疾患又は状態の更なる例には、ハンチントン病、虚血性脳卒中及びADにおける精神異常が含まれる。
【０１３４】
本発明の方法は、従来技術の方法と比較していくつかの重要な利点を有する。式Iの化合物が調製された後、SPEを介したその後の再構成を含まない単一のクロマトグラフ工程のみが必要であるため、構成は、2つの異なるクロマトグラフ工程が行われる従来技術の構成よりもはるかに単純である。
【０１３５】
本方法は、非常に頑強であることが証明されている。調整されたpHを有する移動相としてエタノール及び水の選択のため、沈殿が引き起こされることなくより大量(例えば、1mg超)の前駆体を使用することができる。
【０１３６】
18F-標識された式Iの化合物は、式IIの化合物の前駆体及び可能性のある副生成物から容易に分離することができる。
【０１３７】
更に、高収率及び純度を達成することができる。例えば、少なくとも約35%の崩壊補正なしの収率を得ることが可能である。生成物活性は、少なくとも約20GBq、好ましくは少なくとも約50GBq、より好ましくは少なくとも約100GBqでありうる。放射化学純度は、低及び高放射能レベルで(例えば、少なくとも約100GBqで)少なくとも約95%、好ましくは少なくとも約98%でありうる。
【０１３８】
本発明を、以下の実施例によって例示するが、それらは限定として解釈されるべきではない。
【実施例】
【０１３９】
略号
【０１４０】
【表１Ａ】
2021512064.tif 000017
【０１４１】
【表１Ｂ】
2021512064.tif 000018
【０１４２】
実験データ
すべての試薬及び溶媒は、販売元から得、更なる精製なしに使用した。プロトン(1H)スペクトルは、重溶媒中、Bruker DRX-400 MHz NMR分光計又はBruker AV-400 MHz NMR分光計で記録した。質量スペクトル(MS)は、Advion CMS質量分析計で記録した。クロマトグラフィーは、シリカゲル(Fluka:Silica gel 60、0.063〜0.2mm)及び特定の実施例において示される通りの好適な溶媒を使用して実施した。フラッシュ精製は、HP-Sil(Biotage社)又はpuriFlash-columns(Interchim社)、及び特定の実施例において示される溶媒勾配を使用して、Biotage Isolera Oneフラッシュ精製システムを用いて行った。薄層クロマトグラフィー(TLC)は、UV検出を用い、シリカゲルプレート上で実施した。
【０１４３】
試験化合物の合成
(調製実施例A)
【０１４４】
【化１５】
2021512064.tif 000019
【０１４５】
工程A
市販の2,6-ジブロモピリジン(4.12g、16.6mmol)を、エタノール(40mL)に懸濁し、ヒドラジン水和物(10mL、97.6mmol)水溶液(約50〜60%)を添加した。混合物を砂浴中約115℃で18時間加熱した。溶媒を除去し、残渣を、酢酸エチル/n-ヘプタン(60/40)を使用し、シリカ上でクロマトグラフィーによって精製して、表題化合物をオフホワイト色の固体(3.05g、93%)として得た。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 7.33 (t, 1H), 6.83 (d, 1H), 6.67 (d, 1H), 6.00 (br-s, 1H), 3.33-3.00 (br-s, 2H)
【０１４６】
工程B
上記工程Aからの表題化合物(10g、53.2mmol)及び市販の1-Boc-4-ピペリドン(10.6g、53.2mmol)を500mLフラスコに添加し、均質なブレンドになるまで混合した。次いで、ポリリン酸(80g、115% H3PO4基準)を添加し、混合物を砂浴中約160℃で加熱した。約120℃で、Boc-保護基が切断され、反応混合物は発泡した。Boc-切断の完了後、泡はつぶれ、暗色の反応混合物を約160℃で20時間撹拌した。反応混合物を室温に冷却させ、水(400mL)を添加した。反応混合物を、ガム状材料が溶解するまで撹拌/超音波処理した。次いで、反応混合物を氷浴中に置き、水酸化ナトリウムの固体ペレット(発熱性)を添加することによって溶液のpHをpH約12に調整した。沈殿物を濾取し、水(400mL)で洗浄して塩を除去した。沈殿物を、超音波処理によってジクロロメタン/メタノール(9/1;1500mL)に溶解し、水(2×400mL)で洗浄して残留塩及び不溶性材料を除去した。有機相をNa2SO4で脱水し、ろ過し、溶媒を減圧下で除去した。暗色の残渣をジクロロメタン(100mL)で処理し、5分間超音波処理し、沈殿物を濾取した。沈殿物をジクロロメタン(40mL)で洗浄し、空気乾燥して、表題化合物をベージュ色の固体(3.5g、26%)として得た。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 11.5 (br-s, 1H), 7.72 (d, 1H), 7.15 (d, 1H), 3.86-3.82 (m, 2H), 3.06-3.00 (m, 2H), 2.71-2.65 (m, 2H)
【０１４７】
工程C
上記工程Bからの表題化合物(1.75g、6.94mmol)をキシレン(380mL)に懸濁し、酸化マンガン(IV)(6.62g、76.9mmol)を添加した。次いで、反応混合物を砂浴中約160℃で36時間加熱した。冷却した反応混合物を減圧下で蒸発させ、残渣をジクロロメタン/メタノール(1/1;400mL)に懸濁し、室温で30分間撹拌した。次いで、反応混合物をろ紙を通してろ過して酸化マンガン(IV)を除去し、ろ紙をメタノール(50mL)で洗浄した。合わせたろ液を減圧下で蒸発させ、暗色の残渣を、Biotage Isoleraシステムを使用し、シリカ(50g HP-SIL-カートリッジ)上でのクロマトグラフィーによって、酢酸エチル/ヘプタン勾配(5/95〜100/0)を用いて精製して、非極性不純物を除去し、続いてジクロロメタン/メタノール(9/1→4/1)を用いて、表題化合物を暗黄色の固体として得た。2回のランの合計収量は、1.77g(51%)であった。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 12.52 (br-s, 1H), 9.42 (s, 1H), 8.61 (d, 1H), 8.53 (d, 1H), 7.56-7.52 (m, 2H)
【０１４８】
(調製実施例B)
【０１４９】
【化１６】
2021512064.tif 000020
【０１５０】
工程A
調製実施例Aからの表題化合物(0.776g、0.72mmol)のジクロロメタン(65mL)懸濁液に、トリエチルアミン(1.86mL、13mmol)及びトリチル-クロライド(2.63g、9.39mmol)を添加した。4-(ジメチルアミノ)-ピリジン(0.074g、0.608mmol)の添加後、反応混合物を室温で16時間撹拌した。反応混合物をジクロロメタン(150mL)及び水(50mL)で希釈した。有機相を分離し、Na2SO4で脱水し、ろ過し、溶媒を真空中で除去した。残渣を、Biotage Isolera One精製システムを使用し、HP-Sil SNAPカートリッジ(50g)上で、酢酸エチル/n-ヘプタン勾配(5/95→100/0→100/0)を用いて精製して、表題化合物Bを淡黄色の固体(0.831g、54%)として得た。未反応の出発材料を、カートリッジを酢酸エチル/メタノール(90/10)でフラッシュすることによって回収して、出発材料をオフホワイト色の固体(0.195g、25%)として得た。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 9.22 (s, 1H), 8.23 (d, 1H), 8.13 (d, 1H), 7.48-7.42 (m, 7H), 7.33-7.22 (m, 12H), 6.41 (d, 1H)
MS (ESI); m/z = 490.03/491.96 [M+H]+
【０１５１】
(調製実施例C)
【０１５２】
【化１７】
2021512064.tif 000021
【０１５３】
工程A
調製実施例Aからの表題化合物(0.482g、1.94mmol)のジクロロメタン(40mL)懸濁液に、トリエチルアミン(1.15mL、8mmol)及び4,4'-(クロロ(フェニル)メチレン)ビス(メトキシベンゼン)(DMTrt-Cl)(1.963g、5.8mmol)を添加した。4-(ジメチルアミノ)-ピリジン(0.046g、0.377mmol)の添加後、反応混合物を室温で3日間撹拌した。反応混合物をジクロロメタン(100mL)及び水(40mL)で希釈した。有機相を分離し、Na2SO4で脱水し、ろ過し、溶媒を真空中で除去した。残渣を、Biotage Isolera One精製システムを使用し、HP-Sil SNAPカートリッジ(50g)上で、酢酸エチル/n-ヘプタン勾配(5/95→100/0→100/0)を用いて精製して、表題化合物Cを淡黄色の固体(0.825g、72%)として得た。未反応の出発材料を、カートリッジを酢酸エチル/メタノール(90/10)でフラッシュすることによって回収して、出発材料をオフホワイト色の固体(0.042g、8.8%)として得た。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 9.23 (s, 1H), 8.23 (d, 1H), 8.13 (d, 1H), 7.39-7.31 (m, 6H), 7.29-7.25 (4H), 6.80 (d, 4H), 6.41 (dd, 1H), 3.81 (s, 6H)
【０１５４】
(実施例1)
【０１５５】
【化１８】
2021512064.tif 000022
【０１５６】
工程A
マイクロ波バイアル中の脱気した1,4-ジオキサン(4.3mL)及び水(1mL)の混合物に、ジクロロメタンとの[1,1'-ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン]ジクロロパラジウム(II)複合体(0.0084g、0.01mmol)、続いて、調製実施例Aの表題化合物(0.05g、0.2mmol)、(2-フルオロピリジン-4-イル)ボロン酸(0.035g、0.245mmol)及び炭酸セシウム(0.133g、0.41mmol)を添加した。次いで、反応混合物を砂浴中約115℃で6時間加熱した。反応混合物を酢酸エチル(60mL)及び水(20mL)で希釈し、有機相を分離し、Na2SO4で脱水し、ろ過し、溶媒を真空中で蒸発させた。暗色の残渣を、Biotage Isoleraシステムを使用し、シリカ(25g HP-SIL)上でのクロマトグラフィーによって、ジクロロメタン/メタノール勾配(100/0→95/5→90/10→80/20)を用いて精製して、表題化合物1をオフホワイト色の固体(0.033g、63%)として得た。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.50 (br-s, 1H), 9.45 (s, 1H), 8.83 (d, 1H), 8.56-8.52 (m, 1H), 8.43-8.39 (m, 1H), 8.19-8.14 (m, 2H), 7.92 (s, 1H), 7.54-7.50 (m, 1H)
MS (ESI): m/z = 265.04 [M+H]+
【０１５７】
(実施例2)
【０１５８】
【化１９】
2021512064.tif 000023
【０１５９】
工程A
調製実施例Aの表題化合物(0.430g、1.73mmol)のジクロロメタン(25mL)懸濁液に、トリエチルアミン(1.93mL、13.89mmol)及びジ-tert-ブチルジカーボネート(2.27g、10.02mmol)を添加した。4-(ジメチルアミノ)-ピリジン(0.042g、0.34mmol)の添加後、反応混合物を室温で3日間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、残渣を、Biotage Isolera One精製システムを使用し、HP-Sil SNAPカートリッジ(25g)上で、酢酸エチル/n-ヘプタン勾配(5/95→100/0→100/0)を用いて精製して、表題化合物を白色の固体(0.558g、92%)として得た。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 9.28 (s, 1H), 8.73 (d, 1H), 8.22 (d, 2H), 7.59 8d, 1H), 1.80 (s, 9H)
【０１６０】
工程B
マイクロ波バイアル中の脱気した1,4-ジオキサン(3mL)及び水(0.7mL)の混合物に、ジクロロ-メタンとの[1,1'-ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン]ジクロロパラジウム(II)複合体(0.0058g、0.007mmol)、続いて、上記工程Aからの表題化合物(0.05g、0.143mmol)、(6-フルオロピリジン-3-イル)ボロン酸(0.024g、0.17mmol)及び炭酸セシウム(0.092g、0.286mmol)を添加した。次いで、反応混合物を砂浴中約100℃で4時間加熱した。反応混合物を酢酸エチル(80mL)及び水(35mL)で希釈し、有機相を分離し、Na2SO4で脱水し、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。暗色の残渣を、Biotage Isoleraシステムを使用し、シリカ(12g、puriFlash、Interchim社)上でのクロマトグラフィーによって、ジクロロメタン/メタノール勾配(100/0→98/2→95/5→90/10→80/20)を用いて精製して、低極性のBoc-保護化合物(0.0255g、49%)及び高極性の表題化合物2をオフホワイト色の固体(0.0116g、31%)として得た。
高極性の表題化合物2:
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.40 (br-s, 1H), 9.40 (s, 1H), 9.05 (s, 1H), 8.78-8.70 (m, 2H), 8.51 (d, 1H), 8.02 (d, 1H), 7.50 (d, 1H), 7.36 (dd, 1H)
MS (ESI): m/z = 265.09 [M+H]+
低極性のBoc-保護化合物:
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 9.48 (s, 1H), 9.13 (d, 1H), 8.84-8.78 (m, 2H), 8.68 (d, 1H), 8.23 (d, 1H), 8.19 (d, 1H), 7.40 (dd, 1H), 1.75 8s, 9H)
【０１６１】
表題化合物2の合成は、異なる合成法によってWO2015/052105(実施例1)に最初に記載された。
【０１６２】
放射性標識化前駆体の合成
(実施例3-a)
【０１６３】
【化２０】
2021512064.tif 000024
【０１６４】
工程A
マイクロ波バイアル中の脱気した1,4-ジオキサン(4.3mL)及び水(1mL)の混合物に、ジクロロメタンとの[1,1'-ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン]ジクロロパラジウム(II)複合体(0.0084g、0.01mmol)、調製実施例Bの表題化合物(0.1g、0.2mmol)、2-ニトロ-4-(4,4,5,5,-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ピリジン(0.061g、0.245mmol)及び炭酸セシウム(0.133g、0.41mmol)を添加した。次いで、反応混合物を砂浴中約115℃で6時間加熱した。反応混合物を酢酸エチル(60mL)及び水(20mL)で希釈し、有機相を分離し、Na2SO4で脱水し、ろ過し、溶媒を真空中で蒸発させた。暗色の残渣を、Biotage Isoleraシステムを使用し、シリカ(25g pufiFlash-column、Interchim社)上でのクロマトグラフィーによって、酢酸エチル/n-ヘプタン勾配(5/95→100/0→100/0)を用いて精製して、表題化合物3-aを淡黄色の固体(0.082g、75%)として得た。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 9.32 (s, 1H); 8.56 (d, 1H), 8.48 (d, 1H), 8.33 (s, 1H); 8.30 (d, 1H), 7.85 (d, 1H), 7.69 (d, 1H), 7.58-7.54 (m, 5H), 7.32-7.25 (m, 10H), 6.48 (d, 1H)
MS (ESI): m/z = 534.28 [M+H]+.
【０１６５】
(実施例3-b)
方法a:
【０１６６】
【化２１】
2021512064.tif 000025
【０１６７】
工程A
3-a(0.0396g、0.074mmol)のジクロロメタン(5mL)溶液に、トリフルオロ酢酸(1.2mL)を添加した。反応混合物を室温で6時間撹拌し、メタノール(2mL)を添加した。溶媒を真空中で蒸発させ、残渣をメタノール(5mL)に溶解/懸濁した。溶媒を真空中で蒸発させ、残渣を再度メタノール(5mL)に溶解/懸濁した。溶媒を真空中で蒸発させ、残渣をジクロロメタン(2mL)に懸濁した。トリエチルアミン(1mL、7.2mmol)、ジ-tert-ブチルジカーボネート(0.098g、0.43mmol)及び4-(ジメチルアミノ)-ピリジン(0.0018g、0.014mmol)の添加後、反応混合物を室温で18時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチル(50mL)及び水(20mL)で希釈した。有機相を分離し、Na2SO4で脱水し、ろ過し、溶媒を真空中で除去した。残渣を、Biotage Isolera One精製システムを使用し、シリカ(25g pufiFlash、Interchim社)上での、酢酸エチル/n-ヘプタン勾配(5/95→100/0→100/0)を用いて精製して、非極性副生成物を溶出し、続いて酢酸エチル/メタノール(95/5)を用いて、表題化合物3-bを淡黄色の固体(0.0184g、63%)として得た。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 9.36 (s, 1H), 9.15 (s, 1H), 8.82-8.76 (m, 2H), 8.57 (d, 1H), 8.45 (d, 1H), 8.36 (d, 1H), 8.07 (d, 1H), 1.87 (s, 9H)
MS (ESI); m/z = 391.82 [M+H]+
【０１６８】
方法b:
【０１６９】
【化２２】
2021512064.tif 000026
【０１７０】
工程A
マイクロ波バイアル中の脱気した1,4-ジオキサン(2.2mL)及び水(0.5mL)の混合物に、ジクロロメタンとの[1,1'-ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン]ジクロロパラジウム(II)複合体(0.0042g、0.005mmol)、続いて、調製実施例Cの表題化合物(0.055g、0.1mmol)、2-ニトロ-4-(4,4,5,5,-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ピリジン(0.0305g、0.12255mmol)及び炭酸セシウム(0.067g、0.205mmol)を添加した。次いで、反応混合物を砂浴中約115℃で6時間加熱した。反応混合物を酢酸エチル(20mL)で希釈し、沈殿物を濾取し、水(10mL)及びメタノール(5mL)で洗浄し、空気乾燥して、3-c(0.0277g、95%)を得た。
【０１７１】
工程B
上記工程Aからの粗製表題化合物(0.0277g、0.095mmol)のジクロロメタン(4mL)懸濁液に、トリエチルアミン(1mL、7.2mmol)、ジ-tert-ブチルジカーボネート(0.2g、0.86mmol)及び4-(ジメチルアミノ)-ピリジン(0.0036g、0.028mmol)を添加した。反応混合物を室温で16時間撹拌し、酢酸エチル(50mL)及び水(20mL)で希釈した。有機相を分離し、Na2SO4で脱水し、濾過し、溶媒を真空中で除去した。残渣を、Biotage Isolera One精製システムを使用し、シリカ(25g pufiFlash、Interchim社)上で、酢酸エチル/n-ヘプタン勾配(5/95→100/0→100/0)を用いて精製して、非極性副生成物を溶出し、続いて酢酸エチル/メタノール(95/5)を用いて、表題化合物3-bを淡黄色の固体(0.0261g、70%)として得た。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 9.38 (s, 1H), 9.16 (s, 1H), 8.83-8.78 (m, 2H), 8.58 (d, 1H), 8.46 (d, 1H), 8.38 (d, 1H), 8.09 (d, 1H), 1.88 (s, 9H)
MS (ESI); m/z = 391.85 [M+H]+; 291.74 [M+H-Boc]+
【０１７２】
(実施例3-d)
【０１７３】
【化２３】
2021512064.tif 000027
【０１７４】
工程A
マイクロ波バイアル中の脱気した1,4-ジオキサン(2.2mL)及び水(0.5mL)の混合物に、ジクロロメタンとの[1,1'-ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン]ジクロロパラジウム(II)複合体(0.0042g、0.005mmol)、続いて、調製実施例Cの表題化合物(0.055g、0.1mmol)、2-ニトロ-4-(4,4,5,5,-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ピリジン(0.0305g、0.12255mmol)及び炭酸セシウム(0.067g、0.205mmol)を添加した。次いで、反応混合物を砂浴中約115℃で6時間加熱した。反応混合物を酢酸エチル(20mL)で希釈し、沈殿物を濾取し、水(10mL)及びメタノール(5mL)で洗浄し、空気乾燥して、3-cを灰色の固体(0.0277g、95%)として得た。
【０１７５】
工程B
上記工程Aからの粗製表題化合物(0.0277g、0.095mmol)のジクロロメタン(4mL)懸濁液に、トリエチルアミン(1mL、7.2mmol)、4,4'-(クロロ(フェニル)メチレン)ビス(メトキシベンゼン)(0.081g、0.29mmol)及び4-(ジメチルアミノ)-ピリジン(0.0036g、0.028mmol)を添加した。反応混合物を室温で18時間撹拌し、酢酸エチル(50mL)及び水(20mL)で希釈した。有機相を分離し、Na2SO4で脱水し、ろ過し、溶媒を真空中で除去した。残渣を、Biotage Isolera One精製システムを使用し、シリカ(25g pufiFlash、Interchim社)上で、酢酸エチル/n-ヘプタン勾配(5/95→100/0→100/0)を用いて精製して、表題化合物3-dを淡黄色の固体(0.0261g、44%)として得た。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 9.32 (s, 1H), 8.58 (d, 1H), 8.50 (d, 1h), 8.36 (s, 1H), 8.30 (d, 1H), 7.85 (d, 1H), 7.74 (d, 1H), 7.52-7.42 (m, 6H), 7.27-7.23 (m, 4H), 6.80 (d, 4H), 6.49 (d, 1H), 3.78 (s, 6H)
【０１７６】
(実施例3-e)
【０１７７】
【化２４】
2021512064.tif 000028
【０１７８】
工程A
市販のN,N-ジメチル-4-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ピリジン-2-アミン(0.25g、1mmol)をジクロロメタン(5mL)に溶解した。得られた撹拌溶液に、トリフルオロメタンスルホン酸メチル(0.124mL、1.1mmol)を室温で滴下添加した。溶液を室温で4時間撹拌した。反応混合物を濃縮してジクロロメタンを除去し、残渣を真空中で脱水して、黄色のガラス/泡状物を得、これを次の工程に直接使用した。
【０１７９】
工程B
マイクロ波バイアル中の脱気した1,4-ジオキサン(12mL)及び水(3mL)の溶液に、ジクロロメタンとの[1,1'-ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン]ジクロロパラジウム(II)複合体(0.034g、0.04mmol)、調製実施例Bの表題化合物(0.4g、0.816mmol)、上記工程Aからの粗製表題化合物(約1mmol)及び炭酸セシウム(0.544g、1.68mmol)を添加した。反応混合物を砂浴中約120℃で6時間加熱した。反応混合物を酢酸エチル(150mL)及び水(50mL)で希釈し、有機相を分離し、Na2SO4で脱水し、ろ過し、溶媒を真空中で蒸発させた。暗色の残渣を、Biotage Isoleraシステムを使用し、シリカ(25g HP-Ultra)上でのクロマトグラフィーによって、酢酸エチル/n-ヘプタン勾配(5/95→100/0→100/0)を用いて精製して、未反応の出発材料及び非極性副生成物を溶出した。次いで、勾配をジクロロメタン/メタノール(100/0→95/5→90/10)に変更して、ジメチルアミン誘導体を淡黄色のガラス状物(0.127g、29%;MS (ESI): m/z = 532.27 [M+H]+)として、及びメチルアミン誘導体を灰色の固体(0.0547g、13%; MS (ESI): m/z = 519.18 [M+H]+)として得た。勾配をジクロロメタン/メタノール(90/10→80/20)に再度変更し、(80/20)で維持して、表題化合物3-eを褐色の固体(0.104g、18%)として得た。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 9.47 (s, 1H); 8.89 (d, 1H), 8.55 (d, 1H), 8-35-8.32 (m, 2H), 8.29 (d, 1H), 7.63-7.57 (m, 5H), 7.48 (d, 1H), 7.34-7.25 (m, 10H), 6.48 (d, 1H), 3.60 (s, 9H)
MS (ESI): m/z = 546.26 [M+H]+
【０１８０】
(実施例3-f)
(トリメチルアンモニウム/NH前駆体)(ACI-3613)
【０１８１】
【化２５】
2021512064.tif 000029
【０１８２】
工程A
3-e(0.199g、0.364mmol)を、ジクロロメタン(10mL)に懸濁した。トリフルオロ酢酸(10mL)の添加後、反応混合物を室温で18時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、残渣をメタノール(10mL)に溶解し、溶媒を減圧下で除去した。残渣のメタノール処理を更に2回繰り返した。次いで、残渣をジクロロメタン(20mL)に懸濁し、約5分間超音波処理した。沈殿物を濾取し、ジクロロメタン(10mL)で洗浄し、空気乾燥して、表題化合物3-fを灰色の固体(0.127g、83%)として得た。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 13.76 (br-s, 1H), 9.84 (s, 1H); 8.12 (d, 1H), 8.89 (d, 1H), 8.80 (d, 1H), 8.75 (s, 1H), 8.54-8.50 (m, 2H), 8.04 (d, 1H), 3.72 (s, 9H)
MS (ESI): m/z = 303.91 [M+H]+
【０１８３】
(実施例4-a)
【０１８４】
【化２６】
2021512064.tif 000030
【０１８５】
工程A
マイクロ波バイアル中の脱気した1,4-ジオキサン(3mL)及び水(0.7mL)の混合物に、ジクロロメタンとの[1,1'-ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン]ジクロロパラジウム(II)複合体(0.0058g、0.007mmol)、続いて、実施例2の工程Aからの表題化合物(0.05g、0.143mmol)、2-ニトロ-5-(4,4,5,5,-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ピリジン(0.0428g、0.17mmol)及び炭酸セシウム(0.092g、0.286mmol)を添加した。次いで、反応混合物を砂浴中約100℃で4時間加熱した。反応混合物を酢酸エチル(80mL)及び水(35mL)で希釈し、有機相を分離し、Na2SO4で脱水し、ろ過し、溶媒を真空中で蒸発させた。暗色の残渣を、Biotage Isoleraシステムを使用し、シリカ(12g、puriFlash、Interchim社)上でのクロマトグラフィーによって、ジクロロメタン/メタノール勾配(100/0→98/2→95/5→90/10→80/20)を用いて精製して、表題化合物4-aを淡黄色の固体(0.0173g、31%)として得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3/CD3OD) δ = 9.45 (d, 1H), 9.32 (s, 1H), 8.93 (dd, 1H), 8.68-8.64 (m, 2H), 8.46 (d, 1H), 8.35 (d, 1H), 8.14 (d, 1H), 1.82 (s, 9H)
MS (ESI): m/z = 392.13 [M+H]+
【０１８６】
表題化合物4-aの合成は、異なる合成法によってWO2015/052105(実施例3a)に最初に記載された。
【０１８７】
18Fを用いた前駆体の放射性標識化
放射性標識化前駆体の例
【０１８８】
【化２７】
2021512064.tif 000031
【０１８９】
図3に示される通りのtracerlab FXで実施した一般的な放射性標識化方法A(放射性標識化、脱保護、HPLC及びSPE)  -  比較実施例
[18F]フッ化物を、Sep-Pak Accell Plus QMA lightカートリッジ(Waters社)上で捕捉し、K2CO3/Kryptofix(登録商標)2.2.2溶液で溶出した。95℃でHe又はN2流を使用して水を除去し、MeCN(1mL)で共蒸発乾固させた。その後、溶解した前駆体の溶液を乾燥したK[18F]F-Kryptofix複合体に添加した。反応バイアルを密封し、150℃で15分間加熱した。その後、酸(HCl、H2SO4又はH3PO4)を添加し、混合物を150℃で10分間加熱した。反応混合物をNaOH 1mL及び2.4mLのprepで希釈した。HPLC移動相及び粗生成物を半分取HPLC(例えば、Phenomenex社、Gemini C18、5μm、250×10mm)を介して4mL/分で精製した。単離したトレーサーを水(20mL+10mg/mLアスコルビン酸ナトリウム)で希釈し、C-18 Plusカートリッジ(Waters社)上で捕捉し、水(10mL+10mg/mLアスコルビン酸ナトリウム)で洗浄し、エタノール(1mL)で溶出し、水(14mL+10mg/mLアスコルビン酸ナトリウム)と混合した。
【０１９０】
図3に示される通りのtracerlab FXで実施した一般的な放射性標識化方法B(放射性標識化、HPLC及びSPE)  -  比較実施例
[18F]フッ化物を、Sep-Pak Accell Plus QMA lightカートリッジ(Waters社)上で捕捉し、K2CO3/Kryptofix(登録商標)2.2.2溶液で溶出した。95℃でHe又はN2流を使用して水を除去し、MeCN(1mL)で共蒸発乾固させた。その後、溶解した前駆体の溶液を乾燥したK[18F]F-Kryptofix複合体に添加した。反応バイアルを密封し、150℃で15分間加熱した。反応混合物をNaOH 0.5〜1mL及び2.4mLのprepで希釈した。HPLC移動相及び粗生成物を半分取HPLC(例えば、Phenomenex社、Gemini C18、5μm、250×10mm)を介して4mL/分で精製した。単離したトレーサーを水(20mL+10mg/mLアスコルビン酸ナトリウム)で希釈し、C-18 Plusカートリッジ(Waters社)上で捕捉し、水(10mL+10mg/mLアスコルビン酸ナトリウム)で洗浄し、エタノール(1mL)で溶出し、水(14mL+10mg/mLアスコルビン酸ナトリウム)と混合した。
【０１９１】
図4に示される通りのIBA Synthera+Synthera HPLCで実施した一般的な放射性標識化方法C(放射性標識化、HPLC)
[18F]フッ化物を、Sep-Pak Accell Plus QMA lightカートリッジ(Waters社)上で捕捉し、K2CO3/Kryptofix(登録商標)2.2.2溶液で溶出した。95〜110℃でHe又はN2流を使用して水を除去し、共蒸発乾固させた。その後、溶解した前駆体の溶液を乾燥したK[18F]F-Kryptofix複合体に添加した。反応バイアルを密封し、150℃で15分間加熱した。反応混合物を1M H3PO4 0.5〜1mL及び3〜3.5mLのprepの水性成分で希釈した。HPLC移動相及び粗生成物を半分取HPLC(例えば、Waters社XBridge Peptide BEH C18、130Å、10μm、10mm×250mm)を介して3〜6mL/分で精製した。生成物を含有する画分(5〜10mL)を収集し、EtOH 0〜2mL、水10〜20mL並びにリン酸緩衝液濃縮物(Braun社、20mLの注射用水中、3.05gのリン酸一水素二ナトリウム十二水和物、0.462gのリン酸二水素ナトリウム二水和物)0〜4mL及び/又はアスコルビン酸ナトリウム(100〜1000mg)及び/又はクエン酸ナトリウム(100〜1000mg)及び/又はゲンチジン酸(20〜200mg)を含有する希釈媒体で希釈した。
【０１９２】
図3に示される通りのtracerlab FXで実施した一般的な放射性標識化方法D(放射性標識化、HPLC)
[18F]フッ化物を、Sep-Pak Accell Plus QMA lightカートリッジ(Waters社)上で捕捉し、K2CO3/Kryptofix(登録商標)2.2.2溶液で溶出した。95℃でHe又はN2流を使用して水を除去し、MeCN(1mL)で共蒸発乾固させた。その後、溶解した前駆体の溶液を乾燥したK[18F]F-Kryptofix複合体に添加した。反応バイアルを密封し、150℃で15分間加熱した。反応混合物を1M H3PO4 0.5〜1mL及び3〜3.5mLのprepの水性成分で希釈した。HPLC移動相及び粗生成物を半分取HPLC(例えば、Waters社XBridge Peptide BEH C18、130Å、10μm、10mm×250mm又はGemini 5μm C18、250×10mm、Phenomenex:00G-4435-N0)を介して3〜6mL/分で精製した。生成物を含有する画分(5〜10mL)を収集し、EtOH 0〜2mL、水10〜20mL並びにリン酸緩衝液濃縮物(Braun社)0〜4mL及び/又はアスコルビン酸ナトリウム(100〜1000mg)及び/又はクエン酸ナトリウム(100〜1000mg)及び/又はゲンチジン酸(20〜200mg)を含有する希釈媒体で希釈した。
【０１９３】
図3に示される通りのtracerlab FXで実施した一般的な放射性標識化方法E(放射性標識化、脱保護、HPLC)
[18F]フッ化物を、Sep-Pak Accell Plus QMA lightカートリッジ(Waters社)上で捕捉し、K2CO3/Kryptofix(登録商標)2.2.2溶液で溶出した。95℃でHe又はN2流を使用して水を除去し、MeCN(1mL)で共蒸発乾固させた。その後、溶解した前駆体の溶液を乾燥したK[18F]F-Kryptofix複合体に添加した。反応バイアルを密封し、150℃で15分間加熱した。その後、0.5M H2SO4 1mLを添加し、混合物を100℃で10分間加熱した。反応混合物を1M NaOH 0.5〜1mL及び2〜3mLのprepの水性成分で希釈した。HPLC移動相及び粗生成物を半分取HPLC(例えば、Waters社XBridge Peptide BEH C18、130Å、10μm、10mm×250mm又はGemini 5μm C18、250×10mm、Phenomenex:00G-4435-N0)を介して3〜6mL/分で精製した。生成物を含有する画分(5〜10mL)を収集し、EtOH 0〜2mL、水10〜20mL並びにリン酸緩衝液濃縮物(Braun社)0〜4mL及び/又はアスコルビン酸ナトリウム(100〜1000mg)及び/又はクエン酸ナトリウム(100〜1000mg)及び/又はゲンチジン酸(20〜200mg)を含有する希釈媒体で希釈した。
【０１９４】
図4に示される通りのIBA Synthera+Synthera HPLCで実施した一般的な放射性標識化方法F(放射性標識化、脱保護、HPLC)
[18F]フッ化物を、Sep-Pak Accell Plus QMA lightカートリッジ(Waters社)上で捕捉し、K2CO3/Kryptofix(登録商標)2.2.2溶液で溶出した。95〜110℃でHe又はN2流を使用して水を除去し、共蒸発乾固させた。その後、溶解した前駆体の溶液を乾燥したK[18F]F-Kryptofix複合体に添加した。反応バイアルを密封し、110〜120℃で5〜10分間加熱した。フッ素化後、1M H3PO4 0.5〜1mLを添加し、反応混合物を100〜110℃で10〜15分間加熱した。混合物を3〜3.5mLのprepの水性成分で希釈した。HPLC移動相及び粗生成物を半分取HPLC(例えば、Waters社XBridge Peptide BEH C18、130Å、10μm、10mm×250mm)を介して3〜6mL/分で精製した。生成物を含有する画分(5〜10mL)を収集し、EtOH 0〜2mL、水10〜20mL並びにリン酸緩衝液濃縮物(Braun社、20mLの注射用水中、3.05gのリン酸一水素二ナトリウム十二水和物、0.462gのリン酸二水素ナトリウム二水和物)0〜4mL及び/又はアスコルビン酸ナトリウム(100〜1000mg)及び/又はクエン酸ナトリウム(100〜1000mg)及び/又はゲンチジン酸(20〜200mg)を含有する希釈媒体で希釈した。
【０１９５】
放射化学純度の決定
放射化学純度を分析的HPLC、例えば、カラム:Atlantis T3、Waters社、100×4.6mm、3μm、100;移動相A:40mM酢酸ナトリウム、氷酢酸でpH5.0に最終調整;移動相B:アセトニトリル中35%メタノール;流速:1.8mL/分;勾配:0〜5分15〜32% B、5〜8分32〜80% B、8〜12分80% B、12〜13分80〜15% B、13〜16分15% Bによって決定した。
【０１９６】
18F-Ibの合成についての結果:
【０１９７】
【表２Ａ】
2021512064.tif 000032
【０１９８】
【表２Ｂ】
2021512064.tif 000033
【図１】
2021512064.tif 000037
【図２】
2021512064.tif 000038
【図３】
2021512064.tif 000039
【図４】
2021512064.tif 000040
【手続補正書】
【提出日】令和2年9月24日(2020.9.24)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Iの化合物
【化１】
2021512064.tif 000041
を調製する方法であって、
A)式IIの化合物
【化２】
2021512064.tif 000042
(式中、Xは、H又はPGであり、
LGは、脱離基であり、
PGは、アミン保護基である)
を18Fフッ素化薬と反応させる工程、及び
B)任意選択で、XがPGである場合、保護基PGを切断する工程、及び
C)得られた式Iの化合物を、エタノール及び水を含む移動相を使用する高速液体クロマトグラフィー(HPLC)にかける工程
を含む、方法。
【請求項２】
XがPGであり、工程Bが存在せず、保護基PGが工程Aにおいて切断される、又は、XがPGであり、保護基PGが工程Bにおいて切断される、請求項1に記載の方法。
【請求項３】
移動相中のエタノールの水に対する比が、約5/95v/v〜約80/20v/vである、請求項1又は2に記載の方法。
【請求項４】
移動相のpHが、約0〜約8、好ましくは約1〜約3である、請求項1から3のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
移動相が、アルカリ金属リン酸二水素、ジアルカリ金属リン酸水素、トリアルカリ金属リン酸塩、アルカリ金属酢酸塩、アルカリ金属ギ酸塩及びモノ/ジ/トリアルカリ金属クエン酸塩から好ましくは選択される緩衝液を更に含む、請求項1から4のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
高速液体クロマトグラフィー(HPLC)が、約50〜約400bar、好ましくは約50〜約250barの圧力下で行われる、請求項1から5のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
高速液体クロマトグラフィー(HPLC)により、式Iの化合物を含む画分が得られ、この画分が、工程D)滅菌濾過にかけられる、請求項1から6のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
工程Cの後に、式Iの化合物の固相抽出を含まず、好ましくは、工程Cの前又は後に式Iの化合物の固相抽出を含まない、請求項1から7のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
式Iの化合物が、工程Cの高速液体クロマトグラフィー(HPLC)の後にクロマトグラフィーにかけられず、好ましくは、式Iの化合物が、工程Cの高速液体クロマトグラフィー(HPLC)以外のクロマトグラフィーにかけられない、請求項1から8のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
請求項1から9のいずれか一項に記載の方法によって得ることができる式Iの化合物
【化３】
2021512064.tif 000043
及び任意選択で診断用に許容される担体、希釈剤、アジュバント又は賦形剤を含む診断用組成物。
【請求項１１】
タウ凝集体の画像化に使用するための、特に、タウ凝集体のポジトロン放出断層撮影による画像化に使用するための、請求項10に記載の組成物。
【請求項１２】
タウ凝集体に関連する障害の診断に使用するため、又はタウオパチーの診断に使用するための組成物であって、特には、診断がポジトロン放出断層撮影によって行われる、請求項10に記載の組成物。
【請求項１３】
障害が、アルツハイマー病(AD)、家族性AD、クロイツフェルト-ヤコブ病、パンチドランカー、ダウン症候群、ゲルストマン-シュトロイスラー-シャインカー病、封入体筋炎、プリオンタンパク質脳アミロイド血管症、外傷性脳損傷(TBI)、筋萎縮性側索硬化症、グアムのパーキンソニズム痴呆複合、神経原線維変化を伴う非グアム人運動ニューロン疾患、嗜銀顆粒性疾患、大脳皮質基底核変性症(CBD)、石灰化を伴うびまん性神経原線維変化、第17染色体に関連するパーキンソニズムを伴う前頭側頭型認知症、ハラーフォルデン-シュパッツ病、多系統萎縮症、ニーマン-ピック病C型、淡蒼球橋黒質変性症、ピック病(PiD)、進行性皮質下グリオーシス、進行性核上性麻痺(PSP)、亜急性硬化性全脳炎、もつれのみの認知症、脳炎後パーキンソニズム、筋緊張性ジストロフィー、タウ全脳炎、アストロサイトに関連するAD、特定のプリオン病(タウを伴うGSS)、LRRK2における突然変異、慢性外傷性脳炎、家族性英国型認知症、家族性デンマーク型認知症、前頭側頭葉変性症、グアドループ島パーキンソニズム、脳の鉄蓄積を伴う神経変性、SLC9A6関連精神遅滞、小球体グリア含有物を伴う白質タウオパチー、外傷性ストレス症候群、てんかん、レビー小体認知症(LBD)、アミロイドーシスを伴う遺伝性脳出血(オランダ型)、軽度認知機能障害(MCI)、多発性硬化症、パーキンソン病、不定型パーキンソニズム、HIV関連認知症、成人発症型糖尿病、老人性心臓アミロイドーシス、内分泌腫瘍、緑内障、眼性アミロイドーシス、原発性網膜変性症、黄斑変性(加齢黄斑変性(AMD)等)、視神経ドルーゼン、視神経症、視神経炎、格子状ジストロフィー、ハンチントン病、虚血性脳卒中及びADにおける精神異常;好ましくは、アルツハイマー病から選択される、請求項12に記載の組成物。
【請求項１４】
障害が、アルツハイマー病(AD)、パーキンソン病、不定型パーキンソニズム、進行性核上性麻痺(PSP)又はピック病(PiD)である、請求項13に記載の組成物。
【請求項１５】
分析参照として、又はインビトロスクリーニングツールとして使用するための請求項10に記載の組成物。
【請求項１６】
試料又は患者において、タウ凝集体に関連する障害の診断のためのデータを収集する方法であって、
(a)タウ凝集体を含有することが疑われる試料又は特定の身体部分若しくは身体領域を、式Iの化合物を含有する請求項10に記載の組成物と接触させる工程、
(b)式Iの化合物をタウ凝集体に結合させる工程、
(c)タウ凝集体に結合した式Iの化合物を検出する工程、及び
(d)任意選択で、タウ凝集体と結合する式Iの化合物の存在又は非存在を、試料又は特定の身体部分若しくは身体領域におけるタウ凝集体の存在又は非存在と相関付ける工程
を含む、方法。
【請求項１７】
(a)タウ凝集体を含有することが疑われる試料又は特定の身体部分若しくは身体領域を、タウ凝集体に特異的に結合する式Iの化合物を含有する、請求項10に記載の組成物と接触させる工程、
(b)式Iの化合物をタウ凝集体に結合させて、化合物/タウ凝集体複合体を形成する工程、
(c)化合物/タウ凝集体複合体の形成を検出する工程、
(d)任意選択で、化合物/タウ凝集体複合体の存在又は非存在を、試料又は特定の身体部分若しくは身体領域におけるタウ凝集体の存在又は非存在と相関付ける工程、及び
(e)任意選択で、化合物/タウ凝集体の量を、正常対照値と比較する工程
を含む、方法であって、
(i)試料において又はインサイチュで式Iの化合物を含有する請求項10に記載の組成物のタウ凝集体への特異的結合を検出する工程を含む、患者におけるタウ凝集体に関連する障害の傾向を決定するためのデータを収集する方法、
(ii)医薬で処置されたことがある、タウ凝集体に関連する障害を患う患者における残存障害をモニタリングするためのデータを収集する方法、又は
(iii)タウ凝集体に関連する障害を患う、医薬で処置されている患者の応答性を予測するためのデータを収集する方法。
【国際調査報告】
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