(57)【要約】  本発明は、がんの治療、特にＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体及びＰＤ−１軸結合アンタゴニストを使用するがんの治療に関する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体及びＰＤ−１軸結合アンタゴニストを投与することを含む、がんを治療する方法であって、
ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体が、一週毎（ＱＷ）又は三週毎（Ｑ３Ｗ）、固定用量で投与され、
ＰＤ−１軸結合アンタゴニストが、三週毎（Ｑ３Ｗ）投与される、
方法。
【請求項２】
ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体が、各治療サイクル（Ｃ）の第１日（Ｄ１）、第８日（Ｄ８）及び第１５日（Ｄ１５）に一週毎に（ＱＷ）投与されるか、又は各治療サイクル（Ｃ）の第１日（Ｄ１）に三週毎に（Ｑ３Ｗ）投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体の固定用量が、約８０ｍｇから約１６０ｍｇ、特に約１００ｍｇである、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体及びＰＤ−１軸結合アンタゴニストを投与することを含む、がんを治療する方法であって、
ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体が、最初は特定数の投与にわたって、一週毎に（ＱＷ）漸増用量で投与され、続いて一週毎に（ＱＷ）又は三週毎に（Ｑ３Ｗ）固定用量で投与され、
ＰＤ−１軸結合アンタゴニストが、三週毎に（Ｑ３Ｗ）投与される、
方法。
【請求項５】
ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体が、最初は３、４、５又は６回の投与にわたって、一週毎に（ＱＷ）漸増用量で投与される、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体が、漸増用量の最後の用量と同じ用量で続いて投与される、請求項４又は５に記載の方法。
【請求項７】
ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体が、最初は各治療サイクル（Ｃ）の第１日（Ｄ１）、第８日（Ｄ８）、及び第１５日（Ｄ１５）に、一週毎に（ＱＷ）漸増用量で投与される、請求項４から６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体が、第１の治療サイクルの第１日（Ｃ１Ｄ１）に約４０ｍｇの用量で、第１の治療サイクルの第８日（Ｃ１Ｄ８）に約１５０ｍｇの用量で、第１の治療サイクルの第１５日（Ｃ１Ｄ１５）に約３００ｍｇの用量で、第２の治療サイクルの第１日（Ｃ２Ｄ１）に約６００ｍｇの用量で、第２の治療サイクルの第８日（Ｃ２Ｄ８）に約９００ｍｇの用量で、第２の治療サイクルの第１５日（Ｃ２Ｄ１５）に約１２００ｍｇの用量で、及び第３及び後続の治療サイクルの第１日（Ｃ３Ｄ１）に約１２００ｍｇの用量で投与される、請求項４から７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体が、第１の治療サイクルの第１日（Ｃ１Ｄ１）に約４０ｍｇの用量で、第１の治療サイクルの第８日（Ｃ１Ｄ８）に約１５０ｍｇの用量で、第１の治療サイクルの第１５日（Ｃ１Ｄ１５）に約６００ｍｇの用量で、及び第２及び後続の治療サイクルの第１日（Ｃ２Ｄ１）に約１２００ｍｇの用量で投与される、請求項４から７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体が、第１の治療サイクルの第１日（Ｃ１Ｄ１）に約４０ｍｇの用量で、第１の治療サイクルの第８日（Ｃ１Ｄ８）に約１００ｍｇの用量で、第１の治療サイクルの第１５日（Ｃ１Ｄ１５）に約１５０ｍｇの用量で、及び第２及び後続の治療サイクルの第１日（Ｃ２Ｄ１）に約１５０ｍｇの用量で投与される、請求項４から７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体が、第１の治療サイクルの第１日（Ｃ１Ｄ１）に約４０ｍｇの用量で、第１の治療サイクルの第８日（Ｃ１Ｄ８）に約１５０ｍｇの用量で、第１の治療サイクルの第１５日（Ｃ１Ｄ１５）に約３００ｍｇの用量で、第２及び後続の治療サイクルの第１日（Ｃ２Ｄ１）に約６００ｍｇの用量で投与される、請求項４から７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体が、第１の治療サイクルの第１日（Ｃ１Ｄ１）に約１００ｍｇの用量で、第１の治療サイクルの第８日（Ｃ１Ｄ８）に約１５０ｍｇの用量で、第１の治療サイクルの第１５日（Ｃ１Ｄ１５）に約３００ｍｇの用量で、及び第２及び後続の治療サイクルの第１日（Ｃ２Ｄ１）に約６００ｍｇの用量で投与される、請求項４から７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
ＰＤ−１軸結合アンタゴニストが、固定用量、特に約１２００ｍｇの固定用量で投与される、請求項１から１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
ＰＤ−１軸結合アンタゴニストが、各治療サイクル（Ｃ）の第１日（Ｄ１）に投与される、請求項１から１３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
各治療サイクルが２１日間である、請求項１から１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６】
ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体及び／又はＰＤ−１軸結合アンタゴニストが、静脈内注射により投与される、請求項１から１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７】
請求項１から１６のいずれか一項に記載の方法であって、ＣＥＡ  ＣＤ３抗体が、
（ｉ）ＣＤ３に特異的に結合する第１の抗原結合部分であって、配列番号１の重鎖ＣＤＲ（ＨＣＤＲ）１、配列番号２のＨＣＤＲ２、及び配列番号３のＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；並びに配列番号４の軽鎖ＣＤＲ（ＬＣＤＲ）１、配列番号５のＬＣＤＲ２、及び配列番号６のＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含み、Ｆａｂ軽鎖とＦａｂ重鎖の可変領域又は定常領域、特に定常領域が交換されている、第１の抗原結合部分；
（ｉｉ）ＣＥＡに特異的に結合する第２及び第３の抗原結合部分であって、配列番号９の重鎖ＣＤＲ（ＨＣＤＲ）１、配列番号１０のＨＣＤＲ２、及び配列番号１１のＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；並びに配列番号１２の軽鎖ＣＤＲ（ＬＣＤＲ）１、配列番号１３のＬＣＤＲ２及び配列番号１４のＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含み、第２及び第３の抗原結合部分の各々がＦａｂ分子、特に従来のＦａｂ分子である、第２及び第３の抗原結合部分；
（ｉｉｉ）第１及び第２のサブユニットから構成されるＦｃドメインであって、
第２の抗原結合部分がＦａｂ重鎖のＣ末端において第１の抗原結合部分のＦａｂ重鎖のＮ末端に融合しており、第１の抗原結合部分がＦａｂ重鎖のＣ末端においてＦｃドメインの第１のサブユニットのＮ末端に融合しており、第３の抗原結合部分がＦａｂ重鎖のＣ末端においてＦｃドメインの第２のサブユニットのＮ末端に融合している、Ｆｃドメイン
を含む、方法。
【請求項１８】
第１の抗原結合部分が、配列番号７のアミノ酸配列と少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％同一である重鎖可変領域配列、及び配列番号８のアミノ酸配列と少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％同一である軽鎖可変領域配列を含み、且つ／又は第２及び第３の抗原結合分子が、配列番号１５のアミノ酸配列と少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％同一である重鎖可変領域配列、及び配列番号１６のアミノ酸配列と少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％同一である軽鎖可変領域配列を含む、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
Ｆｃドメインが、Ｆｃドメインの第１のサブユニットと第２のサブユニットとの会合を促進させる修飾を含み、且つ／又はＦｃドメインが、Ｆｃ受容体への結合及び／若しくはエフェクター機能を低下させる一つ又は複数のアミノ酸置換を含む、請求項１７又は１８に記載の方法。
【請求項２０】
ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体がＣＥＡ  ＴＣＢである、請求項１から１９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１】
ＰＤ−１軸結合アンタゴニストがアテゾリズマブである、請求項１から２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２】
がんが、結腸直腸がん、肺がん、膵臓がん、乳がん、及び胃がんからなる群より選択されるがんである、請求項１から２１のいずれか一項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、がんの治療、特にＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体及びＰＤ−１軸結合アンタゴニストを使用するがんの治療に関する。
【背景技術】
【０００２】
Ｔ細胞活性化二重特異性抗体は、腫瘍細胞に対して細胞傷害性Ｔ細胞を用いるように設計された新しいクラスのがん治療法である。このような抗体がＴ細胞上のＣＤ３と腫瘍細胞上に発現される抗原とに同時結合すると、腫瘍細胞とＴ細胞とを一時的に強制的に相互作用させ、Ｔ細胞の活性化と、その後の腫瘍細胞の崩壊とを引き起こす。
【０００３】
ＣＥＡ  ＴＣＢ（ＲＧ７８０２、ＲＯ６９５８６８８、シビサタマブ）は、腫瘍細胞上のＣＥＡ及びＴ細胞上のＣＤ３εを標的とする新規のＴ細胞活性化二重特異性抗体である。マウスモデルでは、ＣＥＡ  ＴＣＢは、強力な抗腫瘍活性を示し、腫瘍内Ｔ細胞の浸潤及び活性化の増加をもたらし、ＰＤ−Ｌ１／ＰＤ−１経路を上方制御する。現在、ＣＥＡ  ＴＣＢは、進行性のＣＥＡ陽性腫瘍を有する患者において、単剤療法として、またはアテゾリズマブとの組み合わせで行われる２つの進行中の用量漸増第Ｉ相試験で試験されている。
【０００４】
Ｔ細胞活性化二重特異性抗体のための安全で有効な投与計画の確立は、困難であるとわかった。いくつかのＴ細胞活性化二重特異性抗体について、ステップアップ投与計画が報告された（例えば、国際公開第２０１１／０５１３０７号、同第２０１６／０８１４９０号、同第２０１８／０９３８２１号、Ｂｌｉｎｃｙｔｏ（登録商標）処方情報（０７／２０１７のバージョン；２０１８年１１月２２日にアクセスhttps://www.accessdata.fda.gov/drugsatfda_docs/label/2017/125557s008lbl.pdf)を参照）。
【発明の概要】
【０００５】
本発明は、最適化された有効性及び安全性を有するがんの治療のための、アテゾリズマブのようなＰＤ−１軸結合アンタゴニストと組み合わせたＣＥＡ  ＴＣＢのようなＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体のための投与計画を提供する。
【０００６】
第１の態様では、本発明は、がんの治療における使用のための、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体、特にＣＥＡ  ＴＣＢであって、前記治療が、ＰＤ−１軸結合アンタゴニスト、特にアテゾリズマブと組み合わせたＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体の投与を含む、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体を提供し、
ここでＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体は、一週毎に（ＱＷ）又は三週毎に（Ｑ３Ｗ）、固定用量、特に約１００ｍｇの用量で投与され、
ＰＤ−１軸結合アンタゴニストは、三週毎に（Ｑ３Ｗ）、特に固定用量で、より具体的には約１２００ｍｇの固定用量で投与される。
【０００７】
さらなる態様では、本発明は、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体、特にＣＥＡ  ＴＣＢ、及びＰＤ−１軸結合アンタゴニスト、特にアテゾリズマブを投与することを含む、がんを治療する方法を提供し、
ここでＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体は、一週毎に（ＱＷ）又は三週毎に（Ｑ３Ｗ）、固定用量、特に約１００ｍｇの用量で投与され、
ＰＤ−１軸結合アンタゴニストは、三週毎に（Ｑ３Ｗ）、特に固定用量で、より具体的には約１２００ｍｇの固定用量で投与される。
【０００８】
またさらなる態様では、本発明は、がんの治療のための医薬の製造における、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体、特にＣＥＡ  ＴＣＢの使用であって、前記治療が、ＰＤ−１軸結合アンタゴニスト、特にアテゾリズマブと組み合わせたＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体の投与を含む、使用を提供し、
ここでＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体は、一週毎に（ＱＷ）又は三週毎に（Ｑ３Ｗ）、固定用量、特に約１００ｍｇの用量で投与され、
ＰＤ−１軸結合アンタゴニストは、三週毎に（Ｑ３Ｗ）、特に固定用量で、より具体的には約１２００ｍｇの固定用量で投与される。
【０００９】
さらなる態様では、本発明は、がんの治療における使用のための、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体、特にＣＥＡ  ＴＣＢであって、前記治療が、ＰＤ−１軸結合アンタゴニスト、特にアテゾリズマブと組み合わせたＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体の投与を含む、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体を提供し、
ここでＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体は、最初は、特定数の投与、特に３、４、５、又は６回の投与にわたって、漸増用量で一週毎に（ＱＷ）投与され、続いて一週毎に（ＱＷ）固定又は三週毎に（Ｑ３Ｗ）、固定用量、特に漸増用量の最後の用量と同じ用量で投与され、
ＰＤ−１軸結合アンタゴニストは、三週毎に（Ｑ３Ｗ）、特に固定用量で、より具体的には約１２００ｍｇの固定用量で投与される。
【００１０】
さらなる態様では、本発明は、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体、特にＣＥＡ  ＴＣＢ、及びＰＤ−１軸結合アンタゴニスト、特にアテゾリズマブを投与することを含む、がんを治療する方法を提供し、
ここでＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体は、最初は、特定数の投与、特に３、４、５、又は６回の投与にわたって、漸増用量で一週毎に（ＱＷ）投与され、続いて一週毎に（ＱＷ）固定で又は三週毎に（Ｑ３Ｗ）固定用量で、特に漸増用量の最後の用量と同じ用量で投与され、
ＰＤ−１軸結合アンタゴニストは、三週毎に（Ｑ３Ｗ）、特に固定用量で、より具体的には約１２００ｍｇの固定用量で投与される。
【００１１】
またさらなる態様では、本発明は、がんの治療のための医薬の製造における、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体、特にＣＥＡ  ＴＣＢの使用であって、前記治療が、ＰＤ−１軸結合アンタゴニスト、特にアテゾリズマブと組み合わせたＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体の投与を含む、使用を提供し、
ここでＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体は、最初は、特定数の投与、特に３、４、５、又は６回の投与にわたって、漸増用量で一週毎に（ＱＷ）投与され、続いて一週毎に（ＱＷ）固定で又は三週毎に（Ｑ３Ｗ）固定用量で、特に漸増用量の最後の用量と同じ用量で投与され、
ＰＤ−１軸結合アンタゴニストは、三週毎に（Ｑ３Ｗ）、特に固定用量で、より具体的には約１２００ｍｇの固定用量で投与される。
【００１２】
ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体、上記及び本明細書に記載の方法又は使用は、単独で又は組み合わせて、（文脈が別途指示しない限り）以下に記載の特徴のいずれかを組み込み得る。
【００１３】
本明細書のＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体は、ＣＤ３及びＣＥＡに特異的に結合する二重特異性抗体である。特に有用なＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体は、ＰＣＴ出願の国際公開第２０１４／１３１７１２号に記載されている（参照によりその全文が本明細書に援用される）。
【００１４】
用語「二重特異性」とは、抗体が少なくとも二つの異なる抗原決定基に特異的に結合することができることを意味する。一般に、二重特異性抗体は二つの抗原結合部位を含み、それらの各々は異なる抗原決定基に特異性である。一部の実施態様では、二重特異性抗体は、二つの抗原決定基、特に二つの異なる細胞に発現される二つの抗原決定基に同時に結合することができる。
【００１５】
本明細書において使用される用語「抗原決定基」は、「抗原」及び「エピトープ」と同義であり、抗原結合部分が結合し、抗原結合部分−抗原複合体を形成するポリペプチド巨大分子上の部位（例えば、アミノ酸の連続的広がり又は非連続的アミノ酸の異なる領域から形成される立体配座構造）を指す。有用な抗原決定基は、例えば、血液血清、及び／又は細胞外マトリックス（ＥＣＭ）が存在しない、腫瘍細胞の表面、ウイルス感染細胞の表面、他の疾患細胞の表面、免疫細胞の表面上にみられる。
【００１６】
本明細書で使用される用語「抗原結合部分」は、抗原決定基に特異的に結合するポリペプチド分子を指す。一実施態様において、抗原結合部分は、それが結合する前記部分（例えば第２の抗原結合部分）を、標的部位、例えば抗原決定基を持つ特定の種類の腫瘍細胞に向けることができる。別の実施態様では、抗原結合部分は、その標的抗原、例えばＴ細胞受容体複合抗原を通して、シグナル伝達を活性化することができる。抗原結合部分は、後述でさらに定義される抗体及びその断片を含む。特定の抗原結合部分は、抗体重鎖可変領域及び抗体軽鎖可変領域を含む抗体の抗原結合ドメインを含む。一部の実施態様では、抗原結合部分は、後述でさらに定義される、当技術分野で既知の抗体定常領域を含む。有用な重鎖定常領域は、五つのアイソタイプ：α、δ、ε、γ、又はμのいずれかを含む。有用な軽鎖定常領域は、二つのアイソタイプ：κ及びλのいずれかを含む。
【００１７】
「特異的結合」とは、結合が抗原について選択的であり、望ましくない又は非特異的な相互作用とは区別可能であることを意味する。抗原結合部分の、特定の抗原決定基への結合能は、酵素結合免疫吸着法（ＥＬＩＳＡ）又は当業者によく知られた他の技術、例えば表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）技術（例えばＢＩＡｃｏｒｅ計器上での解析）（Liljeblad et al., Glyco J 17, 323-329 (2000)）、及び古典的結合アッセイ（Heeley, Endocr Res 28, 217-229 (2002)）により測定することができる。一実施態様では、抗原結合部分の無関係なタンパク質への結合の程度は、例えばＳＰＲによって測定した場合、抗原結合部分の抗原への結合の約１０％未満である。一部の実施態様では、抗原に結合する抗原結合部分、又は抗原結合部分を含む抗体は、≦１μＭ、≦１００ｎＭ、≦１０ｎＭ、≦１ｎＭ、≦０．１ｎＭ、≦０．０１ｎＭ、又は≦０．００１ｎＭ（例えば１０−８Ｍ以下、例えば１０−８Ｍから１０−１３Ｍ、例えば１０−９Ｍから１０−１３Ｍ）の解離定数（ＫＤ）を有する。
【００１８】
「親和性」は、分子（例えば受容体）の単一結合部位とその結合パートナー（例えばリガンド）との間の非共有結合的相互作用の総和の強度を指す。本明細書で使用する場合、特に断らない限り、「結合親和性」は、結合対（例えば、抗原結合部分と抗原、又は受容体とそのリガンド）のメンバー間の１：１の相互作用を反映する固有の結合親和性を指す。分子Ｘの、そのパートナーＹに対する親和性は、通常、解離定数（Ｋｄ）によって表され、この解離定数（ＫＤ）は、解離速度定数と会合速度定数（それぞれ、ｋｏｆｆ及びｋｏｎ）の比である。したがって、速度定数の比が同じである限り、同等の親和性が異なる速度定数を含むことがある。親和性は、ここに記載のものを含む当技術分野で既知の確立された方法により測定することができる。親和性を測定するための特定の方法は、表面プラズモン共鳴アッセイ（ＳＰＲ）である。
【００１９】
特に断らない限り、「ＣＤ３」は、霊長類（例えばヒト）、非ヒト霊長類（例えばカニクイザル）及びげっ歯類（例えばマウス及びラット）といった哺乳動物を含むあらゆる脊椎動物源由来のいずれかの天然型ＣＤ３を指す。用語は、「完全長」の、未処理のＣＤ３と、細胞内でのプロセシングから生じた任意の形態のＣＤ３とを包含する。その用語はまた、天然に存在するＣＤ３の変異体、例えば、スプライス変異体又は対立遺伝子変異体を包含する。一実施態様では、ＣＤ３は、ヒトＣＤ３、特にヒトＣＤ３のエプシロンサブユニット（ＣＤ３ε）である。ヒトＣＤ３εのアミノ酸配列は、ＵｎｉＰｒｏｔ（ｗｗｗ．ｕｎｉｐｒｏｔ．ｏｒｇ）アクセッション番号Ｐ０７７６６（バージョン１４４）、又はＮＣＢＩ（ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／）ＲｅｆＳｅｑ  ＮＰ＿０００７２４．１に示されている。配列番号２２も参照のこと。カニクイザル［Ｍａｃａｃａ  ｆａｓｃｉｃｕｌａｒｉｓ］のアミノ酸配列ＣＤ３εは、ＮＣＢＩ  ＧｅｎＢａｎｋ番号ＢＡＢ７１８４９．１に示されている。配列番号２３も参照のこと。
【００２０】
特に断らない限り、「がん胎児性抗原」又は「ＣＥＡ」（がん胎児性抗原関連細胞接着分子５（ＣＥＡＣＡＭ５）としても知られる）は、霊長類（例えばヒト）、非ヒト霊長類（例えばカニクイザル）及びげっ歯類（例えばマウス及びラット）といった哺乳動物を含むあらゆる脊椎動物源由来のいずれかの天然型ＣＥＡを指す。用語は、「完全長」の、未処理のＣＥＡと、細胞内でのプロセシングから生じた任意の形態のＣＥＡとを包含する。この用語は、天然に存在するＣＥＡの変異体、例えば、スプライス変異体又は対立遺伝子変異体も包含する。一実施態様において、ＣＥＡはヒトＣＥＡである。ヒトＣＥＡのアミノ酸配列は、ＵｎｉＰｒｏｔ（ｗｗｗ．ｕｎｉｐｒｏｔ．ｏｒｇ）の登録番号Ｐ０６７３１、又はＮＣＢＩ（ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／）ＲｅｆＳｅｑ  ＮＰ＿００４３５４に示されている。
【００２１】
本明細書においてＦａｂ分子などに関して使用される用語「第１の」、「第２の」又は「第３の」は、部分の各種類が複数存在するとき、区別を簡便にするために使用されている。これら用語の使用は、特に断らない限り、二重特異性抗体の特定の順序又は配向を付与することを意図していない。
【００２２】
ここで使用される用語「価」は、抗体中における特定数の抗原結合部位の存在を意味する。したがって、用語「抗原に対する一価の結合」は、抗体中の抗原に対して特異性である一つの（且つ一つを超えない）抗原結合部位の存在を意味する。
【００２３】
本明細書における用語「抗体」は最も広い意味で用いられ、様々な抗体構造を包含し、限定されないが、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、多特異性抗体（例えば二重特異性抗体）、及び、所望の抗原結合活性を示す限り、抗体断片を含む。
【００２４】
用語「完全長抗体」、「インタクトな抗体」及び「全抗体」は、本明細書中で互換的に使用され、天然型抗体構造と実質的に類似の構造を有する抗体を指す。
【００２５】
「抗体断片」は、インタクトな抗体が結合する抗原に結合するインタクトな抗体の一部分を含む、インタクトな抗体以外の分子を指す。抗体断片の例には、限定されないが、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆａｂ’−ＳＨ、Ｆ（ａｂ’）２、ダイアボディ、直鎖状抗体、単鎖抗体分子（例えばｓｃＦｖ）、及び単一ドメイン抗体が含まれる。所定の抗体断片の総説については、Hudson et al., Nat Med. 9, 129-134 (2003)を参照。ｓｃＦｖ断片の総説については、例えば、Pluckthun, in The Pharmacology of Monoclonal Antibodies, vol. 113, Rosenburg and Moore eds., Springer-Verlag, New York, pp. 269-315 (1994)を参照；また、国際公開第９３／１６１８５号；及び米国特許第５，５７１，８９４号及び第５，５８７，４５８号も参照。サルベージ受容体結合エピトープ残基を含み、且つインビボ半減期を増加させたＦａｂ及びＦ（ａｂ’）２断片の議論については、米国特許第５８６９０４６号を参照のこと。ダイアボディは、二価又は二重特異性でありうる二つの抗原結合部位を有する抗体断片である。例えば、ＥＰ４０４０９７；国際公開第１９９３／０１１６１号； Hudson et al., Nat Med 9, 129-134 (2003)；及びHollinger et al., Proc Natl Acad Sci USA 90, 6444-6448 (1993)を参照のこと。トリアボディ及びテトラボディもHudson et al., Nat Med 9, 129-134 (2003)に記載されている。単一ドメイン抗体は、抗体の重鎖可変ドメインの全て又は一部、又は軽鎖可変ドメインの全て又は一部を含む抗体断片である。特定の実施態様において、単一ドメイン抗体は、ヒト単一ドメイン抗体である（Domantis, Inc., Waltham, MA；例えば、米国特許第６２４８５１６号を参照）。抗体断片は様々な技術で作成することができ、限定されないが、本明細書に記載するように、インタクトな抗体の分解、並びに組換え宿主細胞（例えば、大腸菌やファージ）による産生を含む。
【００２６】
用語「可変領域」又は「可変ドメイン」は、抗体の抗原への結合に関与する抗体重鎖又は軽鎖のドメインを指す。ネイティブ抗体の重鎖及び軽鎖（それぞれＶＨ及びＶＬ）の可変ドメインは、一般的に同様の構造を有し、各ドメインは、四つの保存フレームワーク領域（ＦＲ）及び三つの超可変領域（ＨＶＲ）を含む。例えば、Kindt et al., Kuby Immunology, 6th ed., W.H. Freeman and Co., page 91 (2007)を参照。単一のＶＨ又はＶＬドメインが、抗原結合特異性を付与するのに十分であり得る。可変領域配列に関してここで使用される「Ｋａｂａｔ番号付け」は、Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD (1991)によって規定された番号付けシステムを指す。
【００２７】
本明細書において使用される場合、重鎖及び軽鎖のすべての定常領域及びドメインのアミノ酸位置は、本明細書において「Ｋａｂａｔによる番号付け」又は「Ｋａｂａｔ番号付け」と呼ばれる、Kabat, et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th ed., Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD (1991)に記載されたＫａｂａｔ番号付けシステムに従って番号付けされる。具体的には、Ｋａｂａｔ番号付けシステム（Kabat, et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th ed., Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD (1991)の６４７−６６０頁参照）が、カッパ及びラムダアイソタイプの軽鎖定常ドメインＣＬに使用され、ここでさらに「Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスによる番号付け」と呼ぶＫａｂａｔ  ＥＵインデックス番号付けシステム（６６１−７２３頁参照）が重鎖定常ドメイン（ＣＨ１、ヒンジ、ＣＨ２  及びＣＨ３）に使用される。
【００２８】
本明細書で用いられる「超可変領域」又は「ＨＶＲ」という用語は、配列が超可変である抗体可変ドメインの領域（「相補性決定領域」すなわち「ＣＤＲ」）及び／又は構造的に規定されるループ（「超可変ループ」）を形成する抗体可変ドメインの領域及び／又は抗原に接触する残基（「抗原コンタクト（ａｎｔｉｇｅｎ  ｃｏｎｔａｃｔ）」を含有する抗体可変ドメインの領域のそれぞれを指す。一般的に、抗体は、ＶＨに３つ（Ｈ１、Ｈ２、Ｈ３）及びＶＬに３つ（Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３）、計６つのＨＶＲを含む。本明細書において、例示的なＨＶＲは：
（ａ）アミノ酸残基２６−３２（Ｌ１）、５０−５２（Ｌ２）、９１−９６（Ｌ３）、２６−３２（Ｈ１）、５３−５５（Ｈ２）、及び９６−１０１（Ｈ３）に生じる超可変ループ（Chothia and Lesk, J. Mol. Biol. 196:901-917 (1987)）；
（ｂ）アミノ酸残基２４−３４（Ｌ１）、５０−５６（Ｌ２）、８９−９７（Ｌ３）、３１−３５ｂ（Ｈ１）、５０−６５（Ｈ２）、及び９５−１０２（Ｈ３）に生じるＣＤＲ（Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD (1991)）；
（ｃ）アミノ酸残基２７ｃ−３６（Ｌ１）、４６−５５（Ｌ２）、８９−９６（Ｌ３）、３０−３５ｂ（Ｈ１）、４７−５８（Ｈ２）、及び９３−１０１（Ｈ３）に生じる抗原接触（MacCallum et al. J. Mol. Biol. 262: 732-745 (1996)）；及び
（ｄ）ＨＶＲアミノ酸残基４６−５６（Ｌ２）、４７−５６（Ｌ２）、４８−５６（Ｌ２）、４９−５６（Ｌ２）、２６−３５（Ｈ１）、２６−３５ｂ（Ｈ１）、４９−６５（Ｈ２）、９３−１０２（Ｈ３）、及び９４−１０２（Ｈ３）を含む（ａ）、（ｂ）、及び／又は（ｃ）の組み合わせ
を含む。
【００２９】
別途指示がない限り、可変ドメイン内のＨＶＲ残基及び他の残基（例えば、ＦＲ残基）は、上掲のＫａｂａｔらに従い、本明細書において番号が付けられる。
【００３０】
「フレームワーク」又は「ＦＲ」は、超可変領域（ＨＶＲ）残基以外の可変ドメイン残基を指す。可変ドメインのＦＲは、一般的に４つのＦＲのドメイン：ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、及びＦＲ４からなる。したがって、ＨＶＲ及びＦＲ配列は一般にＶＨ（又はＶＬ）の以下の順序で現れる：ＦＲ１−Ｈ１（Ｌ１）−ＦＲ２−Ｈ２（Ｌ２）−ＦＲ３−Ｈ３（Ｌ３）−ＦＲ４。
【００３１】
抗体又は免疫グロブリンの「クラス」は、その重鎖が保有する定常ドメイン又は定常領域の種類を指す。抗体の五つの主要なクラス、即ちＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ及びＩｇＭがあり、これらのいくつかは、さらにサブクラス（アイソタイプ）、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩＧＡ１、及びＩｇＡ２に分けることができる。免疫グロブリンの異なるクラスに対応する重鎖定常ドメインは、それぞれα、δ、ε、γ、及びμと呼ばれる。
【００３２】
「Ｆａｂ分子」は、免疫グロブリンの重鎖（「Ｆａｂ重鎖」）のＶＨ及びＣＨ１ドメインと軽鎖（「Ｆａｂ軽鎖」）のＶＬ及びＣＬドメインとからなるタンパク質を指す。
【００３３】
「クロスオーバー」Ｆａｂ分子（「Ｃｒｏｓｓｆａｂ」とも称される）とは、Ｆａｂ重鎖と軽鎖の可変ドメイン又は定常ドメインが交換されている（即ち互いによって置き替えられている）Ｆａｂ分子を意味し、即ちクロスオーバーＦａｂ分子は、軽鎖可変ドメインＶＬ及び重鎖定常ドメイン１  ＣＨ１（ＶＬ−ＣＨ１、Ｎ末端からＣ末端の方向に）から構成されるペプチド鎖と、重鎖可変ドメインＶＨ及び軽鎖定常ドメインＣＬ（ＶＨ−ＣＬ、Ｎ末端からＣ末端の方向に）から構成されるペプチド鎖とを含む。簡潔には、Ｆａｂ軽鎖とＦａｂ重鎖の可変ドメインが交換されているクロスオーバーＦａｂ分子において、重鎖定常ドメイン１  ＣＨ１を含むペプチド鎖を、ここでは（クロスオーバー）Ｆａｂ分子の「重鎖」と呼ぶ。逆に、Ｆａｂ軽鎖とＦａｂ重鎖の定常ドメインが交換されているクロスオーバーＦａｂ分子において、重鎖可変ドメインＶＨを含むペプチド鎖を、ここでは（クロスオーバー）Ｆａｂ分子の「重鎖」と呼ぶ。
【００３４】
これに対して、「従来の」Ｆａｂ分子とは、その天然フォーマットにおけるＦａｂ分子、即ち重鎖の可変ドメイン及び定常ドメイン（ＮからＣ末端の方向に、ＶＨ−ＣＨ１）からなる重鎖と、軽鎖の可変ドメイン及び定常領域（ＮからＣ末端の方向に、ＶＬ−ＣＬ）からなる軽鎖を含むＦａｂ分子を意味する。
【００３５】
用語「免疫グロブリン分子」は、天然に存在する抗体の構造を有するタンパク質を指す。例えば、ＩｇＧクラスの免疫グロブリンは、ジスルフィド結合している二つの軽鎖及び二つの重鎖から構成される約１５００００ダルトンのヘテロ四量体糖タンパク質である。Ｎ末端からＣ末端に、各重鎖は可変重鎖ドメイン又は重鎖可変領域とも呼ばれる可変ドメイン（ＶＨ）を有し、それに、重鎖定常領域とも呼ばれる三つの定常ドメイン（ＣＨ１、ＣＨ２及びＣＨ３）が続いている。同様に、Ｎ末端からＣ末端に、各軽鎖は可変軽鎖ドメイン又は軽鎖可変領域とも呼ばれる可変ドメイン（ＶＬ）を有し、それに、軽鎖定常領域とも呼ばれる定常軽鎖（ＣＬ）ドメインが続いている。免疫グロブリンの重鎖は、α（ＩｇＡ）、δ（ＩｇＤ）、ε（ＩｇＥ）、γ（ＩｇＧ）、又はμ（ＩｇＭ）と呼ばれ、そのうちのいくつかはサブタイプ、例えばγ１（ＩｇＧ１）、γ２（ＩｇＧ２）、γ３（ＩｇＧ３）、γ４（ＩｇＧ４）、α１（ＩｇＡ１）及びα２（ＩｇＡ２）へとさらに分割される五種類のうちの一つに割り当てられる。免疫グロブリンの軽鎖は、その定常ドメインのアミノ酸配列に基づいて、カッパ（κ）とラムダ（λ）と呼ばれる、二種類のうちのいずれか一つに割り当てることができる。免疫グロブリンは、本質的に、免疫グロブリンのヒンジ領域を介して結合された二つのＦａｂ分子とＦｃドメインからなる。
【００３６】
本明細書の用語「Ｆｃドメイン」又は「Ｆｃ領域」は、定常領域の少なくとも一部を含む、免疫グロブリン重鎖のＣ末端領域を定義するために使用される。その用語は、天然配列Ｆｃ領域及び変異体Ｆｃ領域を含む。ＩｇＧ重鎖のＦｃ領域の境界はわずかに変化しうるが、通常、ヒトＩｇＧ重鎖Ｆｃ領域はＣｙｓ２２６又はＰｒｏ２３０から重鎖のカルボキシル末端まで延びると定義される。しかしながら、宿主細胞によって生成された抗体は、重鎖のＣ末端から一つ又は複数、特に一つ又は二つのアミノ酸の翻訳後切断を受けることがある。したがって、完全長重鎖をコードする特異的核酸分子の発現により宿主細胞によって生成された抗体は、完全長重鎖を含みうるか、又は完全長重鎖の切断された変異体を含みうる。これは、重鎖の最後の二のＣ末端アミノ酸がグリシン（Ｇ４４６）とリジン（Ｋ４４７、Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスによる番号付け）である場合に当てはまる。したがって、Ｆｃ領域のＣ末端リジン（Ｌｙｓ４４７）、又はＣ末端グリシン（Ｇｌｙ４４６）とリジン（Ｋ４４７）は、存在してもしなくてもよい。本明細書に明記されていない限り、Ｆｃ領域又は定常領域内のアミノ酸残基の番号付けは、Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD, 1991に記載されるように、ＥＵインデックスとも呼ばれるＥＵ番号付けシステムに従う。Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD, 1991 (上記も参照)。本明細書において使用されるＦｃドメインの「サブユニット」は、二量体Ｆｃドメインを形成する二つのポリペプチドの一方、即ち、免疫グロブリン重鎖のＣ末端定常領域を含み、安定な自己会合能を有するポリペプチドを指す。例えば、ＩｇＧ  Ｆｃドメインのサブユニットは、ＩｇＧ  ＣＨ２及びＩｇＧ  ＣＨ３定常ドメインを含む。
【００３７】
「Ｆｃドメインの第１のサブユニットと第２のサブユニットとの会合を促進する修飾」は、Ｆｃドメインサブユニットを含むポリペプチドと同一のポリペプチドとの会合によるホモダイマーの形成を低減又は防止する、ペプチド骨格の操作又はＦｃドメインサブユニットの翻訳後修飾である。ここで使用される会合を促進する修飾は、会合することが望ましい二つのＦｃドメインサブユニット（即ちＦｃドメインの第１及び第２のサブユニット）の各々に対して行われる別々の修飾を特に含み、この修飾は、二つのＦｃドメインサブユニットの会合を促進するために、互いに対して相補的である。例えば、会合を促進する修飾は、これらＦｃドメインサブユニットの一方又は両方の構造又は電荷を、それらの会合がそれぞれ立体的に又は静電気的に望ましいものになるように変化させる。したがって、サブユニット（例えば抗原結合部分）の各々に融合したさらなる成分が同じでないという意味で非同一でありうる、（ヘテロ）二量体化が第１のＦｃドメインサブユニットを含むポリペプチドと第２のＦｃドメインサブユニットを含むポリペプチドとの間に起こる。いくつかの実施態様では、会合を促進する修飾は、Ｆｃドメイン内のアミノ酸変異、具体的にはアミノ酸置換を含む。特定の一実施態様では、会合を促進する修飾は、Ｆｃドメインの二つのサブユニットの各々に、別個のアミノ酸変異、具体的にはアミノ酸置換を含む。
【００３８】
用語「エフェクター機能」とは、抗体のアイソタイプにより変わる、抗体のＦｃ領域に起因し得る生物学的活性を指す。抗体エフェクター機能の例には：Ｃ１ｑ結合及び補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）；Ｆｃ受容体結合；抗体依存性細胞媒介性細胞傷害（ＡＤＣＣ）；抗体依存性細胞貪食（ＡＤＣＰ）；サイトカイン分泌；抗原提示細胞による免疫複合体媒介抗原取り込み；細胞表面受容体（例えば、Ｂ細胞受容体）の下方制御；及びＢ細胞の活性化が含まれる。
【００３９】
参照ポリペプチド配列に関する「パーセント（％）アミノ酸配列同一性」は、配列を整列させ、最大のパーセント配列同一性を得るために必要ならば間隙を導入した後、いかなる保存的置換も配列同一性の一部と考えないとした場合の、参照ポリペプチドのアミノ酸残基と同一である候補配列中のアミノ酸残基のパーセントとして定義される。パーセントアミノ酸配列同一性を決定するためのアラインメントは、当分野の技術の範囲内にある種々の方法、例えばＢＬＡＳＴ、ＢＬＡＳＴ−２、Ｃｌｕｓｔａｌ  Ｗ、Ｍｅｇａｌｉｇｎ（ＤＮＡＳＴＡＲ）ソフトウェア又はＦＡＳＴＡプログラムパッケージのような公的に入手可能なコンピュータソフトウェアを使用して達成することができる。当業者であれば、比較される配列の完全長に対して最大の整列を達成するために必要な任意のアルゴリズムを含む、配列を整列させるための適切なパラメータを決定することができる。しかしながら、ここでの目的のために、％アミノ酸配列同一性の値は、ＦＡＳＴＡパッケージバージョン３６．３．８ｃのｇｇｓｅａｒｃｈプログラムを用いて又はその後ＢＬＯＳＵＭ５０比較行列を用いて生成される。ＦＡＳＴＡプログラムパッケージは、W. R. Pearson及びD. J. Lipman (1988), “Improved Tools for Biological Sequence Analysis”, PNAS 85:2444-2448; W. R. Pearson (1996) “Effective protein sequence comparison” Meth. Enzymol. 266:227- 258；及びPearson et. al. (1997) Genomics 46:24-36により書かれており、http://fasta.bioch.virginia.edu/fasta_www2/fasta_down.shtml.から公的に入手可能である。代替的に、http://fasta.bioch.virginia.edu/fasta_www2/index.cgiにおいてアクセス可能な公的サーバが、ローカルではなくグローバルなアラインメントを確実に実施するために、ｇｇｓｅａｒｃｈ（ｇｌｏｂａｌ  ｐｒｏｔｅｉｎ：ｐｒｏｔｅｉｎ）プログラム及びデフォルトオプション（ＢＬＯＳＵＭ５０；ｏｐｅｎ：−１０；ｅｘｔ：−２；Ｋｔｕｐ＝２）を用いて、配列を比較するために使用可能である。パーセントアミノ酸同一性は、出力アラインメントヘッダ中に与えられる。
【００４０】
「活性化Ｆｃ受容体」は、抗体のＦｃドメインの結合に続いて、エフェクター機能を実行するように受容体保有細胞を刺激するシグナル伝達現象を生じさせるＦｃ受容体である。ヒト活性化Ｆｃ受容体は、ＦｃγＲＩＩＩａ（ＣＤ１６ａ）、ＦｃγＲＩ（ＣＤ６４）、ＦｃγＲＩＩａ（ＣＤ３２）、及びＦｃαＲＩ（ＣＤ８９）を含む。
【００４１】
「結合の低減」、例えばＦｃ受容体への結合の低減は、例えばＳＰＲによって測定した場合の、それぞれの相互作用に対する親和性の低下を指す。簡潔には、この用語は、親和性のゼロ（又は分析方法の検出限界未満）への低下、即ち相互作用の完全な廃止も含む。逆に、「結合の増大」は、それぞれの相互作用に対する結合親和性の上昇を指す。
【００４２】
「融合した」とは、成分同士（例えばＦａｂ分子とＦｃドメインサブユニット）が、ペプチド結合により、直接又は一つ又は複数のペプチドリンカーを介して結合されていることを意味する。
【００４３】
ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体は、ＣＤ３に特異的に結合する第１の抗原結合部分と、ＣＥＡに特異的に結合する第２の抗原結合部分とを含む。
【００４４】
一実施態様において、第１の抗原結合部分は、配列番号１の重鎖ＣＤＲ（ＨＣＤＲ）１、配列番号２のＨＣＤＲ２、及び配列番号３のＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；並びに配列番号４の軽鎖ＣＤＲ（ＬＣＤＲ）１、配列番号５のＬＣＤＲ２及び配列番号６のＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。
【００４５】
一実施態様において、第２の抗原結合部分は、配列番号９の重鎖ＣＤＲ（ＨＣＤＲ）１、配列番号１０のＨＣＤＲ２、及び配列番号１１のＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；並びに配列番号１２の軽鎖ＣＤＲ（ＬＣＤＲ）１、配列番号１３のＬＣＤＲ２及び配列番号１４のＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。
【００４６】
一実施態様では、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体は、
（ｉ）ＣＤ３に特異的に結合する第１の抗原結合部分であって、配列番号１の重鎖ＣＤＲ（ＨＣＤＲ）１、配列番号２のＨＣＤＲ２、及び配列番号３のＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；並びに配列番号４の軽鎖ＣＤＲ（ＬＣＤＲ）１、配列番号５のＬＣＤＲ２及び配列番号６のＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む第１の抗原結合部分；と
（ｉｉ）ＣＥＡに特異的に結合する第２の抗原結合部分であって、配列番号９の重鎖ＣＤＲ（ＨＣＤＲ）１、配列番号１０のＨＣＤＲ２、及び配列番号１１のＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；並びに配列番号１２の軽鎖ＣＤＲ（ＬＣＤＲ）１、配列番号１３のＬＣＤＲ２及び配列番号１４のＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む第２の抗原結合部分；と
を含む。
【００４７】
一実施態様において、第１の抗原結合部分は、配列番号７のアミノ酸配列と少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％同一である重鎖可変領域配列と、配列番号８のアミノ酸配列と少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域配列とを含む。
【００４８】
一実施態様において、第１の抗原結合部分は、配列番号７の重鎖可変領域配列及び配列番号８の軽鎖可変領域配列を含む。
【００４９】
一実施態様において、第２の抗原結合部分は、配列番号１５のアミノ酸配列と少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％同一である重鎖可変領域配列と、配列番号１６のアミノ酸配列と少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域配列とを含む。
【００５０】
一実施態様において、第２の抗原結合部分は、配列番号１５の重鎖可変領域配列及び配列番号１６の軽鎖可変領域配列を含む。
【００５１】
いくつかの実施態様では、第１及び／又は第２の抗原結合部分はＦａｂ分子である。いくつかの実施態様では、第１の抗原結合部分は、Ｆａｂ軽鎖とＦａｂ重鎖の可変領域又は定常領域が交換されているクロスオーバーＦａｂ分子である。このような実施態様では、第２の抗原結合部分は、好ましくは従来のＦａｂ分子である。
【００５２】
いくつかの実施態様では、第１の抗原結合部分と第２の抗原結合部分が、任意選択的にペプチドリンカーを介して、互いに融合される。
【００５３】
いくつかの実施態様では、第１及び第２の抗原結合部分の各々はＦａｂ分子であり、（ｉ）第２の抗原結合部分がＦａｂ重鎖のＣ末端において第１の抗原結合部分のＦａｂ重鎖のＮ末端に融合しているか、又は（ｉｉ）第１の抗原結合部分がＦａｂ重鎖のＣ末端において第２の抗原結合部分のＦａｂ重鎖のＮ末端に融合している。
【００５４】
いくつかの実施態様では、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体はＣＤ３に対する一価の結合を提供する。
【００５５】
特定の実施態様では、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体は、ＣＤ３に特異的に結合する単一の抗原結合部分と、ＣＥＡに特異的に結合する二つの抗原結合部分とを含む。したがって、いくつかの実施態様では、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体は、ＣＥＡに特異的に結合する第３の抗原結合部分を含む。いくつかの実施態様では、第３の抗原部分は、第１の抗原結合部分と同一である（例えばやはりＦａｂ分子であり、同じアミノ酸配列を含む）。
【００５６】
特定の実施態様では、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体は第１及び第２のサブユニットから構成されるＦｃドメインをさらに含む。一実施態様では、ＦｃドメインはＩｇＧのＦｃドメインである。特定の一実施態様では、ＦｃドメインはＩｇＧ１のＦｃドメインである。別の実施態様では、ＦｃドメインはＩｇＧ４のＦｃドメインである。さらに詳細な実施態様では、Ｆｃドメインは、Ｓ２２８位（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックス番号付け）にアミノ酸置換を、特にアミノ酸置換Ｓ２２８Ｐを含む、ＩｇＧ４のＦｃドメインである。このアミノ酸置換は、ＩｇＧ４抗体のｉｎ  ｖｉｖｏでのＦａｂアーム交換を低減する（Stubenrauch et al., Drug Metabolism and Disposition 38, 84-91 (2010)参照）。さらなる特定の一実施態様では、ＦｃドメインはヒトＦｃドメインである。特定の好ましい一実施態様では、ＦｃドメインはヒトＩｇＧ１  Ｆｃドメインである。ヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域の例示的配列は、配列番号２１に提示されている。
【００５７】
第１、第２、及び存在する場合は第３の抗原結合部分の各々がＦａｂ分子であるいくつかの実施態様では、（ａ）（ｉ）第２の抗原結合部分がＦａｂ重鎖のＣ末端において第１の抗原結合部分のＦａｂ重鎖のＮ末端に融合ししており、且つ第１の抗原結合部分がＦａｂ重鎖のＣ末端においてＦｃドメインの第１のサブユニットのＮ末端に融合しているか、又は（ｉｉ）第１の抗原結合部分がＦａｂ重鎖のＣ末端において第２の抗原結合部分のＦａｂ重鎖のＮ末端に融合しており、且つ第２の抗原結合部分がＦａｂ重鎖のＣ末端においてＦｃドメインの第１のサブユニットのＮ末端に融合しており；（ｂ）存在する場合は、第３の抗原結合部分がＦａｂ重鎖のＣ末端においてＦｃドメインの第２のサブユニットのＮ末端に融合している。
【００５８】
特定の実施態様では、Ｆｃドメインは、Ｆｃドメインの第１のサブユニットと第２のサブユニットとの会合を促進する修飾を含む。ヒトＩｇＧのＦｃドメインの二つのサブユニット間においてタンパク質−タンパク質相互作用が最大である部位は、ＣＨ３ドメインである。したがって、一実施態様では、前記修飾はＦｃドメインのＣＨ３ドメイン内で行われる。
【００５９】
特定の実施態様では、Ｆｃドメインの第１のサブユニットと第２のサブユニットとの会合を促進する前記修飾は、いわゆる「ノブ・イントゥー・ホール」修飾であり、Ｆｃドメインの二つのサブユニットの一方に「ノブ」修飾を、Ｆｃドメインの二つのサブユニットの他方に「ホール」修飾を、それぞれ含む。「ノブ・イントゥー・ホール」技術は、例えば、米国特許第５，７３１，１６８号；同第７，６９５，９３６号；Ridgway et al., Prot Eng 9, 617-621 (1996)及びCarter, J Immunol Meth 248, 7-15 (2001)に記載されている。一般的に、該方法は、突起が空洞中に位置し、ヘテロ二量体形成を促進し、ホモダイマー形成を妨げることができるように、第１のポリペプチドの界面の突起（「ノブ」）を第２のポリペプチドの界面の空洞（「ホール」）に導入することを含む。突起は、第１ポリペプチドの界面由来の小さいアミノ酸側鎖を、より大きい側鎖（例えばチロシン又はトリプトファン）で置き換えることにより、構成される。突起と同一又は類似のサイズの代償的な空洞は、大きいアミノ酸側鎖をより小さい側鎖（例えばアラニン又はスレオニン）で置き換えることにより、第２のポリペプチドの界面に創出される。
【００６０】
したがって、いくつかの実施態様では、Ｆｃドメインの第１のサブユニットのＣＨ３ドメイン内のアミノ酸残基が、より大きな側鎖体積を有するアミノ酸残基で置き換えられ、それにより、第１のサブユニットのＣＨ３ドメイン内部に、第２のサブユニットのＣＨ３ドメイン内部の空洞内に配置可能な隆起が生成されており、Ｆｃドメインの第２のサブユニットのＣＨ３ドメイン内のアミノ酸残基が、より小さな側鎖体積を有するアミノ酸残基で置き換えられ、それにより、第２のサブユニットのＣＨ３ドメイン内部に、第１のサブユニットのＣＨ３ドメイン内部の隆起を配置可能な空洞が生成されている。好ましくは、より大きな側鎖体積を有する前記アミノ酸残基は、アルギニン（Ｒ）、フェニルアラニン（Ｆ）、チロシン（Ｙ）、及びトリプトファン（Ｗ）からなる群より選択される。好ましくは、より小さな側鎖体積を有する前記アミノ酸残基は、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、スレオニン（Ｔ）、及びバリン（Ｖ）からなる群より選択される。隆起及び空洞は、ポリペプチドをコードする核酸を、例えば部位特異的突然変異誘発により、又はペプチド合成により変化させることにより作製することができる。
【００６１】
このような特定の実施態様では、Ｆｃドメインの第１のサブユニットにおいて、３６６位のスレオニン残基がトリプトファン残基で置き換えられており（Ｔ３６６Ｗ）、Ｆｃドメインの第２のサブユニットにおいて、４０７位のチロシン残基がバリン残基で置き換えられており（Ｙ４０７Ｖ）、任意選択的に３６６位のスレオニン残基がセリン残基で置き換えられており（Ｔ３６６Ｓ）、３６８位のロイシン残基がアラニン残基で置き換えられている（Ｌ３６８Ａ）（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスによる番号付け）。さらなる一実施態様では、Ｆｃドメインの第１のサブユニットにおいてさらに、３５４位のセリン残基がシステイン残基で置き換えられているか（Ｓ３５４Ｃ）又は３５６位のグルタミン酸残基がシステイン残基で置き換えられており（Ｅ３５６Ｃ）（特に３５４位のセリン残基がシステイン残基で置き換えられている）、Ｆｃドメインの第２のサブユニットにおいてさらに、３４９位のチロシン残基がシステイン残基で置き換えられている（Ｙ３４９Ｃ）（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスによる番号付け）。好ましい実施態様では、Ｆｃドメインの第１のサブユニットは、アミノ酸置換Ｓ３５４Ｃ及びＴ３６６Ｗを含み、Ｆｃドメインの第２のサブユニットは、アミノ酸置換Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ及びＹ４０７Ｖを含む（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスによる番号付け）。
【００６２】
いくつかの実施態様では、Ｆｃドメインは、Ｆｃ受容体への結合を低減する及び／又はエフェクター機能を低下させる一つ又は複数のアミノ酸置換を含む。
【００６３】
特定の一実施態様では、Ｆｃ受容体はＦｃγ受容体である。一実施態様において、Ｆｃ受容体はヒトＦｃ受容体である。一実施態様において、Ｆｃ受容体は活性化Ｆｃ受容体である。特定の一実施態様では、Ｆｃ受容体は活性化ヒトＦｃγ受容体であり、さらに詳細にはヒトＦｃγＲＩＩＩａ、ＦｃγＲＩ又はＦｃγＲＩＩａ、最も詳細にはヒトＦｃγＲＩＩＩａである。一実施態様において、エフェクター機能は、補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）、抗体依存性細胞媒介性細胞傷害（ＡＤＣＣ）、抗体依存性細胞性食作用（ＡＤＣＰ）、及びサイトカイン分泌の群より選択される一つ又は複数である。特定の一実施態様では、エフェクター機能はＡＤＣＣである。
【００６４】
一般に、同じ一つ又は複数のアミノ酸置換が、Ｆｃドメインの二つのサブユニットの各々に存在する。一実施態様において、一つ又は複数のアミノ酸置換は、Ｆｃ受容体に対するＦｃドメインの結合親和性を低下させる。一実施態様において、一つ又は複数のアミノ酸置換は、Ｆｃ受容体に対するＦｃドメインの結合親和性を、少なくとも２分の１、少なくとも５分の１、又は少なくとも１０分の１に低下させる。
【００６５】
一実施態様では、Ｆｃドメインは、Ｅ２３３、Ｌ２３４、Ｌ２３５、Ｎ２９７、Ｐ３３１及びＰ３２９の群から選択される位置にアミノ酸置換を含む（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスによる番号付け）。さらに特定の一実施態様において、Ｆｃドメインは、Ｌ２３４、Ｌ２３５，及びＰ３２９の群より選択される位置にアミノ酸置換を含む（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスによる番号付け）。いくつかの実施態様では、Ｆｃドメインは、アミノ酸置換Ｌ２３４Ａ及びＬ２３５Ａを含む（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスによる番号付け）。このような一実施態様では、ＦｃドメインはＩｇＧ１のＦｃドメイン、特にヒトＩｇＧ１のＦｃドメインである。一実施態様では、ＦｃドメインはＰ３２９の位置にアミノ酸置換を含む。具体的な実施態様では、アミノ酸置換はＰ３２９Ａ又は  Ｐ３２９Ｇ、特にＰ３２９Ｇである（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスによる番号付け）。一実施態様では、Ｆｃドメインは、Ｐ３２９の位置にアミノ酸置換を、Ｅ２３３、Ｌ２３４、Ｌ２３５、Ｎ２９７及びＰ３３１から選択される位置にさらなるアミノ酸置換を含む（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスによる番号付け）。具体的な実施態様では、さらなるアミノ酸置換は、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｌ２３５Ｅ、Ｎ２９７Ａ、Ｎ２９７Ｄ又はＰ３３１Ｓである。特定の実施態様では、Ｆｃドメインは、Ｐ３２９、Ｌ２３４及びＬ２３５の位置にアミノ酸置換を含む（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスによる番号付け）。さらに詳細な実施態様では、Ｆｃドメインは、アミノ酸変異Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ及びＰ３２９Ｇ（「Ｐ３２９Ｇ  ＬＡＬＡ」、「ＰＧＬＡＬＡ」又は「ＬＡＬＡＰＧ」）を含む。具体的に、好ましい実施態様では、Ｆｃドメインの各サブユニットは、アミノ酸置換Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ及びＰ３２９Ｇを含み（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックス番号付け）、即ちＦｃドメインの第１及び第２のサブユニットの各々では、２３４位のロイシン残基がアラニン残基  で置き換えられており（Ｌ２３４Ａ）、２３５位のロイシン残基がアラニン残基で置き換えられており（Ｌ２３５Ａ）、３２９位のプロリン残基がグリシン残基により置き換えられている（Ｐ３２９Ｇ）（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスによる番号付け）。このような一実施態様では、ＦｃドメインはＩｇＧ１のＦｃドメイン、特にヒトＩｇＧ１のＦｃドメインである。
【００６６】
好ましい実施態様では、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体は、
（ｉ）ＣＤ３に特異的に結合する第１の抗原結合部分であって、配列番号１の重鎖ＣＤＲ（ＨＣＤＲ）１、配列番号２のＨＣＤＲ２、及び配列番号３のＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；並びに配列番号４の軽鎖ＣＤＲ（ＬＣＤＲ）１、配列番号５のＬＣＤＲ２、及び配列番号６のＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含み、Ｆａｂ軽鎖とＦａｂ重鎖の可変領域又は定常領域、特に定常領域が交換されている、第１の抗原結合部分；と
（ｉｉ）ＣＥＡに特異的に結合する第２及び第３の抗原結合部分であって、配列番号９の重鎖ＣＤＲ（ＨＣＤＲ）１、配列番号１０のＨＣＤＲ２、及び配列番号１１のＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；並びに配列番号１２の軽鎖ＣＤＲ（ＬＣＤＲ）１、配列番号１３のＬＣＤＲ２及び配列番号１４のＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含み、第２及び第３の抗原結合部分の各々がＦａｂ分子、特に従来のＦａｂ分子である、第２及び第３の抗原結合部分；と
（ｉｉｉ）第１及び第２のサブユニットから構成されるＦｃドメイン
を含み、
第２の抗原結合部分はＦａｂ重鎖のＣ末端において第１の抗原結合部分のＦａｂ重鎖のＮ末端に融合しており、第１の抗原結合部分はＦａｂ重鎖のＣ末端においてＦｃドメインの第１のサブユニットのＮ末端に融合しており、第３の抗原結合部分はＦａｂ重鎖のＣ末端においてＦｃドメインの第２のサブユニットのＮ末端に融合している。
【００６７】
一実施態様において、第１の抗原結合部分は、配列番号７のアミノ酸配列と少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％同一である重鎖可変領域配列と、配列番号８のアミノ酸配列と少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％同一である軽鎖可変領域配列とを含む。
【００６８】
一実施態様において、第１の抗原結合部分は、配列番号７の重鎖可変領域配列及び配列番号８の軽鎖可変領域配列を含む。
【００６９】
一実施態様において、第２及び第３の抗原結合部分は、配列番号１５のアミノ酸配列と少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％同一である重鎖可変領域配列と、配列番号１６のアミノ酸配列と少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％同一である軽鎖可変領域配列とを含む。
【００７０】
一実施態様において、第２及び第３の抗原結合部分は、配列番号１５の重鎖可変領域及び配列番号１６の軽鎖可変領域を含む。
【００７１】
上記実施態様によるＦｃドメインは、単独で又は組み合わせで、Ｆｃドメインに関連して上述した特徴のすべてを含むことができる。
【００７２】
一実施態様において、抗原結合部分とＦｃ領域とは、ペプチドリンカー、特に配列番号１９及び配列番号２０のペプチドリンカーにより互いに対して融合している。一実施態様では、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体は、配列番号１７の配列と少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％同一である配列を含むポリペプチド（特に二つのポリペプチド）、配列番号１８の配列と少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％同一である配列を含むポリペプチド、配列番号１９の配列と少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％同一である配列を含むポリペプチド、及び配列番号２０の配列と少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％同一である配列を含むポリペプチドを含む。
【００７３】
特に好ましい実施態様において、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体は、配列番号１７の配列を含むポリペプチド（特に二つのポリペプチド）、配列番号１８の配列を含むポリペプチド、配列番号１９の配列を含むポリペプチド、及び配列番号２０の配列を含むポリペプチドを含む。（ＣＥＡＴＣＢ）
【００７４】
特に好ましい実施態様では、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体はＣＥＡ  ＴＣＢである。
【００７５】
本明細書中のＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体は、ＰＤ−１軸結合アンタゴニスト、特にヒトＰＤ−１軸結合アンタゴニストと組み合わせて使用される。用語「ＰＤ−１軸結合アンタゴニスト」は、ＰＤ−１シグナル伝達軸上のシグナル伝達に起因するＴ細胞機能不全を除去するために、ＰＤ−１軸結合パートナーとその結合パートナーのうちの一つ又は複数との相互作用を阻害し、その結果Ｔ細胞機能（例えば、増殖、サイトカイン生成、標的細胞殺傷）が再生又は増強される分子を指す。ここで使用されるＰＤ−１軸結合アンタゴニストは、ＰＤ−１結合アンタゴニスト、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニスト及びＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストを含む。「ヒト」ＰＤ−１軸結合アンタゴニストは、ヒトＰＤ−１シグナル伝達軸に上記作用を有する、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストを指す。
【００７６】
いくつかの実施態様において、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストは、ＰＤ−１結合アンタゴニスト、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニスト及びＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストからなる群より選択される。用語「ＰＤ−１結合アンタゴニスト」は、ＰＤ−１と、ＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２といったその結合パートナーのうちの一つ又は複数との相互作用に起因するシグナル伝達を、低減、ブロック、阻害、抑止、又は妨害する分子を指す。いくつかの実施態様では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、ＰＤ−１の、その結合パートナーのうちの一つ又は複数に対する結合を阻害する分子である。特定の一態様では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、ＰＤ−１のＰＤ−Ｌ１及び／又はＰＤ−Ｌ２に対する結合を阻害する。例えば、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、抗ＰＤ−１抗体、その抗原結合断片、イムノアドヘシン、融合タンパク質、オリゴペプチド及びＰＤ−１とＰＤ−Ｌ１及び／又はＰＤ−Ｌ２との相互作用に起因するシグナル変換を低減、ブロック、阻害、抑止又は妨害する他の分子を含む。一実施態様では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、ＰＤ−１を通じたＴリンパ球媒介シグナル伝達に発現される細胞表面タンパク質を介して、又はそれを通じて負の共刺激シグナルを低減し、機能不全のＴ細胞の機能不全を軽減します（たとえば、抗原認識に対するエフェクター応答の増強）。いくつかの実施態様では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは抗ＰＤ−１抗体である。特定の一態様では、ＰＤ−１結合アンタゴニストはＭＤＸ−１１０６（ニボルマブ）である。別の特定の態様では、ＰＤ−１結合アンタゴニストはＭＫ−３４７５（ペンブロリズマブ）である。別の特定の態様では、ＰＤ−１結合アンタゴニストはＣＴ−０１１（ピジリズマブ）である。別の特定の態様では、ＰＤ−１結合アンタゴニストはここに記載されるＭＥＤＩ−０６８０（ＡＭＰ−５１４）である。別の特定の態様では、ＰＤ−１結合アンタゴニストはＰＤＲ００１である。別の特定の態様では、ＰＤ−１結合アンタゴニストはＲＥＧＮ２８１０である。別の特定の態様では、ＰＤ−１結合アンタゴニストはＢＧＢ−１０８である。用語「ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニスト」は、ＰＤ−Ｌ１とその結合パートナーの一つ又は複数（ＰＤ−１、Ｂ７−１など）との相互作用から生じるシグナル伝達を減少させ、ブロックし、阻害し、抑止し、又は妨害する分子を指す。いくつかの実施態様では、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ１のその結合パートナーへの結合を阻害する分子を指す。特定の態様では、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ１のＰＤ−１及び／又はＢ７−１への結合を阻害する。いくつかの実施態様では、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、その抗原結合断片、イムノアドヘシン、融合タンパク質、オリゴペプチド、及びＰＤ−Ｌ１とその結合パートナーの一つ又は複数（ＰＤ−１、Ｂ７−１など）との相互作用から生じるシグナル伝達を減少させ、ブロックし、阻害し、抑止し、又は妨害するその他の分子を含む。一実施態様では、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ１を介したＴリンパ球媒介性シグナル伝達に発現される細胞表面タンパク質により又は同タンパク質を介して媒介される陰性の共刺激シグナルを低減し、機能障害性のＴ細胞の機能障害性を低下させる（例えば、抗原認識に対するエフェクター応答を増強する）。いくつかの実施態様では、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは抗ＰＤ−Ｌ１抗体である。特定の一態様では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体はＹＷ２４３．５５．Ｓ７０である。別の特定の態様では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体はＭＤＸ−１１０５である。また別の特定の態様では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体はＭＰＤＬ３２８０Ａ（アテゾリズマブ）である。また別の特定の態様では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体はＭＤＸ−１１０５である。また別の特定の態様では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体はＭＥＤＩ４７３６（デュルバルマブ）である。また別の特定の態様では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体はＭＳＢ００１０７１８Ｃ（アベルマブ）である。用語「ＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニスト」は、ＰＤ−Ｌ２と、ＰＤ−１といったその結合パートナーのいずれか一つ又は複数との相互作用に起因するシグナル伝達を、低減、ブロック、阻害、抑止、又は妨害する分子を指す。いくつかの実施態様では、ＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ２の、結合パートナーに対する結合を阻害する分子である。特定の一態様では、ＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ２のＰＤ−１に対する結合を阻害する。いくつかの実施態様では、ＰＤ−Ｌ２アンタゴニストは、抗ＰＤ−Ｌ２抗体、その抗原結合断片、イムノアドヘシン、融合タンパク質、オリゴペプチド及びＰＤ−Ｌ２と、ＰＤ−１といったその結合パートナーの一つ又は複数との相互作用に起因するシグナル伝達を、低減、ブロック、阻害、抑止、又は妨害する他の分子を含む。一実施態様では、ＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ２を介したＴリンパ球媒介性シグナル伝達に発現される細胞表面タンパク質により又は同タンパク質を介して媒介される陰性の共刺激シグナルを低減し、機能障害性のＴ細胞の機能障害性を低下させる（例えば、抗原認識に対するエフェクター応答を増強する）。いくつかの実施態様では、ＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストはイムノアドヘシンである。
【００７７】
いくつかの実施態様では、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストは抗体である。いくつかの実施態様では、抗体はヒト化抗体、キメラ抗体又はヒト抗体である。いくつかの実施態様では、抗体は抗原結合断片である。いくつかの実施態様では、抗原結合断片は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、及びＦｖからなる群より選択される。
【００７８】
いくつかの実施態様では、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストはＰＤ−１結合アンタゴニストである。いくつかの実施態様では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、ＰＤ−１の、そのリガンド結合パートナーに対する結合を阻害する。いくつかの実施態様では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、ＰＤ−１のＰＤ−Ｌ１に対する結合を阻害する。いくつかの実施態様では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、ＰＤ−１のＰＤ−Ｌ２への結合を阻害する。いくつかの実施態様では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、ＰＤ−１のＰＤ−Ｌ１とＰＤ−Ｌ２両方への結合を阻害する。いくつかの実施態様では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは抗体である。いくつかの実施態様では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、ＭＤＸ  １１０６（ニボルマブ）、ＭＫ−３４７５（ペンブロリズマブ）、ＣＴ−０１１（ピジリズマブ）、ＭＥＤＩ−０６８０（ＡＭＰ−５１４）、ＰＤＲ００１、ＲＥＧＮ２８１０、及びＢＧＢ−１０８からなる群より選択される。
【００７９】
いくつかの実施態様では、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストはＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストである。いくつかの実施態様では、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ１のＰＤ−１への結合を阻害する。いくつかの実施態様では、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ１のＢ７−１への結合を阻害する。いくつかの実施態様では、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ１のＰＤ−１とＢ７−１両方への結合を阻害する。いくつかの実施様態では、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは抗ＰＤ−Ｌ１抗体である。いくつかの実施様態では、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは：ＭＰＤＬ３２８０Ａ（アテゾリズマブ）、ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０、ＭＤＸ−１１０５、ＭＥＤＩ４７３６（デュルバルマブ）、及びＭＳＢ００１０７１８Ｃ（アベルマブ）からなる群より選択される。
【００８０】
好ましい一実施態様では、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストはアテゾリズマブである。いくつかの実施態様では、アテゾリズマブは、約８００ｍｇから約１５００ｍｇの用量で三週毎に投与される（例えば、約１０００ｍｇから約１３００ｍｇを三週毎に、例えば、約１１００ｍｇから約１２００ｍｇを三週毎に）。好ましい一実施態様では、アテゾリズマブは、約１２００ｍｇの用量で三週毎に（Ｑ３Ｗ）、特に三週毎に（Ｑ３Ｗ）各治療サイクル（Ｃ）の第１日（Ｄ１）に投与される。
【００８１】
用語「がん」とは、制御されない細胞増殖によって典型的に特徴付けられる、哺乳動物における生理学的状態を指す。がんの例には、限定されないが、癌腫、リンパ腫、芽細胞腫、肉腫及び白血病が含まれる。このようながんの具体的な例には、扁平上皮細胞がん、肺がん（小細胞肺がん、非小細胞肺がん、肺の腺癌、及び肺の非扁平上皮及び扁平上皮癌腫を含む）、腹膜がん、肝細胞がん、胃（ｇａｓｔｒｉｃ）又は腹部（ｓｔｏｍａｃｈ）がん（消化器がん及び胃腸がんを含む）、膵臓がん（転移性膵臓がんを含む）、膠芽細胞腫、子宮頸管がん、卵巣がん、肝臓がん、膀胱がん、肝癌、乳がん（局所進行性、再発性若しくは転移性のＨＥＲ−２陰性乳がん、及び局所再発性若しくは転移性のＨＥＲ２陽性乳がんを含む）、結腸がん、結腸直腸がん、子宮内膜又は子宮癌、唾液腺癌、腎臓又は腎性がん、肝臓がん、前立腺がん、外陰がん、甲状腺がん、肝癌、さまざまな種類の頭頸部がん、及びＢ細胞リンパ腫（低悪性度／濾胞性非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）；小リンパ球（ＳＬ）ＮＨＬ；中悪性度／濾胞性ＮＨＬ；中悪性度びまん性ＮＨＬ；高悪性度免疫芽細胞性ＮＨＬ；高悪性度リンパ芽球性ＮＨＬ；高悪性度小非分割細胞ＮＨＬ；バルキー疾患ＮＨＬ；マントル細胞リンパ腫；エイズ関連リンパ腫；及びワルデンストロームのマクログロブリン病を含む）；慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）；急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）；毛様細胞白血病；慢性骨髄芽球性白血病；及び移植後リンパ増殖性疾患（ＰＴＬＤ）、並びに、母斑症と関係する異常な血管性増殖、浮腫（脳腫瘍と関係するものなど）、及びメイグス症候群が含まれる。
【００８２】
本発明のＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体、方法、及び使用のいくつかの実施態様では、がんは固形腫瘍がんである。「固形腫瘍がん」が意味するのは、患者の体内の特定の位置に分離した腫瘍塊（腫瘍転移も含む）を形成する悪性腫瘍、例えば肉腫又は癌腫（例えば通常固形腫瘍を形成しない白血病といった血液のがんとは対照的な）である。固形腫瘍がんの非限定的な例には、膀胱がん、脳のがん、頸部及び頭部のがん、膵臓がん、肺がん、乳がん、卵巣がん、子宮がん、子宮頸がん、子宮内膜がん、食道がん、結腸がん、結腸直腸がん、直腸がん、胃がん、前立腺がん、皮膚がん、扁平上皮癌、骨がん、肝臓がん及び腎臓がんが含まれる。本発明の文脈において考慮される他の固形腫瘍がんには、限定されないが：腹部、骨、乳房、消化器系、肝臓、膵臓、腹膜、内分泌腺（副腎、副甲状腺、下垂体、睾丸、卵巣、胸腺、甲状腺）、眼、頭部及び頸部、神経系（中枢及び末梢）、リンパ系、骨盤、皮膚、軟組織、筋肉、脾臓、胸部、並びに泌尿器系に位置する腫瘍が含まれる。さらには、前がん性状態又は病変及びがん転移も含まれる。
【００８３】
いくつかの実施様態では、がんはＣＥＡ陽性がんである。「ＣＥＡ陽性がん」又は「ＣＥＡ発現がん」とは、がん細胞上のＣＥＡの発現又は過剰発現を特徴とするがんを意味する。ＣＥＡの発現は、例えば免疫組織化学（ＩＨＣ）又はフローサイトメトリーアッセイにより決定され得る。一実施態様において、がんはＣＥＡを発現する。一実施態様において、がんは、ＣＥＡに特異的な抗体を用いる免疫組織化学（ＩＨＣ）により決定したとき、腫瘍細胞の少なくとも２０％、好ましくは少なくとも５０％又は少なくとも８０％にＣＥＡを発現する。
【００８４】
いくつかの実施態様では、患者のがん細胞はＰＤ−Ｌ１を発現する。ＰＤ−Ｌ１の発現は、例えばＩＨＣ又はフローサイトメトリーアッセイにより決定され得る。
【００８５】
いくつかの実施様態では、がんは、結腸がん、肺がん、卵巣がん、胃がん、膀胱がん、膵臓がん、子宮内膜がん、乳がん、腎臓がん、食道がん、前立腺がん、又は本明細書に記載される他のがんである。
【００８６】
特定の実施態様では、がんは、結腸直腸がん、肺がん、膵臓がん、乳がん、及び胃がんからなる群より選択されるがんである。好ましい実施態様では、がんは結腸直腸がん（ＣＲＣ）である。一実施態様では、結腸直腸がんは、転移性結腸直腸がん（ｍＣＲＣ）である。一実施態様では、結腸直腸がんは、マイクロサテライト安定性（ＭＳＳ）結腸直腸がんである。一実施態様では、結腸直腸がんは、マイクロサテライト安定性の転移性結腸直腸がん（ＭＳＳ  ｍＣＲＣ）である。
【００８７】
本明細書中の「患者」又は「対象」は、がんの一つ又は複数の兆候、症状、又は他の指標を経験しているか又は経験した、治療に適格な単一のヒト対象である。いくつかの実施様態では、患者はがんを有するか又はがんを有すると診断された。いくつかの実施様態では、患者は局所的に進行がん又は転移性がんを有するか、又は局所的に進行がん又は転移性がんを有すると診断された。患者は、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体又は別の薬物で以前治療されたことがあってもよく、又は治療されたことがなくてもよい。特定の実施態様では、患者は、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体で以前に治療されなかった。患者は、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体療法が開始される前に、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体以外の一つ又は複数の薬物を含む療法で治療されたことがあってもよい。
【００８８】
本明細書において用いられる場合、「治療」（及び「治療する（ｔｒｅａｔ）」又は「治療すること（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」などの文法的変形）は、治療されている個体の疾患の自然経過を変えようと試みる臨床的介入を指し、予防のために又は臨床病理の過程において実行できる。治療の望ましい作用には、限定されないが、疾患の発生又は再発の防止、症候の緩和、疾患のいずれかの直接的又は間接的病理学的帰結の縮小、転移の防止、疾患進行速度の低下、病態の改善又は緩和、及び寛解又は予後の改善が含まれる。
【００８９】
アテゾリズマブのようなＰＤ−１軸結合アンタゴニストと組み合わせた、ＣＥＡ  ＴＣＢのようなＣＥＡ  ＣＤ３抗体でのがん治療の最適な有効性及び安全性のために、本発明は特定の投与計画を提供する。
【００９０】
一実施態様では、各治療サイクル（Ｃ）は、継続期間が２１日間である。
【００９１】
好ましい実施態様では、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体は固定用量で投与される。
【００９２】
一実施態様では、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体は一週毎に（ＱＷ）投与される。一実施態様では、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体は、各治療サイクル（Ｃ）の第１日（Ｄ１）、第８日（Ｄ８）、及び第１５日（Ｄ１５）に、一週毎に（ＱＷ）投与される。一実施態様では、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体は、一週毎に（ＱＷ）固定用量で投与される。一実施態様では、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体は、各治療サイクル（Ｃ）の第１日（Ｄ１）、第８日（Ｄ８）、及び第１５日（Ｄ１５）に、一週毎に（ＱＷ）固定用量で投与される。一実施態様では、固定用量は、約８０ｍｇから１６０ｍｇ、特に約１００ｍｇで投与される。
【００９３】
一実施態様では、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体は、三週毎に（Ｑ３Ｗ）投与される。一実施態様では、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体は、各治療サイクル（Ｃ）の第１日（Ｄ１）に三週毎に（Ｑ３Ｗ）投与される。一実施態様では、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体は、三週毎に（Ｑ３Ｗ）固定用量で投与される。一実施態様では、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体は、各治療サイクル（Ｃ）の第１日（Ｄ１）に三週毎に（Ｑ３Ｗ）固定用量で投与される。一実施態様では、固定用量は、約８０ｍｇから１６０ｍｇ、特に約１００ｍｇで投与される。
【００９４】
好ましい実施態様では、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体、特にＣＥＡ  ＴＣＢは、各治療サイクル（Ｃ）の第１日（Ｄ１）に三週毎に（Ｑ３Ｗ）、約１００ｍｇの固定用量で投与され、ＰＤ−１軸結合アンタゴニスト、特にアテゾリズマブは、各治療サイクル（Ｃ）のＤ１にＱ３Ｗで約１２００ｍｇの固定用量で投与される。
【００９５】
いくつかの実施態様では、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体は漸増用量で投与される。本明細書で使用される場合の用語「漸増用量」とは、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体の１回から次の投与への用量の増加、すなわち、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体の２回目の用量が最初の用量を超え、３回目の用量が２回目の用量を超える、などを指す。いくつかの実施態様では、投与間（例えば、１回目の用量と２回目の用量との間、又は２回目の用量と３回目の用量との間、等）の用量増加は、低い方の用量の少なくとも２０％、特に少なくとも５０％である（例えば、２回目の用量は、１回目の用量を少なくとも２０％（又は少なくとも５０％）超え、３回目の用量は、２回目の用量を少なくとも２０％（又は少なくとも５０％）超える）。例えば、１００ｍｇから１５０ｍｇへの用量増加は、低い方の用量の５０％の増加である。１００ｍｇから２００ｍｇへの用量増加は、低い用量の１００％の増加である。
【００９６】
一実施態様では、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体は、一週毎に（ＱＷ）漸増用量で投与される。一実施態様では、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体は、各治療サイクル（Ｃ）の第１日（Ｄ１）、第８日（Ｄ８）、及び第１５日（Ｄ１５）に、一週毎に（ＱＷ）漸増用量で投与される。一実施態様では、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体は、第１の治療サイクルの第１日（Ｃ１Ｄ１）に約４０ｍｇの用量で、第１の治療サイクルの第８日（Ｃ１Ｄ８）に約１５０ｍｇの用量で、第１の治療サイクルの第１５日（Ｃ１Ｄ１５）に約３００ｍｇの用量で投与される。一実施態様では、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体は、第１の治療サイクルの第１日（Ｃ１Ｄ１）に約４０ｍｇの用量で、第１の治療サイクルの第８日（Ｃ１Ｄ８）に約１５０ｍｇの用量で、第１の治療サイクルの第１５日（Ｃ１Ｄ１５）に約３００ｍｇの用量で、第２の治療サイクルの第１日（Ｃ２Ｄ１）に約６００ｍｇの用量で、第２の治療サイクルの第８日（Ｃ２Ｄ８）に約９００ｍｇの用量で、第２の治療サイクルの第１５日（Ｃ２Ｄ１５）に約１２００ｍｇの用量で投与される。一実施態様では、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体は、第１の治療サイクルの第１日（Ｃ１Ｄ１）に約４０ｍｇの用量で、第１の治療サイクルの第８日（Ｃ１Ｄ８）に約１５０ｍｇの用量で、第１の治療サイクルの第１５日（Ｃ１Ｄ１５）に約３００ｍｇの用量で、第２の治療サイクルの第１日（Ｃ２Ｄ１）に約６００ｍｇの用量で、第２の治療サイクルの第８日（Ｃ２Ｄ８）に約９００ｍｇの用量で、第２の治療サイクルの第１５日（Ｃ２Ｄ１５）に約１２００ｍｇの用量で、第３の治療サイクル及び続く治療サイクルの第１日（Ｃ３Ｄ１）に約１２００ｍｇの用量で投与される。
【００９７】
一実施態様では、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体は、以下の投与計画に従って投与される：
（ｉ）Ｃ１Ｄ１に４０ｍｇ、
（ｉｉ）Ｃ１Ｄ８に１５０ｍｇ、
（ｉｉｉ）Ｃ１Ｄ１５に３００ｍｇ、
（ｉｖ）Ｃ２Ｄ１に６００ｍｇ、
（ｖ）Ｃ２Ｄ８に９００ｍｇ、
（ｖｉ）Ｃ２Ｄ１５に１２００ｍｇ、
（ｖｉｉ）Ｃ３Ｄ１に１２００ｍｇ、及び
（ｖｉｉｉ）各後続の治療サイクルのＤ１に１２００ｍｇ、又はそれ以降約三週毎に（Ｑ３Ｗ）１２００ｍｇ。
【００９８】
一実施態様では、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体は、第１の治療サイクルの第１日（Ｃ１Ｄ１）に約４０ｍｇの用量で、第１の治療サイクルの第８日（Ｃ１Ｄ８）に約１５０ｍｇの用量で、第１の治療サイクルの第１５日（Ｃ１Ｄ１５）に約６００ｍｇの用量で投与される。一実施態様では、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体は、第１の治療サイクルの第１日（Ｃ１Ｄ１）に約４０ｍｇの用量で、第１の治療サイクルの第８日（Ｃ１Ｄ８）に約１５０ｍｇの用量で、第１の治療サイクルの第１５日（Ｃ１Ｄ１５）に約６００ｍｇの用量で、及び第２の治療サイクルの第１日（Ｃ２Ｄ１）に約１２００ｍｇの用量で投与される。一実施態様では、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体は、第１の治療サイクルの第１日（Ｃ１Ｄ１）に約４０ｍｇの用量で、第１の治療サイクルの第８日（Ｃ１Ｄ８）に約１５０ｍｇの用量で、第１の治療サイクルの第１５日（Ｃ１Ｄ１５）に約６００ｍｇの用量で、及び第２の及び後続の治療サイクルの第１日（Ｃ２Ｄ１）に約１２００ｍｇの用量で投与される。
【００９９】
一実施態様では、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体は、以下の投与計画に従って投与される：
（ｉ）Ｃ１Ｄ１に４０ｍｇ、
（ｉｉ）Ｃ１Ｄ８に１５０ｍｇ、
（ｉｉｉ）Ｃ１Ｄ１５に６００ｍｇ、
（ｉｖ）Ｃ２Ｄ１に１２００ｍｇ、及び
（ｖ）各後続の治療サイクルのＤ１に１２００ｍｇ、又はそれ以降約三週毎に（Ｑ３Ｗ）１２００ｍｇ。
【０１００】
一実施態様では、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体は、第１の治療サイクルの第１日（Ｃ１Ｄ１）に約４０ｍｇの用量で、第１の治療サイクルの第８日（Ｃ１Ｄ８）に約１００ｍｇの用量で、第１の治療サイクルの第１５日（Ｃ１Ｄ１５）に約１５０ｍｇの用量で投与される。一実施態様では、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体は、第１の治療サイクルの第１日（Ｃ１Ｄ１）に約４０ｍｇの用量で、第１の治療サイクルの第８日（Ｃ１Ｄ８）に約１００ｍｇの用量で、第１の治療サイクルの第１５日（Ｃ１Ｄ１５）に約１５０ｍｇの用量で、及び第２の治療サイクルの第１日（Ｃ２Ｄ１）に約１５０ｍｇの用量で投与される。一実施態様では、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体は、第１の治療サイクルの第１日（Ｃ１Ｄ１）に約４０ｍｇの用量で、第１の治療サイクルの第８日（Ｃ１Ｄ８）に約１００ｍｇの用量で、第１の治療サイクルの第１５日（Ｃ１Ｄ１５）に約１５０ｍｇの用量で、及び第２及び後続の治療サイクルの第１日（Ｃ２Ｄ１）に約１５０ｍｇの用量で投与される。
【０１０１】
一実施態様では、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体は、以下の投与計画に従って投与される：
（ｉ）Ｃ１Ｄ１に４０ｍｇ、
（ｉｉ）Ｃ１Ｄ８に１００ｍｇ、
（ｉｉｉ）Ｃ１Ｄ１５に１５０ｍｇ、
（ｉｖ）Ｃ２Ｄ１に１５０ｍｇ、及び
（ｖ）各後続の治療サイクルのＤ１に１５０ｍｇ、又はそれ以降約三週毎に（Ｑ３Ｗ）１５０ｍｇ。
【０１０２】
一実施態様では、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体は、第１の治療サイクルの第１日（Ｃ１Ｄ１）に約４０ｍｇの用量で、第１の治療サイクルの第８日（Ｃ１Ｄ８）に約１５０ｍｇの用量で、第１の治療サイクルの第１５日（Ｃ１Ｄ１５）に約３００ｍｇの用量で、及び第２の治療サイクルの第１日（Ｃ２Ｄ１）に約６００ｍｇの用量で投与される。一実施態様では、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体は、第１の治療サイクルの第１日（Ｃ１Ｄ１）に約４０ｍｇの用量で、第１の治療サイクルの第８日（Ｃ１Ｄ８）に約１５０ｍｇの用量で、第１の治療サイクルの第１５日（Ｃ１Ｄ１５）に約３００ｍｇの用量で、及び第２の及び後続の治療サイクルの第１日（Ｃ２Ｄ１）に約６００ｍｇの用量で投与される。
【０１０３】
一実施態様では、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体は、以下の投与計画に従って投与される：
（ｉ）Ｃ１Ｄ１に４０ｍｇ、
（ｉｉ）Ｃ１Ｄ８に１５０ｍｇ、
（ｉｉｉ）Ｃ１Ｄ１５に３００ｍｇ、
（ｉｖ）Ｃ２Ｄ１に６００ｍｇ、及び
（ｖ）各後続の治療サイクルのＤ１に６００ｍｇ、又はそれ以降約三週毎に（Ｑ３Ｗ）６００ｍｇ。
【０１０４】
一実施態様では、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体は、第１の治療サイクルの第１日（Ｃ１Ｄ１）に約１００ｍｇの用量で、第１の治療サイクルの第８日（Ｃ１Ｄ８）に約１５０ｍｇの用量で、第１の治療サイクルの第１５日（Ｃ１Ｄ１５）に約３００ｍｇの用量で、及び第２の治療サイクルの第１日（Ｃ２Ｄ１）に約６００ｍｇの用量で投与される。一実施態様では、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体は、第１の治療サイクルの第１日（Ｃ１Ｄ１）に約１００ｍｇの用量で、第１の治療サイクルの第８日（Ｃ１Ｄ８）に約１５０ｍｇの用量で、第１の治療サイクルの第１５日（Ｃ１Ｄ１５）に約３００ｍｇの用量で、及び第２の及び後続の治療サイクルの第１日（Ｃ２Ｄ１）に約６００ｍｇの用量で投与される。
【０１０５】
一実施態様では、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体は、以下の投与計画に従って投与される：
（ｉ）Ｃ１Ｄ１に１００ｍｇ、
（ｉｉ）Ｃ１Ｄ８に１５０ｍｇ、
（ｉｉｉ）Ｃ１Ｄ１５に３００ｍｇ、
（ｉｖ）Ｃ２Ｄ１に６００ｍｇ、及び
（ｖ）各後続の治療サイクルのＤ１に６００ｍｇ、又はそれ以降約三週毎に（Ｑ３Ｗ）６００ｍｇ。
【０１０６】
ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体は、典型的には静脈内（ＩＶ）注射により投与される。
【０１０７】
一実施態様では、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストは、三週毎に（Ｑ３Ｗ）投与される。一実施態様では、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストは、各（２１日）治療サイクル（Ｃ）の第１日（Ｄ１）に投与される。一実施態様では、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストは、三週毎に（Ｑ３Ｗ）固定用量で投与される。一実施態様では、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストは、三週毎に（Ｑ３Ｗ）１２００ｍｇの用量で投与される。一実施態様では、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストは、静脈内（ＩＶ）注射により投与される。一実施態様では、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストは、三週毎に（Ｑ３Ｗ）１２００ｍｇの用量で静脈内（ＩＶ）注射により投与される。好ましい実施態様では、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストは、各治療サイクル（Ｃ）の第１日（Ｄ１）に三週毎に（Ｑ３Ｗ）１２００ｍｇの用量で静脈内（ＩＶ）注射により投与される。
【０１０８】
一実施態様では、各治療サイクル（Ｃ）の第１日（Ｄ１）に、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体とＰＤ−１軸結合アンタゴニストの両方が投与されるとき、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体は、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストの後に投与される。一実施態様では、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体は、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストの注射の終了の少なくとも３０分後に投与される。
【０１０９】
治療剤、例えばＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体又はＰＤ−１軸結合アンタゴニストの投与が一週毎に（ＱＷ）である場合、予定された投与の正確な日（例えば、治療サイクルの第１日、第８日、第１５日）から＋／−１日の偏差がある可能性がある。治療剤、例えばＣＥＡ  ＴＣＢ又はアテゾリズマブの投与が三週毎に（Ｑ３Ｗ）である場合、予定された投与の正確な日（例えば、治療サイクルの第１日）から＋／−２日の偏差がある可能性がある。
【０１１０】
特定の実施態様では、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体のための本明細書に記載の投与計画（例えば、Ｃ１Ｄ１に４０ｍｇ、Ｃ１Ｄ８に１５０ｍｇ、Ｃ１Ｄ１５に３００ｍｇ、Ｃ２Ｄ１に６００ｍｇ、及びその後Ｑ３Ｗで６００ｍｇでのＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体の投与は、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストの投与を伴わずに実行されてもよく、ここではＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体での単剤療法が示されているか、又は所望されている。
【０１１１】
本発明のＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体、方法又は使用の特定の実施態様では、治療は、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体の第１の投与の前に、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の投与をさらに含む。
【０１１２】
「ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体」は、Cragg et al.,Blood 103(2004)2738-2743;Cragg et al.,Blood 101(2003)1045-1052、Klein et al.,mAbs 5(2013),22-33に記載され、以下の表１にまとめられたＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の結合特性及び生物活性を有する抗ＣＤ２０抗体を意味する。
2021506817.tif 000002
【０１１３】
例示的ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体には、例えば、オビヌツズマブ（ＧＡ１０１）、トシツモマブ（Ｂ１）、ヒト化Ｂ−Ｌｙ１抗体ＩｇＧ１（国際公開２００５／０４４８５９号に開示されるようなキメラヒト化ＩｇＧ１抗体）、１１Ｂ８  ＩｇＧ１（国際公開２００４／０３５６０７号に開示）及びＡＴ８０  ＩｇＧ１が含まれる。
【０１１４】
Ｉ型抗ＣＤ２０抗体の例には、例えばリツキシマブ、オファツムマブ、ベルツズマブ、オカラツズマブ、オクレリズマブ、ＰＲＯ１３１９２１、ｕｂｌｉｔｕｘｉｍａｂ、ＨＩ４７  ＩｇＧ３（ＥＣＡＣＣ、ハイブリドーマ）、２Ｃ６  ＩｇＧ１（国際公開第２００５／１０３０８１号に開示）、２Ｆ２  ＩｇＧ１  国際公開第２００４／０３５６０７号及び同第２００５／１０３０８１号に開示）及び２Ｈ７  ＩｇＧ１（国際公開第２００４／０５６３１２号に開示）が含まれる。
【０１１５】
一実施態様において、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体は、配列番号２４の重鎖ＣＤＲ（ＨＣＤＲ）１、配列番号２５のＨＣＤＲ２、及び配列番号２６のＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；並びに配列番号２７の軽鎖ＣＤＲ（ＬＣＤＲ）１、配列番号２８のＬＣＤＲ２及び配列番号２９のＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。より具体的な実施態様において、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体は、配列番号３０の重鎖可変領域配列と、配列番号３１の軽鎖可変領域配列とを含む。一実施態様において、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体は、ＩｇＧ抗体、特にＩｇＧ１抗体である。一実施態様において、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体は完全長抗体である。一実施態様において、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体は、Ｆｃ領域、特にＩｇＧ  Ｆｃ領域、又は、さらに詳細にはＩｇＧ１  Ｆｃ領域を含む。一実施態様では、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体は、非改変抗体と比較してＦｃ領域に増加した非フコシル化オリゴ糖の部分を有するように改変される。一実施態様では、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体のＦｃ領域において少なくとも約４０％のＮ結合型オリゴ糖が非フコシル化される。
【０１１６】
好ましい実施態様では、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体はオビヌツズマブである（WHO Drug Information, Vol. 26, No. 4, 2012, p. 453で推奨のＩＮＮ）。本明細書で使用される場合、オビヌツズマブは、ＧＡ１０１の同義語である。商品名はＧＡＺＹＶＡ（登録商標）又はＧＡＺＹＶＡＲＯ（登録商標）である。これは、全ての旧版を差し替え（例えばVol. 25, No. 1, 2011, p.75-76）、元はアフツズマブとして知られていたものである（WHO Drug Information, Vol. 23, No. 2, 2009, p. 176; Vol. 22, No. 2, 2008, p. 124で推奨されるＩＮＮ）。
【０１１７】
いくつかの実施態様では、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の投与は単回投与である。一実施態様では、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の投与は、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体の第１の投与の約１０−１５日前、特に約１２−１４日前である。一実施態様では、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の投与は、ＣＥＡ  ＣＤ３抗体の第１の投与の約１３日前（第−１３日）である。一実施態様では、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体は、約２０００ｍｇの用量で単回投与で投与される。好ましい実施態様では、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体、特にオビヌツズマブ（ｏｂｉｎｉｔｕｚｕｍａｂ）は、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体、特にＣＥＡ  ＴＣＢの第１の投与の約１３日前に約２０００ｍｇの用量で投与される。上述のように、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体の第１の投与は、典型的には第１の治療サイクル（Ｃ１）の第１日（Ｄ１）にある。
【０１１８】
いくつかの実施態様では、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の投与は、二回以上の別個の投与である。一実施態様では、二回以上の別個の投与は、二日以上連続する。一実施態様では、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の二回以上の別個の投与は、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体の第１の投与の約１０−１５日前、特に約１１−１４日前である。一実施態様では、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の投与は、ＣＥＡ  ＣＤ３抗体の第１の投与の約１３日前（第−１３日）及び約１２日前（第−１２日）の二回の別個の投与である。一実施態様では、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体は、約２０００ｍｇの総量で投与される。好ましい実施態様では、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体、特にオビヌツズマブ（ｏｂｉｎｉｔｕｚｕｍａｂ）は、それぞれＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体、特にＣＥＡ  ＴＣＢの第１の投与の約１３日及び約１２日前に約１０００ｍｇで二回の投与で投与される。上述のように、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体の第１の投与は、典型的には第１の治療サイクル（Ｃ１）の第１日（Ｄ１）にある。
【０１１９】
よって、好ましい実施態様では、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体、特にオビヌツズマブ（ｏｂｉｎｉｔｕｚｕｍａｂ）は、（ｉ）ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体の第１の投与の約１３日前に約２０００ｍｇの用量で、又は（ｉｉ）ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体の投与のそれぞれ約１３日及び約１２日前に約１０００ｍｇの用量で、投与される。
【０１２０】
一実施態様では、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体のさらなる投与は、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体の投与前又は後には、対象に対してなされない。一実施態様では、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の投与は、単回投与、又は二日連続の二回の投与であり、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体のさらなる投与はなされない。一実施態様では、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の投与の前に、対象に対するＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体の投与はなされない（少なくとも同じ治療過程内ではない）。
【０１２１】
一実施態様では、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体は、非経口で、特に、静脈内で、例えば静脈内注射により、投与される。
【０１２２】
理論に縛られることを望むものではないが、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体の投与前のＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の投与は（対象中のＢ細胞数の減少を通じて）、ＣＥＡ  ＣＤ３二重特異性抗体に対する抗薬物抗体（ＡＤＡ）の形成を減少又は防止し、よって、治療の有効性及び／又は安全性をさらに改善する。
【実施例】
【０１２３】
以下は本発明の方法及び組成物の例である。上に提供された一般的な説明を前提として、他の様々な実施態様が実施され得る。
【０１２４】
実施例１
アテゾリズマブと組み合わせたＣＥＡ−ＴＣＢ（ＲＧ７８０２、ＲＯ６９５８６８８）の非盲検、多施設、用量漸増及び拡大フェーズＩｂ臨床試験
局所的に進行した及び／又は転移したＣＥＡ陽性固形腫瘍を有する患者における、アテゾリズマブと組み合わせたＣＥＡ−ＴＣＢ（ＲＧ７８０２、ＲＯ６９５８６８８）の安全性、薬物動態及び治療活性を評価するために、非盲検、他施設、用量漸増及び拡大フェーズＩｂ臨床研究を実施する。
【０１２５】
研究の用量漸増のパート（パート１Ａ）では、ＣＥＡ  ＴＣＢは、ＣＥＡ  ＴＣＢの推奨用量及びスケジュールが決定されるまで、各２１日治療サイクルの第１日にＩＶ注射により、又は各治療サイクルの第１日に三週毎に（Ｑ３Ｗ）１２００ｍｇの固定用量のアテゾリズマブと組み合わせて、各２１日治療サイクルの第１日、第８日及び第１５日に、漸増用量で投与される。
【０１２６】
研究の用量／スケジュール設定のパート（パートＩＢ）では、以下のコホートが存在する。ＣＥＡ  ＴＣＢは、コホートＡに対して、一週毎に（ＱＷ）又は三週毎に（Ｑ３Ｗ）１００ｍｇの固定用量で投与される（各２１日治療サイクルの第１日に開始）。
【０１２７】
コホートＢ１では、ＣＥＡ  ＴＣＢは、以下の投与計画に従って投与される：
Ｃ１Ｄ１に４０ｍｇ、
Ｃ１Ｄ８に１５０ｍｇ、
Ｃ１Ｄ１５に３００ｍｇ、
Ｃ２Ｄ１に６００ｍｇ、
Ｃ２Ｄ８に９００ｍｇ、
Ｃ２Ｄ１５に１２００ｍｇ、
Ｃ３Ｄ１に１２００ｍｇ、及び
その後三週毎に（Ｑ３Ｗ）１２００ｍｇ。
【０１２８】
コホートＢ２では、ＣＥＡ  ＴＣＢは、以下の投与計画に従って投与される：
Ｃ１Ｄ１に４０ｍｇ、
Ｃ１Ｄ８に１５０ｍｇ、
Ｃ１Ｄ１５に６００ｍｇ、
Ｃ２Ｄ１に１２００ｍｇ、及び
その後三週毎に（Ｑ３Ｗ）１２００ｍｇ。
【０１２９】
二つの追加の漸増用量レジメンがコホートＣ１及びＣ２で探索される。ＣＥＡ  ＴＣＢは、コホートＣ１に対して以下の投与計画に従って投与される：
Ｃ１Ｄ１に４０ｍｇ、
Ｃ１Ｄ８に１００ｍｇ、
Ｃ１Ｄ１５に１５０ｍｇ、
Ｃ２Ｄ１に１５０ｍｇ、及び
その後三週毎に（Ｑ３Ｗ）１５０ｍｇ。
【０１３０】
ＣＥＡ  ＴＣＢは、コホートＣ２に対して以下の投与計画に従って投与される：
Ｃ１Ｄ１に４０ｍｇ、
Ｃ１Ｄ８に１５０ｍｇ、
Ｃ１Ｄ１５に３００ｍｇ、
Ｃ２Ｄ１に６００ｍｇ、及び
その後三週毎に（Ｑ３Ｗ）６００ｍｇ。
【０１３１】
場合によっては、ＣＥＡ  ＴＣＢは、追加のコホートとしてコホートＣ３に対して以下の投与計画に従って投与される：
Ｃ１Ｄ１に１００ｍｇ
Ｃ１Ｄ８に１５０ｍｇ
Ｃ１Ｄ１５に３００ｍｇ
Ｃ２Ｄ１に６００ｍｇ
その後三週毎に（Ｑ３Ｗ）６００ｍｇ。
【０１３２】
全てのコホートにおいて、アテゾリズマブは、各治療サイクルの第１日に三週毎に（Ｑ３Ｗ）１２００ｍｇの固定用量で投与される。
【０１３３】
結果
アテゾリズマブと組み合わせたＣＥＡ  ＴＣＢの多数の用量レベル及びスケジュールが、上記の研究のパート１Ｂで試験された。
【０１３４】
利用可能な有効性、安全性及びＰＫデータに基づいて、１００ｍｇ  Ｑ３Ｗの固定用量がさらなる研究のために選択された。
【０１３５】
固定用量のレジメンは、４０ｍｇの用量から開始し１２００ｍｇの用量まで上昇する漸増用量投与計画と比較して、より好ましいベネフィット・リスクプロファイルを有するようである。
【０１３６】
アテゾリズマブと組み合わせたＣＥＡ  ＴＣＢは、ＱＷ又はＱ３Ｗのいずれかで投与された１００ｍｇの固定用量で、概して管理可能なセーフティープロファイルを示した。
【０１３７】
これらの投与計画のセーフティープロファイル及び臨床的有効性は同等であったが、１００ｍｇ  Ｑ３Ｗのスケジュールは、低頻度の投与による、より簡便な（ｃｏｎｖｅｎｔｉｅｎｔ）手法を表し、ＱＷと比較してＣＥＡ  ＴＣＢ投与間のより長い回復期間を可能にする。
【０１３８】
１００ｍｇ  Ｑ３Ｗのレジメンは、アテゾリズマブと組み合わせたＣＥＡ  ＴＣＢを評価するさらなるフェーズ１ｂ研究に使用されることになる。
【０１３９】
上記発明は、理解を明瞭にする目的で説明及び例示としてある程度詳細に記載されたが、それら記載及び例示は本発明の範囲を限定するものではない。ここに引用したすべての特許文献及び科学文献の開示内容は、参照によりその全体が明示的に包含される。
【配列表】
2021506817000001.app
【国際調査報告】
2021506817.tif 000003
2021506817.tif 000004
2021506817.tif 000005
2021506817.tif 000006