(57)【要約】  ある実施形態では、本開示は、てんかん発作性疾患に罹患しているか又はてんかん発作性疾患に罹患するリスクがある哺乳動物を治療するための方法及び使用であって、特定の本明細書に開示される単離されたフェンフルラミン鏡像異性体を投与する工程を備え、この単離されたフェンフルラミン鏡像異性体は驚くべきことに、フェンフルラミンラセミ化合物よりも低い抗発作効力しか有さないが、フェンフルラミンラセミ化合物よりも心毒性が低いことにも起因して抗てんかん薬（ＡＥＤ）として有効である方法及び使用に関する。好ましい実施形態はドラベ症候群の治療を意図し、他の好ましい実施形態は他のてんかん発作性疾患の治療を意図する。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒト対象においててんかん又はてんかん発作性疾患を治療することにおいて使用するための、（Ｒ）−フェンフルラミン又はその薬学的に許容できる塩、（Ｒ）−ノルフェンフルラミン又はその薬学的に許容できる塩、及び（Ｒ）−ベンフルオレクス又はその薬学的に許容できる塩から選択される化合物であって、
８０％超の鏡像体過剰率（ｅｅ）を有する化合物。
【請求項２】
前記化合物が９０％超のｅｅを有する請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
前記化合物が９５％超のｅｅを有する請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
前記化合物が９７％超のｅｅを有する請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
前記化合物が９９％超のｅｅを有する請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
前記化合物が８０％〜９９％のｅｅを有する請求項１に記載の化合物。
【請求項７】
前記化合物が９０％〜９９％のｅｅを有する請求項１に記載の化合物。
【請求項８】
前記対象がドラベ症候群に罹患している請求項１から請求項７のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項９】
前記化合物が（Ｒ）−フェンフルラミン又はその薬学的に許容できる塩である請求項１から請求項８のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１０】
前記化合物が（Ｒ）−ノルフェンフルラミン又はその薬学的に許容できる塩である請求項１から請求項８のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１１】
前記化合物が（Ｒ）−ベンフルオレクス又はその薬学的に許容できる塩である請求項１から請求項８のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１２】
化合物と１以上の薬学的に許容できる賦形剤とを含む医薬組成物であって、
前記化合物は、（Ｒ）−フェンフルラミン又はその薬学的に許容できる塩、（Ｒ）−ノルフェンフルラミン又はその薬学的に許容できる塩、及び（Ｒ）−ベンフルオレクス又はその薬学的に許容できる塩から選択され、
前記化合物は８０％超の鏡像体過剰率（ｅｅ）を有する医薬組成物。
【請求項１３】
前記化合物が９０％超のｅｅを有する請求項１２に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
前記化合物が９５％超のｅｅを有する請求項１２に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
前記化合物が９７％超のｅｅを有する請求項１２に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
前記化合物が９９％超のｅｅを有する請求項１２に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
前記化合物が８０％〜９９％のｅｅを有する請求項１２に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
前記化合物が９０％〜９９％のｅｅを有する請求項１２に記載の医薬組成物。
【請求項１９】
前記化合物が（Ｒ）−フェンフルラミン又はその薬学的に許容できる塩である請求項１２から請求項１８のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項２０】
前記組成物が、３０ｍｇ超の（Ｒ）−フェンフルラミン又はその薬学的に許容できる塩を含む請求項１９に記載の医薬組成物。
【請求項２１】
前記組成物が、３５ｍｇ超の（Ｒ）−フェンフルラミン又はその薬学的に許容できる塩を含む請求項１９に記載の医薬組成物。
【請求項２２】
前記組成物が、４０ｍｇ超の（Ｒ）−フェンフルラミン又はその薬学的に許容できる塩を含む請求項１９に記載の医薬組成物。
【請求項２３】
前記組成物が、４０ｍｇ〜３００ｍｇの（Ｒ）−フェンフルラミン又はその薬学的に許容できる塩を含む請求項１９に記載の医薬組成物。
【請求項２４】
前記組成物が、４０ｍｇ〜１５０ｍｇの（Ｒ）−フェンフルラミン又はその薬学的に許容できる塩を含む請求項１９に記載の医薬組成物。
【請求項２５】
前記化合物が（Ｒ）−ノルフェンフルラミン又はその薬学的に許容できる塩である請求項１２から請求項１８のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項２６】
前記化合物が（Ｒ）−ベンフルオレクス又はその薬学的に許容できる塩である請求項１２から請求項１８のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項２７】
ヒト対象においててんかん又はてんかん発作性疾患を治療することにおいて使用するための請求項１２から請求項２６のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項２８】
前記対象がドラベ症候群に罹患している請求項２７に記載の医薬組成物。
【請求項２９】
治療において使用するための、（Ｒ）−フェンフルラミン又はその薬学的に許容できる塩、（Ｒ）−ノルフェンフルラミン又はその薬学的に許容できる塩、及び（Ｒ）−ベンフルオレクス又はその薬学的に許容できる塩から選択される化合物であって、
前記化合物は８０％超の鏡像体過剰率（ｅｅ）を有する化合物。
【請求項３０】
ヒト対象においててんかん又はてんかん発作性疾患を治療することにおいて使用するための、ラセミのノルフェンフルラミン又はその薬学的に許容できる塩から選択される化合物。
【請求項３１】
前記対象がドラベ症候群に罹患している請求項３０に記載の化合物。
【請求項３２】
ラセミのノルフェンフルラミン又はその薬学的に許容できる塩と、１以上の薬学的に許容できる賦形剤とを含む医薬組成物。
【請求項３３】
ヒト対象においててんかん又はてんかん発作性疾患を治療することにおいて使用するための請求項３２に記載の医薬組成物。
【請求項３４】
前記対象がドラベ症候群に罹患している請求項３３に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本開示は、ドラベ（Ｄｒａｖｅｔ）症候群を含めたてんかんを治療するためのフェンフルラミン若しくはその活性代謝産物、ノルフェンフルラミンの（Ｒ）−鏡像異性体、又はそれらのプロドラッグの使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
てんかん及びてんかん発作性疾患は、米国国内の少なくとも３００万人を含め全世界で６５００万人を超える人々が罹患していると推定される神経の疾患、障害及び状態のクラスを代表する。毎年、およそ１５０，０００件の新しいてんかん症例が米国で報告される。てんかん発作性疾患は、非常に様々な頻度、強度及び継続期間の孤発性の全般発作又は焦点発作を特徴とする慢性状態である（例えば、Ｂｅｒｇら、２０１０  Ｅｐｉｌｅｐｓｉａ  ５１（４）：６７６−６８５）。てんかん発作は、一時的な痙攣、呼吸の停止、意識消失、発話能力若しくは運動能力の障害、姿勢緊張の喪失、不随意の筋収縮、又は中枢神経系（ＣＮＳ）の皮質ニューロンによる信号伝達の異常及び過剰の他の結果のうちの１以上として顕在化する可能性がある。従って、てんかん発作は、歩行、水泳、又は運転等の日常的な活動を安全に行うという個体の能力を損なう可能性があるし、又はあざ、切り傷、熱傷、整形外科的傷害、転落による傷害等の身体の傷害の根本原因となる可能性がある。より劇的な場合には、てんかん発作は、時にはてんかんにおける予期せぬ突然死（Ｓｕｄｄｅｎ  Ｕｎｅｘｐｅｃｔｅｄ  Ｄｅａｔｈ  ｉｎ  Ｅｐｉｌｅｐｓｙ：ＳＵＤＥＰ）を生じることがあり、その症例は、毎年米国で４０，０００症例あると推定されている。
【０００３】
非常に多くのてんかん発作性疾患が特徴づけられて分類されており、それらには、部分発作（単純、複雑、続発性全般、及び焦点起始等）、全般発作（欠神、ミオクロニー、脱力、強直及び強直間代等）、及び障害が含まれ、この障害としては光過敏性てんかん、自己誘発失神、難治性てんかん、アンジェルマン症候群、良性ローランドてんかん、ＣＤＫＬ５障害、幼児期及び若年性欠神てんかん、ドラベ症候群、前頭葉てんかん、グルコーストランスポーター１（Ｇｌｕｔ１）欠損症、視床下部過誤腫、点頭てんかん／ウエスト（Ｗｅｓｔ）症候群、若年性ミオクロニーてんかん、ランドウ・クレフナー（Ｌａｎｄａｕ−Ｋｌｅｆｆｎｅｒ）症候群、レノックス・ガストー（Ｌｅｎｎｏｘ−Ｇａｓｔａｕｔ）症候群（ＬＧＳ）、ミオクロニー欠神てんかん、大田原症候群、パナエトポラス（Ｐａｎａｙｉｏｔｏｐｏｕｌｏｓ）症候群、ＰＣＤＨ１９てんかん、進行性ミオクローヌスてんかん、ラスムッセン（Ｒａｓｍｕｓｓｅｎ）症候群、環状２０番染色体症候群、反射てんかん、側頭葉てんかん、ラフォラ（Ｌａｆｏｒａ）進行性ミオクローヌスてんかん、神経皮膚症候群、結節性硬化症、早期乳児てんかん性脳症、早期発症型てんかん性脳症、全般てんかん熱性痙攣プラス（ＧＥＦＳ＋）、レット（Ｒｅｔｔ）症候群、多発性硬化症、アルツハイマー病、自閉症、運動失調症、筋緊張低下及び発作性ジスキネジアが挙げられる。
【０００４】
およそ２５種の抗てんかん薬（ＡＥＤ）がてんかん発作を制御又は治療するために開発されており、それらのＡＥＤの多くが非選択的なナトリウムチャネル遮断薬としてＣＮＳにおいて作用する。（Ａｎｔｉｅｐｉｌｅｐｔｉｃ  Ｄｒｕｇｓ、第４版．  Ｌｅｖｙ  ＲＨ、Ｍａｔｔｓｏｎ  ＲＧ、Ｍｅｌｄｒｕｍ  ＢＳ編、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ：Ｒａｖｅｎ  Ｐｒｅｓｓ、１９９５：６１−７７のＭａｃｄｏｎａｌｄ  ＲＬ、Ｍｅｌｄｒｕｍ  ＢＳ．  Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｏｆ  ａｎｔｉｅｐｉｌｅｐｔｉｃ  ｄｒｕｇ  ａｃｔｉｏｎ）。しかしながら、ＡＥＤに対する応答性は患者間でばらつき、このため、与えられた対象における任意の特定のＡＥＤの有効性を予測することは困難になっている。あらゆるてんかん発作性疾患の治療法と考えられているＡＥＤはない。さらに、ＡＥＤは、てんかん患者のおよそ３分の１において有効ではなく、これは、異なるてんかん発作性疾患の根底には複数の別個の遺伝子異常が存在するという認識を抱かせる（例えば、Ｓｔｒｉａｎｏら、２０１６  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｒｅｓ．  １０７：４２６−４２９）。
【０００５】
乳児重症ミオクロニーてんかん（ＳＭＥＩ）としても知られるドラベ症候群は、１９７８に最初に記載されたてんかん発作性疾患である（Ｄｒａｖｅｔ、１９７８  Ｖｉｅ  Ｍｅｄ  ８：５４３−５４８）。ドラベ症候群は、４０，０００人に１人から２０，０００人に１人の間のおよその出生率で現れ、人生の最初の年の発作を特徴とし、これは、最初は発熱によって誘発されることが多いが、その後の発作は必ずしも発熱が引き金となるわけではない。ドラベ症候群の患者は、頻繁で予測できない発作、温度若しくは光線過敏によって誘発される発作、運動異常、及び／又は精神発達障害、精神発達停止若しくは精神発達の退行を抱えることがある。
【０００６】
神経特異的電位依存性ナトリウムチャネル（ＳＣＮ１Ａ）の遺伝子異常が、２００１年にドラベ症候群の（すべてではないが）多くの症例の根本原因として特定された（Ｃｌａｅｓら、２００１  Ａｍ．Ｊ．Ｈｕｍ．Ｇｅｎｅｔ．  ６８：１３２７−１３３２；Ｍａｒｉｎｉら、２０１１  Ｅｐｉｌｅｐｓｉａ  ５２（Ｓｕｐｐｌ．２）：２４−２９；Ｃｅｕｌｅｍａｎｓら、２０１２  Ｅｐｉｌｅｐｓｉａ  ５３（７）：１１３１−１１３９）。従って、作用機序としてＳＣＮ１Ａを含めた神経細胞ナトリウムチャネル遮断活性を有するＡＥＤは、ドラベ症候群の治療にとっては禁忌となる。
【０００７】
フェンフルラミン（（Ｒ／Ｓ）−Ｎ−エチル−１−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］プロパン−２−アミン）は、２つの鏡像異性体のラセミ混合物として存在する食欲抑制性のアンフェタミン様薬物であり、抗肥満薬としてのフェンテルミン（２−メチル−１−フェニルプロパン−２−アミン）との配合物として２０年以上のあいだ販売された。フェンフルラミンは、血液脳関門（ＢＢＢ）を通過することができ、そして、小胞セロトニン（５−ヒドロキシトリプタミン、５−ＨＴ）貯蔵を妨害して選択的なセロトニントランスポーターを介する５−ＨＴ取り込みを逆転させることによってＣＮＳにおける５−ＨＴレベルを上昇させる。これらのセロトニン作動性の効果は、フェンフルラミンの食欲抑制特性の根底にあると考えられており、潜在的な抗てんかん性効果についてもインビトロラット誘発ラット嗅内皮質モデルにおいて検討されてきた（Ｇｅｎｔｓｃｈら、２０００  Ｅｐｉｌｅｐｓｉａ  ４１（８）：９２５−９２８）。
【０００８】
しかしながら、フェンフルラミンが、心臓組織で発現されるセロトニン受容体５−ＨＴ２Ｂを介するフェンフルラミンアゴニスト活性から生じる心臓弁肥大、肺高血圧及び心臓線維化を含めた有害心血管効果に関与すると判明したとき（Ａｎｄｒｅｊａｋら、Ａｒｃｈ．Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ  Ｄｉｓ．（２０１３）  １０６：３３３−３３９；Ｅｌａｎｇｂａｍら、Ｅｘｐ  Ｔｏｘｉｃｏｌ  Ｐａｔｈｏｌ（２００８）  ６０（４−５）：２５３−２６２；Ｃａｍｂｏｎら、Ａｒｃｈ．Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ  Ｄｉｓ（２０１５）  １０８：１７２−１８０）、フェンフルラミンは医薬品市場から撤退した。フェンフルラミンは、−  その主要な代謝産物であるノルフェンフルラミンを介して  −、ドラベ症候群患者のコホートにおいて発作の頻度又は重症度を制限することに関してある程度の見かけの有効性を提示していた（Ｃｅｕｌｅｍａｎｓら、２０１２；Ｂｏｅｌら、１９９６  Ｎｅｕｒｏｐｅｄｉａｔｒｉｃｓ  ２７：１７１−１７３；Ｌａｇａｅ，Ｌ．ら、「ＺＸ００８（Ｆｅｎｆｌｕｒａｍｉｎｅ  ＨＣｌ  Ｏｒａｌ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ）  ｉｎ  Ｄｒａｖｅｔ  Ｓｙｎｄｒｏｍｅ：Ｒｅｓｕｌｔｓ  ｏｆ  ａ  Ｐｈａｓｅ  ３，  Ｒａｎｄｏｍｉｚｅｄ，  Ｄｏｕｂｌｅ−Ｂｌｉｎｄ，  Ｐｌａｃｅｂｏ−Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｔｒｉａｌ」、ポスター番号２．４３４、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｅｐｉｌｅｐｓｙ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  Ａｎｎｕａｌ  Ｍｅｅｔｉｎｇ、２０１７年１２月１〜５日）が、その心毒性の履歴に起因してＡＥＤとして利用されていないままである。同じく２つの鏡像異性体のラセミ混合物である、構造的に関連する化合物であるベンフルオレクス（安息香酸（Ｒ／Ｓ）−２−（１−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）プロパン−２−イルアミノ）エチル）は、同様に５−ＨＴ放出を促す（その代謝産物ノルフェンフルラミンを介して５ＨＴ２受容体に対するアゴニスト活性を有する）ノルフェンフルラミンのプロドラッグであり、抗糖尿病薬としてしばらくのあいだ市販されたが、これもその後にフェンフルラミンに関連する有害心血管効果と類似の有害心血管効果が原因で撤退した。しかしながら、ベンフルオレクスは、これまでＡＥＤとしては検討されてこなかった。
【０００９】
てんかん及びドラベ症候群を含めた他のてんかん発作性疾患に対する有効な治療方法に対するニーズが当該技術分野で依然としてあることは明らかである。本開示は、てんかん発作性疾患を治療するための組成物及び方法を提供することによってこのニーズに対処し、他の関連する利点を提供する。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【００１０】
【非特許文献１】Ｂｅｒｇら、２０１０  Ｅｐｉｌｅｐｓｉａ  ５１（４）：６７６−６８５
【非特許文献２】Ａｎｔｉｅｐｉｌｅｐｔｉｃ  Ｄｒｕｇｓ、第４版．  Ｌｅｖｙ  ＲＨ、Ｍａｔｔｓｏｎ  ＲＧ、Ｍｅｌｄｒｕｍ  ＢＳ編、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ：Ｒａｖｅｎ  Ｐｒｅｓｓ、１９９５：６１−７７のＭａｃｄｏｎａｌｄ  ＲＬ、Ｍｅｌｄｒｕｍ  ＢＳ．  Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｏｆ  ａｎｔｉｅｐｉｌｅｐｔｉｃ  ｄｒｕｇ  ａｃｔｉｏｎ
【非特許文献３】Ｓｔｒｉａｎｏら、２０１６  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｒｅｓ．  １０７：４２６−４２９
【非特許文献４】Ｄｒａｖｅｔ、１９７８  Ｖｉｅ  Ｍｅｄ  ８：５４３−５４８
【非特許文献５】Ｃｌａｅｓら、２００１  Ａｍ．Ｊ．Ｈｕｍ．Ｇｅｎｅｔ．  ６８：１３２７−１３３２
【非特許文献６】Ｍａｒｉｎｉら、２０１１  Ｅｐｉｌｅｐｓｉａ  ５２（Ｓｕｐｐｌ．２）：２４−２９
【非特許文献７】Ｃｅｕｌｅｍａｎｓら、２０１２  Ｅｐｉｌｅｐｓｉａ  ５３（７）：１１３１−１１３９
【非特許文献８】Ｇｅｎｔｓｃｈら、２０００  Ｅｐｉｌｅｐｓｉａ  ４１（８）：９２５−９２８
【非特許文献９】Ａｎｄｒｅｊａｋら、Ａｒｃｈ．Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ  Ｄｉｓ．（２０１３）  １０６：３３３−３３９
【非特許文献１０】Ｅｌａｎｇｂａｍら、Ｅｘｐ  Ｔｏｘｉｃｏｌ  Ｐａｔｈｏｌ（２００８）  ６０（４−５）：２５３−２６２
【非特許文献１１】Ｃａｍｂｏｎら、Ａｒｃｈ．Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ  Ｄｉｓ（２０１５）  １０８：１７２−１８０
【非特許文献１２】Ｂｏｅｌら、１９９６  Ｎｅｕｒｏｐｅｄｉａｔｒｉｃｓ  ２７：１７１−１７３
【非特許文献１３】Ｌａｇａｅ，Ｌ．ら、「ＺＸ００８（Ｆｅｎｆｌｕｒａｍｉｎｅ  ＨＣｌ  Ｏｒａｌ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ）  ｉｎ  Ｄｒａｖｅｔ  Ｓｙｎｄｒｏｍｅ：Ｒｅｓｕｌｔｓ  ｏｆ  ａ  Ｐｈａｓｅ  ３，  Ｒａｎｄｏｍｉｚｅｄ，  Ｄｏｕｂｌｅ−Ｂｌｉｎｄ，  Ｐｌａｃｅｂｏ−Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｔｒｉａｌ」、ポスター番号２．４３４、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｅｐｉｌｅｐｓｙ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  Ａｎｎｕａｌ  Ｍｅｅｔｉｎｇ、２０１７年１２月１〜５日
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本開示は、ある実施形態では、ドラベ症候群を含めたてんかんを治療又は予防するための、フェンフルラミンの（Ｒ）−鏡像異性体、ベンフルオレクスの（Ｒ）−鏡像異性体、若しくはフェンフルラミン若しくはベンフルオレクスの活性代謝産物であるノルフェンフルラミンの（Ｒ）−鏡像異性体、又はそのプロドラッグの使用に関する。
【００１２】
従って、１つの実施形態では、本開示は、哺乳動物においててんかん発作性疾患を治療又は予防する方法であって、その哺乳動物に治療上有効量の、（ｉ）（Ｒ）−フェンフルラミン又はその薬学的に許容できる塩、溶媒和物若しくはプロドラッグ；（ｉｉ）（Ｒ）−ノルフェンフルラミン又はその薬学的に許容できる塩、溶媒和物若しくはプロドラッグ、及び（ｉｉｉ）（Ｒ）−ベンフルオレクス又はその薬学的に許容できる塩、溶媒和物若しくはプロドラッグ、のうちの１つ、２つ又は３つすべてを投与する工程を備え、（Ｒ）−フェンフルラミンは（Ｓ）−フェンフルラミンを実質的に含まず（例えば、８０％ｅｅ超）、（Ｒ）−ノルフェンフルラミンは（Ｓ）−ノルフェンフルラミンを実質的に含まず（例えば、８０％ｅｅ超）、（Ｒ）−ベンフルオレクスは（Ｓ）−ベンフルオレクスを実質的に含まない（例えば、８０％ｅｅ超）方法を提供する。ある実施形態では、てんかん発作性疾患に罹患しているか又はてんかん発作性疾患に罹患するリスクがある哺乳動物の治療方法であって、その哺乳動物に（ａ）治療上有効量の、（ｉ）（Ｒ）−フェンフルラミン又はその薬学的に許容できる塩、溶媒和物若しくはプロドラッグ；（ｉｉ）（Ｒ）−ノルフェンフルラミン又はその薬学的に許容できる塩、溶媒和物若しくはプロドラッグ、及び（ｉｉｉ）（Ｒ）−ベンフルオレクス又はその薬学的に許容できる塩、溶媒和物若しくはプロドラッグのうちの１つ、２つ又は３つすべて；並びに（ｂ）治療上有効量のフェンテルミン、又はその薬学的に許容できる塩、溶媒和物若しくはプロドラッグを同時に又は逐次的に、及び任意の順序で投与する工程を備え、（Ｒ）−フェンフルラミンは（Ｓ）−フェンフルラミンを実質的に含まず（例えば、８０％ｅｅ超）、（Ｒ）−ノルフェンフルラミンは（Ｓ）−ノルフェンフルラミンを実質的に含まず（例えば、８０％ｅｅ超）、（Ｒ）−ベンフルオレクスは（Ｓ）−ベンフルオレクスを実質的に含まない（例えば、８０％ｅｅ超）方法が提供される。
【００１３】
当該方法の特定のさらなる実施形態では、てんかん発作性疾患はドラベ症候群である。当該方法の特定の他のさらなる実施形態では、てんかん発作性疾患は、光過敏性てんかん、自己誘発失神、難治性てんかん、アンジェルマン症候群、良性ローランドてんかん、ＣＤＫＬ５障害、幼児期及び若年性欠神てんかん、ドラベ症候群、前頭葉てんかん、グルコーストランスポーター１（Ｇｌｕｔ１）欠損症、視床下部過誤腫、点頭てんかん／ウエスト症候群、若年性ミオクロニーてんかん、ランドウ・クレフナー症候群、レノックス・ガストー症候群（ＬＧＳ）、ミオクロニー欠神てんかん、大田原症候群、パナエトポラス症候群、ＰＣＤＨ１９てんかん、進行性ミオクローヌスてんかん、ラスムッセン症候群、環状２０番染色体症候群、反射てんかん、側頭葉てんかん、ラフォラ進行性ミオクローヌスてんかん、神経皮膚症候群、結節性硬化症、早期乳児てんかん性脳症、早期発症型てんかん性脳症、全般てんかん熱性痙攣プラス（ＧＥＦＳ＋）、レット症候群、多発性硬化症、アルツハイマー病、自閉症、運動失調症、筋緊張低下、発作性ジスキネジア、焦点起始発作、全般起始発作、欠神発作、ジーボンス（Ｊｅａｖｏｎ）症候群、てんかん性脳症、ヒマワリ症候群（ｓｕｎｆｌｏｗｅｒ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ）、脆弱Ｘ症候群、交代性片麻痺、常染色体優性夜間前頭葉てんかん（ＡＤＮＦＬＥ）、良性ローランドてんかん、ドーズ（Ｄｏｏｓｅ）症候群、早期ミオクロニー脳症、遊走性焦点発作を伴う乳児てんかん、全般強直間代発作のみを示すてんかん（ｅｐｉｌｅｐｓｙ  ｗｉｔｈ  ｇｅｎｅｒａｌｉｚｅｄ  ｔｏｎｉｃ−ｃｌｏｎｉｃ  ｓｅｉｚｕｒｅ）、ミオクロニー欠神てんかん、睡眠時持続性棘徐波を示すてんかん性脳症、若年性欠神発作、進行性ミオクローヌスてんかん、ＳＣＮ８Ａ関連てんかん、ＳＣＮ２Ａ関連てんかん、ＫＣＮＱ２関連てんかん、及びＴＢＣ１ドメイン含有キナーゼ（ＴＢＣＫ）関連の知的障害（ＩＤ）症候群から選択される。
【００１４】
特定の他の実施形態では、てんかん発作性疾患に罹患しているか又はてんかん発作性疾患に罹患するリスクがある哺乳動物の治療方法であって、その哺乳動物に治療上有効量のラセミのノルフェンフルラミン［（Ｒ／Ｓ）−１−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）プロパン−２−アミン］又はそのプロドラッグを投与する工程を備える方法が提供される。
【００１５】
ある実施形態では、てんかん発作性疾患に罹患しているか又はてんかん発作性疾患に罹患するリスクがある哺乳動物の治療方法であって、その哺乳動物に（ａ）治療上有効量のラセミのノルフェンフルラミン［（Ｒ／Ｓ）−１−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）プロパン−２−アミン］又はそのプロドラッグ；及び（ｂ）治療上有効量のフェンテルミン、又はその薬学的に許容できる塩、溶媒和物若しくはプロドラッグを同時に又は逐次的に、及び任意の順序で投与する工程を備える方法が提供される。
【００１６】
特定のさらなる実施形態では、てんかん発作性疾患はドラベ症候群である。ある実施形態では、てんかん発作性疾患は、光過敏性てんかん、自己誘発失神、難治性てんかん、アンジェルマン症候群、良性ローランドてんかん、ＣＤＫＬ５障害、幼児期及び若年性欠神てんかん、ドラベ症候群、前頭葉てんかん、グルコーストランスポーター１（Ｇｌｕｔ１）欠損症、視床下部過誤腫、点頭てんかん／ウエスト症候群、若年性ミオクロニーてんかん、ランドウ・クレフナー症候群、レノックス・ガストー症候群（ＬＧＳ）、ミオクロニー欠神てんかん、大田原症候群、パナエトポラス症候群、ＰＣＤＨ１９てんかん、進行性ミオクローヌスてんかん、ラスムッセン症候群、環状２０番染色体症候群、反射てんかん、側頭葉てんかん、ラフォラ進行性ミオクローヌスてんかん、神経皮膚症候群、結節性硬化症、早期乳児てんかん性脳症、早期発症型てんかん性脳症、全般てんかん熱性痙攣プラス（ＧＥＦＳ＋）、レット症候群、多発性硬化症、アルツハイマー病、自閉症、運動失調症、筋緊張低下、発作性ジスキネジア、焦点起始発作、全般起始発作、欠神発作、ジーボンス症候群、てんかん性脳症、ヒマワリ症候群、脆弱Ｘ症候群、交代性片麻痺、常染色体優性夜間前頭葉てんかん（ＡＤＮＦＬＥ）、良性ローランドてんかん、ドーズ症候群、早期ミオクロニー脳症、遊走性焦点発作を伴う乳児てんかん、全般強直間代発作のみを示すてんかん、ミオクロニー欠神てんかん、睡眠時持続性棘徐波を示すてんかん性脳症、若年性欠神発作、進行性ミオクローヌスてんかん、ＳＣＮ８Ａ関連てんかん、ＳＣＮ２Ａ関連てんかん、ＫＣＮＱ２関連てんかん、及びＴＢＣ１ドメイン含有キナーゼ（ＴＢＣＫ）関連の知的障害（ＩＤ）症候群から選択される。
【００１７】
いくつかの実施形態では、本開示は、てんかん又はてんかん発作性疾患の治療方法であって、必要とするヒト対象に治療上有効量の（Ｒ）−フェンフルラミン又はその薬学的に許容できる塩を投与する工程を備え、この（Ｒ）−フェンフルラミン又はその薬学的に許容できる塩は、８０％超、例えば９０％超、９５％超、９７％超、９８％超、９９％超、又は９９．５％超の鏡像体過剰率（ｅｅ）、又は例えば８０％〜９９％若しくは９０％〜９９％のｅｅを有する方法を提供する。ある実施形態では、鏡像体過剰の（Ｒ）−フェンフルラミン又はその薬学的に許容できる塩を用いる当該てんかん又はてんかん発作性疾患の治療方法は、例えば、発作頻度又は平均痙攣発作頻度をベースラインから少なくとも２０％、例えばベースラインから少なくとも２５％、３５％、５０％、６０％、６５％、７０％、７５％又は８０％、特にベースラインから少なくとも２５％、５０％又は７５％低下させることにより、てんかん発作の頻度を低下させる。
【００１８】
ある実施形態では、本開示は、（Ｒ）−フェンフルラミン又はその薬学的に許容できる塩と、１以上の薬学的に許容できる賦形剤とを含む医薬組成物であって、この（Ｒ）−フェンフルラミン又はその薬学的に許容できる塩は８０％超、例えば９０％超、９５％超、９７％超、９８％超、９９％超、又は９９．５％超のｅｅ、又は例えば８０％〜９９％若しくは９０％〜９９％のｅｅを有する医薬組成物を提供する。
【００１９】
いくつかの実施形態では、本開示は、てんかん又はてんかん発作性疾患の治療方法であって、必要とするヒト対象に治療上有効量の（Ｒ）−ノルフェンフルラミン又はその薬学的に許容できる塩若しくはプロドラッグを投与する工程を備え、この（Ｒ）−ノルフェンフルラミン又はその薬学的に許容できる塩若しくはプロドラッグは８０％超、例えば９０％超、９５％超、９７％超、９８％超、９９％超、又は９９．５％超の鏡像体過剰率ｅｅ、又は例えば８０％〜９９％若しくは９０％〜９９％のｅｅを有する方法を提供する。ある実施形態では、鏡像体過剰の（Ｒ）−ノルフェンフルラミン又はその薬学的に許容できる塩若しくはプロドラッグを用いる当該てんかん又はてんかん発作性疾患の治療方法は、例えば、発作頻度又は平均痙攣発作頻度をベースラインから少なくとも２０％、例えばベースラインから少なくとも２５％、３５％、５０％、６０％、６５％、７０％、７５％又は８０％、特にベースラインから少なくとも２５％、５０％又は７５％低下させることにより、てんかん発作の頻度を低下させる。
【００２０】
ある実施形態では、本開示は、（Ｒ）−ノルフェンフルラミン又はその薬学的に許容できる塩若しくはプロドラッグと、１以上の薬学的に許容できる賦形剤とを含む医薬組成物であって、この（Ｒ）−ノルフェンフルラミン又はその薬学的に許容できる塩若しくはプロドラッグは８０％超、例えば９０％超、９５％超、９７％超、９８％超、９９％超、又は９９．５％超のｅｅ、又は例えば８０％〜９９％若しくは９０％〜９９％のｅｅを有する医薬組成物を提供する。
【００２１】
いくつかの実施形態では、本開示は、てんかん又はてんかん発作性疾患の治療方法であって、必要とするヒト対象に治療上有効量の（Ｒ）−ベンフルオレクス又はその薬学的に許容できる塩を投与する工程を備え、この（Ｒ）−ベンフルオレクス又はその薬学的に許容できる塩は８０％超、例えば９０％超、９５％超、９７％超、９８％超、９９％超、又は９９．５％超の鏡像体過剰率ｅｅ、又は例えば８０％〜９９％若しくは９０％〜９９％のｅｅを有する方法を提供する。ある実施形態では、鏡像体過剰の（Ｒ）−ベンフルオレクス又はその薬学的に許容できる塩を用いる当該てんかん又はてんかん発作性疾患の治療方法は、例えば、発作頻度又は平均痙攣発作頻度をベースラインから少なくとも２０％、例えばベースラインから少なくとも２５％、３５％、５０％、６０％、６５％、７０％、７５％又は８０％、特にベースラインから少なくとも２５％、５０％又は７５％低下させることにより、てんかん発作の頻度を低下させる。
【００２２】
ある実施形態では、本開示は、（Ｒ）−ベンフルオレクス又はその薬学的に許容できる塩と、１以上の薬学的に許容できる賦形剤とを含む医薬組成物であって、この（Ｒ）−ベンフルオレクス又はその薬学的に許容できる塩は８０％超、例えば９０％超、９５％超、９７％超、９８％超、９９％超、又は９９．５％超のｅｅ、例えば８０％〜９９％若しくは９０％〜９９％のｅｅ、又は例えば８０％〜９９％若しくは９０％〜９９％のｅｅを有する医薬組成物を提供する。
【００２３】
いくつかの実施形態では、本開示は、てんかん又はてんかん発作性疾患の治療方法であって、必要とするヒト対象に治療上有効量のラセミのノルフェンフルラミン又はその薬学的に許容できる塩若しくはプロドラッグを投与する工程を備える方法を提供する。いくつかの実施形態では、本開示は、治療、例えばヒト対象においててんかん又はてんかん発作性疾患を治療することにおいて使用するための、ラセミのノルフェンフルラミン又はその薬学的に許容できる塩若しくはプロドラッグを提供する。ある実施形態では、ラセミのノルフェンフルラミン又はその薬学的に許容できる塩若しくはプロドラッグを用いる当該てんかん又はてんかん発作性疾患の治療方法は、例えば、発作頻度又は平均痙攣発作頻度をベースラインから少なくとも２０％、例えばベースラインから少なくとも２５％、３５％、５０％、６０％、６５％、７０％、７５％又は８０％、特にベースラインから少なくとも２５％、５０％又は７５％低下させることにより、てんかん発作の頻度を低下させる。
【００２４】
ある実施形態では、本開示は、ラセミのノルフェンフルラミン又はその薬学的に許容できる塩若しくはプロドラッグと、１以上の薬学的に許容できる賦形剤とを含む医薬組成物を提供する。ある実施形態では、当該医薬組成物は、治療、例えばヒト対象においててんかん又はてんかん発作性疾患を治療することにおいて使用するためのものである。
【００２５】
いくつかの実施形態では、本開示は、治療法、例えばヒト対象においててんかん又はてんかん発作性疾患を治療することにおいて使用するための、（Ｒ）−フェンフルラミン又はその薬学的に許容できる塩、（Ｒ）−ノルフェンフルラミン又はその薬学的に許容できる塩若しくはプロドラッグ、及び（Ｒ）−ベンフルオレクス又はその薬学的に許容できる塩から選択される化合物であって、この化合物は８０％超、例えば９０％超、９５％超、９７％超、９８％超、９９％超、又は９９．５％超のｅｅ、又は例えば８０％〜９９％若しくは９０％〜９９％のｅｅを有する化合物を提供する。
【００２６】
ある実施形態では、本開示は、治療、例えばヒト対象においててんかん又はてんかん発作性疾患を治療することにおいて使用するための、化合物と１以上の薬学的に許容できる賦形剤とを含む医薬組成物であって、この化合物は、（Ｒ）−フェンフルラミン又はその薬学的に許容できる塩、（Ｒ）−ノルフェンフルラミン又はその薬学的に許容できる塩若しくはプロドラッグ、及び（Ｒ）−ベンフルオレクス又はその薬学的に許容できる塩から選択され、この化合物は８０％超、例えば９０％超、９５％超、９７％超、９８％超、９９％超、又は９９．５％超のｅｅ、又は例えば８０％〜９９％若しくは９０％〜９９％のｅｅを有する医薬組成物を提供する。
【００２７】
本開示のこれら並びに他の態様及び実施形態は、以下の詳細な説明及び添付の図面を参照すると明らかであろう。本明細書中で参照され、及び／又は出願データシートに列挙された米国特許、米国特許出願公開、米国特許出願、外国（非米国）特許、外国（非米国）特許出願及び非特許刊行物のすべては、参照によりその全体を、あたかもそれぞれが個々に組み込まれたかの如くに本明細書に援用したものとする。本開示の態様及び実施形態は、種々の特許、特許出願及び特許出願公開の技術思想を採用してなおさらなる実施形態を提供するために、必要に応じて変形することができる。
【図面の簡単な説明】
【００２８】
【図１】図１は、ＣＦ−１マウスでの６Ｈｚ発作アッセイにおける候補ＡＥＤ化合物の試験の結果の結果を示す。バーは、このインビボアッセイの１時間前の２０ｍｇ／ｋｇのラセミのフェンフルラミン、（Ｒ）−フェンフルラミン，ラセミのノルフェンフルラミン、及び（Ｒ）−ノルフェンフルラミン、又はビヒクル対照のＩＰ投与の後に保護されたマウスの百分率を表す（一群あたりｎ＝１６）。
【図２】図２は、雄のＤＢＡ／２マウス（ｎ＝１０／群）を利用するマウス聴原発作試験における（Ｒ／Ｓ）−フェンフルラミン及び（Ｒ）−フェンフルラミンの抗痙攣効果の結果を示す。聴原性応答スコアは、０（発作なし）、１（野性的な疾走（ｗｉｌｄ  ｒｕｎｎｉｎｇ））、２（間代痙攣）、３（強直性伸展）、又は４（死亡）と割り当てられた。結果は平均±ＳＥＭとして表されており、それぞれの個々のデータ点が示されている。
【発明を実施するための形態】
【００２９】
１  定義
本明細書及び添付の特許請求の範囲で使用される場合、異なる特段の記載がない限り、以下の用語は示された意味を有する。
【００３０】
「鏡像異性体」は、空間における異なる配置を有する２つの異なる異性体で存在することができる不斉分子を指す。鏡像異性体を表すか又は指すために使用される他の用語としては、「立体異性体」（キラル中心の周りの異なる並び方又は立体化学による。すべての鏡像異性体は立体異性体であるが、すべての立体異性体が鏡像異性体であるわけではない）又は「光学異性体」（異なる鏡像異性体が面偏光を異なる方向に回転させる能力である、鏡像異性体の光学活性による）が挙げられる。鏡像異性体は対称面をもたないので、鏡像異性体はその鏡像と同一ではなく、２つのエナンチオマー体で存在する分子はキラルであり、このことは、２つのエナンチオマー体が「左」手体及び「右」手体で存在するとみなすことができるということを意味する。有機分子におけるキラリティの最も一般的な原因は、４つの異なる置換基又は基に結合した四面体構造の炭素の存在である。そのような炭素は、キラル中心又は不斉中心と呼ばれる。不斉中心における原子の三次元的な並び方（又は配置）を示す方法は、最も優先順位が低い基が仮想的な観測者から遠い方向に配向しているときに、それらの基の優先順位の並び方を指すことである。優先順位が高いものから優先順位が低いものへの残りの３つの基の並び方が時計方向回りであれば、その不斉中心は「Ｒ」配置を有し、その並び方が反時計方向周りであれば、その不斉中心は「Ｓ」配置を有する。
【００３１】
鏡像異性体は、同じ実験的化学式を有し、一般にその反応において、その物理的特性において、及びその分光学的特性において化学的に同一である。しかしながら、鏡像異性体は他の不斉化合物に対して異なる化学反応性を示す可能性があり、非対称の物理的摂動に対して異なる応答をする可能性がある。最も一般的な非対称の摂動は偏光である。
【００３２】
鏡像異性体は面偏光を回転させることができ、従って、鏡像異性体は光学活性である。同じ化合物の２つの異なる鏡像異性体は、面偏光を反対方向に回転させることになる。従って、光は、仮想的な観測者にとって左又は反時計方向に回転されることができる（これは左旋性若しくは「ｌ」若しくはマイナス若しくは「−」である）し、又は光は右若しくは時計方向に回転されることができる（これは右旋性若しくは「ｄ」又はプラス若しくは「＋」である）。旋光性の符号（＋）又は（−）はＲ又はＳ表示とは関連しない。等量の２つのキラルな鏡像異性体の混合物はラセミ混合物、又はラセミ化合物と呼ばれ、右旋性形態及び左旋性形態の混合物を示すための符号（±）によって又は接頭辞「ｄ／ｌ」によって表される。等量の（＋）体及び（−）体が存在するので、ラセミ化合物又はラセミ混合物はゼロ旋光性を示す。一般に、単一の鏡像異性体の存在は、偏光を一方向のみに回転させ、従って、単一の鏡像異性体は光学的に純粋と呼ばれる。
【００３３】
記号「Ｒ」及び「Ｓ」は、分子のキラル中心（１又は複数）の周りのその分子の絶対配置を表すために使用される。それらの記号は、接頭辞として又は接尾辞として現れてもよい。それらは、鏡像異性体名からハイフンで分離されてもよく分離されなくてもよい。それらは、ハイフンでつながれてもよいしつながれなくてもよい。それらは、かっこによって取り囲まれてもよいし囲まれなくてもよい。
【００３４】
ラセミの化合物又は混合物に言及する際に使用される場合「分割」又は「分割する（こと）」は、ラセミ化合物をその２つのエナンチオマー体（すなわち、（＋）体及び（−）体；（Ｒ）体及び（Ｓ）体）に分離することを指す。
【００３５】
「鏡像体過剰率」又は「ｅｅ」は、１つの鏡像異性体が他方に対して過剰に存在する生成物を指し、各鏡像異性体のモル分率の絶対値差分として定義される。鏡像体過剰率は、通常、混合物中に存在する鏡像異性体の、他方の鏡像異性体に対する百分率として表される。本開示の目的のために、対象化合物の（Ｒ）鏡像異性体が８０％超、好ましくは９０％超、より好ましくは９５％超、最も好ましくは９９％超の鏡像体過剰率で存在するとき、その対象化合物の（Ｒ）鏡像異性体は（Ｓ）鏡像異性体を「実質的に含まない」と考えられる。
【００３６】
本明細書で使用される化学物質命名プロトコル及び構造図は、ＡＣＤ／Ｎａｍｅ  Ｖｅｒｓｉｏｎ  ９．０７ソフトウェアプログラムを使用する、ＩＵＰＡＣ命名法体系の変形である。例えば、ノルフェンフルラミンの（Ｒ）−鏡像異性体は、以下の構造：
【化１】
2021530541.tif 000003
を有し、（Ｒ）−１−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）プロパン−２−アミンという化合物名を有する。
【００３７】
「プロドラッグ」は、生理的条件により、又は加溶媒分解により生物活性のある本開示の化合物に変換されうる化合物を示すことを意味する。従って、用語「プロドラッグ」は、薬学的に許容できる本開示の化合物の代謝前駆体を指す。プロドラッグは、必要とする対象に投与されたときには不活性であってもよいが、インビボで本開示の活性な化合物に変換される。プロドラッグは、通常、例えば、血液中での加水分解によってインビボで迅速に変換されて本開示の化合物を与える。プロドラッグ化合物は、哺乳類生物における溶解性、組織適合性又は遅延放出という利点をもたらすことが多い（Ｂｕｎｄｇａｒｄ，Ｈ．、Ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ（１９８５）、７−９頁、２１−２４頁（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ、アムステルダム）を参照）。プロドラッグの論述は、Ｈｉｇｕｃｈｉら、「Ｐｒｏ−ｄｒｕｇｓ  ａｓ  Ｎｏｖｅｌ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ」、Ａ．Ｃ．Ｓ．  Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ  Ｓｅｒｉｅｓ、第１４巻、及びＢｉｏｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ  Ｃａｒｒｉｅｒｓ  ｉｎ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ、Ｅｄｗａｒｄ  Ｂ．Ｒｏｃｈｅ編、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｐｅｒｇａｍｏｎ  Ｐｒｅｓｓ、１９８７に提供されている。これらの文献の両方は、参照によりその全体を本明細書に援用する。
【００３８】
用語「プロドラッグ」は、このようなプロドラッグが哺乳類対象に投与されたときにインビボで本開示の活性化合物を放出するあらゆる共有結合された担体を含むことも意味する。本開示の化合物のプロドラッグは、インビボプロセスによって切断されたときに、本開示の化合物を提供する官能基を含有してもよい。プロドラッグは、ヒドロキシル基、アミノ基又はメルカプト基が、そのプロドラッグが哺乳類対象に投与されたときに切断して、それぞれ遊離ヒドロキシル基、遊離アミノ基又は遊離メルカプト基を形成する任意の基に結合している本開示の化合物を含む。プロドラッグの例としては、本開示の化合物の中のアルコール官能基の酢酸エステル誘導体、ギ酸エステル誘導体及び安息香酸エステル誘導体又はアミン官能基のアミド誘導体などが挙げられるが、これらに限定されない。
【００３９】
本開示の目的のために、（Ｒ）−フェンフルラミン及び（Ｒ）−ベンフルオレクスはともに、（Ｒ）−フェンフルラミン及び（Ｒ）−ベンフルオレクスの両方がインビボで（Ｒ）−ノルフェンフルラミンへと代謝され、この（Ｒ）−ノルフェンフルラミンが本明細書に記載される特定の実施形態に係る方法及び使用の所望の抗てんかん活性を実証するという点で、（Ｒ）−ノルフェンフルラミンのプロドラッグと考えられる。
【００４０】
本開示は、１以上の原子が異なる原子質量又は質量数を有する原子によって置き換えられることにより同位体標識された対象化合物の（Ｒ）−鏡像異性体を包含することも意図されている。開示された化合物に組み込まれることが可能な同位体の例としては、水素、炭素、窒素、酸素の同位体、例えばそれぞれ２Ｈ、３Ｈ、１１Ｃ、１３Ｃ、１４Ｃ、１３Ｎ、１５Ｎ、１５Ｏ、１７Ｏ、１８Ｏ、及び１８Ｆが挙げられる。これらの放射標識された化合物は、例えば、作用機序、又は薬理学的に重要な作用部位に対する結合親和性を特徴づけることにより、対象化合物の鏡像異性体の有効性を決定又は測定するのを補助するために有用であることができよう。同位体標識された化合物は、薬物及び／又は基質の組織分布研究において有用である。放射性同位体であるトリチウム、すなわち３Ｈ、及び炭素−１４、すなわち１４Ｃは、それらの組み込みの簡単さ及び検出の手段の容易さを考慮すると、この目的のために特に有用である。トリチウムは長い半減期を有し、発光は比較的低いエネルギーのものであり、それゆえこの放射性同位体は比較的安全であるので、トリチウム（３Ｈ）を組み込む放射リガンドは、膜を用いるリガンド結合研究にとって特に有用である。この放射リガンドは、典型的には、非標識化合物の中の水素をトリチウムに交換することにより調製される。
【００４１】
ジュウテリウム、すなわち、２Ｈ等のより重い同位体で置換することは、より大きい代謝安定性、例えばインビボ半減期の長期化又は投薬要求量の減少から生じる特定の治療上の利点をもたらす可能性があり、従って一部の状況では好ましいことがある。
【００４２】
１１Ｃ、１８Ｆ、１５Ｏ及び１３Ｎ等の陽電子放出同位体による置換は、基質受容体占有率を調べるための陽電子放出組織分布（Ｐｏｓｉｔｒｏｎ  Ｅｍｉｓｓｉｏｎ  Ｔｏｐｏｇｒａｐｈｙ、ＰＥＴ）研究において有用である可能性がある。対象化合物の同位体標識された鏡像異性体は、一般に、これまでに用いられた非標識試薬の代わりに適切な同位体標識された試薬を使用して、当業者に公知の従来の技術によって、又は本明細書に記載されるプロセスに類似のプロセスによって、調製することができる。
【００４３】
本開示は、開示された（Ｒ）−鏡像異性体のインビボ代謝産物を包含することも意図されている。このような産物は、例えば、主には酵素によるプロセスに起因する投与された化合物の酸化、還元、加水分解、アミド化、エステル化等から生じてもよい。従って、本開示は、代謝産物を得るために十分な時間のあいだ対象化合物の鏡像異性体を哺乳動物と接触させることを含むプロセスによって生成される代謝産物を含む。このような代謝産物は、検出可能な用量の対象化合物の放射標識された鏡像異性体をラット，マウス、モルモット、サル、又はヒト等の動物に投与し、代謝が起こるための十分な時間を確保し、その尿、血液又は他の生物試料から代謝産物を単離することにより特定されてもよい。
【００４４】
本明細書で使用する場合の「選択性」及び「選択的な」は、本開示の化合物が別のもの（又は他のものの群）よりも１つのものと優先的に（例えば、統計的に有意に）関連する傾向の相対的な指標である。
【００４５】
「安定な鏡像異性体」及び「安定構造」は、反応混合物から有用な程度の純度までの単離、及び有効な治療薬への製剤化を乗り切るために十分堅牢である化合物を示すことが意図されている。
【００４６】
「哺乳動物」は、ヒト並びに実験室動物及びペット（例えば、ネコ、イヌ、ブタ、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ウマ、及びウサギ）等の家畜、並びに野生生物等の非家畜の両方、などを含む。
【００４７】
「薬学的に許容できる担体、希釈剤又は賦形剤」としては、ヒト又は家畜での使用に好適な任意のアジュバント（佐剤）、担体、賦形剤、流動促進剤、甘味剤、希釈剤、防腐剤、染料／着色料、フレーバー増強剤、界面活性剤、湿潤剤、分散剤、懸濁剤、安定剤、等張剤、溶媒、又は乳化剤が挙げられるが、これらに限定されない。好ましくは、この担体、希釈剤又は賦形剤は、監督官庁、非限定的な例として、米国食品医薬品局、カナダ保健省又は欧州医薬品庁によって、ヒト又は動物の医薬品としての使用について許容できると承認されたものである。
【００４８】
「医薬組成物」は、本開示の化合物と、生物活性のある化合物を哺乳動物、例えばヒトに送達するために当該技術分野で一般に受け容れられている媒質との配合物を指す。そのような媒質としては、そのためのすべての薬学的に許容できる担体、希釈剤又は賦形剤が挙げられる。
【００４９】
本開示の医薬組成物は、１以上の薬学的に許容できる賦形剤を含み、この薬学的に許容できる賦形剤としては、任意の溶媒、アジュバント、バイオアベイラビリティー増強剤、担体、流動促進剤、甘味剤、希釈剤、防腐剤、染料／着色料、フレーバー増強剤、界面活性剤、湿潤剤、分散剤、懸濁剤、安定剤、等張剤、緩衝液及び／又は乳化剤が挙げられるが、これらに限定されない。この１以上の賦形剤は、非限定的な例として、米国食品医薬品局、カナダ保健省又は欧州医薬品庁によって、ヒト又は家畜における使用について許容できると承認されていることが好ましい。
【００５０】
本明細書に記載されるてんかん又は別のてんかん発作性疾患を「予防すること」は、特に、哺乳動物が、上記状態に対する素因を有しているがまだその状態を有するとは診断されていないときに、上記の疾患がこのような哺乳動物において生じることを（例えば、適切な対照と比べて）統計的に有意に防止するか、又は生じる可能性を低下させることを指す。
【００５１】
「治療上有効量」は、投与されたときに、受容側（レシピエント）の哺乳動物、好ましくはヒトにおけるてんかん又は別のてんかん発作性疾患の、以降に定義される治療をもたらすために十分な本開示の化合物の量を指す。「治療上有効量」を構成する本開示の化合物の量は、化合物、てんかんの状態及びその重症度、投与の様式、並びに治療対象の哺乳動物の年齢に応じて変わることになるが、当業者が自身の知識及び本開示を考慮して常法により決定することができる。
【００５２】
本明細書で使用する場合の「治療すること」又は「治療」は、目的の疾患又は状態を有する哺乳動物、好ましくはヒトにおけるてんかん又は別のてんかん発作性疾患の治療を指し、以下の、例えば
（ｉ）てんかん若しくは別のてんかん発作性疾患を阻害すること、すなわち、その発達を阻むこと、例えば、てんかん発作若しくはこの障害の他の症状の重症度、継続期間若しくは頻度の上昇、増大を（例えば、適切な対照と比べて）統計的に有意に緩慢化すること；
（ｉｉ）てんかん若しくは別のてんかん発作性疾患を緩和すること、すなわち、（例えば、適切な対照と比べて）統計的に有意なてんかんの後退を引き起こすこと；又は
（ｉｉｉ）てんかん若しくは別のてんかん発作性疾患から生じる症状を緩和すること、例えば、てんかん発作若しくはこの障害の他の症状の重症度、継続期間若しくは頻度を（例えば、適切な対照と比べて）統計的に有意に低下させること
のうちの１以上を含む。
【００５３】
ある実施形態では、本明細書に記載される対象化合物の（Ｒ）−鏡像異性体のうちの１以上を用いる治療は、てんかん発作の頻度を（例えば、適切な対照と比べて）統計的に有意に低下させること、例えば、発作頻度又は平均痙攣発作頻度をベースラインから低下させることを含む。いくつかの実施形態では、当該対象化合物の（Ｒ）−鏡像異性体のうちの１以上を用いる治療は、発作頻度又は平均痙攣発作頻度をベースラインから少なくとも２０％、例えばベースラインから少なくとも２５％、３５％、５０％、６０％、６５％、７０％、７５％又は８０％、特にベースラインから少なくとも２５％、５０％又は７５％低下させる。
【００５４】
本明細書で使用する場合、用語「改善すること」、「改善された」、「軽減すること」又は「軽減された」は、それらの一般に許容できる定義を与えられる。例えば、「改善する」ことは、一般に、ある状態を、改善事象の前のその状態よりもより良くするか又は向上することを意味する。「緩和する」ことは、一般に、ある状態を、緩和事象の前のその状態よりもより耐えられるものにすることを意味する。本明細書で使用する場合、「改善すること」又は「改善された」は、本明細書に開示される実施形態に係る化合物の投与によってより良くなるか若しくは向上するてんかん若しくは別のてんかん発作性疾患又はてんかん若しくはてんかん発作性疾患の状態を指すことができる。本明細書で使用する場合、「軽減すること」又は「軽減された」は、本明細書に開示される実施形態に係る化合物の投与によってより耐えられるものになるてんかん若しくは別のてんかん発作性疾患又はてんかん若しくはこのような他のてんかん発作性疾患の状態を指すことができる。例えば、てんかん発作を「軽減すること」は、てんかん発作の重症度又は発生率を低下させること（例えば、統計的に有意に減少させること）を含むことになろう。
【００５５】
２  本開示の（Ｒ）−鏡像異性体
本開示の当該対象化合物の（Ｒ）−鏡像異性体は、フェンフルラミンの（Ｒ）−鏡像異性体、ベンフルオレクスの（Ｒ）−鏡像異性体及びノルフェンフルラミンの（Ｒ）−鏡像異性体であり、これには、本明細書に記載される種々の鏡像体過剰率を有する（Ｒ）−鏡像異性体、及びそれらの薬学的に許容できる塩、溶媒和物又はそれらのプロドラッグが含まれる。
【００５６】
２つの鏡像異性体のラセミ混合物であるフェンフルラミンは以下の構造：
【化２】
2021530541.tif 000004
を有し、（Ｒ／Ｓ）−Ｎ−エチル−１−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）プロパン−２−アミンという化合物名を有する。フェンフルラミンの調製は、仏国特許第Ｍ１６５８号（１９６３）に最初に開示された。フェンフルラミンの（Ｒ）−鏡像異性体及び（Ｓ）−鏡像異性体は、それぞれ以下の構造：
【化３】
2021530541.tif 000005
を有し、それぞれ、（Ｒ）−Ｎ−エチル−１−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）プロパン−２−アミン及び（Ｓ）−Ｎ−エチル−１−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）プロパン−２−アミンという化合物名を有する。本開示の目的のために、フェンフルラミンの（Ｒ）−鏡像異性体は、本明細書中では（Ｒ）−フェンフルラミンと特定され、フェンフルラミンの（Ｓ）−鏡像異性体は本明細書中では（Ｓ）−フェンフルラミンと特定される。（Ｒ）−フェンフルラミンはレボフェンフルラミン、ｌ−フェンフルラミン、又は（−）−フェンフルラミンに対応すること、及び（Ｓ）−フェンフルラミンはデクスフェンフルアミン、ｄ−フェンフルラミン、又は（＋）−フェンフルラミンに対応することは、当該技術分野で理解される。
【００５７】
２つの鏡像異性体のラセミ混合物であるベンフルオレクスは、以下の構造：
【化４】
2021530541.tif 000006
を有し、安息香酸（Ｒ／Ｓ）−２−（１−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）プロパン−２−イルアミノ）エチルという化合物名を有する。ベンフルオレクスの調製は米国特許第３，６０７，９０９号明細書に記載されている。
【００５８】
ベンフルオレクスの（Ｒ）−鏡像異性体及び（Ｓ）−鏡像異性体は、それぞれ以下の構造：
【化５】
2021530541.tif 000007
を有し、それぞれ、安息香酸（Ｒ）−２−（１−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）プロパン−２−イルアミノ）エチル及び安息香酸（Ｓ）−２−（１−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）プロパン−２−イルアミノ）エチルという化合物名を有する。本開示の目的のために、ベンフルオレクスの（Ｒ）−鏡像異性体は本明細書中では（Ｒ）−ベンフルオレクスと特定され、ベンフルオレクスの（Ｓ）−鏡像異性体は本明細書中では（Ｓ）−ベンフルオレクスと特定される。
【００５９】
フェンフルラミン及びベンフルオレクスの両方の活性代謝産物はノルフェンフルラミンであり、これも、２つの鏡像異性体のラセミ混合物である。ノルフェンフルラミンは、以下の構造：
【化６】
2021530541.tif 000008
を有し、（Ｒ／Ｓ）−１−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）プロパン−２−アミンという化合物名を有する。ノルフェンフルラミンラセミ化合物（ＣＡＳ登録番号［１８８６−２６−６］）は、（例えば、Ｔｏｒｏｎｔｏ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ（トロント・リサーチ・ケミカルズ）、ノースヨーク（Ｎｏｒｔｈ  Ｙｏｒｋ）、オンタリオ州、カナダ；Ｃｌｅａｒｓｙｎｔｈ（クリアシンス）、ミシサガ（Ｍｉｓｓｉｓｓａｕｇａ）、オンタリオ州、カナダ；又はＤｒｕｇＩｍｐｕｒｉｔｉｅｓ（ドラッグインピュリティーズ）、ノースハロー（Ｎｏｒｔｈ  Ｈａｒｒｏｗ）、英国から）市販されている。ノルフェンフルラミンの鏡像異性体は、当業者に公知の標準的な分割技術によって単離されてもよいし、又は当業者に公知の方法に従って、若しくは本明細書に開示される方法により調製することができる。
【００６０】
ノルフェンフルラミンの（Ｒ）−鏡像異性体及び（Ｓ）−鏡像異性体は、それぞれ以下の構造：
【化７】
2021530541.tif 000009
を有し、それぞれ、（Ｒ）−１−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）プロパン−２−アミン及び（Ｒ）−１−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）プロパン−２−アミンという化合物名を有する。本開示の目的のために、ノルフェンフルラミンの（Ｒ）−鏡像異性体は本明細書中では（Ｒ）−ノルフェンフルラミンと特定され、ノルフェンフルラミンの（Ｓ）−鏡像異性体は本明細書中では（Ｓ）−ノルフェンフルラミンと特定される。（Ｒ）−ノルフェンフルラミンはｌ−ノルフェンフルラミン、又は（−）−ノルフェンフルラミンに対応すること、及び（Ｓ）−ノルフェンフルラミンはｄ−ノルフェンフルラミン、又は（＋）−ノルフェンフルラミンに対応することは、当該技術分野で理解される。
【００６１】
ある実施形態では、当該対象化合物（すなわち、フェンフルラミン、ベンフルオレクス、及び／又はノルフェンフルラミンのうちの１以上）の（Ｒ）−鏡像異性体は、ある鏡像体過剰率（ｅｅ）で、例えば２０％超、３０％超、４０％超、５０％超、６０％超、７０％超、８０％超、８５％超、９０％超、９５％超、９６％超、９７％超、９８％超、９９％超又は９９．５％超のｅｅで本明細書に記載される方法、使用、及び組成物において用いられる。いくつかの実施形態では、当該対象化合物の（Ｒ）−鏡像異性体は、２０％〜９７％、９８％又は９９％、例えば３０％〜９９％、４０％〜９９％、５０％〜９９％、６０％〜９９％、７０％〜９９％、８０％〜９９％、８５％〜９９％、９０％〜９９％、９５％〜９９％、９６％〜９９％又は９７％〜９９％、特に９０％〜９９％のｅｅで本明細書に記載される方法、使用、及び組成物において用いられる。
【００６２】
３  本開示の化合物の有用性及び試験
本開示は、特定の好ましい実施形態では、当該対象化合物（すなわち、フェンフルラミン、ベンフルオレクス、及び／又はノルフェンフルラミンのうちの１以上）の（Ｒ）−鏡像異性体の使用方法又は使用、並びにてんかん又は別のてんかん発作性疾患の本明細書に提示される治療又は予防のための当該対象化合物の（Ｒ）−鏡像異性体を含む医薬組成物に関する。
【００６３】
本明細書中に開示される実施形態は、一部は、（ｉ）当該対象化合物の（Ｒ）−鏡像異性体は、フェンフルラミン（又はその代謝産物であるノルフェンフルラミン）の複数の特定の有益な活性を保有し、従って、てんかん発作性疾患の本明細書に提示される治療又は予防のために治療上有効であること、及び（ｉｉ）このような治療上有効な（Ｒ）−鏡像異性体は、フェンフルラミンの有害な心毒性に望ましくはないが寄与するフェンフルラミン（又はその代謝産物ノルフェンフルラミン）の特定の有害な活性の原因である対応する（Ｓ）−鏡像異性体を実質的に含まない（例えば、８０％ｅｅ超）形態で調製することができることという、予想外でしかも以前には予測されなかった発見に基づく。
【００６４】
具体的には、フェンフルラミンの望ましい抗発作活性が（Ｒ）−フェンフルラミン又はその代謝産物である（Ｒ）−ノルフェンフルラミンに属すること、及びこれらの特定の鏡像異性体が、望ましくないフェンフルラミンの心毒性活性を低いレベルでしか保有せず、そのため有効なＡＥＤであるということが、初めて本明細書に開示される。逆に、フェンフルラミンの心毒性活性の大部分が（Ｓ）−フェンフルラミン又はその代謝産物である（Ｓ）−ノルフェンフルラミンに属し、それゆえこれらの鏡像異性体は候補ＡＥＤとしては不適である。同じく本明細書に記載されるとおり、対応する（Ｓ）−鏡像異性体を実質的に含まない（例えば、８０％ｅｅ超の）当該対象化合物の（Ｒ）−鏡像異性体を提供することにより、てんかん発作性疾患の（本明細書に提示される）治療又は予防のための治療上有益であるフェンフルラミンの効果を提供しつもフェンフルラミン及びノルフェンフルラミンに付随する有害な心毒性を実質的に回避するＡＥＤ医薬組成物、方法、及び使用が初めて開示される。
【００６５】
さらにより具体的には、フェンフルラミンの望ましくない心毒性は、セロトニン受容体２Ｂアゴニスト活性（５−ＨＴ２Ｂ受容体アゴニスト活性）に属し、このセロトニン受容体２Ｂアゴニスト活性は、大部分は、（Ｓ）−フェンフルラミン及びその代謝産物である（Ｓ）−ノルフェンフルラミンとともに離脱する。従って、（Ｓ）−フェンフルラミンを実質的に含まない（例えば、８０％ｅｅ超の）（Ｒ）−フェンフルラミンの調製は、驚くべきことに、（Ｓ）−フェンフルラミン、（Ｓ）−ノルフェンフルラミン、フェンフルラミン又はノルフェンフルラミンから調製される調製物と比べて有意に低い心毒性効果を特徴とする、一方の鏡像異性体を他方よりも多く含む調製物をもたらし、これにより有用なＡＥＤを提供する。
【００６６】
加えて、（Ｓ）−フェンフルラミンを実質的に含まない（例えば、８０％ｅｅ超の）（Ｒ）−フェンフルラミンの調製は、驚くべきことに、セロトニン受容体２Ａ（５−ＨＴ２Ａ受容体）アゴニスト活性を保有しかつセロトニン受容体２Ｃ（５−ＨＴ２Ｃ受容体）アゴニスト活性も保有し、（Ｒ）−ノルフェンフルラミンへと代謝されることが可能な鏡像異性体ＡＥＤ組成物をもたらし、この（Ｒ）−ノルフェンフルラミンは、ノルエピネフリン（ＮＥ）放出を促進するという望ましいＡＥＤ特性と共に高められた５−ＨＴ２Ａ／５−ＨＴ２Ｃアゴニスト活性を呈する。非限定的な理論によれば、特定の実施形態については、ＡＥＤは、以下の活性プロファイルを有する：５−ＨＴ２Ａアゴニスト／５−ＨＴ２Ｃアゴニスト／ＮＥ放出プロモーター／弱い５−ＨＴ２Ｂアゴニスト。本明細書に開示されるとおり、（Ｒ）−フェンフルラミン及びその代謝産物（Ｒ）−ノルフェンフルラミンは、予想外にもこの好ましいプロファイルを呈し、当該方法において使用するための前例のない候補ＡＥＤを提供する。
【００６７】
本開示以前には、当該技術分野では、強力な５−ＨＴ２Ａアゴニスト活性、強力な５−ＨＴ２Ｃアゴニスト活性、及び強力なＮＥ放出促進活性は、すべて（Ｓ）−ノルフェンフルラミンに存すると理解されており、それゆえ（Ｓ）−ノルフェンフルラミンは候補ＡＥＤとみなされてきたであろう。しかしながら、（Ｓ）−ノルフェンフルラミンは強力な５−ＨＴ２Ｂアゴニスト活性も呈するので、（Ｓ）−ノルフェンフルラミンは、望ましく強力なフェンフルラミンＡＥＤ活性から分けることができない望ましくないフェンフルラミン心毒性の源とみなされてもきたであろう。（Ｒｏｔｈｍａｎら、Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｅｈａｖ．  ７１：８２５（２００２）；Ｒｏｔｈｍａｎら、Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒａｐｅｕｔ．  ３０５：１１９１（２００３））。
【００６８】
本開示は、（Ｒ）−フェンフルラミン及びその代謝産物（Ｒ）−ノルフェンフルラミンが最適以下の５−ＨＴ２Ａアゴニスト活性及びＮＥ放出プロモーター活性（すなわち、それぞれ（Ｓ）−フェンフルラミン及び（Ｓ）−ノルフェンフルラミンについてよりも強力ではない活性）を呈するということにもかかわらず、治療上有効なＡＥＤが、より強力ではない（Ｒ）−フェンフルラミンの選択により得られる可能性があるということを初めて教示する。理論に結び付けられることは望まないが、てんかん発作性疾患を（本明細書に提示されるように）治療又は予防するためのＡＥＤとしての、より強力ではない（Ｒ）−フェンフルラミン又は（Ｒ）−ノルフェンフルラミンの今回の選択は、それらの（Ｒ）−鏡像異性体がフェンフルラミン又はノルフェンフルラミンと比べて弱い５−ＨＴ２Ｂアゴニストでもある限りは、治療有効性をもたらす。従って、てんかん発作性疾患を（本明細書に提示されるように）治療又は予防する当該方法において使用するために（Ｒ）−フェンフルラミン及び（Ｒ）−ノルフェンフルラミンを選択することに付随する利点は、これらの鏡像異性体のＡＥＤとしての適性が従来は認識されていなかった本開示の以前には、予測されなかったであろう。
【００６９】
それゆえ、本開示は、ある実施形態では、てんかん発作性疾患に罹患しているか又はてんかん発作性疾患に罹患するリスクがある哺乳動物、好ましくはヒトの治療方法であって、その哺乳動物に治療上有効量の
（ｉ）（Ｒ）−フェンフルラミン又はその薬学的に許容できる塩、溶媒和物若しくはプロドラッグ；
（ｉｉ）（Ｒ）−ノルフェンフルラミン又はその薬学的に許容できる塩、溶媒和物若しくはプロドラッグ、及び
（ｉｉｉ）（Ｒ）−ベンフルオレクス又はその薬学的に許容できる塩、溶媒和物若しくはプロドラッグ
のうちの１つ、２つ又は３つすべてを投与する工程を備え、
（Ｒ）−フェンフルラミンは（Ｓ）−フェンフルラミンを実質的に含まず（例えば、８０％ｅｅ超）、（Ｒ）−ノルフェンフルラミンは（Ｓ）−ノルフェンフルラミンを実質的に含まず（例えば、８０％ｅｅ超）、及び（Ｒ）−ベンフルオレクスは（Ｓ）−ベンフルオレクスを実質的に含まない（例えば、８０％ｅｅ超）方法に関する。
【００７０】
本開示は、同様に、てんかん発作性疾患に罹患しているか又はてんかん発作性疾患に罹患するリスクがある哺乳動物、好ましくはヒトを治療するための上記の化合物  −（ｉ）、（ｉｉ）、及び（ｉｉｉ）−  のうちの１つ、２つ又は３つすべての使用に関する。
【００７１】
特定の他の実施形態では、本開示は、てんかん発作性疾患に罹患しているか又はてんかん発作性疾患に罹患するリスクがある哺乳動物の治療方法であって、その哺乳動物に治療上有効量のラセミのノルフェンフルラミン［（Ｒ／Ｓ）−１−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）プロパン−２−アミン］を投与する工程を備える方法に関する。本開示は、てんかん発作性疾患に罹患しているか又はてんかん発作性疾患に罹患するリスクがある哺乳動物を治療するためのラセミのノルフェンフルラミンの使用にも関する。
【００７２】
いくつかの実施形態では、本開示は、治療法において使用するための上記の化合物  −（ｉ）、（ｉｉ）、及び（ｉｉｉ）−  のうちの１つ、２つ若しくは３つすべて又はラセミのノルフェンフルラミンに関する。
【００７３】
３．１  てんかん及びてんかん発作性疾患
本開示の方法及び使用は、いくつかの実施形態では、てんかんについての哺乳動物、好ましくはヒトの治療に向けられる。特定の実施形態では、本開示の方法及び使用は、てんかん発作性疾患に罹患しているか又はてんかん発作性疾患に罹患するリスクがある哺乳動物、好ましくはヒトの治療に向けられる。
【００７４】
てんかん及びてんかん発作性疾患は上記されている。当業者は、本明細書に記載されるＡＥＤ組成物の投与の臨床上の適切さを示し、及び／又は本明細書に記載されるＡＥＤ組成物の投与に適合されることができる、てんかん若しくは任意のてんかん発作性疾患に罹患しているか若しくはてんかん若しくは任意のてんかん発作性疾患に罹患するリスクがある対象又は患者を特定するための任意の数の診断的、予後診断的、外科的、遺伝的及び／又は他の臨床判断基準に精通しているであろう。例えば、Ｓｏｎｔｈｅｉｍｅｒ、Ｄｉｓｅａｓｅｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｎｅｒｖｏｕｓ  Ｓｙｓｔｅｍ、２０１５年、Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ／Ｅｌｓｅｖｉｅｒ、ウォルサム（Ｗａｌｔｈａｍ）、マサチューセッツ州；Ｔｈｅ  Ｍｅｒｃｋ  Ｍａｎｕａｌ  ｏｆ  Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ  ａｎｄ  Ｔｈｅｒａｐｙ  第１９版（Ｒ．Ｓ．Ｐｏｒｔｅｒ編、２０１１年、Ｍｅｒｃｋ，Ｉｎｃ．、ニュージャージー州）中の「Ｎｅｕｒｏｌｏｇｉｃ  Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ」；国立神経疾患・脳卒中研究所（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｏｆ  Ｎｅｕｒｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ  ａｎｄ  Ｓｔｒｏｋｅ）、アメリカ国立衛生研究所（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ）、ベセスダ（Ｂｅｔｈｅｓｄａ）、メリーランド州のウェブサイト、ｗｗｗ．ｎｉｎｄｓ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ／ｍｉｓｃ／ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ＿ｔｅｓｔｓ．ｈｔｍの「Ｎｅｕｒｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ  Ｔｅｓｔｓ  ａｎｄ  Ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ」；Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ  ｉｎ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  −  第ＩＩ巻、第４版、Ｂｒａｄｌｅｙら（編）、２００４  Ｂｕｔｔｅｒｗｏｒｔｈ  Ｈｅｉｎｅｍａｎｎ／Ｅｌｓｅｖｉｅｒ、フィラデルフィア（Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ）、ペンシルベニア州；Ｎｏｎ−Ｎｅｏｐｌａｓｔｉｃ  Ｄｉｓｅａｓｅｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｃｅｎｔｒａｌ  Ｎｅｒｖｏｕｓ  Ｓｙｓｔｅｍ（Ａｔｌａｓ  ｏｆ  Ｎｏｎｔｕｍｏｒ  Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ−  Ｆｉｒｓｔ  Ｓｅｒｉｅｓ  Ｆａｓｃｉｃｌｅ）、Ｄ．Ｎ．Ｌｅｗｉｓら（編）、２０１０  Ａｍｅｒ．Ｒｅｇｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ、アナポリス・ジャンクション（Ａｎｎａｐｏｌｉｓ  Ｊｕｎｃｔｉｏｎ）、メリーランド州；Ｂｒａｄｌｅｙ’ｓ  Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ  ｉｎ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ（第６版）、Ｒ．Ｂ．Ｄａｒｏｆｆら（編）、２０１２  Ｓａｕｎｄｅｒｓ／Ｅｌｓｅｖｉｅｒ、ウォルサム（Ｗａｌｔｈａｍ）、マサチューセッツ州を参照；例えば、Ｗｒｉｇｈｔら、２０１６  Ｍｏｌｅｃ．Ｇｅｎｅｔ．Ｇｅｎｏｍ．Ｍｅｄ．  ４（２）：１９７；Ｃｌａｅｓら、２００１  Ａｍ．Ｊ．Ｈｕｍ．Ｇｅｎｅｔ．  ６８：１３２７−１３３２；Ｍａｒｉｎｉら、２０１１  Ｅｐｉｌｅｐｓｉａ  ５２（Ｓｕｐｐｌ．２）：２４−２９；Ｃｅｕｌｅｍａｎｓら、２０１２  Ｅｐｉｌｅｐｓｉａ  ５３（７）：１１３１−１１３９）も参照。このように、てんかん又は任意の他のてんかん発作性疾患に罹患しているか又はてんかん又は任意の他のてんかん発作性疾患に罹患していると疑われる患者の診断及び臨床のモニタリングのための基準は、関連する分野の当業者��とっては周知である。
【００７５】
従って、本明細書に記載される組成物及び方法は、てんかん又はてんかん発作性疾患に関連する広い範囲の疾患、障害又は状態を（本明細書に提示されるように）治療又は予防することにおいて有用であり、このてんかん又はてんかん発作性疾患としては、光過敏性てんかん、自己誘発失神、難治性てんかん、焦点起始てんかん、アンジェルマン症候群、良性ローランドてんかん、ＣＤＫＬ５障害、幼児期及び若年性欠神てんかん、ドラベ症候群、前頭葉てんかん、グルコーストランスポーター１（Ｇｌｕｔ１）欠損症、視床下部過誤腫、点頭てんかん／ウエスト症候群、若年性ミオクロニーてんかん、ランドウ・クレフナー症候群、レノックス・ガストー症候群（ＬＧＳ）、ミオクロニー欠神てんかん、大田原症候群、パナエトポラス症候群、ＰＣＤＨ１９てんかん、進行性ミオクローヌスてんかん、ラスムッセン症候群、環状２０番染色体症候群、反射てんかん、側頭葉てんかん、ラフォラ進行性ミオクローヌスてんかん、神経皮膚症候群、結節性硬化症、早期乳児てんかん性脳症、早期発症型てんかん性脳症、全般てんかん熱性痙攣プラス（ＧＥＦＳ＋）、レット症候群、多発性硬化症、アルツハイマー病、自閉症、運動失調症、筋緊張低下及び発作性ジスキネジアが挙げられるが、これらに限定されない。
【００７６】
３．２  インビトロアッセイ
５ＨＴ２Ｃ及び／又は５ＨＴ２Ａアゴニストとしての（Ｒ）−鏡像異性体の有効性を判定するためのインビトロアッセイは公知である。例えば、Ｒｏｔｈｍａｎら、２００３  Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒａｐｅｕｔ．  ３０５（３）：１１９１−１１９９；Ｌａｗｒｅｎｃｅら、２０００  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ、５７：７５−８１；Ｐｏｒｔｅｒら、１９９９  Ｂｒｉｔ．Ｊ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  １２８：１３−２０を参照。
【００７７】
３．３  動物モデル
てんかん又はてんかん発作性疾患を（本明細書に提示されるように）治療又は予防することにおける当該対象化合物の（Ｒ）−鏡像異性体の有効性を試験するための動物モデルは周知である。例えば、生物学的例に後述された動物モデルを参照。
【００７８】
３．４  投薬量
通常、特定の開示された実施形態の成功裏の治療薬は、以下の基準のいくつか又はすべてを満たすであろう。経口アベイラビリティは、２０％以上であるべきである。動物モデル有効性は約０．１μｇ未満〜約１００ｍｇ／ｋｇ体重であり、目標ヒト用量は０．１μｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇ体重であるが、この範囲を外れる用量も許容できる可能性がある（「ｍｇ／ｋｇ」は、治療薬が投与されている対象の体重１キログラムあたりの化合物のミリグラムを意味する）。治療指数（又は治療用量に対する毒性用量の比）は、１００超であるべきである。効力（例えば、標的に対するインビトロ特性解析によって求められるＩＣ５０によって表される）は、１０μＭ未満、好ましくは１μＭ未満、最も好ましくは５０ｎＭ未満であるべきである。
【００７９】
ある実施形態では、本明細書に開示される方法及び使用は、約０．１ｍｇ／ｋｇ〜約５０ｍｇ／ｋｇ、例えば約０．２５、０．５、０．７５、１、１．５、２、２．５、５、１０、１５、２０又は２５ｍｇ／ｋｇ〜約３５、４０、４５、又は５０ｍｇ／ｋｇ、例えば約２０〜４０ｍｇ／ｋｇ又は２５〜３５ｍｇ／ｋｇ、例えば２０、２５、３０、３５又は４０ｍｇ／ｋｇ±５％、例えば３０ｍｇ／ｋｇ±５％の用量の、上記対象化合物のうちの１以上、例えばフェンフルラミンの（Ｒ）−鏡像異性体の投与を含む。ある実施形態では、本明細書に開示される方法及び使用は、約０．１ｍｇ／ｋｇ〜約１０ｍｇ／ｋｇ、例えば約０．２５、０．５、０．７５、又は１ｍｇ／ｋｇ〜約２、２．５、５、又は１０ｍｇ／ｋｇ、例えば約０．５ｍｇ／ｋｇ〜約２．５ｍｇ／ｋｇ又は約１ｍｇ／ｋｇ〜約２ｍｇ／ｋｇ、例えば０．５、０．７５、１、１．５、２、２．２５、又は２．５ｍｇ／ｋｇ±５％、例えば１ｍｇ／ｋｇ±５％又は２ｍｇ／ｋｇ±５％の用量の、上記対象化合物のうちの１以上、例えばフェンフルラミンの（Ｒ）−鏡像異性体の投与を含む。特定の実施形態では、てんかん又はてんかん発作性疾患、例えばドラベ症候群の治療のために、１ｍｇ／ｋｇ〜２ｍｇ／ｋｇの用量がヒト対象に投与される。当該方法及び使用に従って複数の上記対象化合物が投与される実施形態では、上記用量は、投与された当該化合物の組み合わされた総用量を表すことができ、又は上記用量は、投与された当該化合物の各々の個々の用量を表すことができる。
【００８０】
いくつかの実施形態では、本明細書に開示される方法及び使用は、約１ｍｇ／ｋｇ〜約５０ｍｇ／ｋｇのマウス用量、例えば約１、５、１０、１５、２０、又は２５ｍｇ／ｋｇ〜約３５、４０、４５、又は５０ｍｇ／ｋｇ、例えば約２０〜４０ｍｇ／ｋｇ又は２５〜３５ｍｇ／ｋｇ、例えば２０、２５、３０、３５、又は４０ｍｇ／ｋｇ±５％、例えば３０ｍｇ／ｋｇ±５％のマウス用量に対応する上記対象化合物のうちの１以上、例えばフェンフルラミンの（Ｒ）−鏡像異性体のヒト用量の投与を含む。当該方法及び使用に従って複数の上記対象化合物が投与される実施形態では、上記用量は、投与された当該化合物の組み合わされた総用量を表すことができ、又は上記用量は、投与された当該化合物の各々の個々の用量を表すことができる。
【００８１】
４  本開示の医薬組成物及び投与
本開示は、ある実施形態では、本明細書に記載される種々の鏡像体過剰率を有する（Ｒ）−鏡像異性体を含めた当該対象化合物の（Ｒ）−鏡像異性体と、１以上の薬学的に許容できる賦形剤とを含む医薬組成物にも関する。１つの実施形態では、本開示は、当該対象化合物の（Ｒ）−鏡像異性体を、個々に又はそれらの組み合わせで、薬学的に許容できる担体又は賦形剤の中に、そして動物、好ましくは哺乳動物、最も好ましくはヒト患者に投与されたときにてんかん又は別のてんかん発作性疾患を（本明細書に提示されるように）治療又は予防するために有効な量で含む医薬組成物に関する。
【００８２】
別の実施形態では、本開示は、治療上有効量の、
（ｉ）（Ｒ）−フェンフルラミン又はその薬学的に許容できる塩、溶媒和物若しくはプロドラッグ；
（ｉｉ）（Ｒ）−ノルフェンフルラミン又はその薬学的に許容できる塩、溶媒和物若しくはプロドラッグ、及び
（ｉｉｉ）（Ｒ）−ベンフルオレクス又はその薬学的に許容できる塩、溶媒和物若しくはプロドラッグ
のうちの１つ、２つ又は３つすべてと、薬学的に許容できる賦形剤とを含む医薬組成物であって、（Ｒ）−フェンフルラミンは（Ｓ）−フェンフルラミンを実質的に含まず（例えば、８０％ｅｅ超）、（Ｒ）−ノルフェンフルラミンは（Ｓ）−ノルフェンフルラミンを実質的に含まず（例えば、８０％ｅｅ超）、（Ｒ）−ベンフルオレクスは（Ｓ）−ベンフルオレクスを実質的に含まない（例えば、８０％ｅｅ超）医薬組成物に関する。
【００８３】
いくつかの実施形態では、本開示は、（Ｒ）−フェンフルラミン又はその薬学的に許容できる塩と、１以上の薬学的に許容できる賦形剤とを含む医薬組成物であって、この（Ｒ）−フェンフルラミン又はその薬学的に許容できる塩は本明細書に記載される鏡像体過剰率にあり、例えば８０％超、９０％超、９５％超、９７％超、９８％超、９９％超又は９９．５％超のｅｅを有する医薬組成物に関する。いくつかの実施形態では、そのような医薬組成物は、３０ｍｇではない量の（Ｒ）−フェンフルラミン又はその薬学的に許容できる塩を含み、すなわち、３０ｍｇ未満又は３０ｍｇ超の量、例えば３１ｍｇ超、３２ｍｇ超、３５ｍｇ超、４０ｍｇ超、４５ｍｇ超、若しくは５０ｍｇ超、又は２９ｍｇ未満、２７ｍｇ未満、若しくは２５ｍｇ未満の量を含む。ある実施形態では、当該医薬組成物は、３１ｍｇ、３２ｍｇ、３５ｍｇ、４０ｍｇ、４５ｍｇ、若しくは５０ｍｇ〜１００ｍｇ、１５０ｍｇ、２００ｍｇ、２５０ｍｇ、３００ｍｇ、３５０ｍｇ、若しくは４００ｍｇ、例えば３１ｍｇ〜１５０ｍｇ、３２ｍｇ〜１５０ｍｇ、３５ｍｇ〜１５０ｍｇ、４０ｍｇ〜１５０ｍｇ、５０ｍｇ〜１５０ｍｇ、３１ｍｇ〜２００ｍｇ、３２ｍｇ〜２００ｍｇ、３５ｍｇ〜２００ｍｇ、４０ｍｇ〜２００ｍｇ、５０ｍｇ〜２００ｍｇ、３１ｍｇ〜３００ｍｇ、３２ｍｇ〜３００ｍｇ、３５ｍｇ〜３００ｍｇ、４０ｍｇ〜３００ｍｇ、５０ｍｇ〜３００ｍｇ、３１ｍｇ〜４００ｍｇ、３２ｍｇ〜４００ｍｇ、３５ｍｇ〜４００ｍｇ、４０ｍｇ〜４００ｍｇ、若しくは５０ｍｇ〜４００ｍｇの量の（Ｒ）−フェンフルラミン又はその薬学的に許容できる塩を含む。いくつかの実施形態では、当該医薬組成物は、１ｍｇ、２ｍｇ、３ｍｇ、５ｍｇ、７ｍｇ、若しくは１０ｍｇ〜２５ｍｇ、２７ｍｇ、若しくは２９ｍｇ、例えば５ｍｇ〜２５ｍｇ、５ｍｇ〜２７ｍｇ、５ｍｇ〜２９ｍｇ、１０ｍｇ〜２５ｍｇ、１０ｍｇ〜２７ｍｇ、若しくは１０ｍｇ〜２９ｍｇの量の（Ｒ）−フェンフルラミン又はその薬学的に許容できる塩を含む。いくつかの例では、当該医薬組成物は、５ｍｇ、１０ｍｇ、１５ｍｇ、若しくは２０ｍｇ〜１００ｍｇ、１５０ｍｇ、２００ｍｇ、２５０ｍｇ、３００ｍｇ、３５０ｍｇ、若しくは４００ｍｇ、例えば１０ｍｇ、１５ｍｇ、２０ｍｇ、２５ｍｇ、３０ｍｇ、３５ｍｇ、４０ｍｇ、４５ｍｇ、５０ｍｇ、６０ｍｇ、７５ｍｇ、８０ｍｇ、１００ｍｇ、１２５ｍｇ、１５０ｍｇ、１７５ｍｇ、２００ｍｇ、２２５ｍｇ、２５０ｍｇ、３００ｍｇ、３５０ｍｇ、若しくは４００ｍｇの量の（Ｒ）−フェンフルラミン又はその薬学的に許容できる塩を含む。
【００８４】
いくつかの実施形態では、本開示は、（Ｒ）−ベンフルオレクス又はその薬学的に許容できる塩と、１以上の薬学的に許容できる賦形剤とを含む医薬組成物であって、この（Ｒ）−ベンフルオレクス又はその薬学的に許容できる塩は本明細書に記載される鏡像体過剰率にあり、例えば８０％超、９０％超、９５％超、９７％超、９８％超、９９％超又は９９．５％超のｅｅを有する医薬組成物に関する。いくつかの実施形態では、そのような医薬組成物は、３０ｍｇではないの量の（Ｒ）−ベンフルオレクス又はその薬学的に許容できる塩を含み、すなわち、３０ｍｇ未満又は３０ｍｇ超の量、例えば３１ｍｇ、３２ｍｇ、３５ｍｇ、４０ｍｇ、４５ｍｇ、若しくは５０ｍｇ超又は２９ｍｇ、２７ｍｇ、若しくは２５ｍｇ未満の量を含む。ある実施形態では、当該医薬組成物は、３１ｍｇ、３２ｍｇ、３５ｍｇ、４０ｍｇ、４５ｍｇ、若しくは５０ｍｇ〜１００ｍｇ、１５０ｍｇ、２００ｍｇ、２５０ｍｇ、３００ｍｇ、３５０ｍｇ、若しくは４００ｍｇ、例えば３１ｍｇ〜１５０ｍｇ、３２ｍｇ〜１５０ｍｇ、３５ｍｇ〜１５０ｍｇ、４０ｍｇ〜１５０ｍｇ、５０ｍｇ〜１５０ｍｇ、３１ｍｇ〜２００ｍｇ、３２ｍｇ〜２００ｍｇ、３５ｍｇ〜２００ｍｇ、４０ｍｇ〜２００ｍｇ、５０ｍｇ〜２００ｍｇ、３１ｍｇ〜３００ｍｇ、３２ｍｇ〜３００ｍｇ、３５ｍｇ〜３００ｍｇ、４０ｍｇ〜３００ｍｇ、５０ｍｇ〜３００ｍｇ、３１ｍｇ〜４００ｍｇ、３２ｍｇ〜４００ｍｇ、３５ｍｇ〜４００ｍｇ、４０ｍｇ〜４００ｍｇ、若しくは５０ｍｇ〜４００ｍｇの量の（Ｒ）−ベンフルオレクス又はその薬学的に許容できる塩を含む。いくつかの実施形態では、当該医薬組成物は、１ｍｇ、２ｍｇ、３ｍｇ、５ｍｇ、７ｍｇ、若しくは１０ｍｇ〜２５ｍｇ、２７ｍｇ、若しくは２９ｍｇ、例えば５ｍｇ〜２５ｍｇ、５ｍｇ〜２７ｍｇ、５ｍｇ〜２９ｍｇ、１０ｍｇ〜２５ｍｇ、１０ｍｇ〜２７ｍｇ、若しくは１０ｍｇ〜２９ｍｇの量の（Ｒ）−ベンフルオレクス又はその薬学的に許容できる塩を含む。いくつかの例では、当該医薬組成物は、５ｍｇ、１０ｍｇ、１５ｍｇ、若しくは２０ｍｇ〜１００ｍｇ、１５０ｍｇ、２００ｍｇ、２５０ｍｇ、３００ｍｇ、３５０ｍｇ、若しくは４００ｍｇ、例えば１０ｍｇ、１５ｍｇ、２０ｍｇ、２５ｍｇ、３０ｍｇ、３５ｍｇ、４０ｍｇ、４５ｍｇ、５０ｍｇ、６０ｍｇ、７５ｍｇ、８０ｍｇ、１００ｍｇ、１２５ｍｇ、１５０ｍｇ、１７５ｍｇ、２００ｍｇ、２２５ｍｇ、２５０ｍｇ、３００ｍｇ、３５０ｍｇ、若しくは４００ｍｇの量の（Ｒ）−ベンフルオレクス又はその薬学的に許容できる塩を含む。
【００８５】
いくつかの実施形態では、本開示は、（Ｒ）−ノルフェンフルラミン又はその薬学的に許容できる塩若しくはプロドラッグと、１以上の薬学的に許容できる賦形剤とを含む医薬組成物であって、この（Ｒ）−ノルフェンフルラミン又はその薬学的に許容できる塩若しくはプロドラッグは本明細書に記載される鏡像体過剰率にあり、例えば８０％超、９０％超、９５％超、９７％超、９８％超、９９％超又は９９．５％超のｅｅを有する医薬組成物に関する。いくつかの実施形態では、そのような医薬組成物は、３０ｍｇではない量の（Ｒ）−ノルフェンフルラミン又はその薬学的に許容できる塩若しくはプロドラッグを含み、すなわち、３０ｍｇ未満又は３０ｍｇ超の量、例えば３１ｍｇ、３２ｍｇ、３５ｍｇ、４０ｍｇ、４５ｍｇ、若しくは５０ｍｇ超又は２９ｍｇ、２７ｍｇ、若しくは２５ｍｇ未満の量を含む。ある実施形態では、当該医薬組成物は、３１ｍｇ、３２ｍｇ、３５ｍｇ、４０ｍｇ、４５、若しくは５０ｍｇ〜１００ｍｇ、１５０ｍｇ、２００ｍｇ、２５０ｍｇ、３００ｍｇ、３５０ｍｇ、若しくは４００ｍｇ、例えば３１ｍｇ〜１５０ｍｇ、３２ｍｇ〜１５０ｍｇ、３５ｍｇ〜１５０ｍｇ、４０ｍｇ〜１５０ｍｇ、５０ｍｇ〜１５０ｍｇ、３１ｍｇ〜２００ｍｇ、３２ｍｇ〜２００ｍｇ、３５ｍｇ〜２００ｍｇ、４０ｍｇ〜２００ｍｇ、５０ｍｇ〜２００ｍｇ、３１ｍｇ〜３００ｍｇ、３２ｍｇ〜３００ｍｇ、３５ｍｇ〜３００ｍｇ、４０ｍｇ〜３００ｍｇ、５０ｍｇ〜３００ｍｇ、３１ｍｇ〜４００ｍｇ、３２ｍｇ〜４００ｍｇ、３５ｍｇ〜４００ｍｇ、４０ｍｇ〜４００ｍｇ、若しくは５０ｍｇ〜４００ｍｇの量の（Ｒ）−ノルフェンフルラミン又はその薬学的に許容できる塩若しくはプロドラッグを含む。いくつかの実施形態では、当該医薬組成物は、１ｍｇ、２ｍｇ、３ｍｇ、５ｍｇ、７ｍｇ、若しくは１０ｍｇ〜２５ｍｇ、２７ｍｇ、若しくは２９ｍｇ、例えば５ｍｇ〜２５ｍｇ、５ｍｇ〜２７ｍｇ、５ｍｇ〜２９ｍｇ、１０ｍｇ〜２５ｍｇ、１０ｍｇ〜２７ｍｇ、若しくは１０ｍｇ〜２９ｍｇの量の（Ｒ）−ノルフェンフルラミン又はその薬学的に許容できる塩若しくはプロドラッグを含む。いくつかの例では、当該医薬組成物は、５ｍｇ、１０ｍｇ、１５ｍｇ、若しくは２０ｍｇ〜１００ｍｇ、１５０ｍｇ、２００ｍｇ、２５０ｍｇ、３００ｍｇ、３５０ｍｇ、若しくは４００ｍｇ、例えば１０ｍｇ、１５ｍｇ、２０ｍｇ、２５ｍｇ、３０ｍｇ、３５ｍｇ、４０ｍｇ、４５ｍｇ、５０ｍｇ、６０ｍｇ、７５ｍｇ、８０ｍｇ、１００ｍｇ、１２５ｍｇ、１５０ｍｇ、１７５ｍｇ、２００ｍｇ、２２５ｍｇ、２５０ｍｇ、３００ｍｇ、３５０ｍｇ、若しくは４００ｍｇの量の（Ｒ）−ノルフェンフルラミン又はその薬学的に許容できる塩若しくはプロドラッグを含む。
【００８６】
ある実施形態では、本開示は、鏡像体過剰の（Ｒ）−ノルフェンフルラミン又はその薬学的に許容できる塩若しくはプロドラッグを提供する医薬組成物に関する。このような実施形態では、鏡像体過剰率は本明細書に記載されるとおりであることができ、例えば８０％超、９０％超、９５％超、９７％超、９８％超、９９％超又は９９．５％超のｅｅを有することができる。そのような医薬組成物は、本明細書に記載される１以上の薬学的に許容できる賦形剤を含んでもよい。
【００８７】
別の実施形態では、本開示は、治療上有効量のノルフェンフルラミンラセミ化合物又はその薬学的に許容できる塩若しくはプロドラッグを含む医薬組成物に関する。
【００８８】
純粋な形態にあるか若しくは適切な医薬組成物としての本開示の（Ｒ）−鏡像異性体（又はある実施形態では、ノルフェンフルラミンラセミ化合物）の投与は、同様の有用性をもたらす薬剤の受け容れられた投与方法のいずれによって実施されてもよい。本開示の医薬組成物は、対象化合物を適切な薬学的に許容できる担体、希釈剤又は賦形剤と組み合わせることにより調製することができ、固体、半固体、液体又は気体の形態の調剤、例えば錠剤、カプセル、散剤、顆粒剤、軟膏剤、液剤、座薬、注射剤、吸入剤、ゲル、ミクロスフェア、及びエアロゾルへと製剤化されてもよい。このような医薬組成物の典型的な投与経路としては、経口投与、局所投与、経皮投与、吸入、非経口投与、舌下投与、直腸投与、膣内投与、及び鼻腔内投与が挙げられるが、これらに限定されない。本明細書で使用する場合の非経口という用語は、皮下注射、静脈内、筋肉内、胸骨内への注射若しくは輸液技法を含む。本開示の医薬組成物は、患者への当該組成物の投与の際に当該医薬組成物に含有される活性成分が生物に利用可能な状態になるように配合される。対象又は患者、好ましくは哺乳動物、より好ましくはヒトに投与されることになる組成物は、１以上の投薬単位の形態をとってよく、例えば、錠剤は単独の投薬単位であってもよく、エアロゾル形態にある本発明の化合物の容器は、複数の投薬単位を保持してもよい。このような剤形を調製する実際の方法は公知であるか、又はこの分野の当業者には明らかであろう。例えば、Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ、第２０版（Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ  Ｃｏｌｌｅｇｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ  ａｎｄ  Ｓｃｉｅｎｃｅ、２０００）を参照。いずれにせよ、投与されることになる組成物は、本開示の教示に従う目的の疾患又は状態の（本明細書に提示されるとおりの）治療又は予防のための治療上有効量の対象化合物、又はその薬学的に許容できる塩を含有することになろう。
【００８９】
本発明で有用な医薬組成物は、薬学的に許容できる担体、例えば任意の好適な希釈剤又は賦形剤も含有する。この薬学的に許容できる担体は、当該組成物を受け取る個体にとって有害な抗体の産生を自身では誘導しない任意の医薬品を含み、過度の毒性なしに投与される可能性がある。薬学的に許容できる担体としては、液体、例えば水、生理食塩水、グリセロール及びエタノール等が挙げられるが、これらに限定されない。薬学的に許容できる担体、希釈剤、及び他の賦形剤の十分な論述は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（Ｍａｃｋ  Ｐｕｂ．Ｃｏ．、ニュージャージー州、最新版）に提示されている。
【００９０】
本開示の医薬組成物は、固体又は液体の形態にあってもよい。１つの態様では、上記担体（１種又は複数種）は微粒子であり、そのため、当該組成物は、例えば、錠剤又は粉末の形態にある。この担体（１種又は複数種）は液体であってもよく、この場合、当該組成物は、例えば、経口シロップ、注射用の液体又はエアロゾルであり、エアロゾルは、例えば、吸入による投与において有用である。
【００９１】
経口投与が意図される場合、当該医薬組成物は、固体又は液体の形態にあることが好ましく、この場合、半固体、半液体、懸濁液及びゲルの形態が、固体又は液体と本発明で考えられる形態に含まれる。
【００９２】
経口投与用の固体組成物として、当該医薬組成物は、散剤、顆粒剤、圧縮錠剤、丸剤、カプセル剤、チューインガム、ウェーハ等の形態に製剤化されてもよい。そのような固体組成物は、通常、１以上の不活性な希釈剤又は可食担体を含有することになる。加えて、以下のもののうちの１以上が存在してもよい：カルボキシメチルセルロース、エチルセルロース、微結晶セルロース、ガムトラガント又はゼラチン等の結合剤；デンプン、ラクトース又はデキストリン類等の賦形剤、アルギン酸、アルギン酸ナトリウム、Ｐｒｉｍｏｇｅｌ、コーンスターチ等の崩壊剤；ステアリン酸マグネシウム又はＳｔｅｒｏｔｅｘ等の滑沢剤；コロイド状二酸化ケイ素等の流動促進剤；スクロース又はサッカリン等の甘味剤；ペパーミント、サリチル酸メチル又はオレンジ香味物質等の矯味矯臭剤；及び着色剤。
【００９３】
当該医薬組成物がカプセル剤、例えばゼラチンカプセルの形態にあるとき、当該医薬組成物は、上記の種類の材料に加えて、ポリエチレングリコール又は油等の液体担体を含有してもよい。
【００９４】
当該医薬組成物は、液体、例えば、エリキシル剤、シロップ、溶液、エマルション又は懸濁液の形態にあってもよい。この液体は、２つの例として、経口投与又は注射による送達のためのものであってもよい。経口投与が意図される場合、好ましい組成物は、当該対象化合物の（Ｒ）−鏡像異性体に加えて、甘味剤、防腐剤、染料／着色料及びフレーバー増強剤のうちの１以上を含有する。注射によって投与されることが意図されている組成物では、界面活性剤、防腐剤、湿潤剤、分散剤、懸濁剤、緩衝液、安定剤及び等張剤のうちの１以上が含まれてもよい。
【００９５】
本開示の液体医薬組成物は、それらが溶液であるか、懸濁液であるか、又は他の類似の形態であるかによらず、以下のアジュバントのうちの１以上を含んでよい：注射用の水、食塩水溶液、好ましくは生理食塩水、リンゲル液、等張性塩化ナトリウム等の無菌の希釈剤、溶媒若しくは懸濁媒体としての役割を果たしてもよい合成のモノグリセリド若しくはジグリセリド、ポリエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコール又は他の溶媒等の不揮発性油；ベンジルアルコール又はメチルパラベン等の抗菌薬；アスコルビン酸又は亜硫酸水素ナトリウム等の酸化防止剤；エチレンジアミンテトラ酢酸（ＥＤＴＡ）等のキレート剤；酢酸塩、クエン酸又はリン酸塩等の緩衝液、及び塩化ナトリウム又はデキストロース等の浸透圧の調整のための薬剤。上記非経口調剤は、ガラス製若しくはプラスチック製のアンプル剤、使い捨て注射器又は複数回投与用バイアルに封入することができる。生理食塩水は好ましいアジュバントである。注射用の医薬組成物は無菌であることが好ましい。
【００９６】
非経口投与又は経口投与を意図した本開示の液体医薬組成物は、好適な投薬量が得られるような量の当該対象化合物の（Ｒ）−鏡像異性体を含有する必要がある。通常、当該対象化合物の（Ｒ）−鏡像異性体のこの量は、当該組成物の少なくとも０．０１重量％である。経口投与が意図される場合、この量は、当該組成物の０．１〜約７０重量％で変わる可能性がある。好ましい経口医薬組成物は、約４％〜約５０％、例えば約５％、７％、１０％又は１５％〜約２０％、２５％、３０％、３５％、４０％又は４５％の当該対象化合物の（Ｒ）−鏡像異性体を含有する。本開示に係る好ましい医薬組成物及び医薬調剤は、非経口投薬単位が希釈前に０．０１〜１０重量％、例えば希釈前に０．０１重量％〜４重量％、５重量％、６重量％、７重量％、８重量％又は９重量％、又は希釈前に０．０１重量％、０．２重量％、０．５重量％、０．８重量％、１重量％、１．５重量％、２重量％、３重量％、４重量％又は５重量％〜１０重量％の当該対象化合物の（Ｒ）−鏡像異性体を含有するように、調製される。
【００９７】
本開示の医薬組成物は、局所投与用に意図されてもよく、その場合、上記担体は、好適には、溶液、エマルション、軟膏剤又はゲルベースを含んでもよい。このベースは、例えば、以下のもののうちの１以上を含んでもよい：ワセリン、ラノリン、ポリエチレングリコール、ビーズワックス、鉱油、希釈剤、例えば水及びアルコール、並びに乳化剤並びに安定剤。増粘剤が局所投与用の医薬組成物の中に存在してもよい。経皮投与用に意図される場合、当該組成物は、経皮パッチ（貼付剤）又はイオントフォレーシス（イオン導入法）装置を含んでもよい。局所用製剤は、約０．１〜約１０％ｗ／ｖ（単位体積あたりの重量）、例えば希釈前に０．０１重量％〜４重量％、５重量％、６重量％、７重量％、８重量％又は９重量％、又は希釈前に０．０１重量％、０．２重量％、０．５重量％、０．８重量％、１重量％、１．５重量％、２重量％、３重量％、４重量％又は５重量％〜１０重量％の濃度の当該対象化合物の（Ｒ）−鏡像異性体を含有してもよい。
【００９８】
本開示の医薬組成物は、例えば座薬の形態で直腸投与用に意図されてもよく、この座薬は直腸で融解して上記薬物を放出することになる。直腸投与用の当該組成物は、好適な非刺激性の賦形剤としての油性のベースを含有してもよい。そのようなベースとしては、ラノリン、カカオバター及びポリエチレングリコールが挙げられるが、これらに限定されない。
【００９９】
筋肉内投与又は髄腔内投与のための典型的な製剤は、油中の活性物の懸濁液若しくは溶液、又は油、例えば落花生油若しくはゴマ油の中の活性成分の溶液からなるであろう。静脈内投与又は髄腔内投与のための典型的な製剤は、例えば活性成分と、デキストロース若しくは塩化ナトリウム、又はデキストロース及び塩化ナトリウムの混合物とを含有する無菌の等張性水溶液からなるであろう。本開示の組成物は、当該技術分野で公知の手順を用いることによる患者への投与後に上記活性成分、すなわち、当該対象化合物の（Ｒ）−鏡像異性体（又はある実施形態では、ノルフェンフルラミンラセミ化合物）の迅速放出、持続放出又は遅延放出を提供するように製剤化されることが可能である。制御放出薬物送達システムは、ポリマーコーティングされたレザーバ又は薬物−ポリマーマトリクス配合物を含有する浸透圧ポンプシステム及び溶解システムが挙げられる。制御放出システムの例は米国特許第３，８４５，７７０号明細書及び米国特許第４，３２６，５２５号明細書、並びにＰ．Ｊ．Ｋｕｚｍａら、Ｒｅｇｉｏｎａｌ  Ａｎｅｓｔｈｅｓｉａ  １９９７、２２（６）：５４３−５５１に与えられている、これらの文献のすべては、参照により本明細書に援用したものとする。
【０１００】
本開示の組成物は、局所療法、全身療法、及び鼻から脳への薬物療法のために、鼻腔内薬物送達システムを介して送達することもできる。Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｐａｒｔｉｃｌｅ  Ｄｉｓｐｅｒｓｉｏｎ（ＣＰＤ）（商標）技術、従来の鼻腔内スプレーボトル、吸入器又はネブライザーは、嗅覚的領域及び副鼻腔を標的とすることによる薬物の有効な局所送達及び全身送達を提供するために、当業者に公知である。
【０１０１】
本開示は、雌のヒト又は動物への投与に好適な腟内シェル又はコア薬物送達装置にも関する。この装置は、シースによって取り囲まれたポリマーマトリクス中に医薬品有効成分を含んでもよく、ＰＣＴ特許出願公開の国際公開第９８／５００１６号パンフレット及び米国特許第６，４１６，７８０号に記載されているようなテストステロンを投与するために使用される装置と同様に、１日ベースで実質的に０次パターンで当該対象化合物の（Ｒ）−鏡像異性体を放出することができる。
【０１０２】
最も好適な投与経路は、治療される状態の性質及び重症度によって変わることになる。当業者は、投与方法（例えば、経口、静脈内、吸入、皮下、直腸等）、剤形、好適な薬学的賦形剤、及び必要とする対象への当該対象化合物の（Ｒ）−鏡像異性体の送達に関連する他の事項を決定することにも精通している。
【０１０３】
本開示の医薬組成物は、固体又は液体の投薬単位の物理的形態を改変する種々の材料を含んでもよい。例えば、当該組成物は、活性成分の周りにコーティングシェルを形成する材料を含んでもよい。コーティングシェルを形成する材料は、通常は不活性であり、例えば、糖類、セラック、及び他の腸溶性コーティング剤から選択されてもよい。あるいは、上記活性成分は、ゼラチンカプセルの中に入っていてもよい。
【０１０４】
固体又は液体の形態の本開示の医薬組成物は、当該対象化合物の（Ｒ）−鏡像異性体に結合して、これによりその化合物の送達を補助する薬剤を含んでもよい。この能力において作用しうる好適な薬剤としては、モノクローナル抗体若しくはポリクローナル抗体、タンパク質又はリポソームが挙げられる。
【０１０５】
本開示の医薬組成物は、エアロゾルとして投与することができる投薬単位からなってもよい。エアロゾルという用語は、コロイド状の性質の系から加圧されたパッケージからなる系までに及ぶ様々な系を表すために使用される。送達は、液化ガス若しくは圧縮ガスによってもよいし、又は活性成分を分注する好適なポンプシステムによってもよい。当該対象化合物の（Ｒ）−鏡像異性体のエアロゾルは、活性成分（１種又は複数種）を送達するために、一相系、二相系又は三相系で送達されてもよい。エアロゾルの送達は、必要な容器、アクチベータ、バルブ、副容器等を含み、これらは一緒になってキットを形成してもよい。当業者は、過度の実験をすることなく好ましいエアロゾルを決定しうる。
【０１０６】
本開示の医薬組成物は、医薬品分野で周知の方法によって調製されてもよい。例えば、注射によって投与されることが意図された医薬組成物は、当該対象化合物の（Ｒ）−鏡像異性体（又は、ある実施形態では、ノルフェンフルラミンラセミ化合物）を無菌の蒸留水と、溶液を形成するように組み合わせることにより調製することができる。均一な溶液又は懸濁液の形成を容易にするために、界面活性剤が添加されてもよい。界面活性剤は、水性送達システムの中での当該化合物の溶解又は均一な懸濁を容易にするように、当該対象化合物の（Ｒ）−鏡像異性体と共有結合に依らずに相互作用する化合物である。
【０１０７】
一般に、当該対象化合物の（Ｒ）−鏡像異性体（又は、ある実施形態では、ノルフェンフルラミンラセミ化合物）の治療上有効な１日用量は、（７０ｋｇの哺乳動物に対して）約０．００１ｍｇ／ｋｇ（すなわち、０．０７ｍｇ）〜約１００ｍｇ／ｋｇ（すなわち、７．０ｇ）であり、好ましくは、治療上有効な１日用量は、（７０ｋｇの哺乳動物に対して）約０．０１ｍｇ／ｋｇ（すなわち、０．７０ｍｇ）〜約５０ｍｇ／ｋｇ（すなわち、３．５ｇ）であり、より好ましくは治療上有効な１日用量は、（７０ｋｇの哺乳動物に対して）約１ｍｇ／ｋｇ（すなわち、７０ｍｇ）〜約２５ｍｇ／ｋｇ（すなわち、１．７５ｇ）である。いくつかの実施形態では、対象化合物の（Ｒ）−鏡像異性体（又は、ある実施形態では、ノルフェンフルラミンラセミ化合物）の治療上有効な１日用量は、（７０ｋｇの哺乳動物に対して）約０．５ｍｇ／ｋｇ〜約２．５ｍｇ／ｋｇ、例えば０．７５ｍｇ／ｋｇ〜約２．２５ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ〜約２ｍｇ／ｋｇ、又は約１ｍｇ／ｋｇ又は約２ｍｇ／ｋｇである。
【０１０８】
本明細書に提示される有効用量の範囲は、限定することを意図しておらず、好ましい用量範囲を表す。しかしながら、最も好ましい投薬量は、関連する分野の当業者によって理解され決定されるとおり、個々の対象に対して合わせられることになる（例えば、Ｂｅｒｋｏｗら編、Ｔｈｅ  Ｍｅｒｃｋ  Ｍａｎｕａｌ、第１９版、Ｍｅｒｃｋ  ａｎｄ  Ｃｏ．、ローウェー（Ｒａｈｗａｙ）、ニュージャージー州、２０１１；Ｂｒｕｎｔｏｎら編、Ｇｏｏｄｍａｎ  ａｎｄ  Ｇｉｌｍａｎ’ｓ  Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ、第１２版、ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ  ２０１１；Ａｖｅｒｙ’ｓ  Ｄｒｕｇ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ、第３版、ＡＤＩＳ  Ｐｒｅｓｓ，ＬＴＤ．、Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ａｎｄ  Ｗｉｌｋｉｎｓ、ボルチモア、メリーランド州（１９８７）、Ｅｂａｄｉ、Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ、Ｌｉｔｔｌｅ，Ｂｒｏｗｎ  ａｎｄ  Ｃｏ．、ボストン、（１９８５）；Ｏｓｏｌｃｉら編、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、最新版、Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．、イーストン（Ｅａｓｔｏｎ）、ペンシルベニア州；Ｋａｔｚｕｎｇ、Ｂａｓｉｃ  ａｎｄ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ、Ａｐｐｌｅｔｏｎ  ａｎｄ  Ｌａｎｇｅ、ノーウォーク（Ｎｏｒｗａｌｋ）、コネチカット州（１９９２）を参照）。
【０１０９】
各治療に必要とされる総用量は、所望に応じて、その日の過程にわたって複数回投与によって、又は単回投与で投与されてよい。一般に、治療は当該化合物の最適用量未満のより少ない投薬量を用いて開始される。その後、この投薬量は、その状況下での最適の効果に到達するまで、小さい増分で増やされる。本発明の医薬化合物又は医薬組成物は、単独で、又はその病態に向けられたか若しくはその病態の他の症状に向けられた他の診断薬及び／若しくは医薬品と併用して投与されてもよい。本開示の当該対象化合物の（Ｒ）−鏡像異性体（若しくは、ある実施形態では、ノルフェンフルラミンラセミ化合物）又は医薬組成物の有効量は、４〜７２時間の間隔で、２時間〜１年の間投与される約０．１μｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇ体重、及び／又はその中の任意の範囲若しくは値、例えば１〜４時間、４〜１０時間、１０〜１６時間、１６〜２４時間、２４〜３６時間、２４〜３６時間、３６〜４８時間、４８〜７２時間の間隔で、１〜１４日、１４〜２８日、若しくは３０〜４４日、若しくは１〜２４週間の間投与される０．０００１〜０．００１ｍｇ／ｋｇ、０．００１〜０．０１ｍｇ／ｋｇ、０．０１〜０．１ｍｇ／ｋｇ、０．１〜１．０ｍｇ／ｋｇ、１．０〜１０ｍｇ／ｋｇ、５〜１０ｍｇ／ｋｇ、１０〜２０ｍｇ／ｋｇ、２０〜５０ｍｇ／ｋｇ及び５０〜１００ｍｇ／ｋｇ、又はその中の任意の範囲若しくは値である。
【０１１０】
本開示の対象化合物の（Ｒ）−鏡像異性体（又は、ある実施形態では、ノルフェンフルラミンラセミ化合物）及び／又は医薬組成物の投与の受容側は、霊長目（ヒト、類人猿及びサルを含む）、偶蹄目（ウマ、ヤギ、ウシ、ヒツジ、ブタを含む）、齧歯目（マウス、ラット、及びハムスターを含む）、ウサギ目（ウサギを含む）及び食肉目（ネコ及びイヌを含む）の哺乳動物を含めた任意の哺乳動物であることができる。最も好ましい受容側はヒトである。
【０１１１】
５  併用療法
当該対象化合物の（Ｒ）−鏡像異性体（又は、ある実施形態では、ノルフェンフルラミンラセミ化合物）は、哺乳動物、好ましくはヒトにおけるてんかん又は別のてんかん発作性疾患の（本明細書に提示される）治療又は予防において、１以上の他の治療薬と、又はこれらのいずれかの組み合わせとして有用に組み合わされてもよい。例えば、当該対象化合物の（Ｒ）−鏡像異性体（又は、ある実施形態では、ノルフェンフルラミンラセミ化合物）は、他の治療薬と組み合わせて同時に、逐次的に又は別個に投与されてもよく、この他の治療薬としては以下のものが挙げられるが、これらに限定されない。
・  フェンテルミン（これは、非限定的な理論によれば、例えば、本明細書に記載される５ＨＴ２Ｃ及び／又は５ＨＴ２Ａ受容体に対する（Ｒ）−ノルフェンフルラミン効果の補完成分又は補助成分としてノルエピネフリン放出を増大させる可能性がある）等のＴＡＡＲ１アゴニスト；
・  麻薬性鎮痛剤、例えば、モルヒネ、ヘロイン、コカイン、オキシモルフォン、レボルファノール、レバロルファン、オキシコドン、コデイン、ジヒドロコデイン、プロポキシフェン、ナルメフェン、フェンタニル、ヒドロコドン、ヒドロモルホン、メリピジン（ｍｅｒｉｐｉｄｉｎｅ）、メサドン、ナロルフィン、ナロキソン、ナルトレキソン、ブプレノルフィン、ブトルファノール、ナルブフィン及びペンタゾシン；
・  非麻薬性鎮痛剤、例えば、アセトアミノフェン、サリチル酸誘導体（例えば、アスピリン）；
・  非ステロイド系抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、例えば、イブプロフェン、ナプロキセン、フェノプロフェン、ケトプロフェン、セレコキシブ、ジクロフェナク、ジフルシナル（ｄｉｆｌｕｓｉｎａｌ）、エトドラク、フェンブフェン、フェノプロフェン、フルフェニサール、フルルビプロフェン、イブプロフェン、インドメタシン、ケトプロフェン、ケトロラク、メクロフェナム酸、メフェナム酸、メロキシカム、ナブメトン、ナプロキセン、ニメスリド、ニトロフルルビプロフェン、オルサラジン、オキサプロジン、フェニルブタゾン、ピロキシカム、スルファサラジン、スリンダク、トルメチン及びゾメピラック；
・  抗痙攣薬、例えば、カルバマゼピン、オクスカルバゼピン、ラモトリギン、バルプロ酸、トピラマート、ガバペンチン及びプレガバリン；
・  三環系抗鬱薬等の抗うつ薬、例えば、アミトリプチリン、クロミプラミン、デシプラミン、イミプラミン及びノルトリプチリン、
・  ＣＯＸ−２選択的阻害剤、例えば、セレコキシブ、ロフェコキシブ、パレコキシブ、バルデコキシブ、デラコキシブ、エトリコキシブ、及びルミラコキシブ；
・  α−アドレナリン受容体刺激薬、例えば、ドキサゾシン、タムスロシン、クロニジン、グアンファシン、デクスメタトミジン（ｄｅｘｍｅｔａｔｏｍｉｄｉｎｅ）、モダフィニル、及び４−アミノ−６，７−ジメトキシ−２−（５−メタンスルホンアミド−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノル−２−イル）−５−（２−ピリジル）キナゾリン；
・  バルビツール酸系催眠鎮静薬、例えば、アモバルビタール、アプロバルビタール、ブタバルビタール、ブタルビタール、メホバルビタール、メタルビタール、メトヘキシタール、ペントバルビタール、フェノバルビタール、セコバルビタール、タルブタール、チアミラール及びチオペンタール；
・  タキキニン（ＮＫ）アンタゴニスト、特にＮＫ−３、ＮＫ−２又はＮＫ−１アンタゴニスト、例えば、（αＲ，９Ｒ）−７−［３，５−ビス（トリフルオロメチル）ベンジル）］−８，９，１０，１１−テトラヒドロ−９−メチル−５−（４−メチルフェニル）−７Ｈ−［１，４］ジアゾシノ［２，１−ｇ］［１，７］−ナフチリジン−６−１３−ジオン（ＴＡＫ−６３７）、５−［［２Ｒ，３Ｓ）−２−［（１Ｒ）−１−［３，５−ビス（トリフルオロメチルフェニル］エトキシ−３−（４−フルオロフェニル）−４−モルホリニル］−メチル］−１，２−ジヒドロ−３Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−オン（ＭＫ−８６９）、アプレピタント、ラネピタント、ダピタント又は３−［［２−メトキシ５−（トリフルオロメトキシ）フェニル］−メチルアミノ］−２−フェニルピペリジン（２Ｓ，３Ｓ）；
・  コールタール鎮痛薬、例えば、アセトアミノフェン；
・  セロトニン再取り込み阻害剤、例えば、パロキセチン、セルトラリン、ノルフルオキセチン（フルオキセチン脱メチル体代謝産物）、代謝産物デメチルセルトラリン、‘３フルボキサミン、パロキセチン、シタロプラム、シタロプラム代謝産物デスメチルシタロプラム、エスシタロプラム、ｄ，ｌ−フェンフルラミン、フェモキセチン、イフォキセチン（ｉｆｏｘｅｔｉｎｅ）、シアノドチエピン、リトキセチン、ダポキセチン、ネファゾドン、セリクラミン、トラゾドン及びフルオキセチン；
・  ノルアドレナリン（ノルエピネフリン）再取り込み阻害剤、例えば、マプロチリン、ロフェプラミン、ミルタザピン、オキサプロチリン、フェゾラミン、トモキセチン、ミアンセリン、ブプロプリオン、ブプロプリオン代謝産物ヒドロキシブプロプリオン、ノミフェンシン及びビロキサジン（Ｖｉｖａｌａｎ（登録商標））、とりわけレボキセチン、特に（Ｓ，Ｓ）−レボキセチン等の選択的ノルアドレナリン再取り込み阻害剤、及びベンラファキシン・デュロキセチン神経遮断性鎮静薬／抗不安薬；
・  セロトニン−ノルアドレナリン再取り込み二重阻害剤、例えばベンラファキシン、ベンラファキシン代謝産物Ｏ−デスメチルベンラファキシン、クロミプラミン、クロミプラミン代謝産物デスメチルクロミプラミン、デュロキセチン、ミルナシプラン及びイミプラミン；
・  アセチルコリンエステラーゼ阻害剤、例えばドネペジル；
・  ５−ＨＴ３アンタゴニスト、例えばオンダンセトロン；
・  代謝型グルタミン酸受容体（ｍＧｌｕＲ）アンタゴニスト又はアゴニスト又はｍＧｌｕＲのグルタミン酸のアロステリック増強剤；
・  局所麻酔薬、例えばメキシレチン及びリドカイン；
・  副腎皮質ステロイド、例えばデキサメタゾン；
・  抗不整脈薬、例えば、メキシレチン及びフェニトイン；
・  ムスカリンアンタゴニスト、例えば、トルテロジン、プロピベリン、トロスピウム塩化物、ダリフェナシン、ソリフェナシン、テミベリン及びイプラトロピウム；
・  ムスカリンアゴニスト又はムスカリン受容体のアセチルコリンのアロステリック増強剤
・  カンナビノイド、又はカンナビノイド受容体のエンドルフィン類のアロステリック増強剤；
・  バニロイド受容体のアゴニスト（例えば、レシニフェラトキシン）又はアンタゴニスト（例えば、カプサゼピン）；
・  鎮静剤、例えば、グルテチミド、メプロバメート、メタカロン、及びジクロラルフェナゾン；
・  抗不安薬、例えばベンゾジアゼピン類、
・  抗うつ剤、例えばミルタザピン、
・  外用薬（例えば、リドカイン、カプサイシン及びレシニフェラトキシン）；
・  筋肉弛緩剤、例えば、ベンゾジアゼピン類、バクロフェン、カリソプロドール、クロルゾキサゾン、シクロベンザプリン、メトカルバモール及びオルフェナドリン（ｏｒｐｈｒｅｎａｄｉｎｅ）；
・  抗ヒスタミン薬又はＨ１アンタゴニスト；
・  ＮＭＤＡ受容体アンタゴニスト；
・  ５−ＨＴ受容体アゴニスト／アンタゴニスト；
・  ＰＤＥＶ阻害剤；
・  Ｔｒａｍａｄｏｌ（トラマドール）（登録商標）；
・  コリン作動性（ニコチン性）鎮痛剤；
・  α−２−δリガンド；
・  プロスタグランジンＥ２サブタイプアンタゴニスト；
・  ロイコトリエンＢ４アンタゴニスト；並びに
・  ５−リポキシゲナーゼ阻害剤。
【０１１２】
本明細書で使用する場合、「組み合わせ」は、当該対象化合物の（Ｒ）−鏡像異性体（又は、ある実施形態では、ノルフェンフルラミンラセミ化合物）と１以上のさらなる治療薬との任意の混合物又は順列（入れ替え）を指す。文脈と明らかに矛盾しないかぎり、「組み合わせ」は、当該対象化合物の（Ｒ）−鏡像異性体（又は、ある実施形態では、ノルフェンフルラミンラセミ化合物）の、別の対象化合物の（Ｒ）−鏡像異性体を含めた１以上の治療薬との同時又は逐次的な送達を含んでもよい。文脈と明らかに矛盾しないかぎり、「組み合わせ」は、当該対象化合物の（Ｒ）−鏡像異性体（又は、ある実施形態では、ノルフェンフルラミンラセミ化合物）と別の治療薬との剤形を含んでもよい。文脈と明らかに矛盾しないかぎり、「組み合わせ」は、別の治療薬を伴う当該対象化合物の（Ｒ）−鏡像異性体（又は、ある実施形態では、ノルフェンフルラミンラセミ化合物）の投与経路を含んでもよい。文脈と明らかに矛盾しないかぎり、「組み合わせ」は、当該対象化合物の（Ｒ）−鏡像異性体（又は、ある実施形態では、ノルフェンフルラミンラセミ化合物）と別の治療薬との配合物を含んでもよい。剤形、投与経路及び医薬組成物としては、本明細書に記載されるものが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１１３】
１つの実施形態では、本開示は、治療上有効量の当該対象化合物の（Ｒ）−鏡像異性体（又は、ある実施形態では、ノルフェンフルラミンラセミ化合物）を、フェンテルミンと組み合わせて同時に、逐次的に又は別々に投与する工程を備える本明細書に記載される方法に関する。同様に、本開示は、フェンテルミンと組み合わせた当該対象化合物の（Ｒ）−鏡像異性体（又は、ある実施形態では、ノルフェンフルラミンラセミ化合物）の同時、逐次的又は別々の、本明細書に記載される使用に関する。
【０１１４】
６  パーツのキット
本開示は、本明細書に記載される医薬組成物を含有するキットも提供する。当該キットは、てんかん又は別のてんかん発作性疾患を（本明細書に提示されるように）治療又は予防するための医薬組成物の使用のための説明書も含む。好ましくは、キットは、当該医薬組成物の１以上の単位用量を含有することになる。例えば、そのような単位用量は、静脈注射剤の調製のために十分な量であってもよい。光及び／又は空気に敏感であるこのような組成物が特別の包装及び／又は製剤化を必要としてもよいことは当業者には明らかであろう。例えば、光に対して不透明であり、かつ／又は周囲の空気との接触から封じられており、かつ／又は好適なコーティング又は賦形剤を用いて製剤化されている包装が使用されてもよい。
【０１１５】
７  本発明の（Ｒ）−鏡像異性体の調製
Ａ．（Ｒ）−フェンフルラミン及び（Ｓ）−フェンフルラミンの調製
（Ｒ）−フェンフルラミン及び（Ｓ）−フェンフルラミンは、キラルなシントン又はキラルな試薬を使用して当業者に公知の方法によって調製されてもよいし、又はキラルカラムを使用するＨＰＬＣ等の従来の技法を使用してフェンフルラミンから分割されてもよい。フェンフルラミンの結晶化によるその（Ｒ）−鏡像異性体及び（Ｓ）−鏡像異性体への光学分割は、例えばＣｏｑｕｅｒｅｌら、Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｌｅｔｔｅｒｓ（１９８８）、１０８１−１０８４頁に開示された。
【０１１６】
Ｂ．（Ｒ）−ノルフェンフルラミン及び（Ｓ）−ノルフェンフルラミンの調製
（Ｒ）−ノルフェンフルラミン及び（Ｓ）−ノルフェンフルラミンは、キラルなシントン又はキラルな試薬を使用して当業者に公知の方法によって調製されてもよいし、又はキラルカラムを使用するＨＰＬＣ等の従来の技法を使用してノルフェンフルラミン（例えば、Ｔｏｒｏｎｔｏ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ、ノースヨーク、オンタリオ州、カナダから市販されている）から分割されてもよい。
【０１１７】
（Ｒ）−ノルフェンフルラミン及び（Ｓ）−ノルフェンフルラミンは、下記の反応スキーム１及び反応スキーム２に開示される方法に従って調製することもでき、それらの反応スキームの中では、以下の略語が使用されている。
Ｒａｎｅｙ  ＮｉはＲａｎｅｙニッケルを指し、
ａｔｍは気圧を指し、
ＡｃＯＨは酢酸を指し、
ＭｅＯＨはメタノールを指し、
ｈは時間を指し、
Ｐｄ／Ｃはパラジウム炭素を指し、
ｒｔは室温を指す。
【０１１８】
反応スキーム１は、（Ｒ）−ノルフェンフルラミンの調製を示す。
【化８】
2021530541.tif 000010
【０１１９】
化合物１０１及び化合物１０２は市販されているか、又は当業者に公知の方法によって調製することができる。
【０１２０】
一般に、（Ｒ）−ノルフェンフルラミンは、最初に標準的な還元的アミノ化の条件下で化合物１０１を化合物１０２で処理して化合物１０３を生成し、次いで化合物１０３を標準的な接触水素化の条件下で処理して、（Ｒ）−ノルフェンフルラミンを生成することにより、反応スキーム１に示される方法によって調製することができる。
【０１２１】
同様にして、（Ｓ）−ノルフェンフルラミンは、下に反応スキーム２に示すように調製され、化合物１０１及び化合物２０１は市販されている。
【化９】
2021530541.tif 000011
【０１２２】
Ｃ．（Ｒ）−ベンフルオレクス及び（Ｓ）−ベンフルオレクスの調製
（Ｒ）−ベンフルオレクス及び（Ｓ）−ベンフルオレクスは、（Ｒ）−ノルフェンフルラミン及び（Ｓ）−ノルフェンフルラミンから欧州特許出願公開第１３２１４４５号明細書に開示される方法によって調製することができる。具体的には、この方法論は、（Ｒ）−ノルフェンフルラミン及び（Ｓ）−ノルフェンフルラミンをエチレンオキシドと反応させて対応するアミノアルコールを生成し、続いてそのアルコール部分を塩化ベンゾイルでアシル化することを含む。
【０１２３】
８  番号付けされた実施形態
実施形態１．  てんかん発作性疾患に罹患しているか又はてんかん発作性疾患に罹患するリスクがある哺乳動物の治療方法であって、その哺乳動物に治療上有効量の、
（ｉ）（Ｒ）−フェンフルラミン又はその薬学的に許容できる塩、溶媒和物若しくはプロドラッグ；
（ｉｉ）（Ｒ）−ノルフェンフルラミン又はその薬学的に許容できる塩、溶媒和物若しくはプロドラッグ、ａｎｄ
（ｉｉｉ）（Ｒ）−ベンフルオレクス又はその薬学的に許容できる塩、溶媒和物若しくはプロドラッグ
のうちの１つ、２つ又は３つすべてを投与する工程を備え、
（Ｒ）−フェンフルラミンは（Ｓ）−フェンフルラミンを実質的に含まず、（Ｒ）−ノルフェンフルラミンは（Ｓ）−ノルフェンフルラミンを実質的に含まず、（Ｒ）−ベンフルオレクスは（Ｓ）−ベンフルオレクスを実質的に含まない方法。
【０１２４】
実施形態２．  てんかん発作性疾患に罹患しているか又はてんかん発作性疾患に罹患するリスクがある哺乳動物の治療方法であって、その哺乳動物に
（ａ）治療上有効量の、
（ｉ）（Ｒ）−フェンフルラミン又はその薬学的に許容できる塩、溶媒和物若しくはプロドラッグ；
（ｉｉ）（Ｒ）−ノルフェンフルラミン又はその薬学的に許容できる塩、溶媒和物若しくはプロドラッグ、及び
（ｉｉｉ）（Ｒ）−ベンフルオレクス又はその薬学的に許容できる塩、溶媒和物若しくはプロドラッグ
のうちの１つ、２つ又は３つすべて、並びに
（ｂ）治療上有効量のフェンテルミン、又はその薬学的に許容できる塩、溶媒和物若しくはプロドラッグ
を同時に又は逐次的に、及び任意の順序で投与する工程を備え、
（Ｒ）−フェンフルラミンは（Ｓ）−フェンフルラミンを実質的に含まず、（Ｒ）−ノルフェンフルラミンは（Ｓ）−ノルフェンフルラミンを実質的に含まず、（Ｒ）−ベンフルオレクスは（Ｓ）−ベンフルオレクスを実質的に含まない方法。
【０１２５】
実施形態３．  上記てんかん発作性疾患がドラベ症候群である実施形態１又は実施形態２に記載の方法。
【０１２６】
実施形態４．  上記てんかん発作性疾患が、光過敏性てんかん、自己誘発失神、難治性てんかん、アンジェルマン症候群、良性ローランドてんかん、ＣＤＫＬ５障害、幼児期及び若年性欠神てんかん、ドラベ症候群、前頭葉てんかん、グルコーストランスポーター１（Ｇｌｕｔ１）欠損症、視床下部過誤腫、点頭てんかん／ウエスト症候群、若年性ミオクロニーてんかん、ランドウ・クレフナー症候群、レノックス・ガストー症候群（ＬＧＳ）、ミオクロニー欠神てんかん、大田原症候群、パナエトポラス症候群、ＰＣＤＨ１９てんかん、進行性ミオクローヌスてんかん、ラスムッセン症候群、環状２０番染色体症候群、反射てんかん、側頭葉てんかん、ラフォラ進行性ミオクローヌスてんかん、神経皮膚症候群、結節性硬化症、早期乳児てんかん性脳症、早期発症型てんかん性脳症、全般てんかん熱性痙攣プラス（ＧＥＦＳ＋）、レット症候群、多発性硬化症、アルツハイマー病、自閉症、運動失調症、筋緊張低下、発作性ジスキネジア、焦点起始発作、全般起始発作、欠神発作、ジーボンス症候群、てんかん性脳症、ヒマワリ症候群、脆弱Ｘ症候群、交代性片麻痺、常染色体優性夜間前頭葉てんかん（ＡＤＮＦＬＥ）、良性ローランドてんかん、ドーズ症候群、早期ミオクロニー脳症、遊走性焦点発作を伴う乳児てんかん、全般強直間代発作のみを示すてんかん、ミオクロニー欠神てんかん、睡眠時持続性棘徐波を示すてんかん性脳症、若年性欠神発作、進行性ミオクローヌスてんかん、ＳＣＮ８Ａ関連てんかん、ＳＣＮ２Ａ関連てんかん、ＫＣＮＱ２関連てんかん、及びＴＢＣ１ドメイン含有キナーゼ（ＴＢＣＫ）関連の知的障害（ＩＤ）症候群から選択される実施形態１又は実施形態２に記載の方法。
【０１２７】
実施形態５．  てんかん発作性疾患に罹患しているか又はてんかん発作性疾患に罹患するリスクがある哺乳動物の治療方法であって、その哺乳動物に治療上有効量のラセミのノルフェンフルラミン［（Ｒ，Ｓ）−１−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）プロパン−２−アミン］を投与する工程を備える方法。
【０１２８】
実施形態６．  てんかん発作性疾患に罹患しているか又はてんかん発作性疾患に罹患するリスクがある哺乳動物の治療方法であって、その哺乳動物に
（ａ）治療上有効量のラセミのノルフェンフルラミン［（Ｒ，Ｓ）−１−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）プロパン−２−アミン］；及び
（ｂ）治療上有効量のフェンテルミン、又はその薬学的に許容できる塩、溶媒和物若しくはプロドラッグ
を同時に又は逐次的に、及び任意の順序で投与する工程を備える方法。
【０１２９】
実施形態７．  上記てんかん発作性疾患がドラベ症候群である実施形態５又は実施形態６に記載の方法。
【０１３０】
実施形態８．  上記てんかん発作性疾患が、光過敏性てんかん、自己誘発失神、難治性てんかん、アンジェルマン症候群、良性ローランドてんかん、ＣＤＫＬ５障害、幼児期及び若年性欠神てんかん、ドラベ症候群、前頭葉てんかん、グルコーストランスポーター１（Ｇｌｕｔ１）欠損症、視床下部過誤腫、点頭てんかん／ウエスト症候群、若年性ミオクロニーてんかん、ランドウ・クレフナー症候群、レノックス・ガストー症候群（ＬＧＳ）、ミオクロニー欠神てんかん、大田原症候群、パナエトポラス症候群、ＰＣＤＨ１９てんかん、進行性ミオクローヌスてんかん、ラスムッセン症候群、環状２０番染色体症候群、反射てんかん、側頭葉てんかん、ラフォラ進行性ミオクローヌスてんかん、神経皮膚症候群、結節性硬化症、早期乳児てんかん性脳症、早期発症型てんかん性脳症、全般てんかん熱性痙攣プラス（ＧＥＦＳ＋）、レット症候群、多発性硬化症、アルツハイマー病、自閉症、運動失調症、筋緊張低下、発作性ジスキネジア、焦点起始発作、全般起始発作、欠神発作、ジーボンス症候群、てんかん性脳症、ヒマワリ症候群、脆弱Ｘ症候群、交代性片麻痺、常染色体優性夜間前頭葉てんかん（ＡＤＮＦＬＥ）、良性ローランドてんかん、ドーズ症候群、早期ミオクロニー脳症、遊走性焦点発作を伴う乳児てんかん、全般強直間代発作のみを示すてんかん、ミオクロニー欠神てんかん、睡眠時持続性棘徐波を示すてんかん性脳症、若年性欠神発作、進行性ミオクローヌスてんかん、ＳＣＮ８Ａ関連てんかん、ＳＣＮ２Ａ関連てんかん、ＫＣＮＱ２関連てんかん、及びＴＢＣ１ドメイン含有キナーゼ（ＴＢＣＫ）関連の知的障害（ＩＤ）症候群から選択される実施形態５又は実施形態６に記載の方法。
【０１３１】
以下の例は、当該対象化合物の鏡像異性体の合成に関し、以下の生物学的例は、当該対象化合物の方法及び使用の実施を支援するためのガイドとして提供され、これらの例は、請求項に係る発明の範囲を限定するものとしては意図されていない。
【実施例】
【０１３２】
１  合成例１
（Ｒ）−ノルフェンフルラミン（（Ｒ）−１−（（３−トリフルオロメチル）フェニル）プロパン−２−アミン）の合成
【化１０】
2021530541.tif 000012
Ａ．  メタノール（６０ｍＬ）中の１−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）プロパン−２−オン（１０．０ｇ、４９．５ｍｍｏｌ）の混合物に、（Ｒ）−１−フェニルエタン−１−アミン（６．００ｇ、４９．５ｍｍｏｌ）、Ｒａｎｅｙニッケル（８００ｍｇの、水中の５０％ｗ／ｗスラリー）及び氷酢酸（１．４９ｇ）を加えた。この混合物を水素ガスで５分間パージし、７５℃に加熱し、水素雰囲気（８ａｔｍ）下で２４時間撹拌した。この混合物を常温まで冷却し、珪藻土のパッドを通して濾過した。この濾液のｐＨを、濃塩酸（５ｍＬ）の添加によりｐＨ約１に調整した。水（３０ｍＬ）を加え、この混合物を４０℃で１時間撹拌した。次いでこの混合物を５℃に冷却し、この温度で２０分間放置したところ、その間に、無色の沈殿物が析出した。この固体を濾過によって集め、メタノール及び水（１：１ｖ／ｖ、２００ｍＬ）の混合物で洗浄し、（Ｒ）−Ｎ−（（Ｒ）−１−フェニルエチル）−１−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）プロパン−２−アミン（７．６５ｇ、２２．２ｍｍｏｌ、４５％）をその対応する塩酸塩として得た。濾液を減圧下で乾固するまで濃縮し、残渣をジエチルエーテル（３×３０ｍＬ）で洗浄し、さらなる量の（Ｒ）−Ｎ−（（Ｒ）−１−フェニルエチル）−１−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）プロパン−２−アミン（４．５２ｇ、１３．１ｍｍｏｌ、２６％）をその対応する塩酸塩として得た。全体収率は７１％であった。
【０１３３】
Ｂ．  メタノール（２５ｍＬ）中の（Ｒ）−Ｎ−（（Ｒ）−１−フェニルエチル）−１−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）プロパン−２−アミン塩酸塩（２．２３ｇ、６．５０ｍｍｏｌ）の溶液を乾燥窒素で１０分間パージした。パラジウム炭素（０．４４ｇ、１０％ｗ／ｗＰｄ）を加えた。この混合物を乾燥窒素で１０分間パージし、その後、水素で１０分間パージした。次いで、この混合物を水素雰囲気（１ａｔｍ、バルーン）下で２０時間撹拌し、珪藻土のパッドを通して濾過した。濾液を減圧下で乾固するまで濃縮し、残渣を０．２Ｍ塩酸（２０ｍＬ）に溶解させた。得られた溶液をヘキサン（３×２０ｍＬ）で洗浄し、次いで水層のｐＨを水酸化ナトリウム（約１ｇ）の添加によりｐＨ約１２に調整した。この混合物を酢酸エチル（３×２０ｍＬ）で抽出し、合わせた有機抽出液を飽和塩化ナトリウム水溶液（５０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下で乾固するまで濃縮し、（Ｒ）−ノルフェンフルラミン（（Ｒ）−１−（（３−トリフルオロメチル）フェニル）プロパン−２−アミン）（１．１２ｇ、５．５２ｍｍｏｌ、８５％）を無色の油状物として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：  δ  ７．５２−７．３９（ｍ，４Ｈ），３．２２−３．１８（ｍ，１Ｈ），２．８０−２．７３（ｍ，１Ｈ），２．６３−２．５６（ｍ，１Ｈ），１．１３（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，３Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ＋）  ２０４．２（Ｍ＋Ｈ）；［α］Ｄ２０  −１６．０°（ｃ＝１．０，ＣＨＣｌ３）。
【０１３４】
２  合成例２
（Ｓ）−ノルフェンフルラミン（（Ｓ）−１−（（３−トリフルオロメチル）フェニル）プロパン−２−アミン）の合成
【化１１】
2021530541.tif 000013
Ａ．  メタノール（６０ｍＬ）中の１−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）プロパン−２−オン（１０．０ｇ、４９．５ｍｍｏｌ）の混合物に、（Ｓ）−１−フェニルエタン−１−アミン（６．００ｇ、４９．５ｍｍｏｌ）、Ｒａｎｅｙニッケル（８００ｍｇの、水中の５０％ｗ／ｗスラリー）及び氷酢酸（１．４９ｇ）を加えた。この混合物を水素ガスで５分間パージし、７５℃に加熱し、水素雰囲気（８ａｔｍ）下で２４時間撹拌した。この混合物を常温まで冷却し、珪藻土のパッドを通して濾過した。この濾液のｐＨを、濃塩酸（５ｍＬ）の添加によりｐＨ約１に調整した。水（３０ｍＬ）を加え、この混合物を４０℃で１時間撹拌した。次いでこの混合物を５℃に冷却し、この温度で２０分間放置したところ、その間に、無色の沈殿物が析出した。この固体を濾過によって集め、メタノール及び水（１：１ｖ／ｖ、２００ｍＬ）の混合物で洗浄し、（Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−フェニルエチル）−１−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）プロパン−２−アミン（８．０１ｇ、２３．３ｍｍｏｌ、４７％）をその対応する塩酸塩として得た。濾液を減圧下で乾固するまで濃縮し、残渣をジエチルエーテル（３×３０ｍＬ）で洗浄し、さらなる量の（Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−フェニルエチル）−１−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）プロパン−２−アミン（４．７８ｇ、１３．９ｍｍｏｌ、２８％）をその対応する塩酸塩として得た。全体収率は７５％であった。
【０１３５】
Ｂ．  メタノール（２５ｍＬ）中の（Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−フェニルエチル）−１−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）プロパン−２−アミン塩酸塩（２．２３ｇ、６．５０ｍｍｏｌ）溶液を乾燥窒素で１０分間パージした。パラジウム炭素（０．４４ｇ、１０％ｗ／ｗＰｄ）を加えた。この混合物を乾燥窒素で１０分間パージし、その後、水素で１０分間パージした。次いで、この混合物を水素雰囲気（１ａｔｍ、バルーン）下で２０時間撹拌し、珪藻土のパッドを通して濾過した。濾液を減圧下で乾固するまで濃縮し、残渣を０．２Ｍ塩酸（２０ｍＬ）に溶解させた。得られた溶液をヘキサン（３×２０ｍＬ）で洗浄し、次いで水層のｐＨを水酸化ナトリウム（約１ｇ）の添加によりｐＨ約１２に調整した。この混合物を酢酸エチル（３×２０ｍＬ）で抽出し、合わせた有機抽出液を飽和塩化ナトリウム水溶液（５０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下で乾固するまで濃縮し、（Ｓ）−ノルフェンフルラミン（（Ｓ）−１−（（３−トリフルオロメチル）フェニル）プロパン−２−アミン）（１．１６ｇ、５．７２ｍｍｏｌ、８８％）を無色の油状物として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：  δ  ７．５２−７．３９（ｍ，４Ｈ），３．２２−３．１８（ｍ，１Ｈ），２．８０−２．７３（ｍ，１Ｈ），２．６３−２．５６（ｍ，１Ｈ），１．１３（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，３Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ＋）  ２０４．２（Ｍ＋Ｈ）；［α］Ｄ２０  ＋１６．０°（ｃ＝１．０，ＣＨＣｌ３）。
【０１３６】
３  生物学的アッセイ
本発明の（Ｒ）−鏡像異性体の活性を試験するための種々の技法が当該技術分野で公知である。本明細書に記載される発明がより十分に理解されうるために、以下の生物学的アッセイを示す。これらの例は、例示の目的だけのものであり、本発明を限定するものとは決して解釈されるべきではないということを理解されたい。
【０１３７】
３．１  生物学的例１．  ドラベ症候群マウスモデル
ドラベ症候群、てんかん性脳症、は、神経特異的電位依存性ナトリウムチャネル、ＳＣＮ１Ａをコードする遺伝子におけるヘテロ接合性の機能喪失型（ＬＯＦ）の変異によって引き起こされる。ＳＣＮ１Ａをコードする遺伝子のヘテロ接合性の標的欠失を有するマウスは、ドラベ症候群の多くの特徴を再現し、本明細書に記載されるフェンフルラミン及びフェンフルラミン関連化合物（このような化合物の単離した鏡像異性体を含む）試験するための有用な疾患モデルを提供する。ヘテロ接合性のＳｃｎ１ａノックアウト（Ｓｃｎ１ａ＋／−）マウスも発作を有し、ドラベ症候群のモデルである。
【０１３８】
例えば、１２９Ｓ６／ＳｖＥｖＴａｃ及びＣ５７ＢＬ／６Ｊの系統のＳｃｎ１ａ＋／−  Ｆ１マウスは重度のてんかん及び早期致死を示し、ヒトにおけるドラベ症候群の哺乳類モデルであると考えられる。ナトリウム電流（ＩＮａ）密度の低下及び活動電位発火の機能低下が、Ｆ１  Ｓｃｎ１ａ＋／−マウスの海馬介在ニューロンにおいて記載されており、これらは、活動電位依存的な阻害性のＧＡＢＡ作動性の神経伝達の低下及び神経細胞の易興奮性の上昇を生じる（Ｈａｎら、２０１２  Ｎａｔｕｒｅ  ４８９：３８５；Ｍｉｓｔｒｙら、２０１４  Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ．Ｄｉｓ．  ６５：１）。これらのマウスは、Ｏａｋｌｅｙら、（２００９）  Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．  １０６（１０）：３９９４−３９９９；Ｏａｋｌｅｙら、（２０１３）  Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．  ３４５（２）：２１５−２２４によって報告されているように、生涯の第３週から高熱誘発の発作を起こしやすくなる。
【０１３９】
フルロチル発作誘発。５〜１２週齢のＳｃｎ１ａ＋／−  Ｆ１マウスを透明なＰｌｅｘｉｇｌａｓ（商標）（ポリ（メタクリル酸メチル）、ＰＭＭＡ）チャンバーの中に入れ、フルロチル（２，２，２−トリフルオロエチルエーテル）（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ（シグマ・アルドリッチ）、セントルイス、ミズーリ州）を、シリンジポンプを介して２０ｍｌ／分の速度でゆっくりとそのチャンバーに導入し、揮発させる。発作閾値は、最初のＭＪ（ミオクローヌス反射）及びＧＴＣＳ（全般性強直間代発作）までの潜時を測定することにより決定する。発作閾値は、マウスがビヒクル対照又はビヒクル中で投与した活性化合物（例えば、単離したフェンフルラミン鏡像異性体）を与えたときに測定することができる。ＭＪは、最初に観察できる行動反応であり、肩部及び／又は頸部の短時間の筋反射を特徴とする。ＧＴＣＳは、全身の痙攣及び姿勢の維持不能を特徴とする。上記マウスは、ＧＴＣＳから強直性の後肢伸展への進行についてもスコア付けする。
【０１４０】
ＫＡ発作誘発。３〜４月齢のＳｃｎ１ａ＋／−  Ｆ１マウスに、１５、２０又は３０ｍｇ／ｋｇのカイニン酸ＫＡ（Ｏｃｅａｎ  Ｐｒｏｄｕｃｅ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ（オーシャン・プロデュース・インターナショナル）、シェルバーン（Ｓｈｅｌｂｕｒｎｅ）、ノバスコシア州（Ｎｏｖａ  Ｓｃｏｔｉａ）、カナダ）を腹腔内に（ｉ．ｐ．）注射した。ＫＡは、適切な注入量を得るために、０．９％（重量／体積）食塩水に、２．５ｍｇ／ｍｌの濃度に溶解させる。概日リズムに起因する行動のばらつきを最小にするために、すべてのマウスに、正午〜午後４時に注射する。ＫＡの注射後、マウスを２時間観察し、改変したＲａｃｉｎｅ尺度（Ｒａｃｉｎｅ，Ｒ．Ｊ．  １９７２  Ｅｌｅｃｔｒｏｅｎｃｅｐｈａｌｏｇｒ．Ｃｌｉｎ．Ｎｅｕｒｏｐｈｙｓｉｏｌ．  ３２（３）：２８１−２９４）に従ってスコア付けする。この改変した尺度は、以下の基準に基づく：ステージ０  −  反応なし；ステージ１  −  凝視；ステージ２  −  点頭痙攣；ステージ３  −  前肢クローヌス；ステージ４  −  立ち上がり及び転倒；ステージ５  −  ＧＴＣＳ；ステージ６  −  死亡。改変Ｒａｃｉｎｅ尺度スコアを、ビヒクル単独（対照）を与えたマウス及び活性なフェンフルラミン由来の化合物を受けたマウスについて比較する。
【０１４１】
温度誘発発作アッセイ。発作は、Ｓｃｎ１ａ＋／−  Ｆ１仔マウスに高熱を誘発することにより起こされる。Ｐ１４〜Ｐ２２マウスをＰｌｅｘｉｇｌａｓ（商標）ＰＭＭＡチャンバーに入れ、このチャンバーの底に吸収剤紙を敷く。マウスの深部体温を齧歯動物温度制御装置に接続した直腸温度プローブによってモニタリングし、マウスを１０分間、このＰＭＭＡ試験チャンバーに馴化させ、深部温度を３７．０℃に維持する。次いで、発作を示す行動が始まるか、又は深部体温が４２．５℃に到達するまで、試験チャンバーの上方に配置した赤外線ランプの使用により深部温度を２分毎に０．５℃上昇させる。発作の発症時の深部温度、行動及び時間を記録する。高熱の最大継続期間は２２分間である。
【０１４２】
実験上及び臨床上の終点：発作は、ミオクローヌス反射、前肢のクローヌス、及び／又は肢の強直性伸展として定義される。発作の潜時及び継続期間を記録する。痙攣促進活性を有する化合物は、発作までの潜時を短くするのに対して、抗痙攣活性を有する化合物は潜時を長くする。高熱曝露の継続期間全体は２２分間であり、すべての動物はアッセイの最後に安楽死させられる。
【０１４３】
熱誘導及びＥＥＧ。一群のＳｃｎ１ａ＋／−  Ｆ１マウスにおいて、各動物の深部体温を直腸温度プローブによって連続的にモニタリングし、赤外線ランプと連動したフィードバック回路によって制御する。発作が起こるか又は４２℃の温度に到達するまで、体温は２分間隔で０．５℃のステップで上昇される。発作閾値は、最初の発作までの潜時によって測定し、マウスにビヒクル（対照）又はビヒクル中で投与した活性化合物を与えたときに比較する。次いでこれらの動物を冷やし、住み処のケージに戻す。熱誘導はＰ２２において実施し、誘導プロセス及びその結果生じる発作をビデオモニタリングによって記録する。発作を、自然発作の記録及び分析のところで後述するものと同じ基準を使用するＲａｃｉｎｅ尺度でスコア付けする。
【０１４４】
自然発作の記録及び分析。Ｓｃｎ１ａ＋／−  Ｆ１マウスをＰ１９〜Ｐ２７で連続的にビデオモニタリングする。得られた動画ファイルを、例えば、約８倍速で見直す。次いで、発作が疑われる事象を、より遅い速度、例えば２倍速で見直し、発作の重症度について、以下のＲａｃｉｎｅスコア付けシステムに基づいて１〜５でスコア付けする：１、口及び顔面の動き；２、点頭痙攣；３、前肢クローヌス、通常は１つの肢；４、前肢クローヌスと立ち上がり；及び５、全般性の強直間代性発作（ＧＴＣ）、立ち上がり、クローヌス、及び転倒。このＲａｃｉｎｅスコアを、ビヒクル単独（対照）を投与するマウス対ビヒクル中の活性化合物（試験）を投与するマウスについて比較する。
【０１４５】
Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ（Ｂ６）バックグラウンドで、Ｓｃｎ１ａ＋／−ヌルヘテロ接合体の５０％が自然発作を発症し、生涯の第３週から孤発性の死亡を生じる（Ｙｕら、２００６  Ｎａｔ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．  ９：１１４２−１１４９；Ｍｉｓｔｒｙら、２０１４  Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ．Ｄｉｓ．  ６５：１−１１）。Ｐ１７〜Ｐ２０ヘテロ接合体マウス（ｎ＝２〜４）を記録用チャンバーに入れる。食餌及び水を自由に与える。ＤＶＲレコーダー又はコンピューターに接続したアナログカメラ（チャンバー１つにつき１台）を使用して、マウスの行動を１０〜１４日間、１日２４時間連続的に記録する。最後の記録のあと５時間以内にマウスを屠殺した。自然発作に対する候補ＡＥＤの有効性を試験するいずれの研究においても、ビヒクル単独で処置した対照群のマウスを含めた。化合物は、化合物の特性に応じて、毎日投与するか、又は製造業者の説明書（Ａｌｚｅｔ  Ｉｎｃ．（アルゼット）、クパチーノ（Ｃｕｐｅｒｔｉｎｏ）、カリフォルニア州、米国）に従って浸透圧ポンプを使用して慢性的に投与した。
【０１４６】
動画ファイルの解析：実験群の状況（対照対試験化合物）を知らない研究者がビデオを解析し、手作業で、又は発作検出ソフトウェア（Ｅｔｈｏｖｉｓｉｏｎ  ＸＴ、Ｎｏｌｄｕｓ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ（ノルダス・インフォメーション・テクノロジー）、リーズバーグ（Ｌｅｅｓｂｕｒｇ）、バージニア州）を使用して行動発作について走査する。
【０１４７】
統計解析。パラメトリックなデータセットについて、スチューデント（Ｓｔｕｄｅｎｔ）ｔ−検定を使用して統計解析を実施する。二値データセット（ＧＴＣＳを呈したマウスの数及び死亡率）を、統計的有意性についてフィッシャーの直接確率検定（Ｆｉｓｈｅｒ  Ｅｘａｃｔ  ｔｅｓｔ）を使用して解析し、他方で、ノンパラメトリックなデータ（ＫＡ発作ステージ）を、マン・ホイットニーの順位和検定（Ｍａｎｎ−Ｗｈｉｔｎｅｙ  Ｒａｎｋ  Ｓｕｍ  ｔｅｓｔ）を使用して解析する。
【０１４８】
以下の例は、本開示の（Ｒ）−鏡像異性体を試験するための他のインビボてんかんモデルを説明する。
【０１４９】
３．２  生物学的例２．  ６Ｈｚ発作試験
このアッセイは、長時間の低周波（６Ｈｚ）刺激によって誘発される精神運動性の発作を試験化合物が遮断する能力を試験し、治療抵抗性部分発作のこの分野で受け容れられたモデルを提供する（Ｂｒｏｗｎら、１９５３  Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒａｐｅｕｔ．  １０７（３）：２７３−２８３；Ｌｅｖｙ  ＲＨ、Ｍａｔｔｓｏｎ  ＲＨ、Ｍｅｌｄｒｕｍ  ＢＳ、Ｐｅｒｕｃｃａ  Ｅ編、Ａｎｔｉｅｐｉｌｅｐｔｉｃ  ｄｒｕｇｓ  第５版、フィラデルフィア：Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ；２００２．  ３６−４８頁のＷｈｉｔｅ  ＨＳ、Ｗｏｏｄｈｅａｄ  ＪＨ、Ｗｉｌｃｏｘ  ＫＳ、Ｇｅｎｅｒａｌ  ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ：ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ａｎｄ  ｐｒｅｃｌｉｎｉｃａｌ  ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｏｆ  ａｎｔｉｅｐｉｌｅｐｔｉｃ  ｄｒｕｇｓ；Ｈａｒｔｍａｎら、２００８  Ｅｐｉｌｅｐｓｉａ  ４９（２）：３３４−３３９）。
【０１５０】
最大電撃痙攣（ＭＥＳ）（Ｓｕｚｕｋｉら、１９９５  Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ  ６４（３）：６６５−６７４；Ｂｏｕｉｌｌｅｒｅｔら、１９９９  Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ  ８９（３）：７１７−７２９；Ｒｉｂａｎら、２００２  Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ  １１２（１）：１０１−１１１）又は皮下メトラゾール（ｓ．ｃ．Ｍｅｔ）（Ｓｗｉｎｙａｒｄ，Ｅ．Ａ．、１９６９  Ｅｐｉｌｅｐｓｉａ  １０（２）：１０７−１１９）試験のいずれかにおいて不活性であると判明したものを含めて本明細書に記載される本発明の（Ｒ）−鏡像異性体等の研究中の化合物（例えば、「試験化合物」）を、角膜電極を通して与える低周波数（６Ｈｚ）の長時間（３秒）の刺激によって誘発される精神運動性の発作を遮断する能力についてスクリーニングする。例えば、レベチラセタムは、１９５０年代初頭にもともと記載された６Ｈｚモデル（Ｔｏｍａｎら、１９５２  Ｔｅｘａｓ  Ｒｅｐｏｒｔｓ  ｏｎ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  １０：９６；Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ｍｏｄｅｌｓ  ｏｆ  Ｅｐｉｌｅｐｓｙ、Ｄ．Ｂ．Ｐｕｒｐｕｒａら編、１９７２、Ｒａｖｅｎ  Ｐｒｅｓｓ：Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ．  ４４３−４５８頁のＳｗｉｎｙｗａｒｄ，Ｅ．Ａ．  Ｅｌｅｃｔｒｉｃａｌｌｙ  ｉｎｄｕｃｅｄ  ｃｏｎｖｕｌｓｉｏｎｓ；Ｅｌｅｃｔｒｉｃａｌｌｙ  Ｉｎｄｕｃｅｄ  Ｃｏｎｖｕｌｓｉｏｎｓ、Ｊ．Ｋ．Ｐ．  Ｄ．Ｐ  Ｐｕｒｐｕｒａ、Ｄ．Ｔｏｗｅｒ、Ｄ．Ｍ．Ｗｏｏｄｂｒｙ、Ｒ．Ｗａｌｔｅｒ編、１９７２、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ：Ｒａｖｅｎ  Ｐｒｅｓｓ、４３３−４３８頁のＳｗｉｎｙａｒｄ，Ｅ．Ａ．、Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ｍｏｄｅｌｓ  ｏｆ  Ｅｐｉｌｅｐｓｙ：Ａ  Ｍａｎｕａｌ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｗｏｒｋｅｒ）において非常に有効である（ＥＤ５０：１９ｍｇ／ｋｇ、ｉ．ｐ．注射の３０分後）が、他方で、レベチラセタムはＭＥＳ試験では有効ではない（Ｂａｒｔｏｎら、２００１  Ｅｐｉｌｅｐｓｙ  Ｒｅｓ．  ４７（３）：２１７−２２７）。さらには、６Ｈｚ試験は、多くのＡＥＤを含めた公知のＮａ＋チャネル遮断薬に対して部分的〜完全な抵抗性を明らかにし、従って、この試験を、候補ＡＥＤについての早期の特定及び差別化スクリーニングとして有用なものにする。それゆえ、この低周波数（６Ｈｚ）の長時間アッセイで有効であると判明した化合物は、治療抵抗性部分発作の治療に有効である可能性がある。
【０１５１】
方法。成体の雄のＣＦ１マウス（１８〜２５ｇ）を、２０〜１００ｍｇ／ｋｇの用量の試験化合物で腹腔内に（ｉ．ｐ．）前処置する。試験化合物を様々な投薬量でｉ．ｐ．投与するときの毒性効果についての前試験スクリーニングで毒性が認められる場合、その用量を明らかな毒性効果を回避するように変更する。各処置群（ｎ＝４〜１６マウス／群）を、試験化合物を用いた処置後の５つの時間点（１／４時間、１／２時間、１時間、２時間、及び４時間）のうちの１以上で抗痙攣効果について調べる。前処理のあと、各マウスは、各眼に投与する一滴の０．５％テトラカイン塩酸塩を受け取る。次いで、このマウスに角膜電極を通して与える低周波数（６Ｈｚ）刺激を３秒間で負荷をかける。この低周波数の長時間刺激を、最初は３２ｍＡの強度で与える。動物を手で拘束し、上記刺激の直後に解放して、発作活性の有無について観察する。試験化合物が３２ｍＡスクリーニングで有効である場合には、刺激電流は４４ｍＡに高められるが他の点では上記と同じプロトコルを使用する追加アッセイを実施する。用量反応研究については、１回の投与あたりｎ＝８のマウスを使用し、特定の刺激強度におけるピーク効果の時間（ＴＰＥ）に用量反応曲線を生成する。
【０１５２】
通常、上記６Ｈｚ刺激は、最小の間代相、及びその後の顎部クローヌス、前肢クローヌス、感覚毛の単収縮、及び／又はストラウブ挙尾を含む常同的な、自動性の行動を特徴とする発作を生じる。そのような行動を示さない動物は、保護されていると考えられる。発作スコアは、研究対象の化合物の有効性のさらなる指標として使用することができる（Ｒａｃｉｎｅ，Ｒ．Ｊ．  １９７２  Ｅｌｅｃｔｒｏｅｎｃｅｐｈａｌｏｇｒ．Ｃｌｉｎ．Ｎｅｕｒｏｐｈｙｓｉｏｌ．  ３２（３）：２８１−２９４）。データをマンホイットニーのＵ検定（Ｍａｎｎ−Ｗｈｉｔｎｅｙ  Ｕ  ｔｅｓｔ）によって解析し、ｐ＜０．０５を統計的に有意であると判定する。各時間点で得たデータについては、経時的に試験した動物の数のうちの保護された動物の総数として結果を表す（例えば２／４は、試験した４匹のマウスから２匹のマウスが保護されたことを表す）。
【０１５３】
抗痙攣効果をもたらす（例えば、２以上の時間点で少なくとも２／４で保護する）試験化合物は、任意に、角膜キンドリングマウス試験（Ｒｏｗｌｅｙ及びＷｈｉｔｅ  ２０１０  Ｅｐｉｌｅｐｓｙ  Ｒｅｓ．  ９２（２−３）：１６３−１６９）、海馬キンドリングラット試験（Ｌｏｔｈｍａｎ，Ｅ．Ｗ．  １９８８  Ｅｐｉｌｅｐｓｙ  Ｒｅｓ．  ２（６）：３６７−３７９）又はラモトリギン耐性扁桃核キンドリングラット試験（Ｓｒｉｖａｓｔａｖａ及びＷｈｉｔｅ  ２０１３  Ｅｐｉｌｅｐｓｙ  Ｒｅｓ．  １０４：２６）を含めた慢性てんかん又は薬理耐性（ｐｈａｒｍａｃｏｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ）の他のモデルにおいて試験する。
【０１５４】
６Ｈｚモデルによって誘発される典型的な発作は、初期の瞬間的な気絶、及びその直後に続く前肢クローヌス、感覚毛の単収縮、及びストラウブ挙尾を示す（Ｂａｒｔｏｎら、２００１）。これらの行動は部分発作を抱えるヒト患者の前兆と類似しているともともと記載されているので、これらの行動は、翻訳関連性を提供する（Ｔｏｍａｎら、１９５２  Ｔｅｘａｓ  Ｒｅｐｏｒｔｓ  ｏｎ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  １０：９６；Ｒｏｍａｎ，Ｊ．Ｅ．Ｐ．、１９５１  Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ  １：４４４）。６Ｈｚ発作は、ベンゾジアゼピン類、スクシンアミド類、バルビツール酸類、バルプロ酸及び発作閾値を上昇させる他のＡＥＤに対して感受性がある（Ｂａｒｔｏｎら、２００１）。
【０１５５】
３．３  生物学的例３．  海馬キンドリングラットモデル
このモデルは、試験化合物の、行動発作を遮断し、かつ／又は焦点発作の海馬キンドリングラットモデルにおいて後発射持続時間（ＡＤＤ）を短くする能力を試験する。このキンドリングモデルは、複雑部分発作を治療することについての試験物質の潜在的な有用性を特定するためのより従来的な抗痙攣試験に対する有用な補助手法であり続けている。海馬キンドリングラットは、二次的に全般性になる焦点発作の実験モデル、例えば、Ｌｏｔｈｍａｎ及び共同研究者ら（Ｌｏｔｈｍａｎ，Ｅ．Ｗ．  １９８８）によって記載された海馬キンドリングモデルを提供する。
【０１５６】
方法。動物を最初に、キンドリング獲得のために外科的に準備する。成体の雄のスプラーグドーリー（Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ）ラット（２７５〜３００ｇ）にバイポーラ電極を外科的に埋め込む（Ｌｏｔｈｍａｎ，Ｅ．Ｗ．  １９８８）。手短に言えば、ケタミン−キシラジン麻酔の下でバイポーラ電極を腹側海馬に定位的に埋め込む（硬膜からＡＰ  −３．６、ＭＬ  −４．９、ＶＤ  −５．０、切歯棒＋５．０）。キンドリングレジメンが始まる前までに、動物を１週間回復させる。この急速海馬キンドリングパラダイムは、これまでに記載されたとおり（Ｌｏｔｈｍａｎ及びＷｉｌｌｉａｍｓｏｎ  １９９４  Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ．  ６４９（１−２）：７１−８４）、反復的な刺激レジメンを１日おきに、全部で５刺激日にわたって与えることからなる。刺激レジメンの間、１ｍｓの二相性の２００μＡパルスの５０Ｈｚ、１０秒継続を３０分毎に６時間の間与え、これにより刺激日１日あたり１２回の刺激を与える。動物が一貫してステージ５行動発作を示すまでキンドリングされると、試験化合物を、十分に発現したキンドリングされた発作及び後発射持続時間を１週間の刺激がない期間の後に修正するその能力について評価する。各キンドリングしたラットは、試験と試験との間に少なくとも５日間放置し、試験後に研究対象の化合物が残っていればそれを「洗い流す」。
【０１５７】
海馬キンドリングラットにおける焦点発作。候補物質を、キンドリング獲得後に、十分にキンドリングされた二次性の全般発作を遮断するその能力について評価する（Ｌｏｔｈｍａｎ，Ｅ．Ｗ．  １９８８）。行動発作スコア（ＢＳＳ）は、以下の基準（Ｒａｃｉｎｅ，Ｒ．Ｊ．  １９７２）に従って等級付けする。
ステージ１  −  口及び顔面のクローヌス
ステージ２  −  ステージ１に点頭痙攣が加わる
ステージ３  −  ステージ２に前肢クローヌスが加わる
ステージ４  −  ステージ３に立ち上がりが加わる
ステージ５  −  ステージ４に反復的な立ち上がり及び転倒が加わる
【０１５８】
以下の試験（「試験１１」、「試験１２」、「試験１３」）について、平均値及びＳ．Ｅ．Ｍ．を後発射持続時間（ＡＤＤ）について算出し、ｐ値は、スチューデントのｔ−検定によって求める。対照群及び処置群からのＢＳＳの有意差は、ノンパラメトリックなマンホイットニーのＵ検定によって求め、ｐ＜０．０５を統計的に有意であると判定する。
【０１５９】
試験１１：神経毒性及び海馬キンドリング焦点発作を遮断する能力の特定．
海馬キンドリングラット試験の準備において、候補ＡＥＤの適切な用量（軽度運動機能障害（ｍｉｎｉｍａｌ  ｍｏｔｏｒ  ｉｍｐａｉｒｍｅｎｔ：ＭＭＩ）を欠く）を決定する。ＭＭＩ研究のために、１つの時間点あたり、２匹のラットの３つの群に３００ｍｇ／ｋｇ、１００ｍｇ／ｋｇ、及び３０ｍｇ／ｋｇの試験化合物を投与し、オープンフィールドで１／４時間、１／２時間、１時間、２時間、及び４時間においてＭＭＩをモニタリングする。ＭＭＩ研究からの結果に基づき、次いで、２匹のキンドリングしたラットに無毒な用量の試験薬物を投与し、薬物投与の１５分、５分、７５分、１０５分、１３５分、１６５分、及び１９５分後にキンドリング刺激を与える。ＢＳＳ及び後発射持続時間に対する処置の効果を記録する。この初期スクリーニングからの結果が、十分に発現したキンドリング発作に対する活性を候補ＡＥＤが保有するということを示唆する場合には、後続の試験（試験１２及び試験１３）については群のサイズを８匹のラットに増やす。
【０１６０】
各時間群について、経時的に試験した動物の数のうちの保護された動物の総数として結果を表す（例えば、２匹のうち２匹が保護された）。抗痙攣効果をもたらす（例えば、２以上の時間点で少なくとも１／２で保護する）試験化合物は、次いで、増やしたｎ（例えば、ｎ＝６〜８）を用いて再スクリーニングにかけることになる。活性な化合物は、次いで、６Ｈｚ試験（上記）及びラモトリギン耐性扁桃核キンドリングラット試験（Ｓｒｉｖａｓｔａｖａ及びＷｈｉｔｅ  ２０１３  Ｅｐｉｌｅｐｓｙ  Ｒｅｓ．  １０４：２６）を含めた薬理耐性の他のモデルの候補となる。
【０１６１】
試験１３：ＢＳＳに基づく候補抗てんかん薬の焦点発作を遮断する能力の数量化．
別個の群のキンドリングしたラット（ｎ＝６〜８）が、試験１１（上記）の結果に基づいて高められた用量の候補ＡＥＤを受ける。次いで、薬物投与の１５分、４５分、７５分、１０５分、１３５分、１６５分、及び１９５分後に、ラットを試験する。各ラットのＢＳＳ及びＡＤＤを記録し、平均及びＳ．Ｅ．Ｍ．を算出する。３以下の発作スコアを示す動物を保護されたと考える。これらのデータを使用して、用量反応曲線及びその後のＥＤ５０を確立する。ＡＤＤの有意な変化も記録する。候補ＡＥＤ（試験薬物）が発作スコア（３以下）及び後発射持続時間（ＡＤＤ）の両方を有意に低下させると認められるときには、用量反応研究を開始する。各用量についてのＢＳＳ及びＡＤＤをピーク効果の時間（ＴＰＥ）に平均し、平均及びＳ．Ｅ．Ｍ．をノンパラメトリックなマンホイットニーのＵ検定により対照値と比較する。候補ＡＥＤの発作重症度を低減する能力を数量化し、ＥＤ５０をプロビット解析によって求める。
【０１６２】
候補ＡＥＤの各用量についてのＢＳＳ及びＡＤＤをＴＰＥにおいて平均し、Ｓ．Ｅ．Ｍ．を算出し、対照値と比較する。候補物質の発作重症度を低減する能力を、保護（ＢＳＳ≦３）を実証するいくつかの用量から集めた結果によって数量化し、ＥＤ５０をプロビット解析によって求める。
【０１６３】
試験  １２：  海馬キンドリングラットにおける後発射閾値に対する効果．
この動物モデルアッセイは、候補抗てんかん薬（ＡＥＤ）が十分にキンドリングしたラットにおいて後発射閾値（ＡＤＴ）を上昇させる能力を評価する。初期の刺激を２０μＡの強度で行う。刺激強度は、後発射が誘発されるまで１〜２分毎に１０μＡの増分で高める。事前薬物閾値の決定から１５分後、試験薬物の単回投与を２匹の動物の各々に投与する。次いで、個々のラットの各々について薬物投与後の様々な時間、例えば、１／４時間、１時間、２時間、及び４時間でＡＤＴを再度決定する。試験した時間点の各々においてＢＳＳ及びＡＤＤの両方を記録する。発作スコア及びＡＤＤもＡＤＴにおいて記録する。行動発作は、上記の基準（Ｒａｃｉｎｅ，Ｒ．Ｊ．  １９７２）に従ってスコア付けする。個々の発作スコア、ＡＤＤ、及びＡＤＴを記録する。推定上のＡＥＤ活性を呈する候補（試験）薬物の場合には、４匹以上の動物を使用し、次いで、結果を平均し、群の平均及びＳ．Ｅ．Ｍ．を算出する。
【０１６４】
３．４  生物学的例４．  化学痙攣薬モデル
このモデルは、公知の化学痙攣薬、ビククリン及びピクロトキシンの効果に対する候補ＡＥＤの効果を評価する。この分野で受け容れられた動物モデルでは、発作をＧＡＢＡ  Ａ受容体（ＧＡＢＡＡ）アンタゴニスト、ビククリン（ＢＩＣ）、及びＧＡＢＡＡクロライドチャネル遮断薬、ピクロトキシン（ＰＩＣ）によって誘発する（例えば、Ｗｈｉｔｅら、２０１２  Ｅｐｉｌｅｐｓｉａ  ５３（１）：１３４−１４６；Ｓｈｉｈら、２００１  Ｔｏｘｉｃｏｌ．  １６２（１）：３５−４２；Ｗｈｉｔｅら、１９９７  Ｅｐｉｌｅｐｓｙ  Ｒｅｓ．  ２８：１６７；Ｓｗｉｎｙａｒｄら、１９９３  Ｅｐｉｌｅｐｓｙ  Ｒｅｓ．  １５（１）：３５−４５；Ｃｏｌｅｍａｎら、１９８５  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉ．  ３７（８）：７４９−７５５；Ｗｏｏｄ，Ｊ．Ｄ．  １９７５  Ｐｒｏｇ．Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ．  ５：７７−９５；Ｓｎｏｄｇｒａｓｓ，Ｓ．Ｒ．  １９９２  Ｊ．Ｃｈｉｌｄ  Ｎｅｕｒｏｌ．  ７（１）：７７−８６；Ｎｅｗｌａｎｄ及びＣｕｌｌ−Ｃａｎｄｙ  １９９２  Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．  ４４７（１）：１９１−２１３を参照）。
【０１６５】
方法。初期の研究では、ＢＩＣ（２．７ｍｇ／ｋｇ）又はＰＩＣ（２．５ｍｇ／ｋｇ）のいずれかの皮下（ｓ．ｃ．）注射によって発生した間代発作を予防する試験薬物（候補ＡＥＤ）の能力を評価するために、試験薬物（候補ＡＥＤ）を、好適なビヒクル中の種々の投薬量で実験用マウスに投与し、対照群は、ビヒクル及びＢＩＣ若しくはＰＩＣのいずれか、又はビヒクルのみを受ける。ＢＩＣの投与後、ＣＦ１マウスを隔離ケージに入れ、発作の有無について３０分間観察する。ＰＩＣを受けたマウスは、この痙攣薬のよりゆっくりの吸収のため、４５分間観察する。ＢＩＣ及びＰＩＣによって誘発される発作は、通常、前肢及び後肢、顎部及び感覚毛の間代痙攣の出現からなる。ＢＩＣ誘発の間代発作の後には、一般に、後肢の強直性伸展及び死亡が起こる。
【０１６６】
初期の研究において間代発作を予防するか、間代発作の発症を遅らせるか、又は間代発作の重症度を低減する能力を呈した投薬量の候補ＡＥＤ化合物について、活性を８匹の動物のフォローアップ群において数量化し、試験化合物のＥＤ５０及び９５％信頼区間をプロビット解析によって求める。
【０１６７】
３．５  生物学的例５．  ゼブラフィッシュモデル
このモデルは、インタクトな脊椎動物生物におけるＡＥＤ効果の行動学的及び電気生理学的な特性解析のための、変異体ゼブラフィッシュ（ダニオ・レリオ（Ｄａｎｉｏ  ｒｅｒｉｏ））を用いるこの分野で受け容れられたモデルにおいてインビボで候補ＡＥＤの効果を評価する（Ｄｉｎｄａｙら、２０１５  ＥＮＥＵＲＯ  ２（４）  ｅ００６８−１５．２０１５  １−１９）。神経細胞の電位依存性ナトリウムチャネルｓｃｎ１Ｌａｂにおける変異についてホモ接合性であるゼブラフィッシュは、発作、早期致死、及びいくつかのＡＥＤに対する抵抗性を特徴とするドラベ症候群様の表現型を再現する。ホモ接合性の変異体ｓｃｎ１Ｌａｂゼブラフィッシュは、記載されている（Ｄｉｎｄａｙら、２０１５）ようにして飼育し選択する。
【０１６８】
発作モニタリング。ゼブラフィッシュの行動に対する候補ＡＥＤ効果の評価のために、単一のホモ接合性変異体ｓｃｎ１Ｌａｂの稚魚（受精後５〜６日）を、平底９６穴プレートの個々のウェルの中で、１〜５００μＭ（例えば、１００μＭ）の候補ＡＥＤの不存在下又は存在下でメチレンブルーを含有する「胚培地（ｅｍｂｒｙｏ  ｍｅｄｉｕｍ）」（Ｄｉｎｄａｙら、２０１５）に入れ、記載された（同書）ように移動運動プロッティングソフトウェアを備える動き検出ビデオ設備を使用して、泳ぐ活動についてモニタリングする。活動を、ゼロ（泳ぐ活動がほとんどないかまったくない）、ステージＩ（短時間の泳ぐ活動の出現）、ステージＩＩ（円を描く迅速な泳ぎ）、又はステージＩＩＩ（短時間の姿勢の維持不能を伴う発作的な全身痙攣）の尺度で等級付けする。毒性なしに活性レベルをステージＩＩ又はステージＩＩＩからステージゼロ又はステージＩへ下げる候補ＡＥＤは、電気生理学的なフォローアップのための有望な抗発作活性を有すると考えられる。
【０１６９】
電気生理学。電気生理学的測定は、記載される（Ｄｉｎｄａｙら、２０１５）ように、上記泳ぐ活動試験の少なくとも２回の独立の試行において毒性なしに見かけのＡＥＤ抗発作活性が認められる同じ生物から構成される。手短に言えば、ゼブラフィッシュをα−ブンガロトキシン（１ｍｇ／ｍｌ）を用いて一過性に麻痺させ、１．２％アガロースに固定し、そして、記載される（同書）ように、候補ＡＥＤの不存在下又は存在下で電気記録によるてんかん型発射活性を評価するために、所望の特定の前脳構造（例えば、終脳、視蓋など）を脳波記録のための局所電場電極と接触させる。
【０１７０】
生物学的例６．  インビボでの６Ｈｚ発作試験における抗痙攣効果
この例では、６Ｈｚ発作試験を使用してマウスにおいて候補ＡＥＤのインビボ抗痙攣効果を試験した。この６Ｈｚ発作試験は、候補ＡＥＤの投与の１時間後である時間点でのデータ収集を含めてここで提示するわずかの変更を加えて、実質的に生物学的例２に上記したとおりに実施した。
【０１７１】
材料及び方法
化合物：候補ＡＥＤ化合物は、特に注記しない限り上記のとおり調製し、以下のとおりであった。
ラセミのフェンフルラミン（［ｒａｃ］−フェンフルラミン塩酸塩）；
（Ｒ）−フェンフルラミン（［Ｒ］−（−）−フェンフルラミン塩酸塩）；
ラセミのノルフェンフルラミン（［ｒａｃ］−ノルフェンフルラミン）は、Ｔｏｒｏｎｔｏ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ、ノースヨーク、オンタリオ州、カナダから購入した；
（Ｒ）−ノルフェンフルラミン（［Ｒ］−（−）−ノルフェンフルラミン。
【０１７２】
動物：成体の雄のＣＦ−１アルビノマウス（２５〜３５ｇ）は、Ｈａｒｌａｎ−Ｅｎｖｉｇｏ（ハーラン・エンヴィゴ）（イースト・ミルストーン（Ｅａｓｔ  Ｍｉｌｌｓｔｏｎｅ）、ニュージャージー州）から購入した。これらのマウスは、１ケージあたり４匹で収容し、この実験全体にわたって、濾過水及び食餌を自由に摂らせた。
【０１７３】
化合物の調製及び投与：すべての４種の化合物を無菌の食塩水溶液（０．９％  ＮａＣｌ）に溶解した。アッセイの１時間前に、化合物を、１０ｍｌ／ｋｇ体積で腹腔内（ＩＰ）注射によって動物（各処置群において１６匹のマウス）に投与した。対照動物は、ビヒクル（食塩水）のみを受けた。
【０１７４】
６Ｈｚアッセイ：候補ＡＥＤ化合物を、角膜電極を通して与える低周波数（６Ｈｚ）の交流（４４ｍＡ）の長時間（３秒）の刺激によって誘発する精神運動性の発作を、試験動物への投与の１時間後に遮断する能力についてスクリーニングした。これらの発作は、ヒトにおいて認められる部分発作をモデル化すると考えられる。電流を与える前に一滴の０．５％  Ａｌｃａｉｎｅ溶液を各動物の眼の角膜に差した。その後、制御した電力供給装置（Ｍｏｄｅｌ  ５７８００  Ｅｌｅｃｔｒｏ−Ｃｏｎｖｕｌｓｉｖｅ  Ｔｈｅｒａｐｙ  Ｕｎｉｔ、Ｕｇｏ  Ｂａｓｉｌｅ  Ｓｒｌ（ウゴ・バジレ）、ジェモーニオ（Ｇｅｍｏｎｉｏ）、イタリア）に接続した電極をこの動物の眼に優しく置き、フットペダル式のアクチュエータを使用して３秒間の電流パルス（６Ｈｚ、４４ｍＡ）のスイッチを入れることにより、電気ショックを開始した。この動物を手で拘束し、電気ショックが届き、発作が始まると、優しく解放した。典型的には、発作は、初期の瞬間的な気絶、及びその直後に続く、少なくとも１秒継続する顎部クローヌス、前肢クローヌス、感覚毛の単収縮、及びストラウブ挙尾を特徴とした。この行動を示さない動物を「保護された」と考えた。
【０１７５】
薬理学的な分布及び生物分析。６Ｈｚアッセイでの発作行動の特性解析の直後に、動物を人道的に屠殺し、脳及び血漿試料を、これらの組織区画への投与された化合物の分布を分析するために回収した。
【０１７６】
脳試料の均質化。予め重量測定したマウス脳全体を解凍し、１ｍＬの脱イオン水及び１ｍＬのアセトニトリルを、脳組織を含む各試料バイアルに加えた。この試料を、手持ち式のＯｍｎｉ（商標）ＴＨホモジナイザー（Ｏｍｎｉ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ（オムニ・インターナショナル）、ケネソー（Ｋｅｎｎｅｓａｗ）、ジョージア州、米国）を使用して、均一なスラリーが得られるまで、ホモジナイズした。このスラリーの１ｍＬのアリコート（小分け量）を清浄な１．５ｍＬのプラスチック製エッペンドルフ（ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ）チューブに移し、このチューブを１３，０００ｒｐｍ（１５，８７１×ｇ）で２０分間遠心分離した。上清を集め、清浄なラベル付きプラスチック製エッペンドルフバイアル中で−８０℃で保存した。
【０１７７】
マウスの血漿及び脳ホモジネート試料調製。マウスの脳ホモジネート及びマウスの血漿試料、並びに検量用標品及び対照（「ブランク」）の未処置のマウス血漿から調製したＱＣ試料を、タンパク質沈殿によって抽出した。手短に言えば、５０μＬの各脳ホモジネート及びマウス血漿試料（並びに各検量用標品、ＱＣ試料及びブランクマウス血漿試料）を５０μＬの内部標準溶液［脱イオン水／アセトニトリル（１：１  ｖ／ｖ）中の（Ｓ）−５−（（１−ベンジルピロリジン−３−イル）（メチル）アミノ）−６−メチル−Ｎ−（チアゾール−４−イル）ピリジン−２−スルホンアミドの２，５００ｎｇ／ｍＬ溶液］と混合し、続いて、水中の５０μＬの６％（ｖ／ｖ）リン酸を添加した。これに続いて２００μＬのアセトニトリルを加えた。これらの試料を３０秒間ボルテックスにかけ、次いで１３，０００ｒｐｍ（１５，８７１×ｇ）で２０分間遠心分離した。上清をアセトニトリル：水（１：１  ｖ／ｖ）でさらに４倍に希釈し、分析の前に９６穴プレートに移した。検量用及びＱＣ試料を、低ＱＣ（１４ｎｇ／ｍＬ）、中間ＱＣ（２２５ｎｇ／ｍＬ）、及び高ＱＣ（３６００ｎｇ／ｍＬ）を含めて、ＱＣ試料を用いてブランクＫ２ＥＤＴＡマウス血漿中で２．３ｎｇ／ｍＬ〜４８００ｎｇ／ｍＬの濃度範囲で調製した。
【０１７８】
ＵＨＰＬＣ−ＥＳＩ−ＭＳ／ＭＳ分析。次いで、試料を、Ｓｈｉｍａｄｚｕ  Ｎｅｘｅｒａ（商標）ＵＨＰＬＣポンプ、カラムコンパートメント及びオートサンプラー（Ｓｈｉｍａｄｚｕ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ，Ｉｎｃ．（シマヅ・サイエンティフィック・インスツルメンツ）、コロンビア（Ｃｏｌｕｍｂｉａ）、メリーランド州、米国）を備えるＳｃｉｅｘ（商標）  ＴＱ−５５００（ＡＢ  Ｓｃｉｅｘ（商標）  ＬＰ、コンコード（Ｃｏｎｃｏｒｄ）、オンタリオ州、カナダ）質量分析計を使用し、８０％水（Ａ）／２０％アセトニトリル（Ｂ）（両方の溶媒は０．１％ギ酸を含有する）で開始する二相系勾配溶出を使用して、超高速液体クロマトグラフィー／エレクトロスプレーイオン化タンデム質量分析（ＵＨＰＬＣ−ＥＳＩ  ＭＳ／ＭＳ）により分析した。０．６分後、移動相Ｂを１分間までに線形的に１００％に増やし、溶出を１．５分まで１００％移動相Ｂで維持し、次いで８０％移動相Ａ及び２０％移動相Ｂという最初の割合で再平衡に至らせ、全実行時間は２．５分であり、流量は０．４ｍＬ／分であった。使用したカラムは、ＡＣＥ  Ｅｘｃｅｌ（商標）  ２  Ｃ１８−ＰＦＰ（内径２．１ｍｍ×長さ５．０ｍｍ、２μｍ粒子サイズ）（Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  Ｌｔｄ（アドバンスト・クロマトグラフィー・テクノロジーズ）、アバディーン（Ａｂｅｒｄｅｅｎ）、スコットランド）であった。被分析物及び内部標準は、正イオンモードでエレクトロスプレーによりイオン化し、表１に列挙する移行を使用する多重反応モニタリング（ＭＲＭ）によって検出した。
【０１７９】
【表１】
2021530541.tif 000014
【０１８０】
結果。動物をランダムにビヒクル群（ｎ＝１６）又は異なる用量の群（１用量あたりｎ＝１６）に割り当て、処置条件を知らない実験者によって上記６Ｈｚアッセイを実施した。（ｒａｃ）−フェンフルラミン及び（Ｒ）−フェンフルラミンは、２０ｍｇ／ｋｇで動物に投与したとき、ともに、精神運動性の発作に対して保護されるマウスの百分率において同様の傾向を示した（図１）。（ｒａｃ）−フェンフルラミンによって保護された動物の百分率は３７．５％（フィッシャーの直接確率検定よるとｐ＝０．０１８）であり、（Ｒ）−フェンフルラミンによって保護された動物の百分率は３１．３％（ｐ＝０．０４３）であり、ビヒクルのみ（対照）によって保護された動物の百分率は０％であった。同様に、２０ｍｇ／ｋｇで（ｒａｃ）−ノルフェンフルラミン及び（Ｒ）−ノルフェンフルラミンを動物に投与したところ、精神運動性の発作に対する同様の保護レベルが示された（図１）。（ｒａｃ）−ノルフェンフルラミンによって保護された動物の百分率は５０％（フィッシャーの直接確率検定によるとｐ＝０．００２）であり、（Ｒ）−ノルフェンフルラミンによって保護された動物の百分率は２０％（ｐ＝０．００２）であり、ビヒクルのみ（対照）によって保護された動物の百分率は０％であった。
【０１８１】
６Ｈｚアッセイにおける有効性試験の直後のマウスから採取した脳及び血漿の試料のＵＨＰＬＣ−ＥＳＩ−ＭＳ／ＭＳ分析から、投与した化合物の以下の脳及び血漿中の総濃度が明らかになった（表２）。
【０１８２】
【表２】
2021530541.tif 000015
【０１８３】
要約すれば、６Ｈｚアッセイにおいて、フェンフルラミン及びノルフェンフルラミンはともに、６Ｈｚ精神運動性のてんかん発作アッセイにおいて発作に対する保護活性を呈した。フェンフルラミン及びノルフェンフルラミンの（Ｒ）−鏡像異性体は、６Ｈｚアッセイにおいて、フェンフルラミン及びノルフェンフルラミンのラセミの調製物と比較して、同様のレベルの発作保護をもたらした。
【０１８４】
３．７  生物学的例７．  聴原発作試験における（Ｒ／Ｓ）−フェンフルラミン及び（Ｒ）−フェンフルラミンの抗痙攣効果
ＤＢＡ／２は、ａｓｐ２変異に起因して聴原発作を起こしやすい、広く使用される近交系のマウスである。ＤＢＡ／２系統のマウスのほぼ１００％が聴原発作に対する齢依存的な易罹患性を経験し、野性的な疾走、その後の間代痙攣及び強直性伸展を呈して、多くの場合、高強度の音に曝露されたときに呼吸停止及び死亡に至る（ＤｅＳａｒｒｏら、２０１７  Ｅｐｉｌｅｐｓｙ  Ｂｅｈａｖ．  ７１：１６５−１７３）。本研究の目的は、ＤＢＡ／２マウスにおいて（Ｒ／Ｓ）−フェンフルラミンの抗痙攣活性を評価して、それを（Ｒ）−フェンフルラミンと比較することであった。
【０１８５】
方法は、Ｄｕｒｍｕｌｌｅｒら、Ｎｅｕｒｏｒｅｐｏｒｔ  ４（６）：６８３−６８６によって記載されている方法に従う。マウス（ＤＢＡ／２、３〜４週齢）を準備室から隣接する実験室へと（３〜５分間隔で）個別に移し、電気ベル（１１０〜１２０ｄＢ）を備えるＰｌｅｘｉｇｌａｓ（商標）広口瓶（直径＝４０ｃｍ；高さ＝３５ｃｍ）の中に入れた。ベルを作動させた際に、野性的な疾走発作、間代発作及び強直発作に対する発生率及び潜時を測定した。死亡数も記録した。聴原性応答スコアを各マウスに、０（発作なし）、１（野性的な疾走）、２（間代痙攣）、３（強直性伸展）、又は４（死亡）として割り当てた。ベルは、強直発作が起こるまでか、又は最長６０秒間作動させた。一群あたり１０匹のマウスを検討した。この試験は盲検方式で実施した。すべての試験化合物は０．９％食塩水（ビヒクル）に溶解させ、１０ｍＬ／ｋｇの用量体積で腹腔内（ＩＰ）注射により投与した。ビヒクル単独、（Ｒ／Ｓ）−フェンフルラミン（１５ｍｇ／ｋｇ又は３０ｍｇ／ｋｇ）又は（Ｒ）−フェンフルラミン（３０ｍｇ／ｋｇ）を発作誘発の６０分前に投与した。陽性参照化合物（バルプロ酸；１８０ｍｇ／ｋｇ）を発作誘発の３０分前に投与した。
【０１８６】
図２及び表３は、雄のＤＢＡ／２マウス（ｎ＝１０／群）を利用したマウス聴原発作試験における（Ｒ／Ｓ）−フェンフルラミン及び（Ｒ）−フェンフルラミンの抗痙攣効果の結果を示す。
【０１８７】
ビヒクル対照では、すべてのＤＢＡ／２マウスが野性的な疾走、その後の間代痙攣及び強直痙攣を示した。ベルを起動させた後２．８±０．４〜８．１±０．８秒という平均潜時で痙攣症状が認められた。１０匹の試験したマウスのうち２匹のマウスが死亡した。全体の聴原性応答スコアは３．２±０．１３であった。（Ｒ／Ｓ）−フェンフルラミン（１５ｍｇ／ｋｇ及び３０ｍｇ／ｋｇ）は、間代痙攣（それぞれ−４０％及び−９０％）及び強直痙攣（各用量について−１００％）を示すマウスの数を用量依存的に減少させ、間代痙攣（それぞれ＋４４１％及び＋８５３％）及び強直痙攣（各用量について＋６４１％）までの潜時を上昇させた。全体の聴原性応答スコアは、１５ｍｇ／ｋｇ及び３０ｍｇ／ｋｇでそれぞれ５０％及び７２％低下した。（Ｒ）−フェンフルラミン（３０ｍｇ／ｋｇ）は、間代痙攣（−４０％）、十分に抑制された強直痙攣（−１００％）を示すマウスの数を減少させ、間代痙攣及び強直痙攣（それぞれ＋４５０％及び＋６４１％）までの潜時を上昇させた。全体の聴原性応答スコアは５０％低下した。
【０１８８】
これらの結果は、ＤＢＡ／２マウスでの聴原発作試験における１５ｍｇ／ｋｇ及び３０ｍｇ／ｋｇの（Ｒ／Ｓ）−フェンフルラミン並びに３０ｍｇ／ｋｇの（Ｒ）−フェンフルラミンについての明確な抗痙攣活性を実証する。抗痙攣効果の大きさは、１５ｍｇ／ｋｇの（Ｒ／Ｓ）−フェンフルラミンと３０ｍｇ／ｋｇの（Ｒ）−フェンフルラミンとの間で同等であった。
【０１８９】
【表３】
2021530541.tif 000016
【０１９０】
２０１８年７月２７日出願の米国仮出願第６２／７１１，０５１号を含め、本明細書中で参照される米国特許、米国特許出願公開、米国特許出願、外国特許、外国特許出願及び非特許刊行物のすべては、参照によりその全体を本明細書に援用したものとする。
【０１９１】
上記の化合物、組成物、方法、及び使用が、理解を容易にするためにいくらか詳細に記載されたが、添付の特許請求の範囲の射程内で特定の変更及び改変が実施されてもよいということは明らかである。従って、記載された実施形態は、説明のためのものであり限定するものではないと解釈されるべきであり、請求項に係る発明は、本明細書中に与えられた詳細に限定されず、添付の請求項の射程及び均等物の範囲内で改変されてもよい。
【図１】
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【図２】
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【国際調査報告】
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