(57)【要約】  オニノダケ（Ａｎｇｅｌｉｃａ  ｇｉｇａｓ  Ｎａｋａｉ）抽出物を含む抗血栓用組成物（血小板凝集抑制剤）および血管系疾患の予防および／または治療用薬学組成物が提供される。前記組成物は、胃腸障害を起こさないことを特徴とする。【選択図】図１Ａ
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
オニノダケ（Ａｎｇｅｌｉｃａ  ｇｉｇａｓ  Ｎａｋａｉ）抽出物を有効成分として含む、抗血栓剤。
【請求項２】
前記オニノダケ抽出物は、オニノダケを９０〜１００％（ｖ／ｖ）エタノール水溶液で４０〜８０℃で抽出したオニノダケエタノール抽出物である、請求項１に記載の抗血栓剤。
【請求項３】
前記エタノール水溶液は、９６〜１００％（ｖ／ｖ）の濃度を有するものである、請求項２に記載の抗血栓剤。
【請求項４】
胃腸障害を起こさないことを特徴とする、請求項１〜３のいずれか１項に記載の抗血栓剤。
【請求項５】
オニノダケ（Ａｎｇｅｌｉｃａ  ｇｉｇａｓ  Ｎａｋａｉ）抽出物を有効成分として含む、血管系疾患の予防または治療用薬学組成物。
【請求項６】
前記オニノダケ抽出物は、オニノダケを９０〜１００％（ｖ／ｖ）エタノール水溶液で４０〜８０℃で抽出したオニノダケエタノール抽出物である、請求項５に記載の血管系疾患の予防または治療用薬学組成物。
【請求項７】
前記エタノール水溶液は、９６〜１００％（ｖ／ｖ）の濃度を有するものである、請求項６に記載の血管系疾患の予防または治療用薬学組成物。
【請求項８】
前記血管系疾患は、脳卒中、脳梗塞、高血圧、心筋梗塞、狭心症、動脈硬化症、または末梢血管系疾患である、請求項５〜７のいずれか１項に記載の血管系疾患の予防または治療用薬学組成物。
【請求項９】
胃腸障害を起こさないことを特徴とする、請求項５〜７のいずれか１項に記載の血管系疾患の予防または治療用薬学組成物。
【請求項１０】
オニノダケ（Ａｎｇｅｌｉｃａ  ｇｉｇａｓ  Ｎａｋａｉ）抽出物を含む、抗血栓用健康機能性食品。
【請求項１１】
前記オニノダケ抽出物は、オニノダケを９０〜１００％（ｖ／ｖ）エタノール水溶液で４０〜８０℃で抽出したオニノダケエタノール抽出物である、請求項１０に記載の抗血栓用健康機能性食品。
【請求項１２】
前記エタノール水溶液は、９６〜１００％（ｖ／ｖ）の濃度を有するものである、請求項１１に記載の抗血栓用健康機能性食品。
【請求項１３】
オニノダケ（Ａｎｇｅｌｉｃａ  ｇｉｇａｓ  Ｎａｋａｉ）抽出物を含む、血管系疾患の予防または改善用健康機能性食品。
【請求項１４】
前記オニノダケ抽出物は、オニノダケを９０〜１００％（ｖ／ｖ）エタノール水溶液で４０〜８０℃で抽出したオニノダケエタノール抽出物である、請求項１３に記載の血管系疾患の予防または改善用健康機能性食品。
【請求項１５】
前記エタノール水溶液は、９６〜１００％（ｖ／ｖ）の濃度を有するものである、請求項１４に記載の血管系疾患の予防または改善用健康機能性食品。
【請求項１６】
前記血管系疾患は、脳卒中、脳梗塞、高血圧、心筋梗塞、狭心症、動脈硬化症、または末梢血管系疾患である、請求項１３〜１５のいずれか１項に記載の血管系疾患の予防または改善用健康機能性食品。
【請求項１７】
胃腸障害を起こさないことを特徴とする、請求項１０〜１５のいずれか１項に記載の健康機能性食品。
【請求項１８】
オニノダケ（Ａｎｇｅｌｉｃａ  ｇｉｇａｓ  Ｎａｋａｉ）抽出物を含む非ステロイド抗炎症剤によって誘発される胃腸障害の予防または治療用薬学組成物。
【請求項１９】
オニノダケ（Ａｎｇｅｌｉｃａ  ｇｉｇａｓ  Ｎａｋａｉ）抽出物および抗血栓剤を含む、血管系疾患の予防または治療のための併用投与用薬学組成物。
【請求項２０】
オニノダケ（Ａｎｇｅｌｉｃａ  ｇｉｇａｓ  Ｎａｋａｉ）抽出物および非ステロイド抗炎症剤を含む、抗炎症または鎮痛または炎症性疾患の予防または治療のための併用投与用薬学組成物。
【請求項２１】
胃腸障害を起こさないことを特徴とする、請求項１９または２０に記載の併用投与用薬学組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
オニノダケ（Ａｎｇｅｌｉｃａ  ｇｉｇａｓ  Ｎａｋａｉ）抽出物を含む抗血栓用組成物（血小板凝集抑制剤）および血管系疾患の予防および／または治療用薬学組成物が提供される。前記組成物は、胃腸障害を起こさないことを特徴とする。
【背景技術】
【０００２】
血管系疾患は、血管が詰まったり裂けて生じる全ての疾患を総称するもので、脳血管系疾患、心血管系疾患（冠状動脈疾患）、動脈硬化症、末梢血管系疾患などがある。血管系疾患は、主にコレステロールなどによって生成された血栓によるものであり、血小板の凝集を抑制することで治療効果を得ることができる。かつて、血小板凝集の抑制のために、アスピリン、イブプロフェンなどの非ステロイド抗炎症剤（Ｎｏｎｓｔｅｒｏｉｄａｌ  ａｎｔｉ−ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｄｒｕｇｓ；ＮＳＡＩＤｓ）系薬物が使用された。
【０００３】
アスピリン（Ａｓｐｉｒｉｎ；アセチルサリチル酸（ａｃｅｔｙｌｓａｌｉｃｙｌｉｃ  ａｃｉｄ、ＡＳＡ））はサリチル酸塩医薬品で、解熱、鎮痛、抗炎作用を有し、プロトロンビン生成の抑制による血小板凝集の抑制効果を有するため、脳卒中などの２次発病を抑制する用途にも使用される。しかし、アスピリンなどの非ステロイド抗炎症剤系薬物は胃潰瘍のような副作用を起こし、特に胃腸での過剰出血を誘発して胃腸障害を起こしうる副作用がある。
したがって、胃腸障害を起こすことなく血小板凝集の抑制および／またはこれによる血管系疾患の予防または治療効果に優れた薬物の開発が要求される。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
一例は、オニノダケ（Ａｎｇｅｌｉｃａ  ｇｉｇａｓ  Ｎａｋａｉ）抽出物を有効成分として含む抗血栓用薬学組成物または血小板凝集抑制用薬学組成物を提供する。
他の例は、オニノダケ抽出物を有効成分として含む血管系疾患の予防および／または治療用薬学組成物を提供する。
【０００５】
他の例は、オニノダケ（Ａｎｇｅｌｉｃａ  ｇｉｇａｓ  Ｎａｋａｉ）抽出物を含む抗血栓用健康機能性食品または血小板凝集抑制用健康機能性食品を提供する。
他の例は、オニノダケ抽出物を含む血管系疾患の予防および／または改善用健康機能性食品を提供する。
【０００６】
他の例は、オニノダケ抽出物の薬学的有効量を血小板凝集の抑制を必要とする患者に投与する段階を含む抗血栓（血小板凝集抑制、または血栓抑制）方法を提供する。前記方法は、前記投与する段階の前に、血小板凝集の抑制を必要とする患者を確認する段階を追加的に含んでもよい。
【０００７】
他の例は、オニノダケ抽出物の薬学的有効量を血管系疾患の予防および／または治療を必要とする患者に投与する段階を含む血管系疾患の予防および／または治療方法を提供する。前記方法は、前記投与する段階の前に、血管系疾患の予防および／または治療を必要とする患者を確認する段階を追加的に含んでもよい。
【０００８】
他の例は、オニノダケ（Ａｎｇｅｌｉｃａ  ｇｉｇａｓ  Ｎａｋａｉ）抽出物が既存の抗血栓および／または血管系疾患治療剤の副作用である胃腸障害を起こさないという点に基づき、オニノダケ（Ａｎｇｅｌｉｃａ  ｇｉｇａｓ  Ｎａｋａｉ）抽出物は、非ステロイド抗炎症剤（Ｎｏｎｓｔｅｒｏｉｄａｌ  ａｎｔｉ−ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｄｒｕｇｓ；ＮＳＡＩＤｓ）系薬物のような既存の抗血栓および／または血管系疾患治療剤によって誘発される胃腸障害の予防、減少、改善、緩和、および／または治療用途を提供する。
【０００９】
具体的には、一例は、オニノダケ抽出物を有効成分として含む胃腸障害の予防および／または治療用薬学組成物を提供する。他の例は、オニノダケ（Ａｎｇｅｌｉｃａ  ｇｉｇａｓ  Ｎａｋａｉ）抽出物を含む胃腸障害の予防および／または改善用健康機能性食品を提供する。他の例は、オニノダケ抽出物の薬学的有効量を胃腸障害の予防および／または治療を必要とする患者に投与する段階を含む胃腸障害の予防および／または治療方法を提供する。前記方法は、前記投与する段階の前に、胃腸障害の予防および／または治療を必要とする患者を確認する段階を追加的に含んでもよい。前記胃腸障害は、抗血栓および／または血管系疾患治療剤、例えば、非ステロイド抗炎症剤（Ｎｏｎｓｔｅｒｏｉｄａｌ  ａｎｔｉ−ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｄｒｕｇｓ；ＮＳＡＩＤｓ）系薬物によって誘発される胃潰瘍、胃腸出血などである。
【００１０】
他の例は、オニノダケ（Ａｎｇｅｌｉｃａ  ｇｉｇａｓ  Ｎａｋａｉ）抽出物および非ステロイド抗炎症剤を含む、抗炎症、鎮痛、または炎症性疾患の予防および／または治療のための併用投与用薬学組成物を提供する。他の例は、抗炎症または鎮痛または炎症性疾患の予防および／または治療を必要とする患者にオニノダケ（Ａｎｇｅｌｉｃａ  ｇｉｇａｓ  Ｎａｋａｉ）抽出物および非ステロイド抗炎症剤を併用投与する段階を含む、抗炎症または鎮痛、または炎症性疾患の予防および／または治療方法を提供する。前記併用投与段階は、オニノダケ（Ａｎｇｅｌｉｃａ  ｇｉｇａｓ  Ｎａｋａｉ）抽出物および非ステロイド抗炎症剤を同時にまたは順序に関係なく順次に投与して行われるものであってもよい。前記方法は、前記併用投与する段階の前に、抗炎症、鎮痛、または炎症性疾患の予防および／または治療を必要とする患者を確認する段階を追加的に含んでもよい。前記組成物および方法は、非ステロイド抗炎症剤によって誘発される胃潰瘍、胃腸出血などの胃腸障害を予防、減少、改善、緩和、除去または治療できることを特徴とする。
【００１１】
また、オニノダケ（Ａｎｇｅｌｉｃａ  ｇｉｇａｓ  Ｎａｋａｉ）抽出物の胃腸障害を起こすことなく抗血栓および／または血管系疾患の治療効果および胃腸障害を起こさない効果に基づき、オニノダケ（Ａｎｇｅｌｉｃａ  ｇｉｇａｓ  Ｎａｋａｉ）抽出物の抗血栓および／または血管系疾患治療剤の一部または全部を代替して使用される用途を提供する。
【００１２】
具体的には、一例は、オニノダケ（Ａｎｇｅｌｉｃａ  ｇｉｇａｓ  Ｎａｋａｉ）抽出物および抗血栓剤を含む抗血栓（または血小板凝集抑制）、または血管系疾患の予防および／または治療のための併用投与用薬学組成物を提供する。
【００１３】
他の例は、オニノダケ（Ａｎｇｅｌｉｃａ  ｇｉｇａｓ  Ｎａｋａｉ）抽出物および抗血栓剤を抗血栓（または血小板凝集抑制）、または血管系疾患の予防および／または治療を必要とする患者に併用投与する段階を含む、抗血栓（または血小板凝集抑制、または血栓抑制）方法、または血管系疾患の予防および／または治療方法を提供する。前記併用投与段階は、オニノダケ（Ａｎｇｅｌｉｃａ  ｇｉｇａｓ  Ｎａｋａｉ）抽出物および抗血栓剤を同時にまたは順序に関係なく順次に投与して行われるものであってもよい。前記方法は、前記併用投与する段階の前に、抗血栓（または血小板凝集抑制）、または血管系疾患の予防および／または治療を必要とする患者を確認する段階を追加的に含んでもよい。
【課題を解決するための手段】
【００１４】
本発明は、オニノダケ（Ａｎｇｅｌｉｃａ  ｇｉｇａｓ  Ｎａｋａｉ）抽出物の抗血栓、および血管系疾患の予防、治療および／または改善効果に関する。
【００１５】
より具体的には、一例は、オニノダケ（Ａｎｇｅｌｉｃａ  ｇｉｇａｓ  Ｎａｋａｉ）抽出物を有効成分として含む抗血栓用薬学組成物（抗血栓剤）または血小板凝集抑制用薬学組成物（血小板凝集抑制剤）を提供する。
他の例は、オニノダケ抽出物を有効成分として含む血管系疾患の予防および／または治療用薬学組成物を提供する。
【００１６】
他の例は、オニノダケ（Ａｎｇｅｌｉｃａ  ｇｉｇａｓ  Ｎａｋａｉ）抽出物を含む抗血栓用健康機能性食品または血小板凝集抑制用健康機能性食品を提供する。
他の例は、オニノダケ抽出物を含む血管系疾患の予防および／または改善用健康機能性食品を提供する。
【００１７】
他の例は、オニノダケ抽出物の薬学的有効量を血小板凝集の抑制を必要とする患者に投与する段階を含む抗血栓（血小板凝集抑制、または血栓抑制）方法を提供する。前記方法は、前記投与する段階の前に、血小板凝集の抑制を必要とする患者を確認する段階を追加的に含んでもよい。
【００１８】
他の例は、オニノダケ抽出物の薬学的有効量を血管系疾患の予防および／または治療を必要とする患者に投与する段階を含む血管系疾患の予防および／または治療方法を提供する。前記方法は、前記投与する段階の前に、血管系疾患の予防および／または治療を必要とする患者を確認する段階を追加的に含んでもよい。
【００１９】
他の例は、オニノダケ（Ａｎｇｅｌｉｃａ  ｇｉｇａｓ  Ｎａｋａｉ）抽出物が既存の抗血栓および／または血管系疾患治療剤の副作用である胃腸障害を起こさないという点に基づき、オニノダケ（Ａｎｇｅｌｉｃａ  ｇｉｇａｓ  Ｎａｋａｉ）抽出物は、非ステロイド抗炎症剤（Ｎｏｎｓｔｅｒｏｉｄａｌ  ａｎｔｉ−ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｄｒｕｇｓ；ＮＳＡＩＤｓ）系薬物のような既存の抗血栓および／または血管系疾患治療剤によって誘発される胃腸障害の予防、減少、改善、緩和、および／または治療用途を提供する。
【００２０】
具体的には、一例は、オニノダケ抽出物を有効成分として含む胃腸障害の予防および／または治療用薬学組成物を提供する。他の例は、オニノダケ（Ａｎｇｅｌｉｃａ  ｇｉｇａｓ  Ｎａｋａｉ）抽出物を含む胃腸障害の予防および／または改善用健康機能性食品を提供する。他の例は、オニノダケ抽出物の薬学的有効量を胃腸障害の予防および／または治療を必要とする患者に投与する段階を含む胃腸障害の予防および／または治療方法を提供する。前記方法は、前記投与する段階の前に、胃腸障害の予防および／または治療を必要とする患者を確認する段階を追加的に含んでもよい。前記胃腸障害は、抗血栓および／または血管系疾患治療剤、例えば、非ステロイド抗炎症剤（Ｎｏｎｓｔｅｒｏｉｄａｌ  ａｎｔｉ−ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｄｒｕｇｓ；ＮＳＡＩＤｓ）系薬物によって誘発される胃潰瘍、胃腸出血などの胃腸障害である。
【００２１】
他の例は、オニノダケ（Ａｎｇｅｌｉｃａ  ｇｉｇａｓ  Ｎａｋａｉ）抽出物および非ステロイド抗炎症剤を含む、抗炎症、鎮痛、または炎症性疾患の予防および／または治療のための併用投与用薬学組成物を提供する。他の例は、抗炎症または鎮痛または炎症性疾患の予防および／または治療を必要とする患者にオニノダケ（Ａｎｇｅｌｉｃａ  ｇｉｇａｓ  Ｎａｋａｉ）抽出物および非ステロイド抗炎症剤を併用投与する段階を含む、抗炎症または鎮痛、または炎症性疾患の予防および／または治療方法を提供する。前記併用投与段階は、オニノダケ（Ａｎｇｅｌｉｃａ  ｇｉｇａｓ  Ｎａｋａｉ）抽出物および非ステロイド抗炎症剤を同時にまたは順序に関係なく順次に投与して行われるものであってもよい。前記方法は、前記併用投与する段階の前に、抗炎症、鎮痛、または炎症性疾患の予防および／または治療を必要とする患者を確認する段階を追加的に含んでもよい。前記組成物および方法は、非ステロイド抗炎症剤によって誘発される胃潰瘍、胃腸出血などの胃腸障害を予防、減少、改善、緩和、除去または治療できることを特徴とする。
【００２２】
前記併用投与用薬学組成物に含まれるか、併用投与段階で投与されるオニノダケ（Ａｎｇｅｌｉｃａ  ｇｉｇａｓ  Ｎａｋａｉ）抽出物および非ステロイド抗炎症剤の含有量比は、投与対象患者の状態に応じて適切に処方可能であり、例えば、重量ベースで、１：０．１〜１０、１：０．１〜７．５、１：０．１〜５、１：０．１〜２．５、１：０．１〜１、１：０．１〜０．７５、１：０．１〜０．５、１：０．１〜０．２５、１：０．２５〜１０、１：０．２５〜７．５、１：０．２５〜５、１：０．２５〜２．５、１：０．２５〜１、１：０．２５〜０．７５、１：０．２５〜０．５、１：０．５〜１０、１：０．５〜７．５、１：０．５〜５、１：０．５〜２．５、１：０．５〜１、１：０．５〜０．７５、１：０．７５〜１０、１：０．７５〜７．５、１：０．７５〜５、１：０．７５〜２．５、１：０．７５〜１、１：１〜１０、１：１〜７．５、１：１〜５、１：１〜２．５、１：２．５〜１０、１：２．５〜７．５、１：２．５〜５、１：５〜１０、または１：５〜７．５（オニノダケ抽出物の重量：非ステロイド抗炎症剤の重量）であってもよいが、これに限定されるものではない。
【００２３】
また、オニノダケ（Ａｎｇｅｌｉｃａ  ｇｉｇａｓ  Ｎａｋａｉ）抽出物の胃腸障害を起こすことなく抗血栓および／または血管系疾患の治療効果および胃腸障害を起こさない効果に基づき、オニノダケ（Ａｎｇｅｌｉｃａ  ｇｉｇａｓ  Ｎａｋａｉ）抽出物の抗血栓および／または血管系疾患治療剤の一部または全部を代替して使用される用途を提供する。
【００２４】
具体的には、一例は、オニノダケ（Ａｎｇｅｌｉｃａ  ｇｉｇａｓ  Ｎａｋａｉ）抽出物および抗血栓剤を含む抗血栓（または血小板凝集抑制、または血栓抑制）方法、または血管系疾患の予防および／または治療のための併用投与用薬学組成物を提供する。
【００２５】
他の例は、オニノダケ（Ａｎｇｅｌｉｃａ  ｇｉｇａｓ  Ｎａｋａｉ）抽出物および抗血栓剤を抗血栓（または血小板凝集抑制）、または血管系疾患の予防および／または治療を必要とする患者に併用投与する段階を含む、抗血栓（または血小板凝集抑制）、または血管系疾患の予防および／または治療方法を提供する。前記併用投与段階は、オニノダケ（Ａｎｇｅｌｉｃａ  ｇｉｇａｓ  Ｎａｋａｉ）抽出物および抗血栓剤を同時にまたは順序に関係なく順次に投与して行われるものであってもよい。前記方法は、前記併用投与する段階の前に、抗血栓（または血小板凝集抑制）、または血管系疾患の予防および／または治療を必要とする患者を確認する段階を追加的に含んでもよい。
【００２６】
前記併用投与用薬学組成物に含まれるか、併用投与段階で投与されるオニノダケ（Ａｎｇｅｌｉｃａ  ｇｉｇａｓ  Ｎａｋａｉ）抽出物および抗血栓剤の含有量比は、投与対象患者の状態に応じて適切に処方可能であり、例えば、重量ベースで、１：０．１〜１０、１：０．１〜７．５、１：０．１〜５、１：０．１〜２．５、１：０．１〜１、１：０．１〜０．７５、１：０．１〜０．５、１：０．１〜０．２５、１：０．２５〜１０、１：０．２５〜７．５、１：０．２５〜５、１：０．２５〜２．５、１：０．２５〜１、１：０．２５〜０．７５、１：０．２５〜０．５、１：０．５〜１０、１：０．５〜７．５、１：０．５〜５、１：０．５〜２５、１：０．５〜１、１：０．５〜０．７５、１：０．７５〜１０、１：０．７５〜７．５、１：０．７５〜５、１：０．７５〜２．５、１：０．７５〜１、１：１〜１０、１：１〜７．５、１：１〜５、１：１〜２．５、１：２．５〜１０、１：２．５〜７．５、１：２．５〜５、１：５〜１０、または１：５〜７．５（オニノダケ抽出物の重量：抗血栓剤の重量）であってもよいが、これに限定されるものではない。
【００２７】
本明細書において、「抗血栓剤」は、抗血栓（例えば、血小板凝集抑制）作用をする全ての薬物（小分子化合物、タンパク質、ペプチド、天然物、天然抽出物など）の中から選択されたものであってもよいし、例えば、アスピリン、イブプロフェンなどを含む非ステロイド抗炎症剤（Ｎｏｎｓｔｅｒｏｉｄａｌ  ａｎｔｉ−ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｄｒｕｇｓ；ＮＳＡＩＤｓ）の中から選択された１種以上であってもよいが、これに限定されるものではない。
【００２８】
本明細書において、「非ステロイド抗炎症剤」または「非ステロイド抗炎症剤系薬物」は、アスピリン、セレコキシブ、イブプロフェンなどからなる群より選択される１種以上であってもよい。
【００２９】
本明細書において、「治療」は、症状の軽減、緩和、好転、または改善、疾患の範囲の減少、疾患進行の遅延または緩和、疾患の状態または症状の改善、軽減または安定化、部分的または完全な回復、生存の延長、その他の良い治療結果などを全て含む意味で使用される。
【００３０】
本明細書において、「抗血栓剤」は、血管内の血栓の生成を阻害するか、および／または血栓によって誘発される症状を予防、緩和、改善、および／または治療する作用をする全ての薬学組成物を意味するもので、血小板凝集（凝固）抑制剤、抗血小板剤、抗血栓症剤などで表現される。
【００３１】
本明細書において、「血管系疾患」は、血管で血栓によって誘発される全ての疾患を意味するもので、脳卒中、脳梗塞、高血圧などの脳血管系疾患、心筋梗塞、狭心症などの心血管系疾患、動脈硬化症、末梢血管系疾患などからなる群より選択された１種以上であってもよい。
【００３２】
本発明で提供される抗血栓剤および血管系疾患の予防または治療用組成物は、既存の抗血栓剤として使用されるアスピリン、イブプロフェンなどの非ステロイド抗炎症剤（Ｎｏｎｓｔｅｒｏｉｄａｌ  ａｎｔｉ−ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｄｒｕｇｓ；ＮＳＡＩＤｓ）系薬物の副作用である胃潰瘍、胃腸出血などの胃腸障害を誘発しないという利点を有する。
【００３３】
本明細書において、「炎症」は、細菌、真菌、ウイルス、寄生虫、および／または外来免疫原性物質（例えば、タンパク質、小分子化合物など）の感染、または自家免疫などによって誘発される炎症を全て含む意味で使用される。本明細書において、「抗炎症」は、炎症を予防、緩和、改善、好転、または除去（治療）する作用を意味することができる。
【００３４】
本明細書において、「痛み」は、神経病症性痛み（神経痛など）、頭痛、筋肉痛、胃痛、生理痛などから選択可能であり、「鎮痛」は、痛みの緩和、改善、好転、または除去（治療）を意味することができる。
【００３５】
本明細書において、「炎症性疾患」は、関節炎（例えば、骨関節炎、リウマチ関節炎など）、心嚢炎、血管炎（川崎病）、脊髄炎などから選択できるが、これに限定されるものではない。
【００３６】
トウキはセリ科に属する多年草植物であって、主に韓国、日本、中国などで薬用を目的として栽培されている。トウキは、その産地によって、韓国で生産されるオニノダケ（Ａｎｇｅｌｉｃａ  ｇｉｇａｓ  Ｎａｋａｉ）、日本で生産されるヤマトトウキ（Ａｎｇｅｌｉｃａ  ａｃｕｔｉｌｏｂａ  Ｋｉｔａｇａｗ）、そして中国で生産されるカラトウキ（Ａｎｇｅｌｉｃａ  ｓｉｎｅｎｓｉｓ  Ｄｉｅｌｓ）に区分され、その成分と薬理的効果は異なることが知られている。昔からトウキは幼筍をお浸しとして食用にし、根を鎮痛、抗癌、腎臓毒性軽減、肝機能改善、糖尿性高血圧治療、血液循環改善など、多様な疾患に対する薬材として使用している。
【００３７】
前記オニノダケ（Ａｎｇｅｌｉｃａ  ｇｉｇａｓ  Ｎａｋａｉ）抽出物は、オニノダケ（例えば、全体または根）を水、および炭素数１〜４の直鎖または分枝状アルコールからなる群より選択された１種以上の抽出溶媒で抽出して得られたものであってもよい。一例において、前記オニノダケ抽出物は、オニノダケ（例えば、根）を３０〜１００％（ｖ／ｖ）、４０〜１００％（ｖ／ｖ）、５０〜１００％（ｖ／ｖ）、６０〜１００％（ｖ／ｖ）、７０〜１００％（ｖ／ｖ）、８０〜１００％（ｖ／ｖ）、９０〜１００％（ｖ／ｖ）、９２〜１００％（ｖ／ｖ）、９６〜１００％（ｖ／ｖ）、または９８〜１００％（ｖ／ｖ）エタノール水溶液（例えば、９８％（ｖ／ｖ）エタノール水溶液（酒精））で抽出して得られたオニノダケエタノール水溶液抽出物であってもよい。また、前記オニノダケ抽出物は、１０〜９０℃、１０〜８０℃、１０〜７０℃、１０〜６０℃、１０〜５０℃、２０〜９０℃、２０〜８０℃、２０〜７０℃、２０〜６０℃、２０〜５０℃、３０〜９０℃、３０〜８０℃、３０〜７０℃、３０〜６０℃、３０〜５０℃、４０〜９０℃、４０〜８０℃、４０〜７０℃、４０〜６０℃、４０〜５５℃、または４０〜５０℃で抽出されたものであってもよい。
【００３８】
本明細書に使用されたオニノダケ抽出物、例えば、オニノダケエタノール抽出物（９０〜１００％（ｖ／ｖ）、９２〜１００％（ｖ／ｖ）、９６〜１００％（ｖ／ｖ）、または９８〜１００％（ｖ／ｖ）エタノール水溶液で、１０〜８０℃、１０〜７０℃、１０〜６０℃、１０〜５０℃、２０〜８０℃、２０〜７０℃、２０〜６０℃、２０〜５０℃、３０〜８０℃、３０〜７０℃、３０〜６０℃、３０〜５０℃、４０〜８０℃、４０〜７０℃、４０〜６０℃、４０〜５５℃、または４０〜５０℃で抽出）は、抽出物計１００ｇあたり、
【００３９】
（１）デクルシンの含有量が約２０００ｍｇ以上、約２２００ｍｇ以上、約２４００ｍｇ以上、約２６００ｍｇ以上、または約２８００ｍｇ以上、約３０００ｍｇ以上、例えば、２０００〜５０００ｍｇ、２０００〜４５００ｍｇ、２０００〜４０００ｍｇ、２０００〜３５００ｍｇ、２２００〜５０００ｍｇ、２２００〜４５００ｍｇ、２２００〜４０００ｍｇ、２２００〜３５００ｍｇ、２４００〜５０００ｍｇ、２４００〜４５００ｍｇ、２４００〜４０００ｍｇ、２４００〜３５００ｍｇ、２６００〜５０００ｍｇ、２６００〜４５００ｍｇ、２６００〜４０００ｍｇ、２６００〜３５００ｍｇ、２８００〜５０００ｍｇ、２８００〜４５００ｍｇ、２８００〜４０００ｍｇ、２８００〜３５００ｍｇ、３０００〜５０００ｍｇ、３０００〜４５００ｍｇ、３０００〜４０００ｍｇ、または３０００〜３５００ｍｇであるか、および／または
【００４０】
（２）デクルシノールアンゲレートの含有量が約１２００ｍｇ以上、約１４００ｍｇ以上、約１６００ｍｇ以上、または約１８００ｍｇ以上、例えば、１２００〜３０００ｍｇ、１２００〜２８００ｍｇ、１２００〜２６００ｍｇ、１２００〜２４００ｍｇ、１２００〜２２００ｍｇ、１４００〜３０００ｍｇ、１４００〜２８００ｍｇ、１４００〜２６００ｍｇ、１４００〜２４００ｍｇ、１４００〜２２００ｍｇ、１６００〜３０００ｍｇ、１６００〜２８００ｍｇ、１６００〜２６００ｍｇ、１６００〜２４００ｍｇ、１６００〜２２００ｍｇ、１８００〜３０００ｍｇ、１８００〜２８００ｍｇ、１８００〜２６００ｍｇ、１８００〜２４００ｍｇ、または１８００〜２２００ｍｇであるか、および／または
【００４１】
（３）ノダケニン（Ｎｏｄａｋｅｎｉｎ）の含有量が約８００ｍｇ以上、約１０００ｍｇ以上、約１２００ｍｇ以上、約１５００ｍｇ以上、約１７００ｍｇ以上、約２０００ｍｇ以上、約２２００ｍｇ以上、約２５００ｍｇ以上、または約２７００以上、例えば、８００〜５０００ｍｇ、８００〜４５００ｍｇ、８００〜４０００ｍｇ、８００〜３５００ｍｇ、８００〜３２００ｍｇ、１０００〜５０００ｍｇ、１０００〜４５００ｍｇ、１０００〜４０００ｍｇ、１０００〜３５００ｍｇ、１０００〜３２００ｍｇ、１２００〜５０００ｍｇ、１２００〜４５００ｍｇ、１２００〜４０００ｍｇ、１２００〜３５００ｍｇ、１２００〜３２００ｍｇ、１５００〜５０００ｍｇ、１５００〜４５００ｍｇ、１５００〜４０００ｍｇ、１５００〜３５００ｍｇ、１５００〜３２００ｍｇ、１７００〜５０００ｍｇ、１７００〜４５００ｍｇ、１７００〜４０００ｍｇ、１７００〜３５００ｍｇ、１７００〜３２００ｍｇ、２０００〜５０００ｍｇ、２０００〜４５００ｍｇ、２０００〜４０００ｍｇ、２０００〜３５００ｍｇ、２０００〜３２００ｍｇ、２２００〜５０００ｍｇ、２２００〜４５００ｍｇ、２２００〜４０００ｍｇ、２２００〜３５００ｍｇ、２２００〜３２００ｍｇ、２５００〜５０００ｍｇ、２５００〜４５００ｍｇ、２５００〜４０００ｍｇ、２５００〜３５００ｍｇ、２５００〜３２００ｍｇ、２７００〜５０００ｍｇ、２７００〜４５００ｍｇ、２７００〜４０００ｍｇ、２７００〜３５００ｍｇ、または２７００〜３２００ｍｇであるか、および／または
【００４２】
（４）ベータ−シトステロールの含有量が３０ｍｇ以上、５０ｍｇ以上、１００ｍｇ以上、１５０ｍｇ以上、２００ｍｇ以上、２５０ｍｇ以上、または３００ｍｇ以上、例えば、３０〜１０００ｍｇ、３０〜８００ｍｇ、３０〜６００ｍｇ、３０〜５００ｍｇ、３０〜４００ｍｇ、５０〜１０００ｍｇ、５０〜８００ｍｇ、５０〜６００ｍｇ、５０〜５００ｍｇ、５０〜４００ｍｇ、１００〜１０００ｍｇ、１００〜８００ｍｇ、１００〜６００ｍｇ、１００〜５００ｍｇ、１００〜４００ｍｇ、１５０〜１０００ｍｇ、１５０〜８００ｍｇ、１５０〜６００ｍｇ、１５０〜５００ｍｇ、１５０〜４００ｍｇ、２００〜１０００ｍｇ、２００〜８００ｍｇ、２００〜６００ｍｇ、２００〜５００ｍｇ、２００〜４００ｍｇ、２５０〜１０００ｍｇ、２５０〜８００ｍｇ、２５０〜６００ｍｇ、２５０〜５００ｍｇ、２５０〜４００ｍｇ、３００〜１０００ｍｇ、３００〜８００ｍｇ、３００〜６００ｍｇ、３００〜５００ｍｇ、または３００〜４００ｍｇ
であってもよい。
前記薬学組成物内の有効成分として含まれているオニノダケ抽出物は、乾燥物、濃縮物、または濃縮乾燥物の形態であってもよい。
【００４３】
前記薬学組成物内の有効成分として含まれているオニノダケ抽出物の含有量は、使用形態および目的、患者の状態、症状の種類および軽重などによって適切に調節可能であり、固形分重量ベースで、０．００１〜９９．９重量％、０．０１〜７０重量％、または０．１〜５０重量％であってもよいが、これに限定されない。固形分重量とは、先に説明したように、抽出物から溶媒成分を除去した固形物の重量を意味する。
【００４４】
前記薬学組成物は、ヒト、イヌ、ネコ、ウマ、ウシ、ブタ、ヤギ、ウサギ、マウス、ラットなどを含む哺乳動物、またはこれから分離された細胞、組織、またはその培養物に多様な経路で投与可能である。投与方式は、通常使用される全ての方式であってもよいし、例えば、経口投与、または静脈投与、筋肉投与、皮下投与、腹膜内投与、病変部位（例えば、関節）局所投与のような非経口投与であってもよい。前記薬学組成物は、通常の方法により、散剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤、懸濁液、エマルジョン、シロップ、エアゾールなどの経口型剤形、経皮剤、坐剤および滅菌注射溶液の形態の非経口剤形などに剤形化して使用できる。
【００４５】
前記薬学組成物は、前記オニノダケ抽出物の外に、薬剤学的に適合し生理学的に許容される担体、賦形剤、および／または希釈剤などの補助剤を追加的に含有するものであってもよい。前記担体、賦形剤、または希釈剤の例として、ラクトース、デキストロース、スクロース、ソルビトール、マンニトール、キシリトール、エリスリトール、マルチトール、デンプン、アカシアガム、アルギネート、ゼラチン、カルシウムホスフェート、カルシウムシリケート、セルロース、メチルセルロース、微晶質セルロース、ポリビニルピロリドン、水、メチルヒドロキシベンゾエート、プロピルヒドロキシベンゾエート、タルク、マグネシウムステアレートおよび鉱物油などからなる群より選択された１種以上が挙げられる。製剤化の場合には、通常使用する充填剤、増量剤、結合剤、湿潤剤、崩壊剤、界面活性剤などからなる群より選択された１種以上の希釈剤または賦形剤を使用することができる。経口投与のための固形製剤には、錠剤、丸剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤、シロップ剤、粉末剤、懸濁剤などからなる群より選択された１種以上が含まれ、このような固形製剤は、前記抽出物に少なくとも１つ以上の賦形剤、例えば、デンプン、カルシウムカーボネート、スクロース、ラクトース、ゼラチンなどからなる群より選択された１種以上を混合して調製できる。また、単純な賦形剤の外に、マグネシウムスチレートタルクのような潤滑剤も使用される。経口投与のための液状製剤としては、懸濁剤、内用液剤、乳剤、シロップ剤などからなる群より選択された１種以上が該当するが、良く使用される単純希釈剤である水、リキッドパラフィンの外に、様々な賦形剤、例えば、湿潤剤、甘味剤、芳香剤、保存剤などからなる群より選択された１種以上が含まれる。非経口投与のための製剤には、滅菌された水溶液、非水性溶剤、懸濁剤、乳剤、凍結乾燥製剤、坐剤、経皮剤などからなる群より選択された１種以上が含まれる。非水性溶剤、懸濁剤としては、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、オリーブオイルのような植物性油、エチルオレートのような注射可能なエステルなどからなる群より選択された１種以上が使用できる。
【００４６】
前記薬学組成物は、薬学的有効量で投与可能である。前記薬学的組成物の投与量は、製剤化方法、投与方式、患者の年齢、体重、性別、病的状態、食べ物、投与時間、投与間隔、投与経路、排泄速度および反応感応性のような要因によって多様に処方可能である。投与用量は、患者の年齢、体重、性別、投与形態、健康状態および疾患の程度に応じて異なり、医師または薬剤師の判断により、一定時間間隔で１日１回〜数回に分割投与してもよい。例えば、薬学組成物の１日投与量は、有効成分（オニノダケ抽出物）の固形分重量ベースで、０．００１〜１０００ｍｇ／ｋｇ、具体的には０．０１〜１００ｍｇ／ｋｇ、より具体的には０．１〜２０ｍｇ／ｋｇの範囲であってもよいが、これに限定されるものではない。前記１日投与量は、単位用量形態で１つの製剤に製剤化されるか、適切に分量して製剤化されるか、多用量容器内に移入させて製造されてもよい。前記投与量は平均的な場合を例示したものであって、個人的な差によりその投与量が高いか低い。
【００４７】
本発明の他の例は、オニノダケ抽出物を製造する段階を含む、抗血栓剤または血管系疾患の予防、治療、および／または改善効果を有する組成物の製造方法を提供する。前記オニノダケ抽出物を製造する段階は、オニノダケの根を、１０〜８０℃、１０〜７０℃、１０〜６０℃、１０〜５０℃、２０〜８０℃、２０〜７０℃、２０〜６０℃、２０〜５０℃、３０〜８０℃、３０〜７０℃、３０〜６０℃、３０〜５０℃、４０〜８０℃、４０〜７０℃、４０〜６０℃、４０〜５５℃、または４０〜５０℃で、１〜１０容積倍、２〜８容積倍、または４〜６容積倍の水、および炭素数１〜４の直鎖または分枝状アルコール（例えば、エタノール）からなる群より選択された１種以上、例えば、９０〜１００％（ｖ／ｖ）、９２〜１００％（ｖ／ｖ）、９６〜１００％（ｖ／ｖ）、または９８〜１００％（ｖ／ｖ）エタノール水溶液（例えば、９８％（ｖ／ｖ）エタノール水溶液（酒精））で抽出する段階を含むものであってもよい。抽出時間は、抽出が十分に行われる時間であれば十分であり、１時間以上、２時間以上、３時間以上、または４時間以上、例えば、１〜１２時間、２〜１２時間、３〜１２時間、４〜１２時間、１〜６時間、２〜６時間、３〜６時間、または４〜６時間程度に設定することができるが、これに限定されるものではない。
【００４８】
前記方法に使用された抽出過程は、通常使用される全ての抽出方法によって行われ、例えば、熱水抽出、超音波抽出、還流抽出法などからなる群より選択された１種以上の方法によって行われてもよいが、これに限定されるものではない。
【００４９】
他の側面において、本発明は、オニノダケ抽出物を含有する、抗血栓用（血小板凝集抑制用）または血管系疾患の予防および／または改善用健康機能性食品を提供する。
【００５０】
前記健康機能性食品は、日常の食事で欠乏しやすい栄養素や人体に有用な機能を有する原料や成分（以下、「機能性原料」）を用いて製造した食品で、健康を維持したり、所定の疾病または症状を予防および／または改善するのに役立つすべての食品を意味し、最終製品の形態には特別な制限がない。例えば、前記健康機能性食品は、各種食品、飲料組成物、食品添加剤などからなる群より選択されたものであってもよいが、これに限定されるものではない。
【００５１】
前記健康機能性食品に含有されたオニノダケ抽出物の含有量は、食品の形態、所望の用途などに応じて適切に調節可能であり、例えば、全体食品重量の０．００１〜９５重量％または０．０１〜９０重量％であってもよい。
【００５２】
前記健康機能性食品は、様々な栄養剤、ビタミン、鉱物（電解質）、合成風味剤または天然風味剤などの風味剤、着色剤、充填剤（チーズ、チョコレートなど）、ペクチン酸またはその塩、アルギン酸またはその塩、有機酸、保護性コロイド増粘剤、ｐＨ調節剤、安定化剤、防腐剤、グリセリン、アルコール、炭酸飲料に使用される炭酸化剤などからなる群より選択された１種以上を追加的に含有することができる。その他、前記健康機能性食品、特に健康機能飲料組成物は、天然果物ジュース、果物ジュース飲料、または野菜飲料の製造のための果肉を含有することができる。このような成分は、独立してまたは組み合わせて使用可能である。このような添加剤の比率は、全体健康機能性食品１００重量部あたり、０．００１〜約２０重量部の範囲で選択されることが一般的であるが、これに限定されるものではない。
【発明の効果】
【００５３】
本明細書で確認されたように、オニノダケ抽出物は、胃腸障害を誘発することなく優れた抗血栓効果を奏するので、抗血栓剤または血管系疾患治療剤として有用に適用可能である。
【図面の簡単な説明】
【００５４】
【図１Ａ】ヒト血液におけるオニノダケ抽出物の抗血栓効果を示すグラフである。
【図１Ｂ】ヒト血液におけるオニノダケ抽出物の抗血栓効果を示すグラフである。
【図２】アスピリンで胃腸障害を誘発させたマウスモデルにおけるオニノダケ抽出物投与時の胃腸粘膜の様子を示す写真である。
【図３】図２から確認された胃腸粘膜の損傷の程度を定量して示すグラフである（Ｕｌｃｅｒ  ｉｎｄｅｘ；ＵＩ）。
【図４】セレブレックスで胃腸障害を誘発させたマウスモデルにおけるオニノダケ抽出物投与時の胃腸粘膜の様子を示す写真である。
【図５】図４から確認された胃腸粘膜の損傷の程度を定量して示すグラフである（Ｕｌｃｅｒ  ｉｎｄｅｘ；ＵＩ）。
【発明を実施するための形態】
【００５５】
以下、実施例を挙げて本発明をより具体的に説明するが、これは例示的なものに過ぎず、本発明の範囲を制限しようとするものではない。下記の実施例は発明の本質的な要旨を逸脱しない範囲で変形できることは当業者にとって自明である。
【００５６】
［実施例１：オニノダケ抽出物の製造］
１．１．オニノダケエタノール抽出物の製造
オニノダケ（Ａｎｇｅｌｉｃａ  ｇｉｇａｓ  Ｎａｋａｉ）の根をきれいな水を用いて洗浄した後、十分に乾燥した。乾燥したオニノダケの根を破砕して得られた粉末１００ｇに５容積倍（５００ｍｌ）のエタノール（９８％（ｖ／ｖ）エタノール（酒精））を添加し、４０〜６０℃で４時間以上抽出した後、１ｕｍ（ｍｉｃｒｏｍｅｔｅｒ）のフィルタでろ過した濾液を元の重量の１０％になるまで加温濃縮した。前記得られた濃縮物に結晶セルロースを徐々に加えながら濃縮し続けて完全に乾燥させた後、粉末化して、オニノダケエタノール抽出物粉末を製造した（以下、ＡＧＥ２３２と名付ける）。
【００５７】
１．２．オニノダケエタノール高温抽出物の製造
オニノダケの根をきれいな水を用いて洗浄した後、十分に乾燥した。乾燥したオニノダケの根を破砕して得られた粉末１００ｇに５容積倍（５００ｍｌ）のエタノール（９８％（ｖ／ｖ）エタノール（酒精））を添加し、約９０℃で４時間以上抽出した後、１ｕｍ（ｍｉｃｒｏｍｅｔｅｒ）のフィルタでろ過した濾液を元の重量の１０％になるまで加温濃縮した。前記得られた濃縮物に結晶セルロースを徐々に加えながら濃縮し続けて完全に乾燥させた後、粉末化して、高温オニノダケエタノール抽出物粉末を製造した。
【００５８】
１．３．オニノダケエタノール（低濃度）抽出物の製造
オニノダケの根をきれいな水を用いて洗浄した後、十分に乾燥した。乾燥したオニノダケの根を破砕して得られた粉末１００ｇに５容積倍（５００ｍｌ）の３０％（ｖ／ｖ）エタノールを添加し、４０〜６０℃で４時間以上抽出した後、１ｕｍ（ｍｉｃｒｏｍｅｔｅｒ）のフィルタでろ過した濾液を元の重量の１０％になるまで加温濃縮した。前記得られた濃縮物に結晶セルロースを徐々に加えながら濃縮し続けて完全に乾燥させた後、粉末化して、オニノダケエタノール（低濃度）抽出物粉末を製造した。
【００５９】
１．４．オニノダケ熱水抽出物の製造
オニノダケ２ｋｇに蒸留水５，０００ｍｌを加えて水浴槽（約９０℃）で８時間ずつ４回抽出後、ろ過して濃縮器で溶媒を蒸発させて生薬抽出物を得た。前記得られた抽出物を凍結乾燥機で１２時間凍結乾燥し、粉末化して、乾燥粉末状態のオニノダケ熱水抽出物粉末を準備した。
【００６０】
１．５．オニノダケエタノールＲ／Ｔ（ｒｏｏｍ  ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ）抽出物の製造
オニノダケの根をきれいな水を用いて洗浄した後、十分に乾燥した。乾燥したオニノダケの根を破砕して得られた粉末１００ｇに５容積倍（５００ｍｌ）のエタノール（９８％（ｖ／ｖ）エタノール（酒精））を添加し、常温（約２５℃）で４時間以上抽出した後、１ｕｍ（ｍｉｃｒｏｍｅｔｅｒ）のフィルタでろ過した濾液を元の重量の１０％になるまで加温濃縮した。前記得られた濃縮物に結晶セルロースを徐々に加えながら濃縮し続けて完全に乾燥させた後、粉末化して、高温オニノダケエタノールＲ／Ｔ抽出物粉末を製造した。
【００６１】
［実施例２：抗血栓効果試験］
２．１．Ｅｘ−ｖｉｖｏ試験
血小板準備のために、ヒトＰｌａｔｅｌｅｔ−ｒｉｃｈ  ｐｌａｓｍａ（ＰＲＰ）をＲｅｄ  Ｃｒｏｓｓ  Ｂｌｏｏｄ  Ｃｅｎｔｅｒ（Ｓｅｏｕｌ、Ｋｏｒｅａ）から入手した（ＰＲＰ  ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ：１ｘ１０９  ｐｌａｔｅｌｅｔｓ／ｍｌ）。
【００６２】
血小板の分析は次のように行った：
分析機器としてＣｈｒｏｎｏ−Ｌｏｇ  Ｃｏ社のＡｇｇｒｅｇｏｍｅｔｅｒ（Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ：Ｗｈｏｌｅ  ｂｌｏｏｄ／ｏｐｔｉｃａｌ  Ｌｕｍｉ−Ａｇｇｒｅｇｏｍｅｔｅｒ  Ｍｏｄｅｌ７００（ＣＨＲＯＮＯ−ＬＯＧ））を使用した。ＰＰＰ（Ｐｌａｔｅｌｅｔ  Ｐｏｏｒ  Ｐｌａｓｍａ；Ｒｅｄ  Ｃｒｏｓｓ  Ｂｌｏｏｄ  Ｃｅｎｔｅｒ（Ｓｅｏｕｌ、Ｋｏｒｅａ））のＬｉｇｈｔ  ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ値を基準（Ｂａｓｅｌｉｎｅ）値とし、ＰＲＰ（Ｐｌａｔｅｌｅｔ  Ｒｉｃｈ  Ｐｌａｓｍａ）凝集によるＬｉｇｈｔ  ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ干渉される最大値を百分率（％）に換算した。Ａｇｇｒｅｇａｔｉｏｎ  ａｇｅｎｔとしてｃｏｌｌａｇｅｎ（１２．５μｇ／ｍｌ）を使用した。
【００６３】
血小板凝集に対する各抽出物の抑制効果はｄｕａｌ  ｃｈａｎｎｅｌ  ａｇｇｒｅｇｏｍｅｔｅｒを用いて測定した。Ｐｌａｔｅｌｅｔ−ｒｉｃｈ  ｐｌａｓｍａ（ＰＲＰ）とｐｌａｔｅｌｅｔ−ｐｏｏｒ  ｐｌａｓｍａ（ＰＰＰ）を用いる。前記準備されたＰＲＰ３６０μｌをキュベットに入れて、４０μｌの０．２５％（ｗ／ｖ）ＰＥＧ２００（ｖｅｈｉｃｌｅ）、アスピリン（１０ｕｇ／ｍｌ）、または各抽出物（８０ｕｇ／ｍｌ）を入れた。比較のために、前記抽出物の代わりに、抗血栓剤としてよく知られたアスピリン（１０ｕｇ／ｍｌ）、またはオニノダケ抽出物の有効成分であるデクルシン（８０ｕｇ／ｍｌ；単一化合物）またはデクルシノール（８０ｕｇ／ｍｌ；単一化合物）を用いて同一の実験を行った。
【００６４】
混合物をａｇｇｒｅｇｏｍｅｔｅｒで１０００ｒｐｍ、３７℃撹拌しながら２分間培養した。培養後、ｃｏｌｌａｇｅｎ１２．５μｇ／ｍｌを入れて血小板凝集を誘導し、６分後に光伝達の変化を確認して血小板凝集の程度を測定した。前記得られた血小板凝集率（％）を図１Ａおよび１Ｂに示した（ｃｏｎ：未投与群）。図１Ａおよび１Ｂに示すように、オニノダケ抽出物、特にエタノールを抽出溶媒とした抽出物は、ｖｅｈｉｃｌｅ投与群および対照群（未投与群）と比較して血小板凝集率が低くなった。特に、オニノダケエタノール抽出物（ＡＧＥ２３２）は、他の抽出条件（抽出溶媒の種類、抽出溶媒の濃度、および／または抽出温度）の抽出物と比較して血小板凝集率が顕著に低いことを確認でき、既存の抗血栓剤として使用されるアスピリン（ＡＳＡ）と同等程度の血小板凝集率を示しただけでなく、単一化合物であるデクルシンおよびデクルシノールより顕著に低い血小板凝集率を示した。このような効果は、オニノダケ抽出物、特にエタノール抽出物（例えば、ＡＧＥ２３２）に優れた抗血栓効果を有するだけでなく、既存の抗血栓剤として使用されるアスピリン（ＡＳＡ）と同等程度の抗血栓効果を有し、単一化合物であるデクルシンおよびデクルシノールより顕著に高い抗血栓効果を有することを示すものである。
【００６５】
２．２．Ｉｎ−ｖｉｖｏ試験
実験動物の準備
実験動物はヤングバイオから提供する５週齢の雌ＩＣＲマウスを動物実験室で２４±１℃の温度、５５±５％の湿度、および１２時間の昼夜の周期で１週間安定化させて実験に使用した。
【００６６】
前記準備された血栓誘導マウスモデルに対してＲｏｔａ−ｒｏｄを用いた行動能力の変化を評価して、オニノダケ抽出物の抗血栓効果を評価した。血栓誘導マウスモデルは次のように準備した。実験用マウスとして安定化させた６週齢のＩＣＲマウス（２０−２５ｇ程度）を準備し、Ｒｏｔａ−ｒｏｄ訓練させて３回の基準値を作り、回転速度２４ｒｐｍとして回転数３００回以上で落下せずに耐える個体を選別した。前記選別されたマウスを処理群ごとに分けてそれぞれの薬物を投与した後（表１参照）、９０分後、Ｃｏｌｌａｇｅｎ（１３．２μｇ）とＥｐｉｎｅｐｈｒｉｎｅ（１１４μｇ）を混合して尾静脈に注射して血栓を誘導した。１５分後に再度Ｒｏｔａ−ｒｏｄ  ｔｅｓｔを３回繰り返し行って（回転速度：２４ｒｐｍ）、下記の数式で運動能力の差を分析した：
保護率（Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ、％）＝［（全体個体数−死んだり麻痺した個体数）／全体個体数］ｘ１００
（全体個体数：Ｒｏｔａ−ｒｏｄ  ｔｅｓｔで回転速度２４ｒｐｍとして回転数３００回以上で落下せずに耐える個体の数；
死んだり麻痺した個体数：Ｒｏｔａ−ｒｏｄ  ｔｅｓｔで回転速度２４ｒｐｍとして回転数１５０回以下で落下した個体の数）
前記得られた保護率を下記の表１に示した：
【００６７】
【表１】
2021523239.tif 000003
【００６８】
表１に示されているように、オニノダケ抽出物は、対照群と比較して優れた保護率を示し、特に、オニノダケエタノール抽出物（ＡＧＥ２３２）は、他の抽出条件の抽出物と比較して顕著に優れた保護率を示しただけでなく、既存の抗血栓剤として使用されているアスピリンおよび単一化合物であるデクルシンおよびデクルシノールと比較して同等以上の保護率を示した。
【００６９】
［実施例３．胃腸障害抑制実験（Ｉｎ−ｖｉｖｏ）］
実験動物
Ｍａｌｅ  ＩＣＲ  ｍｉｃｅ、ケージあたり５匹、室温（２２±０．５℃）、昼夜１２時間周期の条件で飼育。
水、飼料は無制限与え、最小実験２時間前に動物を実験に適応させ、ｖａｒｉａｔｉｏｎを低減するために、ｌｉｇｈｔ  ｐｈａｓｅ（１０：００−１７：００）に進行。
【００７０】
処理群ごとに、ｓｙｒｉｎｇｅを用いて、下記のように試験薬物を毎日１回ずつ５日間経口投与した（ＡＳＡ（Ａｓｐｉｒｉｎ）およびセレブレックス（Ｃｅｌｅｂｒｅｘ）は胃腸障害誘発のために使用される）：
【００７１】
実験動物の処理
ＡＳＡ３００またはＣｅｌ３００：ＡｓｐｉｒｉｎＴＭ（ＡＳＡ、Ｂａｙｅｒ  ＡＧ）３００ｍｇ／ｋｇまたはＣｅｌｅｂｒｅｘＴＭ（Ｃｅｌ、Ｐｆｉｚｅｒ）３００ｍｇ／ｋｇ、５日連続投与；
Ｃｏｎ：ｃｏｎｔｒｏｌ；
ＡＧＥ２３２  １０００：オニノダケ抽出物ＡＧＥ２３２  １０００ｍｇ／ｋｇ、５日連続投与；
【００７２】
ＡＳＡ＋ＡＧＥ２３２またはＣｅｌ＋ＡＧＥ２３２：オニノダケ抽出物ＡＧＥ２３２  １０００ｍｇ／ｋｇおよびＡｓｐｉｒｉｎＴＭ（ＡＳＡ）３００ｍｇ／ｋｇまたはＣｅｌｅｂｒｅｘＴＭ（Ｃｅｌ）３００ｍｇ／ｋｇ併用投与、５日連続投与；
Ｄｅｃｕｒｓｉｎ３００：ｄｅｃｕｒｓｉｎ３００ｍｇ／ｋｇ、５日連続投与；
【００７３】
ＡＳＡ＋ＤｅｃｕｒｓｉｎまたはＣｅｌ＋Ｄｅｃｕｒｓｉｎ：ｃｏ−ａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｅｄ、ｄｅｒｃｕｒｓｉｎ３００ｍｇ／ｋｇおよびＡｓｐｉｒｉｎＴＭ（ＡＳＡ）３００ｍｇ／ｋｇまたはＣｅｌｅｂｒｅｘＴＭ（Ｃｅｌ）３００ｍｇ／ｋｇ併用投与、５日連続投与；
Ｄｅｃｕｒｓｉｎｏｌ３００：ｄｅｃｕｒｓｉｎｏｌ３００ｍｇ／ｋｇ、５日連続投与；
【００７４】
ＡＳＡ＋ＤｅｃｕｒｓｉｎｏｌまたはＣｅｌ＋Ｄｅｃｕｒｓｉｎｏｌ：ｄｅｒｃｕｒｓｉｎｏｌ３００ｍｇ／ｋｇおよびＡｓｐｉｒｉｎＴＭ（ＡＳＡ）３００ｍｇ／ｋｇまたはＣｅｌｅｂｒｅｘＴＭ（Ｃｅｌ）３００ｍｇ／ｋｇ併用投与、５日連続投与。
【００７５】
解剖および胃粘膜の観察
頸椎脱骨させた後、即時胃を取り出してｇｒｅａｔｅｒ  ｃｕｒｖａｔｕｒｅに沿って開けてｃｏｒｋ  ｐｌａｔｅに展開させた。裏面をｉｃｅｄ  ｃｏｌｄ  ｓａｌｉｎｅで洗って血などをぬぐい取った後、胃内壁を高解像度の顕微鏡などを用いて観察して、その結果を図２（アスピリン投与胃腸障害誘発群）および図４（セレブレックス投与胃腸障害誘発群）に示した。
【００７６】
胃損傷の定量的測定のために、次の方法で胃粘膜病変率等級（Ｕｌｃｅｒ  ｉｎｄｅｘ（ＵＩ））を測定した：
（Ｉ）粘性出血とｅｒｏｓｉｏｎｓ部位が＜１ｍｍ：胃粘膜むくみ、充血、１つの出血が存在；
（ＩＩ）ｅｒｏｓｉｏｎｓ部位が１−３ｍｍ：胃粘膜下出血が小さい胃粘膜びらん（ｅｒｏｓｉｏｎ）と伴った場合；
（ＩＩＩ）ｅｒｏｓｉｏｎｓ部位が＞３ｍｍ：出血が起こった周縁が激しいびらんと伴い、侵食性損傷や潰瘍が存在。
Ｕｌｃｅｒ  ｉｎｄｅｘ（ＵＩ）：（１＊ｎ＊（Ｉ））＋（２＊ｎ＊（ＩＩ））＋（３＊ｎ＊（ＩＩＩ））／ｎｕｍｂｅｒ  ｏｆ  ａｎｉｍａｌｓ（ｎはＩ、ＩＩ、およびＩＩＩの基準に該当する個体の数を意味する）
【００７７】
前記方法を用いて、図２および図４の結果に対して得られたＵｌｃｅｒ  ｉｎｄｅｘ（ＵＩ）を、図３（ａｓｐｉｒｉｎ（ＡＳＡ）投与胃腸障害誘発群）および図５（ｃｅｌｅｃｏｘｉｂ（ｃｅｌ）投与胃腸障害誘発群）にそれぞれ示した。
【００７８】
図２〜図５に示されるように、（１）ＡＳＡ３００またはＣｅｌ３００とＡＳＡ＋ＡＧＥ２３２またはＣｅｌ＋ＡＧＥ２３２の結果を比較する時、アスピリンまたはセレブレックスによって誘発された胃腸障害（胃出血）がオニノダケ抽出物を共に投与する場合に顕著に減少することと、（２）アスピリンまたはセレブレックスとオニノダケ抽出物の併用投与時、単一化合物であるデクルシンおよびデクルシノールとの併用投与時と比較して、アスピリンまたはセレブレックスが誘発する胃腸障害（胃出血）が顕著に減少することを確認できる。
【００７９】
［実施例４．各抽出物の間の有効成分の分析（ＨＰＬＣ）］
＜検液の調製＞
５種類の試料（オニノダケ水抽出物、オニノダケエタノール高温抽出物、オニノダケ３０％エタノール抽出物、オニノダケエタノール抽出物（ＡＧＥ２３２）、またはオニノダケエタノールＲ／Ｔ抽出物）１ｇを正確に取って５０ｍｌのメスフラスコに入れた後、約３０ｍｌのメタノール（１００％）を入れて溶解させた後、標線までメタノールで満たしてろ過した後、検液とする。試料の種類および分析項目に従って希釈の程度を異ならせて検液を製造した。
【００８０】
＜標準液の調製＞
デクルシノール標準品（純度９８％以上）１０ｍｇ、デクルシン標準品（純度９８％以上）５ｍｇ、デクルシンアンゲレート標準品（純度９８％以上）５ｍｇを取って２５ｍｌのフラスコに入れた後、１００％メタノールを入れて溶解させた後、メタノールで標線を満たして標準液とする。この標準溶液から１２．５−２５−５０−１００−２００μｇ／ｍｌの濃度の標準溶液を製造して検量線の測定に用いた。
【００８１】
＜ＨＰＬＣ操作条件＞
検液および標準液を有し、以下の液体クロマトグラフィー操作条件により試験を行って、デクルシン、デクルシノール、デクルシノールアンゲレートの含有量を計算した：
カラム：Ｃａｄｅｎｚａ  ＣＷ  Ｃ１８、（１５０＊４．６ｍｍ、３μｍ）またはこれと同等のカラム；
検出器：紫外線分光光度計（検出波長３３０ｎｍ）；
流速：０．７ｍｌ／分；
移動相：Ｗａｔｅｒ（Ａ％）、Ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌ（Ｂ％）、
０−５ｍｉｎ（２０、Ｂ）、５−６ｍｉｎ（２０→４０、Ｂ）、６−２２ｍｉｎ（４０→５５、Ｂ）、２２−２３ｍｉｎ（５５→８０、Ｂ）、２３−２５ｍｉｎ（８０、Ｂ）、２５−２７ｍｉｎ（２０、Ｂ）；
試料注入量：１０μｌ。
【００８２】
＜結果＞
前記得られた各抽出物の成分の分析結果を下記の表２に示した。
【００８３】
【表２】
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【００８４】
表２のように、オニノダケ抽出物は、デクルシン、デクルシノールアンゲレート、ノダケニン（Ｎｏｄａｋｅｎｉｎ）、およびベータ−シトステロールのような有効成分の含有量（重量ベース）が比較的高い水準であり、特に、オニノダケエタノール抽出物（ＡＧＥ２３２）の前記有効成分の含有量が顕著に高いことを確認できる。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【国際調査報告】
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