(57)【要約】  本開示は、被検体の脳内に植え込まれたポンプによってボルテゾミブを脳腫瘍内に投与する方法を提供する。また本開示によって、被検体の脳内に植え込まれたポンプによって治療的有効量の薬剤を脳、腫瘍内に送達することを含む、被検体の中枢神経系中の腫瘍に薬剤を投与する方法であって、ここで中枢神経系における被検体への薬剤（ｄｒａｇ）の投与が薬剤の毒性のために禁忌とされている、前記方法が包含される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
被検体の脳内に植え込まれたポンプによって治療的有効量のボルテゾミブを脳腫瘍内に送達することを含む、ボルテゾミブを投与する方法。
【請求項２】
前記ポンプが磁気ブリーザーポンプである、請求項１の方法。
【請求項３】
前記ポンプが浸透圧ポンプである、請求項１の方法。
【請求項４】
前記ポンプが脳腫瘍内に直接植え込まれる、請求項１の方法。
【請求項５】
前記腫瘍が頭蓋内神経膠腫腫瘍である、請求項１の方法。
【請求項６】
被検体の中枢神経系中の腫瘍に薬剤を投与する方法であって、被検体の脳内に植え込まれたポンプによって治療的有効量の薬剤を脳腫瘍内に送達することを含み、中枢神経系における被検体への薬剤の投与が薬剤の毒性のために禁忌とされている、前記方法。
【請求項７】
前記毒性が末梢神経障害、低血圧、心毒性、肺毒性、血小板減少症、好中球減少症、肝毒性またはそれらの組み合わせを含む、請求項６の方法。
【請求項８】
前記薬剤がボルテゾミブ、ビンクリスチン、メトトレキセート、ＢＣＮＵ、ブレオマイシン、シタルビン（ｃｙｔａｒｂｉｎｅ）、ダカルバジン、ジアジキノン（ｄｉａｚｉｑｕｉｎｏｎｅ）、ドキソルビシン、マイトマイシンＣまたはＴｈｉｏＴＥＰＡである、請求項６の方法。
【請求項９】
前記薬剤がボルテゾミブである、請求項８の方法。
【請求項１０】
前記ポンプが磁気ブリーザーポンプである、請求項６の方法。
【請求項１１】
前記ポンプが浸透圧ポンプである、請求項６の方法。
【請求項１２】
前記腫瘍が頭蓋内神経膠腫腫瘍である、請求項６の方法。
【請求項１３】
前記被検体を放射線照射で処置するステップをさらに含む、請求項６の方法。
【請求項１４】
前記薬剤が放射線照射前、放射線照射中または放射線照射後に投与される、請求項６の方法。
【請求項１５】
前記被検体に化学療法剤を投与するステップをさらに含む、請求項６の方法。
【請求項１６】
前記化学療法剤がＤＮＡアルキル化剤、トポイソメラーゼ阻害剤、小胞体ストレス誘導剤、白金化合物、代謝拮抗剤、酵素阻害剤および受容体アンタゴニストよりなる群から選択される、請求項１５の方法。
【請求項１７】
被検体の中枢神経系に薬剤を投与する方法であって、脳内に植え込まれたポンプによって治療的有効量の薬剤を被検体の脳内に送達することを含み、中枢神経系における被検体への薬剤の投与が薬剤の毒性のために禁忌とされている、前記方法。
【請求項１８】
前記毒性が末梢神経障害、低血圧、心毒性、肺毒性、血小板減少症、好中球減少症、肝毒性またはそれらの組み合わせを含む、請求項１７の方法。
【請求項１９】
前記薬剤が化学療法剤、抗生物質、抗ウイルス剤、抗炎症剤、標的化化合物、サイトカイン、免疫毒素、抗腫瘍抗体、抗血管新生剤、抗浮腫剤、放射線増感剤、統合失調症治療薬、抗てんかん薬、神経保護薬およびそれらの組み合わせよりなる群から選択される、請求項１７の方法。
【請求項２０】
前記ポンプが磁気ブリーザーポンプである、請求項１７の方法。
【請求項２１】
前記ポンプが浸透圧ポンプである、請求項１７の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、薬剤の腫瘍内送達に関する。本発明はさらに、中枢神経系中の腫瘍にプロテアソーム阻害剤を投与する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
中枢神経系（ＣＮＳ）がんの最も一般的形態である悪性神経膠腫は、現在のところ本質的に不治の病であると考えられている。様々な悪性神経膠腫のなかでも、退形成性星状細胞腫（グレードＩＩＩ）および多形膠芽腫（ＧＢＭ；グレードＩＶ）は、それらの侵攻性増殖および現在利用可能な治療に対する抵抗性のため、特に予後が不良である。悪性神経膠腫に対する現在の標準治療は、手術、電離放射線照射および化学療法からなる。近年の医学の進歩にもかかわらず、過去５０年間、悪性神経膠腫の予後に何らかの著しい改善は見られていない。Ｗｅｎ  ｅｔ  ａｌ．  Ｍａｌｉｇｎａｎｔ  ｇｌｉｏｍａｓ  ｉｎ  ａｄｕｌｔｓ．  Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｊ  Ｍｅｄ．  ３５９：４９２−５０７，２００８。Ｓｔｕｐｐ  ｅｔ  ａｌ．  Ｒａｄｉｏｔｈｅｒａｐｙ  ｐｌｕｓ  ｃｏｎｃｏｍｉｔａｎｔ  ａｎｄ  ａｄｊｕｖａｎｔ  ｔｅｍｏｚｏｌｏｍｉｄｅ  ｆｏｒ  ｇｌｉｏｂｌａｓｔｏｍａ．  Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｊ  Ｍｅｄ．  ３５２：９８７−９９６，２００５。
【０００３】
膠芽腫（ＧＢＭ）は、原発性脳腫瘍のうち、最も蔓延しており最も侵攻性の高い形態である２。現在、この腫瘍に対して有効な処置はない。手術、放射線照射および化学療法を包含する現在の標準治療は、生存期間を診断時から約１５ヶ月に増加させたが、患者の１０％しか術後５年間生存していない１５。処置成功に対して重要な妨げとなるのは、腫瘍再発およびさらなる化学療法への抵抗性である。手術および放射線照射を繰り返すことは、しばしば実行可能な選択肢ではない。慣例的に、脳内または脳上に位置する腫瘍を処置するための選択肢としては、手術、放射線照射、化学療法および局所腫瘍内治療が挙げられる。全身性化学療法は、放射線照射および手術の補助として実行可能な選択肢である。しかしながら、脳がんにおける有効性は以下によって制限されている：１）血液脳関門を越えた送達、２）がん細胞による薬剤抵抗性の発達、および３）化学療法剤から生じる全身性の副作用。血液脳関門は、悪性脳腫瘍の存在下で部分的にしか破壊されないため、脳がんへの全身性化学療法の効果的な送達および輸送を依然として減じる。第二に、脳腫瘍は薬剤抵抗性を発達させる可能性がある。最後に、化学療法は身体の全体にわたって浸透移行して分配される。患者の（腫瘍および腫瘍関連領域だけでなく）全身が処置を受けるため、望ましくない副作用、例えば吐き気、下痢、脱毛、ならびに食欲および気力の消失などが生じることがある。副作用のうちのいくつかは、いくらかの患者においては化学療法が処置として利用できないほど強く、それゆえに全体的な生存の可能性を減少させる。
【０００４】
プロテアソーム阻害薬ボルテゾミブは、種々の腫瘍に対して有効であるが、ＧＢＭには有効でない。２００３年、ＦＤＡは、治療的使用のための最初のプロテアソーム阻害剤であるボルテゾミブ（Ｖｅｌｃａｄｅ，Ｍｉｌｌｅｎｎｉｕｍ  Ｐｈａｒｍａ）を承認した１９。この薬剤は、現在、多発性骨髄腫およびマントル細胞リンパ腫の処置のために用いられている５。プロテアソームは、タンパク質分解の主要部位である酵素複合体であり、外来性のタンパク質または異常な細胞内タンパク質を、これらのペプチドの選択的破壊を通じて分解するよう機能する１，３，２４。この活性は、正常な細胞周期および種々の他の機能にとって重要である。プロテアソーム活性の阻害はアポトーシスを導く１３。アポトーシス促進性シグナル伝達の増加および生存促進性シグナル伝達の減少の結果として、ボルテゾミブは、細胞がアポトーシスを受けることを効果的に誘導する２４。プロテアソーム阻害剤は、活性酸素種の生成、ＤＲ５およびＦａｓ発現を通じた腫瘍壊死因子関連アポトーシス誘導リガンド（ＴＲＡＩＬ）細胞死の増加、ならびにアポトーシス促進性Ｂｃｌ−２タンパク質ＢｉｍおよびＢａｄの増加、同様に他の細胞傷害メカニズムを通じて細胞死を引き起こす可能性がある１１，１３，２０。先行する証拠は、プロテアソーム阻害は正常な幹細胞と比べて神経膠腫幹細胞様細胞に対して選択的に細胞傷害性であり得ることを示唆している９。近年の研究は、ボルテゾミブはインビトロで神経膠腫細胞において細胞傷害を誘導することを示している２５。しかしながら、頭蓋内腫瘍モデルにおけるボルテゾミブの活性には疑問が残る。研究は、全身投与でのボルテゾミブの活性の欠如は血液脳関門（ＢＢＢ）における高レベルの排出トランスポーターが原因であり得ることを示唆した２２。それゆえに、ボルテゾミブ送達経路は、薬剤の有効性において重要な役割を果たす。
【０００５】
しかしながら、致死性イベントのため、ボルテゾミブの髄腔内投与は禁忌とされている（ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ａｃｃｅｓｓｄａｔａ．ｆｄａ．ｇｏｖ／ｄｒｕｇｓａｔｆｄａ＿ｄｏｃｓ／ｌａｂｅｌ／２０１４／０２１６０２ｓ０４０ｌｂｌ．ｐｄｆを参照されたい）。したがって、がん、例えば悪性神経膠腫などの治療剤、例えばボルテゾミブなどでの処置のための新規の治療的アプローチを見出すことが重要である。これらの化合物は、単独で、または放射線照射、標準的化学療法および手術を包含する他の処置方法と組み合わせて投与され得る。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Ｗｅｎ  ｅｔ  ａｌ．  Ｍａｌｉｇｎａｎｔ  ｇｌｉｏｍａｓ  ｉｎ  ａｄｕｌｔｓ．  Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｊ  Ｍｅｄ．  ３５９：４９２−５０７，２００８
【非特許文献２】Ｓｔｕｐｐ  ｅｔ  ａｌ．  Ｒａｄｉｏｔｈｅｒａｐｙ  ｐｌｕｓ  ｃｏｎｃｏｍｉｔａｎｔ  ａｎｄ  ａｄｊｕｖａｎｔ  ｔｅｍｏｚｏｌｏｍｉｄｅ  ｆｏｒ  ｇｌｉｏｂｌａｓｔｏｍａ．  Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｊ  Ｍｅｄ．  ３５２：９８７−９９６，２００５
【非特許文献３】ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ａｃｃｅｓｓｄａｔａ．ｆｄａ．ｇｏｖ／ｄｒｕｇｓａｔｆｄａ＿ｄｏｃｓ／ｌａｂｅｌ／２０１４／０２１６０２ｓ０４０ｌｂｌ．ｐｄｆ
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本開示は、被検体の脳内に植え込まれたポンプによって治療的有効量のボルテゾミブを脳腫瘍内に送達することを含む、ボルテゾミブを投与する方法を提供する。
【０００８】
また、本開示によって、脳内に植え込まれたポンプによって治療的有効量の薬剤を被検体の脳内に送達することを含む、被検体の中枢神経系に薬剤を投与する方法であって、ここで中枢神経系における被検体への薬剤の投与が薬剤の毒性のために禁忌とされている、前記方法が包含される（本明細書中で用いられる用語「薬剤」は、用語「剤」または「化合物」と交換可能に用いられる）。
【０００９】
本開示は、被検体の脳内に植え込まれたポンプによって治療的有効量の薬剤を脳腫瘍内に送達することを含む、被検体の中枢神経系中の腫瘍に薬剤を投与する方法であって、ここで中枢神経系における被検体への薬剤の投与が薬剤の毒性のために禁忌とされている、前記方法を提供する。
【００１０】
ある実施形態において、毒性は、末梢神経障害、低血圧、心毒性、肺毒性、血小板減少症、好中球減少症、肝毒性またはそれらの組み合わせを含む。
【００１１】
ある実施形態において、剤は、プロテアソーム阻害剤である。ある実施形態において、剤は、ボルテゾミブ、ビンクリスチン、メトトレキセート、ＢＣＮＵ、ブレオマイシン、シタルビン（ｃｙｔａｒｂｉｎｅ）、ダカルバジン、ジアジキノン（ｄｉａｚｉｑｕｉｎｏｎｅ）、ドキソルビシン、マイトマイシンＣおよび／またはＴｈｉｏＴＥＰＡである。一実施形態において、薬剤は、ボルテゾミブである。
【００１２】
一実施形態において、ポンプは、磁気ブリーザーポンプである。別の実施形態において、ポンプは、浸透圧ポンプである。
【００１３】
ある実施形態において、ポンプは、脳腫瘍内に直接植え込まれる。
【００１４】
一実施形態において、腫瘍は、膠芽腫である。一実施形態において、腫瘍は、頭蓋内神経膠腫腫瘍である。
【００１５】
本発明の方法は、被検体を放射線照射で処置するステップをさらに含み得る。薬剤は、放射線照射前、放射線照射中または放射線照射後に投与され得る。
【００１６】
本発明の方法は、被検体に化学療法剤を投与するステップをさらに含み得る。ある実施形態において、化学療法剤は、ＤＮＡアルキル化剤、トポイソメラーゼ阻害剤、小胞体ストレス誘導剤、白金化合物、代謝拮抗剤、酵素阻害剤および受容体アンタゴニストよりなる群から選択される。
【図面の簡単な説明】
【００１７】
【図１】図１は、ボルテゾミブがインビトロでヒト神経膠腫細胞に対して細胞傷害性であることを実証するＭＴＴ細胞傷害アッセイの結果を示す。神経膠腫細胞（Ｕ２５１、ＬＮ２２９、Ｕ８７）をボルテゾミブ（０〜２５ｎＭ）で４８時間処理した。細胞死を、ＭＴＴアッセイを用いて評価した。Ｏ．Ｄ．＝光学濃度。
【図２】図２Ａ〜２Ｂ。ボルテゾミブはＩＶ投与されたときに皮下腫瘍の進行を低下させた。図２Ａ：神経膠腫細胞（Ｕ２５１）を胸腺欠損ｎｕ／ｎｕマウスに皮下移植した。１４日後、静脈内処置：ビヒクル処置（円）；ボルテゾミブ（合計３６μｇ）（正方形）を開始した。続いて、動物を１４日間処置せずに置いた。ボルテゾミブ処置は、腫瘍増殖速度を有意に（ｐ＝０．０１４５）減少させた。図２Ｂ：神経膠腫細胞（Ｕ８７）を胸腺欠損ヌードマウスに皮下移植した。ボルテゾミブを、合計３６μｇの用量で静脈内注射によって移植後３０日目から始めて投与した。ボルテゾミブは、皮下腫瘍の腫瘍増殖速度を有意に（ｐ＝０．０４１）減少させた。
【図３】図３Ａ〜３Ｂ。ボルテゾミブは全身的に送達されたときに頭蓋内腫瘍の進行に影響しない。ヒト神経膠腫細胞Ｕ２５１（図３Ａ）またはＵ８７（図３Ｂ）を頭蓋内移植し；続いて、マウスにボルテゾミブ（合計３６μｇ）（正方形）またはビヒクル（円）をＩＶで与えた。脳腫瘍のサイズを光学イメージングによって毎週モニターし、動物の生存期間データをＫａｐｌａｎ−Ｍｅｉｅｒプロットによって解析した。ボルテゾミブにはビヒクル生理食塩水対照と比較して有意な差はなかった。
【図４】腫瘍内（ＩＴ）投与されたボルテゾミブ（ＢＺＭ）は生存期間の増加に有効である。神経膠腫細胞（Ｕ２５１）を頭蓋内移植した。１０日後、動物に、ビヒクルをＩＴで；ボルテゾミブＩＶ（合計３６μｇ）；ボルテゾミブＩＴ（低用量、合計０．３６μｇ）；ボルテゾミブＩＴ（中用量、合計１．２μｇ）；およびボルテゾミブＩＴ（高用量、合計３．６μｇ）を処置した。ボルテゾミブの局所投与は、腫瘍進行を遅延させ、生存期間中央値を有意に増加させた（それぞれ中用量の場合は２３日から３４日に、高用量の場合は２３日から３７日に）。統計解析は、次のｐ値を示した：ビヒクル対ボルテゾミブＩＶ（合計３６μｇ）、ｐ＝０．９５２３（有意ではない）；ボルテゾミブＩＶ（３．６μｇ）対ボルテゾミブＩＴ（低用量、合計０．３６μｇ）、ｐ＝０．１１０４（有意ではない）；ボルテゾミブＩＶ（３６μｇ）対ボルテゾミブＩＴ（中用量、合計１．２μｇ）、ｐ＝０．０００５；およびボルテゾミブＩＶ（３６μｇ）対ボルテゾミブＩＴ（高用量、合計３．６μｇ）、ｐ＝０．００２２。ＣＥＤ＝対流強化送達。
【図５】ボルテゾミブはインビボでプロテアソーム活性を阻害する。動物を、Ａｌｚｅｔポンプを用いてボルテゾミブの腫瘍内投与（合計３．６μｇ）によって処置した。５、７または１０日後、動物を安楽死させ、腫瘍を担った脳を採取し、プロテアソーム活性アッセイのために溶解液を調製した。対照の値は、５、７および１０日目にビヒクル処置した脳から得た。データは、腫瘍内ボルテゾミブで処置した担腫瘍動物は有意なプロテアソーム活性の低減を呈することを示す：５日目（ｐ＝０．０３）；７日目（ｐ＝０．０３）；および１０日目（ｐ＝０．００４８）。データは、２回の独立した実験の平均値±ＳＤとして表される。ｐ値は、ビヒクルを異なる処置日におけるプロテアソーム活性と比較したものである。
【図６】組織学的分析は、ＩＶ処置した動物と比較して腫瘍内処置した動物において腫瘍がより小さいことを実証する。担腫瘍動物を、腫瘍内投与ボルテゾミブ（Ａ）またはＩＶ投与ボルテゾミブ（Ｂ）で処置した。５日後、動物を安楽死させ、脳を採取し、ヘマトキシリン／エオシンで染色した。表面積に基づいて、結果は、ＩＶ処置された動物における腫瘍は、腫瘍内処置された動物よりも約１０倍大きかったことを示す（倍率４倍）。組織を抗ヒト抗体（ＴＲＡ  １−８５）でも染色した；結果は、ＩＶ処置はＩＴ処置動物（矢印）（Ｄ）と比較してマウス脳内へのより大きな腫瘍細胞浸潤（矢印）（Ｃ）をもたらすことを示した（倍率１０倍）。
【発明を実施するための形態】
【００１８】
本開示は、被検体の脳内に植え込まれたポンプによってボルテゾミブを脳腫瘍内に投与する方法を提供する。
【００１９】
また本開示には、被検体の脳内に植え込まれたポンプによって治療的有効量の薬剤を脳腫瘍内に送達することを含む、被検体の中枢神経系中の腫瘍に剤を投与する方法であって、ここで中枢神経系における被検体への薬剤の投与が薬剤の毒性のために禁忌とされている、前記方法が包含される。
【００２０】
ある実施形態において、毒性は、末梢神経障害、低血圧、心毒性、肺毒性、血小板減少症、好中球減少症、肝毒性またはそれらの組み合わせを含む。
【００２１】
ある実施形態において、剤は、プロテアソーム阻害剤である。ある実施形態において、剤は、ボルテゾミブ、ビンクリスチン、メトトレキセート、ＢＣＮＵ、ブレオマイシン、シタルビン、ダカルバジン、ジアジキノン、ドキソルビシン、マイトマイシンＣおよび／またはＴｈｉｏＴＥＰＡである。一実施形態において、薬剤は、ボルテゾミブである。
【００２２】
一実施形態において、ポンプは、磁気ブリーザーポンプである。別の実施形態において、ポンプは、浸透圧ポンプである。
【００２３】
ある実施形態において、ポンプは、脳腫瘍内に直接植え込まれる。
【００２４】
一実施形態において、腫瘍は、膠芽腫である。一実施形態において、腫瘍は、頭蓋内神経膠腫腫瘍である。
【００２５】
本発明の方法は、被検体を放射線照射で処置するステップをさらに含み得る。薬剤は、放射線照射前、放射線照射中または放射線照射後に投与され得る。
【００２６】
本発明の方法は、被検体に化学療法剤を投与するステップをさらに含み得る。ある実施形態において、化学療法剤は、ＤＮＡアルキル化剤、トポイソメラーゼ阻害剤、小胞体ストレス誘導剤、白金化合物、代謝拮抗剤、酵素阻害剤および受容体アンタゴニストよりなる群から選択される。
【００２７】
本開示はまた、疾患、例えばＣＮＳ腫瘍などを処置するために剤を用いる方法を提供する。本発明の剤は、単独で、または放射線照射、手術もしくは他の化学療法剤と組み合わせて投与され得る。剤はまた、抗ウイルス剤、抗炎症剤または抗生物質と同時投与され得る。剤は、同時にまたは逐次的に投与され得る。本発明の剤は、他の活性剤（１または複数）の投与前、投与中または投与後に投与することができる。
【００２８】
本発明の剤は、神経系のがん、例えば悪性神経膠腫（例として星状細胞腫、退形成性星状細胞腫、多形膠芽腫）、網膜芽細胞腫、毛様細胞性星状細胞腫（グレードＩ）、髄膜腫、転移性脳腫瘍、神経芽細胞腫、脳下垂体腺腫、頭蓋底髄膜腫および頭蓋底がんなどの処置のために用いられ得る。
【００２９】
プロテアソーム阻害剤
本明細書中で用いられる用語「プロテアソーム阻害剤」とは、プロテアソームの活性を標的とする、減少させるまたは阻害する化合物を指す。いくつかの実施形態において、プロテアソーム阻害剤は、ボルテゾミブ（Ｖｅｌｃａｄｅ（登録商標）、ＰＳ−３４１、［（１Ｒ）−３−メチル−１−［［（２Ｓ）−３−フェニル−２−（ピラジン−２−カルボニルアミノ）プロパノイル］アミノ］ブチル］ボロン酸）、カルフィルゾミブ（Ｋｙｐｒｏｌｉｓ）、ジスルフィラム、エピガロカテキン−３−ガレート、ＭＬＮ  ３４１およびサリノスポラミドＡから選択される。
【００３０】
本明細書中に開示される方法における使用に適したプロテアソーム阻害剤としては、限定されるものではないが、ペプチドボロン酸化合物が挙げられ得る。ＮＰＩ−００５２（サリノスポラミドＡアナログ）、２−ピロリドン化合物、エピガロカテキン  ３−ガレート（ＥＧＣＧ）アナログ（とりわけプロテアソーム阻害に特異的なそれらのアナログ）、ＰＲ−１７１、ＰＲ−０４７、エポキソマイシンアナログ、ペプチドアナログ、テトラペプチド誘導体、チロペプチド（ｔｙｒｏｐｅｐｔｉｄｅ）Ａアナログおよびそれらの組み合わせ。いくつかの実施形態において、プロテアソーム阻害剤は、β１サブユニット活性（キモトリプシン様活性）、β２サブユニット活性（トリプシン様活性）およびβ５サブユニット活性（ポスト−グルタミルぺプチジル加水分解様活性）から選択される１または複数のプロテアソーム酵素活性を阻害する。１つの好適なプロテアソーム阻害剤は、ボルテゾミブ（ＢＺ）または薬学的に許容されるその塩であり、例えば、約０．７ｍｇ／ｍ２から約１．９ｍｇ／ｍ２の投薬量で患者に投与され得る。米国特許第９，６３６，３２９号。
【００３１】
しかしながら、がんを処置するためのボルテゾミブのより広範な使用は、全身毒性によって阻止されるようである。ボルテゾミブは健常な組織に分布し、下痢、疲労、体液貯留、低カリウム血症、低ナトリウム血症、低血圧、倦怠感、吐き気、起立効果、ボルテゾミブ誘発性末梢神経障害（ＢＩＰＮ）および血液毒性を引き起こし、そのうち血小板減少症が最も重篤である。
【００３２】
プロテアソーム阻害剤としては、ボルテゾミブ、薬学的に許容されるその塩、そのボロン酸エステルおよび／またはボルテゾミブの構造と類似した構造を持つ化合物が挙げられる。ボルテゾミブと類似した構造を持つプロテアソーム阻害剤としては、米国特許第７，１１９，０８０号；第６，７４７，１５０号；第６，６１７，３１７号；第６，５４８，６６８号；第６，４６５，４３３号；第６，２９７，２１７号；第６，０８３，９０３号；第５，７８０，４５４号；第７，４２２，８３０号；第７，１０９，３２３号；第６，９５８，３１９号；第６，７１３，４４６号；および第６，６９９，８３５号に開示されている化合物が挙げられる。
【００３３】
抗がん活性を有する多くのプロテアソーム阻害剤が当該技術分野で知られており、これらは共有結合型阻害剤であるか非共有結合型阻害剤であるかに応じて分けられ得て、なかでも共有結合型阻害剤はアルデヒド、ボロネート、エポキシケトン、β−ラクトン、ビニルスルホンおよびα，β−不飽和カルボニルに分けられる。アルデヒド類における例としては、ＭＧ−１３２、ＰＳＩおよびフェルタミドＢが挙げられる。ボロネート類における例としては、ボルテゾミブ、ＣＥＰ−１８７７０、ＭＬＮ２２３８およびＭＬＮ９７０８が挙げられる。エポキソケトン類における例としては、エポキソミシン（ｅｐｏｘｏｍｉｃｉｎ）、カルフィルゾミブ（ＰＲ−１７１）、ＮＣ−００５、ＹＵ−１０１、ＬＵ−００５、ＹＵ−１０２、ＮＣ−００１、ＬＵ−００１、ＮＣ−０２２、ＰＲ−９５７（ＬＭＰ７）、ＣＰＳＩ（β５）、ＬＭＰ２−ｓｐ−ｅｋ、ＢＯＤＩＰＹ−ＮＣ−００１、アジド−ＮＣ−００２およびＯＮＸ  ０９１２（オプロモジブ（ｏｐｒｏｍｏｚｉｂ））が挙げられる。β−ラクトン類における例としては、オムラリド、ＰＳ−５１９、マリゾミブおよびベラクトシンＡが挙げられる。ビニルスルホン類における例としては、１２５Ｉ−ＮＩＰ−Ｌ３ＶＳ、ＮＣ−００５−ＶＳおよびＭＶ１５１が挙げられる。Ｋｉｓｓｅｌｅｖ  ｅｔ  ａｌ．”Ｐｒｏｔｅａｓｏｍｅ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ：Ａｎ  Ｅｘｐａｎｄｉｎｇ  Ａｒｍｙ  Ａｔｔａｃｋｉｎｇ  ａ  Ｕｎｉｑｕｅ  Ｔａｒｇｅｔ，”Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  １９，Ｊａｎ．２７，２０１２，９９−１１５（参照により組み込まれる）。米国特許第９，５９７，４１０号；第９，５９２，２４７号；第７，５３１，５２６号および第９，５７２，８５４号。
【００３４】
好適なプロテアソーム阻害剤の例としては、限定されることなく、次の化合物、同様に薬学的に許容されるその塩およびそのボロン酸エステルが挙げられる：Ｎ−（４−モルフォリン）カルボニル−β−（１−ナフチル）−Ｌ−アラニン−Ｌ−ロイシンボロン酸、Ｎ−（８−キノリン）スルホニル−β−（１−ナフチル）−Ｌ−アラニン−Ｌ−ロイシンボロン酸、Ｎ−（２−ピラジン）カルボニル−Ｌ−フェニルアラニン−Ｌ−ロイシンボロン酸、Ｌ−プロリン−Ｌ−ロイシンボロン酸、Ｎ−（２−キノリン）カルボニル−Ｌ−ホモフェニルアラニン−Ｌ−ロイシンボロン酸、Ｎ−（３−ピリジン）カルボニル−Ｌ−フェニルアラニン−Ｌ−ロイシンボロン酸、Ｎ−（３−フェニルプロピオニル）−Ｌ−フェニルアラニン−Ｌ−ロイシンボロン酸、Ｎ−（４−モルフォリン）カルボニル−Ｌ−フェニルアラニン−Ｌ−ロイシンボロン酸、Ｎ−（４−モルフォリン）カルボニル−（Ｏ−ベンジル）−Ｌ−チロシン−Ｌ−ロイシンボロン酸、Ｎ−（４−モルフォリン）カルボニル−Ｌ−チロシン−Ｌ−ロイシンボロン酸およびＮ−（４−モルフォリン）カルボニル−［Ｏ−（２−ピリジルメチル）］−Ｌ−チロシン−Ｌ−ロイシンボロン酸。
【００３５】
ＣＮＳ腫瘍
剤は、脳腫瘍および脳転移を処置するために用いられ得る。
【００３６】
剤は、中枢神経系（ＣＮＳ）腫瘍を処置するために用いられ得て、ＣＮＳ腫瘍としては限定されるものではないが、脳腫瘍、原発性ＣＮＳ腫瘍、大脳原発性腫瘍および脊髄腫瘍が挙げられる。剤は、脳の外側にあるがんを処置するために用いられ得る。
【００３７】
剤は、頭蓋外腫瘍、原発性脳腫瘍または転移起源の脳腫瘍を処置するために用いられ得る。
【００３８】
ＣＮＳ腫瘍の限定されない例としては、神経膠腫、星状細胞腫、髄膜腫、乏突起膠細胞腫および組織球性（ｈｉｓｔｏｃｙｔｉｃ）リンパ腫が挙げられる。神経膠腫は、脳の大脳半球、または例えば視神経、脳幹もしくは小脳などの他の領域において発生し得る。
【００３９】
ある実施形態において、処置または予防されるがんまたは転移としては、限定されるものではないが、原発性頭蓋内中枢神経系腫瘍が挙げられる。
【００４０】
原発性頭蓋内中枢神経系腫瘍としては、多形膠芽腫；悪性星状細胞腫；乏突起膠細胞腫（ｏｌｉｇｄｅｎｄｒｏｇｌｉｏｍａ）；上衣腫；低グレード星状細胞腫；髄膜腫；間葉系腫瘍；脳下垂体腫瘍；脳下垂体腺腫；神経鞘腫瘍、例えばシュワン腫など；中枢神経系リンパ腫；髄芽腫；原始神経外胚葉性腫瘍；神経細胞および神経細胞／グリア腫瘍；頭蓋咽頭腫；生殖細胞腫瘍；ならびに脈絡叢腫瘍が挙げられる。米国特許第９，７１３，６４６号。
【００４１】
他の実施形態において、処置または予防されるがんまたは転移としては、限定されるものではないが、原発性脊髄腫瘍、例えばシュワン腫、髄膜腫、上衣腫、肉腫、星状細胞腫、神経膠腫、血管腫瘍、脊索腫および類表皮腫などが挙げられる。
【００４２】
脳がんの例としては、限定されるものではないが、膠芽腫、脳幹神経膠腫、視床下部（ｈｙｐｏｐｈｔａｌｍｉｃ）神経膠腫、小脳および大脳星状細胞腫、髄芽腫、上衣腫、同様に神経外胚葉腫瘍および松果体腫瘍が挙げられる。
【００４３】
他の実施形態において、処置または予防されるがんまたは転移としては、限定されるものではないが、脳転移に関与する原発性腫瘍、例えば肺腫瘍（小細胞および非小細胞の両方）、乳房腫瘍、未知の原発性腫瘍、黒色腫、結腸腫瘍および泌尿器腫瘍などが挙げられる。
【００４４】
ある実施形態において、脳腫瘍は、例えば、脳組織とは異なる組織起源のものであり得る。
【００４５】
ＣＮＳ腫瘍の起源組織としては、アストロサイト、オリゴデンドロサイト、上衣、神経細胞、髄膜などが挙げられ得る。
【００４６】
ＣＮＳ腫瘍の限定されない例としては、毛様細胞性星状細胞腫（ＰＣＡ）、多形膠芽腫（ＧＢＭ）、乏突起膠細胞腫、上衣腫、髄芽腫、髄膜腫、退形成性星状細胞腫、星状細胞腫、中枢神経細胞腫、脈絡叢癌、脈絡叢乳頭腫、脈絡叢腫瘍、胚芽異形成性神経上皮腫瘍、上衣腫瘍、線維性星状細胞腫、巨細胞性膠芽腫、多形膠芽腫、大脳神経膠腫症、膠肉腫、血管外皮細胞腫、髄芽腫、髄上皮腫、髄膜癌腫症、神経芽細胞腫、神経細胞腫、乏突起星細胞腫、乏突起膠細胞腫、視神経鞘髄膜腫、小児上衣腫、毛様細胞性星状細胞腫、松果体芽細胞腫、松果体細胞腫、多形性退形成性神経芽細胞腫、多形性黄色星状膠細胞腫、原発性中枢神経系リンパ腫、蝶形骨翼髄膜腫、上衣下巨細胞性星状細胞腫、上衣下腫、三側性網膜芽細胞腫が挙げられる。Ｗｏｒｌｄ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ  Ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｔｕｍｏｕｒｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｃｅｎｔｒａｌ  Ｎｅｒｖｏｕｓ  Ｓｙｓｔｅｍ，２０１６，４ｔｈ  ｒｅｖｉｓｅｄ  ｅｄｉｔｉｏｎ。
【００４７】
ある実施形態において、処置または予防されるがんまたは転移としては、限定されるものではないが、原発性頭蓋内中枢神経系腫瘍が挙げられる。原発性頭蓋内中枢神経系腫瘍としては、多形膠芽腫；悪性星状細胞腫；乏突起膠細胞腫（ｏｌｉｇｄｅｎｄｒｏｇｌｉｏｍａ）；上衣腫；低グレード星状細胞腫；髄膜腫；間葉系腫瘍；脳下垂体腫瘍；脳下垂体腺腫；神経鞘腫瘍、例えばシュワン腫など；中枢神経系リンパ腫；髄芽腫；原始神経外胚葉性腫瘍；神経細胞および神経細胞／グリア腫瘍；頭蓋咽頭腫；生殖細胞腫瘍；ならびに脈絡叢腫瘍が挙げられる。
【００４８】
本発明の剤は、神経系のがん、例えば悪性神経膠腫（例として星状細胞腫、退形成性星状細胞腫、多形膠芽腫）、網膜芽細胞腫、毛様細胞性星状細胞腫（グレードＩ）、髄膜腫、転移性脳腫瘍、神経芽細胞腫、脳下垂体腺腫、頭蓋底髄膜腫および頭蓋底がんなどの処置のために用いられ得る。本明細書中で用いられる用語「神経系腫瘍」とは、被検体が神経系細胞の悪性増殖を有する状態を指す。
【００４９】
本発明の化合物によって処置することができるがんとしては、限定されるものではないが、肺がん、耳、鼻および喉のがん、白血病、結腸がん、黒色腫、膵臓がん、乳腺がん、前立腺がん、乳がん、造血系がん、卵巣がん、基底細胞癌、胆道がん；膀胱がん；骨がん；乳がん；子宮頸がん；絨毛癌；結腸直腸がん；結合組織がん；消化器系のがん；子宮内膜がん；食道がん；眼がん；頭頸部のがん；胃がん；上皮内新生物；腎臓がん；喉頭がん；急性骨髄性白血病、急性リンパ性白血病、慢性骨髄性白血病、慢性リンパ性白血病を包含する白血病；肝臓がん；ホジキンリンパ腫および非ホジキンリンパ腫を包含するリンパ腫；骨髄腫；線維腫、神経芽細胞腫；口腔がん（例として口唇、舌、口および咽頭）；卵巣がん；膵臓がん；前立腺がん；網膜芽細胞腫；横紋筋肉腫；直腸がん；腎臓がん；呼吸器系のがん；肉腫；皮膚がん；胃がん；精巣がん；甲状腺がん；子宮がん；泌尿器系のがん、同様に他の癌腫および肉腫が挙げられる。米国特許第７，６０１，３５５号。
【００５０】
本発明はまた、ＣＮＳ障害を処置する方法を提供するものであり、ＣＮＳ障害としては、限定されることなく、原発性変性神経障害、例えばアルツハイマー病、パーキンソン病、精神障害、精神病およびうつ病などが挙げられる。自閉症もまた、本発明の組成物および方法によって処置され得る。処置は、本発明の化合物を単独で、またはパーキンソン病、アルツハイマー病もしくは精神障害の処置において用いられる現在の薬物治療と組み合わせて用いることからなり得る。
【００５１】
本発明はまた、免疫調節処置前または免疫調節処置中に細胞を有効量の本発明の化合物、例えばイソペリリルアルコール（ｉｓｏｐｅｒｉｌｌｙｌ  ａｌｃｏｈｏｌ）などに曝露するステップを含む、免疫調節治療応答を改善する方法を提供する。好ましい免疫調節剤は、サイトカイン、例えば（ｓｕｃｈ）インターロイキン、リンホカイン、モノカイン、インターフェロンおよびケモカインなどである。
【００５２】
組み合わせ治療
剤は、放射線治療と組み合わせて用いられ得る。一実施形態において、本発明は、腫瘍細胞、例えば悪性神経膠腫細胞などを放射線照射で処置する方法を提供し、ここで細胞は有効量の剤で処置され、次いで放射線照射に曝露される。本発明の化合物による処置は、放射線照射前、放射線照射中および／または放射線照射後であり得る。例えば、本発明の化合物は、放射線治療の開始１週間前から始めて連続的に、放射線治療の完了後２週間まで継続して投与され得る。米国特許第５，５８７，４０２号および第５，６０２，１８４号。
【００５３】
一実施形態において、本発明は、腫瘍細胞、例えば悪性神経膠腫細胞などを化学療法で処置する方法を提供し、ここで細胞は有効量の剤で処置され、次いで化学療法に曝露される。本発明の化合物による処置は、化学療法前、化学療法中および／または化学療法後であり得る。
【００５４】
剤は、化学療法剤またはＣＮＳ障害（原発性変性神経障害、例えばアルツハイマー病、パーキンソン病、多発性硬化症、注意欠陥多動性障害つまりＡＤＨＤ、精神障害、精神病およびうつ病などを包含する）の処置のための他の治療剤、免疫療法剤、血管新生阻害剤および降圧剤と組み合わせて用いることができる。剤と組み合わせて用いられ得る抗がん剤は、がん細胞または被検体に対する次の効果のうちの１または複数を持つことができる：細胞死；細胞増殖の低下；細胞数の減少；細胞増殖の阻害；アポトーシス；壊死；分裂期細胞死；細胞周期停止；細胞サイズの減少；細胞分裂の減少；細胞生存の低下；細胞代謝の減少；細胞損傷もしくは細胞毒性のマーカー；細胞損傷もしくは細胞毒性の間接的な指標、例えば腫瘍縮小など；被検体の生存期間の改良；または望ましくない、望まれないもしくは異常な細胞増殖に関連したマーカーの消失。米国特許公開第２００８０２７５０５７号。
【００５５】
また本開示には、剤と少なくとも１つの他の治療剤との混合物および／または共製剤が包含される。
【００５６】
化学療法剤としては、限定されるものではないが、ＤＮＡアルキル化剤、トポイソメラーゼ阻害剤、小胞体ストレス誘導剤、白金化合物、代謝拮抗剤、ビンカアルカロイド（ｖｉｎｃａｌｋａｌｏｉｄ）、タキサン、エポチロン、酵素阻害剤、受容体アンタゴニスト、チロシンキナーゼ阻害剤、ホウ素放射線増感剤（すなわちｖｅｌｃａｄｅ）および化学療法組み合わせ治療が挙げられる。
【００５７】
ＤＮＡアルキル化剤の限定されない例は、ナイトロジェンマスタード、例えばシクロホスファミド（イホスファミド、トロホスファミド）、クロラムブシル（メルファラン、プレドニムスチン）、ベンダムスチン、ウラムスチンおよびエストラムスチンなど；ニトロソウレア、例えばカルムスチン（ＢＣＮＵ）、ロムスチン（セムスチン）、フォテムスチン、ニムスチン、ラニムスチンおよびストレプトゾシンなど；アルキルスルホネート、例えばブスルファン（マンノスルファン、トレオスルファン）など；アジリジン、例えばカルボコン、トリアジコン、トリエチレンメラミンなど；ヒドラジン（プロカルバジン）；トリアゼン、例えばダカルバジンおよびテモゾロミなどド；アルトレタミンおよびミトブロニトールである。
【００５８】
トポイソメラーゼＩ阻害剤の限定されない例としては、Ｐｏｍｍｉｅｒ  Ｙ．（２００６）  Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｃａｎｃｅｒ  ６（１０）：７８９−８０２および米国特許公開第２００５１０２５０８５４号中に記載されるようなＳＮ−３８、ＡＰＣ、ＮＰＣ、カンポテシン（ｃａｍｐｏｔｈｅｃｉｎ）、トポテカン、メシル酸エキサテカン、９−ニトロカンプトテシン、９−アミノカンプトテシン、ラルトテカン、ルビテカン、シラテカン、ジャイマテカン、ジフロモテカン、エクスタテカン（ｅｘｔａｔｅｃａｎ）、ＢＮ−８０９２７、ＤＸ−８９５１ｆおよびＭＡＧ−ＣＰＴを包含するカンポテシン誘導体；Ｌｉ  ｅｔ  ａｌ．（２０００）  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ３９（２４）：７１０７−７１１６およびＧａｔｔｏ  ｅｔ  ａｌ．（１９９６）  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．  １５（１２）：２７９５−２８００中に記載されるようなベルベルビンおよびコラリンを包含するプロトベルベリンアルカロイドおよびその誘導体；Ｍａｋｈｅｙ  ｅｔ  ａｌ．（２００３）  Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．  １１（８）：１８０９−１８２０中に記載されるようなベンゾ［ｉ］フェナントリジン、ニチジンおよびファガロニンを包含するフェナントロリン誘導体；Ｘｕ（１９９８）  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ３７（１０）：３５５８−３５６６中に記載されるようなテルベンゾイミダゾールおよびその誘導体；ならびにＦｏｇｌｅｓｏｎｇ  ｅｔ  ａｌ．（１９９２）  Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．  ３０（２）：１２３−］２５、Ｃｒｏｗ  ｅｔ  ａｌ．（１９９４）  Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．  ３７（１９）：３１９１３１９４およびＣｒｅｓｐｉ  ｅｔ  ａｌ．（１９８６）  Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．  １３６（２）：５２１−８中に記載されるようなドキソルビシン、ダウノルビシンおよびミトキサントロンを包含するアントラサイクリン誘導体が挙げられる。トポイソメラーゼＩＩ阻害剤としては、限定されるものではないが、エトポシドおよびテニポシドが挙げられる。トポイソメラーゼＩおよびＩＩのデュアル阻害剤としては、限定されるものではないが、Ｄｅｎｎｙ  ａｎｄ  Ｂａｇｕｌｅｙ（２００３）  Ｃｕｒｒ．Ｔｏｐ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．  ３（３）：３３９−３５３中に記載されるようなサイントピンおよび他のナフテセンジオン（Ｎａｐｈｔｈｅｃｅｎｅｄｉｏｎｅ）、ＤＡＣＡおよび他のアクリジン−４−カルボキサミンド（Ｃａｒｂｏｘａｍｉｎｄｅ）、イントプリシンおよび他のベンゾピリドインドール、ＴＡＳ−Ｉ０３および他の７Ｈ−インデノ［２，１−ｃ］キノリン−７−オン、ピラゾロアクリジン、ＸＲ  １１５７６および他のベンゾフェナジン、ＸＲ  ５９４４および他のダイマー化合物、７−オキソ−７Ｈ−ジベンズ［ｆ，ｉｊ］イソキノリンおよび７−オキソ−７Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピリミジン、ならびにアントラセニル−アミノ酸コンジュゲートが挙げられる。いくつかの剤、例えば、限定されるものではないが、アントラサイクリン（アクラルビシン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、エピルビシン、イダルビシン、アムルビシン、ピラルビシン、バルルビシン、ゾルビシン）およびアントラセンジオン（Ａｎｔｒａｃ���ｎｅｄｉｏｎｅ）（ミトキサントロンおよびピクサントロン）などは、トポイソメラーゼＩＩを阻害し、ＤＮＡインターカレーション活性を持つ。
【００５９】
小胞体ストレス誘導剤の例としては、限定されるものではないが、ジメチル−セレコキシブ（ＤＭＣ）、ネルフィナビル、セレコキシブおよびホウ素放射線増感剤（すなわちｖｅｌｃａｄｅ（ボルテゾミブ））が挙げられる。
【００６０】
白金系の化合物は、ＤＮＡアルキル化剤のサブクラスである。かかる剤の限定されない例としては、シスプラチン、ネダプラチン、オキサリプラチン、四硝酸トリプラチン、サトラプラチン、アロプラチン、ロバプラチンおよびＪＭ−２１６が挙げられる（ＭｃＫｅａｇｅ  ｅｔ  ａｌ．（１９９７）  Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．  ２０１：１２３２−１２３７、および全般的にＳｅｒｉｅｓ  Ｂａｓｉｃ  ａｎｄ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，Ａｎｇｉｏｌｉ  ｅｔ  ａｌ．Ｅｄｓ．，２００４中の、ＣＨＥＭＯＴＨＥＲＡＰＹ  ＦＯＲ  ＧＹＮＥＣＯＬＯＧＩＣＡＬ  ＮＥＯＰＬＡＳＭ，ＣＵＲＲＥＮＴ  ＴＨＥＲＡＰＹ  ＡＮＤ  ＮＯＶＥＬ  ＡＰＰＲＯＡＣＨＥＳを参照されたい）。
【００６１】
「ＦＯＬＦＯＸ」は、結腸直腸がんを処置するために用いられるあるタイプの組み合わせ治療についての略語である。これは、５−ＦＵ、オキサリプラチンおよびロイコボリンを包含する。この処置に関する情報は、米国国立がん研究所のウェブサイト、ｃａｎｃｅｒ．ｇｏｖ上で入手可能であり、最終アクセスは２００８年１月１６日である。
【００６２】
「ＦＯＬＦＯＸ／ＢＶ」は、結腸直腸がんを処置するために用いられるあるタイプの組み合わせ治療についての略語である。この治療は、５−ＦＵ、オキサリプラチン、ロイコボリンおよびベバシズマブを包含する。さらには（Ｆｕｒｔｈｅｎｎｏｒｅ）、「ＸＥＬＯＸ／ＢＶ」は、結腸直腸がんを処置するために用いられる別の組み合わせ治療であり、カペシタビン（Ｘｅｌｏｄａ）として知られる５−ＦＵのプロドラッグをオキサリプラチンおよびベバシズマブと組み合わせて包含する。これらの処置に関する情報は、米国国立がん研究所のウェブサイト、ｃａｎｃｅｒ．ｇｏｖ上で、または２３のＮａｔｉｏｎａｌ  Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｎｅｔｗｏｒｋのウェブサイト、ｎｃｃｎ．ｏｒｇからで入手可能であり、最終アクセスは２００８年５月２７日である。
【００６３】
代謝拮抗剤の限定されない例としては、葉酸系の、すなわちジヒドロ葉酸レダクターゼ阻害剤、例えばアミノプテリン、メトトレキセートおよびペメトレキセドなど；チミジル酸シンターゼ阻害剤、例えばラルチトレキセド、ペメトレキセドなど；プリン系の、すなわちアデノシンデアミナーゼ阻害剤、例えばペントスタチンなど、チオプリン、例えばチオグアニンおよびメルカプトプリンなど、ハロゲン化／リボヌクレオチドレダクターゼ阻害剤、例えばクラドリビン、クロファラビン、フルダラビンもしくはグアニン／グアノシンなど：チオプリン、例えばチオグアニンなど；またはピリミジン系の、すなわちシトシン／シチジン：メチル化抑制剤、例えばアザシチジンおよびデシタビンなど、ＤＮＡポリメラーゼ阻害剤、例えばシタラビンなど、リボヌクレオチドレダクターゼ阻害剤、例えばゲムシタビン、またはチミン／チミジンなど：チミジル酸シンターゼ阻害剤、例えばフルオロウラシル（５−ＦＵ）などが挙げられる。５−ＦＵの等価物としては、そのプロドラッグ、アナログおよび誘導体、例えばＰａｐａｍｉｃｈｅａｌ（１９９９）  Ｔｈｅ  Ｏｎｃｏｌｏｇｉｓｔ  ４：４７８−４８７中に記載されるような５’−デオキシ−５−フルオロウリジン（ドキシフルロイジン（ｄｏｘｉｆｌｕｒｏｉｄｉｎｅ））、ｌ−テトラヒドロフラニル−５−フルオロウラシル（フトラフル）、カペシタビン（Ｘｅｌｏｄａ）、Ｓ−Ｉ（ＭＢＭＳ−２４７６１６、これはテガフールと２つの調節物質、５−クロロ−２，４−ジヒドロキシピリジンおよびオキソン酸カリウムとからなる）、ラリチトレキセド（ｒａｌｉｔｉｔｒｅｘｅｄ）（ｔｏｍｕｄｅｘ）、ノラトレキセド（Ｔｈｙｍｉｔａｑ、ＡＧ３３７）、ＬＹ２３１５１４およびＺＤ９３３１などが挙げられる。
【００６４】
ビンカアルカロイド（ｖｉｎｃａｌｋａｌｏｉｄ）の例としては、限定されるものではないが、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンフルニン、ビンデシンおよびビノレルビンが挙げられる。
【００６５】
タキサンの例としては、限定されるものではないが、ドセタキセル、ラロタキセル、オルタタキセル、パクリタキセルおよびテセタキセルが挙げられる。エポチロンの例は、イアベピロン（ｉａｂｅｐｉｌｏｎｅ）である。
【００６６】
酵素阻害剤の例としては、限定されるものではないが、ファルネシルトランスフェラーゼ阻害剤（チピファルニブ）；ＣＤＫ阻害剤（アルボシジブ、セリシクリブ）；ホスホジエステラーゼ阻害剤（アナグレリド；ロリプラム）；ＩＭＰデヒドロゲナーゼ阻害剤（チアゾフリン）；およびリポキシゲナーゼ阻害剤（マソプロコール）が挙げられる。受容体アンタゴニストの例としては、限定されるものではないが、ＥＲＡ（アトラセンタン）；レチノイドＸ受容体（ベキサロテン）；および性ステロイド（テストラクトン）が挙げられる。
【００６７】
チロシンキナーゼ阻害剤の例としては、限定されるものではないが、ＥｒｂＢ：ＨＥＲ１／ＥＧＦＲに対する阻害剤（エルロチニブ、ゲフィチニブ、ラパチニブ、バンデタニブ、スニチニブ、ネラチニブ）；ＨＥＲ２／ｎｅｕに対する阻害剤（ラパチニブ、ネラチニブ）；ＲＴＫクラスＩＩＩ：Ｃ−ｋｉｔに対する阻害剤（アキシチニブ、スニチニブ、ソラフェニブ）、ＦＬＴ３に対する阻害剤（レスタウルチニブ）、ＰＤＧＦＲに対する阻害剤（アキシチニブ、スニチニブ、ソラフェニブ）；およびＶＥＧＦＲに対する阻害剤（バンデタニブ、セマクサニブ、セジラニブ、アキシチニブ、ソラフェニブ）；ｂｃｒ−ａｂｌに対する阻害剤（イマチニブ、ニロチニブ、ダサチニブ）；Ｓｒｃに対する阻害剤（ボスチニブ）およびヤヌスキナーゼ２に対する阻害剤（レスタウルチニブ）が挙げられる。
【００６８】
「ラパチニブ」（Ｔｙｋｅｒｂ（登録商標））は、ＥＧＦＲおよびｅｒｂＢ−２のデュアル阻害剤である。ラパチニブは、いくつもの臨床試験において抗がん単独治療として、同様にトラスツズマブ、カペシタビン、レトロゾール、パクリタキセルおよびＦＯＬＦＩＲＩ（イリノテカン、５−フルオロウラシルおよびロイコボリン）と組み合わせて、調べられている。これは現在、転移性乳がん、頭頸部がん、肺がん、胃がん、腎臓がんおよび膀胱がんの経口処置について試験するフェーズＩＩＩ中にある。
【００６９】
ラパチニブの化学的等価物は、チロシンキナーゼ阻害剤（ＴＫＩ）あるいはＨＥＲ−ｌ阻害剤またはＨＥＲ−２阻害剤である低分子または化合物である。いくつかのＴＫＩが有効な抗腫瘍活性を持つことが見出されており、これらは承認されているか、または臨床試験中である。かかるものの例としては、限定されるものではないが、Ｚａｃｔｉｍａ（ＺＤ６４７４）、Ｉｒｅｓｓａ（ゲフィチニブ）、メシル酸イマチニブ（ＳＴＩ５７１；Ｇｌｅｅｖｅｃ）、エルロチニブ（ＯＳＩ−１７７４；Ｔａｒｃｅｖａ）、カネルチニブ（ＣＩ  １０３３）、セマキシニブ（ＳＵ５４１６）、バタラニブ（ＰＴＫ７８７／ＺＫ２２２５８４）、ソラフェニブ（ＢＡＹ  ４３−９００６）、ｓｕｔｅｎｔ（ＳＵＩ  １２４８）およびレフルトモミド（ｌｅｆｌｔｍｏｍｉｄｅ）（ＳＵ１０ｌ）が挙げられる。
【００７０】
ＰＴＫ／ＺＫは、全てのＶＥＧＦ受容体（ＶＥＧＦＲ）、血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）受容体、ｃ−ＫＩＴおよびｃ−Ｆｍｓを標的とする幅広い特異性を有するチロシンキナーゼ阻害剤である。Ｄｒｅｖｓ（２００３）  Ｉｄｒｕｇｓ  ６（８）：７８７−７９４。ＰＴＫ／ＺＫは、ＶＥＧＦＲ−Ｉ（Ｆｌｔ−１）、ＶＥＧＦＲ−２（ＫＤＲ／Ｆｌｋ−１）およびＶＥＧＦＲ−３（Ｆｌｔ−４）を包含する、ＶＥＧＦを結合する全ての既知受容体の活性を阻害することによって血管新生およびリンパ管新生を遮断する標的化薬剤である。ＰＴＫ／ＺＫの化学名は、１−［４−クロロアニリノ］−４−［４−ピリジルメチル］フタラジンスクシネートまたは１−フタラジンアミン、Ｎ−（４−クロロフェニル）−４−（４−ピリジニルメチル）−ブタンジオエート（１：１）である。ＰＴＫ／ＴＫの同義語およびアナログは、バタラニブ、ＣＧＰ７９７８７Ｄ、ＰＴＫ７８７／ＺＫ  ２２２５８４、ＣＧＰ−７９７８７、ＤＥ−００２６８、ＰＴＫ−７８７、ＰＴＫ７８７Ａ、ＶＥＧＦＲ−ＴＫ阻害剤、ＺＫ  ２２２５８４およびＺＫとして知られている。
【００７１】
剤と組み合わせて用いることができる化学療法剤としては、アムサクリン、トラベクテジン、レチノイド（アリトレチノイン、トレチノイン）、三酸化ヒ素、アスパラギン枯渇物質（ａｓｐａｒａｇｉｎｅ  ｄｅｐｌｅｔｅｒ）アスパラギナーゼ／ペグアスパルガーゼ）、セレコキシブ、デメコルチン、エレスクロモル、エルサミトルシン、エトグルシド、ロニダミン、ルカントン、ミトグアゾン、ミトタン、オブリメルセン、テムシロリムスおよびボリノスタットが挙げられる。
【００７２】
剤は、血管新生阻害剤と組み合わせて用いられ得る。血管新生阻害剤の例としては、限定されるものではないが、アンジオスタチン、ａｎｇｉｏｚｙｍｅ、アンチトロンビンＩＩＩ、ＡＧ３３４０、ＶＥＧＦ阻害剤、バチマスタット、ベバシズマブ（ａｖａｓｔｉｎ）、ＢＭＳ−２７５２９１、ＣＡＩ、２Ｃ３、ＨｕＭＶ８３３  カンスタチン、カプトプリル、カルボキシアミドトリアゾール、軟骨由来阻害剤（ＣＤＩ）、ＣＣ−５０１３、６−Ｏ−（クロロアセチル−カルボニル）−フマギロール、ＣＯＬ−３、コンブレタスタチン、リン酸コンブレタスタチンＡ４、ダルテパリン、ＥＭＤ  １２１９７４（シレンジタイド）、エンドスタチン、エルロチニブ、ゲフィチニブ（Ｉｒｅｓｓａ）、ゲニステイン、臭化水素酸ハロフジノン、Ｉｄ１、Ｉｄ３、ＩＭ８６２、メシル酸イマチニブ、ＩＭＣ−ＩＣ１１誘導性タンパク質１０、インターフェロン−α、インターロイキン１２、ラベンダスチンＡ、ＬＹ３１７６１５またはＡＥ−９４１、マリマスタット、ｍｓｐｉｎ、酢酸メドロクスプレゲステロン（ｍｅｄｒｏｘｐｒｅｇｅｓｔｅｒｏｎｅ  ａｃｅｔａｔｅ）、Ｍｅｔｈ−１、Ｍｅｔｈ−２、２−メトキシエストラジオール（２−ＭＥ）、ｎｅｏｖａｓｔａｔ、オテオポンチン（ｏｔｅｏｐｏｎｔｉｎ）切断産物、ＰＥＸ、色素上皮増殖因子（ＰＥＧＦ）、血小板第４因子、プロラクチン断片、プロリフェリン関連タンパク質（ＰＲＰ）、ＰＴＫ７８７／ＺＫ  ２２２５８４、ＺＤ６４７４、組換えヒト血小板第４因子（ｒＰＦ４）、レスチン、スクワラミン、ＳＵ５４１６、ＳＵ６６６８、ＳＵ１１２４８  スラミン、タキソール、テコガラン、サリドマイド、トロンボスポンジン、ＴＮＰ−４７０、トロポニン−ｌ、バソスタチン、ＶＥＧ１、ＶＥＧＦ−ＴｒａｐおよびＺＤ６４７４が挙げられる。
【００７３】
また、血管新生阻害剤の限定されない例としては、チロシンキナーゼ阻害剤、例えば、チロシンキナーゼ受容体Ｆｌｔ−１（ＶＥＧＦＲ１）およびＦｌｋ−１／ＫＤＲ（ＶＥＧＦＲ２）の阻害剤など、表皮由来増殖因子、線維芽細胞由来増殖因子または血小板由来増殖因子の阻害剤、ＭＭＰ（マトリックスメタロプロテアーゼ）阻害剤、インテグリンブロッカー、ポリ硫酸ペントサン、アンジオテンシンＩＩアンタゴニスト、シクロオキシゲナーゼ阻害剤（非ステロイド性の抗炎症性薬剤（ＮＳＡＩＤ）、例えばアスピリンおよびイブプロフェンなど、同様に選択的シクロオキシゲナーゼ−２阻害剤、例えばセレコキシブおよびロフェコキシブなど）、ならびにステロイド性抗炎症剤（例えばコルチコステロイド、ミネラルコルチコイド、デキサメタゾン、プレドニゾン、プレドニゾロン、メチルプレド（ｍｅｔｈｙｌｐｒｅｄ）、ベタメタゾンなどを包含する）も挙げられる。
【００７４】
血管新生を調節または阻害し、剤と組み合わせても用いられ得る他の治療剤としては、凝固系および線溶系を調節または阻害する剤が挙げられ、これらとしては限定されるものではないが、ヘパリン、低分子量ヘパリンおよびカルボキシペプチダーゼＵ阻害剤（活性トロンビン活性化線溶抑制因子［ＴＡＦＩａ］の阻害剤としても知られる）が挙げられる。米国特許公開第２００９０３２８２３９号。米国特許第７，６３８，５４９号。
【００７５】
降圧剤の限定されない例としては、アンジオテンシン変換酵素阻害剤（例としてカプトプリル、エナラプリル、デラプリルなど）、アンジオテンシンＩＩアンタゴニスト（例としてカンデサルタンシレキセチル、カンデサルタン、ロサルタン（またはＣｏｚａａｒ）、ロサルタンカリウム、エプロサルタン、バルサルタン（またはＤｉｏｖａｎ）、テルミサルタン（ｔｅｒｍｉｓａｒｔａｎ）、イルベサルタン、タソサルタン、オルメサルタン、オルメサルタン  メドキソミルなど）、カルシウムアンタゴニスト（例としてマニジピン、ニフェジピン、アムロジピン（またはＡｍｌｏｄｉｎ）、エホニジピン、ニカルジピンなど）、利尿剤、レニン阻害剤（例としてアリスキレンなど）、アルドステロンアンタゴニスト（例としてスピロノラクトン、エプレレノンなど）、βブロッカー（例としてメトプロロール（またはＴｏｐｏｒｏｌ）、アテノロール、プロプラノロール、カルベジロール、ピンドロールなど）、血管拡張薬（例として硝酸塩、可溶性グアニル酸シクラーゼ刺激物質または活性化物質、プロスタサイクリンなど）、アンジオテンシンワクチン、クロニジンなどが挙げられる。米国特許公開第２０１００１１３７８０号。
【００７６】
剤と組み合わせて用いられ得る他の治療剤としては、限定されるものではないが、セルトラリン（Ｚｏｌｏｆｔ）、トピラマート（Ｔｏｐａｍａｘ）、デュロキセチン（Ｃｙｍｂａｌｔａ）、スマトリプタン（Ｉｍｉｔｒｅｘ）、プレガバリン（Ｌｙｒｉｃａ）、ラモトリジン（Ｌａｍｉｃｔａｌ）、バラシクロビル（Ｖａｌｔｒｅｘ）、タムスロシン（Ｆｌｏｍａｘ）、ジドブジン（Ｃｏｍｂｉｖｉｒ）、ラミブジン（Ｃｏｍｂｉｖｉｒ）、エファビレンツ（Ｓｕｓｔｉｖａ）、アバカビル（Ｅｐｚｉｃｏｍ）、ロピナビル（Ｋａｌｅｔｒａ）、ピオグリタゾン（Ａｃｔｏｓ）、デスロラチジン（Ｄｅｓｌｏｒａｔｉｄｉｎｅ）（Ｃｌａｒｉｎｅｘ）、セチリジン（Ｚｙｒｔｅｃ）、ペントプラゾール（Ｐｅｎｔｏｐｒａｚｏｌｅ）（Ｐｒｏｔｏｎｉｘ）、ランソプラゾール（Ｐｒｅｖａｃｉｄ）、レベプラゾール（Ｒｅｂｅｐｒａｚｏｌｅ）（Ａｃｉｐｈｅｘ）、モキシフロキサシン（Ａｖｅｌｏｘ）、メロキシカム（Ｍｏｂｉｃ）、ドルゾラミド（Ｔｒｕｓｐｏｔ）、ジクロフェナク（Ｖｏｌｔａｒｅｎ）、エンラプリル（Ｅｎｌａｐｒｉｌ）（Ｖａｓｏｔｅｃ）、モンテルカスト（Ｓｉｎｇｕｌａｉｒ）、シルデナフィル（Ｖｉａｇｒａ）、カルベジロール（Ｃｏｒｅｇ）、ラミプリル（Ｄｅｌｉｘ）が挙げられる。
【００７７】
投与経路
化合物の神経系への直接投与としては、例えば、頭蓋内、脳内、脊椎内、脳室内、大脳室内、髄腔内、大槽内、脊髄内および脊髄周囲の投与経路を挙げることができる。ある実施形態において、剤は、ポンプ装置を有するまたは有さない針またはカテーテルを介した送達によって投与される。ある実施形態において、剤は、注射または注入によって投与される。一実施形態において、本発明の方法は、剤を腫瘍に直接注入することを含む。一実施形態において、脳室内注射は、例えば、Ｏｍｍａｙａリザーバーなどのリザーバーに取り付けられた脳室内カテーテルによって容易にされ得る。
【００７８】
ある実施形態において、剤は、腫瘍内投与される。
【００７９】
ある実施形態において、剤は、機械的送達装置または植込可能な送達システムを介して投与される。薬学的な剤の送達のための機械的送達装置の構築および使用は、当該技術分野で周知である。例えば薬剤を脳に直接投与するための直接的な技術は、通常、血液脳関門をバイパスするために薬剤送達カテーテルを患者の心室系内に配置することを伴う。米国特許第５，０１１，４７２号および第９，３５９，２９０号。ＷＯ２００４０６０４０３。
【００８０】
ある実施形態において、剤は、剤を放出するポンプまたは他の装置を介して投与される。ある実施形態において、剤は、ブリーザーポンプを介して投与される。ある実施形態において、剤は、磁気的に制御されたポンプを介して投与される。ある実施形態において、剤は、植え込み型の磁気ブリーザーポンプを介して投与される。米国特許第８，３２３，２７０号；第７，３５１，２３９号；第７，２８８，０８５号；および第６，７２６，６７８号。
【００８１】
一実施形態において、ポンプは、患者の脳内に植え込まれ、制御された速度（例として、患者の具体的なニーズに対応したもの）で剤の用量を送達する。
【００８２】
ある実施形態において、剤は、患者の脳内に位置する腫瘍に剤を直接送達することができる装置を介して投与される。
【００８３】
一実施形態において、ポンプは、腫瘍切除腔内に植え込まれ、剤の用量を送達する。
【００８４】
一実施形態において、カテーテルが腫瘍内に植え込まれ、剤の用量を送達する。脳内または脳上に位置する腫瘍を処置するための選択肢としては、手術、放射線照射、化学療法および局所腫瘍内治療が挙げられる。
【００８５】
腫瘍内投与としては、化学療法ウェハー、定位注射および対流強化送達が挙げられ得る。ある実施形態において、外部マイクロポンプを介した対流強化送達は、薬剤送達の周縁を増大させるために用いられる。これは、外付けカテーテルによって与えられ得る。
【００８６】
一実施形態において、ポンプは、次の構成要素を含む：腫瘍内に植え込まれる近位ヘッド、近位ヘッドから延びるカテーテル、およびカテーテルに接続された分析ユニット。近位ヘッドは、腫瘍内に挿入されるカテーテルおよび／または磁気ブリーザーポンプを含む。どのタイプの近位ヘッドを使用するかは、腫瘍腔が利用可能であるかに依存する。腫瘍が切除不能と考えられる場合、または患者が開腹手術を希望しない場合、カテーテルのみが植え込まれる。一方、切除が実施される場合には、腫瘍腔の体積に応じて、異なるサイズの磁気ブリーザーポンプを腫瘍腔内に挿入することができる。一実施形態において、ユニット全体が自己完結型であり、完全に内蔵化される。
【００８７】
剤を投与するために、マルチデリバリーカテーテルを使用することができる。脳腫瘍に対する対流強化送達のために用いられる従来のカテーテルは、脳室腹腔シャントのために用いられる腹膜チューブ先端における単一のポート、またはカテーテル先端の先端から１ｃｍ以内に開けられた複数の孔を有する近位シャントカテーテルのいずれかからなる。マルチデリバリーカテーテルは、ポンプからの正圧下で複数のとげを有するバルーンが現れるカテーテル先端を含み得る。
【００８８】
本発明の方法はまた、剤の規則正しい連続送達を提供する。
【００８９】
例えば、剤は、治療の必要がある領域に局所的に投与することができる。これは、例えば、限定ではないが、手術中の局所注入、局所適用、例として手術後の創傷被覆と併せた局所適用によって、注射によって、カテーテルを使って、坐剤を使って、またはインプラントを使って達成され得て、前記インプラントは、多孔質、非多孔質またはゼラチン状の材料からなり、膜、例えばサイアラスティック膜（ｓｉａｌａｓｔｉｃ  ｍｅｍｂｒａｎｅ）など、または繊維を包含する。一実施形態において、投与は、原発性脳がんまたは脳転移の部位（またはその前の部位）に直接注射することによって行うことができる。
【００９０】
あるいは、剤は、対流強化薬剤送達システムを介して投与することができる。別の実施形態において、剤は、対流強化薬剤送達システム、例えば参照により本明細書中に組み込まれる米国特許第５，７２０，７２０号中に記載されるものなどを介して投与される。対流強化薬剤送達は、組織（例として脳組織）内で注入カテーテルの先端を位置決めすること、および注入中にカテーテルの先端からの正圧グラジエントを維持しながらカテーテルを通じて薬剤（例として剤）を供給することを伴う。カテーテルは、薬剤を送達し、薬剤の送達の間ずっと所望の圧力グラジエントを維持するポンプに接続される。ある実施形態において、薬剤送達速度は、約１ｃｍ以上の注入距離で約０．５から約４．０μｌ／分の範囲である。この方法は、脳および他の組織、とりわけ充実性神経組織への薬剤の送達のためにとりわけ有用である。ある実施形態において、対流強化薬剤送達は、剤を高分子量の極性分子、例えば増殖因子、酵素、抗体、タンパク質コンジュゲートおよび遺伝子ベクターなどと組み合わせて、脳または他の組織に送達するために用いられる。これらの実施形態において、流入速度は最大で約１５．０μｌ／分であることができる。
【００９１】
剤はまた、小胞、例としてリポソームで送達することができる。
【００９２】
ある実施形態において、剤は、制御された放出システムで送達することができる。一実施形態において、ポンプが用いられ得る（上のＬａｎｇｅｒ；Ｓｅｆｔｏｎ，ＣＲＣ  Ｃｒｉｔ．Ｒｅｆ．Ｂｉｏｍｅｄ．Ｅｎｇ．  １４：２０１（１９８７）；Ｂｕｃｈｗａｌｄ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｕｒｇｅｒｙ  ８８：５０７（１９８０）；Ｓａｕｄｅｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．  ３２１：５７４（１９８９）を参照されたい）。別の実施形態において、ポリマー材料を用いることができる（Ｍｅｄｉｃａｌ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ，Ｌａｎｇｅｒ  ａｎｄ  Ｗｉｓｅ（ｅｄｓ．），  ＣＲＣ  Ｐｒｅｓ．，Ｂｏｃａ  Ｒａｔｏｎ，Ｆｌａ．（１９７４）；Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｄｒｕｇ  Ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ，Ｄｒｕｇ  Ｐｒｏｄｕｃｔ  Ｄｅｓｉｇｎ  ａｎｄ  Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ，Ｓｍｏｌｅｎ  ａｎｄ  Ｂａｌｌ（ｅｄｓ．），Ｗｉｌｅｙ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（１９８４）；Ｒａｎｇｅｒ  ａｎｄ  Ｐｅｐｐａｓ，Ｊ．Ｍａｃｒｏｍｏｌ．Ｓｃｉ．Ｒｅｖ．Ｍａｃｒｏｍｏｌ．Ｃｈｅｍ．  ２３：６１（１９８３）を参照されたい；またＬｅｖｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２２８：１９０（１９８５）；Ｄｕｒｉｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｎ．Ｎｅｕｒｏｌ．  ２５：３５１（１９８９）；Ｈｏｗａｒｄ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇ．  ７１：１０５（１９８９）も参照されたい）。なお別の実施形態において、制御放出システムは、剤の標的に近接して、例として脳内に配置することができ、それゆえに全身用量のほんの一部しか必要としない（例としてＧｏｏｄｓｏｎ、上のＭｅｄｉｃａｌ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ中のｖｏｌ．２，ｐｐ．１１５  １３８（１９８４）を参照されたい）。Ｌａｎｇｅｒによる総説（Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４９：１５２７  １５３３（１９９０））中で論じられる他の制御放出システムが用いられ得る。
【００９３】
原発性脳がんまたは脳転移の処置または予防において有効な剤の量は、標準的な臨床技術によって決定することができる。加えて、最適な投薬量の範囲を特定することを助けるため、インビトロまたはインビボのアッセイを使ってもよい。組成物中で使われる正確な用量はまた、投与経路、および疾患または障害の重篤度に依存し、専門家の判断および各患者の状況に応じて決定されるべきである。ある実施形態において、化合物の有効経口投与量の一般的範囲は、約０．５ｍｇ／日から約５０００ｍｇ／日、好ましくは約５００ｍｇ／日から約３５００ｍｇ／日、より好ましくは約１０００ｍｇ／日から約３０００ｍｇ／日、より好ましくは約１５００ｍｇ／日から約２５００ｍｇ／日、最も好ましくは約２０００ｍｇ／日である。別の実施形態において、静脈内投与のための有効量は、経口投薬量の約１０％であり、対流強化薬剤投与のための有効量は、経口投薬量の約１％である。もちろん、化合物の一日用量を少しずつ分けて、一日の様々な時間に投与することは、しばしば実用的である。しかしながら、いずれの所与の場合においても、投与される化合物の量は、有効成分の溶解性、用いられる製剤および投与経路などの要因に依存する。
【００９４】
本発明の医薬組成物は、慣用的な医薬配合技術に従って、薬学的に許容される担体、アジュバントおよび／または賦形剤と混合され得る。本発明の組成物中で用いることができる薬学的に許容される担体は、標準的な薬学的担体のいずれか、例えばリン酸緩衝生理食塩水溶液、水、およびエマルション、例えば油／水または水／油エマルションなど、および様々なタイプの湿潤剤などを包含する。組成物は加えて、固形状の医薬用賦形剤、例えばスターチ、セルロース、タルク、グルコース、乳糖、ショ糖、ゼラチン、麦芽、米、小麦粉、チョーク、シリカゲル、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸ナトリウム、モノステアリン酸グリセロール、塩化ナトリウム、乾燥スキムミルクなどを含有することができる。液状および半固形状の賦形剤は、グリセロール、プロピレングリコール、水、エタノール、および石油由来、動物由来、植物由来または合成由来のものを包含する様々な油、例としてピーナッツ油、ダイズ油、ミネラルオイル、ゴマ油などから選択され得る。液状担体、とりわけ注射液用の担体としては、水、生理食塩水、ブドウ糖水およびグリコールが挙げられる。担体、安定剤およびアジュバントの例については、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｅ．Ｗ．Ｍａｒｔｉｎ編（Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，１８ｔｈ  ｅｄ．，１９９０）を参照されたい。組成物はまた、安定剤および保存剤を包含することができる。
【００９５】
本明細書中で用いられる用語「治療的有効量」は、指定される障害または疾患を処置するために十分な量、あるいは障害または疾患を処置する薬理学的応答を得るために十分な量である。最も有効な手段および投薬量を決定する方法は、治療のために用いられる組成物、治療の目的、処置される標的細胞および処置される対象によって変わり得る。処置の投薬量は、一般的に、安全性および有効性を最適化するように用量設定され得る。単回または複数回の投与は、処置を行う医師によって選択される用量レベルおよびパターンで行うことができる。好適な投与製剤および剤を投与する方法は、当業者によって容易に決定することができる。例えば、組成物は、約０．０１ｍｇ／ｋｇから約２００ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇから約１００ｍｇ／ｋｇ、または約０．５ｍｇ／ｋｇから約５０ｍｇ／ｋｇで投与される。本明細書に記載される化合物が別の剤または治療と同時投与されるとき、有効量は、剤が単独で用いられるときよりも少ないものであり得る。
【００９６】
本発明の化合物は、リポソームまたはマイクロカプセルに封入され得る。リポソームは、脂質二重層膜および水性内部から構成される小胞である。脂質膜は、リン脂質からなり得て、その例としては、ホスファチジルコリン、例えばレシチンおよびリゾレシチンなど；酸性リン脂質、例えばホスファチジルセリンおよびホスファチジルグリセロールなど；ならびにスフィンゴリン脂質、例えばホスファチジルエタノールアミンおよびスフィンゴミエリンなどが挙げられる。あるいは、コレステロールが添加され得る。マイクロカプセルは、コーティング材料で被覆された粒子である。例えば、コーティング材料は、フィルム形成性ポリマー、疎水性可塑剤、界面活性剤、または／および潤滑性窒素含有ポリマーの混合物からなり得る。米国特許第６，３１３，１７６号および第７，５６３，７６８号。
【００９７】
本発明の化合物は、単独で、または上記疾患の処置のための他の薬剤と組み合わせて、短期間または長期間与えることができる。本発明の組成物は、哺乳動物、好ましくはヒトに投与することができる。哺乳動物としては、限定されるものではないが、マウス、ラット、ウサギ、サル、ウシ、ヒツジ、ブタ、イヌ、ネコ、家畜、スポーツ動物（ｓｐｏｒｔ  ａｎｉｍａｌ）、ペット、ウマ、霊長類などが挙げられる。
【００９８】
本発明はまた、細胞、例えばがん細胞などを有効量の本明細書中に記載される本発明の化合物と接触させる、インビトロ、エクスビボまたはインビボで細胞の増殖を阻害するための方法を提供する。
【００９９】
病的な細胞または組織、例えば過剰増殖性の細胞または組織などは、これらの細胞または組織を有効量の本発明の組成物と接触させることによって、処置され得る。細胞、例えばがん細胞などは、初代培養のがん細胞であることができ、例えばＡｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ）などの組織バンクから入手可能な培養細胞であることができる。病的な細胞は、全身がん、神経膠腫、髄膜腫、脳下垂体腺腫、または全身がん、肺がん、前立腺がん、乳がん、造血系がんもしくは卵巣がんからのＣＮＳ転移の細胞であることができる。細胞は、脊椎動物、好ましくは哺乳動物、より好ましくはヒトからのものであり得る。米国特許公開第２００４／００８７６５１号。Ｂａｌａｓｓｉａｎｏ  ｅｔ  ａｌ．（２００２）  Ｉｎｔｅｒｎ．Ｊ．Ｍｏｌ．Ｍｅｄ．  １０：７８５−７８８。Ｔｈｏｒｎｅ，ｅｔ  ａｌ．（２００４）  Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ  １２７：４８１−４９６。Ｆｅｒｎａｎｄｅｓ，ｅｔ  ａｌ．（２００５）  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ  Ｒｅｐｏｒｔｓ  １３：９４３−９４７。Ｄａ  Ｆｏｎｓｅｃａ，ｅｔ  ａｌ．（２００８）  Ｓｕｒｇｉｃａｌ    Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ  ７０：２５９２６７。Ｄａ  Ｆｏｎｓｅｃａ，ｅｔ  ａｌ．（２００８）  Ａｒｃｈ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｔｈｅｒ．Ｅｘｐ．  ５６：２６７−２７６。Ｈａｓｈｉｚｕｍｅ，ｅｔ  ａｌ．（２００８）  Ｎｅｕｒｏｎｃｏｌｏｇｙ  １０：１１２−１２０。
【０１００】
本発明の組成物のインビトロでの有効性は、当該技術分野で周知の方法を用いて決定することができる。例えば、本発明の化合物の細胞傷害性は、ＭＴＴ［３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−２，５−ジフェニルテトラゾリウムブロミド］細胞傷害性アッセイによって調べられ得る。ＭＴＴアッセイは、テトラゾリウム塩であるＭＴＴの代謝的に活性がある細胞による取り込みという原理に基づいており、ここでＭＴＴは青色のホルマゾン（ｆｏｒｍａｚｏｎ）産物に代謝され、分光学的に読み取ることができる。Ｊ．  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ６５：５５  ６３，１９８３。本発明の化合物の細胞傷害性は、コロニー形成アッセイによって調べられ得る。ＶＥＧＦ分泌およびＩＬ−８分泌の阻害についての機能アッセイは、ＥＬＩＳＡによって実施され得る。本発明の化合物による細胞周期の遮断は、標準的なヨウ化プロピジウム（ＰＩ）染色およびフローサイトメトリーによって調べられ得る。浸潤阻害は、Ｂｏｙｄｅｎチャンバーによって調べられ得る。このアッセイにおいては、走化性フィルターの上に再構成された基底膜であるＭａｔｒｉｇｅｌの層がコーティングされ、Ｂｏｙｄｅｎチャンバー内の細胞の遊走に対するバリアとして作用する。浸潤能力のある細胞のみがＭａｔｒｉｇｅｌバリアを越えることができる。他のアッセイとしては、限定されるものではないが、細胞生存率アッセイ、アポトーシスアッセイおよび形態学的アッセイが挙げられる。
【０１０１】
以下は本発明の例であり、限定として解釈されるものではない。
【実施例】
【０１０２】
実施例１：ボルテゾミブの腫瘍内送達：頭蓋内神経膠腫腫瘍モデルにおける生存期間に対する影響
目的  この研究の目標は、適切な薬剤送達方法が用いられればボルテゾミブは同所性ＧＢＭマウスモデルにおいて有効であり得ることを実証することであった。この研究においては、Ａｌｚｅｔミニ浸透圧ポンプを用いることで、薬剤を、血液脳関門を迂回して脳内の腫瘍に直接的にもたらしており、このようにしてボルテゾミブをＧＢＭに対する有効な処置とした。
【０１０３】
方法  ２つのヒト神経膠腫細胞株Ｕ８７およびＵ２５１をルシフェラーゼで標識し、皮下および頭蓋内のインビボ腫瘍モデルにおいて用いた。神経膠腫細胞は、胸腺欠損ヌードマウスの右脇腹に皮下移植されたか、または前頭皮質に頭蓋内移植された。頭蓋内神経膠腫腫瘍を担ったマウスに、異なる用量のボルテゾミブを含有するＡｌｚｅｔミニ浸透圧ポンプを植え込んだ。Ａｌｚｅｔポンプは、脳内の腫瘍床に直接導入された。頭蓋内腫瘍を有するマウスについて生存期間を記録した。
【０１０４】
結果  神経膠腫細胞はインビトロでナノモル量のボルテゾミブに感受性であった。皮下インビボ異種移植腫瘍モデルにおいて、静脈内に与えられたボルテゾミブは腫瘍進行の低減に有効であった。しかしながら、頭蓋内神経膠腫モデルにおいて、全身的に与えられたボルテゾミブは生存期間に影響を与えなかった。はっきりと対照的に、腫瘍部位においてボルテゾミブを頭蓋内処置された動物は、有意な生存期間の増加を呈した。
【０１０５】
結論  浸透圧ポンプを用いることによって血液脳関門をバイパスすることは、頭蓋内腫瘍の処置のためのボルテゾミブの有効性の向上をもたらした。このように、頭蓋腔内へのボルテゾミブの腫瘍内投与は、神経膠腫治療のための有効なアプローチである。
【０１０６】
ボルテゾミブの毒性が限定的であるという心強い証拠１０に基づいて、本発明者らは神経膠腫に対するボルテゾミブの効果をインビボで試験した。全身投与したとき、ボルテゾミブは、齧歯類皮下腫瘍モデルにおいて腫瘍増殖を効果的に低減させたが、頭蓋内腫瘍においては低減させなかった。しかしながら、同所性腫瘍モデルにおいてボルテゾミブを腫瘍内（ＩＴ）投与したとき、この薬剤は有効であった。これらの実験は、ボルテゾミブは同所性腫瘍に対して効果的に用いることができるが、それは送達様式がＢＢＢをバイパスし、薬剤が頭蓋内腫瘍に直接送達される場合のみであることを実証する。
【０１０７】
方法
細胞培養および治療用薬剤
ヒト神経膠腫細胞（Ｕ８７、Ｕ２５１およびＬＮ２２９）を、１０％ウシ胎仔血清および１％ペニシリン−ストレプトマイシンを補充したＤＭＥＭ中で培養し、５％ＣＯ２中でインキュベートした。ボルテゾミブ（Ｖｅｌｃａｄｅ）は、Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｓｏｕｔｈｅｒｎ  Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ／Ｎｏｒｒｉｓ  Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｎｔｅｒの薬剤部から購入した。ボルテゾミブは、臨床的使用のためにＦＤＡによって承認されている。滅菌された１４日分Ａｌｚｅｔミニ浸透圧ポンプ（ｍｏｄｅｌ  ２００２）をこれらの実験において用いた。Ａｌｚｅｔミニ浸透圧ポンプは、２００μｌのリザーバー容量および０．５μｌ／時の送達速度を持つ。脳注入キットは、ポンプおよび分配チューブを包含するものであり、ＤＵＲＥＣＴ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎから購入した。
【０１０８】
ＭＴＴアッセイ
神経膠腫細胞（５０００細胞／ウェル）を９６ウェルプレート中に播種した。２４時間後、ボルテゾミブを異なる濃度で細胞に添加し、細胞を４８時間インキュベートした。モノテトラゾリウム（ＭＴＴ）アッセイは、製造者のプロトコール（Ｃａｌｂｉｏｃｈｅｍ  ＥＭＤ，Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）に従って実施した。吸光度は、マイクロタイタープレートリーダー（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ）を用いて４９０ｎｍで測定した。パーセント生存率は、未処理の対照細胞と比較して算出した。全ての実験は３連で実施した。
【０１０９】
皮下腫瘍細胞移植のためのインビボの手法
動物プロトコールは、Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｓｏｕｔｈｅｒｎ  Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａの実験動物委員会によって承認された。全てのマウスは、実験期間中、病原体のない環境中で維持された。皮下腫瘍異種移植モデルのため、５０μｌ量のリン酸緩衝生理食塩水中に懸濁した５×１０５個のヒト神経膠腫細胞（Ｕ８７、Ｕ２５１およびＬＮ２２９）を、３０匹の胸腺欠損ヌードマウス（Ｈａｒｌａｎ，Ｉｎｃ）の右脇腹に移植した。腫瘍は、移植後約２〜３週間で触知可能であった。動物を無作為に６匹のマウスの５群に分け、処置をプロトコールに従って開始した。
【０１１０】
頭蓋内腫瘍細胞移植のためのインビボの手法
簡潔には、胸腺欠損ヌードマウスをケタミンおよびキシラジン（１０ｍｇ／ｋｇ）で麻酔し、定位頭部フレーム（Ｈａｒｖａｒｄ  Ａｐｐａｒａｔｕｓ）内に固定した。１．５ｍｍの穿頭孔（ｂｕｒ  ｈｏｌｅ）を、右半球上の冠状縫合の１ｍｍ前方かつ正中線から２ｍｍ側方に穿孔した。頭部フレーム上に固定されたハミルトンシリンジを用いて、ヒト神経膠腫細胞（２×１０５細胞／５μｌ）を脳の右前頭葉内に注射した。その後、皮膚切開部を４−０の絹糸で閉じた。痛みを低減するために適切な薬物を与えた。
【０１１１】
動物イメージングのためのインビボの手法
腫瘍細胞移植の７から１０日後に、イメージングを用いて脳腫瘍の形成を確認した。簡潔には、マウスを２％イソフルランガスを用いて麻酔し、５０ｍｇ／ｋｇのＤ−ルシフェリン（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）を静脈内（ＩＶ）注射し、ＩＶＩＳ  Ｓｐｅｃｔｒｕｍ（Ｃａｌｉｐｅｒ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）内に置いた。解析は、Ｌｉｖｉｎｇ  Ｉｍａｇｅソフトウェア（Ｃａｌｉｐｅｒ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）を使用して、腫瘍部位上に描かれた円形の関心領域を用いて実施され、結果は総フラックス（光子／秒）として報告された。総フラックスに基づいて、動物を無作為に実験群に分けた。
【０１１２】
Ａｌｚｅｔミニ浸透圧ポンプの植え込みのためのインビボの手法
腫瘍が特定されたら、頭蓋内腫瘍細胞移植の約７日後、Ａｌｚｅｔミニ浸透圧ポンプに所望用量の試薬を充填して植え込んだ。剤でプライミングされたプラスチックチューブを用いて、注入キットを脳に接続した。組み立てられた送達システムを植え込み前に４℃で一晩保存した。Ａｌｚｅｔミニ浸透性ポンプを用いてボルテゾミブを腫瘍内に送達した。
【０１１３】
ポンプを動物にアンカリングするため、先の手術痕に沿って頭皮に切開を作製した。切開の尾側の端が引っ張られ、結合組織が分離された。続いて、皮下トンネルを準備した。Ａｌｚｅｔミニ浸透圧ポンプを後ろ向きに押して、脳注入キットの位置を腫瘍細胞移植のために先に穿孔されていた頭蓋骨の孔のすぐ上に調整した。注入キット（プラスチックチューブ）を形成された腫瘍内に穏やかに挿入した。プラスチック製プラットフォームの末端を、瞬間スーパー接着剤を用いることによって頭蓋骨上に固定した。皮膚切開周辺領域を滅菌し、４−０絹糸で縫合した。Ａｌｚｅｔミニ浸透圧ポンプの内容物を、０．５ｍｌ／時の速度で腫瘍内に放出した。処置群（１群あたり６匹のマウス）は次のように列挙された：１）ポンプ投与ビヒクル（生理食塩水）；２）ボルテゾミブ（０．３ｍｇ／ｋｇ＝合計３６μｇ）静脈内注射による投与；３）低用量ボルテゾミブ（０．００３ｍｇ／ｋｇ＝合計３６μｇ）頭蓋内ポンプ送達；４）中用量ボルテゾミブ（０．０１ｍｇ／ｋｇ＝合計１．２μｇ）頭蓋内ポンプ送達；および５）高用量ボルテゾミブ（０．０３ｍｇ／ｋｇ＝合計３．６μｇ）頭蓋内ポンプ送達。要約すると、ボルテゾミブの１４日間の投与が、０．３ｍｇ／ｋｇでのＩＶで週２回（１４日間で合計４回の注射）か、またはＡｌｚｅｔミニ浸透圧ポンプを用いることによって頭蓋内腫瘍床中に連続的に行われた。処置が完了した後（１４日間後）、安楽死を必要とする神経学的異常および行動異常が出現するまで動物を処置せずに置いた。ビヒクルで処置した動物は、Ａｌｚｅｔミニ浸透圧ポンプによって生理食塩水を受けた。
【０１１４】
２０Ｓプロテアソーム活性についてのアッセイ
脳溶解液は、腫瘍を担った脳をリン酸緩衝生理食塩水中でホモジナイズすることによって調製した。上清は、４℃で１２，０００ｒｐｍ、１５分間の遠心分離によって回収した。総タンパク質濃度をＢＣＡプロテインアッセイによって測定し、１００μｇの総タンパク質を用いてプロテアソーム活性を測定した。２０Ｓプロテアソームアッセイキット（ＥＭＤ  Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）を製造者の説明書に従って用いた。このアッセイは、標識基質ＬＬＶＹＡＭＣから切断後の蛍光体７−アミノ−４−メチルクマリン（ＡＭＣ）の検出に基づく。遊離ＡＭＣの蛍光は、３８０ｎｍの励起フィルターおよび４６０ｎｍの発光フィルターを用いて定量した。
【０１１５】
組織学的調査
組織学的調査のために用いられる組織は、１０％ホルマリン中で固定し、パラフィン中に包埋し、Ｈ＆Ｅで染色した。抗体ＴＲＡ−１−８５／ＣＤ１４７（ＲＤ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）を用いてヒト細胞に対する染色を行った。
【０１１６】
統計解析
生存期間データは、Ｋａｐｌａｎ−Ｍｅｉｅｒ法を用いてプロットした。解析されたエンドポイントは、腫瘍細胞を頭蓋内注射によって移植した日から数えた生存日数であった。全３０匹のマウス（処置群あたり６匹）が死亡したため、無修正データのための標準的な方法を用いて処置群を比較することができた。解析に先立ち、エンドポイント（生存日数）を対数変換し、データの分布を正規分布の仮定に適合するものにした。結果として得られた平均値および信頼区間を元のスケールに変換した。（５つの処置群との）一元配置ＡＮＯＶＡを、差についての全体的検定のために用いた。平均値のうちのいくつかに他のものとの差があることを全体的Ｆ検定が指し示したら（ｐ＝０．００４）、次いで選択されたペアワイズの比較を、多重比較を調整するＴｕｋｅｙ法を用いて実施した。ｐ＜０．０５の統計的評価結果は有意であると考えられた。
【０１１７】
結果
ボルテゾミブはインビトロで神経膠腫細胞に細胞傷害性である
ボルテゾミブがインビトロで神経膠腫細胞に対して細胞傷害性であるかを決定するため、一連の神経膠腫細胞株を０から２５ｎＭの範囲の用量のボルテゾミブで処理した。４８時間のインキュベーション後、結果（図１）は、試験した３つの細胞株に対する阻害濃度（ＩＣ５０）の中央値が同様であって、５〜１０ｎＭの低ナノモル濃度範囲にあったことを示す。
【０１１８】
ボルテゾミブは皮下インビボモデルにおいて腫瘍増殖の遅延に有効である
ボルテゾミブがインビボで有効であるかを決定するため、齧歯類皮下腫瘍モデルを用いた。腫瘍細胞（Ｕ２５１）を右脇腹に移植した。腫瘍が触知可能になったら（約１５日目）、ボルテゾミブ（０．３ｍｇ／ｋｇ）を週２回ＩＶ投与した。腫瘍のサイズを３〜４日ごとに測定した。結果は、静脈内経路を通じたボルテゾミブの投与が腫瘍増殖の遅延において有意に有効であったことを実証する（ｐ＜０．０２）（図２Ａ）。
【０１１９】
この応答が他の神経膠腫細胞株で、および別の薬物送達様式を用いて観察されるかを決定するため、Ｕ８７を試験した；ここでは、ボルテゾミブ（０．３ｍｇ／ｋｇ）を皮下投与した（図２Ｂ）。結果は、この皮下モデルにおいてボルテゾミブは腫瘍の進行を遅延させたことを示す（ｐ＜０．０１）。
【０１２０】
静脈内のボルテゾミブはインビボの同所性頭蓋内神経膠腫モデルにおいて有効ではない
ボルテゾミブが全身送達様式を用いた頭蓋内神経膠腫治療のために有用であり得るかを決定するため、この薬剤を同所性頭蓋内神経膠腫モデルにおいてＩＶで与えた。Ｕ２５１神経膠腫細胞を胸腺欠損ヌードマウスに移植し、生存エンドポイントを記録した。結果（図３Ａ）は、ビヒクル対照と比較してＩＶ（０．３ｍｇ／ｋｇ）ボルテゾミブ処置動物の間で生存期間に有意な差を示さなかった。この実験をＵ８７細胞株を用いて繰り返し、同様の結果を得た（図３Ｂ）。
【０１２１】
ボルテゾミブはＩＴ送達されたときに頭蓋内腫瘍に対して有効な薬剤である
頭蓋内異種移植モデルにおけるボルテゾミブへの応答の欠如が、薬物が脳に入ることができないことに起因するかを決定するため、本発明者らはボルテゾミブの直接的腫瘍内送達を用いた。この手法において、１４日間送達用のＡｌｚｅｔミニ浸透圧ポンプを担腫瘍マウスに植え込んだ。このポンプは、腫瘍内投与のための効率的な方法であってＢＢＢを迂回することから用いられた１２，２１。さらには、ボルテゾミブは脳環境においてプロテアソーム阻害剤として機能していた（図５）。結果（図４）は、腫瘍内送達の場合、静脈内（３６μｇ）投与と比較して、低い腫瘍内用量（３．６μｇおよび１．２μｇ）の方が生存期間を有意に増大させた（それぞれｐ＝０．００２２およびｐ＝０．０００５）ことを示す。ボルテゾミブの腫瘍内投与は、生存期間の中央値を２３日から３７日に増加させ、約４０％の生存期間の増加を提供した。ビヒクルを受けた対照動物および静脈内投与群の生存期間に統計的な差はなかった。ポンプがイメージングを妨げたため、イメージングを用いて腫瘍の進行を決定することはできなかった。
【０１２２】
これらの実験において用いられたボルテゾミブの用量は、（浸透圧ミニポンプによって送達される）薬剤の用量を段階的に上昇させながら正常な非担腫瘍マウスに脳内注射することによって決定した。０．３６μｇ、１．２μｇおよび３．６μｇの用量は毒性を呈しなかったが、７．２μｇ、１８．０μｇおよび３６．０μｇの用量は試験動物に対して毒性があり、致死的であった。図４において、処置群（ｎ＝６）は、ビヒクル（生理食塩水充填ポンプ）；ボルテゾミブをＩＶ投与（合計３６μｇ）；ボルテゾミブＩＴ（低用量、０．３６μｇ）；ボルテゾミブＩＴ（中用量、１．２μｇ）；およびボルテゾミブＩＴ（高用量、３．６μｇ）であった。生存期間の中央値解析は、ボルテゾミブの局所投与が生存期間を中用量の場合は２３日から３４日へと、高用量の場合は２３日から３７日へと有意に増加させたことを示した。統計解析は、ｐ値の有意性を次のように説明した：ボルテゾミブＩＶ（３６μｇ）対ボルテゾミブＩＴ（中用量、１．２μｇ）、ｐ＝０．０００５；およびボルテゾミブＩＶ（３６μｇ）対ボルテゾミブＩＴ（高用量、３．６μｇ）、ｐ＝０．００２２。対照的に、ビヒクル対ボルテゾミブＩＶ（３６μｇ）の場合、ｐ＝０．９５２３（有意ではない）；およびボルテゾミブＩＶ（３６μｇ）対ボルテゾミブＩＴ（０．３６μｇ、低用量）の場合、ｐ＝０．１１０４（有意ではない）。ボルテゾミブの中用量（１．２μｇ）および高用量（３．６μｇ）のポンプ投与の場合の結果は有意差がなく、薬剤濃度がプラトーに達していた可能性を示唆した。このように、ボルテゾミブの直接的な頭蓋内投与によってＢＢＢを迂回することは、頭蓋内腫瘍を担った動物の生存期間を増加させるために有効である。
【０１２３】
ディスカッション
ＧＢＭの有効な処置は依然として課題であり、したがって新たな薬剤および代替的な薬物送達方法を検討しなければならない。ボルテゾミブは強力な細胞傷害剤であり、ナノモル濃度で機能する。本発明者らはここで、この強力な剤がインビボで神経膠腫に対しても有効であることを示しているが、薬剤の有効性には投与経路が重要であることを示している。頭蓋内腫瘍の場合、ボルテゾミブは頭蓋内投与を必要とする。
【０１２４】
薬剤の局所適用の必要性は、様々な薬剤投与様式を用いたいくつかのインビボ実験の結果として明らかになった。腫瘍を脇腹に移植してボルテゾミブを皮下投与した皮下神経膠腫モデルにおいて、ボルテゾミブは腫瘍進行の遅延に有効であった。しかしながら、頭蓋内腫瘍を担った動物に皮下送達した同用量のボルテゾミブ（合計３６μｇ）は有効ではなかった。頭蓋内投与されたボルテゾミブのみが腫瘍増殖を低減させ、生存期間の有意な増加をもたらした。ボルテゾミブおよびタモキシフェンの組み合わせを悪性神経膠腫を有する患者に全身投与して用いたフェーズＩＩの臨床試験は、治療ベネフィットを示さなかった１４。これらの薬物動態研究および他の薬物動態研究に基づくと２３、それらの著者は、ボルテゾミブの腫瘍への浸透性の悪さはＢＢＢが原因である可能性を示唆している。それゆえに、ボルテゾミブ活性のキーとなるのは、薬剤の直接的な頭蓋内投与によってＢＢＢをバイパスすることである。このボルテゾミブ投与の様式は、頭蓋内腫瘍に最適である。
【０１２５】
他の剤と組み合わせたボルテゾミブは、インビトロで薬剤の活性を高めることが示されている。ヒストンデアセチラーゼ阻害剤のボリノスタットを伴ったボルテゾミブは、インビトロでのミトコンドリアの活性化を通じたアポトーシスの増加に有効である１８。この薬剤の組み合わせはまた、ＧＢＭの処置についてのフェーズＩＩ臨床試験においてインビボで試験された８。ボルテゾミブはＩＶ投与された。臨床試験の結果はベネフィットを実証せず、ボルテゾミブの全身送達は頭蓋内腫瘍に有効でないことを改めて示した。これらのデータおよび我々の結果は、ボルテゾミブはＢＢＢを迂回しなければ臨床的に使用すべきではないことを指し示す。
【０１２６】
以前の研究は、ボルテゾミブは神経膠腫幹細胞に対して細胞傷害性があるのに対し、正常幹細胞には毒性がないことを示している９。この二分の理由は明らかではない。神経膠腫幹細胞においては正常幹細胞と比較してプロテアソームの代謝および機能のレベルに差があり、それゆえにこの差が神経膠腫幹細胞の感受性増加に寄与した結果というのが、可能性のある説明であり得る。報告はまた、高用量のボルテゾミブは低酸素誘導因子−１αおよび血管内皮増殖因子の増加によって仲介される血管新生促進性を持つことを指し示している４。本発明者らのインビボ試験は、ボルテゾミブ処置動物における微小血管密度はビヒクル処置マウスに対して有意な差がないことを示した（データは示されていない）。組織の組織学的検査は、５日目にＩＶ処置動物（合計３６μｇ）における腫瘍が高用量（合計３．６μｇ）のＩＴ処置動物と比較して大きかったことを認めた。さらには、これらの組織の抗ヒト細胞抗体（ＴＲＡ  １−８５）での染色は、静脈内処置はＩＴ処置動物と比較してマウス脳内へのより大きな腫瘍細胞浸潤をもたらすことを示した。これらの試験は、ボルテゾミブの腫瘍内送達は静脈内送達よりも腫瘍進行の低減に有効であったことを示唆する（図６）。
【０１２７】
ボルテゾミブの頭蓋内投与は、ＢＢＢを迂回することから、有効である。この試験においては、脳腫瘍への直接的なアクセスを提供する頭蓋内薬剤送達が用いられた。ミニ浸透圧ポンプは、脳への直接的な薬剤処置を提供し、また肝臓をバイパスし、それによって高用量の薬剤の使用を回避しながら神経膠腫の微小環境において所望の薬剤濃度を達成する。直接的な薬剤投与の他のメカニズムもまた用いられ得る。ＧｌｉａｄｅｌウェハーはＦＤＡに承認されており、有効な局所薬剤投与方法であることが示されている７。Ｏｍｍａｙａリザーバーもまた、腫瘍内薬剤送達のために用いられている１６，１７。最近、本発明者らは、植込型の圧電ポンプを髄膜癌腫症モデルにおいて用いることができることを実証した６。このように、ＢＢＢをバイパスすることは重要であり、いくつかの技術によって達成され得る。
【０１２８】
結論
これらの試験は、ボルテゾミブは、この薬剤がＢＢＢを迂回するような方法で投与されるかぎり、ＧＢＭの処置のために有効な治療であり得ることを実証する。脳腫瘍に直接的に送達する外部ポンプまたは植込型ポンプ６を介した直接的な腫瘍内送達を用いることは、ボルテゾミブを神経膠腫に対する有効な処置にする。本発明者らのデータは、今後の臨床試験は脳腫瘍の処置のためにＩＶ送達でボルテゾミブを用いて実施すべきではないことを意味しており、その理由は、この薬剤がＢＢＢを透過することができないためである。本発明者らのデータは、直接的な局所送達ＩＴを介してＢＢＢ障害を迂回することはＧＢＭに対するボルテゾミブの治療的可能性を利用するための実行可能なアプローチであることを明らかにする。このように、代替的なボルテゾミブ送達方法は、ＧＢＭに対する処置選択肢の増加をもたらすことができる。
【０１２９】
参考文献
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１５．  Ｏｍｕｒｏ  ＡＭ，  Ｆａｉｖｒｅ  Ｓ，  Ｒａｙｍｏｎｄ  Ｅ：  Ｌｅｓｓｏｎｓ  ｌｅａｒｎｅｄ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｏｆ  ｔａｒｇｅｔｅｄ  ｔｈｅｒａｐｙ  ｆｏｒ  ｍａｌｉｇｎａｎｔ  ｇｌｉｏｍａｓ．  Ｍｏｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒ  ６：１９０９−１９１９，  ２００７
１６．  Ｏｓｈｉｒｏ  Ｓ，  Ｔｓｕｇｕ  Ｈ，  Ｋｏｍａｔｓｕ  Ｆ，  Ｏｈｎｉｓｈｉ  Ｈ，  Ｕｅｎｏ  Ｙ，  Ｓａｋａｍｏｔｏ  Ｓ，  ｅｔ  ａｌ：  Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｉｎｔｒａｔｕｍｏｒａｌ  ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｕｍｏｒ  ｎｅｃｒｏｓｉｓ  ｆａｃｔｏｒ−ａｌｐｈａ  ｉｎ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ｍａｌｉｇｎａｎｔ  ｇｌｉｏｍａ．  Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ  ２６  （６Ａ）：４０２７−４０３２，  ２００６
１７．  Ｐａｔｃｈｅｌｌ  ＲＡ，  Ｒｅｇｉｎｅ  ＷＦ，  Ａｓｈｔｏｎ  Ｐ，  Ｔｉｂｂｓ  ＰＡ，  Ｗｉｌｓｏｎ  Ｄ，  Ｓｈａｐｐｌｅｙ  Ｄ，  ｅｔ  ａｌ：  Ａ  ｐｈａｓｅ  Ｉ  ｔｒｉａｌ  ｏｆ  ｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓｌｙ  ｉｎｆｕｓｅｄ  ｉｎｔｒａｔｕｍｏｒａｌ  ｂｌｅｏｍｙｃｉｎ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｒｅｃｕｒｒｅｎｔ  ｇｌｉｏｂｌａｓｔｏｍａ  ｍｕｌｔｉｆｏｒｍｅ．  Ｊ  Ｎｅｕｒｏｏｎｃｏｌ  ６０：３７−４２，  ２００２
１８．  Ｐｒｅｍｋｕｍａｒ  ＤＲ，  Ｊａｎｅ  ＥＰ，  Ａｇｏｓｔｉｎｏ  ＮＲ，  ＤｉＤｏｍｅｎｉｃｏ  ＪＤ，  Ｐｏｌｌａｃｋ  ＩＦ：  Ｂｏｒｔｅｚｏｍｉｂ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｓｅｎｓｉｔｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｍａｌｉｇｎａｎｔ  ｈｕｍａｎ  ｇｌｉｏｍａ  ｃｅｌｌｓ  ｔｏ  ｖｏｒｉｎｏｓｔａｔ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ａｐｏｐｔｏｓｉｓ  ｄｅｐｅｎｄｓ  ｏｎ  ｒｅａｃｔｉｖｅ  ｏｘｙｇｅｎ  ｓｐｅｃｉｅｓ  ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ，  ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ  ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ，  Ｎｏｘａ  ｕｐｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ，  Ｍｃｌ−１  ｃｌｅａｖａｇｅ，  ａｎｄ  ＤＮＡ  ｄａｍａｇｅ．  Ｍｏｌ  Ｃａｒｃｉｎｏｇ  ５２：１１８−１３３，  ２０１３
１９．  Ｒｉｃｈａｒｄｓｏｎ  ＰＧ，  Ｍｉｔｓｉａｄｅｓ  Ｃ，  Ｓｃｈｌｏｓｓｍａｎ  Ｒ，  Ｇｈｏｂｒｉａｌ  Ｉ，  Ｈｉｄｅｓｈｉｍａ  Ｔ，  Ｍｕｎｓｈｉ  Ｎ，  ｅｔ  ａｌ：  Ｂｏｒｔｅｚｏｍｉｂ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｆｒｏｎｔ−ｌｉｎｅ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｍｙｅｌｏｍａ．  Ｅｘｐｅｒｔ  Ｒｅｖ  Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒ  ８：１０５３−１０７２，  ２００８
２０．  Ｓｅｏｌ  ＤＷ：  ｐ５３−Ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  ｕｐ−ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａ  ＴＲＡＩＬ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ＤＲ５  ｂｙ  ｐｒｏｔｅａｓｏｍｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ：  ａ  ｍｅｃｈａｎｉｓｍ  ｆｏｒ  ｐｒｏｔｅａｓｏｍｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ−ｅｎｈａｎｃｅｄ  ＴＲＡＩＬ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ａｐｏｐｔｏｓｉｓ．  Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ｒｅｓ  Ｃｏｍｍｕｎ  ４１６：２２２−２２５，  ２０１１
２１．  ｖａｎ  ｄｅｒ  Ｂｏｍ  ＩＭ，  Ｍｏｓｅｒ  ＲＰ，  Ｇａｏ  Ｇ，  Ｓｅｎａ−Ｅｓｔｅｖｅｓ  Ｍ，  Ａｒｏｎｉｎ  Ｎ，  Ｇｏｕｎｉｓ  ＭＪ：  Ｆｒａｍｅｌｅｓｓ  ｍｕｌｔｉｍｏｄａｌ  ｉｍａｇｅ  ｇｕｉｄａｎｃｅ  ｏｆ  ｌｏｃａｌｉｚｅｄ  ｃｏｎｖｅｃｔｉｏｎ−ｅｎｈａｎｃｅｄ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｏｆ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｂｒａｉｎ．  Ｊ  Ｎｅｕｒｏｉｎｔｅｒｖ  Ｓｕｒｇ  ５：６９−７２，  ２０１３
２２．  Ｖｅｒｉｎｇａ  ＳＪ，  Ｂｉｅｓｍａｎｓ  Ｄ，  ｖａｎ  Ｖｕｕｒｄｅｎ  ＤＧ，  Ｊａｎｓｅｎ  ＭＨ，  Ｗｅｄｅｋｉｎｄ  ＬＥ，  Ｈｏｒｓｍａｎ  Ｉ，  ｅｔ  ａｌ：  Ｉｎ  ｖｉｔｒｏ  ｄｒｕｇ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ａｎｄ  ｅｆｆｌｕｘ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｓ  ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｗｉｔｈ  ｄｒｕｇ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  ｉｎ  ｐｅｄｉａｔｒｉｃ  ｈｉｇｈ  ｇｒａｄｅ  ｇｌｉｏｍａ  ａｎｄ  ｄｉｆｆｕｓｅ  ｉｎｔｒｉｎｓｉｃ  ｐｏｎｔｉｎｅ  ｇｌｉｏｍａ．  ＰＬｏＳ  Ｏｎｅ  ８：ｅ６１５１２，  ２０１３
２３．  Ｗｉｌｌｉａｍｓｏｎ  ＭＪ，  Ｓｉｌｖａ  ＭＤ，  Ｔｅｒｋｅｌｓｅｎ  Ｊ，  Ｒｏｂｅｒｔｓｏｎ  Ｒ，  Ｙｕ  Ｌ，  Ｘｉａ  Ｃ，  ｅｔ  ａｌ：  Ｔｈｅ  ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ  ａｍｏｎｇ  ｔｕｍｏｒ  ａｒｃｈｉｔｅｃｔｕｒｅ，  ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ，  ｐｈａｒｍａｃｏｄｙｎａｍｉｃｓ，  ａｎｄ  ｅｆｆｉｃａｃｙ  ｏｆ  ｂｏｒｔｅｚｏｍｉｂ  ｉｎ  ｍｏｕｓｅ  ｘｅｎｏｇｒａｆｔ  ｍｏｄｅｌｓ．  Ｍｏｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒ  ８：３２３４−３２４３，  ２００９
２４．  Ｙａｎｇ  Ｙ，  Ｙｕ  Ｘ：  Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａｐｏｐｔｏｓｉｓ：  ｔｈｅ  ｕｂｉｑｕｉｔｏｕｓ  ｗａｙ．  ＦＡＳＥＢ  Ｊ  １７：７９０−７９９，  ２００３
２５．  Ｚｈａｎｇ  Ｙ，  Ｚｈｕ  Ｘ，  Ｈｏｕ  Ｋ，  Ｚｈａｏ  Ｊ，  Ｈａｎ  Ｚ，  Ｚｈａｎｇ  Ｘ：  Ｍｃｌ−１  ｄｏｗｎｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ｓｅｎｓｉｔｉｚｅｓ  ｇｌｉｏｍａ  ｔｏ  ｂｏｒｔｅｚｏｍｉｂ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ａｐｏｐｔｏｓｉｓ．  Ｏｎｃｏｌ  Ｒｅｐ  ３３：２２７７−２２８４，  ２０１５
本発明の範囲は、上文において具体的に示され、記載されているものによって限定されない。当業者は、材料、構成、構造および寸法についての描写された例に対する好適な代替物が存在することを認識する。特許および様々な刊行物を包含する多数の参考文献が、本発明の記載の中で引用され、論じられている。かかる参考文献の引用および議論は、単に本発明の記載を明確にするために提供されるものであり、いずれかの参考文献が本明細書中に記載される本発明の先行技術であることを認めるものではない。本明細書中で引用されて論じられている全てのの参考文献は、その全体が参照により本明細書中に組み込まれる。本明細書中に記載されているものの変形、改変および他の実施形態は、本発明の趣旨および範囲から逸脱することなく、当業者に生じる。本発明のある特定の実施形態が示され、記載されているが、本発明の趣旨および範囲から逸脱することなく変更および改変がなされ得ることは、当業者に明らかである。前述の記載および添付の図面中に記載された事項は、説明のみのために提示されたもので、限定としてではない。
【図１】
2021512165.tif 000002
【図２Ａ】
2021512165.tif 000003
【図２Ｂ】
2021512165.tif 000004
【図３Ａ】
2021512165.tif 000005
【図３Ｂ】
2021512165.tif 000006
【図４】
2021512165.tif 000007
【図５】
2021512165.tif 000008
【図６】
2021512165.tif 000009
【国際調査報告】
2021512165.tif 000010