(57)【要約】  一次検体（特に、マグネシウム）および別のイオン（特に、カルシウム）に対して選択性を有するイオン選択性膜を調製する方法であって、ａ）イオノフォア（特に、１，１０−フェナントロリン）、ｂ）前記一次検体を含有する親油性塩（特に、ヘミマグネシウムビス［４−オクチルフェニル］ホスフェート）、およびｃ）前記他のイオンを含有する親油性塩（特に、ヘミカルシウムビス［４−オクチルフェニル］ホスフェート）を添加するステップを含む、方法が提示される。また、前記方法を用いて調製されるイオン選択性膜、特に、マグネシウムイオンに対して選択性のある膜が提示される。さらなる態様において、このような膜を含む電極および電位差測定センサー、ならびに試料中のイオン濃度を決定するためのこれらの使用が提示される。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
一次検体および別のイオンに対して選択性を有するイオン選択性膜を調製する方法であって、任意の順番で
ａ）イオノフォア、
ｂ）前記一次検体を含有する親油性塩、および
ｃ）前記他のイオンを含有する親油性塩
を添加するステップを含む、方法。
【請求項２】
ｂ）に定義される親油性塩とｃ）に定義される親油性塩とのモル比が、膜が前記一次検体および前記他のイオンを含有するリンス液に曝露される場合、前記膜が前記ｃ）に定義される親油性塩を含有しない場合より平衡時間が短くなるようなモル比であり、好ましくは平衡時間がゼロである、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
ｂ）に定義される親油性塩とｃ）に定義される親油性塩とのモル比が、９９：１〜１：１、例えば、２０：１〜１：１、例えば、２０：１〜３：１、例えば、１０：１〜４：１である、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
一次検体が、マグネシウムイオン、カルシウムイオン、亜鉛イオンまたはリン酸イオンである、請求項１から３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
一次検体がマグネシウムイオンであり、ｂ）に定義される親油性塩がマグネシウム塩であり、ｃ）に定義される親油性塩がカルシウム塩である、請求項１から４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
一次検体がマグネシウムイオンであり、ｂ）に定義される親油性塩がマグネシウム塩であり、ｃ）に定義される親油性塩がカルシウム塩であり、リンス液が１：１〜１：４のモル比、例えば、１：１．５〜１：２．５のモル比、例えば、１：２のモル比でマグネシウムイオンとカルシウムイオンとを含む、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
親油性マグネシウム塩ｂ）と親油性カルシウム塩ｃ）とのモル比が、９９：１〜１：１、例えば、２０：１〜１：１、例えば、２０：１〜３：１、例えば、１０：１〜４：１、例えば、１７：３である、請求項５または６に記載の方法。
【請求項８】
イオノフォアが、１，１０−フェナントロリンまたはその置換形態であるフェナントロリン化合物である、請求項１から７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
ｂ）およびｃ）に定義される親油性塩が、酸性基を含み、例えば、式Ｉ
【化１】
2021528661.tif 000032
（式中、
Ａは酸性基であり、
Ｒ１８、Ｒ１９およびＲ２０のうちの１つ、２つまたは３つすべては、Ｃ４〜１８アルキル基、Ｃ４〜１８アルケニル基、Ｃ４〜１８アルキニル基またはアミド含有Ｃ４〜１８基であるＣ４〜１８基であり、前記Ｃ４〜１８基は、フェニル基から数えて１、２および３位が直鎖であるか、または前記１、２および３位に合計で側鎖を１つのみ有し、
他のＲ１８、Ｒ１９およびＲ２０は、独立に、水素または直鎖Ｃ１〜１８アルキル基である）
の構造を含む化合物の親油性塩である、請求項１から８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
ｂ）に定義される親油性塩が、ヘミマグネシウムビス［４−オクチルフェニル］ホスフェートであり、ｃ）に定義される親油性塩が、ヘミカルシウムビス［４−オクチルフェニル］ホスフェートである、請求項１から９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
一次検体および別のイオンに対して選択性を有するイオン選択性膜を調製する方法であって、
ａ）スペーサーを介して酸性基に共有結合しているイオノフォアおよび一次検体の塩である親油性塩、ならびに
ｂ）前記イオノフォアおよび前記他のイオンの塩である親油性塩
を添加するステップを含む、方法。
【請求項１２】
一次検体および１つまたは複数の他のイオンに対して選択性を有するイオン選択性膜であって、水溶液と接触しておらず、
ａ）イオノフォア、
ｂ）前記一次検体を含有する親油性塩、および
ｃ）前記他のイオンを含有する親油性塩
を含む、膜。
【請求項１３】
一次検体がマグネシウムイオン、カルシウムイオン、亜鉛イオンまたはリン酸イオンである、請求項１２に記載の膜。
【請求項１４】
一次検体および別のイオンに対して選択性を有するイオン選択性膜であって、
ａ）スペーサーを介して酸性基に共有結合しているイオノフォアおよび前記一次検体の塩である親油性塩、ならびに
ｂ）前記イオノフォアおよび前記他のイオンの塩である親油性塩
を含み、
好ましくは水溶液と接触していない、
膜。
【請求項１５】
試料中のイオン濃度の測定における使用のためのイオン選択性膜を製造する方法であって、前記膜が、一次検体および別のイオンに対して選択性を有し、前記方法が、
ｉ）試料の分析直前に前記膜が保持されるリンス液を選択するステップであり、前記リンス液が、前記一次検体および前記他のイオンを含有する、ステップと、
ｉｉ）イオノフォア（ａ）、前記一次検体を含有する親油性塩（ｂ）、および前記他のイオンを含有する親油性塩（ｃ）を含むイオン選択性膜の組成を選択するステップであり、前記ｂ）に定義される親油性塩と前記ｃ）に定義される親油性塩とのモル比が、前記膜が前記リンス液に曝露される場合、前記膜が前記（ｃ）に定義される親油性塩を含有しない場合より、平衡時間が短くなるようなモル比であり、好ましくは、膜中の前記親油性塩（ｂ）と（ｃ）とのモル比が、平衡が不要であるように選択される、ステップと、
ｉｉｉ）請求項１に記載の方法のステップｉｉ）において選択された組成を有する膜を製造するステップと
を含む、方法。
【請求項１６】
液体試料のマグネシウムイオン濃度を決定するための電極であって、請求項１２または１３に記載の膜を含む、電極。
【請求項１７】
液体試料のマグネシウムイオン濃度を決定するための電位差測定センサーであって、請求項１６に記載の電極および参照電極を含む、電位差測定センサー。
【請求項１８】
液体試料のマグネシウムイオン濃度を決定する方法であって、前記試料と請求項１６に記載の電極または請求項１７に記載の電位差測定センサーとを接触させるステップと、前記電極またはセンサーから得られる信号に基づき前記マグネシウムイオン濃度を決定するステップとを含む、方法。
【請求項１９】
疾患または障害を診断する方法であって、請求項１８に記載の方法を対象の試料について行うステップを含む、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、イオン選択性膜およびその調製方法、特に、マグネシウムイオンに対して選択性のある膜およびその調製に関する。さらなる態様において、本発明は、このような膜を含む電極および電位差測定センサー、ならびに試料中のイオン濃度を決定するためのこれらの使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
イオン選択性電極は、電位差測定センサーで使用した場合、他の干渉イオンの存在下での検体イオンの活性の決定を可能にする電極である。各種アニオンおよびカチオンに対して選択性のある広範な電極およびセンサーが利用できる。しかし、特定のイオンに対して絶対的選択性を得ることは困難であり、時には不可能である。このように、一部の電極で用いられるイオン選択性膜は、一次検体と他のイオンとを完全に区別しない。これは、例えば、他の二価イオンと比べて特定の二価イオンに対して絶対的選択性を有さない、二価イオン選択性電極がしばしば当てはまる。
【０００３】
マグネシウムは、人体内の普通金属であり、化学および生化学プロセスで重要な役割を果たす。体内のマグネシウムは、タンパク質と結合し、アニオンと錯体を形成するか、または遊離イオン化分画（ｉＭｇ）として存在するかのいずれかである。ｉＭｇ分画は、例えば、神経伝導または骨格筋、心筋もしくは子宮筋の収縮におけるイオンチャネル調節剤として、いくつかの生理学的役割を果たす。入院患者における研究では、低マグネシウム血症（１１％）および高マグネシウム血症（９．３％）の有病率が高いことが見出された（Ｗｏｎｇら（１９８３）Ａｍ  Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｐａｔｈｏｌ  ７９：３４８）。
【０００４】
ｉＭｇの特異的な測定は困難であり、歴史的に、臨床検査は、マグネシウム全体のアッセイに依存する場合が多かった。マグネシウムイオン選択性センサーは、ＷＯ９２／１６８３１（Ｎｏｖａ  Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ  Ｃｏｒｐ．）に記載されており、これはマグネシウムイオン選択性化合物として１，１０−フェナントロリンを含むマグネシウム選択性膜を開示する。ＷＯ２０１５／１６０７５５（Ｓｉｅｍｅｎｓ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ  Ｉｎｃ．）は、三脚型立体化学構造を有するイオノフォア、親油性ホウ酸塩およびポリマーマトリックスを含む、イオン化マグネシウムを検出するための膜を記載する。しかし、これらのマグネシウムイオン選択性膜は依然として、マグネシウムイオンよりも他のイオン、特にカルシウムイオンに対して選択性を有する。
【０００５】
一次検体に対して絶対的選択性を有さないイオン選択性電極は、このような電極がアナライザに取り付けられ、リンス液などの溶液に曝露されると、平衡プロセスが開始し、電極からの一次検体がリンス液からの他のイオンで部分的に置き換えられるため、しばしば、使用時に長い立ち上がり時間を必要とする。これは２つの結果をもたらす：
１）電極前面のリンスの組成は、一次検体の放出および他のイオンの取り込みにより変化する。これは、その後の測定で問題となり得る（一定の組成のリンスが想定される場合）
２）電極の電気化学的特性は、膜が組成を変化させるため安定ではなく、したがって、性能要件を満たすために、頻繁な較正が必要とされる。
【０００６】
したがって、このように調製されたイオン選択性電極の最初の使用時、十分なレベルの平衡を可能にするのにコンディショニング時間（立ち上がり時間）が必要とされる。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
したがって、より迅速な立ち上がり時間を有する改善されたイオン選択性電極が必要とされている。これらの必要性は、本発明によって対処される。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
第１の主要な態様において、本発明は、一次検体および別のイオンに対して選択性を有するイオン選択性膜を調製する方法であって、任意の順番で
ａ）イオノフォア、
ｂ）前記一次検体を含有する親油性塩、および
ｃ）前記他のイオンを含有する親油性塩
を添加するステップを含む、方法に関する。
【０００９】
さらなる態様において、本発明は、一次検体および１つまたは複数の他のイオンに対して選択性を有するイオン選択性膜であって、水溶液と接触しておらず、
ａ）イオノフォア、
ｂ）前記一次検体を含有する親油性塩、および
ｃ）前記他のイオンを含有する親油性塩
を含む、膜に関する。
【００１０】
さらにさらなる態様において、本発明は、試料中のイオン濃度の測定における使用のためのイオン選択性膜を製造する方法であって、前記膜が、一次検体および別のイオンに対して選択性を有し、前記方法が、
ｉ）試料の分析直前に膜が保持されるリンス液を選択するステップであり、前記リンス液が、前記一次検体および前記他のイオンを含有する、ステップと、
ｉｉ）イオノフォア（ａ）、前記一次検体を含有する親油性塩（ｂ）、および前記他のイオンを含有する親油性塩（ｃ）を含むイオン選択性膜の組成を選択するステップであり、ｂ）に定義される親油性塩とｃ）に定義される親油性塩とのモル比が、膜が前記リンス液に曝露される場合、膜が（ｃ）に定義される親油性塩を含有しない場合より、平衡時間が短くなるようなモル比であり、好ましくは、膜中の親油性塩（ｂ）と（ｃ）とのモル比が、平衡が不要であるように選択される、ステップと、
ｉｉｉ）本発明の方法のステップｉｉ）において選択された組成を有する膜を製造するステップと
を含む、方法に関する。
【００１１】
さらなる態様において、本発明は、一次検体および別のイオンに対して選択性を有する、イオン選択性膜を調製する方法であって、
ａ）スペーサーを介して酸性基に共有結合しているイオノフォアおよび一次検体の塩である親油性塩、ならびに
ｂ）前記イオノフォアおよび前記他のイオンの塩である親油性塩
を添加するステップを含む、方法に関する。
【００１２】
さらにさらなる態様において、本発明は、一次検体および別のイオンに対して選択性を有する、イオン選択性膜であって、
ａ）スペーサーを介して酸性基に共有結合しているイオノフォアおよび一次検体の塩である親油性塩、ならびに
ｂ）前記イオノフォアおよび前記他のイオンの塩である親油性塩
を含み、
好ましくは水溶液と接触していない、
膜に関する。
【００１３】
さらなる態様において、本発明は、液体試料のイオン濃度を決定するための電極であって、本明細書に定義される本発明の膜を含む電極を提供する。
さらにさらなる態様において、本発明は、液体試料のイオン濃度を決定するための電位差測定センサーであって、本発明の膜または本発明の電極を含む、電位差測定センサーを提供する。
【００１４】
さらに、本発明は、液体試料のイオン濃度を決定する方法であって、前記試料と本発明の電極または本発明の電位差測定センサーとを接触させるステップと、前記電極または電位差測定センサーから得られる信号に基づきマグネシウムイオン濃度を決定するステップとを含む、方法に関する。本発明はまた、疾患または障害を診断する方法であって、イオン濃度を本発明に従って対象の試料について決定する方法を行うステップを含む、方法に関する。
【００１５】
本発明のこれらおよび他の態様および実施形態を以下にさらに詳細に記載する。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
定義
膜または電極の文脈において本明細書で使用する「選択性」という用語は、特定のイオンに対する選好を指す。本明細書で使用する「選択性」は、絶対的または排他的選択性を意味しない。すなわち、膜は、複数のイオン、例えば、マグネシウムイオンおよびカルシウムイオンに対して選択性であってよい。
【００１７】
本発明で使用する「一次検体」という用語は、イオン選択性電極がそれに対して設計されるカチオンまたはアニオン、典型的には、電極中の膜が最も選択性である、すなわち最も高い選好を有するイオンを指す。重要な実施形態において、一次検体は二価イオン、例えば、マグネシウムである。
【００１８】
「平衡時間」という用語は、電極の膜と、膜が接触する溶液との間で平衡に到達するのに必要な時間を指す。平衡時間中、電極からのイオンは、膜が選択性を有する溶液からの他のイオンで置き換えられる。
【００１９】
本明細書で使用する「リンス液」という用語は、膜が試料との接触直前に接触する溶液、典型的には、水溶液を指す。
本明細書で使用する「イオノフォア」という用語は、イオンを可逆的に結合する化合物、例えば、イオンを膜全体に輸送できる化合物を指す。
【００２０】
特に、「親油性塩」の文脈において、本明細書で使用する「親油性」という用語は、脂肪、油、脂質または非極性溶媒に溶解する化学化合物の能力を指す。
「酸性基」という用語は、水素イオンを塩基に供与してイオン化することができる基を指す。
【００２１】
本明細書で使用する「塩」という用語は、その負電荷を平衡させるカチオン種と共にある、酸が脱プロトン化された形態を指す。
本明細書で使用する１，１０−フェナントロリンの「置換形態」という用語は、それに対する１つまたは複数の置換を含む１，１０−フェナントロリン骨格を含む物質を指す。「置換」という用語は、Ｒ基またはＲ残基での１，１０−フェナントロリン上の水素の置き換えを指す。同様に、「置換アリール」は、水素が異なる残基または基で置き換えられているアリール基を指す。化学基の文脈において「Ｃｘｘ〜ｙｙ」という用語は、該基が、ＸＸ〜ＹＹ個の炭素原子、すなわちＸＸから出発して、ＹＹを含むＹＹまでの任意の数を含有することを示し、例えば、Ｃ１〜１８アルキル基は、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７または１８個の炭素原子を含有する。別段の記載がない限り、このような基は直鎖または分岐であり得る。
【００２２】
化学基を指す場合、「アルキル」、「アリール」、「アルケニル」および「アルキニル」という用語は、当技術分野でのその通常の意味を有する。いくつかの実施形態において、このような基は、１８個以下の炭素原子を含む。「分岐アルキル」という用語は、完全な直鎖ではない、すなわち、少なくとも１つの側鎖を有するアルキル基を指す。
【００２３】
試料中のマグネシウムイオンなどのイオンの濃度の決定の文脈において本明細書で使用する「濃度」という用語は、測定された試料のものと等しいイオン活性を有する、標準化された溶液マトリックス中のイオンの化学量論濃度（参照スケール）を指す。ＩＦＣＣガイドラインを参照のこと（Ｂｅｎ  Ｒａｙａｎａら、（２００８）Ｃｌｉｎ  Ｃｈｅｍ  Ｌａｂ  Ｍｅｄ  ４６（１）：２１）。
【００２４】
ポリマーに関連して本明細書で使用する分子量という用語は、
Ｍｗ＝ΣＷｉＭｉ
（式中、Ｗｉは、分子量Ｍｉを有するポリマーの重量分率である）
によって算出される、重量平均分子量を指す。
【００２５】
本発明のさらなる態様および実施形態
上で説明したように、第１の主要な態様において、本発明は、一次検体および別のイオンに対して選択性を有するイオン選択性膜を調製する方法であって、任意の順番で
ａ）イオノフォア、
ｂ）前記一次検体を含有する親油性塩、および
ｃ）前記他のイオンを含有する親油性塩
を添加するステップを含む、方法を提供する。
本明細書において「別のイオン」は、少なくとも１つの他のイオンを意味する。すなわち、膜は、一次検体および少なくとも１つの他のイオン、例えば、１つの他のイオン、２つの他のイオン、３つの他のイオンなどに対して選択性を有する。いくつかの実施形態において、方法は、前記他のイオンを含有するさらなる親油性塩を添加するステップを含む。例えば、方法は、ｃ）に定義される親油性塩を添加するステップに加えて、膜が選択性を有するさらなるイオンを含有する１つまたは複数のさらなる親油性塩を添加するステップを含み得る。例えば、一実施形態において、一次検体はマグネシウムイオンであり、膜が選択性を有する他のイオンは、カルシウムイオンおよび亜鉛イオンである。したがって、方法は、カルシウムを含有する親油性塩と、亜鉛を含有する親油性塩の両方を添加するステップを含み得る。別の実施形態において、前記他のイオンは、Ｃａ２＋、Ｚｎ２＋、Ｎａ＋、Ｋ＋、Ｌｉ＋、Ｈ＋、ＮＨ４＋、Ｃｓ＋、Ｒｂ＋、Ｃｕ２＋、Ｎｉ２＋、Ｆｅ２＋、Ｓｒ２＋、Ｂａ２＋、Ｃｏ２＋、Ｃｄ２＋およびＡｌ３＋からなる群から選択される１つまたは複数のイオンを含む。
【００２６】
該方法の一実施形態において、一次検体は二価イオンである。別の実施形態において、前記他のイオンは二価イオンである。
本発明の方法の一実施形態において、ｂ）に定義される親油性塩とｃ）に定義される親油性塩とのモル比は、膜が前記一次検体および前記他のイオンを含有するリンス液に曝露される場合、膜がｃ）に定義される親油性塩を含有しない場合より平衡時間が短くなるようなモル比である。好ましい実施形態において、平衡時間は、２時間未満、例えば、１．５時間未満、例えば、１時間未満、例えば、４５分未満、例えば、３０分未満、例えば、１５分未満、例えば、１０分未満、例えば、５分未満である。最も好ましくは、平衡時間は０である。
【００２７】
一実施形態において、ｂ）に定義される親油性塩とｃ）に定義される親油性塩とのモル比は、９９：１〜１：１、例えば、２０：１〜１：１、例えば、２０：１〜３：１、例えば、１０：１〜４：１である。
【００２８】
一実施形態において、一次検体はマグネシウムイオン、カルシウムイオン、亜鉛イオンまたはリン酸イオンである。さらなる実施形態において、一次検体はマグネシウムイオンであり、ｂ）に定義される親油性塩は、マグネシウム塩であり、ｃ）に定義される親油性塩は、カルシウム塩である。
【００２９】
さらなる実施形態において、一次検体はマグネシウムイオンであり、ｂ）に定義される親油性塩はマグネシウム塩であり、ｃ）に定義される親油性塩はカルシウム塩であり、本明細書の上に定義されるリンス液は、１：１〜１：４のモル比、例えば、１：１．５〜１：２．５のモル比、例えば、１：２のモル比でマグネシウムイオンとカルシウムイオンとを含む。一実施形態において、リンス液は０．２５ｍＭ  Ｍｇ２＋および０．５ｍＭ  Ｃａ２＋を含む。さらなる実施形態において、親油性マグネシウム塩ｂ）と親油性カルシウム塩ｃ）とのモル比は、９９：１〜１：１、例えば、２０：１〜１：１、例えば、２０：１〜３：１、例えば、１０：１〜４：１、例えば、１７：３である。
【００３０】
本発明の方法は、成分を溶媒中で混合し、得られた溶液を所望の支持体上に分配し、溶媒を蒸発させるステップを含み得る。任意の好適な溶媒が使用できる。一実施形態において、溶媒はシクロヘキサノンである。支持体は柔軟性または剛性であり得る。支持体は、好ましくは非導電性材料、例えば、ケイ素、ポリマー、プリント回路基板（ＰＣＢ）、フレックスＰＣＢ、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ポリイミド（ＰＩ）、セラミック、アルミナ、ガラス、木材製品、フリットなどでできている。
【００３１】
さらなる主要な態様において、本発明は、一次検体および１つまたは複数の他のイオンに対して選択性を有するイオン選択性膜であって、水溶液と接触しておらず、
ａ）イオノフォア、
ｂ）前記一次検体を含有する親油性塩、および
ｃ）前記他のイオンを含有する親油性塩
を含む、膜に関する。
【００３２】
膜の一実施形態において、一次検体は二価イオンである。別の実施形態において、前記他のイオンは二価イオンである。
一実施形態において、ｂ）に定義される親油性塩とｃ）に定義される親油性塩とのモル比は、膜が前記一次検体および前記他のイオンを含有するリンス液に曝露される場合、膜がｃ）に定義される親油性塩を含有しない場合より平衡時間が短くなるようなモル比である。好ましい実施形態において、平衡時間は、２時間未満、例えば、１．５時間未満、例えば、１時間未満、例えば、４５分未満、例えば、３０分未満、例えば、１５分未満、例えば、１０分未満、例えば、５分未満である。
【００３３】
膜の別の実施形態において、ｂ）に定義される親油性塩とｃ）に定義される親油性塩とのモル比は、９９：１〜１：１、例えば、２０：１〜１：１、例えば、２０：１〜３：１、例えば、１０：１〜４：１である。
【００３４】
一実施形態において、一次検体はマグネシウムイオン、カルシウムイオン、亜鉛イオンまたはリン酸イオンである。さらなる実施形態において、一次検体はマグネシウムイオンであり、ｂ）に定義される親油性塩はマグネシウム塩であり、ｃ）に定義される親油性塩はカルシウム塩である。さらにさらなる実施形態において、一次検体はマグネシウムイオンであり、ｂ）に定義される親油性塩はマグネシウム塩であり、ｃ）に定義される親油性塩はカルシウム塩であり、本明細書の上に定義されるリンス液は、１：１〜１：４のモル比、例えば、１：１．５〜１：２．５のモル比、例えば、１：２のモル比でマグネシウムイオンとカルシウムイオンとを含む。一実施形態において、リンス液は０．２５ｍＭ  Ｍｇ２＋および０．５ｍＭ  Ｃａ２＋を含む。さらなる実施形態において、親油性マグネシウム塩ｂ）と親油性カルシウム塩ｃ）とのモル比は、９９：１〜１：１、例えば、２０：１〜１：１、例えば、２０：１〜３：１、例えば、１０：１〜４：１、例えば、１７：３である。
【００３５】
さらなる主要な態様において、本発明は、試料中のイオン濃度の測定における使用のためのイオン選択性膜を製造する方法であって、前記膜が、一次検体および別のイオンに対して選択性を有し、前記方法が、
ｉ）試料の分析直前に膜が保持されるリンス液を選択するステップであり、前記リンス液が、前記一次検体および前記他のイオンを含有する、ステップと、
ｉｉ）イオノフォア（ａ）、前記一次検体を含有する親油性塩（ｂ）、および前記他のイオンを含有する親油性塩（ｃ）を含むイオン選択性膜の組成を選択するステップであり、ｂ）に定義される親油性塩とｃ）に定義される親油性塩とのモル比が、膜が前記リンス液に曝露される場合、膜が（ｃ）に定義される親油性塩を含有しない場合より、平衡時間が短くなるようなモル比であり、好ましくは、膜中の親油性塩（ｂ）と（ｃ）とのモル比が、平衡が不要であるように選択される、ステップと、
ｉｉｉ）本発明の方法のステップｉｉ）において選択された組成を有する膜を製造するステップと
を含む、方法に関する。
【００３６】
イオノフォア
上記のように、本発明の方法は、イオノフォアまたはイオノフォアの混合物を添加するステップを含む。同様に、本発明のイオン選択性膜は、イオノフォアを含む。用いられるイオノフォアは、荷電している場合も、または荷電していない場合（中性）もある。いくつかの実施形態において、イオノフォアは親油性である。
【００３７】
好ましい実施形態において、イオノフォアは、１，１０−フェナントロリンまたはその置換形態であるフェナントロリン化合物である。このような化合物は、例えば、ＷＯ９２／１６８３１（Ｎｏｖａ  Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ  Ｃｏｒｐ．）に記載されている。１，１０−フェナントロリンは以下の構造
【００３８】
【化１】
2021528661.tif 000002
【００３９】
を有する。
一実施形態において、フェナントロリン化合物の２および９位の炭素原子は、水素に結合している。
【００４０】
一実施形態において、イオノフォアは、式ＩＩ
【００４１】
【化２】
2021528661.tif 000003
【００４２】
［式中、
Ｒ１〜Ｒ６は各々、
Ｈ、
Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＮＯ２、ＣＮもしくはＣＦ３のいずれか、
Ｃ１〜１８アルキル
Ｃ１〜１８アリール、
Ｃ１〜１８アルケニル
（ＣＨ２）ｍＹ（式中、ｍは０または１〜４の整数であり、Ｙは−ＯＲ７、−ＮＲ７Ｒ８、−ＯＣＯＲ７、−ＮＲ７ＣＯＲ８、−ＣＯＲ７、−ＣＯＯＲ７、−ＳＯ３Ｒ７、−ＯＳｉＲ７Ｒ８Ｒ９、−ＰＯ４Ｒ７Ｒ８、−ＰＯ３Ｒ７Ｒ８のいずれかであり、Ｒ７、Ｒ８およびＲ９は各々、Ｈ、アルキル、分岐アルキル、アリールまたは置換アリールのいずれかである）、または
Ｃｎ−Ｒ１０Ｒ１１（式中、ｎは０、または１および１７を含む１〜１７の整数であり、Ｒ１０はＣ、Ｎ、ＮＣＯまたはＣＨ２−Ｚ−ＣＨ２であり、ＺはＯ、ＮＨ、Ｓ、ＯＣＯまたはＣＯのいずれかであり、Ｒ１１は式ＩＩＩ
【００４３】
【化３】
2021528661.tif 000004
【００４４】
の化合物であり、Ｒ１１はＲ１１の３、４、５、６、７または８位のいずれかでＲ１０に結合しており、Ｒ１２〜Ｒ１７はＨ、Ｃ１〜１８アルキル、Ｃ１〜１８アリールのいずれかであるか、または除去され、但し、Ｒ１１がＲ１１の３位でＲ１０に結合している場合、Ｒ１２が除去され、Ｒ１１がＲ１１の４位でＲ１０に結合している場合、Ｒ１３が除去され、Ｒ１１がＲ１１の５位でＲ１０に結合している場合、Ｒ１４が除去され、Ｒ１１がＲ１１の６位でＲ１０に結合している場合、Ｒ１５が除去され、Ｒ１１がＲ１１の７位でＲ１０に結合している場合、Ｒ１６が除去され、Ｒ１１がＲ１１の８位でＲ１０に結合している場合、Ｒ１７が除去される）
のいずれかである、
但し、Ｒ１〜Ｒ６のうちの１つが、Ｈ以外であり、かつ１，１０−フェナントロリンの２および９位のＣ原子が各々、縮合環構造に関与しない結合により、Ｈに結合している］
の化合物である。
【００４５】
さらなる実施形態において、Ｒ１〜Ｒ６は、合計で少なくとも６個の炭素原子、例えば、６、７、８、９、１０または１１個の炭素原子、例えば、合計で少なくとも１１個の炭素原子、例えば、１１〜１８個の炭素原子を含む。
【００４６】
別の実施形態において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６のうちの１つまたは複数は、１〜１８個の炭素原子を有するアルキルまたはアリール基である。例えば、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６から選択される１つまたは２つの基は、１〜１８個の炭素原子を有するアルキルまたはアリール基であり得、他は水素であり、例えば、Ｒ１およびＲ２、Ｒ１およびＲ３、Ｒ１およびＲ４、Ｒ１およびＲ５、Ｒ１およびＲ６、Ｒ２およびＲ３、Ｒ２およびＲ４、Ｒ２およびＲ５、Ｒ２およびＲ６、Ｒ３およびＲ４、Ｒ３およびＲ５、Ｒ３およびＲ６、Ｒ４およびＲ５、Ｒ４およびＲ６またはＲ５およびＲ６は、１〜１８個の炭素原子を有するアルキルまたはアリール基であり、他の基は水素である。
【００４７】
別の実施形態において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６のうちの１つまたは複数は、１〜１８個の炭素原子を有するアルキル基である。例えば、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６から選択される１つまたは２つの基は、１〜１８個の炭素原子を有するアルキル基であり得、他は水素であり、例えば、Ｒ１およびＲ２、Ｒ１およびＲ３、Ｒ１およびＲ４、Ｒ１およびＲ５、Ｒ１およびＲ６、Ｒ２およびＲ３、Ｒ２およびＲ４、Ｒ２およびＲ５、Ｒ２およびＲ６、Ｒ３およびＲ４、Ｒ３およびＲ５、Ｒ３およびＲ６、Ｒ４およびＲ５、Ｒ４およびＲ６またはＲ５およびＲ６は、１〜１８個の炭素原子を有するアルキルであり、他のＲ基は水素である。
【００４８】
別の実施形態において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６のうちの１つまたは複数は、６〜１８個の炭素原子を有するアルキル基である。例えば、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６から選択される１つまたは２つの基は、６〜１８個の炭素原子を有するアルキル基であり得、他は水素であり、例えば、Ｒ１およびＲ２、Ｒ１およびＲ３、Ｒ１およびＲ４、Ｒ１およびＲ５、Ｒ１およびＲ６、Ｒ２およびＲ３、Ｒ２およびＲ４、Ｒ２およびＲ５、Ｒ２およびＲ６、Ｒ３およびＲ４、Ｒ３およびＲ５、Ｒ３およびＲ６、Ｒ４およびＲ５、Ｒ４およびＲ６またはＲ５およびＲ６は、６〜１８個の炭素原子を有するアルキル基であり、他は水素である。
【００４９】
別の実施形態において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６のうちの１つのみが、１〜１８個の炭素原子、例えば、６〜１８個の炭素原子、例えば、１１〜１８個の炭素原子を有するアルキル基であり、他のＲ基は水素である。
【００５０】
別の実施形態において、Ｒ２および／またはＲ５は、１〜１８個の炭素原子、例えば６〜１８個の炭素原子、例えば、１１〜１８個の炭素原子を有するアルキル基であり、他のＲ基は水素である。別の実施形態において、Ｒ２および／またはＲ５は、１〜１８個の炭素原子を有するアリール基である。
【００５１】
好ましい実施形態において、イオノフォアは、４−ウンデシル−１、１０−フェナントロリンまたは４，７−ジウンデシル−１，１０−フェナントロリンである。
置換１，１０−フェナントロリン化合物は、当業者に公知の標準的な技術によって合成され得る。例えば、４−および４，７−置換１，１０−フェナントロリンの合成は、参照により本明細書に組み込まれる、Ｌｕｎｄら、Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｅｎｇ．Ｄａｔａ、２６：２２７−２９（１９８１）に記載される。メチル基は、他の１，１０−フェナントロリン誘導体の合成において所望の側鎖の付着のためのハンドルを提供し得、メチル置換１，１０−フェナントロリンは市販されている。例えば、４−メチル、５−メチル、６−メチル、７−メチル、３，６−ジメチル、５，７−ジメチル、４，７−ジメチルおよび５，６−ジメチル−１，１０−フェナントロリンはすべてＡｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．から入手できる。４−ウンデシル−１、１０−フェナントロリンおよび４，７−ジウンデシル−１，１０−フェナントロリンは、例えば、ＷＯ９２／１６８３１（Ｎｏｖａ  Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ  Ｃｏｒｐ．）に記載されるように合成され得る。
【００５２】
別の実施形態において、イオン選択性膜は、三脚型立体化学構造、例えば、三脚型構造、例えば、ＷＯ２０１５／１６０７５５（Ｓｉｅｍｅｎｓ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ  Ｉｎｃ．）に記載されるものを有するイオノフォアを含む。
【００５３】
したがって、一実施形態において、イオノフォアは、式ＩＶ
【００５４】
【化４】
2021528661.tif 000005
【００５５】
の化合物である（当技術分野においてＥＴＨ５５０６とも称される）。
別の実施形態において、イオノフォアは式Ｖ
【００５６】
【化５】
2021528661.tif 000006
【００５７】
の化合物である（当技術分野においてＥＴＨ５５０４とも称される）。
別の実施形態において、イオノフォアは式ＶＩ
【００５８】
【化６】
2021528661.tif 000007
【００５９】
の化合物である（当技術分野においてＥＴＨ３８３２とも称される）。
別の実施形態において、イオノフォアは式ＶＩＩ
【００６０】
【化７】
2021528661.tif 000008
【００６１】
（式中、ｎは６〜８の整数である）
の化合物である（ｎが６である場合、当技術分野においてＥＴＨ５２８２と称され、ｎが８である場合、当技術分野においてＥＴＨ７０２５と称される）。
【００６２】
別の実施形態において、イオノフォアは、ＩＵＰＡＣ  ２０００  Ｐａｒｔ  Ｉ  Ｉｎｏｒｇａｎｉｃ  ｃａｔｉｏｎｓ  Ｐｕｒｅ  Ａｐｐｌ  Ｃｈｅｍ  ７２：１８５１の表８に記載されるイオノフォアのうちの１つ、例えば、Ｍｇ２＋−１、Ｍｇ２＋−２、Ｍｇ２＋−３、Ｍｇ２＋−４、Ｍｇ２＋−５、Ｍｇ２＋−６、Ｍｇ２＋−７、Ｍｇ２＋−８、Ｍｇ２＋−９、Ｍｇ２＋−１０、Ｍｇ２＋−１１、Ｍｇ２＋−１２、Ｍｇ２＋−１３、Ｍｇ２＋−１４、Ｍｇ２＋−１５、Ｍｇ２＋−１６、Ｍｇ２＋−１７、Ｍｇ２＋−１８、Ｍｇ２＋−１９、Ｍｇ２＋−２０、Ｍｇ２＋−２１、Ｍｇ２＋−２２、Ｍｇ２＋−２３、Ｍｇ２＋−２４、Ｍｇ２＋−２５、Ｍｇ２＋−２６、Ｍｇ２＋−２７、Ｍｇ２＋−２８、Ｍｇ２＋−２９、Ｍｇ２＋−３０、Ｍｇ２＋−３１、Ｍｇ２＋−３２、Ｍｇ２＋−３３、Ｍｇ２＋−３４、Ｍｇ２＋−３５、Ｍｇ２＋−３６、Ｍｇ２＋−３７、Ｍｇ２＋−３８、Ｍｇ２＋−３９、Ｍｇ２＋−４０、Ｍｇ２＋−４１、Ｍｇ２＋−４２、Ｍｇ２＋−４３、Ｍｇ２＋−４４、Ｍｇ２＋−４５、Ｍｇ２＋−４６、Ｍｇ２＋−４７、Ｍｇ２＋−４８、Ｍｇ２＋−４９、Ｍｇ２＋−５０、Ｍｇ２＋−５１、Ｍｇ２＋−５２、Ｍｇ２＋−５３、Ｍｇ２＋−５４、Ｍｇ２＋−５５またはＭｇ２＋−５６である。
【００６３】
別の実施形態において、イオノフォアは、Ｂｕｈｌｍａｎｎら（１９９８）Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．９８：１５９３に記載されるイオノフォアのうちの１つ、例えば、Ｍｇ２＋−１、Ｍｇ２＋−２、Ｍｇ２＋−３、Ｍｇ２＋−４、Ｍｇ２＋−５、Ｍｇ２＋−６、Ｍｇ２＋−７、Ｍｇ２＋−８、Ｍｇ２＋−９、Ｍｇ２＋−１０、Ｍｇ２＋−１１、Ｍｇ２＋−１２、Ｍｇ２＋−１３、Ｍｇ２＋−１４、Ｍｇ２＋−１５またはＭｇ２＋−１６である。
【００６４】
別の実施形態において、イオノフォアは、ＥＴＨ５２２０（Ｚｈａｎｇら（２０１１）Ａｍ．Ｊ．Ｂｉｏｍｅｄ．Ｓｃｉ．３：３０１）またはＥＴＨ２００１、ＥＴＨ２００２、ＥＴＨ２００３またはＥＴＨ２０２２（Ｚｈａｎｇら（２０００）Ａｎａｌ．Ｓｃｉ．１６：１１）である。
【００６５】
別の実施形態において、イオノフォアは、すべてＳｐｉｃｈｉｇｅｒ（１９９３）Ｅｌｅｃｔｒｏａｎａｌｙｓｉｓ  ５：７３９に記載されるＥＴＨ１００１、ＤＢＭ、ＥＴＨ１１１７、ｃｙｃｌｏ（ＬＰｒｏ−ＤＬｅｕ）５、ＥＴＨ１２２４、ＥＴＨ２２２０、ＥＴＨ４０３０、ＥＴＨ５２１４、ＥＴＨ５２８２またはＥＴＨ７０２５である。
【００６６】
別の実施形態において、イオノフォアは、Ｓｕｚｕｋｉら（１９９５）Ａｎａｌ．Ｃｈｅｍ．６７：３２４（参照により本明細書に組み込まれる）に記載されるイオノフォアのうちの１つ、好ましくは、アダマンチル基を有する２つのマロンアミド側鎖を有する１８員のジアザクラウンであるＫ２２Ｂ５、またはその変異体、例えば、Ｋ２２Ｂ１Ｂ５である（Ｓｉｓｗａｎｔａら（１９９７）Ａｎａｌ．Ｓｃｉ．１３：４２９）。
【００６７】
好ましい実施形態において、イオノフォアは、１，２−ビス（ジアリールホスフィンオキシド）ベンゼン（Ｓａｌｅｈ（１９９４）Ｊ．Ｅｌｅｃｔｒｏａｎａｌｙｔｉｃａｌ  Ｃｈｅｍ．３７３：８９）またはメチルフェニルセミカルバゾン（Ｃｈａｎｄｒａら（２０１３）Ｊ．Ｃｈｅｍ．、ｈｔｔｐ：／／ｄｘ．ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１１５５／２０１３／１８９４６４）である。
【００６８】
親油性塩
本発明の方法または膜の多くの実施形態において、ｂ）に定義される親油性塩およびｃ）に定義される親油性塩は、一次検体イオンを除き、同じ化学構造を有する。
【００６９】
好ましい実施形態において、ｂ）およびｃ）に定義される親油性塩は、酸性基を含む化合物の親油性塩、例えば、式Ｉ
【００７０】
【化８】
2021528661.tif 000009
【００７１】
（式中、
Ａは酸性基を含み、
Ｒ１８、Ｒ１９およびＲ２０のうちの１つ、２つまたは３つすべては、Ｃ４〜１８アルキル基、Ｃ４〜１８アルケニル基、Ｃ４〜１８アルキニル基またはアミド含有Ｃ４〜１８基であるＣ４〜１８基であり、前記Ｃ４〜１８基は、フェニル基から数えて１、２および３位が直鎖であるか、または前記１、２および３位に合計で側鎖を１つのみ有し、
他のＲ１８、Ｒ１９およびＲ２０は、独立に、水素または直鎖Ｃ１〜１８アルキル基である）
の構造を含む化合物の親油性塩である。
【００７２】
疑念を回避するために、本明細書において「または前記１、２および３位に合計で側鎖を１つのみ有する」という表現は、各Ｃ４〜１８基が前記１、２、３位に合計で側鎖を１つのみ有することを意味する。したがって、Ｒ１８、Ｒ１９およびＲ２０の２つ以上がＣ４〜１８基である実施形態において、これらのＣ４〜１８基の２つ以上が、１、２または３位に１つの側鎖を有し得る。
【００７３】
例示のために、以下の式は、Ｒ１８およびＲ２０が水素であり、Ｒ１９が側鎖を含まない直鎖Ｃ８アルキル基である一実施形態を示す。１、２および３位は
【００７４】
【化９】
2021528661.tif 000010
【００７５】
で示される。
一実施形態において、式ＩのＡ基に含まれる酸性基は、カルボン酸、スルホン酸、硫酸モノエステル、スルホンアミド、ホスホン酸、リン酸、ヒ酸、スルフィン酸またはチオカルボン酸である。
【００７６】
一実施形態において、式ＩのＡ基に含まれる酸性基は、カルボン酸である。例えば、Ａ基は、式ＩＸのカルボン酸基、式Ｘの炭酸基、式ＸＩのシュウ酸モノエステル基または式ＸＩＩのジカルボン酸モノエステル基であり得る：
式ＩＸ
【００７７】
【化１０】
2021528661.tif 000011
【００７８】
式Ｘ
【００７９】
【化１１】
2021528661.tif 000012
【００８０】
式ＸＩ
【００８１】
【化１２】
2021528661.tif 000013
【００８２】
式ＸＩＩ
【００８３】
【化１３】
2021528661.tif 000014
【００８４】
Ｒ２３は、Ｃ１〜５基、例えば、Ｃ１〜５アルキル基、Ｃ１〜５アルケニル基、Ｃ１〜５アルキニル基またはアミド含有Ｃ１〜５基であり得るか、またはＲ２３は不在であり得る。好ましくは、Ｒ２３は、直鎖である。例えば、式ＩＸの化合物の一実施形態において、Ｒ２３は不在であり、したがって、Ａ基はカルボン酸基からなる。式ＩＸのＲ２４は、Ｃ１〜５基、例えば、Ｃ１〜５アルキル基、Ｃ１〜５アルケニル基、Ｃ１〜５アルキニル基またはアミド含有Ｃ１〜５基であり得る。
【００８５】
別の実施形態において、Ａ基に含まれる酸性基は、スルホン酸である。例えば、Ａ基は、式ＸＩＩＩのスルホン酸基であり得る：
式ＸＩＩＩ
【００８６】
【化１４】
2021528661.tif 000015
【００８７】
Ｒ２３は、Ｃ１〜５基、例えば、Ｃ１〜５アルキル基、Ｃ１〜５アルケニル基、Ｃ１〜５アルキニル基またはアミド含有Ｃ１〜５基であり得るか、またはＲ２３は、不在であり得る。好ましくは、Ｒ２３は、直鎖である。例えば、式ＸＩＩＩの化合物の一実施形態において、Ｒ２３は不在であり、したがって、Ａ基はスルホン酸基からなる。
【００８８】
別の実施形態において、Ａ基に含まれる酸性基は、硫酸モノエステルである。例えば、Ａ基は、式ＸＩＶの硫酸モノエステル基であり得る：
式ＸＩＶ
【００８９】
【化１５】
2021528661.tif 000016
【００９０】
Ｒ２３は、Ｃ１〜５基、例えば、Ｃ１〜５アルキル基、Ｃ１〜５アルケニル基、Ｃ１〜５アルキニル基またはアミド含有Ｃ１〜５基であり得るか、またはＲ２３は、不在であり得る。好ましくは、Ｒ２３は、直鎖である。例えば、式ＸＩＶの化合物の一実施形態において、Ｒ２３は不在であり、したがって、Ａ基は硫酸モノエステル基からなる。
【００９１】
別の実施形態において、Ａ基に含まれる酸性基は、スルホンアミドである。例えば、Ａ基は、式ＸＶのスルホンアミド基であり得る：
式ＸＶ
【００９２】
【化１６】
2021528661.tif 000017
【００９３】
Ｒ２３は、Ｃ１〜５基、例えば、Ｃ１〜５アルキル基、Ｃ１〜５アルケニル基、Ｃ１〜５アルキニル基またはアミド含有Ｃ１〜５基であり得るか、またはＲ２３は、不在であり得る。好ましくは、Ｒ２３は、直鎖である。例えば、式ＸＶの化合物の一実施形態において、Ｒ２３は不在であり、したがって、Ａ基はスルホンアミド基からなる。
【００９４】
別の実施形態において、Ａ基に含まれる酸性基は、ホスホン酸である。例えば、Ａ基は、式ＸＶＩのホスホン酸基または式ＸＶＩＩのホスホン酸モノエステル基であり得る：
式ＸＶＩ
【００９５】
【化１７】
2021528661.tif 000018
【００９６】
式ＸＶＩＩ
【００９７】
【化１８】
2021528661.tif 000019
【００９８】
Ｒ２３は、Ｃ１〜５基、例えば、Ｃ１〜５アルキル基、Ｃ１〜５アルケニル基、Ｃ１〜５アルキニル基またはアミド含有Ｃ１〜５基であり得るか、またはＲ２３は、不在であり得る。好ましくは、Ｒ２３は、直鎖である。例えば、式ＸＶＩの化合物の一実施形態において、Ｒ２３は不在であり、したがって、Ａ基はホスホン酸基からなる。Ｒ２４は、Ｃ１〜１８基、例えば、Ｃ１〜１８アルキル基、Ｃ１〜１８アルケニル基、Ｃ１〜１８アルキニル基、アミド含有Ｃ１〜１８基またはアリール基であり得る。特に、アリール基はフェニル基であり得、例えば、Ｒ２４は、式Ｉに定義されるように置換基Ｒ１８、Ｒ１９およびＲ２０を有するフェニル基であり得る。
【００９９】
別の実施形態において、Ａ基に含まれる酸性基は、リン酸である。例えば、Ａ基は、式ＸＶＩＩＩのリン酸モノエステル基、または式ＸＩＸのリン酸ジエステル基、または式ＸＸのポリリン酸基であり得る：
式ＸＶＩＩＩ
【０１００】
【化１９】
2021528661.tif 000020
【０１０１】
式ＸＩＸ
【０１０２】
【化２０】
2021528661.tif 000021
【０１０３】
式ＸＸ
【０１０４】
【化２１】
2021528661.tif 000022
【０１０５】
Ｒ２３は、Ｃ１〜５基、例えば、Ｃ１〜５アルキル基、Ｃ１〜５アルケニル基、Ｃ１〜５アルキニル基またはアミド含有Ｃ１〜５基であり得るか、またはＲ２３は、不在であり得る。好ましくは、Ｒ２３は、直鎖である。例えば、式ＸＶＩＩＩの化合物の一実施形態において、Ｒ２３は不在であり、したがって、Ａ基はリン酸モノエステル基からなる。式ＸＩＸの化合物の一実施形態において、Ｒ２３は不在であり、したがって、Ａ基はリン酸ジエステル基からなる。Ｒ２４は、Ｃ１〜１８基、例えば、Ｃ１〜１８アルキル基、Ｃ１〜１８アルケニル基、Ｃ１〜１８アルキニル基、アミド含有Ｃ１〜１８基またはアリール基であり得る。特に、アリール基はフェニル基であり得、例えば、Ｒ２４は、式Ｉに定義されるように置換基Ｒ１８、Ｒ１９およびＲ２０を有するフェニル基であり得る。
【０１０６】
別の実施形態において、Ａ基に含まれる酸性基は、ヒ酸である。例えば、Ａ基は、式ＸＶＩ、ＸＶＩＩ、ＸＩＩＩ、ＸＩＸまたはＸＸの基であり得、そこでリン原子は、ヒ素原子（Ａｓ）で置き換えられている。
【０１０７】
別の実施形態において、Ａ基に含まれる酸性基は、スルフィン酸である。例えば、Ａ基は、式ＸＸＩのスルフィン酸基であり得る：
式ＸＸＩ
【０１０８】
【化２２】
2021528661.tif 000023
【０１０９】
Ｒ２３は、Ｃ１〜５基、例えば、Ｃ１〜５アルキル基、Ｃ１〜５アルケニル基、Ｃ１〜５アルキニル基またはアミド含有Ｃ１〜５基あり得るか、またはＲ２３は、不在であり得る。好ましくは、Ｒ２３は、直鎖である。例えば、式ＸＸＩの化合物の一実施形態において、Ｒ２３は不在であり、したがって、Ａ基はスルフィン酸基からなる。
【０１１０】
別の実施形態において、Ａ基に含まれる酸性基は、チオカルボン酸である。例えば、Ａ基は、式ＸＸＩＩまたは式ＸＸＩＩＩのチオカルボン酸基であり得る：
式ＸＸＩＩ
【０１１１】
【化２３】
2021528661.tif 000024
【０１１２】
式ＸＸＩＩＩ
【０１１３】
【化２４】
2021528661.tif 000025
【０１１４】
Ｒ２３は、Ｃ１〜５基、例えば、Ｃ１〜５アルキル基、Ｃ１〜５アルケニル基、Ｃ１〜５アルキニル基またはアミド含有Ｃ１〜５基あり得るか、またはＲ２３は、不在であり得る。好ましくは、Ｒ２３は、直鎖である。例えば、式ＸＸＩＩまたは式ＸＸＩＩＩの化合物の一実施形態において、Ｒ２３は不在であり、したがって、Ａ基はチオカルボン酸基からなる。
【０１１５】
一実施形態において、式ＩのＡ基は、リン酸モノエステルまたはジエステル基、例えば、式ＸＩＸの−Ｒ２３−（ＨＰＯ４）−Ｒ２４基（式中、Ｒ２３は不在であるか、またはアルキル（例えば、Ｃ１〜１８アルキル）、分岐アルキル、アリールまたは置換アリールであり、Ｒ２４は水素またはアルキル（例えば、Ｃ１〜１８アルキル）、分岐アルキル、アリールまたは置換アリールである）である。
【０１１６】
さらなる実施形態において、親油性塩（複数可）は、式ＶＩＩＩ
【０１１７】
【化２５】
2021528661.tif 000026
【０１１８】
（式中、Ｒ１８、Ｒ１９およびＲ２０は式Ｉについて定義される通りである）
の化合物を含む。好ましくは、膜は、式ＶＩＩＩの親油性化合物の塩を含む。
一実施形態において、Ｒ１８、Ｒ１９またはＲ２０のうちの１つは、上に定義されるＣ４〜１８アルキル基（すなわち、フェニル基から数えて１、２および３位が直鎖であるか、または前記１、２および３位に合計で側鎖を１つのみ有するＣ４〜１８アルキル基）であり、他は、独立に、水素または直鎖Ｃ１〜１８アルキル基である。
【０１１９】
さらなる実施形態において、Ｒ１８、Ｒ１９またはＲ２０のうちの１つは、上に定義されるＣ４〜１８アルキル基であり、他は水素である。さらなる実施形態において、Ｒ１９は、上に定義されるＣ４〜１８アルキル基であり、Ｒ１８およびＲ２０は水素である。
【０１２０】
一実施形態において、前記Ｃ４〜１８アルキル基（複数可）は直鎖である。別の実施形態において、前記Ｃ４〜１８アルキル基（複数可）は、少なくとも６個、例えば、少なくとも８個の炭素原子、例えば、８、９、１０、１１または１２個の炭素原子を含む。
【０１２１】
さらなる実施形態において、Ｒ１８、Ｒ１９またはＲ２０のうちの１つのみが、Ｃ４〜１８アルキル基であり、前記Ｃ４〜１８アルキル基は、少なくとも６個、例えば、少なくとも８個の炭素原子、例えば、８、９、１０、１１または１２個の炭素原子を含む。
【０１２２】
好ましい実施形態において、親油性塩（複数可）は、Ｒ１８およびＲ２０が水素であり、Ｒ１９がオクチル基である、式ＶＩＩＩの化合物を含む。
好ましい塩はマグネシウム塩およびカルシウム塩である。
【０１２３】
好ましい実施形態において、ｂ）に定義される親油性塩は、ヘミマグネシウムビス［４−オクチルフェニル］ホスフェートであり、ｃ）に定義される親油性塩は、ヘミカルシウムビス［４−オクチルフェニル］ホスフェートである。
【０１２４】
別の好ましい実施形態において、ｂ）に定義される親油性塩は、ヘミマグネシウムビス［４−（１，１，３，３−テトラメチルブチル）−フェニル］ホスフェートであり、ｃ）に定義される親油性塩は、ヘミカルシウムビス［４−（１，１，３，３−テトラメチルブチル）−フェニル］ホスフェートである。
【０１２５】
親油性塩、例えば、ヘミカルシウムビス［４−オクチルフェニル］ホスフェートおよびヘミマグネシウムビス［４−オクチルフェニル］ホスフェートは、当技術分野で公知の標準的な方法によって調製され得る。
【０１２６】
好ましい実施形態において、親油性塩は、ヘミマグネシウムビス［４−オクチルフェニル］ホスフェート（ｂ）とヘミカルシウムビス［４−オクチルフェニル］ホスフェート（ｃ）であり、混合物は、少なくとも５０％のヘミマグネシウムビス［４−オクチルフェニル］ホスフェート、例えば、少なくとも８０％のヘミマグネシウムビス［４−オクチルフェニル］ホスフェート、例えば、８０％〜９０％のヘミマグネシウムビス［４−オクチルフェニル］ホスフェートを含有する。
【０１２７】
本発明のイオン選択性膜のさらに好ましい実施形態において、イオノフォアは、４，７−ジウンデシル−１，１０−フェナントロリンであり、親油性塩は、ヘミマグネシウムビス［４−オクチルフェニル］ホスフェートおよびヘミカルシウムビス［４−オクチルフェニル］ホスフェートである。
【０１２８】
好ましい実施形態において、イオノフォアと親油性塩のアニオンの合計とのモル比は２：１〜１：１、例えば、１．８：１〜１．２：１のモル比である。
上記の親油性化合物および親油性塩に加えて、さらなる塩が本発明の膜中に存在し得る。したがって、実施形態において、本発明の膜は、さらなる塩、例えば、テトラキス（４−クロロフェニル）ホウ酸塩を含む。
【０１２９】
共有結合している酸性基を含むイオノフォア
さらなる態様において、本発明は、一次検体および別のイオンに対して選択性を有する、イオン選択性膜を調製する方法であって、
ａ）スペーサーを介して酸性基に共有結合しているイオノフォアおよび一次検体の塩である親油性塩、ならびに
ｂ）前記イオノフォアおよび前記他のイオンの塩である親油性塩
を添加するステップを含む、方法に関する。
【０１３０】
さらにさらなる態様において、本発明は、一次検体および別のイオンに対して選択性を有する、イオン選択性膜であって、水溶液と接触しておらず、
ａ）スペーサーを介して酸性基に共有結合しているイオノフォアおよび一次検体の塩である親油性塩、ならびに
ｂ）前記イオノフォアおよび前記他のイオンの塩である親油性塩
を含む、膜に関する。
【０１３１】
一実施形態において、一次検体はマグネシウムイオンであり、前記他のイオンはカルシウムイオンまたは亜鉛イオン、好ましくはカルシウムイオンである。別の実施形態において、前記他のイオンは、Ｃａ２＋、Ｚｎ２＋、Ｎａ＋、Ｋ＋、Ｌｉ＋、Ｈ＋、ＮＨ４＋、Ｃｓ＋、Ｒｂ＋、Ｃｕ２＋、Ｎｉ２＋、Ｆｅ２＋、Ｓｒ２＋、Ｂａ２＋、Ｃｏ２＋、Ｃｄ２＋およびＡｌ３＋からなる群から選択される１つまたは複数のイオンを含む。
【０１３２】
一実施形態において、前記スペーサーは、アルキル基、例えば、合計で１〜１８個の炭素原子を有する直鎖または分岐アルキル基であり、アルキル基は、任意で置換されている。別の実施形態において、前記スペーサーは、直鎖アルキル基、例えば、−（ＣＨ２）ｎ−基（式中、ｎは少なくとも１、例えば、１、２、３、４もしくは５、または少なくとも２である）である。
【０１３３】
一実施形態において、前記イオノフォアは、１，１０−フェナントロリンまたはその置換形態であるフェナントロリン化合物である。本明細書の一実施形態において、スペーサーは、１，１０−フェナントロリンの２、３、４、５、６、７、８または９位の炭素原子でフェナントロリン化合物に共有結合している。
【０１３４】
さらなる実施形態において、スペーサー（前記スペーサーは、少なくとも１個の炭素原子を含む）を介して酸性基に共有結合しているイオノフォアは、式ＩＩ
【０１３５】
【化２６】
2021528661.tif 000027
【０１３６】
［式中、
Ｒ１〜Ｒ６は各々、
Ｈ、
Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＮＯ２、ＣＮもしくはＣＦ３のいずれか、
Ｃ１〜１８アルキル、
Ｃ１〜１８アリール、
Ｃ１〜１８アルケニル、
（ＣＨ２）ｍＹ（式中、ｍは０または１〜４の整数であり、Ｙは−ＯＲ７、−ＮＲ７Ｒ８、−ＯＣＯＲ７、−ＮＲ７ＣＯＲ８、−ＣＯＲ７、−ＣＯＯＲ７、−ＳＯ３Ｒ７、−ＯＳｉＲ７Ｒ８Ｒ９、−ＰＯ４Ｒ７Ｒ８、−ＰＯ３Ｒ７Ｒ８のいずれかであり、Ｒ７、Ｒ８およびＲ９は各々、Ｈ、アルキル、分岐アルキル、アリールまたは置換アリールのいずれかである）、または
Ｃｎ−Ｒ１０Ｒ１１（式中、ｎは０、または１および１７を含む１〜１７の整数であり、Ｒ１０はＣ、Ｎ、ＮＣＯまたはＣＨ２−Ｚ−ＣＨ２であり、ＺはＯ、ＮＨ、Ｓ、ＯＣＯまたはＣＯのいずれかであり、Ｒ１１は
【０１３７】
【化２７】
2021528661.tif 000028
【０１３８】
であり、Ｒ１１はＲ１１の３、４、５、６、７または８位のいずれかでＲ１０に結合しており、Ｒ１２〜Ｒ１７はＨ、Ｃ１〜１８アルキル、Ｃ１〜１８アリールのいずれかであるか、または除去され、但し、Ｒ１１がＲ１１の３位でＲ１０に結合している場合、Ｒ１２が除去され、Ｒ１１がＲ１１の４位でＲ１０に結合している場合、Ｒ１３が除去され、Ｒ１１がＲ１１の５位でＲ１０に結合している場合、Ｒ１４が除去され、Ｒ１１がＲ１１の６位でＲ１０に結合している場合、Ｒ１５が除去され、Ｒ１１がＲ１１の７位でＲ１０に結合している場合、Ｒ１６が除去され、Ｒ１１がＲ１１の８位でＲ１０に結合している場合、Ｒ１７が除去される）
のいずれかである、
但し、Ｒ１〜Ｒ６のうちの１つが、Ｈ以外であり、かつ１，１０−フェナントロリンの２および９位のＣ原子が各々、縮合環構造に関与しない結合により、Ｈに結合しており、
Ｒ１〜Ｒ６のうちの１つがスペーサーおよび酸性基を含み、好ましくは、Ｒ１またはＲ６はスペーサーおよび酸性基を含む］
のフェナントロリン化合物である。
【０１３９】
本明細書のさらなる実施形態において、Ｒ１〜Ｒ６は、合計で少なくとも６個の炭素原子、例えば、６、７、８、９、１０または１１個の炭素原子、例えば、合計で少なくとも１１個の炭素原子、例えば、１１〜１８個の炭素原子を含む。
【０１４０】
別の実施形態において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６のうちの１つまたは複数は、１〜１８個の炭素原子を有するアルキルまたはアリール基である。例えば、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６から選択される１つまたは２つの基は、１〜１８個の炭素原子を有するアルキルまたはアリール基であり得、他は水素であり、例えば、Ｒ１およびＲ２、Ｒ１およびＲ３、Ｒ１およびＲ４、Ｒ１およびＲ５、Ｒ１およびＲ６、Ｒ２およびＲ３、Ｒ２およびＲ４、Ｒ２およびＲ５、Ｒ２およびＲ６、Ｒ３およびＲ４、Ｒ３およびＲ５、Ｒ３およびＲ６、Ｒ４およびＲ５、Ｒ４およびＲ６またはＲ５およびＲ６は、１〜１８個の炭素原子を有するアルキルまたはアリール基であり、他は水素である。
【０１４１】
別の実施形態において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６のうちの１つまたは複数は、１〜１８個の炭素原子を有するアルキル基である。例えば、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６から選択される１つまたは２つの基は、１〜１８個の炭素原子を有するアルキル基であり得、他は水素であり、例えば、Ｒ１およびＲ２、Ｒ１およびＲ３、Ｒ１およびＲ４、Ｒ１およびＲ５、Ｒ１およびＲ６、Ｒ２およびＲ３、Ｒ２およびＲ４、Ｒ２およびＲ５、Ｒ２およびＲ６、Ｒ３およびＲ４、Ｒ３およびＲ５、Ｒ３およびＲ６、Ｒ４およびＲ５、Ｒ４およびＲ６またはＲ５およびＲ６は、１〜１８個の炭素原子を有するアルキル基であり、他は水素である。
【０１４２】
別の実施形態において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６のうちの１つまたは複数は、６〜１８個の炭素原子を有するアルキル基である。例えば、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６から選択される１つまたは２つの基は、６〜１８個の炭素原子を有するアルキル基であり得、他は水素であり、例えば、Ｒ１およびＲ２、Ｒ１およびＲ３、Ｒ１およびＲ４、Ｒ１およびＲ５、Ｒ１およびＲ６、Ｒ２およびＲ３、Ｒ２およびＲ４、Ｒ２およびＲ５、Ｒ２およびＲ６、Ｒ３およびＲ４、Ｒ３およびＲ５、Ｒ３およびＲ６、Ｒ４およびＲ５、Ｒ４およびＲ６またはＲ５およびＲ６は、６〜１８個の炭素原子を有するアルキル基であり、他は水素である。
【０１４３】
別の実施形態において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６のうちの１つが、１〜１８個の炭素原子、例えば、６〜１８個の炭素原子、例えば、１１〜１８個の炭素原子を有するアルキル基である。
【０１４４】
別の実施形態において、Ｒ２および／またはＲ５は、１〜１８個の炭素原子、例えば、６〜１８個の炭素原子、例えば、１１〜１８個の炭素原子を有するアルキル基である。
別の実施形態において、Ｒ２および／またはＲ５は、１〜１８個の炭素原子を有するアリール基である。
【０１４５】
好ましい実施形態において、フェナントロリン化合物は、スペーサーを介して酸性基に共有結合している４−ウンデシル−１、１０−フェナントロリンであり、前記スペーサーは、少なくとも１個の炭素原子、例えば、２または３個の炭素原子を含む。
【０１４６】
別の好ましい実施形態において、フェナントロリン化合物は、スペーサーを介して酸性基に共有結合している４，７−ジウンデシル−１、１０−フェナントロリンであり、前記スペーサーは、少なくとも１個の炭素原子を含む。
【０１４７】
好ましくは、スペーサーは１〜１８個の炭素原子を含む。一実施形態において、スペーサーは、少なくとも２個、例えば、少なくとも３個の炭素原子を含み、スペーサーは、１，１０−フェナントロリン化合物の２、３、４、５、６、７、８または９位に共有結合している。
【０１４８】
一実施形態において、酸性基は、カルボン酸、スルホン酸、硫酸モノエステル、スルホンアミド、ホスホン酸、リン酸、ヒ酸、スルフィン酸またはチオカルボン酸からなる群から選択される。
【０１４９】
好ましい実施形態において、酸性基は、−（ＨＰＯ４）Ｒ７、−（ＨＰＯ３）Ｒ７（式中、Ｒ７はＨ、アルキル、分岐アルキル、アリールまたは置換アリールである）、例えば、４−オクチルフェニルである。
【０１５０】
別の実施形態において、イオノフォアは、三脚型立体化学構造、例えば、式ＩＶ、Ｖ、ＶＩおよびＶＩＩに示される構造のうちの１つを有する。本明細書の一つのさらなる実施形態において、酸性基は、式ＩＶ、Ｖ、ＶＩまたはＶＩＩに示される構造の１、２または３つのアーム上のマロンジアミド基の遠位に位置する。この文脈において「遠位」は、三脚型構造の中心に対して遠位を意味する。好ましくは、分子の１つのアームのみが、共有結合している酸性基を有する。別の実施形態において、式ＩＶ、Ｖ、ＶＩまたはＶＩＩに示される構造の３つのアームのうちの１つにおいて、マロンジアミド基は、酸性基で部分的または完全に置き換えられている。
【０１５１】
さらなる膜成分
可塑剤−本発明の膜は、典型的にはさらに可塑剤を含む。可塑剤の役割は、他の成分、例えば、イオノフォアを溶媒和したままにすることである。多くの好適な可塑剤、例えば、エステル、ホスホン酸塩およびエーテルは、当技術分野において記載されている。一実施形態において、可塑剤は、４−ヘキシルフェニル２−ニトロフェニルエーテル（ＮＨＰＥ）もしくは２−ニトロフェニルオクチルエーテル（ＮＰＯＥ）またはこれらの混合物である。一実施形態において、可塑剤、例えば、ＮＨＰＥは、乾燥膜質量の約４０％〜８０％、例えば、乾燥膜質量の５０％〜７０％、例えば、乾燥膜質量の５５％〜６５％を構成する。
【０１５２】
ポリマー−本発明の膜は、典型的にはさらにポリマーまたはポリマーの混合物、ポリマーブレンドを含む。ポリマーは、可塑剤および活性成分を含有するためのネットワークを提供することによって、膜に構造的完全性を付与する。使用できるポリマーおよびコポリマーの非限定的例としては、ポリ（塩化ビニル）、カルボキシル化（ポリ塩化ビニル）、ポリウレタン、ポリ（塩化ビニル−ｃｏ−ビニルアセテート）、ポリ（塩化ビニル−ｃｏ−ビニルアルコール）、ポリ（塩化ビニル−ｃｏ−ビニルアセテート−ｃｏ−ビニルアルコール）およびこれらのいずれかの組み合わせが挙げられる。
【０１５３】
好ましい実施形態において、膜は、ポリマーブレンドを含み、前記ポリマーブレンドは、
ａ．カルボキシル化ポリ（塩化ビニル）またはポリ（塩化ビニル）である第１のポリマーであって、前記第１のポリマーの分子量が、１００，０００〜５００，０００である、前記第１のポリマーと、
ｂ．塩化ビニルと、親水性基を有する少なくとも１つのさらなるモノマー基とのコポリマーである第２のポリマーであって、前記第２のポリマーの分子量が１００，０００未満である、前記第２のポリマーと
を含み、
前記第１のポリマーが、カルボキシル化ポリ（塩化ビニル）である場合、前記第２のポリマーは前記第１のポリマーより多くの親水性基を有する。
【０１５４】
一実施形態において、前記第１のポリマーは、カルボキシル化ポリ（塩化ビニル）である。さらなる実施形態において、前記第１のポリマーは、カルボキシル化ポリ（塩化ビニル）であり、前記第２のポリマーは、前記第１のポリマーの少なくとも１．５倍の親水性基、例えば、前記第１のポリマーの、例えば、少なくとも２倍、例えば、少なくとも４倍、例えば、少なくとも５倍、例えば、少なくとも１０倍の親水性基を有する。さらにさらなる実施形態において、前記第１のポリマーは、カルボキシル化ポリ（塩化ビニル）であり、前記カルボキシル化ポリ（塩化ビニル）は、０．１％〜１０％カルボキシル化、例えば、０．５％〜５％カルボキシル化、例えば、１％〜３％カルボキシル化、例えば、１．８％カルボキシル化されている。
【０１５５】
別の実施形態において、前記第１のポリマーは、ポリ（塩化ビニル）である。
一実施形態において、前記第１のポリマーの分子量は、少なくとも１１０，０００、例えば、少なくとも１２０，０００、例えば、１３０，０００〜４００，０００、例えば、１３０，０００〜３００，０００、例えば、１３０，０００〜２５０，０００である。
【０１５６】
一実施形態において、前記第１のポリマーは、カルボキシル化ポリ（塩化ビニル）であり、前記第１のポリマーの分子量は、少なくとも１１０，０００、例えば、少なくとも１２０，０００、例えば、１３０，０００〜４００，０００、例えば、２００，０００〜３００，０００、例えば、２００，０００〜２５０，０００、例えば、２２０，０００である。
【０１５７】
別の実施形態において、前記第１のポリマーは、ポリ（塩化ビニル）であり、前記第１のポリマーの分子量は、少なくとも１１０，０００、例えば、少なくとも１２０，０００、例えば、１２０，０００〜２００，０００、例えば、１３０，０００〜１６０，０００、例えば、１４０，０００である。
【０１５８】
本発明の膜の一実施形態において、第２のポリマー中の前記さらなるモノマーは、ビニルアルコール、ビニルエステルまたはヒドロキシ官能性アクリレートである。さらなる実施形態において、前記第２のポリマーは、塩化ビニル、ビニルアセテート、ビニルアルコールと、任意でアクリル酸、メタクリル酸またはマレイン酸などの親水性基を含むさらなるモノマーとのコポリマーである。
【０１５９】
さらにさらなる実施形態において、前記第２のポリマーは、ポリ（塩化ビニル−ｃｏ−ビニルアセテート−ｃｏ−ビニルアルコール）である。一実施形態において、前記ポリ（塩化ビニル−ｃｏ−ビニルアセテート−ｃｏ−ビニルアルコール）は、７５％〜９８％の塩化ビニル、例えば、８５％〜９５％の塩化ビニル、例えば、８９％〜９３％の塩化ビニル、例えば、９１％の塩化ビニルを含む。別の実施形態において、前記ポリ（塩化ビニル−ｃｏ−ビニルアセテート−ｃｏ−ビニルアルコール）は、１％〜２０％のビニルアセテート、例えば、１％〜１０％のビニルアセテート、例えば、１％〜５％のビニルアセテート、例えば、３％のビニルアセテートを含む。さらなる実施形態において、前記ポリ（塩化ビニル−ｃｏ−ビニルアセテート−ｃｏ−ビニルアルコール）は、１％〜１５％のビニルアルコール、例えば、１％〜１０％のビニルアルコール、例えば、４％〜８％のビニルアルコール、例えば、６％のビニルアルコールを含む。
【０１６０】
一実施形態において、第２のポリマーの分子量は、１００，０００未満、例えば、３０，０００〜９０，０００、好ましくは６０，０００〜８０，０００、例えば、７０，０００である。
【０１６１】
一実施形態において、膜中の第１のポリマー質量と第２のポリマー質量との比は、１０：１〜１：５、例えば、４：１〜１：４、例えば、２：１〜１：３、例えば、２：３〜３：７、例えば、１：２である。
【０１６２】
一実施形態において、前記第１のポリマーは、カルボキシル化ポリ（塩化ビニル）であり、膜中の第１のポリマー質量と第２のポリマー質量との比は、４：１〜１：４、例えば、２：１〜１：３、例えば、３：２〜３：７、または２：３〜３：７、例えば、１：２である。
【０１６３】
別の実施形態において、前記第１のポリマーは、ポリ（塩化ビニル）であり、膜中の第１のポリマー質量と第２のポリマー質量との比は、１０：１〜１：５、例えば、７：１〜１：２、例えば、５：１〜１：２、例えば、５：１〜２：３、例えば、５：１〜２：１、例えば、４：１である。
【０１６４】
一実施形態において、ポリマーブレンドは、乾燥膜質量（すなわち、溶媒中で混合される前の成分の質量）の約１０％〜５０％、例えば、乾燥膜質量の２０％〜４０％、例えば、乾燥膜質量の２５％〜３５％、例えば、乾燥膜質量の２５％〜３０％を構成する。
【０１６５】
好ましい実施形態において、膜は、以下の表１に特定される組成を有する。
【０１６６】
【表１】
2021528661.tif 000029
【０１６７】
電極および電位差測定センサー
さらなる主要な態様において、本発明は、本明細書に記載される本発明のイオン選択性膜を含む、イオン選択性電極に関する。電極は、厚膜方式、例えば、スクリーン印刷、輪転グラビア印刷、パッド印刷、ステンシル印刷の導電性材料、例えば、炭素、Ｃｕ、Ｐｔ、Ｐｄ、Ａｕおよび／もしくはナノチューブなどを使用することによって、または、薄膜方式、例えば、スパッタリング、サーマルスプレーおよび／もしくはコールドスプレーの導電性材料を使用することによって支持体上に作られ得る。支持体は柔軟性または剛性であり得る。支持体は、好ましくは、非導電性材料、例えば、ケイ素、ポリマー、プリント回路基板（ＰＣＢ）、フレックスＰＣＢ、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ポリイミド（ＰＩ）、セラミック、アルミナ、ガラス、木材製品、フリットなどでできている。
【０１６８】
さらにさらなる主要な態様において、本発明は、２つ以上の検体電極が、参照電極を含むまたは含まない単一の支持体上に存在する、センサーアセンブリに関する（参照電極を含むセンサーアセンブリについては米国特許第５９１６４２５号を参照のこと）。いくつかの実施形態において、センサーアセンブリは、参照電極を含むまたは含まない、各々２つ以上の検体電極を含む２つの支持体でできている。支持体は、電極を有する前記支持体の表面が互いに面するように、互いの上に層状構造で配置され得る（例えば、ＷＯ２００８／１３１７６７）。別の好適なセンサーアセンブリはＷＯ２０１８／１１２０１７、ＷＯ２０１８／１１２０１２、ＷＯ２０１８／１１２００８、ＷＯ２０１７／１２０４６４、ＷＯ２０１７／０１９６０９、ＷＯ２０１６／１０６３２０、ＷＯ２０１６／０１１３０８、ＷＯ２０１６／００７７１６およびＷＯ２０１３／１６３１２０に記載されている。
【０１６９】
一実施形態において、システムは、生理学的濃度の、干渉する可能性のある化合物（Ｃａ２＋、Ｋ＋およびＮａ＋）を含有するキャリブレーターで較正される。
いくつかの実施形態において、システムは、カルシウムイオンなどの他のカチオンの測定のための１つまたは複数の電極を含有し、したがって干渉は、カチオン活性の測定に基づく検体信号のケモメトリクス補正によって最小限に抑えられ得る。
【０１７０】
使用および使用方法
上記のように、さらなる主要な態様において、本発明は、試料中のマグネシウムイオンなどのイオン濃度を決定するための本発明による電位差測定センサーまたは電極の使用に関する。
【０１７１】
同様に、本発明は、液体試料中のマグネシウムイオンなどのイオン濃度を決定する方法であって、前記試料と本発明の電極または本発明の電位差測定センサーとを接触させるステップと、前記電極または電位差測定センサーから得られる信号に基づきイオン濃度を決定するステップとを含む、方法に関する。
【０１７２】
検体の存在について試験される生体試料は、生理液、例えば、希釈または無希釈の全血、血清、血漿、唾液、尿、糞便、胸膜液、脳脊髄液、滑液、乳、腹水液、腹腔液または羊水であり得る。他の生体試料の例としては、発酵ブロス、培養微生物、廃水、食品などが挙げられる。
【０１７３】
好ましい実施形態において、試料は、血液試料または血清試料である。試料、例えば、血液試料、血清試料、血漿試料または胸膜試料は、例えば、ヒト対象からの試料であり得る。
【０１７４】
マグネシウムイオンレベルを決定する目的は、例えば、ヒト患者などの患者の疾患もしくは障害を診断すること、または医学療法もしくは手術などの治療を受けるか、もしくはこれらに登録される患者のマグネシウムレベルをモニターすることであり得る。一実施形態において、疾患または障害は、心血管疾患または障害である。別の実施形態において、試料は、新生児、すなわち生後２８日未満の乳児からの試料である。
【０１７５】
Ｚｈａｎｇ（２０１１）Ａｍ  Ｊ  Ｂｉｏｍｅｄ  Ｓｃｉ  ３：３０１は、マグネシウムレベル、特に、低マグネシウム血症と臨床成績との関連を実証するいくつかの試験を要約する。例えば、試験は、低マグネシウム血症と、血液透析、２型糖尿病、心血管疾患または医療外科集中治療を経験するＩＣＵ患者の死亡率との関連を実証した。さらに、心疾患患者において、マグネシウムの欠乏は、冠動脈攣縮、不整脈、細動、梗塞および突然死に寄与することが見出された。心肺バイパス術中のマグネシウム介入試験は、ｉＭｇの術中の補正が、術後の心室性不整脈の減少および連続した洞調律の維持に関連していることを示した。臨床治験結果はまた、卒中症状の発症後２時間以内の救急車または救急部における急性卒中患者に対するマグネシウム療法の利点を示唆する。マグネシウムのモニタリングは、低マグネシウム血症と関連づけられることが報告された状態であり、ヨーロッパおよびＵＳＡにおける妊娠の５〜７％で発生する子癇前症においても提唱される。他の知見は、ｉＣａ：ｉＭｇの比が、子癇前症−子癇発作患者における血管系および神経系合併症の予防に極めて重要な診断パラメーターであることを示唆した。Ｓｏｌｉｍａｎら（２００３）Ｃｒｉｔ．Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ．３１：１０８２は、ＩＣＵ滞在中のイオン化低マグネシウム血症の発症と高い罹患率および死亡率との間の相関を報告した。
【０１７６】
したがって、さらなる実施形態において、マグネシウムイオンレベルが本発明の方法または使用で決定される試料は、例えば、急性入院患者、または医学療法もしくは手術、例えば、心臓手術、例えば、心肺バイパス術を受けるか、もしくはこれらに登録された患者からの試料であり得る。さらなる実施形態において、試料は、食物摂取不良、吸収不良障害、低カリウム血症、低カルシウム血症、アルコール依存症を有する患者から、または低マグネシウム血症に関連する利尿薬もしくは他の薬物を摂取する患者からのものである。さらなる実施形態において、試料は、腎疾患、高血圧、子癇前症、真性糖尿病、糖尿病ケトアシドーシス、不整脈、敗血症、胸痛、急性卒中、外傷性ショック（ｃｈｏｃｋ）、熱傷／煙吸入、急性肺疾患または心疾患、例えば、心停止を有する患者からのものである。別の実施形態において、患者は、産科病棟患者または血液透析を受けている患者である。さらに、試料は、血液透析、２型糖尿病、心血管疾患または医療外科集中治療を経験するＩＣＵ患者からのものであり得る。
【０１７７】
本発明は、以下の実施例によりさらに例示され、これは本発明の範囲を限定するものとして解釈されるべきではない。
【実施例】
【０１７８】
実施例１
イオン選択性膜の調製
ヘミマグネシウムビス［４−オクチルフェニル］ホスフェート（ＭｇＯＰＰ）の貯蔵液を、ＭｇＯＰＰ  １ｇ当たりシクロヘキサノン４８．２８ｇの比でＭｇＯＰＰとシクロヘキサノン（＞９９．８％）とを混合して調製した。化合物を室温で混合した後、室温において暗所で最低８時間撹拌するか、または３７℃で最低４時間撹拌した。
【０１７９】
膜を分配する溶液を、以下の成分を混合して調製した。
【０１８０】
【表２】
2021528661.tif 000030
【０１８１】
化合物を、アルゴンまたは窒素ガスを充填したバイアル内で室温において混合した後、室温において暗所で最低４０時間撹拌するか、または３７℃で最低１６時間撹拌した。得られた溶液を使用して、膜を、セラミック支持体上のポリ（３，４−エチレンジオキシチオフェン）−ポリ（スチレンスルホネート）（ＰＥＤＯＴ）で覆われた金電極上に分配した。その後、溶媒を蒸発させて、可塑化したイオン選択性膜を得た。
【０１８２】
実施例２
各種親油性塩の組成を有する膜の比較
各種親油性塩の組成を有する３つの膜を、本質的に実施例１に記載されるように調製した。
１．ヘミカルシウムビス［４−オクチルフェニル］ホスフェートを含有するが、ヘミマグネシウムビス［４−オクチルフェニル］ホスフェートを含有しないＭｇ８９９膜
２．ヘミマグネシウムビス［４−オクチルフェニル］ホスフェートを含有するが、ヘミカルシウムビス［４−オクチルフェニル］ホスフェートを含有しないＭｇ９００膜
３．５０％のヘミカルシウムビス［４−オクチルフェニル］ホスフェートおよび５０％のヘミマグネシウムビス［４−オクチルフェニル］ホスフェートを含有するＭｇ９０１膜
各膜を、電極アレイの２〜３つの個々の電極上に分配した。これはＣａ２＋イオン選択性電極も含有していた。膜を実施例１に記載されるように分配した。各電極アレイを、テストアナライザ内の測定チャンバに配置した。測定チャンバは、参照電極と流体接触させた。テストアナライザには、較正液およびリンス液の液体輸送、試料の吸引、各電極位置の電位差信号のサンプリング、およびこれらのデータ取得の自動制御をプログラムした。
【０１８３】
センサーの較正と同時にリンス液を中間で交換しながら、イオン選択性電極を、０．２５ｍＭ  Ｍｇ２＋および０．５ｍＭ  Ｃａ２＋のリンス液と約１時間１０分接触させた。同じリンス液に約２分アイドル曝露後（最後の較正作業は１時間１０分で終了）、約１時間１２分で、血液試料中のマグネシウムイオン濃度を、５回の繰り返しの測定により決定した。
【０１８４】
Ｍｇ２＋イオン選択性電極を、他のセンサー、例えば、Ｎａ、Ｋ、Ｃａ、Ｃｌ、ｐＨ、ｐＯ２、ｐＣＯ２、グルコースおよび乳酸センサーの同時較正に好適な、複雑な溶液マトリックスで３つの異なる比でＭｇ２＋およびＣａ２＋イオンを含有する３種の較正液を用いて較正した。ニコルスキー−アイゼンマン（ＮＥ）の式を、ＩＦＣＣガイドラインに従ってセンサー応答モデルとして使用した（Ｂｅｎ  Ｒａｙａｎａら（２００８）Ｃｌｉｎ  Ｃｈｅｍ  Ｌａｂ  Ｍｅｄ４６（１）：２１）。状態値（Ｅ０）、感度（Ｓ）およびＣａ２＋イオンに対するＭｇ２＋イオンの選択係数（Ｋ）を、較正液で得られた電極信号に基づき決定した。Ｃａ２＋イオン選択性電極も較正した。
【０１８５】
各Ｍｇ２＋イオン選択性電極について、各血液試料中のＭｇ２＋イオンの濃度（ｃＭｇ）を、試料測定前に電極について決定した較正パラメーター（Ｅ０、ＳおよびＫ）の値およびＣａ２＋イオン選択性電極で決定したＣａ２＋イオンの濃度を利用して、特定の試料で得られた信号から算出した。列挙されたｃＭｇ値を得るためのその後の補正は行われなかった。
【０１８６】
Ｍｇ８９９の２つの膜およびＭｇ９００およびＭｇ９０１の３つの膜を、確実に同一の平衡履歴になるように並行して試験した。結果を以下の表に示す：
【０１８７】
【表３】
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【０１８８】
データからは、約１時間１２分の平衡時間後、各々１００％のカルシウム塩および１００％のマグネシウム塩を含有するＭｇ８９９およびＭｇ９００の膜が、同じ試料でのその後の４回の繰り返しの測定において決定された値からの有意な偏差（下線が引かれた値を参照のこと）を示したことが分かる。これは、これらの膜が、アイドル中に電極前面のリンス液の組成を変化させないために長い平衡時間を必要とし、したがって、これらは、カルシウム塩とマグネシウム塩の両方を含有する膜Ｍｇ９０１より劣ることを実証する。
【国際調査報告】
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