(57)【要約】本発明は、腫瘍併用療法のための抗腫瘍剤又は抗癌剤の新しい組合せ、併用を意図した医薬組成物、及び併用のための異なる抗腫瘍剤の組成物を含むキットに関する。特に、本発明は、ＰＩ３Ｋ‐クラスＩ阻害剤５‐（７‐メタンスルホニル‐２‐モルホリン‐４‐イル‐６，７‐ジヒドロ‐５Ｈ‐ピロロ［２，３‐ｄ］ピリミジン‐４‐イル）‐ピリミジン‐２‐イル‐アミン又はその薬学的に許容される塩と様々な腫瘍剤の組み合わせに関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
第２の抗癌化合物に関連する抗癌治療で使用するための、活性化合物としてＰＩ３Ｋ‐クラスＩ阻害剤化合物：５‐（７‐メタンスルホニル‐２‐モルホリン‐４‐イル‐６，７‐ジヒドロ‐５Ｈ‐ピロロ［２，３‐ｄ］ピリミジン‐４‐イル）‐ピリミジン‐２‐アミン又はその薬学的に許容される塩を含む医薬組成物であって、ただし前記第２の化合物はモノクローナル抗体トラスツズマブ又は化合物エベロリムスではなく、前記第２の抗癌化合物は、トラスツズマブとは異なる抗ＨＥＲ２抗体、ＥＧＦ抗受容体抗体、血管内皮増殖因子‐Ａ（ＶＥＧＦ‐Ａ）を阻害する抗体、エストロゲン受容体（ＥＲ）の分解因子／モジュレーター又は上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）阻害剤又はプロテインキナーゼ阻害剤などの抗体を含む群から選択される、上記医薬組成物。
【請求項２】
前記第２の抗癌化合物が、セツキシマブ、ベバシズマブ、フルベストラント、又はゲフィチニブを含む群から選択される、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
結腸癌、前立腺癌、乳癌、肺癌、卵巣癌の抗癌治療に使用するための、請求項１又は２のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項４】
ＰＩ３ＫＣＡの変異及び野生型ＫＲＡＳを伴う大腸癌の、ＰＩ３ＫＣＡ及びＫＲＡＳの変異を伴う大腸癌の、ＰＩ３ＫＣＡ及びＥＧＦＲの変異を伴う又は伴わない非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）の、ＰＩ３ＫＣＡ変異を伴うＨＥＲ２陽性乳癌、ＨＥＲ２陽性及びＥＲ陽性乳癌の治療における使用のための請求項３に記載の医薬組成物。
【請求項５】
第２の抗癌化合物を含む組成物と組み合わせて使用するための、ＰＩ３ｋクラスＩ阻害剤の経口投与に適した、請求項１〜４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項６】
１〜１０ｍｇ／Ｋｇ体重の単位用量に十分な量のＰＩ３Ｋ‐クラス１阻害剤を含む、請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項７】
５〜７ｍｇ／Ｋｇ体重のＰＩ３Ｋクラス１阻害剤の単一投与量のための、請求項６に記載の医薬組成物。
【請求項８】
第２の抗癌化合物の経口又は非経口投与に適した医薬組成物と組み合わせて使用するための、請求項５〜７のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項９】
１０〜８０ｍｇ／Ｋｇ体重の単位用量に適した量の第２の抗癌化合物を含む医薬組成物と組み合わせて使用するための、請求項８に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
２０〜７０ｍｇ／Ｋｇ体重、好ましくは３０〜５０ｍｇ／Ｋｇ体重の単一投与量に適した量の第２の抗癌化合物を含む医薬組成物と組み合わせて使用するための請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
抗癌併用治療に使用するための、活性化合物としてＰＩ３ＫクラスＩ阻害剤化合物：５‐（７‐メタンスルホニル‐２‐モルホリン‐４‐イル‐６，７‐ジヒドロ‐５Ｈ‐ピロロ［２，３‐ｄ］ピリミジン‐４‐イル）‐ピリミジン‐２‐アミン又はその薬学的に許容される塩、及び第２の抗癌化合物を含む第２の医薬組成物を含む医薬組成物を含むパーツのキットであって、ただし、前記第２の化合物は、モノクローナル抗体トラスツズマブ又は化合物エベロリムスではなく、前記第２の抗癌化合物は、トラスツズマブとは異なる抗ＨＥＲ２抗体、ＥＧＦ抗受容体抗体、血管内皮増殖因子Ａ（ＶＥＧＦ‐Ａ）を阻害する抗体、エストロゲン受容体（ＥＲ）の分解剤／モジュレーター又は上皮増殖因子受容体（ＥＧＦＲ）阻害剤、又はプロテインキナーゼ阻害剤を含む群から選択される、上記パーツのキット。
【請求項１２】
前記第２の抗癌化合物が、セツキシマブ、ベバシズマブ、フルベストラント、又はゲフィチニブを含む群から選択される、請求項１１に記載のパーツのキット。
【請求項１３】
抗癌併用治療が結腸癌、前立腺癌、乳癌、肺癌、卵巣癌である、請求項１１〜１２のいずれか一項に記載のパーツのキット。
【請求項１４】
ＰＩ３ＫＣＡの変異及び野生型ＫＲＡＳを伴う大腸癌、ＰＩ３ＫＣＡ及びＫＲＡＳの変異を伴う大腸癌、ＰＩ３ＫＣＡ及びＥＧＦＲの変異を伴う又は伴わない非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、ＰＩ３ＫＣＡ変異を伴うＨＥＲ２陽性乳癌、ＨＥＲ２陽性及びＥＲ陽性乳癌の併用治療における使用のための請求項１３に記載のパーツのキット。
【請求項１５】
第１の医薬組成物が、１〜１０ｍｇ／Ｋｇ体重、好ましくは５〜７ｍｇ／Ｋｇ体重の単位投与量に十分な量のＰＩ３Ｋ‐クラス１阻害剤を含む、請求項１１〜１４のいずれか一項に記載のパーツのキット。
【請求項１６】
第２の組成物が、１０〜８０ｍｇ／Ｋｇ体重、好ましくは２０〜７０ｍｇ／Ｋｇ又は３０〜５０ｍｇ／Ｋｇ体重の単位投与量に適した量の第２の抗癌化合物を含む、請求項１５に記載のパーツのキット。
【請求項１７】
第１の組成物がＰＩ３ｋクラスＩ阻害剤の経口投与に適しており、第２の組成物が経口又は非経口投与に適している、請求項１１〜１６のいずれか一項に記載のパーツのキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、腫瘍併用療法のための抗腫瘍剤又は抗癌剤の新しい組合せ、併用を意図した医薬組成物、及び併用のための異なる抗腫瘍剤の組成物を含むキットに関する。特に、本発明は、ＰＩ３Ｋ‐クラスＩ阻害剤  ５‐（７‐メタンスルホニル‐２‐モルホリン‐４‐イル‐６，７‐ジヒドロ‐５Ｈ‐ピロロ［２，３‐ｄ］ピリミジン‐４‐イル）‐ピリミジン‐２‐イル‐アミン又はその薬学的に許容される塩と様々な腫瘍剤の組み合わせに関する。
【背景技術】
【０００２】
酵素ホスファチジルイノシトール‐３‐キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）は、ホスファチジルイノシトールのイノシトール環の３位でリン酸化するホスホリラーゼの一種として知られており、全身に広く発現している。ＰＩ３Ｋは成長因子やホルモンなどの刺激により活性化されることが知られている。ＰＩ３ＫはＡｋｔとＰＤＫ１を活性化し、細胞死を阻害し、細胞骨格、グルコース代謝、小胞輸送などを調節する生存シグナルに関与している。
【０００３】
ＰＩ３Ｋは、一次構造、基質として機能するホスファチジルイノシトールのタイプに基づいて、正確にクラスＩ、クラスＩＩ、クラスＩＩＩの３つのグループに分類される。クラスＩの酵素は、活性化メカニズムに応じてクラスＩａ及びＩｂに細分類される。クラスＩａは、サブタイプｐ１１０α、ｐ１１０β及びｐ１１０δを含み、それぞれが調整サブユニット（ｐ８５）とヘテロダイマー複合体を形成し、チロシンキナーゼ受容体などによって活性化される。クラス１ｂは、三量体のプロテインＧのサブユニティβγ（Ｇβγ）によって活性化されたサブタイプｐ１１０γを含み、調整サブユニティ（ｐ１０１）とヘテロダイマーを形成する。
【０００４】
最近、いくつかの種類の癌（特に卵巣癌、結腸癌、乳癌）で３つの現象が報告されている：ＰＩＫ３ＣＡｐ１１０αコード遺伝子の増幅、変異による構成的活性化、及びタンパク質レベルでのｐ１１０αの高発現。結果として、生存シグナルの構成的活性化によるアポトーシス阻害は、腫瘍形成メカニズムの部分的な原因と考えられている。実際、ＰＩＫ３ＣＡは卵巣癌の発癌遺伝子として関与していることが報告されており（Natura Genet. 21, 99-102, (1999)；ヒトの癌におけるＰＩＫ３ＣＡ遺伝子変異の頻度は高く（Science, 304, 554, (2004)、大腸癌（結腸直腸癌）におけるホスホイノシトール３‐キナーゼの活性のレベルが増加している（Cancer, 83, 41-47 (1998)）。
【０００５】
この知識に基づいて、ＰＩ３Ｋ、特にｐ１１０α活性の阻害剤が、特に、高いＰＩ３Ｋ活性を有する癌において、抗腫瘍作用を発揮することがわかった。
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【０００６】
それらのなかで、ＣＨ５１３２７９９としても文献で知られる、化合物５‐（７‐メタンスルホニル‐２‐モルホリン‐４‐イル‐６，７‐ジヒドロ‐５Ｈ‐ピロロ［２，３‐ｄ］ピリミジン‐４‐イル）‐ピリミジン‐２‐アミンは、以下の式Ｉを有する、ＰＩ３Ｋに対する阻害活性を有する抗腫瘍剤として特に効果的であるという結果になった。
【化１】
2021519821.tif 000002
【０００７】
化合物及びその調製方法は、ＷＯ‐Ａ‐２００８／０１８４２６に記載されている。化合物の薬理学的特徴は、科学文献 Jun Ohwada et al. Bioorganic & Medicinal Chemistry Letter, 21 (2001) pages 1767-1772 に記載された。さらに、トラスツズマブに耐性のある癌形態の治療における式Ｉの化合物とモノクローナル抗体トラスツズマブとの関連性は、Hiroshi Tanaka et al. Clin. Cancer Res. 17, (10) May 15 (2011)に記載されている。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
ＰＩ３Ｋ阻害剤は非常に効果的であるが、他の有効成分に関連付けられている場合でも、すべての癌形態が同じ医薬に効果的に反応するわけではないという問題が残っている。
【０００９】
したがって、本発明の目的は、そのような欠点のない医薬を提供することである。 
【００１０】
したがって、本発明の目的は、式Ｉの化合物と最終治療効果を強化することができる追加の抗腫瘍剤との併用療法を提供する新しい抗腫瘍組合せを利用可能にすることである。前記目的は、その主要な特徴が最初の請求項で特定されている組成物で得られ、他の特徴は残りの請求項で特定されている。 
【課題を解決するための手段】
【００１１】
発明の要約
本発明は、いくつかの既知の抗腫瘍化合物が相乗効果を通じて式Ｉの化合物の有効性を改善することができ、したがって効果的に（又は少なくともより効果的に）以前の治療に耐性があるタイプの癌を治療することを可能にするという本発明者らによる発見に基づく。
【００１２】
したがって、本発明は以下の実施形態に関する。
第２の抗癌化合物に関連する抗癌治療で使用するための、活性化合物としてＰＩ３Ｋ‐クラスＩ阻害剤化合物：５‐（７‐メタンスルホニル‐２‐モルホリン‐４‐イル‐６，７‐ジヒドロ‐５Ｈ‐ピロロ［２，３‐ｄ］ピリミジン‐４‐イル）‐ピリミジン‐２‐アミン又はその薬学的に許容される塩を含む医薬組成物、ただし前記第２の化合物がモノクローナル抗体トラスツズマブ又は化合物エベロリムスでない。
【００１３】
前記第２の抗癌化合物が、トラスツズマブとは異なる抗ＨＥＲ２抗体、ＥＧＦ抗受容体抗体、血管内皮増殖因子‐Ａ（ＶＥＧＦ‐Ａ）を阻害する抗体、  又は上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）阻害剤、エストロゲン受容体（ＥＲ）の選択的分解剤／モジュレーター又はタンパク質キナーゼ阻害剤などの抗体を含む群から選択される医薬化合物。
【００１４】
前記第２の抗癌化合物が、ＥＧＦ抗受容体抗体、好ましくは抗体セツキシマブ、血管内皮増殖因子‐Ａ（ＶＥＧＦ‐Ａ）を阻害する抗体、好ましくは抗体ベバシズマブ、又は表皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）阻害剤、好ましくは化合物ゲフィチニブ、エストロゲン受容体（ＥＲ）の選択的分解剤／モジュレーター、好ましくは化合物フルベストラントを含む群から選択される医薬化合物。
【００１５】
結腸癌、前立腺癌、乳癌、肺癌、卵巣癌の抗癌治療に使用するための本発明による医薬組成物。
【００１６】
第２の抗癌化合物を含む組成物と組み合わせて使用するための、ＰＩ３ｋ‐クラスＩ阻害剤の経口投与に適した医薬組成物。
【００１７】
第２の抗癌化合物の経口又は非経口投与に適した医薬組成物と組み合わせて使用するための医薬組成物。
【００１８】
本発明はさらに以下に関する：
抗癌併用療法に使用するための、活性化合物としてＰＩ３ＫクラスＩ阻害剤化合物：５‐（７‐メタンスルホニル‐２‐モルホリン‐４‐イル‐６，７‐ジヒドロ‐５Ｈ‐ピロロ［２，３‐ｄ］ピリミジン‐４‐イル）‐ピリミジン‐２‐アミン又はその薬学的に許容される塩、及び第２の抗癌化合物を含む第２の医薬組成物を含む医薬組成物を含むパーツのキット（ただし、前記第２の化合物がモノクローナル抗体トラスツズマブ又は化合物エベロリムスでない）。
【００１９】
前記第２の抗癌化合物が、トラスツズマブとは異なる抗ＨＥＲ２抗体、ＥＧＦ抗受容体抗体、好ましくは抗体セツキシマブ、血管内皮増殖因子Ａ（ＶＥＧＦ‐Ａ）を阻害する抗体、好ましくは抗体ベバシズマブ、エストロゲン受容体（ＥＲ）の選択的分解剤／モジュレーター、好ましくは化合物フルベストラント、又は上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）阻害剤、好ましくは化合物ゲフィチニブ、又はプロテインキナーゼ阻害剤を含む群から選択される、パーツのキット。
【００２０】
抗癌併用治療が結腸癌、前立腺癌、乳癌、肺癌、卵巣癌の治療である、請求項１３〜１４のいずれか一項に記載のパーツのキット。
【００２１】
第１の組成物がＰＩ３ｋクラスＩ阻害剤の経口投与に適しており、第２の組成物が経口又は非経口投与に適している、本発明によるパーツのキット。
【００２２】
本発明によって提供される利点は、先行する治療及び常習性に耐性のある形態の癌又は腫瘍の治療においてさえも有効性の増加に言及することができる。
【図面の簡単な説明】
【００２３】
【図１】図１は、ヌードマウス（免疫不全）に移植された乳癌細胞ＪＩＭＴ‐１（ＨＥＲ２＋、ＰＩＫ３ＣＡ遺伝子で変異）α）に対するトラスツズマブと組み合わせた化合物ＭＥＮ１６１１（式Ｉの化合物）の抗腫瘍活性を示す。
【図２】ＭＥＮ１６１１の抗腫瘍活性は、その薬力学的活性によっても、イムノブロッティングのアッセイによって裏付けられている。ＰＩ３Ｋの下流のタンパク質である２つのタンパク質ＡＫＴとＳ６のリン酸化が評価された。ＭＥＮ１６１１を単独で、又はＪＩＭＴ‐１のトラスツズマブ（コンボ）と組み合わせて処置すると、２つのタンパク質ＡＫＴ及びＳ６のリン酸化が大幅に阻害されるため、このような経路に対するＭＥＮ１６１１の作用が示される。代わりに、リン酸化はトラスツズマブによる処置後に阻害されない。分析された腫瘍塊は、ＭＥＮ１６１１の３回目及び最後の投与の４時間後に収集された。
【図３】図３は、ヌードマウス（免疫不全）に移植された乳癌細胞ＨＣＣ１９５４（ＨＥＲ２＋、ＰＩＫ３ＣＡ遺伝子で変異）に対するトラスツズマブと組み合わせた化合物ＭＥＮ１６１１の抗腫瘍活性を示す。
【図４】ＭＥＮ１６１１の抗腫瘍活性は、その薬力学的活性によっても、イムノブロッティングのアッセイによって裏付けられ、ＰＩ３Ｋの下流のタンパク質である２つのタンパク質ＡＫＴとＳ６のリン酸化が評価された。ＭＥＮ１６１１単独で、又はＨＣＣ１９５４のトラスツズマブ（コンボ）と組み合わせた処置は、２つのタンパク質ＡＫＴ及びＳ６のリン酸化を大幅に阻害するため、そのような経路に対するＭＥＮ１６１１の作用を示す。逆に、トラスツズマブによる処置後のリン酸化は阻害されない。分析された腫瘍塊は、ＭＥＮ１６１１の３回目及び最後の投与の４時間後に収集された。
【図５】図５は、ヌードマウス（免疫不全）に移植された癌細胞ＨＣＣ７０（トリプルネガティブ乳癌、ＰＩＫ３ＣＡ遺伝子の野生型及びＰＴＥＮ遺伝子の欠損を伴う）におけるセツキシマブと組み合わせた化合物ＭＥＮ１６１１の抗腫瘍活性を示す。
【図６】ＭＥＮ１６１１の抗腫瘍活性は、その薬力学的活性によっても、イムノブロッティングのアッセイにより裏付けられている。ＰＩ３Ｋの下流のタンパク質である２つのタンパク質ＡＫＴ及びＳ６のリン酸化が評価された。ＨＣＣ７０のＭＥＮ１６１１単独又はセツキシマブ（コンボ）との併用による処置は、２つのタンパク質ＡＫＴ及びＳ６のリン酸化を著しく阻害し、したがって、そのような経路に対するＭＥＮ１６１１の作用を示す。逆に、セツキシマブによる処置後のリン酸化は阻害されない。分析された腫瘍塊は、ＭＥＮ１６１１の３回目及び最後の投与の４時間後に収集された。
【図７】ヌードマウス（免疫不全）に移植されたＲＫＯ癌細胞（大腸癌、ＰＩＫ３ＣＡ遺伝子及びＢＲＡＦ遺伝子で変異）に対するセツキシマブと組み合わせた化合物ＭＥＮ１６１１の抗腫瘍活性を示す。
【図８】ＭＥＮ１６１１の抗腫瘍活性は、その薬力学的活性によっても、イムノブロッティングのアッセイによって裏付けられている。ＰＩ３Ｋの下流のタンパク質である２つのタンパク質ＡＫＴとＳ６のリン酸化が評価された。ＲＫＯのＭＥＮ１６１１単独又はセツキシマブ（コンボ）との併用による処置は、２つのタンパク質ＡＫＴ及びＳ６のリン酸化を有意に阻害するため、そのような経路に対するＭＥＮ１６１１の作用を示す。逆に、セツキシマブによる処置後のリン酸化は阻害されない。分析された腫瘍塊は、ＭＥＮ１６１１の３回目及び最後の投与の４時間後に収集された。
【図９】図９は、ヌードマウス（免疫不全）に移植された癌細胞ＨＴ‐２９（大腸癌、ＰＩＫ３ＣＡ遺伝子とＢＲＡＦ遺伝子で変異）に対するセツキシマブと組み合わせた化合物ＭＥＮ１６１１の抗腫瘍活性を示す。
【図１０】ＭＥＮ１６１１の抗腫瘍活性は、その薬力学的活性によっても、イムノブロッティングのアッセイにより裏付けられている。ＰＩ３Ｋの下流のタンパク質である２つのタンパク質ＡＫＴ及びＳ６のリン酸化が評価された。ＭＥＮ１６１１単独で、又はセツキシマブ（コンボ）と組み合わせてＨＴ‐２９を処置すると、２つのタンパク質ＡＫＴ及びＳ６のリン酸化が大幅に阻害されるため、このような経路に対するＭＥＮ１６１１の作用が示される。逆に、セツキシマブによる処置後のリン酸化は阻害されない。分析された腫瘍塊は、ＭＥＮ１６１１の３回目及び最後の投与の４時間後に収集された。
【図１１】図１１は、ヌードマウス（免疫不全）モデルＣＴＧ‐１５０９に移植された、ＰＩＫ３ＣＡ遺伝子及びＫＲＡＳ遺伝子で変異した大腸癌の腫瘍細胞に対するベバシズマブと組み合わせた化合物ＭＥＮ１６１１の抗腫瘍活性を示す。
【図１２】図１２は、ヌードマウス（免疫不全）に移植された癌細胞ＮＣＩ‐Ｈ‐１９７５（非小細胞肺癌、ＰＩＫ３ＣＡ遺伝子及びＥＧＦＲ遺伝子で変異）に対するエルロチニブと組み合わせた化合物ＭＥＮ１６１１の抗腫瘍活性を示す。
【図１３】ＭＥＮ１６１１の抗腫瘍活性は、その薬力学的活性によっても、イムノブロッティングのアッセイにより裏付けられている。ＰＩ３Ｋの下流のタンパク質である２つのタンパク質ＡＫＴ及びＳ６のリン酸化が評価された。ＮＣＩ‐Ｈ‐１９７５のＭＥＮ１６１１単独又はエルロチニブ（コンボ）との併用による処置は、２つのタンパク質ＡＫＴ及びＳ６のリン酸化を有意に阻害するため、そのような経路に対するＭＥＮ１６１１の作用を示す。逆に、エルロチニブによる処置後のリン酸化は阻害されない。分析された腫瘍塊は、ＭＥＮ１６１１の３回目及び最後の投与の４時間後に収集された。
【図１４】ヌードマウス（免疫不全）に移植された癌細胞ＮＣ‐Ｈ‐２９２（非小細胞肺癌、ＰＩＫ３ＣＡ及びＥＧＦＲ遺伝子の野生型）に対するエルロチニブと組み合わせた化合物ＭＥＮ１６１１の抗腫瘍活性を示す。
【図１５】図１５は、ＭＥＮ１６１１とフルベストラント（エストロゲン受容体の分解剤／モジュレーター）の組み合わせが、ＰＩＫ３ＣＡ遺伝子で変異した乳癌ＨＥＲ２＋／ＥＲ＋のＴ４７Ｄ細胞株に及ぼす相乗効果を示す。
【図１６】図１６は、ヌードマウス（免疫不全）に移植された癌細胞ＲＵ２７８（非小細胞肺癌、ＰＩＫ３ＣＡ遺伝子ｅ  ＥＧＦＲで変異）に対するエルロチニブと組み合わせた化合物ＭＥＮ１６１１の抗腫瘍活性を示す。
【図１７】図１７は、ヌードマウス（免疫不全）に移植された癌細胞ＲＢ１（非小細胞肺癌、ＰＩＫ３ＣＡ遺伝子は野生型、ＥＧＦＲ遺伝子で変異）に対するゲフィチニブと組み合わせた化合物ＭＥＮ１６１１の抗腫瘍活性を示す。
【発明を実施するための形態】
【００２４】
詳細な説明
ＰＩ３Ｋ‐クラス‐Ｉ阻害剤化合物５‐（７‐メタンスルホニル‐２‐モルホリン‐４‐イル‐６，７‐ジヒドロ‐５Ｈ‐ピロロ［２，３‐ｄ］ピリミジン‐４‐イル）‐ピリミジン‐２ーイルアミン（ＣＨ５１３２７９９又はＭＥＮ１６１１としても報告されている）又はその薬学的に許容される塩は、ＷＯ２００８／０１８４２６に記載されている。特に、化合物の調製は、実施例１‐Ｄ‐０２に記載されている。化合物自体と薬理学的特性は、科学文献 Jun Ohwada et al. (2011)（上掲）又は Hiroshi Tanaka et al. (2011)（上掲）に記載されている。
【００２５】
式Ｉの阻害剤の化学式を考慮することにより、薬学的に許容される塩の下、酸塩又は塩基性塩が意味される。
【００２６】
酸塩の例には、塩酸塩、（臭化水素酸塩）、（ヨウ化水素酸塩）、硝酸塩、硫酸塩、重硫酸塩、リン酸塩、酸性リン酸塩、酢酸塩、乳酸塩、クエン酸塩、酸性クエン酸塩、酒石酸塩、重酒石酸塩、コハク酸塩、シュウ酸塩、リンゴ酸塩、フマル酸塩、グルコン酸塩、マロン酸塩、サッカリン酸塩（サッカラート）、安息香酸塩、マンデル酸塩、サリチル酸塩、トリフルオロ酢酸塩、プロピオン酸塩、グルタル酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ‐トルエンスルホン酸塩及び１，１’‐メチレン‐ビス‐２‐ヒドロキシ‐３‐ナフタートが含まれる。
【００２７】
塩基性塩の例には、ナトリウム塩及びカリウム塩などのアルカリ金属の塩、カルシウム塩及びマグネシウム塩などのアルカリ土類金属の塩、アンモニウム塩、Ｎ‐メチルグルカミンの塩などの水溶性アミンとの付加塩、低アルカノールアンモニウム塩（inferior alkanol ammonium salts）及び有機アミンの他の薬学的に許容される塩基から誘導される塩が含まれる。 
【００２８】
式Ｉの化合物との併用療法で使用するための抗腫瘍活性を有する化合物はすべて、クラスＬ０１（抗新生物薬）又はＷＨＯコラボレーティブセンター（ＷＨＯＣＣ）ＡＴＣ／ＤＤＤインデックスに分類される既知の医薬品である。
【００２９】
医薬組成物
異なる抗腫瘍剤の有効投与量の間の不一致及び投与計画の間の不一致を考慮して、組み合わせとして投与される２つの抗腫瘍剤は、自律的組成物中に処方される。
【００３０】
本発明の医薬組成物は、経口又は非経口経路（例えば、静脈内、筋肉内、皮下、直腸、鼻腔、嚢内、膣、腹部、嚢胞内経路又は局所的）によって処方及び投与することができる。経口投与用の製剤の例には、錠剤、カプセル、顆粒、粉末、丸薬、溶液、並びに水性及び非水性の経口懸濁液が含まれる。非経口投与のための製剤の例には、静脈内、筋肉内、皮下注射用の水性又は油性溶液が含まれる。軟膏、ゲル、クリーム、坐剤、経口又は経鼻経路によるスプレー、乳濁液、油剤及び懸濁剤などの他の製剤は、状況に応じて適切であれば等しく使用することができる。非経口使用のための溶液は、通常、少量の個別用量での投与に適した容器に分配される。しかしながら、投与量が体重に比例することを考えると、様々な有効成分の処方は、標準量の投与ではなく、カスタマイズされた量の医薬の投与を可能にするものでなければならない。さらに、投与形態は、皮下移植モードでの制御放出製剤を含む様々な投与方法に適合させることができる。
【００３１】
特に、ＰＩ３Ｋ阻害剤である式Ｉの化合物は、通常、経口経路によって投与され、したがって、そのような投与経路に適した任意の形態で処方される。ただし、他の投与経路は除外されない。
【００３２】
第２の化合物は、その性質に応じて、非経口経路又は経口経路により投与することができ、したがって、適切に処方される。 
【００３３】
ＰＩ３Ｋ阻害剤並びに第２の抗腫瘍剤の投与量は、症状、年齢、体重、相対的な健康状態、他の薬物の存在、投与経路などに基づいて適切に変更することができる。 
【００３４】
経口製剤の場合に患者に有効な式ＩのＰＩ３Ｋ阻害剤の典型的な投与量は、好ましくは、毎日体重１ｋｇあたり、０．１〜１０００ｍｇ、より好ましくは１〜１００ｍｇである。好ましい投与量は、１〜１０ｍｇ／Ｋｇ、例えば３、４、５、６、７、８又は９ｍｇ／Ｋｇ体重である。 
【００３５】
特に、４０ｍｇ／ダイ〜１００ｍｇ／ダイの毎日の投与量、例えば、毎日２つの４８ｍｇカプセル（毎日合計９６ｍｇ）が投与される。
【００３６】
非経口投与の場合、典型的な有効量は、好ましくは、毎日体重１ｋｇあたり０．１〜１０００ｍｇ、より好ましくは１〜１００ｍｇである。
【００３７】
すでに市販されている医薬品である第２の医薬は、販売承認（ＭＡ）の申請書に記載されているそれぞれの技術レポートに記載されている処方に準拠した投与量で投与される。これらの投与量は通常、１〜１００ｍｇ／Ｋｇ体重、又は１０〜８０ｍｇ／Ｋｇ又は２０〜７０ｍｇ／Ｋｇ又は３０〜５０ｍｇ／Ｋｇ体重で変動する。
【００３８】
以下に、以下の医薬の臨床使用のために処方された投与量を示す：
セツキシマブ：投与量は単剤療法と併用の両方についてである：初期用量：４００ｍｇ／ｍ2ＩＶ２時間；維持：２５０ｍｇ／ｍ2ＩＶを６０分間ｑＷｅｅｋ、疾患の進行又は毒性イベントまで
トラスツズマブ：治療計画は非常に複雑で、用量は２ｍｇ／Ｋｇ〜８ｍｇ／ＫｇＩＶである。
ベバシズマブ：５〜１０ｍｇ／ｋｇＩＶ  ｑ２週間
エルロチニブ：ＭＥＮ１６１１と同様の小分子であるため、患者が進行するか毒性イベントが発生するまで、経口経路での投与量は１日１５０ｍｇである
フルベストラント：単剤療法と併用療法の両方の投与量は、１、１５、２９日目に筋肉内に５００ｍｇ、その後月１回である
ゲフィチニブ：単剤療法の投与量は、患者が進行するか毒性イベントが発生するまで、経口経路で１日２５０ｍｇである。
【００３９】
投与計画でさえも、本発明の組み合わせで使用される各単一の抗腫瘍剤の最大の有効性を得るために考案されている。したがって、本発明の組み合わせによる併用療法は、必ずしも投与が同時に行われることを必要とせず、単に治療が重複することを伴う。したがって、２つの有効成分の投与は、同時期にかつ迅速な順序で、例えば数分又は数時間間隔で分けて、並びに、交互により長い期間、例えば数日又は数週間間隔で分けて行うことができる。
【００４０】
例えば、ＰＩ３Ｋ阻害剤は、７、１０、１２、１５又は２０日間、１日１回投与することができる（ｑ１ｄｘ７、１０、１２、１５又は２０）。
【００４１】
第２の医薬は、同一又は異なるレジームに従って投与することができるが、第１の医薬に関しては隔日である。
【００４２】
異なることに、第２の医薬が抗体である場合、これは数日間隔で、例えば５日ごと、週に１回、２週間に１回又は月に１回投与することができる。
【００４３】
本発明の組み合わせで治療される癌の例には固形腫瘍が含まれるが、固形腫瘍の例には乳癌、結腸癌、大腸癌（結腸直腸癌）、卵巣癌、前立腺癌及び非小細胞肺癌が含まれる。
【００４４】
本発明の追加の実施形態は、パーツのキット、すなわち、第１のセクションに式ＩのＰＩ３Ｋ阻害剤である第１の医薬、第２のセクションに第２の医薬及び２つの医薬の組み合わせの、同時の、連続の又は交互の投与のための説明書付きのパッケージリーフレットを含む、すぐに使用できるパッケージにある。このキットは、完全な治療サイクルに必要かつ十分な、第１及び第２の医薬の多数の単回投与を含む。
【００４５】
特に、第１のセクションには、例えば、完全なサイクルに十分な凍結乾燥された医薬又は粉末の小袋又は顆粒の錠剤、硬い又は柔らかいカプセル又は小瓶のような経口投与用の第１の医薬の単回投与のブリスターが含まれる。一方、第２のセクションには、第１のセクションと同様に、経口使用のための第２の医薬を含むブリスター又は小瓶又は小袋、又は溶液を含む小瓶又は非経口使用のための第２の医薬の凍結乾燥物を含む小瓶を含む。第１又は第２の医薬の凍結乾燥製剤の場合、それぞれのセクションは、凍結乾燥物を溶液に戻すのに適した必要な使い捨て量の溶媒を含む。
【００４６】
第１及び第２の医薬の単回投与の数は、処方されたものに従って完全なサイクルに必要な用量に対応するであろう。
【００４７】
例えば、第１のセクションには、７〜４０日、又は１０〜３０日、又は１２〜２０日の範囲の期間、毎日の投与に十分な多数の単一用量（錠剤、カプセル剤など）が含まれる（ｑ１ｄｘ７‐４０又はｑ１ｄｘ１０‐３０又はｑ１ｄｘ１２‐２０）。
【００４８】
第２のセクションには、処方に従って、第１の医薬による治療の期間と重複する期間、１回の投与又は毎日又は毎週又は隔週又は毎月の投与に十分な単一用量が含まれる。例えば、同じ１日目に２つの重複した治療を開始することにより、第２の医薬を４、５、７、１０、又は１２日ごとに続いて投与できる。第２の医薬が抗体である場合、通常、限られた回数（２〜４回）の投与で完全なサイクルに十分である。
【００４９】
ＰＩ３Ｋ阻害剤と第２の医薬との併用治療を提供する他の明白な実施形態は、本発明の目的に含まれる。
【００５０】
本発明は、純粋に説明の手段として意図され、限定の目的ではない以下の実験のセクション及び実施例において説明される。
【実施例】
【００５１】
実験のセクション
ＭＥＮ１６１１はＭＥＮＡＲＩＮＩ  ＲＩＣＥＲＣＨＥ  ＳＰＡ  Ｐｉｓａによって得られる。粉末は、ＤＭＳＯ／Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ  ＥＬ（容量５０％／５０％）で構成される保存溶液に溶解し、毎日使用する量に等分した。すべての分割量を使用する日まで冷蔵庫で４℃で保管する。保存溶液ｄｅｌ  ＭＥＮ１６１１は６．５ｍｇ／ｍｌの濃度で調製される。希釈液は、ヒドロキシプロピル‐ベータシクロデキストリン（ＨＰＣＤ）とポリエチレングリコール４００をそれぞれ蒸留水１０％（ｗ／ｖ）と１０％（ｖ／ｖ）に溶解して調製した。この溶液は、最大６か月間、４℃の冷蔵庫に保管される。ＭＥＮ１６１１の保存溶液とビヒクル保存溶液は希釈液で１０倍に希釈され、０．６５ｍｇ／ｍｌの投与溶液を得る。
【００５２】
トラスツズマブは、ＨＥＲ２陽性に分類された乳癌の治療に使用されるＨＥＲ２受容体に対するモノクローナル抗体である。
【００５３】
セツキシマブは、ＥＧＦ受容体に対するキメラ（マウス／ヒト）モノクローナル抗体であり、結腸直腸転移、非小細胞肺転移癌、及び頭頸部癌の治療に使用される。 
【００５４】
ベバシズマブは、血管及び内皮増殖因子‐Ａ（ＶＥＧＦ‐Ａ）の阻害を通じて血管新生を停止するヒト化組換えモノクローナル抗体であり、標準的な化学療法と組み合わせて、又は２位として、５‐フルオロウラシルと組み合わせて、転移性大腸癌（結腸直腸癌）の治療に対してＦＤＡによって承認されている。
【００５５】
エルロチニブは、上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）の阻害剤である。進行性又は転移性非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）の治療、ＥＧＦ受容体の変異を伴う又は伴わない転移性膵臓癌、さらには他の種類の癌にも使用される。 
【００５６】
フルベストラント：エストロゲン受容体（ＥＲ）の選択的分解剤／モジュレーター。転移性陽性エストロゲン乳癌の治療に、好ましくは閉経後の患者に使用される。
【００５７】
ゲフィチニブは、ＥＧＦ受容体（ＥＧＦＲ）の細胞内に存在するチロシンキナーゼの阻害剤である。ＥＧＦ受容体の変異と過剰発現を伴う局所進行性又は転移性非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）の治療に使用される。
【００５８】
異種移植腫瘍モデル
６〜８週齢の無胸腺ヌードマウスの雌をCharles River (Calco, Lecco, Italy)から入手し、環境条件の継続的な制御下でマイクロ隔離ケージに入れた。飲料水と特定の食品（VRF1, Charles River）は自由に提供された。環境条件、並びに動物の安定化及び操作の手順は、ガイドラインＵＫＣＣＣＲ（４）及び実験的及び科学的目的で使用される脊椎動物の保護に関する欧州条約（2010/63/EU; ref 5）に準拠した。
【００５９】
すべての異種移植腫瘍モデルは、０．２ｍｌのＢＭＥタイプ３  ５．６ｍｇ／ｍｌ（ＴＲＥＶＩＧＥＮ）に再懸濁された、２０ｘ１０６細胞の、マウスの各々右側への皮下接種により作成された。
【００６０】
腫瘍の成長に続いて、ゲージを使用して各腫瘍塊の長さと厚さを測定した（週２回）。腫瘍の体積は、次の式を使用して計算された：体積（ｍｍ３）＝厚さ２ｘ長さ／２
【００６１】
マウスの体重も監視した。腫瘍塊が平均体積２００〜３００ｍｍ３に達したときに処置を開始した。
【００６２】
各グループは６匹／７匹のマウスで形成された。以下の有効性パラメーターも評価した：‐対照マウスと比較した、処置されたマウスにおける腫瘍体積％（ＴＶＩ％）の阻害。-科学的目的で使用される脊椎動物の保護に関する指令に従って、研究の終わりに毒性によって引き起こされる死亡は回避し、動物を保護する手順に置き換える必要がある。特に、我々の実験では、少なくとも７日間、腫瘍塊の体積がマウスの総体重の１０％に達したとき、又はマウスの体重が対照マウスに対して２０％超減少したとき、そして食欲の欠損が伴う場合、標準的な手順（Annex IV, ref.5）に従って、マウスを二酸化炭素に曝して安楽死させる。
【００６３】
例１：ＰＩＫ３ＣＡ遺伝子で変異した乳癌ＨＥＲ２＋のＪＩＭＴ‐１異種移植モデルにおけるトラスツズマブと組み合わせたＭＥＮ１６１１の抗腫瘍活性。
ＰＩＫ３ＣＡで変異した乳癌ＨＥＲ２＋の２つの異種移植モデルでトラスツズマブと組み合わせてＭＥＮ１６１１の治療の可能性を調査した。この研究では、ｑ１ｄｘ１２の投与スキームで、経口経路により６．５ｍｇ／Ｋｇの臨床的に適切な用量でＭＥＮ１６１１の有効性を試験し、ｑ７ｄｘ２の投与スキームで、トラスツズマブを３０ｍｇ／Ｋｇの用量で腹腔内に使用した。
有効性は、腫瘍体積減少率（％ＴＶＩ）を使用して評価した。
トラスツズマブに耐性があり、ＰＩ３ＫＣＡ  ｐ．Ｃ４２０Ｒに変異を有するＨＥＲ２＋乳癌、ＪＩＭＴ‐１異種移植モデルでは、ＭＥＮ１６１１とトラスツズマブとの組み合わせにより、強力な相乗的抗腫瘍効果が示された。実際、コンボで処置された群の動物は、研究の終わりには、対照群と比較して６７．６％の腫瘍体積の減少が得られた。逆に、単剤療法でのＭＥＮ１６１１とトラスツズマブは、それぞれ−０．４％と８．８％を決定する（図１）。すべての処置群において、体重の低下や致命的な事象に関する毒性効果は観察されなかった。
【００６４】
さらに、ＭＥＮ１６１１の活性は、ＰＩ３Ｋ、ＡＫＴ（Ｓｅｒｉｎａ  ４７３）シグナル、及びＳ６（２４０‐２４４）因子のカスケードの下流にある２つのタンパク質のリン酸化を阻害する能力によって、ＭＥＮ１６１１の３回目の投与と最後の投与の４時間後に収集された各グループに所属するマウスの腫瘍塊で評価された。両方のリン酸化はＭＥＮ１６１１とトラツズマブの組み合わせで処置されたマウスの腫瘍で抑制されたが、トラスツズマブ単独で処置されたマウスの腫瘍塊におけるリン酸化のレベルは変化しなかった。２つの総タンパク質Ａｋｔ及びＳ６の一定レベルは、ＭＥＮ１６１１がこれらのタンパク質の安定性に影響を与えないことを示した（図２）。
【００６５】
サンプルは、リン酸化ａｋｔ（ｐＳ４７３‐Ａｋｔ）、総Ａｋｔ、Ｓ６のリン酸化（２４０／２４４）、及び総Ｓ６に対する抗体を用いたイムノブロッティングで分析した（図２）。
【００６６】
例２：ＰＩＫ３ＣＡ遺伝子で変異した、トラスツズマブに耐性のあるＨＣＣ１９５４異種移植モデルにおけるトラスツズマブと組み合わせたＭＥＮ１６１１の抗腫瘍活性。
トラスツズマブと組み合わせたＭＥＮ１６１１の抗腫瘍活性の増加は、トラスツズマブに耐性があり、ＰＩＫ３を発現する遺伝子に変異ｐ．Ｈ１０４７Ｒを有するＨＥＲ２＋乳癌ＨＣＣ１９５４の追加の異種移植モデルでも観察された。２つの分子の組み合わせにより、研究の最後に評価したところ、腫瘍体積の６５．１％の減少が誘発される。逆に、ＭＥＮ１６１１とトラスツズマブで処置したマウスでは、それぞれ２０．４％と１５．３％しか誘発されなかった（図３）。すべての処置群のマウスにおいて、体重の低下や致命的な事象に関する毒性効果は観察されなかった。このモデルでも、トラスツズマブと組み合わせたＭＥＮ１６１１の薬力学が確認された（図４）。
【００６７】
サンプルは、リン酸化ａｋｔ（ｐＳ４７３‐Ａｋｔ）、総Ａｋｔ、リン酸化Ｓ６（２４０／２４４）、及び総Ｓ６に対する抗体を用いたイムノブロッティングで分析した。
【００６８】
例３：ＰＩＫ３ＣＡ遺伝子が野生型でＰＴＥＮ遺伝子が欠失した、トリプルネガティブ乳癌（ＴＮＢＣ）のＨＣＣ７０異種移植モデルにおけるセツキシマブと組み合わせたＭＥＮ１６１１の抗腫瘍活性。
セツキシマブと組み合わせたＭＥＮ１６１１の治療の可能性は、ＰＩＫ３ＣＡ遺伝子が野生型で、ＰＴＥＮが欠失した、乳癌の異種移植モデルＴＮＢＣで評価した。これは、ＰＩ３Ｋの経路の過剰活性化を同様に誘発する。この研究では、ＭＥＮ１６１１の有効性を臨床的に適切な６．５ｍｇ／ｋｇの用量で経口経路により、ｑ１ｄｘ１２のスキームで試験し、セツキシマブを３０ｍｇ／Ｋｇの用量でｑ７ｄｘ２の投与スキームで腹腔内投与した。研究の終わりに、２つの分子の組み合わせにより、対照群と比較して６０．２％の腫瘍体積の減少が決定される。これに対して、ＭＥＮ１６１１単独での処置群では５０．５％、セツキシマブで処置した群では３８．１％である（図５）。このモデルでも、セツキシマブと組み合わせたＭＥＮ１６１１の薬力学は確認された（図６）。
【００６９】
例４：ＰＩ３ＫＣＡで変異し、ＢＲＡＦで変異しているがＫＲＡＳでは野生型（ｗ．ｔ．）である大腸癌のＲＫＯ異種移植モデルにおけるセツキシマブと組み合わせたＭＥＮ１６１１の抗腫瘍活性。
セツキシマブと組み合わせたＭＥＮ１６１１の治療の可能性は、ＰＩ３ＫＣＡで変異しているがＫＲＡＳではｗ．ｔ．である、大腸癌の２つの異種移植モデルで評価された。この研究では、ＭＥＮ１６１１の有効性を、６．５ｍｇ／Ｋｇの臨床的に適切な用量で、経口経路により治療スキームｑ１ｄｘ１２で試験し、セツキシマブを３０ｍｇ／Ｋｇの用量で腹腔内に投与スキームｑ７ｄｘ２で使用した。
【００７０】
大腸癌のＲＫＯ異種移植モデルでは、ＰＩＫ３ＣＡにｐ．Ｈ１０４７Ｒ、ＢＲＡＦにｐＶ６００Ｅの変異を有し、セツキシマブと組み合わせたＭＥＮ１６１１は相乗的な抗腫瘍効果を示し、実際には研究の終わりに、２つの薬の併用で処置した群は、腫瘍容積が５９．６％減少している。逆に、ＭＥＮ１６１１及びセツキシマブ単独では、それぞれ３２．３％と３７．３％の腫瘍体積の減少を誘発する（図７）。
【００７１】
すべての処置群で、体重の低下や致命的な事象に関する毒性作用は観察されなかった。両方のタンパク質のリン酸化は、ＭＥＮ１６１１で処置したマウスの腫瘍塊で抑制されたが、セツキシマブで処置したマウスの腫瘍塊には変化が観察されなかった。２つの総タンパク質ＡｋｔとＳ６の一定レベルは、ＭＥＮ１６１１がこれらのタンパク質の安定性に影響を与えないことを示す（図８）。サンプルは、リン酸化ａｋｔ（ｐＳ４７３‐Ａｋｔ）、総Ａｋｔ、Ｓ６のリン酸化（２４０／２４４）、及び総Ｓ６に対する抗体を用いたイムノブロッティングで分析した。
【００７２】
例５：ＰＩＫ３ＣＡで変異し、ＢＲＡＦで変異しているが、ＫＲＡＳについてはｗ．t．の、大腸癌のＨＴ２９異種移植モデルにおけるセツキシマブと組み合わせたＭＥＮ１６１１の抗腫瘍活性。
セツキシマブと組み合わせたＭＥＮ１６１１の効果的な抗腫瘍活性は、ＰＩ３Ｋを発現する遺伝子に変異ｐ．Ｐ４４９Ｔを有する大腸癌の追加モデルでも観察された。２つの医薬の組み合わせにより、Ｎａｄｉｒで評価された腫瘍体積の８９．４％の減少を誘発する（図９）。体重の減少や致命的な事象に関する毒性作用は観察されなかった。このモデルでも、セツキシマブと組み合わせたＭＥＮ１６１１の薬力学は実証された（図１０）。サンプルは、リン酸化ａｋｔ（ｐＳ４７３‐Ａｋｔ）、総Ａｋｔ、Ｓ６のリン酸化（２４０／２４４）、及び総Ｓ６に対する抗体を用いたイムノブロッティングで分析した。
【００７３】
例６：ＰＩ３ＫＣＡ及びＫＲＡＳで変異した大腸癌のＰＤＸモデルにおけるベバシズマブと組み合わせたＭＥＮ１６１１の抗腫瘍活性。
ベバシズマブと組み合わせたＭＥＮ１６１１の治療の可能性は、ＰＩＫ３ＣＡとＫＲＡＳで変異した大腸癌のＰＤＸモデルで評価された。この研究では、ＭＥＮ１６１１の有効性が臨床的に適切な６．５ｍｇ／Ｋｇの用量で経口経路により、ｑ１ｄｘ１２の投与スキームで試験され、ベバシズマブが腹腔内に２ｍｇ／Ｋｇで、週に２回の投与スキームで２週間使用された。
【００７４】
大腸癌のＰＤＸ  ＣＴＧ‐１５０９モデルでは、ＰＩＫ３ＣＡにｐ．Ｈ１０４７Ｒ、ＫＲＡＳにｐ．Ｑ６１Ｈの変異を有する。ベバシズマブと組み合わせたＭＥＮ１６１１は、腫瘍体積の６７％の減少を誘発することにより相乗効果を示した。逆に、ＭＥＮ１６１１及びベバシズマブ単独では、それぞれ４６．１％と４６．９％しか誘発しなかった（図１１）。すべての処置群で、体重の減少や致命的な事象に関する毒性作用は観察されなかった。
【００７５】
例７：ＰＩＫ３ＣＡ及びＥＧＦＲ遺伝子で変異した、非小細胞肺癌のＮＣＩ‐Ｈ‐１９７５異種移植モデルにおけるエルロチニブと組み合わせたＭＥＮ１６１１の抗腫瘍活性。
エルロチニブと組み合わせたＭＥＮ１６１１の治療の可能性は、ＰＩＫ３ＣＡ及びＥＧＦＲ遺伝子で変異した非小細胞肺癌の異種移植モデルで評価された。この研究では、ＭＥＮ１６１１の有効性は、臨床的に適切な用量６．５ｍｇ／Ｋｇで経口経路により、ｑ１ｄｘ１２の治療スキームで試験され、エルロチニブは経口経路により５０ｍｇ／Ｋｇの用量で、ｑ１ｄｘ６の治療スキームで試験された。ＭＥＮ１６１１とエルロチニブの組み合わせの有意な抗腫瘍活性が、ＰＩＫ３ＣＡの変異ｐ．Ｇ１１８ＤとＥＧＦＲ遺伝子の二重変異ｐ．Ｔ７９０Ｍ及びｐ．Ｌ８５８Ｒを有する、非小細胞肺癌を有する、ＮＣＩ‐Ｈ‐１９７５異種移植モデルで観察された。２つの分子の組み合わせにより、研究の終わりに腫瘍体積が５１．４％減少する。逆に、ＭＥＮ１６１１及びエルロチニブ単独では、腫瘍体積の減少を誘発しない（図１２）。このモデルにおいても、エルロチニブと組み合わせたＭＥＮ１６１１の薬力学は確認された（図１３）。サンプルは、リン酸化ａｋｔ（ｐＳ４７３‐Ａｋｔ）、総Ａｋｔ、Ｓ６のリン酸化（２４０／２４４）、及び総Ｓ６に対する抗体を用いたイムノブロッティングで分析した。
【００７６】
例８：ＰＩＫ３ＣＡ及びＥＧＦＲについてｗ．ｔ．の非小細胞肺癌のＮＣＩ‐Ｈ‐２９２異種移植モデルにおけるエルロチニブと組み合わせたＭＥＮ１６１１の抗腫瘍活性。
エルロチニブと組み合わせたＭＥＮ１６１１の治療の可能性は、ＰＩＫ３ＣＡ及びＥＧＦＲ遺伝子についてｗ．ｔ．の非小細胞肺癌の異種移植モデルで評価された。この研究では、ＭＥＮ１６１１の有効性は、ｑ１ｄｘ５の治療スキームを用いて、６．５ｍｇ／Ｋｇの臨床的に適切な用量で経口経路により試験され、エルロチニブは、経口経路により５０ｍｇ／Ｋｇの用量で、ｑ１ｄｘ５の治療スキームを用いて試験された。ＰＩＫ３ＣＡ及びＥＧＦＲ遺伝子についてｗ．ｔ．の非小細胞肺癌のＮＣ‐Ｈ‐２９２異種移植モデルで、ＭＥＮ１６１１とエルロチニブの組み合わせの良好な抗腫瘍活性が観察された。最下点で評価された２つの分子の組み合わせにより、腫瘍体積の６２％の減少を誘発する（図１４）。
【００７７】
例９：乳癌の細胞株に対するＭＥＮ１６１１とフルベストランの組み合わせの相乗効果。
ＰＩＫ３ＣＡ遺伝子で変異した乳癌ＨＥＲ２＋／ＥＲ＋のＴ４７Ｄ細胞株は、増加する用量のＭＥＮ１６１１（すなわち０．０１３-０．０６８-０．３４-１．７-８．５ｕＭ）単独で、又はフルベストラント（エストロゲン受容体の分解剤／モジュレーター）と組み合わせて処置された）（０．００４９-０．０２４-０．１２４-０．６２ｕＭ）。Ｃｈｏｕ‐Ｔａｌａｌａｙ組み合わせインデックス（ＣＩ‐Ｃｈｏｕ‐Ｔａｌａｌａｙ組み合わせインデックスＣＩ）は、Preclinical versus Clinical Drugs Combination Studies（前臨床対臨床の薬物組み合わせ研究）（Chou TC. Leuk. Lymphoma.5 2008;49(11):2059-2080）で指定されたものに従って評価した。
【００７８】
このようなインデックスは、相乗効果の定量的な定義、特に以下を提供する：
‐ＣＩ＜０．３は強力な相乗効果を示し、
‐０．３＜ＣＩ＜０．９は相乗効果を示し、
‐０．９＜ＣＩ＜１．１は相加効果を示し、
‐ＣＩ＞１．１は拮抗作用を示す。
図１５に示すように、異なる濃度でのＭＥＮ１６１とフルベストラントの組み合わせは、強力な相乗効果又は相乗効果を示すＣＩ値を示す。
【００７９】
例１０：ＰＩＫ３ＣＡ及びＥＧＦＲ遺伝子で変異した、非小細胞肺癌のＰＤＸモデルにおけるエルロチニブと組み合わせたＭＥＮ１６１１の抗腫瘍活性。
エルロチニブと組み合わせたＭＥＮ１６１１の治療の可能性は、ＰＩＫ３ＣＡ及びＥＧＦＲ遺伝子で変異した非小細胞肺癌のＰＤＸモデルで評価した。この研究では、ＭＥＮ１６１１の有効性は臨床的に適切な用量である６．５ｍｇ／Ｋｇを経口経路によりｑ１ｄｘ１２の治療スキームで試験し、エルロチニブは２５ｍｇ／Ｋｇを経口経路により、ｑ１ｄｘ５の治療スキームで３週間試験した。ｄｅｌＭＥＮ１６１１とエルロチニブの組み合わせの有意な抗腫瘍活性が、ＰＩＫ３ＣＡの変異ｐ．Ｅ５４２ＫとＥＧＦＲ遺伝子のエクソン１９の欠失、ｐ．Ｅ７４６＿Ａ７５０ｄｅｌを有する非小細胞肺癌のＰＤＸ  ＲＵ２７８モデルで観察された。研究の最後に、２つの分子を組み合わせると、腫瘍体積の７７．７％の減少を誘発する。逆に、ＭＥＮ１６１１及びエルロチニブ単独では、それぞれ４３．６％と１４％の腫瘍体積の減少を誘発する（図１６）。 
【００８０】
例１１：ＥＧＦＲ遺伝子で変異し、ＰＩＫ３ＣＡ遺伝子について野生型の非小細胞肺癌のＲＢ１異種移植モデルにおけるゲフィチニブと組み合わせたＭＥＮ１６１１の抗腫瘍処置。
ゲフィチニブと組み合わせたＭＥＮ１６１１の治療の可能性は、ＥＧＦＲ遺伝子で変異し、ＰＩＫ３ＣＡ遺伝子については野生型の、非小細胞肺癌のＰＤＸモデルで評価された。この研究では、ＭＥＮ１６１１の有効性は、臨床的に適切な６．５ｍｇ／Ｋｇの用量で経口経路により、ｑ１ｄｘ２０の治療スキームで試験され、ゲフィチニブは経口経路により５０ｍｇ／Ｋｇの投与量で、ｑ１ｄｘ２０の治療スキームで試験された。ＭＥＮ１６１１とゲフィチニブの組み合わせによる有意な抗腫瘍活性が、ＥＧＦＲ遺伝子のエクソン１９の欠失、ｐ．Ｅ７４６＿Ａ７５０ｄｅｌを有する非小細胞肺癌のＲＢ１モデルで観察された。２つの分子の組み合わせにより、研究の終わりに、ＭＥＮ１６１１及びゲフィチニブ単独の場合と比較して、腫瘍体積の大幅な減少を誘発する（図１７）。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【国際調査報告】
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