(57)【要約】  本開示は、個体における肺癌（例えば、小細胞肺癌、例えば、進展型小細胞肺がん）を治療するための方法を提供する。本方法は、ＰＤ−１軸結合アンタゴニスト（例えば、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、例えば、アテゾリズマブ）、白金剤（例えば、シスプラチンまたはカルボプラチン）、およびトポイソメラーゼＩＩ阻害剤（例えば、エトポシド）を個体に投与することからなる。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
肺がんを有する個体を治療する方法であって、有効量の抗ＰＤ−Ｌ１抗体、白金剤、およびトポイソメラーゼＩＩ阻害剤を前記個体に投与することを含み、ここで、前記治療は、前記個体の無増悪生存期間（ＰＦＳ）を延長する、方法。
【請求項２】
前記治療は、前記個体の全生存期間（ＯＳ）を延長する、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
肺がんを有する個体を治療する方法であって、有効量の抗ＰＤ−Ｌ１抗体、白金剤、およびトポイソメラーゼＩＩ阻害剤を前記個体に投与することを含み、ここで、前記治療は、前記個体の全生存期間（ＯＳ）を延長する、方法。
【請求項４】
前記治療が、前記個体のＰＦＳを少なくとも約５ヶ月延長する、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記治療が、前記個体のＯＳを少なくとも約１１ヶ月延長する、請求項２または３に記載の方法。
【請求項６】
抗ＰＤ−Ｌ１抗体が：
（ａ）ＧＦＴＦＳＤＳＷＩＨ（配列番号１）のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、ＡＷＩＳＰＹＧＧＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号２）のアミノ酸配列、およびアミノ酸ＲＨＷＰＧＧＦＤＹ（配列番号３）を含むＨＶＲ−３を含むＨＶＲ−２を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、および
（ｂ）ＲＡＳＱＤＶＳＴＡＶＡ（配列番号４）のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、ＳＡＳＦＬＹＳ（配列番号５）のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、およびＱＱＹＬＹＨＰＡＴ（配列番号６）のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、
を含む、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７】
抗ＰＤ−Ｌ１抗体が、配列番号７のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）および配列番号８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む、請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
抗ＰＤ−Ｌ１抗体がアテゾリズマブである、請求項１〜７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
白金剤がカルボプラチンまたはシスプラチンである、請求項１から８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
白金剤がカルボプラチンである、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
トポイソメラーゼＩＩ阻害剤が、エトポシド、テニポシド、ドキソルビシン、ダウノルビシン、ミトキサントロン、アムサクリン、エリプチシン、オーリントリカルボン酸、またはＨＵ−３３１である、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
トポイソメラーゼ阻害剤がエトポシドである、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、１２００ｍｇの用量で投与され、白金剤は、ＡＵＣ＝５ｍｇ／ｍｌ／ｍｉｎを達成するのに十分な用量で投与され、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤は、１００ｍｇ／ｍ２の用量で投与される、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
前記抗ＰＤ−Ｌ１抗体、前記白金剤および前記トポイソメラーゼＩＩ阻害剤は、４回の２１日サイクルで投与され、およびここで、前記抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、１日目に１２００ｍｇの用量で投与され、前記白金剤は１日目にＡＵＣ＝５ｍｇ／ｍｌ／分を達成するのに十分な用量で投与され、前記トポイソメラーゼＩＩ阻害剤は、サイクル１〜４について、各２１日サイクルの１日目、２日目、および３日目のそれぞれに１００ｍｇ／ｍ２の用量で投与される、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５】
前記抗ＰＤ−Ｌ１抗体が、サイクル４に続いてさらに投与され、前記抗ＰＤ−Ｌ１抗体が、サイクル４の後のサイクルごとに、各２１日周期のの１日目に１２００ｍｇの用量で投与される、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記抗ＰＤ−Ｌ１抗体、白金剤、およびトポイソメラーゼＩＩ阻害剤が、サイクル１〜４の１日目に順次投与される、請求項１３〜１５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１７】
抗ＰＤ−Ｌ１抗体が白金剤に先行して投与され、ここで、白金剤が、サイクル１〜４の１日目にトポイソメラーゼＩＩ阻害剤に先行して投与される、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
肺癌が小細胞肺癌（ＳＣＬＣ）である、請求項１〜１７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１９】
前記ＳＣＬＣが広汎性ステージＳＣＬＣ（ＥＳ−ＳＣＬＣ）である、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記個体がＥＳ−ＳＣＬＣに対して治療ナイーブである、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記個体が、少なくとも約１０の血液腫瘍突然変異負荷（ｂＴＭＢ）を有する、請求項１〜２０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２２】
前記個体が少なくとも約１６のｂＴＭＢを有する、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
肺癌が脳に転移している、請求項１〜２２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２４】
肺癌が肝臓に転移している、請求項１〜２３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２５】
肺癌がリンパ節に転移している、請求項１〜２４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２６】
肺癌が副腎に転移している、請求項１〜２５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２７】
前記個体が少なくとも６５歳である、請求項１〜２６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２８】
前記個体がＰＤ−Ｌ１陰性である、請求項１〜２７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２９】
前記患者からのサンプル中の腫瘍細胞または腫瘍浸潤免疫細胞の１％未満がＰＤ−Ｌ１を発現する場合に、前記患者がＰＤ−Ｌ１陰性である、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
抗ＰＤ−Ｌ１抗体、白金剤、およびトポイソメラーゼＩＩ阻害剤をそれぞれ静脈内投与する、請求項１〜２９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３１】
進展型小細胞肺がん（ＥＳ−ＳＣＬＣ）を有する個体を治療する方法であって、有効量のアテゾリズマブ、カルボプラチンおよびエトポシドを患者に投与することを含み、ここで、アテゾリズマブは１２００ｍｇの用量で投与され、カルボプラチンはＡＵＣ＝５ｍｇ／ｍｌ／分を達成するのに十分な用量で投与され、エトポシドは１００ｍｇ／ｍ２の用量で投与され、およびここで、治療は、前記個体の無増悪生存期間（ＰＦＳ）および全生存期間（ＯＳ）を延長する、方法。
【請求項３２】
アテゾリズマブ、カルボプラチンおよびエトポシドが４回の２１日サイクルで投与され、アテゾリズマブがサイクル４に続いてさらに投与され、ここで、アテゾリズマブは、１〜４サイクルの各２１日周期の１日目に１２００ｍｇの用量で投与され、カルボプラチンは、１〜４サイクルの各２１日周期の１日目にＡＵＣ＝５ｍｇ／ｍｌ／分を達成するのに十分な用量で投与され、エトポシドは、１〜４サイクルの各２１日周期の１日目、２日目および３日目のそれぞれに１００ｍｇ／ｍ２の用量で投与され、およびここで、アテゾリズマブは、第４サイクル以降のサイクルごとの、各２１日周期の１日目に１２００ｍｇの用量でさらに投与される、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
前記個体がＥＳ−ＳＣＬＣに対して治療ナイーブである、請求項３１または３２に記載の方法。
【請求項３４】
前記治療が、前記個体のＰＦＳを少なくとも約５ヶ月延長する、請求項３１〜３３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３５】
前記治療が、前記個体のＯＳを少なくとも約１１ヶ月延長させる、請求項３１〜３４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３６】
前記個体が、少なくとも約１０の血液腫瘍突然変異負荷（ｂＴＭＢ）を有する、請求項３１〜３５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３７】
前記個体が少なくとも約１６のｂＴＭＢを有する、請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
前記ＥＳ−ＳＣＬＣが脳に転移している、請求項３１〜３７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３９】
前記ＥＳ−ＳＣＬＣが肝臓に転移している、請求項３１〜３８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４０】
肺癌がリンパ節に転移している、請求項３１〜３９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４１】
肺癌が副腎に転移している、請求項３１〜４０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４２】
前記個体が少なくとも６５歳である、請求項３１〜４１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４３】
前記個体がＰＤ−Ｌ１陰性である、請求項３１〜４２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４４】
患者からのサンプル中の腫瘍細胞または腫瘍浸潤免疫細胞の１％未満がＰＤ−Ｌ１を発現する場合、患者がＰＤ−Ｌ１陰性である、請求項４３に記載の方法。
【請求項４５】
前記アテゾリズマブ、カルボプラチン、およびエトポシドが、サイクル１〜４について、各２１日間周期の１日目に順次投与される、請求項３１〜４４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４６】
前記アテゾリズマブがカルボプラチンに先行して投与され、前記カルボプラチンが、サイクル１〜４について、各２１日間周期の１日目にエトポシドに先行して投与される、請求項４５に記載の方法。
【請求項４７】
前記アテゾリズマブ、前記カルボプラチンおよび前記エトポシドがそれぞれ静脈内投与される、請求項３１〜４６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４８】
前記個体がヒトである、請求項１〜４７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４９】
請求項１〜３０および４８のいずれか１項に記載の方法に従って肺癌を有する個体を治療するための、白金剤およびトポイソメラーゼＩＩ阻害剤と組み合わせて使用するための、抗ＰＤ−Ｌ１抗体を含むキット。
【請求項５０】
請求項３１〜４８のいずれか１項に記載の方法に従って肺癌を有する個体を治療するための、カルボプラチンおよびエトポシドと組み合わせて使用するための、アテゾリズマブを含むキット。
【請求項５１】
個体において肺癌を治療する方法における使用のための抗ＰＤ−Ｌ１抗体であって、前記方法は、有効量の抗ＰＤ−Ｌ１抗体、白金剤、およびトポイソメラーゼＩＩ阻害剤を前記個体に投与することを含み、前記治療は、前記個体の無増悪生存期間（ＰＦＳ）および／または全生存期間（ＯＳ）を延長する、抗ＰＤ−Ｌ１抗体。
【請求項５２】
請求項２〜３０および４８のいずれか１項に記載の方法における使用のための、請求項５１に記載の抗ＰＤ−Ｌ１抗体。
【請求項５３】
進展型小細胞肺がん（ＥＳ−ＳＣＬＣ）を治療する方法における使用のためのアテゾリズマブを含む組成物であって、有効量のアテゾリズマブ、カルボプラチンおよびエトポシドを個体に投与することを含み、アテゾリズマブは、１２００ｍｇで投与され、カルボプラチンは、ＡＵＣ＝５ｍｇ／ｍｌ／分を達成するのに十分な量で投与され、エトポシドは、１００ｍｇ／ｍ２の量で投与され、およびここで、前記治療は、前記個体の無増悪生存期間（ＰＦＳ）および全生存期間（ＯＳ）を延長する、組成物。
【請求項５４】
請求項３１〜４８のいずれか１項に従った方法における使用のための、請求項５３に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１８年６月２３日に出願された米国仮出願第６２／６８９，１０５号、２０１８年８月１７日に出願された第６２／７１９，４６１号、および２０１８年９月２５日に出願された第６２／７３６，３２６号の利益を主張するものであり、それぞれの内容は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
ＡＳＣＩＩテキストファイルでの配列表の提出
【０００２】
ＡＳＣＩＩテキストファイル上の以下の投稿の内容は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる：シーケンスリストのコンピュータ可読形式（ＣＲＦ）（ファイル名：１４６３９２０４４９４０ＳＥＱＬＩＳＴ．ＴＸＴ、記録日：２０１９年６月１８日、サイズ：３７ＫＢ）。
【０００３】
本開示は、白金剤（例えば、カルボプラチン）およびトポイソメラーゼＩＩ阻害剤（例えば、エトポシド）と組み合わせて、ＰＤ−１軸結合拮抗薬（例えば、アテゾリズマブ）を投与することにより、癌を治療する方法に関する。
【背景技術】
【０００４】
肺がんは依然として世界のがん死亡原因の第一位であり、男性に最も多いがんであり、２００８年には全ての新規がんの約１３％を占めている（Ｊｅｍａｌ  ｅｔ  ａｌ．（２０１１）ＣＡ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｊ．Ｃｌｉｎ  ６１：６９−９０）。２０１２年には、ヨーロッパで３１３，０００人の肺がんの新規症例と２６８，０００人の肺がんによる死亡があったと推定された（ＧＬＯＢＯＣＡＮ（２０１２））。推定がん発生率：２０１２年の世界的な死亡率と有病率。入手可能：ｇｌｏｂｏｃａｎ（ｄｏｔ）ｉａｒｃ（ｄｏｔ）ｆｒ／Ｐａｇｅｓ／ｆａｃｔ＿ｓｈｅｅｔｓ＿ｃａｎｃｅｒ．ａｓｐｘ）。米国の同様のデータによると、２０１５年には肺がんの新規症例数が２２１，２００人、肺がんによる死亡者数が１５８，０４０人になると推定されている（Ｓｉｅｇｅｌ  ｅｔ  ａｌ．（２０１５）ＣＡ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｊ  Ｃｌｉｎ．６５：５−２９）。
【０００５】
小細胞肺がん（ＳＣＬＣ）は肺がん全体の約１３％を占めており、成長速度が速いこと、転移が早いことなどから非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）と区別されている（Ｇｏｖｉｎｄａｎ  ｅｔ  ａｌ．（２００６）Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｏｎｃｏｌ．２４：４５３９−４４）。ＳＣＬＣのほぼ全ての症例はタバコの喫煙に起因する（Ｐｅｓｃｈ  ｅｔ  ａｌ．（２０１２）Ｉｎｔ  Ｊ  Ｃａｎｃｅｒ．１３１：１２１０−９）。ＳＣＬＣ患者は広範囲の転移性疾患の症状を呈することが多く、臨床症状の悪化が早い可能性があるため、これらの患者に対しては迅速な治療開始が必要である。ＳＣＬＣ患者の生存の予後不良因子には、末期疾患、パフォーマンスの低下、体重減少、および過剰な病変の大きさに関連するマーカー（例えば、乳酸脱水素酵素）が含まれる（Ｙｉｐ  ｅｔ  ａｌ．（２０００）Ｌｕｎｇ  Ｃａｎｃｅｒ．２８：１７３−８５；Ｆｏｓｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（２００９）Ｃａｎｃｅｒ．１１５：２７２１−３１。
【０００６】
ステージが限定されたＳＣＬＣの患者は、長期生存の可能性がある化学療法や放射線治療を受けることができる（Ｓｔｉｎｃｈｃｏｍｂｅ  ｅｔ  ａｌ．（２０１０）Ｏｎｃｏｌｏｇｉｓｔ．１５：１８７−９５）。しかし、ＳＣＬＣ患者の大多数（約７０％）は、生存の見通しが悪い（全生存期間の中央値［ＯＳ］約１０ヶ月）の末期疾患（ＥＳ−ＳＣＬＣ）と診断されている（Ｓｏｃｉｎｓｋｉ  ｅｔ  ａｌ．（２００９）．Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｏｎｃｏｌ．２７：４７８７−９２．）。胸痛、呼吸困難、および咳は、肺がんの患者が経験する最も頻繁な疾患関連症状の１つである。化学療法単独でＥＳ−ＳＣＬＣ患者の症状を緩和し、生存期間を延長することができるが、長期生存はまれである（Ｊｏｈｎｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．（２００４）Ｈｅｍａｔｏｌ  Ｏｎｃｏｌ  Ｃｌｉｎ  Ｎｏｒｔｈ  Ａｍ．１８：３０９−２２；Ｄｅｍｅｄｔｓ  ｅｔ  ａｌ．（２０１０）Ｅｕｒ  Ｒｅｓｐｉｒ  Ｊ．３５：２０２−１５）。
【０００７】
Ｉ期のＳＣＬＣ患者の５年相対生存率は約３１％だが、ＩＶ期では５年相対生存率は約２％に低下する。（アメリカ癌協会；小細胞肺癌の生存率、ステージ別：ｗｗｗ．ｃａｎｃｅｒ．ｏｒｇ／ｃａｎｃｅｒ／ｓｍａｌｌ−ｃｅｌｌ−ｌｕｎｇ−ｃａｎｃｅｒ／ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ−ｄｉａｇｎｏｓｉｓ−ｓｔａｇｉｎｇ／ｓｕｒｖｉｖａｌ−ｒａｔｅｓ．ｈｔｍｌ。２０１８年６月アクセス済み。）したがって、当技術分野では、肺癌を治療する方法、例えば、生存率を延長する方法が必要とされている。
【０００８】
特許出願、特許公報、およびＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ受託番号を含む、本明細書に引用される全ての参考文献は、各個々の参考文献が参照により組み込まれるように具体的かつ個別に示されているかのように、参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれる。
【発明の概要】
【０００９】
本明細書に提供されるのは、肺癌患者を治療するための抗ＰＤ−Ｌ１抗体の方法および使用である。特に、本発明の方法および用途は、前治療歴のない進展型小細胞肺がん（ＥＳ−ＳＣＬＣ）個体を対象とした、カルボプラチンおよびエトポシドとの併用によるアテゾリズマブ（ＴＥＣＥＴＲＩＱ（登録商標））の無作為化第ＩＩＩ相臨床試験からのデータに基づいている。本試験では、ＴＥＣＥＮＴＲＩＱ（登録商標）（アテゾリズマブ）と化学療法（カルボプラチンおよびエトポシド）を併用した初回（ファーストライン）治療では、化学療法のみの場合と比較して、進展型小細胞肺がん（ＥＳ−ＳＣＬＣ）の患者の生存期間が有意に長くなることが示された。また、ＴＥＣＥＮＴＲＩＱをベースとした併用療法は、化学療法単独と比較して、疾患の悪化または死亡（ＰＦＳ）のリスクを減少させた。ＴＥＣＥＮＴＲＩＱと化学療法の併用療法の安全性は、個々の医薬品の既知の安全性プロファイルと一致しており、併用療法では新たな安全性シグナルは確認されなかった。
【００１０】
ある態様において、本明細書で提供される肺癌を有する個体を治療する方法であって、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、白金剤、およびトポイソメラーゼＩＩ阻害剤の有効量を個体に投与することからなる方法であって、この治療により個体の無増悪生存期間（ＰＦＳ）が延長される。いくつかの実施形態では、治療は、個体の全生存期間（ＯＳ）を延長する。
【００１１】
別の態様において、本明細書で提供される肺癌を有する個体を治療する方法であって、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、白金剤、およびトポイソメラーゼＩＩ阻害剤の有効量を個体に投与することからなる方法であって、この治療は、白金剤およびトポイソメラーゼＩＩ阻害剤による治療を受けた肺癌を有する個体と比較して、その個体の全生存期間（ＯＳ）が延長される（例えば、少なくとも０．５、１、１．２５、１．５、１．７５、２、２．２５、２．５、２．７５、または３か月のいずれか１つまで）。いくつかの実施形態では、治療は、ＯＳを、例えば、１０．５、１０．７５、１１、１１．２５、１１．５、１１．７５、１２、１２．２５、１２．５、１２．７５、１３、１３．２５、１３．５、１３．７５、または１４ヶ月のうちの少なくとも約１つによって延長する。いくつかの実施形態では、治療は、１４ヶ月以上、例えば、１４．２５、１４．５、１４．７５、１５、１５．２５、１５．５、１５．７５、または１５．７５ヶ月以上のうちの約１つによって、ＯＳを延長する。いくつかの実施形態では、治療はＯＳを約１５．９ヶ月延長する。
【００１２】
いくつかの実施形態では、治療は、その個体のＰＦＳを少なくとも約５ヶ月延長する。いくつかの実施形態では、治療は、その個体のＰＦＳを少なくとも約５．２ヶ月延長する。いくつかの実施形態では、治療は、その個体のＰＦＳを少なくとも約５．５ヶ月延長する。いくつかの実施形態では、治療は、その個体のＰＦＳを少なくとも約５．６ヶ月延長する。いくつかの実施形態では、治療は、その個体のＰＦＳを少なくとも約６ヶ月延長する。いくつかの実施形態では、治療は、個体のＯＳを少なくとも約１１ヶ月延長する。いくつかの実施形態では、治療は、個体のＯＳを少なくとも約１１．５ヶ月延長する。いくつかの実施形態では、治療は、個体のＯＳを少なくとも約１２ヶ月延長する。いくつかの実施形態では、治療は、個体のＯＳを少なくとも約１２．３ヶ月延長する。
【００１３】
いくつかの実施形態において、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は以下を含む：ＧＦＴＦＳＤＳＷＩＨ（配列番号１）のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、ＡＷＩＳＰＹＧＧＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号２）のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−２、およびＨＶＲを含む重鎖可変領域（ＶＨ）−３はアミノ酸ＲＨＷＰＧＧＦＤＹ（配列番号３）を含み、（ｂ）ＲＡＳＱＤＶＳＴＡＶＡ（配列番号４）のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、ＨＶＲ−ＳＡＳＦＬＹＳのアミノ酸配列（配列番号５）を含むＬ２、およびＱＱＹＬＹＨＰＡＴのアミノ酸配列（配列番号６）を含むＨＶＲ−Ｌ３。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、配列番号７のアミノ酸配列からなる重鎖可変領域（ＶＨ）と、配列番号８のアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域（ＶＬ）からなる。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体はアテゾリズマブである。
【００１４】
いくつかの実施形態では、白金剤は、カルボプラチンまたはシスプラチンである。いくつかの実施形態では、白金剤はカルボプラチンである。いくつかの実施形態では、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤は、エトポシド、テニポシド、ドキソルビシン、ダウノルビシン、ミトキサントロン、アムサクリン、エリプシン、オーリントリカルボン酸、またはＨＵ−３３１である。いくつかの実施形態では、トポイソメラーゼ阻害剤はエトポシドである。いくつかの実施形態では、白金剤はカルボプラチンであり、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤はエトポシドである。
【００１５】
いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体を１２００ｍｇの用量で投与し、白金剤をＡＵＣ＝５ｍｇ／ｍｌ／分を達成するのに十分な用量で投与し、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤を１００ｍｇ／ｍ２の用量で投与する。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、白金剤およびトポイソメラーゼＩＩ阻害剤は、４つの２１日サイクルで投与され、ここで、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、１日目に１２００ｍｇの用量で投与され、白金剤は、１日目にＡＵＣ＝５ｍｇ／ｍｌ／分を達成するのに十分な用量で投与され、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤は、１〜４サイクルの各２１日サイクルの１日目、２日目、および３日目に１００ｍｇ／ｍ２の用量で投与される。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、サイクル４に続いてさらに投与され、ここで、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、サイクル４の後の各サイクルについて、２１日目の各サイクルの第１日目に１２００ｍｇの用量で投与される。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、白金剤、およびトポイソメラーゼＩＩ阻害剤は、サイクル１〜４の１日目に順次投与される。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体が白金剤に先行して投与され、ここで、白金剤が、サイクル１〜４の第１日目にトポイソメラーゼＩＩ阻害剤に先行して投与される。
【００１６】
いくつかの実施形態では、肺癌は小細胞肺癌（ＳＣＬＣ）である。いくつかの実施形態では、ＳＣＬＣは、末期ＳＣＬＣ（ＥＳ−ＳＣＬＣ）である。いくつかの実施形態では、その個体はＥＳ−ＳＣＬＣの治療を受けていない。いくつかの実施形態では、個体は、少なくとも約１０の血液腫瘍突然変異負荷（ｂＴＭＢ）を有する。いくつかの実施形態では、個体は、少なくとも約１６のｂＴＭＢを有する。いくつかの実施形態では、肺癌は脳に転移している。いくつかの実施形態では、肺癌は肝臓に転移している。いくつかの実施形態では、肺癌は副腎に転移している。いくつかの実施形態では、肺癌はリンパ節に転移している。いくつかの実施形態では、肺癌は、肺内（例えば、元の病変部位の外）または他の肺に転移している。いくつかの実施形態では、個体は少なくとも６５歳（例えば、約６５歳から約７４歳までの間、約７５歳から約８４歳までの間、または約８５歳よりも大きい）である。いくつかの実施形態では、個体はＰＤ−Ｌ１陰性である。いくつかの実施形態では、個体から得られたサンプル中の腫瘍細胞（ＴＣ）および／または腫瘍浸潤免疫細胞（ＩＣ）の１％未満がＰＤ−Ｌ１を発現する場合、個体はＰＤ−Ｌ１陰性であり、例えば、本明細書に記載のアッセイに従う。
【００１７】
いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、白金剤、およびトポイソメラーゼＩＩ阻害剤は、それぞれ静脈内投与される。
【００１８】
別の態様において、本明細書で提供される方法は、進展型小細胞肺がん（ＥＳ−ＳＣＬＣ）を有する個体を治療する方法であって、有効量のアテゾリズマブ、カルボプラチンおよびエトポシドを個体に投与することからなり、ここでアテゾリズマブは１２００ｍｇの用量で投与される。前記カルボプラチンは、ＡＵＣ＝５ｍｇ／ｍｌ／分を達成するのに十分な用量で投与され、前記エトポシドは、１００ｍｇ／ｍ２の用量で投与され、ここで、前記治療が、前記個体の無増悪生存期間（ＰＦＳ）および全生存期間（ＯＳ）を延長する治療法。
【００１９】
いくつかの実施形態では、アテゾリズマブ、カルボプラチン、およびエトポシドは、４回の２１日サイクルで投与され、アテゾリズマブは、サイクル４に続いてさらに投与され、ここで、アテゾリズマブは、サイクル１〜４の各２１日サイクルの第１日目に１２００ｍｇの用量で投与される。カルボプラチンを、サイクル１〜４の各２１日周期の第１日目にＡＵＣ＝５ｍｇ／ｍｌ／分を達成するのに十分な量で投与し、エトポシドを、サイクル１〜４の各２１日周期の第１日目、第２日目、および第３日目に１００ｍｇ／ｍ２の量で投与する。そして、ここで、アテゾリズマブが、サイクル４以降の各サイクルについて、各２１日間のサイクルの第１日目に１２００ｍｇの用量でさらに投与される。
【００２０】
いくつかの実施形態では、治療は、その個体のＰＦＳを少なくとも約５ヶ月延長する。いくつかの実施形態では、治療は、その個体のＰＦＳを少なくとも約５．２ヶ月延長する。いくつかの実施形態では、治療は、その個体のＰＦＳを少なくとも約５．５ヶ月延長する。いくつかの実施形態では、治療は、その個体のＰＦＳを少なくとも約５．６ヶ月延長する。いくつかの実施形態では、治療は、その個体のＰＦＳを少なくとも約６ヶ月延長する。いくつかの実施形態では、治療は、個体のＯＳを少なくとも約１１ヶ月延長する。いくつかの実施形態では、治療は、個体のＯＳを少なくとも約１１．５ヶ月延長する。いくつかの実施形態では、治療は、個体のＯＳを少なくとも約１２ヶ月延長する。いくつかの実施形態では、治療は、個体のＯＳを少なくとも約１２．３ヶ月延長する。
【００２１】
いくつかの実施形態では、その個体はＥＳ−ＳＣＬＣの治療を受けていない。いくつかの実施形態では、個体は、少なくとも約１０の血液腫瘍突然変異負荷（ｂＴＭＢ）を有する。いくつかの実施形態では、個体は、少なくとも約１６のｂＴＭＢを有する。いくつかの実施形態では、ＥＳ−ＳＣＬＣは脳に転移している。いくつかの実施形態では、ＥＳ−ＳＣＬＣは肝臓に転移している。いくつかの実施形態では、個体は少なくとも６５歳である。
【００２２】
いくつかの実施形態では、アテゾリズマブ、カルボプラチン、およびエトポシドは、サイクル１〜４の各２１日間のサイクルの第１日目に順次投与される。いくつかの実施形態では、アテゾリズマブは、カルボプラチンに先立って投与され、ここで、カルボプラチンは、サイクル１〜４のための各２１日間のサイクルの第１日目にエトポシドに先立って投与される。いくつかの実施形態では、アテゾリズマブ、カルボプラチンおよびエトポシドは、それぞれ静脈内投与される。
【００２３】
いくつかの実施形態では、個体はヒトである。
【００２４】
別の様態において、本明細書に提供されるのは、上記および本明細書に記載される方法のいずれかに従って肺癌を有する個体を治療するための白金剤およびトポイソメラーゼＩＩ阻害剤と組み合わせて使用するための抗ＰＤ−Ｌ１抗体からなるキットである。また、本明細書には、上記および本明細書に記載の方法のいずれかに従って肺癌を有する個体を治療するためのカルボプラチンおよびエトポシドとの組み合わせで使用するためのアテゾリズマブからなるキットも提供される。
【００２５】
別の様態において、本明細書で提供される抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、個体における肺癌を治療する方法において使用するための抗ＰＤ−Ｌ１抗体であり、該方法は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、白金剤、およびトポイソメラーゼＩＩ阻害剤の有効量を個体に投与することからなり、該治療は、個体の無増悪生存期間（ＰＦＳ）および／または全生存期間（ＯＳ）を延長する。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、上記または本明細書に記載のいずれかの方法に従った方法で使用するためのものである。
【００２６】
別の様態において、本明細書で提供されるのは、進展型小細胞肺がん（ＥＳ−ＳＣＬＣ）を治療する方法において使用するためのアテゾリズマブからなる組成物であって、この組成物は、有効量のアテゾリズマブ、カルボプラチン、およびエトポシドを個体に投与することからなる。ここで、アテゾリズマブは１２００ｍｇの用量で投与され、カルボプラチンはＡＵＣ＝５ｍｇ／ｍｌ／分を達成するのに十分な用量で投与され、エトポシドは１００ｍｇ／ｍ２の用量で投与され、治療により、当該個体の無増悪生存期間（ＰＦＳ）および全生存期間（ＯＳ）が延長される治療法。いくつかの実施形態では、組成物は、上記または本明細書に記載された方法のうちのいずれか１つに従った方法で使用するためのものである。
【００２７】
本明細書に記載の様々な実施形態の特性のうちの１つ、いくつか、または全てを組み合わせて、本発明の他の実施形態を形成することができることを理解されたい。本発明のこれらおよび他の態様は、当業者に明らかであろう。本発明のこれらおよび他の実施形態は、以下の発明を実施するための形態によってさらに説明される。
【図面の簡単な説明】
【００２８】
特許または出願ファイルには、カラーの少なくとも１つの図面が含まれている。この特許または特許出願公告のカラー図面付きの写しは，請求および必要な手数料の支払いにより，国内官庁から提供される。
【００２９】
【図１】図１は、実施例１に記載された臨床試験の試験デザインの概略を示す。Ａ群には２０１人の患者が含まれていた。Ｂ群には２０２人の患者が含まれていた。ＰＣＩ＝予防的頭蓋照射。ＰＤ＝病気の進行。
【００３０】
【図２】図２は、Ａ群（アテゾリズマブ＋カルボプラチン＋エトポシド）とＢ群（プラセボ＋カルボプラチン＋エトポシド）の患者の全生存期間（ＯＳ）のカプランマイヤープロットを示している。
【００３１】
【図３】図３は、Ａ群（アテゾリズマブ＋カルボプラチン＋エトポシド）とＢ群（プラセボ＋カルボプラチン＋エトポシド）の患者の無増悪生存期間（ＰＦＳ）のカプランマイヤープロットを示している。
【００３２】
【図４】図４は、Ａ群とＢ群の患者における全奏効率（ＯＲＲ）と奏効期間（ＤＯＲ）の比較を示している（ＣＲ＝完全奏効、ＣＲ／ＰＲ＝完全奏効／部分奏効、ＳＤ＝安定病変、ＰＤ＝進行性病変）。ＯＲＲおよびＤＯＲはＲＥＣＩＳＴ  ｖ１．１基準に従って評価された。
【００３３】
【図５Ａ】図５Ａは、Ａ群（アテゾリズマブ＋カルボプラチン＋エトポシド）とＢ群（プラセボ＋カルボプラチン＋エトポシド）における様々なベースラインの危険因子を有する患者におけるＯＳのサブグループ解析を示すフォレストプロットである。Ｐ＝プラセボ；Ａ＝アテゾリズマブ）。中央値はＫＭ法から推定した。Ｐ＋ＣＥに対するハザード比および関連する信頼区間は、層化されていないＣｏｘ回帰を用いて推定された。肝転移は標的病変のみを基準とした。
【００３４】
【図５Ｂ】図５Ｂはまた、Ａ群（アテゾリズマブ＋カルボプラチン＋エトポシド）とＢ群（プラセボ＋カルボプラチン＋エトポシド）における様々なベースラインの危険因子を有する患者におけるＯＳのサブグループ分析を示すフォレストプロットを提供する。
【００３５】
【図６Ａ】図６Ａは、Ａ群（アテゾリズマブ＋カルボプラチン＋エトポシド）とＢ群（プラセボ＋カルボプラチン＋エトポシド）における様々なベースラインの危険因子を有する患者におけるＰＦＳのサブグループ分析を示すフォレストプロットである。Ｐ＝プラセボ；Ａ＝アテゾリズマブ）。中央値はＫＭ法から推定した。Ｐ＋ＣＥに対するハザード比および関連する信頼区間は、層化されていないＣｏｘ回帰を用いて推定された。肝転移は標的病変のみを基準とした。
【００３６】
【図６Ｂ】図６Ｂはまた、Ａ群（アテゾリズマブ＋カルボプラチン＋エトポシド）とＢ群（プラセボ＋カルボプラチン＋エトポシド）における様々なベースラインの危険因子を有する患者のＰＦＳのサブグループ分析を示すフォレストプロットを提供する。
【００３７】
【図７Ａ】図７Ａは、Ａ群（アテゾリズマブ＋カルボプラチン＋エトポシド）とＢ群（プラセボ＋カルボプラチン＋エトポシド）におけるｂＴＭＢ＞１６の患者の全生存期間のカプランマイヤープロットを示す。
【００３８】
【図７Ｂ】図７Ｂは、Ａ群（アテゾリズマブ＋カルボプラチン＋エトポシド）とＢ群（プラセボ＋カルボプラチン＋エトポシド）におけるｂＴＭＢ＜１６の患者の全生存期間のカプランマイヤープロットである。
【００３９】
【図８Ａ】図８Ａは、Ａ群（アテゾリズマブ＋カルボプラチン＋エトポシド）とＢ群（プラセボ＋カルボプラチン＋エトポシド）におけるｂＴＭＢ＞１０の患者の全生存期間のカプランマイヤープロットを示す。
【００４０】
【図８Ｂ】図８Ｂは、Ａ群（アテゾリズマブ＋カルボプラチン＋エトポシド）とＢ群（プラセボ＋カルボプラチン＋エトポシド）におけるｂＴＭＢ＜１０の患者の全生存期間のカプランマイヤープロットを示す。
【００４１】
【図９Ａ】図９Ａは、Ａ群（アテゾリズマブ＋カルボプラチン＋エトポシド）とＢ群（プラセボ＋カルボプラチン＋エトポシド）におけるｂＴＭＢ＞１６の患者の無増悪生存期間のカプランマイヤープロットを示す。
【００４２】
【図９Ｂ】図９Ｂは、Ａ群（アテゾリズマブ＋カルボプラチン＋エトポシド）とＢ群（プラセボ＋カルボプラチン＋エトポシド）におけるｂＴＭＢが１６未満の患者の無増悪生存期間のカプランマイヤープロットである。
【００４３】
【図１０Ａ】図１０Ａは、Ａ群（アテゾリズマブ＋カルボプラチン＋エトポシド）とＢ群（プラセボ＋カルボプラチン＋エトポシド）におけるｂＴＭＢ＞１０の患者の無増悪生存期間のカプランマイヤープロットを示す。
【００４４】
【図１０Ｂ】図１０Ｂは、Ａ群（アテゾリズマブ＋カルボプラチン＋エトポシド）とＢ群（プラセボ＋カルボプラチン＋エトポシド）のｂＴＭＢが１０未満の患者の無増悪生存期間のカプランマイヤープロットである。
【００４５】
【図１１Ａ】図１１Ａは、Ａ群（アテゾリズマブ＋カルボプラチン＋エトポシド）対Ｂ群（プラセボ＋カルボプラチン＋エトポシド）における様々なベースラインの危険因子を有する患者におけるＯＳのサブグループ分析を示すフォレストプロットを提供する。
【００４６】
【図１１Ｂ】図１１Ｂは、Ａ群（アテゾリズマブ＋カルボプラチン＋エトポシド）対Ｂ群（プラセボ＋カルボプラチン＋エトポシド）における様々なベースラインの危険因子を有する患者におけるＯＳのサブグループ分析を示す別のフォレストプロットを提供する。
【００４７】
【図１１Ｃ】図１１Ｃは、Ａ群（アテゾリズマブ＋カルボプラチン＋エトポシド）対Ｂ群（プラセボ＋カルボプラチン＋エトポシド）における様々なベースライン危険因子を有する患者におけるＯＳのサブグループ分析を示す別のフォレストプロットを提供する。
【００４８】
【図１２Ａ】図１２Ａは、Ａ群（アテゾリズマブ＋カルボプラチン＋エトポシド）とＢ群（プラセボ＋カルボプラチン＋エトポシド）におけるＰＤ−Ｌ１発現レベルが１％未満のＢＥＰ１（バイオマーカー評価可能な母集団１）患者の無増悪生存期間のカプランマイヤープロットを提供する。
【００４９】
【図１２Ｂ】図１２Ｂは、Ａ群（アテゾリズマブ＋カルボプラチン＋エトポシド）とＢ群（プラセボ＋カルボプラチン＋エトポシド）におけるＰＤ−Ｌ１発現レベルが１％未満のＢＥＰ２（バイオマーカー評価可能な母集団２）患者の無増悪生存期間のカプランマイヤープロットを示す。
【００５０】
【図１３Ａ】図１３Ａは、Ａ群（アテゾリズマブ＋カルボプラチン＋エトポシド）とＢ群（プラセボ＋カルボプラチン＋エトポシド）におけるＰＤ−Ｌ１発現レベルが１％未満のＢＥＰ１（バイオマーカー評価可能な母集団１）患者の全生存期間のカプランマイヤープロットを提供する。
【００５１】
【図１３Ｂ】図１３Ｂは、Ａ群（アテゾリズマブ＋カルボプラチン＋エトポシド）とＢ群（プラセボ＋カルボプラチン＋エトポシド）におけるＰＤ−Ｌ１発現レベルが１％未満のＢＥＰ２（バイオマーカー評価可能な母集団２）患者の全生存期間のカプランマイヤープロットプロットを示す。
【発明を実施するための形態】
【００５２】
詳細な説明
Ｉ．定義
本発明を詳細に説明する前に、本発明が特定の組成物または生物学的系に限定されず、それらが言うまでもなく多種多様であることを理解されたい。本明細書で使用される専門用語が特定の実施形態を説明することのみを目的としており、限定するようには意図されていないことも理解されたい。
【００５３】
本明細書および添付の特許請求の範囲で使用されるとき、単数形「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」は、別途内容が明確に指示しない限り、複数の指示対象を含む。したがって、例えば、「分子」への言及は、２つ以上のかかる分子の組み合わせを任意に含むといった具合である。
【００５４】
本明細書で使用される「約」という用語は、当業者であれば容易に理解するそれぞれの値の通常の誤差範囲を指す。本明細書における「約」値またはパラメータへの言及は、その値またはパラメータ自体を対象とする実施形態を含む（かつ説明する）。
【００５５】
本明細書に記載の本発明の態様および実施形態が、態様および実施形態「を含む」、「からなる」、および「から本質的になる」を含むことが理解される。
【００５６】
用語「ＰＤ−１軸結合拮抗薬」とは、ＰＤ−１シグナル伝達軸上のシグナル伝達に起因するＴ細胞機能不全を除去するために、ＰＤ−１軸結合パートナーとその１つ以上の結合パートナーとの相互作用を阻害する分子を意味し、その結果、Ｔ細胞機能（例えば、増殖、サイトカイン産生、標的細胞殺傷）を回復または増強することになる。本明細書で使用されるとき、ＰＤ−１軸結合拮抗薬は、ＰＤ−１結合拮抗薬、ＰＤ−Ｌ１結合拮抗薬、およびＰＤ−Ｌ２結合拮抗薬を含む。
【００５７】
「ＰＤ−１結合拮抗薬」という用語は、ＰＤ−１とその結合パートナーのうちの１つ以上、例えば、ＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２との相互作用に起因するシグナル伝達を低減、遮断、阻害、抑止、または妨害する分子を指す。いくつかの実施形態では、ＰＤ−１結合拮抗薬は、ＰＤ−１のその結合パートナーのうちの１つ以上への結合を阻害する分子である。具体的な一態様では、ＰＤ−１結合拮抗薬は、ＰＤ−１のＰＤ−Ｌ１および／またはＰＤ−Ｌ２への結合を阻害する。例えば、ＰＤ−１結合拮抗薬は、抗ＰＤ−１抗体、その抗原結合断片、イムノアドヘシン、融合タンパク質、オリゴペプチド、ならびにＰＤ−１とＰＤ−Ｌ１および／またはＰＤ−Ｌ２との相互作用に起因するシグナル伝達を低減、遮断、阻害、抑止、または妨害する他の分子を含む。一実施形態では、ＰＤ−１結合拮抗薬は、ＰＤ−１を介するシグナル伝達を媒介したＴリンパ球で発現された細胞表面タンパク質によってまたはそれを介して媒介される負の共刺激シグナルを低減し、機能障害Ｔ細胞の機能障害性をより低くする（例えば、抗原認識へのエフェクター応答を増強する）。いくつかの実施形態では、ＰＤ−１結合拮抗薬は、抗ＰＤ−１抗体である。ＰＤ−１結合拮抗薬の特定の例を以下に提供する。
【００５８】
「ＰＤ−Ｌ１結合拮抗薬」という用語は、ＰＤ−Ｌ１とその結合パートナーのうちのいずれか１つ以上、例えば、ＰＤ−１、Ｂ７−１との相互作用に起因するシグナル伝達を低減、遮断、阻害、抑止、または妨害する分子を指す。いくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌ１結合拮抗薬は、ＰＤ−Ｌ１のその結合パートナーへの結合を阻害する分子である。具体的な一態様では、ＰＤ−Ｌ１結合拮抗薬は、ＰＤ−Ｌ１のＰＤ−１および／またはＢ７−１への結合を阻害する。いくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌ１結合拮抗薬は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、その抗原結合断片、イムノアドヘシン、融合タンパク質、オリゴペプチド、およびＰＤ−Ｌ１とその結合パートナーのうちの１つ以上、例えば、ＰＤ−１、Ｂ７−１との相互作用に起因するシグナル伝達を低減、遮断、阻害、抑止、または妨害する他の分子を含む。一実施形態では、ＰＤ−Ｌ１結合拮抗薬は、ＰＤ−Ｌ１を介するシグナル伝達を媒介したＴリンパ球で発現された細胞表面タンパク質によってまたはそれを介して媒介される負の共刺激シグナルを低減し、機能障害Ｔ細胞の機能障害性をより低くする（例えば、抗原認識へのエフェクター応答を増強する）。いくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌ１結合拮抗薬は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体である。ＰＤ−Ｌ１結合拮抗薬の具体例を以下に示す。
【００５９】
「ＰＤ−Ｌ２結合拮抗薬」という用語は、ＰＤ−Ｌ２とその結合パートナーのうちのいずれか１つ以上、例えば、ＰＤ−１との相互作用に起因するシグナル伝達を低減、遮断、阻害、抑止、または妨害する分子を指す。いくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌ２結合拮抗薬は、ＰＤ−Ｌ２のその結合パートナーのうちの１つ以上への結合を阻害する分子である。具体的な一態様では、ＰＤ−Ｌ２結合拮抗薬は、ＰＤ−Ｌ２のＰＤ−１への結合を阻害する。いくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌ２拮抗薬は、抗ＰＤ−Ｌ２抗体、その抗原結合フラグメント、イムノアドヘシン、融合タンパク質、オリゴペプチド、およびＰＤ−Ｌ２とその結合パートナーのうちのいずれか１つ以上、例えば、ＰＤ−１との相互作用に起因するシグナル伝達を低減、遮断、阻害、抑止、または妨害する他の分子を含む。一実施形態では、ＰＤ−Ｌ２結合拮抗薬は、ＰＤ−Ｌ２を介するシグナル伝達を媒介したＴリンパ球で発現された細胞表面タンパク質によってまたはそれを介して媒介される負の共刺激シグナルを低減し、機能障害Ｔ細胞の機能障害性をより低くする（例えば、抗原認識へのエフェクター応答を増強する）。いくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌ２結合拮抗薬は、イムノアドヘシンである。
【００６０】
「持続的応答」とは、治療の中止後の腫瘍成長の低減への持続的効果を指す。例えば、腫瘍サイズは、投与期の開始時のサイズと比較して同じままであるか、またはより小さくなり得る。いくつかの実施形態では、持続的応答は、治療期間と少なくとも同じ期間、治療期間の少なくとも１．５倍、２．０倍、２．５倍、または３．０倍の期間を有する。
【００６１】
「薬学的製剤」という用語は、活性成分の生物学的活性が有効になるような形態であり、かつ製剤が投与される対象に許容できないほどに有毒なさらなる成分を含有しない調製物を指す。かかる製剤は、滅菌である。「薬学的に許容される」賦形剤（ビヒクル、添加物）は、対象哺乳動物に適度に投与されて、用いられる有効用量の活性成分を提供することができるものである。
【００６２】
本明細書で使用される場合、「治療」という用語は、臨床病理学の過程中に治療される個体または細胞の自然な経過を変えるように設計された臨床的介入を指す。治療の望ましい効果としては、疾患進行速度の低減、疾患状態の回復または緩和、および予後の寛解または改善が挙げられる。例えば、個体は、癌性細胞の増殖の低減（もしくは破壊）、疾患に起因する症状の軽減、疾患に罹患している者の生活の質の向上、疾患の治療に必要な他の薬剤の用量の低減、および／または個体の生存期間の延長を含むが、これらに限定されない、癌に関連する１つ以上の症状が軽減または排除された場合、「治療」に成功する。
【００６３】
本明細書で使用されるとき、「疾患の進行を遅延させる」とは、疾患（癌等）の発症を延期し、妨害し、減速し、遅らせ、安定させ、かつ／または延ばすことを意味する。この遅延は、病歴および／または治療される個体に応じて様々な期間のものであり得る。当業者に明らかであるように、十分または著しい遅延は、個体が疾患を発症しないという点で、予防を事実上包含し得る。例えば、転移の発症等の末期癌を遅延させることができる。
【００６４】
「有効量」とは、特定の障害の測定可能な改善または予防の達成に必要な少なくとも最小の量である。本明細書における有効量は、患者の疾患状態、年齢、性別、および体重、ならびに個体における所望の応答を誘発する抗体の能力等の要因に応じて異なり得る。有効量は、治療上有益な作用が治療の任意の毒性作用または有害作用を上回るものでもある。予防的使用の場合、有益なまたは所望の結果としては、疾患の生化学的、組織学的、および／または挙動的症状、その合併症、ならびに疾患の発症中に現れる中間病理学的表現型を含む、疾患のリスクの排除または低減、疾患の重症度の軽減、または疾患の発生の遅延等の結果が挙げられる。治療的使用の場合、有益なまたは所望の結果としては、疾患に起因する１つ以上の症状の軽減、疾患に罹患している者の生活の質の向上、疾患の治療に必要な他の薬剤の用量の低減、別の薬剤の効果の増強（例えば、標的による）、疾患の進行の遅延、および／または生存期間の延長等の臨床結果が挙げられる。癌または腫瘍の場合、有効量の薬物は、癌細胞の数を減少させ、腫瘍サイズを低減させ、癌細胞の末梢器官への浸潤を阻害し（すなわち、ある程度遅らせるか、または望ましくは停止し）、腫瘍転移を阻害し（すなわち、ある程度遅らせるか、または望ましくは停止し）、腫瘍成長をある程度阻害し、かつ／または障害に関連する症状のうちの１つ以上をある程度軽減する効果を有し得る。有効量は、１回以上の投与で投与され得る。本発明では、薬物、化合物、または薬学的組成物の有効量は、予防的治療または治療的治療を直接または間接的に達成するのに十分な量である。臨床分野において理解されるように、薬物、化合物、または薬学的組成物の有効量は、別の薬物、化合物、または薬学的組成物と併せて達成されてもされなくてもよい。したがって、「有効量」は、１つ以上の治療薬の投与との関連で考慮され得、単剤は、１つ以上の他の薬剤と併せて、望ましい結果が達成され得るか、または達成される場合、有効量で与えられると見なされ得る。
【００６５】
本明細書で使用されるように、「併用」とは、別の治療様式に加えて、１つの治療様式の投与を意味する。したがって、「と併せて」とは、個体への１つの治療法の施行前、施行中、または施行後の別の治療法の施行を指す。
【００６６】
「障害」とは、哺乳動物を問題の障害に罹患しやすくする病理学的状態を含む慢性および急性障害または疾患を含むが、これらに限定されない、治療から恩恵を受けることになる任意の状態である。
【００６７】
「細胞増殖性障害」および「増殖性障害」という用語は、ある程度の異常な細胞増殖に関連する障害を指す。一実施形態において、細胞増殖性障害は、がんである。他の実施形態では、細胞増殖性障害は、腫瘍である。一実施形態では、細胞増殖性障害は、癌である。一実施形態では、細胞増殖性障害は、腫瘍である。
【００６８】
「腫瘍」は、本明細書で使用される場合、悪性か良性かを問わず、全ての腫瘍性細胞の成長および増殖、ならびに全ての前がん性およびがん性細胞および組織を指す。「癌」、「癌性」、「細胞増殖性障害」、「増殖性障害」、および「腫瘍」という用語は、本明細書で言及されるとき、相互排他的ではない。
【００６９】
「癌」および「癌性」という用語は、制御されていない細胞成長を典型的に特徴とする哺乳動物における生理学的状態を指すか、または説明する。癌の例としては、癌腫、リンパ腫、芽細胞腫、肉腫、および白血病またはリンパ性悪性腫瘍が挙げられるが、これらに限定されない。かかる癌のより具体的な例としては、扁平上皮癌（例えば、上皮扁平上皮癌）、肺癌、例えば、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、肺腺癌および肺扁平上皮癌、腹膜癌、肝細胞癌、胃癌（ｇａｓｔｒｉｃ  ｃａｎｃｅｒ）または胃癌（ｓｔｏｍａｃｈ  ｃａｎｃｅｒ）、例えば、胃腸癌および胃腸間質癌、膵臓癌、膠芽細胞腫、子宮頸癌、卵巣癌、肝臓癌、膀胱癌、尿路癌、肝癌、乳癌、結腸癌、直腸癌、結腸直腸癌、子宮内膜癌または子宮癌、唾液腺癌、腎臓癌または腎癌、前立腺癌、外陰部癌、甲状腺癌、肝癌、肛門癌、陰茎癌、黒色腫、表在拡大型黒色腫、悪性黒子型黒色腫、末端性黒子性黒色腫、結節型黒色腫、多発性骨髄腫およびＢ細胞リンパ腫（低悪性度／濾胞性非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、小リンパ球性（ＳＬ）ＮＨＬ、中悪性度／濾胞性ＮＨＬ、中悪性度びまん性ＮＨＬ、高悪性度免疫芽細胞性ＮＨＬ、高悪性度リンパ芽球性ＮＨＬ、高悪性度小型非開裂細胞性ＮＨＬ、巨大病変ＮＨＬ、マントル細胞リンパ腫、ＡＩＤＳ関連リンパ腫、およびワルデンストレームマクログロブリン血症等）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、ヘアリー細胞白血病、慢性骨髄芽球性白血病、および移植後リンパ増殖性障害（ＰＴＬＤ）、ならびに母斑症に関連する異常な血管増殖、浮腫（脳腫瘍に関連するもの等）、メーグス症候群、脳腫瘍、ならびに頭頸部癌、および関連転移が挙げられるが、これらに限定されない。ある特定の実施形態では、本発明の抗体での治療に適する癌としては、乳癌、結腸直腸癌、直腸癌、非小細胞肺癌、膠芽細胞腫、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、腎細胞癌、前立腺癌、肝臓癌、膵臓癌、軟組織肉腫、カポジ肉腫、カルチノイド癌、頭頸部癌、卵巣癌、中皮腫、および多発性骨髄腫が挙げられる。いくつかの実施形態において、癌は、小細胞肺癌、神経膠芽腫、神経芽細胞腫、黒色腫、乳癌、胃癌、結腸直腸癌（ＣＲＣ）、および肝細胞癌から選択される。
【００７０】
「細胞傷害性剤」という用語は、本明細書で使用される場合、細胞に有害である（例えば、細胞死を引き起こすか、増殖を阻害するか、またはさもなければ細胞機能を妨害する）任意の薬剤を指す。細胞毒性剤には、放射性同位体（例えば  Ａｔ２１１、Ｉ１３１、Ｉ１２５、Ｙ９０、Ｒｅ１８６、Ｒｅ１８８、Ｓｍ１５３、Ｂｉ２１２、Ｐ３２、Ｐｂ２１２、およびＬｕの放射性同位体）；化学療法剤；成長阻害剤；核分解酵素などの酵素およびその断片；および細菌、真菌、植物または動物由来の低分子毒素または酵素的に活性な毒素などの毒素（その断片および／または変種を含む）が挙げられるが、これらに限定されない。例示的な細胞毒性薬は、抗微小管薬、白金配位錯体、アルキル化剤、抗生物質剤、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤、代謝拮抗薬、トポイソメラーゼＩ阻害剤、ホルモンおよびホルモン類似体、シグナル伝達経路阻害剤、非受容体チロシンキナーゼ血管新生阻害剤、免疫療法薬、アポトーシス促進剤、ＬＤＨ−Ａ阻害剤、脂肪酸生合成阻害剤、細胞周期シグナル伝達阻害剤、ＨＤＡＣ阻害剤、プロテアソーム阻害剤、ならびに癌代謝阻害剤から選択され得る。一実施形態では、細胞毒性薬は、タキサンである。一実施形態において、タキサンは、パクリタキセルまたはドセタキセルである。一実施形態では、細胞毒性薬は、白金剤である。一実施形態では、細胞毒性薬は、ＥＧＦＲの拮抗薬である。一実施形態において、ＥＧＦＲの拮抗薬は、Ｎ−（３−エチニルフェニル）−６，７−ビス（２−メトキシエトキシ）キナゾリン−４−アミン（例えば、エルロチニブ）である。一実施形態では、細胞毒性薬は、ＲＡＦ阻害剤である。一実施形態において、ＲＡＦ阻害剤は、ＢＲＡＦおよび／またはＣＲＡＦ阻害剤である。一実施形態において、ＲＡＦ阻害剤は、ベムラフェニブである。一実施形態では、細胞毒性薬は、ＰＩ３Ｋ阻害剤である。
【００７１】
「化学療法剤」は、癌の治療に有用な化合物を含む。化学療法剤およびその誘導体の例としては、以下のものが挙げられる：エルロチニブ（ＴＡＲＣＥＶＡ（登録商標），Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ／ＯＳＩ  Ｐｈａｒｍ．）、ジスルフィラム、エピガロカテキンガレート、サリノスポラミドＡ、カーフィルゾミブ、１７−ＡＡＧ（ゲルダナマイシン）、ラジコール、乳酸脱水素酵素Ａ（ＬＤＨ−Ａ）、フルベストラント（ＦＡＳＬＯＤＥＸ（登録商標）．アストラゼネカ社）、スニチブ（ＳＵＴＥＮＴ（登録商標）、ファイザー／スーゲン）、レトロゾール（ＦＥＭＡＲＡ（登録商標）、ノバルティス）、メシル酸イマチニブ（ＧＬＥＥＶＥＣ（登録商標）、ノバルティス）、フィナサン酸塩（ＶＡＴＡＬＡＮＩＢ（登録商標）、ノバルティス）。オキサリプラチン（ＥＬＯＸＡＴＩＮ（登録商標）、サノフィ）、５−ＦＵ（５−フルオロウラシル）、ロイコボリン、ラパマイシン（シロリムス、ＲＡＰＡＭＵＮＥ（登録商標）、ワイエス）、ラパチニブ（ＴＹＫＥＲＢ（登録商標）、ＧＳＫ５７２０１６、グラクソ・スミス・クライン）。ロナファミブ（ＳＣＨ  ６６３３６）、ソラフェニブ（ＮＥＸＡＶＡＲ（登録商標）、バイエルラボ）、ゲフィチニブ（ＩＲＥＳＳＡ（登録商標）、アストラゼネカ）、ＡＧ１４７８、チオテパ、ＣＹＴＯＸＡＮ（登録商標）シクロホスファミド等のアルキル化剤；ブスルファン、インプロスルファンおよびピポスルファンなどのアルキルスルホネート；ベンゾドーパ、カルボクオン、メチュレドーパ、ウレドパなどのアジリジン。アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホルアミド、トリエチレンチオホスホルアミドおよびトリメチロメラミンを含むエチレンイミンおよびメチルアメラミン；アセトゲニン（特にブラタシンとブラタシノン）；カンプトテシン（トポテカンとイリノテカンを含む）；ブリオスタチン；カリスタチン；ＣＣ−１０６５（アドゼレシン、カルゼレシン、ビゼレシン合成類似体を含む）；クリプトフィシン（特にクリプトフィシン１およびクリプトフィシン８）；アドレノコルチコステロイド（プレドニゾンおよびプレドニゾロンを含む）；酢酸シプロテロン；フィナステリドおよびデュタステリドを含む５α−レダクターゼ）；ボリノスタット、ロミデプシン、パノビノスタット、バルプロ酸、モセチノスタットドラスタチン；アルデスロイキン、タルクデュオカルマイシン（合成類似体、ＫＷ−２１８９およびＣＢ１−ＴＭ１を含む）；エレタロビン；パンクラチスタチン；サルコジクチン；スポンギスタチン；クロラムブシル、クロマファジン、クロロホスファミド、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレスタミン、メクロレスタミンオキシド塩酸塩、メルファラン、ノベンビチン、フェネステリン、プレドニムスチン、トロフォスファミド、ウラシルマスタードなどの窒素マスタード。カルムスチン、クロロゾトシン、フォテムスチン、ロムスチン、ニムスチン、およびラニムスチンのようなニトロソウレア；エニジン系抗生物質のような抗生物質（例えば、カリチェマイシン、特にカリチェマイシンγ１Ｉおよびカリチェマイシンω１Ｉ（Ａｎｇｅｗ  Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔｌ．Ｅｄ．Ｅｎｇｌ．１９９４  ３３：１８３−１８６）；ダイ���マイシンＡを含むダイネマイシン；クロドロネートなどのビスホスホネート；エスペラマイシン  と同様に、ネオカルジノスタチン発色団および関連する発色団エンジイン抗生物質発色団）、アクラシノマイシン、アクチノマイシン、オートラマイシン、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン  カラビシン、カミノマイシン、カルジノフィリン、クロモマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン、６−ジアゾ−５−オキソ−Ｌ−ノルロイシン、アドリアマイシン（登録商標）（ドキソルビシン）、モルホリノドキソルビシン。シアノモルホリノドキソルビシン、２−ピロリノドキソルビシン、デオキシドキソルビシン）、エピルビシン、エソルビシン、イダルビシン、マルセロマイシン、マイトマイシンＣ等のマイトマイシン、マイコフェノール酸。ノガラマイシン、オリボマイシン、ペプロマイシン、ポルフィロマイシン、ピュロマイシン、ケラマイシン、ロドルビシン、ストレプトゾシン、ツベルクリジン、ウベニメックス、ジノスタチン、ゾルビシン  メトトレキサートおよび５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）などの抗メタボローム剤；デノプテリン、メトトレキサート、プテロプテリン、トリメトレキサートなどの葉酸アナログ；フルダラビン、６−メルカプトプリン、チアミプリン、チオグアニンなどのプリンアナログ。アンシタビン、アザシチジン、６−アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロクスリジンなどのピリミジン類縁体。カルステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン、エピチオスタノール、メピチオステイン、テストラクトンなどのアンドロゲン；アミノグルテチミド、ミトタン、トリロステインなどの抗アドレナール；フロリン酸などの葉酸補充剤；エースグラトン；アルドホスファミド配糖体；アミノレブリン酸；エニルラシル；アムサクリン；ベストラブシル；ビサントレン；エダトラキサート；デフォファミン；デメコルシン；ジアジキオン；エルフォミチン；酢酸エリプチン；アンエポチロン；エトグルシド；硝酸ガリウム；ヒドロキシウレア；レンティナン；ロニダイニン；メイタンシン、アンサミトシンなどのメイタンシノイド類  ミトグアゾン；マイトキサントロン；モピダムノール；ニトラエリン；ペントスタチン；フェナメット；ピラルビシン；ロソキサントロン；ポドフィリン酸；２−エチルヒドラジド；プロカルバジン；ＰＳＫ（登録商標）多糖複合体（ＪＨＳ  Ｎａｔｕｒａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ，Ｅｕｇｅｎｅ，Ｏｒｅｇ．）；ラゾキサン；リゾキシン；シゾフラン；スピロゲルマニウム；テヌアゾン酸；トリアジキオン；２，２’，２’’−トリクロロトリエチルアミン；トリコテセン（特にＴ−２毒素、ベラキュリンＡ、ロリジンＡおよびアングイジン）。ウレタン；ビンデシン；ダカルバジン；マンノムスチン；マイトブロニトール；マイトラクトール；ピポブロマン；ガシトシン；アラビノシド（「Ａｒａ−Ｃ」）；シクロホスファミド；チオテパ；タキソイド、例えば、タクソール（パクリタキセル；ブリストル・マイヤーズ・スクイブ・オンコロジー、プリンストン、Ｎ．Ｊ．）、ＡＢＲＡＸＡＮＥ（登録商標）（クレモフォフリー）、パクリタキセルのアルブミン���計ナノ粒子製剤（アメリカン・ファーマシューティカル・パートナーズ、シャウンバーグ、イリノイ州）、およびＴＡＸＯＴＥＲＥ（登録商標）（ドセタキセル、ドキセタキセル、サノフィ−アベンティス）、クロランブシル、ＧＥＭＺＡＲ（登録商標）（ゲムシタビン）、６−チオグアニン、メルカプトプリン、メトトレキサート；シスプラチンおよびカルボプラチンなどの白金アナログ；ビンブラスチン；エトポシド（ＶＰ−１６）；イボスファミド；マイトキサントロン；ビンクリスチン；ナベルバイン（ｖｉｎｏｒｅｌｂｉｎｅ）；ノバンドロン；テニポシド；エダトレキサート；ダウノマイシン；アミノプテリン；カペシタビン（ＸＥＬＯＤＡ（登録商標））；イバンドロネート；ＣＰＴ−１１；トポイソメラーゼ阻害剤ＲＦＳ２０００；ジフルオロメチルオルニチン（ＤＭＦＯ）；レチノイン酸などのレチノイド；および薬学的に許容される塩。
【００７２】
また、化学療法剤には、以下のようなものがある：（ｉ）抗エストロゲンおよび選択的エストロゲン受容体モジュレーター（ＳＥＲＭ）など、腫瘍に対するホルモン作用を調節または阻害するように作用する抗ホルモン剤、例えば、タモキシフェン（ＮＯＬＶＡＤＥＸ（登録商標）；クエン酸タモキシフェンを含む）、ラロキシフェン、ドロキシフェン、ヨードキシフェン、４−ヒドロキシタモキシフェン、トリオキシフェン、ケオキシフェン、ＬＹ１１７０１８、オナプリストン、およびファレストン（クエン酸トレミフィン）。（ｉｉ）副腎におけるエストロゲン産生を調節する酵素アロマターゼを阻害するアロマターゼ阻害剤、例えば、４（５）−イミダゾール、アミノグルテチミド、ＭＥＧＡＳＥ（登録商標）（酢酸メグストロール）、ＡＲＯＭＡＳＩＮ（登録商標）（ｅｘｅｍｅｓｔａｎｅ、ファイザー社）、フォルメスタニー、ファドロゾール、リビソール（ボルゾール）、フェマーラ（レトロゾール、ノバルティス）、アリミデックス（アナストロゾール、アストラゼネカ）などの抗アンドロゲン剤、（ｉｉｉ）フルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、リュープロライド、ゴセレレリンなどの抗アンドロゲン剤。ブセレリン、トリプレリン、メドロキシプロゲステロンアセテート、ジエチルスチルベストロール、プレマリン、フルオキシメステロン、全トランスレチオン酸、フェンレチニド、およびトロキサシタビン（１，３−ジオキソランヌクレオシドシトシンアナログ）などの抗アンドロゲン剤；ｉｖ）プロテインキナーゼ阻害剤；（ｖ）脂質キナーゼ阻害剤；（ｖｉ）アンチセンスオリゴヌクレオチド、特に異常細胞増殖に関与するシグナル伝達経路の遺伝子の発現を阻害するもの、例えばＰＫＣ−α、ＲａｌｆおよびＨ−Ｒａｓ；（ｖｉｉ）ＶＥＧＦ発現阻害剤（例えばＡＮＧＩＯＺＹＭＥ（登録商標））およびＨＥＲ２発現阻害剤などのリボザイム；（ｖｉｉｉ）遺伝子治療ワクチンなどのワクチン、例えばＡＬＬＯＶＥＣＴＩＮ（登録商標）ＬＥＵＶＥＣＴＩＮ（登録商標）およびＶＡＸＩＤ（登録商標）；ＰＲＯＬＥＵＫＩＮ（登録商標）、ｒＩＬ−２；ＬＵＲＴＯＴＥＣＡＮ（登録商標）などのトポイソメラーゼ１阻害剤；ＡＢＡＲＥＬＩＸ（登録商標）ｒｍＲＨ；および（ｉｘ）上記のいずれかの薬学的に許容される塩、酸および誘導体。
【００７３】
化学療法剤としては、抗体、例えば、アレムツズマブ（Ｃａｍｐａｔｈ）、ベバシズマブ（ＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）、セツキシマブ（ＥＲＢＩＴＵＸ（登録商標）、Ｉｍｃｌｏｎｅ）、パニツムマブ（ＶＥＣＴＩＢＩＸ（登録商標）、Ａｍｇｅｎ）、リツキシマブ（ＲＩＴＵＸＡＮ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ／Ｂｉｏｇｅｎ  Ｉｄｅｃ）、ペルツズマブ（ＯＭＮＩＴＡＲＧ（登録商標）、２Ｃ４、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）、トラスツズマブ（ＨＥＲＣＥＰＴＩＮ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）、トシツモマブ（Ｂｅｘｘａｒ、Ｃｏｒｉｘｉａ）、および抗体−薬物コンジュゲート、ゲムツズマブ・オゾガマイシン（ＭＹＬＯＴＡＲＧ（登録商標）、Ｗｙｅｔｈ）も挙げられる。本発明の化合物と組み合わせた薬剤としての治療可能性を有するさらなるヒト化モノクローナル抗体には、アポリズマブ、アセリズマブ、アトリズマブ、バピネオズマブ、ビバツズマブメルタンシン（ｂｉｖａｔｕｚｕｍａｂ  ｍｅｒｔａｎｓｉｎｅ）、カンツズマブメルタンシン、セデリズマブ、セルトリズマブペゴール、シドフシツズマブ、シドツズマブ、ダクリズマブ、エクリズマブ、エファリズマブ、エピラツズマブ、エルリズマブ、フェルビズマブ、フォントリズマブ、ゲムツズマブ・オゾガマイシン、イノツズマブ・オゾガマイシン、イピリムマブ、ラベツズマブ、リンツズマブ、マツズマブ、メポリズマブ、モタビズマブ、モトビズマブ、ナタリズマブ、ニモツズマブ、ノロビズマブ、ヌマビズマブ、オクレリズマブ、オマリズマブ、パリビズマブ、パスコリズマブ、ペクフシツズマブ、ペクツズマブ、ペキセリズマブ、ラリビズマブ、ラニビズマブ、レスリビズマブ、レスリズマブ、レシビズマブ、ロベリズマブ、ルプリズマブ、シブロツズマブ、シプリズマブ、ソンツズマブ、タカツズマブ・テトラキセタン、タドシズマブ、タリズマブ、テフィバズマブ、トシリズマブ、トラリズマブ、ツコツズマブ・セルモロイキン、ツクシツズマブ、ウマビズマブ、ウルトキサズマブ、ウステキヌマブ、ビシリズマブ、およびインターロイキン１２  ｐ４０タンパク質を認識するように遺伝的に改変された、組換え型で専らヒト配列の完全長ＩｇＧ１  λ抗体である、抗インターロイキン−１２（ＡＢＴ−８７４／Ｊ６９５、Ｗｙｅｔｈ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ａｎｄ  Ａｂｂｏｔｔ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）が挙げられる。
【００７４】
化学療法剤には、ＥＧＦＲに結合するか、またはさもなければそれと直接相互作用し、そのシグナル伝達活性を阻止または低減する化合物を指す「ＥＧＦＲ阻害剤」も含まれ、「ＥＧＦＲ拮抗薬とも称される。かかる薬剤の例としては、ＥＧＦＲに結合する抗体および小分子が挙げられる。ＥＧＦＲに結合する抗体の例としては、以下のものが挙げられる：ＭＡｂ  ５７９（ＡＴＣＣ  ＣＲＬ  ＨＢ  ８５０６）、ＭＡｂ  ４５５（ＡＴＣＣ  ＣＲＬ  ＨＢ８５０７）、ＭＡｂ  ２２５（ＡＴＣＣ  ＣＲＬ  ８５０８）、ＭＡｂ  ５２８（ＡＴＣＣ  ＣＲＬ  ８５０９）（参照、米国特許第４，９４３，５３３号、Ｍｅｎｄｅｌｓｏｈｎ  ｅｔ  ａｌ．）およびその変種、例えばキメラ化２２５（Ｃ２２５またはセツキシマブ；ＥＲＢＵＴＩＸ（登録商標））およびリシェイプヒト２２５（Ｈ２２５）（参照、ＷＯ  ９６／４０２１０、Ｉｍｃｌｏｎｅ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  Ｉｎｃ．）；完全ヒト、ＥＧＦＲ標的化抗体ＩＭＣ−１１Ｆ８（イムクロン）；ＩＩ型変異型ＥＧＦＲを結合する抗体（米国特許第５，２１２，２９０号）；米国特許第５，８９１，９９６号に記載されているようなＥＧＦＲを結合するヒト化抗体およびキメラ抗体；およびＡＢＸ−ＥＧＦまたはＰａｎｉｔｕｍｕｍａｂ（ＷＯ９８／５０４３３、Ａｂｇｅｎｉｘ／Ａｍｇｅｎを参照）のようなＥＧＦＲと結合するヒト抗体；ＥＭＤ  ５５９００（Ｓｔｒａｇｌｉｏｔｔｏら、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ  ３２Ａ：６３６−６４０（１９９６））；ＥＧＦＲ結合のためにＥＧＦおよびＴＧＦ−αの両方と競合するＥＧＦＲに対するヒト化ＥＧＦＲ抗体であるＥＭＤ７２００（マツズマブ）；ヒトＥＧＦＲ抗体、ＨｕＭａｘ−ＥＧＦＲ（ＧｅｎＭａｂ）；Ｅ１．１、Ｅ２．４、Ｅ２．５、Ｅ６．２、Ｅ６．４、Ｅ２．１１、Ｅ６．３およびＥ７．６．３として知られ、ＵＳ  ６，２３５，８８３に記載の完全ヒト抗体；ＭＤＸ−４４７（Ｍｅｄａｒｅｘ  Ｉｎｃ）；およびｍＡｂ  ８０６またはヒト化ｍＡｂ  ８０６（Ｊｏｈｎｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７９（２９）：３０３７５−３０３８４（２００４））。抗ＥＧＦＲ抗体は、細胞傷害性剤にコンジュゲートされ、それにより免疫コンジュゲートを生成することができる（例えば、ＥＰ６５９４３９Ａ２，Ｍｅｒｃｋ  Ｐａｔｅｎｔ  ＧｍｂＨを参照されたい）。ＥＧＦＲ拮抗薬としては、米国特許第５，６１６，５８２号、同第５，４５７，１０５号、同第５，４７５，００１号、同第５，６５４，３０７号、同第５，６７９，６８３号、同第６，０８４，０９５号、同第６，２６５，４１０号、同第６，４５５，５３４号、同第６，５２１，６２０号、同第６，５９６，７２６号、同第６，７１３，４８４号、同第５，７７０，５９９号、同第６，１４０，３３２号、同第５，８６６，５７２号、同第６，３９９，６０２号、同第６，３４４，４５９号、同第６，６０２，８６３号、同第６，３９１，８７４号、同第６，３４４，４５５号、同第５，７６０，０４１号、同第６，００２，００８号、および同第５，７４７，４９８号、ならびに以下のＰＣＴ公報、ＷＯ９８／１４４５１、ＷＯ９８／５００３８、ＷＯ９９／０９０１６、およびＷＯ９９／２４０３７に記載の化合物等の小分子を含む。特��の小分子ＥＧＦＲアンタゴニストとしては、ＯＳＩ−７７４（ＣＰ−３５８７７４、エルロチニブ、ＴＡＲＣＥＶＡ（登録商標）  Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ／ＯＳＩ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）；ＰＤ  １８３８０５（ＣＩ  １０３３、２−プロペンアミド、Ｎ−［４−［（３−クロロ−４−フルオロフェニル）アミノ］−７−［３−（４−モルホリニル）プロポキシ］−６−キナゾリニル］−、ジヒドロクロリド、Ｐｆｉｚｅｒ  Ｉｎｃ．）；ＺＤ１８３９、ゲフィチニブ（ＩＲＥＳＳＡ（登録商標））４−（３’−クロロ−４’−フルオロアニリノ）−７−メトキシ−６−（３−モルホリノプロポキシ）キナゾリン、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）；ＺＭ１０５１８０（（６−アミノ−４−（３−メチルフェニル−アミノ）−キナゾリン、Ｚｅｎｅｃａ）；ＢＩＢＸ−１３８２（Ｎ８−（３−クロロ−４−フルオロ−フェニル）−Ｎ２−（１−メチル−ピペリジン−４−イル）−ピリミド［５，４−ｄ］ピリミジン−２，８−ジアミン、Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ）；ＰＫＩ−１６６（（Ｒ）−４−［４−［（１−フェニルエチル）アミノ］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−イル］−フェノール）；（Ｒ）−６−（４−ヒドロキシフェニル）−４−［（１−フェニルエチル）アミノ］−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン）；ＣＬ−３８７７８５（Ｎ−［４−［（３−ブロモフェニル）アミノ］−６−キナゾリニル］−２−ブチンアミド）；ＥＫＢ−５６９（Ｎ−［４−［（３−クロロ−４−フルオロフェニル）アミノ］−３−シアノ−７−エトキシ−６−キナゾリニル］−４−（ジメチルアミノ）−２−ブチンアミド）（Ｗｙｅｔｈ）；ＡＧ１４７８（Ｐｆｉｚｅｒ）；ＡＧ１５７１（ＳＵ  ５２７１、Ｐｆｉｚｅｒ）；および二重ＥＧＦＲ／ＨＥＲ２チロシンキナーゼ阻害剤、例えば、ラパチニブ（ＴＹＫＥＲＢ（登録商標）、ＧＳＫ５７２０１６またはＮ−［３−クロロ−４−［（３−フルオロフェニル）メトキシ］フェニル］−６［５［［［２メチルスルホニル）エチル］アミノ］メチル］−２−フラニル］−４−キナゾリンアミン）が挙げられる。
【００７５】
化学療法剤としては、「チロシンキナーゼ阻害剤」、例えば、前段落に記載のＥＧＦＲ標的薬物；小分子ＨＥＲ２チロシンキナーゼ阻害剤、例えば、Ｔａｋｅｄａから入手可能なＴＡＫ１６５；ＥｒｂＢ２受容体チロシンキナーゼの経口選択的阻害剤であるＣＰ−７２４，７１４（ＰｆｉｚｅｒおよびＯＳＩ）；二重ＨＥＲ阻害剤、例えば、ＥＧＦＲに優先的に結合するが、ＨＥＲ２およびＥＧＦＲ過剰発現細胞の両方を阻害するＥＫＢ−５６９（Ｗｙｅｔｈから入手可能）；ラパチニブ（ＧＳＫ５７２０１６、Ｇｌａｘｏ−ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅから入手可能）；経口ＨＥＲ２およびＥＧＦＲチロシンキナーゼ阻害剤；ＰＫＩ−１６６（Ｎｏｖａｒｔｉｓから入手可能）；ｐａｎ−ＨＥＲ阻害剤、例えば、カネルチニブ（ＣＩ−１０３３、Ｐｈａｒｍａｃｉａ）；Ｒａｆ−１阻害剤、例えば、Ｒａｆ−１シグナル伝達を阻害するＩＳＩＳ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓから入手可能なアンチセンス薬剤ＩＳＩＳ−５１３２；非ＨＥＲ標的ＴＫ阻害剤、例えば、メシル酸イマチニブ（ＧＬＥＥＶＥＣ（登録商標）、Ｇｌａｘｏ  ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅから入手可能）；多標的チロシンキナーゼ阻害剤、例えば、スニチニブ（ＳＵＴＥＮＴ（登録商標）、Ｐｆｉｚｅｒから入手可能）；ＶＥＧＦ受容体チロシンキナーゼ阻害剤、例えば、バタラニブ（ＰＴＫ７８７／ＺＫ２２２５８４、Ｎｏｖａｒｔｉｓ／Ｓｃｈｅｒｉｎｇ  ＡＧから入手可能）；ＭＡＰＫ細胞外制御キナーゼＩ阻害剤ＣＩ−１０４０（Ｐｈａｒｍａｃｉａから入手可能）；キナゾリン、例えば、ＰＤ  １５３０３５，４−（３−クロロアニリノ）キナゾリン；ピリドピリミジン；ピリミドピリミジン；ピロロピリミジン、例えば、ＣＧＰ  ５９３２６、ＣＧＰ  ６０２６１、およびＣＧＰ  ６２７０６；ピラゾロピリミジン、４−（フェニルアミノ）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン；クルクミン（ジフェルロイルメタン、４，５−ビス（４−フルオロアニリノ）フタルイミド）；ニトロチオフェン部分を含有するチルホスチン；ＰＤ−０１８３８０５（Ｗａｒｎｅｒ−Ｌａｍｂｅｒ）；アンチセンス分子（例えば、ＨＥＲコード核酸に結合するもの）、キノキサリン（米国特許第５，８０４，３９６号）；トリホスチン（ｔｒｙｐｈｏｓｔｉｎ）（米国特許第５，８０４，３９６号）；ＺＤ６４７４（Ａｓｔｒａ  Ｚｅｎｅｃａ）；ＰＴＫ−７８７（Ｎｏｖａｒｔｉｓ／Ｓｃｈｅｒｉｎｇ  ＡＧ）；ｐａｎ−ＨＥＲ阻害剤、例えば、ＣＩ−１０３３（Ｐｆｉｚｅｒ）；Ａｆｆｉｎｉｔａｃ（ＩＳＩＳ  ３５２１、Ｉｓｉｓ／Ｌｉｌｌｙ）；メシル酸イマチニブ（ＧＬＥＥＶＥＣ（登録商標））；ＰＫＩ  １６６（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）；ＧＷ２０１６（Ｇｌａｘｏ  ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）；ＣＩ−１０３３（Ｐｆｉｚｅｒ）；ＥＫＢ−５６９（Ｗｙｅｔｈ）；セマキシニブ（Ｐｆｉｚｅｒ）；ＺＤ６４７４（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）；ＰＴＫ−７８７（Ｎｏｖａｒｔｉｓ／Ｓｃｈｅｒｉｎｇ  ＡＧ）；ＩＮＣ−１Ｃ１１（Ｉｍｃｌｏｎｅ）、ラパマイシン（シロリムス、ＲＡＰＡＭＵＮＥ（登録商標）；または以下の特許公報：米国特許第５，８０４，３９６号、ＷＯ１９９９／０９０１６（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｃｙａｎａｍｉｄ）、ＷＯ１９９８／４３９６��（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｃｙａｎａｍｉｄ）、ＷＯ１９９７／３８９８３（Ｗａｒｎｅｒ  Ｌａｍｂｅｒｔ）、ＷＯ１９９９／０６３７８（Ｗａｒｎｅｒ  Ｌａｍｂｅｒｔ）、ＷＯ１９９９／０６３９６（Ｗａｒｎｅｒ  Ｌａｍｂｅｒｔ）、ＷＯ１９９６／３０３４７（Ｐｆｉｚｅｒ，Ｉｎｃ）、ＷＯ１９９６／３３９７８（Ｚｅｎｅｃａ）、ＷＯ１９９６／３３９７（Ｚｅｎｅｃａ）、およびＷＯ１９９６／３３９８０（Ｚｅｎｅｃａ）のいずれかに記載されるものが挙げられる。
【００７６】
化学療法剤としては、デキサメタゾン、インターフェロン、コルヒチン、メトプリン、シクロスポリン、アンホテリシン、メトロニダゾール、アレムツズマブ、アリトレチノイン、アロプリノール、アミホスチン、三酸化ヒ素、アスパラギナーゼ、ＢＣＧ生、ベバシズマブ、ベキサロテン、クラドリビン、クロファラビン、ダルベポエチンアルファ、デニロイキン、デクスラゾキサン、エポエチンアルファ、エルロチニブ、フィルグラスチム、酢酸ヒストレリン、イブリツモマブ、インターフェロンアルファ−２ａ、インターフェロンアルファ−２ｂ、レナリドミド、レバミゾール、メスナ、メトキサレン、ナンドロロン、ネララビン、ノフェツモマブ、オプレルベキン、パリフェルミン、パミドロネート、ペガデマーゼ、ペグアスパラガーゼ、ペグフィルグラスチム、ペメトレキセド二ナトリウム、プリカマイシン、ポルフィマーナトリウム、キナクリン、ラスブリカーゼ、サルグラモスチム、テモゾロミド、ＶＭ−２６、６−ＴＧ、トレミフェン、トレチノイン、ＡＴＲＡ、バルルビシン、ゾレドロネート、およびゾレドロン酸、ならびにそれらの薬学的に許容される塩も挙げられる。
【００７７】
また、化学療法剤には、以下のようなものがある：ヒドロコルチゾン、酢酸ヒドロコルチゾン、酢酸コルチゾン、ピバル酸チクソコルトール、トリアムシノロンアセトニド、トリアムシノロンアルコール、モメタゾン、アムシノニド、ブデソニド、デソニド、フルオシノニド、フルオシノロンアセトニド、ベタメタゾン、ベタメタゾンナトリウムリン酸塩、デキサメタゾン、デキサメタゾンナトリウムリン酸塩。フルオコルトン、ヒドロコルチゾン−１７−ブチレート、ヒドロコルチゾン−１７−バレレート、アクロメタゾンジプロピオン酸塩、ベタメタゾンバレレート、ベタメタゾンジプロピオン酸塩、プレドニカルベート、クロベタゾン−１７−ブチレート、クロベタゾール−１７−プロピオン酸塩、フルオコルトンカプロエート、フルオコルトンピバル酸塩およびフルプレドニデンアセテート、フェニルアラニン−グルタミン−グリシン（ＦＥＧ）およびそのＤ異性体形態（ｆｅＧ）などの免疫選択的抗炎症ペプチド（ＩｍＳＡＩＤｓ）（ＩＭＵＬＡＮ  ＢｉｏＴｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，ＬＬＣ）。アザチオプリン、シクロスポリン（シクロスポリンＡ）、Ｄ−ペニシラミン、金塩、ヒドロキシクロロキン、レフルノミデミノサイクリン、スルファサラジンなどの抗リウマチ薬。エタネルセプト（エンブレル）などの腫瘍壊死因子α（ＴＮＦα）遮断薬、インフリキシマブ（レミケード）、アダリムマブ（ヒュミラ）、セルトリズマブペゴール（チムジア）、ゴリムマブ（シンポニ）、アナキンラ（キネレ）などのインターロイキン１（ＩＬ−１）遮断薬、アバタセプト（オレンシア）などのＴ細胞共刺激ブロッカー、トシリズマブ（ＡＣＴＥＭＥＲＡ（登録商標））などのインターロイキン６（ＩＬ−６）ブロッカー、レブリキズマブなどのインターロイキン１３（ＩＬ−１３）遮断薬；ロンタリズマブなどのインターフェロンアルファ（ＩＦＮ）ブロッカー；ｒｈｕＭＡｂ  Ｂｅｔａ７などのＢｅｔａ７インテグリンブロッカー、抗Ｍ１ｐｒｉｍｅなどのＩｇＥ経路ブロッカー、分泌されたホモ三量体ＬＴａ３および抗リンホトキシンアルファ（ＬＴａ）などの膜結合ヘテロ三量体ＬＴａ１  ／β２ブロッカー；放射性同位元素（例：Ａｔ２１１，Ｉ１３１，Ｉ１２５，Ｙ９０，Ｒｅ１８６，Ｒｅ１８８，Ｓｍ１５３，Ｂｉ２１２，Ｐ３２，Ｐｂ２１２およびＬｕの放射性同位体）；チオプラチン、ＰＳ−３４１、フェニルブチレート、ＥＴ−１８−ＯＣＨ３、またはファルネシルトランスフェラーゼ阻害剤（Ｌ−７３９７４９、Ｌ−７４４８３２）などのその他の治験薬。ケルセチン、レスベラトロール、ピセアタンノール、没食子酸エピガロカテキン、テアフラビン、フラバノール、プロシアニジン、ベツリン酸およびそれらの誘導体などのポリフェノール。クロロキンなどのオートファジー阻害剤；デルタ−９−テトラヒドロカンナビノール（ドロナビノール、ＭＡＲＩＮＯＬ（登録商標））；ベータラパコン；ラパコール；コルヒチン；ベツリン酸；アセチルカンプトテシン、スコポレクチン、および９−アミノカンプトテシン）；ポドフィロトキシン；テガフール（ＵＦＴＯＲＡＬ（登録商標））；ベキサロテン（ＴＡＲＧＲＥＴＩＮ（登録商標））；クロドロネート（例えば、ＢＯＮＥＦＯＳ（登録商標）またはＯＳＴＡＣ（登録商標））、エチドロネート（ＤＩＤＲＯＣＡＬ（登録商標））、ＮＥ−５８０９５、ゾレドロン酸／ゾレドロネート（ＺＯＭＥＴＡ（登録商標））、アレンドロネート（ＦＯＳＡＭＡＸ（登録商標））、パミドロネート（ＡＲＥＤＩＡ（登録商標））、チルドロネート（ＳＫＥＬＩＤ（登録商標））などのビスホスホネート）、またはリセドロネート（ＡＣＴＯＮＥＬ（登録商標））；および上皮成長因子受容体（ＥＧＦ−Ｒ）；ＴＨＥＲＡＴＯＰＥ（登録商標）ワクチンなどのワクチン；ペリホシン、ＣＯＸ−２阻害剤（例：セレコキシブまたはエトリコキシブ）、プロテオソーム阻害剤（例：ＰＳ３４１）；ＣＣＩ−７７９；ティピファルニブ（Ｒ１１５７７）；オラフェニブ、ＡＢＴ５１０；オブリメルセンナトリウム（ＧＥＮＡＳＥＮＳＥ（登録商標））などのＢｃｌ−２阻害剤。ピキサントロン；ロナファルニブ（ＳＣＨ  ６６３６、ＳＡＲＡＳＡＲ（商標））などのファルネシルトランスフェラーゼ阻害剤。および上記のいずれかの薬学的に許容される塩、酸または誘導体；およびシクロホスファミド、ドキソルビシン、ビンクリスチン、プレドニゾロンの併用療法の略であるＣＨＯＰ、および５−ＦＵとロイコボリンを組み合わせたオキサリプラチン（ＥＬＯＸＡＴＩＮ（商標））の治療レジメンの略であるＦＯＬＦＯＸのような上記の２つ以上の組み合わせ。
【００７８】
化学療法剤としてはまた、鎮痛効果、解熱効果、および抗炎症効果を有する非ステロイド抗炎症薬が挙げられ得る。ＮＳＡＩＤとしては、酵素シクロオキシゲナーゼの非選択的阻害剤を含む。ＮＳＡＩＤの具体的な例としては、アスピリン、プロピオン酸誘導体、例えば、イブプロフェン、フェノプロフェン、ケトプロフェン、フルルビプロフェン、オキサプロジン、およびナプロキセン、酢酸誘導体、例えば、インドメタシン、スリンダク、エトドラク、ジクロフェナク、エノール酸誘導体、例えば、ピロキシカム、メロキシカム、テノキシカム、ドロキシカム、ロルノキシカム、およびイソキシカム、フェナム酸誘導体、例えば、メフェナム酸、メクロフェナム酸、フルフェナム酸、トルフェナム酸、ならびにＣＯＸ−２阻害剤、例えば、セレコキシブ、エトリコキシブ、ルミラコキシブ、パレコキシブ、ロフェコキシブ、ロフェコキシブ、およびバルデコキシブが挙げられる。ＮＳＡＩＤの適応は、リウマチ性関節炎、変形性関節炎、炎症性関節症、強直性脊椎炎、乾癬性関節炎、ライター症候群、急性痛風、月経困難症、転移性骨痛、頭痛および片頭痛、術後疼痛、炎症および組織損傷に起因する軽度〜中程度の疼痛、発熱、腸閉塞症、ならびに腎疝痛等の状態の症状軽減であり得る。
【００７９】
本明細書で使用されるとき、「成長阻害剤」とは、インビトロまたはインビボのいずれかで細胞の成長を阻害する化合物または組成物を指す。一実施形態では、成長阻害剤は、抗体が結合する抗原を発現する細胞の増殖を予防または低減する成長阻害抗体である。別の実施形態では、成長阻害剤は、Ｓ期の細胞の割合を著しく減少させるものであり得る。成長阻害剤の例としては、細胞周期進行（Ｓ期以外の場所で）を遮断する薬剤、例えば、Ｇ１停止およびＭ期停止を誘導する薬剤が挙げられる。従来のＭ期遮断薬としては、ビンカ（ビンクリスチンおよびビンブラスチン）、タキサン、およびトポイソメラーゼＩＩ阻害剤、例えば、ドキソルビシン、エピルビシン、ダウノルビシン、エトポシド、およびブレオマイシンが挙げられる。Ｇ１で停止させるこれらの薬剤はまた、Ｓ期での停止、例えば、タモキシフェン、プレドニゾン、ダカルバジン、メクロレタミン、シスプラチン、メトトレキサート、５−フルオロウラシル、およびａｒａ−ＣなどのＤＮＡアルキル化剤にも及ぶ。さらなる情報は、ＭｅｎｄｅｌｓｏｈｎおよびＩｓｒａｅｌ編、Ｔｈｅ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｃａｎｃｅｒ，Ｃｈａｐｔｅｒ  １におけるＭｕｒａｋａｍｉ  ｅｔ  ａｌ．による「Ｃｅｌｌ  ｃｙｃｌｅ  ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ，ｏｎｃｏｇｅｎｅｓ，ａｎｄ  ａｎｔｉｎｅｏｐｌａｓｔｉｃ  ｄｒｕｇｓ」（Ｗ．Ｂ．Ｓａｕｎｄｅｒｓ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，１９９５）、例えば、ｐ．１３により見出せる。タキサン（パクリタキセルおよびドセタキセル）は、いずれもイチイ由来の抗癌薬である。ヨーロッパイチイ由来のドセタキセル（ＴＡＸＯＴＥＲＥ（登録商標）、Ｒｈｏｎｅ−Ｐｏｕｌｅｎｃ  Ｒｏｒｅｒ）は、パクリタキセル（ＴＡＸＯＬ（登録商標）、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）の半合成類似体である。パクリタキセルおよびドセタキセルは、チューブリン二量体由来の微小管の構築を促進し、脱重合を阻止することによって微小管を安定させ、細胞内での有糸分裂を阻害する。
【００８０】
「放射線療法」とは、正常に機能するか、または細胞を完全に破壊する能力を制限するように細胞に十分な損傷を誘導するための指向性ガンマ線またはベータ線の使用を意味する。多くの投与量および治療期間を決定するための当該技術分野で既知の方法が多く存在することが理解される。典型的な治療は、１回投与として与えられ、典型的な投与量は、１日１０〜２００単位（グレイ）の範囲である。
【００８１】
治療の目的のための「被験者」または「個体」とは、哺乳類に分類される任意の動物を指し、ヒト、家畜および農場動物、および動物園、スポーツ動物、またはペット動物、例えば犬、馬、猫、牛などを含む。好ましくは、哺乳動物はヒトである。
【００８２】
本明細書における「抗体」という用語は、最も広い意味で使用され、具体的には、それらが所望の生物学的活性を呈する限り、モノクローナル抗体（全長モノクローナル抗体等）、ポリクローナル抗体、多重特異性抗体（例えば、二重特異性抗体）、および抗体断片を包含する。
【００８３】
「単離された」抗体とは、その自然環境の成分から特定および分離され、かつ／または回収された抗体である。その自然環境の汚染物質成分は、抗体の試験的、診断的、または治療的使用を妨害するであろう物質であり、それらとしては、酵素、ホルモン、および他のタンパク質性または非タンパク質性溶質が挙げられる。いくつかの実施形態では、抗体は、（１）例えば、ローリー法によって決定される、９５重量％超、いくつかの実施形態では、９９重量％超の抗体になるまで、（２）例えば、スピニングカップシークエネーターを使用して、Ｎ末端または内部アミノ酸配列の少なくとも１５個の残基を得るのに十分な程度まで、または（３）例えば、クマシーブルーまたはシルバー染色を使用して、還元または非還元条件下でＳＤＳ−ＰＡＧＥによって均質性が得られるまで精製される。単離された抗体は、抗体の自然環境の少なくとも１つの成分が存在しないため、組換え細胞内のインサイツ抗体を含む。しかしながら、通常、単離された抗体は、少なくとも１つの精製ステップによって調製される。
【００８４】
「天然抗体」は、通常、２つの同一の軽（Ｌ）鎖および２つの同一の重（Ｈ）鎖から成る、約１５０，０００ダルトンのヘテロ四量体糖タンパク質である。各軽鎖が１つのジスルフィド共有結合により重鎖に連結される一方で、ジスルフィド結合の数は、異なる免疫グロブリンアイソタイプの重鎖間で異なる。各重鎖および軽鎖は、規則的に離間した鎖間ジスルフィド架橋も有する。各重鎖は、一方の端に可変ドメイン（ＶＨ）を有し、いくつかの定常ドメインが続く。各軽鎖は、一方の端に可変ドメイン（ＶＬ）を有し；その他方の端に定常ドメインを有し、軽鎖の定常ドメインは、重鎖の第１の定常ドメインと整列し、軽鎖の可変ドメインは、重鎖の可変ドメインと整列する。特定のアミノ酸残基は、軽鎖可変ドメインと重鎖可変ドメインとの間に界面を形成すると考えられている。
【００８５】
「定常ドメイン」という用語は、抗原結合部位を含有する可変ドメインである免疫グロブリンの他の部分と比較してより保存されたアミノ酸配列を有する免疫グロブリン分子の部分を指す。定常ドメインには、重鎖のＣＨ１、ＣＨ２、およびＣＨ３ドメイン（総称してＣＨ）と軽鎖のＣＨＬ（またはＣＬ）ドメインが含まれる。
【００８６】
抗体の「可変領域」または「可変ドメイン」とは、抗体の重鎖または軽鎖のアミノ末端ドメインを指す。重鎖の可変ドメインは“ＶＨ”と呼ばれることがある。軽鎖の可変ドメインは、“ＶＬ”と呼ばれてもよい。これらのドメインは、一般に、抗体の最も可変性の高い部分であり、抗原結合部位を含有する。
【００８７】
「可変」という用語は、可変ドメインのある特定の部分の配列が抗体間で広く異なり、かつ各特定の抗体のその特定の抗原に対する結合および特異性において使用されるという事実を指す。しかしながら、可変性は、抗体の可変ドメイン全体にわたって均等に分布していない。これは、軽鎖可変ドメインおよび重鎖可変ドメインの両方における超可変領域（ＨＶＲ）と呼ばれる３つのセグメントに集中している。可変ドメインのより高度に保存された部分は、フレームワーク領域（ＦＲ）と呼ばれる。天然の重鎖および軽鎖の可変ドメインは各々、ベータ−シート構造を接続し、かついくつかの場合では、ベータ−シート構造の一部を形成するループを形成する３つのＨＶＲによって接続されたベータシート立体配置を大いに採用する４つのＦＲ領域を含む。各鎖内のＨＶＲは、ＦＲ領域によって近接して互いに結び付いており、他方の鎖のＨＶＲと共に、抗体の抗原結合部位の形成に寄与する（Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，Ｆｉｆｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．（１９９１））。定常ドメインは、抗体の抗原への結合に直接関与していないが、抗体の抗体依存性細胞毒性への関与等の様々なエフェクター機能を呈する。
【００８８】
任意の哺乳類種由来の抗体（免疫グロブリン）の「軽鎖」は、定常ドメインのアミノ酸配列に基づいてカッパ（「κ」）およびラムダ（「λ」）と呼ばれる２つの明らかに異なる型のうちの一方に割り当てられ得る。
【００８９】
本明細書で使用されるＩｇＧ「アイソタイプ」または「サブクラス」という用語は、それらの定常領域の化学的および抗原的特性によって定義される免疫グロブリンのサブクラスのうちのいずれかを意味する。
【００９０】
それらの重鎖の定常ドメインのアミノ酸配列に応じて、抗体（免疫グロブリン）は、異なるクラスに割り当てられ得る。免疫グロブリンには５つの主なクラス：ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、およびＩｇＭであり、これらのうちのいくつかは、下位クラス（アイソタイプ）、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１、およびＩｇＡ２にさらに分けることができる。免疫グロブリンの異なるクラスに対応する重鎖定常ドメインは、それぞれα、γ、ε、γ、およびμと呼ばれる。異なるクラスの免疫グロブリンのサブユニット構造および三次元構成はよく知られており、例えば、ＡｂｂａｓらがＣｅｌｌｕｌａｒ  ａｎｄ  Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ第４版に一般的に記載されている（Ｗ．Ｂ．Ｓａｕｎｄｅｒｓ，Ｃｏ．，２０００）。抗体は、抗体と１つ以上の他のタンパク質またはペプチドとの共有または非共有会合によって形成されるより大きい融合分子の一部であり得る。
【００９１】
「全長抗体」、「インタクトな抗体」、および「全抗体」という用語は、以下に記載の抗体断片ではない、その実質的にインタクトな形態の抗体を指すために本明細書で同義に使用される。これらの用語は、具体的には、Ｆｃ領域を含有する重鎖を有する抗体を指す。
【００９２】
本明細書における目的のための「裸抗体」は、細胞傷害性部分または放射標識にコンジュゲートされていない抗体である。
【００９３】
「抗体断片」は、好ましくはその抗原結合領域を含む、インタクトな抗体の一部を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗体断片は、抗原結合断片である。抗体断片の例としては、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、およびＦｖ断片；ダイアボディ；直鎖状抗体；一本鎖抗体分子；ならびに抗体断片から形成された多特異性抗体が挙げられる。
【００９４】
抗体のパパイン消化により、各々単一の抗原結合部位を有する「Ｆａｂ」断片と、容易に結晶化するその能力を反映して命名された残りの「Ｆｃ」断片と呼ばれる２つの同一の抗原結合断片が産生される。ペプシンで処理すると、Ｆ（ａｂ’）２断片が得られ、これは、２つの抗原結合部位を有し、依然として抗原を架橋する能力を有する。
【００９５】
「Ｆｖ」とは、完全な抗原結合部位を含有する最小の抗体断片である。一実施形態では、二本鎖Ｆｖ種は、密接に非共有会合した１つの重鎖可変ドメインおよび１つの軽鎖可変ドメインの二量体からなる。一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）種において、１つの重鎖可変ドメインおよび１つの軽鎖可変ドメインは、軽鎖および重鎖が二本鎖Ｆｖ種における構造に類似の「二量体」構造で会合し得るように、可動性ペプチドリンカーによって共有結合し得る。各可変ドメインの３つのＨＶＲが相互作用してＶＨ−ＶＬ二量体の表面上の抗原結合部位を定義するのは、この立体配置においてである。まとめると、６つのＨＶＲは抗体に抗原結合特異性を与える。しかしながら、全結合部位よりも低い親和性であるが、単一の可変ドメイン（または抗原に特異的なＨＶＲを３つしか含まないＦｖの半分）でさえも、抗原を認識し、それに結合する能力を有する。
【００９６】
Ｆａｂ断片は、重鎖可変ドメインおよび軽鎖可変ドメインを含有し、軽鎖定常ドメインおよび第１の重鎖定常ドメイン（ＣＨ１）も含有する。Ｆａｂ’断片は、抗体ヒンジ領域由来の１つ以上のシステインを含め、重鎖ＣＨ１ドメインのカルボキシ末端での数個の残基の付加によって、Ｆａｂ断片とは異なる。Ｆａｂ’−ＳＨとは、定常ドメインのシステイン残基（複数可）が遊離チオール基を持つＦａｂ’の本明細書における指名である。Ｆ（ａｂ’）２抗体断片は、元々、間にヒンジシステインを有するＦａｂ’断片の対として生成されたものであった。抗体断片の他の化学的カップリングも既知である。
【００９７】
「一本鎖Ｆｖ」または「ｓｃＦｖ」抗体断片は、抗体のＶＨおよびＶＬドメインを含み、これらのドメインは、単一のポリペプチド鎖内に存在する。一般に、ｓｃＦｖポリペプチドは、ＶＨドメインとＶＬドメインとの間にポリペプチドリンカーをさらに含み、これにより、ｓｃＦｖが抗原結合に望ましい構造を形成することが可能になる。ｓｃＦｖに関する概説については、例えば、ＰｌｕｃｋｔｈｕｎのＴｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ｏｆ  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，ｖｏｌ．１１３，Ｒｏｓｅｎｂｕｒｇ  ａｎｄ  Ｍｏｏｒｅ  ｅｄｓ．，（Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９９４），ｐｐ．２６９−３１５を参照されたい。
【００９８】
「ダイアボディ」という用語は、２つの抗原結合部位を有する抗体断片を指し、これらの断片は、同じポリペプチド鎖内の軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）に接続した重鎖可変ドメイン（ＶＨ）（ＶＨ−ＶＬ）を含む。同じ鎖上の２つのドメイン間の対合を可能にするには短すぎるリンカーを使用することにより、これらのドメインは、別の鎖の相補的ドメインと対合させられ、２つの抗原結合部位を作製する。ダイアボディは二価または二重特異性である可能性がある。ダイアボディについては、例えば、以下で詳しく説明されている：ＥＰ４０４，０９７；ＷＯ  １９９３／０１１６１；Ｈｕｄｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔ．Ｍｅｄ．９：１２９−１３４（２００３）；ａｎｄ  Ｈｏｌｌｉｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９０：６４４４−６４４８（１９９３）。三重特異性抗体および四重特異性抗体については、Ｈｕｄｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ，Ｎａｔ．Ｍｅｄ．９：１２９−１３４（２００３）にもまた記載されている。
【００９９】
本明細書で使用される「モノクローナル抗体」という用語は、実質的に同種の抗体の集団から得られる抗体を指し、例えば、その集団を構成する個々の抗体は、少量で存在し得る可能な変異、例えば、天然に存在する変異を除いて同一である。したがって、「モノクローナル」という修飾語は、別個の抗体の混合物ではないという抗体の特徴を示す。ある特定の実施形態では、かかるモノクローナル抗体は、典型的には、標的に結合するポリペプチド配列を含む抗体を含み、標的結合ポリペプチド配列は、複数のポリペプチド配列からの標的結合ポリペプチド配列の選択を含むプロセスによって得られたものである。例えば、この選択プロセスは、ハイブリドーマクローン、ファージクローン、または組換えＤＮＡクローンのプール等の複数のクローンからの特有のクローンの選択であり得る。選択された標的結合配列が、例えば、標的への親和性を改善し、標的結合配列をヒト化し、細胞培養におけるその産生を改善し、インビボでのその免疫原性を低減し、多重特異性抗体を作製するようにさらに改変されてもよく、かつ改変された標的結合配列を含む抗体が本発明のモノクローナル抗体でもあることを理解されたい。異なる決定基（エピトープ）に対して異なる抗体を典型的には含むポリクローナル抗体の調製と比べて、モノクローナル抗体の調製における各モノクローナル抗体は抗原の単一の決定基に対するものである。それらの特異性に加えて、モノクローナル抗体調製物は、それらが通常他の免疫グロブリンによって汚染されていないという点で有利である。
【０１００】
「モノクローナル」という修飾語は、実質的に同種の抗体集団から得られるという抗体の特徴を示し、任意の特定の方法による抗体の産生を必要とするものと解釈されるべきではない。例えば、本発明に従って使用されるモノクローナル抗体は、例えば、ハイブリドーマ法（例えば、Ｋｏｈｌｅｒ  ａｎｄ  Ｍｉｌｓｔｅｉｎ，Ｎａｔｕｒｅ，２５６：４９５−９７（１９７５）；Ｈｏｎｇｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ，１４（３）：２５３−２６０（１９９５），Ｈａｒｌｏｗ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，（Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，２ｎｄ  ｅｄ．１９８８）；Ｈａｍｍｅｒｌｉｎｇ  ｅｔ  ａｌ．のＭｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ａｎｄ  Ｔ−Ｃｅｌｌ  Ｈｙｂｒｉｄｏｍａｓ  ５６３−６８１（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，Ｎ．Ｙ．，１９８１））、組換えＤＮＡ法（ｓｅｅ，ｅ．ｇ．，Ｕ．Ｓ．Ｐａｔ．Ｎｏ．４，８１６，５６７）、ファージディスプレイ技術（例えば、Ｃｌａｃｋｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３５２：６２４−６２８（１９９１）；Ｍａｒｋｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２２：５８１−５９７（１９９２）；Ｓｉｄｈｕ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３３８（２）：２９９−３１０（２００４）；Ｌｅｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３４０（５）：１０７３−１０９３（２００４）；Ｆｅｌｌｏｕｓｅ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  １０１（３４）：１２４６７−１２４７２（２００４）；およびＬｅｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  ２８４（１−２）：１１９−１３２（２００４））、およびヒト免疫グロブリン遺伝子座またはヒト免疫グロブリン配列をコードする遺伝子の一部または全部を有する動物においてヒトまたはヒト様抗体を産生するための技術（例えば、ＷＯ  １９９８／２４８９３；ＷＯ  １９９６／３４０９６；ＷＯ  １９９６／３３７３５；ＷＯ  １９９１／１０７４１；Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９０：２５５１（１９９３）；Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３６２：２５５−２５８（１９９３）；Ｂｒｕｇｇｅｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｙｅａｒ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．７：３３（１９９３）；Ｕ．Ｓ．Ｐａｔ．Ｎｏｓ．５，５４５，８０７；５，５４５，８０６；５，５６９，８２５；５，６２５，１２６；５，６３３，４２５；ａｎｄ  ５，６６１，０１６；Ｍａｒｋｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １０：７７９−７８３（１９９２）；Ｌｏｎｂｅｒｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３６８：８５６−８５９（１９９４）；Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，Ｎａｔｕｒｅ  ３６８：８１２−８１３（１９９４）；Ｆｉｓｈｗｉｌｄ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１４：８４５−８５１（１９９６）；Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒ，Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１４：８２６（１９９６）；ａｎｄ  Ｌｏｎｂｅｒｇ  ａｎｄ  Ｈｕｓｚａｒ，Ｉｎｔｅｒｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３：６５−９３（１９９５））。
【０１０１】
本明細書のモノクローナル抗体は、特に、重鎖および／または軽鎖の一部が、特定の種に由来する抗体または特定の抗体クラスまたはサブクラスに属する抗体中の対応する配列と同一または相同であり、一方、鎖の残りの部分が、他の種に由来する抗体または他の抗体クラスまたはサブクラスに属する抗体中の対応する配列と同一または相同であり、所望の生物学的活性を示す限り、そのような抗体のフラグメントを含む「キメラ」抗体を含む（例えば、Ｕ．Ｓ．Ｐａｔ．Ｎｏ．４，８１６，５６７；およびＭｏｒｒｉｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８１：６８５１−６８５５（１９８４））。キメラ抗体には、ＰＲＩＭＡＴＴＺＥＤ（登録商標）抗体が含まれ、抗体の抗原結合領域は、例えば、アカゲザルを目的の抗原で免疫することによって産生された抗体に由来する。
【０１０２】
非ヒト（例えば、マウス）抗体の「ヒト化」形態は、非ヒト免疫グロブリン由来の最小限の配列を含有するキメラ抗体である。一実施形態では、ヒト化抗体は、レシピエントのＨＶＲ由来の残基が、所望の特異性、親和性、および／または能力を有するマウス、ラット、ウサギ、または非ヒト霊長類等の非ヒト種（ドナー抗体）のＨＶＲ由来の残基により置き換えられるヒト免疫グロブリン（レシピエント抗体）である。いくつかの例では、ヒト免疫グロブリンのＦＲ残基は、対応する非ヒト残基により置き換えられる。さらに、ヒト化抗体は、レシピエント抗体にもドナー抗体にも見られない残基を含み得る。これらの修飾を加えて、抗体の性能をさらに洗練させることができる。一般に、ヒト化抗体は、少なくとも１つ、典型的には、２つの可変ドメインのうちの実質的に全てを含み、超可変ループのうちの全てまたは実質的に全てが非ヒト免疫グロブリンの超可変ループに対応し、ＦＲのうちの全てまたは実質的に全てがヒト免疫グロブリン配列のＦＲである。ヒト化抗体は、任意に、免疫グロブリン定常領域（Ｆｃ）、典型的には、ヒト免疫グロブリンのＦｃの少なくとも一部も含む。さらなる詳細については、以下を参照：例えば、Ｊｏｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３２１：５２２−５２５（１９８６）；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３３２：３２３−３２９（１９８８）；およびＰｒｅｓｔａ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．２：５９３−５９６（１９９２）．また以下を参照：例えば、Ｖａｓｗａｎｉ  ａｎｄ  Ｈａｍｉｌｔｏｎ，Ａｎｎ．Ａｌｌｅｒｇｙ，Ａｓｔｈｍａ＆Ｉｍｍｕｎｏｌ．１：１０５−１１５（１９９８）；Ｈａｒｒｉｓ，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｔｒａｎｓａｃｔｉｏｎｓ  ２３：１０３５−１０３８（１９９５）；Ｈｕｒｌｅ  ａｎｄ  Ｇｒｏｓｓ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．５：４２８−４３３（１９９４）；ならびに米国特許第６，９８２，３２１号および同第７，０８７，４０９号。
【０１０３】
「ヒト抗体」とは、ヒトによって産生され、かつ／または本明細書に開示されるヒト抗体を作製するための技法のうちのいずれかを使用して作製された抗体のアミノ酸配列に対応するアミノ酸配列を有する抗体である。ヒト抗体のこの定義は、詳細には非ヒト抗原結合残基を含むヒト化抗体を除外する。ヒト抗体は、ファージディスプレイライブラリ等の当該技術分野で既知の様々な技法を使用して産生され得る。Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ  ａｎｄ  Ｗｉｎｔｅｒ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２７：３８１（１９９１）；Ｍａｒｋｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２２：５８１（１９９１）。Ｃｏｌｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ａｎｄ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ，Ａｌａｎ  Ｒ．Ｌｉｓｓ，ｐ．７７（１９８５）；Ｂｏｅｒｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１４７（１）：８６−９５（１９９１）に記載されている方法も、ヒトモノクローナル抗体の調製に利用可能である。ｖａｎ  Ｄｉｊｋ  ａｎｄ  ｖａｎ  ｄｅ  Ｗｉｎｋｅｌ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，５：３６８−７４（２００１）もまた参照のこと。ヒト抗体は、抗原投与に応答してこのような抗体を産生するよう改変されているが、その内在性遺伝子座は無能になっているトランスジェニック動物、例えば免疫化ゼノマウスに抗原を投与することによって調製することが可能である（例えば、ＸＥＮＯＭＯＵＳＥ（商標）技術に関する米国特許第６，０７５，１８１号および同第６，１５０，５８４号を参照のこと）。例えば、ヒトＢ細胞ハイブリドーマ技術により生成するヒト抗体に関する、Ｌｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１０３：３５５７−３５６２（２００６）もまた参照のこと。
【０１０４】
「種依存性抗体」は、第２の哺乳類種由来の抗原の相同体に対する結合親和性よりも強い第１の哺乳類種由来の抗原に対する結合親和性を有する抗体である。通常、種依存性抗体は、ヒト抗原に「特異的に」結合するが（例えば、約１×１０−７Ｍ以下、好ましくは約１×１０−８Ｍ以下、より好ましくは約１×１０−９Ｍ以下の結合親和性（Ｋｄ）値を有する）、ヒト抗原に対するその結合親和性よりも少なくとも約５０倍、または少なくとも約５００倍、または少なくとも約１０００倍弱い第２の非ヒト哺乳動物種由来の抗原の相同体に対する結合親和性を有する。種依存性抗体は、上で定義される様々な種類の抗体のうちのいずれかであり得るが、好ましくは、ヒト化抗体またはヒト抗体である。
【０１０５】
本明細書で使用されるとき、「超可変領域」、「ＨＶＲ」、または「ＨＶ」という用語は、配列が超可変性であり、かつ／または構造的に定義されたループを形成する抗体可変ドメインの領域を指す。一般的に、抗体は、６個のＨＶＲを含み、ＶＨに３個（Ｈ１、Ｈ２、Ｈ３）、ＶＬに３個（Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３）含む。天然抗体において、Ｈ３およびＬ３が６つのＨＶＲの最も高い多様性を呈し、特にＨ３が抗体に優れた特異性を与える上で特有の役割を果たすと考えられる。以下を参照：例えば、Ｘｕ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  １３：３７−４５（２０００）、Ｊｏｈｎｓｏｎ  ａｎｄ  Ｗｕ，ｉｎ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ２４８：１−２５（Ｌｏ，ｅｄ．，Ｈｕｍａｎ  Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，Ｎ．Ｊ．，２００３）。実際には、重鎖のみからなる天然に存在するラクダ抗体は、軽鎖の不在下で機能的であり、安定している。例えば、Ｈａｍｅｒｓ−Ｃａｓｔｅｒｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３６３：４４６−４４８（１９９３）、Ｓｈｅｒｉｆｆ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  Ｓｔｒｕｃｔ  Ｂｉｏｌ．３：７３３−７３６（１９９６）を参照されたい．
【０１０６】
いくつかのＨＶＲ描写が本明細書で使用され、本明細書に包含される。カバット相補性決定領域（ＣＤＲ）は、配列の可変性に基づいており、最も一般的に使用されている。（Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ  Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．（１９９１））。Ｃｈｏｔｈｉａは、そうではなく、構造的ループの位置を指す（ＣｈｏｔｈｉａおよびＬｅｓｋ  Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１−９１７（１９８７））。ＡｂＭ  ＨＶＲは、Ｋａｂａｔ  ＨＶＲとＣｈｏｔｈｉａ構造的ループとの間の妥協案を示し、Ｏｘｆｏｒｄ  ＭｏｌｅｃｕｌａｒのＡｂＭ抗体モデリングソフトウェアによって使用される。「接触」ＨＶＲは、利用可能な複合体結晶構造の分析に基づく。これらのＨＶＲの各々由来の残基が以下に記載される。
ループ  Ｋａｂａｔ      ＡｂＭ          Ｃｈｏｔｈｉａ  接触
Ｌ１    Ｌ２４−Ｌ３４  Ｌ２４−Ｌ３４  Ｌ２６−Ｌ３２  Ｌ３０−Ｌ３６
Ｌ２    Ｌ５０−Ｌ５６  Ｌ５０−Ｌ５６  Ｌ５０−Ｌ５２  Ｌ４６−Ｌ５５
Ｌ３    Ｌ８９−Ｌ９７  Ｌ８９−Ｌ９７  Ｌ９１−Ｌ９６  Ｌ８９−Ｌ９６
Ｈ１    Ｈ３１−Ｈ３５Ｂ  Ｈ２６−Ｈ３５Ｂ  Ｈ２６−Ｈ３２  Ｈ３０−Ｈ３５Ｂ（Ｋａｂａｔ番号付け）
Ｈ１    Ｈ３１−Ｈ３５  Ｈ２６−Ｈ３５  Ｈ２６−Ｈ３２  Ｈ３０−Ｈ３５（Ｃｈｏｔｈｉａ番号付け）
Ｈ２    Ｈ５０−Ｈ６５  Ｈ５０−Ｈ５８  Ｈ５３−Ｈ５５  Ｈ４７−Ｈ５８
Ｈ３    Ｈ９５−Ｈ１０２  Ｈ９５−Ｈ１０２  Ｈ９６−Ｈ１０１  Ｈ９３−Ｈ１０１
【０１０７】
ＨＶＲは、以下の「伸長ＨＶＲ」を含み得る：ＶＬにおいて、２４−３６または２４−３４（Ｌ１）、４６−５６または５０−５６（Ｌ２）、および８９−９７または８９−９６（Ｌ３）、ならびにＶＨにおいて、２６−３５（Ｈ１）、５０−６５または４９−６５（Ｈ２）、および９３−１０２、９４−１０２、または９５−１０２（Ｈ３）。可変ドメイン残基は、これらの定義の各々について、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．（上記参照）に従って番号付けされる。
【０１０８】
ＨＶＲは、以下の「伸長ＨＶＲ」を含み得る：ＶＬにおいて、２４−３６または２４−３４（Ｌ１）、４６−５６または５０−５６（Ｌ２）、および８９−９７または８９−９６（Ｌ３）、ならびにＶＨにおいて、２６−３５（Ｈ１）、５０−６５または４９−６５（Ｈ２）、および９３−１０２、９４−１０２、または９５−１０２（Ｈ３）。可変ドメイン残基は、これらの定義の各々について、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．（上記参照）に従って番号付けされる。
【０１０９】
「フレームワーク」または「ＦＲ」残基は、本明細書で定義されるＨＶＲ残基以外の可変ドメイン残基である。
【０１１０】
「Ｋａｂａｔにあるような可変ドメイン残基番号付け」または「Ｋａｂａｔにあるようなアミノ酸位置番号付け」という用語、およびそれらの変形は、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．（上記参照）における抗体の編集物の重鎖可変ドメインまたは軽鎖可変ドメインに使用される番号付けシステムを指す。この番号付けシステムを使用して、実際の直鎖状アミノ酸配列は、可変ドメインのＦＲもしくはＨＶＲの短縮、またはそれへの挿入に対応するより少ないアミノ酸または追加のアミノ酸を含有し得る。例えば、重鎖可変ドメインは、Ｈ２の残基５２の後に単一のアミノ酸挿入（Ｋａｂａｔに従う残基５２ａ）を含み、重鎖ＦＲ残基８２の後に挿入された残基（例えば、Ｋａｂａｔに従う残基８２ａ、８２ｂ、および８２ｃ等）を含み得る。残基のＫａｂａｔ番号付けは、所与の抗体に対して、抗体の配列と「標準の」Ｋａｂａｔによって番号付けされた配列との相同領域での整列によって決定され得る。
【０１１１】
Ｋａｂａｔナンバリングシステムは、可変ドメインの残基（軽鎖の残基１〜１０７および重鎖の残基１〜１１３）を参照する場合に一般的に使用される（例えば、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ．５ｔｈ  Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．（１９９１））。「ＥＵ番号付けシステム」または「ＥＵ指標」は、一般に、免疫グロブリン重鎖定常領域における残基について言及する際に使用される（例えば、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．（上記参照）で報告されるＥＵ指標）。「ＫａｂａｔにあるようなＥＵ指標」とは、ヒトＩｇＧ１  ＥＵ抗体の残基番号付けを指す。
【０１１２】
「直鎖状抗体」という表現は、Ｚａｐａｔａ  ｅｔ  ａｌ．（１９９５  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇ，８（１０）：１０５７−１０６２）に記載の抗体を指す。簡潔には、これらの抗体は、相補的軽鎖ポリペプチドと一緒になって一対の抗原結合領域を形成する一対のタンデムＦｄセグメント（ＶＨ−ＣＨ１−ＶＨ−ＣＨ１）を含む。直鎖状抗体は、二重特異性または単一特異性であり得る。
【０１１３】
本明細書で使用されるとき、「結合する」、「に特異的に結合する」、または「に特異的な」という用語は、生物学的分子等の異種分子集団の存在下で標的の存在を決定する標的と抗体との間の結合等の測定可能かつ再現可能な相互作用を指す。例えば、標的（エピトープであり得る）に結合するか、またはそれに特異的に結合する抗体は、この標的に、他の標的に結合するよりも高い親和性で、結合力で、より容易に、かつ／またはより長期間結合する抗体である。一実施形態では、抗体が無関係の標的に結合する程度は、例えば、ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）によって測定される、抗体の標的への結合の約１０％未満である。ある特定の実施形態では、標的に特異的に結合する抗体は、１μＭ以下、１００ｎＭ以下、１０ｎＭ以下、１ｎＭ以下、または０．１ｎＭ以下の解離定数（Ｋｄ）を有する。ある特定の実施形態では、抗体は、異なる種由来のタンパク質間で保存されるタンパク質上のエピトープに特異的に結合する。別の実施形態では、特異的結合は、排他的結合を含み得るが、それを必要としない。
【０１１４】
本明細書で使用される「試料」という用語は、例えば、物理的、生化学的、化学的、および／または生理学的特性に基づいて、特徴付けかつ／または特定される細胞および／または他の分子の実体を含有する、目的とする対象および／または個体から得られるか、またはそれ由来の組成物を指す。例えば、「疾患試料」という語句およびその変化形は、特性評価される細胞および／または分子実体を含有することが予期されるか、または含有することが既知である、目的の対象から得られた任意の試料を指す。試料としては、初代または培養細胞または細胞株、細胞上清、細胞溶解物、血小板、血清、血漿、硝子体液、リンパ液、滑液、卵胞液、精液、羊水、乳、全血、血液由来の細胞、尿、脳脊髄液、唾液、痰、涙、汗、粘液、腫瘍溶解物、および組織培養培地、組織抽出物、例えば、均質化組織、腫瘍組織、細胞抽出物、ならびにそれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１１５】
「組織試料」または「細胞試料」は、対象または個体の組織から得られた同様の細胞の集合を意味する。組織または細胞試料の供給源は、新鮮な、凍結した、および／または保存された器官、組織試料、生検、および／または吸引液からなどの固形組織；血漿などの血液または任意の血液構成物；脳脊髄液、羊水、腹水、または間質液などの体液；対象の妊娠または発育における任意の時期の細胞であってもよい。組織試料はまた、初代または培養細胞または細胞株であってもよい。任意で、組織または細胞試料は、疾患組織／器官から得られる。組織試料は、保存剤、抗凝固剤、緩衝液、固定剤、栄養剤、または抗生物質などの天然の組織と天然では混合しない化合物を含有し得る。
【０１１６】
本明細書で使用される場合、「参照試料」、「参照細胞」、「参照組織」、「対照試料」、「対照細胞」、または「対照組織」とは、比較目的のために使用される試料、細胞、組織、標準物、またはレベルを指す。一実施形態では、基準試料、基準細胞、基準組織、対照試料、対照細胞、または対照組織は、同じ対象または個体の身体の健常なおよび／または罹患していない部分（例えば、組織または細胞）から得られる。例えば、罹患細胞または組織に隣接する健常および／または非罹患の細胞または組織（例えば、腫瘍に隣接する細胞または組織）。別の実施形態では、基準試料は、同じ対象または個体の身体の治療されていない組織および／または細胞から得られる。さらに別の実施形態では、基準試料、基準細胞、基準組織、対照試料、対照細胞、または対照組織は、対象または個体ではない個体の身体の健常なおよび／または罹患していない部分（例えば、組織または細胞）から得られる。さらに別の実施形態では、基準試料、基準細胞、基準組織、対照試料、対照細胞、または対照組織は、対象または個体ではない個体の身体の治療されていない組織および／または細胞から得られる。
【０１１７】
薬品を用いた治療に対する患者の「有効な応答」または患者の「応答性」および類似の単語は、がん等の疾患もしくは障害の危険性があるか、またはそれを  患う患者に付与される臨床的または治療的有益性を指す。一実施形態において、そのような利益としては、生存期間（全生存期間および無増悪生存期間を含む）を延長すること、客観的奏効（完全奏効もしくは部分奏効を含む）をもたらすこと、またはがんの徴候もしくは症状を改善することのいずれか１つ以上が挙げられる。
【０１１８】
治療に「有効な応答を示さない」患者とは、生存期間（全生存期間および無増悪生存期間を含む）が延長すること、客観的応答（完全応答もしくは部分的応答を含む）がもたらされること、または癌の兆候または症状が改善されることのうちのいずれも有しない患者を指す。
【０１１９】
「機能的Ｆｃ領域」は、天然配列Ｆｃ領域の「エフェクター機能」を有する。例示的な「エフェクター機能」には、Ｃ１ｑ結合が含まれる；ＣＤＣ；Ｆｃ受容体結合；ＡＤＣＣ；食作用；細胞表面受容体（例：Ｂ細胞受容体；ＢＣＲ）などのダウンレギュレーションがある。そのようなエフェクター機能は、一般に、Ｆｃ領域が結合ドメイン（例えば、抗体可変ドメイン）と結合することを必要とし、そして、例えば、本明細書の定義に開示されているように、様々なアッセイを使用して評価することができる。
【０１２０】
「ヒトエフェクター細胞」とは、１つ以上のＦｃＲを発現し、かつエフェクター機能を行う白血球を指す。ある特定の実施形態では、細胞は、少なくともＦｃγＲＩＩＩを発現し、ＡＤＣＣエフェクター機能（複数可）を実行する。ＡＤＣＣを媒介するヒト白血球の例としては、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、単球、細胞  毒性Ｔ細胞、および好中球が挙げられる。エフェクター細胞は、天然源、例えば、血液から単離され得る。
【０１２１】
「ヒトエフェクター細胞を有する」がんまたは生体試料は、診断試験において、試料中に存在するヒトエフェクター細胞（例えば、浸潤性ヒトエフェクター細胞）を有するものである。
【０１２２】
「ＦｃＲ発現細胞を有する」がんまたは生体試料は、診断試験において、試料中に存在するＦｃＲ発現（例えば、浸潤性ＦｃＲ発現細胞）を有するものである。いくつかの実施形態では、ＦｃＲはＦｃγＲである。いくつかの実施形態では、ＦｃＲは、活性化ＦｃγＲである。
ＩＩ．概要
【０１２３】
本明細書に提供される方法は、個体における肺癌（小細胞肺癌、例えば、進展型小細胞肺がんなど）の治療または進行を遅らせるための方法であって、有効量のＰＤ−１軸結合アンタゴニスト（例えば、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、例えば、アテゾリズマブ）、白金剤（例えば、カルボプラチンまたはシスプラチン）、およびトポイソメラーゼＩＩ阻害剤（例えば、エトポシド）を個体に投与することからなる方法である。また、本明細書に提供される方法は、肺癌（例えば、小細胞肺癌、例えば、進展型小細胞肺がん）を有する個体において免疫機能を増強する方法であって、有効量のＰＤ−１軸結合アンタゴニスト（例えば、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、例えば、アテゾリズマブ）、白金剤（例えば、カルボプラチンまたはシスプラチン）、およびトポイソメラーゼＩＩ阻害剤（例えば、エトポシド）を個体に投与することからなる方法である。いくつかの実施形態では、治療は、その個体の無増悪生存期間（ＰＦＳ）および／または全生存期間（ＯＳ）を延長する。いくつかの実施形態では、白金剤（例えば、カルボプラチンまたはシスプラチン）およびトポイソメラーゼＩＩ阻害剤（例えば、エトポシド）の投与からなる治療と比較して、治療は、個体の無増悪生存期間（ＰＦＳ）および／または全生存期間（ＯＳ）を延長する。
【０１２４】
いくつかの実施形態では、本方法は、進展型小細胞肺がん（ＥＳ−ＳＣＬＣ）を有する患者を治療することからなり、カルボプラチンおよびエトポシドと組み合わせてアテゾリズマブを患者に投与することにより、投与は導入期および維持期からなる。導入期は、１日目にアテゾリズマブを１２００ｍｇ、１日目にカルボプラチンをＡＵＣ＝５ｍｇ／ｍｌ／分を達成するのに十分な量、エトポシドを２１日間の各サイクルの１日目、２日目、３日目に１００ｍｇ／ｍ２の用量で投与することからなる、サイクル１〜４までの各サイクル。維持期は、サイクル４以降の各サイクルについて、各２１日間のサイクルの１日目に１２００ｍｇの用量でアテゾリズマブを投与することからなり、ここで、個体がＥＳ−ＳＣＬＣの治療を受けていない場合、個体の無増悪生存期間（ＰＦＳ）および全生存期間（ＯＳ）が延長される。
ＩＩＩ．ＰＤ−１軸結合アンタゴニスト
【０１２５】
例えば、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストとしては、ＰＤ−１結合アンタゴニスト、ＰＤＬ１結合アンタゴニスト、およびＰＤＬ２結合アンタゴニストが挙げられる。「ＰＤ−１」の代替名としては、ＣＤ２７９およびＳＬＥＢ２が挙げられる。「ＰＤＬ１」の別名には、Ｂ７−Ｈ１、Ｂ７−４、ＣＤ２７４、およびＢ７−Ｈが含まれる。「ＰＤＬ２」の別名には、Ｂ７−ＤＣ、Ｂｔｄｃ、およびＣＤ２７３が含まれる。いくつかの実施形態では、ＰＤ−１、ＰＤＬ１、およびＰＤＬ２は、ヒトＰＤ−１、ＰＤＬ１、およびＰＤＬ２である。
【０１２６】
いくつかの実施形態では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、ＰＤ−１のそのリガンド結合パートナーへの結合を阻害する分子である。具体的な一態様では、ＰＤ−１のリガンド結合パートナーは、ＰＤＬ１および／またはＰＤＬ２である。別の実施形態では、ＰＤＬ１結合アンタゴニストは、ＰＤＬ１のその結合パートナーへの結合を阻害する分子である。具体的な一態様では、ＰＤＬ１の結合パートナーは、ＰＤ−１および／またはＢ７−１である。別の実施形態では、ＰＤＬ２結合アンタゴニストは、ＰＤＬ２のその結合パートナーへの結合を阻害する分子である。具体的な一態様では、ＰＤＬ２の結合パートナーは、ＰＤ−１である。アンタゴニストは、抗体、その抗原結合断片、イムノアドヘシン、融合タンパク質、またはオリゴペプチドであり得る。
【０１２７】
いくつかの実施形態では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、抗ＰＤ−１抗体（例えば、ヒト抗体、ヒト化抗体、またはキメラ抗体）である。
【０１２８】
いくつかの実施形態において、抗ＰＤ−１抗体は、ニボルマブ（ＣＡＳ登録番号：９４６４１４−９４−４）である。ニボルマブ（ブリストルマイヤーズスクイブ／オノ）は、ＭＤＸ−１１０６−０４、ＭＤＸ−１１０６、ＯＮＯ−４５３８、ＢＭＳ−９３６５５８、およびＯＰＤＩＶＯ（登録商標）とも呼ばれ、ＷＯ２００６／１２１１６８に記載されている抗ＰＤ−１抗体である。いくつかの実施形態において、抗ＰＤ−１抗体は、重鎖および軽鎖配列を含み、ここで：
（ａ）重鎖はアミノ酸配列を含む：
ＱＶＱＬＶＥＳＧＧＧＶＶＱＰＧＲＳＬＲＬＤＣＫＡＳＧＩＴＦＳＮＳＧＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＶＩＷＹ  ＤＧＳＫＲＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＦＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＴＮＤＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＣＳＲＳＴＳＥＳＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＫＴＹＴＣＮＶＤＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＳＫＹＧＰＰＣＰＰＣＰＡＰＥＦＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＱＥＤＰＥＶＱＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＦＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＧＬＰＳＳＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＱＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＲＬＴＶＤＫＳＲＷＱＥＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＬＧＫ（配列番号１１）、および
（ｂ）軽鎖はアミノ酸配列を含む：
ＥＩＶＬＴＱＳＰＡＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＱＳＶＳＳＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＤＡＳＮＲＡＴ  ＧＩＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＥＰＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＳＳＮＷＰＲＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ（配列番号１２）。
【０１２９】
いくつかの実施形態において、抗ＰＤ−１抗体は、配列番号１１および配列番号１２からの６つのＨＶＲ配列（例えば、配列番号１１からの３つの重鎖ＨＶＲおよび配列番号１２からの３つの軽鎖ＨＶＲ）を含む。いくつかの実施形態において、抗ＰＤ−１抗体は、配列番号１１からの重鎖可変ドメインおよび配列番号１２からの軽鎖可変ドメインを含む。
【０１３０】
いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−１抗体は、ペムブロリズマブ（ＣＡＳ登録番号：１３７４８５３−９１−４）である。ペンブロリズマブ（メルク）は、ＭＫ−３４７５、メルク３４７５、ラムブロリズマブ、ＫＥＹＴＲＵＤＡ（登録商標）、およびＳＣＨ−９００４７５としても知られており、ＷＯ２００９／１１４３３５に記載の抗ＰＤ−１抗体である。いくつかの実施形態において、抗ＰＤ−１抗体は、重鎖および軽鎖配列を含み、ここで：
（ａ）重鎖はアミノ酸配列を含む：
ＱＶＱＬＶＱＳＧＶＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＮＹＹＭＹＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＧ  ＩＮＰＳＮＧＧＴＮＦＮＥＫＦＫＮＲＶＴＬＴＴＤＳＳＴＴＴＡＹＭＥＬＫＳＬＱＦＤＤＴＡＶＹＹＣＡＲＲＤＹＲＦＤＭＧＦＤＹＷ  ＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＣＳＲＳＴＳＥＳＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶ  ＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＫＴＹＴＣＮＶＤＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＳＫＹＧＰＰＣＰＰＣＰ  ＡＰＥＦＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＱＥＤＰＥＶＱＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫ  ＰＲＥＥＱＦＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＧＬＰＳＳＩＥＫＴＩＳＫＡＫ  ＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＱＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮ  ＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＲＬＴＶＤＫＳＲＷＱＥＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＬＧＫ（配列番号１３）、および
（ｂ）軽鎖はアミノ酸配列を含む：
ＥＩＶＬＴＱＳＰＡＴ  ＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＫＧＶＳＴＳＧＹＳＹＬＨＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＬＡＳＹＬＥＳ  ＧＶＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＥＰＥＤＦＡＶＹＹＣＱＨＳＲＤＬＰＬＴＦＧＧＧＴＫＶＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦ  ＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱ  ＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ（配列番号１４）。
【０１３１】
配列の配列位置、抗ＰＤ−１抗体は、配列番号１３および配列番号１４からの６ＨＶＲ配列（例えば、配列番号１３からの３重鎖ＨＶＲおよび配列番号１４からの３軽鎖ＨＶＲ）からなる。いくつかの実施形態において、抗ＰＤ−１抗体は、配列番号１３からの重鎖可変ドメインおよび配列番号１４からの軽鎖可変ドメインを含む。
【０１３２】
いくつかの実施形態において、抗ＰＤ−１抗体は、ＭＥＤＩ−０６８０（ＡＭＰ−５１４；アストラゼネカ）である。ＭＥＤＩ−０６８０はヒト化ＩｇＧ４抗ＰＤ−１抗体である。
【０１３３】
いくつかの実施形態において、抗ＰＤ−１抗体は、ＰＤＲ００１（ＣＡＳ登録番号１８５９０７２−５３−９；ノバルティス）である。ＰＤＲ００１は、ＰＤＬ１およびＰＤＬ２とＰＤ−１との結合を阻害するヒト化ＩｇＧ４抗ＰＤ１抗体である。
【０１３４】
いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−１抗体は、ＲＥＧＮ２８１０（Ｒｅｇｅｎｅｒｏｎ））である。ＲＥＧＮ２８１０はヒト抗ＰＤ１抗体である。
【０１３５】
いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−１抗体は、ＢＧＢ−１０８（ＢｅｉＧｅｎｅ）である。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−１抗体は、ＢＧＢ−Ａ３１７（ＢｅｉＧｅｎｅ）である。
【０１３６】
いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−１抗体は、ＪＳ−００１（Ｓｈａｎｇｈａｉ  Ｊｕｎｓｈｉ）である。ＪＳ−００１はヒト化抗ＰＤ１抗体である。
【０１３７】
いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−１抗体は、ＳＴＩ−Ａ１１１０（ソレント）である。ＳＴＩ−Ａ１１１０はヒト抗ＰＤ１抗体である。
【０１３８】
いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−１抗体は、ＩＮＣＳＨＲ−１２１０（Ｉｎｃｙｔｅ）である。ＩＮＣＳＨＲ−１２１０は、ヒトＩｇＧ４抗ＰＤ１抗体である。
【０１３９】
いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−１抗体は、ＰＦ−０６８０１５９１（ファイザー社）である。
【０１４０】
いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−１抗体は、ＴＳＲ−０４２（ＡＮＢ０１１としても知られている；Ｔｅｓａｒｏ／ＡｎａｐｔｙｓＢｉｏ）である。
【０１４１】
いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−１抗体は、ＡＭ０００１（ＡＲＭＯ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）である。
【０１４２】
いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−１抗体は、ＥＮＵＭ  ２４４Ｃ８（Ｅｎｕｍｅｒａｌ  Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ  Ｈｏｌｄｉｎｇｓ）である。ＥＮＵＭ  ２４４Ｃ８は、ＰＤＬ１とＰＤ−１の結合を阻害することなく、ＰＤ−１の機能を阻害する抗ＰＤ１抗体である。
【０１４３】
いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−１抗体は、ＥＮＵＭ  ３８８Ｄ４（Ｅｎｕｍｅｒａｌ  Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ  Ｈｏｌｄｉｎｇｓ）である。ＥＮＵＭ  ３８８Ｄ４は、ＰＤＬ１とＰＤ−１の結合を競合的に阻害する抗ＰＤ１抗体である。
【０１４４】
いくつかの実施形態では、ＰＤ−１抗体は、６つのＨＶＲ配列（例えば、３つの重鎖ＨＶＲおよび３つの軽鎖ＨＶＲ）および／または下記に記載のＰＤ−１抗体からの重鎖可変ドメインおよび軽鎖可変ドメインからなる：ＷＯ２０１５／１１２８００（出願人：Ｒｅｇｅｎｅｒｏｎ）、ＷＯ２０１５／１１２８０５（出願人：Ｒｅｇｅｎｅｒｏｎ）、ＷＯ２０１５／１１２９００（出願人：Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＵＳ２０１５０２１０７６９（Ｎｏｖａｒｔｉｓに譲渡）、ＷＯ２０１６／０８９８７３（出願人：Ｃｅｌｇｅｎｅ）、ＷＯ２０１５／０３５６０６（出願人：Ｂｅｉｇｅｎｅ）、ＷＯ２０１５／０８５８４７（出願人：Ｓｈａｎｇｈａｉ  Ｈｅｎｇｒｕｉ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ／Ｊｉａｎｇｓｕ  Ｈｅｎｇｒｕｉ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ）、ＷＯ２０１４／２０６１０７（出願人：Ｓｈａｎｇｈａｉ  Ｊｕｎｓｈｉ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ／Ｊｕｎｍｅｎｇ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）、ＷＯ２０１２／１４５４９３（出願人：Ａｍｐｌｉｍｍｕｎｅ）、ＵＳ９２０５１４８（ＭｅｄＩｍｍｕｎｅに譲渡），ＷＯ２０１５／１１９９３０（Ａｐｐｌｉｃａｎｔｓ：Ｐｆｉｚｅｒ／Ｍｅｒｃｋ）、ＷＯ２０１５／１１９９２３  出願人：Ｐｆｉｚｅｒ／Ｍｅｒｃｋ）、ＷＯ２０１６／０３２９２７（出願人：Ｐｆｉｚｅｒ／Ｍｅｒｃｋ）、ＷＯ２０１４／１７９６６４（出願人：ＡｎａｐｔｙｓＢｉｏ）、ＷＯ２０１６／１０６１６０（出願人：Ｅｎｕｍｅｒａｌ）およびＷＯ２０１４／１９４３０２（出願人：Ｓｏｒｒｅｎｔｏ）。
【０１４５】
いくつかの実施形態では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、イムノアドヘシン（例えば、定常領域（例えば、免疫グロブリン配列のＦｃ領域に融合したＰＤＬ１またはＰＤＬ２の細胞外またはＰＤ−１結合部分を含むイムノアドヘシン）である。いくつかの実施形態では、ＰＤ−１結合アンタゴニストはＡＭＰ−２２４である。Ｂ７−ＤＣＩｇとしても知られるＡＭＰ−２２４（ＣＡＳ登録番号１４２２１８４−００−６；ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ／ＭｅｄＩｍｍｕｎｅ）は、ＷＯ２０１０／０２７８２７およびＷＯ２０１１／０６６３４２に記載されているＰＤＬ２−Ｆｃ融合可溶性受容体である。
【０１４６】
いくつかの実施形態では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、ペプチドまたは低分子化合物である。いくつかの実施形態では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、ＡＵＮＰ−１２（ピエールファーブル／オーリゲン）である。例えば、ＷＯ２０１２／１６８９４４，ＷＯ２０１５／０３６９２７，ＷＯ２０１５／０４４９００，ＷＯ２０１５／０３３３０３，ＷＯ２０１３／１４４７０４，ＷＯ２０１３／１３２３１７，ａｎｄ  ＷＯ２０１１／１６１６９９。
【０１４７】
いくつかの実施形態では、ＰＤＬ１結合アンタゴニストは、ＰＤ−１を阻害する低分子である。いくつかの実施形態では、ＰＤＬ１結合アンタゴニストは、ＰＤＬ１を阻害する低分子である。いくつかの実施形態では、ＰＤＬ１結合アンタゴニストは、ＰＤＬ１およびＶＩＳＴＡを阻害する低分子である。いくつかの実施形態では、ＰＤＬ１結合アンタゴニストは、ＣＡ−１７０（ＡＵＰＭ−１７０としても知られている）である。いくつかの実施形態では、ＰＤＬ１結合アンタゴニストは、ＰＤＬ１およびＴＩＭ３を阻害する低分子である。いくつかの実施形態では、低分子は、ＷＯ２０１５／０３３３０１およびＷＯ２０１５／０３３２９９に記載の化合物である。
【０１４８】
いくつかの実施形態では、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストは、抗ＰＤＬ１抗体である。本明細書では、様々な抗ＰＤＬ１抗体が企図され、記載されている。本明細書における実施形態のうちのいずれかでは、単離された抗ＰＤＬ１抗体は、ヒトＰＤＬ１、例えば、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ受託番号Ｑ９ＮＺＱ７．１に示されるヒトＰＤＬ１、またはその変異形に結合することができる。いくつかの実施形態では、抗ＰＤＬ１抗体は、ＰＤＬ１とＰＤ−１との間の結合および／またはＰＤＬ１とＢ７−１との間の結合を阻害することができる。いくつかの実施形態では、抗ＰＤＬ１抗体は、モノクローナル抗体である。いくつかの実施形態では、抗ＰＤＬ１抗体は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’−ＳＨ、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、および（Ｆａｂ’）２断片からなる群から選択される抗体断片である。いくつかの実施形態では、抗ＰＤＬ１抗体は、ヒト化抗体である。いくつかの実施形態では、抗ＰＤＬ１抗体は、ヒト抗体である。本発明の方法に有用な抗ＰＤＬ１抗体の例、およびその製造方法は、ＰＣＴ特許出願ＷＯ  ２０１０／０７７６３４  Ａ１および米国特許第８，２１７，１４９号に記載されており、これらは参照により本明細書に組み込まれる。
【０１４９】
いくつかの実施形態において、抗ＰＤＬ１抗体は、重鎖可変領域および軽鎖可変領域を含み、ここで：
（ａ）重鎖可変領域は、それぞれ、ＧＦＴＦＳＤＳＷＩＨ（配列番号１）、ＡＷＩＳＰＹＧＧＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号２）およびＲＨＷＰＧＧＦＤＹ（配列番号３）のＨＶＲ−Ｈ１、ＨＶＲ−Ｈ２、およびＨＶＲ−Ｈ３配列を含み、そして
（ｂ）軽鎖可変領域は、それぞれ、ＲＡＳＱＤＶＳＴＡＶＡ（配列番号４）、ＳＡＳＦＬＹＳ（配列番号５）およびＱＱＹＬＹＨＰＡＴ（配列番号６）のＨＶＲ−Ｌ１、ＨＶＲ−Ｌ２、およびＨＶＲ−Ｌ３配列を含む。
【０１５０】
いくつかの実施形態において、抗ＰＤＬ１抗体は、アテゾリズマブおよびＴＥＣＥＮＴＲＩＱ（登録商標）（ＣＡＳ登録番号：１４２２１８５−０６−５）としても知られているＭＰＤＬ３２８０Ａである。いくつかの実施形態において、抗ＰＤＬ１抗体は、重鎖および軽鎖配列を含み、ここで：
（ａ）この重鎖可変領域配列は、以下のアミノ酸配列を含む：
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＤＳＷＩＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＷＩＳＰＹＧＧＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＡＤＴＳＫＮＴＡＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＲＨＷＰＧＧＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号７）および
（ｂ）この軽鎖可変領域配列は、以下のアミノ酸配列を含む：
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＤＶＳＴＡＶＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹ  ＳＡＳＦ  ＬＹＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＹＬＹＨＰＡＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲ（配列番号８）。
【０１５１】
いくつかの実施形態において、抗ＰＤＬ１抗体は、重鎖および軽鎖配列を含み、ここで：
（ａ）重鎖はアミノ酸配列を含む：
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＤＳＷＩＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＷＩＳＰＹＧＧＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＡＤＴＳＫＮＴＡＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＲＨＷＰＧＧＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＡＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧ（配列番号９）、および
（ｂ）軽鎖はアミノ酸配列を含む：ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＤＶＳＴＡＶＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＳＡＳＦＬＹＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＹＬＹＨＰＡＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ（配列番号：１０）。
【０１５２】
いくつかの実施形態では、抗ＰＤＬ１抗体はアベルマブ（ＣＡＳ登録番号：１５３７０３２−８２−８）．アベルマブ（ＭＳＢ００１０７１８Ｃとしても知られている）は、ヒトモノクローナルＩｇＧ１抗ＰＤＬ１抗体（Ｍｅｒｃｋ  ＫＧａＡ、ファイザー社）である。いくつかの実施形態において、抗ＰＤＬ１抗体は、重鎖および軽鎖配列を含み、ここで：
（ａ）重鎖はアミノ酸配列を含む：ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＩＭＭＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＳＩＹＰＳＧＧＩＴＦＹＡＤＴＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＩＫＬＧＴＶＴＴＶＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧ（配列番号１５）、および
（ｂ）軽鎖はアミノ酸配列を含む：ＱＳＡＬＴＱＰＡＳＶＳＧＳＰＧＱＳＩＴＩＳＣＴＧＴＳＳＤＶＧＧＹＮＹＶＳＷＹＱＱＨＰＧＫＡＰＫＬＭＩＹＤＶＳＮＲＰＳＧＶＳＮＲＦＳＧＳＫＳＧＮＴＡＳＬＴＩＳＧＬＱＡＥＤＥＡＤＹＹＣＳＳＹＴＳＳＳＴＲＶＦＧＴＧＴＫＶＴＶＬＧＱＰＫＡＮＰＴＶＴＬＦＰＰＳＳＥＥＬＱＡＮＫＡＴＬＶＣＬＩＳＤＦＹＰＧＡＶＴＶＡＷＫＡＤＧＳＰＶＫＡＧＶＥＴＴＫＰＳＫＱＳＮＮＫＹＡＡＳＳＹＬＳＬＴＰＥＱＷＫＳＨＲＳＹＳＣＱＶＴＨＥＧＳＴＶＥＫＴＶＡＰＴＥＣＳ（配列番号１６）。
【０１５３】
いくつかの実施形態において、抗ＰＤＬ１抗体は、配列番号１５および配列番号１６からの６つのＨＶＲ配列を含む（例えば、配列番号１５からの３つの重鎖ＨＶＲおよび配列番号１６からの３つの軽鎖ＨＶＲ）。いくつかの実施形態において、抗ＰＤＬ１抗体は、配列番号１５からの重鎖可変ドメインおよび配列番号１６からの軽鎖可変ドメインを含む。
【０１５４】
いくつかの実施形態において、抗ＰＤＬ１抗体は、デュルバルマブ（ＣＡＳ登録番号：１４２８９３５−６０−７）．ＭＥＤＩ４７３６としても知られるデュルバルマブは、ＷＯ２０１１／０６６３８９およびＵＳ２０１３／０３４５５９に記載されているＦｃ最適化ヒトモノクローナルＩｇＧ１カッパ抗ＰＤＬ１抗体（ＭｅｄＩｍｍｕｎｅ、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）である。いくつかの実施形態において、抗ＰＤＬ１抗体は、重鎖および軽鎖配列を含み、ここで：
（ａ）重鎖はアミノ酸配列を含む：ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＲＹＷＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＮＩＫＱＤＧＳＥＫＹＹＶＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＧＧＷＦＧＥＬＡＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＦＥＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＳＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧ（配列番号１７）、および
（ｂ）軽鎖はアミノ酸配列を含む：ＥＩＶＬＴＱＳＰＧＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＱＲＶＳＳＳＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＤＡＳＳＲＡＴＧＩＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＲＬＥＰＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＹＧＳＬＰＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ（配列番号１８）。
【０１５５】
いくつかの実施形態において、抗ＰＤＬ１抗体は、配列番号１７および配列番号１８からの６つのＨＶＲ配列を含む（例えば、配列番号１７の３つの重鎖ＨＶＲおよび配列番号１８の３つの軽鎖ＨＶＲ）。いくつかの実施形態において、抗ＰＤＬ１抗体は、配列番号１７からの重鎖可変ドメインおよび配列番号１８からの軽鎖可変ドメインを含む。
【０１５６】
いくつかの実施形態において、抗ＰＤＬ１抗体は、ＭＤＸ−１１０５（ブリストルマイヤーズスクイブ）である。ＭＤＸ−１１０５、別名、ＢＭＳ−９３６５５９は、ＷＯ２００７／００５８７４に記載の抗ＰＤＬ１抗体である。
【０１５７】
いくつかの実施形態において、抗ＰＤＬ１抗体は、ＬＹ３３０００５４（イーライリリー）である。
【０１５８】
いくつかの実施形態では、抗ＰＤＬ１抗体はＳＴＩ−Ａ１０１４（Ｓｏｒｒｅｎｔｏ）である。ＳＴＩ−Ａ１０１４はヒト抗ＰＤＬ１抗体である。
【０１５９】
いくつかの実施形態では、抗ＰＤＬ１抗体はＫＮ０３５（Ｓｕｚｈｏｕ  Ａｌｐｈａｍａｂ）である。ＫＮ０３５は、ラクダファージディスプレイライブラリから生成されたシングルドメイン抗体（ｄＡＢ）である。
【０１６０】
いくつかの実施形態では、抗ＰＤＬ１抗体は、（例えば、腫瘍微小環境中のプロテアーゼによって）切断されると、抗体抗原結合ドメインを活性化して、例えば、非結合性立体部位を除去することによって、その抗原を結合させることができるようにする、切断可能な部位またはリンカーから構成される。いくつかの実施形態では、抗ＰＤＬ１抗体はＣＸ−０７２（ＣｙｔｏｍＸ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）である。
【０１６１】
いくつかの実施形態では、ＰＤＬ１抗体は、６つのＨＶＲ配列（例えば３つの重鎖ＨＶＲおよび３つの軽鎖ＨＶＲ）および／または、ＵＳ２０１６０１０８１２３（Ｎｏｖａｒｔｉｓに譲渡）、ＷＯ２０１６／０００６１９（出願人：Ｂｅｉｇｅｎｅ）、ＷＯ２０１２／１４５４９３（出願人：Ａｍｐｌｉｍｍｕｎｅ）、ＵＳ９２０５１４８（ＭｅｄＩｍｍｕｎｅに譲渡）、ＷＯ２０１３／１８１６３４（出願人：Ｓｏｒｒｅｎｔｏ）、およびＷＯ２０１６／０６１１４２（出願人：Ｎｏｖａｒｔｉｓ）に記載のＰＤＬ１抗体からの重鎖可変ドメインおよび軽鎖可変ドメインからなる。
【０１６２】
なおさらに具体的な一態様では、本抗体は、ヒトまたはマウス定常領域をさらに含む。なおさらなる一態様では、ヒト定常領域は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４からなる群から選択される。なおさらに具体的な一態様では、ヒト定常領域は、ＩｇＧ１である。なおさらなる一態様では、マウス定常領域は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２Ａ、ＩｇＧ２Ｂ、ＩｇＧ３からなる群から選択される。なおさらなる一態様では、マウス定常領域は、ＩｇＧ２Ａである。
【０１６３】
なおさらに具体的な一態様では、本抗体は、低減されたまたは最小のエフェクター機能を有する。さらに具体的な一態様では、最小のエフェクター機能は、「エフェクターのないＦｃ突然変異」またはグリコシル化突然変異から生じる。なおさらなる一実施形態では、エフェクターなしのＦｃ変異は、定常領域内のＮ２９７ＡまたはＤ２６５Ａ／Ｎ２９７Ａ置換である。いくつかの実施形態では、単離された抗ＰＤＬ１抗体は、非グリコシル化されている。抗体のグリコシル化は、典型的には、Ｎ結合型またはＯ結合型のいずれかである。Ｎ結合型とは、炭水化物部分のアスパラギン残基の側鎖への結合を指す。トリペプチド配列であるアスパラギン−Ｘ−セリンおよびアスパラギン−Ｘ−トレオニン（式中、Ｘは、プロリン以外の任意のアミノ酸である）は、炭水化物部分のアスパラギン側鎖への酵素結合の認識配列である。したがって、ポリペプチド内でのこれらのトリペプチド配列のいずれかの存在により、潜在的なグリコシル化部位が作製される。Ｏ結合型グリコシル化とは、糖類、Ｎ−アセチルガラクトサミン、ガラクトース、またはキシロースのうちの１つのヒドロキシアミノ酸、最も一般的にはセリンまたはトレオニンへの結合を指すが、５−ヒドロキシプロリンまたは５−ヒドロキシリジンも使用され得る。抗体からのグリコシル化部位の除去は、（Ｎ結合型グリコシル化部位について）上述のトリペプチド配列のうちの１つが除去されるようにアミノ酸配列を改変することによって好都合に達成される。この改変は、グリコシル化部位内のアスパラギン、セリン、またはトレオニン残基の別のアミノ酸残基（例えば、グリシン、アラニンまたは保存的置換）との置換によって行われ得る。
【０１６４】
さらなる実施形態では、本開示は、上述した抗ＰＤＬ１抗体のいずれかを、少なくとも１つの薬学的に受容可能な担体と組み合わせて含む組成物を提供する。
【０１６５】
さらなる実施形態では、本開示は、本明細書で提供されるような抗ＰＤＬ１、抗ＰＤ−１、または抗ＰＤＬ２抗体、またはそれらの抗原結合断片と、少なくとも１つの薬学的に許容される担体とからなる組成物を提供する。いくつかの実施形態では、個体に投与される抗ＰＤＬ１、抗ＰＤ−１、もしくは抗ＰＤＬ２抗体、またはその抗原結合断片は、１つ以上の薬学的に許容される担体を含む組成物である。本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知の薬学的に許容される担体のうちのいずれかが使用され得る。
ＩＶ．白金剤とトポイソメラーゼＩＩ阻害剤
白金剤
【０１６６】
白金剤（シスプラチン、カルボプラチン、オキサリプラチン、スターラプラチンなど）は、モノアダクト、鎖間クロスリンク、鎖内クロスリンク、またはＤＮＡタンパク質クロスリンクとしてＤＮＡの架橋を引き起こす、広く使用されている抗腫瘍剤である。白金剤は、典型的には、グアニンの隣接するＮ−７位に作用し、１，２位の鎖内クロスリンクを形成する。（Ｐｏｋｌａｒ  ｅｔ  ａｌ．（１９９６）．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．９３（１５）：７６０６−１１；Ｒｕｄｄ  ｅｔ  ａｌ．（１９９５）．Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．３５（４）：３２３−６）その結果、架橋は、癌細胞におけるＤＮＡ修復および／またはＤＮＡ合成を阻害する。
【０１６７】
カルボプラチンは、本明細書に記載の方法で使用される例示的な白金配位化合物である。カルボプラチンの化学名は白金、ジアミン［１，１−シクロブタンジカルボキシラト（２−）−Ｏ，Ｏ′］−（ＳＰ−４−２）であり、カルボプラチンは以下の構造式を有する。
2021528438.tif 000003
【０１６８】
カルボプラチンは、分子式Ｃ６Ｈ１２Ｎ２Ｏ４Ｐｔ、分子量３７１．２５の結晶性粉末である。約１４ｍｇ／ｍＬの割合で水に溶解し、１％溶液のｐＨは５〜７である。エタノール、アセトン、ジメチルアセトアミドには実質的に不溶である。カルボプラチンは主に鎖間ＤＮＡ架橋を産生するが、この効果は細胞周期の非特異的なものである。カルボプラチンは、以下のように市販されている：ＰＡＲＡＰＬＡＴＩＮ（登録商標），ＢＩＯＣＡＲＮ，ＢＬＡＳＴＯＣＡＲＢ，ＢＬＡＳＴＯＰＬＡＴＩＮ，ＣＡＲＢＯＫＥＭ，ＣＡＲＢＯＭＡＸ，ＣＡＲＢＯＰＡ，ＣＡＲＢＯＰＬＡＮ，ＣＡＲＢＯＴＥＥＮ，ＣＡＲＢＯＴＩＮＡＬ，ＣＹＴＯＣＡＲＢ，ＤＵＣＡＲＢ，ＫＡＲＰＬＡＴ，ＫＥＭＯＣＡＲＢ，ＮＡＰＲＯＰＬＡＴ，ＮＥＯＰＬＡＴＩＮ，ＮＩＳＣＡＲＢＯ，ＯＮＣＯＣＡＲＢＩＮ，ＴＥＶＡＣＡＲＢ，ＷＯＭＡＳＴＩＮ等。
トポイソメラーゼＩＩ阻害剤
【０１６９】
トポイソメラーゼＩＩの阻害剤（例えば、エトポシド（ＶＰ−１６）、テニポシド、ドキソルビシン、ダウノルビシン、マイトキサントロン、アムサクリン、エリプチン、オーリントリカルボン酸、およびＨＵ−３３１）もまた、酵素媒介ＤＮＡ切断の形成後に、トポイソメラーゼＩＩ：ＤＮＡ共有結合複合体（すなわち、「開裂複合体」）を安定化させる、広く使用されている抗腫瘍剤である。このような開裂複合体の蓄積は、細胞死の経路を誘導する。
【０１７０】
エトポシドは、本明細書に記載の方法で使用される例示的なトポイソメラーゼＩＩ阻害剤である。エトポシドは、通常、プロドラッグであるエトポシドリン酸塩として投与されるが、その化学名は以下の通りである：４’−デメチレピポフィロトキシン９−［４，６−Ｏ−（Ｒ）−エチリデン−β−グルコピラノシド］、４’（リン酸二水素）。
【０１７１】
エトポシドリン酸塩は、以下の構造を有している：
2021528438.tif 000004
【０１７２】
エトポシドのリン酸エステルであるエトポシドリン酸塩は、ポドフィロトキシンの半合成誘導体であり、脱リン酸化によりエトポシドに変換される。エトポシドは、ＤＮＡトポイソメラーゼＩＩとの相互作用やフリーラジカルの形成によりＤＮＡ鎖切断を誘導し、細胞周期停止（主に細胞周期のＧ２段階）や細胞死を引き起こす。エトポシドは以下のように市販されている：ＥＴＯＰＯＰＨＯＳ（登録商標），ＴＯＰＯＳＡＲ（商標）、ＶＰ−１６，ＶＥＰＥＳＩＤ（登録商標），ＡＣＴＩＴＯＰ，ＡＳＩＤＥ，ＢＩＯＰＯＳＩＤＥ，ＣＴＯＰ，ＣＹＴＯＰ，ＥＰＯＳＥＤ，ＥＳＩＤＥ，ＥＴＨＯＰＵＬ，ＥＴＯＬＯＮ，ＥＴＯＮＩＳ，ＥＴＯＰＬＡＳＴ，ＥＴＯＳＩＤ，ＥＴＯＶＥＬ，ＦＹＴＯＰ，ＦＹＴＯＳＩＤ，ＬＡＳＴＥＴ，ＮＺＹＴＯＰ，ＯＮＣＯＳＩＤＥ，ＰＬＡＣＩＤ，ＰＯＳＩＤ，ＲＥＴＯＰＳＯＮ，ＴＥＶＡＳＩＤＥ，ＴＯＰＯＫ，ＴＯＰＯＳＩＤＥ等。
Ｖ．抗体の調製
【０１７３】
本明細書に記載の抗体は、抗体を生成するための当該技術分野で利用可能な技法を使用して調製され、その例示的な方法は、以下の節により詳細に記載される。
【０１７４】
この抗体は、関心のある抗原（例えば、ヒトＰＤ−Ｌ１のようなＰＤ−Ｌ１）に対して向けられている。好ましくは、抗原は、生物学的に重要なポリペプチドであり、障害に罹患している哺乳動物への本抗体の投与により、その哺乳動物に治療的利点がもたらされ得る。
【０１７５】
ある特定の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、１μＭ以下、１５０ｎＭ以下、１００ｎＭ以下、５０ｎＭ以下、１０ｎＭ以下、１ｎＭ以下、０．１ｎＭ以下、０．０１ｎＭ以下、または０．００１ｎＭ以下（例えば、１０−８Ｍ以下、例えば、１０−８Ｍ〜１０−１３Ｍ、例えば、１０−９Ｍ〜１０−１３Ｍ）の解離定数（Ｋｄ）を有する。
【０１７６】
一実施形態では、Ｋｄは、以下のアッセイにより説明されるように、目的とする抗体のＦａｂバージョンおよびその抗原を用いて行われる放射標識抗原結合アッセイ（ＲＩＡ）によって測定される。抗原に対するＦａｂの溶液結合親和性は、標識されていない抗原の滴定系列の存在下で、最小濃度の（１２５Ｉ）標識抗原でＦａｂを平衡化し、結合した抗原を抗Ｆａｂ抗体でコーティングしたプレートで捕捉することによって測定される（例えば、Ｃｈｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２９３：８６５−８８１（１９９９））。アッセイのための条件を確立するために、ＭＩＣＲＯＴＩＴＥＲ（登録商標）マルチウェルプレート（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を、５０ｍＭの炭酸塩（ｐＨ９．６）中５μｇ／ｍｌの捕捉用抗Ｆａｂ抗体（Ｃａｐｐｅｌ  Ｌａｂｓ）で一晩コーティングし、続いて、室温（約２３℃）で２〜５時間、ＰＢＳ中２％（ｗ／ｖ）のウシ血清アルブミンによってブロッキングする。非吸着プレート（Ｎｕｎｃ＃２６９６２０）で、１００ｐＭまたは２６ｐＭ  ［１２５Ｉ］−抗原を目的のＦａｂの段階希釈液と混合する。その後、目的とするＦａｂを一晩インキュベートするが、インキュベーションをより長い期間（例えば、約６５時間）続けて、平衡に達することを確実にすることができる。その後、室温でのインキュベーション（例えば、１時間）のために混合物を捕捉プレートに移す。次に、溶液を除去し、プレートを、ＰＢＳ中０．１％のポリソルベート２０（ＴＷＥＥＮ−２０（登録商標））で８回洗浄する。プレートが乾燥したら、１５０μＬ／ウェルのシンチラント（ｓｃｉｎｔｉｌｌａｎｔ）（ＭＩＣＲＯＳＣＩＮＴ−２０（商標）；Ｐａｃｋａｒｄ）を付加し、プレートをＴＯＰＣＯＵＮＴ（商標）ガンマ計数器（Ｐａｃｋａｒｄ）上で１０分間、計数する。最大結合の２０％以下をもたらす各Ｆａｂの濃度を競合結合アッセイでの使用に選択する。
【０１７７】
別の実施形態によれば、Ｋｄは、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）−２０００またはＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）−３０００（ＢＩＡｃｏｒｅ，Ｉｎｃ．、Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ，ＮＪ）を使用した表面プラズモン共鳴アッセイを使用して、２５℃で、約１０応答単位（ＲＵ）で固定化された抗原ＣＭ５チップを用いて測定される。簡潔には、カルボキシメチル化デキストランバイオセンサーチップ（ＣＭ５、ＢＩＡＣＯＲＥ，Ｉｎｃ．）を、供給業者の指示に従って、Ｎ−エチル−Ｎ’−（３−ジメチルアミノプロピル）−カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ）およびＮ−ヒドロキシスクシンイミド（ＮＨＳ）で活性化する。抗原をｐＨ４．８の１０ｍＭの酢酸ナトリウムによって５μｇ／ｍｌ（約０．２μＭ）に希釈した後、５μｌ／分の流量で注射し、カップリングされたタンパク質のおよそ１０応答単位（ＲＵ）を達成する。抗原の注入後、１Ｍのエタノールアミンを注入して、未反応基を遮断する。動態測定のため、Ｆａｂの２倍段階希釈液（０．７８ｎＭ〜５００ｎＭ）を、およそ２５μＬ／分の流量にて２５℃で０．０５％のポリソルベート２０（ＴＷＥＥＮ−２０（商標））界面活性剤（ＰＢＳＴ）を有するＰＢＳ中に注射する。会合速度（ｋｏｎ）および解離速度（ｋｏｆｆ）を、会合センサグラムおよび解離センサグラムを同時に適合することによって、単純１対１Ｌａｎｇｍｕｉｒ結合モデル（ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）評価ソフトウェアバージョン３．２）を使用して計算する。平衡解離定数（Ｋｄ）は、ｋｏｆｆ／ｋｏｎ比として計算される。例えば、Ｃｈｅｎら、「Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．」、第２９３巻、第８６５〜８８１頁（１９９９年）を参照されたい。オン速度が、上記の表面プラスモン共鳴アッセイによって、１０６Ｍ−１ｓ−１を超える場合、オン速度は、撹拌されたキュベットを備えるストップトフロー装着分光光度計（Ａｖｉｖ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）または８０００シリーズＳＬＭ−ＡＭＩＮＣＯ（商標）分光光度計（ＴｈｅｒｍｏＳｐｅｃｔｒｏｎｉｃ）等の分光計において測定される、漸増濃度の抗原の存在下で、２５℃でのＰＢＳ（ｐＨ７．２）中の２０ｎＭ抗−抗原抗体（Ｆａｂ型）の蛍光発光強度（励起＝２９５ｎｍ、発光＝３４０ｎｍ、１６ｎｍ帯域通過）の増加または減少を測定する、蛍光消光技法を使用することによって、判定することができる。
（ｉ）抗原の調製
【０１７８】
他の分子に任意でコンジュゲートされる可溶性抗原またはその断片は、抗体を生成するための免疫原として使用され得る。受容体等の膜貫通分子の場合、これらの断片（例えば、受容体の細胞外ドメイン）が免疫原として使用され得る。代替的に、膜貫通分子を発現する細胞が免疫原として使用され得る。かかる細胞は、天然源（例えば、癌細胞株）由来であり得るか、または膜貫通分子を発現するように組換え技法によって形質転換された細胞であり得る。抗体の調製に有用な他の抗原およびその形態は、当業者には明らかであろう。
（ｉｉ）特定の抗体ベースの方法
【０１７９】
ポリクローナル抗体は、好ましくは、関連する抗原およびアジュバントの複数回の皮下（ｓｃ）または腹腔内（ｉｐ）注射によって動物において産生される。関連する抗原を、免疫化される種において免疫原性を有するタンパク質、例えば  キーホールリンペットヘモシアニン、血清アルブミン、ウシサイログロブリン、または大豆トリプシン阻害剤などの二官能性または誘導体化剤、例えば、マレイミドベンゾイルスルホスクシンイミドエステル（システイン残基を介した共役化）、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（リジン残基を介した共役化）、グルタルアルデヒド、コハク酸無水物、ＳＯＣｌ２、またはＲ１Ｎ＝Ｃ＝ＮＲ、ここでＲおよびＲ１は異なるアルキル基である。
【０１８０】
動物は、タンパク質またはコンジュゲート（ウサギまたはマウスの場合、それぞれ１００μｇまたは５μｇ）を、例えばフロイントの完全アジュバント３容量と組み合わせて、抗原、免疫原性コンジュゲートまたは誘導体に対して免疫化され、溶液を複数の部位で皮内注射することにより、免疫化される。１ヶ月後、動物を、複数の部位での皮下注入により、完全フロイントアジュバント中の最初の量の１／５〜１／１０のペプチドまたはコンジュゲートで追加免疫する。７〜１４日後、動物を採血し、血清を抗体力価についてアッセイする。力価が水平状態になるまで動物を追加免疫する。好ましくは、動物を、同じ抗原のコンジュゲートであるが、異なるタンパク質にコンジュゲートしたものおよび／または異なる架橋試薬によりコンジュゲートしたもので追加免疫する。コンジュゲートを、タンパク質融合物として組換え細胞培養で作製することもできる。ミョウバン等の凝集剤も免疫応答を増強するために好適に使用される。
【０１８１】
本開示のモノクローナル抗体は、Ｋｏｈｌｅｒら、Ｎａｔｕｒｅ、２５６：４９５（１９７５）に最初に記載されたハイブリドーマ法を用いて作製することができ、さらに、例えば、Ｈｏｎｇｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ，１４（３）：２５３−２６０（１９９５），Ｈａｒｌｏｗ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，（Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，２ｎｄ  ｅｄ．１９８８）；Ｈａｍｍｅｒｌｉｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，ｉｎ：Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ａｎｄ  Ｔ−Ｃｅｌｌ  Ｈｙｂｒｉｄｏｍａｓ  ５６３−６８１（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，Ｎ．Ｙ．，１９８１）、およびＮｉ，Ｘｉａｎｄａｉ  Ｍｉａｎｙｉｘｕｅ，２６（４）：２６５−２６８（２００６）ｒｅｇａｒｄｉｎｇ  ｈｕｍａｎ−ｈｕｍａｎ  ｈｙｂｒｉｄｏｍａｓ。追加の方法には、例えば、ハイブリドーマ細胞株からのモノクローナルヒト天然ＩｇＭ抗体の産生に関する米国特許第７，１８９，８２６号に記載されている方法が含まれる。ヒトハイブリドーマ技術（トリオーマ技術）はまた、Ｖｏｌｌｍｅｒｓ  ａｎｄ  Ｂｒａｎｄｌｅｉｎ，Ｈｉｓｔｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｈｉｓｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｙ，２０（３）：９２７−９３７（２００５）およびＶｏｌｌｍｅｒｓ  ａｎｄ  Ｂｒａｎｄｌｅｉｎ，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ａｎｄ  Ｆｉｎｄｉｎｇｓ  ｉｎ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  ａｎｄ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，２７（３）：１８５−９１（２００５）にも記載されている。
【０１８２】
他の様々なハイブリドーマ技術については、例えば、ＵＳ  ２００６／２５８８４１；ＵＳ  ２００６／１８３８８７（完全ヒト抗体）、ＵＳ  ２００６／０５９５７５；ＵＳ  ２００５／２８７１４９；ＵＳ  ２００５／１００５４６；ＵＳ  ２００５／０２６２２９；および米国特許第７，０７８，４９２号および第７，１５３，５０７号。ハイブリドーマ法を使用してモノクローナル抗体を産生するための例示的なプロトコルが以下に記載される。一実施形態では、マウスまたは他の適切な宿主動物、例えば、ハムスターは、免疫化に使用されるタンパク質に特異的に結合することになる抗体を産生するか、またはそれを産生することができるリンパ球を誘発するように免疫化される。抗体は、本開示のポリペプチドまたはそのフラグメント、およびモノホスホリルリピドＡ（ＭＰＬ）／トレハロースジクリノミコレート（ＴＤＭ）などのアジュバントの複数回の皮下（ｓｃ）または腹腔内（ｉｐ）注射によって動物で産生される（Ｒｉｂｉ  Ｉｍｍｕｎｏｃｈｅｍ．Ｒｅｓｅａｒｃｈ、Ｉｎｃ．、ハミルトン、モンタナ州）。本開示のポリペプチド（例えば、抗原）またはそのフラグメントは、組換え法などの当技術分野で周知の方法を使用して調製することができ、そのいくつかは本明細書でさらに説明される。免疫された動物からの血清は、抗抗原抗体のためにアッセイされ、ブースター免疫は、任意に投与される。抗抗原抗体を産生する動物由来のリンパ球が単離される。代替として、リンパ球がインビトロで免疫化され得る。
【０１８３】
その後、リンパ球は、ポリエチレングリコール等の好適な融合剤を使用して骨髄腫細胞と融合して、ハイブリドーマ細胞を形成する。Ｇｏｄｉｎｇ，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ，ｐｐ．５９−１０３（Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，１９８６）を参照されたい。効率的に融合し、選択された抗体産生細胞による安定した高レベルの抗体産生を支援し、ＨＡＴ培地等の培地に感受性を示す骨髄腫細胞が使用され得る。示的な骨髄腫細胞には、米国カリフォルニア州サンディエゴのソーク研究所細胞分布センターから入手可能なＭＯＰＣ−２１およびＭＰＣ−１１マウス腫瘍に由来するものなどのマウス骨髄腫株、およびＳＰ−２または  Ｘ６３−Ａｇ８−６５３細胞は、米国カリフォルニア州ロックビルのＡｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎから入手できる。ヒト骨髄腫およびマウス−ヒトヘテロ骨髄腫細胞株は、ヒトモノクローナル抗体の産生についても説明されている（Ｋｏｚｂｏｒ，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１３３：３００１（１９８４）、Ｂｒｏｄｅｕｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，ｐｐ．５１−６３（Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（１９８７））。
【０１８４】
そのように調製されたハイブリドーマ細胞は、播種され、好適な培養培地、例えば、融合していない親骨髄腫細胞の成長または生存を阻害する１つ以上の物質を含有する培地で成長する。例えば、親骨髄腫細胞が酵素ヒポキサンチングアニンホスホリボシルトランスフェラーゼ（ＨＧＰＲＴまたはＨＰＲＴ）を欠く場合、ハイブリドーマ用の培養培地は、典型的には、ヒポキサンチン、アミノプテリン、およびチミジン（ＨＡＴ培地）を含むことになり、これらの物質は、ＨＧＰＲＴ欠損細胞の成長を阻止する。好ましくは、例えば、Ｅｖｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｒｅｎｄｓ  ｉｎ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２４（３），１０５−１０８（２００６）に記載されるウシ胎仔血清などの動物由来の血清の使用を低減するために、無血清ハイブリドーマ細胞培養法が使用される。
【０１８５】
ハイブリドーマ細胞培養の生産性を改善するためのツールとしてのオリゴペプチドについては、Ｆｒａｎｅｋ，Ｔｒｅｎｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，１１１−１２２（２００５）に記載されている。具体的には、標準の培養培地がある特定のアミノ酸（アラニン、セリン、アスパラギン、プロリン）、またはタンパク質加水分解画分で富化され、アポトーシスが３〜６つのアミノ酸残基から構成される合成オリゴペプチドによって著しく抑制され得る。これらのペプチドは、ミリモル濃度またはそれより高い濃度で存在する。
【０１８６】
ハイブリドーマ細胞が増殖している培養液は、本開示の抗体に結合するモノクローナル抗体の産生のためにアッセイされてもよい。ハイブリドーマ細胞によって産生されるモノクローナル抗体の結合特異性は、免疫沈降またはインビトロ結合アッセイ、例えば、ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）または酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）によって決定され得る。モノクローナル抗体の結合親和性は、例えば、スキャッチャード分析によって決定され得る。例えば、Ｍｕｎｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１０７：２２０（１９８０）を参照されたい。
【０１８７】
所望の特異性、親和性、および／または活性を有する抗体を産生するハイブリドーマ細胞が特定された後、クローンは、限界希釈手順によってサブクローニングされ得、標準の方法によって成長し得る。例えば、上記のＧｏｄｉｎｇを参照されたい。この目的に好適な培養培地としては、例えば、Ｄ−ＭＥＭ培地またはＲＰＭＩ−１６４０培地が挙げられる。加えて、ハイブリドーマ細胞は、動物における腹水腫瘍としてインビボで成長し得る。サブクローンによって分泌されるモノクローナル抗体は、従来の免疫グロブリン精製手順、例えば、タンパク質Ａ−セファロース、ヒドロキシアパタイトクロマトグラフィー、ゲル電気泳動、透析、または親和性クロマトグラフィー等によって、培養培地、腹水、または血清から好適に分離される。ハイブリドーマ細胞からタンパク質を単離するための１つの手順は、ＵＳ  ２００５／１７６１２２号および米国特許第６，９１９，４３６号に記載されている。この方法は、結合プロセスで離液性塩等の最小限の塩を使用することを含み、好ましくは、溶出プロセスで少量の有機溶媒を使用することも含む。
（ｉｉｉ）ライブラリ由来の抗体
【０１８８】
本開示の抗体は、コンビナトリアルライブラリを所望の活性（複数可）を有する抗  体についてスクリーニングすることによって単離され得る。例えば、実施例３に記載の方法等のファージディスプレイライブラリを生成し、かつ所望の結合特性を有する抗体についてかかるライブラリをスクリーニングするための様々な方法が当該技術分野で既知である。そのような方法は例えば、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍら、「Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ」、第１７８巻：第１〜３７頁（Ｏ’Ｂｒｉｅｎら編、Ｈｕｍａｎ  Ｐｒｅｓｓ、ニュージャージー州トトワ、２００１年）で確認され、例えば、ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙら、「Ｎａｔｕｒｅ」、第３４８巻：第５５２〜５５４頁；Ｃｌａｃｋｓｏｎら、「Ｎａｔｕｒｅ」、第３５２巻：第６２４〜６２８頁（１９９１年）；Ｍａｒｋｓら、「Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．」、第２２２巻：第５８１〜５９７頁（１９９２年）；Ｍａｒｋｓ  ａｎｄ  Ｂｒａｄｂｕｒｙ、「Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ」、第２４８巻：第１６１〜１７５頁（Ｌｏ編、Ｈｕｍａｎ  Ｐｒｅｓｓ、ニュージャージー州トトワ、２００３年）；Ｓｉｄｈｕら、「Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．」、第３３８巻、第２号：第２９９〜３１０頁（２００４年）；Ｌｅｅら、「Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．」、第３４０巻、第５号：第１０７３〜１０９３頁（２００４年）；Ｆｅｌｌｏｕｓｅ、「Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ」、第１０１巻、第３４号：第１２４６７〜１２４７２頁（２００４年）；およびＬｅｅら、「Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ」、第２８４巻、第１〜２号：第１１９〜１３２頁（２００４年）で更に説明されている。
【０１８９】
ある種のファージディスプレイ法では、ＶＨおよびＶＬ遺伝子のレパートリはポリメラーゼ連鎖反応（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ  ｃｈａｉｎ  ｒｅａｃｔｉｏｎ：ＰＣＲ）により別々にクローニングされ、ファージライブラリ内で無作為に再結合され、次いでＷｉｎｔｅｒら、「Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．」、第１２巻：第４３３〜４５５頁（１９９４年）に記載されているような、抗原結合ファージに対してスクリーニングすることが可能である。ファージは、典型的には、一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）フラグメントとして、またはＦａｂフラグメントとしてのいずれかで、抗体フラグメントを呈する。免疫化源からのライブラリは、ハイブリドーマを構築する必要なく、免疫原に対する高親和性抗体を与える。あるいは、ナイーブレパートリーは、Ｇｒｉｆｆｉｔｈｓら、「ＥＭＢＯ  Ｊ」、第１２巻：第７２５〜７３４頁（１９９３年）によって記載されるように、（例えば、ヒトから）クローニングされて、いかなる免疫化も伴うことなく、広範囲の非自己抗原および自己抗原に対する単一抗体源を提供することができる。最後に、天然ライブラリはまた、ＨｏｏｇｅｎｂｏｏｍおよびＷｉｎｔｅｒ、「Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．」、第２２７巻、第３８１〜３８８頁（１９９２年）に記載されるように、幹細胞からの再配列されていないＶ遺伝子セグメントをクローニングし、ランダム配列を含有するＰＣＲプライマーを使用して高度可変ＣＤＲ３領域をコードし、インビトロで再配列を遂行することによって、合成的に作製することができる。ヒト抗体ファージライブラリを説明する特許公表物としては、例えば、以下のものが挙げられる：米国特許第５，７５０，３７３号、ならびに米国特許出願公開第２００５／００７９５７４号、同第２００５／０１１９４５５号、同第２００５／０２６６０００号、同第２００７／０１１７１２６号、同第２００７／０１６０５９８号、同第２００７／０２３７７６４号、同第２００７／０２９２９３６号、および同第２００９／０００２３６０号が挙げられる。
【０１９０】
ヒト抗体ライブラリから単離された抗体または抗体断片は、本明細書においてヒト抗体またはヒト抗体断片と見なされる。
（ｉｖ）キメラ抗体、ヒト化抗体、ヒト抗体
【０１９１】
特定の実施形態において、本明細書に提供される抗体は、キメラ抗体である。ある種のキメラ抗体は、例えば、米国特許第４，８１６，５６７号；およびＭｏｒｒｉｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８１：６８５１−６８５５（１９８４）に開示されている。一例において、キメラ抗体は、非ヒト可変領域（例えばマウス、ラット、ハムスター、ウサギ、またはサル等の非ヒト霊長類に由来の可変領域）、およびヒト定常領域を含む。更なる例において、キメラ抗体は、クラスまたはサブクラスが親抗体のそれらから変更している「クラススイッチ」抗体である。キメラ抗体には、その抗原結合断片が含まれる。
【０１９２】
特定の実施形態では、キメラ抗体はヒト化抗体である。一般的に、非ヒト抗体をヒト化すると、ヒトに対する免疫原性は低下するが、親非ヒト抗体の特異性および親和性は維持される。通常、ヒト化抗体は、ＨＶＲ、例えばＣＤＲ（またはその一部）が非ヒト抗体に由来する１つ以上の可変ドメインを含み、ＦＲ（またはその一部）はヒト抗体配列に由来する。ヒト化抗体は所望により、ヒト定常領域の少なくとも一部もまた含む。いくつかの実施形態では、ヒト化抗体中のいくつかのＦＲ残基は、例えば、抗体特異性または親和性を復元または改善するために、非ヒト抗体（例えば、ＨＶＲ残基が由来する抗体）由来の対応する残基で置換される。
【０１９３】
ヒト化抗体およびこれを製造する方法は、例えば、Ａｌｍａｇｒｏ  ａｎｄ  Ｆｒａｎｓｓｏｎ，Ｆｒｏｎｔ．Ｂｉｏｓｃｉ．１３：１６１９−１６３３（２００８）に記載され、さらに、例えば、Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３３２：３２３−３２９（１９８８）；Ｑｕｅｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ  Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８６：１００２９−１００３３（１９８９）；米国特許第５，８２１，３３７号、第７，５２７，７９１号、第６，９８２，３２１号および第７，０８７，４０９号；Ｋａｓｈｍｉｒｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ３６：２５−３４（２００５）（特異性決定領域（ＳＤＲ）のグラフト接合を記載する）；Ｐａｄｌａｎ，Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２８：４８９−４９８（１９９１）（「リサーフェシング」を記載する）；Ｄａｌｌ’Ａｃｑｕａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ３６：４３−６０（２００５）（「ＦＲシャッフリング」を記載する）；およびＯｓｂｏｕｒｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ３６：６１−６８（２００５）およびＫｌｉｍｋａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ，８３：２５２−２６０（２０００）（ＦＲシャッフリングに対する「ガイド付き選択」手法を記載する）に記載される。
【０１９４】
ヒト化に使用され得るヒトフレームワーク領域としては、以下が含む：「ベストフィット」法を使用して選択されたフレームワーク領域（例えば、Ｓｉｍｓ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５１：２２９６（１９９３）を参照されたい）；軽鎖または重鎖可変領域の特定のサブグループのヒト抗体のコンセンサス配列に由来するフレームワーク領域（例えば、Ｃａｒｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８９：４２８５（１９９２）およびＰｒｅｓｔａ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１５１：２６２３（１９９３）を参照されたい）；ヒト成熟（体細胞変異）フレームワーク領域またはヒト生殖細胞系フレームワーク領域（例えば、Ａｌｍａｇｒｏ  ａｎｄ  Ｆｒａｎｓｓｏｎ，Ｆｒｏｎｔ．Ｂｉｏｓｃｉ．１３：１６１９−１６３３（２００８）を参照されたい）；および（例えば、Ｂａｃａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２：１０６７８−１０６８４（１９９７）およびＲｏｓｏｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７１：２２６１１−２２６１８（１９９６）を参照されたい）。
【０１９５】
特定の実施形態において、本明細書に提供される抗体は、ヒト抗体である。ヒト抗体は、当該技術分野において既知である様々な技術を使用して産生することができる。ヒト抗体は通常、ｖａｎ  Ｄｉｊｋおよびｖａｎ  ｄｅ  Ｗｉｎｋｅｌ、「Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．」、第５巻：第３６８〜７４頁（２００１年）およびＬｏｎｂｅｒｇ、「Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．」、第２０巻：第４５０〜４５９頁（２００８年）に記載されている。
【０１９６】
ヒト抗体は、抗原負荷に応答して、インタクトなヒト抗体またはヒト可変領域を有するインタクトな抗体を産生するように修飾されたトランスジェニック動物に免疫原を投与することによって調製され得る。そのような動物は通常、内在性イムノグロブリン遺伝子座を置き換える、または染色体外に存在する、もしくは動物の染色体中に無作為に導入したヒトイムノグロブリン遺伝子座の全部または一部を含有する。そのようなトランスジェニックマウスでは、内在性免疫グロブリン遺伝子座は通常不活性である。トランスジェニック動物からヒト抗体を得るための方法の概説については、Ｌｏｎｂｅｒｇ，Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．２３：１１１７−１１２５（２００５）を参照のこと。また、例えば、ＸＥＮＯＭＯＵＳＥ（商標）技術を記載する米国特許第６，０７５，１８１号および第６，１５０，５８４号、ＨｕＭａｂ（登録商標）技術を記載する米国特許第５，７７０，４２９号、Ｋ−Ｍ  ＭＯＵＳＥ（登録商標）技術を記載する米国特許第７，０４１，８７０号、ＶｅｌｏｃｉＭｏｕｓｅ（登録商標）技術）を記載する米国特許出願公開第ＵＳ  ２００７／００６１９００号も参照。かかる動物によって生成されたインタクトな抗体由来のヒト可変領域は、例えば、異なるヒト定常領域と組み合わせることによってさらに修飾され得る。
【０１９７】
ヒト抗体はまた、ハイブリドーマに基づく方法によっても作製され得る。ヒトモノクローナル抗体の産生のためのヒト骨髄腫およびマウス−ヒトヘテロ骨髄腫細胞株が説明されている。（例えば、Ｋｏｚｂｏｒ、「Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．」、第１３３巻、第３００１頁（１９８４年）；Ｂｒｏｄｅｕｒら、「Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ」、第５１〜６３頁（Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．、ニューヨーク、１９８７年）；およびＢｏｅｒｎｅｒら、「Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．」、第１４７巻、第８６頁（１９９１年）を参照されたい。）ヒトＢ細胞ハイブリドーマ技術を介して生成されるヒト抗体はまた、Ｌｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１０３：３５５７−３５６２，２００６にも記載されている。更なる方法としては、例えば、米国特許第７，１８９，８２６号（ハイブリドーマ細胞株からのモノクローナルヒトＩｇＭ抗体の産生について記載）およびＮｉ，Ｘｉａｎｄａｉ  Ｍｉａｎｙｉｘｕｅ，２６（４）：２６５−２６８（２００６）（ヒト−ヒトハイブリドーマについて記載）に記載されるものが挙げられる。ヒトハイブリドーマ技術（トリオーマ技術）はまた、Ｖｏｌｌｍｅｒｓ  ａｎｄ  Ｂｒａｎｄｌｅｉｎ，Ｈｉｓｔｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｈｉｓｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｙ，２０（３）：９２７−９３７（２００５）およびＶｏｌｌｍｅｒｓ  ａｎｄ  Ｂｒａｎｄｌｅｉｎ，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ａｎｄ  Ｆｉｎｄｉｎｇｓ  ｉｎ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  ａｎｄ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，２７（３）：１８５−９１（２００５）にも記載されている。
【０１９８】
ヒト抗体は、ヒト由来のファージディスプレイライブラリから選択されるＦｖクローン可変ドメイン配列を単離することによって生成することもできる。その後、かかる可変ドメイン配列は、所望のヒト定常ドメインと組み合わせられ得る。抗体ライブラリからヒト抗体を選択するための技法が以下に記載されている。
（ｖ）抗体断片
【０１９９】
抗体断片は、酵素消化等の伝統的な手段または組換え技法によって生成され得る。ある特定の状況下では、全抗体ではなく抗体断片を使用する利点がある。より小さいサイズの断片により、迅速なクリアランスが可能になり、固形腫瘍へのアクセスの改善がもたらされ得る。特定の抗体断片に関する概説については、Ｈｕｄｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．（Ｎａｔ．Ｍｅｄ．９：１２９−１３４，２００３）を参照されたい。
【０２００】
抗体断片を産生するために様々な技法が開発されている。従来、これらの断片は、無傷抗体のタンパク質分解消化により得られていた（例えば、Ｍｏｒｉｍｏｔｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ２４：１０７−１１７（１９９２）、およびＢｒｅｎｎａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２２９：８１（１９８５）を参照されたい）。しかしながら、これらの断片は、現在、組換え宿主細胞から直接産生することができる。Ｆａｂ、Ｆｖ、およびＳｃＦｖ抗体断片は全て、Ｅ．ｃｏｌｉで発現され、Ｅ．ｃｏｌｉから分泌され得るため、これらの断片の容易な大量産生が可能になる。抗体フラグメントは、上記の抗体ファージライブラリから単離することができる。代替えとして、Ｆａｂ’−ＳＨ断片は、Ｅ．ｃｏｌｉから直接回収され、化学的にカップリングして、Ｆ（ａｂ’）２断片を形成し得る（Ｃａｒｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １０：１６３−１６７（１９９２））。別のアプローチに従って、Ｆ（ａｂ’）２断片は、組換え宿主細胞培養から直接単離することができる。サルベージ受容体結合エピトープ残基を含むインビボ半減期が増加したＦａｂおよびＦ（ａｂ’）２フラグメントについては、米国特許第５，８６９，０４６号に記載されている。抗体断片を産生するための他の技法は、当業者に明らかである。ある特定の実施形態では、抗体は、一本鎖Ｆｖ断片（ｓｃＦｖ）である。ＷＯ  ９３／１６１８５；米国特許第５，５７１，８９４号；および同第５，５８７，４５８を参照されたい。ＦｖおよびｓｃＦｖは、定常領域を欠くインタクトな結合部位を有する唯一の種であり、それ故に、それらは、インビボでの使用中の非特異的結合の低減に好適であり得る。ｓｃＦｖ融合タンパク質を構築して、ｓｃＦｖのアミノ末端またはカルボキシ末端のいずれかでのエフェクタータンパク質の融合をもたらすことができる。Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ、ｅｄ．Ｂｏｒｒｅｂａｅｃｋ、前出を参照。抗体フラグメントはまた、例えば、米国特許第５，６４１，８７０号に記載されているように、「直鎖状抗体」であり得る。かかる直鎖状抗体は、単一特異性または二重特異性であり得る。
（ｖｉ）多重特異性抗体
【０２０１】
多重特異性抗体は、少なくとも２つの異なるエピトープに対する結合特異性を有し、これらのエピトープは、通常、異なる抗原由来である。かかる分子が通常２つの異なるエピトープ（すなわち、二重特異性抗体、ＢｓＡｂ）のみに結合する一方で、三重特異性抗体等のさらなる特異性を有する抗体は、本明細書で使用される場合、この表現に包含される。二重特異性抗体は、完全長抗体または抗体断片（例えば、Ｆ（ａｂ’）２二重特異性抗体）として調製され得る。
【０２０２】
二重特異性抗体の作製方法が、当該技術分野で既知である。完全長二重特異性抗体の伝統的な産生は、２つの免疫グロブリン重鎖−軽鎖対の共発現に基づき、これらの２つの鎖は、異なる特異性を有する（Ｍｉｌｌｓｔｅｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３０５：５３７−５３９（１９８３））。免疫グロブリン重鎖および軽鎖のランダムな分類のため、これらのハイブリドーマ（クアドローマ）は、１０個の異なる抗体分子を有する混合物を産生する可能性があり、これらのうちの１つのみが正しい二重特異性構造を有する。通常親和性クロマトグラフィーステップによって行われるこの正しい分子の精製は、幾分厄介であり、生成物収率は低い。同様の手順が、ＷＯ９３／０８８２９、およびＴｒａｕｎｅｃｋｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，ＥＭＢＯ  Ｊ．，１０：３６５５−３６５９（１９９１）に記載されている。
【０２０３】
二重特異性抗体を作製するための当技術分野で知られている１つのアプローチは、「ノブからホールへ」または「隆起からキャビティへ」アプローチである（例えば、米国特許第５，７３１，１６８号を参照されたい）このアプローチにおいて、２つの免疫グロブリンポリペプチド（例えば、重鎖ポリペプチド）が各々界面を含む。一方の免疫グロブリンポリペプチドの界面が他方の免疫グロブリンポリペプチドの対応する界面と相互作用し、それにより、２つの免疫グロブリンポリペプチドの会合を可能にする。これらの界面は、一方の免疫グロブリンポリペプチドの界面に位置する「ノブ」または「プロチェバランス」（これらの用語は、本明細書で同義に使用され得る）は、他方の免疫グロブリンポリペプチドの界面に位置する「ホール」または「キャビティ」（これらの用語は、本明細書で同義に使用され得る）に対応するように操作することができる。いくつかの実施形態では、ホールは、ノブと同一または同様の大きさのものであり、２つの界面が相互作用するときに、一方の界面のノブが他方の界面の対応するホール内に位置付け可能であるように好適に位置付けられる。理論に拘束されることを望むことなく、これは、ヘテロ多量体を安定させ、かつ他の種、例えば、ホモ多量体よりもヘテロ多量体の形成を好むと考えられる。いくつかの実施形態では、このアプローチを使用して、２つの異なる免疫グロブリンポリペプチドのヘテロ多量体化を促進し、異なるエピトープに対する結合特異性を有する２つの免疫グロブリンポリペプチドを含む二重特異性抗体を作製することができる。
【０２０４】
いくつかの実施形態では、ノブは、小さいアミノ酸側鎖をより大きい側鎖で置き換えることによって構築され得る。いくつかの実施形態では、ホールは、大きいアミノ酸側鎖をより小さい側鎖で置き換えることによって構築され得る。ノブまたはホールは、元の界面に存在し得るか、または合成的に導入され得る。例えば、ノブまたはホールは、界面をコードする核酸配列を改変させて、少なくとも１つの「元の」アミノ酸残基を少なくとも１つの「移入」アミノ酸残基で置き換えることによって合成的に導入され得る。核酸配列を改変させるための方法としては、当該技術分野で周知の標準の分子生物学技法が挙げられ得る。様々なアミノ酸残基の側鎖体積を以下の表１に示す。いくつかの実施形態では、元の残基は、小さい側鎖体積（例えば、アラニン、アスパラギン、アスパラギン酸、グリシン、セリン、トレオニン、またはバリン）を有し、ノブを形成するための移入残基は、天然に存在するアミノ酸であり、アルギニン、フェニルアラニン、チロシン、およびトリプトファンを含み得る。いくつかの実施形態では、元の残基は、大きい側鎖体積（例えば、アルギニン、フェニルアラニン、チロシン、およびトリプトファン）を有し、ホールを形成するための移入残基は、天然に存在するアミノ酸であり、アラニン、セリン、トレオニン、およびバリンを含み得る。
2021528438.tif 000005
【０２０５】
いくつかの実施形態では、ノブまたはホールを形成するための元の残基は、ヘテロ多量体の三次元構造に基づいて特定される。当該技術分野で既知の三次元構造を得るための技法としては、Ｘ線結晶学およびＮＭＲが挙げられ得る。いくつかの実施形態では、界面は、免疫グロブリン定常ドメインのＣＨ３ドメインである。これらの実施形態では、ヒトＩｇＧ１のＣＨ３／ＣＨ３インターフェースは、４つの逆平行βストランド上に位置する各ドメイン上の１６個の残基を含む。理論に拘束されることを望むことなく、変異残基は、好ましくは、ノブがパートナーＣＨ３ドメイン内の補償ホールではなく周囲の溶媒によって収容され得る危険性を最小限に抑えるように、これらの２つの中央逆平行β鎖上に位置する。いくつかの実施形態では、２つの免疫グロブリンポリペプチドにおいて対応するノブおよびホールを形成する突然変異は、表２に提供される１つ以上の対に対応する。
2021528438.tif 000006
【０２０６】
いくつかの実施形態では、免疫グロブリンポリペプチドは、上の表２に列記される１つ以上のアミノ酸置換を含むＣＨ３ドメインを含む。いくつかの実施形態では、二重特異性抗体は、表２の左側の欄に列記される１つ以上のアミノ酸置換を含むＣＨ３ドメインを含む第１の免疫グロブリンポリペプチドと、表２の右側の欄に列記される１つ以上の対応するアミノ酸置換を含むＣＨ３ドメインを含む第２の免疫グロブリンポリペプチドとを含む。
【０２０７】
上述のようにＤＮＡを変異させた後、１つ以上の対応するノブまたはホール形成変異を有する修飾された免疫グロブリンポリペプチドをコードするポリヌクレオチドは、当該技術分野で既知の標準の組換え技法および細胞系を使用して発現および精製することができる。例えば、Ｕ．Ｓ．Ｐａｔ．Ｎｏｓ．５，７３１，１６８；５，８０７，７０６；５，８２１，３３３；７，６４２，２２８；７，６９５，９３６；８，２１６，８０５；Ｕ．Ｓ．Ｐｕｂ．Ｎｏ．２０１３／００８９５５３；およびＳｐｉｅｓｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ３１：７５３−７５８，２０１３を参照されたい。修飾された免疫グロブリンポリペプチドは、Ｅ．ｃｏｌｉ等の原核宿主細胞またはＣＨＯ細胞等の真核宿主細胞を使用して産生することができる。対応するノブおよびホールを持つ免疫グロブリンポリペプチドは、共培養下で、宿主細胞で発現され、ヘテロ多量体として一緒に精製され得るか、または単一培養下で発現され、別個に精製され、インビトロで構築され得る。いくつかの実施形態では、細菌宿主細胞の２つの株（一方はノブを有する免疫グロブリンポリペプチドを発現し、他方はホールを有する免疫グロブリンポリペプチドを発現する）は、当該技術分野で既知の標準の細菌培養技法を使用して共培養される。いくつかの実施形態では、２つの株は、例えば、培養下で等しい発現レベルを達成するように、特定の比率で混合され得る。いくつかの実施形態では、２つの株は、５０：５０、６０：４０、または７０：３０の比率で混合され得る。ポリペプチドが発現した後、これらの細胞が一緒に溶解され得、タンパク質が抽出され得る。ホモ多量体種対ヘテロ多量体種の存在量の測定を可能にする当該技術分野で既知の標準の技法としては、サイズ排除クロマトグラフィーが挙げられ得る。いくつかの実施形態では、各修飾された免疫グロブリンポリペプチドは、標準の組換え技法を使用して別個に発現され、それらはインビトロで一緒に構築され得る。構築は、例えば、各修飾された免疫グロブリンポリペプチドを精製し、それらを等しい質量で一緒に混合およびインキュベートし、ジスルフィドを還元し（例えば、ジチオスレイトールで処理することにより）、濃縮し、かつポリペプチドを再酸化することによって達成され得る。形成された二重特異性抗体は、カチオン交換クロマトグラフィー等の標準の技法を使用して精製することができ、サイズ排除クロマトグラフィー等の標準の技法を使用して測定することができる。これらの方法のより詳細な説明については、Ｓｐｅｉｓｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ  ３１：７５３−８，２０１３を参照されたい。いくつかの実施形態では、修飾された免疫グロブリンポリペプチドは、ＣＨＯ細胞で別個に発現し、上述の方法を使用してインビトロで構築することができる。
【０２０８】
異なる手法によると、所望の結合特異性を有する抗体可変ドメイン（抗体−抗原結合部位）が、免疫グロブリン定常ドメイン配列に融合される。この融合は、好ましくは、ヒンジ領域、ＣＨ２領域、およびＣＨ３領域の少なくとも一部を含む免疫グロブリン重鎖定常ドメインとの融合である。これらの融合のうちの少なくとも１つに存在する、軽鎖結合に必要な部位を含有する第１の重鎖定常領域（ＣＨ１）を有することが典型的である。免疫グロブリン重鎖融合物、所望の場合、免疫グロブリン軽鎖をコードするＤＮＡが別個の発現ベクターに挿入され、好適な宿主生物に共トランスフェクトされる。これにより、構築時に使用される不均等な比率の３つのポリペプチド鎖が最適収率を提供する実施形態において、３つのポリペプチド断片の相互割合を調整する際に優れた柔軟性が提供される。しかしながら、等しい比率での少なくとも２つのポリペプチド鎖の発現が高収率をもたらす場合に、またはそれらの比率が特に重要でない場合に、２つまたは３つ全てのポリペプチド鎖をコードする配列を１つの発現ベクターに挿入することが可能である。
【０２０９】
このアプローチの一実施形態では、二種特異的抗体は、一方のアームに第１の結合特異性を有するハイブリッド免疫グロブリン重鎖を有し、他方のアームにハイブリッド免疫グロブリン重鎖−軽鎖対（第２の結合特異性を提供する）を有するように構成されている。二重特異性分子の半分のみでの免疫グロブリン軽鎖の存在により容易な分離方法が提供されるため、この非対称構造が望ましくない免疫グロブリン鎖の組み合わせからの所望の二重特異性化合物の分離を促進することが見出された。このアプローチは、ＷＯ９４／０４６９０に開示されている。二重特異性抗体の生成のさらなる詳細については、例えば、Ｓｕｒｅｓｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，１２１：２１０（１９８６）を参照されたい。
【０２１０】
ＷＯ９６／２７０１１に記載の別のアプローチに従って、抗体分子の対間の界面は、組換え細胞培養から回収されるヘテロ二量体の割合を最大にするように操作され得る。１つのインターフェースは、抗体定常ドメインのＣＨ  ３ドメインの少なくとも一部を含む。この方法では、第１の抗体分子の界面由来の１つ以上の小さいアミノ酸側鎖は、より大きい側鎖（例えば、チロシンまたはトリプトファン）で置き換えられる。大きい側鎖（複数可）と同一または同様の大きさの補償「キャビティ」は、大きいアミノ酸側鎖をより小さいアミノ酸側鎖（例えば、アラニンまたはトレオニン）で置き換えることによって第２の抗体分子の界面上に作製される。これにより、ホモ二量体等の他の望ましくない最終生成物と比べてヘテロ二量体の収率を増加させるための機構が提供される。
【０２１１】
二重特異性抗体には、架橋抗体または「ヘテロコンジュゲート」抗体が含まれる。例えば、ヘテロコンジュゲート中の抗体の一方がアビジンにカップリングし、他方がビオチンにカップリングし得る。かかる抗体は、例えば、望ましくない細胞を免疫系細胞の標的とするために（米国特許第４，６７６，９８０号）、かつＨＩＶ感染を治療するために（ＷＯ９１／００３６０、ＷＯ９２／２００３７３、およびＥＰ０３０８９）提案されている。ヘテロコンジュゲート抗体は、任意の便利な架橋方法を使用して作製することができる。好適な架橋剤が当該技術分野で周知であり、いくつかの架橋技法とともに米国特許第４，６７６，９８０号に開示されている。
【０２１２】
抗体断片から二重特異性抗体を生成するための技法も本文献に記載されている。例えば、二重特異性抗体は、化学結合を使用して調製することができる。Ｂｒｅｎｎａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２２９：８１（１９８５）は、インタクトな抗体がタンパク質分解的に切断されてＦ（ａｂ’）２’断片を生成する  手技について記載している。これらの断片は、ジチオール錯化剤である亜ヒ酸ナトリウムの存在の存在下で還元されて、隣接するジチオールを安定させ、分子間ジスルフィド形成を阻止する。その後、生成されたＦａｂ’断片は、チオニトロベンゾエート（ＴＮＢ）誘導体に変換される。その後、Ｆａｂ’−ＴＮＢ誘導体の一方がメルカプトエチルアミンでの還元によってＦａｂ’−チオールに再変換され、等モル量の他方のＦａｂ’−ＴＮＢ誘導体と混合されて、二重特異性抗体を形成する。産生された二重特異性抗体は、酵素の選択的固定化のための薬剤として使用され得る。
【０２１３】
近年の進歩により、化学的にカップリングして二重特異性抗体を形成することができるＦａｂ’−ＳＨ断片のＥ．ｃｏｌｉからの直接回収が容易になった。Ｓｈａｌａｂｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．，１７５：２１７−２２５（１９９２）に、完全にヒト化された二重特異性抗体Ｆ（ａｂ’）２分子の産生を記載している。各Ｆａｂ’断片は、Ｅ．ｃｏｌｉから別個に分泌され、インビトロでの指向性化学カップリングに供されて、二重特異性抗体を形成する。
【０２１４】
二重特異性抗体断片を組換え細胞培養から直接作製および単離するための様々な技法も記載されている。例えば、ロイシンジッパーを使用して二重特異性抗体が産生された。Ｋｏｓｔｅｌｎｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１４８（５）：１５４７−１５５３（１９９２）。ＦｏｓおよびＪｕｎタンパク質由来のロイシンジッパーペプチドを遺伝子融合によって２つの異なる抗体のＦａｂ’部分に連結させた。抗体ホモ二量体をヒンジ領域で還元して単量体を形成し、その後、再酸化して抗体ヘテロ二量体を形成した。この方法は、抗体ホモ二量体の産生にも利用することができる。Ｈｏｌｌｉｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９０：６４４４−６４４８（１９９３）により記載される「ダイアボディ」技術は、二重特異性抗体断片を作製するための代替的機序を提供している。それらのフラグメントは、同じ鎖上の２つのドメイン間のペアリングを可能にするには短すぎるリンカーによって軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）に接続された重鎖可変ドメイン（ＶＨ）を含む。したがって、あるフラグメントのＶＨおよびＶＬドメインは、別のフラグメントの相補的なＶＬおよびＶＨドメインと強制的に対になり、それによって２つの抗原結合部位を形成する。一本鎖Ｆｖ（ｓＦｖ）二量体を使用することによって二重特異性抗体断片を作製するための別の戦略も報告されている。Ｇｒｕｂｅｒ  ｅｔ  ａｌ，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ，１５２：５３６８（１９９４）を参照されたい。
【０２１５】
２を超える結合価を有する抗体が企図される。例えば、三重特異性抗体が調製され得る。Ｔｕｆｔ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４７：６０（１９９１）．
（ｖｉｉ）単一ドメイン抗体
【０２１６】
いくつかの実施形態では、本開示の抗体は、単一ドメイン抗体である。単一ドメイン抗体は、抗体の重鎖可変ドメインの全てもしくは一部または軽鎖可変ドメインの全てもしくは一部を含む単一のポリペプチド鎖である。特定の実施形態では、単一ドメイン抗体は、ヒト単一ドメイン抗体である（ドマンティス社、マサチューセッツ州ウォルサム；例えば、米国特許第６，２４８，５１６  Ｂ１号を参照のこと）。一実施形態では、単一ドメイン抗体は、抗体の重鎖可変ドメインの全てまたは一部からなる。
（ｖｉｉｉ）抗体バリアント
【０２１７】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗体のアミノ酸配列修飾（複数可）が企図される。例えば、抗体の結合親和性および／または他の生物学的特性を改善することが望ましくあり得る。本抗体のアミノ酸配列変異形は、本抗体をコードするヌクレオチド配列に適切な変化を導入することによって、またはペプチド合成によって調製することができる。そのような修飾は、例えば、抗体のアミノ酸配列内の残基の欠失、および／または挿入、および／または置換を含む。欠失、挿入、および置換の任意の組み合わせにより、最終構築物に到達することができるが、但し、最終構築物が所望の特性を有することを条件とする。主題の抗体のアミノ酸配列が作製されるときにアミノ酸改変がその配列に導入されてもよい。
（ｉｘ）置換、挿入、および欠失バリアント
【０２１８】
ある特定の実施形態では、１つ以上のアミノ酸置換を有する抗体変異形が提供される。置換による変異誘発に関して目的とする部位には、ＨＶＲおよびＦＲが含まれる。保守的な置換は表３に示すとおりである。より実質的な変化は、表３において、「例示的な置換」の見出しの下に提供され、またアミノ酸側鎖クラスを参照して以下に更に記載されるとおりである。目的とする抗体中にアミノ酸置換を導入し、その産物を、所望の活性、例えば、保持／改善された抗原結合、減少した免疫原性、または改善されたＡＤＣＣもしくはＣＤＣについてスクリーニングすることができる。
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【０２１９】
アミノ酸は、共通の側鎖特性に従ってグループ分けされてもよい。
ａ．疎水性：ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ；
ｂ．中性親水性：Ｃｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ；
ｃ．酸性：Ａｓｐ、Ｇｌｕ；
ｄ．塩基性：Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ；
ｅ．鎖の配向に影響を与える残基：Ｇｌｙ、Ｐｒｏ、
ｆ．芳香族：Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ。
【０２２０】
非保存的置換は、これらのクラスのうちの１つのメンバーを別のクラスと交換することを伴うことになる。
【０２２１】
ある種類の置換型バリアントは、親抗体（例えば、ヒト化抗体またはヒト抗体）の１つ以上の超可変領域残基を置換することを伴う。一般に、さらなる研究のために選択される、得られたバリアント（複数可）は、親抗体と比較して、ある特定の生物学的特性における修飾（例えば、改善）（例えば、親和性の増加、免疫原性の低減）を有し、および／または実質的に保持された親抗体のある特定の生物学的特性を有することになる。例示的な置換バリアントは、例えば、本明細書に記載されるものなどのファージディスプレイに基づく親和性成熟技法を使用して好都合に生成することができる、親和性成熟抗体である。要するに、１つ以上のＨＶＲ残基が変異され、バリアント抗体がファージにディスプレイされ、特定の生物活性（例えば、結合親和性）についてスクリーニングされる。
【０２２２】
変更（例えば、置換）は、抗体親和性を改善するために、例えば、ＨＶＲにおいて行われてもよい。そのような改変は、ＨＶＲの「ホットスポット」、すなわち、体細胞成熟プロセスの間に高頻度で変異が起こるコドンによってコードされる残基（例えば、Ｃｈｏｗｄｈｕｒｙ，Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２０７：１７９−１９６（２００８）を参照されたい）、および／またはＳＤＲ（ａ−ＣＤＲ）において行われてもよく、得られた変異体ＶＨまたはＶＬが、結合親和性について試験される。二次ライブラリを構築し、それから再選択することによる親和性成熟が、例えば、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ  ｅｔ  ａｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  １７８：１−３７に記載されている（Ｏ’Ｂｒｉｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，ｅｄ．，Ｈｕｍａｎ  Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ，（２００１）。）親和性成熟のいくつかの実施形態では、多様な方法（例えば、エラープローンＰＣＲ、鎖シャッフリング、またはオリゴヌクレオチド指向性変異誘発）のいずれかによって、成熟のために選択される可変遺伝子に多様性が導入される。次いで、二次ライブラリが創出される。次いで、このライブラリは、所望の親和性を有する任意の抗体変異体を特定するためにスクリーニングされる。多様性を導入するための別の方法は、いくつかのＨＶＲ残基（例えば、一度に４〜６個の残基）をランダム化する、ＨＶＲ指向性アプローチを含む。抗原結合に関与するＨＶＲ残基は、例えば、アラニンスキャニング突然変異誘発またはモデリングを使用して、具体的に特定されてもよい。特に、ＣＤＲ−Ｈ３およびＣＤＲ−Ｌ３が、しばしば標的化される。
【０２２３】
ある特定の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、そのような改変が抗原に結合する抗体の能力を実質的に低減させない限り、１つまたは複数のＨＶＲ中で生じてもよい。例えば、結合親和性を実質的に低減させない保存的改変（例えば、本明細書に提供されるような保存的置換）が、ＨＶＲ中で行われてもよい。かかる改変は、ＨＶＲ「ホットスポット」またはＳＤＲ外であり得る。上に提供されるバリアントＶＨおよびＶＬ配列のある特定の実施形態では、各ＨＶＲは、改変されていないか、または１つ、２つ、もしくは３つ以下のアミノ酸置換を含有するかのいずれかである。
【０２２４】
変異を標的とし得る抗体の残基または領域の同定のための有用な方法は、Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍ  ａｎｄ  Ｗｅｌｌｓ（１９８９年）、「Ｓｃｉｅｎｃｅ」、第２４４巻：第１０８１〜１０８５頁によって記載されるように、「アラニンスキャニング突然変異生成」と呼ばれる。この方法では、抗体と抗原との相互作用が影響を受けるかどうかを決定するために、残基または標的残基群（例えば、荷電残基、例えば、ａｒｇ、ａｓｐ、ｈｉｓ、ｌｙｓおよびｇｌｕ）が同定され、中性または負に荷電したアミノ酸（例えば、アラニンまたはポリアラニン）によって置き換えられる。更なる置換が、初期置換に対する機能的感受性を示すアミノ酸位置に導入されてもよい。あるいは、または加えて、抗体と抗原との間の接点を特定するための抗原−抗体複合体の結晶構造。そのような接触残基および隣接残基は、置換の候補として標的とされるか、または除去されてもよい。バリアントは、所望の特性を有するか否かを判定するためにスクリーニングされてもよい。
【０２２５】
アミノ酸配列挿入として、１個の残基から１００個以上の残基を含むポリペプチドまでの長さ範囲のアミノ末端および／またはカルボキシル末端の融合、ならびに１個または複数のアミノ酸残基の配列内挿入が挙げられる。末端挿入の例として、Ｎ末端メチオニル残基を有する抗体が挙げられる。抗体分子の他の挿入バリアントとしては、酵素（例えば、ＡＤＥＰＴのための）またはポリペプチドへの抗体のＮ末端またはＣ末端の融合が挙げられ、これは抗体の血清半減期を増大させる。
（ｘ）グリコシル化バリアント
【０２２６】
特定の実施形態において、本明細書に提供される抗体は、抗体がグリコシル化される程度を増加または減少させるように変化する。抗体へのグリコシル化部位の付加または欠失は、１つ以上のグリコシル化部位が作り出されるか、または除去されるようにアミノ酸配列を改変させることにより好都合に達成され得る。
【０２２７】
抗体がＦｃ領域を含む場合、それに結合した炭水化物が改変され得る。哺乳動物細胞によって産生された天然抗体は、典型的には、Ｎ結合によってＦｃ領域のＣＨ２ドメインのＡｓｎ２９７に一般に結合される分岐状の二分岐オリゴ糖を含む。例えば、Ｗｒｉｇｈｔ  ｅｔ  ａｌ．ＴＩＢＴＥＣＨ  １５：２６−３２（１９９７）を参照。オリゴ糖としては、様々な炭水化物、例えば、マンノース、Ｎ−アセチルグルコサミン（ＧｌｃＮＡｃ）、ガラクトース、およびシアル酸、ならびに二分岐オリゴ糖構造の「幹」のＧｌｃＮＡｃに結合したフコースが挙げられ得る。いくつかの実施形態では、本開示の抗体中のオリゴ糖の修飾は、特定の改良された特性を有する抗体バリアントを作製するために行われてもよい。
【０２２８】
一実施形態では、Ｆｃ領域を含む抗体変異形が提供され、Ｆｃ領域に結合した炭水化物構造は、フコースが減少しているか、またはフコースを欠き、これによりＡＤＣＣ機能が改善され得る。具体的には、野生型ＣＨＯ細胞で産生される同じ抗体のフコースの量と比較してフコースが減少した抗体が本明細書で企図される。すなわち、それらは、それらが天然ＣＨＯ細胞（例えば、天然ＦＵＴ８遺伝子を含有するＣＨＯ細胞等の天然グリコシル化パターンを産生するＣＨＯ細胞）によって産生された場合にさもなければ有するであろう量よりも少ない量のフコースを有することを特徴とする。ある特定の実施形態では、本抗体は、そのＮ結合型グリカンの約５０％、４０％、３０％、２０％、１０％、または５％未満がフコースを含む抗体である。例えば、かかる抗体中のフコースの量は、１％〜８０％、１％〜６５％、５％〜６５％、または２０％〜４０％であり得る。ある特定の実施形態では、本抗体は、そのＮ結合型グリカンのいずれもフコースを含まない抗体であり、すなわち、本抗体は、フコースを全く有しないか、またはフコースを有しないか、またはアフコシル化されている。フコースの量は、例えば、国際公開第２００８／０７７５４６号に記載されるＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ質量分析法によって測定される、Ａｓｎ２９７に結合した全ての糖構造（例えば、複合体、ハイブリッド、および高マンノース構造）の合計に対する、Ａｓｎ２９７での糖鎖内のフコースの平均量を計算することによって決定される。Ａｓｎ２９７とは、Ｆｃ領域内の約２９７位（Ｆｃ領域残基のＥｕ番号付け）に位置するアスパラギン残基を指すが、Ａｓｎ２９７は、抗体内のわずかな配列変異のため、２９７位から約±３アミノ酸上流または下流に、すなわち、２９４位と３００位との間に位置し得る。かかるフコシル化バリアントは、改善されたＡＤＣＣ機能を有し得る。例えば、米国特許出願公開第２００３／０１５７１０８号（Ｐｒｅｓｔａ，Ｌ．）；同第２００４／００９３６２１号（Ｋｙｏｗａ  Ｈａｋｋｏ  Ｋｏｇｙｏ  Ｃｏ．，Ｌｔｄ）を参照されたい。「脱フコシル化」または「フコース欠損」抗体バリアントに関する公報の例としては、米国特許出願公開第２００３／０１５７１０８号；国際公開第２０００／６１７３９号；同第２００１／２９２４６号；米国特許出願公開第２００３／０１１５６１４号；同第２００２／０１６４３２８号；同第２００４／００９３６２１号；同第２００４／０１３２１４０号；同第２００４／０１１０７０４号；同第２００４／０１１０２８２号；同第２００４／０１０９８６５号；国際公開第２００３／０８５１１９号；同第２００３／０８４５７０号；同第２００５／０３５５８６号；同第２００５／０３５７７８号；同第２００５／０５３７４２号；同第２００２／０３１１４０号；Ｏｋａｚａｋｉら、「Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．」、第３３６巻：第１２３９〜１２４９頁（２００４年）；Ｙａｍａｎｅ−Ｏｈｎｕｋｉら、「Ｂｉｏｔｅｃｈ．Ｂｉｏｅｎｇ．」、第８７巻：第６１４頁（２００４年）が挙げられる。脱フコシル化抗体を生成可能な細胞株の例としては、タンパク質フコシル化で欠失したＬｅｃ１３  ＣＨＯ細胞（Ｒｉｐｋａら、「Ａｒｃｈ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂ��ｏｐｈｙｓ．」、第２４９巻、第５３３〜５４５頁（１９８６年）；米国特許出願公開第２００３／０１５７１０８Ａ１号、Ｐｒｅｓｔａ，Ｌ；および国際公開第２００４／０５６３１２Ａ１号、Ａｄａｍｓら、特に実施例１１において）、ならびにα−１，６−フコシルトランスフェラーゼ遺伝子、ＦＵＴ８、ノックアウトＣＨＯ細胞などのノックアウト細胞株（例えば、Ｙａｍａｎｅ−Ｏｈｎｕｋｉら、「Ｂｉｏｔｅｃｈ．Ｂｉｏｅｎｇ．」、第８７巻、第６１４頁（２００４年）；Ｋａｎｄａ，Ｙ．ら、「Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｂｉｏｅｎｇ．」、第９４巻、第４号第６８０〜６８８頁（２００６年）；および国際公開第２００３／０８５１０７号を参照）が挙げられる。
【０２２９】
例えば、抗体のＦｃ領域に結合した二分岐オリゴ糖がＧｌｃＮＡｃによって二分される二分オリゴ糖を有する抗体バリアントがさらに提供される。かかる抗体バリアントは、低減されたフコシル化および／または改善されたＡＤＣＣ機能を有し得る。そのような抗体バリアントの例は、例えば、ＷＯ２００３／０１１８７８、米国特許第６，６０２，６８４号、ＵＳ２００５／０１２３５４６、およびＦｅｒｒａｒａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，９３（５）：８５１−８６１（２００６）に記載されている。Ｆｃ領域に結合したオリゴ糖内の少なくとも１つのガラクトース残基を有する抗体バリアントもまた提供する。そのような抗体バリアントは、改善されたＣＤＣ機能を有し得る。このような抗体バリアントは、例えば、国際公開第１９９７／３００８７号（Ｐａｔｅｌら）、国際公開第１９９８／５８９６４号（Ｒａｊｕ，Ｓ．）、および国際公開第１９９９／２２７６４号（Ｒａｊｕ、Ｓ．）に記載される。
【０２３０】
ある特定の実施形態では、本明細書に記載のＦｃ領域を有する抗体変異形は、ＦｃγＲＩＩＩに結合することができる。ある特定の実施形態では、本明細書に記載のＦｃ領域を含む抗体変異形は、ヒトエフェクター細胞の存在下でＡＤＣＣ活性を有するか、またはヒトエフェクター細胞の存在下でヒト野生型ＩｇＧ１Ｆｃ領域を有するという点以外は同じ抗体と比較して増加したＡＤＣＣ活性を有する。
（ｘｉ）Ｆｃ領域バリアント
【０２３１】
ある特定の実施形態では、１つ以上のアミノ酸修飾が本明細書に提供される抗体のＦｃ領域に導入され、それにより、Ｆｃ領域変異形が生成され得る。Ｆｃ領域バリアントは、１つ以上のアミノ酸位置にアミノ酸修飾（例えば、置換）を含むヒトＦｃ領域配列（例えば、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４  Ｆｃ領域）を含み得る。
【０２３２】
特定の実施形態において、本開示は、全てではないが一部のエフェクター機能を有し、それによりインビボでの抗体の半減期が重要であるが、特定のエフェクター機能（例えば補体およびＡＤＣＣなど）が不要または有害である用途にとって望ましい候補となる、抗体バリアントを企図する。インビトロおよび／またはインビボ細胞傷害性アッセイを行って、ＣＤＣおよび／またはＡＤＣＣ活性の低減／欠乏を確認してもよい。例えば、Ｆｃ受容体（ＦｃＲ）結合アッセイを実行して、抗体がＦｃγＲ結合を欠いている（そのため、ＡＤＣＣ活性を欠いている可能性が高い）が、ＦｃＲｎ結合能力を保持することを確実にすることができる。ＡＤＣＣを媒介するための主要な細胞であるＮＫ細胞は、Ｆｃ（ＲＩＩＩのみを発現するが、一方で単球は、Ｆｃ（ＲＩ、Ｆｃ（ＲＩＩ、およびＦｃ（ＲＩＩＩを発現する。造血細胞内でのＦｃＲ発現は、Ｒａｖｅｔｃｈ  ａｎｄ  Ｋｉｎｅｔ、「Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．」、第９巻：第４５７〜４９２頁（１９９１年）の第４６４頁、表３にまとめられている。目的の分子のＡＤＣＣ活性を評価するためのインビトロアッセイの非限定的な例は、米国特許第５，５００，３６２号（例えば、Ｈｅｌｌｓｔｒｏｍ，Ｉ．ら、「Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ  Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ」、第８３巻、第７０５９〜７０６３頁（１９８６年）、およびＨｅｌｌｓｔｒｏｍ，Ｉ．ら、「Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ  Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ」、第８２巻、第１４９９〜１５０２頁（１９８５年）を参照のこと）、米国特許第５，８２１，３３７号（Ｂｒｕｇｇｅｍａｎｎ，Ｍ．ら、「Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．」、第１６６巻、第１３５１〜１３６１頁（１９８７年）を参照のこと）に記載される。あるいは、非放射性アッセイ法が用いられ得る（例えば、フローサイトメトリのためのＡＣＴＩ（商標）非放射性細胞傷害性アッセイ（ＣｅｌｌＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｉｎｃ．Ｍｏｕｎｔａｉｎ  Ｖｉｅｗ，ＣＡ；およびＣｙｔｏＴｏｘ  ９６（登録商標）非放射性細胞毒性アッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ）を参照されたい））。そのようなアッセイに有用なエフェクター細胞としては、末梢血単核球細胞（ＰＢＭＣ）およびナチュラルキラー（ＮＫ）細胞が挙げられる。あるいは、または加えて、目的とする分子のＡＤＣＣ活性は、例えば、Ｃｌｙｎｅｓら、「Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ  Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ」、第９５巻、第６５２〜６５６頁（１９９８年）に開示されるような動物モデルにおいて、インビボで評価することができる。Ｃ１ｑ結合アッセイを実行して、抗体がＣ１ｑに結合することができないためにＣＤＣ活性を欠くことを確認してもよい。例えば、国際公開第２００６／０２９８７９号および国際公開第２００５／１００４０２号における、Ｃ１ｑおよびＣ３ｃ結合ＥＬＩＳＡを参照されたい。補体活性化を評価するために、ＣＤＣアッセイを行ってもよい（例えば、Ｇａｚｚａｎｏ−Ｓａｎｔｏｒｏら、「Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ」、第２０２巻、第１６３頁（１９９６年）；Ｃｒａｇｇ，Ｍ．Ｓ．ら、「Ｂｌｏｏｄ」、第１０１巻、第１０４５〜１０５２頁（２００３年）；およびＣｒａｇｇ，Ｍ．Ｓ．およびＭ．Ｊ．Ｇｌｅｎｎｉｅ、「Ｂ���ｏｏｄ」、第１０３巻、第２７３８〜２７４３頁（２００４年）を参照されたい）。ＦｃＲｎ結合およびインビボでのクリアランス／半減期の決定は、当該技術分野で既知の方法を用いても行うことができる（例えば、Ｐｅｔｋｏｖａ，Ｓ．Ｂ．ら、「Ｉｎｔ’ｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．」、第１８巻、第１２号、第１７５９〜１７６９頁（２００６年）を参照）。
【０２３３】
エフェクター機能が低下した抗体としては、Ｆｃ領域の残基２３８、２６５、２６９、２７０、２９７、３２７および３２９の１つ以上の置換を有するものが挙げられる（米国特許第６，７３７，０５６号）。このようなＦｃ変異体としては、アミノ酸位置２６５、２６９、２７０、２９７および３２７のうち２つ以上での置換を有するＦｃ変異体が挙げられ、残基２６５および２９７がアラニンに置換されている、いわゆる「ＤＡＮＡ」Ｆｃ変異体を含む（米国特許第７，３３２，５８１号）。
【０２３４】
ＦｃＲへの結合が向上または低下した特定の抗体バリアントについて記載されている。（例えば、米国特許第６，７３７，０５６号；国際公開第２００４／０５６３１２号，およびＳｈｉｅｌｄｓ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．９（２）：６５９１−６６０４（２００１）を参照のこと。）
【０２３５】
ある特定の実施形態では、抗体バリアントは、ＡＤＣＣを改善する１つ以上のアミノ酸置換、例えば、Ｆｃ領域の２９８、３３３、および／または３３４位（残基のＥＵナンバリング）での置換を有するＦｃ領域を含む。例示的な一実施形態では、本抗体は、そのＦｃ領域に以下のアミノ酸置換：Ｓ２９８Ａ、Ｅ３３３Ａ、およびＫ３３４Ａ。
【０２３６】
いくつかの場合において、例えば米国特許第６，１９４，５５１号、国際公開第９９／５１６４２号、およびＩｄｕｓｏｇｉｅ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６４：４１７８−４１８４（２０００）に記載されているように、Ｃ１ｑ結合および／または補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）の変化（すなわち向上または低下のいずれか）をもたらすＦｃ領域内で変化が起こる。
【０２３７】
半減期が増大し、胎生Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）への結合が向上した、母体ＩｇＧを胎児に移行する役割を果たす抗体（Ｇｕｙｅｒら、「Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．」、第１１７巻、第５８７頁（１９７６年）およびＫｉｍら、「Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．」、第２４巻、第２４９頁（１９９４年））は、米国特許出願公開第２００５／００１４９３４Ａ１号（Ｈｉｎｔｏｎら）に記載されている。これらの抗体は、ＦｃＲｎへのＦｃ領域の結合を向上する１つ以上の置換基を有するＦｃ領域を含む。そのようなＦｃバリアントとしては、Ｆｃ領域残基：２３８、２５６、２６５、２７２、２８６、３０３、３０５、３０７、３１１、３１２、３１７、３４０、３５６、３６０、３６２、３７６、３７８、３８０、３８２、４１３、４２４、または４３４の１つ以上の置換、例えば、Ｆｃ領域残基４３４の置換を有するものが挙げられる（米国特許第７，３７１，８２６号）。Ｆｃ領域バリアントのその他の例に関係するＤｕｎｃａｎ＆Ｗｉｎｔｅｒ，Ｎａｔｕｒｅ  ３２２：７３８−４０（１９８８）米国特許第５，６４８，２６０号；同第５，６２４，８２１号；および国際公開第９４／２９３５１号も参照のこと。
（ｘｉｉ）抗体誘導体
【０２３８】
本発明の抗体は、当該技術分野で既知であり、かつ容易に入手可能な更なる非タンパク質部分を含有するように更に修飾され得る。ある特定の実施形態では、本抗体の誘導体化に好適なこれらの部分は、水溶性ポリマーである。水溶性ポリマーの非限定的な例としては、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、エチレングリコール／プロピレングリコールコポリマー、カルボキシメチルセルロース、デキストラン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ポリ−１，３−ジオキソラン、ポリ−１，３，６−トリオキサン、エチレン／無水マレイン酸コポリマー、ポリアミノ酸（ホモポリマーまたはランダムコポリマーのいずれか）、およびデキストランまたはポリ（ｎ−ビニルピロリドン）ポリエチレングリコール、プロプロピレングリコールホモポリマー、プロリプロピレンオキシド／エチレンオキシドコポリマー、ポリオキシエチル化ポリオール（例えば、グリセロール）、ポリビニルアルコール、ならびにそれらの混合物が挙げられるが、これらに限定されない。ポリエチレングリコールプロピオンアルデヒドは、水中でのその安定性のため、製造時に有利であり得る。このポリマーは、任意の分子量を有していてもよく、分岐していてもよく、または分岐していなくてもよい。本抗体に結合したポリマーの数は異なってもよく、１つより多くのポリマーが結合している場合、それらは、同じ分子または異なる分子であり得る。一般に、誘導体化に使用されるポリマーの数および／または種類は、改善される抗体の特定の特性または機能、抗体誘導体が定義された条件下である療法に使用されるかなどを含むが、これらに限定されない、考慮すべき事項に基づいて決定され得る。
（ｘｉｉｉ）ベクター、宿主細胞、および組換え方法
【０２３９】
抗体は、組換え方法を使用して産生され得る。抗抗原抗体の組換え産生について、本抗体をコードする核酸が単離され、さらなるクローニング（ＤＮＡの増幅）または発現のために複製可能なベクターに挿入される。本抗体をコードするＤＮＡは、容易に単離され、従来の手順を使用して（例えば、本抗体の重鎖および軽鎖をコードする遺伝子に特異的に結合することができるオリゴヌクレオチドプローブを使用して）配列決定され得る。より多くのベクターが用意されている。ベクター成分には、一般に、シグナル配列、複製起点、１つ以上のマーカー遺伝子、エンハンサーエレメント、プロモーター、および転写終結配列のうちの１つ以上が含まれるが、これらに限定されない。
【０２４０】
なおさらなる一態様では、本明細書に記載の抗体のうちのいずれかをコードする核酸が本明細書に提供される。いくつかの実施形態では、核酸は、前述の抗ＰＤＬ１、抗ＰＤ−１、または抗ＰＤＬ２抗体のうちのいずれかをコードする核酸の発現に好適なベクターをさらに含む。なおさらに具体的な一態様では、ベクターは、核酸の発現に好適な宿主細胞をさらに含む。なおさらに具体的な一態様では、宿主細胞は、真核細胞または原核細胞である。なおさらに具体的な一態様では、真核細胞は、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）等の哺乳類細胞である。
【０２４１】
なおさらなる一実施形態では、抗ＰＤＬ１抗体の軽鎖可変領域配列または重鎖可変領域配列をコードする単離された核酸が提供され、
（ａ）（ａ）重鎖は、それぞれ、ＧＦＴＦＳＤＳＷＩＨ（配列番号１）、ＡＷＩＳＰＹＧＧＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号２）、およびＲＨＷＰＧＧＦＤＹ（配列番号３）と少なくとも８５％の配列同一性を有するＨＶＲ−Ｈ１、ＨＶＲ−Ｈ２、およびＨＶＲ−Ｈ３配列をさらに含み、
（ｂ）軽鎖は、ＲＡＳＱＤＶＳＴＡＶＡ（配列番号４）、ＳＡＳＦＬＹＳ（配列番号５）、およびＱＱＹＬＹＨＰＡＴ（配列番号６）に対して、それぞれ、少なくとも８５％の配列同一性を有するＨＶＲ−Ｌ１、ＨＶＲ−Ｌ２、およびＨＶＲ−Ｌ３配列をさらに含む。
具体的な一態様では、配列同一性は、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％である。
【０２４２】
本抗体またはその抗原結合断片は、当該技術分野で既知の方法を使用して、例えば、前述の抗ＰＤＬ１、抗ＰＤ−１、もしくは抗ＰＤＬ２抗体、または抗原結合断片のうちのいずれかをコードする核酸を発現に好適な形態で含有する宿主細胞をかかる抗体または断片の産生に好適な条件下で培養することと、その抗体または断片を回収することとを含むプロセスによって作製され得る。さらなる例示的な技術および方法が本明細書に記載されている。
（ａ）シグナル配列構成成分
【０２４３】
本開示の抗体は、直接的にのみではなく、異種ポリペプチドとの融合ポリペプチドとしても組換え的に生成され得る。この異種ポリペプチドは、好ましくは、成熟タンパク質またはポリペプチドのＮ末端にて特異的切断部位を有するシグナル配列または他のポリペプチドである。選択される異種シグナル配列は、好ましくは、宿主細胞によって認識およびプロセシング（例えば、シグナルペプチダーゼによって切断される）ものである。天然抗体シグナル配列を認識もプロセシングもしない原核宿主細胞の場合、シグナル配列は、例えば、アルカリ性ホスファターゼ、ペニシリナーゼ、ｌｐｐ、または熱安定性エンテロトキシンＩＩリーダーの群から選択される原核シグナル配列によって置換される。酵母分泌のために、ネイティブシグナル配列は、例えば、酵母インベルターゼリーダー、因子リーダー（サッカロマイセスおよびクルイベロマイセスα因子リーダーを含む）、または酸ホスファターゼリーダー、Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓグルコアミラーゼリーダー、またはＷＯ  ９０／１３６４６に記載されたシグナルによって置換されてもよい。哺乳類細胞発現において、哺乳類シグナル配列、ならびにウイルス分泌リーダー、例えば、単純ヘルペスｇＤシグナルが利用可能である。
（ｂ）複製起点
【０２４４】
発現ベクターもクローニングベクターもいずれも、ベクターが１つ以上の選択された宿主細胞内で複製することを可能にする核酸配列を含む。一般に、クローニングベクターにおいて、この配列は、宿主染色体ＤＮＡとは無関係にベクターの複製を可能にするものであり、これらとしては、複製起点または自己複製配列が挙げられる。かかる配列は、様々な細菌、酵母、およびウイルスについて周知である。プラスミドｐＢＲ３２２由来の複製起点が大半のグラム陰性細菌に好適であり、２μプラスミド起点が酵母に好適であり、様々なウイルス起点（ＳＶ４０、ポリオーマ、アデノウイルス、ＶＳＶ、またはＢＰＶ）が哺乳動物細胞におけるクローニングベクターに有用である。一般に、複製起点成分は、哺乳類発現ベクターに必要とされない（ＳＶ４０起点は、初期プロモーターを含有するために、典型的に使用され得る。
（ｃ）遺伝子成分の選択
【０２４５】
発現ベクターおよびクローニングベクターは、選択遺伝子、別名、選択可能なマーカーを含有し得る。典型的な選択遺伝子は、（ａ）抗生物質もしくは他の毒素、例えば、アンピシリン、ネオマイシン、メトトレキサート、もしくはテトラサイクリンへの耐性を与えるか、（ｂ）栄養要求性欠損を補完するか、または（ｃ）複合培地から入手不可能な重要な栄養素を供給するタンパク質、例えば、ＢａｃｉｌｌｉについてＤ−アラニンラセマーゼをコードする遺伝子をコードする。
【０２４６】
選択スキームの一例は、宿主細胞の成長を停止する薬物を利用する。異種遺伝子での形質転換に成功した細胞は、薬物耐性を与え、それ故に選択レジメンで生き残るタンパク質を産生する。かかる優性選択の例は、薬物ネオマイシン、ミコフェノール酸、およびハイグロマイシンを使用する。
【０２４７】
哺乳類細胞に好適な選択可能なマーカーの別の例は、ＤＨＦＲ、グルタミンシンテターゼ（ＧＳ）、チミジンキナーゼ、メタロチオネイン−Ｉおよび−ＩＩ、好ましくは、霊長類メタロチオネイン遺伝子、アデノシンデアミナーゼ、オルニチンデカルボキシラーゼ等の抗体コード核酸を取り込むための細胞成分の特定を可能にするものである。
【０２４８】
例えば、ＤＨＦＲ遺伝子で形質転換された細胞は、ＤＨＦＲの競合アンタゴニストであるメトトレキサート（Ｍｔｘ）を含有する培養培地中で形質転換体を培養することによって特定される。これらの条件下で、ＤＨＦＲ遺伝子は、任意の他の共形質転換された核酸とともに増幅される。内因性ＤＨＦＲ活性が欠損したチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞株（例えば、ＡＴＣＣ  ＣＲＬ−９０９６）が使用され得る。
【０２４９】
代替として、ＧＳ遺伝子で形質転換された細胞は、ＧＳ阻害剤であるＬ−メチオニンスルホキシミン（Ｍｓｘ）を含有する培養培地中で形質転換体を培養することによって特定される。これらの条件下で、ＧＳ遺伝子は、任意の他の共形質転換された核酸とともに増幅される。ＧＳ選択／増幅系が、上述のＤＨＦＲ選択／増幅系と組み合わせて使用され得る。
【０２５０】
代替として、目的とする抗体をコードするＤＮＡ配列、野生型ＤＨＦＲ遺伝子、および別の選択可能なマーカー、例えば、アミノグリコシド３’−ホスホトランスフェラーゼ（ＡＰＨ）で形質転換または共形質転換された宿主細胞（具体的には、内因性ＤＨＦＲを含有する野生型宿主）は、アミノグリコシド抗生物質、例えば、カナマイシン、ネオマイシン、またはＧ４１８等の選択可能なマーカー用の選択剤を含有する培地中での細胞成長によって選択され得る。例えば、米国特許第４，９６５，１９９号を参照されたい。
【０２５１】
酵母での使用に好適な選択遺伝子は、酵母プラスミドＹＲｐ７中に存在するｔｒｐ１遺伝子である（Ｓｔｉｎｃｈｃｏｍｂ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，２８２：３９（１９７９））。ｔｒｐ１遺伝子は、トリプトファン中で成長する能力を欠く酵母の変異菌株に対する選択マーカー、例えば、ＡＴＣＣ番号４４０７６またはＰＥＰ４−１を提供する。Ｊｏｎｅｓ，Ｇｅｎｅｔｉｃｓ，８５：１２（１９７７）．その後、酵母宿主細胞ゲノム中でのｔｒｐ１病変の存在により、トリプトファンの不在下での成長による形質転換の検出に有効な環境が提供される。同様に、Ｌｅｕ２が欠損した酵母株（ＡＴＣＣ２０，６２２または３８，６２６）は、Ｌｅｕ２遺伝子を持つ既知のプラスミドによって補完される。
【０２５２】
加えて、１．６μｍの環状プラスミドｐＫＤ１由来のベクターが、Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓ酵母の形質転換に使用され得る。代替として、組換え仔牛キモシンの大規模産生のための発現系としてＫ．ｌａｃｔｉｓが報告された。Ｖａｎ  ｄｅｎ  Ｂｅｒｇ，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，８：１３５（１９９０）。Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓの工業用株による成熟組換えヒト血清アルブミンの分泌のための安定した多コピー発現ベクターも開示されている。Ｆｌｅｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，９：９６８−９７５（１９９１）。
（ｄ）宿主細胞の選択および形質転換
【０２５３】
本明細書におけるベクター中でのＤＮＡのクローニングまたは発現に好適な宿主細胞は、上述の原核生物、酵母、またはより高次の真核生物細胞である。この目的のための好適な原核生物としては、グラム陰性またはグラム陽性生物などの真核細菌、例えば：Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ、例えば大腸菌、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ、Ｅｒｗｉｎｉａ、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ、Ｐｒｏｔｅｕｓ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ、例えばＳａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ、Ｓｅｒｒａｔｉａ、例えばＳｅｒｒａｔｉａ  ｍａｒｃｅｓｃａｎｓ、およびＳｈｉｇｅｌｌａ、Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ、Ｂ．ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓなどのバチルス（例えば、１９８９年４月１２日に公開されたＤＤ  ２６６，７１０に開示されたＢ．ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ  ４１Ｐ）、Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａなどのシュードモナス、およびＳｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓなどが挙げられる。好ましい大腸菌クローニング宿主の一つは、大腸菌２９４（ＡＴＣＣ  ３１，４４６）であるが、大腸菌Ｂ、大腸菌Ｘ１７７６（ＡＴＣＣ  ３１，５３７）、大腸菌Ｗ３１１０（ＡＴＣＣ  ２７，３２５）のような他の株も適している。これらの例は、限定するものではなく、例証するものである。
【０２５４】
全長抗体、抗体融合タンパク質、および抗体フラグメントは、特に、治療用抗体がそれ自体が腫瘍細胞破壊に有効性を示す細胞傷害剤（例えば、毒素）にコンジュゲートされている場合のように、グリコシル化およびＦｃエフェクター機能を必要としない場合には、細菌中で製造することができる。全長抗体は、より優れた血中半減期を有する。Ｅ．ｃｏｌｉでの産生がより迅速であり、より費用効率が高い。細菌における抗体フラグメントおよびポリペプチドの発現については、発現および分泌を最適化するための翻訳開始領域（ＴＩＲ）およびシグナル配列を説明している、例えば、米国特許第５，６４８，２３７号（Ｃａｒｔｅｒら）、米国特許第５，７８９，１９９号（Ｊｏｌｙら）、米国特許第５，８４０，５２３号（Ｓｉｍｍｏｎｓら）を参照のこと。また、Ｅ．ｃｏｌｉにおける抗体断片の発現を記載するＣｈａｒｌｔｏｎ，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．２４８（Ｂ．Ｋ．Ｃ．Ｌｏ，ｅｄ．，Ｈｕｍａｎａ  Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，Ｎ．Ｊ．，２００３），ｐｐ．２４５−２５４も参照されたい。発現後、本抗体は、可溶性画分中のＥ．ｃｏｌｉ細胞ペーストから単離され得、例えば、アイソタイプに応じてタンパク質ＡまたはＧカラムにより精製され得る。最終精製は、例えば、ＣＨＯ細胞で発現された抗体を精製するためのプロセスと同様に行われ得る。
【０２５５】
原核生物に加えて、糸状菌または酵母等の真核微生物が、抗体コードベクターに好適なクローニングまたは発現宿主である。より下位の真核宿主微生物の中でＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅまたは一般的なパン酵母が最も一般的に使用されている。しかしながら、Ｓｃｈｉｚｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｐｏｍｂｅ、Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓ宿主、例えば、Ｋ．ｌａｃｔｉｓ、Ｋ．ｆｒａｇｉｌｉｓ（ＡＴＣＣ  １２，４２４）、Ｋ．ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓ（ＡＴＣＣ  １６，０４５）、Ｋ．ｗｉｃｋｅｒａｍｉｉ（ＡＴＣＣ  ２４，１７８）、Ｋ．ｗａｌｔｉｉ（ＡＴＣＣ  ５６，５００）、Ｋ．ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａｒｕｍ（ＡＴＣＣ  ３６，９０６）、Ｋ．ｔｈｅｒｍｏｔｏｌｅｒａｎｓ、およびＫ．ｍａｒｘｉａｎｕｓなど、ｙａｒｒｏｗｉａ（ＥＰ  ４０２，２２６）、Ｐｉｃｈｉａ  ｐａｓｔｏｒｉｓ（ＥＰ  １８３，０７０）、Ｃａｎｄｉｄａ、Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｒｅｅｓｉａ（ＥＰ  ２４４，２３４）、Ｎｅｕｒｏｓｐｏｒａ  ｃｒａｓｓａ、Ｓｃｈｗａｎｎｉｏｍｙｃｅｓ  ｏｃｃｉｄｅｎｔａｌｉｓなどのＳｃｈｗａｎｎｉｏｍｙｃｅｓ、ならびに糸状真菌、例えば、Ｎｅｕｒｏｓｐｏｒａ、Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ、Ｔｏｌｙｐｏｃｌａｄｉｕｍ、およびＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ宿主、例えば、Ａ．ｎｉｄｕｌａｎｓおよびＡ．ｎｉｇｅｒなどのいくつかの他の属、種、および菌株が本明細書において一般的に利用可能であり、有用である。治療用タンパク質の生産のための酵母および糸状菌の使用を議論するレビューについては、例えば、Ｇｅｒｎｇｒｏｓｓ，Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．２２：１４０９−１４１４（２００４）を参照のこと。
【０２５６】
グリコシル化経路が「ヒト化」されており、結果として部分的または完全ヒトグリコシル化パターンを有する抗体の産生をもたらすある特定の真菌および酵母株が選択され得る。たとえば、Ｌｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．２４：２１０−２１５（２００６）（Ｐｉｃｈｉａ  ｐａｓｔｏｒｉｓにおけるグリコシル化経路のヒト化について説明）、およびＧｅｒｎｇｒｏｓｓ  ｅｔ  ａｌ．（上記参照）。
【０２５７】
グリコシル化抗体の発現に好適な宿主細胞は、多細胞生物（無脊椎動物および脊椎動物）からも得られる。無脊椎動物細胞の例としては、植物細胞および昆虫細胞が挙げられる。多数のバキュロウイルス株および変異形、ならびに宿主、例えば、Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ  ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ（毛虫）、Ａｅｄｅｓ  ａｅｇｙｐｔｉ（ｍｏｓｑｕｉｔｏ）、Ａｅｄｅｓ  ａｌｂｏｐｉｃｔｕｓ（蚊）、Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａ  ｍｅｌａｎｏｇａｓｔｅｒ（ミバエ）、およびＢｏｍｂｙｘ  ｍｏｒｉ由来の対応する許容昆虫宿主細胞が特定されている。トランスフェクションのための種々のウイルス株、例えば、Ａｕｔｏｇｒａｐｈａ  ｃａｌｉｆｏｒｎｉｃａ  ＮＰＶのＬ−１変異形、およびＢｏｍｂｙｘ  ｍｏｒｉ  ＮＰＶのＢｍ−５株が公的に入手可能であり、かかるウイルスは、本発明における本明細書におけるウイルスとして、特にＳｐｏｄｏｐｔｅｒａ  ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ細胞のトランスフェクションのために使用され得る。
【０２５８】
綿、トウモロコシ、ジャガイモ、大豆、ペチュニア、トマト、ウキクサ（Ｌｅｎｉｎａｃｅａｅ）、ムラサキウマゴヤシ（Ｍ．ｔｒｕｎｃａｔｕｌａ）、およびタバコの植物細胞培養物も宿主として利用され得る。例えば、米国特許第５，９５９，１７７号、第６，０４０，４９８号、第６，４２０，５４８号、第７，１２５，９７８号および第６，４１７，４２９号（トランスジェニック植物において抗体を産生するためのＰＬＡＮＴＩＢＯＤＩＥＳ（商標）技術）を参照。
【０２５９】
脊椎動物細胞が宿主として使用され得、培養下での脊椎動物細胞の繁殖（組織培養）が日常的な手順になっている。有用な哺乳類宿主細胞株の例としては、以下のものが挙げられる：ＳＶ４０（ＣＯＳ−７、ＡＴＣＣ  ＣＲＬ  １６５１）によって形質転換されたサル腎臓ＣＶ１系統；ヒト胎児腎臓株（浮遊培養での増殖のためにサブクローン化された２９３または２９３細胞、Ｇｒａｈａｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｇｅｎ  Ｖｉｒｏｌ．３６：５９（１９７７））；ベビーハムスター腎臓細胞（ＢＨＫ、ＡＴＣＣ  ＣＣＬ  １０）；マウスセルトリ細胞（ＴＭ４，Ｍａｔｈｅｒ，Ｂｉｏｌ．Ｒｅｐｒｏｄ．２３：２４３−２５１（１９８０））；サル腎臓細胞（ＣＶ１  ＡＴＣＣ  ＣＣＬ  ７０）；アフリカミドリザル腎臓細胞（ＶＥＲＯ−７６、ＡＴＣＣ  ＣＲＬ−１５８７）；ヒト子宮頸癌細胞（ＨＥＬＡ、ＡＴＣＣ  ＣＣＬ  ２）；犬の腎臓細胞（ＭＤＣＫ、ＡＴＣＣ  ＣＣＬ  ３４）；バッファローラット肝細胞（ＢＲＬ  ３Ａ、ＡＴＣＣ  ＣＲＬ  １４４２）；ヒト肺細胞（Ｗ１３８、ＡＴＣＣ  ＣＣＬ  ７５）；ヒト肝細胞（Ｈｅｐ  Ｇ２、ＨＢ  ８０６５）；マウス乳腺腫瘍（ＭＭＴ  ０６０５６２、ＡＴＣＣ  ＣＣＬ５１）；ＴＲＩ細胞（Ｍａｔｈｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｎａｌｓ  Ｎ．Ｙ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．３８３：４４−６８（１９８２））；ＭＲＣ５細胞；ＦＳ４細胞；およびヒト肝癌株（ＨｅｐＧ２）。他の有用な哺乳動物宿主細胞株としては、ＤＨＦＲ−ＣＨＯ細胞（Ｕｒｌａｕｂら、「Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ」、第７７巻：第４２１６頁（１９８０年））を含むチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、並びにＮＳ０、およびＳｐ２／０などの骨髄腫細胞株が挙げられる。抗体産生に好適なある特定の哺乳類宿主細胞株の概説については、例えば、Ｙａｚａｋｉ  ａｎｄ  Ｗｕ，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．２４８（Ｂ．Ｋ．Ｃ．Ｌｏ，ｅｄ．，Ｈｕｍａｎａ  Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，Ｎ．Ｊ．），ｐｐ．２５５−２６８（２００３）を参照されたい。
【０２６０】
宿主細胞は、抗体産生のために上述の発現ベクターまたはクローニングベクターで形質転換され、プロモーターの誘導、形質転換対の選択、または所望の配列をコードする遺伝子の増幅に適切なものとして修飾された従来の栄養素培地中で培養される。
（ｅ）宿主細胞の培養
【０２６１】
本開示の抗体を産生するために用いられる宿主細胞は、種々の培地で培養してもよい。ハムＦ１０（Ｓｉｇｍａ）、最小必須培地（（ＭＥＭ）、（Ｓｉｇｍａ）、ＲＰＭＩ−１６４０（Ｓｉｇｍａ）、およびダルベッコ修飾イーグル培地（（ＤＭＥＭ）、Ｓｉｇｍａ）等の市販の培地が、宿主細胞の培養に好適である。また、Ｈａｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚ．５８：４４（１９７９），Ｂａｒｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１０２：２５５（１９８０）、米国特許第４，７６７，７０４号、同第４，６５７，８６６号、同第４，９２７，７６２号、同第４，５６０，６５５号、同第５，１２２，４６９号、ＷＯ  ９０／０３４３０、ＷＯ  ８７／００１９５、または米国特許番号３０，９８５に記載のいずれの培地も宿主細胞の培地として使用することができる。これらの培地のうちのいずれかには、必要に応じて、ホルモンおよび／または他の成長因子（インスリン、トランスフェリン、または上皮成長因等子）、塩（塩化ナトリウム、カルシウム、マグネシウム、およびリン酸塩等）、緩衝液（ＨＥＰＥＳ等）、ヌクレオチド（アデノシンおよびチミジン等）、抗生物質（ＧＥＮＴＡＭＹＣＩＮ（商標）薬物等）、微量元素（通常マイクロモル範囲の最終密度で存在する無機化合物と定義される）、ならびにグルコースまたは等価エネルギー源が補充され得る。任意の他の必要な補充物も当業者に既知の適切な濃度で含まれ得る。培養条件、例えば、温度、ｐＨ等は、発現のために選択された宿主細胞で既に使用したものであり、当業者に明らかであろう。
（ｘｉｖ）抗体の精製
【０２６２】
組換え技法を使用する場合、本抗体は、細胞内で産生され得るか、ペリプラズム空間で産生され得るか、または培地に直接分泌され得る。本抗体が細胞内で産生される場合、第１のステップとして、微粒子残屑（宿主細胞または溶解断片のいずれか）が、例えば、遠心分離または限外濾過によって除去される。Ｃａｒｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １０：１６３−１６７（１９９２）には、大腸菌のペリプラズム空間に分泌される抗体を分離する方法が記載している。要するに、細胞ペーストを酢酸ナトリウム（ｐＨ３．５）、ＥＤＴＡ、およびフェニルメチルスルホニルフルオリド（ＰＭＳＦ）の存在下で約３０分かけて解凍する。細胞片は遠心分離によって除去され得る。本抗体が培地に分泌される場合、かかる発現系由来の上清が、一般に、市販のタンパク質濃縮フィルター、例えば、ＡｍｉｃｏｎまたはＭｉｌｌｉｐｏｒｅ  Ｐｅｌｌｉｃｏｎ限外濾過装置を使用して最初に濃縮される。タンパク質分解を阻害するために、ＰＭＳＦなどのプロテアーゼ阻害薬が前述のステップのいずれかに含まれてもよく、外来性混入物の増殖を防止するために、抗生物質が含まれてもよい。
【０２６３】
細胞から調製された抗体組成物は、例えば、ヒドロキシアパタイトクロマトグラフィー、疎水性相互作用クロマトグラフィー、ゲル電気泳動、透析、および親和性クロマトグラフィーを使用して精製され得、親和性クロマトグラフィーが典型的に好ましい精製ステップのうちの１つである。タンパク質Ａの親和性リガンドとしての好適性は、本抗体中に存在する任意の免疫グロブリンＦｃドメインの種およびアイソタイプに依存する。プロテインＡは、ヒトγ１、γ２またはγ４重鎖に基づく抗体を精製するために使用することができる（Ｌｉｎｄｍａｒｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈ．６２：１−１３（１９８３））。タンパク質Ｇは、全てのマウスアイソタイプおよびヒトγ３に対して推奨される（Ｇｕｓｓ  ｅｔ  ａｌ．，ＥＭＢＯ  Ｊ．５：１５６７１５７５（１９８６））。親和性リガンドが結合するマトリックスは、ほとんどの場合、アガロースであるが、他のマトリックスも利用可能である。制御細孔ガラスまたはポリ（スチレンジビニル）ベンゼン等の機械的に安定なマトリックスにより、アガロースで達成され得るよりも速い流速および短いプロセシング時間が可能になる。抗体がＣＨ３ドメインからなる場合、Ｂａｋｅｒｂｏｎｄ  ＡＢＸＴＭ樹脂（Ｊ．Ｔ．Ｂａｋｅｒ，Ｐｈｉｌｌｉｐｓｂｕｒｇ，Ｎ．Ｊ．）が精製に有用である。タンパク質を精製するための他の技法、例えば、イオン交換カラム上での分別、エタノール沈殿、逆相ＨＰＬＣ、シリカ上でのクロマトグラフィー、ヘパリンセファロース（商標）上でのクロマトグラフィー、陰イオンまたは陽イオン交換樹脂（ポリアスパラギン酸カラム等）上でのクロマトグラフィー、クロマト分画、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ、および硫酸アンモニウム沈殿も回収される抗体に応じて利用可能である。
【０２６４】
一般に、研究、試験、および臨床で使用するための抗体を調製するための様々な方法論が当該技術分野で十分に確立されており、上述の方法論と一致しており、かつ／または当業者によって目的とする特定の抗体に適切であると見なされる。
ＶＩ．生理活性抗体の選択
【０２６５】
上述のように産生された抗体は、１つ以上の「生物学的活性」アッセイに供されて、治療的観点から有益な特性を有する抗体を選択するか、または本抗体の生物学的活性を保持する製剤および条件を選択することができる。本抗体は、それが産生される抗原に結合するその能力について試験され得る。例えば、当該技術分野で既知の方法（例えば、ＥＬＩＳＡ、ウエスタンブロット等）が使用され得る。
【０２６６】
例えば、抗ＰＤＬ１抗体の場合、抗体の抗原結合特性は、ＰＤＬ１に結合する能力を検出するアッセイで評価され得る。いくつかの実施形態では、抗体の結合性は、例えば、飽和結合、ＥＬＩＳＡ、および／または競合アッセイ（例えばＲＩＡ）によって決定され得る。本抗体は、例えば、治療薬としてのその有効性を評価するために、他の生物学的活性アッセイにも供され得る。かかるアッセイが当該技術分野で既知であり、本抗体の標的抗原および意図される使用に依存する。例えば、本抗体によるＰＤ−Ｌ１遮断の生物学的効果は、ＣＤ８＋Ｔ細胞、リンパ球性脈絡髄膜炎ウイルス（ＬＣＭＶ）マウスモデル、および／または同系腫瘍モデル、例えば、米国特許第８，２１７，１４９号に記載のモデルにおいて評価され得る。
【０２６７】
目的とする抗原上の特定のエピトープに結合する抗体（例えば、例示的な抗ＰＤＬ１抗体のＰＤ−Ｌ１への結合を遮断する抗体）についてスクリーニングするために、通常の交差遮断アッセイ、例えば、Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｅｄ  Ｈａｒｌｏｗ  ａｎｄ  Ｄａｖｉｄ  Ｌａｎｅ（１９８８）に記載のアッセイが行われ得る。あるいは、エピトープマッピング、例えば、Ｃｈａｍｐｅら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７０：１３８８−１３９４（１９９５）に記載されているように、抗体が関心のあるエピトープに結合するかどうかを決定するために実施することができる。
ＶＩＩ．医薬組成物および製剤
【０２６８】
また、本明細書では、例えば、ＰＤ−１軸結合アンタゴニスト（アテゾリズマブなど）、白金剤（カルボプラチンなど）、およびトポシドなどのトポイソメラーゼＩＩ阻害剤からなる肺癌（小細胞肺癌、例えば、進展型小細胞肺がん）の治療のための医薬組成物および製剤も提供される。いくつかの実施形態では、医薬組成物および製剤は、薬学的に許容される担体をさらに含む。
【０２６９】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗ＰＤＬ１抗体（例えば、アテゾリズマブ）は、約６０ｍｇ／ｍＬの量の抗体、約２０ｍＭの濃度の酢酸ヒスチジン、約１２０ｍＭの濃度のスクロース、および約０．０４％（ｗ／ｖ）の濃度のポリソルベート（例えば、ポリソルベート２０）からなる製剤中にあり、製剤は、約５．８のｐＨを有する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗ＰＤＬ１抗体は、約１２５ｍｇ／ｍＬの量の本抗体、約２０ｍＭの濃度の酢酸ヒスチジン、約２４０ｍＭの濃度のスクロース、および０．０２％（ｗ／ｖ）の濃度のポリソルベート（例えば、ポリソルベート２０）を含む製剤中に存在し、この製剤は、約５．５のｐＨを有する。
【０２７０】
目的の抗体を調製した後（例えば、本明細書に開示されているように製剤化することができる抗体を製造するための技術は、本明細書に精巧に記載されており、当技術分野で知られている）、それを構成する医薬製剤を調製する。ある特定の実施形態では、製剤化される抗体は、事前凍結乾燥に供されておらず、本明細書における目的とする製剤は、水性製剤である。ある特定の実施形態では、抗体は、完全長抗体である。一実施形態では、製剤中の抗体は、Ｆ（ａｂ’）２等の抗体断片であり、この場合、完全長抗体では起こり得ない問題（抗体のＦａｂへのクリッピング等）に対処しなければならない場合がある。製剤中に存在する抗体の治療有効量は、例えば、所望の用量体積および投与様式（複数可）を考慮することによって決定される。約２５ｍｇ／ｍＬから約１５０ｍｇ／ｍＬ、または約３０ｍｇ／ｍＬから約１４０ｍｇ／ｍＬ、または約３５ｍｇ／ｍＬから約１３０ｍｇ／ｍＬ、または約４０ｍｇ／ｍＬから約１２０ｍｇ／ｍＬ、または約５０ｍｇ／ｍＬから約１３０ｍｇ／ｍＬ、または約５０ｍｇ／ｍＬから約１２５ｍｇ／ｍＬ、または約５０ｍｇ／ｍＬから約１２０ｍｇ／ｍＬ。または約５０ｍｇ／ｍＬから約１１０ｍｇ／ｍＬ、または約５０ｍｇ／ｍＬから約１００ｍｇ／ｍＬ、または約５０ｍｇ／ｍＬから約９０ｍｇ／ｍＬ、または約５０ｍｇ／ｍＬから約８０ｍｇ／ｍＬ、または約５４ｍｇ／ｍＬから約６６ｍｇ／ｍＬは、製剤中の例示的な抗体濃度である。
【０２７１】
ｐＨ緩衝溶液中に抗体を含む水性製剤が調製される。いくつかの実施形態では、本開示の緩衝液は、約５．０から約７．０の範囲のｐＨを有する。いくつかの実施形態では、ｐＨは約５．０から約６．５の範囲にあり、ｐＨは約５．０から約６．４の範囲にあり、約５．０から約６．３の範囲にあり、ｐＨは約５．０から約６．２の範囲にあり、ｐＨは約５．０から約６．１の範囲にあり、ｐＨは約５．５から約６．１の範囲にあり、ｐＨは約５．０から約６．０の範囲にあり、ｐＨは約５．０から約５．９の範囲にあり、ｐＨは約５．０から約５．８の範囲にあり、ｐＨは約５．１から約６．０の範囲にあり、ｐＨは約５．２から約６．０の範囲にあり、ｐＨは約５．３から約６．０の範囲にあり、ｐＨは約５．４から約６．０の範囲にあり、ｐＨは約５．５から約６．０の範囲にあり、ｐＨは約５．６から約６．０の範囲にあり、ｐＨは５．７から約６．０にあり、またはｐＨは約５．８から約６．０の範囲にある。いくつかの実施形態では、製剤は、６．０または約６．０のｐＨを有する。いくつかの実施形態では、製剤は５．９または約５．９のｐＨを有する。いくつかの実施形態では、製剤は５．８または約５．８のｐＨを有する。いくつかの実施形態では、製剤は、５．７または約５．７のｐＨを有する。いくつかの実施形態では、製剤は、５．６または約５．６のｐＨを有する。いくつかの実施形態では、製剤は、５．５または約５．５のｐＨを有する。いくつかの実施形態では、製剤は、５．４または約５．４のｐＨを有する。いくつかの実施形態では、製剤は、５．３または約５．３のｐＨを有する。いくつかの実施形態では、製剤は、５．２または約５．２のｐＨを有する。この範囲内でｐＨを制御するバッファーの例には、ヒスチジン（Ｌ−ヒスチジンなど）または酢酸ナトリウムが含まれる。特定の実施形態では、緩衝液は、約１５ｍＭから約２５ｍＭの濃度で酢酸ヒスチジンまたは酢酸ナトリウムを含む。いくつかの実施形態では、緩衝液には、酢酸ヒスチジンまたは酢酸ナトリウムの濃度が約１５ｍＭ〜約２５ｍＭ、約１６ｍＭ〜約２５ｍＭ、約１７ｍＭ〜約２５ｍＭ、約１８ｍＭ〜約２５ｍＭ、約１９ｍＭ〜約２５ｍＭ、約２０ｍＭ〜約２５ｍＭ、約  ２１ｍＭから約２５ｍＭ、約２２ｍＭから約２５ｍＭ、約１５ｍＭ、約１６ｍＭ、約１７ｍＭ、約１８ｍＭ、約１９ｍＭ、約２０ｍＭ、約２１ｍＭ、約２２ｍＭ、約２３ｍＭ、約２４ｍＭ、または約２５ｍＭである。一実施形態では、緩衝液は、約２０ｍＭ、ｐＨ５．０の量の酢酸ヒスチジンまたは酢酸ナトリウムである。一実施形態では、緩衝液は、約２０ｍＭ、ｐＨ５．１の量の酢酸ヒスチジンまたは酢酸ナトリウムである。一実施形態では、緩衝液は、約２０ｍＭ、ｐＨ５．２の量の酢酸ヒスチジンまたは酢酸ナトリウムである。一実施形態では、緩衝液は、約２０ｍＭ、ｐＨ５．３の量の酢酸ヒスチジンまたは酢酸ナトリウムである。一実施形態では、緩衝液は、約２０ｍＭ、ｐＨ５．４の量の酢酸ヒスチジンまたは酢酸ナトリウムである。一実施形態では、緩衝液は、約２０ｍＭ、ｐＨ５．５の量の酢酸ヒスチジンまたは酢酸ナトリウムである。一実施形態では、緩衝液は、約２０ｍＭ、ｐＨ５．６の量の酢酸ヒスチジンまたは酢酸ナトリ���ムである。一実施形態では、緩衝液は、約２０ｍＭ、ｐＨ５．７の量の酢酸ヒスチジンまたは酢酸ナトリウムである。一実施形態では、緩衝液は、約２０ｍＭ、ｐＨ５．８の量の酢酸ヒスチジンまたは酢酸ナトリウムである。一実施形態では、緩衝液は、約２０ｍＭ、ｐＨ５．９の量の酢酸ヒスチジンまたは酢酸ナトリウムである。一実施形態では、緩衝液は、約２０ｍＭ、ｐＨ６．０の量の酢酸ヒスチジンまたは酢酸ナトリウムである。一実施形態では、緩衝液は、約２０ｍＭ、ｐＨ６．１の量の酢酸ヒスチジンまたは酢酸ナトリウムである。一実施形態では、緩衝液は、約２０ｍＭ、ｐＨ６．２の量の酢酸ヒスチジンまたは酢酸ナトリウムである。一実施形態では、緩衝液は、約２０ｍＭ、ｐＨ６．３の量の酢酸ヒスチジンまたは酢酸ナトリウムである。一実施形態では、緩衝液は、約２５ｍＭ、ｐＨ５．２の量の酢酸ヒスチジンまたは酢酸ナトリウムである。一実施形態では、緩衝液は、約２５ｍＭ、ｐＨ５．３の量の酢酸ヒスチジンまたは酢酸ナトリウムである。一実施形態では、緩衝液は、約２５ｍＭ、ｐＨ５．４の量の酢酸ヒスチジンまたは酢酸ナトリウムである。一実施形態では、緩衝液は、約２５ｍＭ、ｐＨ５．５の量の酢酸ヒスチジンまたは酢酸ナトリウムである。一実施形態では、緩衝液は、約２５ｍＭ、ｐＨ５．６の量の酢酸ヒスチジンまたは酢酸ナトリウムである。一実施形態では、緩衝液は、約２５ｍＭ、ｐＨ５．７の量の酢酸ヒスチジンまたは酢酸ナトリウムである。一実施形態では、緩衝液は、約２５ｍＭ、ｐＨ５．８の量の酢酸ヒスチジンまたは酢酸ナトリウムである。一実施形態では、緩衝液は、約２５ｍＭ、ｐＨ５．９の量の酢酸ヒスチジンまたは酢酸ナトリウムである。一実施形態では、緩衝液は、約２５ｍＭ、ｐＨ６．０の量の酢酸ヒスチジンまたは酢酸ナトリウムである。一実施形態では、緩衝液は、約２５ｍＭ、ｐＨ６．１の量の酢酸ヒスチジンまたは酢酸ナトリウムである。一実施形態では、緩衝液は、約２５ｍＭ、ｐＨ６．２の量の酢酸ヒスチジンまたは酢酸ナトリウムである。一実施形態では、緩衝液は、約２５ｍＭ、ｐＨ６．３の量の酢酸ヒスチジンまたは酢酸ナトリウムである。
【０２７２】
いくつかの実施形態では、製剤は、約６０ｍＭから約２４０ｍＭの量のスクロースをさらに含む。いくつかの実施形態では、製剤中のショ糖は約６０ｍＭ〜約２３０ｍＭ、約６０ｍＭ〜約２２０ｍＭ、約６０ｍＭ〜約２１０ｍＭ、約６０ｍＭ〜約２００ｍＭ、約６０ｍＭ〜約１９０ｍＭ、約６０ｍＭ〜約１８０ｍＭ、約６０ｍＭ〜約１７０ｍＭ、約６０ｍＭ〜約１６０ｍＭ、約６０ｍＭ〜約１５０ｍＭ、約６０ｍＭ〜約１４０ｍＭ、約８０ｍＭ〜約２４０ｍＭ、約９０ｍＭ〜約２４０ｍＭ、約１００ｍＭ〜約２４０ｍＭ、約１１０ｍＭから約２４０ｍＭ、約１２０ｍＭから約２４０ｍＭ、約１３０ｍＭから約２４０ｍＭ、約１４０ｍＭから約２４０ｍＭ、約１５０ｍＭから約２４０ｍＭ、約１６０ｍＭから約２４０ｍＭ、約１７０ｍＭから約２４０ｍＭ、約１８０ｍＭから約２４０ｍＭ、約１９０ｍＭから約２４０ｍＭ、約２００ｍＭから約２４０ｍＭ、約８０ｍＭから約１６０ｍＭ、約１００ｍＭから約１４０ｍＭ、または約１１０ｍＭから約１３０ｍＭである。いくつかの実施形態では、製剤中のショ糖は約６０ｍＭ、約７０ｍＭ、約８０ｍＭ、約９０ｍＭ、約１００ｍＭ、約１１０ｍＭ、約１２０ｍＭ、約１３０ｍＭ、約１４０ｍＭ、約１５０ｍＭ、約１６０ｍＭ、約１７０ｍＭ、約１８０ｍＭ、約１９０ｍＭ、約２００ｍＭ、約２１０ｍＭ、約２２０ｍＭ、約２３０ｍＭ、または約２４０ｍＭである。
【０２７３】
いくつかの実施形態では、製剤中の抗体濃度は、約４０ｍｇ／ｍｌ〜約１２５ｍｇ／ｍｌである。いくつかの実施形態では、製剤中の抗体濃度は４０ｍｇ／ｍｌ〜約１２０ｍｇ／ｍｌ、約４０ｍｇ／ｍｌ〜約１１０ｍｇ／ｍｌ、約４０ｍｇ／ｍｌ〜約１００ｍｇ／ｍｌ、約４０ｍｇ／ｍｌ〜約９０ｍｇ／ｍｌ、約４０ｍｇ／ｍｌ〜約８０ｍｇ／ｍｌ、約４０ｍｇ／ｍｌ〜約７０ｍｇ／ｍｌ、約５０ｍｇ／ｍｌ〜約１２０ｍｇ／ｍｌ、約６０ｍｇ／ｍｌ〜約１２０ｍｇ／ｍｌ、約７０ｍｇ／ｍｌ〜約１２０ｍｇ／ｍｌ、約８０ｍｇ／ｍｌ〜約１２０ｍｇ／ｍｌ、約９０ｍｇ／ｍｌ〜約１２０ｍｇ／ｍｌ、または約１００ｍｇ／ｍｌ〜約１２０ｍｇ／ｍｌである。いくつかの実施形態では、製剤中の抗体濃度は約６０ｍｇ／ｍｌである。いくつかの実施形態では、製剤中の抗体濃度は約６５ｍｇ／ｍｌである。いくつかの実施形態では、製剤中の抗体濃度は約７０ｍｇ／ｍｌである。いくつかの実施形態では、製剤中の抗体濃度は約７５ｍｇ／ｍｌである。いくつかの実施形態では、製剤中の抗体濃度は約８０ｍｇ／ｍｌである。いくつかの実施形態では、製剤中の抗体濃度は約８５ｍｇ／ｍｌである。いくつかの実施形態では、製剤中の抗体濃度は約９０ｍｇ／ｍｌである。いくつかの実施形態では、製剤中の抗体濃度は約９５ｍｇ／ｍｌである。いくつかの実施形態では、製剤中の抗体濃度は約１００ｍｇ／ｍｌである。いくつかの実施形態では、製剤中の抗体濃度は約１１０ｍｇ／ｍｌである。いくつかの実施形態では、製剤中の抗体濃度は約１２５ｍｇ／ｍｌである。
【０２７４】
いくつかの実施形態では、界面活性剤が抗体製剤に添加される。例示の界面活性剤としては、非イオン性界面活性剤、例えば、ポリソルベート（例えば、ポリソルベート２０、８０号）またはポロキサマー（例えば、ポロキサマー１８８等）が挙げられる。界面活性剤の添加量は、製剤化された抗体の凝集を低減し、および／または製剤中の微粒子の形成を最小化し、および／または吸着を低減するような量である。例えば、界面活性剤は、約０．００１％から約０．５％（ｗ／ｖ）の量で製剤中に存在してもよい。いくつかの実施形態では、界面活性剤（例えば、ポリソルベート２０）は約０．００５％から約０．２％、約０．００５％  から約０．１％、約０．００５％から約０．０９％、約  ０．００５％から約０．０８％、約０．００５％から約０．０７％、約０．００５％から約０．０６％、約０．００５％から約０．０５％まで、約０．００５％から約０．０４％まで、約０．００８％から約０．０６％まで、約０．０１％から約０．０６％まで、約０．０２％から約０．０６％まで、約０．０１％から約０．０５％まで、または約０．０２％から約０．０４％までである。特定の実施形態では、界面活性剤（例えば、ポリソルベート２０）は、０．００５％または約０．００５％の量で製剤中に存在する。特定の実施形態では、界面活性剤（例えば、ポリソルベート２０）は、０．００６％または約０．００６％の量で製剤中に存在する。特定の実施形態では、界面活性剤（例えば、ポリソルベート２０）は、０．００７％または約０．００７％の量で製剤中に存在する。特定の実施形態では、界面活性剤（例えば、ポリソルベート２０）は、０．００８％または約０．００８％の量で製剤中に存在する。特定の実施形態では、界面活性剤（例えば、ポリソルベート２０）は、０．００９％または約０．００９％の量で製剤中に存在する。特定の実施形態では、界面活性剤（例えば、ポリソルベート２０）は、０．０１％または約０．０１％の量で製剤中に存在する。特定の実施形態では、界面活性剤（例えば、ポリソルベート２０）は、０．０２％または約０．０２％の量で製剤中に存在する。特定の実施形態では、界面活性剤（例えば、ポリソルベート２０）は、０．０３％または約０．０３％の量で製剤中に存在する。特定の実施形態では、界面活性剤（例えば、ポリソルベート２０）は、０．０４％または約０．０４％の量で製剤中に存在する。特定の実施形態では、界面活性剤（例えば、ポリソルベート２０）は、０．０５％または約０．０５％の量で製剤中に存在する。特定の実施形態では、界面活性剤（例えば、ポリソルベート２０）は、０．０６％または約０．０６％の量で製剤中に存在する。特定の実施形態では、界面活性剤（例えば、ポリソルベート２０）は、０．０７％または約０．０７％の量で製剤中に存在する。特定の実施形態では、界面活性剤（例えば、ポリソルベート２０）は、０．０８％または約０．０８％の量で製剤中に存在する。特定の実施形態では、界面活性剤（例えば、ポリソルベート２０）は、０．１％または約０．１％の量で製剤中に存在する。特定の実施形態では、界面活性剤（例えば、ポリソルベート２０）は、０．２％または約０．２％の量で製剤中に存在する。��定の実施形態では、界面活性剤（例えば、ポリソルベート２０）は、０．３％または約０．３％の量で製剤中に存在する。特定の実施形態では、界面活性剤（例えば、ポリソルベート２０）は、０．４％または約０．４％の量で製剤中に存在する。特定の実施形態では、界面活性剤（例えば、ポリソルベート２０）は、０．５％または約０．５％の量で製剤中に存在する。
【０２７５】
一実施形態では、製剤は、上で定義された薬剤（例えば、抗体、緩衝液、糖、および／または界面活性剤）を含み、ベンジルアルコール、フェノール、ｍ−クレゾール、クロロブタノール、およびベンゼトニウムＣｌ等の１つ以上の保存料を本質的に含まない。別の実施形態では、保存料が製剤中に含まれてもよく、具体的には、製剤は、複数回投与量製剤である。保存料の濃度は、約０．１％〜約２％、好ましくは、約０．５％〜約１％の範囲であり得る。１つ以上の他の薬学的に許容される担体、賦形剤、または安定剤、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  １６ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｏｓｏｌ，Ａ．Ｅｄ．（１９８０）に記載のものが製剤中に含まれ得るが、但し、それらが製剤の所望の特性に悪影響を及ぼさないことを条件とする。許容される担体、賦形剤または安定剤は、使用される投与量および濃度でレシピエントに対して無毒であり、以下を含む：追加の緩衝剤；共溶媒；アスコルビン酸とメチオニンを含む抗酸化剤；ＥＤＴＡなどのキレート剤；金属錯体（例：Ｚｎ−タンパク質複合体）；ポリエステルなどの生分解性ポリマー、および／または塩形成対イオン。本明細書における例示的な薬学的に許容される担体は、可溶性の中性活性ヒアルロニダーゼ糖タンパク質（ｓＨＡＳＥＧＰ）、例えば、ｒＨｕＰＨ２０（ＨＹＬＥＮＥＸ（登録商標）、Ｂａｘｔｅｒ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，Ｉｎｃ．）などのヒト可溶性ＰＨ−２０ヒアルロニダーゼ糖タンパク質などの介在性薬物分散剤をさらに含む。特定の例示的なｓＨＡＳＥＧＰおよび使用方法は、ｒＨｕＰＨ２０を含め、米国特許出願公開第２００５／０２６０１８６号および第２００６／０１０４９６８号に記載される。一態様では、ｓＨＡＳＥＧＰを、１つ以上の更なるグリコサミノグリカナーゼ（例えば、コンドロイチナーゼ）と合わせる。
【０２７６】
本明細書の製剤はまた、治療される特定の適応症に必要な複数のタンパク質、好ましくは他のタンパク質に悪影響を及ぼさない相補的活性を有するものを含み得る。例えば、抗体が抗ＰＤＬ１（例えば、アテゾリズマブ）である場合、それは、別の薬剤（例えば、化学療法剤、および抗腫瘍剤）と組み合わせることができる。
【０２７７】
本明細書に記載の医薬組成物および製剤は、所望の純度を有する有効成分（抗体またはポリペプチドなど）を、凍結乾燥製剤または水溶液の形態の１つまたは複数の任意の薬学的に許容される担体（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  １６ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｏｓｏｌ，Ａ．Ｅｄ．（１９８０））と混合することによって調製することができる。薬学的に許容される担体は一般的に、用いられる投薬量および濃度でレシピエントに対して非毒性であり、リン酸塩、クエン酸塩、および他の有機酸等の緩衝剤、アスコルビン酸およびメチオニンを含む抗酸化物質、防腐剤（塩化オクタデシルジメチルベンジルアンモニウム、塩化ヘキサメトニウム、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、フェノール、ブチル、若しくはベンジルアルコール、メチル若しくはプロピルパラベン等のアルキルパラベン、カテコール、レゾルシノール、シクロヘキサノール、３−ペンタノール、およびｍ−クレゾール等）、低分子量（約１０残基未満）のポリペプチド、血清アルブミン、ゼラチン、若しくは免疫グロブリン等のタンパク質、ポリビニルピロリドン等の親水性ポリマー、グリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニン、若しくはリジン等のアミノ酸、単糖類、二糖類、およびグルコース、マンノース、若しくはデキストリンを含む他の炭水化物、ＥＤＴＡ等のキレート剤、スクロース、マンニトール、トレハロース、若しくはソルビトール等の糖類、ナトリウム等の塩形成対イオン、金属複合体（例えば、Ｚｎ−タンパク質複合体）、並びに／またはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）等の非イオン性界面活性剤を含むが、これらに限定されない。本明細書における例示的な薬学的に許容される担体は、可溶性の中性活性ヒアルロニダーゼ糖タンパク質（ｓＨＡＳＥＧＰ）、例えば、ｒＨｕＰＨ２０（ＨＹＬＥＮＥＸ（登録商標）、Ｂａｘｔｅｒ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，Ｉｎｃ．）などのヒト可溶性ＰＨ−２０ヒアルロニダーゼ糖タンパク質などの介在性薬物分散剤をさらに含む。特定の例示的なｓＨＡＳＥＧＰおよび使用方法は、ｒＨｕＰＨ２０を含め、米国特許出願公開第２００５／０２６０１８６号および第２００６／０１０４９６８号に記載される。一態様では、ｓＨＡＳＥＧＰを、１つ以上の更なるグリコサミノグリカナーゼ（例えば、コンドロイチナーゼ）と合わせる。
【０２７８】
例示的な凍結乾燥した抗体製剤は、米国特許第６，２６７，９５８号に記載される。水性抗体製剤としては、米国特許第６，１７１，５８６号および国際公開第２００６／０４４９０８号に記載されるものが挙げられ、後者の製剤は、酢酸ヒスチジン緩衝液を含む。
【０２７９】
本明細書における組成物および製剤は、治療される特定の適応症に必要な１つより多くの活性成分、好ましくは、互いに悪影響を及ぼさない相補的活性を有するものも含有し得る。かかる活性成分は、意図される目的に有効な量で組み合わせて好適に存在する。
【０２８０】
活性成分はまた、例えば、コアセルベーション技術によって、若しくは界面重合によって調製されたマイクロカプセル、例えば、それぞれ、ヒドロキシメチルセルロース若しくはゼラチンマイクロカプセルおよびポリ−（メチルメタクリレート）マイクロカプセルにより、コロイド薬物送達系（例えば、リポソーム、アルブミンマイクロスフェア、マイクロ乳濁液、ナノ粒子、およびナノカプセル）内、またはマクロ乳濁液中にも取り込まれ得る。そのような技術は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  １６ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｏｓｏｌ，Ａ．Ｅｄ．，１９８０に開示されている。
【０２８１】
徐放性調製物を調製してもよい。徐放性調製物の好適な例としては、抗体を含有する固体疎水性ポリマーの半透性マトリクスが含まれ、これらのマトリクスは、成形物品、例えば、フィルムまたはマイクロカプセルの形態である。インビボ投与に使用される製剤は一般に、滅菌される。滅菌性は、例えば、滅菌濾過膜による濾過によって、容易に達成され得る。
【０２８２】
カルボプラチンおよび／またはエトポシドの医薬製剤は市販されている。たとえば、カルボプラチンは、ＰＡＲＡＰＬＡＴＩＮ（登録商標）を含むさまざまな商品名（本明細書の他の箇所で説明されている）で知られている。エトポシドは、ＶＰ−１６、ＥＴＯＰＯＰＨＯＳ（登録商標）、ＴＯＰＯＳＡＲ（商標）、ＶＥＰＥＳＩＤ（登録商標）など、さまざまな商品名で知られている（本書の他の箇所で説明されている）。いくつかの実施形態では、カルボプラチンおよび／またはエトポシドは、別個の容器に提供される。いくつかの実施形態では、カルボプラチンおよび／またはエトポシドは、それぞれ、市販されている製品と共に入手可能な処方情報に記載されているように、個体への投与のために使用されるおよび／または調製される。
ＶＩＩＩ．治療方法
【０２８３】
本明細書に提供される方法は、ＰＤ−１軸結合アンタゴニスト（例えば、抗ＰＤ−Ｌ１抗体）、白金剤（例えば、カルボプラチン）、およびトポイソメラーゼ阻害剤（例えば、エトポシド）の有効量を個体に投与することからなる、個体における癌（例えば、肺癌、小細胞肺癌、例えば、進展型小細胞肺がん）の治療または進行を遅延させるための方法である。いくつかの実施形態では、この治療は、治療の中止後に個体における持続的応答をもたらす。いくつかの実施形態では、治療は、その個体の無増悪生存期間（ＰＦＳ）および／または全生存期間（ＯＳ）を延長する。本明細書に記載の方法は、癌の治療のための腫瘍免疫原性の増大等の免疫原性の増強が所望される状態の治療における使用を見出し得る。また、本明細書に提供される方法は、（例えば、肺癌、例えば、小細胞肺癌、例えば、進展型小細胞肺がん）を有する個体における免疫機能を増強する方法であって、ＰＤ−１軸結合アンタゴニスト（例えば、抗ＰＤ−Ｌ１抗体）、白金剤（例えば、カルボプラチン）、およびトポイソメラーゼ阻害剤（例えば、エトポシド）の有効量を個体に投与することからなる方法であって、本明細書に提供される。
【０２８４】
いくつかの実施形態では、肺癌は小細胞肺癌（ＳＣＬＣ）である。いくつかの実施形態では、ＳＣＬＣは、ステージ４（ＩＶ）ＳＣＬＣとも呼ばれる、進展型小細胞肺がん（ＥＳ−ＳＣＬＣ）である。いくつかの実施形態では、ＳＣＬＣは、退役軍人局肺研究グループ（Ｖｅｔｅｒａｎｓ  Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ  Ｌｕｎｇ  Ｓｔｕｄｙ  Ｇｒｏｕｐ（ＶＡＬＧ））の病期分類システムに従って、またはそれによって定義されるように、組織学的または細胞学的に確認されたＥＳ−ＳＣＬＣである（例えば、Ｍｉｃｋｅら（２００２）「Ｓｔａｇｉｎｇ  ｓｍａｌｌ  ｃｅｌｌ  ｌｕｎｇ  ｃａｎｃｅｒ．Ｖｅｔｅｒａｎｓ  Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ  Ｌｕｎｇ  Ｓｔｕｄｙ  Ｇｒｏｕｐ  ｖｅｒｓｕｓ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｓｔｕｄｙ  ｏｆ  Ｌｕｎｇ  Ｃａｎｃｅｒ−ｗｈａｔ  ｌｉｍｉｔｓ  ｌｉｍｉｔｅｄ  ｄｉｓｅａｓｅ？  Ｌｕｎｇ  Ｃａｎｃｅｒ  ３７：２７１−６）を参照のこと。）いくつかの実施形態では、ＳＣＬＣは、個体が手術不能であり、限定的または限定的なステージのＳＣＬＣ（Ｌ−ＳＣＬＣまたはＬＳ−ＳＣＬＣ）を有するものとして分類することができない場合、ＥＳ−ＳＣＬＣとして分類される。いくつかの実施形態では、ＥＳ−ＳＣＬＣは検出可能であり、および／または元々患っていた肺の外に広がっている。いくつかの実施形態では、ＥＳ−ＳＣＬＣは、肝臓、副腎、リンパ節および／または脳などの他の（例えば、遠隔の）器官に検出可能であり、および／またはさらに広がっている。いくつかの実施形態では、ＥＳ−ＳＣＬＣは治療が困難である。
【０２８５】
いくつかの実施形態では、個体の予後は不良である。いくつかの実施形態では、個体は、治療を受けていない個体である。いくつかの実施形態において、治療未経験の個体は、例えば、癌、ＳＣＬＣ、またはＥＳ−ＳＣＬＣのために、以前の治療を受けていない個体である。いくつかの実施形態では、治療ナイーブ個体は、ＥＳ−ＳＣＬＣに対する先行治療を受けていない個体である。いくつかの実施形態では、治療ナイーブな個体は、化学療法ナイーブであり、例えば、例えば、癌、ＳＣＬＣ、および／またはＥＳ−ＳＣＬＣの治療のための先行化学療法を受けていない個体である。いくつかの実施形態では、その個体は、ＥＳ−ＳＣＬＣに対する治療を受けていない。いくつかの実施形態では、個体は、ＥＳ−ＳＣＬＣのための先行する全身治療を受けていない。いくつかの実施形態では、個体は、治癒的意図を有する限定的病期ＳＣＬＣ（ＬＳ−ＳＣＬＣ）に対する先行化学放射線療法を受けており、ＥＳ−ＳＣＬＣの診断から最後の化学療法、放射線療法、または化学放射線療法のサイクルから少なくとも６ヶ月間の無治療サイクルを経験している。いくつかの実施形態では、個体は、無症候性の前頭上または小脳中枢神経系（ＣＮＳ）転移を有する。いくつかの実施形態では、個体は、中脳、ポンズ、髄質、または脊髄への転移を有していない。いくつかの実施形態では、個体はＣＮＳ疾患を有し、ＣＮＳ疾患のためのコルチコステロイド治療を必要としない。いくつかの実施形態では、個体は、新たな無症候性転移を有し、ＣＮＳ転移のための放射線療法および／または手術を受けている。いくつかの実施形態では、個体は、ＲＥＣＩＳＴ  ｖ１．１基準に従って／またはＲＥＣＩＳＴ  ｖ１．１基準によって定義された測定可能な疾患を有する（例えば、Ｅｉｓｅｎｈａｕｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（２００９）“Ｎｅｗ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｃｒｉｔｅｒｉａ  ｉｎ  ｓｏｌｉｄ  ｔｕｍｏｒｓ：Ｒｅｖｉｓｅｄ  ＲＥＣＩＳＴ  ｇｕｉｄｅｌｉｎｅ（バージョン１．１）．”  Ｅｕｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ．４５：２２８−２４７を参照のこと）．いくつかの実施形態では、個体は、ＣＤ１３７アゴニストまたは免疫チェックポイント遮断療法、例えば、抗ＰＤ−１抗体または抗ＰＤ−Ｌ１抗体を含むがこれらに限定されない免疫チェックポイント遮断療法による先行治療を受けていない。
【０２８６】
当技術分野で知られているか、または本明細書に記載されているＰＤ−１軸結合アンタゴニスト、白金剤、およびトポイソメラーゼＩＩ阻害剤のいずれかを、本発明の方法に使用することができる。当技術分野で知られているか、または本明細書に記載されているＰＤ−１軸結合アンタゴニスト、白金剤、およびトポイソメラーゼＩＩ阻害剤のいずれかを、本発明の方法に使用することができる。
【０２８７】
いくつかの実施形態では、治療は、導入期および維持期（または「維持療法」）からなる。いくつかの実施形態では、導入期は以下を含む：ＰＤ−１軸結合拮抗薬（例、アテゾリズマブなどの抗ＰＤ−Ｌ１抗体）を１日目に１２００ｍｇの用量で投与し、１日目に５ｍｇ／ｍＬ／分の初期目標曲線下面積（ＡＵＣ）を達成するのに十分な用量の白金剤（例えば、カルボプラチンまたはシスプラチン）を投与し、およびサイクル１〜４の各２１日サイクルの１日目、２日目、および３日目のそれぞれに１００ｍｇ／ｍ２の用量のトポイソメラーゼＩＩ阻害剤（例えば、エトポシド）を投与する。いくつかの実施形態において、維持段階は、サイクル４に続く各２１日サイクルの１日目に１２００ｍｇの用量でＰＤ−１軸結合アンタゴニスト（例えば、アテゾリズマブなどの抗ＰＤ−Ｌ１抗体）を投与することを含む。誘導サイクルおよび維持サイクルを含む例示的な投薬および投与スケジュールを以下の表４に提供する：
2021528438.tif 000008
【０２８８】
いくつかの実施形態において、アテゾリズマブの１２００ｍｇの用量は、１５ｍ／ｋｇの平均体重ベースの用量と同等である。いくつかの実施形態では、５ｍｇ／ｍＬ／分のＡＵＣを達成するために必要なカルボプラチンの用量は、カルバート式に従って計算される（例えば、Ｃａｌｖｅｒｔ  ｅｔ  ａｌ．（１９８９）“Ｃａｒｂｏｐｌａｔｉｎ  ｄｏｓａｇｅ：ｐｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅ  ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａ  ｓｉｍｐｌｅ  ｆｏｒｍｕｌａ  ｂａｓｅｄ  ｏｎ  ｒｅｎａｌ  ｆｕｎｃｔｉｏｎ．”  Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．７：１７４８−５６；ｖａｎ  Ｗａｒｍｅｒｄａｍ  ｅｔ  ａｌ．（１９９５）Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．１２１（８）：４７８−４８６）を参照のこと）。詳細については、以下の例１を参照のこと。
【０２８９】
いくつかの実施形態では、個体の無増悪生存期間（ＰＦＳ）は、Ｅｉｓｅｎｈａｕｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（２００９）“Ｎｅｗ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｃｒｉｔｅｒｉａ  ｉｎ  ｓｏｌｉｄ  ｔｕｍｏｒｓ：Ｒｅｖｉｓｅｄ  ＲＥＣＩＳＴ  ｇｕｉｄｅｌｉｎｅ（Ｖｅｒｓｉｏｎ  １．１）．”  Ｅｕｒ  Ｊ  Ｃａｎｃｅｒ．４５：２２８−４７）に記載されているように、ＲＥＣＩＳＴ  ｖ１．１基準に従って測定される。いくつかの実施形態では、ＰＦＳは、治療の開始から、ＲＥＣＩＳＴ  ｖ１．１基準によって決定される疾患進行の最初の発生までの期間として測定される。いくつかの実施形態では、ＰＦＳは、治療の開始から死亡の時間までの時間として測定される。いくつかの実施形態では、治療は、個体の無増悪生存期間（ＰＦＳ）を、少なくとも４．５、４．７５、５、５．２５、５．５、５．７５または６ヶ月（これらの値の間の任意の範囲を含む）のいずれか１つだけ増加させる。いくつかの実施形態では、治療は、その個体の無増悪生存期間（ＰＦＳ）を少なくとも約５．６ヶ月増加させる。いくつかの実施形態では、治療は、白金剤（例えば、カルボプラチンまたはシスプラチン）およびトポイソメラーゼＩＩ阻害剤（例えば、エトポシド）による治療を受けた肺癌（小細胞肺がんなどの進展型小細胞肺がんなど）を有する個体と比較し、０．５、１、１．２５、１．５、１．７５、２、２．２５、２．５、２．７５、または３ヶ月（これらの値の間の任意の範囲を含む）のうちの少なくとも約１つによって、個体のＰＦＳを増加させる。いくつかの実施形態では、治療は、白金剤（例えば、カルボプラチンまたはシスプラチン）およびトポイソメラーゼＩＩ阻害剤（例えば、エトポシド）による治療を受けた肺癌（小細胞肺癌、例えば、進展型小細胞肺がんなど）を有する個体と比較して、個体のＰＦＳを少なくとも約１．１ヶ月増加させる。
【０２９０】
いくつかの実施形態では、全生存期間（ＯＳ）は、治療開始から死亡までの期間として測定される。いくつかの実施形態では、治療は、１０．５、１０．７５、１１、１１．２５、１１．５、１１．７５、１２、１２．２５、１２．５、１２．７５、１３、１３．２５、１３．５、１３．７５、または１４ヶ月（これらの値の間の任意の範囲を含む）のうちの少なくとも約１つによって、個体のＯＳを増加させる。いくつかの実施形態では、治療は、ＯＳを１４ヶ月以上、例えば、１４．２５ヶ月、１４．５ヶ月、１４．７５ヶ月、１５ヶ月、１５．２５ヶ月、１５．５ヶ月、１５．７５ヶ月、または１５．７５ヶ月以上（これらの値の間の任意の範囲を含む）のうちの約１つによって延長する。いくつかの実施形態では、治療はＯＳを約１５．９ヶ月延長する。いくつかの実施形態では、治療は、白金剤（例えば、カルボプラチンまたはシスプラチン）およびトポイソメラーゼＩＩ阻害剤（例えば、エトポシド）による治療を受けた肺癌（小細胞肺がんなどの進展型小細胞肺がんなど）を有する個体と比較し、０．５、１、１．２５、１．５、１．７５、２、２．２５、２．５、２．７５、または３ヶ月（これらの値の間の任意の範囲を含む）のうちの少なくとも約１つによって、個体のＯＳを増加させる。いくつかの実施形態では、治療は、白金剤（例えば、カルボプラチンまたはシスプラチン）およびトポイソメラーゼＩＩ阻害剤（例えば、エトポシド）による治療を受けた肺癌（小細胞肺がんなどの進展型小細胞肺がんなど）を有する個体と比較し、約３ヶ月、例えば４、４．２５、４．５、４．７５、５、５．２５、５．５、５．７５、６、６．２５、６．５、または６．７５ヶ月（これらの値の間の任意の範囲を含む）のうちの少なくとも約１つによって、個体のＯＳを増加させる。いくつかの実施形態では、治療は、白金剤（例えば、カルボプラチンまたはシスプラチン）およびトポイソメラーゼＩＩ阻害剤（例えば、エトポシド）による治療を受けた肺癌（小細胞肺癌、例えば、進展型小細胞肺がん）を有する個体と比較して、個体のＯＳを約６．６ヶ月増加させる。
【０２９１】
いくつかの実施形態では、個体は、６５歳以上（例えば、約６５歳から約７４歳までの間、約７５歳から約８４歳までの間、または＞８５歳までの間）である。いくつかの実施形態では、個体は、少なくとも約１０、１１、１２、１３、１４、１５、または１６の血液腫瘍突然変異負荷（ｂＴＭＢ）を有する。いくつかの実施形態では、個体は、１６より大きい血液腫瘍突然変異負荷（ｂＴＭＢ）を有する。ｂＴＭＢは、周知の方法を用いて循環腫瘍ＤＮＡ（ｃｔＤＮＡ）のゲノムシークエンシングにより算出された腫瘍ゲノムのコード領域あたりの突然変異の総数を表している。
【０２９２】
いくつかの実施形態では、個体は、例えば、治療開始後１２週間で、１つ以上の肺癌に関連した症状からの緩和を報告する。いくつかの実施形態では、肺癌に関連する症状は、腕の痛み、肩の痛み、胸の痛み、咳、および呼吸困難（すなわち、呼吸困難または呼吸困難）のうちの１つまたは複数である。
【０２９３】
いくつかの実施形態では、個体はヒトである。
【０２９４】
いくつかの実施形態では、個体は、１つ以上のＰＤ−１軸アンタゴニストに耐性を示す（耐性を示すと実証された）癌を有する。いくつかの実施形態では、ＰＤ−１軸アンタゴニストへの耐性は、癌の再発または不応性癌を含む。再発とは、治療後の発症元の部位または新たな部位における癌の再現を指し得る。いくつかの実施形態では、ＰＤ−１軸アンタゴニストへの耐性は、ＰＤ−１軸アンタゴニストでの治療中の癌の進行を含む。いくつかの実施形態では、ＰＤ−１軸アンタゴニストへの耐性は、治療に応答しない癌を含む。癌は、治療開始時に耐性を示し得るか、または治療中に耐性を示すようになり得る。いくつかの実施形態では、癌は早期または後期にある。
【０２９５】
別の態様では、個体は、ＰＤ−Ｌ１バイオマーカーを発現する（例えば、診断試験において、発現することが示された）癌を有する。いくつかの実施形態では、そのような個体は、ＰＤ−Ｌ１陽性  であるか、またはＰＤ−Ｌ１陽性癌を有する。いくつかの実施形態では、個体からのサンプル中の腫瘍細胞（ＴＣ）上（またはその中）でＰＤ−Ｌ１発現（例えば、タンパク質発現）が検出される場合、または個体からのサンプル中の腫瘍浸潤免疫細胞（ＩＣ）上（またはその中）でＰＤ−Ｌ１発現（例えば、タンパク質発現）が検出される場合、個体は「ＰＤ−Ｌ１陽性」であるか、または「ＰＤ−Ｌ１陽性癌」である。いくつかの実施形態では、個体のＴＣおよび／またはＩＣは、低レベルのＰＤ−Ｌ１バイオマーカーを発現する。いくつかの実施形態では、個体のＴＣおよび／またはＩＣは、高レベルのＰＤ−Ｌ１バイオマーカーを発現する。いずれかの方法のいくつかの実施形態では、アッセイおよび／またはキットは、ＰＤ−Ｌ１バイオマーカーが、サンプルの０％以上、サンプルの少なくとも１％、サンプルの少なくとも５％、または個体からのサンプル（例えば、個体のＴＣおよび／またはＩＣを含む個体からのサンプル）の少なくとも１０％において存在する（例えば、ＩＨＣを介して検出される）場合、個体は、ＰＤ−Ｌ１陽性であるか、またはＰＤ−Ｌ１陽性癌を有する。いずれかの方法のいくつかの実施形態では、アッセイおよび／またはキット、サンプル中の（例えば、個体のＴＣおよび／またはＩＣを含む個体からのサンプル中の）ＰＤ−Ｌ１バイオマーカーの存在は、サンプル中の染色の任意のレベルとして検出される。
【０２９６】
これらの方法、アッセイ、および／またはキットのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌ１バイオマーカーは、ＦＡＣＳ、ウエスタンブロット、ＥＬＩＳＡ、免疫沈降、免疫組織化学、免疫蛍光、ラジオイムノアッセイ、ドットブロット法、免疫検出方法、ＨＰＬＣ、表面プラズモン共鳴、光学分光学、質量分光、ＨＰＬＣ、ｑＰＣＲ、ＲＴ−ｑＰＣＲ、多重ｑＰＣＲまたはＲＴ−ｑＰＣＲ、ＲＮＡ−ｓｅｑ、マイクロアレイ分析、ＳＡＧＥ、ＭａｓｓＡＲＲＡＹ技法、およびＦＩＳＨ、ならびにそれらの組み合わせからなる群から選択される方法を使用して試料中で検出される。
【０２９７】
これらの方法、アッセイ、および／またはキットのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌ１バイオマーカーは、タンパク質発現によって試料中で検出される。いくつかの実施形態では、タンパク質発現は、免疫組織化学（ＩＨＣ）によって決定される。いくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌ１バイオマーカーは、抗ＰＤ−Ｌ１抗体を使用して検出される。いくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌ１バイオマーカーは、ＩＨＣによって弱い染色強度として検出される。いくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌ１バイオマーカーは、ＩＨＣによって中程度の染色強度として検出される。いくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌ１バイオマーカーは、ＩＨＣによって強い染色強度として検出される。いくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌ１バイオマーカーは、腫瘍細胞、腫瘍浸潤免疫細胞、間質細胞、およびそれらの任意の組み合わせ中で検出される。いくつかの実施形態では、染色は、膜染色、細胞質染色、またはそれらの組み合わせである。
【０２９８】
いくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌ１バイオマーカーは、抗ＰＤ−Ｌ１ウサギモノクローナル一次抗体を使用して検出される。いくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌ１はホルマリン固定パラフィン包埋サンプルで検出される。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−Ｌ１ウサギモノクローナル一次抗体は、検出可能な標識からなる二次抗体で検出される。いくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌ１を検出するために使用されるアッセイは、ＶＥＮＴＡＮＴＡ  ＰＤ−Ｌ１（ＳＰ１４２）アッセイ（ＶＥＮＴＡＮＴＡ（登録商標）から市販されている）である。
【０２９９】
別の側面において、個体は、ＰＤ−Ｌ１バイオマーカーを発現しないか、または非常に低いレベルのＰＤ−Ｌ１バイオマーカーを発現する癌を有する。いくつかの実施形態では、そのような個体は、ＰＤ−Ｌ１陰性と呼ばれ、または  ＰＤ−Ｌ１陰性癌を有すると呼ばれる。いくつかの実施形態では、個体からのサンプル中の腫瘍細胞（ＴＣ）上（またはＴＣ中）でＰＤ−Ｌ１発現（例えば、タンパク質発現）が検出されない場合、ＰＤ−Ｌ１発現（例えば、タンパク質発現）が、個体からのサンプル中の腫瘍浸潤免疫細胞（ＩＣ）上（またはＩＣ中）で検出されない場合、またはＰＤ−Ｌ１発現（例えば、タンパク質発現）が、個体からのサンプル中の（または中の）ＴＣおよび／またはＩＣ上で非常に低いレベルで検出される場合、個体は「ＰＤ−Ｌ１陰性」であるか、または「ＰＤ−Ｌ１陰性癌」である。いずれかの方法のいくつかの実施形態では、アッセイおよび／またはキット、個体からのサンプル中のＴＣおよび／またはＩＣの０％においてＰＤ−Ｌ１（例えば、ＰＤ−Ｌ１発現）が（例えば、ＩＨＣまたは他のアッセイを介して）検出される場合、個体は「ＰＤ−Ｌ１陰性」であるか、または「ＰＤ−Ｌ１陰性癌」を有する。いずれかの方法、アッセイ、および／またはキットのいくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌ１（例えば、ＰＤ−Ｌ１発現）が（例えば、ＩＨＣまたは他のアッセイを介して）個体からのサンプル中のＴＣおよび／またはＩＣの１％未満で検出される場合、個体は「ＰＤ−Ｌ１陰性」であるか、または「ＰＤ−Ｌ１陰性癌」である。いずれかの方法、アッセイ、および／またはキットのいくつかの実施形態では、「ＰＤ−Ｌ１陰性」とは、例えば、個体のＴＣおよび／またはＩＣを含む個体からのサンプル中に染色がないことを意味する。
【０３００】
ＰＤ−１軸結合アンタゴニスト（アテゾリズマブなど）、白金剤（カルボプラチンなど）、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤（エトポシドなど）は、任意の順序で投与することができる。例えば、ＰＤ−１軸結合アンタゴニスト（アテゾリズマブなど）、白金剤（カルボプラチンなど）、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤（エトポシドなど）は、順次（異なる時期に）投与してもよいし、同時に（同時に）投与してもよい。いくつかの実施形態では、ＰＤ−１軸結合アンタゴニスト（アテゾリズマブなど）、白金剤（カルボプラチンなど）、およびトポイソメラーゼＩＩ阻害剤（エトポシドなど）は、別個の組成物中にある。いくつかの実施形態では、ＰＤ−１軸結合アンタゴニスト（アテゾリズマブなど）、白金剤（カルボプラチンなど）、およびトポイソメラーゼＩＩ阻害剤（エトポシドなど）のうちの１つ以上（またはすべての３つ）が、同一の組成物中に存在する。
【０３０１】
ＰＤ−１軸結合アンタゴニスト（アテゾリズマブなど）、白金剤（カルボプラチンなど）、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤（エトポシドなど）は、同一の投与経路で投与してもよいし、異なる投与経路で投与してもよい。いくつかの実施形態では、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストは、静脈内、筋肉内、皮下、局所、経口、経皮、腹腔内、眼窩内、移植による、吸入による、髄腔内、静脈内、静脈内、または鼻腔内に投与される。いくつかの実施形態では、白金剤（例えば、カルボプラチン）は、静脈内、筋肉内、皮下、局所、経口、経皮、腹腔内、眼窩内、留置、吸入、肝内、腹腔内、静脈内、または経鼻で投与される。いくつかの実施形態では、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤（例えばエトポシド）は、静脈内、筋肉内、皮下、局所、経口、経皮、腹腔内、眼窩内、移植による、吸入による、髄腔内、静脈内、静脈内、または経鼻で投与される。いくつかの実施形態では、ＰＤ−１軸結合アンタゴニスト（アテゾリズマブなど）、白金剤（カルボプラチンなど）、およびトポイソメラーゼＩＩ阻害剤（エトポシドなど）は、点滴を介して投与される。疾患の予防または治療のために、ＰＤ−１軸結合アンタゴニスト（アテゾリズマブなど）、白金剤（カルボプラチンなど）、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤（エトポシドなど）の有効量を投与してもよい。
【０３０２】
いくつかの実施形態において、提供される方法は、個体（例えば、ＥＳ−ＳＣＬＣの治療を受けていない個体）における進展型小細胞肺がん（ＥＳ−ＳＣＬＣ）を治療する方法であって、この方法は、有効量のアテゾリズマブ、カルボプラチン、およびエトポシドを個体に投与することからなる。ここで、投与は導入期と維持期からなり、導入期には、アテゾリズマブを１日目に１２００ｍｇ、カルボプラチンを１日目に５ｍｇ／ｍＬ／分の初期目標曲線下面積（ＡＵＣ）を達成するのに十分な量、エトポシドを１日目、２日目、３日目の各２１日間のサイクルで１〜４日目に１００ｍｇ／ｍ２の用量で投与し、維持期には維持期の投与を行う。いくつかの実施形態では、維持期は、サイクル４に続く各２１日間のサイクルの１日目に１２００ｍｇの用量でアテゾリズマブを投与することからなる。いくつかの実施形態では、方法は、個体のＰＦＳ（例えば、これらの値の間の任意の範囲を含む、４．５、４．７５、５、５．２５、５．５、５．７５、または６ヶ月のうちの少なくとも約１つによって）および／または個体のＯＳ（例えば、１０．５、１０．７５、１１、１１．２５、１１．５、１１．７５、１２、１２．２５、１２．５、１２．７５、１３、１３．２５、１３．５、１３．７５、または１４ヶ月のうちの少なくとも約１つによって、これらの値の間の任意の範囲を含む）を延長する。いくつかの実施形態では、本方法は、白金剤（例えば、カルボプラチンまたはシスプラチン）およびトポイソメラーゼＩＩ阻害剤（例えば、エトポシド）による治療を受けた肺癌（小細胞肺がん、例えば、進展型小細胞肺がんなど）を有する個体と比較して、個体のＰＦＳ（たとえば、少なくとも０．５、１、１．２５、１．５、１．７５、２、２．２５、２．５、２．７５、または３か月のいずれか、これらの値の間の範囲を含む）および／または個体のＯＳ（たとえば、少なくとも０．５、１、１．２５、１．５、１．７５、２、２．２５、２．５、２．７５、または３か月のいずれか、これらの値の間の範囲を含む）を延長する。
【０３０３】
いくつかの実施形態では、アテゾリズマブの投与は、カルボプラチンの投与に続いて行われ、カルボプラチンの投与は、サイクル１〜４のための各２１日間のサイクルの第１日目にエトポシドの投与に続いて行われ、例えば、上記の表４に示されるように、エトポシドの投与に続いて行われる。
【０３０４】
いくつかの実施形態では、アテゾリズマブは、第１日目に６０（±１５分）にわたって静脈内投与され、カルボプラチンは、第１日目に３０〜６０分の期間にわたって静脈内投与され、エトポシドは、最初の２１日間のサイクル（すなわち、サイクル１については）の第１、第２、および第３日目に６０分間の期間にわたって静脈内投与される。いくつかの実施形態では、アテゾリズマブは、第１日目に３０（±１０分）にわたって静脈内投与され、カルボプラチンは、第１日目に３０〜６０分の期間にわたって静脈内投与され、エトポシドは、第２〜４サイクルのための各２１日間のサイクルについて、第１日目、第２日目、および第３日目に６０分の期間にわたって静脈内投与される。いくつかの実施形態では、アテゾリズマブは、サイクル４に続く各２１日周期の第１日目に３０（±１０分）にわたって静脈内投与される。
【０３０５】
一般的な提案として、ヒトに投与される治療有効量の抗体は、１回以上の投与によるかにかかわらず、約０．０１〜約５０ｍｇ／患者の体重ｋｇの範囲であろう。いくつかの実施形態では、使用される本抗体は、約０．０１〜約４５ｍｇ／ｋｇ、約０．０１〜約４０ｍｇ／ｋｇ、約０．０１〜約３５ｍｇ／ｋｇ、約０．０１〜約３０ｍｇ／ｋｇ、約０．０１〜約２５ｍｇ／ｋｇ、約０．０１〜約２０ｍｇ／ｋｇ、約０．０１〜約１５ｍｇ／ｋｇ、約０．０１〜約１０ｍｇ／ｋｇ、約０．０１〜約５ｍｇ／ｋｇ、または約０．０１〜約１ｍｇ／ｋｇであり、例えば、毎日投与される。いくつかの実施形態では、本抗体は、１５ｍｇ／ｋｇで投与される。しかしながら、他の投薬計画が有用であってもよい。一実施形態では、本明細書に記載の抗ＰＤＬ１抗体は、２１日周期の１日目に、約１００ｍｇ、約２００ｍｇ、約３００ｍｇ、約４００ｍｇ、約５００ｍｇ、約６００ｍｇ、約７００ｍｇ、約８００ｍｇ、約９００ｍｇ、約１０００ｍｇ、約１１００ｍｇ、約１２００ｍｇ、約１３００ｍｇ、または約１４００ｍｇの用量でヒトに投与される。用量は、注入物などの、単回用量で、または複数回用量（例えば、２回用量または３回用量）で投与されてもよい。併用治療において投与される本抗体の用量は、単剤治療と比較して減少し得る。この療法の進展は、従来の技法によって容易に監視される。
【０３０６】
いくつかの実施形態では、これらの方法は、さらなる療法をさらに含み得る。追加療法は、放射線療法、手術（例えば、乳腺摘出術および乳房切除術）、化学療法、遺伝子療法、ＤＮＡ療法、ウイルス療法、ＲＮＡ療法、免疫療法、骨髄移植、ナノ療法、モノクローナル抗体療法、または前記の組み合わせであってもよい。さらなる療法は、アジュバント療法またはネオアジュバント療法の形態であり得る。いくつかの実施形態では、さらなる療法は、小分子酵素阻害剤または抗転移薬の投与である。いくつかの実施形態では、さらなる療法は、副作用制限剤（例えば、治療の副作用の発生および／または重症度を軽減するよう意図された薬剤、例えば、制嘔吐剤等）の投与である。いくつかの実施形態では、追加の治療は放射線治療である。いくつかの実施形態では、追加の治療は手術である。いくつかの実施形態では、追加の治療は、放射線治療および手術の組み合わせである。いくつかの実施形態では、追加の治療はガンマ線照射である。
【０３０７】
いくつかの実施形態では、追加の治療は、ＣＴ−０１１（ピディリズマブまたはＭＤＶ９３００としても知られている；ＣＡＳ登録番号１０３６７３０−４２−３；ＣｕｒｅＴｅｃｈ／Ｍｅｄｉｖａｔｉｏｎ）からなる。ＣＴ−０１１は、ｈＢＡＴまたはｈＢＡＴ−１としても知られており、ＷＯ２００９／１０１６１１に記載の抗体である。いくつかの実施形態では、追加の治療薬は、重鎖および軽鎖の配列からなる抗体からなり、ここで：
（ａ）重鎖はアミノ酸配列を含む：ＱＶＱＬＶＱＳＧＳＥＬＫＫＰＧＡＳＶＫＩＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＮＹＧＭＮＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＱＷＭＧＷＩＮＴＤＳＧＥＳＴＹＡＥＥＦＫＧＲＦＶＦＳＬＤＴＳＶＮＴＡＹＬＱＩＴＳＬＴＡＥＤＴＧＭＹＦＣＶＲＶＧＹＤＡＬＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ（配列番号１９）、および
（ｂ）軽鎖はアミノ酸配列を含む：ＥＩＶＬＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＳＡＲＳＳＶＳＹＭＨＷＦＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＷＩＹＲＴＳＮＬＡＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＳＹＣＬＴＩＮＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＲＳＳＦＰＬＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ（配列番号２０）。
【０３０８】
いくつかの実施形態では、追加の治療抗体は、配列番号１９および配列番号２０からの６つのＨＶＲ配列（例えば、配列番号１９からの３つの重鎖ＨＶＲおよび配列番号２０からの３つの軽鎖ＨＶＲ）からなる。いくつかの実施形態では、追加の治療用抗体は、配列番号１９からの重鎖可変ドメインおよび配列番号２０からの軽鎖可変ドメインからなる。本明細書で使用するために企図される他の追加の治療用抗体には、限定されないが、以下のものが含まれる：ａｌｅｍｔｕｚｕｍａｂ（Ｃａｍｐａｔｈ），ｂｅｖａｃｉｚｕｍａｂ（ＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標），Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）；ｃｅｔｕｘｉｍａｂ（ＥＲＢＩＴＵＸ（登録商標），Ｉｍｃｌｏｎｅ）；ｐａｎｉｔｕｍｕｍａｂ（ＶＥＣＴＩＢＩＸ（登録商標），Ａｍｇｅｎ），ｒｉｔｕｘｉｍａｂ（ＲＩＴＵＸＡＮ（登録商標），Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ／Ｂｉｏｇｅｎ  Ｉｄｅｃ），ｐｅｒｔｕｚｕｍａｂ（ＯＭＮＩＴＡＲＧ（登録商標），２Ｃ４，Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ），ｔｒａｓｔｕｚｕｍａｂ（ＨＥＲＣＥＰＴＩＮ（登録商標），Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ），ｔｏｓｉｔｕｍｏｍａｂ（Ｂｅｘｘａｒ，Ｃｏｒｉｘｉａ）、抗体薬物コンジュゲートｇｅｍｔｕｚｕｍａｂ  ｏｚｏｇａｍｉｃｉｎ（ＭＹＬＯＴＡＲＧ（登録商標），Ｗｙｅｔｈ），ａｐｏｌｉｚｕｍａｂ，ａｓｅｌｉｚｕｍａｂ，ａｔｌｉｚｕｍａｂ，ｂａｐｉｎｅｕｚｕｍａｂ，ｂｉｖａｔｕｚｕｍａｂ  ｍｅｒｔａｎｓｉｎｅ，ｃａｎｔｕｚｕｍａｂ  ｍｅｒｔａｎｓｉｎｅ，ｃｅｄｅｌｉｚｕｍａｂ，ｃｅｒｔｏｌｉｚｕｍａｂ  ｐｅｇｏｌ，ｃｉｄｆｕｓｉｔｕｚｕｍａｂ，ｃｉｄｔｕｚｕｍａｂ，ｄａｃｌｉｚｕｍａｂ，ｅｃｕｌｉｚｕｍａｂ，ｅｆａｌｉｚｕｍａｂ，ｅｐｒａｔｕｚｕｍａｂ，ｅｒｌｉｚｕｍａｂ，ｆｅｌｖｉｚｕｍａｂ，ｆｏｎｔｏｌｉｚｕｍａｂ，ｇｅｍｔｕｚｕｍａｂ  ｏｚｏｇａｍｉｃｉｎ，ｉｎｏｔｕｚｕｍａｂ  ｏｚｏｇａｍｉｃｉｎ，ｉｐｉｌｉｍｕｍａｂ，ｌａｂｅｔｕｚｕｍａｂ，ｌｉｎｔｕｚｕｍａｂ，ｍａｔｕｚｕｍａｂ，ｍｅｐｏｌｉｚｕｍａｂ，ｍｏｔａｖｉｚｕｍａｂ，ｍｏｔｏｖｉｚｕｍａｂ，ｎａｔａｌｉｚｕｍａｂ，ｎｉｍｏｔｕｚｕｍａｂ，ｎｏｌｏｖｉｚｕｍａｂ，ｎｕｍａｖｉｚｕｍａｂ，ｏｃｒｅｌｉｚｕｍａｂ，ｏｍａｌｉｚｕｍａｂ，ｐａｌｉｖｉｚｕｍａｂ，ｐａｓｃｏｌｉｚｕｍａｂ，ｐｅｃｆｕｓｉｔｕｚｕｍａｂ，ｐｅｃｔｕｚｕｍａｂ，ｐｅｘｅｌｉｚｕｍａｂ，ｒａｌｉｖｉｚｕｍａｂ，ｒａｎｉｂｉｚｕｍａｂ，ｒｅｓｌｉｖｉｚｕｍａｂ，ｒｅｓｌｉｚｕｍａｂ，ｒｅｓｙｖｉｚｕｍａｂ，ｒｏｖｅｌｉｚｕｍａｂ，ｒｕｐｌｉｚｕｍａｂ，ｓｉｂｒｏｔｕｚｕｍａｂ，ｓｉｐｌｉｚｕｍａｂ，ｓｏｎｔｕｚｕｍａｂ，ｔａｃａｔｕｚｕｍａｂ  ｔｅｔｒａｘｅｔａｎ，ｔａｄｏｃｉｚｕｍａｂ，ｔａｌｉｚｕｍａｂ，ｔｅｆｉｂａｚｕｍａｂ，ｔｏｃｉｌｉｚｕｍａｂ，ｔｏｒａｌｉｚｕｍａｂ，ｔｕｃｏｔｕｚｕｍａｂ  ｃｅｌｍｏｌｅｕｋｉｎ，ｔｕｃｕｓｉｔｕｚｕｍａｂ，ｕｍａｖｉｚｕｍａｂ，ｕｒｔｏｘａｚｕｍａｂ，ｕｓｔｅｋｉｎｕｍａｂ，ｖｉｓｉｌｉｚｕｍａｂおよび抗インターロイキン１２（ＡＢＴ−８７４／Ｊ６９５，Ｗｙｅｔｈ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ａｎｄ  Ａｂｂｏｔｔ  Ｌａｂｏｒ���ｔｏｒｉｅｓ）。
【０３０９】
いくつかの実施形態では、さらなる療法は、ＰＩ３Ｋ／ＡＫＴ／ｍＴＯＲ経路を標的とする療法、ＨＳＰ９０阻害剤、チューブリン阻害剤、アポトーシス阻害剤、および／または化学予防剤である。いくつかの実施形態では、追加治療は、ＣＴＬＡ−４（ＣＤ１５２としても知られている）、例えば、ブロッキング抗体、イピリムマブ（ＭＤＸ−０１０、ＭＤＸ−１０１、またはＹｅｒｖｏｙ（登録商標）としても知られている）、トレメリムマブ（ｔｉｃｉｌｉｍｕｍａｂまたはＣＰ−６７５，２０６としても知られている）、Ｂ７−Ｈ３（ＣＤ２７６としても知られている）に対するアンタゴニスト、例えば、ブロッキング抗体、ＭＧＡ２７１、ＴＧＦβに対するアンタゴニスト、例えば、メテリムマブ（ＣＡＴ−１９２としても知られている）、フレゾリムマブ（ＧＣ１００８としても知られている）またはＬＹ２１５７２９９、Ｔ細胞（例えば、細胞傷害性Ｔ細胞または細胞傷害性Ｔ細胞）の養子移入からなる治療法。キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現するＴ細胞（例えば、細胞障害性Ｔ細胞またはＣＴＬ）を養子に移すことからなる治療法、ドミナントネガティブＴＧＦβ受容体（例えば、ドミナントネガティブＴＧＦβＩＩ型受容体）を発現するＴ細胞を養子に移すことからなる治療法、ＨＥＲＣＲＥＥＭプロトコールを含む治療法（例えば、ＣｌｉｎｉｃａｌＴｒｉａｌｓ．ｇｏｖ  Ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｒ  ＮＣＴ００８８９９５４参照）、ＣＤ１３７（ＴＮＦＲＳＦ９、４−１ＢＢ、またはＩＬＡとしても知られている）に対するアゴニスト、例えば  活性化抗体、ウレルマブ（ＢＭＳ−６６３５１３としても知られている）、ＣＤ４０に対するアゴニスト、例えば、活性化抗体ＣＰ−８７０８９３、ＯＸ４０（ＣＤ１３４としても知られる）に対するアゴニスト、例えば、別のＯＸ４０抗体（例えば、ＡｇｏｎＯＸ）と組み合わせて投与される活性化抗体、ＣＤ２７に対するアゴニスト、例えば、活性化抗体、ＣＤＸ−１１２７、インドールアミン−２，３−ジオキシゲナーゼ（ＩＤＯ）、１−メチル−Ｄ−トリプトファン（１−Ｄ−ＭＴとしても知られる）、抗体−薬物コンジュゲート（いくつかの実施形態では、メルタンシンまたはモノメチルアウリスタチンＥ（ＭＭＡＥ）からなる）。抗ＮａＰｉ２ｂ抗体−ＭＭＡＥコンジュゲート（ＤＮＩＢ０６００ＡまたはＲＧ７５９９としても知られている）、トラスツズマブ・エムタンシン（Ｔ−ＤＭ１、アド−トラスツズマブ・エムタンシン、またはＫＡＤＣＹＬＡ（登録商標）としても知られている、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ社）、ＤＭＵＣ５７５４Ａ、エンドセリンＢ受容体（ＥＤＮＢＲ）を標的とした抗体−薬物コンジュゲート、例えば血管新生阻害剤であるＭＭＡＥとコンジュゲートされたＥＤＮＢＲに対する抗体、ＶＥＧＦに対する抗体、例えば  ＶＥＧＦ−Ａ、ベバシズマブ（ＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標）としても知られている、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ社）、アンジオポエチン２（Ａｎｇ２としても知られている）に対して指示された抗体、ＭＥＤＩ３６１７、抗悪性腫瘍剤、ＣＳＦ−１Ｒ（Ｍ−ＣＳＦＲまたはＣＤ１１５としても知られている）を標的とする薬剤。抗ＣＳＦ−１Ｒ（ＩＭＣ−ＣＳ４としても知られる）、インターフェロン、例えばインター���ェロンαまたはインターフェロンγ、ロフェロン−Ａ、ＧＭ−ＣＳＦ（組換えヒト顆粒球マクロファージコロニー刺激因子、ｒｈｕ  ＧＭ−ＣＳＦ、サルグラモスチム、またはロイキン（登録商標）としても知られる）。ＩＬ−２（アルデスロイキンまたはプロロイキン（登録商標）としても知られる）、ＩＬ−１２、ＣＤ２０を標的とする抗体（いくつかの実施形態では、ＣＤ２０を標的とする抗体は、オビヌツズマブ（ＧＡ１０１またはＧａｚｙｖａ（登録商標）としても知られる）またはリツキシマブである）、ＧＩＴＲを標的とする抗体（いくつかの実施形態では、ＧＩＴＲを標的とする抗体はＴＲＸ５１８である）、癌ワクチン（いくつかの実施形態では、癌ワクチンは、ペプチド癌ワクチンであり、これは、いくつかの実施形態では、パーソナライズされたペプチドワクチンである。いくつかの実施形態では、ペプチド癌ワクチンは、アジュバントと組み合わされた、多価のロングペプチド、マルチペプチド、ペプチドカクテル、ハイブリッドペプチド、またはペプチドパルス化樹状細胞ワクチンである（例えば、Ｙａｍａｄａら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｓｃｉ、１０４：１４−２１、２０１３）参照）、ＴＬＲアゴニスト、例えば、Ｐｏｌｙ−ＩＣＬＣ（Ｈｉｌｔｏｎｏｌ（登録商標）としても知られる）、ＬＰＳ、ＭＰＬ、またはＣｐＧ  ＯＤＮ、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）アルファ、ＩＬ−１、ＨＭＧＢ１、ＩＬ−１０アンタゴニスト、ＩＬ−４アンタゴニスト、ＩＬ−１３アンタゴニスト、ＨＶＥＭアンタゴニスト、ＩＣＯＳアゴニスト、例えば、ＩＣＯＳ−Ｌの投与による、またはＩＣＯＳに対して指示されたアゴニスティック抗体、ＣＸ３ＣＬ１を標的とする治療法、ＣＸＣＬ１０を標的とする治療法、ＣＣＬ５を標的とする治療法、ＬＦＡ−１またはＩＣＡＭ１アゴニスト、セレクチンアゴニスト、標的治療法。Ｂ−Ｒａｆの阻害剤、ベムラフェニブ（ゼルボラフ（登録商標）としても知られる）、ダブラフェニブ（タフィンラ（登録商標）としても知られる）、エルロチニブ（タルセバ（登録商標）としても知られる）、ＭＥＫ１（ＭＡＰ２Ｋ１としても知られる）またはＭＥＫ２（ＭＡＰ２Ｋ２としても知られる）などのＭＥＫの阻害剤。コビメチニブ（ＧＤＣ−０９７３またはＸＬ−５１８としても知られる）、トラメチニブ（メキニスト（登録商標）としても知られる）、Ｋ−Ｒａｓの阻害剤、ｃ−Ｍｅｔの阻害剤、オナルツズマブ（ＭｅｔＭＡｂとしても知られる）、Ａｌｋの阻害剤、ホスファチジルイノシトール３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害剤であるＡＦ８０２（ＣＨ５４２４８０２またはアレクチニブとしても知られている）、ＢＫＭ１２０、イデラリシブ（ＧＳ−１１０１またはＣＡＬ−１０１としても知られている）、ペリフォシン（ＫＲＸ−０４０１としても知られている）、Ａｋｔ、ＭＫ２２０６の阻害剤。ＧＳＫ６９０６９３、ＧＤＣ−０９４１、ｍＴＯＲ阻害剤、シロリムス（ラパマイシンとしても知られている）、テンシロリムス（ＣＣＩ−７７９またはトリセル（登録商標）としても知られている）、エベロリムス（ＲＡＤ００１としても知られている）、リダフォロリムス（ＡＰ−２３５７３としても知られている。ＭＫ−８６６９、またはデフォロリムス）、ＯＳＩ−０２７、ＡＺＤ８０５５、ＩＮＫ１２８、デュアルＰＩ３Ｋ／ｍＴＯＲ阻害剤、ＸＬ７６５、ＧＤＣ−０９８０、ＢＥＺ２３５（ＮＶＰ−ＢＥＺ２３５としても知られている）、ＢＧＴ２２６、ＧＳＫ２１２６４５８、ＰＦ−０４６９１５０２、ＰＦ−０５２１２３８４（ＰＫＩ−５８７としても知られている）などが挙げられる。さらなる療法は、本明細書に記載の化学療法剤のうちの１つ以上であり得る。
ＩＸ．検出および診断方法
【０３１０】
いくつかの実施形態では、サンプルは、ＰＤ−１軸結合アンタゴニスト（例えば、アテゾリズマブ）、白金剤（例えば、カルボプラチン）、およびトポイソメラーゼＩＩ阻害剤（例えば、エトポシド）での処置に先立って得られる。いくつかの実施形態では、組織試料は、ホルマリン固定およびパラフィン包埋試料、アーカイブ試料、新鮮な試料、または凍結試料である。
【０３１１】
いくつかの実施形態では、試料は、全血である。いくつかの実施形態では、全血は、免疫細胞、循環腫瘍細胞、およびそれらの任意の組み合わせを含む。
【０３１２】
バイオマーカー（例えば、ＰＤ−Ｌ１）の存在および／または発現レベル／量は、ＤＮＡ、ｍＲＮＡ、ｃＤＮＡ、タンパク質、タンパク質フラグメントおよび／または遺伝子コピー数を含むがこれらに限定されない、当技術分野で知られている任意の適切な基準に基づいて、定性的および／または定量的に決定することができる。ある特定の実施形態では、第１の試料中のバイオマーカーの存在および／または発現レベル／量が、第２の試料中の存在／不在および／または発現レベル／量と比較して増加または上昇する。ある特定の実施形態では、第１の試料中のバイオマーカーの存在／不在および／または発現レベル／量が、第２の試料中の存在および／または発現レベル／量と比較して減少または低下する。ある特定の実施形態では、第２の試料は、基準試料、基準細胞、基準組織、対照試料、対照細胞、または対照組織である。遺伝子の存在／不在および／または発現レベル／量を決定するためのさらなる開示が本明細書に記載されている。
【０３１３】
これらの方法のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、上昇した発現とは、基準試料、基準細胞、基準組織、対照試料、対照細胞、または対照組織と比較した、本明細書に記載の方法等の標準の当該技術分野で既知の方法によって検出される、バイオマーカー（例えば、タンパク質または核酸（例えば、遺伝子またはｍＲＮＡ））のレベルの約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、またはそれ以上のうちのいずれかの全体的な増加を指す。ある特定の実施形態では、上昇した発現とは、試料中のバイオマーカーの発現レベル／量の増加を指し、この増加は、基準試料、基準細胞、基準組織、対照試料、対照細胞、または対照組織中のそれぞれのバイオマーカーの発現レベル／量の少なくとも約１．５倍、１．７５倍、２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、１０倍、２５倍、５０倍、７５倍、または１００倍のうちのいずれかである。いくつかの実施形態では、上昇した発現とは、基準試料、基準細胞、基準組織、対照試料、対照細胞、対照組織、または内部対照（例えば、ハウスキーピング遺伝子）と比較して、約１．５倍、約１．７５倍、約２倍、約２．２５倍、約２．５倍、約２．７５倍、約３．０倍、または約３．２５倍を超える全体的な増加を指す。
【０３１４】
これらの方法のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、低減した発現とは、基準試料、基準細胞、基準組織、対照試料、対照細胞、または対照組織と比較した、本明細書に記載の方法等の標準の当該技術分野で既知の方法によって検出される、バイオマーカー（例えば、タンパク質または核酸（例えば、遺伝子またはｍＲＮＡ））のレベルの約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、またはそれ以上のうちのいずれかの全体的な低減を指す。ある特定の実施形態では、低減した発現とは、試料中のバイオマーカーの発現レベル／量の減少を指し、この減少は、基準試料、基準細胞、基準組織、対照試料、対照細胞、または対照組織中のそれぞれのバイオマーカーの発現レベル／量の少なくとも約０．９倍、０．８倍、０．７倍、０．６倍、０．５倍、０．４倍、０．３倍、０．２倍、０．１倍、０．０５倍、または０．０１倍のうちのいずれかである。
【０３１５】
試料中の様々なバイオマーカーの存在および／または発現レベル／量は、いくつかの方法論によって分析され得、これらの多くは、当該技術分野で既知であり、当業者に理解されており、免疫組織化学（「ＩＨＣ」）、ウエスタンブロット分析、免疫沈降、分子結合アッセイ、ＥＬＩＳＡ、ＥＬＩＦＡ、蛍光活性化細胞選別（「ＦＡＣＳ」）、ＭａｓｓＡＲＲＡＹ、プロテオミクス、定量的血液ベースのアッセイ（例えば、血清ＥＬＩＳＡ）、生化学的酵素活性アッセイ、インサイツハイブリダイゼーション、サザン分析、ノーザン分析、全ゲノム配列決定、ポリメラーゼ連鎖反応（「ＰＣＲ」）、例えば、定量的リアルタイムＰＣＲ（「ｑＲＴ−ＰＣＲ」）および他の増幅型検出方法、例えば、分岐状ＤＮＡ、ＳＩＳＢＡ、ＴＭＡ等）、ＲＮＡ−Ｓｅｑ、ＦＩＳＨ、マイクロアレイ分析、遺伝子発現プロファイリング、および／または遺伝子発現連続分析（「ＳＡＧＥ」）、ならびにタンパク質、遺伝子、および／または組織アレイ分析によって行われ得る多種多様なアッセイのうちのいずれかを含むが、これらに限定されない。遺伝子および遺伝子生成物の状態を評価するための典型的なプロトコルは、例えば、Ａｕｓｕｂｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，ｅｄｓ．，１９９５，Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  Ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｕｎｉｔｓ  ２（ノーザンブロット法）、４（サザンブロット法）、１５（免疫ブロット法）、および１８（ＰＣＲ分析）において見出される。Ｒｕｌｅｓ  Ｂａｓｅｄ  ＭｅｄｉｃｉｎｅまたはＭｅｓｏ  Ｓｃａｌｅ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ（「ＭＳＤ」）から入手可能なアッセイ等の多重化免疫アッセイも使用され得る。
【０３１６】
いくつかの実施形態では、バイオマーカーの存在および／または発現レベル／量は、（ａ）試料（対象癌試料等）において、遺伝子発現プロファイリング、ＰＣＲ（ｒｔＰＣＲもしくはｑＲＴ−ＰＣＲ等）、ＲＮＡ−ｓｅｑ、マイクロアレイ分析、ＳＡＧＥ、ＭａｓｓＡＲＲＡＹ技法、またはＦＩＳＨを行うことと、ｂ）試料中のバイオマーカーの存在および／または発現レベル／量を決定することとを含む方法を使用して決定される。いくつかの実施形態では、マイクロアレイ方法は、ストリンジェントな条件下で上述の遺伝子をコードする核酸分子にハイブリダイズすることができる１つ以上の核酸分子を有するか、または上述の遺伝子によってコードされるタンパク質のうちの１つ以上に結合することができる１つ以上のポリペプチド（ペプチドもしくは抗体等）を有するマイクロアレイチップの使用を含む。一実施形態では、ＰＣＲ方法は、ｑＲＴ−ＰＣＲである。一実施形態では、ＰＣＲ方法は、多重ＰＣＲである。いくつかの実施形態では、遺伝子発現は、マイクロアレイによって測定される。いくつかの実施形態では、遺伝子発現は、ｑＲＴ−ＰＣＲによって測定される。いくつかの実施形態では、発現は、多重ＰＣＲによって測定される。
【０３１７】
細胞中のｍＲＮＡの評価方法が周知であり、該方法として、例えば、相補的ＤＮＡプローブを使用したハイブリダイゼーションアッセイ（１つ以上の遺伝子に特異的な標識リボプローブを使用したインサイツハイブリダイゼーション、ノーザンブロット、および関連技法等）、ならびに様々な核酸増幅アッセイ（遺伝子のうちの１つ以上に特異的な相補的プライマーを使用したＲＴ−ＰＣＲ、および他の増幅型検出方法、例えば、分岐状ＤＮＡ、ＳＩＳＢＡ、ＴＭＡ等）が挙げられる。
【０３１８】
哺乳動物由来の試料は、ノーザンブロット、ドットブロット、またはＰＣＲ分析を使用してｍＲＮＡについて好都合にアッセイされ得る。加えて、かかる方法は、生物学的試料中の標的ｍＲＮＡのレベルを決定する（例えば、アクチンファミリーメンバー等の「ハウスキーピング」遺伝子の比較対照ｍＲＮＡ配列のレベルを同時に試験することによって）ことを可能にする１つ以上のステップを含み得る。任意に、増幅標的ｃＤＮＡの配列が決定され得る。
【０３１９】
任意の方法は、マイクロアレイ技術によって組織または細胞試料中の標的ｍＲＮＡ等のｍＲＮＡを試験または検出するプロトコルを含む。核酸マイクロアレイを使用して、試験および対照組織試料からの試験および対照ｍＲＮＡ試料を逆転写し、標識して、ｃＤＮＡプローブを生成する。その後、プローブを、固体支持体に固定した核酸のアレイにハイブリダイズする。アレイは、アレイの各メンバーの配列および位置が分かるように構成する。例えば、発現が抗血管新生療法の臨床的利益の増加または低減と相関する様々な遺伝子の選択が固体支持体上にアレイされ得る。特定のアレイメンバーとの標識されたプローブのハイブリダイゼーションは、プローブが由来する試料がその遺伝子を発現することを示す。
【０３２０】
いくつかの実施形態によれば、存在および／または発現レベル／量は、前述の遺伝子のタンパク質発現レベルを観察することによって測定される。ある特定の実施形態では、この方法は、バイオマーカーの結合を許容する条件下で生物学的試料を本明細書に記載のバイオマーカーに対する抗体（例えば、抗ＰＤ−Ｌ１抗体）と接触させることと、複合体が抗体とバイ  オマーカーとの間に形成されるかを検出することとを含む。このような方法は、インビトロ法であっても、またはインビボ法であってもよい。一実施形態では、抗体を使用して、ＰＤ−Ｌ１軸結合アンタゴニストでの療法に適格な対象、例えば、個体の選択のためのバイオマーカーを選択する。
【０３２１】
ある特定の実施形態では、試料中のバイオマーカータンパク質の存在および／または発現レベル／量は、ＩＨＣおよび染色プロトコルを使用して試験される。組織切片のＩＨＣ染色は、試料中のタンパク質の存在を決定または検出する信頼できる方法であることが示されている。これらの方法、アッセイ、および／またはキットのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌ１バイオマーカーは、ＰＤ−Ｌ１である。いくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌ１は、免疫組織化学によって検出される。いくつかの実施形態では、個体由来の試料中のＰＤ−Ｌ１バイオマーカーの発現の増加は、タンパク質発現の増加であり、さらなる実施形態では、ＩＨＣを使用して決定される。一実施形態では、バイオマーカーの発現レベルは、（ａ）抗体を用いた試料（対象癌試料等）のＩＨＣ分析を行うことと、ｂ）試料中のバイオマーカーの発現レベルを決定することとを含む方法を使用して決定される。いくつかの実施形態では、ＩＨＣ染色強度は、基準と比較して決定される。いくつかの実施形態では、基準は、基準値である。いくつかの実施形態では、基準は、基準試料（例えば、対照細胞株染色試料または非癌性患者由来の組織試料）である。
【０３２２】
ＩＨＣは、形態学的染色および／または蛍光インサイツハイブリダイゼーション等のさらなる技法と組み合わせて行われ得る。２つの一般的なＩＨＣ方法、直接アッセイおよび間接アッセイが利用可能である。第１のアッセイに従って、抗体の標的抗原への結合は、直接決定される。この直接アッセイは、さらなる抗体相互作用なしで可視化され得る蛍光タグまたは酵素標識一次抗体等の標識試薬を使用する。典型的な間接アッセイでは、コンジュゲートしていない一次抗体が抗原に結合し、その後、標識二次抗体がその一次抗体に結合する。二次抗体が酵素標識にコンジュゲートする場合、発色基質または蛍光発生基質が添加されて、抗原の可視化をもたらす。複数の二次抗体が一次抗体上の異なるエピトープと反応する可能性があるため、シグナル増幅が起こる。
【０３２３】
ＩＨＣに使用される一次抗体および／または二次抗体は、典型的には、検出可能な部分で標識される。多数の標識が利用可能であり、これらは、一般に、以下のカテゴリーに群分けされ得る：以下に、これらのいくつかのレビューを示す：（ａ）３５Ｓ、１４Ｃ、１２５Ｉ、３Ｈ、１３１Ｉなどの放射性同位元素；（ｂ）コロイド金粒子；（ｃ）希土類キレート（ユーロピウムキレート）、テキサスレッド、ローダミン、フルオレセイン、ダンシル、リサミン、ウンベリフェロン、フィコクリテリン、フィコシアニン、またはＳＰＥＣＴＲＵＭ  ＯＲＡＮＧＥ７およびＳＰＥＣＴＲＵＭ  ＧＲＥＥＮ７などの市販のフルオロフォアを含むがこれらに限定されない蛍光標識および／  または上記のいずれか１つまたは複数の派生物；（ｄ）さまざまな酵素基質ラベルが利用可能であり、および米国特許第４，２７５，１４９号。酵素標識の例としては、ルシフェラーゼ（例えば  ホタルルシフェラーゼおよび細菌性ルシフェラーゼ；米国特許第４，７３７，４５６号）、ルシフェリン、２，３−ジヒドロフタラジンジオン、リンゴ酸デヒドロゲナーゼ、ウレアーゼ、ワサビペルオキシダーゼ（ＨＲＰＯ）などのペルオキシダーゼ、アルカリホスファターゼ、β−ガラクトシダーゼ、グルコアミラーゼ、リゾチーム、サッカライドオキシダーゼ（例えば、グルコースオキシダーゼ、ガラクトースオキシダーゼ、グルコース−６−リン酸デヒドロゲナーゼ）、ヘテロ糖類オキシダーゼ（例えば、ウリカーゼ、キサンチンオキシダーゼなど）、ラクトペルオキシダーゼ、マイクロペルオキシダーゼなどが挙げられる。
【０３２４】
酵素−基質の組み合わせの例としては、例えば基質として水素ペルオキシダーゼを有する西洋ワサビペルオキシダーゼ（ＨＲＰＯ）、発色基質としてパラ−ニトロフェニルリン酸塩を有するアルカリホスファターゼ（ＡＰ）、および発色基質（例えば、ｐ−ニトロフェニル−β−Ｄ−ガラクトシダーゼ）または蛍光発生基質（例えば、４−メチルアンベリフェリル−β−Ｄ−ガラクトシダーゼ）を有するβ−Ｄ−ガラクトシダーゼ（β−Ｄ−Ｇａｌ）が挙げられる。これらの一般的なレビューについては、米国特許第４，２７５，１４９号および第４，３１８，９８０号を参照されたい。
【０３２５】
これらの方法のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌ１は、抗ＰＤ−Ｌ１診断抗体（すなわち、一次抗体）を使用した免疫組織化学によって検出される。いくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌ１診断抗体は、ヒトＰＤ−Ｌ１に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌ１診断抗体は、非ヒト抗体である。いくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌ１診断抗体は、ラット、マウス、またはウサギ抗体である。いくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌ１診断抗体は、モノクローナル抗体である。いくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌ１診断抗体は、直接標識される。
【０３２６】
このようにして調製された検体は、載置かつカバースリップされ得る。その後、スライド評価が、例えば、顕微鏡を使用して決定され、当該技術分野によって常用されている染色強度判断基準が用いられ得る。一実施形態では、腫瘍由来の細胞および／または組織がＩＨＣを使用して試験される場合、染色は、一般に、（試料中に存在する間質または周辺組織とは対照的に）腫瘍細胞および／または組織において決定または評価されることが理解される。いくつかの実施形態では、腫瘍由来の細胞および／または組織がＩＨＣを使用して試験される場合、染色は、腫瘍内または腫瘍周辺免疫細胞等の腫瘍浸潤免疫細胞における決定または評価を含むことが理解される。
【０３２７】
いくつかの実施形態では、ＰＤＬ１発現は、腫瘍または腫瘍試料で評価される。本明細書で使用されるとき、腫瘍または腫瘍試料は、腫瘍細胞によって占有される腫瘍面積の一部または全てを包含し得る。いくつかの実施形態では、腫瘍または腫瘍試料は、腫瘍関連腫瘍内細胞および／または腫瘍関連間質（例えば、隣接腫瘍周辺線維形成性間質）によって占有される腫瘍面積をさらに包含する。腫瘍関連腫瘍内細胞および／または腫瘍関連間質は、主要な腫瘍塊に直接隣接しており、かつ／またはそれと連続している免疫浸潤物（例えば、本明細書に記載の腫瘍浸潤免疫細胞）の面積を含み得る。いくつかの実施形態では、ＰＤＬ１発現は、腫瘍細胞で評価される。いくつかの実施形態では、ＰＤＬ１発現は、腫瘍浸潤免疫細胞等の上述の腫瘍面積内の免疫細胞で評価される。
【０３２８】
代替の方法では、試料は、抗体−バイオマーカー複合体が形成されるのに十分な条件下で該バイオマーカーに特異的な抗体と接触してもよく、その後、複合体を検出する。バイオマーカーの存在は、血漿または血清等の多種多様な組織および試料をアッセイするためのいくつかの方法で、例えば、ウエスタンブロット法およびＥＬＩＳＡ手順によって検出され得る。このようなアッセイ形式を用いた広範囲のイムノアッセイ技術が利用可能であり、例えば、米国特許第４，０１６，０４３号、第４，４２４，２７９号および第４，０１８，６５３号を参照されたい。これらは、従来の競合結合アッセイだけでなく、非競合タイプの１部位および２部位または「サンドイッチ」アッセイの両方を含む。これらのアッセイは、標識された抗体の標的バイオマーカーへの直接結合も含む。
【０３２９】
組織または細胞試料中の選択されたバイオマーカーの存在および／または発現レベル／量も、機能アッセイまたは活性ベースのアッセイによって試験され得る。例えば、バイオマーカーが酵素である場合、当該技術分野で既知のアッセイを行って、組織または細胞試料中の所与の酵素活性の存在を決定または検出することができる。
【０３３０】
ある特定の実施形態では、試料は、アッセイされるバイオマーカーの量の差および使用される試料の質の変動の両方、ならびにアッセイラン間の変動について正規化される。かかる正規化は、周知のハウスキーピング遺伝子等のある特定の正規化バイオマーカーの発現を検出し、かつそれを組み込むことによって達成され得る。代替として、正規化は、アッセイされた遺伝子またはその大サブセットの全ての平均シグナルまたはシグナル中央値に基づき得る（包括的正規化アプローチ）。遺伝子毎に、対象の腫瘍ｍＲＮＡまたはタンパク質の測定された正規化量が、基準セットで見られる量と比較される。対象毎の試験された腫瘍毎の各ｍＲＮＡまたはタンパク質の正規化発現レベルが、基準セットにおける測定された発現レベルの割合として表され得る。分析される特定の対象試料中の測定された存在および／または発現レベル／量がこの範囲内のある百分率で表されるが、これは、当該技術分野で周知の方法によって決定され得る。
【０３３１】
一実施形態では、試料は、臨床試料である。別の実施形態では、試料は、診断アッセイで使用される。いくつかの実施形態では、試料は、原発性腫瘍または転移性腫瘍から得られる。組織生検は、多くの場合、腫瘍組織の代表的な小片を得るために使用される。代替として、腫瘍細胞は、目的とする腫瘍細胞を含有することで知られているか、またはそのように考えられている組織または流体の形態で間接的に得られ得る。例えば、肺癌病変試料は、切除、気管支鏡法、微細針吸引、気管支擦過によって、または痰、胸膜液、もしくは血液から得られ得る。遺伝子または遺伝子産物は、癌もしくは腫瘍組織から、または他の身体試料、例えば、尿、痰、血清、もしくは血漿から検出され得る。癌性試料中の標的遺伝子または遺伝子産物の検出について上で考察された同じ技法が他の身体試料に適用され得る。癌細胞が癌病変から脱落し、かかる身体試料中に現れ得る。かかる身体試料をスクリーニングすることにより、これらの癌の簡単な早期診断が達成され得る。加えて、療法の進展が、かかる身体試料を標的遺伝子または遺伝子産物について試験することによってより容易に監視され得る。
【０３３２】
ある特定の実施形態では、基準試料、基準細胞、基準組織、対照試料、対照細胞、または対照組織は、試験試料が得られたときとは異なる１つ以上の時点で得られる同じ対象または個体由来の単一の試料または組み合わせられた複数の試料である。例えば、基準試料、基準細胞、基準組織、対照試料、対照細胞、または対照組織は、試験試料が得られるよりも早い時点で同じ対象または個体から得られる。かかる基準試料、基準細胞、基準組織、対照試料、対照細胞、または対照組織は、基準試料が癌の初期診断中に得られる場合、かつ癌が転移性癌になったときに試験試料が得られる場合に有用であり得る。
【０３３３】
ある特定の実施形態では、基準試料、基準細胞、基準組織、対照試料、対照細胞、または対照組織は、対象または個体ではない１以上の健常な個体由来の組み合わせられた複数の試料である。ある特定の実施形態では、基準試料、基準細胞、基準組織、対照試料、対照細胞、または対照組織は、対象または個体ではない疾患または障害（例えば、癌）を有する１以上の個体由来の組み合わせられた複数の試料である。ある特定の実施形態では、基準試料、基準細胞、基準組織、対照試料、対照細胞、または対照組織は、正常組織由来のプールされたＲＮＡ試料、または対象もしくは個体ではない１以上の個体由来のプールされた血漿もしくは血清試料である。ある特定の実施形態では、基準試料、基準細胞、基準組織、対照試料、対照細胞、または対照組織は、腫瘍組織由来のプールされたＲＮＡ試料、または対象もしくは個体ではない疾患もしくは障害（例えば、癌）を有する１以上の個体由来のプールされた血漿もしくは血清試料である。
【０３３４】
いくつかの実施形態では、試料は、個体由来の組織試料である。いくつかの実施形態では、組織試料は、腫瘍組織試料（例えば、生検組織）である。いくつかの実施形態では、組織試料は、肺組織である。いくつかの実施形態では、組織試料は、腎組織である。いくつかの実施形態では、組織試料は、皮膚組織である。いくつかの実施形態では、組織試料は、膵臓組織である。いくつかの実施形態では、組織試料は、胃組織である。いくつかの実施形態では、組織試料は、膀胱組織である。いくつかの実施形態では、組織試料は、食道組織である。いくつかの実施形態では、組織試料は、中皮組織である。いくつかの実施形態では、組織試料は、乳房組織である。いくつかの実施形態では、組織試料は、甲状腺組織である。いくつかの実施形態では、組織試料は、結腸直腸組織である。いくつかの実施形態では、組織試料は、頭頸部組織である。いくつかの実施形態では、組織試料は、骨肉腫組織である。いくつかの実施形態では、組織試料は、前立腺組織である。いくつかの実施形態では、組織試料は、卵巣組織、ＨＣＣ（肝臓）、血球、リンパ節、および／または骨／骨髄組織である。いくつかの実施形態では、組織試料は、結腸組織である。いくつかの実施形態では、組織試料は、子宮内膜組織である。いくつかの実施形態では、組織試料は、脳組織（例えば、膠芽細胞腫、神経芽細胞腫等）である。
【０３３５】
いくつかの実施形態では、腫瘍組織試料（「腫瘍試料」という用語は、本明細書で同義に使用される）は、腫瘍細胞によって占有される腫瘍面積の一部または全てを包含し得る。いくつかの実施形態では、腫瘍または腫瘍試料は、腫瘍関連腫瘍内細胞および／または腫瘍関連間質（例えば、隣接腫瘍周辺線維形成性間質）によって占有される腫瘍面積をさらに包含する。腫瘍関連腫瘍内細胞および／または腫瘍関連間質は、主要な腫瘍塊に直接隣接しており、かつ／またはそれと連続している免疫浸潤物（例えば、本明細書に記載の腫瘍浸潤免疫細胞）の面積を含み得る。
【０３３６】
これらの方法のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、疾患または障害は、腫瘍である。いくつかの実施形態では、腫瘍は、悪性癌性腫瘍（すなわち、癌）である。いくつかの実施形態では、腫瘍および／または癌は、固形腫瘍または非固形もしくは軟組織腫瘍である。軟組織腫瘍の例としては、白血病（例えば、慢性骨髄性白血病、急性骨髄性白血病、成人急性リンパ芽球性白血病、急性骨髄性白血病、成熟Ｂ細胞急性リンパ芽球性白血病、慢性リンパ球性白血病、前リンパ球性白血病、もしくはヘアリー細胞白血病）、またはリンパ腫（例えば、非ホジキンリンパ腫、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、もしくはホジキン病）が挙げられる。固形腫瘍は、血液、骨髄、またはリンパ系以外の身体組織の任意の癌を含む。固形腫瘍は、上皮細胞起源のものおよび非上皮細胞起源のものにさらに分類され得る。上皮細胞固形腫瘍の例としては、胃腸管、結腸、結腸直腸（例えば、類基底結腸直腸癌）、乳房、前立腺、肺、腎臓、肝臓、膵臓、卵巣（例えば、類内膜卵巣癌）、頭頸部、口腔、胃、十二指腸、小腸、大腸、肛門、胆嚢、唇、鼻咽頭、皮膚、子宮、男性生殖器、泌尿器官（例えば、尿路上皮癌、異型尿路上皮癌、移行上皮癌）、膀胱、および皮膚の腫瘍が挙げられる。非上皮起源の固形腫瘍としては、肉腫、脳腫瘍、および骨腫瘍が挙げられる。いくつかの実施形態では、癌は、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）である。いくつかの実施形態では、癌は、二次または三次局所進行性または転移性非小細胞肺癌である。いくつかの実施形態では、癌は、腺癌である。いくつかの実施形態では、癌は、扁平上皮癌である。いくつかの実施形態では、癌は、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、膠芽細胞腫、神経芽細胞腫、黒色腫、乳癌（例えば、トリプルネガティブ乳癌）、胃癌、結腸直腸癌（ＣＲＣ）、または肝細胞癌である。いくつかの実施形態では、癌は、原発性腫瘍である。いくつかの実施形態では、癌は、上述の癌型のうちのいずれか由来の第２の部位での転移性腫瘍である。
【０３３７】
これらの方法のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、癌は、ヒトエフェクター細胞を呈する（例えば、ヒトエフェクター細胞によって浸潤される）。例えば、ＩＨＣによる方法等のヒトエフェクター細胞の検出方法が当該技術分野で周知である。いくつかの実施形態では、癌は、高レベルのヒトエフェクター細胞を呈する。いくつかの実施形態では、ヒトエフェクター細胞は、ＮＫ細胞、マクロファージ、単球のうちの１つ以上である。いくつかの実施形態では、癌は、本明細書に記載の任意の癌である。いくつかの実施形態では、癌は、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、膠芽細胞腫、神経芽細胞腫、黒色腫、乳癌（例えば、トリプルネガティブ乳癌）、胃癌、結腸直腸癌（ＣＲＣ）、または肝細胞癌である。
【０３３８】
これらの方法のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、癌は、ＦｃＲを発現する細胞を呈する（例えば、ＦｃＲを発現する細胞によって浸潤される）。例えば、ＩＨＣによる方法等のＦｃＲの検出方法が当該技術分野で周知である。いくつかの実施形態では、癌は、高レベルのＦｃＲを発現する細胞を呈する。いくつかの実施形態では、ＦｃＲはＦｃγＲである。いくつかの実施形態では、ＦｃＲは、活性化ＦｃγＲである。いくつかの実施形態では、癌は、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、膠芽細胞腫、神経芽細胞腫、黒色腫、乳癌（例えば、トリプルネガティブ乳癌）、胃癌、結腸直腸癌（ＣＲＣ）、または肝細胞癌である。
【０３３９】
いくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌ１バイオマーカーは、ＦＡＣＳ、ウエスタンブロット、ＥＬＩＳＡ、免疫沈降、免疫組織化学、免疫蛍光、ラジオイムノアッセイ、ドットブロット法、免疫検出方法、ＨＰＬＣ、表面プラズモン共鳴、光学分光学、質量分光、ＨＰＬＣ、ｑＰＣＲ、ＲＴ−ｑＰＣＲ、多重ｑＰＣＲまたはＲＴ−ｑＰＣＲ、ＲＮＡ−ｓｅｑ、マイクロアレイ分析、ＳＡＧＥ、ＭａｓｓＡＲＲＡＹ技法、およびＦＩＳＨ、ならびにそれらの組み合わせからなる群から選択される方法を使用して試料中で検出される。いくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌ１バイオマーカーは、ＦＡＣＳ分析を使用して検出される。いくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌ１バイオマーカーは、ＰＤ−Ｌ１である。いくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌ１発現は、血液試料中で検出される。いくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌ１発現は、血液試料中の循環免疫細胞で検出される。いくつかの実施形態では、循環免疫細胞は、ＣＤ３＋／ＣＤ８＋Ｔ細胞である。いくつかの実施形態では、分析前に、免疫細胞が血液試料から単離される。細胞選別を含むが、これに限定されない、かかる細胞集団の任意の好適な単離／濃縮方法が使用され得る。いくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌ１発現は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体等のＰＤ−Ｌ１／ＰＤ−１軸経路阻害剤での処置に応答する個体由来の試料中で上昇する。いくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌ１発現は、血液試料中のＣＤ３＋／ＣＤ８＋Ｔ細胞等の循環免疫細胞で上昇する。
【０３４０】
本開示のある特定の態様は、試料中の１つ以上の遺伝子または１つ以上のタンパク質の発現レベルの測定に関する。いくつかの実施形態では、試料は、白血球を含み得る。いくつかの実施形態では、試料は、末梢血試料（例えば、腫瘍を有する患者由来）であり得る。いくつかの実施形態では、試料は、腫瘍試料である。腫瘍試料は、癌細胞、リンパ球、白血球、間質、血管、結合組織、基底膜、および腫瘍に関連する任意の他の細胞型を含み得る。いくつかの実施形態では、試料は、腫瘍浸潤白血球を含有する腫瘍組織試料である。いくつかの実施形態では、試料は、１つ以上の細胞型（例えば、白血球）を分離または単離するように処理され得る。いくつかの実施形態では、試料は、細胞型を分離または単離することなく使用され得る。
【０３４１】
腫瘍試料は、生検、内視鏡検査、または外科的手順を含むが、これらに限定されない当該技術分野で既知の任意の方法によって対象から得られ得る。いくつかの実施形態では、腫瘍試料は、凍結、固定（例えば、ホルマリンもしくは同様の固定剤を使用して）、および／またはパラフィンワックスでの包理等の方法によって調製することができる。いくつかの実施形態では、腫瘍試料が切片化され得る。いくつかの実施形態では、新鮮な腫瘍試料（すなわち、上述の方法によって調製されていない腫瘍試料）が使用され得る。いくつかの実施形態では、腫瘍試料は、ｍＲＮＡおよび／またはタンパク質の完全性を保存するために溶液中でのインキュベーションによって調製することができる。
【０３４２】
いくつかの実施形態では、試料は、末梢血試料であり得る。末梢血試料は、白血球、ＰＢＭＣ等を含み得る。当該技術分野で既知の白血球を末梢血試料から単離するための任意の技法が使用され得る。例えば、血液試料が採取されてもよく、赤血球が溶解されてもよく、白血球ペレットが試料のために単離かつ使用されてもよい。別の例において、密度勾配分離を使用して、白血球（例えば、ＰＢＭＣ）を赤血球から分離することができる。いくつかの実施形態では、新鮮な末梢血試料（すなわち、上述の方法によって調製されていない末梢血試料）が使用され得る。いくつかの実施形態では、末梢血試料は、ｍＲＮＡおよび／またはタンパク質の完全性を保存するために溶液中でのインキュベーションによって調製することができる。
【０３４３】
いくつかの実施形態において、治療に対する応答性は、生存期間（全生存期間および無増悪生存期間を含む）を延長すること、客観的奏効（完全奏効もしくは部分奏効を含む）をもたらすこと、またはがんの徴候もしくは症状を改善することのいずれか１つ以上を指し得る。いくつかの実施形態では、応答性とは、癌患者における腫瘍の状態、すなわち、応答、安定、または進行を決定するための公開された一組のＲＥＣＩＳＴガイドラインに従う１つ以上の要因の改善を指し得る。これらのガイドラインのより詳細な議論については、Ｅｉｓｅｎｈａｕｅｒら、Ｅｕｒ  Ｊ  Ｃａｎｃｅｒ  ２００９；４５：２２８−４７；Ｔｏｐａｌｉａｎら、Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ  ２０１２；３６６：２４４３−５４；Ｗｏｌｃｈｏｋら、Ｃｌｉｎ  Ｃａｎ  Ｒｅｓ  ２００９；１５：７４１２−２０；およびＴｈｅｒａｓｓｅ，Ｐ．ら、Ｊ．Ｎａｔｌ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔ．９２：２０５−１６（２０００）を参照のこと。応答性対象とは、癌（複数可）が、例えば、ＲＥＣＩＳＴ判断基準に基づく１つ以上の要因に従う改善を示す対象を指し得る。非応答性対象とは、癌（複数可）が、例えば、ＲＥＣＩＳＴ判断基準に基づく１つ以上の要因に従う改善を示さない対象を指し得る。
【０３４４】
従来の応答判断基準は、免疫療法薬の抗腫瘍活性を特徴付けるには適切でない場合があり、新たな病変の出現等の最初の明らかな放射線学的進行が先行し得る遅延応答をもたらし得る。したがって、新たな病変の出現の可能性を説明し、かつその後の評価で確認される放射線学的進行を可能にする修正された応答判断基準が開発されている。したがって、いくつかの実施形態では、応答性とは、免疫関連応答判断基準２（ｉｒＲＣ）に従うより多くの要因のうちの１つの改善を指し得る。例えば、Ｗｏｌｃｈｏｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｌｉｎ  Ｃａｎ  Ｒｅｓ  ２００９；１５：７４１２−２０を参照されたい。いくつかの実施形態では、新たな病変は、定義された腫瘍負荷に追加され、例えば、その後の評価での放射線学的進行が続く。いくつかの実施形態では、非標的病変の存在は、完全応答の評価に含まれ、放射線学的進行の評価には含まれない。いくつかの実施形態では、放射線学的進行は、測定可能な疾患のみに基づいて決定され得、かつ／または最初に記録された日から４週間以上の連続評価によって確認され得る。
【０３４５】
いくつかの実施形態では、応答性は、免疫活性化を含み得る。いくつかの実施形態では、応答性は、治療効力を含み得る。いくつかの実施形態では、応答性は、免疫活性化および治療効力を含み得る。
Ｘ．製品またはキット
【０３４６】
本発明の別の実施形態では、ＰＤ−１軸結合アンタゴニスト（アテゾリズマブなど）、白金剤（カルボプラチンなど）および／またはトポシドなどのトポイソメラーゼＩＩ阻害剤からなる製造品またはキットが提供される。いくつかの実施形態では、製造品またはキットは、さらに、個体における癌（例えば、進展型小細胞肺がん（ＥＳ−ＳＣＬＣ）を含む、小細胞肺癌（ＳＣＬＣ）などの肺癌）の治療または進行を遅延させる（例えば、末期の小細胞肺癌（ＥＳ−ＳＣＬＣ）を含む、小細胞肺癌（ＳＣＬＣ）などの肺癌）ため、または癌を有する個体の免疫機能を強化するために、白金剤（カルボプラチンなど）およびトポイソメラーゼＩＩ阻害剤（エトポシドなど）と組み合わせてＰＤ−１軸結合アンタゴニストを使用するための指示書を含むパッケージインサートを含んでいる。当技術分野で知られているＰＤ−１軸結合アンタゴニスト、白金剤、およびトポイソメラーゼＩＩ阻害剤のいずれかを、製造品またはキットに含めることができる。いくつかの実施形態では、キットはアテゾリズマブ、カルボプラチン、およびエトポシドからなる。
【０３４７】
いくつかの実施形態では、ＰＤ−１軸結合アンタゴニスト（アテゾリズマブなど）、白金剤（カルボプラチンなど）、およびトポイソメラーゼＩＩ阻害剤（エトポシドなど）は、同じ容器内にあるか、または別個の容器内にある。好適な容器としては、例えば、ボトル、バイアル、袋、およびシリンジが挙げられる。容器は、ガラス、プラスチック（ポリ塩化ビニルもしくはポリオレフィン等）、または金属合金（ステンレス鋼もしくはハステロイ等）等の様々な材料から形成され得る。いくつかの実施形態では、容器は、製剤を保持し、容器上のラベルまたは容器に関連するラベルは、使用上の指示を示し得る。製品またはキットは、他の緩衝液、希釈剤、フィルター、針、シリンジ、および使用上の指示を有する添付文書等の商業的視点および使用者の視点から望ましい他の材料をさらに含み得る。いくつかの実施形態では、製品は、別の薬剤（例えば、化学療法剤および抗新生物薬）のうちの１つ以上をさらに含む。１つ以上の薬剤に好適な容器としては、例えば、ボトル、バイアル、袋、およびシリンジが挙げられる。
【０３４８】
本明細書は、当業者が本発明を実践することを可能にするのに充分なものであるとみなされる。本明細書に示されて説明される修正に加えて、本発明の様々な修正は、前述の説明から当業者に明らかになり、それらは添付の特許請求の範囲内のものである。本明細書で引用される全ての公報、特許、および特許出願は、あらゆる目的のために参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれる。
【実施例】
【０３４９】
本開示は、以下の実施例を参照することによってより完全に理解されることになる。しかしながら、実施例は、本発明の範囲を限定するものと解釈されるべきではない。本明細書に記載の実施例および実施形態が例証のみを目的とするものであり、それを考慮に入れた様々な修正または変更が当業者に提案されており、本明細書の趣旨および範囲ならびに添付の特許請求の範囲内に含まれるべきであることが理解される。
実施例１：未治療の進展型小細胞肺がん（ＥＳ−ＳＣＬＣ）患者を対象とした、アテゾリズマブ（抗ＰＤ−Ｌ１抗体）の有無にかかわらず、カルボプラチンとエトポシドの第Ｉ／ＩＩＩ相ランダム化二重盲検プラセボ対照試験
【０３５０】
本試験は、化学療法を受けていないＥＳ−ＳＣＬＣ患者において、プラセボ、カルボプラチン、エトポシドと比較して、アテゾリズマブを投与した患者に見られる抗腫瘍効果が、カルボプラチンおよびエトポシドと併用した場合に、統計学的に有意で臨床的に関連性のあるＰＦＳおよびＯＳの改善につながるかどうかを検討することを目的としたものである。この試験では、ＩＴＴ集団におけるアテゾリズマブの有効性を評価し、ＰＤ−Ｌ１発現によるレトロスペクティブ評価や患者転帰との関連性などの探索的免疫エンドポイントを評価することができましたが、これに限定されない。
研究目的
【０３５１】
本試験の主な有効性の目的は以下の通りであった。
●ＲＥＣＩＳＴ  ｖ１．１（例えば、Ｅｉｓｅｎｈａｕｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（２００９）“Ｎｅｗ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｃｒｉｔｅｒｉａ  ｉｎ  ｓｏｌｉｄ  ｔｕｍｏｒｓ：Ｒｅｖｉｓｅｄ  ＲＥＣＩＳＴ  ｇｕｉｄｅｌｉｎｅ（Ｖｅｒｓｉｏｎ  １．１）．”  Ｅｕｒ  Ｊ  Ｃａｎｃｅｒ．４５：２２８−４７を参照のこと）に従って研究者が評価した無増悪生存期間（ＰＦＳ）で測定した、ＩＴＴ集団におけるアテゾリズマブ＋カルボプラチン＋エトポシドの有効性をプラセボ＋カルボプラチン＋エトポシドと比較して評価すること。
●全生存期間（ＯＳ）で測定した、ＩＴＴ集団におけるアテゾリズマブ＋カルボプラチン＋エトポシドの有効性をプラセボ＋カルボプラチン＋エトポシドと比較して評価すること。
【０３５２】
この試験の二次的な有効性の目的は次のとおり：
●ＲＥＣＩＳＴ  ｖ１．１に従って研究者が評価した全体的な奏効率（ＯＲＲ）によって測定された、ＩＴＴ集団におけるアテゾリズマブ＋カルボプラチン＋エトポシドとプラセボ＋カルボプラチン＋エトポシドの有効性を評価すること。
●ＲＥＣＩＳＴ  ｖ１．１に従って研究者が評価した奏効期間（ＤＯＲ）によって測定された、ＩＴＴ集団におけるアテゾリズマブ＋カルボプラチン＋エトポシドの有効性をプラセボ＋カルボプラチン＋エトポシドと比較して評価すること。
●ＩＴＴ集団の各治療群における６か月および１年でのＰＦＳ率を評価すること。ＩＴＴ集団の各治療群における１年および２年のＯＳ率を評価すること。
●ＩＴＴ集団におけるプラセボ＋カルボプラチン＋エトポシドと比較して、アテゾリズマブ＋カルボプラチン＋エトポシドを投与された患者の咳、呼吸困難（単項目および多項目のサブスケール）、胸痛、腕・肩の痛み、または欧州がん研究治療機構（ＥＯＲＴＣ）の生活の質に関する質問−コア３０（ＱＬＱ−Ｃ３０）および補足的な肺がんモジュール（ＱＬＱ−ＬＣ１３）を使用した疲労の患者報告肺がん症状の悪化までの時間（ＴＴＤ）で測定されるアテゾリズマブの影響を調べること。
【０３５３】
本試験の安全性の目的は以下の通りである：
●アテゾリズマブとカルボプラチン＋エトポシドを併用した場合の安全性と忍容性をカルボプラチン＋エトポシドと比較して評価する。
●アテゾリズマブに対する抗治療抗体（ＡＴＡ）の発現率と力価を評価し、免疫原性応答と薬物動態、安全性、有効性との潜在的な関係を探ること。
【０３５４】
本試験の薬物動態学的目的は、化学療法未実施のＥＳ−ＳＣＬＣ患者におけるアテゾリズマブ、カルボプラチン、エトポシドの薬物動態を明らかにすることである。
【０３５５】
本研究の探索的な目的は以下の通りである：
●ＩＴＴ集団におけるアテゾリズマブを含む治療群のＰＦＳ、ＯＲＲ、ＤＯＲをＲＥＣＩＳＴを修正して評価すること。
●免疫組織化学（ＩＨＣ）または定量的逆転写酵素ポリメラーゼ連鎖反応（ｑＲＴ−ＰＣＲ）、次世代シークエンシング（ＮＧＳ）、および／または他の方法および有効性の測定法によって定義される腫瘍バイオマーカー（ＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−１、体細胞突然変異などを含むが、これらに限定されない）の間の関係を評価すること。
●アーカイブおよび／または新鮮な腫瘍組織、血液、血漿および血清中の予測、予後、薬力学的探索的バイオマーカーと、それらの病状、抵抗性のメカニズム、および／または試験治療に対する反応との関連を評価すること。
●ＥｕｒｏＱｏＬ  ５  Ｄｉｍｅｎｓｉｏｎｓ  ５−Ｌｅｖｅｌ（ＥＱ−５Ｄ−５Ｌ）質問紙で評価された患者の健康状態を評価・比較し、償還のための経済モデルで使用するための効用スコアを作成すること。
●欧州がん研究・治療機構（Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ａｎｄ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｑｕａｌｉｔｙ  ｏｆ  Ｌｉｆｅ  Ｑｕｅｓｔｉｏｎｎａｉｒｅｓ  ＥＯＲＴＣ  ＱＬＱ−Ｃ３０およびＬＣ１３）で評価した健康関連ＱＯＬ、肺がん関連症状、身体機能、健康状態の患者報告アウトカム（ＰＲＯ）のベースラインからの変化を測定し、プラセボ＋カルボプラチン＋エトポシドと比較したアテゾリズマブ＋カルボプラチン＋エトポシドの影響を検討すること。
●化学療法（カルボプラチンとエトポシドの両方）が導入療法中および導入後の末梢および腫瘍特異的Ｔ細胞集団に与える影響を評価し、その有効性および安全性の転帰との関係を評価する。
研究デザイン
【０３５６】
以下に記載されている研究デザインは、ＥＳ−ＳＣＬＣを有し、化学療法を受けていない病期の患者を対象に、アテゾリズマブとカルボプラチン＋エトポシドを併用した場合の安全性と有効性を、プラセボ＋カルボプラチン＋エトポシドを併用した場合と比較して評価することを目的とした第Ｉ／ＩＩＩ相多施設共同二重盲検プラセボ対照試験の無作為化試験の詳細を示したものである。図１は、研究のデザインを示している。研究デザインに関する追加の詳細は、以下のスキーマに記載されている。
2021528438.tif 000009
【０３５７】
資格のある患者は、性別（男性  ｖｓ  女性）、ＥＣＯＧ（すなわちＥａｓｔｅｒｎ  Ｃｏｏｐｅｒａｔｉｖｅ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ  Ｇｒｏｕｐ）のパフォーマンスステータス（０  ｖｓ  １）、および脳転移の有無（ｙｅｓ  ｖｓ  ｎｏ）で層別化され、表５に示すように、以下の治療レジメンのいずれかを受けるように１対１で無作為に割り付けられた。ＥＣＯＧパフォーマンスの状態に関する更なる詳細は、Ｏｋｅｎ  ｅｔ  ａｌ．（１９８２）Ａｍ  Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｏｎｃｏｌ．５：６４９−６５５を参照のこと。
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【０３５８】
誘導治療は２１日周期で４サイクル投与された。導入期の後、患者はアテゾリズマブ（アームＡ）またはプラセボ（アームＢ）のいずれかによる維持療法を継続した。維持期では、予防的頭蓋照射が地域の標準治療に従って許可され、予防的頭蓋照射電子症例報告書（ｅＣＲＦ）で報告された。治癒目的または残存病変を排除する目的の胸部放射線療法は許可されなかった。姑息的胸部放射線療法が許可された。表５の治療レジメンの投与および投与スケジュールを以下の表６に示す。
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【０３５９】
臨床的に実行可能であれば、患者はＸ線病変進行時に腫瘍生検サンプルの採取を受けることが推奨された。これらのデータは、Ｘ線所見が腫瘍の存在と一致するかどうかを調べるために使用された。さらに、これらのデータを解析し、腫瘍組織の変化と臨床転帰との関連を評価し、化学療法単独での治療後のそのようなメカニズムと比較して、アテゾリズマブに対する進行および抵抗性の潜在的なメカニズムをさらに理解することを目的とした。この探索的バイオマーカー評価は、治療に関連した決定には使用されなかった。
【０３６０】
すべての患者は、治療用量の遅延にかかわらず、ベースライン時およびサイクル１、１日目から４８週間、６週間ごと（±７日間）に腫瘍評価を受けた。４８週目の腫瘍評価終了後、その後は治療量の遅延にかかわらず、９週目（±７日）ごとに腫瘍評価が必要となった。患者は、ＲＥＣＩＳＴ  ｖ１．１に従ったＸ線画像病変の進行、同意の撤回、スポンサーによる研究の終了、または死亡のいずれか早い方が発生するまで、腫瘍の評価を受けた。
【０３６１】
ＲＥＣＩＳＴ  ｖ１．１に基づいてＸ線像上の病変進行を超えて治療を継続した患者は、６週間（±７日）ごとに腫瘍の評価を受けるか、症状の悪化が認められた場合はそれより早く受けることを継続した。これらの患者に対しては、試験中の時間にかかわらず、試験治療が中止されるまで、６週間（±７日）ごとに腫瘍の評価が継続された。
【０３６２】
ＲＥＣＩＳＴ  ｖ１．１による放射線疾患の進行以外の理由で治療を中止した患者は、患者が新たな抗がん剤治療を開始したかどうかにかかわらず、ＲＥＣＩＳＴ  ｖ１．１．１（例：毒性、症状の悪化）に基づくＸ線撮影病変の進行、同意の撤回、スポンサーによる試験の終了、または死亡のいずれかが先に発生した場合が起こるまで、研究治療を続けた場合（すなわち、第１サイクル１日目から４８週間は６週間［±７日］ごとに、その後は治療用量の遅延にかかわらず９週間［±７日］ごとに）と同じ頻度で、予定された腫瘍評価を継続した。
【０３６３】
試験を早期に中止した場合、アテゾリズマブによる治療で臨床的有用性が認められた患者には、治験責任医師の判断でアテゾリズマブによる治療を継続することが認められた。
評価項目
【０３６４】
本試験の主要な有効性評価指標は以下の通りであある：
●ＰＦＳ、無作為化からＲＥＣＩＳＴ  ｖ１．１を使用して研究者が決定した疾患進行の最初の発生までの時間、または何らかの原因による死亡のいずれか早い方の時間と定義される
●ＯＳ、ランダム化から死に至るまでの時間として定義される。
【０３６５】
本試験の副次的な有効性評価指標は以下の通りである：
●客観的奏効とは、ＲＥＣＩＳＴ  ｖ１．１に従って治験責任医師によって決定されたＰＲまたはＣＲと定義される。
●奏効期間（ＤＯＲ）、文書化された客観的奏効が最初に発現してから、ＲＥＣＩＳＴ  ｖ１．１．１を使用して治験責任医師が決定した疾患進行の時点までの時間間隔、または何らかの原因による死亡のいずれか早い方の時間間隔として定義される。
●６ヶ月時と１年時のＰＦＳ率：
●１年後と２年後のＯＳ率。
●患者が報告した肺がん症状の悪化までの時間（ＴＴＤ）は、ＥＯＲＴＣ  ＱＬＱ−Ｃ３０（Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ａｎｄ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｑｕａｌｉｔｙ  ｏｆ  Ｌｉｆｅ  Ｑｕｅｓｔｉｏｎｎａｉｒｅ  Ｃ３０）およびＥＯＲＴＣ  ＱＬＱ−ＬＣ１３症状サブスケール（Ｂｅｒｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．（１９９４）Ｅｕｒ  Ｊ  Ｃａｎｃｅｒ．３０Ａ（５）：６３５−４２参照のこと）のそれぞれについて、無作為化から悪化（１０ポイントの変化）するまでの時間と定義され、２回の評価または１回の評価の後、３週間以内に何らかの原因で死亡した場合に定義された。
【０３６６】
この研究の安全性アウトカム指標は次のとおりで：
●Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  Ｃｏｍｍｏｎ  Ｔｅｒｍｉｎｏｌｏｇｙ  Ｃｒｉｔｅｒｉａ  ｆｏｒ  Ａｄｖｅｒｓｅ  Ｅｖｅｎｔｓ（ＮＣＩ  ＣＴＣＡＥ）ｖ４．０に従って等級付けされた有害事象の発生率、性質、および重症度。
●治験治療投与中および投与後のバイタルサイン、身体所見、および臨床検査結果の変化。
●アテゾリズマブに対する抗治療抗体（ＡＴＡ）反応の発生率、およびＰＫ、薬力学、安全性、有効性パラメータとの相関性の可能性。
【０３６７】
本試験の薬物動態学的アウトカム指標は以下の通りである：
●注入後の観察された最大血清アテゾリズマブ濃度（Ｃｍａｘ）。
●選択したサイクルでの注入前、治療中止時、およびアテゾリズマブの最終投与後１２０日（±３０日）で観察された最小血清アテゾリズマブ濃度（Ｃｍｉｎ）。
●カルボプラチンの血漿中濃度。
●エトポシドの血漿中濃度。
【０３６８】
この研究の探索的結果の測定値は次のとおり：
●修正されたＲＥＣＩＳＴに従って調査員が決定した客観的レスポンス、ＰＦＳ、およびＤＯＲ。
●アーカイブおよび／または新鮮に得られた腫瘍組織、ならびにアテゾリズマブによる治療前、治療中、または治療後、または進行時に採取された血液（または血液誘導体）中のＰＤ−Ｌ１、免疫、およびＳＣＬＣ関連、およびその他の探索的バイオマーカーの状態、および病状および／またはアテゾリズマブに対する反応との関連。
●ＥＱ−５Ｄ−５Ｌの効用スコア（つまり、一般的な健康状態を測定するための標準化方法。Ｔｈｅ  ＥｕｒｏＱｏｌ  Ｇｒｏｕｐ（１９９０）Ｈｅａｌｔｈ  Ｐｏｌｉｃｙ  １６（３）：１９９−２０８を参照）。
●ＥＯＲＴＣ  ＱＬＱ−Ｃ３０およびＱＬＱ−ＬＣ１３によって評価された、健康関連の生活の質、肺がん関連の症状、身体機能、および健康状態のＰＲＯのベースラインからの変化。
●導入療法中および導入後の末梢および腫瘍特異的Ｔ細胞集団のレベルとタイプの変化、およびその有効性と安全性の結果との関係。
患者
【０３６９】
化学療法を受けておらず、ＥＳ−ＳＣＬＣを患っている患者は、この研究に参加する資格があった。
含有基準
【０３７０】
主要な包含基準は、１８歳以上、ＥＣＯＧパフォーマンスステータスが０または１である；組織学的および細胞学的にも確認されたＥＳ−ＳＣＬＣである（Ｖｅｔｅｒａｎｓ  Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ  Ｌｕｎｇ  Ｓｔｕｄｙ  Ｇｒｏｕｐ（ＶＡＬＧ）の病期分類システムによる；（Ｍｉｃｋｅ  ｅｔ  ａｌ．（２００２）“Ｓｔａｇｉｎｇ  ｓｍａｌｌ  ｃｅｌｌ  ｌｕｎｇ  ｃａｎｃｅｒ：Ｖｅｔｅｒａｎｓ  Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ  Ｌｕｎｇ  Ｓｔｕｄｙ  Ｇｒｏｕｐ  ｖｅｒｓｕｓ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｓｔｕｄｙ  ｏｆ  Ｌｕｎｇ  Ｃａｎｃｅｒ−ｗｈａｔ  ｌｉｍｉｔｓ  ｌｉｍｉｔｅｄ  ｄｉｓｅａｓｅ？”  Ｌｕｎｇ  Ｃａｎｃｅｒ  ３７：２７１−６）；ＥＳ−ＳＣＬＣに対する全身治療の既往歴がない；限局期ＳＣＬＣに対して以前に化学放射線療法を受けたことのある患者は、治癒を目的とした治療を受けていなければならず、広汎期ＳＣＬＣと診断されてから最後の化学療法、放射線療法、または化学放射線療法サイクルから少なくとも６ヶ月間の無治療期間を経験していなければならない；無症状の中枢神経系転移の治療歴のある患者は、（ａ）転移が大脳上および／または小脳（すなわち、中脳、小脳、髄膜、脊髄への転移がないこと、（ｂ）中枢神経系疾患の治療としてコルチコステロイドを継続的に必要としていないこと、（ｃ）中枢神経系の治療が終了してから無作為化されるまでの間に中間進行の証拠がないこと、（ｄ）スクリーニング検査で新たに無症状の中枢神経系転移が検出された患者は、中枢神経系転移に対する放射線治療および／または手術を受けなければならないこと、である；ＲＥＣＩＳＴ  ｖ１．１で定義された測定可能な病変（以前に照射された病変は、放射線照射後にその部位で病変の進行が明確に記録されており、以前に照射された病変が唯一の病変部位ではない場合にのみ測定可能な病変とみなされる）；ランダム化前１４日以内に得られた以下の臨床検査結果によって十分な血液学的および末梢臓器機能がある：
○顆粒球コロニー刺激因子支持なしでＡＮＣが≧１５００細胞／μＬ。
○リンパ球数≧５００／μＬ。
○輸血なしで血小板数≧１０万／μＬ。
○ヘモグロビン≧９．０ｇ／ｄＬ。（患者はこの基準を満たすために輸血を許可される）。
○ＩＮＲまたはａＰＴＴが≦１．５Ｘ正常範囲の上限（ＵＬＮ）。（これは抗凝固療法を受けていない患者にのみ適用される。抗凝固療法を受けている患者は安定した用量である必要がある）。
○ＡＳＴ、ＡＬＴ、およびアルカリホスファターゼが≦２．５ＸＵＬＮ。ただし、次の例外がある：
●肝転移が記録されている患者：ＡＳＴおよび／またはＡＬＴが≦５ＸＵＬＮ。
●記録された肝臓転移または骨転移を有する患者：アルカリホスァターゼが≦５ＸＵＬＮ。
○血清ビリルビンが≦１．２５ＸＵＬＮ。（血清ビリルビンレベル≦３Ｘ  ＵＬＮの既知のギルバート病の患者は登録させる。）
○血清クレアチニンが≦１．５ＸＵＬＮ。
【０３７１】
患者は、無作為化の前または４週間以内に治療前の腫瘍組織サンプルを提出する必要がある。（利用可能な腫瘍組織サンプルを提出することができる。）
除外基準
【０３７２】
主な除外基準は次のとおりである：スクリーニング時のＣＴ（コンピュータ断層撮影）またはＭＲＩ（磁気共鳴画像法）による評価および事前の放射線評価で決定された活動性または未治療の中枢神経系転移、手術および／または放射線による治療が確定的でない脊髄圧迫、または以前に脊髄圧迫と診断され治療を受けたことがあり、無作為化の≧１週間前から臨床的に安定していたという証拠のない脊髄圧迫、下腿神経疾患、制御不能な胸水、心嚢液貯留、または腹水があり、再発のドレナージ処置を必要とする場合（月１回またはそれ以上の頻度であるが、留置カテーテル（例：ＰｌｅｕｒＸ（登録商標））を使用している患者はドレナージの頻度に関係なく許可された。；制御不能または症候性の高カルシウム血症（無作為化前にデノスマブを投与されていた患者は、適格であれば、試験中はデノスマブの使用を中止し、ビスフォスフォネートに置き換える必要があった）；無作為化前５年以内にＳＣＬＣ以外の悪性腫瘍があった場合、転移または死亡のリスクが無視できるものを除いて（例：予想５年ＯＳ＞９０％）。完治が期待される治療を受けた悪性腫瘍（適切に治療された子宮頸がん、基底または扁平上皮がん、治癒の意図をもって外科的治療を受けた限局性前立腺がん、治癒の意図をもって外科的治療を受けた限局性管がんなど）；試験期間中に妊娠していた、授乳中であった、または妊娠を意図していた女性。重症筋無力症、筋炎、自己免疫性肝炎、全身性エリテマトーデス、関節リウマチ、炎症性腸疾患、抗リン脂質症候群に伴う血管血栓症を含むがこれらに限定されない自己免疫疾患の既往歴；妊娠中、授乳中、または試験中に妊娠を予定していた女性；重症筋無力症、筋炎、自己免疫性肝炎、全身性エリテマトーデス、関節リウマチ、炎症性腸疾患、抗リン脂質症候群に伴う血管血栓症の既往歴。ウェゲナー肉芽腫症、シェーグレン症候群、ギラン・バレー症候群、多発性硬化症、血管炎、または糸球体腎炎（甲状腺補充ホルモン療法を受けている自己免疫関連甲状腺機能低下症の既往歴のある患者が対象となった。インスリンレジメンでコントロールされたＩ型糖尿病の患者は対象となった）；特発性肺線維症、組織性肺炎の既往歴（例えば、特発性肺線維症、組織性肺炎（例：閉塞性気管支炎等）、薬剤性肺炎、特発性肺炎、またはスクリーニング胸部ＣＴスキャンでの活動性肺炎の証拠。放射線分野での放射線肺炎の既往歴（線維化）は認められた）；ＨＩＶに対する陽性検査結果；活動性Ｂ型肝炎（慢性または急性；スクリーニング時にＢ型肝炎表面抗原［ＨＢｓＡｇ］検査結果が陽性であったことと定義）またはＣ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）を有する患者；活動性結核。感染症の合併症、菌血症、または重度の肺炎のための入院を含むがこれらに限定されないランダム化時の重度の感染症；ニューヨーク心臓協会心疾患（クラスＩＩ以上）、心筋梗塞、またはランダム化前３ヶ月以内の脳血管事故などの重度の心血管系疾患、不安定な不整脈、または不安定狭心症。冠動脈疾患、うっ血性心不全で上記の基準を満たさない患者、または左室駆出率＜５０％の患者は、適切な場合には循環器専門医と相談の上、治療担当医師の意見に基づいて最適化された安定した医療レジメンを受けていることが必要とされた）；無作為化前２８日以内の診断以外の大手術、または試験期間中に大手術が必要となることが予想される大手術。同種骨髄移植または固形臓器移植を受けたことのある患者；治験薬の使用を禁忌とする疾患または状態の合理的な疑いを与えるその他の疾患、代謝機能障害、身体検査所見、または臨床検査所見；治験薬の結果の解釈に影響を与えた可能性のある、または治療合併症のリスクが高い患者；治験手順を理解し、遵守し、および／または遵守する能力を妨げる疾患または状態のある患者。無作為化の２８日前までに治療目的で他の治験薬を使用した場合；無作為化の４週間前までに生ワクチンを投与した場合、または試験中に生ワクチンが必要になると予想される場合；ＣＤ１３７アゴニストまたは免疫チェックポイント遮断療法、抗−ＰＤ−１抗体、抗−ＰＤ−Ｌ１抗体を使用した治療歴のある場合。無作為化前１週間以内に全身性免疫抑制剤（コルチコステロイド、シクロホスファミド、アザチオプリン、メトトレキサート、サリドマイド、抗腫瘍壊死因子［抗ＴＮＦ］剤を含むが、これらに限定されない）による治療を受けていること。キメラ化またはヒト化抗体または融合タンパク質に対する重度のアレルギー反応、アナフィラキシー反応、またはその他の過敏症反応の既往歴；チャイニーズハムスター卵巣細胞で生産されたバイオ医薬品またはアテゾリズマブ製剤のいずれかの成分に対する既知の過敏症またはアレルギー；およびカルボプラチンまたはエトポシドに対するアレルギー反応の既往歴。
治療方法
【０３７３】
４０３人の患者が、アテゾリズマブ＋カルボプラチン＋エトポシド（Ａ群）またはプラセボ＋カルボプラチン＋エトポシド（Ｂ群）の治療を受けるように無作為（１：１）に割り付けられた。（Ａ群およびＢ群の治療の詳細は上記の表５に示される）。患者の気質を下の表７に示し、患者の人口統計とベースライン特性を下の表８に示す。（表７および８では、ＰＢＯ＋ＣＥ＝プラセボ＋カルボプラチン＋エトポシド。アテゾ＋ＣＥ＝アテゾリズマブ＋カルボプラチン＋エトポシド。）
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【０３７４】
可能であれば、患者は無作為化の日に治験薬の最初の投与を受けた。これができなかった場合、最初の投与は無作為化後５日以内に発生した。アテゾリズマブとプラセボはスポンサーから供給された。カルボプラチンとエトポシドは背景治療であり、非試験的医薬品（ＮＩＭＰ）とされていた。市販の製剤では、カルボプラチンおよびエトポシドを使用した。
【０３７５】
本試験の導入期は、アテゾリズマブ／プラセボと化学療法を４サイクル行い、各サイクルの期間は２１日間であった。図１を参照されたい。各サイクルの１日目に、対象となるすべての患者に以下の順序で試験薬の輸液を行った。
Ａ群：アテゾリズマブ→カルボプラチン→エトポシド
Ｂ群：プラセボ→カルボプラチン→エトポシド
【０３７６】
導入期において、試験治療は、１日目に以下の方法で実施した。
１．アテゾリズマブ／プラセボ（１２００ｍｇ、平均体重ベースの用量１５ｍｇ／ｋｇに相当）を、６０分（±１５分）かけて静脈内投与（最初の注入では３０分［±１０分］に短縮）、
２．続いてカルボプラチンを３０〜６０分かけて静脈内投与し、５ｍｇ／ｍＬ／分の濃度−時間曲線（ＡＵＣ）で初期目標面積を達成し（カルバート式投与）、
３．続いてエトポシド（１００ｍｇ／ｍ２）を６０分かけて静脈内投与した。
【０３７７】
ＡＵＣ  ５のカルボプラチン用量は、Ｃａｌｖｅｒｔ式（Ｃａｌｖｅｒｔ  ｅｔ  ａｌ．（１９８９）Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｏｎｃｏｌ  ７：１７４８−５６）を用いて計算した；
カルバート式；
総投与量（ｍｇ）＝（目標ＡＵＣ）Ｘ（糸球体濾過率［ＧＦＲ］＋２５）
【０３７８】
ＡＵＣ  ベースの投与量を計算するためにカルバート式で使用した  ＧＦＲ  は  １２５ｍＬ／分を超えないようにする。本プロトコルの目的のために、ＧＦＲはクレアチニンクリアランス（ＣＲＣＬ）と同等であると考えられた。ＣＲＣＬは、機関のガイドラインにより、またはＣｏｃｋｃｒｏｆｔ  ａｎｄ  Ｇａｕｌｔ（１９７６）Ｎｅｐｈｒｏｎ  １６：３１−４１に記載されている方法により、以下の式を用いて計算される。
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【０３７９】
式中、ＣＲＣＬ＝クレアチニンクリアランス  ｍＬ／分
年齢＝患者の年齢（年）
体重＝患者の体重  ｋｇ
Ｓｃｒ＝血清クレアチニン  ｍｇ／ｄＬ
【０３８０】
血清クレアチニンレベルが異常に低い患者の場合、最小クレアチニンレベル０．８ｍｇ／ｄＬを使用してＧＦＲを推定するか、推定ＧＦＲを１２５ｍＬ／分に制限した。過量投与による潜在的な毒性を避けるために、医師はカルボプラチンの希望曝露量（ＡＵＣ）に上限を設けることが推奨された。カルボプラチンのラベルに記載されているカルバート式に基づき、最大投与量を以下のように算出した。
カルボプラチンの最大投与量（ｍｇ）＝目標ＡＵＣ（ｍｇＸ分／ｍＬ）Ｘ（ＧＦＲ＋２５ｍＬ／分）
【０３８１】
最大投与量は、腎機能が正常な患者の場合、１２５ｍＬ／分を上限とするＧＦＲ推定値に基づく。より高い推定ＧＦＲ値は使用しなかった。目標ＡＵＣ＝５の場合、最大投与量は５Ｘ１５０＝７５０ｍｇ  であった。目標ＡＵＣ＝４の場合、最大投与量は４Ｘ１５０＝６００ｍｇであった。カルボプラチンの投与に関する詳細は、ｗｗｗ．ｆｄａ．ｇｏｖ／ａｂｏｕｔｆｄａ／ｃｅｎｔｅｒｓｏｆｆｉｃｅｓ／ｏｆｆｉｃｅｏｆｍｅｄｉｃａｌｐｒｏｄｕｃｔｓａｎｄｔｏｂａｃｃｏ／ｃｄｅｒ／ｕｃｍ２２８９７４．ｈｔｍ  に記載されている。
【０３８２】
導入期には、エトポシド（１００ｍｇ／ｍ２）を２日目および３日目にも６０分かけて静脈内投与した。化学療法が行われなかったサイクルは、導入化学療法サイクルの総数にはカウントされなかった。導入期の後、アテゾリズマブ／プラセボによる維持療法を開始した。（すなわち、１２００ｍｇを、その後の２１日周期ごとの第１日目に、上述のように注入する。図１および上述の試験スキーマを参照のこと）。アテゾリズマブ／プラセボの用量変更は認められなかった。
腫瘍と応答の評価
【０３８３】
スクリーニング評価には、コンピュータ断層撮影（ＣＴ）スキャン（禁忌でない限り経口／ＩＶ型造影）または胸部および腹部の磁気共鳴画像（ＭＲＩ）が含まれていた。スクリーニング時に骨盤のＣＴまたはＭＲＩスキャンが必要とされ、その後の対応評価では臨床的に指示された通り、または局所的な標準治療の通りに行われた。胸部のスパイラルＣＴスキャンは可能であれば取得したが、必須ではなかった。
【０３８４】
すべての患者で中枢神経系転移を評価するために、スクリーニング時に頭部のＣＴ（禁忌の場合は造影剤を使用）またはＭＲＩ検査が必要であった。脳のＭＲＩスキャンは、スキャンが不明確な場合のベースラインでの中枢神経系転移の診断の確認または反論に必要であった。活動性または未治療の中枢神経系転移を有する患者は、本試験の対象とはならなかった（除外基準を参照）。
【０３８５】
腫瘍評価のためのＣＴスキャンを陽電子放出断層撮影（ＰＥＴ）／ＣＴスキャナーで実施した場合、ＣＴ取得は完全造影診断用ＣＴスキャンの基準と一致していることが求められた。
【０３８６】
臨床的に必要とされる場合には、骨スキャンおよび頸部のＣＴスキャンも実施された。研究者の裁量で、ＲＥＣＩＳＴ  ｖ１．１に従った測定可能な疾患の他の評価方法が使用された。
【０３８７】
検査を繰り返すのではなく、インフォームドコンセントを得る前に標準治療として実施された腫瘍評価を、サイクル１の２８日目から１日目までの間に使用することが許容された。スクリーニング時の既知の疾患部位のすべての文書化が必要であり、その後の腫瘍評価のたびに再評価された文書化が必要であった。スクリーニング時に疾患部位を評価するために使用されたレントゲン撮影法は、研究全体を通して同じであるべきである（例えば、ＣＴスキャンの造影プロトコールは同じである）。応答は、ＲＥＣＩＳＴ  ｖ１．１（Ｅｉｓｅｎｈａｕｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（２００９）Ｎｅｗ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｃｒｉｔｅｒｉａ  ｉｎ  ｓｏｌｉｄ  ｔｕｍｏｒｓ：Ｒｅｖｉｓｅｄ  ＲＥＣＩＳＴ  ｇｕｉｄｅｌｉｎｅ（Ｖｅｒｓｉｏｎ  １．１）．Ｅｕｒ  Ｊ  Ｃａｎｃｅｒ．４５：２２８−４７を参照のこと）を参照）および修正されたＲＥＣＩＳＴ基準を用いて、治験責任医師により評価された。修正されたＲＥＣＩＳＴ基準は、ＲＥＣＩＳＴ  ｖ１．１（Ｅｉｓｅｎｈａｕｅｒ  ｅｔ  ａｌ．；Ｔｏｐａｌｉａｎ  ｅｔ  ａｌ．（２０１２）Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ．３６６：２４４３−５４；ａｎｄ  Ｗｏｌｃｈｏｋ  ｅｔ  ａｌ．（２００９）Ｃｌｉｎ  Ｃａｎ  Ｒｅｓ  １５：７４１２−２０）および免疫関連の応答基準（Ｗｏｌｃｈｏｉｋ  ｅｔ  ａｌ．；Ｎｉｓｈｉｎｏ  ｅｔ  ａｌ．（２０１４）Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ  Ｃａｎ．２：１７；ａｎｄ  Ｎｉｓｈｉｎｏ  ｅｔ  ａｌ．（２０１３）Ｃｌｉｎ  Ｃａｎ  Ｒｅｓ．１９：３９３６−４３）から導き出されました。評価は、可能であれば同じ評価者によって行われ、訪問先間での内部の一貫性を確保した。結果は、次のサイクルでの投与前に治験責任医師によって検討された。
【０３８８】
患者は、治療用量の遅延に関係なく、ベースライン時およびサイクル１、１日目から４８週間、６週間ごと（±７日間）に腫瘍評価を受けた。４８週間の腫瘍評価の完了後、腫瘍の評価は、治療用量の遅延にかかわらず、その後は９週間（±７日）ごとに必要とされた。患者は、ＲＥＣＩＳＴ  ｖ１．１に従ったＸ線画像病変の進行、同意の撤回、スポンサーによる研究の終了、または死亡のいずれか早い方が発生するまで、腫瘍の評価を受けた。ＲＥＣＩＳＴ  ｖ１．１に基づいてＸ線像上の病変進行を超えて治療を継続した患者は、６週間（±７日）ごとに腫瘍の評価を受けるか、症状の悪化が認められた場合はそれより早く受けることを継続した。これらの患者に対しては、試験中の時間に関係なく、試験治療が中止されるまで、６週間（±７日）ごとに腫瘍の評価が継続された。
【０３８９】
ＲＥＣＩＳＴ  ｖ１．１．１に基づくＸ線病変進行以外の理由で治療を中止した患者は、ＲＥＣＩＳＴ  ｖ１．１．１（例：毒性、症状の悪化）に基づくＸ線病変進行、同意の撤回、スポンサーによる試験終了、または死亡のいずれかが最初に発生するまで、患者が試験治療を継続していた場合（すなわち、第１サイクル１日目から４８週間は６週間［±７日］ごとに、その後は治療用量の遅延にかかわらず９週間［±７日］ごとに）と同じ頻度で、予定されていた腫瘍の評価を継続した。
結果
【０３９０】
その結果を以下の表９に示す。
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【０３９１】
表９は、ＲＣＥＣＩＳＴ  ｖ１．１の全生存期間（ＯＳ）と治験責任医師が評価した無増悪生存期間（ＰＦＳ）の共同主要評価項目を満たしていることを示している。全生存期間の改善は統計的に有意であり、臨床的に意義がある。
【０３９２】
アテゾ＋ＣＥ投与群では、プラセボ＋ＣＥ投与群と比較して全生存期間が延長した。図２を参照されたい。アテゾ＋ＣＥを投与された患者の６か月のＯＳはは８５．８％に対し、プラセボ＋ＣＥ投与群では８２．８％であった。アテゾ＋ＣＥを投与された患者の１２か月のＯＳは５１．７％であったが、プラセボ＋ＣＥを投与された患者では３８．２％であった。アテゾ＋ＣＥで治療された患者は、プラセボ＋ＣＥで治療された患者と比較して、無増悪生存期間の延長も示した。図３を参照されたい。アテゾ＋ＣＥを投与された患者の６ヶ月間のＰＦＳは３０．９％であったのに対し、プラセボ＋ＣＥを投与された患者では２２．４％であった。アテゾ＋ＣＥを投与された患者の１２ヶ月間のＰＦＳは１２．６％であったのに対し、プラセボ＋ＣＥを投与された患者では５．４％であった。
【０３９３】
アテゾ＋ＣＥを投与された患者の１年全生存率は５１．７％であったのに対し、プラセボ＋ＣＥを投与された患者の１年全生存率は３８．２％であった。
【０３９４】
さらに、全体的な奏効率（ＯＲＲ）は２つの治療群間で類似しており、アテゾリズマブ＋カルボプラチン＋エトポシドを投与された患者では６０％、プラセボ＋カルボプラチン＋エトポシドを投与された患者では６４％のＯＲＲが確認された（ＣＲ：２．５％  アテゾリズマブ＋カルボプラチン＋エトポシド群ｖｓ．プラセボ＋カルボプラチン＋エトポシド群で１％）。図４を参照されたい。（ＣＲ＝完全奏効；ＣＲ／ＰＲ＝完全奏効／部分奏効；ＳＤ＝安定した疾患；ＰＤ＝進行性疾患。）以下の表１０を参照されたい。奏効期間（ＤＯＲ）も２つの治療群間で類似しており、ＤＯＲの中央値はアツェオリズマブ＋カルボプラチン＋エトポシド群で４．２か月であったのに対し、プラセボ＋カルボプラチン＋エトポシド群では３．９か月であった。ＯＲＲおよびＤＯＲはＲＥＣＩＳＴ  ｖ１．１基準に従って評価された。
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【０３９５】
ＯＳの有益性とＰＦＳの有益性は、解析したすべてのサブグループで観察された。図５と図６を参照されたい。血中腫瘍変異負荷（ｂＴＭＢ）に関係なく、ＯＳの有益性が認められた。図７ＡではｂＴＭＢ＞１６の各治療群の患者のＯＳのカプランマイヤープロットを示し、それに対し、図７ＢではｂＴＭＢ  ＜  １６の各治療群の患者のＯＳのＫａｐｌａｎ  Ｍｅｉｅｒプロットを示している。図８ＡではｂＴＭＢが１０以上の各治療群の患者のＯＳのＫａｐｌａｎ  Ｍｅｉｅｒプロットを示し、図８ＢではｂＴＭＢ  ＜  １０の各治療群の患者のＯＳのＫａｐｌａｎ  Ｍｅｉｅｒプロットを示している。同様に、血中腫瘍変異負担（ｂＴＭＢ）に関係なくＰＦＳの有益性が認められた。図９ＡではｂＴＭＢが１６を超える各治療群の患者のＰＦＳのＫａｐｌａｎ  Ｍｅｉｅｒプロットを示し、図９ＢではｂＴＭＢ＜１６の各治療群の患者のＰＦＳのＫａｐｌａｎ  Ｍｅｉｅｒプロットを示している。図１０ＡではｂＴＭＢが１０を超える各治療群の患者のＰＦＳのＫａｐｌａｎ  Ｍｅｉｅｒプロットを示し、図１０ＢではｂＴＭＢ＜１０の各治療群の患者のＰＦＳのＫａｐｌａｎ  Ｍｅｉｅｒプロットを示している。
【０３９６】
アテゾリズマブ＋カルボプラチン＋エトポシドを投与された患者の安全性プロファイルは、個々の治療成分の既知のリスクと一致していた。新たな安全信号は確認されなかった。化学療法の曝露量は両治療群で同様であったことから、アテゾリズマブ＋カルボプラチン＋エトポシド治療レジメンにおいて、アテゾリズマブの投与はカルボプラチン＋エトポシドの送達を損なうことはなかったことが示唆された。骨髄抑制に関連した毒性（好中球減少症や血小板減少症など）は両治療群間で一貫しており、化学療法に関連した率と一致していた。
【０３９７】
この試験では、アテゾリズマブと化学療法（カルボプラチンとエトポシド）を併用した初回（第一選択）治療では、化学療法のみの場合に比べて、進展型小細胞肺がん（ＥＳ−ＳＣＬＣ）の患者の生存期間が有意に長くなることが示された。また、アテゾリズマブと化学療法（カルボプラチンとエトポシド）を併用することで、化学療法単独に比べて疾患の悪化や死亡（ＰＦＳ）のリスクが低下した。これらの結果は、特に治療が困難な病期の進展型小細胞肺がんの初期治療において、免疫療法をベースとした併用療法を行った場合の初の良好な生存率である。さらに、ＥＳ−ＳＣＬＣの初期治療において、化学療法のみの治療に比べて全生存期間が臨床的にも統計的にも有意に改善したことを示した２０年以上ぶりの研究である。１年生存率はアテゾリズマブ群で１３％高かったことから、この致死性疾患における長期生存率の向上の可能性が示唆された。
実施例２：実施例１の患者報告アウトカム（ＰＲＯ）
【０３９８】
実施例１に記載の試験に参加した患者は、ベースライン時に、欧州がん研究治療機構（Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｏｒｇａｎｉｓａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ａｎｄ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｃａｎｃｅｒ）によるＱＯＬ質問票Ｃ３０（ＥＯＲＴＣ  ＱＬＱ−Ｃ３０）およびＱＯＬ質問票ＬＣ１３（ＱＬＱ−ＬＣ１３）をベースライン時に、その後３週間ごとに記入した。分析には、ベースラインからの変化、１２週目までの変化の累積分布関数曲線、および悪化までの時間（ＴＴＤ）が含まれた。臨床的意義は、ベースラインからの１０ポイント以上の変化（スコア範囲０〜１００）に基づいている。
【０３９９】
試験の完了率は、両群ともベースライン時で８５％以上、７５週目までは７０％以上であった。ベースラインで患者が報告したアウトカムスコアは両群間で同等であった。両群とも早期に顕著な症状の改善が報告され、アテゾ＋ＣＥはプラセボ＋ＣＥに比べて改善が大きいという数値的な傾向がみられた。表１１を参照されたい。１２週目までに、アテゾ＋ＣＥを投与された患者では、プラセボ＋ＣＥを投与された患者と比較して、より高い割合で肺がん（ＬＣ）関連の症状の緩和が報告された（表１１参照）。咳や胸痛のＴＴＤには明らかな差は認められなかったが、呼吸困難のＴＴＤの数値的遅延はアテゾ＋ＣＥ投与群に有利であった（ＨＲ  ０．７５［９５％ＣＩ  ０．５５−１．０２］）。アテゾ＋ＣＥ群では、身体機能・役割機能および健康関連ＱＯＬ（ＨＲＱｏＬ：１０ポイント以上の上昇）の改善が報告され、５４週目までほとんどの来院で持続した。治療に関連した症状（例えば、下痢、吐き気／嘔吐）の変化は両群間で類似していた。
【０４００】
アテゾ＋ＣＥによるファーストライン治療では、プラセボ＋ＣＥによる治療と比較して、患者が報告する肺がんの症状が即時かつ具体的に改善されたことに加えて、ＯＳおよびＰＦＳの改善が認められた。患者から報告されたアウトカムは、治療毒性による影響を最小限に抑えつつ、機能の持続的な改善と健康関連ＱＯＬの改善を示しており、ＥＳ−ＳＣＬＣのファーストラインにＡｔｅｚｏ＋ＣＥを追加することの有益性と危険性をさらに支持している。
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実施例３：ＩＴＴ集団におけるアテゾリズマブ＋カルボプラチン＋エトポシドの有効性に関する追加データ（プラセボ＋カルボプラチン＋エトポシドと比較した場合の全生存期間（ＯＳ）の測定値
【０４０１】
全生存期間（ＯＳ）によって測定されるＩＴＴ集団におけるアテゾリズマブ＋カルボプラチン＋エトポシドとプラセボ＋カルボプラチン＋エトポシドとを比較したアテゾリズマブ＋カルボプラチン＋エトポシドの有効性に関する実施例１からの追加の結果を以下に記載する。
６ヶ月、１２ヶ月、１８ヶ月、２４ヶ月の全生存率
【０４０２】
実施例１で示したように、アテゾ＋ＣＥで処置された患者は、プラセボ＋ＣＥで処置された患者と比較して、全生存期間が延長されたことを示した。図２を参照されたい。アテゾ＋ＣＥを投与された患者の６か月のＯＳはは８５．８％に対し、プラセボ＋ＣＥ投与群では８２．８％であった。アテゾ＋ＣＥ投与群の１２ヵ月間のＯＳは５１．７％対プラセボ＋ＣＥ投与群３８．２％であった。アテゾ＋ＣＥで治療された患者は、プラセボ＋ＣＥで治療された患者と比較して、無増悪生存期間の延長も示した。図３を参照されたい。アテゾ＋ＣＥを投与された患者の６ヶ月間のＰＦＳは３０．９％であったのに対し、プラセボ＋ＣＥを投与された患者では２２．４％であった。アテゾ＋ＣＥを投与された患者の１２ヶ月間のＰＦＳは１２．６％であったのに対し、プラセボ＋ＣＥを投与された患者では５．４％であった。アテゾ＋ＣＥを投与された患者の１年全生存率は５１．７％であったのに対し、プラセボ＋ＣＥを投与された患者の１年全生存率は３８．２％であった。
【０４０３】
無作為化から２２．９ヵ月後に実施した追加解析では、アテゾ＋ＣＥで治療した患者の全生存期間中央値は約２３．３ヵ月、全生存期間中央値またはプラセボ＋ＣＥで治療した患者は１０．３ヵ月（層化ＨＲ（９５％ＣＩ）＝０．７５５（０．６０１、０．９４９）；層化ログランクｐ値−０．０１５４）であった。２２．９ヶ月の追跡調査におけるアテゾ＋ＣＥ投与群とプラセボ＋ＣＥ投与群の６ヶ月、１２ヶ月、１８ヶ月、２４ヶ月の全生存期間を以下の表１２に示す：
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【０４０４】
実施例１で前述したように、Ａｔｅｚｏ＋ＣＥを投与された患者の６か月ＯＳは８５．８％であったが、プラセボ＋ＣＥを投与された患者では８２．８％であった。アテゾ＋ＣＥを投与された患者の１２ヶ月のＯＳは、５１．９％対プラセボ＋ＣＥを投与された患者の３９％であり、すなわち、実施例１に記載された結果と非常に類似していた。アテゾ＋ＣＥを投与された患者の１８カ月間のＯＳは、プラセボ＋ＣＥを投与された患者の３４％対２１％であった。アテゾ＋ＣＥ投与群の２４ヵ月全生存期間は２２％対プラセボ＋ＣＥ投与群では１６．８％であった。
サブグループ分析
【０４０５】
追加の更新されたサブグループ分析データは、図１１Ａ〜１１Ｃで提供される。実施例１で観察されたＯＳの有益性は、以下を含む解析された全てのサブグループで確認された：例として、６５歳未満、６５〜７４歳、７５〜８４歳、８５歳以上の患者（男女ともに）；ネイティブアメリカン、アラスカ人、アジア人、黒人、アフリカ系アメリカ人、および白人の患者；タバコを使用したことがない患者、現在タバコを使用している患者、および以前にタバコを使用したことがある患者；脳（登録時）、肺（登録時）、肝臓（登録時）、リンパ節（登録時）、副腎（登録時）への転移の有無にかかわらず患者；およびｂＴＭＢに関係なく、すべての患者。
バイオマーカーサブグループ解析
【０４０６】
ＰＤ−Ｌ１発現のために選択されなかった疾患を有するＥＳ−ＳＣＬＣ患者を、実施例１に記載の試験に登録した。実施例１に記載したように、可能な場合には、腫瘍バイオマーカー（例えば、ＰＤ−Ｌ１）と治療に対する応答との間の関係を評価するために、分析のために試験に登録された患者から治療前の腫瘍組織サンプルを得た。バイオマーカー評価可能な患者のＰＤ−Ｌ１有病率を表１３に示す。
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【０４０７】
ＢＥＰ１とは、ＩＨＣ染色の１年未満前に切除された腫瘍組織スライドからの有効なＰＤ−Ｌ１免疫組織化学（ＩＨＣ）結果を有する本試験のバイオマーカー評価対象患者を指す。ＢＥＰ２とは、ＩＨＣ染色時のスライドの年齢にかかわらず、腫瘍組織スライドからの有効なＰＤ−Ｌ１免疫組織化学（ＩＨＣ）結果を有する本試験のバイオマーカー評価対象患者を指す。様々なカットオフにおけるＰＤ−Ｌ１有病率のパーセンテージは、ＢＥＰ１／２に基づいている。ＢＥＰ１とＢＥＰ２の人口統計学的およびベースライン特性は、治療群間で概ね均衡していた。図１４Ａおよび１４Ｂを参照のこと。
【０４０８】
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【０４０９】
ＢＥＰ１およびＢＥＰ２でアテゾ＋ＣＥを投与された患者は、プラセボ＋ＣＥを投与されたＢＥＰ１およびＢＥＰ２の患者さんと比較して、すべての患者でＰＦＳの改善が認められた。図１２Ａおよび１２Ｂに示すように、ＰＦＳは、プラセボ＋ＣＥを投与された患者と比較して、アテゾ＋ＣＥを投与されたＢＥＰ１およびＢＥＰの患者においても観察された。さらに、ＰＤ−Ｌ１発現量が１％未満のＢＥＰ１およびＢＥＰ２患者のうち、アテゾ＋ＣＥを投与した患者の全奏効率（ＯＲＲ）は、プラセボ＋ＣＥを投与した患者のＯＲＲよりも高かった。表１５を参照のこと。
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【０４１０】
ＢＥＰ１およびＢＥＰ２でアテゾ＋ＣＥを投与されたすべての患者で、プラセボ＋ＣＥを投与されたＢＥＰ１およびＢＥＰ２の患者と比較して、ＯＳの有効性が示された。１３Ａおよび１３Ｂに示すように、アテゾ＋ＣＥを投与したＢＥＰ１およびＢＥＰの患者では、プラセボ＋ＣＥを投与した患者と比較して、ＰＦＳの有益性も観察された。
【０４１１】
このように、ＰＤ−Ｌ１陰性のサブグループ（すなわち、腫瘍細胞または腫瘍浸潤免疫細胞上に１％未満のＰＤ−Ｌ１発現を有する患者）は、プラセボ＋ＣＥで治療された患者と比較して、アテゾ＋ＣＥでの治療が臨床的に有益であることが明らかになった。このような結果は、オールカマーの治療効果を示している。
【０４１２】
本開示は、理解を明確にする目的で、図示および例示の方法でいくつか詳細に記載されてきたが、これらの記載および例示は、本開示の範囲を限定するものとして解釈されるべきではない。本明細書に引用される全ての特許および科学文献の開示は、その全体が参考として明示的に組み込まれる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【図６Ａ】
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【図６Ｂ】
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【図７Ａ】
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【図７Ｂ】
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【図８Ａ】
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【図８Ｂ】
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【図９Ａ】
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【図９Ｂ】
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【図１０Ａ】
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【図１０Ｂ】
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【図１１Ａ】
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【図１１Ｂ】
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【図１１Ｃ】
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【図１２Ａ】
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【図１２Ｂ】
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【図１３Ａ】
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【図１３Ｂ】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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