(57)【要約】  線維芽細胞活性化タンパク質（ＦＡＰ）を調節するための化合物および組成物が記載されている。本化合物および組成物は、過増殖性疾患を含む疾患の治療のための治療剤としての使用を見出し得る。【選択図】図６Ｃ
2021506972.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）の化合物、
【化１】
2021506972.tif 000194
またはその薬学的に許容される塩が提供され、式中、
Ｒが、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、またはＣ６〜Ｃ１４アリールであり、Ｒの前記Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、およびＣ６〜Ｃ１４アリールが独立して、Ｒｄによって任意に置換されており、
ｍは、０、１、２、３、または４であり、
ｎが、０、１、２、３、または４であり、
ｍ＋ｎは、１、２、３、または４であり、
Ｘが、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｏ−、−ＣＨ（ＯＨ）−、−Ｓ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、または−Ｓ（＝Ｏ）２−であり、
Ｌは、
【化２】
2021506972.tif 000195
であって、式中、
＊が、Ｙ−Ｘ−部分への結合点を表し、
＊＊が、分子の残部への結合点を表し、
Ｒａが、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、もしくはＣ６〜Ｃ１４アリールであり、ＲａのＣ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、およびＣ６〜Ｃ１４アリールが独立して、Ｒｅによって任意に置換されており、
Ｒ１およびＲ２が互いに独立して、かつ各出現において独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ２アルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、もしくはＣ６〜Ｃ１４アリールであり、Ｒ１およびＲ２の前記Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、およびＣ６〜Ｃ１４アリールが独立して、Ｒｆによって任意に置換されており、
または、Ｒ１およびＲ２が、それらが結合する１個以上の炭素原子と一緒になって、Ｒｆによって任意に置換されている３〜８員シクロアルキレンを形成し、
ｑが、１、２、もしくは３であり、
Ｒ３およびＲ４が互いに独立して、かつ各出現において独立して、水素、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、もしくはＣ６〜Ｃ１４アリールであり、Ｒ３およびＲ４の前記Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、およびＣ６〜Ｃ１４アリールが独立して、Ｒｇによって任意に置換されており、
または、Ｒ３およびＲ４が、それらが結合する炭素原子と一緒になって、Ｒｇによって任意に置換されている３〜８員シクロアルキレンを形成し、
ｐが、０、１、または２である、式（ａ）、
【化３】
2021506972.tif 000196
であって、式中、
＊が、Ｙ−Ｘ−部分への結合点を表し、
＊＊が、分子の残部への結合点を表し、
Ｒ５およびＲ６が互いに独立して、かつ各出現において独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、もしくはＣ６〜Ｃ１４アリールであり、Ｒ５およびＲ６の前記Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、およびＣ６〜Ｃ１４アリールが独立して、Ｒｈによって任意に置換されており、
ＲｂおよびＲｃは独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、Ｃ６〜Ｃ１４アリール、もしくは−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ１７であり、ＲｂおよびＲｃの前記Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、およびＣ６〜Ｃ１４アリールが独立して、Ｒｉによって任意に置換されており、
ｒが、１、２、もしくは３である、式（ｂ）、あるいは
【化４】
2021506972.tif 000197
であって、式中、
＊が、Ｙ−Ｘ−部分への結合点を表し、
＊＊が、分子の残部への結合点を表し、
Ｒ７およびＲ８が互いに独立して、かつ各出現において独立して、水素、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、もしくはＣ６〜Ｃ１４アリールであり、Ｒ７およびＲ８の前記Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、およびＣ６〜Ｃ１４アリールが独立して、Ｒｊによって任意に置換されており、
または、Ｒ７およびＲ８が、それらが結合する炭素原子と一緒になって、Ｒｊによって任意に置換されている３〜８員シクロアルキレンを形成し、
Ｒ９およびＲ１０が互いに独立して、かつ各出現において独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、もしくはＣ６〜Ｃ１４アリールであり、Ｒ９およびＲ１０のＣ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、およびＣ６〜Ｃ１４アリールが独立して、Ｒｋによって任意に置換されており、
ｓが、１、２、もしくは３であり、
ｔが、１、２、もしくは３であり、
ｓ＋ｔが、２、３、もしくは４であり、
ｕが、０もしくは１であり、
ｖが、０もしくは１である、式（ｃ）、であり、
Ｙが、Ｒ１１によって任意に置換されているＣ６〜Ｃ９アリール、Ｒ１２によって任意に置換されている６〜１０員ヘテロアリール、またはＲ１３によって任意に置換されている３〜１２員ヘテロシクリルであり、Ｙが、フェニルまたはナフチルであるとき、Ｙの前記フェニルまたはナフチルは、少なくとも１つのＲ１１によって置換されており、Ｌが、＊−ＮＨ−ＣＨ２−＊＊であり、Ｙが、任意に置換されているキノリニルであるとき、Ｙの前記任意に置換されているキノリニルは、２、３、５、６、７、または８位で親構造に接続されており、
Ｒ１１、Ｒ１２、およびＲ１３が互いに独立して、かつ各出現において独立して、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ４〜Ｃ８シクロアルケニル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、Ｃ６〜Ｃ１４アリール、ハロゲン、シアノ、オキソ、−ＯＲ１４、−ＮＲ１５Ｒ１６、−ＳＲ１４、−ＮＯ２、−Ｃ＝ＮＨ（ＯＲ１４）、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１４、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１４、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１４、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１５Ｒ１６、−ＮＲ１４Ｃ（Ｏ）Ｒ１５、−ＮＲ１４Ｃ（Ｏ）ＯＲ１５、−ＮＲ１４Ｃ（Ｏ）ＮＲ１５Ｒ１６、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１４、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１４、−ＮＲ１４Ｓ（Ｏ）Ｒ１５、−ＮＲ１４Ｓ（Ｏ）２Ｒ１５、−Ｓ（Ｏ）ＮＲ１５Ｒ１６、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ１５Ｒ１６、または−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１５）（ＯＲ１６）であり、各Ｒ１１、Ｒ１２、およびＲ１３が独立して、ＲＬによって任意に置換されており、
各Ｒ１４が独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ６〜Ｃ１４アリール、５〜１０員ヘテロアリール、または３〜１２員ヘテロシクリルであり、Ｒ１４の前記Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ６〜Ｃ１４アリール、５〜１０員ヘテロアリール、および３〜１２員ヘテロシクリルが独立して、ハロゲン、−ＯＨ、オキソ、シアノ、またはハロゲン、−ＯＨ、もしくはオキソによって任意に置換されているＣ１〜Ｃ６アルキルによって任意に置換されており、
Ｒ１５およびＲ１６は互いに独立して、かつ各出現において独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ６〜Ｃ１４アリール、５〜１０員ヘテロアリール、または３〜１２員ヘテロシクリルであり、Ｒ１５およびＲ１６のＣ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ６〜Ｃ１４アリール、５〜１０員ヘテロアリール、および３〜１２員ヘテロシクリルは独立して、ハロゲン、−ＯＨ、オキソ、シアノ、またはハロゲン、−ＯＨ、もしくはオキソによって任意に置換されているＣ１〜Ｃ６アルキルによって任意に置換されており、
あるいは、Ｒ１５およびＲ１６が、それらが結合する原子と一緒になって、ハロゲン、オキソ、シアノ、またはハロゲン、−ＯＨ、もしくはオキソによって任意に置換されているＣ１〜Ｃ６アルキルによって任意に置換されている３〜６員ヘテロシクリルを形成し、
Ｒｄ、Ｒｅ、Ｒｆ、Ｒｇ、Ｒｈ、Ｒｉ、Ｒｊ、およびＲｋは互いに独立して、かつ各出現において独立して、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ６〜Ｃ１４アリール、５〜１０員ヘテロアリール、３〜１２員ヘテロシクリル、−ＯＲ１４、−ＮＲ１５Ｒ１６、シアノ、またはニトロであり、
各ＲＬは独立して、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ６〜Ｃ１４アリール、５〜１０員ヘテロアリール、３〜１２員ヘテロシクリル、−ＯＲ１４、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１４、−ＮＲ１５Ｒ１６、シアノ、オキソ、またはニトロである。
【請求項２】
Ｘが、−Ｃ（＝Ｏ）−である、請求項１に記載の化合物、またはその塩。
【請求項３】
Ｘが、−Ｏ−である、請求項１に記載の化合物、またはその塩。
【請求項４】
Ｘが、−ＣＨ（ＯＨ）−である、請求項１に記載の化合物、またはその塩。
【請求項５】
Ｌが、−ＮＨ−ＣＲ１Ｒ２−である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物、またはその塩。
【請求項６】
Ｌが、−ＮＨ−ＣＨ２−である、請求項５に記載の化合物、またはその塩。
【請求項７】
Ｌが、−ＮＨ−ＣＨ（ＣＨ３）−である、請求項５に記載の化合物、またはその塩。
【請求項８】
Ｌが、−ＮＨ−ＣＲ１Ｒ２−であり、Ｒ１およびＲ２が、それらが結合する炭素原子と一緒になって、３〜８員シクロアルキレンを形成する、請求項５に記載の化合物、またはその塩。
【請求項９】
Ｒ１およびＲ２が、それらが結合する炭素原子と一緒になって、シクロプロピレンを形成する、請求項８に記載の化合物、またはその塩。
【請求項１０】
Ｌが、
−ＣＲ５Ｒ６−ＣＨ（ＮＲｂＲｃ）−である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物、またはその塩。
【請求項１１】
Ｌが、−ＣＲ５Ｒ６−ＣＨ（ＮＲｂＲｃ）−であり、Ｒ６、Ｒｂ、およびＲｃが、Ｈであり、Ｒ５が、ＨまたはＣ１〜Ｃ６アルキルである、請求項１０に記載の化合物、またはその塩。
【請求項１２】
Ｌが、
【化５】
2021506972.tif 000198
であり、＊が、Ｙ−Ｘ−部分への結合点を表し、＊＊が、分子の残部への結合点を表す、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物、またはその塩。
【請求項１３】
Ｌが、
【化６】
2021506972.tif 000199
であり、＊が、Ｙ−Ｘ−部分への結合点を表し、＊＊が、分子の残部への結合点を表す、請求項１２に記載の化合物、またはその塩。
【請求項１４】
Ｙが、Ｒ１２によって任意に置換されている６〜１０員ヘテロアリール、またはＲ１３によって任意に置換されている３〜１２員ヘテロシクリルである、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の化合物、またはその塩。
【請求項１５】
Ｙが、Ｒ１１によって任意に置換されているＣ６〜Ｃ９アリールであり、Ｙが、フェニルまたはナフチルであるとき、Ｙの前記フェニルまたはナフチルが、少なくとも１つのＲ１１によって置換されている、請求項１に記載の化合物、またはその塩。
【請求項１６】
Ｙが、ハロゲン、トリハロメチル、シアノ、および−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ２から独立して選択される１〜５のＲ１１によって置換されているフェニルである、請求項１５に記載の化合物。
【請求項１７】
Ｙが、非置換２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イルである、請求項１５に記載の化合物。
【請求項１８】
Ｙが、Ｒ１２によって任意に置換されている６〜１０員ヘテロアリールであり、Ｌが、＊−ＮＨ−ＣＨ２−＊＊であり、Ｙが、任意に置換されているキノリニルであるとき、Ｙの前記任意に置換されているキノリニルは、２、３、５、６、７、または８位で親構造に接続されている、請求項１４に記載の化合物、またはその塩。
【請求項１９】
そのいずれかである、請求項１８に記載の化合物、またはその塩。
（ａ）Ｌが、＊−ＣＨ２−ＣＨ（ＮＨ２）−＊＊もしくは＊−ＣＨ（ＣＨ３）−ＣＨ（ＮＨ２）−＊＊であり、Ｙが、Ｒ１２によって任意に置換されているキノリン−４−イルであるか、または
（ｂ）Ｌが、＊−ＮＨ−ＣＨ２−＊＊であり、Ｙが、Ｒ１２によって任意に置換されているキノリン−６−イルであり、Ｒ１２が独立して、−ＯＨおよびフェニルから選択される。
【請求項２０】
Ｙが、Ｒ１２によって３位で置換されているピリジン−４−イルである、請求項１８に記載の化合物、またはその塩。
【請求項２１】
Ｒ１２が、Ｃ１〜Ｃ６アルキルによって任意に置換されているピリジニルである、請求項２０に記載の化合物、またはその塩。
【請求項２２】
Ｒ１２が、Ｃ１〜Ｃ６アルキルによって任意に置換されているインドリルである、請求項２０に記載の化合物、またはその塩。
【請求項２３】
Ｒ１２が、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ハロゲン、またはＣ１〜Ｃ６アルコキシによって任意に置換されているフェニルである、請求項２０に記載の化合物、またはその塩。
【請求項２４】
Ｙが、Ｒ１２によって任意に置換されており、Ｃ６〜Ｃ１４アリールまたはＣ５〜Ｃ１０シクロアルキルに任意に融合されているピリミジン−４−イルであり、Ｃ６〜Ｃ１４アリールおよびＣ５〜Ｃ１０シクロアルキルが、Ｒ１２によって任意に置換されている、請求項１８に記載の化合物、またその塩。
【請求項２５】
Ｙが、Ｃ６〜Ｃ１４アリールに融合されているピリミジン−４−イルであり、Ｃ６〜Ｃ１４アリールが、Ｒ１２によって任意に置換されている、請求項２４に記載の化合物、またはその塩。
【請求項２６】
Ｙが、任意に置換されているピリジン−３−イル、非置換キナゾリン−４−イル、または非置換６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｄ］ピリミジン−４−イルである、請求項２４に記載の化合物、またはその塩。
【請求項２７】
Ｙが、Ｒ１２によって任意に置換されており、Ｃ６〜Ｃ１４アリールに任意に融合されている２Ｈ−ピラン−２−オン−５−イルであり、前記Ｃ６〜Ｃ１４アリールが、Ｒ１２によって任意に置換されている、請求項１８に記載の化合物、またはその塩。
【請求項２８】
Ｙが、ハロゲンによって任意に置換されている１Ｈ−イソクロメン−１−オン−４−イルである、請求項２７に記載の化合物、またはその塩。
【請求項２９】
Ｙが、Ｒ１２によって任意に置換されており、Ｃ６〜Ｃ１４アリールまたは５〜１０員ヘテロシクリルに任意に融合されているピリジン−２（１Ｈ）−オン−５−イルであり、前記Ｃ６〜Ｃ１４アリールまたは５〜１０員ヘテロシクリルが互いに独立して、かつ各出現において独立して、Ｒ１２によって任意に置換されている、請求項１８に記載の化合物、またはその塩。
【請求項３０】
Ｙが、Ｃ１〜Ｃ６アルキルまたはＣ６〜Ｃ１４アリールによって任意に置換されているピリジン−２（１Ｈ）−オン−５−イルである、請求項２９に記載の化合物、またはその塩。
【請求項３１】
Ｙが、非置換７，８，９，１０−テトラヒドロピリド［１，２−ａ］アゼピン−４（６Ｈ）−オン−１−イルである、請求項２９に記載の化合物、またはその塩。
【請求項３２】
Ｙが、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ６〜Ｃ１４アリール、またはＣ３〜Ｃ８シクロアルキルによって任意に置換されているイソキノリン−１（２Ｈ）−オン−４−イルである、請求項２９に記載の化合物、またはその塩。
【請求項３３】
Ｙが、Ｒ１３によって任意に置換されている３〜１２員ヘテロシクリルである、請求項１４に記載の化合物、またはその塩。
【請求項３４】
Ｙが、非置換イソインドリン−２−イルである、請求項３３に記載の化合物、またはその塩。
【請求項３５】
Ｙが、Ｃ１〜Ｃ６アルキルまたはＣ６〜Ｃ１４アリールによって任意に置換されているピペリジン−２−オン−５−イルである、請求項３３に記載の化合物、またはその塩。
【請求項３６】
ｍ＝ｎ＝１である、請求項１〜３５のいずれか一項に記載の化合物、またはその塩。
【請求項３７】
Ｒが、水素である、請求項１〜３６のいずれか一項に記載の化合物、またはその塩。
【請求項３８】
−Ｘ−Ｌ−部分が、
【化７】
2021506972.tif 000200
からなる群から選択され、＊が、Ｙ部分への結合点を表し、＊＊が、分子の残部への結合点を表す、請求項１に記載の化合物、またはその塩。
【請求項３９】
請求項１〜３８のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩、および薬学的に許容される担体を含む薬学的組成物。
【請求項４０】
線維芽細胞活性化タンパク質（ＦＡＰ）によって媒介される疾患または障害の治療を必要とする個体においてそれを治療する方法であって、治療有効量の、請求項１〜３８のいずれか一項に記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、または請求項３９に記載の薬学的組成物を前記個体に投与することを含む、方法。
【請求項４１】
増殖、組織再構築、慢性炎症、肥満、ブドウ糖不耐症、またはインスリン不感受性によって特徴付けられる疾患または障害の治療を必要とする個体においてそれを治療する方法であって、治療有効量の、請求項１〜３８のいずれか一項に記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、または請求項３９に記載の薬学的組成物を前記個体に投与することを含む、方法。
【請求項４２】
前記疾患または障害が、乳癌、大腸癌、卵巣癌、前立腺癌、膵臓癌、腎臓癌、肺癌、黒色腫、線維肉腫、骨肉腫、結合組織肉腫、腎細胞癌、巨大細胞癌、扁平上皮癌、白血病、皮膚癌、軟組織癌、肝臓癌、胃腸癌、または腺癌である、請求項４０または４１に記載の方法。
【請求項４３】
前記疾患または障害が、転移性腎臓癌、慢性リンパ球性白血病、膵臓腺癌、または非小細胞肺癌である、請求項４２に記載の方法。
【請求項４４】
前記疾患または障害が、線維性疾患、創傷治癒、ケロイド形成、変形性関節症、関節リウマチおよび軟骨分解を伴う関連障害、アテローム性動脈硬化性疾患、クローン病、またはＩＩ型糖尿病である、請求項４０または４１に記載の方法。
【請求項４５】
腫瘍成長、腫瘍増殖、または腫瘍発生性の低減を必要とする個体においてそれを行う方法であって、請求項１〜３８のいずれか一項に記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、または請求項３９に記載の薬学的組成物を前記個体に投与することを含む、方法。
【請求項４６】
個体におけるＦＡＰを阻害する方法であって、請求項１〜３８のいずれか一項に記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、または請求項３９に記載の薬学的組成物を前記個体に投与することを含む、方法。
【請求項４７】
細胞におけるＦＡＰを阻害する方法であって、請求項１〜３８のいずれか一項に記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、または請求項３９に記載の薬学的組成物、あるいは前述のものの代謝産物を前記細胞に投与または送達することを含む、方法。
【請求項４８】
前記細胞が、線維芽細胞である、請求項４７に記載の方法。
【請求項４９】
前記細胞が、癌関連線維芽細胞（ＣＡＦ）または反応性間質線維芽細胞である、請求項４７または４８に記載の方法。
【請求項５０】
腫瘍におけるＦＡＰを阻害する方法であって、請求項１〜３８のいずれか一項に記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、または請求項３９に記載の薬学的組成物、あるいは前述のものの代謝産物を前記腫瘍に投与または送達することを含む、方法。
【請求項５１】
血漿におけるＦＡＰを阻害する方法であって、請求項１〜３８のいずれか一項に記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、または請求項３９に記載の薬学的組成物、あるいは前述のものの代謝産物を前記血漿に投与または送達することを含む、方法。
【請求項５２】
ＦＡＰを阻害することが、ＦＡＰのエンドペプチダーゼ活性を阻害することを含む、請求項４６〜５１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５３】
ＦＡＰを阻害することが、ＦＡＰのエキソペプチダーゼ活性を阻害することを含む、請求項４６〜５１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５４】
個体における免疫応答を増強する方法であって、（ａ）免疫チェックポイント阻害剤、および（ｂ）請求項１〜３８のいずれか一項に記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、または請求項３９に記載の薬学的組成物を投与することを含む、方法。
【請求項５５】
個体におけるＦＧＦ２１発現レベルを増加する方法であって、請求項１〜３８のいずれか一項に記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、または請求項３９に記載の薬学的組成物を前記個体に投与することを含む、方法。
【請求項５６】
ＦＧＦ２１発現の誘導剤を投与することをさらに含む、請求項５５に記載の方法。
【請求項５７】
前記ＦＧＦ２１発現の誘導剤が、ＰＰＡＲαアゴニストである、請求項５６に記載の方法。
【請求項５８】
前記ＰＰＡＲαアゴニストが、フィブラートまたはフェノフィブラートである、請求項５７に記載の方法。
【請求項５９】
ヒトまたは獣医用薬剤として使用するための、請求項３９に記載の組成物。
【請求項６０】
ＦＡＰによって媒介される障害または疾患の予防および／または治療のための薬剤の製造における、請求項１〜３８のいずれか一項に記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、または請求項３９に記載の薬学的組成物の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１７年１２月１５日に出願された米国仮特許出願第６２／５９９，６３０号の優先権の利益を主張するものであり、その開示は参照によりその全体において本明細書に組み込まれる。
【０００２】
本開示は、概して、線維芽細胞活性化タンパク質を調節するのに有用であり得る治療剤に関する。
【背景技術】
【０００３】
ＦＡＰα、セプラーゼ、またはα２−抗プラスミン変換酵素とも称される線維芽細胞活性化タンパク質（ＦＡＰ）は、ＤＰＰＩＩ、ＤＰＰＩＶ、ＤＰＰ８、ＤＰＰ９、およびＰＲＥＰ酵素も含むプロリルオリゴペプチダーゼファミリーＳ９に属するＩＩ型内在性膜セリンプロテアーゼである。このファミリーは、エキソ−ジペプチジルペプチダーゼ（ＤＰＰ）活性を有することを特徴とする。ＦＡＰは、エンドペプチダーゼ活性も有する唯一のメンバーである（Ａｅｒｔｇｅｅｒｔｓ，Ｋ．，ｅｔ  ａｌ．Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ，２００５．２８０（２０）：ｐ．１９４４１−４）。ＦＡＰは、ＤＰＰＩＶと高度の相同性を有する。主に細胞表面ホモ二量体として見出されるが、インビボでＤＰＰＩＶとともにヘテロ二量体を形成することも報告されている（Ｏ’Ｂｒｉｅｎ，Ｐ．，ｅｔ  ａｌ．Ｂｉｏｃｈｉｍ  Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ａｃｔａ，２００８．１７８４（９）：ｐ．１１３０−４５）。ＦＡＰエンドペプチダーゼ活性の意図される生理学的基質には、α２−抗プラスミン、Ｉ型コラーゲン、ゼラチン、および線維芽細胞成長因子２１（ＦＧＦ２１）が含まれ（Ｌｅｅ，Ｋ．Ｎ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００９．４８（２３）：ｐ．５１４９−５８）、エキソペプチダーゼ活性については、ニューロペプチドＹ、Ｂ型ナトリウム利尿ペプチド、Ｐ物質、およびペプチドＹＹが含まれる（Ｂｒｏｋｏｐｐ，Ｃ．Ｅ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｅｕｒ  Ｈｅａｒｔ  Ｊ，２０１１．３２（２１）：ｐ．２７１３−２２；Ｃｏｐｐａｇｅ，Ａ．Ｌ．，ｅｔ  ａｌ．，ＰＬｏＳ  Ｏｎｅ，２０１６．１１（３）：ｐ．ｅ０１５１２６９；Ｄｕｎｓｈｅｅ，Ｄ．Ｒ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ，２０１６．２９１（１１）：ｐ．５９８６−９６；Ｌｅｅ，Ｋ．Ｎ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｔｈｒｏｍｂ  Ｈａｅｍｏｓｔ，２０１１．９（５）：ｐ．９８７−９６）。
【０００４】
ＦＡＰは、これらに限定されないが、線維性疾患、創傷治癒、ケロイド形成、変形性関節症、関節リウマチおよび軟骨分解を伴う関連障害、アテローム性動脈硬化性疾患、およびクローン病を含む、増殖、組織再構築、慢性炎症、および／または線維症を伴う疾患に関与している。
【０００５】
ＦＡＰ発現は、胃癌、膵臓腺癌、および肝細胞癌を含むいくつかの種類の癌における予後不良に関連し（Ｗｅｎ，Ｘ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｏｎｃｏｌ  Ｒｅｓ，２０１６；Ｃｏｈｅｎ，Ｓ．Ｊ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｐａｎｃｒｅａｓ，２００８．３７（２）：ｐ．１５４−８；Ｊｕ，Ｍ．Ｊ．，ｅｔ  ａｌ．，Ａｍ  Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｐａｔｈｏｌ，２００９．１３１（４）：ｐ．４９８−５１０）、結腸癌において、増加したＦＡＰ発現は、より侵攻的な疾患と関連付けられている（Ｈｅｎｒｙ，Ｌ．Ｒ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｃｌｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ，２００７．１３（６）：ｐ．１７３６−４１）。おそらく、ＣＡＦ上のＦＡＰαは、腫瘍促進炎症を誘導することによって抗腫瘍免疫応答を調節する上で重要な役割を有する（Ｃｈｅｎ，Ｌ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ｒｅｓ  Ｃｏｍｍｕｎ，２０１７；Ｗｅｎ，Ｘ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｏｎｃｏｌ  Ｒｅｓ，２０１６；Ｈｕｇｏ，Ｗ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｃｅｌｌ，２０１６．１６５（１）：ｐ．３５−４４）。
【０００６】
Ｖａｌ−ｂｏｒｏＰｒｏ（Ｔａｌａｂｏｓｔａｔ、ＰＴ−１００）は、臨床段階に達した唯一のＦＡＰ阻害剤である。この化合物は、本来、ＤＰＰＩＶ阻害剤として開発され、その後、その選択性の欠如に関わらず、ＦＡＰ阻害剤として評価された（Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍ，Ｃ．Ｃ．，Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇ  Ｄｒｕｇｓ，２００７．１６（９）：ｐ．１４５９−６５）。この薬剤は、様々な癌において標準細胞毒性化学療法と組み合わせて、第ＩＩ相で試験されたが、有効性に関する評価項目は満たされなかった（Ｅａｇｅｒ，Ｒ．Ｍ．，ｅｔ  ａｌ．，ＢＭＣ  Ｃａｎｃｅｒ，２００９．９：ｐ．２６３；Ｎａｒｒａ，Ｋ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｂｉｏｌ  Ｔｈｅｒ，２００７．６（１１）：ｐ．１６９１−９；Ｅａｇｅｒ，Ｒ．Ｍ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｃｌｉｎ  Ｏｎｃｏｌ  Ｒ  Ｃｏｌｌ  Ｒａｄｉｏｌ，２００９．２１（６）：ｐ．４６４−７２）。２つの第ＩＩＩ相試験は、明らかに安全性および有効性の両方の懸念のために早期終了した（Ｊａｎｓｅｎ，Ｋ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ，２０１４．５７（７）：ｐ．３０５３−７４）。ｐＨ７．８に静置すると、Ｖａｌ−ｂｏｒｏＰｒｏは環状化により急速にプロテアーゼ阻害活性を失うので、この薬剤をより高い用量で用いた場合に見られる臨床毒性を考慮すると、患者において有効濃度を達成することは困難であった（Ｎａｒｒａ，Ｋ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｂｉｏｌ  Ｔｈｅｒ，２００７．６（１１）：ｐ．１６９１−９）
【０００７】
インビボでの安全性および有効性を改善するために、ＦＡＰ阻害剤の選択性および阻害剤の特性を改善する余地がある。
【発明の概要】
【０００８】
化合物、その塩、前述のものの薬学的組成物、ならびにそれらの製造および使用方法が本明細書に提供される。一態様において、式（Ｉ）の化合物、
【化１】
2021506972.tif 000003
またはその薬学的に許容される塩が提供され、式中、
Ｒが、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、またはＣ６〜Ｃ１４アリールであり、Ｒの前記Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、およびＣ６〜Ｃ１４アリールが独立して、Ｒｄによって任意に置換されており、
ｍは、０、１、２、３、または４であり、
ｎは、０、１、２、３、または４、
ｍ＋ｎは、１、２、３、または４であり、
Ｘが、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｏ−、−ＣＨ（ＯＨ）−、−Ｓ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、または−Ｓ（＝Ｏ）２−であり、
Ｌは、
【化２】
2021506972.tif 000004
であって、式中、
＊が、Ｙ−Ｘ−部分への結合点を表し、
＊＊が、分子の残部への結合点を表し、
Ｒａが、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、もしくはＣ６〜Ｃ１４アリールであり、ＲａのＣ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、およびＣ６〜Ｃ１４アリールが独立して、Ｒｅによって任意に置換されており、
Ｒ１およびＲ２が互いに独立して、かつ各出現において独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ２アルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、もしくはＣ６〜Ｃ１４アリールであり、Ｒ１およびＲ２のＣ３〜Ｃ８シクロアルキル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、およびＣ６〜Ｃ１４アリールが独立して、Ｒｆによって任意に置換されており、または、Ｒ１およびＲ２が、それらが結合する１個以上の炭素原子と一緒になって、Ｒｆによって任意に置換されている３〜８員シクロアルキレンを形成し、
ｑが、１、２、もしくは３であり、
Ｒ３およびＲ４が互いに独立して、かつ各出現において独立して、水素、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、もしくはＣ６〜Ｃ１４アリールであり、Ｒ３およびＲ４のＣ３〜Ｃ８シクロアルキル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、およびＣ６〜Ｃ１４アリールが独立して、Ｒｇによって任意に置換されており、または、Ｒ３およびＲ４が、それらが結合する炭素原子と一緒になって、Ｒｇによって任意に置換されている３〜８員シクロアルキレンを形成し、
ｐが、０、１、または２である、式（ａ）、
【化３】
2021506972.tif 000005
であって、式中、
＊が、Ｙ−Ｘ−部分への結合点を表し、
＊＊が、分子の残部への結合点を表し、
Ｒ５およびＲ６が互いに独立して、かつ各出現において独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、もしくはＣ６〜Ｃ１４アリールであり、Ｒ５およびＲ６の前記Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、およびＣ６〜Ｃ１４アリールが独立して、Ｒｈによって任意に置換されており、
ＲｂおよびＲｃは独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、Ｃ６〜Ｃ１４アリール、もしくは−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ１７であり、ＲｂおよびＲｃの前記Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、およびＣ６〜Ｃ１４アリールが独立して、Ｒｉによって任意に置換されており、
ｒが、１、２、もしくは３である、式（ｂ）、あるいは
【化４】
2021506972.tif 000006
であって、式中、
＊が、Ｙ−Ｘ−部分への結合点を表し、
＊＊が、分子の残部への結合点を表し、
Ｒ７およびＲ８が互いに独立して、かつ各出現において独立して、水素、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、もしくはＣ６〜Ｃ１４アリールであり、Ｒ７およびＲ８のＣ３〜Ｃ８シクロアルキル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、およびＣ６〜Ｃ１４アリールが独立して、Ｒｊによって任意に置換されており、または、Ｒ７およびＲ８が、それらが結合する炭素原子と一緒になって、Ｒｊによって任意に置換されている３〜８員シクロアルキレンを形成し、
Ｒ９およびＲ１０が互いに独立して、かつ各出現において独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、もしくはＣ６〜Ｃ１４アリールであり、Ｒ９およびＲ１０のＣ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、およびＣ６〜Ｃ１４アリールが独立して、Ｒｋによって任意に置換されており、
ｓが、１、２、もしくは３であり、
ｔが、１、２、もしくは３であり、
ｓ＋ｔが、２、３、もしくは４であり、
ｕが、０もしくは１であり、
ｖが、０もしくは１である、式（ｃ）、であり、
Ｙが、Ｒ１１によって任意に置換されているＣ６〜Ｃ９アリール、Ｒ１２によって任意に置換されている６〜１０員ヘテロアリール、またはＲ１３によって任意に置換されている３〜１２員ヘテロシクリルであり、Ｙが、フェニルまたはナフチルであるとき、Ｙの前記フェニルまたはナフチルは、少なくとも１つのＲ１１によって置換されており、Ｌが、＊−ＮＨ−ＣＨ２−＊＊であり、Ｙが、任意に置換されているキノリニルであるとき、Ｙの前記任意に置換されているキノリニルは、２、３、５、６、７、または８位で親構造に接続されており、
Ｒ１１、Ｒ１２、およびＲ１３が互いに独立して、かつ各出現において独立して、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ４〜Ｃ８シクロアルケニル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、Ｃ６〜Ｃ１４アリール、ハロゲン、シアノ、オキソ、−ＯＲ１４、−ＮＲ１５Ｒ１６、−ＳＲ１４、−ＮＯ２、−Ｃ＝ＮＨ（ＯＲ１４）、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１４、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１４、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１４、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１５Ｒ１６、−ＮＲ１４Ｃ（Ｏ）Ｒ１５、−ＮＲ１４Ｃ（Ｏ）ＯＲ１５、−ＮＲ１４Ｃ（Ｏ）ＮＲ１５Ｒ１６、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１４、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１４、−ＮＲ１４Ｓ（Ｏ）Ｒ１５、−ＮＲ１４Ｓ（Ｏ）２Ｒ１５、−Ｓ（Ｏ）ＮＲ１５Ｒ１６、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ１５Ｒ１６、または−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１５）（ＯＲ１６）であり、各Ｒ１１、Ｒ１２、およびＲ１３が独立して、ＲＬによって任意に置換されており、
各Ｒ１４が独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ６〜Ｃ１４アリール、５〜１０員ヘテロアリール、または３〜１２員ヘテロシクリルであり、Ｒ１４の前記Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ６〜Ｃ１４アリール、５〜１０員ヘテロアリール、および３〜１２員ヘテロシクリルが独立して、ハロゲン、−ＯＨ、オキソ、シアノ、またはハロゲン、−ＯＨ、もしくはオキソによって任意に置換されているＣ１〜Ｃ６アルキルによって任意に置換されており、
Ｒ１５およびＲ１６は互いに独立して、かつ各出現において独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ６〜Ｃ１４アリール、５〜１０員ヘテロアリール、または３〜１２員ヘテロシクリルであり、Ｒ１５およびＲ１６のＣ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ６〜Ｃ１４アリール、５〜１０員ヘテロアリール、および３〜１２員ヘテロシクリルは独立して、ハロゲン、−ＯＨ、オキソ、シアノ、またはハロゲン、−ＯＨ、もしくはオキソによって任意に置換されているＣ１〜Ｃ６アルキルによって任意に置換されており、
あるいは、Ｒ１５およびＲ１６は、それらが結合する原子と一緒になって、ハロゲン、オキソ、シアノ、またはハロゲン、−ＯＨ、もしくはオキソによって任意に置換されているＣ１〜Ｃ６アルキルによって任意に置換されている３〜６員ヘテロシクリルを形成し、
Ｒｄ、Ｒｅ、Ｒｆ、Ｒｇ、Ｒｈ、Ｒｉ、Ｒｊ、およびＲｋは互いに独立して、かつ各出現において独立して、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ６〜Ｃ１４アリール、５〜１０員ヘテロアリール、３〜１２員ヘテロシクリル、−ＯＲ１４、−ＮＲ１５Ｒ１６、シアノ、またはニトロであり、
各ＲＬは独立して、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ６〜Ｃ１４アリール、５〜１０員ヘテロアリール、３〜１２員ヘテロシクリル、−ＯＲ１４、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１４、−ＮＲ１５Ｒ１６、シアノ、オキソ、またはニトロである。
【０００９】
一態様において、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩が提供され、化合物は、以下の特徴のうちのいずれか１つ以上を有する：
（ｉ）Ｘは、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｏ−、または−ＣＨ（ＯＨ）−である；
（ｉｉ）Ｌは、
（ａ）−ＮＨ−ＣＨ２−もしくは−ＮＨ−ＣＨ（ＣＨ３）−など、またはＲ１およびＲ２が、それらが結合する炭素原子と一緒になって、シクロプロピレンなどの３〜８員シクロアルキレンを形成する、−ＮＨ−ＣＲ１Ｒ２−；
（ｂ）これらに限定されないが、Ｒ６、Ｒｂ、およびＲｃがそれぞれＨであり、Ｒ５がＨもしくはＣ１〜Ｃ６アルキルである場合を含む、−ＣＲ５Ｒ６−ＣＨ（ＮＲｂＲｃ）−；または
（ｃ）＊が、Ｙ−Ｘ−部分への結合点を表し、＊＊が、以下などの分子の残部への結合点を表す、
【化５】
2021506972.tif 000007
、である；
【化６】
2021506972.tif 000008
（ｉｉｉ）Ｙは、
（ａ）これらに限定されないが、各Ｒ１１が独立して、ハロゲン、トリハロメチル、シアノ、および−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ２から選択される場合を含む、非置換２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イル、または少なくとも１つのＲ１１によって置換されているフェニルもしくはナフチルなどの、Ｒ１１によって任意に置換されているＣ６〜Ｃ９アリール；
（ｂ）少なくとも１つのＲ１２によって置換されているピリジニルもしくはピリミジニルなどの、Ｒ１２によって任意に置換されている６〜１０員ヘテロアリール；または
（ｃ）少なくとも１つのＲ１３によって置換されているピペリジニルなどの、Ｒ１３によって任意に置換されている３〜１２員ヘテロシクリルである。
【００１０】
別の態様において、式（Ｉ）の化合物、またはその塩が提供され、式中、−Ｘ−Ｌ−部分は、
【化７】
2021506972.tif 000009
からなる群から選択され、＊は、Ｙ部分への結合点を表し、＊＊は、分子の残部への結合点を表す。
【００１１】
式（Ｉ）を含む、本明細書の任意の式の化合物、またはその薬学的に許容される塩、および薬学的に許容される担体を含む、薬学的組成物もまた提供される。
【００１２】
線維芽細胞活性化タンパク質（ＦＡＰ）によって媒介される疾患または障害の治療を必要とする個体においてそれを治療する方法もまた提供され、これらに限定されないが、式（Ｉ）の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、またはそのような化合物もしくは塩を含む薬学的組成物を含む、治療有効量の、本明細書に詳述される化合物を個体に投与することを含む。一態様におけるかかる疾患または障害は、増殖、組織再構築、慢性炎症、肥満、ブドウ糖不耐症、またはインスリン不感受性によって特徴付けられる。一態様において、疾患または障害は、乳癌、結腸直腸癌、卵巣癌、前立腺癌、膵臓癌、腎臓癌、肺癌、黒色腫、線維肉腫、骨肉腫、結合組織肉腫、腎細胞癌、巨大細胞癌、扁平上皮癌、白血病、皮膚癌、軟組織癌、肝臓癌、胃腸癌、または腺癌である。特定の態様において、疾患または障害は、転移性腎臓癌、慢性リンパ球性白血病、膵臓腺癌、または非小細胞肺癌である。さらなる態様において、疾患または障害は、線維性疾患、創傷治癒、ケロイド形成、変形性関節症、関節リウマチおよび軟骨分解を伴う関連障害、アテローム性動脈硬化性疾患、クローン病、またはＩＩ型糖尿病である。別の特定の態様において、腫瘍成長、腫瘍増殖、または腫瘍発生性の低減を必要とする個体においてそれを行う方法が提供され、式（Ｉ）の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、または前述のものの薬学的組成物などの、本明細書に詳述される化合物を個体に投与することを含む。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１Ａ】ｒｈＦＡＰによる経時的なＰＲＸＳ−ＡＭＣ分解を示す。
【図１Ｂ】ｒｈＦＡＰによる経時的なＺ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−ＡＭＣ分解を示す。
【図２Ａ】ｒｈＰＲＥＰによる経時的なＰＲＸＳ−ＡＭＣ分解を示す。
【図２Ｂ】ｒｈＰＲＥＰによる経時的なＺ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−ＡＭＣ分解を示す。
【図３Ａ】ｒｈＤＰＰＩＶによる経時的なＰＲＸＳ−ＡＭＣ分解を示す。
【図３Ｂ】ｒｈＤＰＰ９による経時的なＰＲＸＳ−ＡＭＣ分解を示す。
【図４】投与後の様々な時点での、化合物１３を投与したマウスの血漿におけるＦＡＰα活性を示す。
【図５】投与後の様々な時点での、化合物１３を投与したマウスの血漿におけるＤＰＰＩＶ活性を示す。
【図６Ａ】投与後の様々な時点での、例示的な化合物を投与したマウスの血漿におけるＦＡＰ活性を示す。
【図６Ｂ】投与後の様々な時点での、例示的な化合物を投与したマウスの血漿におけるＤＰＰＩＶ活性を示す。
【図６Ｃ】例示的な化合物を投与したマウスの血漿において測定される、経時的なＦＡＰ活性および化合物曝露の比較を示す。
【図７】試験化合物２４（５０ｍｇ／ｋｇ、毎日２回）またはビヒクル対照の経口投与後（７日目）のＣ５７／ＢＬ６マウスにおけるＭＣ３８結腸癌細胞株由来異種移植腫瘍の体積を示す。
【図８】試験化合物２４（５０ｍｇ／ｋｇ、毎日２回）またはビヒクル対照の投与後（７日目）のＭＣ３８結腸癌細胞株由来異種移植腫瘍を有するＣ４７／ＢＬ６マウスの体重増加を示す。
【図９】マウスを試験化合物２４または対照ビヒクルで処置したときの腫瘍体積の個々の記録を示す。
【図１０】マウスを試験化合物２４または対照ビヒクルで処置したときの腫瘍の総質量の平均および標準誤差（ＳＥＭ）を示す。
【図１１Ａ】ビヒクルまたは化合物１３（例示的な化合物）を投与した、Ｂ１６−Ｆ１０腫瘍を有するマウスの血漿および腫瘍における例示的な化合物の濃度を示す。
【図１１Ｂ】ビヒクルまたは化合物１３（例示的な化合物）を投与した、Ｂ１６−Ｆ１０腫瘍を有するマウスの血漿および腫瘍におけるＦＡＰ活性を示す。
【図１２Ａ】ビヒクルまたは化合物１３（例示的な化合物）を投与した、ＭＣ３８腫瘍を有するマウスの血漿および腫瘍における例示的な化合物の濃度を示す。
【図１２Ｂ】ビヒクルまたは化合物１３（例示的な化合物）を投与した、ＭＣ３８腫瘍を有するマウスの血漿および腫瘍におけるＦＡＰ活性を示す。
【図１３Ａ】ｒｈＦＡＰによるｒｈＦＧＦ２１の分解を示す抗ＦＧＦ２１ウエスタンブロットの画像を示す。
【図１３Ｂ】図１３Ａに示されるウエスタンブロットの密度測定分析を示す。
【図１３Ｃ】ｒｈＦＡＰによるｒｈＦＧＦ２１の分解の化合物１３（例示的な化合物）媒介阻害を示す抗ＦＧＦ２１ウエスタンブロットの画像を示す。
【図１３Ｄ】図１３Ｃに示されるウエスタンブロットの密度測定分析を示す。
【図１４Ａ】用量依存性様式におけるｒｈＦＡＰによるｒｈＦＧＦ２１の分解の化合物１３（例示的な化合物）媒介阻害を示す抗ＦＧＦ２１ウエスタンブロットの画像を示す。
【図１４Ｂ】図１４Ａに示されるウエスタンブロットおよび得られた曲線から決定されるＩＣ５０の密度測定分析を示す。
【図１５】ラットにビヒクルまたは化合物１３（例示的な化合物）を経口投与し、その後ｒｈＦＧＦ２１を静脈内投与するための実験プロトコルの概要を示し、また得られた抗ＦＧＦ２１ウエスタンブロット、ＦＡＰ活性、および経時的な血漿曝露レベルも示す。
【図１６】化合物１３（例示的な化合物）の静脈内投与後のハムスターにおける経時的なＦＡＰ活性およびＦＧＦ２１レベルを示す。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
式（Ｉ）による化合物、
【化８】
2021506972.tif 000010
およびその薬学的に許容される塩が本明細書に記載される。化合物は、線維芽細胞活性化タンパク質（ＦＡＰα）を阻害するのに有用であり得る。ある特定の実施形態において、化合物は、個体におけるＦＡＰαによって媒介される疾患または障害を治療するために使用される。かかる疾患または障害には、増殖、組織再構築、慢性炎症、肥満、ブドウ糖不耐症、および／またはインスリン不感受性が含まれ得るか、またはそれによって特徴付けられ得る。いくつかの実施形態において、化合物は、癌を治療するために使用される。
定義
【００１５】
本明細書で使用する場合、別途明示されない限り、「ａ」、「ａｎ」などの用語の使用は、１つ以上を指す。
【００１６】
本明細書における値またはパラメータの「約」への言及は、その値またはパラメータ自体を対象とする実施形態を含む（および説明する）。例えば、「約Ｘ」を参照する説明は、「ｘ」の説明を含む。
【００１７】
本明細書で使用される「アルキル」は、別段の記載がない限り、指定された炭素原子の数を有する飽和直鎖（すなわち、非分岐状）または分岐状の一価炭化水素鎖またはこれらの組み合わせを指し、これらを含む（すなわち、Ｃ１〜Ｃ１０は、１〜１０個の炭素原子を意味する）。特定のアルキル基は、１〜２０個の炭素原子（「Ｃ１〜Ｃ２０アルキル」）、１〜１０個の炭素原子（「Ｃ１〜Ｃ１０アルキル」）、６〜１０個の炭素原子（「Ｃ６〜Ｃ１０アルキル」）、１〜６個の炭素原子（「Ｃ１〜Ｃ６アルキル」）、２〜６個の炭素原子（「Ｃ２〜Ｃ６アルキル」）、または１〜４個の炭素原子（「Ｃ１〜Ｃ４アルキル」）を有するものである。アルキル基の例には、これらに限定されないが、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｔ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル、ｎ−ヘプチル、ｎ−オクチル、ｎ−ノニル、ｎ−デシル、および同類のものなどの基が挙げられる。
【００１８】
本明細書で使用される「アルキレン」は、アルキルと同じ残基を指すが、二価性を有する。特定のアルキレン基は、１〜２０個の炭素原子（「Ｃ１〜Ｃ２０アルキレン」）、１〜１０個の炭素原子（「Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン」）、６〜１０個の炭素原子（「Ｃ６〜Ｃ１０アルキレン」）、１〜６個の炭素原子（「Ｃ１〜Ｃ６アルキレン」）、１〜５個の炭素原子（「Ｃ１〜Ｃ５アルキレン」）、１〜４個の炭素原子（「Ｃ１〜Ｃ４アルキレン」）、または１〜３個の炭素原子（「Ｃ１〜Ｃ３アルキレン」）を有するものである。アルキレンの例には、これらに限定されないが、メチレン（−ＣＨ２−）、エチレン（−ＣＨ２ＣＨ２−）、プロピレン（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−）、イソプロピレン（−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）−）、ブチレン（−ＣＨ２（ＣＨ２）２ＣＨ２−）、イソブチレン（−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２−）、ペンチレン（−ＣＨ２（ＣＨ２）３ＣＨ２−）、ヘキシレン（−ＣＨ２（ＣＨ２）４ＣＨ２−）、ヘプチレン（−ＣＨ２（ＣＨ２）５ＣＨ２−）、オクチレン（−ＣＨ２（ＣＨ２）６ＣＨ２−）、および同類のものなどの基が挙げられる。
【００１９】
本明細書で使用される「アルケニル」は、別段の記載がない限り、少なくとも１つのオレフィン不飽和部位（すなわち、式Ｃ＝Ｃの少なくとも１つの部分を有する）を有し、かつ指定された炭素原子の数（すなわち、Ｃ２〜Ｃ１０は、２〜１０個の炭素原子を意味する）を有する、不飽和直鎖（すなわち、非分岐状）または分岐状一価炭化水素鎖またはこれらの組み合わせを指し、かつそれを含む。アルケニル基は、「シス」もしくは「トランス」配置を有し得るか、または代替的には「Ｅ」もしくは「Ｚ」配置を有し得る。特定のアルケニル基は、２〜２０個の炭素原子（「Ｃ２〜Ｃ２０アルケニル」）を有する、６〜１０個の炭素原子（「Ｃ６〜Ｃ１０アルケニル」）を有する、２〜８個の炭素原子（「Ｃ２〜Ｃ８アルケニル」）を有する、２〜６個の炭素原子（「Ｃ２〜Ｃ６アルケニル」）を有する、または２〜４個の炭素原子（「Ｃ２〜Ｃ４アルケニル」）を有するものである。アルケニル基の例には、これらに限定されないが、エテニル（またはビニル）、プロプ−１−エニル、プロプ−２−エニル（またはアリル）、２−メチルプロプ−１−エニル、ブタ−１−エニル、ブタ−２−エニル、ブタ−３−エニル、ブタ−１，３−ジエニル、２−メチルブタ−１，３−ジエニル、ペント−１−エニル、ペント−２−エニル、ヘキサ−１−エニル、ヘキサ−２−エニル、ヘキサ−３−エニル、および同類のものなどの基が挙げられる。
【００２０】
本明細書で使用される「アルキニル」は、別段の記載がない限り、少なくとも１つのアセチレン不飽和部位（すなわち、式Ｃ≡Ｃの少なくとも１つの部分を有する）を有し、かつ指定された炭素原子の数（すなわち、Ｃ２〜Ｃ１０は、２〜１０個の炭素原子を意味する）を有する、不飽和直鎖（すなわち、非分岐状）または分岐状一価炭化水素鎖またはこれらの組み合わせを指し、かつそれを含む。特定のアルキニル基は、２〜２０個の炭素原子（「Ｃ２〜Ｃ２０アルキニル」）を有する、６〜１０個の炭素原子（「Ｃ６〜Ｃ１０アルキニル」）を有する、２〜８個の炭素原子（「Ｃ２〜Ｃ８アルキニル」）を有する、２〜６個の炭素原子（「Ｃ２〜Ｃ６アルキニル」）を有する、または２〜４個の炭素原子（「Ｃ２〜Ｃ４アルキニル」）を有するものである。アルキニル基の例には、これらに限定されないが、エチニル（またはアセチレニル）、プロプ−１−イニル、プロプ−２−イニル（またはプロパルギル）、ブタ−１−イニル、ブタ−２−イニル、ブタ−３−イニル、および同類のものなどの基が挙げられる。
【００２１】
本明細書で使用される「シクロアルキル」は、別段の記載がない限り、指定された炭素原子の数を有する（すなわち、Ｃ３〜Ｃ１０は、３〜１０個の炭素原子を意味する）飽和環式一価炭化水素構造を指し、かつそれを含む。シクロアルキルは、シクロヘキシルなどの１つの環、またはアダマンチルなどの複数の環からなることができる。２つ以上の環を含むシクロアルキルは、融合、スピロ、もしくは架橋、またはこれらの組み合わせであってもよい。特定のシクロアルキル基は、３〜１２個の環状炭素原子を有するものである。好ましいシクロアルキルは、３〜８個の環状炭素原子（「Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル」）を有する、３〜６個の炭素原子（「Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル」）を有する、または３〜４個の環状炭素原子（「Ｃ３〜Ｃ４シクロアルキル」）を有する環式炭化水素である。シクロアルキルの例には、これらに限定されないが、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、ノルボルニル、および同類のものが挙げられる。
【００２２】
本明細書で使用される「シクロアルキレン」は、シクロアルキルと同じ残基を指すが、二価性を有する。シクロアルキレンは、融合、スピロ、または架橋され得る１つの環もしくは複数の環、またはそれらの組み合わせからなることができる。特定のシクロアルキレン基は、３〜１２個の環状炭素原子を有するものである。好ましいシクロアルキレンは、３〜８個の環状炭素原子（「Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキレン」）を有する、３〜６個の炭素原子（「Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキレン」）を有する、または３〜４個の環状炭素原子（「Ｃ３〜Ｃ４シクロアルキレン」）を有する環式炭化水素である。シクロアルキレンの例には、これらに限定されないが、シクロプロピレン、シクロブチレン、シクロペンチレン、シクロヘキシレン、シクロヘプチレン、ノルボニレン、および同類のものが挙げられる。シクロアルキレンは、同じ環炭素原子または異なる環炭素原子を介して残りの構造に結合し得る。シクロアルキレンが２つの異なる環炭素原子を介して残りの構造に結合するとき、接続結合は、互いにシスまたはトランスであり得る。例えば、シクロプロピレンは、１，１−シクロプロピレンおよび１，２−シクロプロピレン（例えば、シス−１，２−シクロプロピレンまたはトランス−１，２−シクロプロピレン）、またはそれらの混合物を含んでもよい。
【００２３】
「シクロアルケニル」は、別段の記載がない限り、少なくとも１つのオレフィン不飽和部位（すなわち、式Ｃ＝Ｃの少なくとも１つの部分を有する）を有し、指定された炭素原子の数（すなわち、Ｃ３〜Ｃ１０は、３〜１０個の炭素原子を意味する）を有する、不飽和環式非芳香族一価炭化水素構造を指し、かつこれらを含む。シクロアルケニルは、シクロヘキセニルなどの１つの環、またはノルボルネニルなどの複数の環からなることができる。好ましいシクロアルケニルは、３〜８個の環状炭素原子を有する不飽和環式炭化水素である（「Ｃ３〜Ｃ８シクロアルケニル」）。シクロアルケニル基の例には、これらに限定されないが、シクロプロペニル、シクロブテニル、シクロペンテニル、シクロヘキセニル、ノルボルネニル、および同類のものが挙げられる。
【００２４】
本明細書で使用される「シクロアルケニレン」は、シクロアルケニルと同じ残基を指すが、二価性を有する。
【００２５】
本明細書で使用される「アリール」または「Ａｒ」は、縮合環が芳香族であっても芳香族でなくてもよい単環（例えば、フェニル）または複数の縮合環（例えば、ナフチルまたはアントリル）を有する不飽和芳香族炭素環式基を指す。特定のアリール基は、６〜１４個の環状炭素原子（「Ｃ６〜Ｃ１４アリール」）を有するものである。少なくとも１つの環が非芳香族である２つ以上の環を有するアリール基は、芳香族環位置または非芳香族環位置のいずれかで親構造に接続されてもよい。１つの変形例において、少なくとも１つの環が非芳香族である２つ以上の環を有するアリール基は、芳香族環位置で親構造に接続される。
【００２６】
本明細書で使用される「アリーレン」は、アリールと同じ残基を指すが、二価性を有する。特定のアリーレン基は、６〜１４個の環状炭素原子（「Ｃ６〜Ｃ１４アリーレン」）を有するものである。
【００２７】
本明細書で使用される「ヘテロアリール」は、１〜１４個の環状炭素原子およびこれらに限定されないが、窒素、酸素、および硫黄などのヘテロ原子を含む、少なくとも１つの環状ヘテロ原子を有する不飽和芳香族環式基を指す。ヘテロアリール基は、縮合環が芳香族であっても芳香族でなくてもよい単環（例えば、ピリジル、フリル）または複数の縮合環（例えば、インドリジニル、ベンゾチエニル）を有してもよい。特定のヘテロアリール基は１〜１２個の環状炭素原子および、独立して、窒素、酸素、および硫黄から選択される１〜６個の環状ヘテロ原子を有する５〜１４員環、１〜８個の環状炭素原子および独立して、窒素、酸素、および硫黄から選択される１〜４個の環状ヘテロ原子を有する５〜１０員環、または１〜５個の環状炭素原子および独立して、窒素、酸素、および硫黄から選択される１〜４個の環状ヘテロ原子を有する５、６、もしくは７員環である。１つの変形例において、特定のヘテロアリール基は、１〜６個の環状炭素原子および独立して、窒素、酸素、および硫黄から選択される１〜４個の環状ヘテロ原子を有する単環式芳香族５、６、または７員環である。別の変形例において、特定のヘテロアリール基は、１〜１２個の環状炭素原子および独立して、窒素、酸素、および硫黄から選択される１〜６個の環状ヘテロ原子を有する多環式芳香族環である。少なくとも１つの環が非芳香族である２つ以上の環を有するヘテロアリール基は、芳香族環位置または非芳香族環位置のいずれかで親構造に接続されてもよい。１つの変形例において、少なくとも１つの環が非芳香族である２つ以上の環を有するヘテロアリール基は、芳香族環位置で親構造に接続される。ヘテロアリール基は、環炭素原子または環ヘテロ原子で親構造に接続され得る。
【００２８】
該当する場合、ヘテロアリール基は、互変異性体形態で示され得る。かかる化合物は、特定の互変異性体形態が、例えば、ヘテロシクリルであっても、ヘテロアリールであると見なされる。例えば、ヘテロアリール基
【化９】
2021506972.tif 000011
は、複素環互変異性体形態で示され得る
【化１０】
2021506972.tif 000012
。どの互変異性体が示されているかにかかわらず、基はヘテロアリールであると見なされる。
【００２９】
本明細書で使用される「複素環」、「複素環式」、または「ヘテロシクリル」は、単環または複数の縮合環を有し、１〜１４個の環状炭素原子および１〜６個の環状ヘテロ原子、例えば、窒素、硫黄、または酸素、および同類のものを有する飽和または不飽和の非芳香族環基を指す。２つ以上の環を含む複素環は、融合、架橋、もしくはスピロ、またはそれらの任意の組み合わせであってもよいが、ヘテロアリール基を除外する。ヘテロシクリル基は、任意に独立して、本明細書に記載の１つ以上の置換基で置換され得る。特定のヘテロシクリル基は、１〜１３個の環状炭素原子および独立して、窒素、酸素、および硫黄から選択される１〜６個の環状ヘテロ原子を有する３〜１４員環、１〜１１個の環状炭素原子および独立して、窒素、酸素、および硫黄から選択される１〜６個の環状ヘテロ原子を有する３〜１２員環、１〜９個の環状炭素原子および独立して、窒素、酸素、および硫黄から選択される１〜４個の環状ヘテロ原子を有する３〜１０員環、１〜７個の環状炭素原子および独立して、窒素、酸素、および硫黄から選択される１〜４個の環状ヘテロ原子を有する３〜８員環、または１〜５個の環状炭素原子および独立して、窒素、酸素、および硫黄から選択される１〜４個の環状ヘテロ原子を有する３〜６員環である。１つの変形例において、ヘテロシクリルは、１〜２、１〜３、１〜４、１〜５、または１〜６個の環状炭素原子、および独立して、窒素、酸素、および硫黄から選択される１〜２、１〜３、または１〜４個の環状ヘテロ原子を有する単環式３、４、５、６、または７員環を含む。別の変形例では、ヘテロシクリルは、１〜１２個の環状炭素原子および独立して、窒素、酸素、および硫黄から選択される１〜６個の環状ヘテロ原子を有する多環式非芳香族環を含む。
【００３０】
「ハロ」または「ハロゲン」は、原子番号９〜８５を有する第１７族の元素を指す。好ましいハロ基には、フッ素、塩素、臭素、およびヨウ素のラジカルが挙げられる。残基が２つ以上のハロゲンで置換される場合、それは、結合されたハロゲン部分の数に対応する接頭辞を使用することによって称されてもよく、例えば、ジハロアリール、ジハロアルキル、トリハロアリールなどは、２つ（「ジ」）または３つ（「トリ」）のハロ基で置換されているアリールおよびアルキルを指し、これは同じハロゲンであり得るが必ずしも同じではない；したがって、４−クロロ−３−フルオロフェニルは、ジハロアリールの範囲内にある。各水素がハロ基で置き換えられるアルキル基は、「ペルハロアルキル」と称される。好ましいペルハロアルキル基は、トリフルオロメチル（−ＣＦ３）である。同様に、「ペルハロアルコキシ」は、ハロゲンがアルコキシ基のアルキル部分を構成する炭化水素中の各Ｈの位置を取るアルコキシ基を指す。ペルハロアルコキシ基の一例は、トリフルオロメトキシ（−ＯＣＦ３）である。
【００３１】
「カルボニル」は、基Ｃ＝Ｏを指す。
【００３２】
「オキソ」は、部分＝Ｏを指す。
【００３３】
「任意に置換されている」とは、別段の定めがない限り、基が、置換基が同じであっても異なっていてもよいその基のために列挙される置換基のうちの１つ以上（例えば、１、２、３、４、または５個）によって非置換または置換され得ることを意味する。一実施形態において、任意に置換されている基は、１つの置換基を有する。別の実施形態において、任意に置換されている基は、２つの置換基を有する。別の実施形態において、任意に置換されている基は、３つの置換基を有する。別の実施形態において、任意に置換されている基は、４つの置換基を有する。いくつかの実施形態において、任意に置換されている基は、１〜２、１〜３、１〜４、１〜５、２〜３、２〜４、または２〜５個の置換基を有する。一実施形態において、任意に置換されている基は、非置換である。
【００３４】
別途明示されない限り、本明細書で使用される「個体」は、これらに限定されないが、霊長類、ヒト、ウシ、ウマ、ネコ、イヌ、またはげっ歯類を含む哺乳動物を意図する。１つの変形例において、個体はヒトである。
【００３５】
本明細書で使用される場合、「治療」または「治療すること」は、臨床結果を含む有益なまたは所望の結果を得るためのアプローチである。有益または所望の結果には、これらに限定されないが、以下のうちの１つ以上が挙げられる：疾患に起因するもう１つの症状を減少させること、疾患の程度を軽減させること、疾患を安定させること（例えば、疾患の悪化を予防または遅延させること）、疾患の拡散を予防または遅延させること、疾患の発生または再発を遅延させること、疾患の進行を遅延または減速させること、疾患状態を改善すること、疾患の寛解（部分的または全体的にかかわらず）を提供すること、疾患を治療するために必要とされる１つ以上の他の薬剤の用量を減少させること、別の薬剤の効果を増強すること、疾患の進行を遅延させること、生活の質を向上させること、および／または生存期間を延長すること。本明細書に記載される方法は、治療のこれらの態様のうちの任意の１つ以上を企図している。
【００３６】
本明細書で使用される場合、「有効量」という用語は、所与の治療形態で有効であるべき本発明の化合物のかかる量を意図する。当該技術分野で理解されるように、有効量は、１つ以上の用量であってもよく、すなわち、所望の治療を達成するために単回用量または複数回用量が必要とされ得る。有効量は、１つ以上の治療剤を投与する文脈において考慮されてもよく、１つ以上の他の薬剤と併せて、所望または有益な結果が得られ得るか、または達成される場合、単一の薬剤は、有効量で投与されると考えてもよい。併用投与される化合物のうちのいずれかの好適な用量は、化合物の併用作用（例えば、添加効果または相乗効果）に起因して任意に低減され得る。
【００３７】
「治療有効量」は、所望の治療転帰を生じるのに十分な化合物またはその塩の量を指す。
【００３８】
本明細書で使用される場合、「単位剤形」は、各単位が、必要な薬学的担体と関連して所望の治療効果を生成するように計算された所定の量の活性成分を含む、単位剤として好適な物理的に別個の単位を指す。単位剤形は、単一療法または併用療法を含み得る。
【００３９】
本明細書で使用される場合、「薬学的に許容される」または「薬理学的に許容される」とは、生物学的でないまたはそうでなければ望ましくない材料を意味し、例えば、材料は、いかなる有意な望ましくない生物学的効果も引き起こすことなく、またはそれに含まれる組成物の他の構成成分のいずれかと有害な様式で相互作用することなく、患者に投与される薬学的組成物に組み込まれ得る。薬学的に許容される担体または賦形剤は、好ましくは、毒性学的および製造試験の必要な基準を満たしており、かつ／または米国食品医薬品局によって準備された非活性成分ガイドに含まれる。
【００４０】
「薬学的に許容される塩」は、遊離（非塩）化合物の生物活性の少なくとも一部を保持し、個体に薬物または医薬品として投与することができる塩である。かかる塩には、例えば、（１）塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸、および同類のものなどの無機酸で形成されるか、または酢酸、シュウ酸、プロピオン酸、コハク酸、マレイン酸、酒石酸等の有機酸で形成される酸付加塩；（２）親化合物中に存在する酸性陽子が金属イオン、例えば、アルカリ金属イオン、アルカリ土イオン、またはアルミニウムイオンで置き換えられるか、または有機塩基と配位するときに形成される塩が挙げられる。許容される有機塩基には、エタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、および同類のものが挙げられる。許容される無機塩基には、水酸化アルミニウム、水酸化カルシウム、水酸化カリウム、炭酸ナトリウム、水酸化ナトリウム、および同類のものが挙げられる。薬学的に許容される塩は、製造工程において、またはその遊離酸もしくは塩基形態の本発明の精製された化合物を、それぞれ好適な有機もしくは無機塩基または酸と別々に反応させ、その後の精製中にそのように形成された塩を単離することによって、その場で調製することができる。
【００４１】
本明細書で使用される「賦形剤」という用語は、活性成分として本発明の化合物を含む錠剤などの薬物または医薬品の製造に使用され得る不活性または非活性物質を意味する。様々な物質は、限定することなく、結合剤、崩壊剤、コーティング剤、圧縮／封入補助剤、クリームもしくはローション、潤滑剤、非経口投与のための溶液、咀嚼性錠剤のため材料、甘味料もしくは調味料、懸濁剤／ゲル化剤、または湿式造粒剤として使用される任意の物質を含む、賦形剤という用語によって包含され得る。結合剤には、例えば、カルボマー、ポビドン、キサンタンガムなどが挙げられ；コーティング剤には、例えば、酢酸フタル酸セルロース、エチルセルロース、ゲランガム、マルトデキストリン、腸溶性コーティングなどが挙げられ；圧縮／封入補助剤には、例えば、炭酸カルシウム、デキストロース、フルクトースｄｃ（ｄｃ＝「直接圧縮可能」）、ハチミツｄｃ、ラクトース（無水または一水和物；任意に、アスパルテーム、セルロース、または微結晶セルロースと組み合わせて）、デンプンｄｃ、スクロースなどが挙げられ；崩壊剤には、例えば、クロスカルメロースナトリウム、ゲランガム、デンプングリコール酸ナトリウムなどが挙げられ；クリームまたはローションには、例えば、マルトデキストリン、カラゲナンなどが挙げられ；潤滑剤には、例えば、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、ステアリルフマル酸ナトリウムなどが挙げられ；咀嚼性錠剤のため材料には、例えば、デキストロース、フルクトースｄｃ、ラクトース（一水和物、任意に、アスパルテームまたはセルロースと組み合わせて）などが挙げられ；懸濁剤／ゲル化剤には、例えば、カラギーナン、デンプングリコール酸ナトリウム、キサンタンガムなどが挙げられ；甘味料には、例えば、アスパルテーム、デキストロース、フルクトースｄｃ、ソルビトール、スクロースｄｃなどが挙げられ；湿式造粒剤には、例えば、炭酸カルシウム、マルトデキストリン、微結晶性セルロースなどが挙げられる。
【００４２】
「含む」として本明細書に記載される態様および実施形態は、実施形態「からなる」および「から本質的になる」を含むことを理解されたい。
【００４３】
組成物が、列挙される構成成分「から本質的になる」と記載される場合、組成物は、明示的に列挙される構成成分を含み、微量不純物などの治療されている疾患または状態に実質的に影響を与えない他の構成成分を含み得る。しかしながら、組成物は、それら明示的に列挙されている構成成分以外に、治療されている疾患または状態に実質的に影響を与える任意の他の構成成分を含まないか、または、組成物が、治療されている疾患または状態に実質的に影響を与える列挙されるもの以外の追加の構成成分を含む場合、組成物は、治療されている疾患または状態に実質的に影響を与える十分な濃度または量のそれらの追加の構成成分を含まない。方法が、列挙されるステップ「から本質的になる」と記載される場合、方法は、列挙されるステップを含み、治療されている疾患または状態に実質的に影響を与えない他のステップを含み得るが、方法は、明示的に列挙されるそれらのステップ以外の治療されている疾患または状態に実質的に影響を与える任意の他のステップを含まない。
【００４４】
部分が「少なくとも１つの」置換基によって置換されていると示されるとき、これはまた、正確には１つの置換基の開示を包含する。
【００４５】
化合物
一態様において、式（Ｉ）の化合物、
【化１１】
2021506972.tif 000013
またはその薬学的に許容される塩が提供され、式中、
Ｒが、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、またはＣ６〜Ｃ１４アリールであり、Ｒの前記Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、およびＣ６〜Ｃ１４アリールが独立して、Ｒｄによって任意に置換されており、
ｍは、０、１、２、３、または４であり、
ｎが、０、１、２、３、または４であり、
ｍ＋ｎは、１、２、３、または４であり、
Ｘが、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｏ−、−ＣＨ（ＯＨ）−、−Ｓ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、または−Ｓ（＝Ｏ）２−であり、
Ｌは、
【化１２】
2021506972.tif 000014
であって、式中、
＊が、Ｙ−Ｘ−部分への結合点を表し、
＊＊が、分子の残部への結合点を表し、
Ｒａが、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、もしくはＣ６〜Ｃ１４アリールであり、ＲａのＣ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、およびＣ６〜Ｃ１４アリールが独立して、Ｒｅによって任意に置換されており、
Ｒ１およびＲ２が互いに独立して、かつ各出現において独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ２アルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、もしくはＣ６〜Ｃ１４アリールであり、Ｒ１およびＲ２の前記Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、およびＣ６〜Ｃ１４アリールが独立して、Ｒｆによって任意に置換されており、
または、Ｒ１およびＲ２が、それらが結合する１個以上の炭素原子と一緒になって、Ｒｆによって任意に置換されている３〜８員シクロアルキレンを形成し、
ｑが、１、２、もしくは３であり、
Ｒ３およびＲ４が互いに独立して、かつ各出現において独立して、水素、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、もしくはＣ６〜Ｃ１４アリールであり、Ｒ３およびＲ４の前記Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、およびＣ６〜Ｃ１４アリールが独立して、Ｒｇによって任意に置換されており、
または、Ｒ３およびＲ４が、それらが結合する炭素原子と一緒になって、Ｒｇによって任意に置換されている３〜８員シクロアルキレンを形成し、
ｐが、０、１、または２である、式（ａ）、
【化１３】
2021506972.tif 000015
であって、式中、
＊が、Ｙ−Ｘ−部分への結合点を表し、
＊＊が、分子の残部への結合点を表し、
Ｒ５およびＲ６が互いに独立して、かつ各出現において独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、もしくはＣ６〜Ｃ１４アリールであり、Ｒ５およびＲ６の前記Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、およびＣ６〜Ｃ１４アリールが独立して、Ｒｈによって任意に置換されており、
ＲｂおよびＲｃは独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、Ｃ６〜Ｃ１４アリール、もしくは−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ１７であり、ＲｂおよびＲｃの前記Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、およびＣ６〜Ｃ１４アリールが独立して、Ｒｉによって任意に置換されており、
ｒが、１、２、もしくは３である、式（ｂ）、あるいは
【化１４】
2021506972.tif 000016
であって、式中、
＊が、Ｙ−Ｘ−部分への結合点を表し、
＊＊が、分子の残部への結合点を表し、
Ｒ７およびＲ８が互いに独立して、かつ各出現において独立して、水素、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、もしくはＣ６〜Ｃ１４アリールであり、Ｒ７およびＲ８の前記Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、およびＣ６〜Ｃ１４アリールが独立して、Ｒｊによって任意に置換されており、
または、Ｒ７およびＲ８が、それらが結合する炭素原子と一緒になって、Ｒｊによって任意に置換されている３〜８員シクロアルキレンを形成し、
Ｒ９およびＲ１０が互いに独立して、かつ各出現において独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、もしくはＣ６〜Ｃ１４アリールであり、Ｒ９およびＲ１０のＣ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、およびＣ６〜Ｃ１４アリールが独立して、Ｒｋによって任意に置換されており、
ｓが、１、２、もしくは３であり、
ｔが、１、２、もしくは３であり、
ｓ＋ｔが、２、３、もしくは４であり、
ｕが、０もしくは１であり、
ｖが、０もしくは１である、式（ｃ）、であり、
Ｙが、Ｒ１１によって任意に置換されているＣ６〜Ｃ９アリール、Ｒ１２によって任意に置換されている６〜１０員ヘテロアリール、またはＲ１３によって任意に置換されている３〜１２員ヘテロシクリルであり、Ｙが、フェニルまたはナフチルであるとき、Ｙの前記フェニルまたはナフチルは、少なくとも１つのＲ１１によって置換されており、Ｌが、＊−ＮＨ−ＣＨ２−＊＊であり、Ｙが、任意に置換されているキノリニルであるとき、Ｙの前記任意に置換されているキノリニルは、２、３、５、６、７、または８位で親構造に接続されており、
Ｒ１１、Ｒ１２、およびＲ１３が互いに独立して、かつ各出現において独立して、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ４〜Ｃ８シクロアルケニル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、Ｃ６〜Ｃ１４アリール、ハロゲン、シアノ、オキソ、−ＯＲ１４、−ＮＲ１５Ｒ１６、−ＳＲ１４、−ＮＯ２、−Ｃ＝ＮＨ（ＯＲ１４）、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１４、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１４、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１４、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１５Ｒ１６、−ＮＲ１４Ｃ（Ｏ）Ｒ１５、−ＮＲ１４Ｃ（Ｏ）ＯＲ１５、−ＮＲ１４Ｃ（Ｏ）ＮＲ１５Ｒ１６、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１４、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１４、−ＮＲ１４Ｓ（Ｏ）Ｒ１５、−ＮＲ１４Ｓ（Ｏ）２Ｒ１５、−Ｓ（Ｏ）ＮＲ１５Ｒ１６、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ１５Ｒ１６、または−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１５）（ＯＲ１６）であり、各Ｒ１１、Ｒ１２、およびＲ１３が独立して、ＲＬによって任意に置換されており、
各Ｒ１４が独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ６〜Ｃ１４アリール、５〜１０員ヘテロアリール、または３〜１２員ヘテロシクリルであり、Ｒ１４の前記Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ６〜Ｃ１４アリール、５〜１０員ヘテロアリール、および３〜１２員ヘテロシクリルが独立して、ハロゲン、−ＯＨ、オキソ、シアノ、またはハロゲン、−ＯＨ、もしくはオキソによって任意に置換されているＣ１〜Ｃ６アルキルによって任意に置換されており、
Ｒ１５およびＲ１６は互いに独立して、かつ各出現において独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ６〜Ｃ１４アリール、５〜１０員ヘテロアリール、または３〜１２員ヘテロシクリルであり、Ｒ１５およびＲ１６のＣ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ６〜Ｃ１４アリール、５〜１０員ヘテロアリール、および３〜１２員ヘテロシクリルは独立して、ハロゲン、−ＯＨ、オキソ、シアノ、またはハロゲン、−ＯＨ、もしくはオキソによって任意に置換されているＣ１〜Ｃ６アルキルによって任意に置換されており、
あるいは、Ｒ１５およびＲ１６が、それらが結合する原子と一緒になって、ハロゲン、オキソ、シアノ、またはハロゲン、−ＯＨ、もしくはオキソによって任意に置換されているＣ１〜Ｃ６アルキルによって任意に置換されている３〜６員ヘテロシクリルを形成し、
Ｒｄ、Ｒｅ、Ｒｆ、Ｒｇ、Ｒｈ、Ｒｉ、Ｒｊ、およびＲｋは互いに独立して、かつ各出現において独立して、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ６〜Ｃ１４アリール、５〜１０員ヘテロアリール、３〜１２員ヘテロシクリル、−ＯＲ１４、−ＮＲ１５Ｒ１６、シアノ、またはニトロであり、
各ＲＬは独立して、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ６〜Ｃ１４アリール、５〜１０員ヘテロアリール、３〜１２員ヘテロシクリル、−ＯＲ１４、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１４、−ＮＲ１５Ｒ１６、シアノ、オキソ、またはニトロである。
【００４６】
本明細書の説明において、部分のすべての説明、変形例、実施形態、または態様は、説明のすべての組み合わせが特異的かつ個別に列挙されたかのように、他の部分のすべての説明、変形例、実施形態、または態様と組み合わされ得ることを理解されたい。例えば、式（Ｉ）のＲに関して本明細書に提供されるすべての説明、変形例、実施形態、または態様は、各々およびすべての組み合わせが特異的かつ個別に列挙されたかのように、Ｙ、Ｘ、Ｌ、ｍ、および／またはｎのすべての説明、変形例、実施形態、または態様と組み合わされ得る。式（Ｉ）のすべての説明、変形例、実施形態、または態様は、該当する場合、本明細書に詳述される他の式に等しく適用され、各々およびすべての説明、変形例、実施形態、または態様がすべての式について別々および個別に列挙されたかのように等しく説明されることも理解されたい。例えば、式（Ｉ）のすべての説明、変形例、実施形態、または態様は、該当する場合、本明細書に詳述される式Ｉａ、Ｉｂ、ＩＩ、ＩＩａ、ＩＩｂ、ＩＩＩ、ＩＩＩａ、ＩＩＩｂ、ＩＶ、ＩＶａ、ＩＶｂ、Ｖ、Ｖａ、Ｖｂ、ＶＩ、ＶＩａ、ＶＩｂ、ＶＩＩ、ＶＩＩａ、ＶＩＩｂ、ＶＩＩＩ、ＶＩＩＩａ、およびＶＩＩＩｂのいずれかに等しく適用され、各々およびすべての説明、変形例、実施形態、または態様がすべての式について別々および個別に列挙されたかと同様に等しく説明される。
【００４７】
いくつかの実施形態において、式（Ｉ）の化合物は、式（Ｉａ）、
【化１５】
2021506972.tif 000017
またはその塩のものであり、式中、Ｙ、Ｘ、Ｌ、Ｒ、ｍ、およびｎは、式（Ｉ）に対して定義される通りである。
【００４８】
いくつかの実施形態において、式（Ｉ）の化合物は、式（Ｉｂ）、
【化１６】
2021506972.tif 000018
またはその塩のものであり、式中、Ｙ、Ｘ、Ｌ、Ｒ、ｍ、およびｎは、式（Ｉ）に対して定義される通りである。
【００４９】
式（Ｉ）の化合物のいくつかの実施形態において、ｍが１であり、ｎが１である場合、化合物は、式（ＩＩ）、
【化１７】
2021506972.tif 000019
またはその塩のものであり、Ｙ、Ｘ、Ｌ、およびＲは、式（Ｉ）に対して定義される通りである。
【００５０】
いくつかの実施形態において、式（ＩＩ）の化合物は、式（ＩＩａ）、
【化１８】
2021506972.tif 000020
またはその塩のものであり、Ｙ、Ｘ、Ｌ、およびＲは、式（Ｉ）に対して定義される通りである。
【００５１】
いくつかの実施形態において、式（ＩＩ）の化合物は、式（ＩＩｂ）、
【化１９】
2021506972.tif 000021
またはその塩のものであり、Ｙ、Ｘ、Ｌ、およびＲは、式（Ｉ）に対して定義される通りである。
【００５２】
式（ＩＩ）の化合物いくつかの実施形態において、Ｌが−ＮＨ−ＣＨ２−である場合、化合物は、式（ＩＩＩ）、
【化２０】
2021506972.tif 000022
またはその塩のものであり、Ｙ、Ｘ、およびＲは、式（Ｉ）に対して定義される通りである。
【００５３】
いくつかの実施形態において、式（ＩＩＩ）の化合物は、式（ＩＩＩａ）、
【化２１】
2021506972.tif 000023
またはその塩のものであり、Ｙ、Ｘ、およびＲは、式（Ｉ）に対して定義される通りである。
【００５４】
いくつかの実施形態において、式（ＩＩＩ）の化合物は、式（ＩＩＩｂ）、
【化２２】
2021506972.tif 000024
またはその塩のものであり、Ｙ、Ｘ、およびＲは、式（Ｉ）に対して定義される通りである。
【００５５】
いくつかの実施形態において、式（ＩＩＩ）の化合物は、式（ＩＩＩ−１）、
【化２３】
2021506972.tif 000025
またはその塩のものであり、ＹおよびＸは、式（Ｉ）に対して定義される通りである。
【００５６】
式（ＩＩ）の化合物のいくつかの実施形態において、Ｌが−ＮＨ−ＣＨ（ＣＨ３）−である場合、化合物は、式（ＩＶ）、
【化２４】
2021506972.tif 000026
またはその塩のものであり、Ｙ、Ｘ、およびＲは、式（Ｉ）に対して定義される通りである。式（ＩＶ）の化合物の一態様において、Ｌのメチル基を有する炭素は、Ｓ配置にある。式（ＩＶ）の化合物の一態様において、Ｌのメチル基を有する炭素は、Ｒ配置にある。
【００５７】
いくつかの実施形態において、式（ＩＶ）の化合物は、式（ＩＶａ）、
【化２５】
2021506972.tif 000027
またはその塩のものであり、Ｙ、Ｘ、およびＲは、式（Ｉ）に対して定義される通りである。式（ＩＶａ）の化合物の一態様において、Ｌのメチル基を有する炭素は、Ｓ配置にある。式（ＩＶａ）の化合物の一態様において、Ｌのメチル基を有する炭素は、Ｒ配置にある。
【００５８】
いくつかの実施形態において、式（ＩＶ）の化合物は、式（ＩＶｂ）、
【化２６】
2021506972.tif 000028
またはその塩のものであり、Ｙ、Ｘ、およびＲは、式（Ｉ）に対して定義される通りである。式（ＩＶｂ）の化合物の一態様において、
Ｌのメチル基を有する炭素は、Ｓ配置にある。式（ＩＶｂ）の化合物の一態様において、Ｌのメチル基を有する炭素は、Ｒ配置にある。
【００５９】
式（ＩＩ）の化合物のいくつかの実施形態において、化合物は、式（Ｖ）、
【化２７】
2021506972.tif 000029
またはその塩のものであり、Ｙ、Ｘ、およびＲは、式（Ｉ）に対して定義される通りである。
【００６０】
いくつかの実施形態において、式（Ｖ）の化合物は、式（Ｖａ）、
【化２８】
2021506972.tif 000030
またはその塩のものであり、Ｙ、Ｘ、およびＲは、式（Ｉ）に対して定義される通りである。
【００６１】
いくつかの実施形態において、式（Ｖ）の化合物は、式（Ｖｂ）、
【化２９】
2021506972.tif 000031
またはその塩のものであり、Ｙ、Ｘ、およびＲは、式（Ｉ）に対して定義される通りである。
【００６２】
式（ＩＩ）の化合物のいくつかの実施形態において、化合物は、式（ＶＩ）、
【化３０】
2021506972.tif 000032
またはその塩のものであり、Ｙ、Ｘ、およびＲは、式（Ｉ）に対して定義される通りである。
【００６３】
いくつかの実施形態において、式（ＶＩ）の化合物は、式（ＶＩａ）、
【化３１】
2021506972.tif 000033
またはその塩のものであり、Ｙ、Ｘ、およびＲは、式（Ｉ）に対して定義される通りである。
【００６４】
いくつかの実施形態において、式（ＶＩ）の化合物は、式（ＶＩｂ）、
【化３２】
2021506972.tif 000034
またはその塩のものであり、Ｙ、Ｘ、およびＲは、式（Ｉ）に対して定義される通りである。
【００６５】
式（ＩＩ）の化合物のいくつかの実施形態において、Ｌが−ＣＨ２−ＣＨ（ＮＨ２）−である場合、化合物は、式（ＶＩＩ）、
【化３３】
2021506972.tif 000035
またはその塩のものであり、Ｙ、Ｘ、およびＲは、式（Ｉ）に対して定義される通りである。式（ＶＩＩ）の化合物の一態様において、Ｌの−ＮＨ２基を有する炭素は、Ｓ配置にある。式（ＶＩＩ）の化合物の一態様において、Ｌの−ＮＨ２基を有する炭素は、Ｒ配置にある。
【００６６】
いくつかの実施形態において、式（ＶＩＩ）の化合物は、式（ＶＩＩａ）、
【化３４】
2021506972.tif 000036
またはその塩のものであり、Ｙ、Ｘ、およびＲは、式（Ｉ）に対して定義される通りである。式（ＶＩＩａ）の化合物の一態様において、Ｌの−ＮＨ２基を有する炭素は、Ｓ配置にある。式（ＶＩＩａ）の化合物の一態様において、Ｌの−ＮＨ２基を有する炭素は、Ｒ配置にある。
【００６７】
いくつかの実施形態において、式（ＶＩＩ）の化合物は、式（ＶＩＩｂ）、
【化３５】
2021506972.tif 000037
またはその塩のものであり、Ｙ、Ｘ、およびＲは、式（Ｉ）に対して定義される通りである。式（ＶＩＩｂ）の化合物の一態様において、Ｌの−ＮＨ２基を有する炭素は、Ｓ配置にある。式（ＶＩＩｂ）の化合物の一態様において、Ｌの−ＮＨ２基を有する炭素は、Ｒ配置にある。
【００６８】
式（ＩＩ）の化合物のいくつかの実施形態において、Ｌが−ＣＨ（ＣＨ３）−ＣＨ（ＮＨ２）−である場合、化合物は、式（ＶＩＩＩ）、
【化３６】
2021506972.tif 000038
またはその塩のものであり、Ｙ、Ｘ、およびＲは、式（Ｉ）に対して定義される通りである。式（ＶＩＩＩ）の化合物の一態様において、Ｌの−ＮＨ２基を有する炭素は、Ｓ配置にある。式（ＶＩＩＩ）の化合物の一態様において、Ｌの−ＮＨ２基を有する炭素は、Ｒ配置にある。式（ＶＩＩＩ）の化合物の一態様において、Ｌのメチル基を有する炭素は、Ｓ配置にある。式（ＶＩＩＩ）の化合物の一態様において、Ｌのメチル基を有する炭素は、Ｒ配置にある。
【００６９】
いくつかの実施形態において、式（ＶＩＩＩ）の化合物は、式（ＶＩＩＩａ）、
【化３７】
2021506972.tif 000039
またはその塩のものであり、Ｙ、Ｘ、およびＲは、式（Ｉ）に対して定義される通りである。式（ＶＩＩＩａ）の化合物の一態様において、Ｌの−ＮＨ２基を有する炭素は、Ｓ配置にある。式（ＶＩＩＩａ）の化合物の一態様において、Ｌの−ＮＨ２基を有する炭素は、Ｒ配置にある。式（ＶＩＩＩａ）の化合物の一態様において、Ｌのメチル基を有する炭素は、Ｓ配置にある。式（ＶＩＩＩａ）の化合物の一態様において、Ｌのメチル基を有する炭素は、Ｒ配置にある。
【００７０】
いくつかの実施形態において、式（ＶＩＩＩ）の化合物は、式（ＶＩＩＩｂ）、
【化３８】
2021506972.tif 000040
【００７１】
またはその塩のものであり、Ｙ、Ｘ、およびＲは、式（Ｉ）に対して定義される通りである。式（ＶＩＩＩｂ）の化合物の一態様において、Ｌの−ＮＨ２基を有する炭素は、Ｓ配置にある。式（ＶＩＩＩｂ）の化合物の一態様において、Ｌの−ＮＨ２基を有する炭素は、Ｒ配置にある。式（ＶＩＩＩｂ）の化合物の一態様において、Ｌのメチル基を有する炭素は、Ｓ配置にある。式（ＶＩＩＩｂ）の化合物の一態様において、Ｌのメチル基を有する炭素は、Ｒ配置にある。式（ＩＩ）の化合物のいくつかの実施形態において、化合物は、式（ＩＸ）、
【化３９】
2021506972.tif 000041
またはその塩のものであり、Ｙ、Ｘ、およびＲは、式（Ｉ）に対して定義される通りである。式（ＩＸ）の化合物の一態様において、１，３−シクロブチレンは、シス異性体である。式（ＩＸ）の化合物の一態様において、１，３−シクロブチレンは、トラン異性体である。
【００７２】
いくつかの実施形態において、式（ＩＸ）の化合物は、式（ＩＸａ）、
【化４０】
2021506972.tif 000042
またはその塩のものであり、Ｙ、Ｘ、およびＲは、式（Ｉ）に対して定義される通りである。式（ＩＸａ）の化合物の一態様において、１，３−シクロブチレンは、シス異性体である。式（ＩＸａ）の化合物の一態様において、１，３−シクロブチレンは、トラン異性体である。
【００７３】
いくつかの実施形態において、式（ＩＸ）の化合物は、式（ＩＸｂ）、
【化４１】
2021506972.tif 000043
またはその塩のものであり、Ｙ、Ｘ、およびＲは、式（Ｉ）に対して定義される通りである。式（ＩＸｂ）の化合物の一態様において、１，３−シクロブチレンは、シス異性体である。式（ＩＸｂ）の化合物の一態様において、１，３−シクロブチレンは、トラン異性体である。
【００７４】
式（ＩＩ）の化合物のいくつかの実施形態において、Ｌが−ＮＨ−ＣＨ２−である場合、化合物は、式（Ｘ）、
【化４２】
2021506972.tif 000044
またはその塩のものであり、Ｙ、Ｘ、およびＲは、式（Ｉ）に対して定義される通りである。
【００７５】
いくつかの実施形態において、式（Ｘ）の化合物は、式（Ｘａ）、
【化４３】
2021506972.tif 000045
またはその塩のものであり、Ｙ、Ｘ、およびＲは、式（Ｉ）に対して定義される通りである。
【００７６】
いくつかの実施形態において、式（Ｘ）の化合物は、式（Ｘｂ）、
【化４４】
2021506972.tif 000046
またはその塩のものであり、Ｙ、Ｘ、およびＲは、式（Ｉ）に対して定義される通りである。
【００７７】
１つの変形例において、式（Ｉ）の化合物、またはその塩が提供され、式中、Ｘは、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｏ−、または−ＣＨ（ＯＨ）−である。別の変形例において、式（Ｉ）の化合物、またはその塩が提供され、式中、Ｘは、−Ｓ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、または−Ｓ（＝Ｏ）２−である。式（Ｉ）の化合物、またはその塩のいくつかの実施形態において、Ｘは、−Ｃ（＝Ｏ）−である。式（Ｉ）の化合物、またはその塩の他の実施形態において、Ｘは、−Ｏ−である。Ｘのすべての変形例は、式Ｉａ、Ｉｂ、ＩＩ、ＩＩａ、ＩＩｂ、ＩＩＩ、ＩＩＩａ、ＩＩＩｂ、ＩＶ、ＩＶａ、ＩＶｂ、Ｖ、Ｖａ、Ｖｂ、ＶＩ、ＶＩａ、ＶＩｂ、ＶＩＩ、ＶＩＩａ、ＶＩＩｂ、ＶＩＩＩ、ＶＩＩＩａ、およびＶＩＩＩｂなどの、本明細書における任意の適用可能な式に等しく適用される。
【００７８】
式（Ｉ）の化合物、またはその塩のいくつかの実施形態において、Ｌは、
【化４５】
2021506972.tif 000047
である。特定のかかる実施形態において、ＲａはＨであり、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４は、存在する場合、それぞれＨである。一実施形態において、Ｌは、
【化４６】
2021506972.tif 000048
であり、Ｘは、−Ｃ＝Ｏである。別の実施形態において、Ｌは、
【化４７】
2021506972.tif 000049
であり、Ｘは、−Ｃ＝Ｏであり、ｐは、０である。
【００７９】
いくつかの実施形態において、Ｌは、
【化４８】
2021506972.tif 000050
である。１つの特定の変形例において、Ｒ１およびＲ２は、同じ炭素原子に結合される。別の特定の変形例において、Ｒ１およびＲ２は、異なる炭素原子に結合される。
【００８０】
いくつかの実施形態において、Ｌは、−Ｎ（Ｒａ）−ＣＲ１Ｒ２−（すなわち、ｐは０である）である。１つの特定の変形例において、Ｌは、−ＮＨ−ＣＲ１Ｒ２−である。別の特定の変形例において、Ｌは、−ＮＨ−ＣＨ２−である。別の特定の変形例において、Ｌは、−ＮＨ−ＣＨ（ＣＨ３）−である。別の特定の変形例において、Ｌは、−ＮＨ−ＣＲ１Ｒ２−であり、Ｒ１およびＲ２は、それらが結合する１個以上の炭素原子と一緒になって、３〜８員シクロアルキレン（例えば、シクロプロピレン）を形成する。
【００８１】
いくつかの実施形態において、Ｌは、−Ｎ（Ｒａ）−（ＣＲ１Ｒ２）３−（すなわち、ｐは０である）である。１つの特定の変形例において、Ｌは、−ＮＨ−（ＣＲ１Ｒ２）３−である。別の特定の変形例において、Ｌは、−ＮＨ−（ＣＨ２）３−である。別の特定の変形例において、Ｌは、−ＮＨ−（ＣＲ１Ｒ２）３−であり、２つの非隣接炭素からのＲ１およびＲ２は、それらが結合する炭素原子および間質炭素と一緒になって、３〜８員シクロアルキレン（例えば、１，３−シクロブチレン）を形成する。
【００８２】
式（Ｉ）の化合物、またはその塩の他の実施形態において、Ｌは、
【化４９】
2021506972.tif 000051
である。１つのかかる実施形態において、Ｘは、−Ｃ＝Ｏである。別のかかる実施形態において、Ｘは、−Ｏ−である。さらなるかかる実施形態において、Ｘは、−ＣＨ（ＯＨ）−である。さらに別のかかる実施形態において、Ｘは、−Ｓ−である。さらに別のかかる実施形態において、Ｘは、−Ｓ（＝Ｏ）−である。さらに別のかかる実施形態において、Ｘは、−Ｓ（＝Ｏ）２である。かかる実施形態の一態様において、ｒは、１である。かかる実施形態の別の態様において、ｒは、２である。かかる実施形態のさらに別の態様において、ｒは、３である。Ｌが一変形例において
【化５０】
2021506972.tif 000052
である場合に提供される任意の実施形態において、ＲｂおよびＲｃは両方ともＨである。Ｌが別の変形例において
【化５１】
2021506972.tif 000053
である場合に提供される任意の実施形態において、ＲｂおよびＲｃは両方ともＨであり、ｒは１であり、Ｒ５は、Ｈであり、Ｒ６は、メチルなどのＣ１〜Ｃ６アルキルである。
【００８３】
これらの実施形態のうちのいくつかにおいて、Ｌは、−ＣＲ５Ｒ６−ＣＨ（ＮＲｂＲｃ）−（すなわち、ｒは１である）である。１つの特定の変形例において、Ｌは、−ＣＨ（Ｒ５）−ＣＨ（ＮＨ２）−であり、これらに限定されないが、Ｒ５が水素またはＣ１〜Ｃ６アルキルである態様を含む。１つの特定の変形例において、Ｌは、−ＣＨ２−ＣＨ（ＮＨ２）−である。別の特定の変形例において、Ｌは、−ＣＨ（ＣＨ３）−ＣＨ（ＮＨ２）−である。
【００８４】
式（Ｉ）の化合物、またはその塩のいくつかの実施形態において、Ｌは、
【化５２】
2021506972.tif 000054
である。１つのかかる実施形態において、Ｘは、−Ｃ＝Ｏである。別のかかる実施形態において、Ｘは、−Ｏ−である。さらなるかかる実施形態において、Ｘは、−Ｓ−である。さらに別のかかる実施形態において、Ｘは、−Ｓ（＝Ｏ）−である。さらに別のかかる実施形態において、Ｘは、−Ｓ（＝Ｏ）２である。特定の変形例において、Ｌは、
【化５３】
2021506972.tif 000055
であり、ｕは、０である。別の変形例において、Ｌは、
【化５４】
2021506972.tif 000056
であり、ｕは、０であり、Ｘは、−Ｃ＝Ｏ、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、および−Ｓ（＝Ｏ）２からなる群から選択される。Ｌが
【化５５】
2021506972.tif 000057
である任意の実施形態または変形例において、一態様では、ｓは、１であり、ｔは、１である。
【００８５】
一変形例において、Ｌは、
【化５６】
2021506972.tif 000058
である。別の特定の変形例において、Ｌは、
【化５７】
2021506972.tif 000059
である。一変形例において、Ｌは、
【化５８】
2021506972.tif 000060
であり、Ｘは、−Ｃ＝Ｏ、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、および−Ｓ（＝Ｏ）２からなる群から選択される。
【００８６】
一変形例において、式（Ｉ）の化合物、またはその塩が本明細書に提供され、式中、−Ｘ−Ｌ−部分は、
【化５９】
2021506972.tif 000061
2021506972.tif 000062
からなる群から選択される。
＊は、Ｙ部分への結合点を表し、＊＊は、分子の残部への結合点を表す。
【００８７】
別の変形例において、式（Ｉ）の化合物、またはその塩が提供され、式中、−Ｘ−Ｌ−部分は、
【化６０】
2021506972.tif 000063
からなる群から選択され、
＊は、Ｙ部分への結合点を表し、＊＊は、分子の残部への結合点を表す。
【００８８】
一態様において、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩が提供され、化合物は、以下の特徴のうちのいずれか１つ以上を有する：
（ｉ）Ｘは、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｏ−、または−ＣＨ（ＯＨ）−である；
（ｉｉ）Ｌは、
（ａ）Ｒ１およびＲ２が互いに独立して、かつ各出現において独立して、水素またはＣ１〜Ｃ２アルキルであるか、または同じ炭素原子に結合したＲ１およびＲ２基が、それらが結合する炭素原子と一緒になって、３〜５員シクロアルキレンを形成するか、または２つの異なる炭素原子に結合したＲ１およびＲ２基が、それらが結合する炭素原子と一緒になって、３〜５員シクロアルキレンを形成する、−ＮＨ−（ＣＲ１Ｒ２）ｑ−（かかる−ＮＨ−（ＣＲ１Ｒ２）ｑ−部分の例には、
【化６１】
2021506972.tif 000064
が挙げられる）；
（ｂ）Ｒ５およびＲ６が互いに独立して、かつ各出現において独立して、水素またはＣ１〜Ｃ２アルキルである、−ＣＲ５Ｒ６−ＣＨ（ＮＨ２）−（かかる−ＣＲ５Ｒ６−ＣＨ（ＮＨ２）−部分の例には、
【化６２】
2021506972.tif 000065
が挙げられる）；または
【化６３】
2021506972.tif 000066
であって、
式中、＊は、Ｙ−Ｘ−部分への結合点を表し、＊＊は、分子の残部への結合点を表す；
（ｉｉｉ）Ｙは、
（ａ）これらに限定されないが、各Ｒ１１が独立して、ハロゲン、トリハロメチル、シアノ、および−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ２から選択される場合を含む、非置換２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イル、または少なくとも１つのＲ１１によって置換されているフェニルもしくはナフチルなどの、Ｒ１１によって任意に置換されているＣ６〜Ｃ９アリール；
（ｂ）Ｒ１２がフェニルまたは−ＯＨである、Ｒ１２によって任意に置換されている、ピリジニル、ピリミジニル、ピリジン−２（１Ｈ）−オニル、キノリン−６−イルなどの、Ｒ１２によって任意に置換されている６〜１０員ヘテロアリール；または
（ｃ）少なくとも１つのＲ１３によって置換されている、２Ｈ−ピラン−２−オニル、イソインドリニル、ピペリジン−２−オニル、およびピペリジニルなどの、Ｒ１３によって任意に置換されている３〜１２員ヘテロシクリルである。
この変形例の一態様において、（ｉ）、（ｉｉ）（ａ）、および（ｉｉｉ）（ａ）が適用される。別の変形例において、（ｉ）、（ｉｉ）（ａ）、および（ｉｉｉ）（ｂ）が適用される。別の変形例において、（ｉ）、（ｉｉ）（ａ）、および（ｉｉｉ）（ｃ）が適用される。別の変形例において、（ｉ）、（ｉｉ）（ｂ）、および（ｉｉｉ）（ａ）が適用される。別の変形例において、（ｉ）、（ｉｉ）（ｂ）、および（ｉｉｉ）（ｂ）が適用される。別の変形例において、（ｉ）、（ｉｉ）（ｂ）、および（ｉｉｉ）（ｃ）が適用される。別の変形例において、（ｉ）、（ｉｉ）（ｃ）、および（ｉｉｉ）（ａ）が適用される。別の変形例において、（ｉ）、（ｉｉ）（ｃ）、および（ｉｉｉ）（ｂ）が適用される。別の変形例において、（ｉ）、（ｉｉ）（ｃ）、および（ｉｉｉ）（ｃ）が適用される。
【００８９】
Ｌ、またはＸおよびＬの組み合わせのすべての変形例は、式Ｉａ、Ｉｂ、ＩＩ、ＩＩａ、ＩＩｂ、ＩＩＩ、ＩＩＩａ、ＩＩＩｂ、ＩＶ、ＩＶａ、ＩＶｂ、Ｖ、Ｖａ、Ｖｂ、ＶＩ、ＶＩａ、ＶＩｂ、ＶＩＩ、ＶＩＩａ、ＶＩＩｂ、ＶＩＩＩ、ＶＩＩＩａおよびＶＩＩＩｂなどの、本明細書における任意の適用可能な式に等しく適用される。
【００９０】
いくつかの実施形態において、Ｙは、Ｒ１１によって任意に置換されているＣ６〜Ｃ９アリール、Ｒ１２によって任意に置換されている６〜１０員ヘテロアリール、またはＲ１３によって任意に置換されている３〜１２員ヘテロシクリルであり、Ｙは、フェニルまたはナフチルであるとき、Ｙのフェニルまたはナフチルは、少なくとも１つのＲ１１によって置換されており、Ｌが、＊−ＮＨ−ＣＨ２−＊＊であり、Ｙは、任意に置換されているキノリニルであるとき、Ｙの任意に置換されているキノリニルは、２、３、５、６、７、または８位で親構造に接続されている。
【００９１】
いくつかの実施形態において、Ｙは、Ｒ１１によって任意に置換されているＣ６〜Ｃ９アリールである。一態様において、Ｙは、Ｒ１１によって任意に置換されているフェニルである。一変形例において、Ｙは、同じであっても異なっていてもよい１〜３個のＲ１１部分で置換されている。いくつかの実施形態において、Ｙは、ハロゲン、トリハロメチル、シアノ、および−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ２から独立して選択される１〜５個のＲ１１によって置換されているフェニルである。別の特定の実施形態において、Ｙは、Ｒ１１によってＣ４位で置換されているフェニルなどの、単置換フェニルである。特定の変形例において、Ｙは、シアノまたは−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ２によってＣ４位で置換されているフェニルである。別の特定の実施形態において、Ｙは、同じであっても異なっていてもよい、２つのＲ１１基によってＣ２およびＣ４位またはＣ３およびＣ４位で置換されているフェニルなどの、二置換フェニルである。一態様において、Ｙのフェニルは、シアノ、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ２、ハロゲン、およびトリハロメチルからなる群から選択される２つのＲ１１基で置換されている。別の実施形態において、Ｙは、任意に置換された２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イルである。
【００９２】
いくつかの実施形態において、Ｙは、Ｒ１２によって任意に置換されている６〜１０員ヘテロアリールであり、Ｌが、＊−ＮＨ−ＣＨ２−＊＊であり、Ｙが、任意に置換されているキノリニルであるとき、Ｙの任意に置換されているキノリニルは、２、３、５、６、７、または８位で親構造に接続されている。別の実施形態において、Ｙは、Ｒ１２によって任意に置換されているキノリン−６−イルである。別の実施形態において、Ｙは、Ｒ１２によって任意に置換されているキノリン−４−イルであり、Ｌは、＊−ＣＨ２−ＣＨ（ＮＨ２）−＊＊または＊−ＣＨ（ＣＨ３）−ＣＨ（ＮＨ２）−＊＊である。別の実施形態において、Ｙは、Ｒ１２によって任意に置換されているピリジン−４−イルである。別の実施形態において、Ｙは、Ｒ１２によって任意に置換されており、Ｃ６〜Ｃ１４アリールまたはＣ５〜Ｃ１０シクロアルキルに任意に融合されているピリミジン−４−イルであり、Ｃ６〜Ｃ１４アリールまたはＣ５〜Ｃ１０シクロアルキルは、Ｒ１２によって任意に置換されている。
【００９３】
いくつかの実施形態において、Ｙは、Ｒ１２によって任意に置換されているキノリン−６−イルであり、Ｒ１２は、−ＯＨまたはフェニルである。
【００９４】
いくつかの実施形態において、Ｙは、Ｒ１２によって置換されているピリジン−３−イルである。一変形例において、Ｙは、Ｒ１２によって置換されているピリジン−３−イルであり、Ｒ１２は独立して、任意に置換されているＣ６〜Ｃ１４アリールまたは−ＯＲ１４から選択される。一変形例において、Ｙは、Ｒ１２によってＣ２位で置換されているピリジン−３−イルであり、Ｒ１２は、任意に置換されているＣ６〜Ｃ１４アリールである。一変形例において、Ｙは、Ｒ１２によってＣ６位で置換されているピリジン−３−イルであり、Ｒ１２は、−ＯＲ１４である。一変形例において、Ｙは、任意に置換されているＣ６〜Ｃ１４アリールによってＣ２で置換されており、−ＯＲ１４によってＣ６位で置換されているピリジン−３−イルである。
【００９５】
いくつかの実施形態において、Ｙは、Ｒ１２によってＣ３位で置換されているピリジン−４−イルである。一変形例において、Ｙは、Ｒ１２によってＣ３位で置換されているピリジン−４−イルであり、Ｒ１２は独立して、任意に置換されているＣ１〜Ｃ６アルキル、任意に置換されているＣ２〜Ｃ６アルケニル、任意に置換されているＣ３〜Ｃ８シクロアルキル、任意に置換されているＣ４〜Ｃ８シクロアルケニル、ＯＲ１４、ＮＲ１５Ｒ１６、任意に置換されているピリジニル、任意に置換されているキノリニル、任意に置換されているインドリル、任意に置換されているインダゾリル、任意に置換されているピリジン−２（１Ｈ）−オニル、任意に置換されているフェニル、および任意に置換されている３〜１２員ヘテロシクリルから選択される。
【００９６】
いくつかの実施形態において、Ｙは、Ｒ１２によってＣ３位で置換されているピリジン−４−イルであり、Ｒ１２は、Ｃ１〜Ｃ６アルキルによって任意に置換されているピリジニルである。別の実施形態において、Ｙは、Ｒ１２によってＣ３位で置換されているピリジン−４−イルであり、Ｒ１２は、Ｃ１〜Ｃ６アルキルによって任意に置換されているインドリルである。別の実施形態において、Ｙは、Ｒ１２によってＣ３位で置換されているピリジン−４−イルであり、Ｒ１２は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ハロゲン、またはＣ１〜Ｃ６アルコキシによって任意に置換されているフェニルである。別の実施形態において、Ｙは、Ｒ１２によってＣ３位で置換されているピリジン−４−イルであり、Ｒ１２は、Ｃ１〜Ｃ６アルキルまたは−ＯＲ１４によって任意に置換されているシクロプロピルである。別の実施形態において、Ｙは、Ｒ１２によってＣ３位で置換されているピリジン−４−イルであり、Ｒ１２は、−ＯＲ１４であり、Ｒ１４は、任意に置換されているＣ１〜Ｃ６アルキルまたは任意に置換されているフェニルである。
【００９７】
一変形例において、Ｙが、Ｃ１〜Ｃ２アルキルによって置換されている６員ヘテロアリール（例えば、ピリジン−４−イル）であり、Ｃ１〜Ｃ２アルキルがＲＬによって置換されているとき、ＲＬは、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ６〜Ｃ１４アリール、５〜１０員ヘテロアリール、３〜１２員ヘテロシクリル、−ＯＲ１４、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１４、シアノ、オキソ、およびニトロからなる群から選択される。
【００９８】
一変形例において、Ｙが、Ｃ１〜Ｃ２アルキルによって置換されている６員ヘテロアリール（例えば、ピリジン−４−イル）であり、Ｃ１〜Ｃ２アルキルがＲＬによって置換されているとき、ＲＬは、ハロゲンおよびＣ６〜Ｃ１４アリールからなる群から選択される。
【００９９】
いくつかの実施形態において、Ｙは、Ｒ１２によって任意に置換されており、Ｃ６〜Ｃ１４アリールまたはＣ５〜Ｃ１０シクロアルキルに任意に融合されているピリミジン−４−イルであり、Ｃ６〜Ｃ１４アリールまたはＣ５〜Ｃ１０シクロアルキルは、Ｒ１２によって任意に置換されている。特定の実施形態において、Ｙは、Ｃ６〜Ｃ１４アリールに融合されているピリミジン−４−イルであり、Ｃ６〜Ｃ１４アリールは、Ｒ１２によって任意に置換されている。さらなる実施形態において、Ｙは、非置換キナゾリン−４−イルである。別の特定の実施形態において、Ｙは、Ｃ５〜Ｃ１０シクロアルキルに融合されているピリミジン−４−イルであり、Ｃ５〜Ｃ１０シクロアルキルは、Ｒ１２によって任意に置換されている。さらなる実施形態において、Ｙは、６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｄ］ピリミジン−４−イルである。
【０１００】
いくつかの実施形態において、Ｙは、Ｒ１２によって任意に置換されており、Ｃ６〜Ｃ１４アリールに任意に融合されている２Ｈ−ピラン−２−オニルであり、Ｃ６〜Ｃ１４アリールは、Ｒ１２によって任意に置換されている。さらなる実施形態において、Ｙは、Ｃ６〜Ｃ１４アリールに融合されている２Ｈ−ピラン−２−オン−５−イルであり、２Ｈ−ピラン−２−オニルまたはＣ６〜Ｃ１４アリールは、Ｒ１２によって任意に置換されている。さらに別の実施形態において、Ｙは、ハロゲンによって任意に置換されている１Ｈ−イソクロメン−１−オン−４−イルである。
【０１０１】
いくつかの実施形態において、Ｙは、Ｂ’またはその互変異性体である。したがって、いくつかの実施形態において、Ｙは、
【化６４】
2021506972.tif 000067
であり、式中、ｚは、０、１、２、３、４、または５であり、
【化６５】
2021506972.tif 000068
は、Ａ’およびＢ’の間の互変異性を示し、Ｒ１２およびＲ１３は、任意の対の互変異性体について同一であることを理解されたい。いくつかの実施形態において、Ｙは、Ｄ’またはその互変異性体である。したがって、いくつかの実施形態において、Ｙは、
【化６６】
2021506972.tif 000069
であり、式中、ｚは、０、１、２、３、４、または５であり、
【化６７】
2021506972.tif 000070
は、Ｃ’およびＤ’の間の互変異性を示し、Ｒ１２およびＲ１３は、任意の対の互変異性体について同一であることを理解されたい。
【０１０２】
一実施形態において、Ｙは、以下からなる群から選択される。
【化６８】
2021506972.tif 000071
【０１０３】
いくつかの実施形態において、Ｙは、Ｒ１２によって任意に置換されており、Ｃ６〜Ｃ１４アリールまたは５〜１０員ヘテロシクリルに任意に融合されているピリジン−２（１Ｈ）−オニルであり、Ｃ６〜Ｃ１４アリールまたは５〜１０員ヘテロシクリルは互いに独立して、かつ各出現において独立して、Ｒ１２によって任意に置換されている。さらなる実施形態において、Ｙは、Ｃ１〜Ｃ６アルキル（例えば、メチル）またはＣ６〜Ｃ１４アリール（例えば、フェニル、本明細書で「Ｐｈ」とも称される）によって任意に置換されているピリジン−２（１Ｈ）−オン−５−イルである。さらに別の実施形態において、Ｙは、Ｒ１２によって任意に置換されており、Ｃ６〜Ｃ１４アリールに任意に融合されているピリジン−２（１Ｈ）−オン−５−イルであり、Ｃ６〜Ｃ１４アリールは、Ｒ１２によって任意に置換されている。さらなる実施形態において、Ｙは、ハロゲン（例えば、フルオロ）、Ｃ１〜Ｃ６アルキル（例えば、メチル）、Ｃ６〜Ｃ１４アリール（例えば、フェニル）、またはＣ３〜Ｃ８シクロアルキル（例えば、シクロプロピル）などの、Ｒ１２によって任意に置換されているイソキノリン−１（２Ｈ）−オン−４−イルである。さらに別の実施形態において、Ｙは、Ｒ１２によって任意に置換されており、５〜１０員ヘテロシクリルに任意に融合されているピリジン−２（１Ｈ）−オン−５−イルであり、５〜１０員ヘテロシクリルは、Ｒ１２によって任意に置換されている。さらなる実施形態において、Ｙは、非置換７，８，９，１０−テトラヒドロピリド［１，２−ａ］アゼピン−４（６Ｈ）−オン−１−イルである。
【０１０４】
いくつかの実施形態において、Ｙは、Ｒ１３によって任意に置換されている３〜１２員ヘテロシクリルである。特定の実施形態において、Ｙは、非置換イソインドリン−２−イルである。別の実施形態において、Ｙは、Ｃ１〜Ｃ６アルキル（例えば、エチル）およびＣ６〜Ｃ１４アリール（例えば、フェニル）などの、Ｒ１３によって任意に置換されているピペリジン−２−オン−５−イルである。
【０１０５】
これらの実施形態のうちのいくつかにおいて、Ｙは、
【化６９】
2021506972.tif 000072
2021506972.tif 000073
2021506972.tif 000074
からなる群から選択される。
【０１０６】
これらの実施形態のうちのいくつかにおいて、Ｙは、
【化７０】
2021506972.tif 000075
2021506972.tif 000076
からなる群から選択される。
【０１０７】
Ｙのすべての変形例は、式Ｉａ、Ｉｂ、ＩＩ、ＩＩａ、ＩＩｂ、ＩＩＩ、ＩＩＩａ、ＩＩＩｂ、ＩＶ、ＩＶａ、ＩＶｂ、Ｖ、Ｖａ、Ｖｂ、ＶＩ、ＶＩａ、ＶＩｂ、ＶＩＩ、ＶＩＩａ、ＶＩＩｂ、ＶＩＩＩ、ＶＩＩＩａ、およびＶＩＩＩｂなどの、本明細書における任意の適用可能な式に等しく適用される。
【０１０８】
薬学的に許容される塩などの、本明細書において言及される化合物の塩もまた提供される。本発明はまた、任意のエナンチオマーまたはジアステレオマー形態、および記載される化合物の任意の互変異性体または他の形態を含む、立体化学形態のうちのいずれかまたはすべてを含む。
【０１０９】
本明細書に記載される化合物のうちのいくつかは、互変異性体形態と平衡に存在する。例えば、アミドＡは、Ｂの互変異性形態であり、イミジン酸Ｂは、Ａの互変異性形態である。同様に、アミドＣは、Ｄの互変異性形態であり、イミジン酸Ｄは、Ｃの互変異性形態である。アミドＡは、イミジン酸Ｂの互変異性形態と平衡に存在し、アミドＣは、イミジン酸Ｄの互変異性形態と平衡に存在する。いずれの互変異性形態が示されても、化合物は、当業者によって、アミドおよびイミジン酸互変異性体の両方を含むと理解される。
【化７１】
2021506972.tif 000077
【０１１０】
本明細書に詳述される化合物は、一態様において精製形態であってもよく、精製形態の化合物を含む組成物は、本明細書に詳述される。実質的に純粋な化合物の組成物などの、本明細書に詳述される化合物またはその塩を含む組成物が提供される。いくつかの実施形態において、本明細書に詳述される化合物またはその塩を含む組成物は、実質的に純粋な形態である。別段の記載がない限り、「実質的に純粋」は、３５％以下の不純物を含む組成物を意図し、不純物は、組成物の大部分またはその塩を含む化合物以外の化合物を示す。いくつかの実施形態において、実質的に純粋な化合物またはその塩の組成物が提供され、組成物は、２５％、２０％、１５％、１０％、または５％以下の不純物を含む。いくつかの実施形態において、実質的に純粋な化合物またはその塩の組成物が提供され、その組成物は、３％、２％、１％、または０．５％以下の不純物を含む。
【０１１１】
代表的な化合物を表１に列挙する。
【表１】
2021506972.tif 000078
2021506972.tif 000079
2021506972.tif 000080
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2021506972.tif 000084
2021506972.tif 000085
【０１１２】
追加の代表的な化合物を表１−Ａに列挙する。
【表２】
2021506972.tif 000086
2021506972.tif 000087
【０１１３】
表１または表１−Ａに示されるある特定の化合物は、互変異性体として存在する。どの互変異性体が示されているかにかかわらず、すべての互変異性体形態が意図される。
【０１１４】
いくつかの実施形態において、表１に記載される化合物、もしくはその互変異性体、または前述のもののいずれかの塩、およびそれらの使用が、本明細書に提供される。いくつかの実施形態において、表１に記載される化合物またはその薬学的に許容される塩が、本明細書に提供される。いくつかの実施形態において、表１−Ａに記載される化合物、もしくはその互変異性体、または前述のもののいずれかの塩、およびそれらの使用が、本明細書に提供される。いくつかの実施形態において、表１−Ａに記載される化合物またはその薬学的に許容される塩が、本明細書に提供される。いくつかの実施形態において、表１または１−Ａに記載される化合物、もしくはその互変異性体、または前述のもののいずれかの塩、およびそれらの使用が、本明細書に提供される。いくつかの実施形態において、表１または１−Ａに記載される化合物またはその薬学的に許容される塩が、本明細書に提供される。
【０１１５】
いくつかの実施形態において、化合物番号１〜１２９から選択される化合物、もしくはその互変異性体、または前述のもののいずれかの塩、およびそれらの使用が、本明細書に提供される。いくつかの実施形態において、化合物番号１〜１２９から選択される化合物、またはその薬学的に許容される塩が、本明細書に提供される。
【０１１６】
いくつかの実施形態において、化合物番号１〜１２９から選択される化合物、またはその立体異性体（その２つ以上の立体異性体の混合物を含む）、またはその塩が提供される。いくつかの実施形態において、化合物は化合物番号１〜１２９から選択される化合物、またはその立体異性体の塩である。
【０１１７】
【表３】
2021506972.tif 000088
2021506972.tif 000089
2021506972.tif 000090
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2021506972.tif 000093
【０１１８】
本明細書に示される化合物は、塩が示されていなくても塩として存在してもよく、本開示は、当業者によって十分に理解されるように、ここに示される化合物のすべての塩および溶媒和物、ならびに化合物の非塩および非溶媒和物形態を包含することを理解されたい。いくつかの実施形態において、本明細書に提供される化合物の塩は、薬学的に許容される塩である。１つ以上の第３級アミン部分が化合物中に存在する場合、Ｎ−オキシドもまた提供され、記載される。
【０１１９】
互変異性体形態が本明細書に記載の化合物のいずれかについて存在し得る場合、互変異性体形態のうちの１つまたはいくつかのみが明示的に示され得るが、各々およびすべての互変異性体形態が意図される。具体的に示される互変異性形態は、溶液中または本明細書に記載される方法に従って使用されるときの主な形態であってもそうでなくてもよい。
【０１２０】
本開示はまた、表１の化合物などの記載される化合物の任意のエナンチオマー形態またはジアステレオマー形態を含む、立体化学形態のうちのいずれかまたはすべてを含む。構造または名称は、示される化合物のすべての可能な立体異性体を包含することが意図される。化合物のすべての形態はまた、化合物の結晶形態または非結晶形態などの本発明によって包含される。本発明の化合物を含む組成物はまた、例えば、その特定の立体化学形態を含む実質的に純粋な化合物の組成物、またはラセミまたは非ラセミ混合物などの２つ以上の立体化学形態を含む本発明の化合物の混合物を任意の比率で含む組成物も意図される。
【０１２１】
本発明はまた、同位体標識および／または同位体濃縮形態の本明細書に記載される化合物を意図する。本明細書における化合物は、そのような化合物を構成する原子のうちの１つ以上に不自然な割合の原子同位体を含み得る。いくつかの実施形態において、化合物は、１つ以上の原子の画分が同じ元素の同位体によって置き換えられる、本明細書に記載される式（Ｉ）の同位体標識化合物またはその変形例などの、同位体標識である。本発明の化合物に組み込まれ得る例示的な同位体には、２Ｈ、３Ｈ、１１Ｃ、１３Ｃ、１４Ｃ  １３Ｎ、１５Ｏ、１７Ｏ、３２Ｐ、３５Ｓ、１８Ｆ、３６Ｃｌなどの水素、炭素、窒素、酸素、リン、硫黄、塩素の同位体が挙げられる。ある特定の同位体標識化合物（例えば、３Ｈおよび１４Ｃ）は、化合物または基質組織分布研究において有用である。重水素（２Ｈ）などのより重い同位体の組み込みは、より大きな代謝安定性、例えば、インビボ半減期の増加、または用量要件の低減に起因するある特定の治療上の利点を提供することができ、したがって、いくつかの事例において好ましい場合がある。
【０１２２】
本発明の同位体標識化合物は、概して、当業者に既知の標準的な方法および技法によって、または対応する非標識試薬の代わりに適切な同位体標識試薬を置き換える付随する実施例に記載されるものと同様の手順によって調製することができる。
【０１２３】
本明細書に記載される化合物、またはその塩もしくは溶媒和物を好適な容器に含む製造物品が提供される。容器は、バイアル、ジャー、アンプル、プリロードシリンジ、静脈内バッグ、および同類のものであり得る。
【０１２４】
好ましくは、本明細書に詳述される化合物は、経口的に生体利用可能である。しかしながら、化合物はまた、非経口（例えば、静脈内）投与用に製剤化され得る。
【０１２５】
本明細書に記載される１つまたはいくつかの化合物は、活性成分としての化合物（単数または複数）を、当該技術分野で既知の薬理学的に許容される担体と組み合わせることによって、薬剤の調製に使用することができる。薬剤の治療形態に応じて、担体は様々な形態であり得る。一変形例において、薬剤の製造は、例えば、がんの治療のために、本明細書に開示される方法のうちのいずれかにおける使用のためのものである。
【０１２６】
一般的な合成方法
本発明の化合物は、以下、およびより具体的には以下の実施例（以下の実施例に提供されるスキームなど）で一般的に説明されるようないくつかのプロセスによって調製され得る。以下のプロセスの説明では、示される式で使用されるときの記号は、本明細書の式に関して上に記載されるそれらの基を表すものと理解されたい。
【０１２７】
化合物の特定のエナンチオマーを得ることが所望される場合、これは、エナンチオマーを分離または分解するための任意の好適な従来の手順を使用して、対応するエナンチオマーの混合物から達成され得る。したがって、例えば、ジアステレオマー誘導体は、エナンチオマー、例えば、ラセミ体、および適切なキラル化合物の混合物の反応によって生成され得る。次いで、ジアステレオマーは、任意の好都合な手段によって、例えば、結晶化によって分離され得、所望のエナンチオマーが回収される。別の解像度プロセスでは、ラセミ体は、キラル高速液体クロマトグラフィーを使用して分離され得る。あるいは、所望である場合、特定のエナンチオマーは、記載されるプロセスのうちの１つにおいて適切なキラル中間体を使用することによって得ることができる。
【０１２８】
クロマトグラフィー、再結晶化、および他の従来の分離手順はまた、化合物の特定の異性体を得ること、またはそれ以外の場合反応の生成物を精製することが所望される中間体または最終生成物とともに使用され得る。
【０１２９】
本明細書に提供される化合物またはその塩の溶媒和物も企図される。溶媒和物は、化学量論または非化学量論量の溶媒のいずれかを含み、結晶化のプロセス中に形成されることが多い。溶媒が水であるときに水和物を形成するか、または溶媒がアルコールであるときにアルコール酸塩を形成する。
【０１３０】
式（Ｉ−１）の化合物は、スキーム１に従って調製することができ、Ｒ、Ｒ１、Ｒ２、Ｙ、ｍ、ｎ、およびｑは、式（Ｉ）、または本明細書に詳述されるその任意の変形例について本明細書に詳述される通りであり、ＺおよびＺ１は、脱基であり、ＰＧ１は、アミン保護基である。
【化７２】
2021506972.tif 000094
【０１３１】
式（Ｉ−１ａ）の化合物を、カップリング剤（例えば、ＨＡＴＵ、ＨＯＢｔ、またはＰｙＢＯＰ）の存在下で式（Ｉ−１ｂ）の化合物とカップリングすると、式（Ｉ−１ｃ）の化合物が得られる。酸性条件下（例えば、ＨＣｌまたはｐＴｓＯＨ）での式（Ｉ−１ｃ）の化合物のアミンの脱保護は、式（Ｉ−１ｄ）の化合物を塩として提供し、これは、カップリング剤（例えば、ＨＡＴＵ、ＨＯＢｔ、またはＰｙＢＯＰ）の存在下でカルボン酸と結合して、式（１−１）の化合物を得る。
【０１３２】
スキーム１における調製方法の例示的な実施形態をスキーム１ａに示す。
【化７３】
2021506972.tif 000095
【０１３３】
いくつかの実施形態において、Ｙは、Ｒ１２によって任意に置換されている６〜１０員ヘテロアリールである。さらなる実施形態において、Ｙは、Ｒ１２によって３位で置換されているピリジン−４−イルであり、
【化７４】
2021506972.tif 000096
は、式（ＩＩ−１）の化合物によって表される。
【化７５】
2021506972.tif 000097
【０１３４】
上記のスキームは、適切な試薬および出発物質の選択によって、本発明の様々な化合物に到達するように修飾され得ることを理解されたい。保護基およびそれらの使用に関する一般的な説明については、Ｐ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ  ａｎｄ  Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ，Ｇｒｅｅｎｅ’ｓ  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ４ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，２００６を参照されたい。
【０１３５】
薬学的組成物および製剤
本明細書に記載の化合物のうちのいずれかの薬学的組成物は、本開示によって包含される。したがって、本開示は、本明細書に詳述される化合物またはその塩と、薬学的に許容される担体または賦形剤とを含む薬学的組成物を含む。一態様において、薬学的に許容される塩は、無機または有機酸で形成される塩などの酸付加塩である。薬学的組成物は、経口、口腔、非経口、鼻腔、局所、または直腸投与に好適な形態、または吸入による投与に好適な形態をとり得る。
【０１３６】
本明細書に詳述される化合物は、一態様において精製形態であってもよく、精製形態の化合物を含む組成物は、本明細書に詳述される。実質的に純粋な化合物の組成物などの、本明細書に詳述される化合物またはその塩を含む組成物が提供される。いくつかの実施形態において、本明細書に詳述される化合物またはその塩を含む組成物は、実質的に純粋な形態である。
【０１３７】
一変形例において、本明細書の化合物は、個体への投与のために調製された合成化合物である。別の変形例において、実質的に純粋な形態の化合物を含む組成物が提供される。別の変形例において、本開示は、本明細書に詳述される化合物と、薬学的に許容される担体とを含む薬学的組成物を包含する。別の変形例において、化合物を投与する方法が提供される。精製された形態、薬学的組成物、および化合物の投与方法は、本明細書に詳述される任意の化合物またはその形態に好適である。
【０１３８】
本明細書に詳述される化合物またはその塩は、経口、粘膜（例えば、鼻、舌下、膣、頬、または直腸）、非経口（例えば、筋肉内、皮下、または静脈内）、局所、または経皮送達形態を含む、任意の利用可能な送達経路のために製剤化され得る。化合物またはその塩は、これらに限定されないが、錠剤、カプレット、カプセル（硬質ゼラチンカプセルまたは軟質弾性ゼラチンカプセルなど）、カシェ剤、トローチ、ロゼンジ、ガム、分散液、座薬、軟膏、パップ剤（湿布剤）、ペースト、粉末、ドレッシング、クリーム、溶液、パッチ、エアロゾル（例えば、鼻腔スプレーまたは吸入器）、ゲル、懸濁液（例えば、水性または非水性液体懸濁液、水中油型乳剤または油中水型液体乳剤）、溶液、およびエリキシル剤を含む送達形態を提供するために好適な担体とともに製剤化され得る。
【０１３９】
本明細書に記載される１つまたはいくつかの化合物もしくはその塩は、活性成分としての化合物（単数、複数）またはその塩を、上記のようなものなどの薬学的に許容される担体と組み合わせることによって、薬学的製剤などの製剤の調製に使用することができる。システムの治療形態（例えば、経皮パッチ対経口錠剤）に応じて、担体は様々な形態であり得る。加えて、薬学的製剤は、防腐剤、可溶化剤、安定化剤、再湿潤剤、乳化剤、甘味料、染料、調整剤、および浸透圧の調整のための塩、緩衝液、コーティング剤、または酸化防止剤を含み得る。化合物を含む製剤は、貴重な治療特性を有する他の物質も含み得る。薬学的製剤は、既知の薬学的方法によって調製され得る。好適な製剤は、例えば、参照により本明細書に組み込まれる、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，ＰＡ，２０ｔｈ  ｅｄ．（２０００）に見出され得る。
【０１４０】
本明細書に記載されるような化合物は、硬質または軟質シェル、乳剤または懸濁液中の、錠剤、コーティング錠剤、およびゲルカプセルなどの一般に許容される経口組成物の形態で個体に投与され得る。かかる組成物の調製に使用され得る担体の例は、乳糖、トウモロコシデンプンまたはその誘導体、タルク、ステアリン酸塩またはその塩などである。軟質シェルを有するゲルカプセルについて許容される担体は、例えば、植物油、ワックス、脂肪、半固体、および液体ポリオールなどである。加えて、薬学的製剤は、防腐剤、可溶化剤、安定化剤、再湿潤剤、乳化剤、甘味料、染料、調整剤、および浸透圧の調整のための塩、緩衝液、コーティング剤、または酸化防止剤を含み得る。
【０１４１】
本明細書に提供される化合物を含む組成物もまた記載される。一変形例において、組成物は、化合物またはその塩、ならびに薬学的に許容される担体または賦形剤を含む。別の変形例において、実質的に純粋な化合物の組成物が提供される。いくつかの実施形態において、組成物は、ヒトまたは獣医用薬剤として使用するためのものである。いくつかの実施形態において、組成物は、本明細書に記載される方法で使用するためのものである。いくつかの実施形態において、組成物は、本明細書に記載される疾患または障害の治療に使用するためのものである。
【０１４２】
使用方法および使用
本明細書に提供される任意の式の化合物またはその塩、および薬学的に許容される担体または賦形剤を含む薬学的組成物などの、本明細書に詳述される化合物および組成物は、本明細書に提供されるような投与および治療の方法において使用され得る。化合物および組成物はまた、スクリーニング目的のためおよび／または品質管理アッセイを実施するために、化合物または組成物を細胞に投与するインビトロ方法などの、インビトロ方法において使用され得る。
【０１４３】
本明細書、またはその任意の実施形態、変形例、もしくは態様に記載される化合物、またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む、疾患または障害の治療を必要とする個体においてそれを治療する方法が本明細書に提供される。いくつかの実施形態において、化合物、その薬学的に許容される塩、または組成物は、本明細書に記載される用量および／または投与方法に従って個体に投与される。
【０１４４】
本明細書に記載される化合物またはその塩および本明細書に記載される組成物は、様々な疾患および障害の治療に有効であると考えられる。いくつかの実施形態において、本明細書に記載される化合物もしくはその塩、または本明細書に記載される組成物は、線維芽細胞活性化タンパク質（ＦＡＰ）によって媒介される疾患または障害を治療する方法において使用され得る。いくつかの実施形態において、疾患または障害は、増殖、組織再構築、線維症、慢性炎症、過剰なアルコール摂取、または異常な代謝によって特徴付けられる。
【０１４５】
いくつかの実施形態において、本明細書に記載される化合物またはその塩または本明細書に記載の組成物は、ＦＡＰペプチダーゼ活性の生理的基質によって媒介される疾患または障害を治療する方法に使用され得る。いくつかの実施形態において、ＦＡＰペプチダーゼ活性は、エンドペプチダーゼ活性である。いくつかの実施形態において、ＦＡＰエンドペプチダーゼ活性の生理学的基質はα２−抗プラスミン、Ｉ型コラーゲン、ゼラチン、および線維芽細胞成長因子２１（ＦＧＦ２１）である。いくつかの実施形態において、ＦＡＰペプチダーゼ活性は、エキソペプチダーゼ活性である。いくつかの実施形態において、ＦＡＰエキソペプチダーゼ活性の生理学的基質は、ニューロペプチドＹ、Ｂ型ナトリウスペプチド、Ｐ物質、およびペプチドＹＹである。いくつかの実施形態において、本明細書に記載される化合物またはその塩または本明細書に記載される組成物は、ＦＧＦ２１によって媒介される疾患または障害を治療する方法に使用され得る。
【０１４６】
いくつかの実施形態において、本明細書に記載される化合物もしくはその塩、または本明細書に記載される組成物は、肥満、Ｉ型およびＩＩ型糖尿病、膵臓炎、脂質異常症、高脂血症状態、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪肝炎（ＮＡＳＨ）、インスリン抵抗性、高インスリン血症、ブドウ糖不耐症、高血糖症、代謝症候群、急性心筋梗塞、高血圧、心血管疾患、アテローム性動脈硬化症、末梢動脈疾患、卒中、心不全、冠動脈心臓疾患、腎臓疾患、糖尿病合併症、ニューロパチー、胃不全麻痺、インスリン受容体における深刻な不活性化変異に関連する障害、および他の代謝障害などの、ＦＧＦ２１関連障害を治療する方法において使用され得る。いくつかの実施形態において、ＦＧＦ２１関連障害は、糖尿病、肥満、脂質異常症、代謝症候群、非アルコール性脂肪性肝疾患、非アルコール性脂肪性肝炎、または心血管疾患である。
【０１４７】
いくつかの実施形態において、本明細書に記載される化合物もしくはその塩、または本明細書に記載される組成物は、増殖、組織再構築、線維症、慢性炎症、過剰アルコール摂取、または異常な代謝によって特徴付けられる疾患または障害を治療する方法において使用され得る。
【０１４８】
いくつかの実施形態において、本明細書に記載される化合物もしくはその塩、または本明細書に記載される組成物は、乳癌、結腸直腸癌、卵巣癌、前立腺癌、膵臓癌、腎臓癌、肺癌、黒色腫、線維肉腫、骨肉腫、結合組織肉腫、腎細胞癌、巨細胞癌、扁平上皮癌、白血病、皮膚癌、軟組織癌、肝臓癌、胃腸癌、または腺癌などの、がんを治療する方法において使用され得る。いくつかの実施形態において、化合物、塩、または組成物は、転移性腎臓癌、慢性リンパ球性白血病、膵臓腺癌、または非小細胞肺癌を治療する方法において使用され得る。
【０１４９】
いくつかの実施形態において、化合物、塩、または組成物の投与は、個体における腫瘍成長、腫瘍増殖、または腫瘍発生性を低減する。いくつかの実施形態において、化合物、塩、または組成物は、腫瘍成長、腫瘍増殖、または腫瘍発生性を低減することを必要とする個体においてそれを行う方法において使用され得る。いくつかの実施形態において、腫瘍成長は、遅くなるか、または停止される。いくつかの実施形態において、腫瘍成長は、少なくとも約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０以上低減される。いくつかの実施形態において、腫瘍のサイズが低減される。いくつかの実施形態において、腫瘍転移は、予防されるか、または遅くなる。いくつかの実施形態において、腫瘍成長、腫瘍増殖、または腫瘍発生性は、化合物、塩、または組成物の投与前の個体における腫瘍成長、腫瘍増殖、または腫瘍発生性と比較される。いくつかの実施形態において、腫瘍成長、腫瘍増殖、または腫瘍発生性は、同様の個体または個体群における腫瘍成長、腫瘍増殖、または腫瘍発生性と比較される。腫瘍成長、腫瘍増殖、および腫瘍発生性を測定する方法は、当該技術分野で既知であり、例えば、個体の反復イメージングによる。
【０１５０】
いくつかの実施形態において、本明細書に記載される化合物もしくはその塩、または本明細書に記載の組成物は、線維性疾患、血栓症、創傷治癒、ケロイド形成、変形性関節症、関節リウマチ、および軟骨分解、アテローム性動脈硬化性疾患、クローン病、肝硬変、特発性肺線維症、心筋肥大、拡張機能障害、肥満、ブドウ糖不耐症、インスリン不感受性、または真性糖尿病を伴う関連疾患を治療する方法において使用され得る。いくつかの実施形態において、肝硬変は、ウイルス性肝炎誘発、アルコール性誘発、または胆汁性肝硬変である。いくつかの実施形態において、真性糖尿病は、ＩＩ型糖尿病である。いくつかの実施形態において、疾患または障害は、線維性肝変性である。
【０１５１】
いくつかの実施形態において、ＦＡＰを阻害する方法が本明細書に提供される。本明細書に記載される化合物またはその塩および本明細書に記載される組成物は、ＦＡＰを阻害するのに有効であると考えられる。
【０１５２】
いくつかの実施形態において、ＦＡＰを阻害する方法は、本明細書に記載される化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、または本明細書に記載される薬学的組成物を、細胞に投与または送達することによって、細胞においてＦＡＰを阻害することを含む。いくつかの実施形態において、細胞は、とりわけＦＡＰ発現を有する細胞の中でも、筋線維芽細胞、ケロイド線維芽細胞、癌関連線維芽細胞（ＣＡＦ）、または反応性間質線維芽細胞などの、線維芽細胞である。
【０１５３】
いくつかの実施形態において、ＦＡＰを阻害する方法は、本明細書に記載される化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、または本明細書に記載される薬学的組成物を、腫瘍または血漿に投与または送達することによって、腫瘍または血漿においてＦＡＰを阻害することを含む。
【０１５４】
いくつかの実施形態において、ＦＡＰの阻害は、ＦＡＰのエンドペプチダーゼおよび／またはエキソペプチダーゼ活性を阻害することを含む。いくつかの実施形態において、ＦＡＰは、少なくとも約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９８％以上阻害される。ＦＡＰの阻害は、当該技術分野で既知の方法によって判定され得る。
【０１５５】
いくつかの実施形態において、化合物、その塩、または組成物は、約１μＭ未満、例えば、約７５０ｎＭ未満、６００ｎＭ未満、５００ｎＭ未満、３００ｎＭ未満、２００ｎＭ未満、１００ｎＭ未満、８０ｎＭ未満、６０ｎＭ未満、４０ｎＭ未満、２５ｎＭ未満、もしくはそれ未満のＩＣ５０でＦＡＰを阻害する。いくつかの実施形態において、化合物、その塩、または組成物は、約７ｎＭ〜１μＭ、例えば、約１０ｎＭ〜６００ｎＭ、１５ｎＭ〜２００ｎＭ、または２０ｎＭ〜１８０ｎＭのＩＣ５０でＦＡＰを阻害する。いくつかの態様において、半最大阻害濃度（ＩＣ５０）は、特定の生物学的または生化学的機能を阻害する物質の有効性の尺度である。いくつかの態様において、ＩＣ５０は、所与の生物学的プロセスまたはプロセスの構成要素、例えば、酵素、細胞、細胞受容体、または微生物を半分阻害するのにどの程度の阻害剤が必要かを示す定量的尺度である。ＩＣ５０をインビトロおよびインビボで判定する方法は、当該技術分野で既知である。
【０１５６】
いくつかの実施形態において、本明細書に記載される化合物またはその塩および本明細書に記載される組成物は、ＤＰＰＩＩ、ＤＰＰＩＶ、ＤＰＰ８、ＤＰＰ９、および／またはＰＲＥＰ活性が阻害されないか、またはより少ない程度阻害される量で投与される。いくつかの実施形態において、ＦＡＰの阻害は、ＤＰＰＩＩ、ＤＰＰＩＶ、ＤＰＰ８、ＤＰＰ９、および／またはＰＲＥＰ活性の阻害よりも、少なくともまたは少なくとも約２倍大きく、例えば、少なくともまたは少なくとも約３倍、４倍、５倍、８倍、１０倍、１５倍、３０倍、５０倍、６０倍、７５倍、もしくは１００倍大きい。
【０１５７】
本明細書に記載される化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、または本明細書に記載の薬学的組成物を個体に投与することを含む、個体における免疫応答を増強する方法が本明細書に提供される。いくつかの実施形態において、個体は、がんを有する。いくつかの実施形態において、増強された免疫応答は、腫瘍または癌細胞を対象とする。一例として、かつ理論によって拘束されることを望むものではないが、ＦＡＰは、特にがんの文脈において免疫応答を抑制すると考えられ、したがって、ＦＡＰを阻害することは、個体の免疫応答を増強し得る。したがって、本明細書に記載される化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、または本明細書に記載される薬学的組成物を個体に投与することを含む、癌の治療を必要とする個体においてそれを治療する方法が本明細書に提供され、個体の免疫応答は増加される。
【０１５８】
本明細書に記載される化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、または本明細書に記載される薬学的組成物を個体に投与することを含む、個体におけるＦＧＦ２１発現のレベルを増加する方法が本明細書に提供される。明細書に記載される化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、または本明細書に記載される薬学的組成物を個体に投与することを含む、個体におけるＦＧＦ２１またはＦＧＦ２１類似体のレベルを増加する方法もまた提供される。いくつかの実施形態において、方法は、変異ＦＧＦ２１、ペグ化ＦＧＦ２１、ＰＦ−０５２３１０２３、またはＬＹ２４０５３１９などのＦＧＦ２１またはＦＧＦ２１類似体を投与することをさらに含む。
【０１５９】
ＦＧＦ２１は、主に肝臓によって分泌されるペプチド内分泌ホルモンである（Ｍａｒｋａｎ，Ｋ．Ｒ．ｅｔ  ａｌ．Ｓｅｍｉｎ  Ｃｅｌｌ  Ｄｅｖ  Ｂｉｏｌ，２０１６，５３：８５−９３）。循環に入ると、ＦＧＦ２１は、炭水化物および脂質代謝を調節する特定の組織にシグナル伝達することによって機能する（Ｋｈａｒｉｔｏｎｅｎｋｏｖ，Ａ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｉｎｖｅｓｔ，２００５，１１５（６）：１６２７−３５）。ＦＧＦ２１は、脂肪細胞におけるブドウ糖取り込みを刺激し、肥満およびインスリン不感受性に対して保護すると考えられる。糖尿病および肥満動物モデルへのＦＧＦ２１の薬理学的投与は、げっ歯類における肥満、インスリン抵抗性、脂質異常症、脂肪肝、および高血糖症を顕著に改善する（Ｍａｒｋａｎ，Ｋ．Ｒ．ｅｔ  ａｌ．Ｓｅｍｉｎ  Ｃｅｌｌ  Ｄｅｖ  Ｂｉｏｌ，２０１６，５３：８５−９３）。小型臨床試験は、ＦＧＦ２１類似体が、２型糖尿病を有する肥満個体における減量を誘導し、高インスリン血症、脂質異常症、および低アディポネクチン血症を矯正するのに有効であることを実証している（Ｇａｉｃｈ，Ｇ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｃｅｌｌ  Ｍｅｔａｂ，２０１３，１８（３）：ｐ．３３３−４０；Ｄｏｎｇ，Ｊ．Ｑ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｂｒ  Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ，２０１５，８０（５）：１０５１−６３）。
【０１６０】
一例として、かつ理論によって拘束されることを望むものではないが、ＦＡＰは、ＦＧＦ２１の切断および不活性化に関与する酵素であると考えられ、したがって、ＦＡＰを阻害することは、ＦＧＦ２１発現のレベルを増加させ得、内因性および／または外因性ＦＧＦ２１作用を増強し得る。ＦＧＦ２１は、そのＮ末端を通してＦＧＦＲ１と相互作用し、そのＣ末端を通じてβ−Ｋｌｏｔｈｏと相互作用する。ＦＧＦ２１のこのＣ末端領域は、受容体複合体を活性化してシグナル伝達を開始するために不可欠である（Ｍｉｃａｎｏｖｉｃ，Ｒ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｃｅｌｌ  Ｐｈｙｓｉｏｌ，２００９，２１９（２）：２２７−３４；Ｙｉｅ，Ｊ．，ｅｔ  ａｌ．，ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔ，２００９，５８３（１）：１９−２４）。最近、ＦＡＰαは、Ｐｒｏ１７１におけるＣ末端切断による循環ＦＧＦ２１の不活性化に関与するプロテアーゼとして同定されている（Ｄｕｎｓｈｅｅ，Ｄ．Ｒ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ，２０１６，２９１（１１）：５９８６−９６；Ｃｏｐｐａｇｅ，Ａ．Ｌ．，ｅｔ  ａｌ．，ＰＬｏＳ  Ｏｎｅ，２０１６，１１（３）：ｅ０１５１２６９；Ｚｈｅｎ，Ｅ．Ｙ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｊ，２０１６，４７３（５）：６０５−１４）。げっ歯類および霊長類において、ＦＡＰ媒介酵素分解および腎クリアランスに対する感受性の結果として、外因性投与ヒトＦＧＦ２１の半減期は短い（約０．５〜２時間）（Ｈａｇｅｒ，Ｔ．，ｅｔ  ａｌ．，Ａｎａｌ  Ｃｈｅｍ，２０１３，８５（５）：２７３１−８；Ｘｕ，Ｊ．，ｅｔ  ａｌ．，Ａｍ  Ｊ  Ｐｈｙｓｉｏｌ  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ  Ｍｅｔａｂ，２００９，２９７（５）：Ｅ１１０５−１４；Ｋｈａｒｉｔｏｎｅｎｋｏｖ，Ａ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ，２００７，１４８（２）：７７４−８１）。一般的な半減期延長戦略は、これらのＦＧＦ２１類似体のインビボでのＰＫ特性を著しく改善しているが、これらの類似体においてタンパク質分解処理は依然として継続している（Ｈｅｃｈｔ，Ｒ．，ｅｔ  ａｌ．，ＰＬｏＳ  Ｏｎｅ，２０１２，７（１１）：ｅ４９３４５；Ｍｕ，Ｊ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｄｉａｂｅｔｅｓ，２０１２，６１（２）：５０５−１２；Ｃａｍａｃｈｏ，Ｒ．Ｃ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｅｕｒ  Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ，２０１３，７１５（１−３）：４１−５）。
【０１６１】
したがって、本明細書に記載される化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、または本明細書に記載される薬学的組成物を個体に投与することを含む、真性糖尿病、インスリン不感受性、および／または肥満の治療を必要とする個体においてそれを治療する方法が本明細書に提供される。いくつかの実施形態において、方法は、ＦＧＦ２１またはＦＧＦ２１類似体を投与することをさらに含む。いくつかの実施形態において、ＦＧＦ２１類似体は、ペグ化ＦＧＦ２１、ＰＦ−０５２３１０２３、またはＬＹ２４０５３１９である。本明細書に記載される化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、または本明細書に記載される薬学的組成物を個体に投与することを含む、真性糖尿病、インスリン不感受性、および／または肥満の治療を必要とする個体においてそれを治療する方法もまた本明細書に提供され、ＦＧＦ２１発現は増加される。いくつかの実施形態において、真性糖尿病は、ＩＩ型糖尿病である。
【０１６２】
いくつかの実施形態において、個体は、哺乳動物である。いくつかの実施形態において、個体は、霊長類、ウシ、ヒツジ、ブタ、ウマ、イヌ、ネコ、ウサギ、またはげっ歯類である。いくつかの実施形態において、個体は、ヒトである。いくつかの実施形態において、個体は、本明細書に開示される疾患または障害のうちのいずれかを有する。いくつかの実施形態において、個体は、本明細書に開示される疾患または障害のいずれかを発症するリスクである。
【０１６３】
いくつかの実施形態において、個体は、ヒトである。いくつかの実施形態において、ヒトは、少なくとも約２１、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、または８５歳であるか、または約２１、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、または８５歳のいずれかである。いくつかの実施形態において、ヒトは、子供である。いくつかの実施形態において、ヒトは、約２１、１８、１５、１２、１０、８、６、５、４、３、２、または１歳未満であるか、または約２１、１８、１５、１２、１０、８、６、５、４、３、２、または１歳のいずれかである。
【０１６４】
薬剤の製造における、本明細書に記載される化合物もしくはその薬学的に許容される塩、または本明細書に記載される薬学的組成物の使用もまた本明細書に提供される。いくつかの実施形態において、薬剤の製造は、本明細書に記載される障害または疾患の治療のためのものである。いくつかの実施形態において、薬剤の製造は、ＦＡＰによって媒介される障害または疾患の予防および／または治療のためのものである。
【０１６５】
併用療法
本明細書に提供されるように、本明細書に記載される化合物またはその塩、および本明細書に記載される組成物は、本明細書に開示される疾患および障害のうちのいずれかを治療するために追加の薬剤とともに投与され得る。
【０１６６】
いくつかの実施形態において、（ａ）本明細書に記載される化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、または本明細書に記載される薬学的組成物、および（ｂ）追加の薬剤は、逐次投与、併用投与、または同時投与される。ある特定の実施形態において、（ａ）本明細書に記載される化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、または本明細書に記載される薬学的組成物、および（ｂ）追加の薬剤は、約１５分以下、例えば、約１０、５、または１分以下のいずれかの時間分離で投与される。ある特定の実施形態において、（ａ）本明細書に記載される化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、または本明細書に記載される薬学的組成物、および（ｂ）追加の薬剤は、約１５分以上、例えば、約２０、３０、４０、５０、６０、もしくはそれ以上のいずれかの時間分離で投与される。（ａ）本明細書に記載される化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、または本明細書に記載される薬学的組成物のいずれかと、（ｂ）追加の薬剤とが最初に投与され得る。ある特定の実施形態において、（ａ）本明細書に記載される化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、または本明細書に記載される薬学的組成物、および（ｂ）追加の薬剤は、同時に投与される。
【０１６７】
いくつかの実施形態において、追加の薬剤は、免疫チェックポイントタンパク質を標的とする。いくつかの実施形態において、追加の薬剤は、免疫チェックポイントタンパク質を標的とする抗体である。いくつかの実施形態において、追加の薬剤は、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２、ＣＴＬＡ４、ＴＩＭ３、ＬＡＧ３、ＣＣＲ４、ＯＸ４０、ＯＸ４０Ｌ、ＩＤＯ、およびＡ２ＡＲを標的とする。いくつかの実施形態において、追加の薬剤は、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、または抗ＣＴＬＡ−４抗体である。
【０１６８】
いくつかの実施形態において、追加の薬剤は、ＰＰＡＲαアゴニストなどのＦＧＦ２１発現の誘導剤である。いくつかの実施形態において、ＰＰＡＲαアゴニストは、フィブラートまたはフェノフィブラートである。いくつかの実施形態において、追加の薬剤は、ＦＧＦ−２１またはＦＧＦ−２１類似体である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦ−２１類似体は、変異ＦＧＦ２１および／またはペグ化ＦＧＦ２１である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦ−２１類似体は、ＰＦ−０５２３１０２３またはＬＹ２４０５３１９である。
【０１６９】
いくつかの実施形態において、追加の薬剤は、ＫＬＢ／ＦＧＦＲ複合体アゴニスト、ＤＤＰＩＶアンタゴニスト、ＧＬＰ−１受容体アゴニスト、またはグルカゴン受容体アゴニストである。
【０１７０】
（ａ）本明細書に記載される化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、または本明細書に記載される薬学的組成物、および（ｂ）免疫チェックポイントタンパク質を標的とする薬剤を個体に投与することを含む、個体における免疫応答を増強する方法が本明細書に提供される。いくつかの実施形態において、個体は、がんを有する。いくつかの実施形態において、増強された免疫応答は、腫瘍または癌細胞を対象とする。
【０１７１】
（ａ）本明細書に記載される化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、または本明細書に記載される薬学的組成物、および（ｂ）免疫チェックポイントタンパク質を標的とする薬剤を個体に投与することを含む、癌の治療を必要とする個体においてそれを治療する方法もまた本明細書に提供され、個体の免疫応答は増加される。
【０１７２】
（ａ）本明細書に記載される化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、または本明細書に記載される薬学的組成物、および（ｂ）ＦＧＦ２１発現を誘導する薬剤を個体に投与することを含む、個体におけるＦＧＦ２１発現のレベルを増加する方法が本明細書に提供される。
【０１７３】
（ａ）本明細書に記載される化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、または本明細書に記載される薬学的組成物、および（ｂ）ＦＧＦ２１発現を誘導する薬剤を個体に投与することを含む、真性糖尿病、インスリン不感受性、および／または肥満の治療を必要とする個体においてそれを治療する方法もまた本明細書に提供され、ＦＧＦ２１発現は増加される。いくつかの実施形態において、真性糖尿病は、ＩＩ型糖尿病である。
【０１７４】
本明細書に提供されるように、本明細書に記載される化合物またはその塩、および本明細書に記載される組成物は、筋力トレーニングまたは心血管運動などの運動レジメンを含む治療レジメンの一部として投与される。いくつかの実施形態において、本明細書に記載される化合物またはその塩、および本明細書に記載される組成物は、追加の薬剤とともに、筋力トレーニングまたは心血管運動などの運動レジメンを含む治療レジメンの一部として投与される。いくつかの実施形態において、運動レジメンは、週に少なくとも１回、例えば、週に２回、週に３回、週に４回、週に５回、週に６回、または週に７回運動することを含む。いくつかの実施形態において、運動レジメンは、週に少なくとも１日、例えば、週に２日、週に３日、週に４日、週に５日、週に６日、または週に７日運動することを含む。いくつかの実施形態において、運動レジメンは、１日１回、１日２回、または１日３回運動することを含む。いくつかの実施形態において、運動レジメンは、セッション毎に少なくとも１０分間、例えば、少なくとも１５分間、２０分間、２５分間、３０分間、３５分間、４０分間、４５分間、５０分間、５５分間、１時間、１．２５時間、または１．５時間運動することを含む。
【０１７５】
投与および投与の方法
個体（ヒトなど）に投与される化合物の用量は、特定の化合物またはその塩、投与の方法、および治療されているがんの種類および段階などの特定の疾患とともに変化し得る。いくつかの実施形態において、化合物またはその塩の量は、治療有効量である。
【０１７６】
化合物の有効量は、一態様において、約０．０１〜約１００ｍｇ／ｋｇの用量であり得る。本発明の化合物の有効量または用量は、日常的な要因、例えば、投与または薬物送達の様式または経路、薬剤の薬物動態、治療される疾患の重症度および経過、対象の健康状態、状態、ならびに体重を考慮して、モデリング、用量漸増、または臨床試験などの日常的な方法によって確認され得る。例示的な用量は、毎日約０．７ｍｇ〜７ｇ、または毎日約７ｍｇ〜３５０ｍｇ、または毎日約３５０ｍｇ〜１．７５ｇ、または毎日約１．７５〜７ｇの範囲である。
【０１７７】
本明細書に提供される方法のうちのいずれかは、一態様において、有効量の本明細書に提供される化合物またはその塩、および薬学的に許容される賦形剤を含む薬学的組成物を個体に投与することを含み得る。
【０１７８】
本発明の化合物または組成物は、所望の期間または持続時間、例えば、少なくとも約１ヶ月、少なくとも約２ヶ月、少なくとも約３ヶ月、少なくとも約６ヶ月、または少なくとも約１２ヶ月以上の有効投与レジメンに従って、個体に投与されてもよく、これは、いくつかの変形例において、個体の寿命の持続時間であり得る。一変形例において、化合物は、毎日スケジュールまたは間欠スケジュールで投与される。化合物は、一定期間にわたって個体に連続的に（例えば、少なくとも毎日１回）投与することができる。投与頻度はまた、毎日１回未満、例えば、１週間に約１回の投与であり得る。投与頻度は、毎日１回超、例えば、毎日２回または３回であり得る。投与頻度はまた、「休薬日」を含む間欠であり得る（例えば、毎日１回の投与を７日間、続いて７日間の投与なしが、約２ヶ月、約４ヶ月、約６ヶ月以上などの任意の１４日間の期間繰り返される）。投与頻度のうちのいずれかは、本明細書に記載される化合物のうちのいずれかを、本明細書に記載される用量のうちのいずれかとともに用いることができる。
【０１７９】
製品およびキット
本開示は、本明細書に記載される化合物もしくはその塩、本明細書に記載される組成物、または本明細書に記載される１つ以上の単位用量を好適なパッケージングに含む製品をさらに提供する。ある特定の実施形態において、製品は、本明細書に記載される方法のうちのいずれかにおいて使用されるためのものである。好適なパッケージングは、当該技術分野で既知であり、例えば、バイアル、容器、アンプル、ボトル、ジャー、可撓性パッケージング、および同類のものを含む。製品は、さらに滅菌および／または密封されてもよい。
【０１８０】
本開示は、本明細書に記載される１つ以上の化合物または本明細書に記載される化合物を含む組成物を含む、本発明の方法を実施するためのキットをさらに提供する。キットは、本明細書に開示される化合物のうちのいずれかを用いてもよい。一変形例において、キットは、本明細書に記載される化合物またはその塩を用いる。キットは、本明細書に記載される使用のうちのいずれか１つ以上に使用されてもよく、したがって、任意の疾患または本明細書に記載される治療のため、例えば、がんの治療のための説明書を含み得る。
【０１８１】
キットは概して、好適なパッケージングを含む。キットは、本明細書に記載される任意の化合物を含む１つ以上の容器を含んでもよい。各構成要素（１つ超の構成要素がある場合）は、別個の容器にパッケージすることができるか、またはいくつかの構成要素は、交差反応性および保存期間が許容される１つの容器に組み合わせることができる。
【０１８２】
キットは、単位剤形、バルクパッケージ（例えば、複数用量パッケージ）またはサブ単位用量であり得る。例えば、１週間、２週間、３週間、４週間、６週間、８週間、３ヶ月、４ヶ月、５ヶ月、７ヶ月、８ヶ月、９ヶ月、またはそれ以上のうちのいずれかなどの、長期期間にわたって個体の有効な治療を提供するために本明細書に詳述される疾患に有用な、十分な投与量の本明細書に開示される化合物および／または追加の薬学的に活性な化合物を含むキットが提供され得る。キットはまた、化合物の複数の単位用量、および使用のための説明書を含み得、薬局（例えば、病院薬局および調剤薬局）における保管および使用に十分な量でパッケージされ得る。
【０１８３】
キットは、説明書を含む電子記憶媒体（例えば、磁気ディスケットまたは光ディスク）もまた、本発明の方法の構成要素（複数可）の使用に関連して許容されるが、任意に、一組の説明書、概して書かれた説明書を含んでもよい。キットに含まれる説明書は、概して、構成成分およびそれらの個体への投与に関する情報を含む。
【０１８４】
本発明は、以下の実施例を参照することによってさらに理解することができ、これらは例示として提供され、限定することを意味するものではない。
【０１８５】
刊行物、特許、特許出願、および公開された特許出願などの全体の参照は、参照によりそれらの全体において本明細書に組み込まれる。
【０１８６】
以下に列挙される実施形態は、本発明のいくつかの態様を表す。
実施形態１．式（Ｉ）の化合物、
【化７６】
2021506972.tif 000098
またはその薬学的に許容される塩が提供され、式中、
Ｒが、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、またはＣ６〜Ｃ１４アリールであり、Ｒの前記Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、およびＣ６〜Ｃ１４アリールが独立して、Ｒｄによって任意に置換されており、
ｍは、０、１、２、３、または４であり、
ｎが、０、１、２、３、または４であり、
ｍ＋ｎは、１、２、３、または４であり、
Ｘが、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｏ−、−ＣＨ（ＯＨ）−、−Ｓ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、または−Ｓ（＝Ｏ）２−であり、
Ｌは、
【化７７】
2021506972.tif 000099
であって、式中、
＊が、Ｙ−Ｘ−部分への結合点を表し、
＊＊が、分子の残部への結合点を表し、
Ｒａが、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、もしくはＣ６〜Ｃ１４アリールであり、ＲａのＣ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、およびＣ６〜Ｃ１４アリールが独立して、Ｒｅによって任意に置換されており、
Ｒ１およびＲ２が互いに独立して、かつ各出現において独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ２アルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、もしくはＣ６〜Ｃ１４アリールであり、Ｒ１およびＲ２の前記Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、およびＣ６〜Ｃ１４アリールが独立して、Ｒｆによって任意に置換されており、
または、Ｒ１およびＲ２が、それらが結合する炭素原子と一緒になって、Ｒｆによって任意に置換されている３〜８員シクロアルキレンを形成し、
ｑが、１、２、もしくは３であり、
Ｒ３およびＲ４が互いに独立して、かつ各出現において独立して、水素、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、もしくはＣ６〜Ｃ１４アリールであり、Ｒ３およびＲ４の前記Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、およびＣ６〜Ｃ１４アリールが独立して、Ｒｇによって任意に置換されており、
または、Ｒ３およびＲ４が、それらが結合する炭素原子と一緒になって、Ｒｇによって任意に置換されている３〜８員シクロアルキレンを形成し、
ｐが、０、１、または２である、式（ａ）、
【化７８】
2021506972.tif 000100
であって、式中、
＊が、Ｙ−Ｘ−部分への結合点を表し、
＊＊が、分子の残部への結合点を表し、
Ｒ５およびＲ６が互いに独立して、かつ各出現において独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、もしくはＣ６〜Ｃ１４アリールであり、Ｒ５およびＲ６の前記Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、およびＣ６〜Ｃ１４アリールが独立して、Ｒｈによって任意に置換されており、
ＲｂおよびＲｃは独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、Ｃ６〜Ｃ１４アリール、もしくは−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ１７であり、ＲｂおよびＲｃの前記Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、およびＣ６〜Ｃ１４アリールが独立して、Ｒｉによって任意に置換されており、
ｒが、１、２、もしくは３である、式（ｂ）、
【化７９】
2021506972.tif 000101
であって、式中、
＊が、Ｙ−Ｘ−部分への結合点を表し、
＊＊が、分子の残部への結合点を表し、
Ｒ７およびＲ８が互いに独立して、かつ各出現において独立して、水素、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、もしくはＣ６〜Ｃ１４アリールであり、Ｒ７およびＲ８の前記Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、およびＣ６〜Ｃ１４アリールが独立して、Ｒｊによって任意に置換されており、
または、Ｒ７およびＲ８が、それらが結合する炭素原子と一緒になって、Ｒｊによって任意に置換されている３〜８員シクロアルキレンを形成し、
Ｒ９およびＲ１０が互いに独立して、かつ各出現において独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、もしくはＣ６〜Ｃ１４アリールであり、Ｒ９およびＲ１０のＣ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、およびＣ６〜Ｃ１４アリールが独立して、Ｒｋによって任意に置換されており、
ｓが、１、２、もしくは３であり、
ｔが、１、２、もしくは３であり、
ｓ＋ｔが、２、３、もしくは４であり、
ｕが、０もしくは１であり、
ｖが、０もしくは１である、式（ｃ）、であり、
Ｙが、Ｒ１１によって任意に置換されているＣ６〜Ｃ９アリール、Ｒ１２によって任意に置換されている６〜１０員ヘテロアリール、またはＲ１３によって任意に置換されている３〜１２員ヘテロシクリルであり、Ｙが、フェニルまたはナフチルであるとき、Ｙの前記フェニルまたはナフチルは、少なくとも１つのＲ１１によって置換されており、Ｌが、＊−ＮＨ−ＣＨ２−＊＊であり、Ｙが、任意に置換されているキノリニルであるとき、Ｙの前記任意に置換されているキノリニルは、２、３、５、６、７、または８位で親構造に接続されており、
Ｒ１１、Ｒ１２、およびＲ１３が互いに独立して、かつ各出現において独立して、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ４〜Ｃ８シクロアルケニル、３〜１２員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリール、Ｃ６〜Ｃ１４アリール、ハロゲン、シアノ、オキソ、−ＯＲ１４、−ＮＲ１５Ｒ１６、−ＳＲ１４、−ＮＯ２、−Ｃ＝ＮＨ（ＯＲ１４）、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１４、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１４、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１４、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１５Ｒ１６、−ＮＲ１４Ｃ（Ｏ）Ｒ１５、−ＮＲ１４Ｃ（Ｏ）ＯＲ１５、−ＮＲ１４Ｃ（Ｏ）ＮＲ１５Ｒ１６、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１４、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１４、−ＮＲ１４Ｓ（Ｏ）Ｒ１５、−ＮＲ１４Ｓ（Ｏ）２Ｒ１５、−Ｓ（Ｏ）ＮＲ１５Ｒ１６、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ１５Ｒ１６、または−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１５）（ＯＲ１６）であり、各Ｒ１１、Ｒ１２、およびＲ１３が独立して、ＲＬによって任意に置換されており、
各Ｒ１４が独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ６〜Ｃ１４アリール、５〜１０員ヘテロアリール、または３〜１２員ヘテロシクリルであり、Ｒ１４の前記Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ６〜Ｃ１４アリール、５〜１０員ヘテロアリール、および３〜１２員ヘテロシクリルが独立して、ハロゲン、−ＯＨ、オキソ、シアノ、またはハロゲン、−ＯＨ、もしくはオキソによって任意に置換されているＣ１〜Ｃ６アルキルによって任意に置換されており、
Ｒ１５およびＲ１６は互いに独立して、かつ各出現において独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ６〜Ｃ１４アリール、５〜１０員ヘテロアリール、または３〜１２員ヘテロシクリルであり、Ｒ１５およびＲ１６のＣ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ６〜Ｃ１４アリール、５〜１０員ヘテロアリール、および３〜１２員ヘテロシクリルは独立して、ハロゲン、−ＯＨ、オキソ、シアノ、またはハロゲン、−ＯＨ、もしくはオキソによって任意に置換されているＣ１〜Ｃ６アルキルによって任意に置換されており、
あるいは、Ｒ１５およびＲ１６が、それらが結合する原子と一緒になって、ハロゲン、オキソ、シアノ、またはハロゲン、−ＯＨ、もしくはオキソによって任意に置換されているＣ１〜Ｃ６アルキルによって任意に置換されている３〜６員ヘテロシクリルを形成し、
Ｒｄ、Ｒｅ、Ｒｆ、Ｒｇ、Ｒｈ、Ｒｉ、Ｒｊ、およびＲｋは互いに独立して、かつ各出現において独立して、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ６〜Ｃ１４アリール、５〜１０員ヘテロアリール、３〜１２員ヘテロシクリル、−ＯＲ１４、−ＮＲ１５Ｒ１６、シアノ、またはニトロであり、
各ＲＬは独立して、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ６〜Ｃ１４アリール、５〜１０員ヘテロアリール、３〜１２員ヘテロシクリル、−ＯＲ１４、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１４、−ＮＲ１５Ｒ１６、シアノ、オキソ、またはニトロである。
実施形態２．Ｘが、−Ｃ（＝Ｏ）−である、実施形態１に記載の化合物、またはその塩。
実施形態３．Ｘが、−Ｏ−である、実施形態１に記載の化合物、またはその塩。
実施形態４．Ｘが、−ＣＨ（ＯＨ）−である、実施形態１に記載の化合物、またはその塩。
実施形態５．Ｌが、−ＮＨ−ＣＲ１Ｒ２−である、実施形態１〜４のいずれか１つに記載の化合物、またはその塩。
実施形態６．Ｌが、−ＮＨ−ＣＨ２−である、実施形態５に記載の化合物、またはその塩。
実施形態７．Ｌが、−ＮＨ−ＣＨ（ＣＨ３）−である、実施形態５に記載の化合物、またはその塩。
実施形態８．Ｌが、−ＮＨ−ＣＲ１Ｒ２−であり、Ｒ１およびＲ２が、それらが結合する炭素原子と一緒になって、３〜８員シクロアルキレンを形成する、実施形態５に記載の化合物、またはその塩。
実施形態９．Ｒ１およびＲ２が、それらが結合する炭素原子と一緒になって、シクロプロピレンを形成する、実施形態８に記載の化合物、またはその塩。
実施形態１０．Ｌが、
−ＣＲ５Ｒ６−ＣＨ（ＮＲｂＲｃ）−である、実施形態１〜４のいずれか１つに記載の化合物、またはその塩。
実施形態１１．Ｌが、−ＣＲ５Ｒ６−ＣＨ（ＮＲｂＲｃ）−であり、Ｒ６、Ｒｂ、およびＲｃが、Ｈであり、Ｒ５が、ＨまたはＣ１〜Ｃ６アルキルである、実施形態１０に記載の化合物、またはその塩。
実施形態１２．Ｌが、
【化８０】
2021506972.tif 000102
であり、＊が、Ｙ−Ｘ−部分への結合点を表し、＊＊が、分子の残部への結合点を表す、実施形態１〜４のいずれか１つに記載の化合物、またはその塩。
実施形態１３．Ｌが、
【化８１】
2021506972.tif 000103
であり、＊が、Ｙ−Ｘ−部分への結合点を表し、＊＊が、分子の残部への結合点を表す、実施形態１２に記載の化合物、またはその塩。
実施形態１４．Ｙが、Ｒ１１によって任意に置換されているＣ６〜Ｃ９アリール、Ｒ１２によって任意に置換されている６〜１０員ヘテロアリール、またはＲ１３によって任意に置換されている３〜１２員ヘテロシクリルである、実施形態１〜１３のいずれか１つに記載の化合物、またはその塩。
実施形態１５．Ｙが、Ｒ１１によって任意に置換されているＣ６〜Ｃ９アリールであり、Ｙが、フェニルまたはナフチルであるとき、Ｙのフェニルまたはナフチルが、少なくとも１つのＲ１１によって置換されている、実施形態１４に記載の化合物、またはその塩。
実施形態１６．Ｙが、ハロゲン、トリハロメチル、シアノ、および−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ２から独立して選択される１〜５のＲ１１によって置換されているフェニルである、実施形態１５に記載の化合物。
実施形態１７．Ｙが、非置換２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イルである、実施形態１５に記載の化合物。
実施形態１８．Ｙが、Ｒ１２によって任意に置換されている６〜１０員ヘテロアリールであり、Ｌが、＊−ＮＨ−ＣＨ２−＊＊であり、Ｙが、任意に置換されているキノリニルであるとき、Ｙの任意に置換されているキノリニルは、２、３、５、６、７、または８位で親構造に接続されている、実施形態１４に記載の化合物、またはその塩。
実施形態１９．そのいずれかである、実施形態１８に記載の化合物、またはその塩。
（ａ）Ｌが、＊−ＣＨ２−ＣＨ（ＮＨ２）−＊＊もしくは＊−ＣＨ（ＣＨ３）−ＣＨ（ＮＨ２）−＊＊であり、Ｙが、Ｒ１２によって任意に置換されているキノリン−４−イルであるか、または
（ｂ）Ｌが、＊−ＮＨ−ＣＨ２−＊＊であり、Ｙが、Ｒ１２によって任意に置換されているキノリン−６−イルであり、Ｒ１２が独立して、−ＯＨおよびフェニルから選択される。
実施形態２０．Ｙが、Ｒ１２によって３位で置換されているピリジン−４−イルである、実施形態１８に記載の化合物、またはその塩。
実施形態２１．Ｒ１２が、Ｃ１〜Ｃ６アルキルによって任意に置換されているピリジニルである、実施形態２０に記載の化合物、またはその塩。
実施形態２２．Ｒ１２が、Ｃ１〜Ｃ６アルキルによって任意に置換されているインドリルである、実施形態２０に記載の化合物、またはその塩。
実施形態２３．Ｒ１２が、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ハロゲン、またはＣ１〜Ｃ６アルコキシによって任意に置換されているフェニルである、実施形態２０に記載の化合物、またはその塩。
実施形態２４．Ｙが、Ｒ１２によって任意に置換されており、Ｃ６〜Ｃ１４アリールまたはＣ５〜Ｃ１０シクロアルキルに任意に融合されているピリミジン−４−イルであり、Ｃ６〜Ｃ１４アリールおよびＣ５〜Ｃの、実施形態１８の化合物、またはその塩。Ｙが、Ｃ６〜Ｃ１４アリールに融合されているピリミジン−４−イルであり、Ｃ６〜Ｃ１４アリールが、Ｒ１２によって任意に置換されている、実施形態２４に記載の化合物、またはその塩。
実施形態２６．Ｙが、任意に置換されているピリジン−３−イル、非置換キナゾリン−４−イル、または非置換６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｄ］ピリミジン−４−イルである、実施形態２４に記載の化合物、またはその塩。
実施形態２７．Ｙが、Ｒ１２によって任意に置換されており、Ｃ６〜Ｃ１４アリールに任意に融合されている２Ｈ−ピラン−２−オン−５−イルであり、Ｃ６〜Ｃ１４アリールが、Ｒ１２によって任意に置換されている、実施形態１８に記載の化合物、またはその塩。
実施形態２８．Ｙが、ハロゲンによって任意に置換されている１Ｈ−イソクロメン−１−オン−４−イルである、実施形態２７に記載の化合物、またはその塩。
実施形態２９．Ｙが、Ｒ１２によって任意に置換されており、Ｃ６〜Ｃ１４アリールまたは５〜１０員ヘテロシクリルに任意に融合されているピリジン−２（１Ｈ）−オン−５−イルであり、Ｃ６〜Ｃ１４アリールまたは５〜１０員ヘテロシクリルが互いに独立して、かつ各出現において独立して、Ｒ１２によって任意に置換されている、実施形態１８に記載の化合物、またはその塩。
実施形態３０．Ｙが、Ｃ１〜Ｃ６アルキルまたはＣ６〜Ｃ１４アリールによって任意に置換されているピリジン−２（１Ｈ）−オン−５−イルである、実施形態２９に記載の化合物、またはその塩。
実施形態３１．Ｙが、非置換７，８，９，１０−テトラヒドロピリド［１，２−ａ］アゼピン−４（６Ｈ）−オン−１−イルである、実施形態２９に記載の化合物、またはその塩。
実施形態３２．Ｙが、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ６〜Ｃ１４アリール、またはＣ３〜Ｃ８シクロアルキルによって任意に置換されているイソキノリン−１（２Ｈ）−オン−４−イルである、実施形態２９に記載の化合物、またはその塩。
実施形態３３．Ｙが、Ｒ１３によって任意に置換されている３〜１２員ヘテロシクリルである、実施形態１４に記載の化合物、またはその塩。
実施形態３４．Ｙが、非置換イソインドリン−２−イルである、実施形態３３に記載の化合物、またはその塩。
実施形態３５．Ｙが、Ｃ１〜Ｃ６アルキルまたはＣ６〜Ｃ１４アリールによって任意に置換されているピペリジン−２−オン−５−イルである、実施形態３３に記載の化合物、またはその塩。
実施形態３６．ｍ＝ｎ＝１である、実施形態１〜３５のいずれか１つに記載の化合物、またはその塩。
実施形態３７．Ｒが水素である、実施形態１〜３６のいずれか１つに記載の化合物、またはその塩。
実施形態３８．−Ｘ−Ｌ−部分が、
【化８２】
2021506972.tif 000104
からなる群から選択され、＊が、Ｙ部分への結合点を表し、＊＊が、分子の残部への結合点を表す、実施形態１に記載の化合物、またはその塩。
実施形態３９．実施形態１〜３８のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩、および薬学的に許容される担体を含む薬学的組成物。
実施形態４０．線維芽細胞活性化タンパク質（ＦＡＰ）によって媒介される疾患または障害の治療を必要とする個体においてそれを治療する方法であって、治療有効量の、実施形態１〜３８のいずれか１つに記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、または実施形態３９に記載の薬学的組成物を個体に投与することを含む、方法。
実施形態４１．増殖、組織再構築、慢性炎症、肥満、ブドウ糖不耐症、またはインスリン不感受性によって特徴付けられる疾患または障害の治療を必要とする個体においてそれを治療する方法であって、治療有効量の、実施形態１〜３８のいずれか１つに記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、または実施形態３９に記載の薬学的組成物を個体に投与することを含む、方法。
実施形態４２．疾患または障害が、乳癌、大腸癌、卵巣癌、前立腺癌、膵臓癌、腎臓癌、肺癌、黒色腫、線維肉腫、骨肉腫、結合組織肉腫、腎細胞癌、巨大細胞癌、扁平上皮癌、白血病、皮膚癌、軟組織癌、肝臓癌、胃腸癌、または腺癌である、実施形態４０または４１に記載の方法。
実施形態４３．疾患または障害が、転移性腎臓癌、慢性リンパ球性白血病、膵臓腺癌、または非小細胞肺癌である、実施形態４２に記載の方法。
実施形態４４．疾患または障害が、線維性疾患、創傷治癒、ケロイド形成、変形性関節症、関節リウマチおよび軟骨分解を伴う関連障害、アテローム性動脈硬化性疾患、クローン病、またはＩＩ型糖尿病である、実施形態４０または４１に記載の方法。
実施形態４５．腫瘍成長、腫瘍増殖、または腫瘍発生性の低減を必要とする個体においてそれを行う方法であって、実施形態１〜３８のいずれか１つに記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、または実施形態３９に記載の薬学的組成物を前記個体に投与することを含む、方法。
実施形態４６．個体におけるＦＡＰを阻害する方法であって、実施形態１〜３８のいずれか１つに記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、または実施形態３９に記載の薬学的組成物を前記個体に投与することを含む、方法。
実施形態４７．細胞におけるＦＡＰを阻害する方法であって、実施形態１〜３８のいずれか１つに記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、または実施形態３９に記載の薬学的組成物、あるいは前述のものの代謝産物を細胞に投与または送達することを含む、方法。
実施形態４８．細胞が、線維芽細胞である、実施形態４７に記載の方法。
実施形態４９．細胞が、癌関連線維芽細胞（ＣＡＦ）または反応性間質線維芽細胞である、実施形態４７または４８に記載の方法。
実施形態５０．腫瘍におけるＦＡＰを阻害する方法であって、実施形態１〜３８のいずれか１つに記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、または実施形態３９に記載の薬学的組成物、あるいは前述のものの代謝産物を腫瘍に投与または送達することを含む、方法。
実施形態５１．血漿におけるＦＡＰを阻害する方法であって、実施形態１〜３８のいずれか１つに記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、または実施形態３９に記載の薬学的組成物、あるいは前述のものの代謝産物を前記血漿に投与または送達することを含む、方法。
実施形態５２．ＦＡＰを阻害することが、ＦＡＰのエンドペプチダーゼ活性を阻害することを含む、実施形態４６〜５１のいずれか１つに記載の方法。
実施形態５３．ＦＡＰを阻害することが、ＦＡＰのエキソペプチダーゼ活性を阻害することを含む、実施形態４６〜５１のいずれか１つに記載の方法。
実施形態５４．個体における免疫応答を増強する方法であって、（ａ）免疫チェックポイント阻害剤、および（ｂ）実施形態１〜３８のいずれか１つに記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、または実施形態３９に記載の薬学的組成物を投与することを含む、方法。
実施形態５５．個体におけるＦＧＦ２１発現レベルを増加する方法であって、実施形態１〜３８のいずれか１つに記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、または実施形態３９に記載の薬学的組成物を個体に投与することを含む、方法。
実施形態５６．ＦＧＦ２１発現の誘導剤を投与することをさらに含む、実施形態５５に記載の方法。
実施形態５７．ＦＧＦ２１発現の誘導剤が、ＰＰＡＲαアゴニストである、実施形態５６に記載の方法。
実施形態５８．ＰＰＡＲαアゴニストが、フィブラートまたはフェノフィブラートである、実施形態５７に記載の方法。
実施形態５９．ヒトまたは獣医用薬剤として使用するための、実施形態３９に記載の組成物。
実施形態６０．ＦＡＰによって媒介される障害または疾患の予防および／または治療のための薬剤の製造における、実施形態１〜３８のいずれか１つに記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、または実施形態３９に記載の薬学的組成物の使用。
【実施例】
【０１８７】
合成実施例
記載される合成実施例における化学反応は、本発明のいくつかの他の化合物を調製するために容易に適合させることができ、この発明の化合物を調製するための代替的な方法は、この発明の範囲内であると見なされる。例えば、本発明による非例示的な化合物の合成は、当業者に明白な変更によって、例えば、干渉基を適切に保護することによって、記載されるもの以外の当該技術分野で既知の他の好適な試薬を利用することによって、または反応条件の日常的な変更を行うことによって成功させることができる。あるいは、本明細書に開示される、または当該技術分野で既知の他の反応は、本発明の他の化合物を調製するための適用性を有すると認識されるであろう。
【０１８８】
実施例１
（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−１−オキソ−１，２−ジヒドロイソキノリン−４−カルボキサミドの合成
【化８３】
2021506972.tif 000105
化合物１ａ：ＤＣＭ（１５ｍＬ）中１−（ｔｅｒｔ−ブチル）２−メチル（Ｓ）−４−オキソピロリジン−１，２−ジカルボキシレート（１．９ｇ、７．３６ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、ＤＡＳＴ（２．６ｍｌ、１９．８５ｍｍｏｌ、２．６当量）を３０分間にわたって０℃で、滴下で添加し、反応混合物を室温で一晩撹拌した。反応の進行をＮＭＲによって監視した。水（５０ｍＬ）を反応混合物に添加し、５分間撹拌し、ＤＣＭ（５０ｍＬ×３）で抽出した。組み合わされた有機層を飽和炭酸水素ナトリウム溶液（１００ｍＬ）、ブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮して、１−（ｔｅｒｔ−ブチル）２−メチル（Ｓ）−４，４−ジフルオロピロリジン−１，２−ジカルボキシレート（１．２５ｇ、収率６１％）を赤色の油として得た。
【０１８９】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ４．４１〜４．５３（ｍ、１Ｈ）、３．６５〜３．８４（ｍ、５Ｈ）、２．８２〜３．０１（ｍ、２Ｈ）、１．４１（ｓ、４Ｈ）、１．３５（ｓ、５Ｈ）。
【０１９０】
化合物１ｂ：ＭｅＯＨ（１．０ｍＬ）中１−（ｔｅｒｔ−ブチル）２−メチル（Ｓ）−４，４−ジフルオロピロリジン−１，２−ジカルボキシレート（２００ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、メタノール（５．０ｍＬ）中のアンモニア中７．０Ｍの溶液を０℃で、滴下で添加した。混合物を室温で１２時間撹拌させた。反応の進行をＮＭＲによって監視した。反応の完了後、溶媒を減圧下で蒸発させ、得られた粗物質をヘキサンおよびペンタンによって結晶化し、ｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−２−カルバモイル−４，４−ジフルオロピロリジン−１−カルボキシレート（１８５ｍｇ、収率９８％）を灰色がかった白色の固体として得た。
【０１９１】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．４８（ｄ、Ｊ＝１５．１６Ｈｚ、１Ｈ）、７．１６（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、４．２４（ｄｄ、Ｊ＝５．８７、８．８０Ｈｚ、１Ｈ）、３．５８〜３．８３（ｍ、２Ｈ）、２．７７（ｄｄ、Ｊ＝８．３１、１３．６９Ｈｚ、１Ｈ）、２．２０〜２．３８（ｍ、１Ｈ）、１．２６〜１．５５（ｍ、９Ｈ）。
【０１９２】
化合物１ｃ：ＤＣＭ（５．０ｍＬ）中ｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−２−カルバモイル−４，４−ジフルオロピロリジン−１−カルボキシレート（１００ｍｇ、０．４ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、ピリジン（０．３６ｍｌ、０．４８ｍｍｏｌ、１．２当量）を０℃で、滴下で添加した。反応混合物を、０℃で１５分間撹拌させた。トリフルオロ酢酸無水物（５４．７２ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ、１．２当量）を０℃で、滴下で添加した。反応混合物を室温で１時間撹拌させた。反応の進行をＮＭＲおよびＴＬＣによって監視し、反応の完了後、水（２０ｍＬ）によってクエンチし、酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出した。組み合わせた有機層を、飽和ＮａＨＣＯ３溶液（１０ｍＬ）およびブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮した。得られた粗生成物を、コンビフラッシュクロマトグラフィー（溶出剤としてヘキサン中の酢酸エチル０〜３０％）によって精製して、ｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−カルボキシレート（７０ｍｇ、収率７６％）を得た。
【０１９３】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ４．９６（ｄ、Ｊ＝８．８０Ｈｚ、１Ｈ）、３．６５〜３．８９（ｍ、２Ｈ）、２．８２〜３．０３（ｍ、１Ｈ）、２．７５（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、１．３５〜１．５６（ｍ、９Ｈ）。
【０１９４】
化合物１ｄ：アセトニトリル（１０ｍＬ）中ｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−カルボキシレート（２５０ｍｇ、１．０７ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、ジオキサン（０．５ｍＬ）中４．０Ｍ  ＨＣｌを１０分間にわたって０℃で、滴下で添加した。得られた反応混合物を室温で１６時間撹拌させた。反応の進行をＴＬＣおよびＮＭＲによって監視した。反応混合物を減圧下で濃縮し、得られた粗物質を酢酸エチルおよびヘキサン（１：１（２０ｍＬ））で洗浄して、（Ｓ）−４，４−ジフルオロピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（７０ｍｇ、収率３８％）を灰色がかった白色の固体として得た。
【０１９５】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ４．５６〜４．６７（ｍ、１Ｈ）、３．２７〜３．５０（ｍ、２Ｈ）、２．５４〜２．７５（ｍ、２Ｈ）。
【０１９６】
化合物１ｆ：ＤＭＦ（１０ｍＬ）中（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）グリシン（９２１．８ｍｇ、５．２６ｍｍｏｌ、１．５当量）およびＨＡＴＵ（２６６７ｍｇ、７．０２５ｍｍｏｌ、２．０当量）の撹拌溶液に、（Ｓ）−４，４−ジフルオロピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（５９０ｍｇ、３．５１ｍｍｏｌ、１．０当量）を添加し、１０分間撹拌した。ＤＩＰＥＡ（１．８ｍＬ、１０．５３ｍｍｏｌ、３．０当量）を添加し、反応混合物を室温で１６時間撹拌させた。反応の進行をＮＭＲおよびＴＬＣによって監視した。反応混合物を冷水（５０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出した。組み合わせた有機層を水（２５ｍＬ×４）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮した。得られた粗物質をコンビフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、ｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）カルバメート（３００ｍｇ、収率３０％）を得た。
【０１９７】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．０８（ｔ、Ｊ＝５．９２Ｈｚ、１Ｈ）、４．９８〜５．１６（ｍ、１Ｈ）、４．０９〜４．２４（ｍ、１Ｈ）、３．９３〜４．０９（ｍ、１Ｈ）、３．７７（ｄ、Ｊ＝６．１４Ｈｚ、２Ｈ）、２．７１〜２．９７（ｍ、２Ｈ）、１．３１〜１．４２（ｍ、９Ｈ）。
【０１９８】
化合物１ｇ：アセトニトリル（１０ｍＬ）中ｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）カルバメート（３００ｍｇ、１．０３ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、ジオキサン（２ｍＬ）中４．０Ｍ  ＨＣｌを１０分間にわたって０℃で、滴下で添加した。混合物を、室温で１６時間撹拌させた。反応の進行をＴＬＣおよびＮＭＲによって監視した。溶媒を減圧下で蒸発させて、残基を得、それを２０ｍＬ酢酸エチルおよびヘキサン（１：１）で洗浄して、（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−１−グリシルピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（２００ｍｇ、収率８６％）を灰色がかった白色の固体として得た。
【０１９９】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．３１（ｂｒ．ｓ．、２Ｈ）、５．１８（ｄ、Ｊ＝７．８９Ｈｚ、１Ｈ）、４．２１（ｄ、Ｊ＝１１．４０Ｈｚ、１Ｈ）、３．９７〜４．１０（ｍ、１Ｈ）、３．９４（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、３．８２（ｄ、Ｊ＝１２．２８Ｈｚ、１Ｈ）、２．８１〜２．９７（ｍ、２Ｈ）。
【０２００】
化合物１：ＤＭＦ（５ｍＬ）中１−オキソ−１，２−ジヒドロイソキノリン−４−カルボン酸（３１５ｍｇ、１．６ｍｍｏｌ、１．５当量）およびＨＡＴＵ（８４３ｍｇ、２．２２ｍｍｏｌ、２．０当量）の撹拌溶液に、（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−１−グリシルピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（２５０ｍｇ、１．１１ｍｍｏｌ、１．０当量）を添加し、１０分間撹拌した。ＤＩＰＥＡ（４２９ｍｇ、３．３３ｍｍｏｌ、３．０当量）を添加し、混合物を室温で１６時間撹拌させた。反応の進行をＮＭＲおよびＴＬＣによって監視した。反応混合物を冷水（５０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出した。組み合わせた有機層を水（５０ｍＬ×３）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮した。得られた粗生成物を逆相ＨＰＬＣによって精製して、（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−１−オキソ−１，２−ジヒドロイソキノリン−４−カルボキサミド（３８ｍｇ、収率６％）を灰色がかった白色の固体として得た。
【０２０１】
ＬＣＭＳ  ３６１［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１１．６２（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、８．６８（ｔ、Ｊ＝５．６２Ｈｚ、１Ｈ）、８．２５（ｔ、Ｊ＝８．３１Ｈｚ、２Ｈ）、７．７５（ｔ、Ｊ＝７．０９Ｈｚ、１Ｈ）、７．４７〜７．６２（ｍ、２Ｈ）、５．０３〜５．１８（ｍ、１Ｈ）、４．２２〜４．３６（ｍ、１Ｈ）、３．９９〜４．２０（ｍ、３Ｈ）、２．７７〜２．９８（ｍ、２Ｈ）。
【０２０２】
実施例２
（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−１−オキソ−２−フェニル−１，２−ジヒドロイソキノリン−４−カルボキサミドの合成
【化８４】
2021506972.tif 000106
化合物２ａ：ＤＣＭ（１０ｍＬ）中１−オキソ−１，２−ジヒドロイソキノリン−４−カルボン酸（５００ｍｇ、２．６ｍｍｏｌ、１当量）の撹拌溶液に、フェニルボロン酸（４８０ｍｇ、３．９ｍｍｏｌ、１．５当量）、酢酸銅（２３６０ｍｇ、１３ｍｍｏｌ、５当量）、分子篩、およびＥｔ３Ｎ（４ｍＬ、２６ｍｍｏｌ、１０当量）を添加した。反応混合物を室温で一晩撹拌させた。反応の進行をＴＬＣおよびＬＣＭＳによって監視した。反応の完了後、反応混合物をｃｅｌｉｔｅ（登録商標）ベッドに通し、濾液を減圧下で濃縮して粗製物を得、それを水（１００ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１００ｍＬ）で洗浄した。水性層を３Ｎ  ＨＣｌ（３０ｍＬ）でｐＨ−３に酸性化し、酢酸エチル（１００ｍＬ×２）で抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮して、１−オキソ−２−フェニル−１，２−ジヒドロイソキノリン−４−カルボン酸（６５０ｍｇ、９３％）を白色の固体として得た。
【０２０３】
ＬＣＭＳ  ２６６［Ｍ＋Ｈ］＋
化合物２：ＤＭＦ（５ｍＬ）中１−オキソ−２−フェニル−１，２−ジヒドロイソキノリン−４−カルボン酸（２００ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ、１当量）の撹拌溶液に、ＤＩＰＥＡ（０．５ｍＬ、３ｍｍｏｌ、４当量）およびＨＡＴＵ（８０２ｍｇ、２．１ｍｍｏｌ、２．８当量）を添加し、反応混合物を窒素雰囲気下で３０分間撹拌させた。（Ｓ）−１−（２−アミノアセチル）−４，４−ジフルオロピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（２０４ｍｇ、０．９０５ｍｍｏｌ、１．２当量）を、上記の混合物に添加し、室温で一晩撹拌させた。反応の進行をＴＬＣおよびＬＣＭＳによって監視した。反応の完了後、反応混合物を水（３０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１００ｍＬ×２）で抽出した。有機層を水（１００ｍＬ）、ブライン溶液（１００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮して粗化合物を得、それを逆相ＨＰＬＣによって精製して、（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−１−オキソ−２−フェニル−１，２−ジヒドロイソキノリン−４−カルボキサミド（遊離塩基）（２５ｍｇ、７％）を白色の固体化合物として得た。
【０２０４】
ＬＣＭＳ  ４３７．３［Ｍ＋Ｈ］＋
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．７８（ｔ、Ｊ＝５．９Ｈｚ、１Ｈ）、８．３５〜８．２７（ｍ、２Ｈ）、７．８２（ｑ、Ｊ＝５．３、３．２Ｈｚ、２Ｈ）、７．６６〜７．５４（ｍ、５Ｈ）、７．５１（ｐ、Ｊ＝４．６Ｈｚ、１Ｈ）、５．１５〜５．０７（ｍ、１Ｈ）、４．２９（ｄｄｄ、Ｊ＝１６．２、１１．９、４．５Ｈｚ、１Ｈ）、４．１４（ｑｄ、Ｊ＝１８．６、１７．９、７．２Ｈｚ、２Ｈ）、３．２９（ｓ、１Ｈ）、２．９９〜２．７３（ｍ、２Ｈ）。
【０２０５】
実施例３
（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−２−シクロプロピル−１−オキソ−１，２−ジヒドロイソキノリン−４−カルボキサミドの合成
【化８５】
2021506972.tif 000107
化合物３ａ：ＤＣＭ（１５ｍＬ）中１−オキソ−１，２−ジヒドロイソキノリン−４−カルボン酸（１０００ｍｇ、５．２ｍｍｏｌ、１当量）の撹拌溶液に、シクロプロピルボロン酸（６８３ｍｇ、７．９ｍｍｏｌ、１．５当量）、酢酸銅（４７３２ｍｇ、２６ｍｍｏｌ、５当量）、分子篩、およびＥｔ３Ｎ（７．２ｍＬ、５２ｍｍｏｌ、１０当量）を添加した。反応混合物を室温で一晩撹拌させた。反応の進行をＴＬＣおよびＬＣＭＳによって監視した。反応の完了後、反応混合物をｃｅｌｉｔｅベッドに通し、濾液を減圧下で濃縮して粗製物を得、それを水（１００ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１００ｍＬ）で抽出した。水性層を３Ｎ  ＨＣｌ（３０ｍＬ）でｐＨ−３に酸性化し、酢酸エチル（１００ｍＬ×２）で抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮して、２−シクロプロピル−１−オキソ−１，２−ジヒドロイソキノリン−４−カルボン酸（５５０ｍｇ、４５％）を淡い茶色の固体化合物として得た。
【０２０６】
ＬＣＭＳ  ２３０［Ｍ＋Ｈ］＋
化合物３：ＤＭＦ（５ｍＬ）中２−シクロプロピル−１−オキソ−１、２−ジヒドロイソキノリン−４−カルボン酸（２００ｍｇ、０．８７ｍｍｏｌ、１当量）の撹拌溶液に、ＤＩＰＥＡ（０．６ｍＬ、３．４８ｍｍｏｌ、４当量）およびＨＡＴＵ（９２６ｍｇ、２．４３ｍｍｏｌ、２．８当量）を添加した。反応混合物を窒素下で３０分間撹拌させた。（Ｓ）−１−（２−アミノアセチル）−４，４−ジフルオロピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（２３６ｍｇ、１．０４ｍｍｏｌ、１．２当量）を、上記の混合物に添加し、室温で一晩撹拌させた。反応の進行をＴＬＣおよびＬＣＭＳによって監視した。反応の完了後、反応混合物を水（３０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１００ｍＬ×２）で抽出した。有機層を水（１００ｍＬ）、ブライン溶液（１００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮して粗化合物を得、それを逆相ＨＰＬＣによって精製して、（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−２−シクロプロピル−１−オキソ−１，２−ジヒドロイソキノリン−４−カルボキサミド（遊離塩基）（６０ｍｇ、１７％）を白色の固体化合物として得た。
【０２０７】
ＬＣＭＳ  ４３７．３［Ｍ＋Ｈ］＋
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．７５（ｔ、Ｊ＝５．９Ｈｚ、１Ｈ）、８．２４（ｄｄ、Ｊ＝１９．７、８．１Ｈｚ、２Ｈ）、７．７８〜７．６６（ｍ、２Ｈ）、７．５５（ｔ、Ｊ＝７．５Ｈｚ、１Ｈ）、５．１４（ｄ、Ｊ＝９．２Ｈｚ、１Ｈ）、４．３７〜４．２４（ｍ、１Ｈ）、４．１４（ｑｄ、Ｊ＝１７．０、１６．５、７．９Ｈｚ、３Ｈ）、３．３５（ｓ、１Ｈ）、２．８８（ｄｄ、Ｊ＝４０．５、１３．１Ｈｚ、２Ｈ）、１．７５（ｓ、０Ｈ）、１．０５（ｄ、Ｊ＝７．３Ｈｚ、２Ｈ）、０．９８（ｓ、２Ｈ）。
【０２０８】
実施例４
（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）キノリン−６−カルボキサミドの合成
【化８６】
2021506972.tif 000108
ＤＭＦ（１５ｍｌ）中キノリン−６−カルボン酸（２３０ｍｇ、１．３２ｍｍｏｌ、１．０当量）およびＨＡＴＵ（１００３ｍｇ、２．６４ｍｍｏｌ、２．０当量）の撹拌溶液に、（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−１−グリシルピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（２５０ｍｇ、１．３２ｍｍｏｌ、１．０当量）を添加し、反応混合物を１０分間撹拌した。ＤＩＰＥＡ（５１０ｍｇ、３．９６ｍｍｏｌ、３．０当量）を添加し、反応混合物を室温で１６時間撹拌させた。反応の進行をＮＭＲおよびＴＬＣによって監視した。反応混合物を水（５０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出した。組み合わせた有機層を水（２５ｍＬ×４）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮した。得られた粗物質を逆相ＨＰＬＣによって精製して、（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）キノリン−６−カルボキサミド（１７５ｍｇ、収率３８％）を灰色がかった白色の固体として得た。
【０２０９】
ＬＣＭＳ  ３４５［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１１．６２（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、８．６８（ｔ、Ｊ＝５．６２Ｈｚ、１Ｈ）、８．２５（ｔ、Ｊ＝８．３１Ｈｚ、２Ｈ）、７．７５（ｔ、Ｊ＝７．０９Ｈｚ、１Ｈ）、７．４７〜７．６２（ｍ、２Ｈ）、５．０３〜５．１８（ｍ、１Ｈ）、４．２２〜４．３６（ｍ、１Ｈ）、３．９９〜４．２０（ｍ、３Ｈ）、２．７７〜２．９８（ｍ、２Ｈ）。
【０２１０】
実施例５
（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｄ］ピリミジン−４−カルボキサミドの合成
【化８７】
2021506972.tif 000109
ＤＭＦ（３ｍＬ）中（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−１−グリシルピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（１００ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ、１当量）の撹拌溶液に、キノリン−４−カルボン酸（７３ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ、１当量）、Ｅｔ３Ｎ（０．０６ｍＬ、０．４８ｍｍｏｌ、１．１当量）、ＨＯＢｔ（６８ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ、１当量）、ＤＭＡＰ（３ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌ、０．０５当量）、およびＥＤＣ．ＨＣｌ（９３ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ、１．１当量）を添加した。反応混合物を室温で一晩撹拌させた。反応の進行をＴＬＣおよびＬＣＭＳによって監視した。反応の完了後、反応混合物を水（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（３０ｍＬ×２）で抽出した。有機層を水（５０ｍＬ）、ブライン溶液（５０ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮して粗化合物を得、それを順相コンビフラッシュによって精製して、（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｄ］ピリミジン−４−カルボキサミド（４０ｍｇ、２７％）を白色の固体化合物として得た。
【０２１１】
ＬＣＭＳ  ３３６［Ｍ＋Ｈ］＋
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ９．０２（ｓ、１Ｈ）、５．０９〜５．０１（ｍ、１Ｈ）、４．３３〜３．９２（ｍ、４Ｈ）、３．２４（ｔ、Ｊ＝７．７Ｈｚ、２Ｈ）、２．９７（ｔ、Ｊ＝７．８Ｈｚ、２Ｈ）、２．９３〜２．７０（ｍ、２Ｈ）、２．０６（ｐ、Ｊ＝７．７Ｈｚ、２Ｈ）。
【０２１２】
実施例６
（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボキサミドの合成
【化８８】
2021506972.tif 000110
ＤＭＦ（３ｍＬ）中６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボン酸（５０ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ、１当量）の撹拌溶液に、Ｅｔ３Ｎ（０．０３ｍＬ、０．２４ｍｍｏｌ、１．１当量）、ＨＯＢｔ（３４ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ、１当量）、ＤＭＡＰ（１．３ｍｇ、０．０１ｍｍｏｌ、０．０５当量）、およびＥＤＣ．ＨＣｌ（４７ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ、１．１当量）を添加した。反応混合物を室温で一晩撹拌させた。反応の進行をＴＬＣおよびＬＣＭＳによって監視した。反応の完了後、反応混合物を水（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（３０ｍＬ×２）で抽出した。有機層を水（５０ｍＬ）、ブライン溶液（５０ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮して粗化合物を得、それを逆相ＨＰＬＣによって精製して、（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボキサミド（遊離塩基）（５０ｍｇ、５８％）を白色の固体化合物として得た。
【０２１３】
ＬＣＭＳ  ３１１［Ｍ＋Ｈ］＋
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１１．７８（ｓ、１Ｈ）、８．６０（ｑ、Ｊ＝７．８、６．０Ｈｚ、１Ｈ）、８．０３（ｄ、Ｊ＝２．７Ｈｚ、１Ｈ）、７．８７（ｄｄ、Ｊ＝９．６、２．８Ｈｚ、１Ｈ）、６．３７（ｄ、Ｊ＝９．６Ｈｚ、１Ｈ）、５．０７（ｄｄ、Ｊ＝９．３、２．８Ｈｚ、１Ｈ）、４．３２〜４．２０（ｍ、１Ｈ）、４．０７（ｑｔ、Ｊ＝１６．８、７．９Ｈｚ、３Ｈ）、２．９７〜２．７１（ｍ、２Ｈ）。
【０２１４】
実施例７
（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−カルボキサミドの合成
【化８９】
2021506972.tif 000111
ＤＭＦ（３ｍＬ）中２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−カルボン酸（１００ｍｇ、０．６１７ｍｍｏｌ、１当量）の撹拌溶液に、ＤＩＰＥＡ（０．４ｍＬ、２．４６ｍｍｏｌ、４当量）およびＨＡＴＵ（６５７ｍｇ、１．７２ｍｍｏｌ、２．８当量）を添加し、混合物を３０分間撹拌させた。（Ｓ）−１−（２−アミノアセチル）−４，４−ジフルオロピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（１６７ｍｇ、０．７４ｍｍｏｌ、１．２当量）を、上記の混合物に添加し、得られた混合物を室温で一晩撹拌させた。反応の進行をＬＣＭＳによって監視した。反応の完了後、反応混合物を水（３０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５０ｍＬ×２）で抽出した。有機層を水（５０ｍＬ）、ブライン溶液（５０ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮して粗化合物を得、それを逆相ＨＰＬＣによって精製して、（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−カルボキサミド（遊離塩基）（１００ｍｇ、４９％）を白色の固体化合物として得た。
【０２１５】
ＬＣＭＳ  ３３４．１［Ｍ＋Ｈ］＋
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．２９（ｔ、Ｊ＝５．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．１９（ｄｔ、Ｊ＝７．３、３．６Ｈｚ、２Ｈ）、７．１２（ｄｄ、Ｊ＝５．５、３．２Ｈｚ、２Ｈ）、５．０７（ｄｄ、Ｊ＝９．３、２．８Ｈｚ、１Ｈ）、４．２２（ｄｄｄ、Ｊ＝１５．８、１１．３、４．５Ｈｚ、１Ｈ）、４．１６〜４．００（ｍ、１Ｈ）、３．９７（ｔ、Ｊ＝６．０Ｈｚ、１Ｈ）、３．２９（ｄｄ、Ｊ＝１７．８、９．２Ｈｚ、２Ｈ）、３．０８（ｔ、Ｊ＝６．３Ｈｚ、４Ｈ）、２．９６〜２．７１（ｍ、２Ｈ）。
【０２１６】
実施例８
（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）イソインドリン−２−カルボキサミドの合成
【化９０】
2021506972.tif 000112
ＤＣＭ（３ｍＬ）中（Ｓ）−１−（２−アミノアセチル）−４，４−ジフルオロピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（５０ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ、１当量）の撹拌溶液に、Ｅｔ３Ｎ（０．２ｍＬ、１．１ｍｍｏｌ、５当量）を添加した。反応混合物を窒素下で１５分間撹拌させた。イソインドリン（２６ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ、１．０当量）を上記混合物に添加し、反応混合物を０℃に冷却した。ホスゲン（トルエン中２０％）（０．６ｍＬ）を上記混合物に滴下で添加した。温度を室温に上げ、室温で一晩撹拌させた。反応の進行をＬＣＭＳによって監視した。反応の完了後、反応混合物を水（３０ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（５０ｍＬ×２）で抽出した。有機層を水（５０ｍＬ）、ブライン溶液（５０ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮して粗化合物を得、それを逆相ＨＰＬＣによって精製して、（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）イソインドリン−２−カルボキサミド（遊離塩基）（２０ｍｇ、２７％）を白色の固体化合物として得た。
【０２１７】
ＬＣＭＳ  ３３５．１［Ｍ＋Ｈ］＋
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．３４（ｄｔ、Ｊ＝７．１、３．６Ｈｚ、２Ｈ）、７．３１〜７．２５（ｍ、２Ｈ）、６．７０（ｔ、Ｊ＝５．８Ｈｚ，１Ｈ）、５．０７（ｄｄ、Ｊ＝９．３、２．９Ｈｚ、１Ｈ）、４．６２（ｓ、４Ｈ）、４．２４（ｄｄｄ、Ｊ＝１６．１、１１．５、４．６Ｈｚ、１Ｈ）、４．１５〜４．０１（ｍ，１Ｈ）、３．９０（ｔ、Ｊ＝５．３Ｈｚ、２Ｈ）、．９７〜２．７１（ｍ、２Ｈ）。
【０２１８】
実施例９
（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−２−メチル−１−オキソ−１，２−ジヒドロイソキノリン−４−カルボキサミドの合成
【化９１】
2021506972.tif 000113
ＤＭＦ（３ｍＬ）中（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−１−グリシルピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（１００ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ、１当量）の撹拌溶液に、２−メチル−１−オキソ−１，２−ジヒドロイソキノリン−４−カルボン酸（８９ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ、１当量）、Ｅｔ３Ｎ（０．０６ｍＬ、０．４８ｍｍｏｌ、１．１当量）、ＨＯＢｔ（６８ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ、１当量）、ＤＭＡＰ（３ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌ、０．０５当量）、およびＥＤＣ．ＨＣｌ（９３ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ、１．１当量）を添加した。反応混合物を室温で一晩撹拌させた。反応の進行をＴＬＣおよびＬＣＭＳによって監視した。反応の完了後、反応混合物を水（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（３０ｍＬ×２）で抽出した。有機層を水（５０ｍＬ）、ブライン溶液（５０ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮して粗化合物を得、それを順相コンビフラッシュによって精製して、（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−２−メチル−１−オキソ−１，２−ジヒドロイソキノリン−４−カルボキサミド（遊離塩基）（８０ｍｇ、４８％）を白色の固体化合物として得た。
【０２１９】
ＬＣＭＳ  ３７５［Ｍ＋Ｈ］＋
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．６９（ｔ、Ｊ＝５．７Ｈｚ、１Ｈ）、８．２６（ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、１Ｈ）、８．１６（ｄ、Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）、７．８３（ｓ、１Ｈ）、７．７９〜７．７０（ｍ、１Ｈ）、７．５６（ｔ、Ｊ＝７．６Ｈｚ、１Ｈ）、５．０７（ｄｄ、Ｊ＝９．５、２．６Ｈｚ、１Ｈ）、４．２９〜３．９９（ｍ、４Ｈ）、３．５４（ｓ、３Ｈ）、２．９７〜２．７０（ｍ、２Ｈ）。
【０２２０】
実施例１０
（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−２−ヒドロキシキノリン−６−カルボキサミドの合成
【化９２】
2021506972.tif 000114
ＤＭＦ（５ｍＬ）中２−ヒドロキシキノリン−６−カルボン酸（０．２００ｇ、１．０５ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−１−グリシルピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（０．２６１ｇ、１．１６ｍｍｏｌ、１．１当量）、ＨＯＢｔ（０．１５６ｇ、１．１６ｍｍｏｌ、１．１当量）、およびＥＤＣ．ＨＣｌ（０．２２１ｇ、１．１６ｍｍｏｌ、１．１当量）を添加した。混合物を室温で１０分間撹拌させた。トリエチルアミン（０．７３ｍＬ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳおよびＴＬＣによって確認した。反応混合物を水（５０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５０ｍＬ×２）で抽出した。組み合わせた有機層を水（２０ｍＬ×４）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。得られた粗物質を逆相ＨＰＬＣによって精製して、（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−２−ヒドロキシキノリン−６−カルボキサミド（０．０１０ｇ、収率約５％）を灰色がかった白色の固体として得た。
【０２２１】
ＬＣＭＳ  ３６１．２［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）ｄ１１．９７（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、８．８０（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、８．２３（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、７．８９〜８．０４（ｍ、２Ｈ）、７．３５（ｄ、Ｊ＝８．３３Ｈｚ、１Ｈ）、６．５６（ｄ、Ｊ＝７．４５Ｈｚ、１Ｈ）、５．１０（ｄ、Ｊ＝１０．９６Ｈｚ、１Ｈ）、４．３０（ｂｒ．ｓ．、２Ｈ）、４．１５（ｄ、Ｊ＝１０．９６Ｈｚ、２Ｈ）、２．８５（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、２．８０（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）。
【０２２２】
実施例１１
（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）テレフタルアミドの合成
【化９３】
2021506972.tif 000115
ＤＭＦ（１０ｍＬ）中（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−１−グリシルピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（１３６ｍｇ、０．６０６ｍｍｏｌ、１当量）の撹拌溶液に、４−カルバモイル安息香酸（１００ｍｇ、０．６０６ｍｍｏｌ、１当量）、Ｅｔ３Ｎ（０．２ｍＬ、１．８１８ｍｍｏｌ、３当量）、ＨＯＢＴ（９０ｍｇ、０．６６６ｍｍｏｌ、１．１当量）、ＥＤＣ．ＨＣＬ（１２８ｍｇ、０．６６６ｍｍｏｌ、１．１当量）を添加した。反応混合物を室温で一晩撹拌させた。反応の進行をＴＬＣおよびＬＣＭＳによって監視した。反応の完了後、反応混合物を水（５０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５０ｍＬ×２）で抽出した。有機層を水（２０ｍＬ×４）、ブライン溶液（５０ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮して粗化合物を得、それを順相コンビフラッシュによって精製して、（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）テレフタルアミド（遊離塩基）（２５ｍｇ、収率１２％）を灰色がかった白色の固体化合物として得た。
【０２２３】
ＬＣＭＳ  ３３７［Ｍ＋Ｈ］＋
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ２．７９〜３．００（ｍ、３Ｈ）４．０４〜４．２２（ｍ、３Ｈ）４．２４〜４．４１（ｍ、１Ｈ）５．１０（ｄ、Ｊ＝７．０２Ｈｚ、１Ｈ）７．５１（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）７．８３〜８．０２（ｍ、３Ｈ）８．０９（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）８．９２（ｄ、Ｊ＝５．７０Ｈｚ、１Ｈ）。
【０２２４】
実施例１２
（Ｓ）−４−シアノ−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−（トリフルオロメチル）ベンズアミドの合成
【化９４】
2021506972.tif 000116
化合物１２ａ．ピリジン（８ｍＬ）および水（２ｍＬ）中４−メチル−２−（トリフルオロメチル）ベンゾニトリル（０．７９０ｇ、４．２７０ｍｍｏｌ、１当量）の溶液に、ＫＭｎＯ４（０．６７５ｇ、４．２７０ｍｍｏｌ、１．０当量）を添加した。得られた反応混合物を、電子レンジ反応器中で、１００℃で１時間加熱した。生成物形成を、ＬＣＭＳ（−ｖｅモード質量）によって確認した。反応の完了後、混合物をｃｅｌｉｔｅベッドに通して濾過し、酢酸エチルで洗浄した。濾液を１Ｎ  ＨＣｌで酸性化し、酢酸エチル（５０ｍＬ×２）で抽出した。組み合わせた有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶出剤としてヘキサン中０〜５０％酢酸エチル）によって精製して、４−シアノ−３−（トリフルオロメチル）安息香酸（０．２００ｇ、収率２２％）を灰色がかった白色の固体として得た。
【０２２５】
ＬＣＭＳ  ２１４．２（Ｍ−１）
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．６６（ｄ、Ｊ＝４．３８Ｈｚ、１Ｈ）、８．３２〜８．４２（ｍ、２Ｈ）。
【０２２６】
化合物１２．ＤＭＦ（５ｍＬ）中４−シアノ−３−（トリフルオロメチル）安息香酸（０．２００ｇ、０．９３０ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−１−グリシルピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（０．２１０ｇ、０．９３０ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＨＯＢｔ（０．１５１ｇ、１．１１６ｍｍｏｌ、１．２当量）、およびＥＤＣ．ＨＣｌ（０．２１２ｇ、１．１１６ｍｍｏｌ、１．２当量）を添加した。反応混合物を室温で１０分間撹拌させた。トリエチルアミン（０．４ｍＬ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳおよびＴＬＣによって確認した。反応の完了後、混合物を水（３０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５０ｍＬ×２）で抽出した。組み合わせた有機層を水（２０ｍＬ×４）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶出剤としてヘキサン中０〜５０％酢酸エチル）によって精製して、（Ｓ）−４−シアノ−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−（トリフルオロメチル）ベンズアミド（０．０６０ｇ、収率１７％）を灰色がかった白色の固体として得た。
【０２２７】
ＬＣＭＳ  ３８７．１［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）ｄ９．３５（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、８．４１（ｓ、１Ｈ）、８．３５（ｓ、２Ｈ）、５．１０（ｄ、Ｊ＝７．８９Ｈｚ、１Ｈ）、４．３１（ｔ、Ｊ＝１１．６２Ｈｚ、１Ｈ）、４．０５〜４．２２（ｍ、２Ｈ）、２．７７〜３．００（ｍ、２Ｈ）、２．７３（ｓ、１Ｈ）。
【０２２８】
実施例１３
（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−フェニルイソニコチンアミドの合成
【化９５】
2021506972.tif 000117
化合物１３ａ．ＴＨＦ（２０ｍＬ）中エチル３−ブロモイソニコチナート（１．００ｇ、４．３４ｍｍｏｌ、１．当量）の溶液に、フェニルボロン酸（０．５８４ｇ、４．７８ｍｍｏｌ、１．１当量）、Ｎａ２ＣＯ３（０．９２２ｇ、８．６８ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加し、続いてＰｄ（ＰＰｈ３）２Ｃｌ２（０．１５３ｇ、０．２１７ｍｍｏｌ．０．０５当量）を添加した。得られた反応混合物を１００℃で一晩加熱した。生成物形成を、ＬＣＭＳによって確認した。反応の完了後、混合物をｃｅｌｉｔｅベッドに通して濾過し、酢酸エチル（１００ｍＬ）で洗浄した。濾過物を減圧下で濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶出剤としてヘキサン中０〜３０％酢酸エチル）によって精製して、エチル３−フェニルイソニコチナート（０．３００ｇ、収率３１％）を灰色がかった白色の固体として得た。
【０２２９】
ＬＣＭＳ  ２２８．２［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．６８〜８．７６（ｍ、２Ｈ）、７．６７（ｄ、Ｊ＝４．８２Ｈｚ、１Ｈ）、７．４１〜７．５１（ｍ、３Ｈ）、７．３７（ｄ、Ｊ＝６．１４Ｈｚ、２Ｈ）、４．１１（ｑ、Ｊ＝７．０２Ｈｚ、２Ｈ）、０．９８（ｔ、Ｊ＝７．２４Ｈｚ、３Ｈ）。
【０２３０】
化合物１３ｂ．ＴＨＦ（５ｍＬ）および水（５ｍＬ）中エチル３−フェニルイソニコチナート（０．２５０ｇ、１．１０ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、ＬｉＯＨ（０．０５３ｇ、２．２０ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加した。混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳおよび１Ｈ  ＮＭＲ分光法によって確認した。反応混合物を水（１５ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１５ｍＬ）で洗浄した。水性層を分離し、凍結乾燥機で凍結乾燥させて、３−フェニルイソニコチン酸（０．３００ｇ、収率９９％）を灰色がかった白色の固体として得た。
【０２３１】
ＬＣＭＳ  ２００．１［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）ｄ８．３０〜８．４７（ｍ、２Ｈ）、７．５８（ｄ、Ｊ＝７．０２Ｈｚ、２Ｈ）、７．２６〜７．４５（ｍ、３Ｈ）、７．１３（ｄ、Ｊ＝４．８２Ｈｚ、１Ｈ）。
【０２３２】
化合物１３．ＤＭＦ（５ｍＬ）中３−フェニルイソニコチン酸（０．２００ｇ、１．００ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−１−グリシルピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（０．２２４ｇ、１．００ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＨＯＢｔ（０．１６３ｇ、１．２０６ｍｍｏｌ、１．２当量）、およびＥＤＣ．ＨＣｌ（０．２３０ｇ、１．２０６ｍｍｏｌ、１．２当量）を添加した。混合物を室温で１０分間撹拌させた。トリエチルアミン（０．７ｍＬ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳおよびＴＬＣによって確認した。反応の完了後、混合物を水（５０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５０ｍＬ×２）で抽出した。組み合わせた有機層を水（２０ｍＬ×４）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶出剤としてヘキサン中０〜５０％酢酸エチル）によって精製して、（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−フェニルイソニコチンアミド（０．０５０ｇ、収率１４％）を灰色がかった白色の固体として得た。
【０２３３】
ＬＣＭＳ  ３７１．２［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．９６（ｔ、Ｊ＝５．４８Ｈｚ、１Ｈ）、８．６２〜８．７０（ｍ、１Ｈ）、７．５４（ｄ、Ｊ＝６．５８Ｈｚ、１Ｈ）、７．２９〜７．５１（ｍ、３Ｈ）、５．１０（ｄ、Ｊ＝７．０２Ｈｚ、１Ｈ）、４．２１（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、３．９３〜４．１２（ｍ、２Ｈ）、２．８０（ｄ、Ｊ＝１３．５９Ｈｚ、２Ｈ）。
【０２３４】
実施例１４
（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−６−オキソ−５−フェニル−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボキサミドの合成
【化９６】
2021506972.tif 000118
ＤＭＦ（２ｍＬ）中（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−１−グリシルピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（５０ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ、１当量）の撹拌溶液に、６−オキソ−５−フェニル−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボン酸（４８ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ、１当量）、Ｅｔ３Ｎ（０．０３ｍＬ、０．２４ｍｍｏｌ、１．１当量）、ＨＯＢｔ（３４ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ、１当量）、ＤＭＡＰ（２ｍｇ、０．０１ｍｍｏｌ、０．０５当量）、およびＥＤＣ．ＨＣｌ（４６ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ、１．１当量）を添加した。反応混合物を室温で一晩撹拌させた。反応の進行をＴＬＣおよびＬＣＭＳによって監視した。反応の完了後、反応混合物を水（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（３０ｍＬ×２）で抽出した。有機層を水（５０ｍＬ）、ブライン溶液（５０ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮して粗化合物を得、それを順相コンビフラッシュによって精製して、（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−６−オキソ−５−フェニル−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボキサミド（遊離塩基）（３０ｍｇ、３５％）を灰色がかった白色の固体化合物として得た。
【０２３５】
ＬＣＭＳ  ３８７［Ｍ＋Ｈ］＋
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１２．２２（ｓ、１Ｈ）、８．７２（ｔ、Ｊ＝５．８Ｈｚ、１Ｈ）、８．１１（ｄ、Ｊ＝２．７Ｈｚ、１Ｈ）、８．０４（ｓ、１Ｈ）、７．７４（ｄ、Ｊ＝７．５Ｈｚ、２Ｈ）、７．４２（ｔ、Ｊ＝７．５Ｈｚ、２Ｈ）、７．３５（ｔ、Ｊ＝７．２Ｈｚ、１Ｈ）、５．０９（ｄｄ，Ｊ＝９．４、２．８Ｈｚ、１Ｈ）、４．２９（ｄｄｄ、Ｊ＝１５．９、１１．６、４．６Ｈｚ、１Ｈ）、４．１８〜３．９３（ｍ、３Ｈ）、２．９８〜２．７０（ｍ、２Ｈ）。
【０２３６】
実施例１５
（Ｓ）−４−シアノ−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−フルオロベンズアミドの合成
【化９７】
2021506972.tif 000119
ＤＭＦ（３ｍＬ）中（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−１−グリシルピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（１００ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ、１当量）の撹拌溶液に、４−シアノ−３−フルオロ安息香酸（７３ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ、１当量）、Ｅｔ３Ｎ（０．０６ｍＬ、０．４８ｍｍｏｌ、１．１当量）、ＨＯＢｔ（６７ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ、１当量）、ＤＭＡＰ（３ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌ、０．０５当量）、およびＥＤＣ．ＨＣｌ（９２ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ、１．１当量）を添加した。反応混合物を室温で一晩撹拌させた。反応の進行をＴＬＣおよびＬＣＭＳによって監視した。反応の完了後、反応混合物を水（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（３０ｍＬ×２）で抽出した。有機層を水（５０ｍＬ）、ブライン溶液（５０ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮して粗化合物を得、それを順相コンビフラッシュによって精製して、（Ｓ）−４−シアノ−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−フルオロベンズアミド（遊離塩基）（４５ｍｇ、３０％）を白色の固体化合物として得た。
【０２３７】
ＬＣＭＳ  ３３７［Ｍ＋Ｈ］＋
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ９．１８（ｑ、Ｊ＝８．４、５．８Ｈｚ、１Ｈ）、８．１０（ｔ、Ｊ＝７．３Ｈｚ、１Ｈ）、７．９１（ｄｄ、Ｊ＝１８．９、９．１Ｈｚ、２Ｈ）、５．１０（ｄｄ、Ｊ＝９．３、２．８Ｈｚ、１Ｈ）、４．３１（ｄｄｔ、Ｊ＝１６．３、１１．９、５．９Ｈｚ、１Ｈ）、４．２５〜４．００（ｍ，３Ｈ）、２．９９〜２．７４（ｍ、２Ｈ）。
【０２３８】
実施例１６
（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４、４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボキサミドの合成
【化９８】
2021506972.tif 000120
ＤＭＦ（３ｍＬ）中（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−１−グリシルピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（１００ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ、１当量）の撹拌溶液に、１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボン酸（６８ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ、１当量）、Ｅｔ３Ｎ（０．０６ｍＬ、０．４８ｍｍｏｌ、１．１当量）、ＨＯＢｔ（６７ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ、１当量）、ＤＭＡＰ（３ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌ、０．０５当量）、およびＥＤＣ．ＨＣｌ（９２ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ、１．１当量）を添加した。反応混合物を室温で一晩撹拌させた。反応の進行をＴＬＣおよびＬＣＭＳによって監視した。反応の完了後、反応混合物を水（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（３０ｍＬ×２）で抽出した。有機層を水（５０ｍＬ）、ブライン溶液（５０ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮して粗化合物を得、それを順相コンビフラッシュによって精製して、（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボキサミド（遊離塩基）（３０ｍｇ、２１％）を白色の固体化合物として得た。
【０２３９】
ＬＣＭＳ  ３２５［Ｍ＋Ｈ］＋
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．３３−８．６６（ｄ、Ｊ＝２．６Ｈｚ、２Ｈ）、７．９８（ｄｄ、Ｊ＝９．４、２．７Ｈｚ、１Ｈ）、６．６８（ｄ、Ｊ＝９．４Ｈｚ、１Ｈ）、５．１４（ｄｄ、Ｊ＝８．４、４．４Ｈｚ、１Ｈ）、４．２６（ｄｄ、Ｊ＝１２．１、７．１Ｈｚ、１Ｈ）、４．２２（ｓ、２Ｈ）、４．２０〜４．０６（ｍ、１Ｈ）、３．６５（ｓ、３Ｈ）、３．０６〜２．８２（ｍ、２Ｈ）。
【０２４０】
実施例１７
（Ｓ）−４−シアノ−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）ベンズアミドの合成
【化９９】
2021506972.tif 000121
ＤＭＦ（３ｍＬ）中（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−１−グリシルピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（１００ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ、１当量）の撹拌溶液に、４−シアノ安息香酸（６８ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ、１当量）、Ｅｔ３Ｎ（０．０６ｍＬ、０．４８ｍｍｏｌ、１．１当量）、ＨＯＢｔ（６７ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ、１当量）、ＤＭＡＰ（３ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌ、０．０５当量）、およびＥＤＣ．ＨＣｌ（９２ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ、１．１当量）を添加した。反応混合物を室温で一晩撹拌させた。反応の進行をＴＬＣおよびＬＣＭＳによって監視した。反応の完了後、反応混合物を水（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（３０ｍＬ×２）で抽出した。有機層を水（５０ｍＬ）、ブライン溶液（５０ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮して粗化合物を得、それを順相コンビフラッシュによって精製して、（Ｓ）−４−シアノ−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）ベンズアミド（遊離塩基）（３５ｍｇ、２５％）を白色の固体化合物として得た。
【０２４１】
ＬＣＭＳ  ３１９［Ｍ＋Ｈ］＋
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ９．１０（ｑ、Ｊ＝７．５、５．８Ｈｚ、１Ｈ）、８．０１（ｑ、Ｊ＝８．０Ｈｚ、５Ｈ）、５．１０（ｄｄ、Ｊ＝９．４、２．８Ｈｚ、１Ｈ）、４．３０（ｄｄｄ、Ｊ＝１６．１、１１．８、４．８Ｈｚ、１Ｈ）、４．１４（ｑｔ、Ｊ＝１７．２、８．４Ｈｚ、３Ｈ）、１７．９、１４．３、９．９Ｈｚ、２Ｈ）。
【０２４２】
実施例１８
（Ｓ）−４−シアノ−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−２−（トリフルオロメチル）ベンズアミドの合成
【化１００】
2021506972.tif 000122
ＤＭＦ（１０ｍＬ）中３−フェニルイソニコチン酸（０．１００ｇ、０．４６ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−１−グリシルピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（０．１０４ｇ、０．４６ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＨＯＢｔ（０．０６８ｇ、０．５０ｍｍｏｌ、１．１当量）、およびＥＤＣ．ＨＣｌ（０．９６ｇ、０．５０ｍｍｏｌ、１．１当量）を添加した。混合物を室温で１０分間撹拌させた。トリエチルアミン（０．１９ｍＬ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳおよびＴＬＣによって確認した。反応混合物を水で希釈し、酢酸エチル（５０ｍＬ×２）で抽出した。組み合わせた有機抽出物を水（２０ｍＬ×４）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。得られた粗生成物を逆相ＨＰＬＣによって精製して、（Ｓ）−４−シアノ−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−２−（トリフルオロメチル）ベンズアミド（０．０３０ｇ、収率１７％）を灰色がかった白色の固体として得た。
【０２４３】
ＬＣＭＳ  ３８７．２［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ９．０５（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、８．４０（ｓ、１Ｈ）、８．２８（ｄ、Ｊ＝７．４５Ｈｚ、１Ｈ）、７．７８（ｄ、Ｊ＝７．８９Ｈｚ、１Ｈ）、５．１２（ｄ、Ｊ＝７．０２Ｈｚ、１Ｈ）、４．２７（ｔ、Ｊ＝１５．１３Ｈｚ、１Ｈ）、４．０１〜４．２１（ｍ、３Ｈ）、２．７２〜２．９９（ｍ、３Ｈ）。
【０２４４】
実施例１９
（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−４−フェニルキノリン−６−カルボキサミドの合成
【化１０１】
2021506972.tif 000123
化合物１９ａ．ＭｅＯＨ（１０ｍＬ）中キノリン−６−カルボン酸（１．００ｇ、５．７ｍｍｏｌ、１当量）の溶液に、ＳＯＣｌ２（２．０６ｍＬ、１７．３０ｍｍｏｌ、３．０当量）を０℃で添加した。反応混合物を５０℃で一晩加熱した。反応（ＴＬＣ）の完了後、混合物を飽和ＮａＨＣＯ３で塩基性化し、ＤＣＭ（１００ｍＬ×２）で抽出した。組み合わせた有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮して、メチルキノリン−６−カルボキシレート（１．００ｇ、収率９８％）を茶色の固体として得た。
【０２４５】
ＬＣＭＳ  １８８．２［Ｍ＋Ｈ］＋
化合物１９ｂ．ＤＣＭ（３０ｍＬ）中メチルキノリン−６−カルボキシレート（１．００ｇ、５．３ｍｍｏｌ、１当量）の溶液に、ｍＣＰＢＡ（１．８４ｇ、１０．６ｍｍｏｌ、２当量）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌させた。反応（ＴＬＣ）の完了後、混合物を飽和ＮａＨＣＯ３（４０ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（１００ｍＬ×２）で抽出した。組み合わせた有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮して残基を得、それを酢酸エチル中で結晶化して、６−（メトキシカルボニル）キノリン１−オキシド（１．００ｇ、収率９２％）を得た。
【０２４６】
ＬＣＭＳ  ２０４．２［Ｍ＋Ｈ］＋
化合物１９ｃ．６−（メトキシカルボニル）キノリン１−オキシド（０．９００ｇ、４．４ｍｍｏｌ  １当量）を、窒素雰囲気下で５０ｍＬ  ＲＢ中に取り、これにＰＯＣｌ３（５ｍＬ）を添加し、次いで、得られた混合物を窒素雰囲気化で２時間撹拌した。反応（ＴＬＣ）の完了後、混合物を減圧下で濃縮した。得られた残基をＤＣＭ（１００ｍＬ）中に溶解し、飽和ＮａＨＣＯ３（２５ｍＬ×３）で洗浄した。有機層を分離し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮して粗物質を得、それをフラッシュクロマトグラフィー（溶出剤としてヘキサン中０〜２０％酢酸エチル）によって精製してメチル４−クロロキノリン−６−カルボキシレート（０．３００ｇ、収率３０％）を得た。
【０２４７】
ＬＣＭＳ  ２２２．１［Ｍ＋Ｈ］＋
化合物１９ｄ．ＴＨＦ（５ｍＬ）中メチル４−クロロキノリン−６−カルボキシレート（３００ｍｇ、１．３０ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、フェニルボロン酸（１９８ｍｇ、１．６０ｍｍｏｌ、１．２当量）、Ｎａ２ＣＯ３（２８７ｍｇ、２．７０ｍｍｏｌ、２．０当量）、および触媒量のＰｄ（ＰＰｈ３）２Ｃｌ２（４７ｍｇ、０．０６９ｍｍｏｌ、０．０５当量）を添加した。得られた反応混合物を１００℃で一晩加熱した。生成物形成を、ＬＣＭＳによって確認した。反応の完了後、反応混合物を水（３０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５０ｍＬ×２）で抽出した。組み合わせた有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮して粗物質を得、それをフラッシュクロマトグラフィー（溶出剤としてヘキサン中０〜２０％酢酸エチル）によって精製して、メチル４−フェニルキノリン−６−カルボキシレート（０．３００ｇ、収率８４％）を得た。
【０２４８】
ＬＣＭＳ  ２６４．１［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ９．０８（ｄ、Ｊ＝４．３８Ｈｚ、１Ｈ）、８．５３（ｓ、１Ｈ）、８．０８〜８．３５（ｍ、２Ｈ）、７．４８〜７．６９（ｍ、５Ｈ）、３．８６（ｓ、３Ｈ）。
【０２４９】
化合物１９ｅ．ＴＨＦ（５ｍＬ）および水（５ｍＬ）中エチル３−フェニルイソニコチナート（０．３６０ｇ、１．３０ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、ＬｉＯＨ（０．０９８ｇ、４．１０ｍｍｏｌ、３．０当量）を添加した。混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳおよび１Ｈ  ＮＭＲによって確認した。反応混合物を濃縮して、４−フェニルキノリン−６−カルボン酸（０．４２０ｇ、収率１００％）を灰色がかった白色の固体として得た。
【０２５０】
ＬＣＭＳ  ２４９．９［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．８８（ｄ、Ｊ＝４．３８Ｈｚ、１Ｈ）、８．３７（ｓ、１Ｈ）、８．２７（ｄ、Ｊ＝８．７７Ｈｚ、１Ｈ）、７．９５（ｄ、Ｊ＝８．７７Ｈｚ、１Ｈ）、７．４９〜７．６５（ｍ、４Ｈ）、７．３９（ｄ、Ｊ＝４．３８Ｈｚ、１Ｈ）。
【０２５１】
化合物１９．ＤＭＦ（５ｍＬ）中４−フェニルキノリン−６−カルボン酸（０．２００ｇ、０．８０ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−１−グリシルピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（０．１８０ｇ、０．８０ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＨＯＢｔ（０．１１８ｇ、０．８８ｍｍｏｌ、１．１当量）、およびＥＤＣ．ＨＣｌ（０．１６８ｇ、０．８８ｍｍｏｌ、１．２当量）を添加した。混合物を室温で１０分間撹拌させた。トリエチルアミン（０．４ｍＬ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳおよびＴＬＣによって確認した。反応の完了後、混合物を水（５０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５０ｍＬ×２）で抽出した。組み合わせた有機抽出物を水（２０ｍＬ×４）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。得られた粗生成物を逆相ＨＰＬＣによって精製して、（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−４−フェニルキノリン−６−カルボキサミド（０．０３０ｇ、収率９％）を灰色がかった白色の固体として得た。
【０２５２】
ＬＣＭＳ  ４２１．２［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ９．０４（ｄ、Ｊ＝４．３８Ｈｚ、２Ｈ）、８．４３（ｓ、１Ｈ）、８．１２〜８．２８（ｍ、２Ｈ）、７．６１（ｓ、３Ｈ）、７．５５（ｄ、Ｊ＝４．３８Ｈｚ、２Ｈ）、５．０９（ｄ、Ｊ＝８．３３Ｈｚ、１Ｈ）、４．２９（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、４．０４〜４．２３（ｍ、２Ｈ）、２．９０（ｂｒ．ｓ．、２Ｈ）、２．８１（ｄ、Ｊ＝１７．５４Ｈｚ、２Ｈ）。
【０２５３】
実施例２０
（２Ｒ，３Ｒ）−Ｎ−（２−（（Ｓ）−２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−１−エチル−６−オキソ−２−フェニルピペリジン−３−カルボキサミドの合成
【化１０２】
2021506972.tif 000124
ＤＭＦ（５ｍＬ）中（２Ｒ，３Ｒ）−１−エチル−６−オキソ−２−フェニルピペリジン−３−カルボン酸（０．２００ｇ、０．８０９ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−１−グリシルピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（０．２００ｇ、０．８９０ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＨＯＢｔ（０．１６３ｇ、１．２１ｍｍｏｌ、１．５当量）、およびＥＤＣ．ＨＣｌ（０．２３０ｇ、１．２１ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加した。混合物を室温で１０分間撹拌させた。トリエチルアミン（０．４ｍＬ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳおよびＴＬＣによって確認した。反応混合物を水で希釈し、酢酸エチル（５０ｍＬＸ２）で抽出した。組み合わせた有機層を水（２０ｍＬ×４）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。得られた粗生成物を逆相ＨＰＬＣによって精製して、（２Ｒ，３Ｒ）−Ｎ−（２−（（Ｓ）−２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−１−エチル−６−オキソ−２−フェニルピペリジン−３−カルボキサミド（０．０４０ｇ、収率１２％）を灰色がかった白色の固体として得た。
【０２５４】
ＬＣＭＳ  ４１９．３［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．２６（ｄ、Ｊ＝４．８２Ｈｚ、１Ｈ）、７．１７〜７．４３（ｍ、４Ｈ）、５．０７（ｔ、Ｊ＝９．６５Ｈｚ、１Ｈ）、４．８８（ｄ、Ｊ＝５．２６Ｈｚ、１Ｈ）、４．１７（ｔ、Ｊ＝１２．０６Ｈｚ、１Ｈ）、３．９５〜４．１１（ｍ、２Ｈ）、３．７７〜３．９０（ｍ、１Ｈ）、３．５８〜３．７４（ｍ、１Ｈ）、２．８７（ｄｄ、Ｊ＝５．２６、９．６５Ｈｚ、１Ｈ）、２．７２〜２．８３（ｍ、２Ｈ）、２．２７〜２．４６（ｍ、３Ｈ）、１．８４（ｄ、Ｊ＝６．５８Ｈｚ、２Ｈ）、０．９２（ｔ、Ｊ＝６．３６Ｈｚ、３Ｈ）。
【０２５５】
実施例２１
（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−４−オキソ−４，６，７，８，９，１０−ヘキサヒドロピリド［１，２−ａ］アゼピン−１−カルボキサミドの合成
【化１０３】
2021506972.tif 000125
ＤＭＦ（２ｍＬ）中４−オキソ−４，６，７，８，９，１０−ヘキサヒドロピリド［１，２−ａ］アゼピン−１−カルボン酸（０．０５０ｇ、０．２４１ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−１−グリシルピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（０．０６０ｇ、０．２６５ｍｍｏｌ、１．１当量）、ＤＭＡＰ（０．００２ｇ、０．０１２０ｍｍｏｌ、０．０５当量）、ＨＯＢｔ（０．０５０ｇ、０．３６２ｍｍｏｌ、１．５当量）、およびＥＤＣ．ＨＣｌ（０．０７０ｇ、０．３６２ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加した。混合物を室温で１０分間撹拌させた。Ｅｔ３Ｎ（０．１ｍＬ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳおよびＴＬＣによって確認した。反応混合物を水で希釈し、酢酸エチル（２５ｍＬ×２）で抽出した。組み合わせた有機抽出物を水（１０ｍＬ×４）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。得られた粗生成物を逆相ＨＰＬＣによって精製して、（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−４−オキソ−４，６，７，８，９，１０−ヘキサヒドロピリド［１，２−ａ］アゼピン−１−カルボキサミド（０．０１５ｇ、収率１７％）を灰色がかった白色の固体として得た。
【０２５６】
ＬＣＭＳ  ３７９．３［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．５１（ｄ、Ｊ＝５．７０Ｈｚ、１Ｈ）、７．３７（ｄ、Ｊ＝９．２１Ｈｚ、１Ｈ）、６．３０（ｄ、Ｊ＝９．６５Ｈｚ、１Ｈ）、５．１０（ｄ、Ｊ＝７．０２Ｈｚ、１Ｈ）、４．３４（ｂｒ．ｓ．、２Ｈ）、４．１７〜４．３１（ｍ、２Ｈ）、３．９６〜４．１５（ｍ、３Ｈ）、３．０９（ｂｒ．ｓ．、２Ｈ）、２．７２〜２．９２（ｍ、２Ｈ）、１．６９（ｂｒ．ｓ．、３Ｈ）、１．５９（ｂｒ．ｓ．、２Ｈ）。
【０２５７】
実施例２２
（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−１−オキソ−１Ｈ−イソクロメン−４−カルボキサミドの合成
【化１０４】
2021506972.tif 000126
ＤＭＦ（５ｍＬ）中１−オキソ−１Ｈ−イソクロメン−４−カルボン酸（０．２００ｇ、１．０４ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−１−グリシルピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（０．２３５ｇ、１．０４ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＨＯＢｔ（０．１６８ｇ、１．２４ｍｍｏｌ、１．２当量）、およびＥＤＣ．ＨＣｌ（０．２３５ｇ、１．２４ｍｍｏｌ、１．２当量）を添加した。混合物を室温で１０分間撹拌させた。トリエチルアミン（０．５ｍＬ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳおよびＴＬＣによって確認した。反応混合物を水で希釈し、酢酸エチル（５０ｍＬ×２）で抽出した。組み合わせた有機抽出物を水（２０ｍＬ×４）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。得られた粗生成物を逆相ＨＰＬＣによって精製して、（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−１−オキソ−１Ｈ−イソクロメン−４−カルボキサミド（０．０３０ｇ、収率１５％）を灰色がかった白色の固体として得た。
【０２５８】
ＬＣＭＳ  ３６２．２［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ  ４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．９０（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、８．２２（ｄ、Ｊ＝７．０２Ｈｚ、１Ｈ）、８．０５（ｄ、Ｊ＝７．８９Ｈｚ、１Ｈ）、７．９３（ｓ、２Ｈ）、７．５７〜７．７４（ｍ、１Ｈ）、５．１４（ｄ、Ｊ＝６．５８Ｈｚ、１Ｈ）、４．０１〜４．２２（ｍ、２Ｈ）、２．８３（ｄ、Ｊ＝１７．９８Ｈｚ、２Ｈ）、１．８７（ｓ、２Ｈ）。
【０２５９】
実施例２３
（Ｓ）−Ｎ−（１−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−カルボニル）シクロプロピル）−１−オキソ−１，２−ジヒドロイソキノリン−４−カルボキサミドの合成
【化１０５】
2021506972.tif 000127
化合物２３ａ．ＤＭＦ（２ｍＬ）中１−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）シクロプロパン−１−カルボン酸（２０１ｍｇ、１．００ｍｍｏｌ、１当量）の撹拌溶液に、ＨＡＴＵ（７６０ｍｇ、２．００ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加し、続いて（Ｓ）−４，４−ジフルオロピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（３０５ｍｇ、１．００ｍｍｏｌ、１．０当量）を添加した。反応混合物を室温で１０分間撹拌させた。ＤＩＰＥＡ（０．８６ｍＬ、５．００ｍｍｏｌ、５．０当量）を添加し、反応混合物を室温で一晩撹拌させた。反応の進行を１Ｈ  ＮＭＲによって監視した。反応の完了後、反応混合物を水（２５ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５０ｍＬ×２）で抽出した。組み合わせた有機層を水（２５ｍＬ×４）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶出剤としてヘキサン中０〜５０％酢酸エチル）によって濃縮して、ｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−（１−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−カルボニル）シクロプロピル）カルバメート（３００ｍｇ、収率９５％）を灰色がかった白色の固体として得た。
【０２６０】
ＬＣＭＳ  ３１５．２［Ｍ＋Ｈ］＋
化合物２３ｂ．ＭｅＣＮ（５ｍＬ）中ｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−（１−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−カルボニル）シクロプロピル）カルバメート（４６８ｍｇ、１．４８ｍｍｏｌ、１当量）の撹拌溶液に、ｐＴｓＯＨ（３８３ｍｇ、２．２２ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加した。反応混合物を室温で一晩撹拌させた。反応の進行をＮＭＲによって監視した。反応の完了後、溶媒を減圧下で除去して、（Ｓ）−１−（１−アミノシクロプロパン−１−カルボニル）−４，４−ジフルオロピロリジン−２−カルボニトリル４−メチルベンゼンスルホナート（８９８ｍｇ、ｑａｎｔ．）を白色の固体化合物として得た。
【０２６１】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．６６（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、７．４２〜７．５４（ｍ、２Ｈ）、７．０９〜７．２０（ｍ、Ｊ＝７．８９Ｈｚ、２Ｈ）、５．１０〜５．２８（ｍ、１Ｈ）、４．１４〜４．３１（ｍ、１Ｈ）、３．８７〜４．１１（ｍ、１Ｈ）、２．７４〜３．０３（ｍ、１Ｈ）、２．２９（ｓ、３Ｈ）、１．４２〜１．６７（ｍ、１Ｈ）、１．３１〜１．４１（ｍ、１Ｈ）。
【０２６２】
化合物２３．ＤＭＦ（５ｍＬ）中１−オキソ−１，２−ジヒドロイソキノリン−４−カルボン酸（０．３９８ｇ、２．１０ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、（Ｓ）−１−（１−アミノシクロプロパン−１−カルボニル）−４，４−ジフルオロピロリジン−２−カルボニトリル４−メチルベンゼンスルホナート（０．８１６ｇ、２．１０ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＨＯＢｔ（０．３１１ｇ、２．３１ｍｍｏｌ、１．１当量）、およびＥＤＣ．ＨＣｌ（０．４４１ｇ、２．３１ｍｍｏｌ、１．１当量）を添加した。混合物を室温で１０分間撹拌させた。トリエチルアミン（０．８７ｍＬ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳおよびＴＬＣによって確認した。反応混合物を水（３０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５０ｍＬ×２）で抽出した。組み合わせた有機層を水（２０ｍＬ×４）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。得られた粗生成物をＭｅＯＨ中で結晶化し、（Ｓ）−Ｎ−（１−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−カルボニル）シクロプロピル）−１−オキソ−１，２−ジヒドロイソキノリン−４−カルボキサミド（０．１４０ｇ、収率１７％）を灰色がかった白色の固体として得た。
【０２６３】
ＬＣＭＳ  ３８７．２［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１１．７９（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、１０．７２（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、８．２４（ｄ、Ｊ＝７．８９Ｈｚ、１Ｈ）、７．７６（ｔ、Ｊ＝７．６７Ｈｚ、１Ｈ）、７．５４（ｔ、Ｊ＝７．４５Ｈｚ、１Ｈ）、５．４０（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、４．２２（ｄ、Ｊ＝１１．４０Ｈｚ、１Ｈ）、３．６８（ｄ、Ｊ＝１１．８４Ｈｚ、１Ｈ）、２．８７（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、２．７８（ｄ、Ｊ＝１４．０３Ｈｚ、１Ｈ）、１．６５（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、１．４０（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、１．１５〜１．２３（ｍ、１Ｈ）、１．１２（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）。
【０２６４】
実施例２４
（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−シクロプロピルイソニコチンアミドの合成
【化１０６】
2021506972.tif 000128
化合物２４ａ．トルエン（３０ｍＬ）中エチル３−ブロモイソニコチナート（０．５ｇ、２．３２ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、シクロプロピルボロン酸（０．３９８ｇ、４．６３ｍｍｏｌ、２．０当量）、Ｋ２ＣＯ３（０．９５８ｇ、６．９５ｍｍｏｌ、３．０当量）を添加し、得られた反応混合物をＮ２ガスで１０分間パージし、続いてＰｄ（ＰＰｈ３）４（０．１３３ｇ、０．１１６ｍｍｏｌ、０．０５当量）を添加した。得られた反応混合物を１００℃で一晩加熱した。生成物形成を、ＬＣＭＳによって確認した。反応の完了後、混合物をｃｅｌｉｔｅ（登録商標）ベッドに通して濾過し、酢酸エチル（１００ｍＬ）で洗浄した。濾過物を減圧下で濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶出剤としてヘキサン中０〜１５％酢酸エチル）によって精製して、メチル３−シクロプロピルイソニコチナート（０．３６０ｇ、収率８７．８％）を黄色の液体として得た。
【０２６５】
ＬＣＭＳ  １７８．２［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．５１（ｄ、Ｊ＝５．２６Ｈｚ、１Ｈ）、８．３７（ｓ、１Ｈ）、７．５６（ｄ、Ｊ＝４．８２Ｈｚ、１Ｈ）、３．８９（ｓ、３Ｈ）、２．３５（ｄ、Ｊ＝１４．０３Ｈｚ、１Ｈ）、０．９６〜１．０４（ｍ、２Ｈ）、０．８０〜０．８７（ｍ、２Ｈ）。
【０２６６】
化合物２４ｂ．ＴＨＦ（１０ｍＬ）および水（５ｍＬ）中メチル３−シクロプロピルイソニコチナート（０．４２０ｇ、２．３７ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、ＬｉＯＨ（０．１７０ｇ、７．１１ｍｍｏｌ、および３．０当量）を添加した。混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳおよび１Ｈ  ＮＭＲによって確認した。反応混合物を減圧下で濃縮し、水（１５ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１５ｍＬ）で洗浄した。水性層を分離し、凍結乾燥機で凍結乾燥させて、３−シクロプロピルイソニコチン酸（０．３８０ｇ、収率１００％）を灰色がかった白色の固体として得た。
【０２６７】
ＬＣＭＳ  １６４．１［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．５４（ｄ、Ｊ＝４．８２Ｈｚ、１Ｈ）、８．３８（ｓ、１Ｈ）、７．６６（ｄ、Ｊ＝５．２６Ｈｚ、１Ｈ）、２．４２〜２．４６（ｍ、１Ｈ）、０．９９〜１．０７（ｍ、２Ｈ）、０．７８〜０．９４（ｍ、２Ｈ）。
【０２６８】
化合物２４．ＤＭＦ（５ｍＬ）中３−シクロプロピルイソニコチン酸（０．２００ｇ、１．２２ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−１−グリシルピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（０．３３ｇ、１．４６ｍｍｏｌ、１．２当量）およびＴＢＴＵ（０．５８７ｇ、１．８３ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加し、混合物を室温で１０分間撹拌し続けた。Ｎ−メチルモルホリン（０．４ｍＬ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳおよびＴＬＣによって確認した。反応の完了後、混合物を水（５０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５０ｍＬ×２）で抽出した。組み合わせた有機抽出物を水（２０ｍＬ×４）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶出剤としてヘキサン中０〜５０％酢酸エチル）によって精製し、続いて逆相精製して、（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−シクロプロピルイソニコチンアミド（０．０６５ｇ、収率１６％）を白色の固体として得た。
【０２６９】
ＬＣＭＳ  ３３５．２［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．８５（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、８．４４（ｄ、Ｊ＝４．８２Ｈｚ、１Ｈ）、８．２４（ｓ、１Ｈ）、７．２６（ｄ、Ｊ＝４．８２Ｈｚ、１Ｈ）、５．１２（ｄ、Ｊ＝８．３３Ｈｚ、１Ｈ）、４．２７（ｄ、Ｊ＝１１．８４Ｈｚ、１Ｈ）、４．０５〜４．１７（ｍ、２Ｈ）、２．９０（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、２．８１（ｄ、Ｊ＝１７．１０Ｈｚ、２Ｈ）、２．２２（ｄ、Ｊ＝５．２６Ｈｚ、１Ｈ）、０．９７（ｄ、Ｊ＝８．３３Ｈｚ、２Ｈ）、０．７４〜０．９０（ｍ、２Ｈ）。
【０２７０】
実施例２５
Ｎ−（１−（（Ｓ）−２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−１−オキソプロパン−２−イル）−１−オキソ−１，２−ジヒドロイソキノリン−４−カルボキサミドの合成
【化１０７】
2021506972.tif 000129
化合物２５ａ．ＤＭＦ（３ｍＬ）中（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アラニン（１４０ｍｇ、０．７３ｍｍｏｌ、１当量）の撹拌溶液に、ＨＡＴＵ（５５５ｍｇ、１．４６ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加し、続いて（Ｓ）−４，４−ジフルオロピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（２２５ｍｇ、０．７３ｍｍｏｌ、１．０当量）を添加した。反応混合物を室温で１０分間撹拌させた。ＤＩＰＥＡ（０．６３ｍＬ、３．６５ｍｍｏｌ、５．０当量）を添加し、反応混合物を室温で一晩撹拌させた。反応の進行を１Ｈ  ＮＭＲによって監視した。反応の完了後、反応混合物を水（２５ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５０ｍＬ×２）で抽出した。組み合わせた有機層を水（２５ｍＬ×４）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶出剤としてヘキサン中０〜５０％酢酸エチル）によって濃縮して、ｔｅｒｔ−ブチル（１−（（Ｓ）−２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−１−オキソプロパン−２−イル）カルバメート（２８０ｍｇ、定量的）を灰色がかった白色の固体として得た。
【０２７１】
ＬＣＭＳ  ３０４．２．２［Ｍ＋Ｈ］＋
化合物２５ｂ．ＡＣＮ（５ｍＬ）中ｔｅｒｔ−ブチル（１−（（Ｓ）−２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−１−オキソプロパン−２−イル）カルバメート（５００ｍｇ、１．６５ｍｍｏｌ、１当量）の撹拌溶液に、ＰＴＳＡ（４２５ｍｇ、２．４０ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加した。反応混合物を室温で一晩混合物を撹拌した。反応の進行をＮＭＲによって監視した。反応の完了後、溶媒を減圧下で除去して、（２Ｓ）−１−アラニル−４，４−ジフルオロピロリジン−２−カルボニトリル４−メチルベンゼンスルホナート（６３０ｍｇ、定量的）を白色の固体化合物として得た。
【０２７２】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．２２（ｂｒ．ｓ．、２Ｈ）、７．４４〜７．５２（ｍ、２Ｈ）、７．０６〜７．１７（ｍ、Ｊ＝７．８９Ｈｚ、２Ｈ）、５．１２（ｄ、Ｊ＝９．２１Ｈｚ、１Ｈ）、４．２１（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、３．６１（ｄ、Ｊ＝４．３８Ｈｚ、１Ｈ）、３．０７〜３．２６（ｍ、１Ｈ）、２．７７〜２．９６（ｍ、１Ｈ）、２．２９（ｓ、３Ｈ）、１．２０〜１．２６（ｍ、３Ｈ）。
【０２７３】
化合物２５．ＤＭＦ（５ｍＬ）中１−オキソ−１，２−ジヒドロイソキノリン−４−カルボン酸（０．１００ｇ、０．５３ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、（２Ｓ）−１−アラニル−４，４−ジフルオロピロリジン−２−カルボニトリル４−メチルベンゼンスルホナート（０．２００ｇ、０．５３ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＨＯＢｔ（０．０７８ｇ、０．５８ｍｍｏｌ、１．１当量）、およびＥＤＣ．ＨＣｌ（０．１１１ｇ、０．５８ｍｍｏｌ、１．１当量）を添加した。混合物を室温で１０分間撹拌させた。トリエチルアミン（０．２２ｍＬ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳおよびＴＬＣによって確認した。反応混合物を水で希釈し、酢酸エチル（５０ｍＬ×２）で抽出した。組み合わせた有機抽出物を水（２０ｍＬ×４）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。得られた粗生成物を純ＭｅＯＨ中で結晶化し、Ｎ−（１−（（Ｓ）−２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−１−オキソプロパン−２−イル）−１−オキソ−１，２−ジヒドロイソキノリン−４−カルボキサミド（０．１２０ｇ、収率６０％）を灰色がかった白色の固体として得た。
【０２７４】
ＬＣＭＳ  ３７５．３［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１１．６４（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、８．７７（ｄｄ、Ｊ＝６．８０、１８．２０Ｈｚ、１Ｈ）、８．２２（ｄ、Ｊ＝７．８９Ｈｚ、２Ｈ）、７．７３（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、７．４５〜７．６５（ｍ、２Ｈ）、４．９８〜５．１６（ｍ、１Ｈ）、４．６２（ｄ、Ｊ＝５．７０Ｈｚ、１Ｈ）、４．３１（ｄ、Ｊ＝１７．５４Ｈｚ、２Ｈ）、２．９２（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、２．８５（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、１．２６〜１．４４（ｍ、３Ｈ）。
【０２７５】
実施例２６
（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−６−フルオロ−１−オキソ−１，２−ジヒドロイソキノリン−４−カルボキサミドの合成
【化１０８】
2021506972.tif 000130
ＤＭＦ（１２ｍＬ）中６−フルオロ−１−オキソ−１，２−ジヒドロイソキノリン−４−カルボン酸（０．８０ｇ、０．３８６ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−１−グリシルピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（０．１７３ｇ、０．７７２ｍｍｏｌ、２．０当量）およびＴＢＴＵ（０．１３６ｇ、０．４２５ｍｍｏｌ、１．１当量）を添加した。混合物を室温で１０分間撹拌させた。Ｎ−メチルモルホリン（０．３ｍＬ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳおよびＴＬＣによって確認した。反応の完了後、混合物を水（１５ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１５ｍＬ×２）で抽出した。組み合わせた有機層を水（２０ｍＬ×４）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶出剤としてＤＣＭ中０〜５％メタノール）によって精製して、（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−６−フルオロ−１−オキソ−１，２−ジヒドロイソキノリン−４−カルボキサミド（０．０１５ｇ、収率１０．３％）を灰色がかった白色の固体として得た。
【０２７６】
ＬＣＭＳ  ３７９．２［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１１．７４（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、８．７２（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、８．２９（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、８．０７（ｄ、Ｊ＝１３．１６Ｈｚ、１Ｈ）、７．６６（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、７．４１（ｄ、Ｊ＝７．８９Ｈｚ、１Ｈ）、５．１３（ｄ、Ｊ＝８．３３Ｈｚ、１Ｈ）、４．２８（ｄ、Ｊ＝１６．２２Ｈｚ、１Ｈ）、４．０５〜４．２１（ｍ、３Ｈ）、２．８２（ｄ、Ｊ＝１０．０９Ｈｚ、２Ｈ）。
【０２７７】
実施例２７
Ｎ−［２−［（２Ｓ）−２−シアノ−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イル］−２−オキソ−エチル］−３−メトキシ−ピリジン−４−カルボキサミドの合成
【化１０９】
2021506972.tif 000131
ＤＭＦ（３ｍＬ）中３−メトキシピリジン−４−カルボン酸（０．１００ｇ、０．６５ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、（２Ｓ）−１−（２−アミノアセチル）−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（０．１４６ｇ、０．６５ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＨＯＢｔ（０．１０５ｇ、０．７８ｍｍｏｌ、１．２当量）、およびＥＤＣ．ＨＣｌ（０．１４９ｇ、０．７８ｍｍｏｌ、１．２当量）を添加した。混合物を室温で１０分間撹拌させた。トリエチルアミン（０．３ｍＬ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳおよびＴＬＣによって確認した。反応混合物を水で希釈し、酢酸エチル（４０ｍＬＸ２）で抽出した。組み合わせた有機層を水（１５ｍＬＸ４）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。粗生成物をヘキサンで洗浄し、ジエチルエーテル中で結晶化して、Ｎ−［２−［（２Ｓ）−２−シアノ−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イル］−２−オキソ−エチル］−３−メトキシ−ピリジン−４−カルボキサミド（０．０６０ｇ、収率２８％）を灰色がかった白色の固体として得た。
【０２７８】
ＬＣＭＳ  ３２５．２［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６、４００ＭＨｚ）：δ＝８．６６〜８．７２（ｍ、１Ｈ）、８．５９（ｓ、１Ｈ）、８．３５（ｄ、Ｊ＝４．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．６６（ｄ、Ｊ＝４．８Ｈｚ、１Ｈ）、５．１２（ｄｄ、Ｊ＝９．０、２．４Ｈｚ、１Ｈ）、４．１５〜４．３４（ｍ、２Ｈ）、４．１１（ｄ、Ｊ＝１１．８Ｈｚ、２Ｈ）、３．９９（ｓ、３Ｈ）、２．８９（ｄ、Ｊ＝３．１Ｈｚ、１Ｈ）、２．８２ｐｐｍ（ｄ、Ｊ＝８．８Ｈｚ、１Ｈ）。
【０２７９】
実施例２８
（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−（トリフルオロメチル）イソニコチンアミドの合成
【化１１０】
2021506972.tif 000132
ＤＭＦ（７ｍＬ）中３−（トリフルオロメチル）イソニコチン酸（０．１００ｇ、０．５２３ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−１−グリシルピロリジン−２−カルボニトリル４−メチルベンゼンスルホナート（０．２２６ｇ、０．６２７ｍｍｏｌ、１．２当量）およびＴＢＴＵ（０．２０１ｇ、０．６２７ｍｍｏｌ、１．２当量）を添加した。混合物を室温で１０分間撹拌させた。Ｎ−メチルモルホリン（０．２ｍＬ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳおよびＴＬＣによって確認した。反応の完了後、混合物を水（２５ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２５ｍＬ×２）で抽出した。組み合わせた有機層を水（２０ｍＬ×４）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。得られた粗生成物をヘキサン中の２０％ＤＣＭで結晶化して、（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−（トリフルオロメチル）イソニコチンアミド（０．０７０ｇ、収率３７％）を灰色がかった白色の固体として得た。
【０２８０】
ＬＣＭＳ  ３６３．２［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ９．０９（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、９．０４（ｓ、１Ｈ）、８．９８（ｄ、Ｊ＝４．８２Ｈｚ、１Ｈ）、７．６１（ｄ、Ｊ＝４．８２Ｈｚ、１Ｈ）、５．１３（ｄ、Ｊ＝８．３３Ｈｚ、１Ｈ）、４．２６（ｄ、Ｊ＝１５．７９Ｈｚ、１Ｈ）、４．１８（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、４．１１（ｄ、Ｊ＝１１．８４Ｈｚ、２Ｈ）、２．８２（ｄ、Ｊ＝１５．３５Ｈｚ、１Ｈ）、２．７３（ｓ、１Ｈ）。
【０２８１】
実施例２９
（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−ビニルイソニコチンアミドの合成
【化１１１】
2021506972.tif 000133
化合物４０ａ．ジオキサン：水（１：１）（１２ｍＬ）中３−ブロモイソニコチン酸（０．３００ｇ、１．４９ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、化合物４，４，５，５−テトラメチル−２−ビニル−１，３，２−ジオキサボロラン（０．３４ｇ、２．２１ｍｍｏｌ、２．０当量）、Ｋ２ＣＯ３（０．３１ｇ、２．２３ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加し、得られた混合物をＮ２ガスで１０分間パージし、続いてＰｄ（ＰＰｈ３）４（０．０８６ｇ、０．０７４ｍｍｏｌ．０．０５当量）を添加した。得られた反応混合物を、１００℃で一晩加熱した。生成物形成を、ＬＣＭＳによって確認した。反応混合物を濃縮し、水（１５ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×２）で洗浄した。水性層を分離し、凍結乾燥させて、３−ビニルイソニコチン酸（定量的収率）を白色の固体として得た。
【０２８２】
ＬＣＭＳ  １５０．２［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．６５（ｓ、１Ｈ）、８．２９（ｄ、Ｊ＝４．８２Ｈｚ、１Ｈ）、７．２６〜７．３９（ｍ、１Ｈ）、７．２３（ｄ、Ｊ＝４．３８Ｈｚ、１Ｈ）、５．７４（ｄ、Ｊ＝１７．９８Ｈｚ、１Ｈ）、５．１９（ｄ、Ｊ＝１０．９６Ｈｚ、１Ｈ）。
【０２８３】
化合物４０．ＤＭＦ（１５ｍＬ）中化合物３−ビニルイソニコチン酸（０．２００ｇ、１．３４２ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−１−グリシルピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（０．４５３ｇ、２．０１３ｍｍｏｌ、１．５当量）およびＴＢＴＵ（０．６４６ｇ、２．０１３ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加した。混合物を室温で１０分間撹拌させた。Ｎ−メチルモルホリン（０．５ｍＬ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳおよびＴＬＣによって確認した。反応の完了後、混合物を水（５０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５０ｍＬ×２）で抽出した。組み合わせた有機抽出物を水（２０ｍＬ×６）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶出剤としてＤＣＭ中５％ＭｅＯＨ）によって精製し、続いて逆相精製して、（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−ビニルイソニコチンアミド（０．０１２ｇ、収率３％）を白色の固体として得た。
【０２８４】
ＬＣＭＳ  ３２０．２［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．８５〜９．００（ｍ、１Ｈ）、８．５６（ｄ、Ｊ＝４．８２Ｈｚ、１Ｈ）、７．３５（ｄ、Ｊ＝４．８２Ｈｚ、１Ｈ）、７．０２（ｄｄ、Ｊ＝１１．４０、１７．５４Ｈｚ、１Ｈ）、６．０１（ｄ、Ｊ＝１７．５４Ｈｚ、１Ｈ）、５．４３（ｄ、Ｊ＝１０．９６Ｈｚ、１Ｈ）、５．１４（ｄ、Ｊ＝８．３３Ｈｚ、１Ｈ）、４．２８（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、３．９９〜４．２１（ｍ、３Ｈ）、２．９１（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、２．８２（ｄ、Ｊ＝１７．５４Ｈｚ、１Ｈ）、２．６７（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）。
【０２８５】
実施例３０
Ｎ−［２−［（２Ｓ）−２−シアノ−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イル］−２−オキソ−エチル］−３−（１−ピペリジル）ピリジン−４−カルボキサミドの合成
【化１１２】
2021506972.tif 000134
ＤＭＦ（３ｍＬ）中３−（１−ピペリジル）ピリジン−４−カルボン酸（０．１００ｇ、０．４９ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、（２Ｓ）−１−（２−アミノアセチル）−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（０．１１０ｇ、０．４９ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＨＯＢｔ（０．０７８ｇ、０．５８ｍｍｏｌ、１．２当量）、およびＥＤＣ．ＨＣｌ（０．１１０ｇ、０．５８ｍｍｏｌ、１．２当量）を添加した。混合物を室温で１０分間撹拌させた。トリエチルアミン（０．２１ｍＬ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳおよびＴＬＣによって確認した。反応混合物を水で希釈し、酢酸エチル（４０ｍＬＸ２）で抽出した。組み合わせた有機層を水（１５ｍＬＸ４）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。粗生成物を、カラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ中２％ＭｅＯＨ）によって精製して、Ｎ−［２−［（２Ｓ）−２−シアノ−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イル］−２−オキソ−エチル］−３−（１−ピペリジル）ピリジン−４−カルボキサミド（０．０５０ｇ、収率２７．３２％）を灰色がかった白色の固体として得た。
【０２８６】
ＬＣＭＳ  ３７８．３［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６、４００ＭＨｚ）δ９．７８（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、８．５８（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、８．４０（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、７．６４（ｄ、Ｊ＝４．８Ｈｚ、１Ｈ）、５．１４（ｄ、Ｊ＝９．２Ｈｚ、１Ｈ）、４．１７〜４．３７（ｍ、２Ｈ）、４．０１〜４．１７（ｍ、１Ｈ）、２．９４〜３．０７（ｍ、３Ｈ）、２．９０（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、２．８２（ｄ、Ｊ＝９．６Ｈｚ、１Ｈ）、１．７２（ｂｒ．ｓ．、３Ｈ）、１．５３ｐｐｍ（ｂｒ．ｓ．、２Ｈ）。
【０２８７】
実施例３１
（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−（３，５−ジフルオロフェニル）イソニコチンアミドの合成
【化１１３】
2021506972.tif 000135
化合物４７ａ．トルエン（１５ｍＬ）中エチル３−ブロモイソニコチナート（０．２５ｇ、１．１６ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、（３，５−ジフルオロフェニル）ボロン酸（０．３６６ｇ、２．３１５ｍｍｏｌ、２．０当量）、Ｋ２ＣＯ３（０．４８ｇ、３．４７２ｍｍｏｌ、３．０当量）を添加し、得られた混合物をＮ２ガスで１０分間パージし、続いてＰｄ（ＰＰｈ３）４（０．６９ｇ、０．０５８ｍｍｏｌ．０．０５当量）を添加した。得られた反応混合物を１００℃で一晩加熱した。生成物形成を、ＬＣＭＳによって確認した。反応の完了後、混合物をｃｅｌｉｔｅベッドに通して濾過し、酢酸エチル（１００ｍＬ）で洗浄した。濾過物を減圧下で濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶出剤としてヘキサン中０〜１０％酢酸エチル）によって精製して、メチル３−（３，５−ジフルオロフェニル）イソニコチナート（０．３４ｇ、定量的）を灰色がかった白色の固体として得た。
【０２８８】
ＬＣＭＳ  ２５０．２［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．８０（ｄ、Ｊ＝４．８２Ｈｚ、１Ｈ）、８．７２（ｓ、１Ｈ）、８．４０（ｓ、１Ｈ）、７．７７（ｄ、Ｊ＝５．２６Ｈｚ、１Ｈ）、７．２７〜７．４５（ｍ、１Ｈ）、７．１６（ｄ、Ｊ＝６．５８Ｈｚ、１Ｈ）、３．７１（ｓ、３Ｈ）。
【０２８９】
化合物４７ｂ．ＴＨＦ（１０ｍＬ）および水（５ｍＬ）中メチル３−（３，５−ジフルオロフェニル）イソニコチナート（０．３４ｇ、１．３６４ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、ＬｉＯＨ（０．９８ｇ、４．０８ｍｍｏｌ、３．０当量）を添加した。混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳおよび１Ｈ  ＮＭＲ分光法によって確認した。反応混合物を濃縮し、水（１５ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１５ｍＬ）で洗浄した。水性層を分離し、凍結乾燥機で凍結乾燥させて、３−（３，５−ジフルオロフェニル）イソニコチン酸（０．３４０ｇ、定量的、灰色がかった白色の固体として）を得た。
【０２９０】
ＬＣＭＳ  ２３６．２［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．４５（ｓ、１Ｈ）、８．４１（ｄ、Ｊ＝４．８２Ｈｚ、１Ｈ）、７．３２（ｄ、Ｊ＝７．０２Ｈｚ、２Ｈ）、７．０５〜７．２２（ｍ、２Ｈ）。
【０２９１】
化合物４７．ＤＭＦ（１０ｍＬ）中３−（３，５−ジフルオロフェニル）イソニコチン酸（０．２００ｇ、０．８４５ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−１−グリシルピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（０．３８ｇ、１．４６ｍｍｏｌ、２．０当量）およびＴＢＴＵ（０．５８７ｇ、１．８３ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加した。混合物を室温で１０分間撹拌させた。Ｎ−メチルモルホリン（０．４ｍＬ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳおよびＴＬＣによって確認した。反応の完了後、混合物を水（５０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５０ｍＬ×２）で抽出した。組み合わせた有機層を水（２０ｍＬ×４）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶出剤としてヘキサン中０〜５０％酢酸エチル）によって精製し、続いて逆相精製して、（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−（３，５−ジフルオロフェニル）イソニコチンアミド（０．０２０ｇ、収率５．８％）を白色の固体として得た。
【０２９２】
ＬＣＭＳ  ４０７．３［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６、４００ＭＨｚ）δ９．０１（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、８．６５〜８．７４（ｍ、１Ｈ）、７．４９（ｄ、Ｊ＝４．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．２２〜７．３３（ｍ、１Ｈ）、５．０８（ｄ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、１Ｈ）、４．１５〜４．３３（ｍ、１Ｈ）、３．９２〜４．１５（ｍ、３Ｈ）、２．８９（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、２．７９ｐｐｍ（ｄ、Ｊ＝１３．２Ｈｚ、１Ｈ）。
【０２９３】
実施例３２
（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−（４−フルオロフェニル）イソニコチンアミドの合成
【化１１４】
2021506972.tif 000136
化合物５２ａ．トルエン（１５ｍＬ）中エチル３−ブロモイソニコチナート（０．２ｇ、０．９３ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、（４−フルオロフェニル）ボロン酸（０．２１ｇ、１．８５ｍｍｏｌ、２．０当量）、Ｋ２ＣＯ３（０．３８ｇ、２．７８ｍｍｏｌ、３．０当量）を添加した。得られた反応混合物を、Ｎ２ガスで１０分間パージし、続いてＰｄ（ＰＰｈ３）４（０．０５４ｇ、０．０４６ｍｍｏｌ．０．０５当量）を添加した。反応混合物を、１００℃で一晩加熱した。生成物形成を、ＬＣＭＳによって確認した。反応の完了後、混合物をｃｅｌｉｔｅベッドに通して濾過し、酢酸エチル（１００ｍＬ）で洗浄した。濾過物を減圧下で濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶出剤としてヘキサン中０〜２０％酢酸エチル）によって精製して、メチル３−（４−フルオロフェニル）イソニコチナート（０．１８５ｇ、８３．３％）を灰色がかった白色の固体として得た。
【０２９４】
ＬＣＭＳ  ２３２．２［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．７４（ｄ、Ｊ＝５．２６Ｈｚ、１Ｈ）、８．７０（ｓ、１Ｈ）、７．７０（ｄ、Ｊ＝４．８２Ｈｚ、１Ｈ）、７．４２（ｄｄ、Ｊ＝５．７０、８．３３Ｈｚ、２Ｈ）、７．３１（ｔ、Ｊ＝８．７７Ｈｚ、２Ｈ）、３．６８（ｓ、３Ｈ）。
【０２９５】
化合物５２ｂ．ＴＨＦ（２０ｍＬ）および水（１０ｍＬ）中メチル３−（４−フルオロフェニル）イソニコチナート（０．３７ｇ、１．６０１ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、ＬｉＯＨ（０．１９２ｇ、８．０１ｍｍｏｌ、５．０当量）を添加した。混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳおよび１Ｈ  ＮＭＲ分光法によって確認した。反応混合物を濃縮し、水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１５ｍＬ×２）で洗浄した。水性層を分離し、凍結乾燥させて、３−（４−フルオロフェニル）イソニコチン酸（定量的収率）を白色の固体として得た。
【０２９６】
ＬＣＭＳ  ２１８．２［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．３８（ｓ、１Ｈ）、８．３６（ｄ、Ｊ＝４．８２Ｈｚ、１Ｈ）、７．６１（ｄｄ、Ｊ＝５．９２、８．１１Ｈｚ、２Ｈ）、７．１８（ｔ、Ｊ＝８．７７Ｈｚ、２Ｈ）、７．１３（ｄ、Ｊ＝４．８２Ｈｚ、１Ｈ）。
【０２９７】
化合物５２．ＤＭＦ（２０ｍＬ）中３−（４−フルオロフェニル）イソニコチン酸（０．２００ｇ、０．９２ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−１−グリシルピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（０．２２８ｇ、１．０１４ｍｍｏｌ、１．１当量）およびＴＢＴＵ（０．３２５ｇ、１．０１４ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加した。混合物を室温で１０分間撹拌させた。Ｎ−メチルモルホリン（０．３ｍＬ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳおよびＴＬＣによって確認した。反応の完了後、混合物を水（５０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５０ｍＬ×２）で抽出した。組み合わせた有機抽出物を水（２０ｍＬ×４）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶出剤としてＤＣＭ中５％ＭｅＯＨ）によって精製し、続いて逆相精製して、（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−（４−フルオロフェニル）イソニコチンアミド（０．００５ｇ、収率２％）を白色の固体として得た。
【０２９８】
ＬＣＭＳ  ３８９．３［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．９７（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、８．６５（ｂｒ．ｓ．、２Ｈ）、７．５７（ｂｒ．ｓ．、２Ｈ）、７．４５（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、７．２３（ｂｒ．ｓ．、２Ｈ）、５．０８（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、４．２０（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、４．０５（ｂｒ．ｓ．、２Ｈ）、２．８７（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、２．８１（ｂｒ．ｓ．、２Ｈ）。
【０２９９】
実施例３３
（Ｓ）−３−（５−クロロ−２−フルオロフェニル）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）イソニコチンアミドの合成
【化１１５】
2021506972.tif 000137
化合物５４ａ．トルエン（１５ｍＬ）中エチル３−ブロモイソニコチナート（０．２５ｇ、１．１６ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、（５−クロロ−２−フルオロフェニル）ボロン酸（０．４０３ｇ、２．３１５ｍｍｏｌ、２．０当量）、Ｋ２ＣＯ３（０．４８ｇ、３．４７２ｍｍｏｌ、３．０当量）を添加し、得られた混合物をＮ２ガスで１０分間パージし、続いてＰｄ（ＰＰｈ３）４（０．６９ｇ、０．０５８ｍｍｏｌ．０．０５当量）を添加した。得られた反応混合物を、１００℃で一晩加熱した。生成物形成を、ＬＣＭＳによって確認した。反応の完了後、混合物をｃｅｌｉｔｅベッドに通して濾過し、酢酸エチル（１００ｍＬ）で洗浄した。濾過物を減圧下で濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶出剤としてヘキサン中０〜１０％酢酸エチル）によって精製して、メチル３−（５−クロロ−２−フルオロフェニル）イソニコチナート（０．４００ｇ、定量的、灰色がかった白色の固体として）を得た。
【０３００】
ＬＣＭＳ  ２６６．２［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．８４（ｄ、Ｊ＝５．２６Ｈｚ、１Ｈ）、８．７３（ｓ、１Ｈ）、７．８３（ｄ、Ｊ＝５．２６Ｈｚ、１Ｈ）、７．４９〜７．６８（ｍ、２Ｈ）、７．２９〜７．４１（ｍ、２Ｈ）、３．７２（ｓ、３Ｈ）。
【０３０１】
化合物５４ｂ．ＴＨＦ（２０ｍＬ）および水（１０ｍＬ）中化合物メチル３−（５−クロロ−２−フルオロフェニル）イソニコチナート（０．４ｇ、１．５０４ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、ＬｉＯＨ（０．１０８ｇ、４．５１ｍｍｏｌ、３．０当量）を添加した。混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳおよび１Ｈ  ＮＭＲ分光法によって確認した。反応混合物を濃縮し、水（１５ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１５ｍＬ）で洗浄した。水性層を分離し、凍結乾燥機で凍結乾燥させて、３−（５−クロロ−２−フルオロフェニル）イソニコチン酸（０．４００定量的、白色の固体として）を得た。
【０３０２】
ＬＣＭＳ  ２５２．２［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．４６（ｄ、Ｊ＝４．８２Ｈｚ、１Ｈ）、８．３４（ｓ、１Ｈ）、７．３２〜７．５２（ｍ、３Ｈ）、７．２４（ｔ、Ｊ＝９．２１Ｈｚ、１Ｈ）。
【０３０３】
化合物５４．ＤＭＦ（２０ｍＬ）中化合物３−（５−クロロ−２−フルオロフェニル）イソニコチン酸（０．２００ｇ、０．７９６ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−１−グリシルピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（０．３５８ｇ、１．５９ｍｍｏｌ、２．０当量）およびＴＢＴＵ（０．３８３ｇ、１．１９ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加した。混合物を室温で１０分間撹拌させた。Ｎ−メチルモルホリン（０．３ｍＬ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳおよびＴＬＣによって確認した。反応の完了後、混合物を水（５０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５０ｍＬ×２）で抽出した。組み合わせた有機層を水（２０ｍＬ×４）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶出剤としてヘキサン中０〜５０％酢酸エチル）によって精製し、続いて逆相精製して、（Ｓ）−３−（５−クロロ−２−フルオロフェニル）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）イソニコチンアミド（０．０５５ｇ、収率１６．４１％）を白色の固体として得た。
【０３０４】
ＬＣＭＳ  ４２３．２［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ  １Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．９２（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、８．７８（ｄ、Ｊ＝４．８２Ｈｚ、１Ｈ）、８．６４（ｓ、１Ｈ）、７．６１（ｄ、Ｊ＝４．８２Ｈｚ、１Ｈ）、７．５２（ｄ、Ｊ＝７．０２Ｈｚ、２Ｈ）、７．３１（ｓ、１Ｈ）、５．０７（ｄ、Ｊ＝９．２１Ｈｚ、１Ｈ）、３．９３〜４．０９（ｍ、２Ｈ）、２．８０（ｂｒ．ｓ．、２Ｈ）。
【０３０５】
実施例３４
Ｎ−（２−（（Ｓ）−２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−４−オキソ−３，４，４ａ，８ａ−テトラヒドロフタラジン−１−カルボキサミドの合成
【化１１６】
2021506972.tif 000138
ＤＭＦ（５ｍＬ）中４−オキソ−３，４，４ａ，８ａ−テトラヒドロフタラジン−１−カルボン酸（０．２００ｇ、１．０５ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−１−グリシルピロリジン−２−カルボニトリル  ４−メチルベンゼンスルホナート（０．３８０ｇ、１．０５ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＨＯＢｔ（０．１７０ｇ、１．２６ｍｍｏｌ、１．２当量）、およびＥＤＣ．ＨＣｌ（０．２４０ｇ、１．２６ｍｍｏｌ、１．２当量）を添加した。混合物を室温で１０分間撹拌させた。トリエチルアミン（０．３ｍＬ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳおよびＴＬＣによって確認した。反応混合物を水で希釈し、酢酸エチル（５０ｍＬＸ２）で抽出した。組み合わせた有機層を水（２０ｍＬＸ４）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。得られた粗生成物を逆相ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（２−（（Ｓ）−２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−４−オキソ−３，４，４ａ，８ａ−テトラヒドロフタラジン−１−カルボキサミド（０．１１０ｇ、収率２９％）を灰色がかった白色の固体として得た。
【０３０６】
ＬＣＭＳ  ３６３［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１３．０４（ｓ、１Ｈ）、８．８４（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、８．６１（ｄ、Ｊ＝７．４５Ｈｚ、１Ｈ）、８．３０（ｄ、Ｊ＝７．８９Ｈｚ、１Ｈ）、７．９４〜７．９９（ｍ、１Ｈ）、７．９０（ｄ、Ｊ＝７．０２Ｈｚ、１Ｈ）、５．１４（ｄ、Ｊ＝６．５８Ｈｚ、１Ｈ）、４．３０（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、４．１２〜４．２３（ｍ、２Ｈ）、４．０８（ｄ、Ｊ＝１１．８４Ｈｚ、１Ｈ）、２．９１（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、２．８３（ｄ、Ｊ＝１７．９８Ｈｚ、１Ｈ）。
【０３０７】
実施例３５
Ｎ−［２−［（２Ｓ）−２−シアノ−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イル］−２−オキソ−エチル］−３−メチル−４−オキソ−フタラジン−１−カルボキサミドの合成
【化１１７】
2021506972.tif 000139
ＤＭＦ（３ｍＬ）中３−メチル−４−オキソ−フタラジン−１−カルボン酸（０．１００ｇ、０．４９ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、（２Ｓ）−１−（２−アミノアセチル）−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（０．１１０ｇ、０．４９ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＨＯＢｔ（０．０８０ｇ、０．５９ｍｍｏｌ、１．２当量）、およびＥＤＣ．ＨＣｌ（０．１１３ｇ、０．５９ｍｍｏｌ、１．２当量）を添加した。混合物を室温で１０分間撹拌させた。トリエチルアミン（０．２１ｍＬ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳおよびＴＬＣによって確認した。反応混合物を水で希釈し、酢酸エチル（３０ｍＬＸ２）で抽出した。組み合わせた有機層を水（１５ｍＬＸ４）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。粗生成物をヘキサンで洗浄し、ジエチルエーテル中で結晶化して、（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−メチル−４−オキソ−３，４−ジヒドロフタラジン−１−カルボキサミド（０．０４０ｇ、収率２１．７％）を灰色がかった白色の固体として得た。
【０３０８】
ＬＣＭＳ  ３７６．３［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６、４００ＭＨｚ）：δ＝８．９３（ｔ、Ｊ＝５．７Ｈｚ、１Ｈ）、８．６６（ｄ、Ｊ＝７．９Ｈｚ、１Ｈ）、８．３３（ｄ、Ｊ＝７．９Ｈｚ、１Ｈ）、７．８６〜８．０３（ｍ、２Ｈ）、５．１４（ｄ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、１Ｈ）、４．３１（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、４．０７〜４．２４（ｍ、３Ｈ）、２．９２（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、２．８３ｐｐｍ（ｄ、Ｊ＝１７．１Ｈｚ、１Ｈ）。
【０３０９】
実施例３６
（Ｓ）−Ｎ−（４−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−４−オキソブチル）−１−オキソ−１，２−ジヒドロイソキノリン−４−カルボキサミドの合成
【化１１８】
2021506972.tif 000140
化合物８２ａ．ＤＭＦ（４ｍＬ）中４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ブタン酸（２００ｍｇ、０．９８ｍｍｏｌ、１当量）の撹拌溶液に、ＨＡＴＵ（７４５ｍｇ、１．９６ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加して、続いて（Ｓ）−４，４−ジフルオロピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（５９９ｍｇ、１．９７ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加した。反応混合物を室温で１０分間撹拌させた。ＤＩＰＥＡ（０．８ｍＬ、４．７ｍｍｏｌ、５．０当量）を添加し、反応混合物を室温で一晩撹拌させた。反応の進行をＬＣＭＳによって監視した。反応の完了後、反応混合物を水（２５ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５０ｍＬ×２）で抽出した。組み合わせた有機層を水（２５ｍＬ×４）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶出剤としてヘキサン中０〜５０％酢酸エチル）によって濃縮して、ｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−（４−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−４−オキソブチル）カルバメート（２６７ｍｇ、収率８５％）を灰色がかった白色の固体として得た。
【０３１０】
ＬＣＭＳ  ３１８．３［Ｍ＋Ｈ］＋
化合物８２ｂ．ＡＣＮ（３ｍＬ）中ｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−（４−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−４−オキソブチル）カルバメート（２６７ｍｇ、０．８４ｍｍｏｌ、１当量）の撹拌溶液に、ＰＴＳＡ（２１７ｍｇ、１．２６ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加した。反応混合物を室温で一晩混合物を撹拌した。反応の進行をＮＭＲによって監視した。反応の完了後、溶媒を減圧下で除去して、（Ｓ）−１−（４−アミノブタノイル）−４，４−ジフルオロピロリジン−２−カルボニトリル４−メチルベンゼンスルホナート（４２５ｍｇ、定量的）を白色の固体化合物として得た。
【０３１１】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６、４００ＭＨｚ）δ７．６８（ｂｒ．ｓ．、２Ｈ）、７．４８（ｄ、Ｊ＝８．３Ｈｚ、２Ｈ）、７．１２（ｄ、Ｊ＝７．９Ｈｚ、２Ｈ）、５．０４（ｄ、Ｊ＝９．２Ｈｚ、１Ｈ）、４．０７（ｄ、Ｊ＝１５．８Ｈｚ、１Ｈ）、３．９１〜４．０２（ｍ、１Ｈ）、２．７７〜２．９３（ｍ、２Ｈ）、２．３８〜２．４４（ｍ、１Ｈ）、２．２９（ｓ、４Ｈ）、１．９９〜２．１２（ｍ、２Ｈ）、１．６９〜１．８６ｐｐｍ（ｍ、３Ｈ）。
【０３１２】
化合物８２．ＤＭＦ（３ｍＬ）中１−オキソ−１，２−ジヒドロイソキノリン−４−カルボン酸（２０６ｍｇ、１．０９ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、（Ｓ）−１−（４−アミノブタノイル）−４，４−ジフルオロピロリジン−２−カルボニトリル４−メチルベンゼンスルホナート（４２５ｍｇ、１．０９ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＨＯＢｔ（１６０ｍｇ、１．１９ｍｍｏｌ、１．１当量）、およびＥＤＣ．ＨＣｌ（２２９ｍｇ、１．１９ｍｍｏｌ、１．１当量）を添加した。混合物を室温で１０分間撹拌させた。トリエチルアミン（０．４ｍＬ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳおよびＴＬＣによって確認した。反応混合物を水で希釈し、酢酸エチル（５０ｍＬＸ２）で抽出した。組み合わせた有機層を水（２０ｍＬＸ４）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。得られた粗生成物を純ＭｅＯＨで結晶化して、（Ｓ）−Ｎ−（４−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−４−オキソブチル）−１−オキソ−１，２−ジヒドロイソキノリン−４−カルボキサミド（１７ｍｇ、収率４％）を灰色がかった白色の固体として得た。
【０３１３】
ＬＣＭＳ  ３８９．３［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６、４００ＭＨｚ）δ１１．５７（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、８．３４（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、８．２２（ｄ、Ｊ＝７．９Ｈｚ、２Ｈ）、７．７３（ｔ、Ｊ＝７．５Ｈｚ、１Ｈ）、７．４２〜７．６０（ｍ、２Ｈ）、５．０５（ｄ、Ｊ＝８．３Ｈｚ、１Ｈ）、３．９０〜４．２０（ｍ、４Ｈ）、３．２２〜３．２９（ｍ、２Ｈ）、２．８６（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、２．７８（ｄ、Ｊ＝１２．３Ｈｚ、１Ｈ）、２．２０〜２．４０（ｍ、２Ｈ）、１．６９〜１．８６ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）。
【０３１４】
実施例３７
（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−１Ｈ−インダゾール−５−カルボキサミドの合成
【化１１９】
2021506972.tif 000141
ＤＭＦ（１０ｍＬ）中１Ｈ−インダゾール−５−カルボン酸（０．２００ｇ、１．２ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−１−グリシルピロリジン−２−カルボニトリルＰＴＳＡ（０．４４４ｇ、１．２ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＨＯＢｔ（０．１９８ｇ、１．４６ｍｍｏｌ、１．２当量）、およびＥＤＣ．ＨＣｌ（０．２８０ｇ、１．４６ｍｍｏｌ、１．２当量）を添加した。混合物を室温で１０分間撹拌させた。トリエチルアミン（０．４ｍＬ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳおよびＴＬＣによって確認した。反応混合物を水で希釈し、酢酸エチル（５０ｍＬＸ２）で抽出した。組み合わせた有機層を水（２０ｍＬＸ４）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。得られた粗生成物を逆相ＨＰＬＣによって精製して、（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−１Ｈ−インダゾール−５−カルボキサミド（０．０２０ｇ、収率１０％）を白色の固体として得た。
【０３１５】
ＬＣＭＳ  ３３４［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１３．２９（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、８．７９（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、８．３８（ｓ、１Ｈ）、８．２３（ｓ、１Ｈ）、７．８８（ｄ、Ｊ＝８．７７Ｈｚ、１Ｈ）、７．６０（ｄ、Ｊ＝８．７７Ｈｚ、１Ｈ）、５．１０（ｄ、Ｊ＝８．７７Ｈｚ、１Ｈ）、４．３１（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、４．０４〜４．２１（ｍ、３Ｈ）、２．９０−２．８１（ｍ、２Ｈ）。
【０３１６】
実施例３８
（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）フロ［２，３−ｃ］ピリジン−２−カルボキサミドの合成
【化１２０】
2021506972.tif 000142
ＤＭＦ（１０ｍＬ）中フロ［２，３−ｃ］ピリジン−２−カルボン酸（０．０５０ｇ、０．３０ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−１−グリシルピロリジン−２−カルボニトリル４−メチルベンゼンスルホナート（０．１１０ｇ、０．３０ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＨＯＢｔ（０．０４９ｇ、０．３６ｍｍｏｌ、１．２当量），およびＥＤＣ．ＨＣｌ（０．０６９ｇ、０．３６ｍｍｏｌ、１．２当量）を添加した。混合物を室温で１０分間撹拌させた。トリエチルアミン（０．１ｍＬ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳおよびＴＬＣによって確認した。反応混合物を水で希釈し、酢酸エチル（５０ｍＬ×２）で抽出した。組み合わせた有機抽出物を水（２０ｍＬ×４）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。得られた粗生成物を逆相ＨＰＬＣによって精製して、（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）フロ［２，３−ｃ］ピリジン−２−カルボキサミド（０．０２０ｇ、収率１９％）を白色の固体として得た。
【０３１７】
ＬＣＭＳ  ３３５［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６、４００ＭＨｚ）δ（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、９．０９（ｓ、１Ｈ）、８．４９（ｄ、Ｊ＝５．３Ｈｚ、１Ｈ）、７．８４（ｄ、Ｊ＝５．３Ｈｚ、１Ｈ）、７．６９（ｓ、１Ｈ）、５．１１（ｄ、Ｊ＝９．６Ｈｚ、１Ｈ）、４．２５〜４．３９（ｍ、１Ｈ）、４．０４〜４．２２（ｍ、３Ｈ）、２．７２〜３．００ｐｐｍ（ｍ、３Ｈ）。
【０３１８】
実施例３９
（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミドの合成
【化１２１】
2021506972.tif 000143
ＤＭＦ（２ｍＬ）中ピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボン酸（０．１００ｇ、０．６１ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−１−グリシルピロリジン−２−カルボニトリル４−メチルベンゼンスルホナート（０．２２２ｇ、０．６１ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＨＯＢｔ（０．９３ｇ、０．６７ｍｍｏｌ、１．１当量）、およびＥＤＣ．ＨＣｌ（０．１２９ｇ、０．６７ｍｍｏｌ、１．１当量）を添加した。混合物を室温で１０分間撹拌させた。トリエチルアミン（０．２ｍＬ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳおよびＴＬＣによって確認した。反応混合物を水で希釈し、酢酸エチル（５０ｍＬ×２）で抽出した。組み合わせた有機抽出物を水（２０ｍＬ×４）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。得られた粗生成物を逆相ＨＰＬＣによって精製して、（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド（０．０３０ｇ、収率１５％）を灰色がかった白色の固体として得た。
【０３１９】
ＬＣＭＳ  ３３４．２［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ９．０２（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、８．７８（ｄ、Ｊ＝７．５Ｈｚ、１Ｈ）、８．２９（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、８．１１（ｓ、１Ｈ）、７．３０（ｄ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、１Ｈ）、６．８５（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、５．１１（ｄ、Ｊ＝７．９Ｈｚ、１Ｈ）、４．４２〜４．２３（ｍ、１Ｈ）、４．２３〜４．０５（ｍ、３Ｈ）、３．０１〜２．７２（ｍ、３Ｈ）。
【０３２０】
実施例４０
（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−６−メトキシ−２−フェニルニコチンアミドの合成
【化１２２】
2021506972.tif 000144
化合物８６ａ．ＭｅＯＨ（５０ｍＬ）中２，６−ジクロロニコチン酸（２．０ｇ、１０．４１ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、化合物ｔｅｒｔ−ブトキシドカリウム（４．７ｇ、４１．６６ｍｍｏｌ、４．０当量）を添加し、得られた反応混合物を７０℃で３時間加熱した。生成物形成を、ＬＣＭＳおよびＴＬＣによって確認した。反応の完了後、反応混合物を濃縮し、水（５０ｍｌ）で希釈した。水性層を酢酸エチル（３０ｍＬ×３）で抽出した。組み合わせた有機抽出物を、ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶出剤としてＤＣＭ中５％ＭｅＯＨ）によって精製して、２−クロロ−６−メトキシニコチン酸（１．８ｇ、９６．４％）を白色の固体として得た。
【０３２１】
ＬＣＭＳ  １８８［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ  １Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１３．３３（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、８．０６〜８．２４（ｍ、１Ｈ）、６．９２（ｄ、Ｊ＝８．７７Ｈｚ、１Ｈ）、３．９１（ｓ、３Ｈ）。
【０３２２】
化合物８６ｂ．ジオキサン（１０ｍＬ）中２−クロロ−６−メトキシニコチン酸（０．２００ｇ、１．０７ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、フェニルボロン酸（０．１９５ｇ、１．６０４ｍｍｏｌ、１．５当量）、Ｎａ２ＣＯ３（０．２３ｇ、２．１４ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加し、得られた反応混合物をＮ２ガスで１０分間パージし、続いてＰｄ（ＰＰｈ３）４（０．０６２ｇ、０．０５４ｍｍｏｌ．０．０５当量）を添加した。得られた反応混合物を、１００℃で一晩加熱した。生成物形成を、ＬＣＭＳおよびＴＬＣによって確認した。反応の完了後、混合物をｃｅｌｉｔｅベッドに通して濾過し、酢酸エチル（１００ｍＬ）で洗浄した。濾過物を減圧下で濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶出剤としてＤＣＭ中０〜２％ＭｅＯＨ）によって精製して、６−メトキシ−２−フェニルニコチン酸（０．０７ｇ、２８．６％）を白色の固体として得た。
【０３２３】
ＬＣＭＳ  ２３０［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１２．８９（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、８．１７（ｄ、Ｊ＝６．５８Ｈｚ、３Ｈ）、７．６７（ｄ、Ｊ＝７．４５Ｈｚ、１Ｈ）、７．３８〜７．６０（ｍ、３Ｈ）、４．０４（ｓ、３Ｈ）。
【０３２４】
化合物８６．ＤＭＦ（５ｍＬ）中６−メトキシ−２−フェニルニコチン酸（０．０５０ｇ、０．２１８ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−１−グリシルピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（０．０７３ｇ、０．３２７ｍｍｏｌ、１．５当量）およびＴＢＴＵ（０．１０４ｇ、０．３２７ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加した。混合物を室温で１０分間撹拌させた。Ｎ−メチルモルホリン（０．１ｍＬ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳおよびＴＬＣによって確認した。反応の完了後、混合物を水（１５ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×２）で抽出した。組み合わせた有機抽出物を水（１０ｍＬ×４）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶出剤としてＤＣＭ中５％ＭｅＯＨ）によって精製し、続いて逆相精製して、（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−６−メトキシ−２−フェニルニコチンアミド（０．０１５ｇ、収率１７．２％）を白色の固体として得た。
【０３２５】
ＬＣＭＳ  ４０１．２［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．７６（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、８．４８（ｓ、２Ｈ）、７．７９（ｄ、Ｊ＝８．３３Ｈｚ、２Ｈ）、７．３９（ｂｒ．ｓ．、２Ｈ）、６．８６（ｄ、Ｊ＝８．３３Ｈｚ、１Ｈ）、５．１０（ｄ、Ｊ＝７．４５Ｈｚ、１Ｈ）、４．２３（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、３．９８〜４．１２（ｍ、２Ｈ）、３．９４（ｓ、３Ｈ）、２．９０（ｄ、Ｊ＝８．３３Ｈｚ、１Ｈ）、２．７０〜２．８６（ｍ、１Ｈ）、２．６７（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）。
【０３２６】
実施例４１
（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−（１−メチル−１Ｈ−インダゾール−４−イル）イソニコチンアミドの合成
【化１２３】
2021506972.tif 000145
化合物８７ａ．トルエン（１５ｍＬ）中エチル３−ブロモイソニコチナート（０．２ｇ、０．９３ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、（１−メチル−１Ｈ−インダゾール−４−イル）ボロン酸（０．３２５ｇ、１．８５ｍｍｏｌ、２．０当量）、Ｋ２ＣＯ３（０．３８ｇ、２．７８ｍｍｏｌ、３．０当量）を添加し、得られた反応混合物をＮ２ガスで１０分間パージし、続いてＰｄ（ＰＰｈ３）４（０．０５４ｇ、０．０４６ｍｍｏｌ．０．０５当量）を添加した。得られた反応混合物を、１００℃で一晩加熱した。生成物形成を、ＬＣＭＳによって確認した。反応の完了後、混合物をｃｅｌｉｔｅベッドに通して濾過し、酢酸エチル（１００ｍＬ）で洗浄した。濾過物を減圧下で濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶出剤としてヘキサン中０〜３０％酢酸エチル）によって精製して、メチル３−（１−メチル−１Ｈ−インダゾール−４−イル）イソニコチナート（０．１５０ｇ、６０．７％）を茶色の液体として得た。
【０３２７】
ＬＣＭＳ  ２６８．２［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．７２〜８．８７（ｍ、２Ｈ）、７．７９（ｄ、Ｊ＝５．２６Ｈｚ、１Ｈ）、７．６４〜７．７６（ｍ、２Ｈ）、７．４９（ｓ、１Ｈ）、７．０７（ｄ、Ｊ＝７．０２Ｈｚ、１Ｈ）、４．１０（ｓ、３Ｈ）、３．５３（ｓ、３Ｈ）。
【０３２８】
化合物８７ｂ．ＴＨＦ（１０ｍＬ）および水（１０ｍＬ）中メチル３−（１−メチル−１Ｈ−インダゾール−４−イル）イソニコチナート（０．２７ｇ、１．０１１ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、ＬｉＯＨ（０．０７２ｇ、３．０３ｍｍｏｌ、３．０当量）を添加した。混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳおよび１Ｈ  ＮＭＲ分光法によって確認した。反応混合物を濃縮し、水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１５ｍＬ×２）で洗浄した。水性層を分離し、凍結乾燥させて、３−（１−メチル−１Ｈ−インダゾール−４−イル）イソニコチン酸（定量的収率）を白色の固体として得た。
【０３２９】
ＬＣＭＳ  ２５４．２［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．３４〜８．５２（ｍ、２Ｈ）、７．９０（ｓ、１Ｈ）、７．５６（ｄ、Ｊ＝８．７７Ｈｚ、１Ｈ）、７．３９（ｓ、１Ｈ）、７．１６〜７．３１（ｍ、２Ｈ）、４．０６（ｓ、３Ｈ）。
【０３３０】
化合物８７．ＤＭＦ（５ｍＬ）中３−（１−メチル−１Ｈ−インダゾール−４−イル）イソニコチン酸（０．１００ｇ、０．３９５ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−１−グリシルピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（０．０８８ｇ、０．３９５ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＥＤＣ．ＨＣｌ（０．０７５ｇ、０．３９５ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＨＯＢｔ（０．０６０ｇ、０．３９５ｍｍｏｌ、１．０当量）、およびＤＭＡＰ（０．００３ｇ、０．０１９ｍｍｏｌ、０．０５当量）を添加した。混合物を室温で１０分間撹拌させた。ＴＥＡ（０．５ｍＬ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳおよびＴＬＣによって確認した。反応の完了後、混合物を水（５０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５０ｍＬ×２）で抽出した。組み合わせた有機抽出物を水（２０ｍＬ×４）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶出剤としてＤＣＭ中５％ＭｅＯＨ）によって精製し、続いて逆相精製して、（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−（１−メチル−１Ｈ−インダゾール−４−イル）イソニコチンアミド（０．０１０ｇ、収率６％）を白色の固体として得た。
【０３３１】
ＬＣＭＳ  ４２５．３［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．９２（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、８．６２〜８．８０（ｍ、２Ｈ）、７．８６（ｓ、１Ｈ）、７．６４（ｄ、Ｊ＝８．３３Ｈｚ、１Ｈ）、７．５６（ｄ、Ｊ＝４．８２Ｈｚ、１Ｈ）、７．３５〜７．４５（ｍ、１Ｈ）、７．１８（ｄ、Ｊ＝７．０２Ｈｚ、１Ｈ）、５．０５（ｄ、Ｊ＝６．５８Ｈｚ、１Ｈ）、４．１３（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、４．０６（ｓ、３Ｈ）、３．８３〜３．９９（ｍ、３Ｈ）、２．７５（ｄ、Ｊ＝１１．８４Ｈｚ、２Ｈ）、２．６５（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）。
【０３３２】
実施例４２
Ｎ−［２−［（２Ｓ）−２−シアノ−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イル］−２−オキソ−エチル］−３−モルホリノ−ピリジン−４−カルボキサミドの合成
【化１２４】
2021506972.tif 000146
化合物８８ａ．２５ｍＬのボトル中に、３−フルオロピリジン−４−カルボン酸（０．５００ｇ、３．５４ｍｍｏｌ、１．０当量）およびモルホリン（０．６１６ｇ、７．０８ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加し、反応混合物を１２０℃で１時間加熱した。反応の進行をＮＭＲおよびＬＣＭＳによって監視した。反応の完了後、反応混合物を減圧下で濃縮し、粗化合物を順相フラッシュクロマトグラフィー（溶出剤としてＤＣＭ中２〜１０％ＭｅＯＨ）によって精製して、３−モルホリノピリジン−４−カルボン酸（１００ｍｇ、収率１３％）を黄色の固体として得た。
【０３３３】
ＬＣＭＳ  ２０９．３［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１４．１６（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、８．５５（ｓ、１Ｈ）、８．３４（ｄ、Ｊ＝４．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．５３（ｄ、Ｊ＝４．８Ｈｚ、１Ｈ）、３．８２〜３．６３（ｍ、４Ｈ）、３．１９〜３．０１（ｍ、４Ｈ）。
【０３３４】
化合物８８．ＤＭＦ（３ｍＬ）中３−モルホリノピリジン−４−カルボン酸（０．１００ｇ、０．４８ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、（２Ｓ）−１−（２−アミノアセチル）−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（０．１０８ｇ、０．４８ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＨＯＢｔ（０．０７８ｇ、０．５８ｍｍｏｌ、１．２当量）、およびＥＤＣ．ＨＣｌ（０．１１１ｇ、０．５８ｍｍｏｌ、１．２当量）を添加した。混合物を室温で１０分間撹拌させた。トリエチルアミン（０．２１ｍＬ）を添加し、反応混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳによって確認した。反応混合物を水で希釈し、酢酸エチル（４０ｍＬ×２）で抽出した。組み合わせた有機抽出物を水（１５ｍＬ×４）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。得られた粗生成物を逆相ＨＰＬＣによって精製して、（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−モルホリノイソニコチンアミド（０．０２０ｇ、収率１１％）を灰色がかった白色の固体として得た。
【０３３５】
ＬＣＭＳ  ３８０．５［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ９．４８（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、８．５５（ｓ、１Ｈ）、８．４０（ｄ、Ｊ＝４．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．５７（ｄ、Ｊ＝４．８Ｈｚ、１Ｈ）、４．３７〜４．０９（ｍ、４Ｈ）、３．７８（ｂｒ．ｓ．、４Ｈ）、３．０８（ｂｒ．ｓ．、４Ｈ）、２．９０（ｂｒ．ｓ．、２Ｈ）、２．０８（ｓ、１Ｈ）。
【０３３６】
実施例４３
（Ｓ）−３−ベンジル−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）イソニコチンアミドの合成
【化１２５】
2021506972.tif 000147
化合物５０ａ．ジオキサン（６ｍＬ）および水（１２ｍＬ）中３−ブロモイソニコチン酸（０．５ｇ、２．４７５ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、２−ベンジル−４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン（１．１ｇ、４．９５ｍｍｏｌ、２．０当量）、Ｋ２ＣＯ３（１．１ｇ、７．４５ｍｍｏｌ、３．０当量）を添加し、得られた反応混合物をＮ２ガスで１０分間パージした。Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（０．１４３ｇ、０．１２４ｍｍｏｌ．０．０５当量）を添加し、得られた反応混合物を１００℃で一晩加熱した。生成物形成を、ＬＣＭＳによって確認した。反応の完了後、反応混合物を濃縮し、水（１０ｍＬ）で希釈した。水性層をＥｔＯＡｃ（１０ｍＬｘ２）で洗浄し、６Ｎ  ＨＣｌで酸性化し（ｐＨ約３．０）、ＥｔＯＡｃ（１０ｍＬｘ３）で抽出した。組み合わせた有機抽出物を水（３０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶出剤としてＤＣＭ中０〜１０％メタノール）によって精製して、３−ベンジルイソニコチン酸（０．１００ｇ、１９％）を灰色がかった白色の固体として得た。
【０３３７】
ＬＣＭＳ  ２１４．２［Ｍ＋Ｈ］＋
化合物５０．ＤＭＦ（８ｍＬ）中３−ベンジルイソニコチン酸（０．１００ｇ、０．４６７ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−１−グリシルピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（０．１０５ｇ、０．４６７ｍｍｏｌ、１．０当量）およびＴＢＴＵ（０．１６４ｇ、０．５１４ｍｍｏｌ、１．１当量）を添加した。混合物を室温で１０分間撹拌させた。Ｎ−メチルモルホリン（０．４ｍＬ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳおよびＴＬＣによって確認した。反応の完了後、反応混合物を水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ×２）で抽出した。組み合わせた有機抽出物を水（２０ｍＬ×４）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶出剤としてＤＣＭ中５％ＭｅＯＨ）によって精製し、続いて逆相精製して、（Ｓ）−３−ベンジル−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）イソニコチンアミド（０．０２５ｇ、収率１４％）を白色の固体として得た。
【０３３８】
ＬＣＭＳ  ３８５．２［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．９４（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、８．６１〜８．４２（ｍ、２Ｈ）、７．３４（ｄ、Ｊ＝４．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．３０〜７．２１（ｍ、３Ｈ）、７．１８（ｄ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、２Ｈ）、５．１３（ｄ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、１Ｈ）、４．２７（ｄ、Ｊ＝１５．３Ｈｚ、２Ｈ）、４．２３〜４．０１（ｍ、４Ｈ）、２．９０（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、２．８２（ｄ、Ｊ＝１７．５Ｈｚ、１Ｈ）。
【０３３９】
実施例４４
Ｎ−（２−（（Ｓ）−２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−（シクロヘキサ−１−エン−１−イル）イソニコチンアミドの合成
【化１２６】
2021506972.tif 000148
化合物４３ａ．トルエン（２０ｍＬ）中エチル３−ブロモイソニコチナート（０．４ｇ、１．８５ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、２−（シクロヘキサ−１−エン−１−イル）−４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン（０．５８ｇ、２．７７ｍｍｏｌ、１．５当量）、Ｋ２ＣＯ３（０．５１ｇ、３．７８ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加し、得られた反応混合物をＮ２ガスで１０分間パージし、続いてＰｄ（ＰＰｈ３）４（０．０６５ｇ、０．０９３ｍｍｏｌ．０．０５当量）を添加した。得られた反応混合物を１００℃で一晩加熱した。生成物形成を、ＬＣＭＳによって確認した。反応の完了後、反応混合物をｃｅｌｉｔｅ（登録商標）ベッドを通して濾過し、酢酸エチル（１００ｍＬ）で洗浄した。濾過物を減圧下で濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶出剤としてヘキサン中０〜１０％酢酸エチル）によって精製して、メチル３−（シクロヘキサ−１−エン−１−イル）イソニコチナート（０．１７０ｇ、４２．４％）を無色の油として得た。
【０３４０】
ＬＣＭＳ  ２１８．２［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．６０（ｄ、Ｊ＝５．３Ｈｚ、１Ｈ）、８．５２（ｓ、１Ｈ）、７．５６（ｄ、Ｊ＝５．３Ｈｚ、１Ｈ）、５．６２（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、２．２４〜２．０６（ｍ、４Ｈ）、１．７７〜１．５４（ｍ、４Ｈ）。
【０３４１】
化合物４３ｂ．ＴＨＦ（５ｍＬ）および水（５ｍＬ）中メチル３−（シクロヘキサ−１−エン−１−イル）イソニコチナート（０．１７ｇ、０．７７９ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、ＬｉＯＨ（０．０３７ｇ、１．５６ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加した。混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳおよび１Ｈ  ＮＭＲによって確認した。反応混合物を濃縮し、水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１５ｍＬｘ２）で洗浄した。水性層を分離し、凍結乾燥させて、３−（シクロヘキサ−１−エン−１−イル）イソニコチン酸（定量的収率）を白色の固体として得た。
【０３４２】
ＬＣＭＳ  ２０４．２［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．２５（ｄ、Ｊ＝４．８Ｈｚ、１Ｈ）、８．１７（ｓ、１Ｈ）、７．１０（ｄ、Ｊ＝４．８Ｈｚ、１Ｈ）、５．６６（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、２．２９（ｂｒ．ｓ．、２Ｈ）、２．１２〜２．０５（ｍ、２Ｈ）、１．７２〜１．５３（ｍ、４Ｈ）。
【０３４３】
化合物４３．ＤＭＦ（５ｍＬ）中３−（シクロヘキサ−１−エン−１−イル）イソニコチン酸（０．１００ｇ、０．４９３ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−１−グリシルピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（０．１１０ｇ、０．４９３ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＴＢＴＵ（０．１７４ｇ、０．５４２ｍｍｏｌ、１．１当量）を添加した。混合物を室温で１０分間撹拌させた。Ｎ−メチルモルホリン（０．４ｍＬ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳおよびＴＬＣによって確認した。反応の完了後、反応混合物を水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ×２）で抽出した。組み合わせた有機抽出物を水（２０ｍＬ×４）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶出剤としてＤＣＭ中５％ＭｅＯＨ）によって精製し、続いて逆相精製して、Ｎ−（２−（（Ｓ）−２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−（シクロヘキサ−１−エン−１−イル）イソニコチンアミド（０．００４ｇ、収率２．４％）を白色の固体として得た。
【０３４４】
ＬＣＭＳ  ３７５．３［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．６９（ｔ、Ｊ＝５．８Ｈｚ、１Ｈ）、８．５３（ｄ、Ｊ＝４．９Ｈｚ、１Ｈ）、８．４６（ｓ、１Ｈ）、７．３３（ｄ、Ｊ＝４．９Ｈｚ、１Ｈ）、５．７９（ｄ、Ｊ＝３．９Ｈｚ、１Ｈ）、５．１０（ｄｄ、Ｊ＝９．３、２．７Ｈｚ、１Ｈ）、４．３３〜４．２３（ｍ、１Ｈ）、４．１５〜４．０３（ｍ、３Ｈ）、２．９５〜２．７４（ｍ、２Ｈ）、２．２５（ｓ、２Ｈ）、２．１２（ｄ、Ｊ＝６．４Ｈｚ、２Ｈ）、１．７０〜１．６１（ｍ、２Ｈ）、１．５８（ｑ、Ｊ＝６．０、５．５Ｈｚ、２Ｈ）。
【０３４５】
実施例４５
（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−（１−メチル−１Ｈ−インドール−４−イル）イソニコチンアミドの合成
【化１２７】
2021506972.tif 000149
化合物６６ａ．トルエン（１６ｍＬ）および水（４ｍＬ）の混合物中エチル３−ブロモイソニコチナート（０．２ｇ、０．９３ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、１−メチル−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−インドール（０．４８ｇ、１．８５ｍｍｏｌ、２．０当量）、Ｋ２ＣＯ３（０．３８２ｇ、２．７８ｍｍｏｌ、３．０当量）を添加し、得られた反応混合物をＮ２ガスで１０分間パージし、続いてＰｄ（ＰＰｈ３）２Ｃｌ２（０．０３３ｇ、０．０４６ｍｍｏｌ．０．０５当量）を添加した。得られた反応混合物を１００℃で一晩加熱した。生成物形成を、ＬＣＭＳによって確認した。反応の完了後、混合物をｃｅｌｉｔｅベッドに通して濾過し、酢酸エチル（１００ｍＬ）で洗浄した。濾過物を減圧下で濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶出剤としてヘキサン中０〜２０％酢酸エチル）によって精製して、メチル３−（１−メチル−１Ｈ−インドール−４−イル）イソニコチナート（０．１８０ｇ、７３．４％）を黄色の油として得た。
【０３４６】
ＬＣＭＳ  ２６７．２［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．７４（ｓ、１Ｈ）、８．６７（ｄ、Ｊ＝４．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．６７〜７．４９（ｍ、３Ｈ）、７．４０（ｄ、Ｊ＝３．１Ｈｚ、１Ｈ）、７．１２（ｄ、Ｊ＝８．８Ｈｚ、１Ｈ）、６．４９（ｄ、Ｊ＝３．１Ｈｚ、１Ｈ）、３．９２（ｓ、３Ｈ）、３．６３（ｓ、３Ｈ）。
【０３４７】
化合物６６ｂ．ＴＨＦ（５ｍＬ）および水（５ｍＬ）中メチル−１Ｈ−インドール−４−イル）イソニコチナート（０．１８ｇ、０．６７ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、ＬｉＯＨ．Ｈ２Ｏ（０．０８５ｇ、２．６３ｍｍｏｌ、３．０当量）を添加した。混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳによって確認した。反応混合物を濃縮し、水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１５ｍＬｘ２）で洗浄した。水性層を分離し、凍結乾燥させて、３−（１−メチル−１Ｈ−インドール−４−イル）イソニコチン酸（定量的収率）を白色の固体として得た。
【０３４８】
ＬＣＭＳ  ２５３．２［Ｍ＋Ｈ］＋
化合物６６．ＤＭＦ（２ｍＬ）中３−（１−メチル−１Ｈ−インドール−４−イル）イソニコチン酸（０．０５０ｇ、０．１９８ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−１−グリシルピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（０．０４４ｇ、０．１９８ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＥＤＣＩ．ＨＣｌ（０．０５７ｇ、０．２９７ｍｍｏｌ、１．５当量）、ＨＯＢｔ（０．０４ｇ、０．２９７ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加した。得られた反応混合物を室温で１０分間撹拌させた。Ｅｔ３Ｎ（０．２ｍＬ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳおよびＴＬＣによって確認した。反応の完了後、混合物を水（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×２）で抽出した。組み合わせた有機抽出物を水（１０ｍＬ×４）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶出剤としてＤＣＭ中５％ＭｅＯＨ）によって精製して、（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−（１−メチル−１Ｈ−インドール−４−イル）イソニコチンアミド（０．０１３ｇ、収率１５．５％）を白色の固体として得た。
【０３４９】
ＬＣＭＳ  ４２４．３［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．９１（ｔ、Ｊ＝６．０Ｈｚ、１Ｈ）、８．６９（ｓ、１Ｈ）、８．６１（ｄ、Ｊ＝４．９Ｈｚ、１Ｈ）、８．１９（ｔ、Ｊ＝５．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．７４（ｄ、Ｊ＝１．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．４９〜７．４０（ｍ、２Ｈ）、７．４０〜７．２９（ｍ、２Ｈ）、６．４７（ｄ、Ｊ＝３．１Ｈｚ、１Ｈ）、５．０８（ｄｄｄ、Ｊ＝１５．６、９．３、２．８Ｈｚ、２Ｈ）、４．１８（ｔ、Ｊ＝１３．４Ｈｚ、２Ｈ）、４．１０〜３．８９（ｍ、６Ｈ）、３．８１（ｓ、４Ｈ）、２．９１〜２．７２（ｍ、４Ｈ）、１．８８（ｓ、２Ｈ）、１．３２〜１．２１（ｍ、５Ｈ）、０．８４（ｑ、Ｊ＝１０．７、８．５Ｈｚ、１Ｈ）。
【０３５０】
実施例４６
（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−（インドリン−５−イル）イソニコチンアミドの合成
【化１２８】
2021506972.tif 000150
化合物１０４ａ．トルエン（８ｍＬ）および水（２ｍＬ）中エチル３−ブロモイソニコチナート（０．２ｇ、０．９２２ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、ｔｅｒｔ−ブチル５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）インドリン−１−カルボキシレート（０．３８１ｇ、１．１０６ｍｍｏｌ、１．２当量）、Ｋ２ＣＯ３（０．３８ｇ、２．７６４ｍｍｏｌ、３．０当量）を添加し、得られた反応混合物をＮ２ガスで１０分間パージし、続いてＰｄ（ＰＰｈ３）４（０．０３３ｇ、０．０４６ｍｍｏｌ．０．０５当量）を添加した。得られた反応混合物を１００℃で一晩加熱した。生成物形成を、ＬＣＭＳによって確認した。反応の完了後、混合物をｃｅｌｉｔｅ（登録商標）ベッドに通して濾過し、酢酸エチル（１００ｍＬ）で洗浄した。濾過物を減圧下で濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶出剤としてヘキサン中０〜２０％酢酸エチル）によって精製して、ｔｅｒｔ−ブチル５−（４−（メトキシカルボニル）ピリジン−３−イル）インドリン−１−カルボキシレート（０．２００ｇ、６１．３４％）の化合物を黄色の油として得た。
【０３５１】
ＣＭＳ  ３５５．４［Ｍ＋Ｈ］＋
化合物１０４ｂ．ＴＨＦ（８ｍＬ）および水（８ｍＬ）中化合物ｔｅｒｔ−ブチル５−（４−（メトキシカルボニル）ピリジン−３−イル）インドリン−１−カルボキシレート（０．２００ｇ、０．５６５ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、ＬｉＯＨ（０．０２８ｇ、１．２９ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加した。混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳによって確認した。反応混合物を濃縮し、水（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬｘ２）で洗浄した。水性層を分離し、凍結乾燥機で凍結乾燥させて、化合物３−（１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）インドリン−５−イル）イソニコチン酸（定量的収率）を白色の固体として得た。
【０３５２】
ＣＭＳ  ３４１．４［Ｍ＋Ｈ］＋
化合物１０４ｃ．ＤＭＦ（３ｍＬ）中化合物３−（１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）インドリン−５−イル）イソニコチン酸（０．０５０ｇ、０．１４７ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−１−グリシルピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（０．０３４ｇ、０．１４７ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＥＤＣＩ．ＨＣｌ（０．０４２ｇ、０．２２５ｍｍｏｌ、１．５当量）、ＨＯＢＴ（０．０３ｇ、０．２２５ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加した。混合物を室温で３０分間撹拌させた。トリエチルアミン（０．２ｍＬ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳによって確認した。反応の完了後、混合物を水（０．１ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×２）で抽出した。組み合わせた有機抽出物を、水（１０ｍＬ×４）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮して、ｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−５−（４−（（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）カルバモイル）ピリジン−３−イル）インドリン−１−カルボキシレート（０．０３５ｇ、収率４６％）を黄色の固体として得た。
【０３５３】
ＣＭＳ  ５１２．４［Ｍ＋Ｈ］＋
化合物１０４．ＤＣＭ（５ｍＬ）中ｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−５−（４−（（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）カルバモイル）ピリジン−３−イル）インドリン−１−カルボキシレート（０．０７ｇ、０．１４ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、トリフルオロ酢酸（０．５ｍＬ）を添加した。混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳによって確認した。反応混合物を濃縮し、粗製物を逆相精製によって精製して、（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−（インドリン−５−イル）イソニコチンアミド（０．０２２ｇ、収率４０％）を白色の固体として得た。
【０３５４】
ＣＭＳ  ５１２．３［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．８３（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、８．５８（ｓ、１Ｈ）、８．５２（ｄ、Ｊ＝４．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．３３（ｄ、Ｊ＝４．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．２６（ｓ、１Ｈ）、７．０８（ｄ、Ｊ＝６．６Ｈｚ、１Ｈ）、６．５０（ｄ、Ｊ＝７．９Ｈｚ、１Ｈ）、５．６８（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、５．０９（ｄ、Ｊ＝７．５Ｈｚ、１Ｈ）、４．２１（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、４．０６（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、４．００（ｂｒ．ｓ．、３Ｈ）、３．４５（ｔ、Ｊ＝８．６Ｈｚ、２Ｈ）、２．９６（ｄ、Ｊ＝９．２Ｈｚ、２Ｈ）、２．８０（ｄ、Ｊ＝１７．５Ｈｚ、１Ｈ）。
【０３５５】
実施例４７
（Ｓ）−３−（６−クロロナフタレン−２−イル）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）イソニコチンアミドの合成
【化１２９】
2021506972.tif 000151
化合物１０８ａ．ジオキサン（４ｍＬ）中メチル３−ブロモイソニコチナート（０．１５０ｇ、０．６９４ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、２−（６−クロロナフタレン−２−イル）−４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン（０．３００ｇ、１．０４ｍｍｏｌ、１．５当量）、Ｋ２ＣＯ３（０．１９２ｇ、１．３８ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加し、得られた反応混合物をＮ２ガスで１０分間パージし、続いてＰｄ（ＰＰｈ３）Ｃｌ２（０．０２４ｇ、０．０３４７ｍｍｏｌ．０．０５当量）を添加した。得られた反応混合物を、１００℃で一晩加熱した。生成物形成を、ＬＣＭＳによって確認した。反応の完了後、混合物をｃｅｌｉｔｅベッドに通して濾過し、酢酸エチル（１００ｍＬ）で洗浄した。濾過物を減圧下で濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶出剤としてヘキサン中０〜２０％酢酸エチル）によって精製して、メチル３−（６−クロロナフタレン−２−イル）イソニコチナート（０．２００ｇ、収率９７．４３％）を黄色の固体として得た。
【０３５６】
ＬＣＭＳ  ２９８．１［Ｍ＋Ｈ］＋
化合物１０８ｂ．ＴＨＦ（４ｍＬ）および水（４ｍＬ）中メチル３−（６−クロロナフタレン−２−イル）イソニコチナート（０．２００ｇ、０．６７３ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、ＬｉＯＨ．Ｈ２Ｏ（０．０４３ｇ、１．０１１ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加した。混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳおよび１Ｈ  ＮＭＲ分光法によって確認した。反応混合物を濃縮し、水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×２）で洗浄した。水性層を分離し、凍結乾燥機で凍結乾燥させて、３−（６−クロロナフタレン−２−イル）イソニコチン酸（定量的収率）を黄色の固体として得た。
【０３５７】
ＬＣＭＳ  ２８４．２［Ｍ＋Ｈ］＋
化合物１０８．ＤＭＦ（５ｍＬ）中３−（６−クロロナフタレン−２−イル）イソニコチン酸（０．１３０ｇ、０．４５９ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−１−グリシルピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（０．１０３ｇ、０．４５９ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＥＤＣＩ．ＨＣｌ（０．１３３ｇ、０．６８８ｍｍｏｌ、１．５当量）、およびＨＯＢｔ（０．０９４ｇ、０．６８８ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加した。混合物を室温で１０分間撹拌させた。ＴＥＡ（０．３ｍＬ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳおよびＴＬＣによって確認した。反応の完了後、混合物を水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ×２）で抽出した。組み合わせた有機抽出物を水（２０ｍＬ×４）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶出剤としてＤＣＭ中５％ＭｅＯＨ）によって精製して、（Ｓ）−３−（６−クロロナフタレン−２−イル）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）イソニコチンアミド（０．１００ｇ、収率４８％）を灰色がかった白色の固体として得た。
【０３５８】
ＬＣＭＳ  ４５５．２［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ９．１２（ｔ、Ｊ＝５．９Ｈｚ、１Ｈ）、８．８２（ｓ、１Ｈ）、８．７２（ｄ、Ｊ＝４．８Ｈｚ、１Ｈ）、８．２３（ｓ、１Ｈ）、８．１２〜８．００（ｍ、２Ｈ）、７．９５（ｄ、Ｊ＝８．３Ｈｚ、１Ｈ）、７．７５（ｄｄ、Ｊ＝１．８、８．３Ｈｚ、１Ｈ）、７．６１〜７．４５（ｍ、２Ｈ）、５．１２（ｄｄ、Ｊ＝２．９、９．０Ｈｚ、１Ｈ）、４．２７〜３．９７（ｍ、３Ｈ）、２．９５〜２．７６（ｍ、２Ｈ）。
【０３５９】
実施例４８
（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−６−ヒドロキシ−２−フェニルニコチンアミドの合成
【化１３０】
2021506972.tif 000152
化合物３０ａ．ＭｅＯＨ（５０ｍＬ）中２，６−ジクロロニコチン酸（２．０ｇ、１０．４１ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、化合物ｔｅｒｔ−ブトキシドカリウム（４．７ｇ、４１．６６ｍｍｏｌ、４．０当量）を添加し、得られた反応混合物を７０℃で３時間加熱した。生成物形成を、ＬＣＭＳおよびＴＬＣによって確認した。反応の完了後、反応混合物を最大濃縮し、水（５０ｍｌ）で希釈した。水性層を酢酸エチル（３０ｍＬ×３）で抽出した。濾過物を減圧下で濃縮した。組み合わせた有機抽出物を、ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶出剤としてＤＣＭ中５％ＭｅＯＨ）によって精製して、２−クロロ−６−メトキシニコチン酸（１．８ｇ、９６．４％）を白色の固体として得た。
【０３６０】
ＬＣＭＳ  １８８［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１３．３３（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、８．０６〜８．２４（ｍ、１Ｈ）、６．９２（ｄ、Ｊ＝８．７７Ｈｚ、１Ｈ）、３．９１（ｓ、３Ｈ）。
【０３６１】
化合物３０ｂ．ジオキサン（１０ｍＬ）中２−クロロ−６−メトキシニコチン酸（０．２００ｇ、１．０７ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、化合物（０．１９５ｇ、１．６０４ｍｍｏｌ、１．５当量）、Ｎａ２ＣＯ３（０．２３ｇ、２．１４ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加し、得られた反応混合物をＮ２ガスで１０分間パージし、続いてＰｄ（ＰＰｈ３）４（０．０６２ｇ、０．０５４ｍｍｏｌ．０．０５当量）を添加した。得られた反応混合物を、１００℃で一晩加熱した。生成物形成を、ＬＣＭＳおよびＴＬＣによって確認した。反応の完了後、混合物をｃｅｌｉｔｅベッドに通して濾過し、酢酸エチル（１００ｍＬ）で洗浄した。濾過物を減圧下で濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶出剤としてＤＣＭ中０〜２％ＭｅＯＨ）によって精製し、６−メトキシ−２−フェニルニコチン酸（０．０７ｇ、収率２８．６％）を白色の固体として得た。
【０３６２】
ＬＣＭＳ  ２３０［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１２．８９（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、８．１７（ｄ、Ｊ＝６．５８Ｈｚ、３Ｈ）、７．６７（ｄ、Ｊ＝７．４５Ｈｚ、１Ｈ）、７．３８〜７．６０（ｍ、３Ｈ）、４．０４（ｓ、３Ｈ）。
【０３６３】
化合物３０ｃ．ＤＭＦ（５ｍＬ）中６−メトキシ−２−フェニルニコチン酸（０．０５０ｇ、０．２１８ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−１−グリシルピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（０．０７３ｇ、０．３２７ｍｍｏｌ、１．５当量）およびＴＢＴＵ（０．１０４ｇ、０．３２７ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加した。混合物を室温で１０分間撹拌させた。Ｎ−メチルモルホリン（０．１ｍＬ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳおよびＴＬＣによって確認した。反応の完了後、混合物を水（１５ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×２）で抽出した。組み合わせた有機抽出物を水（１０ｍＬ×４）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶出剤としてＤＣＭ中５％ＭｅＯＨ）によって精製し、続いて逆相精製して、（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−６−メトキシ−２フェニルニコチンアミド（０．０１５ｇ、収率１７．２％）を白色の固体として得た。
【０３６４】
ＬＣＭＳ  ４０１．２［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．７６（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、８．４８（ｓ、２Ｈ）、７．７９（ｄ、Ｊ＝８．３３Ｈｚ、２Ｈ）、７．３９（ｂｒ．ｓ．、２Ｈ）、６．８６（ｄ、Ｊ＝８．３３Ｈｚ、１Ｈ）、５．１０（ｄ、Ｊ＝７．４５Ｈｚ、１Ｈ）、４．２３（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、３．９８〜４．１２（ｍ、２Ｈ）、３．９４（ｓ、３Ｈ）、２．９０（ｄ、Ｊ＝８．３３Ｈｚ、１Ｈ）、２．７０〜２．８６（ｍ、１Ｈ）、２．６７（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）。
【０３６５】
化合物３０．ＤＣＭ（５ｍＬ）中（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−６−メトキシ−２フェニルニコチンアミド（０．０３５ｇ、０．０８７ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、ＤＣＭ（５ｍｌ）中に溶解したＴＭＳＩ（１ｍｌ）を滴下で添加した。混合物を室温で１０分間撹拌させ、次いで５０℃で２時間撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳおよびＴＬＣによって確認した。反応の完了後、混合物を乾燥するまで濃縮し、残基を酢酸エチル（１５ｍＬ）で希釈し、水（１０ｍＬ×２）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。得られた粗生成物を逆相精製によって精製して、（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−６−ヒドロキシ−２−フェニルニコチンアミド（０．００３ｇ、収率８．９％）を灰色がかった白色の固体として得た。
【０３６６】
ＬＣＭＳ  ３８７．２［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１０．１８（ｓ、１Ｈ）、８．３７（ｄ、Ｊ＝７．９Ｈｚ、１Ｈ）、７．８２（ｂｒ．ｓ．、２Ｈ）、７．５４（ｂｒ．ｓ．、２Ｈ）、６．８１（ｄ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、１Ｈ）、５．１２（ｄ、Ｊ＝８．８Ｈｚ、１Ｈ）、４．３７〜４．１８（ｍ、２Ｈ）、４．１８〜３．９５（ｍ、１Ｈ）、２．８９（ｓ、１Ｈ）、２．８１（ｄ、Ｊ＝８．８Ｈｚ、２Ｈ）。
【０３６７】
実施例４９
（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−（ｏ−トリル）イソニコチンアミドの合成
【化１３１】
2021506972.tif 000153
化合物６４ａ．トルエン（１５ｍＬ）および水（２ｍＬ）中エチル３−ブロモイソニコチナート（０．３ｇ、１．３８ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、ｏ−トリルボロン酸（０．２８８ｇ、１．６６ｍｍｏｌ、１．２当量）、Ｋ２ＣＯ３（０．５７１ｇ、４．１４ｍｍｏｌ、３．０当量）を添加し、得られた反応混合物をＮ２ガスで１０分間パージし、続いてＰｄ（ＰＰｈ３）４（０．０８ｇ、０．００７ｍｍｏｌ．０．０５当量）を添加した。得られた反応混合物を９０℃で一晩加熱した。生成物形成を、ＬＣＭＳによって確認した。反応の完了後、混合物をｃｅｌｉｔｅベッドに通して濾過し、酢酸エチル（１００ｍＬ）で洗浄した。濾過物を減圧下で濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶出剤としてヘキサン中０〜２０％酢酸エチル）によって精製して、メチル３−（ｏ−トリル）イソニコチナート（０．３００ｇ、９５％）を黄色の液体として得た。
【０３６８】
ＬＣＭＳ  ２２８．３［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．７６（ｄ、Ｊ＝５．３Ｈｚ、１Ｈ）、８．５５（ｓ、１Ｈ）、７．７７（ｄ、Ｊ＝４．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．３９〜７．１４（ｍ、３Ｈ）、７．０８（ｄ、Ｊ＝７．５Ｈｚ、１Ｈ）、３．３３（ｓ、３Ｈ）、２．０２（ｓ、３Ｈ）
【０３６９】
化合物６４ｂ．ＴＨＦ（５ｍＬ）および水（５ｍＬ）中メチル３−（ｏ−トリル）イソニコチナート（０．４ｇ、１．７６２ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、ＬｉＯＨ．Ｈ２Ｏ（０．１４８ｇ、３．５２４ｍｍｏｌ、２．０当量）を得た。混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳによって確認した。反応混合物を濃縮し、水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×２）で洗浄した。水性層を分離し、凍結乾燥機で凍結乾燥させて、３−（ｏ−トリル）イソニコチン酸（定量的収率）を白色の固体として得た。
【０３７０】
ＬＣＭＳ  ２１４．２［Ｍ＋Ｈ］＋
化合物６４．ＤＭＦ（４ｍＬ）中３−（ｏ−トリル）イソニコチン酸（０．１００ｇ、０．４６９ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−１−グリシルピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（０．１０５ｇ、０．４６９ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＥＤＣＩ．ＨＣｌ（０．１３５ｇ、０．７０４ｍｍｏｌ、１．５当量）、およびＨＯＢｔ（０．０９６ｇ、０．７０４ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加した。混合物を室温で１０分間撹拌させた。トリエチルアミン（０．５ｍＬ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳおよびＴＬＣによって確認した。反応の完了後、混合物を水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ×２）で抽出した。組み合わせた有機抽出物を水（２０ｍＬ×４）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶出剤としてＤＣＭ中３％ＭｅＯＨ）によって精製して、（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−（ｏ−トリル）イソニコチンアミド（０．１ｇ、収率５５．５％）を白色の固体として得た。
【０３７１】
ＬＣＭＳ  ３１５．２［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．７９〜８．６２（ｍ、２Ｈ）、８．４６（ｓ、１Ｈ）、７．５２（ｄ、Ｊ＝４．４Ｈｚ、１Ｈ）、７．２５（ｂｒ．ｓ．、２Ｈ）、７．２２〜７．０３（ｍ、２Ｈ）、５．０６（ｄ、Ｊ＝８．８Ｈｚ、１Ｈ）、４．１４（ｄ、Ｊ＝１２．７Ｈｚ、１Ｈ）、４．０３〜３．８３（ｍ、２Ｈ）、２．８７（ｄ、Ｊ＝１６．７Ｈｚ、１Ｈ）、２．８１〜２．６９（ｍ、２Ｈ）、２．０９（ｓ、３Ｈ）。
【０３７２】
実施例５０
（Ｒ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−シクロプロピルイソニコチンアミドの合成
【化１３２】
2021506972.tif 000154
化合物３７．ＤＭＦ（０５ｍＬ）中３−シクロプロピルイソニコチン酸（０．１００ｇ、０６０ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、（Ｒ）−４，４−ジフルオロ−１−グリシルピロリジン−２−カルボニトリル．ＨＣｌ（０．１３８ｇ、０．６０ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＨＯＢｔ（０．０９８ｇ、０．７２ｍｍｏｌ、１．２当量）、およびＥＤＣ．ＨＣｌ（０．１３８ｇ、０．７２ｍｍｏｌ、１．２当量）を添加した。混合物を室温で１０分間撹拌させた。トリエチルアミン（０．２ｍＬ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳおよびＴＬＣによって確認した。反応混合物を水で希釈し、酢酸エチル（５０ｍＬ×２）で抽出した。組み合わせた有機抽出物を水（２０ｍＬ×４）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。得られた粗生成物を逆相ＨＰＬＣによって精製して、（Ｒ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−シクロプロピルイソニコチンアミド（０．００５ｇ、収率０３％）を白色の固体として得た。
【０３７３】
ＬＣＭＳ  ３３５［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−δ８．８５（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、８．４４（ｄ、Ｊ＝４．４Ｈｚ、１Ｈ）、８．２４（ｓ、１Ｈ）、７．２６（ｄ、Ｊ＝４．８Ｈｚ、１Ｈ）、５．１２（ｄ、Ｊ＝７．５Ｈｚ、１Ｈ）、４．２７（ｄ、Ｊ＝１２．３Ｈｚ、２Ｈ）、４．２１〜３．９９（ｍ、２Ｈ）、２．９８〜２．８６（ｍ、１Ｈ）、２．８１（ｄ、Ｊ＝１７．１Ｈｚ、１Ｈ）、２．７３（ｓ、１Ｈ）、２．２１（ｂｒ．ｓ．、２Ｈ）、１．２４（ｂｒ．ｓ．、２Ｈ）。
【０３７４】
実施例５１
（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−６−オキソ−４−フェニル−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボキサミドの合成
【化１３３】
2021506972.tif 000155
化合物２９ａ．ジオキサン（４ｍＬ）および水（１ｍＬ）中メチル４−クロロ−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボキシレート（０．２００ｇ、１．０７ｍｍｏｌ、１当量）の撹拌溶液に、Ｎａ２ＣＯ３（０．２２７ｇ、２．１４ｍｍｏｌ、２当量）およびフェニルボロン酸（０．１９６ｇ、１．６１ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加した。反応混合物を窒素ガスで１５分間空気混和した。Ｐｄ（ＰＰｈ３）２Ｃｌ２（０．０７８ｇ、０．１１ｍｍｏｌ、０．１当量）を反応混合物に添加した。反応混合物を再度窒素ガスで１５分間空気混和した。反応混合物を１００℃で１６時間撹拌させた。反応の進行をＬＣＭＳによって監視した。反応の完了後、反応混合物を水（１５ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２５ｍＬＸ２）で抽出した。組み合わせた有機抽出物を、ブライン（２５ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮して、メチル６−オキソ−４−フェニル−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボキシレート（０．１７０ｇ、収率６９％）を灰色がかった白色の固体として得た。
【０３７５】
ＬＣＭＳ  ２３０．３［Ｍ＋Ｈ］＋
化合物２９ｂ．ＥｔＯＨおよび水（１：１）（６ｍＬ）中メチル６−オキソ−４−フェニル−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボキシレート（０．１７０ｇ、０．７４ｍｍｏｌ、１当量）の撹拌溶液に、ＮａＯＨ（０．０５９ｇ、１．４８ｍｍｏｌ、２当量）を添加した。混合物を５０℃で１６時間撹拌させた。反応の進行をＬＣＭＳによって監視した。反応の完了後、反応混合物を１Ｍ  ＨＣｌ（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬＸ３）で抽出した。組み合わせた有機抽出物を、ブライン（２５ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶出剤としてＤＣＭ中０〜１０％ＭｅＯＨ）によって精製して、６−オキソ−４−フェニル−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボン酸（０．０９０ｇ、収率５６％）を灰色がかった白色の固体として得た。
【０３７６】
ＬＣＭＳ  ２１６．２［Ｍ＋Ｈ］＋
化合物２９．ＤＭＦ（３ｍＬ）中６−オキソ−４−フェニル−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボン酸（０．０８０ｇ、０．３７ｍｍｏｌ、１当量）の撹拌溶液に、（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−１−グリシルピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（０．０８３ｇ、０．３７ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＨＯＢｔ（０．０５９ｇ、０．４４ｍｍｏｌ、１．２当量）、およびＥＤＣ．ＨＣｌ（０．０８５ｇ、０．４４ｍｍｏｌ、１．２当量）を添加した。混合物を室温で１０分間撹拌させた。トリエチルアミン（０．１１２ｇ、１．１１ｍｍｏｌ、３．０当量）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳによって確認した。反応混合物を水で希釈し、酢酸エチル（４０ｍＬ×２）で抽出した。組み合わせた有機抽出物を水（１５ｍＬ×４）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。得られた粗生成物を、順相コンビフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−６−オキソ−４−フェニル−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボキサミド（０．０４５ｇ、収率３１．２５％）を灰色がかった白色の固体として得た。
【０３７７】
ＬＣＭＳ  ３８７．３［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１２．３９〜１１．７０（ｍ、１Ｈ）、８．６６（ｔ、Ｊ＝５．９Ｈｚ、１Ｈ）、７．６４（ｓ、１Ｈ）、７．４４〜７．３２（ｍ、５Ｈ）、６．２９（ｓ、１Ｈ）、５．０８（ｄｄ、Ｊ＝９．３、２．９Ｈｚ、１Ｈ）、４．２０（ｄｄｄ、Ｊ＝１６．０、１１．６、４．４Ｈｚ、１Ｈ）、４．０１（ｄｄ、Ｊ＝１９．７、８．６Ｈｚ、３Ｈ）、２．９６〜２．７０（ｍ、２Ｈ）、１．３８〜１．２１（ｍ、３Ｈ）、１．１６（ｓ、１Ｈ）。
【０３７８】
実施例５２
（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−フェノキシイソニコチンアミドの合成
【化１３４】
2021506972.tif 000156
化合物９７ａ．ＤＭＦ（１０ｍＬ）中メチル３−ブロモイソニコチナート（１．０ｇ、４．６５ｍｍｏｌ、１当量）の撹拌溶液に、フェノール（０．４３７ｇ、４．６５ｍｍｏｌ、１当量）、ＣｕＩ（１．７６２ｇ、９．３ｍｍｏｌ、２当量）、およびＣｓ２ＣＯ３（３．０３ｇ、１０．０ｍｍｏｌ、２当量）を添加した。反応混合物を１１０℃で１８時間加熱した。反応の進行をＬＣＭＳによってチェックした。反応混合物を水（２０ｍＬ）で希釈し、ｐＨが、わずかに酸性になるまで希釈ＨＣｌを数滴添加した。水性層を酢酸エチル（５０ｍＬ×２）で抽出した。組み合わせた有機抽出物を、ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、３−フェノキシイソニコチン酸（０．２００ｇ、収率２０％）を灰色がかった白色の固体として得た。
【０３７９】
ＬＣＭＳ：２１６．１［Ｍ＋Ｈ］＋
化合物９７．ＤＭＦ（３ｍＬ）中３−フェノキシイソニコチン酸（０．１４０ｇ、０．６５ｍｍｏｌ、１当量）の撹拌溶液に、（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−１−グリシルピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（０．１４６ｇ、０．６５ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＨＯＢｔ（０．１０５ｇ、０．７８ｍｍｏｌ、１．２当量）、およびＥＤＣ．ＨＣｌ（０．１４９ｇ、０．７８ｍｍｏｌ、１．２当量）を添加した。混合物を室温で１０分間撹拌させた。トリエチルアミン（０．１９７ｇ、１．９５ｍｍｏｌ、３当量）を添加し、混合物を周囲温度で１６時間撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳによって確認した。反応混合物を水（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（４０ｍＬ×２）で抽出した。組み合わせた有機抽出物を水（２５ｍＬ×５）で洗浄した。有機抽出物を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して粗生成物を得た。得られた粗生成物を、順相コンビフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−フェノキシイソニコチンアミド（０．０５０ｇ、収率１９．９％）を灰色がかった白色の固体として得た。
【０３８０】
ＬＣＭＳ  ３８７．２［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．８０（ｔ、Ｊ＝５．２Ｈｚ、１Ｈ）、８．４９（ｄ、Ｊ＝４．９Ｈｚ、１Ｈ）、８．２５（ｓ、１Ｈ）、７．６７（ｄ、Ｊ＝４．９Ｈｚ、１Ｈ）、７．４３（ｔ、Ｊ＝７．９Ｈｚ、２Ｈ）、７．２１（ｔ、Ｊ＝７．５Ｈｚ、１Ｈ）、７．１１（ｄ、Ｊ＝８．０Ｈｚ、２Ｈ）、５．１０（ｄｄ、Ｊ＝９．３、３．０Ｈｚ、１Ｈ）、４．２９〜３．９８（ｍ、４Ｈ）、２．９３〜２．７３（ｍ、２Ｈ）、１．２３（ｄ、Ｊ＝３．６Ｈｚ、１Ｈ）。
【０３８１】
実施例５３
Ｎ−（２−（（２Ｒ）−２−シアノ−４，４−ジフルオロシクロペンチル）−２−オキソエチル）−３−（フェニルアミノ）イソニコチンアミドの合成
【化１３５】
2021506972.tif 000157
化合物１０２ａ．トルエン（６ｍＬ）中メチル３−ブロモイソニコチナート（１．０ｇ、４．６５ｍｍｏｌ、１当量）の撹拌溶液に、アニリン（０．４７６ｇ、５．１２ｍｍｏｌ、１．１当量）、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（０．４３１ｇ、０．４７ｍｍｏｌ、０．１当量）、キサントホス（０．５３９ｇ、０．９３ｍｍｏｌ、０．２当量）、およびＣｓ２ＣＯ３（２．２８ｇ、６．９８ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加した。得られた反応混合物を、電子レンジで、１９０℃で１時間加熱した。反応の進行をＬＣＭＳによってチェックした。反応混合物を水（１５ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（３０ｍＬ×２）で抽出した。組み合わせた有機抽出物を、ブライン（３０ｍＬ）で洗浄し、有機抽出物を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。粗化合物を、順相コンビフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、メチル−３−（フェニルアミノ）イソニコチナート（０．３００ｇ、収率２８％）を黄色の半固体として得た。
【０３８２】
ＬＣＭＳ：２２９．２［Ｍ＋Ｈ］＋
化合物１０２ｂ．ＴＨＦおよび水（１：１）（４ｍＬ）中メチル−３−（フェニルアミノ）イソニコチナート（０．３００ｇ、１．３１ｍｍｏｌ、１当量）の撹拌溶液に、ＬｉＯＨ．Ｈ２Ｏ（０．０８３ｇ、１．９７ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加した。混合物を周囲温度で１６時間撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳによって確認した。反応混合物を水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチルで抽出し、水性層を減圧下で濃縮し、凍結乾燥させて、３−（フェニルアミノ）イソニコチン酸（０．２６０ｇ）を灰色がかった白色の固体として得た。
【０３８３】
ＬＣＭＳ  ２１５．２［Ｍ＋Ｈ］＋
化合物１０２．ＤＭＦ（３ｍＬ）中３−（フェニルアミノ）イソニコチン酸（０．２６０ｇ、１．２１ｍｍｏｌ、１当量）の撹拌溶液に、（１Ｒ）−４，４−ジフルオロ−２−グリシルシクロペンタン−１−カルボニトリル塩酸塩（０．２７２ｇ、１．２１ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＨＯＢｔ（０．１９６ｇ、１．４５ｍｍｏｌ、１．２当量）、およびＥＤＣ．ＨＣｌ（０．２７８ｇ，１．４５ｍｍｏｌ、１．２当量）を添加し、トリエチルアミン（０．３６６ｇ、３．６３ｍｍｏｌ、３当量）を添加し、混合物を周囲温度で１６時間撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳによって確認した。反応混合物を水（１５ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（４０ｍＬ×３）で抽出した。組み合わせた有機抽出物を水（２５ｍＬ×５）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、粗生成物を得、それを逆相ＨＰＬＣ  Ｎ−（２−（（２Ｒ）−２−シアノ−４，４−ジフルオロシクロペンチル）−２−オキソエチル）−３−（フェニルアミノ）イソニコチンアミド（０．００４ｇ、収率０．８％）によって精製した。
【０３８４】
ＬＣＭＳ  ３８６．２［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ９．２２〜９．０７（ｍ、２Ｈ）、８．６４（ｓ、１Ｈ）、８．１２（ｄ、Ｊ＝５．０Ｈｚ、１Ｈ）、７．５８（ｄ、Ｊ＝５．０Ｈｚ、１Ｈ）、７．３４（ｔ、Ｊ＝７．７Ｈｚ、２Ｈ）、７．２２（ｄ、Ｊ＝７．８Ｈｚ、２Ｈ）、７．０３（ｔ、Ｊ＝７．４Ｈｚ、１Ｈ）、５．１３（ｄｄ、Ｊ＝９．４、２．９Ｈｚ、１Ｈ）、４．３６〜４．２５（ｍ、１Ｈ）、４．２５〜４．０４（ｍ、３Ｈ）、３．００〜２．７４（ｍ、２Ｈ）、２．０９（ｓ、３Ｈ）、１．２４（ｓ、１Ｈ）。
【０３８５】
実施例５４
（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−１’，２’，３’，６’−テトラヒドロ−［３，４’−ビピリジン］−４−カルボキサミド２，２，２−トリフルオロ酢酸塩の合成
【化１３６】
2021506972.tif 000158
化合物１０５ａ．トルエン（８ｍＬ）および水（２ｍＬ）中エチル３−ブロモイソニコチナート（０．２ｇ、０．９２５ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、ｔｅｒｔ−ブチル  ４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−３，６−ジヒドロピリジン−１（２Ｈ）−カルボキシレート（０．４２９ｇ、１．３９ｍｍｏｌ、１．５当量）、Ｋ２ＣＯ３（０．２５５ｇ、１．８５ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加し、得られた反応混合物をＮ２ガスで１０分間パージし、続いてＰｄ（ＰＰｈ２）Ｃｌ２（０．０３３ｇ、０．０４６ｍｍｏｌ．０．０５当量）を添加した。得られた反応混合物を９０℃で一晩加熱した。生成物形成を、ＬＣＭＳによって確認した。反応の完了後、混合物をｃｅｌｉｔｅベッドに通して濾過し、酢酸エチル（１００ｍＬ）で洗浄した。濾過物を減圧下で濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶出剤としてヘキサン中０〜２０％酢酸エチル）によって精製して、１’−（ｔｅｒｔ−ブチル）４−メチル３’，６’−ジヒドロ−［３，４’−ビピリジン］−１’，４（２’Ｈ）−ジカルボキシレート（０．１３０ｇ、収率４４．４％）を黄色の油として得た。
【０３８６】
ＬＣＭＳ  ３１９．２［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．６５（ｄ、Ｊ＝４．８Ｈｚ、１Ｈ）、８．５９〜８．５２（ｍ、１Ｈ）、７．６３（ｄ、Ｊ＝４．８Ｈｚ、１Ｈ）、５．６８（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、３．９６（ｂｒ．ｓ．、２Ｈ）、３．８７〜３．６９（ｍ、３Ｈ）、３．５２（ｂｒ．ｓ．、２Ｈ）、２．２７（ｂｒ．ｓ．、２Ｈ）、１．５３〜１．２５（ｍ、９Ｈ）、１．０７（ｓ、３Ｈ）。
【０３８７】
化合物１０５ｂ．ＴＨＦ（５ｍＬ）および水（５ｍＬ）中１’−（ｔｅｒｔ−ブチル）４−メチル３’，６’−ジヒドロ−［３，４’−ビピリジン］−１’，４（２’Ｈ）−ジカルボキシレート（０．１３ｇ、０．４０８ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、ＬｉＯＨ（０．０２０ｇ、０．８１７ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加した。混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳおよび１Ｈ  ＮＭＲ分光法によって確認した。反応混合物を濃縮し、水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１５ｍＬ×２）で洗浄した。水性層を分離し、凍結乾燥機で凍結乾燥させて、１’−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−１’，２’，３’，６’−テトラヒドロ−［３，４’−ビピリジン］−４−カルボン酸（定量的収率）を白色の固体として得た。
【０３８８】
ＬＣＭＳ  ３０５．２［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．３０（ｄ、Ｊ＝４．８Ｈｚ、２Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、７．１７（ｄ、Ｊ＝４．８Ｈｚ、１Ｈ）、３．９２（ｂｒ．ｓ．、２Ｈ）、２．３８（ｂｒ．ｓ．、２Ｈ）、２．０６（ｓ、１Ｈ）、２．０４〜１．９２（ｍ、１Ｈ）、１．４３（ｓ、９Ｈ）、１．０６（ｓ、２Ｈ）
【０３８９】
化合物１０５ｃ．ＤＭＦ（５ｍＬ）中１’−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−１’，２’，３’，６’−テトラヒドロ−［３，４’−ビピリジン］−４−カルボン酸（０．１００ｇ、０．３２ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−１−グリシルピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（０．０７４ｇ、０．３２ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＥＤＣＩ．ＨＣｌ（０．０９２ｇ、０．４８ｍｍｏｌ、１．５当量）、およびＨＯＢｔ（０．０６５ｇ、０．４８ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加した。混合物を室温で１０分間撹拌させた。トリエチルアミン（０．５ｍＬ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳおよびＴＬＣによって確認した。反応の完了後、混合物を水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ×２）で抽出した。組み合わせた有機抽出物を水（２０ｍＬ×４）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶出剤としてＤＣＭ中５％ＭｅＯＨ）によって精製し、続いて逆相精製して、ｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−４−（（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）カルバモイル）−３’，６’−ジヒドロ−［３，４’−ビピリジン］−１’（２’Ｈ）−カルボキシレート（０．０２０ｇ、収率１３．１５％）を白色の固体として得た。
【０３９０】
ＬＣＭＳ  ４７６．３［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．８３（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、８．５７（ｄ、Ｊ＝４．８Ｈｚ、１Ｈ）、８．５２（ｓ、１Ｈ）、７．３６（ｄ、Ｊ＝５．３Ｈｚ、１Ｈ）、５．８３（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、５．０９（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、４．２５（ｄ、Ｊ＝１３．６Ｈｚ、２Ｈ）、４．１１（ｄ、Ｊ＝５．３Ｈｚ、２Ｈ）、３．９４（ｂｒ．ｓ．、２Ｈ）、３．４８（ｂｒ．ｓ．、２Ｈ）、２．８１（ｄ、Ｊ＝１７．５Ｈｚ、３Ｈ）、２．６７（ｂｒ．ｓ．、２Ｈ）、２．３５（ｄ、Ｊ＝１４．５Ｈｚ、３Ｈ）、１．４３（ｓ、９Ｈ）。
【０３９１】
化合物１０５・ＴＦＡ．ＤＣＭ（２ｍＬ）中Ｎ−（２−（（Ｓ）−２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−（シクロヘキサ−２−エン−１−イル）イソニコチンアミド（０．０２０ｇ、０．０４２ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、ＴＦＡ（０．０２ｍＬ、０．１２６ｍｍｏｌ、３．０当量）を室温で添加し、混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳによって確認した。反応の完了後、混合物を乾燥するまで濃縮して粗製物を得た。得られた粗生成物を逆相精製によって精製して、（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−１’，２’，３’，６’−テトラヒドロ−［３，４’−ビピリジン］−４−カルボキサミド２，２，２−トリフルオロ酢酸塩（０．００５ｇ、収率３１．７２％）を灰色がかった白色の固体として得た。
【０３９２】
ＬＣＭＳ  ３７６．３［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．７１（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、８．５４（ｄ、Ｊ＝４．４Ｈｚ、１Ｈ）、８．４７（ｓ、１Ｈ）、７．３３（ｄ、Ｊ＝４．４Ｈｚ、２Ｈ）、５．８５（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、５．１１（ｄ、Ｊ＝８．３Ｈｚ、１Ｈ）、４．２６（ｄ、Ｊ＝１２．３Ｈｚ、１Ｈ）、４．１５〜４．００（ｍ、２Ｈ）、３．３１（ｂｒ．ｓ．、４Ｈ）、２．９８〜２．８２（ｍ、３Ｈ）、２．７９（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、２．２４（ｂｒ．ｓ．、２Ｈ）、１．８０（ｂｒ．ｓ．、３Ｈ）、１．７５（ｓ、２Ｈ）。
【０３９３】
実施例５５
（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−（５−メチルフラン−２−イル）イソニコチンアミドの合成
【化１３７】
2021506972.tif 000159
化合物１０６ａ．ジオキサン（５ｍＬ）および水（５ｍＬ）中メチル３−ブロモイソニコチナート（０．３００ｇ、１．４ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、（５−メチルフラン−２−イル）ボロン酸（０．２１２ｇ、１．６８ｍｍｏｌ、１．２当量）、Ｎａ２ＣＯ３（０．２９７ｇ、２．８ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加し、反応混合物を窒素で１５分間空気混和し、ジクロロビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）（０．０９８ｇ、０．１４ｍｍｏｌ、０．１当量）を添加した。反応混合物を再度窒素で１５分間空気混和した。混合物を１００℃で２時間撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳによって確認した。反応混合物を水（５０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ×２）で洗浄した。水性層を分離し、凍結乾燥機で凍結乾燥させて、３−（５−メチルフラン−２−イル）イソニコチン酸（０．２５０ｇ）を得た。
【０３９４】
ＬＣＭＳ  ２０４．２［Ｍ＋Ｈ］＋
化合物１０６．ＤＭＦ（３ｍＬ）中３−（５−メチルフラン−２−イル）イソニコチン酸（０．１００ｇ、０．５ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−１−グリシルピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（０．１１２ｇ、０．５ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＨＯＢｔ（０．０８１ｇ、０．６ｍｍｏｌ、１．２当量）、およびＥＤＣ．ＨＣｌ（０．１１５ｇ、０．６ｍｍｏｌ、１．２当量）を添加した。混合物を室温で１０分間撹拌させた。トリエチルアミン（０．１５１ｇ、１．５ｍｍｏｌ、３．０当量）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳによって確認した。反応混合物を水で希釈し、酢酸エチル（４０ｍＬ×２）で抽出した。組み合わせた有機抽出物を水（２５ｍＬ×６）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。得られた粗生成物を逆相ＨＰＬＣによって精製して、（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−（５−メチルフラン−２−イル）イソニコチンアミド（０．０１０ｇ、収率５．０４％）を灰色がかった白色の固体として得た。
【０３９５】
ＬＣＭＳ  ３７５．３［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．９７（ｔ、Ｊ＝５．８Ｈｚ、１Ｈ）、８．９２（ｓ、１Ｈ）、８．５２（ｄ、Ｊ＝４．９Ｈｚ、１Ｈ）、７．３２（ｄ、Ｊ＝４．９Ｈｚ、１Ｈ）、６．９０（ｄ、Ｊ＝３．４Ｈｚ、１Ｈ）、６．２１（ｄ、Ｊ＝３．４Ｈｚ、１Ｈ）、５．１３（ｄｄ、Ｊ＝９．３、２．８Ｈｚ、１Ｈ）、４．２９（ｄｄｄ、Ｊ＝１６．０、１１．２、４．１Ｈｚ、１Ｈ）、４．１６（ｄ、Ｊ＝５．８Ｈｚ、２Ｈ）、４．１２〜４．０３（ｍ、１Ｈ）、２．９７〜２．７４（ｍ、２Ｈ）、２．３４（ｓ、３Ｈ）、１．２４（ｓ、１Ｈ）。
【０３９６】
実施例５６
（Ｓ）−６’−アミノ−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−［３，３’−ビピリジン］−４−カルボキサミドホルメートの合成
【化１３８】
2021506972.tif 000160
化合物１０７ａ．ジオキサン（５ｍＬ）および水（５ｍＬ）中３−ブロモイソニコチン酸（０．５００ｇ、２．３４ｍｍｏｌ、１当量）の撹拌溶液に、Ｎａ２ＣＯ３（０．４９６ｇ、４．６８ｍｍｏｌ、２当量）および５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ピリジン−２−アミン（０．６１８ｇ、２．８１ｍｍｏｌ、１．２当量）を添加した。反応混合物を窒素ガスで１５分間空気混和した。ビス（トリフェニルホスフィン）塩化パラジウム（０．１６４ｇ、０．２３４ｍｍｏｌ、０．１当量）を、反応混合物に添加した。反応混合物を再度窒素ガスで１５分間空気混和した。反応混合物を１２０℃で１６時間加熱させた。反応の進行をＬＣＭＳによって監視した。反応の完了後、反応混合物を水（３５ｍＬ）で希釈した。水性層を酢酸エチル（２０ｍＬ×２）で洗浄し、凍結乾燥機で凍結乾燥させて、６’−アミノ−［３，３’−ビピリジン］−４−カルボン酸（０．６００ｇ、定量的収率）を得た。
【０３９７】
ＬＣＭＳ  ２１６．２［Ｍ＋Ｈ］＋
化合物１０７．ＤＭＦ（４ｍＬ）中６’−アミノ−［３，３’−ビピリジン］−４−カルボン酸（０．２００ｇ、０．９３ｍｍｏｌ、１当量）の撹拌溶液に、（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−１−グリシルピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（０．２０８ｇ、０．９３ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＨＯＢｔ（０．１５１ｇ、１．１２ｍｍｏｌ、１．２当量）、およびＥＤＣ．ＨＣｌ（０．２１４ｇ、１．１２ｍｍｏｌ、１．２当量）を添加した。混合物を室温で１０分間撹拌させた。トリエチルアミン（０．２８２ｇ、２．７９ｍｍｏｌ、３．０当量）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳによって確認した。反応混合物を水で希釈し、酢酸エチル（４０ｍＬ×２）で抽出した。組み合わせた有機抽出物を水（１５ｍＬ×４）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。粗生成物を逆相ＨＰＬＣによって精製して、（Ｓ）−６’−アミノ−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−［３，３’−ビピリジン］−４−カルボキサミドホルメート（０．００３ｇ、収率０．８％）を得た。
【０３９８】
ＬＣＭＳ  ３８７．３［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．８８（ｔ、Ｊ＝５．８Ｈｚ、１Ｈ）、８．６４〜８．５５（ｍ、２Ｈ）、８．１８（ｓ、１Ｈ）、８．０３（ｓ，１Ｈ）、７．５５（ｄ、Ｊ＝８．６Ｈｚ、１Ｈ）、７．３８（ｄ、Ｊ＝４．９Ｈｚ、１Ｈ）、６．４６（ｄ、Ｊ＝８．６Ｈｚ、１Ｈ）、６．１１（ｓ、２Ｈ）、５．１３〜５．０３（ｍ、１Ｈ）、４．３０〜４．１７（ｍ、１Ｈ）、４．０５（ｄｔ、Ｊ＝２１．０、８．８Ｈｚ、３Ｈ）、３．９５〜３．８０（ｍ、１Ｈ）、３．２６（ｓ、３Ｈ）、２．９４〜２．７２（ｍ、２Ｈ）、２．１３（ｄ、Ｊ＝１６．６Ｈｚ、１Ｈ）、１．２３（ｓ、１Ｈ）、１．１２（ｄ、Ｊ＝１６．９Ｈｚ、１Ｈ）。
【０３９９】
実施例５７
（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−（キノリン−４−イル）イソニコチンアミドの合成
【化１３９】
2021506972.tif 000161
化合物５１ａ．トルエン（１５ｍＬ）および水（２ｍＬ）中エチル３−ブロモイソニコチナート（０．３ｇ、１．３８ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、キノリン−４−イルボロン酸（０．２８８ｇ、１．６６ｍｍｏｌ、１．２当量）、Ｋ３ＰＯ４．３Ｈ２Ｏ（０．８８７ｇ、４．１４ｍｍｏｌ、３．０当量）を添加し、得られた反応混合物をＮ２ガスで１０分間パージし、続いてＰｄ（ＯＡｃ）（０．０３２ｇ、０．１３９ｍｍｏｌ．０．１当量）およびトリシクロヘキシルホスフィン（０．０５３ｇ、０．１３９ｍｍｏｌ．０．１当量）を添加した。得られた反応混合物を、１００℃で一晩加熱した。生成物形成を、ＬＣＭＳによって確認した。反応の完了後、混合物をｃｅｌｉｔｅベッドに通して濾過し、酢酸エチル（１００ｍＬ）で洗浄した。濾過物を減圧下で濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶出剤として１００％酢酸エチル）によって精製して、メチル３−（キノリン−４−イル）イソニコチナート（０．２３０ｇ、収率６２．７％）を白色の固体として得た。
【０４００】
ＬＣＭＳ  ２６５．３［Ｍ＋Ｈ］＋
化合物５１ｂ．ＴＨＦ（７ｍＬ）および水（７ｍＬ）中メチル３−（キノリン−４−イル）イソニコチナート（０．２１ｇ、０．７９５ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、ＬｉＯＨ．Ｈ２Ｏ（０．０６７ｇ、１．５９ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加した。混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳによって確認した。反応混合物を濃縮し、水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×２）で洗浄した。水性層を分離し、凍結乾燥機で凍結乾燥させて、３−（キノリン−４−イル）イソニコチン酸（定量的収率）を白色の固体として得た。
【０４０１】
ＬＣＭＳ  ２５１．２［Ｍ＋Ｈ］＋
化合物５１．ＤＭＦ（５ｍＬ）中３−（キノリン−４−イル）イソニコチン酸（０．１２ｇ、０．４８ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−１−グリシルピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（０．１０８ｇ、０．４８ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＥＤＣＩ．ＨＣｌ（０．１３８ｇ、０．７２ｍｍｏｌ、１．５当量）、およびＨＯＢｔ（０．０９７ｇ、０．７２ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加した。混合物を室温で１０分間撹拌させた。トリエチルアミン（１ｍＬ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳおよびＴＬＣによって確認した。反応の完了後、混合物を水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ×２）で抽出した。組み合わせた有機抽出物を水（２０ｍＬ×４）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶出剤としてＤＣＭ中５％ＭｅＯＨ）によって精製して、（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−（キノリン−４−イル）イソニコチンアミド（０．０４０ｇ、収率１９．８％）を白色の固体として得た。
【０４０２】
ＬＣＭＳ  ４２２．２［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ９．００（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、８．９２〜８．８１（ｍ、２Ｈ）、８．６５（ｓ、１Ｈ）、８．０８（ｄ、Ｊ＝８．３Ｈｚ、１Ｈ）、７．７８（ｄ、Ｊ＝４．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．７０（ｄ、Ｊ＝４．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．５５（ｂｒ．ｓ．、２Ｈ）、７．４７（ｄ、Ｊ＝４．４Ｈｚ、１Ｈ）、５．０３（ｄ、Ｊ＝８．３Ｈｚ、１Ｈ）、４．１１（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、３．９６〜３．７４（ｍ、３Ｈ）、２．８２（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、２．７４（ｄ、Ｊ＝９．２Ｈｚ、１Ｈ）
【０４０３】
実施例５８
（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４、４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−４−（４−フルオロフェニル）−６−オキソ−１、６−ジヒドロピリジン−３−カルボキサミドの合成
【化１４０】
2021506972.tif 000162
化合物１０９ａ．ジオキサン（３０ｍＬ）：水（１０ｍＬ）中メチル４−クロロ−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボキシレート（１ｇ、５．３１９１ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、化合物４−フルオロフェニル）ボロン酸（０．８２ｇ、５．８５１０ｍｍｏｌ、１．１当量）、Ｎａ２ＣＯ３（１．１２ｇ、１０．６３ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加し、得られた混合物をＮ２ガスで１０分間パージし、続いてＰｄ（ＰＰｈ３）２Ｃｌ２（０．１８７ｇ、０．２６５９ｍｍｏｌ．０．０５当量）を添加した。得られた反応混合物を、１００℃で一晩加熱した。生成物形成を、ＬＣＭＳによって確認した。反応の完了後、混合物をｃｅｌｉｔｅベッドに通して濾過し、酢酸エチル（１００ｍＬ）で洗浄した。濾過物を減圧下で濃縮した。水で希釈し、ＥｔＯＡｃ（３×５０ｍＬ）で抽出し、有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶出剤としてヘキサン中０〜５０％酢酸エチル）によって精製して、メチル４−（４−フルオロフェニル）−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボキシレート（１．２ｇ、８１．３４％）の化合物を白色の固体として得た。
【０４０４】
ＬＣＭＳ  ２４７．８［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１２．２２（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、８．０５（ｓ、１Ｈ）、７．６５〜７．５８（ｍ、１Ｈ）、７．５６（ｄ、Ｊ＝６．６Ｈｚ、１Ｈ）、７．３５〜７．２６（ｍ、１Ｈ）、７．２２〜７．１４（ｍ、１Ｈ）、６．２１（ｓ、１Ｈ）、３．６１〜３．５２（ｍ、３Ｈ）
【０４０５】
化合物１０９ｂ．ＴＨＦ（３０ｍＬ）および水（１０ｍＬ）中化合物メチル４−（４−フルオロフェニル）−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボキシレート（１．２ｇ、４．８５８２ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、ＬｉＯＨ（０．２２５ｇ、９．７１６５ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加した。混合物を８０℃で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳによって確認した。反応混合物を濃縮し、水（３０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬｘ２）で洗浄した。水性層を分離し、凍結乾燥機で凍結乾燥させて、化合物４−（４−フルオロフェニル）−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボン酸（１ｇｍ、８８％）を白色の固体として得た。
【０４０６】
ＬＣＭＳ：２３４．０［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１１．０７（ｓ、１Ｈ）７．６３（ｓ、１Ｈ）、７．３４（ｄｄ、Ｊ＝５．７、８．３Ｈｚ、２Ｈ）、７．１１（ｔ、Ｊ＝９．０Ｈｚ、２Ｈ）、６．０３（ｓ、１Ｈ）、３．５３（ｓ、１Ｈ）。
【０４０７】
化合物１０９．ＤＭＦ（１０ｍｌ）中４−（４−フルオロフェニル）−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボン酸（０．４ｇｍ、１．７１６７ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＨＡＴＵ（０．２７８ｇｍ、２．０６４ｍｍｏｌ、１．２当量）の撹拌溶液に、１０分後、（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−１−グリシルピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（０．４６４ｇｍ、２．０６ｍｍｏｌ、１．２当量）を添加し、反応混合物を１０分間撹拌し、続いてＥｔ３Ｎ（０．５ｍｌ、３．４３３４ｍｍｏｌ、３当量）を滴下で添加して、反応物を室温で１６時間撹拌させた。反応の進行をＬＣＭＳおよびＴＬＣによって監視し、冷却水（５０ｍＬ）を反応質量に添加し、酢酸エチル（３×５０ｍｌ）によって抽出して仕上げを完了し、すべての有機層を収集し、３回水で洗浄し、１回重炭酸ナトリウムおよび１回ブライン溶液で洗浄した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧で濃縮して、粗製物を逆相クロマトグラフィーによって精製して、所望の生成物（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−４−（４−フルオロフェニル）−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボキサミド（１００ｍｇ、２０％）を得た。
【０４０８】
ＬＣＭＳ：４０５．２［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１１．９３（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、８．６９（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、７．６４（ｓ、１Ｈ）、７．４４（ｂｒ．ｓ．、２Ｈ）、７．１７（ｔ、Ｊ＝８．８Ｈｚ、２Ｈ）、６．３０（ｓ、１Ｈ）、５．０８（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、４．２０（ｄ、Ｊ＝１１．０Ｈｚ、２Ｈ）、３．９９〜３．８９（ｍ、２Ｈ）、２．８０（ｄ、Ｊ＝１３．６Ｈｚ、２Ｈ）。
【０４０９】
実施例５９
（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−（３，５−ジメチルイソキサゾール−４−イル）イソニコチンアミドの合成
【化１４１】
2021506972.tif 000163
化合物１１０ａ．トルエン（５ｍＬ）中エチル３−ブロモイソニコチナート（０．１ｇ、０．４６３ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、３，５−ジメチル−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）イソキサゾール（０．１２６ｇ、０．９２６ｍｍｏｌ、２当量）、Ｋ２ＣＯ３（０．１９２ｇ、１．３９ｍｍｏｌ、３．０当量）を添加し、得られた反応混合物をＮ２ガスで１０分間パージし、続いて、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（０．０２７ｇ、０．０２３ｍｍｏｌ．０．０５当量）を添加した。得られた反応混合物を１００℃で一晩加熱した。生成物形成を、ＬＣＭＳによって確認した。反応の完了後、混合物をｃｅｌｉｔｅベッドに通して濾過し、酢酸エチル（１００ｍＬ）で洗浄した。濾過物を減圧下で濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶出剤としてヘキサン中０〜３０％酢酸エチル）によって精製して、メチル３−（３，５−ジメチルイソキサゾール−４−イル）イソニコチナート（０．１０５ｇ、収率９７．２％）を黄色の液体として得た。
【０４１０】
ＬＣＭＳ  ２３３．２［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．８１（ｄ、Ｊ＝４．８Ｈｚ、１Ｈ）、８．６５（ｓ、１Ｈ）、７．８５（ｄ、Ｊ＝５．３Ｈｚ、１Ｈ）、３．３２（ｓ、３Ｈ）、２．２３（ｓ、３Ｈ）、２．０９〜１．９０（ｍ、３Ｈ）。
【０４１１】
化合物１１０ｂ．ＴＨＦ（５ｍＬ）および水（５ｍＬ）中３−（３，５−ジメチルイソキサゾール−４−イル）イソニコチナート（０．１２０ｇ、０．５１８ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、ＬｉＯＨ．２Ｈ２Ｏ（０．０４３ｇ、１．０３４ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加した。混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳによって確認した。反応混合物を濃縮し、水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×２）で洗浄した。水性層を分離し、凍結乾燥機で凍結乾燥させて、３−（３，５−ジメチルイソキサゾール−４−イル）イソニコチン酸（定量的収率）を白色の固体として得た。
【０４１２】
ＬＣＭＳ  ２１９．２［Ｍ＋Ｈ］＋
化合物１１０．ＤＭＦ（４ｍＬ）中３−（３，５−ジメチルイソキサゾール−４−イル）イソニコチン酸（０．１ｇ、０．４６ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−１−グリシルピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（０．１０３ｇ、０．４６ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＥＤＣＩ．ＨＣｌ（０．１３２ｇ、０．６９ｍｍｏｌ、１．５当量）、およびＨＯＢｔ（０．０９３ｇ、０．６９ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加した。混合物を室温で１０分間撹拌させた。トリエチルアミン（０．５ｍＬ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳおよびＴＬＣによって確認した。反応の完了後、混合物を水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出した。組み合わせた有機抽出物を水（５０ｍＬ×５）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶出剤としてＤＣＭ中５％ＭｅＯＨ）によって精製して、（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−（３，５−ジメチルイソキサゾール−４−イル）イソニコチンアミド（０．０５５ｇ、収率３０．７％）を白色の固体として得た。
【０４１３】
ＬＣＭＳ  ３９０．２［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．８５（ｄ、Ｊ＝５．７Ｈｚ、１Ｈ）、８．７５（ｄ、Ｊ＝４．８Ｈｚ、１Ｈ）、８．５６（ｓ、１Ｈ）、７．５６（ｄ、Ｊ＝４．８Ｈｚ、１Ｈ）、５．１０〜４．９８（ｍ、１Ｈ）、４．２７〜４．１８（ｍ、１Ｈ）、４．１１〜３．９５（ｍ、２Ｈ）、２．９５〜２．７４（ｍ、３Ｈ）、２．２５（ｓ、３Ｈ）、２．０６（ｓ、３Ｈ）。
【０４１４】
実施例６０
（Ｓ）−３−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）イソニコチンアミドの合成
【化１４２】
2021506972.tif 000164
化合物１１１ａ．トルエン（１０ｍＬ）中エチル３−ブロモイソニコチナート（１）（０．２ｇ、０．９２６ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、３，５−ジメチル−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）イソキサゾール（２）（０．２４２ｇ、１．３９ｍｍｏｌ、１．５当量）、Ｋ２ＣＯ３（０．３８３ｇ、２．７９ｍｍｏｌ、３．０当量）を添加し、得られた反応混合物をＮ２ガスで１０分間パージし、続いてＰｄ（ＰＰｈ３）４（０．０５３ｇ、０．０４６ｍｍｏｌ．０．０５当量）を添加した。得られた反応混合物を１００℃で一晩加熱した。生成物形成を、ＬＣＭＳによって確認した。反応の完了後、混合物をｃｅｌｉｔｅベッドに通して濾過し、酢酸エチル（１００ｍＬ）で洗浄した。濾過物を減圧下で濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶出剤としてヘキサン中０〜２０％酢酸エチル）によって精製して、メチル３−（３，５−ジメチルイソキサゾール−４−イル）イソニコチナート（３）（０．２５０ｇ、収率９８％）を灰色がかった白色の固体として得た。
【０４１５】
ＬＣＭＳ  ２６６．１［Ｍ＋Ｈ］＋
化合物１１１ｂ．ＴＨＦ（８ｍＬ）および水（８ｍＬ）中メチル３−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）イソニコチン酸（０．２５ｇ、０．９４ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、ＬｉＯＨ．Ｈ２Ｏ（０．０８０ｇ、１．８９ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加した。混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳによって確認した。反応混合物を濃縮し、水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×２）で洗浄した。水性層を分離し、凍結乾燥機で凍結乾燥させて、３−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）イソニコチン酸（定量的収率）を白色の固体として得た。
【０４１６】
ＬＣＭＳ  ２５２．１［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．４７〜８．３５（ｍ、２Ｈ）、７．６７〜７．５１（ｍ、２Ｈ）、７．４２（ｄ、Ｊ＝８．３Ｈｚ、１Ｈ）、７．１９（ｄ、Ｊ＝４．８Ｈｚ、１Ｈ）。
【０４１７】
化合物１１１．ＤＭＦ（５ｍＬ）中３−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）イソニコチン酸（０．１２ｇ、０．４８ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−１−グリシルピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（０．１０８ｇ、０．４８ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＥＤＣＩ．ＨＣｌ（０．１３８ｇ、０．７１７ｍｍｏｌ、１．５当量）、およびＨＯＢｔ（０．０９７ｇ、０．７１７ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加した。混合物を室温で１０分間撹拌させた。トリエチルアミン（１ｍＬ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳおよびＴＬＣによって確認した。反応の完了後、混合物を水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出した。組み合わせた有機抽出物を水（５０ｍＬ×５）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶出剤としてＤＣＭ中５％ＭｅＯＨ）によって精製して、（Ｓ）−３−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）イソニコチンアミド（０．１２０ｇ、収率５９．１％）を白色の固体として得た。
【０４１８】
ＬＣＭＳ  ４２３．５［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ９．０４（ｔ、Ｊ＝５．９Ｈｚ、１Ｈ）、８．７６〜８．６３（ｍ、２Ｈ）、７．６５〜７．５４（ｍ、２Ｈ）、７．４９（ｄ、Ｊ＝４．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．４１（ｄ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、１Ｈ）、５．０９（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、４．２２（ｄ、Ｊ＝１１．８Ｈｚ、１Ｈ）、４．１２〜３．９６（ｍ、２Ｈ）、３．９２（ｄ、Ｊ＝５．３Ｈｚ、１Ｈ）、２．９７〜２．７６（ｍ、２Ｈ）。
【０４１９】
実施例６１
（Ｓ）−３−（３−（ｔｅｒｔ−ブチル）フェニル）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）イソニコチンアミドの合成
【化１４３】
2021506972.tif 000165
化合物１１２ａ．ＤＭＳＯ（１０ｍＬ）中１−ブロモ−３−（ｔｅｒｔ−ブチル）ベンゼン（０．２ｇ、０．９３８ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、４，４，４’，４’，５，５，５’，５’−オクタメチル−２，２’−ビ（１，３，２−ジオキサボロラン）（０．３５６ｇ、１．４１ｍｍｏｌ、１．５当量）、ＫＯＡｃ（０．１８４ｇ、１．８７６ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加し、得られた反応混合物をＮ２ガスで１０分間パージし、続いてＰｄ（ＰＰｈ３）４（０．０５５ｇ、０．０４７ｍｍｏｌ．０．０５当量）を添加した。得られた反応混合物を１００℃で一晩加熱した。生成物形成を、ＬＣＭＳによって確認した。反応の完了後、混合物をｃｅｌｉｔｅベッドに通して濾過し、酢酸エチル（１００ｍＬ）で洗浄した。濾過物を減圧下で濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶出剤としてヘキサン）によって精製して、２−（３−（ｔｅｒｔ−ブチル）フェニル）−４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン（０．２３０ｇ、収率９４．２６％）を灰色がかった白色の固体として得た。
【０４２０】
ＬＣＭＳ  ２６１．３［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．６７（ｓ、１Ｈ）、７．５７〜７．４５（ｍ、２Ｈ）、７．３２（ｔ、Ｊ＝７．５Ｈｚ、１Ｈ）、１．４４（ｄ、Ｊ＝６．６Ｈｚ、１Ｈ）、１．３９〜１．２３（ｍ、９Ｈ）、１．２３〜１．０４（ｍ、１２Ｈ）
【０４２１】
化合物１１２ｂ．トルエン（１５ｍＬ）中２−（３−（ｔｅｒｔ−ブチル）フェニル）−４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン（０．２１６ｇ、０．８３３ｍｍｏｌ、１．２当量）の溶液に、エチル３−ブロモイソニコチナート（０．１５０ｇ、０．６４９ｍｍｏｌ、１．０当量）、Ｋ２ＣＯ３（０．２８７ｇ、２．０８ｍｍｏｌ、３．０当量）を添加し、得られた反応混合物をＮ２ガスで１０分間パージし、続いてＰｄ（ＰＰｈ３）４（０．０４０ｇ、０．０３５ｍｍｏｌ．０．０５当量）を添加した。得られた反応混合物を１００℃で一晩加熱した。生成物形成を、ＬＣＭＳによって確認した。反応の完了後、混合物をｃｅｌｉｔｅベッドに通して濾過し、酢酸エチル（１００ｍＬ）で洗浄した。濾過物を減圧下で濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶出剤としてヘキサン中０〜２０％酢酸エチル）によって精製して、メチル３−（３−（ｔｅｒｔ−ブチル）フェニル）イソニコチナート（０．１５０ｇ、８０．６％）を黄色の半固体として得た。
【０４２２】
ＬＣＭＳ  ２７０．５［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．７５〜８．６６（ｍ、２Ｈ）、７．７４（ｄ、Ｊ＝４．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．６６（ｄ、Ｊ＝４．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．５１〜７．３９（ｍ、２Ｈ）、７．２４（ｄ、Ｊ＝７．５Ｈｚ、１Ｈ）、３．６６（ｓ、３Ｈ）、１．３０（ｓ、９Ｈ）。
【０４２３】
化合物１１２ｃ．ＴＨＦ（４ｍＬ）および水（４ｍＬ）中メチル３−（３−（ｔｅｒｔ−ブチル）フェニル）イソニコチナート（０．１５０ｇ、０．５５５ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、ＬｉＯＨ．Ｈ２Ｏ（０．０４７ｇ、１．１１ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加した。混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳによって確認した。反応混合物を濃縮し、水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×２）で洗浄した。水性層を分離し、凍結乾燥機で凍結乾燥させて、３−（３−（ｔｅｒｔ−ブチル）フェニル）イソニコチン酸（定量的収率）を白色の固体として得た。
【０４２４】
ＬＣＭＳ  ２５６．３［Ｍ＋Ｈ］＋
化合物１１２．ＤＭＦ（５ｍＬ）中３−（３−（ｔｅｒｔ−ブチル）フェニル）イソニコチン酸（０．１ｇ、０．３９２ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−１−グリシルピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（０．８９ｇ、０．３９２ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＥＤＣＩ．ＨＣｌ（０．１１３ｇ、０．５９ｍｍｏｌ、１．５当量）、およびＨＯＢｔ（０．０８０ｇ、０．５９ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加した。混合物を室温で１０分間撹拌させた。トリエチルアミン（０．５ｍＬ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳおよびＴＬＣによって確認した。反応の完了後、混合物を水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出した。組み合わせた有機抽出物を水（５０ｍＬ×５）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶出剤としてＤＣＭ中５％ＭｅＯＨ）によって精製し、続いて調製精製して、（Ｓ）−３−（３−（ｔｅｒｔ−ブチル）フェニル）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）イソニコチンアミド（０．０２８ｇ、収率１６．８６％）を白色の固体として得た。
【０４２５】
ＬＣＭＳ  ４２７．３［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．９２（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、８．７６〜８．５６（ｍ、２Ｈ）、７．５０（ｓ、１Ｈ）、７．４８〜７．４０（ｍ、２Ｈ）、７．４０〜７．２９（ｍ、２Ｈ）、５．１４〜５．０４（ｍ、１Ｈ）、４．２１（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、４．０３（ｄ、Ｊ＝２．６Ｈｚ、２Ｈ）、２．８７（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、２．７９（ｄ、Ｊ＝１４．５Ｈｚ、１Ｈ）、２．６７（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）。
【０４２６】
実施例６２
（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−エトキシイソニコチンアミドの合成
【化１４４】
2021506972.tif 000166
化合物１１３．ＤＭＦ（３ｍＬ）中３−エトキシイソニコチン酸（０．０５ｇ、０．２９９ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−１−グリシルピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（０．０６７ｇ、０．２９９ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＥＤＣＩ．ＨＣｌ（０．０８６ｇ、０．４８８ｍｍｏｌ、１．５当量）、およびＨＯＢｔ（０．０６ｇ、０．４８８ｍｍｏｌ、１．５当量）を得た。混合物を室温で１０分間撹拌させた。トリエチルアミン（０．５ｍＬ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳおよびＴＬＣによって確認した。反応の完了後、混合物を水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出した。組み合わせた有機抽出物を水（５０ｍＬ×５）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶出剤としてＤＣＭ中５％ＭｅＯＨ）によって精製して、（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−エトキシイソニコチンアミド（０．０７ｇ、収率３０．７％）を灰色がかった白色の固体として得た。
【０４２７】
ＬＣＭＳ  ３３９．２［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．７１（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、８．５９（ｓ、１Ｈ）、８．３４（ｄ、Ｊ＝４．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．７０（ｄ、Ｊ＝４．８Ｈｚ、１Ｈ）、５．１５（ｄｄ、Ｊ＝２．９、９．０Ｈｚ、１Ｈ）、４．３６（ｑ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、２Ｈ）、４．３０〜４．１２（ｍ、３Ｈ）、４．１２〜３．９８（ｍ、１Ｈ）、２．９０〜２．６８（ｍ、２Ｈ）、１．４６（ｔ、Ｊ＝６．８Ｈｚ、３Ｈ）。
【０４２８】
実施例６３
（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−（（４−フルオロフェニル）アミノ）イソニコチンアミド２，２，２−トリフルオロ酢酸塩の合成
【化１４５】
2021506972.tif 000167
化合物１１４ａ．トルエン（３ｍＬ）中メチル３−ブロモイソニコチナート（０．２００ｇ、０．９３ｍｍｏｌ、１当量）の撹拌溶液に、４−フルオロアニリン（０．１０３ｇ、０．９３ｍｍｏｌ、１．０当量）、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（０．０４３ｇ、０．０４６ｍｍｏｌ、０．０５当量）、キサントホス（０．０５３ｇ、０．０９３ｍｍｏｌ、０．１当量）、およびＣｓ２ＣＯ３（０．４５６ｇ、１．４ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加した。得られた反応混合物を、電子レンジで、１９０℃で１時間加熱した。反応の進行をＬＣＭＳによってチェックした。反応混合物を水（１５ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（３０ｍＬ×２）で抽出した。組み合わせた有機抽出物を、ブライン（３０ｍＬ）で洗浄し、有機抽出物を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。粗化合物を、順相コンビフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、メチル３−（（４−フルオロフェニル）アミノ）イソニコチナート（０．１２０ｇ、収率５３％）を灰色がかった白色の固体として得た。
【０４２９】
ＬＣＭＳ：２４６．８［Ｍ＋Ｈ］＋
化合物１１４ｂ．ＴＨＦおよび水（１：１）（６ｍＬ）中メチル３−（（４−フルオロフェニル）アミノ）イソニコチナート（０．３５０ｇ、１．４ｍｍｏｌ、１当量）の撹拌溶液に、ＬｉＯＨ．Ｈ２Ｏ（０．０８９ｇ、２．１ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加した。混合物を周囲温度で１６時間撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳによって確認した。反応混合物を水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチルで抽出し、水性層を減圧下で濃縮し、凍結乾燥させて、３−（（４−フルオロフェニル）アミノ）イソニコチン酸（０．３５０ｇ．定量的収率）を灰色がかった白色の固体として得た。
【０４３０】
ＬＣＭＳ  ２３３．２［Ｍ＋Ｈ］＋
化合物１１４．ＤＭＦ（４ｍＬ）中３−（（４−フルオロフェニル）アミノ）イソニコチン酸（０．３５０ｇ、１．５ｍｍｏｌ、１当量）の撹拌溶液に、（１Ｒ）−４，４−ジフルオロ−２−グリシルシクロペンタン−１−カルボニトリル塩酸塩（０．３３７ｇ、１．５ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＨＯＢｔ（０．２４３ｇ、１．８ｍｍｏｌ、１．２当量）、ＥＤＣ．ＨＣｌ（０．３４３ｇ、１．８ｍｍｏｌ、１．２当量）を添加し、トリエチルアミン（０．４５５ｇ、４．５ｍｍｏｌ、３当量）を添加し、混合物を周囲温度で１６時間撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳによって確認した。反応混合物を水（１５ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（４０ｍＬ×３）で抽出した。組み合わせた有機抽出物を水（２５ｍＬ×５）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、粗生成物を得、それを逆相ＨＰＬＣによって精製して、（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−（（４−フルオロフェニル）アミノ）イソニコチンアミドをＴＦＡ塩として得た（０．００３ｇ、収率０．５％）。
【０４３１】
ＬＣＭＳ  ４０４．２［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ９．２２（ｔ、Ｊ＝６．０Ｈｚ、１Ｈ）、９．１２（ｓ、１Ｈ）、８．５８（ｓ、１Ｈ）、８．５０（ｑ、Ｊ＝１５．７Ｈｚ、１Ｈ）、８．１５（ｓ、１Ｈ）、７．６８〜７．６３（ｍ、１Ｈ）、７．３２〜７．１４（ｍ、４Ｈ）、５．１２（ｄｄ、Ｊ＝９．３、２．９Ｈｚ、１Ｈ）、４．３０（ｄｄｄ、Ｊ＝１５．９、１１．５、４．６Ｈｚ、１Ｈ）、４．２０〜４．０６（ｍ、３Ｈ）、２．９２〜２．７３（ｍ、２Ｈ）、２．３３〜２．２５（ｍ、１Ｈ）、１．５６〜１．４９（ｍ、１Ｈ）、１．２３（ｓ、１Ｈ）、０．８７（ｄ、Ｊ＝１２．４Ｈｚ、１Ｈ）。
【０４３２】
実施例６４
（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−（４−フルオロフェノキシ）イソニコチンアミドの合成
【化１４６】
2021506972.tif 000168
化合物３５ａ．ＤＭＦ（１０ｍＬ）中３−ブロモピリジン−４−カルボン酸（１．０ｇ、５．０ｍｍｏｌ、１当量）の撹拌溶液に、４−フルオロフェノール（０．５６０ｇ、５．０ｍｍｏｌ、１当量）、ＣｕＩ（１．９０ｇ、１０．０ｍｍｏｌ、２当量）、およびＣｓ２ＣＯ３（３．２６０ｇ、１０．０ｍｍｏｌ、２当量）を添加した。反応混合物を１１０℃で１８時間加熱した。反応の進行をＬＣＭＳによってチェックした。反応混合物を水（２０ｍＬ）で希釈し、ｐＨが、わずかに酸性になるまで希釈ＨＣｌを数滴添加した。水性層を酢酸エチル（５０ｍＬ×２）で抽出した。組み合わせた有機抽出物を、ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、３−（４−フルオロフェノキシ）ピリジン−４−カルボン酸（０．２００ｇ、収率１８％）を得た。
【０４３３】
ＬＣＭＳ：２３４．２［Ｍ＋Ｈ］＋
化合物３５．ＤＭＦ（３ｍＬ）中３−（４−フルオロフェノキシ）ピリジン−４−カルボン酸（０．２００ｇ、０．８６ｍｍｏｌ、１当量）の撹拌溶液に、（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−１−グリシルピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（０．１９４ｇ、０．８６ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＨＯＢｔ（０．１４０ｇ、１．０３ｍｍｏｌ、１．２当量）、およびＥＤＣ．ＨＣｌ（０．１９７ｇ、１．０３ｍｍｏｌ、１．２当量）を添加した。混合物を室温で１０分間撹拌させた。トリエチルアミン（０．２６０ｇ、２．５８ｍｍｏｌ、３当量）を添加し、混合物を周囲温度で１６時間撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳによって確認した。反応混合物を水（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（４０ｍＬ×２）で抽出した。組み合わせた有機抽出物を水（２５ｍＬ×５）で洗浄した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下濃縮して粗生成物を得た。得られた粗生成物を、逆相ＨＰＬＣによって精製して、（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−（４−フルオロフェノキシ）イソニコチンアミド（０．０４０ｇ、収率１１．５％）を灰色がかった白色の固体として得た。
【０４３４】
ＬＣＭＳ  ４０５．２［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．８０（ｔ、Ｊ＝５．６Ｈｚ、１Ｈ）、８．４８（ｄ、Ｊ＝４．８Ｈｚ、１Ｈ）、８．２４（ｓ、１Ｈ）、７．６５（ｄ、Ｊ＝５．０Ｈｚ、１Ｈ）、７．２６（ｔ、Ｊ＝８．７Ｈｚ、２Ｈ）、７．１８（ｄｄ、Ｊ＝９．０、４．５Ｈｚ、２Ｈ）、５．１０（ｄｄ、Ｊ＝８．９、３．０Ｈｚ、１Ｈ）、４．３０〜３．９８（ｍ、４Ｈ）、２．９３〜２．７２（ｍ、２Ｈ）。
【０４３５】
実施例６５
（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−（フェニルチオ）イソニコチンアミドの合成
【化１４７】
2021506972.tif 000169
化合物１１５ａ．ジオキサン（１０ｍＬ）中メチル３−ブロモイソニコチナート（０．２ｇ、０．９３ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、ベンゼンチオール（０．２０４ｇ、１．８５ｍｍｏｌ、２．０当量）、ＫＯＡｃ（０．１８４ｇ、１．８７６ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加し、得られた反応混合物をＮ２ガスで１０分間パージし、続いてＰｄ２（ｄｂａ）３（０．０４２ｇ、０．０４６ｍｍｏｌ．０．０５当量）、キサントホス（０．０２６ｇ、０．０４６ｍｍｏｌ、０．０５当量）、および得られた反応混合物）を添加した。得られた反応混合物を９０℃で一晩加熱した。生成物形成を、ＬＣＭＳによって確認した。反応の完了後、混合物をｃｅｌｉｔｅベッドに通して濾過し、酢酸エチル（１００ｍＬ）で洗浄した。濾過物を減圧下で濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶出剤としてヘキサン中２０％酢酸エチル）によって精製して、メチル３−（フェニルチオ）イソニコチナート（０．１００ｇ、収率４４．４％）を黄色の油として得た。
【０４３６】
ＬＣＭＳ  ２４６．１［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．９２（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、８．７６〜８．５６（ｍ、２Ｈ）、７．５０（ｓ、１Ｈ）、７．４８〜７．４０（ｍ、２Ｈ）、７．４０〜７．２９（ｍ、２Ｈ）、５．１４〜５．０４（ｍ、１Ｈ）、４．２１（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、４．０３（ｄ、Ｊ＝２．６Ｈｚ、２Ｈ）、２．８７（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、２．７９（ｄ、Ｊ＝１４．５Ｈｚ、１Ｈ）、２．６７（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）。
【０４３７】
化合物１１５ｂ．ＴＨＦ（５ｍＬ）および水（５ｍＬ）中得られるメチル３−（フェニルチオ）イソニコチナート（０．１５０ｇ、０．６１４ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、ＬｉＯＨ．Ｈ２Ｏ（０．０５２ｇ、１．２３ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加した。混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳによって確認した。反応混合物を濃縮し、水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×２）で洗浄した。水性層を分離し、凍結乾燥機で凍結乾燥させて、３−（フェニルチオ）イソニコチナート（定量的収率）を白色の固体として得た。
【０４３８】
ＬＣＭＳ  ２３２．３［Ｍ＋Ｈ］＋
化合物１１５．ＤＭＦ（５ｍＬ）中３−（フェニルチオ）イソニコチナート（０．１５ｇ、０．６５ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−１−グリシルピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（０．１４６ｇ、０．６５ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＥＤＣＩ．ＨＣｌ（０．１９０ｇ、０．９７ｍｍｏｌ、１．５当量）、およびＨＯＢｔ（０．１３２ｇ、０．９７ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加した。混合物を室温で１０分間撹拌させた。トリエチルアミン（０．３ｍＬ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳおよびＴＬＣによって確認した。反応の完了後、混合物を水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出した。組み合わせた有機抽出物を水（５０ｍＬ×５）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶出剤としてＤＣＭ中５％ＭｅＯＨ）によって精製し、続いて調製精製して、（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−（フェニルチオ）イソニコチンアミド（０．０１０ｇ、収率３．８％）を白色の固体として得た。
【０４３９】
ＬＣＭＳ  ４０３．２［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ９．０３（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、８．５２（ｄ、Ｊ＝４．８Ｈｚ、１Ｈ）、８．１８（ｓ、１Ｈ）、７．５６〜７．３２（ｍ、６Ｈ）、５．１３（ｄ、Ｊ＝７．５Ｈｚ、１Ｈ）、４．２９（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、４．２４〜４．０５（ｍ、２Ｈ）、２．８２（ｄ、Ｊ＝１４．９Ｈｚ、３Ｈ）。
【０４４０】
実施例６６
（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−６−オキソ−４−（キノリン−４−イル）−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボキサミドの合成
【化１４８】
2021506972.tif 000170
化合物１１６ａ．ジオキサン（１０ｍＬ）中メチル４−クロロ−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボキシレート（０．２ｇ、１．０７ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、キノリン−４−イルボロン酸（０．２２ｇ、１．２６ｍｍｏｌ、２．０当量）、Ｋ３ＰＯ４．３Ｈ２Ｏ（０．４５５ｇ、２．１４ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加し、得られた反応混合物をＮ２ガスで１０分間パージし、続いてＰｄ２（ｄｂａ）３（０．０２４ｇ、０．１１ｍｍｏｌ．０．１当量）、トリシクロヘキシルホスフィン（０．０３０ｇ、０．１１ｍｍｏｌ、０．１当量）を添加した。得られた反応混合物を１４０℃で一晩加熱した。生成物形成を、ＬＣＭＳによって確認した。反応の完了後、混合物をｃｅｌｉｔｅベッドに通して濾過し、ＤＣＭ（１００ｍＬ）中１０％メタノールで洗浄した。濾過物を減圧下で濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶出剤としてＤＣＭ中５メタノール）によって精製して、メチル６−オキソ−４−（キノリン−４−イル）−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボキシレート（３）（０．０５８ｇ、１９．４％）を灰色がかった白色の固体として得た。
【０４４１】
ＬＣＭＳ  ２８１．３［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１２．４７（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、８．９１（ｄ、Ｊ＝４．４Ｈｚ、１Ｈ）、８．２３（ｓ、１Ｈ）、８．１１〜７．９６（ｍ、１Ｈ）、７．８４〜７．７０（ｍ、１Ｈ）、７．６４〜７．４３（ｍ、２Ｈ）、７．３５（ｄ、Ｊ＝４．４Ｈｚ、１Ｈ）、６．３０（ｓ、１Ｈ）、３．３５（ｓ、３Ｈ）。
【０４４２】
化合物１１６ｂ．ＴＨＦ（４ｍＬ）および水（４ｍＬ）中得られるメチル６−オキソ−４−（キノリン−４−イル）−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボキシレート（０．１１５ｇ、０．４１２ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、ＬｉＯＨ．Ｈ２Ｏ（０．０２６ｇ、０．６１６ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加した。混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳによって確認した。反応混合物を濃縮し、水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×２）で洗浄した。水性層を分離し、凍結乾燥機で凍結乾燥させて、６−オキソ−４−（キノリン−４−イル）−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボキシレート（定量的収率）を白色の固体として得た。
【０４４３】
ＬＣＭＳ  ２６７．２［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１１．５４（ｄ、Ｊ＝１７．１Ｈｚ、１Ｈ）、８．８０（ｄ、Ｊ＝４．４Ｈｚ、１Ｈ）、８．０５〜７．８６（ｍ、２Ｈ）、７．６７（ｔ、Ｊ＝７．２Ｈｚ、１Ｈ）、７．５８（ｄ、Ｊ＝８．３Ｈｚ、１Ｈ）、７．２１（ｄ、Ｊ＝４．４Ｈｚ、１Ｈ）、５．９８（ｓ、１Ｈ）
【０４４４】
化合物１１６．ＤＭＦ（５ｍＬ）中６−オキソ−４−（キノリン−４−イル）−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボキシレート（０．１ｇ、０．３８ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−１−グリシルピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（０．０８５ｇ、０．３８ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＨＡＴＵ（０．２８６ｇ、０．７５４ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加した。混合物を室温で１０分間撹拌させた。ＤＩＰＥＡ（０．３ｍＬ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳおよびＴＬＣによって確認した。反応の完了後、混合物を水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出した。組み合わせた有機抽出物を水（５０ｍＬ×５）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。得られた粗生成物を、調製精製によって精製して、（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−６−オキソ−４−（キノリン−４−イル）−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボキサミド（０．０４５ｇ、収率２７．１２％）を白色の固体として得た。
【０４４５】
ＬＣＭＳ  ４３８．２［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１２．２４（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、８．８６（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、８．５９（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、８．０３（ｄ、Ｊ＝８．３Ｈｚ、１Ｈ）、７．９４（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、７．７４（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、７．６７（ｄ、Ｊ＝７．９Ｈｚ、１Ｈ）、７．６０〜７．４５（ｍ、１Ｈ）、７．３３（ｄ、Ｊ＝４．４Ｈｚ、１Ｈ）、６．２９（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、４．９８（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、４．０５（ｄ、Ｊ＝１４．９Ｈｚ、１Ｈ）、３．８９〜３．７３（ｍ、２Ｈ）、２．８３〜２．６０（ｍ、３Ｈ）。
【０４４６】
実施例６７
（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−（ピリジン−３−イルアミノ）イソニコチンアミドの合成
【化１４９】
2021506972.tif 000171
化合物１１７ａ．ジオキサン（１０ｍＬ）中メチル３−ブロモイソニコチナート（０．５ｇ、２．３１５ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、ピリジン−３−アミン（０．２１８ｇ、２．３１５ｍｍｏｌ、１．０当量）、Ｃｓ２ＣＯ３（１．５ｇ、４．６３ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加し、得られた反応混合物をＮ２ガスで１０分間パージし、続いてＰｄ２（ｄｂａ）３（０．１０６ｇ、０．１１６ｍｍｏｌ．０．０５当量）、キサントホス（０．１３４ｇ、０．２３２ｍｍｏｌ、０．１当量）、および得られた反応混合物）を添加した。得られた反応混合物を１２０℃で一晩加熱した。生成物形成を、ＬＣＭＳによって確認した。反応の完了後、混合物をｃｅｌｉｔｅベッドに通して濾過し、酢酸エチル（１００ｍＬ）で洗浄した。濾過物を減圧下で濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶出剤としてＤＣＭ中３％メタノール）によって精製して、メチル３−（ピリジン−３−イルアミノ）イソニコチナート（０．１７０ｇ、３２．０７％）をこげ茶色の液体として得た。
【０４４７】
ＬＣＭＳ  ２３０．１［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．８８（ｓ、１Ｈ）、８．５７〜８．４４（ｍ、２Ｈ）、８．２９（ｄ、Ｊ＝３．５Ｈｚ、１Ｈ）、８．１３（ｄ、Ｊ＝５．３Ｈｚ、１Ｈ）、７．７９〜７．６２（ｍ、２Ｈ）、７．３９〜７．２９（ｍ、１Ｈ）、３．８８（ｓ、３Ｈ）。
【０４４８】
化合物１１７ｂ．ＴＨＦ（４ｍＬ）および水（４ｍＬ）中得られるメチル３−（ピリジン−３−イルアミノ）イソニコチナート（０．１７０ｇ、０．７４２ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、ＬｉＯＨ．Ｈ２Ｏ（０．０４８ｇ、１．１１４ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加した。混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳによって確認した。反応混合物を濃縮し、水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×２）で洗浄した。水性層を分離し、凍結乾燥機で凍結乾燥させて、３−（ピリジン−３−イルアミノ）イソニコチナート（定量的収率）を白色の固体として得た。
【０４４９】
ＬＣＭＳ  ２１６．１［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１１．８４（ｓ、１Ｈ）、８．５５（ｓ、１Ｈ）、８．３９（ｄ、Ｊ＝２．６Ｈｚ、１Ｈ）、８．１０（ｄ、Ｊ＝３．９Ｈｚ、１Ｈ）、７．９６（ｄ、Ｊ＝４．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．７０（ｄ、Ｊ＝４．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．６５〜７．５５（ｍ、１Ｈ）、７．２８（ｄｄ、Ｊ＝４．８、８．３Ｈｚ、１Ｈ）。
【０４５０】
化合物１１７．ＤＭＦ（５ｍＬ）中３−（ピリジン−３−イルアミノ）イソニコチナート（０．１０ｇ、０．４６５ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−１−グリシルピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（０．１０４ｇ、０．４６５ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＨＡＴＵ（０．３５３ｇ、０．９３ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加した。混合物を室温で１０分間撹拌させた。ＤＩＰＥＡ（０．３５ｍＬ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳおよびＴＬＣによって確認した。反応の完了後、混合物を水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出した。組み合わせた有機抽出物を水（５０ｍＬ×５）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶出剤としてＤＣＭ中１０％ＭｅＯＨ）によって精製し、続いて調製精製して、（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−（ピリジン−３−イルアミノ）イソニコチンアミド（０．０７２ｇ、収率４０％）を灰色がかった白色の固体として得た。
【０４５１】
ＬＣＭＳ  ３８７．２［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ９．１７（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、９．０９（ｓ、１Ｈ）、８．６２（ｓ、１Ｈ）、８．４５（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、８．１９（ｂｒ．ｓ．、２Ｈ）、７．６４（ｄ、Ｊ＝７．５Ｈｚ、１Ｈ）、７．５８（ｄ、Ｊ＝４．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．３８〜７．２２（ｍ、１Ｈ）、５．１２（ｄ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、１Ｈ）、４．３１（ｄ、Ｊ＝１１．４Ｈｚ、１Ｈ）、４．１８〜３．９８（ｍ、２Ｈ）、２．９０（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、２．８２（ｄ、Ｊ＝１５．３Ｈｚ、２Ｈ）。
【０４５２】
実施例６８
（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−（ピペリジン−４−イルアミノ）イソニコチンアミドの合成
【化１５０】
2021506972.tif 000172
化合物１１８ａ．ジオキサン（１５ｍＬ）中メチル３−ブロモイソニコチナート（０．５００ｇｍ、２．３１４８ｍｍｏｌ、１当量）およびｔｅｒｔ−ブチル４−アミノピペリジン−１−カルボキシレート（０．４６３ｇｍ、２．３１４８ｍｍｏｌ、１当量）およびＣＳ２ＣＯ３（１．５ｇｍ、４．６２９６ｍｍｏｌ、２当量）の撹拌溶液に。得られた混合物を、窒素で１０分間パージし、続いてＰｄ２（ｄｂａ）３（０．１０６ｇｍ、０．１１５７ｍｍｏｌ、０．０５当量）およびキサントホス（０．１３４ｇｍ、０．２３１４ｍｍｏｌ、０．１当量）を添加し、再度窒素で１０分間パージした。反応混合物を１２０℃で一晩加熱した。反応の進行をＬＣＭＳによって監視した。反応混合物を水（３０ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（２×５０ｍＬ）で抽出した。組み合わせた有機層を、水（３０ｍＬ）、ブライン（３０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮して、粗製物を得、それをフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、メチル３−（（１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペリジン−４−イル）アミノ）イソニコチナート（４００ｍｇ、５１．４９％）を白色の固体として得た。
【０４５３】
ＬＣＭＳ：３３６．３［Ｍ＋Ｈ］＋｀
１Ｈ  ＮＭＲ：（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．４１（ｓ、１Ｈ）、７．６０〜７．５１（ｍ、２Ｈ）、７．２７（ｄ、Ｊ＝７．９Ｈｚ、１Ｈ）、３．００（ｍ．、４Ｈ）、２．０４〜１．８８（ｓ、３Ｈ）、１．４４〜１．３５（ｓ、９Ｈ）、１．３１〜１．１２（ｍ、４Ｈ）。
【０４５４】
化合物１１８ｂ．ＴＨＦ（８ｍＬ）および水（４ｍＬ）中化合物メチル３−（（１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペリジン−４−イル）アミノ）イソニコチナート（０．４００ｇｍ、１．１９０４ｍｍｏｌ、１当量）の撹拌溶液に、ＬｉＯＨ（０．０５８ｇｍ、２．３８０９ｍｍｏｌ、２当量）を添加した。混合物を８０℃で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳによって確認した。反応混合物を濃縮し、水（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×２）で洗浄した。水性層を分離し、凍結乾燥機で凍結乾燥させて、化合物３−（（１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペリジン−４−イル）アミノ）イソニコチン酸（３３０ｍｇ、収率７８％）を白色の固体として得た。
【０４５５】
ＬＣＭＳ：３２２．２［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ：（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１１．７０（ｓ、１Ｈ）、８．４１（ｓ、１Ｈ）、７．６０〜７．５１（ｍ、２Ｈ）、７．２７（ｄ、Ｊ＝７．９Ｈｚ、１Ｈ）、３．００（ｍ．、４Ｈ）、１．４４〜１．３５（ｓ、９Ｈ）、１．３１〜１．１２（ｍ、４Ｈ）。
【０４５６】
化合物１１８ｃ．ＤＭＦ（１０ｍｌ）中３−（（１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペリジン−４−イル）アミノ）イソニコチン酸（０．２００ｇｍ、０．６２１１ｍｍｏｌ、１当量）、ＨＡＴＵ（０３５４ｇｍ、０．９３１６ｍｍｏｌ、１．５当量）の撹拌溶液に、１０分後、（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−１−グリシルピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（０．１６８ｇｍ、０．７４５３ｍｍｏｌ、１．２当量）を添加し、反応混合物を１０分間撹拌し、続いてＤＩＰＥＡ（０．２ｍｌ、０．９３１６ｍｍｏｌ、１．５当量）を滴下で添加し、反応物を室温で１６時間撹拌させた。反応の進行をＬＣＭＳおよびＴＬＣによって監視し、水（３０ｍｌ）を添加することによって仕上げを完了し、酢酸エチル（３×５０ｍＬ）によって抽出した。組み合わせた有機層を、水（４×２０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮して、ｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−４−（（４−（（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）カルバモイル）ピリジン−３−イル）アミノ）ピペリジン−１−カルボキシレート（２２０ｍｇ、収率７１．８９％）を茶色の固体として得た。
【０４５７】
ＬＣＭＳ：４９３．３［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ：（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．９５（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、８．２８（ｓ、１Ｈ）、７．８６（ｄ、Ｊ＝５．３Ｈｚ、１Ｈ）、７．５１〜７．３８（ｍ、２Ｈ）、５．７６（ｓ、１Ｈ）、４．１２〜４．０２（ｍ、４Ｈ）、３．８１（ｄ、Ｊ＝１３．２Ｈｚ、２Ｈ）、３．５０（ｍ、１Ｈ）、２．０５〜１．９３（ｍ、４Ｈ）、１．４０（ｓ、９Ｈ）、１．２８〜１．１０（ｍ、４Ｈ）。
【０４５８】
化合物１１８．ＤＣＭ（５ｍＬ）中ｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−４−（（４−（（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）カルバモイル）ピリジン−３−イル）アミノ）ピペリジン−１−カルボキシレート（０．１９０ｇｍ、０．３８６１ｍｍｏｌ、１当量）の撹拌溶液に、トリフルオロ酢酸（１．５ｍＬ）を添加した。混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳによって確認した。反応混合物を濃縮し、粗製物を逆相ＨＰＬＣによって精製して、（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−（ピペリジン−４−イルアミノ）イソニコチンアミド（６０ｍｇ、収率３９．７３％）を白色の固体として得た。
【０４５９】
ＬＣＭＳ：３９３．３［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ：（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ＝８．９５（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、８．２８（ｓ、１Ｈ）、７．８６（ｄ、Ｊ＝５．３Ｈｚ、１Ｈ）、７．５１〜７．３８（ｍ、２Ｈ）、５．７６（ｓ、１Ｈ）、４．１２〜４．０２（ｍ、４Ｈ）、３．８１（ｄ、Ｊ＝１３．２Ｈｚ、２Ｈ）、３．５０（ｍ、１Ｈ）、２．０５〜１．９３（ｍ、４Ｈ）、１．２８〜１．１０（ｍ、４Ｈ）。
【０４６０】
実施例６９
（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−（キノリン−４−イルアミノ）イソニコチンアミドの合成
【化１５１】
2021506972.tif 000173
化合物１１９ａ．ジオキサン（１０ｍＬ）中メチル３−ブロモイソニコチナート（０．５ｇ、２．３１５ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、ピリジン−３−アミン（０．３３４ｇ、２．３１５ｍｍｏｌ、１．０当量）、Ｃｓ２ＣＯ３（１．５ｇ、４．６３ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加し、得られた反応混合物をＮ２ガスで１０分間パージし、続いてＰｄ２（ｄｂａ）３（０．１０６ｇ、０．１１６ｍｍｏｌ．０．０５当量）、キサントホス（０．１３４ｇ、０．２３２ｍｍｏｌ、０．１当量）、および得られた反応混合物）を添加した。得られた反応混合物を１２０℃で一晩加熱した。生成物形成を、ＬＣＭＳによって確認した。反応の完了後、混合物を水（３０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５０ｍＬ）で洗浄した。水性層を分離し、凍結乾燥機で凍結乾燥させて、３−（キノリン−４−イルアミノ）イソニコチン酸（定量的収率）を白色の固体として得た。
【０４６１】
ＬＣＭＳ  ２６６．１［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１３．６６（ｓ、１Ｈ）、８．９３（ｓ、１Ｈ）、８．５８（ｄ、Ｊ＝５．３Ｈｚ、１Ｈ）、８．２８〜８．１８（ｍ、１Ｈ）、８．１４（ｄ、Ｊ＝４．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．９１（ｄ、Ｊ＝８．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．７９（ｄ、Ｊ＝４．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．７２（ｔ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、１Ｈ）、７．５８（ｔ、Ｊ＝７．２Ｈｚ、１Ｈ）、７．４５〜７．３３（ｍ、１Ｈ）、６．７６（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）。
【０４６２】
化合物１１９．ＤＭＦ（５ｍＬ）中３−（キノリン−４−イルアミノ）イソニコチン酸（０．１０ｇ、０．３７７ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−１−グリシルピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（０．０８５ｇ、０．３７７ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＨＡＴＵ（０．２８６ｇ、０．７５４ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加した。混合物を室温で１０分間撹拌させた。ＤＩＰＥＡ（０．２ｍＬ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳおよびＴＬＣによって確認した。反応の完了後、混合物を水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出した。組み合わせた有機抽出物を水（５０ｍＬ×５）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。得られた粗生成物を、調製精製によって精製して、（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−（キノリン−４−イルアミノ）イソニコチンアミド（０．００４ｇ、収率２．４％）を灰色がかった白色の固体として得た。
【０４６３】
ＬＣＭＳ  ４３７．２［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．７６（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、８．４８（ｓ、２Ｈ）、７．７９（ｄ、Ｊ＝８．３３Ｈｚ、２Ｈ）、７．３９（ｂｒ．ｓ．、２Ｈ）、６．８６（ｄ、Ｊ＝８．３３Ｈｚ、１Ｈ）、５．１０（ｄ、Ｊ＝７．４５Ｈｚ、１Ｈ）、４．２３（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、３．９８〜４．１２（ｍ、２Ｈ）、３．９４（ｓ、３Ｈ）、２．９０（ｄ、Ｊ＝８．３３Ｈｚ、１Ｈ）、２．７０〜２．８６（ｍ、１Ｈ）、２．６７（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）。
【０４６４】
実施例７０
（Ｓ）−３−（４−アミノピペリジン−１−イル）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）イソニコチンアミド２，２，２−トリフルオロ酢酸塩の合成
【化１５２】
2021506972.tif 000174
化合物１２０ａ．ジオキサン（５ｍＬ）中メチル３−ブロモイソニコチナート（０．２００ｇｍ、０．９２５ｍｍｏｌ、１．０当量）およびｔｅｒｔ−ブチルピペリジン−４−イルカルバメート（０．１８５ｇｍ、０．９２５ｍｍｏｌ、１．０当量）およびＣＳ２ＣＯ３（０．６０１ｇｍ、１．８５ｍｍｏｌ、２．０当量）の撹拌溶液に。得られた反応混合物を、窒素で１０分間パージし、続いてＰｄ２（ｄｂａ）３（０．０４２ｇｍ、０．０４６ｍｍｏｌ、０．０５当量）およびキサントホス（０．０５３ｇｍ、０．０９２ｍｍｏｌ、０．１当量）を添加し、再度窒素で１０分間パージした。反応混合物を１２０℃で一晩加熱した。反応の進行をＬＣＭＳによって監視した。反応混合物を水（３０ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（２×５０ｍＬ）で抽出した。組み合わせた有機層を、水（３０ｍＬ）、ブライン（３０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮して、粗製物を得、それをカラムクロマトグラフィーによって精製して、メチル３−（４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ピペリジン−１−イル）イソニコチナート（０．１２０ｇ、収率３８％）を黄色の半固体として得た。
【０４６５】
ＬＣＭＳ：３３６．５［Ｍ＋Ｈ］＋｀
化合物１２０ｂ．ＴＨＦ（３ｍＬ）および水（２ｍＬ）中化合物メチル３−（４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ピペリジン−１−イル）イソニコチナート（０．１００ｇｍ、０．２９８ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、ＬｉＯＨ（０．０１４ｇｍ、０．５９７ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加した。混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳによって確認した。反応混合物を濃縮し、水（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×２）で洗浄した。水性層を分離し、凍結乾燥機で凍結乾燥させて、３−（４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ピペリジン−１−イル）イソニコチン酸、リチウム塩（０．１２０ｇ、定量的収率）を白色の固体として得た。
【０４６６】
ＬＣＭＳ：３２２．２［Ｍ＋Ｈ］＋
化合物１２０ｃ．ＤＭＦ（３ｍｌ）中３−（４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ピペリジン−１−イル）イソニコチン酸、リチウム塩（０．０７０ｇｍ、０．２１３ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＨＡＴＵ（０．１６２ｇｍ、０．４２６ｍｍｏｌ、２．０当量）の撹拌溶液に、１０分後、（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−１−グリシルピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（０．０４８ｇｍ、０．２１３ｍｍｏｌ、１．０当量）を添加し、反応混合物を１０分間撹拌し、続いてＤＩＰＥＡ（０．０８２ｇ、０．６４０ｍｍｏｌ、３．０当量）を滴下で添加し、反応物を室温で１６時間撹拌させた。反応の進行をＬＣＭＳおよびＴＬＣによって監視し、水（３０ｍｌ）を添加することによって仕上げを完了し、酢酸エチル（２×５０ｍｌ）によって抽出した。組み合わせた有機層を、水（４×２０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮して、（Ｓ）−（１−（４−（（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）カルバモイル）ピリジン−３−イル）ピペリジン−４−イル）カルバメート（０．１１０ｇ）を粗生成物として得、それを次のステップに直接使用した。
【０４６７】
ＬＣＭＳ：４９３．３［Ｍ＋Ｈ］＋
化合物１２０・ＴＦＡ．ＤＣＭ（３ｍＬ）中（Ｓ）−（１−（４−（（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）カルバモイル）ピリジン−３−イル）ピペリジン−４−イル）カルバメート（０．１１０  ｇｍ、０．２２３ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、トリフルオロ酢酸（１．０ｍＬ）を添加した。混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳによって確認した。反応混合物を濃縮し、粗製物を逆相ＨＰＬＣによって精製して、（Ｓ）−３−（４−アミノピペリジン−１−イル）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）イソニコチンアミド２，２，２−トリフルオロ酢酸塩（０．０１５ｇ）を灰色がかった白色の固体として得た。
【０４６８】
ＬＣＭＳ：３９３．３［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ９．２５（ｄ、Ｊ＝５．７Ｈｚ、１Ｈ）、８．５０（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、８．３４（ｄ、Ｊ＝４．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．９３（ｂｒ．ｓ．、２Ｈ）、７．４９（ｄ、Ｊ＝４．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．１１（ｓ、１Ｈ）、５．１０（ｄ、Ｊ＝６．６Ｈｚ、１Ｈ）、４．２２〜４．１１（ｍ、２Ｈ）、３．５１〜３．３５（ｍ、３Ｈ）、３．１９（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、３．０４〜２．７５（ｍ、４Ｈ）、１．９７（ｄ、Ｊ＝１１．８Ｈｚ、２Ｈ）、１．７１（ｄ、Ｊ＝１１．４Ｈｚ、２Ｈ）、１．５５（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、０．９４〜０．７７（ｍ、２Ｈ）
【０４６９】
実施例７１
（Ｓ）−４−ベンジル−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボキサミドの合成
【化１５３】
2021506972.tif 000175
化合物１２１ａ．ジオキサン（４ｍｌ）および水（４ｍｌ）中メチル４−クロロ−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボキシレート（０．２５０ｇ、１．３４ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、Ｎａ２ＣＯ３（０．２８４ｇ、２．６８ｍｍｏｌ、２．０当量）、２−ベンジル−４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン（０．５８４ｇ、２．６８ｍｍｏｌ、２．０当量）、およびＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２．ＤＣＭ複合体（０．０５８ｇ、０．０７ｍｍｏｌ、０．０５当量）を添加した。反応混合物を、電子レンジで７０分間１５０℃で加熱させた。生成物形成を、ＴＬＣおよびＬＣＭＳによって確認した。反応混合物を水（１５ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬＸ３）で抽出した。組み合わせた有機層をブライン（３０ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。化合物を順相コンビフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、メチル４−ベンジル−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボキシレート（０．０３０ｇ）を得た。
【０４７０】
ＬＣＭＳ  ２４４．０［Ｍ＋Ｈ］＋
化合物１２１ｂ．ＴＨＦおよび水（１：１）（６ｍＬ）中メチル４−ベンジル−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボキシレート（０．３００ｇ、１．２３ｍｍｏｌ、１当量）の撹拌溶液に、ＬｉＯＨ．Ｈ２Ｏ（０．１０４ｇ、２．４７ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加した。混合物を６０℃で１６時間撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳによって確認した。反応混合物を水（２５ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ）で抽出し、水性層を減圧下で濃縮し、凍結乾燥させて、４−ベンジル−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボン酸（０．２６０ｇ）を得た。
【０４７１】
ＬＣＭＳ  ２３０．０［Ｍ＋Ｈ］＋
化合物１２１．ＤＭＦ（１７ｍｌ）中４−ベンジル−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボン酸（０．５００ｇ、２．１８ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−１−グリシルピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（０．５９０ｇ、２．６２ｍｍｏｌ、１．２当量）、ＥＤＣ．ＨＣｌ（０．５０３ｇ、２．６２ｍｍｏｌ、１．２当量）、ＨＯＢＴ（０．３５４ｇ、２．６２ｍｍｏｌ、１．２当量）、ＤＭＡＰ（０．００１ｇ）を添加し、反応混合物を室温で１０分間撹拌し、続いてＴＥＡ（０．６６１ｇ、６．５４ｍｍｏｌ、３．０当量）を添加した。反応混合物を室温で１６時間撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳによって確認した。反応混合物を水（３５ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（６０ｍＬＸ３）で抽出した。組み合わせた有機層を、水（４０ｍＬＸ６）およびブライン（６０ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。化合物を逆相ＨＰＬＣによって精製して、純（Ｓ）−４−ベンジル−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボキサミド（０．０７０ｇ  ８．５％）を灰色がかった白色の固体として得た。
【０４７２】
ＬＣＭＳ  ４０１．１［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１１．７４（ｓ、１Ｈ）、８．５５（ｔ、Ｊ＝５．９Ｈｚ、１Ｈ）、７．５８（ｓ、１Ｈ）、７．３３〜７．１５（ｍ、５Ｈ）、６．０５（ｓ、１Ｈ）、５．０９（ｄｄ、Ｊ＝９．１、２．８Ｈｚ、１Ｈ）、４．２６（ｄｄ、Ｊ＝１４．５、９．９Ｈｚ、１Ｈ）、４．１６〜３．９５（ｍ、５Ｈ）、２．９８〜２．７２（ｍ、２Ｈ）。
【０４７３】
実施例７２
（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−（１−フェニルビニル）イソニコチンアミドの合成
【化１５４】
2021506972.tif 000176
化合物１２２ａ．トルエン（１０ｍＬ）中メチル３−ブロモイソニコチナート（１．０ｇ、４．６ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、４，４，５，５−テトラメチル−２−（１−フェニルビニル）−１，３，２−ジオキサボロラン（１．０６ｇ、４．６ｍｍｏｌ、１．０当量）、Ｋ３Ｏ４Ｐ（１．９６ｇ、９．２ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加し、続いてパラジウム（ＩＩ）酢酸塩（０．１０４ｇ、０．４６ｍｍｏｌ．０．１当量）、およびトリシクロヘキシルホスフィン（０．１３０ｇ、０．４６ｍｍｏｌ．０．１当量）を添加し、得られた反応混合物を、１００℃で一晩加熱した。生成物形成を、ＬＣＭＳによって確認した。反応の完了後、混合物を水（２００ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１５０ｍＬ×２）で抽出した。組み合わせた有機抽出物を水（２０ｍＬ×２）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶出剤としてヘキサン中０〜２０％酢酸エチル）によって精製して、メチル３−（１−フェニルビニル）イソニコチナート（０．５６０ｇ、収率５０％）を茶色の半固体として得た。
【０４７４】
ＬＣＭＳ  ２４０［Ｍ＋Ｈ］＋
化合物１２２ｂ．ＴＨＦ（５ｍＬ）および水（５ｍＬ）中メチル３−（１−フェニルビニル）イソニコチナート（０．１００ｇ、０．４１ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、ＬｉＯＨ（０．０２０ｇ、０．８２ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加した。混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳおよび１Ｈ  ＮＭＲ分光法によって確認した。反応混合物を水（１５ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１５ｍＬ）で洗浄した。水性層を分離し、凍結乾燥機で凍結乾燥させて、３−（１−フェニルビニル）イソニコチン酸（０．１４０ｇ、定量的収率）を茶色の固体として得た。
【０４７５】
ＬＣＭＳ  ２２５．９［Ｍ＋Ｈ］＋
化合物１２２．ＤＭＦ（５ｍＬ）中３−（１−フェニルビニル）イソニコチン酸（０．１４０ｇ、０．４４ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−１−グリシルピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（０．１００ｇ、０．４４ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＨＯＢｔ（０．０７２ｇ、０．５３ｍｍｏｌ、１．２当量）、およびＥＤＣ．ＨＣｌ（０．１０２ｇ、０．５３ｍｍｏｌ、１．２当量）を添加した。混合物を室温で１０分間撹拌させた。トリエチルアミン（０．２ｍＬ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳによって確認した。反応の完了後、混合物を水（５０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５０ｍＬ×２）で抽出した。組み合わせた有機抽出物を水（２０ｍＬ×４）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。粗生成物を逆相ＨＰＬＣによって精製して、（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−（１−フェニルビニル）イソニコチンアミド（０．０１０ｇ、収率０７％）を白色の固体として得た。
【０４７６】
ＬＣＭＳ  ３９７［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．６６（ｔ、Ｊ＝５．９Ｈｚ、２Ｈ）、８．４３（ｓ、１Ｈ）、７．４６（ｄ、Ｊ＝４．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．２９（ｂｒ．ｓ．、２Ｈ）、７．２５（ｂｒ．ｓ．、２Ｈ）、５．７７（ｓ、１Ｈ）、５．３８（ｓ、１Ｈ）、５．０７（ｄ、Ｊ＝６．６Ｈｚ、１Ｈ）、４．１６（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、３．９７（ｄ、Ｊ＝９．２Ｈｚ、１Ｈ）、３．８６（ｂｒ．ｓ．、２Ｈ）、２．７８（ｄ、Ｊ＝１０．５Ｈｚ、２Ｈ）、２．６７（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）。
【０４７７】
実施例７３
Ｎ−（２−（（Ｓ）−２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−（１−フェニルエチル）イソニコチンアミドの合成
【化１５５】
2021506972.tif 000177
化合物１２３ａ．ＴＨＦ：メタノール（１０：０４ｍＬ）中メチル３−（１−フェニルビニル）イソニコチナート（０．２００ｇ、０．８３ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、ＴＥＡ（０．４２５ｇ、４．１６ｍｍｏｌ、５．０当量）を窒素下で添加し、炭素［Ｐｄ／Ｃ］上のパラジウム（０．０４５ｇ、０．４１ｍｍｏｌ、０．５当量）を添加した。反応混合物をＨ２ガスで１時間パージする。生成物形成を、ＬＣＭＳによって確認した。反応の完了後、反応混合物Ｃｅｌｉｔｅベッドに通して濾過し、濾過物を減圧下で濃縮して、メチル３−（１−フェニルエチル）イソニコチナート（０．１８０ｇ、収率８９％）を茶色の半固体として得た。
【０４７８】
ＬＣＭＳ  ２４１．２８［Ｍ＋Ｈ］＋
化合物１２３ｂ．ＴＨＦ（１５ｍＬ）および水（１０ｍＬ）中メチル３−（１−フェニルエチル）イソニコチナート（０．１８０ｇ、０．７４ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、ＬｉＯＨ（０．０３６ｇ、１．４８ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加した。混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳおよび１Ｈ  ＮＭＲ分光法によって確認した。反応混合物を水（１５ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１５ｍＬ）で洗浄した。水性層を分離し、凍結乾燥機で凍結乾燥させて、３−（１−フェニルエチル）イソニコチン酸（０．２１０ｇ、定量的収率）を茶色の固体として得た。
【０４７９】
ＬＣＭＳ  ２２７．９［Ｍ＋Ｈ］＋
化合物１２３．ＤＭＦ（５ｍＬ）中３−（１−フェニルエチル）イソニコチン酸（０．１００ｇ、０．４３ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、ＤＩＰＥＡ（０．３ｍＬ、１．２９ｍｍｏｌ、３．０当量）およびＨＡＴＵ（０．３２７ｇ、０．８６ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加した。混合物を窒素雰囲気下で３０分間撹拌させる。（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−１−グリシルピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（０．０９９ｇ、０．４３ｍｍｏｌ、１．０当量）を、上記の混合物に添加し、室温で一晩撹拌させた。反応の進行をＴＬＣおよびＬＣＭＳによって監視した。反応の完了後、反応混合物を水（３０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１００ｍＬ×２）で抽出した。有機層を水（１００ｍＬ）、ブライン溶液（１００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮して粗化合物を得、それを逆相ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（２−（（Ｓ）−２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−（１−フェニルエチル）イソニコチンアミド（遊離塩基）（０．００５ｇ、収率０３％）を白色の固体として得た。
【０４８０】
ＬＣＭＳ  ３９９［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．９７（ｄ、Ｊ＝８．８Ｈｚ、１Ｈ）、８．５６〜８．３８（ｍ、２Ｈ）、７．４６〜７．３３（ｍ、２Ｈ）、７．２９（ｔ、Ｊ＝７．２Ｈｚ、３Ｈ）、７．１８（ｔ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、１Ｈ）、５．１４（ｄ、Ｊ＝９．６Ｈｚ、１Ｈ）、４．６９〜４．５９（ｍ、１Ｈ）、４．２９（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、４．２２〜３．９９（ｍ、３Ｈ）、２．８２（ｄ、Ｊ＝１８．４Ｈｚ、２Ｈ）、１．６３（ｔ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、３Ｈ）。
実施例７４
Ｎ−（２−（（Ｓ）−２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−（（Ｒ）−１−フェニルエチル）イソニコチンアミドおよびＮ−（２−（（Ｓ）−２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−（（Ｓ）−１−フェニルエチル）イソニコチンアミドの合成
【化１５６】
2021506972.tif 000178
【０４８１】
キラル分割法：エナンチオマーを、キラルＳＦＣ（Ｃｈｉｒａｌｐａｋ−ＩＣ、２５０Ｘ２０ｍｍ、５μ）によって分離した。ヘキサンおよびイソプロピルアルコール中、ＨＰＬＣグレードの０．２％ＤＥＡを有し、分析グレードの液体二酸化炭素を有する無勾配プログラム。
【０４８２】
ＬＣＭＳ  ３９９．３［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．９７（ｄ、Ｊ＝８．８Ｈｚ、１Ｈ）、８．５６〜８．３８（ｍ、２Ｈ）、７．４６〜７．３３（ｍ、２Ｈ）、７．２９（ｔ、Ｊ＝７．２Ｈｚ、３Ｈ）、７．１８（ｔ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、１Ｈ）、５．１４（ｄ、Ｊ＝９．６Ｈｚ、１Ｈ）、４．６９〜４．５９（ｍ、１Ｈ）、４．２９（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、４．２２〜３．９９（ｍ、３Ｈ）、２．８２（ｄ、Ｊ＝１８．４Ｈｚ、２Ｈ）、１．６３（ｔ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、３Ｈ）。
実施例７５
（Ｓ，Ｅ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−スチリルイソニコチンアミドの合成
【化１５７】
2021506972.tif 000179
【０４８３】
化合物１２４ａ．ジオキサン（１０ｍＬ）および水（１ｍＬ）中エチル３−ブロモイソニコチナート（０．２ｇ、０．９２５ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、（Ｅ）−４，４，５，５−テトラメチル−２−スチリル−１，３，２−ジオキサボロラン（０．３１９ｇ、１．３９ｍｍｏｌ、１．５当量）、Ｋ２ＣＯ３（０．２６ｇ、１．８５２ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加し、得られた反応混合物をＮ２ガスで１０分間パージし、続いてＰｄ（ＰＰｈ３）Ｃｌ２（０．０３３ｇ、０．０４６ｍｍｏｌ．０．０５当量）を添加した。得られた反応混合物を１２０℃で一晩加熱した。生成物形成を、ＬＣＭＳによって確認した。反応の完了後、混合物をｃｅｌｉｔｅベッドに通して濾過し、酢酸エチル（１００ｍＬ）で洗浄した。濾過物を減圧下で濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶出剤としてヘキサン中０〜３０％酢酸エチル）によって精製して、メチル（Ｅ）−３−スチリルイソニコチナート（０．１５０ｇ、収率６７．８７％）を淡黄色の固体として得た。
【０４８４】
ＬＣＭＳ  ２４０．１［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６、４００ＭＨｚ）δ９．１２（ｓ、１Ｈ）、８．６３（ｄ、Ｊ＝５．４Ｈｚ、１Ｈ）、７．６５〜７．７７（ｍ、２Ｈ）、７．６１（ｄ、Ｊ＝７．３Ｈｚ、２Ｈ）、７．３８〜７．４９（ｍ、２Ｈ）、７．２６〜７．３８（ｍ、２Ｈ）、３．８３〜３．９６ｐｐｍ（ｍ、３Ｈ）。
【０４８５】
化合物１２４ｂ．ＴＨＦ（２ｍＬ）および水（２ｍＬ）中メチル（Ｅ）−３−スチリルイソニコチナート（０．１ｇ、０．４１８ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、ＬｉＯＨ．Ｈ２Ｏ（０．０２１ｇ、０．０．５０２ｍｍｏｌ、１．２当量）を添加した。混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳおよび１Ｈ  ＮＭＲ分光法によって確認した。反応混合物を濃縮し、水（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬｘ２）で洗浄した。水性層を分離し、凍結乾燥機で凍結乾燥させて、（Ｅ）−３−スチリルイソニコチン酸（定量的収率）を灰色がかった白色の固体として得た。
【０４８６】
ＬＣＭＳ  ２２６．２［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６、４００ＭＨｚ）δ  ８．８３（ｓ、１Ｈ）、８．３０（ｄ、Ｊ＝４．９Ｈｚ、１Ｈ）、７．８６（ｄ、Ｊ＝１７．１Ｈｚ、１Ｈ）、７．５２（ｄ、Ｊ＝７．３Ｈｚ、２Ｈ）、７．３８（ｔ、Ｊ＝７．６Ｈｚ、２Ｈ）、７．２０〜７．２９（ｍ、２Ｈ）、７．１８ｐｐｍ（ｓ、１Ｈ）。
【０４８７】
化合物１２４．ＤＭＦ（２ｍＬ）中（Ｅ）−３−スチリルイソニコチン酸（０．０６ｇ、０．２６６ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−１−グリシルピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（０．０６ｇ、０．２６６ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＥＤＣＩ．ＨＣｌ（０．０７７ｇ、０．３９ｍｍｏｌ、１．５当量）、およびＨＯＢｔ（０．０５４ｇ、０．３９ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加した。混合物を室温で１０分間撹拌させた。トリエチルアミン（０．２ｍＬ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳおよびＴＬＣによって確認した。反応の完了後、混合物を水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ×２）で抽出した。組み合わせた有機抽出物を水（２０ｍＬ×４）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶出剤としてＤＣＭ中５％メタノール）によって精製して、（Ｓ，Ｅ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−スチリルイソニコチンアミド（０．０４６ｇ、収率４３．８％）を灰色がかった白色固体として得た。
【０４８８】
ＬＣＭＳ  ３９７．２［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６、４００ＭＨｚ）δ９．１４（ｓ、１Ｈ）、８．９９（ｔ、Ｊ＝５．９Ｈｚ、１Ｈ）、８．５３（ｄ、Ｊ＝４．４Ｈｚ、１Ｈ）、７．６９（ｄ、Ｊ＝７．３Ｈｚ、２Ｈ）、７．６３（ｓ、１Ｈ）、７．４７（ｄ、Ｊ＝１６．１Ｈｚ、１Ｈ）、７．３３〜７．４４（ｍ、３Ｈ）、７．２４〜７．３３（ｍ、１Ｈ）、５．１０〜５．２４（ｍ、１Ｈ）、４．３２（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、４．０５〜４．２３（ｍ、３Ｈ）、２．９４（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、２．８０〜２．９１ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）。
実施例７６
（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−フェネチルイソニコチンアミドの合成
【化１５８】
2021506972.tif 000180
【０４８９】
化合物１２５ａ．ジオキサン（１０ｍＬ）および水（１ｍＬ）中エチル３−ブロモイソニコチナート（０．２ｇ、０．９２５ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、（Ｅ）−４，４，５，５−テトラメチル−２−スチリル−１，３，２−ジオキサボロラン（０．３１９ｇ、１．３９ｍｍｏｌ、１．５当量）、Ｋ２ＣＯ３（０．２６ｇ、１．８５２ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加し、得られた反応混合物をＮ２ガスで１０分間パージし、続いてＰｄ（ＰＰｈ３）Ｃｌ２（０．０３３ｇ、０．０４６ｍｍｏｌ．０．０５当量）を添加した。得られた反応混合物を１２０℃で一晩加熱した。生成物形成を、ＬＣＭＳによって確認した。反応の完了後、混合物をｃｅｌｉｔｅベッドに通して濾過し、酢酸エチル（１００ｍＬ）で洗浄した。濾過物を減圧下で濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶出剤としてヘキサン中０〜３０％酢酸エチル）によって精製して、メチル（Ｅ）−３−スチリルイソニコチナート（０．１５０ｇ、収率６７．８７％）を淡黄色の固体として得た。
【０４９０】
ＬＣＭＳ  ２４０．１［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６、４００ＭＨｚ）δ９．１２（ｓ、１Ｈ）、８．６３（ｄ、Ｊ＝５．４Ｈｚ、１Ｈ）、７．６５〜７．７７（ｍ、２Ｈ）、７．６１（ｄ、Ｊ＝７．３Ｈｚ、２Ｈ）、７．３８〜７．４９（ｍ、２Ｈ）、７．２６〜７．３８（ｍ、２Ｈ）、３．８３〜３．９６ｐｐｍ（ｍ、３Ｈ）。
【０４９１】
化合物１２５ｂ．メタノール（９ｍＬ）中メチル（Ｅ）−３−スチリルイソニコチナート（０．１３ｇ、０．５４４ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、Ｎ２ガスで１０分間パージし、続いてＰｄ／Ｃ（０．０６５ｇ）を添加した。次いで、得られた反応混合物を、Ｈ２ガスで６時間パージした。生成物形成を、ＬＣＭＳおよびＮＭＲによって確認した。反応の完了後、混合物をｃｅｌｉｔｅベッドに通して濾過し、メタノール（３０ｍＬ）で洗浄した。濾過物を減圧下で濃縮して、メチル３−フェネチルイソニコチナート（０．１ｇ、収率７６．３３％）を透明の油として得た。
【０４９２】
ＬＣＭＳ  ２４２．２［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６、４００ＭＨｚ）δ８．５７（ｓ、２Ｈ）、７．２７（ｄ、Ｊ＝６．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．１９（ｄ、Ｊ＝６．８Ｈｚ、２Ｈ）、３．８８（ｓ、３Ｈ）、３．１５（ｄ、Ｊ＝８．８Ｈｚ、２Ｈ）、２．８３ｐｐｍ（ｂｒ．ｓ．、２Ｈ）。
【０４９３】
化合物１２５ｃ．ＴＨＦ（４ｍＬ）および水（４ｍＬ）中メチル３−フェネチルイソニコチナート（０．１ｇ、０．４１５ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、ＬｉＯＨ．Ｈ２Ｏ（０．０２１ｇ、０．５ｍｍｏｌ、および１．２当量）を添加した。混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳおよび１Ｈ  ＮＭＲ分光法によって確認した。反応混合物を濃縮し、水（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬｘ２）で洗浄した。水性層を分離し、凍結乾燥機で凍結乾燥させて、３−フェネチルイソニコチン酸（定量的収率）を灰色がかった白色の固体として得た。
【０４９４】
ＬＣＭＳ  ２２８．２［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６、４００ＭＨｚ）δ８．２２（ｄ、Ｊ＝４．９Ｈｚ、１Ｈ）、７．１８〜７．３３（ｍ、５Ｈ）、７．０８〜７．１８（ｍ、１Ｈ）、２．９６〜３．１１（ｍ、２Ｈ）、２．７４〜２．８７ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）。
【０４９５】
化合物１２５．ＤＭＦ（３ｍＬ）中（Ｅ）−３−スチリルイソニコチン酸（０．０５ｇ、０．２２ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−１−グリシルピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（０．０５ｇ、０．２２ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＥＤＣＩ．ＨＣｌ（０．０６３ｇ、０．３３ｍｍｏｌ、１．５当量）、およびＨＯＢｔ（０．０４６ｇ、０．３３ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加した。混合物を室温で１０分間撹拌させた。トリエチルアミン（０．２ｍＬ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌させた。生成物形成を、ＬＣＭＳおよびＴＬＣによって確認した。反応の完了後、混合物を水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ×２）で抽出した。組み合わせた有機抽出物を水（２０ｍＬ×４）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶出剤としてＤＣＭ中５％メタノール）によって精製して、（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−フェネチルイソニコチンアミド（０．０５０ｇ、収率５７．１２％）を白色固体として得た。
【０４９６】
ＬＣＭＳ  ３９９．２［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６、４００ＭＨｚ）δ８．９２（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、８．４０〜８．５３（ｍ、２Ｈ）、７．３４（ｄ、Ｊ＝４．４Ｈｚ、１Ｈ）、７．２１〜７．２９（ｍ、４Ｈ）、７．１７（ｄ、Ｊ＝６．４Ｈｚ、１Ｈ）、５．１２（ｄ、Ｊ＝７．３Ｈｚ、１Ｈ）、４．３１（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、４．０２〜４．２２（ｍ、３Ｈ）、２．９６〜３．０８（ｍ、２Ｈ）、２．７７〜２．９５ｐｐｍ（ｍ、４Ｈ）。
実施例７７
Ｎ−（１−（（Ｓ）−２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−１−オキソプロパン−２−イル）−３−フェニルイソニコチンアミドの合成
【化１５９】
2021506972.tif 000181
【０４９７】
化合物１２６ａ．ＡＣＮ（２０ｍＬ）中アラニン（２．０ｇ、２２．２ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、ジ−ｔｅｒｔ−ブチル二炭酸（５．３５ｇ、２４．４ｍｍｏｌ、１．１当量）を添加し、１０分間撹拌した。０．５Ｍ  ＮａＯＨ溶液（２０ｍＬ）を添加し、反応混合物を室温で一晩撹拌させた。反応の進行をＮＭＲによって監視した。反応物を、希釈したＨＣｌ（ＰＨ＝２．５）で酸性化し、酢酸エチル（１００ｍＬ）で抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮して、（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アラニンを得た。（２．１００ｇ、白色の固体）。
【０４９８】
化合物１２６ｂ．ＤＭＦ（０５ｍＬ）中（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アラニン（０．６２３ｇ、３．２ｍｍｏｌ，１．１当量）およびＨＡＴＵ（２．２０ｇ、５．８ｍｍｏｌ、２．０当量）の撹拌溶液に、（Ｓ）−４，４−ジフルオロピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（０．５００ｇ、２．９ｍｍｏｌ、１．０当量）を添加し、１０分間撹拌した。ＤＩＰＥＡ（１．５ｍＬ、８．７ｍｍｏｌ、３．０当量）を添加し、反応混合物を室温で一晩撹拌させた。反応の進行をＮＭＲおよびＴＬＣによって監視した。反応物を冷水（２００ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２００ｍＬ×２）で抽出した。組み合わせた有機抽出物を、水（２００ｍＬ×３）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮して、ｔｅｒｔ−ブチル（１−（（Ｓ）−２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−１−オキソプロパン−２−イル）カルバメート（０．７００ｇ、茶色の様な固体として）を得た。
【０４９９】
化合物１２６ｃ．アセトニトリル（１０ｍＬ）中ｔｅｒｔ−ブチル（１−（（Ｓ）−２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−１−オキソプロパン−２−イル）カルバメート（０．７００ｇ、２．３１ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、１０分間にわたってジオキサン（５．０ｍｌ）中４．０Ｍ  ＨＣｌを０℃で、滴下で添加した。混合物を室温で一晩撹拌させた。反応の進行をＮＭＲによって監視した。溶媒を減圧下で蒸発させて残基を得、それを２０ｍＬ酢酸エチルおよびヘキサン（１：１）で洗浄して、（２Ｓ）−１−アラニル−４，４−ジフルオロピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（０．９００ｇ）を黄色の半固体として得た。
【０５００】
化合物１２６．ＤＭＦ（５ｍＬ）中３−フェニルイソニコチン酸（０．７５３ｇ、３．７ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、（２Ｓ）−１−アラニル−４，４−ジフルオロピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩（０．９００ｇ、３．７ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＨＯＢＴ（０．５９４ｇ、４．４ｍｍｏｌ、１．２当量）、ＥＤＣ．ＨＣｌ（０．８４８ｇ、４．４ｍｍｏｌ、１．２当量）を添加し、１０分間撹拌した。ＴＥＡ（１．０ｍＬ、７．４ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加し、混合物を室温で１６時間撹拌させた。反応の進行をＮＭＲおよびＴＬＣによって監視した。反応混合物を冷水（５０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１５０×２ｍＬ）で抽出した。組み合わせた有機抽出物を、水（５０ｍＬ×４）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮した。得られた粗生成物を、逆相クロマトグラフィーによって精製して、Ｎ−（１−（（Ｓ）−２−シアノ−４，４−ジフルオロピロリジン−１−イル）−１−オキソプロパン−２−イル）−３−フェニルイソニコチンアミド（３５ｍｇ、収率０３％）を灰色がかった白色の固体として得た。
【０５０１】
ＬＣＭＳ  ３８５［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ９．０６（ｄ、Ｊ＝７．４５Ｈｚ、１Ｈ）８．６６（ｂｒ．ｓ．、２Ｈ）７．３２〜７．５２（ｍ、５Ｈ）５．０５（ｄ、Ｊ＝７．０２Ｈｚ、１Ｈ）４．５６（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）４．０７（ｄ、Ｊ＝９．２１Ｈｚ、１Ｈ）４．０１（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）２．８２（ｂｒ．ｓ．、２Ｈ）１．０９〜１．２０（ｍ、３Ｈ）。
【０５０２】
生物学的実施例
実施例Ｂ１
試験化合物によるＦＡＰαの阻害を、インビトロ酵素活性アッセイによって評価した。
ＦＡＰα酵素エキソペプチダーゼ（ジペプチダーゼ）活性アッセイ。ベースラインＦＡＰα酵素エキソペプチダーゼ活性をアッセイするために、４０ｎｇの組換えヒトＦＡＰα（ｒｈＦＡＰα、Ｒ＆Ｓ  ｓｙｓｔｅｍ、＃３７１５−ＳＥ）または４０ｎｇの組換えマウスＦＡＰα（ｒｍＦＡＰα、Ｒ＆Ｓ  ｓｙｓｔｅｍ、＃８６４７−ＳＥ）を、９６ウェルブラックプレート（Ｎｕｎｃ、＃２３７１０８）に、遮光で、３７℃で１時間、ＦＡＰαアッセイ緩衝液（５０ｍＭトリスｐＨ７．４、１００ｍＭ  ＮａＣｌ、０．１ｍｇ／ｍｌウシ血清アルブミン）中の１００μＭのＺ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−ＡＭＣペプチド（ＢＡＣＨＥＭ、＃Ｌ−１１４５）とともにインキュベートした。試験化合物によるＦＡＰα酵素エキソペプチダーゼ活性阻害をアッセイするために、すべての試験化合物を、９６ウェルブラックプレート（Ｎｕｎｃ、＃２３７１０８）中の基質添加による反応を開始する前に、３７℃で１５分間酵素とともに事前インキュベートした。７−アミノ−４−メチルクマリン（ＡＭＣ）放出を、多機能マイクロプレートリーダー（Ｓｙｎｅｒｇｙ  ４、Ｂｉｏｔｅｋ）を使用してＥｘ／Ｅｍ  ３８０／４６０ｎｍで蛍光を測定することによって検出した。すべての測定を２つ組で実施した。非特異的プロリルペプチダーゼ阻害剤であるＶａｌ−ｂｏｒｏＰｒｏを陽性対照として使用した。表２に示されるように、ある特定の化合物について、１μＭでのｒｍＦＡＰαまたはｒｈＦＡＰα酵素エキソペプチダーゼ活性の阻害パーセントを決定した。計算については、酵素を含まないビヒクルおよび基質のみを含む反応からの平均測定値をブランクとして使用し、残りの測定値から差し引いた。ビヒクル、酵素、および基質を含む反応からの平均測定値を酵素活性の最大値として用いて、阻害パーセントを計算した。加えて、ある特定の化合物のｒｍＦＡＰαまたはｒｈＦＡＰα酵素エキソペプチダーゼ活性のＩＣ５０もまた、表２に示す。測定を一点として行った。
【０５０３】
ＦＡＰα酵素エンドペプチダーゼ（コラゲナーゼ）活性アッセイ。ベースラインＦＡＰα酵素エキソペプチダーゼ活性をアッセイするために、ＦＡＰαアッセイ緩衝液（５０ｍＭトリスｐＨ７．４、１００ｍＭ  ＮａＣｌ、０．１ｍｇ／ｍｌウシ血清アルブミン）に希釈した５０ｎｇの組換えヒトＦＡＰα（ｒｈＦＡＰα）（Ｒ＆Ｓ  ｓｙｓｔｅｍ、＃３７１５−ＳＥ）を、３８４ウェルｏｐｔｉｐｌａｔｅｓ（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ、＃３８４−Ｆ）に、３７℃で５時間および遮光で、５μｇの基質ＤＱコラーゲン溶液（分子プローブ＃Ｄ−１２０６０）とともにインキュベートした。試験化合物によるＦＡＰα酵素エンドペプチダーゼ活性阻害をアッセイするために、すべての試験化合物を、３８４ウェルＯｐｔｉＰｌａｔｅｓ（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ、＃３８４−Ｆ）中の基質添加による反応を開始する前に、３７℃で３０分間酵素とともに事前インキュベートした。多機能マイクロプレートリーダー（Ｓｙｎｅｒｇｙ  ４、Ｂｉｏｔｅｋ）を用いてＥｘ／Ｅｍ  ４９５／５１５ｎｍで蛍光を測定することによって、コラーゲン加水分解を決定した。すべての測定は、単一の点として行った。非特異的プロリルペプチダーゼ阻害剤であるＶａｌ−ｂｏｒｏＰｒｏを陽性対照として使用した。ある特定の化合物のｒｈＦＡＰα酵素エンドペプチダーゼ活性（コラゲナーゼアッセイによって決定される）ＩＣ５０もまた、表２に示す。
【表４】
2021506972.tif 000182
2021506972.tif 000183
2021506972.tif 000184
【０５０４】
実施例Ｂ２
試験化合物によるＦＡＰαの阻害の選択性を、他のプロリルオリゴペプチダーゼファミリーＳ９メンバーと比較して評価した：ＤＰＰＩＶ、ＰＲＥＰ、およびＤＰＰ９
ＤＰＰＩＶ酵素活性アッセイ
ベースラインジペプチジルペプチダーゼ−４（ＤＰＰＩＶ）活性をアッセイするために、４０ｎｇの組換えヒトＤＰＰＩＶ（ｒｈＤＰＰＩＶ）（Ｒ＆Ｓ  ｓｙｓｔｅｍ、＃１１８０−ＳＥ）または４０ｎｇの組換えマウスＤＰＰＩＶ（ｒｍＤＰＰＩＶ）（Ｒ＆Ｓ  ｓｙｓｔｅｍ、＃９５４−ＳＥ）を、９６ウェルブラックプレート（Ｎｕｎｃ、＃２３７１０８）に、遮光で、３７℃で３０分間、ＤＰＰＩＶアッセイ緩衝液（２５ｍＭトリス、ｐＨ８．３）中の４００μＭのＨ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−ｐＮＡ基質（ＢＡＣＨＥＭ、＃Ｌ−１８８０）とともにインキュベートした。試験化合物によるＤＰＰＩＶ阻害をアッセイするために、試験化合物を、９６ウェルブラックプレート（Ｎｕｎｃ、＃２３７１０８）中の基質添加による反応を開始する前に、３７℃で１５分間酵素とともに事前インキュベートした。多機能マイクロプレートリーダー（Ｓｙｎｅｒｇｙ  ４、Ｂｉｏｔｅｋ）を使用して４０５ｎｍで吸光度を測定することによって、パラ−ニトロアニリン（ｐＮＡ）放出を検出した。すべての測定を３つ組で実施した。非特異的プロリルペプチダーゼ阻害剤であるＶａｌ−ｂｏｒｏＰｒｏを陽性対照として使用した。
ＰＲＥＰ酵素活性アッセイ
【０５０５】
ベースラインプロリルエンドペプチダーゼ（ＰＲＥＰ）活性をアッセイするために、２０ｎｇの組換えヒトＰＲＥＰ（ｒｈＰＲＥＰ）（Ｒ＆Ｓ  ｓｙｓｔｅｍ、＃４３０８−ＳＥ）または２０ｎｇの組換えマウスＰＲＥＰ（ｒｍＰＲＥＰ）（Ｒ＆Ｓ  ｓｙｓｔｅｍ、＃６３３９−ＳＥ）を、９６ウェルブラックプレート（Ｎｕｎｃ、＃２３７１０８）に、３７℃で３０分間、遮光で、ＰＲＥＰアッセイ緩衝液（２５ｍＭトリス、２５０ｍＭ  ＮａＣｌ、１０ｍＭ  ＤＴＴ、ｐＨ７．５）中の１００μＭのＺ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−ＡＭＣペプチド（ＢＡＣＨＥＭ、＃Ｌ−１１４５）とともにインキュベートした。試験化合物によるＰＲＥＰ活性阻害をアッセイするために、試験化合物を、９６ウェルブラックプレート（Ｎｕｎｃ、＃２３７１０８）中の基質添加による反応を開始する前に、３７℃で１５分間酵素とともに事前インキュベートした。多機能マイクロプレートリーダー（Ｓｙｎｅｒｇｙ  ４、Ｂｉｏｔｅｋ）を使用してＥｘ／Ｅｍ  ３８０／４６０ｎｍで蛍光を測定することによって、７−アミノ−４−メチルクマリン（ＡＭＣ）放出を検出した。すべての測定を３つ組で実施した。非特異的プロリルペプチダーゼ阻害剤であるＶａｌ−ｂｏｒｏＰｒｏを陽性対照として使用した。
【０５０６】
ＤＰＰ９酵素活性アッセイ
ベースラインジペプチジルペプチダーゼ９（ＤＰＰ９）活性をアッセイするために、４０ｎｇの組換えヒトＤＰＰ９（ｒｈＤＰＰ９）（Ｒ＆Ｓ  ｓｙｓｔｅｍ、＃５４１９−ＳＥ）を、９６ウェルブラックプレート（Ｎｕｎｃ、＃２３７１０８）に、３７℃で３０分間、ＤＤＰ９アッセイ緩衝液（５０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、ｐＨ８）中の１００μＭのＨ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−ＡＭＣペプチド（ＢＡＣＨＥＭ、＃Ｌ−１２１５）とともにインキュベートした。試験化合物によるｒｈＤＰＰ９活性阻害をアッセイするために、試験化合物を、９６ウェルブラックプレート（Ｎｕｎｃ、＃２３７１０８）中の基質添加による反応を開始する前に、３７℃で１５分間酵素とともに事前インキュベートした。７−アミノ−４−メチルクマリン（ＡＭＣ）放出を、多機能マイクロプレートリーダー（Ｓｙｎｅｒｇｙ  ４、Ｂｉｏｔｅｋ）を使用してＥｘ／Ｅｍ  ３８０／４６０ｎｍで蛍光を測定することによって検出した。すべての測定を３つ組で実施した。非特異的プロリルペプチダーゼ阻害剤であるＶａｌ−ｂｏｒｏＰｒｏを陽性対照として使用した。
【０５０７】
新しいＦＡＰα阻害剤が選択的であったか、またはそれらが他のプロリルペプチダーゼも阻害したかどうかを判定するために、ある特定の試験化合物、参照化合物（Ｊａｎｓｅｎ，Ｋ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ，２０１４．５７（７）：ｐ．３０５３−７４に記載される通りの化合物６０）、ならびにＶａｌ−ｂｏｒｏＰｒｏのｒｍＤＰＰＩＶ、ｒｈＤＰＰＩＶ、ｒｍＰＲＥＰ、および／またはＤＰＰ９のＩＣ５０を、表３に示されるように決定した。
【表５】
2021506972.tif 000185
2021506972.tif 000186
【０５０８】
実施例Ｂ３
ＦＡＰα活性測定のための選択的ＰＲＸＳ−ＡＭＣ基質の検証
ＦＡＰα活性は、Ａｌａ−Ｐｒｏ−７−アミノ−４−トリフルオロメチル−クマリン（ＡＦＣ）などの化学クエンチ色素に結合したペプチド基質、またはＺ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−ＡＭＣなどのコンセンサスＧｌｙ−Ｐｒｏジペプチドを含む基質を使用してジペプチジル−ペプチダーゼに対する一般的な蛍光強度アッセイによって測定することができる（Ｌｅｖｙ，Ｍ．Ｔ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ，１９９９，２９（６）：１７６８−７８；Ｓａｎｔｏｓ，Ａ．Ｍ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｉｎｖｅｓｔ，２００９，１１９（１２）：３６１３−２５；Ｐａｒｋ，Ｊ．Ｅ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ，１９９９，２７４（５１）：３６５０５−１２；Ｎｉｅｄｅｒｍｅｙｅｒ，Ｊ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ，２０００，２０（３）：１０８９−９４；Ｎａｒｒａ，Ｋ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｂｉｏｌ  Ｔｈｅｒ，２００７，６（１１）：１６９１−９；Ｌｅｅ，Ｋ．Ｎ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｔｈｒｏｍｂ  Ｈａｅｍｏｓｔ，２０１１，９（５）：９８７−９６；Ｌｉ，Ｊ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇ  Ｃｈｅｍ，２０１２，２３（８）：１７０４−１１）。これらの基質は、反応中に存在し得るＰＲＥＰなどの他の循環プロリン特異的エンドペプチダーゼによっても標的化される可能性が高い。対照的に、ＰＲＸＳ−ＡＭＣと名付けられた独自の基質試薬は、ＦＡＰα活性を特異的に監視することができる。
【０５０９】
この独自の基質の高選択性を検証するために、実施例Ｂ１およびＢ２に記載されるようにＺ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−ＡＭＣまたはＰＲＸＳ−ＡＭＣを使用して、ＦＡＰ、ＤＰＰＩＶ、ＰＲＥＰ、およびＤＰＰ９の酵素活性アッセイを実施した。
【０５１０】
ＦＡＰα、ＤＰＰＩＶ、ＤＰＰ９、およびＰＲＥＰ酵素活性をアッセイするために、ヒト組換え酵素を、それぞれ５、２．５、２．５、および５ｎＭの最終濃度で使用した。Ｚ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−ＡＭＣまたはＰＲＸＳ−ＡＭＣを、２５、５０、１００、および２００μＭの最終濃度で使用した。反応を３７℃で６０分間実施し、遮光した。動態モードで多機能マイクロプレートリーダーを使用してＥｘ／Ｅｍ  ３８０／４６０ｎｍで蛍光を測定することによって、ＡＭＣ放出を検出した。測定を一点として行った。ｒｈＦＡＰαの存在下でのＰＲＸＳ−ＡＭＣおよびＺ−ｇｌｙ−ｐｒｏ−ＡＭＣの経時的な得られた蛍光を、それぞれ図１Ａおよび図１Ｂに示し、ｒｈＰＲＥＰの存在下でのＰＲＸＳ−ＡＭＣおよびＺ−ｇｌｙ−ｐｒｏ−ＡＭＣの経時的な得られた蛍光を、それぞれ図２Ａおよび図２Ｂに示し、ｒｈＤＰＰＩＶまたはｒｈＤＰＰ９の存在下でのＰＲＸＳ−ＡＭＣの経時的な得られた蛍光を、それぞれ図３Ａおよび図３Ｂに示す。
【０５１１】
ＰＲＸＳ−ＡＭＣは、Ｚ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−ＡＭＣよりも低い程度で、同様の濃度で密接に関連するプロリルオリゴペプチダーゼＰＲＥＰによって処理される（図２Ａ〜２Ｂを参照されたい）。ＰＲＸＳ−ＡＭＣは、ＤＰＰＩＶまたはＤＰＰ９によって処理されない（図３Ａ〜３Ｂ）。加えて、ＰＲＸＳ−ＡＭＣは、水性緩衝液中で改善された溶解度を示した。
【０５１２】
実施例Ｂ４
血漿における酵素活性
マウス血漿におけるＦＡＰα酵素活性
１匹のＣ５７ＢＬ／６マウスからの約５００μＬの全血を、末端心臓穿刺によりＢＤ  Ｍｉｃｒｏｔａｉｎｅｒ（登録商標）チューブ（Ｋ２）ＥＤＴＡ（＃３６５９７４、Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ  ａｎｄ  Ｃｏ．）に採取した。４℃で５分間約９０００ｇで、血液試料を直ちに遠心分離した。血漿を分離し、３００μＬにアリコートし、−８０℃で保存した。ベースラインＦＡＰα酵素エキソペプチダーゼ活性をアッセイするために、５μＬの解凍された血漿を、ｃＦＡＰ緩衝液（１００ｍＭトリス−ＨＣｌ、４００ｍＭ  ＮａＣｌ、５０ｍＭサリチル酸、１ｍＭ  ＥＤＴＡ、ｐＨ７．５）で希釈（１：５）し、３５μＬの同じ緩衝液と混合した後、９６ウェルブラックプレート（Ｎｕｎｃ、＃２３７１０８）に、３７℃で１５分間、異なる濃度の１０μＬの試験化合物またはＤＭＳＯビヒクルとともに事前インキュベートした。事前インキュベーション後、５０μＬの２００μＭジペプチド基質Ｚ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−ＡＭＣ（Ｂａｃｈｅｍ、＃Ｌ−１１４５）またはＰＲＸＳ−ＡＭＣを混合物に添加した。アッセイを、遮光で、３７℃で１時間行った。多機能マイクロプレートリーダー（Ｓｙｎｅｒｇｙ  ４、Ｂｉｏｔｅｋ）を使用して３８０ｎｍの励起波長および４６０ｎｍの発光波長で蛍光を測定することによって、７−アミノ−４−メチルクマリン（ＡＭＣ）放出を検出した。すべての測定を、少なくとも単一の点として実施した。結果を表４に示す。
【０５１３】
マウス血漿におけるＤＰＰＩＶ酵素活性
１匹のＣ５７ＢＬ／６マウスからの約５００μＬの全血を、末端心臓穿刺によりＢＤ  Ｍｉｃｒｏｔａｉｎｅｒ（登録商標）チューブ（Ｋ２）ＥＤＴＡ（＃３６５９７４、Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ  ａｎｄ  Ｃｏ．）に採取した。４℃で５分間約９０００ｇで、血液試料を直ちに遠心分離した。血漿を分離し、３００μＬにアリコートし、−８０℃で保存した。ベースラインＤＰＰＩＶ酵素エキソペプチダーゼ活性をアッセイするために、５μＬの解凍されたマウス血漿を、緩衝液（１００ｍＭトリス−ＨＣｌ、４００ｍＭ  ＮａＣｌ、５０ｍＭサリチル酸、１ｍＭ  ＥＤＴＡ、ｐＨ７．５）で希釈（１：５）し、３５μＬの同じ緩衝液と混合した後、９６ウェルブラックプレート（Ｎｕｎｃ、＃２３７１０８）に、３７℃で１５分間、異なる濃度の１０μＬの試験化合物またはＤＭＳＯビヒクルとともに事前インキュベートした。事前インキュベーション後、５０μＬの２００μＭジペプチド基質Ｈ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−ＡＭＣ（Ｂａｃｈｅｍ、＃Ｌ−１２２５）を混合物に添加した。アッセイを、３７℃で１時間行った。多機能マイクロプレートリーダー（Ｓｙｎｅｒｇｙ  ４、Ｂｉｏｔｅｋ）を使用して３６０ｎｍの励起波長および４６０ｎｍの発光波長で蛍光を測定することによって、７−アミノ−４−メチルクマリン（ＡＭＣ）放出を検出した。すべての測定を少なくとも２つ組で実施した。結果を表４に示す。
【表６】
2021506972.tif 000187
【０５１４】
実施例Ｂ５
ヒト血漿におけるＦＡＰα酵素活性
ヒト血漿をＰＢＳ中で１／１０に希釈する。ベースラインＦＡＰα酵素エキソペプチダーゼ活性をアッセイするために、希釈した血漿を、９６ウェルブラックプレート（Ｎｕｎｃ、＃２３７１０８）に、３７℃で１時間、１００μＭ  Ｚ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−ＡＭＣペプチド（ＢＡＣＨＥＭ、＃Ｌ−１１４５）とともにインキュベートする。試験化合物を、９６ウェルブラックプレート（Ｎｕｎｃ、＃２３７１０８）中の基質の添加による反応を開始する前に、３７℃で１５分間、希釈した血漿とともに事前インキュベートする。多機能マイクロプレートリーダー（Ｓｙｎｅｒｇｙ  ４、Ｂｉｏｔｅｋ）を使用してＥｘ／Ｅｍ  ３８０／４６０ｎｍで蛍光を測定することによって、７−アミノ−４−メチルクマリン（ＡＭＣ）放出を検出する。すべての測定を、３つ組で実施する。
【０５１５】
実施例Ｂ６
異なる種の血漿からの循環ＦＡＰα活性のエクスビボ阻害
ヒト血漿
ヒトの血液を健康な若い志願者から得た。血液試料を、静脈穿刺法によってＥＤＴＡ−Ｋ２でコーティングされたチューブに収集し、穏やかに混合し、次いで、氷上に維持して、４℃で１５分間２，５００×ｇで遠心分離した。血漿の分離後、試料を３００μＬに分けて、−８０℃で保存した。
【０５１６】
ヒト血漿からの循環ＦＡＰα活性を超える例示的な試験化合物の阻害力を判定するために、２０μＬの解凍した血漿を、２０μＬのｃＦＡＰ緩衝液（１００ｍＭトリス−ＨＣｌ、４００ｍＭ  ＮａＣｌ、５０ｍＭサリチル酸、１ｍＭ  ＥＤＴＡ、ｐＨ７．５）および１０μＬの異なる濃度の例示的な試験化合物またはビヒクル（ＤＭＳＯ）と混合した。
【０５１７】
例示的な化合物を、３７℃で１５分間酵素を相互作用させた。事前インキュベーション後、５０μｌの２００μＭ  ＰＲＸＳ−ＡＭＣ基質をすべての混合物に添加した。すべての反応を、遮光で、３７℃で１時間実施した。多機能マイクロプレートリーダーを使用して３８０／４６０ｎｍの励起／発光波長で蛍光を測定することによって、ＡＭＣ放出を検出した。すべての測定を、単一の点として実施した。
ヒトからの循環ＦＡＰαを超える例示的な試験化合物のＩＣ５０の結果を表５に示す。
【０５１８】
ハムスター血漿
雄のゴールデンシリアンハムスターは、台湾の国立実験動物センター（ＮＬＡＣ）により提供された。動物を、調整温度（２０〜２４℃）および湿度（５０％〜８０％）で、１２時間の明暗サイクルで、衛生的な環境で維持した。スタンダードラボダイエット［ＭＦＧ（オリエンタル酵母工業株式会社、日本）］およびオートクレーブされた水道水を無料で利用することが認められた。動物の飼育、実験、および処分を含むこの作業のすべての態様を、一般に“Ｇｕｉｄｅ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｃａｒｅ  ａｎｄ  Ｕｓｅ  ｏｆ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ａｎｉｍａｌｓ：Ｅｉｇｈｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ”（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ａｃａｄｅｍｉｅｓ  Ｐｒｅｓｓ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｄ．Ｃ．，２０１１）に従って行った。加えて、動物の管理および使用プロトコルは、Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ  Ｔａｉｗａｎ，ＬｔｄでＩＡＣＵＣにより審査および承認を受けた。
ハムスターの屠殺の直後に、ＥＤＴＡ−Ｋ２でコーティングされたチューブ内に末端心臓穿刺により血液試料を収集し、穏やかに混合し、次いで、氷上に維持して、４℃で１５分間２，５００×ｇで遠心分離した。血漿の分離後、試料を３００μＬにアリコートし、−８０℃で保存した。
【０５１９】
ハムスター血漿における例示的な化合物をアッセイするために、ｃＦＡＰ緩衝液中で解凍された血漿１：２を希釈して、ヒト血漿について記載されているような同様のプロトコルを行った。９６ウェルブラックプレートにおいて、５μｌの希釈ハムスター血漿を、３５μｌの同じ緩衝液および１０μｌの例示的な試験化合物と、異なる濃度またはビヒクル（ＤＭＳＯ）で混合した。
【０５２０】
例示的な試験化合物を、３７℃で１５分間酵素と相互作用させた。事前インキュベーション後、５０μｌの２００μＭ  ＰＲＸＳ−ＡＭＣ基質をすべての混合物に添加した。すべての反応を、遮光で、３７℃で１時間実施した。多機能マイクロプレートリーダーを使用して３８０／４６０ｎｍの励起／発光波長で蛍光を測定することによって、ＡＭＣ放出を検出した。すべての測定を、単一の点として実施した。
【０５２１】
ハムスター血漿からの循環ＦＡＰαを超える例示的な試験化合物のＩＣ５０の結果を表５に示す。
【表７】
2021506972.tif 000188
【０５２２】
実施例Ｂ７
静脈内および経口生物学的利用能
例示的な試験化合物の薬物動態特性を、マウスにおける静脈内（ＩＶ）２ｍｇ／ｋｇまたは経口（ＰＯ）１０ｍｇ／ｋｇの単回用量の投与後にアッセイした。例示的な試験化合物を、それぞれ静脈内および経口投与のための投与溶液としてポリ−エチレングリコール２００（ＰＥＧ２００；カタログ番号＃Ｐ３０１５、Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ）および蒸留水（ｄＨ２Ｏ）（５０／５０、ｖ／ｖ）を含むビヒクル中０．４および１ｍｇ／ｍｌで製剤化した。
【０５２３】
約８〜１０週齢のＣ５７ＢＬ／６ｊおよびＢａｌｂ／ｃマウスを、Ｆｕｎｄａｃｉｏｎ  Ｃｉｅｎｃｉａ＆Ｖｉｄａ  Ｃｈｉｌｅ（Ｓａｎｔｉａｇｏ，Ｃｈｉｌｅ）のビバリウムから得て、適宜食物および水とともに、１２／１２時間の明暗スケジュールで温度調整室内に維持した。動物を、試験施設に到着したときに最低４日間順化させた。
【０５２４】
研究日に、マウスを重量測定し、実験グループへの指定のために無毒性永久マーカーを使用して尾部に数字で印付けすることによって識別した（１グループあたりｎ＝３）。ＩＶ投与グループの各マウスは、尾静脈を介して２ｍｇ／ｋｇ投与溶液の全身ボーラスを受けた。ＰＯ投与グループの各マウスは、給餌チューブ２０Ｇ（カタログ番号：ＦＴＰ−２０３８；Ｉｎｓｔｅｃｈ  Ｓａｌｏｍｏｎ  Ｉｎｃ．）を介して１０ｍｇ／ｋｇの胃内ボーラスを受けた。
【０５２５】
投与後５、１０、１５、３０、６０、１２０、２４０、３６０、および４８０分で、末端心臓穿刺により血液試料を採取した。非投与マウスを使用して、ゼロ時点の試料を収集した。全血を（Ｋ２）ＥＤＴＡ（カタログ番号＃３６５９７４、Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ＆Ｃｏ．）を含むｍｉｃｒｏｔａｉｎｅｒチューブに収集した。血液試料を４℃で５分間９，０００ｇで直ちに遠心分離し、血漿を分離した。血漿試料を個々に標識されたクリオバイアル（カタログ番号＃３６６６５６、Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｉｎｃ．）に入れ、ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ生体分析まで−８０℃の冷凍庫に保存した。
【０５２６】
血漿試料を、試験化合物に応じて正または負のイオンモードでＱＴＲＡＰ  ４５００三連四重極質量分析計（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ  ＳＣＩＥＸ）によって分析し、ｅｋｓｐｅｒｔ  ｕｌｔｒａＬＣ  １００−ＸＬ  ＵＰＬＣ  Ｓｙｓｔｅｍ（ｅｋｓｉｇｅｎｔ）と接続して、例示的な試験化合物の濃度を決定した。３体積の氷冷内部標準溶液（２０μＭのテオフィリンを含むアセトニトリル）での沈殿によって、マウス血漿研究試料（６０μｌ）と並行して、天然マウス血漿から較正標準（０．００１〜１０μＭ）およびＱＣ（０．０２、０．２および２μＭ）を調製した。沈殿した試料を、４℃で３０分間６，１００ｇで遠心分離した。遠心分離後、各上清のアリコートをきれいな試料バイアルに移し、２体積の移動相水溶液（水中０．２％ギ酸）で希釈した。試料を逆相分析カラム（ＹＭＣ  Ｔｒｉａｒｔ  Ｃ１８；２．０ｘ５０ｍｍ；１．９μｍ；ＹＭＣ  ＣＯ）に注入し、アセトニトリル中０．１または０．２％のギ酸の勾配で溶出した。試験化合物および内部標準を、Ａｎａｌｙｓｔソフトウェア（ｖ１．６．２、Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ  ＳＣＩＥＸ）を使用した複数の反応モニタリング（ＭＲＭ）実験によって監視した。ＭｕｌｔｉＱｕａｎｔソフトウェア（ｖ２．１、Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ  ＳＣＩＥＸ）を使用して定量を行い、得られた較正曲線に線形または二次回帰および１／ｘ重み付けを適合した。定量の下限は、０．００３〜０．０１μＭであった。
【０５２７】
ノンコンパートメント解析法により、Ｐｈｏｅｎｉｘ  ＷｉｎＮｏｎｌｉｎソフトウェア（ｖ６．４、Ｃｅｒｔａｒａ、Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ，ＮＪ）を使用して濃度−時間データからＩＶおよびＰＯ  ＰＫパラメータを計算した。濃度−時間曲線（ＡＵＣｌａｓｔ）下の面積を、投与時間から最後の測定可能な濃度まで、対数線形台形法を使用して推定した。マウス血漿における例示的な化合物のＡＵＣの結果を表６に示す。
【表８】
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【０５２８】
実施例Ｂ８
試験化合物１３のインビボでの薬物動態学および薬力学
試験化合物１３の溶液を、経口投与のために蒸留水中で５０％ポリエチレングリコール２００（ＰＥＧ２００、＃Ｐ３０１５−１ＫＧ：Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ，Ｉｎｃ．）を含むビヒクルに１ｍｇ／ｍＬで調製した。
【０５２９】
ビバリウム（Ｆｕｎｄａｃｉｏｎ  Ｃｉｅｎｃｉａ＆Ｖｉｄａ、Ｓａｎｔｉａｇｏ，Ｃｈｉｌｅ）から得られた雌のＣ５７ＢＬ／６マウス（約９〜１０週齢；２０〜２１グラム）を重量測定し、表７に記載されるコホートに分割した。
【表９】
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【０５３０】
１００μＬの全血を、投与の２４時間前に各マウスの尾静脈からサンプリングした。投与日に、すべてのコホートのマウスは、給餌針（＃ＦＴＰ−２０３８／０５０３１２、Ｉｎｓｔｅｃｈ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．）を使用して、単回用量（１０ｍｇ／ｋｇ）の試験化合物１３を経口で受けた。
【０５３１】
各コホートに応じて、各マウスからの約５００μＬの全血を、採取時点で末端心臓穿刺によりＢＤ  Ｍｉｃｒｏｔａｉｎｅｒ（登録商標）チューブ（Ｋ２）ＥＤＴＡ（＃３６５９７４、Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ  ａｎｄ  Ｃｏ．）に収集した（表５）。４℃で５分間約９０００ｇで、血液試料を直ちに遠心分離した。血漿を分離し、個々に標識されたクライオチューブバイアル（＃３６６６５６；Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｉｎｃ．）に入れ、酵素活性またはＬＣ／ＭＳ／ＭＳ分析のためにアッセイする前に−８０℃で保存した。
【０５３２】
すべての血漿試料を解凍し、アッセイ緩衝液で希釈した（５部の緩衝液に対して１部の血漿）。アッセイ緩衝液は、１００ｍＭトリス−ＨＣｌ、４００ｍＭ  ＮａＣｌ、５０ｍＭサリチル酸、１ｍＭ  ＥＤＴＡ、ｐＨ７．５を含んだ。すべての血漿を、ＦＡＰおよびＤＰＰＩＶ活性についてアッセイした。ＦＡＰαまたはＤＰＰＩＶ酵素活性について血漿をアッセイするために、５μＬの各希釈血漿試料を、４５μＬの追加のアッセイ緩衝液を含んだ９６ウェルブラックプレート（Ｎｕｎｃ、＃２３７１０８）のウェルに充填した。プレートを、アッセイを始める前に、３７℃で１５分間温めた。アッセイを開始するために、５０μＬの２００μＭジペプチド基質Ｚ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−ＡＭＣ（Ｂａｃｈｅｍ、＃Ｌ−１１４５）（ＦＡＰα酵素活性アッセイ）または５０μＬの２００μＭジペプチド基質Ｈ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−ＡＭＣ（Ｂａｃｈｅｍ、＃Ｌ−１２２５）（ＤＰＰＩＶ酵素活性アッセイ）を各ウェルに添加した。多機能マイクロプレートリーダー（Ｓｙｎｅｒｇｙ  ４、Ｂｉｏｔｅｋ）を使用して３６０ｎｍの励起波長および４６０ｎｍの発光波長で蛍光を測定することによって、７−アミノ−４−メチルクマリン（ＡＭＣ）放出を検出した。すべての測定を少なくとも２つ組で実施した。
【０５３３】
化合物１３を経口投与した各動物について、投与後に収集した血漿試料において見出されたＦＡＰおよびＤＰＰＩＶの活性を、投与前の血漿試料において見出されたそれぞれの活性に対する百分率として正規化した。化合物１３を経口投与したマウスの血漿において見出されたＦＡＰ活性の百分率を図４に要約する。ＤＰＰＩＶ活性の百分率を図５に要約する。
【０５３４】
実施例Ｂ９
マウスにおける経口薬物動態学（ＰＫ）および薬力学（ＰＤ）研究
例示的な試験化合物のＰＫ／ＰＤを決定するために、マウスのグループに化合物１３（例示的な化合物）を経口投与し、次いで、異なる時点で収集した血漿試料を、化合物の濃度およびＦＡＰ活性について生体分析に供した。
Ｖｉｖａｒｉｕｍ  Ｆｕｎｄａｃｉｏｎ  Ｃｉｅｎｃｉａ＆Ｖｉｄａから得られた約８〜１０週齢（１９〜２１ｇｒ）の雌のｃ５７ＢＬ／６マウスを、試験施設に到着したときに最低４日間順化させた。投与の日に、動物を重量測定し、表８に記載される治療グループへの指定のために無毒性永久マーカーを使用して、尾部に数字で印付けすることによって識別した。
【表１０】
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【０５３５】
化合物１３（例示的な化合物）を、経口投与のための投与溶液としてポリ−エチレングルコール２００（ＰＥＧ２００；カタログ番号＃Ｐ３０１５、Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ）および蒸留水（ｄＨ２Ｏ）（５０／５０、ｖ／ｖ）を含むビヒクル中５ｍｇ／ｍｌで製剤化した。
【０５３６】
経口投与について、グループ１〜６のマウスは、１０ｍＬ／ＫｇのビヒクルＰＥＧ２００／ｄＨ２Ｏ（５０／５０／、ｖ／ｖ）で単回経口用量を受けた。グループ７〜１２のマウスは、ビヒクル中５ｍｇ／ｍＬで新鮮に製剤化した化合物１３（例示的な化合物）の単回経口用量を受けた。
【０５３７】
ビヒクルまたは化合物１３（例示的な化合物）の投与の１、４、８、１２、１６、および２４時間後に心臓穿刺により全血を収集した。グループ１３のマウスには投与せず、ゼロ時点の試料を収集するために使用した。４℃で５分間約９０００ｇで、血液試料を直ちに遠心分離した。血漿を分離し、個々に標識されたクライオチューブバイアルに入れ、酵素活性または生体分析のためにアッセイする前に−８０℃で保存した。
【０５３８】
すべての血漿試料を解凍し、アッセイ緩衝液（１００ｍＭトリス−ＨＣｌ、４００ｍＭ  ＮａＣｌ、５０ｍＭサリチル酸、１ｍＭ  ＥＤＴＡ、ｐＨ７．５）で１：５に希釈した。すべての血漿を、ＦＡＰおよびＤＰＰＩＶ活性についてアッセイした。ＦＡＰαまたはＤＰＰＩＶ酵素活性について血漿をアッセイするために、５μＬの各希釈血漿試料を、４５μＬの追加のアッセイ緩衝液を含んだ９６ウェルブラックプレートのウェルに充填した。プレートを、アッセイを始める前に、３７℃で１５分間温めた。アッセイを開始するために、アッセイ緩衝液中に希釈した５０μＬの４００μＭジペプチド基質Ｚ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−ＡＭＣ（ＦＡＰα酵素活性アッセイ）または５０μＬの２００μＭジペプチド基質Ｈ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−ＡＭＣ（ＤＰＰＩＶ酵素活性アッセイ）を各ウェルに添加した。多機能マイクロプレートリーダーを使用して３６０ｎｍの励起波長および４６０ｎｍの発光波長で蛍光を測定することによって、ＡＭＣ放出を検出した。すべての測定を少なくとも２つ組で実施した。
【０５３９】
基質およびアッセイ緩衝液のみを含むブランク反応からの平均蛍光を差し引いて、すべての蛍光測定値を修正した。ビヒクルまたは化合物１３（例示的な化合物）を投与したマウスからの血漿における残りのＦＡＰおよびＤＰＰＩＶを計算するために、すべての蛍光測定値を、各アッセイについて１００パーセントの活性と仮定される非投与グループの試料からの蛍光に対して正規化した。ビヒクルまたは化合物１３（例示的な化合物）を経口投与したマウスの血漿において見出された残りのＦＡＰ活性の百分率を図６Ａに示す。ＤＰＰＩＶ活性の百分率を図６Ｂに要約する。経時的な化合物のＦＡＰα活性およびＰＫ／ＰＤの比較を図６Ｃに示す。
【０５４０】
実施例Ｂ１０
インビボでの腫瘍阻害
Ｆｕｎｄａｃｉｏｎ  Ｃｉｅｎｃｉａ＆Ｖｉｄａ（Ｓａｎｔｉａｇｏ，Ｃｈｉｌｅ）のビバリウムから得られた雌のＣ５７／ＢＬ６マウス（約８〜９週齢；２０〜２１ｇｒ）を、適宜食物および水とともに、１２／１２時間の明暗スケジュールで温度調整室内に維持した。マウスを、試験施設に到着したときに最低４日間順化させた。
【０５４１】
ＭＣ３８マウス結腸癌細胞を、単層培養として、ＤＭＥＭ−Ｆ１２（カタログ番号：ＳＨ３００２３．０１，Ｈｙｃｌｏｎｅ）（１０％胎児ウシ血清（カタログ番号：１６０００、Ｇｉｂｃｏ）とペニシリン／ストレプトマイシン（カタログ番号：１５１４０１２２、Ｇｉｂｃｏ）を補充）を用い、３７°Ｃ、５％ＣＯ  ２雰囲気下で維持した。細胞を３日ごとに日常的に継代し、対数期で成長を維持した。指数成長期に成長した腫瘍細胞を、０．０５％トリプシン−ＥＤＴＡ（カタログ番号：１５４０００５４、Ｇｉｂｃｏ）を含む１倍ＰＢＳを使用して採取し、続いて、室温で、遠心分離器で３３０ｇ×３分間遠心分離を行った。その後、吸引によって上清を除去した。細胞ペレットを約１０倍体積の細胞培養培地に再懸濁し、カウントした。細胞生存率を、トリパンブルー染色によって＞９５％であることを決定した。
【０５４２】
接種の日に、雌のＣ５７／Ｂｌ６マウス（合計ｎ＝１５）を重量測定し、無毒性永久マーカーを使用して尾部に数字で印付けすることによって識別した。マウスを、１倍ＰＢＳ中に約２ｘ１０６ＭＣ３８細胞を含む０．１ｍＬの細胞懸濁液の単一体積で、右側下腹部（大腿部裏側領域付近）に皮下接種した。腫瘍をデジタルキャリパーで週３回測定し、ｍｍ３で表される腫瘍体積を以下の式で計算した。
【０５４３】
腫瘍体積（ｍｍ３）＝（ａｘｂ２）／２
式中、「ｂ」は最小の直径であり、「ａ」は最大の垂直直径である。
接種から７日後、平均腫瘍体積は約１００ｍｍ３であった。マウスを重量測定し、無作為に２つの実験グループ（ｎ＝５〜６匹のマウス）に分け、以下の治療を終了まで経口投与で毎日２回受けさせた：１）ビヒクル（水中ＰＥＧ２００  ５０％）；または２）ＰＥＧ２００  ５０％／水中５０ｍｇ／ｋｇ試験化合物２４。マウスの体重および腫瘍体積を、週２〜３回、合計２２日間記録した。２２日目に、マウスを屠殺し、すべての腫瘍質量を重量測定した。
【０５４４】
腫瘍体積を、図７に標準誤差（ＳＥＭ）とともに平均として示す。マウスの体重増加を、図８に標準誤差（ＳＥＭ）とともに平均として示す。腫瘍体積の個別記録を図９に示す。腫瘍質量重量を、図１０に標準誤差（ＳＥＭ）とともに平均として示す。図に示されるように、試験化合物２４で処置したマウスは、ビヒクル単独での処置よりも小さな体積の腫瘍を有した。これらの研究において統計的有意性は観察されなかった。
【０５４５】
実施例Ｂ１１
マウス腫瘍におけるＦＡＰα酵素活性
マウス腫瘍タンパク質を、ｕｌｔｒａ  Ｔｕｒｒａｘ（ＩＫＡ、＃３７３７０００）を使用して２０分間、溶解緩衝液（トリスＨＣｌ  ５０ｍＭ  ｐＨ７．６、ＥＤＴＡ  １ｍＭ、グリセロール１０％、プロテアーゼ／ホスファターゼ阻害剤カクテル）中で抽出する。腫瘍抽出物におけるベースラインＦＡＰα酵素エキソペプチダーゼ活性をアッセイするために、１０μｇの腫瘍抽出物試料を、９６ウェルブラックプレート（Ｎｕｎｃ、＃２３７１０８）に、３７℃で１時間、ＰＢＳ１ｘ中１００μＭ  Ｚ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−ＡＭＣペプチド（ＢＡＣＨＥＭ、＃Ｌ−１１４５）とともにインキュベートする。阻害剤を、９６ウェルブラックプレート（Ｎｕｎｃ、＃２３７１０８）中の基質の添加による反応を開始する前に、３７℃で１５分間、腫瘍抽出物とともに事前インキュベートする。多機能マイクロプレートリーダー（Ｓｙｎｅｒｇｙ  ４、Ｂｉｏｔｅｋ）を使用してＥｘ／Ｅｍ  ３８０／４６０ｎｍで蛍光を測定することによって、７−アミノ−４−メチルクマリン（ＡＭＣ）放出を検出する。すべての測定を、３つ組で実施する。
【０５４６】
実施例Ｂ１２
マウス癌モデルの腫瘍におけるＰＫ／ＰＤ研究
Ｂ１６−Ｆ１０マウス黒色腫モデル
雄のＣ５７Ｂ１／６マウスに、１００μＬの減菌ＰＢＳ１ｘ（０日目）中に懸濁した１ｘ１０６個のＢ１６−Ｆ１０マウス黒色腫細胞を皮内に移植した。移植後２日目に、動物のグループ（ｎ＝３）に、ビヒクルＰＥＧ２００／ｄＨ２Ｏ（５０／５０ｖ／ｖ）または化合物１３（例示的な化合物）を、１５日目まで１日２回（ＢＩＤ）、経口（ＰＯ）で、５０ｍｇ／Ｋｇで投与した。
【０５４７】
終了の日に、すべてのマウスを屠殺し、直ちに腫瘍および血漿試料を収集し、ＦＡＰα酵素活性または生体分析についてアッセイする前に、−８０℃で保存した。
【０５４８】
マウス癌腫瘍のタンパク質を、Ｕｌｔｒａ  Ｔｕｒｒａｘホモジナイザー（ＩＫＡ、＃３７３７０００）を使用して、溶解緩衝液（トリスＨＣｌ  ５０ｍＭ  ｐＨ７．６、ＥＤＴＡ  １ｍＭ、グリセロール１０％、プロテアーゼ／ホスファターゼ阻害剤カクテル）中で抽出する。ホモジネートを、２１，０００ｇ、４℃で２０分間の遠心分離によって清澄化した。上清を収集し、タンパク質を、ＢＣＡタンパク質アッセイキット（カタログ番号＃２３２２５、Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を使用して定量化した。すべてのタンパク質試料を、溶解緩衝液で、２μｇ／μＬで調整し、次いで、−８０℃で保存するためにアリコートした。
【０５４９】
腫瘍ホモジネートにおけるＦＡＰα活性の評価のために、１０μｇの各腫瘍抽出物を、５０μＬの最終体積で９６ウェルブラックプレートに、ｃＦＡＰ緩衝液アッセイで希釈し、次いで、１００μＭ  ＰＲＸＳ−ＡＭＣペプチドと混合した。反応を３７℃で１時間実施した。多機能マイクロプレートリーダーを使用してＥｘ／Ｅｍ  ３８０／４６０ｎｍで蛍光を測定することによってＡＭＣ放出を検出し、相対蛍光単位（ＲＦＵ）として表した。すべての測定を、単一の点として実施した。
【０５５０】
化合物１３（例示的な化合物）の濃度を図１１Ａに示す。Ｂ１６−Ｆ１０マウス黒色腫腫瘍を有する動物からの血漿および腫瘍におけるＦＡＰα活性を、図１１Ｂに示す。
【０５５１】
ＭＣ３８マウス黒色腫モデル
：雌のＣ５７Ｂ１／６マウスに、１００μＬの減菌ＰＢＳ１ｘ（０日目）中に懸濁した２ｘ１０６個のＭＣ３８マウス結腸癌細胞を皮下に移植した。移植後１２日目に、マウスを、腫瘍体積に基づいて、約１６０ｍｍ３の平均腫瘍体積を有する２つの実験グループ（ｎ＝６）に無作為に分けた。動物のグループは、ビヒクルＰＥＧ２００／ｄＨ２Ｏ（５０／５０  ｖ／ｖ）または化合物１３（例示的な化合物）５０ｍｇ／ｋｇ  ＰＯを、２４日目まで１日２回受けた。
【０５５２】
終了の日に、すべてのマウスを屠殺し、直ちに腫瘍および血漿試料を収集し、Ｂ１６−Ｆ１０マウス黒色腫モデルについて記載されるようにＦＡＰα酵素活性または生体分析についてアッセイする前に、−８０℃で保存した。
【０５５３】
化合物１３（例示的な化合物）の濃度を図１２Ａに示す。ＭＣ３８マウス黒色腫腫瘍を有する動物からの血漿および腫瘍におけるＦＡＰα活性を、図１２Ｂに示す。
【０５５４】
実施例Ｂ１３
ＦＧＦ２１アッセイのインビトロＦＡＰ媒介タンパク質分解切断。
糖尿病および肥満動物モデルへのＦＧＦ２１の薬理学的投与は、げっ歯類における、肥満、インスリン抵抗性、脂質異常症、脂肪肝、および高血糖を顕著に改善し（Ｍａｒｋａｎ，Ｋ．Ｒ．ｅｔ．ａｌ．，Ｓｅｍｉｎ  Ｃｅｌｌ  Ｄｅｖ  Ｂｉｏｌ，２０１６，５３：８５−９３）、ＦＧＦ２１類似体は、２型糖尿病を有する肥満者における重量減少の誘導ならびに高インスリン血症、脂質異常症、および低アディポネクチン血症の矯正に有効であった（Ｇａｉｃｈ，Ｇ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｃｅｌｌ  Ｍｅｔａｂ，２０１３，１８（３）：３３３−４０；Ｄｏｎｇ，Ｊ．Ｑ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｂｒ  Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ，２０１５，８０（５）：１０５１−６３）．しかしながら、げっ歯類および霊長類において、ＦＡＰ媒介酵素分解および腎クリアランスに対する感受性の結果として、外因性投与ヒトＦＧＦ２１の半減期は短い（約０．５〜２時間）（Ｈａｇｅｒ，Ｔ．，ｅｔ  ａｌ．，Ａｎａｌ  Ｃｈｅｍ，２０１３，８５（５）：２７３１−８；Ｘｕ，Ｊ．，ｅｔ  ａｌ．，Ａｍ  Ｊ  Ｐｈｙｓｉｏｌ  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ  Ｍｅｔａｂ，２００９，２９７（５）：Ｅ１１０５−１４；Ｋｈａｒｉｔｏｎｅｎｋｏｖ，Ａ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ，２００７，１４８（２）：７７４−８１）。一般的な半減期延長戦略は、これらのＦＧＦ２１類似体のインビボでのＰＫ特性を著しく改善しているが、これらの類似体においてタンパク質分解処理は依然として継続している（Ｈｅｃｈｔ，Ｒ．，ｅｔ  ａｌ．，ＰＬｏＳ  Ｏｎｅ，２０１２，７（１１）：ｅ４９３４５；Ｍｕ，Ｊ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｄｉａｂｅｔｅｓ，２０１２，６１（２）：５０５−１２；Ｃａｍａｃｈｏ，Ｒ．Ｃ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｅｕｒ  Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ，２０１３，７１５（１−３）：４１−５）。本明細書に記載されるＦＡＰ阻害剤化合物が、ＦＧＦ−２１切断を阻害することができ、かつ内因性および／または外因性ＦＧＦ２１作用を増強するための経口療法を提供することができるかどうかを判定するために、例示的なＦＡＰ阻害剤化合物の存在下および不在下でのＦＧＦ２１のＦＡＰ媒介消化を比較した。
【０５５５】
インビトロでのＦＧＦ２１のＦＡＰ媒介消化
組換えヒトＦＧＦ２１（ｒｈＦＧＦ２１；カタログ番号＃２５３９−ＦＧ−０２５／ＣＦ、Ｒ＆Ｄ  ｓｙｓｔｅｍｓ）を、消化緩衝液（５０ｍＭトリスｐＨ７．４、１００ｍＭ  ＮａＣｌ、０．１ｍｇ／ｍｌウシ血清アルブミン）中の組換えヒトＦＡＰ（ｒｈＦＡＰ；カタログ番号＃３７１５−ＳＥ−０１０、Ｒ＆Ｄ  ｓｙｓｔｅｍｓ）とともに、３７℃で一晩（１６時間）インキュベートした。反応を、１００μＬの体積で、１０００ｎｇ／ｍＬ  ｈＦＧＦ２１および４００、８００、または１２００ｎｇ／ｍＬ  ｒｈＦＡＰの最終濃度で実施した。ＳＤＳ−ＰＡＧＥ分析のために、インキュベーション後、各試料は、０．１ｍｌ  β−メルカプトエタノール／１０ｍｌアリコートで補充し、次いで１０分間９５℃で沸騰させた４ｘＬａｅｍｍｌｉタンパク質試料緩衝液（カタログ番号＃１６１−０７４７、Ｂｉｏ−Ｒａｄ）を直ちに受けた。次いで、各試料の１５μＬのアリコートを、還元２０％トリス−トリシンＳＤＳ−ＰＡＧＥゲルに充填した。免疫ブロット分析のために、タンパク質をＳＤＳ−ＰＡＧＥゲル上で分離し、ＰＶＤＦ膜（カタログ番号＃１６２０１７７、Ｂｉｏ−Ｒａｄ）に移した。免疫検出のために、抗ＦＧＦ２１（カタログ番号＃ＲＤ１８１１０８１００、ＢｉｏＶｅｎｄｏｒ）および抗ウサギＨＲＰ複合体（カタログ番号＃６１１−１３２２、Ｒｏｃｋｌａｎｄ）を、それぞれ一次抗体および二次抗体として使用した。ＥＣＬウエスタンブロッティング基質（カタログ番号＃３２１０６、Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を使用してタンパク質を検出し、ＣｈｅｍｉＤｏｃ（商標）イメージングシステム（Ｂｉｏｒａｄ）およびＩｍａｇｅ  ｌａｂソフトウェアｖ５．２．１ビルド１１を使用して可視化した。
【０５５６】
ｒｈＦＧＦ２１の無傷およびｒｈＦＡＰ切断形態の免疫検出を図１３Ａに示し、密度測定分析を図１３Ｂに示す。免疫ブロット画像および密度測定分析によって示されるように、切断形態のｒｈＦＧＦ２１は、ｒｈＦＡＰ濃度依存的様式で増加する。
【０５５７】
インビトロでのＦＧＦ２１のＦＡＰ媒介消化の阻害。
ｒｈＦＧＦ２１のｒｈＦＡＰ媒介タンパク質分解処理を阻害することについての有効性を比較するために、例示的な化合物および商業用非選択的ＤＤＰ阻害剤Ｖａｌ−ｂｏｒｏＰｒｏを、インビトロでＦＧＦ２１切断アッセイにおいて低濃度で試験した。
ＤＭＳＯ中で１０ｍＭストック溶液として粉末から試験化合物およびＶａｌ−ｂｏｒｏＰｒｏを調製し、−８０℃でＮ２中性雰囲気の存在下で保存した。ストック溶液をＤＭＳＯ中で事前希釈し、１および０．１ｍＭに希釈したアリコートを得た。これらのアリコートを再び消化緩衝液中で１０倍希釈し、次いで、１０μＬのこれらの希釈液を５０μＬのｒｈＦＡＰに添加した。酵素阻害剤混合物を、３７℃で３０分間相互作用させ、次いで、４０μＬのｒｈＦＧＦ２１を添加して反応を開始した。反応を、３７℃で１６時間、１０００ｎｇ／ｍＬ  ｈＦＧＦ２１および１２００ｎｇ／ｍＬ  ｒｈＦＡＰの濃度で実施した。インキュベーション後、試料をＬａｅｍｍｌｉタンパク質試料緩衝液中で直ちに沸騰させ、次いで、タンパク質を還元２０％トリス−トリシンＳＤＳ−ＰＡＧＥゲル中に分離した。ｒｈＦＧＦ２１の無傷およびｒｈＦＡＰ切断形態の免疫検出を上に記載されるように実施した。
【０５５８】
ｒｈＦＡＰによるｒｈＦＧＦ２１のタンパク質分解処理をインビトロで阻害するための１００ｎＭおよび１０００ｎＭでの化合物１３（例示的な化合物）およびＶａｌ−ｂｏｒｏＰｒｏの間の有効性の比較を、図１３Ｃに示し、密度測定分析を図１３Ｄに示す。免疫ブロット画像および密度測定分析によって示されるように、無傷形態のｒｈＦＧＦ２１は、低い濃度であっても化合物１３（例示的な化合物）の存在下で保存される。
【０５５９】
さらに、ＦＧＦ２１のＦＡＰ媒介タンパク質分解切断のためのＩＣ５０を、化合物１３（例示的な化合物）の連続希釈液を使用して決定した。図１４Ａに示されるように、例示的な化合物は、インビトロでの用量依存的様式でＦＧＦ２１のｒｈＦＡＰ媒介タンパク質分解処理を阻害した。図１４Ｂに密度測定分析によって示されるように、例示的な化合物は、ＦＧＦ２１アッセイのＦＡＰ媒介タンパク質分解切断におけるナノモル範囲のＩＣ５０を示した。
【０５６０】
実施例Ｂ１４
インビボでのＦＡＰ阻害と併せたｒｈＦＧＦ２１投与。
本発明の例示的な化合物が、インビボでのｈＦＧＦ２１の半減期を延長することに寄与し得るかどうかを判定するために、ラットに、ビヒクルまたは化合物１３（例示的な化合物）、続いて、ｒｈＦＧＦ２１の治療量未満の用量を経口投与した。
【０５６１】
約７〜８週齢（約２５０ｇ）の雄のスプラーグドーリーラットを、Ｕｎｉｖｅｒｓｉｄａｄ  Ｃａｔｏｌｉｃａ  ｄｅ  Ｃｈｉｌｅ（Ｓａｎｔｉａｇｏ，Ｃｈｉｌｅ）のビバリウムから得た。動物を、試験施設に到着したときに最低４日間順化させた。研究日に、セボフルランを用いて２匹のラットを麻酔し、頸動脈および頸静脈にカテーテルの外科的埋め込みを行った。カテーテルプラグを、カテーテルの外側端部に固定し、０．９％ＮａＣｌ  Ａｐｉｒｏｆｌｅｘ（Ｆｒｅｓｅｎｉｕｓ  Ｋａｂｉ、Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｏ  Ｓａｎｄｅｒｓｏｎ）中２５Ｕ／ｍＬヘパリン（Ｆｒｅｓｅｎｉｕｓ  Ｋａｂｉ、Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｏ  Ｓａｎｄｅｒｓｏｎ）を含む抗凝固ヘパリン生理食塩水溶液を使用して特許を保持した。手術回復後、ラットを重量測定し、表９に記載される治療の指定のために非毒性永久マーカーを使用して、尾部に数字で印付けすることによって識別した。
【表１１】
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【０５６２】
化合物１３（例示的な化合物）を、経口投与のためにビヒクルＰＥＧ２００／ｄＨ２Ｏ（５０／５０、ｖ／ｖ）中５ｍｇ／ｍｌで製剤化し、ｒｈＦＧＦ２１を、１００μｇ／ｍＬで０．９％ＮａＣｌ  Ａｐｉｒｏｆｌｅｘ中に製剤化した。
両方の動物から埋め込まれた頸動脈カテーテルを介して（時点＝−１５分）全血試料を収集し、その直後に第１の用量を投与した（それぞれラット＃１および＃２への給餌チューブ（１５ゲージ）を介して５０ｍｇ／Ｋｇビヒクルまたは化合物１３の単回経口用量）。１５分後、第２の全血試料を収集し（時点＝０分）、その直後に第２の用量を投与した（埋め込まれた頸静脈カテーテルを介したｒｈＦＧＦ２１  ９０μｇ／Ｋｇの単回静脈内用量）。次いで、全血試料を次の時点で収集した：第２の投与後５、１５、３０、６０、１２０、２４０、および４８０分。４℃で５分間約９０００ｇで、血液試料を直ちに遠心分離した。血漿を分離し、個々に標識されたクライオチューブバイアルに入れ、ウエスタンブロット技法、ＰＲＸＳ−ＡＭＣを用いたＦＡＰα活性アッセイ、または以前の実施例で上に記載される生体分析によってｒｈＦＧＦ２１の免疫検出のためにアッセイする前に、−８０℃で保存した。
【０５６３】
免疫検出のために、解凍した血漿試料を、４℃で１５分間２，０００ｇで遠心分離し、次いで、上清をきれいなエッペンドルフチューブに移した。１．５μＬの各血漿試料を、１１．２５μＬの４ｘＬａｅｍｍｌｉタンパク質試料緩衝液および３２．２５μＬのｄＨ２Ｏと混合した。タンパク質を沸騰させ、次いで、１５μＬの各試料を、還元２０％トリス−トリシンＳＤＳ−ＰＡＧＥゲル中で分離し、次いで、上に記載されるようにＦＧＦ２１の検出のために免疫ブロットした。
【０５６４】
結果を図１５に要約する。５０ｍｇ／ｋｇの経口単回用量での化合物１３の投与は、血漿ＦＡＰ活性を強力に抑制した。例示的な化合物による事前処置は、血漿において経時的に検出されるｒｈＦＧＦ２１の量を増加させた。
【０５６５】
実施例Ｂ１５
ハムスターにおける経口ＰＫ／ＰＤ研究。
ｈＦＡＰは、Ｐ２でグリシン（Ｇｌｙ）およびＰ１でプロリン（Ｐｒｏ）の両方を有するペプチドを加水分解する。ヒトＦＧＦ２１における１７０〜１７１位のＧｌｙ−Ｐｒｏ  ＦＡＰコンセンサス残基は、利用可能なＦＧＦ２１配列（予測配列を含む）を有するほとんどの哺乳動物種において保存されている。しかしながら、ラットおよびマウスにおいて発現されるＦＧＦ２１は、推定ＦＡＰ切断部位で保存されたＧｌｙ−Ｐｒｏの代わりにＧｌｕ−Ｐｒｏを有する。ｈＦＡＰは、マウス配列を含むＦＧＦ２１を処理しないことが報告されている（Ｄｕｎｓｈｅｅ，Ｄ．Ｒ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ，２０１６，２９１（１１）：５９８６−９６）。興味深いことに、Ｐ１’位にＬｅｕを有するシリアンハムスターＦＧＦ２１からの対応するペプチドは、ｈＦＡＰによる著しい加水分解を呈した（Ｄｕｎｓｈｅｅ，Ｄ．Ｒ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ，２０１６，２９１（１１）：５９８６−９６）。
【０５６６】
内因的に生成されたＦＧＦ２１の切断に対する例示的な化合物によるＦＡＰ阻害の効果を評価するために、例示的な化合物の単回静脈内投与および経口投与後、雄のゴールデンシリアンハムスターにおいてインビボＰＫ／ＰＤ研究を行った。
【０５６７】
雄のゴールデンシリアンハムスターは、台湾の国立実験動物センター（ＮＬＡＣ）により提供された。動物を、調整温度（２０〜２４℃）および湿度（５０％〜８０％）で、１２時間の明暗サイクルで、衛生的な環境で維持した。スタンダードラボダイエット［ＭＦＧ（オリエンタル酵母工業株式会社、日本）］およびオートクレーブされた水道水を無料で利用することが認められた。動物の飼育、実験、および処分を含むこの作業のすべての態様を、一般に“Ｇｕｉｄｅ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｃａｒｅ  ａｎｄ  Ｕｓｅ  ｏｆ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ａｎｉｍａｌｓ：Ｅｉｇｈｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ”（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ａｃａｄｅｍｉｅｓ  Ｐｒｅｓｓ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｄ．Ｃ．，２０１１）に従って獣医の指導のもと行った。加えて、動物の管理および使用プロトコルは、Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ  Ｔａｉｗａｎ，ＬｔｄでＩＡＣＵＣにより審査および承認を受けた。
【０５６８】
化合物１３（例示的な化合物）を、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）／Ｓｏｌｕｔｏｌ（登録商標）ＨＳ１５（ＢＡＳＦ、Ｇｅｒｍａｎｙ）／リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ、Ｓｉｇｍａ、ＵＳＡ）（５／５／９０、ｖ／ｖ／ｖ）中ＩＶ注射のために０．２ｍｇ／ｍＬで、およびポリエチレングリコール（ＰＥＧ）２００（Ｓｉｇｍａ、ＵＳＡ）／注射用水（ＷＦＩ；Ｔａｉ−Ｙｕ、Ｔａｉｗａｎ）（５０／５０、ｖ／ｖ）中ＰＯ投与のために１ｍｇ／ｍＬで製剤化した。投与体積は、ＩＶの場合５ｍＬ／ｋｇ、およびＰＯの場合１０ｍＬ／ｋｇであった。
【０５６９】
研究日に、ハムスターを麻酔し、頸静脈にカテーテルの外科的埋め込みを行った。カテーテルプラグを、カテーテルの外側端部に固定し、抗凝固ヘパリン生理食塩水溶液を使用して特許を保持した。手術回復後、ハムスターを重量測定し、表１０に詳述するようにＩＶまたはＰＯグループ（ｎ＝３）の指定のために非毒性永久マーカーを使用して、尾部に数字で印付けすることによって識別した。
【表１２】
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【０５７０】
グループ１のハムスターは、頸静脈を介して１ｍｇ／ｋｇの化合物１３（例示的な化合物）の静脈内ボーラスを受けた。一方で、グループ２のハムスターは、給餌針を使用して１０ｍｇ／ｋｇの化合物１３（例示的な化合物）の胃内ボーラスを受けた。
【０５７１】
ＩＶおよびＰＯグループの両方において、投与後５、１０、１５、３０、６０、１２０、２４０、３６０、４８０、および１４４０分で血漿試料を収集した。グループ３のハムスターには投与せず、ＦＡＰ活性および内因性ＦＧＦ２１のゼロ時点およびベースラインレベルの試料を収集するために使用した。
【０５７２】
ＥＤＴＡ−Ｋ２でコーティングされたチューブ内に頸静脈カテーテル処置されたハムスターから血液アリコート（１００〜１５０μＬ）を収集し、穏やかに混合し、次いで、氷上に維持して、収集から１時間以内に４℃で１５分間２，５００×ｇで遠心分離した。血漿試料を、個々に標識されたクライオチューブバイアルに入れ、ＦＡＰα活性アッセイ（Ｚ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−ＡＭＣ基質）および以前の実施例で上に記載される生体分析のためにアッセイする前に、−８０℃で保存した。
【０５７３】
血漿試料における内因性ハムスターＦＧＦ２１のレベルを、ＥＬＩＳＡキット（カタログ番号＃ＥＺＲＭＦＧＦ２１−２６Ｋ、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）を製造業者の指示に従って使用することによって定量化した。検出限界は、４４．８５ｐｇ／ｍｌであった。非投与動物の血漿試料を、血漿のプールとして分析した。すべての試料を、単一の点としてアッセイした。結果を図１６に示す。
【０５７４】
静脈内投与および経口投与のための化合物１３（例示的な化合物）のＡＵＣ最終は、それぞれ２５５および３５０時間ｎｇ／ｍＬに等しかった。ベースラインレベルと比較して、化合物１３（例示的な化合物）の投与後、ＦＡＰ活性は急速に低下し、個体間でＦＧＦ２１のベースラインレベルは異なったが、ほとんどのハムスターにおいて総ＦＧＦ２１のレベルは増加した。重要なことに、この増加の時間経過は、血漿における内因性ＦＡＰの活性の阻害と密接に相関した。したがって、例示的な化合物の投与によるインビボでのＦＡＰの阻害は、内因性血清ＦＧＦ２１の増加をもたらし、ＦＡＰによる切断からの保護を示唆した。
【０５７５】
実施例Ｂ１６
ハムスターにおける食事誘発性肥満（ＤＩＯ）モデルに対する効果
９０±１０ｇの重量である１０匹の雄のゴールデンシリアンハムスターのグループに、実験を通じて高脂肪食事（ＨＦＤ）（ｇ／１００ｇ：トウモロコシ油、５；ココナッツ油、５；コレステロール、０．２；標準食事、８９．８）を与える。食事の開始から７日後、ビヒクル、エゼチミブ（陽性対照）、または例示的な試験化合物を、２８日間連続（１日目）で毎日経口強制（ＰＯ、ＱＤ）によって投与する。動物の追加の未処置のグループ（グループ５）に、通常の食事（対照）を与える。体重（ＢＷ）を測定し、週２回記録する。
【０５７６】
一晩の断食後、０、７、１４、２１、および２８日間投与した後、１、８、１５、２２、および２９日目の毎日投与の５分前に、各動物の後方眼窩洞から血液を得る。
【０５７７】
各ハムスターから得られた血清を、空腹時ブドウ糖、総コレステロール（総）、低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）、高密度リポタンパク質（ＨＤＬ）、およびトリグリセリド（ＴＧ）についてアッセイする。処置後の値は、処置前の値の百分率として計算される。ビヒクル対照グループに対して処置されたものの変化パーセントも求める。
【０５７８】
終了の２９日目に、すべての動物を屠殺し、最大体積の血液試料を収集するために直ちに心臓穿刺を行う。血清のために血液試料の半分を処理し、ＥＬＩＳＡ法によって末端アディポネクチンおよびインスリンをアッセイするために使用する。血液試料の残りの半分は血漿のために処理する。血漿試料を、個々に標識されたクライオチューブバイアルに入れ、ＦＡＰα活性アッセイ、ＥＬＩＳＡによるＦＧＦ２１レベルの定量、および以前の実施例で上に記載される例示的な化合物の生体分析の前に、−８０℃で保存した。
【０５７９】
さらに、ＦＧＦ２１標的遺伝子およびタンパク質の分子および生化学的評価のために、脳、肝臓、肩甲骨間ＢＡＴ、精巣上体ＷＡＴ、膵臓、および腓腹筋などの組織を採取する。肝臓の一部はまた、非固定凍結試料として収集され、オイルレッドＯ染色で染色され、またはＨ＆Ｅ染色および組織病理学的分析のためのホルマリン固定およびパラフィン埋め込み試料として収集される。  
【０５８０】
刊行物、特許、特許出願、および公開された特許出願などの全体の参照は、参照によりそれらの全体において本明細書に組み込まれる。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図４】
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【図５】
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【図６Ａ】
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【図６Ｂ】
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【図６Ｃ】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１Ａ】
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【図１１Ｂ】
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【図１２Ａ】
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【図１２Ｂ】
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【図１３Ａ】
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【図１３Ｂ】
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【図１３Ｃ】
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【図１３Ｄ】
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【図１４Ａ】
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【図１４Ｂ】
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【図１５】
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【図１６】
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【国際調査報告】
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