(57)【要約】  本発明は、抗生物質としての新規クラスの環状ペプチドに関する。本発明の抗生物質は、テイクソバクチンの誘導体である。テイクソバクチンを、修飾して、抗細菌および治療性質が改善されたテイクソバクチンアナログを開発した。本発明の抗生物質および薬学的に許容される担体または添加物を含む医薬組成物も提供される。さらに提供されるのが、対象にここに記載する抗生物質を投与することを含む、対象における病原体による感染を処置する方法。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式ＩまたはＩ’、IIまたはII’、IIIまたはIII’、IVまたはIV’、ＶまたはＶ’またはVIまたはVI’の抗生物質またはその塩。
【化１】
2021510148.tif 000027
【化２】
2021510148.tif 000028
【化３】
2021510148.tif 000029
【化４】
2021510148.tif 000030
【請求項２】
Ｒ１〜Ｒ５の各々がアミノ酸の側鎖である、請求項１に記載の抗生物質。
【請求項３】
Ｒ１〜Ｒ５の各々が、独立してロイシン、イソロイシン、グルタミン、セリン、スレオニン、Ｄ−アロイソロイシン、リシンまたはアルギニンの側鎖である、請求項１または２に記載の抗生物質。
【請求項４】
Ｒ１がイソロイシンの側鎖である、請求項１〜３の何れかに記載の抗生物質。
【請求項５】
Ｒ２がセリンまたはスレオニンの側鎖である、請求項１〜４の何れかに記載の抗生物質。
【請求項６】
Ｒ３がグルタミンの側鎖である、請求項１〜５の何れかに記載の抗生物質。
【請求項７】
Ｒ４がイソロイシンまたはＤ−アロイソロイシンの側鎖である、請求項１〜６の何れかに記載の抗生物質。
【請求項８】
Ｒ５がイソロイシンまたはＤ−アロイソロイシンの側鎖である、請求項１〜７の何れかに記載の抗生物質。
【請求項９】
Ｒ６がＨまたはＣ１〜Ｃ９直鎖または分枝鎖アルキル基である、請求項１〜８の何れかに記載の抗生物質。
【請求項１０】
Ｒ６がメチルである、請求項１〜９の何れかに記載の抗生物質。
【請求項１１】
式IVおよびIV’のＲがＣ２−Ｃ８直鎖または分枝鎖アルキル鎖である、請求項１に記載の抗生物質。
【請求項１２】
式ＶおよびＶ’のＲがＣ２−Ｃ８直鎖または分枝鎖アルキル鎖、請求項１に記載の抗生物質。
【請求項１３】
式VIおよびVI’のＲがＣ２−Ｃ８直鎖または分枝鎖アルキル鎖、請求項１に記載の抗生物質。
【請求項１４】
抗生物質が表１に提供される抗生物質から選択される、請求項１〜１３の何れかに記載の抗生物質。
【請求項１５】
請求項１〜１４の何れかに記載の抗生物質またはその塩および薬学的に許容される担体または添加物を含む、組成物。
【請求項１６】
対象に治療有効量の請求項１〜１４の何れかに記載の抗生物質または請求項１５に記載の組成物を投与することを含む、対象における病原体が原因の感染を処置する方法。
【請求項１７】
病原体が細菌、ウイルス、原生動物、蠕虫、寄生虫または真菌である、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
細菌がヘリコバクター・ピロリ、レジオネラ・ニューモフィラ、マイコバクテリウム・ツベルクローシス、マイコバクテリウム・アビウム、マイコバクテリウム・イントラセルラレ、マイコバクテリウム・カンサイ、マイコバクテリウム・ゴルドノアエ、マイコバクテリア・スポロゾイテス、スタフィロコッカス・アウレウス、スタフィロコッカス・エピデルミディス、ナイセリア・ゴノレエ、ナイセリア・メニンギティディス、リステリア・モノサイトゲネス、ストレプトコッカス・ピオゲネス(Ａ群レンサ球菌)、ストレプトコッカス・アガラクティアエ・ピオゲネス(Ｂ群レンサ球菌)、ストレプトコッカス・ディスガラクチア、ストレプトコッカス・フェカリス、ストレプトコッカス・ボビス、ストレプトコッカス・ニューモニアエ、病原性カンピロバクター・スポロゾイテス、エンテロコッカス・スポロゾイテス、ヘモフィルス・インフルエンザエ、シュードモナス・エルギノーザ、バシラス・アントラシス、バシラス・サブティリス、エシェリキア・コリ、コリネバクテリア・ジフテリアエ、コリネバクテリア・ジェイケイウム、コリネバクテリア・スポロゾイテス、エリジペロスリックス・ルジオパシエ、クロストリジウム・パーフリンジェンス、クロストリジウム・テタニ、クロストリジウム・ディフィシル、エンテロバクター・アエロゲネス、クレブシエラ・ニューモニアエ、パスツレラ・ムルトシダ、バクテロイデス・シータイオタオミクロン、バクテロイデス・ユニフォルミス、バクテロイデス・ブルガタス、フソバクテリウム・ヌクレアタム、ストレプトバシラス・モニリフォルミス、レプトスピラおよびアクチノマイセス・イスラエリの１以上である、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
ウイルスがレトロウイルス科、ピコルナウイルス科、カリシウイルス科、トガウイルス科、フラビウイルス科、コロナウイルス科、ラブドウイルス科、フィロウイルス科、パラミクソウイルス科、オルトミクソウイルス科、ブニヤウイルス科、アレナウイルス科、レオウイルス科、ビルナウイルス科、ヘパドナウイルス科、パルボウイルス科、パポバウイルス科、アデノウイルス科、ヘルペスウイルス科、ポックスウイルス科およびイリドウイルス科である、請求項１７に記載の方法。
【請求項２０】
原生動物が腟トリコモナス、ランブル鞭毛虫、赤痢アメーバ、大腸バランジウム、クリプトスポリジウム・パルバム、戦争シストイソスポーラ、クルーズトリパノソーマ、ガンビアトリパノソーマ、ドノヴァン・リーシュマニアまたはフォーラーネグレリアである、請求項１７に記載の方法。
【請求項２１】
蠕虫がマンソン住血吸虫、シストソーマ・セルカリア、日本住血吸虫、メコン住血吸虫、ビルハルツ住血吸虫、回虫、糞線虫、単包条虫、多包条虫、広東住血線虫、コスタリカ住血線虫、肥大吸虫、フィリピン毛頭虫、ウェステルマン肺吸虫、十二指腸鉤虫、アメリカ鉤虫、トリキナ、バンクロフト糸状虫、マレー糸状虫およびチモール糸状虫、犬回虫、猫回虫、牛回虫、線虫またはアニサキス属である、請求項１７に記載の方法。
【請求項２２】
寄生虫が熱帯熱マラリア原虫、ヨーエリマラリア原虫、小形条虫、肝吸虫、ロア糸状虫、ウェステルマン肺吸虫、肝蛭またはトキソプラズマ原虫である、請求項１７に記載の方法。
【請求項２３】
真菌がクリプトコックス・ネオフォルマンス、ヒストプラズマ・カプスラタム、コクシジオイデス・イミチス、ブラストミセス・デルマチチジス、クラミジア・トラコマチス、カンジダ・アルビカンス、カンジダ・トロピカリス、カンジダ・グラブラータ、カンジダ・クルーセイ、カンジダ・パラプシローシス、カンジダ・デュブリニエンシス、カンジダ・ルシタニアエ、エピデルモフィトン・フロッコーズム、ミクロポルム・オーズアニー、ミクロスポルム・カニス、ミクロスポルム・カニス・バラエティー・ジストルツムミクロスポルム・コーケイ、ミクロスポルム・エクイナム、ミクロスポルム・フェルギネウム、ミクロスポルム・フラバム、ミクロスポルム・ガリネ、ミクロスポルム・ジプセウム、ミクロスポルム・ナヌム、ミクロスポルム・ペルジコロル、トリコフィトン・アジェロイ、トリコフィトン・コンセントリカム、トリコフィトン・エクイヌム、トリコフィトン・フラベセンス、トリコフィトン・グロリアエ、トリコフィトン・メグニニ、トリコフィトン・メンタグロフィテス・バラエティー・エリナセイ、トリコフィトン・メンタグロフィテス・バラエティー・インテルディギターレ、トリコフィトン・ファセオリフォルメ、トリコフィトン・ルブラム、トリコフィトン・ルブラム・ダウニー株、トリコフィトン・ルブラム・グラニュラー株、トリコフィトン・シェーンライニ、トリコフィトン・シミイ、トリコフィトン・ソウダネンセ、トリコフィトン・テレストレ、トリコフィトン・トンズランス、トリコフィトン・バンブロセゲミイ、トリコフィトン・ベルコーズム、トリコフィトン・ビオラセウム、トリコフィトン・ヤオウンデイ、アスペルギルス・フミガーツス、アスペルギルス・フラバスまたはアスペルギルス・クラバタスである、請求項１７に記載の方法。
【請求項２４】
感染性病原体と有効量の請求項１〜１４の何れかに記載の抗生物質または請求項１５に記載の組成物を接触させることを含む、感染性病原体を殺滅または増殖阻害する方法。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
発明の背景
細菌病原体の多剤耐性の出現は、公衆衛生管理に対する厳しい挑戦である。世界的な抗生物質耐性感染症の増加による医療費および生産性損失は数十憶に達する。実体ある研究にも関わらず、臨床的に重要な抗微生物剤への耐性の急速な獲得に対処する信頼できる解決には至っていない。さらに、現在の薬物開発プログラムは、一部、新規クラスの抗生物質および確立されたクラスにおける新規物質を発見する科学的困難さならびに製薬業界の財政的懸念により、近未来における治療網を提示するには不十分である。そのため、抗生物質耐性生物の世界的蔓延は未制止のままである。
【０００２】
テイクソバクチンは、最近、土壌から発見されたグラム陰性細菌であるエルフテリア・テラエ(Eleftheria terrae)から発見された。テイクソバクチンは、広範なグラム陽性細菌に対して細胞壁の形成の阻止により作用し得る、新規広域スペクトル抗生物質である。
【発明の概要】
【０００３】
発明の概要
本発明のある実施態様は、抗生物質としての新規クラスの環状ペプチドに関する。本発明の抗生物質はテイクソバクチンの誘導体である。テイクソバクチンは、図１に示すとおり、特有の構造モチーフを有する。テイクソバクチンの構造モチーフを修飾して、テイクソバクチンアナログを開発し、これが本発明の抗生物質である。本発明の抗生物質は、テイクソバクチンより優れた抗細菌および治療特性を示す。ここに記載する新規抗生物質は、抗生物質耐性細菌の深刻な問題を克服する、相当な見込みを提供する。
【０００４】
特定の実施態様において、本発明の抗生物質は、下記式Ｉ、Ｉ’、II、II’、III、III’、IV、IV’、Ｖ、Ｖ’またはVI、VI’の構造を有する。
【化１】
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【化２】
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【化３】
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【化４】
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【０００５】
好ましい実施態様において、Ｒ１〜Ｒ５の各々はアミノ酸側鎖、例えば、ロイシン、イソロイシン、グルタミン、セリン、スレオニン、Ｄ−アロイソロイシン、リシンまたはアルギニンの側鎖である。ある実施態様において、Ｒ６はＨまたはＣ１〜Ｃ９直鎖または分枝鎖アルキル基、好ましくは、メチルである。式IVまたはIV’のＲ基はＣ２−Ｃ８直鎖または分枝鎖アルキル鎖であり得る。
【０００６】
本発明の抗生物質および薬学的に許容される担体または添加物を含む医薬組成物も提供される。さらに提供されるのは、対象にここに記載する抗生物質を投与することを含む、対象における病原体による感染を処置する方法である。
【図面の簡単な説明】
【０００７】
【図１】テイクソバクチンの構造。
【０００８】
【図２】本発明のある抗生物質のインビボ抗細菌活性。黄色ブドウ球菌株ＡＴＣＣ４３３００による感染の処置におけるテイクソバクチンおよび本発明のある抗生物質の有効性を、ワックスワーム幼虫(ガレリア・メロネラ)モデルで試験した。ＰＢＳ、感染させず、ＰＢＳで処置した対照群：他の全群(各群２０)を、１０７ＣＦＵの黄色ブドウ球菌株ＡＴＣＣ４３３００で感染させ、続いて処置しないかまたはバンコマイシン１０mg／kg(Ａ−１０)または５０mg／kg(Ａ−５０)、テイクソバクチン１０mg／kg(Ｂ−１０)または５０mg／kg(Ｂ−５０)１回または代表的アナログ、Ｃｈｇ１０−テイクソバクチン、１０mg／kg(Ｃ−１０)または５０mg／kg(Ｃ−５０)で１回処置した。
【０００９】
【図３】Ｃｈｇ１０−テイクソバクチンの構造およびＬＣ−ＭＳスペクトル。化合物Ｃｈｇ１０−テイクソバクチンのＵＶトレースおよびＬＣ−ＭＳ分析からの対応する質量。ＥＳＩ：Ｃ６０Ｈ９９Ｎ１２Ｏ１５＋  [Ｍ＋Ｈ＋]の計算値：１２２７.７；実測値：１２２７.８。
【００１０】
【図４】Ｍｅｔ１０−テイクソバクチン／Methibactinの構造およびＬＣ−ＭＳスペクトル。白色固体、２.９mg、収率４４％(最終工程)。化合物Ｔ６１  ＥＳＩのＵＶトレースおよびＬＣ−ＭＳ分析からの対応する質量：Ｃ５７Ｈ９５Ｎ１２Ｏ１５Ｓ＋  [Ｍ＋Ｈ＋]の計算値：１２１９.７；実測値：１２１９.７。
【００１１】
【図５】化合物Ｌ−Ｐｈｅ(４−Ｆ)１０−テイクソバクチンの構造およびＬＣ−ＭＳスペクトル。白色固体、２.９mg、収率４５％(最終工程)。化合物Ｌ−Ｐｈｅ(４−Ｆ)１０−テイクソバクチンのＵＶトレースおよびＬＣ−ＭＳ分析からの対応する質量。勾配：５〜９５％ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏと０.１％ＴＦＡを、０.６mL／分の流速で１５分間。ＥＳＩ：Ｃ６１Ｈ９４ＦＮ１２Ｏ１５＋  [Ｍ＋Ｈ＋]の計算値：１２５３.７；実測値：１２５３.８
【００１２】
【図６】化合物Ｎｌｅ１０−テイクソバクチンの構造およびＬＣ−ＭＳスペクトル。白色固体、２.９mg、収率４５％(最終工程)。化合物Ｎｌｅ１０−テイクソバクチンのＵＶトレースおよびＬＣ−ＭＳ分析からの対応する質量。勾配：５〜９５％ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏと０.１％ＴＦＡを、０.６mL／分の流速で１５分間。ＥＳＩ：Ｃ５８Ｈ９７Ｎ１２Ｏ１５＋  [Ｍ＋Ｈ＋]の計算値：１２０１.７；実測値：１２０１.８
【００１３】
【図７】化合物Ｌ−Ｎｖａ１０−テイクソバクチンの構造およびＬＣ−ＭＳスペクトル。白色固体、３.１mg、収率４８％(最終工程)。化合物Ｌ−Ｎｖａ１０−テイクソバクチンのＵＶトレースおよびＬＣ−ＭＳ分析からの対応する質量。勾配：５〜９５％ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏと０.１％ＴＦＡを、０.６mL／分の流速で１５分間。ＥＳＩ：Ｃ５７Ｈ９５Ｎ１２Ｏ１５＋  [Ｍ＋Ｈ＋]の計算値：１１８７.７；実測値：１１８７.７
【００１４】
【図８】化合物Ｌ−Ｃｈａ１０−テイクソバクチンの構造およびＬＣ−ＭＳスペクトル。白色固体、３.３mg、収率５０％(最終工程)。化合物Ｌ−Ｃｈａ１０−テイクソバクチンのＵＶトレースおよびＬＣ−ＭＳ分析からの対応する質量。勾配：５〜９５％ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏと０.１％ＴＦＡを、０.６mL／分の流速で１５分間。ＥＳＩ：Ｃ６１Ｈ１０１Ｎ１２Ｏ１５＋  [Ｍ＋Ｈ＋]の計算値：１２４１.７；実測値：１２４１.９
【００１５】
【図９】化合物Ｌ−β−シクロプロピル−Ａｌａ１０−テイクソバクチンの構造およびＬＣ−ＭＳスペクトル。白色固体、２.８mg、収率４３％(最終工程)。化合物Ｌ−β−シクロプロピル−Ａｌａ１０−テイクソバクチンのＵＶトレースおよびＬＣ−ＭＳ分析からの対応する質量。勾配：５〜９５％ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏと０.１％ＴＦＡを、０.６mL／分の流速で１５分間。ＥＳＩ：Ｃ５８Ｈ９５Ｎ１２Ｏ１５＋  [Ｍ＋Ｈ＋]の計算値：１１９９.７；実測値：１１９９.９
【００１６】
【図１０】化合物Ｔ８３の構造およびＬＣ−ＭＳスペクトル。化合物Ｔ８３のＵＶトレースおよびＬＣ−ＭＳ分析からの対応する質量。勾配：５〜９５％ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏと０.１％ＴＦＡを、０.６mL／分の流速で１５分間。ＥＳＩ：Ｃ６０Ｈ１００Ｎ１３Ｏ１４＋  [Ｍ＋Ｈ＋]の計算値：１２２６.７；実測値：１２２６.９
【００１７】
【図１１】化合物Ｔ８４の構造およびＬＣ−ＭＳスペクトル。勾配：５〜９５％ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏと０.１％ＴＦＡを、０.６mL／分の流速で１５分間。ＥＳＩ：Ｃ５８Ｈ９８Ｎ１３Ｏ１４＋  [Ｍ＋Ｈ＋]の計算値：１２００.７；実測値：１２００.８
【００１８】
【図１２】化合物Ｔ８５の構造およびＬＣ−ＭＳスペクトル。勾配：５〜９５％ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏと０.１％ＴＦＡを、０.６mL／分の流速で１５分間。ＥＳＩ：Ｃ５７Ｈ９６Ｎ１３Ｏ１４＋  [Ｍ＋Ｈ＋]の計算値：１１８６.７；実測値：１１８６.７
【００１９】
【図１３】化合物Ｔ８６の構造およびＬＣ−ＭＳスペクトル。勾配：５〜９５％ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏと０.１％ＴＦＡを、０.６mL／分の流速で１５分間。ＥＳＩ：Ｃ５７Ｈ９６Ｎ１３Ｏ１４Ｓ＋  [Ｍ＋Ｈ＋]の計算値：１２１８.７；実測値：１２１８.８
【００２０】
【図１４】化合物Ｔ８７の構造およびＬＣ−ＭＳスペクトル。勾配：５〜９５％ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏと０.１％ＴＦＡを、０.４mL／分の流速で５分間。ＥＳＩ：Ｃ６３Ｈ１０６Ｎ１３Ｏ１４＋  [Ｍ＋Ｈ＋]の計算値：１２９７.５；実測値：１２９７.３
【００２１】
【図１５】化合物Ｔ８８の構造およびＬＣ−ＭＳスペクトル。勾配：５〜９５％ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏと０.１％ＴＦＡを、０.４mL／分の流速で５分間。ＥＳＩ：Ｃ６３Ｈ１０５Ｎ１２Ｏ１４＋  [Ｍ＋Ｈ＋]の計算値：１２５３.８；実測値：１２５４.２
【発明を実施するための形態】
【００２２】
発明の詳細な記載
ここで使用する単数表現は、文脈から他のことが明らかに示されない限り、複数形も同様に含む。さらに、用語「含み」、「含む」、「有し」、「有する」、「伴う」またはこれらの変型は、詳細な記載および／または特許請求の範囲で使用される限り、このような用語は、用語「含有する」に類似する様式で、包括的であることを意図する。
【００２３】
用語「本質的にからなり」または「本質的にからなる」は、特許請求の範囲が、特定の物質または工程を含む実施態様および特許請求の範囲の基本的かつ新規特徴に実質的に影響を与えないものを包含することを示す。
【００２４】
用語「約」は、当業者により決定される特定の値の許容される誤差範囲ないであることを意味し、これは、値の測定または決定方法、すなわち、測定系の限界に一部依存する。特定の値が明細書および特許請求の範囲に記載されるとき、特に断らない限り、特定の値の許容される誤差範囲内を意味する用語「約」が想定されるべきである。ある量の成分を含む組成物の量で、用語「約」または「凡そ」が使用されるとき、これら組成物は、該値の周囲０〜１０％(Ｘ±１０％)の変動(誤差範囲)を伴い、記載される量の該成分を含む。
【００２５】
本明細書において、範囲を、冗長に、範囲内のありとあらゆる値を記載することを避けるために、省略して記載する。範囲内の任意の適切な値が、適切なとき、より高い値、低い値または範囲の終点として選択され得る。例えば、０.１〜１.０の範囲は、末端値０.１および１.０、ならびに０.２、０.３、０.４、０.５、０.６、０.７、０.８、０.９の中間値および０.１〜１.０内に含まれる全中間範囲、例えば、０.２〜０.５、０.２〜０.８、０.７〜１.０などを表す。範囲内の少なくとも２つの有効数字の値が想起されるとき、例えば、５〜１０の範囲は、値５.０〜１０.０の全てならびに末端値を含む５.００〜１０.００を示す。
【００２６】
ここで、用量範囲などで範囲、範囲の組み合わせおよび下位の組み合わせ(例えば、記載範囲内の下位の範囲)が使用されるとき、その中の特定の実施態様は明示的に包含されることが意図される。
【００２７】
「薬学的に許容される」は、連邦または州政府の規制当局または米国以外の国では対応する当局により承認されたまたは承認可能なまたは米国薬局方または他の一般に認識されている薬局方に、動物およびより具体的に、ヒトでの使用について記載されていることを意味する。
【００２８】
「薬学的に許容される塩」は、薬学的に許容され、かつ親抗生物質の所望の抗細菌活性を有する、本発明の抗生物質の塩をいう。特に、このような塩は非毒性であり、無機または有機酸付加塩および塩基付加塩であり得る。
【００２９】
「薬学的に許容される添加物」は、薬理学的組成物に添加された不活性物質または薬剤の投与の促進のために他に使用される媒体、担体または希釈剤などの、非毒性であり、生物学的に容認でき、対象への投与に他の点で生物学的に適するおよびそれと適合性である物質をいう。添加物の例は、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、種々の糖およびある種のデンプン、セルロース誘導体、ゼラチン、植物油およびポリエチレングリコールを含む。
【００３０】
何らかの疾患または障害を「処置する」または「処置」は、ある実施態様において、感染を改善する(すなわち、感染またはその臨床的症状の少なくとも一つの進展の停止または軽減)をいう。「処置する」または「処置」は、対象が認識できないものでもよい、身体パラメータの少なくとも一つの改善を含む。「処置する」または「処置」はまた身体的(例えば、認識できる症状の安定化)、生理学的(例えば、身体パラメータの安定化)または両者での、感染の調節も含む。「処置する」または「処置」は、さらに感染の発症の遅延を含む。
【００３１】
ここで使用する用語「低減」、「阻害」、「遮断」、「予防」、「軽減」または「緩和」は、抗生物質についていうとき、該抗生物質が、該抗生物質または該抗生物質を含む組成物の適用を欠く場合に、感染が通常どのように存在するかと比較して、少なくとも約７.５％、１０％、１２.５％、１５％、１７.５％、２０％、２２.５％、２５％、２７.５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、９０％または１００％、感染の発生、重症度、サイズ、体積または感染、事象もしくは活性度の関連症状を低減させることを意味する。用語「増加」、「上昇」、「増強」、「上方制御」、「改善」または「活性化」は、抗生物質についていうとき、該抗生物質が、該抗生物質または該抗生物質を含む組成物の適用を欠く場合に、感染が通常どの用に存在するかと比較して、少なくとも約７.５％、１０％、１２.５％、１５％、１７.５％、２０％、２２.５％、２５％、２７.５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、９０％、１００％、１５０％、２００％、２５０％、３００％、４００％、５００％、７５０％または１０００％、感染の発生、重症度、サイズ、体積または感染、事象もしくは活性度の関連症状を増加させることを意味する。
【００３２】
用語「有効量」または「治療有効量」は、感染処置を含むが、これに限定されない意図される適用に十分に効果がある、ここに記載する抗生物質の量をいう。治療有効量は、処置する対象および感染、例えば、対象の体重および年齢、感染の重症度、投与方法などにより変わり得て、当業者により容易に決定され得る。本用語はまたインビトロで特定の応答、例えば、標的細菌の増殖減少、死滅を誘発する用量にも適用される。特定の用量は、選択した特定の化合物、従うべき投与レジメン、他の化合物と組み合わせて投与されるか否か、投与のタイミング、投与される組織および運搬される物理的送達系により変わる。
【００３３】
薬剤の「治療量以下の量」は、該治療剤の有効量未満であるが、有効量または治療量以下の量の他の薬剤または治療と組み合わせたとき、例えば、患者が得られた治療利益の相乗作用のため、または患者に投与した抗生物質と関連する副作用の減少のため、所望の結果を生じ得る量である。
【００３４】
薬剤の「相乗的に有効な」治療量または「相乗的に有効な」量は、有効量または治療量以下の量の他の薬剤または治療と組み合わせたとき、２剤のいずれかを単独で使用したときより大きな効果を生じる、量である。薬剤の相乗的に有効な治療量は、組み合わせで使用したとき、２剤または治療の各々を単独で使用したときの相加効果より大きな効果を生じる。用語「より大きな効果」は、処置する障害の症状の軽減だけでなく、副作用プロファイル改善、忍容性改善、患者コンプライアンス改善、有効性または何らかの他の臨床成績改善も含む。
【００３５】
用語「共投与」、「組み合わせて投与」およびその文法的に等しい表現は、対象に、２以上の薬剤を、両剤および／またはその代謝物が対象に同時に存在するように投与することを包含する。共投与は、別々の組成物の同時投与、別々の組成物の異なる時点での投与または両剤が存在する組成物の投与を含む。共投与される薬剤は、同じ製剤であってよい。共投与される薬剤は、異なる製剤であってもよい。
【００３６】
「対象」は、哺乳動物、例えばヒトなどの動物をいう。ここに記載する方法は、前臨床ヒト治療および獣医適用の両者に有用であり得る。ある実施態様において、対象は哺乳動物(例えば疾患の動物モデル)であり、ある実施態様において、対象はヒトである。
【００３７】
対象への複数薬剤の投与について適用される用語「同時」または「同時に」は、１以上の薬剤を同時にまたは、１時間を超えて離れない２つの異なる時点での投与をいう。用語「連続的に」は、１を超える薬剤の、１時間を超えて、例えば、約２時間、約５時間、８時間、１日、２日、３日、４日、５日、６日、７日またはそれ以上離れた２つの異なる時点での投与をいう。
【００３８】
テイクソバクチンは、多くの細菌病原体に有望な活性を発揮する。今日まで、テイクソバクチンは、一部、構造多様性を有するテイクソバクチンアナログの製造が、不可能ではないにしても、困難であるため、天然起源からの単離によってのみ得られていた。例えば、テイクソバクチンは、(２Ｓ,４Ｓ)エンドウラシジジン(enduracididine)(Ｌ−ａｌｌｏ−Ｅｎｄ)を含み、これは、市販されておらず、合成が困難である。それ故に、Ｌ−ａｌｌｏ−Ｅｎｄ含有テイクソバクチンアナログの化学合成による製造も困難である。
【００３９】
本発明は、Ｌ−ａｌｌｏ−Ｅｎｄ残基を、ノルロイシン(Ｎｌｅ)、ノルバリン(Ｎｖａ)、シクロヘキシルグリシン(Ｃｈｇ)、シクロヘキシルアラニン(Ｃｈａ)、シクロプロピル−Ａｌａ、Ａｂｕ(アミノ酪酸)、Ａｉｂ(２−アミノイソ酪酸)、Ｓ−(ｔｅｒｔ−ブチルチオ)−Ｌ−システイン(Ｃｙｓ(ＳｔＢｕ))などを含む疎水性、非天然アミノ酸残基に置換できたことを開示する。
【００４０】
従って、本発明は、望ましい抗細菌活性を有する合成クラスのテイクソバクチン誘導体を開示する。本発明の抗生物質は、化学合成され得る。本発明の抗生物質は、テイクソバクチンコア構造の合成テーラリングを経て、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌(ＭＲＳＡ)、バンコマイシン耐性腸球菌(ＶＲＥ)およびマイコバクテリウム・ツベルクローシス(Mycobacterium tuberculosis)を含むグラム陽性細菌に活性となる。
【００４１】
ある実施態様において、本発明の抗生物質は、式ＩまたはＩ’：
【化５】
2021510148.tif 000006
を有する。
【００４２】
式ＩまたはＩ’のある抗生物質において、Ｒ１〜Ｒ５の各々は、天然または非天然アミノ酸を含む、アミノ酸の側鎖である。式ＩまたはＩ’の好ましい実施態様において、Ｒ１〜Ｒ５の各々は、独立してロイシン、イソロイシン、グルタミン、セリン、スレオニン、Ｄ−アロイソロイシン、リシンまたはアルギニンの側鎖である。式ＩまたはＩ’の抗生物質の特定の実施態様において、Ｒ１はイソロイシンの側鎖であり、Ｒ２はセリンまたはスレオニンの側鎖であり、Ｒ３はグルタミンの側鎖であり、Ｒ４はイソロイシンまたはＤ−アロイソロイシンの側鎖でありおよび／またはＲ５はイソロイシンまたはＤ−アロイソロイシンの側鎖である。式Ｉのさらなる抗生物質において、Ｒ６はＨまたはＣ１〜Ｃ９直鎖または分枝鎖アルキル基、好ましくは、メチルである。
【００４３】
ある実施態様において、本発明の抗生物質は、式IIまたはII’：
【化６】
2021510148.tif 000007
を有する。
【００４４】
式IIまたはII’のある抗生物質において、Ｒ１〜Ｒ５の各々は、天然または非天然アミノ酸を含む、アミノ酸の側鎖である。式IIまたはII’の好ましい実施態様において、Ｒ１〜Ｒ５の各々は、独立してロイシン、イソロイシン、グルタミン、セリン、スレオニン、Ｄ−アロイソロイシン、リシンまたはアルギニンの側鎖である。式IIまたはII’の抗生物質の特定の実施態様において、Ｒ１はイソロイシンの側鎖であり、Ｒ２はセリンまたはスレオニンの側鎖であり、Ｒ３はグルタミンの側鎖であり、Ｒ４はイソロイシンまたはＤ−アロイソロイシンの側鎖でありおよび／またはＲ５はイソロイシンまたはＤ−アロイソロイシンの側鎖である。式IIまたはII’のさらなる抗生物質において、Ｒ６はＨまたはＣ１〜Ｃ９直鎖または分枝鎖アルキル基、好ましくは、メチルである。
【００４５】
さらなる実施態様において、本発明の抗生物質は、式IIIまたはIII’：
【化７】
2021510148.tif 000008
を有する。
【００４６】
式IIIまたはIII’のある抗生物質において、Ｒ１〜Ｒ５の各々は、天然または非天然アミノ酸を含む、アミノ酸の側鎖である。式IIIまたはIII’の好ましい実施態様において、Ｒ１〜Ｒ５の各々は、独立してロイシン、イソロイシン、グルタミン、セリン、スレオニン、Ｄ−アロイソロイシン、リシンまたはアルギニンの側鎖である。式IIIまたはIII’の抗生物質の特定の実施態様において、Ｒ１はイソロイシンの側鎖であり、Ｒ２はセリンまたはスレオニンの側鎖であり、Ｒ３はグルタミンの側鎖であり、Ｒ４はイソロイシンまたはＤ−アロイソロイシンの側鎖でありおよび／またはＲ５はイソロイシンまたはＤ−アロイソロイシンの側鎖である。式IIIまたはIII’のさらなる抗生物質において、Ｒ６はＨまたはＣ１〜Ｃ９直鎖または分枝鎖アルキル基、好ましくは、メチルである。
【００４７】
さらなる実施態様において、本発明の抗生物質は、式IVまたはIV’：
【化８】
2021510148.tif 000009
を有する。
【００４８】
式IVまたはIV’のある抗生物質において、Ｒ１〜Ｒ５の各々は、天然または非天然アミノ酸を含む、アミノ酸の側鎖である。式IVまたはIV’の好ましい実施態様において、Ｒ１〜Ｒ５の各々は、独立してロイシン、イソロイシン、グルタミン、セリン、スレオニン、Ｄ−アロイソロイシン、リシンまたはアルギニンの側鎖である。式IVまたはIV’の抗生物質の特定の実施態様において、Ｒ１はイソロイシンの側鎖であり、Ｒ２はセリンまたはスレオニンの側鎖であり、Ｒ３はグルタミンの側鎖であり、Ｒ４はイソロイシンまたはＤ−アロイソロイシンの側鎖でありおよび／またはＲ５はイソロイシンまたはＤ−アロイソロイシンの側鎖である。式IVまたはIV’のさらなる抗生物質において、Ｒ６はＨまたはＣ１〜Ｃ９直鎖または分枝鎖アルキル基、好ましくは、メチルである。さらなる実施態様において、ＲはＨまたはＣ２−Ｃ８直鎖または分枝鎖アルキル鎖である。
【００４９】
ある実施態様において、本発明の抗生物質は、式ＶまたはＶ’：
【化９】
2021510148.tif 000010
を有する。
【００５０】
式ＶまたはＶ’のある抗生物質において、Ｒ１〜Ｒ５の各々は、天然または非天然アミノ酸を含む、アミノ酸の側鎖である。式ＶまたはＶ’の好ましい実施態様において、Ｒ１〜Ｒ５の各々は、独立してロイシン、イソロイシン、グルタミン、セリン、スレオニン、Ｄ−アロイソロイシン、リシンまたはアルギニンの側鎖である。式ＶまたはＶ’の抗生物質の特定の実施態様において、Ｒ１はイソロイシンの側鎖であり、Ｒ２はセリンまたはスレオニンの側鎖であり、Ｒ３はグルタミンの側鎖であり、Ｒ４はイソロイシンまたはＤ−アロイソロイシンの側鎖でありおよび／またはＲ５はイソロイシンまたはＤ−アロイソロイシンの側鎖である。式ＶまたはＶ’のさらなる抗生物質において、Ｒ６はＨまたはＣ１〜Ｃ９直鎖または分枝鎖アルキル基、好ましくは、メチルである。
【００５１】
なおさらなる実施態様において、本発明の抗生物質は、式VIまたはVI’：
【化１０】
2021510148.tif 000011
を有する。
【００５２】
式VIまたはVI’のある抗生物質において、Ｒ１〜Ｒ５の各々は、天然または非天然アミノ酸を含む、アミノ酸の側鎖である。式VIまたはVI’の好ましい実施態様において、Ｒ１〜Ｒ５の各々は、独立してロイシン、イソロイシン、グルタミン、セリン、スレオニン、Ｄ−アロイソロイシン、リシンまたはアルギニンの側鎖である。式VIまたはVI’の抗生物質の特定の実施態様において、Ｒ１はイソロイシンの側鎖であり、Ｒ２はセリンまたはスレオニンの側鎖であり、Ｒ３はグルタミンの側鎖であり、Ｒ４はイソロイシンまたはＤ−アロイソロイシンの側鎖でありおよび／またはＲ５はイソロイシンまたはＤ−アロイソロイシンの側鎖である。式VIまたはVI’のさらなる抗生物質において、Ｒ６はＨまたはＣ１〜Ｃ９直鎖または分枝鎖アルキル基、好ましくは、メチルである。式VIまたはVI’の抗生物質の特定の実施態様において、ｎ＝１〜３である。
【００５３】
本発明の抗生物質は、液相合成／固相合成ハイブリッド法を使用して、製造できる。このようなハイブリッド法において、天然テイクソバクチンのＬ−ａｌｌｏ−Ｅｎｄ(図１)は、他の天然または非天然アミノ酸に置き換えられる。また、テイクソバクチンの直鎖ペプチド部分の残基を、他のアミノ酸に交換できる。
【００５４】
式Ｉ〜VI’の種々の抗生物質およびＲ１〜Ｒ６およびＲ位置の種々の置換基に基づき、本発明は、一定範囲の抗生物質を提供する。種々の置換基に基づく例示的抗生物質を合成し、特徴づけした。
【００５５】
例えば、図１のテイクソバクチンコアの末端を他の非天然疎水性アミノ酸で置換し、得られた抗生物質は、メチシリン感受性黄色ブドウ球菌株ＡＴＣＣ２９２１３(ＭＳＳＡ)およびメチシリン耐性黄色ブドウ球菌(ＭＲＳＡ)臨床単離株(ＭＩＣ：０.２５〜１μg／mL)に抗細菌活性を示した。このようなＭＳＳＡおよびＭＲＳＡ株に対するこの抗生物質の抗細菌活性は、テイクソバクチンと同等であるか、優れる。
【００５６】
さらなるこのような例の抗細菌活性を、下表１に示す。
【表１】
2021510148.tif 000012
表１において、テイクソバクチンアナログのＭＩＣはμgmL−１である
【００５７】
表１に示すとおり、４アナログ(Ｍｅｔ１０−テイクソバクチン、Ｐｈｅ(４−Ｆ)１０−テイクソバクチン、Ｎｖａ１０−テイクソバクチンおよびＣｈｇ１０−テイクソバクチン)は、テイクソバクチンより２倍高い活性を示した。他の３アナログ(Ｎｌｅ１０−テイクソバクチン、Ｃｈａ１０−テイクソバクチンおよびβ−シクロプロピル−Ａｌａ１０−テイクソバクチン)も、テイクソバクチンと同等の活性を示した。
【００５８】
次の化合物(Ｔ８３〜Ｔ８８)も製造し、これら化合物の活性を、下表２に示す。
【表２】
2021510148.tif 000013
表２において、テイクソバクチンアナログのＭＩＣはμgmL−１である
【００５９】
表２に示すとおり、これらアナログ全て、ＭＲＳＡ、ＳＡ、ストレプトコッカス・フェカリスおよびエンテロコッカス株に対して極めて強力な抗細菌活性を示した。アナログＴ８３、Ｔ８４、Ｔ８５およびＴ８６は、これらアナログにおける環状テトラペプチドのエステル結合をアミド結合に置き換えたものであり、テイクソバクチンより２〜４倍高い活性を示した。アナログＴ８７も、テイクソバクチンより２〜４倍高い活性を示した。ＭＲＳＡおよびＳＡ株に対するアナログＴ８８の活性はテイクソバクチンより約４倍低かったが、ストレプトコッカス・フェカリスおよびエンテロコッカス株に対する活性は、テイクソバクチンより良好であった。
【００６０】
例示的インビボ抗細菌活性：Ｃｈｇ１０−テイクソバクチンを、黄色ブドウ球菌株ＡＴＣＣ４３３００感染ワックスワーム生存モデルで試験した。テイクソバクチンを対照として使用した。見られるとおり、１回処置で、Ｃｈｇ１０−テイクソバクチンは、改善された抗細菌活性を示した。５０mg／kg用量で、Ｃｈｇ１０−テイクソバクチンは、感染ワックスワームを１００％保護した(図２参照)。
【００６１】
本発明のある実施態様は、対象に本発明の抗生物質を投与することを含む、対象における感染を処置する方法を提供する。ある実施態様において、対象は植物または動物、好ましくは、哺乳動物、より好ましくは、ヒトである。ある実施態様において、感染は、細菌、真菌、ウイルス、原生動物、蠕虫、寄生虫およびそれらの組み合わせを含むが、これらに限定されない病原体が原因である。
【００６２】
従って、感染を処置する方法のある実施態様は、対象に治療有効量のここに記載する抗生物質、例えば、抗生物質式ＩまたはＩ’、IIまたはII’、IIIまたはIII’またはIVまたはIV’を投与し、それにより対象における感染を処置することを含む。
【００６３】
具体的実施態様において、病原体は、グラム陽性細菌またはグラム陰性細菌などの細菌である。グラム陽性細菌の非限定的例は、ストレプトコッカス属、スタフィロコッカス属、エンテロコッカス属、コリネバクテリア属、リステリア属、バシラス属、エリジペロスリックス属およびアクチノミセス属を含む。グラム陰性細菌の非限定的例は、ヘリコバクター属、ナイセリア属、カンピロバクター属、エンテロバクター属、シュードモナス属、クレブシエラ属、パスツレラ属、バクテロイデス属、ストレプトバシラス属、レプトスピラ属、サルモネラ属およびシトロバクター属を含む。
【００６４】
ある実施態様において、式ＩまたはＩ’、IIまたはII’、IIIまたはIII’またはIVまたはIV’の抗生物質は、ヘリコバクター・ピロリ、レジオネラ・ニューモフィラ、マイコバクテリウム・ツベルクローシス、マイコバクテリウム・アビウム、マイコバクテリウム・イントラセルラレ、マイコバクテリウム・カンサイ、マイコバクテリウム・ゴルドノアエ、マイコバクテリア・スポロゾイテス、スタフィロコッカス・アウレウス、スタフィロコッカス・エピデルミディス、ナイセリア・ゴノレエ、ナイセリア・メニンギティディス、リステリア・モノサイトゲネス、ストレプトコッカス・ピオゲネス(Ａ群レンサ球菌)、ストレプトコッカス・アガラクティアエ・ピオゲネス(Ｂ群レンサ球菌)、ストレプトコッカス・ディスガラクチア、ストレプトコッカス・フェカリス、ストレプトコッカス・ボビス、ストレプトコッカス・ニューモニアエ、病原性カンピロバクター・スポロゾイテス、エンテロコッカス・スポロゾイテス、ヘモフィルス・インフルエンザエ、シュードモナス・エルギノーザ、バシラス・アントラシス、バシラス・サブティリス、エシェリキア・コリ、コリネバクテリア・ジフテリアエ、コリネバクテリア・ジェイケイウム、コリネバクテリア・スポロゾイテス、エリジペロスリックス・ルジオパシエ、クロストリジウム・パーフリンジェンス、クロストリジウム・テタニ、クロストリジウム・ディフィシル、エンテロバクター・アエロゲネス、クレブシエラ・ニューモニアエ、パスツレラ・ムルトシダ、バクテロイデス・シータイオタオミクロン、バクテロイデス・ユニフォルミス、バクテロイデス・ブルガタス、フソバクテリウム・ヌクレアタム、ストレプトバシラス・モニリフォルミス、レプトスピラおよびアクチノマイセス・イスラエリの１以上の感染に使用される。特に、細菌は、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌またはバチルス・アントラシスである。
【００６５】
他の実施態様において、ここに記載する抗生物質をウイルス感染処置に使用できる。式ＩまたはＩ’、IIまたはII’、IIIまたはIII’またはIVまたはIV’の抗生物質により処置され得る感染性ウイルスの非限定的例は、レトロウイルス科(例えば、ヒト免疫不全ウイルス、例えばＨＩＶ−１(別名ＨＴＬＶ−III、ＬＡＶまたはＨＴＬＶ−III／ＬＡＶ)またはＨＩＶ−III；および他の単離株、例えばＨＩＶ−ＬＰ；ピコルナウイルス科(例えば、ポリオウイルス、Ａ型肝炎ウイルス；エンテロウイルス、ヒトコクサッキーウイルス、ライノウイルス、エコーウイルス)；カリシウイルス科(例えば、胃腸炎を起こす株)；トガウイルス科(例えば、ウマ脳炎ウイルス、風疹ウイルス)；フラビウイルス科(例えば、デングウイルス、脳炎ウイルス、黄色熱ウイルス)；コロナウイルス科(例えば、コロナウイルス、重症急性呼吸器症候群(ＳＡＲＳ)ウイルス)；ラブドウイルス科(例えば、水疱性口炎ウイルス、狂犬病ウイルス)；フィロウイルス科(例えば、エボラウイルス)；パラミクソウイルス科(例えば、パラインフルエンザウイルス、ムンプスウイルス、麻疹ウイルス、呼吸器多核体ウイルス)；オルトミクソウイルス科(例えば、インフルエンザウイルス)；ブニヤウイルス科(例えば、ハンタウイルス、ブンガウイルス、フレボウイルスおよびナイロウイルス)；アレナウイルス科(出血性熱ウイルス)；レオウイルス科(例えば、レオウイルス、オルビウイルスおよびロタウイルス)；ビルナウイルス科；ヘパドナウイルス科(例えば、Ｂ型肝炎ウイルス)；パルボウイルス科(パルボウイルス)；パポバウイルス科(パピローマウイルス、ポリオーマウイルス)；アデノウイルス科(大部分のアデノウイルス)；ヘルペスウイルス科(例えば、単純ヘルペスウイルス(ＨＳＶ)１および２、水痘帯状疱疹ウイルス、サイトメガロウイルス(ＣＭＶ)、ヘルペスウイルス)；ポックスウイルス科(例えば、痘瘡ウイルス、ワクシニアウイルス、ポックスウイルス)；およびイリドウイルス科(例えば、アフリカブタ熱ウイルス)；および未分類ウイルス(例えば、海綿状脳症の病原体、デルタ肝炎の病原体(Ｂ型肝炎ウイルスの不完全サテライトと考えられる)、非Ａ、非Ｂ型肝炎(クラス１＝内面的に伝達；クラス２＝親の方法で伝達、すなわち、Ｃ型肝炎)；ノーウォークおよび関連ウイルスおよびアストロウイルス)を含む。特定の実施態様において、式ＩまたはＩ’、IIまたはII’、IIIまたはIII’またはIVまたはIV’の抗生物質は、インフルエンザウイルス、ヒト免疫不全ウイルスまたは単純ヘルペスウイルスの処置に使用される。
【００６６】
さらに他の実施態様において、ここに記載する抗生物質は、原生動物が原因の感染の処置に有用である。式ＩまたはＩ’、IIまたはII’、IIIまたはIII’またはIVまたはIV’の抗生物質により阻害され得る原生動物の非限定的例は、腟トリコモナス、ランブル鞭毛虫、赤痢アメーバ、大腸バランジウム、クリプトスポリジウム・パルバムおよび戦争シストイソスポーラ、クルーズトリパノソーマ、ガンビアトリパノソーマ、ドノヴァン・リーシュマニアおよびフォーラーネグレリアを含むが、これらに限定されない。
【００６７】
ある実施態様において、ここに記載する抗生物質は、蠕虫が原因の感染の処置に有用である。式ＩまたはＩ’、IIまたはII’、IIIまたはIII’またはIVまたはIV’の抗生物質により阻害され得る蠕虫の非限定的例は、マンソン住血吸虫、シストソーマ・セルカリア、日本住血吸虫、メコン住血吸虫、ビルハルツ住血吸虫、回虫、糞線虫、単包条虫、多包条虫、広東住血線虫、コスタリカ住血線虫、肥大吸虫、フィリピン毛頭虫、ウェステルマン肺吸虫、十二指腸鉤虫、アメリカ鉤虫、トリキナ、バンクロフト糸状虫、マレー糸状虫およびチモール糸状虫、犬回虫、猫回虫、牛回虫、線虫およびアニサキス属を含むが、これらに限定されない。
【００６８】
ある実施態様において、ここに記載する抗生物質は、寄生虫が原因の障害の処置に有用である。式ＩまたはＩ’、IIまたはII’、IIIまたはIII’またはIVまたはIV’の抗生物質により阻害され得る寄生虫の非限定的例は、熱帯熱マラリア原虫、ヨーエリマラリア原虫、小形条虫、肝吸虫、ロア糸状虫、ウェステルマン肺吸虫、肝蛭およびトキソプラズマ原虫を含むが、これらに限定されない。特定の実施態様において、寄生虫は、マラリア寄生虫である。
【００６９】
さらなる実施態様において、式ＩまたはＩ’、IIまたはII’、IIIまたはIII’またはIVまたはIV’の抗生物質は、真菌が原因の障害の処置に有用である。式ＩまたはＩ’、IIまたはII’、IIIまたはIII’またはIVまたはIV’の抗生物質により阻害され得る真菌の非限定的例は、クリプトコックス・ネオフォルマンス、ヒストプラズマ・カプスラタム、コクシジオイデス・イミチス、ブラストミセス・デルマチチジス、クラミジア・トラコマチス、カンジダ・アルビカンス、カンジダ・トロピカリス、カンジダ・グラブラータ、カンジダ・クルーセイ、カンジダ・パラプシローシス、カンジダ・デュブリニエンシス、カンジダ・ルシタニアエ、エピデルモフィトン・フロッコーズム、ミクロポルム・オーズアニー、ミクロスポルム・カニス、ミクロスポルム・カニス・バラエティー・ジストルツム、ミクロスポルム・コーケイ、ミクロスポルム・エクイナム、ミクロスポルム・フェルギネウム、ミクロスポルム・フラバム、ミクロスポルム・ガリネ、ミクロスポルム・ジプセウム、ミクロスポルム・ナヌム、ミクロスポルム・ペルジコロル、トリコフィトン・アジェロイ、トリコフィトン・コンセントリカム、トリコフィトン・エクイヌム、トリコフィトン・フラベセンス、トリコフィトン・グロリアエ、トリコフィトン・メグニニ、トリコフィトン・メンタグロフィテス・バラエティー・エリナセイ、トリコフィトン・メンタグロフィテス・バラエティー・インテルディギターレ、トリコフィトン・ファセオリフォルメ、トリコフィトン・ルブラム、トリコフィトン・ルブラム・ダウニー株、トリコフィトン・ルブラム・グラニュラー株、トリコフィトン・シェーンライニ、トリコフィトン・シミイ、トリコフィトン・ソウダネンセ、トリコフィトン・テレストレ、トリコフィトン・トンズランス、トリコフィトン・バンブロセゲミイ、トリコフィトン・ベルコーズム、トリコフィトン・ビオラセウム、トリコフィトン・ヤオウンデイ、アスペルギルス・フミガーツス、アスペルギルス・フラバスおよびアスペルギルス・クラバタスを含むが、これらに限定されない。
【００７０】
さらに他の実施態様において、本発明は、感染性病原体の増殖を阻害する方法であって、該病原体とここに記載する化合物、例えば、式ＩまたはＩ’、IIまたはII’、IIIまたはIII’またはIVまたはIV’の化合物を接触させ、それにより感染性病原体の増殖を阻害することを含む、方法に関する。
【００７１】
投与経路および投与形態
本発明のある実施態様は、本発明の抗生物質を含む医薬組成物を提供する。本発明の医薬組成物は、本発明の抗生物質および薬学的に許容される担体または添加物を含む。
【００７２】
ある実施態様において、抗生物質は、筋肉内、皮下、髄腔内、静脈内または腹腔内に点滴または注射により投与し得る。抗生物質の溶液を、所望により非毒性界面活性剤と混合した水で調製し得る。通常の保存および使用条件下、これらの調製物は、微生物の増殖を阻止するために防腐剤を含み得る。
【００７３】
注射または点滴に適する医薬投与形態は、所望によりリポソームに封入された、無菌水溶液または分散剤または、無菌注射可能または点滴可能溶液または分散剤の即座の調製に適合させた抗生物質を含む無菌粉末を含み得る。好ましくは、最終剤型は、無菌、流体および製造および保管条件下で安定でなければならない。液体担体または媒体は、例えば、水、エタノール、ポリオール(例えば、グリセロール、プロピレングリコール、液体ポリエチレングリコールなど)、植物油、非毒性グリセリルエステルおよびこれらの適当な混合物を含む、溶媒または液体分散媒体であり得る。適切な流動性は、例えば、リポソームの形成により、分散剤の場合必要な粒子径の維持によりまたは界面活性剤の使用により維持され得る。微生物の活動の予防は、種々の抗細菌および抗真菌剤、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸、チメロサールなどによりもたらされ得る。多くの場合、等張剤、例えば、糖、緩衝液または塩化ナトリウムを含むのが好ましい。注射用組成物の長期吸収は、組成物に吸収遅延剤、例えば、モノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチンを使用することにより、もたらされ得る。
【００７４】
無菌注射用溶液は、必要な量の抗生物質を、ここに記載する適切な溶媒に、必要に応じて、ここに挙げた種々の他の成分と共に取り込み、好ましくは続いて濾過滅菌することにより製造される。無菌注射用溶液の調製のための無菌粉末の場合、好ましい製造方法は、先に滅菌濾過した溶液に存在する、活性成分と任意のさらなる所望の成分の粉末を作る真空乾燥および凍結乾燥技術を含む。
【００７５】
本発明の組成物は、不活性希釈剤または同化性可食担体などの薬学的に許容される媒体と組み合わせて、経口でも投与され得る。それらは、硬または軟殻ゼラチンカプセルに封入されてよく、錠剤に圧縮されてよくまたは患者の食餌の食べ物に直接組み込んでよい。
【００７６】
経口治療投与のために、抗生物質を、１以上の添加物と組み合わせ、摂取可能錠剤、バッカル錠剤、トローチ剤、カプセル剤、エリキシル剤、懸濁液剤、シロップ剤、ウェーハ剤などの形で使用し得る。このような組成物および調製物は、少なくとも０.１％の本発明の抗生物質を含むべきである。このような組成物および調製物に存在する本発明の抗生物質のパーセンテージは、当然変動してよく、簡便には、ある単位剤型の重量の約２％〜約６０％であり得る。このような治療に有用な組成物中の抗生物質の量は、有効投与量レベルが得られるものである。
【００７７】
錠剤、トローチ剤、丸剤、カプセル剤などは、次の１以上を含み得る：結合剤、例えばトラガカントゴム、アカシア、コーンデンプンまたはゼラチン；添加物、例えばリン酸二カルシウム；崩壊剤、例えばコーンデンプン、ジャガイモデンプン、アルギン酸など；滑沢剤、例えばステアリン酸マグネシウム；および甘味剤、例えばスクロース、フルクトース、ラクトースまたはアスパルテームまたは風味剤、例えばペパーミント、ウインターグリーン油またはサクランボフレーバーを添加し得る。
【００７８】
単位剤型がカプセル剤であるとき、上記タイプの物質に加えて、植物油またはポリエチレングリコールなどの液体担体を含み得る。
【００７９】
種々の他の物質が、コーティングとしてまたは固体単位剤型の物理形態を他に修飾するために存在し得る。例えば、錠剤、丸剤またはカプセル剤を、ゼラチン、蝋、シェラックまたは糖などでコーティングし得る。シロップ剤またはエリキシル剤は、活性抗生物質、甘味剤としてスクロースまたはフルクトース、防腐剤としてメチルおよびプロピルパラベン、色素およびサクランボまたはオレンジフレーバーを風味剤として含み得る。
【００８０】
当然、あらゆる単位剤型に使用するあらゆる物質は、薬学的に許容され、用いる量で実質的に非毒性でなければならない。
【００８１】
さらに、抗生物質を、徐放製剤およびデバイスに取り込ませ得る。例えば、抗生物質を、徐放カプセル、徐放錠剤、徐放丸剤および徐放抗生物質またはナノ粒子に取り込ませ得る。
【００８２】
抗生物質の表皮(粘膜または皮膚表面)への局所投与のための医薬組成物は、軟膏、クリーム、ローション、ゲルまたは経皮パッチとして製剤し得る。このような経皮パッチは、リナロール、カルバクロール、チモール、シトラール、メントール、ｔ−アネトールなどの浸透増強剤を含み得る。軟膏およびクリームは、適当な濃化剤、ゲル化剤、着色剤などを加えた、例えば、水性または油性基剤を含み得る。ローションおよびクリームは、水性または油性基剤を含み、一般にまた１以上の乳化剤、安定化剤、分散剤、懸濁化剤、濃化剤、着色剤なども含み得る。ゲルは、好ましくは水性担体基剤を含み、架橋ポリアクリル抗生物質、誘導体化多糖(例えば、カルボキシメチルセルロース)などを含む。
【００８３】
口腔(例えば、バッカルまたは舌下投与)への局所投与に適する医薬組成物は、スクロース、アカシアまたはトラガカントなどの風味付けされた基剤に組成物を含むロゼンジ；ゼラチンおよびグリセリンまたはスクロースおよびアカシアなどの不活性基剤に組成物を含む芳香錠；および適当な液体担体に活性成分を含む洗口剤を含む。口腔への局所投与用医薬組成物は、所望により、浸透増強剤を含み得る。
【００８４】
有用な固体担体は、タルク、クレイ、微結晶セルロース、シリカ、アルミナなどの微粉砕固体を含む。他の固体担体は、非毒性ポリマーナノ粒子または微粒子を含む。有用な液体担は、所望により非毒性界面活性剤の助けをかりて、抗生物質が有効レベルで溶解または分散できる、水、アルコールまたはグリコールまたは水／アルコール／グリコールブレンドを含む。芳香剤およびさらなる抗微生物剤などのアジュバントを、ある用途についての性質を最適化するために加え得る。得られた液体組成物を、含浸バンデージおよび他のドレッシングに使用する、吸収パッドに適用するかまたはポンプタイプまたはエアロゾル噴霧器を使用して、罹患領域にスプレーし得る。
【００８５】
合成ポリマー、脂肪酸、脂肪塩およびエステル、脂肪アルコール、修飾セルロースまたは修飾鉱物物質などの濃厚剤も、液体担体に用いて、使用者の皮膚に直接適用する噴霧可能ペースト、ゲル、軟膏、石鹸などを形成できる。
【００８６】
抗生物質を皮膚に送達するのに使用できる有用な皮膚用組成物の例は、当分野で知られる；例えば、全て引用により本明細書に包含させる、Jacquet et al. (米国特許４,６０８,３９２)、Geria(米国特許４,９９２,４７８)、Smith et al. (米国特許４,５５９,１５７)およびWortzman(米国特許４,８２０,５０８)参照。
【００８７】
このような製剤中の本発明の治療抗生物質の濃度は、製剤の性質および意図する投与経路により広範に変わり得る。例えば、ローション剤などの液体組成物中の抗生物質の濃度は、好ましくは約０.１〜２５重量％、または、より好ましくは、約０.５〜１０重量％であり得る。ゲル剤または散剤などの半固体または固体組成物中の濃度は、好ましくは約０.１〜５重量％、または、より好ましくは、約０.５〜２.５重量％であり得る。
【００８８】
脊髄投与または羊水への注入のための医薬組成物は、アンプル、充填済シリンジ、小体積点滴または反復用量容器に単位用量形態で提供され得て、防腐剤が添加され得る。非経腸投与用組成物は懸濁液剤、溶液剤またはエマルジョン剤であり得て、懸濁化剤、安定化剤および分散剤などの添加物を含み得る。
【００８９】
直腸投与に適する医薬組成物は、固体または半固体(例えば、クリームまたはペースト)担体または媒体と組み合わせて本発明の抗生物質を含む。例えば、このような直腸組成物は、単位用量坐薬として提供され得る。適当な担体または媒体は、カカオバターおよび当分野で一般に使用される他の物質を含む。
【００９０】
ある実施態様によって、膣投与に適する本発明の医薬組成物は、当分野で知られる担体と組み合わせて本発明の抗生物質を含む、ペッサリー、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト、フォームまたはスプレーとして提供される。あるいは、膣投与に適する組成物は、液体または固体剤型で送達され得る。
【００９１】
鼻腔内投与に適する医薬組成物も本発明に包含される。このような鼻腔内組成物は、液体スプレー、分散性粉末または液滴を送達するための適当な、媒体および投与デバイスに本発明の抗生物質を含む。液滴は、１以上の分散剤、可溶化剤または懸濁化剤も含む水性または非水性基剤と製造され得る。液体スプレーは、簡便には加圧パック、注入器、ネブライザーまたは抗生物質を含むエアロゾルの送達の他の簡便な手段から送達される。加圧パックは、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、二酸化炭素または当分野で周知の他の適当なガスなどの適当な噴射剤を含む。エアロゾル投与量は、測定された量の抗生物質を送達するバルブを提供することにより制御され得る。
【００９２】
抗生物質を不活性粉末担体と組み合わせ、対象により吸入されるかまたは注入され得る。
【００９３】
吸入または吹送法による投与のための医薬組成物は、乾燥粉末組成物、例えば、抗生物質とラクトースまたはデンプンなどの適当な粉末基剤の粉末混合物の形で提供され得る。このような粉末組成物は、単位剤型で、例えば、カプセル、カートリッジ、ゼラチンパックまたはブリスターパックで提供され、そこから、粉末が吸入器または注入器により投与され得る。
【００９４】
抗生物質の正確な量(有効用量)は、例えば、対象の種、年齢、体重および一般的または臨床的状態、重症度または処置する感染の機序、用いる特定の薬剤または媒体、投与の方法および間隔などにより、対象毎に異なる。治療有効用量は、当業者に知ら得る慣用法により経験的に決定され得る。例えば、The Pharmacological Basis of Therapeutics, Goodman and Gilman, eds., Macmillan Publishing Co., New York参照。例えば、有効用量を、最初に細胞培養アッセイまたは適当な動物モデルで推定できる。動物モデルをまた適切な濃度範囲および投与経路の決定にも使用し得る。次いで、このような情報を使用して、ヒトへの投与の有用な用量および経路を決定し得る。マウスおよび他の動物からヒトの有効投与量を外挿する方法は、当分野で知られる；例えば、引用により本明細書に包含させる米国特許４,９３８,９４９参照。治療用量はまた、同等な治療剤の投与量に準じて選択し得る。
【００９５】
特定の投与方法および投与レジメンは、症例の特性(例えば、関係する対象、疾患、疾患状態および処置が予防か否か)を考慮して、処置医により選択される。処置は、数日〜数か月または数年の期間の連日または１日複数用量の化合物を含み得る。
【００９６】
しかしながら、一般に、適当な用量は約０.００１〜約１００mg／kg体重／日、好ましくは約０.０１〜約１００mg／kg体重／日、より好ましくは、約０.１〜約５０mg／kg体重／日の範囲、またはさらにより好ましくは、約１〜約１０mg／kg体重／日の範囲である。例えば、適当な用量は約１mg／kg、１０mg／kgまたは５０mg／kg体重／日であり得る。
【００９７】
抗生物質は、簡便には、単位剤型あたり、例えば、約０.０５〜約１００００mg、約０.５〜約１００００mg、約５〜約１０００mgまたは約５０〜約５００mgの活性成分を含む、単位剤型で投与され得る。
【００９８】
抗生物質は、例えば、約０.２５〜約２００μM、約０.５〜約７５μM、約１〜約５０μM、約２〜約３０μMまたは約５〜約２５μMの、ピーク血漿濃度を達成するために投与され得る。望ましい血漿濃度の例は、少なくとも０.２５μM、０.５μM、１μM、５μM、１０μM、２５μM、５０μM、７５μM、１００μMまたは２００μMを含む。例えば、血漿レベルは、約１〜約１００マイクロモル濃度または約１０〜約２５マイクロモル濃度であり得る。これは、例えば、所望により、食塩水中の、抗生物質の０.０５〜５％溶液の静脈内注射によりまたは抗生物質約１〜約１００mgを含むボーラスとしての経口投与により達成され得る。望ましい血中レベルは、連続的または間欠的点滴により維持され得る。
【００９９】
抗生物質は、組成物に、医療および製薬分野で周知の慣用法により決定した、治療的に有用かつ有効濃度範囲内で含まれ得る。例えば、典型的組成物は、１以上の抗生物質を、少なくとも約１mg／ml、好ましくは少なくとも約４mg／ml、より好ましくは少なくとも５mg／mlおよび最も好ましくは少なくとも６mg／mlの範囲の濃度で含み得る。
【０１００】
抗生物質は、簡便には単一用量でまたは適当な間隔で投与する分割用量で、例えば、１日１回用量または１日２回、３回、４回またはそれ以上の分割用量で提供され得る。分割用量自体、注入器からの複数注入のように、例えば、多数の分離した間隔を開けた投与のために、さらに分割してよい。
【０１０１】
所望により、本発明の医薬組成物は、例えば、組み合わせ治療として、１以上の他の治療剤を含み得る。さらなる治療剤は、組成物に、医療および製薬分野で周知の慣用法により決定した、治療的に有用かつ有効濃度範囲内で含まれ得る。任意の特定のさらなる治療剤の濃度は、その薬剤が単剤療法で使用される典型的範囲と同じであってよくまたは濃度は、本発明の抗生物質と組み合わせたとき相乗作用があるならば。典型的単剤療法より低くてよい。
【０１０２】
ここに記載するまたは引用する全ての特許、特許出願、仮出願および刊行物は、それらが本明細書の明白な教示と矛盾しない限り、全ての図および表を含み、全体として引用により本明細書に包含させる。
【０１０３】
以下は、本発明を実施する方法を説明する実施例である。これらの実施例は限定的と解釈してはならない。特に断らない限り全てのパーセンテージは重量であり、全ての溶媒混合物比は体積である。
【０１０４】
本発明の化合物の合成法
化学
Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＤＴｈｒ(ＮＨ−Ａｌｌｏｃ)−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｄ−Ｎ−メチル−Ｐｈｅ−ＯＨおよびＢｏｃ−Ｉｌｅ−ＳＡＬｏｆｆを報告されたとおり、製造した１、２。全ての市販アミノ酸およびカップリング剤は、さらに精製することなく使用した。特に断らない限り全てのＨＰＬＣグレード(ＤＵＫＳＡＮ)および分析グレード(ＲＣＩ)溶媒は受領したまま使用した。無水ジクロロメタン(ＤＣＭ)は、水素化カルシウム(ＣａＨ２)存在下で蒸留した。分析逆相ＨＰＬＣを、Vydac 218TPTM C18カラム(５μm、４.６×２５０mm)を備えたWater系で、０.６mL／分の流速でアセトニトリル(０.１％ＴＦＡ)の水(０.１％ＴＦＡ)溶液の特定の直線勾配を使用して実施した。分取逆相ＨＰＬＣを、Vydac 218TPTM C18カラム(１０μm、１０×２５０mm)を備えたWater系で、１０.０mL／分の流速でアセトニトリル(０.１％ＴＦＡ)の水(０.１％ＴＦＡ)溶液の特定の直線勾配を使用して実施した。
【０１０５】
一般的Ｆｍｏｃ−ＳＰＰＳ(固相ペプチド合成)法。
１００mg  ２−クロロトリチル樹脂(０.５mmol／ｇ)を乾燥ＤＣＭで３０分間膨張させ、第一構成要素(２.０当量)およびＤＩＥＡ(４.０当量)の乾燥ＤＣＭ溶液で処理した。１時間、８０μL  ＭｅＯＨを添加して、未反応樹脂をさらに２０分間キャップした。充填樹脂をＤＣＭ(３×２mL)およびＤＭＦ(３×２mL)で洗浄した。Ｆｍｏｃ脱保護を、２mLのＤＭＦ中ピペリジン２０％溶液と２０分間振盪することにより達成した。次のＦｍｏｃ−またはＢｏｃ−アミノ(４.０当量)を、ＨＡＴＵ(４.０当量)をカップリング剤およびＤＩＥＡ(８.０当量)を塩基として使用してカップリングした。混合物を、ＤＭＦ中１時間振盪させた。各Ｆｍｏｃ脱保護およびカップリング反応後、樹脂をＤＭＦ(３×２mL)、ＤＣＭ(３×２mL)およびＤＭＦ(３×２mL)で洗浄した。
【０１０６】
Ａｌｌｏｃ脱保護。
充填樹脂をＤＣＭ(３×２mL)で洗浄し、次いでＰｄ(ＰＰｈ３)４(１.０当量)およびフェニルシラン(２５当量)の２mL  無水ＤＣＭ溶液を加えた。混合物を、１時間、乾燥アルゴンの保護下に振盪した。Ａｌｌｏｃ脱保護完了後、樹脂をＤＭＦ(３×２mL)、ＤＣＭ(３×２mL)およびＤＭＦ(３×２mL)で洗浄した。
【０１０７】
ペプチド開裂。
最後の構成要素のカップリング後、樹脂をＤＣＭ(３×２mL)、ＤＭＦ(３×２mL)およびＤＣＭ(５×２mL)で洗浄した。次いで、ＤＣＭ／ＡｃＯＨ／ＴＦＥ((ｖ／ｖ／ｖ＝８：１：１)のカクテルを樹脂に加え、１.５時間振盪した。次いで、樹脂を濾別し、ＤＣＭ(５×２mL)で濯いだ。合わせた濾液を低圧下で濃縮し、酢酸を除去するためＤＣＭと数回共沸した。側鎖保護ペプチドが白色固体として得られた。
【０１０８】
環化および側鎖脱保護。
側鎖保護ペプチド(１.０当量)を、０.１mmol／Ｌ濃度で無水ＤＣＭに溶解した。ＨＯＡＴ(６.０当量)、Oxyma Pure(６.０当量)およびＤＩＥＡ(１２.０当量)の無水ＤＣＭ溶液を加え、０℃で１５分間撹拌した。次いでＨＡＴＵ(１０.０当量)を加えた。得られた反応混合物を室温にゆっくり温め、２４時間撹拌を続けた。完全な環化反応をＬＣ−ＭＳモニタリングでモニタリングした。
ＤＣＭを減圧下蒸発させ、残留物を、１.５時間、ＴＦＡ／ＴＩＰＳ／Ｈ２Ｏ(ｖ／ｖ／ｖ＝９５：２.５：２.５)のカクテルで処理した。ＴＦＡ／ＴＩＰＳ／Ｈ２Ｏを圧縮気流により風乾除去(blown away)し、残留物を沈殿させ、冷エチルエーテル(２０mL×３)で洗浄して、粗製環状非保護ペプチドを得た。
粗製環状ペプチドをＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ(ｖ／ｖ＝１：１)溶液に溶解し、分取ＨＰＬＣ(５〜５０％ＣＨ３ＣＮ[０.１％ＴＦＡ]のＨ２Ｏ[０.１％ＴＦＡ]溶液を３０分間)で精製して、純粋環状ペプチドを得た。
【０１０９】
ペプチド１−６  ＳＡＬエステル合成。
ペプチド１−６  ＳＡＬエステルを、「ｎ＋１」戦略により合成した。「ｎ」(側鎖保護ペプチド１−５)を、一般的Ｆｍｏｃ−ＳＰＰＳおよび開裂法により合成した。
化合物Ｂｏｃ−Ｉｌｅ−ＳＡＬｏｆｆ(１.０当量)をジオキサン中４.０Ｎ  ＨＣｌ溶液(１０.０当量)に溶解し、１時間、室温で撹拌した。次いで溶媒を圧縮気流で風乾除去し、残留物を沈殿させ、冷ジエチルエーテル(２０mL×３)で洗浄して、粗製「１」を得た。
「ｎ」(１.０当量)および「１」(３.０当量)をＣＨＣｌ３／ＴＦＥ(ｖ／ｖ＝３：１)混合物に溶解し、次いでＥＤＣ(３.０当量)およびＨＯＯＢＴ(３.０当量)をカップリング剤として加えた。得られた反応混合物を室温で６時間撹拌した。カップリング反応完了後、ＣＨＣｌ３／ＴＦＥを圧縮気流下に風乾除去した。残留物をＴＦＡ／ＴＩＰＳ／Ｈ２Ｏ(ｖ／ｖ／ｖ＝９５：２.５：２.５)で１時間およびピルビン(１００.０当量)でさらに２時間処理した。得られた混合物を冷ジエチルエーテルで摩砕して、懸濁液を得た。遠心分離後、粗製ペプチドをＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ(ｖ／ｖ＝１：１)溶液に溶解し、分取ＨＰＬＣ(３０〜８０％ＣＨ３ＣＮ[０.１％ＴＦＡ]のＨ２Ｏ[０.１％ＴＦＡ]溶液を３０分間)で精製して、純粋ペプチド１−６  ＳＡＬエステルを白色固体として得た。
【０１１０】
Ｓｅｒライゲーション。
環状ペプチド(１.０当量)およびペプチド１−６  ＳＡＬエステル(１.２当量)を、ピリジン／ＡｃＯＨ(mol：mol＝６：１)混合物に１０.０mmol／Ｌの濃度で溶解した。反応混合物を室温で１０時間撹拌した。凍結乾燥によりピリジン／ＡｃＯＨを除去した後、残留物をＴＦＡ／ＴＩＰＳ／Ｈ２Ｏ(ｖ／ｖ／ｖ＝９５：２.５：２.５)で１時間処理した。次いで、粗製ペプチドを、圧縮気流下、ドライヤーで風乾し、分取ＨＰＬＣ(２０〜６０％ＣＨ３ＣＮ[０.１％ＴＦＡ]のＨ２Ｏ[０.１％ＴＦＡ]溶液を３０分間)で精製して、テイクソバクチンアナログを白色固体として得た。
【０１１１】
【化１１】
2021510148.tif 000014
【０１１２】
【化１２】
2021510148.tif 000015
【０１１３】
抗細菌試験
テイクソバクチンおよびそのアナログへの感受性を、Tecan Freedom EVOハイスループット自動化プラットフォームを使用して、Clinical and Laboratory Standards Instituteに記載の標準ブロス希釈法に従い、選択したグラム陽性株について試験した３。ＭＩＣを、ＣＬＳＩガイドラインに従い決定した。
【０１１４】
参考文献および注
1. Ling L. L., Schneider T., Peoples A. J., Spoering A. L., Engels I., Conlon B. P., Muller A., Schaberle T. F., Hughes D. E., Epstein S., Jones M., Lazarides L., Steadman V. A., Cohen D. R., Felix C. R., Fetterman K. A., Millett W. P., Nitti A. G., Zullo A. M., Chen C., Lewis K. Nature 2015; 517: 455-459.
2. Zhang Y., Xu C., Lam H. Y., Lee C. L., Li X. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 2013; 110: 6657-6662.
3. CLSI. CLSI document M 100-S26, Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute (2016).
【０１１５】
略語一覧
ＡｃＯＨ：酢酸
Ａｌｌｏｃ：アリルオキシカルボニル
Ｂｏｃ：ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル
ＤＣＭ：ジクロロメタン
ＤＩＥＡ：Ｎ,Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン
ＤＭＦ：Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド
ＥＤＣ：１−エチル−３−(３−ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド
Ｆｍｏｃ：９−フルオレニルメトキシカルボニル
ＨＡＴＵ：Ｏ−(７−アザベンゾトリアゾール−１−イル)−Ｎ,Ｎ,Ｎ’,Ｎ’−テトラメチルウロニウム
ＨＯＡＴ：１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール
ＨＯＯＢＴ：３−ヒドロキシ−１,２,３−ベンゾトリアジン−４(３Ｈ)−オン
Ｐｄ(ＰＰｈ３)４：テトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(０)
ＳＡＬ：サリチルアルデヒド
ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸
ＴＦＥ：２,２,２−トリフルオロエタノール
ＴＩＰＳ：トリイソプロピルシラン
【０１１６】
テイクソバクチンアナログの合成
表１および２のテイクソバクチンアナログを、上記一般法により合成した。一部テイクソバクチンアナログの合成を下に詳述する。
【０１１７】
実施例１−ＣＨＧ１０−テイクソバクチンの合成
【化１３】
2021510148.tif 000016
直鎖ペプチド樹脂−Ｔｈｒ[Ｏ−Ｉｌｅ−Ｃｈｇ−Ａｌａ−ＮＨ２]−Ｓｅｒ(ＯｔＢｕ)ＮＨＢｏｃを、９Ｈ−フルオレン−９−イル−メトキシカルボニル(Ｆｍｏｃ)固相ペプチド合成プロトコールにより合成した。ペプチドを、２−クロロトリチル樹脂から穏やかな条件下(ＴＦＥ／ＡｃＯＨ／ＤＣＭ)に開裂した。乾燥後、ペプチドを、ＨＡＴＵ／ＨＯＡｔ／OxymaPureのＣＨ２Ｃｌ２(ジクロロメタン、ＤＣＭ)溶液を、０.１mMで使用して、２４時間、室温で環化した。ＣＨ２Ｃｌ２を低圧で蒸発させ、残留物を、５mL  ＴＦＡ／フェノール／Ｈ２Ｏ(ｖ／ｖ／ｖ＝９５：２.５：２.５)の混合物で１.５時間処理した。ＴＦＡ／フェノール／Ｈ２Ｏの混合物を圧縮気流により風乾除去し、残留物をエチルエーテルで洗浄した。粗製化合物を１mL  ＭｅＯＨ／ＨＣＯＯＨ(ｖ／ｖ＝９：１)に溶解し、１０時間、Ｈ２(５０atm)下でＰｄ(ＯＨ)２(炭素上１０％)により水素化した。反応混合物を濾過し、減圧下濃縮した。残留物を分取ＨＰＬＣ(５〜５０％ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ溶液を３０分間)で精製して、側鎖非保護環状ペプチドを得た。
【０１１８】
直鎖ペプチドＤ−Ｎ−Ｍｅ−Ｐｈｅ−Ｌ−Ｉｌｅ−Ｌ−Ｓｅｒ−Ｄ−Ｇｌｎ−Ｄ−ａｌｌｏ−Ｉｌｅ−Ｌ−Ｉｌｅ−サリチルアルデヒドエステルを次のとおり合成した：アミノメチル樹脂(Chemimpex、充填１.１mmol／ｇ、５００mg)を、無水ＤＣＭで２０分間膨張させた。ＤＣＭを排水後、３−(２−アセトキシフェニル)アクリル酸、ＨＡＴＵ(Ｏ−(７−アザベンゾトリアゾール−１−イル)−Ｎ,Ｎ,Ｎ’,Ｎ’−テトラメチルウロニウム、２.０当量)およびＤＩＥＡ(Ｎ,Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、４.０当量)のＤＭＦ(Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド)中の混合物を加えた。反応混合物を１２時間、室温で撹拌した。樹脂をＤＭＦおよびＤＣＭで洗浄した。次いで５mL  ＤＭＦ中２０％ピペリジン溶液を上記樹脂に加えた。混合物を１時間、室温で撹拌した。次いで、樹脂をＤＣＭ(５mL×３)およびＤＭＦ(５mL×３)で洗浄した。次いで、Ｂｏｃ−ＳＰＰＳ(Ｂｏｃ−固相ペプチド合成)をＢｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｄ−ａｌｌｏ−Ｉｌｅ、Ｄ−Ｇｌｎ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｓｅｒ(Ｂｎ)−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨおよびＢｏｃ−ＮＭｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−ＯＨを用いて実施した。ペプチドを樹脂から開裂する前、ＴＭＳＯＴｆ(トリメチルシリルトリフルオロメタンスルホネート)／ＴＦＡ(トリフルオロ酢酸)／チオアニソール(１：８.５：０.５、ｖ／ｖ／ｖ)の混合物で０℃で１時間処理して、保護基を除去した。次いで、樹脂をＤＣＭで洗浄し、その後樹脂を−７８℃でＤＣＭ／ＴＦＡ(９５：５、ｖ／ｖ)に加え、Ｏ３で５分間処理した。Ｍｅ２Ｓを加え、溶液を温め、室温でさらに１時間撹拌した。反応混合物を低圧下濃縮し、分取ＨＰＬＣ(２０〜６０％ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ溶液を３０分間)で精製して、所望のペプチドサリチルアルデヒドエステルを得た。
得られたペプチドサリチルアルデヒドエステルおよび環状ペプチドをピリジン／ＡｃＯＨ(mole／mole＝１：１)の混合物に溶解し、室温で１０時間撹拌した。凍結乾燥により溶媒除去後、１mL  ＴＦＡ／Ｈ２Ｏ／ＴＩＰＳ(ｖ／ｖ／ｖ＝９４：５：１)を加え、１時間撹拌した。ＴＦＡ／Ｈ２Ｏ／ＴＩＰＳを圧縮気流により風乾除去した。残留物を分取ＨＰＬＣ(２０〜６０％ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ溶液を３０分間)で精製して、Ｃｈｇ１０−テイクソバクチンを得た。
【０１１９】
実施例２−ＣＨＡ１０−テイクソバクチンの合成
【化１４】
2021510148.tif 000017
直鎖ペプチド樹脂−Ｔｈｒ[Ｏ−Ｉｌｅ−Ｃｈａ−Ａｌａ−ＮＨ２]−Ｓｅｒ(ＯｔＢｕ)ＮＨＢｏｃを、９Ｈ−フルオレン−９−イル−メトキシカルボニル(Ｆｍｏｃ)固相ペプチド合成プロトコールにより合成した。ペプチドを、２−クロロトリチル樹脂から穏やかな条件下(ＴＦＥ／ＡｃＯＨ／ＤＣＭ)に開裂した。乾燥後、ペプチドを、ＨＡＴＵ／ＨＯＡｔ／OxymaPureのＤＣＭ溶液を、０.１mMで使用して、２４時間、室温で環化した。ＤＣＭを低圧で蒸発させ、残留物を、５mL  ＴＦＡ／フェノール／Ｈ２Ｏ(ｖ／ｖ／ｖ＝９５：２.５：２.５)の混合物で１.５時間処理した。ＴＦＡ／フェノール／Ｈ２Ｏの混合物を圧縮気流により風乾除去し、残留物をエチルエーテルで洗浄した。粗製化合物を１mL  ＭｅＯＨ／ＨＣＯＯＨ(ｖ／ｖ＝９：１)に溶解し、１０時間、Ｈ２(５０atm)下でＰｄ(ＯＨ)２(炭素上１０％)により水素化した。反応混合物を濾過し、減圧下濃縮した。残留物を分取ＨＰＬＣ(５〜５０％ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ溶液を３０分間)で精製して、側鎖非保護環状ペプチドを得た。
【０１２０】
直鎖ペプチドＤ−Ｎ−Ｍｅ−Ｐｈｅ−Ｌ−Ｉｌｅ−Ｌ−Ｓｅｒ−Ｄ−Ｇｌｎ−Ｄ−ａｌｌｏ−Ｉｌｅ−Ｌ−Ｉｌｅ−サリチルアルデヒドエステルを次のとおり合成した：アミノメチル樹脂(Chemimpex、充填１.１mmol／ｇ、５００mg)を、無水ＤＣＭで２０分間膨張させた。ＤＣＭを排水後、ＤＭＦ中の化合物３−(２−アセトキシフェニル)アクリル酸、ＨＡＴＵ(２.０当量)およびＤＩＥＡ(４.０当量)の混合物を加えた。反応混合物を１２時間、室温で撹拌した。樹脂をＤＭＦおよびＤＣＭで洗浄した。次いで５mL  ＤＭＦ中２０％ピペリジン溶液を上記樹脂に加えた。混合物を１時間、室温で撹拌した。次いで、樹脂をＤＣＭ(５mL×３)およびＤＭＦ(５mL×３)で洗浄した。次いで、Ｂｏｃ−ＳＰＰＳをＢｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｄ−ａｌｌｏ−Ｉｌｅ、Ｄ−Ｇｌｎ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｓｅｒ(Ｂｎ)−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨおよびＢｏｃ−ＮＭｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−ＯＨを用いて実施した。ペプチドを樹脂から開裂する前、ＴＭＳＯＴｆ／ＴＦＡ／チオアニソール(１：８.５：０.５、ｖ／ｖ／ｖ)の混合物で０℃で１時間処理して、保護基を除去した。次いで、樹脂をＤＣＭで洗浄し、その後樹脂を−７８℃でＤＣＭ／ＴＦＡ(９５：５、ｖ／ｖ)に加え、Ｏ３で５分間処理した。Ｍｅ２Ｓ添加後、溶液を温め、室温でさらに１時間撹拌した。反応混合物を低圧下濃縮し、分取ＨＰＬＣ(２０〜６０％ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ溶液を３０分間)で精製して、所望のペプチドサリチルアルデヒドエステルを得た。
得られたペプチドサリチルアルデヒドエステルおよび環状ペプチドをピリジン／ＡｃＯＨ(mole／mole＝１：１)の混合物に溶解し、室温で１０時間撹拌した。凍結乾燥により溶媒除去後、１mL  ＴＦＡ／Ｈ２Ｏ／ＴＩＰＳ(ｖ／ｖ／ｖ＝９４：５：１)を加え、１時間撹拌した。ＴＦＡ／Ｈ２Ｏ／ＴＩＰＳを圧縮気流により風乾除去した。残留物を分取ＨＰＬＣ(２０〜６０％ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ溶液を３０分間)で精製して、得られたＣｈａ１０−テイクソバクチンを得た。
【０１２１】
実施例３−β−シクロプロピル−ＡＬＡ１０−テイクソバクチンの合成
【化１５】
2021510148.tif 000018
直鎖ペプチド樹脂−Ｔｈｒ[Ｏ−Ｉｌｅ−(シクロプロピル−Ａｌａ)−Ａｌａ−ＮＨ２]−Ｓｅｒ(ＯｔＢｕ)ＮＨＢｏｃを、９Ｈ−フルオレン−９−イル−メトキシカルボニル(Ｆｍｏｃ)固相ペプチド合成プロトコールにより合成した。ペプチドを、２−クロロトリチル樹脂から穏やかな条件下(ＴＦＥ／ＡｃＯＨ／ＤＣＭ)に開裂した。乾燥後、ペプチドを、ＨＡＴＵ／ＨＯＡｔ／OxymaPureのＤＣＭ溶液を、０.１mMで使用して、２４時間、室温で環化した。ＤＣＭを低圧で蒸発させ、残留物を、５mL  ＴＦＡ／フェノール／Ｈ２Ｏ(ｖ／ｖ／ｖ＝９５：２.５：２.５)の混合物で１.５時間処理した。ＴＦＡ／フェノール／Ｈ２Ｏの混合物を圧縮気流により風乾除去し、残留物をエチルエーテルで洗浄した。粗製化合物を１mL  ＭｅＯＨ／ＨＣＯＯＨ(ｖ／ｖ＝９：１)に溶解し、１０時間、Ｈ２(５０atm)下でＰｄ(ＯＨ)２(炭素上１０％)により水素化した。反応混合物を濾過し、減圧下濃縮した。残留物を分取ＨＰＬＣ(５〜５０％ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ溶液を３０分間)で精製して、側鎖非保護環状ペプチドを得た。
【０１２２】
直鎖ペプチドＤ−Ｎ−Ｍｅ−Ｐｈｅ−Ｌ−Ｉｌｅ−Ｌ−Ｓｅｒ−Ｄ−Ｇｌｎ−Ｄ−ａｌｌｏ−Ｉｌｅ−Ｌ−Ｉｌｅ−サリチルアルデヒドエステルを次のとおり合成した：アミノメチル樹脂(Chemimpex、充填１.１mmol／ｇ、５００mg)を、無水ＤＣＭで２０分間膨張させた。ＤＣＭを排水後、ＤＭＦ中の３−(２−アセトキシフェニル)アクリル酸、ＨＡＴＵ(２.０当量)およびＤＩＥＡ(４.０当量)の混合物を加えた。反応混合物を１２時間、室温で撹拌した。樹脂をＤＭＦおよびＤＣＭで洗浄した。次いで５mL  ＤＭＦ中２０％ピペリジン溶液を上記樹脂に加えた。混合物を１時間、室温で撹拌した。次いで、樹脂をＤＣＭ(５mL×３)およびＤＭＦ(５mL×３)で洗浄した。次いで、Ｂｏｃ−ＳＰＰＳをＢｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｄ−ａｌｌｏ−Ｉｌｅ、Ｄ−Ｇｌｎ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｓｅｒ(Ｂｎ)−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨおよびＢｏｃ−ＮＭｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−ＯＨを用いて実施した。ペプチドを樹脂から開裂する前、ＴＭＳＯＴｆ／ＴＦＡ／チオアニソール(１：８.５：０.５、ｖ／ｖ／ｖ)の混合物で０℃で１時間処理して、保護基を除去した。次いで、樹脂をＤＣＭで洗浄し、その後樹脂を−７８℃でＤＣＭ／ＴＦＡ(９５：５、ｖ／ｖ)に加え、Ｏ３で５分間処理した。Ｍｅ２Ｓ添加後、溶液を温め、室温でさらに１時間撹拌した。反応混合物を低圧下濃縮し、分取ＨＰＬＣ(２０〜６０％ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ溶液を３０分間)で精製して、所望のペプチドサリチルアルデヒドエステルを得た。
得られたペプチドサリチルアルデヒドエステルおよび環状ペプチドをピリジン／ＡｃＯＨ(mole／mole＝１：１)の混合物に溶解し、室温で１０時間撹拌した。凍結乾燥により溶媒除去後、１mL  ＴＦＡ／Ｈ２Ｏ／ＴＩＰＳ(ｖ／ｖ／ｖ＝９４：５：１)を加え、１時間撹拌した。ＴＦＡ／Ｈ２Ｏ／ＴＩＰＳを圧縮気流により風乾除去した。残留物を分取ＨＰＬＣ(２０〜６０％ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ溶液を３０分間)で精製して、β−シクロプロピル−Ａｌａ１０−テイクソバクチンを得た。
【０１２３】
実施例４−ＮＬＥ１０−テイクソバクチンの合成
【化１６】
2021510148.tif 000019
直鎖ペプチド樹脂−Ｔｈｒ[Ｏ−Ｉｌｅ−Ｎｌｅ−Ａｌａ−ＮＨ２]−Ｓｅｒ(ＯｔＢｕ)ＮＨＢｏｃを、９Ｈ−フルオレン−９−イル−メトキシカルボニル(Ｆｍｏｃ)固相ペプチド合成プロトコールにより合成した。ペプチドを、２−クロロトリチル樹脂から穏やかな条件下(ＴＦＥ／ＡｃＯＨ／ＤＣＭ)に開裂した。乾燥後、ペプチドを、ＨＡＴＵ／ＨＯＡｔ／OxymaPureのＤＣＭ溶液を、０.１mMで使用して、２４時間、室温で環化した。ＤＣＭを低圧で蒸発させ、残留物を、５mL  ＴＦＡ／フェノール／Ｈ２Ｏ(ｖ／ｖ／ｖ＝９５：２.５：２.５)の混合物で１.５時間処理した。ＴＦＡ／フェノール／Ｈ２Ｏの混合物を圧縮気流により風乾除去し、残留物をエチルエーテルで洗浄した。粗製化合物を１mL  ＭｅＯＨ／ＨＣＯＯＨ(ｖ／ｖ＝９：１)に溶解し、１０時間、Ｈ２(５０atm)下でＰｄ(ＯＨ)２(炭素上１０％)により水素化した。反応混合物を濾過し、真空で濃縮した。残留物を分取ＨＰＬＣ(５〜５０％ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ溶液を３０分間)で精製して、側鎖非保護環状ペプチドを得た。
【０１２４】
直鎖ペプチドＤ−Ｎ−Ｍｅ−Ｐｈｅ−Ｌ−Ｉｌｅ−Ｌ−Ｓｅｒ−Ｄ−Ｇｌｎ−Ｄ−ａｌｌｏ−Ｉｌｅ−Ｌ−Ｉｌｅ−サリチルアルデヒドエステルを次のとおり合成した：アミノメチル樹脂(Chemimpex、充填１.１mmol／ｇ、５００mg)を、無水ＤＣＭで２０分間膨張させた。ＤＣＭを排水後、ＤＭＦ中の３−(２−アセトキシフェニル)アクリル酸、ＨＡＴＵ(２.０当量)およびＤＩＥＡ(４.０当量)の混合物を加えた。反応混合物を１２時間、室温で撹拌した。樹脂をＤＭＦおよびＤＣＭで洗浄した。次いで５mL  ＤＭＦ中２０％ピペリジン溶液を上記樹脂に加えた。混合物を１時間、室温で撹拌した。次いで、樹脂をＤＣＭ(５mL×３)およびＤＭＦ(５mL×３)で洗浄した。次いで、Ｂｏｃ−ＳＰＰＳをＢｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｄ−ａｌｌｏ−Ｉｌｅ、Ｄ−Ｇｌｎ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｓｅｒ(Ｂｎ)−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨおよびＢｏｃ−ＮＭｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−ＯＨを用いて実施した。ペプチドを樹脂から開裂する前、ＴＭＳＯＴｆ／ＴＦＡ／チオアニソール(１：８.５：０.５、ｖ／ｖ／ｖ)の混合物で０℃で１時間処理して、保護基を除去した。次いで、樹脂をＤＣＭで洗浄し、その後樹脂を−７８℃でＤＣＭ／ＴＦＡ(９５：５、ｖ／ｖ)に加え、Ｏ３で５分間処理した。Ｍｅ２Ｓ添加後、溶液を温め、室温でさらに１時間撹拌した。反応混合物を低圧下濃縮し、分取ＨＰＬＣ(２０〜６０％ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ溶液を３０分間)で精製して、所望のペプチドサリチルアルデヒドエステルを得た。
得られたペプチドサリチルアルデヒドエステルおよび環状ペプチドをピリジン／ＡｃＯＨ(mole／mole＝１：１)の混合物に溶解し、室温で１０時間撹拌した。凍結乾燥により溶媒除去後、１mL  ＴＦＡ／Ｈ２Ｏ／ＴＩＰＳ(ｖ／ｖ／ｖ＝９４：５：１)を加え、１時間撹拌した。ＴＦＡ／Ｈ２Ｏ／ＴＩＰＳを圧縮気流により風乾除去した。残留物を分取ＨＰＬＣ(２０〜６０％ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ溶液を３０分間)で精製して、Ｎｌｅ１０−テイクソバクチンを得た。
【０１２５】
実施例５  ＭＥＴ１０−テイクソバクチン／METHIBACTINの合成
【化１７】
2021510148.tif 000020
直鎖ペプチド樹脂−Ｔｈｒ[Ｏ−Ｉｌｅ−Ｍｅｔ−Ａｌａ−ＮＨ２]−Ｓｅｒ(ＯｔＢｕ)ＮＨＢｏｃを、９Ｈ−フルオレン−９−イル−メトキシカルボニル(Ｆｍｏｃ)固相ペプチド合成プロトコールにより合成した。ペプチドを、２−クロロトリチル樹脂から穏やかな条件下(ＴＦＥ／ＡｃＯＨ／ＤＣＭ)に開裂した。乾燥後、ペプチドを、ＨＡＴＵ／ＨＯＡｔ／OxymaPureのＣＨ２Ｃｌ２溶液を、０.１mMで使用して、２４時間、室温で環化した。ＣＨ２Ｃｌ２を低圧で蒸発させ、残留物を、５mL  ＴＦＡ／フェノール／Ｈ２Ｏ(ｖ／ｖ／ｖ＝９５：２.５：２.５)の混合物で１.５時間処理した。ＴＦＡ／フェノール／Ｈ２Ｏの混合物を圧縮気流により風乾除去し、残留物をエチルエーテルで洗浄した。粗製化合物を１mL  ＭｅＯＨ／ＨＣＯＯＨ(ｖ／ｖ＝９：１)に溶解し、１０時間、Ｈ２(５０atm)下でＰｄ(ＯＨ)２(炭素上１０％)により水素化した。反応混合物を濾過し、減圧下濃縮した。残留物を分取ＨＰＬＣ(５〜５０％ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ溶液を３０分間)で精製して、側鎖非保護環状ペプチドを得た。
【０１２６】
直鎖ペプチドＤ−Ｎ−Ｍｅ−Ｐｈｅ−Ｌ−Ｉｌｅ−Ｌ−Ｓｅｒ−Ｄ−Ｇｌｎ−Ｄ−ａｌｌｏ−Ｉｌｅ−Ｌ−Ｉｌｅ−サリチルアルデヒドエステルを次のとおり合成した：アミノメチル樹脂(Chemimpex、充填１.１mmol／ｇ、５００mg)を、無水ＤＣＭで２０分間膨張させた。ＤＣＭを排水後、ＤＭＦ中の化合物３−(２−アセトキシフェニル)アクリル酸、ＨＡＴＵ(２.０当量)およびＤＩＥＡ(４.０当量)の混合物を加えた。反応混合物を、１２時間、室温で振盪した。樹脂をＤＭＦおよびＤＣＭで洗浄した。次いで５mL  ＤＭＦ中２０％ピペリジン溶液を上記樹脂に加えた。混合物を、１時間、室温で振盪した。次いで、樹脂をＤＣＭ(５mL×３)およびＤＭＦ(５mL×３)で洗浄した。次いで、Ｂｏｃ−ＳＰＰＳをＢｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｄ−ａｌｌｏ−Ｉｌｅ、Ｄ−Ｇｌｎ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｓｅｒ(Ｂｎ)−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨおよびＢｏｃ−ＮＭｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−ＯＨを用いて実施した。ペプチドを樹脂から開裂する前、ＴＭＳＯＴｆ／ＴＦＡ／チオアニソール(１：８.５：０.５、ｖ／ｖ／ｖ)の混合物で０℃で１時間処理して、保護基を除去した。次いで、樹脂をＤＣＭで洗浄し、その後樹脂を−７８℃でＤＣＭ／ＴＦＡ(９５：５、ｖ／ｖ)に加え、Ｏ３で５分間処理した。Ｍｅ２Ｓ添加後、溶液を温め、室温でさらに１時間撹拌した。反応混合物を低圧下濃縮し、分取ＨＰＬＣ(２０〜６０％ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ溶液を３０分間)で精製して、所望のペプチドサリチルアルデヒドエステルを得た。
得られたペプチドサリチルアルデヒドエステルおよび環状ペプチドをピリジン／ＡｃＯＨ(mole／mole＝１：１)の混合物に溶解し、室温で１０時間撹拌した。凍結乾燥により溶媒除去後、１mL  ＴＦＡ／Ｈ２Ｏ／ＴＩＰＳ(ｖ／ｖ／ｖ＝９４：５：１)を加え、１時間撹拌した。ＴＦＡ／Ｈ２Ｏ／ＴＩＰＳを圧縮気流により風乾除去した。残留物を分取ＨＰＬＣ(２０〜６０％ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ溶液を３０分間)で精製して、Ｍｅｔ１０−テイクソバクチン／Methibactinを得た。
【０１２７】
実施例６  Ｔ８３の合成
【化１７】
2021510148.tif 000021
直鎖ペプチド樹脂−Ｔｈｒ[ＮＨ−Ｉｌｅ−Ｃｈｇ−Ａｌａ−ＮＨ２]−Ｓｅｒ(ＯｔＢｕ)ＮＨＢｏｃを、９Ｈ−フルオレン−９−イル−メトキシカルボニル(Ｆｍｏｃ)固相ペプチド合成プロトコールにより合成した。ペプチドを、２−クロロトリチル樹脂から穏やかな条件下(ＴＦＥ／ＡｃＯＨ／ＤＣＭ)に開裂した。乾燥後、ペプチドを、ＨＡＴＵ／ＨＯＡｔ／OxymaPureのＣＨ２Ｃｌ２溶液を、０.１mMで使用して、２４時間、室温で環化した。ＣＨ２Ｃｌ２を低圧で蒸発させ、残留物を、５mL  ＴＦＡ／フェノール／Ｈ２Ｏ(ｖ／ｖ／ｖ＝９５：２.５：２.５)の混合物で１.５時間処理した。ＴＦＡ／フェノール／Ｈ２Ｏの混合物を圧縮気流により風乾除去し、残留物をエチルエーテルで洗浄した。残留物を分取ＨＰＬＣ(５〜５０％ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ溶液を３０分間)で精製して、側鎖非保護環状ペプチドを得た。
【０１２８】
直鎖ペプチドＤ−Ｎ−Ｍｅ−Ｐｈｅ−Ｌ−Ｉｌｅ−Ｌ−Ｓｅｒ−Ｄ−Ｇｌｎ−Ｄ−ａｌｌｏ−Ｉｌｅ−Ｌ−Ｉｌｅ−サリチルアルデヒドエステルを次のとおり合成した：アミノメチル樹脂(Chemimpex、充填１.１mmol／ｇ、５００mg)を、無水ＤＣＭで２０分間膨張させた。ＤＣＭを排水後、ＤＭＦ中の化合物３−(２−アセトキシフェニル)アクリル酸、ＨＡＴＵ(２.０当量)およびＤＩＥＡ(４.０当量)の混合物を加えた。反応混合物を、１２時間、室温で振盪した。樹脂をＤＭＦおよびＤＣＭで洗浄した。次いで５mL  ＤＭＦ中２０％ピペリジン溶液を上記樹脂に加えた。混合物を、１時間、室温で振盪した。次いで、樹脂をＤＣＭ(５mL×３)およびＤＭＦ(５mL×３)で洗浄した。次いで、Ｂｏｃ−ＳＰＰＳをＢｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｄ−ａｌｌｏ−Ｉｌｅ、Ｄ−Ｇｌｎ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｓｅｒ(Ｂｎ)−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨおよびＢｏｃ−ＮＭｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−ＯＨを用いて実施した。ペプチドを樹脂から開裂する前、ＴＭＳＯＴｆ／ＴＦＡ／チオアニソール(１：８.５：０.５、ｖ／ｖ／ｖ)の混合物で０℃で１時間処理して、保護基を除去した。次いで、樹脂をＤＣＭで洗浄し、その後樹脂を−７８℃でＤＣＭ／ＴＦＡ(９５：５、ｖ／ｖ)に加え、Ｏ３で５分間処理した。Ｍｅ２Ｓ添加後、溶液を温め、室温でさらに１時間撹拌した。反応混合物を低圧下濃縮し、分取ＨＰＬＣ(２０〜６０％ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ溶液を３０分間)で精製して、所望のペプチドサリチルアルデヒドエステルを得た。
得られたペプチドサリチルアルデヒドエステルおよび環状ペプチドをピリジン／ＡｃＯＨ(mole／mole＝１：１)の混合物に溶解し、室温で１０時間撹拌した。凍結乾燥により溶媒除去後、１mL  ＴＦＡ／Ｈ２Ｏ／ＴＩＰＳ(ｖ／ｖ／ｖ＝９４：５：１)を加え、１時間撹拌した。ＴＦＡ／Ｈ２Ｏ／ＴＩＰＳを圧縮気流により風乾除去した。残留物を分取ＨＰＬＣ(２０〜６０％ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ溶液を３０分間)で精製して、Ｔ８３を得た。
【０１２９】
実施例７  Ｔ８４の合成
【化１８】
2021510148.tif 000022
直鎖ペプチド樹脂−Ｔｈｒ[ＮＨ−Ｉｌｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−ＮＨ２]−Ｓｅｒ(ＯｔＢｕ)ＮＨＢｏｃを、９Ｈ−フルオレン−９−イル−メトキシカルボニル(Ｆｍｏｃ)固相ペプチド合成プロトコールにより合成した。ペプチドを、２−クロロトリチル樹脂から穏やかな条件下(ＴＦＥ／ＡｃＯＨ／ＤＣＭ)に開裂した。乾燥後、ペプチドを、ＨＡＴＵ／ＨＯＡｔ／OxymaPureのＣＨ２Ｃｌ２溶液を、０.１mMで使用して、２４時間、室温で環化した。ＣＨ２Ｃｌ２を低圧で蒸発させ、残留物を、５mL  ＴＦＡ／フェノール／Ｈ２Ｏ(ｖ／ｖ／ｖ＝９５：２.５：２.５)の混合物で１.５時間処理した。ＴＦＡ／フェノール／Ｈ２Ｏの混合物を圧縮気流により風乾除去し、残留物をエチルエーテルで洗浄した。残留物を分取ＨＰＬＣ(５〜５０％ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ溶液を３０分間)で精製して、側鎖非保護環状ペプチドを得た。
【０１３０】
直鎖ペプチドＤ−Ｎ−Ｍｅ−Ｐｈｅ−Ｌ−Ｉｌｅ−Ｌ−Ｓｅｒ−Ｄ−Ｇｌｎ−Ｄ−ａｌｌｏ−Ｉｌｅ−Ｌ−Ｉｌｅ−サリチルアルデヒドエステルを次のとおり合成した：アミノメチル樹脂(Chemimpex、充填１.１mmol／ｇ、５００mg)を、無水ＤＣＭで２０分間膨張させた。ＤＣＭを排水後、ＤＭＦ中の化合物３−(２−アセトキシフェニル)アクリル酸、ＨＡＴＵ(２.０当量)およびＤＩＥＡ(４.０当量)の混合物を加えた。反応混合物を、１２時間、室温で振盪した。樹脂をＤＭＦおよびＤＣＭで洗浄した。次いで５mL  ＤＭＦ中２０％ピペリジン溶液を上記樹脂に加えた。混合物を、１時間、室温で振盪した。次いで、樹脂をＤＣＭ(５mL×３)およびＤＭＦ(５mL×３)で洗浄した。次いで、Ｂｏｃ−ＳＰＰＳをＢｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｄ−ａｌｌｏ−Ｉｌｅ、Ｄ−Ｇｌｎ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｓｅｒ(Ｂｎ)−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨおよびＢｏｃ−ＮＭｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−ＯＨを用いて実施した。ペプチドを樹脂から開裂する前、ＴＭＳＯＴｆ／ＴＦＡ／チオアニソール(１：８.５：０.５、ｖ／ｖ／ｖ)の混合物で０℃で１時間処理して、保護基を除去した。次いで、樹脂をＤＣＭで洗浄し、その後樹脂を−７８℃でＤＣＭ／ＴＦＡ(９５：５、ｖ／ｖ)に加え、Ｏ３で５分間処理した。Ｍｅ２Ｓ添加後、溶液を温め、室温でさらに１時間撹拌した。反応混合物を低圧下濃縮し、分取ＨＰＬＣ(２０〜６０％ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ溶液を３０分間)で精製して、所望のペプチドサリチルアルデヒドエステルを得た。
得られたペプチドサリチルアルデヒドエステルおよび環状ペプチドをピリジン／ＡｃＯＨ(mole／mole＝１：１)の混合物に溶解し、室温で１０時間撹拌した。凍結乾燥により溶媒除去後、１mL  ＴＦＡ／Ｈ２Ｏ／ＴＩＰＳ(ｖ／ｖ／ｖ＝９４：５：１)を加え、１時間撹拌した。ＴＦＡ／Ｈ２Ｏ／ＴＩＰＳを圧縮気流により風乾除去した。残留物を分取ＨＰＬＣ(２０〜６０％ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ溶液を３０分間)で精製して、Ｔ８４を得た。
【０１３１】
実施例８  Ｔ８５の合成
【化１９】
2021510148.tif 000023
直鎖ペプチド樹脂−Ｔｈｒ[ＮＨ−Ｉｌｅ−Ｎｖａ−Ａｌａ−ＮＨ２]−Ｓｅｒ(ＯｔＢｕ)ＮＨＢｏｃを、９Ｈ−フルオレン−９−イル−メトキシカルボニル(Ｆｍｏｃ)固相ペプチド合成プロトコールにより合成した。ペプチドを、２−クロロトリチル樹脂から穏やかな条件下(ＴＦＥ／ＡｃＯＨ／ＤＣＭ)に開裂した。乾燥後、ペプチドを、ＨＡＴＵ／ＨＯＡｔ／OxymaPureのＣＨ２Ｃｌ２溶液を、０.１mMで使用して、２４時間、室温で環化した。ＣＨ２Ｃｌ２を低圧で蒸発させ、残留物を、５mL  ＴＦＡ／フェノール／Ｈ２Ｏ(ｖ／ｖ／ｖ＝９５：２.５：２.５)の混合物で１.５時間処理した。ＴＦＡ／フェノール／Ｈ２Ｏの混合物を圧縮気流により風乾除去し、残留物をエチルエーテルで洗浄した。残留物を分取ＨＰＬＣ(５〜５０％ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ溶液を３０分間)で精製して、側鎖非保護環状ペプチドを得た。
【０１３２】
直鎖ペプチドＤ−Ｎ−Ｍｅ−Ｐｈｅ−Ｌ−Ｉｌｅ−Ｌ−Ｓｅｒ−Ｄ−Ｇｌｎ−Ｄ−ａｌｌｏ−Ｉｌｅ−Ｌ−Ｉｌｅ−サリチルアルデヒドエステルを次のとおり合成した：アミノメチル樹脂(Chemimpex、充填１.１mmol／ｇ、５００mg)を、無水ＤＣＭで２０分間膨張させた。ＤＣＭを排水後、ＤＭＦ中の化合物３−(２−アセトキシフェニル)アクリル酸、ＨＡＴＵ(２.０当量)およびＤＩＥＡ(４.０当量)の混合物を加えた。反応混合物を、１２時間、室温で振盪した。樹脂をＤＭＦおよびＤＣＭで洗浄した。次いで５mL  ＤＭＦ中２０％ピペリジン溶液を上記樹脂に加えた。混合物を、１時間、室温で振盪した。次いで、樹脂をＤＣＭ(５mL×３)およびＤＭＦ(５mL×３)で洗浄した。次いで、Ｂｏｃ−ＳＰＰＳをＢｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｄ−ａｌｌｏ−Ｉｌｅ、Ｄ−Ｇｌｎ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｓｅｒ(Ｂｎ)−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨおよびＢｏｃ−ＮＭｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−ＯＨを用いて実施した。ペプチドを樹脂から開裂する前、ＴＭＳＯＴｆ／ＴＦＡ／チオアニソール(１：８.５：０.５、ｖ／ｖ／ｖ)の混合物で０℃で１時間処理して、保護基を除去した。次いで、樹脂をＤＣＭで洗浄し、その後樹脂を−７８℃でＤＣＭ／ＴＦＡ(９５：５、ｖ／ｖ)に加え、Ｏ３で５分間処理した。Ｍｅ２Ｓ添加後、溶液を温め、室温でさらに１時間撹拌した。反応混合物を低圧下濃縮し、分取ＨＰＬＣ(２０〜６０％ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ溶液を３０分間)で精製して、所望のペプチドサリチルアルデヒドエステルを得た。
得られたペプチドサリチルアルデヒドエステルおよび環状ペプチドをピリジン／ＡｃＯＨ(mole／mole＝１：１)の混合物に溶解し、室温で１０時間撹拌した。凍結乾燥により溶媒除去後、１mL  ＴＦＡ／Ｈ２Ｏ／ＴＩＰＳ(ｖ／ｖ／ｖ＝９４：５：１)を加え、１時間撹拌した。ＴＦＡ／Ｈ２Ｏ／ＴＩＰＳを圧縮気流により風乾除去した。残留物を分取ＨＰＬＣ(２０〜６０％ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ溶液を３０分間)で精製して、Ｔ８５を得た。
【０１３３】
実施例９  Ｔ８６の合成
【化２０】
2021510148.tif 000024
直鎖ペプチド樹脂−Ｔｈｒ[ＮＨ−Ｉｌｅ−Ｍｅｔ−Ａｌａ−ＮＨ２]−Ｓｅｒ(ＯｔＢｕ)ＮＨＢｏｃを、９Ｈ−フルオレン−９−イル−メトキシカルボニル(Ｆｍｏｃ)固相ペプチド合成プロトコールにより合成した。ペプチドを、２−クロロトリチル樹脂から穏やかな条件下(ＴＦＥ／ＡｃＯＨ／ＤＣＭ)に開裂した。乾燥後、ペプチドを、ＨＡＴＵ／ＨＯＡｔ／OxymaPureのＣＨ２Ｃｌ２溶液を、０.１mMで使用して、２４時間、室温で環化した。ＣＨ２Ｃｌ２を低圧で蒸発させ、残留物を、５mL  ＴＦＡ／フェノール／Ｈ２Ｏ(ｖ／ｖ／ｖ＝９５：２.５：２.５)の混合物で１.５時間処理した。ＴＦＡ／フェノール／Ｈ２Ｏの混合物を圧縮気流により風乾除去し、残留物をエチルエーテルで洗浄した。残留物を分取ＨＰＬＣ(５〜５０％ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ溶液を３０分間)で精製して、側鎖非保護環状ペプチドを得た。
【０１３４】
直鎖ペプチドＤ−Ｎ−Ｍｅ−Ｐｈｅ−Ｌ−Ｉｌｅ−Ｌ−Ｓｅｒ−Ｄ−Ｇｌｎ−Ｄ−ａｌｌｏ−Ｉｌｅ−Ｌ−Ｉｌｅ−サリチルアルデヒドエステルを次のとおり合成した：アミノメチル樹脂(Chemimpex、充填１.１mmol／ｇ、５００mg)を、無水ＤＣＭで２０分間膨張させた。ＤＣＭを排水後、ＤＭＦ中の化合物３−(２−アセトキシフェニル)アクリル酸、ＨＡＴＵ(２.０当量)およびＤＩＥＡ(４.０当量)の混合物を加えた。反応混合物を、１２時間、室温で振盪した。樹脂をＤＭＦおよびＤＣＭで洗浄した。次いで５mL  ＤＭＦ中２０％ピペリジン溶液を上記樹脂に加えた。混合物を、１時間、室温で振盪した。次いで、樹脂をＤＣＭ(５mL×３)およびＤＭＦ(５mL×３)で洗浄した。次いで、Ｂｏｃ−ＳＰＰＳをＢｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｄ−ａｌｌｏ−Ｉｌｅ、Ｄ−Ｇｌｎ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｓｅｒ(Ｂｎ)−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨおよびＢｏｃ−ＮＭｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−ＯＨを用いて実施した。ペプチドを樹脂から開裂する前、ＴＭＳＯＴｆ／ＴＦＡ／チオアニソール(１：８.５：０.５、ｖ／ｖ／ｖ)の混合物で０℃で１時間処理して、保護基を除去した。次いで、樹脂をＤＣＭで洗浄し、その後樹脂を−７８℃でＤＣＭ／ＴＦＡ(９５：５、ｖ／ｖ)に加え、Ｏ３で５分間処理した。Ｍｅ２Ｓ添加後、溶液を温め、室温でさらに１時間撹拌した。反応混合物を低圧下濃縮し、分取ＨＰＬＣ(２０〜６０％ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ溶液を３０分間)で精製して、所望のペプチドサリチルアルデヒドエステルを得た。
得られたペプチドサリチルアルデヒドエステルおよび環状ペプチドをピリジン／ＡｃＯＨ(mole／mole＝１：１)の混合物に溶解し、室温で１０時間撹拌した。凍結乾燥により溶媒除去後、１mL  ＴＦＡ／Ｈ２Ｏ／ＴＩＰＳ(ｖ／ｖ／ｖ＝９４：５：１)を加え、１時間撹拌した。ＴＦＡ／Ｈ２Ｏ／ＴＩＰＳを圧縮気流により風乾除去した。残留物を分取ＨＰＬＣ(２０〜６０％ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ溶液を３０分間)で精製して、Ｔ８６を得た。
【０１３５】
実施例１０  Ｔ８７の合成
【化２１】
2021510148.tif 000025
直鎖ペプチド樹脂−Ｔｈｒ[Ｏ−Ｉｌｅ−Ｃｈｇ−Ａｌａ−ＮＨ２]−Ｓｅｒ(ＯｔＢｕ)ＮＨＢｏｃを、９Ｈ−フルオレン−９−イル−メトキシカルボニル(Ｆｍｏｃ)固相ペプチド合成プロトコールにより合成した。ペプチドを、２−クロロトリチル樹脂から穏やかな条件下(ＴＦＥ／ＡｃＯＨ／ＤＣＭ)に開裂した。乾燥後、ペプチドを、ＨＡＴＵ／ＨＯＡｔ／OxymaPureのＣＨ２Ｃｌ２溶液を、０.１mMで使用して、２４時間、室温で環化した。ＣＨ２Ｃｌ２を低圧で蒸発させ、残留物を、５mL  ＴＦＡ／フェノール／Ｈ２Ｏ(ｖ／ｖ／ｖ＝９５：２.５：２.５)の混合物で１.５時間処理した。ＴＦＡ／フェノール／Ｈ２Ｏの混合物を圧縮気流により風乾除去し、残留物をエチルエーテルで洗浄した。残留物を分取ＨＰＬＣ(５〜５０％ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ溶液を３０分間)で精製して、側鎖非保護環状ペプチドを得た。
【０１３６】
直鎖ペプチドＤ−Ｎ−Ｍｅ−Ｐｈｅ−Ｌ−Ｉｌｅ−Ｌ−Ａｒｇ−Ｄ−Ｇｌｎ−Ｄ−ａｌｌｏ−Ｉｌｅ−Ｌ−Ｉｌｅ−サリチルアルデヒドエステルを次のとおり合成した：アミノメチル樹脂(Chemimpex、充填１.１mmol／ｇ、５００mg)を、無水ＤＣＭで２０分間膨張させた。ＤＣＭを排水後、ＤＭＦ中の化合物３−(２−アセトキシフェニル)アクリル酸、ＨＡＴＵ(２.０当量)およびＤＩＥＡ(４.０当量)の混合物を加えた。反応混合物を、１２時間、室温で振盪した。樹脂をＤＭＦおよびＤＣＭで洗浄した。次いで５mL  ＤＭＦ中２０％ピペリジン溶液を上記樹脂に加えた。混合物を、１時間、室温で振盪した。次いで、樹脂をＤＣＭ(５mL×３)およびＤＭＦ(５mL×３)で洗浄した。次いで、Ｂｏｃ−ＳＰＰＳをＢｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｄ−ａｌｌｏ−Ｉｌｅ、Ｄ−Ｇｌｎ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｓｅｒ(Ｂｎ)−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨおよびＢｏｃ−ＮＭｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−ＯＨを用いて実施した。ペプチドを樹脂から開裂する前、ＴＭＳＯＴｆ／ＴＦＡ／チオアニソール(１：８.５：０.５、ｖ／ｖ／ｖ)の混合物で０℃で１時間処理して、保護基を除去した。次いで、樹脂をＤＣＭで洗浄し、その後樹脂を−７８℃でＤＣＭ／ＴＦＡ(９５：５、ｖ／ｖ)に加え、Ｏ３で５分間処理した。Ｍｅ２Ｓ添加後、溶液を温め、室温でさらに１時間撹拌した。反応混合物を低圧下濃縮し、分取ＨＰＬＣ(２０〜６０％ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ溶液を３０分間)で精製して、所望のペプチドサリチルアルデヒドエステルを得た。
得られたペプチドサリチルアルデヒドエステルおよび環状ペプチドをピリジン／ＡｃＯＨ(mole／mole＝１：１)の混合物に溶解し、室温で１０時間撹拌した。凍結乾燥により溶媒除去後、１mL  ＴＦＡ／Ｈ２Ｏ／ＴＩＰＳ(ｖ／ｖ／ｖ＝９４：５：１)を加え、１時間撹拌した。ＴＦＡ／Ｈ２Ｏ／ＴＩＰＳを圧縮気流により風乾除去した。残留物を分取ＨＰＬＣ(２０〜６０％ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ溶液を３０分間)で精製して、Ｔ８７を得た。
【０１３７】
実施例１１  Ｔ８８の合成
【化２２】
2021510148.tif 000026
直鎖ペプチド樹脂−Ｔｈｒ[Ｏ−Ｉｌｅ−Ｃｈｇ−Ａｌａ−ＮＨ２]−Ｓｅｒ(ＯｔＢｕ)ＮＨＢｏｃを、９Ｈ−フルオレン−９−イル−メトキシカルボニル(Ｆｍｏｃ)固相ペプチド合成プロトコールにより合成した。ペプチドを、２−クロロトリチル樹脂から穏やかな条件下(ＴＦＥ／ＡｃＯＨ／ＤＣＭ)に開裂した。乾燥後、ペプチドを、ＨＡＴＵ／ＨＯＡｔ／OxymaPureのＣＨ２Ｃｌ２溶液を、０.１mMで使用して、２４時間、室温で環化した。ＣＨ２Ｃｌ２を低圧で蒸発させ、残留物を、５mL  ＴＦＡ／フェノール／Ｈ２Ｏ(ｖ／ｖ／ｖ＝９５：２.５：２.５)の混合物で１.５時間処理した。ＴＦＡ／フェノール／Ｈ２Ｏの混合物を圧縮気流により風乾除去し、残留物をエチルエーテルで洗浄した。残留物を分取ＨＰＬＣ(５〜５０％ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ溶液を３０分間)で精製して、側鎖非保護環状ペプチドを得た。
【０１３８】
直鎖ペプチドＤ−Ｎ−Ｍｅ−Ｐｈｅ−Ｌ−Ｉｌｅ−Ｌ−Ｉｌｅ−Ｄ−Ｇｌｎ−Ｄ−ａｌｌｏ−Ｉｌｅ−Ｌ−Ｉｌｅ−サリチルアルデヒドエステルを次のとおり合成した：アミノメチル樹脂(Chemimpex、充填１.１mmol／ｇ、５００mg)を、無水ＤＣＭで２０分間膨張させた。ＤＣＭを排水後、ＤＭＦ中の化合物３−(２−アセトキシフェニル)アクリル酸、ＨＡＴＵ(２.０当量)およびＤＩＥＡ(４.０当量)の混合物を加えた。反応混合物を、１２時間、室温で振盪した。樹脂をＤＭＦおよびＤＣＭで洗浄した。次いで５mL  ＤＭＦ中２０％ピペリジン溶液を上記樹脂に加えた。混合物を、１時間、室温で振盪した。次いで、樹脂をＤＣＭ(５mL×３)およびＤＭＦ(５mL×３)で洗浄した。次いで、Ｂｏｃ−ＳＰＰＳをＢｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｄ−ａｌｌｏ−Ｉｌｅ、Ｄ−Ｇｌｎ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｓｅｒ(Ｂｎ)−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨおよびＢｏｃ−ＮＭｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−ＯＨを用いて実施した。ペプチドを樹脂から開裂する前、ＴＭＳＯＴｆ／ＴＦＡ／チオアニソール(１：８.５：０.５、ｖ／ｖ／ｖ)の混合物で０℃で１時間処理して、保護基を除去した。次いで、樹脂をＤＣＭで洗浄し、その後樹脂を−７８℃でＤＣＭ／ＴＦＡ(９５：５、ｖ／ｖ)に加え、Ｏ３で５分間処理した。Ｍｅ２Ｓ添加後、溶液を温め、室温でさらに１時間撹拌した。反応混合物を低圧下濃縮し、分取ＨＰＬＣ(２０〜６０％ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ溶液を３０分間)で精製して、所望のペプチドサリチルアルデヒドエステルを得た。
得られたペプチドサリチルアルデヒドエステルおよび環状ペプチドをピリジン／ＡｃＯＨ(mole／mole＝１：１)の混合物に溶解し、室温で１０時間撹拌した。凍結乾燥により溶媒除去後、１mL  ＴＦＡ／Ｈ２Ｏ／ＴＩＰＳ(ｖ／ｖ／ｖ＝９４：５：１)を加え、１時間撹拌した。ＴＦＡ／Ｈ２Ｏ／ＴＩＰＳを圧縮気流により風乾除去した。残留物を分取ＨＰＬＣ(２０〜６０％ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ溶液を３０分間)で精製して、Ｔ８８を得た。
【０１３９】
ここに記載する実施例および実施態様は、説明の目的のみであり、それに照らした種々の修飾または変化が当業者により示唆され、本明細書の精神内および特許請求の範囲の範囲内に包含されることは理解される。さらに、ここに開示する発明またはその実施態様のあらゆる要素または限定を、任意のおよび／または全ての他の要素または限定(個々にまたは任意の組み合わせで)とまたはここに開示する任意の他の発明または実施態様と組み合わせることができ、全てのこのような組み合わせは、限定なく、本発明の範囲内にあると考えられる。
【図１】
2021510148.tif 000031
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
2021510148.tif 000039
【図１０】
2021510148.tif 000040
【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【手続補正書】
【提出日】令和2年10月14日(2020.10.14)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式ＩまたはＩ’、IIまたはII’、IIIまたはIII’、IVまたはIV’、ＶまたはＶ’またはVIまたはVI’の抗生物質またはその塩。
【化１】
2021510148.tif 000046
【化２】
2021510148.tif 000047
【化３】
2021510148.tif 000048
【化４】
2021510148.tif 000049
【請求項２】
Ｒ１〜Ｒ５の各々がアミノ酸の側鎖である、請求項１に記載の抗生物質。
【請求項３】
Ｒ１〜Ｒ５の各々が、独立してロイシン、イソロイシン、グルタミン、セリン、スレオニン、Ｄ−アロイソロイシン、リシンまたはアルギニンの側鎖である、請求項１または２に記載の抗生物質。
【請求項４】
Ｒ１がイソロイシンの側鎖である、請求項１〜３の何れかに記載の抗生物質。
【請求項５】
Ｒ２がセリンまたはスレオニンの側鎖である、請求項１〜４の何れかに記載の抗生物質。
【請求項６】
Ｒ３がグルタミンの側鎖である、請求項１〜５の何れかに記載の抗生物質。
【請求項７】
Ｒ４がイソロイシンまたはＤ−アロイソロイシンの側鎖である、請求項１〜６の何れかに記載の抗生物質。
【請求項８】
Ｒ５がイソロイシンまたはＤ−アロイソロイシンの側鎖である、請求項１〜７の何れかに記載の抗生物質。
【請求項９】
Ｒ６がＨまたはＣ１〜Ｃ９直鎖または分枝鎖アルキル基である、請求項１〜８の何れかに記載の抗生物質。
【請求項１０】
Ｒ６がメチルである、請求項１〜９の何れかに記載の抗生物質。
【請求項１１】
式IVおよびIV’のＲがＣ２−Ｃ８直鎖または分枝鎖アルキル鎖である、請求項１に記載の抗生物質。
【請求項１２】
式ＶおよびＶ’のＲがＣ２−Ｃ８直鎖または分枝鎖アルキル鎖、請求項１に記載の抗生物質。
【請求項１３】
式VIおよびVI’のＲがＣ２−Ｃ８直鎖または分枝鎖アルキル鎖、請求項１に記載の抗生物質。
【請求項１４】
抗生物質がＭｅｔ１０−テイクソバクチン、Ｐｈｅ(４−Ｆ)１０−テイクソバクチン、Ｎｌｅ１０−テイクソバクチン、Ｎｖａ１０−テイクソバクチン、Ｃｈｇ１０−テイクソバクチン、Ｃｈａ１０−テイクソバクチン、β−シクロプロピル−Ａｌａ１０−テイクソバクチンおよびテイクソバクチンから選択される、請求項１〜１３の何れかに記載の抗生物質。
【請求項１５】
請求項１〜１４の何れかに記載の抗生物質またはその塩および薬学的に許容される担体または添加物を含む、組成物。
【請求項１６】
請求項１〜１４の何れかに記載の抗生物質を有効成分として含む、病原体が原因の感染を処置する医薬組成物。
【請求項１７】
病原体が細菌、ウイルス、原生動物、蠕虫、寄生虫または真菌である、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
細菌がヘリコバクター・ピロリ、レジオネラ・ニューモフィラ、マイコバクテリウム・ツベルクローシス、マイコバクテリウム・アビウム、マイコバクテリウム・イントラセルラレ、マイコバクテリウム・カンサイ、マイコバクテリウム・ゴルドノアエ、マイコバクテリア・スポロゾイテス、スタフィロコッカス・アウレウス、スタフィロコッカス・エピデルミディス、ナイセリア・ゴノレエ、ナイセリア・メニンギティディス、リステリア・モノサイトゲネス、ストレプトコッカス・ピオゲネス(Ａ群レンサ球菌)、ストレプトコッカス・アガラクティアエ・ピオゲネス(Ｂ群レンサ球菌)、ストレプトコッカス・ディスガラクチア、ストレプトコッカス・フェカリス、ストレプトコッカス・ボビス、ストレプトコッカス・ニューモニアエ、病原性カンピロバクター・スポロゾイテス、エンテロコッカス・スポロゾイテス、ヘモフィルス・インフルエンザエ、シュードモナス・エルギノーザ、バシラス・アントラシス、バシラス・サブティリス、エシェリキア・コリ、コリネバクテリア・ジフテリアエ、コリネバクテリア・ジェイケイウム、コリネバクテリア・スポロゾイテス、エリジペロスリックス・ルジオパシエ、クロストリジウム・パーフリンジェンス、クロストリジウム・テタニ、クロストリジウム・ディフィシル、エンテロバクター・アエロゲネス、クレブシエラ・ニューモニアエ、パスツレラ・ムルトシダ、バクテロイデス・シータイオタオミクロン、バクテロイデス・ユニフォルミス、バクテロイデス・ブルガタス、フソバクテリウム・ヌクレアタム、ストレプトバシラス・モニリフォルミス、レプトスピラおよびアクチノマイセス・イスラエリの１以上である、請求項１７に記載の医薬組成物。
【請求項１９】
ウイルスがレトロウイルス科、ピコルナウイルス科、カリシウイルス科、トガウイルス科、フラビウイルス科、コロナウイルス科、ラブドウイルス科、フィロウイルス科、パラミクソウイルス科、オルトミクソウイルス科、ブニヤウイルス科、アレナウイルス科、レオウイルス科、ビルナウイルス科、ヘパドナウイルス科、パルボウイルス科、パポバウイルス科、アデノウイルス科、ヘルペスウイルス科、ポックスウイルス科およびイリドウイルス科である、請求項１７に記載の医薬組成物。
【請求項２０】
原生動物が腟トリコモナス、ランブル鞭毛虫、赤痢アメーバ、大腸バランジウム、クリプトスポリジウム・パルバム、戦争シストイソスポーラ、クルーズトリパノソーマ、ガンビアトリパノソーマ、ドノヴァン・リーシュマニアまたはフォーラーネグレリアである、請求項１７に記載の医薬組成物。
【請求項２１】
蠕虫がマンソン住血吸虫、シストソーマ・セルカリア、日本住血吸虫、メコン住血吸虫、ビルハルツ住血吸虫、回虫、糞線虫、単包条虫、多包条虫、広東住血線虫、コスタリカ住血線虫、肥大吸虫、フィリピン毛頭虫、ウェステルマン肺吸虫、十二指腸鉤虫、アメリカ鉤虫、トリキナ、バンクロフト糸状虫、マレー糸状虫およびチモール糸状虫、犬回虫、猫回虫、牛回虫、線虫またはアニサキス属である、請求項１７に記載の医薬組成物。
【請求項２２】
寄生虫が熱帯熱マラリア原虫、ヨーエリマラリア原虫、小形条虫、肝吸虫、ロア糸状虫、ウェステルマン肺吸虫、肝蛭またはトキソプラズマ原虫である、請求項１７に記載の医薬組成物。
【請求項２３】
真菌がクリプトコックス・ネオフォルマンス、ヒストプラズマ・カプスラタム、コクシジオイデス・イミチス、ブラストミセス・デルマチチジス、クラミジア・トラコマチス、カンジダ・アルビカンス、カンジダ・トロピカリス、カンジダ・グラブラータ、カンジダ・クルーセイ、カンジダ・パラプシローシス、カンジダ・デュブリニエンシス、カンジダ・ルシタニアエ、エピデルモフィトン・フロッコーズム、ミクロポルム・オーズアニー、ミクロスポルム・カニス、ミクロスポルム・カニス・バラエティー・ジストルツムミクロスポルム・コーケイ、ミクロスポルム・エクイナム、ミクロスポルム・フェルギネウム、ミクロスポルム・フラバム、ミクロスポルム・ガリネ、ミクロスポルム・ジプセウム、ミクロスポルム・ナヌム、ミクロスポルム・ペルジコロル、トリコフィトン・アジェロイ、トリコフィトン・コンセントリカム、トリコフィトン・エクイヌム、トリコフィトン・フラベセンス、トリコフィトン・グロリアエ、トリコフィトン・メグニニ、トリコフィトン・メンタグロフィテス・バラエティー・エリナセイ、トリコフィトン・メンタグロフィテス・バラエティー・インテルディギターレ、トリコフィトン・ファセオリフォルメ、トリコフィトン・ルブラム、トリコフィトン・ルブラム・ダウニー株、トリコフィトン・ルブラム・グラニュラー株、トリコフィトン・シェーンライニ、トリコフィトン・シミイ、トリコフィトン・ソウダネンセ、トリコフィトン・テレストレ、トリコフィトン・トンズランス、トリコフィトン・バンブロセゲミイ、トリコフィトン・ベルコーズム、トリコフィトン・ビオラセウム、トリコフィトン・ヤオウンデイ、アスペルギルス・フミガーツス、アスペルギルス・フラバスまたはアスペルギルス・クラバタスである、請求項１７に記載の医薬組成物。
【請求項２４】
感染性病原体と有効量の請求項１〜１４の何れかに記載の抗生物質または請求項１５に記載の組成物を接触させることを含む、インビトロまたは非ヒト動物において感染性病原体を殺滅または増殖阻害する方法。
【国際調査報告】
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