(57)【要約】本開示は、抗ＩＬ−２７抗体及びその抗原結合部分に関する。本開示は、抗体またはその抗原結合部分を投与することにより、がんなどの疾患の１つまたは複数の症状を処置または回復するための方法にも関する。本開示は、例えば、対象または試料中のＩＬ−２７を検出するための方法にも関する。高い親和性及び特異性でヒトＩＬ−２７（インターロイキン２７）に特異的に結合して拮抗する、抗体またはその抗原結合部分を、本明細書に開示する。抗体分子をコードする核酸分子、発現ベクター、宿主細胞、及び抗体分子を作成する方法も提供する。抗体分子を含む医薬組成物も提供する。本明細書に開示する抗ＩＬ−２７抗体またはその抗原結合部分を（単独で、または他の治療剤もしくは手技と組み合わせて）使用して、免疫障害及びがんを含む障害を、処置、予防及び／または診断することができる。
2021518138.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分であって、以下の特性：
（ｉ）ヒトＩＬ−２７に１５ｎＭ以下の平衡解離定数（ＫＤ）で結合する；
（ｉｉ）ＩＬ−２７のＩＬ−２７受容体への結合を遮断する；
（ｉｉｉ）細胞におけるＳＴＡＴ１及び／またはＳＴＡＴ３リン酸化を阻害または低下する；
（ｉｖ）細胞におけるＣＤ１６１発現のＩＬ−２７媒介性阻害を阻害または低下する；
（ｖ）細胞におけるＩＬ−２７媒介性ＰＤ−Ｌ１及び／またはＴＩＭ−３発現を阻害または低下する；ならびに
（ｖｉ）細胞からの１つまたは複数のサイトカインのＰＤ−１媒介性分泌を誘導または増強するのうちの少なくとも１つまたは複数を呈する、前記抗体またはその抗原結合部分。
【請求項２】
前記抗体またはその抗原結合部分が、ヒトＩＬ−２７に１５ｎＭ以下の平衡解離定数（ＫＤ）で結合する、請求項１に記載の単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分。
【請求項３】
前記抗体またはその抗原結合部分が、マウスＩＬ−２７に結合する、請求項１または２に記載の単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分。
【請求項４】
ヒトＩＬ−２７と特異的に結合する単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分であって、以下：
（ｉ）Ｎ−ＧＦＴＦＸＸＸＸ−Ｃ（配列番号４０８）からなる重鎖ＣＤＲ１、Ｎ−ＩＳＳＳＸＸＹＩ−Ｃ（配列番号４０９）からなる重鎖ＣＤＲ２、及び配列番号１６３に記載の重鎖ＣＤＲ３配列；ならびにそれぞれ、配列番号１６９、１７０及び１７１に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；または
（ｉｉ）Ｎ−ＦＴＦＸＸＸＸＭＮ−Ｃ（配列番号４１０）からなる重鎖ＣＤＲ１、Ｎ−ＸＩＳＳＳＸＸＹＩＸＹＡＤＳＶＫＧ−Ｃ（配列番号４１１）からなる重鎖ＣＤＲ２、及び配列番号１６６に記載の重鎖ＣＤＲ３配列；ならびにそれぞれ、配列番号１７２、１７３及び１７４に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列からなる群から選択される重鎖ＣＤＲ及び軽鎖ＣＤＲを含む、前記抗体またはその抗原結合部分。
【請求項５】
前記重鎖ＣＤＲ１が、Ｎ−ＧＦＴＦ［Ｓ／Ａ／Ｒ］［Ｓ／Ｒ］［Ｔ／Ｙ］［Ｇ／Ｓ］−Ｃ（配列番号４１２）からなり、前記重鎖ＣＤＲ２が、Ｎ−ＩＳＳＳ［Ｓ／Ｇ］［Ｓ／Ａ］ＹＩ−Ｃ（配列番号４１３）からなる；または前記重鎖ＣＤＲ１が、Ｎ−ＦＴＦ［Ｓ／Ａ／Ｒ］［Ｓ／Ｒ］［Ｔ／Ｙ］［Ｇ／Ｓ］ＭＮ−Ｃ（配列番号４１４）からなり、前記重鎖ＣＤＲ２が、Ｎ−［Ｇ／Ｓ］ＩＳＳＳ［Ｓ／Ｇ］［Ｓ／Ａ］ＹＩ［Ｌ／Ｙ］ＹＡＤＳＶＫＧ−Ｃ（配列番号４１５）からなる、請求項４に記載の単離されたモノクローナル抗体。
【請求項６】
（ｉ）前記重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号１６１、１６２及び１６３に記載されており、前記軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号１６９、１７０及び１７１に記載されている；
（ｉｉ）前記重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号１６４、１６５及び１６６に記載されており、前記軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号１７２、１７３及び１７４に記載されている；
（ｉｉｉ）前記重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号７３、７４及び７５に記載されており、前記軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号８１、８２及び８３に記載されている；
（ｉｖ）前記重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号７６、７７及び７８に記載されており、前記軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号８４、８５及び８６に記載されている；
（ｖ）前記重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号９５、９６及び９７に記載されており、前記軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号１０３、１０４及び１０５に記載されている；
（ｖｉ）前記重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号９８、９９及び１００に記載されており、前記軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号１０６、１０７及び１０８に記載されている；
（ｖｉｉ）前記重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号１１７、１１８及び１１９に記載されており、前記軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号１２５、１２６及び１２７に記載されている；
（ｖｉｉｉ）前記重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号１２０、１２１及び１２２に記載されており、前記軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号１２８、１２９及び１３０に記載されている；
（ｉｘ）前記重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号１３９、１４０及び１４１に記載されており、前記軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号１４７、１４８及び１４９に記載されている；
（ｘ）前記重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号１４２、１４３及び１４４に記載されており、前記軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号１５０、１５１及び１５２に記載されている；
（ｘｉ）前記重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号５１、５２及び５３に記載されており、前記軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号５９、６０及び６１に記載されている；または
（ｘｉｉ）前記重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号５４、５５及び５６に記載されており、前記軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号６２、６３及び６４に記載されている、請求項４に記載の単離されたモノクローナル抗体。
【請求項７】
ヒトＩＬ−２７と特異的に結合する単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分であって、以下：
（ｉ）それぞれ、Ｎ−ＧＧＳＦＳＸＹＸ−Ｃ（配列番号４１６）からなる重鎖ＣＤＲ１、Ｎ−ＩＤＸＳＧＸＴ−Ｃ（配列番号４１７）からなる重鎖ＣＤＲ２、及びＮ−ＡＲＸＸＸＹＹ［Ｘ］ｎ＝０−１ＤＳＳ［Ｘ］ｎ＝４−６ＤＸ−Ｃ（配列番号４１８）からなる重鎖ＣＤＲ３配列；ならびにＮ−ＱＸＸＳＸＹ−Ｃ（配列番号４１９）からなる軽鎖ＣＤＲ１、Ｎ−ＤＸＳ−Ｃ（配列番号４２０）からなる軽鎖ＣＤＲ２、及びＮ−ＱＱＸＸＤＸＰＩＴ−Ｃ（配列番号４２１）からなる軽鎖ＣＤＲ３配列；または
（ｉｉ）それぞれ、Ｎ−ＧＳＦＳＸＹＸＷＳ−Ｃ（配列番号４２２）からなる重鎖ＣＤＲ１、Ｎ−ＳＩＤＸＳＧＸＴＸＹＮＰＳＬＫＳ−Ｃ（配列番号４２３）からなる重鎖ＣＤＲ２、及びＮ−ＡＲＸＸＸＹＹ［Ｘ］ｎ＝０−１ＤＳＳ［Ｘ］ｎ＝４−６ＤＸ−Ｃ（配列番号４１８）からなる重鎖ＣＤＲ３配列；ならびにＮ−ＸＡＳＱＸＸＳＸＹＬＸ−Ｃ（配列番号４２４）からなる軽鎖ＣＤＲ１、Ｎ−ＤＸＳＮＸＸＴ−Ｃ（配列番号４２５）からなる軽鎖ＣＤＲ２、及びＮ−ＱＱＸＸＤＸＰＩＴ−Ｃ（配列番号４２１）からなる軽鎖ＣＤＲ３配列からなる群から選択される重鎖ＣＤＲ及び軽鎖ＣＤＲを含む、前記抗体またはその抗原結合部分。
【請求項８】
（ｉ）それぞれ、前記重鎖ＣＤＲ１が、Ｎ−ＧＧＳＦＳ［Ｒ／Ｄ］Ｙ［Ｅ／Ｙ］−Ｃ（配列番号４２６）からなり、前記重鎖ＣＤＲ２が、Ｎ−ＩＤ［Ｗ／Ｙ］ＳＧ［Ｉ／Ｓ］Ｔ−Ｃ（配列番号４２７）からなり、Ｎ−ＡＲ［Ｄ／Ｌ］［Ｐ／Ｇ］［Ｍ／Ｖ］ＹＹ［−／Ｙ］ＤＳＳ［ＶＳＴＧＳＶ／ＤＬＧＦ］Ｄ［Ｖ／Ｉ］−Ｃ（配列番号４２８）からなる重鎖ＣＤＲ３配列；ならびにＮ−Ｑ［Ｓ／Ｄ］［Ｖ／Ｉ］Ｓ［Ｓ／Ｎ］Ｙ−Ｃ（配列番号４２９）からなる軽鎖ＣＤＲ１、Ｎ−Ｄ［Ｓ／Ａ］Ｓ−Ｃ（配列番号４３０）からなる軽鎖ＣＤＲ２、及びＮ−ＱＱ［Ｄ／Ｙ］［Ｓ／Ｄ］Ｄ［Ｈ／Ｌ］ＰＩＴ−Ｃ（配列番号４３１）からなる軽鎖ＣＤＲ３配列；または、
（ｉｉ）それぞれ、前記重鎖ＣＤＲ１が、Ｎ−ＧＳＦＳ［Ｒ／Ｄ］Ｙ［Ｅ／Ｙ］ＷＳ−Ｃ（配列番号４３２）からなり、前記重鎖ＣＤＲ２が、Ｎ−ＳＩＤ［Ｗ／Ｙ］ＳＧ［Ｉ／Ｓ］Ｔ［Ｎ／Ｅ］ＹＮＰＳＬＫＳ−Ｃ（配列番号４３３）からなり、Ｎ−ＡＲ［Ｄ／Ｌ］［Ｐ／Ｇ］［Ｍ／Ｖ］ＹＹ［−／Ｙ］ＤＳＳ［ＶＳＴＧＳＶ／ＤＬＧＦ］Ｄ［Ｖ／Ｉ］−Ｃ（配列番号４２８）からなる重鎖ＣＤＲ３配列；ならびにＮ−［Ｑ／Ｒ］ＡＳＱ［Ｓ／Ｄ］［Ｖ／Ｉ］Ｓ［Ｓ／Ｎ］ＹＬ［Ｎ／Ａ］−Ｃ（配列番号４３４）からなる軽鎖ＣＤＲ１、Ｎ−Ｄ［Ｓ／Ａ］ＳＮ［Ｒ／Ｌ］［Ａ／Ｅ］Ｔ−Ｃ（配列番号４３５）からなる軽鎖ＣＤＲ２、及びＮ−ＱＱ［Ｄ／Ｙ］［Ｓ／Ｄ］Ｄ［Ｈ／Ｌ］ＰＩＴ−Ｃ（配列番号４３１）からなる軽鎖ＣＤＲ３配列の、請求項７に記載の単離されたモノクローナル抗体。
【請求項９】
（ｉ）前記重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号２２９、２３０及び２３１に記載されており、前記軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号２３７、２３８及び２３９に記載されている；または
（ｉｉ）前記重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号２３２、２３３及び２３４に記載されており、前記軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号２４０、２４１及び２４２に記載されている、請求項７に記載の単離されたモノクローナル抗体。
【請求項１０】
（ｉ）前記重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号２５１、２５２及び２５３に記載されており、前記軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号２５９、２６０及び２６１に記載されている；または
（ｉｉ）前記重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号２５４、２５５及び２５６に記載されており、前記軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号２６２、２６３及び２６４に記載されている、請求項７に記載の単離されたモノクローナル抗体。
【請求項１１】
ヒトＩＬ−２７と特異的に結合する単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分であって、重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号２３、２４及び２５に記載されており、前記軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号２６、２７及び２８に記載されている、からなる群から選択される重鎖ＣＤＲ及び軽鎖ＣＤＲを含む、前記抗体またはその抗原結合部分。
【請求項１２】
ヒトＩＬ−２７と特異的に結合する単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分であって、以下：
（ｉ）重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号３３９、３４０及び３４１に記載されており、前記軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号３４７、３４８及び３４９に記載されている；または
（ｉｉ）重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号３４２、３４３及び３４４に記載されており、前記軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号３５０、３５１及び３５２に記載されている、からなる群から選択される重鎖ＣＤＲ及び軽鎖ＣＤＲを含む、前記抗体またはその抗原結合部分。
【請求項１３】
ヒトＩＬ−２７と特異的に結合する単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分であって、以下：
（ｉ）重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号１８５、１８６及び１８７に記載されており、前記軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号１９３、１９４及び１９５に記載されている；または
（ｉｉ）重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号１８８、１８９及び１９０に記載されており、前記軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号１９６、１９７及び１９８に記載されている、からなる群から選択される重鎖ＣＤＲ及び軽鎖ＣＤＲを含む、前記抗体またはその抗原結合部分。
【請求項１４】
ヒトＩＬ−２７と特異的に結合する単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分であって、以下：
（ｉ）重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号２０７、２０８及び２０９に記載されており、前記軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号２１５、２１６及び２１７に記載されている；または
（ｉｉ）重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号２１０、２１１及び２１２に記載されており、前記軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号２１８、２１９及び２２０に記載されている、からなる群から選択される重鎖ＣＤＲ及び軽鎖ＣＤＲを含む、前記抗体またはその抗原結合部分。
【請求項１５】
ヒトＩＬ−２７と特異的に結合する単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分であって、以下：
（ｉ）重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号２７３、２７４及び２７５に記載されており、前記軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号２８１、２８２及び２８３に記載されている；または
（ｉｉ）重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号２７６、２７７及び２７８に記載されており、前記軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号２８４、２８５及び２８６に記載されている、からなる群から選択される重鎖ＣＤＲ及び軽鎖ＣＤＲを含む、前記抗体またはその抗原結合部分。
【請求項１６】
ヒトＩＬ−２７と特異的に結合する単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分であって、以下：
（ｉ）それぞれ、Ｎ−ＧＦＴＦＳＳＹＧ−Ｃ（配列番号３６１）からなる重鎖ＣＤＲ１、Ｎ−ＩＸＸＤＧＳＸＫ−Ｃ（配列番号４３６）からなる重鎖ＣＤＲ２、及びＮ−ＡＲＸＡＰ［Ｘ］ｎ＝３−８ＤＶ−Ｃ（配列番号４３７）からなる重鎖ＣＤＲ３配列；ならびにＮ−ＱＳＸＳＳＹ−Ｃ（配列番号４３８）からなる軽鎖ＣＤＲ１、Ｎ−ＸＸＳ−Ｃ（配列番号４３９）からなる軽鎖ＣＤＲ２、及びＮ−ＱＱＸＸＸＸＰ［Ｘ］ｎ＝０−１Ｔ−Ｃ（配列番号４４０）からなる軽鎖ＣＤＲ３配列；または
（ｉｉ）それぞれ、Ｎ−ＦＴＦＳＳＹＧＭＸ−Ｃ（配列番号４４１）からなる重鎖ＣＤＲ１、Ｎ−ＸＩＸＸＤＧＳＸＫＹＹＸＤＳＶＫＧ−Ｃ（配列番号４４２）からなる重鎖ＣＤＲ２、及びＮ−ＡＲＸＡＰ［Ｘ］ｎ＝３−８ＤＶ−Ｃ（配列番号４３７）からなる重鎖ＣＤＲ３配列；ならびにＮ−ＲＡＳＱＳＸＳＳＹＬＸ−Ｃ（配列番号４４３）からなる軽鎖ＣＤＲ１、Ｎ−［Ｘ］ｎ＝１−２ＳＳ［Ｘ］ｎ＝３−４−Ｃ（配列番号４４４）からなる軽鎖ＣＤＲ２、及びＮ−ＱＱＸＸＸＸＰ［Ｘ］ｎ＝０−１Ｔ−Ｃ（配列番号４４０）からなる軽鎖ＣＤＲ３配列からなる群から選択される重鎖ＣＤＲ及び軽鎖ＣＤＲを含む、前記抗体またはその抗原結合部分。
【請求項１７】
（ｉ）それぞれ、前記重鎖ＣＤＲ１が、Ｎ−ＧＦＴＦＳＳＹＧ−Ｃ（配列番号３６１）からなり、重鎖ＣＤＲ２が、Ｎ−Ｉ［Ｋ／Ｗ］［Ｑ／Ｙ］ＤＧＳ［Ｅ／Ｎ］Ｋ−Ｃ（配列番号４４５）からなり、重鎖ＣＤＲ３配列が、Ｎ−ＡＲ［Ｄ／Ｇ］ＡＰ［ＷＤＩＹＤＹＹＭ／ＥＹＶ］ＤＶ−Ｃ（配列番号４４６）からなる；及び軽鎖ＣＤＲ１が、Ｎ−ＱＳ［Ｉ／Ｖ］ＳＳＹ−Ｃ（配列番号４４７）からなり、軽鎖ＣＤＲ２が、Ｎ−［Ａ／Ｄ］［Ａ／Ｓ］Ｓ−Ｃ（配列番号４４８）からなり、軽鎖ＣＤＲ３配列が、Ｎ−ＱＱ［Ｓ／Ｙ］［Ｙ／Ｓ］［Ｖ／Ｌ］［Ｐ／Ｙ］Ｐ［Ｗ／−］Ｔ−Ｃ（配列番号４４９）からなる；または（ｉｉ）それぞれ、前記重鎖ＣＤＲ１が、Ｎ−ＦＴＦＳＳＹＧＭ［Ｓ／Ｈ］−Ｃ（配列番号４５０）からなり、重鎖ＣＤＲ２が、Ｎ−［Ｎ／Ｖ］Ｉ［Ｋ／Ｗ］［Ｑ／Ｙ］ＤＧＳ［Ｅ／Ｎ］ＫＹＹ［Ｖ／Ａ］ＤＳＶＫＧ−Ｃ（配列番号４５１）からなり、重鎖ＣＤＲ３配列が、Ｎ−ＡＲ［Ｄ／Ｇ］ＡＰ［ＷＤＩＹＤＹＹＭ／ＥＹＶ］ＤＶ−Ｃ（配列番号４４６）からなる；及び軽鎖ＣＤＲ１が、Ｎ−ＲＡＳＱＳ［Ｉ／Ｖ］ＳＳＹＬ［Ｎ／Ａ］−Ｃ（配列番号４５２）からなり、軽鎖ＣＤＲ２が、Ｎ−［ＡＡ／Ｄ］ＳＳ［ＬＱＳ／ＮＲＡＴ］−Ｃ（配列番号４５３）からなり、軽鎖ＣＤＲ３配列が、Ｎ−ＱＱ［Ｓ／Ｙ］［Ｙ／Ｓ］［Ｖ／Ｌ］［Ｐ／Ｙ］Ｐ［Ｗ／−］Ｔ−Ｃ（配列番号４４９）からなる、請求項１６に記載の単離されたモノクローナル抗体。
【請求項１８】
（ｉ）前記重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号３６１、３６２及び３６３であり、前記軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号３６９、３７０及び３７１である；または
（ｉｉ）前記重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号３６４、３６５及び３６６であり、前記軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号３７２、３７３及び３７４である、請求項１６に記載の単離されたモノクローナル抗体。
【請求項１９】
（ｉ）前記重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号３８３、３８４及び３８５であり、前記軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号３９１、３９２及び３９３である；または
（ｉｉ）前記重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号３８６、３８７及び３８８であり、前記軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号３９４、３９５及び３９６である、請求項１６に記載の単離されたモノクローナル抗体。
【請求項２０】
ヒトＩＬ−２７と特異的に結合する単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分であって、以下：
（ｉ）それぞれ、Ｎ−ＧＦＴＦＸＸＸＸ−Ｃ（配列番号４０８）からなる重鎖ＣＤＲ１、Ｎ−ＩＸＸＸＸＸＸＸ−Ｃ（配列番号４５６）からなる重鎖ＣＤＲ２、及びＮ−ＡＲ［Ｘ］ｎ＝６−１５ＤＸ−Ｃ（配列番号４５８）からなる重鎖ＣＤＲ３配列；ならびにＮ−ＱＳ［Ｘ］ｎ＝１−３ＳＳ［Ｘ］ｎ＝０−４Ｙ−Ｃ（配列番号４６０）からなる軽鎖ＣＤＲ１、Ｎ−ＸＸＳ−Ｃ（配列番号４６２）からなる軽鎖ＣＤＲ２、及びＮ−ＱＱＸＸＸＸＰ［Ｘ］ｎ＝０−１Ｔ−Ｃ（配列番号４６４）からなる軽鎖ＣＤＲ３配列；または
（ｉｉ）それぞれ、Ｎ−ＦＴＦＸＸＸＸＭＸ−Ｃ（配列番号４６６）からなる重鎖ＣＤＲ１、Ｎ−ＸＩＸＸＸＸＸＸＸＸＹＸＤＳＶＫＧ−Ｃ（配列番号４６８）からなる重鎖ＣＤＲ２、及びＮ−ＡＲ［Ｘ］ｎ＝６−１５ＤＸ−Ｃ（配列番号４７０）からなる重鎖ＣＤＲ３配列；ならびにＮ−ＲＡＳＱＳＸＳＳＹＬＸ−Ｃ（配列番号４７２）からなる軽鎖ＣＤＲ１、Ｎ−［Ｘ］ｎ＝１−２Ｓ［Ｘ］ｎ＝４−５−Ｃ（配列番号４７４）からなる軽鎖ＣＤＲ２、及びＮ−ＱＱＸＸＸＸＰ［Ｘ］ｎ＝０−１Ｔ−Ｃ（配列番号４７６）からなる軽鎖ＣＤＲ３配列からなる群から選択される重鎖ＣＤＲ及び軽鎖ＣＤＲを含む、前記抗体またはその抗原結合部分。
【請求項２１】
（ｉ）それぞれ、前記重鎖ＣＤＲ１が、Ｎ−ＧＦＴＦ［Ｓ／Ａ／Ｒ］［Ｓ／Ｒ］［Ｔ／Ｙ］［Ｇ／Ｓ］−Ｃ（配列番号４５４）からなり、重鎖ＣＤＲ２が、Ｎ−Ｉ［Ｓ／Ｋ／Ｗ］［Ｓ／Ｑ／Ｙ］［Ｓ／Ｄ］［Ｓ／Ｇ］［Ｓ／Ａ］［Ｙ／Ｅ／Ｎ］［Ｉ／Ｋ］−Ｃ（配列番号４５５）からなり、重鎖ＣＤＲ３配列が、Ｎ−ＡＲ［ＤＧＧＲＴＳＹＴＡＴＡＨＮＷＦ／ＤＡＰＷＤＩＹＤＹＹＭ／ＧＡＰＥＹＶ］Ｄ［Ｐ／Ｖ］−Ｃ（配列番号４５７）からなる；及び軽鎖ＣＤＲ１が、Ｎ−ＱＳ［ＶＬＦ／Ｉ／Ｖ］ＳＳ［ＮＮＫＮ／−］Ｙ−Ｃ（配列番号４５９）からなり、軽鎖ＣＤＲ２が、Ｎ−［Ｗ／Ａ／Ｄ］［Ａ／Ｓ］Ｓ−Ｃ（配列番号４６１）からなり、軽鎖ＣＤＲ３配列が、Ｎ−ＱＱ［Ｈ／Ｓ／Ｙ］［Ａ／Ｙ／Ｓ］［Ｓ／Ｖ／Ｌ］［Ａ／Ｐ／Ｙ］Ｐ［Ｐ／Ｗ／−］Ｔ−Ｃ（配列番号４６３）からなる；または
（ｉｉ）それぞれ、前記重鎖ＣＤＲ１が、Ｎ−ＦＴＦ［Ｓ／Ａ／Ｒ］［Ｓ／Ｒ］［Ｔ／Ｙ］［Ｇ／Ｓ］Ｍ［Ｎ／Ｓ／Ｈ］−Ｃ（配列番号４６５）からなり、重鎖ＣＤＲ２が、Ｎ−［Ｇ／Ｓ／Ｎ／Ｖ］Ｉ［Ｓ／Ｋ／Ｗ］［Ｓ／Ｑ／Ｙ］［Ｓ／Ｄ］［Ｓ／Ｇ］［Ｓ／Ａ］［Ｙ／Ｅ／Ｎ］［Ｉ／Ｋ］［Ｌ／Ｙ］Ｙ［Ｖ／Ａ］ＤＳＶＫＧ−Ｃ（配列番号４６７）からなり、重鎖ＣＤＲ３配列が、Ｎ−ＡＲ［Ｄ／Ｇ］［ＧＧＲＴＳＹＴＡＴＡＨＮＷＦ／ＡＰＷＤＩＹＤＹＹＭ／ＡＰＥＹＶ］Ｄ［Ｐ／Ｖ］−Ｃ（配列番号４６９）からなる；及び軽鎖ＣＤＲ１が、Ｎ−ＲＡＳＱＳ［Ｉ／Ｖ］ＳＳＹＬ［Ｎ／Ａ］−Ｃ（配列番号４７１）からなり、軽鎖ＣＤＲ２が、Ｎ−［ＷＡ／ＡＡ／Ｄ］Ｓ［ＴＲＥＳ／ＳＬＱＳ／ＳＮＲＡＴ］−Ｃ（配列番号４７３）からなり、軽鎖ＣＤＲ３配列が、Ｎ−ＱＱ［Ｈ／Ｓ／Ｙ］［Ａ／Ｙ／Ｓ］［Ｓ／Ｖ／Ｌ］［Ａ／Ｐ／Ｙ］Ｐ［Ｐ／Ｗ／−］Ｔ−Ｃ（配列番号４７５）からなる、請求項２０に記載の単離されたモノクローナル抗体。
【請求項２２】
前記抗体またはその抗原結合部分が、ＩＬ−２７に拮抗する、請求項１〜２１のいずれか１項に記載の単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分。
【請求項２３】
前記抗体またはその抗原結合部分が、細胞におけるＳＴＡＴ１及び／またはＳＴＡＴ３リン酸化を阻害または低下する、請求項１〜２２のいずれか１項に記載の単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分。
【請求項２４】
前記細胞が、免疫細胞である、請求項２３に記載の単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分。
【請求項２５】
前記細胞が、がん細胞である、請求項２３に記載の単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分。
【請求項２６】
前記抗体またはその抗原結合部分が、細胞におけるＣＤ１６１発現の阻害を阻害または低下する、請求項１〜２５のいずれか１項に記載の単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分。
【請求項２７】
前記細胞が、免疫細胞である、請求項２６に記載の単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分。
【請求項２８】
前記抗体またはその抗原結合部分が、細胞におけるＰＤ−Ｌ１及び／またはＴＩＭ−３発現を阻害または低下する、請求項１〜２７のいずれか１項に記載の単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分。
【請求項２９】
前記細胞が、免疫細胞である、請求項２８に記載の単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分。
【請求項３０】
前記細胞が、がん細胞である、請求項２９に記載の単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分。
【請求項３１】
前記細胞が、がん細胞であり、前記抗体またはその抗原結合部分が、がん細胞におけるＰＤ−Ｌ１発現を阻害または低下する、請求項２９に記載の単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分。
【請求項３２】
前記抗体またはその抗原結合部分が、細胞からの１つまたは複数のサイトカインの前記ＰＤ−１媒介性分泌を誘導または増強する、請求項１〜３１のいずれか１項に記載の単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分。
【請求項３３】
前記１つまたは複数のサイトカインが、ＩＦＮｇ、ＴＮＦαまたはＩＬ−６である、請求項３２に記載の単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分。
【請求項３４】
前記１つまたは複数のサイトカインが、ＩＦＮｇ、ＩＬ−１７、ＴＮＦαまたはＩＬ−６である、請求項３３に記載の単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分。
【請求項３５】
前記１つまたは複数のサイトカインが、ＴＮＦαである、請求項３３に記載の単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分。
【請求項３６】
前記細胞が、免疫細胞である、請求項３２〜３５のいずれか１項に記載の単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分。
【請求項３７】
前記抗体が、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＭ、ＩｇＡ１、ＩｇＡ２、ＩｇＤ、及びＩｇＥ抗体からなる群から選択される、請求項１〜３６のいずれか１項に記載の単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分。
【請求項３８】
前記抗体が、ＩｇＧ１抗体またはＩｇＧ４抗体である、請求項３７に記載の単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分。
【請求項３９】
前記抗体が、野生型ＩｇＧ１重鎖定常領域を含む、請求項３８に記載の単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分。
【請求項４０】
前記抗体が、野生型ＩｇＧ４重鎖定常領域を含む、請求項３８に記載の単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分。
【請求項４１】
前記抗体が、少なくとも１つの突然変異を含むＦｃドメインを含む、請求項１〜４０のいずれか１項に記載の単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分。
【請求項４２】
前記抗体が、突然変異型ＩｇＧ１重鎖定常領域を含む、請求項４１に記載の単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分。
【請求項４３】
前記抗体が、突然変異型ＩｇＧ４重鎖定常領域を含む、請求項４１に記載の単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分。
【請求項４４】
前記突然変異型ＩｇＧ４重鎖定常領域が、ＥＵナンバリングに従って、置換Ｓ２２８Ｐ、Ｌ２３５Ｅ、Ｌ２３５Ａのいずれか１つ、またはその組み合わせを含む、請求項４３に記載の単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分。
【請求項４５】
請求項１〜４４のいずれか１項に記載の抗体またはその抗原結合部分と実質的に同じエピトープに結合する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分。
【請求項４６】
請求項１〜４４のいずれか１項に記載の抗体またはその抗原結合部分が結合するアミノ酸残基の少なくとも１つに結合する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分。
【請求項４７】
前記抗体またはその抗原結合部分が結合する前記エピトープの突然変異が、前記抗体またはその抗原結合部分及び請求項１〜４４のいずれか１項に記載の抗体またはその抗原結合部分の両方への結合を、阻害、低下、または遮断する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分。
【請求項４８】
ＩＬ−２７上のエピトープに結合し、前記エピトープが、表１２に記載する抗体分子が結合するエピトープと同じであるまたは類似している、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分。
【請求項４９】
ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分であって、以下：
（ｉ）それぞれ、配列番号５１、５２及び５３に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号５９、６０及び６１に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｉｉ）それぞれ、配列番号７３、７４及び７５に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号８１、８２及び８３に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｉｉｉ）それぞれ、配列番号９５、９６及び９７に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号１０３、１０４及び１０５に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｉｖ）それぞれ、配列番号１１７、１１８及び１１９に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号１２５、１２６及び１２７に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｖ）それぞれ、配列番号１３９、１４０及び１４１に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号１４７、１４８及び１４９に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｖｉ）それぞれ、配列番号１６１、１６２及び１６３に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号１６９、１７０及び１７１に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｖｉｉ）それぞれ、配列番号１８５、１８６及び１８７に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号１９３、１９４及び１９５に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｖｉｉｉ）それぞれ、配列番号２０７、２０８及び２０９に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号２１５、２１６及び２１７に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｉｘ）それぞれ、配列番号２２９、２３０及び２３１に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号２３７、２３８及び２３９に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｘ）それぞれ、配列番号２５１、２５２及び２５３に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号２５９、２６０及び２６１に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｘｉ）それぞれ、配列番号２７３、２７４及び２７５に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号２８１、２８２及び２８３に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｘｉｉ）それぞれ、配列番号２９５、２９６及び２９７に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号３０３、３０４及び３０５に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｘｉｉｉ）それぞれ、配列番号３１７、３１８及び３１９に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号３２５、３２６及び３２７に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｘｉｖ）それぞれ、配列番号３３９、３４０及び３４１に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号３４７、３４８及び３４９に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｘｖ）それぞれ、配列番号３６１、３６２及び３６３に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号３６９、３７０及び３７１に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；ならびに
（ｘｖｉ）それぞれ、配列番号３８３、３８４及び３８５に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号３９１、３９２及び３９３に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列からなる群から選択される重鎖ＣＤＲ及び軽鎖ＣＤＲを含む、前記抗体またはその抗原結合部分。
【請求項５０】
ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分であって、以下：
（ｉ）それぞれ、配列番号５４、５５及び５６に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号６２、６３及び６４に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｉｉ）それぞれ、配列番号７６、７７及び７８に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号８４、８５及び８６に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｉｉｉ）それぞれ、配列番号９８、９９及び１００に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号１０６、１０７及び１０８に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｉｖ）それぞれ、配列番号１２０、１２１及び１２２に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号１２８、１２９及び１３０に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｖ）それぞれ、配列番号１４２、１４３及び１４４に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号１５０、１５１及び１５２に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｖｉ）それぞれ、配列番号１６４、１６５及び１６６に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号１７２、１７３及び１７４に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｖｉｉ）それぞれ、配列番号１８８、１８９及び１９０に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号１９６、１９７及び１９８に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｖｉｉｉ）それぞれ、配列番号２１０、２１１及び２１２に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号２１８、２１９及び２２０に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｉｘ）それぞれ、配列番号２３２、２３３及び２３４に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号２４０、２４１及び２４２に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｘ）それぞれ、配列番号２５４、２５５及び２５６に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号２６２、２６３及び２６４に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｘｉ）それぞれ、配列番号２７６、２７７及び２７８に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号２８４、２８５及び２８６に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｘｉｉ）それぞれ、配列番号２９８、２９９及び３００に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号３０６、３０７及び３０８に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｘｉｉｉ）それぞれ、配列番号３２０、３２１及び３２２に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号３２８、３２９及び３３０に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｘｉｖ）それぞれ、配列番号３４２、３４３及び３４４に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号３５０、３５１及び３５２に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｘｖ）それぞれ、配列番号３６４、３６５及び３６６に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号３７２、３７３及び３７４に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；ならびに
（ｘｖｉ）それぞれ、配列番号３８６、３８７及び３８８に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号３９４、３９５及び３９６に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列からなる群から選択される重鎖ＣＤＲ及び軽鎖ＣＤＲを含む、前記抗体またはその抗原結合部分。
【請求項５１】
ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分であって、重鎖ＣＤＲ及び軽鎖ＣＤＲを含み、前記重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号１６４、１６５及び１６６に記載されており、前記軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号１７２、１７３及び１７４に記載されている、前記抗体またはその抗原結合部分。
【請求項５２】
ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分であって、重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含み、前記重鎖可変領域が、配列番号５７、７９、１０１、１２３、１４５、１６７、１９１、２１３、２３５、２５７、２７９、３０１、３２３、３４５、３６７及び３８９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域が、配列番号６５、８７、１０９、１３１、１５３、１７５、１９９、２２１、２４３、２６５、２８７、３０９、３３１、３５３、３７５及び３９７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、前記抗体またはその抗原結合部分。
【請求項５３】
ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分であって、以下：
（ｉ）それぞれ、配列番号５７及び６５；
（ｉｉ）それぞれ、配列番号７９及び８７；
（ｉｉｉ）それぞれ、配列番号１０１及び１０９；
（ｉｖ）それぞれ、配列番号１２３及び１３１；
（ｖ）それぞれ、配列番号１４５及び１５３；
（ｖｉ）それぞれ、配列番号１６７及び１７５；
（ｖｉｉ）それぞれ、配列番号１９１及び１９９；
（ｖｉｉｉ）それぞれ、配列番号２１３及び２２１；
（ｉｘ）それぞれ、配列番号２３５及び２４３；
（ｘ）それぞれ、配列番号２５７及び２６５；
（ｘｉ）それぞれ、配列番号２７９及び２８７；
（ｘｉｉ）それぞれ、配列番号３０１及び３０９；
（ｘｉｉｉ）それぞれ、配列番号３２３及び３３１；
（ｘｉｖ）それぞれ、配列番号３４５及び３５３；
（ｘｖ）それぞれ、配列番号３６７及び３７５；ならびに
（ｘｖｉ）それぞれ、配列番号３８９及び３９７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含む、前記抗体またはその抗原結合部分。
【請求項５４】
ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分であって、重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含み、前記重鎖可変領域が、配列番号５７、７９、１０１、１２３、１４５、１６７、１９１、２１３、２３５、２５７、２７９、３０１、３２３、３４５、３６７及び３８９からなる群から選択されるアミノ酸配列に、少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域が、配列番号６５、８７、１０９、１３１、１５３、１７５、１９９、２２１、２４３、２６５、２８７、３０９、３３１、３５３、３７５及び３９７からなる群から選択されるアミノ酸配列に、少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含む、前記抗体またはその抗原結合部分。
【請求項５５】
ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分であって、以下：
（ｉ）それぞれ、配列番号５７及び６５；
（ｉｉ）それぞれ、配列番号７９及び８７；
（ｉｉｉ）それぞれ、配列番号１０１及び１０９；
（ｉｖ）それぞれ、配列番号１２３及び１３１；
（ｖ）それぞれ、配列番号１４５及び１５３；
（ｖｉ）それぞれ、配列番号１６７及び１７５；
（ｖｉｉ）それぞれ、配列番号１９１及び１９９；
（ｖｉｉｉ）それぞれ、配列番号２１３及び２２１；
（ｉｘ）それぞれ、配列番号２３５及び２４３；
（ｘ）それぞれ、配列番号２５７及び２６５；
（ｘｉ）それぞれ、配列番号２７９及び２８７；
（ｘｉｉ）それぞれ、配列番号３０１及び３０９；
（ｘｉｉｉ）それぞれ、配列番号３２３及び３３１；
（ｘｉｖ）それぞれ、配列番号３４５及び３５３；
（ｘｖ）それぞれ、配列番号３６７及び３７５；ならびに
（ｘｖｉ）それぞれ、配列番号３８９及び３９７からなる群から選択されるアミノ酸配列に、少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含む、前記抗体またはその抗原結合部分。
【請求項５６】
ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分であって、それぞれ、配列番号１６７及び１７５に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含む、前記抗体またはその抗原結合部分。
【請求項５７】
ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分であって、それぞれ、配列番号１６７及び１７５に記載のアミノ酸配列に、少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含む、前記抗体またはその抗原結合部分。
【請求項５８】
ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分であって、重鎖及び軽鎖を含み、前記重鎖が、配列番号６７、８９、１１１、１３３、１５５、１７７、２０１、２４３、２４５、２６７、２８９、３１１、３３３、３５５、３７７及び３９９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖が、配列番号６９、９１、１１３、１３５、１５７、１７９、２０３、２２５、２４７、２６９、２９１、３１３、３３５、３５７、３７９及び４０１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、前記抗体またはその抗原結合部分。
【請求項５９】
ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分であって、重鎖及び軽鎖を含み、前記重鎖が、配列番号６７、８９、１１１、１３３、１５５、１７７、２０１、２４３、２４５、２６７、２８９、３１１、３３３、３５５、３７７及び３９９からなる群から選択されるアミノ酸配列に、少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖が、配列番号６９、９１、１１３、１３５、１５７、１７９、２０３、２２５、２４７、２６９、２９１、３１３、３３５、３５７、３７９及び４０１からなる群から選択されるアミノ酸配列に、少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含む、前記抗体またはその抗原結合部分。
【請求項６０】
ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分であって、重鎖及び軽鎖を含み、前記重鎖が、配列番号７１、９３、１１５、１３７、１５９、１８１、２０５、２２７、２４９、２７１、２９３、３１５、３３７、３５９、３８１及び４０３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖が、配列番号６９、９１、１１３、１３５、１５７、１７９、２０３、２２５、２４７、２６９、２９１、３１３、３３５、３５７、３７９及び４０１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、前記抗体またはその抗原結合部分。
【請求項６１】
ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分であって、重鎖及び軽鎖を含み、前記重鎖が、配列番号７１、９３、１１５、１３７、１５９、１８１、２０５、２２７、２４９、２７１、２９３、３１５、３３７、３５９、３８１及び４０３からなる群から選択されるアミノ酸配列に、少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖が、配列番号６９、９１、１１３、１３５、１５７、１７９、２０３、２２５、２４７、２６９、２９１、３１３、３３５、３５７、３７９及び４０１からなる群から選択されるアミノ酸配列に、少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含む、前記抗体またはその抗原結合部分。
【請求項６２】
ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分であって、以下：
（ｉ）それぞれ、配列番号６７及び６９；
（ｉｉ）それぞれ、配列番号８９及び９１；
（ｉｉｉ）それぞれ、配列番号１１１及び１１３；
（ｉｖ）それぞれ、配列番号１３３及び１３５；
（ｖ）それぞれ、配列番号１５５及び１５７；
（ｖｉ）それぞれ、配列番号１７７及び１７９；
（ｖｉｉ）それぞれ、配列番号２０１及び２０３；
（ｖｉｉｉ）それぞれ、配列番号２４３及び２２５；
（ｉｘ）それぞれ、配列番号２４５及び２４７；
（ｘ）それぞれ、配列番号２６７及び２６９；
（ｘｉ）それぞれ、配列番号２８９及び２９１；
（ｘｉｉ）それぞれ、配列番号３１１及び３１３；
（ｘｉｉｉ）それぞれ、配列番号３３３及び３３５；
（ｘｉｖ）それぞれ、配列番号３５５及び３５７；
（ｘｖ）それぞれ、配列番号３７７及び３７９；ならびに
（ｘｖｉ）それぞれ、配列番号３９９及び４０１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖及び軽鎖を含む、前記抗体またはその抗原結合部分。
【請求項６３】
ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分であって、以下：
（ｉ）それぞれ、配列番号６７及び６９；
（ｉｉ）それぞれ、配列番号８９及び９１；
（ｉｉｉ）それぞれ、配列番号１１１及び１１３；
（ｉｖ）それぞれ、配列番号１３３及び１３５；
（ｖ）それぞれ、配列番号１５５及び１５７；
（ｖｉ）それぞれ、配列番号１７７及び１７９；
（ｖｉｉ）それぞれ、配列番号２０１及び２０３；
（ｖｉｉｉ）それぞれ、配列番号２４３及び２２５；
（ｉｘ）それぞれ、配列番号２４５及び２４７；
（ｘ）それぞれ、配列番号２６７及び２６９；
（ｘｉ）それぞれ、配列番号２８９及び２９１；
（ｘｉｉ）それぞれ、配列番号３１１及び３１３；
（ｘｉｉｉ）それぞれ、配列番号３３３及び３３５；
（ｘｉｖ）それぞれ、配列番号３５５及び３５７；
（ｘｖ）それぞれ、配列番号３７７及び３７９；ならびに
（ｘｖｉ）それぞれ、配列番号３９９及び４０１からなる群から選択されるアミノ酸配列に、少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含む重鎖及び軽鎖を含む、前記抗体またはその抗原結合部分。
【請求項６４】
ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分であって、以下：
（ｉ）それぞれ、配列番号７１及び６９；
（ｉｉ）それぞれ、配列番号９３及び９１；
（ｉｉｉ）それぞれ、配列番号１１５及び１１３；
（ｉｖ）それぞれ、配列番号１３７及び１３５；
（ｖ）それぞれ、配列番号１５９及び１５７；
（ｖｉ）それぞれ、配列番号１８１及び１７９；
（ｖｉｉ）それぞれ、配列番号２０５及び２０３；
（ｖｉｉｉ）それぞれ、配列番号２２７及び２２５；
（ｉｘ）それぞれ、配列番号２４９及び２４７；
（ｘ）それぞれ、配列番号２７１及び２６９；
（ｘｉ）それぞれ、配列番号２９３及び２９１；
（ｘｉｉ）それぞれ、配列番号３１５及び３１３；
（ｘｉｉｉ）それぞれ、配列番号３３７及び３３５；
（ｘｉｖ）それぞれ、配列番号３５９及び３５７；
（ｘｖ）それぞれ、配列番号３８１及び３７９；ならびに
（ｘｖｉ）それぞれ、配列番号４０３及び４０１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖及び軽鎖を含む、前記抗体またはその抗原結合部分。
【請求項６５】
ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分であって、以下：
（ｉ）それぞれ、配列番号７１及び６９；
（ｉｉ）それぞれ、配列番号９３及び９１；
（ｉｉｉ）それぞれ、配列番号１１５及び１１３；
（ｉｖ）それぞれ、配列番号１３７及び１３５；
（ｖ）それぞれ、配列番号１５９及び１５７；
（ｖｉ）それぞれ、配列番号１８１及び１７９；
（ｖｉｉ）それぞれ、配列番号２０５及び２０３；
（ｖｉｉｉ）それぞれ、配列番号２２７及び２２５；
（ｉｘ）それぞれ、配列番号２４９及び２４７；
（ｘ）それぞれ、配列番号２７１及び２６９；
（ｘｉ）それぞれ、配列番号２９３及び２９１；
（ｘｉｉ）それぞれ、配列番号３１５及び３１３；
（ｘｉｉｉ）それぞれ、配列番号３３７及び３３５；
（ｘｉｖ）それぞれ、配列番号３５９及び３５７；
（ｘｖ）それぞれ、配列番号３８１及び３７９；ならびに
（ｘｖｉ）それぞれ、配列番号４０３及び４０１からなる群から選択されるアミノ酸配列に、少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含む重鎖及び軽鎖を含む、前記抗体またはその抗原結合部分。
【請求項６６】
ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分であって、それぞれ、配列番号１７７及び１７９に記載のアミノ酸配列を含む重鎖及び軽鎖を含む、前記抗体またはその抗原結合部分。
【請求項６７】
ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分であって、それぞれ、配列番号１７７及び１７９に記載のアミノ酸配列に、少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含む重鎖及び軽鎖を含む、前記抗体またはその抗原結合部分。
【請求項６８】
ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分であって、それぞれ、配列番号１８１及び１７９に記載のアミノ酸配列を含む重鎖及び軽鎖を含む、前記抗体またはその抗原結合部分。
【請求項６９】
ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分であって、それぞれ、配列番号１８１及び１７９に記載のアミノ酸配列に、少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含む重鎖及び軽鎖を含む、前記抗体またはその抗原結合部分。
【請求項７０】
先行請求項のいずれか１項に記載の単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分、及び医薬的に許容可能な担体を含む医薬組成物。
【請求項７１】
請求項１〜６９のいずれか１項に記載の単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分の軽鎖、重鎖、または軽鎖及び重鎖の両方をコードするヌクレオチド配列を含む核酸。
【請求項７２】
請求項７１に記載の核酸を含む、発現ベクター。
【請求項７３】
請求項７２に記載の発現ベクターで形質転換された細胞。
【請求項７４】
ヒトＩＬ−２７と特異的に結合するモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を産生する方法であって、請求項７３に記載の細胞を、前記モノクローナル抗体またはその抗原結合部分の発現を可能にする条件下で維持することを含む、前記方法。
【請求項７５】
前記モノクローナル抗体またはその抗原結合部分を得ることをさらに含む、請求項７４に記載の方法。
【請求項７６】
細胞におけるＳＴＡＴ１及び／またはＳＴＡＴ３リン酸化を阻害または低下する方法であって、前記細胞を、請求項１〜６９のいずれか１項に記載の単離されたモノクローナル抗体または抗原結合フラグメントと接触させることを含み、前記抗体またはその抗原結合部分が、細胞におけるＳＴＡＴ１及び／またはＳＴＡＴ３リン酸化を阻害または低下する、前記方法。
【請求項７７】
細胞におけるＣＤ１６１発現の阻害を阻害または低下する方法であって、前記細胞を、請求項１〜６９のいずれか１項に記載の単離されたモノクローナル抗体または抗原結合フラグメントと接触させることを含み、前記抗体またはその抗原結合部分が、細胞におけるＣＤ１６１発現の阻害を阻害または低下する、前記方法。
【請求項７８】
細胞におけるＰＤ−Ｌ１及び／またはＴＩＭ−３発現を阻害または低下する方法であって、前記細胞を、請求項１〜６９のいずれか１項に記載の単離されたモノクローナル抗体または抗原結合フラグメントと接触させることを含み、前記抗体またはその抗原結合部分が、細胞におけるＰＤ−Ｌ１及び／またはＴＩＭ−３発現を阻害またはする、前記方法。
【請求項７９】
細胞からの１つまたは複数のサイトカインの分泌を誘導または増強する方法であって、前記細胞を、請求項１〜６９のいずれか１項に記載の単離されたモノクローナル抗体または抗原結合フラグメントと接触させることを含み、前記抗体またはその抗原結合部分が、細胞からの１つまたは複数のサイトカインのＰＤ−１媒介性分泌を誘導または増強する、前記方法。
【請求項８０】
対象の免疫応答を刺激する方法であって、前記対象に、有効量の請求項１〜６９のいずれか１項に記載の単離されたモノクローナル抗体もしくは抗原結合フラグメントまたは請求項７０に記載の医薬組成物を投与することを含む、前記方法。
【請求項８１】
対象のがんを処置する方法であって、前記対象に、有効量の請求項１〜６９のいずれか１項に記載の単離されたモノクローナル抗体もしくは抗原結合フラグメントまたは請求項７０に記載の医薬組成物を投与することを含む、前記方法。
【請求項８２】
対象の免疫応答を刺激するまたはがんを処置する方法であって、前記対象に、有効量の請求項１〜６９のいずれか１項に記載の単離されたモノクローナル抗体もしくは抗原結合フラグメントまたは請求項７０に記載の医薬組成物を投与することを含み、前記抗体もしくはその抗原結合部分または前記医薬組成物が、細胞におけるＳＴＡＴ１及び／またはＳＴＡＴ３リン酸化を阻害または低下し、それによって前記免疫応答を刺激するまたは前記がんを処置する、前記方法。
【請求項８３】
対象の免疫応答を刺激するまたはがんを処置する方法であって、前記対象に、有効量の請求項１〜６９のいずれか１項に記載の単離されたモノクローナル抗体もしくは抗原結合フラグメントまたは請求項７０に記載の医薬組成物を投与することを含み、前記抗体もしくはその抗原結合部分または前記医薬組成物が、細胞におけるＣＤ１６１発現の阻害を阻害または低下し、それによって前記免疫応答を刺激するまたは前記がんを処置する、前記方法。
【請求項８４】
対象の免疫応答を刺激するまたはがんを処置する方法であって、前記対象に、有効量の請求項１〜６９のいずれか１項に記載の単離されたモノクローナル抗体もしくは抗原結合フラグメントまたは請求項７０に記載の医薬組成物を投与することを含み、前記抗体もしくはその抗原結合部分または前記医薬組成物が、細胞上のＰＤ−Ｌ１及び／またはＴＩＭ−３発現を阻害または低下し、それによって前記免疫応答を刺激するまたは前記がんを処置する、前記方法。
【請求項８５】
対象の免疫応答を刺激するまたはがんを処置する方法であって、前記対象に、有効量の請求項１〜６９のいずれか１項に記載の単離されたモノクローナル抗体もしくは抗原結合フラグメントまたは請求項７０に記載の医薬組成物を投与することを含み、前記抗体もしくはその抗原結合部分または前記医薬組成物が、細胞からの１つまたは複数のサイトカインのＰＤ−１媒介性分泌を誘導または増強し、それによって前記免疫応答を刺激するまたは前記がんを処置する、前記方法。
【請求項８６】
前記がんが、肺癌（例えば、非小細胞肺癌）、肉腫、精巣癌、卵巣癌、膵臓癌、乳癌（例えば、トリプルネガティブ乳癌）、黒色腫、頭頸部癌（例えば、扁平上皮性頭頸部癌）、結腸直腸癌、膀胱癌、子宮内膜癌、前立腺癌、甲状腺癌、肝細胞癌、胃癌、脳癌、リンパ腫（例えば、ＤＬ−ＢＣＬ）、白血病（例えば、ＡＭＬ）または腎癌（例えば、腎細胞癌、例えば、腎明細胞癌）から選択される、請求項８１〜８５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８７】
抗ＰＤ−１抗体の１つまたは複数の活性を増強する（例えば、ＰＤ−１媒介性サイトカイン分泌を増強する、抗ＰＤ−１媒介性ＴＮＦα分泌を増強する、抗ＰＤ−１抗体に曝露された細胞からの抗ＰＤ−１媒介性ＩＬ−６分泌を増強する）方法であって、細胞を、抗ＰＤ−１抗体と同時並行または連続して、請求項１〜６９のいずれか１項に記載の抗体またはその抗原結合部分に曝露することを含み、それによって抗ＰＤ−１抗体の１つまたは複数の活性を増強する、前記方法。
【請求項８８】
抗ＰＤ−１抗体、及び請求項１〜６９のいずれか１項に記載の抗体またはその抗原結合部分、及び医薬的に許容可能な担体を含む、医薬組成物。
【請求項８９】
同時並行または順次投与のための、抗ＰＤ−１抗体及び請求項１〜６９のいずれか１項に記載の抗体またはその抗原結合部分、及びその使用説明書を含む、キット。
【請求項９０】
前記単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分が、１つまたは複数の追加の治療剤または手技と組み合わせて投与され、前記第二の治療剤または手技が、化学療法、標的抗がん療法、腫瘍溶解薬、細胞傷害剤、免疫系療法、サイトカイン、外科的手技、放射線手技、共刺激分子の活性化剤、阻害分子の阻害剤、ワクチン、もしくは細胞性免疫療法、またはそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項８０〜８６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９１】
前記１つまたは複数の追加の治療剤が、ＰＤ−１アンタゴニスト、ＰＤ−Ｌ１阻害剤、ＴＩＭ−３阻害剤、ＬＡＧ−３阻害剤、ＴＩＧＩＴ阻害剤、ＣＤ１１２Ｒ阻害剤、ＴＡＭ阻害剤、ＳＴＩＮＧアゴニスト、４−１ＢＢアゴニスト、またはそれらの組み合わせである、請求項９０に記載の方法。
【請求項９２】
前記１つまたは複数の追加の治療剤が、ＰＤ−１アンタゴニストである、請求項９１に記載の方法。
【請求項９３】
前記ＰＤ−１アンタゴニストが、ＰＤＲ００１、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、ピディリズマブ、ＭＥＤＩ０６８０、ＲＥＧＮ２８１０、ＴＳＲ−０４２、ＰＦ−０６８０１５９１、及びＡＭＰ−２２４からなる群から選択される、請求項９２に記載の方法。
【請求項９４】
前記ＰＤ−Ｌ１阻害剤が、ＦＡＺ０５３、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、及びＢＭＳ−９３６５５９からなる群から選択される、請求項９１に記載の方法。
【請求項９５】
前記１つまたは複数の追加の治療剤が、スニチニブ（Ｓｕｔｅｎｔ（登録商標））、カボザンチニブ（Ｃａｂｏｍｅｔｙｘ（登録商標））、アキシチニブ（Ｉｎｌｙｔａ（登録商標））、レンバチニブ（Ｌｅｎｖｉｍａ（登録商標））、エベロリムス（Ａｆｉｎｉｔｏｒ（登録商標））、ベバシズマブ（Ａｖａｓｔｉｎ（登録商標））、エパカドスタット、ＮＫＴＲ−２１４（ＣＤ−１２２バイアスアゴニスト）、チボザニブ（Ｆｏｔｉｖｄａ（登録商標））、アベキシノスタット、イピリムマブ（Ｙｅｒｖｏｙ（登録商標））、トレメリムマブ、パゾパニブ（Ｖｏｔｒｉｅｎｔ（登録商標））、ソラフェニブ（Ｎｅｘａｖａｒ（登録商標））、テムシロリムス（Ｔｏｒｉｓｅｌ（登録商標））、ラムシルマブ（Ｃｙｒａｍｚａ（登録商標））、ニラパリブ、サボリチニブ、ボロラニブ（Ｘ−８２）、レゴラフェニブ（Ｓｔｉｖａｒｇｏ（登録商標））、ドナフェニブ（マルチキナーゼ阻害剤）、カムレリズマブ（ＳＨＲ−１２１０）、ペキサスチモジンデバシレプベク（ＪＸ−５９４）、ラムシルマブ（Ｃｙｒａｍｚａ（登録商標））、アパチニブ（ＹＮ９６８Ｄ１）、カプセル化ドキソルビシン（Ｔｈｅｒｍｏｄｏｘ（登録商標））、チバンチニブ（ＡＲＱ１９７）、ＡＤＩ−ＰＥＧ２０、ビニメチニブ、アパチニブメシレート、ニンテダニブ、リリルマブ、ニボルマブ（Ｏｐｄｉｖｏ（登録商標））、ペンブロリズマブ（Ｋｅｙｔｒｕｄａ（登録商標））、アテゾリズマブ（Ｔｅｃｅｎｔｒｉｑ（登録商標））、アベルマブ（Ｂａｖｅｎｃｉｏ（登録商標））、デュルバルマブ（Ｉｍｆｉｍｚｉ（登録商標））、セミプリマブ−ｒｗｌｃ（Ｌｉｂｔａｙｏ（登録商標））、チスレリズマブ、及びスパルタリズマブからなる群から選択される、請求項９１に記載の方法。
【請求項９６】
前記１つまたは複数の追加の治療剤が、ＴＩＭ−３阻害剤であり、任意選択で、前記ＴＩＭ−３阻害剤が、ＭＧＢ４５３またはＴＳＲ−０２２である、請求項９１に記載の方法。
【請求項９７】
前記１つまたは複数の追加の治療剤が、ＬＡＧ−３阻害剤であり、任意選択で、前記ＬＡＧ−３阻害剤が、ＬＡＧ５２５、ＢＭＳ−９８６０１６、及びＴＳＲ−０３３からなる群から選択される、請求項９１に記載の方法。
【請求項９８】
前記１つまたは複数の追加の治療剤が、ＴＩＧＩＴ阻害剤である、請求項９１に記載の方法。
【請求項９９】
前記１つまたは複数の追加の治療剤が、ＣＤ１１２Ｒ阻害剤である、請求項９１に記載の方法。
【請求項１００】
前記１つまたは複数の追加の治療剤が、ＴＡＭ（Ａｘｌ、Ｍｅｒ、Ｔｙｒｏ）阻害剤である、請求項９１に記載の方法。
【請求項１０１】
前記１つまたは複数の追加の治療剤が、４−１ＢＢアゴニストである、請求項９１に記載の方法。
【請求項１０２】
前記１つまたは複数の追加の治療剤が、チロシンキナーゼ阻害剤（ＴＫＩ）である、請求項９１に記載の方法。
【請求項１０３】
対象からの試料中のＩＬ−２７またはＥＢＩ３を検出する方法であって、（ａ）前記対象からの試料を、検出抗体と、ＩＬ−２７またはＥＢＩ３が前記試料中に存在する場合に、前記検出抗体が検出抗体−ＥＢＩ３複合体を形成することを可能にする条件下で接触させること、ここで前記検出抗体は請求項１〜６９のいずれか１項に記載の抗体またはその抗原結合フラグメントである、及び（ｂ）存在する場合、ステップ（ａ）において産生された前記複合体の存在を検出することを含む、前記方法。
【請求項１０４】
対象のＩＬ−２７関連がんを検出する方法であって、（ａ）ＩＬ−２７関連がんを有する疑いのある対象からの試料を、検出抗体と、ＩＬ−２７またはＥＢＩ３が前記試料中に存在する場合に、前記検出抗体が検出抗体−ＥＢＩ３複合体を形成することを可能にする条件下で接触させるステップ、ここで前記検出抗体は請求項１〜６９のいずれか１項に記載の抗体またはその抗原結合部分である、及び（ｂ）存在する場合、ステップ（ａ）において産生された前記複合体の存在を検出するステップを含む、前記方法。
【請求項１０５】
前記検出抗体が、検出可能な標識に結合している、請求項１０３または１０４に記載の方法。
【請求項１０６】
前記方法が、前記試料を、捕捉抗体と接触させて、ＩＬ−２７またはＥＢＩ３が前記試料中に存在する場合に、ＩＬ−２７またはＥＢＩ３及び前記捕捉抗体を含む複合体を産生することをさらに含み、前記捕捉抗体が、請求項１〜６９のいずれか１項に記載の抗体またはその抗原結合部分である、請求項１０３〜１０５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０７】
前記捕捉抗体が、固体支持体上に固定化されている、請求項１０６に記載の方法。
【請求項１０８】
前記試料を、前記検出抗体の前に前記捕捉抗体と接触させる、請求項１０３〜１０７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０９】
前記試料が、体液試料である、請求項１０３〜１０８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１０】
前記流体試料が、血液、血清、血漿、細胞溶解液または組織溶解液である、請求項１０９に記載の方法。
【請求項１１１】
前記がんが、腎細胞癌（ＲＣＣ）、肝細胞癌（ＨＣＣ）、肺癌、胃食道癌、卵巣癌、子宮内膜癌、黒色腫、白血病及びリンパ腫から選択される、請求項１０４〜１１０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１２】
前記がんが、腎細胞癌（ＲＣＣ）である、請求項１１１に記載の方法。
【請求項１１３】
前記がんが、肝細胞癌（ＨＣＣ）である、請求項１１１に記載の方法。
【請求項１１４】
前記がんが、白血病及びリンパ腫から選択される、請求項１１１に記載の方法。
【請求項１１５】
前記がんが、卵巣癌である、請求項１１１に記載の方法。
【請求項１１６】
対象の免疫応答を刺激するため、または対象のがんを処置するため、任意選択で１つまたは複数の追加の治療剤または手技と組み合わせて使用するための、請求項１〜６９のいずれか１項に記載の単離されたモノクローナル抗体もしくはその抗原結合部分、または請求項７０に記載の医薬組成物の使用。
【請求項１１７】
請求項１〜６９のいずれか１項に記載の単離されたモノクローナル抗体もしくはその抗原結合部分、または請求項７０に記載の医薬組成物、及び対象の免疫応答の刺激または対象のがんの処置における使用説明書を、１つまたは複数の追加の治療剤または手技との併用説明書を任意選択で伴って含む、キット。
【請求項１１８】
請求項１〜６９のいずれか１項に記載の単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分及び対照からの試料中のＩＬ−２７を検出するための使用説明書を、対象のＩＬ−２７関連がんを検出するための使用説明書を任意選択で伴って含む、キット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１８年３月２２日に出願された米国仮特許出願第６２／６４６，４９６号の利益を主張するものであり、この内容全体が、参照により本明細書に組み込まれる。
【０００２】
本開示は、概して、ＩＬ−２７シグナル伝達を調節するための組成物及び方法に関する。より具体的には、本開示は、ＩＬ−２７に結合し、ＩＬ−２７シグナル伝達を調節する免疫原性組成物（例えば、抗体、抗体フラグメントなど）に関する。
【背景技術】
【０００３】
近年、増加している一連の証拠により、免疫系が、腫瘍形成及び進行に対する重要な障壁として機能することが示されている。抗腫瘍可能性または活性を伴う天然に生じるＴ細胞ががん患者に存在するという原理は、腫瘍学における免疫療法アプローチの発展を合理化した。Ｔ細胞、マクロファージ、及びナチュラルキラー細胞などの免疫細胞は、抗腫瘍活性を呈し、悪性腫瘍の発生及び増殖を有効に制御できる。腫瘍特異的抗原または腫瘍関連抗原は、免疫細胞に悪性を認識させ、排除させることができる（Ｃｈｅｎ＆Ｍｅｌｌｍａｎ，（２０１３）Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ３９（１）：１−１０）。腫瘍特異的免疫応答が存在するにもかかわらず、悪性腫瘍は、しばしば様々な免疫調節メカニズムを通した免疫攻撃を逃れるまたは回避し、その結果、腫瘍発生及び進行の制御に失敗してしまう（Ｍｏｔｚ＆Ｃｏｕｋｏｓ，（２０１３）Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ３９（１）：６１−７３０）。実際、がんの新たな特徴は、これらの免疫調節メカニズムの搾取利用及び抗腫瘍免疫応答の無効化であり、結果として免疫学的殺滅からの腫瘍回避及び逃避がもたらされる（Ｈａｎａｈａｎ  ａｎｄ  Ｗｅｉｎｂｅｒｇ（２０１１）Ｃｅｌｌ  １４４（５）：６４６−６７４）。
【０００４】
ＩＬ−２７は、２つのサブユニット（ＥＢＩ３及びＩＬ−２７ｐ２８）から構成される、ヘテロ二量体サイトカインである。ＩＬ−２７は、ＩＬ−１２及びＩＬ−６サイトカインファミリーの両方に構造的に関連する。ＩＬ−２７は、主にＳＴＡＴ１及びＳＴＡＴ３を通してシグナル伝達を媒介する、ＩＬ−２７Ｒα（ＷＳＸ１）及びｇｐ１３０鎖からなるヘテロ二量体受容体に結合し、これを通してシグナル伝達を媒介する。当初の報告では、ＩＬ−２７は、ＣＤ４＋Ｔ細胞の増殖、Ｔヘルパー（Ｔｈ）１細胞の分化、及びＩＦＮ−γ産生を支持する免疫増強サイトカインであり、しばしばＩＬ−１２と協調して作用すると特徴評価された。その後の研究では、ＩＬ−２７が複雑な免疫調節機能を提示し、生物学的背景及び使用されている実験モデルに応じて、炎症促進性または抗炎症性効果をもたらすことが示されている。ＩＬ−２７は、ヒトがん細胞において異なる免疫制御分子の発現を駆動し得、これはｉｎ  ｖｉｖｏでの免疫応答の局所的な撹乱を支持し得る（Ｆａｂｂｉ  ｅｔ  ａｌ．，（２０１７）Ｍｅｄｉａｔｏｒｓ  Ｉｎｆｌａｍｍ  ３９５８０６９。２０１７年２月１日にオンライン公開。ｄｏｉ：１０．１１５５／２０１７／３９５８０６９、及びそこに含有される参考文献）。
がん処置及び管理において著しい進歩がなされているにもかかわらず、がんを処置及び管理するための新しく有効である治療法が依然として必要とされている。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】Ｃｈｅｎ＆Ｍｅｌｌｍａｎ，（２０１３）Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ３９（１）：１−１０
【非特許文献２】Ｍｏｔｚ＆Ｃｏｕｋｏｓ，（２０１３）Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ３９（１）：６１−７３０
【非特許文献３】Ｈａｎａｈａｎ  ａｎｄ  Ｗｅｉｎｂｅｒｇ（２０１１）Ｃｅｌｌ  １４４（５）：６４６−６７４
【非特許文献４】Ｆａｂｂｉ  ｅｔ  ａｌ．，（２０１７）Ｍｅｄｉａｔｏｒｓ  Ｉｎｆｌａｍｍ  ３９５８０６９
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００６】
高い親和性及び特異性でヒトＩＬ−２７（インターロイキン２７）に特異的に結合して拮抗する、抗体またはその抗原結合部分を、本明細書に開示する。抗体分子をコードする核酸分子、発現ベクター、宿主細胞、及び抗体分子を作成する方法も提供する。抗体分子を含む医薬組成物も提供する。本明細書に開示する抗ＩＬ−２７抗体またはその抗原結合部分を（単独で、または他の治療剤もしくは手技と組み合わせて）使用して、免疫障害及びがんを含む障害を、処置、予防及び／または診断することができる。ゆえに、抗ＩＬ−２７抗体分子を使用して、がん及び免疫障害を含む様々な障害を、処置及び／または診断するための組成物及び方法を、本明細書に開示する。
【０００７】
一部の実施形態では、本開示は、ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供し、該抗体またはその抗原結合部分は、以下の特性：（ｉ）ヒトＩＬ−２７に１５ｎＭ以下の平衡解離定数（ＫＤ）で結合する；（ｉｉ）ＩＬ−２７のＩＬ−２７受容体への結合を遮断する；（ｉｉｉ）細胞におけるＳＴＡＴ１及び／またはＳＴＡＴ３リン酸化を阻害または低下する；（ｉｖ）細胞におけるＣＤ１６１発現の阻害を阻害または低下する；（ｖ）細胞におけるＰＤ−Ｌ１及び／またはＴＩＭ−３発現を阻害または低下する；（ｖｉ）細胞からの１つまたは複数のサイトカインのＰＤ−１媒介性分泌を誘導または増強する；ならびに（ｖｉｉ）（ｉ）〜（ｖｉ）の組み合わせのうちの少なくとも１つまたは複数を呈する。
【０００８】
一部の実施形態では、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分は、ヒトＩＬ−２７に１５ｎＭ以下の平衡解離定数（ＫＤ）で結合する。
【０００９】
一部の実施形態では、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分は、組換えヒトＩＬ−２７またはマウスＩＬ−２７に結合する。
【００１０】
一態様では、本開示は、ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供し、該抗体またはその抗原結合部分は、（ｉ）重鎖ＣＤＲ１が、Ｎ−ＧＦＴＦＸＸＸＸ−Ｃ（配列番号４０８）であり、重鎖ＣＤＲ２が、Ｎ−ＩＳＳＳＸＸＹＩ−Ｃ（配列番号４０９）であり、重鎖ＣＤＲ３配列が、配列番号１６３である；軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号１６９、１７０及び１７１である；または（ｉｉ）重鎖ＣＤＲ１が、Ｎ−ＦＴＦＸＸＸＸＭＮ−Ｃ（配列番号４１０）であり、重鎖ＣＤＲ２が、Ｎ−ＸＩＳＳＳＸＸＹＩＸＹＡＤＳＶＫＧ−Ｃ（配列番号４１１）であり、重鎖ＣＤＲ３配列が、配列番号１６６である；軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号１７２、１７３及び１７４である重鎖ＣＤＲ及び軽鎖ＣＤＲを有する。
【００１１】
一実施形態では、重鎖ＣＤＲ１は、Ｎ−ＧＦＴＦ［Ｓ／Ａ／Ｒ］［Ｓ／Ｒ］［Ｔ／Ｙ］［Ｇ／Ｓ］−Ｃ（配列番号４１２）であり、重鎖ＣＤＲ２は、Ｎ−ＩＳＳＳ［Ｓ／Ｇ］［Ｓ／Ａ］ＹＩ−Ｃ（配列番号４１３）である；または重鎖ＣＤＲ１は、Ｎ−ＦＴＦ［Ｓ／Ａ／Ｒ］［Ｓ／Ｒ］［Ｔ／Ｙ］［Ｇ／Ｓ］ＭＮ−Ｃ（配列番号４１４）であり、重鎖ＣＤＲ２は、Ｎ−［Ｇ／Ｓ］ＩＳＳＳ［Ｓ／Ｇ］［Ｓ／Ａ］ＹＩ［Ｌ／Ｙ］ＹＡＤＳＶＫＧ−Ｃ（配列番号４１５）である。
【００１２】
別の実施形態では、それぞれの重鎖ＣＤＲ及び軽鎖ＣＤＲは：（ｉ）重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列は、それぞれ、配列番号１６１、１６２及び１６３であり、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列は、それぞれ、配列番号１６９、１７０及び１７１である；（ｉｉ）重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列は、それぞれ、配列番号１６４、１６５及び１６６であり、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列は、それぞれ、配列番号１７２、１７３及び１７４である；（ｉｉｉ）重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列は、それぞれ、配列番号７３、７４及び７５であり、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列は、それぞれ、配列番号８１、８２及び８３である；（ｉｖ）重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列は、それぞれ、配列番号７６、７７及び７８であり、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列は、それぞれ、配列番号８４、８５及び８６である；（ｖ）重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列は、それぞれ、配列番号９５、９６及び９７であり、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列は、それぞれ、配列番号１０３、１０４及び１０５である；（ｖｉ）重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列は、それぞれ、配列番号９８、９９及び１００であり、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列は、それぞれ、配列番号１０６、１０７及び１０８である；（ｖｉｉ）重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列は、それぞれ、配列番号１１７、１１８及び１１９であり、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列は、それぞれ、配列番号１２５、１２６及び１２７である；（ｖｉｉｉ）重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列は、それぞれ、配列番号１２０、１２１及び１２２であり、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列は、それぞれ、配列番号１２８、１２９及び１３０である；（ｉｘ）重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列は、それぞれ、配列番号１３９、１４０及び１４１であり、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列は、それぞれ、配列番号１４７、１４８及び１４９である；（ｘ）重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列は、それぞれ、配列番号１４２、１４３及び１４４であり、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列は、それぞれ、配列番号１５０、１５１及び１５２である；（ｘｉ）重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列は、それぞれ、配列番号５１、５２及び５３であり、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列は、それぞれ、配列番号５９、６０及び６１である；または（ｘｉｉ）重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列は、それぞれ、配列番号５４、５５及び５６であり、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列は、それぞれ、配列番号６２、６３及び６４である。
【００１３】
本開示の別の態様は、ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供し、該抗体またはその抗原結合部分は：（ｉ）それぞれ、重鎖ＣＤＲ１が、Ｎ−ＧＧＳＦＳＸＹＸ−Ｃ（配列番号４１６）であり、重鎖ＣＤＲ２が、Ｎ−ＩＤＸＳＧＸＴ−Ｃ（配列番号４１７）であり、重鎖ＣＤＲ３が、Ｎ−ＡＲＸＸＸＹＹ［Ｘ］ｎ＝０−１ＤＳＳ［Ｘ］ｎ＝４−６ＤＸ−Ｃ（配列番号４１８）である；及び軽鎖ＣＤＲ１が、Ｎ−ＱＸＸＳＸＹ−Ｃ（配列番号４１９）であり、軽鎖ＣＤＲ２が、Ｎ−ＤＸＳ−Ｃ（配列番号４２０）であり、軽鎖ＣＤＲ３が、Ｎ−ＱＱＸＸＤＸＰＩＴ−Ｃ（配列番号４２１）である；または（ｉｉ）それぞれ、重鎖ＣＤＲ１が、Ｎ−ＧＳＦＳＸＹＸＷＳ−Ｃ（配列番号４２２）であり、重鎖ＣＤＲ２が、Ｎ−ＳＩＤＸＳＧＸＴＸＹＮＰＳＬＫＳ−Ｃ（配列番号４２３）であり、重鎖ＣＤＲ３配列が、Ｎ−ＡＲＸＸＸＹＹ［Ｘ］ｎ＝０−１ＤＳＳ［Ｘ］ｎ＝４−６ＤＸ−Ｃ（配列番号４１８）である；及び軽鎖ＣＤＲ１が、Ｎ−ＸＡＳＱＸＸＳＸＹＬＸ−Ｃ（配列番号４２４）であり、軽鎖ＣＤＲ２が、Ｎ−ＤＸＳＮＸＸＴ−Ｃ（配列番号４２５）であり、軽鎖ＣＤＲ３が、Ｎ−ＱＱＸＸＤＸＰＩＴ−Ｃ（配列番号４２１）である、重鎖ＣＤＲ及び軽鎖ＣＤＲを含む。
【００１４】
ある特定の実施形態では、（ｉ）それぞれ、重鎖ＣＤＲ１は、Ｎ−ＧＧＳＦＳ［Ｒ／Ｄ］Ｙ［Ｅ／Ｙ］−Ｃ（配列番号４２６）であり、重鎖ＣＤＲ２は、Ｎ−ＩＤ［Ｗ／Ｙ］ＳＧ［Ｉ／Ｓ］Ｔ−Ｃ（配列番号４２７）であり、重鎖ＣＤＲ３は、Ｎ−ＡＲ［Ｄ／Ｌ］［Ｐ／Ｇ］［Ｍ／Ｖ］ＹＹ［−／Ｙ］ＤＳＳ［ＶＳＴＧＳＶ／ＤＬＧＦ］Ｄ［Ｖ／Ｉ］−Ｃ（配列番号４２８）である；及び軽鎖ＣＤＲ１は、Ｎ−Ｑ［Ｓ／Ｄ］［Ｖ／Ｉ］Ｓ［Ｓ／Ｎ］Ｙ−Ｃ（配列番号４２９）であり、軽鎖ＣＤＲ２は、Ｎ−Ｄ［Ｓ／Ａ］Ｓ−Ｃ（配列番号４３０）であり、軽鎖ＣＤＲ３は、Ｎ−ＱＱ［Ｄ／Ｙ］［Ｓ／Ｄ］Ｄ［Ｈ／Ｌ］ＰＩＴ−Ｃ（配列番号４３１）である；または（ｉｉ）それぞれ、重鎖ＣＤＲ１は、Ｎ−ＧＳＦＳ［Ｒ／Ｄ］Ｙ［Ｅ／Ｙ］ＷＳ−Ｃ（配列番号４３２）であり、重鎖ＣＤＲ２は、Ｎ−ＳＩＤ［Ｗ／Ｙ］ＳＧ［Ｉ／Ｓ］Ｔ［Ｎ／Ｅ］ＹＮＰＳＬＫＳ−Ｃ（配列番号４３３）であり、重鎖ＣＤＲ３は、Ｎ−ＡＲ［Ｄ／Ｌ］［Ｐ／Ｇ］［Ｍ／Ｖ］ＹＹ［−／Ｙ］ＤＳＳ［ＶＳＴＧＳＶ／ＤＬＧＦ］Ｄ［Ｖ／Ｉ］−Ｃ（配列番号４２８）である；及び軽鎖ＣＤＲ１は、Ｎ−［Ｑ／Ｒ］ＡＳＱ［Ｓ／Ｄ］［Ｖ／Ｉ］Ｓ［Ｓ／Ｎ］ＹＬ［Ｎ／Ａ］−Ｃ（配列番号４３４）であり、軽鎖ＣＤＲ２は、Ｎ−Ｄ［Ｓ／Ａ］ＳＮ［Ｒ／Ｌ］［Ａ／Ｅ］Ｔ−Ｃ（配列番号４３５）であり、軽鎖ＣＤＲ３は、Ｎ−ＱＱ［Ｄ／Ｙ］［Ｓ／Ｄ］Ｄ［Ｈ／Ｌ］ＰＩＴ−Ｃ（配列番号４３１）である。
【００１５】
一部の実施形態では、（ｉ）重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列は、それぞれ、配列番号２２９、２３０及び２３１であり、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列は、それぞれ、配列番号２３７、２３８及び２３９である；または（ｉｉ）重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列は、それぞれ、配列番号２３２、２３３及び２３４であり、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列は、それぞれ、配列番号２４０、２４１及び２４２である。
【００１６】
ある特定の実施形態では、（ｉ）重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列は、それぞれ、配列番号２５１、２５２及び２５３であり、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列は、配列番号２５９、２６０及び２６１である；または（ｉｉ）重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列は、それぞれ、配列番号２５４、２５５及び２５６であり、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列は、それぞれ、配列番号２６２、２６３及び２６４である。
【００１７】
本開示の別の態様は、ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供し、該抗体またはその抗原結合部分は、重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号２３、２４及び２５であり、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号２６、２７及び２８である、重鎖ＣＤＲ及び軽鎖ＣＤＲを含む。
【００１８】
本開示の追加の態様は、ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供し、該抗体またはその抗原結合部分は、（ｉ）重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号３３９、３４０及び３４１であり、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号３４７、３４８及び３４９である；または（ｉｉ）重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号３４２、３４３及び３４４であり、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号３５０、３５１及び３５２である、重鎖ＣＤＲ及び軽鎖ＣＤＲを含む。
【００１９】
本開示の別の態様は、ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供し、該抗体またはその抗原結合部分は、（ｉ）重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号１８５、１８６及び１８７であり、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号１９３、１９４及び１９５である；または（ｉｉ）重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号１８８、１８９及び１９０であり、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号１９６、１９７及び１９８である、重鎖ＣＤＲ及び軽鎖ＣＤＲを含む。
【００２０】
本開示の一態様は、ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供し、該抗体またはその抗原結合部分は、（ｉ）重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号２０７、２０８及び２０９であり、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号２１５、２１６及び２１７である；または（ｉｉ）重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号２１０、２１１及び２１２であり、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号２１８、２１９及び２２０である、重鎖ＣＤＲ及び軽鎖ＣＤＲを含む。
【００２１】
本開示の追加の態様は、ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供し、該抗体またはその抗原結合部分は、（ｉ）重鎖鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号２７３、２７４及び２７５であり、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号２８１、２８２及び２８３である；または（ｉｉ）重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号２７６、２７７及び２７８であり、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列が、それぞれ、配列番号２８４、２８５及び２８６である、重鎖ＣＤＲ及び軽鎖ＣＤＲを含む。
【００２２】
本開示の一態様は、ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供し、該抗体またはその抗原結合部分は、（ｉ）それぞれ、重鎖ＣＤＲ１が、Ｎ−ＧＦＴＦＳＳＹＧ−Ｃ（配列番号３６１）であり、重鎖ＣＤＲ２が、Ｎ−ＩＸＸＤＧＳＸＫ−Ｃ（配列番号４３６）であり、重鎖ＣＤＲ３が、Ｎ−ＡＲＸＡＰ［Ｘ］ｎ＝３−８ＤＶ−Ｃ（配列番号４３７）である；及び軽鎖ＣＤＲ１が、Ｎ−ＱＳＸＳＳＹ−Ｃ（配列番号４３８）であり、軽鎖ＣＤＲ２が、Ｎ−ＸＸＳ−Ｃ（配列番号４３９）であり、軽鎖ＣＤＲ３が、Ｎ−ＱＱＸＸＸＸＰ［Ｘ］ｎ＝０−１ＴＣ（配列番号４４０）である；または（ｉｉ）それぞれ、重鎖ＣＤＲ１が、Ｎ−ＦＴＦＳＳＹＧＭＸ−Ｃ（配列番号４４１）であり、重鎖ＣＤＲ２が、Ｎ−ＸＩＸＸＤＧＳＸＫＹＹＸＤＳＶＫＧ−Ｃ（配列番号４４２）であり、重鎖ＣＤＲ３が、Ｎ−ＡＲＸＡＰ［Ｘ］ｎ＝３−８ＤＶ−Ｃ（配列番号４３７）である；及び軽鎖ＣＤＲ１が、Ｎ−ＲＡＳＱＳＸＳＳＹＬＸ−Ｃ（配列番号４４３）であり、軽鎖ＣＤＲ２が、Ｎ−［Ｘ］ｎ＝１−２ＳＳ［Ｘ］ｎ＝３−４−Ｃ（配列番号４４４）であり、軽鎖ＣＤＲ３が、Ｎ−ＱＱＸＸＸＸＰ［Ｘ］ｎ＝０−１ＴＣ（配列番号４４０）である、重鎖ＣＤＲ及び軽鎖ＣＤＲを含む。
【００２３】
ある特定の実施形態では、（ｉ）それぞれ、重鎖ＣＤＲ１は、Ｎ−ＧＦＴＦＳＳＹＧ−Ｃ（配列番号３６１）であり、重鎖ＣＤＲ２は、Ｎ−Ｉ［Ｋ／Ｗ］［Ｑ／Ｙ］ＤＧＳ［Ｅ／Ｎ］Ｋ−Ｃ（配列番号４４５）であり、重鎖ＣＤＲ３は、Ｎ−ＡＲ［Ｄ／Ｇ］ＡＰ［ＷＤＩＹＤＹＹＭ／ＥＹＶ］ＤＶ−Ｃ（配列番号４４６）である；及び軽鎖ＣＤＲ１は、Ｎ−ＱＳ［Ｉ／Ｖ］ＳＳＹ−Ｃ（配列番号４４７）であり、軽鎖ＣＤＲ２は、Ｎ−［Ａ／Ｄ］［Ａ／Ｓ］Ｓ−Ｃ（配列番号４４８）であり、軽鎖ＣＤＲ３は、Ｎ−ＱＱ［Ｓ／Ｙ］［Ｙ／Ｓ］［Ｖ／Ｌ］［Ｐ／Ｙ］Ｐ［Ｗ／−］Ｔ−Ｃ（配列番号４４９）である；または（ｉｉ）それぞれ、重鎖ＣＤＲ１は、Ｎ−ＦＴＦＳＳＹＧＭ［Ｓ／Ｈ］−Ｃ（配列番号４５０）であり、重鎖ＣＤＲ２は、Ｎ−［Ｎ／Ｖ］Ｉ［Ｋ／Ｗ］［Ｑ／Ｙ］ＤＧＳ［Ｅ／Ｎ］ＫＹＹ［Ｖ／Ａ］ＤＳＶＫＧ−Ｃ（配列番号４５１）であり、重鎖ＣＤＲ３は、Ｎ−ＡＲ［Ｄ／Ｇ］ＡＰ［ＷＤＩＹＤＹＹＭ／ＥＹＶ］ＤＶ−Ｃ（配列番号４４６）である；及び軽鎖ＣＤＲ１は、Ｎ−ＲＡＳＱＳ［Ｉ／Ｖ］ＳＳＹＬ［Ｎ／Ａ］−Ｃ（配列番号４５２）であり、軽鎖ＣＤＲ２は、Ｎ−［ＡＡ／Ｄ］ＳＳ［ＬＱＳ／ＮＲＡＴ］−Ｃ（配列番号４５３）であり、軽鎖ＣＤＲ３は、Ｎ−ＱＱ［Ｓ／Ｙ］［Ｙ／Ｓ］［Ｖ／Ｌ］［Ｐ／Ｙ］Ｐ［Ｗ／−］Ｔ−Ｃ（配列番号４４９）である。
【００２４】
一部の実施形態では、（ｉ）重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列は、それぞれ、配列番号３６１、３６２及び３６３であり、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列は、それぞれ、配列番号３６９、３７０及び３７１である；または（ｉｉ）重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列は、それぞれ、配列番号３６４、３６５及び３６６であり、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列は、それぞれ、配列番号３７２、３７３及び３７４である。
【００２５】
一実施形態では、（ｉ）重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列は、それぞれ、配列番号３８３、３８４及び３８５であり、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列は、それぞれ、配列番号３９１、３９２及び３９３である；または（ｉｉ）重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列は、それぞれ、配列番号３８６、３８７及び３８８であり、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列は、それぞれ、配列番号３９４、３９５及び３９６である。
【００２６】
本開示の別の態様は、ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供し、該抗体またはその抗原結合部分は、（ｉ）それぞれ、重鎖ＣＤＲ１が、Ｎ−ＧＦＴＦＸＸＸＸ−Ｃ（配列番号４０８）であり、重鎖ＣＤＲ２が、Ｎ−ＩＸＸＸＸＸＸＸ−Ｃ（配列番号４５６）であり、重鎖ＣＤＲ３が、Ｎ−ＡＲ［Ｘ］ｎ＝６−１５ＤＸ−Ｃ（配列番号４５８）である；及び軽鎖ＣＤＲ１が、Ｎ−ＱＳ［Ｘ］ｎ＝１−３ＳＳ［Ｘ］ｎ＝０−４Ｙ−Ｃ（配列番号４６０）であり、軽鎖ＣＤＲ２が、Ｎ−ＸＸＳ−Ｃ（配列番号４６２）であり、軽鎖ＣＤＲ３が、Ｎ−ＱＱＸＸＸＸＰ［Ｘ］ｎ＝０−１Ｔ−Ｃ（配列番号４６４）である；または（ｉｉ）それぞれ、重鎖ＣＤＲ１が、Ｎ−ＦＴＦＸＸＸＸＭＸ−Ｃ（配列番号４６６）であり、重鎖ＣＤＲ２が、Ｎ−ＸＩＸＸＸＸＸＸＸＸＹＸＤＳＶＫＧ−Ｃ（配列番号４６８）であり、重鎖ＣＤＲ３が、Ｎ−ＡＲ［Ｘ］ｎ＝６−１５ＤＸ−Ｃ（配列番号４７０）である；及び軽鎖ＣＤＲ１が、Ｎ−ＲＡＳＱＳＸＳＳＹＬＸ−Ｃ（配列番号４７２）であり、軽鎖ＣＤＲ２が、Ｎ−［Ｘ］ｎ＝１−２Ｓ［Ｘ］ｎ＝４−５−Ｃ（配列番号４７４）であり、軽鎖ＣＤＲ３が、Ｎ−ＱＱＸＸＸＸＰ［Ｘ］ｎ＝０−１Ｔ−Ｃ（配列番号４７６）である、重鎖ＣＤＲ及び軽鎖ＣＤＲを含む。
【００２７】
ある特定の実施形態では、（ｉ）それぞれ、重鎖ＣＤＲ１は、Ｎ−ＧＦＴＦ［Ｓ／Ａ／Ｒ］［Ｓ／Ｒ］［Ｔ／Ｙ］［Ｇ／Ｓ］−Ｃ（配列番号４５４）であり、重鎖ＣＤＲ２は、Ｎ−Ｉ［Ｓ／Ｋ／Ｗ］［Ｓ／Ｑ／Ｙ］［Ｓ／Ｄ］［Ｓ／Ｇ］［Ｓ／Ａ］［Ｙ／Ｅ／Ｎ］［Ｉ／Ｋ］−Ｃ（配列番号４５５）であり、重鎖ＣＤＲ３は、Ｎ−ＡＲ［ＤＧＧＲＴＳＹＴＡＴＡＨＮＷＦ／ＤＡＰＷＤＩＹＤＹＹＭ／ＧＡＰＥＹＶ］Ｄ［Ｐ／Ｖ］−Ｃ（配列番号４５７）である；及び軽鎖ＣＤＲ１は、Ｎ−ＱＳ［ＶＬＦ／Ｉ／Ｖ］ＳＳ［ＮＮＫＮ／−］Ｙ−Ｃ（配列番号４５９）であり、軽鎖ＣＤＲ２は、Ｎ−［Ｗ／Ａ／Ｄ］［Ａ／Ｓ］Ｓ−Ｃ（配列番号４６１）であり、軽鎖ＣＤＲ３は、Ｎ−ＱＱ［Ｈ／Ｓ／Ｙ］［Ａ／Ｙ／Ｓ］［Ｓ／Ｖ／Ｌ］［Ａ／Ｐ／Ｙ］Ｐ［Ｐ／Ｗ／−］Ｔ−Ｃ（配列番号４６３）である；または（ｉｉ）それぞれ、重鎖ＣＤＲ１は、Ｎ−ＦＴＦ［Ｓ／Ａ／Ｒ］［Ｓ／Ｒ］［Ｔ／Ｙ］［Ｇ／Ｓ］Ｍ［Ｎ／Ｓ／Ｈ］−Ｃ（配列番号４６５）であり、重鎖ＣＤＲ２は、Ｎ−［Ｇ／Ｓ／Ｎ／Ｖ］Ｉ［Ｓ／Ｋ／Ｗ］［Ｓ／Ｑ／Ｙ］［Ｓ／Ｄ］［Ｓ／Ｇ］［Ｓ／Ａ］［Ｙ／Ｅ／Ｎ］［Ｉ／Ｋ］［Ｌ／Ｙ］Ｙ［Ｖ／Ａ］ＤＳＶＫＧ−Ｃ（配列番号４６７）であり、重鎖ＣＤＲ３は、Ｎ−ＡＲ［Ｄ／Ｇ］［ＧＧＲＴＳＹＴＡＴＡＨＮＷＦ／ＡＰＷＤＩＹＤＹＹＭ／ＡＰＥＹＶ］Ｄ［Ｐ／Ｖ］−Ｃ（配列番号４６９）である；及び軽鎖ＣＤＲ１は、Ｎ−ＲＡＳＱＳ［Ｉ／Ｖ］ＳＳＹＬ［Ｎ／Ａ］−Ｃ（配列番号４７１）であり、軽鎖ＣＤＲ２は、Ｎ−［ＷＡ／ＡＡ／Ｄ］Ｓ［ＴＲＥＳ／ＳＬＱＳ／ＳＮＲＡＴ］−Ｃ（配列番号４７３）であり、軽鎖ＣＤＲ３は、Ｎ−ＱＱ［Ｈ／Ｓ／Ｙ］［Ａ／Ｙ／Ｓ］［Ｓ／Ｖ／Ｌ］［Ａ／Ｐ／Ｙ］Ｐ［Ｐ／Ｗ／−］Ｔ−Ｃ（配列番号４７５）である。
【００２８】
一部の実施形態では、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分は、細胞におけるＳＴＡＴ１及び／またはＳＴＡＴ３リン酸化を阻害または低下する。一部の実施形態では、細胞は、免疫細胞である。一部の実施形態では、細胞は、がん細胞である。
【００２９】
一部の実施形態では、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分は、細胞におけるＣＤ１６１発現の阻害を阻害または低下する（例えば、細胞におけるＣＤ１６１発現の阻害を、回復または緩和する）。一部の実施形態では、細胞は、免疫細胞である。
【００３０】
一部の実施形態では、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分は、細胞におけるＩＬ−２７媒介性ＰＤ−Ｌ１及び／またはＴＩＭ−３発現を阻害または低下する。一部の実施形態では、ＰＤ−Ｌ１発現は、阻害または低下される。一部の実施形態では、ＴＩＭ−３発現は、阻害または低下される。一部の実施形態では、ＰＤ−Ｌ１発現及びＴＩＭ−３発現の両方が、低下される。一部の実施形態では、細胞は、免疫細胞である。
【００３１】
一部の実施形態では、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分は、細胞からの１つまたは複数のサイトカインのＰＤ−１媒介性分泌を誘導または増強する。一部の実施形態では、１つまたは複数のサイトカインは、ＴＮＦαである。一部の実施形態では、１つまたは複数のサイトカインは、ＩＬ−６である。一部の実施形態では、１つまたは複数のサイトカインは、ＴＮＦα及びＩＬ−６である。一部の実施形態では、細胞は、免疫細胞である。
【００３２】
一部の実施形態では、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＭ、ＩｇＡ１、ＩｇＡ２、ＩｇＤ、及びＩｇＥ抗体からなる群から選択される。一部の実施形態では、抗体は、ＩｇＧ１抗体またはＩｇＧ４抗体である。一部の実施形態では、抗体は、野生型ＩｇＧ１重鎖定常領域を含む。一部の実施形態では、抗体は、野生型ＩｇＧ４重鎖定常領域を含む。一部の実施形態では、抗体は、少なくとも１つの突然変異を含むＦｃドメインを含む。一部の実施形態では、抗体は、突然変異型ＩｇＧ１重鎖定常領域を含む。一部の実施形態では、抗体は、突然変異型ＩｇＧ４重鎖定常領域を含む。一部の実施形態では、突然変異型ＩｇＧ４重鎖定常領域は、ＥＵナンバリングに従って、置換Ｓ２２８Ｐ、Ｌ２３５Ｅ、Ｌ２３５Ａのいずれか１つ、またはそれらの組み合わせを含む。
【００３３】
一部の実施形態では、本開示は、前述の実施形態のいずれか１つに記載の抗体またはその抗原結合部分と実質的に同じＩＬ−２７上のエピトープに結合する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供する。
【００３４】
一部の実施形態では、本開示は、前述の実施形態のいずれか１つに記載の抗体またはその抗原結合部分が結合するＩＬ−２７を含むアミノ酸残基の少なくとも１つに結合する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供する。
【００３５】
一部の実施形態では、本開示は、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供し、抗体またはその抗原結合部分が結合するＩＬ−２７上のエピトープの突然変異が、抗体またはその抗原結合部分及び前述の実施形態のいずれか１つに記載の抗体またはその抗原結合部分の両方への結合を、阻害、低下、または遮断する。
【００３６】
一部の実施形態では、本開示は、ＩＬ−２７上のエピトープに結合する単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供し、エピトープは、表１２に記載する抗体分子が結合するエピトープと同じであるまたは類似する。
【００３７】
一部の実施形態では、本開示は、ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供し、該抗体またはその抗原結合部分は、以下：
（ｉ）それぞれ、配列番号５１、５２及び５３に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号５９、６０及び６１に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｉｉ）それぞれ、配列番号７３、７４及び７５に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号８１、８２及び８３に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｉｉｉ）それぞれ、配列番号９５、９６及び９７に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号１０３、１０４及び１０５に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｉｖ）それぞれ、配列番号１１７、１１８及び１１９に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号１２５、１２６及び１２７に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｖ）それぞれ、配列番号１３９、１４０及び１４１に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号１４７、１４８及び１４９に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｖｉ）それぞれ、配列番号１６１、１６２及び１６３に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号１６９、１７０及び１７１に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｖｉｉ）それぞれ、配列番号１８５、１８６及び１８７に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号１９３、１９４及び１９５に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｖｉｉｉ）それぞれ、配列番号２０７、２０８及び２０９に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号２１５、２１６及び２１７に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｉｘ）それぞれ、配列番号２２９、２３０及び２３１に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号２３７、２３８及び２３９に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｘ）それぞれ、配列番号２５１、２５２及び２５３に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号２５９、２６０及び２６１に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｘｉ）それぞれ、配列番号２７３、２７４及び２７５に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号２８１、２８２及び２８３に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｘｉｉ）それぞれ、配列番号２９５、２９６及び２９７に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号３０３、３０４及び３０５に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｘｉｉｉ）それぞれ、配列番号３１７、３１８及び３１９に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号３２５、３２６及び３２７に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｘｉｖ）それぞれ、配列番号３３９、３４０及び３４１に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号３４７、３４８及び３４９に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｘｖ）それぞれ、配列番号３６１、３６２及び３６３に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号３６９、３７０及び３７１に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；ならびに
（ｘｖｉ）それぞれ、配列番号３８３、３８４及び３８５に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号３９１、３９２及び３９３に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列からなる群から選択される重鎖ＣＤＲ及び軽鎖ＣＤＲを含む。
【００３８】
一部の実施形態では、本開示は、ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供し、該抗体またはその抗原結合部分は、重鎖ＣＤＲ及び軽鎖ＣＤＲを含み、重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列は、それぞれ、配列番号１６１、１６２及び１６３に記載されており、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列は、それぞれ、配列番号１６９、１７０及び１７１に記載されている。
【００３９】
一部の実施形態では、本開示は、ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供し、該抗体またはその抗原結合部分は、以下：
（ｉ）それぞれ、配列番号５４、５５及び５６に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号６２、６３及び６４に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｉｉ）それぞれ、配列番号７６、７７及び７８に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号８４、８５及び８６に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｉｉｉ）それぞれ、配列番号９８、９９及び１００に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号１０６、１０７及び１０８に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｉｖ）それぞれ、配列番号１２０、１２１及び１２２に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号１２８、１２９及び１３０に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｖ）それぞれ、配列番号１４２、１４３及び１４４に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号１５０、１５１及び１５２に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｖｉ）それぞれ、配列番号１６４、１６５及び１６６に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号１７２、１７３及び１７４に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｖｉｉ）それぞれ、配列番号１８８、１８９及び１９０に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号１９６、１９７及び１９８に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｖｉｉｉ）それぞれ、配列番号２１０、２１１及び２１２に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号２１８、２１９及び２２０に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｉｘ）それぞれ、配列番号２３２、２３３及び２３４に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号２４０、２４１及び２４２に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｘ）それぞれ、配列番号２５４、２５５及び２５６に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号２６２、２６３及び２６４に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｘｉ）それぞれ、配列番号２７６、２７７及び２７８に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号２８４、２８５及び２８６に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｘｉｉ）それぞれ、配列番号２９８、２９９及び３００に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号３０６、３０７及び３０８に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｘｉｉｉ）それぞれ、配列番号３２０、３２１及び３２２に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号３２８、３２９及び３３０に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｘｉｖ）それぞれ、配列番号３４２、３４３及び３４４に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号３５０、３５１及び３５２に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｘｖ）それぞれ、配列番号３６４、３６５及び３６６に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号３７２、３７３及び３７４に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；ならびに
（ｘｖｉ）それぞれ、配列番号３８６、３８７及び３８８に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号３９４、３９５及び３９６に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列からなる群から選択される重鎖ＣＤＲ及び軽鎖ＣＤＲを含む。
【００４０】
一部の実施形態では、本開示は、ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供し、該抗体またはその抗原結合部分は、重鎖ＣＤＲ及び軽鎖ＣＤＲを含み、重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列は、それぞれ、配列番号１６４、１６５及び１６６に記載されており、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列は、それぞれ、配列番号１７２、１７３及び１７４に記載されている。
【００４１】
一部の実施形態では、本開示は、ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供し、該抗体またはその抗原結合部分は、重鎖ＣＤＲ及び軽鎖ＣＤＲを含み、重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列は、それぞれ、ＳＹＳＭＳ（配列番号２３）、ＹＩＳＹＤＧＧＳＡＹＹＰＤＴＶＫＧ（配列番号２４）及びＨＧＤＹＤＤＤＤＡＭＤＹ（配列番号２５）であり、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列は、それぞれ、ＲＡＳＥＮＩＹＳＹＬＡ（配列番号２６）、ＮＡＥＴＬＴＥ（配列番号２７）及びＱＨＨＹＧＴＰＬＴ（配列番号２８）である。
【００４２】
一部の実施形態では、本開示は、ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供し、該抗体またはその抗原結合部分は、重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含み、重鎖可変領域は、配列番号５７、７９、１０１、１２３、１４５、１６７、１９１、２１３、２３５、２５７、２７９、３０１、３２３、３４５、３６７及び３８９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域は、配列番号６５、８７、１０９、１３１、１５３、１７５、１９９、２２１、２４３、２６５、２８７、３０９、３３１、３５３、３７５及び３９７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。
【００４３】
一部の実施形態では、本開示は、ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供し、該抗体またはその抗原結合部分は、以下：
（ｉ）それぞれ、配列番号５７及び６５；
（ｉｉ）それぞれ、配列番号７９及び８７；
（ｉｉｉ）それぞれ、配列番号１０１及び１０９；
（ｉｖ）それぞれ、配列番号１２３及び１３１；
（ｖ）それぞれ、配列番号１４５及び１５３；
（ｖｉ）それぞれ、配列番号１６７及び１７５；
（ｖｉｉ）それぞれ、配列番号１９１及び１９９；
（ｖｉｉｉ）それぞれ、配列番号２１３及び２２１；
（ｉｘ）それぞれ、配列番号２３５及び２４３；
（ｘ）それぞれ、配列番号２５７及び２６５；
（ｘｉ）それぞれ、配列番号２７９及び２８７；
（ｘｉｉ）それぞれ、配列番号３０１及び３０９；
（ｘｉｉｉ）それぞれ、配列番号３２３及び３３１；
（ｘｉｖ）それぞれ、配列番号３４５及び３５３；
（ｘｖ）それぞれ、配列番号３６７及び３７５；ならびに
（ｘｖｉ）それぞれ、配列番号３８９及び３９７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含む。
【００４４】
一部の実施形態では、本開示は、ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供し、該抗体またはその抗原結合部分は、重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含み、重鎖可変領域は、配列番号５７、７９、１０１、１２３、１４５、１６７、１９１、２１３、２３５、２５７、２７９、３０１、３２３、３４５、３６７及び３８９からなる群から選択されるアミノ酸配列に、少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域は、配列番号６５、８７、１０９、１３１、１５３、１７５、１９９、２２１、２４３、２６５、２８７、３０９、３３１、３５３、３７５及び３９７からなる群から選択されるアミノ酸配列に、少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含む。
【００４５】
一部の実施形態では、本開示は、ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供し、該抗体またはその抗原結合部分は、以下：
（ｉ）それぞれ、配列番号５７及び６５；
（ｉｉ）それぞれ、配列番号７９及び８７；
（ｉｉｉ）それぞれ、配列番号１０１及び１０９；
（ｉｖ）それぞれ、配列番号１２３及び１３１；
（ｖ）それぞれ、配列番号１４５及び１５３；
（ｖｉ）それぞれ、配列番号１６７及び１７５；
（ｖｉｉ）それぞれ、配列番号１９１及び１９９；
（ｖｉｉｉ）それぞれ、配列番号２１３及び２２１；
（ｉｘ）それぞれ、配列番号２３５及び２４３；
（ｘ）それぞれ、配列番号２５７及び２６５；
（ｘｉ）それぞれ、配列番号２７９及び２８７；
（ｘｉｉ）それぞれ、配列番号３０１及び３０９；
（ｘｉｉｉ）それぞれ、配列番号３２３及び３３１；
（ｘｉｖ）それぞれ、配列番号３４５及び３５３；
（ｘｖ）それぞれ、配列番号３６７及び３７５；ならびに
（ｘｖｉ）それぞれ、配列番号３８９及び３９７からなる群から選択されるアミノ酸配列に、少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含む。
【００４６】
一部の実施形態では、本開示は、ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供し、該抗体またはその抗原結合部分は、それぞれ、配列番号１６７及び１７５に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含む。
【００４７】
一部の実施形態では、本開示は、ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供し、該抗体またはその抗原結合部分は、それぞれ、配列番号１６７及び１７５に記載のアミノ酸配列に、少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含む。
【００４８】
一部の実施形態では、本開示は、ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供し、該抗体またはその抗原結合部分は、重鎖及び軽鎖を含み、重鎖は、配列番号６７、８９、１１１、１３３、１５５、１７７、２０１、２２３、２４５、２６７、２８９、３１１、３３３、３５５、３７７及び３９９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、軽鎖は、配列番号６９、９１、１１３、１３５、１５７、１７９、２０３、２２５、２４７、２６９、２９１、３１３、３３５、３５７、３７９及び４０１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。
【００４９】
一部の実施形態では、本開示は、ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供し、該抗体またはその抗原結合部分は、重鎖及び軽鎖を含み、重鎖は、配列番号６７、８９、１１１、１３３、１５５、１７７、２０１、２２３、２４５、２６７、２８９、３１１、３３３、３５５、３７７及び３９９からなる群から選択されるアミノ酸配列に、少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含み、軽鎖は、配列番号６９、９１、１１３、１３５、１５７、１７９、２０３、２２５、２４７、２６９、２９１、３１３、３３５、３５７、３７９及び４０１からなる群から選択されるアミノ酸配列に、少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含む。
【００５０】
一部の実施形態では、本開示は、ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供し、該抗体またはその抗原結合部分は、重鎖及び軽鎖を含み、重鎖は、配列番号７１、９３、１１５、１３７、１５９、１８１、２０５、２２７、２４９、２７１、２９３、３１５、３３７、３５９、３８１及び４０３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、軽鎖は、配列番号６９、９１、１１３、１３５、１５７、１７９、２０３、２２５、２４７、２６９、２９１、３１３、３３５、３５７、３７９及び４０１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。
【００５１】
一部の実施形態では、本開示は、ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供し、該抗体またはその抗原結合部分は、重鎖及び軽鎖を含み、重鎖は、配列番号７１、９３、１１５、１３７、１５９、１８１、２０５、２２７、２４９、２７１、２９３、３１５、３３７、３５９、３８１及び４０３からなる群から選択されるアミノ酸配列に、少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含み、軽鎖は、配列番号６９、９１、１１３、１３５、１５７、１７９、２０３、２２５、２４７、２６９、２９１、３１３、３３５、３５７、３７９及び４０１からなる群から選択されるアミノ酸配列に、少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含む。
【００５２】
一部の実施形態では、本開示は、ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供し、該抗体またはその抗原結合部分は、以下：
（ｉ）それぞれ、配列番号６７及び６９；
（ｉｉ）それぞれ、配列番号８９及び９１；
（ｉｉｉ）それぞれ、配列番号１１１及び１１３；
（ｉｖ）それぞれ、配列番号１３３及び１３５；
（ｖ）それぞれ、配列番号１５５及び１５７；
（ｖｉ）それぞれ、配列番号１７７及び１７９；
（ｖｉｉ）それぞれ、配列番号２０１及び２０３；
（ｖｉｉｉ）それぞれ、配列番号２２３及び２２５；
（ｉｘ）それぞれ、配列番号２４５及び２４７；
（ｘ）それぞれ、配列番号２６７及び２６９；
（ｘｉ）それぞれ、配列番号２８９及び２９１；
（ｘｉｉ）それぞれ、配列番号３１１及び３１３；
（ｘｉｉｉ）それぞれ、配列番号３３３及び３３５；
（ｘｉｖ）それぞれ、配列番号３５５及び３５７；
（ｘｖ）それぞれ、配列番号３７７及び３７９；ならびに
（ｘｖｉ）それぞれ、配列番号３９９及び４０１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖及び軽鎖を含む。
【００５３】
一部の実施形態では、本開示は、ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供し、該抗体またはその抗原結合部分は、以下：
（ｉ）それぞれ、配列番号６７及び６９；
（ｉｉ）それぞれ、配列番号８９及び９１；
（ｉｉｉ）それぞれ、配列番号１１１及び１１３；
（ｉｖ）それぞれ、配列番号１３３及び１３５；
（ｖ）それぞれ、配列番号１５５及び１５７；
（ｖｉ）それぞれ、配列番号１７７及び１７９；
（ｖｉｉ）それぞれ、配列番号２０１及び２０３；
（ｖｉｉｉ）それぞれ、配列番号２２３及び２２５；
（ｉｘ）それぞれ、配列番号２４５及び２４７；
（ｘ）それぞれ、配列番号２６７及び２６９；
（ｘｉ）それぞれ、配列番号２８９及び２９１；
（ｘｉｉ）それぞれ、配列番号３１１及び３１３；
（ｘｉｉｉ）それぞれ、配列番号３３３及び３３５；
（ｘｉｖ）それぞれ、配列番号３５５及び３５７；
（ｘｖ）それぞれ、配列番号３７７及び３７９；ならびに
（ｘｖｉ）それぞれ、配列番号３９９及び４０１からなる群から選択されるアミノ酸配列に、少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含む重鎖及び軽鎖を含む。
【００５４】
一部の実施形態では、本開示は、ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供し、該抗体またはその抗原結合部分は、以下：
（ｉ）それぞれ、配列番号７１及び６９；
（ｉｉ）それぞれ、配列番号９３及び９１；
（ｉｉｉ）それぞれ、配列番号１１５及び１１３；
（ｉｖ）それぞれ、配列番号１３７及び１３５；
（ｖ）それぞれ、配列番号１５９及び１５７；
（ｖｉ）それぞれ、配列番号１８１及び１７９；
（ｖｉｉ）それぞれ、配列番号２０５及び２０３；
（ｖｉｉｉ）それぞれ、配列番号２２７及び２２５；
（ｉｘ）それぞれ、配列番号２４９及び２４７；
（ｘ）それぞれ、配列番号２７１及び２６９；
（ｘｉ）それぞれ、配列番号２９３及び２９１；
（ｘｉｉ）それぞれ、配列番号３１５及び３１３；
（ｘｉｉｉ）それぞれ、配列番号３３７及び３３５；
（ｘｉｖ）それぞれ、配列番号３５９及び３５７；
（ｘｖ）それぞれ、配列番号３８１及び３７９；ならびに
（ｘｖｉ）それぞれ、配列番号４０３及び４０１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖及び軽鎖を含む。
【００５５】
一部の実施形態では、本開示は、ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供し、該抗体またはその抗原結合部分は、以下：
（ｉ）それぞれ、配列番号７１及び６９；
（ｉｉ）それぞれ、配列番号９３及び９１；
（ｉｉｉ）それぞれ、配列番号１１５及び１１３；
（ｉｖ）それぞれ、配列番号１３７及び１３５；
（ｖ）それぞれ、配列番号１５９及び１５７；
（ｖｉ）それぞれ、配列番号１８１及び１７９；
（ｖｉｉ）それぞれ、配列番号２０５及び２０３；
（ｖｉｉｉ）それぞれ、配列番号２２７及び２２５；
（ｉｘ）それぞれ、配列番号２４９及び２４７；
（ｘ）それぞれ、配列番号２７１及び２６９；
（ｘｉ）それぞれ、配列番号２９３及び２９１；
（ｘｉｉ）それぞれ、配列番号３１５及び３１３；
（ｘｉｉｉ）それぞれ、配列番号３３７及び３３５；
（ｘｉｖ）それぞれ、配列番号３５９及び３５７；
（ｘｖ）それぞれ、配列番号３８１及び３７９；ならびに
（ｘｖｉ）それぞれ、配列番号４０３及び４０１からなる群から選択されるアミノ酸配列に、少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含む重鎖及び軽鎖を含む。
【００５６】
一部の実施形態では、本開示は、ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供し、該抗体またはその抗原結合部分は、それぞれ、配列番号１７７及び１７９に記載のアミノ酸配列を含む重鎖及び軽鎖を含む。
【００５７】
一部の実施形態では、本開示は、ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供し、該抗体またはその抗原結合部分は、それぞれ、配列番号１７７及び１７９に記載のアミノ酸配列に、少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含む重鎖及び軽鎖を含む。
【００５８】
一部の実施形態では、本開示は、ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供し、該抗体またはその抗原結合部分は、それぞれ、配列番号１８１及び１７９に記載のアミノ酸配列を含む重鎖及び軽鎖を含む。
【００５９】
一部の実施形態では、本開示は、ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供し、該抗体またはその抗原結合部分は、それぞれ、配列番号１８１及び１７９に記載のアミノ酸配列に、少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含む重鎖及び軽鎖を含む。
【００６０】
一部の実施形態では、本開示は、細胞におけるＳＴＡＴ１及び／またはＳＴＡＴ３リン酸化を阻害または低下する方法を提供し、該方法は、細胞を、本開示により提供する単離されたモノクローナル抗体または抗原結合フラグメントと接触させることを含み、抗体またはその抗原結合部分は、細胞におけるＳＴＡＴ１及び／またはＳＴＡＴ３リン酸化を阻害または低下する。
【００６１】
一部の実施形態では、本開示は、細胞におけるＣＤ１６１発現のＩＬ−２７媒介性阻害を阻害または低下する方法を提供し、該方法は、細胞を、本開示により提供する単離されたモノクローナル抗体または抗原結合フラグメントと接触させることを含み、抗体またはその抗原結合部分は、細胞におけるＣＤ１６１発現の阻害を阻害または低下する。
【００６２】
一部の実施形態では、本開示は、細胞におけるＰＤ−Ｌ１及び／またはＴＩＭ−３発現のＩＬ−２７媒介性発現を阻害または低下する方法を提供し、該方法は、細胞を、本開示により提供する単離されたモノクローナル抗体または抗原結合フラグメントと接触させることを含み、抗体またはその抗原結合部分は、細胞におけるＰＤ−Ｌ１及び／またはＴＩＭ−３発現を阻害する。
【００６３】
一部の実施形態では、本開示は、細胞からの１つまたは複数のサイトカインの分泌を誘導または増強する方法を提供し、該方法は、細胞を、本開示により提供する単離されたモノクローナル抗体または抗原結合フラグメントと接触させることを含み、抗体またはその抗原結合部分は、細胞からの１つまたは複数のサイトカインのＰＤ−１媒介性分泌を誘導または増強する。
【００６４】
一部の実施形態では、本開示は、対象の免疫応答を刺激する方法を提供し、該方法は、対象に、本開示により提供する、ＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、有効量の単離されたモノクローナル抗体もしくはその抗原結合部分、または抗体もしくはその抗原結合部分及び医薬的に許容可能な担体を含む医薬組成物を投与することを含む。
【００６５】
一部の実施形態では、本開示は、対象のがんを処置する方法を提供し、該方法は、対象に、本開示により提供する、ＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、有効量の単離されたモノクローナル抗体もしくはその抗原結合部分、または抗体もしくはその抗原結合部分及び医薬的に許容可能な担体を含む医薬組成物を投与することを含む。
【００６６】
一部の実施形態では、本開示は、対象の免疫応答を刺激するまたはがんを処置する方法を提供し、該方法は、対象に、本開示により提供する、有効量の単離されたモノクローナル抗体もしくは抗原結合フラグメント、または抗体もしくはその抗原結合部分及び医薬的に許容可能な担体を含む医薬組成物を投与することを含み、抗体もしくはその抗原結合部分、または医薬組成物は、細胞におけるＳＴＡＴ１及び／またはＳＴＡＴ３リン酸化を阻害または低下し、それによって免疫応答を刺激するまたはがんを処置する。
【００６７】
一部の実施形態では、本開示は、対象の免疫応答を刺激するまたはがんを処置する方法を提供し、該方法は、対象に、本開示により提供する、有効量の単離されたモノクローナル抗体もしくは抗原結合フラグメント、または抗体もしくはその抗原結合部分及び医薬的に許容可能な担体を含む医薬組成物を投与することを含み、抗体もしくはその抗原結合部分、または医薬組成物は、細胞におけるＣＤ１６１発現のＩＬ−２７媒介性阻害を阻害または低下し、それによって免疫応答を刺激するまたはがんを処置する。
【００６８】
一部の実施形態では、本開示は、対象の免疫応答を刺激するまたはがんを処置する方法を提供し、該方法は、対象に、本開示により提供する、有効量の単離されたモノクローナル抗体もしくは抗原結合フラグメント、または抗体もしくはその抗原結合部分及び医薬的に許容可能な担体を含む医薬組成物を投与することを含み、抗体もしくはその抗原結合部分、または医薬組成物は、細胞におけるＰＤ−Ｌ１及び／またはＴＩＭ−３のＩＬ−２７媒介性発現を阻害または低下し、それによって免疫応答を刺激するまたはがんを処置する。
【００６９】
一部の実施形態では、本開示は、対象の免疫応答を刺激するまたはがんを処置する方法を提供し、該方法は、対象に、本開示により提供する、有効量の単離されたモノクローナル抗体もしくは抗原結合フラグメント、または抗体もしくはその抗原結合部分及び医薬的に許容可能な担体を含む医薬組成物を投与することを含み、抗体もしくはその抗原結合部分、または医薬組成物は、細胞からの１つまたは複数のサイトカインのＰＤ−１媒介性分泌を誘導または増強し、それによって免疫応答を刺激するまたはがんを処置する。
【００７０】
一部の実施形態では、がんは、肺癌（例えば、非小細胞肺癌）、肉腫、精巣癌、卵巣癌、膵臓癌、乳癌（例えば、トリプルネガティブ乳癌）、黒色腫（例えば、ブドウ膜黒色腫などを含む）、頭頸部癌（例えば、扁平上皮性頭頸部癌）、結腸直腸癌、膀胱癌、子宮内膜癌、前立腺癌、甲状腺癌、肝細胞癌、胃癌、脳癌、リンパ腫（例えば、ＤＬ−ＢＣＬ）、白血病（例えば、ＡＭＬ）または腎癌（例えば、腎細胞癌、例えば、腎明細胞癌）から選択される。
【００７１】
一部の実施形態では、本開示は、対象のがんを処置する方法を提供し、該方法は、対象に、本開示により提供する、ＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、有効量の単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を、１つまたは複数の追加の治療剤または手技と組み合わせて投与することを含み、第二の治療剤または手技は、化学療法、標的抗がん療法（例えば、チロシンキナーゼ阻害剤（ＴＫＩ）を含む）、腫瘍溶解薬、細胞傷害剤、免疫系療法、サイトカイン、外科的手技、放射線手技、共刺激分子の活性化剤、阻害分子の阻害剤、ワクチン、もしくは細胞性免疫療法、またはそれらの組み合わせからなる群から選択される。
【００７２】
一部の実施形態では、１つまたは複数の追加の治療剤は、ＰＤ−１アンタゴニスト、ＰＤ−Ｌ１阻害剤、ＴＩＭ−３阻害剤、ＬＡＧ−３阻害剤、ＴＩＧＩＴ阻害剤、ＣＤ１１２Ｒ阻害剤、ＴＡＭ阻害剤、ＳＴＩＮＧアゴニスト、４−１ＢＢアゴニスト、またはそれらの組み合わせである。
【００７３】
一部の実施形態では、１つまたは複数の追加の治療剤は、ＰＤ−１アンタゴニストである。一部の実施形態では、ＰＤ−１アンタゴニストは、ＰＤＲ００１、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、ピディリズマブ、ＭＥＤＩ０６８０、ＲＥＧＮ２８１０、ＴＳＲ−０４２、ＰＦ−０６８０１５９１、及びＡＭＰ−２２４からなる群から選択される。
【００７４】
ある特定の実施形態では、１つまたは複数の追加の治療剤は、ＰＤ−Ｌ１阻害剤である。一部の実施形態では、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、ＦＡＺ０５３、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、及びＢＭＳ−９３６５５９からなる群から選択される。一部の実施形態では、本開示は、抗ＰＤ−１抗体の１つまたは複数の活性を増強する（例えば、ＰＤ−１媒介性サイトカイン分泌を増強する、抗ＰＤ−１媒介性ＴＮＦα分泌を増強する、抗ＰＤ−１抗体に曝露された細胞からの抗ＰＤ−１媒介性ＩＬ−６分泌を増強する）方法を提供し、該方法は、細胞を、抗ＰＤ−１抗体と同時並行または連続して、本開示により提供する、抗体またはその抗原結合部分に曝露することを含み、それによって抗ＰＤ−１抗体の１つまたは複数の活性を増強する。
【００７５】
ある特定の実施形態では、本開示は、抗ＰＤ−１抗体及び／または抗ＰＤ−Ｌ１抗体、ならびに本明細書に開示する抗体またはその抗原結合部分（例えば、抗ＩＬ−２７抗体）、ならびに医薬的に許容可能な担体を含む医薬組成物を提供する。
【００７６】
関連する実施形態では、本開示は、同時並行または順次投与のための、抗ＰＤ−１抗体及び／または抗ＰＤ−Ｌ１抗体、ならびに本明細書に開示する抗体またはその抗原結合部分（例えば、抗ＩＬ−２７抗体）、ならびにその使用説明書を含む、キットを提供する。
【００７７】
一部の実施形態では、１つまたは複数の追加の治療剤は、ＴＩＭ−３阻害剤であり、任意選択で、ＴＩＭ−３阻害剤は、ＭＧＢ４５３またはＴＳＲ−０２２である。
【００７８】
一部の実施形態では、１つまたは複数の追加の治療剤は、ＬＡＧ−３阻害剤であり、任意選択で、ＬＡＧ−３阻害剤は、ＬＡＧ５２５、ＢＭＳ−９８６０１６、及びＴＳＲ−０３３からなる群から選択される。
【００７９】
一部の実施形態では、１つまたは複数の追加の治療剤は、ＴＩＧＩＴ阻害剤である。一部の実施形態では、１つまたは複数の追加の治療剤は、ＣＤ１１２Ｒ阻害剤である。一部の実施形態では、１つまたは複数の追加の治療剤は、ＴＡＭ（Ａｘｌ、Ｍｅｒ、Ｔｙｒｏ）阻害剤である。一部の実施形態では、１つまたは複数の追加の治療剤は、ＳＴＩＮＧアゴニストである。一部の実施形態では、１つまたは複数の追加の治療剤は、４−１ＢＢアゴニストである。
【００８０】
一部の実施形態では、本開示は、対象からの試料中のＩＬ−２７を検出する方法を提供し、該方法は、（ａ）対象からの試料を、検出抗体と、ＩＬ−２７が試料中に存在する場合に、検出抗体が検出抗体−ＩＬ−２７複合体を形成することを可能にする条件下で接触させること、ここで検出抗体は本開示により提供する抗体またはその抗原結合フラグメントである、及び（ｂ）存在する場合、ステップ（ａ）において産生された複合体の存在を検出することを含む。
【００８１】
一部の実施形態では、本開示は、対象のＩＬ−２７関連がんを検出する方法を提供し、該方法は、（ａ）ＩＬ−２７関連がんを有する疑いのある対象からの試料を、検出抗体と、ＩＬ−２７が試料中に存在する場合に、検出抗体が検出抗体−ＩＬ−２７複合体を形成することを可能にする条件下で接触させるステップ、ここで検出抗体は本開示により提供する抗体またはその抗原結合部分である、及び（ｂ）存在する場合、ステップ（ａ）において産生された複合体の存在を検出するステップを含む。一部の実施形態では、検出抗体は、検出可能な標識に結合している。一部の実施形態では、該方法は、試料を、捕捉抗体と接触させて、ＩＬ−２７が試料中に存在する場合に、ＩＬ−２７及び捕捉抗体を含む複合体を産生することをさらに含み、捕捉抗体は、本開示により提供する抗体またはその抗原結合部分である。
【００８２】
一部の実施形態では、検出抗体または捕捉抗体は、重鎖ＣＤＲ及び軽鎖ＣＤＲを含み、重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列は、それぞれ、ＳＹＳＭＳ（配列番号２３）、ＹＩＳＹＤＧＧＳＡＹＹＰＤＴＶＫＧ（配列番号２４）及びＨＧＤＹＤＤＤＤＡＭＤＹ（配列番号２５）であり、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列は、それぞれ、ＲＡＳＥＮＩＹＳＹＬＡ（配列番号２６）、ＮＡＥＴＬＴＥ（配列番号２７）及びＱＨＨＹＧＴＰＬＴ（配列番号２８）である。
【００８３】
一部の実施形態では、検出抗体または捕捉抗体は、それぞれ、配列番号１及び配列番号３に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含む。
【００８４】
一部の実施形態では、捕捉抗体は、固体支持体上に固定化されている。一部の実施形態では、試料を、検出抗体の前に捕捉抗体と接触させる。一部の実施形態では、試料は、体液試料である。一部の実施形態では、流体試料は、血液、血清、血漿、細胞溶解液または組織溶解液である。
【００８５】
一部の実施形態では、がんは、腎細胞癌（ＲＣＣ）、肝細胞癌（ＨＣＣ）、肺癌、胃食道癌、卵巣癌、子宮内膜癌、黒色腫、白血病及びリンパ腫から選択される。一部の実施形態では、がんは、腎細胞癌（ＲＣＣ）である。一部の実施形態では、がんは、肝細胞癌（ＨＣＣ）である。一部の実施形態では、がんは、白血病及びリンパ腫から選択される。一部の実施形態では、がんは、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）である。
【００８６】
定義
本特許請求の範囲及び明細書内で使用する用語は、別段の指定がない限り、下記のように定義される。
【００８７】
本明細書及び添付の特許請求の範囲において使用する場合、単数形「ａ」、「ａｎ」、及び「ｔｈｅ」は、文脈上そうでないと明確に指示されない限り、複数形の指示対象を含むことに留意されなければならない。
【００８８】
本明細書で使用する場合、「約」は、当業者により理解され、それが使用される文脈に応じてある程度変動するだろう。当業者にとって明白ではない本用語の使用がある場合、それが使用される文脈を考慮して、「約」は、特定の値のプラスまたはマイナス１０％までを意味するだろう。
【００８９】
本明細書で使用する場合、「アゴニスト」という用語は、本明細書に開示する天然ポリペプチドの生物学的活性を、部分的または完全に促進、誘導、増加、及び／または活性化する任意の分子を指す。好適なアゴニスト分子は、アゴニスト抗体または抗体フラグメント、天然ポリペプチド、ペプチドまたはタンパク質の、フラグメントまたはアミノ酸配列変異体を具体的に含む。一部の実施形態では、アゴニストの存在下での活性化は、用量依存様式にて観察される。一部の実施形態では、測定されたシグナル（例えば、生物学的活性）は、同等の条件下で陰性対照を用いて測定されたシグナルよりも、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、または少なくとも約１００％高い。本明細書では、本開示の方法における使用に好適なアゴニストを同定する方法も開示する。例えば、これらの方法には、限定されないが、酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）、Ｆｏｒｔｅ  Ｂｉｏ（著作権）システム、及びラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）などの結合アッセイが含まれる。これらのアッセイは、目的のポリペプチド（例えば、受容体またはリガンド）に結合するアゴニストの能力を決定し、それゆえ、ポリペプチドの活性を促進、増加または活性化するアゴニストの能力を示す。ポリペプチドの機能を活性化または促進するアゴニストの能力などのアゴニストの有効性は、機能性アッセイを使用して決定することもできる。例えば、機能性アッセイは、ポリペプチドを候補アゴニスト分子と接触させること、及びポリペプチドに通常関連する１つまたは複数の生物学的活性における検出可能な変化を測定することを含み得る。アゴニストの効力は、通常、そのＥＣ５０値（アゴニスト応答の５０％を活性化するために必要な濃度）によって定義される。ＥＣ５０値が低いほど、アゴニストの効力は大きくなり、最大の生物学的応答を活性化するために必要な濃度は低くなる。
【００９０】
本明細書で使用する場合、「アラニンスキャニング」という用語は、所定のタンパク質またはポリペプチドの安定性または機能（複数可）（例えば、結合親和性）に対する特定の野生型残基の寄与を決定するために使用される技術を指す。この技術は、ポリペプチドの野生型残基のアラニン残基での置換、その後、アラニン置換誘導体または突然変異型ポリペプチドの安定性または機能（複数可）（例えば、結合親和性）の評価、及び野生型ポリペプチドとの比較を伴う。ポリペプチドの野生型残基をアラニンで置換する技術は、当該技術分野で公知である。
【００９１】
「回復する」という用語は、予防、重症度もしくは進行の緩和、寛解、または治癒を含む、疾患状態、例えば、がんの処置における任意の治療上有益な結果を指す。
【００９２】
本明細書で使用する場合、「アミノ酸」という用語は、天然に生じるアミノ酸及び合成アミノ酸、ならびに天然に生じるアミノ酸と同様の様式で機能するアミノ酸類似体及びアミノ酸模倣体を指す。天然に生じるアミノ酸は、遺伝暗号によってコードされるもの、ならびに後に修飾されたアミノ酸、例えば、ヒドロキシプロリン、γ−カルボキシグルタメート及びＯ−ホスホセリンである。アミノ酸類似体とは、天然に生じるアミノ酸と同じ塩基化学構造を有する化合物、すなわち、水素、カルボキシル基、アミノ基、及びＲ基に結合しているα炭素を有する化合物、例えば、ホモセリン、ノルロイシン、メチオニンスルホキシド、メチオニンメチルスルホニウムを指す。このような類似体は、修飾されたＲ基を有するか（例えばノルロイシン）または修飾されたペプチド主鎖を有するが、天然に生じるアミノ酸と同じ塩基化学構造を保持している。アミノ酸模倣体とは、アミノ酸の一般的な化学構造とは異なる構造を有するが、天然に生じるアミノ酸と同様の様式で機能する化学化合物を指す。
【００９３】
アミノ酸は、本明細書では、一般に公知である三文字の記号、またはＩＵＰＡＣ−ＩＵＢ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｎｏｍｅｎｃｌａｔｕｒｅ  Ｃｏｍｍｉｓｓｉｏｎによって推奨されている一文字の記号のいずれかによって称することができる。ヌクレオチドも同様に、一般に認められている一文字の略号で称することができる。
【００９４】
本明細書で使用する場合、「アミノ酸置換」は、所定のアミノ酸配列（出発ポリペプチドのアミノ酸配列）における少なくとも１つの既存のアミノ酸残基の、第二の、異なる「置換」アミノ酸残基での置換を指す。「アミノ酸挿入」とは、少なくとも１つの追加のアミノ酸を所定のアミノ酸配列に組み込むことを指す。挿入は通常、１つまたは２つのアミノ酸残基の挿入からなり得るが、より大きな「ペプチド挿入」、例えば約３〜約５、またさらには最大約１０、１５、または２０のアミノ酸残基の挿入もなされ得る。挿入された残基（複数可）は、上に開示するように、天然に生じても非天然に生じてもよい。「アミノ酸欠失」は、所定のアミノ酸配列からの少なくとも１つのアミノ酸残基の除去を指す。
【００９５】
本明細書で使用する場合、「量」または「レベル」という用語は、最も広い意味で使用され、物質（例えば、代謝産物、小分子、タンパク質、ｍＲＮＡ、マーカー）の数量、濃度または存在量を指す。代謝産物または小分子（例えば、薬物）に言及する場合、「量」、「レベル」、及び「濃度」という用語は、一般的に互換可能に使用され、一般的に生体試料中の検出可能な量を指す。「上昇したレベル」または「増加したレベル」とは、対照試料、例えば疾患もしくは障害（例えば、がん）に罹患していない１つもしくは複数の個体に由来するものまたは内部対照と比較した、試料内での物質の数量、濃度または存在量における増加を指す。一部の実施形態では、試料中の物質（例えば、薬物）の上昇したレベルは、当該技術分野で公知の技術（例えば、ＨＰＬＣ）によって決定される、対照試料中の物質の量に対する約５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の物質の量の増加を指す。「低下したレベル」とは、対照、例えば疾患もしくは障害（例えば、がん）に罹患していない１つもしくは複数の個体に由来するものまたは内部対照と比較した、個体内での物質（例えば、薬物）の数量、濃度または存在量における低減を指す。一部の実施形態では、低下したレベルは、検出可能な数量、濃度または存在量がほとんどまたは全くない。一部の実施形態では、試料中の物質（例えば、薬物）の低下したレベルは、当該技術分野で公知の技術（例えば、ＨＰＬＣ）によって決定される、対照試料中の物質の量に対する約５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の物質の量の低減を指す。
【００９６】
本明細書に記載されているものなどのタンパク質、ｍＲＮＡまたはマーカーに言及するとき、「発現のレベル」または「発現レベル」という用語は、一般に互換可能に使用され、一般的に生体試料中のタンパク質、ｍＲＮＡまたはマーカーの検出可能な量を指す。一部の態様では、タンパク質、ｍＲＮＡまたはマーカーの検出可能な量または検出可能なレベルは、本明細書に記載されているものなどの作用物質に対する応答の尤度に関連する。「発現」は、一般的に、遺伝子内に含有された情報が、細胞内に存在し作動する構造体（例えば、ＰＤ−Ｌ１などのタンパク質マーカー）へと転換される、プロセスを指す。それゆえ、本明細書で使用する場合、「発現」とは、ポリヌクレオチドへの転写、ポリペプチドへの翻訳、あるいはさらにはポリヌクレオチド及び／またはポリペプチド修飾（例えば、ポリペプチドの翻訳後修飾）を指し得る。転写されたポリヌクレオチド、翻訳されたポリペプチド、あるいはポリヌクレオチド及び／またはポリペプチド修飾（例えば、ポリペプチドの翻訳後修飾）のフラグメントも、それらが選択的スプライシングによって生成された転写物もしくは分解された転写物に由来するか、または例えばタンパク質分解によるポリペプチドの翻訳後プロセシングに由来するかどうかにかかわらず、発現されたものと見なされるべきである。「発現遺伝子」は、ｍＲＮＡとしてポリヌクレオチドに転写され、その後、ポリペプチドに翻訳される遺伝子を含み、ＲＮＡに転写されるが、ポリペプチドに翻訳されない遺伝子（例えば、トランスファーＲＮＡ及びリボソームＲＮＡ）も含む。「上昇した発現」、「上昇した発現レベル」、または「上昇したレベル」とは、対照試料、例えば疾患もしくは障害（例えば、がん）に罹患していない１つもしくは複数の個体または内部対照と比較した、試料内の物質の発現の増加またはレベルの増加を指す。一部の実施形態では、試料中の物質（例えば、ＰＤ−Ｌ１などのタンパク質マーカー）の上昇した発現は、当該技術分野で公知の技術（例えば、ＦＡＣＳ）によって決定される、対照試料中の物質の量に対する約５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の物質の量の増加を指す。「低下した発現」、「低下した発現レベル」、または「低下したレベル」とは、対照、例えば疾患もしくは障害（例えば、がん）に罹患していない１つもしくは複数の個体または内部対照と比較した、個体内の物質（例えば、タンパク質マーカー）の発現の低減またはレベルの低減を指す。一部の実施形態では、低下した発現は、発現がほとんどまたは全くない。一部の実施形態では、試料中の物質（例えば、タンパク質マーカー）の低下した発現は、当該技術分野で公知の技術（例えば、ＦＡＣＳ）によって決定される、対照試料中の物質の量に対する約５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の物質の量の低減を指す。
【００９７】
本明細書で使用する場合、「血管新生」または「新血管新生」という用語は、新しい血管が既存の血管から発生するプロセスを指す（Ｖａｒｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９９）Ａｎｇｉｏｇｅｎ．３：５３−６０；Ｍｏｕｓａ  ｅｔ  ａｌ．，（２０００）Ａｎｇｉｏｇｅｎ．Ｓｔｉｍ．Ｉｎｈｉｂ．３５：４２−４４；Ｋｉｍ  ｅｔ  ａｌ．，（２０００）Ａｍｅｒ．Ｊ．Ｐａｔｈ．１５６：１３４５−１３６２；Ｋｉｍ  ｅｔ  ａｌ．，（２０００）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７５：３３９２０−３３９２８；Ｋｕｍａｒ  ｅｔ  ａｌ．（２０００）Ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ：Ｆｒｏｍ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｔｏ  Ｉｎｔｅｇｒａｔｉｖｅ  Ｐｈａｒｍ．１６９−１８０）。既存の血管または循環内皮幹細胞（Ｔａｋａｈａｓｈｉ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９５）Ｎａｔ．Ｍｅｄ．５：４３４−４３８；Ｉｓｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９９）Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．１０３：１２３１−１２３６）由来の内皮細胞は、成長因子もしくはホルモンによる合図または低酸素もしくは虚血状態に応答して、遊走、増殖及び管腔を有する構造へと分化するよう活性化され、新たな血管を形成するようになる。がんにおいて生じるような、虚血の際の、酸素負荷及び栄養素の送達を増加させる必要性は、罹患組織による血管新生因子の分泌を明らかに誘導する；これらの因子は、新たな血管形成を刺激する。いくつかの追加の用語が、血管新生に関係する。
【００９８】
本明細書で使用する場合、「アンタゴニスト」という用語は、本明細書に開示する天然ポリペプチドの生物学的活性を部分的または完全に遮断、阻害、または中和する任意の分子を指す。好適なアンタゴニスト分子は、アンタゴニスト抗体または抗体フラグメント、天然ポリペプチド、ペプチドまたはタンパク質の、フラグメントまたはアミノ酸配列変異体を具体的に含む。一部の実施形態では、アンタゴニストの存在下での阻害は、用量依存様式にて観察される。一部の実施形態では、測定されたシグナル（例えば、生物学的活性）は、同等の条件下で陰性対照を用いて測定されたシグナルよりも、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、または少なくとも約１００％低い。本明細書では、本開示の方法における使用に好適なアンタゴニストを同定する方法も開示する。例えば、これらの方法には、限定されないが、酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）、Ｆｏｒｔｅ  Ｂｉｏ（著作権）システム、ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）、Ｍｅｓｏ  Ｓｃａｌｅ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙアッセイ（例えば、Ｍｅｓｏ  Ｓｃａｌｅ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ電気化学発光（ＭＳＤ−ＥＣＬ））、及びビーズベースＬｕｍｉｎｅｘ（登録商標）アッセイが含まれる。これらのアッセイは、アンタゴニストが目的のポリペプチド（例えば、受容体またはリガンド）に結合する能力を決定し、それゆえ、アンタゴニストがポリペプチドの活性を阻害、中和または遮断する能力を示す。ポリペプチドまたはアゴニストの機能を阻害するアンタゴニストの能力などのアンタゴニストの有効性は、機能性アッセイを使用して決定することもできる。例えば、機能性アッセイは、ポリペプチドを候補アンタゴニスト分子と接触させること、及びポリペプチドに通常関連する１つまたは複数の生物学的活性における検出可能な変化を測定することを含み得る。アンタゴニストの効力は、そのＩＣ５０値（アゴニスト応答の５０％を阻害するために必要な濃度）によって通常定義され得る。ＩＣ５０値が低いほど、アンタゴニストの効力は大きくなり、最大の生物学的応答を阻害するために必要な濃度は低くなる。
【００９９】
本明細書で使用する場合、「ヒトＩＬ−２７に拮抗する抗体またはその抗原結合部分」という語句は、ヒトＩＬ−２７の少なくとも１つの当該技術分野で認識されている活性（例えば、ＩＬ−２７生物学的活性及び／またはＩＬ−２７シグナル伝達によって媒介される下流経路（複数可）または他のＩＬ−２７媒介機能）に拮抗する抗体を指し、例えば、少なくとも５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％以上のヒトＩＬ−２７活性における低減（または低下）に関連する。ＩＬ−２７生物学的活性及び／またはＩＬ−２７シグナル伝達によって媒介される下流経路（複数可）または他のＩＬ−２７媒介機能のさらなる例は、本明細書下記及び他の箇所にてさらに詳細に説明する。
【０１００】
本明細書で使用する場合、「抗ＩＬ−２７アンタゴニスト抗体」（互換可能に「抗ＩＬ−２７抗体」と称する）という用語は、ＩＬ−２７に特異的に結合し、ＩＬ−２７生物学的活性及び／またはＩＬ−２７シグナル伝達によって媒介される下流経路（複数可）または他のＩＬ−２７媒介機能を阻害する抗体を指す。抗ＩＬ−２７アンタゴニスト抗体は、受容体結合及び／またはＩＬ−２７もしくはその代謝産物に対する細胞応答の誘発などのＩＬ−２７シグナル伝達または機能によって媒介される下流経路を含む、ＩＬ−２７生物学的活性（例えば、リガンド結合、酵素活性）を遮断、拮抗、抑制、阻害、または低下する抗体を包含する。一部の実施形態では、本開示により提供する抗ＩＬ−２７アンタゴニスト抗体は、ヒトＩＬ−２７に結合し、その同族もしくは正常受容体（例えば、ＩＬ−２７受容体）または１つもしくは複数の受容体サブユニット（例えば、ｇｐ１３０及び／またはＩＬ−２７Ｒα（ＷＳＸ１／ＴＣＣＲとしても知られる））へのヒトＩＬ−２７の結合を防止、遮断、または阻害する。一部の実施形態では、抗ＩＬ−２７アンタゴニスト抗体は、ヒトＩＬ−２７のｇｐ１３０への結合を防止、遮断または阻害する。一部の実施形態では、抗ＩＬ−２７アンタゴニスト抗体は、ヒトＩＬ−２７のＩＬ−２７Ｒαへの結合を防止、遮断、または阻害する。一部の実施形態では、抗ＩＬ−２７アンタゴニスト抗体は、ＩＬ−２７単量体の二量体化を防止、遮断、または阻害する。一部の実施形態では、抗ＩＬ−２７抗体は、ＥＢＩ３単量体に特異的に結合する。一部の実施形態では、抗ＩＬ−２７抗体は、ＩＬ−２７ｐ２８単量体に特異的に結合する。一部の実施形態では、抗ＩＬ−２７抗体は、両方のＩＬ−２７単量体に特異的に結合する。一部の実施形態では、抗ＩＬ−２７抗体は、ＥＢＩ３及びＰ２８の両方を含む非隣接エピトープに特異的に結合する。一部の実施形態では、抗ＩＬ−２７抗体は、細胞におけるＳＴＡＴ１及び／またはＳＴＡＴ３リン酸化を阻害または低下する。一部の実施形態では、抗ＩＬ−２７抗体は、細胞におけるＣＤ１６１発現の阻害を阻害または低下する（例えば、細胞におけるＣＤ１６１発現のＩＬ−２７媒介性阻害を回復または緩和する）。一部の実施形態では、抗ＩＬ−２７抗体は、細胞におけるＰＤ−Ｌ１及び／またはＴＩＭ−３発現を阻害または低下する。一部の実施形態では、抗ＩＬ−２７は、細胞からの１つまたは複数のサイトカインのＰＤ−１媒介性分泌を誘導または増強する。一部の実施形態では、抗ＩＬ−２７アンタゴニスト抗体は、ヒトＩＬ−２７に結合し、抗腫瘍応答を刺激または増強する。一部の実施形態では、抗ＩＬ−２７アンタゴニスト抗体は、ヒトＩＬ−２７に１５ｎＭ以下の親和性で結合する。一部の実施形態では、抗ＩＬ−２７アンタゴニスト抗体は、ヒトＩＬ−２７に結合し、野生型もしくは突然変異型ＩｇＧ１重鎖定常領域または野生型もしくは突然変異型ＩｇＧ４重鎖定常領域を含む。抗ＩＬ−２７アンタゴニスト抗体の例は、本明細書に提供する。
【０１０１】
本明細書で使用する場合、「抗体」という用語は、２つの軽鎖ポリペプチド及び２つの重鎖ポリペプチドを含む全抗体を指す。全抗体には、ＩｇＭ、ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、及びＩｇＥ抗体を含む異なる抗体アイソタイプが含まれる。「抗体」という用語は、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、キメラ化抗体またはキメラ抗体、ヒト化抗体、霊長類化抗体、脱免疫化抗体、及び完全ヒト抗体を含む。抗体は、様々な種、例えば、哺乳動物、例えばヒト、非ヒト霊長類（例えば、オランウータン、ヒヒ、またはチンパンジー）、ウマ、ウシ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、イヌ、ネコ、ウサギ、モルモット、スナネズミ、ハムスター、ラット及びマウスのいずれかにおいて作成するまたはこれに由来することができる。抗体は、精製または組換え抗体であることができる。本明細書で使用する場合、「抗体フラグメント」、「抗原結合フラグメント」という用語、または類似の用語は、標的抗原（例えば、ＩＬ−２７）に結合し、標的抗原の活性を阻害する能力を保持する抗体のフラグメントを指す。このようなフラグメントには、例えば、一本鎖抗体、一本鎖Ｆｖフラグメント（ｓｃＦｖ）、Ｆｄフラグメント、Ｆａｂフラグメント、Ｆａｂ’フラグメント、またはＦ（ａｂ’）２フラグメントが含まれる。ｓｃＦｖフラグメントは、ｓｃＦｖが由来する抗体の重鎖可変領域及び軽鎖可変領域の両方を含む単一のポリペプチド鎖である。加えて、イントラボディ、ミニボディ、トリアボディ、及びダイアボディも抗体の定義に含まれ、本明細書に記載の方法での使用に適合する。例えば、Ｔｏｄｏｒｏｖｓｋａ  ｅｔ  ａｌ．，（２００１）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  ２４８（１）：４７−６６；Ｈｕｄｓｏｎ  ａｎｄ  Ｋｏｒｔｔ，（１９９９）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  ２３１（１）：１７７−１８９；Ｐｏｌｊａｋ，（１９９４）Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ２（１２）：１１２１−１１２３；Ｒｏｎｄｏｎ  ａｎｄ  Ｍａｒａｓｃｏ，（１９９７）Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．  ５１：２５７−２８３を参照されたく、それぞれの開示は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０１０２】
本明細書中で使用する場合、「抗体フラグメント」という用語はまた、例えば、ラクダ化単一ドメイン抗体などの単一ドメイン抗体を含む。例えば、Ｍｕｙｌｄｅｒｍａｎｓ  ｅｔ  ａｌ．，（２００１）Ｔｒｅｎｄｓ  Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｓｃｉ．２６：２３０−２３５；Ｎｕｔｔａｌｌ  ｅｔ  ａｌ．，（２０００）Ｃｕｒｒ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．１：２５３−２６３；Ｒｅｉｃｈｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９９）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈ．２３１：２５−３８；ＰＣＴ出願公開番号ＷＯ９４／０４６７８及びＷＯ９４／２５５９１；ならびに米国特許第６，００５，０７９号を参照されたく、これらは全て、参照により本明細書に組み込まれる。一部の実施形態では、本開示は、単一ドメイン抗体が形成されるように修飾された２つのＶＨドメインを含む単一ドメイン抗体を提供する。
【０１０３】
一部の実施形態では、抗原結合フラグメントは、重鎖ポリペプチドの可変領域及び軽鎖ポリペプチドの可変領域を含む。一部の実施形態では、本明細書に記載の抗原結合フラグメントは、抗体の軽鎖及び重鎖ポリペプチドのＣＤＲを含む。
【０１０４】
「抗原提示細胞」または「ＡＰＣ」という用語は、ＭＨＣと複合体を形成した外来抗原をその表面上に提示する細胞である。Ｔ細胞は、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）を使用してこの複合体を認識する。ＡＰＣの例としては、限定されないが、Ｂ細胞、樹状細胞（ＤＣ）、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）、単球（ＴＨＰ−１など）、Ｂリンパ芽球細胞（Ｃ１Ｒ．Ａ２、１５１８  Ｂ−ＬＣＬなど）及び単球由来樹状細胞（ＤＣ）が挙げられる。一部のＡＰＣは、食作用または受容体を介したエンドサイトーシスのいずれかによって抗原を内在化させる。
【０１０５】
「抗原提示」という用語は、ＡＰＣが抗原を捕捉し、例えば、ＭＨＣ−Ｉ及び／またはＭＨＣ−ＩＩコンジュゲートの成分としての、Ｔ細胞によるそれらの認識を可能にするプロセスを指す。
【０１０６】
本明細書で使用する場合、「アポトーシス」という用語は、多細胞生物（例えば、ヒト）において生じるプログラムされた細胞死のプロセスを指す。アポトーシスをもたらす高度に制御された生化学的及び分子的事象は、細胞に観察可能及び特徴的な形態変化をもたらし、それには膜の小疱形成、細胞体積の収縮、染色体ＤＮＡの凝縮及びフラグメント化、ならびにｍＲＮＡの崩壊が含まれる。アポトーシスを起こしているＴ細胞を含む細胞を同定する一般的な方法は、細胞をフルオロフォアコンジュゲートタンパク質（アネキシンＶ）に曝露することである。アネキシンＶは、細胞がアポトーシスの過程にあることの初期の指標である、原形質膜の外側の小葉上のホスファチジルセリンに結合する能力によって、アポトーシス細胞を検出するために一般に使用される。
【０１０７】
本明細書で使用する場合、「Ｂ細胞」（あるいは「Ｂリンパ球」）という用語は、リンパ球サブタイプの白血球細胞の一種を指す。Ｂ細胞は、抗体を分泌することにより、適応免疫系の体液性免疫成分中で機能する。Ｂ細胞はまた、抗原を提示し、サイトカインを分泌する。Ｂ細胞は、他の２つのクラスのリンパ球であるＴ細胞及びナチュラルキラー細胞とは異なり、その細胞膜上にＢ細胞受容体（ＢＣＲ）を発現する。ＢＣＲは、Ｂ細胞が特定の抗原に結合することを可能にし、それに対して抗体応答を開始することになる。
【０１０８】
本明細書で使用する場合、「固定化ＩＬ−２７に結合する」という用語は、例えば、細胞の表面上で発現しているか、または固体支持体に付着している、ＩＬ−２７に結合する本開示の抗体の能力を指す。
【０１０９】
本明細書で使用する場合、「二重特異性」または「二機能性抗体」という用語は、２つの異なる重／軽鎖対及び２つの異なる結合部位を有する人工ハイブリッド抗体を指す。二重特異性抗体は、ハイブリドーマの融合またはＦａｂ’フラグメントの連結を含む様々な方法によって生産することができる。例えば、Ｓｏｎｇｓｉｖｉｌａｉ＆Ｌａｃｈｍａｎｎ，（１９９０）Ｃｌｉｎ．Ｅｘｐ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．７９：３１５−３２１；Ｋｏｓｔｅｌｎｙ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９２）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４８：１５４７−１５５３を参照されたい。
【０１１０】
従来、二重特異性抗体の組換え産生は、２つの免疫グロブリン重鎖／軽鎖対の共発現に基づき、この場合２つの重鎖／軽鎖対は、異なる特異性を有する（Ｍｉｌｓｔｅｉｎ  ａｎｄ  Ｃｕｅｌｌｏ，（１９８３）Ｎａｔｕｒｅ  ３０５：５３７−５３９）。所望の結合特異性を伴う抗体可変ドメイン（抗体−抗原複合部位）は、免疫グロブリン定常ドメイン配列に融合することができる。重鎖可変領域の融合は、好ましくは、ヒンジ、ＣＨ２、及びＣＨ３領域の少なくとも一部を含む免疫グロブリン重鎖定常ドメインとの融合である。二重特異性抗体を生成するための例示的な現在公知の方法のさらなる詳細については、例えば、Ｓｕｒｅｓｈ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８６）Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｅｎｚｙｍｏｌ．１２１：２１０；ＰＣＴ公開番号ＷＯ９６／２７０１１；Ｂｒｅｎｎａｎ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８５）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２２９：８１；Ｓｈａｌａｂｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．（１９９２）１７５：２１７−２２５；Ｋｏｓｔｅｌｎｙ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９２）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４８（５）：１５４７−１５５３；Ｈｏｌｌｉｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９３）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９０：６４４４−６４４８；Ｇｒｕｂｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９４）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５２：５３６８；及びＴｕｔｔ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９１）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４７：６０を参照されたい。二重特異性抗体には、架橋またはヘテロコンジュゲート抗体も含まれる。ヘテロコンジュゲート抗体は、任意の好都合な架橋方法を使用して作成され得る。好適な架橋剤が当該技術分野で周知であり、いくつかの架橋技術とともに、米国特許第４，６７６，９８０号に開示されている。
【０１１１】
組換え細胞培養物から直接二重特異性抗体フラグメントを作成する及び単離するための様々な技術も記載されている。例えば、二重特異性抗体は、ロイシンジッパーを使用して産生されている。例えば、Ｋｏｓｔｅｌｎｙ  ｅｔ  ａｌ．（１９９２）Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １４８（５）：１５４７−１５５３を参照されたい。Ｆｏｓ及びＪｕｎタンパク質由来のロイシンジッパーペプチドを、遺伝子融合によって２つの異なる抗体のＦａｂ’部分に連結させ得る。抗体ホモ二量体をヒンジ領域にて還元して単量体を形成し、次に、再酸化して抗体ヘテロ二量体を形成し得る。この方法は、抗体ホモ二量体の産生にも利用することができる。Ｈｏｌｌｉｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（１９９３）Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ  ９０：６４４４−６４４８により記載される「ダイアボディ」技術は、二重特異性抗体フラグメントを作成するための代替的機序を提供している。フラグメントは、同じ鎖上で２つのドメイン間の対合を可能にするには短すぎるリンカーによって軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）に連結した重鎖可変ドメイン（ＶＨ）を含む。従って、１つのフラグメントのＶＨ及びＶＬドメインは別のフラグメントの相補的ＶＬ及びＶＨドメインと強制的に対合し、それにより２つの抗原結合部位が形成される。一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）二量体の使用による二重特異性抗体フラグメントを作成するための別の戦略も報告されている。例えば、Ｇｒｕｂｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（１９９４）Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １５２：５３６８を参照されたい。あるいは、抗体は、例えば、Ｚａｐａｔａ  ｅｔ  ａｌ．（１９９５）Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇ．８（１０）：１０５７−１０６２に記載されるように「線状抗体」であることができる。簡潔には、これらの抗体は、一対の抗原結合領域を形成する一対のタンデムＦｄセグメント（ＶＨ−ＣＨ１−ＶＨ−ＣＨ１）を含む。線状抗体は、二重特異性または単一特異性であることができる。
【０１１２】
２つ以上の価数を伴う抗体（例えば、三重特異性抗体）は企図され、例えば、Ｔｕｔｔ  ｅｔ  ａｌ．（１９９１）Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １４７：６０に記載されている。
【０１１３】
本開示はまた、Ｗｕ  ｅｔ  ａｌ．（２００７）Ｎａｔ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ  ２５（１１）：１２９０−１２９７に記載されている二重可変ドメイン免疫グロブリン（ＤＶＤ−Ｉｇ）分子などの多重特異性抗体の変異形態も包含する。ＤＶＤ−Ｉｇ分子は、２つの異なる親抗体からの２つの異なる軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）がタンデムに直接または短いリンカーを介して組換えＤＮＡ技術によって連結され、その後に軽鎖定常ドメインが続くように設計されている。同様に、重鎖は、タンデムに連結された２つの異なる重鎖可変ドメイン（ＶＨ）、続く定常ドメインＣＨ１及びＦｃ領域を含む。２つの親抗体からＤＶＤ−Ｉｇ分子を作成する方法は、例えば、ＰＣＴ公開番号ＷＯ０８／０２４１８８及びＷＯ０７／０２４７１５にさらに記載されている。一部の実施形態では、二重特異性抗体は、第二の特異性を有する軽鎖可変領域が全抗体の重鎖可変領域に融合している、タンデム型Ｆａｂ免疫グロブリンである。そのような抗体は、例えば、国際特許出願公開番号ＷＯ２０１５／１０３０７２に記載されている。
【０１１４】
本明細書で使用する場合、「がん抗原」または「腫瘍抗原」とは、（ｉ）腫瘍特異的抗原、（ｉｉ）腫瘍関連抗原、（ｉｉｉ）腫瘍特異的抗原を発現する細胞、（ｉｖ）腫瘍関連抗原を発現する細胞、（ｖ）腫瘍上の胚性抗原、（ｖｉ）自己腫瘍細胞、（ｖｉｉ）腫瘍特異的膜抗原、（ｖｉｉｉ）腫瘍関連膜抗原、（ｉｘ）増殖因子受容体、（ｘ）増殖因子リガンド、及び（ｘｉ）がんに関連する任意の他のタイプの抗原または抗原提示細胞もしくは物質を指す。
【０１１５】
本明細書で使用する場合、「がん特異的免疫応答」という用語は、腫瘍、がん細胞、またはがん抗原の存在によって誘発される免疫応答を指す。ある特定の実施形態では、応答は、がん抗原特異的リンパ球の増殖を含む。ある特定の実施形態では、応答は、抗体及びＴ細胞受容体の発現及び上方制御、ならびにリンホカイン、ケモカイン、及びサイトカインの形成及び放出を含む。自然免疫系及び後天性免疫系の両方が相互作用して、腫瘍、がん細胞、またはがん抗原に対する抗原応答を開始する。ある特定の実施形態では、がん特異的免疫応答は、Ｔ細胞応答である。
【０１１６】
「癌種」という用語は、当該技術分野で認識されており、呼吸器系癌、消化器系癌、泌尿生殖器系癌、精巣癌、乳癌、前立腺癌、内分泌系癌、及び黒色腫を含む上皮または内分泌組織の悪性腫瘍を指す。本明細書に記載の抗ＩＬ−２７抗体を使用して、腎癌もしくは黒色腫を含む任意のタイプのがん、または任意のウイルス性疾患を有する、有する疑いのある、または発症するリスクが高い可能性がある患者を処置することができる。例示的な癌種には、子宮頸部、肺、前立腺、乳房、頭頸部、結腸及び卵巣の組織から形成されるものが含まれる。本用語は、癌性肉腫も含み、これには、癌性組織及び肉腫性組織から構成される悪性腫瘍が含まれる。「腺癌」は、腺組織に由来する癌種、または腫瘍細胞が認識可能な腺構造を形成する癌種を指す。
【０１１７】
本明細書で使用する場合、「ＣＤ１１２Ｒ」という用語は、ポリオウイルス受容体様タンパク質のメンバーを指し、ヒトＴ細胞に対する共阻害受容体である。ＣＤ１１２Ｒは、Ｔ細胞上に優先的に発現し、Ｔ細胞受容体を介したシグナルを阻害する。抗原提示細胞及び腫瘍細胞上で広く発現しているＣＤ１１２は、ＣＤ１１２Ｒに対するリガンドである。ＣＤ１１２Ｒは、ＣＤ１１２への結合をめぐってＣＤ２２６と競合する。ＣＤ１１２Ｒ−ＣＤ１１２相互作用を妨害することは、ヒトＴ細胞応答を増強する。ＣＤ１１２との相互作用を介するヒトＴ細胞に対する新規チェックポイントとしてのＣＤ１１２Ｒ。本明細書で使用する場合、「ＣＤ１１２Ｒ阻害剤」という用語は、ＣＤ１１２Ｒの生物学的機能または活性を妨害、遮断または阻害する作用物質を指す。
【０１１８】
本明細書で使用する場合、「ＣＤ１３７」（あるいは「４−１ＢＢ」）という用語は、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）受容体スーパーファミリーのメンバーを指す。４−１ＢＢは、主に活性化Ｔ細胞に対する共刺激性免疫チェックポイント分子である。ＣＤ１３７の架橋は、Ｔ細胞の増殖、ＩＬ−２分泌、生存、及び細胞溶解活性を増強する。本明細書で使用する場合、「４−１ＢＢアゴニスト」という用語は、４−１ＢＢの１つまたは複数の機能を刺激、誘導または増加させる作用物質を指す。例示的な４−１ＢＢアゴニストは、この４−１ＢＢを標的としてＴ細胞を刺激する完全ヒトＩｇＧ２モノクローナル抗体である、ウトミルマブ（ＰＦ−０５０８２５６６）である。
【０１１９】
本明細書で使用する場合、「ＣＤ１６１」という用語（あるいはキラー細胞レクチン様受容体サブファミリーＢ、メンバー１（ＫＬＲＢ１）；ＮＫ１．１、またはＮＫＲ−Ｐ１Ａとしても知られる）は、Ｃ型レクチンスーパーファミリーのメンバーを指す。ＣＤ１６１は、Ｔ細胞のマーカーであり、ＣＤ１６１の発現は、多くの異なるがんタイプの腫瘍微小環境へのＴ細胞浸潤と関連している。ＣＤ１６１は、Ｆｅｒｇｕｓｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，（２０１４）Ｃｅｌｌ  Ｒｅｐｏｒｔｓ  ９（３）：１０７５−１０８８にさらに記載されており、これは参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０１２０】
本明細書で使用する場合、「ＩＬ−２７」または「インターロイキン２７」という用語は、ＩＬ−２７サイトカインを指す。ＩＬ−２７は、ＩＬ−６／ＩＬ−１２サイトカインファミリーに関連しており、エプスタイン−バーウイルス誘導遺伝子３として知られる（ＥＢＩ３；ＩＬ−２７サブユニットβ及びＩＬ−２７Ｂとしても知られる）第一のサブユニット及びＩＬ−２７ｐ２８として知られる（ＩＬ３０、ＩＬ−２７サブユニットα及びＩＬ−２７Ａとしても知られる）第二のサブユニットを含む、ヘテロ二量体サイトカインである。ＩＬ−２７は、単球、内皮細胞及び樹状細胞を含む活性化抗原提示細胞によって主に合成される（Ｊａｎｋｏｗｓｋｉ  ｅｔ  ａｌ．（２０１０）Ａｒｃｈ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｔｈｅｒ．Ｅｘｐ．５８：４１７−４２５、Ｄｉａｋｏｗｓｋｉ  ｅｔ  ａｌ．（２０１３）Ａｄｖ．Ｃｌｉｎ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．（２０１３）２２（５）：６８３−６９１）。ＩＬ−２７は、炎症促進性の作用を有し得るが、多くの研究が、ＩＬ−２７の重要な役割を免疫抑制剤として示している（Ｓｈｉｍｉｚｕ  ｅｔ  ａｌ．（２００６）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１７６：７３１７−７３２４、Ｈｉｓａｄａ  ｅｔ  ａｌ．（２００４）Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．６４：１１５２−１１５６、Ｄｉａｋｏｗｓｋｉ（２０１３）上記）。当初は、Ｔｈ１応答の開始を促進する因子として説明されていたが、後に、ＩＬ−２７が、Ｔｈ１応答を制限し、Ｔｈ２及びＴｈ１７細胞分化を阻害し、Ｔｒ１及び他のＴ制御細胞集団の発生を制御することにより、主要なＴ細胞抑制機能を担うことが見いだされた（Ｄｉｅｔｒｉｃｈ  ｅｔ  ａｌ．（２０１４）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９２：５３８２−５３８９）。免疫制御因子としての役割に加えて、ＩＬ−２７は、血管新生、造血、及び破骨細胞形成（ｏｓｔｅｏｃａｌｓｔｏｇｅｎｅｓｉｓ）を制御する（同上）。
【０１２１】
ＩＬ−２７は、ＷＳＸ１として知られる（ＩＬ−２７受容体サブユニットα、ＩＬ−２７ＲＡ、Ｔ細胞１型サイトカイン受容体（ＴＣＣＲ）、及びサイトカイン受容体様１（ＣＲＬ１）としても知られる）第一のサブユニット及びｇｐ１３０として知られる（インターロイキン−６シグナルトランスデューサー（ＩＬ６ＳＴ）、インターロイキン−６受容体サブユニットβ（ＩＬ−６ＲＢ）、及びオンコスタチンＭ受容体としても知られる）第二のサブユニットを含むヘテロ二量体Ｉ型サイトカイン受容体（ＩＬ−２７受容体またはＩＬ−２７Ｒ）を通してシグナル伝達する。ｇｐ１３０は、ＩＬ−６ファミリーサイトカインに対する受容体サブユニットでもある（Ｌｉｕ  ｅｔ  ａｌ．（２００８）Ｓｃａｎ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．６８：２２−２９９、Ｄｉａｋｏｗｓｋｉ（２０１３）上記）。ＩＬ−２７Ｒを通したＩＬ−２７シグナル伝達は、ＪＡＫ−ＳＴＡＴ及びｐ３８ＭＡＰＫ経路を含む複数のシグナル伝達カスケードを活性化する。
【０１２２】
ＥＢＩ３は、さらにｐ２８またはＩＬ−２７ヘテロ二量体とは独立した生物学的機能を有すると考えられている。例えば、ＥＢＩ３は、ｐ３５とも相互作用してヘテロ二量体サイトカインＩＬ−３５を形成し（Ｙｏｓｈｉｄａ  ｅｔ  ａｌ．（２０１５）Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．３３：４１７−４３）、ｐ２８またはＩＬ−２７が対応して増加することなく、ある特定の細胞型で選択的に過剰発現されることが示されている（Ｌａｒｏｕｓｓｅｒｉｅ  ｅｔ  ａｌ．（２００５）Ａｍ．Ｊ．Ｐａｔｈｏｌ．１６６（４）：１２１７−２８）。
【０１２３】
例示的なヒトＥＢＩ３タンパク質のアミノ酸配列は、配列番号６９８（ＮＣＢＩ参照配列：ＮＰ＿００５７４６．２；Ｎ−ＭＴＰＱＬＬＬＡＬＶＬＷＡＳＣＰＰＣＳＧＲＫＧＰＰＡＡＬＴＬＰＲＶＱＣＲＡＳＲＹＰＩＡＶＤＣＳＷＴＬＰＰＡＰＮＳＴＳＰＶＳＦＩＡＴＹＲＬＧＭＡＡＲＧＨＳＷＰＣＬＱＱＴＰＴＳＴＳＣＴＩＴＤＶＱＬＦＳＭＡＰＹＶＬＮＶＴＡＶＨＰＷＧＳＳＳＳＦＶＰＦＩＴＥＨＩＩＫＰＤＰＰＥＧＶＲＬＳＰＬＡＥＲＱＬＱＶＱＷＥＰＰＧＳＷＰＦＰＥＩＦＳＬＫＹＷＩＲＹＫＲＱＧＡＡＲＦＨＲＶＧＰＩＥＡＴＳＦＩＬＲＡＶＲＰＲＡＲＹＹＶＱＶＡＡＱＤＬＴＤＹＧＥＬＳＤＷＳＬＰＡＴＡＴＭＳＬＧＫ−Ｃ）に提供する。例示的なヒトｐ２８タンパク質のアミノ酸配列は、配列番号６９９（ＮＣＢＩ参照配列：ＮＰ＿６６３６３４．２；Ｎ−ＭＧＱＴＡＧＤＬＧＷＲＬＳＬＬＬＬＰＬＬＬＶＱＡＧＶＷＧＦＰＲＰＰＧＲＰＱＬＳＬＱＥＬＲＲＥＦＴＶＳＬＨＬＡＲＫＬＬＳＥＶＲＧＱＡＨＲＦＡＥＳＨＬＰＧＶＮＬＹＬＬＰＬＧＥＱＬＰＤＶＳＬＴＦＱＡＷＲＲＬＳＤＰＥＲＬＣＦＩＳＴＴＬＱＰＦＨＡＬＬＧＧＬＧＴＱＧＲＷＴＮＭＥＲＭＱＬＷＡＭＲＬＤＬＲＤＬＱＲＨＬＲＦＱＶＬＡＡＧＦＮＬＰＥＥＥＥＥＥＥＥＥＥＥＥＥＲＫＧＬＬＰＧＡＬＧＳＡＬＱＧＰＡＱＶＳＷＰＱＬＬＳＴＹＲＬＬＨＳＬＥＬＶＬＳＲＡＶＲＥＬＬＬＬＳＫＡＧＨＳＶＷＰＬＧＦＰＴＬＳＰＱＰ−Ｃ）に提供する。例示的なヒトＷＳＸ１タンパク質のアミノ酸配列は、配列番号７００（ＮＣＢＩ参照配列：ＮＰ＿００４８３４．１；Ｎ−ＭＲＧＧＲＧＡＰＦＷＬＷＰＬＰＫＬＡＬＬＰＬＬＷＶＬＦＱＲＴＲＰＱＧＳＡＧＰＬＱＣＹＧＶＧＰＬＧＤＬＮＣＳＷＥＰＬＧＤＬＧＡＰＳＥＬＨＬＱＳＱＫＹＲＳＮＫＴＱＴＶＡＶＡＡＧＲＳＷＶＡＩＰＲＥＱＬＴＭＳＤＫＬＬＶＷＧＴＫＡＧＱＰＬＷＰＰＶＦＶＮＬＥＴＱＭＫＰＮＡＰＲＬＧＰＤＶＤＦＳＥＤＤＰＬＥＡＴＶＨＷＡＰＰＴＷＰＳＨＫＶＬＩＣＱＦＨＹＲＲＣＱＥＡＡＷＴＬＬＥＰＥＬＫＴＩＰＬＴＰＶＥＩＱＤＬＥＬＡＴＧＹＫＶＹＧＲＣＲＭＥＫＥＥＤＬＷＧＥＷＳＰＩＬＳＦＱＴＰＰＳＡＰＫＤＶＷＶＳＧＮＬＣＧＴＰＧＧＥＥＰＬＬＬＷＫＡＰＧＰＣＶＱＶＳＹＫＶＷＦＷＶＧＧＲＥＬＳＰＥＧＩＴＣＣＣＳＬＩＰＳＧＡＥＷＡＲＶＳＡＶＮＡＴＳＷＥＰＬＴＮＬＳＬＶＣＬＤＳＡＳＡＰＲＳＶＡＶＳＳＩＡＧＳＴＥＬＬＶＴＷＱＰＧＰＧＥＰＬＥＨＶＶＤＷＡＲＤＧＤＰＬＥＫＬＮＷＶＲＬＰＰＧＮＬＳＡＬＬＰＧＮＦＴＶＧＶＰＹＲＩＴＶＴＡＶＳＡＳＧＬＡＳＡＳＳＶＷＧＦＲＥＥＬＡＰＬＶＧＰＴＬＷＲＬＱＤＡＰＰＧＴＰＡＩＡＷＧＥＶＰＲＨＱＬＲＧＨＬＴＨＹＴＬＣＡＱＳＧＴＳＰＳＶＣＭＮＶＳＧＮＴＱＳＶＴＬＰＤＬＰＷＧＰＣＥＬＷＶＴＡＳＴＩＡＧＱＧＰＰＧＰＩＬＲＬＨＬＰＤＮＴＬＲＷＫＶＬＰＧＩＬＦＬＷＧＬＦＬＬＧＣＧＬＳＬＡＴＳＧＲＣＹＨＬＲＨＫＶＬＰＲＷＶＷＥＫＶＰＤＰＡＮＳＳＳＧＱＰＨＭＥＱＶＰＥＡＱＰＬＧＤＬＰＩＬＥＶＥＥＭＥＰＰＰＶＭＥＳＳＱＰＡＱＡＴＡＰＬＤＳＧＹＥＫＨＦＬＰＴＰＥＥＬＧＬＬＧＰＰＲＰＱＶＬＡ−Ｃ）に提供する。例示的なヒトｇｐ１３０タンパク質のアミノ酸配列は、配列番号７０１（ＮＣＢＩ参照配列：ＮＰ＿００２１７５．２；Ｎ−ＭＬＴＬＱＴＷＬＶＱＡＬＦＩＦＬＴＴＥＳＴＧＥＬＬＤＰＣＧＹＩＳＰＥＳＰＶＶＱＬＨＳＮＦＴＡＶＣＶＬＫＥＫＣＭＤＹＦＨＶＮＡＮＹＩＶＷＫＴＮＨＦＴＩＰＫＥＱＹＴＩＩＮＲＴＡＳＳＶＴＦＴＤＩＡＳＬＮＩＱＬＴＣＮＩＬＴＦＧＱＬＥＱＮＶＹＧＩＴＩＩＳＧＬＰＰＥＫＰＫＮＬＳＣＩＶＮＥＧＫＫＭＲＣＥＷＤＧＧＲＥＴＨＬＥＴＮＦＴＬＫＳＥＷＡＴＨＫＦＡＤＣＫＡＫＲＤＴＰＴＳＣＴＶＤＹＳＴＶＹＦＶＮＩＥＶＷＶＥＡＥＮＡＬＧＫＶＴＳＤＨＩＮＦＤＰＶＹＫＶＫＰＮＰＰＨＮＬＳＶＩＮＳＥＥＬＳＳＩＬＫＬＴＷＴＮＰＳＩＫＳＶＩＩＬＫＹＮＩＱＹＲＴＫＤＡＳＴＷＳＱＩＰＰＥＤＴＡＳＴＲＳＳＦＴＶＱＤＬＫＰＦＴＥＹＶＦＲＩＲＣＭＫＥＤＧＫＧＹＷＳＤＷＳＥＥＡＳＧＩＴＹＥＤＲＰＳＫＡＰＳＦＷＹＫＩＤＰＳＨＴＱＧＹＲＴＶＱＬＶＷＫＴＬＰＰＦＥＡＮＧＫＩＬＤＹＥＶＴＬＴＲＷＫＳＨＬＱＮＹＴＶＮＡＴＫＬＴＶＮＬＴＮＤＲＹＬＡＴＬＴＶＲＮＬＶＧＫＳＤＡＡＶＬＴＩＰＡＣＤＦＱＡＴＨＰＶＭＤＬＫＡＦＰＫＤＮＭＬＷＶＥＷＴＴＰＲＥＳＶＫＫＹＩＬＥＷＣＶＬＳＤＫＡＰＣＩＴＤＷＱＱＥＤＧＴＶＨＲＴＹＬＲＧＮＬＡＥＳＫＣＹＬＩＴＶＴＰＶＹＡＤＧＰＧＳＰＥＳＩＫＡＹＬＫＱＡＰＰＳＫＧＰＴＶＲＴＫＫＶＧＫＮＥＡＶＬＥＷＤＱＬＰＶＤＶＱＮＧＦＩＲＮＹＴＩＦＹＲＴＩＩＧＮＥＴＡＶＮＶＤＳＳＨＴＥＹＴＬＳＳＬＴＳＤＴＬＹＭＶＲＭＡＡＹＴＤＥＧＧＫＤＧＰＥＦＴＦＴＴＰＫＦＡＱＧＥＩＥＡＩＶＶＰＶＣＬＡＦＬＬＴＴＬＬＧＶＬＦＣＦＮＫＲＤＬＩＫＫＨＩＷＰＮＶＰＤＰＳＫＳＨＩＡＱＷＳＰＨＴＰＰＲＨＮＦＮＳＫＤＱＭＹＳＤＧＮＦＴＤＶＳＶＶＥＩＥＡＮＤＫＫＰＦＰＥＤＬＫＳＬＤＬＦＫＫＥＫＩＮＴＥＧＨＳＳＧＩＧＧＳＳＣＭＳＳＳＲＰＳＩＳＳＳＤＥＮＥＳＳＱＮＴＳＳＴＶＱＹＳＴＶＶＨＳＧＹＲＨＱＶＰＳＶＱＶＦＳＲＳＥＳＴＱＰＬＬＤＳＥＥＲＰＥＤＬＱＬＶＤＨＶＤＧＧＤＧＩＬＰＲＱＱＹＦＫＱＮＣＳＱＨＥＳＳＰＤＩＳＨＦＥＲＳＫＱＶＳＳＶＮＥＥＤＦＶＲＬＫＱＱＩＳＤＨＩＳＱＳＣＧＳＧＱＭＫＭＦＱＥＶＳＡＡＤＡＦＧＰＧＴＥＧＱＶＥＲＦＥＴＶＧＭＥＡＡＴＤＥＧＭＰＫＳＹＬＰＱＴＶＲＱＧＧＹＭＰＱ−Ｃ）に提供する。
【０１２４】
本明細書で使用する場合、「競合する」という用語は、同じエピトープへの結合をめぐって競合する抗原結合タンパク質（例えば、免疫グロブリン、抗体、またはその抗原結合フラグメント）の文脈で使用される場合、アッセイ（例えば、競合結合アッセイ、クロスブロッキングアッセイ）によって決定される抗原結合タンパク質間の相互作用を指し、試験抗原結合タンパク質（例えば、試験抗体）は、参照抗原結合タンパク質（例えば、参照抗体）の共通抗原（例えば、ＩＬ−２７またはそのフラグメント）に対する特異的結合を阻害する（例えば、低下または遮断する）。
【０１２５】
指定されたポリペプチドまたはタンパク質「に由来する」ポリペプチドまたはアミノ酸配列は、ポリペプチドの起源を指す。好ましくは、特定の配列に由来するポリペプチドまたはアミノ酸配列は、その配列またはその一部分と本質的に同一であるアミノ酸配列を有し、その部分は、少なくとも１０〜２０個のアミノ酸、好ましくは少なくとも２０〜３０個のアミノ酸、より好ましくは少なくとも３０〜５０個のアミノ酸からなるか、またはそうでなければ、配列にその起源を有するとして当業者に識別可能である。別のペプチドに由来するポリペプチドは、出発ポリペプチドに対して１つまたは複数の突然変異、例えば、別のアミノ酸残基で置換された、または１つもしくは複数のアミノ酸残基の挿入もしくは欠失を有する１つまたは複数のアミノ酸残基を有し得る。
【０１２６】
ポリペプチドは、天然に生じないアミノ酸配列を含むことができる。このような変異体は、必然的に出発分子と１００％未満の配列同一性または類似性を有する。ある特定の実施形態では、変異体は、出発ポリペプチドのアミノ酸配列と、例えば、変異分子の長さにわたって、約７５％から１００％未満の、より好ましくは約８０％から約１００％未満、より好ましくは約８５％から１００％未満、より好ましくは約９０％から１００％未満（例えば、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％）、そして最も好ましくは約９５％から１００％未満のアミノ酸配列同一性または類似性のアミノ酸配列を有するだろう。
【０１２７】
ある特定の実施形態では、出発ポリペプチド配列及びそれに由来する配列との間に１個のアミノ酸の差異がある。この配列に関する同一性または類似性は、本明細書において、これらの配列をアライメントし、必要に応じてギャップを導入して、最大パーセント配列同一性を達成した後の、出発アミノ酸残基と同一（すなわち、同じ残基）である候補配列中のアミノ酸残基の割合（％）と定義される。ある特定の実施形態では、ポリペプチドは、表１２に記載の配列から選択されるアミノ酸配列からなる、から本質的になる、またはそれを含む。ある特定の実施形態では、ポリペプチドは、表１２に記載の配列から選択されたアミノ酸配列に、少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一であるアミノ酸配列を含む。ある特定の実施形態では、ポリペプチドは、表１２に記載の配列から選択された連続したアミノ酸配列に、少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％同一である連続したアミノ酸配列を含む。ある特定の実施形態では、ポリペプチドは、表１２に記載の配列から選択されたアミノ酸配列の少なくとも１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００、２００、３００、４００、または５００（またはこれらの数値内の任意の整数）の連続したアミノ酸を有するアミノ酸配列を含む。
【０１２８】
ある特定の実施形態では、本開示の抗体は、ヌクレオチド配列によってコードされる。本発明のヌクレオチド配列は、多くの用途、例えば、クローニング、遺伝子治療、タンパク質発現及び精製、突然変異導入、それを必要とする宿主のＤＮＡワクチン接種、例えば、受動免疫のための抗体生成、ＰＣＲ、プライマー及びプローブの生成などに有用であることができる。ある特定の実施形態では、本発明のヌクレオチド配列は、表１２に記載の配列から選択されるヌクレオチド配列を含む、からなる、またはから本質的になる。ある特定の実施形態では、ヌクレオチド配列は、表１２に記載の配列から選択されたヌクレオチド配列に、少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一であるヌクレオチド配列を含む。ある特定の実施形態では、ヌクレオチド配列は、表１２に記載の配列から選択された連続したヌクレオチド配列に、少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％同一である連続したヌクレオチド配列を含む。ある特定の実施形態では、ヌクレオチド配列は、表１２に記載の配列から選択されたヌクレオチド配列の少なくとも１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００、２００、３００、４００、または５００（またはこれらの数値内の任意の整数）の連続したヌクレオチドを有するヌクレオチド配列を含む。
【０１２９】
本明細書に開示の方法における使用に好適な抗体は、天然配列の望ましい活性を保持しつつ、それらが由来する天然に生じるまたは天然配列とは配列が異なるように変更され得ることも当業者は理解するだろう。例えば、「非必須」アミノ酸残基にて保存的置換または変化をもたらすヌクレオチドまたはアミノ酸置換が行われ得る。突然変異は、標準的な技術、例えば部位特異的突然変異誘発及びＰＣＲを介した突然変異誘発によって導入され得る。
【０１３０】
本明細書に開示の方法における使用に好適な抗体は、１つまたは複数のアミノ酸残基、例えば、必須または非必須アミノ酸残基にて保存的アミノ酸置換を含み得る。「保存的アミノ酸置換」とは、アミノ酸残基が、類似の側鎖を有するアミノ酸残基で置換されている置換である。類似の側鎖を有するアミノ酸残基のファミリーは、当該技術分野において定義されており、塩基性側鎖（例えば、リジン、アルギニン、ヒスチジン）、酸性側鎖（例えば、アスパラギン酸、グルタミン酸）、非荷電極性側鎖（例えば、グリシン、アスパラギン、グルタミン、セリン、トレオニン、チロシン、システイン）、非極性側鎖（例えば、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン、トリプトファン）、ベータ分岐側鎖（例えば、トレオニン、バリン、イソロイシン）及び芳香族側鎖（例えば、チロシン、フェニルアラニン、トリプトファン、ヒスチジン）が挙げられる。ゆえに、結合ポリペプチド中の非必須アミノ酸残基は、好ましくは、同じ側鎖ファミリー由来の別のアミノ酸残基で置換される。ある特定の実施形態では、一連のアミノ酸は、側鎖ファミリーのメンバーの順序及び／または組成が異なる構造的に類似した連続鎖で置換され得る。あるいは、ある特定の実施形態では、突然変異を、飽和突然変異誘発法などにより、コード配列の全部または一部にわたってランダムに導入し、得られた突然変異体を本発明の結合ポリペプチドに組み入れて、所望の標的に結合するそれらの能力に関してスクリーニングすることができる。
【０１３１】
本明細書で使用する場合、抗原「交差提示」という用語は、ＡＰＣ上のＭＨＣクラスＩ及びクラスＩＩ分子を介したＴ細胞への外因性タンパク質抗原の提示を指す。
【０１３２】
本明細書で使用する場合、「交差反応する」という用語は、本開示の抗体が異なる種に由来するＩＬ−２７に結合する能力を指す。例えば、ヒトＩＬ−２７に結合する本開示の抗体はさらに、別の種のＩＬ−２７に結合し得る。本明細書で使用する場合、交差反応性は、結合アッセイ（例えば、ＳＰＲ、ＥＬＩＳＡ）における精製抗原との特異的反応性またはＩＬ−２７を生理学的に発現する細胞への結合、そうでなければ機能的相互作用の検出によって測定する。交差反応性の決定方法には、例えば、Ｂｉａｃｏｒｅ（商標）２０００ＳＰＲ機器（Ｂｉａｃｏｒｅ  ＡＢ，Ｕｐｐｓａｌａ，Ｓｗｅｄｅｎ）を使用したＢｉａｃｏｒｅ（商標）表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）分析による本明細書に記載するような標準的な結合アッセイ、またはフローサイトメトリー技術が含まれる。
【０１３３】
本明細書で使用する場合、「細胞傷害性Ｔリンパ球（ＣＴＬ）応答」という用語は、細胞傷害性Ｔ細胞によって誘導される免疫応答を指す。ＣＴＬ応答は、主にＣＤ８＋Ｔ細胞によって媒介される。
【０１３４】
本明細書で使用する場合、「樹状細胞」または「ＤＣ」という用語は、骨髄（ＢＭ）由来の白血球であり、最も強力なタイプの抗原提示細胞である抗原提示細胞のタイプを指す。ＤＣは、抗原を捕捉して処理し、Ｔ細胞によって認識される主要組織適合複合体（ＭＨＣ）分子上に提示されるペプチドにタンパク質を変換する。ＤＣは、不均一であり、例えば骨髄及び形質細胞様ＤＣが挙げられ、全てのＤＣは、抗原の取り込み、処理、及びナイーブＴ細胞への提示が可能であるが、ＤＣサブタイプは別個のマーカーを有し、場所、遊走経路、詳細な免疫機能、及びそれらの生成に関する感染または炎症刺激への依存性が異なる。適応免疫応答の発達中に、ＤＣの表現型及び機能は、寛容、メモリー、及び極性化Ｔヘルパー１（Ｔｈ１）、Ｔｈ２、Ｔｈ１７分化の開始において役割を担う。
【０１３５】
本明細書で使用する場合、「樹状細胞活性化」という用語は、未成熟樹状細胞から成熟樹状細胞への移行を指す。そして、活性化された樹状細胞は、成熟樹状細胞及び移行の過程中の樹状細胞を包含し、共刺激シグナルを誘導するＣＤ８０及びＣＤ８６の発現は、活性化刺激によって上昇する。成熟したヒト樹状細胞は、ＣＤ４０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、及びＨＬＡクラスＩＩ（例えば、ＨＬＡ−ＤＲ）の発現に関して陽性である細胞である。未成熟樹状細胞は、例えば、ＣＤ８０及びＣＤ８６からなる群から選択されるマーカーに基づいて、成熟樹状細胞と区別することができる。未成熟樹状細胞はこれらのマーカーに関して弱陽性であり、好ましくは陰性であるが、一方で成熟樹状細胞は陽性である。成熟樹状細胞の識別は、当業者によって慣例的に行われており、上記のそれぞれのマーカー及びそれらの発現を測定するための方法も当業者に周知である。
【０１３６】
本明細書で使用する場合、「ＥＣ５０」という用語は、最大応答の５０％である、つまり、最大応答及びベースラインの中間である、ｉｎ  ｖｉｔｒｏまたはｉｎ  ｖｉｖｏアッセイのいずれかにおいて応答を誘導する抗体またはその抗原結合部分の濃度を指す。
【０１３７】
本明細書で使用する場合、「有効用量」または「有効投与量」という用語は、所望の効果を、達成するまたは少なくとも部分的に達成するために十分な量として定義される。「治療有効用量」という用語は、疾患に既に罹患している患者の疾患及びその合併症を、治癒するまたは少なくとも部分的に停止させるために十分な量として定義される。この使用に有効な量は、処置される障害の重症度、及び患者自身の免疫系の全体状態に依存するだろう。
【０１３８】
本明細書で使用する場合、「エピトープ」または「抗原決定基」という用語は、免疫グロブリンまたは抗体が特異的に結合する抗原上の部位を指す。「エピトープマッピング」という用語は、その標的タンパク質抗原上の、抗体またはその抗原結合フラグメントの結合部位、つまりエピトープを同定するプロセスまたは方法を指す。エピトープマッピングの方法及び技術を本明細書に提供する。エピトープは、連続アミノ酸、及びタンパク質の３次折り畳みによって並置した非連続アミノ酸の両方から形成することができる。連続アミノ酸から形成されたエピトープは、典型的には、変性溶媒への曝露で保持され、一方で３次折り畳みによって形成されたエピトープは、典型的には、変性溶媒を用いた処理で失われる。エピトープは、典型的には、少なくとも３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４または１５個のアミノ酸を固有の空間構造にて含む。所与の抗体がどのエピトープに結合するかを決定する方法（すなわち、エピトープマッピング）は、当該技術分野で周知であり、例えば、免疫ブロット法及び免疫沈降アッセイが含まれ、この場合、ＩＬ−２７からの重複または連続ペプチドを、所与の抗ＩＬ−２７抗体との反応性に関して試験する。エピトープの空間構造を決定する方法には、当該技術分野における技術及び本明細書に記載する技術、例えば、Ｘ線結晶学及び２次元核磁気共鳴を含む（例えば、Ｅｐｉｔｏｐｅ  Ｍａｐｐｉｎｇ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．６６，Ｇ．Ｅ．Ｍｏｒｒｉｓ，Ｅｄ．（１９９６）を参照されたい）。
【０１３９】
また、本開示は、本明細書に記載の特定の抗体によって認識されるエピトープの全てまたは一部（例えば、同じもしくは重複領域または領域間の領域もしくは領域にまたがる領域）を含むＩＬ−２７上のエピトープに結合する抗体を包含する。
【０１４０】
本開示は、同じエピトープと結合する抗体及び／または本明細書に記載の抗体とヒトＩＬ−２７への結合をめぐって競合する抗体も包含する。同じエピトープを認識する、または結合をめぐって競合する抗体は、通常の技術を使用して同定できる。そのような技術には、例えば、ある抗体が別の抗体の標的抗原への結合を遮断する能力を示すイムノアッセイ、すなわち競合結合アッセイが含まれる。競合結合は、試験中の免疫グロブリンがＩＬ−２７などの共通の抗原に対する参照抗体の特異的結合を阻害するアッセイにて決定される。多くの種類の競合結合アッセイが公知であり、例えば、固相直接または間接ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）、固相直接または間接酵素イムノアッセイ（ＥＩＡ）、サンドイッチ競合アッセイ（Ｓｔａｈｌｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ  ９：２４２（１９８３）を参照されたい）、固相直接ビオチン−アビジンＥＩＡ（Ｋｉｒｋｌａｎｄ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３７：３６１４（１９８６）を参照されたい）、固相直接標識アッセイ、固相直接標識サンドイッチアッセイ（Ｈａｒｌｏｗ  ａｎｄ  Ｌａｎｅ，Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｐｒｅｓｓ（１９８８））を参照されたい）、Ｉ−１２５標識を使用した固相直接標識ＲＩＡ（Ｍｏｒｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２５（１）：７（１９８８）を参照されたい）、固相直接ビオチン−アビジンＥＩＡ（Ｃｈｅｕｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｖｉｒｏｌｏｇｙ  １７６：５４６（１９９０））、及び直接標識ＲＩＡ（Ｍｏｌｄｅｎｈａｕｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃａｎｄ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３２：７７（１９９０））である。典型的には、このようなアッセイは、非標識試験免疫グロブリン及び標識参照免疫グロブリンのいずれかを担持する固体表面または細胞に結合する精製抗原の使用を伴う。競合阻害は、試験免疫グロブリンの存在下で、固体表面または細胞に結合する標識の量を決定することによって測定する。通常、試験免疫グロブリンは過剰に存在する。通常、競合抗体が過剰に存在する場合、それは共通の抗原への参照抗体の特異的結合を少なくとも５０〜５５％、５５〜６０％、６０〜６５％、６５〜７０％、７０〜７５％以上阻害するだろう。
【０１４１】
他の技術には、例えば、エピトープマッピング法、例えば、エピトープの原子分解能を提供する抗原：抗体複合体の結晶のＸ線分析、ならびに抗原：抗体相互作用の立体構造及び動力学を試験する水素／重水素（Ｈ／Ｄ）交換と組み合わせた質量分析が含まれる。他の方法は、抗体の抗原フラグメントまたは抗原の突然変異させた変異体への結合をモニターし、ここでは、抗原配列内のアミノ酸残基の修飾に起因する結合の消失がエピトープ構成成分の指標であるとしばしばみなされる。加えて、エピトープマッピングのために計算論的なコンビナトリアル法も使用できる。これらの方法は、コンビナトリアルファージディスプレイペプチドライブラリから特定の短いペプチドを親和性単離する目的の抗体の能力に依存する。次に、ペプチドは、ペプチドライブラリをスクリーニングするために用いられる抗体に対応するエピトープの定義のための手掛かりと見なされる。エピトープマッピングに関しては、立体構造的に不連続なエピトープをマッピングすることが示されている計算アルゴリズムも開発されている。
【０１４２】
本明細書で使用する場合、「Ｆｃ媒介エフェクター機能」または「Ｆｃエフェクター機能」という用語は、抗体の主要な機能及び目的以外の抗体の生物学的活性を指す。例えば、治療横断的（ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ａｇｎｏｓｔｉｃ）抗体のエフェクター機能は、標的タンパク質または経路の活性化以外の生物学的活性である。抗体のエフェクト機能の例としては、Ｃ１ｑ結合及び補体依存性細胞傷害性、Ｆｃ受容体結合、抗体依存性細胞媒介性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）、ファゴサイトーシス、細胞表面受容体（例えば、Ｂ細胞受容体）の下方制御、Ｆｃ受容体を発現する血小板の活性化の欠如、ならびにＢ細胞活性化が挙げられる。多くのエフェクター機能は、Ｆｃγ受容体へのＦｃ結合で開始する。一部の実施形態では、腫瘍抗原標的化抗体は、エフェクター機能、例えば、ＡＤＣＣ活性を有する。一部の実施形態では、本明細書に記載の腫瘍抗原標的化抗体は、非修飾形態の定常領域と比較してエフェクター機能が増加した（例えば、ＡＤＣＣを媒介する能力が増加した）変異した定常領域を含む。
【０１４３】
本明細書で使用する場合、「Ｆｃ受容体」という用語は、抗体のＦｃ領域によって結合される、免疫エフェクター細胞の表面上に見出されるポリペプチドを指す。一部の実施形態では、Ｆｃ受容体はＦｃγ受容体である。Ｆｃγ受容体には、ＦｃγＲＩ（ＣＤ６４）、ＦｃγＲＩＩ（ＣＤ３２）及びＦγｃＲＩＩＩ（ＣＤ１６）の３つのサブクラスがある。全ての４つのＩｇＧアイソタイプ（ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３及びＩｇＧ４）は、Ｆｃ受容体のＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩＡ及びＦｃγＲＩＩＩＡと結合し、活性化する。ＦＣγＲＩＩＢは、阻害性受容体であり、それゆえこの受容体に結合する抗体は、補体及び細胞応答を活性化しない。ＦＣγＲＩは、ＩｇＧに単量体形態で結合する高親和性受容体であり、一方で、ＦｃγＲＩＩＡ及びＦｃγＲＩＩＡは、多量体形態でのみＩｇＧに結合し、わずかに低い親和性を有する、低親和性受容体である。Ｆｃ受容体及び／またはＣ１ｑへの抗体の結合は、Ｆｃ領域内の特定の残基またはドメインによって管理される。結合は、抗体のヒンジ領域内及びＣＨ２部分内に位置する残基にも依存する。一部の実施形態では、本明細書に記載の抗体の作動性及び／または治療活性は、Ｆｃ受容体（例えば、ＦｃγＲ）へのＦｃ領域の結合に依存する。一部の実施形態では、本明細書に記載の抗体の作動性及び／または治療活性は、Ｆｃ受容体（例えば、ＦｃγＲ）へのＦｃ領域の結合により増強される。
【０１４４】
本開示において採用されるある特定のＦｃ受容体配列のリストを、以下に表１３として記載する。
【０１４５】
本明細書で使用する場合、「グリコシル化パターン」という用語は、タンパク質、より具体的には免疫グロブリンタンパク質に共有結合される炭水化物単位のパターンとして定義される。異種抗体のグリコシル化パターンは、当業者が、異種抗体のグリコシル化パターンを、導入遺伝子のＣＨ遺伝子が由来する種よりも、非ヒトトランスジェニック動物の種におけるグリコシル化の前記パターンにより類似していると認識し得る場合、非ヒトトランスジェニック動物の種によって産生される抗体に対して天然に生じるグリコシル化パターンと実質的に同様であると特徴付けることができる。
【０１４６】
本明細書で使用する場合、「ヒト抗体」という用語は、ヒト生殖細胞免疫グロブリン配列の可変領域及び定常領域（存在する場合）を有する抗体を含む。本開示のヒト抗体は、ヒト生殖細胞免疫グロブリン配列によってコードされないアミノ酸残基（例えば、ｉｎ  ｖｉｔｒｏでのランダムもしくは部位特異的突然変異誘発によって、またはｉｎ  ｖｉｖｏでの体細胞突然変異によって導入された突然変異）を含むことができる（例えば、Ｌｏｎｂｅｒｇ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９４）Ｎａｔｕｒｅ  ３６８（６４７４）：８５６−８５９）；Ｌｏｎｂｅｒｇ，（１９９４）Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  １１３：４９−１０１；Ｌｏｎｂｅｒｇ＆Ｈｕｓｚａｒ，（１９９５）Ｉｎｔｅｒｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３：６５−９３、及びＨａｒｄｉｎｇ＆Ｌｏｎｂｅｒｇ，（１９９５）Ａｎｎ．Ｎ．Ｙ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．７６４：５３６−５４６を参照されたい）。しかしながら、「ヒト抗体」という用語は、マウスなどの別の哺乳動物種の生殖細胞に由来するＣＤＲ配列がヒトフレームワーク配列に移植されている抗体（すなわち、ヒト化抗体）を含まない。
【０１４７】
本明細書で使用する場合、「異種抗体」という用語は、そのような抗体を産生するトランスジェニック非ヒト生物に関連して定義される。本用語は、トランスジェニック非ヒト動物からならない生物に見られるものに相当するアミノ酸配列またはコーディング核酸配列を有し、一般的にはトランスジェニック非ヒト動物の種以外の種を由来とする抗体を指す。
【０１４８】
「免疫応答の誘導」及び「免疫応答の増強」という用語は、互換可能に使用され、特定の抗原に対する免疫応答（すなわち、受動的または適応的）の刺激を指す。ＣＤＣまたはＡＤＣＣを誘導することに関して使用される「誘導する」という用語は、特定の直接的な細胞殺滅機序の刺激を指す。
【０１４９】
本明細書で使用する場合、「免疫原性細胞死」という（あるいは「免疫原性アポトーシス」としても知られる、用語は、腫瘍細胞の免疫原性の増加及び免疫原性様式での（例えば、食作用による）腫瘍細胞の死をもたらす、腫瘍細胞からのダメージ関連分子パターン（ＤＡＭＰ）分子（例えば、アデノシン三リン酸、ＡＴＰ）の死亡前発現及び放出を誘導する１つまたは複数のシグナル伝達経路の活性化に関連する細胞死様式を指す。本明細書で使用する場合、「免疫原性細胞死誘導剤」という用語は、免疫原性細胞死プロセス、経路、または様式を誘導する化学的、生物学的、または薬理学的作用物質を指す。
【０１５０】
本明細書で使用する場合、「阻害する」、「低下する」または「遮断する」という用語（例えば、細胞におけるＳＴＡＴ１及び／またはＳＴＡＴ３のヒトＩＬ−２７媒介性リン酸化の阻害または低下に言及する）は、互換可能に使用され、部分的及び完全な阻害／遮断の両方を含む。ＩＬ−２７の阻害／遮断は、阻害または遮断を伴わない場合に生じる正常レベルまたはタイプの活性を低下または変化させる。阻害及び遮断はまた、抗ＩＬ−２７抗体と接触していないＩＬ−２７と比較して、抗ＩＬ−２７抗体と接触している場合のＩＬ−２７の結合親和性における任意の測定可能な低減を含むことを意図し、例えば、ＩＬ−２７の結合を少なくとも約１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または１００％阻害する。
【０１５１】
本明細書で使用する場合、「血管新生を阻害する」、「血管新生を減少させる」及び「血管新生を低下する」という用語は、対応する対照組織における数量の少なくとも１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９９％以下であり、最も好ましくは対照組織において観察されるレベルと同じである数量まで組織における血管新生のレベルを低下することを指す。
【０１５２】
本明細書で使用する場合、「増殖を阻害する」（例えば、細胞に言及する）という用語は、細胞の増殖における任意の測定可能な低減、例えば、細胞の増殖の少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９９％、または１００％の阻害を含むことを意図する。
【０１５３】
本明細書で使用する場合、「予防が必要」、「処置が必要」、または「それが必要」である対象は、適切な医療従事者（例えば、ヒトの場合は、医師、看護師、またはナース・プラクティショナー、非ヒト哺乳動物の場合は、獣医師）の判断により、所与の処置（例えば、抗ＩＬ−２７抗体を含む組成物を用いた処置）から合理的に利益を得るだろうものを指す。
【０１５４】
「ｉｎ  ｖｉｖｏ」という用語は、生体内で生じるプロセスを指す。
【０１５５】
本明細書で使用する場合、「単離された抗体」という用語は、異なる抗原特異性を有する他の抗体を実質的に含まない抗体を指すことが意図される（例えば、ヒトＩＬ−２７に特異的に結合する単離された抗体は、ＩＬ−２７以外の抗原と特異的に結合する抗体を実質的に含まない）。しかしながら、エピトープに特異的に結合する単離された抗体は、異なる種に由来する他のＩＬ−２７タンパク質に対する交差反応性を有し得る。しかしながら、抗体は、本明細書に記載するような特異的結合アッセイにおいて、ヒトＩＬ−２７への特異的結合を提示し続ける。加えて、単離された抗体は、典型的には、他の細胞物質及び／または化学物質を実質的に含まない。一部の実施形態では、異なるＩＬ−２７特異性を有する「単離された」抗体の組み合わせは、十分に定義された組成にて組み合わされる。
【０１５６】
本明細書で使用する場合、「単離された核酸分子」という用語は、ＩＬ−２７に結合する抗体または抗体部分（例えば、ＶＨ、ＶＬ、ＣＤＲ３）をコードする核酸を指し、抗体または抗体部分をコードするヌクレオチド配列が、ＩＬ−２７以外の抗原に結合する抗体または抗体部分をコードする他のヌクレオチド配列を含まず、他の配列は、ヒトゲノムＤＮＡ中の核酸に自然に隣接し得る、核酸分子を指すと意図される。例えば、表１２に記載の配列から選択される配列は、本明細書に記載される抗ＩＬ−２７抗体モノクローナル抗体の重鎖（ＶＨ）可変領域及び軽鎖（ＶＬ）可変領域を含むヌクレオチド配列に対応する。
【０１５７】
本明細書で使用する場合、「アイソタイプ」は、重鎖定常領域遺伝子によってコードされる抗体クラス（例えば、ＩｇＭまたはＩｇＧ１）を指す。一部の実施形態では、本開示のヒトモノクローナル抗体は、ＩｇＧ１アイソタイプのものである。一部の実施形態では、本開示のヒトモノクローナル抗体は、ＩｇＧ２アイソタイプのものである。一部の実施形態では、本開示のヒトモノクローナル抗体は、ＩｇＧ３アイソタイプのものである。一部の実施形態では、本開示のヒトモノクローナル抗体は、ＩｇＧ４アイソタイプのものである。当業者に明らかであるように、抗体アイソタイプ（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＭ、ＩｇＡ１、ＩｇＡ２、ＩｇＤ、及びＩｇＥ）の同定は、当該技術分野において日常的であり、一般に、公知の抗体、公開されたＦｃ変異体配列及び保存配列を用いた配列アライメントの組み合わせを伴う。
【０１５８】
本明細書で使用する場合、「アイソタイプスイッチング」という用語は、抗体のクラスまたはアイソタイプが、１つのＩｇクラスから他のＩｇクラスの１つに変化する現象を指す。
【０１５９】
本明細書で使用する場合、「ＫＤ」または「ＫＤ」という用語は、抗体及び抗原間の結合反応の平衡解離定数を指す。ＫＤの値は、抗体の会合速度定数（ｋａ）に対する抗体の解離速度定数（ｋｄ）の比率を数値で表したものである。ＫＤの値は、抗原に対する抗体の結合親和性に反比例する。ＫＤ値が小さいほど、その抗原に対する抗体の親和性が高くなる。親和性は、単一分子のそのリガンドに対する結合の強度であり、典型的には、平衡解離定数（ＫＤ）によって測定及び報告され、この平衡解離定数を使用して、二分子間相互作用の強度を評価し、順位決定する。
【０１６０】
本明細書で使用する場合、「ｋｄ」または「ｋｄ」（あるいは「ｋｏｆｆ」または「ｋｏｆｆ」）という用語は、抗体／抗原複合体からの抗体の解離の解離速度定数を指すことを意図する。ｋｄの値は、１秒あたりに減衰または解離する複合体の割合を数値で表したものであり、秒−１の単位で表される。
【０１６１】
本明細書で使用する場合、「ｋａ」または「ｋａ」（あるいは「ｋｏｎ」または「ｋｏｎ」）という用語は、抗原と抗体の会合の会合速度定数を指すことを意図する。ｋａの値は、１モル（１Ｍ）溶液の抗体及び抗原において１秒あたりに形成される抗体／抗原複合体の数を数値で表したものであり、Ｍ−１秒−１の単位で表される。
【０１６２】
本明細書で使用する場合、「白血球」という用語は、感染性生物及び異物から身体を防御することに関与する白血球細胞の一種を指す。白血球は、骨髄にて産生される。白血球細胞には、５つの主要な種類があり、２つの主要な群：多形核白血球（好中球、好酸球、好塩基球）及び単核白血球（単球及びリンパ球）に分類される。
【０１６３】
本明細書で使用する場合、「リンパ球」という用語は、身体の免疫防御に関与する白血球または白血球細胞の一種を指す。リンパ球には、２つの主要な種類：Ｂ細胞及びＴ細胞がある。
【０１６４】
本明細書で使用する場合、「連結した」、「融合した」、または「融合」という用語は、互換可能に使用される。これらの用語は、化学的コンジュゲーションまたは組換え手段を含む任意の手段によって、２つ以上の要素または構成要素またはドメインを１つに結合することを指す。（例えば、ヘテロ二官能性架橋剤を使用する）化学的コンジュゲーションの方法は、当該技術分野で公知である。
【０１６５】
本明細書で使用する場合、「局所投与」または「局所送達」は、血管系を介したその意図された標的組織または部位への組成物または作用物質の輸送に依存しない送達を指す。例えば、組成物は、組成物もしくは作用物質の注射もしくは移植によって、または組成物もしくは作用物質を含有するデバイスの注射もしくは移植によって送達され得る。標的組織または部位の近傍への局所投与に続いて、組成物もしくは作用物質、またはその１つもしくは複数の成分は、意図された標的組織または部位へと拡散し得る。
【０１６６】
本明細書で使用する場合、「ＭＨＣ分子」は、２つのタイプの分子、ＭＨＣクラスＩ及びＭＨＣクラスＩＩを指す。ＭＨＣクラスＩ分子は特定のＣＤ８＋Ｔ細胞に抗原を提示し、ＭＨＣクラスＩＩ分子は特定のＣＤ４＋Ｔ細胞に抗原を提示する。ＡＰＣに外因的に送達された抗原は、主にＭＨＣクラスＩＩと会合するためにプロセシングされる。対照的に、ＡＰＣに内因的に送達された抗原は、主にＭＨＣクラスＩと会合するためにプロセシングされる。
【０１６７】
本明細書で使用する場合、「モノクローナル抗体」という用語は、特定のエピトープに対して単一結合特異性及び親和性を示す抗体を指す。従って、「ヒトモノクローナル抗体」という用語は、単一の結合特異性を示し、ヒト生殖細胞免疫グロブリン配列に由来する可変及び任意の定常領域を有する抗体を指す。一部の実施形態では、ヒトモノクローナル抗体は、不死化細胞に融合されたヒト重鎖導入遺伝子及び軽鎖導入遺伝子を含むゲノムを有する、トランスジェニック非ヒト動物、例えば、トランスジェニックマウスから得られたＢ細胞を含むハイブリドーマによって産生される。
【０１６８】
本明細書で使用する場合、「単球」という用語は、白血球の一種を指し、マクロファージ及び樹状細胞に分化して免疫応答をもたらすことができる。
【０１６９】
本明細書で使用する場合、「ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞」という用語は、細胞傷害性リンパ球の一種を指す。これらは大きく、通常は顆粒状で、非Ｔリンパ球、非Ｂリンパ球であり、ある特定の腫瘍細胞を殺滅し、ウイルス及び他の細胞内病原体に対する自然免疫において、ならびに抗体依存性細胞媒介性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）において重要である。
【０１７０】
本明細書で使用する場合、「天然に生じる」という用語は、ある対象物に適用される場合、対象物を天然に見出すことができるという事実を指す。例えば、（ウイルスを含む）生物中に存在し、天然の源から単離でき、研究室で人為的に改変されていないポリペプチドまたはポリヌクレオチド配列は天然に生じるものである。
【０１７１】
本明細書で使用する場合、「非スイッチングアイソタイプ」は、アイソタイプスイッチングが生じない場合に生産される重鎖のアイソタイプクラスを指し、非スイッチングアイソタイプをコードするＣＨ遺伝子は典型的には、機能的再編成の起きるＶＤＪ遺伝子のすぐ下流にある１番目のＣＨ遺伝子である。アイソタイプスイッチングは、古典的または非古典的なアイソタイプスイッチングに分類される。古典的なアイソタイプスイッチングは、導入遺伝子中の少なくとも１つのスイッチ配列領域が関与する組換え事象によって生じる。非古典的なアイソタイプスイッチングは、例えば、ヒトσμ及びヒトΣμ間の相同的組換え（δ関連欠失）によって生じ得る。中でも、導入遺伝子間及び／または染色体間での組換えなどの代替的な非古典的なスイッチング機序が生じて、アイソタイプスイッチングにつながることもある。
【０１７２】
本明細書で使用する場合、「核酸」という用語は、一本鎖または二本鎖形のいずれかのデオキシリボヌクレオチドまたはリボヌクレオチド及びそれらのポリマーを指す。特に限定しない限り、本用語は、参照核酸と同様の結合特性を有し、天然に生じるヌクレオチドと同様の様式で代謝される、天然ヌクレオチドの公知の類似体を含有する核酸を包含する。特に明記しない限り、特定の核酸配列は、保存的に改変されたその突然変異体（例えば、縮重コドン置換）及び相補的配列、ならびに明示的に示された配列も暗黙的に包含する。具体的には、縮重コドン置換は、１つまたは複数の選択された（または全ての）コドンの第三位が、混合塩基及び／またはデオキシイノシン残基で置換された配列を生成することによって達成することができる（Ｂａｔｚｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄ  Ｒｅｓ．１９：５０８１，１９９１；Ｏｈｔｓｕｋａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６０：２６０５−２６０８，１９８５；及びＣａｓｓｏｌ  ｅｔ  ａｌ，１９９２；Ｒｏｓｓｏｌｉｎｉ  ｅｔ  ａｌ，Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｐｒｏｂｅｓ  ８：９１−９８，１９９４）。アルギニン及びロイシンに関しては、第二の塩基での修飾も保存的であることができる。核酸という用語は、遺伝子、ｃＤＮＡ、及び遺伝子によってコードされるｍＲＮＡと互換可能に使用される。
【０１７３】
本明細書で使用するポリヌクレオチドは、任意のポリリボヌクレオチドまたはポリデオキシリボヌクレオチドで構成することができ、それらは非修飾ＲＮＡもしくはＤＮＡまたは修飾ＲＮＡもしくはＤＮＡであり得る。例えば、ポリヌクレオチドは、一本鎖ＤＮＡ、二本鎖ＤＮＡ、一本鎖領域及び二本鎖領域の混合物であるＤＮＡ、一本鎖ＲＮＡ、二本鎖ＲＮＡ、ならびに一本鎖領域及び二本鎖領域の混合物であるＲＮＡ、一本鎖またはより典型的には二本鎖であるもしくは一本鎖領域及び二本鎖領域の混合物であることができるＤＮＡ及びＲＮＡを含むハイブリッド分子から構成され得る。加えて、ポリヌクレオチドは、ＲＮＡもしくはＤＮＡ、またはＲＮＡ及びＤＮＡの両方を含む三本鎖領域から構成され得る。ポリヌクレオチドはまた、安定性または他の理由のために修飾された１つまたは複数の修飾された塩基またはＤＮＡもしくはＲＮＡ骨格を含有することができる。「修飾された」塩基には、例えば、トリチル化された塩基及びイノシンなどの微量塩基が含まれる。ＤＮＡ及びＲＮＡに様々な修飾を行うことができ、ゆえに、「ポリヌクレオチド」は、化学的、酵素的、または代謝的に修飾された形態を包含する。
【０１７４】
核酸は、それが別の核酸配列と機能的な関係性に置かれるとき、「作動可能に連結」している。例えば、プロモータまたはエンハンサは、それがコード配列の転写に影響を及ぼす場合、そのコード配列に作動可能に連結している。転写制御配列に関する場合、作動可能に連結したとは、連結しているＤＮＡ配列が連続していることを意味し、２つのタンパク質コーディング領域を接合する必要がある場合には、連続し、リーディングフレーム内にあることを意味する。スイッチ配列に関しては、作動可能に連結したとは、当該配列がスイッチ組換えをもたらすことができることを指す。
【０１７５】
本明細書で使用する場合、「非経口投与」、「非経口的に投与する」、及び他の文法的に等しい語句は、経腸及び局所投与以外の投与様式を指し、通常、注射によるものであり、限定されないが、静脈内、鼻腔内、眼内、筋肉内、動脈内、髄腔内、被膜内、眼窩内、心臓内、皮内、腹腔内、経気管、皮下、表皮下、関節内、被膜下、くも膜下、脊髄内、硬膜外、脳内、頭蓋内、頸動脈内及び胸骨内注射及び注入を含む。
【０１７６】
本明細書で使用する場合、「患者」という用語は、予防的または治療的処置のいずれかを受けるヒト及び他の哺乳動物対象を含む。
【０１７７】
本明細書で使用する場合、「ＰＤ−１アンタゴニスト」という用語は、ＰＤ−１シグナル伝達経路を阻害するか、さもなければ細胞（例えば、免疫細胞）におけるＰＤ−１機能を阻害する任意の化学化合物または生体分子を指す。一部の実施形態では、ＰＤ−１アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ１のＰＤ−１への及び／またはＰＤ−Ｌ２のＰＤ−１への結合を遮断する。一部の実施形態では、ＰＤ−１アンタゴニストは、ＰＤ−１と特異的に結合する。一部の実施形態では、ＰＤ−１アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ１と特異的に結合する。
【０１７８】
２つ以上の核酸またはポリペプチドの配列の文脈における、「パーセント同一性」という用語は、下記の配列比較アルゴリズム（例えば、ＢＬＡＳＴＰ及びＢＬＡＳＴＮまたは当業者に利用可能な他のアルゴリズム）の１つを用いて、または目視検査によって測定されるような、最大一致について比較及びアライメントしたときに、同一である特定の割合（％）のヌクレオチドまたはアミノ酸残基を有する２つ以上の配列または部分配列を指す。適用に応じて、「パーセント同一性」は、比較される配列のある領域にわたって、例えば、機能性ドメインにわたって存在し得る、あるいは比較される２つの配列の全長にわたって存在する。配列比較に関して、典型的には、一方の配列は、試験配列を比較する参照配列として役割を担う。配列比較アルゴリズムを使用する場合、試験配列及び参照配列をコンピュータにインプットし、必要であれば部分配列座標を指定し、配列アルゴリズムプログラムパラメータを指定する。次に、配列比較アルゴリズムが、指定されたプログラムパラメータに基づいて試験配列（複数可）の参照配列に対するパーセント配列同一性を算出する。
【０１７９】
比較のための配列の最適なアライメントは、例えば、Ｓｍｉｔｈ＆Ｗａｔｅｒｍａｎ，Ａｄｖ．Ａｐｐｌ．Ｍａｔｈ．２：４８２（１９８１）の局所的相同性アルゴリズムによって、Ｎｅｅｄｌｅｍａｎ＆Ｗｕｎｓｃｈ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．４８：４４３（１９７０）の相同性アライメントアルゴリズムによって、Ｐｅａｒｓｏｎ＆Ｌｉｐｍａｎ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８５：２４４４（１９８８）の類似性検索法よって、これらのアルゴリズム（Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ  Ｐａｃｋａｇｅ，Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  Ｃｏｍｐｕｔｅｒ  Ｇｒｏｕｐ，５７５  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｄｒ．，Ｍａｄｉｓｏｎ，Ｗｉｓ．のＧＡＰ、ＢＥＳＴＦＩＴ、ＦＡＳＴＡ、及びＴＦＡＳＴＡ）のコンピュータ化実装によって、または目視検査（一般的に、Ａｕｓｕｂｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，下記を参照されたい）によって、行うことができる。
【０１８０】
パーセント配列同一性及び配列類似性を決定するために適したアルゴリズムの一例は、ＢＬＡＳＴアルゴリズムであり、これは、Ａｌｔｓｃｈｕｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２１５：４０３−４１０（１９９０）に記載されている。ＢＬＡＳＴ分析を行うためのソフトウェアは、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｅｎｔｅｒ  ｆｏｒ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎのウェブサイトを通して、公開されている。
【０１８１】
一般に本明細書で使用する場合、「医薬的に許容可能」とは、安全な医学的判断の範囲内にあり、ヒト及び動物の組織、臓器、及び／または体液と接触させて使用するのに好適な、過度の毒性、刺激、アレルギー反応、または他の問題もしくは合併症を伴わない、妥当な利益／リスク比に見合う、化合物、物質、組成物及び／または剤形を指す。
【０１８２】
本明細書で使用する場合、「医薬的に許容可能な担体」は、生理学的に適合性のある、あらゆる及び全ての溶媒、分散媒、コーティング、抗菌剤及び抗真菌剤、等張剤ならびに吸収遅延剤などを指し、含む。組成物は、医薬的に許容可能な塩、例えば、酸付加塩または塩基付加塩を含むことができる（例えば、Ｂｅｒｇｅ  ｅｔ  ａｌ．（１９７７）Ｊ  Ｐｈａｒｍ  Ｓｃｉ  ６６：１−１９を参照されたい）。
【０１８３】
本明細書で使用する場合、「ポリペプチド」、「ペプチド」、及び「タンパク質」という用語は、互換可能に使用され、アミノ酸残基のポリマーを指す。これらの用語は、１つまたは複数のアミノ酸残基が、対応する天然に生じるアミノ酸の人工的な化学的模倣体であるアミノ酸ポリマー、ならびに天然に生じるアミノ酸ポリマー及び非天然に生じるアミノ酸ポリマーに適用される。
【０１８４】
本明細書で使用する場合、状態に関して使用される場合の「予防する」という用語は、組成物を受けない対象に比べて、対象における医学的状態の症状の頻度を低下する、または発症を遅延させる組成物の投与を指す。
【０１８５】
本明細書で使用する場合、本明細書に記載のタンパク質（抗体またはフラグメント）のいずれかに適用される「精製」または「単離」という用語は、それに天然に付随する成分（例えば、タンパク質または他の天然に生じる生体分子もしくは有機分子）、例えば、他のタンパク質、脂質、及びタンパク質を発現する原核生物の核酸から、分離または精製されているポリペプチドを指す。典型的には、ポリペプチドが試料中の総タンパク質の、少なくとも６０（例えば、少なくとも６５、７０、７５、８０、８５、９０、９２、９５、９７、または９９）重量％を構成するとき、ポリペプチドは精製されている。
【０１８６】
本明細書で使用する場合、「プログラムされた細胞死タンパク質１」または「ＰＤ−１」という用語は、ＣＤ２８ファミリーに属する免疫阻害性受容体である、プログラムされた細胞死タンパク質１ポリペプチドを指し、ヒトではＰＤＣＤ１遺伝子によってコードされる。ＰＤ−１の別名または同義語には、ＰＤＣＤ１、ＰＤ１、ＣＤ２７９及びＳＬＥＢ２が含まれる。ＰＤ−１は、ｉｎ  ｖｉｖｏでは、前もって活性化されたＴ細胞、Ｂ細胞、骨髄細胞に主に発現し、２つのリガンドであるＰＤ−Ｌ１及びＰＤ−Ｌ２に結合する。本明細書で使用する場合、「ＰＤ−１」という用語は、ヒトＰＤ−１（ｈＰＤ−１）、ｈＰＤ−１の変異体、アイソフォーム、及び種ホモログ、ならびにｈＰＤ−１と少なくとも１つの共通のエピトープを有する類似体を含む。完全なｈＰＤ−１配列は、ＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号ＡＡＣ５１７７３に見出すことができる。
【０１８７】
本明細書で使用する場合、「プログラムされた死リガンド−１」または「ＰＤ−Ｌ１」という用語は、ＰＤ−１に対する２つの細胞表面糖タンパク質リガンドの１つ（他方は、ＰＤ−Ｌ２）であり、ＰＤ−１への結合の際に、Ｔ細胞の活性化及びサイトカイン分泌を下方制御する。ＰＤ−Ｌ１の別名及び同義語には、ＰＤＣＤ１Ｌ１、ＰＤＬ１、Ｂ７Ｈ１、Ｂ７−４、ＣＤ２７４及びＢ７−Ｈが含まれる。本明細書で使用する場合、「ＰＤ−Ｌ１」という用語は、ヒトＰＤ−Ｌ１（ｈＰＤ−Ｌ１）、ｈＰＤ−Ｌ１の変異体、アイソフォーム、及び種ホモログ、ならびにｈＰＤ−Ｌ１と少なくとも１つの共通エピトープを有する類似体を含む。完全なｈＰＤ−Ｌ１配列は、ＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号Ｑ９ＮＺＱ７に見出すことができる。
【０１８８】
ＰＤ−１は、ＴＣＲシグナルを負に制御する免疫阻害性タンパク質として知られている（Ｉｓｈｉｄａ，Ｙ．ｅｔ  ａｌ．（１９９２）ＥＭＢＯ  Ｊ．１１：３８８７−３８９５；Ｂｌａｎｋ，Ｃ．ｅｔ  ａｌ．（Ｅｐｕｂ  ２００６  Ｄｅｃ．２９）Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．５６（５）：７３９−７４５）。ＰＤ−１及びＰＤ−Ｌ１間の相互作用は、免疫チェックポイントとして機能することができ、これによりＴ細胞受容体を介した増殖の低減をもたらすことができる（Ｄｏｎｇ  ｅｔ  ａｌ．（２００３）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｍｅｄ．８１：２８１−７；Ｂｌａｎｋ  ｅｔ  ａｌ．（２００５）Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．５４：３０７−３１４；Ｋｏｎｉｓｈｉ  ｅｔ  ａｌ．（２００４）Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．１０：５０９４−１００）。ＰＤ−１とＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２との局所的な相互作用を阻害することにより、免疫抑制を逆転させることができ、ＰＤ−１とＰＤ−Ｌ２の相互作用も同様に遮断される場合、その効果は相加的である（Ｉｗａｉ  ｅｔ  ａｌ．（２００２）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９９：１２２９３−７；Ｂｒｏｗｎ  ｅｔ  ａｌ．（２００３）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１７０：１２５７−６６）。
【０１８９】
いくつかのがんに関しては、腫瘍の生存及び増殖は、腫瘍を介した免疫チェックポイントの調節によって維持される。この調節は、抗がん免疫系機能の破壊をもたらし得る。例えば、最近の研究では、腫瘍細胞によるＰＤ−Ｌ１やＰＤ−Ｌ２などの免疫チェックポイント受容体リガンドの発現が、特にＴ細胞を抑制することにより、腫瘍微小環境における免疫系の活性を下方制御し、がん免疫回避を促進し得ることが示されている。ＰＤ−Ｌ１は、様々なヒトのがんによって多量に発現される（Ｄｏｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，（２００２）Ｎａｔ  Ｍｅｄ  ８：７８７−７８９）。ＰＤ−Ｌ１の受容体である、ＰＤ−１は、リンパ球（例えば、活性化Ｔ細胞）上に発現し、通常は、特にＴ細胞の抑制による、免疫系の下方制御及び自己寛容の促進に関与する。しかしながら、Ｔ細胞上で発現するＰＤ−１受容体が腫瘍細胞上の同族ＰＤ−Ｌ１リガンドに結合すると、結果として生じるＴ細胞抑制が、腫瘍に対する免疫応答不全（例えば、腫瘍浸潤リンパ球の低減またはがん細胞による免疫回避の確立）に寄与する。
【０１９０】
卵巣癌、腎癌、結腸直腸癌、膵臓癌、肝癌及び黒色腫の大規模な試料セットでは、ＰＤ−Ｌ１の発現が予後不良と相関し、その後の処置に関係なく全生存率を低下することが示された（例えば、Ｄｏｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，（２００２）Ｎａｔ  Ｍｅｄ  ８（８）：７９３−８００；Ｙａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，（２００８）Ｉｎｖｅｓｔ  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ  Ｖｉｓ  Ｓｃｉ  ４９（６）：２５１８−２５２５；Ｇｈｅｂｅｈ  ｅｔ  ａｌ．，（２００６）Ｎｅｏｐｌａｓｉａ  ８：１９０−１９８；Ｈａｍａｎｉｓｈｉ  ｅｔ  ａｌ．，（２００７）Ｐｒｏｃ  Ｎａｔ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ  １０４：３３６０−３３６５；Ｔｈｏｍｐｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，（２００６）Ｃｌｉｎ  Ｇｅｎｉｔｏｕｒｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  ５：２０６−２１１；Ｎｏｍｉ  ｅｔ  ａｌ．，（２００５）Ｃｌｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ  １１：２９４７−２９５３；Ｉｎｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，（２００７）Ｃａｎｃｅｒ  １０９：１４９９−１５０５；Ｓｈｉｍａｕｃｈｉ  ｅｔ  ａｌ．，（２００７）Ｉｎｔ  Ｊ  Ｃａｎｃｅｒ  １２１：２５８５−２５９０；Ｇａｏ  ｅｔ  ａｌ．，（２００９）Ｃｌｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ  １５：９７１−９７９；Ｎａｋａｎｉｓｈｉ  ｅｔ  ａｌ．，（２００７）Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ  ５６：１１７３−１１８２；Ｈｉｎｏ  ｅｔ  ａｌ．，（２０１０）Ｃａｎｃｅｒ  １１６（７）：１７５７−１７６６）。同様に、腫瘍リンパ球上のＰＤ−１発現は、乳癌（Ｋｉｔａｎｏ  ｅｔ  ａｌ．，（２０１７）ＥＳＭＯ  Ｏｐｅｎ  ２（２）：ｅ０００１５０）及び黒色腫（Ｋｌｅｆｆｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，（２０１５）Ｃｅｌｌ  １６２（６）：１２４２−１２５６）において機能不全Ｔ細胞を示すことが見出された。例えば、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１／ＰＤ−Ｌ２シグナル伝達軸の機能に影響を与えるもの、及び／またはＰＤ−１とＰＤ−Ｌ１及び／またはＰＤ−Ｌ２との間の相互作用を妨害するものなどのＰＤ−１アンタゴニストが、開発されており、免疫細胞−腫瘍細胞相互作用の調節を介して機能する新規クラスの抗腫瘍阻害剤を表す。
【０１９１】
本明細書で使用する場合、「再編成された」という用語は、Ｖセグメントが、Ｄ−ＪまたはＪセグメントのすぐ隣に位置し、それぞれ完全ＶＨまたはＶＬドメインを本質的にコードする立体構造となっている重鎖または軽鎖免疫グロブリン遺伝子座の立体配置を指す。再編成された免疫グロブリン遺伝子座は、生殖細胞ＤＮＡに比較することによって同定でき、再編成された遺伝子座は少なくとも１つの組換え７量体／９量体相同エレメントを有するだろう。
【０１９２】
本明細書で使用する場合、「組換え宿主細胞」（または単に「宿主細胞」）は、組換え発現ベクターが導入されている細胞を指すと意図される。このような用語は、特定の対象細胞だけでなく、このような細胞の後代も指すものと意図されていることが理解されたい。突然変異または環境的影響に起因して、ある特定の修飾が継代に起きる場合があるため、このような後代は実際には親細胞と同一でない可能性があるが、それでもなお、本明細書で用いる場合「宿主細胞」という用語の範囲内に含まれる。
【０１９３】
本明細書で使用する場合、「組換えヒト抗体」という用語は、例えば（ａ）ヒト免疫グロブリン遺伝子に関してトランスジェニックもしくはトランスクロモソーマルである動物（例えばマウス）から、またはそれから調製されたハイブリドーマから単離された抗体、（ｂ）抗体を発現するように形質転換された宿主細胞から、例えばトランスフェクトーマから単離された抗体、（ｃ）組換えコンビナトリアルヒト抗体ライブラリから単離された抗体、及び（ｄ）ヒト免疫グロブリン遺伝子配列の他のＤＮＡ配列へのスプライシングを伴う何らかの他の手段により調製、発現、作製または単離された抗体など、組換え手段により調製、発現、作製または単離された全てのヒト抗体を含む。そのような組換えヒト抗体は、生殖細胞遺伝子によってコードされる特定のヒト生殖細胞免疫グロブリン配列を利用する可変領域及び定常領域を含むが、例えば、抗体成熟の間に起こるその後の再編成及び突然変異を含む。当該技術分野で知られているように（例えば、Ｌｏｎｂｅｒｇ（２００５）Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈ．２３（９）：１１１７−１１２５）、可変領域は、抗原結合ドメインを含有し、これは、再編成して外来抗原に特異的な抗体を形成する様々な遺伝子によってコードされる。再編成に加えて、可変領域を、複数の単一アミノ酸の変化（体細胞突然変異または超突然変異と称する）によってさらに修飾して、外来抗原に対する抗体の親和性を増加することができる。定常領域は、抗原にさらに応答して変化するだろう（すなわち、アイソタイプスイッチ）。それゆえ、抗原に応答して軽鎖免疫グロブリンポリペプチド及び重鎖免疫グロブリンポリペプチドをコードする再編成された及び体細胞突然変異した核酸分子は、元の核酸分子と配列同一性を持たない可能性があるが、代わりに実質的に同一または類似するだろう（すなわち、少なくとも８０％の同一性を有する）。
【０１９４】
本明細書で使用する場合、「参照抗体」（「参照ｍＡｂ」と互換可能に使用される）または「参照抗原結合タンパク質」という用語は、ＩＬ−２７上の特定のエピトープに結合する抗体またはその抗原結合フラグメントを指し、それ自体と１つまたは複数の別個の抗体との間の関係を確立するために使用され、この関係は、ＩＬ−２７上の同じエピトープに対する参照抗体及び１つまたは複数の別個の抗体の結合である。本明細書で使用する場合、本用語は、本明細書に記載のものなどの試験またはアッセイ（例えば、競合結合アッセイ）において競合物質として有用である抗ＩＬ−２７抗体を暗示し、アッセイは、同じエピトープに結合する１つまたは複数の別個の抗体の発見、同定または開発に有用である。
【０１９５】
本明細書で使用する場合、「特異的結合」、「選択的結合」、「選択的に結合する」、及び「特異的に結合する」という用語は、所定の抗原上のエピトープに結合する抗体を指す。典型的には、抗体は、組換えヒトＩＬ−２７を分析物として及び抗体をリガンドとして使用してＢＩＡＣＯＲＥ  ２０００機器にて表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）技術により決定した場合に、およそ１０−６Ｍ未満、例えばおよそ１０−７、１０−８Ｍ、１０−９Ｍもしくは１０−１０Ｍ未満またはさらに低い平衡解離定数（ＫＤ）で結合し、所定の抗原に、所定の抗原または密接に関連する抗原以外の非特異的抗原（例えば、ＢＳＡ、カゼイン）に対する結合の親和性より少なくとも２倍大きい親和性で結合する。ある特定の実施形態では、ＩＬ−２７に特異的に結合する抗体は、組換えヒトＩＬ−２７を分析物として及び抗体をリガンドとして使用してＢＩＡＣＯＲＥ  ２０００機器にて表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）技術により決定した場合に、およそ１００ｎＭ（１０−７Ｍ）未満、任意選択でおよそ５０ｎＭ（５×１０−８Ｍ）未満、任意選択でおよそ１５ｎＭ（１．５×１０−８Ｍ）未満、任意選択でおよそ１０ｎＭ（１０−８Ｍ）未満、任意選択でおよそ５ｎＭ（５×１０−９Ｍ）未満、任意選択でおよそ１ｎＭ（１０−９Ｍ）未満、任意選択でおよそ０．１ｎＭ（１０−１０Ｍ）未満、任意選択でおよそ０．０１ｎＭ（１０−１１Ｍ）未満、またはさらに低い平衡解離定数（ＫＤ）で結合し、所定の抗原への結合は、所定の抗原または密接に関連する抗原以外の非特異的抗原（例えば、ＢＳＡ、カゼイン）に対する結合に関する抗体の親和性より少なくとも２倍大きい親和性で生じる。「抗原を認識する抗体」及び「抗原に特異的な抗体」という語句は、本明細書では、「抗原に特異的に結合する抗体」という用語と互換可能に使用される。
【０１９６】
本明細書で使用する場合、「ＳＴＡＴ１リン酸化」という用語は、ヒトにおいてＳＴＡＴ１遺伝子によってコードされる転写因子である、シグナル伝達性転写因子１（ＳＴＡＴ１）ポリペプチドのリン酸化を指す。ＳＴＡＴ分子は、受容体関連キナーゼによってリン酸化され、核に移動して転写因子として機能するホモまたはヘテロ二量体を形成することにより、活性化及び二量体化を引き起こす。ＳＴＡＴ１は、ＩＬ−２７を含むいくつかのリガンドを介したシグナル伝達に応じて、活性化（すなわち、リン酸化）することができる。ＩＬ−２７Ｒを通したＩＬ−２７シグナル伝達は、ＳＴＡＴ１のリン酸化（ｐＳＴＡＴ１）をもたらす。ＳＴＡＴ１は、細胞の生存、生存力、病原体応答に関与する遺伝子発現において重要な役割を有する。ＩＬ−２７シグナル伝達の結果としてのＳＴＡＴ１リン酸化を決定する方法には、限定されないが、リン酸化ＳＴＡＴ１を特異的に認識する抗体を用いて標識された細胞のフローサイトメトリー分析が含まれる（例えば、Ｔｏｃｈｉｚａｗａ  ｅｔ  ａｌ．，（２００６）Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ３１３（１−２）：２９−３７を参照されたい）。
【０１９７】
本明細書で使用する場合、「ＳＴＡＴ３リン酸化」という用語は、ヒトにおいてＳＴＡＴ３遺伝子によってコードされる転写因子である、シグナル伝達性転写因子３（ＳＴＡＴ３）ポリペプチドのリン酸化を指す。ＳＴＡＴ３は、細胞刺激に応じて、様々な遺伝子の発現を媒介し、ゆえに細胞増殖及びアポトーシスなどの多くの細胞プロセスにおいて重要な役割を担う。ＩＬ−２７シグナル伝達の結果としてのＳＴＡＴ３リン酸化を決定する方法には、限定されないが、リン酸化ＳＴＡＴ３を特異的に認識する抗体を用いて標識された細胞または細胞抽出物の分析が含まれる（例えば、Ｆｕｒｓｏｖ  ｅｔ  ａｌ．，（２０１１）Ａｓｓａｙ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｖ  Ｔｅｃｈｎｏｌ  ９（４）：４２０−４２９を参照されたい）。
【０１９８】
本明細書で使用する場合、「スイッチ配列」という用語は、スイッチ組換えを担うＤＮＡ配列を指す。「スイッチドナー」配列は、典型的にはμスイッチ領域であり、スイッチ組換えの際に欠失するコンストラクト領域の５’側（すなわち、上流）にあるだろう。「スイッチアクセプター」領域は、欠失することになるコンストラクト領域と、置換定常領域（例えば、γ、ε、など）との間にあるだろう。組換えが常に起きるという特定の部位はないため、最終的な遺伝子配列は典型的にはコンストラクトからは予測不能だろう。
【０１９９】
本明細書で使用する場合、「対象」という用語は、任意のヒトまたは非ヒト動物を含む。例えば、本発明の方法及び組成物は、免疫障害を有する対象を処置するために使用され得る。「非ヒト動物」という用語は、全ての脊椎動物、例えば、哺乳動物及び非哺乳動物、例えば、非ヒト霊長類、ヒツジ、イヌ、ウシ、ニワトリ、両性類、爬虫類などを含む。
【０２００】
核酸に関しては、「実質的な相同性」という用語は、２つの核酸またはそのうちの指定した配列が、最適にアライメント及び比較した場合、適切なヌクレオチド挿入または欠失を伴って、ヌクレオチドの少なくとも約８０％、通常は少なくとも約９０％〜９５％、より好ましくは、ヌクレオチドの少なくとも約９８％〜９９．５％において同一であることを示す。あるいは、セグメントが選択的ハイブリダイゼーション条件下で鎖の相補配列にハイブリダイズし得るときに、実質的な相同性が存在する。
【０２０１】
２つの配列間のパーセント同一性は、配列によって共有される同一位置の数の関数（すなわち、パーセント相同性＝同一位置の数／位置の総数×１００）であり、２つの配列の最適なアライメントのために導入されることが必要なギャップの数及び各ギャップの長さが考慮される。配列の比較及び２つの配列間のパーセント同一性の決定は、以下の非限定的な例に記載するように、数学的アルゴリズムを使用して達成することができる。
【０２０２】
２つのヌクレオチド配列間のパーセント同一性は、ＧＣＧソフトウェアパッケージ中のＧＡＰプログラムを使用して決定することができ（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｇｃｇ．ｃｏｍにて入手可能）、これは、ＮＷＳｇａｐｄｎａ．ＣＭＰマトリックス、ならびに４０、５０、６０、７０または８０のギャップ加重及び１、２、３、４、５または６の長さ加重を使用する。２つのヌクレオチドまたはアミノ酸配列間のパーセント同一性はまた、Ｅ．Ｍｅｙｅｒｓ及びＷ．Ｍｉｌｌｅｒ（ＣＡＢＩＯＳ，４：１１−１７（１９８９））のアルゴリズムを使用して決定することができ、これは、ＡＬＩＧＮプログラム（バージョン２．０）に組み込まれており、ＰＡＭ１２０加重残基表、１２のギャップ長ペナルティー及び４のギャップペナルティーを使用する。加えて、２つのアミノ酸配列間のパーセント同一性は、Ｎｅｅｄｌｅｍａｎ及びＷｕｎｓｃｈ（Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．（４８）：４４４−４５３（１９７０））アルゴリズムを使用して決定することができ、これは、ＧＣＧソフトウェアパッケージ中のＧＡＰプログラムに組み込まれており（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｇｃｇ．ｃｏｍにて入手可能）、Ｂｌｏｓｓｕｍ６２マトリックスまたはＰＡＭ２５０マトリックスのいずれか、ならびに１６、１４、１２、１０、８、６または４のギャップ加重及び１、２、３、４、５または６の長さ加重を使用する。
【０２０３】
本開示の核酸配列及びタンパク質配列を「クエリー配列」としてさらに使用して、例えば、関連する配列を同定するために公共のデータベースに対して検索を行うことができる。そのような検索は、Ａｌｔｓｃｈｕｌ  ｅｔ  ａｌ．（１９９０）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２１５：４０３−１０のＮＢＬＡＳＴ及びＸＢＬＡＳＴプログラム（バージョン２．０）を使用して行うことができる。ＢＬＡＳＴヌクレオチド検索を、ＮＢＬＡＳＴプログラム、スコア＝１００、ワード長＝１２を用いて行って、本発明の核酸分子に相同なヌクレオチド配列を得ることができる。ＢＬＡＳＴタンパク質検索を、ＸＢＬＡＳＴプログラム、スコア＝５０、ワード長＝３を用いて行って、本発明のタンパク質分子に相同なアミノ酸配列を得ることができる。比較目的のためのギャップアライメントを得るために、Ｇａｐｐｅｄ  ＢＬＡＳＴを、Ａｌｔｓｃｈｕｌ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９７）Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．２５（１７）：３３８９−３４０２に記載のように利用することができる。ＢＬＡＳＴ及びＧａｐｐｅｄ  ＢＬＡＳＴプログラムを利用する場合、それぞれのプログラム（例えば、ＸＢＬＡＳＴ及びＮＢＬＡＳＴ）のデフォルトパラメータを使用できる。ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ．を参照されたい。
【０２０４】
核酸は全細胞中にあっても、細胞ライセート中にあっても、または部分的に精製されたもしくは実質的に純粋な形で存在してもよい。核酸は、アルカリ／ＳＤＳ処理、ＣｓＣｌバンディング、カラムクロマトグラフィ、アガロースゲル電気泳動法、及び当該技術分野で公知の他の技術を含む標準的な技術により、他の細胞成分または他の混入物質、例えば、他の細胞内核酸またはタンパク質を取り除いて精製されている場合に、「単離された」または「実質的に純粋にされた」ことになる。Ｆ．Ａｕｓｕｂｅｌ，ｅｔ  ａｌ．，ｅｄ．Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｇｒｅｅｎｅ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  ａｎｄ  Ｗｉｌｅｙ  Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（１９８７）を参照されたい。
【０２０５】
ｃＤＮＡ、ゲノムまたはこれらの混合物に由来する、本開示の核酸組成物は、しばしば天然配列（修飾された制限部位などを除き）であり、遺伝子配列を提供する標準的技術に従って突然変異させてよい。コード配列に関しては、これらの突然変異は、必要に応じてアミノ酸配列を左右してよい。具体的には、天然Ｖ、Ｄ、Ｊ、定常、スイッチ及び本明細書に記載する他のこのような配列に実質的に相同するまたは由来とするＤＮＡ配列が企図される（この場合、「由来する」は、ある配列が別の配列と同一であるかまたは別の配列から修飾されていることを示す）。
【０２０６】
本明細書で使用する場合、「ＳＴＩＮＧ」（あるいはＴＭＥＭ１７３）という用語は、直接細胞質ゾルＤＮＡセンサー及びアダプタータンパク質の両方として機能するタンパク質である、インターフェロン遺伝子の刺激因子を指す。ヒトでは、ＳＴＩＮＧは、ＴＭＥＭ１７３遺伝子によってコードされている。ＳＴＩＮＧは、自然免疫において重要な役割を担う。ＳＴＩＮＧは、細胞が、細胞内病原体、例えばウイルス、マイコバクテリア及び細胞内寄生虫に感染したとき、Ｉ型インターフェロンの産生を誘導する。Ｉ型インターフェロンは、ＳＴＩＮＧによって媒介され、感染した細胞及び近接細胞を、それを分泌する同じ細胞及び近接細胞に結合することにより、局所感染から保護する。ＳＴＩＮＧの例示的なアミノ酸配列は、ＮＣＢＩ  Ｇｅｎｂａｎｋデータベースにより、アクセッション番号ＮＰ＿００１２８８６６７の下に提供される。
【０２０７】
「Ｔ細胞」という用語は、細胞表面上のＴ細胞受容体の存在によって他の白血球細胞と区別できる白血球細胞の一種を指す。Ｔ細胞にはいくつかのサブセットがあり、Ｔヘルパー細胞（別名、ＴＨ細胞またはＣＤ４＋Ｔ細胞）ならびにサブタイプ、例えばＴＨ１、ＴＨ２、ＴＨ３、ＴＨ１７、ＴＨ９、及びＴＦＨ細胞、細胞傷害性Ｔ細胞（別名、ＴＣ細胞、ＣＤ８＋Ｔ細胞、細胞傷害性Ｔリンパ球、Ｔキラー細胞、キラーＴ細胞）、メモリーＴ細胞ならびにサブタイプ、例えばセントラルメモリーＴ細胞（ＴＣＭ細胞）、エフェクターメモリーＴ細胞（ＴＥＭ及びＴＥＭＲＡ細胞）、及びレジデントメモリーＴ細胞（ＴＲＭ細胞）、制御性Ｔ細胞（別名、Ｔｒｅｇ細胞またはサプレッサーＴ細胞）ならびにサブタイプ、例えばＣＤ４＋ＦＯＸＰ３＋Ｔｒｅｇ細胞、ＣＤ４＋ＦＯＸＰ３−Ｔｒｅｇ細胞、Ｔｒ１細胞、Ｔｈ３細胞、及びＴｒｅｇ１７細胞、ナチュラルキラーＴ細胞（別名、ＮＫＴ細胞）、粘膜関連インバリアントＴ細胞（ＭＡＩＴ）、ならびにガンマデルタＴ細胞（γδＴ細胞）、例えばＶγ９／Ｖδ２Ｔ細胞が含まれるがこれらに限定されない。前述のまたは言及していないＴ細胞の任意の１つまたは複数が、本発明の使用の方法の標的細胞型であり得る。
【０２０８】
本明細書で使用する場合、「Ｔ細胞媒介性応答」という用語は、エフェクターＴ細胞（例えば、ＣＤ８＋細胞）及びヘルパーＴ細胞（例えば、ＣＤ４＋細胞）を含むがこれらに限定されない、Ｔ細胞により媒介される任意の応答を指す。Ｔ細胞媒介性応答には、例えば、Ｔ細胞細胞傷害性及び増殖が含まれる。
【０２０９】
本明細書で使用する場合、「治療有効量」もしくは「治療有効用量」という用語、または本明細書で使用される同様の用語は、望ましい生物学的または医学的応答（例えば、がんの１つまたは複数の症状における改善）を引き出し得る作用物質（例えば、抗ＩＬ−２７抗体またはその抗原結合フラグメント）の量を意味することが意図される。
【０２１０】
本明細書で使用する場合、「ＴＡＭ受容体」という用語は、ＴＡＭ受容体タンパク質チロシンキナーゼ（ＴＹＲＯ３、ＡＸＬ及びＭＥＲ）を指す。ＴＡＭ受容体は、免疫系恒常性の制御に関与している。がん環境では、ＴＡＭ受容体は、腫瘍発生の開始及び進行、ならびに同時に、多様な免疫細胞の関連する抗腫瘍応答を管理する、二重制御の役割を有する。ＴＡＭ受容体のさらなる記載は、Ｐａｏｌｉｎｏ  ａｎｄ  Ｐｅｎｎｉｎｇｅｒ（２０１６）Ｃａｎｃｅｒｓ  ８（９７）：ｄｏｉ：１０．３３９０／ｃａｎｃｅｒｓ８１０００９７）に見出される。本明細書で使用する場合、「ＴＡＭ受容体阻害剤」または「ＴＡＭ阻害剤」という用語は、ＴＡＭ受容体の機能または活性を阻害、遮断または低下する作用物質を指す。
【０２１１】
本明細書で使用する場合、「ＴＩＧＩＴ」または「Ｉｇ及びＩＴＩＭドメインを有するＴ細胞免疫受容体」は、別途示されない限り、霊長類（例えば、ヒト）及びげっ歯類（例えば、マウス及びラット）などの哺乳動物を含む、任意の脊椎動物源由来の任意の天然ＴＩＧＩＴを指す。ＴＩＧＩＴは、当該技術分野において、ＤＫＦＺｐ６６７Ａ２０５、ＦＬＪ３９８７３、Ｖセット及び免疫グロブリンドメイン含有タンパク質９、Ｖセット及び膜貫通ドメイン含有タンパク質３、ＶＳＩＧ９、ＶＳＴＭ３、ならびにＷＵＣＡＭとしても知られている。本用語は、ＴＩＧＩＴの天然に生じる変異型、例えば、スプライス変異型または対立遺伝子変異型も包含する。例示的なヒトＴＩＧＩＴのアミノ酸配列は、ＵｎｉＰｒｏｔアクセッション番号Ｑ４９５Ａ１下に見出され得る。
【０２１２】
本明細書で使用する場合、「処置する」、「処置すること」、及び「処置」という用語は、本明細書に記載の治療的または予防的手段を指す。「処置」の方法は、障害もしくは再発性障害の１つもしくは複数の症状を、予防、治癒、遅延、重症度を軽減する、もしくは改善するため、またはかかる処置の不在下で予想されるものを超えて対象の生存を延長するために、本開示のヒト抗体の、そのような処置を必要とする対象、例えば、特定の抗原に対する免疫応答の増強を必要とする対象または最終的にそのような障害を得る可能性がある対象への投与を採用する。
【０２１３】
本明細書で使用する場合、「腫瘍微小環境」（あるいは「がん微小環境」；略してＴＭＥ）という用語は、周囲の血管ならびに免疫細胞、線維芽細胞、骨髄由来炎症細胞及びリンパ球を含むがこれらに限定されない非がん性細胞を含む、腫瘍または新生物が存在する細胞環境（ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ）または環境（ｍｉｌｉｅｕ）を指す。シグナル伝達分子及び細胞外マトリックスもＴＭＥに含まれる。腫瘍及び周囲の微小環境は密接に関連しており、常に相互作用している。腫瘍は、細胞外シグナルを放出し、腫瘍の血管新生を促進し、末梢免疫寛容を誘導することにより、微小環境に影響を与えることができ、一方で、微小環境内の免疫細胞は、腫瘍細胞の増殖及び発展に影響を及ぼすことができる。
【０２１４】
本明細書で使用する場合、「再編成のない」または「生殖細胞の配置」という用語は、ＶセグメントがＤまたはＪセグメントにすぐ隣接するように組換えられていない配置を指す。
【０２１５】
本明細書で使用する場合、「ベクター」という用語は、それが連結している別の核酸を輸送できる核酸分子を指すことを意図する。ベクターの一種が「プラスミド」であり、これは付加的なＤＮＡセグメントが連結され得る環状の二本鎖ＤＮＡループを指す。ベクターの別種は、ウイルスベクターであり、付加的なＤＮＡセグメントは、ウイルスゲノム内に連結し得る。ある特定のベクターは、それらが導入される宿主細胞内で自律的複製が可能である（例えば、細菌由来の複製開始点を有する細菌ベクター及びエピソーム哺乳動物ベクター）。他のベクター（例えば、非エピソーム哺乳動物ベクター）は、宿主細胞への導入の際に、宿主細胞のゲノムに組み込まれ得、それにより、宿主ゲノムと一緒に複製される。さらに、ある特定のベクターは、それらが作動可能に連結された遺伝子の発現を命令することができる。そのようなベクターは、本明細書では、「組換え発現ベクター」（または単に「発現ベクター」）と称される。一般に、組換えＤＮＡ技術で実用性のある発現ベクターは、しばしばプラスミドの形態である。本明細書では、「プラスミド」及び「ベクター」は、プラスミドが最も一般的に使用されるベクターの形態であるため、互換可能に使用され得る。しかしながら、本発明には、ウイルスベクター（例えば、複製欠陥レトロウイルス、アデノウイルス及びアデノ随伴ウイルス）などの、同等の機能を果たす他の形の発現ベクターを含むことが意図される。
【０２１６】
別段の定義がない限り、本明細書で用いる全ての技術用語及び科学用語は、本開示が属する技術分野の当業者によって一般的に理解されるものと同じ意味を有する。好ましい方法及び材料を後述するが、本明細書に記載するものと類似するまたは同等な方法及び材料も、本開示の方法及び組成物の実施または試験において使用できる。本明細書で言及される全ての刊行物、特許出願、特許、及び他の参考文献は、参照によりその全体が組み込まれる。
【図面の簡単な説明】
【０２１７】
【図１】図示の通りの抗ＩＬ−２７抗体に関する親和性データを提供する表である。親和性測定は、ＦｏｒｔｅＢｉｏ及びＭｅｓｏ  Ｓｃａｌｅ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ法を使用して実行した。
【図２】ＥＬＩＳＡによって測定した、プレート結合組換えＩＬ−２７への、図示する通りの抗ＩＬ−２７抗体の結合を示すグラフである。
【図３Ａ】棒チャートである。フローサイトメトリーによって測定した、図示の通りの抗ＩＬ−２７抗体によるヒト全血におけるＳＴＡＴ１のＩＬ−２７媒介性リン酸化の阻害を示すグラフである。
【図３Ｂ】グラフである。フローサイトメトリーによって測定した、図示の通りの抗ＩＬ−２７抗体によるヒトＰＢＭＣにおけるＳＴＡＴ１のＩＬ−２７媒介性リン酸化の阻害を示すグラフである。
【図３Ｃ】グラフである。フローサイトメトリーによって測定した、図示の通りの抗ＩＬ−２７抗体によるＵ９３７細胞におけるＳＴＡＴ１のＩＬ−２７媒介性リン酸化の阻害を示すグラフである。
【図３Ｄ】棒チャートである。フローサイトメトリーによって測定した、図示の通りの抗ＩＬ−２７抗体によるＨＵＴ−７８細胞におけるＳＴＡＴ１のＩＬ−２７媒介性リン酸化の阻害を示すグラフである。
【図３Ｅ】グラフである。ＳＲＦ３８８がヒト全血Ｔ細胞においてＩＬ−２７媒介性ｐＳＴＡＴ１を阻害することを示すグラフである。
【図４】図示の通りの様々な濃度の抗ＩＬ−２７抗体によるＴ細胞におけるＣＤ１６１発現のＩＬ−２７媒介性阻害の逆転を示すグラフである。ＣＤ１６１の発現は、フローサイトメトリーを使用して決定した。
【図５Ａ】ＥＬＩＳＡによって測定した、ヒトＰＢＭＣにおけるＴＮＦαのＰＤ−１媒介性分泌を増強するための抗ＩＬ−２７抗体の程度を示すグラフである。
【図５Ｂ】ＥＬＩＳＡによって測定した、ヒトＰＢＭＣにおけるＩＬ−６のＰＤ−１媒介性分泌を増強するための抗ＩＬ−２７抗体の程度を示すグラフである。
【図５Ｃ】ＰＤ−１遮断と組み合わせたＳＲＦ３８８が、健常ドナー及びＲＣＣ患者からのＰＢＭＣにおけるサイトカイン産生の増加をもたらすことを示すドットプロットである（略語：ＣＢＡ＝Ｃｙｔｏｍｅｔｒｉｃ  Ｂｅａｄ  Ａｒｒａｙ、ＩＦＮγ＝インターフェロンガンマ、ＭＳＤ＝Ｍｅｓｏ  Ｓｃａｌｅ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ、ＰＢＭＣ＝末梢血単核細胞、ＰＤ−１＝プログラムされた死受容体−１、ＲＣＣ＝腎細胞癌、ＴＮＦα＝腫瘍壊死因子アルファ）。
【図５Ｄ】ＩＬ−２７が、ＰＤ−１遮断後のサイトカイン産生を阻害し、ＳＲＦ３８８との組み合わせにおいて復元されることを示す（略語：Ｃｔｒｌ＝対照、ｎｓ＝有意差無し、ＰＢＭＣ＝末梢血単核球、ｒｈＩＬ−２７＝組換えヒトＩＬ−２７）。
【図５Ｅ−１】様々な図示する種類の細胞を、ＳＲＦ３８８抗体、αＰＤ−１抗体、またはＳＲＦ３８８及びαＰＤ−１抗体の組み合わせと接触させたときに、ＰＢＭＣ培養で観察されたサイトカイン誘導（具体的には、ＴＮＦα、ＩＦＮγ、ＩＬ−６及びＩＬ−１７Ａ）を、様々な図示する種類の細胞に関してまとめている。
【図５Ｅ−２】様々な図示する種類の細胞を、ＳＲＦ３８８抗体、αＰＤ−１抗体、またはＳＲＦ３８８及びαＰＤ−１抗体の組み合わせと接触させたときに、ＰＢＭＣ培養で観察されたサイトカイン誘導（具体的には、ＴＮＦα、ＩＦＮγ、ＩＬ−６及びＩＬ−１７Ａ）を、様々な図示する種類の細胞に関してまとめている。
【図５Ｆ】図示する変動濃度の個々の抗体（ＳＲＦ４０５、ＳＲＦ４１０、ＳＲＦ４１１、ＳＲＦ４１４、ＳＲＦ４１６、ＳＲＦ５３６、ＳＲＦ５４３、ＳＲＦ５２９、ＳＲＦ３８１、ＳＲＦ３８８及びＡｂ７）のＵ９３７（リンパ腫）細胞におけるｐＳＴＡＴ１シグナルへの影響を示す。
【図５Ｇ】変動濃度のこれらの個々の抗体のＰＢＭＣ（末梢血単核細胞）におけるｐＳＴＡＴ１シグナルへの影響を示す。
【図５Ｈ】変動濃度のこれらの個々の抗体のＰＢＭＣ（末梢血単核細胞）におけるＣＤ１６１シグナルへの影響を示す。
【図５Ｉ】変動濃度のこれらの個々の抗体（ＳＲＦ４１４を除く）のＣＤ４Ｔリンパ球（ＣＤ４細胞）におけるＰＤ−Ｌ１シグナルへの影響を示す。
【図５Ｊ】変動濃度のこれらの個々の抗体（ＳＲＦ５２９を除く）の単球におけるＰＤ−Ｌ１シグナルへの影響を示す。
【図５Ｋ】変動濃度のこれらの個々の抗体（ＳＲＦ５２９を除く）の単球におけるＴＩＭ−３シグナルへの影響を示す。
【図６Ａ】フローサイトメトリーによって決定した、抗ＩＬ−２７抗体を用いたヒト単球の処置による、ＰＤ−Ｌ１のＩＬ−２７媒介性発現の阻害を示すグラフである。
【図６Ｂ】フローサイトメトリーによって決定した、ＥＢＩ３単量体に特異的に結合する様々な濃度の抗ＩＬ−２７抗体を用いたヒト単球の処置による、ＰＤ−Ｌ１のＩＬ−２７媒介性発現の用量依存性阻害を示すグラフである。
【図６Ｃ】フローサイトメトリーによって決定した、抗ＩＬ−２７抗体を用いたヒト単球の処置による、ＴＩＭ３のＩＬ−２７媒介性発現の阻害を示すグラフである。
【図６Ｄ】フローサイトメトリーによって決定した、抗ＩＬ−２７抗体を用いた休止ヒトＴ細胞の処置による、ＰＤ−Ｌ１のＩＬ−２７媒介性発現の阻害を示すグラフである。
【図７Ａ】マウスから単離された肺の結節の目視計数により決定した、図示の通りの抗ＩＬ２７抗体（ＳＲＦ３８８）、アイソタイプ対照抗体、αＷＳＸ−１抗体または組み合わせたαＰＤ−１及びαＣＴＬＡ−４抗体を用いて処置したＢ１６Ｆ１０腫瘍を有するマウスからの表面肺Ｂ１６Ｆ１０転移性結節（肺結節）の数を示すドットプロットである。
【図７Ｂ】生物発光画像分析によって決定した、抗ＩＬ−２７抗体（ＳＲＦ３８８）またはアイソタイプ対照抗体を用いて処置したマウスにおける生物発光Ｂ１６−Ｌｕｃ腫瘍の増殖速度論を示すグラフを提供する。
【図７Ｃ】図示の通りの抗ＩＬ２７抗体（ＳＲＦ３８８）、アイソタイプ対照抗体、αＷＳＸ−１抗体または組み合わせたαＰＤ−１及びαＣＴＬＡ−４抗体を用いて処置したＢ１６Ｆ１０腫瘍を有するマウスから単離した、ヘマトキシリン及びエオシンを用いて染色した、固定切片肺組織の一連の画像を示す。
【図７Ｄ】画像分析ソフトウェアにより決定した、図示の通りの抗ＩＬ２７抗体（ＳＲＦ３８８）、アイソタイプ対照抗体、αＷＳＸ−１抗体または組み合わせたαＰＤ−１及びαＣＴＬＡ−４抗体を用いて処置したＢ１６Ｆ１０腫瘍を有するマウスから単離した、ヘマトキシリン及びエオシンを用いて染色した、固定切片肺組織Ｂ１６Ｆ１０腫瘍組織の総組織面積の割合（％）として総腫瘍面積を示すドットプロットである。表面肺転移数及び総腫瘍面積において同様の低下が、ＩＬ−２７ＲＡ（ＷＳＸ−１）媒介性抗体遮断及び抗ＰＤ−１＋抗ＣＴＬＡ−４併用療法で観察された。
【図８Ａ】ＩＬ−２７ミニサークルを用いた処置後に、ＩＬ−２７を過剰発現するマウスから単離された脾臓細胞において、１．０超ｌｏｇ２倍変化（黒点）の発現変化を伴う遺伝子のマイクロアレイデータを示す散布図を提供する。
【図８Ｂ】図８Ａと同様の脾臓細胞における、図示の通りの選択された免疫調節遺伝子の発現レベルを示すグラフを提供する。
【図８Ｃ】ヒトＩＬ−２７の異所性発現が、ｉｎ  ｖｉｖｏでマウスＴ細胞上の阻害性受容体発現を誘導し、ＳＲＦ３８８が、ＩＬ−２７ミニサークル処置後にｉｎ  ｖｉｖｏでＴ細胞上の阻害性受容体発現を低下させることを示す。６週齢の雌Ｂａｌｂ／ｃマウスに、空ベクター（対照）またはｈＩＬ−２７ミニサークルを注射した。（左上及び右上パネル）ＰＢＭＣ及び（左下及び右下パネル）総脾臓細胞を、トランスフェクションの５日後に収集し、細胞を染色し、フローサイトメトリーにより分析した。図示するマーカーの発現を、ＣＤ４＋Ｔ細胞（左上及び左下パネル）及びＣＤ８＋Ｔ細胞（右上及び右下パネル）で分析した。分析は、ＦｌｏｗＪｏソフトウェアを使用して行った。
【図８Ｄ】ＳＲＦ３８８が、マウス血漿中のミニサークル由来ヒトＩＬ−２７の検出を阻害することを示す。
【図９−１】選択されたモノクローナル抗体特性の一覧表を提示する。
【図９−２】選択されたモノクローナル抗体特性の一覧表を提示する。
【図１０Ａ−１】ＮＴナンバリングを反映する配列分割を伴う、抗体配列のチャートを提示する。ＣＤＲ配列における強調されたアミノ酸は、生殖細胞がコードする配列からの突然変異を示す。当業者に明らかであるように、ＣＤＲ配列、フレームワーク配列などの決定を含む抗体番号付けは、図１０Ａ及び図１０Ｂに提示されているならびに本明細書の他箇所にて採用されるＮＴ及びＩＭＧＴ番号付けシステムを介することを含む、多くの当該技術分野で認識されている様式にて行うことができる。
【図１０Ａ−２】ＮＴナンバリングを反映する配列分割を伴う、抗体配列のチャートを提示する。ＣＤＲ配列における強調されたアミノ酸は、生殖細胞がコードする配列からの突然変異を示す。当業者に明らかであるように、ＣＤＲ配列、フレームワーク配列などの決定を含む抗体番号付けは、図１０Ａ及び図１０Ｂに提示されているならびに本明細書の他箇所にて採用されるＮＴ及びＩＭＧＴ番号付けシステムを介することを含む、多くの当該技術分野で認識されている様式にて行うことができる。
【図１０Ａ−３】ＮＴナンバリングを反映する配列分割を伴う、抗体配列のチャートを提示する。ＣＤＲ配列における強調されたアミノ酸は、生殖細胞がコードする配列からの突然変異を示す。当業者に明らかであるように、ＣＤＲ配列、フレームワーク配列などの決定を含む抗体番号付けは、図１０Ａ及び図１０Ｂに提示されているならびに本明細書の他箇所にて採用されるＮＴ及びＩＭＧＴ番号付けシステムを介することを含む、多くの当該技術分野で認識されている様式にて行うことができる。
【図１０Ａ−４】ＮＴナンバリングを反映する配列分割を伴う、抗体配列のチャートを提示する。ＣＤＲ配列における強調されたアミノ酸は、生殖細胞がコードする配列からの突然変異を示す。当業者に明らかであるように、ＣＤＲ配列、フレームワーク配列などの決定を含む抗体番号付けは、図１０Ａ及び図１０Ｂに提示されているならびに本明細書の他箇所にて採用されるＮＴ及びＩＭＧＴ番号付けシステムを介することを含む、多くの当該技術分野で認識されている様式にて行うことができる。
【図１０Ｂ−１】ＩｍＭｕｎｏＧｅｎｅＴｉｃｓ（ＩＭＧＴ）ナンバリングを反映する配列分割を伴う、抗体配列のチャート（図１０Ａの配列チャートに対応する）を提示する。ＣＤＲ配列における強調されたアミノ酸は、生殖細胞がコードする配列からの突然変異を示す。当業者に明らかであるように、ＣＤＲ配列、フレームワーク配列などの決定を含む抗体番号付けは、図１０Ａ及び図１０Ｂに提示されているならびに本明細書の他箇所にて採用されるＮＴ及びＩＭＧＴ番号付けシステムを介することを含む、多くの当該技術分野で認識されている様式にて行うことができる。
【図１０Ｂ−２】ＩｍＭｕｎｏＧｅｎｅＴｉｃｓ（ＩＭＧＴ）ナンバリングを反映する配列分割を伴う、抗体配列のチャート（図１０Ａの配列チャートに対応する）を提示する。ＣＤＲ配列における強調されたアミノ酸は、生殖細胞がコードする配列からの突然変異を示す。当業者に明らかであるように、ＣＤＲ配列、フレームワーク配列などの決定を含む抗体番号付けは、図１０Ａ及び図１０Ｂに提示されているならびに本明細書の他箇所にて採用されるＮＴ及びＩＭＧＴ番号付けシステムを介することを含む、多くの当該技術分野で認識されている様式にて行うことができる。
【図１０Ｂ−３】ＩｍＭｕｎｏＧｅｎｅＴｉｃｓ（ＩＭＧＴ）ナンバリングを反映する配列分割を伴う、抗体配列のチャート（図１０Ａの配列チャートに対応する）を提示する。ＣＤＲ配列における強調されたアミノ酸は、生殖細胞がコードする配列からの突然変異を示す。当業者に明らかであるように、ＣＤＲ配列、フレームワーク配列などの決定を含む抗体番号付けは、図１０Ａ及び図１０Ｂに提示されているならびに本明細書の他箇所にて採用されるＮＴ及びＩＭＧＴ番号付けシステムを介することを含む、多くの当該技術分野で認識されている様式にて行うことができる。
【図１０Ｂ−４】ＩｍＭｕｎｏＧｅｎｅＴｉｃｓ（ＩＭＧＴ）ナンバリングを反映する配列分割を伴う、抗体配列のチャート（図１０Ａの配列チャートに対応する）を提示する。ＣＤＲ配列における強調されたアミノ酸は、生殖細胞がコードする配列からの突然変異を示す。当業者に明らかであるように、ＣＤＲ配列、フレームワーク配列などの決定を含む抗体番号付けは、図１０Ａ及び図１０Ｂに提示されているならびに本明細書の他箇所にて採用されるＮＴ及びＩＭＧＴ番号付けシステムを介することを含む、多くの当該技術分野で認識されている様式にて行うことができる。
【発明を実施するための形態】
【０２１８】
本開示は、少なくとも部分的に、高い親和性及び特異性でヒトＩＬ−２７に結合する抗体分子を提供する。一実施形態では、ＩＬ−２７に結合するヒト抗体を本明細書に開示する。本明細書で使用する場合、「ＩＬ−２７」及び「ＩＬ２７」という用語は、２つの異なる遺伝子：エプスタイン−バーウイルス誘導遺伝子３（ＥＢＩ３）及びＩＬ−２７ｐ２８によってコードされる２つの別個のサブユニットから構成されるヘテロ二量体サイトカインである、ＩＬ−２７を互換可能に指す。ＩＬ−２７は、炎症促進性と抗炎症性の両方の特性を有し、造血細胞及び非造血細胞に多様な影響を与える。
【０２１９】
従って、一態様では、本開示は、ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗するモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供し、該抗体またはその抗原結合部分は、以下の特性：
（ｉ）ヒトＩＬ−２７に１５ｎＭ以下の平衡解離定数（ＫＤ）で結合する；
（ｉｉ）ＩＬ−２７のＩＬ−２７受容体への結合を遮断する；
（ｉｉｉ）細胞におけるＳＴＡＴ１及び／またはＳＴＡＴ３リン酸化を阻害または低下する；
（ｉｖ）細胞におけるＣＤ１６１発現のＩＬ−２７媒介性阻害を阻害または低下する；
（ｖ）細胞におけるＩＬ−２７媒介性ＰＤ−Ｌ１及び／またはＴＩＭ−３発現を阻害または低下する；
（ｖｉ）細胞からの１つまたは複数のサイトカインのＰＤ−１媒介性分泌を誘導または増強する；ならびに
（ｖｉｉ）（ｉ）〜（ｖｉ）の組み合わせのうちの少なくとも１つまたは複数を呈する。
【０２２０】
他の態様では、本開示は、ヒトＩＬ−２７と特異的に結合し、ＩＬ−２７生物学的活性またはＩＬ−２７シグナル伝達を阻害または低下する、モノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供する。
【０２２１】
本発明の追加の態様は、抗体分子をコードする核酸分子、発現ベクター、宿主細胞、及び抗体分子を作成する方法を含む。イムノコンジュゲート、多重または二重特異性分子及び抗体分子を含む医薬組成物も提供する。本明細書に開示する抗ＩＬ−２７抗体分子を使用して、がん性または悪性障害、例えば、固形及び液体腫瘍（例えば、白血病、例えば、リンパ腫、例えば、ＡＭＬ）、肺癌（例えば、非小細胞肺癌）、膵臓癌、乳癌（例えば、トリプルネガティブ乳癌）、黒色腫、精巣癌、肉腫、頭頸部癌（例えば、扁平上皮性頭頸部癌）、肝癌（例えば、肝細胞癌（ＨＣＣ））、結腸直腸癌、卵巣癌、脳癌（例えば、多形性膠芽腫）、または腎癌（例えば、腎細胞癌、例えば、腎明細胞癌）を処置、予防及び／または診断することができる。
【０２２２】
抗ＩＬ−２７抗体及びその抗原結合フラグメント
本開示は、ＩＬ−２７、特にヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する抗体及びその抗原結合部分を提供する。表１２に記載の重鎖ＣＤＲ及び軽鎖ＣＤＲならびに可変配列を含む、ヒトＩＬ−２７に特異的に結合する単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を本明細書にて提供する。
【０２２３】
一部の実施形態では、本開示は、ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供し、該抗体またはその抗原結合部分は、以下の特性：（ｉ）ヒトＩＬ−２７に１５ｎＭ以下の平衡解離定数（ＫＤ）で結合する；（ｉｉ）ＩＬ−２７のＩＬ−２７受容体への結合を遮断する；（ｉｉｉ）細胞におけるＳＴＡＴ１及び／またはＳＴＡＴ３リン酸化を阻害または低下する；（ｉｖ）細胞におけるＣＤ１６１発現の阻害を阻害または低下する；（ｖ）細胞におけるＰＤ−Ｌ１及び／またはＴＩＭ−３発現を阻害または低下する；（ｖｉ）細胞からの１つまたは複数のサイトカインのＰＤ−１媒介性分泌を誘導または増強する；ならびに（ｖｉｉ）（ｉ）〜（ｖｉ）の組み合わせのうちの少なくとも１つまたは複数を呈する。
【０２２４】
一部の実施形態では、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分は、ヒトＩＬ−２７に１５ｎＭ以下の平衡解離定数（ＫＤ）で結合する。
【０２２５】
一部の実施形態では、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分は、組換えヒトＩＬ−２７またはマウスＩＬ−２７に結合する。
【０２２６】
一部の実施形態では、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分は、細胞におけるＳＴＡＴ１及び／またはＳＴＡＴ３リン酸化を阻害または低下する。一部の実施形態では、細胞は、免疫細胞である。一部の実施形態では、細胞は、がん細胞である。
【０２２７】
一部の実施形態では、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分は、細胞におけるＣＤ１６１発現の阻害を阻害または低下する（例えば、細胞におけるＣＤ１６１発現の阻害を、回復または緩和する）。一部の実施形態では、細胞は、免疫細胞である。
【０２２８】
一部の実施形態では、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分は、細胞におけるＰＤ−Ｌ１及び／またはＴＩＭ−３発現を阻害または低下する。一部の実施形態では、ＰＤ−Ｌ１発現は、阻害または低下される。一部の実施形態では、ＴＩＭ−３発現は、阻害または低下される。一部の実施形態では、ＰＤ−Ｌ１発現及びＴＩＭ−３発現の両方が、低下される。一部の実施形態では、細胞は、免疫細胞である。
【０２２９】
一部の実施形態では、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分は、細胞からの１つまたは複数のサイトカインのＰＤ−１媒介性分泌を誘導または増強する。一部の実施形態では、１つまたは複数のサイトカインは、ＴＮＦαである。一部の実施形態では、１つまたは複数のサイトカインは、ＩＬ−６である。一部の実施形態では、１つまたは複数のサイトカインは、ＴＮＦα及びＩＬ−６である。一部の実施形態では、細胞は、免疫細胞である。
【０２３０】
一部の実施形態では、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＭ、ＩｇＡ１、ＩｇＡ２、ＩｇＤ、及びＩｇＥ抗体からなる群から選択される。一部の実施形態では、抗体は、ＩｇＧ１抗体またはＩｇＧ４抗体である。一部の実施形態では、抗体は、野生型ＩｇＧ１重鎖定常領域を含む。一部の実施形態では、抗体は、野生型ＩｇＧ４重鎖定常領域を含む。一部の実施形態では、抗体は、少なくとも１つの突然変異を含むＦｃドメインを含む。一部の実施形態では、抗体は、突然変異型ＩｇＧ１重鎖定常領域を含む。一部の実施形態では、抗体は、突然変異型ＩｇＧ４重鎖定常領域を含む。一部の実施形態では、突然変異型ＩｇＧ４重鎖定常領域は、ＥＵナンバリングに従って、置換Ｓ２２８Ｐ、Ｌ２３５Ｅ、Ｌ２３５Ａのいずれか１つ、またはそれらの組み合わせを含む。
【０２３１】
一部の実施形態では、本開示は、前述の実施形態のいずれか１つに記載の抗体またはその抗原結合部分と実質的に同じＩＬ−２７上のエピトープに結合する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供する。
【０２３２】
一部の実施形態では、本開示は、前述の実施形態のいずれか１つに記載の抗体またはその抗原結合部分が結合するＩＬ−２７を含むアミノ酸残基の少なくとも１つに結合する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供する。
【０２３３】
一部の実施形態では、本開示は、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供し、抗体またはその抗原結合部分が結合するＩＬ−２７上のエピトープの突然変異が、抗体またはその抗原結合部分及び前述の実施形態のいずれか１つに記載の抗体またはその抗原結合部分の両方への結合を、阻害、低下、または遮断する。
【０２３４】
一部の実施形態では、本開示は、ＩＬ−２７上のエピトープに結合する単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供し、エピトープは、表１２に記載する抗体分子が結合するエピトープと同じであるまたは類似する。
【０２３５】
一部の実施形態では、本開示は、ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供し、該抗体またはその抗原結合部分は、以下：
（ｉ）それぞれ、配列番号５１、５２及び５３に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号５９、６０及び６１に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｉｉ）それぞれ、配列番号７３、７４及び７５に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号８１、８２及び８３に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｉｉｉ）それぞれ、配列番号９５、９６及び９７に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号１０３、１０４及び１０５に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｉｖ）それぞれ、配列番号１１７、１１８及び１１９に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号１２５、１２６及び１２７に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｖ）それぞれ、配列番号１３９、１４０及び１４１に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号１４７、１４８及び１４９に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｖｉ）それぞれ、配列番号１６１、１６２及び１６３に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号１６９、１７０及び１７１に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｖｉｉ）それぞれ、配列番号１８５、１８６及び１８７に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号１９３、１９４及び１９５に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｖｉｉｉ）それぞれ、配列番号２０７、２０８及び２０９に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号２１５、２１６及び２１７に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｉｘ）それぞれ、配列番号２２９、２３０及び２３１に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号２３７、２３８及び２３９に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｘ）それぞれ、配列番号２５１、２５２及び２５３に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号２５９、２６０及び２６１に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｘｉ）それぞれ、配列番号２７３、２７４及び２７５に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号２８１、２８２及び２８３に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｘｉｉ）それぞれ、配列番号２９５、２９６及び２９７に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号３０３、３０４及び３０５に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｘｉｉｉ）それぞれ、配列番号３１７、３１８及び３１９に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号３２５、３２６及び３２７に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｘｉｖ）それぞれ、配列番号３３９、３４０及び３４１に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号３４７、３４８及び３４９に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｘｖ）それぞれ、配列番号３６１、３６２及び３６３に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号３６９、３７０及び３７１に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；ならびに
（ｘｖｉ）それぞれ、配列番号３８３、３８４及び３８５に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号３９１、３９２及び３９３に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列からなる群から選択される重鎖ＣＤＲ及び軽鎖ＣＤＲを含む。
【０２３６】
一部の実施形態では、本開示は、ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供し、該抗体またはその抗原結合部分は、重鎖ＣＤＲ及び軽鎖ＣＤＲを含み、重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列は、それぞれ、配列番号１６１、１６２及び１６３に記載されており、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列は、それぞれ、配列番号１６９、１７０及び１７１に記載されている。
【０２３７】
一部の実施形態では、本開示は、ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供し、該抗体またはその抗原結合部分は、以下：
（ｉ）それぞれ、配列番号５４、５５及び５６に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号６２、６３及び６４に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｉｉ）それぞれ、配列番号７６、７７及び７８に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号８４、８５及び８６に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｉｉｉ）それぞれ、配列番号９８、９９及び１００に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号１０６、１０７及び１０８に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｉｖ）それぞれ、配列番号１２０、１２１及び１２２に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号１２８、１２９及び１３０に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｖ）それぞれ、配列番号１４２、１４３及び１４４に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号１５０、１５１及び１５２に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｖｉ）それぞれ、配列番号１６４、１６５及び１６６に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号１７２、１７３及び１７４に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｖｉｉ）それぞれ、配列番号１８８、１８９及び１９０に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号１９６、１９７及び１９８に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｖｉｉｉ）それぞれ、配列番号２１０、２１１及び２１２に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号２１８、２１９及び２２０に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｉｘ）それぞれ、配列番号２３２、２３３及び２３４に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号２４０、２４１及び２４２に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｘ）それぞれ、配列番号２５４、２５５及び２５６に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号２６２、２６３及び２６４に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｘｉ）それぞれ、配列番号２７６、２７７及び２７８に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号２８４、２８５及び２８６に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｘｉｉ）それぞれ、配列番号２９８、２９９及び３００に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号３０６、３０７及び３０８に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｘｉｉｉ）それぞれ、配列番号３２０、３２１及び３２２に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号３２８、３２９及び３３０に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｘｉｖ）それぞれ、配列番号３４２、３４３及び３４４に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号３５０、３５１及び３５２に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；
（ｘｖ）それぞれ、配列番号３６４、３６５及び３６６に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号３７２、３７３及び３７４に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列；ならびに
（ｘｖｉ）それぞれ、配列番号３８６、３８７及び３８８に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列、ならびにそれぞれ、配列番号３９４、３９５及び３９６に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列からなる群から選択される重鎖ＣＤＲ及び軽鎖ＣＤＲを含む。
【０２３８】
一部の実施形態では、本開示は、ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供し、該抗体またはその抗原結合部分は、重鎖ＣＤＲ及び軽鎖ＣＤＲを含み、重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列は、それぞれ、配列番号１６４、１６５及び１６６に記載されており、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列は、それぞれ、配列番号１７２、１７３及び１７４に記載されている。
【０２３９】
一部の実施形態では、本開示は、ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供し、該抗体またはその抗原結合部分は、重鎖ＣＤＲ及び軽鎖ＣＤＲを含み、重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列は、それぞれ、ＳＹＳＭＳ（配列番号２３）、ＹＩＳＹＤＧＧＳＡＹＹＰＤＴＶＫＧ（配列番号２４）及びＨＧＤＹＤＤＤＤＡＭＤＹ（配列番号２５）であり、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列は、それぞれ、ＲＡＳＥＮＩＹＳＹＬＡ（配列番号２６）、ＮＡＥＴＬＴＥ（配列番号２７）及びＱＨＨＹＧＴＰＬＴ（配列番号２８）である。
【０２４０】
一部の実施形態では、本開示は、ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供し、該抗体またはその抗原結合部分は、重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含み、重鎖可変領域は、配列番号５７、７９、１０１、１２３、１４５、１６７、１９１、２１３、２３５、２５７、２７９、３０１、３２３、３４５、３６７及び３８９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域は、配列番号６５、８７、１０９、１３１、１５３、１７５、１９９、２２１、２４３、２６５、２８７、３０９、３３１、３５３、３７５及び３９７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。
【０２４１】
一部の実施形態では、本開示は、ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供し、該抗体またはその抗原結合部分は、以下：
（ｉ）それぞれ、配列番号５７及び６５；
（ｉｉ）それぞれ、配列番号７９及び８７；
（ｉｉｉ）それぞれ、配列番号１０１及び１０９；
（ｉｖ）それぞれ、配列番号１２３及び１３１；
（ｖ）それぞれ、配列番号１４５及び１５３；
（ｖｉ）それぞれ、配列番号１６７及び１７５；
（ｖｉｉ）それぞれ、配列番号１９１及び１９９；
（ｖｉｉｉ）それぞれ、配列番号２１３及び２２１；
（ｉｘ）それぞれ、配列番号２３５及び２４３；
（ｘ）それぞれ、配列番号２５７及び２６５；
（ｘｉ）それぞれ、配列番号２７９及び２８７；
（ｘｉｉ）それぞれ、配列番号３０１及び３０９；
（ｘｉｉｉ）それぞれ、配列番号３２３及び３３１；
（ｘｉｖ）それぞれ、配列番号３４５及び３５３；
（ｘｖ）それぞれ、配列番号３６７及び３７５；ならびに
（ｘｖｉ）それぞれ、配列番号３８９及び３９７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含む。
【０２４２】
一部の実施形態では、本開示は、ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供し、該抗体またはその抗原結合部分は、重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含み、重鎖可変領域は、配列番号５７、７９、１０１、１２３、１４５、１６７、１９１、２１３、２３５、２５７、２７９、３０１、３２３、３４５、３６７及び３８９からなる群から選択されるアミノ酸配列に、少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域は、配列番号６５、８７、１０９、１３１、１５３、１７５、１９９、２２１、２４３、２６５、２８７、３０９、３３１、３５３、３７５及び３９７からなる群から選択されるアミノ酸配列に、少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含む。
【０２４３】
一部の実施形態では、本開示は、ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供し、該抗体またはその抗原結合部分は、以下：
（ｉ）それぞれ、配列番号５７及び６５；
（ｉｉ）それぞれ、配列番号７９及び８７；
（ｉｉｉ）それぞれ、配列番号１０１及び１０９；
（ｉｖ）それぞれ、配列番号１２３及び１３１；
（ｖ）それぞれ、配列番号１４５及び１５３；
（ｖｉ）それぞれ、配列番号１６７及び１７５；
（ｖｉｉ）それぞれ、配列番号１９１及び１９９；
（ｖｉｉｉ）それぞれ、配列番号２１３及び２２１；
（ｉｘ）それぞれ、配列番号２３５及び２４３；
（ｘ）それぞれ、配列番号２５７及び２６５；
（ｘｉ）それぞれ、配列番号２７９及び２８７；
（ｘｉｉ）それぞれ、配列番号３０１及び３０９；
（ｘｉｉｉ）それぞれ、配列番号３２３及び３３１；
（ｘｉｖ）それぞれ、配列番号３４５及び３５３；
（ｘｖ）それぞれ、配列番号３６７及び３７５；ならびに
（ｘｖｉ）それぞれ、配列番号３８９及び３９７からなる群から選択されるアミノ酸配列に、少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含む。
【０２４４】
一部の実施形態では、本開示は、ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供し、該抗体またはその抗原結合部分は、それぞれ、配列番号１６７及び１７５に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含む。
【０２４５】
一部の実施形態では、本開示は、ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供し、該抗体またはその抗原結合部分は、それぞれ、配列番号１６７及び１７５に記載のアミノ酸配列に、少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含む。
【０２４６】
一部の実施形態では、本開示は、ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供し、該抗体またはその抗原結合部分は、重鎖及び軽鎖を含み、重鎖は、配列番号６７、８９、１１１、１３３、１５５、１７７、２０１、２２３、２４５、２６７、２８９、３１１、３３３、３５５、３７７及び３９９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、軽鎖は、配列番号６９、９１、１１３、１３５、１５７、１７９、２０３、２２５、２４７、２６９、２９１、３１３、３３５、３５７、３７９及び４０１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。
【０２４７】
一部の実施形態では、本開示は、ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供し、該抗体またはその抗原結合部分は、重鎖及び軽鎖を含み、重鎖は、配列番号６７、８９、１１１、１３３、１５５、１７７、２０１、２２３、２４５、２６７、２８９、３１１、３３３、３５５、３７７及び３９９からなる群から選択されるアミノ酸配列に、少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含み、軽鎖は、配列番号６９、９１、１１３、１３５、１５７、１７９、２０３、２２５、２４７、２６９、２９１、３１３、３３５、３５７、３７９及び４０１からなる群から選択されるアミノ酸配列に、少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含む。
【０２４８】
一部の実施形態では、本開示は、ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供し、該抗体またはその抗原結合部分は、重鎖及び軽鎖を含み、重鎖は、配列番号７１、９３、１１５、１３７、１５９、１８１、２０５、２２７、２４９、２７１、２９３、３１５、３３７、３５９、３８１及び４０３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、軽鎖は、配列番号６９、９１、１１３、１３５、１５７、１７９、２０３、２２５、２４７、２６９、２９１、３１３、３３５、３５７、３７９及び４０１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。
【０２４９】
一部の実施形態では、本開示は、ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供し、該抗体またはその抗原結合部分は、重鎖及び軽鎖を含み、重鎖は、配列番号７１、９３、１１５、１３７、１５９、１８１、２０５、２２７、２４９、２７１、２９３、３１５、３３７、３５９、３８１及び４０３からなる群から選択されるアミノ酸配列に、少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含み、軽鎖は、配列番号６９、９１、１１３、１３５、１５７、１７９、２０３、２２５、２４７、２６９、２９１、３１３、３３５、３５７、３７９及び４０１からなる群から選択されるアミノ酸配列に、少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含む。
【０２５０】
一部の実施形態では、本開示は、ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供し、該抗体またはその抗原結合部分は、以下：
（ｉ）それぞれ、配列番号６７及び６９；
（ｉｉ）それぞれ、配列番号８９及び９１；
（ｉｉｉ）それぞれ、配列番号１１１及び１１３；
（ｉｖ）それぞれ、配列番号１３３及び１３５；
（ｖ）それぞれ、配列番号１５５及び１５７；
（ｖｉ）それぞれ、配列番号１７７及び１７９；
（ｖｉｉ）それぞれ、配列番号２０１及び２０３；
（ｖｉｉｉ）それぞれ、配列番号２２３及び２２５；
（ｉｘ）それぞれ、配列番号２４５及び２４７；
（ｘ）それぞれ、配列番号２６７及び２６９；
（ｘｉ）それぞれ、配列番号２８９及び２９１；
（ｘｉｉ）それぞれ、配列番号３１１及び３１３；
（ｘｉｉｉ）それぞれ、配列番号３３３及び３３５；
（ｘｉｖ）それぞれ、配列番号３５５及び３５７；
（ｘｖ）それぞれ、配列番号３７７及び３７９；ならびに
（ｘｖｉ）それぞれ、配列番号３９９及び４０１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖及び軽鎖を含む。
【０２５１】
一部の実施形態では、本開示は、ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供し、該抗体またはその抗原結合部分は、以下：
（ｉ）それぞれ、配列番号６７及び６９；
（ｉｉ）それぞれ、配列番号８９及び９１；
（ｉｉｉ）それぞれ、配列番号１１１及び１１３；
（ｉｖ）それぞれ、配列番号１３３及び１３５；
（ｖ）それぞれ、配列番号１５５及び１５７；
（ｖｉ）それぞれ、配列番号１７７及び１７９；
（ｖｉｉ）それぞれ、配列番号２０１及び２０３；
（ｖｉｉｉ）それぞれ、配列番号２２３及び２２５；
（ｉｘ）それぞれ、配列番号２４５及び２４７；
（ｘ）それぞれ、配列番号２６７及び２６９；
（ｘｉ）それぞれ、配列番号２８９及び２９１；
（ｘｉｉ）それぞれ、配列番号３１１及び３１３；
（ｘｉｉｉ）それぞれ、配列番号３３３及び３３５；
（ｘｉｖ）それぞれ、配列番号３５５及び３５７；
（ｘｖ）それぞれ、配列番号３７７及び３７９；ならびに
（ｘｖｉ）それぞれ、配列番号３９９及び４０１からなる群から選択されるアミノ酸配列に、少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含む重鎖及び軽鎖を含む。
【０２５２】
一部の実施形態では、本開示は、ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供し、該抗体またはその抗原結合部分は、以下：
（ｉ）それぞれ、配列番号７１及び６９；
（ｉｉ）それぞれ、配列番号９３及び９１；
（ｉｉｉ）それぞれ、配列番号１１５及び１１３；
（ｉｖ）それぞれ、配列番号１３７及び１３５；
（ｖ）それぞれ、配列番号１５９及び１５７；
（ｖｉ）それぞれ、配列番号１８１及び１７９；
（ｖｉｉ）それぞれ、配列番号２０５及び２０３；
（ｖｉｉｉ）それぞれ、配列番号２２７及び２２５；
（ｉｘ）それぞれ、配列番号２４９及び２４７；
（ｘ）それぞれ、配列番号２７１及び２６９；
（ｘｉ）それぞれ、配列番号２９３及び２９１；
（ｘｉｉ）それぞれ、配列番号３１５及び３１３；
（ｘｉｉｉ）それぞれ、配列番号３３７及び３３５；
（ｘｉｖ）それぞれ、配列番号３５９及び３５７；
（ｘｖ）それぞれ、配列番号３８１及び３７９；ならびに
（ｘｖｉ）それぞれ、配列番号４０３及び４０１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖及び軽鎖を含む。
【０２５３】
一部の実施形態では、本開示は、ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供し、該抗体またはその抗原結合部分は、以下：
（ｉ）それぞれ、配列番号７１及び６９；
（ｉｉ）それぞれ、配列番号９３及び９１；
（ｉｉｉ）それぞれ、配列番号１１５及び１１３；
（ｉｖ）それぞれ、配列番号１３７及び１３５；
（ｖ）それぞれ、配列番号１５９及び１５７；
（ｖｉ）それぞれ、配列番号１８１及び１７９；
（ｖｉｉ）それぞれ、配列番号２０５及び２０３；
（ｖｉｉｉ）それぞれ、配列番号２２７及び２２５；
（ｉｘ）それぞれ、配列番号２４９及び２４７；
（ｘ）それぞれ、配列番号２７１及び２６９；
（ｘｉ）それぞれ、配列番号２９３及び２９１；
（ｘｉｉ）それぞれ、配列番号３１５及び３１３；
（ｘｉｉｉ）それぞれ、配列番号３３７及び３３５；
（ｘｉｖ）それぞれ、配列番号３５９及び３５７；
（ｘｖ）それぞれ、配列番号３８１及び３７９；ならびに
（ｘｖｉ）それぞれ、配列番号４０３及び４０１からなる群から選択されるアミノ酸配列に、少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含む重鎖及び軽鎖を含む。
【０２５４】
一部の実施形態では、本開示は、ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供し、該抗体またはその抗原結合部分は、それぞれ、配列番号１７７及び１７９に記載のアミノ酸配列を含む重鎖及び軽鎖を含む。
【０２５５】
一部の実施形態では、本開示は、ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供し、該抗体またはその抗原結合部分は、それぞれ、配列番号１７７及び１７９に記載のアミノ酸配列に、少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含む重鎖及び軽鎖を含む。
【０２５６】
一部の実施形態では、本開示は、ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供し、該抗体またはその抗原結合部分は、それぞれ、配列番号１８１及び１７９に記載のアミノ酸配列を含む重鎖及び軽鎖を含む。
【０２５７】
一部の実施形態では、本開示は、ヒトＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供し、該抗体またはその抗原結合部分は、それぞれ、配列番号１８１及び１７９に記載のアミノ酸配列に、少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含む重鎖及び軽鎖を含む。
【０２５８】
抗ＩＬ−２７抗体及びその抗原結合フラグメントを産生するための方法
本開示は、本明細書に記載の抗ＩＬ−２７抗体またはその抗原結合フラグメントのいずれかを産生するための方法にも関する。一部の実施形態では、本明細書に記載の抗体を調製するための方法は、適切な免疫原で対象（例えば、非ヒト哺乳動物）に免疫付与することを含むことができる。本明細書に記載の抗体のいずれかを生成するための好適な免疫原は、本明細書に記載する。例えば、ＩＬ−２７に結合する抗体を生成するために、当業者は好適な対象（例えば、ラット、マウス、スナネズミ、ハムスター、イヌ、ネコ、ブタ、ヤギ、ウマ、または非ヒト霊長類などの非ヒト哺乳動物）に、ＩＬ−２７を用いて、免疫付与することができる。一部の実施形態では、配列番号９７に記載のアミノ酸配列を含む完全長ヒトＩＬ−２７  ＥＢＩ３単量体ポリペプチドを、免疫原として使用する。一部の実施形態では、配列番号９８に記載のアミノ酸配列を含む完全長ヒトＩＬ−２７ｐ２８単量体ポリペプチドを、免疫原として使用する。
【０２５９】
好適な対象（例えば、非ヒト哺乳動物）は、適切な抗原を、後続の追加免疫を伴って、哺乳動物による抗体の産生を誘発するのに十分な回数用いて、免疫付与することができる。免疫原は、アジュバントを伴って対象（例えば、非ヒト哺乳動物）に投与することができる。対象において抗体を産生するのに有用なアジュバントには、限定されないが、タンパク質アジュバント；細菌アジュバント、例えば全細菌（ＢＣＧ、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｐａｒｖｕｍまたはＳａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｍｉｎｎｅｓｏｔａ）及び細菌成分、例えば細胞壁骨格、トレハロースジミコレート、モノホスホリルリピドＡ、ｔｕｂｅｒｃｌｅ  ｂａｃｉｌｌｕｓのメタノール抽出残渣（ＭＥＲ）、完全または不完全フロイントアジュバント；ウイルスアジュバント；化学的アジュバント、例えば、水酸化アルミニウム、ならびにヨードアセテート及びコレステリルヘミスクシネートが含まれる。免疫応答を誘導するための方法において使用することができる他のアジュバントには、例えば、コレラ毒素及びパラポックスウイルスタンパク質が含まれる。Ｂｉｅｇ  ｅｔ  ａｌ．（１９９９）Ａｕｔｏｉｍｍｕｎｉｔｙ  ３１（１）：１５−２４も参照されたい。例えば、Ｌｏｄｍｅｌｌ  ｅｔ  ａｌ．（２０００）Ｖａｃｃｉｎｅ  １８：１０５９−１０６６；Ｊｏｈｎｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．（１９９９）Ｊ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  ４２：４６４０−４６４９；Ｂａｌｄｒｉｄｇｅ  ｅｔ  ａｌ．（１９９９）Ｍｅｔｈｏｄｓ  １９：１０３−１０７；及びＧｕｐｔａ  ｅｔ  ａｌ．（１９９５）Ｖａｃｃｉｎｅ  １３（１４）：１２６３−１２７６も参照されたい。
【０２６０】
一部の実施形態では、本方法は、免疫原に結合するモノクローナル抗体を分泌するハイブリドーマ細胞株を調製することを含む。例えば、好適な哺乳動物、例えば実験用マウスに、上記のようにＩＬ−２７ポリペプチドを用いて免疫付与する。免疫付与された哺乳動物の抗体産生細胞（例えば、脾臓のＢ細胞）は、免疫原を少なくとも１回追加免疫した２〜４日後に単離され得、次に短時間培養して増殖させてから好適な骨髄腫細胞株の細胞と融合させる。これらの細胞は、融合促進剤、例えば、ワクシニアウイルスまたはポリエチレングリコールの存在下で融合することができる。融合において得られたハイブリッド細胞をクローニングし、所望の抗体を分泌する細胞クローンを選択する。例えば、好適な免疫原を用いて免疫付与されたＢａｌｂ／ｃマウスの脾臓細胞を、骨髄腫細胞株ＰＡＩまたは骨髄腫細胞株Ｓｐ２／０−Ａｇ１４の細胞と融合させることができる。融合後、細胞を、正常な骨髄腫細胞による所望のハイブリドーマ細胞の過剰増殖を防ぐために、一定間隔で選択培地、例えば、ＨＡＴ培地を補充した好適な培養培地中で拡大させる。得られたハイブリッド細胞を、次に、所望の抗体、例えば、ヒトＩＬ−２７に結合する抗体の分泌についてスクリーニングし、一部の実施形態では、当業者は、例えば、米国特許第６，３００，０６４号（Ｋｎａｐｐｉｋ  ｅｔ  ａｌ．；Ｍｏｒｐｈｏｓｙｓ  ＡＧ）及びＳｃｈｏｏｎｂｒｏｏｄｔ  ｅｔ  ａｌ．（２００５）Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ  ３３（９）：ｅ８１に記載されるように、非免疫バイアスライブラリから抗ＩＬ−２７抗体を同定することができる。
【０２６１】
一部の実施形態では、本明細書に記載の方法は、例えば、ファージディスプレイ技術、細菌ディスプレイ、酵母表面ディスプレイ、真核生物ウイルスディスプレイ、哺乳動物細胞ディスプレイ、及び無細胞（例えば、リボソームディスプレイ）抗体スクリーニング技術（例えば、Ｅｔｚ  ｅｔ  ａｌ．（２００１）Ｊ  Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ  １８３：６９２４−６９３５；Ｃｏｒｎｅｌｉｓ（２０００）Ｃｕｒｒ  Ｏｐｉｎ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ  １１：４５０−４５４；Ｋｌｅｍｍ  ｅｔ  ａｌ．（２０００）Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ  １４６：３０２５−３０３２；Ｋｉｅｋｅ  ｅｔ  ａｌ．（１９９７）Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇ  １０：１３０３−１３１０；Ｙｅｕｎｇ  ｅｔ  ａｌ．（２００２）Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ  Ｐｒｏｇ  １８：２１２−２２０；Ｂｏｄｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（２０００）Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ  ３２８：４３０−４４４；Ｇｒａｂｈｅｒｒ  ｅｔ  ａｌ．（２００１）Ｃｏｍｂ  Ｃｈｅｍ  Ｈｉｇｈ  Ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔ  Ｓｃｒｅｅｎ  ４：１８５−１９２；Ｍｉｃｈａｅｌ  ｅｔ  ａｌ．（１９９５）Ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒ  ２：６６０−６６８；Ｐｅｒｅｂｏｅｖ  ｅｔ  ａｌ．（２００１）Ｊ  Ｖｉｒｏｌ７５：７１０７−７１１３；Ｓｃｈａｆｆｉｔｚｅｌ  ｅｔ  ａｌ．（１９９９）Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ２３１：１１９−１３５；及びＨａｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．（２０００）Ｎａｔ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ  １８：１２８７−１２９２を参照されたい）を伴うことができる、またはと合わせて使用することができる。
【０２６２】
様々なファージディスプレイ法を使用する抗体を同定するための方法は当該技術分野で公知である。ファージディスプレイ法では、機能的抗体ドメインは、それをコードするポリヌクレオチド配列を運ぶファージ粒子の表面上に提示される。このようなファージを利用して、レパートリーまたはコンビナトリアル抗体ライブラリ（例えば、ヒトまたはマウス）から発現される、Ｆａｂ、Ｆｖ、またはジスルフィド結合安定化Ｆｖ抗体フラグメントなどの抗体の抗原結合ドメインを提示することができる。これらの方法で使用されるファージは、典型的には、ｆｄ及びＭ１３などの繊維状ファージである。抗原結合ドメインは、ファージコートタンパク質ｐＩＩＩ、ｐＶＩＩＩ、またはｐＩＸのいずれかに組換えて融合されたタンパク質として発現される。例えば、Ｓｈｉ  ｅｔ  ａｌ．（２０１０）ＪＭＢ  ３９７：３８５−３９６を参照されたい。本明細書に記載の免疫グロブリンまたはそのフラグメントを作成するために使用できるファージディスプレイ法の例としては、Ｂｒｉｎｋｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．（１９９５）Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  １８２：４１−５０；Ａｍｅｓ  ｅｔ  ａｌ．（１９９５）Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  １８４：１７７−１８６；Ｋｅｔｔｌｅｂｏｒｏｕｇｈ  ｅｔ  ａｌ．（１９９４）Ｅｕｒ  Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ２４：９５２−９５８；Ｐｅｒｓｉｃ  ｅｔ  ａｌ．（１９９７）Ｇｅｎｅ  １８７：９−１８；Ｂｕｒｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．（１９９４）Ａｄｖａｎｃｅｓ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  ５７：１９１−２８０；ならびにＰＣＴ公開番号ＷＯ９０／０２８０９、ＷＯ９１／１０７３７、ＷＯ９２／０１０４７、ＷＯ９２／１８６１９、ＷＯ９３／１１２３６、ＷＯ９５／１５９８２、及びＷＯ９５／２０４０１に開示されるものが挙げられる。好適な方法は、例えば、米国特許第５，６９８，４２６号、同第５，２２３，４０９号、同第５，４０３，４８４号、同第５，５８０，７１７号、同第５，４２７，９０８号、同第５，７５０，７５３号、同第５，８２１，０４７号、同第５，５７１，６９８号、同第５，４２７，９０８号、同第５，５１６，６３７号、同第５，７８０，２２５号、同第５，６５８，７２７号、同第５，７３３，７４３号及び同第５，９６９，１０８号にも記載されている。
【０２６３】
一部の実施形態では、ファージディスプレイ抗体ライブラリは、免疫付与された哺乳動物からのＢ細胞から収集したｍＲＮＡを使用して生成することができる。例えば、Ｂ細胞を含む脾臓細胞試料は、上記のようにＩＬ−２７ポリペプチドを用いて免疫付与したマウスから単離することができる。ｍＲＮＡを細胞から分離し、標準的な分子生物学技術を使用してｃＤＮＡに変換することができる。例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋ  ｅｔ  ａｌ．（１９８９）“Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，２ｎｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，”Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．；Ｈａｒｌｏｗ  ａｎｄ  Ｌａｎｅ（１９８８）、上記；Ｂｅｎｎｙ  Ｋ．Ｃ．Ｌｏ（２００４）、上記；及びＢｏｒｒｅｂａｅｋ（１９９５）、上記を参照されたい。免疫グロブリンの重鎖ポリペプチド及び軽鎖ポリペプチドの可変領域をコードするｃＤＮＡを使用して、ファージディスプレイライブラリを構築する。そのようなライブラリを生成するための方法は、例えば、Ｍｅｒｚ  ｅｔ  ａｌ．（１９９５）Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ６２（１−２）：２１３−９；Ｄｉ  Ｎｉｒｏ  ｅｔ  ａｌ．（２００５）Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｊ  ３８８（Ｐｔ３）：８８９−８９４；及びＥｎｇｂｅｒｇ  ｅｔ  ａｌ．（１９９５）Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｍｏｌ  Ｂｉｏｌ  ５１：３５５−３７６に記載されている。
【０２６４】
一部の実施形態では、選択及びスクリーニングの組み合わせを採用して、目的の抗体を、例えば、ハイブリドーマ由来の抗体の集団またはファージディスプレイ抗体ライブラリから同定することができる。好適な方法が当該技術分野で公知であり、例えば、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ（１９９７）Ｔｒｅｎｄｓ  ｉｎ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １５：６２−７０；Ｂｒｉｎｋｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．（１９９５）、上記；Ａｍｅｓ  ｅｔ  ａｌ．（１９９５）、上記；Ｋｅｔｔｌｅｂｏｒｏｕｇｈ  ｅｔ  ａｌ．（１９９４）、上記；Ｐｅｒｓｉｃ  ｅｔ  ａｌ．（１９９７）、上記；及びＢｕｒｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．（１９９４）、上記に記載されている。例えば、それぞれがバクテリオファージコートタンパク質（例えば、Ｍ１３ファージのｐＩＩＩ、ｐＶＩＩＩ、またはｐＩＸ）及び異なる抗原複合領域の融合タンパク質をコードする複数のファージミドベクターが、標準的な分子生物学技術を使用して産生され、細菌（例えば、Ｅ．ｃｏｌｉ）の集団へと導入される。細菌におけるバクテリオファージの発現は、一部の実施形態では、ヘルパーファージの使用を必要とし得る。一部の実施形態では、ヘルパーファージは必要とされない（例えば、Ｃｈａｓｔｅｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，（２００６）Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ  ３４（２１）：ｅ１４５を参照されたい）。細菌から産生されたファージを回収し、例えば、固体支持体に結合した（固定化された）標的抗原に接触させる。ファージを溶液中の抗原に接触させてもよく、続いて、複合体を固体支持体に結合させる。
【０２６５】
上記の方法を使用してスクリーニングされた抗体の亜集団は、当該技術分野で公知の任意の免疫学または生化学に基づく方法を使用して、特定の抗原（例えば、ヒトＩＬ−２７）に対するそれらの特異性及び結合親和性について特徴評価することができる。例えば、ＩＬ−２７への抗体の特異的結合は、例えば、上記のＥＬＩＳＡアッセイ、ＳＰＲアッセイ、免疫沈降アッセイ、アフィニティークロマトグラフィー、及び平衡透析などであるがこれらに限定されない免疫学または生化学に基づく方法を使用して決定され得る。抗体の免疫特異的結合及び交差反応性を解析するために使用できるイムノアッセイには、ウエスタンブロット、ＲＩＡ、ＥＬＩＳＡ（酵素結合免疫吸着アッセイ）などの技術を使用する競合及び非競合アッセイ系、「サンドイッチ」イムノアッセイ、免疫沈降アッセイ、免疫拡散アッセイ、凝集アッセイ、補体固定アッセイ、免疫放射定量アッセイ、蛍光イムノアッセイならびにプロテインＡイムノアッセイが含まれるが、これらに限定されない。このようなアッセイは慣習的であり、当該技術分野において周知である。
【０２６６】
上記の方法を使用して、例えば、抗ＩＬ−２７抗体が、完全長、ヒトＩＬ−２７及び／またはＩＬ−２７タンパク質に結合しないか否かを決定することもできることが理解されたい。
【０２６７】
選択されたＣＤＲアミノ酸配列が短い配列（例えば、１０〜１５アミノ酸長未満）である実施形態では、ＣＤＲをコードする核酸は、例えば、Ｓｈｉｒａｉｓｈｉ  ｅｔ  ａｌ．（２００７）Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ  Ｓｅｒｉｅｓ  ５１（１）：１２９−１３０及び米国特許第６，９９５，２５９号に記載のように化学合成することができる。アクセプター抗体をコードする所与の核酸配列に関しては、ＣＤＲをコードする核酸配列の領域は、標準的な分子生物学技術を使用して化学合成された核酸で置き換えることができる。化学合成された核酸の５’及び３’末端を合成して、核酸をドナー抗体の可変領域をコードする核酸へとクローニングする際に使用するための粘着末端制限酵素部位を含むことができる。
【０２６８】
一部の実施形態では、本明細書に記載の抗ＩＬ−２７抗体は、その対応する未改変の定常領域と比較してエフェクター機能が低下した（または有さない）改変された重鎖定常領域を含む。抗ＩＬ−２７抗体の定常領域を伴うエフェクター機能は、定常またはＦｃ領域の特性を改変することにより調節され得る。改変されたエフェクター機能は、例えば、以下の活性：抗体依存性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）、補体依存性細胞傷害性（ＣＤＣ）、アポトーシス、１つまたは複数のＦｃ受容体への結合、及び炎症促進反応のうちの１つまたは複数の調節を含む。調節は、未改変形態の定常領域の活性と比較して、改変定常領域を含有する対象抗体によって呈されるエフェクター機能活性の増加、低減、または排除を指す。特定の実施形態では、調節は、活性が廃止されるか、または完全に存在しない状況を含む。
【０２６９】
一実施形態では、本明細書に記載の抗ＩＬ−２７抗体は、ＩｇＧ４重鎖定常領域を含む。一実施形態では、ＩｇＧ４重鎖定常領域は、野生型ＩｇＧ４重鎖定常領域である。別の実施形態では、ＩｇＧ４定常領域は、突然変異、例えば、ＥＵナンバリング（Ｋａｂａｔ，Ｅ．Ａ．，ｅｔ  ａｌ．，上記）に従って、例えば、Ｓ２２８Ｐ及びＬ２３５ＥまたはＬ２３５Ａの一方または両方を含む。野生型及び突然変異型ＩｇＧ４定常領域の本開示の抗体で使用するための代表的な配列を表１２に記載する。一実施形態では、本明細書に記載の抗ＩＬ−２７抗体は、ＩｇＧ１定常領域を含む。一実施形態では、ＩｇＧ１重鎖定常領域は、野生型ＩｇＧ１重鎖定常領域である。別の実施形態では、ＩｇＧ１重鎖定常領域は、突然変異を含む。野生型及び突然変異型ＩｇＧ４定常領域の本開示の抗体で使用するための代表的な配列を表１２に記載する。
【０２７０】
改変ＦｃＲ結合親和性及び／またはＡＤＣＣ活性及び／または改変ＣＤＣ活性を有する改変定常領域は、未改変形態の定常領域と比較して、増強または減少したＦｃＲ結合活性及び／またはＡＤＣＣ活性及び／またはＣＤＣ活性を有するポリペプチドである。ＦｃＲへの結合の増加を提示する改変定常領域は、未改変ポリペプチドよりも大きい親和性で少なくとも１つのＦｃＲと結合する。ＦｃＲへの結合の低減を提示する改変定常領域は、未改変形態の定常領域よりも低い親和性で少なくとも１つのＦｃＲと結合する。ＦｃＲへの結合の低減を提示するかかる変異体は、ＦｃＲへの認識できる結合をほとんどまたは全く有しない場合があり、例えば、ＦｃＲへの天然配列免疫グロブリン定常領域またはＦｃ領域の結合レベルと比較して、０〜５０％（例えば、５０、４９、４８、４７、４６、４５、４４、４３、４２、４１、４０、３９、３８、３７、３６、３５、３４、３３、３２、３１、３０、２９、２８、２７、２６、２５、２４、２３、２２、２１、２０、１９、１８、１７、１６、１５、１４、１３、１２、１１、１０、９、８、７、６、５、４、３、２、または１％未満）のＦｃＲへの結合である。同様に、調節されたＡＤＣＣ及び／またはＣＤＣ活性を提示する改変定常領域は、未改変定常領域と比較して、増加または低下したＡＤＣＣ及び／またはＣＤＣ活性を呈し得る。例えば、一部の実施形態では、改変定常領域を含む抗ＩＬ−２７抗体は、未改変形態の定常領域のおよそ０〜５０％（例えば、５０、４９、４８、４７、４６、４５、４４、４３、４２、４１、４０、３９、３８、３７、３６、３５、３４、３３、３２、３１、３０、２９、２８、２７、２６、２５、２４、２３、２２、２１、２０、１９、１８、１７、１６、１５、１４、１３、１２、１１、１０、９、８、７、６、５、４、３、２、または１％未満）のＡＤＣＣ及び／またはＣＤＣ活性を呈し得る。低下したＡＤＣＣ及び／またはＣＤＣを提示する改変定常領域を含む本明細書に記載の抗ＩＬ−２７抗体は、低下したＡＤＣＣ及び／またはＣＤＣ活性を呈するか、または全く呈さない場合がある。
【０２７１】
一部の実施形態では、本明細書に記載の抗ＩＬ−２７抗体は、低下したエフェクター機能を呈するか、または全く呈さない。一部の実施形態では、抗ＩＬ−２７抗体は、ハイブリッド定常領域またはその一部、例えば、Ｇ２／Ｇ４ハイブリッド定常領域を含む（例えば、Ｂｕｒｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．（１９９２）Ａｄｖ  Ｉｍｍｕｎ  ５１：１−１８；Ｃａｎｆｉｅｌｄ  ｅｔ  ａｌ．（１９９１）Ｊ  Ｅｘｐ  Ｍｅｄ  １７３：１４８３−１４９１；及びＭｕｅｌｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（１９９７）Ｍｏｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ３４（６）：４４１−４５２を参照されたい）。上記を参照されたい。
【０２７２】
一部の実施形態では、抗ＩＬ−２７抗体は、増強または低下した補体依存性細胞傷害性（ＣＤＣ）を呈する改変定常領域を含有し得る。調節されたＣＤＣ活性は、１つまたは複数のアミノ酸置換、挿入、または欠失を、抗体のＦＣ領域に導入することによって達成され得る。例えば、米国特許第６，１９４，５５１号を参照されたい。あるいはまたは加えて、システイン残基（複数可）を、Ｆｃ領域に導入し、それにより、この領域における鎖間ジスルフィド結合形成を可能にし得る。このように生成されたホモ二量体抗体は、改善もしくは低下した内部移行能力及び／または増加したもしくは低減した補体媒介性細胞殺滅性を有し得る。例えば、Ｃａｒｏｎ  ｅｔ  ａｌ．（１９９２）Ｊ  Ｅｘｐ  Ｍｅｄ  １７６：１１９１−１１９５及びＳｈｏｐｅｓ（１９９２）Ｉｍｍｕｎｏｌ  １４８：２９１８−２９２２；ＰＣＴ公開番号ＷＯ９９／５１６４２及びＷＯ９４／２９３５１；Ｄｕｎｃａｎ  ａｎｄ  Ｗｉｎｔｅｒ（１９８８）Ｎａｔｕｒｅ  ３２２：７３８−４０；ならびに米国特許第５，６４８，２６０号及び同第５，６２４，８２１号を参照されたい。
【０２７３】
組換え抗体発現及び精製
本明細書に記載の抗体またはその抗原結合フラグメントは、分子生物学及びタンパク質化学の技術分野において公知の様々な技術を使用して産生することができる。例えば、抗体の重鎖ポリペプチド及び軽鎖ポリペプチドの一方または両方をコードする核酸は、例えば、プロモータ配列、リボソーム結合部位、転写開始及び停止配列、翻訳開始及び停止配列、転写ターミネータシグナル、ポリアデニル化シグナル、ならびにエンハンサまたはアクチベータ配列を含む、転写及び翻訳制御配列を含有する発現ベクターに挿入することができる。制御配列は、プロモータ、ならびに転写開始及び停止配列を含む。加えて、発現ベクターは、それが２つの異なる生物において、例えば、発現のために哺乳動物または昆虫細胞において、ならびにクローニング及び増幅のために原核宿主において維持され得るように、複数の複製系を含むことができる。
【０２７４】
いくつかの可能性のあるベクター系が、哺乳動物細胞中の核酸からのクローン化された重鎖ポリペプチド及び軽鎖ポリペプチドの発現のために利用可能である。ベクターの１つのクラスは、所望の遺伝子配列の宿主細胞ゲノムへの統合に依存する。安定的に統合されたＤＮＡを有する細胞は、Ｅ．ｃｏｌｉ  ｇｐｔ（Ｍｕｌｌｉｇａｎ  ａｎｄ  Ｂｅｒｇ（１９８１）Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ  ７８：２０７２）またはＴｎ５ｎｅｏ（Ｓｏｕｔｈｅｒｎ  ａｎｄ  Ｂｅｒｇ（１９８２）Ｍｏｌ  Ａｐｐｌ  Ｇｅｎｅｔ  １：３２７）などの薬物耐性遺伝子を同時に導入することによって選択することができる。選択可能なマーカー遺伝子は、発現されるＤＮＡ遺伝子配列に連結され得るか、または同時形質移入によって同じ細胞に導入され得るかのいずれかである（Ｗｉｇｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（１９７９）Ｃｅｌｌ  １６：７７）。ベクターの２番目のクラスは、染色体外プラスミドに自律複製能力を与えるＤＮＡエレメントを利用する。これらのベクターは、動物ウイルス、例えばウシパピローマウイルス（Ｓａｒｖｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（１９８２）Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ，７９：７１４７）、サイトメガロウイルス、ポリオーマウイルス（Ｄｅａｎｓ  ｅｔ  ａｌ．（１９８４）Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ  ８１：１２９２）、またはＳＶ４０ウイルス（Ｌｕｓｋｙ  ａｎｄ  Ｂｏｔｃｈａｎ（１９８１）Ｎａｔｕｒｅ  ２９３：７９）から誘導することができる。
【０２７５】
発現ベクターは、核酸のその後の発現のために好適な様式で細胞に導入することができる。導入方法は、以下で説明するように、標的とする細胞の種類によって大きく左右される。例示的な方法としては、ＣａＰＯ４沈殿、リポソーム融合、カチオン性リポソーム、エレクトロポレーション、ウイルス感染、デキストラン媒介トランスフェクション、ポリブレン媒介トランスフェクション、プロトプラスト融合、及び直接マイクロインジェクションが挙げられる。
【０２７６】
抗体またはその抗原結合フラグメントの発現に適切な宿主細胞には、酵母、細菌、昆虫、植物、及び哺乳動物細胞が含まれる。特に興味深いのは、Ｅ．ｃｏｌｉなどの細菌、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ及びＰｉｃｈｉａ  ｐａｓｔｏｒｉｓなどの真菌、ＳＦ９などの昆虫細胞、哺乳動物細胞株（例えば、ヒト細胞株）、ならびに初代細胞株である。
【０２７７】
一部の実施形態では、抗体またはそのフラグメントは、トランスジェニック動物（例えば、トランスジェニック哺乳動物）において発現することができる、及びそれから精製することができる。例えば、抗体は、例えば、Ｈｏｕｄｅｂｉｎｅ（２００２）Ｃｕｒｒ  Ｏｐｉｎ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ  １３（６）：６２５−６２９；ｖａｎ  Ｋｕｉｋ−Ｒｏｍｅｉｊｎ  ｅｔ  ａｌ．（２０００）Ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ  Ｒｅｓ  ９（２）：１５５−１５９；及びＰｏｌｌｏｃｋ  ｅｔ  ａｌ．（１９９９）Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ２３１（１−２）：１４７−１５７に記載されるように、トランスジェニック非ヒト哺乳動物（例えば、げっ歯類）において産生することができ、乳汁から単離することができる。
【０２７８】
抗体及びそのフラグメントは、抗体またはフラグメントをコードする核酸を含有する発現ベクターで形質転換された宿主細胞を、タンパク質の発現を可能にするのに十分な条件下及び時間量をかけて培養することにより、細胞から産生することができる。タンパク質発現のためのそのような条件は、発現ベクター及び宿主細胞の選択によって変動し、慣例的な実験を通して当業者によって容易に確認されるだろう。例えば、Ｅ．ｃｏｌｉで発現された抗体は、封入体からリフォールディングすることができる（例えば、Ｈｏｕ  ｅｔ  ａｌ．（１９９８）Ｃｙｔｏｋｉｎｅ  １０：３１９−３０を参照されたい）。細菌発現系及びそれらの使用方法は、当該技術分野で周知である（Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ、及びＭｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ−−Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ−−３ｒｄ  Ｅｄ．，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（２００１）を参照されたい）。コドン、好適な発現ベクター及び好適な宿主細胞の選択は、いくつかの要因に応じて変動し得、必要に応じて容易に最適化され得る。本明細書に記載の抗体（またはそのフラグメント）は、哺乳動物細胞、または他の発現系、例えば限定されないが酵母、バキュロウイルス、及びｉｎ  ｖｉｔｒｏ発現系において発現することができる（例えば、Ｋａｓｚｕｂｓｋａ  ｅｔ  ａｌ．（２０００）Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ａｎｄ  Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ  １８：２１３−２２０を参照されたい）。
【０２７９】
発現後、抗体及びそのフラグメントを単離することができる。抗体またはそのフラグメントは、試料中に存在する他の成分に応じて、当業者に公知の様々な方法において単離または精製することができる。標準的な精製方法には、電気泳動、分子、免疫学、ならびにクロマトグラフィー技術、例えばイオン交換、疎水性、アフィニティー、及び逆相ＨＰＬＣクロマトグラフィーが含まれる。例えば、抗体は、標準的な抗抗体カラム（例えば、プロテインＡまたはプロテインＧカラム）を使用して精製することができる。タンパク質濃縮と組み合わせた、限外濾過及びダイアフィルトレーション技術も有用である。例えば、Ｓｃｏｐｅｓ（１９９４）“Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ，３ｒｄ  ｅｄｉｔｉｏｎ，”Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ  Ｃｉｔｙ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋを参照されたい。必要な精製の程度は、所望の用途に応じて変動するだろう。一部の例では、発現された抗体またはそのフラグメントの精製は必要ないだろう。
【０２８０】
精製された抗体またはそのフラグメントの収率または純度を決定するための方法は、当該技術分野で公知であり、例えば、ブラッドフォードアッセイ、紫外分光法、ビウレットタンパク質アッセイ、ローリータンパク質アッセイ、アミドブラックタンパク質アッセイ、高圧液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、質量分析（ＭＳ）、及びゲル電気泳動法（例えば、クマシーブルーまたはコロイド銀染色などのタンパク質染色を使用する）が含まれる。
【０２８１】
抗体またはその抗原結合フラグメントの修飾
抗体またはその抗原結合フラグメントは、それらの発現及び精製の後に修飾することができる。修飾は、共有結合修飾または非共有結合修飾であることができる。そのような修飾は、例えば、ポリペプチドの標的アミノ酸残基を、選択された側鎖または末端残基と反応することができる有機誘導体化剤と反応させることによって、抗体またはフラグメントに導入することができる。修飾のための好適な部位は、例えば、抗体またはフラグメントの構造分析またはアミノ酸配列分析を含む、様々な基準のいずれかを使用して選択することができる。
【０２８２】
一部の実施形態では、抗体またはその抗原結合フラグメントは、異種部分にコンジュゲートすることができる。異種部分は、例えば、異種ポリペプチド、治療剤（例えば、毒素または薬物）、または検出可能な標識、例えば、限定されないが、放射性標識、酵素標識、蛍光標識、重金属標識、発光標識、またはビオチンもしくはストレプトアビジンなどの親和性タグであることができる。好適な異種ポリペプチドには、例えば、抗体またはフラグメントの精製に使用するための、抗原タグ（ＦＬＡＧ（ＤＹＫＤＤＤＤＫ（配列番号４０５））、ポリヒスチジン（６−Ｈｉｓ；ＨＨＨＨＨＨ（配列番号４０６）、ヘマグルチニン（ＨＡ；ＹＰＹＤＶＰＤＹＡ（配列番号４０７））、グルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼ（ＧＳＴ）、またはマルトース結合タンパク質（ＭＢＰ））が含まれる。異種ポリペプチドには、診断または検出可能マーカーとして有用であるポリペプチド（例えば、酵素）、例えば、ルシフェラーゼ、蛍光タンパク質（例えば、緑色蛍光タンパク質（ＧＦＰ））、またはクロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ（ＣＡＴ）も含まれる。好適な放射性標識には、例えば、３２Ｐ、３３Ｐ、１４Ｃ、１２５Ｉ、１３１Ｉ、３５Ｓ、及び３Ｈが含まれる。好適な蛍光標識には、限定されないが、フルオレセイン、フルオレセインイソチオシアネート（ＦＩＴＣ）、緑色蛍光タンパク質（ＧＦＰ）、ＤｙＬｉｇｈｔ（商標）４８８、フィコエリトリン（ＰＥ）、ヨウ化プロピジウム（ＰＩ）、ＰｅｒＣＰ、ＰＥ−Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ（登録商標）７００、Ｃｙ５、アロフィコシアニン、及びＣｙ７が含まれる。発光標識には、例えば、様々な発光ランタニド（例えば、ユーロピウムまたはテルビウム）キレートのいずれかが含まれる。例えば、好適なユーロピウムキレートには、ジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）またはテトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸（ＤＯＴＡ）のユーロピウムキレートが含まれる。酵素標識には、例えば、アルカリホスファターゼ、ＣＡＴ、ルシフェラーゼ、及び西洋ワサビペルオキシダーゼが含まれる。
【０２８３】
２つのタンパク質（例えば、抗体及び異種部分）は、いくつかの公知の化学的架橋剤のいずれかを使用して架橋することができる。そのような架橋剤の例は、２つのアミノ酸残基を「障害された」ジスルフィド結合を含む連結を介して連結するものである。これらの連結において、架橋単位内のジスルフィド結合は、例えば、還元型グルタチオンまたは酵素ジスルフィド還元酵素の作用による還元から、（ジスルフィド結合の両側の障害基によって）保護されている。ある好適な試薬、４−スクシンイミジルオキシカルボニル−α−メチル−α（２−ピリジルジチオ）トルエン（ＳＭＰＴ）は、一方のタンパク質の末端リジン及びもう一方の末端システインを利用して、２つのタンパク質間にこのような結合を形成する。各タンパク質上の異なるカップリング部分によって架橋するヘテロ二官能性試薬も使用できる。他の有用な架橋剤には、限定されないが、２つのアミノ基を連結する試薬（例えば、Ｎ−５−アジド−２−ニトロベンゾイルオキシスクシンイミド）、２つのスルフヒドリル基を連結する試薬（例えば、１，４−ビス−マレイミドブタン）、アミノ基及びスルフヒドリル基を連結する試薬（例えば、ｍ−マレイミドベンゾイル−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル）、アミノ基及びカルボキシル基を連結する試薬（例えば、４−［ｐ−アジドサリチルアミド］ブチルアミン）、ならびにアミノ基及びアルギニンの側鎖に存在するグアニジニウム基を連結する試薬（例えば、ｐ−アジドフェニルグリオキサール一水和物）が含まれる。
【０２８４】
一部の実施形態では、放射性標識は、抗体のアミノ酸骨格に直接コンジュゲートすることができる。あるいは、放射性標識を、遊離アミノ基に結合して関連タンパク質のメタヨードフェニル（ｍＩＰ）誘導体を形成するより大きな分子（例えば、メタ−［１２５Ｉ］ヨードフェニル−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（［１２５Ｉ］ｍＩＰＮＨＳ）中の１２５Ｉ）（例えば、Ｒｏｇｅｒｓ  ｅｔ  ａｌ．（１９９７）Ｊ  Ｎｕｃｌ  Ｍｅｄ  ３８：１２２１−１２２９を参照されたい）またはキレート（例えば、ＤＯＴＡもしくはＤＴＰＡ）の一部として含めることができ、次にそれをタンパク質骨格に結合する。放射性標識またはそれらを含有するより大きな分子／キレートを本明細書に記載の抗体または抗原結合フラグメントにコンジュゲートする方法は当該技術分野で公知である。そのような方法は、放射性標識またはキレートのタンパク質への結合を促進する条件（例えば、ｐＨ、塩濃度及び／または温度）下でタンパク質を放射性標識とインキュベートすることを伴う（例えば、米国特許第６，００１，３２９号を参照されたい）。
【０２８５】
蛍光標識（「フルオロフォア」と称する場合がある）をタンパク質（例えば、抗体）にコンジュゲートするための方法はタンパク質化学の分野において公知である。例えば、フルオロフォアを、フルオロフォアに付着したスクシンイミジル（ＮＨＳ）エステルまたはテトラフルオロフェニル（ＴＦＰ）エステル部分を使用してタンパク質の遊離アミノ基（例えばリジンの）またはスルフヒドリル基（例えばシステイン）にコンジュゲートすることができる。一部の実施形態では、フルオロフォアを、スルホ−ＳＭＣＣなどのヘテロ二官能性架橋剤部分にコンジュゲートすることができる。好適なコンジュゲート方法は、抗体またはそのフラグメントを、フルオロフォアのタンパク質への結合を促進する条件下で、フルオロフォアとインキュベートすることを伴う。例えば、Ｗｅｌｃｈ  ａｎｄ  Ｒｅｄｖａｎｌｙ（２００３）“Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ：Ｒａｄｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，”Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ（ＩＳＢＮ  ０４７１４９５６０３）を参照されたい。
【０２８６】
一部の実施形態では、抗体またはフラグメントは、例えば、循環中、例えば、血液、血清または他の組織中の抗体の安定化及び／または保持を改善する部分を用いて修飾することができる。例えば、抗体またはフラグメントは、例えば、Ｌｅｅ  ｅｔ  ａｌ．（１９９９）Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇ  Ｃｈｅｍ  １０（６）：９７３−８；Ｋｉｎｓｔｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（２００２）Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｉｅｓ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  ５４：４７７−４８５；及びＲｏｂｅｒｔｓ  ｅｔ  ａｌ．（２００２）Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  ５４：４５９−４７６に記載のようにＰＥＧ化する、またはＨＥＳ化することができる（Ｆｒｅｓｅｎｉｕｓ  Ｋａｂｉ，Ｇｅｒｍａｎｙ；例えば、Ｐａｖｉｓｉｃ  ｅｔ  ａｌ．（２０１０）Ｉｎｔ  Ｊ  Ｐｈａｒｍ  ３８７（１−２）：１１０−１１９を参照されたい）。安定化部分は、抗体（またはフラグメント）の安定性または保持を少なくとも１．５（例えば、少なくとも２、５、１０、１５、２０、２５、３０、４０または５０以上）倍改善することができる。
【０２８７】
一部の実施形態では、本明細書に記載の抗体またはその抗原結合フラグメントは、グリコシル化することができる。一部の実施形態では、本明細書に記載の抗体またはその抗原結合フラグメントは、抗体またはフラグメントのグリコシル化が低下または存在しないように、酵素処理もしくは化学処理に供されるか、または細胞から産生されることができる。グリコシル化が低下した抗体を産生するための方法は、当該技術分野で公知であり、例えば、米国特許第６，９３３，３６８号；Ｗｒｉｇｈｔ  ｅｔ  ａｌ．（１９９１）ＥＭＢＯ  Ｊ  １０（１０）：２７１７−２７２３；及びＣｏ  ｅｔ  ａｌ．（１９９３）Ｍｏｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ３０：１３６１に記載されている。
【０２８８】
医薬組成物及び製剤
ある特定の実施形態では、本発明は、抗ＩＬ−２７抗体を、医薬的に許容可能な希釈剤、担体、可溶化剤、乳化剤、防腐剤及び／またはアジュバントと共に含む医薬組成物を提供する。
【０２８９】
ある特定の実施形態では、許容可能な製剤材料は、好ましくは、採用される投与量及び濃度にてレシピエントに対して非毒性である。ある特定の実施形態では、製剤材料（複数可）は、皮下及び／または静脈内投与用である。ある特定の実施形態では、医薬組成物は、例えば、組成物のｐＨ、オスモル濃度、粘度、透明度、色、等張性、匂い、滅菌性、安定性、溶解速度もしくは放出速度、吸着または浸透を改変する、維持する、または保存するための製剤材料を含有することができる。ある特定の実施形態では、好適な製剤材料には、アミノ酸（グリシン、グルタミン、アスパラギン、アルギニン、またはリジンなど）；抗菌剤；酸化防止剤（アスコルビン酸、亜硫酸ナトリウム、または亜硫酸水素ナトリウムなど）；緩衝剤（ホウ酸塩、重炭酸塩、トリス−ＨＣｌ、クエン酸塩、リン酸塩または他の有機酸など）；増量剤（マンニトールまたはグリシンなど）、キレート剤（エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）など）；錯化剤（カフェイン、ポリビニルピロリドン、ベータ−シクロデキストリン、またはヒドロキシプロピル−ベータ−シクロデキストリンなど）；充填剤；単糖；二糖；ならびに他の炭水化物（グルコース、マンノース、またはデキストリン類など）；タンパク質（血清アルブミン、ゼラチン、または免疫グロブリンなど）；着色剤；香味剤及び希釈剤；乳化剤；親水性ポリマー（ポリビニルピロリドンなど）；低分子量ポリペプチド；塩形成対イオン（ナトリウムなど）；防腐剤（塩化ベンザルコニウム、安息香酸、サリチル酸、チメロサール、フェネチルアルコール、メチルパラベン、プロピルパラベン、クロルヘキシジン、ソルビン酸、または過酸化水素など）；溶媒（グリセリン、プロピレングリコール、またはポリエチレングリコールなど）；糖アルコール（マンニトールまたはソルビトールなど）；懸濁剤；界面活性剤もしくは湿潤剤（プルロニック（登録商標）、ＰＥＧ、ソルビタンエステル、ポリソルベート２０、ポリソルベート８０などのポリソルベート、トリトン、トロメタミン、レシチン、コレステロール、チロキサパール（ｔｙｌｏｘａｐａｌ）など）；安定性増強剤（スクロースまたはソルビトールなど）；等張化増強剤（アルカリ金属ハロゲン化物、好ましくは塩化ナトリウムまたは塩化カリウム、マンニトールソルビトールなど）；送達ビヒクル；希釈剤；賦形剤、及び／または医薬アジュバントが含まれるが、これらに限定されない。（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１８ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ａ．Ｒ．Ｇｅｎｎａｒｏ，ｅｄ．，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ（１９９５）。ある特定の実施形態では、製剤は、ＰＢＳ；２０ｍＭ  ＮａＯＡＣ、ｐＨ５．２、５０ｍＭ  ＮａＣｌ；及び／または１０ｍＭ  ＮＡＯＡＣ、ｐＨ５．２、９％スクロースを含む。ある特定の実施形態では、最適な医薬組成物は、例えば、意図される投与経路、送達形式及び所望の投与量に応じて、当業者によって決定されるだろう。例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、上記を参照されたい。ある特定の実施形態では、そのような組成物は、抗ＩＬ−２７抗体の物理状態、安定性、ｉ���  ｖｉｖｏ放出速度及び／またはｉｎ  ｖｉｖｏクリアランス速度に影響を及ぼし得る。
【０２９０】
ある特定の実施形態では、医薬組成物中の主要なビヒクルまたは担体は、本質的に水性または非水性のいずれでもあることができる。例えば、ある特定の実施形態では、好適なビヒクルまたは担体は、注射用水、生理食塩水溶液または人工脳脊髄液であることができ、非経口投与用の組成物に一般的な他の材料が補充されている可能性がある。ある特定の実施形態では、生理食塩水は、等張リン酸緩衝生理食塩水を含む。ある特定の実施態様では、中性緩衝生理食塩水または血清アルブミンと混合された生理食塩水が、さらなる例示的なビヒクルである。ある特定の実施形態では、医薬組成物は、約ｐＨ７．０〜８．５のトリス緩衝液、または約ｐＨ４．０〜５．５の酢酸緩衝液を含み、これらはさらにソルビトールまたはその好適な代替物を含むことができる。ある特定の実施形態では、抗ＩＬ−２７抗体を含む組成物は、所望の純度を有する選択された組成物を、凍結乾燥ケーキまたは水溶液の形態の任意選択の製剤作用物質（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、上記）と混合することによって、貯蔵用に調製することができる。さらに、ある特定の実施形態では、抗ＩＬ−２７抗体を含む組成物は、スクロースなどの適切な賦形剤を使用して、凍結乾燥物として製剤化することができる。
【０２９１】
ある特定の実施形態では、医薬組成物は、非経口送達用に選択することができる。ある特定の実施形態では、組成物は、吸入または消化管を通じた送達、例えば経口用に選択することができる。そのような医薬的に許容可能な組成物の調製は、当業者の能力の範囲内である。
【０２９２】
ある特定の実施形態では、製剤成分は、投与部位に対して許容可能な濃度で存在する。ある特定の実施形態では、緩衝剤を使用して、組成物を生理学的ｐＨまたはわずかに低いｐＨ、典型的には約５〜約８のｐＨ範囲内に維持する。
【０２９３】
ある特定の実施形態では、非経口投与が企図される場合、治療組成物は、医薬的に許容可能なビヒクル中に、抗ＩＬ−２７抗体を含む、発熱物質を含まない非経口的に許容可能な水溶液の形態であり得る。ある特定の実施形態では、非経口注射用のビヒクルは、抗ＩＬ−２７抗体が滅菌等張性溶液として製剤化され、適正に保存される滅菌蒸留水である。ある特定の実施形態では、調製は、所望の分子の、その後デポ注射を介して送達することができる産物の制御放出または持続放出を提供できる作用物質、例えば、注射可能なマイクロスフェア、生体浸食性粒子、ポリマー化合物（例えば、ポリ乳酸またはポリグリコール酸）、ビーズまたはリポソームなどとの製剤化を伴う。ある特定の実施形態では、ヒアルロン酸も使用することができ、循環中の持続期間を促進する効果を有することができる。ある特定の実施形態では、移植可能な薬物送達デバイスを使用して、所望の分子を導入することができる。
【０２９４】
ある特定の実施形態では、医薬組成物は、吸入用に製剤化され得る。ある特定の実施形態では、抗ＩＬ−２７抗体は、吸入用乾燥粉末として製剤化され得る。ある特定の実施形態では、抗ＩＬ−２７抗体を含む吸入溶液は、エアロゾル送達のための噴霧剤と共に製剤化され得る。ある特定の実施形態では、溶液を噴霧化することができる。肺投与は、ＰＣＴ出願番号ＰＣＴ／ＵＳ９４／００１８７５においてさらに記載されており、これは化学的に修飾されたタンパク質の肺送達について記載している。
【０２９５】
ある特定の実施形態では、製剤を経口投与できることが企図される。ある特定の実施形態では、この様式で投与される抗ＩＬ−２７抗体は、錠剤及びカプセルなどの固体剤形の配合において慣習的に使用される担体を用いて、または用いずに製剤化され得る。ある特定の実施形態では、カプセルは、バイオアベイラビリティが最大化され、前全身分解が最小化されるときに、胃腸管内のポイントで製剤の活性部分を放出するように設計され得る。ある特定の実施形態では、抗ＩＬ−２７抗体の吸収を促進するために、少なくとも１つの追加の作用物質を含めることができる。ある特定の実施形態では、希釈剤、香味剤、低融点ワックス、植物油、潤滑剤、懸濁剤、錠剤崩壊剤、及び結合剤も採用することができる。
【０２９６】
ある特定の実施形態では、医薬組成物は、錠剤の製造に好適な非毒性の賦形剤との混合物中に有効量の抗ＩＬ−２７抗体を伴うことができる。ある特定の実施形態では、錠剤を滅菌水または別の適切なビヒクルに溶解することにより、溶液を単位剤形にて調製することができる。ある特定の実施形態では、好適な賦形剤には、不活性希釈剤、例えば炭酸カルシウム、炭酸ナトリウムもしくは炭酸水素ナトリウム、ラクトース、もしくはリン酸カルシウム；または結合剤、例えばデンプン、ゼラチン、もしくはアラビアゴム；または潤滑剤、例えばステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、もしくはタルクなどが含まれるがこれらに限定されない。
【０２９７】
抗ＩＬ−２７抗体を持続送達製剤または制御送達製剤中に伴う製剤を含む、追加的な医薬組成物は、当業者には明らかだろう。ある特定の実施形態では、リポソーム担体、生体浸食性微粒子または多孔質ビーズ及びデポ注射などの様々な他の持続送達手段または制御送達手段を製剤化するための技術も当業者には公知である。例えば、ＰＣＴ出願番号ＰＣＴ／ＵＳ９３／００８２９号を参照されたく、これは、医薬組成物の送達のための多孔質ポリマー微粒子の制御放出について記載している。ある特定の実施形態では、持続放出調製物は、半透性ポリマーマトリックスを、造形品、例えば、フィルム、またはマイクロカプセルの形態で含み得る。持続放出マトリックスには、ポリエステル、ヒドロゲル、ポリラクチド（米国特許第３，７７３，９１９号及びＥＰ０５８，４８１）、Ｌ−グルタミン酸及びガンマエチル−Ｌ−グルタメートの共重合体（Ｓｉｄｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｐｏｌｙｍｅｒｓ，２２：５４７−５５６（１９８３））、ポリ（２−ヒドロキシエチル−メタクリレート）（Ｌａｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｍｅｄ．Ｍａｔｅｒ．Ｒｅｓ．，１５：１６７−２７７（１９８１）及びＬａｎｇｅｒ，Ｃｈｅｍ．Ｔｅｃｈ．，１２：９８−１０５（１９８２））、エチレン酢酸ビニル（Ｌａｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，上記）またはポリ−Ｄ（−）−３−ヒドロキシ酪酸（ＥＰ１３３，９８８）が含まれる。ある特定の実施形態では、持続放出組成物は、当該技術分野で公知のいくつかの方法のいずれかによって調製され得るリポソームも含むことができる。例えば、Ｅｐｐｓｔｅｉｎ  ｅｔ  ａｌ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８２：３６８８−３６９２（１９８５）；ＥＰ０３６，６７６；ＥＰ０８８，０４６及びＥＰ１４３，９４９を参照されたい。
【０２９８】
ｉｎ  ｖｉｖｏ投与に使用される医薬組成物は、典型的には滅菌である。ある特定の実施形態では、これは、滅菌濾過膜を通す濾過によって達成することができる。ある特定の実施形態では、組成物が凍結乾燥される場合、この方法を使用する滅菌は、凍結乾燥及び再構成の前後で行うことができる。ある特定の実施形態では、非経口投与用の組成物は、凍結乾燥形態または溶液にて保存することができる。ある特定の実施形態では、非経口組成物は、一般的に、滅菌アクセスポートを有する容器、例えば、皮下注射針によって穿刺可能なストッパーを有する静脈内輸液バッグまたはバイアルに入れられる。
【０２９９】
ある特定の実施形態では、医薬組成物は製剤化されると、溶液、懸濁液、ゲル、乳濁液、固体として、または脱水もしくは凍結乾燥粉末として滅菌バイアル中に保存することができる。ある特定の実施形態では、そのような製剤は、すぐに使用できる形態または投与前に再構成される形態（例えば、凍結乾燥）のいずれかで保存することができる。
【０３００】
ある特定の実施形態では、単回投与単位を産生するためのキットを提供する。ある特定の実施形態では、キットは、乾燥タンパク質を有する第一の容器及び水性製剤を有する第二の容器の両方を含有することができる。ある特定の実施形態では、単一チャンバー及びマルチチャンバーのプレフィルドシリンジ（例えば、液体シリンジ及びリオシリンジ）を含有するキットが含まれる。
【０３０１】
ある特定の実施形態では、治療的に採用される抗ＩＬ−２７抗体を含む医薬組成物の有効量は、例えば、治療の状況及び目的に依存するだろう。当業者は、ある特定の実施形態に従って、処置のための適切な投与量レベルが、部分的に、送達される分子、抗ＩＬ−２７抗体が使用されている適応症、投与経路、ならびに患者のサイズ（体重、体表面積または臓器サイズ）及び／または状態（年齢及び全身健康状態）に依存して、変動するだろうことを理解するだろう。ある特定の実施形態では、臨床医は、最適な治療効果を得るように、投与量を滴定する及び投与経路を変更することができる。
【０３０２】
ある特定の実施形態では、投薬の頻度は、使用される製剤中の抗ＩＬ−２７抗体の薬物動態パラメータを考慮に入れるだろう。ある特定の実施形態では、臨床医は、所望の効果を達成する投与量に達するまで組成物を投与するだろう。ある特定の実施形態では、組成物は、それゆれ、単回用量として、または２回以上の用量（同じ量の所望の分子を含んでも含まなくてもよい）として経時的に、または移植デバイスもしくはカテーテルを介した持続注入として投与され得る。適切な投与量のさらなる改良は、当業者によって日常的に行われ、彼らが日常的に実施するタスクの範囲内である。ある特定の実施形態では、適切な投与量は、適切な用量反応データの使用を通して確認することができる。
【０３０３】
ある特定の実施形態では、医薬組成物の投与経路は、公知の方法に従う、例えば、経口的な、静脈内、腹腔内、脳内（実質内）、脳室内、筋肉内、皮下、眼内、動脈内、門脈内または病巣内経路による注射を通した；持続放出システムによるかまたは移植デバイスによるものである。ある特定の実施形態では、組成物は、ボーラス注射により、または注入により継続的に、または移植デバイスにより投与することができる。ある特定の実施形態では、併用療法の個々の要素は、異なる経路によって投与され得る。
【０３０４】
ある特定の実施形態では、組成物を、所望の分子をその上に吸着しているまたはカプセル化している膜、スポンジまたは別の適切な材料の移植を介して局所的に投与することができる。ある特定の実施形態では、移植デバイスを使用する場合、デバイスを、任意の好適な組織または臓器に移植することができ、所望の分子の送達は、拡散、時限放出ボーラス、または連続投与を介することができる。ある特定の実施形態では、抗ＩＬ−２７抗体を含む医薬組成物をｅｘ  ｖｉｖｏ様式で使用することが望ましい場合がある。そのような場合、患者から取り出された細胞、組織及び／または臓器は、抗ＩＬ−２７抗体を含む医薬組成物に曝露され、その後、細胞、組織及び／または臓器は続いて患者の体内に移植し戻される。
【０３０５】
ある特定の実施形態では、抗ＩＬ−２７抗体は、ポリペプチドを発現及び分泌するように、本明細書に記載するような方法を使用して遺伝子操作されているある特定の細胞を移植することにより、送達することができる。ある特定の実施形態では、そのような細胞は、動物またはヒト細胞であり得、自己、異種（ｈｅｔｅｒｏｌｏｇｏｕｓ）、または異種（ｘｅｎｏｇｅｎｅｉｃ）であり得る。ある特定の実施形態では、細胞を不死化することができる。ある特定の実施形態では、免疫学的応答の可能性を低減するために、細胞をカプセル化して、周囲の組織の浸潤を回避することができる。ある特定の実施形態では、カプセル化材料は、典型的には、タンパク質産物（複数可）の放出を可能にするが、患者の免疫系による、または周囲組織からの他の有害な因子による、細胞の破壊を防ぐ、生体適合性、半透過性のポリマーエンクロージャまたは膜である。
【０３０６】
適用
本明細書に記載の組成物は、多くの診断及び治療用途で使用できる。例えば、検出可能に標識された抗原結合分子は、試料（例えば、生物学的試料）中の標的抗原の存在または量を検出するためのアッセイにおいて使用できる。組成物は、標的抗原機能の阻害を研究するためのｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイにおいて使用できる。例えば、組成物が補体タンパク質に結合して阻害する一部の実施形態では、組成物は、補体活性を阻害するか、さもなければ補体関連障害の処置に有用である、追加の新規化合物を同定するために設計されたアッセイにおける陽性対照として使用できる。例えば、ＩＬ−２７阻害性組成物を、ＩＬ−２７産生を低下または抑止する追加の化合物（例えば、小分子、アプタマー、または抗体）を同定するためのアッセイにおける陽性対照として使用できる。組成物は、以下に詳述するような治療方法においても使用できる。
【０３０７】
一部の実施形態では、本開示は、ＩＬ−２７を、生体試料または対象において検出する方法であって、（ｉ）試料または対象（及び任意選択で、参照試料または対象）を、本明細書に記載の任意の抗体と、抗体分子及びＩＬ−２７の相互作用の発生を可能にする条件下で、接触させること、ならびに（ｉｉ）抗体分子及び試料または対象（及び任意選択で、参照試料または対象）間での複合体の形成を検出することを含む、方法を提供する。
【０３０８】
キット
キットは、本明細書に開示する抗ＩＬ−２７抗体、及び使用説明書を含み得る。キットは、好適な容器内に、抗ＩＬ−２７抗体、１つまたは複数の対照、及び当該技術分野で周知の様々な緩衝剤、試薬、酵素及び他の標準的な成分を含み得る。一部の態様では、本開示は、本明細書に開示する抗ＩＬ−２７抗体または抗原結合部分、及び対象の免疫応答の刺激または対象のがんの処置における使用説明書を、本明細書に開示する１つまたは複数の追加の治療剤または手技との併用説明書を任意選択で伴って含む、キットを提供する。
【０３０９】
容器は、少なくとも１つのバイアル、ウェル、試験管、フラスコ、ボトル、シリンジ、または他の容器手段を含むことができ、その中に抗ＩＬ−２７抗体を入れ、場合によっては好適に分注し得る。追加の成分が提供される場合、キットは、この成分を入れ得る追加の容器を含有することができる。キットはさらに、商業的販売のために密閉した状態で、抗ＩＬ−２７抗体を含有するための手段及び任意の他の試薬容器を含むことができる。そのような容器は、所望のバイアルが保持される射出またはブロー成形プラスチック容器を含み得る。容器及び／またはキットは、使用説明書及び／または注意書きを伴うラベルを含むことができる。
【０３１０】
使用方法
本発明の組成物は、ＩＬ−２７及び／またはＩＬ−２７機能の拮抗作用の検出及び／または定量化を伴う多数のｉｎ  ｖｉｔｒｏ及びｉｎ  ｖｉｖｏでの有用性を有する。
【０３１１】
一部の実施形態では、本開示は、細胞におけるＳＴＡＴ１及び／またはＳＴＡＴ３リン酸化を阻害または低下する方法を提供し、該方法は、細胞を、本開示により提供する単離されたモノクローナル抗体または抗原結合フラグメントと接触させることを含み、抗体またはその抗原結合部分は、細胞におけるＳＴＡＴ１及び／またはＳＴＡＴ３リン酸化を阻害または低下する。
【０３１２】
一部の実施形態では、本開示は、細胞におけるＣＤ１６１発現の阻害を阻害または低下する方法を提供し、該方法は、細胞を、本開示により提供する単離されたモノクローナル抗体または抗原結合フラグメントと接触させることを含み、抗体またはその抗原結合部分は、細胞におけるＣＤ１６１発現の阻害を阻害または低下する。
【０３１３】
一部の実施形態では、本開示は、細胞におけるＰＤ−Ｌ１及び／またはＴＩＭ−３発現を阻害または低下する方法を提供し、該方法は、細胞を、本開示により提供する単離されたモノクローナル抗体または抗原結合フラグメントと接触させることを含み、抗体またはその抗原結合部分は、細胞におけるＰＤ−Ｌ１及び／またはＴＩＭ−３発現を阻害またはする。
【０３１４】
一部の実施形態では、本開示は、細胞からの１つまたは複数のサイトカインの分泌を誘導または増強する方法を提供し、該方法は、細胞を、本開示により提供する単離されたモノクローナル抗体または抗原結合フラグメントと接触させることを含み、抗体またはその抗原結合部分は、細胞からの１つまたは複数のサイトカインのＰＤ−１媒介性分泌を誘導または増強する。
【０３１５】
一部の実施形態では、本開示は、対象の免疫応答を刺激する方法を提供し、該方法は、対象に、本開示により提供する、ＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、有効量の単離されたモノクローナル抗体もしくはその抗原結合部分、または抗体もしくはその抗原結合部分及び医薬的に許容可能な担体を含む医薬組成物を投与することを含む。
【０３１６】
一部の実施形態では、本開示は、対象のがんを処置する方法を提供し、該方法は、対象に、本開示により提供する、ＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、有効量の単離されたモノクローナル抗体もしくはその抗原結合部分、または抗体もしくはその抗原結合部分及び医薬的に許容可能な担体を含む医薬組成物を投与することを含む。
【０３１７】
一部の実施形態では、本開示は、対象の免疫応答を刺激するまたはがんを処置する方法を提供し、該方法は、対象に、本開示により提供する、有効量の単離されたモノクローナル抗体もしくは抗原結合フラグメント、または抗体もしくはその抗原結合部分及び医薬的に許容可能な担体を含む医薬組成物を投与することを含み、抗体もしくはその抗原結合部分、または医薬組成物は、細胞におけるＳＴＡＴ１及び／またはＳＴＡＴ３リン酸化を阻害または低下し、それによって免疫応答を刺激するまたはがんを処置する。
【０３１８】
一部の実施形態では、本開示は、対象の免疫応答を刺激するまたはがんを処置する方法を提供し、該方法は、対象に、本開示により提供する、有効量の単離されたモノクローナル抗体もしくは抗原結合フラグメント、または抗体もしくはその抗原結合部分及び医薬的に許容可能な担体を含む医薬組成物を投与することを含み、抗体もしくはその抗原結合部分、または医薬組成物は、細胞におけるＣＤ１６１発現の阻害を阻害または低下し、それによって免疫応答を刺激するまたはがんを処置する。
【０３１９】
一部の実施形態では、本開示は、対象の免疫応答を刺激するまたはがんを処置する方法を提供し、該方法は、対象に、本開示により提供する、有効量の単離されたモノクローナル抗体もしくは抗原結合フラグメント、または抗体もしくはその抗原結合部分及び医薬的に許容可能な担体を含む医薬組成物を投与することを含み、抗体もしくはその抗原結合部分、または医薬組成物は、細胞におけるＰＤ−Ｌ１及び／またはＴＩＭ−３発現を阻害または低下し、それによって免疫応答を刺激するまたはがんを処置する。
【０３２０】
一部の実施形態では、本開示は、対象の免疫応答を刺激するまたはがんを処置する方法を提供し、該方法は、対象に、本開示により提供する、有効量の単離されたモノクローナル抗体もしくは抗原結合フラグメント、または抗体もしくはその抗原結合部分及び医薬的に許容可能な担体を含む医薬組成物を投与することを含み、抗体もしくはその抗原結合部分、または医薬組成物は、細胞からの１つまたは複数のサイトカインのＰＤ−１媒介性分泌を誘導または増強し、それによって免疫応答を刺激するまたはがんを処置する。
【０３２１】
一部の実施形態では、がんは、肺癌（例えば、非小細胞肺癌）、肉腫、精巣癌、卵巣癌、膵臓癌、乳癌（例えば、トリプルネガティブ乳癌）、黒色腫、頭頸部癌（例えば、扁平上皮性頭頸部癌）、結腸直腸癌、膀胱癌、子宮内膜癌、前立腺癌、甲状腺癌、肝細胞癌、胃癌、脳癌、リンパ腫（例えば、ＤＬ−ＢＣＬ）、白血病（例えば、ＡＭＬ）または腎癌（例えば、腎細胞癌、例えば、腎明細胞癌）から選択される。
【０３２２】
上記の組成物は、とりわけ、対象における様々ながんを処置または予防するための方法において有用である。組成物は、対象、例えばヒト対象に、投与経路に一部依存する様々な方法を使用して、投与することができる。経路は、例えば、静脈内注射もしくは注入（ＩＶ）、皮下注射（ＳＣ）、腹腔内（ＩＰ）注射、筋肉内注射（ＩＭ）、または髄腔内注射（ＩＴ）であり得る。注射は、ボーラスまたは持続注入であり得る。
【０３２３】
投与は、例えば、局所注入、注射によって、またはインプラントを用いることによって達成することができる。インプラントは、多孔性、非多孔性、またはゼラチン性材料のものであり得、膜、例えばシアラスティック（ｓｉａｌａｓｔｉｃ）膜、または繊維のものが含まれる。インプラントは、対象への組成物の持続的または周期的な放出のために構成され得る。例えば、米国特許出願公開第２００８０２４１２２３号；米国特許第５，５０１，８５６号；同第４，８６３，４５７号；及び同第３，７１０，７９５号；ＥＰ４８８４０１；及びＥＰ４３０５３９を参照されたく、このそれぞれの開示は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。組成物は、例えば、拡散システム、侵食システム、または対流システムに基づく移植可能デバイス、例えば、浸透圧ポンプ、生体分解性インプラント、電気拡散システム、電気浸透システム、蒸気圧ポンプ、電解ポンプ、気泡ポンプ、圧電ポンプ、侵食ベースのシステム、または電子機械システムにより、対象に送達することができる。
【０３２４】
一部の実施形態では、抗ＩＬ−２７抗体またはその抗原結合フラグメントは、局所投与によって対象に治療的に送達される。
【０３２５】
本明細書に記載の抗体またはそのフラグメントの好適な用量であって、対象のがんを処置または予防することができる用量は、例えば、処置される対象の年齢、性別、及び体重、ならびに用いられる特定の阻害剤化合物を含む様々な因子に依存し得る。例えば、がんを有する対象を処置するには、同じ対象を処置するのに必要とされるＩＬ−２７結合Ｆａｂ’抗体フラグメントの用量と比較して、異なる用量の全抗ＩＬ−２７抗体が必要とされ得る。対象に投与される用量に影響を与える他の因子には、例えば、がんの種類または重症度が含まれる。例えば、転移性黒色腫を有する対象は、神経膠芽腫を有する対象とは異なる投与量の抗ＩＬ−２７抗体の投与を必要とし得る。他の因子には、例えば、同時にまたは以前に対象が罹患した他の医学的障害、対象の全身健康状態、対象の遺伝的性質、食事、投与時間、排出速度、併用薬物、及び対象に投与される任意の他の追加の治療剤が含まれ得る。また、任意の特定の対象に対する特定の投与量及び処置計画は、処置を行う医療従事者（例えば、医師または看護師）の判断にも依存するだろうことが理解されたい。好適な投与量は、本明細書に記載する。
【０３２６】
医薬組成物は、治療有効量の本明細書に記載の抗ＩＬ−２７抗体またはその抗原結合フラグメントを含むことができる。そのような有効量は、投与される抗体の効果、または複数の作用物質が使用される場合、抗体及び１つまたは複数の追加の活性剤のコンビナトリアル効果に一部基づいて、当業者によって容易に決定され得る。本明細書に記載の抗体またはそのフラグメントの治療有効量はまた、個体の疾患状態、年齢、性別及び体重ならびに個体における所望の応答、例えば、腫瘍増殖の低下を誘発する抗体（及び１つまたは複数の活性剤）の能力などの因子に従って変動し得る。例えば、抗ＩＬ−２７抗体の治療有効量は、当該技術分野で公知であるまたは本明細書に記載する特定の障害、及び／または特定の障害の症状のいずれか１つを阻害する（重症度を緩和するまたは発症を取り除く）及び／または予防することができる。治療有効量は、組成物の任意の毒性効果または有害効果を治療的に有益な効果が上回る量でもある。
【０３２７】
本明細書に記載の抗体またはそのフラグメントのいずれかの好適なヒト用量は、例えば、第Ｉ相用量漸増研究においてさらに評価することができる。例えば、ｖａｎ  Ｇｕｒｐ  ｅｔ  ａｌ．（２００８）Ａｍ  Ｊ  Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ  ８（８）：１７１１−１７１８；Ｈａｎｏｕｓｋａ  ｅｔ  ａｌ．（２００７）Ｃｌｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ  １３（２，ｐａｒｔ  １）：５２３−５３１；及びＨｅｔｈｅｒｉｎｇｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．（２００６）Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ａｇｅｎｔｓ  ａｎｄ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ  ５０（１０）：３４９９−３５００を参照されたい。
【０３２８】
一部の実施形態では、組成物が全体として治療上有効であるように、本明細書に記載の抗体またはその抗原結合フラグメントのいずれか及び１つまたは複数（例えば、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、または１１以上）の追加の治療剤を含有する。例えば、組成物は、本明細書に記載の抗ＩＬ−２７抗体及びアルキル化剤を含有することができ、抗体及び作用物質はそれぞれ、組み合わせた場合に、対象のがん（例えば、黒色腫）の処置または予防に治療上有効な濃度である。
【０３２９】
そのような組成物の毒性及び治療効果は、細胞培養または実験動物（例えば、本明細書に記載のがんのいずれかの動物モデル）における公知の薬学的手順によって決定することができる。これらの手順は、例えば、ＬＤ５０（集団の５０％に対する致死量）及びＥＤ５０（集団の５０％に対する治療有効用量）を決定するために使用され得る。毒性効果及び治療効果との間の用量比は治療指数であり、ＬＤ５０／ＥＤ５０の比率として表すことができる。高い治療指数を示す抗体またはその抗原結合フラグメントが好ましい。有毒な副作用を呈する組成物を使用してよいが、そのような化合物を患部組織の部位に標的化し、正常細胞への潜在的な損傷を最小限に抑え、それによって副作用を減らす送達システムを設計するように注意するべきである。
【０３３０】
細胞培養アッセイ及び動物研究から得られたデータは、ヒトにおける使用のための投与量の範囲の策定に使用できる。そのような抗体または抗原結合フラグメントの投与量は、一般的には、毒性をほとんどまたは全く伴わないＥＤ５０を含む抗体またはフラグメントの循環濃度の範囲内に収まる。投与量は、採用される剤形及び利用される投与経路に依存して、この範囲内で変動し得る。本明細書に記載の抗ＩＬ−２７抗体について、治療有効用量は、最初に細胞培養アッセイから推定することができる。用量は、細胞培養で決定されるＩＣ５０（すなわち、症状の最大の半分の阻害を達成する抗体の濃度）を含む循環血漿濃度範囲を達成するように、動物モデルにおいて策定され得る。このような情報を使用して、ヒトにおける有用な用量をより正確に決定することができる。血漿中のレベルは、例えば、高速液体クロマトグラフィーによって測定され得る。例えば、（例えば、目または関節への）局所投与が望ましい一部の実施形態では、細胞培養または動物モデリングを使用して、局所部位内で治療有効濃度を達成するために必要な用量を決定することができる。
【０３３１】
一部の実施形態では、本方法は、がんの他の治療と併せて実施することができる。例えば、組成物は、対象に、放射線、手術、標的化もしくは細胞傷害性化学療法、化学放射線療法、ホルモン療法、免疫療法、遺伝子療法、細胞移植療法、精密医療、ゲノム編集療法、または他の薬物療法と同時に、その前または後に、投与することができる。
【０３３２】
上記のように、本明細書に記載の組成物（例えば、抗ＩＬ−２７組成物）を使用して、様々ながん、例えば限定されないが、カポジ肉腫、白血病、急性リンパ性白血病、急性骨髄性白血病、骨髄芽球前骨髄球性骨髄単球性単球性赤白血病、慢性白血病、慢性骨髄性（顆粒球性）白血病、慢性リンパ球性白血病、マントル細胞リンパ腫、原発性中枢神経系リンパ腫、バーキットリンパ腫及び辺縁帯Ｂ細胞性リンパ腫、真性赤血球増加症リンパ腫、ホジキン病、非ホジキン病、多発性骨髄腫、ウォルデンストレームマクログロブリン血症、重鎖疾患、固形腫瘍、肉腫、及び癌種、線維肉腫、粘液肉腫、脂肪肉腫、軟骨肉腫、骨原性肉腫、骨肉腫、脊索腫、血管肉腫、内皮肉腫、リンパ管肉腫、リンパ管内皮肉腫、滑膜腫、中皮腫、ユーイング腫瘍、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、結腸肉腫、結腸直腸癌、膵臓癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、扁平上皮癌、基底細胞癌、腺癌、汗腺癌、脂腺癌、乳頭癌、乳頭腺癌、嚢胞腺癌、髄様癌、気管支原性癌、腎細胞癌、肝細胞癌（ＨＣＣ）、肝癌、胆管癌、絨毛癌、精上皮腫、胎児性癌、ウィルムス腫瘍、子宮頸癌、子宮癌、精巣腫瘍、肺癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、膀胱癌、上皮癌、神経膠腫、星細胞腫、髄芽腫、頭蓋咽頭腫、上衣腫、松果体腫、血管芽腫、聴神経腫、乏突起神経膠腫、髄膜腫（ｍｅｎａｎｇｉｏｍａ）、黒色腫、神経芽細胞腫、網膜芽細胞腫、上咽頭癌、食道癌、基底細胞癌、胆道癌、膀胱癌、骨癌、脳及び中枢神経系（ＣＮＳ）癌、子宮頸癌、絨毛癌、結腸直腸癌、結合組織癌、消化器系癌、子宮内膜癌、食道癌、眼癌、頭頸部癌、胃癌、上皮内腫瘍、腎臓癌、喉頭癌、肝癌、肺癌（小細胞、大細胞）、黒色腫、神経芽細胞腫；口腔癌（例えば、唇、舌、口、咽頭）、卵巣癌、膵臓癌、網膜芽細胞腫、横紋筋肉腫、直腸癌；呼吸器系癌、肉腫、皮膚癌、胃癌、精巣癌、甲状腺癌、子宮癌、ならびに泌尿器系癌を処置することができる。
【０３３３】
併用療法
一部の実施形態では、本開示により提供する、抗ＩＬ−２７抗体またはその抗原結合部分は、１つまたは複数の追加の治療剤または処置、例えば、がんの別の治療剤または処置と組み合わせることができる。例えば、抗ＩＬ−２７抗体またはその抗原結合部分は、対象（例えば、ヒト患者）に、１つまたは複数の追加の治療剤と組み合わせて投与することができ、その組み合わせは、がんを有する、または発症のリスクがある対象に対して治療上の利益を提供する。
【０３３４】
一部の実施形態では、抗ＩＬ−２７抗体またはその抗原結合部分、及び１つまたは複数の追加の治療剤は、同じ時に（例えば、同時に）投与される。他の実施形態では、抗ＩＬ−２７抗体またはその抗原結合部分が時間に関して最初に投与され、１つまたは複数の追加の治療剤が時間に関して２番目に投与される（例えば、順次）。一部の実施形態では、１つまたは複数の追加の治療剤が時間に関して最初に投与され、抗ＩＬ−２７抗体が時間に関して２番目に投与される。
【０３３５】
本明細書に記載の抗ＩＬ−２７抗体またはその抗原結合フラグメントは、以前または現在施されている治療を、置き換えるか、または増大させることができる。例えば、抗ＩＬ−２７抗体またはその抗原結合フラグメントを用いて処置する際、１つまたは複数の追加の治療剤の投与を中止または減少させる、例えば、より低いレベルで投与することができる。一部の実施形態では、以前の治療の投与を維持することができる。一部の実施形態では、以前の治療は、抗ＩＬ−２７抗体のレベルが治療効果を提供するのに十分なレベルに達するまで、維持されるだろう。
【０３３６】
一部の実施形態では、本開示は、対象のがんを処置する方法を提供し、該方法は、対象に、本開示により提供する、ＩＬ−２７に特異的に結合して拮抗する、有効量の単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を、１つまたは複数の追加の治療剤または手技と組み合わせて投与することを含み、第二の治療剤または手技は、化学療法、標的抗がん療法、腫瘍溶解薬、細胞傷害剤、免疫系療法、サイトカイン、外科的手技、放射線手技、共刺激分子の活性化剤、阻害分子の阻害剤、ワクチン、もしくは細胞性免疫療法、またはそれらの組み合わせからなる群から選択される。
【０３３７】
一部の実施形態では、１つまたは複数の追加の治療剤は、ＰＤ−１アンタゴニスト、ＴＩＭ−３阻害剤、ＬＡＧ−３阻害剤、ＴＩＧＩＴ阻害剤、ＣＤ１１２Ｒ阻害剤、ＴＡＭ阻害剤、ＳＴＩＮＧアゴニスト、４−１ＢＢアゴニスト、またはそれらの組み合わせである。
【０３３８】
一部の実施形態では、１つまたは複数の追加の治療剤は、ＰＤ−１アンタゴニストである。一部の実施形態では、ＰＤ−１アンタゴニストは、ＰＤＲ００１、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、ピディリズマブ、ＭＥＤＩ０６８０、ＲＥＧＮ２８１０、ＴＳＲ−０４２、ＰＦ−０６８０１５９１、及びＡＭＰ−２２４からなる群から選択される。ある特定の実施形態では、１つまたは複数の追加の治療剤は、ＰＤ−Ｌ１阻害剤である。一部の実施形態では、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、ＦＡＺ０５３、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、及びＢＭＳ−９３６５５９からなる群から選択される。一部の実施形態では、本開示は、抗ＰＤ−１抗体の１つまたは複数の活性を増強する（例えば、ＰＤ−１媒介性サイトカイン分泌を増強する、抗ＰＤ−１媒介性ＴＮＦα分泌を増強する、抗ＰＤ−１抗体に曝露された細胞からの抗ＰＤ−１媒介性ＩＬ−６分泌を増強する）方法を提供し、該方法は、細胞を、抗ＰＤ−１抗体と同時並行または連続して、本開示により提供する、抗体またはその抗原結合部分に曝露することを含み、それによって抗ＰＤ−１抗体の１つまたは複数の活性を増強する。
【０３３９】
一部の実施形態では、１つまたは複数の追加の治療剤は、スニチニブ（Ｓｕｔｅｎｔ（登録商標））、カボザンチニブ（Ｃａｂｏｍｅｔｙｘ（登録商標））、アキシチニブ（Ｉｎｌｙｔａ（登録商標））、レンバチニブ（Ｌｅｎｖｉｍａ（登録商標））、エベロリムス（Ａｆｉｎｉｔｏｒ（登録商標））、ベバシズマブ（Ａｖａｓｔｉｎ（登録商標））、エパカドスタット、ＮＫＴＲ−２１４（ＣＤ−１２２バイアスアゴニスト）、チボザニブ（Ｆｏｔｉｖｄａ（登録商標））、アベキシノスタット、イピリムマブ（Ｙｅｒｖｏｙ（登録商標））、トレメリムマブ、パゾパニブ（Ｖｏｔｒｉｅｎｔ（登録商標））、ソラフェニブ（Ｎｅｘａｖａｒ（登録商標））、テムシロリムス（Ｔｏｒｉｓｅｌ（登録商標））、ラムシルマブ（Ｃｙｒａｍｚａ（登録商標））、ニラパリブ、サボリチニブ、ボロラニブ（Ｘ−８２）、レゴラフェニブ（Ｓｔｉｖａｒｇｏ（登録商標））、ドナフェニブ（マルチキナーゼ阻害剤）、カムレリズマブ（ＳＨＲ−１２１０）、ペキサスチモジンデバシレプベク（ＪＸ−５９４）、ラムシルマブ（Ｃｙｒａｍｚａ（登録商標））、アパチニブ（ＹＮ９６８Ｄ１）、カプセル化ドキソルビシン（Ｔｈｅｒｍｏｄｏｘ（登録商標））、チバンチニブ（ＡＲＱ１９７）、ＡＤＩ−ＰＥＧ２０、ビニメチニブ、アパチニブメシレート、ニンテダニブ、リリルマブ、ニボルマブ（Ｏｐｄｉｖｏ（登録商標））、ペンブロリズマブ（Ｋｅｙｔｒｕｄａ（登録商標））、アテゾリズマブ（Ｔｅｃｅｎｔｒｉｑ（登録商標））、アベルマブ（Ｂａｖｅｎｃｉｏ（登録商標））、デュルバルマブ（Ｉｍｆｉｍｚｉ（登録商標））、セミプリマブ−ｒｗｌｃ（Ｌｉｂｔａｙｏ（登録商標））、チスレリズマブ、及び／またはスパルタリズマブである。
【０３４０】
一部の実施形態では、１つまたは複数の追加の治療剤は、ＴＩＭ−３阻害剤であり、任意選択で、ＴＩＭ−３阻害剤は、ＭＧＢ４５３またはＴＳＲ−０２２である。
【０３４１】
一部の実施形態では、１つまたは複数の追加の治療剤は、ＬＡＧ−３阻害剤であり、任意選択で、ＬＡＧ−３阻害剤は、ＬＡＧ５２５、ＢＭＳ−９８６０１６、及びＴＳＲ−０３３からなる群から選択される。
【０３４２】
一部の実施形態では、１つまたは複数の追加の治療剤は、ＴＩＧＩＴ阻害剤である。一部の実施形態では、１つまたは複数の追加の治療剤は、ＣＤ１１２Ｒ阻害剤である。一部の実施形態では、１つまたは複数の追加の治療剤は、ＴＡＭ（Ａｘｌ、Ｍｅｒ、Ｔｙｒｏ）阻害剤である。一部の実施形態では、１つまたは複数の追加の治療剤は、ＳＴＩＮＧアゴニストである。一部の実施形態では、１つまたは複数の追加の治療剤は、４−１ＢＢアゴニストである。
【０３４３】
化学療法剤との組み合わせ
本発明の組成物と組み合わせて及び／または同時投与するのに好適な化学療法剤には、例えば、タキソール、サイトカラシンＢ、グラミシジンＤ、臭素エチジウム、エメチン、マイトマイシン、エトポシド、テノポシド、ビンクリスチン、ビンブラスチン、コルチシン、ドキソルビシン、ダウノルビシン、ジヒドロキシアントラシンジオン、ミトキサントロン、ミトラマイシン、アクチノマイシンＤ、１−デヒドロテストステロン、グルココルチコイド、プロカイン、テトラカイン、リドカイン、プロプラノロール、及びピュロマイシン、ならびにそれらの類似体または相同体が含まれる。さらなる作用物質としては、例えば、代謝拮抗物質（例えば、メトトレキサート、６−メルカプトプリン、６−チオグアニン、シタラビン、５−フルオロウラシル、デカルバジン）、アルキル化剤（例えば、メクロレタミン、チオテパ、クロランブシル、メルファラン、カルムスチン（ＢＳＮＵ）、ロムスチン（ＣＣＮＵ）、シクロホスファミド、ブスルファン、ジブロモマンニトール、ストレプトゾトシン、マイトマイシンＣ、シス−ジクロロジアミンプラチナ（ＩＩ）（ＤＤＰ）、プロカルバジン、アルトレタミン、シスプラチン、カルボプラチン、オキサリプラチン、ネダプラチン、サトラプラチン、または四硝酸トリプラチン）、アントラサイクリン（例えば、ダウノルビシン（以前のダウノマイシン）及びドキソルビシン）、抗生物質（例えば、ダクチノマイシン（以前のアクチノマイシン）、ブレオマイシン、ミトラマイシン、及びアントラマイシン（ＡＭＣ））、及び抗有糸分裂剤（例えば、ビンクリスチン及びビンブラスチン）、及びテモゾロミドが含まれる。
【０３４４】
ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１アンタゴニストとの組み合わせ
一部の実施形態では、本開示により提供する、抗ＩＬ−２７抗体またはその抗原結合部分は、ヒトＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１に特異的に結合して、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１生物学的活性及び／またはヒトＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１シグナル伝達により媒介される下流経路（複数可）及び／または細胞プロセスまたは他のヒトＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１媒介機能を阻害する１つまたは複数のＰＤ−１アンタゴニストと組み合わされる（例えば、組み合わせて投与される）。
【０３４５】
従って、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１生物学的活性、例えば、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１シグナル伝達により媒介される下流経路及び／または細胞プロセス、例えばＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１に対する受容体結合及び／または細胞反応の誘発を、直接またはアロステリックに遮断、拮抗、抑制、阻害または低下するＰＤ−１アンタゴニストを本明細書に提供する。細胞または対象によって産生されるヒトＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１の数量または量を低下するＰＤ−１アンタゴニストも本明細書に提供する。
【０３４６】
一部の実施形態では、本開示は、ヒトＰＤ−１と結合し、ＰＤ−１へのＰＤ−Ｌ１結合を防止、阻害または低下するＰＤ−１アンタゴニストを提供する。一部の態様では、ＰＤ−１アンタゴニストは、ＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１をコードするｍＲＮＡに結合し、翻訳を防止する。一部の実施形態では、ＰＤ−１アンタゴニストは、ＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１をコードするｍＲＮＡに結合し、分解及び／または代謝回転を引き起こす。
【０３４７】
一部の実施形態では、ＰＤ−１アンタゴニストは、ＰＤ−１シグナル伝達または機能を阻害する。一部の実施形態では、ＰＤ−１アンタゴニストは、ＰＤ−１のＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２、またはＰＤ−Ｌ１及びＰＤ−Ｌ２の両方への結合を遮断する。一部の実施形態では、ＰＤ−１アンタゴニストは、ＰＤ−１のＰＤ−Ｌ１への結合を遮断する。一部の実施形態では、ＰＤ−１アンタゴニストは、ＰＤ−１のＰＤ−Ｌ２への結合を遮断する。一部の実施形態では、ＰＤ−１アンタゴニストは、ＰＤ−１のＰＤ−Ｌ１及びＰＤ−Ｌ２への結合を遮断する。一部の実施形態では、ＰＤ−１アンタゴニストは、ＰＤ−１と特異的に結合する。一部の実施形態では、ＰＤ−１アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ１と特異的に結合する。一部の実施形態では、ＰＤ−１アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ２と特異的に結合する。
【０３４８】
一部の実施形態では、ＰＤ−１アンタゴニストは、ＰＤ−１の、その同族リガンドへの結合を阻害する。一部の実施形態では、ＰＤ−１アンタゴニストは、ＰＤ−１のＰＤ−Ｌ１への結合、ＰＤ−１のＰＤ−Ｌ２への結合、またはＰＤ−１のＰＤ−Ｌ１及びＰＤ−Ｌ２の両方への結合を阻害する。一部の実施形態では、ＰＤ−１アンタゴニストは、ＰＤ−１の、その同族リガンドへの結合を阻害しない。
【０３４９】
一部の実施形態では、ＰＤ−１アンタゴニストは、ＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１に特異的に結合する単離されたモノクローナル抗体（ｍＡｂ）またはその抗原結合フラグメントである。一部の実施形態では、ＰＤ−１アンタゴニストは、ヒトＰＤ−１に特異的に結合する抗体またはその抗原結合フラグメントである。一部の実施形態では、ＰＤ−１アンタゴニストは、ヒトＰＤ−Ｌ１に特異的に結合する抗体またはその抗原結合フラグメントである。一部の実施形態では、ＰＤ−１アンタゴニストは、ヒトＰＤ−Ｌ１に結合し、ＰＤ−Ｌ１のＰＤ−１への結合を阻害する抗体または抗原結合フラグメントである。一部の実施形態では、ＰＤ−１アンタゴニストは、ヒトＰＤ−１に結合し、ＰＤ−Ｌ１のＰＤ−１への結合を阻害する抗体または抗原結合フラグメントである。
【０３５０】
ＰＤ−１ならびにそのリガンドＰＤ−Ｌ１及びＰＤ−Ｌ２のいずれか一方または両方の間の相互作用を阻害または妨害するいくつかの免疫チェックポイントアンタゴニストは、臨床開発中である、またはがんを処置するために臨床医が現在利用可能である。
【０３５１】
本開示が提供する組成物、方法、及び使用のいずれかにおいてＰＤ−１アンタゴニストを含み得る抗ヒトＰＤ−１モノクローナル抗体またはその抗原結合フラグメントの例としては、限定はされないが：ＫＥＹＴＲＵＤＡ（登録商標）（ペムブロリズマブ、ＭＫ−３４７５、ｈ４０９Ａ１１；ＵＳ８９５２１３６、ＵＳ８３５４５０９、ＵＳ８９００５８７、及びＥＰ２１７０９５９を参照されたく、これらは全て参照によりその全体が本明細書に含まれる；Ｍｅｒｃｋ）、ＯＰＤＩＶＯ（登録商標）（ニボルマブ、ＢＭＳ−９３６５５８、ＭＤＸ−１１０６、ＯＮＯ−４５３８；ＵＳ７５９５０４８、ＵＳ８７２８４７４、ＵＳ９０７３９９４、ＵＳ９０６７９９９、ＥＰ１５３７８７８、ＵＳ８００８４４９、ＵＳ８７７９１０５、及びＥＰ２１６１３３６を参照されたく、これらは全て参照によりその全体が本明細書に含まれる；Ｂｒｉｓｔｏｌ  Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、ＭＥＤＩ０６８０（ＡＭＰ−５１４）、ＢＧＢ−Ａ３１７及びＢＧＢ−１０８（ＢｅｉＧｅｎｅ）、２４４Ｃ８及び３８８Ｄ４（ＷＯ２０１６１０６１５９を参照されたく、これは参照によりその全体が本明細書に組み込まれる；Ｅｎｕｍｅｒａｌ  Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ）、ＰＤＲ００１（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ならびにＲＥＧＮ２８１０（Ｒｅｇｅｎｅｒｏｎ）が挙げられる。従って、一部の実施形態では、ＰＤ−１アンタゴニストは、ペムブロリズマブである。一部の実施形態では、ＰＤ−１アンタゴニストは、ニボルマブである。
【０３５２】
本開示が提供する組成物、方法、及び使用のいずれかにおいてＰＤ−１アンタゴニストを含み得る抗ヒトＰＤ−Ｌ１モノクローナル抗体またはその抗原結合フラグメントの例としては、限定されないが：ＢＡＶＥＮＣＩＯ（登録商標）（アベルマブ、ＭＳＢ００１０７１８Ｃ、ＷＯ２０１３／７９１７４を参照されたく、これは参照によりその全体が本明細書に組み込まれる；Ｍｅｒｃｋ／Ｐｆｉｚｅｒ）、ＩＭＦＩＮＺＩ（登録商標）（デュルバルマブ、ＭＥＤＩ４７３６）、ＴＥＣＥＮＴＲＩＱ（登録商標）（アテゾリズマブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＲＧ７４４６；ＷＯ２０１０／０７７６３４を参照されたく、これは参照によりその全体が本明細書に組み込まれる；Ｒｏｃｈｅ）、ＭＤＸ−１１０５（ＢＭＳ−９３６５５９、１２Ａ４；ＵＳ７９４３７４３及びＷＯ２０１３／１７３２２３を参照されたく、これらは両方とも参照によりその全体が本明細書に組み込まれる；Ｍｅｄａｒｅｘ／ＢＭＳ）、及びＦＡＺ０５３（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）が挙げられる。従って、一部の実施形態では、ＰＤ−１アンタゴニストは、アベルマブである。一部の実施形態では、ＰＤ−１アンタゴニストは、デュルバルマブである。一部の実施形態では、ＰＤ−１アンタゴニストは、アテゾリズマブである。
【０３５３】
一部の実施形態では、ＰＤ−１アンタゴニストは、ヒトＰＤ−１またはヒトＰＤ−Ｌ１に特異的に結合するイムノアドヘシン、例えば、免疫グロブリン分子のＦｃ領域などの定常領域に融合したＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２の細胞外またはＰＤ−１結合部分を含有する融合タンパク質である。ＰＤ−１に特異的に結合するイムノアドヘシン分子の例は、ＷＯ２０１０／０２７８２７及びＷＯ２０１１／０６６３４２に記載されており、これらは両方とも、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。一部の実施形態では、ＰＤ−１アンタゴニストは、ヒトＰＤ−１に特異的に結合するＰＤ−Ｌ２−ＦＣ融合タンパク質であるＡＭＰ−２２４（Ｂ７−ＤＣＩｇとしても知られる）である。
【０３５４】
ＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１に結合し、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１シグナル伝達経路を破壊する任意のＰＤ−１アンタゴニストが、本明細書に開示する組成物、方法、及び使用に好適であることが当業者によって理解されるだろう。
【０３５５】
一部の実施形態では、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１アンタゴニストは、小分子、核酸、ペプチド、ペプチド模倣物、タンパク質、炭水化物、炭水化物誘導体、または糖ポリマーである。例示的な小分子ＰＤ−１阻害剤は、Ｚｈａｎ  ｅｔ  ａｌ．，（２０１６）Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖ  Ｔｏｄａｙ  ２１（６）：１０２７−１０３６に記載されている。
【０３５６】
ＴＩＭ−３阻害剤との組み合わせ
一部の実施形態では、本開示により提供する、抗ＩＬ−２７抗体またはその抗原結合部分は、ＴＩＭ−３阻害剤と組み合わされる（例えば、組み合わせて投与される）。ＴＩＭ−３阻害剤は、抗体、その抗原結合フラグメント、イムノアドヘシン、融合タンパク質、またはオリゴペプチドであり得る。一部の実施形態では、ＴＩＭ−３阻害剤は、ＭＧＢ４５３（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＴＳＲ−０２２（Ｔｅｓａｒｏ）、またはＬＹ３３２１３６７（Ｅｌｉ  Ｌｉｌｌｙ）から選択される。一部の実施形態では、抗ＩＬ−２７抗体またはその抗原結合部分は、ＭＧＢ４５３と組み合わせて投与される。一部の実施形態では、抗ＩＬ−２７抗体またはその抗原結合部分は、ＴＳＲ−０２２と組み合わせて投与される。
【０３５７】
ＬＡＧ−３阻害剤との組み合わせ
一部の実施形態では、本開示により提供する、抗ＩＬ−２７抗体またはその抗原結合部分は、ＬＡＧ−３阻害剤と組み合わされる（例えば、組み合わせて投与される）。ＬＡＧ−３阻害剤は、抗体、その抗原結合フラグメント、イムノアドヘシン、融合タンパク質、またはオリゴペプチドであり得る。一部の実施形態では、ＬＡＧ−３阻害剤は、ＬＡＧ５２５（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＢＭＳ−９８６０１６（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、ＴＳＲ−０３３（Ｔｅｓａｒｏ）、ＭＫ−４２８０（Ｍｅｒｃｋ＆Ｃｏ）、またはＲＥＧＮ３７６７（Ｒｅｇｅｎｅｒｏｎ）から選択される。
【０３５８】
その他の組み合わせ
一部の実施形態では、本開示により提供する、抗ＩＬ−２７抗体またはその抗原結合部分は、ＴＩＧＩＴ阻害剤、キナーゼ阻害剤（例えば、チロシンキナーゼ阻害剤（ＴＫＩ））、ＣＤ１１２Ｒ阻害剤、ＴＡＭ受容体阻害剤、ＳＴＩＮＧアゴニスト及び／または４−１ＢＢアゴニスト、あるいはそれらの組み合わせと組み合わされる（例えば、組み合わせて投与される）。
【０３５９】
検出方法
一部の実施形態では、本明細書に記載の抗ＩＬ−２７抗体またはその抗原結合フラグメントは、生体試料中のヒトＩＬ−２７の検出及び／または定量化の方法において採用することができる。従って、本明細書に記載の抗ＩＬ−２７抗体またはその抗原結合フラグメントは、患者の疾患（例えば、がん）の診断、予後診断及び／または進行決定に有用である。
【０３６０】
本明細書で定義するように、がんの改善に関して対象（例えば、ヒト患者）をモニタリングすることは、対象を疾患パラメータにおける変化、例えば、腫瘍増殖の低下に関して評価することを意味する。一部の実施形態では、評価は、投与の、少なくとも１時間、例えば、少なくとも２、４、６、８、１２、２４、もしくは４８時間、または少なくとも１日、２日、４日、１０日、１３日、２０日以上、または少なくとも１週間、２週間、４週間、１０週間、１３週間、２０週間以上後に行われる。対象は、以下の期間：処置の開始前；処置中；または処置の１つもしくは複数の要素が施された後のうちの、１つまたは複数において評価することができる。評価には、さらなる処置の必要性を評価すること、例えば、投与量、投与頻度、または処置期間を変更すべきか否かを評価することを含むことができる。選択された治療法を追加または削除する必要性を評価すること、例えば、本明細書に記載のがんのための処置のいずれかを追加または削除することも含むことができる。
【０３６１】
一部の実施形態では、本開示は、対象からの試料中のＩＬ−２７を検出する方法を提供し、該方法は、（ａ）対象からの試料を、検出抗体と、ＩＬ−２７が試料中に存在する場合に、検出抗体が検出抗体−ＩＬ−２７複合体を形成することを可能にする条件下で接触させること、ここで検出抗体は本開示により提供する抗体またはその抗原結合フラグメントである、及び（ｂ）存在する場合、ステップ（ａ）において産生された複合体の存在を検出することを含む。
【０３６２】
一部の実施形態では、本開示は、対象のＩＬ−２７関連がんを検出する方法を提供し、該方法は、（ａ）ＩＬ−２７関連がんを有する疑いのある対象からの試料を、検出抗体と、ＩＬ−２７が試料中に存在する場合に、検出抗体が検出抗体−ＩＬ−２７複合体を形成することを可能にする条件下で接触させるステップ、ここで検出抗体は本開示により提供する抗体またはその抗原結合部分である、及び（ｂ）存在する場合、ステップ（ａ）において産生された複合体の存在を検出するステップを含む。一部の実施形態では、検出抗体は、検出可能な標識に結合している。一部の実施形態では、該方法は、試料を、捕捉抗体と接触させて、ＩＬ−２７が試料中に存在する場合に、ＩＬ−２７及び捕捉抗体を含む複合体を産生することをさらに含み、捕捉抗体は、本開示により提供する抗体またはその抗原結合部分である。
【０３６３】
一部の実施形態では、捕捉抗体は、固体支持体上に固定化されている。一部の実施形態では、試料を、検出抗体の前に捕捉抗体と接触させる。一部の実施形態では、試料は、体液試料である。一部の実施形態では、流体試料は、血液、血清、血漿、細胞溶解液または組織溶解液である。
【０３６４】
一部の実施形態では、がんは、腎細胞癌（ＲＣＣ）、肝細胞癌、肺癌、胃食道癌、卵巣癌、子宮内膜癌、黒色腫、白血病及びリンパ腫から選択される。一部の実施形態では、がんは、腎細胞癌（ＲＣＣ）である。一部の実施形態では、がんは、肝細胞癌（ＨＣＣ）である。一部の実施形態では、がんは、白血病及びリンパ腫から選択される。一部の実施形態では、がんは、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）である。
【実施例】
【０３６５】
本開示を、その特定の実施形態を参照して説明してきたが、当業者は、本開示の真の主旨及び範囲から逸脱することなく、様々な変更が行われてもよく、等価物が置き換えられてもよいことを理解されたい。加えて、特定の状況、材料、物質の組成、プロセス、１つまたは複数のプロセスステップを、本開示の目的、主旨及び範囲に適応させるために、多くの修正が行われてもよい。全てのそのような修正は、本開示の範囲内であることが意図される。
【０３６６】
実施例１：ＩＬ−２７  ＥＢＩ３単量体と特異的に結合する抗ＩＬ−２７抗体の生成及び特徴評価
この実施例は、ヒトＩＬ−２７のＥＢＩ３サブユニットに特異的に結合する抗ＩＬ−２７抗体の産生を説明する。簡潔には、ＢＡＬＢ／ｃマウスにヒトＥＢＩ３免疫付与ベクター（Ａｌｄｅｖｒｏｎ）を用いて免疫付与し、抗ＥＢＩ３モノクローナル抗体を発現するハイブリドーマの生成及び単離に使用した。単離したハイブリドーマには、本明細書でＡｂ１、Ａｂ２、Ａｂ３、Ａｂ４、Ａｂ５、Ａｂ６、Ａｂ７、及びＡｂ８と称する抗ＩＬ−２７抗体分子を発現するハイブリドーマが含まれた。ハイブリドーマ上清を、表面標的化ヒトＥＢＩ３を発現する哺乳動物細胞のフローサイトメトリーによって分析した。試験した全てのハイブリドーマクローン上清は、ＥＢＩ３発現細胞に結合した（データは示さず）。
【０３６７】
例示的な単離された抗ＥＢＩ３抗体Ａｂ７（以下、「Ａｂ７」と称し、以下「Ａｂ７−ＶＨ０」と称する免疫グロブリン重鎖可変領域、及び以下「Ａｂ７−ＶＬ０」と称する免疫グロブリン軽鎖可変領域を含む）を配列決定し、以下にさらに特徴評価した（アミノ末端シグナルペプチド配列は示さず）。
【０３６８】
単離されたＡｂ７抗体の重鎖可変領域（Ａｂ７−ＶＨ０）は、以下の配列
【化１】
2021518138.tif 000003
（配列番号１）を有する。
【０３６９】
重鎖可変領域Ａｂ７−ＶＨ０をコードする核酸配列は、以下の配列
【化２−１】
2021518138.tif 000004
【化２−２】
2021518138.tif 000005
を有する。
【０３７０】
単離されたＡｂ７抗体（Ａｂ７−ＶＬ０の軽鎖可変領域は、以下の配列
【化３】
2021518138.tif 000006
を有する。
【０３７１】
単離されたＡｂ７抗体の重鎖（Ａｂ７−ＶＨ０−ｍＩｇＧ２ａ）は、以下の配列
【化４】
2021518138.tif 000007
を有する。
【０３７２】
軽鎖可変領域Ａｂ７−ＶＬ０をコードする核酸配列は、以下の配列
【化５−１】
2021518138.tif 000008
【化５−２】
2021518138.tif 000009
を有する。
【０３７３】
単離されたＡｂ７抗体の軽鎖（Ａｂ７−ＶＬ０−ｍＫａｐｐａ）は、以下の配列
【化６】
2021518138.tif 000010
を有する。
【０３７４】
ヒト化Ａｂ７抗体は、当該技術分野で公知の方法を使用して設計した。簡潔には、マウスモノクローナルＡｂ７抗体をコードするＶ領域遺伝子配列を使用して、一連の完全ヒト化抗体を構築した。可変領域遺伝子を、ヒトＩｇＧ１重鎖定常ドメイン及びヒトカッパ軽鎖定常ドメインをコードするベクターにクローニングした。キメラ及びヒト化抗体は、哺乳動物細胞で一過性に発現された。単離されたＡｂ７重鎖可変領域のヒト化により、５つのヒト化重鎖可変領域変異型（以下、「Ａｂ７−ＶＨ１」、「Ａｂ７−ＶＨ２」、「Ａｂ７−ＶＨ３」、「Ａｂ７−ＶＨ４」及び「Ａｂ７−ＶＨ５」と称する）がもたらされた。単離されたＡｂ７軽鎖可変領域のヒト化により、４つのヒト化軽鎖可変領域変異型（以下、「Ａｂ７−ＶＬ１」、「Ａｂ７−ＶＬ２」、「Ａｂ７−ＶＬ３」、及び「Ａｂ７−ＶＬ４」と称する）がもたらされた。
【０３７５】
ヒト化Ａｂ７変異型可変領域を定義するタンパク質配列、及びヒト化Ａｂ７変異型可変領域をコードするヌクレオチド配列を、以下にまとめる（アミノ末端シグナルペプチド配列は示さず）。
【０３７６】
重鎖可変領域Ａｂ７−ＶＨ１は、以下の配列
【化７】
2021518138.tif 000011
を有する。
【０３７７】
重鎖可変領域Ａｂ７−ＶＨ１をコードする核酸配列は、以下の配列
【化８】
2021518138.tif 000012
を有する。
【０３７８】
重鎖可変領域Ａｂ７−ＶＨ２は、以下の配列
【化９】
2021518138.tif 000013
（配列番号７）を有する。
【０３７９】
重鎖可変領域Ａｂ７−ＶＨ２をコードする核酸配列は、以下の配列
【化１０】
2021518138.tif 000014
を有する。
【０３８０】
重鎖可変領域Ａｂ７−ＶＨ３は、以下の配列
【化１１】
2021518138.tif 000015
（配列番号９）を有する。
【０３８１】
重鎖可変領域Ａｂ７−ＶＨ３をコードする核酸配列は、以下の配列
【化１２】
2021518138.tif 000016
を有する。
【０３８２】
重鎖可変領域Ａｂ７−ＶＨ４は以下の配列
【化１３】
2021518138.tif 000017
（配列番号１１）を有する。
【０３８３】
重鎖可変領域Ａｂ７−ＶＨ４をコードする核酸配列は、以下の配列
【化１４】
2021518138.tif 000018
を有する。
【０３８４】
重鎖可変領域Ａｂ７−ＶＨ５は、以下の配列
【化１５】
2021518138.tif 000019
（配列番号１３）を有する。
【０３８５】
重鎖可変領域Ａｂ７−ＶＨ５をコードする核酸配列は、以下の配列
【化１６−１】
2021518138.tif 000020
【化１６−２】
2021518138.tif 000021
を有する。
【０３８６】
軽鎖可変領域Ａｂ７−ＶＬ１は、以下の配列
【化１７】
2021518138.tif 000022
を有する。
【０３８７】
軽鎖可変領域Ａｂ７−ＶＬ１をコードする核酸配列は、以下の配列
【化１８】
2021518138.tif 000023
を有する。
【０３８８】
軽鎖可変領域Ａｂ７−ＶＬ２は、以下の配列
【化１９】
2021518138.tif 000024
を有する。
【０３８９】
軽鎖可変領域Ａｂ７−ＶＬ２をコードする核酸配列は、以下の配列
【化２０−１】
2021518138.tif 000025
【化２０−２】
2021518138.tif 000026
を有する。
【０３９０】
軽鎖可変領域Ａｂ７−ＶＬ３は、以下の配列
【化２１】
2021518138.tif 000027
を有する。
【０３９１】
軽鎖可変領域Ａｂ７−ＶＬ３をコードする核酸配列は、以下の配列
【化２２】
2021518138.tif 000028
を有する。
【０３９２】
軽鎖可変領域Ａｂ７−ＶＬ４は、以下の配列
【化２３】
2021518138.tif 000029
を有する。
【０３９３】
軽鎖可変領域Ａｂ７−ＶＬ４をコードする核酸配列は、以下の配列
【化２４−１】
2021518138.tif 000030
【化２４−２】
2021518138.tif 000031
を有する。
【０３９４】
単離された親Ａｂ７抗体（Ｋａｂａｔ定義）の重鎖ＣＤＲアミノ酸配列及び軽鎖ＣＤＲアミノ酸配列を表１に示す。
【０３９５】
【表１】
2021518138.tif 000032
【０３９６】
完全なキメラ及びヒト化重鎖抗体配列または軽鎖抗体配列を作製するために、上記の各重鎖可変領域をヒトＩｇＧ１定常領域と組み合わせ、上記の各軽鎖可変領域をヒトカッパ定常領域と組み合わせた。
【０３９７】
キメラ及びヒト化Ａｂ７変異体の完全な重鎖及び軽鎖を定義するタンパク質配列を、以下にまとめる（アミノ末端シグナルペプチド配列は示さず）。
【０３９８】
重鎖Ａｂ７−ＶＨ０−ＩｇＧ１は、以下の配列
【化２５−１】
2021518138.tif 000033
【化２５−２】
2021518138.tif 000034
を有する。
【０３９９】
重鎖Ａｂ７−ＶＨ０−ＩｇＧ１をコードする核酸配列は、以下の配列
【化２６】
2021518138.tif 000035
を有する。
【０４００】
重鎖Ａｂ７−ＶＨ１−ＩｇＧ１は、以下の配列
【化２７】
2021518138.tif 000036
を有する。
【０４０１】
重鎖Ａｂ７−ＶＨ１−ＩｇＧ１をコードする核酸配列は、以下の配列
【化２８−１】
2021518138.tif 000037
【化２８−２】
2021518138.tif 000038
を有する。
【０４０２】
重鎖Ａｂ７−ＶＨ２−ＩｇＧ１は、以下の配列
【化２９】
2021518138.tif 000039
を有する。
【０４０３】
重鎖Ａｂ７−ＶＨ２−ＩｇＧ１をコードする核酸配列は、以下の配列
【化３０】
2021518138.tif 000040
を有する。
【０４０４】
重鎖Ａｂ７−ＶＨ３−ＩｇＧ１は、以下の配列
【化３１−１】
2021518138.tif 000041
【化３１−２】
2021518138.tif 000042
を有する。
【０４０５】
重鎖Ａｂ７−ＶＨ３−ＩｇＧ１をコードする核酸配列は、以下の配列
【化３２】
2021518138.tif 000043
を有する。
【０４０６】
重鎖Ａｂ７−ＶＨ４−ＩｇＧ１は、以下の配列
【化３３】
2021518138.tif 000044
を有する。
【０４０７】
重鎖Ａｂ７−ＶＨ４−ＩｇＧ１をコードする核酸配列は、以下の配列
【化３４−１】
2021518138.tif 000045
【化３４−２】
2021518138.tif 000046
を有する。
【０４０８】
重鎖Ａｂ７−ＶＨ５−ＩｇＧ１は、以下の配列
【化３５】
2021518138.tif 000047
を有する。
【０４０９】
重鎖Ａｂ７−ＶＨ５−ＩｇＧ１をコードする核酸配列は、以下の配列
【化３６】
2021518138.tif 000048
を有する。
【０４１０】
軽鎖Ａｂ７−ＶＬ０−Ｋａｐｐａは、以下の配列
【化３７】
2021518138.tif 000049
を有する。
【０４１１】
軽鎖Ａｂ７−ＶＬ０−Ｋａｐｐａをコードする核酸配列は、以下の配列
【化３８】
2021518138.tif 000050
を有する。
【０４１２】
軽鎖Ａｂ７−ＶＬ１−Ｋａｐｐａは、以下の配列
【化３９】
2021518138.tif 000051
を有する。
【０４１３】
軽鎖Ａｂ７−ＶＬ１−Ｋａｐｐａをコードする核酸配列は、以下の配列
【化４０−１】
2021518138.tif 000052
【化４０−２】
2021518138.tif 000053
を有する。
【０４１４】
軽鎖Ａｂ７−ＶＬ２−Ｋａｐｐａは、以下の配列
【化４１】
2021518138.tif 000054
を有する。
【０４１５】
軽鎖Ａｂ７−ＶＬ２−Ｋａｐｐａをコードする核酸配列は、以下の配列
【化４２−１】
2021518138.tif 000055
【化４２−２】
2021518138.tif 000056
を有する。
【０４１６】
軽鎖Ａｂ７−ＶＬ３−Ｋａｐｐａは、以下の配列
【化４３】
2021518138.tif 000057
を有する。
【０４１７】
軽鎖Ａｂ７−ＶＬ３−Ｋａｐｐａをコードする核酸配列は、以下の配列
【化４４−１】
2021518138.tif 000058
【化４４−２】
2021518138.tif 000059
を有する。
【０４１８】
軽鎖Ａｂ７−ＶＬ４−Ｋａｐｐａは、以下の配列
【化４５】
2021518138.tif 000060
を有する。
【０４１９】
軽鎖Ａｂ７−ＶＬ４−ｋａｐｐａをコードする核酸配列は、以下の配列
【化４６−１】
2021518138.tif 000061
【化４６−２】
2021518138.tif 000062
を有する。
【０４２０】
また、可変領域配列を他の抗体定常領域配列に融合させて、完全長免疫グロブリン重鎖及び軽鎖を産生できることも企図される。例えば、Ａｂ７−ＶＨ０、Ａｂ７−ＶＨ１、Ａｂ７−ＶＨ２、Ａｂ７−ＶＨ３、Ａｂ７−ＶＨ４、またはＡｂ７−ＶＨ５重鎖可変領域は、ヒトＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４または定常領域に１つもしくは複数のアミノ酸置換を含むＩｇＧ４（例えば、ＩｇＧ４ｍｔ、またはＩｇＧ４ｍｔ２）と組み合わせてよい。同様に、Ａｂ７−ＶＬ０、Ａｂ７−ＶＬ１、Ａｂ７−ＶＬ２、Ａｂ７−ＶＬ３またはＡｂ７−ＶＬ４軽鎖可変領域は、ヒトラムダ定常領域と組み合わせてよい。
【０４２１】
上記のＡｂ７及びヒト化Ａｂ７変異体の重鎖可変領域及び軽鎖可変領域をコードするＤＮＡフラグメントを、ＩｇＧ１重鎖及びカッパ軽鎖のｐＡＮＴ発現ベクター（Ａｎｔｉｔｏｐｅ）系にクローニングするために、隣接する制限酵素部位を用いて合成した。全ての構築物は、配列決定によって確認した。表２に示す重鎖及び軽鎖の組み合わせを、ＰＥＩトランスフェクション法を使用してＨＥＫ２９３  ＥＢＮＡ付着細胞（ＬＧＣ  Ｓｔａｎｄａｒｄｓ，Ｔｅｄｄｉｎｇｔｏｎ，ＵＫ）に一過的にトランスフェクトし、トランスフェクション後７日間インキュベートした。
【０４２２】
【表２−１】
2021518138.tif 000063
【表２−２】
2021518138.tif 000064
【０４２３】
抗体を、プロテインＡコンジュゲートセファロースカラム（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ，Ｌｉｔｔｌｅ  Ｃｈａｌｆｏｎｔ，ＵＫ）で細胞培養物上清から精製し、緩衝液を、１×ＤＰＢＳ  ｐＨ７．２に交換し、予測されたアミノ酸配列に基づいて吸光係数（Ｅｃ（０．１％））を使用してＯＤ２８０ｎｍにより定量化した。１μｇの各抗体をＳＤＳ−ＰＡＧＥにより分析し、典型的な抗体のプロファイルに対応するバンドを観察した（データは示さず）。
【０４２４】
抗ＥＢＩ３抗体のｉｎ  ｖｉｔｒｏ特徴評価
表２に記載の通りに産生されたＡｂ７抗体及びＡｂ７抗体変異体を、その生物学的特徴及び活性を確認するために、一連のｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイで試験した。
【０４２５】
キメラＡｂ７．１抗体と比較したヒト化Ａｂ７抗体変異体の結合を評価するために、結合競合ＥＬＩＳＡを確立した。アッセイプレートを、１×ＤＰＢＳ  ｐＨ７．２に希釈した１μｇ／ｍＬのヒトＩＬ−２７（ｈＩＬ−２７）（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ａｂｉｎｇｄｏｎ，ＵＫ）でコーティングし、一晩４℃にてインキュベートした。全ての抗体を、２％ＢＳＡ／ＤＰＢＳに２５μｇ／ｍＬまで希釈し、プレートを３倍まで段階希釈して、８点結合曲線を生成した。抗体希釈液を、０．０８μｇ／ｍＬの一定の最終濃度にてビオチン化Ａｂ７．１抗体と予混合した。次に、抗体混合物を、コーティングしたアッセイプレート上に移し、１時間室温にてインキュベートした。ビオチン化Ａｂ７．１抗体の結合を、ストレプトアビジン−ペルオキシダーゼコンジュゲート（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ，Ｇｉｌｌｉｎｇｈａｍ，ＵＫ）及びＴＭＢ基質（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ，Ｌｏｕｇｈｂｏｒｏｕｇｈ，ＵＫ）を用いて検出した。反応を、１Ｍ  ＨＣｌを用いて停止し、Ｄｙｎｅｘ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  ＭＲＸ  ＴＣ  ＩＩプレートリーダー上で４５０ｎｍにて吸光度を読み取った。
【０４２６】
試験抗体の絶対ＩＣ５０値を、４パラメータロジスティック曲線を使用して決定した。各プレート上のキメラ抗体のＩＣ５０に対して正規化されたＩＣ５０を、表３にまとめた。結果は、Ａｂ７−ＶＬ４軽鎖を含有する変異体を除いて、生成された全てのヒト化Ａｂ７変異体が、キメラＡｂ７．１抗体と同様の結合プロファイルを有し、ほとんどの変異体がキメラＡｂ７．１抗体の２倍以内で競合していることを示す。
【０４２７】
【表３−１】
2021518138.tif 000065
【表３−２】
2021518138.tif 000066
【０４２８】
抗体を、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）によってさらに特徴評価した。反応速度実験を、Ｂｉａｃｏｒｅ  Ｔ２００（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ，Ｕｐｐｓａｌａ，Ｓｗｅｄｅｎ）で行った。全ての実験は、２５℃にて、ＨＢＳ−Ｐ＋泳動用緩衝液（ｐＨ７．４）（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ，Ｌｉｔｔｌｅ  Ｃｈａｌｆｏｎｔ，ＵＫ）を用いて、ｈＩＬ−２７（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ａｂｉｎｇｄｏｎ，ＵＫ）を使用して実行した。ヒトＩＬ−２７（ｈＩＬ−２７）抗原は、ＣＭ５チップ上に捕捉して、約１６ＲＵを得た。固定化を、１０ｍＭ酢酸緩衝液ｐＨ５．０中１μｇ／ｍＬのタンパク質濃度にて実行した。各濃度間で再生することなく、ＨＢＳ−Ｐ＋緩衝液に希釈した３．３ｎＭから３０ｎＭの抗体の３点、３倍希釈範囲を使用した。漸増濃度の抗体の３回の注射についての会合相を各時７５秒間モニターし、最後の抗体注射後２５０秒間、単一の解離相を測定した。ｈＩＬ−２７表面の再生は、１２０秒間の２Ｍ  ＭｇＣｌ２の単回注射を使用して行った。キメラ抗体の複数回の反復測定（ｎ＝４）を、アッセイ全体を通して行って、動態サイクル全体にわたって表面及び分析物の安定性を確認した。
【０４２９】
１：１結合及び二価分析物モデルの両方を使用して、抗体の二価性質に起因するデータを分析した。１：１結合モデル分析からの結果を表４にまとめ、二価分析物モデルからの結果を表５にまとめる。
【０４３０】
【表４−１】
2021518138.tif 000067
【表４−２】
2021518138.tif 000068
【０４３１】
【表５−１】
2021518138.tif 000069
【表５−２】
2021518138.tif 000070
【０４３２】
１：１モデル（表４）を使用する単一サイクル反応速度は、Ａｂ７−ＶＬ４ヒト化変異体が、ｈＩＬ−２７に結合せず、残りの変異体がキメラ抗体の２倍以内で結合したことを実証し、これは、二価分析物モデル（表５）及び競合ＥＬＩＳＡからの結果と一致する。
【０４３３】
要約すると、単一サイクル反応速度によって及び１：１結合モデルを使用して決定したＡｂ７．１キメラ抗体の結合親和性は、１ｎＭであった。結合が消失したＡｂ７−ＶＬ４含有変異体を除いて、全てのヒト化変異体のＫＤは１．５ｎＭ以下であった。これらの結果は、Ａｂ７抗体及びＡｂ７抗体変異体が、ＩＬ−２７のＥＢＩ３サブユニットに高い親和性で結合することを実証する。
【０４３４】
実施例２：ヒトＩＬ−２７のＥＢＩ３及び／またはＰ２８サブユニットと特異的に結合する酵母における抗ＩＬ−２７抗体の生成
複数のエピトープビンを表す追加の抗ＩＬ−２７モノクローナル抗体を、下記の方法を使用して、８つのナイーブヒト合成酵母ライブラリから選択した。
【０４３５】
材料及び方法
約１０９の多様性をそれぞれ有する８つのナイーブヒト合成酵母ライブラリを、以前に記載されているとおりに増殖させた（例えば、Ｘｕ  ｅｔ  ａｌ．，（２０１３）Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇ  Ｄｅｓ  Ｓｅｌ  ２６（１０）：６６３−６７０；ＷＯ２００９０３６３７９；ＷＯ２０１０１０５２５６；及びＷＯ２０１２００９５６８を参照されたく、これらは全て参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）。選択の最初の２ラウンドには、Ｍｉｌｔｅｎｙｉ  ＭＡＣＳシステムを利用する磁気ビーズソーティング法を、以前に記載されているとおりに実施した（例えば、Ｓｉｅｇｅｌ  ｅｔ  ａｌ．（２００４）Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ２８６（１−２）：１４１−１５３を参照されたく、これは参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）。
【０４３６】
簡潔に言えば、酵母細胞（約１０１０個の細胞／ライブラリ）を、洗浄緩衝液（リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）／０．１％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ））中、３ｍｌの１００ｎＭビオチン化抗原（組換えヒトＩＬ−２７；Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）と３０分間３０℃にてインキュベートした。４０ｍｌ氷冷洗浄緩衝液を用いて１回洗浄した後、細胞ペレットを２０ｍＬ洗浄緩衝液に再懸濁し、ストレプトアビジンマイクロビーズ（５００μｌ）を酵母に加え、１５分間４℃にてインキュベートした。次に、酵母細胞をペレット化し、２０ｍＬ洗浄緩衝液に再懸濁し、Ｍｉｌｔｅｎｙｉ  ＬＳカラム上に充填した。２０ｍＬを充填した後、カラムを３ｍｌ洗浄緩衝液を用いて３回洗浄した。カラムを、次に、磁場から取り出し、酵母細胞を５ｍＬの増殖培地で溶離し、次に一晩増殖させた。次の選択ラウンドを、フローサイトメトリーを使用して実施した。およそ２×１０７個の酵母細胞をペレット化し、洗浄緩衝液を用いて３回洗浄し、３０℃にて、平衡条件下にて漸減濃度のビオチン化抗原（１００から１ｎＭ）、種交差反応性を得るために異なる種の３０ｎＭビオチン化抗原、または選択から非特異的抗体を除去するために多特異性除去試薬（ＰＳＲ）のいずれかとインキュベートした。ＰＳＲを枯渇させるために、ライブラリをビオチン化ＰＳＲ試薬の１：１０希釈液とインキュベートした。
【０４３７】
次に、酵母細胞を、洗浄緩衝液を用いて２回洗浄し、ＬＣ−ＦＩＴＣ（１：１００に希釈）及びＳＡ−６３３（１：５００に希釈）またはＥＡＰＥ（１：５０に希釈）のいずれかの二次試薬を用いて１５分間４℃にて染色した。洗浄緩衝液を用いて２回洗浄した後、細胞ペレットを０．３ｍＬ洗浄緩衝液に再懸濁し、ストレーナーキャップ付きのソートチューブに移した。ＦＡＣＳ  ＡＲＩＡソーター（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を使用してソーティングを行い、所望の特徴を持つ抗体を選択するためにソートゲートを決定した。所望の特徴を全て備えた集団が得られるまで、選択ラウンドを繰り返した。ソーティングの最終ラウンドの後、酵母細胞をプレーティングし、特徴評価のために個々のコロニーを精選した。
【０４３８】
軽鎖の多様化
抗体のさらなる探索研究及び改善のために、プライマリ探索研究段階中に、軽鎖多様化プロトコルを使用した。
【０４３９】
軽鎖バッチ多様化プロトコル：ナイーブ選択出力からの重鎖プラスミドを、スマッシュアンドグラブを介して酵母から抽出し、Ｅ．ｃｏｌｉにて増殖させてから精製し、５×１０６の多様性を有する軽鎖ライブラリに形質転換した。選択を、ナイーブ探索研究と同じ条件を採用して１ラウンドのＭＡＣＳ及び４ラウンドのＦＡＣＳを用いて実施した。
【０４４０】
抗体最適化
抗体の最適化を、下記のように重鎖可変領域及び軽鎖可変領域へと多様性を導入することにより実施した。
【０４４１】
ＣＤＲＨ１及びＣＤＲＨ２選択：単一抗体のＣＤＲＨ３を、１×１０８の多様性のＣＤＲＨ１変異体及びＣＤＲＨ２変異体を有する既製のライブラリ中に組換え、ナイーブ探索研究において記載するように１ラウンドのＭＡＣＳ及び４ラウンドのＦＡＣＳを用いて選択を実施した。異なるＦＡＣＳラウンドでは、ライブラリを、ＰＳＲ結合、種交差反応性、滴定または親Ｆａｂ予複合体化による親和性圧力について調べ、所望の特徴を有する集団を得るために、ソーティングを実施した。
【０４４２】
抗体産生及び精製
酵母クローンを飽和状態まで増殖させ、次に４８時間３０℃にて振とうしながら誘導した。誘導後、酵母細胞をペレット化し、上清を精製のために回収した。プロテインＡカラムを使用してＩｇＧを精製し、酢酸、ｐＨ２．０で溶出した。Ｆａｂフラグメントを、パパイン消化によって生成し、ＫａｐｐａＳｅｌｅｃｔ（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  ＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅｓ）上で精製した。
【０４４３】
ＦｏｒｔｅＢｉｏ  ＫＤ測定
ＦｏｒｔｅＢｉｏ親和性測定を、一般的に、以前に記載されているようにＯｃｔｅｔ  ＲＥＤ３８４で実施した（例えば、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる、Ｅｓｔｅｐ  ｅｔ  ａｌ，Ｈｉｇｈ  ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔ  ｓｏｌｕｔｉｏｎ−ｂａｓｅｄ  ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ  ｏｆ  ａｎｔｉｂｏｄｙ−ａｎｔｉｇｅｎ  ａｆｆｉｎｉｔｙ  ａｎｄ  ｅｐｉｔｏｐｅ  ｂｉｎｎｉｎｇ．Ｍａｂｓ  ５（２），２７０−２７８（２０１３）を参照されたい）。簡潔には、ＦｏｒｔｅＢｉｏ親和性測定を、ＩｇＧをＡＨＱセンサー上にオンラインで充填することによって実施した。センサーをアッセイ緩衝液中で３０分間にわたりオフラインで平衡化した後、ベースライン確立のために、オンラインで６０秒間モニタリングした。ＩｇＧを充填したセンサーを１００ｎＭ抗原に３分間曝露し、その後、アッセイ緩衝液に３分間移して、解離速度を測定した。全ての反応速度を、１：１結合モデルを使用して分析した。組換えヒトＩＬ−２７タンパク質（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓカタログ番号：２５２６−ＩＬ）を抗原として使用した。抗ＩＬ−２７抗体に関する親和性測定を、図１に示す。
【０４４４】
ＦｏｒｔｅＢｉｏエピトープビニング／リガンドブロッキング
エピトープビニング／リガンドブロッキングを、標準的なサンドイッチ形式のクロスブロッキングアッセイを使用して実施した。対照抗標的ＩｇＧをＡＨＱセンサー上に充填し、センサー上の非占有Ｆｃ結合部位を無関連ヒトＩｇＧ１抗体でブロッキングした。次に、センサーを１００ｎＭ標的抗原に曝露し、続いて、二次抗標的抗体またはリガンドに曝露した。抗原会合後の二次抗体またはリガンドによる追加的結合は、非占有エピトープ（非競合物質）を示し、一方で結合無しはエピトープブロッキング（競合物質またはリガンドブロッキング）を示す。
【０４４５】
ＭＳＤ−ＳＥＴ反応速度アッセイ
以前に記載されている（Ｅｓｔｅｐ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３）通りに平衡親和性測定を実施した。溶液平衡滴定（ＳＥＴ）を、抗原を１０〜１００ｐＭで一定に保持したＰＢＳ＋０．１％ＩｇＧ不含ＢＳＡ（ＰＢＳＦ）中で実施し、５〜１００ｎＭにて開始する抗体の３倍〜５倍の連続希釈物とインキュベートした（実験条件は試料に依存する）。抗体（ＰＢＳ中２０ｎＭ）を、標準的な結合ＭＳＤ−ＥＣＬプレート上へと一晩４℃にてまたは室温にて３０分間コーティングした。次に、プレートを７００ｒｐｍにて振とうしながら３０分間ブロックし、その後、洗浄緩衝液（ＰＢＳＦ＋０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０）を用いて３回洗浄した。ＳＥＴ試料を適用し、プレート上で７００ｒｐｍにて振とうしながら１５０秒間インキュベートした後、１回洗浄した。プレート上に捕捉された抗原を、ＰＢＳＦ中２５０ｎｇ／ｍＬスルホタグ標識ストレプトアビジンを用いて、プレート上で３分間インキュベートすることにより検出した。プレートを、洗浄緩衝液を用いて３回洗浄し、次に界面活性剤を伴う１×リード緩衝液Ｔを使用してＭＳＤ  Ｓｅｃｔｏｒ  Ｉｍａｇｅｒ  ２４００測定器で読み取った。遊離抗原の割合（％）を、滴定された抗体の関数としてＰｒｉｓｍにプロットし、二次方程式に当てはめてＫＤを抽出した。スループットを向上させるために、ＳＥＴ試料調製を含む、ＭＳＤ−ＳＥＴ実験を通して、液体処理ロボットを使用した。
【０４４６】
実施例３：組換えヒトＩＬ−２７への抗ＩＬ−２７抗体の結合
実施例２に記載の抗ＩＬ−２７抗体が組換えヒトＩＬ−２７に結合する能力を、ＥＬＩＳＡによって評価した。簡潔には、Ｎｕｎｃ  ＭａｘｉＳｏｒｐ  ＥＬＩＳＡプレート（Ａｆｆｙｍｅｔｒｉｘ番号４４−２４０４−２１）を、１００μＬ／ウェル組換えヒトＩＬ−２７（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ番号２５２６−ＩＬ／ＣＦ）（０．５μｇ／ｍＬをＰＢＳ中に希釈）を用いてコーティングし、密封して、一晩４℃にてインキュベートした。プレートを、１００μＬ／ウェルの洗浄緩衝液（ＰＢＳ＋０．０１％Ｔｗｅｅｎ）を用いて３回洗浄した。次に、プレートを２００μＬ／ウェルのブロッキング緩衝液（ＰＢＳ＋０．１％  ＢＳＡ＋０．０１％Ｔｗｅｅｎ）を用いて、１時間室温（ＲＴ）にて振とうしながらブロックした。示すように、ブロッキング緩衝液をデカントし、１００μＬ／ウェルの希釈対照及び抗ＩＬ−２７抗体を加えた。抗体を、１μｇ／ｍＬの最高濃度から開始して１：１０に希釈することにより、各抗体に関して１０点段階希釈を作製した。プレートを、１〜２時間室温にて振とうしながらインキュベートした。プレートを、１００μＬ／ウェルの洗浄緩衝液を用いて３回洗浄した。１００μＬ／ウェルの抗ヒトＩｇＧ二次抗体（ＳｏｕｔｈｅｒｎＢｉｏｔｅｃｈ；カタログ番号２０１４−０５）を加えた（ブロッキング緩衝液中に１：５０００希釈）。次に、プレートを、１時間室温にて振とうしながらインキュベートした。１時間のインキュベーション後、プレートを、１００μＬ／ウェルの洗浄緩衝液を用いて３回洗浄した。プレートを展開させるために、１００μＬ／ウェルＴＭＢ緩衝液（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ番号００−２０２３）を加えた。標準曲線のウェルで青色の発色が観察され、希釈された対照抗体の最高濃度が濃い青色（５〜１０分）に達するとすぐに、５０μＬ／ウェルＳＴＯＰ溶液（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ番号ＳＳ０４）を加えた（色は黄色に変化するだろう）。展開されたプレートを、反応停止後３０分以内に４５０ｎｍ（波長補正に関してはマイナス５７０ｎｍ）にて読み取った。
【０４４７】
図２に示すように、抗ＩＬ−２７抗体は、組換えヒトＩＬ−２７に結合する。ＩｇＧアイソタイプ対照抗体（ＩｇＧ対照）を、コンパレーターとして使用した。
【０４４８】
例えば、生化学的親和性及び特異性の研究では、抗ＩＬ−２７抗体ＳＲＦ３８８がヘテロ二量体サイトカインＩＬ−２７のｐ２８サブユニット（しかし、ＥＢＩ３サブユニットではない）に結合することが示された。ＳＲＦ３８８は、ヒト、非ヒト霊長類、及びげっ歯類組換えＩＬ−２７に結合し、結合の程度は種間で異なった。ＳＲＦ３８８のＩＬ−２７への結合特異性を、約４５００細胞表面及び可溶性分子のパネルに対して試験することにより確認し、オフターゲット結合は観察されなかった。ＩＬ−２７のその受容体ＩＬ−２７ＲＡ（ＷＳＸ−１）に対する結合特異性も確認した：他の細胞表面受容体はヒトＩＬ−２７に結合しなかった。ＳＲＦ３８８がヒトＩＬ−２７及びＩＬ−２７ＲＡ（ＷＳＸ−１）間の相互作用を遮断する能力は、表面プラズモン共鳴によって確認した。
【０４４９】
本明細書に開示する抗体の結合を、いくつかのモデル系において評価した。ヒトＩＬ−２７がマウス細胞上で生物学的に活性であるため、ＤＮＡミニサークル送達を使用したマウスにおけるヒトＩＬ−２７の全身過剰発現を利用して、全ゲノムマイクロアレイ分析、フローサイトメトリー、及び血清サイトカイン分析により、ｉｎ  ｖｉｖｏでのＩＬ−２７媒介作用を分析した。ｉｎ  ｖｉｖｏでＩＬ−２７によって調節されたマーカーの多くは、ヒトの細胞ベースのアッセイでの所見と一致していた。ＳＲＦ３８１は、播種性Ｂ１６腫瘍モデルでも評価した。その設定では、ＳＲＦ３８１を用いた処置は、ＩＬ−２７リガンド（ＩＬ−２７ｐ２８、ＥＢＩ３）または受容体（ＩＬ−２７ＲＡ）の様々な構成要素が欠損しているマウスで観察された表現型と一致する結果を示した。
【０４５０】
まとめると、これらの研究は、ＳＲＦ３８８（及びその同胞ＳＲＦ３８１）が、マウスのＩＬ２７欠損症を表現型コピーすることができ、ＩＬ−２７に特異的及び高い親和性で結合し、単独でまたはＰＤ−Ｌ１遮断剤と組み合わせてその免疫抑制効果を阻害できることを実証する。
【０４５１】
実施例４：抗ＩＬ２７抗体は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏでＳＴＡＴ１のリン酸化を阻害する
ＩＬ−２７受容体（ＩＬ−２７Ｒ）を通したＩＬ−２７シグナル伝達は、シグナル伝達性転写因子（ＳＴＡＴ１）ポリペプチドのリン酸化（ｐＳＴＡＴ１）をもたらす。実施例２に記載した抗ＩＬ−２７抗体を、フローサイトメトリーにより、ヒト全血、ヒトＰＢＭＣ、Ｕ９３７骨髄細胞（組織球性リンパ腫細胞株）及びＨＵＴ−７８Ｔ細胞リンパ腫におけるＳＴＡＴ１のＩＬ−２７媒介性リン酸化を阻害する能力について試験した。
【０４５２】
抗ＩＬ−２７抗体を、ヒト全血におけるＳＴＡＴ１のＩＬ−２７媒介性リン酸化を阻害する能力について試験した。簡潔には、室温で保存された、ＥＤＴＡ抗凝固処理ヒト全血を、このアッセイで使用した。４５μＬ血液を、深型ウェル丸底プレート（Ｐｈｅｎｉｘ番号８５０３５６）の各ウェルへと配布し、プレートウォーマー（ＥｃｈｏＴｈｅｒｍ  ＩＣ２０）上または３７℃インキュベーター内で３０分間３７℃にて加温した。抗ＩＬ−２７抗体を、ポリプロピレンＶ底プレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ番号３３６３）にてエンドトキシン不含ＰＢＳ（Ｔｅｋｎｏｖａ番号Ｐ０３００）中１０倍最高濃度に希釈した。抗ＩＬ−２７抗体を、エンドトキシン不含ＰＢＳ中に必要に応じて段階希釈した。ＰＢＳ単独を、未刺激対照及び刺激対照のウェルに加えた。５μＬの各希釈液を、４５μＬ血液のウェルに加え、プレートシェーカー上で１５秒間、１０００ＲＰＭ（Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ  Ｍｉｘ  Ｍａｔｅ）にて振とうすることによって混合した。プレートを、６０分間３７℃にてプレートウォーマー上または３７℃インキュベーター内でインキュベートした。
【０４５３】
１０μｇバイアルの組換えヒトＩＬ−２７（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ番号２５２６−ＩＬ）を、１００μＬ  ＰＢＳ＋０．１％ＢＳＡ（１０％ＢＳＡ  Ｓｉｇｍａ番号Ａ１５９５から作成）を加えることにより１００μｇ／ｍＬへと再構成した。組換えｈＩＬ−２７（ｒｈＩＬ−２７）のワーキングストックを、エンドトキシン不含ＰＢＳ中２００ｎｇ／ｍＬへと希釈することにより調製した。６０分間のインキュベーション後、５μＬの２００ｎｇ／ｍＬ  ｒｈＩＬ−２７を刺激された血液の各ウェルに加えた。５μＬ  ＰＢＳを未刺激対照ウェルに加えた。プレートを、プレートシェーカー上で１５秒間１０００ＲＰＭにて振とうした。プレートを、３０分間３７℃にてインキュベートした。
【０４５４】
３０分間のインキュベーション後、細胞を固定した。Ｌｙｓｅ／Ｆｉｘ試薬（ＢＤ番号５５８０４９）を、滅菌水（Ｈｙｃｌｏｎｅ番号ＳＨ３０５２９０２）中１：５に希釈し、水浴にて３７℃まで加温した。５００μＬ  Ｌｙｓｅ／Ｆｉｘ試薬を、深型ウェルプレートの各ウェルに加え、プレートをプレートシェーカー上で１５秒間１０００ＲＰＭにて混合した。プレートを、１５分間３７℃にてインキュベートした。
【０４５５】
１５分間のインキュベーション後、プレートを５分間１５００ＲＰＭで室温にて遠心分離し（Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ遠心分離５８１０Ｒ）、フリックして上清を廃棄した。１ｍＬのエンドトキシン不含ＰＢＳを、ウェルごとに加え、プレートをプレートシェーカー上で１５秒間１０００ＲＰＭにて振とうした。プレートを、５分間１５００ＲＰＭで室温にて遠心分離し（Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ遠心分離５８１０Ｒ）、フリックして上清を廃棄した。細胞ペレットは、プレートに残した。
【０４５６】
細胞ペレットを、ＦＡＣＳ緩衝液（ＰＢＳ，Ｇｉｂｃｏ番号１４１９０−１４４／２％ＦＢＳ，Ｓｉｇｍａ番号Ｆ８３１７／１ｍＭ  ＥＤＴＡ，Ｆｉｓｈｅｒ番号ＢＰ２４８２）中５０μＬ  １：２００  ＣＤ１４−パシフィックブルー（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ番号３２５６１６）に再懸濁し、Ｕ底９６ウェルプレート（Ｃｏｓｔａｒ番号３７９９）に移した。プレートを、プレートシーラー（ＶＷＲ番号８９１３４−４３２）を用いて密封し、３０分間室温にて暗所でインキュベートした。
【０４５７】
３０分間のインキュベーション後、１５０μＬ  ＦＡＣＳ緩衝液を各ウェルに加え、プレートを１５００ＲＰＭで５分間室温にて遠心分離した。次に、細胞ペレットを、１００μＬ  Ｐｅｒｍ  ＩＩＩ（−２０℃にて保存）（ＢＤ番号５５８０５０）にピペッティングを用いて再懸濁し、プレートをプレートシーラー及び蓋で密封した。プレートを、一晩−２０℃にてまたは１５分間４℃にてインキュベートした。インキュベーション後、１５０μＬ  ＰＢＳを加え、プレートを１５００ＲＰＭで５分間室温にて遠心分離した。フリックしてプレートから上清を廃棄し、プレートを、以下の表６に記載のように調製した５０μＬ染色カクテルに再懸濁した。
【０４５８】
【表６】
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【０４５９】
プレートを、１時間室温にて暗所でインキュベートした。１時間のインキュベーション後、１００μＬのＦＡＣＳ緩衝液を加え、プレートを１５００ＲＰＭで５分間室温にて遠心分離した。フリックしてプレートから上清を廃棄し、プレートを１００μＬ  ＦＡＣＳ緩衝液に再懸濁して、フローサイトメトリーにより分析した。
【０４６０】
図３Ａに示すように、抗ＩＬ−２７抗体は、ヒト全血におけるＳＴＡＴ１のリン酸化を阻害する。抗ＩＬ−２７抗体Ａｂ１４は、ヒト全血において２４．７ｎｇ／ｍＬのＩＣ５０でＳＴＡＴ１のリン酸化を阻害した。
【０４６１】
実施例２に記載の抗ＩＬ−２７抗体を、フローサイトメトリーにより、プールされたヒトＰＢＭＣにおけるＳＴＡＴ１のＩＬ−２７媒介性リン酸化を阻害する能力についてさらに試験した。簡潔には、バフィーコートから得たヒトＰＢＭＣ（末梢血単核細胞）の凍結したクライオバイアルを、液体窒素貯蔵庫から取り出し、３７℃の水浴にて素早く解凍した。各クライオバイアルの内容物を、Ｐ１０００ピペットを用いて取り出し、１５ｍＬコニカルファルコンチューブに移した。２〜３ｍＬの完全ＲＰＭＩ−１６４０（Ｇｉｂｃｏ，６１８７０−０３６）を解凍した細胞にゆっくりと加え、細胞を穏やかにかき回すかまたは、フリックして懸濁させた。コニカルチューブに完全ＲＰＭＩ−１６４０を最大１０ｍＬまで補充し、チューブを逆さにして混合した。コニカルチューブを、１４００ＲＰＭで室温にて８分間遠心分離した。
【０４６２】
ＰＢＭＣ細胞を、温かい、血清不含ＲＰＭＩ−１６４０に、４００万個の細胞／ｍＬの密度で再懸濁し、丸底９６ウェルプレート（Ｃｏｓｔａｒ，３７９９）に２００，０００個の細胞／ウェル（５０μ）の密度でプレーティングした。抗ＩＬ−２７抗体を、９６ウェルポリプロピレンプレートの一列目にて血清不含ＲＰＭＩ−１６４０に希釈して、４０μｇ／ｍｌの最高濃度とした（最終的には１０μｇ／ｍｌとなるだろう）。必要に応じて、段階希釈（１：２、１：３、など）を、プレートの最初の１０列の残りにて行った。５０マイクロリットル（μＬ）の抗体ストック（４倍）を、丸底プレートのＰＢＭＣ細胞のプレート最初の１０列に加えた。列１１及び１２では、５０μＬの血清不含ＲＰＭＩ−１６４０細胞培地を加えた。次に、プレートを３７℃にて２時間インキュベートした。
【０４６３】
２時間のインキュベーション後、血清不含ＲＰＭＩ−１６４０細胞培地に希釈した１００μの５０ｎｇ／ｍｌ組換えヒトＩＬ−２７（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，２５２６−ＩＬ）を、各ウェル（血清不含培地のみまたは抗体のみを含む対照ウェルを除く）に加え、最終濃度を２５ｎｇ／ｍｌとした。１００μＬ血清不含ＲＰＭＩ−１６４０細胞培地を、対照ウェルまたは抗体のみのウェルに加えた。プレートを、２０分間３７℃にてインキュベートした。
【０４６４】
２０分のインキュベーション後、５０μＬの４％ＰＦＡ（Ｐｉｅｒｃｅ，２８９０６）を含むＤＩ水を、各ウェルに直接加え、プレートを３７℃にて５分間インキュベートして、細胞を固定した。プレートを、２０００ＲＰＭにて５分間遠心分離した。フリックして培地を廃棄し、プレートを１５０μＬ  ＤＰＢＳを用いて洗浄した。洗浄工程をさらに２回繰り返した。Ｈ２Ｏに希釈した５０μ氷冷９０％メタノール（ＭｅＯＨ）（Ｓｉｇｍａ，４３９１９３）を、１２チャネルピペットを使用して各ウェルに素早く加えた。ＭｅＯＨを加えるとき、各ウェルを混合するために特別な注意を払った。プレートを、２０℃にて少なくとも１５分間インキュベートした。１００μＬのＤＰＢＳを、各ウェルの９０％メタノールの上に加え、プレートを２０００ＲＰＭにて５分間遠心分離した。プレートの内容物を、フリックして廃棄し、プレートを、前述の通りに３回洗浄した。最後の洗浄後、細胞ペレットを、プレートのウェルに残した。
【０４６５】
ペレット化したＰＢＭＣを、ｐＳＴＡＴ１  ＰＥ（ＢＤ  Ｐｈｏｓｆｌｏｗ，５２６０６９）を１：１００でＦＡＣＳ緩衝液（２％ＦＢＳ、ＤＰＢＳ中２ｍＭ  ＥＤＴＡ）中にて用いて４５分間室温にて暗所で染色した。染色液を加えるとき、各ウェルを１２チャンネルピペットを用いて混合するために特別な注意を払った。４５分間のインキュベーション後、１００μＬ  ＦＡＣＳ緩衝液を各ウェルに加え、プレートを２０００ＲＰＭにて５分間遠心分離した。フリックして上清を廃棄し、プレートを、前述の通りに２回洗浄した。細胞を１００μｌ  ＦＡＣＳ緩衝液に再懸濁し、フローサイトメトリーにより分析した。
【０４６６】
図３Ｂに示すように、抗ＩＬ−２７抗体は、ヒトプールＰＢＭＣにおいてＳＴＡＴ１のリン酸化を阻害した。抗ＩＬ−２７抗体ＳＲＦ３８１は、プールされたヒトＰＢＭＣにおいて１４０．５ｎｇ／ｍｌの平均ＩＣ５０（ｎ＝２）でＳＴＡＴ１のリン酸化を阻害した。抗ＩＬ−２７抗体ＳＲＦ３８８は、プールされたヒトＰＢＭＣにおいて５８．３ｎｇ／ｍｌの平均ＩＣ５０（ｎ＝３）でＳＴＡＴ１のリン酸化を阻害した。
【０４６７】
抗ＩＬ−２７抗体を、本質的に図３Ｂに関して記載の通りに、フローサイトメトリーにより、Ｆｃ受容体を発現することが公知の細胞株であるＵ９３７細胞におけるＳＴＡＴ１のＩＬ−２７媒介性リン酸化を阻害する能力についてさらに試験した。図３Ｃに示すように、抗ＩＬ−２７抗体は、図示の通り、Ｕ−９３７細胞におけるＳＴＡＴ１のリン酸化を阻害する。抗体ＳＲＦ３８１は、Ｕ９３７細胞において８１ｎｇ／ｍｌの平均ＩＣ５０（ｎ＝２）でＳＴＡＴ１のリン酸化を阻害した。抗体ＳＲＦ３８８は、Ｕ９３７細胞において９６ｎｇ／ｍｌの平均ＩＣ５０（ｎ＝２）でＳＴＡＴ１のリン酸化を阻害した。
【０４６８】
抗ＩＬ−２７抗体を、本質的に図３Ｂに関して記載の通りに、フローサイトメトリーにより、細胞表面Ｆｃ受容体を発現しない皮膚Ｔ細胞性リンパ腫株ＨＵＴ−７８におけるＳＴＡＴ１のＩＬ−２７媒介性リン酸化を阻害する能力について試験した。図３Ｄに示すように、抗ＩＬ−２７抗体は、ＨＵＴ−７８細胞におけるＳＴＡＴ１のリン酸化を阻害した。抗体ＳＲＦ３８１は、ＨＵＴ−７８細胞において８０ｎｇ／ｍｌのＩＣ５０（ｎ＝１）でＳＴＡＴ１のリン酸化を阻害した。抗体ＳＲＦ３８８は、ＨＵＴ−７８細胞において９５ｎｇ／ｍｌのＩＣ５０（ｎ＝１）でＳＴＡＴ１のリン酸化を阻害した。
【０４６９】
本開示は、全血アッセイにおける種間でのＳＲＦ３８８によるＩＬ−２７阻害も評価した。種間でのＳＲＦ３８８活性を特徴評価するために、ヒト、カニクイザル、ラット、及びマウス由来の組換えＩＬ−２７を試験して、これらの種から得た全血試料のＴリンパ球におけるｐＳＴＡＴ１シグナル伝達を刺激した（データは示さず）。
【０４７０】
簡潔には、全血を３７℃まで加温し、その後ＳＲＦ３８８と６０分間プレインキュベーションし、２０ｎｇ／ｍＬのヒトＩＬ−２７を加えた。試料を、さらに３０分間インキュベートした。白血球を固定し、赤血球を溶解した。洗浄後、固定した細胞を透過処理し、抗ＣＤ３及び抗リン酸化ＳＴＡＴ１（Ｙ７０１）を用いて染色した。１時間のインキュベーション後、試料を洗浄し、再懸濁して、フローサイトメトリーを行った。阻害率（％）を、刺激及び未刺激対照ウェルを使用して計算し、ＩＣ５０値を、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍを使用して計算した。
【０４７１】
ヒトＴ細胞におけるＳＲＦ３８８シグナル伝達阻害に関する代表的なデータを、図３Ｅに示す。様々な種に対するＳＲＦ３８８の親和性で得られた所見と一致して、ＳＲＦ３８８によるＩＬ−２７シグナル伝達阻害の効力はヒトにおいて最も強く、次にカニクイザル、ラット、及びマウスが続いた（例えば、表７を参照されたい）。
【０４７２】
【表７】
2021518138.tif 000072
略語：ＩＣ５０＝最大阻害濃度の半分、Ｎ／Ａ＝該当せず
【０４７３】
実施例５：抗ＩＬ−２７抗体によるＣＤ１６１のＩＬ−２７媒介性阻害の低下
Ｃ型レクチンＣＤ１６１は、ＩＬ−２７によって発現が抑制されるＴ細胞のマーカーである。実施例２に記載の抗ＩＬ−２７抗体を、フローサイトメトリーにより、プールされたヒトＰＢＭＣにおけるＣＤ１６１のＩＬ−２７媒介性阻害を逆転させる能力について試験した。簡潔には、バフィーコートから得たプールされたヒトＰＢＭＣ（末梢血単核細胞）の凍結クライオバイアルを、液体窒素貯蔵庫から取り出し、３７℃の水浴にて素早く解凍した。各クライオバイアルの内容物を、Ｐ１０００ピペットを用いて取り出し、１５ｍＬコニカルファルコンチューブに移した。２〜３ｍＬの完全ＲＰＭＩ−１６４０（Ｇｉｂｃｏ，６１８７０−０３６）を解凍した細胞にゆっくりと加え、細胞を穏やかにかき回すかまたは、フリックして懸濁させた。コニカルチューブに完全ＲＰＭＩ−１６４０を最大１０ｍＬまで補充し、チューブを逆さにして混合した。コニカルチューブを、１４００ＲＰＭで室温にて８分間遠心分離した。
【０４７４】
５日間のアッセイ中の蒸発の影響を最小限に抑えるため、外側の壁の使用は避けた。外側のウェルには、２００μＬ／ウェルのＤＰＢＳ（Ｇｉｂｃｏ，１４１９０−１４４）を充填するべきである。ＰＢＭＣ細胞を、温かい、完全ＲＰＭＩ−１６４０に、２００万個の細胞／ｍＬの密度で再懸濁した。精製ヒト抗ＣＤ３抗体（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ，ＵＣＴＨ１、番号３００４０２）を、０．５μｇ／ｍＬの濃度にて加えた（これは最終濃度の２倍である）。１００μＬ／ウェルのこの細胞混合物（２００，０００個の細胞／ウェル）を、丸底９６ウェルプレート（Ｃｏｓｔａｒ，３７９９）にプレーティングする。
【０４７５】
抗ＩＬ−２７抗体を、９６ウェルポリプロピレンプレートの一列目にて完全ＲＰＭＩ−１６４０に希釈して、４０μｇ／ｍｌの最高濃度とした（最終１０μｇ／ｍｌとなるだろう）。必要に応じて、段階希釈（１：２、１：３、など）を、プレートの最初の１０列の残りにて行った。５０μＬの抗体ストック（４倍）を、丸底プレートのＰＢＭＣ細胞のプレートの最初の１０列に加えた。列１１及び１２では、５０μＬの完全ＲＰＭＩ−１６４０を加えた。
【０４７６】
抗ＩＬ−２７抗体の添加後、完全ＲＰＭＩ−１６４０に希釈した５０μｌの１００ｎｇ／ｍｌ組換えヒトＩＬ−２７（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、番号２５２６−ＩＬ）を、各ウェル（血清不含培地または抗体のみを含む対照ウェルを除く）に加え、最終濃度を２５ｎｇ／ｍｌとした。５０μＬの完全ＲＰＭＩ−１６４０を、対照ウェルに加えた。プレートを、組織培養インキュベーター内で干渉を最小限に抑えながら５日間３７℃にてインキュベートした。
【０４７７】
５日間のインキュベーション後、プレートをインキュベーターから取り出し、プレートシェーカー上で３０秒間６００ＲＰＭにて攪拌した。プレートを、１８００ＲＰＭにて５分間遠心分離した。培地を取り出し、追加のアッセイのために取っておき、プレートを１５０μＬ  ＤＰＢＳ（Ｇｉｂｃｏ、番号１４１９０−１４４）を用いて洗浄した。洗浄工程を、さらに２回繰り返した。細胞ペレットを、以下の表８に記載するように、５０μＬ／ウェルの染色カクテルを用いて染色した。
【０４７８】
【表８】
2021518138.tif 000073
【０４７９】
プレートを、プレートシェーカー上で３０秒間６００ＲＰＭにて撹拌し、プレートを３０分間室温にて暗所でインキュベートした。
【０４８０】
３０分間のインキュベーション後、プレートを遠心分離し、フリックすることにより上清を廃棄した。プレートを、前述の通りに２回洗浄した。最後の洗浄後、細胞ペレットを、５０μＬ  ４％ＰＦＡ（Ｐｉｅｒｃｅ，２８９０６）を含むＤＩ水を、室温にて１０分間加えることにより固定した。１００μＬのＦＡＳＣ緩衝液を各ウェルに加え、プレートを１８００ＲＰＭで５分間遠心分離した。細胞を、１００μＬ  ＦＡＣＳ緩衝液に再懸濁し、フローサイトメトリーにより読み取った。
【０４８１】
図４に示すように、抗ＩＬ−２７抗体は、図示の通り、ＣＤ１６１のＩＬ−２７媒介性阻害を低下させた。
【０４８２】
実施例６：抗ＩＬ−２７抗体の追加のｉｎ  ｖｉｔｒｏ特徴評価を含む、抗ＩＬ−２７抗体による、ＴＮＦα、ＩＬ−６、及び他のサイトカインのＰＤ−１媒介性分泌の増強
抗ＩＬ−２７抗体を、がん患者由来のヒトＰＢＭＣ細胞におけるＴＮＦα及びＩＬ−６のＰＤ−１媒介性分泌を増強する能力について試験した。がん患者由来のヒトＰＢＭＣ細胞を、本質的に実施例５に記載の通りに培養し、図示するように、１μｇ／ｍＬにて抗ＰＤ−１抗体を受けるウェルも追加した。アッセイからの上清を、ヒトＣＢＡ  Ｔｈ１／Ｔｈ２／Ｔｈ１７キット（ＢＤ，５６０４８４）を使用してＴＮＦα及びＩＬ−６について分析した。図５Ａ及び５Ｂに示すように、抗ＩＬ−２７抗体は、プールされたヒトＰＢＭＣ細胞におけるＴＮＦα及びＩＬ−６のＰＤ−１媒介性分泌を増強する。
【０４８３】
本明細書中の技術により、ヒトＰＢＭＣにおけるＳＲＦ３８８単剤療法及び抗ＰＤ−１との組み合わせのサイトカイン誘導活性も示された。ＩＬ−２７は、いくつかの炎症性サイトカインの発現を負に制御することが公知である。サイトカイン産生に対するＩＬ−２７遮断の効果を決定するために、健常ドナー、ＲＣＣ患者、及び卵巣癌患者からのヒトＰＢＭＣを、ＳＲＦ３８８の存在下または非存在下で抗ＣＤ３で数日間活性化し、ＩＬ−１７、ＩＦＮγ、ＴＮＦα及びＩＬ−６を含むサイトカインの分泌レベルに関して試験した。簡潔には、４人の健常ドナー、５人のＲＣＣ患者、及び２人の卵巣癌患者からの新鮮な全血から単離したＰＢＭＣを、ＳＲＦ３８８（１μｇ／ｍＬ）の非存在下もしくは存在下での０．２５μｇ／ｍＬ抗ＣＤ３抗体、抗ＰＤ１（ペムブロリズマブ、１μｇ／ｍＬ）または両方の抗体により活性化した。５日後、上清を収集し、ＭＳＤまたはＣＢＡにより、ＴＮＦα（Ａ）またはＩＦＮγ（Ｂ）のレベルに関して試験した。示すデータは、抗ＣＤ３刺激単独と比較したサイトカイン産生における倍率変化を表す。統計は、対応のあるｔ検定によって計算した（＊ｐ＜０．００５）。
【０４８４】
抗ＰＤ−１抗体をこれらのアッセイにおける対照として使用し、図５Ｃに示すようにＰＤ−１及びＩＬ−２７遮断の組み合わせも調査した。ＳＲＦ３８８処置により、試験したＰＢＭＣ試料１１のうち６においてＴＮＦα産生が増加し（２倍を超える増加により決定）、これには４人中２人の健常ドナー、５人中３人のＲＣＣ患者、２人中１人の卵巣癌患者が含まれた。ドナーのサブセットにおいて試験した場合、この活性はＳＲＦ３８８用量依存性であった（データは示さず）。抗ＰＤ−１（ペンブロリズマブ）処置は、試験した１１人中２人（ＲＣＣ５人中１人、卵巣癌２人中１人）においてＴＮＦαの増加を示し、一方でＳＲＦ３８８及び抗ＰＤ−１の組み合わせは、ドナー１１人中１０人において増加をもたらした。併用処置条件で見られたＴＮＦαの増加は、１０人中８人の応答者で相加的であるように思われた。ＳＲＦ３８８及び抗ＰＤ−１処置後、これらの培養物においてＩＦＮγ産生に関する相加効果が観察された（ドナー１１人中１０人）。しかしながら、抗ＰＤ−１処置単独に対する応答は、ＳＲＦ３８８（ドナー１１人中２人）と比較して、より頻度高く見られた（ドナー１１人中１０人）。まとめると、これらのデータは、ＳＲＦ３８８が、健常ドナー及びがん患者からの活性化ＰＢＭＣ培養物におけるＴＮＦαレベルを増加させ、ＳＲＦ３８８及び抗ＰＤ−１処置の組み合わせが、いずれかの処置単独と比較してより高いレベルのＴＮＦα及びＩＦＮγをもたらすことを示す。
【０４８５】
ＩＬ−２７及びＰＤ−１遮断の役割をさらに調査するために、同じ活性化ＰＢＭＣ培養系を使用して、ＩＬ−２７がＰＤ−１遮断によって引き起こされる増加したサイトカイン産生の作用を直接打ち消すことができるか否かを決定した。簡潔には、ヒト全血から新鮮に単離されたＰＢＭＣを、０．２５μｇ／ｍＬ抗ＣＤ３抗体によって活性化した。細胞を、対照ＩｇＧ１（１μｇ／ｍＬ）、αＰＤ−１抗体（ペムブロリズマブ、１μｇ／ｍＬ）単独、ｒｈＩＬ−２７（２５ｎｇ／ｍＬ）プラスαＰＤ−１またはｒｈＩＬ−２７プラスαＰＤ−１とＳＲＦ３８８（１μｇ／ｍＬ）のいずれかで３７℃にて５日間処置した。上清を収集して、ＣＢＡ検出を行った。４人の健常ドナーからの例としてのサイトカイン（ＩＬ−１７Ａ及びＩＦＮγ）を、対照に対する倍率変化として示した。平均及び標準偏差を示した。統計は、対応のあるｔ検定によって計算した（＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１）。同様の結果が、ＲＣＣ患者からのＰＢＭＣにおいても見られた。ＰＤ−１遮断は、ＩＬ−１７及びＩＦＮγの両方をこれらの培養物において増加させ、ＩＬ−２７はこの活性、つまり図５Ｄにおいて示す通りのＳＲＦ３８８の存在下で逆転された応答を完全に阻害し得た。これらのデータは、ＩＬ−２７が、サイトカイン産生に対する抗ＰＤ−１処置の効果を弱めることができることを示す。
【０４８６】
それゆえ、ＩＬ−２７が、ＳＲＦ３８８によって遮断された特性である、活性化されたヒトＰＢＭＣにおける抗ＰＤ−１媒介性炎症促進性サイトカインの産生を阻害することが示された。さらに、ＰＤ−１遮断と組み合わせたＳＲＦ３８８は、健常ドナー及びＲＣＣ患者からの活性化ＰＢＭＣにおけるサイトカイン産生の増加をもたらした。ゆえに、ＩＬ−２７を遮断することにより、ＳＲＦ３８８は免疫制御受容体発現を変化させ、炎症性サイトカイン産生を増加させることにより、免疫細胞の活性化を増強する。
【０４８７】
抗ＩＬ−２７抗体（本明細書では、ＳＲＦ３８８）、αＰＤ−１抗体、または抗ＩＬ−２７及びαＰＤ−１抗体の組み合わせの存在下での個々の抗ＩＬ−２７抗体の追加の特徴評価では、サイトカイン誘導／分泌のさらなる特徴評価を実施した（図５Ｅ、具体的には、ＴＮＦα、ＩＦＮγ、ＩＬ−６及びＩＬ−１７Ａについて）。ｉｎ  ｖｉｔｒｏ用量応答曲線を、さらにＳＲＦ４０５、ＳＲＦ４１０、ＳＲＦ４１１、ＳＲＦ４１４、ＳＲＦ４１６、ＳＲＦ５３６、ＳＲＦ５４３、ＳＲＦ５２９、ＳＲＦ３８１、ＳＲＦ３８８及びＡｂ７抗体のいくつかのＩＬ−２７媒介性シグナル伝達作用にわたって得た（図５Ｆ〜５Ｋ、ここで：図５Ｆは、漸増濃度の抗ＩＬ−２７抗体にわたるＵ９３７（リンパ腫）細胞におけるｐＳＴＡＴ１シグナルの阻害を示し；図５Ｇは、漸増濃度の抗ＩＬ−２７抗体にわたるＰＢＭＣ（末梢血単核細胞）におけるｐＳＴＡＴ１シグナルの阻害を示し；図５Ｈは、漸増濃度の抗ＩＬ−２７抗体にわたるＰＢＭＣ（末梢血単核細胞）におけるＣＤ１６１シグナルに対する効果の変動を示し；図５Ｉは、漸増濃度の抗ＩＬ−２７抗体にわたるＣＤ４Ｔリンパ球（ＣＤ４細胞）におけるＰＤ−Ｌ１シグナルに対する効果の変動を示し；図５Ｊは、漸増濃度の抗ＩＬ−２７抗体にわたる単球におけるＰＤ−Ｌ１シグナルに対する効果の変動を示し；図５Ｋは、漸増濃度の抗ＩＬ−２７抗体にわたる単球におけるＴＩＭ−３シグナルに対する阻害性効果の変動程度を示す）。
【０４８８】
実施例７：抗ＩＬ−２７抗体によるＰＤ−Ｌ１及びＴＩＭ３のＩＬ−２７媒介性発現の阻害
実施例１及び２に記載の抗ＩＬ−２７抗体を、フローサイトメトリーにより、プールされたヒト単球におけるＩＬ−２７媒介性発現ＰＤ−Ｌ１及びＴＩＭ−３を阻害する能力について試験した。
【０４８９】
新鮮な単球を、ＲｏｓｅｔｔｅＳｅｐ（商標）ヒト単球濃縮カクテル（Ｓｔｅｍｃｅｌｌ番号１５０６８）を使用してヒトバフィーコートから単離した。
【０４９０】
５日間のアッセイ中の蒸発の影響を最小限に抑えるため、外側の壁の使用は避けた。外側のウェルには、２００μＬ／ウェルのＤＰＢＳ（Ｇｉｂｃｏ，１４１９０−１４４）を充填するべきである。単球を、温かい、完全ＲＰＭＩ−１６４０に、２００万個の細胞／ｍＬの密度で再懸濁した。１００μＬ／ウェルのこの細胞混合物を、丸底９６ウェルプレート（Ｃｏｓｔａｒ，３７９９）にプレーティングした（２００，０００個の細胞／ウェル）。
【０４９１】
抗ＩＬ−２７抗体を、９６ウェルポリプロピレンプレートの一列目にて完全ＲＰＭＩ−１６４０に希釈して、４０μｇ／ｍｌの最高濃度とした（最終濃度は１０μｇ／ｍｌ）。必要に応じて、段階希釈（１：２、１：３、など）を、プレートの最初の１０列の残りにて行った。５０μＬの抗体ストック（４倍）を、丸底プレートのＰＢＭＣ細胞のプレートの最初の１０列に加えた。列１１及び１２では、１２５０μＬの完全ＲＰＭＩ−１６４０を加えた。
【０４９２】
抗ＩＬ−２７抗体の添加後、完全ＲＰＭＩ−１６４０に希釈した５０μｌの８０ｎｇ／ｍｌ組換えヒトＩＬ−２７（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，２５２６−ＩＬ）を、各ウェル（血清不含培地または抗体のみを含む対照ウェルを除く）に加えて、最終濃度を２０ｎｇ／ｍｌとした。１００μＬ血清不含ＲＰＭＩ−１６４０を、対照ウェルに加えた。プレートを、干渉を最小限に抑えながら３日間３７℃にてインキュベートした。
【０４９３】
３日間のインキュベーション後、プレートをインキュベーターから取り出し、プレートシェーカー上で３０秒間６００ＲＰＭにて攪拌した。プレートを、１８００ＲＰＭにて５分間遠心分離した。フリックして培地を廃棄し、プレートを１５０μＬ  ＤＰＢＳ（Ｇｉｂｃｏ，１４１９０−１４４）を用いて洗浄した。洗浄工程を、２回繰り返した。細胞ペレットを、以下の表９に記載するように、５０μＬ／ウェルの染色カクテルを用いて染色した。
【０４９４】
【表９】
2021518138.tif 000074
【０４９５】
プレートを、プレートシェーカー上で３０秒間６００ＲＰＭにて撹拌し、プレートを３０分間４℃にて暗所でインキュベートした。
【０４９６】
３０分間のインキュベーション後、プレートを遠心分離し、フリックして上清を廃棄した。プレートを、前述の通りに２回洗浄した。最後の洗浄後、細胞ペレットを、５０μＬ  ４％ＰＦＡ（Ｐｉｅｒｃｅ，２８９０６）を含む脱イオン（ＤＩ）水を、室温にて１０分間加えることにより固定した。１００μＬのＦＡＳＣ緩衝液を各ウェルに加え、プレートを１８００ＲＰＭにて５分間遠心分離した。細胞を１００μｌ  ＦＡＣＳ緩衝液に再懸濁し、フローサイトメトリーにより分析した。
【０４９７】
図６Ａ、６Ｂ及び６Ｃに示すように、抗ＩＬ−２７抗体は、プールされたヒト単球におけるＰＤ−Ｌ１及びＴＩＭ３のＩＬ−２７媒介性発現を強力に阻害する。
【０４９８】
抗ＩＬ−２７抗体を、本質的に図６Ａ、６Ｂ及び６Ｃに関して記載の通りに、休止Ｔ細胞（不活化）におけるＰＤ−Ｌ１のＩＬ−２７媒介性発現を阻害する能力についてさらに試験した。休止Ｔ細胞を、ＲｏｓｅｔｔｅＳｅｐ（商標）ヒトＴ細胞濃縮カクテル（Ｓｔｅｍｃｅｌｌ番号１５０６１）を使用してヒトバフィーコートから単離した。
【０４９９】
アッセイの終わりに、細胞ペレットを、以下の表１０に記載するように、５０μＬ／ウェルの染色カクテルを用いて染色した。
【０５００】
【表１０】
2021518138.tif 000075
【０５０１】
プレートを、プレートシェーカー上で３０秒間６００ＲＰＭにて撹拌し、プレートを３０分間４℃にて暗所でインキュベートした。
【０５０２】
３０分間のインキュベーション後、プレートを遠心分離し、フリックして上清を廃棄した。プレートを、前述の通りに２回洗浄した。最後の洗浄後、細胞ペレットを、５０μＬ  ４％ＰＦＡ（Ｐｉｅｒｃｅ，２８９０６）を含むＤＩ水を、室温にて１０分間加えることにより固定した。１００μＬのＦＡＳＣ緩衝液を各ウェルに加え、プレートを１８００ＲＰＭにて５分間遠心分離した。細胞を、１００μＬ  ＦＡＣＳ緩衝液に再懸濁し、フローサイトメトリーにより読み取った。図６Ｄに示すように、抗ＩＬ−２７抗体は、プールされたヒト休止Ｔ細胞におけるＰＤ−Ｌ１のＩＬ−２７媒介性発現を強力に阻害する。
【０５０３】
実施例８：黒色腫の播種性Ｂ１６Ｆ１０モデルにおける抗ＩＬ−２７抗体のｉｎ  ｖｉｖｏ有効性
黒色腫肺転移のモデルを使用して、臨床候補ＳＲＦ３８８を使用するＩＬ−２７遮断の抗腫瘍活性を評価した。播種性Ｂ１６Ｆ１０肺転移の増殖は、ＥＢＩ３及びＩｌ２７ｒａ（Ｗｓｘ−１）欠損マウスにおいて有意に低下することが公知である（Ｓａｕｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  １８１：６１４８−６１５７）。肺結節のサイズ及び増殖速度論が、転移したＢ１６Ｆ１０細胞の数に依存し、可変的及び急速に進行し得るため、抗ＰＤ−１及び抗ＣＴＬＡ−４の組み合わせを治療活性のベンチマークとして研究した。ＳＲＦ３８８前処置により、全体的な腫瘍量の有意な減少がもたらされた。ｉｎ  ｖｉｖｏでの抗ＩＬ−２７抗体の抗腫瘍有効性を評価するために、Ｂ１６Ｆ１０黒色腫腫瘍モデルにおける腫瘍増殖に対するＡｂ１４の効果を評価した。
【０５０４】
簡潔には、６〜８週齢の雌Ｃ５７ＢＬ／６マウス（ｎ＝１０／群）に、２００μＬリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）中２．５×１０５個のＢ１６Ｆ１０細胞または１×１０５個のＢ１６−Ｌｕｃ細胞のいずれかを、尾静脈を介して、静脈内（ｉ．ｖ．）接種した。動物に、ＳＲＦ３８８（１ｍｇ用量）（Ｗｕｘｉ；ロット２１０８ＳＤ１７０３１６Ｋ０１Ｘ０１Ｉ０１）またはポリクローナルヒトＩｇＧアイソタイプ対照（１ｍｇ用量）（Ｂｉｏｘｃｅｌｌ；ＢＥ００９２；ロット６５８４１７Ｄ１）を腹腔内（ｉ．ｐ．）注射した。抗体を、腫瘍注射の７日前に開始して、週１回、合計４回（−７日、０日、７日、１４日）投与した。肺転移の視覚計数のために、Ｂ１６Ｆ１０腫瘍を有するマウスを、腫瘍細胞注入１８日後にＣＯ２窒息により安楽死させ、肺を心臓穿刺を介してＰＢＳで灌流し、取り出し、１０％中性緩衝ホルマリン中で２４時間固定した。次に、固定した肺を、７０％エタノールに移し、表面肺転移を視覚的に計数した。免疫組織化学分析に関しては、ホルマリン固定肺（ｎ＝５／群）をパラフィン包埋し、切片化し、ヘマトキシリン及びエオシンを用いて染色して、各切片における総組織面積の割合（％）として総腫瘍面積を定量化した。肺転移のｉｎ  ｖｉｖｏ腫瘍イメージングに関しては、Ｂ１６−Ｌｕｃ腫瘍を有する動物に、２００μｌ  ＰＢＳ（Ｐｒｏｍｅｇａ）中３ｍｇのＶｉｖｏＧｌｏ  Ｄ−ルシフェリンを、週２回、尾静脈を介して静脈内注射した。ルシフェリン注射の５分後に、動物を麻酔し、ＩＶＩＳ  Ｌｕｍｉｎａ  ＬＴシリーズＩＩＩイメージャーを使用して生物発光イメージングを行った。画像は、Ｌｉｖｉｎｇ  Ｉｍａｇｅ（バージョン４．５．５）ソフトウェアを使用して分析し、フォトン／秒の総フラックス測定値として表す。
【０５０５】
図７Ａ〜７Ｄに示すように、Ｂ１６Ｆ１０腫瘍を有するマウスを、抗ＩＬ−２７抗体ＳＲＦ３８８を用いて処置すると、表面肺転移の総数（肺結節の数、図７Ａ）及び免疫組織化学（ＩＨＣ）分析による肺組織切片における腫瘍面積の低下（図７Ｃ及び図７Ｄ）によって測定して、全体的な腫瘍量における有意な低下がもたらされた。ＳＲＦ３８８を用いたｐ２８の遮断により、アイソタイプ対照処置と比較して、肺Ｂ１６結節の数が４２％減少した。ＳＲＦ３８８処置は、アイソタイプ対照と比較してＢ１６Ｆ１０肺転移の増殖を有意に阻害した（ｐ＝０．００７９）（それぞれ、２１．６±８．４対３７．６±１０．９肺結節）。ＳＲＦ３８８処置により、ＩＨＣによって測定して、全体の肺腫瘍転移面積が８３％減少した（アイソタイプ対照群では１６．４３±１．３９％であるのに対し、ＳＲＦ３８８処置群では２．８３±１．４５％）。同様に、生物発光イメージングにより、ＳＲＦ３８８処置がＢ１６−Ｌｕｃ肺転移の増殖を有意に（ｐ＝０．００６２）遅延させたことが明らかになった（図７Ｂ）。表面肺転移数及び総腫瘍面積において同様の減少が、ＩＬ−２７ＲＡ（ＷＳＸ−１）媒介性抗体遮断及び抗ＰＤ−１＋抗ＣＴＬＡ−４併用療法で観察され、これは図７Ｄに示す通りである。これらのデータは、抗ＰＤ−１及び抗ＣＴＬＡ−４のベンチマーク組み合わせが抗腫瘍活性を示した２つの独立した実験からのものである。Ｂ１６Ｆ１０細胞（２．５×１０５）を、Ｃ５７ＢＬ／６マウス（ｎ＝１０／群）に静脈内注射した。マウスを、１ｍｇのＳＲＦ３８８、抗ＩＬ−２７ＲＡ（ＷＳＸ−１）、またはヒトＩｇＧアイソタイプ対照抗体のいずれかを用いて腹腔内処置した（−７日、０日、７日、１４日）。一部の動物は、抗ＰＤ−１及び抗ＣＴＬＡ−４を用いて腹腔内処置した（０日、４日、７日、及び１１日）。肺を、上記のように処置したＢ１６Ｆ１０肺転移を有する動物（ｎ＝５／群）から収集し、切片化し、Ｈ＆Ｅを用いて染色した。Ｂ１６Ｆ１０腫瘍組織を、処置された動物からのＨ＆Ｅ染色済み肺切片における正常肺組織から描写した（図７Ａ）。腫瘍面積は、総肺面積の割合（％）として計算した（図７Ｄ）。統計は、ｔ検定によって計算した。まとめると、これらのデータは、ＳＲＦ３８８が腫瘍モデルにおいてＩｌ２７ｒａ（ＷＳＸ−１）及びＥＢＩ３欠損症を表現型コピーでき、ＰＤ−１及びＣＴＬＡ−４の組み合わせた遮断と同様の活性を示すことを実証する。
【０５０６】
これらのデータは、抗ＩＬ−２７抗体（ＳＲＦ３８８）を用いた処置が、抗腫瘍効果をもたらし、腫瘍増殖及び転移の両方を、ＩＬ−２７と結合しないアイソタイプ対照抗体を用いた処置よりも大きい程度に低下することを実証する。
【０５０７】
実施例９：ヒトＩＬ−２７ミニサークルを流体力学的にトランスフェクトしたマウスからのマウス脾臓細胞の遺伝子発現プロファイリング
ｉｎ  ｖｉｖｏでのＴ細胞表現型に対するＩＬ−２７の効果を調べるために、ＩＬ−２７をコードするＤＮＡミニサークルを使用して、マウスにおいてＩＬ−２７を過剰発現させ、Ｔ細胞応答をＲＮＡ−Ｓｅｑ及びフローサイトメトリーにより評価した。ヒトＩＬ−２７は、種交差反応性であることが知られており、ｉｎ  ｖｉｔｒｏでマウス脾臓細胞においてｐＳＴＡＴ１シグナル伝達及びＰＤ  Ｌ１を誘導することができる。この種交差反応性を使用して、マウスにおけるヒトＩＬ−２７過剰発現の効果及びＳＲＦ３８８によるその阻害を研究した。これを行うために、ヒトＩＬ−２７をコードするＤＮＡプラスミドミニサークル（ｐ２８がグリシンセリンリンカーによってＥＢＩ３に係留している）を、下記の通りに流体力学的トランスフェクションによってマウスに投与し、ＩＬ−２７の全身レベルを高めた。
【０５０８】
ヒトＩＬ−２７ミニサークルの流体力学的トランスフェクション
６週齢の雌ＢＡＬＢ／ｃマウスに、２ｍＬの０．９％生理食塩水中、２０μｇの空ベクターまたは連結されたヒトＩＬ−２７ミニサークルＤＮＡ（Ｓｙｓｔｅｍ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｐａｌｏ  Ａｌｔｏ，ＣＡ）のいずれかを、尾静脈を介して、５秒間かけて注射した。注射された動物を、加熱パッドを備えた空のケージに移し、５分間回復させた。全血を、Ｋ２−ＥＤＴＡチューブに収集し、ミニサークル注射の２４時間後に血漿分離し、ＥＬＩＳＡにより血漿ＩＬ−２７レベルを確認した。トランスフェクションの５日後にＰＢＭＣ及び総脾臓細胞を収集し、細胞を染色し、フローサイトメトリーにより分析した。指示するマーカーの発現を、ＣＤ４＋Ｔ細胞及びＣＤ８＋Ｔ細胞で分析した。分析は、ＦｌｏｗＪｏソフトウェアを使用して行った。
【０５０９】
遺伝子発現プロファイリング
マウス脾臓細胞は、全脾臓を機械的に解離し、その後赤血球をＡＣＫ溶解することによって調製した。総ＲＮＡを、脾臓細胞から、ＲＮｅａｓｙ（登録商標）ミニキット（Ｑｉａｇｅｎ、カタログ番号７４１０４）を用いて抽出し、ヌクレアーゼ不含水（Ｑｉａｇｅｎ、カタログ番号１９１０１）中２０ｎｇ／ｕｌに調整した。遺伝子発現プロファイリングを、Ａｆｆｙｍｅｔｒｉｘ  ＧｅｎｅＣｈｉｐ（商標）Ｍｏｕｓｅ  Ｇｅｎｅ  ２．０  ＳＴ  Ａｒｒａｙｓ（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ、カタログ番号：９０２１１８）で実行した。ＲＮＡ試料の処理、ハイブリダイゼーション及びアレイスキャンを、Ｂｏｓｔｏｎ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｍｉｃｒｏａｒｒａｙ  ａｎｄ  Ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ  Ｒｅｓｏｕｒｃｅ  （ＢＵＭＳＲ）にて標準的なＡｆｆｙｍｅｔｒｉｘ  ＧｅｎｅＣｈｉｐ（商標）プロトコルを使用して実行した。全てのＣＥＬファイルを、Ｒｏｂｕｓｔ  Ｍｕｌｔｉ−ａｒｒａｙ  Ａｖｅｒａｇｅ（ＲＭＡ）（Ｉｒｉｚａｒｒｙ  ｅｔ  ａｌ．，２００３）によって正規化し、遺伝子発現データを、未発現プローブを削除し、高い複製間変動係数を有する転写物を破棄することによって前処理した。その後の分析（平均発現、倍率変化、ｔ検定）は、Ｒにて行った。
【０５１０】
フローサイトメトリー分析
全血及び脾臓を、ミニサークル注射の５日後にマウスから収集した。脾臓細胞を、トランスフェクションの５日後にＩＬ２７発現マウスから収集し、Ａｆｆｙｍｅｔｒｉｘ  ＧｅｎｅＣｈｉｐ  Ｍｏｕｓｅ  Ｇｅｎｅ  ２．０  ＳＴ  Ａｒｒａｙによって分析した。単細胞脾臓細胞懸濁液は、４０μｍナイロンセルストレーナーを通した機械的解離と、それに続くＡＣＫ緩衝液での赤血球溶解によって調製した。全血細胞を直接染色した後、製造業者（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ，ＣＡ）の指示に従ってＢＤ  Ｐｈｏｓｆｌｏｗ  Ｌｙｓｅ／Ｆｉｘ緩衝液中で赤血球を溶解及び固定した。ＦｃγＲＩＩＩ／ＩＩを、細胞を、２％ＦＢＳ及び２ｍＭ  ＥＤＴＡを含むＰＢＳ中のラット抗マウスＣＤ１６／ＣＤ３２ｍＡｂ（１μｇ／１００万個の細胞；Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）とプレインキュベートすることにより遮断した。細胞を、マウスＣＤ４（クローンＧＫ１．５）、ＣＤ８（５３−６．７）、ＰＤ−Ｌ１（１０Ｆ．９Ｇ２）、ＴＩＭ３（ＲＭＴ３−２３）、ＬＡＧ３（Ｃ９Ｂ７Ｗ）、及びＴＩＧＩＴ（１Ｇ９）に対して、ＡＰＣ−、ＰＥ−、Ｂｒｉｌｌｉａｎｔ  Ｖｉｏｌｅｔ  ５１０−、及びＢｒｉｌｌｉａｎｔ  Ｖｉｏｌｅｔ７１１−コンジュゲートｍＡｂを用いて染色した（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ）。ＬＳＲＦｏｒｔｅｓｓａ  Ｘ−２０フローサイトメーター（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を使用して、細胞関連蛍光を測定し、ＦｌｏｗＪｏソフトウェア（Ｔｒｅｅ  Ｓｔａｒ，Ａｓｈｌａｎｄ，ＯＲ）を使用して分析を行った。
【０５１１】
統計分析
統計学的有意性は、指示するように、対応のある、対応のない、または比のスチューデントのｔ検定を使用して、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍソフトウェアを使用して決定した。比のｔ検定を使用した場合、０．１をゼロ値に追加して、それらをゼロではなくした。０．０５未満のＰ値は有意であるとみなした。
【０５１２】
ＩＬ−２７は、ｉｎ  ｖｉｖｏでＴ細胞による阻害性受容体の発現を促進する
図８Ａに示すように、ＩＬ−２７の投与に応答して、４００を超える遺伝子が１．０倍以上変化した。これらの遺伝子のサブセットを表１１に示す。これらの遺伝子の中には、免疫応答において重要な役割を担う免疫阻害性受容体をコードする遺伝子があった。図８Ｂに示すように、Ｌｙ６ａ（Ｓｃａ−１をコードする）、Ｌａｇ３、Ｔｉｇｉｔ及びＩｌ１０は、ＩＬ−２７に応答して脾臓細胞で上方制御された。Ｃｔｌａ４及びＣｄ２７４（ＰＤ−Ｌ１をコードする）のＩＬ−２７媒介性上方制御への傾向もあったが、１倍未満の誘導であった（データは示さず）。発現データを検証するために、フローサイトメトリーを利用して、これらのマウス由来のＴ細胞でのＰＤ−Ｌ１、ＬＡＧ−３、ＴＩＧＩＴ及びＴＩＭ−３のタンパク質発現を評価した。ＩＬ−２７ミニサークルの投与は、脾臓の（脾臓）及び末梢血（ＰＢＭＣ）ＣＤ４＋Ｔ細胞におけるＰＤ−Ｌ１、ＬＡＧ−３及びＴＩＧＩＴの上方制御をもたらした。ＣＤ８＋Ｔ細胞では、ＩＬ−２７ミニサークルは、ＰＤ−Ｌ１、ＬＡＧ−３、ＴＩＧＩＴ、及びＴＩＭ−３を上方制御した。図８Ｃに示すように、ＩＬ−２７ミニサークルの投与は、脾臓の及び末梢血ＣＤ４＋Ｔ細胞におけるＰＤ−Ｌ１、Ｌａｇ−３、及びＴｉｇｉｔの上方制御をもたらした。ＣＤ８＋Ｔ細胞では、ＩＬ−２７ミニサークルは、ＰＤ−Ｌ１、Ｌａｇ−３、Ｔｉｇｉｔ、及びＴｉｍ−３を上方制御した。これらのデータは、ＩＬ−２７が、ｉｎ  ｖｉｖｏで免疫制御性受容体発現を駆動する上で重要な役割を担うことができることを示す。
【０５１３】
ＳＲＦ３８８が、ｉｎ  ｖｉｖｏでミニサークル由来ヒトＩＬ−２７を遮断する能力を調査するために、脾臓細胞における酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）による標的結合及び免疫制御性受容体発現の両方を研究した。ＩＬ−２７トランスフェクション及びＳＲＦ３８８（５０ｍｇ／ｋｇ）を用いた処置の５日後に、血漿をマウスから収集して、Ｍｅｓｏ  Ｓｃａｌｅ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ（ＭＳＤ）によってＩＬ−２７ヘテロ二量体及びＥＢＩ３レベルを分析した。ＩＬ−２７ヘテロ二量体アッセイは、ＳＲＦ３８８及びヒト特異的ＥＢＩ３検出抗体をクロスブロックするｐ２８捕捉抗体を利用する；それゆえ、ＳＲＦ３８８がＩＬ−２７に結合している場合、その検出は遮蔽されることになる。ＥＢＩ３アッセイは、ヒトＥＢＩ３の２つの別個のエピトープに特異的な捕捉抗体及び検出抗体の両方を利用し、ミニサークル由来のＩＬ−２７が係留されたヘテロ二量体であるため、このアッセイにより、ＳＲＦ３８８結合に関係なく、総ＩＬ２７の検出が可能になる。
【０５１４】
簡潔には、６週齢の雌Ｂａｌｂ／ｃマウスに空ベクター（対照）またはヒトＩＬ−２７のいずれかを注射した。ミニサークルトランスフェクションの７日前及び当日（−７日と０日）に、マウスを、１ｍｇのＳＲＦ３８８または抗ＤＮＰ  ＩｇＧ１アイソタイプ対照抗体のいずれかを用いて処置した。全血を収集し、血漿をＩＬ−２７（図８Ｄ）に関してＭｅｓｏ  Ｓｃａｌｅ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙにより分析した。図８Ｄは、ＭＳＤにより、ＳＲＦ３８８処置が血漿中のＩＬ−２７検出を完全に阻害することを示す。同様のデータが、２５ｍｇ／ｋｇの用量のＳＲＦ３８８を試験したときに見られた。これらのデータは、２５ｍｇ／ｋｇ以上の用量でのＳＲＦ３８８がミニサークル由来ＩＬ−２７をｉｎ  ｖｉｖｏで完全に飽和させることができることを示す。この完全な標的結合は、ｐＳＴＡＴ１機能性アッセイにおいても確認された。
【０５１５】
ＳＲＦ３８８がｉｎ  ｖｉｖｏでＩＬ−２７の活性を遮断する能力を評価するために、ＰＤ  Ｌ１、Ｔｉｍ−３、Ｌａｇ−３、及びＴｉｇｉｔの発現を、マウスＰＢＭＣ及び脾臓細胞においてフローサイトメトリーにより分析した。ＳＲＦ３８８は、ＣＤ４＋ＰＢＭＣにおけるＩＬ２７誘導性ＰＤ−Ｌ１及びＬａｇ３発現、ならびにＣＤ８＋ＰＢＭＣにおけるＰＤ−Ｌ１、Ｔｉｍ−３、Ｌａｇ−３、及びＴｉｇｉｔ発現を有意に遮断した。ＳＲＦ３８８処置は、ＣＤ４＋脾臓細胞におけるＩＬ２７誘導性ＰＤ−Ｌ１、Ｌａｇ−３、及びＴｉｇｉｔ発現、ならびにＣＤ８＋脾臓細胞におけるＰＤ−Ｌ１及びＬａｇ３発現も遮断した。これらのデータは、ＳＲＦ３８８が、ｉｎ  ｖｉｖｏでヒトＩＬ−２７と結合でき、その活性を遮断できることを示す。
【０５１６】
これらの結果は、ｉｎ  ｖｉｖｏでのＩＬ−２７の異所性発現が、Ｔ細胞による複数の阻害性受容体、及び脾臓細胞における免疫制御活性を伴ういくつかの他の分子の上方制御をもたらすことを実証する。これらのデータは、ＩＬ−２７拮抗作用（例えば、抗ＩＬ−２７抗体を用いた処置による）が、Ｔ細胞上の阻害受容体の発現を低減させ得、それによって免疫応答を増加させることを示す。
【０５１７】
【表１１−１】
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【表１１−２】
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【表１１−３】
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【表１１−４】
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【０５１８】
【表１２−１】
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【表１２−２】
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【表１２−３】
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【表１２−４】
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【表１２−５】
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【表１２−６】
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【表１２−７】
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【表１２−８】
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【表１２−９】
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【表１２−１０】
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【表１２−１１】
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【表１２−１２】
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【表１２−１３】
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【表１２−１４】
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【表１２−１５】
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【表１２−１６】
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【表１２−１７】
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【表１２−１８】
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【表１２−１９】
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【表１２−２０】
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【表１２−２１】
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【表１２−２２】
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【表１２−２３】
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【表１２−２４】
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【表１２−２５】
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【表１２−２６】
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【表１２−２７】
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【表１２−２８】
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【表１２−２９】
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【表１２−３０】
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【表１２−３１】
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【表１２−３２】
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【表１２−３３】
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【表１２−３４】
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【表１２−３５】
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【表１２−３６】
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【表１２−３７】
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【表１２−３８】
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【表１２−３９】
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【表１２−４０】
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【表１２−４１】
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【表１２−４２】
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【表１２−４３】
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【表１２−４４】
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【表１２−４５】
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【表１２−４６】
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【表１２−４７】
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【表１２−４８】
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【表１２−４９】
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【表１２−５０】
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【表１２−５１】
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【表１２−５２】
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【表１２−５３】
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【表１２−５４】
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【表１２−５５】
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【表１２−５６】
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【表１２−５７】
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【表１２−５８】
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【表１２−５９】
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【表１２−６０】
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【表１２−６１】
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【表１２−６２】
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【表１２−６３】
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【表１２−６４】
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【表１２−６５】
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【表１２−６６】
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【表１２−６７】
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【表１２−６８】
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【表１２−６９】
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【表１２−７０】
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【表１２−７１】
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【表１２−７２】
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【表１２−７３】
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【表１２−７４】
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【表１２−７５】
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【表１２−７６】
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【表１２−７７】
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【表１２−７８】
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【表１２−７９】
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【表１２−８０】
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【表１２−８１】
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【表１２−８２】
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【表１２−８３】
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【表１２−８４】
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【表１２−８５】
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【表１２−８６】
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【表１２−８７】
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【表１２−８８】
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【表１２−８９】
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【表１２−９０】
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【表１２−９１】
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【表１２−９２】
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【０５１９】
【表１３−１】
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【表１３−２】
2021518138.tif 000173
【０５２０】
実施例１０：ＳＲＦ３８８結合特性及びＩＬ−２７受容体遮断
ＳＲＦ３８８濃度を１μｇ／ｍＬとして、０〜５．０μｇ／ｍＬの範囲の濃度での組換えヒトＩＬ−２７の会合及び解離を決定した。表１４に、データに対するモデルの当てはめの良さを実証する結合モデルフィットパラメータ（Ｒ２及びχ２）とともに、最終的な結合速度論パラメータを示す。
【０５２１】
ヒトＩＬ−２７は、この研究で試験された全ての種のＳＲＦ３８８に対して最も強い結合親和性を示した（３．８６ｐＭ）。組換えラット及びカニクイザルＩＬ−２７も、ＳＲＦ３８８に対して強い親和性を示し、それぞれ８０．９及び３７．４ｐＭの値であったが、ヒトタンパク質よりもやや弱いものであった。組換えマウスＩＬ−２７は、ヒトタンパク質と比較してＳＲＦ３８８に対する親和性が最も低く、会合速度が遅く、解離速度が速いことにより示されるように、値はｎＭ範囲であった（４．４３ｎＭ）。
【０５２２】
【表１４−１】
2021518138.tif 000174
【表１４−２】
2021518138.tif 000175
略語：ＩＬ−２７＝インターロイキン２７、ｋａ＝会合定数、ｋｄ＝解離定数、ＫＤ＝結合親和性
注釈：Ｒ２値＞０．９５及びχ２値＜３．０は、データに対してモデルの当てはめが良いことを示す。
【０５２３】
実施例１１：ＣＤＲ配列のアライメント
本開示の抗ＩＬ−２７抗体の多くのサブセレクションは、それらのＣＤＲ領域にわたって配列相同性を共有し、機能性を保持するものとして検証されている多様な変異型ＣＤＲ配列を提供する。以下のコンセンサスＣＤＲ配列が、本開示により完全に支持され、それゆえ本開示の範囲内であることが、本明細書で明確に企図されている。
【０５２４】
ＳＲＦ３８８、ＳＲＦ３８１、ＳＲＦ３８２、ＳＲＦ３８４、ＳＲＦ３８６、及びＳＲＦ５２９抗体に関して、これらの抗ＩＬ−２７抗体のそれぞれのＣＤＲ配列のアライメントにより、可変残基によって区切られた広範な相同性が明らかになった。具体的には、重鎖ＣＤＲ１アライメントにより、以下の可変残基が明らかになった：
ＨＣＤＲ１（ＩＭＧＴ）
ＣＬＵＳＴＡＬ  Ｏ（１．２．４）複数配列アライメント
１  ＧＦＴＦＲＳＹＧ  ８  （配列番号１６１）
５  ＧＦＴＦＲＳＹＧ  ８  （配列番号７３）
４  ＧＦＴＦＡＳＹＧ  ８  （配列番号１３９）
２  ＧＦＴＦＳＲＴＧ  ８  （配列番号９５）
３  ＧＦＴＦＳＲＹＧ  ８  （配列番号１１７）
６  ＧＦＴＦＳＳＹＳ  ８  （配列番号５１）
＊＊＊＊
【０５２５】
それゆえ、これらの相同抗体のコンセンサス重鎖ＣＤＲ１（ＩＭＧＴ）配列は、Ｎ−ＧＦＴＦ［Ｓ／Ａ／Ｒ］［Ｓ／Ｒ］［Ｔ／Ｙ］［Ｇ／Ｓ］−Ｃ（配列番号４１２）であり、従って、コンセンサス重鎖ＣＤＲ１（ＩＭＧＴ）配列として本明細書でより一般的に企図されるのは、Ｎ−ＧＦＴＦＸＸＸＸ−Ｃ（配列番号４０８）であり、Ｘは任意のアミノ酸残基である。
【０５２６】
ＳＲＦ３８８、ＳＲＦ３８１、ＳＲＦ３８２、ＳＲＦ３８４、ＳＲＦ３８６、及びＳＲＦ５２９抗体重鎖ＣＤＲ２（ＩＭＧＴ）配列のアライメントにより、以下が明らかになった：
ＨＣＤＲ２（ＩＭＧＴ）
ＣＬＵＳＴＡＬ  Ｏ（１．２．４）複数配列アライメント
１０  ＩＳＳＳＧＳＹＩ  ８  （配列番号１６２）
１１  ＩＳＳＳＳＳＹＩ  ８  （配列番号１４０）
７  ＩＳＳＳＳＳＹＩ  ８  （配列番号７４）
９  ＩＳＳＳＳＳＹＩ  ８  （配列番号９６）
８  ＩＳＳＳＳＡＹＩ  ８  （配列番号１１８）
１２  ＩＳＳＳＳＳＹＩ  ８  （配列番号５２）
＊＊＊＊．：＊＊
【０５２７】
それゆえ、これらの相同抗体のコンセンサス重鎖ＣＤＲ２（ＩＭＧＴ）配列は、Ｎ−ＩＳＳＳ［Ｓ／Ｇ］［Ｓ／Ａ］ＹＩ−Ｃ（配列番号４１３）であり、従って、コンセンサス重鎖ＣＤＲ２（ＩＭＧＴ）配列として本明細書でより一般的に企図されるのは、Ｎ−ＩＳＳＳＸＸＹＩ−Ｃ（配列番号４０９）であり、Ｘは任意のアミノ酸残基である。
【０５２８】
ヒトＣＤＲ１（ＮＴ）及びヒトＣＤＲ２（ＮＴ）配列のアライメントにより、さらに以下が明らかになった：
ＨＣＤＲ１（ＮＴ）
ＣＬＵＳＴＡＬ  Ｏ（１．２．４）複数配列アライメント
１３  ＦＴＦＲＳＹＧＭＮ  ９  （配列番号７６）
１６  ＦＴＦＲＳＹＧＭＮ  ９  （配列番号１６４）
１７  ＦＴＦＡＳＹＧＭＮ  ９  （配列番号１４２）
１４  ＦＴＦＳＲＴＧＭＮ  ９  （配列番号９８）
１５  ＦＴＦＳＲＹＧＭＮ  ９  （配列番号１２０）
１８  ＦＴＦＳＳＹＳＭＮ  ９  （配列番号５４）
＊＊＊      ＊＊＊
ＨＣＤＲ２（ＮＴ）
ＣＬＵＳＴＡＬ  Ｏ（１．２．４）複数配列アライメント
２３  ＧＩＳＳＳＧＳＹＩＹＹＡＤＳＶＫＧ  １７  （配列番号１６５）
１９  ＳＩＳＳＳＳＳＹＩＹＹＡＤＳＶＫＧ  １７  （配列番号７７）
２０  ＳＩＳＳＳＳＳＹＩＹＹＡＤＳＶＫＧ  １７  （配列番号９９）
２２  ＳＩＳＳＳＳＳＹＩＹＹＡＤＳＶＫＧ  １７  （配列番号１４３）
２１  ＳＩＳＳＳＳＡＹＩＬＹＡＤＳＶＫＧ  １７  （配列番号１２１）
２４  ＳＩＳＳＳＳＳＹＩＹＹＡＤＳＶＫＧ  １７  （配列番号５５）
．＊＊＊＊．：＊＊  ＊＊＊＊＊＊＊
【０５２９】
それゆえ、これらの相同抗体のコンセンサス重鎖ＣＤＲ１（ＮＴ）及びＣＤＲ２（ＮＴ）配列は、それぞれ、Ｎ−ＦＴＦ［Ｓ／Ａ／Ｒ］［Ｓ／Ｒ］［Ｔ／Ｙ］［Ｇ／Ｓ］ＭＮ−Ｃ（配列番号４１４）及びＮ−［Ｇ／Ｓ］ＩＳＳＳ［Ｓ／Ｇ］［Ｓ／Ａ］ＹＩ［Ｌ／Ｙ］ＹＡＤＳＶＫＧ−Ｃ（配列番号４１５）である。これらのコンセンサス配列を考慮して、本明細書でより一般的に企図されるのは、それぞれ、コンセンサス重鎖ＣＤＲ１（ＮＴ）及びＣＤＲ２（ＮＴ）配列Ｎ−ＦＴＦＸＸＸＸＭＮ−Ｃ（配列番号４１０）及びＮ−ＸＩＳＳＳＸＸＹＩＸＹＡＤＳＶＫＧ−Ｃ（配列番号４１１）であり、Ｘは任意のアミノ酸残基である。
【０５３０】
重鎖ＣＤＲ３（ＩＭＧＴまたはＮＴ）及び軽鎖ＣＤＲのＣＤＲ１（ＩＭＧＴまたはＮＴ）、ＣＤＲ２（ＩＭＧＴまたはＮＴ）及びＣＤＲ３（ＩＭＧＴまたはＮＴ）は、ＳＲＦ３８８、ＳＲＦ３８１、ＳＲＦ３８２、ＳＲＦ３８４、ＳＲＦ３８６及びＳＲＦ５２９間で完全に保存されていた。
【０５３１】
ＳＲＦ５３５及びＳＲＦ５３８モノクローナル抗体に対して同様のＣＤＲ配列アライメントを実行することにより、これらの２つの関連抗体に関して以下のコンセンサスＣＤＲ配列が明らかになった：
観察された変異（ＩＭＧＴ）：
ＨＣＤＲ１（ＩＭＧＴ）−Ｎ−ＧＦＴＦＳＳＹＧ−Ｃ（配列番号３６１）
ＨＣＤＲ２（ＩＭＧＴ）−Ｎ−Ｉ［Ｋ／Ｗ］［Ｑ／Ｙ］ＤＧＳ［Ｅ／Ｎ］Ｋ−Ｃ（配列番号４４５）
ＨＣＤＲ３（ＩＭＧＴ）−Ｎ−ＡＲ［Ｄ／Ｇ］ＡＰ［ＷＤＩＹＤＹＹＭ／ＥＹＶ］ＤＶ−Ｃ（配列番号４４６）
ＬＣＤＲ１（ＩＭＧＴ）−Ｎ−ＱＳ［Ｉ／Ｖ］ＳＳＹ−Ｃ（配列番号４４７）
ＬＣＤＲ２（ＩＭＧＴ）−Ｎ−［Ａ／Ｄ］［Ａ／Ｓ］Ｓ−Ｃ（配列番号４４８）
ＬＣＤＲ３（ＩＭＧＴ）−Ｎ−ＱＱ［Ｓ／Ｙ］［Ｙ／Ｓ］［Ｖ／Ｌ］［Ｐ／Ｙ］Ｐ［Ｗ／−］Ｔ−Ｃ（配列番号４４９）
コンセンサス（ＩＭＧＴ）：
ＨＣＤＲ１（ＩＭＧＴ）−Ｎ−ＧＦＴＦＳＳＹＧ−Ｃ（配列番号３６１）
ＨＣＤＲ２（ＩＭＧＴ）−Ｎ−ＩＸＸＤＧＳＸＫ−Ｃ（配列番号４３６）
ＨＣＤＲ３（ＩＭＧＴ）−Ｎ−ＡＲＸＡＰ［Ｘ］ｎ＝３−８ＤＶ−Ｃ（配列番号４３７）
ＬＣＤＲ１（ＩＭＧＴ）−Ｎ−ＱＳＸＳＳＹ−Ｃ（配列番号４３８）
ＬＣＤＲ２（ＩＭＧＴ）−Ｎ−ＸＸＳ−Ｃ（配列番号４３９）
ＬＣＤＲ３（ＩＭＧＴ）−Ｎ−ＱＱＸＸＸＸＰ［Ｘ］ｎ＝０−１Ｔ−Ｃ（配列番号４４０）
観察された変異（ＮＴ）：
ＨＣＤＲ１（ＮＴ）−Ｎ−ＦＴＦＳＳＹＧＭ［Ｓ／Ｈ］−Ｃ（配列番号４５０）
ＨＣＤＲ２（ＮＴ）−Ｎ−［Ｎ／Ｖ］Ｉ［Ｋ／Ｗ］［Ｑ／Ｙ］ＤＧＳ［Ｅ／Ｎ］ＫＹＹ［Ｖ／Ａ］ＤＳＶＫＧ−Ｃ（配列番号４５１）
ＨＣＤＲ３（ＮＴ）−Ｎ−ＡＲ［Ｄ／Ｇ］ＡＰ［ＷＤＩＹＤＹＹＭ／ＥＹＶ］ＤＶ−Ｃ（配列番号４４６）
ＬＣＤＲ１（ＮＴ）−Ｎ−ＲＡＳＱＳ［Ｉ／Ｖ］ＳＳＹＬ［Ｎ／Ａ］−Ｃ（配列番号４５２）
ＬＣＤＲ２（ＮＴ）−Ｎ−［ＡＡ／Ｄ］ＳＳ［ＬＱＳ／ＮＲＡＴ］−Ｃ（配列番号４５３）
ＬＣＤＲ３（ＮＴ）−Ｎ−ＱＱ［Ｓ／Ｙ］［Ｙ／Ｓ］［Ｖ／Ｌ］［Ｐ／Ｙ］Ｐ［Ｗ／−］Ｔ−Ｃ（配列番号４４９）
コンセンサス（ＮＴ）：
ＨＣＤＲ１（ＮＴ）−Ｎ−ＦＴＦＳＳＹＧＭＸ−Ｃ（配列番号４４１）
ＨＣＤＲ２（ＮＴ）−Ｎ−ＸＩＸＸＤＧＳＸＫＹＹＸＤＳＶＫＧ−Ｃ（配列番号４４２）
ＨＣＤＲ３（ＮＴ）−Ｎ−ＡＲＸＡＰ［Ｘ］ｎ＝３−８ＤＶ−Ｃ（配列番号４３７）
ＬＣＤＲ１（ＮＴ）−Ｎ−ＲＡＳＱＳＸＳＳＹＬＸ−Ｃ（配列番号４４３）
ＬＣＤＲ２（ＮＴ）−Ｎ−［Ｘ］ｎ＝１−２ＳＳ［Ｘ］ｎ＝３−４−Ｃ（配列番号４４４）
ＬＣＤＲ３（ＮＴ）−Ｎ−ＱＱＸＸＸＸＰ［Ｘ］ｎ＝０−１ＴＣ（配列番号４４０）
【０５３２】
ＣＤＲ配列のアライメントを、ＳＲＦ３８８、ＳＲＦ３８１、ＳＲＦ３８２、ＳＲＦ３８４、ＳＲＦ３８６、ＳＲＦ５２９、ＳＲＦ５３５及びＳＲＦ５３８抗体の全体間でも実行し、これにより以下の観察された変異及びコンセンサス配列が得られた：
観察された変異（ＩＭＧＴ）：
ＨＣＤＲ１（ＩＭＧＴ）−Ｎ−ＧＦＴＦ［Ｓ／Ａ／Ｒ］［Ｓ／Ｒ］［Ｔ／Ｙ］［Ｇ／Ｓ］−Ｃ（配列番号４５４）
ＨＣＤＲ２（ＩＭＧＴ）−Ｎ−Ｉ［Ｓ／Ｋ／Ｗ］［Ｓ／Ｑ／Ｙ］［Ｓ／Ｄ］［Ｓ／Ｇ］［Ｓ／Ａ］［Ｙ／Ｅ／Ｎ］［Ｉ／Ｋ］−Ｃ（配列番号４５５）
ＨＣＤＲ３（ＩＭＧＴ）−Ｎ−ＡＲ［ＤＧＧＲＴＳＹＴＡＴＡＨＮＷＦ／ＤＡＰＷＤＩＹＤＹＹＭ／ＧＡＰＥＹＶ］Ｄ［Ｐ／Ｖ］−Ｃ（配列番号４５７）
ＬＣＤＲ１（ＩＭＧＴ）−Ｎ−ＱＳ［ＶＬＦ／Ｉ／Ｖ］ＳＳ［ＮＮＫＮ／−］Ｙ−Ｃ（配列番号４５９）
ＬＣＤＲ２（ＩＭＧＴ）−Ｎ−［Ｗ／Ａ／Ｄ］［Ａ／Ｓ］Ｓ−Ｃ（配列番号４６１）
ＬＣＤＲ３（ＩＭＧＴ）−Ｎ−ＱＱ［Ｈ／Ｓ／Ｙ］［Ａ／Ｙ／Ｓ］［Ｓ／Ｖ／Ｌ］［Ａ／Ｐ／Ｙ］Ｐ［Ｐ／Ｗ／−］Ｔ−Ｃ（配列番号４６３）
コンセンサス（ＩＭＧＴ）：
ＨＣＤＲ１（ＩＭＧＴ）−Ｎ−ＧＦＴＦＸＸＸＸ−Ｃ（配列番号４０８）
ＨＣＤＲ２（ＩＭＧＴ）−Ｎ−ＩＸＸＸＸＸＸＸ−Ｃ（配列番号４５６）
ＨＣＤＲ３（ＩＭＧＴ）−Ｎ−ＡＲ［Ｘ］ｎ＝６−１５ＤＸ−Ｃ（配列番号４５８）
ＬＣＤＲ１（ＩＭＧＴ）−Ｎ−ＱＳ［Ｘ］ｎ＝１−３ＳＳ［Ｘ］ｎ＝０−４ＹＣ（配列番号４６０）
ＬＣＤＲ２（ＩＭＧＴ）−Ｎ−ＸＸＳ−Ｃ（配列番号４６２）
ＬＣＤＲ３（ＩＭＧＴ）−Ｎ−ＱＱＸＸＸＸＰ［Ｘ］ｎ＝０−１Ｔ−Ｃ（配列番号４６４）
観察された変異（ＮＴ）：
ＨＣＤＲ１（ＮＴ）−Ｎ−ＦＴＦ［Ｓ／Ａ／Ｒ］［Ｓ／Ｒ］［Ｔ／Ｙ］［Ｇ／Ｓ］Ｍ［Ｎ／Ｓ／Ｈ］−Ｃ（配列番号４６５）
ＨＣＤＲ２（ＮＴ）−Ｎ−［Ｇ／Ｓ／Ｎ／Ｖ］Ｉ［Ｓ／Ｋ／Ｗ］［Ｓ／Ｑ／Ｙ］［Ｓ／Ｄ］［Ｓ／Ｇ］［Ｓ／Ａ］［Ｙ／Ｅ／Ｎ］［Ｉ／Ｋ］［Ｌ／Ｙ］Ｙ［Ｖ／Ａ］ＤＳＶＫＧ−Ｃ（配列番号４６７）
ＨＣＤＲ３（ＮＴ）−Ｎ−ＡＲ［Ｄ／Ｇ］［ＧＧＲＴＳＹＴＡＴＡＨＮＷＦ／ＡＰＷＤＩＹＤＹＹＭ／ＡＰＥＹＶ］Ｄ［Ｐ／Ｖ］−Ｃ（配列番号４６９）
ＬＣＤＲ１（ＮＴ）−Ｎ−ＲＡＳＱＳ［Ｉ／Ｖ］ＳＳＹＬ［Ｎ／Ａ］−Ｃ（配列番号４７１）
ＬＣＤＲ２（ＮＴ）−Ｎ−［ＷＡ／ＡＡ／Ｄ］Ｓ［ＴＲＥＳ／ＳＬＱＳ／ＳＮＲＡＴ］−Ｃ（配列番号４７３）
ＬＣＤＲ３（ＮＴ）−Ｎ−ＱＱ［Ｈ／Ｓ／Ｙ］［Ａ／Ｙ／Ｓ］［Ｓ／Ｖ／Ｌ］［Ａ／Ｐ／Ｙ］Ｐ［Ｐ／Ｗ／−］Ｔ−Ｃ（配列番号４７５）
コンセンサス（ＮＴ）：
ＨＣＤＲ１（ＮＴ）−Ｎ−ＦＴＦＸＸＸＸＭＸ−Ｃ（配列番号４６６）
ＨＣＤＲ２（ＮＴ）−Ｎ−ＸＩＸＸＸＸＸＸＸＸＹＸＤＳＶＫＧ−Ｃ（配列番号４６８）
ＨＣＤＲ３（ＮＴ）−Ｎ−ＡＲ［Ｘ］ｎ＝６−１５ＤＸ−Ｃ（配列番号４７０）
ＬＣＤＲ１（ＮＴ）−Ｎ−ＲＡＳＱＳＸＳＳＹＬＸ−Ｃ（配列番号４７２）
ＬＣＤＲ２（ＮＴ）−Ｎ−［Ｘ］ｎ＝１−２Ｓ［Ｘ］ｎ＝４−５−Ｃ（配列番号４７４）
ＬＣＤＲ３（ＮＴ）−Ｎ−ＱＱＸＸＸＸＰ［Ｘ］ｎ＝０−１Ｔ−Ｃ（配列番号４７６）
【０５３３】
ＳＲＦ５４３及びＳＲＦ４１４のアライメントも行い、以下の観察された変異及びコンセンサス配列が得られた：
観察された変異（ＩＭＧＴ）：
ＨＣＤＲ１（ＩＭＧＴ）−Ｎ−ＧＧＳＦＳ［Ｒ／Ｄ］Ｙ［Ｅ／Ｙ］−Ｃ（配列番号４２６）
ＨＣＤＲ２（ＩＭＧＴ）−Ｎ−ＩＤ［Ｗ／Ｙ］ＳＧ［Ｉ／Ｓ］Ｔ−Ｃ（配列番号４２７）
ＨＣＤＲ３（ＩＭＧＴ）−Ｎ−ＡＲ［Ｄ／Ｌ］［Ｐ／Ｇ］［Ｍ／Ｖ］ＹＹ［−／Ｙ］ＤＳＳ［ＶＳＴＧＳＶ／ＤＬＧＦ］Ｄ［Ｖ／Ｉ］−Ｃ（配列番号４２８）
ＬＣＤＲ１（ＩＭＧＴ）−Ｎ−Ｑ［Ｓ／Ｄ］［Ｖ／Ｉ］Ｓ［Ｓ／Ｎ］Ｙ−Ｃ（配列番号４２９）
ＬＣＤＲ２（ＩＭＧＴ）−Ｎ−Ｄ［Ｓ／Ａ］Ｓ−Ｃ（配列番号４３０）
ＬＣＤＲ３（ＩＭＧＴ）−Ｎ−ＱＱ［Ｄ／Ｙ］［Ｓ／Ｄ］Ｄ［Ｈ／Ｌ］ＰＩＴ−Ｃ（配列番号４３１）
コンセンサス（ＩＭＧＴ）：
ＨＣＤＲ１（ＩＭＧＴ）−Ｎ−ＧＧＳＦＳＸＹＸ−Ｃ（配列番号４１６）
ＨＣＤＲ２（ＩＭＧＴ）−Ｎ−ＩＤＸＳＧＸＴ−Ｃ（配列番号４１７）
ＨＣＤＲ３（ＩＭＧＴ）−Ｎ−ＡＲＸＸＸＹＹ［Ｘ］ｎ＝０−１ＤＳＳ［Ｘ］ｎ＝４−６ＤＸ−Ｃ（配列番号４１８）
ＬＣＤＲ１（ＩＭＧＴ）−Ｎ−ＱＸＸＳＸＹ−Ｃ（配列番号４１９）
ＬＣＤＲ２（ＩＭＧＴ）−Ｎ−ＤＸＳ−Ｃ（配列番号４２０）
ＬＣＤＲ３（ＩＭＧＴ）−Ｎ−ＱＱＸＸＤＸＰＩＴ−Ｃ（配列番号４２１）
観察された変異（ＮＴ）：
ＨＣＤＲ１（ＮＴ）−Ｎ−ＧＳＦＳ［Ｒ／Ｄ］Ｙ［Ｅ／Ｙ］ＷＳ−Ｃ（配列番号４３２）
ＨＣＤＲ２（ＮＴ）−Ｎ−ＳＩＤ［Ｗ／Ｙ］ＳＧ［Ｉ／Ｓ］Ｔ［Ｎ／Ｅ］ＹＮＰＳＬＫＳ−Ｃ（配列番号４３３）
ＨＣＤＲ３（ＮＴ）−Ｎ−ＡＲ［Ｄ／Ｌ］［Ｐ／Ｇ］［Ｍ／Ｖ］ＹＹ［−／Ｙ］ＤＳＳ［ＶＳＴＧＳＶ／ＤＬＧＦ］Ｄ［Ｖ／Ｉ］−Ｃ（配列番号４２８）
ＬＣＤＲ１（ＮＴ）−Ｎ−［Ｑ／Ｒ］ＡＳＱ［Ｓ／Ｄ］［Ｖ／Ｉ］Ｓ［Ｓ／Ｎ］ＹＬ［Ｎ／Ａ］−Ｃ（配列番号４３４）
ＬＣＤＲ２（ＮＴ）−Ｎ−Ｄ［Ｓ／Ａ］ＳＮ［Ｒ／Ｌ］［Ａ／Ｅ］Ｔ−Ｃ（配列番号４３５）
ＬＣＤＲ３（ＮＴ）−Ｎ−ＱＱ［Ｄ／Ｙ］［Ｓ／Ｄ］Ｄ［Ｈ／Ｌ］ＰＩＴ−Ｃ（配列番号４３１）
コンセンサス（ＮＴ）：
ＨＣＤＲ１（ＮＴ）−Ｎ−ＧＳＦＳＸＹＸＷＳ−Ｃ（配列番号４２２）
ＨＣＤＲ２（ＮＴ）−Ｎ−ＳＩＤＸＳＧＸＴＸＹＮＰＳＬＫＳ−Ｃ（配列番号４２３）
ＨＣＤＲ３（ＮＴ）−Ｎ−ＡＲＸＸＸＹＹ［Ｘ］ｎ＝０−１ＤＳＳ［Ｘ］ｎ＝４−６ＤＸ−Ｃ（配列番号４１８）
ＬＣＤＲ１（ＮＴ）−Ｎ−ＸＡＳＱＸＸＳＸＹＬＸ−Ｃ（配列番号４２４）
ＬＣＤＲ２（ＮＴ）−Ｎ−ＤＸＳＮＸＸＴ−Ｃ（配列番号４２５）
ＬＣＤＲ３（ＮＴ）−Ｎ−ＱＱＸＸＤＸＰＩＴ−Ｃ（配列番号４２１）
【０５３４】
実施例１２：選択されたモノクローナル抗体の特性
本開示の選択されたモノクローナル抗体を、様々な機能特性について評価した。ある特定のこのような評価の結果を、図９に表として示した。注目すべきことに、（上記の通りに、ＢＩＡＣＯＲＥ  ２０００機器にて表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）技術により決定して）１５ｎＭ以下の平衡解離定数（ＫＤ）でヒトＩＬ−２７への結合を呈した幅広いモノクローナル抗体が同定され（「特性（ｉ）」）、それにはＡｂ７、ＳＲＦ５５７、ＳＲＦ５３６、ＳＲＦ４１６、ＳＲＦ５４３、ＳＲＦ４１４、ＳＲＦ５２９、ＳＲＦ３８１、ＳＲＦ３８８、ＳＲＦ３８２、ＳＲＦ３８４、ＳＲＦ３８６、ＳＲＦ４１０、ＳＲＦ４１１、ＳＲＦ４０５、ＳＲＦ５３５、ＳＲＦ５３８が含まれた。
【０５３５】
予期せぬことに、選出モノクローナル抗体がＷＳＸ−１競合性であることが同定され（「特性（ｉｉ）」）、それにはＡｂ７、ＳＲＦ５３６、ＳＲＦ４１６、ＳＲＦ５４３、ＳＲＦ４１４、ＳＲＦ５２９、ＳＲＦ３８１、ＳＲＦ３８８、ＳＲＦ３８２、ＳＲＦ３８４、ＳＲＦ３８６、ＳＲＦ５３５、及びＳＲＦ５３８が含まれた。
【０５３６】
驚くべきことに、ｐＳＴＡＴ１  Ｕ９３７を阻害した選出モノクローナル抗体が同定され（「特性（ｉｉｉ）」）、それにはＡｂ７、ＳＲＦ５３６、ＳＲＦ４１６、ＳＲＦ５４３、ＳＲＦ４１４、ＳＲＦ５２９、ＳＲＦ３８１、ＳＲＦ３８８、ＳＲＦ３８２、ＳＲＦ３８４、ＳＲＦ３８６、ＳＲＦ４１０、ＳＲＦ４１１、ＳＲＦ４０５、ＳＲＦ５３５及びＳＲＦ５３８が含まれた。
【０５３７】
注目すべきことに、ＣＤ１６１発現を阻害した選出モノクローナル抗体も同定され（「特性（ｉｖ）」）、それにはＡｂ７、ＳＲＦ５３６、ＳＲＦ４１６、ＳＲＦ５４３、ＳＲＦ５２９、ＳＲＦ３８１、ＳＲＦ３８８、ＳＲＦ３８２、ＳＲＦ３８４、及びＳＲＦ３８６が含まれた。
【０５３８】
ＣＤ４＋Ｔ細胞においてＰＤ−Ｌ１発現を、注目すべきことに、阻害した選出モノクローナル抗体も同定され（「特性（ｖ）」）、それにはＡｂ７、ＳＲＦ５３６、ＳＲＦ４１６、ＳＲＦ５４３、ＳＲＦ４１４、ＳＲＦ５２９、ＳＲＦ３８１、ＳＲＦ３８８、ＳＲＦ３８２、ＳＲＦ３８４、ＳＲＦ３８６、及びＳＲＦ５３５が含まれた。
【０５３９】
限られた数のモノクローナル抗体についてのみ試験したが、試験されたこれらの抗体がＰＤ−１媒介性サイトカイン分泌を増強する能力（「特性（ｖｉ）」）のばらつきも観察された。具体的には、ＳＲＦ３８１及びＳＲＦ３８８抗体は、ＰＤ−１媒介性サイトカイン分泌を増強することが注目すべきことに同定されたが、ＳＲＦ５３６はそうではなかった。
【０５４０】
上記の通りの特性（ｉ）〜（ｖｉ）のそれぞれを有するモノクローナル抗体を、それゆえ、本明細書で同定している。検査された全ての抗体が特性（ｉ）〜（ｖｉ）のそれぞれを有すると同定されたわけではなく、それゆえ、これらの特性のサブセレクションを有する選出抗体を集めることができることが明確に企図される。例えば、抗体Ａｂ７、ＳＲＦ５３６、ＳＲＦ４１６、ＳＲＦ５４３、ＳＲＦ５２９、ＳＲＦ３８１、ＳＲＦ３８８、ＳＲＦ３８２、ＳＲＦ３８４及びＳＲＦ３８６は、特性（ｉ）〜（ｖ）のそれぞれを有すると同定された。一方、抗体Ａｂ７、ＳＲＦ５３６、ＳＲＦ４１６、ＳＲＦ５４３、ＳＲＦ５２９、ＳＲＦ３８１、ＳＲＦ３８８、ＳＲＦ３８２、ＳＲＦ３８４及びＳＲＦ３８６は、特性（ｉｉｉ）及び（ｉｖ）のそれぞれを有すると同定された。当業者に明らかであるように、抗体の類似するサブセレクション及び関連特性は、図９に提示される情報から容易に集められる。
【図１】
2021518138.tif 000176
【図２】
2021518138.tif 000177
【図３Ａ】
2021518138.tif 000178
【図３Ｂ】
2021518138.tif 000179
【図３Ｃ】
2021518138.tif 000180
【図３Ｄ】
2021518138.tif 000181
【図３Ｅ】
2021518138.tif 000182
【図４】
2021518138.tif 000183
【図５Ａ】
2021518138.tif 000184
【図５Ｂ】
2021518138.tif 000185
【図５Ｃ】
2021518138.tif 000186
【図５Ｄ】
2021518138.tif 000187
【図５Ｅ−１】
2021518138.tif 000188
【図５Ｅ−２】
2021518138.tif 000189
【図５Ｆ】
2021518138.tif 000190
【図５Ｇ】
2021518138.tif 000191
【図５Ｈ】
2021518138.tif 000192
【図５Ｉ】
2021518138.tif 000193
【図５Ｊ】
2021518138.tif 000194
【図５Ｋ】
2021518138.tif 000195
【図６Ａ】
2021518138.tif 000196
【図６Ｂ】
2021518138.tif 000197
【図６Ｃ】
2021518138.tif 000198
【図６Ｄ】
2021518138.tif 000199
【図７Ａ】
2021518138.tif 000200
【図７Ｂ】
2021518138.tif 000201
【図７Ｃ】
2021518138.tif 000202
【図７Ｄ】
2021518138.tif 000203
【図８Ａ】
2021518138.tif 000204
【図８Ｂ】
2021518138.tif 000205
【図８Ｃ】
2021518138.tif 000206
【図８Ｄ】
2021518138.tif 000207
【図９−１】
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【図９−２】
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【図１０Ａ−１】
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【図１０Ａ−２】
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【図１０Ａ−３】
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【図１０Ａ−４】
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【図１０Ｂ−１】
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【図１０Ｂ−２】
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【図１０Ｂ−３】
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【図１０Ｂ−４】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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