(57)【要約】  本発明は概して抗体の医薬製剤の分野に関する。具体的には、本発明は、高濃度の抗体製剤ならびにその医薬調製物および使用に関する。本発明は、抗ＰＤ−１抗体の製剤によって例示される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
抗ＰＤ−１抗体であって、前記抗体の濃度が約１００ｍｇ／ｍｌから約３００ｍｇ／ｍｌの間である、抗ＰＤ−１抗体と、
二糖と、
緩衝液と、
キレート化剤と、
ポリソルベートと
を含む医薬組成物であって、
前記医薬組成物のｐＨが約４．５〜約５．５であり、前記医薬組成物が、約１センチポアズ（ｃＰ）から約２０ｃＰの間の粘度を有する、医薬組成物。
【請求項２】
ポリソルベートがポリソルベート８０（ＰＳ８０）である、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
ポリソルベートの濃度が約０．０１〜約０．３ｍｇ／ｍｌである、請求項１から２のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項４】
０．２ｍｇ／ｍｌのＰＳ８０を含む、請求項３に記載の医薬組成物。
【請求項５】
緩衝液がヒスチジン緩衝液である、請求項１から４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項６】
ヒスチジンの濃度が約２０ｍＭである、請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項７】
緩衝液が酢酸塩緩衝液である、請求項１から４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項８】
キレート化剤がＥＤＴＡであり、および／またはキレート化剤の濃度が約０．０１〜約０．３ｍｇ／ｍＬの範囲である、請求項１から７のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項９】
ＥＤＴＡが、ＥＤＴＡ二ナトリウム、ＥＤＴＡ二ナトリウム二水和物、またはＥＤＴＡ二ナトリウムとＥＤＴＡ二ナトリウム二水和物の組合せを含む、請求項８に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
ＥＤＴＡの濃度が、約０．０４ｍｇ／ｍＬ、約０．０４５ｍｇ／ｍＬ、または約０．０５ｍｇ／ｍＬである、請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
二糖がスクロースである、請求項１から１０のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
二糖がトレハロースである、請求項１から１０のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
トレハロースがトレハロース二水和物である、請求項１２に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
二糖の濃度が、約２５ｍｇ／ｍＬから約１００ｍｇ／ｍＬの間、約５０ｍｇ／ｍＬまたは約８４ｍｇ／ｍＬである、請求項１から１３のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
約２５ｍＭから約３００ｍＭの間、約５０ｍＭ、約１００ｍＭ、約１５０ｍＭ、約２００ｍＭ、または約２５０ｍＭの濃度でアルギニンをさらに含む、請求項１から１４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
プロリンをさらに含む、請求項１から１５のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
プロリンの濃度が、約２５ｍＭから約３００ｍＭの間、または約１００ｍＭもしくは約２００ｍＭである、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
抗体の濃度が、約１４０ｍｇ／ｍｌ、約１４５ｍｇ／ｍｌ、約１５０ｍｇ／ｍｌ、約１５５ｍｇ／ｍｌ、約１６０ｍｇ／ｍｌ、約１６５ｍｇ／ｍｌ、約１７０ｍｇ／ｍｌ、約１７５ｍｇ／ｍｌ、約１８０ｍｇ／ｍｌ、約１８５ｍｇ／ｍｌ、約１９０ｍｇ／ｍｌ、約１９５ｍｇ／ｍｌ、および約２００ｍｇ／ｍｌからなる群から選択される、請求項１から１７のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１９】
抗体の濃度が、約１４０ｍｇ／ｍｌ〜約２００ｍｇ／ｍｌ、１４５ｍｇ／ｍｌ〜約１６０ｍｇ／ｍｌ、または約１４８ｍｇ／ｍｌ〜約１５２ｍｇ／ｍｌである、請求項１から１７のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項２０】
約１５０ｍｇ／ｍｌの抗ＰＤ−１抗体と、
約２０ｍＭのヒスチジン緩衝液と、
約８４ｍｇ／ｍｌのトレハロースと、
約０．２ｍｇ／ｍｌのＰＳ８０と、
約０．４５または約０．５ｍｇ／ｍｌのＥＤＴＡと
を含むか、またはそれらからなり、
ｐＨ５．０＋／−０．５である、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項２１】
組成物の粘度が、２０℃で約１０ｃＰから約１８ｃＰの間である、請求項２０に記載の医薬組成物。
【請求項２２】
組成物の粘度が、２０℃で約１５ｃＰである、請求項２１に記載の医薬組成物。
【請求項２３】
約１５０ｍｇ／ｍｌの抗ＰＤ−１抗体と、
約２０ｍＭのヒスチジン緩衝液と、
約１００ｍＭのアルギニンＨＣｌと、
約５０ｍｇ／ｍｌのトレハロースと、
約０．２ｍｇ／ｍｌのＰＳ８０と、
約０．４５または約０．５ｍｇ／ｍｌのＥＤＴＡと
を含むか、またはそれらから本質的になり、
ｐＨ５．０＋／−０．５である、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項２４】
組成物の粘度が、２０℃で約１０ｃＰから約１８ｃＰの間である、請求項２３に記載の医薬組成物。
【請求項２５】
組成物の粘度が、２０℃で約１５ｃＰである、請求項２４に記載の医薬組成物。
【請求項２６】
ＥＤＴＡが、ＥＤＴＡ二ナトリウム、ＥＤＴＡ二ナトリウム二水和物、またはＥＤＴＡ二ナトリウムとＥＤＴＡ二ナトリウム二水和物の組合せを含む、請求項２０から２５のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項２７】
抗体が、ヒトまたはヒト化モノクローナル抗体である、請求項１から２６のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項２８】
抗体がＩｇＧ４抗体である、請求項１から２７のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項２９】
抗体がＩｇＧ４  Ｓ２２８Ｐ抗体である、請求項２８に記載の医薬組成物。
【請求項３０】
抗体が、配列番号２に示されるＶＨ配列のＶＨ相補性決定領域１（ＣＤＲ１）、ＶＨ  ＣＤＲ２、およびＶＨ  ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；ならびに／または配列番号３に示されるＶＬ配列のＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、およびＶＬ  ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む、請求項１から２９のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項３１】
ＶＨ  ＣＤＲ１が配列番号４に示されるアミノ酸配列を含み、ＶＨ  ＣＤＲ２が配列番号５に示されるアミノ酸配列を含み、ＶＨ  ＣＤＲ３が配列番号６に示されるアミノ酸配列を含み、ＶＬ  ＣＤＲ１が配列番号７に示されるアミノ酸配列を含み、ＶＬ  ＣＤＲ２が配列番号８に示されるアミノ酸配列を含み、ＶＬ  ＣＤＲ３が配列番号９に示されるアミノ酸配列を含む、請求項３０に記載の医薬組成物。
【請求項３２】
抗体が、配列番号２に示される重鎖可変領域アミノ酸配列と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列および配列番号３に示される軽鎖可変領域アミノ酸配列と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項１から２９のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項３３】
抗体が、配列番号２に示されるアミノ酸配列、またはＣＤＲ内ではない残基において１つもしくは複数の保存的アミノ酸置換を有するバリアントを含む重鎖可変領域（ＶＨ）および／あるいは配列番号３に示されるアミノ酸配列、またはＣＤＲ内ではないアミノ酸において１つもしくは複数のアミノ酸置換を有するそのバリアントを含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む、請求項１から２９のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項３４】
抗体が、配列番号１０のＣ末端リジンを有するかまたは有さない、配列番号１０に示されるアミノ酸配列を含む重鎖；および配列番号１１に示されるアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、請求項１から３３のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項３５】
抗体が、主要グリカン種としてＧ０ＦおよびＧ１Ｆを含むＡｓｎ２９４でのグリコシル化を示す、請求項３４に記載の医薬組成物。
【請求項３６】
グリコシル化が、マイナーグリカン種として、切断されたおよび／またはアフコシル化された複合型二分岐構造、高マンノース型Ｍａｎ５構造、ならびにシアル化された、コア−フコシル化された複合型二分岐オリゴ糖をさらに含む、請求項３５に記載の医薬組成物。
【請求項３７】
凍結乾燥されているか、または凍結乾燥されていない、請求項１から３６のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項３８】
２０℃で約１０〜約１８ｃＰの粘度を有する、請求項１から２０、２３、または２７から３７のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項３９】
抗体が、ＰＦ−０６８０１５９１、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、セミプリマブ、もしくはスパルタリズマブ、または前述のいずれかの抗原結合部分である、請求項１から２７のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項４０】
約１５０ｍｇ／ｍｌの抗ＰＤ−１抗体であって、配列番号１０のＣ末端リジンを有するかまたは有さない、配列番号１０に示されるアミノ酸配列を含む重鎖；および配列番号１１に示されるアミノ酸配列を含む軽鎖を含む抗ＰＤ−１抗体と、
約２０ｍＭのヒスチジン緩衝液と、
約８４ｍｇ／ｍｌのトレハロースと、
約０．２ｍｇ／ｍｌのＰＳ８０と、
約０．４５または約０．５ｍｇ／ｍｌのＥＤＴＡと
を含むか、またはそれらから本質的になる医薬組成物であって、
ｐＨ５．０＋／−０．５であり、２０℃で約１０〜約１８ｃＰの粘度を有する医薬組成物。
【請求項４１】
約１５０ｍｇ／ｍｌの抗ＰＤ−１抗体であって、配列番号１０のＣ末端リジンを有するかまたは有さない、配列番号１０に示されるアミノ酸配列を含む重鎖；および配列番号１１に示されるアミノ酸配列を含む軽鎖を含む抗ＰＤ−１抗体と、
約２０ｍＭのヒスチジン緩衝液と、
約８４ｍｇ／ｍｌのトレハロースと、
約０．２ｍｇ／ｍｌのＰＳ８０と、
約０．４５または約０．５ｍｇ／ｍｌのＥＤＴＡと
を含むか、またはそれらから本質的になる医薬組成物であって、
ｐＨ５．０＋／−０．５であり、２０℃で約１０〜約１８ｃＰの粘度を有する医薬組成物。
【請求項４２】
ＥＤＴＡが、ＥＤＴＡ二ナトリウム、ＥＤＴＡ二ナトリウム二水和物、またはＥＤＴＡ二ナトリウムとＥＤＴＡ二ナトリウム二水和物の組合せを含む、請求項４０または４１に記載の医薬組成物。
【請求項４３】
トレハロースがトレハロース二水和物である、請求項４０から４２のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項４４】
抗酸化物質を含まない、請求項１から４３のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項４５】
抗酸化物質が、Ｌ−メチオニン、またはその薬学的に許容される塩である、請求項４４に記載の医薬組成物。
【請求項４６】
メチオニンを含まない、請求項１から４３のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項４７】
アルギニンを含まない、請求項１から２２または２７から４６のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項４８】
疾患を処置する方法であって、請求項１から４７のいずれか一項に記載の医薬組成物の有効量を、そのような疾患を有する対象に投与するステップを含む方法。
【請求項４９】
医薬組成物が１５０ｍｇ／ｍＬの抗ＰＤ−１抗体を含む、請求項４８に記載の方法。
【請求項５０】
がんの処置を必要とする対象におけるがんを処置する方法であって、（１）請求項１から４７のいずれか一項に記載の医薬組成物の有効量、および（２）がんの細胞に対する免疫応答を誘発することができるワクチンの有効量を対象に投与するステップを含む方法。
【請求項５１】
がんの処置のために対象に投与されたワクチンの免疫原性または治療効果を増強する方法であって、請求項１から４７のいずれか一項に記載の医薬組成物の有効量を、ワクチンを受けた対象に投与するステップを含む方法。
【請求項５２】
医薬組成物が、単回の２ｍＬの皮下注射として投与される、請求項４８から５１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５３】
医薬組成物が、３週間に１回投与される、請求項４８から５２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５４】
医薬組成物が、４週間に１回投与される、請求項４８から５２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５５】
医薬組成物が、３００ｍｇの用量で皮下に投与される、請求項４８から５４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５６】
対象が、クリゾチニブ、パルボシクリブ、タラゾパリブ、抗ＣＴＬＡ４抗体、抗４−１ＢＢ抗体、抗ＯＸ４０抗体、第２のＰＤ−１抗体、ＣＤ４０アゴニスト、ＴＬＲアゴニスト、ＣＡＲ−Ｔ細胞、および化学療法剤からなる群から選択される少なくとも１種の他の治療剤を投与される、請求項４８から５５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５７】
疾患ががんである、請求項４８から５６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５８】
がんが、胃がん、肉腫、リンパ腫、ホジキンリンパ腫、白血病、頭頸部がん、頭頸部扁平上皮がん、胸腺がん、上皮がん、唾液腺がん、肝がん、胃がん、甲状腺がん、肺がん、卵巣がん、乳がん、前立腺がん、食道がん、膵がん、神経膠腫、白血病、多発性骨髄腫、腎細胞癌、膀胱がん、子宮頸がん、絨毛腫、結腸がん、口腔がん、皮膚がん、および黒色腫からなる群から選択される、請求項５７に記載の方法。
【請求項５９】
対象におけるがんを処置するための医薬を製造するための、請求項１から４７のいずれか一項に記載の医薬組成物の使用。
【請求項６０】
医薬の投与パターンが、８週間に１回の医薬の用量の投与を含む、対象におけるがんを処置するための医薬を製造するための、請求項１から４７のいずれか一項に記載の医薬組成物の使用。
【請求項６１】
用量の体積が、約２．５ｍｌ以下、２．０ｍｌ以下、１．５ｍｌ以下、または１．０ｍｌ以下である、請求項６０に記載の使用。
【請求項６２】
用量の投与が皮下である、請求項５９から６１のいずれか一項に記載の使用。
【請求項６３】
対象がヒトである、請求項５９から６２のいずれか一項に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は抗体の医薬製剤の分野に関する。具体的には、本発明は、抗ＰＤ−１抗体製剤ならびにその医薬調製物および使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
抗体治療剤は典型的に、定期的に投与され、一般に、注射による数ｍｇ／ｋｇの投与を含む。非経口送達は治療用抗体のための一般的な投与経路である。各用量の体積を最小限にするために、非経口投与では比較的高濃度の抗体製剤が望ましい。
【０００３】
高濃度のタンパク質製剤の開発は、タンパク質の物理的および化学的安定性、タンパク質製剤の製造、保存、および送達に関する問題に起因して困難であり得る。抗体製剤の粘度の増加は、薬物製造から患者への薬物送達までに問題を引き起こす可能性がある。高濃度の水性タンパク質含有製剤に対する粘度低下剤の効果を研究するために、様々な試みがなされてきた。
【０００４】
抗ＰＤ−１抗体は、１型がんを含む過剰増殖性障害の処置に有用であることが示されている。がんなどのＰＤ−１によって媒介される状態に罹患している患者の医学的必要性を満たすのに適した粘度を有する抗ＰＤ−１抗体の安定で高濃度の抗体調製物が必要とされている。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００５】
抗ＰＤ−１抗体および抗体を含む製剤（ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ）の粘度を低下させることができる賦形剤を含む組成物が提供される。ある特定の製剤が粘度を低下させるのに効果的であることが実証される。有利には、本明細書で提供される組成物は、治療的処置のために使用される薬物製品について１００ｍｇ／ｍＬを超える濃度を達成するのに適した粘度挙動を実証する。
【０００６】
溶液中の高濃度の生物活性抗体を支持し、皮下、静脈内、筋肉内、腹腔内、または皮内注射を含む、非経口投与に適した医薬組成物が本明細書で提供される。組成物は、抗ＰＤ−１抗体、二糖、緩衝液、キレート化剤、およびポリソルベートを含む。一部の態様では、組成物のｐＨは約４．５から５．５の間であり得る。一部の態様では、組成物は好ましくは、約１センチポアズ（ｃＰ）から約２０ｃＰの間の粘度を有する。一部の態様では、好ましい投与経路は皮下注射である。
【０００７】
一部の態様では、組成物は、約１００ｍｇ／ｍｌから約２００ｍｇ／ｍｌの間の抗ＰＤ−１抗体、二糖、緩衝液、キレート化剤、およびポリソルベートを含み得るか、またはそれらから本質的になり得、約４．５〜約５．５のｐＨを有する。一部の態様では、組成物は、約１５０ｍｇ／ｍｌの抗ＰＤ−１抗体、二糖、緩衝液、キレート化剤、およびポリソルベートから本質的になり得、約５．０のｐＨを有する。
【０００８】
一部の態様では、組成物は抗酸化物質を含まない。一部の態様では、組成物は、例えば、限定されないが、Ｌ−メチオニンなどのメチオニン、またはその薬学的に許容される塩を含まない。一部の態様では、組成物はアルギニンを含まない。
【０００９】
一部の態様では、組成物は、２０℃で約５０ｃＰ未満、約４０ｃＰ未満、約３０ｃＰ未満、または約２０ｃＰ未満の粘度を有し得る。一部の態様では、組成物は、２０℃で約５〜約５０ｃＰの粘度を有し得る。一部の態様では、組成物は、２０℃で約５〜約４０ｃＰの粘度を有し得る。一部の態様では、組成物は、２０℃で約５〜約３０ｃＰの粘度を有し得る。一部の態様では、組成物は、２０℃で約５〜約２０ｃＰの粘度を有し得る。一部の態様では、組成物は、２０℃で約１０〜約２０ｃＰの粘度を有し得る。一部の態様では、組成物は、２０℃で約１４〜約１６ｃＰの粘度を有し得る。一部の態様では、組成物は、２０℃で約１４ｃＰの粘度を有し得る。
【００１０】
一部の態様では、ポリソルベートの濃度は約０．０１〜約０．３ｍｇ／ｍｌであり得る。一部の態様では、ポリソルベートの濃度は約０．２ｍｇ／ｍｌである。一部の態様では、ポリソルベートはポリソルベート８０である。
【００１１】
一部の態様では、二糖はトレハロースであり得る。一部の態様では、トレハロースはトレハロース二水和物である。一部の態様では、トレハロースの濃度は約１ｍｇ／ｍｌ〜約１００ｍｇ／ｍｌであり得る。一部の態様では、トレハロースの濃度は約８４ｍｇ／ｍｌである。他の態様では、トレハロースの濃度は約５０ｍｇ／ｍｌである。
【００１２】
他の態様では、二糖薬剤はスクロースであり得る。一部の態様では、スクロースの濃度は約１ｍｇ／ｍｌ〜約１００ｍｇ／ｍｌであり得る。一部の態様では、スクロースの濃度は約５０ｍｇ／ｍｌである。
【００１３】
一部の態様では、緩衝液はヒスチジン緩衝液であり得る。一部の態様では、ヒスチジン緩衝液の濃度は約１．０〜約３０ｍＭであり得る。一部の態様では、ヒスチジン緩衝液の濃度は約２０ｍＭのヒスチジンである。
【００１４】
他の態様では、緩衝液は酢酸塩緩衝液であり得る。一部の態様では、酢酸塩緩衝液の濃度は約１．０〜約３０ｍＭであり得る。一部の態様では、酢酸塩緩衝液の濃度は約２０ｍＭの酢酸塩である。
【００１５】
一部の態様では、キレート化剤は、例えば、限定されないが、ＥＤＴＡ二ナトリウムおよびＥＤＴＡ二ナトリウム二水和物を含む、ＥＤＴＡであり得る。一部の態様では、ＥＤＴＡの濃度は約０．０１〜約０．３ｍｇ／ｍＬであり得る。一部の態様では、ＥＤＴＡの濃度は、約０．０１ｍｇ／ｍＬ、約０．０５ｍｇ／ｍＬ、約０．１ｍｇ／ｍＬ、約０．１５ｍｇ／ｍＬ、約０．２ｍｇ／ｍＬ、約０．２５ｍｇ／ｍＬ、または約０．３ｍｇ／ｍＬであり得る。一部の態様では、ＥＤＴＡの濃度は、約０．０４、約０．０４５、または約０．０５ｍｇ／ｍＬである。
【００１６】
一部の態様では、抗体濃度は、約１００ｍｇ／ｍｌから約１５０ｍｇ／ｍｌの間であり得る。一部の態様では、抗体濃度は、約１３０ｍｇ／ｍｌ、約１３５ｍｇ／ｍｌおよび約１４０ｍｇ／ｍｌであり得る。一部の態様では、抗体濃度は約１５０ｍｇ／ｍｌである。一部の態様では、抗体濃度は約１２０ｍｇ／ｍｌである。
【００１７】
一部の態様では、組成物はアルギニンをさらに含み得る。一部の態様では、アルギニンの濃度は、約２５ｍＭから約３００ｍＭの間、好ましくは約５０ｍＭ、約１００ｍＭ、約１５０ｍＭ、約２００ｍＭ、または約２５０ｍＭである。
【００１８】
一部の態様では、組成物はプロリンをさらに含み得る。一部の態様では、プロリンの濃度は、約２５ｍＭから約３００ｍＭの間、好ましくは約１００ｍＭまたは約２００ｍＭである。
【００１９】
一部の態様では、組成物は、約１５０ｍｇ／ｍｌの抗ＰＤ−１抗体と、約２０ｍＭのヒスチジン緩衝液と、約８４ｍｇ／ｍｌのトレハロース二水和物と、約０．２ｍｇ／ｍｌのＰＳ８０と、約０．０５ｍｇ／ｍｌのＥＤＴＡとから本質的になる。一部の態様では、組成物は５．０＋／−０．５のｐＨを有する。
【００２０】
一部の態様では、組成物は、約１５０ｍｇ／ｍｌの抗ＰＤ−１抗体と、約２０ｍＭのヒスチジン緩衝液と、約１００ｍＭのアルギニンＨＣｌと、約５０ｍｇ／ｍｌのトレハロース二水和物と、約０．２ｍｇ／ｍｌのＰＳ８０と、約０．０５ｍｇ／ｍｌのＥＤＴＡとから本質的になる。一部の態様では、組成物は、５．０＋／−０．５のｐＨおよび２０℃で約１０ｃＰ〜約１６ｃＰの粘度を有する。一部の態様では、組成物は２０℃で約１５ｃＰの粘度を有する。
【００２１】
一部の態様では、組成物は、約１００ｍｇ／ｍｌ、約１１０ｍｇ／ｍｌ、約１２０ｍｇ／ｍｌ、約１３０ｍｇ／ｍｌ、約１４０ｍｇ／ｍｌ、約１４５ｍｇ／ｍｌ、約１４８ｍｇ／ｍｌ、約１４９ｍｇ／ｍｌ、約１５０ｍｇ／ｍｌ、約１５１ｍｇ／ｍｌ、または約１５２ｍｇ／ｍｌの抗体と、約２０ｍＭのヒスチジン緩衝液と、約８４ｍｇ／ｍｌのトレハロース二水和物と、約０．２ｍｇ／ｍｌのＰＳ８０と、約０．０５ｍｇ／ｍｌのＥＤＴＡとから本質的になり、組成物はｐＨ５．０＋／−０．５である。一部の態様では、組成物は２０℃で約１０ｃＰ〜約１６ｃＰの粘度を有する。
【００２２】
一部の態様では、組成物は、約１００ｍｇ／ｍｌ、約１１０ｍｇ／ｍｌ、約１２０ｍｇ／ｍｌ、約１３０ｍｇ／ｍｌ、約１４０ｍｇ／ｍｌ、約１４５ｍｇ／ｍｌ、約１４８ｍｇ／ｍｌ、約１４９ｍｇ／ｍｌ、約１５０ｍｇ／ｍｌ、約１５１ｍｇ／ｍｌ、または約１５２ｍｇ／ｍｌの抗ＰＤ−１抗体と、約２０ｍＭのヒスチジン緩衝液と、約８４ｍｇ／ｍｌのトレハロースと、約０．２ｍｇ／ｍｌのＰＳ８０と、約０．０５ｍｇ／ｍｌのＥＤＴＡとから本質的になり、組成物はｐＨ５．０＋／−０．５である。
【００２３】
一部の態様では、組成物は、約１５０ｍｇ／ｍｌの抗ＰＤ−１抗体と、約２０ｍＭのヒスチジン緩衝液と、約８４ｍｇ／ｍｌのトレハロース二水和物と、約０．２ｍｇ／ｍｌのＰＳ８０と、約０．０５ｍｇ／ｍｌのＥＤＴＡとから本質的になり、組成物はｐＨ５．０＋／−０．５である。
【００２４】
一部の態様では、抗体は、ヒト抗体、ヒト化抗体、またはキメラ抗体であり得る。一部の態様では、抗体はモノクローナル抗体である。一部の態様では、抗体は、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ２Δａ、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＧ４Δｂ、ＩｇＧ４Δｃ、ＩｇＧ４  Ｓ２２８Ｐ、ＩｇＧ４Δｂ  Ｓ２２８Ｐ、およびＩｇＧ４Δｃ  Ｓ２２８Ｐサブクラスのものである。一部の態様では、抗体はＩｇＧ４アイソタイプのものであり、安定化されたヒンジ、例えばＳ２２８Ｐを含む。
【００２５】
一部の態様では、抗体は、ＰＦ−０６８０１５９１、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、セミプリマブ、またはスパルタリズマブであり得る。他の態様では、抗体は、ＰＦ−０６８０１５９１、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、セミプリマブ、またはスパルタリズマブの抗原結合部分であり得る。
【００２６】
一部の態様では、抗体は、配列番号２に示されるＶＨ配列のＶＨ相補性決定領域１（ＣＤＲ１）、ＶＨ  ＣＤＲ２、およびＶＨ  ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；ならびに／または配列番号３に示されるＶＬ配列のＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、およびＶＬ  ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含み得る。一部の態様では、ＶＨ  ＣＤＲ１は配列番号４に示されるアミノ酸配列を含み、ＶＨ  ＣＤＲ２は配列番号５に示されるアミノ酸配列を含み、ＶＨ  ＣＤＲ３は配列番号６に示されるアミノ酸配列を含み、ＶＬ  ＣＤＲ１は配列番号７に示されるアミノ酸配列を含み、ＶＬ  ＣＤＲ２は配列番号８に示されるアミノ酸配列を含み、ＶＬ  ＣＤＲ３は配列番号９に示されるアミノ酸配列を含む。
【００２７】
一部の態様では、ＶＨ領域は、配列番号２に示されるアミノ酸配列、またはＣＤＲ内ではない残基において１つもしくは複数の保存的アミノ酸置換を有するバリアントを含み、および／あるいはＶＬ領域は、配列番号３に示されるアミノ酸配列、またはＣＤＲ内ではないアミノ酸において１つもしくは複数のアミノ酸置換を有するそのバリアントを含む。一部の態様では、抗体は、配列番号２に示される重鎖可変領域アミノ酸配列と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列、および配列番号３に示される軽鎖可変領域アミノ酸配列と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含み得る。一部の態様では、抗体は、配列番号１０に示されるアミノ酸配列を含む可変重鎖配列、および配列番号１１に示されるアミノ酸配列を含む可変軽鎖配列を含み得る。一部の態様では、抗体は、ＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−１２１１８３を有する発現ベクターによって産生されるＶＨ領域を含む。一部の態様では、抗体は、ＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−１２１１８２を有する発現ベクターによって産生されるＶＬ領域を含む。一部の態様では、抗体は、ＰＤ−１と特異的に結合し、本明細書に記載される抗体と同じＰＤ−１エピトープと競合および／または結合する抗体である。
【００２８】
一部の態様では、組成物は、約１５０ｍｇ／ｍｌのＰＦ−０６８０１５９１と、約２０ｍＭのヒスチジン緩衝液と、約８４ｍｇ／ｍｌのトレハロース二水和物と、約０．２ｍｇ／ｍｌのＰＳ８０と、約０．０５ｍｇ／ｍｌのＥＤＴＡとから本質的になり、この組成物はｐＨ５．０＋／−０．１であり、メチオニンまたはアルギニンを含有しない。一部の態様では、組成物は、約１５０ｍｇ／ｍｌのニボルマブと、約２０ｍＭのヒスチジン緩衝液と、約８４ｍｇ／ｍｌのトレハロース二水和物と、約０．２ｍｇ／ｍｌのＰＳ８０と、約０．０５ｍｇ／ｍｌのＥＤＴＡとから本質的になり、この組成物はｐＨ５．０＋／−０．１であり、メチオニンまたはアルギニンを含有しない。一部の態様では、組成物は、約１５０ｍｇ／ｍｌのペンブロリズマブと、約２０ｍＭのヒスチジン緩衝液と、約８４ｍｇ／ｍｌのトレハロース二水和物と、約０．２ｍｇ／ｍｌのＰＳ８０と、約０．０５ｍｇ／ｍｌのＥＤＴＡとから本質的になり、この組成物はｐＨ５．０＋／−０．１であり、メチオニンまたはアルギニンを含有しない。
【００２９】
一部の態様では、組成物は凍結乾燥されなくてもよい。他の態様では、組成物は凍結乾燥されてもよい。
また、対象における状態を処置する方法であって、本明細書に記載される有効量の医薬組成物を、状態の処置を必要とする対象に投与するステップを含む方法も本明細書で提供される。一部の態様では、状態はがんである。一部の態様では、がんは、胃がん（ｇａｓｔｒｉｃ  ｃａｎｃｅｒ）、肉腫、リンパ腫、白血病、頭頸部がん、鼻咽頭がん、胸腺がん、上皮がん、上皮性卵巣がん、唾液腺がん、肝がん、胃がん（ｓｔｏｍａｃｈ  ｃａｎｃｅｒ）、甲状腺がん、肺がん（例えば、限定されないが、非小細胞肺がんを含む）、卵巣がん、卵管がん、乳がん（例えば、限定されないが、トリプルネガティブ乳がんを含む）、前立腺がん、食道がん、膵がん、神経膠腫、白血病、多発性骨髄腫、腎細胞癌、膀胱がん、子宮頸がん、絨毛腫、結腸がん、大腸がん、口腔がん、皮膚がん、腹膜がん、および黒色腫からなる群から選択される。一部の態様では、対象は、局所進行性または転移性黒色腫、頭頸部扁平上皮がん（ＳＣＨＮＣ）、卵巣癌、肉腫、または再発性もしくは難治性古典的ホジキンリンパ腫（ｃＨＬ）を有する以前に処置された成人患者である。一部の態様では、がんは、例えば、白金耐性および／もしくは不応性卵巣がん、白金耐性および／もしくは不応性乳がん、または白金耐性および／もしくは不応性肺がんなどの白金耐性および／もしくは白金不応性がんであり得る。
【００３０】
一部の態様では、本明細書で提供される抗ＰＤ−１抗体医薬組成物は、約２５ｍｇから約１０００ｍｇの間、好ましくは約５０ｍｇ、約１００ｍｇ、約１２５ｍｇ、約１５０ｍｇ、約２００ｍｇ、約２５０ｍｇ、約３００ｍｇ、約３５０ｍｇ、約４００ｍｇ、約４５０ｍｇ、約５００ｍｇ、約５２５ｍｇ、約５５０ｍｇ、約６００ｍｇ、約６５０ｍｇ、約７００ｍｇ、約７５０ｍｇ、または約８００ｍｇの投薬量で投与される。一部の態様では、組成物は、約０．５ｍｇ／ｋｇから約１５ｍｇ／ｋｇの間、好ましくは約０．５ｍｇ／ｋｇ、約１．０ｍｇ／ｋｇ、約３．０ｍｇ／ｋｇ、約５．０ｍｇ／ｋｇ、または約１０ｍｇ／ｋｇの投薬量で投与される。一部の態様では、組成物は、７、１４、２１、または２８日に１回投与される。一部の態様では、組成物は皮下に投与される。他の態様では、組成物は静脈内に投与される。一部の態様では、組成物は単一の２ｍｌ皮下注射として投与される。一部の態様では、組成物は３週間に１回投与される。一部の態様では、組成物は４週間に１回投与される。一部の態様では、組成物は３００ｍｇの用量で皮下に投与される。一部の態様では、組成物は２８日に１回、３００ｍｇの皮下用量として投与される。
【００３１】
また、腫瘍を有する対象における腫瘍成長または進行を阻害する方法であって、有効量の本明細書に記載される医薬組成物を対象に投与するステップを含む方法も本明細書で提供される。
【００３２】
また、対象におけるがん細胞の転移を阻害または予防する方法であって、有効量の本明細書に記載される医薬組成物を、がん細胞の転移の阻害または予防を必要とする対象に投与するステップを含む方法も本明細書で提供される。
【００３３】
また、ＰＤ−１発現腫瘍を有する対象において腫瘍退縮を誘導する方法であって、有効量の本明細書に記載される医薬組成物を対象に投与するステップを含む方法も本明細書で提供される。
【００３４】
一部の態様では、本明細書における抗体は対象に非経口的に投与され得る。一部の態様では、対象はヒトである。
一部の態様では、方法は、有効量の少なくとも１種の他の治療剤を投与するステップをさらに含み得る。一部の態様では、治療剤は、例えば、クリゾチニブ、パルボシクリブ、タラゾパリブ、抗ＣＴＬＡ４抗体、抗４−１ＢＢ抗体、抗ＯＸ４０抗体、第２のＰＤ−１抗体、ＣＡＲ−Ｔ細胞、または化学療法剤である。
【００３５】
また、がんの処置または腫瘍成長もしくは進行の阻害を必要とする対象におけるがんの処置のための、または腫瘍成長もしくは進行を阻害するための医薬の製造における本明細書に提供される抗ＰＤ−１抗体医薬組成物のいずれかの使用も本明細書で提供される。
【００３６】
また、がんの処置または腫瘍成長もしくは進行の阻害を必要とする対象におけるがんの処置に使用するための、または腫瘍成長もしくは進行を阻害するための抗ＰＤ−１抗体医薬組成物も提供される。一部の態様では、がんは、例えば、限定されないが、胃がん、肉腫、リンパ腫、ホジキンリンパ腫、白血病、頭頸部がん、胸腺がん、上皮がん、唾液腺がん、肝がん、胃がん、甲状腺がん、肺がん（例えば、非小細胞肺癌を含む）、卵巣がん、乳がん、前立腺がん、食道がん、膵がん、神経膠腫、白血病、多発性骨髄腫、腎細胞癌、膀胱がん、子宮頸がん、絨毛腫、結腸がん、口腔がん、皮膚がん、および黒色腫である。
【００３７】
また、哺乳動物、特にヒトにおけるがんを処置するためのワクチンの免疫原性または治療効果を増強する方法であって、本開示によって提供される有効量の抗ＰＤ−１抗体組成物を、ワクチンを受けている哺乳動物に投与するステップを含む方法も本明細書で提供される。
【００３８】
また、哺乳動物、特にヒトにおけるがんを処置する方法であって、（１）がんの細胞に対して免疫応答を誘発することができる有効量のワクチン、および（２）本開示によって提供される有効量の抗ＰＤ−１抗体医薬組成物を哺乳動物に投与するステップを含む方法も本明細書で提供される。一部の態様では、組成物は、約１２５から約３００ｍｇの皮下両側用量として投与される。一部の態様では、組成物は３００ｍｇの皮下両側用量として投与される。
【図面の簡単な説明】
【００３９】
【図１】異なるｐＨ値での抗ＰＤ−１抗体製剤の粘度を比較するグラフを示す。
【図２】様々な濃度のアルギニンＨＣｌを有する抗ＰＤ−１抗体製剤の粘度を比較するグラフを示す。
【図３】異なるｐＨ値での抗ＰＤ−１抗体製剤の粘度を比較するグラフを示す。
【図４】プロリンを有するかまたは有さない、１００ｍＭのアルギニンＨＣｌを添加した抗ＰＤ−１抗体製剤の粘度を比較するグラフを示す。
【図５】抗ＰＤ−１抗体製剤７および８の粘度を比較するグラフを示す。
【図６】抗ＰＤ−１抗体ｍＡｂ７におけるグリカン不均一性を示すグラフを示す。
【図７】製剤７における種々の抗ＰＤ−１抗体の熱特性を示すグラフを示す。
【発明を実施するための形態】
【００４０】
低下した粘度を有する組成物が本明細書に開示される。有利には、組成物は、溶液中で高濃度の生物活性抗体を安定に支持し、皮下、静脈内、筋肉内、腹腔内、または皮内注射を含む非経口投与に適している。
一般的技術
本発明の実施は、別段の指示がない限り、分子生物学（組換え技術を含む）、微生物学、細胞生物学、生化学および免疫学の従来の技術を利用し、これらは当該技術分野の範囲内である。このような技術は、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ、第２版（Ｓａｍｂｒｏｏｋら、１９８９）、Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｐｒｅｓｓ；Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ（Ｍ．Ｊ．Ｇａｉｔ編、１９８４）；Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ、Ｈｕｍａｎａ  Ｐｒｅｓｓ；Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｎｏｔｅｂｏｏｋ（Ｊ．Ｅ．Ｃｅｌｌｉｓ編、１９９８）、Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ；Ａｎｉｍａｌ  Ｃｅｌｌ  Ｃｕｌｔｕｒｅ（Ｒ．Ｉ．Ｆｒｅｓｈｎｅｙ編、１９８７）；Ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  ｔｏ  Ｃｅｌｌ  ａｎｄ  Ｔｉｓｓｕｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ（Ｊ．Ｐ．ＭａｔｈｅｒおよびＰ．Ｅ．Ｒｏｂｅｒｔｓ、１９９８）、Ｐｌｅｎｕｍ  Ｐｒｅｓｓ；Ｃｅｌｌ  ａｎｄ  Ｔｉｓｓｕｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ：Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ（Ａ．Ｄｏｙｌｅ、Ｊ．Ｂ．Ｇｒｉｆｆｉｔｈｓ、およびＤ．Ｇ．Ｎｅｗｅｌｌ編、１９９３〜１９９８）、Ｊ．ＷｉｌｅｙおよびＳｏｎｓ；Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ（Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．）；Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（Ｄ．Ｍ．ＷｅｉｒおよびＣ．Ｃ．Ｂｌａｃｋｗｅｌｌ編）；Ｇｅｎｅ  Ｔｒａｎｓｆｅｒ  Ｖｅｃｔｏｒｓ  ｆｏｒ  Ｍａｍｍａｌｉａｎ  Ｃｅｌｌｓ（Ｊ．Ｍ．ＭｉｌｌｅｒおよびＭ．Ｐ．Ｃａｌｏｓ編、１９８７）；Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ（Ｆ．Ｍ．Ａｕｓｕｂｅｌら編、１９８７）；ＰＣＲ：Ｔｈｅ  Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ  Ｃｈａｉｎ  Ｒｅａｃｔｉｏｎ、（Ｍｕｌｌｉｓら編、１９９４）；Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（Ｊ．Ｅ．Ｃｏｌｉｇａｎら編、１９９１）；Ｓｈｏｒｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ（ＷｉｌｅｙおよびＳｏｎｓ、１９９９）；Ｉｍｍｕｎｏｂｉｏｌｏｇｙ（Ｃ．Ａ．ＪａｎｅｗａｙおよびＰ．Ｔｒａｖｅｒｓ、１９９７）；Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ（Ｐ．Ｆｉｎｃｈ、１９９７）；Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：ａ  ｐｒａｃｔｉｃａｌ  ａｐｐｒｏａｃｈ（Ｄ．Ｃａｔｔｙ．編、ＩＲＬ  Ｐｒｅｓｓ、１９８８〜１９８９）；Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：ａ  ｐｒａｃｔｉｃａｌ  ａｐｐｒｏａｃｈ（Ｐ．ＳｈｅｐｈｅｒｄおよびＣ．Ｄｅａｎ編、Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ、２０００）；Ｕｓｉｎｇ  ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：ａ  ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  ｍａｎｕａｌ（Ｅ．ＨａｒｌｏｗおよびＤ．Ｌａｎｅ（Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ、１９９９）；Ｔｈｅ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ（Ｍ．ＺａｎｅｔｔｉおよびＪ．Ｄ．Ｃａｐｒａ編、Ｈａｒｗｏｏｄ  Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ、１９９５）などの文献に十分に説明されている。
定義
以下の用語は、別段の指示がない限り、以下の意味を有すると理解されるべきである：「単離された分子」（ここで、分子は、例えば、ポリペプチド、ポリヌクレオチド、または抗体である）という用語は、その起源または誘導の供給源によって、（１）そのネイティブ状態ではそれに伴っている天然に付随する成分が付随していない、（２）同じ種由来の他の分子を実質的に含まない、（３）異なる種由来の細胞によって発現される、または（４）天然に存在しない、分子である。したがって、化学的に合成されるか、またはそれが天然に由来する細胞とは異なる細胞系において発現される分子は、その天然に付随する成分から「単離される」。分子はまた、当該分野で周知の精製技術を使用する単離によって、天然に付随する成分を実質的に含まないようにされ得る。分子の純度または均一性は、当該分野で周知のいくつかの手段によってアッセイされ得る。例えば、ポリペプチド試料の純度は、当該分野で周知の技術を使用してポリペプチドを可視化するために、ポリアクリルアミドゲル電気泳動およびゲルの染色を使用してアッセイされ得る。特定の目的のために、より高い分解能が、ＨＰＬＣまたは精製のための当該分野で周知の他の手段を使用することによって提供され得る。
【００４１】
本明細書で使用される場合、「製剤」または「組成物」という用語は、それらが抗体に関する場合には、少なくとも１つの等張化剤、少なくとも１つの緩衝液、少なくとも１つのキレート化剤、少なくとも１つの界面活性剤を含む薬学的に許容される賦形剤と組み合わせた抗体であって、定義に従うｐＨである抗体を記載することを意味する。
【００４２】
「医薬組成物」または「医薬製剤」という用語は、活性成分の生物活性が効果的であることを可能にするような形態をとる調製物を指す。
「薬学的に許容される賦形剤」（ビヒクル、添加剤）は、対象に安全に投与して、利用する活性成分の有効用量をもたらすことができる賦形剤である。「賦形剤」または「担体」という用語は、本明細書で使用される場合、薬物のための希釈剤、ビヒクル、保存物質、結合剤または安定化剤として通常使用される不活性な物質を指す。本明細書で使用される場合、「希釈剤」という用語は、薬学的に許容される（ヒトに投与するのに安全かつ無毒性である）溶媒を指し、本明細書における液体製剤を調製するのに有用である。例示的な希釈剤には、限定されないが、滅菌水および注射用静菌水（ＢＷＦＩ）が含まれる。
【００４３】
「抗体」は、標的、例えば、炭水化物、ポリヌクレオチド、脂質、ポリペプチドなどに、免疫グロブリン分子の可変領域中に位置する少なくとも１つの抗原認識部位を通して特異的に結合することができる免疫グロブリン分子である。本明細書で使用される場合、この用語は、未変化のポリクローナル抗体またはモノクローナル抗体のみならずまた、別段の特定がない限り、未変化の抗体と特異的な結合について競合するそれらの任意の抗原結合部分、抗原結合部分を含む融合タンパク質、および抗原認識部位を含む免疫グロブリン分子の任意の他の修飾された構成も包含する。抗原結合部分には、例えば、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｄ、Ｆｖ、ドメイン抗体（ｄＡｂ、例えば、サメおよびラクダ科の抗体）、相補性決定領域（ＣＤＲ）、単鎖可変断片抗体（ｓｃＦｖ）、マキシボディ（ｍａｘｉｂｏｄｙ）、ミニボディ（ｍｉｎｉｂｏｄｙ）、イントラボディ（ｉｎｔｒａｂｏｄｙ）、ダイアボディ（ｄｉａｂｏｄｙ）、トリアボディ（ｔｒｉａｂｏｄｙ）、テトラボディ（ｔｅｔｒａｂｏｄｙ）、ｖ−ＮＡＲおよびビス−ｓｃＦｖを含む断片、ならびに特異的な抗原結合をポリペプチドに付与するのに十分である免疫グロブリンの少なくとも一部を含有するポリペプチドが含まれる。抗体には、いずれかのクラス、例えば、ＩｇＧ、ＩｇＡもしくはＩｇＭ（またはそれらのサブクラス）の抗体が含まれ、抗体は、いずれかの特定のクラスである必要はない。抗体の重鎖の定常領域の抗体アミノ酸配列に応じて、免疫グロブリンを異なるクラスに帰属させることができる。免疫グロブリンの５つの主要なクラス：ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、およびＩｇＭがあり、これらのうちのいくつかを、サブクラス（アイソタイプ）、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１およびＩｇＡ２にさらに分けることができる。免疫グロブリンの異なるクラスに対応する重鎖定常領域はそれぞれ、アルファ、デルタ、イプシロン、ガンマ、およびミューと呼ばれる。免疫グロブリンの異なるクラスのサブユニット構造および三次元構成は周知である。
【００４４】
抗体の「可変領域」とは、単独のまたは組み合わせた、抗体の軽鎖の可変領域または抗体の重鎖の可変領域を指す。当該分野では公知であるが、重鎖および軽鎖の可変領域は各々、超可変領域としてもまた公知である、３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）により接続される４つのフレームワーク領域（ＦＲ）からなり、抗体の抗原結合部位の形成に寄与する。特に、ＣＤＲの外部（すなわち、フレームワーク領域中）のアミノ酸残基における置換を有する、対象とする可変領域のバリアントを所望する場合、適切なアミノ酸置換、好ましくは、保存的アミノ酸置換を、対象とする可変領域を他の抗体の可変領域と比較することによって同定することができ、この他の抗体の可変領域は、対象とする可変領域と同じ定められたクラスにおけるＣＤＲ１およびＣＤＲ２配列を含有する（ＣｈｏｔｈｉａおよびＬｅｓｋ、Ｊ  Ｍｏｌ  Ｂｉｏｌ  １９６（４）：９０１〜９１７、１９８７）。
【００４５】
ある特定の態様では、ＣＤＲの最終的な描写および抗体の結合部位を含む残基の同定は、抗体の構造を解明することおよび／または抗体−リガンドの複合体の構造を解明することによって達成される。ある特定の態様では、それは、当業者に公知である多様な技術のいずれか、例えば、Ｘ線結晶構造解析によって達成され得る。ある特定の態様では、種々の解析方法を利用して、ＣＤＲ領域を同定するか、または見積もることができる。ある特定の態様では、種々の解析方法を利用して、ＣＤＲ領域を同定するか、または見積もることができる。そのような方法の例には、限定されないが、Ｋａｂａｔの定義、Ｃｈｏｔｈｉａの定義、ＡｂＭの定義、接触の定義、および立体構造による定義が含まれる。
【００４６】
Ｋａｂａｔの定義は、抗体中の残基の番号付けを行うための標準であり、典型的には、ＣＤＲ領域を同定するために使用される。例えば、ＪｏｈｎｓｏｎおよびＷｕ、２０００、Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．、２８：２１４〜８を参照のこと。Ｃｈｏｔｈｉａの定義は、Ｋａｂａｔの定義に類似するが、Ｃｈｏｔｈｉａの定義は、ある特定の構造のループの領域の位置を考慮に入れる。例えば、Ｃｈｏｔｈｉａら、１９８６、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、１９６：９０１〜１７；Ｃｈｏｔｈｉａら、１９８９、Ｎａｔｕｒｅ、３４２：８７７〜８３を参照のこと。ＡｂＭの定義は、抗体の構造をモデル化する、Ｏｘｆｏｒｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｇｒｏｕｐにより作成されたコンピュータプログラムの統合パッケージソフトを使用する。例えば、Ｍａｒｔｉｎら、１９８９、Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ（ＵＳＡ）、８６：９２６８〜９２７２；「ＡｂＭＴＭ，Ａ  Ｃｏｍｐｕｔｅｒ  Ｐｒｏｇｒａｍ  ｆｏｒ  Ｍｏｄｅｌｉｎｇ  Ｖａｒｉａｂｌｅ  Ｒｅｇｉｏｎｓ  ｏｆ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ」、Ｏｘｆｏｒｄ、ＵＫ；Ｏｘｆｏｒｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ，Ｌｔｄ．を参照のこと。ＡｂＭの定義は、知識データベースとａｂ  ｉｎｉｔｉｏ法との組合せ、例えば、Ｓａｍｕｄｒａｌａら、１９９９、「Ａｂ  Ｉｎｉｔｉｏ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  Ｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎ  Ｕｓｉｎｇ  ａ  Ｃｏｍｂｉｎｅｄ  Ｈｉｅｒａｒｃｈｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ」、ＰＲＯＴＥＩＮＳ，Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，Ｆｕｎｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  Ｓｕｐｐｌ．、３：１９４〜１９８により記載されているものを使用して、一次配列から抗体の三次構造をモデル化する。接触の定義は、入手可能な複合体の結晶構造の解析に基づく。例えば、ＭａｃＣａｌｌｕｍら、１９９６、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、５：７３２〜４５を参照のこと。別のアプローチでは、本明細書ではＣＤＲの「立体構造による定義」と称するが、ＣＤＲの位置は、抗原結合にエンタルピーの点で寄与する残基として同定され得る。例えば、Ｍａｋａｂｅら、２００８、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、２８３：１１５６〜１１６６を参照のこと。さらなる他のＣＤＲ境界の定義は、上記のアプローチのいずれにも厳格には従わなくてよいが、にもかかわらず、ＫａｂａｔのＣＤＲの少なくとも一部と重複するが、特定の残基または一連の残基が抗原結合に顕著には影響しないという予測的または実験的知見に照らして、ＣＤＲを短縮させるか、または伸ばすことができる。本明細書で使用される場合、ＣＤＲは、アプローチの組合せを含む、当該分野で公知の任意のアプローチによって定義されるＣＤＲを指すことができる。本明細書で使用される方法は、これらのアプローチのいずれかの定義されたＣＤＲを利用することができる。１つより多いＣＤＲを含有する所与の態様の場合はいずれも、ＣＤＲは、Ｋａｂａｔの定義、Ｃｈｏｔｈｉａの定義、拡張された定義、ＡｂＭの定義、接触の定義、および／または立体構造による定義のいずれかに従って定義され得る。
【００４７】
当該分野では公知であるが、抗体の「定常領域」とは、単独のまたは組み合わせた、抗体の軽鎖の定常領域または抗体の重鎖の定常領域を指す。
本明細書で使用される場合、「モノクローナル抗体」とは、実質的に均一な抗体の集団から得られる抗体を指し、すなわち、集団を構成する個々の抗体が、微量で存在し得る天然に存在する可能性がある突然変異を除き同一である。モノクローナル抗体は、極めて特異的であり、単一の抗原部位に対して作られている。さらに、ポリクローナル抗体の調製物は典型的には、異なる決定基（エピトープ）に対して作られた異なる抗体を含むが、それらとは対照的に、各モノクローナル抗体は、抗原上の単一の決定基に対して作られる。修飾語「モノクローナル」は、実質的に均一な抗体集団から得られるという抗体の特徴を意味し、いずれかの特定の方法により抗体を産生する必要があると解釈してはならない。例えば、本発明に従って使用されるモノクローナル抗体は、ＫｏｈｌｅｒおよびＭｉｌｓｔｅｉｎ、１９７５、Ｎａｔｕｒｅ  ２５６：４９５により最初に記載されたハイブリドーマ法によって作製され得るか、または組換えＤＮＡ法、例えば、米国特許第４，８１６，５６７号に記載されている方法によって作製され得る。モノクローナル抗体はまた、例えば、ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙら、１９９０、Ｎａｔｕｒｅ  ３４８：５５２〜５５４に記載されている技術を使用して生成されるファージライブラリーから単離され得る。本明細書で使用される場合、「ヒト化」抗体とは、非ヒト免疫グロブリンに由来する最小の配列を含有する、キメラの免疫グロブリン、免疫グロブリン鎖またはそれらの断片（例えば、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、または抗体の他の抗原結合サブ配列）である非ヒト（例えば、ネズミ）抗体の形態を指す。好ましくは、ヒト化抗体は、ヒト免疫グロブリン（レシピエント抗体）であり、ここで、レシピエントのＣＤＲに由来する残基が、所望の特異性、親和性および能力を有する非ヒトの種（ドナー抗体）、例えば、マウス、ラットまたはウサギのＣＤＲに由来する残基により置き換えられている。ヒト化抗体は、レシピエント抗体中にも、移入したＣＤＲまたはフレームワーク配列中にも存在しないが、抗体の性能をさらに精緻化および最適化するために含める残基を含むことができる。
【００４８】
「ヒト抗体」は、ヒトが産生する抗体および／または本明細書で開示されるヒト抗体を作製するための技術のいずれかを使用して作製された抗体のアミノ酸配列に対応するアミノ酸配列を保有する抗体である。ヒト抗体のこの定義は、非ヒト抗原結合残基を含むヒト化抗体を明確に除外する。
【００４９】
本明細書で使用される場合、「ヒト抗体」という用語は、ヒト生殖系列免疫グロブリン配列に由来する可変領域および定常領域を有する抗体を含むことを意図する。ヒト抗体のこの定義は、少なくとも１つのヒト重鎖ポリペプチドまたは少なくとも１つのヒト軽鎖ポリペプチドを含む抗体を含む。本発明のヒト抗体は、例えば、ＣＤＲ、特に、ＣＤＲ３中に、ヒト生殖系列免疫グロブリン配列によりコードされないアミノ酸残基（例えば、ｉｎ  ｖｉｔｒｏでのランダムもしくは部位特異的突然変異誘発またはｉｎ  ｖｉｖｏでの体細胞突然変異により導入される突然変異）を含むことができる。しかしながら、「ヒト抗体」という用語は、本明細書で使用される場合、別の哺乳動物種、例えば、マウスの生殖系列に由来するＣＤＲ配列が、ヒトのフレームワーク配列上にグラフトされている抗体を含む意図はない。
【００５０】
「キメラ抗体」という用語は、可変領域配列が１つの種に由来し、定常領域配列が別の種に由来する抗体、例えば、可変領域配列がマウス抗体に由来し、定常領域配列がヒト抗体に由来する抗体を指すことを意図する。
【００５１】
本明細書で使用される場合、「ヒト化」抗体とは、非ヒト免疫グロブリンに由来する最小の配列を含有する、キメラの免疫グロブリン、免疫グロブリン鎖またはそれらの断片（例えば、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、または抗体の他の抗原結合サブ配列）である非ヒト（例えば、ネズミ）抗体の形態を指す。好ましくは、ヒト化抗体は、ヒト免疫グロブリン（レシピエント抗体）であり、その中で、レシピエントの相補性決定領域（ＣＤＲ）に由来する残基が、所望の特異性、親和性および能力を有する非ヒトの種（ドナー抗体）、例えば、マウス、ラットまたはウサギのＣＤＲに由来する残基により置き換えられている。一部の場合では、ヒト免疫グロブリンのＦｖフレームワーク領域（ＦＲ）の残基が、対応する非ヒト残基により置き換えられている。さらに、ヒト化抗体は、レシピエント抗体中にも、移入したＣＤＲまたはフレームワーク配列中にも存在しないが、抗体の性能をさらに精緻化および最適化するために含める残基を含むことができる。一般に、ヒト化抗体は、実質的に全て、または少なくとも１つ、典型的には２つの可変ドメインを含み、ここで、全てまたは実質的に全てのＣＤＲ領域が、非ヒト免疫グロブリンのＣＤＲ領域に対応し、全てまたは実質的に全てのＦＲ領域が、ヒト免疫グロブリンのコンセンサス配列のＦＲ領域である。また最適には、ヒト化抗体は、免疫グロブリンの定常領域またはドメイン（Ｆｃ）、典型的には、ヒト免疫グロブリンの定常領域またはドメイン（Ｆｃ）の少なくとも一部も含む。ヒト化抗体の他の形態は、元の抗体に比して変化させた１つまたは複数のＣＤＲ（ＣＤＲ  Ｌ１、ＣＤＲ  Ｌ２、ＣＤＲ  Ｌ３、ＣＤＲ  Ｈ１、ＣＤＲ  Ｈ２、またはＣＤＲ  Ｈ３）を有し、またこれらは、元の抗体からの１つまたは複数のＣＤＲ「に由来する」１つまたは複数のＣＤＲとも呼ばれる。
【００５２】
本明細書で使用される場合、「ｍＡｂ７」という用語は、それぞれ配列番号２および配列番号３に示される重鎖および軽鎖可変領域のアミノ酸配列を含む抗ＰＤ−１抗体を指すために使用される。
ｍＡｂ７重鎖可変領域アミノ酸配列：
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＳＹＷＩＮＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＮＩＹＰＧＳＳＬＴＮＹＮＥＫＦＫＮＲＶＴＭＴＲＤＴＳＴＳＴＶＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＬＳＴＧＴＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号２）
ｍＡｂ７軽鎖可変領域アミノ酸配列：
ＤＩＶＭＴＱＳＰＤＳＬＡＶＳＬＧＥＲＡＴＩＮＣＫＳＳＱＳＬＷＤＳＧＮＱＫＮＦＬＴＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹＷＴＳＹＲＥＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＡＥＤＶＡＶＹＹＣＱＮＤＹＦＹＰＨＴＦＧＧＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号３）
ｍＡｂ７の生成および特徴付けはＷＯ２０１６／０９２４１９の実施例に記載されており、その全体の内容は参照により本明細書に組み込まれる。一部の態様では、「ｍＡｂ７」という用語は、（ａ）ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１８２の寄託番号を有するｍＡｂ７軽鎖可変領域をコードするポリヌクレオチド、および（ｂ）ＡＴＣＣ番号ＰＴＡ−１２１１８３の寄託番号を有するｍＡｂ７重鎖可変領域をコードするポリヌクレオチドによってコードされる免疫グロブリンを指す。
【００５３】
「エピトープ」という用語は、抗体が認識し、抗体の抗原結合領域の１つまたは複数において抗体が結合することができる分子の部分を指す。エピトープはしばしば、アミノ酸または糖側鎖などの表面の一連の分子からなり、特異的な三次元構造の特徴および特異的な電荷の特徴を有する。一部の態様では、エピトープは、タンパク質エピトープであり得る。タンパク質エピトープは、直線であり得るか、または立体構造であり得る。直線的なエピトープでは、タンパク質と、相互作用する分子（例えば抗体）との間の相互作用の点の全てが、タンパク質の一次アミノ酸配列に沿って直線的に存在する。「非直線的なエピトープ」または「立体構造的なエピトープ」は、エピトープに特異的な抗体が結合する抗原性タンパク質内に、近接しないポリペプチド（またはアミノ酸）を含む。「抗原性エピトープ」という用語は、本明細書で使用される場合、当該分野で周知である任意の方法、例えば、従来のイムノアッセイによって決定する場合に、抗体が特異的に結合することができる抗原の一部として定義される。抗原上の所望のエピトープが決定されると、そのエピトープに対する抗体を、例えば、本明細書に記載される技術を使用して生成することが可能になる。あるいは、発見プロセスの間に、抗体の生成および特徴付けにより、望ましいエピトープについての情報も解明され得る。次いで、この情報から、抗体を同じエピトープに対する結合について競合的にスクリーニングすることが可能になる。これを達成するためのアプローチでは、競合および交差競合研究を実施して、ＰＤ−１に対する結合について相互に競合または交差競合する抗体、例えば、抗原に対する結合について競合する抗体を見出す。
【００５４】
本明細書で使用される場合、「単離された抗体」または「精製された抗体」という用語は、その起源または誘導の供給源によって、以下：（１）そのネイティブ状態ではそれに伴っている天然に付随する成分が付随していないこと、（２）同じ種由来の他のタンパク質を含まないこと、（３）異なる種由来の細胞によって発現されること、または（４）天然に存在しないことの１から４つを有する抗体を指す。
【００５５】
試料の少なくとも約６０から７５％が単一の種の抗体を示す場合、抗体は、「実質的に純粋である」、「実質的に均一である」または「実質的に精製されている」。実質的に純粋な抗体は、典型的には約５０％、６０％、７０％、８０％または９０％ｗ／ｗの抗体試料を含むことができ、より一般的には約９５％、好ましくは９９％超純粋である。抗体の純度または均一性は、当該分野で周知であるいくつかの手段、例えば、ポリアクリルアミドゲル電気泳動またはＨＰＬＣによって試験され得る。
【００５６】
「抗体」という用語は、標的に結合し、その標的の生物学的効果を阻止または低下させる抗体を指す。一部の態様では、この用語は、標的、例えば、ＰＤ−１に結合すると、その標的が生物学的に機能するのを阻止する抗体を意味することができる。
【００５７】
エピトープに「選択的に結合する」または「特異的に結合する」（本明細書では交換可能に使用される）抗体は、当該分野で十分に理解されている用語であり、そのような特異的または選択的な結合を決定するための方法もまた、当該分野で周知である。分子が、特定の細胞または物質と、それに代わる細胞または物質と比して、より頻繁に、より迅速に、より長い持続期間で、および／またはより高い親和性で反応または会合する場合、この分子は「特異的な結合」または「選択的な結合」を示すといわれる。抗体が標的に、他の物質に結合するのに比して、より高い親和性、アビディティーで、より容易に、および／またはより長い持続期間で結合する場合、抗体は標的に「特異的に結合する」または「選択的に結合する」。例えば、ＰＤ−１のエピトープに特異的または選択的に結合する抗体は、このエピトープ配列に、他の配列に結合するのに比して、より高い親和性、アビディティーで、より容易に、および／またはより長い持続期間で結合する抗体である。また、この定義を読み取ることによって、例えば、第１の標的に特異的または選択的に結合する抗体（または部分もしくはエピトープ）は、第２の標的に特異的または選択的に結合する場合があるか、または結合しない場合があることも理解される。したがって、「特異的な結合」または「選択的な結合」は必ずしも排他的な結合である必要はない（しかし、それを含んでもよい）。必ずではないが、一般に、結合についての言及は選択的な結合を意味する。
【００５８】
本明細書で使用される場合、抗体の「免疫特異的」結合とは、抗体の抗原につながる部位と、その抗体が認識する特異的な抗原との間で生じる、抗原に特異的な結合の相互作用を指す（すなわち、抗体は、ＥＬＩＳＡまたは他のイムノアッセイ中でタンパク質と反応し、関連のないタンパク質とは検出可能に反応しない）。
【００５９】
「競合」という用語は、抗体に関して本明細書で使用される場合、第１の抗体またはその抗原結合部分が、エピトープに、第２の抗体またはその抗原結合部分が結合するのと十分に類似する様式で結合し、したがって、第１の抗体のその同種のエピトープとの結合の結果が、第２の抗体の存在下では、第２の抗体の非存在下での第１の抗体の結合と比較して検出可能に減少することを意味する。代わって、第２の抗体のそのエピトープに対する結合もまた、第１の抗体の存在下で検出可能に減少する場合もあるが、必ずしもそうである必要はない。すなわち、第１の抗体が、第２の抗体のそのエピトープに対する結合を阻害することができ、第２の抗体は、第１の抗体のその個別のエピトープに対する結合を阻害しない。しかしながら、各抗体が、他の抗体のその同種のエピトープまたはリガンドとの結合を検出可能に阻害する場合、阻害の程度が、同じ、より高いまたはより低いのいずれであっても、抗体はそれらの個別のエピトープの結合について相互に「交差競合する」といわれる。競合および交差競合する抗体の両方が本発明によって包含される。そのような競合または交差競合が生じる機構（例えば、立体障害、立体構造変化、または共通のエピトープもしくはその一部に対する結合）にかかわらず、当業者であれば、本明細書に提供される教示に基づいて、そのような競合および／または交差競合する抗体が包含され、本明細書に開示される方法にとって有用であり得ることを理解する。
【００６０】
本明細書で使用される場合、「ＰＤ−１」という用語は、ＰＤ−１およびＰＤ−１の活性の少なくとも一部を保持するそのバリアントの任意の形態を指す。ヒトＰＤ−１であることが具体的に言及されるなどの別段の記載がない限り、ＰＤ−１は、全ての哺乳動物種、例えば、ヒト、イヌ、ネコ、ウマおよびウシのネイティブ配列ＰＤ−１を含む。１つの例示的なヒトＰＤ−１は、Ｕｎｉｐｒｏｔ受託番号Ｑ１５１１６（配列番号１）として見出される。
【００６１】
【化１】
2021517129.tif 000002
【００６２】
本明細書で使用される場合、「抗ＰＤ−１抗体」とは、ＰＤ−１によって媒介されるＰＤ−１生物活性および／または下流の事象を阻害することができる抗体を指す。抗ＰＤ−１抗体は、ＰＤ−１生物活性を（顕著を含む、任意の程度まで）遮断し、拮抗し、抑制し、または低下させる抗体を包含し、ＰＤ−１生物活性には、ＰＤ−１によって媒介される下流の事象、このようなＰＤ−Ｌ１の結合および下流のシグナル伝達、ＰＤ−Ｌ２の結合および下流のシグナル伝達、Ｔ細胞増殖の阻害、Ｔ細胞活性化の阻害、ＩＦＮ分泌の阻害、ＩＬ−２分泌の阻害、ＴＮＦ分泌の阻害、ＩＬ−１０の誘導、および抗腫瘍免疫応答の阻害が含まれる。本発明の目的では、「抗ＰＤ−１抗体」（「ＰＤ−１抗体」と交換可能に呼ばれる）という用語は、全ての以前に同定されている用語、称号、ならびにＰＤ−１自体、ＰＤ−１生物活性、または生物活性の結果を、任意の意味のある程度に実質的に、無効にし、減少させ、または中和する、機能的状態および特徴を包含することが明確に理解される。一部の態様では、抗ＰＤ−１抗体はＰＤ−１に結合し、抗腫瘍免疫応答を上方制御する。抗ＰＤ−１抗体の例は本明細書で提供される。
【００６３】
「同一性」という用語は、２つのアミノ酸配列または２つの核酸配列の「同一性」パーセントを指す。同一性パーセントは一般に、配列を最適に比較する目的で整列させ（例えば、ギャップを第１の配列中に導入して、第２の配列との最良のアラインメントを得ることができる）、対応する位置のアミノ酸残基またはヌクレオチドを比較することによって決定される。「最良のアラインメント」は、最も高い同一性パーセントをもたらす２つの配列のアラインメントである。同一性パーセントは、配列内の同一のアミノ酸残基またはヌクレオチドの数を比較することによって決定される（すなわち、同一性％＝同一の位置の数／位置の総数×１００）。
【００６４】
２つの配列間の同一性パーセントの決定は、当業者に公知である数学的アルゴリズムを使用して達成され得る。２つの配列を比較するための数学的アルゴリズムの例は、ＫａｒｌｉｎおよびＡｌｔｓｃｈｕｌ（１９９０）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８７：２２６４〜２２６８のアルゴリズムであり、ＫａｒｌｉｎおよびＡｌｔｓｃｈｕｌ（１９９３）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９０：５８７３〜５８７７のように改変されている。Ａｌｔｓｃｈｕｌら（１９９０）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２１５：４０３〜４１０のＮＢＬＡＳＴおよびＸＢＬＡＳＴプログラムは、そのようなアルゴリズムを組み込んでいる。ＢＬＡＳＴヌクレオチド検索を、ＮＢＬＡＳＴプログラム、スコア＝１００、ワード長＝１２を用いて実施して、本発明の核酸分子に相同なヌクレオチド配列を得ることができる。ＢＬＡＳＴタンパク質検索を、ＸＢＬＡＳＴプログラム、スコア＝５０、ワード長＝３を用いて実施して、本発明のタンパク質分子に相同なアミノ酸配列を得ることができる。比較する目的でギャップを有するアラインメントを得るためには、Ａｌｔｓｃｈｕｌら（１９９７）Ｎｕｃｌｉｅｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．２５：３３８９〜３４０２に記載されているように、Ｇａｐｐｅｄ  ＢＬＡＳＴを利用することができる。あるいは、ＰＳＩ−Ｂｌａｓｔを使用して、分子間の遠い関係を検出する反復検索を実施することもできる（同上）。ＢＬＡＳＴ、Ｇａｐｐｅｄ  ＢＬＡＳＴ、およびＰＳＩ−Ｂｌａｓｔプログラムを利用する場合、それぞれのプログラムのデフォルトパラメータ（例えば、ＸＢＬＡＳＴおよびＮＢＬＡＳＴ）を使用することができる。ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖを参照のこと。配列を比較するために利用される数学的アルゴリズムの別の例は、ＭｙｅｒｓおよびＭｉｌｌｅｒ、ＣＡＢＩＯＳ（１９８９）のアルゴリズムである。ＧＣＧ配列アラインメントソフトウェアパッケージの一部であるＡＬＩＧＮプログラム（バージョン２．０）には、そのようなアルゴリズムが組み込まれている。当該分野で公知である、配列解析のための他のアルゴリズムには、ＴｏｒｅｌｌｉｓおよびＲｏｂｏｔｔｉ（１９９４）Ｃｏｍｐｕｔ．Ａｐｐｌ．Ｂｉｏｓｃｉ．、１０：３〜５に記載されているＡＤＶＡＮＣＥおよびＡＤＡＭ；ならびにＰｅａｒｓｏｎおよびＬｉｐｍａｎ（１９８８）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．８５：２４４４〜８に記載されているＦＡＳＴＡが含まれる。ＦＡＳＴＡ内では、ｋｔｕｐが、検索の感度および速度を設定する制御オプションである。
【００６５】
本明細書で使用される場合、「処置」は、有益なまたは所望の臨床結果を得るためのアプローチである。本発明の目的のために、有益なまたは所望の臨床結果には、以下のうちの１つまたは複数が含まれるがこれらに限定されない：新生物性もしくはがん性細胞の増殖を低減させること（または新生物性もしくはがん性細胞を破壊すること）、新生物性細胞の転移を阻害すること、腫瘍のサイズを収縮もしくは減少させること、がんの寛解、がんから生じる症状を減少させること、がんに罹患している人の生活の質を増加させること、がんを処置するために必要とされる他の薬物療法の用量を減少させること、がんの進行を遅延させること、がんを治癒すること、および／またはがんを有する患者の生存を延長させること。
【００６６】
本明細書で使用される場合、薬物、化合物または医薬組成物の「有効投薬量」または「有効量」は、任意の１つまたは複数の有益なまたは所望の結果をもたらすのに十分な量である。より具体的な側面では、有効量は、処置されている対象の疾患の症状を予防、軽減もしくは改善する、および／または処置されている対象の生存を延長する。予防的用途について、有益なまたは所望の結果には、疾患の発達の間に存在する、疾患、その合併症および中間の病理学的表現型の生化学的、組織学的および／または挙動的症状を含む、疾患のリスクを排除もしくは低減させること、疾患の重症度を軽減すること、または疾患の発症を遅延させることが含まれる。治療的用途について、有益なまたは所望の結果には、例えば、限定されないが、胃がん、肉腫、リンパ腫、ホジキンリンパ腫、白血病、頭頸部がん、頭頸部扁平上皮がん、胸腺がん、上皮がん、唾液腺がん、肝がん、胃がん、甲状腺がん、肺がん、卵巣がん、乳がん、前立腺がん、食道がん、膵がん、神経膠腫、白血病、多発性骨髄腫、腎細胞癌、膀胱がん、子宮頸がん、絨毛腫、結腸がん、口腔がん、皮膚がん、および黒色腫を含む、例えば、がんなどの疾患の１つまたは複数の症状を低減させること、疾患を処置するために必要とされる他の薬物療法の用量を減少させること、別の薬物療法の効果を増強すること、ならびに／または患者におけるがんの進行を遅延させることなどの臨床結果が含まれる。有効投薬量は、１回または複数の投与で投与され得る。本発明の目的のために、薬物、化合物または医薬組成物の有効投薬量は、直接的または間接的のいずれかで予防的処置または治療的処置を達成するのに十分な量である。臨床的文脈において理解されるように、薬物、化合物または医薬組成物の有効投薬量は、別の薬物、化合物または医薬組成物と併せて達成されてもされなくてもよい。したがって、「有効投薬量」は、１つまたは複数の治療剤を投与するという観点から検討され得、単一の薬剤は、１つまたは複数の他の薬剤と併せて、望ましい結果が達成され得るかまたは達成される場合、有効量で与えられたとみなされ得る。
【００６７】
本明細書で使用される場合、処置の目的では、「対象」という用語は、任意の対象を含み、好ましくは、標的とする病的状態、例えば、自己免疫疾患の処置を必要とする対象である。予防の目的では、対象は、任意の対象であり、好ましくは、標的とする病的状態を発症するリスクがあるか、または素因がある対象である。「対象」という用語は、生きている生物、例えば、原核生物および真核生物を含むことを意図する。対象の例には、哺乳動物、例えば、ヒト、イヌ、ウシ、ウマ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、ネコ、マウス、ウサギ、ラット、およびトランスジェニック非ヒト動物が含まれる。本発明の特定の態様では、対象はヒトである。
【００６８】
本明細書で使用される場合、「ポリヌクレオチド」または「核酸」という用語は、本明細書では交換可能に使用され、リボヌクレオチドもしくはデオキシヌクレオチドのいずれかのヌクレオチドのポリマーの形態、またはいずれかのタイプのヌクレオチドの修飾形態を意味し、一本鎖および二本鎖の形態であり得る。「ポリヌクレオチド」または「核酸」の配列は、別段の特定がない限り、その相補体を包含する。本明細書で使用される場合、「単離されたポリヌクレオチド」または「単離された核酸」という用語は、ゲノム、ｃＤＮＡもしくは合成起源またはそれらの何らかの組合せのポリヌクレオチドを意味し、その起源または誘導の供給源によって、単離されたポリヌクレオチドは、以下：（１）天然において「単離されたポリヌクレオチド」と共に見出されるポリヌクレオチドの全てまたは一部が付随しないこと、（２）「単離されたポリヌクレオチド」が天然において連結していないポリヌクレオチドに作動可能に連結していること、または（３）より大きな配列の一部として天然に存在しないことの１から３つを示す。
【００６９】
本明細書で使用される場合、「キレート化剤」という用語は、金属イオンに対して少なくとも１つの結合（例えば、共有結合性、イオン性またはその他）を形成することができる賦形剤である。キレート化剤は典型的には、組成物中で安定化剤として使用して、錯体非形成時には不安定性を促す場合がある種と錯体を形成させることができる多座配位性の配位子である。
【００７０】
本明細書で使用される場合、「緩衝液」という用語は、典型的にはその酸−塩基共役成分の作用により、液体の抗体製剤がｐＨの変化に抵抗するのを可能にする添加組成を指す。緩衝液の濃度を指す場合、言及される濃度は緩衝液の遊離酸または遊離塩基の形態のモル濃度を表すことを意図する。
【００７１】
「粘度」は、本明細書で使用される場合、「絶対粘度」であっても、または「動粘度」であってもよい。「絶対粘度」は、時には動的な粘度ともまたは単に粘度とも呼ばれ、流体の流動に対する抵抗性を記載する分量である。「動粘度」は、絶対粘度と流体の密度との指数である。動粘度は、流体の抵抗性の流動を、毛細管粘度計を使用して特徴付ける場合に報告されることが多い。等しい体積の２つの流体を、同一の毛細管粘度計中に入れ、重力により流動させる場合、粘性の流体は、粘性が低い流体よりも、毛細血管を通って流動するのに長い時間がかかる。流動を完了するのに、１つの流体では２００秒かかり、別の流体では４００秒かかる場合、動粘度スケール上では、第２の流体の粘度は、第１の流体の２倍である。両方の流体が等しい密度を有する場合、絶対粘度スケール上では、第２の流体の粘度は、第１の流体の２倍である。動粘度のディメンションはＬ２／Ｔであり、ここでＬは長さを表し、Ｔは時間を表す。動粘度のＳＩ単位はｍ２／秒である。一般に、動粘度はセンチストーク、ｃＳｔで表し、これはｍｍ２／秒に相当する。絶対粘度のディメンションはＭ／Ｌ／Ｔであり、ここでＭは質量を表し、ＬおよびＴはそれぞれ長さおよび時間を表す。絶対粘度のＳＩ単位はＰａ・秒であり、これはｋｇ／ｍ／秒に相当する。一般に、絶対粘度はセンチポアズ、ｃＰの単位で表し、これはミリパスカル−秒、ｍＰａ・秒に相当する。
【００７２】
本明細書で使用される場合、「等張化剤」または「浸透圧調節剤（ｔｏｎｉｃｉｆｉｅｒ）」という用語は、液体の抗体製剤の浸透圧を加減することができる賦形剤を指す。ある特定の態様では、等張化剤は、液体の抗体製剤の浸透圧を加減して、等張になすことができ、したがって、抗体製剤は、対象の身体組織の細胞に生理学的に適合する。さらなる他の態様では、「等張化剤」は、本明細書に記載される抗体の安定性の改善に寄与することができる。「等張」な製剤は、ヒト血液と本質的に同じ浸透圧を有する製剤である。等張な製剤は一般に、約２５０から３５０ｍＯｓｍの浸透圧を有する。「低張」という用語は、製剤がヒト血液の浸透圧を下回る浸透圧を有することを記載する。それに対応して、「高張」という用語は、製剤がヒト血液の浸透圧を上回る浸透圧を有することを記載するために使用される。等張性は、例えば、蒸気圧型または氷点降下型の浸透圧計を使用して測定され得る。等張化剤は、鏡像異性体（例えば、Ｌ−もしくはＤ−鏡像異性体）またはラセミ体の形態；アルファ、アルファ；またはベータ、ベータ；またはアルファ、ベータ；またはベータ、アルファを含む、アルファまたはベータなどの異性体；遊離酸または遊離塩基の形態；水和形態（例えば、一水和物）、または無水形態であり得る。
【００７３】
本明細書で使用される場合、「ポリオール」という用語は、複数のヒドロキシル基を有する賦形剤を指し、糖（還元糖および非還元糖）、糖アルコールおよび糖酸を含む。
本明細書で使用される場合、「界面活性剤」という用語は、液体の抗体製剤の表面張力を変化させることができる賦形剤を指す。ある特定の態様では、界面活性剤は、液体の抗体製剤の表面張力を低下させる。さらなる他の態様では、「界面活性剤」は、製剤中のいかなる抗体の安定性の改善にも寄与することができる。界面活性剤は、製剤化した抗体の凝集を低下させることおよび／もしくは製剤中の粒子の形成を最小限に留めることができ、ならびに／または吸着を低下させる。界面活性剤はまた、凍結／解凍のサイクルの間および後の抗体の安定性を改善させることもできる。
【００７４】
本明細書で使用される場合、「サッカライド」という用語は、多価アルコールの誘導体である分子のクラスを指す。サッカライドは、一般に炭水化物と称され、異なる量の糖（サッカライド）単位、例えば、単糖、二糖および多糖を含有することができる。
【００７５】
本明細書で使用される場合、「還元糖」という用語は、金属イオンを還元することまたはタンパク質中のリジンおよび他のアミノ基と共有結合性に反応することができるヘミアセタール基を含有する糖であり、「非還元糖」は、還元糖のこれらの性質を有しない糖である。
【００７６】
「リオプロテクタント」は、目的のタンパク質と組み合わせた場合、凍結乾燥および続く保存の際に、タンパク質が物理化学的に不安定になるのを顕著に阻止するか、または低下させる分子である。例示的なリオプロテクタントには、糖およびそれらに対応する糖アルコール；アミノ酸、例えば、グルタミン酸一ナトリウムまたはヒスチジン；メチルアミン、例えば、ベタイン；リオトロピックな塩、例えば、硫酸マグネシウム；ポリオール、例えば、三価のアルコールまたはより高い分子量の糖アルコール、例えば、グリセリン、デキストラン、エリスリトール、グリセロール、アラビトール、キシリトール、ソルビトールおよびマンニトール；プロピレングリコール；ポリエチレングリコール；プルロニック（登録商標）；ならびにそれらの組合せが含まれる。さらなる例示的なリオプロテクタントには、グリセリンおよびゼラチン、ならびに糖であるメリビオース（ｍｅｌｌｉｂｉｏｓｅ）、メレジトース、ラフィノース、マンノトリオースおよびスタキオースが含まれる。還元糖の例には、グルコース、マルトース、ラクトース、マルツロース、イソ−マルツロースおよびラクツロースが含まれる。非還元糖の例には、糖アルコールおよび他の直鎖ポリアルコールから選択されるポリヒドロキシ化合物の非還元性のグリコシドが含まれる。好ましい糖アルコールは、モノグリコシド、とりわけ、二糖、例えば、ラクトース、マルトース、ラクツロースおよびマルツロースを還元することによって得られる化合物である。グリコシド側基は、グルコシド性（ｇｌｕｃｏｓｉｄｉｃ）またはガラクトシド性のいずれであってもよい。糖アルコールのさらなる例は、グルシトール、マルチトール、ラクチトールおよびイソ−マルツロースである。好ましいリオプロテクタントは、非還元糖のトレハロースまたはスクロースである。
【００７７】
リオプロテクタントは、あらかじめ凍結乾燥した製剤に「リオプロテクタントとして機能する量（ｌｙｏｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  ａｍｏｕｎｔ）」で添加されており、このことは、タンパク質をリオプロテクタントのリオプロテクタントとして機能する量の存在下で凍結乾燥すると、凍結乾燥および保存に際して、タンパク質がその物理化学的安定性を本質的に保持することを意味する。
【００７８】
本明細書で使用される場合、「薬学的に許容される担体」は、活性成分と組み合わせた場合、その成分が生物活性を保持するのを可能にし、対象の免疫系とは反応しない任意の材料を含む。例には、限定されないが、標準的な医薬担体のいずれか、例えば、リン酸緩衝生理食塩水溶液、水、油／水のエマルジョンなどのエマルジョン、および種々の種類の湿潤剤が含まれる。エアロゾルまたは非経口投与に好ましい希釈剤は、リン酸緩衝生理食塩水、通常（０．９％）生理食塩水、または５％デキストロースである。そのような担体を含む組成物は、周知の従来法により製剤化される（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、第１８版、Ａ．Ｇｅｎｎａｒｏ編、Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．、Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ、１９９０；およびＲｅｍｉｎｇｔｏｎ、Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ  第２０版、Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ、２０００を参照のこと）。
【００７９】
「罹患状態の抑制（ｒｅｄｕｃｉｎｇ  ｉｎｃｉｄｅｎｃｅ）」は、重症度を低下させる何らかの行為を意味する（これには、こうした状態のために一般に使用される他の薬物および／または療法に対する（例えば、それらへの暴露の）必要性、および／またはそれらの量を低下させることを含み得る）。当業者が理解しているように、個体は、それらの処置に対する応答に関して変化する場合があり、したがって、例えば、「罹患状態の抑制の方法」は、そのような投与がその特定の個体において罹患状態のそのような抑制をもたらす可能性が高いと合理的に予想することに基づいて、抗ＰＤ−１抗体を投与することを反映する。
【００８０】
「改善」は、抗ＰＤ−１抗体を投与しない場合と比較して、１つまたは複数の症状が低減または好転することを意味する。「改善」はまた、症状の持続期間の短縮または低下も含む。
【００８１】
本明細書において「約」ある値またはパラメータという場合、その値またはパラメータ自体を示す態様を含む（かつそれを記載する）。例えば、「約Ｘ」という記載は、「Ｘ」の記載を含む。数値の範囲は、その範囲を定義する数を含む。
【００８２】
本発明の側面または態様を、マーカッシュ群または他の代替の群により記載する場合、本発明は、列挙する群全体をまとめて包含するのみならず、群の各メンバーも個別に含み、主要な群の全ての可能な亜群も含み、また、群のメンバーうちの１つまたは複数を欠く主要な群も包含する。本発明はまた、請求項に記載する発明中の群のメンバーのいずれかの１つまたは複数の明確な排除も想定する。
【００８３】
本発明またはその好ましい態様の要素を紹介する場合、冠詞「ある（ａ）」、「ある（ａｎ）」、「その（ｔｈｅ）」および「前記（ｓａｉｄ）」は、その要素の１つまたは複数があることを意味することを意図する。「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」、「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」および「有する（ｈａｖｉｎｇ）」という用語は、包括的であり、列挙した要素以外の追加の要素があり得ることを意味することを意図する。本明細書で態様を、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という言語を用いて記載する場合は必ず、これら以外の、「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｏｆ）」および／または「から本質的になる（ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ  ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｏｆ）」という用語により記載される類似の態様もまた提供していることを理解されたい。
【００８４】
別段の定義がない限り、本明細書で使用される全ての技術用語および科学用語は、本発明が属する当業者によって通常理解される意味と同じ意味を有する。矛盾が生じる場合には、定義を含む、本明細書が優先する。本明細書および特許請求の範囲の全体を通して、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」または変化形、例えば、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」または「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という単語は、記述する整数または一連の整数が含まれることを示唆しているのであって、任意の他の整数または一連の整数が排除されることを示唆しているのではないことを理解されたい。そうでないことが文脈により必要にならない限り、単数形の用語は複数形を含むものとし、複数形の用語は単数形を含むものとする。
【００８５】
例示的な方法および材料を本明細書に記載するが、本明細書に記載するものに類似のまたは均等な方法および材料もまた、本発明の実施または試験に際して使用され得る。材料、方法および例は例示に過ぎず、それらに制限する意図はない。
抗ＰＤ−１抗体組成物
一つの側面では、本発明は、抗ＰＤ−１抗体を含む製剤を提供し、この製剤は、約１ｃＰから約２５ｃＰの間の粘度を有する。別の側面では、抗ＰＤ−１抗体含有製剤の粘度を低下させるための方法が提供され、この方法は、前記抗ＰＤ−１抗体を含む水性製剤の粘度を低下させることができる化合物の、粘度を低下させる量を製剤に添加するステップを含む。製剤は、水性形態または凍結乾燥形態のいずれかであり得る。水性形態では、製剤は、約１５０ｃＰ以下、好ましくは約１２０ｃＰ以下、好ましくは約１００ｃＰ以下、好ましくは約９０ｃＰ以下、好ましくは約８０ｃＰ以下、好ましくは約７０ｃＰ以下、好ましくは約６０ｃＰ以下、好ましくは約５０ｃＰ以下、好ましくは約４０ｃＰ以下、好ましくは約３０ｃＰ以下、好ましくは約２０ｃＰ以下、好ましくは約１０ｃＰ以下、好ましくは約５ｃＰ以下の粘度を有し得る。一部の態様では、抗体を含む組成物は、２０℃で、約１ｃＰから約５００ｃＰの間、約１ｃＰから２００ｃＰの間、約１ｃＰから約１５０ｃＰの間、約１ｃＰから約１００ｃＰの間、約１ｃＰから約９０ｃＰの間、約１ｃＰから約８０ｃＰの間、約１ｃＰから約７０ｃＰの間、約１ｃＰから約６０ｃＰの間、約１ｃＰから約５０ｃＰの間、約１ｃＰから約４０ｃＰの間、約１ｃＰから約３０ｃＰの間、約１ｃＰから約２０ｃＰの間、または約１ｃＰから約１０ｃＰの間の粘度を有する。一部の態様では、製剤は、約１２０ｃＰ、約１１５ｃＰ、約１１０ｃＰ、約１０５ｃＰ、約１００ｃＰ、約９５ｃＰ、約９０ｃＰ、約８５ｃＰ、約８０ｃＰ、約７５ｃＰ、約７０ｃＰ、約６５ｃＰ、約６０ｃＰ、約５５ｃＰ、約５０ｃＰ、約４５ｃＰ、約４０ｃＰ、約３５ｃＰ、約３０ｃＰ、約２５ｃＰ、約２０ｃＰ、約１５ｃＰ、または約１０ｃＰ、または約５ｃＰの粘度を有する。一部の態様では、製剤は、約１０ｃＰから５０ｃＰの間、約１０ｃＰから１００ｃＰの間、約２０ｃＰから６０ｃＰの間、約３０ｃＰから６０ｃＰの間、約４０ｃＰから６０ｃＰの間、または約５０ｃＰから６０ｃＰの間の粘度を有する。一部の態様では、水性形態では、製剤は、約１ｃＰから１０ｃＰの間の粘度を有し得る。一部の態様では、水性形態では、製剤は、約１ｃＰから１５ｃＰの間の粘度を有し得る。一部の態様では、水性形態では、製剤は、約１ｃＰから２０ｃＰの間の粘度を有し得る。
【００８６】
本発明の別の態様は、本明細書に記載される製剤のうちのいずれかを保持する容器を含む製造についての論述を対象とする。
一部の態様では、製剤は、少なくとも１つの抗ＰＤ−１抗体を含む。一部の態様では、１つより多い抗体が存在し得る。少なくとも１つ、少なくとも２つ、少なくとも３つ、少なくとも４つ、少なくとも５つ、またはそれ以上の異なる抗体が存在し得る。一般に、２つ以上の異なる抗体が補完的な活性を有し、それらの活性は相互に有害な影響を及ぼさない。また、そのまたは各々の抗体は、抗体の有効性を増強するおよび／または補足するように働く他の薬剤と併用して使用され得る。抗体は、製剤中に約０．１〜約３００ｍｇ／ｍｌの範囲の濃度で存在し得る。一部の態様では、抗体の濃度は、約０．５ｍｇ／ｍｌ、約１ｍｇ／ｍｌ、約２ｍｇ／ｍｌ、約２．５ｍｇ／ｍｌ、約３ｍｇ／ｍｌ、約３．５ｍｇ／ｍｌ、約４ｍｇ／ｍｌ、約４．５ｍｇ／ｍｌ、約５ｍｇ／ｍｌ、約５．５ｍｇ／ｍｌ、約６ｍｇ／ｍｌ、約６．５ｍｇ／ｍｌ、約７ｍｇ／ｍｌ、約７．５ｍｇ／ｍｌ、約８ｍｇ／ｍｌ、約８．５ｍｇ／ｍｌ、約９ｍｇ／ｍｌ、約９．５ｍｇ／ｍｌ、約１０ｍｇ／ｍｌ、約１１ｍｇ／ｍｌ、約１２ｍｇ／ｍｌ、約１３ｍｇ／ｍｌ、約１４ｍｇ／ｍｌ、約１５ｍｇ／ｍｌ、約１６ｍｇ／ｍｌ、約１７ｍｇ／ｍｌ、約１８ｍｇ／ｍｌ、約１９ｍｇ／ｍｌ、約２０ｍｇ／ｍｌ、約２１ｍｇ／ｍｌ、約２２ｍｇ／ｍｌ、約２３ｍｇ／ｍｌ、約２４ｍｇ／ｍｌ、約２５ｍｇ／ｍｌ、約２６ｍｇ／ｍｌ、約２７ｍｇ／ｍｌ、約２８ｍｇ／ｍｌ、約２９ｍｇ／ｍｌ、約３０ｍｇ／ｍｌ、約３１ｍｇ／ｍｌ、約３２ｍｇ／ｍｌ、約３３ｍｇ／ｍｌ、約３４ｍｇ／ｍｌ、約３５ｍｇ／ｍｌ、約３６ｍｇ／ｍｌ、約３７ｍｇ／ｍｌ、約３８ｍｇ／ｍｌ、約３９ｍｇ／ｍｌ、約４０ｍｇ／ｍｌ、約４１ｍｇ／ｍｌ、約４２ｍｇ／ｍｌ、約４３ｍｇ／ｍｌ、約４４ｍｇ／ｍｌ、約４５ｍｇ／ｍｌ、約４６ｍｇ／ｍｌ、約４７ｍｇ／ｍｌ、約４８ｍｇ／ｍｌ、約４９ｍｇ／ｍｌ、約５０ｍｇ／ｍｌ、約５１ｍｇ／ｍｌ、約５２ｍｇ／ｍｌ、約５３ｍｇ／ｍｌ、約５４ｍｇ／ｍｌ、約５５ｍｇ／ｍｌ、約５６ｍｇ／ｍｌ、約５７ｍｇ／ｍｌ、約５８ｍｇ／ｍｌ、約５９ｍｇ／ｍｌ、約６０ｍｇ／ｍｌ、約７０ｍｇ／ｍｌ、約８０ｍｇ／ｍｌ、約９０ｍｇ／ｍｌ、約１００ｍｇ／ｍｌ、約１０１ｍｇ／ｍｌ、約１０２ｍｇ／ｍｌ、約１０２．５ｍｇ／ｍｌ、約１０３ｍｇ／ｍｌ、約１０３．５ｍｇ／ｍｌ、約１０４ｍｇ／ｍｌ、約１０４．５ｍｇ／ｍｌ、約１０５ｍｇ／ｍｌ、約１０５．５ｍｇ／ｍｌ、約１０６ｍｇ／ｍｌ、約１０６．５ｍｇ／ｍｌ、約１０７ｍｇ／ｍｌ、約１０７．５ｍｇ／ｍｌ、約１０８ｍｇ／ｍｌ、約１０８．５ｍｇ／ｍｌ、約１０９ｍｇ／ｍｌ、約１０９．５ｍｇ／ｍｌ、約１１０ｍｇ／ｍｌ、約１１１ｍｇ／ｍｌ、約１１２ｍｇ／ｍｌ、約１１３ｍｇ／ｍｌ、約１１４ｍｇ／ｍｌ、約１１５ｍｇ／ｍｌ、約１１６ｍｇ／ｍｌ、約１１７ｍｇ／ｍｌ、約１１８ｍｇ／ｍｌ、約１１９ｍｇ／ｍｌ、約１２０ｍｇ／ｍｌ、約１２１ｍｇ／ｍｌ、約１２２ｍｇ／ｍｌ、約１２３ｍｇ／ｍｌ、約１２４ｍｇ／ｍｌ、約１２５ｍｇ／ｍｌ、約１２６ｍｇ／ｍｌ、約１２７ｍｇ／ｍｌ、約１２８ｍｇ／ｍｌ、約１２９ｍｇ／ｍｌ、約１３０ｍｇ／ｍｌ、約１３１ｍｇ／ｍｌ、約１３２ｍｇ／ｍｌ、約１３３ｍｇ／ｍｌ、約１３４ｍｇ／ｍｌ、約１３５ｍｇ／ｍｌ、約１３６ｍｇ／ｍｌ、約１３７ｍｇ／ｍｌ、約１３８ｍｇ／ｍｌ、約１３９ｍｇ／ｍｌ、約１４０ｍｇ／ｍｌ、約１４１ｍｇ／ｍｌ、約１４２ｍｇ／ｍｌ、約１４３ｍｇ／ｍｌ、約１４４ｍｇ／ｍｌ、約１４５ｍｇ／ｍｌ、約１４６ｍｇ／ｍｌ、約１４７ｍｇ／ｍｌ、約１４８ｍｇ／ｍｌ、約１４９ｍｇ／ｍｌ、約１５０ｍｇ／ｍｌ、約１５１ｍｇ／ｍｌ、約１５２ｍｇ／ｍｌ、約１５３ｍｇ／ｍｌ、約１５４ｍｇ／ｍｌ、約１５５ｍｇ／ｍｌ、約１５６ｍｇ／ｍｌ、約１５７ｍｇ／ｍｌ、約１５８ｍｇ／ｍｌ、約１５９ｍｇ／ｍｌ、約１６０ｍｇ／ｍｌ、約１７０ｍｇ／ｍｌ、約１８０ｍｇ／ｍｌ、約１９０ｍｇ／ｍｌ、約２００ｍｇ／ｍｌ、約２０１ｍｇ／ｍｌ、約２０２ｍｇ／ｍｌ、約２０２．５ｍｇ／ｍｌ、約２０３ｍｇ／ｍｌ、約２０３．５ｍｇ／ｍｌ、約２０４ｍｇ／ｍｌ、約２０４．５ｍｇ／ｍｌ、約２０５ｍｇ／ｍｌ、約２０５．５ｍｇ／ｍｌ、約２０６ｍｇ／ｍｌ、約２０６．５ｍｇ／ｍｌ、約２０７ｍｇ／ｍｌ、約２０７．５ｍｇ／ｍｌ、約２０８ｍｇ／ｍｌ、約２０８．５ｍｇ／ｍｌ、約２０９ｍｇ／ｍｌ、約２０９．５ｍｇ／ｍｌ、約２１０ｍｇ／ｍｌ、約２１１ｍｇ／ｍｌ、約２１２ｍｇ／ｍｌ、約２１３ｍｇ／ｍｌ、約２１４ｍｇ／ｍｌ、約２１５ｍｇ／ｍｌ、約２１６ｍｇ／ｍｌ、約２１７ｍｇ／ｍｌ、約２１８ｍｇ／ｍｌ、約２１９ｍｇ／ｍｌ、約２２０ｍｇ／ｍｌ、約２２１ｍｇ／ｍｌ、約２２２ｍｇ／ｍｌ、約２２３ｍｇ／ｍｌ、約２２４ｍｇ／ｍｌ、約２２５ｍｇ／ｍｌ、約２２６ｍｇ／ｍｌ、約２２７ｍｇ／ｍｌ、約２２８ｍｇ／ｍｌ、約２２９ｍｇ／ｍｌ、約２３０ｍｇ／ｍｌ、約２３１ｍｇ／ｍｌ、約２３２ｍｇ／ｍｌ、約２３３ｍｇ／ｍｌ、約２３４ｍｇ／ｍｌ、約２３５ｍｇ／ｍｌ、約２３６ｍｇ／ｍｌ、約２３７ｍｇ／ｍｌ、約２３８ｍｇ／ｍｌ、約２３９ｍｇ／ｍｌ、約２４０ｍｇ／ｍｌ、約２４１ｍｇ／ｍｌ、約２４２ｍｇ／ｍｌ、約２４３ｍｇ／ｍｌ、約２４４ｍｇ／ｍｌ、約２４５ｍｇ／ｍｌ、約２４６ｍｇ／ｍｌ、約２４７ｍｇ／ｍｌ、約２４８ｍｇ／ｍｌ、約２４９ｍｇ／ｍｌ、約２５０ｍｇ／ｍｌ、約２５１ｍｇ／ｍｌ、約２５２ｍｇ／ｍｌ、約２５３ｍｇ／ｍｌ、約２５４ｍｇ／ｍｌ、約２５５ｍｇ／ｍｌ、約２５６ｍｇ／ｍｌ、約２５７ｍｇ／ｍｌ、約２５８ｍｇ／ｍｌ、約２５９ｍｇ／ｍｌ、約２６０ｍｇ／ｍｌ、約２７０ｍｇ／ｍｌ、約２８０ｍｇ／ｍｌ、約２９０ｍｇ／ｍｌ、または約３００ｍｇ／ｍｌである。
【００８７】
本発明の一部の態様によれば、ｐＨは、約ｐＨ４．０〜６．０、好ましくは、約ｐＨ５．０から、約ｐＨ４．５、約４．６、約４．７、約４．８、約４．９、約５．０、約５．１、約５．２、約５．３、約５．４または約５．５のいずれかの間の範囲内であり得る。さらに好ましくは、ｐＨは、約ｐＨ４．９、５．０または５．１のいずれか１つの間から選択される範囲内である。一部の態様では、ｐＨは、ｐＨ５．０＋／−０．５である。これらの範囲におけるｐＨの値は、組成物により低い粘度をもたらす。
【００８８】
一部の態様では、製剤はアルギニンを含み得る。一部の態様では、アルギニンは、アルギニン塩酸塩またはアルギニンＨＣｌである。［Ｂｒｙａｎ：製剤７はアルギニンを含有しないが、本発明者らはこれを代替として含む。同じ注釈が、製剤７には存在しないが、この記述に含まれる他の賦形剤などにも当てはまる。］アルギニンの濃度は、約０．１ミリモル（ｍＭ）〜約２００ｍＭの範囲であり得る。一部の態様では、アルギニンの濃度は、約１０ｍＭ〜約１５０ｍＭ、約５０ｍＭ〜約１３０ｍＭ、約８０ｍＭ〜約１２０ｍＭ、または約９０ｍＭ〜約１１０ｍＭである。一部の態様では、アルギニンの濃度は、約１ｍＭ、約２ｍＭ、約３ｍＭ、約４ｍＭ、約５ｍＭ、約６ｍＭ、約７ｍＭ、約８ｍＭ、約９ｍＭ、約１０ｍＭ、約１１ｍＭ、約１２ｍＭ、約１３ｍＭ、約１４ｍＭ、約１５ｍＭ、約１６ｍＭ、約１７ｍＭ、約１８ｍＭ、約１９ｍＭ、約２０ｍＭ、約２１ｍＭ、約２２ｍＭ、約２３ｍＭ、約２４ｍＭ、約２５ｍＭ、約３０ｍＭ、約３５ｍＭ、約４０ｍＭ、約４５ｍＭ、約５０ｍＭ、約５５ｍＭ、約６０ｍＭ、約６５ｍＭ、約７０ｍＭ、約７５ｍＭ、約８０ｍＭ、約８５ｍＭ、約９０ｍＭ、ａ約９５ｍＭ、約１００ｍＭ、約１０５ｍＭ、約１１０ｍＭ、約１１５ｍＭ、約１２０ｍＭ、約１２５ｍＭ、約１３０ｍＭ、約１３５ｍＭ、約１４０ｍＭ、約１４５ｍＭ、約１５０ｍＭ、約１５５ｍＭ、約１６０ｍＭ、約１６５ｍＭ、約１７０ｍＭ、約１７５ｍＭ、約１８０ｍＭ、約１８５ｍＭ、約１９０ｍＭ、約１９５ｍＭ、または約２００ｍＭである。一部の態様では、アルギニンの濃度は１００ｍＭである。
【００８９】
一部の態様では、等張化剤は、ポリオール、サッカライド、炭水化物、塩、例えば、塩化ナトリウム、またはそれらの混合物を含むことができる。ポリオールは、例えば、非限定的に、約６００ｋＤ未満（例えば、約１２０〜約４００ｋＤの範囲）の分子量を有し得、例えば、非限定的に、マンニトール、トレハロース、ソルビトール、エリスリトール、イソマルトース（ｉｓｏｍａｌｔ）、ラクチトール、マルチトール、キシリトール、グリセロール、ラクチトール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、イノシトール、またはそれらの混合物であり得る。サッカライドまたは炭水化物は、例えば、非限定的に、単糖、二糖もしくは多糖、または上記のうちのいずれかの混合物であり得る。サッカライドまたは炭水化物は、例えば、非限定的に、フルクトース、グルコース、マンノース、スクロース、ソルボース、キシロース、ラクトース、マルトース、スクロース、デキストラン、プルラン、デキストリン、シクロデキストリン、可溶性デンプン、ヒドロキシエチルデンプン、水溶性グルカン、またはそれらの混合物であり得る。等張化剤は、例えば、非限定的に、還元糖もしくは非還元糖、またはそれらの混合物などのサッカライドを含むことができる。等張化剤は、例えば、非限定的に、スクロース、トレハロース、およびそれらの混合物などの非還元糖であるサッカライドを含むことができる。
【００９０】
組成物中の等張化剤の濃度は、約１ｍｇ／ｍｌ〜約３００ｍｇ／ｍｌ、約１ｍｇ／ｍｌ〜約２００ｍｇ／ｍｌ、または約１ｍｇ／ｍｌ〜約１００ｍｇ／ｍｌの範囲である。好ましくは、組成物中の等張化剤の濃度は、約０．５ｍｇ／ｍｌ、約１ｍｇ／ｍｌ、約２ｍｇ／ｍｌ、約２．５ｍｇ／ｍｌ、約３ｍｇ／ｍｌ、約３．５ｍｇ／ｍｌ、約４ｍｇ／ｍｌ、約４．５ｍｇ／ｍｌ、約５ｍｇ／ｍｌ、約５．５ｍｇ／ｍｌ、約６ｍｇ／ｍｌ、約６．５ｍｇ／ｍｌ、約７ｍｇ／ｍｌ、約７．５ｍｇ／ｍｌ、約８ｍｇ／ｍｌ、約８．５ｍｇ／ｍｌ、約９ｍｇ／ｍｌ、約９．５ｍｇ／ｍｌ、約１０ｍｇ／ｍｌ、約１１ｍｇ／ｍｌ、約１２ｍｇ／ｍｌ、約１３ｍｇ／ｍｌ、約１４ｍｇ／ｍｌ、約１５ｍｇ／ｍｌ、約１６ｍｇ／ｍｌ、約１７ｍｇ／ｍｌ、約１８ｍｇ／ｍｌ、約１９ｍｇ／ｍｌ、約２０ｍｇ／ｍｌ、約２１ｍｇ／ｍｌ、約２２ｍｇ／ｍｌ、約２３ｍｇ／ｍｌ、約２４ｍｇ／ｍｌ、約２５ｍｇ／ｍｌ、約２６ｍｇ／ｍｌ、約２７ｍｇ／ｍｌ、約２８ｍｇ／ｍｌ、約２９ｍｇ／ｍｌ、約３０ｍｇ／ｍｌ、約３１ｍｇ／ｍｌ、約３２ｍｇ／ｍｌ、約３３ｍｇ／ｍｌ、約３４ｍｇ／ｍｌ、約３５ｍｇ／ｍｌ、約３６ｍｇ／ｍｌ、約３７ｍｇ／ｍｌ、約３８ｍｇ／ｍｌ、約３９ｍｇ／ｍｌ、約４０ｍｇ／ｍｌ、約４１ｍｇ／ｍｌ、約４２ｍｇ／ｍｌ、約４３ｍｇ／ｍｌ、約４４ｍｇ／ｍｌ、約４５ｍｇ／ｍｌ、約４６ｍｇ／ｍｌ、約４７ｍｇ／ｍｌ、約４８ｍｇ／ｍｌ、約４９ｍｇ／ｍｌ、約５０ｍｇ／ｍｌ、約５１ｍｇ／ｍｌ、約５２ｍｇ／ｍｌ、約５３ｍｇ／ｍｌ、約５４ｍｇ／ｍｌ、約５５ｍｇ／ｍｌ、約５６ｍｇ／ｍｌ、約５７ｍｇ／ｍｌ、約５８ｍｇ／ｍｌ、約５９ｍｇ／ｍｌ、約６０ｍｇ／ｍｌ、約６５ｍｇ／ｍｌ、約７０ｍｇ／ｍｌ、約７５ｍｇ／ｍｌ、約８０ｍｇ／ｍｌ、約８１ｍｇ／ｍｌ、約８２ｍｇ／ｍｌ、約８３ｍｇ／ｍｌ、約８４ｍｇ／ｍｌ、約８５ｍｇ／ｍｌ、約８６ｍｇ／ｍｌ、約８７ｍｇ／ｍｌ、約８８ｍｇ／ｍｌ、約８９ｍｇ／ｍｌ、約９０ｍｇ／ｍｌ、約９１ｍｇ／ｍｌ、約９２ｍｇ／ｍｌ、約９３ｍｇ／ｍｌ、約９４ｍｇ／ｍｌ、約９５ｍｇ／ｍｌ、約９６ｍｇ／ｍｌ、約９７ｍｇ／ｍｌ、約９８ｍｇ／ｍｌ、約９９ｍｇ／ｍｌ、約１００ｍｇ／ｍｌ、約１０１ｍｇ／ｍｌ、約１０２ｍｇ／ｍｌ、約１０３ｍｇ／ｍｌ、約１０４ｍｇ／ｍｌ、約１０５ｍｇ／ｍｌ、約１０６ｍｇ／ｍｌ、約１０７ｍｇ／ｍｌ、約１０８ｍｇ／ｍｌ、約１０９ｍｇ／ｍｌ、約１１０ｍｇ／ｍｌ、約１１１ｍｇ／ｍｌ、約１１２ｍｇ／ｍｌ、約１１３ｍｇ／ｍｌ、約１１４ｍｇ／ｍｌ、約１１５ｍｇ／ｍｌ、約１１６ｍｇ／ｍｌ、約１１７ｍｇ／ｍｌ、約１１８ｍｇ／ｍｌ、約１１９ｍｇ／ｍｌ、約１２０ｍｇ／ｍｌ、約１２１ｍｇ／ｍｌ、約１２２ｍｇ／ｍｌ、約１２３ｍｇ／ｍｌ、約１２４ｍｇ／ｍｌ、約１２５ｍｇ／ｍｌ、約１２６ｍｇ／ｍｌ、約１２７ｍｇ／ｍｌ、約１２８ｍｇ／ｍｌ、約１２９ｍｇ／ｍｌ、約１３０ｍｇ／ｍｌ、約１３１ｍｇ／ｍｌ、約１３２ｍｇ／ｍｌ、約１３３ｍｇ／ｍｌ、約１３４ｍｇ／ｍｌ、約１３５ｍｇ／ｍｌ、約１３６ｍｇ／ｍｌ、約１３７ｍｇ／ｍｌ、約１３８ｍｇ／ｍｌ、約１３９ｍｇ／ｍｌ、約１４０ｍｇ／ｍｌ、約１４１ｍｇ／ｍｌ、約１４２ｍｇ／ｍｌ、約１４３ｍｇ／ｍｌ、約１４４ｍｇ／ｍｌ、約１４５ｍｇ／ｍｌ、約１４６ｍｇ／ｍｌ、約１４７ｍｇ／ｍｌ、約１４８ｍｇ／ｍｌ、約１４９ｍｇ／ｍｌ、または約１５０ｍｇ／ｍｌである。
【００９１】
界面活性剤は、例えば、非限定的に、ポリソルベート、ポロキサマー、トリトン、ドデシル硫酸ナトリウム、ラウリル硫酸ナトリウム、オクチルグリコシドナトリウム、ラウリル−スルホベタイン、ミリスチル−スルホベタイン、リノレイル−スルホベタイン、ステアリル−スルホベタイン、ラウリル−サルコシン、ミリスチル−サルコシン、リノレイル−サルコシン、ステアリル−サルコシン、リノレイル−ベタイン、ミリスチル−ベタイン、セチル−ベタイン、ラウロアミドプロピル−ベタイン、コカミドプロピル−ベタイン、リノレアミドプロピル−ベタイン、ミリストアミドプロピル−ベタイン、パーミドプロピル−ベタイン（ｐａｌｍｉｄｏｐｒｏｐｙｌ−ｂｅｔａｉｎ）、イソステアラミドプロピル−ベタイン、ミリストアミドプロピル−ジメチルアミン、パーミドプロピル−ジメチルアミン（ｐａｌｍｉｄｏｐｒｏｐｙｌ−ｄｉｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ）、イソステアラミドプロピル−ジメチルアミン、メチルココイルタウリン酸ナトリウム、メチルオレイルタウリン酸二ナトリウム、ジヒドロキシプロピルＰＥＧ５リノレアンモニウムクロリド、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、およびそれらの混合物であり得る。界面活性剤は、例えば、非限定的に、ポリソルベート２０、ポリソルベート２１、ポリソルベート４０、ポリソルベート６０、ポリソルベート６１、ポリソルベート６５、ポリソルベート８０、ポリソルベート８１、ポリソルベート８５、ＰＥＧ３３５０およびそれらの混合物であり得る。一部の態様では、界面活性剤はポリソルベート８０（ＰＳ８０）である。
【００９２】
界面活性剤の濃度は一般に、約０．０１ｍｇ／ｍｌ〜約１０ｍｇ／ｍｌ、約０．０１ｍｇ／ｍｌ〜約５．０ｍｇ／ｍｌ、約０．０１ｍｇ／ｍｌ〜約２．０ｍｇ／ｍｌ、約０．０１ｍｇ／ｍｌ〜約１．５ｍｇ／ｍｌ、約０．０１ｍｇ／ｍｌ〜約１．０ｍｇ／ｍｌ、約０．０１ｍｇ／ｍｌ〜約０．５ｍｇ／ｍｌ、約０．０１ｍｇ／ｍｌ〜約０．４ｍｇ／ｍｌ、約０．０１ｍｇ／ｍｌ〜約０．３ｍｇ／ｍｌ、約０．０１ｍｇ／ｍｌ〜約０．２ｍｇ／ｍｌ、約０．０１ｍｇ／ｍｌ〜約０．１５ｍｇ／ｍｌ、約０．０１ｍｇ／ｍｌ〜約０．１ｍｇ／ｍｌ、または約０．０１ｍｇ／ｍｌ〜約０．０５ｍｇ／ｍｌの範囲である。さらに好ましくは、界面活性剤の濃度は、約０．５ｍｇ／ｍｌ、約０．０５ｍｇ／ｍｌ、約０．０６ｍｇ／ｍｌ、約０．０７ｍｇ／ｍｌ、約０．０８ｍｇ／ｍｌ、約０．０９ｍｇ／ｍｌ、約０．１ｍｇ／ｍｌ、約０．１１ｍｇ／ｍｌ、約０．１２ｍｇ／ｍｌ、約０．１３ｍｇ／ｍｌ、約０．１４ｍｇ／ｍｌ、約０．１５ｍｇ／ｍｌ、約０．１６ｍｇ／ｍｌ、約０．１７ｍｇ／ｍｌ、約０．１８ｍｇ／ｍｌ、約０．１９ｍｇ／ｍｌ、約０．２ｍｇ／ｍｌである。一部の態様では、界面活性剤の濃度は０．２ｍｇ／ｍｌである。
【００９３】
緩衝液は、例えば、非限定的に、酢酸塩、ヒスチジン、コハク酸塩、グルコン酸塩、クエン酸塩、酢酸、リン酸塩、リン酸、アスコルビン酸塩、酒石酸（ｔａｒｔａｒｔｉｃ  ａｃｉｄ）、マレイン酸、グリシン、乳酸塩、乳酸、アスコルビン酸、イミダゾール、炭酸水素塩および炭酸、コハク酸、安息香酸ナトリウム、安息香酸、グルコン酸塩、エデト酸塩、酢酸塩、リンゴ酸塩、イミダゾール、トリス、リン酸塩、ならびにそれらの混合物であり得る。一部の態様では、緩衝液はヒスチジン緩衝液であり、ヒスチジンは、Ｌ−ヒスチジンもしくはＤ−ヒスチジンのいずれか、ヒスチジンの溶媒和形態、ヒスチジンの水和形態（例えば、一水和物）、ヒスチジンの塩（例えば、ヒスチジン塩酸塩）もしくはヒスチジンの無水形態、またはそれらの混合物を含むことができる。好ましくは、緩衝液は酢酸塩緩衝液であり、酢酸塩は、酢酸ナトリウム、酢酸、またはそれらの混合物を含むことができる。
【００９４】
緩衝液の濃度は、約０．１ミリモル（ｍＭ）〜約１００ｍＭの範囲であり得る。好ましくは、緩衝液の濃度は、約０．５ｍＭ〜約５０ｍＭ、さらに好ましくは約１ｍＭ〜約３０ｍＭ、より好ましくは約１ｍＭ〜約１８ｍＭ、なお好ましくは約１ｍＭ〜約１５ｍＭである。好ましくは、緩衝液の濃度は、約１ｍＭ、約２ｍＭ、約３ｍＭ、約４ｍＭ、約５ｍＭ、約６ｍＭ、約７ｍＭ、約８ｍＭ、約９ｍＭ、約１０ｍＭ、約１１ｍＭ、約１２ｍＭ、約１３ｍＭ、約１４ｍＭ、約１５ｍＭ、約１６ｍＭ、約１７ｍＭ、約１８ｍＭ、約１９ｍＭ、約２０ｍＭ、約２１ｍＭ、約２２ｍＭ、約２３ｍＭ、約２４ｍＭ、約２５ｍＭ、約３０ｍＭ、約３５ｍＭ、約４０ｍＭ、約４５ｍＭまたは約５０ｍＭである。一部の態様では、緩衝液の濃度は、約１９０ｍＭ、約２００ｍＭ、約２１０ｍＭ、約２２０ｍＭ、約２３０ｍＭ、約２４０ｍＭ、約２５０ｍＭ、約２６０ｍＭ、約２７０ｍＭ、約２８０ｍＭ、約２９０、約３００ｍＭ、約３１０ｍＭまたは約３２０ｍＭである。
【００９５】
一部の態様では、キレート化剤は、アミノポリカルボン酸、ヒドロキシアミノカルボン酸、Ｎ−置換グリシン、２−（２−アミノ−２−オキソエチル（ｏｘｏｃｔｈｙｌ））アミノエタンスルホン酸（ＢＥＳ）、デフェロキサミン（ＤＥＦ）、クエン酸、ナイアシンアミドおよびデスオキシコール酸塩、ならびにそれらの混合物からなる群から選択され得る。一部の態様では、キレート化剤は、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、ジエチレントリアミン五酢酸５（ＤＴＰＡ）、ニトリロ三酢酸（ＮＴＡ）、Ｎ−２−アセトアミド−２−イミノ二酢酸（ＡＤＡ）、ビス（アミノエチル）グリコールエーテル、Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−四酢酸（ＥＧＴＡ）、トランス−ジアミノシクロヘキサン四酢酸（ＤＣＴＡ）、グルタミン酸およびアスパラギン酸、Ｎ−ヒドロキシエチルイミノ二酢酸（ＨＩＭＤＡ）、Ｎ，Ｎ−ビス−ヒドロキシエチルグリシン（ビシン）およびＮ−（トリスヒドロキシメチルメチル）１０グリシン（トリシン）、グリシルグリシン、デスオキシコール酸ナトリウム、エチレンジアミン；プロピレンジアミン；ジエチレントリアミン；トリエチレンテトラアミン（トリエン）、エチレンジアミンテトラアセトＥＤＴＡ；ＥＤＴＡ二ナトリウム、ＥＤＴＡ、ＥＤＴＡカルシウム、シュウ酸、リンゴ酸塩、クエン酸、クエン酸一水和物およびクエン酸三ナトリウム−二水和物、８−ヒドロキシキノレート、アミノ酸、ヒスチジン、システイン、メチオニン、ペプチド、ポリペプチドおよびタンパク質、ならびにそれらの混合物からなる群から選択される。一部の態様では、キレート化剤は、エデト酸二カリウム、エデト酸二ナトリウム、エデト酸カルシウム二ナトリウム、エデト酸ナトリウム、エデト酸三ナトリウムおよびエデト酸カリウムを含む、ＥＤＴＡの塩からなる群から選択され；デフェロキサミン（ＤＥＦ）の適切な塩は、メシル酸デフェロキサミン（ＤＦＭ）またはそれらの混合物である。本発明で使用されるキレート化剤は、可能であれば、化合物の遊離酸もしくは遊離塩基の形態または塩の形態として存在し得、また、化合物または対応する塩の無水、溶媒和または水和の形態としても存在し得る。所与のｐＨおよびエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）の同じ濃度で溶液に溶解した後、ナトリウムおよび水を含有するＥＤＴＡの種々の塩、遊離酸、水和または無水の形態は、同等のキレート剤とみなされる。例えば、０．０５００ｇ／ＬのＥＤＴＡ二ナトリウム二水和物（ＦＷ：３７２．３）、０．０３９３ｇ／ＬのＥＤＴＡ（ＦＷ：２９２．３）、０．０４５２ｇ／ＬのＥＤＴＡ二ナトリウム（ＦＷ：３３６．２）、０．０４８１ｇ／ＬのＥＤＴＡ三ナトリウム（ｙｒｉｓｏｄｉｕｍ）（ＦＷ：３５８．２）、０．０５１１ｇ／ＬのＥＤＴＡ四ナトリウム（ＦＷ：３８０．２）、０．０４２２ｇ／ＬのＥＤＴＡナトリウム（Ｓｓｏｄｉｕｍ）（ＦＷ：３１４．２）、および０．０４４６ｇ／ＬのＥＤＴＡナトリウム水和物（ＦＷ：３３２．３）の全ては１３４．４μＭのＥＤＴＡを含有し、同等のキレート化剤とみなされる。
【００９６】
最も好ましくは、キレート化剤は、例えば、非限定的に、ＥＤＴＡ二ナトリウム、ＥＤＴＡカルシウム、またはＥＤＴＡ二ナトリウム二水和物などのＥＤＴＡである。
ＥＤＴＡ二ナトリウムが、増強された抗体の安定性および／または凝集に対する抵抗性を組成物にもたらすので、特に好ましい。
【００９７】
キレート化剤の濃度は一般に、約０．０１ｍｇ／ｍｌ〜約５０ｍｇ／ｍｌ、約１ｍｇ／ｍｌ〜約１０．０ｍｇ／ｍｌ、約５ｍｇ／ｍｌ〜約１５．０ｍｇ／ｍｌ、約０．０１ｍｇ／ｍｌ〜約１．０ｍｇ／ｍｌ、または約０．０３ｍｇ／ｍｌ〜約０．５ｍｇ／ｍｌの範囲である。さらに好ましくは、キレート化剤の濃度は一般に、約０．０１ｍＭ〜約２．０ｍＭ、約０．０１ｍＭ〜約１．５ｍＭ、約０．０１ｍＭ〜約０．５ｍＭ、約０．０１ｍＭ〜約０．４ｍＭ、約０．０１ｍＭ〜約０．３ｍＭ、約０．０１ｍＭ〜約０．２ｍＭ、約０．０１ｍＭ〜約０．１５ｍＭ、約０．０１ｍＭ〜約０．１ｍＭ、約０．０１ｍＭ〜約０．０９ｍＭ、約０．０１ｍＭ〜約０．０８ｍＭ、約０．０１ｍＭ〜約０．０７ｍＭ、約０．０１ｍＭ〜約０．０６ｍＭ、約０．０１ｍＭ〜約０．０５ｍＭ、約０．０１ｍＭ〜約０．０４ｍＭ、約０．０１ｍＭ〜約０．０３ｍＭ、約０．０１ｍＭ〜約０．０２ｍＭ、または約０．０５ｍＭ〜約０．０１ｍＭの範囲である。好ましくは、キレート化剤の濃度は、約０．０１ｍｇ／ｍｌ、０．０２ｍｇ／ｍｌ、０．０３ｍｇ／ｍｌ、約０．０４ｍｇ／ｍｌ、約０．０５ｍｇ／ｍｌ、約０．０６ｍｇ／ｍｌ、約０．０７ｍｇ／ｍｌ、約０．１０ｍｇ／ｍｌ、約０．２０ｍｇ／ｍｌであり得る。さらに好ましくは、キレート化剤の濃度は、約０．０４ｍｇ／ｍｌ、約０．０４１ｍｇ／ｍｌ、約０．０４２ｍｇ／ｍｌ、約０．０４３ｍｇ／ｍｌ、約０．０４４ｍｇ／ｍｌ、約０．０４５ｍｇ／ｍｌ、約０．０４６ｍｇ／ｍｌ、約０．０４７ｍｇ／ｍｌ、約０．０４８ｍｇ／ｍｌ、約０．０４９ｍｇ／ｍｌ、約０．０５ｍｇ／ｍｌ、約０．０５１ｍｇ／ｍｌ、約０．０５２ｍｇ／ｍｌ、約０．０５３ｍｇ／ｍｌ、約０．０５４ｍｇ／ｍｌ、約０．０５５ｍｇ／ｍｌ、または約０．０５６ｍｇ／ｍｌである。最も好ましくは、キレート化剤の濃度は約０．０５ｍｇ／ｍｌである。
【００９８】
キレート化剤は、本発明の組成物中で、還元型酸素種の形成を減らすこと、酸性種（例えば、脱アミド）の形成を低下させること、抗体の凝集を低下させること、および／または抗体の断片化を低下させること、および／または抗体の酸化を低下させることができる。そのようなキレート化剤は、キレート化剤の保護を欠く抗体と比較して、製剤化する抗体の分解を低下させるか、または阻止することができる。
【００９９】
別段の記載がない限り、本明細書に列挙される濃度は、周囲条件、すなわち、２５℃および大気圧における濃度である。
好ましい態様では、製剤は抗酸化物質を含まない。例えば、本明細書で提供される組成物の好ましい態様は、メチオニン、チオ硫酸ナトリウム、カタラーゼまたは白金を含まない。
【０１００】
一部の態様では、製剤は抗酸化剤を含むことができる。一部の態様では、抗酸化物質は、メチオニン、チオ硫酸ナトリウム、カタラーゼおよび白金を含む群から選択される。
抗酸化物質の濃度は一般に、約０．０１ｍｇ／ｍｌ〜約５０ｍｇ／ｍｌ、約０．０１ｍｇ／ｍｌ〜約１０．０ｍｇ／ｍｌ、約０．０１ｍｇ／ｍｌ〜約５．０ｍｇ／ｍｌ、約０．０１ｍｇ／ｍｌ〜約１．０ｍｇ／ｍｌ、または約０．０１ｍｇ／ｍｌ〜約０．０２ｍｇ／ｍｌの範囲である。好ましくは、抗酸化物質の濃度は、約０．０１ｍｇ／ｍｌ、０．０２ｍｇ／ｍｌ、０．０３ｍｇ／ｍｌ、約０．０４ｍｇ／ｍｌ、約０．０５ｍｇ／ｍｌ、約０．０６ｍｇ／ｍｌ、約０．０７ｍｇ／ｍｌ、０．０８ｍｇ／ｍｌ、０．０９ｍｇ／ｍｌ、約０．１０ｍｇ／ｍｌ、０．１１ｍｇ／ｍｌ、０．１２ｍｇ／ｍｌ、０．１３ｍｇ／ｍｌ、約０．１４ｍｇ／ｍｌ、約０．１５ｍｇ／ｍｌ、約０．１６ｍｇ／ｍｌ、約０．１７ｍｇ／ｍｌ、０．１８ｍｇ／ｍｌ、０．１９ｍｇ／ｍｌ、約０．２０ｍｇ／ｍｌ、約０．２５ｍｇ／ｍｌ、０．３ｍｇ／ｍｌ、０．４ｍｇ／ｍｌ、０．５ｍｇ／ｍｌ、０．６ｍｇ／ｍｌ、０．７ｍｇ／ｍｌ、０．８ｍｇ／ｍｌ、０．９ｍｇ／ｍｌ、１．０ｍｇ／ｍｌであり得る。最も好ましくは、抗酸化物質の濃度は、約０．０１ｍｇ／ｍｌである。
【０１０１】
一部の態様では、製剤は、保存物質を含むことができる。好ましくは、保存剤は、フェノール、ｍ−クレゾール、ベンジルアルコール、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンザルトニウム（ｂｅｎｚａｌｔｈｏｎｉｕｍ  ｃｈｌｏｒｉｄｅ）、フェノキシエタノールおよびメチルパラベンから選択される。
【０１０２】
保存物質の濃度は一般に、約０．００１ｍｇ／ｍｌ〜約５０ｍｇ／ｍｌ、約０．００５ｍｇ／ｍｌ〜約１５．０ｍｇ／ｍｌ、約０．００８ｍｇ／ｍｌ〜約１２．０ｍｇ／ｍｌ、または約０．０１ｍｇ／ｍｌ〜約１０．０ｍｇ／ｍｌの範囲である。好ましくは、保存物質の濃度は、約０．１ｍｇ／ｍｌ、０．２ｍｇ／ｍｌ、０．３ｍｇ／ｍｌ、約０．４ｍｇ／ｍｌ、約０．５ｍｇ／ｍｌ、約０．６ｍｇ／ｍｌ、約０．７ｍｇ／ｍｌ、０．８ｍｇ／ｍｌ、０．９ｍｇ／ｍｌ、約１．０ｍｇ／ｍｌ、２．０ｍｇ／ｍｌ、３．０ｍｇ／ｍｌ、約４．０ｍｇ／ｍｌ、約５．０ｍｇ／ｍｌ、約６．０ｍｇ／ｍｌ、約７．０ｍｇ／ｍｌ、８．０ｍｇ／ｍｌ、９．０ｍｇ／ｍｌ、約９．１ｍｇ／ｍｌ、約９．２ｍｇ／ｍｌ、９．３ｍｇ／ｍｌ、９．４ｍｇ／ｍｌ、９．５ｍｇ／ｍｌ、９．６ｍｇ／ｍｌ、９．７ｍｇ／ｍｌ、９．８ｍｇ／ｍｌ、９．９ｍｇ／ｍｌ、１０．０ｍｇ／ｍｌであり得る。最も好ましくは、保存物質の濃度は、約０．１ｍｇ／ｍｌまたは９．０ｍｇ／ｍＬである。
【０１０３】
一部の態様では、組成物は抗酸化物質を含有しない。
一部の態様では、組成物は保存物質を含有しない。
一部の態様では、抗体は、例えば、ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＡおよびＩｇＥなどの重鎖定常領域；ならびにＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３およびＩｇＧ４などの任意のアイソタイプを含む。好ましくは、抗体はＩｇＧ２またはＩｇＧ４抗体である。一部の態様では、抗体は、以下の突然変異（Ａｒｍｏｕｒら、２００３、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  ４０  ５８５〜５９３）：Ｅ２３３Ｆ２３４Ｌ２３５からＰ２３３Ｖ２３４Ａ２３５（ＩｇＧ４Δｃ）を含むＩｇＧ４の定常領域を含み、ここで番号付けは野生型ＩｇＧ４を基準にしている。さらに別の態様では、Ｆｃは、Ｇ２３６が欠失しているヒトＩｇＧ４  Ｅ２３３Ｆ２３４Ｌ２３５からＰ２３３Ｖ２３４Ａ２３５（ＩｇＧ４Δｂ）である。一部の態様では、Ｆｃは、ヒンジ安定化突然変異Ｓ２２８からＰ２２８を含有する任意のヒトＩｇＧ４  Ｆｃ（ＩｇＧ４、ＩｇＧ４ΔｂまたはＩｇＧ４Δｃ）である（Ａａｌｂｅｒｓｅら、２００２、Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  １０５、９〜１９）。
【０１０４】
一部の態様では、抗体は、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、抗体断片（例えば、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、Ｆｃ、ＳｃＦｖなど）、キメラ抗体、二重特異性抗体、ヘテロコンジュゲート抗体、単鎖（ＳｃＦｖ）、それらの突然変異体、抗体の一部（例えば、ドメイン抗体）を含む融合タンパク質、ヒト化抗体、ヒト抗体、および必要な特異性の抗原認識部位を含む免疫グロブリン分子の任意の他の修飾された構成からなる群から選択され得、これらの抗体には、抗体のグリコシル化バリアント、抗体のアミノ酸配列バリアント、および共有結合的に修飾された抗体が含まれる。抗体は、ネズミ、ラット、ヒト、または任意の他の起源（キメラ抗体またはヒト化抗体を含む）であり得る。一部の態様では、抗体は、ヒトであり得るが、より好ましくは、ヒト化されている。好ましくは、抗体は単離されており、さらに好ましくは抗体は実質的に純粋である。抗体が抗体断片である場合、これは好ましくは、元の抗体の機能的特徴、すなわち、リガンド結合性および／またはアンタゴニストもしくはアゴニストの活性を保持する。
【０１０５】
例示的な抗ＰＤ−１抗体には、限定されないが、例えば、ニボルマブ（ＯＰＤＩＶＯ（登録商標）、ＯＮＯ−４５３８、ＢＭＳ−９３６５５８、ＭＤＸ１１０６、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ  Ｃｏｍｐａｎｙ）、ペンブロリズマブ（ＫＥＹＴＲＵＤＡ（登録商標）、ＭＫ−３４７５、ランブロリズマブ、Ｍｅｒｃｋ  ＆  Ｃｏ．，Ｉｎｃ．）、ＢＣＤ１００（ＢＩＯＣＡＤ  Ｂｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｃｏｍｐａｎｙ）、ＢＧＢ−Ａ３１７（ＢｅｉＧｅｎｅ  Ｌｔｄ．／Ｃｅｌｇｅｎｅ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）、ＣＢＴ−５０１（ＣＢＴ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、ＧＬＳ−０１０（Ｈａｒｂｉｎ  Ｇｌｏｒｉａ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ  Ｃｏ．，Ｌｔｄ．）、ＩＢＩ３０８（Ｉｎｎｏｖｅｎｔ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃｓ，Ｉｎｃ．）、ＡＭＰ−２２４（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ  ｐｌｃ）、ＢＩ  ７５４０９１（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ  ＧｍｂＨ）、ＰＤＲ００１（Ｎｏｖａｒｔｉｓ  ＡＧ）、ＭＥＤＩ０６８０（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ  ＰＬＣ）、ＰＤＲ００１（Ｎｏｖａｒｔｉｓ  ＡＧ）、国際特許公開番号ＷＯ２０１６／０９２４１９（その開示はその全体が参照により本明細書に組み込まれる）にｍＡｂ７として記載されているＰＦ−０６８０１５９１（ａｋａ  ＲＮ８８８）（Ｐｆｉｚｅｒ  Ｉｎｃ．）、ＲＥＧＮ２８１０（Ｒｅｇｅｎｅｒｏｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．）、ＳＨＲ−１２１０（Ｉｎｃｙｔｅ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）、ＴＳＲ−０４２（Ｔｅｓａｒｏ，Ｉｎｃ．）、ＡＧＥＮ２０３４（Ａｇｅｎｕｓ  Ｉｎｃ．）、ＪＮＪ−６３７２３２８３（Ｊｏｈｎｓｏｎ  ＆  Ｊｏｈｎｓｏｎ）、ＭＧＤ０１３（ＭａｃｒｏＧｅｎｉｃｓ，Ｉｎｃ．）、ＡＮＡ０１１（ＡｎａｐｔｙｓＢｉｏ，Ｉｎｃ．）、ＡＮＢ０１１（ＡｎａｐｔｙｓＢｉｏ，Ｉｎｃ．）、ＡＵＮＰ−１２（Ｐｉｅｒｒｅ  Ｆａｂｒｅ  Ｍｅｄｉｃａｍｅｎｔ  Ｓ．Ａ．）、ＥＮＵＭ  ２４４Ｃ８（Ｅｎｕｍｅｒａｌ  Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ  Ｈｏｌｄｉｎｇｓ，Ｉｎｃ．）、ｈＡｂ２１（Ｓｔａｉｎｗｅｉ  Ｂｉｏｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．）、Ｊ４３（Ｔｒａｎｓｇｅｎｅ  Ｓ．Ａ．）、ＪＴＸ−４０１４（Ｊｏｕｎｃｅ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，Ｉｎｃ．）、ＭＣＬＡ−１３４（Ｍｅｒｕｓ  Ｂ．Ｖ．）、ＰＲＳ−３３２（Ｐｉｅｒｉｓ  ＡＧ）、ＳＨＲ−１３１６（Ａｔｒｉｄｉａ  Ｐｔｙ  Ｌｔｄ．）、ＳＴＩ−Ａ１０１０（Ｓｏｒｒｅｎｔｏ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，Ｉｎｃ．）、ＳＴＩ−Ａ１１１０（Ｌｅｓ  Ｌａｂｏｒａｔｏｉｒｅｓ  Ｓｅｒｖｉｅｒ）、およびＸｍＡｂ２０７１７（Ｘｅｎｃｏｒ，Ｉｎｃ．）が含まれる。
【０１０６】
ＢｅｉＧｅｎｅ  Ｌｔｄ．によって開発中のＢＧＢ−Ａ３１７（ティスレリズマブ（ｔｉｓｌｅｌｉｚｕｍａｂ））は、操作されたＦｃ領域（すなわち、Ｆｃガンマ受容体Ｉに結合する能力が特異的に取り除かれている）を有するヒト化ＩｇＧ４、モノクローナル抗体である。ＢＧＢ−Ａ３１７はＰＤ−１に結合し、ＰＤ−１のＰＤ−Ｌ１およびＰＤ−Ｌ２への結合を阻害する。
【０１０７】
１つまたは複数の態様では、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストは、ＰＦ−０６８０１５９１、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、スパルタリズマブ、およびＢＧＢ−Ａ３１７から選択される。
【０１０８】
具体的な側面では、抗ＰＤ−１抗体は、ＰＦ−０６８０１５９１（Ｐｆｉｚｅｒ  Ｉｎｃ．、ＣＡＳ登録番号２０２９２１０−６１−３）である。別の具体的な側面では、抗ＰＤ−１抗体はニボルマブ（ＯＰＤＩＶＯ（登録商標）、ＭＤＸ−１１０６、ＣＡＳ登録番号９４６４１４−９４−４）である。別の具体的な側面では、抗ＰＤ−１抗体はセミプリマブ（ＲＥＧＮ２８１０としても知られているＬＩＢＴＡＹＯ（登録商標）、Ｒｅｇｅｎｅｒｏｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．およびｓａｎｏｆｉ−ａｖｅｎｔｉｓ  Ｕ．Ｓ．ＬＬＣ、ＣＡＳ登録番号１８０１３４２−６０−８）である。別の具体的な側面では、抗ＰＤ−１抗体はニボルマブ（ＯＰＤＩＶＯ（登録商標）、ＭＤＸ−１１０６、ＣＡＳ登録番号９４６４１４−９４−４）である。別の具体的な側面では、抗ＰＤ−１抗体はスパルタリズマブである（ＰＤＲ００１、Ｎｏｖａｒｔｉｓ、ＣＡＳ登録番号１９３５６９４−８８−４）。別の具体的な側面では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、ＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−１２１  １８３を有する発現ベクターによって産生されるＶＨ領域を含み、本明細書で記載されているようにｍＡｂ７またはｍＡｂ１５（Ｒｉｎａｔ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ、Ｐｆｉｚｅｒ  Ｉｎｃ．）としても知られている、ＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−１  ２１  １８２を有する発現ベクターによって産生されるＶＬ領域を有する抗体である。
【０１０９】
具体的な側面では、抗ＰＤ−１抗体は、
（ａ）配列番号４（ＧＹＴＦＴＳＹＷＩＮ）に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１；
（ｂ）配列番号５（ＮＩＹＰＧＳＳＬＴＮＹＮＥＫＦＫＮ）に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２；および
（ｃ）配列番号６（ＬＳＴＧＴＦＡＹ）に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３
を含む重鎖可変領域を含む。
【０１１０】
一部の態様では、抗体は、
（ａ）配列番号７（ＫＳＳＱＳＬＷＤＳＧＮＱＫＮＦＬＴ）に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１；
（ｂ）配列番号８（ＷＴＳＹＲＥＳ）に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２；および
（ｃ）配列番号９（ＱＮＤＹＦＹＰＨＴ）に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３
を含む軽鎖可変領域を含む抗ＰＤ−１抗体であり得る。
【０１１１】
一部の態様では、抗体は、配列番号２に示されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域由来の３つのＣＤＲを含む抗ＰＤ−１抗体であり得る。
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＳＹＷＩＮＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＮＩＹＰＧＳＳＬＴＮＹＮＥＫＦＫＮＲＶＴＭＴＲＤＴＳＴＳＴＶＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＬＳＴＧＴＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号２）
一部の態様では、抗体は、配列番号３に示されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域由来の３つのＣＤＲを含む抗ＰＤ−１抗体であり得る。
ＤＩＶＭＴＱＳＰＤＳＬＡＶＳＬＧＥＲＡＴＩＮＣＫＳＳＱＳＬＷＤＳＧＮＱＫＮＦＬＴＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹＷＴＳＹＲＥＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＡＥＤＶＡＶＹＹＣＱＮＤＹＦＹＰＨＴＦＧＧＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号３）
一部の態様では、抗ＰＤ−１抗体は、配列番号２に示されるアミノ酸配列を含むアミノ酸配列に対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％もしくは９９％同一のうちのいずれかのアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および／または配列番号３に示されるアミノ酸配列を含むアミノ酸配列に対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％もしくは９９％同一のうちのいずれかのアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含むことができ、この抗体は、ヒトＰＤ−１に特異的に結合する。
【０１１２】
一部の態様では、抗ＰＤ−１抗体は、配列番号２に示されるアミノ酸配列を含むアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含むことができ、および／または配列番号３にされるアミノ酸配列を含むアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含むことができる。
【０１１３】
一部の態様では、抗ＰＤ−１抗体は、配列番号２および３に示されるアミノ酸配列を含む抗体であり得る。
一部の態様では、抗ＰＤ−１抗体は、配列番号１０に示されるアミノ酸配列を含むアミノ酸配列に対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％もしくは９９％同一のうちのいずれかのアミノ酸配列を含む重鎖領域、および／または配列番号１１に示されるアミノ酸配列を含むアミノ酸配列に対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％もしくは９９％同一のうちのいずれかのアミノ酸配列を含む軽鎖領域を含むことができ、この抗体は、ヒトＰＤ−１に特異的に結合する。
重鎖配列
【０１１４】
【化２】
2021517129.tif 000003
【０１１５】
軽鎖配列
【０１１６】
【化３】
2021517129.tif 000004
【０１１７】
一部の態様では、抗ＰＤ−１抗体は、配列番号１０に示されるアミノ酸配列を含むアミノ酸配列を含む重鎖領域を含むことができ、および／または配列番号１１に示されるアミノ酸配列を含むアミノ酸配列を含む軽鎖領域を含むことができる。一部の態様では、配列番号１０に示される重鎖配列のＣ末端リジンは切断され得る；すなわち、重鎖配列はＣ末端リジンを欠損していてもよい。
【０１１８】
一部の態様では、抗ＰＤ−１抗体は、配列番号１０および１１に示されるアミノ酸配列を含む抗体であり得る。
一部の態様では、抗ＰＤ−１抗体は、本明細書に定義されるように、ＰＤ−１への結合について抗ＰＤ−１抗体と競合することができる。抗ＰＤ−１抗体は、ＰＤ−１への結合について、配列番号２に示されるアミノ酸配列を含むアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および／または配列番号３に示されるアミノ酸配列を含むアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む抗体と競合することができる。
【０１１９】
一部の態様では、抗ＰＤ−１抗体は、ヒトＰＤ−１に特異的に結合する、モノクローナル抗体、ｍＡｂ７であり得る。抗体ｍＡｂ７は、ＷＯ２０１６／０９２４１９に記載されており、その内容はその全体が参照により本明細書に組み込まれる。ｍＡｂ７の重鎖および軽鎖可変領域のアミノ酸配列はそれぞれ、配列番号２および３に示される。（ＣｈｏｔｈｉａおよびＫａｂａｔのＣＤＲを含む）抗体ｍＡｂ７のＣＤＲ部分が、ＷＯ２０１６／０９２４１９の表１に図式的に示されている。抗体ｍＡｂ７は、ＰＤ−１の生物活性を遮断するのに極めて強力である。
【０１２０】
一部の態様では、抗ＰＤ−１抗体はまた、抗体ｍＡｂ７の断片または領域を含むこともできる。一態様では、断片は、本明細書では配列番号１１に示されるアミノ酸配列を含む抗体ｍＡｂ７の軽鎖である。別の態様では、断片は、本明細書では配列番号１０に示されるアミノ酸配列を含む抗体ｍＡｂ７の重鎖である。さらに別の態様では、断片は、抗体ｍＡｂ７の軽鎖および／または重鎖に由来する１つまたは複数の可変領域を含有する。さらに別の態様では、断片は、本明細書ではそれぞれ配列番号１１および１０に示されるアミノ酸配列を含む抗体ｍＡｂ７の軽鎖および／または重鎖に由来する１つまたは複数のＣＤＲを含有する。
【０１２１】
一部の態様では、抗体は、抗体ｍＡｂ７に由来する１つまたは複数（１、２、３、４、５または６つ）のＣＤＲを含むことができる。一部の態様では、ＣＤＲは、ＫａｂａｔのＣＤＲ、ＣｈｏｔｈｉａのＣＤＲ、またはＫａｂａｔのＣＤＲとＣｈｏｔｈｉａのＣＤＲとの組合せ（本明細書では、「拡張された」または「組み合わせた」ＣＤＲと呼ぶ）であり得る。一部の態様では、ポリペプチドは、本明細書に記載される（組合せ、バリアントなどを含む）ＣＤＲの構成のいずれかを含む。
【０１２２】
本発明の一部の態様では、本明細書に記載される抗ＰＤ−１抗体のいずれかの重鎖のＣ末端リジンは欠失している。種々の場合において、本明細書に記載される抗ＰＤ−１抗体の重鎖および／または軽鎖は、シグナル配列を任意選択により含むことができる。
【０１２３】
他の態様では、抗体は、例えば、非限定的に、以下：米国特許第８３５４５０９号、同第９０８４７７６号、同第９４９２５４０号、同第９４９２５３９号、同第９３８７２４７号、同第８７７９１０５号、同第８９５２１３６号、および同第８７０９４１６号のうちのいずれかに記載されている抗体などの当該分野で公知の抗ＰＤ−１抗体から選択され得る。抗体は、当該分野で公知の抗ＰＤ−１抗体と同じエピトープに結合することができ、および／またはＰＤ−１に対する結合についてそのような抗体と競合することができる。
【０１２４】
本発明のさらなる側面によれば、
約１４０ｍｇ／ｍｌ〜約１６０ｍｇ／ｍｌの抗体と、
約１０．０ｍＭ〜約３０．０ｍＭのヒスチジン緩衝液と、
約４０ｍｇ／ｍｌ〜約１００ｍｇ／ｍｌのトレハロースと、
約０．０１〜約０．３ｍｇ／ｍｌのポリソルベート８０（ＰＳ８０）と、
約０．０１〜約０．１ｍｇ／ｍｌのＥＤＴＡ二ナトリウムと
を含むか、またはそれらから本質的になる組成物であって、
約ｐＨ４．５から約ｐＨ５．５のいずれかの間の範囲から選択され、または代わって、約ｐＨ４．５から、約ｐＨ４．６、４．７、４．８、４．９、５．０、５．１、５．２、５．３、５．４、５．５、５．６、５．７、５．８、５．９のいずれかの間の範囲から選択されるｐＨである、前記組成物を提供する。
【０１２５】
好ましい態様によれば、組成物は、約９０ｍｇ／ｍｌ、約１００ｍｇ／ｍｌ、約１１０ｍｇ／ｍｌ、約１２０ｍｇ／ｍｌ、約１３０ｍｇ／ｍｌ、約１４０ｍｇ／ｍｌまたは約１５０ｍｇ／ｍｌのいずれかの抗体と、
約２０ｍＭのヒスチジン緩衝液と、
約８４ｍｇ／ｍｌのトレハロースと、
約０．２ｍｇ／ｍｌのＰＳ８０と、
約０．０５ｍｇ／ｍｌのＥＤＴＡ二ナトリウムと
を含むか、またはそれらから本質的になり、
前記組成物は、約ｐＨ５．０から、約ｐＨ５．０、５．２、５．５もしくは５．８のいずれかの間の範囲から選択され、または代わって、約ｐＨ４．５から、約ｐＨ４．５、４．６、４．７、４．８、４．９、５．０、５．１、５．２、５．３、５．４もしくは５．５のいずれかの間の範囲から選択されるｐＨであり、前記抗体は、配列番号２に示されるアミノ酸配列を含む可変重鎖配列および配列番号３に示されるアミノ酸配列を含む可変軽鎖配列を含む。
【０１２６】
好ましい態様によれば、組成物は、約１２０ｍｇ／ｍｌ、約１３０ｍｇ／ｍｌ、約１４０ｍｇ／ｍｌ、約１５０ｍｇ／ｍｌ、約１６０ｍｇ／ｍｌ、約１７０ｍｇ／ｍｌまたは約１８０ｍｇ／ｍｌのいずれかの抗体と、
約２０ｍＭのヒスチジン緩衝液と、
約８４ｍｇ／ｍｌのトレハロースと、
約０．２ｍｇ／ｍｌのＰＳ８０と、
約０．０５ｍｇ／ｍｌのＥＤＴＡ二ナトリウムと
を含むか、またはそれらから本質的になり、
前記組成物のｐＨは約ｐＨ５．０＋／−０．５であり、前記抗体は、配列番号２に示されるアミノ酸配列を含む可変重鎖配列および配列番号３に示されるアミノ酸配列を含む可変軽鎖配列を含む。一部の態様では、使用される用量の体積は、約０．５ｍｌ、約１ｍｌ、約２ｍｌ、約３ｍｌ、約４ｍｌ、約５ｍｌ、約６ｍｌ、約７ｍｌ、約８ｍｌ、約９ｍｌ、約１０ｍｌ、約１１ｍｌ、約１２ｍｌ、約１３ｍｌ、約１４ｍｌ、約１５ｍｌ、約１６ｍｌ、約１７ｍｌ、約１８ｍｌ、約１９ｍｌ、約２０ｍｌ、約２１ｍｌ、約２２ｍｌ、約２３ｍｌ、約２４ｍｌ、約２５ｍｌ、約２６ｍｌ、約２７ｍｌ、約２８ｍｌ、約２９ｍｌ、約３０ｍｌ、約３１ｍｌ、約３２ｍｌ、約３３ｍｌ、約３４ｍｌ、約３５ｍｌ、約３６ｍｌ、約３７ｍｌ、約３８ｍｌ、約３９ｍｌ、約４０ｍｌ、約４１ｍｌ、約４２ｍｌ、約４３ｍｌ、約４４ｍｌ、約４５ｍｌ、約４６ｍｌ、約４７ｍｌ、約４８ｍｌ、約４９ｍｌ、または約５０ｍｌである。
【０１２７】
一部の態様では、凍結乾燥される、および／または凍結乾燥に付されている組成物が提供される。一部の態様では、凍結乾燥されず、凍結乾燥に付されていない組成物が提供される。
【０１２８】
一部の態様では、抗体の濃度は、約１００ｍｇ／ｍｌ、約１０５ｍｇ／ｍｌ、約１１０ｍｇ／ｍｌ、約１１５ｍｇ／ｍｌ、約１２０ｍｇ／ｍｌ、約１２５ｍｇ／ｍｌ、約１３０ｍｇ／ｍｌ、約１３５ｍｇ／ｍｌ、約１４０ｍｇ／ｍｌ、約１４５ｍｇ／ｍｌ、約１５０ｍｇ／ｍｌ、約１５５ｍｇ／ｍｌまたは約１６０ｍｇ／ｍｌのいずれかである。
【０１２９】
本発明のさらに好ましい側面によれば、対象における、例えば、がんなどの過剰増殖性（ｈｙｐｅｒｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ）障害を処置するための医薬を製造するための、上述の側面または態様のいずれかの組成物が提供される。
【０１３０】
一部の態様では、がんは、胃がん、肉腫、リンパ腫、ホジキンリンパ腫、白血病、頭頸部がん、頭頸部扁平上皮がん、胸腺がん、上皮がん、唾液腺がん、肝がん、胃がん、甲状腺がん、肺がん、卵巣がん、乳がん、前立腺がん、食道がん、膵がん、神経膠腫、白血病、多発性骨髄腫、腎細胞癌、膀胱がん、子宮頸がん、絨毛腫、結腸がん、口腔がん、皮膚がん、および黒色腫のうちの１つまたは複数から選択される。
【０１３１】
本発明のなおさらなる態様によれば、対象における、例えば、がんなどの過剰増殖性障害を処置するための医薬を製造するための、上述の側面または態様のいずれかの組成物が提供される。
【０１３２】
好ましい態様によれば、組成物は、血流中、筋肉内、組織内、脂肪内または内臓内に直接投与され得る。非経口投与に適切な手段には、皮下、静脈内、動脈内、腹腔内、くも膜下腔内、脳室内、尿道内、胸骨内、頭蓋内、筋肉内、小孔内（ｉｎｔｒａ−ｏｓｓｉａｌ）および皮内が含まれる。非経口投与に適切なデバイスには、（マイクロニードル、マイクロプロジェクション、可溶性針および他の微細孔形成技術を含む）針を利用する注射器、無針注射器および注入技術が含まれる。
【０１３３】
一部の態様では、医薬の投与パターンは、１週間に１回、２週間に１回、３週間に１回、４週間に１回、５週間に１回、６週間に１回、７週間に１回、８週間に１回、９週間に１回、１０週間に１回、１５週間に１回、２０週間に１回、２５週間に１回、または２６週間に１回の医薬の用量の投与を含む。一部の態様では、抗ＰＤ−１抗体は、１ヵ月に１回、２ヵ月に１回、３ヵ月に１回、４ヵ月に１回、５ヵ月に１回、または６ヵ月に１回投与される。一部の態様では、医薬の投与パターンは、４週間または８週間に１回の医薬の用量の投与を含む。
【０１３４】
一部の態様では、用量の体積は、約３ｍｌ以下、約２．５ｍｌ以下、約２ｍｌ以下、約１．５ｍｌ以下、約１ｍｌ以下、約０．７５ｍｌ以下、約０．５ｍｌ以下、約０．２５ｍｌ以下または約０．１ｍｌ以下である。
【０１３５】
一部の態様では、用量の体積は、約２０ｍｌ、約１９ｍｌ、約１８ｍｌ、約１７ｍｌ、約１６ｍｌ、約１５ｍｌ、約１４ｍｌ、約１３ｍｌ、約１２ｍｌ、約１１ｍｌ、約１０ｍｌ、約９ｍｌ、約８ｍｌ、約７ｍｌ、約６ｍｌ、約５ｍｌ、約４ｍｌ、約３ｍｌ、約２ｍｌまたは約１ｍｌである。あるいは、用量の体積は、約２０．５ｍｌ、約１９．５ｍｌ、約１８．５ｍｌ、約１７．５ｍｌ、約１６．５ｍｌ、約１５．５ｍｌ、約１４．５ｍｌ、約１３．５ｍｌ、約１２．５ｍｌ、約１１．５ｍｌ、約１０．５ｍｌ、約９．５ｍｌ、約８．５ｍｌ、約７．５ｍｌ、約６．５ｍｌ、約５．５ｍｌ、約４．５ｍｌ、約３．５ｍｌ、約２．５ｍｌ、約１．５ｍｌまたは約０．５ｍｌである。あるいは、用量の体積は、約９００マイクロリットル、約８００マイクロリットル、約７００マイクロリットル、約６００マイクロリットル、約５００マイクロリットル、約４００マイクロリットル、約３００マイクロリットル、約２００マイクロリットルまたは約１００マイクロリットル、あるいは約９５０マイクロリットル、約８５０マイクロリットル、約７５０マイクロリットル、約６５０マイクロリットル、約５５０マイクロリットル、約４５０マイクロリットル、約３５０マイクロリットル、約２５０マイクロリットル、約１５０マイクロリットルまたは約５０マイクロリットルである。一部の態様では、用量の体積は約２．０ｍｌ以下である。
【０１３６】
好ましい態様によれば、抗体の濃度は、約０．１〜約２００ｍｇ／ｍｌの範囲であり得る。好ましくは、抗体の濃度は、約１００ｍｇ／ｍｌ、約１０１ｍｇ／ｍｌ、約１０２ｍｇ／ｍｌ、約１０３ｍｇ／ｍｌ、約１０４ｍｇ／ｍｌ、約１０５ｍｇ／ｍｌ、約１０６ｍｇ／ｍｌ、約１０７ｍｇ／ｍｌ、約１０８ｍｇ／ｍｌ、約１０９ｍｇ／ｍｌ、または約１１０ｍｇ／ｍｌ、約１１１ｍｇ／ｍｌ、約１１２ｍｇ／ｍｌ、約１１３ｍｇ／ｍｌ、約１１４ｍｇ／ｍｌ、約１１５ｍｇ／ｍｌ、約１１６ｍｇ／ｍｌ、約１１７ｍｇ／ｍｌ、約１１８ｍｇ／ｍｌ、約１１９ｍｇ／ｍｌ、約１２０ｍｇ／ｍｌ、約１２１ｍｇ／ｍｌ、約１２２ｍｇ／ｍｌ、約１２３ｍｇ／ｍｌ、約１２４ｍｇ／ｍｌ、約１２５ｍｇ／ｍｌ、約１２６ｍｇ／ｍｌ、約１２７ｍｇ／ｍｌ、約１２８ｍｇ／ｍｌ、約１２９ｍｇ／ｍｌ、約１３０ｍｇ／ｍｌ、約１３１ｍｇ／ｍｌ、約１３２ｍｇ／ｍｌ、約１３３ｍｇ／ｍｌ、約１３４ｍｇ／ｍｌ、約１３５ｍｇ／ｍｌ、約１３６ｍｇ／ｍｌ、約１３７ｍｇ／ｍｌ、約１３８ｍｇ／ｍｌ、約１３９ｍｇ／ｍｌ、約１４０ｍｇ／ｍｌ、約１４１ｍｇ／ｍｌ、約１４２ｍｇ／ｍｌ、約１４３ｍｇ／ｍｌ、約１４４ｍｇ／ｍｌ、約１４５ｍｇ／ｍｌ、約１４６ｍｇ／ｍｌ、約１４７ｍｇ／ｍｌ、約１４８ｍｇ／ｍｌ、約１４９ｍｇ／ｍｌ、または約１５０ｍｇ／ｍｌである。最も好ましくは、抗体の濃度は、約１００ｍｇ／ｍｌ〜約１８０ｍｇ／ｍｌであり、約１００ｍｇ／ｍｌ、約１０５ｍｇ／ｍｌ、約１１０ｍｇ／ｍｌ、約１１５ｍｇ／ｍｌ、約１２０ｍｇ／ｍｌ、約１２５ｍｇ／ｍｌ、約１３０ｍｇ／ｍｌ、約１３５ｍｇ／ｍｌ、約１４０ｍｇ／ｍｌ、約１４５ｍｇ／ｍｌ、約１５０ｍｇ／ｍｌ、約１５５ｍｇ／ｍｌ、約１６０ｍｇ／ｍｌ、約１６５ｍｇ／ｍｌ、約１７０ｍｇ／ｍｌ、約１７５ｍｇ／ｍｌまたは約１８０ｍｇ／ｍｌを含む群から選択され得る。
【０１３７】
好ましい態様によれば、用量は、約５０ｍｇ以下、約５１ｍｇ以下、約５２ｍｇ以下、約５３ｍｇ以下、約５４ｍｇ以下、約５５ｍｇ以下、約５６ｍｇ以下、約５７ｍｇ以下、約５８ｍｇ以下、約５９ｍｇ以下、約６０ｍｇ以下、約７０ｍｇ以下、約８０ｍｇ以下、約９０ｍｇ以下、約１００ｍｇ以下、約１１０ｍｇ以下、約１２０ｍｇ以下、約１３０ｍｇ以下、約１４０ｍｇ以下、約１５０ｍｇ以下、約１６０ｍｇ以下、約１７０ｍｇ以下、約１８０ｍｇ以下、約１９０ｍｇ以下、約２００ｍｇ以下、約２１０ｍｇ以下、約２２０ｍｇ以下、約２３０ｍｇ以下、約２４０ｍｇ以下、約２５０ｍｇ以下、約２６０ｍｇ以下、約２７０ｍｇ以下、約２８０ｍｇ以下、約２９０ｍｇ以下、約３００ｍｇ以下、約３１０ｍｇ以下、約３２０ｍｇ以下、約３３０ｍｇ以下、約３４０ｍｇ以下、約３５０ｍｇ以下、約３６０ｍｇ以下、約３７０ｍｇ以下、約３８０ｍｇ以下、約３９０ｍｇ以下、約４００ｍｇ以下、約４１０ｍｇ以下、約４２０ｍｇ以下、約４３０ｍｇ以下、約４４０ｍｇ以下、約４５０ｍｇ以下、約４６０ｍｇ以下、約４７０ｍｇ以下、約４８０ｍｇ以下、約４９０ｍｇ以下、約５００ｍｇ以下、約５１０ｍｇ以下、約５２０ｍｇ以下、約５３０ｍｇ以下、約５４０ｍｇ以下、約５５０ｍｇ以下、約５６０ｍｇ以下、約５７０ｍｇ以下、約５８０ｍｇ以下、約５９０ｍｇ以下、約６００ｍｇ以下、約６１０ｍｇ以下、約６２０ｍｇ以下、約６３０ｍｇ以下、約６４０ｍｇ以下、約６５０ｍｇ以下、約６６０ｍｇ以下、約６７０ｍｇ以下、約６８０ｍｇ以下、約６９０ｍｇ以下、約７００ｍｇ以下、約７１０ｍｇ以下、約７２０ｍｇ以下、約７３０ｍｇ以下、約７４０ｍｇ以下、約７５０ｍｇ以下、約７６０ｍｇ以下、約７７０ｍｇ以下、約７８０ｍｇ以下、約７９０ｍｇ以下、約８００ｍｇ以下、約８１０ｍｇ以下、約８２０ｍｇ以下、約８３０ｍｇ以下、約８５０ｍｇ以下、約８５０ｍｇ以下、約８６０ｍｇ以下、約８７０ｍｇ以下、約８８０ｍｇ以下、約８９０ｍｇ以下、約９００ｍｇ以下、約９１０ｍｇ以下、約９２０ｍｇ以下、約９３０ｍｇ以下、約９４０ｍｇ以下、約９５０ｍｇ以下、約９６０ｍｇ以下、約９７０ｍｇ以下、約９８０ｍｇ以下、約９９０ｍｇ以下、または約１０００ｍｇ以下の抗体を含有する。
【０１３８】
一部の態様によれば、用量は、約１μｇ／ｋｇ、約１０μｇ／ｋｇ、約２０μｇ／ｋｇ、約２５μｇ／ｋｇ、約５０μｇ／ｋｇ、約１００μｇ／ｋｇ、約２００μｇ／ｋｇ、約２５０μｇ／ｋｇ、約５００μｇ／ｋｇ、約１ｍｇ／ｋｇ、約２ｍｇ／ｋｇ、約３ｍｇ／ｋｇ、約４ｍｇ／ｋｇ、約５ｍｇ／ｋｇ、約６ｍｇ／ｋｇ、約７ｍｇ／ｋｇ、約８ｍｇ／ｋｇ、約９ｍｇ／ｋｇ、約１０ｍｇ／ｋｇまたは約１１ｍｇ／ｋｇ（ｋｇは用量が投与される対象の質量である）である抗体の量を含有する。一部の態様では、用量は、約２０μｇ／ｋｇ、約２５μｇ／ｋｇ、約５０μｇ／ｋｇ、約１００μｇ／ｋｇ、約２００μｇ／ｋｇ、約２５０μｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、約２ｍｇ／ｋｇ、約３ｍｇ／ｋｇ、約４ｍｇ／ｋｇ、約５ｍｇ／ｋｇ、約６ｍｇ／ｋｇ、約７ｍｇ／ｋｇ、約８ｍｇ／ｋｇ、約９ｍｇ／ｋｇまたは約１０ｍｇ／ｋｇを含有する。
【０１３９】
投薬レジメンは、医師が達成するのを望む薬物動態学的崩壊のパターンに依存し得る。例えば、一部の態様では、週１〜４回の投薬が企図される。さらに少ない投薬頻度が使用されてもよい。一部の態様では、用量は、１週間に１回、２週間に１回、３週間に１回、４週間に１回、５週間に１回、６週間に１回、７週間に１回、８週間に１回、９週間に１回、１０週間に１回、１５週間に１回、２０週間に１回、２５週間に１回、またはそれより長い期間に１回で投与される。一部の態様では、用量は、１ヵ月に１回、２ヵ月に１回、３ヵ月に１回、４ヵ月に１回、５ヵ月に１回、６ヵ月に１回、またはそれより長い期間に１回で投与される。この療法の進行は、従来の技術およびアッセイによって容易にモニターされる。投薬レジメンは、経時的に変化させることができる。
【０１４０】
本発明の目的では、医薬の適切な投薬量は、利用される抗体、薬剤が予防目的のために投与されるか、または治療目的のために投与されるかにかかわらず、処置される障害の種類および重症度、以前の療法、患者の病歴および薬剤に対する応答、ならびに主治医の裁量に依存する。典型的には臨床医は、医薬を、投薬量が所望の結果の達成をもたらすまで投与する。投薬量は、実験的に決定され得る。例えば、個体は、医薬の効能を評価するために投薬量を漸進的に与えられる。
【０１４１】
用量および／または頻度は、処置の過程にわたって変化させることができる。抗体の半減期などの実験的考察は一般に、投薬量の決定に寄与する。投与頻度を決定し、療法の過程にわたって加減することができ、投与頻度は一般に、過剰増殖性疾患の１つまたは複数の症状の処置および／または抑制および／または改善および／または遅延に基づくが、必ずしもそうであるとは限らない。個体によっては、１回より多い用量が必要になる場合がある。投与頻度を決定し、療法の過程にわたって加減することができる。例えば、限定されないが、数日以上にわたって反復投与する場合、疾患およびその重症度に応じて、症状の所望の抑制が生じるまで、またはがんを処置するのに十分な治療レベルが達成されるまで、処置は維持される。
【０１４２】
組成物を含む医薬の投与は、例えば、投与の目的が治療または予防のいずれであっても、レシピエントの生理学的状態、および熟練した医師に公知の他の要因に応じて、連続的または間欠的であり得る。組成物を含む医薬の投与は、あらかじめ選択された期間にわたって本質的に連続的であってもよく、または間隔を開けた一連の投与であってもよい。
【０１４３】
好ましくは、用量の投与は、非経口投与であり、好ましくは、静脈内、動脈内、腹腔内、くも膜下腔内、脳室内、尿道内、胸骨内、頭蓋内、筋肉内、小孔内、皮内および皮下から選択される。好ましくは、医薬は、非経口投与のための、無菌の単位投薬形態をとる。
【０１４４】
以下の実施例は、例示目的のみのために提供し、いかなる場合であっても、本発明の範囲を限定する意図はない。実際に、本明細書に示され、記載されるものに加えて、本発明の種々の修飾が上述の記載から当業者に明らかになり、これらは添付の特許請求の範囲に属する。ＷＯ２０１６／０９２４１９の実施例を参照して、本発明において使用するための抗体を例示する。ＷＯ２０１６／０９２４１９の内容全体が、参照により本明細書に組み込まれる。
【実施例】
【０１４５】
方法
この方法の段落は、以下の実施例１〜６において使用される方法の概要を提供する。
抗体製剤の粘度を、圧力差が溶液動的粘度と相関するチップベースのｍ−ＶＲＯＣ装置で測定した。測定を異なる流速およびせん断速度で試験した。試料サイズは約７０〜１００μＬであった。アリコートを１００μＬのハミルトンシリンジに充填し、ｍ−ＶＲＯＣチップに接続した。２０℃で３回の測定を行った。
【０１４６】
凍結融解安定性を決定するために、１００〜１５０ｍｇ／ｍＬで抗ＰＤ−１抗体を−２０℃から２〜８℃まで５サイクルでサイクルを繰り返した。抗体の安定性は、ｐＨ、濃度、およびＳＥＣによって評価した。
【０１４７】
撹拌安定性を決定するために、高濃度にて抗ＰＤ−１抗体を、３００ｒｐｍでの２４時間の撹拌後、周囲温度および直立配向の光で評価した。安定性は、ｐＨ、濃度、およびＳＥＣによって評価した。
【０１４８】
高濃度の抗体製剤のｐＨ安定性は、水素イオン活性、ガラス電極、および適切な基準電極（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｏｒｉｏｎ（商標）  ＰｅｒｐＨｅｃＴ（商標）  ＲＯＳＳ（商標）  Ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ  ｐＨ  Ｍｉｃｒｏ  Ｅｌｅｃｔｒｏｄｅ）に感度が高い指示電極を使用してｐＨ値を０．０２ｐＨ単位で再現することができる適切な正しく標準化されたポテンショメーター装置（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｏｒｉｏｎ  Ｓｔａｒ  Ａ１１１ｐＨメーター）を使用してＵＳＰ公定法＜７９１＞およびＥＰ公定法２．２．３に従って測定した。２２．５〜２５．４℃で２点または３点較正を使用日に実施して、ｐＨメーターの標準化を確認し、試料を周囲温度で少なくとも３０分間平衡化し、ｐＨ読み取り後に記録した０．０１ｐＨ単位までの値を少なくとも６０秒間安定化した。
【０１４９】
可変経路長およびＢｅｅｒ−Ｌａｍｂｅｒｔの法則（Ａ＝ｃｌε、ここでＡ＝吸光度、ｃ＝濃度、ｌ＝経路長、およびε＝ｍｇ  ｍｌ−１  ｃｍ−１での消衰係数／モル吸光係数）に基づいてＳｏｌｏＶＰＥ（Ｃ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  Ｉｎｃ．）装置を使用して総タンパク質濃度を分光学的に測定した。抗ＰＤ−１抗体ｍＡｂ７に関して、使用したεは１．６２ｍｇ  ｍｇ  ｍｌ−１  ｃｍ−１である。ニボルマブに関して、使用したεは１．６８ｍｇ  ｍｇ  ｍｌ−１  ｃｍ−１である。ペンブロリズマブに関して、使用したεは１．４２ｍｇ  ｍｇ  ｍｌ−１  ｃｍ−１である。試料を周囲温度に平衡化し、試料容器（Ｃ  Ｔｅｃｈ  Ｉｎｃ．＃ＯＣ０００９−１−Ｐ５０）に添加し、検出窓プラットフォームにおける容器ホルダーに充填した。試料ごとに、清浄なフィブレット（ｆｉｂｒｅｔｔｅ）（＃ＯＣ０００２−Ｐ５０）をフィブレットカプラーに取り付け、２８０ｎｍでの勾配を読み取った（３２０ｍｍでの散乱補正）。
【０１５０】
高分子質量種（ＨＭＭＳ）の形成を、Ａｇｉｌｅｎｔ  ＨＰＬＣシステム上のサイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）によって分析した。０．７５ｍＬ／分にてアイソクラチック勾配（２０ｍＭリン酸ナトリウム、４００ｍＭ塩化ナトリウム、ｐＨ７．２）を使用して３０±２℃に維持したＹＭＣ−Ｐａｃｋ  Ｄｉｏｌ−２００カラム（Ｗａｔｅｒｓ、カタログ番号ＤＬ２０Ｓ０５３００８ＷＴ）上の流体力学的体積に基づいて５０μｇのタンパク質を分離した。分子量種を溶離し、２８０ｎｍでのＵＶ吸収によって検出した。
【０１５１】
脱アミド化および断片化に対する高濃度での抗体の電荷不均一性および安定性を、ｐＨ勾配におけるそれらの電荷差（ｐＩ値）に基づいてタンパク質種を分離する、画像化キャピラリー等電点電気泳動（ｉＣＥ）を使用して定量した。試料を、０．３ｍｇ／ｍｌのタンパク質、０．０１ｍｇ／ｍＬのｐＩマーカー６．１４（Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｓｉｍｐｌｅ、品番１０２２２０）、０．０１ｍｇ／ｍＬのｐＩマーカー９．５０（Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｓｉｍｐｌｅ、品番１０１９９６）、４％のＰｈａｒｍａｌｙｔｅ  ｐＨ３〜１０（ＧＥ品番１７−０４５６−０１）、０．２５％のメチルセルロース（Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｓｉｍｐｌｅ、品番１０１８７６））、および２Ｍの尿素（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ、品番Ｕ４８８３）の最終濃度まで混合物中に希釈した。試料を、Ｐｒｏｔｅｉｎ  ｓｉｍｐｌｅ  ｉＣＥ３装置に取り付けたフルオロカーボンで被覆したｃＩＥＦカートリッジカラム（Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｓｉｍｐｌｅ、品番１０１７０１）に注入し、高電圧（≦３０００Ｖ）下でキャピラリーカラム内に集束させ、２８０ｎｍの固定波長でリアルカラムイメージング検出（ＷＣＩＤ）システムにおいてモニターした。得られた電気泳動図を適切なソフトウェアにより分析して、各種についてｐＩ値およびピーク面積を決定する。
【０１５２】
マイクロフローイメージング（ＭＦＩ）を使用してサブビジブル粒子を分析した。あらゆる試料分析の前に、１５μｍのＤｕｋｅ  ｌａｔｅｘ計数標準を、システム適合性チェックとして実行した。各分析の間に水フラッシュを使用した。さらに、バックグラウンド計数が試験に適切であることを確認するために事前に水ブランクを分析した。１ｍｌ当たりの平均累積計数を報告した。さらに、サイズ範囲当たりの粒子計数に関する情報を提供するために複数のサイズのチャネルをモニターした。
【０１５３】
実施例１．粘度に対する緩衝液およびｐＨの影響
この実施例は、高濃度の抗ＰＤ−１抗体製剤における粘度に対するｐＨの影響を例示する。
【０１５４】
抗体製剤を調製するために、抗ＰＤ−１抗体ｍＡｂ７を、緩衝液で繰り返し希釈し、続いて緩衝液交換が完了するまで約１６０ｍｇ／ｍＬに濃縮することによって２０ｍＭのヒスチジンｐＨ５．５、２０ｍＭのヒスチジンｐＨ６．０、２０ｍＭのヒスチジンｐＨ６．５、２０ｍＭのヒスチジンｐＨ７．０、２０ｍＭの酢酸塩ｐＨ５．０、および２０ｍＭの酢酸塩ｐＨ６．０に緩衝液を交換した。全ての試料の最終濃度は１６０ｍｇ／ｍＬであることを目標とした。
【０１５５】
タンパク質濃度、粘度、およびｐＨを、全ての試料について測定した。結果を表１および図１にまとめる。この結果は、より低いｐＨを有する製剤が顕著に低い粘度を有することを実証する。さらに、同じｐＨにおいて、ヒスチジンおよび酢酸塩ベースの製剤は両方とも同様の粘度を有する。
【０１５６】
【表１】
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【０１５７】
実施例２．アルギニンの評価
この実施例は、抗ＰＤ−１抗体の粘度に対する様々な濃度のアルギニンの影響を例示する。
【０１５８】
粘度に対するアルギニンの影響を評価するために、抗ＰＤ−１抗体ｍＡｂ７を、２０ｋＤａのＭＷＣＯ透析カセットを用いて透析し（ＰＳ８０なし）、５０ｋＤａのＡｍｉｃｏｎ遠心フィルターを用いて約２００ｍｇ／ｍＬの抗ＰＤ−１抗体に濃縮し、高濃度のＰＳ８０中でスパイクすることによって、２０ｍＭの酢酸塩ｐＨ５．０、５０ｇ／Ｌのスクロース、０．０５ｇ／ＬのＮａ２ＥＤＴＡ二水和物、および０．２ｇ／ＬのＰＳ８０中に配合した。高濃度の塩酸アルギニン（ＨＣｌ）溶液の添加によって、様々な濃度のアルギニンを有する製剤を作製した。
【０１５９】
タンパク質濃度およびｐＨを全ての試料について測定した。結果を表２および図２にまとめる。様々な抗ＰＤ−１抗体濃度において０、５０、１００、１５０、２００、および２５０ｍＭのアルギニンを有する抗ＰＤ−１抗体製剤の粘度を示す（表２、図２）。この結果は、５０ｍＭのアルギニンの添加が高濃度の抗ＰＤ−１抗体製剤の粘度を減少させることを実証する。さらに、２５０ｍＭまでアルギニンの濃度を漸増的に増加させると、粘度がさらに低下する。
【０１６０】
【表２】
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【０１６１】
実施例３．アルギニン含有製剤の評価
この実施例は、抗ＰＤ−１抗体の粘度および安定性に対するさらなる賦形剤の影響を例示する。
【０１６２】
アルギニン含有抗体製剤を調製するために、抗ＰＤ−１抗体ｍＡｂ７を、２０ｋＤａのＭＷＣＯ透析カセットを用いてｍＡｂ７を各製剤（ＰＳ８０なし）中に透析し、５０ｋＤａのＡｍｉｃｏｎ遠心フィルターを用いて１５０〜２００ｍｇ／ｍＬの抗ＰＤ−１抗体に濃縮し、高濃度のＰＳ８０中でスパイクすることによって、製剤１〜６（表３）の各々に配合した。
【０１６３】
【表３】
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【０１６４】
製剤１、２、および３は、アルギニン含有製剤におけるｐＨの影響を評価する。表４および図３は、様々な抗ＰＤ−１濃度における製剤１、２、および３の粘度をまとめている。この結果は、１５０ｍＭのアルギニンを含有する製剤において、ｐＨを５．５から４．５に低下させると、粘度が顕著に低下することを実証する。
【０１６５】
【表４】
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【０１６６】
製剤４、５および６は、ｐＨ５．０にて１００ｍＭのアルギニンを含有する製剤へのプロリンの添加の影響を評価した。表５および図４は、様々な抗ＰＤ−１抗体濃度における製剤４、５および６の粘度をまとめている。この結果は、０、１００または２００ｍＭのプロリンを含有する高濃度の抗ＰＤ−１抗体製剤の粘度に有意差がないことを実証する。
【０１６７】
【表５】
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【０１６８】
１５０ｍｇ／ｍＬの抗ＰＤ−１抗体での製剤１、２、３、４および５の安定性を、試料を５℃、２５℃および４０℃で安定に配置することによって決定した。タンパク質安定性を、凝集（ＳＥＣ）、電荷アイソフォーム（ｉＣＥ）、濃度およびｐＨに関して評価した。表６、７、８、９および１０は、それぞれ製剤１、２、３、４および５の熱安定性をまとめている。
【０１６９】
【表６】
2021517129.tif 000010
【０１７０】
【表７】
2021517129.tif 000011
【０１７１】
【表８】
2021517129.tif 000012
【０１７２】
【表９】
2021517129.tif 000013
【０１７３】
【表１０】
2021517129.tif 000014
【０１７４】
全ての製剤１〜５に関して、５℃および２５℃での電荷種および凝集（ＨＭＭＳ）に対して１０週間後（製剤４および５に関しては４週間）に有意な変化はない。４０℃において、製剤１（ｐＨ４．５）は塩基性種の有意な増加を示したが、製剤２、３、４および５（ｐＨ＞４．５）は酸性種の増加を示した。凝集（ＨＭＭＳ）は４０℃での保存後、全ての製剤について同様の量、増加したが、この増加は５℃の意図された保存状態を伴う液体製剤について許容可能であると考えられる。
【０１７５】
実施例４．トレハロース含有製剤の評価
この実施例は、抗ＰＤ−１抗体製剤の安定性および粘度に対するトレハロースの効果を例示する。
【０１７６】
トレハロース二水和物を、アルギニンを含まない製剤およびアルギニン含有製剤における安定剤として評価した（表１１）。
【０１７７】
【表１１】
2021517129.tif 000015
【０１７８】
トレハロース含有抗体製剤を調製するために、抗ＰＤ−１抗体ｍＡｂ７を、５０ｋＤａの限外濾過カートリッジによるタンジェンシャル（ｔａｎｇｅｎｔｒｉａｌ）フロー濾過を使用して２０ｍＭのヒスチジンおよび５０ｇ／Ｌのトレハロース二水和物に緩衝液を交換した。抗ＰＤ−１抗体ｍＡｂ７の濃度を、限外濾過を使用して増加させ、続いて高濃度溶液を使用して賦形剤を添加し、必要に応じて希釈した。抗ＰＤ−１抗体ｍＡｂ７を、以下の濃度：１０４ｍｇ／ｍｌ、１５４ｍｇ／ｍｌ、１７４ｍｇ／ｍｌおよび２００ｍｇ／ｍｌで製剤７中に配合した。抗ＰＤ−１抗体ｍＡｂ７を、以下の濃度：１５０ｍｇ／ｍｌ、１７０ｍｇ／ｍｌおよび２００ｍｇ／ｍｌで製剤８中に配合した。粘度を上記のように測定した。結果を表１２および図５にまとめる。
【０１７９】
【表１２】
2021517129.tif 000016
【０１８０】
１０４ｍｇ／ｍｌ、１５４ｍｇ／ｍｌ、１７４ｍｇ／ｍｌおよび２００ｍｇ／ｍｌのｍＡｂ７を含有する製剤７の粘度は、２０℃でそれぞれ５．３、１６．９、３２．５および６７．６ｃＰである。１５０ｍｇ／ｍｌ、１７０ｍｇ／ｍｌおよび２００ｍｇ／ｍｌのｍＡｂ７を含有する製剤８の粘度は、２０℃でそれぞれ１４．１、２５．０および５４．４ｃＰである。
【０１８１】
この結果は、製剤８（アルギニンを含有する）が１７５ｇ／Ｌ以上の抗ＰＤ−１抗体濃度で製剤７よりも低い粘度を有することを実証する。約１５０ｍｇ／ｍｌでの製剤７および８の粘度は同様であった（図５）。
【０１８２】
抗ＰＤ−１抗体製剤７および８の安定性を、５℃、２５℃および４０℃において評価した。製剤７を、１００ｍｇ／ｍＬおよび１５０ｍｇ／ｍＬの抗ＰＤ−１抗体を使用して試験し、製剤８を、１５０ｍｇ／ｍＬの抗ＰＤ−１抗体を使用して試験した。試料を５℃、２５℃および４０℃に置き、凝集（ＳＥＣ）、電荷アイソフォーム（ｉＣＥ）、濃縮、ｐＨおよびサブビジブル粒子（ＭＦＩ）を上記のように測定することによって安定性を評価した。結果を表１３〜２１にまとめる（ＮＴ＝試験していない）。
【０１８３】
表１３、１４および１５は、それぞれ、５℃、２５℃および４０℃における１５０ｍｇ／ｍＬの抗ＰＤ−１での製剤７についての熱安定性をまとめている。
【０１８４】
【表１３】
2021517129.tif 000017
【０１８５】
【表１４】
2021517129.tif 000018
【０１８６】
【表１５】
2021517129.tif 000019
【０１８７】
表１６、１７および１８は、それぞれ、５℃、２５℃および４０℃における１０ｍｇ／ｍＬの抗ＰＤ−１での製剤７についての熱安定性をまとめている。
【０１８８】
【表１６】
2021517129.tif 000020
【０１８９】
【表１７】
2021517129.tif 000021
【０１９０】
【表１８】
2021517129.tif 000022
【０１９１】
表１９、２０および２１は、それぞれ、５℃、２５℃および４０℃における１５０ｍｇ／ｍＬの抗ＰＤ−１での製剤８についての熱安定性をまとめている。
【０１９２】
【表１９】
2021517129.tif 000023
【０１９３】
【表２０】
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【０１９４】
【表２１】
2021517129.tif 000025
【０１９５】
タンパク質濃度、ｐＨまたはサブビジブル粒子の有意な変化は、全ての研究した条件において全ての製剤について観察されなかった（表１３〜２１）。さらに、５℃または２５℃での凝集または電荷種の有意な変化は観察されなかった。凝集（ＨＭＭＳ）および酸性種は、４０℃での保存後、全ての製剤について増加するが、この増加は全ての製剤において同じであり、５℃の意図された保存条件を伴う液体製剤について、相対的な増加は許容されると考えられる。
【０１９６】
これらの結果は、ｐＨ５．０〜５．１において１５０ｍｇ／ｍｌの抗ＰＤ−１抗体ｍＡｂ７、２０ｍＭのヒスチジン、８４ｍｇ／ｍｌのトレハロース二水和物、０．０５ｍｇ／ｍｌのＥＤＴＡ二ナトリウム二水和物、および０．２ｍｇ／ｍｌのＰＳ８０を含有する製剤７が、５℃または２５℃での１４週間の保存後に安定であることを実証する（表１３および１４）。これらの結果はまた、ｐＨ５．０〜５．１において１００ｍｇ／ｍｌの抗ＰＤ−１抗体ｍＡｂ７、２０ｍＭのヒスチジン、８４ｍｇ／ｍｌのトレハロース二水和物、０．０５ｍｇ／ｍｌのＥＤＴＡ二ナトリウム二水和物、および０．２ｍｇ／ｍｌのＰＳ８０を含有する製剤７が、５℃または２５℃での１４週間の保存後に安定であることを実証する（表１６および１７）。これらの結果はまた、ｐＨ５．０において１５０ｍｇ／ｍｌの抗ＰＤ−１抗体ｍＡｂ７、２０ｍＭのヒスチジン、１００ｍＭのアルギニン、５０ｍｇ／ｍｌのトレハロース二水和物、０．０５ｍｇ／ｍｌのＥＤＴＡ二ナトリウム二水和物、および０．２ｍｇ／ｍｌのＰＳ８０を含有する製剤８が、５℃または２５℃での６週間の保存後に安定であることを実証する（表１９および２０）。
【０１９７】
１００および１５０ｍｇ／ｍＬの抗ＰＤ−１での製剤７ならびに１５０ｍｇ／ｍＬの抗ＰＤ−１での製剤８の凍結融解および撹拌安定性を、製剤に５回の凍結／融解（ＦＴ）サイクルまたは２４時間の撹拌（ＡＧ）のいずれかのストレスを加えることによって決定した。結果を表２２にまとめる。
【０１９８】
【表２２】
2021517129.tif 000026
【０１９９】
同様に、凍結／融解または撹拌のいずれかによるストレスを加えた後に低レベルの凝集形成が製剤７および製剤８について観察された（すなわち、０．６％）（表２２）。
これらの結果は、ｐＨ５．０〜５．１において１００または１５０ｍｇ／ｍｌの抗ＰＤ−１抗体ｍＡｂ７、２０ｍＭのヒスチジン、８４ｍｇ／ｍｌのトレハロース二水和物、０．０５ｍｇ／ｍｌのＥＤＴＡ二ナトリウム二水和物、および０．２ｍｇ／ｍｌのＰＳ８０を含有する製剤７が、５回の凍結／融解サイクルまたは２４時間の撹拌後に安定であることを実証する。１５０ｍｇ／ｍｌの抗ＰＤ−１抗体ｍＡｂ７、２０ｍＭのヒスチジン、１００ｍＭのアルギニンＨＣｌ、５０ｍｇ／ｍｌのトレハロース二水和物、０．０５ｍｇ／ｍｌのＥＤＴＡ二ナトリウム二水和物、０．２ｍｇ／ｍｌのＰＳ８０、ｐＨ５．０）を含有する製剤８もまた、５回の凍結／融解サイクルまたは２４時間の撹拌後に安定である。
【０２００】
実施例５．抗ＰＤ−１抗体ｍＡｂ７のグリコシル化パターン
この実施例は、抗ＰＤ−１抗体ｍＡｂ７のグリコシル化パターン（ｐａｔｔｅｎｒ）を例示する。
【０２０１】
ＬＣ／ＭＳによるペプチドマッピングにより、Ｎ２９４ＳＴコンセンサス配列を含有する重鎖ペプチド上に位置するＮ−グリコシル化の１つの部位が確認された。Ｎ２９４ＳＴコンセンサス配列が本質的に完全に占めている。ｍＡｂ７について観察されたＮ結合型オリゴ糖プロファイルにより、２つの主要なＮ−グリカンであるＧ０ＦおよびＧ１Ｆが示され、これらの両方はコア−フコシル化された、複合型二分岐構造である。さらに、切断されたおよび／またはアフコシル化された複合型二分岐構造、高マンノース型Ｍａｎ５構造、ならびにシアル化された、コア−フコシル化された複合型二分岐オリゴ糖に対応する、より少ない量のＮ−グリカンも検出し、同定する。
【０２０２】
ｍＡｂ７のＮ結合型オリゴ糖プロファイリングは、ペプチド−Ｎ−グリコシダーゼＦ（ＰＮＧａｓｅＦ）によって放出されたＮ結合型オリゴ糖の２−アミノベンズアミド（２−ＡＢ）標識化を含んでいた。２−ＡＢ標識化Ｎ結合型オリゴ糖を、蛍光検出および質量分析による構造解明を伴う親水性相互作用液体クロマトグラフィー（ＨＩＬＩＣ）によって分離した。ｍＡｂ７におけるグリカン不均一性を図６のグラフに示す。
【０２０３】
実施例６．製剤７における抗ＰＤ−１抗体の評価
この実施例は、ＫＥＹＴＲＵＤＡ（登録商標）（ペンブロリズマブ）およびＯＰＤＩＶＯ（登録商標）（ニボルマブ）を用いた製剤７の使用の実現可能性を評価する。
【０２０４】
ペンブロリズマブおよびニボルマブを、各々、２０ｍＭのヒスチジン緩衝液、８４ｍｇ／ｍｌのトレハロース二水和物、ｐＨ５．０中に配合した。高濃度のポリソルベート８０およびＥＤＴＡ二ナトリウム二水和物を、ｐＨ５．０において、２０ｍＭのヒスチジン、８４ｍｇ／ｍｌのトレハロース二水和物、０．０５ｍｇ／ｍｌのＥＤＴＡ二ナトリウム二水和物、および０．２ｍｇ／ｍｌのＰＳ８０の最終製剤（製剤７）について試料中にスパイクした。次いで全ての製剤を、０．２２ｕｍのＰＥＳフィルターを使用して濾過し、タンパク質を含まない製剤７溶液を使用して必要な濃度に希釈した。
【０２０５】
ペンブロリズマブを、１２９、１５０、１７５および１９３ｍｇ／ｍＬにて製剤７中に配合した。ニボルマブを、１２５、１４８および１７９ｍｇ／ｍＬにて製剤７中に配合した。２０℃での粘度を上記のように測定した。結果を表２３にまとめる。
【０２０６】
【表２３】
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【０２０７】
この結果は、製剤７におけるペンブロリズマブ（ｐｅｍｂｒｏｌｉｚｕｍｂ）およびニボルマブのタンパク質濃度の関数としての粘度が、製剤７における抗ＰＤ−１抗体ｍＡｂ７の粘度に匹敵することを実証する（表１２）。
【０２０８】
製剤７におけるペンブロリズマブ、ニボルマブおよび抗ＰＤ−１抗体ｍＡｂ７の熱安定性を、示差走査熱量測定によって融解温度を測定することによって評価した。３つの抗体全てを、分析前にタンパク質を含まない製剤７の溶液を使用して１ｍｇ／ｍＬに希釈した。１００℃／時間のランプ速度で１０℃から１１０℃まで熱走査を実施した。サーモグラムを図７に示し、熱変性の開始温度（Ｔｏｎｓｅｔ）および融解温度（Ｔｍ１、ｍ２）を表２４に示す。
【０２０９】
【表２４】
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【０２１０】
熱安定性の結果は、製剤７におけるペンブロリズマブ、ニボルマブおよび抗ＰＤ−１抗体ｍＡｂ７が、同等の熱プロファイル、融解開始温度および融解温度を有することを実証する。
【０２１１】
製剤７における１５０ｍｇ／ｍＬのペンブロリズマブおよびニボルマブの安定性を、凝集（ＳＥＣ）、電荷アイソフォーム（ｉＣＥ）、濃度、還元キャピラリーゲル電気泳動（ｒＣＧＥ）による純度およびｐＨを測定することによって４０℃で２週間評価した。結果を表２５および２６にまとめる。
【０２１２】
【表２５】
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【０２１３】
【表２６】
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【０２１４】
これらの結果は、ｐＨ５．０〜５．１において、１５０ｍｇ／ｍｌのペンブロリズマブ、２０ｍＭのヒスチジン、８４ｍｇ／ｍｌのトレハロース二水和物、０．０５ｍｇ／ｍｌのＥＤＴＡ二ナトリウム二水和物、および０．２ｍｇ／ｍｌのＰＳ８０を含有する製剤７が、４０℃での２週間の保存後に安定であることを実証する。これらの結果はまた、ｐＨ５．１〜５．２において、１５０ｍｇ／ｍｌのニボルマブ、２０ｍＭのヒスチジン、８４ｍｇ／ｍｌのトレハロース二水和物、０．０５ｍｇ／ｍｌのＥＤＴＡ二ナトリウム二水和物、および０．２ｍｇ／ｍｌのＰＳ８０を含有する製剤７が、４０℃での２週間の保存後に安定であることを実証する。
【０２１５】
特許、特許出願、論文、教科書などを含む、本明細書で引用された全ての参考文献、およびそれらの中で引用された参考文献は、まだ引用されていない範囲まで、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる。定義された用語、用語の用法、記載された技術などが含まれるがこれらに限定されない、組み込まれた文献および同様の資料のうち１つまたは複数が、本出願とは異なる場合または本出願と矛盾する場合には、本出願が優先する。
【０２１６】
上述の説明および実施例は、本発明のある特定の具体的な態様を詳述し、本発明者らが企図する最良の形態を記載している。しかしながら、上述の詳細がいくら本文中に現れる場合であっても、本発明が多くの方法で実施され得、本発明が、添付の特許請求の範囲およびその任意の均等物に従って解釈されるべきであることが、理解される。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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