(57)【要約】  本発明は、トリプトリド誘導体およびその製造方法と使用を公開する。当該トリプトリド誘導体の構造は一般式Iで表され、各置換基の定義は明細書および請求の範囲に記載の通りである。本発明のトリプトリド誘導体は、優れた免疫抑制活性および抗腫瘍活性を有し、毒性が低く、安全性が高く、良い開発と利用の将来性がある。  【化１】2021504455.tif 000034
2021504455.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式Iで表される化合物、またはその薬学的に許容される塩、あるいはそのエナンチオマー、ジアステレオマー、互変異性体、溶媒和物、多形体またはプロドラッグ。
【化１】
2021504455.tif 000029
（式中において、
R1は置換または無置換の、C1-C6アルキル基、C3-C8シクロアルキル基、C2-C6アルケニル基、C3-C8シクロアルケニル基、C2-C6アルキニル基、C6-C10アリール基、C7-C15アリールアルキル基または4-8員ヘテロアリール基である。
YはO、NHまたはSである。
R2は置換または無置換の、C1-C6アルキル基、C3-C8シクロアルキル基、C2-C6アルケニル基、C3-C8シクロアルケニル基、C2-C6アルキニル基、C6-C10アリール基、C7-C15アリールアルキル基、4-8員ヘテロアリール基または-C(=O)R4で、ここで、R4は置換または無置換の、C1-C6アルキル基、C3-C8シクロアルキル基、C2-C6アルケニル基、C3-C8シクロアルケニル基、C2-C6アルキニル基、C6-C10アリール基、C7-C15アリールアルキル基または4-8員ヘテロアリール基である。
【化２】
2021504455.tif 000030
は二重結合または単結合を表すが、二重結合の場合、R3はOで、単結合の場合、R3はOR5、FまたはSHで、R5はH、Boc、TBS、TES、CH2SCH3、CH2OCH3、-CH2OP(=O)(OH)2、-CH2OP(=O)(OBn)2、-OP(=O)(OH)2、-OP(=O)(OBn)2、-COOH、単糖、葉酸および葉酸類似体またはモノクローナル抗体から選ばれる。
各Xは独立にH、OHまたはハロゲンである。
上記各置換とは独立に基における一つまたは複数の水素原子がハロゲン、-OH、NH2、CN、COOH、-OP(=O)(OH)2、無置換またはハロゲン置換のC1-C8アルキル基、無置換またはハロゲン置換のC3-C8シクロアルキル基、無置換またはハロゲン置換のC1-C8アルコキシ基、無置換またはハロゲン置換のC2-C6アルケニル基、無置換またはハロゲン置換のC2-C6アルキニル基、無置換またはハロゲン置換のC2-C6アシル基、無置換またはハロゲン置換のC2-C6アミド基、無置換またはハロゲン置換の5-8員アリール基、無置換またはハロゲン置換の5-8員ヘテロアリール基、無置換またはハロゲン置換の4-8員飽和複素環または炭素環からなる群から選ばれる置換基で置換されることである。ここで、上記各ヘテロアリール基は独立にN、OまたはSからなる群から選ばれる1-3個のヘテロ原子を含む。）
【請求項２】
各XはいずれもHであることを特徴とする請求項1に記載の化合物。
【請求項３】
YはOであることを特徴とする請求項1に記載の化合物。
【請求項４】
R1は置換または無置換の、C1-C4アルキル基、C3-C6シクロアルキル基、C6-C10アリール基または4-8員ヘテロアリール基で、前記置換とは、基における一つまたは複数の水素原子がハロゲン、-OH、無置換またはハロゲン置換のC1-C4アルキル基、無置換またはハロゲン置換のC1-C3アルコキシ基からなる群から選ばれる置換基で置換されることであることを特徴とする請求項1に記載の化合物。
【請求項５】
R2は置換または無置換の、C1-C4アルキル基、C7-C10アリールアルキル基、4-6員ヘテロアリール基または-C(=O)R4で、ここで、R4は置換または無置換の、C1-C4アルキル基、C3-C6シクロアルキル基、C6-C10アリール基、C7-C15アリールアルキル基または4-8員ヘテロアリール基で、前記置換とは、基における一つまたは複数の水素原子がハロゲン、-OH、無置換またはハロゲン置換のC1-C4アルキル基、無置換またはハロゲン置換のC1-C3アルコキシ基からなる群から選ばれる置換基で置換されることであることを特徴とする請求項1に記載の化合物。
【請求項６】
前記化合物は、
【化３】
2021504455.tif 000031
2021504455.tif 000032
であることを特徴とする請求項1に記載の化合物。
【請求項７】
請求項1に記載の化合物の製造方法であって、
R2が-C(=O)R4で、R1=R4である場合、トリプトリドとアシル化試薬から式II化合物を得、式II化合物から誘導して式III化合物を得る工程を含み、ここで、前記アシル化試薬はR1COCl、R1COBrまたはR1COOCOR1であるか、
あるいは、R2が-C(=O)R4で、R1≠R4である場合、トリプトリドをそれぞれ第一のアシル化試薬、第二のアシル化試薬と反応させて式II化合物を得、式II化合物から誘導して式III化合物を得る工程を含み、ここで、前記第一のアシル化試薬はR1COCl、R1COBrまたはR1COOCOR1で、前記第二のアシル化試薬はR4COCl、R4COBr、R4COOCOR4であることを特徴とする方法。
【化４】
2021504455.tif 000033
（各式中において、R1、R4、R5の定義は請求項1に記載の通りである。）
【請求項８】
請求項1に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩、あるいはそのエナンチオマー、ジアステレオマー、互変異性体、溶媒和物、多形体またはプロドラッグと、
薬学的に許容される担体と、
を含むことを特徴とする薬物組成物。
【請求項９】
請求項1に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩、あるいはそのエナンチオマー、ジアステレオマー、互変異性体、溶媒和物、多形体またはプロドラッグ、あるいは請求項8に記載の薬物組成物の使用であって、
a）腫瘍を治療する薬物の製造、
b）細胞アポトーシスを誘導する薬物の製造、および/または
c）免疫抑制薬物の製造
に使用されることを特徴とする使用。
【請求項１０】
前記腫瘍は、白血病、消化管間質腫瘍、組織球性リンパ腫、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、膵臓腺癌、肺扁平上皮癌、肺腺癌、乳癌、前立腺癌、肝臓癌、皮膚癌、上皮細胞癌、子宮頸癌、卵巣癌、腸癌、鼻咽頭癌、脳癌、骨癌、食管癌、メラノーマ、腎臓癌、口腔癌からなる群から選ばれることを特徴とする請求項9に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、薬物化学の分野に関し、具体的に、抗腫瘍活性、免疫抑制活性を有するトリプトリド誘導体およびその製造と使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
天然産物はいつも新規な抗腫瘍薬物の構造の主な由来であるが、これらの化合物は薬物動態学的性質が劣るものが多く、臨床において抗腫瘍薬物に開発された純粋な天然産物が少ない。
【０００３】
【化１】
2021504455.tif 000003
【０００４】
生薬植物であるライコウトウ（Tripterygium wilfordii）(TW)はよく見られる抗腫瘍薬物の研究対象で、現在、その中から抽出された化合物であるトリプトリドはライコウトウの重要な有効成分で、研究で抗炎症、抗腫瘍および免疫抑制の活性を有することが見出された。同時に、研究では、トリプトリドは大きい毒性および多くの不良反応もあることが見出され、これはトリプトリドの開発・利用に大きく影響している。体内実験では、トリプトリドは安全範囲が狭く、有効投与量の2倍または4倍のトリプトリドが動物の死亡につながることがわかり、ある研究では、有効投与量が致死投与量に非常に近いことが報告された。毒理学の研究では、トリプトリドの不良反応は胃腸管、腎臓、心臓、肝臓、造血系および生殖系などの多くの組織・器官に関わることがわかった。そのため、抗腫瘍およびほかの生物活性を発揮しながら毒性を避けるために、トリプトリドに対して構造改変を行い、効率的で低毒性のトリプトリド誘導体を得ることは、科学研究における重要な研究方向になっている。
【０００５】
文献の調査では、現在、トリプトリドに対する構造改変は主にC14位のヒドロキシ基、C7/C8のエポキシ、C12/C13のエポキシ、および不飽和ラクトン環に集中している。中では、不飽和ラクトン環に対する構造改変は主にラクトン環をフラン環またはラクタムに変換するか、ラクトン環を開環させることによって水溶性を増加させるものであるが、この二つの策略のいずれも誘導体の活性の低下、ひいては消失につながる。
【発明の概要】
【０００６】
本発明の目的は、新規な構造のトリプトリド誘導体およびその製造方法と使用を提供することにある。
【０００７】
本発明の第一の側面では、一般式Iで表される化合物、またはその薬学的に許容される塩、あるいはそのエナンチオマー、ジアステレオマー、互変異性体、溶媒和物、多形体またはプロドラッグを提供する。
【０００８】
【化２】
2021504455.tif 000004
【０００９】
（式中において、
R1は置換または無置換の、C1-C6アルキル基、C3-C8シクロアルキル基、C2-C6アルケニル基、C3-C8シクロアルケニル基、C2-C6アルキニル基、C6-C10アリール基、C7-C15アリールアルキル基または4-8員ヘテロアリール基である。
【００１０】
YはO、NHまたはSである。
【００１１】
R2は置換または無置換の、C1-C6アルキル基、C3-C8シクロアルキル基、C2-C6アルケニル基、C3-C8シクロアルケニル基、C2-C6アルキニル基、C6-C10アリール基、C7-C15アリールアルキル基、4-8員ヘテロアリール基または-C(=O)R4で、ここで、R4は置換または無置換の、C1-C6アルキル基、C3-C8シクロアルキル基、C2-C6アルケニル基、C3-C8シクロアルケニル基、C2-C6アルキニル基、C6-C10アリール基、C7-C15アリールアルキル基または4-8員ヘテロアリール基である。
【００１２】
【化３】
2021504455.tif 000005
【００１３】
は二重結合または単結合を表すが、二重結合の場合、R3はOで、単結合の場合、R3はOR5、FまたはSHで、R5はH、Boc、TBS、TES、CH2SCH3、CH2OCH3、-OP(=O)(OH)2、-OP(=O)(OBn)2、-CH2OP(=O)(OH)2、-CH2OP(=O)(OBn)2、-COOH、単糖、葉酸および葉酸類似体またはモノクローナル抗体から選ばれる。
【００１４】
各Xは独立にH、OHまたはハロゲンである。
【００１５】
上記各置換とは独立に基における一つまたは複数の水素原子がハロゲン、-OH、NH2、CN、COOH、-OP(=O)(OH)2、無置換またはハロゲン置換のC1-C8アルキル基、無置換またはハロゲン置換のC3-C8シクロアルキル基、無置換またはハロゲン置換のC1-C8アルコキシ基、無置換またはハロゲン置換のC2-C6アルケニル基、無置換またはハロゲン置換のC2-C6アルキニル基、無置換またはハロゲン置換のC2-C6アシル基、無置換またはハロゲン置換のC2-C6アミド基、無置換またはハロゲン置換の5-8員アリール基、無置換またはハロゲン置換の5-8員ヘテロアリール基、無置換またはハロゲン置換の4-8員飽和複素環または炭素環からなる群から選ばれる置換基で置換されることである。ここで、上記各ヘテロアリール基は独立にN、OまたはSからなる群から選ばれる1-3個のヘテロ原子を含む。）
本発明において、Bocはt-ブトキシカルボニル基で、TBSはt-ブチルジメチルシリル基で、TESはトリエチルシリル基である。
【００１６】
もう一つの好適な例において、R3はOHまたはOBoc、OCH2OP(=O)(OH)2、-OCH2OP(=O)(OBn)2、OTBS、OTES、OCH2SCH3、OCH2OCH3である。もう一つの好適な例において、R3はOHである。もう一つの好適な例において、R3はβ-OHである。もう一つの好適な例において、R3はOBoc、OCH2OP(=O)(OH)2または-OCH2OP(=O)(OBn)2である。
【００１７】
もう一つの好適な例において、Xの多くとも一つはOHである。
【００１８】
もう一つの好適な例において、14位の炭素の配置はα-配置またはβ-配置である。
【００１９】
もう一つの好適な例において、各XはいずれもHである。
【００２０】
もう一つの好適な例において、YはOである。
【００２１】
もう一つの好適な例において、R1は置換または無置換の、C1-C4アルキル基、C3-C6シクロアルキル基、C6-C10アリール基または4-8員ヘテロアリール基で、前記置換とは、基における一つまたは複数の水素原子がハロゲン、-OH、無置換またはハロゲン置換のC1-C4アルキル基、無置換またはハロゲン置換のC1-C3アルコキシ基からなる群から選ばれる置換基で置換されることである。
【００２２】
もう一つの好適な例において、R1はシクロヘキシル基、n-プロピル基、n-ブチル基、フェニル基、2-フリル基、p-メチルフェニル基、p-メトキシフェニル基またはp-トリフルオロメチルフェニル基である。
【００２３】
もう一つの好適な例において、R2は置換または無置換の、C1-C4アルキル基、C7-C10アリールアルキル基、4-6員ヘテロアリール基または-C(=O)R4で、ここで、R4は置換または無置換の、C1-C4アルキル基、C3-C6シクロアルキル基、C6-C10アリール基、C7-C15アリールアルキル基または4-8員ヘテロアリール基で、前記置換とは、基における一つまたは複数の水素原子がハロゲン、-OH、無置換またはハロゲン置換のC1-C4アルキル基、無置換またはハロゲン置換のC1-C3アルコキシ基からなる群から選ばれる置換基で置換されることである。
【００２４】
もう一つの好適な例において、R2はC1-C4アルキル基、C7-C10アリールアルキル基または(CO)R4である。もう一つの好適な例において、R2はメチル基、エチル基、プロピル基またはブチル基である。もう一つの好適な例において、R4は置換または無置換の、C1-C4アルキル基、C3-C6シクロアルキル基、C6-C10アリール基または4-8員ヘテロアリール基である。
【００２５】
もう一つの好適な例において、R4はシクロヘキシル基、n-ブチル基、n-プロピル基、フェニル基、2-フリル基、p-メチルフェニル基、p-トリフルオロメチルフェニル基またはp-メトキシフェニル基である。
【００２６】
もう一つの好適な例において、R1およびR2は同様のものまたは異なるものである。
【００２７】
もう一つの好適な例において、R1およびR4は同様のものまたは異なるものである。
【００２８】
もう一つの好適な例において、前記化合物は、
【００２９】
【化４】
2021504455.tif 000006
【００３０】
2021504455.tif 000007
【００３１】
である。
【００３２】
本発明の第二の側面では、第一の側面に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩、あるいはそのエナンチオマー、ジアステレオマー、互変異性体、溶媒和物、多形体またはプロドラッグと、不純物とを含み、ことを特徴とする組成物を提供する。
【００３３】
組成物の合計重量に対し、前記不純物の含有量は0.1-2wt％、好ましくは0.2-1wt％、より好ましくは0.3-0.6wt％である。
【００３４】
もう一つの好適な例において、第一の側面に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩、あるいはそのエナンチオマー、ジアステレオマー、互変異性体、溶媒和物、多形体またはプロドラッグの重量は、組成物の合計重量の98wt％-99.9wt％、好ましくは99-99.8wt％、より好ましくは99.2-99.6wt％または99.3-99.5wt％である。
【００３５】
本発明の第三の側面では、第一の側面に記載の化合物の製造方法であって、以下の工程を含む方法を提供する：
R2が-C(=O)R4で、R1=R4である場合、トリプトリドとアシル化試薬から式II化合物を得、式II化合物から誘導して式III化合物を得る工程を含み、ここで、前記アシル化試薬はR1COCl、R1COBrまたはR1COOCOR1である；
【００３６】
【化５】
2021504455.tif 000008
【００３７】
あるいは、R2が-C(=O)R4で、R1≠R4である場合、トリプトリドをそれぞれ第一のアシル化試薬、第二のアシル化試薬と反応させて式II化合物を得、式II化合物から誘導して式III化合物を得る工程を含み、ここで、前記第一のアシル化試薬はR1COCl、R1COBrまたはR1COOCOR1で、前記第二のアシル化試薬はR4COCl、R4COBr、R4COOCOR4である。
【００３８】
（各式中において、R1、R4、R5の定義は第一の側面に記載の通りである。）
1種の典型的な反応工程は以下の通りである。
【００３９】
【化６】
2021504455.tif 000009
【００４０】
本発明の第四の側面では、を含む薬物組成物を提供する。
【００４１】
第一の側面に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩、あるいはそのエナンチオマー、ジアステレオマー、互変異性体、溶媒和物、多形体またはプロドラッグと、
薬学的に許容される担体と、
本発明の第四の側面では、第一の側面に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩、あるいはそのエナンチオマー、ジアステレオマー、互変異性体、溶媒和物、多形体またはプロドラッグ、あるいは第三の側面に記載の薬物組成物の使用であって、のための使用を提供する。
【００４２】
a）腫瘍を治療する薬物の製造、
b）細胞アポトーシスを誘導する薬物の製造、および/または
c）免疫抑制薬物の製造
もう一つの好適な例において、前記腫瘍は、白血病、消化管間質腫瘍、組織球性リンパ腫、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、膵臓腺癌、肺扁平上皮癌、肺腺癌、乳癌、前立腺癌、肝臓癌、皮膚癌、上皮細胞癌、子宮頸癌、卵巣癌、腸癌、鼻咽頭癌、脳癌、骨癌、食管癌、メラノーマ、腎臓癌、口腔癌からなる群から選ばれる。
【００４３】
もう一つの好適な例において、前記腫瘍は、膵臓腺癌、前立腺癌、卵巣癌または脳癌が好ましい。
【００４４】
もちろん、本発明の範囲内において、本発明の上記の各技術特徴および下記（たとえば実施例）の具体的に記述された各技術特徴は互いに組み合わせ、新しい、または好適な技術方案を構成できることが理解される。明細書で開示された各特徴は、任意の相同、同等或いは類似の目的の代替性特徴にも任意に替えることができる。紙数に限りがあるため、ここで逐一説明しない。
【図面の簡単な説明】
【００４５】
【図１】図1は腫瘍担持マウスの体重の経時変化の結果の図である。
【図２】図2は体重のデータの図である。
【発明を実施するための形態】
【００４６】
具体的な実施形態
本願の発明者は、幅広く深く研究したところ、初めて、C-19の二重結合化によってトリプトリドに修飾基を導入し、そしてさらなる誘導を行うことによって一連の新規で、かつ高活性（優れた免疫抑制活性および抗腫瘍活性）、高安全性（低毒性）を有するトリプトリド誘導体を獲得し、良い開発と利用の将来性がある。これに基づき、本発明を完成させた。
【００４７】
用語
別途に定義しない限り、本明細書におけるすべての科学技術の用語が有する意味は請求項の趣旨が属する分野の当業者によって通常理解される意味と同様である。別途に説明しない限り、本明細書全体で引用されるすべての特許、特許出願、公開材料は引用の形で全体で本明細書に取り込まれる。
【００４８】
もちろん、上記の概要および下記の詳細は例示的で説明するためのものだけで、本発明の趣旨の何らの限定にもならない。本願において、別途に具体的に説明しない限り、単数の場合も複数が含まれる。なお、別途に明確に説明しない限り、本明細書および請求の範囲で使用される単数の様態は指されるものの複数の様態を含む。さらに、別途に説明しない限り、使用される「または」、「あるいは」は「および/または」を意味する。また、使用される用語「含む」およびほかの形態、たとえば「含める」、「含有」および「含有する」は限定的なものではない。
【００４９】
参照文献に標準の化学用語の定義がある。別途に説明しない限り、本分野の技術範囲内における通常の方法、たとえば質量分析、NMR、IRおよびUV/VISスペクトル法や薬理学的方法が使用される。具体的な定義を示さない限り、本明細書の分析化学、有機合成化学および薬物と薬物化学の関連記述で使用される用語は本分野で既知のものである。化学合成、化学分析、薬物の製造、製剤化と輸送、ならびに患者に対する治療において標準技術が使用される。たとえば、メーカーのキットに対する使用説明、あるいは本分野で公知の手段または本発明の説明を利用して反応および精製を実施することができる。通常、本明細書で引用・検討されたいくつかの概要的および具体的な文献における記述に従い、本分野で熟知の通常の方法によって上記技術および方法を実施することができる。本明細書において、当業者が基およびその置換基を選択することによって安定した構造部分および化合物を提供することができる。
【００５０】
左から右に書かれる通常の化学式によって置換基を説明する場合、当該置換基は同様に右から左に構造式を書く場合得られた化学的に同等の置換基を含む。例を挙げると、-CH2O-は-OCH2-と同様である。
【００５１】
本明細書に用いられる章節の標題は文章を組み立てるだけのためのもので、前記主題に対する制限と解釈されてはならない。本願で引用されたすべての文献または文献の一部は特許、特許出願、文章、書籍、マニュアルや論文を含むが、これらに限定されず、いずれも全体として引用の形で本明細書に取り入れられる。
【００５２】
本明細書で定義された一部の化学基の前に略号をつけることによって当該基に存在する炭素原子数の合計を表す。たとえば、C1-6アルキル基とは合計1〜6個の炭素原子を有する後記で定義されるアルキルアルキル基をいう。略号における炭素原子数の合計は前記基に存在し得る置換基における炭素を含まない。
【００５３】
前記以外、本願の明細書および請求の範囲で使用される場合、特別に明示しない限り、以下の用語は下記で示される意味を有する。
【００５４】
本願においえ、用語「ハロゲン」とはフッ素、塩素、臭素またはヨウ素をいう。
【００５５】
「ヒドロキシ基」とは-OH基をいう。
【００５６】
「ヒドロキシアルキル基」とはヒドロキシ基（-OH）で置換された後記で定義されるアルキル基をいう。
【００５７】
「カルボニル基」とは-C(=O)-基をいう。
【００５８】
「ニトロ基」とは-NO2をいう。
【００５９】
「シアノ基」とは-CNをいう。
【００６０】
「アミノ基」とは-NH2をいう。
【００６１】
「置換のアミノ基」とは1個または2個の後記で定義されるアルキル基、アルキルカルボニル基、アルアルキル基、ヘテロアルアルキル基で置換されたアミノ基をいうが、たとえば、モノアルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、アルキルアシルアミノ基、アルアルキルアミノ基、ヘテロアルアルキルアミノ基が挙げられる。
【００６２】
「カルボキシ基」とは-COOHをいう。
【００６３】
本願において、基またはほかの基の一部（たとえばハロゲン置換のアルキル基などの基に使用される場合）として、用語「アルキル基」とは炭素原子および水素原子のみからなり、不飽和結合を含まず、たとえば1〜12個(好ましくは1〜8個、より好ましくは1〜6個)の炭素原子を有し、かつ単結合を介して分子のほかの部分に連結している、直鎖または分岐鎖の炭化水素鎖基をいう。アルキル基の実例はメチル基、エチル基、n-プロピル基、イソプロピル基、n-ブチル基、イソブチル基、s-ブチル基、t-ブチル基、n-ペンチル基、2-メチルブチル基、2,2-ジメチルプロピル基、n-ヘキシル基、ヘプチル基、2-メチルヘキシル基、3-メチルヘキシル基、オクチル基、ノニル基やデシル基などを含むが、これらに限定されない。
【００６４】
本願において、基またはほかの基の一部として、用語「アルケニル基」とは炭素原子および水素原子のみからなり、少なくとも一つの二重結合を含有し、たとえば2〜14個(好ましくは2〜10個、より好ましくは2〜6個)の炭素原子を有し、かつ単結合を介して分子のほかの部分に連結している、直鎖または分岐鎖の炭化水素鎖基をいうが、たとえばビニル基、プロペニル基、アリル基、1-ブテニル基、2-ブテニル基、1-ペンテニル基、1,4-ペンタジエニル基などが挙げられるが、これらに限定されない。
【００６５】
本願において、基またはほかの基の一部として、用語「アルキニル基」とは炭素原子および水素原子のみからなり、少なくとも一つの三重結合および任意の一つまたは複数の二重結合を含有し、たとえば2〜14個(好ましくは2〜10個、より好ましくは2〜6個)の炭素原子を有し、かつ単結合を介して分子のほかの部分に連結している、直鎖または分岐鎖の炭化水素鎖基をいうが、たとえばエチニル基、1-プロパギル基、1-ブチニル基、1-ペンテン-4-イニル基などが挙げられるが、これらに限定されない。
【００６６】
本願において、基またはほかの基の一部として、用語「シクロアルキル基」とは炭素原子および水素原子のみからなり、縮合環系、橋架け環系またはスピロ環系を含んでもよく、3〜15個、好ましくは3〜10個、より好ましくは3〜6個の炭素原子を有し、かつ飽和または不飽和で任意の適切な炭素原子で単結合を介して分子のほかの部分に連結している、安定した非芳香族単環式または多環式炭化水素基をいう。本明細書において、特別に明示しない限り、シクロアルキル基における炭素原子は任意に酸化されてもよい。シクロアルキル基の実例は、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロペンテニル基、シクロヘキシル基、シクロヘキセニル基、シクロヘキサジエニル基、シクロヘプチル基、シクロオクチル基、1H-インデニル基、2,3-インダニル基、1,2,3,4-テトラヒドロナフチル基、5,6,7,8-テトラヒドロナフチル基、8,9-ジヒドロ-7H-ベンゾシクロヘプテン-6-イル基、6,7,8,9-テトラヒドロ-5H-ベンゾシクロヘプテニル基、5,6,7,8,9,10-ヘキサヒドロベンゾシクロオクテニル基、フルオレニル基、ビシクロ[2.2.1]ヘプチル基、7,7-ジメチル-ビシクロ[2.2.1]ヘプチル基、ビシクロ[2.2.1]ヘプテニル基、ビシクロ[2.2.2]オクチル基、ビシクロ[3.1.1]ヘプチル基、ビシクロ[3.2.1]オクチル基、ビシクロ[2.2.2]オクテニル基、ビシクロ[3.2.1]オクテニル基、アダマンチル基、オクタヒドロ-4,7-メチレン-1H-インデニル基やオクタヒドロ-2,5-メチレンジシクロペンタジエニル基などを含むが、これら限定されない。
【００６７】
本願において、基またはほかの基の一部として、用語「複素環基」とは2〜14個の炭素原子および窒素、リン、酸素および硫黄から選ばれる1〜6個のヘテロ原子からなる、安定した3員〜20員の非芳香族環状基をいう。本明細書において、特別に明示しない限り、複素環基は単環、二環、三環またはそれ以上の環の環系でもよく、縮合環系、橋架け環系またはスピロ環系を含んでもよく、その複素環基における窒素、炭素または硫黄原子は任意に酸化されたもよく、窒素原子は任意に第4級アンモニウム化されてもよく、かつ複素環基は一部または完全飽和のものでもよい。複素環基は炭素原子またはヘテロ原子が単結合を介して分子のほかの部分に連結している。縮合環を含む複素環基において、1つまたは複数の環は後記で定義されるアリール基またはヘテロアリール基でもよいが、条件は分子のほかの部分に連結している箇所が非芳香族環原子であることである。本発明の目的からすると、複素環基は窒素、酸素および硫黄水素から選ばれる1〜3個のヘテロ原子を含む、安定した4員〜11員の非芳香性単環、二環、橋架け環またはスピロ環の基が好ましく、窒素、酸素および硫黄水素から選ばれる1〜3個のヘテロ原子を含む、安定した4員〜8員の非芳香性単環、二環、橋架け環またはスピロ環の基がより好ましい。複素環基の実例は、ピロリジル基、モルホリル基、ピペラジニル基、ホモピペラジニル基、ピペリジル基、チオモルホリル基、2,7-ジアザスピロ[3.5]ノナン-7-イル基、2-オキサ-6-アザスピロ[3.3]ヘプタン-6-イル基、2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-イル基、アゼチジル基、ピラニル基、テトラヒドロピラニル基、チオピラニル基、テトラヒドロフリル基、オキサジニル基、ジオキサシクロペンチル基、テトラヒドロイソキノリル基、デカヒドロイソキノリル基、イミダゾリニル基、イミダゾリジニル基、キノリジジニル基、チアゾリジニル基、イソチアゾリジニル基、イソオキサゾリジニル基、ジヒドロインドリル基、オクタヒドロインドリル基、オクタヒドロイソインドリル基、ピロリジル基、ピラゾリジニル基、フタルイミド基などを含むが、これら限定されない。
【００６８】
本願において、基またはほかの基の一部として、用語「アリール基」とは6〜18個の炭素原子（好ましくは6〜10個の炭素原子）を有する共役炭化水素環系基をいう。本発明の目的からすると、アリール基は単環、二環、三環またはそれ以上の環の環系でもよく、上記で定義されたシクロアルキル基または複素環基と縮合してもよいが、条件はアリール基は芳香環における原子が単結合を介して分子のほかの部分に連結していることである。アリール基の実例は、フェニル基、ナフチル基、アントラセニル基、フェナントレニル基、フルオレニル基、2,3-ジヒドロ-1H-イソインドリル基、2-ベンゾオキサゾリノン、2H-1,4-ベンゾオキサジン-3(4H)-オン-7-イル基などを含むが、これら限定されない。
【００６９】
本願において、用語「アリールアルキル基」とは上記で定義されたアリールで置換された上記で定義されたアルキル基をいう。
【００７０】
本願において、基またはほかの基の一部として、用語「ヘテロアリール基」とは環内に1〜15個の炭素原子（好ましくは1〜10個の炭素原子）および窒素、酸素および硫黄から選ばれる1〜6個のヘテロ原子を有する6員〜16員の共役環系基をいう。本明細書において、特別に明示しない限り、ヘテロアリール基は単環、二環、三環またはそれ以上の環の環系でもよく、上記で定義されたシクロアルキル基または複素環基と縮合してもよいが、条件はヘテロアリール基は芳香環における原子が単結合を介して分子のほかの部分に連結していることである。ヘテロアリール基における窒素、炭素または硫黄原子は任意に酸化されてもよく、窒素原子は任意に第4級アンモニウム化されてもよい。本発明の目的からすると、ヘテロアリール基は窒素、酸素および硫黄水素から選ばれる1〜5個のヘテロ原子を含む、安定した5員〜12員の芳香性基が好ましく、窒素、酸素および硫黄水素から選ばれる1〜4個のヘテロ原子を含む、安定した5員〜10員の芳香性基または窒素、酸素および硫黄水素から選ばれる1〜3個のヘテロ原子を含む、5員〜6員の芳香性基がより好ましい。ヘテロアリール基の実例は、チエニル基、イミダゾリル基、ピラゾリル基、チアゾリル基、オキサゾリル基、オキサジアゾリル基、イソオキサゾリル基、ピリジル基、ピリミリジル基、ピラジニル基、ピリダジル基、ベンゾイミダゾリル基、ベンゾピラゾリル基、インドリル基、フリル基、ピロリル基、トリアゾリル基、テトラゾリル基、トリアジル基、インドリジニル基、イソインドリル基、インダゾリル基、イソインダゾリル基、プリニル基、キノリル基、イソキノリル基、ジアザナフチル基、ナフチリジニル基、キノキサリニル基、プテリジニル基、カルバゾリル基、カルボリニル基、フェナントリジニル基、フェナントロリニル基、アゼチジニル基、フェナジリル基、イソチアゾリル基、ベンゾチアゾリル基、ベンゾチエニル基、オキサトリアゾリル基、シンノリニル基、キナゾリニル基、フェニルチオ基、インドリジニル基、o-フェナントロリニル基、イソオキサゾリル基、フェニキサジリル基、フェノチアジル基、4,5,6,7-テトラヒドロベンゾ[b]チエニル基、ナフチリジニル基、[1,2,4]トリアゾロ[4,3-b]ピリダジン、[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピラジン、[1,2,4]トリアゾロ[4,3-c]ピリミジン、[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン、イミダゾ[1,2-a]ピリジン、イミダゾ[1,2-b]ピリダジン、イミダゾ[1,2-a]ピラジンなどを含むが、これら限定されない。
【００７１】
本願において、用語「ヘテロアリールアルキル基」とは上記で定義されたヘテロアリールで置換された上記で定義されたアルキル基をいう。
【００７２】
本願において、「任意の」または「任意に」とは後に記載の事項または状況が発生してもしなくてもよく、かつ当該記載は当該事項または状況が発生する場合と発生しない場合の両方を含むことを表す。たとえば、「任意に置換されたアリール基」とはアリール基が置換されるか置換されず、かつ当該記載は置換されたアリール基と置換されていないアリール基の両方を含むことを表す。
【００７３】
本明細書で用いられる「部分」、「構造部分」、「化学部分」、「基」、「化学基」とは分子における特定の断片または官能基をいう。化学部分は、通常、分子に挿入または付加された化学的実体と思われる。
【００７４】
「立体異性体」とは同じ原子からなり、同じ結合で結合したが、異なる三次元構造を有する化合物をいう。本発明は様々な立体異性体およびその混合物を含む。
【００７５】
本発明の化合物がオレフィン二重結合を有する場合、別途に説明しない限り、本発明の化合物はE-とZ-の幾何異性体を含む。
【００７６】
「互変異性体」とはプロトンが分子の一つの原子から同じ分子のもう一つの原子に移動してなった異性体をいう。本発明の化合物の互変異性体の形態も全部本発明の範囲内に含まれる。
【００７７】
本発明の化合物またはその薬学的に許容される塩は一つまたは複数のキラル炭素原子を含み、かつこれによってエナンチオマー、ジアステレオマーおよびほかの立体異性体の形態が生じる。各キラル炭素原子は立体化学に基づいて(R)-または(S)-と定義されている。本発明はすべての可能な異性体、およびそのラセミ体と光学的に単一の形態を含む。本発明の化合物の調製は原料または中間体としてラセミ体、ジアステレオマーまたはエナンチオマーを選択してもよい。光学活性異性体はキラル合成素子またはキラル試薬で調製するか、通常の技術によって分割してもよいが、たとえば結晶やキラルクロマトグラフィーを使用することができる。
【００７８】
単独の異性体を調製/分離する通常の技術は、適切な光学的に単一の前駆体によるキラル合成、またはたとえばカラル高速液体クロマトグラフィーによるラセミ体(または塩または誘導体のラセミ体)の分割を含む。
【００７９】
本願において、用語「薬学的に許容される塩」は、薬学的に許容される酸付加塩および薬学的に許容される塩基付加塩を含む。
【００８０】
「薬学的に許容される酸付加塩」とは、遊離塩基の生物的有効性を残したまま、ほかの副作用がなく、無機酸または有機酸と形成された塩である。無機酸塩は、塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩などを含むが、これらに限定されない。有機酸塩は、ギ酸塩、酢酸塩、2,2-ジクロロ酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、プロピオン酸塩、カプロン酸塩、カプリル酸塩、カプリン酸塩、ウンデシレン酸塩、グリコール酸塩、グルコン酸塩、乳酸塩、セバシン酸塩、アジピン酸塩、グルタル酸塩、マロン酸塩、シュウ酸塩、マレイン酸塩、コハク酸塩、フマル酸、酒石酸塩、クエン酸塩、パルミチン酸塩、ステアリン酸塩、オレイン酸塩、ケイ皮酸塩、ラウリン酸塩、リンゴ酸塩、グルタミン酸塩、ピログルタミン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、メタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、p-トルエンスルホン酸塩、アルギン酸塩、アスコルビン酸塩、サリチル酸塩、4-アミノサリチル酸塩、ナフタレンジスルホン酸塩などを含むが、これらに限定されない。これらの塩は、本分野で既知の方法で製造することができる。
【００８１】
「薬学的に許容される塩基付加塩」とは、遊離酸の生物的有効性を残したまま、ほかの副作用がなく、無機塩基または有機塩基と形成された塩である。無機塩基から誘導される塩は、ナトリウム塩、カリウム塩、リチウム塩、アンモニウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩、鉄塩、亜鉛塩、銅塩、マンガン塩、アルミニウム塩などを含むが、これらに限定されない。好適な無機塩はアンモニウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩およびマグネシウム塩である。無機塩基から誘導される塩は、第１級アミン類、第2級アミン類および第3級アミン類、天然の置換アミン類を含む置換されたアミン類、環状アミン類および塩基性イオン交換樹脂の塩、例えば、アンモニア、イソプロピルアミン、トリメチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、トリプロピルアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、ジメチルエタノールアミン、2-メチルアミノエタノール、2-ジエチルアミノエタノール、ジシクロヘキシルアミン、リシン、アルギニン、ヒスチジン、カフェイン、プロカイン、コリン、ベタイン、エチレンジアミン、グルコサミン、メチルグルカミン、テオブロミン、プリン、ピペラジン、ピペリジン、N-エチルピペリジン、ポリアミン樹脂などの塩を含むが、これらに限定されない。好適な有機塩基はイソプロピルアミン、ジエチルアミン、エタノールアミン、トリメチルアミン、ジシクロヘキシルアミン、コリンおよびカフェインを含む。これらの塩は、本分野で既知の方法で製造することができる。
【００８２】
「多形体」とは本発明の一部の化合物が固体の状態で2種または2種以上の異なる分子の配列の存在による異なる固体の結晶相である。本発明の一部の化合物は複数種の結晶形が存在しうるが、本発明では、様々な結晶形およびその混合物が含まれる。
【００８３】
通常、結晶化作用によって本発明の化合物の溶媒和物が生成する。本発明で使用される用語「溶媒和物」とは一つまたは複数の本発明の化合物の分子と一つまたは複数の溶媒の分子の集合体である。溶媒は水でもよく、当該場合の溶媒和物は水和物である。あるいは、溶媒は有機溶媒でもよい。そのため、本発明の化合物は水和物として存在してもよいが、一水和物、二水和物、半水和物、セスキ水和物、三水和物、四水和物など、および相応する溶媒和の形態を含む。本発明の化合物は単純な溶媒和物を形成してもよいが、場合によって、遊離の水のみまたは水と一部の遊離の溶媒の混合物が残ってもよい。本発明の化合物は、溶媒で反応させること、または溶媒から沈殿・析出させることまたは結晶させることによってできる。本発明の化合物の溶媒和物も全部本発明の範囲内に含まれる。
【００８４】
また、本発明は上記化合物のプロドラッグを含む。本願において、用語「プロドラッグ」は生理学の条件においてあるいは溶媒の分解によって本発明の生物活性化合物に変換できる化合物を表す。そのため、用語「プロドラッグ」とは本発明の化合物の薬学的に許容される代謝前駆体をいう。必要な個体に投与される場合、プロドラッグは活性を有さなくてもよいが、体内において本発明の活性化合物に変換される。プロドラッグは、通常、体内において迅速に変換することによって、本発明の母体化合物が生成するが、たとえば血液において加水分解によって実現する。プロドラッグの化合物は、通常、哺乳動物の生体内において溶解度、組織適合性または徐放の利点が得られる。プロドラッグは、既知のアミノ保護基およびカルボキシ保護基を含む。
【００８５】
本願において、「薬物組成物」とは本発明の化合物と本分野で通常許容される生物活性化合物を哺乳動物（たとえばヒト）に送達するための媒体との製剤をいう。当該媒体は薬学的に許容される担体を含む。薬物組成物の目的は生物体への投与を促進し、活性成分の吸収に貢献することによって生物活性を発揮させることである。
【００８６】
本明細書で用いられる「薬学的に許容される」とは本発明の生物活性または性質に影響を与えない物質（たとえば担体や希釈剤）であって、かつ相対的に毒性がなく、すなわち、当該物質は不良な生物反応を起こしたり、不良な様態で組成物に含まれる任意の成分と相互作用したりしないように、個体に施用することができることをいう。
【００８７】
本願において、「薬学的に許容される担体」は任意の関連する政府管理部署によってヒトまたは家畜への使用が許可された補助剤、担体、賦形剤、流動化剤、甘味料、希釈剤、防腐剤、染料/着色剤、矯味剤、界面活性剤、湿潤剤、分散剤、懸濁助剤、安定化剤、等張化剤、溶媒や乳化剤を含むが、これらに限定されない。
【００８８】
本発明に記載の「腫瘍」、「細胞増殖異常に関連する疾患」などは、白血病、消化管間質腫瘍、組織球性リンパ腫、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、膵臓腺癌、肺扁平上皮癌、肺腺癌、乳癌、前立腺癌、肝臓癌、皮膚癌、上皮細胞癌、子宮頸癌、卵巣癌、腸癌、鼻咽頭癌、脳癌、骨癌、食管癌、メラノーマ、腎臓癌、口腔癌などの疾患を含むが、これらに限定されない。
【００８９】
本明細書で用いられる用語「予防する」、「予防」および「防止」は患者の疾患または病症の発生または悪化の可能性を減少させることを含む。 
【００９０】
本明細書で用いられる用語「治療」およびほかの類似の同義語は以下の意味を含む：
（i）哺乳動物における疾患または病症の出現を、特に、このような哺乳動物が当該疾患または病症に罹りやすいが、当該疾患または病症に罹ったと診断されていない場合、予防する；
（ii）疾患または病症を抑制し、すなわち、その進行を阻害する；
（iii）疾患または病症を緩和し、すなわち、当該疾患または病症の状態を消退させる；あるいは
（iv）当該疾患または病症による症状を軽減する。
【００９１】
本明細書で用いられる用語「有効量」、「治療有効量」または「薬学的有効量」とは摂取するとある程度治療される疾患または病症の一つまたは複数の症状を緩和するに十分な少なくとも1種の薬剤または化合物の量をいう。その結果は所見、症状または病因の解消および/または緩和、あるいは生物系の任意のほかの必要な変化でもよい。たとえば、治療のための「有効量」は臨床で顕著な病症緩和効果を提供するに必要な本明細書で公開された化合物を含む組成物の量である。たとえば用量漸増試験の技術によって任意の個体の病例に適する有効量を測定することができる。
【００９２】
本明細書で用いれる用語「摂取」、「施用」、「投与」などとは化合物または組成物を生物作用に必要な部位に送達することができる方法をいう。これらの方法は経口投与経路、十二指腸経由経路、胃腸外注射（静脈内、皮下、腹膜内、筋肉内、動脈内注射または点滴を含む）、局部投与および直腸経由投与を含むが、これらに限定されない。当業者は、本明細書に記載の化合物および方法に使用可能な施用技術を熟知している。好適な実施形態において、本明細書で検討される化合物および組成物は経口投与によって施用される。
【００９３】
本明細書で用いれる用語「薬物の組み合わせ」、「薬物の併用」、「薬物を併用する」、「ほかの治療を施用する」、「ほかの治療剤を施用する」などとは2種以上の活性成分の混合または組み合わせを行って得られる薬物によって治療することをいうが、活性成分の固定または不固定の組み合わせを含む。用語「固定の組み合わせ」とは単一の実体または単一の剤形の形態によって患者に同時に少なくとも1種の本明細書に記載の化合物と少なくとも1種の協同薬剤を施用することをいう。用語「不固定の組み合わせ」とは単一の実体の形態によって患者に同時に施用、併用するか、あるいは変更可能な間隔で順に少なくとも1種の本明細書に記載の化合物と少なくとも1種の協同薬剤を施用することをいう。これらはカクテル療法、たとえば3種またはそれ以上の活性成分を施用する場合にも使用することができる。
【００９４】
当業者には、下記の方法において、中間体化合物の官能基は適切な保護基によって保護することが必要である場合があることがわかる。これらの官能基はヒドロキシ基、アミノ基、メルカプト基やカルボン酸を含む。適切なヒドロキシ保護基はトリアルキルシリル基またはジアリールアルキルシリル基（たとえばt-ブチルジメチルシリル基、t-ブチルジフェニルシリル基やトリメチルシリル基）、テトラヒドロピラニル基、ベンジル基などを含む。適切なアミノ基、アミジノ基およびグアニジノの保護基はt-ブトキシカルボニル基、ベントキシカルボニル基などを含む。適切なメルカプト保護基は-C(O)-R"（ここで、R"はアルキル基、アリール基またはアルアルキル基である）、p-メトキシベンジル基、トリフェニルメチル基などを含む。適切なカルボキシ保護基はアルキル基、アリール基またはアルアルキルエステルを含む。
【００９５】
保護基は当業者に既知の標準技術および本明細書に記載の標準技術によって導入と除去を行うことができる。保護基はさらにポリマー樹脂でもよい。
【００９６】
以下、具体的な実施例によって、さらに本発明を説明する。これらの実施例は本発明を説明するために用いられるものだけで、本発明の範囲の制限にはならないと理解されるものである。以下の実施例で具体的な条件が示されていない実験方法は、通常、たとえばSambrookら、「モレキュラー・クローニング：研究室マニュアル」(ニューヨーク、コールド・スプリング・ハーバー研究所出版社、1989) に記載の条件などの通常の条件に、あるいは、メーカーのお薦めの条件に従う。特に説明しない限り、百分率および部は重量百分率および重量部である。
【００９７】
別途に定義しない限り、本文に用いられるすべての専門用語と科学用語は、当業者に熟知される意味と同様である。また、記載の内容と類似あるいは同等の方法および材料は、いずれも本発明の方法に用いることができる。ここで記載の好ましい実施方法及び材料は例示のためだけである。
【実施例】
【００９８】
実施例1：化合物CK21S-001の製造
1.1  化合物CK21S-001の合成
【００９９】
【化７】
2021504455.tif 000010
【０１００】
窒素ガスの保護下において、化合物トリプトリド（180 mg，0.5 mmol）を三口丸底フラスコに入れ、無水テトラヒドロフラン（25 mL）を入れ、-20℃に降温させ、そして当該温度でリチウム-2,2,6,6-テトラメチルピペリジドのテトラヒドロフラン/トルエン溶液（0.75 mL，2.0 M，1.5 mmol）を1滴ずつ入れ、温度を維持しながら30 min撹拌した後、ゆっくりベンゾイルクロリド（0.105 mL, 0.75mmol）を滴下し、滴下終了後、撹拌を続けて1 h反応させた後、2-フロイルクロリド（0.105 mL, 0.75 mmol）を滴下した。続いて、-20℃に維持しながら2 h反応させた後、炭酸ナトリウム水溶液（10％）を入れて反応をクエンチングし、酢酸エチル（25 mL×3）で抽出し、合併した有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧で濃縮した。粗製品をシリカゲルクロマトグラフィーによって分離・精製し（ジクロロメタン：酢酸エチル）、収集して目的の産物（白色の固体，255 mg，収率90％）を得たが、上記製品を混合有機溶媒においてさらに再結晶させて最終の製品（213 mg，収率85％，純度99％超）を得た。
【０１０１】
1H NMR (400MHz, CDCl3): δ 7.76 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.74 (d, J = 1.2 Hz, 2H), 7.54 (dd, J1 = 0.8 Hz, J2 = 3.6 Hz, 1H), 7.44~7.36 (m, 3H), 6.63 (dd, J1 = 1.6 Hz, J2 = 3.6 Hz, 1H), 3.79 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 3.40 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 3.17 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 2.97~2.89 (m, 2H), 2.63~2.56 (m, 2H), 2.37~2.33 (m, 2H), 2.21 (q, J = 6.4 Hz, 1H), 1.93 (t, J = 13.6 Hz, 1H), 1.57 (s, 3H), 1.56 ~1.51 (m, 1H), 1.43 (s, 3H), 1.12 (s, 3H), 1.15~1.08 (m, 1H), 0.96 (d, J = 7.2 Hz, 3H), 0.84 (d, J = 7.2 Hz, 3H). 13C NMR (100MHz, CDCl3): δ171.3, 167.9, 155.9, 151.4, 150.5, 148.2, 142.7, 142.3, 134.6, 132.4, 131.5, 129.9, 129.5, 129.1, 128.9, 128.6, 128.0, 121.5, 113.3, 112.6, 73.1, 60.0, 65.6, 65.4, 60.7, 56.9, 56.4, 56.3, 53.9, 40.8, 36.7, 35.9, 30.1, 29.1, 27.9, 24.6, 17.8, 17.7, 16.8, 14.8. MS calcd for C32H30O9(M+): 559.2, found 559.2.  
1.2  化合物CK21S-001-bの合成
【０１０２】
【化８】
2021504455.tif 000011
【０１０３】
室温において、CK21S-001（558 mg，1 mmol）を乾燥した丸底フラスコに入れ、10 mLの酢酸エチルを入れ、溶解させた後、それぞれN, N-ジメチルピリジン（DMAP，0.6 g, 5 mmol）およびジカルボン酸ジ-t-ブチル（0.65 g, 3 mmol）を入れ、室温で一晩反応させた。反応終了後、酢酸エチル（150 mL）を入れて希釈し、有機相をそれぞれ希塩酸（50 mL）、水（50 mL）および飽和塩化ナトリウム（10 mL）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧で濃縮した。粗製品をシリカゲルクロマトグラフィーによって分離・精製し（n-ヘキサン：酢酸エチル）、収集して目的の産物（白色の固体，0.6 g，90％，純度98％超）を得た。
【０１０４】
1H NMR (400MHz, CDCl3): δ 7.77 (d, J = 0.8 Hz, 2H), 7.75 (dd, J1 = 2.0Hz, J2 = 3.2 Hz, 1H), 7.54 (dd, J1 = 0.8 Hz, J2 = 3.6 Hz, 1H), 7.44~7.36 (m, 3H), 6.65 (dd, J1 = 1.6 Hz, J2 = 3.6 Hz, 1H), 4.53 (s, 1H), 4.12 (q, J = 7.2 Hz, 1H), 3.702 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 3.41 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 3.03 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 3.94 ~2.88 (m, 1H), 2.56 ~2.52 (m, 1H), 2.39~2.31 (m, 2H), 1.94~1.86 (m, 2H), 1.60 (s, 3H), 1.58~1.50 (m, 1H), 1.49 (s, 9H), 1.33~1.24 (m, 4 H), 1.13 (s, 3H), 1.15~1.08 (m, 1H), 0.96 (d, J = 5.6 Hz, 3H), 0.88 (t, J = 7.2 Hz, 3H), 0.82 (d, J = 6.8Hz, 3H). MS calcd for C37H38O11 (M+): 659.2, found 659.2.
実施例2：化合物CK21S-002の製造
2.1  化合物CK21S-002の合成
【０１０５】
【化９】
2021504455.tif 000012
【０１０６】
CK21S-001の製造と類似する方法によってCK21S-002を製造したが、収率は89％で、純度は99％超であった。異なる点は、実施例1におけるベンゾイルクロリドおよびフロイルクロリドの代わりにp-メトキシベンゾイルクロリドを使用したことで、ほかの条件は同様であった。
【０１０７】
1H NMR (400MHz, CDCl3): δ 8.20 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.71 (d, J = 8.8 Hz,2H), 7.03 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.92 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 3.87 (s, 3H), 3.83 (s, 3H), 3.79 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 3.37 (d, J = 3.2 Hz,1H), 3.02 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 2.84~2.78 (m, 1H), 2.71 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 2.59~2.53 (m, 2H), 2.35~2.32 (m, 2H), 2.19~2.12 (m, 1H), 1.92~1.85 (m, 1H), 1.53~1.50 (m, 1H),1.15 (s, 3H), 1.12~1.09 (m, 1H), 0.90 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 0.81(d, J= 6.8 Hz, 3H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ 168.3, 164.6, 164.1, 160.7, 150.4, 141.2, 133.6, 132.7, 132.7, 129.8, 129.8, 127.7, 124.5, 120.2, 114.4, 114.4, 114.1, 114.1, 72.9, 65.9, 65.3, 60.8, 60.1, 56.5, 55.5, 55.4, 53.7, 40.7, 36.7, 29.3, 28.0, 24.6, 17.6, 17.5, 16.7, 15.0. MS calcd for C36H36O10 (M+): 629.3, found 629.3.
2.2  化合物CK21S-002-bの合成
【０１０８】
【化１０】
2021504455.tif 000013
【０１０９】
CK21S-001-bの製造と類似する方法によって、CK21S-001-aからCK21S-002-bを製造したが、収率は90％で、純度は99％超であった。
【０１１０】
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.21(d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.72 (d, J = 9.2 Hz, 2H), 7.05 (d, J = 9.2 Hz, 2H), 6.92 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 4.35 (s, 1H), 3.89 (d, J = 6 Hz, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.83 (s, 3H), 3.70 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 3.38 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 2.80~2.78 (m, 2H), 2.55~2.52 (m, 1H), 2.34~2.30 (m, 2H), 1.91~1.80 (m, 2H), 1.47 (s, 9H), 1.11 (s, 3H), 1.12~1.05 (m, 1H), 0.89 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 0.79 (d, J= 6.8 Hz, 3H). MS calcd for C41H44O12 (M+): 729.3, found 729.3.
実施例3：化合物CK21S-003の製造
3.1  化合物CK21S-003の合成
【０１１１】
【化１１】
2021504455.tif 000014
【０１１２】
CK21S-001の製造と類似する方法によってCK21S-003を製造したが、収率は90%で、純度は99％超であった。異なる点は、実施例1におけるベンゾイルクロリドおよびフロイルクロリドの代わりにp-トリフルオロメチルベンゾイルクロリドを使用したことで、ほかの条件は同様であった。
【０１１３】
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.36 (d, J= 8.0 Hz, 2H), 7.88 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.81 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.67 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 3.82 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 3.44 (d, J = 3.2 Hz,1H), 3.04 (d, J = 10 Hz, 1H), 2.68~2.58 (m, 3H), 2.55 (d, J = 10 Hz, 1H), 2.40~2.37 (m, 2H), 2.20~2.13 (m, 1H), 2.00~1.90 (m, 1H), 1.60 (m, 1H), 1.18 (s, 3H), 1.16~1.13 (m, 1H), 0.90 (d, J = 7.2 Hz, 3H), 0.83 (d, J = 7.2Hz, 3H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ 167.3, 163.3, 150.0, 143.2, 136.4, 136.1, 135.1, 131.6, 131.5, 131.3, 130.9, 130.4, 128.3, 126.3, 125.6, 73.0, 65.8, 65.5, 60.1, 60.1, 56.2, 54.0, 40.9, 36.8, 29.1, 28.0, 24.7, 17.7, 17.5, 16.7, 14.9. MS calcd for C36H30O8F6 (M+): 705.2, found 705.2.
3.2  化合物CK21S-003-bの合成
【０１１４】
【化１２】
2021504455.tif 000015
【０１１５】
CK21S-001-bの製造と類似する方法によってCK21S-003-bを製造したが、収率は92％で、純度は98％超であった。
【０１１６】
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.37 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.89 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.81 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.67 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 4.36 (s, 1H), 3.73 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 3.44 (d, J = 2.8Hz, 1H), 2.72 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 2.63~2.57 (m, 2H), 2.38~2.36 (m, 2H), 1.96~1.84 (m, 2H), 1.62~1.59 (m, 1H), 1.46 (s, 9H), 1.19~1.16 (m, 1H), 1.14 (s, 3H), 0.86 (d, J= 6.8 Hz, 3H), 0.80 (d, J = 7.2 Hz, 3H). MS calcd for C41H38O10F6 (M+): 805.2, found 805.2.
実施例4：化合物CK21S-004の製造
4.1  化合物CK21S-004の合成
【０１１７】
【化１３】
2021504455.tif 000016
【０１１８】
CK21S-001の製造と類似する方法によってCK21S-004を製造したが、収率は88％で、純度は99％超であった。異なる点は、実施例1におけるベンゾイルクロリドの代わりに2-フロイルクロリドを使用したことで、ほかの条件は同様であった。
【０１１９】
1H NMR (400MHz, CDCl3): δ 7.74~7.72 (m, 1H), 7.54 (dd, 1H), 7.49 (d, 1H), 7.17 (d, 1H), 6.63 (q, 1H), 6.56 (q, 1H), 3.77 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 3.38 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 3.18 (d, J = 10 Hz,1H), 3.01(d, J = 3.2 Hz, 1H), 3.04 ~2.97 (m, 1H), 3.62 (d, J = 10 Hz, 1H), 2.54~2.50 (m, 1H), 2.40~2.32 (m, 1H), 2.23~2.16 (m, 1H), 1.96~1.87 (m, 1H), 1.57~1.50 (m, 2H), 1.17 (s, 3H), 1.13~1.10 (m, 1H), 0.95 (d, J = 7.2 Hz, 3H), 0.823 (d, J = 7.2 Hz, 3H); 13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ 167.4, 155.6, 150.0, 148.0, 145.1, 144.2, 142.6, 140.3, 128.7, 124.6, 121.6, 115.5, 113.0, 112.6, 73.2, 66.1, 65.4, 60.6, 60.2, 56.3, 54.0, 40.4, 36.7, 29.1, 28.0, 24.4, 17.8, 17.7, 16.8, 14.8. MS calcd for C30H28O10(M+): 549.18, found 549.17.
4.2  化合物CK21S-004-bの合成
【０１２０】
【化１４】
2021504455.tif 000017
【０１２１】
CK21S-001-bの製造と類似する方法によってCK21S-004-bを製造したが、収率は93％で、純度は99％超であった。1H NMR(400MHz, CDCl3): δ 7.76 (d, J = 0.8 Hz,1H), 7.55 (d, J = 3.2 Hz,1H), 7.50 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.17 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 6.66 (dd, J = 1.6 Hz, 3.6 Hz, 1H), 6.56 (dd, J = 1.6 Hz, 3.6 Hz, 1H), 4.54 (s, 1H), 3.68 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 3.40 (d, J = 2.8 Hz,1H), 3.08 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 3.03~2.97 (m, 1H), 2.50~2.47 (m, 1H), 2.35~2.31 (m, 2H), 1.93~1.85 (m, 2H), 1.49 (s, 9H), 1.25 (m, 1H), 1.13 (s, 3H), 1.08~1.05 (m, 1H), 0.93 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 0.80 (d, J= 6.8 Hz, 3H). MS calcd for C35H36O12 (M+): 649.2, found 649.2.
実施例5：化合物CK21S-005の製造
5.1  化合物CK21S-005の合成
【０１２２】
【化１５】
2021504455.tif 000018
【０１２３】
CK21S-001の製造と類似する方法によってCK21S-005を製造したが、収率は80%で、純度は99％超であった。反応条件は同様であった。1H NMR（400M, CDCl3）: δ 8.25 (dd, J=1.6 Hz, 8 Hz, 2H), 7.76 (dd, J =1.6 Hz, 8.4 Hz, 2H), 7.67 (m, 1H), 7.58 (t, J= 7.2 Hz, 2H), 7.43~7.38 (m, 3H), 3.80 (d, J= 3.2 Hz, 1H), 3.39 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 2.98 (d, J = 10 Hz, 1H), 2.75~2.69 (m, 1H), 2.63~2.58 (m, 1H), 2.56 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 2.53 (d, J= 10Hz, 1H), 2.40~2.32 (m, 2H), 2.21~2.14 (m, 1H), 1.88 (dd, J =14.0 Hz, 13.2 Hz, 1H), 1.55~1.52 (m, 1H), 1.18~1.11 (m, 1H), 1.15 (s, 3H), 0.92 (d, J = 7.2 Hz, 3H), 0.82 (d, J= 6.8 Hz, 3H); 13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ 168.1, 164.5, 150.3, 142.2, 134.4, 133.5, 131.9, 130.5, 129.9,129.2, 128.9, 128.6, 128.1, 128.0, 72.8, 65.8, 65.3, 60.7, 60.0, 56.5, 53.7, 40.7, 36.7, 29.3, 27.9, 24.6, 17.8, 17.6, 16.7, 15.0.  MS calcd for C34H32O8(M+): 569.2, found 569.2.
5.2  化合物CK21S-005-bの合成
【０１２４】
【化１６】
2021504455.tif 000019
【０１２５】
CK21S-001-bの製造と類似する方法によってCK21S-005-bを製造したが、収率は90％で、純度は99％超であった。1H NMR（400M, CDCl3）: δ 8.26 (dd, J=1.6 Hz, 8 Hz, 2H), 7.76 (dd, J =1.6 Hz, 8.4 Hz, 2H), 7.67 (m, 1H), 7.58 (t, J= 7.2 Hz, 2H), 7.44~7.38 (m, 3H), 4.30 (d, J= 3.2 Hz, 1H), 3.70 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 3.40 (d, J = 10 Hz, 1H), 2.75~2.68 (m, 1H), 2.62 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 2.58~2.54 (m, 1H), 2.33~2.27 (m, 2H), 1.91~1.81 (m, 2H), 1.49 (s, 9H), 1.11(s, 3H), 0.92 (d, J = 7.2 Hz, 3H), 0.82 (d, J = 6.8 Hz, 3H); 13C-NMR (100 MHz, CDCl3): δ 168.1, 164.5, 150.3, 142.2, 134.4, 133.5, 131.9, 130.5, 129.9,129.2, 128.9, 128.6, 128.1, 128.0, 82.9, 73.9, 63.4, 63.1, 61.6, 58.6, 55.2, 54.5, 40.8, 36.7, 29.3, 27.9, 24.6, 17.8, 17.7, 16.7, 15.5. MS calcd for C39H40O10 (M+): 669.2, found 669.2
実施例6：化合物CK21S-006の製造
【０１２６】
【化１７】
2021504455.tif 000020
【０１２７】
CK21S-001の製造と類似する方法によってCK21S-006を製造したが、収率は75%で、純度は95％超であった。異なる点は、実施例1におけるフロイルクロリドの代わりにシクロヘキサンカルボニルクロリドを使用したことで、ほかの条件は同様であった。
【０１２８】
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.67 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.65 (d, J =1.6 Hz, 1H), 7.43~7.35(m, 2H), 3.86 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 3.50 (d, J = 2.8Hz, 1H), 3.42 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 3.37 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 3.0 (t, J = 4.8 Hz, 1H), 2.71 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 2.62 ~ 2.55 (m, 2H), 2.37~2.32 (m, 2H), 2.28 (q, J = 6.8 Hz,1H), 2.22~2.16 (m, 2H), 1.97 (dd, J1=13.2 Hz, J2 = 2.0 Hz, 1H), 1.90~1.84 (m, 2H), 1.73 (d, J =11.6 Hz,1H), 1.63~1.53 (m, 2H), 1.39 ~1.24 (m, 4H), 1.20 (s, 3H), 1.17~1.12 (m, 1H), 1.01  (d, J = 7.2 Hz, 3H), 0.87 (d, J = 7.2Hz, 3H). MS calcd for C34H38O8 (M+): 575.2, found 575.2。
【０１２９】
CK21S-001-bの製造と類似する方法によってCK21S-006-bを製造した。
【０１３０】
実施例7：化合物CK21S-007の製造
【０１３１】
【化１８】
2021504455.tif 000021
【０１３２】
CK21S-001の製造と類似する方法によって、トリプトニド（Triptonide）からCK21S-007を製造したが、収率は91％で、純度は98％超であった。
【０１３３】
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.22~8.25 (m, 2H), 7.77~7.79 (m, 2H), 7.59~7.63 (m, 1H), 7.49~7.54 (m, 2H), 7.37~7.41 (m, 3H), 3.94 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 3.71(d, J = 2.8 Hz, 1H), 2.79~2.85 (m, 1H), 2.56 ~ 2.61 (m, 2H), 2.33 ~ 2.45 (m, 2H), 2.20~2.29 (m, 1H), 1.88 (dd, J1 = 13.6 Hz, J2 = 14.8 Hz, 1H), 1.54~1.58 (m, 1H), 1.19~1.28 (m, 1H), 1.09 (s, 3H), 0.93 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 0.87 (d, J= 6.8 Hz, 3H)。MS calcd for C34H30O8(M+):567.2, found 567.2.
実施例8：化合物CK21S-008の製造
【０１３４】
【化１９】
2021504455.tif 000022
【０１３５】
化合物CK21S-005（57 mg，0.1 mmol）を乾燥した三口丸底フラスコに入れ、3 mLのジクロロメタンを入れて溶解させ、0℃に降温させ、DAST F試薬（0.3 ml, 2.289 mmol）を吸い取り、反応系に滴下し、十分に撹拌し、系がゆっくり微黄色になり、4 h反応させた後、飽和NaHCO3溶液を入れて反応をクエンチングした。酢酸エチルを入れて希釈した。有機相をそれぞれ水（10 mL）、飽和炭酸ナトリウム（10 mL）および飽和塩化ナトリウム（10 mL）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧で濃縮した。粗製品をシリカゲルクロマトグラフィーによって分離・精製し（ジクロロメタン：酢酸エチル）、収集して目的の産物CK21S-008（白色の固体，40 mg，収率70％）を得た。1H NMR （400M, CDCl3）δ 0.89 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 1.18 (d, J = 6.9 Hz,3H), 1.13 (s, 3H), 1.23-1.28 (m, 1H), 1.51-1.54 (m, 1H), 1.83 ~ 1.90 (m, 1H), 1.92 ~ 1.99 (m, 1H), 2.25-2.36 (m, 2H), 2.58 ~ 2.61 (m, 1H), 2.74 ~ 2.80 (m, 1H), 2.98 ~ 2.99 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 3.34 (t, J = 2.8 Hz,1H), 3.70 (t, J = 1.6 Hz, 1H), 4.95 (d, 1H), 7.38 ~ 7.45 (m ,3H), 7.47 ~ 7.49 (m, 1H), 7.56 ~ 7.60 (m,2H), 7.67 ~ 7.70 (m,1H), 7.75 ~ 7.78 (m,2H), 8.23 ~ 8.25(m, 1H); 19F NMR（400M, CDCl3）δ 213.49。MS calcd for C34H31FO7 (M+):571.2, found 571.3.
実施例9：化合物CK21S-005-b'の製造
【０１３６】
【化２０】
2021504455.tif 000023
【０１３７】
CK21S-005を原料とし、文献（J. Med. Chem., 2015, 58, 9334）と類似する方法によってCK21S-005-b'を合成した。 1H NMR (400MHz, CDCl3): δ 8.25 (d, J = 5.2 Hz, 2H), 7.74 (d, J = 4.8 Hz, 2H), 7.68 (t, 1H), 7.61(t, 2H), 7.43~7.38 (m, 3H), 4.94 (d, J = 8 Hz, 1H), 4.85 (d, J = 8 Hz, 1H), 3.69 (d, J = 2 Hz, 1H), 3.38 (d, J = 2 Hz, 1H), 3.21(s, 1H), 2.62~2.72 (m, 2H), 2.44 (d, J = 4 Hz, 1H), 2.35~2.33 (m, 2H), 2.29~2.24 (m, 1H), 2.13 (s, 3H), 1.86 (t, 1H), 1.59~1.57 (m, 1H), 1.16~1.09 (m, 1H), 1.13 (s, 3H), 0.90 (d, J = 4.4 Hz, 3H), 0.78 (d, J = 4.4 Hz, 3H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ 168.1, 164.5, 150.5, 142.2, 134.4, 133.5, 132.0, 130.5, 129.8, 129.3, 129.0, 128.6, 128.1, 128.0, 75.6, 64.1, 63.8, 60.8, 58.4, 54.9, 53.8, 40.7, 36.8, 29.6, 29.0, 26.1, 24.4, 17.7, 17.3, 16.7, 15.0, 14.8. MS calcd for C36H36O12 S(M+): 628.2, found 628.2.
実施例10：化合物CK21S-009の製造
【０１３８】
【化２１】
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【０１３９】
化合物CK21S-005-b'からさらに誘導して化合物CK21S-009-bを得、化合物CK21S-009-bからさらにベンジル基を脱離させて化合物CK21S-009を得たが、具体的な操作は以下の通りである。
【０１４０】
室温において、CK21S-005-b'（300 mg, 0.48 mmol）をジクロロメタン（10 mL）に溶解させ、そして分子篩（300 mg）を入れ、窒素ガスで置換し、15〜20℃で撹拌した。さらに、NIS(ヨードスクシンイミド)（129 mg, 0.57mmol）、リン酸ジベンジル（159 mg, 0.57mmol）をテトラヒドロフラン（10 mL）に溶解させた後、ゆっくり反応液に滴下し、滴下終了後、室温に維持しながら3h反応させ、反応終了後、まず反応液をろ過し、さらにジクロロメタン（120 mL）を入れて希釈した後、0.1Mのチオ硫酸ナトリウム（10 mL）を入れて脱色させ、さらに飽和炭酸ナトリウム水溶液および飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、有機相を乾燥し、濃縮し、産物であるCK21S-009-bを300mg得たが、カラムによって精製せず、そのまま次の工程の反応を行った。
【０１４１】
パラジウム炭素触媒（160 mg）をテトラヒドロフラン(12 mL)に置いた後、0℃に降温させて維持しながら撹拌し、別途にCK21S-009-b（300mg）をTHF（12 mL）に溶解させた後、ゆっくり上記反応液に入れ、添加完了後、水素ガスで置換し、水素バルーンで反応を水素ガスの雰囲気に維持し、室温で2h反応させた。反応終了後、反応液をろ過した後、少量の炭酸ナトリウム水溶液（50mg Na2CO3, 4 mL）を入れ、pHを8〜9程度に調整し、少量の水およびメタノールを入れ、凍結乾燥後、分取液体クロマトグラフィーによって精製し、目的の産物（白色の固体，80mg，純度99％超）を得た。1H NMR (400MHz, CDCl3) δ  8.20 (d, J = 7.6Hz, 2H), 7.76~7.79 (m, 1H), 7.65~7.71(m, 4H), 7.42~7.51 (m, 3H), 7.27 (s, 2H), 4.89~4.97 (m, 2H), 3.75 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 3.38 (d, J = 2.8Hz, 1H), 3.32 (s, 1H), 2.73~2.82 (m, 2H), 2.31~2.40 (m, 2H), 2.22~2.26 (m, 2H), 1.81 (t, J = 14Hz, 1H), 1.23~1.30 (m, 1H), 1.10~1.11(m, 1H), 0.97 (s, 3H), 0.82 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 0.65 (d, J = 6.8 Hz, 3H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ 167.2, 164.3, 150.3, 141.9, 135.0, 131.9, 131.7, 130.0, 129.8, 129.4, 128.9, 128.7, 127.6, 126.9, 90.7, 75.7, 63.7, 62.9, 60.5, 59.8, 54.7, 53.3, 36.1, 28.6, 25.3, 23.8, 17.3, 17.2, 16.8, 15.0. 31P-NMR (400MHz, CDCl3): δ -2.1. MS calcd for C35H35O12P(M-): 677.2, found 627.2.
実施例11：小分子化合物CK21S-001、CK21S-001-b、CK21S-002、CK21S-002-b、CK21S-003、CK21S-003-b、CK21S-004、CK21S-004-b、CK21S-005、CK21S-005-b、CK21S-006、CK21S-006-b、CK21S-007、CK21S-008、CK21S-009およびトリプトリドの体外抗腫瘍活性の検出
腫瘍細胞はAsPC-1(ヒト膵臓腺癌細胞)、PC-3(ヒト前立腺癌細胞)およびSK-OV-3(ヒト卵巣癌細胞)を含み、細胞の由来および培地は下記表1に示す。
【０１４２】
【表１】
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【０１４３】
トリプトリドを陽性対照とし、試験薬物の使用濃度は1 μM、0.33 μM、0.11 μM、0.037 μM、0.012 μM、0.004 μM、1.4nMおよび0.46nMであった。腫瘍細胞を再生させた後、相応する完全培地で再懸濁させ、5％ CO2、37℃で培養した。対数増殖期の腫瘍細胞を取り、相応する完全培地で細胞の濃度を調整し、各ウェルに90 μLの細胞懸濁液を入れ、各細胞の数は下記表2に示し、5％ CO2、37℃で一晩培養し，各濃度の試験薬物を入れ、続いて48時間培養した。最後にPromega CellTiter-Gloルミネセンス細胞生存アッセイキット（Luminescent Cell Viability Assay Kit）によって検出した。
【０１４４】
【表２】
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【０１４５】
化合物CK21S-001、CK21S-001-b、CK21S-002、CK21S-002-b、CK21S-003、CK21S-003-b、CK21S-004、CK21S-004-b、CK21S-005、CK21S-005-b、CK21S-006、CK21S-006-b、CK21S-007、CK21S-008、CK21S-009およびトリプトリドの体外抗腫瘍活性のIC50値は表3に示し、化合物はいずれも体外抗腫瘍活性を有し、かつ活性が陽性対照トリプトリドの活性と変わらなかった。
【０１４６】
【表３】
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【０１４７】
実施例12：
小分子化合物CK21S-001、CK21S-001-b、CK21S-002、CK21S-002-b、CK21S-003、CK21S-003-b、CK21S-004、CK21S-004-b、CK21S-005、CK21S-005-b、CK21S-006、CK21S-006-b、CK21S-007、CK21S-008、CK21S-009およびトリプトリドの体外免疫抑制活性の検出
マウス脾臓リンパ球の調製
BALB/cマウスを頸椎脱臼で殺処分し、無菌でその脾臓を取り出し、単細胞懸濁液を調製し、所要の濃度に調整した。
【０１４８】
細胞増殖試験
常法によって4×106個/mlの脾臓リンパ球懸濁液を調製し、96ウェルプレートに細胞を100μL/ウェル入れ、50μLの異なる濃度の被験サンプルを入れ、同時にConA（最終濃度5μg/mL）を入れてT細胞の活性化を誘導して増殖させるか、LPS(最終濃度10μg/mL)を50μL入れてB細胞の活性化を誘導して増殖させ、別途に相応する陽性対照および無刺激のバックグランド対照を設けた。37℃、5％CO2のインキュベーターで48h培養した。培養終了の8h前に0.25 μCiの3H-チミジンを配合した。培養終了時、培養プレートを-20℃の冷蔵庫で凍結保存し、検出に備えた。測定時、細胞収集装置で細胞をガラス繊維膜に収集し、シンチレーション液を入れた後、β計数装置で細胞DNAに配合された3H-チミジル酸の量を読み取り、cpm値で細胞増殖の様子を表す。
【０１４９】
化合物CK21S-001、CK21S-001-b、CK21S-002、CK21S-002-b、CK21S-003、CK21S-003-b、CK21S-004、CK21S-004-b、CK21S-005、CK21S-005-bおよびトリプトリドの体外免疫抑制活性のIC50値は表4に示し、化合物はいずれも体外免疫抑制活性を有し、かつ活性が陽性対照トリプトリドの活性に相当した。
【０１５０】
【表４】
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【０１５１】
実施例13：
小分子化合物CK21S-005およびトリプトリドの体内抗腫瘍活性の検出
ヒト膵臓腺癌細胞AsPC-1を皮下接種法によってオスのヌードマウスの右側の側腹部の皮下に接種した。腫瘍担持マウスはランダムに5群に分けられ、それぞれ陰性対照群（対照，n = 8，ブランク乳剤，i.p./i.v.，qd）、トリプトリド群（トリプトリド，n=8，0.25mg/kg，i.v.，qd）、陽性対照群（ゲムシタビン，n=8，50mg/kg，i.p.，tiw）、 CK21S-005乳剤群（CK21S-005乳剤，n=8，5mg/kg，i.p./i.v.，qd）、CK21S-005乳剤群（CK21S-005乳剤，n=8，2.5mg/kg，i.p./i.v.，qd）であった。実験が終わるまで、マウスは群によって投与した。2週間の投与期間で、腫瘍のサイズおよび腫瘍担持マウスの体重の経時変化をモニタリングし、そして実験終了時に腫瘍の重量を秤量することによって、総合的に薬物CK21S-005の腫瘍生長に対する抑制降下を評価した。
【０１５２】
ここで、乳剤の調製方法は以下の通りである。処方量の注射用油を秤量し、70-90℃に加熱し、処方量の原料を秤量して油相に分散させ、完全に溶解するように剪断・撹拌し、油相を形成した。処方量の注射用水を秤量し、水浴で70℃に加熱し、処方量のリン脂質、乳化助剤、グリセリンなどを入れ、剪断して分散させ、水相を形成した。高速剪断の条件において、油相をゆっくり水相に入れ、3-15 min剪断し、初期乳を形成した。初期乳を圧力400-1000 barの条件において高圧均質化を3-6回行い、均一に分布する乳剤を形成した。乳剤を分けてガラス容器（たとえばアンプル瓶）に入れた後、121℃、15分で湿熱滅菌を行った。滅菌後、サンプルをQC実験室に送って検出した。
【０１５３】
腫瘍の体積および重量のデータ（図1を参照する）から、CK21S-005乳剤5mg/kg(5mpkで表示する)、CK21S-005乳剤2.5mg/kg(2.5mpkで表示する)、トリプトリド乳剤0.25mg/kgの静脈または腹腔投与は膵臓腺癌AsPC-1腫瘍担持マウスに顕著な抑制作用を有し、陽性対照のゲムシタビン群よりも顕著に優れたことが示された。
【０１５４】
マウスの体重のデータ（図2を参照する）から、CK21S-005乳剤(2.5mg/kg、5mg/kg)、トリプトリド乳剤0.25mg/kgの投与（静脈または腹腔投与）後、マウスの体重が顕著に低下したことが示された。トリプトリド乳剤（0.25mg/kg）は連続i.v.投与の6日目から、マウスは次々と死亡し、尾部が重度に潰瘍化し、死体解剖では、全肺が黒くて壊死し、5/8のマウスが死亡した。トリプトリド乳剤は当該投与量における毒性が高く、致死投与量であった。CK21S-005乳剤群では、マウスは死亡が見られず、8匹のマウスは全部投与終了まで生存したことから、CK21S-005の安全性はトリプトリドによりも優れたことがわかる。
【０１５５】
各文献がそれぞれ単独に引用されるように、本発明に係るすべての文献は本出願で参考として引用する。また、本発明の上記の内容を読み終わった後、当業者が本発明を各種の変動や修正をすることができるが、それらの等価の形態のものは本発明の請求の範囲に含まれることが理解されるはずである。
【図１】
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【図２】
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【国際調査報告】
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