(57)【要約】  本発明は、粒子の表面に負電荷を含有するポリマー粒子を提供する。好ましくは、粒子は、ＰＬＧＡ及びガンマカルボキシル化ポリアミノ酸を含む。本発明は、本発明の方法によって製造されたポリマー粒子も提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ラクチド−グリコリドコポリマー（ＰＬＧＡ）及びカルボキシル化ポリアミノ酸、例えばガンマカルボキシル化ポリアミノ酸、好ましくはポリ（ガンマグルタミン酸）、ポリ（Ｌ−グルタミン酸）、ポリ（Ｄ−グルタミン酸）、ポリ（Ｄ，Ｌ−グルタミン酸）及びポリ（アスパラギン酸）を含む、負の表面電荷を有する粒子。
【請求項２】
前記粒子がマイクロ粒子又はナノ粒子である、請求項１に記載の粒子。
【請求項３】
前記粒子が、少なくとも約２５ｍＶ、例えば少なくとも約４０ｍＶの絶対値を有するゼータ電位を有する、請求項１に記載の粒子。
【請求項４】
前記ＰＬＧＡ及びガンマカルボキシル化ポリアミノ酸が相互貫入網目を形成する、請求項１に記載の粒子。
【請求項５】
有効成分をさらに含む、請求項１に記載の粒子。
【請求項６】
マイクロ粒子又はナノ粒子の調製方法であって、
（１）ＰＬＧＡ（及び任意に有効成分、例えば医薬品成分（ＡＰＩ）、又は難水溶性化合物）を第１の溶媒に溶解させて、ＰＬＧＡ溶液をを形成するステップ、
（２）前記ポリマー溶液を第２の溶媒の溶液中に乳化させて、エマルジョンを形成するステップであって、前記第１の溶媒が前記第２の溶媒と混和性でないか、又は一部混和性であり、
前記第２の溶媒の前記溶液がカルボキシル化ポリアミノ酸を含み、
前記第２の溶媒の前記溶液が任意に、前記第２の溶媒に可溶性の界面活性剤及び／又はＡＰＩをさらに含む、ステップ、並びに（３）前記第１の溶媒を除去して、負の表面電荷を有する前記マイクロ粒子又はナノ粒子を形成するステップ、
を含む、方法。
【請求項７】
請求項６に記載の方法であって、
（１）ＰＬＧＡ（及び任意に有効成分、ＡＰＩ又は難水溶性化合物）を第１の溶媒に溶解させて、ポリマー溶液を形成するステップ、
（２）第２の溶媒を前記ポリマー溶液に添加して、混合物を形成するステップであって、
前記第１の溶媒が前記第２の溶媒と混和性でないか、又は一部混和性であり、
前記第２の溶媒の前記第１の溶液が、（同じであり得る又は異なり得る有効成分を任意に含む）、ステップ、
（３）前記混合物を乳化させて、第１のエマルジョンを形成するステップ、
（４）前記第１のエマルジョンを前記第２の溶媒の第２の溶液中に乳化させて、第２のエマルジョンを形成するステップであって、
前記第２の溶媒の前記第２の溶液がカルボキシル化ポリアミノ酸を含み、任意に界面活性剤をさらに含む、ステップ、及び
（５）前記第１の溶媒を除去して、負の表面電荷を有するマイクロ粒子又はナノ粒子を形成するステップ、
を含む、方法。
【請求項８】
前記マイクロ粒子若しくはナノ粒子を洗浄するステップ及び／又は前記マイクロ粒子若しくはナノ粒子を所望の体積まで濃縮するステップをさらに含む、請求項６に記載の方法。
【請求項９】
前記負の表面電荷が、洗浄後のゼータ電位によって測定された、前記負の表面電荷を維持することができる、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
前記マイクロ粒子又はナノ粒子が、洗浄後にゼータ電位によって測定された、少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％又は９９％の前記負の表面電荷を保持している、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記ＰＬＧＡが約５００〜約１，０００，０００Ｄａ、好ましくは約１，０００〜約１００，０００Ｄａの平均分子量を有し、並びに／又は前記ＰＬＧＡが約１００／０〜０／１００、約９５／５〜５／９５、約８５／１５〜１５／８５及び約５０／５０のＬ／Ｇ比を有し、並びに／又は前記ＰＬＧＡがカルボキシル基などの複数の負に帯電した末端基を含有する、請求項６に記載の方法。
【請求項１２】
前記マイクロ粒子又はナノ粒子が、約−２５ｍＶ以下、約−３０ｍＶ以下、約−３５ｍＶ以下、−４０ｍＶ以下、約−４５ｍＶ以下又は約−５０ｍＶ以下、例えば−４０ｍＶ〜−６５ｍＶのゼータ電位を有する、請求項６に記載の方法。
【請求項１３】
前記第１の溶媒が、メチレンクロリド、エチルアセタート又はクロロホルムである、請求項６に記載の方法。
【請求項１４】
前記第２の溶媒の前記溶液が水性であり、好ましくは有機又は無機の医薬用賦形剤；各種ポリマー；オリゴマー；天然物；非イオン性、カチオン性、双性イオン性又はイオン性界面活性剤；及びその混合物を含む界面活性剤を含み、好ましくは、前記界面活性剤が、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、ツインシリーズ界面活性剤、プルロニック（登録商標）シリーズ、ポロキサマーシリーズ若しくはトリトンＸ−１００又はその塩、誘導体、コポリマー若しくは混合物から選択される、請求項６に記載の方法。
【請求項１５】
前記乳化ステップが、ホモジナイゼーション、機械的撹拌及び／又はマイクロフルイダイゼーションを含む、請求項６に記載の方法。
【請求項１６】
前記第１の溶媒が溶媒交換及び／又は蒸発によって除去される、請求項６に記載の方法。
【請求項１７】
前記マイクロ粒子又はナノ粒子が、好ましくは前記マイクロ粒子又はナノ粒子内に封入されるようになる有効成分、例えばＡＰＩ（医薬品有効成分）を含む、請求項６に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
あるカルボキシル化粒子、例えばカルボキシル化ＰＬＧＡマイクロ粒子及びナノ粒子は、ある治療用途に有用であり得る。場合により、表面に高い負の電荷があっても、負の電荷を持つマイクロ粒子及びナノ粒子が有することが望ましい。ある場合において、抗体、抗原、タンパク質、ペプチド、小分子又は標的化リガンドなどの生物学的物質が粒子の表面に化学結合を介して結合され得るように、マイクロ粒子及びナノ粒子が表面カルボキシル基を有することが望ましい。
【０００２】
しかし、従来の手段を使用して製造したカルボキシル化ＰＬＧＡ粒子は生体適合性でないことが多く、ゆえにそのような製造方法から得られるＰＬＧＡ粒子は、ヒト及び動物への使用に安全ではないことがある。場合によっては、マイクロ粒子やナノ粒子は、特定の用途のために表面に十分な負電荷を含有していない。さらに、従来の手段を用いて製造したＰＬＧＡ粒子は、ＡＰＩ又は他の化学物質をマイクロ粒子及びナノ粒子に結合させるために十分な数のＣＯＯＨ基を含有していない場合がある。
【０００３】
我々は、ＰＬＧＡ粒子にポリアクリル酸とヒアルロン酸を包含させることによって形成されたマイクロ粒子やナノ粒子を提案した。形成された粒子は、特定の用途に好適な負のゼータ電位を有する。ただし、なお満足されていない以下のニーズがある。
１）状況によっては、ヒアルロン酸（ＨＡ）及びポリアクリル酸（ＰＡＡ）とは異なる、薬学的に許容される負に帯電したポリマーが好ましいことがある。
２）ある用途では、さらにより負の表面電荷が好ましいことがある。
３）ＨＡ及びＰＡＡはどちらも、ＡＰＩ装填ナノ粒子及びマイクロ粒子の表面にある標的化リガンドとの共有結合の形成に有用であり得る追加のカルボキシル基を与えることができる。ある状況では、カルボキシル基が２級又は３級カルボキシル基ではなく、１級カルボキシル基であることが好ましい。ＨＡ分子とＰＡＡ分子の両方におけるカルボキシル基はすべて２級カルボキシル基である。したがって、表面に高い負の電荷と１級カルボキシル基を有する薬物装填粒子が必要とされている。
【０００４】
要約すると、治療特性が増強された、負に帯電した（例えばカルボキシル化ＰＬＧＡ）マイクロ粒子及びナノ粒子を調製するさらなる必要がある。
【発明の概要】
【０００５】
本発明の一態様は、高い負の表面電荷又はゼータ電位を有するマイクロ粒子及びナノ粒子並びにその調製方法を提供する。マイクロ粒子及び／又はナノ粒子は、乳酸−グリコール酸コポリマー（ＰＬＧＡ）、カルボキシル化ポリアミノ酸（ガンマポリグルタミン酸など）及び任意に有効成分を含む。カルボキシル化ポリアミノ酸は、好ましくは、少なくとも２５ｍＶ、好ましくは少なくとも約３０ｍＶ、より好ましくは少なくとも約３５ｍＶの絶対値を有する負のゼータ電位を付与するのに有効な量で添加される。ポリアミノ酸は、本明細書では、アニオン性ポリマー又は負帯電剤とも呼ばれる。
【０００６】
本発明は、マイクロ粒子又はナノ粒子の調製方法であって、（１）ＰＬＧＡ（及び任意に医薬品成分（ＡＰＩ）などの有効成分又は難水溶性化合物）を第１の溶媒に溶解させて、ＰＬＧＡ溶液を形成するステップ、（２）ポリマー溶液を第２の溶媒の溶液中に乳化させて、エマルジョンを形成するステップであって、第１の溶媒が第２の溶媒と混和性でないか、又は一部混和性であり、第２の溶媒の溶液がカルボキシル化ポリアミノ酸を含み、前記第２の溶媒の溶液が任意に、第２の溶媒に可溶性の界面活性剤及び／又はＡＰＩをさらに含む、ステップ、並びに（３）第１の溶媒を除去して、負の表面電荷を有する前記マイクロ粒子又はナノ粒子を形成するステップを含む方法を含む。
【０００７】
本発明は、負の表面電荷を有するマイクロ粒子又はナノ粒子を調製する方法であって、（１）ＰＬＧＡ（及び任意に有効成分、ＡＰＩ又は難水溶性化合物）を第１の溶媒に溶解させて、ポリマー溶液を形成するステップ、（２）第２の溶媒を前記ポリマー溶液に添加して、混合物を形成するステップであって、第１の溶媒が第２の溶媒と混和性でないか、又は一部混和性であり、第２の溶媒の第１の溶液が、同じであり得る又は異なり得る有効成分を任意に含む、ステップ、（３）混合物を乳化させて、第１のエマルジョンを形成するステップ、（４）第１のエマルジョンを第２の溶媒の第２の溶液中に乳化させて、第２のエマルジョンを形成するステップであって、第２の溶媒の第２の溶液がカルボキシル化ポリアミノ酸を含み、任意に界面活性剤をさらに含む、ステップ、並びに（５）第１の溶媒を除去して、負の表面電荷を有するマイクロ粒子又はナノ粒子を形成するステップ、を含む方法も提供する。
【０００８】
好ましくは、方法は、前記マイクロ粒子若しくはナノ粒子を洗浄すること及び／又は前記マイクロ粒子若しくはナノ粒子を所望の体積まで濃縮することをさらに含む。
【０００９】
好ましくは、負の表面電荷は、ゼータ電位によって測定した場合に負の表面電荷を著しく失わずに（例えば、著しくより小さい負、つまり元の負の値より０に近い負の値にならずに）、本明細書に例示する洗浄試験などの、ある洗浄試験に耐えることができる。
【００１０】
好ましくは、洗浄後、マイクロ粒子又はナノ粒子は、ゼータ電位によって測定すると、少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％又は９９％の負の表面電荷を保持している。
【００１１】
好ましくは、ＰＬＧＡは、約５００〜約１，０００，０００Ｄａ、好ましくは約１，０００〜約１００，０００Ｄａの平均分子量を有する。
【００１２】
好ましくは、ＰＬＧＡは、約１００／０〜０／１００、約９５／５〜５／９５、約８５／１５〜１５／８５及び約５０／５０のＬ／Ｇ比を有する。
【００１３】
好ましくは、ＰＬＧＡは複数の負に帯電した末端基、例えばカルボキシル基を含む。
【００１４】
好ましくは、マイクロ粒子又はナノ粒子は、約−２５  ｍＶ  以下、約−３０  ｍＶ  以下、約−３５  ｍＶ  以下、−４０  ｍＶ  以下、約−４５ｍＶ  以下又は約−５０  ｍＶ  以下のゼータ電位を有する。例えば−４０ｍＶ〜−６５ｍＶである。
【００１５】
好ましくは、第１の溶媒はメチレンクロリド、エチルアセタート又はクロロホルムである。
【００１６】
好ましくは、第２の溶媒の溶液は、水性であり、好ましくは有機又は無機の医薬用賦形剤、各種ポリマー、オリゴマー、天然物、非イオン性、カチオン性、双性イオン性又はイオン性界面活性剤及びその混合物を含む界面活性剤を含む。好ましい界面活性剤は、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、ツインシリーズ界面活性剤、プルロニック（登録商標）シリーズ、ポロキサマーシリーズ若しくはトリトンＸ−１００又はその塩、誘導体、コポリマー若しくは混合物を含む。
【００１７】
好ましくは、乳化ステップは、ホモジナイゼーション、機械的撹拌及び／又はマイクロフルイダイゼーションを含む。
【００１８】
好ましくは、第１の溶媒は溶媒交換及び／又は蒸発によって除去される。
【００１９】
好ましくは、マイクロ粒子又はナノ粒子は、有効成分、例えばＡＰＩ（医薬品有効成分）を含む。
【００２０】
好ましくは、ＡＰＩはマイクロ粒子又はナノ粒子内に封入されている。
【００２１】
代替的に又は追加的に、ＡＰＩは、マイクロ粒子又はナノ粒子の表面に共有結合又はイオン結合させることができる。例えばＡＰＩは、インビボ放出を促進する加水分解性結合を介して粒子表面に共有結合させることができる。
【００２２】
好ましくは、第２の溶媒の溶液は、乳化中に第１の溶媒中のＰＬＧＡ溶液が第２の溶媒の溶液に添加される前に、第１の溶媒をさらに含むか又は第１の溶媒によって飽和される。このことは、乳化のために第２の溶媒の溶液に添加したときに、第１の溶媒中のＰＬＧＡが沈殿しにくいという点で有益であり得る。好ましくは、第１の溶媒はエチルアセタートであり、第２の溶媒の溶液（例えば水又は水溶液）は約７〜８％体積／体積のエチルアセタートを含む。
【００２３】
本明細書に記載する本発明の任意の好ましい特徴は、本発明の一態様の下にのみ記載される好ましい特徴及び例にのみ記載される好ましい特徴を含む、任意の他の好ましい特徴と組合せることができる。
【発明を実施するための形態】
【００２４】
１．概要
製薬及びバイオテクノロジーの分野では、薬物／ＡＰＩのポリマー粒子への封入が所望であることが多い。例えば、薬物は、長時間作用型の持続放出のためのラクチド−グリコリドコポリマー、ＰＬＧＡなどの、生分解性ポリマーのマイクロ粒子（本明細書ではミクロスフェアとも呼ばれる）に封入することができる。市販品の例として、ロイプロリドアセタート、エクセナチド、リスペリドン及びナルトレキソンのＰＬＧＡ又はＰＬＡミクロスフェアが挙げられる。
【００２５】
ミクロスフェア製剤に加えて、標的薬物送達のために薬物分子をポリマーナノ粒子に封入することもでき、標的薬物送達は、特定の部位、細胞、臓器及び受容体に薬物を送達することを含む。例えば、ナノ粒子は、「血管透過性・滞留性亢進効果（Ｅｎｈａｎｃｅｄ  Ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙ  ａｎｄ  Ｒｅｔｅｎｔｉｏｎ  Ｅｆｆｅｃｔ）」、即ちＥＰＲ効果を利用して、腫瘍組織に薬物を送達することができる。ＥＰＲ効果は、特定サイズの分子又は粒子が、正常組織よりもはるかに多く腫瘍組織に蓄積する傾向があるという特性である（Ｍａｔｓｕｍｕｒａ  ａｎｄ  Ｍａｅｄａ，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ．４６（１２  Ｐｔ  １）：６３８７−６３９２，１９８６；Ｄｕｎｃａｎ  ａｎｄ  Ｓａｔ，Ａｎｎ．Ｏｎｃｏｌ．９，Ｓｕｐｐｌ．２：３９，１９９８；Ｋａｙｅ，ｅｔ  ａｌ．Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ．５（１）：８３−９４，１９９９）。
【００２６】
標的薬物送達は、最初に薬物をナノ粒子中に封入し、続いてナノ粒子の表面に標的化剤を付着させることによっても達成され得る。ほとんどの場合、表面への標的化剤の付着は化学的コンジュゲーションを介して行うことが必要である。通例、そのようなコンジュゲーションは、標的化剤とナノ粒子の表面上の適切な反応基との間の化学反応を含む。反応基としては、カルボキシル、アミノ、チオール、アルデヒド、マレイミド、エポキシド及び無水物が挙げられる。
【００２７】
ポリラクチド（ＰＬＡ）、ＰＬＧＡ、ＰＣＬ及び他のいくつかの生分解性及び生体適合性ポリマーが、多種多様な用途のためのＡＰＩの封入に使用されてきた。
【００２８】
そのようなポリマー粒子の表面特性は、標的薬物送達にとって非常に重要であり得る。考慮できる薬物装填粒子の表面特性に関連して、少なくとも以下の２つの側面がある：
１）表面電荷−特定の薬物送達用途それぞれについて、粒子表面は正、負、又は中性である必要があり得て、ゼータ電位は特定の範囲内にある必要があり得る。
２）表面の官能基−薬物装填粒子の表面に生物学的物質又は標的化剤をコンジュゲーションするために、例としては、表面に対するカルボキシル、アミノ、チオール、アルデヒド、マレイミド、グリシジル及び無水物が挙げられる。
【００２９】
場合により、１つの解決策で両方の目的を達成できる。例えば、カルボキシル基を薬物装填ポリマー粒子の表面に付加して、同時に表面に負電荷及び官能基を生成することができる。
【００３０】
本明細書に記載の発明は、マイクロ粒子及びナノ粒子を含む医薬製剤（薬剤／薬物／ＡＰＩ装填あり又はなし）並びに医薬的に許容される成分のみを使用して、カルボキシル基の高い表面密度及び高い負の表面電荷を有するマイクロ粒子及びナノ粒子を含む、そのような医薬製剤を製造可能な改良方法を提供する。
【００３１】
本発明は、ＰＬＧＡ又はＰＬＡなどの疎水性及び／又は中性生体適合性ポリマーとカルボキシル化ポリアミノ酸などのポリアニオン性ポリマーとの共沈又はコアセルベーションから本発明の方法において製造されるマイクロ粒子及びナノ粒子が、粒子表面にアニオンを高密度で供給するという発見に一部基づいており、それにより高装填量で有効成分を封入する能力によって免疫原性特性を改善する。いかなる理論にも縛られることなく、ポリマー主鎖はエマルジョンの有機相中で絡み合い又は組合され、この間に親水性アニオンはエマルジョン液滴の表面に有利に作用すると考えられる。このようにして形成された相互連結網状構造によって、さもなければ水溶性のアニオン性ポリマーを洗い流すことができない粒子を生じ、同時に封入に有利な疎水性微小環境が保存される。
【００３２】
理論に縛られることなく、カルボキシル化ポリアミノ酸を利用する本発明のマイクロ粒子及びナノ粒子は、著しいゼータ電位を保持しながら、改善された代謝及び組織標的化を特徴とする。この方法はまた、ポリエステル骨格を有するポリマーと、生分解性で加水分解性のポリアミド骨格を有するポリマーとの良好から優れた相互貫入網目を生じると考えられる。
【００３３】
本明細書で使用する場合、「少（量）」は、第１の溶媒中のポリマー溶液中で、第２の溶媒の第１の溶液の乳化によって、エマルジョン（即ち、第１のエマルジョン）が形成され、連続相がポリマー溶液であるように、ＰＬＧＡポリマーを有する第１の溶媒の体積と比較して、第２の溶媒の第１の溶液の量／体積が比較的少ないことを示す。通例、少量の第２の溶媒の第１の溶液と第１の溶媒との間の体積比は、少なくとも約１：ｎであり、ここでｎは１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０又は１００であり得る。
【００３４】
本明細書で使用する場合、「大（量）」は、第２の溶媒の第２の溶液中の第１のエマルジョンの乳化によって、エマルジョン（即ち、第２のエマルジョン）が形成され、連続相が第２の溶媒の第２の溶液であるように、第１のエマルジョンの体積と比較して、第２の溶媒の第２の溶液の量／体積が比較的大きいことを示す。通例、第１のエマルジョンと大量の第２の溶媒の第２の溶液との間の体積比は、少なくとも約１：ｍであり、ここでｍは１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０又は１００であり得る。
【００３５】
好ましくは、大規模製造は、約−４０ｍＶ以下、約−４５ｍＶ以下又は約−５０ｍＶ以下のゼータ電位を有するマイクロ粒子又はナノ粒子を生じる。特性を示す別の方法は、ゼータ電位が負であり、ゼータ電位の絶対値が４０  ｍＶを超える、４５  ｍＶを超える、又は５０ｍＶを超えることである。
【００３６】
本発明の方法を使用して、カルボキシルポリアミノ酸は、製造されたマイクロ粒子又はナノ粒子に堅固に組み入れられている。したがって、好ましくは、ポリアミノ酸は、前記マイクロ粒子又はナノ粒子に包含されて、前記マイクロ粒子又はナノ粒子の負の表面電荷を上昇させる。
【００３７】
マイクロ粒子又はナノ粒子への医薬的に許容される負に帯電した薬剤の包含は安定かつ堅固であり得る。このため、好ましくは、方法は、前記マイクロ粒子若しくはナノ粒子を洗浄すること及び／又は前記マイクロ粒子若しくはナノ粒子を所望の体積まで濃縮することをさらに含む。
【００３８】
特定の理論に縛られることを望むものではないが、アミノ酸カルボキシル基の存在による負の表面電荷が、マイクロ粒子及びナノ粒子の表面に堅固に固定され、このため、そのような負の表面電荷及び／又はカルボキシル基の著しい損失を被ることなく、各種の洗浄条件又は洗浄試験に耐えられる。
【００３９】
本発明の方法を使用して製造したマイクロ粒子及びナノ粒子は、不純物を除去する、並びに／又はそのように製造されたマイクロ粒子及びナノ粒子を濃縮する精製工程の一部として、日常的に洗浄を行ってよい。
【００４０】
本発明の方法を使用して製造されたマイクロ粒子及びナノ粒子は、負の表面電荷及び／又はカルボキシル基のマイクロ粒子及びナノ粒子への安定的な包含を確実にするために、例えば品質管理工程の一部として、より厳格な洗浄試験を受けることもある。
【００４１】
好ましくは、洗浄試験は、以下に例示されたものと同一又は類似の条件を使用する。好ましくは、洗浄試験後、マイクロ粒子及びナノ粒子は、ゼータ電位によって測定される負の表面電荷を著しく失わない（例えば、著しくより小さい負、つまり元の負の値より０に実質的に近い又はより低い絶対値を有する負の値にならない）。
【００４２】
好ましくは、洗浄後、マイクロ粒子又はナノ粒子は、ゼータ電位によって測定すると、少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％又は９９％の負の表面電荷を保持している。
【００４３】
上記で一般に説明した本発明を用いて、本発明の具体的な態様を以下の節でさらに説明する。
２．定義：
【００４４】
本明細書で使用する場合、「医薬的に許容される」は、健全な医学的判断の範囲内で、過度の毒性、刺激、アレルギー反応、又は他の問題若しくは合併症を引き起すことなく、生成物中に存在する濃度、投薬量又は量にて、ヒト及び動物の組織と接触したときの医学的又は獣医学的使用に好適であり、合理的な利益／リスク比に見合った、化合物、材料、組成物及び／又は剤形を含む。好ましくは、医薬的に許容される材料（例えば、それから製造されるポリマー、賦形剤、界面活性剤、溶媒又はマイクロ粒子／ナノ粒子）は、ヒトの医学用途に好適であるか又は承認されている。
【００４５】
本明細書で使用する場合、「マイクロ粒子」は、好ましくはおおよそ円形、球形又は球形様の形状であり、一般に、例えばレーザ回折によって測定した場合、例えば約１〜１，０００μｍの又は約１０〜１００μｍのサイズ範囲内である。主題のマイクロ粒子は、インビボで凝集又は集合しにくい粒子も含み得る。ただし、棒状、板状、シート状、及び針状を含む、他の粒子形態も可能であることが理解される。通常、粒径は、試験を行った生成物サンプルの体積中央幾何径を反映していると理解される。
【００４６】
本明細書中で使用する場合、「ナノ粒子」は、好ましくはおおよそ円形、球形、又は球形様の形状であり、一般に、例えばレーザ回折又は動的光散乱によって測定した場合、例えば約１〜１，０００ｎｍ、約１０〜１，０００ｎｍ又は約５０〜１，０００ｎｍ又は約１００〜５００ｎｍのサイズ範囲内である。主題のナノ粒子は、インビボで凝集しにくい粒子を含み得る。
【００４７】
粒径及び粒度分布は動的光散乱装置、例えばＭａｌｖｅｒｎ  Ｚｅｔａｓｉｚｅｒによって測定することができる。別の技術としては、例えば沈降場流動分画法、光子相関分光法、光散乱法、動的光散乱法、光回折法及びディスク遠心分離法が挙げられる。「マイクロ粒子」及び「ナノ粒子」という用語は、いかなる特定の形状の限定も伝えることを意図するものではない。そのような粒子は、一般的に多面体又は球形の形状を有するものを含むが、これに限定されない。好ましい粒子は、通例、エマルジョン系封入方法によって製造された球形の幾何学的形状を特徴とする。「マイクロ粒子」及び「ナノ粒子」という用語は、大きさの具体的な説明を伴わない限り、本明細書では互換的に使用されることが理解される。例えば、「マイクロ粒子」という用語は、文脈で別途求められない限り、「マイクロ粒子及び／又はナノ粒子」と記載されているかのように、「ナノ粒子」も包含することを意図している。
【００４８】
各マイクロ粒子又はナノ粒子は、大きさが均一である必要はないが、粒子は一般に抗原提示細胞（ＡＰＣ）又は他のＭＰＳ細胞において食作用を誘発するのに十分な大きさである。好ましくは、主題のマイクロ粒子及びナノ粒子は、抗原提示細胞（ＡＰＣ）又は他のＭＰＳ細胞において食作用を誘発するのに十分な直径を有する。
【００４９】
本発明により、マイクロ粒子又はナノ粒子は負（表面）電荷を有する。カルボキシル化マイクロ粒子及びナノ粒子の負電荷密度は、「ゼータ電位」によって定量化することができる。負の表面電荷を有するマイクロ粒子及びナノ粒子のゼータ電位は、通例、粒子の水性懸濁液中で４〜１０、好ましくは５〜８のｐＨにて測定される。好ましくは、本発明の方法によって製造されたマイクロ粒子又はナノ粒子は、約−２０ｍＶ〜約−２００ｍＶ、好ましくは約−３０ｍＶ〜約−１００ｍＶ、最も好ましくは−３５ｍＶ〜８５ｍＶのゼータ電位を有し得る。約−４０ｍＶよりも負のゼータ電位は、本明細書では「高度に負に帯電した粒子」と呼ぶ。
【００５０】
本明細書で使用する場合、「約」は一般に、修飾されている特定の用語の最大±１０％を意味する。
【００５１】
「ガンマカルボキシル化ポリアミノ酸」を本明細書で使用して、以下のモノマー単位を有するモノマーを含むポリマーを定義する：
【化１】
2021523151.tif 000002
式中、ｎは０〜約４の整数である。
【００５２】
他のカルボキシル化アミノ酸には、以下のモノマー単位を有するモノマーを含むポリマーが含まれる：
【化２】
2021523151.tif 000003
式中、ｎは０〜約４の整数である。
【００５３】
負の表面電荷は、ゼータ電位の測定によってなど、当分野において既知の任意の技術を用いて測定することができる（例を参照のこと）。
【００５４】
３．ＰＬＧＡ
ＰＬＧＡは通例、ラクチドとグリコリドの開環重合によって調製される。この反応では、触媒としてスズオクトアートが通常使用されるが、他の触媒も使用され得る。アルコールなどの開始剤が重合反応を開始するためによく使用される。意図的に開始剤を添加しない場合、微量の、アルコール及び水などの活性プロトンを含有する極性化合物が開始剤として作用し得る。下記のように、重合により、鎖末端にカルボキシル基を有するＰＬＧＡポリマーが通常得られる。
Ｒ−ＯＨ＋Ｌ（ラクチドモノマー）＋Ｇ（グリコリドモノマー）＝ＰＬＧＡ−ＣＯＯＨ
【００５５】
したがって、各ＰＬＧＡ及び／又はＰＬＡポリマー分子は通例は直鎖状であり、通例は鎖末端にＣＯＯＨ基を１個含有する。その結果、そのようなＰＬＧＡ／ＰＬＡポリマーから調製した、従来のＰＬＧＡ／ＰＬＡ粒子は表面に少量のＣＯＯＨ基のみを有し、その負電荷は、細胞標的化及び疾患、例えば癌又は炎症性疾患の処置などの、ある種の用途には十分ではない場合がある。さらに、ＡＰＩ又は他の化学的部分、例えばタンパク質リガンド若しくは他の標的化剤の前記マイクロ粒子及びナノ粒子の表面への共有結合に十分な数のＣＯＯＨ基が存在しない場合がある。そのようなタンパク質リガンド又は他の標的化剤は、標的細胞、組織、臓器又は位置の表面の受容体又は結合パートナーに結合し得る。
【００５６】
本発明は、ＰＬＧＡ／ＰＬＡ粒子表面に追加の負に帯電した基（例えばカルボキシル基）を有するＰＬＧＡ／ＰＬＡ粒子を製造するための、各種の方法又はその組合せを提供する。正味の負の表面電荷が増加したそのようなＰＬＧＡ／ＰＬＡ粒子は、例えばある細胞を標的化して免疫反応を引き起こし、癌又は炎症性疾患などの疾患を処置して、ＡＰＩ又は他の化学物質のマイクロ粒子及びナノ粒子へのコンジュゲーションを促進するために特に有用である。
【００５７】
好ましくは、医薬的に許容されるポリマーＰＬＧＡの平均分子量は、所望の範囲内にある。
【００５８】
範囲の下限は、好ましくは約１００、２００、３００、４００、５００、６００、７００、８００、９００、１０００、１２００、１５００、２０００、２５００又は３０００Ｄａ以上である。所望の範囲は、上記の値のいずれかの下限を有する。
【００５９】
範囲の上限は、好ましくは  ５００，０００、４００，０００、３００，０００、２００，０００、１００，０００、７５，０００、５０，０００、４０，０００、３５，０００、３０，０００、２５，０００、２０，０００、１５，０００、１０，０００、７，５００又は５，０００Ｄａ以下である。所望の範囲は、上記の値のいずれかの上限を有する。
【００６０】
例えば、所望の範囲は、約５００〜約２００，０００Ｄａ又は約１，０００〜約１００，０００Ｄａであり得る。
【００６１】
好ましくは、ＰＬＧＡは、約５００〜約１，０００，０００Ｄａ、好ましくは約１，０００〜約１００，０００Ｄａの平均分子量を有する。
【００６２】
ＰＬＧＡの場合、平均分子量は、固有粘度などの他の物理的特性で表すことができる。固有粘度（ＩＶ）は、分子サイズを測定するための粘度測定法である。ＩＶは、毛細管を通過する純粋溶媒の流動時間に対する、毛細管を通過するポリマー溶液の流動時間に基づく。本出願における確実な測定のために、使用される溶媒は通例クロロホルムであり、ポリマー濃度は約０．５％（重量／体積）である。粘度の測定温度は約３０℃である。ＩＶの単位は、通例、デシリットル／グラム（ｄＬ／ｇ）で示す。このため、例えば本発明において使用されるＰＬＧＡは、約０．０１〜約２０ｄＬ／ｇ又は約０．０５〜約２．０ｄＬ／ｇの固有粘度を有し得る。
【００６３】
主題のＰＬＧＡポリマーの組成及び生分解性は、ポリマー中のラクチド（Ｌ）単位のグリコリド（Ｇ）単位に対するモル比、即ちＬ／Ｇ比によって一部求められる。本発明におけるＰＬＧＡポリマーのＬ／Ｇ比は、１００／０〜０／１００であることができる。本明細書で使用する場合、「１００／０」のＬ／Ｇ比はポリラクチド、即ちＰＬＡを示し、「０／１００」のＬ／Ｇ比はポリグリコリド、即ちＰＧＡを示す。好ましくは、ＰＬＧＡポリマーのＬ／Ｇ比は、約１００／０〜０／１００又は約９５／５〜５／９５、より好ましくは約８５／１５〜１５／８５である。本発明における最も好ましいＬ／Ｇ比は、約５０／５０である。
【００６４】
ＰＬＧＡマイクロ粒子及びナノ粒子の調製において、他のポリマーをＰＬＧＡポリマーと混合することができる。例えば、ポリエチレングリコール、即ちＰＥＧは、性能を向上させるためにＰＬＧＡに添加されることが多い。ＰＥＧ化粒子は、ヒト又は動物の体内で循環時間が長くなることが多いため有用である。
【００６５】
好ましくは、ＰＥＧとＰＬＧＡのコポリマーも使用することができる。
【００６６】
ＰＥＧとＰＬＧＡの混合物又はＰＥＧとＰＬＧＡのコポリマーから調製したマイクロ粒子及びナノ粒子は、ＰＥＧ化ＰＬＧＡマイクロ粒子及びナノ粒子と呼ばれる。
【００６７】
そのような「ＰＥＧ化」工程は、マイクロ粒子及びナノ粒子が形成された後に行うこともできる。この場合、ＰＥＧポリマー又はＰＥＧ単位を含有する他のポリマーは、ＰＬＧＡマイクロ粒子及びナノ粒子への物理的吸収によってコーティングされている。
【００６８】
ＰＥＧ単位は、共有結合を介してＰＬＧＡマイクロ粒子又はナノ粒子の表面に結合することもできる。そのような工程は「コンジュゲーション」と呼ばれることが多い。コンジュゲーション工程において、ＰＥＧ単位を含有する反応性物質は、マイクロ粒子及びナノ粒子の表面の特定の官能基と反応して化学結合を形成する。
【００６９】
このため、好ましくは、医薬的に許容されるポリマーはＰＬＧＡであり、マイクロ粒子又はナノ粒子はＰＥＧ化されている。マイクロ粒子又はナノ粒子は、マイクロ粒子及びナノ粒子の調製中にポリエチレングリコール（ＰＥＧ）又はＰＥＧ含有物質を混合することによって、ＰＥＧ化され得る。マイクロ粒子又はナノ粒子は、ＰＥＧとＰＬＧＡとのコポリマーを使用することによってもＰＥＧ化され得る。マイクロ粒子又はナノ粒子はさらに、ＰＥＧポリマー又はＰＥＧ単位を含有するポリマーをＰＬＧＡマイクロ粒子及びナノ粒子に物理的に吸収させることによって、さらにＰＥＧ化することができる。マイクロ粒子又はナノ粒子は加えて、共有結合を介してＰＬＧＡマイクロ粒子又はナノ粒子の表面にＰＥＧ単位をコンジュゲートさせることによってＰＥＧ化され得る。
【００７０】
４．カルボキシル化ポリアミノ酸
ガンマカルボキシル化ポリアミノ酸は、以下のモノマー単位を有するモノマーを有するポリマーである：
【化３】
2021523151.tif 000004
式中、ｎは、１、２、３又は４を含む、０〜約４の整数である。
【００７１】
他のカルボキシル化アミノ酸には、以下のモノマー単位を有するモノマーを含むポリマーが含まれる：
【化４】
2021523151.tif 000005
式中、ｎは０〜約４の整数である。好ましいガンマカルボキシル化ポリアミノ酸としては、ガンマポリグルタミン酸（ｎ＝１）及びガンマアスパラギン酸（ｎ＝０）が挙げられる。
【００７２】
ガンマカルボキシル化アミノ酸及び他のカルボキシル化アミノ酸（例えばアルファグルタミン酸、アルファアスパラギン酸及び／又はベータカルボキシル化アミノ酸）とのコポリマーも使用することができる。他の天然型又は非天然型アミノ酸を使用して、カルボン酸を共重合することが望ましい場合がある。コモノマーは、必要に応じて、鎖に疎水性若しくは親水性を導入し、及び／又は粒子表面のカルボキシ基の密度を低下させることができる。さらに、アミノ酸を添加して、インビボでの分解又は加水分解の速度を上昇又は低下させることができる。例えば、特定のプロテアーゼ又はエステラーゼによって認識されるペプチドを添加することができる。好適なアミノ酸は、飽和又は不飽和の置換又は非置換脂肪酸であることができる。共重合に好ましいアミノ酸としては、グリシン、アラニン、ベータアラニン、ロイシン、イソロイシン、バリン及びフェニルアラニンが挙げられる。他のアミノ酸として、アミノ酪酸、アミノペンタン酸、アミノヘキサン酸などのアミノアルカン酸が挙げられる。ガンマアミノアルカン酸が好ましい。アミノ酸をさらに置換することができる。置換基を選択して、ポリマーの疎水性を最適化又は制御することができる。例えば、グルタミン酸をフェニルアラニンと共重合させることによって、グリシンとの共重合体と比較して、ポリマーの疎水性を上昇させることができる。セリン又はシステインと共重合させることは、電荷間に距離を与えながら親水性を維持するのに有用であり、それによって電荷密度が低下される。アミノ酸のコポリマーは、所望の順序の特別に設計された配列、ブロック化コポリマー（例えばジブロック、トリブロック若しくはポリブロック）又は複数のアミノ酸のランダムコポリマーであることができる。一般に、グルタミン酸及び／又はアスパラギン酸は、全モノマーの重量の少なくとも約１０重量％、好ましくは２０重量％、３０重量％、４０重量％、５０重量％、６０重量％、７０重量％、８０重量％、又は９０重量％以上に相当する。さらに、ポリマーは、直鎖ポリマー又は分岐若しくは樹状ポリマーであることができる。
【００７３】
ポリアミノ酸末端は、独立してブロック又は非ブロック化することができる。例えば、末端カルボキシル基は非ブロック化又はエステル化することができるが（Ｃ１−Ｃ１４アルキルエステル、例えばＣ１−Ｃ４アルキルエステルなどの）、アミノ末端はアシル基で（例えばＣ１−Ｃ１４アシル基、例えばアセチル基若しくはｔ−ＢＯＣ基で）置換することができるか、又はアルキル化（例えば、メチルなどのＣ１−Ｃ１４アルキル）することができる。ポリアミノ酸の長さ又は重量は広範に変化し得る。少なくとも１，０００（１Ｋ）ｇ／ｍｏｌ、好ましくは少なくとも３Ｋ、少なくとも５Ｋ、少なくとも１０Ｋ、少なくとも１５Ｋ、少なくとも２０Ｋ、少なくとも２５Ｋ、少なくとも３０Ｋ、少なくとも３５Ｋ、少なくとも４０Ｋ、少なくとも４５Ｋ、少なくとも５０Ｋ、少なくとも７５Ｋ、少なくとも１００Ｋ、少なくとも１５０Ｋ、少なくとも２００Ｋ、少なくとも２５０Ｋ、少なくとも３００Ｋ、少なくとも３５０Ｋ、少なくとも４００Ｋ、少なくとも４５０Ｋ、少なくとも５００Ｋ、少なくとも５５０Ｋ又は少なくとも６００Ｋ以上の分子量を有する好ましいポリアミノ酸。ポリマー鎖を最適化することによって、耐久性のある相互貫入網目の形成を促進できる。ポリマーが小さすぎる場合、ポリマーの界面活性剤特性が網目形成を妨害し得る。ただし、長すぎる又は過度に分岐した鎖によって、良好な絡み合いが妨げられる場合がある。
【００７４】
さらに、ペプチドは、鎖の長さに沿って又は鎖の末端にて、共有結合的又はイオン的に置換することができる。例えば、１つ以上のポリアミノ酸を細胞リガンド（又はフラグメント）、ペプチド、炭水化物又はシアル酸などの標的化部分によって置換することができる。標的化部分の置換又はコンジュゲーションステップは、マイクロ粒子の形成前又は形成後に行うことができる。
【００７５】
本発明で使用するアニオン性ポリマーの量は、製剤中で使用される医薬的に許容されるポリマー（ＰＬＧＡなど）の重量に基づいて、０．０１％〜３０％、好ましくは０．１％〜１５％である。
【００７６】
５．向上した負表面を有するナノ粒子又はマイクロ粒子の製造
本明細書に記載の発明は、高度に負の表面電荷を有する粒子を調製するための、いくつかの基本的な方法を提供する。これらの方法は相互に相容れないものではなく、互いに組合されて相加的効果又は相乗的効果さえ生じ、高度に負に帯電した表面を有するマイクロ粒子及びナノ粒子を製造し得る。
【００７７】
このため、一態様において、本発明は、負の表面電荷を有するマイクロ粒子又はナノ粒子を含む組成物の調製方法であって、エマルジョン工程又は沈殿工程（好ましくは、ダブルエマルジョン工程を含むエマルジョン工程）のどちらかを使用して、医薬的に許容されるポリマー（例えばＰＬＧＡ）によってマイクロ粒子又はナノ粒子を製造することを含み、以下に記載される任意の１つ以上の特徴又はその組合せを含む、方法を提供する。
【００７８】
具体的には、本発明の方法の１つの特徴は、アニオン性ポリマーのイオン化を促進するｐＨを有する水溶液中で、エマルジョン工程又は沈殿工程を行うことを含む。特定の理論に縛られることを望むものではないが、イオン化基又は部分は、その非イオン化形態と比較して、本発明の方法を使用して調製した、最終的に形成されたマイクロ粒子又はナノ粒子の表面でより曝露される傾向がある。
【００７９】
エマルジョン工程は、本発明の方法で使用され得る。好ましくは、主題のマイクロ粒子及びナノ粒子（例えばＰＬＧＡマイクロ粒子及びナノ粒子）は、以下のステップ（必ずしもこの順序ではない）：１）医薬的に許容されるポリマー（例えばＰＬＧＡ）を第１の溶媒（例えばメチレンクロリド）に溶解させて、ポリマー溶液を形成するステップ、２）ポリマー溶液（例えばＰＬＧＡ溶液）を第２の溶媒の溶液（例えば水溶液又は有機溶媒）中に乳化させて、エマルジョンを形成するステップであって、第１の溶媒が第２の溶媒と混和性でないか、又は一部混和性であり、第２の溶媒の溶液が、アニオン性ポリマー（例えばＰＧＧＡ）を任意に含む、ステップ、及び３）第１の溶媒を除去して、負の表面電荷を有するマイクロ粒子又はナノ粒子を形成するステップを含む乳化工程によって調製することができる。
【００８０】
好ましくは、少なくとも１つのＡＰＩがナノ粒子又はマイクロ粒子中に存在し、エマルジョン工程は、（１）第１の溶媒（例えば有機溶媒）中に前記少なくとも１つのＡＰＩ及び医薬的に許容されるポリマー（例えばＰＬＧＡ）を溶解させて、ポリマーＡＰＩ溶液を形成するステップ、（２）アニオン性ポリマー（例えばＰＧＧＡ）を、溶解させた界面活性剤又は表面化安定剤を任意に含む第２の溶媒（例えば水溶液）に溶解させるステップ、（３）ポリマー−ＡＰＩ溶液を前記第２の溶媒／水溶液中に乳化させるステップ、並びに（４）溶媒蒸発法又は溶媒交換法などによって、第１の有機／溶媒を除去するステップを含む。
【００８１】
好ましくは、乳化工程において、ＰＬＧＡ溶液と水溶液との重量比は、通例１：１，０００〜１０：１、好ましくは１：１００〜１：１である。
【００８２】
本明細書で使用する場合、混和性は、液体があらゆる割合で混合し、均一な溶液を形成する特性であると定義される。物質／液体は、ある割合でそれらが溶液を形成しない場合、非混和性である又は混和性でないと言われる。
【００８３】
水と混和性である例示的な溶媒としては、アセトン、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、アセトニトリル、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）が挙げられる。
【００８４】
ダブルエマルジョン工程が使用できるが、ダブルエマルジョン工程は、水溶液中で調製されるタンパク質系治療薬などの医薬品有効成分（ＡＰＩ）が最初に医薬的に許容されるポリマー溶液で乳化されて、ＡＰＩがポリマー溶液中に封入されるように第１のエマルジョンを形成する場合に特に有用であり得る。次いで、マイクロ粒子又はナノ粒子が形成される前に、ポリマー及びポリマー中に封入された治療薬をより大量の溶媒中で再度乳化させて、第２のエマルジョン（例えば水中油中水型又はｗ／ｏ／ｗ型ダブルエマルジョン）を形成する。
【００８５】
例えば、上記のｗ／ｏ／ｗ技術では、比較的少量の第２の溶媒の第１の溶液（例えばタンパク質水溶液）（例えば有機溶媒の約２０％、１５％、１０％、５％体積／体積）が、疎水性ポリマーＰＬＧＡを溶解するメチレンクロリド又はエチルアセタートなどの比較的大量の第１の溶媒（例えば有機溶媒）中に導入され得る。次いで、適切な方法、例えばプローブ音波処理又はホモジナイゼーションを使用して、第１のエマルジョンを形成する。第１のエマルジョンの形成後、第２のエマルジョンは、第１のエマルジョンを、例えばポリビニルアルコールのような乳化剤を含む、より大量（例えば第１のエマルジョンの少なくとも約２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、１０倍）の第２の溶媒の第２の溶液中に導入することによって形成する。ここでもホモジナイゼーション法を使用して第２エマルジョンを形成することができる。この次には溶媒蒸発の期間が続いて、通例数時間撹拌することによって、ポリマーの硬化につながる。結果として、タンパク質溶液は、ＰＬＧＡポリマーの比較的疎水性のマトリクス中に捕捉されて、小さな封入物を形成する。最後に、形成されたマイクロ粒子又はナノ粒子を回収し、遠心分離又は濾過を反復して（例えば蒸留水で）洗浄した後、通例は凍結乾燥によって脱水する。
【００８６】
このため、好ましくは、主題のマイクロ粒子及びナノ粒子（例えばＰＬＧＡマイクロ粒子及びナノ粒子）は、以下のステップ（必ずしもこの順序ではない）：１）医薬的に許容されるポリマー（例えばＰＬＧＡ）を第１の溶媒（例えばメチレンクロリドなどの有機溶媒）に溶解させて、ポリマー溶液を形成するステップ、２）比較的少量（有機溶媒の量に対して、例えば約２０％未満、１５％、１０％、５％体積／体積）の第２の溶媒の第１の溶液をポリマー溶液中に添加して、混合物を形成するステップであって、第１の溶媒が第２の溶媒と混和性でないか、又は一部混和性であり、第２の溶媒の第１の溶液が医薬品有効成分（ＡＰＩ）を任意に含む、ステップ、３）混合物を乳化させて、第１のエマルジョンを形成するステップ、４）第１のエマルジョンを、より大きな体積（第１のエマルジョンの例えば少なくとも約２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、１０倍）の第２の溶媒の第２の溶液中に乳化させて、第２のエマルジョンを形成するステップであって、第２の溶媒の溶液がアニオン性ポリマーを任意に含み、さらに界面活性剤を任意に含む、ステップ、及び５）第１の溶媒を除去して、負の表面電荷を有する前記マイクロ粒子又はナノ粒子を形成するステップを含む、ダブル乳化工程によって調製することができる。
【００８７】
好ましくは、少なくとも１つのＡＰＩがナノ粒子又はマイクロ粒子中に存在し、エマルジョン工程は、（１）医薬的に許容されるポリマー（例えばＰＬＧＡ）及び任意にＡＰＩを第１の溶媒（例えば有機溶媒）に溶解させて、溶液Ａを形成するステップ、（２）前記ＡＰＩを第２の溶媒の第１の溶液（例えば第１の水溶液）に溶解させて、溶液Ｂを形成するステップ、（３）アニオン性ポリマーを第２の溶媒の第２の溶液（例えば第２の水溶液）に溶解させて、溶液Ｃを形成するステップであって、前記第２の水溶液がその中に溶解した界面活性剤又は表面化安定剤を任意に含む、ステップ、（４）溶液Ｂを溶液Ａ中に乳化させて、第１のエマルジョンを形成するステップ、（５）第１のエマルジョンを溶液Ｃ中にさらに乳化させて、第２のエマルジョンを形成するステップ、並びに（６）溶媒蒸発法又は溶媒交換法などによって、第２のエマルジョンの有機溶媒を除去するステップを含む。
【００８８】
好ましくは、第１のエマルジョンの生成のためにポリマー溶液に添加される少量の第２の溶媒の溶液の体積は、ＰＬＧＡ溶液の体積に対して、通例０．０１％〜５０％、好ましくは０．１％〜１０％である。
【００８９】
好ましくは、上記の工程４）に記載されている第２の溶媒の第２の溶液に対する第１のエマルジョンの体積比は、通例１０：１〜１：１０，０００、好ましくは１：１〜１：１００、例えば１：１０又は１：４〜５である。
【００９０】
沈殿工程は、本発明の方法で使用され得る。好ましくは、主題のマイクロ粒子及びナノ粒子（例えば、ＰＬＧＡマイクロ粒子及びナノ粒子）は、以下のステップ（必ずしもこの順序ではない）：１）医薬的に許容されるポリマー（例えばＰＬＧＡ）を第１の溶媒（例えばアセトン）に溶解させて、ポリマー溶液を形成するステップ、２）第２の溶媒の溶液（例えば１ｍＭ  ＮａＯＨ溶液などの水溶液）を調製するステップであって、第１の溶媒が第２の溶媒と混和性であり、第２の溶媒の溶液がアニオン性ポリマーを任意に含み、界面活性剤を任意に含む、ステップ、及び３）ポリマー溶液を第２の溶媒の溶液に混合しながら添加し、それにより負の表面電荷を有するマイクロ粒子又はナノ粒子を形成するステップであって、第２の溶媒の溶液が任意に水溶液である、ステップを含む沈殿工程によって調製することができる。
【００９１】
好ましくは、沈殿工程は、（１）医薬的に許容されるポリマー（例えばＰＬＧＡ）及び少なくとも１つのＡＰＩを第１の溶媒（例えば有機溶媒）に溶解させて、ポリマー−ＡＰＩ溶液を形成するステップ、（２）アニオン性ポリマーを第２の溶媒（例えば水溶液）に溶解させるステップであって、前記第２の溶媒／水溶液がその中に溶解した界面活性剤又は表面安定化剤を任意に含む、ステップ、並びに（３）ポリマー−ＡＰＩ溶液を混合しながら水溶液に合せる（例えば添加する）ことによって、表面に負電荷及びカルボキシル基を有するＡＰＩ装填ナノ粒子又はマイクロ粒子を形成するステップを含む。
【００９２】
好ましくは、沈殿工程において、水溶液に対するＰＬＧＡ溶液の体積比は、通例１０：１〜１：１，０００、好ましくは１：１〜１：１０である。
【００９３】
好ましくは、沈殿工程におけるステップ３）の代替手順として、第２の溶媒の溶液（例えば水溶液）をポリマー溶液（例えばＰＬＧＡ溶液）に添加することができる。
【００９４】
エマルジョン工程を含む上記の態様のいずれにおいても、好ましくは、第１の溶媒はメチレンクロリド、エチルアセタート又はクロロホルムである。好ましくは、第２の溶媒の第２の溶液は、有機又は無機の医薬用賦形剤、各種ポリマー、オリゴマー、天然物、非イオン性、カチオン性、双性イオン性又はイオン性界面活性剤及びその混合物を含む界面活性剤を含む。界面活性剤は、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、ポリソルバート（ツインシリーズ）界面活性剤、ＰＥＯ−ＰＰＯ−ＰＥＯポリエチレンオキシドポリプロピレンオキシドトリブロックコポリマー（プルロニック（登録商標）シリーズ又はポロキサマーシリーズ）界面活性剤若しくはｔ−オクチルフェニル−ポリエチレングリコール（トリトンＸ−１００）界面活性剤又はその塩、誘導体、コポリマー若しくは混合物を含み得る。好ましくは、界面活性剤はＰＶＡである（例を参照のこと）。
【００９５】
好ましくは、乳化ステップは、ホモジナイゼーション、機械的撹拌及び／又はマイクロフルイダイゼーションを含む。
【００９６】
好ましくは、第１の溶媒は溶媒交換及び／又は蒸発によって除去される。
【００９７】
好ましくは、マイクロ粒子又はナノ粒子は負（表面）電荷を有する。カルボキシル化マイクロ粒子及びナノ粒子の負電荷密度は、ゼータ電位によって定量化することができる。カルボキシル化マイクロ粒子及びナノ粒子のゼータ電位は、通例、粒子の水性懸濁液中で４〜１０、好ましくは５〜８のｐＨにて測定される。Ｎａｎｏｓｉｚｅｒ（ウスターシャ―、英国）などのＭａｌｖｅｒｎ粒径分析器は、工場の指示に従ってゼータ電位を測定できる。好ましくは、本発明の方法によって製造されたマイクロ粒子又はナノ粒子は、約−５ｍＶ〜約−２００ｍＶ、好ましくは約−１５ｍＶ〜約−１００ｍＶ、最も好ましくは−３５ｍＶ〜−８５ｍＶのゼータ電位を有し得る。
【００９８】
好ましくは、マイクロ粒子又はナノ粒子は、約−４０ｍＶ以下、約−４５ｍＶ以下又は約−５０ｍＶ以下、例えば約−４０ｍＶ〜−６５ｍＶのゼータ電位を有する。
【００９９】
６．溶媒及び界面活性剤
ポリマーの溶解工程で使用される溶媒は、ポリマーを溶解する任意の種類の溶媒（例えばＰＬＧＡ）であり得る。しかし、揮発性溶媒をその除去のために使用するのが好ましい。例えば、ＰＬＧＡ溶液を形成するための好ましい溶媒としては、メチレンクロリド、エチルアセタート及びクロロホルムが挙げられる。
【０１００】
乳化工程において、（水）溶液は界面活性剤又は表面安定剤を含有し得る。界面活性剤は、一般に、液体の表面張力、２つの液体間の界面張力又は液体と固体との間の界面張力を低下させる化合物を含む。界面活性剤は、洗剤、湿潤剤、乳化剤、発泡剤及び分散剤として作用し得る。界面活性剤は、通常、両親媒性の有機化合物であり、疎水性基（通常、「尾部」として分枝鎖、直鎖又は芳香族炭化水素鎖、フルオロカーボン鎖又はシロキサン鎖）及び親水性基（通常、頭部）の両方を含む。界面活性剤は、最も一般的にはその極性の頭部基に従って分類される。非イオン性界面活性剤は、その頭部に電荷基を有さない。イオン性界面活性剤は、正味の電荷を担持している。電荷が負の場合は、界面活性剤はアニオン性であり、電荷が正の場合はカチオン性である。界面活性剤が２つの逆に帯電した基を有する頭部を含有する場合、それは双性イオン性と呼ばれる。好ましくは、カルボキシル基を含有するもの（「カルボキシラート」）などのアニオン性又は双性イオン性界面活性剤が、本発明で好ましく使用される。カルボキシラートは、最も一般的な界面活性剤であり、アルキルカルボキシラート、例えばナトリウムステアラート、ナトリウムラウロイルサルコシナート及びカルボキシラート系フルオロ界面活性剤、例えばペルフルオロノナノアート、ペルフルオロオクタノアート（ＰＦＯＡ又はＰＦＯ）を含む。
【０１０１】
特定の理論に縛られることを望むものではないが、界面活性剤はエマルジョン液滴の形成及び安定化に有用であり得る。界面活性剤は、有機又は無機の医薬用賦形剤、各種ポリマー、オリゴマー、天然物、非イオン性、カチオン性、双性イオン性又はイオン性界面活性剤及びその混合物も含み得る。
【０１０２】
主題の（ＰＬＧＡ）マイクロ粒子／ナノ粒子の調製に使用できる界面活性剤としては、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ツインシリーズ、プルロニック（登録商標）シリーズ、ポロキサマーシリーズ、トリトンＸ−１００などが挙げられる。追加の好適な界面活性剤は、本明細書中以下で与える。
【０１０３】
乳化工程は、当分野で認識されている任意の手段、例えばホモジナイゼーション、超音波処理、機械的撹拌、マイクロフルイダイゼーション又はその組合せなどによって実施され得る。
【０１０４】
溶媒の除去は通常、例えば溶媒交換及び蒸発によって行う。
【０１０５】
好ましくは、大部分のカルボキシル基を主題の（例えばＰＬＧＡ）マイクロ粒子及びナノ粒子の表面に確実に存在させるために、水溶液は、ポリマー上の部分のイオン化を促進するｐＨ、例えばＰＬＧＡ上のカルボキシル基のための塩基性ｐＨに調整される。ｐＨは、イオン化されて負電荷を担持することができるポリマー基のｐＫａに応じて、好ましくは約４〜１４、６〜１４、６〜１０又は約８〜１２の範囲である。水溶液のｐＨは、例えばその塩基又は溶液、例えばナトリウムヒドロキシド、カリウムヒドロキシド、ナトリウムバイカーボナート、ナトリウムカーボナート、カリウムバイカーボナート、カリウムカーボナートなどを添加することによって好ましい範囲に調整することができる。
【０１０６】
複数の界面活性剤の組合せを本発明で使用することができる。本発明で使用することができる有用な界面活性剤又は表面安定剤は、既知の有機及び無機医薬用賦形剤を含むことができるが、それに限定されない。そのような賦形剤としては、各種のポリマー、低分子量オリゴマー、天然物及び界面活性剤が挙げられる。界面活性剤又は表面安定剤としては、非イオン性、カチオン性、双性イオン性及びイオン性界面活性剤が挙げられる。
【０１０７】
他の有用な界面活性剤又は表面安定剤の代表例としては、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ポリビニルピロリドン、ナトリウムラウリルサルファート、ナトリウムジオクチルスルホスクシナート、ゼラチン、カゼイン、レシチン（ホスファチド）、デキストラン、アラビアゴム、コレステロール、トラガカント、ステアリン酸、ベンザルコニウムクロリド、カルシウムステアラート、グリセロールモノステアラート、セトステアリルアルコール、セトマクロゴール乳化ワックス、ソルビタンエステル、ポリオキシエチレンアルキルエーテル（例えばマクロゴールエーテル、例えばセトマクロゴール１０００）、ポリオキシエチレンヒマシ油誘導体、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル（例えば市販のＴＷＥＥＮ（登録商標）、例えばＴＷＥＥＮ２０（登録商標）及びＴＷＥＥＮ８０（登録商標）（ＩＣＩ  Ｓｐｅｃｉａｌｔｙ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ））、ポリエチレングリコール（例えばＣＡＲＢＯＷＡＸＳ  ３５５０（登録商標）及び９３４（登録商標）（Ｕｎｉｏｎ  Ｃａｒｂｉｄｅ））、ポリオキシエチレンステアラート、コロイド状二酸化ケイ素、ホスファート、カルボキシメチルセルロースカルシウム、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタラート、非結晶性セルロース、マグネシウムアルミニウムシリカート、トリエタノールアミン、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、エチレンオキシド及びホルムアルデヒドを含む４−（１，１，３，３−テトラメチルブチル）−フェノールポリマー（タイロキサポール（ｔｙｌｏｘａｐｏｌ）、スペリオン（ｓｕｐｅｒｉｏｎｅ）及びトリトンとしても既知）；ポロキサマー（例えば、エチレンオキシドとプロピレンオキシドのブロックコポリマーである、ＰＬＵＲＯＮＩＣＳＦ６８（登録商標）及びＦ１０８（登録商標））；ポロキサミン（例えばエチレンジアミンへのプロピレンオキシド及びエチレンオキシドの逐次付加から誘導された４官能性ブロックコポリマーである、ＰＯＬＯＸＡＭＩＮＥ  ９０８（登録商標）としても既知である、ＴＥＴＲＯＮＩＣ  ９０８（登録商標））（ＢＡＳＦ  Ｗｙａｎｄｏｔｔｅ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、パーシッパニー、ニュージャージー州）；ＴＥＴＲＯＮＩＣ  １５０８（登録商標）（Ｔ−１５０８）（ＢＡＳＦ  Ｗｙａｎｄｏｔｔｅ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）、アルキルアリールポリエーテルスルホナートである、ＴＲＩＴＯＮＳＸ−２００（登録商標）（Ｒｏｈｍ  ａｎｄ  Ｈａａｓ）；スクロースステアラートとスクロースジステアラートの混合物であるＣＲＯＤＥＳＴＡＳ  Ｆ−１１０（登録商標）（Ｃｒｏｄａ  Ｉｎｃ．）；ＯＬＩＮ−１ＯＧ（登録商標）又はＳＵＲＦＡＣＴＡＮＴ  １０−Ｇ（登録商標）（Ｏｌｉｎ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ、スタンフォード、コネチカット州）としても既知である、ｐ−イソノニルフェノキシポリ−（グリシドール）；Ｃｒｏｄｅｓｔａｓ  ＳＬ−４０（Ｃｒｏｄａ，Ｉｎｃ．）；及びＣ１８Ｈ３７ＣＨ２（ＣＯＮ（ＣＨ３）−ＣＨ２（ＣＨＯＨ）４（ＣＨ２ＯＨ）２である、ＳＡ９ＯＨＣＯ（Ｅａｓｔｍａｎ  Ｋｏｄａｋ  Ｃｏ．）；デカノイル��Ｎ−メチルグルカミド；ｎ−デシルβ−Ｄ−グルコピラノシド；ｎ−デシルβ−Ｄ−マルトピラノシド；ｎ−ドデシルβ−Ｄ−グルコピラノシド；ｎ−ドデシルβ−Ｄ−マルトシド；ヘプタノイル−Ｎ−メチルグルカミド；ｎ−ヘプチル−ｐ−Ｄ−グルコピラノシド；ｎ−ヘプチルβ−  Ｄ−チオグルコシド；ｎ−ヘキシルβ−Ｄ−グルコピラノシド；ノナノイル−Ｎ−メチルグルカミド；ｎ−ノイル−β−Ｄ−グルコピラノシド；オクタノイル−Ｎ−メチルグルカミド；ｎ−オクチル−β−Ｄ−グルコピラノシド；オクチルβ−Ｄ−チオグルコピラノシド；ＰＥＧ誘導体化リン脂質、ＰＥＧ誘導体化コレステロール、ＰＥＧ誘導体化コレステロール誘導体、ＰＥＧ誘導体化ビタミンＡ、ＰＥＧ誘導体化ビタミンＥ、リゾチーム、ビニルピロリドンとビニルアセタートのランダムコポリマーなどが挙げられる。
【０１０８】
有用なカチオン性界面活性剤又は表面安定剤の例としては、ポリマー、バイオポリマー、多糖類、セルロース系物質、アルギナート、リン脂質及び非ポリマー系化合物、例えば双性イオン性安定剤、ポリ−ｎ−メチルピリジニウム、アントリル（ａｎｔｈｒｙｕｌ）ピリジニウムクロリド、カチオン性リン脂質、キトサン、ポリリジン、ポリビニルイミダゾール、ポリブレン、ポリメチルメタクリラート、トリメチルアンモニウムブロミドブロミド（ＰＭＭＴＭＡＢｒ）、ヘキシルデシルトリメチルアンモニウムブロミド（ＨＤＭＡＢ）、ポリビニルピロリドン−２−ジメチルアミノエチルメタクリラートジメチルサルファート、１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン−Ｎ−［アミノ（ポリエチレングリコール）２０００］（ナトリウム塩）（ＤＰＰＥ−ＰＥＧ（２０００）−アミンＮａとしても既知）（Ａｖａｎｔｉ  Ｐｏｌａｒ  Ｌｉｐｉｄｓ、アラバスター、アリゾナ州）、ポリ（２−メタクリロキシエチルトリメチルアンモニウムブロミド）（Ｐｏｌｙｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｉｎｃ．、ワーリントン、ペンシルベニア州）（Ｓ１００１としても既知）、ポロキサミン、例えばプロピレンオキシド及びエチレンオキシドのエチレンジアミンへの逐次付加から誘導された４官能性ブロックコポリマーである、ＰＯＬＯＸＡＭＩＮＥ  ９０８（登録商標）としても既知のＴＥＴＲＯＮＩＣ  ９０８（登録商標）（ＢＡＳＦ  Ｗｙａｎｄｏｔｔｅ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、パーシッパニー、ニュージャージー州）、リゾチーム、長鎖ポリマー、例えばアルギン酸、カラギーナン（ＦＭＣ  Ｃｏｒｐ．）及びポリオックス（Ｄｏｗ、ミッドランド、ミシガン州）が挙げられるが、これに限定されない。
【０１０９】
他の有用なカチオン性安定剤としては、カチオン性脂質、スルホニウム、ホスホニウム及び第４級アンモニウム化合物、例えばステアリルトリメチルアンモニウムクロリド、ベンジルジ（２−クロロエチル）エチルアンモニウムブロミド、ココナッツトリメチルアンモニウムクロリド又はブロミド、ココナッツメチルジヒドロキシエチルアンモニウムクロリド又はブロミド、デシルトリエチルアンモニウムクロリド、デシルジメチルヒドロキシエチルアンモニウムクロリド又はブロミド、Ｃ１２−１５ジメチルヒドロキシエチルアンモニウムクロリド又はブロミド、ココナッツジメチルヒドロキシエチルアンモニウムクロリド又はブロミド、ミリスチルトリメチルアンモニウムメチルサルファート、ラウリルジメチルベンジルアンモニウムクロリド又はブロミド、ラウリルジメチル（エテノキシ）アンモニウムクロリド又はブロミド、Ｎ−アルキル（Ｃ１２−１８）ジメチルベンジルアンモニウムクロリド、Ｎ−アルキル（Ｃ１４−１８）ジメチル−ベンジルアンモニウムクロリド、Ｎ−テトラデシルメチルベンジルアンモニウムクロリド一水和物、ジメチルジデシルアンモニウムクロリド、Ｎ−アルキル及び（Ｃ１２−１４）ジメチル１−ナフチルメチルアンモニウムクロリド、トリメチルアンモニウムハライド、アルキル−トリメチルアンモニウム塩及びジアルキルジメチルアンモニウム塩、ラウリルトリメチルアンモニウムクロリド、エトキシル化アルキルアミドアルキルジアルキルアンモニウム塩及び／又はエトキシル化トリアルキルアンモニウム塩、ジアルキルベンゼンジアルキルアンモニウムクロリド、Ｎ−ジデシルジメチルアンモニウムクロリド、Ｎ−テトラデシルジメチルベンジルアンモニウム、クロリド一水和物、Ｎ−アルキル（Ｃ１２−１４）ジメチル１−ナフチルメチルアンモニウムクロリド及びドデシルジメチルベンジルアンモニウムクロリド、ジアルキルベンゼンアルキルアンモニウムクロリド、ラウリルトリメチルアンモニウムクロリド、アルキルベンジルジメチルアンモニウムクロリド、アルキルベンジルジメチルアンモニウムブロミド、Ｃ１２，Ｃ１５，Ｃ１７トリメチルアンモニウムブロミド、ドデシルベンジルトリエチルアンモニウムクロリド、ポリジアリルジメチルアンモニウムクロリド（ＤＡＤＭＡＣ）、ジメチルアンモニウムクロリド、アルキルジメチルアンモニウムハロゲニド、トリセチルメチルアンモニウムクロリド、デシルトリメチルアンモニウムブロミド、ドデシルトリエチルアンモニウムブロミド、テトラデシルトリメチルアンモニウムブロミド、メチルトリオクチルアンモニウムクロリド（ＡＬＩＱＵＡＴ  ３３６（商標））、ＰＯＬＹＱＵＡＴ  １０（商標）、テトラブチルアンモニウムブロミド、ベンジルトリメチルアンモニウムブロミド、コリンエステル（脂肪酸のコリンエステルなど）、ベンザルコニウムクロリド、ステアラルコニウムクロリド化合物（例えばステアリルトリモニウムクロリド及びジステアリルジモニウムクロリド）、セチルピリジニウムブロミド又はクロリド、４級化ポリオキシエチルアルキルアミンのハライド塩、ＭＩＲＡＰＯＬ（商標）及びＡＬＫＡＱＵＡＴ（商標）（Ａｌｋａｒｉｌ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏｍｐａｎｙ）、アルキルピリジ���ウム塩；アミン、例えばアルキルアミン、ジアルキルアミン、アルカノールアミン、ポリエチレンポリアミン、Ｎ，Ｎ−ジアルキルアミノアルキルアクリラート及びビニルピリジン、アミン塩、例えばラウリルアミンアセタート、ステアリルアミンアセタート、アルキルピリジニウム塩及びアルキルイミダゾリウム塩並びにアミンオキシド；イミドアゾリニウム塩；プロトン化第４級アクリルアミド；メチル化第４級ポリマー、例えばポリ［ジアリルジメチルアンモニウムクロリド］及びポリ［Ｎ−メチルビニルピリジウムクロリド］；及びカチオン性グアーが挙げられるが、これに限定されない。
【０１１０】
そのような例示的なカチオン性界面活性剤又は表面安定剤及び他の有用なカチオン性界面活性剤又は表面安定剤は、それぞれその全体が参照により本明細書に組み入れられている、Ｊ．Ｃｒｏｓｓ  ａｎｄ  Ｅ．Ｓｉｎｇｅｒ，Ｃａｔｉｏｎｉｃ  Ｓｕｒｆａｃｔａｎｔｓ：Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ（Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，１９９４）；Ｐ．ａｎｄ  Ｄ．Ｒｕｂｉｎｇｈ（Ｅｄｉｔｏｒ），Ｃａｔｉｏｎｉｃ  Ｓｕｒｆａｃｔａｎｔｓ：Ｐｈｙｓｉｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，１９９１）；及びＪ．Ｒｉｃｈｍｏｎｄ，Ｃａｔｉｏｎｉｃ  Ｓｕｒｆａｃｔａｎｔｓ：Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，（Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，１９９０）に記載されている。
【０１１１】
非ポリマーカチオン界面活性剤又は表面安定剤は、任意の非ポリマー化合物、例えばベンザルコニウムクロリド、カルボニウム化合物、ホスホニウム化合物、オキソニウム化合物、ハロニウム化合物、カチオン性有機金属化合物、第４級リン化合物、ピリジニウム化合物、アニリニウム化合物、アンモニウム化合物、ヒドロキシルアンモニウム化合物、第１級アンモニウム化合物、第２級アンモニウム化合物、第３級アンモニウム化合物及び式ＮＲ１Ｒ２Ｒ３Ｒ４（＋）の第４級アンモニウム化合物である。式ＮＲ１Ｒ２Ｒ３Ｒ４（＋）の化合物では、（ｉ）Ｒ１−Ｒ４のいずれもＣＨ３ではない；（ｉｉ）Ｒ１−Ｒ４の１つがＣＨ３である；（ｉｉｉ）Ｒ１−Ｒ４のうち３つがＣＨ３である；（ｉｖ）Ｒ１−Ｒ４の全てがＣＨ３である；（ｖ）Ｒ１−Ｒ４のうちの２つがＣＨ３であり、Ｒ１−Ｒ４のうちの１つがＣ６Ｈ５ＣＨ２であり、Ｒ１−Ｒ４のうちの１つが炭素原子７個以下のアルキル鎖である；（ｖｉ）Ｒ１−Ｒ４のうちの２つがＣＨ３であり、Ｒ１−Ｒ４のうちの１つがＣ６Ｈ５ＣＨ２であり、Ｒ１−Ｒ４のうちの１つが炭素原子１９個以上のアルキル鎖である；（ｖｉｉ）Ｒ１−Ｒ４のうちの２つがＣＨ３であり、Ｒ１−Ｒ４のうちの１つが基Ｃ６Ｈ５（ＣＨ２）ｎであり、式中、ｎ＞１である；（ｖｉｉｉ）Ｒ１−Ｒ４のうちの２つがＣＨ３であり、Ｒ１−Ｒ４のうちの１つがＣ６Ｈ５ＣＨ２であり、Ｒ１−Ｒ４のうちの１つが少なくとも１個のヘテロ原子を含む；（ｉｘ）Ｒ１−Ｒ４のうち２つがＣＨ３であり、Ｒ１−Ｒ４のうち１つがＣ６Ｈ５ＣＨ２であり、Ｒ１−Ｒ４のうち１つがが少なくとも１個のハロゲンを含む；（ｘ）Ｒ１−Ｒ４のうち２つがＣＨ３であり、Ｒ１−Ｒ４の１つがＣ６Ｈ５ＣＨ２であり、Ｒ１−Ｒ４のうち１つが少なくとも１個の環状フラグメントを含む；（ｘｉ）Ｒ１−Ｒ４のうちの２つがＣＨ３であり、Ｒ１−Ｒ４のうちの１つがフェニル環である；又は（ｘｉｉ）Ｒ１−Ｒ４のうち２つがＣＨ３であり、Ｒ１−Ｒ４の２つが純粋に脂肪族フラグメントである。
【０１１２】
そのような化合物としては、ベヘンアルコニウムクロリド、ベンゼトニウムクロリド、セチルピリジニウムクロリド、ベヘントリモニウムクロリド、ラウラルコニウムクロリド、セタルコニウムクロリド、セトリモニウムブロミド、セトリモニウムクロリド、セチルアミンヒドロフルオリド、クロルアリルメタンアミンクロリド（クオタニウム−１５）、ジステアリルジアンモニウムクロリド（クオタニウム−５）、ドデシルジメチルエチルベンジルアンモニウムクロリド（クオタニウム−１４）、クオタニウム−２２、クオタニウム−２６、クオタニウム−１８ヘクトライト、ジメチルアミノエチルクロリドヒドロクロリド、システインヒドロクロリド、ジエタノールアンモニウムＰＯＥ（１０）オレチルエーテルホスファート、ジエタノールアンモニウムＰＯＥ（３）オレイルエーテルホスファート、タローアルコニウムクロリド、ジメチルジオクタデシルアンモニウムベントナイト、ステラルコニウムクロリド、ドミフェンブロミド、デナトニウムベンゾアート、ミリスタルコニウムクロリド、ラウトリモニウムクロリド、エチレンジアミンジヒドロクロリド、グアニジンヒドロクロリド、ピリドキシンＨＣｌ、イオフェタミンヒドロクロリド、メグルミンヒドロクロリド、メチルベンゼトニウムクロリド、ミルトリモニウムブロミド、オレイルトリモニウムクロリド、ポリクオタニウム−１、プロカインヒドロクロリド、ココベタイン、ステラルコニウムベントナイト、ステアラルコニウムヘクトナイト、ステアリルトリヒドロキシエチルプロピレンジアミンジヒドロフルオリド、タロートリモニウムクロリド及びヘキサデシルトリメチルアンモニウムブロミドが挙げられるが、これに限定されない。
【０１１３】
これらの界面活性剤又は表面安定剤の大半は既知の医薬用賦形剤であり、参照により特に組み入れられている、米国薬剤師会（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ）及び英国薬剤師会（Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  ｏｆ  Ｇｒｅａｔ  Ｂｒｉｔａｉｎ）により共同出版されたＨａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ（Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｓｓ、２０００）に詳説されている。
【０１１４】
界面活性剤又は表面安定剤は市販され、及び／又は当分野における既知の技術によって調製することができる。
【０１１５】
好ましくは、主題のマイクロ粒子又はナノ粒子の表面は、粒子表面と間質との間の非特異的又は望ましくない生物学的相互作用を最小にする材料からなり、例えば粒子表面は非特異的相互作用を防止又は減少するための材料でコーティングされ得る。ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）及びそのコポリマー、例えばプルロニック（登録商標）（ポリ（エチレングリコール）−ｂｌ−ポリ（プロピレングリコール）−ｂｌ−ポリ（エチレングリコール）のコポリマーを含む）などの親水性層で粒子をコーティングすることによる立体安定化によって、皮下注射後のリンパによる取込みの改善で示されるように、間質のタンパク質との非特異的相互作用が低減され得る。
【０１１６】
７．粒径
主題のマイクロ粒子及びナノ粒子の大きさは、約１ｎｍ〜約１０００μｍ、好ましくは約１０ｎｍ〜約１００μｍ、最も好ましくは約２０ｎｍ〜約５μｍ、最も好ましくは約５０ｎｍ〜約２μｍである。例えば、マイクロ粒子及びナノ粒子は、約１００、３００、５００、７００又は９００ｎｍなど、約１００〜９００ｎｍの平均粒径を有し得る。
【０１１７】
本明細書で使用する場合、粒径は、当業者に周知の任意の従来の粒径測定技術によって決定することができる。そのような技術としては、例えば沈降場流動分画法、光子相関分光法、光散乱法、動的光散乱法、光回折法及びディスク遠心分離法が挙げられる。
【０１１８】
８．追加の成分
好ましくは、本発明の粒子は追加の成分も含み得る。例えば、担体は、該担体に組み込まれた又はコンジュゲートされた造影剤を有し得る。現在市販されている造影剤を有する担体ナノスフェアの例は、Ｋｏｄａｋ  Ｘ−ｓｉｇｈｔナノスフェアである。量子ドット（ＱＤ）として既知の無機量子閉じ込め発光性ナノ結晶は、ＦＲＥＴ用途における理想的な供与体として浮上している。その高い量子収率及び調整可能なサイズ依存性のストークスシフトによって、単一の紫外線波長における励起時に、異なるサイズが青から赤外まで放出できるようにする（Ｂｒｕｃｈｅｚ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９９８，２８１：２０１３；Ｎｉｅｍｅｙｅｒ，Ｃ．Ｍ．，Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．，２００３，４２：５７９６；Ｗａｇｇｏｎｅｒ，Ａ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｅｎｚｙｍｏｌ．，１９９５，２４６：３６２；Ｂｒｕｓ，Ｌ．Ｅ．，Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｐｈｙｓ．，１９９３，７９，５５６６）。デンドリマーとして既知のポリマーのクラスに基づくハイブリッド有機／無機量子ドットなどの量子ドットは、生物学的標識化、撮像及び光学バイオセンシングシステムにおいて使用され得る（Ｌｅｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，２０００，１２２：１２８８６）。無機量子ドットの従来の合成とは異なり、これらのハイブリッド量子ドットナノ粒子の合成は、高温又は毒性の高い不安定な試薬を必要としない（Ｅｔｉｅｎｎｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｐｐｌ．Ｐｈｙｓ．Ｌｅｔｔ．，８７：１８１９１３，２００５）。
【０１１９】
９．ＡＰＩ
本発明の別の態様は、負の表面電荷を有する主題のマイクロ粒子又はナノ粒子を含む組成物を提供し、組成物は本明細書に記載の主題の方法のいずれか１つ又はその組合せに従って調製される。
【０１２０】
組成物は、結合ペプチド又は抗原部分などの他の医薬品有効成分、即ちＡＰＩを含まないことができる。ＡＰＩは、診断薬、農薬又は化学薬品などの非治療用化合物で置換できることが理解されている。したがって、ＡＰＩという用語が使用される各例において、診断薬、農薬又は化学薬品を含む「有効成分」という用語をその代わりに使用できることを理解されたい。
【０１２１】
組成物はＡＰＩを含むことができ、ＡＰＩは、タンパク質のアミド基とマイクロ粒子又はナノ粒子の表面のカルボキシル基との間に形成された結合などの共有結合を介して、マイクロ粒子又はナノ粒子の表面に共有結合又はイオン結合することができる。ＡＰＩはマイクロ粒子又はナノ粒子内に封入させることもできる。
【０１２２】
ＡＰＩの量は、マイクロ粒子又はナノ粒子の約０．０１〜５０％（重量／重量）又は約０．０５〜２５％、約０．１〜１０％、約０．２〜５％、０．５〜３％、１〜５％又は２〜５％（重量／重量）であることができる。
【０１２３】
好ましくは、組成物は、ＡＰＩの代わりに又はＡＰＩに加えて、マイクロ粒子又はナノ粒子の表面に共有結合した標的化部分、例えばペプチド又はタンパク質リガンド又はドメインを含み、標的化部分は標的部位（例えば標的化部分の細胞表面受容体又は結合パートナー）に特異的又は優先的に結合して、そのような標的化部分を担持するマイクロ粒子又はナノ粒子はインビボで標的部位を特異的又は優先的に対象とする。標的化部分を担持するマイクロ粒子又はナノ粒子は、標的部位で放出することができるか、又はさもなければ有効化できる、マイクロ粒子又はナノ粒子内に封入された又は埋め込まれたＡＰＩをさらに含み得る。実際、ポリガンマグルタミン酸はそれ自体が癌細胞の標的化部分になることがある。
【０１２４】
標的化部分を有することにより、標的特異的ナノ粒子は、生物学的物質、例えば膜成分又は細胞表面受容体に効率的に結合するか、さもなければ会合することができる。治療薬の標的化（例えば特定の組織又は細胞種、特異的な患部組織等は標的化するが、正常な組織は標的化しない）は、癌（例えば前立腺癌）などの組織特異的な疾患の治療に望ましい。例えば、細胞傷害性抗癌剤の全身送達とは対照的に、標的化送達は、薬剤が健康な細胞を死滅させるのを防ぐことができる。さらに、標的化送達は、より低用量の薬剤の投与を可能にし、従来の化学療法に一般的に付随する望ましくない副作用を低減することができる。上で論じたように、本発明のナノ粒子の標的特異性は、ナノ粒子上のリガンドの密度を最適化することにより最大化される。標的化部分は、ナノ粒子又はマイクロ粒子の表面に共有結合させることができる。例えば、標的化部分は、（例えば１つ以上のカルボン酸部分をカップリングすることによって）ポリアミノ酸、（例えばポリマー末端を介して）ＰＬＧＡ／ＰＬＡに、又はさらに別の分子若しくはポリマーを相互貫入網目内に包含することによって、共有結合することができる。例えば、標的化部分は、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）分子又はＰＬＧＡ−ＰＥＧジブロックに共有結合され、ポリアミノ酸と共にエマルジョンに添加することができる。
【０１２５】
例えば標的化部分は、生物学的物質、例えば膜成分、細胞表面受容体、前立腺特異的膜抗原などに結合するか、さもなければ会合することができる部分であり得る。本発明の場合、標的化部分は低分子量ＰＳＭＡリガンドである。本明細書で使用される「結合する（ｂｉｎｄ）」又は「結合（ｂｉｎｄｉｎｇ）」という用語は、通例、生化学的、生理学的及び／又は化学的相互作用を含むが、これに限定されない、特異的又は非特異的結合又は相互作用による、相互親和性又は結合能力を示す、対応する分子の対又はその部分の間の相互作用を示す。「生物学的結合」は、タンパク質、核酸、糖タンパク質、炭水化物、ホルモンなどを含む分子の対の間で起こる種類の相互作用を定義する。「結合パートナー」という用語は、特定の分子と結合可能である分子を示す。「特異的結合」は、他の同様の生物学的物質よりも実質的に高い程度で結合パートナー（又は限定数の結合パートナー）に結合することができる又は結合パートナーを認識することができる、ポリヌクレオチドなどの分子を示す。一連の実施形態において、標的化部分は、（解離定数を介して測定した）約１マイクロモル未満、少なくとも約１０マイクロモル、又は少なくとも約１００マイクロモルの親和性を有する。
【０１２６】
好ましい実施形態において、本発明の標的化部分は小分子である。ある実施形態において、「小分子」という用語は、天然に発生するか又は（例えば化学合成を介して）人工的に作製されるかにかかわらず、比較的低分子量を有し、タンパク質、ポリペプチド又は核酸ではない有機化合物を指す。小分子は通例、複数の炭素間結合を有する。ある実施形態において、小分子は、サイズが約２０００ｇ／モル未満である。いくつかの実施形態においては、小分子は、約１５００ｇ／モル未満又は約１０００ｇ／モル未満である。いくつかの実施形態において、小分子は、約８００ｇ／モル未満又は約５００ｇ／モル未満である。
【０１２７】
特に好ましい実施形態では、小分子標的化部分は前立腺癌腫瘍を標的化し、特に小分子標的化部分はＰＳＭＡペプチダーゼ阻害剤である。これらの部分は、本明細書では「低分子量ＰＳＭＡリガンド」とも呼ばれる。米国特許公開第２０１４／０２３５７０６号に記載されているように、正常組織における発現と比較した場合、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）の発現は、正常組織と比較して悪性前立腺で少なくとも１０倍過剰発現され、ＰＳＭＡ発現のレベルは、疾患が転移期に進行するにつれてさらにアップレギュレートされる（Ｓｉｌｖｅｒ  ｅｔ  ａｌ．１９９７，Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．，３：８１）。
【０１２８】
いくつかの実施形態において、前立腺癌腫瘍に関連する細胞を標的化するために使用され得る小分子標的化部分としては、２−ＰＭＰＡ、ＧＰＩ５２３２、ＶＡ−０３３、フェニルアルキルホスホナミデートなどのＰＳＭＡペプチダーゼ阻害剤（Ｊａｃｋｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００１，Ｃｕｒｒ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，８：９４９；Ｂｅｎｎｅｔｔ  ｅｔ  ａｌ，１９９８，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，１２０：１２１３９；Ｊａｃｋｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００１，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，４４：４１７０；Ｔｓｕｌｃａｒｎｏｔｏ  ｅｔ  ａｌ，２００２，Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．，１２：２１８９；Ｔａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，２００３，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．，３０７：８；Ｏｌｉｖｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２００３，Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，１１：４４５５；ａｎｄ  Ｍａｕｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，２００４，Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，１２：４９６９）並びに／又はその類似体及び誘導体が挙げられる。いくつかの実施形態において、前立腺癌腫瘍に関連する細胞を標的化するために使用され得る小分子標的化部分としては、チオール及びインドールチオール誘導体、例えば２−ＭＰＰＡ及び３−（２−メルカプトエチル）−１Ｈ−インドール−２−カルボン酸誘導体が挙げられる（Ｍａｊｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２００３，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，４６：１９８９；及び米国特許公開第２００５／００８０１２８号）。いくつかの実施形態において、前立腺癌腫瘍に関連する細胞を標的化するために使用され得る小分子標的化部分としては、ヒドロキサマート誘導体が挙げられる（Ｓｔｏｅｒｍｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２００３，Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．，１３：２０９７）。いくつかの実施形態において、前立腺癌腫瘍に関連する細胞を標的化するために使用され得る小分子標的化部分としては、ＰＢＤＡ及び尿素系阻害剤、例えばＺＪ  ４３、ＺＪ  １１、ＺＪ  １７、ＺＪ  ３８（Ｎａｎ  ｅｔ  ａｌ．２０００，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，４３：７７２；及びＫｏｚｉｋｏｗｓｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，２００４，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，４７：１７２９）並びに／又はその類似体及び誘導体が挙げられる。いくつかの実施形態において、前立腺癌腫瘍に関連する細胞を標的化するために使用され得る小分子標的化部分としては、プトレシン、スペルミン及びスペルミジン、アンドロゲン受容体標的化剤（ＡＲＴＡ）、例えば米国特許第７，０２６，５００号；第７，０２２，８７０号；第６，９９８，５００号；第６，９９５，２８４号；第６，８３８，４８４号；第６，５６９，８９６号；第６，４９２，５５４号及び米国特許公開第２００６／０２８７５４７号；第２００６／０２７６５４０号；第２００６／０２５８６２８号；第２００６／０２４１１８０号；第２００６／０１８３９３１号；第２００６／００３５９６６号；第２００６／０００９５２９号；第２００６／０００４０４２号；第２００５／００３３０７４号；第２００４／０２６０１０８号；第２００４／０２６００９２号；第２００４／０１６７１０３号；第２００４／０１４７５５０号；第２００４／０１４７４８９号；第２００４／００８７８１０号；第２００４／００６７９７９号；第２００４／００５２７２７号；第２００４／００２９９１３号；第２００４／００１４９７５号；第２００３／０２３２７９２号；第２００３／０２３２０１３号；第２００３／０２２５０４０号；第２００３／０１６２７６１号；第２００４／００８７８１０号；第２００３／００２２８６８号；第２００２／０１７３４９５号；第２００２／００９９０９６号；第２００２／００９９０３６号に記載されているものが挙げられる。本発明の関連する態様は、主題組成物及び医薬的に許容される担体又は賦形剤を含む医薬組成物を提供する。医薬組成物は、別の節でより詳細に後述する。
【０１２９】
ＡＰＩは水溶性であることができるか、又は比較的低い水溶性を有することができる。例えば、難水溶性ＡＰＩは、ＰＬＧＡを溶解するために使用されるのと同じ第１の溶媒に溶解されるか、又は（第１の溶媒と同じであり得る若しくは異なり得る）好適な溶媒に溶解されて、ＡＰＩ溶液を形成し得て、続いてＡＰＩ溶液がＰＬＧＡを含む第１の溶媒と混合され、ＡＰＩ及びＰＬＧＡの両方が生じた溶液に残存する。
【０１３０】
水溶性ＡＰＩが最初に（第２の溶媒と同じあり得る又は異なり得る）それ自体の溶媒に溶解されて、ＡＰＩ溶液を形成し得て、その後、ＡＰＩ溶液が第２の溶媒に添加される。
【０１３１】
ＡＰＩ又は治療薬としては、化学化合物及び化学化合物の混合物、例えば有機小分子又は無機小分子；サッカリン；オリゴ糖類；多糖類；生物学的巨大分子、例えばペプチド、タンパク質並びにペプチド類似体及び誘導体、ペプチド模倣薬；抗体及びその抗原結合断片；核酸；核酸類似体及び誘導体；細菌、植物、真菌又は動物細胞などの生物学的材料から作られた抽出物；動物組織；天然又は合成組成物；並びにその任意の組合せを含む、多種多様の異なる化合物が挙げられる。好ましくは、治療薬は小分子である。
【０１３２】
本明細書で使用する場合、「小分子」という用語は「天然物様」である化合物を示すことができるが、「小分子」という用語は、「天然物様」化合物に限定されない。むしろ、小分子は通例、小分子が複数の炭素−炭素結合を含有し、５０００ダルトン（５ｋＤａ）未満、好ましくは３ｋＤａ未満、さらにより好ましくは２ｋＤａ未満、最も好ましくは１ｋＤａ未満の分子量を有することを特徴とする。場合によっては、小分子は７００ダルトン以下の分子量を有することが好ましい。
【０１３３】
例示的な治療薬としては、臨床試験又は前臨床研究において、ＦＤＡによる新薬申請に供され、ＦＤＡによる承認を受けたものが挙げられるが、これに限定されない。
【０１３４】
ＡＰＩ又は治療薬は、本明細書に開示されている種類及び具体例を含む。種類が特定の例によって限定されることを意図するものではない。当業者はまた、その種類に含まれ、本開示に従って有用である多数の他の化合物も認識するであろう。例としては、放射線増感剤、ステロイド、キサンチン、ベータ−２−アゴニスト気管支拡張剤、抗炎症剤、鎮痛剤、カルシウム拮抗剤、アンジオテンシン変換酵素阻害剤、ベータ遮断薬、中枢活性型アルファ−アゴニスト、アルファ−１−アンタゴニスト、抗コリン薬／鎮痙薬、バソプレシン類似体、抗不整脈薬、抗パーキンソン病薬、抗狭心症薬／抗高血圧薬、抗凝固薬、抗血小板薬、鎮静薬、抗不安薬、ペプチド剤、バイオポリマー剤、抗新生物剤、緩下薬、下痢止め剤、抗微生物剤、抗真菌剤、ワクチン、タンパク質又は核酸が挙げられる。さらなる態様において、医薬的有効成分は、クマリン、アルブミン、ステロイド、例えばベタメタゾン、デキサメタゾン、メチルプレドニゾロン、プレドニゾロン、プレドニゾン、トリアムシノロン、ブデソニド、ヒドロコルチゾン及び医薬的に許容されるヒドロコルチゾン誘導体；キサンチン類、例えばテオフィリン及びドキソフィリン；ベータ−２−アゴニスト気管支拡張剤、例えばサルブタモール、フェンテロール、クレンブテロール、バンブテロール、サルメテロール、フェノテロール；抗喘息抗炎症剤  抗関節炎性抗炎症剤及び非ステロイド系抗炎症剤を含む抗炎症剤、この例としては、スルフィド、メサラミン、ブデソニド、サラゾピリン、ジクロフェナク、医薬的に許容されるジクロフェナク塩、ニメスリド、ナプロキセン、アセトアミノフェン、イブプロフェン、ケトプロフェン及びピロキシカムが挙げられるが、これに限定されない；サリチラートなどの鎮痛剤；カルシウムチャネル遮断薬、例えば、ニフェジピン、アムロジピン及びニカルジピン；アンジオテンシン変換酵素阻害剤、例えばカプトプリル、ベナゼプリルヒドロクロリド、ホシノプリルナトリウム、トランドラプリル、ラミプリル、リシノプリル、エナラプリル、キナプリルヒドロクロリド及びモエキシプリルヒドロクロリド；ベータ遮断薬（即ち、ベータアドレナリン遮断剤）、例えばソタロールヒドロクロリド、チモロールマレアート、エスモロールヒドロクロリド、カルテオロール、プロパノロールヒドロクロリド、ベタキソロールヒドロクロリド、ペンブトロールサルファート、メトプロロールタートラート、メトプロロールスクシナート、アセブトロールヒドロクロリド、アテノロール、ピンドロール及びビソプロロールフマラート；中枢活性型アルファ−２−アゴニスト、例えばクロニジン；アルファ−１−アンタゴニスト、例えばドキサゾシン及びプラゾシン；抗コリン薬／鎮痙薬、例えばジサイクロミンヒドロクロリド、スコポラミンヒドロブロミド、グリコピロラート、クリジニウムブロミド、フラボキサート及びオキシブチニン；バソプレッシン類似体、例えばバソプレッシン及びデスモプレシン；抗不整脈薬、例えばキニジン、リドカイン、トカイニドヒドロクロリド、メキシレチンヒドロクロリド、ジゴキシン、ベラパミルヒドロクロリド、プロパフェノンヒドロクロリド、フレカイニドアセタート、プロカインアミドヒドロクロリ���、モリシジンヒドロクロリド及びジソピラミドホスファート；抗パーキンソン病剤、例えばドーパミン、Ｌ−ドパ／カルビドパ、セレギリン、ジヒドロエルゴクリプチン、ペルゴリド、リスリド、アポモルフィン及びブロモクリプチンなど；抗狭心症薬及び降圧薬、例えばイソソルビドモノニトラート、イソソルビドジニトラート、プロプラノロール、アテノロール及びベラパミル；抗凝固薬及び抗血小板薬、例えばクマジン、ワルファリン、アセチルサリチル酸及びチクロピジン；鎮静薬、例えばベンゾジアザピン及びバルビツラート；抗不安薬（ａｎｓｉｏｌｙｔｉｃ  ａｇｅｎｔ）、例えばロラゼパム、ブロマゼパム及びジアゼパム；ペプチド剤及びバイオポリマー剤、例えばカルシトニン、ロイプロリド及び他のＬＨＲＨアゴニスト、ヒルジン、シクロスポリン、インスリン、ソマトスタチン、プロチレリン、インターフェロン、デスモプレシン、ソマトトロピン、チモペンチン、ピドチモド、エリスロポエチン、インターロイキン、メラトニン、顆粒球／マクロファージ−ＣＳＦ及びヘパリン；抗新生物剤、例えばエトポシド、エトポシドホスファート、シクロホスファミド、メトトレキサート、５−フルオロウラシル、ビンクリスチン、ドキソルビシン、シスプラチン、ヒドロキシウレア、ロイコボリンカルシウム、タモキシフェン、フルタミド、アスパラギナーゼ、アルトレタミン、ミトタン及びプロカルバジンヒドロクロリド；緩下薬、例えばセンナ濃縮物、カサントラノール、ビサコジル及びナトリウムピコスルファート；下痢止め剤、例えばジフェノキシンヒドロクロリド、ロペラミドヒドロクロリド、フラゾリドン、ジフェノキシラートヒドロクロリド（ｈｄｙｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）及び微生物；ワクチン、例えば細菌ワクチン及びウイルスワクチン；抗微生物剤、例えばペニシリン、セファロスポリン及びマクロライド；抗真菌剤、例えばイミダゾール系誘導体及びトリアゾール系誘導体；並びに核酸、例えば生物学的タンパク質をコードするＤＮＡ配列及びアンチセンスオリゴヌクレオチドであることができる。
【０１３５】
好適なＡＰＩの例としては、インフリキシマブ、エタネルセプト、ベバシズマブ、ラニビズマブ、アダリムマブ、セルトリズマブペゴル、ゴリムマブ、アナキンラなどのインターロイキン１（ＩＬ−１）遮断薬、アバタセプトなどのＴ細胞共刺激遮断薬、トシリズマブなどのインターロイキン６（ＩＬ−６）遮断薬、レブリキズマブなどのインターロイキン１３（ＩＬ−１３）遮断薬；ロンタリズマブなどのインターフェロンアルファ（ＩＦＮ）遮断薬；ｒｈｕＭＡｂベータ７などのベータ７インテグリン遮断薬；抗Ｍ１プライムなどのＩｇＥ経路遮断薬；抗リンホトキシンα（ＬＴａ）などの分泌ホモトリマーＬＴａ３及び膜結合ヘテロトリマーＬＴａ１／ベータ２遮断薬又は抗ＶＥＧＦ剤などが挙げられる。
【０１３６】
「ＡＰＩ」という用語は、本明細書で便宜上使用される。この用語は、本明細書内で、それぞれの場合に具体的に列挙されているかのように、生体分子、タンパク質及び核酸という用語によって置き換えられることが理解される。
【０１３７】
本発明は、特に抗癌剤の投与に利用できる。例えば、薬剤は、ＤＮＡ脱メチル化剤である５−アザシチジン（アザシチジン）若しくは５−アザ−２’−デオキシシチジン（デシタビン）（シタラビン又はａｒａ−Ｃ）；シュードイソシチジン（ｐｓｉ  ＩＣＲ）；５−フルオロ−２’−デオキシシチジン（ＦＣｄＲ）；２’−デオキシ−２’，２’−ジフルオロシチジン（ゲムシタビン）；５−アザ−２’−デオキシ−２’，２’−ジフルオロシチジン；５−アザ−２’−デオキシ−２’−フルオロシチジン；ゼブラリン；２’，３’−ジデオキシ−５−フルオロ−３’−チアシチジン（エムトリバ）；２’−シクロシチジン（アンシタビン）；ファザラビン若しくはａｒａ−ＡＣ；６−アザシチジン（６−アザ−ＣＲ）；５，６−ジヒドロ−５−アザシチジン（ｄＨ−アザ−ＣＲ）；Ｎ４−ペンチルオキシ−カルボニル−５’−デオキシ−５−フルオロシチジン（カペシタビン）；Ｎ４−オクタデシル−シタラビン；又はエライジン酸シタラビンであることができる。シチジン類似体はまた、シチジン又はデオキシシチジンに構造的に関連付けることができ、シチジン又はデオキシシチジンの作用を機能的に模倣及び／又はその作用に拮抗する。薬剤としては、５−フルオロウラシル、アファチニブ、アプリジン、アザリビン、アナストロゾール、アントラサイクリン、アクシチニブ、ＡＶＬ−１０１、ＡＶＬ−２９１、ベンダムスチン、ブレオマイシン、ボルテゾミブ、ボスチニブ、ブリオスタチン−１、ブスルファン、カリケアマイシン、カンプトテシン、カルボプラチン、１０−ヒドロキシカンプトテシン、カルムスチン、セレコキシブ、クロランブシル、シスプラチナ、ＣＯＸ−２阻害剤、イリノテカン（ＣＰＴ−１１）、ＳＮ−３８、カルボプラチン、クラドリビン、カンプトテカン、クリゾチニブ、シクロホスファミド、シタラビン、ダカルバジン、ダサチニブ、ダイナシクリブ、ドセタキシル、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、ＤＭ１、ＤＭ３、ＤＭ４、ドキソルビシン、２−ピロリノドキソルビシン（２−ＰＤｏｘ）、２−ＰＤｏｘのプロドラッグ形態（プロ−２−ＰＤｏｘ）、シアノ−モルホリノドキソルビシン、ドキソルビシングルクロニド、エンドスタチン、エピルビシングルクロニド、エルロチニブ、エストラムスチン、エピドフィロトキシン、エルロチニブ、エンチノスタット、エストロゲン受容体結合剤、エトポシド（ＶＰ１６）、エトポシドグルクロニド、エトポシドホスファート、エキセメスタン、フィンゴリモド、フロクスウリジン（ＦＵｄＲ）、３’，５’−Ｏ−ジオレオイル−ＦｕｄＲ（ＦＵｄＲ−ｄＯ）、フルダラビン、フルタミド、ファルネシル−プロテイントランスフェラーゼ阻害剤、フラボピリドール、フォスタマチニブ、ガネテスピブ、ＧＤＣ−０８３４、ＧＳ−１１０１、ゲフィチニブ、ゲムシタビン、ヒドロキシウレア、イブルチニブ、イダルビシン、イデラリシブ、イホスファミド、イマチニブ、ラパチニブ、レノリダミド、ロイコボリン、ＬＦＭ−Ａ１３、ロムスチン、メクロレタミン、メルファラン、メルカプトプリン、６−メルカプトプリン、メトトレキサート、ミトキサントロン、ミトラマイシン、マイトマイシン、ミトタン、モノメチルアウリスタチンＦ（���ＭＡＦ）、モノメチルアウリスタチンＤ（ＭＭＡＤ）、モノメチルアウリスタチンＥ（ＭＭＡＥ）、ナベルビン、ネラチニブ、ニロチニブ、ニトロソウレア、オラパリブ、プリコマイシン、プロカルバジン、パクリタキセル、ＰＣＩ−３２７６５、ペントスタチン、ＰＳＩ−３４１、ラロキシフェン、セムスチン、ＳＮ−３８、ソラフェニブ、ストレプトゾシン、ＳＵ１１２４８、スニチニブ、タモキシフェン、テマゾロミド、トランス白金、サリドマイド、チオグアニン、チオテパ、テニポシド、トポテカン、ウラシルマスタード、バタラニブ、ビノレルビン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンカアルカロイド及びＺＤ１８３９又はその薬学的に許容される塩も挙げることができる。
【０１３８】
抗癌剤としては、以下の遺伝子、リガンド、受容体、タンパク質、因子の阻害剤、アゴニスト、アンタゴニスト、リガンド、モジュレータ、刺激因子、遮断剤、活性化因子又はサプレッサが挙げられるが、これに限定されない：
アデノシン受容体（例えばＡ２Ｂ、Ａ２ａ、Ａ３）、エーベルソンマウス白血病ウイルス腫瘍遺伝子ホモログ１遺伝子（ＡＢＬ、例えばＡＢＬ１など）、アセチル−ＣｏＡカルボキシラーゼ（例えばＡＣＣ１／２）、副腎皮質刺激ホルモン受容体（ＡＣＴＨ）、活性化ＣＤＣキナーゼ（ＡＣＫ、例えばＡＣＫ１）、アデノシンデアミナーゼ、アデニラートシクラーゼ、ＡＤＰリボシルシクラーゼ−１、エアロリシン、アンジオテンシノーゲン（ＡＧＴ）遺伝子、マウス胸腺腫ウイルス腫瘍遺伝子ホモログ１（ＡＫＴ）プロテインキナーゼ（例えばＡＫＴ１、ＡＫＴ２、ＡＫＴ３）、ＡＫＴ１遺伝子、アルカリホスファターゼ、アルファ１アドレナリン受容体、アルファ２アドレナリン受容体、アルファケトグルタラートデヒドロゲナーゼ（ＫＧＤＨ）、アミノペプチダーゼＮ、アルギニンデイミナーゼ、ベータアドレナリン受容体、未分化リンパ腫キナーゼ受容体、未分化リンパ腫キナーゼ（ＡＬＫ、例えばＡＬＫ１）、Ａｌｋ−５プロテインキナーゼ、ＡＭＰ活性化プロテインキナーゼ、アンドロゲン受容体、アンジオポイエチン（例えばリガンド−１、リガンド−２）、アポリポタンパク質ＡＩ（ＡＰＯＡ１）遺伝子、アポトーシスシグナル調節キナーゼ（ＡＳＫ、例えばＡＳＫ１）、アポトーシス誘導因子、アポトーシスタンパク質（例えば１、２）、アルギナーゼ（Ｉ）、アスパラギナーゼ、アステロイドホモログ１（ＡＳＴＥ１）遺伝子、毛細血管拡張性運動失調症及びＲａｄ３関連（ＡＴＲ）セリン／トレオニンタンパク質キナーゼ、Ａｘｌチロシンキナーゼ受容体、アロマターゼ、オーロラプロテインキナーゼ（例えば１、２）、ベイシジン、ＢＣＲ（切断点クラスター領域）タンパク質及び遺伝子、Ｂ細胞リンパ腫２（ＢＣＬ２）遺伝子、Ｂｃ１２タンパク質、Ｂｃ１２結合成分３、ＢＣＬ２Ｌ１１遺伝子、バキュロウイルスＩＡＰリピート含有５（ＢＩＲＣＳ）遺伝子、Ｂ−Ｒａｆ癌原遺伝子（ＢＲＡＦ）、Ｂｒｃ−Ａｂｌチロシンキナーゼ、β−カテニン、Ｂリンパ球抗原ＣＤ１９、Ｂリンパ球抗原ＣＤ２０、Ｂリンパ球刺激因子リガンド、Ｂリンパ球細胞接着分子、骨形成タンパク質−１０リガンド、骨形成タンパク質−９リガンドモジュレーター、ブラキウリタンパク質、ブラジキニン受容体、ブルトン型チロシンキナーゼ（ＢＴＫ）、ブロモドメイン及び外部ドメイン（ＢＥＴ）ブロモドメイン含有タンパク質（例えばＢＲＤ２、ＢＲＤ３、ＢＲＤ４）、カルモジュリン、カルモジュリン依存性プロテインキナーゼ（ＣａＭＫ、例えばＣＡＭＫＩＩ）、癌精巣抗原２、癌精巣抗原ＮＹ−ＥＳＯ−１、カンナビノイド受容体（例えばＣＢ１、ＣＢ２）、炭酸脱水酵素、カスパーゼ８アポトーシス関連システインペプチダーゼＣＡＳＰ８−ＦＡＤＤ様レギュレータ、カスパーゼ（例えばカスパーゼ−３、カスパーゼ−７、カスパーゼ−９）、カスパーゼ動員ドメインタンパク質−１５、カテプシンＧ、ケモカイン（Ｃ−Ｃモチーフ）受容体（ＣＣＲ２、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５など）、ＣＣＲ５遺伝子、ケモカインＣＣ２１リガンド、分化抗原群（ＣＤ）、例えばＣＤ４、ＣＤ２７、ＣＤ２９、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ４０、ＣＤ４０リガンド受容体、ＣＤ４０リガンド、ＣＤ４０ＬＧ遺伝子、ＣＤ４���、ＣＤ４５、ＣＤ４７、ＣＤ４９ｂ、ＣＤ５１、ＣＤ５２、ＣＤ５５、ＣＤ５８、ＣＤ６６ｅ、ＣＤ７０遺伝子、ＣＤ７４、ＣＤ７９、ＣＤ７９ｂ、ＣＤ７９Ｂ遺伝子、ＣＤ８０、ＣＤ９５、ＣＤ９９、ＣＤ１１７、ＣＤ１２２、ＣＤｗ１２３、ＣＤ１３４、ＣＤｗ１３７、ＣＤ１５８ａ、ＣＤ１５８ｂ１、ＣＤ１５８ｂ２、ＣＤ２２３、ＣＤ２７６抗原；絨毛性ゴナドトロピン、サイクリンＧ１、サイクリンＤ１、サイクリン依存性キナーゼ（ＣＤＫ、例えばＣＤＫ１、ＣＤＫ１Ｂ、ＣＤＫ２−９）、カゼインキナーゼ（ＣＫ、例えばＣＭ、ＣＭＩ）、ｃ−Ｋｉｔ（チロシンプロテインキナーゼＫｉｔ又はＣＤ１１７）、ｃ−Ｍｅｔ（肝細胞成長因子受容体（ＨＧＦＲ））、ＣＤＫ活性化キナーゼ（ＣＡＫ）、チェックポイントキナーゼ（例えばＣＨＫ１、ＣＨＫ２）、コレシストキニンＣＣＫ２受容体、クローディン（例えば６、１８）、クラステリン、補体Ｃ３、ＣＯＰ９シグナロソームサブユニット５、ＣＳＦ−１（コロニー刺激因子１受容体）、ＣＳＦ２遺伝子、クラステリン（ＣＬＵ）遺伝子、結合組織成長因子、シクロオキシゲナーゼ（例えば１、２）、癌／精巣抗原１Ｂ（ＣＴＡＧ１）遺伝子、ＣＴＬＡ−４（細胞傷害性Ｔリンパ球タンパク質４）受容体、ＣＹＰ２Ｂ１遺伝子、システインパルミトイルトランスフェラーゼポーキュパイン、サイトカインシグナル伝達−１、サイトカインシグナル伝達−３、シトクロムＰ４５０  １１Ｂ２、シトクロムＰ４５０レダクターゼ、シトクロムＰ４５０  ３Ａ４、シトクロムＰ４５０  １７Ａ１、シトクロムＰ４５０  １７、サイクリンＰ４５０  ２Ｄ６、（抗癌剤又はシトクロム（ｃｙｔｒｏｃｈｒｏｍｅ）調節剤がコビシスタット以外のものである場合）、細胞質イソシトラートデヒドロゲナーゼ、シトシンデアミナーゼ、シトシンＤＮＡメチルトランスフェラーゼ、細胞傷害性Ｔリンパ球タンパク質−４、ケモカイン（Ｃ−Ｘ−Ｃモチーフ）受容体（例えばＣＸＣＲ４、ＣＸＣＲ１及びＣＸＣＲ２）、デルタ様タンパク質リガンド（例えば３、４）、デオキシリボヌクレアーゼ、Ｄｉｃｋｋｏｐｆ−１リガンド、ジヒドロピリミジンデヒドロゲナーゼ、ＤＮＡ結合タンパク質（例えばＨＵ−ベータなど）、ＤＮＡ依存性プロテインキナーゼ、ＤＮＡジャイレース、ＤＮＡメチルトランスフェラーゼ、ＤＮＡポリメラーゼ（例えばアルファ）、ＤＮＡプライマーゼ、ジスコイジンドメイン受容体（ＤＤＲ、例えばＤＤＲ１）、ＤＤＲ２遺伝子、ジヒドロ葉酸レダクターゼ（ＤＨＦＲ）、ジペプチジルペプチダーゼＩＶ、
Ｌ−ドーパクロームトートメラーゼ、ｄＵＴＰピロホスファターゼ、棘皮動物微小管様タンパク質４、上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）遺伝子、ＥＧＦＲチロシンキナーゼ受容体、真核生物翻訳開始因子５Ａ（ＥＩＦＳＡ）遺伝子、エラスターゼ、伸長因子１アルファ２、伸長因子２、エンドグリン、エンドヌクレアーゼ、エンドプラスミン、エンドシアリン、エンドスタチン、エンドセリン（例えばＥＴ−Ａ、ＥＴ−Ｂ）、ｚｅｓｔｅホモログ２のエンハンサ（ＥＺＨ２）、上皮成長因子、上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）、上皮細胞接着分子（ＥｐＣＡＭ）、エフリン（ＥＰＨ）チロシンキナーゼ（例えばＥｐｈａ３、Ｅｐｈｂ４）、エフリンＢ２リガンド、エピジェン、Ｅｒｂ−ｂ２（ｖ−ｅｒｂ−ｂ２トリ赤芽球性白血病ウイルス腫瘍遺伝子ホモログ２）チロシンキナーゼ受容体、Ｅｒｂ−ｂ３チロシンキナーゼ受容体、Ｅｒｂ−ｂ４チロシンキナーゼ受容体、細胞外シグナル調節キナーゼ（ＥＲＫ）、Ｅ−セレクチン、エストラジオール１７ベータデヒドロゲナーゼ、エストロゲン受容体（例えばアルファ、ベータ）、エストロゲン関連受容体、エクスポーチン１、細胞外シグナル関連キナーゼ（例えば１、２など）、因子（例えばＸａ、ＶＩＩａ）、Ｆａｓリガンド、脂肪酸合成酵素、フェリチン、接着斑キナーゼ（ＦＡＫ、ＦＡＫ２など）、線維芽細胞成長因子（ＦＧＦ、例えばＦＧＦ１、ＦＧＦ２、ＦＧＦ４など）、ＦＧＦ−２リガンド、ＦＧＦ−５リガンド、フィブロネクチン、Ｆｍｓ関連チロシンキナーゼ３（Ｆｌｔ３）、ファルネソイドｘ受容体（ＦＸＲ）、葉酸、葉酸トランスポータ１、葉酸受容体（例えばアルファ）、葉酸ヒドロラーゼ前立腺特異的膜抗原１（ＦＯＬＨ１）、対塩基性アミノ酸対切断酵素（ＦＵＲＩＮ）、ＦＹＮチロシンキナーゼ、ガラクトシルトランスフェラーゼ、ガレクチン−３、グルココルチコイド誘導ＴＮＦＲ関連タンパク質ＧＩＴＲ受容体、グルココルチコイド、ベータ−グルクロニダーゼ、グルタミン酸カルボキシペプチダーゼＩＩ、グルタミナーゼ、グルタチオンＳ−トランスフェラーゼＰ、グリピカン３（ＧＰＣ３）、グリコーゲンシンターゼキナーゼ（ＧＳＫ、例えば３−ベータ）、顆粒球コロニー刺激因子（ＧＣＳＦ）リガンド、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）受容体、ゴナドトロピン放出ホルモン（ＧＮＲＨ）、成長因子受容体結合タンパク質２（ＧＲＢ２）、分子シャペロンｇｒｏＥＬ２遺伝子、Ｇｒｐ７８（７８  ｋＤａグルコース調節タンパク質）カルシウム結合タンパク質、インプリント母方発現転写産物（Ｈ１９）遺伝子、熱安定性エンテロトキシン受容体、ヘパラナーゼ、肝細胞成長因子、熱ショックタンパク質遺伝子、熱ショックタンパク質（例えば２７、７０、９０アルファ、ベータ）、ヘッジホッグタンパク質、ＨＥＲＶ−Ｈ  ＬＴＲ関連タンパク質２、ヘキソースキナーゼ、チロシンプロテインキナーゼＨＣＫ、ヒスタミンＨ２受容体、ヒストンデアセチラーゼ（例えばＨＤＡＣ、１、２、３、６、１０、１１）、ヒストンＨ１、ヒストンＨ３、ヒストンメチルトランスフェラーゼ（ＤＯＴ１Ｌ）、ヒト白血球抗原（ＨＬＡ）、ＨＬＡクラスＩ抗原（Ａ−２アルファ）、ＨＬＡクラスＩＩ抗原、ホメオボックスタン��ク質ＮＡＮＯＧ、マイトジェン活性化タンパク質キナーゼキナーゼキナーゼキナーゼ１（ＭＡＰ４Ｋ１、ＨＰＫ１）、ＨＳＰＢ１遺伝子、ヒトパピローマウイルス（例えばＥ６、Ｅ７）タンパク質、ヒアルロニダーゼ、ヒアルロン酸、低酸素誘導因子−１アルファ、細胞間接着分子１（ＩＣＡＭ−１）、免疫グロブリン（例えばＧ、Ｇ１、Ｇ２、Ｋ、Ｍ）、インドールアミン２，３−ジオキシゲナーゼ（例えばＩＤＯ、ＩＤＯ１）、インドールアミンピロール２，３−ジオキシゲナーゼ１阻害剤、Ｉ−カッパ−Ｂキナーゼ（ＩＫＫ、例えばＩＫＫβε）、免疫グロブリンＦｃ受容体、免疫グロブリンガンマＦｃ受容体（例えばＩ、ＩＩＩ、ＩＩＩＡ）、インターロイキン１リガンド、インターロイキン２リガンド、インターロイキン−２、ＩＬ−２遺伝子、ＩＬ−１アルファ、ＩＬ−１ベータ、ＩＬ−２、ＩＬ−２受容体アルファサブユニット、ＩＬ−３受容体、ＩＬ−４、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−１２遺伝子、ＩＬ−１７、インターロイキン１３受容体アルファ２、インターロイキン−２９リガンド、インターロイキン−１受容体関連キナーゼ４（ＩＲＡＫ４）、インスリン様成長因子（例えば１、２）、インスリン受容体、インテグリンアルファ−Ｖ／ベータ−３、インテグリンアルファ−Ｖ／ベータ−５、インテグリンアルファ−Ｖ／ベータ−６、インテグリンアルファ−５／ベータ−１、インテグリンアルファ−４／ベータ−１、インテグリンアルファ−４／ベータ−７、黒色腫には存在しないインターフェロン誘導タンパク質２（ＡＩＭ２）、インターフェロン（アルファ、アルファ２、ベータ、ガンマなど）、インターフェロンＩ型受容体、イソクエン酸デヒドロゲナーゼ（例えばＩＤＨ１、ＩＤＨ２）、ヤヌスキナーゼ（ＪＡＫ、例えばＪＡＫ１、ＪＡＫ２）、Ｊｕｎ  Ｎ末端キナーゼ、キナーゼ挿入ドメイン受容体（ＫＤＲ）、キラー細胞Ｉｇ様受容体、キスペプチン（ＫＩＳＳ−１）受容体、ｖ−ｋｉｔ  ハーディ−ズッカーマン４ネコ肉腫ウイルス癌遺伝子ホモログ（ＫＩＴ）チロシンキナーゼ、ＫＩＴ遺伝子、キネシン様タンパク質ＫＩＦ１１、カリクレイン関連ペプチダーゼ３（ＫＬＫ３）遺伝子、カーステンラット肉腫ウイルス癌遺伝子ホモログ（ＫＲＡＳ）遺伝子、ラクトフェリン、リンパ球活性化遺伝子３タンパク質（ＬＡＧ−３）、リソソーム関連膜タンパク質ファミリ（ＬＡＭＰ）遺伝子、ラノステロール−１４デメチラーゼ、ＬＤＬ受容体関連タンパク質−１、ロイコトリエンＡ４ヒドロラーゼ、リステリオリシン、Ｌ−セレクチン、黄体形成ホルモン受容体、リアーゼ、リンパ球抗原７５、リジンデメチラーゼ（例えばＫＤＭ１、ＫＤＭ２、ＫＤＭ４、ＫＤＭ５、ＫＤＭ６、Ａ／Ｂ／Ｃ／Ｄ）、リンパ球機能抗原−３受容体、リンパ球特異的タンパク質チロシンキナーゼ（ＬＣＫ）、リンホタクチン、Ｌｙｎ（Ｌｃｋ／Ｙｅｓ新規）チロシンキナーゼ、リゾホスファチジン酸−１受容体、リシルオキシダーゼタンパク質（ＬＯＸ）、リシルオキシダーゼ様タンパク質（ＬＯＸＬ、例えばＬＯＸＬ２）、リシルオキシダーゼホモログ２、マクロファージ遊走阻止因子、黒色腫抗原ファミリＡ３（ＭＡＧＥＡ３）遺伝子、ＭＡＧＥＣ１遺伝子、ＭＡＧＥＣ２遺伝子、主要ヴォールトタンパク質、ミリストイル化アラニンリッチプロテインキナーゼＣ基質（ＭＡＲＣＫＳ）タンパク質、メラン−Ａ（ＭＡＲＴ−１）黒色腫抗原、Ｍａｓ関連Ｇタンパク質共役受容体、マトリクスメタロプロテアーゼ（ＭＭＰ、例えばＭＭＰ２、ＭＭＰ９）、骨髄細胞白血病１（ＭＣＬ１）遺伝子、Ｍｃｌ−１分化タンパク質、マクロファージコロニー刺激因子（ＭＣＳＦ）リガンド、黒色腫関連抗原（例えば１、２、３、６）、メラノサイト刺激ホルモンリガンド、メラノサイトタンパク質Ｐｍｅｌ  １７、膜銅アミンオキシダーゼ、メソテリン、代謝型グルタミン酸受容体１、マイトジェン活性化プロテインキナーゼ（ＭＥＫ、例えばＭＥＫ１、ＭＥＫ２）、
肝細胞成長因子受容体（ＭＥＴ）遺伝子、ＭＥＴチロシンキナーゼ、メチオニンアミノペプチダーゼ−２、マイトジェン活性化プロテインキナーゼ（ＭＡＰＫ）、Ｍｄｍ２  ｐ５３結合タンパク質、Ｍｄｍ４タンパク質、メタロレダクターゼＳＴＥＡＰ１（前立腺の６回膜貫通上皮抗原１）、メタスチン、メチルトランスフェラーゼ、ミトコンドリア３ケトアシルＣｏＡチオラーゼ、ＭＡＰＫ活性化プロテインキナーゼ（例えばＭＫ２）、ｍＴＯＲ（ラパマイシンの機構的標的（セリン／トレオニンキナーゼ））、ｍＴＯＲ複合体（例えば１、２）、ムチン（例えば１、５Ａ、１６）、ｍｕｔ  Ｔホモログ（ＭＴＨ、例えばＭＴＨ１）、Ｍｙｃ癌原遺伝子タンパク質、ＮＡＤ  ＡＤＰリボシルトランスフェラーゼ、ナトリウム利尿ペプチド受容体Ｃ、神経細胞接着分子１、ニューロキニン受容体、ニューロピリン２、一酸化窒素合成酵素、核因子（ＮＦ）カッパＢ、ＮＦカッパＢ活性化タンパク質、ニューロキニン１（ＮＫ１）受容体、ＮＫ細胞受容体、ＮＫ３受容体、ＮＫＧ２  ＡＢ活性化ＮＫ受容体、ＮＩＭＡ関連キナーゼ９（ＮＥＫ９）、ノルアドレナリントランスポータ、Ｎｏｔｃｈ（例えばＮｏｔｃｈ−２受容体、Ｎｏｔｃｈ−３受容体）、ヌクレオフォスミン未分化リンパ腫キナーゼ（ＮＰＭ−ＡＬＫ）、２，５−オリゴアデニラートシンテターゼ、核赤芽球２関連因子２、ヌクレオリン、ヌクレオフォスミン、Ｏ−メチルグアニンＤＮＡメチルトランスフェラーゼ、オルニチンデカルボキシラーゼ、オロタートホスホリボシルトランスフェラーゼ、オーファン核ホルモン受容体ＮＲ４Ａ１、オピオイド受容体（例えばデルタ）、オステオカルシン、破骨細胞分化因子、オステオポンチン、ＯＸ−４０（腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリメンバ４  ＴＮＦＲＳＦ４又はＣＤ１３４）受容体、２オキソグルタラートデヒドロゲナーゼ、プリン作動性受容体Ｐ２Ｘリガンド開口型イオンチャネル７（Ｐ２Ｘ７）、副甲状腺ホルモンリガンド、ｐ５３腫瘍サプレッサタンパク質、Ｐ３タンパク質、プログラム細胞死１（ＰＤ−１）、癌原遺伝子セリン／トレオニンプロテインキナーゼ（ＰＩＭ、例えばＰＩＭ−１、ＰＩＭ−２、ＰＩＭ−３）、ポリＡＤＰリボースポリメラーゼ（ＰＡＲＰ、例えばＰＡＲＰ１、２及び３）、
ｐ３８キナーゼ、ｐ３８ＭＡＰキナーゼ、血小板由来成長因子（ＰＤＧＦ、例えばアルファ、ベータ）、Ｐ糖タンパク質（例えば１）、血小板由来成長因子（ＰＤＧＦ、例えばアルファ、ベータ）、ＰＫＮ３遺伝子、Ｐ−セレクチン、ホスファチジルイノシトール３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）、ホスホイノシチド−３キナーゼ（ＰＩ３Ｋ、例えばアルファ、デルタ、ガンマ）、ホスホリラーゼキナーゼ（ＰＫ）、胎盤成長因子、多剤耐性トランスポータ、プレキシンＢ１、ポロ様キナーゼ１、ペルオキシソーム成長因子活性化受容体（ＰＰＡＲ、例えばアルファ、デルタ、ガンマ）、黒色腫において優先的に発現される抗原（ＰＲＡＭＥ）遺伝子、推定転写因子ＰＭＬ、プログラム細胞死リガンド１阻害剤（ＰＤ−Ｌ１）、プロゲステロン受容体、前立腺特異的抗原、前立腺酸ホスファターゼ、プロスタノイド受容体（ＥＰ４）、プロテアソーム、プロテインファルネシルトランスフェラーゼ、プロテインキナーゼ（ＰＫ、例えばＡ、Ｂ、Ｃ）、タンパク質Ｅ７、タンパク質チロシンキナーゼ、タンパク質チロシンホスファターゼベータ、ポロ様キナーゼ（ＰＬＫ）、ＰＬＫ１遺伝子、プレニル結合タンパク質（ＰｒＰＢ）、プロトポルフィリノーゲンオキシダーゼ、プロサポシン（ＰＳＡＰ）遺伝子、ホスファターゼ及びテンシンホモログ（ＰＴＥＮ）、プリンヌクレオシドホスホリラーゼ、ピルバートキナーゼ（ＰＹＫ）、ピルバートデヒドロゲナーゼ（ＰＤＨ）、ピルバートデヒドロゲナーゼキナーゼ、Ｒａｆプロテインキナーゼ（例えば１、Ｂ）、ＲＡＦ１遺伝子、Ｒａｓ  ＧＴＰアーゼ、Ｒａｓ遺伝子、５−アルファレダクターゼ、ＲＥＴ遺伝子、Ｒｅｔチロシンキナーゼ受容体、網膜芽細胞腫関連タンパク質、レチノイン酸受容体（例えばガンマ）、レチノイドＸ受容体、Ｒｈｅｂ（脳に豊富なＲａｓホモログ）ＧＴＰアーゼ、Ｒｈｏ（Ｒａｓホモログ）関連プロテインキナーゼ２、リボヌクレアーゼ、リボヌクレオチドレダクターゼ（Ｍ２サブユニットなど）、リボソームタンパク質Ｓ６キナーゼ、ＲＮＡポリメラーゼ（例えばＩ、ＩＩ）、Ｒｏｎ（Ｒｅｃｅｐｔｅｕｒ  ｄ’Ｏｒｉｇｉｎｅ  Ｎａｎｔａｉｓ）チロシンキナーゼ、ＲＯＳ１（ＲＯＳ癌原遺伝子１、受容体チロシンキナーゼ）遺伝子、Ｒｏｓ１チロシンキナーゼ、Ｒｕｎｔ関連転写因子３、５１００カルシウム結合タンパク質Ａ９、筋小胞体カルシウムＡＴＰアーゼ、ガンマセクレターゼ、分泌型Ｆｒｉｚｚｌｅｄ関連タンパク質−２、セマフォリン−４Ｄ、ＳＬサイトカインリガンド、セリンプロテアーゼ、シグナル伝達リンパ球活性化分子（ＳＬＡＭ）ファミリメンバ７、脾臓チロシンキナーゼ（ＳＹＫ）、Ｓｒｃチロシンキナーゼ、腫瘍進行遺伝子座２（ＴＰＬ２）、セリン／トレオニンキナーゼ（ＳＴＫ）、シグナル伝達及び転写（ＳＴＡＴ、例えばＳＴＡＴ−１、ＳＴＡＴ−３、ＳＴＡＴ−５）、第２のミトコンドリア由来のカスパーゼ活性化因子（ＳＭＡＣ）タンパク質、スムーズンド（ＳＭＯ）受容体、ナトリウムホスファート共輸送体２Ｂ、ナトリウムヨージド共輸送体、ソマトスタチン受容体（例えば１、２、３、４、５）、ソニックヘッジホッグタンパク質、特異的タンパク質１（Ｓｐ１）転写因子、スフィンゴミエリン合成酵素、スフィンゴシン−１−ホスファート受容体−１、スフィンゴシンキナーゼ（例えば１、２）、ＳＲＣ遺伝子、ＳＴＡＴ３遺伝子、前立腺の６回膜貫通上皮抗原（ＳＴＥＡＰ）遺伝子、ステロイドスルファターゼ、インターフェロン遺伝子タンパク質の刺激因子、インターフェロン遺伝子の刺激因子（ＳＴＩＮＧ）受容体、間質細胞由来因子１リガンド、ＳＵＭＯ（低分子ユビキチン様修飾因子）、スーパーオキシドジスムターゼ、サバイビンタンパク質、シナプシン３、シンデカン−１、シヌクレインアルファ、セリン／トレオニンタンパク質キナーゼ（ＴＢＫ、例えばＴＢＫ１）、ＴＡＴＡボックス結合タンパク質関連因子ＲＮＡポリメラーゼＩサブユニットＢ（ＴＡＦ１Ｂ）遺伝子、Ｔ細胞表面糖タンパク質ＣＤ８、Ｔ細胞ＣＤ３糖タンパク質ゼータ鎖、Ｔ細胞分化抗原ＣＤ６、Ｔ細胞表面糖タンパク質ＣＤ２８、Ｔｅｃタンパク質チロシンキナーゼ、Ｔｅｋチロシンキナーゼ受容体、テロメラーゼ、テネイシン、テロメラーゼ逆転写酵素（ＴＥＲＴ）遺伝子、トランスフォーミング成長因子（ＴＧＦ、例えばベータ）キナーゼ、ＴＧＦベータ２リガンド、Ｔ細胞免疫グロブリン及びムチンドメイン含有−３（ＴＩＭ−３）、組織因子、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ、例えばアルファ、ベータ）、ＴＮＦ関連アポトーシス誘導リガンド、ＴＮＦＲ１関連デスドメインタンパク質、ＴＮＦＳＦ９遺伝子、ＴＮＦＳＦ１１遺伝子、栄養芽細胞糖タンパク質（ＴＰＢＧ）遺伝子、トランスフェリン、トロポミオシン受容体キナーゼ（Ｔｒｋ）受容体（例えばＴｒｋＡ、ＴｒｋＢ、ＴｒｋＣ）、栄養芽細胞糖タンパク質、チミジラート合成酵素、免疫グロブリン様及びＥＧＦ様ドメインを有するチロシンキナーゼ（ＴＩＥ）受容体、Ｔｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ、例えば１−１３）、トポイソメラーゼ（例えばＩ、ＩＩ、ＩＩＩ）、腫瘍タンパク質５３（ＴＰ５３）遺伝子、転写因子、トランスフェラーゼ、トランスフォーミング成長因子ＴＧＦ−β受容体キナーゼ、トランスグルタミナーゼ、トランスロケーション関連タンパク質、膜貫通糖タンパク質ＮＭＢ、腫瘍壊死因子１３Ｃ受容体、チミジンキナーゼ、チミジンホスホリラーゼ、チミジラート合成酵素、サイモシン（例えばアルファ１）、甲状腺ホルモン受容体、Ｔｒｏｐ−２カルシウムシグナルトランスデューサ、甲状腺刺激ホルモン受容体、トリプトファン５−ヒドロキシラーゼ、チロシナーゼ、チロシンキナーゼ（ＴＫ）、チロシンキナーゼ受容体、チロシンプロテインキナーゼＡＢＬ１阻害剤、ｔａｎｋ結合キナーゼ（ＴＢＫ）、トロンボポイエチン受容体、ＴＮＦ関連アポトーシス誘導リガンド（ＴＲＡＩＬ）受容体、チューブリン、腫瘍サプレッサ候補２（ＴＵＳＣ２）遺伝子、チロシンヒドロキシラーゼ、ユビキチンコンジュゲート酵素Ｅ２Ｉ（ＵＢＥ２Ｉ、ＵＢＣ９）、ユビキチン、ユビキチンカルボキシルヒドロラーゼアイソザイムＬ５、ユビキチンチオエステラーゼ−１４、ウレアーゼ、ウロキナーゼプラスミノーゲン活性化因子、ウテログロビン、バニロイドＶＲ１、血管細胞接着タンパク質１、血管内皮成長因子受容体（ＶＥＧＦＲ）、Ｔ細胞活性化のＶドメインＩｇサプレッサ（ＶＩＳＴＡ）、ＶＥＧＦ−１受容体、ＶＥＧＦ−２受容体、ＶＥＧＦ−３受容体、���ＥＧＦ−Ａ、ＶＥＧＦ−Ｂ、ビメンチン、ビタミンＤ３受容体、癌原遺伝子チロシンプロテインキナーゼＹｅｓ、Ｗｅｅ−１プロテインキナーゼ、ウィルムス腫瘍タンパク質、ウィルムス腫瘍抗原１、Ｘ連鎖アポトーシス抑制タンパク質、ジンクフィンガータンパク質転写因子又はそれらの任意の組合せ。
【０１３９】
抗癌剤には、作用機序またはクラスによって定義される薬剤が含まれ、これには以下が含まれる：
代謝拮抗剤／抗癌剤、例えばピリミジン類似体フロクスウリジン、カペシタビン、シタラビン、ＣＰＸ−３５１（リポソームシタラビン、ダウノルビシン）、ＴＡＳ−１１８；プリン類似体、葉酸拮抗薬（例えばプララトレキサート）及び関連する阻害剤；ビンカアルカロイド（ビンブラスチン、ビンクリスチン）などの天然産物並びにタキサン（パクリタキセル、ドセタキセル）、ビンブラスチン、ノコダゾール、エポチロン、ビノレルビン、（ナベルビン）及びエピポドフィロトキシン（エトポシド、テニポシド）などの微小管を含む抗増殖／抗有糸分裂剤；ＤＮＡ損傷剤、例えばアクチノマイシン、アムサクリン、ブスルファン、カルボプラチン、クロラムブシル、シスプラチン、シクロホスファミド、（シトキサン）、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、エピルビシン、イホスファミド、メルファラン、メルクロレタミン、マイトマイシンＣ、ミトキサントロン、ニトロソウレア、プロカルバジン、タキソール、タキソテール、テニポシド、エトポシド及びトリエチレンチオホスホルアミド；ＤＮＡ低メチル化剤、例えばグアデシタビン（ＳＧＩ−１１０）；抗生物質、例えばダクチノマイシン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、イダルビシン、アントラサイクリン、ミトキサントロン、ブレオマイシン、プリカマイシン（ミトラマイシン）並びに；Ｌ−アスパラギンを全身的に代謝しそれらの自身のアスパラギンを合成する能力をもたない細胞を取り除く酵素、例えばＬ−アスパラギナーゼ；抗血小板剤；Ｂｃｌ−２を標的とするＤＮＡｉオリゴヌクレオチド、例えばＰＮＴ２２５８；潜在性ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）を活性化または再活性化させる薬剤、例えばパノビノスタットまたはロミデプシン；アスパラギナーゼ刺激因子、例えばクリサンタスパーゼ（アーウィナーゼ（登録商標））及びＧＲＡＳＰＡ（ＥＲＹ−００１、ＥＲＹ−ＡＳＰ）；汎−Ｔｒｋ、ＲＯＳ１およびＡＬＫ阻害剤、例えばエントレクチニブ；未分化リンパ腫キナーゼ（ＡＬＫ）阻害剤、例えばアレクチニブ；抗増殖／抗有糸分裂アルキル化剤例えばナイトロジェンマスタードシクロホスファミドおよび類似体（メルファラン、クロラムブシル、ヘキサメチルメラミン、およびチオテパ）、アルキルニトロソウレア（カルムスチン）および類似体、ストレプトゾシンおよびトリアゼン（ダカルバジン）；抗増殖剤／抗有糸分裂代謝拮抗剤、例えば葉酸類似体（メトトレキサート）；白金配位錯体（シスプラチン、オキサリプラチン及びカルボプラチン）、プロカルバジン、ヒドロキシウレア、ミトタン及びアミノグルテチミド；ホルモン、ホルモン類似体（エストロゲン、タモキシフェン、ゴセレリン、ビカルタミド及びニルタミド）及びアロマターゼ阻害剤（レトロゾール及びアナストロゾール）；抗凝固剤、例えばヘパリン、合成ヘパリン塩及びトロンビンの他の阻害剤；血栓溶解剤、例えば組織プラスミノーゲン活性化因子、ストレプトキナーゼ、ウロキナーゼ、アスピリン、ジピリダモール、チクロピジン及びクロピドグレル；抗遊走剤；抗分泌剤（ブレフェルジン）；免疫抑制剤タクロリムス、シロリムス、アザチオプリン及びミコフェノラート；化合物（ＴＮＰ−４７０、ゲニステイン）及び成長因子阻害剤（血管内皮成長因子阻害剤、及び線維芽細胞成長因子阻害剤、例えばＦＰＡ１４；アンジオテンシン受容体遮断剤、酸化窒素供与体；アンチセンスオリゴヌクレオチド、例えばＡＥＧ３５１５６；ＤＮＡ干渉オリゴヌクレオチド、例えばＰＮＴ２２５８、ＡＺＤ−９１５０；抗体、例えばトラスツズマブ及びリツキシマブなど；抗ＨＥＲ３抗体、例えばＬＪＭ７１６  抗ＨＥＲ２抗体、例えばマルゲツキシマブ；抗ＨＬＡ−ＤＲ抗体、例えばＩＭＭＵ−１１４；抗ＩＬ−３抗体、例えばＪＮＪ−５６０２２４７３；抗ＯＸ４０抗体、例えばＭＥＤＩ６４６９；抗ＥｐｈＡ３抗体、例えばＫＢ−００４；抗ＣＤ２０抗体、例えばオビヌツズマブ；抗プログラム細胞死タンパク質１（抗ＰＤ−１）抗体、例えばニボルマブ（オプジーボ、ＢＭＳ−９３６５５８、ＭＤＸ−１１０６）、ペンブロリズマブ（ＫＥＹＴＲＵＤＡ、ＭＫ−３４７７、ＳＣＨ−９００４７５、ランブロリズマブ、ＣＡＳ登録番号１３７４８５３−９１−４）、ピディリズマブ及び抗プログラム死リガンド１（抗ＰＤ−Ｌ１）抗体、例えばＢＭＳ−９３６５５９、アテゾリズマブ（ＭＰＤＬ３２８０Ａ）、デュルバルマブ（ＭＥＤＩ４７３６）、アベルマブ（ＭＳＢ００１０７１８Ｃ）及びＭＤＸ１１０５−０１、ＣＸＣＲ４アンタゴニスト、例えばＢＬ−８０４０；ＣＸＣＲ２アンタゴニスト、例えばＡＺＤ−５０６９；ＧＭ−ＣＳＦ抗体、例えばレンジルマブ。選択的エストロゲン受容体ダウンレギュレータ（ＳＥＲＤ）、例えばフルベストラント（フェソロデックス）；トランスフォーミング成長因子ベータ（ＴＧＦ−ベータ）キナーゼアンタゴニスト、例えばガルニセルチブ；二重特異性抗体、例えばＭＭ−１４１（ＩＧＦ−１／ＥｒｂＢ３）、ＭＭ−１１１（Ｅｒｂ２／Ｅｒｂ３）、ＪＮＪ−６４０５２７８１（ＣＤ１９／ＣＤ３）。
変異体選択的ＥＧＦＲ阻害剤、例えばＰＦ−０６７４７７７５、ＥＧＦ８１６、ＡＳＰ８２７３、ＡＣＥＡ−００１０、ＢＩ−１４８２６９４。アルファ−ケトグルタル酸デヒドロゲナーゼ（ＫＧＤＨ）阻害剤、例えばＣＰＩ−６１３、ＸＰＯ１阻害剤、例えばセリネクサー（ＫＰＴ−３３０）。イソクエン酸デヒドロゲナーゼ２（ＩＤＨ２）阻害剤、例えばエナシデニブ（ＡＧ−２２１）並びにＩＤＨ１阻害剤、例えばＡＧ−１２０及びＡＧ−８８１（ＩＤＨ１及びＩＤＨ２）。インターロイキン−３受容体（ＩＬ−３Ｒ）を標的とする薬剤、例えばＳＬ−４０１。アルギニンデイミナーゼ刺激因子、例えばペガルギミナーゼ（ＡＤＩ−ＰＥＧ−２０）抗体−薬物コンジュゲート、例えばＭＬＮ０２６４（抗ＧＣＣ、グアニリルシクラーゼＣ）、Ｔ−ＤＭ１（トラスツズマブエムタンシン、カドサイラ）、ミラツズマブ−ドキソルビシン（ｈＣＤ７４−ＤＯＸ）、ブレンツキシマブベドチン、ＤＣＤＴ２９８０Ｓ、ポラツズマブベドチン、ＳＧＮ−ＣＤ７０Ａ、ＳＧＮ−ＣＤ１９Ａ、イノツズマブオゾガマイシン、ロルボツズマブメルタンシン、ＳＡＲ３４１９、イサクツズマブゴビテカン、抗クローディン−１８．２抗体、例えばＩＭＡＢ３６２、β−カテニン阻害剤、例えばＣＷＰ−２９１、ＣＤ７３アンタゴニスト、例えばＭＥＤＩ−９４４７；ｃ−ＰＩＭ阻害剤、例えばＰＩＭ４４７、ＢＲＡＦ阻害剤、例えばダブラフェニブ、ベムラフェニブ、スフィンゴシンキナーゼ−２（ＳＫ２）阻害剤、例えばＹｅｌｉｖａ。（ＡＢＣ２９４６４０）細胞周期阻害剤、例えばセルメチニブ（ＭＥＫ１／２）、サパシタビン、ＡＫＴ阻害剤、例えばＭＫ−２２０６、イパタセルチブ、アフレセルチブ、抗ＣＴＬＡ−４（細胞傷害性Ｔリンパ球タンパク質−４）阻害剤、例えばトレメリムマブ、ｃ−ＭＥＴ阻害剤、例えばＡＭＧ−３３７、サボリチニブ、チバンチニブ（ＡＲＱ−１９７）、カプマチニブ、テポチニブ、ＣＳＦ１Ｒ／ＫＩＴ及びＦＬＴ３の阻害剤、例えばＰＬＸ３３９７、キナーゼ阻害剤、例えばバンデタニブ；Ｅセレクチンアンタゴニスト、例えばＧＭＩ−１２７１、分化誘導物質、例えばトレチノイン；上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）阻害剤、例えばオシメルチニブ（ＡＺＤ−９２９１）、トポイソメラーゼ阻害剤（ドキソルビシン、ダウノルビシン、ダクチノマイシン、エニポシド、エピルビシン、エトポシド、イダルビシン、イリノテカン、ミトキサントロン、ピクサントロン、ソブゾキサン、トポテカン及びイリノテカン、ＭＭ−３９８（リポソームイリノテカン）、ボサロキシン並びにコルチコステロイド（コルチゾン、デキサメタゾン、ヒドロコルチゾン、メチルプレドニゾロン、プレドニゾン及びプレドニゾロン）；成長因子シグナル伝達キナーゼ阻害剤；機能障害誘導物質；ヌクレオシド類似体、例えばＤＦＰ−１０９１７、Ａｘｌ阻害剤、例えばＢＧＢ−３２４；ＢＥＴ阻害剤、例えばＩＮＣＢ−０５４３２９、ＰＡＲＰ阻害剤、例えばオラパリブ、ルカパリブ、ベリパリブ、プロテアソーム阻害剤、例えばイキサゾミブ、カルフィルゾミブ（カイプロリス）；グルタミナーゼ阻害剤、例えばＣＢ−８３９；ワクチン、例えばペプチドワクチンＴＧ−０１（ＲＡＳ）、細菌ベクターワクチン、例え���ＣＲＳ−２０７／ＧＶＡＸ、自己Ｇｐ９６ワクチン、樹状細胞ワクチン、Ｏｎｃｏｑｕｅｓｔ−Ｌワクチン、ＤＰＸ−Ｓｕｒｖｉｖａｃ、ＰｒｏｓｔＡｔａｋ、ＤＣＶＡＣ、ＡＤＸＳ３１−１４２、デムシズマブ（抗ＤＬＬ４、デルタ様リガンド４、Ｎｏｔｃｈ経路）、ナパブカシン（ＢＢＩ−６０８）、スムーズンド（ＳＭＯ）受容体阻害剤、例えばオドムゾ（登録商標）（ソニデギブ、以前はＬＤＥ−２２５）、ＬＥＱ５０６、ビスモデギブ（ＧＤＣ−０４４９）、ＢＭＳ−８３３９２３、グラスデギブ（ＰＦ−０４４４９９１３）、ＬＹ２９４０６８０及びイトラコナゾール；インターフェロンアルファリガンドモジュレータ、例えばインターフェロンアルファ−２ｂ、インターフェロンアルファ−２ａバイオシミラー（バイオジェノミクス）、ロペジンインターフェロンアルファ−２ｂ（ＡＯＰ−２０１４、Ｐ−１１０１、ＰＥＧ  ＩＦＮアルファ−２ｂ）、マルチフェロン（アルファナティブ（Ａｌｆａｎａｔｉｖｅ）、ビラゲン（Ｖｉｒａｇｅｎ））、インターフェロンアルファ１ｂ、ロフェロンＡ（キャンフェロン、Ｒｏ−２５−３０３６）、インターフェロンアルファ２ａフォローオン生物製剤（バイオシダス（Ｂｉｏｓｉｄｕｓ））（インムタグ（Ｉｎｍｕｔａｇ）、インター２Ａ（Ｉｎｔｅｒ  ２Ａ）），インターフェロンアルファ２ｂフォローオン生物製剤（バイオシダス（Ｂｉｏｓｉｄｕｓ）−バイオフェロン（Ｂｉｏｆｅｒｏｎ）、サイトフェロン（Ｃｉｔｏｐｈｅｒｏｎ）、ガナパー（Ｇａｎａｐａｒ））（Ｂｅｉｊｉｎｇ  Ｋａｗｉｎ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ−Ｋａｆｅｒｏｎ）（ＡＸＸＯ−インターフェロンアルファ−２ｂ）、アルファフェロン（Ａｌｆａｆｅｒｏｎｅ）、ＰＥＧ化インターフェロンアルファ−１ｂ、ＰＥＧインターフェロン−２ｂフォローオン生物製剤（Ａｍｅｇａ），組換ヒトインターフェロンアルファ−１ｂ、組換ヒトインターフェロンアルファ−２ａ、組換ヒトインターフェロンアルファ−２ｂ、ベルツズマブ−ＩＦＮアルファ２ｂコンジュゲート、ダイナバックス（ＳＤ−１０１）及びインターフェロンアルファ−ｎ１（フモフェロン、ＳＭ−１０５００、スミフェロン）；インターフェロンガンマリガンドモジュレータ、例えばインターフェロンガンマ（ＯＨ−６０００、Ｏｇａｍｍａ  １００）；ＩＬ−６受容体モジュレータ、例えばトシリズマブ、シルツキシマブ、ＡＳ−１０１（ＣＢ−０６−０２、ＩＶＸ−Ｑ−１０１）；テロメラーゼモジュレータ、例えばテルトモチド（ＧＶ−１００１、ＨＲ−２８０２、リアバックス（Ｒｉａｖａｘ））及びイメテルスタット（ＧＲＮ−１６３、ＪＮＪ−６３９３５９３７）、ＤＮＡメチルトランスフェラーゼ阻害剤、例えばテモゾロミド（ＣＣＲＧ−８１０４５）、デシタビン、グアデシタビン（Ｓ−１１０、ＳＧＩ−１１０）、ＫＲＸ−０４０２及びアザシチジン；ＤＮＡジャイレース阻害剤、例えばピクサントロン及びソブゾキサン；Ｂｃｌ−２ファミリタンパク質阻害剤ＡＢＴ−２６３、ベネトクラクス（ＡＢＴ−１９９）、ＡＢＴ−７３７及びＡＴ−１０１；ノッチ阻害剤、例えばＬＹ３０３９４７８、タレクツマブ（抗ノッチ２／３）、ＢＭＳ−９０６０２４、抗ミオスタチン阻害剤、例えばランドグロズマブ、ヒアルロニダーゼ刺激因子、例えばＰＥＧＰＨ−２０、Ｗｎｔ経路阻害剤、例えばＳＭ−０４７５５、ＰＲＩ−７２４、ガンマセクレターゼ阻害剤、例えばＰＦ−０３０８４０１４、ＩＤＯ阻害剤、例えばインドキシモド、Ｇｒｂ−２（成長因子受容体結合タンパク質−２）阻害剤ＢＰ１００１（リポソームＧｒｂ−２）、ＴＲＡＩＬ経路誘導化合物、例えばＯＮＣ２０１、接着斑キナーゼ阻害剤、例えばＶＳ−４７１８、デファクチニブ、ヘッジホッグ阻害剤、例えばサリデギブ、ソニデギブ（ＬＤＥ２２５）、グラスデギブ及びビスモデギブ、オーロラキナーゼ阻害剤、例えばアリセルチブ（ＭＬＮ−８２３７）、ＨＳＰＢ１活性のモジュレータ（熱ショックタンパク質２７、ＨＳＰ２７）、例えばブリブジン、アパトルセン、ＡＴＲ阻害剤、例えばＡＺＤ６７３８及びＶＸ−９７０、ｍＴＯＲ阻害剤、例えばサパニセルチブ、Ｈｓｐ９０阻害剤、例えばＡＵＹ９２２。マウスの二重微小染色体（ｍｄｍ２）癌遺伝子阻害剤例えばＤＳ−３０３２ｂ、ＣＤ１３７アゴニスト、例えばウレルマブ、抗ＫＩＲモノクローナル抗体、例えばリリルマブなど（ＩＰＨ−２１０２）。抗原ＣＤ１９阻害剤、例えばＭＯＲ２０８、ＭＥＤＩ−５５１、ＡＦＭ−１１、ＣＤ４４バインダ、例えばＡ６、ＣＹＰ１７阻害剤、例えばＶＴ−４６４、ＡＳＮ−００１、ＯＤＭ−２０４。ＲＸＲアゴニスト、例えばＩＲＸ４２０４、ＴＬＲ（Ｔｏｌｌ様受容体）アゴニスト、例えばＩＭＯ−８４００、Ａヘッジホッグ／スムーズンド（ｈｈ／Ｓｍｏ）アンタゴニスト、例えばタラデギブ。イムノモジュレータ、例えば補体Ｃ３モジュレータ、例えばインプライム（Ｉｍｐｒｉｍｅ）ＰＧＧ。腫瘍内（Ｉｎｔｒａｔｕｍｕｒａｌ）腫瘍免疫療法薬、例えばＧ１００（ＴＬＲ４アゴニスト）、ＩＬ−１５アゴニスト、例えばＡＬＴ−８０３、ＥＺＨ２（ｚｅｓｔｅホモログ２のエンハンサ）阻害剤、例えばタゼメトスタット。腫瘍溶解性ウイルス、例えばペラレオレプ及びタリモジーン・ラハーパレプベック。ＤＯＴ１Ｌ（ヒストンメチルトランスフェラーゼ）阻害剤、例えばピノメトスタット（ＥＰＺ−５６７６）、毒素、例えばコレラ毒素、リシン、シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）外毒素、百日咳菌（Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ  ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ）アデニラートシクラーゼ毒素、ジフテリア毒素及びカスパーゼ活性化因子；並びにクロマチン。ＤＮＡプラスミド、例えばＢＣ−８１９。ＰＬＫ１、２及び３のＰＬＫ阻害剤、例えばボラセルチブ（ＰＬＫ１）。アポトーシスシグナル調節キナーゼ（ＡＳＫ）阻害剤：ＡＳＫ阻害剤はＡＳＫ１阻害剤を含む。ＡＳＫ１阻害剤の例には、国際公開第２０１１／００８７０９号（ギリアド・サイエンシズ）及び国際公開第２０１３／１１２７４１号（ギリアド・サイエンシズ）に記載されているものが挙げられるが、これに限定されない。
ブルトン型チロシンキナーゼ（ＢＴＫ）阻害剤：ＢＴＫ阻害剤の例として、（Ｓ）−６−アミノ−９−（１−（ブト−２−イノイル）ピロリジン−３−イル）−７−（４−フェノキシフェニル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン、アカラブルチニブ（ＡＣＰ−１９６）、ＢＧＢ−３１１１、ＨＭ７１２２４、イブルチニブ、Ｍ−２９５１、ＯＮＯ−４０５９、ＰＲＮ−１００８、スペブルチニブ（ＣＣ−２９２）、ＴＡＫ−０２０が挙げられるが、これに限定されない。
サイクリン依存性キナーゼ（ＣＤＫ）阻害剤：ＣＤＫ阻害剤としては、ＣＤＫ  １、２、３、４、６及び９の阻害剤、例えばアベマシクリブ、アルボシジブ（ＨＭＲ−１２７５、フラボピリドール）、ＡＴ−７５１９、ＦＬＸ−９２５、ＬＥＥ００１、パルボシクリブ、リボシクリブ、リゴセルチブ、セリネクサー、ＵＣＮ−０１及びＴＧ−０２が挙げられる。ジスコイジンドメイン受容体（ＤＤＲ）阻害剤：ＤＤＲ阻害剤には、ＤＤＲ１及び／又はＤＤＲ２の阻害剤が含まれる。ＤＤＲ阻害剤の例としては、国際公開第２０１４／０４７６２４号（ギリアド・サイエンシズ）、米国特許出願公開第２００９−０１４２３４５号（武田薬品工業）、米国特許出願公開第２０１１−０２８７０１１号（オンコメッド・ファーマシューティカルズ）、国際公開第２０１３／０２７８０２号（中外製薬）及び国際公開第２０１３／０３４９３３号（インペリアル・イノベーションズ）に開示されているものが挙げられるが、これに限定されない。
ヒストンデアセチラーゼ（ＨＤＡＣ）阻害剤：ＨＤＡＣ阻害剤の例としては、アベキシノスタット、ＡＣＹ−２４１、ＡＲ−４２、ＢＥＢＴ−９０８、ベリノスタット、ＣＫＤ−５８１、ＣＳ−０５５（ＨＢＩ−８０００）、ＣＵＤＣ−９０７、エンチノスタット、ギビノスタット、モセチノスタット、パノビノスタット、プラシノスタット、キシノスタット（ＪＮＪ−２６４８１５８５）、レスミノスタット、リコリノスタット、ＳＨＰ−１４１、バルプロ酸（ＶＡＬ−００１）、ボリノスタットが挙げられるが、これに限定されない。
ヤヌスキナーゼ（ＪＡＫ）阻害剤：ＪＡＫ阻害剤は、ＪＡＫ１、ＪＡＫ２及び／又はＪＡＫ３を阻害する。ＪＡＫ阻害剤の例としては、ＡＴ９２８３、ＡＺＤ１４８０、バリシチニブ、ＢＭＳ−９１１５４３、フェドラチニブ、フィルゴチニブ（ＧＬＰＧ０６３４）、ガンドチニブ（ＬＹ２７８４５４４）、ＩＮＣＢ０３９１１０、レスタウルチニブ、モメロチニブ（ＣＹＴ０３８７）、ＮＳ−０１８、パクリチニブ（ＳＢ１５１８）、ペフィシチニブ（ＡＳＰ０１５Ｋ）、ルキソリチニブ、トファシチニブ（以前はタソシチニブ）及びＸＬ０１９が挙げられるが、これに限定されない。
リシルオキシダーゼ様タンパク質（ＬＯＸＬ）阻害剤：ＬＯＸＬ阻害剤には、ＬＯＸＬ１、ＬＯＸＬ２、ＬＯＸＬ３、ＬＯＸＬ４及び／又はＬＯＸＬ５の阻害剤が含まれる。ＬＯＸＬ阻害剤の例としては、国際公開第２００９／０１７８３３号（アレストバイオサイエンシズ（Ａｒｒｅｓｔｏ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ））に記載されている抗体が挙げられるが、これに限定されない。ＬＯＸＬ２阻害剤の例としては、国際公開第２００９／０１７８３３号（アレストバイオサイエンシズ（Ａｒｒｅｓｔｏ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ））、国際公開第２００９／０３５７９１号（アレストバイオサイエンシズ（Ａｒｒｅｓｔｏ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ））及び国際公開第２０１１／０９７５１３号（ギリアド・バイオロジックス（Ｇｉｌｅａｄ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃｓ））に記載されている抗体が含まれるが、これに限定されない。
マトリクスメタロプロテアーゼ（ＭＭＰ）阻害剤：ＭＭＰ阻害剤はＭＭＰ１〜１０の阻害剤を含む。ＭＭＰ９阻害剤の例としては、マリマスタット（ＢＢ−２５１６）、シペマスタット（Ｒｏ  ３２−３５５５）及び国際公開第２０１２／０２７７２１号（ギリアド・バイオロジックス（Ｇｉｌｅａｄ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃｓ））に記載されているものが挙げられるが、これに限定されない。
マイトジェン活性化プロテインキナーゼ（ＭＥＫ）阻害剤：ＭＥＫ阻害剤には、アントロキノノール、ビニメチニブ、コビメチニブ（ＧＤＣ−０９７３、ＸＬ−５１８）、ＭＴ−１４４、セルメチニブ（ＡＺＤ６２４４）、ソラフェニブ、トラメチニブ（ＧＳＫ１１２０２１２）、ウプロセルチブ＋トラメチニブが含まれる。
ホスファチジルイノシトール３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害剤：ＰＩ３Ｋ阻害剤には、ＰＩ３Ｋγ、ＰＩ３Ｋδ、ＰＩ３β、ＰＩ３Ｋα及び／又は汎ＰＩ３Ｋの阻害剤が含まれる。ＰＩ３Ｋ阻害剤の例としては、ＡＣＰ−３１９、ＡＥＺＡ−１２９、ＡＭＧ−３１９、ＡＳ２５２４２４、ＢＡＹ  １０８２４３９１、ＢＥＺ２３５、ブパルリシブ（ＢＫＭ１２０）、ＢＹＬ７１９（アルペリシブ）、ＣＨ５１３２７９９、コパンリシブ（ＢＡＹ  ８０−６９４６）、デュベリシブ、ＧＤＣ−０９４１、ＧＤＣ−０９８０、ＧＳＫ２６３６７７１、ＧＳＫ２２６９５５７、イデラリシブ（ザイデリグ（Ｚｙｄｅｌｉｇ）（登録商標））、ＩＰＩ−１４５、ＩＰＩ−４４３、ＫＡＲ４１４１、ＬＹ２９４００２、Ｌｙ−３０２３４１４、ＭＬＮ１１１７、ＯＸＹ１１１Ａ、ＰＡ７９９、ＰＸ−８６６、ＲＧ７６０４、リゴセルチブ、ＲＰ５０９０、タセリシブ、ＴＧ１００１１５、ＴＧＲ−１２０２、ＴＧＸ２２１、ＷＸ−０３７、Ｘ−３３９、Ｘ−４１４、ＸＬ１４７（ＳＡＲ２４５４０８）、ＸＬ４９９、ＸＬ７５６、ワートマニン、ＺＳＴＫ４７４並びに国際公開第２００５／１１３５５６号（ＩＣＯＳ）、国際公開第２０１３／０５２６９９号（ギリアド・カリストガ（Ｇｉｌｅａｄ  Ｃａｌｉｓｔｏｇａ））、国際公開第２０１３／１１６５６２号（ギリアド・カリストガ（Ｇｉｌｅａｄ  Ｃａｌｉｓｔｏｇａ））、国際公開第２０１４／１００７６５号（ギリアド・カリストガ（Ｇｉｌｅａｄ  Ｃａｌｉｓｔｏｇａ））、国際公開第２０１４／１００７６７号（ギリアド・カリストガ（Ｇｉｌｅａｄ  Ｃａｌｉｓｔｏｇａ））及び国際公開第２０１４／２０１４０９号（ギリアド・サイエンシズ（Ｇｉｌｅａｄ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ））に記載されている化合物が挙げられるが、これに限定されない。
脾臓チロシンキナーゼ（ＳＹＫ）阻害剤：ＳＹＫ阻害剤の例としては、６−（１Ｈ−インダゾール−６−イル）−Ｎ−（４−モルホリノフェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミン、ＢＡＹ−６１−３６０６、セルデュラチニブ（ＰＲＴ−０６２６０７）、エントスプレチニブ、フォスタマチニブ（Ｒ７８８）、ＨＭＰＬ−５２３、ＮＶＰ−ＱＡＢ  ２０５  ＡＡ、Ｒ１１２、Ｒ３４３、タマチニブ（Ｒ４０６）、並びに米国特許第８，４５０，３２１号に記載されているもの（ギリアド・コネチカット（Ｇｉｌｅａｄ  Ｃｏｎｎ．））及び米国特許出願公開第２０１５／０１７５６１６号に記載されているものが挙げられるが、これに限定されない。
チロシンキナーゼ阻害剤（ＴＫＩ）：ＴＫＩは、上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）並びに線維芽細胞成長因子（ＦＧＦ）、血小板由来成長因子（ＰＤＧＦ）及び血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）の受容体を標的とし得る。ＴＫＩの例としては、アファチニブ、ボスチニブ、ブリガチニブ、カボザンチニブ、クレノラニブ、ダコミチニブ、ダサチニブ、ドビチニブ、Ｅ−６２０１、エルロチニブ、ゲフィチニブ、ギルテリチニブ（ＡＳＰ−２２１５）、ＨＭ６１７１３、イコチニブ、イマチニブ、ＫＸ２−３９１（Ｓｒｃ）、ラパチニブ、レスタウルチニブ、ミドスタウリン、ニンテダニブ、オシメルチニブ（ＡＺＤ−９２９１）、ポナチニブ、ポジオチニブ、キザルチニブ、ラドチニブ、ロシレチニブ、スニチニブ及びＴＨ−４０００が挙げられるが、これに限定されない。
さらなる抗癌剤には、アルキル化剤、例えばチオテパ及びシクロホスファミド（シトキサン）；アルキルスルホナート、例えばブスルファン、インプロスルファン及びピポスルファン；アジリジン、例えばベンゾデパ、カルボクオン、メツレデパ及びウレデパ；アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホラアミド、トリエチレンチオホスホルアミド及びトリメチロールメラミンを含むエチレンイミン及びメチロールメラミン；アセトゲニン、特にブラタシン及びブラタシノン；合成類似体トポテカンを含むカンプトテシン；ブリオスタチン、カリスタチン；そのアドゼレシン、カルゼレシン及びビゼレシン合成類似体を含むＣＣ−１０６５；クリプトフィシン、特にクリプトフィシン１及びクリプトフィシン８；ドラスタチン；合成類似体ＫＷ−２１８９及びＣＢＩ−ＴＭＩを含むデュオカルマイシン；エリュテロビン；５−アザシチジン；パンクラチスタチン；サルコジクイチン；スポンジスタチン；ナイトロジェンマスタード、例えばクロラムブシル、クロルナファジン、シクロホスファミド、グルホスファミド、エボホスファミド、ベンダムスチン、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、メクロレタミンオキシドヒドロクロリド、メルファラン、ノベンビチン、フェネステリン、プレドニムスチン、トロホスファミド及びウラシルマスタード；ニトロソウレア、例えばカルムスチン、クロロゾトシン、フォレムスチン、ロムスチン、ニムスチン及びラニムスチン；抗生物質、例えばエンジイン抗生物質（例えばカリケアマイシン、特にカリケアマイシンガンマＩＩ及びカリケアマイシンｐｈｉＩ１）、ジネマイシンＡを含むジネマイシン、ビスホスホナート、例えばクロドロナート、エスペラミシン、ネオカルジノスタチンクロモフォア及び関連するクロモプロテインエンジイン抗生物質クロモフォア、アクラシノマイシン、アクチノマイシン、オースラマイシン、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カラビシン、カルミノマイシン、カルジノフィリン、クロモマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン、６−ジアゾ−５−オキソ−Ｌ−ノルロイシン、ドキソルビシン（モルホリノ−ドキソルビシン、シアノモルホリノ−ドキソルビシン、２−ピロリノ−ドキソルビシン及びデオキシドキソルビシンを含む）、エピルビシン、エソルビシン、イダルビシン、マルセロマイシン、マイトマイシン、例えばマイトマイシンＣ、ミコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン、ペプロマイシン、ポルフィロマイシン、ピューロマイシン、ケラマイシン、ロドルビシン、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメクス、ジノスタチン及びゾルビシン；代謝拮抗剤、例えばメトトレキサート及び５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）；葉酸類似体、例えばデモプテリン、メトトレキサート、プテロプテリン及びトリメトレキサート；プリン類似体、例えばフルダラビン、６−メルカプトプリン、チアミプリン及びチオグアニン；ピリミジン類似体、例えばアンシタビン、アザシチジン、６−アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン及びフロクスウリジン；アンドロゲン、例えばカルステロン、ドロモスタノロンプロピオナート、エピチオスタノール、メピチオスタン及びテストトラクトン；抗副腎剤（ａｎｔｉ−ａｄｒｅｎａｌ）、例えばアミノグルテチミド、ミトタン及びトリロスタン；葉酸補充剤、例えばフォリン酸；放射線治療薬、例えばラジウム−２２３；トリコテセン、特にＴ−２トキシン、ベラキュリンＡ、ロリジンＡ及びアンギジン；タキソイド、例えばパクリタキセル（タキソール）、アブラキサン、ドセタキセル（タキソテール）、カバジタキセル、ＢＩＮＤ−０１４；白金類似体、例えばシスプラチン及びカルボプラチン、ＮＣ−６００４ナノプラチン；アセグラトン；アルドホスファミドグリコシド；アミノレブリン酸；エニルウラシル；アムサクリン；ヘストラブシル；ビサントレン；エダトラキサート；デフォファミン；デメコルシン；ジアジコン；エルホルムチン（ｅｌｆｏｒｍｔｈｉｎｅ）；エリプチニウムアセタート；エポチロン；エトグルシド；ガリウムニトラート；ヒドロキシウレア；レンチナン；ロイコボリン；ロニダミン；メイタンシノイド、例えばメイタンシン及びアンサミトシン；ミトグアゾン；ミトキサントロン；モピダモール；ニトラクリン；ペントスタチン；フェナメット；ピラルビシン；ロソキサントロン；フルオロピリミジン；フォリン酸；ポドフィリン酸；２−エチルヒドラジド；プロカルバジン；多糖−Ｋ（ＰＳＫ）；ラゾキサン；リゾキシン；シゾフィラン；スピロゲルマニウム；テヌアゾン酸；トラベクテジン、トリアジコン；２，２’，２’’−トリクロロエミルアミン；ウレタン；ビンデシン；ダカルバジン；マンノムスチン；ミトブロニトール；ミトラクトール；ピポブロマン；ガシトシン；アラビノシド（「Ａｒａ−Ｃ」）；シクロホスファミド；チオテパ；クロラムブシル；ゲムシタビン）（ジェムザール（登録商標））；６−チオグアニン；メルカプトプリン；メトトレキサート；ビンブラスチン；白金；エトポシド（ＶＰ−１６）；イホスファミド；ミトキサントロン；バンクリスチン；ビノレルビン（ナベルビン（登録商標））；ノバントロン；テニポシド；エダトレキサート；ダウノマイシン；アミノプテリン；ゼローダ；イバンドロナート；ＣＰＴ−１１；トポイソメラーゼ阻害剤ＲＦＳ２０００；ジフルオロメチルオルニチン（ＤＦＭＯ）；レチノイド、例えばレチノイン酸；カペシタビン；ＦＯＬＦＩＲＩ（フルオロウラシル、ロイコボリン及びイリノテカン）；並びに上記のいずれかの薬学的に許容される塩、酸又は誘導体が含まれる。
【０１４０】
抗癌剤の定義には、抗ホルモン剤、例えば抗エストロゲン及び選択的エストロゲン受容体モジュレータ（ＳＥＲＭ）、酵素アロマターゼの阻害剤、抗アンドロゲン及び腫瘍に対するホルモン作用を制御又は阻害する上記のいずれかの薬学的に許容される塩、酸又は誘導体も含まれる。抗エストロゲン及びＳＥＲＭの例としては、例えばタモキシフェン（ノルバデックスを含む）、ラロキシフェン、ドロロキシフェン、４−ヒドロキシタモキシフェン、トリオキシフェン、ケオキシフェン、ＬＹ１１７０１８、オナプリストン及びトレミフェン）（フェアストン）が挙げられる。酵素アロマターゼの阻害剤は、副腎におけるエストロゲン産生を調節する。例としては、４（５）−イミダゾール、アミノグルテチミド、メゲストロールアセタート）（メゲース）、エキセメスタン、フォルメスタン、ファドロゾール、ボロゾール）（ＲＩＶＩＳＯＲ）、レトロゾール）（フェマーラ）及びアナストロゾール）（アリミデックス）が挙げられる。抗アンドロゲンの例としては、アパルタミド、アビラテロン、エンザルタミド、フルタミド、ガレテロン、ニルタミド、ビカルタミド、ロイプロリド、ゴセレリン、ＯＤＭ−２０１、ＡＰＣ−１００、ＯＤＭ−２０４が挙げられる。プロゲステロン受容体アンタゴニストの例には、オナプリストンが含まれる。
【０１４１】
抗血管新生剤としては、レチノイド酸及びその誘導体、２−メトキシエストラジオール、アンジオスタチン、エンドスタチン、レゴラフェニブ、ネクパラニブ、スラミン、スクアラミン、メタロプロテイナーゼ−１の組織阻害剤、メタロプロテイナーゼ−２の組織阻害剤、プラスミノーゲン活性化因子阻害剤−１、プラスミノーゲン活性化因子阻害剤−２、軟骨由来阻害剤、パクリタキセル（ｎａｂ−パクリタキセル）、血小板因子４、プロタミンスルファート（クルペイン）、硫酸化キチン誘導体（クィーンクラブシェルから調製）、硫酸化多糖ペプチドグリカン複合体（ｓｐ−ｐｇ）、スタウロスポリン、プロリン類似体を含むマトリクス代謝のモジュレータ、例えば１−アゼチジン−２−カルボン酸（ＬＡＣＡ）、シスヒドロキシプロリン、ｄ，Ｉ−３，４−デヒドロプロリン、チアプロリン、α，α’−ジピリジル、ベータ−アミノプロピオニトリルフマラート、４−プロピル−５−（４−ピリジニル）−２（３ｈ）−オキサゾロン、メトトレキサート、ミトキサントロン、ヘパリン、インターフェロン、２マクログロブリン血清、メタロプロテイナーゼ−３のニワトリ阻害剤（ＣｈＩＭＰ−３）、キモスタチン、ベータ−シクロデキストリンテトラデカスルファート、エポネマイシン、フマギリン、金ナトリウムチオマレアート、ｄ−ペニシラミン、ベータ−１−アンチコラゲナーゼ血清、アルファ−２−抗プラスミン、ビサントレン、ロベンザリット二ナトリウム、ｎ−２−カルボキシフェニル−４−クロロアントニル酸二ナトリウム、即ち「ＣＣＡ」、サリドマイド、血管新生抑制ステロイド、カルボキシアミノイミダゾール、メタロプロテイナーゼ阻害剤、例えばＢＢ−９４、Ｓ１００Ａ９の阻害剤、例えばタスキニモドが挙げられるが、これに限定されない。他の抗血管新生剤としては、抗体、好ましくはこれらの血管新生成長因子に対するモノクローナル抗体：ベータ−ＦＧＦ、アルファ−ＦＧＦ、ＦＧＦ−５、ＶＥＧＦアイソフォーム、ＶＥＧＦ−Ｃ、ＨＧＦ／ＳＦ及びＡｎｇ−１／Ａｎｇ−２が挙げられる。
【０１４２】
抗線維化剤としては、ベータアミノプロピオニトリル（ＢＡＰＮ）などの化合物、並びに参照により本明細書に組み入れられている、リシルオキシダーゼの阻害剤及びコラーゲンの異常沈着を伴う疾患及び状態の処置におけるその使用に関連する米国特許第４，９６５，２８８号並びに様々な病理学的線維化状態の処置のためのＬＯＸを阻害する化合物に関連した米国特許第４，９９７，８５４号に開示されている化合物が挙げられるが、これに限定されない。さらなる例示的な阻害剤は、参照により本明細書に組み入れられている、２−イソブチル−３−フルオロ−、クロロ−又はブロモ−アリルアミンなどの化合物に関連する米国特許第４，９４３，５９３号、米国特許第５，０２１，４５６号、米国特許第５，０５９，７１４号、米国特許第５，１２０，７６４号、米国特許第５，１８２，２９７号、２−（１−ナフチルオキシメミル）−３−フルオロアリルアミンに関連する米国特許第５，２５２，６０８号及び米国特許出願公開第２００４−０２４８８７１号に記載されている。
【０１４３】
例示的な抗線維化剤としては、リジルオキシダーゼの活性部位のカルボニル基と反応する第一級アミン、より詳細には、カルボニルと結合した後に共鳴によって安定化された生成物、例えば以下の第一級アミン：エミレンマミン（ｅｍｙｌｅｎｅｍａｍｉｎｅ）、ヒドラジン、フェニルヒドラジン及びそれらの誘導体；セミカルバジド及び尿素誘導体；アミノニトリル、例えばＢＡＰＮ又は２−ニトロエチルアミン；不飽和又は飽和ハロアミン、例えば２−ブロモ−エチルアミン、２−クロロエチルアミン、２−トリフルオロエチルアミン、３−ブロモプロピルアミン及びｐ−ハロベンジルアミン；並びにセレノホモシステインラクトンを生成するものも挙げられる。
【０１４４】
他の抗線維化剤は、細胞に浸透する又は浸透しない銅キレート剤である。例示的な化合物には、リシルオキシダーゼによる、リシル及びヒドロキシリシル残基の酸化的脱アミノ化に由来するアルデヒド誘導体を遮断する間接的阻害剤が含まれる。例としては、チオールアミン、特にＤ−ペニシラミン及びその類似体、例えば２−アミノ−５−メルカプト−５−メチルヘキサン酸、Ｄ−２−アミノ−３−メチル−３−（（２−アセトアミドエチル）ジチオ）ブタン酸、ｐ−２−アミノ−３−メチル−３−（（２−アミノエチル）ジチオ）ブタン酸、ナトリウム−４−（（ｐ−１−ジメチル−２−アミノ−２−カルボキシエチル）ジチオ）ブタンスルフラート（ｓｕｌｐｈｕｒａｔｅ）、２−アセトアミドエチル−２−アセトアミドエタンチオールスルファナート（ｓｕｌｐｈａｎａｔｅ）及びナトリウム−４−メルカプトブタンスルフィナート三水和物が挙げられる。
【０１４５】
免疫療法剤には、患者の処置に好適な治療用抗体が含まれるが、これに限定されない。治療用抗体のいくつかの例としては、シムツズマブ（ｓｉｍｔｕｚｕｍａｂ）、アバゴボマブ、アデカツムマブ（ａｄｅｃａｔｕｍｕｍａｂ）、アフツズマブ、アレムツズマブ、アルツモマブ（ａｌｔｕｍｏｍａｂ）、アマツキシマブ、アナツモマブ（ａｎａｔｕｍｏｍａｂ）、アルシツモマブ、バビツキシマブ、ベクツモマブ（ｂｅｃｔｕｍｏｍａｂ）、ベバシズマブ、ビバツズマブ（ｂｉｖａｔｕｚｕｍａｂ）、ブリナツモマブ、ブレンツキシマブ、カンツズマブ、カツマキソマブ、セツキシマブ、シタツズマブ（ｃｉｔａｔｕｚｕｍａｂ）、シクツムマブ、クリバツズマブ、コナツムマブ、ダラツムマブ、ドロジツマブ、ドゥリゴツマブ（ｄｕｌｉｇｏｔｕｍａｂ）、ドゥシギツマブ、デツモマブ（ｄｅｔｕｍｏｍａｂ）、ダセツズマブ、ダロツズマブ、ジヌツキシマブ、エクロメキシマブ、エロツズマブ、エミベツズマブ、エンシツキシマブ、エルツマキソマブ（ｅｒｔｕｍａｘｏｍａｂ）、エタラシズマブ、ファルレツズマブ、フィクラツズマブ、フィギツムマブ、フランボツマブ、フツキシマブ（ｆｕｔｕｘｉｍａｂ）、ガニツマブ、ゲムツズマブ、ギレンツキシマブ、グレムバツムマブ（ｇｌｅｍｂａｔｕｍｕｍａｂ）、イブリツモマブ、イゴボマブ（ｉｇｏｖｏｍａｂ）、イムガツズマブ、インダツキシマブ（ｉｎｄａｔｕｘｉｍａｂ）、イノツズマブ、インテツムマブ、イピリムマブ（ヤーボイ（ＹＥＲＶＯＹ）、ＭＤＸ−０１０、ＢＭＳ−７３４０１６及びＭＤＸ−１０１）、イラツムマブ、ラベツズマブ、レクサツムマブ、リンツズマブ、ロルボツズマブ（ｌｏｒｖｏｔｕｚｕｍａｂ）、ルカツムマブ、マパツズマブ、マツズマブ、ミラツズマブ、ミンレツモマブ（ｍｉｎｒｅｔｕｍｏｍａｂ）、ミツモマブ、モガムリズマブ、モキセツモマブ、パスドトクス、ナルナツマブ、ナプツモマブ、ネシツムマブ、ニモツズマブ、ノフェツモマブ、オビヌツズマブ、オカラツズマブ、オファツムマブ、オララツマブ、オナルツズマブ、オポルツズマブ（ｏｐｏｒｔｕｚｕｍａｂ）、オレゴボマブ、パニツムマブ、パルサツズマブ、パトリツマブ、ペムツモマブ（ｐｅｍｔｕｍｏｍａｂ）、ペルツズマブ、ピンツモマブ（ｐｉｎｔｕｍｏｍａｂ）、プリツムマブ、ラコツモマブ、ラドレツマブ（ｒａｄｒｅｔｕｍａｂ）、ラムシルマブ（サイラムザ（登録商標））、リロツムマブ、リツキシマブ、ロバツムマブ（ｒｏｂａｔｕｍｕｍａｂ）、サマリズマブ、サツモマブ、シブロツズマブ（ｓｉｂｒｏｔｕｚｕｍａｂ）、シルツキシマブ、ソリトマブ（ｓｏｌｉｔｏｍａｂ）、タカツズマブ（ｔａｃａｔｕｚｕｍａｂ）、タプリツモマブ（ｔａｐｌｉｔｕｍｏｍａｂ）、テナツモマブ（ｔｅｎａｔｕｍｏｍａｂ）、テプロツムマブ、チガツズマブ（ｔｉｇａｔｕｚｕｍａｂ）、トシツモマブ、トラスツズマブ、ＡＢＰ−９８０、ツコツズマブ（ｔｕｃｏｔｕｚｕｍａｂ）、ウブリツキシマブ、ベルツズマブ、ボルセツズマブ、ボツムマブ、ザルツムマブ、ＣＣ４９、ＯＢＩ−８３３及び３Ｆ８が挙げられる。リツキシマブは、辺縁帯リンパ腫、ＷＭ、ＣＬＬ、小リンパ球性リンパ腫を含む緩慢性Ｂ細胞癌の処置に使用できる。リツキシマブと化学療法剤の組合せは特に有効である。
【０１４６】
例示された治療用抗体は、インジウム−１１１、イットリウム９０（９０Ｙ−クリバツズマブ）又はヨウ素１３１などの放射性同位体粒子でさらに標識化され得るか、又はそれと組合せられ得る。
【０１４７】
１０．使用例
本発明の方法は、多数の用途を有するナノ粒子及びマイクロ粒子を製造するために使用することができる。
【０１４８】
好ましくは、ナノ粒子及びマイクロ粒子は、それを必要とする対象における疾患若しくは状態を処置する方法、又はそれを必要とする対象における疾患若しくは状態の期間若しくは重症度を軽減する方法であって、疾患又は状態が負の表面電荷を有する（又は任意で特定のＡＰＩを有する）マイクロ粒子又はナノ粒子によって処置可能であり、マイクロ粒子若しくはナノ粒子を含む組成物又は医薬組成物を対象に投与し、これにより疾患又は状態を処置することを含む、方法で使用することができる。
【０１４９】
関連する態様において、本発明は、それを必要とする対象、好ましくは哺乳動物、より好ましくはヒトにおいて免疫応答を制御する方法であって、マイクロ粒子若しくはナノ粒子を含む組成物又は医薬組成物を対象に投与し、これにより免疫応答を制御する方法を提供する。本発明によって提供される免疫制御の方法は、これに限定されるわけではないが、免疫刺激ポリペプチド又はウイルス若しくは細菌成分によって刺激される免疫応答を含む、先天性免疫応答又は適応免疫応答を抑制及び／又は阻害する方法を含む。主題の粒子は、免疫応答を調節するのに十分な量で投与される。本明細書に記載するように、免疫応答の制御は体液性及び／又は細胞性であり得て、当分野における標準的な技術を使用して本明細書に記載するように測定される。
【０１５０】
好ましくは、疾患又は状態は炎症性免疫応答によって特徴付けることができる。
【０１５１】
処置可能な疾患又は状態には、自己免疫疾患、例えば多発性硬化症、強皮症、Ｉ型糖尿病、関節リウマチ、甲状腺炎、全身性エリテマトーデス、レイノー症候群、シェーグレン（Ｓｊｏｒｇｅｎ）症候群、自己免疫性ブドウ膜炎、自己免疫性心筋炎又はクローン病が含まれるが、これに限定されない。好ましくは、自己免疫疾患は多発性硬化症である。自己免疫疾患又は炎症性疾患を有する個体は、既存の自己免疫疾患又は炎症性疾患の認識可能な症状を有する個体である。
【０１５２】
自己免疫疾患は、臓器特異的及び全身性という、２つの大きな種類に分けることができる。自己免疫疾患としては、限定されないが、関節リウマチ（ＲＡ）、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、Ｉ型糖尿病、ＩＩ型糖尿病、多発性硬化症（ＭＳ）、早発卵巣不全などの免疫性不妊症、強皮症、シェーグレン病、白斑、脱毛症（禿頭症）、多腺性不全、バセドウ病、甲状腺機能低下症、多発性筋炎、尋常性天疱瘡、落葉状天疱瘡、クローン病及び潰瘍性大腸炎を含む炎症性腸疾患、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）及びＣ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）と関連付けられるものを含む自己免疫肝炎、下垂体機能低下症、移植片対宿主疾患（ＧｖＨＤ）、心筋炎、アジソン病、自己免疫皮膚疾患、ブドウ膜炎、悪性貧血並びに副甲状腺機能低下症が挙げられる。
【０１５３】
自己免疫疾患としてはまた、限定されないが、橋本甲状腺炎、Ｉ型及びＩＩ型自己免疫多腺性症候群、腫瘍随伴性天疱瘡、水疱性類天疱瘡、疱疹状皮膚炎、線状ＩｇＡ病、後天性表皮水疱症、結節性紅斑、妊娠性類天疱瘡、瘢痕性類天疱瘡、本態性混合型クリオグロブリン血症、小児慢性水疱性疾患、溶血性貧血、血小板減少性紫斑病、グッドパスチャー症候群、自己免疫性好中球減少症、重症筋無力症、イートン・ランバート筋無力症症候群、スティフマン症候群、急性播種性脳脊髄炎、ギラン・バレー症候群、慢性炎症性脱髄性多発ニューロパチー、伝導ブロックを伴う多巣性運動ニューロパチー、単クローン性グロブリン血症を伴う慢性ニューロパチー、オプソクローヌス・ミオクローヌス症候群、小脳変性症、脳脊髄炎、網膜症、原発性胆管硬化症、硬化性胆管炎、グルテン過敏性腸疾患、強直性脊椎炎、反応性関節炎、多発性筋炎／皮膚筋炎、混合性結合組織疾患、ベチェット症候群、乾癬、結節性多発動脈炎、アレルギー性脈管炎及び肉芽腫症（チャーグ・ストラウス病）、多発性血管炎重複症候群、過敏性血管炎、ウェーゲナー肉芽腫症、側頭動脈炎、高安動脈炎、川崎病、中枢神経系の孤立性血管炎、閉塞性血栓血管炎、サルコイドーシス、糸球体腎炎並びに寒冷症が挙げられ得る。これらの症状は、医学分野で周知であり、例えばＨａｒｒｉｓｏｎ’ｓ  Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｏｆ  Ｉｎｔｅｒｎａｌ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，１４ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｆａｕｃｉ，Ａ．Ｓ．ｅｔ  ａｌ．，Ｅｄｓ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ：ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ，１９９８に記載されている。
【０１５４】
好ましくは、疾患又は状態としては、アレルギー性障害又は状態、例えばアレルギー性疾患、アレルギー、湿疹、喘息、アレルギー性鼻炎又は皮膚過敏症が挙げられる。アレルギー性疾患又は喘息を有する個体は、既存のアレルギー性疾患又は喘息の認識可能な症状を有する個体である。
【０１５５】
好ましくは、疾患又は状態は細菌感染又はウイルス感染を含む。細菌又はウイルス感染を有する個体は、既存の細菌又はウイルス感染の認識可能な症状を有する個体である。
【０１５６】
好ましくは、対象はウイルス感染症を有する。好ましくは、ウイルス感染症は、ヘルペスウイルス感染症、肝炎ウイルス感染症、西ナイルウイルス感染症、フラビウイルス、インフルエンザ感染症、ライノウイルス感染症、パピローマウイルス感染症、パラミクソウイルス感染症又はパラインフルエンザウイルス感染症である。好ましくは、ウイルス感染症は前記対象の中枢神経系に感染する。好ましくは、ウイルス感染症はウイルス性脳炎又はウイルス性髄膜炎を引き起こす。
【０１５７】
好ましくは、対象は細菌感染症を有する。本発明の主題の粒子によって処置可能な細菌感染症の非限定的なリストには、ブドウ球菌感染症、連鎖球菌感染症、マイコバクテリア感染症、バチルス感染症、サルモネラ感染症、ビブリオ感染症、スピロヘータ感染症及びナイセリア感染症が含まれる。対象の中枢神経系に感染する細菌が好ましい。脳炎又は髄膜炎を引き起こす細菌が最も好ましい。
【０１５８】
好ましくは、本発明の方法は、細菌感染症又はウイルス感染症を有する対象に投与された場合に免疫寛容を誘導する。好ましくは、この方法は、細菌感染症又はウイルス感染症を有する対象に投与された場合に炎症性免疫応答を改善又は軽減する。
【０１５９】
好ましくは、対象は移植レシピエントである。移植とは、ドナー個体からレシピエント個体への組織サンプル又は移植片の移植を示し、組織によって提供される生理学的機能を回復するために組織を必要とするヒトレシピエントに対してよく行われる。移植される組織としては、全臓器、例えば腎臓、肝臓、心臓、肺；臓器構成要素、例えば皮膚移植片及び眼の角膜；並びに細胞懸濁液、例えば骨髄細胞及び骨髄又は循環血液から選択及び増殖された細胞の培養物、並びに全血輸血が挙げられる（が、これに限定されない）。
【０１６０】
任意の移植の重篤な潜在的合併症は、宿主のレシピエントと生着した組織との間の抗原の相違から生じる。相違の性質及び程度に応じて、宿主による移植片の、又は移植片による宿主の免疫学的攻撃、又はその両方のリスクがあり得る。リスクの程度は、同様の表現型を有し、同様に処置された対象の集団における反応パターンを追跡し、十分に受け入れられている臨床手順に従って考えられる各種の寄与因子を相関させることにより求められる。免疫学的攻撃は、既存の免疫応答（事前に形成された抗体など）の又はほぼ移植時に開始されたもの（ＴＨ細胞の生成など）の結果であり得る。抗体、Ｔヘルパー（ＴＨ）細胞又は細胞傷害性Ｔ（Ｔｃ）細胞は、相互との、及び各種のエフェクター分子や細胞との任意の組合せで関与し得る。しかし、免疫応答に関与する抗原は一般に既知でなく、したがって抗原特異的療法の設計又は抗原特異的寛容の誘導に困難がもたらされる。本発明の修飾粒子が臓器拒絶反応の予防に特に有用であるのは、粒子が寛容の誘導又は炎症性免疫応答の改善に有効であるために、結合したペプチド又は抗原を修飾粒子にコンジュゲートさせる必要がないためである。
【０１６１】
好ましくは、本発明は、レシピエントによる組織移植片の拒絶につながる、宿主対移植片病のリスクを低減させることに関する。超急性、急性又は慢性の拒絶反応の影響を予防又は軽減するために処置が実施され得る。処置は、移植片の設置時に、寛容の準備が整うように、移植の十分に事前に優先的に開始されるが、これが可能ではない場合、処置は、移植と同時に又はその後に開始することができる。開始の時間にかかわらず、処置は一般に、移植後の少なくとも最初の１ヶ月間は一定の間隔で継続する。移植片の十分な順応が生じる場合、追跡の投薬は不要であり得るが、移植片の拒絶又は炎症の何らかの証拠が存在する場合、再開することができる。もちろん、本発明の寛容化手順は、さらに低いレベルのリスクを達成するために、他の形態の免疫抑制と組合せることができる。
【０１６２】
好ましくは、疾患又は状態は、望ましくない免疫活性化、例えばアテローム性動脈硬化症、虚血性再灌流障害及び心筋梗塞などを含む。
【０１６３】
好ましくは、本発明は、望ましくない過敏症に関する病理学的状態の処置に関する。過敏症は、Ｉ型、ＩＩ型、ＩＩＩ型及びＩＶ型、即時型（Ｉ型）過敏症のうちのいずれか１つであることができる。投与頻度は、通例、アレルゲン曝露のタイミングと一致する。好適な動物モデルは当分野で公知である（例えばＧｕｎｄｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｍ．Ｒｅｖ．Ｒｅｓｐｉｒ．Ｄｉｓ．，１４６：３６９，１９９２，Ｗａｄａ  ｅｔ  ａｌ，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，３９：２０５５，１９９６；及び国際公開第９６／３５４１８号）。
【０１６４】
好ましくは、処置可能な疾患又は状態としては、炎症性単球、自己免疫によって引き起こされたもの、心血管疾患（例えば心虚血又は心筋梗塞及び移植後の虚血再灌流障害）、ウイルス性脳炎、多発性硬化症（ＭＳ）、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、腹膜炎、致死性フラビウイルス脳炎、免疫病理学的ウイルス感染（インフルエンザ及び西ナイルウイルス（ＷＮＶ）を含む）、関節リウマチ、ＨＩＶ脳炎、慢性肝疾患、アテローム性動脈硬化症、心筋梗塞、実験的自己免疫性脳脊髄炎（ＥＡＥ）及びその対応する疾患、大腸炎、潰瘍性大腸炎などが挙げられる。
【０１６５】
請求された発明における好ましい使用条件は、癌を処置することである。本明細書において処置される患者及び癌としては、バーキットリンパ腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、緩慢性非ホジキンリンパ腫（ｉＮＨＬ）、難治性ｉＮＨＬ、多発性骨髄腫（ＭＭ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、Ｂ細胞ＡＬＬ、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、骨髄増殖性疾患（ＭＰＤ）、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）、濾胞性リンパ腫（ＦＬ）、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症（ＷＭ）、Ｔ細胞リンパ腫、Ｂ細胞リンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）又は辺縁帯リンパ腫（ＭＺＬ）が挙げられる。一実施形態において、癌は微小残存病変（ＭＲＤ）である。追加の実施形態において、癌は、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、緩慢性非ホジキンリンパ腫（ｉＮＨＬ）及び難治性ｉＮＨＬから選択される。ある実施形態において、癌は緩慢性非ホジキンリンパ腫（ｉＮＨＬ）である。いくつかの実施形態において、癌は難治性ｉＮＨＬである。一実施形態において、癌は慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）である。他の実施形態において、癌はびまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）である。
【０１６６】
ある実施形態において、癌は固形腫瘍であり、膵臓癌；膀胱癌；結腸直腸癌；転移性乳癌を含む乳癌；アンドロゲン依存性及びアンドロゲン非依存性前立腺癌を含む前立腺癌；例えば転移性腎細胞癌を含む腎臓又は腎癌；肝細胞癌；例えば非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、細気管支肺胞癌（ＢＡＣ）及び肺腺癌を含む肺癌；例えば進行性上皮癌又は原発性腹膜癌を含む卵巣癌；子宮頸癌；胃癌；食道癌；例えば頭頸部扁平上皮癌を含む頭頸部癌；黒色腫；転移性神経内分泌腫瘍を含む神経内分泌癌；例えば神経膠腫、退形成性乏突起神経膠腫、成人多形性膠芽腫及び成人退形成性星状細胞腫を含む脳腫瘍；骨癌；並びに軟部組織肉腫、肝癌、直腸癌、陰茎癌、外陰部癌、甲状腺癌、唾液腺癌、子宮内膜癌又は子宮癌、肝細胞癌、肝臓癌、消化器を含む胃癌（ｇａｓｔｒｉｃ  ｏｒ  ｓｔｏｍａｃｈ  ｃａｎｃｅｒ）、腹膜癌、肺扁平上皮癌、胃食道癌、胆道癌、胆嚢癌、結腸直腸／虫垂癌、扁平上皮癌（例えば上皮扁平上皮癌）からなる群から選択される。
【０１６７】
提供される処置方法のいずれも、様々な病期で癌を処置するために使用することができる。例として、癌病期には、早期、進行期、局所進行期、寛解、難治性、寛解後の再発及び進行性が含まれるが、これに限定されない。
【０１６８】
好ましくは、本発明のマイクロ粒子又はナノ粒子（例えば、本発明の方法で製造されたもの）は、処置可能な状態のいずれか１つを処置するのに有効な第２の治療薬と組合せて使用することができる。
【０１６９】
好ましくは、対象はヒト患者である。好ましくは、対象は、非ヒト哺乳動物、例えば非ヒト霊長類、家畜動物（ウマ、ラバ、ウシ、オウシ、メウシ、ヒツジ、ヤギ、ブタ、ラクダなど）、齧歯動物（ウサギ、ハムスター、マウス、ラットなど）又はペット（猫、犬）である。
【０１７０】
好ましくは、方法は、任意の好適な手段又は経路、例えば経口、経鼻、静脈内、筋肉内、眼内、経皮、皮下、腫瘍内、膀胱内、関節腔内、頭蓋内及び腹腔内によって、主題のマイクロ粒子又はナノ粒子（例えばカルボキシル化粒子）を含む主題の組成物又は医薬組成物を対象に投与することを含む。
【０１７１】
好ましくは、約１０２〜約１０２０個の粒子が個体に与えられる。好ましくは、約１０３〜約１０１５個の粒子が与えられる。好ましくは、約１０６〜約１０１２個の粒子が与えられる。好ましくは、約１０８〜約１０１０の粒子が与えられる。好ましくは、好ましい用量は０．１％固形分／ｍｌである。したがって、０．５μｍビーズでは、好ましい用量は約４×１０９ビーズであり、０．０５μｍビーズでは、好ましい用量は約４×１０１２ビーズであり、３μｍビーズでは、好ましい用量は２×１０７ビーズである。しかし、処置されるべき特定の状態を処置するのに有効である用量が本発明に含まれる。
【０１７２】
好ましくは、主題のマイクロ粒子又はナノ粒子（例えばカルボキシル化粒子）を含有する主題の組成物又は主題の医薬組成物は、それを必要とする対象への投与時に免疫寛容を誘導する。
【０１７３】
好ましくは、主題のマイクロ粒子又はナノ粒子（例えばカルボキシル化粒子）を含有する主題の組成物又は主題の医薬組成物は、それを必要とする対象への投与時に炎症性免疫応答を改善する。
１１．効能試験
【０１７４】
処置可能な疾患及び状態に対する主題のマイクロ粒子及びナノ粒子の有効性は、好適な動物モデルを含めた、いくつかの有効性試験を使用して試験することができる。
【０１７５】
寛容原性活性の代用は、標的部位で適切なサイトカインの産生を刺激する粒子の能力である。標的部位でＴサプレッサ細胞によって放出される免疫制御性サイトカインはＴＧＦ−βであると考えられる（Ｍｉｌｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８９：４２１，１９９２）。寛容中に産生され得る他の因子は、サイトカインＩＬ−４及びＩＬ−１０並びに媒介物質ＰＧＥである。対照的に、活発な免疫破壊を受けている組織中のリンパ球は、ＩＬ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−６及びＩＦＮγなどのサイトカインを分泌する。したがって、対象粒子の有効性は、適切な種類のサイトカインを刺激するその能力を測定することによって評価することができる。
【０１７６】
例えば、対象粒子、有効な粘膜結合成分、有効な組合せ又は粘膜投与の有効な様式及びスケジュールの迅速なスクリーニング試験を、動物モデル系を使用して実施することができる。動物は粘膜表面で試験粒子組成物によって処置され、ある時点で疾患を引き起こす抗原又は感染性因子の投与によって攻撃される。脾臓細胞を単離し、約５０μｇ／ｍＬの濃度の、疾患を引き起こす抗原又は感染性因子に由来する抗原の存在下にて、インビトロで培養する。培地中へのサイトカイン分泌は標準的なイムノアッセイにより定量化することができる。
【０１７７】
対象粒子が細胞の活性を抑制する能力は、修飾粒子で免疫付与した動物から単離した細胞を使用して、又は疾患を引き起こす抗原若しくはウイルス抗原標的抗原に応答性である細胞株を作製することによって決定することができる（Ｂｅｎ−Ｎｕｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１１１９５，１９８１）。この実験の一変形形態では、サプレッサ細胞集団に軽度に放射線照射して（約１０００〜１２５０ラド）増殖を防止し、サプレッサをレスポンダ細胞と共培養し、その後、トリチウム化チミジン取込み（又はＭＴＴ）を使用して、レスポンダの増殖活性を定量化する。別の変形では、サプレッサ細胞集団及びレスポンダ細胞集団を、ポリカーボナート膜によって分離された、細胞集団が相互の１ｍｍ以内で共インキュベーションするのを可能にする、デュアル・チャンバ・トランスウェル培養システム（ｄｕａｌ  ｃｈａｍｂｅｒ  ｔｒａｎｓｗｅｌｌ  ｃｕｌｔｕｒｅ  ｓｙｓｔｅｍ）（Ｃｏｓｔａｒ、ケンブリッジ、マサチューセッツ州）の上部及び下部レベルにて培養する（国際公開第９３／１６７２４号）。この手法では、レスポンダの増殖活性を別個に測定することができるため、サプレッサ細胞集団の照射は不要である。
【０１７８】
特定の疾患の処置のための組成物の有効性及び投与様式も、対応する動物疾患モデルにおいて詳しく説明することができる。疾患の総合的症状を減退又は遅延させるための処置の能力は、使用されているモデルに適するように、疾患の循環生化学的及び免疫学的特徴、罹患組織の免疫組織学並びに全体的な臨床的特徴のレベルにて監視される。試験に使用することができる動物モデルの非限定的な例は以下に含まれる。
【０１７９】
例えば、自己免疫疾患の研究のための動物モデルは当分野で公知である。ヒト自己免疫疾患に最も類似していると思われる動物モデルとしては、高い発生率の特定の疾患を自発的に発症する動物株が含まれる。そのようなモデルの例としては、１型糖尿病に類似した疾患を発症する非肥満性糖尿病（ＮＯＤ）マウス、並びにニュージーランドハイブリッド、ＭＲＬ−Ｆａｓｌｐｒ及びＢＸＳＢマウスなどの、狼瘡様疾患を発症しやすい動物が挙げられるが、これに限定されない。自己免疫疾患が誘導されている動物モデルとしては、多発性硬化症のモデルである実験的自己免疫性脳脊髄炎（ＥＡＥ）、関節リウマチのモデルであるコラーゲン誘導性関節炎（ＣＩＡ）及びブドウ膜炎のモデルである実験的自己免疫ブドウ膜炎（ＥＡＵ）が挙げられるが、これに限定されない。自己免疫疾患の動物モデルも遺伝子操作によって作製されていて、例えば炎症性腸疾患用のＩＬ−２／ＩＬ−１０ノックアウトマウス、ＳＬＥ用のＦａｓ又はＦａｓリガンドノックアウト及び関節リウマチ用のＩＬ−１受容体アンタゴニストノックアウトが挙げられる。
【０１８０】
本発明は、ＴＨ１応答、ＴＨ２応答、ＴＨ１７応答又はこれらの応答の組合せを調節することによる寛容の調節を考慮する。ＴＨ１応答の調節は、例えばインターフェロンガンマの発現を変化させることを含む。ＴＨ２応答の調節は、例えばＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−１０及びＩＬ−１３の任意の組合せの発現を変化させることを含む。通例、ＴＨ２応答の増加（減少）は、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−１０又はＩＬ−１３のうちの少なくとも１つの発現の増加（減少）を含むことになり、より通例には、ＴＨ２応答の増加（減少）は、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−１０又はＩＬ−１３のうちの少なくとも２つの発現の増加を含むことになり、最も通例には、ＴＨ２応答の増加（減少）は、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−１０又はＩＬ−１３のうちの少なくとも３つの増加を含むことになるが、ＴＨ２応答の増加（減少）は理想的には、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−１０及びＩＬ−１３のうちの全ての発現の増加（減少）を含むことになる。ＴＨ１７の調節は、例えば、ＴＧＦ−ベータ、ＩＬ−６、ＩＬ−２１及びＩＬ−２３の発現を変化させることを含み、ＩＬ−１７、ＩＬ−２１及びＩＬ−２２のレベルに影響する
【０１８１】
自己抗原及び自己免疫疾患に対する寛容は、胸腺における自己反応性Ｔ細胞のネガティブ選択及び胸腺欠失を免れ、末梢に認められる自己反応性Ｔ細胞の末梢寛容の機構を含む、様々な機構によって達成される。末梢Ｔ細胞寛容をもたらす機構の例としては、自己の抗原の「無視」、自己抗原に対するアネルギー又は不応答性、サイトカイン免疫偏向及び自己反応性Ｔ細胞の活性化誘導細胞死が挙げられる。さらに、制御性Ｔ細胞は、末梢寛容の媒介に関与することが示されている。例えばＷａｌｋｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（２００２）Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，２：１１−１９；Ｓｈｅｖａｃｈ  ｅｔ  ａｌ．（２００１）Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｒｅｖ．，１８２：５８−６７を参照のこと。ある状況において、自己抗原に対する末梢寛容が消失し（又は破壊され）、自己免疫応答が生じる。例えば、ＥＡＥの動物モデルにおいて、ＴＬＲ自然免疫受容体による抗原提示細胞（ＡＰＣ）の活性化が、自己寛容を破壊し、結果的にＥＡＥを誘導することが示されている（Ｗａｌｄｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（２００４）Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．，１１３：９９０−９９７）。
【０１８２】
好ましくは、本発明は、ＴＬＲ７／８、ＴＬＲ９及び／又はＴＬＲ７／８／９依存性細胞刺激を抑制又は低減しながら、抗原提示を増加させるための方法を提供する。本明細書に記載されるように、特定の主題粒子の投与により、免疫刺激性ポリヌクレオチドに関連するＴＬＲ  ７／８、ＴＬＲ９及び／又はＴＬＲ７／８／９依存性細胞応答を抑制しながら、ＤＣ又はＡＰＣによる抗原提示がもたらされる。そのような抑制は、１つ以上のＴＬＲ関連サイトカインのレベルの低下を含み得る。
【０１８３】
本発明は、Ｍａｃ−１及びＬＦＡ−１介在性障害の処置に有用な生物学的特性を有する、新規化合物も提供する。
【０１８４】
１２．医薬組成物
本発明の一態様は、主題のマイクロ粒子及びナノ粒子を含み、医薬的に許容される担体を任意に含む医薬組成物を提供する。好ましくは、これらの組成物は、１種以上の追加の治療薬を任意にさらに含む。又は、本発明の主題の粒子は、それを必要とする患者に、１種以上の他の治療薬の投与と組合せて投与され得る。例えば、本発明の化合物との併用投与又は医薬組成物中への包含のためのさらなる治療薬は、承認された抗炎症薬であり得るか、又は制御されていない炎症性免疫応答又は細菌感染症若しくはウイルス感染症を特徴とする任意の疾患の処置について承認を最終的に得る、食品医薬品局において承認を受けている、いくつかの薬剤のうちのいずれかであり得る。本発明の特定の主題の粒子は、処置のために遊離形態で、又は適切な場合には、その医薬的に許容される誘導体として存在し得ることも理解されよう。
【０１８５】
好ましくは、本発明の医薬組成物は、医薬的に許容される担体をさらに含み、担体は、本明細書で使用する場合、所望の特定の剤形に適した、ありとあらゆる溶媒、希釈剤又は他の液体ビヒクル、分散剤若しくは懸濁助剤、界面活性剤、等張剤、増粘剤又は乳化剤、保存料、固体結合剤、潤滑剤などを含む。Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｓｉｘｔｅｅｎｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｅ．Ｗ．Ｍａｒｔｉｎ（Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐａ．，１９８０）には、医薬組成物の調合に用いられる各種の担体及びそれを調製するための既知の技術が開示されている。いずれの従来の担体媒体も、例えば、何らかの望ましくない生物学的作用を生ずることにより、又はさもなければ医薬組成物の他のいずれの成分と有害な様式で相互作用することにより、本発明の化合物に不相溶性である場合を除き、その使用は、本発明の範囲内であると考えられる。
【０１８６】
医薬的に許容される担体として役立つことのできる材料のいくつかの例としては、糖類、例えばラクトース、グルコース及びスクロース；デンプン、例えばコーンスターチ及びポテトスターチ；セルロース及びその誘導体、例えばナトリウムカルボキシメチルセルロース、エチルセルロース及びセルロースアセタート；粉末トラガカント；麦芽；ゼラチン；タルク；賦形剤、例えばカカオバター及び座薬用ワックス；油、例えばピーナッツ油、綿実油、ベニバナ油、ゴマ油、オリーブ油、コーン油及び大豆油；グリコール、例えばプロピレングリコール；エステル、例えばエチルオレアート及びエチルラウラート；寒天；緩衝剤、例えばマグネシウムヒドロキシド及びアルミニウムヒドロキシド；アルギン酸；発熱物質不含水；等張食塩水；リンガー溶液；エチルアルコール及びリン酸緩衝液並びに他の非毒性相溶性潤滑剤、例えばナトリウムラウリルサルファート及びマグネシウムステアラートが挙げられるが、これに限定されず、並びに着色剤、離型剤、コーティング剤、甘味料、香味剤及び香料、保存料及び酸化防止剤も、調合者の裁量に従って、組成物中に存在することができる。
【０１８７】
経口投与用の液体剤形としては、医薬的に許容されるエマルジョン、マイクロエマルジョン、溶液、懸濁液、シロップ及びエリキシルが挙げられるが、これに限定されない。活性化合物に加えて、液体剤形は、当分野で一般に使用される不活性希釈剤、例えば水又は他の溶媒、可溶化剤及び乳化剤、例えばエチルアルコール、イソプロピルアルコール、エチルカーボナート、エチルアセタート、ベンジルアルコール、ベンジルベンゾアート、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、ジメチルホルムアミド、油（特に綿実油、落花生油、コーン油、胚芽油、オリーブ油、ヒマシ油及びゴマ油）、グリセロール、テトラヒドロフルフリルアルコール、ポリエチレングリコール及びソルビタンの脂肪酸エステル並びにその混合物を含有し得る。不活性希釈剤の他に、経口組成物はアジュバント、例えば湿潤剤、乳化剤及び懸濁剤、甘味剤、香味剤及び香料も含むことができる。
【０１８８】
注射用調製物、例えば水性又は油性の滅菌注射用懸濁液は、好適な分散剤又は湿潤剤及び懸濁化剤を使用して、既知の技術に従って製剤され得る。滅菌注射用調製物は、例えば１，３−ブタンジオール中の溶液としての、非毒性の非経口的に許容される希釈剤又は溶媒中の無菌注射用溶液、懸濁液又はエマルジョンであってもよい。用いられ得る許容されるビヒクル及び溶媒には、水、リンガー溶液（米国薬局方）及び等張ナトリウムクロリド溶液がある。さらに、滅菌不揮発性油が、溶媒又は懸濁媒体として従来から使用されている。この目的のために、合成モノグリセリド又はジグリセリドを含む任意の無刺激性不揮発性油を用いることができる。さらに、オレイン酸などの脂肪酸が注射剤の調製に使用される。
【０１８９】
注射用製剤は、例えば細菌保持フィルターでの濾過によって、又は使用前に滅菌水若しくは他の滅菌注射用媒体に溶解又は分散することができる滅菌固体組成物の形態で滅菌剤を包含することによって滅菌することができる。
【０１９０】
薬物の効果を延長するために、皮下注射又は筋肉内注射からの薬物の吸収を遅延することが望ましいことが多い。この遅延は、液体懸濁液又は水溶性が低い結晶性若しくは非晶質の材料を使用することによって達成され得る。
【０１９１】
経口投与用の固体剤形としては、カプセル剤、錠剤、丸剤、散剤及び顆粒剤が挙げられる。そのような固体剤形において、修飾粒子は、少なくとも１つの不活性の医薬的に許容される賦形剤又は担体、例えばナトリウムシトラート若しくはジカルシウムホスファート並びに／又はａ）充填剤若しくは増量剤、例えばデンプン、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトール及びケイ酸；ｂ）結合剤、例えばカルボキシメチルセルロース、アルギナート、ゼラチン、ポリビニルピロリジノン、スクロース及びアラビアゴム；ｃ）保湿剤、例えばグリセロール；ｄ）崩壊剤、例えば寒天、カルシウムカーボナート、ポテトスターチ若しくはタピオカスターチ、アルギン酸、あるシリカート及びナトリウムカーボナート；ｅ）溶解遅延剤、例えばパラフィン；ｆ）吸収促進剤、例えば第４級アンモニウム化合物；ｇ）湿潤剤、例えばセチルアルコール及びグリセロールモノステアラート；ｈ）吸収剤、例えばカオリン及びベントナイト粘土並びにｉ）潤滑剤、タルク、カルシウムステアラート、マグネシウムステアラート、固体ポリエチレングリコール、ナトリウムラウリルサルファート並びにその混合物と混合される。カプセル剤、錠剤及び丸剤の場合、剤形は緩衝剤も含み得る。
【０１９２】
同様の種類の固体組成物は、ラクトース又は乳糖、並びに高分子量ポリエチレングリコールなどの賦形剤を使用して、軟質及び硬質充填ゼラチンカプセルの充填剤としても用いられ得る。錠剤、糖衣錠、カプセル剤、丸剤及び顆粒剤の固体剤形は、コーティング及びシェル、例えば腸溶コーティング及び製薬業界で周知である他のコーティングを用いて調製することができる。それらは乳白剤を任意に含有し得て、それらが活性成分のみを又は活性成分を優先的に、腸管のある部分において、任意に遅延した様式で放出する組成物であることもできる。使用することができる包埋組成物の例としては、ポリマー物質及びワックスが挙げられる。同様の種類の固体組成物は、ラクトース又は乳糖、並びに高分子量ポリエチレングリコールなどの賦形剤を使用して、軟質及び硬質充填ゼラチンカプセルの充填剤としても用いられ得る。
【０１９３】
マイクロ粒子及びナノ粒子はまた、上記のように１種以上の賦形剤を含むマイクロカプセル化形態であることもできる。錠剤、糖衣錠、カプセル剤、丸剤及び顆粒剤の固体剤形は、コーティング及びシェル、例えば腸溶コーティング、放出制御コーティング及び医薬製剤分野で周知の他のコーティングを用いて調製することができる。そのような固体剤形において、活性化合物は、少なくとも１つの不活性希釈剤、例えばスクロース、ラクトース及びデンプンと混合され得る。そのような剤形は、通常の慣行と同様に、不活性希釈剤以外の追加の物質、例えば錠剤化潤滑剤及び他の錠剤化助剤、例えばマグネシウムステアラート及び微結晶セルロースも含み得る。カプセル剤、錠剤及び丸剤の場合、剤形は緩衝剤も含み得る。それらは乳白剤を任意に含有し得て、それらが修飾粒子のみを又は修飾粒子を優先的に、腸管のある部分において、任意に遅延した様式で放出する組成物であることもできる。使用することができる包埋組成物の例としては、ポリマー物質及びワックスが挙げられる。
【０１９４】
本発明は、カルボキシル化マイクロ粒子及びナノ粒子の医薬的に許容される局所製剤を含む。「医薬的に許容される局所製剤」という用語は、本明細書で使用する場合、表皮への製剤の適用による主題のマイクロ粒子／ナノ粒子の皮内投与のために医薬的に許容される、任意の製剤を意味する。好ましくは、本発明の局所製剤は、担体系を含む。医薬的に有効な担体としては、溶媒（例えばアルコール、ポリアルコール、水）、クリーム、ローション、軟膏、オイル、プラスター、リポソーム、粉末、エマルジョン、マイクロエマルジョン及び緩衝溶液（例えば低張又は緩衝食塩水）又は局所投与医薬品の分野において既知の任意の他の担体が挙げられるが、これに限定されない。当分野で既知の担体のより完全な列挙は、当分野の標準である参考テキスト、例えば、どちらもＭａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐａ．によって出版されたＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１６ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，１９８０及び１７ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，１９８５によって提供され、その開示は、参照によりその全体が本明細書に組み入れられている。好ましくは、本発明の局所製剤は賦形剤を含み得る。当分野において既知の任意の医薬的に許容される賦形剤を使用して、本発明の医薬的に許容される局所製剤が調製され得る。
【０１９５】
本発明の局所製剤に含めることができる賦形剤の例としては、保存料、酸化防止剤、保湿剤、皮膚軟化剤、緩衝剤、可溶化剤、他の浸透剤、皮膚保護剤、界面活性剤及び噴射剤並びに／又は修飾粒子と組合せて使用される追加の治療薬が挙げられるが、これに限定されない。適切な保存料としては、アルコール、第４級アミン、有機酸、パラベン及びフェノールが挙げられるが、これに限定されない。好適な酸化防止剤としては、アスコルビン酸及びそのエステル、ナトリウムビススルファイト、ブチル化ヒドロキシトルエン、ブチル化ヒドロキシアニソール、トコフェロール並びにＥＤＴＡ及びクエン酸などのキレート剤が挙げられるが、これに限定されない。好適な保湿剤としては、グリセリン、ソルビトール、ポリエチレングリコール、尿素及びプロピレングリコールが挙げられるが、これに限定されない。本発明と共に使用するための好適な緩衝剤としては、クエン酸、塩酸及び乳酸緩衝剤が挙げられるが、これに限定されない。好適な可溶化剤としては、第４級アンモニウムクロリド、シクロデキストリン、ベンジルベンゾアート、レシチン及びポリソルバートが挙げられるが、これに限定されない。本発明の局所製剤で使用できる好適な皮膚保護剤としては、ビタミンＥ油、アラトイン、ジメチコン、グリセリン、ワセリン及び酸化亜鉛が挙げられるが、これに限定されない。
【０１９６】
好ましくは、本発明の医薬的に許容される局所製剤は、少なくともカルボキシル化マイクロ粒子及びナノ粒子並びに浸透促進剤を含む。局所製剤の選択は、処置される症状、存在する粒子及び他の賦形剤の物理化学的特徴、製剤中でのその安定性、利用可能な製造装置並びに費用の制約を含む、複数の要因に依存する。「浸透促進剤」という用語は、本明細書で使用する場合、角質層を通して表皮又は真皮中へ、好ましくは全身吸収をほぼ又は全く伴わずに、薬理学的に活性な化合物を輸送することができる薬剤を意味する。多種多様な化合物が、皮膚を介した薬物の浸透速度の向上における、その有効性に関して評価されてきた。例えば、多様な皮膚浸透促進剤の使用及び試験を概説するＰｅｒｃｕｔａｎｅｏｕｓ  Ｐｅｎｅｔｒａｔｉｏｎ  Ｅｎｈａｎｃｅｒｓ，Ｍａｉｂａｃｈ  Ｈ．Ｉ．ａｎｄ  Ｓｍｉｔｈ  Ｈ．Ｅ．（ｅｄｓ．），ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．，Ｂｏｃａ  Ｒａｔｏｎ，Ｆｌａ．（１９９５）、及びＢｕｙｕｋｔｉｍｋｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｍｅａｎｓ  ｏｆ  Ｔｒａｎｓｄｅｒｍａｌ  Ｄｒｕｇ  Ｐｅｒｍｅａｔｉｏｎ  Ｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔ  ｉｎ  Ｔｒａｎｓｄｅｒｍａｌ  ａｎｄ  Ｔｏｐｉｃａｌ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｇｏｓｈ  Ｔ．Ｋ．，Ｐｆｉｓｔｅｒ  Ｗ．Ｒ．，Ｙｕｍ  Ｓ．Ｉ．（Ｅｄｓ．），Ｉｎｔｅｒｐｈａｒｍ  Ｐｒｅｓｓ  Ｉｎｃ．，Ｂｕｆｆａｌｏ  Ｇｒｏｖｅ，１１１（１９９７）を参照のこと。好ましくは、本発明で使用するための浸透剤としては、トリグリセリド（例えばダイズ油）、アロエ組成物（例えばアロエベラゲル）、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、オクトリフェニル（ｏｃｔｏｌｙｐｈｅｎｙｌ）ポリエチレングリコール、オレイン酸、ポリエチレングリコール４００、プロピレングリコール、Ｎ−デシルメチルスルホキシド、脂肪酸エステル（例えばイソプロピルミリスタート、メチルラウラート、グリセロールモノオレアート及びプロピレングリコールモノオレアート）並びにＮ−メチルピロリドンが挙げられるが、これに限定されない。
【０１９７】
好ましくは、組成物は、軟膏、ペースト、クリーム、ローション、ゲル、散剤、液剤、スプレー剤、吸入剤又はパッチ剤の形態であり得る。好ましくは、本発明による組成物の製剤はクリームであり、クリームは飽和又は不飽和脂肪酸、例えばステアリン酸、パルミチン酸、オレイン酸、パルミト−オレイン酸、セチルアルコール又はオレイルアルコールをさらに含み得て、ステアリン酸が特に好ましい。本発明のクリームは、非イオン性界面活性剤、例えばポリオキシステアラートも含み得る。好ましくは、活性成分は、滅菌条件下で医薬的に許容される担体及び必要に応じて、任意の必要な保存料又は緩衝剤と混合される。眼科用製剤、点耳剤及び点眼剤も、本発明の範囲内であると考えられる。さらに、本発明は、身体への化合物の制御送達を提供するというさらなる利点を有する、経皮パッチの使用を検討する。そのような剤形は、化合物を適切な媒体に溶解又は分散させることによって作製される。上記のように、浸透促進剤も、皮膚での化合物の流動を増大させるために使用することができる。速度は、速度制御膜を設けることによって、又は化合物をポリマーマトリクス若しくはゲルに分散させることによって制御することができる。
【０１９８】
カルボキシル化マイクロ粒子及びナノ粒子は、エアゾールによって投与することができる。これは修飾粒子を含有する水性エアゾール、リポソーム調製物又は固体粒子を調製することにより達成される。非水性（例えばフルオロカーボン噴射剤）懸濁液を使用することができる。
【０１９９】
通常、水性エアゾールは、薬剤の水溶液又は懸濁液を、従来の医薬的に許容される担体及び安定剤と共に製剤することによって作製される。担体及び安定化剤は特定の化合物の要件によって変わるが、通例、非イオン性界面活性剤（ツイン、プルロニック（登録商標）又はポリエチレングリコール）、血清アルブミンなどの無毒性タンパク質、ソルビタンエステル、オレイン酸、レシチン、グリシンなどのアミノ酸、緩衝剤、塩、糖又は糖アルコールが挙げられる。エアゾールは一般に等張液から調製される。
【０２００】
本発明のカルボキシル化ナノ粒子及びマイクロ粒子並びに医薬組成物は、併用療法において製剤及び使用できることも、即ち、化合物及び医薬組成物は、１つ以上の他の所望の治療又は医療手順と同時に、その前に、又はその後に製剤及び／又は（ｗｉｔｈ／ｏｒ）投与できることも認識されるであろう。併用レジメンで用いる療法（治療薬又は手順）の特定の組合せによって、所望の治療薬及び／又は手順の適合性並びに達成される所望の治療効果が考慮されるであろう。用いられる療法は同じ障害に対して所望の効果を達成し得る（例えば、本発明の化合物は別の抗炎症剤と同時に投与され得る）、又はその療法が異なる効果を達成し得る（例えば、任意の有害な影響の抑制）ことも認識されるであろう。
【０２０１】
好ましくは、本発明のカルボキシル化粒子を含有する医薬組成物は、１つ以上の追加の治療活性成分（例えば抗炎症性及び／又は緩和性）をさらに含む。本発明の目的では、「緩和的」という用語は、疾患の症状及び／又は治療レジメンの副作用の軽減に集中するが、治癒的ではない処置を示す。例えば、緩和処置は、鎮痛剤、抗悪心薬及び制吐薬を含む。
【０２０２】
以下の例は、本発明を説明するために与える。しかし、本発明はこれらの例に記載された特定の条件又は詳細事項に限定されないことを理解されたい。本明細書を通して、米国特許又は特許出願公開を含む公的に利用可能な文書へのありとあらゆる言及は、参照により具体的に組み入れられている。
【０２０３】
例
例１  高度に負に帯電したＰＬＧＡナノ粒子の調製
ＰＬＧＡ  ０．２０４３ｇをエチルアセタート８ｍｌに溶解させて、ポリマー溶液を形成した。ポリマー溶液を、ポリ（ガンマグルタミン酸）４０ミリグラムを含有する０．５％ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）溶液４０ｍＬと混合し、ＩＫＡ（登録商標）ＤＩＧＩＴＡＬ  ＵＬＴＲＡ−ＴＵＲＲＡＸ（登録商標）Ｔ２５ホモジナイザを使用して、２５，０００ｒｐｍにて１分間ホモジナイズした。得られたエマルジョンをガラス容器に注入し、４００ｒｐｍにて３時間磁気撹拌して、溶媒を蒸発させた。次いで、ナノ粒子を蒸留水で３回洗浄してから、凍結乾燥させた。粒径及びゼータ電位は、Ｍａｌｖｅｒｎ粒径分析器（ウスターシャー、英国）及びベックマン・コールターレーザ回折サイザによって測定した。次いで、凍結乾燥粒子を蒸留水に十分に再懸濁させると、平均粒径６２５．０  ｎｍを有し、凝集がなく、ゼータ電位−４９．３ｍＶを有することがわかった。
【０２０４】
例２  高度に負に帯電したＰＬＧＡナノ粒子の調製
ＰＬＧＡ０．２０１３ｇをエチルアセタート８ｍｌに溶解させて、ポリマー溶液を形成した。ポリマー溶液を、ポリ（Ｌ−グルタミン酸）４０ミリグラムを含有する０．５％ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）溶液４０ｍＬと混合し、ＩＫＡ（登録商標）ＤＩＧＩＴＡＬ  ＵＬＴＲＡ−ＴＵＲＲＡＸ（登録商標）Ｔ２５ホモジナイザを使用して、２５，０００ｒｐｍにて１分間ホモジナイズした。得られたエマルジョンをガラス容器に注入し、４００ｒｐｍにて３時間磁気撹拌して、溶媒を蒸発させた。次いで、ナノ粒子を蒸留水で３回洗浄してから、凍結乾燥させた。粒径及びゼータ電位は、Ｍａｌｖｅｒｎ粒径分析器（ウスターシャー、英国）及びベックマン・コールターレーザ回折サイザによって測定した。次いで、凍結乾燥粒子を蒸留水に十分に再懸濁させると、平均粒径４８８．５ｎｍを有し、凝集がなく、ゼータ電位−３７．８ｍＶを有することがわかった。
【０２０５】
例３  高度に負に帯電したＰＬＧＡナノ粒子の調製
ＰＬＧＡ０．２０１３ｇをエチルアセタート８ｍｌに溶解させて、ポリマー溶液を形成した。ポリマー溶液を、ポリ（Ｌ−アスパラギン酸）４０ミリグラムを含有する０．５％ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）溶液４０ｍＬと混合し、ＩＫＡ（登録商標）ＤＩＧＩＴＡＬ  ＵＬＴＲＡ−ＴＵＲＲＡＸ（登録商標）Ｔ２５ホモジナイザを使用して、２５，０００ｒｐｍにて１分間ホモジナイズした。得られたエマルジョンをガラス容器に注入し、４００ｒｐｍにて３時間磁気撹拌して、溶媒を蒸発させた。次いで、ナノ粒子を蒸留水で３回洗浄してから、凍結乾燥させた。粒径及びゼータ電位は、Ｍａｌｖｅｒｎ粒径分析器（ウスターシャー、英国）及びベックマン・コールターレーザ回折サイザによって測定した。凍結乾燥粒子を再び蒸留水に再懸濁させると、平均粒径５１３．５ｎｍを有し、表面に一次カルボキシル基を有することがわかった。
【０２０６】
例４  高度に負に帯電したＰＬＧＡナノ粒子の調製
ＰＬＧＡ  ０．９００５ｇをエチルアセタート１８ｍｌに溶解させて、ポリマー溶液を形成した。ポリマー溶液を、ポリ（ガンマグルタミン酸）１８０ミリグラムを含有する０．５％ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）溶液８０ｍＬと混合し、ＩＫＡ（登録商標）ＤＩＧＩＴＡＬ  ＵＬＴＲＡ−ＴＵＲＲＡＸ（登録商標）Ｔ２５ホモジナイザを使用して、１８，０００ｒｐｍにて１分間ホモジナイズする。得られたエマルジョンをガラス容器に注入し、４００ｒｐｍにて５時間磁気撹拌して、溶媒を蒸発させる。次いで、ナノ粒子を蒸留水で３回洗浄してから、凍結乾燥させる。粒径及びゼータ電位は、Ｍａｌｖｅｒｎ粒径分析器（ウスターシャー、英国）によって測定することができる。
【０２０７】
例５  高度カルボキシル化ＰＬＧＡナノ粒子の調製
ＰＬＧＡ  ５．０８６０ｇをエチルアセタート１００ｍＬに溶解させて、ＰＬＧＡ溶液を形成する。１％ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）溶液２８０ｍｌ、エチルアセタート２０ｍｌ及びポリ（ガンマ−グルタミン酸）１グラムからなる水溶液を調製する。次いで、ＰＬＧＡ溶液をＰＶＡ溶液と混合し、ＩＫＡ（登録商標）ＤＩＧＩＴＡＬ  ＵＬＴＲＡ−ＴＵＲＲＡＸ（登録商標）Ｔ２５ホモジナイザを使用して、２４，０００ｒｐｍにて１分間均ホモジナイズする。得られたエマルジョンを２Ｌガラス製フラスコに注入し、一晩撹拌することによって有機溶媒を除去する。硬化したナノ粒子を蒸留水で３回洗浄してから、凍結乾燥させる。粒径及びゼータ電位は、Ｍａｌｖｅｒｎ粒径分析器（ウスターシャー、英国）によって測定することができる。
【０２０８】
例６  ダブル乳化工程による、ＢＳＡが装填された、高度に負に帯電したＰＬＧＡナノ粒子の調製
ＰＬＧＡ  ０．９０８４ｇをエチルアセタート１８ｍＬに溶解させて、ＰＬＧＡ溶液を形成する。０．５％ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）溶液（水中）８０ｍｌ、エチルアセタート６．５ｍｌ及びポリ（ガンマ−グルタミン酸）１８０ミリグラムからなる水溶液を調製する。ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ、モデル治療タンパク質）２０ｍｇを水性緩衝液２．０ｍＬに溶解させて、タンパク質溶液を形成する。ＢＳＡ溶液１．８ｍＬをＰＬＧＡ溶液と混合し、ホモジナイザを使用して２４，０００ｒｐｍにて４５秒間ホモジナイズする。得られたエマルジョンをＰＶＡ溶液と混合し、別のホモジナイザを使用して１８，０００ｒｐｍにて１分間ホモジナイズする。得られた最終エマルジョンを１Ｌガラス製フラスコに注入し、５０ミリバールの真空下でローター蒸発により溶媒を除去する。ＢＳＡ装填粒子を蒸留水で３回洗浄してから、凍結乾燥させる。粒径及びゼータ電位は、Ｍａｌｖｅｒｎ粒径分析器（ウスターシャー、英国）によって測定することができる。
【０２０９】
例７  シングル乳化工程によってパクリタキセルを装填した、高度に負に帯電したＰＬＧＡナノ粒子の調製
ＰＬＧＡ  ０．９ｇ及びパクリタキセル１８ｍｇをエチルアセタート１８ｍＬに溶解させて、ＰＬＧＡ−パクリタキセル溶液を形成する。ＰＬＧＡ−パクリタキセル溶液を、ポリ（ガンマ−グルタミン酸）１８０ミリグラムを含有する０．５％ポリビニルアルコール溶液８０ｍＬと混合し、ＩＫＡ（登録商標）ＤＩＧＩＴＡＬ  ＵＬＴＲＡ−ＴＵＲＲＡＸ（登録商標）Ｔ２５ホモジナイザを使用して、１８，０００ｒｐｍにて１分間ホモジナイズする。得られたエマルジョンをガラス容器に注入し、４００ｒｐｍにて５時間磁気撹拌して、溶媒を蒸発させる。次いで、パクリタキセル装填ナノ粒子を蒸留水で３回洗浄してから、凍結乾燥させる。粒径及びゼータ電位は、Ｍａｌｖｅｒｎ粒径分析器（ウスターシャー、英国）によって測定することができる。
【０２１０】
例８  洗浄試験
例６に記載したように製造したＢＳＡ装填ＰＬＧＡナノ粒子３００ｍｇを脱イオン水３０ｍＬ中で再構成する。短時間の超音波処理の後、粒子は十分に懸濁されている。試料をゼータ電位測定用に採取する。ゼータ電位は−４２．７ｍＶであることが判明する。
【０２１１】
次いで、そのようなナノ粒子懸濁液に脱イオン水３００ｍＬを添加する。得られた混合物を、タンジェンシャルフロー濾過（ＴＦＦ）装置を使用して３０ｍＬに濃縮すると、ゼータ電位は−４４．５ｍＶであることが判明する。この洗浄工程をさらに２回反復し、各洗浄後に得られるゼータ電位はそれぞれ−４３．０ｍＶ及び−４０．１ｍＶであることが判明する。
【０２１２】
例の参考文献
Ｌａｙｎｅ，Ｅ．Ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｉｃ  ａｎｄ  Ｔｕｒｂｉｄｉｍｅｔｒｉｃ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  Ｍｅａｓｕｒｉｎｇ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ  ３：４４７−４５５．１９５７．
Ｓｔｏｓｃｈｅｃｋ，ＣＭ．Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ  １８２：５０−６９．１９９０．
【０２１３】
本発明をその好ましい実施形態を参照して、特に図示及び説明したが、当業者は、添付の特許請求の範囲に含まれる本発明の範囲から逸脱することなく、形態及び詳細事項に各種の変更がなされ得ることを理解するであろう。
【国際調査報告】
2021523151.tif 000006