(57)【要約】  本開示は、組換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）粒子および製剤を含む、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）粒子およびＡＡＶ製剤の生産に使用するための方法および系を記載する。ある特定の実施形態では、本開示は、ＡＡＶ粒子およびＡＡＶ製剤を清澄化、精製、製剤化、濾過、および処理するための方法および系を提示する。また、本開示は、ハンチンチン（ＨＴＴ）遺伝子（例えば、野生型または突然変異型ＣＡＧ伸長ＨＴＴ遺伝子）を標的とする調節性ポリヌクレオチド、例えば低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）分子をコードするポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子を設計、調製、製造、使用、および／または製剤化するための組成物、方法、およびプロセスを記載する。調節性ポリヌクレオチドを含む製剤化ＡＡＶ粒子を使用して神経変性疾患（例えば、ハンチントン病（ＨＤ））を有する対象のＨＴＴ遺伝子発現を阻害するための方法も開示される。
2021530548.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）粒子を含む医薬製剤を生産する方法であって、
ＡＡＶ粒子をバイオリアクター内の１つまたは複数のウイルス産生細胞（ＶＰＣ）において産生し、それにより前記ＡＡＶ粒子および液体培地を含むウイルス産生プールを準備する工程、
前記ウイルス産生プールを、化学的溶解、清澄化濾過、親和性クロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、接線流濾過（ＴＦＦ）、およびウイルス保持濾過から選択される１つまたは複数の工程により処理する工程、ならびに
前記ウイルス産生プールに由来する前記ＡＡＶ粒子を医薬製剤へと組み込む工程であって、前記医薬製剤は、前記ＡＡＶ粒子および少なくとも１つの医薬賦形剤を含む工程
を含む方法。
【請求項２】
前記ＶＰＣは、Ｓｆ９昆虫細胞を含み、前記ＡＡＶ粒子は、バキュロウイルス産生系を使用して産生される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記ウイルス産生プールを前記バイオリアクターから収集する工程であって、前記ウイルス産生プールは、前記１つまたは複数のＶＰＣを含み、前記ＡＡＶ粒子は、前記ＶＰＣ内に含有されている工程、および
前記ウイルス産生プール内の前記ＶＰＣを、化学的溶解条件下で化学的溶解溶液を使用して化学的溶解に曝露する工程であって、前記化学的溶解は、前記ＡＡＶ粒子を前記ＶＰＣから前記ウイルス産生プールの前記液体培地へと放出する工程
を含む、請求項１または請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記化学的溶解溶液は、アルギニンまたはアルギニン塩から選択される安定化添加剤を含む、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記安定化添加剤の濃度は、０．１〜０．５Ｍである、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
前記安定化添加剤の濃度は、０．２〜０．３Ｍである、請求項４に記載の方法。
【請求項７】
前記化学的溶解溶液は、Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００を含まない、請求項３〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８】
前記化学的溶解溶液は、ラウリルジメチルアミンＮ−オキシド（ＬＤＡＯ）；Ｎ，Ｎ−ジメチル−Ｎ−ドデシルグリシンベタイン（Ｅｍｐｉｇｅｎ  ＢＢ）；３−（Ｎ，Ｎ−ジメチルミリスチルアンモニオ）プロパンスルホネート（Ｚｗｉｔｔｅｒｇｅｎｔ  ３−１０）；ｎ−ドデシル−Ｎ，Ｎ−ジメチル−３−アンモニオ−１−プロパンスルホネート（Ｚｗｉｔｔｅｒｇｅｎｔ  ３−１２）；ｎ−テトラデシル−Ｎ，Ｎ−ジメチル−３−アンモニオ−１−プロパンスルホネート（Ｚｗｉｔｔｅｒｇｅｎｔ  ３−１４）；３−（Ｎ，Ｎ−ジメチルパルミチルアンモニオ）プロパンスルホネート（Ｚｗｉｔｔｅｒｇｅｎｔ  ３−１６）；３−（（３−コラミドプロピル）ジメチルアンモニオ）−１−プロパンスルホネート（ＣＨＡＰＳ）；または３−（［３−コラミドプロピル］ジメチルアンモニオ）−２−ヒドロキシ−１−プロパンスルホネート（ＣＨＡＰＳＯ）から選択される双性イオン性界面活性剤を含む、請求項３〜７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９】
前記化学的溶解溶液は、ラウリルジメチルアミンＮ−オキシド（ＬＤＡＯ）を含む、請求項３〜７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
前記化学的溶解溶液は、Ｎ，Ｎ−ジメチル−Ｎ−ドデシルグリシンベタイン（Ｅｍｐｉｇｅｎ  ＢＢ）を含む、請求項３〜７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１】
前記ウイルス産生プールが１つまたは複数の清澄化濾過系により処理される１つまたは複数の清澄化濾過工程を含む、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１２】
前記１つまたは複数の清澄化濾過系は、深層濾過系を含む、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記深層濾過系は、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ  Ｍｉｌｌｉｓｔａｋ  Ｄ０ＨＣメディアシリーズフィルターを含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記深層濾過系は、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ  Ｍｉｌｌｉｓｔａｋ  Ｃ０ＳＰメディアシリーズフィルターを含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項１５】
前記１つまたは複数の清澄化濾過系は、０．２μｍ精密濾過系を含む、請求項１１〜１４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１６】
前記ウイルス産生プールが１つまたは複数の親和性クロマトグラフィー系により処理される１つまたは複数の親和性クロマトグラフィー工程を含む、請求項１〜１５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１７】
前記ウイルス産生プールを、結合−溶出モードの１つまたは複数の免疫親和性クロマトグラフィー系により処理する工程を含み、前記免疫親和性クロマトグラフィー系は、１つまたは複数のＡＡＶカプシドバリアントに結合することが可能な１つまたは複数の組換え単鎖抗体を含む、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記免疫親和性クロマトグラフィー系は、再生溶液を使用して再生され、前記再生溶液は、１〜３Ｍのグアニジンまたはグアニジン塩を含む、請求項１６または請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記免疫親和性クロマトグラフィー系は、２ＭグアニジンＨＣｌを含む再生溶液を使用して再生される、請求項１６または請求項１７に記載の方法。
【請求項２０】
前記ウイルス産生プールが１つまたは複数のイオン交換クロマトグラフィー系により処理される１つまたは複数のイオン交換クロマトグラフィー工程を含む、請求項１〜１９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２１】
前記ウイルス産生プールを、フロースルーモードの１つまたは複数の陰イオン交換クロマトグラフィー系により処理する工程を含み、前記陰イオン交換クロマトグラフィー系は、非ウイルス不純物、非ＡＡＶウイルス粒子、またはそれらの組合せに結合する固定相を含み、前記陰イオン交換クロマトグラフィー系の前記固定相は、ＡＡＶ粒子に結合しない、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記陰イオン交換クロマトグラフィー系の前記固定相は、第四級アミン官能基を含む、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
前記陰イオン交換クロマトグラフィー系の前記固定相は、トリメチルアンモニウムエチル（ＴＭＡＥ）官能基を含む、請求項２１に記載の方法。
【請求項２４】
前記ウイルス産生プールが１つまたは複数の接線流濾過（ＴＦＦ）系により処理される１つまたは複数の接線流濾過（ＴＦＦ）工程を含む、請求項１〜２３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２５】
前記ＴＦＦ系は、再生セルロースカセットを含むフラットシートフィルターを含む、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
前記ＴＦＦ系は、５．５〜６．５ＰＳＩの膜間圧力（ＴＭＰ）、および５．５〜６．５Ｌ／分／ｍ２の標的クロスフローで稼動される、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
前記１つまたは複数のＴＦＦ工程の前に、５０％スクロース混合物が前記ウイルス産生プールに添加され、前記５０％スクロース混合物は、９〜１３ｖ／ｖ％の濃度で前記ウイルス産生プールに添加される、請求項２４〜２６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２８】
前記１つまたは複数のＴＦＦ工程は、前記ウイルス産生プールの前記液体培地の少なくとも一部分が、低スクロースダイアフィルトレーション緩衝液で置き換えられる第１のダイアフィルトレーション工程を含み、前記低スクロースダイアフィルトレーション緩衝液は、４〜６ｗ／ｖ％の糖または糖代替物および１５０〜２５０ｍＭのアルカリ塩化物塩を含む、請求項２４〜２７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２９】
前記低スクロースダイアフィルトレーション緩衝液は、４．５〜５．５ｗ／ｖ％のスクロースおよび２１０〜２３０ｍＭの塩化ナトリウムを含む、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
前記低スクロースダイアフィルトレーション緩衝液は、５ｗ／ｖ％のスクロースおよび２２０ｍＭの塩化ナトリウムを含む、請求項２８に記載の方法。
【請求項３１】
前記１つまたは複数のＴＦＦ工程は、限外濾過濃縮工程を含み、前記ウイルス産生プール中の前記ＡＡＶ粒子は、１．０×１０１２〜５．０×１０１３ｖｇ／ｍＬに濃縮される、請求項２４〜３０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３２】
前記ウイルス産生プール中の前記ＡＡＶ粒子は、１．０〜５．０×１０１３ｖｇ／ｍＬに濃縮される、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
前記ウイルス産生プール中の前記ＡＡＶ粒子は、２．７×１０１３ｖｇ／ｍＬに濃縮される、請求項３１に記載の方法。
【請求項３４】
前記１つまたは複数のＴＦＦ工程は、前記ウイルス産生プールの前記液体培地の少なくとも一部分が、高スクロース製剤緩衝液で置き換えられる最終ダイアフィルトレーション工程を含み、前記高スクロース製剤緩衝液は、６〜８ｗ／ｖ％の糖または糖代替物および９０〜１００ｍＭのアルカリ塩化物塩を含む、請求項２４〜３３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３５】
前記高スクロース製剤緩衝液は、７ｗ／ｖ％のスクロースおよび９０〜１００ｍＭの塩化ナトリウムを含む、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
前記高スクロース製剤緩衝液は、７ｗ／ｖ％のスクロース、１０ｍＭのリン酸ナトリウム、９５〜１００ｍＭの塩化ナトリウム、および０．００１％（ｗ／ｖ）ポロキサマー１８８を含む、請求項３４に記載の方法。
【請求項３７】
前記ウイルス産生プールが１つまたは複数のウイルス保持濾過（ＶＲＦ）系により処理される１つまたは複数のウイルス保持濾過（ＶＲＦ）工程を含む、請求項１〜３６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３８】
前記ＶＲＦ系は、３５ｎｍ以上の大きさの粒子を保持する濾材を含む、請求項３７に記載の方法。
【請求項３９】
前記ＶＲＦ系は、２０ｎｍ以上の大きさの粒子を保持する濾材を含む、請求項３７に記載の方法。
【請求項４０】
遺伝子治療製品を生産する方法であって、（ｉ）ＡＡＶ粒子を含む医薬製剤を準備する工程であって、前記医薬製剤は、請求項１〜３９のいずれか１項に記載の方法により生産される工程、および（ｉｉ）前記医薬製剤を製剤容器へと適切にアリコートする工程を含む方法。
【請求項４１】
（ｉ）５×１０１３ｖｇ／ｍｌ未満の濃度のＡＡＶ粒子、（ｉｉ）１つまたは複数の塩、（ｉｉｉ）１つまたは複数の糖または糖代替物、および（ｉｖ）１つまたは複数の緩衝剤を含む医薬製剤であって、水性製剤である医薬製剤。
【請求項４２】
１．０×１０１２〜５．０×１０１３ｖｇ／ｍＬの濃度のＡＡＶ粒子を含む、請求項４１に記載の医薬製剤。
【請求項４３】
１．０〜５．０×１０１３ｖｇ／ｍＬの濃度のＡＡＶ粒子を含む、請求項４１に記載の医薬製剤。
【請求項４４】
２．７×１０１３ｖｇ／ｍＬの濃度のＡＡＶ粒子を含む、請求項４１に記載の医薬製剤。
【請求項４５】
前記製剤の前記１つまたは複数の塩は、塩化ナトリウムを含む、請求項４１〜４４のいずれか１項に記載の医薬製剤。
【請求項４６】
前記製剤中の塩化ナトリウムの濃度は、８０〜２２０ｍＭである、請求項４５に記載の医薬製剤。
【請求項４７】
前記製剤中の塩化ナトリウムの濃度は、８５〜１１０ｍＭである、請求項４５に記載の医薬製剤。
【請求項４８】
前記製剤中の塩化ナトリウムの濃度は、９５ｍＭである、請求項４５に記載の医薬製剤。
【請求項４９】
前記製剤中の塩化ナトリウムの濃度は、１００ｍＭである、請求項４５に記載の医薬製剤。
【請求項５０】
前記製剤の前記１つまたは複数の塩は、塩化カリウムを含む、請求項４１〜４９のいずれか１項に記載の医薬製剤。
【請求項５１】
前記製剤中の塩化カリウムの濃度は、０〜１０ｍＭである、請求項５０に記載の医薬製剤。
【請求項５２】
前記製剤中の塩化カリウムの濃度は、１〜３ｍＭである、請求項５０に記載の医薬製剤。
【請求項５３】
前記製剤中の塩化カリウムの濃度は、１〜２ｍＭである、請求項５０に記載の医薬製剤。
【請求項５４】
前記製剤中の塩化カリウムの濃度は、１．５ｍＭである、請求項５０に記載の医薬製剤。
【請求項５５】
前記製剤の前記１つまたは複数の塩は、リン酸カリウムを含む、請求項４１〜５４のいずれか１項に記載の医薬製剤。
【請求項５６】
前記製剤中のリン酸カリウムの濃度は、０〜１０ｍＭである、請求項５５に記載の医薬製剤。
【請求項５７】
前記製剤中のリン酸カリウムの濃度は、１〜３ｍＭである、請求項５５に記載の医薬製剤。
【請求項５８】
前記製剤中のリン酸カリウムの濃度は、１．５ｍＭである、請求項５５に記載の医薬製剤。
【請求項５９】
前記製剤中の前記糖または糖代替物の濃度は、１〜１０ｗ／ｖ％である、請求項４１〜５８のいずれか１項に記載の医薬製剤。
【請求項６０】
前記製剤中の前記糖または糖代替物の濃度は、４〜６ｗ／ｖ％である、請求項４１〜５８のいずれか１項に記載の医薬製剤。
【請求項６１】
前記製剤中の前記糖または糖代替物の濃度は、５ｗ／ｖ％である、請求項４１〜５８のいずれか１項に記載の医薬製剤。
【請求項６２】
前記製剤中の前記糖または糖代替物の濃度は、６〜８ｗ／ｖ％である、請求項４１〜５８のいずれか１項に記載の医薬製剤。
【請求項６３】
前記製剤中の前記糖または糖代替物の濃度は、７ｗ／ｖ％である、請求項４１〜５８のいずれか１項に記載の医薬製剤。
【請求項６４】
前記１つまたは複数の糖または糖代替物は、スクロース、ラクツロース、ラクトース、マルトース、トレハロース、セロビオース、キトビオース、コージビオース、ニゲロース、イソマルトース、β，β−トレハロース、α，β−トレハロース、ソホロース、ラミナリビオース、ゲンチオビオース、ツラノース、マルツロース、パラチノース、ゲンチオビウロース、マンノビオース、メリビオース、メリビウロース、ルチノース、ルチヌロース、およびキシロビオースから選択される少なくとも１つの二糖を含む、請求項４１〜６３のいずれか１項に記載の医薬製剤。
【請求項６５】
前記１つまたは複数の糖または糖代替物は、スクロースを含む、請求項４１〜６３のいずれか１項に記載の医薬製剤。
【請求項６６】
前記１つまたは複数の糖または糖代替物は、トレハロースを含む、請求項４１〜６３のいずれか１項に記載の医薬製剤。
【請求項６７】
前記１つまたは複数の糖または糖代替物は、ソルビトールを含む、請求項４１〜６３のいずれか１項に記載の医薬製剤。
【請求項６８】
前記１つまたは複数の緩衝剤は、５℃で７．０〜８．２の製剤ｐＨを提供する、請求項４１〜６７のいずれか１項に記載の医薬製剤。
【請求項６９】
前記緩衝剤は、前記製剤中において１〜２０ｍＭの濃度である、請求項４１〜６８のいずれか１項に記載の医薬製剤。
【請求項７０】
前記緩衝剤は、前記製剤中において１０ｍＭの濃度である、請求項４１〜６８のいずれか１項に記載の医薬製剤。
【請求項７１】
前記１つまたは複数の緩衝剤は、トリスＨＣｌ、トリス塩基、リン酸ナトリウム、リン酸カリウム、ヒスチジン、ホウ酸、クエン酸、グリシン、ＨＥＰＥＳ（４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジンエタンスルホン酸）、およびＭＯＰＳ（３−（Ｎ−モルホリノ）プロパンスルホン酸）から選択される、請求項４１〜７０のいずれか１項に記載の医薬製剤。
【請求項７２】
前記１つまたは複数の緩衝剤は、リン酸ナトリウムを含み、前記製剤ｐＨは、５℃で７．２〜７．６である、請求項４１〜７０のいずれか１項に記載の医薬製剤。
【請求項７３】
前記製剤中の前記リン酸ナトリウムの濃度は、８〜１１ｍＭである、請求項７２に記載の医薬製剤。
【請求項７４】
前記製剤中の前記リン酸ナトリウムの濃度は、１０ｍＭである、請求項７２に記載の医薬製剤。
【請求項７５】
前記１つまたは複数の緩衝剤は、塩酸で調整されたトリス塩基を含み、前記製剤ｐＨは、５℃で７．８〜８．２である、請求項４１〜７０のいずれか１項に記載の医薬製剤。
【請求項７６】
前記１つまたは複数の緩衝剤は、塩酸で調整されたトリス塩基を含み、前記製剤ｐＨは、５℃で７．３〜７．７である、請求項４１〜７０のいずれか１項に記載の医薬製剤。
【請求項７７】
コポリマー表面活性物質を含む、請求項４１〜７６のいずれか１項に記載の医薬製剤。
【請求項７８】
前記コポリマー表面活性物質の濃度は、０．００００１ｗ／ｖ％〜１ｗ／ｖ％である、請求項７７に記載の医薬製剤。
【請求項７９】
前記コポリマー表面活性物質の濃度は、０．００１ｗ／ｖ％である、請求項７７に記載の医薬製剤。
【請求項８０】
前記コポリマー表面活性物質は、エチレンオキシド／プロピレンオキシドコポリマーを含む、請求項７７〜７９のいずれか１項に記載の医薬製剤。
【請求項８１】
前記エチレンオキシド／プロピレンオキシドコポリマーは、ポロキサマー１８８である、請求項８０に記載の医薬製剤。
【請求項８２】
４００〜５００ｍＯｓｍ／ｋｇのオスモル濃度を有する、請求項４１〜８１のいずれか１項に記載の医薬製剤。
【請求項８３】
４００〜４８０ｍＯｓｍ／ｋｇのオスモル濃度を有する、請求項４１〜８１のいずれか１項に記載の医薬製剤。
【請求項８４】
少なくとも１つのＡＡＶ粒子、リン酸ナトリウム、リン酸カリウム、塩化ナトリウム、スクロース、およびコポリマー表面活性物質を含む医薬製剤であって、６．５〜８のｐＨ、および１×１０１２〜５×１０１３ｖｇ／ｍｌのＡＡＶ粒子濃度を有する医薬製剤。
【請求項８５】
（ｉ）１×１０１３〜５×１０１３ｖｇ／ｍｌの濃度のＡＡＶ粒子、（ｉｉ）９〜１１ｍＭのリン酸ナトリウム、（ｉｉｉ）１〜２ｍＭのリン酸カリウム、（ｉｖ）９０〜１００ｍＭの塩化ナトリウム、（ｖ）６〜８ｗ／ｖ％の糖または糖代替物、および（ｖｉ）エチレンオキシド／プロピレンオキシドコポリマーを含み、７〜８のｐＨを有する、請求項８４に記載の医薬製剤。
【請求項８６】
（ｉ）２×１０１３〜３×１０１３ｖｇ／ｍｌの濃度のＡＡＶ粒子、（ｉｉ）１０ｍＭのリン酸ナトリウム、（ｉｉｉ）１．５ｍＭのリン酸カリウム、（ｉｖ）９５ｍＭの塩化ナトリウム、（ｖ）７ｗ／ｖ％のスクロース、および（ｖｉ）０．００１ｖ／ｖ％のポロキサマー１８８コポリマーを含む、請求項８４に記載の医薬製剤。
【請求項８７】
（ｉ）２×１０１３〜３×１０１３ｖｇ／ｍｌの濃度のＡＡＶ粒子、（ｉｉ）１．５ｍＭの塩化カリウム、（ｉｉｉ）１００ｍＭの塩化ナトリウム、（ｉｖ）７ｗ／ｖ％のスクロース、および（ｖ）０．００１ｖ／ｖ％のポロキサマー１８８コポリマーを含む医薬製剤であって、７．３〜８．２の製剤ｐＨを提供するのに十分なトリスＨＣｌを含む医薬製剤。
【請求項８８】
前記ＡＡＶ粒子は、ＡＡＶベクターゲノムおよびＡＡＶカプシドを含み、前記ＡＡＶベクターゲノムは、配列番号４１のポリヌクレオチド配列を含む、請求項４１〜８７のいずれか１項に記載の医薬製剤。
【請求項８９】
前記ＡＡＶカプシドは、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ２Ｇ９、ＡＡＶ３、ＡＡＶ３ａ、ＡＡＶ３ｂ、ＡＡＶ３−３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ４−４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ６．１、ＡＡＶ６．２、ＡＡＶ６．１．２、ＡＡＶ７、ＡＡＶ７．２、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ９．１１、ＡＡＶ９．１３、ＡＡＶ９．１６、ＡＡＶ９．２４、ＡＡＶ９．４５、ＡＡＶ９．４７、ＡＡＶ９．６１、ＡＡＶ９．６８、ＡＡＶ９．８４、ＡＡＶ９．９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、ＡＡＶ１２、ＡＡＶ１６．３、ＡＡＶ２４．１、ＡＡＶ２７．３、ＡＡＶ４２．１２、ＡＡＶ４２−１ｂ、ＡＡＶ４２−２、ＡＡＶ４２−３ａ、ＡＡＶ４２−３ｂ、ＡＡＶ４２−４、ＡＡＶ４２−５ａ、ＡＡＶ４２−５ｂ、ＡＡＶ４２−６ｂ、ＡＡＶ４２−８、ＡＡＶ４２−１０、ＡＡＶ４２−１１、ＡＡＶ４２−１２、ＡＡＶ４２−１３、ＡＡＶ４２−１５、ＡＡＶ４２−ａａ、ＡＡＶ４３−１、ＡＡＶ４３−１２、ＡＡＶ４３−２０、ＡＡＶ４３−２１、ＡＡＶ４３−２３、ＡＡＶ４３−２５、ＡＡＶ４３−５、ＡＡＶ４４．１、ＡＡＶ４４．２、ＡＡＶ４４．５、ＡＡＶ２２３．１、ＡＡＶ２２３．２、ＡＡＶ２２３．４、ＡＡＶ２２３．５、ＡＡＶ２２３．６、ＡＡＶ２２３．７、ＡＡＶ１−７／ｒｈ．４８、ＡＡＶ１−８／ｒｈ．４９、ＡＡＶ２−１５／ｒｈ．６２、ＡＡＶ２−３／ｒｈ．６１、ＡＡＶ２−４／ｒｈ．５０、ＡＡＶ２−５／ｒｈ．５１、ＡＡＶ３．１／ｈｕ．６、ＡＡＶ３．１／ｈｕ．９、ＡＡＶ３−９／ｒｈ．５２、ＡＡＶ３−１１／ｒｈ．５３、ＡＡＶ４−８／ｒ１１．６４、ＡＡＶ４−９／ｒｈ．５４、ＡＡＶ４−１９／ｒｈ．５５、ＡＡＶ５−３／ｒｈ．５７、ＡＡＶ５−２２／ｒｈ．５８、ＡＡＶ７．３／ｈｕ．７、ＡＡＶ１６．８／ｈｕ．１０、ＡＡＶ１６．１２／ｈｕ．１１、ＡＡＶ２９．３／ｂｂ．１、ＡＡＶ２９．５／ｂｂ．２、ＡＡＶ１０６．１／ｈｕ．３７、ＡＡＶ１１４．３／ｈｕ．４０、ＡＡＶ１２７．２／ｈｕ．４１、ＡＡＶ１２７．５／ｈｕ．４２、ＡＡＶ１２８．３／ｈｕ．４４、ＡＡＶ１３０．４／ｈｕ．４８、ＡＡＶ１４５．１／ｈｕ．５３、ＡＡＶ１４５．５／ｈｕ．５４、ＡＡＶ１４５．６／ｈｕ．５５、ＡＡＶ１６１．１０／ｈｕ．６０、ＡＡＶ１６１．６／ｈｕ．６１、ＡＡＶ３３．１２／ｈｕ．１７、ＡＡＶ３３．４／ｈｕ．１５、ＡＡＶ３３．８／ｈｕ．１６、ＡＡＶ５２／ｈｕ．１９、ＡＡＶ５２．１／ｈｕ．２０、ＡＡＶ５８．２／ｈｕ．２５、ＡＡＶＡ３．３、ＡＡＶＡ３．４、ＡＡＶＡ３．５、ＡＡＶＡ３．７、ＡＡＶＣ１、ＡＡＶＣ２、ＡＡＶＣ５、ＡＡＶ−ＤＪ、ＡＡＶ−ＤＪ８、ＡＡＶＦ３、ＡＡＶＦ５、ＡＡＶＨ２、ＡＡＶｒｈ．７２、ＡＡＶｈｕ．８、ＡＡＶｒｈ．６８、ＡＡＶｒｈ．７０、ＡＡＶｐｉ．１、ＡＡＶｐｉ．３、ＡＡＶｐｉ．２、ＡＡＶｒｈ．６０、ＡＡＶｒｈ．４４、ＡＡＶｒｈ．６５、ＡＡＶｒｈ．５５、ＡＡＶｒｈ．４７、ＡＡＶｒｈ．６９、ＡＡＶｒｈ．４５、ＡＡＶｒｈ．５９、ＡＡＶｈｕ．１２、ＡＡＶＨ６、ＡＡＶＬＫ０３、ＡＡＶＨ−１／ｈｕ．１、ＡＡＶＨ−５／ｈｕ．３、ＡＡＶＬＧ−１０／ｒｈ．４０、ＡＡＶＬＧ−４／ｒｈ．３８、ＡＡＶＬＧ−９／ｈｕ．３９、ＡＡＶＮ７２１−８／ｒｈ．４３、ＡＡＶＣｈ．５、ＡＡＶＣｈ．５Ｒ１、ＡＡＶｃｙ．２、ＡＡＶｃｙ．３、ＡＡＶｃｙ．４、ＡＡＶｃｙ．５、ＡＡＶＣｙ．５Ｒ１、ＡＡＶＣｙ．５Ｒ２、ＡＡＶＣｙ．５Ｒ３、ＡＡＶＣｙ．５Ｒ４、ＡＡＶｃｙ．６、ＡＡＶｈｕ．１、ＡＡＶｈｕ．２、ＡＡＶｈｕ．３、ＡＡＶｈｕ．４、ＡＡＶｈｕ．５、ＡＡＶｈｕ．６、ＡＡＶｈｕ．７、ＡＡＶｈｕ．９、ＡＡＶｈｕ．１０、ＡＡＶｈｕ．１１、ＡＡＶｈｕ．１３、ＡＡＶｈｕ．１５、ＡＡＶｈｕ．１６、ＡＡＶｈｕ．１７、ＡＡＶｈｕ．１８、ＡＡＶｈｕ．２０、ＡＡＶｈｕ．２１、ＡＡＶｈｕ．２２、ＡＡＶｈｕ．２３．２、ＡＡＶｈｕ．２４、ＡＡＶｈｕ．２５、ＡＡＶｈｕ．２７、ＡＡＶｈｕ．２８、ＡＡＶｈｕ．２９、ＡＡＶｈｕ．２９Ｒ、ＡＡＶｈｕ．３１、ＡＡＶｈｕ．３２、ＡＡＶｈｕ．３４、ＡＡＶｈｕ．３５、ＡＡＶｈｕ．３７、ＡＡＶｈｕ．３９、ＡＡＶｈｕ．４０、ＡＡＶｈｕ．４１、ＡＡＶｈｕ．４２、ＡＡＶｈｕ．４３、ＡＡＶｈｕ．４４、ＡＡＶｈｕ．４４Ｒ１、ＡＡＶｈｕ．４４Ｒ２、ＡＡＶｈｕ．４４Ｒ３、ＡＡＶｈｕ．４５、ＡＡＶｈｕ．４６、ＡＡＶｈｕ．４７、ＡＡＶｈｕ．４８、ＡＡＶｈｕ．４８Ｒ１、ＡＡＶｈｕ．４８Ｒ２、ＡＡＶｈｕ．４８Ｒ３、ＡＡＶｈｕ．４９、ＡＡＶｈｕ．５１、ＡＡＶｈｕ．５２、ＡＡＶｈｕ．５４、ＡＡＶｈｕ．５５、ＡＡＶｈｕ．５６、ＡＡＶｈｕ．５７、ＡＡＶｈｕ．５８、ＡＡＶｈｕ．６０、ＡＡＶｈｕ．６１、ＡＡＶｈｕ．６３、ＡＡＶｈｕ．６４、ＡＡＶｈｕ．６６、ＡＡＶｈｕ．６７、ＡＡＶｈｕ．１４／９、ＡＡＶｈｕ．ｔ  １９、ＡＡＶｒｈ．２、ＡＡＶｒｈ．２Ｒ、ＡＡＶｒｈ．８、ＡＡＶｒｈ．８Ｒ、ＡＡＶｒｈ．１０、ＡＡＶｒｈ．１２、ＡＡＶｒｈ．１３、ＡＡＶｒｈ．１３Ｒ、ＡＡＶｒｈ．１４、ＡＡＶｒｈ．１７、ＡＡＶｒｈ．１８、ＡＡＶｒｈ．１９、ＡＡＶｒｈ．２０、ＡＡＶｒｈ．２１、ＡＡＶｒｈ．２２、ＡＡＶｒｈ．２３、ＡＡＶｒｈ．２４、ＡＡＶｒｈ．２５、ＡＡＶｒｈ．３１、ＡＡＶｒｈ．３２、ＡＡＶｒｈ．３３、ＡＡＶｒｈ．３４、ＡＡＶｒｈ．３５、ＡＡＶｒｈ．３６、ＡＡＶｒｈ．３７、ＡＡＶｒｈ．３７Ｒ２、ＡＡＶｒｈ．３８、ＡＡＶｒｈ．３９、ＡＡＶｒｈ．４０、ＡＡＶｒｈ．４６、ＡＡＶｒｈ．４８、ＡＡＶｒｈ．４８．１、ＡＡＶｒｈ．４８．１．２、ＡＡＶｒｈ．４８．２、ＡＡＶｒｈ．４９、ＡＡＶｒｈ．５１、ＡＡＶｒｈ．５２、ＡＡＶｒｈ．５３、ＡＡＶｒｈ．５４、ＡＡＶｒｈ．５６、ＡＡＶｒｈ．５７、ＡＡＶｒｈ．５８、ＡＡＶｒｈ．６１、ＡＡＶｒｈ．６４、ＡＡＶｒｈ．６４Ｒ１、ＡＡＶｒｈ．６４Ｒ２、ＡＡＶｒｈ．６７、ＡＡＶｒｈ．７３、ＡＡＶｒｈ．７４、ＡＡＶｒｈ８Ｒ、ＡＡＶｒｈ８Ｒ  Ａ５８６Ｒ突然変異体、ＡＡＶｒｈ８Ｒ  Ｒ５３３Ａ突然変異体、ＡＡＡＶ、ＢＡＡＶ、ヤギＡＡＶ、ウシＡＡＶ、ヒツジＡＡＶ、ＡＡＶｈＥ１．１、ＡＡＶｈＥｒ１．５、ＡＡＶｈＥＲ１．１４、ＡＡＶｈＥｒ１．８、ＡＡＶｈＥｒ１．１６、ＡＡＶｈＥｒ１．１８、ＡＡＶｈＥｒ１．３５、ＡＡＶｈＥｒ１．７、ＡＡＶｈＥｒ１．３６、ＡＡＶｈＥｒ２．２９、ＡＡＶｈＥｒ２．４、ＡＡＶｈＥｒ２．１６、ＡＡＶｈＥｒ２．３０、ＡＡＶｈＥｒ２．３１、ＡＡＶｈＥｒ２．３６、ＡＡＶｈＥＲ１．２３、ＡＡＶｈＥｒ３．１、ＡＡＶ２．５Ｔ、ＡＡＶ−ＰＡＥＣ、ＡＡＶ−ＬＫ０１、ＡＡＶ−ＬＫ０２、ＡＡＶ−ＬＫ０３、ＡＡＶ−ＬＫ０４、ＡＡＶ−ＬＫ０５、ＡＡＶ−ＬＫ０６、ＡＡＶ−ＬＫ０７、ＡＡＶ−ＬＫ０８、ＡＡＶ−ＬＫ０９、ＡＡＶ−ＬＫ１０、ＡＡＶ−ＬＫ１１、ＡＡＶ−ＬＫ１２、ＡＡＶ−ＬＫ１３、ＡＡＶ−ＬＫ１４、ＡＡＶ−ＬＫ１５、ＡＡＶ−ＬＫ１６、ＡＡＶ−ＬＫ１７、ＡＡＶ−ＬＫ１８、ＡＡＶ−ＬＫ１９、ＡＡＶ−ＰＡＥＣ２、ＡＡＶ−ＰＡＥＣ４、ＡＡＶ−ＰＡＥＣ６、ＡＡＶ−ＰＡＥＣ７、ＡＡＶ−ＰＡＥＣ８、ＡＡＶ−ＰＡＥＣ１１、ＡＡＶ−ＰＡＥＣ１２、ＡＡＶ−２−ｐｒｅ−ｍｉＲＮＡ−１０１、ＡＡＶ−８ｈ、ＡＡＶ−８ｂ、ＡＡＶ−ｈ、ＡＡＶ−ｂ、ＡＡＶ  ＳＭ１０−２、ＡＡＶシャッフル１００−１、ＡＡＶシャッフル１００−３、ＡＡＶシャッフル１００−７、ＡＡＶシャッフル１０−２、ＡＡＶシャッフル１０−６、ＡＡＶシャッフル１０−８、ＡＡＶシャッフル１００−２、ＡＡＶ  ＳＭ  １０−１、ＡＡＶ  ＳＭ  １０−８、ＡＡＶ  ＳＭ  １００−３、ＡＡＶ  ＳＭ  １００−１０、ＢＮＰ６１  ＡＡＶ、ＢＮＰ６２  ＡＡＶ、ＢＮＰ６３  ＡＡＶ、ＡＡＶｒｈ．５０、ＡＡＶｒｈ．４３、ＡＡＶｒｈ．６２、ＡＡＶｒｈ．４８、ＡＡＶｈｕ．１９、ＡＡＶｈｕ．１１、ＡＡＶｈｕ．５３、ＡＡＶ４−８／ｒｈ．６４、ＡＡＶＬＧ−９／ｈｕ．３９、ＡＡＶ５４．５／ｈｕ．２３、ＡＡＶ５４．２／ｈｕ．２２、ＡＡＶ５４．７／ｈｕ．２４、ＡＡＶ５４．１／ｈｕ．２１、ＡＡＶ５４．４Ｒ／ｈｕ．２７、ＡＡＶ４６．２／ｈｕ．２８、ＡＡＶ４６．６／ｈｕ．２９、ＡＡＶ１２８．１／ｈｕ．４３、真型ＡＡＶ（ｔｔＡＡＶ）、ＵＰＥＮＮ  ＡＡＶ１０、ジャパニーズＡＡＶ１０血清型、ＡＡＶ  ＣＢｒ−７．１、ＡＡＶ  ＣＢｒ−７．１０、ＡＡＶ  ＣＢｒ−７．２、ＡＡＶ  ＣＢｒ−７．３、ＡＡＶ  ＣＢｒ−７．４、ＡＡＶ  ＣＢｒ−７．５、ＡＡＶ  ＣＢｒ−７．７、ＡＡＶ  ＣＢｒ−７．８、ＡＡＶ  ＣＢｒ−Ｂ７．３、ＡＡＶ  ＣＢｒ−Ｂ７．４、ＡＡＶ  ＣＢｒ−Ｅ１、ＡＡＶ  ＣＢｒ−Ｅ２、ＡＡＶ  ＣＢｒ−Ｅ３、ＡＡＶ  ＣＢｒ−Ｅ４、ＡＡＶ  ＣＢｒ−Ｅ５、ＡＡＶ  ＣＢｒ−ｅ５、ＡＡＶ  ＣＢｒ−Ｅ６、ＡＡＶ  ＣＢｒ−Ｅ７、ＡＡＶ  ＣＢｒ−Ｅ８、ＡＡＶ  ＣＨｔ−１、ＡＡＶ  ＣＨｔ−２、ＡＡＶ  ＣＨｔ−３、ＡＡＶ  ＣＨｔ−６．１、ＡＡＶ  ＣＨｔ−６．１０、ＡＡＶ  ＣＨｔ−６．５、ＡＡＶ  ＣＨｔ−６．６、ＡＡＶ  ＣＨｔ−６．７、ＡＡＶ  ＣＨｔ−６．８、ＡＡＶ  ＣＨｔ−Ｐ１、ＡＡＶ  ＣＨｔ−Ｐ２、ＡＡＶ  ＣＨｔ−Ｐ５、ＡＡＶ  ＣＨｔ−Ｐ６、ＡＡＶ  ＣＨｔ−Ｐ８、ＡＡＶ  ＣＨｔ−Ｐ９、ＡＡＶ  ＣＫｄ−１、ＡＡＶ  ＣＫｄ−１０、ＡＡＶ  ＣＫｄ−２、ＡＡＶ  ＣＫｄ−３、ＡＡＶ  ＣＫｄ−４、ＡＡＶ  ＣＫｄ−６、ＡＡＶ  ＣＫｄ−７、ＡＡＶ  ＣＫｄ−８、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｂ１、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｂ２、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｂ３、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｂ４、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｂ５、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｂ６、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｂ７、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｂ８、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｈ１、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｈ２、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｈ３、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｈ４、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｈ５、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｈ６、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｎ３、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｎ４、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｎ９、ＡＡＶ  ＣＬｇ−Ｆ１、ＡＡＶ  ＣＬｇ−Ｆ２、ＡＡＶ  ＣＬｇ−Ｆ３、ＡＡＶ  ＣＬｇ−Ｆ４、ＡＡＶ  ＣＬｇ−Ｆ５、ＡＡＶ  ＣＬｇ−Ｆ６、ＡＡＶ  ＣＬｇ−Ｆ７、ＡＡＶ  ＣＬｇ−Ｆ８、ＡＡＶ  ＣＬｖ−１、ＡＡＶ  ＣＬｖ１−１、ＡＡＶ  Ｃｌｖ１−１０、ＡＡＶ  ＣＬｖ１−２、ＡＡＶ  ＣＬｖ−１２、ＡＡＶ  ＣＬｖ１−３、ＡＡＶ  ＣＬｖ−１３、ＡＡＶ  ＣＬｖ１−４、ＡＡＶ  Ｃｌｖ１−７、ＡＡＶ  Ｃｌｖ１−８、ＡＡＶ  Ｃｌｖ１−９、ＡＡＶ  ＣＬｖ−２、ＡＡＶ  ＣＬｖ−３、ＡＡＶ  ＣＬｖ−４、ＡＡＶ  ＣＬｖ−６、ＡＡＶ  ＣＬｖ−８、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｄ１、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｄ２、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｄ３、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｄ４、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｄ５、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｄ６、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｄ７、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｄ８、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｅ１、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｋ１、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｋ３、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｋ６、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｌ４、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｌ５、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｌ６、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｍ１、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｍ１１、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｍ２、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｍ５、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｍ６、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｍ７、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｍ８、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｍ９、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｒ１、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｒ２、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｒ３、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｒ４、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｒ５、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｒ６、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｒ７、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｒ８、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｒ９、ＡＡＶ  ＣＳｐ−１、ＡＡＶ  ＣＳｐ−１０、ＡＡＶ  ＣＳｐ−１１、ＡＡＶ  ＣＳｐ−２、ＡＡＶ  ＣＳｐ−３、ＡＡＶ  ＣＳｐ−４、ＡＡＶ  ＣＳｐ−６、ＡＡＶ  ＣＳｐ−７、ＡＡＶ  ＣＳｐ−８、ＡＡＶ  ＣＳｐ−８．１０、ＡＡＶ  ＣＳｐ−８．２、ＡＡＶ  ＣＳｐ−８．４、ＡＡＶ  ＣＳｐ−８．５、ＡＡＶ  ＣＳｐ−８．６、ＡＡＶ  ＣＳｐ−８．７、ＡＡＶ  ＣＳｐ−８．８、ＡＡＶ  ＣＳｐ−８．９、ＡＡＶ  ＣＳｐ−９、ＡＡＶ．ｈｕ．４８Ｒ３、ＡＡＶ．ＶＲ−３５５、ＡＡＶ３Ｂ、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶＦ１／ＨＳＣ１、ＡＡＶＦ１１／ＨＳＣ１１、ＡＡＶＦ１２／ＨＳＣ１２、ＡＡＶＦ１３／ＨＳＣ１３、ＡＡＶＦ１４／ＨＳＣ１４、ＡＡＶＦ１５／ＨＳＣ１５、ＡＡＶＦ１６／ＨＳＣ１６、ＡＡＶＦ１７／ＨＳＣ１７、ＡＡＶＦ２／ＨＳＣ２、ＡＡＶＦ３／ＨＳＣ３、ＡＡＶＦ４／ＨＳＣ４、ＡＡＶＦ５／ＨＳＣ
５、ＡＡＶＦ６／ＨＳＣ６、ＡＡＶＦ７／ＨＳＣ７、ＡＡＶＦ８／ＨＳＣ８、ＡＡＶＦ９／ＨＳＣ９、ＡＡＶ−ＰＨＰ．Ｂ、ＡＡＶ−ＰＨＰ．Ａ、Ｇ２Ｂ−２６、Ｇ２Ｂ−１３、ＴＨ１．１−３２、ＴＨ１．１−３５、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ２、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ３、ＡＡＶＰＨＰ．Ｎ／ＰＨＰ．Ｂ−ＤＧＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＥＳＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＧＧＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＡＴＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＡＴＴ−Ｔ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＤＧＴ−Ｔ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＧＧＴ−Ｔ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＳＧＳ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＡＱＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＱＱＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＳＮＰ（３）、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＳＮＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＱＧＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＮＱＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＥＧＳ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＳＧＮ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＥＧＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＤＳＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＤＳＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＳＴＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＰＱＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＳＱＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＱＬＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＴＭＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＴＴＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｓ／Ｇ２Ａ１２、ＡＡＶＧ２Ａ１５／Ｇ２Ａ３、ＡＡＶＧ２Ｂ４、および／またはＡＡＶＧ２Ｂ５、およびそれらのバリアント
から選択される血清型を有する、請求項８８に記載の医薬製剤。
【請求項９０】
前記ＡＡＶカプシド血清型は、ＡＡＶ１である、請求項８８に記載の医薬製剤。
【請求項９１】
前記医薬製剤は、請求項４１〜９０のいずれか１項に記載の医薬製剤を含む、請求項１〜４０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９２】
対象のハンチントン病を処置する方法であって、前記対象に、請求項４１〜９０のいずれか１項に記載の医薬製剤の治療有効量を投与する工程を含む方法。
【請求項９３】
医薬組成物は、前記対象の被殻および視床への注入により投与される、請求項９２に記載の方法。
【請求項９４】
医薬組成物は、前記対象の被殻および視床への両側性注入により投与される、請求項９２に記載の方法。
【請求項９５】
前記医薬組成物は、磁気共鳴画像（ＭＲＩ）誘導対流増強送達法（ＣＥＤ）を使用して投与される、請求項９３または請求項９４に記載の方法。
【請求項９６】
被殻に投与される前記医薬製剤の容積は、１５００μＬ／半球以下である、請求項９３〜９５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９７】
被殻に投与される前記医薬製剤の容積は、９００〜１５００μＬ／半球である、請求項９３〜９５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９８】
被殻に投与される用量は、８×１０１１〜４×１０１３ＶＧ／半球である、請求項９３〜９７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９９】
視床に投与される前記医薬製剤の容積は、２５００μＬ／半球以下である、請求項９３〜９８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１００】
視床に投与される前記医薬製剤の容積は、１３００〜２５００μＬ／半球である、請求項９３〜９８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０１】
視床に投与される用量は、３．５×１０１２〜６．８×１０１３ＶＧ／半球である、請求項９３〜１００のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０２】
前記対象に投与される総用量は、８．６×１０１２〜２×１０１４ＶＧである、請求項９２〜１０１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０３】
前記対象に対する前記医薬製剤の投与は、前記対象の線条体におけるハンチンチン（ＨＴＴ）遺伝子の発現を阻害または抑制する、請求項９２〜１０２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０４】
前記ＨＴＴ遺伝子の発現は、被殻において阻害または抑制される、請求項１０３に記載の方法。
【請求項１０５】
前記ＨＴＴ遺伝子の発現は、被殻の１つまたは複数の中型有棘ニューロンにおいて阻害または抑制される、請求項１０３に記載の方法。
【請求項１０６】
前記ＨＴＴ遺伝子の発現は、被殻の１つまたは複数のアストロサイトにおいて阻害または抑制される、請求項１０３に記載の方法。
【請求項１０７】
被殻における前記ＨＴＴ遺伝子の発現は、少なくとも３０％低減される、請求項１０３〜１０６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０８】
被殻における前記ＨＴＴ遺伝子の発現は、４０〜７０％低減される、請求項１０３〜１０６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０９】
被殻における前記ＨＴＴ遺伝子の発現は、５０〜８０％低減される、請求項１０３〜１０６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１０】
前記ＨＴＴ遺伝子の発現は、尾状核において阻害または抑制される、請求項１０３〜１０９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１１】
尾状核における前記ＨＴＴ遺伝子の発現は、少なくとも３０％低減される、請求項１１０に記載の方法。
【請求項１１２】
尾状核における前記ＨＴＴ遺伝子の発現は、４０〜７０％低減される、請求項１１０に記載の方法。
【請求項１１３】
尾状核における前記ＨＴＴ遺伝子の発現は、５０〜８５％低減される、請求項１１０に記載の方法。
【請求項１１４】
前記医薬製剤の投与は、前記対象の大脳皮質における前記ＨＴＴ遺伝子の発現を阻害または抑制する、請求項９２〜１１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１５】
前記ＨＴＴ遺伝子の発現は、一次運動および体性感覚皮質において阻害または抑制される、請求項１１４に記載の方法。
【請求項１１６】
前記ＨＴＴ遺伝子の発現は、一次運動および体性感覚皮質の錐体ニューロンにおいて阻害または抑制される、請求項１１４に記載の方法。
【請求項１１７】
大脳皮質における前記ＨＴＴ遺伝子の発現は、少なくとも２０％低減される、請求項１１４〜１１６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１８】
大脳皮質における前記ＨＴＴ遺伝子の発現は、３０〜７０％低減される、請求項１１４〜１１６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１９】
前記医薬組成物の投与は、前記対象の視床における前記ＨＴＴ遺伝子の発現を阻害または抑制する、請求項９２〜１１８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１２０】
視床における前記ＨＴＴ遺伝子の発現は、少なくとも３０％低減される、請求項１１９に記載の方法。
【請求項１２１】
視床における前記ＨＴＴ遺伝子の発現は、４０〜８０％低減される、請求項１１９に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本開示は、組換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）粒子および製剤を含む、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）粒子およびＡＡＶ製剤の生産に使用するための方法および系を記載する。ある特定の実施形態では、本開示は、ＡＡＶ粒子およびＡＡＶ製剤を清澄化、精製、製剤化、濾過、および処理するための方法および系を提示する。また、本開示は、ハンチンチン（ＨＴＴ）遺伝子（例えば、野生型または突然変異型ＣＡＧ伸長ＨＴＴ遺伝子）を標的とする調節性ポリヌクレオチド、例えば低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）分子をコードするポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子を設計、調製、製造、使用、および／または製剤化するための組成物、方法、およびプロセスを記載する。調節性ポリヌクレオチドを含む製剤化ＡＡＶ粒子を使用して神経変性疾患（例えば、ハンチントン病（ＨＤ））を有する対象のＨＴＴ遺伝子発現を阻害するための方法も開示される。
【背景技術】
【０００２】
ＡＡＶは、哺乳動物細胞への遺伝子移入のために最も広く研究および利用されているウイルスベクターの１つとして出現している。例えば、その内容をその全体で本願明細書に援用する、非特許文献１および非特許文献２を参照されたい。アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターは、治療用遺伝子送達の有望な候補であり、臨床治験において安全性および有効性が証明されている。この目的のために改良されたＡＡＶ粒子の設計および生産は、積極的に研究されている分野である。
【０００３】
ＡＡＶ分野における開発の到来と共に、ＡＡＶベクター（ＡＡＶ粒子など）を生産するために改良された系および方法、ならびにＡＡＶ粒子を保管および送達するための対応する治療用製剤の必要性が依然として存在する。そうしたものとしては、ＡＡＶ粒子およびＡＡＶ製剤を清澄化、精製、製剤化、濾過、および処理するための改良された方法および系が挙げられる。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】トラトスキンら（Ｔｒａｔｓｃｈｉｎ  ｅｔ  ａｌ．），Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．，５（１１）：３２５１−３２６０（１９８５）
【非特許文献２】グリムら（Ｇｒｉｍｍ  ｅｔ  ａｌ．），Ｈｕｍ．Ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒ．，１０（１５）：２４４５−２４５０（１９９９）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本開示は、医薬製剤を生産するための方法および系を提示する。ある特定の実施形態では、医薬製剤は、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）粒子を含む。ある特定の実施形態では、本方法は、化学的溶解、清澄化濾過、親和性クロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、接線流濾過（ＴＦＦ）、およびウイルス保持濾過から選択される１つまたは複数の工程を含む。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
ある特定の実施形態では、本開示は、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）粒子を含む医薬製剤を生産するための方法またはプロセスを提示する。ある特定の実施形態では、本方法は、ＡＡＶ粒子をバイオリアクター内の１つまたは複数のウイルス産生細胞（ＶＰＣ）において産生し、それによりＡＡＶ粒子および液体培地を含むウイルス産生プールを準備する工程；ウイルス産生プールを、化学的溶解、清澄化濾過、親和性クロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、接線流濾過（ＴＦＦ）、およびウイルス保持濾過から選択される１つまたは複数の工程により処理する工程；ならびにウイルス産生プールに由来するＡＡＶ粒子を医薬製剤へと組み込む工程であって、医薬製剤は、ＡＡＶ粒子および少なくとも１つの医薬賦形剤を含む工程を含む。ある特定の実施形態では、本方法は、ウイルス産生プールが化学的溶解に曝露される１つまたは複数の化学的溶解工程を含む。ある特定の実施形態では、本方法は、ウイルス産生プールが１つまたは複数の清澄化濾過系により処理される１つまたは複数の清澄化濾過工程を含む。ある特定の実施形態では、本方法は、ウイルス産生プールが１つまたは複数の親和性クロマトグラフィー系により処理される１つまたは複数の親和性クロマトグラフィー工程を含む。ある特定の実施形態では、本方法は、ウイルス産生プールが１つまたは複数のイオン交換クロマトグラフィー系により処理される１つまたは複数のイオン交換クロマトグラフィー工程を含む。ある特定の実施形態では、本方法は、ウイルス産生プールが１つまたは複数のＴＦＦ系により処理される１つまたは複数の接線流濾過（ＴＦＦ）工程を含む。ある特定の実施形態では、本方法は、ウイルス産生プールが１つまたは複数のＶＲＦ系により処理される１つまたは複数のウイルス保持濾過（ＶＲＦ）工程を含む。
【０００７】
ある特定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、バイオリアクター内のウイルス産生細胞（ＶＰＣ）において産生される。ある特定の実施形態では、ＶＰＣは、昆虫細胞を含む。ある特定の実施形態では、ＶＰＣは、Ｓｆ９昆虫細胞を含む。ある特定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、バキュロウイルス産生系を使用して産生される。
【０００８】
ある特定の実施形態では、本方法は、ウイルス産生プールが化学的溶解に曝露される１つまたは複数の化学的溶解工程を含む。ある特定の実施形態では、本方法は、ウイルス産生プールをバイオリアクターから収集する工程であって、ウイルス産生プールは、１つまたは複数のＶＰＣを含み、ＡＡＶ粒子は、ＶＰＣ内に含有されている工程；およびウイルス産生プール内のＶＰＣを、化学的溶解条件下で化学的溶解溶液を使用して化学的溶解に曝露する工程であって、化学的溶解は、ＡＡＶ粒子をＶＰＣからウイルス産生プールの液体培地へと放出する工程を含む。ある特定の実施形態では、化学的溶解溶液は、アルギニンまたはアルギニン塩から選択される安定化添加剤を含む。ある特定の実施形態では、安定化添加剤の濃度は、０．１〜０．５Ｍである。ある特定の実施形態では、安定化添加剤の濃度は、０．２〜０．３Ｍである。
【０００９】
ある特定の実施形態では、化学的溶解溶液は、Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００を含んでいない。ある特定の実施形態では、化学的溶解溶液は、ラウリルジメチルアミンＮ−オキシド（ＬＤＡＯ）；Ｎ，Ｎ−ジメチル−Ｎ−ドデシルグリシンベタイン（Ｅｍｐｉｇｅｎ  ＢＢ）；３−（Ｎ，Ｎ−ジメチルミリスチルアンモニオ）プロパンスルホネート（Ｚｗｉｔｔｅｒｇｅｎｔ  ３−１０）；ｎ−ドデシル−Ｎ，Ｎ−ジメチル−３−アンモニオ−１−プロパンスルホネート（Ｚｗｉｔｔｅｒｇｅｎｔ  ３−１２）；ｎ−テトラデシル−Ｎ，Ｎ−ジメチル−３−アンモニオ−１−プロパンスルホネート（Ｚｗｉｔｔｅｒｇｅｎｔ  ３−１４）；３−（Ｎ，Ｎ−ジメチルパルミチルアンモニオ）プロパンスルホネート（Ｚｗｉｔｔｅｒｇｅｎｔ  ３−１６）；３−（（３−コラミドプロピル）ジメチルアンモニオ）−１−プロパンスルホネート（ＣＨＡＰＳ）；または３−（［３−コラミドプロピル］ジメチルアンモニオ）−２−ヒドロキシ−１−プロパンスルホネート（ＣＨＡＰＳＯ）から選択される双性イオン性界面活性剤を含む。ある特定の実施形態では、化学的溶解溶液は、ラウリルジメチルアミンＮ−オキシド（ＬＤＡＯ）を含む。ある特定の実施形態では、化学的溶解溶液は、Ｎ，Ｎ−ジメチル−Ｎ−ドデシルグリシンベタイン（Ｅｍｐｉｇｅｎ  ＢＢ）を含む。
【００１０】
ある特定の実施形態では、本方法は、ウイルス産生プールが１つまたは複数の清澄化濾過系により処理される１つまたは複数の清澄化濾過工程を含む。ある特定の実施形態では、１つまたは複数の清澄化濾過系は、深層濾過系を含む。ある特定の実施形態では、深層濾過系は、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ  Ｍｉｌｌｉｓｔａｋ  Ｄ０ＨＣメディアシリーズフィルターを含む。ある特定の実施形態では、深層濾過系は、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ  Ｍｉｌｌｉｓｔａｋ  Ｃ０ＳＰメディアシリーズフィルターを含む。ある特定の実施形態では、１つまたは複数の清澄化濾過系は、０．２μｍ精密濾過系を含む。
【００１１】
ある特定の実施形態では、本方法は、ウイルス産生プールが１つまたは複数の親和性クロマトグラフィー系により処理される１つまたは複数の親和性クロマトグラフィー工程を含む。ある特定の実施形態では、本方法は、ウイルス産生プールを、結合−溶出モードの１つまたは複数の免疫親和性クロマトグラフィー系により処理する工程を含む。ある特定の実施形態では、免疫親和性クロマトグラフィー系は、１つまたは複数のＡＡＶカプシドバリアントに結合することが可能な１つまたは複数の組換え単鎖抗体を含む。ある特定の実施形態では、免疫親和性クロマトグラフィー系は、再生溶液を使用して再生される。ある特定の実施形態では、再生溶液は、１〜３Ｍのグアニジンまたはグアニジン塩を含む。ある特定の実施形態では、免疫親和性クロマトグラフィー系は、２ＭグアニジンＨＣｌを含む再生溶液を使用して再生される。
【００１２】
ある特定の実施形態では、本方法は、ウイルス産生プールが１つまたは複数のイオン交換クロマトグラフィー系により処理される１つまたは複数のイオン交換クロマトグラフィー工程を含む。ある特定の実施形態では、本方法は、ウイルス産生プールを、フロースルーモードの１つまたは複数の陰イオン交換クロマトグラフィー系により処理する工程を含む。ある特定の実施形態では、陰イオン交換クロマトグラフィー系は、非ウイルス不純物、非ＡＡＶウイルス粒子、またはそれらの組合せに結合する固定相を含む。ある特定の実施形態では、陰イオン交換クロマトグラフィー系は、ＡＡＶ粒子に結合しない固定相を含む。ある特定の実施形態では、陰イオン交換クロマトグラフィー系の固定相は、第四級アミン官能基を含む。ある特定の実施形態では、陰イオン交換クロマトグラフィー系は、トリメチルアンモニウムエチル（ＴＭＡＥ）官能基を含む。
【００１３】
ある特定の実施形態では、本方法は、ウイルス産生プールが１つまたは複数のＴＦＦ系により処理される１つまたは複数の接線流濾過（ＴＦＦ）工程を含む。ある特定の実施形態では、ＴＦＦ系は、再生セルロースカセットを含むフラットシートフィルターを含む。ある特定の実施形態では、ＴＦＦ系は、中空繊維フィルターを含む。ある特定の実施形態では、ＴＦＦ系は、５．５〜６．５ＰＳＩの膜間圧力（ＴＭＰ）および５．５〜６．５Ｌ／分／ｍ２の標的クロスフローで稼動される。ある特定の実施形態では、ＴＦＦ系は、６ＰＳＩの膜間圧力（ＴＭＰ）および６Ｌ／分／ｍ２の標的クロスフローで稼動される。ある特定の実施形態では、１つまたは複数のＴＦＦ工程の前に、５０％スクロース混合物がウイルス産生プールに添加される。ある特定の実施形態では、５０％スクロース混合物は、９〜１３ｖ／ｖ％の濃度でウイルス産生プールに添加される。ある特定の実施形態では、５０％スクロース混合物は、１０〜１２ｖ／ｖ％の濃度でウイルス産生プールに添加される。ある特定の実施形態では、５０％スクロース混合物は、１１ｖ／ｖ％の濃度でウイルス産生プールに添加される。
【００１４】
ある特定の実施形態では、１つまたは複数のＴＦＦ工程は、ウイルス産生プールの液体培地の少なくとも一部分が低スクロースダイアフィルトレーション緩衝液で置き換えられる第１のダイアフィルトレーション工程を含む。ある特定の実施形態では、低スクロースダイアフィルトレーション緩衝液は、４〜６ｗ／ｖ％の糖または糖代替物、および１５０〜２５０ｍＭのアルカリ塩化物塩を含む。ある特定の実施形態では、低スクロースダイアフィルトレーション緩衝液は、４．５〜５．５ｗ／ｖ％のスクロース、および２１０〜２３０ｍＭの塩化ナトリウムを含む。ある特定の実施形態では、低スクロースダイアフィルトレーション緩衝液は、５ｗ／ｖ％のスクロース、および２２０ｍＭの塩化ナトリウムを含む。
【００１５】
ある特定の実施形態では、１つまたは複数のＴＦＦ工程は、限外濾過濃縮工程を含み、ウイルス産生プール内のＡＡＶ粒子は、標的粒子濃度に濃縮される。ある特定の実施形態では、ウイルス産生プール中のＡＡＶ粒子は、１．０×１０１２〜５．０×１０１３ｖｇ／ｍＬに濃縮される。ある特定の実施形態では、ウイルス産生プール中のＡＡＶ粒子は、２．０×１０１２〜５．０×１０１２ｖｇ／ｍＬに濃縮される。ある特定の実施形態では、ウイルス産生プール中のＡＡＶ粒子は、１．０×１０１３〜５．０×１０１３ｖｇ／ｍＬに濃縮される。ある特定の実施形態では、ウイルス産生プール中のＡＡＶ粒子は、２．０×１０１３〜３．０×１０１３ｖｇ／ｍＬに濃縮される。ある特定の実施形態では、ウイルス産生プール中のＡＡＶ粒子は、２．７×１０１３ｖｇ／ｍＬに濃縮される。
【００１６】
ある特定の実施形態では、１つまたは複数のＴＦＦ工程は、ウイルス産生プールの液体培地の少なくとも一部分が高スクロース製剤緩衝液で置き換えられる最終ダイアフィルトレーション工程を含む。ある特定の実施形態では、高スクロース製剤緩衝液は、６〜８ｗ／ｖ％の糖または糖代替物、および９０〜１００ｍＭのアルカリ塩化物塩を含む。ある特定の実施形態では、高スクロース製剤緩衝液は、７ｗ／ｖ％のスクロース、および９０〜１００ｍＭの塩化ナトリウムを含む。ある特定の実施形態では、高スクロース製剤緩衝液は、７ｗ／ｖ％のスクロース、１０ｍＭのリン酸ナトリウム、９５〜１００ｍＭの塩化ナトリウム、および０．００１％（ｗ／ｖ）ポロキサマー１８８を含む。
【００１７】
ある特定の実施形態では、本方法は、ウイルス産生プールが１つまたは複数のＶＲＦ系により処理される１つまたは複数のウイルス保持濾過（ＶＲＦ）工程を含む。ある特定の実施形態では、ＶＲＦ系は、５０ｎｍ以上の大きさの粒子を保持する濾材を含む。ある特定の実施形態では、ＶＲＦ系は、３５ｎｍ以上の大きさの粒子を保持する濾材を含む。ある特定の実施形態では、ＶＲＦ系は、２０ｎｍ以上の大きさの粒子を保持する濾材を含む。
【００１８】
本開示は、遺伝子治療製品を生産するための方法および系であって、ＡＡＶ粒子を含む医薬製剤を準備する工程であって、医薬製剤は、本開示の方法により生産される工程；および医薬製剤を製剤容器へと適切にアリコートする工程を含む方法を提示する。
【００１９】
本開示は、遺伝子治療モダリティーに有用な医薬製剤を提示する。ある特定の実施形態では、医薬製剤は、ＡＡＶ粒子を含む。ある特定の実施形態では、医薬製剤は、５×１０１３ｖｇ／ｍｌ未満の濃度のＡＡＶ粒子を含む。ある特定の実施形態では、医薬製剤は、１．０×１０１２〜５×１０１３ｖｇ／ｍＬの濃度のＡＡＶ粒子を含む。ある特定の実施形態では、医薬製剤は、１．０×１０１２〜５．０×１０１２ｖｇ／ｍＬの濃度のＡＡＶ粒子を含む。ある特定の実施形態では、医薬製剤は、１．０×１０１３〜５．０×１０１３ｖｇ／ｍＬの濃度のＡＡＶ粒子を含む。ある特定の実施形態では、医薬製剤は、２．７×１０１３ｖｇ／ｍＬの濃度のＡＡＶ粒子を含む。
【００２０】
ある特定の実施形態では、医薬製剤は、（ｉ）５×１０１３ｖｇ／ｍｌ未満の濃度のＡＡＶ粒子；（ｉｉ）１つまたは複数の塩；（ｉｉｉ）１つまたは複数の糖または糖代替物；および（ｉｖ）１つまたは複数の緩衝剤を含む。ある特定の実施形態では、医薬製剤は、水性製剤である。
【００２１】
ある特定の実施形態では、医薬製剤は、（ｉ）５×１０１３ｖｇ／ｍｌ未満の濃度のＡＡＶ粒子；（ｉｉ）塩化ナトリウム；（ｉｉｉ）１つまたは複数の糖または糖代替物；および（ｉｖ）コポリマーを含む。ある特定の実施形態では、医薬製剤は、６．５〜８のｐＨを有する。ある特定の実施形態では、医薬製剤は、３５０〜５００ｍＯｓｍ／ｋｇのオスモル濃度を有する。
【００２２】
ある特定の実施形態では、医薬製剤は、少なくとも１つのＡＡＶ粒子、塩化ナトリウム、リン酸ナトリウム、リン酸カリウム、糖または糖代替物、およびコポリマーを含む。ある特定の実施形態では、塩化ナトリウムの濃度は、９５ｍＭである。ある特定の実施形態では、リン酸ナトリウムの濃度は、１０ｍＭである。ある特定の実施形態では、１０ｍＭのリン酸ナトリウムは、５ｍＭのリン酸二水素ナトリウムおよび５ｍＭのリン酸水素ナトリウムを含む。ある特定の実施形態では、リン酸カリウムの濃度は、１．５ｍＭである。ある特定の実施形態では、糖または糖代替物の濃度は、７ｗ／ｖ％である。ある特定の実施形態では、コポリマーの濃度は、０．００１ｗ／ｖ％である。ある特定の実施形態では、糖はスクロースである。ある特定の実施形態では、コポリマーは、ポロキサマー１８８（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ−６８）。ある特定の実施形態では、ｐＨは７．４である。ある特定の実施形態では、医薬製剤は、９５ｍＭの塩化ナトリウム；１０ｍＭのリン酸ナトリウム（５ｍＭのリン酸二水素ナトリウムおよび５ｍＭのリン酸水素ナトリウム）；１．５ｍＭのリン酸カリウム；７ｗ／ｖ％のスクロース；および０．００１ｗ／ｖ％のポロキサマー１８８コポリマーを含む。
【００２３】
ある特定の実施形態では、塩化ナトリウムの濃度は、１５５ｍＭである。ある特定の実施形態では、リン酸ナトリウムの濃度は、２．７ｍＭである。ある特定の実施形態では、リン酸カリウムの濃度は、１．５ｍＭである。ある特定の実施形態では、糖または糖代替物の濃度は、５ｗ／ｖ％である。ある特定の実施形態では、コポリマーの濃度は、０．００１ｗ／ｖ％である。ある特定の実施形態では、医薬製剤は、１５５ｍＭの塩化ナトリウム；２．７ｍＭのリン酸ナトリウム；１．５ｍＭのリン酸カリウム；５ｗ／ｖ％のスクロース；および０．００１ｗ／ｖ％のポロキサマー１８８コポリマーを含む。
【００２４】
ある特定の実施形態では、医薬製剤は、少なくとも１つのＡＡＶ粒子、塩化ナトリウム、塩化カリウム、糖または糖代替物、およびコポリマーを含む。ある特定の実施形態では、医薬製剤は、ｐＨを調整するためにトリス塩基を含む。
【００２５】
ある特定の実施形態では、塩化ナトリウムの濃度は、１００ｍＭである。ある特定の実施形態では、トリスの濃度は、１０ｍＭである。ある特定の実施形態では、塩化カリウムの濃度は、１．５ｍＭである。ある特定の実施形態では、糖または糖代替物の濃度は、７ｗ／ｖ％である。ある特定の実施形態では、コポリマーの濃度は、０．００１ｗ／ｖ％である。ある特定の実施形態では、糖はスクロースである。ある特定の実施形態では、コポリマーは、ポロキサマー１８８（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ−６８）である。ある特定の実施形態では、ｐＨは８である。
【００２６】
ある特定の実施形態では、製剤の１つまたは複数の塩は、塩化ナトリウムを含む。ある特定の実施形態では、製剤中の塩化ナトリウムの濃度は、８０〜２２０ｍＭまたは８０〜１５０ｍＭである。ある特定の実施形態では、製剤中の塩化ナトリウムの濃度は、７５、８３、９２、９５、９８、１００、１０７、１０９、１１８、１２５、１２７、１３３、１４２、１５０、１５５、１９２、または２１０ｍＭである。
【００２７】
ある特定の実施形態では、製剤の１つまたは複数の塩は、塩化カリウムを含む。ある特定の実施形態では、製剤中の塩化カリウムの濃度は、０〜１０ｍＭ、１〜２ｍＭ、１〜３ｍＭ、または２〜３ｍＭである。ある特定の実施形態では、塩化カリウムの濃度は、１．５ｍＭである。ある特定の実施形態では、塩化カリウムの濃度は、２．７ｍＭである。
【００２８】
ある特定の実施形態では、製剤の１つまたは複数の塩は、リン酸カリウムを含む。ある特定の実施形態では、製剤中のリン酸カリウムの濃度は、０〜１０ｍＭまたは１〜３ｍＭである。ある特定の実施形態では、リン酸カリウムの濃度は、１．５ｍＭである。ある特定の実施形態では、リン酸カリウムの濃度は、２ｍＭである。
【００２９】
ある特定の実施形態では、製剤の１つまたは複数の塩は、リン酸ナトリウムを含む。ある特定の実施形態では、製剤中のリン酸ナトリウムの濃度は、０〜１０ｍＭ、２〜３ｍＭ、または１０〜１１ｍＭである。ある特定の実施形態では、リン酸ナトリウムの濃度は、２．７ｍＭである。ある特定の実施形態では、リン酸ナトリウムの濃度は、１０ｍＭである。
【００３０】
ある特定の実施形態では、製剤中の糖および／または糖代替物の濃度は、１〜１０ｗ／ｖ％である。ある特定の実施形態では、糖および／または糖代替物の濃度は、１ｗ／ｖ％、２ｗ／ｖ％、３ｗ／ｖ％、４ｗ／ｖ％、５ｗ／ｖ％、６ｗ／ｖ％、７ｗ／ｖ％、８ｗ／ｖ％、９ｗ／ｖ％、または１０ｗ／ｖ％である。
【００３１】
ある特定の実施形態では、１つまたは複数の糖または糖代替物は、スクロース、ラクツロース、ラクトース、マルトース、トレハロース、セロビオース、キトビオース、コージビオース、ニゲロース、イソマルトース、β，β−トレハロース、α，β−トレハロース、ソホロース、ラミナリビオース、ゲンチオビオース、ツラノース、マルツロース、パラチノース、ゲンチオビウロース、マンノビオース、メリビオース、メリビウロース、ルチノース、ルチヌロース、およびキシロビオースから選択される少なくとも１つの二糖を含む。
【００３２】
ある特定の実施形態では、製剤中の少なくとも１つの糖はスクロースを含み、スクロースの濃度は１〜１０ｗ／ｖ％である。ある特定の実施形態では、製剤中のスクロースの濃度は、１ｗ／ｖ％、２ｗ／ｖ％、３ｗ／ｖ％、４ｗ／ｖ％、５ｗ／ｖ％、６ｗ／ｖ％、７ｗ／ｖ％、８ｗ／ｖ％、９ｗ／ｖ％、または１０ｗ／ｖ％である。
【００３３】
ある特定の実施形態では、製剤中の少なくとも１つの糖はトレハロースを含み、トレハロースの濃度は１〜１０ｗ／ｖ％である。ある特定の実施形態では、製剤中のトレハロースの濃度は、１ｗ／ｖ％、２ｗ／ｖ％、３ｗ／ｖ％、４ｗ／ｖ％、５ｗ／ｖ％、６ｗ／ｖ％、７ｗ／ｖ％、８ｗ／ｖ％、９ｗ／ｖ％、または１０ｗ／ｖ％である。
【００３４】
ある特定の実施形態では、製剤中の少なくとも１つの糖はソルビトールを含み、ソルビトールの濃度は１〜１０ｗ／ｖ％である。ある特定の実施形態では、製剤中のソルビトールの濃度は、１ｗ／ｖ％、２ｗ／ｖ％、３ｗ／ｖ％、４ｗ／ｖ％、５ｗ／ｖ％、６ｗ／ｖ％、７ｗ／ｖ％、８ｗ／ｖ％、９ｗ／ｖ％、または１０ｗ／ｖ％である。
【００３５】
ある特定の実施形態では、製剤は、１つまたは複数の緩衝剤を含む。ある特定の実施形態では、製剤は、トリスＨＣｌ、トリス塩基、リン酸ナトリウム、リン酸カリウム、ヒスチジン、ホウ酸、クエン酸、グリシン、ＨＥＰＥＳ（４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジンエタンスルホン酸）、およびＭＯＰＳ（３−（Ｎ−モルホリノ）プロパンスルホン酸）から選択される１つまたは複数の緩衝剤を含む。ある特定の実施形態では、製剤中の緩衝剤の濃度は、１〜２０ｍＭである。ある特定の実施形態では、製剤中の緩衝剤の濃度は、１０ｍＭである。
【００３６】
ある特定の実施形態では、１つまたは複数の緩衝剤は、リン酸ナトリウムを含み、製剤のｐＨは、５℃で７．２〜７．６である。ある特定の実施形態では、製剤中のリン酸ナトリウムの濃度は、８〜１１ｍＭである。ある特定の実施形態では、製剤中のリン酸ナトリウムの濃度は、１０ｍＭである。
【００３７】
ある特定の実施形態では、１つまたは複数の緩衝剤は、塩酸で調整されたトリス塩基を含む。ある特定の実施形態では、製剤のｐＨは、５℃で７．３〜８．２である。ある特定の実施形態では、製剤のｐＨは、５℃で７．３〜７．７である。ある特定の実施形態では、製剤のｐＨは、５℃で７．８〜８．２である。
【００３８】
ある特定の実施形態では、製剤は、コポリマー表面活性物質を含む。ある特定の実施形態では、コポリマーの濃度は、０．００００１％〜１ｗ／ｖ％である。ある特定の実施形態では、コポリマーの濃度は、０．００００１％、０．０００１％、０．００１％、０．０１％、０．１％、または１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、濃度は、０．００１ｗ／ｖ％である。
【００３９】
ある特定の実施形態では、コポリマーは、エチレンオキシド／プロピレンオキシドコポリマーである。ある特定の実施形態では、エチレンオキシド／プロピレンオキシドコポリマーの濃度は、０．００００１％〜１ｗ／ｖ％である。ある特定の実施形態では、エチレンオキシド／プロピレンオキシドコポリマーの濃度は、０．００００１％、０．０００１％、０．００１％、０．０１％、０．１％、または１ｗ／ｖ％である。ある特定の実施形態では、コポリマーは、ポロキサマー１８８（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ−６８）である。ある特定の実施形態では、ポロキサマー１８８の濃度は、０．０１ｗ／ｖ％である。
【００４０】
ある特定の実施形態では、記載されている製剤中のＡＡＶ粒子の濃度は、５×１０１３ｖｇ／ｍｌ未満である。ある特定の実施形態では、記載されている製剤中のＡＡＶ粒子の濃度は、２．７×１０１１ｖｇ／ｍｌ、９×１０１１ｖｇ／ｍｌ、１．２×１０１２ｖｇ／ｍｌ、２．７×１０１２ｖｇ／ｍｌ、４×１０１２ｖｇ／ｍｌ、６×１０１２ｖｇ／ｍｌ、７．９×１０１２ｖｇ／ｍｌ、８×１０１２ｖｇ／ｍｌ、１．８×１０１３ｖｇ／ｍｌ、２．７×１０１３ｖｇ／ｍｌ、または３．５×１０１３ｖｇ／ｍｌである。ある特定の実施形態では、記載されている製剤中のＡＡＶ粒子の濃度は、２．５〜２．９×１０１３ｖｇ／ｍｌである。ある特定の実施形態では、記載されている製剤中のＡＡＶ粒子の濃度は、２．７×１０１３ｖｇ／ｍｌである。
【００４１】
ある特定の実施形態では、本開示の医薬製剤は、ＡＡＶベクターゲノムおよびＡＡＶカプシドを含むＡＡＶ粒子を含む。ある特定の実施形態では、ＡＡＶベクターゲノムは、配列番号４１のポリヌクレオチド配列を含む。
【００４２】
ある特定の実施形態では、ＡＡＶカプシドの血清型は、ＡＡＶ１である。ある特定の実施形態では、ＡＡＶカプシドの血清型は、以下から選択される：ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ２Ｇ９、ＡＡＶ３、ＡＡＶ３ａ、ＡＡＶ３ｂ、ＡＡＶ３−３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ４−４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ６．１、ＡＡＶ６．２、ＡＡＶ６．１．２、ＡＡＶ７、ＡＡＶ７．２、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ９．１１、ＡＡＶ９．１３、ＡＡＶ９．１６、ＡＡＶ９．２４、ＡＡＶ９．４５、ＡＡＶ９．４７、ＡＡＶ９．６１、ＡＡＶ９．６８、ＡＡＶ９．８４、ＡＡＶ９．９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、ＡＡＶ１２、ＡＡＶ１６．３、ＡＡＶ２４．１、ＡＡＶ２７．３、ＡＡＶ４２．１２、ＡＡＶ４２−１ｂ、ＡＡＶ４２−２、ＡＡＶ４２−３ａ、ＡＡＶ４２−３ｂ、ＡＡＶ４２−４、ＡＡＶ４２−５ａ、ＡＡＶ４２−５ｂ、ＡＡＶ４２−６ｂ、ＡＡＶ４２−８、ＡＡＶ４２−１０、ＡＡＶ４２−１１、ＡＡＶ４２−１２、ＡＡＶ４２−１３、ＡＡＶ４２−１５、ＡＡＶ４２−ａａ、ＡＡＶ４３−１、ＡＡＶ４３−１２、ＡＡＶ４３−２０、ＡＡＶ４３−２１、ＡＡＶ４３−２３、ＡＡＶ４３−２５、ＡＡＶ４３−５、ＡＡＶ４４．１、ＡＡＶ４４．２、ＡＡＶ４４．５、ＡＡＶ２２３．１、ＡＡＶ２２３．２、ＡＡＶ２２３．４、ＡＡＶ２２３．５、ＡＡＶ２２３．６、ＡＡＶ２２３．７、ＡＡＶ１−７／ｒｈ．４８、ＡＡＶ１−８／ｒｈ．４９、ＡＡＶ２−１５／ｒｈ．６２、ＡＡＶ２−３／ｒｈ．６１、ＡＡＶ２−４／ｒｈ．５０、ＡＡＶ２−５／ｒｈ．５１、ＡＡＶ３．１／ｈｕ．６、ＡＡＶ３．１／ｈｕ．９、ＡＡＶ３−９／ｒｈ．５２、ＡＡＶ３−１１／ｒｈ．５３、ＡＡＶ４−８／ｒ１１．６４、ＡＡＶ４−９／ｒｈ．５４、ＡＡＶ４−１９／ｒｈ．５５、ＡＡＶ５−３／ｒｈ．５７、ＡＡＶ５−２２／ｒｈ．５８、ＡＡＶ７．３／ｈｕ．７、ＡＡＶ１６．８／ｈｕ．１０、ＡＡＶ１６．１２／ｈｕ．１１、ＡＡＶ２９．３／ｂｂ．１、ＡＡＶ２９．５／ｂｂ．２、ＡＡＶ１０６．１／ｈｕ．３７、ＡＡＶ１１４．３／ｈｕ．４０、ＡＡＶ１２７．２／ｈｕ．４１、ＡＡＶ１２７．５／ｈｕ．４２、ＡＡＶ１２８．３／ｈｕ．４４、ＡＡＶ１３０．４／ｈｕ．４８、ＡＡＶ１４５．１／ｈｕ．５３、ＡＡＶ１４５．５／ｈｕ．５４、ＡＡＶ１４５．６／ｈｕ．５５、ＡＡＶ１６１．１０／ｈｕ．６０、ＡＡＶ１６１．６／ｈｕ．６１、ＡＡＶ３３．１２／ｈｕ．１７、ＡＡＶ３３．４／ｈｕ．１５、ＡＡＶ３３．８／ｈｕ．１６、ＡＡＶ５２／ｈｕ．１９、ＡＡＶ５２．１／ｈｕ．２０、ＡＡＶ５８．２／ｈｕ．２５、ＡＡＶＡ３．３、ＡＡＶＡ３．４、ＡＡＶＡ３．５、ＡＡＶＡ３．７、ＡＡＶＣ１、ＡＡＶＣ２、ＡＡＶＣ５、ＡＡＶ−ＤＪ、ＡＡＶ−ＤＪ８、ＡＡＶＦ３、ＡＡＶＦ５、ＡＡＶＨ２、ＡＡＶｒｈ．７２、ＡＡＶｈｕ．８、ＡＡＶｒｈ．６８、ＡＡＶｒｈ．７０、ＡＡＶｐｉ．１、ＡＡＶｐｉ．３、ＡＡＶｐｉ．２、ＡＡＶｒｈ．６０、ＡＡＶｒｈ．４４、ＡＡＶｒｈ．６５、ＡＡＶｒｈ．５５、ＡＡＶｒｈ．４７、ＡＡＶｒｈ．６９、ＡＡＶｒｈ．４５、ＡＡＶｒｈ．５９、ＡＡＶｈｕ．１２、ＡＡＶＨ６、ＡＡＶＬＫ０３、ＡＡＶＨ−１／ｈｕ．１、ＡＡＶＨ−５／ｈｕ．３、ＡＡＶＬＧ−１０／ｒｈ．４０、ＡＡＶＬＧ−４／ｒｈ．３８、ＡＡＶＬＧ−９／ｈｕ．３９、ＡＡＶＮ７２１−８／ｒｈ．４３、ＡＡＶＣｈ．５、ＡＡＶＣｈ．５Ｒ１、ＡＡＶｃｙ．２、ＡＡＶｃｙ．３、ＡＡＶｃｙ．４、ＡＡＶｃｙ．５、ＡＡＶＣｙ．５Ｒ１、ＡＡＶＣｙ．５Ｒ２、ＡＡＶＣｙ．５Ｒ３、ＡＡＶＣｙ．５Ｒ４、ＡＡＶｃｙ．６、ＡＡＶｈｕ．１、ＡＡＶｈｕ．２、ＡＡＶｈｕ．３、ＡＡＶｈｕ．４、ＡＡＶｈｕ．５、ＡＡＶｈｕ．６、ＡＡＶｈｕ．７、ＡＡＶｈｕ．９、ＡＡＶｈｕ．１０、ＡＡＶｈｕ．１１、ＡＡＶｈｕ．１３、ＡＡＶｈｕ．１５、ＡＡＶｈｕ．１６、ＡＡＶｈｕ．１７、ＡＡＶｈｕ．１８、ＡＡＶｈｕ．２０、ＡＡＶｈｕ．２１、ＡＡＶｈｕ．２２、ＡＡＶｈｕ．２３．２、ＡＡＶｈｕ．２４、ＡＡＶｈｕ．２５、ＡＡＶｈｕ．２７、ＡＡＶｈｕ．２８、ＡＡＶｈｕ．２９、ＡＡＶｈｕ．２９Ｒ、ＡＡＶｈｕ．３１、ＡＡＶｈｕ．３２、ＡＡＶｈｕ．３４、ＡＡＶｈｕ．３５、ＡＡＶｈｕ．３７、ＡＡＶｈｕ．３９、ＡＡＶｈｕ．４０、ＡＡＶｈｕ．４１、ＡＡＶｈｕ．４２、ＡＡＶｈｕ．４３、ＡＡＶｈｕ．４４、ＡＡＶｈｕ．４４Ｒ１、ＡＡＶｈｕ．４４Ｒ２、ＡＡＶｈｕ．４４Ｒ３、ＡＡＶｈｕ．４５、ＡＡＶｈｕ．４６、ＡＡＶｈｕ．４７、ＡＡＶｈｕ．４８、ＡＡＶｈｕ．４８Ｒ１、ＡＡＶｈｕ．４８Ｒ２、ＡＡＶｈｕ．４８Ｒ３、ＡＡＶｈｕ．４９、ＡＡＶｈｕ．５１、ＡＡＶｈｕ．５２、ＡＡＶｈｕ．５４、ＡＡＶｈｕ．５５、ＡＡＶｈｕ．５６、ＡＡＶｈｕ．５７、ＡＡＶｈｕ．５８、ＡＡＶｈｕ．６０、ＡＡＶｈｕ．６１、ＡＡＶｈｕ．６３、ＡＡＶｈｕ．６４、ＡＡＶｈｕ．６６、ＡＡＶｈｕ．６７、ＡＡＶｈｕ．１４／９、ＡＡＶｈｕ．ｔ  １９、ＡＡＶｒｈ．２、ＡＡＶｒｈ．２Ｒ、ＡＡＶｒｈ．８、ＡＡＶｒｈ．８Ｒ、ＡＡＶｒｈ．１０、ＡＡＶｒｈ．１２、ＡＡＶｒｈ．１３、ＡＡＶｒｈ．１３Ｒ、ＡＡＶｒｈ．１４、ＡＡＶｒｈ．１７、ＡＡＶｒｈ．１８、ＡＡＶｒｈ．１９、ＡＡＶｒｈ．２０、ＡＡＶｒｈ．２１、ＡＡＶｒｈ．２２、ＡＡＶｒｈ．２３、ＡＡＶｒｈ．２４、ＡＡＶｒｈ．２５、ＡＡＶｒｈ．３１、ＡＡＶｒｈ．３２、ＡＡＶｒｈ．３３、ＡＡＶｒｈ．３４、ＡＡＶｒｈ．３５、ＡＡＶｒｈ．３６、ＡＡＶｒｈ．３７、ＡＡＶｒｈ．３７Ｒ２、ＡＡＶｒｈ．３８、ＡＡＶｒｈ．３９、ＡＡＶｒｈ．４０、ＡＡＶｒｈ．４６、ＡＡＶｒｈ．４８、ＡＡＶｒｈ．４８．１、ＡＡＶｒｈ．４８．１．２、ＡＡＶｒｈ．４８．２、ＡＡＶｒｈ．４９、ＡＡＶｒｈ．５１、ＡＡＶｒｈ．５２、ＡＡＶｒｈ．５３、ＡＡＶｒｈ．５４、ＡＡＶｒｈ．５６、ＡＡＶｒｈ．５７、ＡＡＶｒｈ．５８、ＡＡＶｒｈ．６１、ＡＡＶｒｈ．６４、ＡＡＶｒｈ．６４Ｒ１、ＡＡＶｒｈ．６４Ｒ２、ＡＡＶｒｈ．６７、ＡＡＶｒｈ．７３、ＡＡＶｒｈ．７４、ＡＡＶｒｈ８Ｒ、ＡＡＶｒｈ８Ｒ  Ａ５８６Ｒ突然変異体、ＡＡＶｒｈ８Ｒ  Ｒ５３３Ａ突然変異体、ＡＡＡＶ、ＢＡＡＶ、ヤギＡＡＶ、ウシＡＡＶ、ヒツジＡＡＶ、ＡＡＶｈＥ１．１、ＡＡＶｈＥｒ１．５、ＡＡＶｈＥＲ１．１４、ＡＡＶｈＥｒ１．８、ＡＡＶｈＥｒ１．１６、ＡＡＶｈＥｒ１．１８、ＡＡＶｈＥｒ１．３５、ＡＡＶｈＥｒ１．７、ＡＡＶｈＥｒ１．３６、ＡＡＶｈＥｒ２．２９、ＡＡＶｈＥｒ２．４、ＡＡＶｈＥｒ２．１６、ＡＡＶｈＥｒ２．３０、ＡＡＶｈＥｒ２．３１、ＡＡＶｈＥｒ２．３６、ＡＡＶｈＥＲ１．２３、ＡＡＶｈＥｒ３．１、ＡＡＶ２．５Ｔ、ＡＡＶ−ＰＡＥＣ、ＡＡＶ−ＬＫ０１、ＡＡＶ−ＬＫ０２、ＡＡＶ−ＬＫ０３、ＡＡＶ−ＬＫ０４、ＡＡＶ−ＬＫ０５、ＡＡＶ−ＬＫ０６、ＡＡＶ−ＬＫ０７、ＡＡＶ−ＬＫ０８、ＡＡＶ−ＬＫ０９、ＡＡＶ−ＬＫ１０、ＡＡＶ−ＬＫ１１、ＡＡＶ−ＬＫ１２、ＡＡＶ−ＬＫ１３、ＡＡＶ−ＬＫ１４、ＡＡＶ−ＬＫ１５、ＡＡＶ−ＬＫ１６、ＡＡＶ−ＬＫ１７、ＡＡＶ−ＬＫ１８、ＡＡＶ−ＬＫ１９、ＡＡＶ−ＰＡＥＣ２、ＡＡＶ−ＰＡＥＣ４、ＡＡＶ−ＰＡＥＣ６、ＡＡＶ−ＰＡＥＣ７、ＡＡＶ−ＰＡＥＣ８、ＡＡＶ−ＰＡＥＣ１１、ＡＡＶ−ＰＡＥＣ１２、ＡＡＶ−２−ｐｒｅ−ｍｉＲＮＡ−１０１、ＡＡＶ−８ｈ、ＡＡＶ−８ｂ、ＡＡＶ−ｈ、ＡＡＶ−ｂ、ＡＡＶ  ＳＭ  １０−２、ＡＡＶシャッフル１００−１、ＡＡＶシャッフル１００−３、ＡＡＶシャッフル１００−７、ＡＡＶシャッフル１０−２、ＡＡＶシャッフル１０−６、ＡＡＶシャッフル１０−８、ＡＡＶシャッフル１００−２、ＡＡＶ  ＳＭ  １０−１、ＡＡＶ  ＳＭ  １０−８、ＡＡＶ  ＳＭ  １００−３、ＡＡＶ  ＳＭ  １００−１０、ＢＮＰ６１  ＡＡＶ、ＢＮＰ６２  ＡＡＶ、ＢＮＰ６３  ＡＡＶ、ＡＡＶｒｈ．５０、ＡＡＶｒｈ．４３、ＡＡＶｒｈ．６２、ＡＡＶｒｈ．４８、ＡＡＶｈｕ．１９、ＡＡＶｈｕ．１１、ＡＡＶｈｕ．５３、ＡＡＶ４−８／ｒｈ．６４、ＡＡＶＬＧ−９／ｈｕ．３９、ＡＡＶ５４．５／ｈｕ．２３、ＡＡＶ５４．２／ｈｕ．２２、ＡＡＶ５４．７／ｈｕ．２４、ＡＡＶ５４．１／ｈｕ．２１、ＡＡＶ５４．４Ｒ／ｈｕ．２７、ＡＡＶ４６．２／ｈｕ．２８、ＡＡＶ４６．６／ｈｕ．２９、ＡＡＶ１２８．１／ｈｕ．４３、真型ＡＡＶ（ｔｔＡＡＶ）、ＵＰＥＮＮ  ＡＡＶ１０、ジャパニーズＡＡＶ１０血清型、ＡＡＶ  ＣＢｒ−７．１、ＡＡＶ  ＣＢｒ−７．１０、ＡＡＶ  ＣＢｒ−７．２、ＡＡＶ  ＣＢｒ−７．３、ＡＡＶ  ＣＢｒ−７．４、ＡＡＶ  ＣＢｒ−７．５、ＡＡＶ  ＣＢｒ−７．７、ＡＡＶ  ＣＢｒ−７．８、ＡＡＶ  ＣＢｒ−Ｂ７．３、ＡＡＶ  ＣＢｒ−Ｂ７．４、ＡＡＶ  ＣＢｒ−Ｅ１、ＡＡＶ  ＣＢｒ−Ｅ２、ＡＡＶ  ＣＢｒ−Ｅ３、ＡＡＶ  ＣＢｒ−Ｅ４、ＡＡＶ  ＣＢｒ−Ｅ５、ＡＡＶ  ＣＢｒ−ｅ５、ＡＡＶ  ＣＢｒ−Ｅ６、ＡＡＶ  ＣＢｒ−Ｅ７、ＡＡＶ  ＣＢｒ−Ｅ８、ＡＡＶ  ＣＨｔ−１、ＡＡＶ  ＣＨｔ−２、ＡＡＶ  ＣＨｔ−３、ＡＡＶ  ＣＨｔ−６．１、ＡＡＶ  ＣＨｔ−６．１０、ＡＡＶ  ＣＨｔ−６．５、ＡＡＶ  ＣＨｔ−６．６、ＡＡＶ  ＣＨｔ−６．７、ＡＡＶ  ＣＨｔ−６．８、ＡＡＶ  ＣＨｔ−Ｐ１、ＡＡＶ  ＣＨｔ−Ｐ２、ＡＡＶ  ＣＨｔ−Ｐ５、ＡＡＶ  ＣＨｔ−Ｐ６、ＡＡＶ  ＣＨｔ−Ｐ８、ＡＡＶ  ＣＨｔ−Ｐ９、ＡＡＶ  ＣＫｄ−１、ＡＡＶ  ＣＫｄ−１０、ＡＡＶ  ＣＫｄ−２、ＡＡＶ  ＣＫｄ−３、ＡＡＶ  ＣＫｄ−４、ＡＡＶ  ＣＫｄ−６、ＡＡＶ  ＣＫｄ−７、ＡＡＶ  ＣＫｄ−８、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｂ１、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｂ２、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｂ３、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｂ４、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｂ５、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｂ６、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｂ７、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｂ８、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｈ１、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｈ２、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｈ３、���ＡＶ  ＣＫｄ−Ｈ４、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｈ５、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｈ６、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｎ３、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｎ４、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｎ９、ＡＡＶ  ＣＬｇ−Ｆ１、ＡＡＶ  ＣＬｇ−Ｆ２、ＡＡＶ  ＣＬｇ−Ｆ３、ＡＡＶ  ＣＬｇ−Ｆ４、ＡＡＶ  ＣＬｇ−Ｆ５、ＡＡＶ  ＣＬｇ−Ｆ６、ＡＡＶ  ＣＬｇ−Ｆ７、ＡＡＶ  ＣＬｇ−Ｆ８、ＡＡＶ  ＣＬｖ−１、ＡＡＶ  ＣＬｖ１−１、ＡＡＶ  Ｃｌｖ１−１０、ＡＡＶ  ＣＬｖ１−２、ＡＡＶ  ＣＬｖ−１２、ＡＡＶ  ＣＬｖ１−３、ＡＡＶ  ＣＬｖ−１３、ＡＡＶ  ＣＬｖ１−４、ＡＡＶ  Ｃｌｖ１−７、ＡＡＶ  Ｃｌｖ１−８、ＡＡＶ  Ｃｌｖ１−９、ＡＡＶ  ＣＬｖ−２、ＡＡＶ  ＣＬｖ−３、ＡＡＶ  ＣＬｖ−４、ＡＡＶ  ＣＬｖ−６、ＡＡＶ  ＣＬｖ−８、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｄ１、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｄ２、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｄ３、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｄ４、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｄ５、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｄ６、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｄ７、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｄ８、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｅ１、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｋ１、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｋ３、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｋ６、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｌ４、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｌ５、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｌ６、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｍ１、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｍ１１、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｍ２、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｍ５、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｍ６、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｍ７、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｍ８、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｍ９、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｒ１、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｒ２、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｒ３、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｒ４、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｒ５、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｒ６、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｒ７、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｒ８、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｒ９、ＡＡＶ  ＣＳｐ−１、ＡＡＶ  ＣＳｐ−１０、ＡＡＶ  ＣＳｐ−１１、ＡＡＶ  ＣＳｐ−２、ＡＡＶ  ＣＳｐ−３、ＡＡＶ  ＣＳｐ−４、ＡＡＶ  ＣＳｐ−６、ＡＡＶ  ＣＳｐ−７、ＡＡＶ  ＣＳｐ−８、ＡＡＶ  ＣＳｐ−８．１０、ＡＡＶ  ＣＳｐ−８．２、ＡＡＶ  ＣＳｐ−８．４、ＡＡＶ  ＣＳｐ−８．５、ＡＡＶ  ＣＳｐ−８．６、ＡＡＶ  ＣＳｐ−８．７、ＡＡＶ  ＣＳｐ−８．８、ＡＡＶ  ＣＳｐ−８．９、ＡＡＶ  ＣＳｐ−９、ＡＡＶ．ｈｕ．４８Ｒ３、ＡＡＶ．ＶＲ−３５５、ＡＡＶ３Ｂ、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶＦ１／ＨＳＣ１、ＡＡＶＦ１１／ＨＳＣ１１、ＡＡＶＦ１２／ＨＳＣ１２、ＡＡＶＦ１３／ＨＳＣ１３、ＡＡＶＦ１４／ＨＳＣ１４、ＡＡＶＦ１５／ＨＳＣ１５、ＡＡＶＦ１６／ＨＳＣ
１６、ＡＡＶＦ１７／ＨＳＣ１７、ＡＡＶＦ２／ＨＳＣ２、ＡＡＶＦ３／ＨＳＣ３、ＡＡＶＦ４／ＨＳＣ４、ＡＡＶＦ５／ＨＳＣ５、ＡＡＶＦ６／ＨＳＣ６、ＡＡＶＦ７／ＨＳＣ７、ＡＡＶＦ８／ＨＳＣ８、ＡＡＶＦ９／ＨＳＣ９、ＰＨＰ．Ｂ、ＰＨＰ．Ａ、Ｇ２Ｂ−２６、Ｇ２Ｂ−１３、ＴＨ１．１−３２、ＴＨ１．１−３５、または本開示の修飾血清型のいずれか、またはそれらのバリアント。
【００４３】
本明細書に記載の医薬遺伝子治療用の、例えば、ＡＡＶの製剤は、糖または糖代替物を有しない同じ製剤と比較して、保管寿命の増加、凝集の低減、工程内プールのより長い保持時間、および／またはＡＡＶ粒子の濃度の増加を有することができる。
【００４４】
本開示は、対象のハンチントン病を処置する方法を提示する。ある特定の実施形態では、本方法は、本開示の医薬製剤の治療有効量を対象に投与する工程を含む。
ある特定の実施形態では、医薬組成物は、対象の被殻および視床への注入により投与される。ある特定の実施形態では、医薬組成物は、対象の被殻および視床への両側性注入により投与される。ある特定の実施形態では、医薬組成物は、磁気共鳴画像（ＭＲＩ）誘導対流増強送達法（ＣＥＤ）を使用して投与される。
【００４５】
ある特定の実施形態では、被殻に投与される医薬製剤の容積は、１５００μＬ／半球以下である。ある特定の実施形態では、被殻に投与される医薬製剤の容積は、９００〜１５００μＬ／半球である。ある特定の実施形態では、被殻に投与される用量は、８×１０１１〜４×１０１３ＶＧ／半球である。
【００４６】
ある特定の実施形態では、視床に投与される医薬製剤の容積は、２５００μＬ／半球以下である。ある特定の実施形態では、視床に投与される医薬製剤の容積は、１３００〜２５００μＬ／半球である。ある特定の実施形態では、視床に投与される用量は、３．５×１０１２〜６．８×１０１３ＶＧ／半球である。
【００４７】
ある特定の実施形態では、対象に投与される総用量は、８．６×１０１２〜２×１０１４ＶＧである。
ある特定の実施形態では、対象への医薬製剤の投与は、対象の線条体におけるハンチンチン（ＨＴＴ）遺伝子の発現を阻害または抑制する。ある特定の実施形態では、ＨＴＴ遺伝子の発現は、被殻において阻害または抑制される。ある特定の実施形態では、ＨＴＴ遺伝子の発現は、被殻の１つまたは複数の中型有棘ニューロンにおいて阻害または抑制される。ある特定の実施形態では、ＨＴＴ遺伝子は、被殻の１つまたは複数のアストロサイトにおいて阻害または抑制される。ある特定の実施形態では、被殻におけるＨＴＴ遺伝子の発現は、少なくとも３０％低減される。ある特定の実施形態では、被殻におけるＨＴＴ遺伝子の発現は、４０〜７０％低減される。ある特定の実施形態では、被殻におけるＨＴＴ遺伝子の発現は、５０〜８０％低減される。
【００４８】
ある特定の実施形態では、ＨＴＴ遺伝子の発現は、尾状核において阻害または抑制される。ある特定の実施形態では、尾状核のＨＴＴ遺伝子は、少なくとも３０％低減される。ある特定の実施形態では、尾状核のＨＴＴ遺伝子は、４０〜７０％低減される。ある特定の実施形態では、尾状核のＨＴＴ遺伝子は、５０〜８５％低減される。
【００４９】
ある特定の実施形態では、医薬製剤の投与は、対象の大脳皮質におけるＨＴＴ遺伝子の発現を阻害または抑制する。ある特定の実施形態では、ＨＴＴ遺伝子の発現は、一次運動および体性感覚皮質において阻害または抑制される。ある特定の実施形態では、ＨＴＴ遺伝子の発現は、一次運動および体性感覚皮質の錐体ニューロンにおいて阻害または抑制される。ある特定の実施形態では、大脳皮質におけるＨＴＴ遺伝子の発現は、少なくとも２０％低減される。ある特定の実施形態では、大脳皮質におけるＨＴＴ遺伝子の発現は、３０〜７０％低減される。
【００５０】
ある特定の実施形態では、医薬組成物の投与は、対象の視床におけるＨＴＴ遺伝子の発現を阻害または抑制する。ある特定の実施形態では、視床におけるＨＴＴ遺伝子の発現は、少なくとも３０％低減される。ある特定の実施形態では、視床におけるＨＴＴ遺伝子の発現は、４０〜８０％低減される。
【００５１】
前記のおよび他の目的、特徴および利点は、添付の図面に例示されるような以下の本開示の特定の実施形態の説明から明らかとなる。図面は、必ずしも縮尺するものでも、包括的なものでもなく、代わりに、本開示の種々の実施形態の原理を例示することに重点が置かれている。
【図面の簡単な説明】
【００５２】
【図１】ウイルス産生細胞（ＶＰＣ）およびプラスミド構築物を使用してバキュロウイルス感染昆虫細胞（ＢＩＩＣ）を製造するための、系の一実施形態の模式図およびプロセスの一実施形態のフローダイヤグラムを示す図。
【図２】ウイルス産生細胞（ＶＰＣ）およびバキュロウイルス感染昆虫細胞（ＢＩＩＣ）を使用してＡＡＶ粒子を製造するための、系の一実施形態の模式図およびプロセスの一実施形態のフローダイヤグラムを示す図。
【図３】ＡＡＶ粒子およびウイルス産生細胞のバルク回収物を処理、清澄化および精製することによって原薬を製造するための、系の一実施形態の模式図およびプロセスの一実施形態のフローダイヤグラムを示す図。
【図４Ａ】本開示のある特定の実施形態に従って、陰イオン交換クロマトグラフィー系をフロースルー様式で使用する、バキュロウイルス（ＢＡＣＶ）ウイルス混入物（ＴＣＩＤ５０）のＬｏｇ１０低減値を示す図。
【図４Ｂ】本開示のある特定の実施形態に従って、陰イオン交換クロマトグラフィー系をフロースルー様式で使用する、水疱性口内炎ウイルス（ＶＳＶ）ウイルス混入物（ＴＣＩＤ５０）のＬｏｇ１０低減値を示す図。
【図４Ｃ】本開示のある特定の実施形態に従って、陰イオン交換クロマトグラフィー系をフロースルー様式で使用するヒトアデノウイルス５型（Ａｄ５）ウイルス混入物（ＴＣＩＤ５０）のＬｏｇ１０低減値を示す図。
【図４Ｄ】本開示のある特定の実施形態に従って、陰イオン交換クロマトグラフィー系をフロースルー様式で使用する、レオウイルス３型（Ｒｅｏ３）ウイルス混入物（ＴＣＩＤ５０）のＬｏｇ１０低減値を示す図。
【図５Ａ】非ヒト霊長類（ＮＨＰ）被殻から収集された組織パンチにおけるＨＴＴ  ｍＲＮＡノックダウンおよびベクターゲノムレベルを示すグラフのパネルである図。
【図５Ｂ】非ヒト霊長類（ＮＨＰ）被殻から収集された組織パンチにおけるＨＴＴ  ｍＲＮＡノックダウンおよびベクターゲノムレベルを示すグラフのパネルである図。
【図５Ｃ】非ヒト霊長類（ＮＨＰ）被殻から収集された組織パンチにおけるＨＴＴ  ｍＲＮＡノックダウンおよびベクターゲノムレベルを示すグラフのパネルである図。
【図６Ａ】ＮＨＰ尾状核から収集された組織パンチにおけるＨＴＴ  ｍＲＮＡノックダウンおよびベクターゲノムレベルを示すグラフのパネルである図。
【図６Ｂ】ＮＨＰ尾状核から収集された組織パンチにおけるＨＴＴ  ｍＲＮＡノックダウンおよびベクターゲノムレベルを示すグラフのパネルである図。
【図６Ｃ】ＮＨＰ尾状核から収集された組織パンチにおけるＨＴＴ  ｍＲＮＡノックダウンおよびベクターゲノムレベルを示すグラフのパネルである図。
【図７Ａ】ＮＨＰ運動皮質（ｍＣＴＸ）から収集された組織パンチにおけるＨＴＴ  ｍＲＮＡノックダウンおよびベクターゲノムレベルを示すグラフのパネルである図。
【図７Ｂ】ＮＨＰ運動皮質（ｍＣＴＸ）から収集された組織パンチにおけるＨＴＴ  ｍＲＮＡノックダウンおよびベクターゲノムレベルを示すグラフのパネルである図。
【図７Ｃ】ＮＨＰ運動皮質（ｍＣＴＸ）から収集された組織パンチにおけるＨＴＴ  ｍＲＮＡノックダウンおよびベクターゲノムレベルを示すグラフのパネルである図。
【図８Ａ】ＮＨＰ体性感覚皮質（ｓｓＣＴＸ）から収集された組織パンチにおけるＨＴＴ  ｍＲＮＡノックダウンおよびベクターゲノムレベルを示すグラフのパネルである図。
【図８Ｂ】ＮＨＰ体性感覚皮質（ｓｓＣＴＸ）から収集された組織パンチにおけるＨＴＴ  ｍＲＮＡノックダウンおよびベクターゲノムレベルを示すグラフのパネルである図。
【図８Ｃ】ＮＨＰ体性感覚皮質（ｓｓＣＴＸ）から収集された組織パンチにおけるＨＴＴ  ｍＲＮＡノックダウンおよびベクターゲノムレベルを示すグラフのパネルである図。
【図９Ａ】ＮＨＰ側頭皮質（ｔＣＴＸ）から収集された組織パンチにおけるＨＴＴ  ｍＲＮＡノックダウンおよびベクターゲノムレベルを示すグラフのパネルである図。
【図９Ｂ】ＮＨＰ側頭皮質（ｔＣＴＸ）から収集された組織パンチにおけるＨＴＴ  ｍＲＮＡノックダウンおよびベクターゲノムレベルを示すグラフのパネルである図。
【図９Ｃ】ＮＨＰ側頭皮質（ｔＣＴＸ）から収集された組織パンチにおけるＨＴＴ  ｍＲＮＡノックダウンおよびベクターゲノムレベルを示すグラフのパネルである図。
【図１０Ａ】ＮＨＰ皮質からレーザー捕捉された皮質錐体ニューロンにおける、それぞれ、ＨＴＴ  ｍＲＮＡノックダウンおよびベクターゲノムレベルを示すグラフである図。
【図１０Ｂ】ＮＨＰ皮質からレーザー捕捉された皮質錐体ニューロンにおける、それぞれ、ＨＴＴ  ｍＲＮＡノックダウンおよびベクターゲノムレベルを示すグラフである図。
【図１１Ａ】被殻から採取された組織パンチにおける、ＨＴＴ  ｍＲＮＡノックダウン対ベクターゲノムレベルの相関曲線を示す図。
【図１１Ｂ】被殻から採取された組織パンチにおける、ベクターゲノム対ＡＡＶ１−ＶＯＹＨＴ１  ｍｉＲＮＡレベルの相関曲線を示す図。
【図１１Ｃ】被殻から採取された組織パンチにおける、ＡＡＶ１−ＶＯＹＨＴ１  ｍｉＲＮＡ対ＨＴＴ  ｍＲＮＡレベルの相関曲線を示す図。
【図１２Ａ】尾状核から採取された組織パンチにおける、ＨＴＴ  ｍＲＮＡノックダウン対ベクターゲノムレベルの相関曲線を示す図。
【図１２Ｂ】尾状核から採取された組織パンチにおける、ベクターゲノム対ＡＡＶ１−ＶＯＹＨＴ１  ｍｉＲＮＡレベルの相関曲線を示す図。
【図１２Ｃ】尾状核から採取された組織パンチにおける、ＡＡＶ１−ＶＯＹＨＴ１  ｍｉＲＮＡ対ＨＴＴ  ｍＲＮＡレベルの相関曲線を示す図。
【図１３】視床から採取された組織パンチにおける、ＨＴＴ  ｍＲＮＡノックダウン対ベクターゲノムレベルの相関曲線を示す図。
【発明を実施するための形態】
【００５３】
Ｉ．アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）
概要
アデノ随伴ウイルス（ＡＶＶ）は、一本鎖ＤＮＡウイルスゲノムにより特徴付けられるパルボウイルス科の小型非エンベロープ正二十面体カプシドウイルスである。パルボウイルス科ウイルスは、２つの亜科：脊椎動物に感染するパルボウイルス亜科および無脊椎動物に感染するデンソウイルス亜科からなる。パルボウイルス科は、これらに限定されないが、ヒト、霊長類、ウシ、イヌ、ウマ、およびヒツジ種を含む脊椎動物宿主において複製可能なＡＡＶを含むディペンドウイルス属を含む。
【００５４】
パルボウイルスおよびパルボウイルス科の他のメンバーは、その内容をその全体で本願明細書に援用する、ケネス  Ｉ．ベルン（Ｋｅｎｎｅｔｈ  Ｉ．Ｂｅｒｎｓ）、「パルボウイルス科：ウイルスおよびそれらの複製（Ｔｈｅ  Ｖｉｒｕｓｅｓ  ａｎｄ  Ｔｈｅｉｒ  Ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ）」、ＦＩＥＬＤＳ  ＶＩＲＯＬＯＧＹ（第３版、１９９６年）の第６９章に概説されている。
【００５５】
ＡＡＶは、それらの構造が比較的単純であり、宿主ゲノムに組み込まれることも複製することもなく幅広い範囲の細胞（静止細胞および分裂細胞を含む）に感染することができ、免疫原性プロファイルが比較的良性であるため、生物学的ツールとして有用であることが証明されている。ウイルスのゲノムは、所望のペイロードが負荷されるか、または特定の組織を標的とし所望のペイロードを発現もしくは送達するように遺伝子操作されている機能的組換えウイルスまたはウイルス粒子のアセンブリーのための最低限の成分を含有するように操作されていてもよい。
【００５６】
ＡＡＶウイルスゲノム
野生型ＡＡＶウイルスゲノムは、およそ５，０００ヌクレオチド（ｎｔ）長の直鎖状の一本鎖ＤＮＡ（ｓｓＤＮＡ）分子である。逆位末端反復配列（ＩＴＲ）は、従来、５’末端および３’末端の両方でウイルスゲノムをフランキングし、ウイルスゲノムの複製起点を提供する。理論により束縛されることは望まないが、ＡＡＶウイルスゲノムは、典型的には、２つのＩＴＲ配列を含む。こうしたＩＴＲは、エネルギー的に安定した二本鎖領域を形成するｓｓＤＮＡの５’末端および３’末端の自己相補的領域（野生型ＡＡＶでは１４５ｎｔ）により規定される特徴的なＴ形ヘアピン構造を有する。二本鎖ヘアピン構造は、これに限定されないが、宿主ウイルス複製細胞の内因性ＤＮＡポリメラーゼ複合体のプライマーとして機能することによりＤＮＡ複製のための起点として作用することを含む、複数の機能を含む。
【００５７】
野生型ＡＡＶウイルスゲノムは、２つのオープンリーディングフレームのヌクレオチド配列をさらに含み、１つは、４つの非構造Ｒｅｐタンパク質（Ｒｅｐ遺伝子によりコードされるＲｅｐ７８、Ｒｅｐ６８、Ｒｅｐ５２、Ｒｅｐ４０）のためのものであり、１つは、３つのカプシドタンパク質または構造タンパク質（カプシド遺伝子またはＣａｐ遺伝子によりコードされるＶＰ１、ＶＰ２、ＶＰ３）のためのものである。Ｒｅｐタンパク質は、複製およびパッケージングに重要であり、カプシドタンパク質はアセンブルして、ＡＡＶのタンパク質シェル、すなわちＡＡＶカプシドを作出する。選択的スプライシングならびに選択的開始コドンおよびプロモータにより、単一のオープンリーディングフレームから４つの異なるＲｅｐタンパク質が生成され、単一のオープンリーディングフレームから３つのカプシドタンパク質が生成される。ＡＡＶ血清型により異なるが、非限定的な例として、ＡＡＶ９／ｈｕ．１４（その内容をその全体で本願明細書に援用する米国特許第７，９０６，１１１号明細書の配列番号１２３）の場合、ＶＰ１はアミノ酸１〜７３６を指し、ＶＰ２はアミノ酸１３８〜７３６を指し、ＶＰ３はアミノ酸２０３〜７３６を指す。言い換えれば、ＶＰ１は完全長カプシド配列であり、ＶＰ２およびＶＰ３は全体のより短い成分である。その結果、ＶＰ３領域の配列の変更は、ＶＰ１およびＶＰ２の変更でもあるが、親配列と比較した差異パーセントは、３つの中で最も短い配列であるためＶＰ３で最も大きくなるであろう。本明細書ではアミノ酸配列に関して説明されているが、こうしたタンパク質をコードする核酸配列も同様に説明することができる。３つのカプシドタンパク質が一緒にアセンブルしてＡＡＶカプシドタンパク質が作出される。理論に束縛されることは望まないが、ＡＡＶカプシドタンパク質は、典型的には、１：１：１０のモル比のＶＰ１：ＶＰ２：ＶＰ３を含む。本明細書で使用される場合、「ＡＡＶ血清型」は、主にＡＡＶカプシドにより規定される。また、一部の場合では、ＩＴＲは、ＡＡＶ血清型（例えば、ＡＡＶ２／９など）により具体的に記載される。
【００５８】
生物学的ツールとして使用するため、野生型ＡＡＶウイルスゲノムを修飾して、ｒｅｐ／ｃａｐ配列を、少なくとも１つのＩＴＲ領域を有するペイロード領域を含む核酸配列と置き換えることができる。典型的には、組換えＡＡＶウイルスゲノムには２つのＩＴＲ領域が存在する。産生中にｒｅｐ／ｃａｐ配列をトランスで提供して、ＡＡＶ粒子を生成することができる。
【００５９】
コード化異種性ペイロードに加えて、ＡＡＶベクターは、任意の天然に存在するおよび／または組換えＡＡＶ血清型ヌクレオチド配列もしくはバリアントのウイルスゲノムの全体または一部を含んでいてもよい。ＡＡＶバリアントは、概して物理的および機能的均等物である構築物を産生し、類似の機序により複製し、類似の機序によりアセンブルするように核酸レベル（ゲノムまたはカプシド）およびアミノ酸レベル（カプシド）において著しく相同性である配列を有してもよい。例えば、その各々の内容をその全体で本願明細書に援用する、チオリニら（Ｃｈｉｏｒｉｎｉ  ｅｔ  ａｌ．），Ｊ．Ｖｉｒ．７１：６８２３−３３（１９９７）；スリバスタバら（Ｓｒｉｖａｓｔａｖａ  ｅｔ  ａｌ．），Ｊ．Ｖｉｒ．４５：５５５−６４（１９８３）；チオリニら（Ｃｈｉｏｒｉｎｉ  ｅｔ  ａｌ．），Ｊ．Ｖｉｒ．７３：１３０９−１３１９（１９９９）；ラトリッジら（Ｒｕｔｌｅｄｇｅ  ｅｔ  ａｌ．），Ｊ．Ｖｉｒ．７２：３０９−３１９（１９９８）；およびウーら（Ｗｕ  ｅｔ  ａｌ．），Ｊ．Ｖｉｒ．７４：８６３５−４７（２０００）を参照されたい。
【００６０】
ある特定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子、ウイルスゲノム、および／またはペイロード、ならびにそれらの使用方法は、その内容をその全体で本願明細書に援用する国際公開第２０１７１８９９６３号パンフレットに記載されている通りであってもよい。
【００６１】
本開示のＡＡＶ粒子は、当業者にとって明白であるそのような製剤の任意の変異型を含む本開示の遺伝子治療製剤のいずれかに製剤化することができる。本出願における「ＡＡＶ粒子」、「ＡＡＶ粒子製剤」、および「製剤化ＡＡＶ粒子」への言及は、製剤化され得るＡＡＶ粒子および製剤化されているＡＡＶ粒子を指すが、いずれにも限定されない。
【００６２】
ある特定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子は、複製欠損であり、それらのウイルスゲノム内に機能的なＲｅｐおよびＣａｐタンパク質をコードする配列を欠如する組換えＡＡＶ（ｒＡＡＶ）ウイルス粒子である。こうした欠損ＡＡＶ粒子は、ほとんどまたはすべての親コード配列を欠如し、本質的に、１つまたは２つのＡＡＶ  ＩＴＲ配列、および細胞、組織、臓器、または生物へと送達するための目的の核酸（つまり、ペイロード）のみを運搬することができる。
【００６３】
ある特定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子のウイルスゲノムは、そこにコードされているコード配列の複製、転写、および翻訳を提供する少なくとも１つの制御エレメントを含む。コード配列が適切な宿主細胞中で複製、転写、および／または翻訳され得る限り、制御エレメントのすべてが常に存在する必要があるわけではない。発現制御エレメントの非限定的な例としては、転写開始および／もしくは終結のための配列、プロモータおよび／もしくはエンハンサー配列、スプライシングおよびポリアデニル化シグナルなどの効率的ＲＮＡプロセシングシグナル、細胞質ｍＲＮＡを安定させる配列、翻訳有効性を増強する配列（例えば、コザックコンセンサス配列）、タンパク質安定性を増強する配列、ならびに／またはタンパク質プロセシングおよび／もしくは分泌を増強する配列が挙げられる。
【００６４】
本開示によると、療法および／または診断に使用されるＡＡＶ粒子は、目的の核酸ペイロードまたは積荷の形質導入に必要な最小限の成分へと蒸留または低減されているウイルスを含む。このように、ＡＡＶ粒子は、野生型ウイルスに見出される有害な複製および／または組込み特徴を欠如しつつ特異的送達のためのビヒクルとして遺伝子操作される。
【００６５】
本開示のＡＡＶ粒子は、組換え的に産生されてもよく、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）親または参照配列に基づいていてもよい。本明細書で使用される場合、「ベクター」は、本明細書に記載の核酸などの異種性分子を輸送し、形質導入し、またはその他の形で担体として作用する任意の分子または部分である。
【００６６】
一本鎖ＡＡＶウイルスゲノム（例えば、ｓｓＡＡＶ）に加えて、本開示は、自己相補的ＡＡＶ（ｓｃＡＡＶ）ウイルスゲノムも提供する。ｓｃＡＡＶベクターゲノムは、一緒にアニーリングして二本鎖ＤＮＡを形成するＤＮＡ鎖を含有する。ｓｃＡＡＶは、第２鎖の合成を省くことにより、細胞での迅速発現を可能にする。
【００６７】
ある特定の実施形態では、本開示のＡＡＶウイルスゲノムは、ｓｃＡＡＶである。ある特定の実施形態では、本開示のＡＡＶウイルスゲノムは、ｓｓＡＡＶである。
ＡＡＶ粒子を産生および／または修飾するための方法は、シュードタイプＡＡＶ粒子など、当技術分野に開示されている（その各々の内容をその全体で本願明細書に援用する、ＰＣＴ特許出願番号、国際公開第２０００２８００４号パンフレット、国際公開第２００１２３００１号パンフレット、国際公開第２００４１１２７２７号パンフレット、国際公開第２００５００５６１０号パンフレット、および国際公開第２００５０７２３６４号パンフレット）。
【００６８】
ＡＡＶ粒子は、送達の効率が増強されるように修飾されていてもよい。そのような修飾ＡＡＶ粒子は、効率的にパッケージングすることができ、高頻度でおよび最小限の毒性で標的細胞への感染を成功させるために使用することができる。ある特定の実施形態では、ＡＡＶ粒子のカプシドは、その内容をその全体で本願明細書に援用する米国特許出願公開第２０１３０１９５８０１号明細書に記載の方法に従って遺伝子操作されている。
【００６９】
ある特定の実施形態では、本開示のポリペプチドまたはタンパク質をコードするペイロード領域を含むＡＡＶ粒子は、哺乳動物細胞に導入することができる。
ＡＡＶ血清型
本開示のＡＡＶ粒子は、任意の天然または組換えＡＡＶ血清型を含んでいてもよく、またはそれに由来してもよい。本開示によると、ＡＡＶ粒子は、以下のいずれかから選択される血清型を利用するかもしくはそれに基づいていてもよく、または以下のいずれかから選択されるペプチドを含んでいてもよい：ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ２Ｇ９、ＡＡＶ３、ＡＡＶ３ａ、ＡＡＶ３ｂ、ＡＡＶ３−３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ４−４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ６．１、ＡＡＶ６．２、ＡＡＶ６．１．２、ＡＡＶ７、ＡＡＶ７．２、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ９．１１、ＡＡＶ９．１３、ＡＡＶ９．１６、ＡＡＶ９．２４、ＡＡＶ９．４５、ＡＡＶ９．４７、ＡＡＶ９．６１、ＡＡＶ９．６８、ＡＡＶ９．８４、ＡＡＶ９．９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、ＡＡＶ１２、ＡＡＶ１６．３、ＡＡＶ２４．１、ＡＡＶ２７．３、ＡＡＶ４２．１２、ＡＡＶ４２−１ｂ、ＡＡＶ４２−２、ＡＡＶ４２−３ａ、ＡＡＶ４２−３ｂ、ＡＡＶ４２−４、ＡＡＶ４２−５ａ、ＡＡＶ４２−５ｂ、ＡＡＶ４２−６ｂ、ＡＡＶ４２−８、ＡＡＶ４２−１０、ＡＡＶ４２−１１、ＡＡＶ４２−１２、ＡＡＶ４２−１３、ＡＡＶ４２−１５、ＡＡＶ４２−ａａ、ＡＡＶ４３−１、ＡＡＶ４３−１２、ＡＡＶ４３−２０、ＡＡＶ４３−２１、ＡＡＶ４３−２３、ＡＡＶ４３−２５、ＡＡＶ４３−５、ＡＡＶ４４．１、ＡＡＶ４４．２、ＡＡＶ４４．５、ＡＡＶ２２３．１、ＡＡＶ２２３．２、ＡＡＶ２２３．４、ＡＡＶ２２３．５、ＡＡＶ２２３．６、ＡＡＶ２２３．７、ＡＡＶ１−７／ｒｈ．４８、ＡＡＶ１−８／ｒｈ．４９、ＡＡＶ２−１５／ｒｈ．６２、ＡＡＶ２−３／ｒｈ．６１、ＡＡＶ２−４／ｒｈ．５０、ＡＡＶ２−５／ｒｈ．５１、ＡＡＶ３．１／ｈｕ．６、ＡＡＶ３．１／ｈｕ．９、ＡＡＶ３−９／ｒｈ．５２、ＡＡＶ３−１１／ｒｈ．５３、ＡＡＶ４−８／ｒ１１．６４、ＡＡＶ４−９／ｒｈ．５４、ＡＡＶ４−１９／ｒｈ．５５、ＡＡＶ５−３／ｒｈ．５７、ＡＡＶ５−２２／ｒｈ．５８、ＡＡＶ７．３／ｈｕ．７、ＡＡＶ１６．８／ｈｕ．１０、ＡＡＶ１６．１２／ｈｕ．１１、ＡＡＶ２９．３／ｂｂ．１、ＡＡＶ２９．５／ｂｂ．２、ＡＡＶ１０６．１／ｈｕ．３７、ＡＡＶ１１４．３／ｈｕ．４０、ＡＡＶ１２７．２／ｈｕ．４１、ＡＡＶ１２７．５／ｈｕ．４２、ＡＡＶ１２８．３／ｈｕ．４４、ＡＡＶ１３０．４／ｈｕ．４８、ＡＡＶ１４５．１／ｈｕ．５３、ＡＡＶ１４５．５／ｈｕ．５４、ＡＡＶ１４５．６／ｈｕ．５５、ＡＡＶ１６１．１０／ｈｕ．６０、ＡＡＶ１６１．６／ｈｕ．６１、ＡＡＶ３３．１２／ｈｕ．１７、ＡＡＶ３３．４／ｈｕ．１５、ＡＡＶ３３．８／ｈｕ．１６、ＡＡＶ５２／ｈｕ．１９、ＡＡＶ５２．１／ｈｕ．２０、ＡＡＶ５８．２／ｈｕ．２５、ＡＡＶＡ３．３、ＡＡＶＡ３．４、ＡＡＶＡ３．５、ＡＡＶＡ３．７、ＡＡＶＣ１、ＡＡＶＣ２、ＡＡＶＣ５、ＡＡＶ−ＤＪ、ＡＡＶ−ＤＪ８、ＡＡＶＦ３、ＡＡＶＦ５、ＡＡＶＨ２、ＡＡＶｒｈ．７２、ＡＡＶｈｕ．８、ＡＡＶｒｈ．６８、ＡＡＶｒｈ．７０、ＡＡＶｐｉ．１、ＡＡＶｐｉ．３、ＡＡＶｐｉ．２、ＡＡＶｒｈ．６０、ＡＡＶｒｈ．４４、ＡＡＶｒｈ．６５、ＡＡＶｒｈ．５５、ＡＡＶｒｈ．４７、ＡＡＶｒｈ．６９、ＡＡＶｒｈ．４５、ＡＡＶｒｈ．５９、ＡＡＶｈｕ．１２、ＡＡＶＨ６、ＡＡＶＬＫ０３、ＡＡＶＨ−１／ｈｕ．１、ＡＡＶＨ−５／ｈｕ．３、ＡＡＶＬＧ−１０／ｒｈ．４０、ＡＡＶＬＧ−４／ｒｈ．３８、ＡＡＶＬＧ−９／ｈｕ．３９、ＡＡＶＮ７２１−８／ｒｈ．４３、ＡＡＶＣｈ．５、ＡＡＶＣｈ．５Ｒ１、ＡＡＶｃｙ．２、ＡＡＶｃｙ．３、ＡＡＶｃｙ．４、ＡＡＶｃｙ．５、ＡＡＶＣｙ．５Ｒ１、ＡＡＶＣｙ．５Ｒ２、ＡＡＶＣｙ．５Ｒ３、ＡＡＶＣｙ．５Ｒ４、ＡＡＶｃｙ．６、ＡＡＶｈｕ．１、ＡＡＶｈｕ．２、ＡＡＶｈｕ．３、ＡＡＶｈｕ．４、ＡＡＶｈｕ．５、ＡＡＶｈｕ．６、ＡＡＶｈｕ．７、ＡＡＶｈｕ．９、ＡＡＶｈｕ．１０、ＡＡＶｈｕ．１１、ＡＡＶｈｕ．１３、ＡＡＶｈｕ．１５、ＡＡＶｈｕ．１６、ＡＡＶｈｕ．１７、ＡＡＶｈｕ．１８、ＡＡＶｈｕ．２０、ＡＡＶｈｕ．２１、ＡＡＶｈｕ．２２、ＡＡＶｈｕ．２３．２、ＡＡＶｈｕ．２４、ＡＡＶｈｕ．２５、ＡＡＶｈｕ．２７、ＡＡＶｈｕ．２８、ＡＡＶｈｕ．２９、ＡＡＶｈｕ．２９Ｒ、ＡＡＶｈｕ．３１、ＡＡＶｈｕ．３２、ＡＡＶｈｕ．３４、ＡＡＶｈｕ．３５、ＡＡＶｈｕ．３７、ＡＡＶｈｕ．３９、ＡＡＶｈｕ．４０、ＡＡＶｈｕ．４１、ＡＡＶｈｕ．４２、ＡＡＶｈｕ．４３、ＡＡＶｈｕ．４４、ＡＡＶｈｕ．４４Ｒ１、ＡＡＶｈｕ．４４Ｒ２、ＡＡＶｈｕ．４４Ｒ３、ＡＡＶｈｕ．４５、ＡＡＶｈｕ．４６、ＡＡＶｈｕ．４７、ＡＡＶｈｕ．４８、ＡＡＶｈｕ．４８Ｒ１、ＡＡＶｈｕ．４８Ｒ２、ＡＡＶｈｕ．４８Ｒ３、ＡＡＶｈｕ．４９、ＡＡＶｈｕ．５１、ＡＡＶｈｕ．５２、ＡＡＶｈｕ．５４、ＡＡＶｈｕ．５５、ＡＡＶｈｕ．５６、ＡＡＶｈｕ．５７、ＡＡＶｈｕ．５８、ＡＡＶｈｕ．６０、ＡＡＶｈｕ．６１、ＡＡＶｈｕ．６３、ＡＡＶｈｕ．６４、ＡＡＶｈｕ．６６、ＡＡＶｈｕ．６７、ＡＡＶｈｕ．１４／９、ＡＡＶｈｕ．ｔ  １９、ＡＡＶｒｈ．２、ＡＡＶｒｈ．２Ｒ、ＡＡＶｒｈ．８、ＡＡＶｒｈ．８Ｒ、ＡＡＶｒｈ．１０、ＡＡＶｒｈ．１２、ＡＡＶｒｈ．１３、ＡＡＶｒｈ．１３Ｒ、ＡＡＶｒｈ．１４、ＡＡＶｒｈ．１７、ＡＡＶｒｈ．１８、ＡＡＶｒｈ．１９、ＡＡＶｒｈ．２０、ＡＡＶｒｈ．２１、ＡＡＶｒｈ．２２、ＡＡＶｒｈ．２３、ＡＡＶｒｈ．２４、ＡＡＶｒｈ．２５、ＡＡＶｒｈ．３１、ＡＡＶｒｈ．３２、ＡＡＶｒｈ．３３、ＡＡＶｒｈ．３４、ＡＡＶｒｈ．３５、ＡＡＶｒｈ．３６、ＡＡＶｒｈ．３７、ＡＡＶｒｈ．３７Ｒ２、ＡＡＶｒｈ．３８、ＡＡＶｒｈ．３９、ＡＡＶｒｈ．４０、ＡＡＶｒｈ．４６、ＡＡＶｒｈ．４８、ＡＡＶｒｈ．４８．１、ＡＡＶｒｈ．４８．１．２、ＡＡＶｒｈ．４８．２、ＡＡＶｒｈ．４９、ＡＡＶｒｈ．５１、ＡＡＶｒｈ．５２、ＡＡＶｒｈ．５３、ＡＡＶｒｈ．５４、ＡＡＶｒｈ．５６、ＡＡＶｒｈ．５７、ＡＡＶｒｈ．５８、ＡＡＶｒｈ．６１、ＡＡＶｒｈ．６４、ＡＡＶｒｈ．６４Ｒ１、ＡＡＶｒｈ．６４Ｒ２、ＡＡＶｒｈ．６７、ＡＡＶｒｈ．７３、ＡＡＶｒｈ．７４、ＡＡＶｒｈ８Ｒ、ＡＡＶｒｈ８Ｒ  Ａ５８６Ｒ突然変異体、ＡＡＶｒｈ８Ｒ  Ｒ５３３Ａ突然変異体、ＡＡＡＶ、ＢＡＡＶ、ヤギＡＡＶ、ウシＡＡＶ、ヒツジＡＡＶ、ＡＡＶｈＥ１．１、ＡＡＶｈＥｒ１．５、ＡＡＶｈＥＲ１．１４、ＡＡＶｈＥｒ１．８、ＡＡＶｈＥｒ１．１６、ＡＡＶｈＥｒ１．１８、ＡＡＶｈＥｒ１．３５、ＡＡＶｈＥｒ１．７、ＡＡＶｈＥｒ１．３６、ＡＡＶｈＥｒ２．２９、ＡＡＶｈＥｒ２．４、ＡＡＶｈＥｒ２．１６、ＡＡＶｈＥｒ２．３０、ＡＡＶｈＥｒ２．３１、ＡＡＶｈＥｒ２．３６、ＡＡＶｈＥＲ１．２３、ＡＡＶｈＥｒ３．１、ＡＡＶ２．５Ｔ、ＡＡＶ−ＰＡＥＣ、ＡＡＶ−ＬＫ０１、ＡＡＶ−ＬＫ０２、ＡＡＶ−ＬＫ０３、ＡＡＶ−ＬＫ０４、ＡＡＶ−ＬＫ０５、ＡＡＶ−ＬＫ０６、ＡＡＶ−ＬＫ０７、ＡＡＶ−ＬＫ０８、ＡＡＶ−ＬＫ０９、ＡＡＶ−ＬＫ１０、ＡＡＶ−ＬＫ１１、ＡＡＶ−ＬＫ１２、ＡＡＶ−ＬＫ１３、ＡＡＶ−ＬＫ１４、ＡＡＶ−ＬＫ１５、ＡＡＶ−ＬＫ１６、ＡＡＶ−ＬＫ１７、ＡＡＶ−ＬＫ１８、ＡＡＶ−ＬＫ１９、ＡＡＶ−ＰＡＥＣ２、ＡＡＶ−ＰＡＥＣ４、ＡＡＶ−ＰＡＥＣ６、ＡＡＶ−ＰＡＥＣ７、ＡＡＶ−ＰＡＥＣ８、ＡＡＶ−ＰＡＥＣ１１、ＡＡＶ−ＰＡＥＣ１２、ＡＡＶ−２−ｐｒｅ−ｍｉＲＮＡ−１０１、ＡＡＶ−８ｈ、ＡＡＶ−８ｂ、ＡＡＶ−ｈ、ＡＡＶ−ｂ、ＡＡＶ  ＳＭ  １０−２、ＡＡＶシャッフル１００−１、ＡＡＶシャッフル１００−３、ＡＡＶシャッフル１００−７、ＡＡＶシャッフル１０−２、ＡＡＶシャッフル１０−６、ＡＡＶシャッフル１０−８、ＡＡＶシャッフル１００−２、ＡＡＶ  ＳＭ  １０−１、ＡＡＶ  ＳＭ  １０−８、ＡＡＶ  ＳＭ  １００−３、ＡＡＶ  ＳＭ  １００−１０、ＢＮＰ６１  ＡＡＶ、ＢＮＰ６２  ＡＡＶ、ＢＮＰ６３  ＡＡＶ、ＡＡＶｒｈ．５０、ＡＡＶｒｈ．４３、ＡＡＶｒｈ．６２、ＡＡＶｒｈ．４８、ＡＡＶｈｕ．１９、ＡＡＶｈｕ．１１、ＡＡＶｈｕ．５３、ＡＡＶ４−８／ｒｈ．６４、ＡＡＶＬＧ−９／ｈｕ．３９、ＡＡＶ５４．５／ｈｕ．２３、ＡＡＶ５４．２／ｈｕ．２２、ＡＡＶ５４．７／ｈｕ．２４、ＡＡＶ５４．１／ｈｕ．２１、ＡＡＶ５４．４Ｒ／ｈｕ．２７、ＡＡＶ４６．２／ｈｕ．２８、ＡＡＶ４６．６／ｈｕ．２９、ＡＡＶ１２８．１／ｈｕ．４３、真型ＡＡＶ（ｔｔＡＡＶ）、ＵＰＥＮＮ  ＡＡＶ１０、ジャパニーズＡＡＶ１０血清型、ＡＡＶ  ＣＢｒ−７．１、ＡＡＶ  ＣＢｒ−７．１０、ＡＡＶ  ＣＢｒ−７．２、ＡＡＶ  ＣＢｒ−７．３、ＡＡＶ  ＣＢｒ−７．４、ＡＡＶ  ＣＢｒ−７．５、ＡＡＶ  ＣＢｒ−７．７、ＡＡＶ  ＣＢｒ−７．８、ＡＡＶ  ＣＢｒ−Ｂ７．３、ＡＡＶ  ＣＢｒ−Ｂ７．４、ＡＡＶ  ＣＢｒ−Ｅ１、ＡＡＶ  ＣＢｒ−Ｅ２、ＡＡＶ  ＣＢｒ−Ｅ３、ＡＡＶ  ＣＢｒ−Ｅ４、ＡＡＶ  ＣＢｒ−Ｅ５、ＡＡＶ  ＣＢｒ−ｅ５、ＡＡＶ  ＣＢｒ−Ｅ６、ＡＡＶ  ＣＢｒ−Ｅ７、ＡＡＶ  ＣＢｒ−Ｅ８、ＡＡＶ  ＣＨｔ−１、ＡＡＶ  ＣＨｔ−２、ＡＡＶ  ＣＨｔ−３、ＡＡＶ  ＣＨｔ−６．１、ＡＡＶ  ＣＨｔ−６．１０、ＡＡＶ  ＣＨｔ−６．５、ＡＡＶ  ＣＨｔ−６．６、ＡＡＶ  ＣＨｔ−６．７、ＡＡＶ  ＣＨｔ−６．８、ＡＡＶ  ＣＨｔ−Ｐ１、ＡＡＶ  ＣＨｔ−Ｐ２、ＡＡＶ  ＣＨｔ−Ｐ５、ＡＡＶ  ＣＨｔ−Ｐ６、ＡＡＶ  ＣＨｔ−Ｐ８、ＡＡＶ  ＣＨｔ−Ｐ９、ＡＡＶ  ＣＫｄ−１、ＡＡＶ  ＣＫｄ−１０、ＡＡＶ  ＣＫｄ−２、ＡＡＶ  ＣＫｄ−３、ＡＡＶ  ＣＫｄ−４、ＡＡＶ  ＣＫｄ−６、ＡＡＶ  ＣＫｄ−７、ＡＡＶ  ＣＫｄ−８、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｂ１、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｂ２、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｂ３、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｂ４、ＡＡＶ  Ｃ���ｄ−Ｂ５、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｂ６、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｂ７、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｂ８、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｈ１、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｈ２、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｈ３、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｈ４、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｈ５、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｈ６、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｎ３、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｎ４、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｎ９、ＡＡＶ  ＣＬｇ−Ｆ１、ＡＡＶ  ＣＬｇ−Ｆ２、ＡＡＶ  ＣＬｇ−Ｆ３、ＡＡＶ  ＣＬｇ−Ｆ４、ＡＡＶ  ＣＬｇ−Ｆ５、ＡＡＶ  ＣＬｇ−Ｆ６、ＡＡＶ  ＣＬｇ−Ｆ７、ＡＡＶ  ＣＬｇ−Ｆ８、ＡＡＶ  ＣＬｖ−１、ＡＡＶ  ＣＬｖ１−１、ＡＡＶ  Ｃｌｖ１−１０、ＡＡＶ  ＣＬｖ１−２、ＡＡＶ  ＣＬｖ−１２、ＡＡＶ  ＣＬｖ１−３、ＡＡＶ  ＣＬｖ−１３、ＡＡＶ  ＣＬｖ１−４、ＡＡＶ  Ｃｌｖ１−７、ＡＡＶ  Ｃｌｖ１−８、ＡＡＶ  Ｃｌｖ１−９、ＡＡＶ  ＣＬｖ−２、ＡＡＶ  ＣＬｖ−３、ＡＡＶ  ＣＬｖ−４、ＡＡＶ  ＣＬｖ−６、ＡＡＶ  ＣＬｖ−８、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｄ１、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｄ２、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｄ３、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｄ４、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｄ５、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｄ６、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｄ７、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｄ８、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｅ１、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｋ１、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｋ３、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｋ６、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｌ４、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｌ５、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｌ６、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｍ１、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｍ１１、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｍ２、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｍ５、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｍ６、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｍ７、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｍ８、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｍ９、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｒ１、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｒ２、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｒ３、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｒ４、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｒ５、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｒ６、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｒ７、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｒ８、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｒ９、ＡＡＶ  ＣＳｐ−１、ＡＡＶ  ＣＳｐ−１０、ＡＡＶ  ＣＳｐ−１１、ＡＡＶ  ＣＳｐ−２、ＡＡＶ  ＣＳｐ−３、ＡＡＶ  ＣＳｐ−４、ＡＡＶ  ＣＳｐ−６、ＡＡＶ  ＣＳｐ−７、ＡＡＶ  ＣＳｐ−８、ＡＡＶ  ＣＳｐ−８．１０、ＡＡＶ  ＣＳｐ−８．２、ＡＡＶ  ＣＳｐ−８．４、ＡＡＶ  ＣＳｐ−８．５、ＡＡＶ  ＣＳｐ−８．６、ＡＡＶ  ＣＳｐ−８．７、ＡＡＶ  ＣＳｐ−８．８、ＡＡＶ  ＣＳｐ−８．９、ＡＡＶ  ＣＳｐ−９、ＡＡＶ．ｈｕ．４８Ｒ３、ＡＡＶ．ＶＲ−３５５、ＡＡＶ３Ｂ、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶＦ１／ＨＳＣ１、ＡＡＶＦ１
１／ＨＳＣ１１、ＡＡＶＦ１２／ＨＳＣ１２、ＡＡＶＦ１３／ＨＳＣ１３、ＡＡＶＦ１４／ＨＳＣ１４、ＡＡＶＦ１５／ＨＳＣ１５、ＡＡＶＦ１６／ＨＳＣ１６、ＡＡＶＦ１７／ＨＳＣ１７、ＡＡＶＦ２／ＨＳＣ２、ＡＡＶＦ３／ＨＳＣ３、ＡＡＶＦ４／ＨＳＣ４、ＡＡＶＦ５／ＨＳＣ５、ＡＡＶＦ６／ＨＳＣ６、ＡＡＶＦ７／ＨＳＣ７、ＡＡＶＦ８／ＨＳＣ８、ＡＡＶＦ９／ＨＳＣ９、ＡＡＶｒｈ２０、ＡＡＶｒｈ３２／３３、ＡＡＶｒｈ３９、ＡＡＶｒｈ４６、ＡＡＶｒｈ７３、ＡＡＶｒｈ７４、ＡＡＶｈｕ．２６、ＶＯＹ１０１、ＶＯＹ２０１、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ（ＰＨＰ．Ｂ）、ＡＡＶＰＨＰ．Ａ（ＰＨＰ．Ａ）、ＡＡＶＧ２Ｂ−２６、ＡＡＶＧ２Ｂ−１３、ＡＡＶＴＨ１．１−３２、ＡＡＶＴＨ１．１−３５、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ２（ＰＨＰ．Ｂ２）、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ３（ＰＨＰ．Ｂ３）、ＡＡＶＰＨＰ．Ｎ／ＰＨＰ．Ｂ−ＤＧＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＥＳＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＧＧＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＡＴＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＡＴＴ−Ｔ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＤＧＴ−Ｔ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＧＧＴ−Ｔ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＳＧＳ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＡＱＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＱＱＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＳＮＰ（３）、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＳＮＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＱＧＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＮＱＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＥＧＳ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＳＧＮ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＥＧＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＤＳＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＤＳＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＳＴＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＰＱＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＳＱＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＱＬＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＴＭＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＴＴＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｓ／Ｇ２Ａ１２、ＡＡＶＧ２Ａ１５／Ｇ２Ａ３（Ｇ２Ａ３）、ＡＡＶＧ２Ｂ４（Ｇ２Ｂ４）、ＡＡＶＧ２Ｂ５（Ｇ２Ｂ５）、ＰＨＰ．Ｓ、またはそれらのバリアントもしくは誘導体。
【００７０】
一部の実施形態では、ＡＡＶは、表１に見出されるもののいずれかから選択される血清型であってもよい。
一部の実施形態では、ＡＡＶは、表１の配列のうちの配列、その断片、またはバリアントを含んでもよい。
【００７１】
一部の実施形態では、ＡＡＶは、表１に記載される通りの配列、断片、またはバリアントによりコードされてもよい。
【００７２】
【表１−１】
2021530548.tif 000003
【００７３】
【表１−２】
2021530548.tif 000004
【００７４】
【表１−３】
2021530548.tif 000005
【００７５】
表１に列挙されている特許、出願、および／または刊行物の各々は、その全体が本願明細書に援用される。
一部の実施形態では、血清型は、グリムら（Ｇｒｉｍｍ  ｅｔ  ａｌ．）（Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｖｉｒｏｌｏｇｙ  ８２（１２）：５８８７−５９１１（２００８）、参照により全体が本明細書に援用される）により記載されている通りのＡＡＶＤＪ８（またはＡＡＶ−ＤＪ８）など、ＡＡＶＤＪ（またはＡＡＶ−ＤＪ）またはそのバリアントであってもよい。ＡＡＶＤＪ８のアミノ酸配列は、ヘパリン結合ドメイン（ＨＢＤ）を除去するために２つ以上の多くの突然変異を含んでいてもよい。非限定的な例として、その内容をその全体で本願明細書に援用する米国特許第７，５８８，７７２号明細書に配列番号１として記載されているＡＡＶ−ＤＪ配列は、２つの突然変異：（１）アミノ酸５８７のアルギニン（Ｒ；Ａｒｇ）がグルタミン（Ｑ；Ｇｌｎ）に変更されているＲ５８７Ｑおよび（２）アミノ酸５９０のアルギニン（Ｒ；Ａｒｇ）がスレオニン（Ｔ；Ｔｈｒ）に変更されているＲ５９０Ｔを含んでいてもよい。別の非限定的な例として、３つの突然変異：（１）アミノ酸４０６のリシン（Ｋ；Ｌｙｓ）がアルギニン（Ｒ；Ａｒｇ）に変更されているＫ４０６Ｒ、（２）アミノ酸５８７のアルギニン（Ｒ；Ａｒｇ）がグルタミン（Ｑ；Ｇｌｎ）に変更されているＲ５８７Ｑ、および（３）アミノ酸５９０のアルギニン（Ｒ；Ａｒｇ）がスレオニン（Ｔ；Ｔｈｒ）に変更されているＲ５９０Ｔを含んでいてもよい。
【００７６】
一部の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、これらに限定されないが、野生型ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、ＡＡＶ１２、およびそれらのハイブリッドのＹ２５２Ｆ、Ｙ２７２Ｆ、Ｙ４４４Ｆ、Ｙ５００Ｆ、Ｙ７００Ｆ、Ｙ７０４Ｆ、Ｙ７３０Ｆ、Ｙ２７５Ｆ、Ｙ２８１Ｆ、Ｙ５０８Ｆ、Ｙ５７６Ｆ、Ｙ６１２Ｇ、Ｙ６７３Ｆ、およびＹ７２０Ｆなどの、その内容をその全体で本願明細書に援用する米国特許出願公開第２０１６０３６１４３９号明細書に記載されている通りの修飾であってもよくまたはそれを有していてもよい。
【００７７】
一部の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、これらに限定されないが、ＡＡＶ６（米国特許第９５４６１１２号明細書の配列番号４）、ＡＡＶ１（米国特許第９５４６１１２号明細書の配列番号６）、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ７、ＡＡＶ９、ＡＡＶ１０、またはＡＡＶ１１、またはそれらの誘導体の配列における、Ｆ１２９Ｌ、Ｄ４１８Ｅ、Ｋ５３１Ｅ、Ｌ５８４Ｆ、Ｖ５９８Ａ、およびＨ６４２Ｎ突然変異の少なくとも２つ、しかしながらすべてではないものなど、その内容をその全体で本願明細書に援用する米国特許第９５４６１１２号明細書に記載されている通りの突然変異であってもよくまたはそれを有していてもよい。更に別の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、Ｋ５３１Ｅ突然変異を含むＡＡＶ６配列（米国特許第９５４６１１２号明細書の配列番号５）であってもよくまたはそれを有していてもよい。
【００７８】
一部の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、これらに限定されないが、別のアミノ酸、好ましくはフェニルアラニン残基に置換された、好ましくは、ＡＡＶ１（米国特許出願公開第２０１３０２２４８３６号明細書の配列番号２）の２５２、２７３、４４５、７０１、７０５、および７３１位の表面露出チロシン残基の少なくとも１つなど、その内容をその全体で本願明細書に援用する米国特許出願公開第２０１３０２２４８３６号明細書に記載されている通りの、ＡＡＶ１配列における突然変異であってもよくまたはそれを有していてもよい。一部の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、これらに限定されないが、別のアミノ酸、好ましくはフェニルアラニン残基に置換された、好ましくは、ＡＡＶ２（米国特許出願公開第２０１３０２２４８３６号明細書の配列番号４）の２５２、２７２、４４４、５００、７００、７０４、および７３０位の表面露出チロシン残基の少なくとも１つなど、ＡＡＶ９配列における突然変異であってもよくまたはそれを有していてもよい。一部の実施形態では、ＡＡＶ９（米国特許出願公開第２０１３０２２４８３６号明細書の配列番号６）の４４６位のチロシン残基は、フェニルアラニン残基に置換されている。
【００７９】
一部の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、これらに限定されないが、ＡＡＶ９．９、ＡＡＶ９．１１、ＡＡＶ９．１３、ＡＡＶ９．１６、ＡＡＶ９．２４、ＡＡＶ９．４５、ＡＡＶ９．４７、ＡＡＶ９．６１、ＡＡＶ９．６８、ＡＡＶ９．８４など、Ｎ  プリチャーラら（Ｎ  Ｐｕｌｉｃｈｅｒｌａ  ｅｔ  ａｌ．）（その全体で本願明細書に援用する、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ  １９（６）：１０７０−１０７８（２０１１））により記載される通りのＡＡＶ９配列における突然変異であってもよくまたはそれを有してもよい。
【００８０】
一部の実施形態では、血清型は、その全体で本願明細書に援用する国際公開第２０１６１３０５８９号パンフレットに記載されている通りのＡＡＶ２またはそのバリアントであってもよい。ＡＡＶ２のアミノ酸配列は、Ｎ５８７Ａ、Ｅ５４８Ａ、またはＮ７０８Ａ突然変異を含んでいてもよい。一部の実施形態では、任意のＡＡＶのアミノ酸配列は、Ｖ７０８Ｋ突然変異を含んでいてもよい。
【００８１】
一部の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、これらに限定されないが、ＡＡＶ２（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号９７）またはそのバリアントの部位特異的突然変異型カプシドタンパク質であって、特異的部位が、ＶＰ１またはその断片の部位Ｒ４４７、Ｇ４５３、Ｓ５７８、Ｎ５８７、Ｎ５８７＋１、Ｓ６６２から選択される少なくとも１つの部位であるものなど、その内容をその全体で本願明細書に援用する米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書に記載されている通りの配列であってもよくまたはそれを有していてもよい。
【００８２】
一部の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、その内容をその全体で本願明細書に援用する米国特許出願公開第２０１７０１４５４０５号明細書に記載の通りに修飾されていてもよい。ＡＡＶ血清型としては、修飾ＡＡＶ２（例えば、Ｙ４４４Ｆ、Ｙ５００Ｆ、Ｙ７３０Ｆ、および／またはＳ６６２Ｖの修飾）、修飾ＡＡＶ３（例えば、Ｙ７０５Ｆ、Ｙ７３１Ｆ、および／またはＴ４９２Ｖの修飾）、および修飾ＡＡＶ６（例えば、Ｓ６６３Ｖおよび／またはＴ４９２Ｖの修飾）を挙げることができる。
【００８３】
一部の実施形態では、ＡＡＶカプシド血清型の選択または使用は、様々な種に由来してもよい。一部の実施形態では、ＡＡＶは、トリＡＡＶ（ＡＡＡＶ）であってもよい。ＡＡＡＶ血清型は、これらに限定されないが、ＡＡＡＶ（米国特許第９，２３８，８００号明細書の配列番号１、２、４、６、８、１０、１２、および１４）またはそれらのバリアントなど、その内容をその全体で本願明細書に援用する米国特許第９２３８８００号明細書に記載の通りの配列であってもよくまたはそれを有していてもよい。
【００８４】
一部の実施形態では、ＡＡＶは、ウシＡＡＶ（ＢＡＡＶ）であってもよい。ＢＡＡＶ血清型は、これらに限定されないが、ＢＡＡＶ（米国特許第９１９３７６９号明細書の配列番号１および６）またはそれらのバリアントなど、その内容をその全体で本願明細書に援用する米国特許第９，１９３，７６９号明細書に記載の通りの配列であってもよくまたはそれを有していてもよい。ＢＡＡＶ血清型は、これらに限定されないが、ＢＡＡＶ（米国特許第７４２７３９６号明細書の配列番号５および６）またはそれらのバリアントなど、その内容をその全体で本願明細書に援用する米国特許第７４２７３９６号明細書に記載の通りの配列であってもよくまたはそれを有していてもよい。
【００８５】
一部の実施形態では、ＡＡＶは、ヤギＡＡＶであってもよい。ヤギＡＡＶ血清型は、これらに限定されないが、ヤギＡＡＶ（米国特許第７４２７３９６号明細書の配列番号３）またはそのバリアントなど、その内容をその全体で本願明細書に援用する米国特許第７４２７３９６号明細書に記載の通りの配列であってもよくまたはそれを有していてもよい。
【００８６】
他の実施形態では、ＡＡＶは、２つ以上の親血清型に由来するハイブリッドＡＡＶとして遺伝子操作されていてもよい。一部の実施形態では、ＡＡＶは、ＡＡＶ２およびＡＡＶ９に由来する配列を含むＡＡＶ２Ｇ９であってもよい。ＡＡＶ２Ｇ９血清型は、その内容をその全体で本願明細書に援用する米国特許出願公開第２０１６００１７００５号明細書に記載の通りの配列であってもよくまたはそれを有していてもよい。
【００８７】
ある特定の実施形態では、ＡＡＶは、その内容をその全体で本願明細書に援用する、プリチャーラら（Ｐｕｌｉｃｈｅｒｌａ  ｅｔ  ａｌ．）（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ  １９（６）：１０７０−１０７８（２０１１）により記載されている通り、アミノ酸３９０〜６２７（ＶＰ１付番）に突然変異を有するＡＡＶ９カプシドライブラリーにより生成される血清型であってもよい。血清型ならびに対応するヌクレオチド置換およびアミノ酸置換は、これらに限定されないが、ＡＡＶ９．１（Ｇ１５９４Ｃ；Ｄ５３２Ｈ）、ＡＡＶ６．２（Ｔ１４１８ＡおよびＴ１４３６Ｘ；Ｖ４７３ＤおよびＩ４７９Ｋ）、ＡＡＶ９．３（Ｔ１２３８Ａ；Ｆ４１３Ｙ）、ＡＡＶ９．４（Ｔ１２５０ＣおよびＡ１６１７Ｔ；Ｆ４１７Ｓ）、ＡＡＶ９．５（Ａ１２３５Ｇ、Ａ１３１４Ｔ、Ａ１６４２Ｇ、Ｃ１７６０Ｔ；Ｑ４１２Ｒ、Ｔ５４８Ａ、Ａ５８７Ｖ）、ＡＡＶ９．６（Ｔ１２３１Ａ；Ｆ４１１Ｉ）、ＡＡＶ９．９（Ｇ１２０３Ａ、Ｇ１７８５Ｔ；Ｗ５９５Ｃ）、ＡＡＶ９．１０（Ａ１５００Ｇ、Ｔ１６７６Ｃ；Ｍ５５９Ｔ）、ＡＡＶ９．１１（Ａ１４２５Ｔ、Ａ１７０２Ｃ、Ａ１７６９Ｔ；Ｔ５６８Ｐ、Ｑ５９０Ｌ）、ＡＡＶ９．１３（Ａ１３６９Ｃ、Ａ１７２０Ｔ；Ｎ４５７Ｈ、Ｔ５７４Ｓ）、ＡＡＶ９．１４（Ｔ１３４０Ａ、Ｔ１３６２Ｃ、Ｔ１５６０Ｃ、Ｇ１７１３Ａ；Ｌ４４７Ｈ）、ＡＡＶ９．１６（Ａ１７７５Ｔ；Ｑ５９２Ｌ）、ＡＡＶ９．２４（Ｔ１５０７Ｃ、Ｔ１５２１Ｇ；Ｗ５０３Ｒ）、ＡＡＶ９．２６（Ａ１３３７Ｇ、Ａ１７６９Ｃ；Ｙ４４６Ｃ、Ｑ５９０Ｐ）、ＡＡＶ９．３３（Ａ１６６７Ｃ；Ｄ５５６Ａ）、ＡＡＶ９．３４（Ａ１５３４Ｇ、Ｃ１７９４Ｔ；Ｎ５１２Ｄ）、ＡＡＶ９．３５（Ａ１２８９Ｔ、Ｔ１４５０Ａ、Ｃ１４９４Ｔ、Ａ１５１５Ｔ、Ｃ１７９４Ａ、Ｇ１８１６Ａ；Ｑ４３０Ｌ、Ｙ４８４Ｎ、Ｎ９８Ｋ、Ｖ６０６Ｉ）、ＡＡＶ９．４０（Ａ１６９４Ｔ、Ｅ５６５Ｖ）、ＡＡＶ９．４１（Ａ１３４８Ｔ、Ｔ１３６２Ｃ；Ｔ４５０Ｓ）、ＡＡＶ９．４４（Ａ１６８４Ｃ、Ａ１７０１Ｔ、Ａ１７３７Ｇ；Ｎ５６２Ｈ、Ｋ５６７Ｎ）、ＡＡＶ９．４５（Ａ１４９２Ｔ、Ｃ１８０４Ｔ；Ｎ４９８Ｙ、Ｌ６０２Ｆ）、ＡＡＶ９．４６（Ｇ１４４１Ｃ、Ｔ１５２５Ｃ、Ｔ１５４９Ｇ；Ｇ４８１Ｒ、Ｗ５０９Ｒ、Ｌ５１７Ｖ）、９．４７（Ｇ１２４１Ａ、Ｇ１３５８Ａ、Ａ１６６９Ｇ、Ｃ１７４５Ｔ；Ｓ４１４Ｎ、Ｇ４５３Ｄ、Ｋ５５７Ｅ、Ｔ５８２Ｉ）、ＡＡＶ９．４８（Ｃ１４４５Ｔ、Ａ１７３６Ｔ；Ｐ４８２Ｌ、Ｑ５７９Ｌ）、ＡＡＶ９．５０（Ａ１６３８Ｔ、Ｃ１６８３Ｔ、Ｔ１８０５Ａ；Ｑ５４６Ｈ、Ｌ６０２Ｈ）、ＡＡＶ９．５３（Ｇ１３０１Ａ、Ａ１４０５Ｃ、Ｃ１６６４Ｔ、Ｇ１８１１Ｔ；Ｒ１３４Ｑ、Ｓ４６９Ｒ、Ａ５５５Ｖ、Ｇ６０４Ｖ）、ＡＡＶ９．５４（Ｃ１５３１Ａ、Ｔ１６０９Ａ；Ｌ５１１Ｉ、Ｌ５３７Ｍ）、ＡＡＶ９．５５（Ｔ１６０５Ａ；Ｆ５３５Ｌ）、ＡＡＶ９．５８（Ｃ１４７５Ｔ、Ｃ１５７９Ａ；Ｔ４９２Ｉ、Ｈ５２７Ｎ）、ＡＡＶ．５９（Ｔ１３３６Ｃ；Ｙ４４６Ｈ）、ＡＡＶ９．６１（Ａ１４９３Ｔ；Ｎ４９８Ｉ）、ＡＡＶ９．６４（Ｃ１５３１Ａ、Ａ１６１７Ｔ；Ｌ５１１Ｉ）、ＡＡＶ９．６５（Ｃ１３３５Ｔ、Ｔ１５３０Ｃ、Ｃ１５６８Ａ；Ａ５２３Ｄ）、ＡＡ���９．６８（Ｃ１５１０Ａ；Ｐ５０４Ｔ）、ＡＡＶ９．８０（Ｇ１４４１Ａ；Ｇ４８１Ｒ）、ＡＡＶ９．８３（Ｃ１４０２Ａ、Ａ１５００Ｔ；Ｐ４６８Ｔ、Ｅ５００Ｄ）、ＡＡＶ９．８７（Ｔ１４６４Ｃ、Ｔ１４６８Ｃ；Ｓ４９０Ｐ）、ＡＡＶ９．９０（Ａ１１９６Ｔ；Ｙ３９９Ｆ）、ＡＡＶ９．９１（Ｔ１３１６Ｇ、Ａ１５８３Ｔ、Ｃ１７８２Ｇ、Ｔ１８０６Ｃ；Ｌ４３９Ｒ、Ｋ５２８Ｉ）、ＡＡＶ９．９３（Ａ１２７３Ｇ、Ａ１４２１Ｇ、Ａ１６３８Ｃ、Ｃ１７１２Ｔ、Ｇ１７３２Ａ、Ａ１７４４Ｔ、Ａ１８３２Ｔ；Ｓ４２５Ｇ、Ｑ４７４Ｒ、Ｑ５４６Ｈ、Ｐ５７１Ｌ、Ｇ５７８Ｒ、Ｔ５８２Ｓ、Ｄ６１１Ｖ）、ＡＡＶ９．９４（Ａ１６７５Ｔ；Ｍ５５９Ｌ）およびＡＡＶ９．９５（Ｔ１６０５Ａ；Ｆ５３５Ｌ）であってもよい。
【００８８】
本明細書に参照および／または記載されているＤＮＡ配列およびＲＮＡ配列のいずれにおいても、一文字記号は、以下のように説明される：Ａはアデニン；Ｃはシトシン；Ｇはグアニン；Ｔはチミン；Ｕはウラシル；Ｗは、アデニンまたはチミンなどの弱塩基；Ｓは、シトシンおよびグアニンなどの強ヌクレオチド（ｓｔｒｏｎｇ  ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ）；Ｍは、アデニンおよびシトシンなどのアミノヌクレオチド；Ｋは、グアニンおよびチミンなどのケトヌクレオチド；Ｒは、プリン  アデニンおよびグアニン；Ｙは、ピリミジン  シトシンおよびチミン；Ｂは、Ａではない任意の塩基（例えば、シトシン、グアニン、およびチミン）；Ｄは、Ｃではない任意の塩基（例えば、アデニン、グアニン、およびチミン）；Ｈは、Ｇではない任意の塩基（例えば、アデニン、シトシン、およびチミン）；Ｖは、Ｔではない任意の塩基（例えば、アデニン、シトシン、およびグアニン）；Ｎは、任意のヌクレオチド（ギャップではない）；およびＺはゼロである。
【００８９】
本明細書に参照および／または記載されているアミノ酸配列のいずれにおいても、一文字記号は、以下のように説明される：Ｇ（Ｇｌｙ）はグリシン；Ａ（Ａｌａ）はアラニン；Ｌ（Ｌｅｕ）はロイシン；Ｍ（Ｍｅｔ）はメチオニン；Ｆ（Ｐｈｅ）はフェニルアラニン；Ｗ（Ｔｒｐ）はトリプトファン；Ｋ（Ｌｙｓ）はリシン；Ｑ（Ｇｌｎ）はグルタミン；Ｅ（Ｇｌｕ）はグルタミン酸；Ｓ（Ｓｅｒ）はセリン；Ｐ（Ｐｒｏ）はプロリン；Ｖ（Ｖａｌ）はバリン；Ｉ（Ｉｌｅ）はイソロイシン；Ｃ（Ｃｙｓ）はシステイン；Ｙ（Ｔｙｒ）はチロシン；Ｈ（Ｈｉｓ）はヒスチジン；Ｒ（Ａｒｇ）はアルギニン；Ｎ（Ａｓｎ）はアスパラギン；Ｄ（Ａｓｐ）はアスパラギン酸；Ｔ（Ｔｈｒ）はスレオニン；Ｂ（Ａｓｘ）はアスパラギン酸またはアスパラギン；Ｊ（Ｘｌｅ）はロイシンまたはイソロイシン；Ｏ（Ｐｙｌ）はピロリジン；Ｕ（Ｓｅｃ）はセレノシステイン；Ｘ（Ｘａａ）は任意のアミノ酸；およびＺ（Ｇｌｘ）はグルタミンまたはグルタミン酸。
【００９０】
ある特定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、その内容をその全体で本願明細書に援用する、国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレット、国際公開第２０１７１００６７１号パンフレット、国際公開第２０１６１３４３７５号パンフレット、国際公開第２０１７０８３７２２号パンフレット、国際公開第２０１７０１５１０２国際公開第、国際公開第２０１７０５８８９２号パンフレット、国際公開第２０１７０６６７６４号パンフレット、米国特許第９６２４２７４号明細書、米国特許第９４７５８４５号明細書、米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書、米国特許出願公開第２０１７０１４５４０５号明細書に記載の通りの配列、挿入、修飾、または突然変異であってもよくまたはそれを含んでいてもよい。
【００９１】
ある特定の実施形態では、ＡＡＶは、その内容をその全体で本願明細書に援用する、デバーマンら（Ｄｅｖｅｒｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．）（Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ３４（２）：２０４−２０９（２０１６））により記載されている通り、Ｃｒｅ組換えに基づくＡＡＶ標的進化により生成される血清型であってもよい。ある特定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、その内容をその全体で本願明細書に援用する、ジャクソンら（Ｊａｃｋｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．）ら（Ｆｒｏｎｔｉｅｒｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ  ９：１５４（２０１６））に記載の通りであってもよい。一部の実施形態では、このようにして生成されたＡＡＶ血清型は、他のＡＡＶ血清型と比較して、向上したＣＮＳ形質導入ならびに／またはニューロン向性およびアストロサイト向性を有する。非限定的な例として、ＡＡＶ血清型は、ＰＨＰ．Ｂ、ＰＨＰ．Ｂ２、ＰＨＰ．Ｂ３、ＰＨＰ．Ａ、Ｇ２Ａ１２、Ｇ２Ａ１５であってもよい。一部の実施形態では、こうしたＡＡＶ血清型は、アミノ酸５８８〜５８９間に７個アミノ酸のインサートを有するＡＡＶ９誘導体であってもよい。
【００９２】
ある特定の実施形態では、ＡＡＶ血清型の使用は、それが中枢神経系の細胞に対して向性であるため選択される。ある特定の実施形態では、中枢神経系の細胞は、ニューロンである。別の実施形態では、中枢神経系の細胞は、アストロサイトである。
【００９３】
ある特定の実施形態では、ＡＡＶ血清型の使用は、それが筋肉の細胞に対して向性であるため選択される。
一部の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、ＰＨＰ．ＢまたはＡＡＶ９である。一部の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、より遍在性のプロモーター（例えば、ＣＢＡまたはＣＭＶ）が使用される場合と比較してニューロン形質導入が増強されるようにシナプシンプロモーターと対にされる。
【００９４】
ある特定の実施形態では、ＡＡＶ  ＶＰ１カプシドタンパク質の翻訳のための開始コドンは、その内容をその全体で本願明細書に援用する米国特許第８１６３５４３号明細書に記載の通り、ＣＴＧ、ＴＴＧ、またはＧＴＧであってもよい。
【００９５】
本開示は、カプシド（Ｃａｐ）遺伝子によりコードされる構造カプシドタンパク質（ＶＰ１、ＶＰ２、およびＶＰ３を含む）を参照する。こうしたカプシドタンパク質は、ＡＡＶなどのウイルスベクターの外側タンパク質構造シェル（つまり、カプシド）を形成する。Ｃａｐポリヌクレオチドから合成されるＶＰカプシドタンパク質は、一般に、対応するＣａｐヌクレオチド配列の開始コドン（ＡＵＧまたはＡＴＧ）に関連付けられる、ペプチド配列の最初のアミノ酸としてのメチオニン（Ｍｅｔ１）を含む。しかしながら、最初のメチオニン（Ｍｅｔ１）残基または一般に任意の最初のアミノ酸（ＡＡ１）は、Ｍｅｔ−アミノペプチダーゼなどのタンパク質プロセシング酵素によりポリペプチド合成後または合成中に切断されるのが一般的である。この「Ｍｅｔ／ＡＡクリッピング」プロセスは、ポリペプチド配列の２番目のアミノ酸（たとえば、アラニン、バリン、セリン、スレオニンなど）の対応するアセチル化と相関することが多い。Ｍｅｔ−クリッピングは、一般的に、ＶＰ１およびＶＰ３カプシドタンパク質で生じるが、ＶＰ２カプシドタンパク質でも生じる場合がある。
【００９６】
Ｍｅｔ／ＡＡクリッピングが不完全であると、ウイルスカプシドを含む１つまたは複数の（１、２、または３つの）ＶＰカプシドタンパク質の混合物が産生される場合があり、その一部は、Ｍｅｔ１／ＡＡ１アミノ酸を含んでいてもよく（Ｍｅｔ＋／ＡＡ＋）、その一部は、Ｍｅｔ／ＡＡクリッピングの結果としてＭｅｔ１／ＡＡ１アミノ酸を欠如してもよい（Ｍｅｔ−／ＡＡ−）。カプシドタンパク質のＭｅｔ／ＡＡ−クリッピングに関するさらなる考察は、以下の文献を参照されたい：ジンら（Ｊｉｎ、ｅｔ  ａｌ．「組換えアデノ随伴ウイルスカプシドタンパク質の完全な特徴付けのための直接液体クロマトグラフィー／質量分析（Ｄｉｒｅｃｔ  Ｌｉｑｕｉｄ  Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ／Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  ｆｏｒ  Ｃｏｍｐｌｅｔｅ  Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ  Ａｄｅｎｏ−Ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  Ｖｉｒｕｓ  Ｃａｐｓｉｄ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ）」Ｈｕｍ  Ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒ  Ｍｅｔｈｏｄｓ．２０１７  Ｏｃｔ．２８（５）：２５５−２６７；ウォンら（Ｈｗａｎｇ，ｅｔ  ａｌ．）「細胞タンパク質のＮ末端アセチル化は特異的分解シグナルを作出する（Ｎ−Ｔｅｒｍｉｎａｌ  Ａｃｅｔｙｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  Ｃｒｅａｔｅｓ  Ｓｐｅｃｉｆｉｃ  Ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ  Ｓｉｇｎａｌｓ）」Ｓｃｉｅｎｃｅ．２０１０  Ｆｅｂｒｕａｒｙ  １９．３２７（５９６８）：９７３−９７７；これらの文献の内容はその全体で本願明細書に援用される。
【００９７】
本開示によると、カプシドタンパク質への言及は、クリッピングされたもの（Ｍｅｔ−／ＡＡ−）またはクリッピングされていないもの（Ｍｅｔ＋／ＡＡ＋）のいずれかに限定されず、文脈によっては、独立したカプシドタンパク質、カプシドタンパク質の混合物に含まれているウイルスカプシド、および／または本開示のカプシドタンパク質をコードするか、記載するか、産生するか、もしくはもたらすポリヌクレオチド配列（またはそれらの断片）を指すことができる。また、「カプシドタンパク質」または「カプシドポリペプチド」（ＶＰ１、ＶＰ２、またはＶＰ２など）への直接的参照は、Ｍｅｔ１／ＡＡ１アミノ酸を含む（Ｍｅｔ＋／ＡＡ＋）ＶＰカプシドタンパク質、ならびにＭｅｔ／ＡＡ−クリッピングの結果としてＭｅｔ１／ＡＡ１アミノ酸を欠如する（Ｍｅｔ−／ＡＡ−）対応するＶＰカプシドタンパク質を含むことができる。
【００９８】
さらに本開示によると、それぞれ、Ｍｅｔ１／ＡＡ１アミノ酸を含む（Ｍｅｔ＋／ＡＡ＋）１つまたは複数のカプシドタンパク質を含むかまたはコードする特定の配列番号（タンパク質であるかまたは核酸であるかに関わらず）への言及は、配列を精査した際にＭｅｔ１／ＡＡ１アミノ酸を欠如するＶＰカプシドタンパク質を教示すると理解されるべきであり、最初に挙げられているアミノ酸（Ｍｅｔ１／ＡＡ１であるか否かに関わらず）を単に欠如する任意の配列は直ちに明白である。
【００９９】
非限定的な例として、７３６アミノ酸長であり、ＡＵＧ／ＡＴＧ開始コドンによりコードされる「Ｍｅｔ１」アミノ酸を含む（Ｍｅｔ＋）ＶＰ１ポリペプチド配列への言及は、７３５アミノ酸長であり、７３６アミノ酸Ｍｅｔ＋配列の「Ｍｅｔ１」アミノ酸を含まない（Ｍｅｔ−）ＶＰ１ポリペプチド配列も教示すると理解することができる。第２の非限定的な例として、７３６アミノ酸長であり、任意のＮＮＮ開始コドンによりコードされる「ＡＡ１」アミノ酸を含む（ＡＡ１＋）ＶＰ１ポリペプチド配列への言及は、７３５アミノ酸長であり、７３６アミノ酸ＡＡ１＋配列の「ＡＡ１」アミノ酸を含まない（ＡＡ１−）ＶＰ１ポリペプチド配列も教示すると理解することができる。
【０１００】
ＶＰカプシドタンパク質で形成されるウイルスカプシドへの言及（特定のＡＡＶカプシド血清型への言及など）は、Ｍｅｔ１／ＡＡ１アミノ酸を含む（Ｍｅｔ＋／ＡＡ１＋）ＶＰカプシドタンパク質、Ｍｅｔ／ＡＡ１−クリッピングの結果としてＭｅｔ１／ＡＡ１アミノ酸を欠如する（Ｍｅｔ−／ＡＡ１−）対応するＶＰカプシドタンパク質、およびそれらの組合せ（Ｍｅｔ＋／ＡＡ１＋およびＭｅｔ−／ＡＡ１−）を組み込むことができる。
【０１０１】
非限定的な例として、ＡＡＶカプシド血清型は、ＶＰ１（Ｍｅｔ＋／ＡＡ１＋）、ＶＰ１（Ｍｅｔ−／ＡＡ１−）、またはＶＰ１（Ｍｅｔ＋／ＡＡ１＋）およびＶＰ１（Ｍｅｔ−／ＡＡ１−）の組合せを含んでいてもよい。ＡＡＶカプシド血清型は、ＶＰ３（Ｍｅｔ＋／ＡＡ１＋）、ＶＰ３（Ｍｅｔ−／ＡＡ１−）、またはＶＰ３（Ｍｅｔ＋／ＡＡ１＋）およびＶＰ３（Ｍｅｔ−／ＡＡ１−）の組合せも含むことができ、ＶＰ２（Ｍｅｔ＋／ＡＡ１）およびＶＰ２（Ｍｅｔ−／ＡＡ１−）の同様の任意選択の組合せも含むことができる。
【０１０２】
逆位末端反復配列（ＩＴＲ）
本開示のＡＡＶ粒子は、少なくとも１つのＩＴＲ領域およびペイロード領域を有するウイルスゲノムを含む。ある特定の実施形態では、ウイルスゲノムは、２つのＩＴＲを有する。こうした２つのＩＴＲは、５’末端および３’末端にてペイロード領域をフランキングする。ＩＴＲは、複製のための認識部位を含む複製起点として機能する。ＩＴＲは、相補的であり対称的に配置されていてもよい配列領域を含む。本開示のウイルスゲノムに組み込まれるＩＴＲは、天然に存在するポリヌクレオチド配列を含んでいてもよくまたは組換え由来のポリヌクレオチド配列を含んでいてもよい。
【０１０３】
ＩＴＲは、カプシドと同じ血清型に由来してもよく、またはその誘導体に由来してもよい。ＩＴＲは、カプシドとは異なる血清型のものであってもよい。ある特定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、１つよりも多くのＩＴＲを有する。非限定的な例では、ＡＡＶ粒子は、２つのＩＴＲを含むウイルスゲノムを有する。ある特定の実施形態では、ＩＴＲは、互いに同じ血清型のものである。別の実施形態では、ＩＴＲは、異なる血清型のものである。非限定的な例としては、ＩＴＲのゼロ個、一方、または両方が、カプシドと同じ血清型を有することが挙げられる。ある特定の実施形態では、ＡＡＶ粒子のウイルスゲノムのＩＴＲは両方ともＡＡＶ２  ＩＴＲである。
【０１０４】
各ＩＴＲは、独立して、約１００〜約１５０ヌクレオチド長であってもよい。ＩＴＲは、約１００〜１０５ヌクレオチド長、１０６〜１１０ヌクレオチド長、１１１〜１１５ヌクレオチド長、１１６〜１２０ヌクレオチド長、１２１〜１２５ヌクレオチド長、１２６〜１３０ヌクレオチド長、１３１〜１３５ヌクレオチド長、１３６〜１４０ヌクレオチド長、１４１〜１４５ヌクレオチド長、または１４６〜１５０ヌクレオチド長であってもよい。ある特定の実施形態では、ＩＴＲは、１４０〜１４２ヌクレオチド長である。ＩＴＲの長さの非限定的な例は、１０２、１３０、１４０、１４１、１４２、１４５ヌクレオチド長、およびそれらと少なくとも９５％の同一性を有するものである。
【０１０５】
ある特定の実施形態では、各ＩＴＲは、１４１ヌクレオチド長であってもよい。ある特定の実施形態では、各ＩＴＲは、１３０ヌクレオチド長であってもよい。ある特定の実施形態では、各ＩＴＲは、１１９ヌクレオチド長であってもよい。
【０１０６】
ある特定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、２つのＩＴＲを含み、一方のＩＴＲは１４１ヌクレオチド長であり、他方のＩＴＲは、１３０ヌクレオチド長である。ある特定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、２つのＩＴＲを含み、両ＩＴＲは、１４１ヌクレオチド長である。
【０１０７】
各ＩＴＲは、独立して、約７５〜約１７５ヌクレオチド長であってもよい。ＩＴＲは、独立して、これらに限定されないが、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、１００、１０１、１０２、１０３、１０４、１０５、１０６、１０７、１０８、１０９、１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、１３５、１３６、１３７、１３８、１３９、１４０、１４１、１４２、１４３、１４４、１４５、１４６、１４７、１４８、１４９、１５０、１５１、１５２、１５３、１５４、１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１６０、１６１、１６２、１６３、１６４、１６５、１６６、１６７、１６８、１６９、１７０、１７１、１７２、１７３、１７４、および１７５ヌクレオチドなどの長さを有してもよい。ウイルスゲノムのＩＴＲの長さは、７５〜８０、７５〜８５、７５〜１００、８０〜８５、８０〜９０、８０〜１０５、８５〜９０、８５〜９５、８５〜１１０、９０〜９５、９０〜１００、９０〜１１５、９５〜１００、９５〜１０５、９５〜１２０、１００〜１０５、１００〜１１０、１００〜１２５、１０５〜１１０、１０５〜１１５、１０５〜１３０、１１０〜１１５、１１０〜１２０、１１０〜１３５、１１５〜１２０、１１５〜１２５、１１５〜１４０、１２０〜１２５、１２０〜１３０、１２０〜１４５、１２５〜１３０、１２５〜１３５、１２５〜１５０、１３０〜１３５、１３０〜１４０、１３０〜１５５、１３５〜１４０、１３５〜１４５、１３５〜１６０、１４０〜１４５、１４０〜１５０、１４０〜１６５、１４５〜１５０、１４５〜１５５、１４５〜１７０、１５０〜１５５、１５０〜１６０、１５０〜１７５、１５５〜１６０、１５５〜１６５、１６０〜１６５、１６０〜１７０、１６５〜１７０、１６５〜１７５、および１７０〜１７５ヌクレオチドであってもよい。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約１０５ヌクレオチド長であるＩＴＲを含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約１４１ヌクレオチド長であるＩＴＲを含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約１３０ヌクレオチド長であるＩＴＲを含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約１０５ヌクレオチド長および１４１ヌクレオチド長であるＩＴＲを含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約１０５ヌクレオチド長および１３０ヌクレオチド長であるＩＴＲを含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約１３０ヌクレオチド長および１４１ヌクレオチド長であるＩＴＲを含む。
【０１０８】
ゲノムサイズ
ある特定の実施形態では、本明細書に記載のペイロードを含むＡＡＶ粒子は、一本鎖または二本鎖ベクターゲノムであってもよい。ベクターゲノムのサイズは、小型、中型、大型、または最大サイズであってもよい。加えて、ベクターゲノムは、プロモーターおよびポリＡテールを含んでいてもよい。
【０１０９】
ある特定の実施形態では、本明細書に記載のペイロードを含むベクターゲノムは、小型一本鎖ベクターゲノムであってもよい。小型一本鎖ベクターゲノムは、サイズが約２．１、２．２、２．３、２．４、２．５、２．６、２．７、２．８、２．９、３．０、３．１、３．２、３．３、３．４、および３．５ｋｂなど、サイズが２．１〜３．５ｋｂであってもよい。非限定的な例として、小型一本鎖ベクターゲノムは、サイズが３．２ｋｂであってもよい。別の非限定的な例として、小型一本鎖ベクターゲノムは、サイズが２．２ｋｂであってもよい。加えて、ベクターゲノムは、プロモーターおよびポリＡテールを含んでいてもよい。
【０１１０】
ある特定の実施形態では、本明細書に記載のペイロードを含むベクターゲノムは、小型二本鎖ベクターゲノムであってもよい。小型二本鎖ベクターゲノムは、サイズが約１．３、１．４、１．５、１．６、および１．７ｋｂなど、サイズが１．３〜１．７ｋｂであってもよい。非限定的な例として、小型二本鎖ベクターゲノムは、サイズが１．６ｋｂであってもよい。加えて、ベクターゲノムは、プロモーターおよびポリＡテールを含んでいてもよい。
【０１１１】
ある特定の実施形態では、本明細書に記載のペイロード、例えば、ポリヌクレオチド、ｓｉＲＮＡまたはｄｓＲＮＡを含むベクターゲノムは、中型一本鎖ベクターゲノムであってもよい。中型一本鎖ベクターゲノムは、サイズが約３．６、３．７、３．８、３．９、４．０、４．１、４．２、および４．３ｋｂなど、サイズが３．６〜４．３ｋｂであってもよい。非限定的な例として、中型一本鎖ベクターゲノムは、サイズが４．０ｋｂであってもよい。加えて、ベクターゲノムは、プロモーターおよびポリＡテールを含んでいてもよい。
【０１１２】
ある特定の実施形態では、本明細書に記載のペイロードを含むベクターゲノムは、中型二本鎖ベクターゲノムであってもよい。中型二本鎖ベクターゲノムは、サイズが約１．８、１．９、２．０、および２．１ｋｂなど、サイズが１．８〜２．１ｋｂであってもよい。非限定的な例として、中型二本鎖ベクターゲノムは、サイズが２．０ｋｂであってもよい。加えて、ベクターゲノムは、プロモーターおよびポリＡテールを含んでいてもよい。
【０１１３】
ある特定の実施形態では、本明細書に記載のペイロードを含むベクターゲノムは、大型一本鎖ベクターゲノムであってもよい。大型一本鎖ベクターゲノムは、サイズが約４．４、４．５、４．６、４．７、４．８、４．９、５．０、５．１、５．２、５．３、５．４、５．５、５．６、５．７、５．８、５．９、および６．０ｋｂなど、サイズが４．４〜６．０ｋｂであってもよい。非限定的な例として、大型一本鎖ベクターゲノムは、サイズが４．７ｋｂであってもよい。別の非限定的な例として、大型一本鎖ベクターゲノムは、サイズが４．８ｋｂであってもよい。さらに別の非限定的な例として、大型一本鎖ベクターゲノムは、サイズが６．０ｋｂサイズであってもよい。加えて、ベクターゲノムは、プロモーターおよびポリＡテールを含んでいてもよい。
【０１１４】
ある特定の実施形態では、本明細書に記載のペイロードを含むベクターゲノムは、大型二本鎖ベクターゲノムであってもよい。大型二本鎖ベクターゲノムは、サイズが約２．２、２．３、２．４、２．５、２．６、２．７、２．８、２．９、および３．０ｋｂなど、サイズが２．２〜３．０ｋｂであってもよい。非限定的な例として、大型二本鎖ベクターゲノムは、サイズが２．４ｋｂであってもよい。加えて、ベクターゲノムは、プロモーターおよびポリＡテールを含んでいてもよい。
【０１１５】
ベクターゲノム領域：フィラー領域
本開示のＡＡＶ粒子は、少なくとも１つのフィラー領域を有するウイルスゲノムを含む。フィラー領域は、独立して、これらに限定されないが、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、１００、１０１、１０２、１０３、１０４、１０５、１０６、１０７、１０８、１０９、１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、１３５、１３６、１３７、１３８、１３９、１４０、１４１、１４２、１４３、１４４、１４５、１４６、１４７、１４８、１４９、１５０、１５１、１５２、１５３、１５４、１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１６０、１６１、１６２、１６３、１６４、１６５、１６６、１６７、１６８、１６９、１７０、１７１、１７２、１７３、１７４、１７５、１７６、１７７、１７８、１７９、１８０、１８１、１８２、１８３、１８４、１８５、１８６、１８７、１８８、１８９、１９０、１９１、１９２、１９３、１９４、１９５、１９６、１９７、１９８、１９９、２００、２０１、２０２、２０３、２０４、２０５、２０６、２０７、２０８、２０９、２１０、２１１、２１２、２１３、２１４、２１５、２１６、２１７、２１８、２１９、２２０、２２１、２２２、２２３、２２４、２２５、２２６、２２７、２２８、２２９、２３０、２３１、２３２、２３３、２３４、２３５、２３６、２３７、２３８、２３９、２４０、２４１、２４２、２４３、２４４、２４５、２４６、２４７、２４８、２４９、２５０、２５１、２５２、２５３、２５４、２５５、２５６、２５７、２５８、２５９、２６０、２６１、２６２、２６３、２６４、２６５、２６６、２６７、２６８、２６９、２７０、２７１、２７２、２７３、２７４、２７５、２７６、２７７、２７８、２７９、２８０、２８１、２８２、２８３、２８４、２８５、２８６、２８７、２８８、２８９、２９０、２９１、２９２、２９３、２９４、２９５、２９６、２９７、２９８、２９９、３００、３０１、３０２、３０３、３０４、３０５、３０６、３０７、３０８、３０９、３１０、３１１、３１２、３１３、３１４、３１５、３１６、３１７、３１８、３１９、３２０、３２１、３２２、３２３、３２４、３２５、３２６、３２７、３２８、３２９、３３０、３３１、３３２、３３３、３３４、３３５、３３６、３３７、３３８、３３９、３４０、３４１、３４２、３４３、３４４、３４５、３４６、３４７、３４８、３４９、３５０、３５１、３５２、３５３、３５４、３５５、３５６、３５７、３５８、３５９、３６０、３６１、３６２、３６３、３６４、３６５、３６６、３６７、３６８、３６９、３７０、３７１、３７２、３７３、３７４、３７５、３７６、３７７、３７８、３７９、３８０、３８１、３８２、３８３、３８４、３８５、３８６、３８７、３８８、３８９、３９０、３９１、３９２、３９３、３９４、３９５、３９６、３９７、３９８、３９９、４００、４０１、４０２、４０３、４０４、４０５、４０６、４０７、４０８、４０９、４１０、４１１、４１２、４１３、４１４、４１５、４１６、４１７、４１８、４１９、４２０、４２１、４２２、４２３、４２４、４２５、４２６、４２７、４２８、４２９、４３０、４３１、４３２、４３３、４３４、４３５、４３６、４３７、４３８、４３９、４４０、４４１、４４２、４４３、４４４、４４５、４４６、４４７、４４８、４４９、４５０、４５１、４５２、４５３、４５４、４５５、４５６、４５７、４５８、４５９、４６０、４６１、４６２、４６３、４６４、４６５、４６６、４６７、４６８、４６９、４７０、４７１、４７２、４７３、４７４、４７５、４７６、４７７、４７８、４７９、４８０、４８１、４８２、４８３、４８４、４８５、４８６、４８７、４８８、４８９、４９０、４９１、４９２、４９３、４９４、４９５、４９６、４９７、４９８、４９９、５００、５０１、５０２、５０３、５０４、５０５、５０６、５０７、５０８、５０９、５１０、５１１、５１２、５１３、５１４、５１５、５１６、５１７、５１８、５１９、５２０、５２１、５２２、５２３、５２４、５２５、５２６、５２７、５２８、５２９、５３０、５３１、５３２、５３３、５３４、５３５、５３６、５３７、５３８、５３９、５４０、５４１、５４２、５４３、５４４、５４５、５４６、５４７、５４８、５４９、５５０、５５１、５５２、５５３、５５４、５５５、５５６、５５７、５５８、５５９、５６０、５６１、５６２、５６３、５６４、５６５、５６６、５６７、５６８、５６９、５７０、５７１、５７２、５７３、５７４、５７５、５７６、５７７、５７８、５７９、５８０、５８１、５８２、５８３、５８４、５８５、５８６、５８７、５８８、５８９、５９０、５９１、５９２、５９３、５９４、５９５、５９６、５９７、５９８、５９９、６００、６０１、６０２、６０３、６０４、６０５、６０６、６０７、６０８、６０９、６１０、６１１、６１２、６１３、６１４、６１５、６１６、６１７、６１８、６１９、６２０、６２１、６２２、６２３、６２４、６２５、６２６、６２７、６２８、６２９、６３０、６３１、６３２、６３３、６３４、６３５、６３６、６３７、６３８、６３９、６４０、６４１、６４２、６４３、６４４、６４５、６４６、６４７、６４８、６４９、６５０、６５１、６５２、６５３、６５４、６５５、６５６、６５７、６５８、６５９、６６０、６６１、６６２、６６３、６６４、６６５、６６６、６６７、６６８、６６９、６７０、６７１、６７２、６７３、６７４、６７５、６７６、６７７、６７８、６７９、６８０、６８１、６８２、６８３、６８４、６８５、６８６、６８７、６８８、６８９、６９０、６９１、６９２、６９３、６９４、６９５、６９６、６９７、６９８、６９９、７００、７０１、７０２、７０３、７０４、７０５、７０６、７０７、７０８、７０９、７１０、７１１、７１２、７１３、７１４、７１５、７１６、７１７、７１８、７１９、７２０、７２１、７２２、７２３、７２４、７２５、７２６、７２７、７２８、７２９、７３０、７３１、７３２、７３３、７３４、７３５、７３６、７３７、７３８、７３９、７４０、７４１、７４２、７４３、７４４、７４５、７４６、７４７、７４８、７４９、７５０、７５１、７５２、７５３、７５４、７５５、７５６、７５７、７５８、７５９、７６０、７６１、７６２、７６３、７６４、７６５、７６６、７６７、７６８、７６９、７７０、７７１、７７２、７７３、７７４、７７５、７７６、７７７、７７８、７７９、７８０、７８１、７８２、７８３、７８４、７８５、７８６、７８７、７８８、７８９、７９０、７９１、７９２、７９３、７９４、７９５、７９６、７９７、７９８、７９９、８００、８０１、８０２、８０３、８０４、８０５、８０６、８０７、８０８、８０９、８１０、８１１、８１２、８１３、８１４、８１５、８１６、８１７、８１８、８１９、８２０、８２１、８２２、８２３、８２４、８２５、８２６、８２７、８２８、８２９、８３０、８３１、８３２、８３３、８３４、８３５、８３６、８３７、８３８、８３９、８４０、８４１、８４２、８４３、８４４、８４５、８４６、８４７、８４８、８４９、８５０、８５１、８５２、８５３、８５４、８５５、８５６、８５７、８５８、８５９、８６０、８６１、８６２、８６３、８６４、８６５、８６６、８６７、８６８、８６９、８７０、８７１、８７２、８７３、８７４、８７５、８７６、８７７、８７８、８７９、８８０、８８１、８８２、８８３、８８４、８８５、８８６、８８７、８８８、８８９、８９０、８９１、８９２、８９３、８９４、８９５、８９６、８９７、８９８、８９９、９００、９０１、９０２、９０３、９０４、９０５、９０６、９０７、９０８、９０９、９１０、９１１、９１２、９１３、９１４、９１５、９１６、９１７、９１８、９１９、９２０、９２１、９２２、９２３、９２４、９２５、９２６、９２７、９２８、９２９、９３０、９３１、９３２、９３３、９３４、９３５、９３６、９３７、９３８、９３９、９４０、９４１、９４２、９４３、９４４、９４５、９４６、９４７、９４８、９４９、９５０、９５１、９５２、９５３、９５４、９５５、９５６、９５７、９５８、９５９、９６０、９６１、９６２、９６３、９６４、９６５、９６６、９６７、９６８、９６９、９７０、９７１、９７２、９７３、９７４、９７５、９７６、９７７、９７８、９７９、９８０、９８１、９８２、９８３、９８４、９８５、９８６、９８７、９８８、９８９、９９０、９９１、９９２、９９３、９９４、９９５、９９６、９９７、９９８、９９９、１０００、１００１、１００２、１００３、１００４、１００５、１００６、１００７、１００８、１００９、１０１０、１０１１、１０１２、１０１３、１０１４、１０１５、１０１６、１０１７、１０１８、１０１９、１０２０、１０２１、１０２２、１０２３、１０２４、１０２５、１０２６、１０２７、１０２８、１０２９、１０３０、１０３１、１０３２、１０３３、１０３４、１０３５、１０３６、１０３７、１０３８、１０３９、１０４０、１０４１、１０４２、１０４３、１０４４、１０４５、１０４６、１０４７、１０４８、１０４９、１０５０、１０５１、１０５２、１０５３、１０５４、１０５５、１０５６、１０５７、１０５８、１０５９、１０６０、１０６１、１０６２、１０６３、１０６４、１０６５、１０６６、１０６７、１０６８、１０６９、１０７０、１０７１、１０７２、１０７３、１０７４、１０７５、１０７６、１０７７、１０７８、１０７９、１０８０、１０８１、１０８２、１０８３、１０８４、１０８５、１０８６、１０８７、１０８８、１０８９、１０９０、１０９１、１０９２、１０９３、１０９４、１０９５、１０９６、１０９７、１０９８、１０９９、１１００、１１０１、１１０２、１１０３、１１０４、１１０５、１１０６、１１０７、１１０８、１１０９、１１１０、１１１１、１１１２、１１１３、１１１４、１１１５、１１１６、１１１７、１１１８、１１１９、１１２０、１１２１、１１２２、１１２３、１１２４、１１２５、１１２６、１１２７、１１２８、１１２９、１１３０、１１３１、１１３２、１１３３、１１３４、１１３５、１１３６、１１３７、１１３８、１１３９、１１４０、１１４１、１１４２、１１４３、１１４４、１１４５、１１４６、１１４７、１１４８、１１４９、１１５０、１１５１、１１５２、１１５３、１１５４、１１５５、１１５６、１１５７、１１５８、１１５９、１１６０、１１６１、１１６２、１１６３、１１６４、１１６５、１１６６、１１６７、１１６８、１１６９、１１７０、１１７１、１１７２、１１７３、１１７４、１１７５、１１７６、１１７７、１１７８、１１７９、１１８０、１１８１、１１８２、１１８３、１１８４、１１８５、１１８６、１１８７、１１８８、１１８９、１１９０、１１９１、１１９２、１１９３、１１９４、１１９５、１１９６、１１９７、１１９８、１１９９、１２００、１２０１、１２０２、１２０３、１２０４、１２０５、１２０６、１２０７、１２０８、１２０９、１２１０、１２１１、１２１２、１２１３、１２１４、１２１５、１２１６、１２１７、１２１８、１２１９、１２２０、１２２１、１２２２、１２２３、１２２４、１２２５、１２２６、１２２７、１２２８、１２２９、１２３０、１２３１、１２３２、１２３３、１２３４、１２３５、１２３６、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２８５、２２８６、２２８７、２２８８、２２８９、２２９０、２２９１、２２９２、２２９３、２２９４、２２９５、２２９６、２２９７、２２９８、２２９９、２３００、２３０１、２３０２、２３０３、２３０４、２３０５、２３０６、２３０７、２３０８、２３０９、２３１０、２３１１、２３１２、２３１３、２３１４、２３１５、２３１６、２３１７、２３１８、２３１９、２３２０、２３２１、２３２２、２３２３、２３２４、２３２５、２３２６、２３２７、２３２８、２３２９、２３３０、２３３１、２３３２、２３３３、２３３４、２３３５、２３３６、２３３７、２３３８、２３３９、２３４０、２３４１、２３４２、２３４３、２３４４、２３４５、２３４６、２３４７、２３４８、２３４９、２３５０、２３５１、２３５２、２３５３、２３５４、２３５５、２３５６、２３５７、２３５８、２３５９、２３６０、２３６１、２３６２、２３６３、２３６４、２３６５、２３６６、２３６７、２３６８、２３６９、２３７０、２３７１、２３７２、２３７３、２３７４、２３７５、２３７６、２３７７、２３７８、２３７９、２３８０、２３８１、２３８２、２３８３、２３８４、２３８５、２３８６、２３８７、２３８８、２３８９、２３９０、２３９１、２３９２、２３９３、２３９４、２３９５、２３９６、２３９７、２３９８、２３９９、２４００、２４０１、２４０２、２４０３、２４０４、２４０５、２４０６、２４０７、２４０８、２４０９、２４１０、２４１１、２４１２、２４１３、２４１４、２４１５、２４１６、２４１７、２４１８、２４１９、２４２０、２４２１、２４２２、２４２３、２４２４、２４２５、２４２６、２４２７、２４２８、２４２９、２４３０、２４３１、２４３２、２４３３、２４３４、２４３５、２４３６、２４３７、２４３８、２４３９、２４４０、２４４１、２４４２、２４４３、２４４４、２４４５、２４４６、２４４７、２４４８、２４４９、２４５０、２４５１、２４５２、２４５３、２４５４、２４５５、２４５６、２４５７、２４５８、２４５９、２４６０、２４６１、２４６２、２４６３、２４６４、２４６５、２４６６、２４６７、２４６８、２４６９、２４７０、２４７１、２４７２、２４７３、２４７４、２４７５、２４７６、２４７７、２４７８、２４７９、２４８０、２４８１、２４８２、２４８３、２４８４、２４８５、２４８６、２４８７、２４８８、２４８９、２４９０、２４９１、２４９２、２４９３、２４９４、２４９５、２４９６、２４９７、２４９８、２４９９、２５００、２５０１、２５０２、２５０３、２５０４、２５０５、２５０６、２５０７、２５０８、２５０９、２５１０、２５１１、２５１２、２５１３、２５１４、２５１５、２５１６、２５１７、２５１８、２５１９、２５２０、２５２１、２５２２、２５２３、２５２４、２５２５、２５２６、２５２７、２５２８、２５２９、２５３０、２５３１、２５３２、２５３３、２５３４、２５３５、２５３６、２５３７、２５３８、２５３９、２５４０、２５４１、２５４２、２５４３、２５４４、２５４５、２５４６、２５４７、２５４８、２５４９、２５５０、２５５１、２５５２、２５５３、２５５４、２５５５、２５５６、２５５７、２５５８、２５５９、２５６０、２５６１、２５６２、２５６３、２５６４、２５６５、２５６６、２５６７、２５６８、２５６９、２５７０、２５７１、２５７２、２５７３、２５７４、２５７５、２５７６、２５７７、２５７８、２５７９、２５８０、２５８１、２５８２、２５８３、２５８４、２５８５、２５８６、２５８７、２５８８、２５８９、２５９０、２５９１、２５９２、２５９３、２５９４、２５９５、２５９６、２５９７、２５９８、２５９９、２６００、２６０１、２６０２、２６０３、２６０４、２６０５、２６０６、２６０７、２６０８、２６０９、２６１０、２６１１、２６１２、２６１３、２６１４、２６１５、２６１６、２６１７、２６１８、２６１９、２６２０、２６２１、２６２２、２６２３、２６２４、２６２５、２６２６、２６２７、２６２８、２６２９、２６３０、２６３１、２６３２、２６３３、２６３４、２６３５、２６３６、２６３７、２６３８、２６３９、２６４０、２６４１、２６４２、２６４３、２６４４、２６４５、２６４６、２６４７、２６４８、２６４９、２６５０、２６５１、２６５２、２６５３、２６５４、２６５５、２６５６、２６５７、２６５８、２６５９、２６６０、２６６１、２６６２、２６６３、２６６４、２６６５、２６６６、２６６７、２６６８、２６６９、２６７０、２６７１、２６７２、２６７３、２６７４、２６７５、２６７６、２６７７、２６７８、２６７９、２６８０、２６８１、２６８２、２６８３、２６８４、２６８５、２６８６、２６８７、２６８８、２６８９、２６９０、２６９１、２６９２、２６９３、２６９４、２６９５、２６９６、２６９７、２６９８、２６９９、２７００、２７０１、２７０２、２７０３、２７０４、２７０５、２７０６、２７０７、２７０８、２７０９、２７１０、２７１１、２７１２、２７１３、２７１４、２７１５、２７１６、２７１７、２７１８、２７１９、２７２０、２７２１、２７２２、２７２３、２７２４、２７２５、２７２６、２７２７、２７２８、２７２９、２７３０、２７３１、２７３２、２７３３、２７３４、２７３５、２７３６、２７３７、２７３８、２７３９、２７４０、２７４１、２７４２、２７４３、２７４４、２７４５、２７４６、２７４７、２７４８、２７４９、２７５０、２７５１、２７５２、２７５３、２７５４、２７５５、２７５６、２７５７、２７５８、２７５９、２７６０、２７６１、２７６２、２７６３、２７６４、２７６５、２７６６、２７６７、２７６８、２７６９、２７７０、２７７１、２７７２、２７７３、２７７４、２７７５、２７７６、２７７７、２７７８、２７７９、２７８０、２７８１、２７８２、２７８３、２７８４、２７８５、２７８６、２７８７、２７８８、２７８９、２７９０、２７９１、２７９２、２７９３、２７９４、２７９５、２７９６、２７９７、２７９８、２７９９、２８００、２８０１、２８０２、２８０３、２８０４、２８０５、２８０６、２８０７、２８０８、２８０９、２８１０、２８１１、２８１２、２８１３、２８１４、２８１５、２８１６、２８１７、２８１８、２８１９、２８２０、２８２１、２８２２、２８２３、２８２４、２８２５、２８２６、２８２７、２８２８、２８２９、２８３０、２８３１、２８３２、２８３３、２８３４、２８３５、２８３６、２８３７、２８３８、２８３９、２８４０、２８４１、２８４２、２８４３、２８４４、２８４５、２８４６、２８４７、２８４８、２８４９、２８５０、２８５１、２８５２、２８５３、２８５４、２８５５、２８５６、２８５７、２８５８、２８５９、２８６０、２８６１、２８６２、２８６３、２８６４、２８６５、２８６６、２８６７、２８６８、２８６９、２８７０、２８７１、２８７２、２８７３、２８７４、２８７５、２８７６、２８７７、２８７８、２８７９、２８８０、２８８１、２８８２、２８８３、２８８４、２８８５、２８８６、２８８７、２８８８、２８８９、２８９０、２８９１、２８９２、２８９３、２８９４、２８９５、２８９６、２８９７、２８９８、２８９９、２９００、２９０１、２９０２、２９０３、２９０４、２９０５、２９０６、２９０７、２９０８、２９０９、２９１０、２９１１、２９１２、２９１３、２９１４、２９１５、２９１６、２９１７、２９１８、２９１９、２９２０、２９２１、２９２２、２９２３、２９２４、２９２５、２９２６、２９２７、２９２８、２９２９、２９３０、２９３１、２９３２、２９３３、２９３４、２９３５、２９３６、２９３７、２９３８、２９３９、２９４０、２９４１、２９４２、２９４３、２９４４、２９４５、２９４６、２９４７、２９４８、２９４９、２９５０、２９５１、２９５２、２９５３、２９５４、２９５５、２９５６、２９５７、２９５８、２９５９、２９６０、２９６１、２９６２、２９６３、２９６４、２９６５、２９６６、２９６７、２９６８、２９６９、２９７０、２９７１、２９７２、２９７３、２９７４、２９７５、２９７６、２９７７、２９７８、２９７９、２９８０、２９８１、２９８２、２９８３、２９８４、２９８５、２９８６、２９８７、２９８８、２９８９、２９９０、２９９１、２９９２、２９９３、２９９４、２９９５、２９９６、２９９７、２９９８、２９９９、３０００、３００１、３００２、３００３、３００４、３００５、３００６、３００７、３００８、３００９、３０１０、３０１１、３０１２、３０１３、３０１４、３０１５、３０１６、３０１７、３０１８、３０１９、３０２０、３０２１、３０２２、３０２３、３０２４、３０２５、３０２６、３０２７、３０２８、３０２９、３０３０、３０３１、３０３２、３０３３、３０３４、３０３５、３０３６、３０３７、３０３８、３０３９、３０４０、３０４１、３０４２、３０４３、３０４４、３０４５、３０４６、３０４７、３０４８、３０４９、３０５０、３０５１、３０５２、３０５３、３０５４、３０５５、３０５６、３０５７、３０５８、３０５９、３０６０、３０６１、３０６２、３０６３、３０６４、３０６５、３０６６、３０６７、３０６８、３０６９、３０７０、３０７１、３０７２、３０７３、３０７４、３０７５、３０７６、３０７７、３０７８、３０７９、３０８０、３０８１、３０８２、３０８３、３０８４、３０８５、３０８６、３０８７、３０８８、３０８９、３０９０、３０９１、３０９２、３０９３、３０９４、３０９５、３０９６、３０９７、３０９８、３０９９、３１００、３１０１、３１０２、３１０３、３１０４、３１０５、３１０６、３１０７、３１０８、３１０９、３１１０、３１１１、３１１２、３１１３、３１１４、３１１５、３１１６、３１１７、３１１８、３１１９、３１２０、３１２１、３１２２、３１２３、３１２４、３１２５、３１２６、３１２７、３１２８、３１２９、３１３０、３１３１、３１３２、３１３３、３１３４、３１３５、３１３６、３１３７、３１３８、３１３９、３１４０、３１４１、３１４２、３１４３、３１４４、３１４５、３１４６、３１４７、３１４８、３１４９、３１５０、３１５１、３１５２、３１５３、３１５４、３１５５、３１５６、３１５７、３１５８、３１５９、３１６０、３１６１、３１６２、３１６３、３１６４、３１６５、３１６６、３１６７、３１６８、３１６９、３１７０、３１７１、３１７２、３１７３、３１７４、３１７５、３１７６、３１７７、３１７８、３１７９、３１８０、３１８１、３１８２、３１８３、３１８４、３１８５、３１８６、３１８７、３１８８、３１８９、３１９０、３１９１、３１９２、３１９３、３１９４、３１９５、３１９６、３１９７、３１９８、３１９９、３２００、３２０１、３２０２、３２０３、３２０４、３２０５、３２０６、３２０７、３２０８、３２０９、３２１０、３２１１、３２１２、３２１３、３２１４、３２１５、３２１６、３２１７、３２１８、３２１９、３２２０、３２２１、３２２２、３２２３、３２２４、３２２５、３２２６、３２２７、３２２８、３２２９、３２３０、３２３１、３２３２、３２３３、３２３４、３２３５、３２３６、３２３７、３２３８、３２３９、３２４０、３２４１、３２４２、３２４３、３２４４、３２４５、３２４６、３２４７、３２４８、３２４９、および３２５０ヌクレオチドなどの長さを有してもよい。ウイルスゲノムの任意のフィラー領域の長さは、５０〜１００、１００〜１５０、１５０〜２００、２００〜２５０、２５０〜３００、３００〜３５０、３５０〜４００、４００〜４５０、４５０〜５００、５００〜５５０、５５０〜６００、６００〜６５０、６５０〜７００、７００〜７５０、７５０〜８００、８００〜８５０、８５０〜９００、９００〜９５０、９５０〜１０００、１０００〜１０５０、１０５０〜１１００、１１００〜１１５０、１１５０〜１２００、１２００〜１２５０、１２５０〜１３００、１３００〜１３５０、１３５０〜１４００、１４００〜１４５０、１４５０〜１５
００、１５００〜１５５０、１５５０〜１６００、１６００〜１６５０、１６５０〜１７００、１７００〜１７５０、１７５０〜１８００、１８００〜１８５０、１８５０〜１９００、１９００〜１９５０、１９５０〜２０００、２０００〜２０５０、２０５０〜２１００、２１００〜２１５０、２１５０〜２２００、２２００〜２２５０、２２５０〜２３００、２３００〜２３５０、２３５０〜２４００、２４００〜２４５０、２４５０〜２５００、２５００〜２５５０、２５５０〜２６００、２６００〜２６５０、２６５０〜２７００、２７００〜２７５０、２７５０〜２８００、２８００〜２８５０、２８５０〜２９００、２９００〜２９５０、２９５０〜３０００、３０００〜３０５０、３０５０〜３１００、３１００〜３１５０、３１５０〜３２００、および３２００〜３２５０ヌクレオチドであってもよい。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約５５ヌクレオチド長であるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約５６ヌクレオチド長であるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約９７ヌクレオチド長であるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約１０３ヌクレオチド長であるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約１０５ヌクレオチド長であるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約３５７ヌクレオチド長であるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約３６３ヌクレオチド長であるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約７１２ヌクレオチド長であるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約７１４ヌクレオチド長であるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約１２０３ヌクレオチド長であるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約１２０９ヌクレオチド長であるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約１５１２ヌクレオチド長であるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約１５１９ヌクレオチド長であるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約２３９５ヌクレオチド長であるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約２４０３ヌクレオチド長であるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約２４０５ヌクレオチド長であるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約３０１３ヌクレオチド長であるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約３０２１ヌクレオチド長であるフィラー領域を含む。
【０１１６】
一実施形態では、フィラー領域は、７１４ヌクレオチド長である。
ベクターゲノム領域：マルチクローニングサイト（ＭＣＳ）領域
本開示のＡＡＶ粒子は、少なくとも１つのマルチクローニング部位（ＭＣＳ）を有するウイルスゲノムを含む。ＭＣＳ領域は、独立して、これらに限定されないが、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、１００、１０１、１０２、１０３、１０４、１０５、１０６、１０７、１０８、１０９、１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、１３５、１３６、１３７、１３８、１３９、１４０、１４１、１４２、１４３、１４４、１４５、１４６、１４７、１４８、１４９、および１５０ヌクレオチドなどの長さを有してもよい。ウイルスゲノムのＭＣＳ領域の長さは、２〜１０、５〜１０、５〜１５、１０〜２０、１０〜３０、１０〜４０、１５〜２０、１５〜２５、２０〜３０、２０〜４０、２０〜５０、２５〜３０、２５〜３５、３０〜４０、３０〜５０、３０〜６０、３５〜４０、３５〜４５、４０〜５０、４０〜６０、４０〜７０、４５〜５０、４５〜５５、５０〜６０、５０〜７０、５０〜８０、５５〜６０、５５〜６５、６０〜７０、６０〜８０、６０〜９０、６５〜７０、６５〜７５、７０〜８０、７０〜９０、７０〜１００、７５〜８０、７５〜８５、８０〜９０、８０〜１００、８０〜１１０、８５〜９０、８５〜９５、９０〜１００、９０〜１１０、９０〜１２０、９５〜１００、９５〜１０５、１００〜１１０、１００〜１２０、１００〜１３０、１０５〜１１０、１０５〜１１５、１１０〜１２０、１１０〜１３０、１１０〜１４０、１１５〜１２０、１１５〜１２５、１２０〜１３０、１２０〜１４０、１２０〜１５０、１２５〜１３０、１２５〜１３５、１３０〜１４０、１３０〜１５０、１３５〜１４０、１３５〜１４５、１４０〜１５０、および１４５〜１５０ヌクレオチドであってもよい。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約５ヌクレオチド長であるＭＣＳ領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約１０ヌクレオチド長であるＭＣＳ領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約１４ヌクレオチド長であるＭＣＳ領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約１８ヌクレオチド長であるＭＣＳ領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約７３ヌクレオチド長であるＭＣＳ領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約１２１ヌクレオチド長であるＭＣＳ領域を含む。
【０１１７】
一実施形態では、ＭＣＳ領域は、５ヌクレオチド長である。
一実施形態では、ＭＣＳ領域は、１０ヌクレオチド長である。
ベクターゲノム領域：プロモーター領域およびエンハンサー領域
本開示のＡＡＶ粒子は、少なくとも１つのプロモーター領域を有するウイルスゲノムを含む。プロモーター領域は、独立して、これらに限定されないが、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、１００、１０１、１０２、１０３、１０４、１０５、１０６、１０７、１０８、１０９、１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、１３５、１３６、１３７、１３８、１３９、１４０、１４１、１４２、１４３、１４４、１４５、１４６、１４７、１４８、１４９、１５０、１５１、１５２、１５３、１５４、１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１６０、１６１、１６２、１６３、１６４、１６５、１６６、１６７、１６８、１６９、１７０、１７１、１７２、１７３、１７４、１７５、１７６、１７７、１７８、１７９、１８０、１８１、１８２、１８３、１８４、１８５、１８６、１８７、１８８、１８９、１９０、１９１、１９２、１９３、１９４、１９５、１９６、１９７、１９８、１９９、２００、２０１、２０２、２０３、２０４、２０５、２０６、２０７、２０８、２０９、２１０、２１１、２１２、２１３、２１４、２１５、２１６、２１７、２１８、２１９、２２０、２２１、２２２、２２３、２２４、２２５、２２６、２２７、２２８、２２９、２３０、２３１、２３２、２３３、２３４、２３５、２３６、２３７、２３８、２３９、２４０、２４１、２４２、２４３、２４４、２４５、２４６、２４７、２４８、２４９、２５０、２５１、２５２、２５３、２５４、２５５、２５６、２５７、２５８、２５９、２６０、２６１、２６２、２６３、２６４、２６５、２６６、２６７、２６８、２６９、２７０、２７１、２７２、２７３、２７４、２７５、２７６、２７７、２７８、２７９、２８０、２８１、２８２、２８３、２８４、２８５、２８６、２８７、２８８、２８９、２９０、２９１、２９２、２９３、２９４、２９５、２９６、２９７、２９８、２９９、３００、３０１、３０２、３０３、３０４、３０５、３０６、３０７、３０８、３０９、３１０、３１１、３１２、３１３、３１４、３１５、３１６、３１７、３１８、３１９、３２０、３２１、３２２、３２３、３２４、３２５、３２６、３２７、３２８、３２９、３３０、３３１、３３２、３３３、３３４、３３５、３３６、３３７、３３８、３３９、３４０、３４１、３４２、３４３、３４４、３４５、３４６、３４７、３４８、３４９、３５０、３５１、３５２、３５３、３５４、３５５、３５６、３５７、３５８、３５９、３６０、３６１、３６２、３６３、３６４、３６５、３６６、３６７、３６８、３６９、３７０、３７１、３７２、３７３、３７４、３７５、３７６、３７７、３７８、３７９、３８０、３８１、３８２、３８３、３８４、３８５、３８６、３８７、３８８、３８９、３９０、３９１、３９２、３９３、３９４、３９５、３９６、３９７、３９８、３９９、４００、４０１、４０２、４０３、４０４、４０５、４０６、４０７、４０８、４０９、４１０、４１１、４１２、４１３、４１４、４１５、４１６、４１７、４１８、４１９、４２０、４２１、４２２、４２３、４２４、４２５、４２６、４２７、４２８、４２９、４３０、４３１、４３２、４３３、４３４、４３５、４３６、４３７、４３８、４３９、４４０、４４１、４４２、４４３、４４４、４４５、４４６、４４７、４４８、４４９、４５０、４５１、４５２、４５３、４５４、４５５、４５６、４５７、４５８、４５９、４６０、４６１、４６２、４６３、４６４、４６５、４６６、４６７、４６８、４６９、４７０、４７１、４７２、４７３、４７４、４７５、４７６、４７７、４７８、４７９、４８０、４８１、４８２、４８３、４８４、４８５、４８６、４８７、４８８、４８９、４９０、４９１、４９２、４９３、４９４、４９５、４９６、４９７、４９８、４９９、５００、５０１、５０２、５０３、５０４、５０５、５０６、５０７、５０８、５０９、５１０、５１１、５１２、５１３、５１４、５１５、５１６、５１７、５１８、５１９、５２０、５２１、５２２、５２３、５２４、５２５、５２６、５２７、５２８、５２９、５３０、５３１、５３２、５３３、５３４、５３５、５３６、５３７、５３８、５３９、５４０、５４１、５４２、５４３、５４４、５４５、５４６、５４７、５４８、５４９、５５０、５５１、５５２、５５３、５５４、５５５、５５６、５５７、５５８、５５９、５６０、５６１、５６２、５６３、５６４、５６５、５６６、５６７、５６８、５６９、５７０、５７１、５７２、５７３、５７４、５７５、５７６、５７７、５７８、５７９、５８０、５８１、５８２、５８３、５８４、５８５、５８６、５８７、５８８、５８９、５９０、５９１、５９２、５９３、５９４、５９５、５９６、５９７、５９８、５９９、および６００ヌクレオチドなどの長さを有してもよい。ウイルスゲノムのプロモーター領域の長さは、４〜１０、１０〜２０、１０〜５０、２０〜３０、３０〜４０、４０〜５０、５０〜６０、５０〜１００、６０〜７０、７０〜８０、８０〜９０、９０〜１００、１００〜１１０、１００〜１５０、１１０〜１２０、１２０〜１３０、１３０〜１４０、１４０〜１５０、１５０〜１６０、１５０〜２００、１６０〜１７０、１７０〜１８０、１８０〜１９０、１９０〜２００、２００〜２１０、２００〜２５０、２１０〜２２０、２２０〜２３０、２３０〜２４０、２４０〜２５０、２５０〜２６０、２５０〜３００、２６０〜２７０、２７０〜２８０、２８０〜２９０、２９０〜３００、３００〜３１０、３００〜３５０、３１０〜３２０、３２０〜３３０、３３０〜３４０、３４０〜３５０、３５０〜３６０、３５０〜４００、３６０〜３７０、３７０〜３８０、３８０〜３９０、３９０〜４００、４００〜４１０、４００〜４５０、４１０〜４２０、４２０〜４３０、４３０〜４４０、４４０〜４５０、４５０〜４６０、４５０〜５００、４６０〜４７０、４７０〜４８０、４８０〜４９０、４９０〜５００、５００〜５１０、５００〜５５０、５１０〜５２０、５２０〜５３０、５３０〜５４０、５４０〜５５０、５５０〜５６０、５５０〜６００、５６０〜５７０、５７０〜５８０、５８０〜５９０、および５９０〜６００ヌクレオチドであってもよい。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約４ヌクレオチド長であるプロモーター領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約１７ヌクレオチド長であるプロモーター領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約２０４ヌクレオチド長であるプロモーター領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約２１９ヌクレオチド長であるプロモーター領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約２６０ヌクレオチド長であるプロモーター領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約３０３ヌクレオチド長であるプロモーター領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約３８２ヌクレオチド長であるプロモーター領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約５８８ヌクレオチド長であるプロモーター領域を含む。
【０１１８】
一実施形態では、プロモーター領域は、ＣＢＡプロモーター配列に由来する。非限定的な例として、プロモーターは、２６０ヌクレオチド長である。
本開示のＡＡＶ粒子は、少なくとも１つのエンハンサー領域を有するウイルスゲノムを含む。エンハンサー領域は、独立して、これらに限定されないが、３００、３０１、３０２、３０３、３０４、３０５、３０６、３０７、３０８、３０９、３１０、３１１、３１２、３１３、３１４、３１５、３１６、３１７、３１８、３１９、３２０、３２１、３２２、３２３、３２４、３２５、３２６、３２７、３２８、３２９、３３０、３３１、３３２、３３３、３３４、３３５、３３６、３３７、３３８、３３９、３４０、３４１、３４２、３４３、３４４、３４５、３４６、３４７、３４８、３４９、３５０、３５１、３５２、３５３、３５４、３５５、３５６、３５７、３５８、３５９、３６０、３６１、３６２、３６３、３６４、３６５、３６６、３６７、３６８、３６９、３７０、３７１、３７２、３７３、３７４、３７５、３７６、３７７、３７８、３７９、３８０、３８１、３８２、３８３、３８４、３８５、３８６、３８７、３８８、３８９、３９０、３９１、３９２、３９３、３９４、３９５、３９６、３９７、３９８、３９９、および４００ヌクレオチドなどの長さを有してもよい。ウイルスゲノムのエンハンサー領域の長さは、３００〜３１０、３００〜３２５、３０５〜３１５、３１０〜３２０、３１５〜３２５、３２０〜３３０、３２５〜３３５、３２５〜３５０、３３０〜３４０、３３５〜３４５、３４０〜３５０、３４５〜３５５、３５０〜３６０、３５０〜３７５、３５５〜３６５、３６０〜３７０、３６５〜３７５、３７０〜３８０、３７５〜３８５、３７５〜４００、３８０〜３９０、３８５〜３９５、および３９０〜４００ヌクレオチドであってもよい。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約３０３ヌクレオチド長であるエンハンサー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約３８２ヌクレオチド長であるエンハンサー領域を含む。
【０１１９】
一実施形態では、エンハンサー領域は、ＣＭＶエンハンサー配列に由来する。非限定的な例として、ＣＭＶエンハンサーは、３８２ヌクレオチド長である。
ベクターゲノム領域：エクソン領域およびイントロン領域。
【０１２０】
本開示のＡＡＶ粒子は、少なくとも１つのエクソン領域を有するウイルスゲノムを含む。エクソン領域は、独立して、これらに限定されないが、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、１００、１０１、１０２、１０３、１０４、１０５、１０６、１０７、１０８、１０９、１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、１３５、１３６、１３７、１３８、１３９、１４０、１４１、１４２、１４３、１４４、１４５、１４６、１４７、１４８、１４９、および１５０ヌクレオチドなどの長さを有してもよい。ウイルスゲノムのエクソン領域の長さは、２〜１０、５〜１０、５〜１５、１０〜２０、１０〜３０、１０〜４０、１５〜２０、１５〜２５、２０〜３０、２０〜４０、２０〜５０、２５〜３０、２５〜３５、３０〜４０、３０〜５０、３０〜６０、３５〜４０、３５〜４５、４０〜５０、４０〜６０、４０〜７０、４５〜５０、４５〜５５、５０〜６０、５０〜７０、５０〜８０、５５〜６０、５５〜６５、６０〜７０、６０〜８０、６０〜９０、６５〜７０、６５〜７５、７０〜８０、７０〜９０、７０〜１００、７５〜８０、７５〜８５、８０〜９０、８０〜１００、８０〜１１０、８５〜９０、８５〜９５、９０〜１００、９０〜１１０、９０〜１２０、９５〜１００、９５〜１０５、１００〜１１０、１００〜１２０、１００〜１３０、１０５〜１１０、１０５〜１１５、１１０〜１２０、１１０〜１３０、１１０〜１４０、１１５〜１２０、１１５〜１２５、１２０〜１３０、１２０〜１４０、１２０〜１５０、１２５〜１３０、１２５〜１３５、１３０〜１４０、１３０〜１５０、１３５〜１４０、１３５〜１４５、１４０〜１５０、および１４５〜１５０ヌクレオチドであってもよい。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約５３ヌクレオチド長であるエクソン領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約１３４ヌクレオチド長であるエクソン領域を含む。
【０１２１】
本開示のＡＡＶ粒子は、少なくとも１つのイントロン領域を有するウイルスゲノムを含む。イントロン領域は、独立して、これらに限定されないが、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、１００、１０１、１０２、１０３、１０４、１０５、１０６、１０７、１０８、１０９、１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、１３５、１３６、１３７、１３８、１３９、１４０、１４１、１４２、１４３、１４４、１４５、１４６、１４７、１４８、１４９、１５０、１５１、１５２、１５３、１５４、１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１６０、１６１、１６２、１６３、１６４、１６５、１６６、１６７、１６８、１６９、１７０、１７１、１７２、１７３、１７４、１７５、１７６、１７７、１７８、１７９、１８０、１８１、１８２、１８３、１８４、１８５、１８６、１８７、１８８、１８９、１９０、１９１、１９２、１９３、１９４、１９５、１９６、１９７、１９８、１９９、２００、２０１、２０２、２０３、２０４、２０５、２０６、２０７、２０８、２０９、２１０、２１１、２１２、２１３、２１４、２１５、２１６、２１７、２１８、２１９、２２０、２２１、２２２、２２３、２２４、２２５、２２６、２２７、２２８、２２９、２３０、２３１、２３２、２３３、２３４、２３５、２３６、２３７、２３８、２３９、２４０、２４１、２４２、２４３、２４４、２４５、２４６、２４７、２４８、２４９、２５０、２５１、２５２、２５３、２５４、２５５、２５６、２５７、２５８、２５９、２６０、２６１、２６２、２６３、２６４、２６５、２６６、２６７、２６８、２６９、２７０、２７１、２７２、２７３、２７４、２７５、２７６、２７７、２７８、２７９、２８０、２８１、２８２、２８３、２８４、２８５、２８６、２８７、２８８、２８９、２９０、２９１、２９２、２９３、２９４、２９５、２９６、２９７、２９８、２９９、３００、３０１、３０２、３０３、３０４、３０５、３０６、３０７、３０８、３０９、３１０、３１１、３１２、３１３、３１４、３１５、３１６、３１７、３１８、３１９、３２０、３２１、３２２、３２３、３２４、３２５、３２６、３２７、３２８、３２９、３３０、３３１、３３２、３３３、３３４、３３５、３３６、３３７、３３８、３３９、３４０、３４１、３４２、３４３、３４４、３４５、３４６、３４７、３４８、３４９、および３５０ヌクレオチドなどの長さを有してもよい。ウイルスゲノムのイントロン領域の長さは、２５〜３５、２５〜５０、３５〜４５、４５〜５５、５０〜７５、５５〜６５、６５〜７５、７５〜８５、７５〜１００、８５〜９５、９５〜１０５、１００〜１２５、１０５〜１１５、１１５〜１２５、１２５〜１３５、１２５〜１５０、１３５〜１４５、１４５〜１５５、１５０〜１７５、１５５〜１６５、１６５〜１７５、１７５〜１８５、１７５〜２００、１８５〜１９５、１９５〜２０５、２００〜２２５、２０５〜２１５、２１５〜２２５、２２５〜２３５、２２５〜２５０、２３５〜２４５、２４５〜２５５、２５０〜２７５、２５５〜２６５、２６５〜２７５、２７５〜２８５、２７５〜３００、２８５〜２９５、２９５〜３０５、３００〜３２５、３０５〜３１５、３１５〜３２５、３２５〜３３５、３２５〜３５０、および３３５〜３４５ヌクレオチドであってもよい。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約３２ヌクレオチド長であるイントロン領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約１７２ヌクレオチド長であるイントロン領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約２０１ヌクレオチド長であるイントロン領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約３４７ヌクレオチド長であるイントロン領域を含む。
【０１２２】
一実施形態では、イントロン領域は、ＳＶ４０イントロン配列に由来する。非限定的な例として、イントロンは、１７２ヌクレオチド長である。
ＩＩ．ＡＡＶ産生
一般的産生プロセスおよび成分
ｒＡＡＶ粒子を産生するためのウイルス産生細胞としては、一般に、哺乳動物細胞タイプが挙げられる。しかしながら、哺乳動物細胞は、１複製細胞当たりのウイルス粒子の収量が低いこと、ならびにウイルス産生細胞内の他の哺乳動物生体物質による望ましくない混入のリスクが高いことなど、ｒＡＡＶ粒子の大規模生産に関して幾つかの難問を提示する。その結果、昆虫細胞が、ｒＡＡＶ粒子の大規模生産のための代替的ビヒクルになっている。
【０１２３】
昆虫細胞を使用するＡＡＶ産生系も、一連の難問を提示する。例えば、ｒＡＡＶ粒子の高収量産生には、Ｒｅｐ５２と比較してＲｅｐ７８の発現がより低いことが必要とされることが多い。したがって、昆虫細胞におけるＲｅｐ７８およびＲｅｐ５２の相対的な発現制御には、Ｒｅｐオペロン内に注意深く設計された制御機構が必要である。こうした制御機構としては、Ｒｅｐ７８のΔＩＥ１プロモーターおよびＲｅｐ５２のＰｏｌＨプロモーターなど、個々に最適化される昆虫細胞プロモーター、またはＲｅｐをコードするヌクレオチド配列を、独立して最適化される配列もしくは構築物へと分割することを挙げることができる。しかしながら、こうした制御機構を実装すると、ｒＡＡＶ粒子収量の低減、または構造的に不安定なビリオンに結び付くことが多い。
【０１２４】
別の例では、ｒＡＡＶ粒子の産生には、アセンブルしてＡＡＶカプシドを形成するＶＰ１、ＶＰ２、およびＶＰ３タンパク質が必要である。ｒＡＡＶ粒子の高収量産生には、ＶＰ１、ＶＰ２、およびＶＰ３の比率の最適化が必要であり、この比率は、一般にそれぞれ約１：１：１０であるべきであるが、１０個のＶＰ３コピーに対して、ＶＰ１は１〜２個および／またはＶＰ２は１〜２個と変動してもよい。ＶＰ１が多すぎるとカプシドが不安定になり、ＶＰ１が少なすぎるとウイルスの感染力が減少することになるため、この比率はカプシドの品質にとって重要である。
【０１２５】
野生型ＡＡＶでは、ＶＰ１発現を制御するための欠損スプライシング法；ＶＰ２を制御するための特殊な周囲環境（「コザック」配列）を有する弱い開始コドン（ＡＣＧ）；およびＶＰ３発現のための標準的開始コドン（ＡＴＧ）が使用される。しかしながら、一部のバキュロウイルス系では、哺乳動物スプライシング配列は、常に認識されるとは限らず、ＶＰ１、ＶＰ２、およびＶＰ３の産生を正しく制御することができない。結果的に、近隣のヌクレオチドおよびＶＰ２に由来するＡＣＧ開始配列が使用され、カプシドタンパク質の産生が駆動され得る。残念ながら、ＡＡＶ血清型のほとんどの場合、この方法では、ＶＰ２と比較してＶＰ１の比率がより低いカプシドが作出される（１０個のＶＰ３コピーに対して＜１個）。ＶＰタンパク質の産生をより効果的に制御するため、ＴＴＧ、ＧＴＧ、またはＣＴＧのような、非標準コドンまたは開始コドンが使用されている。しかしながら、こうした開始コドンは、当業者によると野生型ＡＴＧまたはＡＣＧ開始コドンと比べて最適未満であるとみなされている（その内容をその全体で本願明細書に援用する、国際公開第２００７０４６７０３号パンフレットおよび国際公開第２００７１４８９７１号パンフレットを参照されたい）。
【０１２６】
別の例では、バキュロウイルス／Ｓｆ９系を使用するｒＡＡＶ粒子の産生には、一般に、広く使用されているバクミドに基づくバキュロウイルス発現ベクター系（ＢＥＶ）が必要であるが、これらは、大規模ＡＡＶ生産のためには最適化されていない。バキュロウイルス／Ｓｆ９系を使用するＡＡＶカプシドタンパク質の信頼性の高い大規模生産を妨げる、バクミドに基づくＢＥＶでのウイルスタンパク質の異常なタンパク質分解は、予想外の問題である。
【０１２７】
哺乳動物細胞および昆虫細胞でのｒＡＡＶ粒子の効果的で効率的な大規模（商業的）生産を可能にする方法および系に対する必要性が存在し続けている。
本開示の１つまたは複数の実施形態の詳細は、下記の添付の説明に示されている。本開示の他の特徴、目的、および利点は、本明細書、図面、および特許請求の範囲から明白になるであろう。本明細書では、文脈上別段に明確な指示がない限り、単数形は複数形も含む。別段に定義されない限り、本明細書で使用されるすべての技術的および科学的用語は、本開示が属する技術分野の当業者が一般的に理解するものと同じ意味を有する。参照により援用される開示と矛盾する場合、本明細書の明示的な説明が優先されることになる。
【０１２８】
ある特定の実施形態では、本開示の構築物、ポリヌクレオチド、ポリペプチド、ベクター、血清型、カプシド製剤、または粒子は、以下の文献の１つに記載されている任意の配列、エレメント、構築物、系、標的、またはプロセスであってもよく、それらを含んでいてもよく、それらにより修飾されていてもよく、それらにより使用されてもよく、それらのために使用されてもよく、それらと共に使用されてもよく、またはそれらにより産生されてもよい：国際公開第２０１６０７３６９３号パンフレット、国際公開第２０１７０２３７２４号パンフレット、国際公開第２０１８２３２０５５号パンフレット、国際公開第２０１６０７７６８７号パンフレット、国際公開第２０１６０７７６８９号パンフレット、国際公開第２０１８２０４７８６号パンフレット、国際公開第２０１７２０１２５８号パンフレット、国際公開第２０１７２０１２４８号パンフレット、国際公開第２０１８２０４８０３号パンフレット、国際公開第２０１８２０４７９７号パンフレット、国際公開第２０１７１８９９５９号パンフレット、国際公開第２０１７１８９９６３号パンフレット、国際公開第２０１７１８９９６４号パンフレット、国際公開第２０１５１９１５０８号パンフレット、国際公開第２０１６０９４７８３号パンフレット、国際公開第２０１６０１３７９４９号パンフレット、国際公開第２０１７０７５３３５号パンフレット；これらの文献の内容はその全体で本願明細書に援用される。
【０１２９】
本開示のＡＡＶ産生は、標的細胞と接触して、ペイロード分子をコードするヌクレオチドを含むペイロード、例えば組換えウイルス構築物を送達することができるＡＡＶ粒子およびウイルスベクターを産生するためのプロセスおよび方法を含む。ある特定の実施形態では、ウイルスベクターは、組換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）ベクターなど、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターである。ある特定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、組換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）粒子など、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）粒子である。
【０１３０】
ある特定の実施形態では、本開示のプロセスは、少なくとも１つのウイルス発現構築物および少なくとも１つのペイロード構築物を含むウイルス産生系を使用してウイルス産生細胞にてウイルス粒子を産生する工程を含む。少なくとも１つのウイルス発現構築物および少なくとも１つのペイロード構築物は、ウイルス産生細胞にコトランスフェクトすることができる（例えば、二重トランスフェクション、三重トランスフェクション）。トランスフェクションは、当業者に公知であり日常的に実施されている標準的な分子生物学技法を使用して完了する。ウイルス産生細胞は、ペイロード構築物を複製するＲｅｐタンパク質と、アセンブルして、複製されたペイロード構築物を封入するカプシドを形成するＣａｐタンパク質とを含む、ＡＡＶ粒子を産生するために必要なタンパク質および他の生体材料の発現に必要な細胞機構を提供する。得られたＡＡＶ粒子は、ウイルス産生細胞から抽出され、投与用の医薬調製物へと処理される。
【０１３１】
ＡＡＶ粒子は、投与されると、標的細胞と接触し、細胞に進入してエンドソームに入る。ＡＡＶ粒子はエンドソームから放出され、その後、標的細胞の核と接触してペイロード構築物を送達する。ペイロード構築物、例えば、組換えウイルス構築物は、標的細胞の核に送達され、そこで、ペイロード構築物によりコードされているペイロード分子が発現され得る。
【０１３２】
ある特定の実施形態では、ウイルス粒子を産生するためのプロセスは、１つまたは複数のバキュロウイルス（例えば、バキュロウイルス発現ベクター（ＢＥＶ）、またはウイルス発現構築物およびペイロード構築物ベクターをトランスフェクトしたバキュロウイルス感染昆虫細胞（ＢＩＩＣ））を含むウイルス産生細胞のシード培養物を利用する。ある特定の実施形態では、シード培養物を回収し、アリコートへと分割し、凍結し、後の時点で、産生細胞の未感作集団の感染を開始するために使用してもよい。
【０１３３】
ＡＡＶ粒子の大規模生産には、バイオリアクターを利用することができる。バイオリアクターの使用により、質量、温度、混合条件（インペラーＲＰＭまたはウェーブ振動）、ＣＯ２濃度、Ｏ２濃度、ガススパージ速度および容積、ガスオーバーレイ速度および容積、ｐＨ、生存細胞密度（ＶＣＤ）、細胞生存率、細胞直径、および／または光学密度（ＯＤ）など、ウイルス産生細胞の成長および活性を支援する変数の正確な測定および／または制御が可能になる。ある特定の実施形態では、バイオリアクターは、培養物全体を実験的に決定された時点で収集してＡＡＶ粒子を精製するバッチ生産のために使用される。別の実施形態では、バイオリアクターは、培養物の一部分を実験的に決定された時点でＡＡＶ粒子の精製のために回収し、バイオリアクター中の残りの培養物を追加の成長培地成分でリフレッシュする連続生産のために使用される。
【０１３４】
ＡＡＶウイルス粒子は、細胞溶解、清澄化、滅菌、および精製を含むプロセスでウイルス産生細胞から抽出することができる。細胞溶解は、ウイルス産生細胞の構造を破壊し、それによりＡＡＶ粒子を放出させる任意のプロセスを含む。ある特定の実施形態では、細胞溶解としては、熱ショック溶解法、化学的溶解法、または機械的溶解法を挙げることができる。清澄化は、溶解した細胞、培地成分、およびＡＡＶ粒子の混合物の粗精製を含んでいてもよい。ある特定の実施形態では、清澄化としては、遠心分離、および／またはこれらに限定されないが、深層濾過、接線流濾過、および／または中空繊維濾過を含む濾過が挙げられる。
【０１３５】
ウイルス産生の最終結果は、２つの成分：（１）ペイロード構築物（例えば、組換えウイルス構築物）および（２）ウイルスカプシドを含むＡＡＶ粒子の精製収集物である。
図１は、ウイルス産生細胞（ＶＰＣ）およびプラスミド構築物を使用してバキュロウイルス感染昆虫細胞（ＢＩＩＣ）を産生するための系の一実施形態の概略図およびプロセスの一実施形態のフローダイヤグラムを示す。細胞バンク（ＣＢ）からのウイルス産生細胞（ＶＰＣ）を解凍および拡大増殖して、標的作業容積およびＶＰＣ濃度を提供する。得られたＶＰＣのプールを、Ｒｅｐ／ＣａｐＶＰＣプールとペイロードＶＰＣプールとに分ける。１つまたは複数のＲｅｐ／Ｃａｐプラスミド構築物（ウイルス発現構築物）を処理して、Ｒｅｐ／Ｃａｐバクミドポリヌクレオチドにして、Ｒｅｐ／ＣａｐＶＰＣプールへとトランスフェクトする。１つまたは複数のペイロードプラスミド構築物（ペイロード構築物）を処理して、ペイロードバクミドポリヌクレオチドにして、ペイロードＶＰＣプールへとトランスフェクトする。２つのＶＰＣプールをインキュベートして、Ｐ１  Ｒｅｐ／Ｃａｐバキュロウイルス発現ベクター（ＢＥＶ）およびＰ１ペイロードＢＥＶを産生させる。２つのＢＥＶプールを、一団のプラークへと拡大増殖させ、単一のプラークをクローンプラーク（ＣＰ）精製のために選択する（単一プラーク拡大増殖とも呼ばれる）。このプロセスは、単一のＣＰ精製工程を含んでいてもよく、または連続して行われるかもしくは他の処理工程により隔てられているかのいずれでもよい複数のＣＰ精製工程を含んでいてもよい。１つまたは複数のＣＰ精製工程は、ＣＰ  Ｒｅｐ／ＣａｐＢＥＶプールおよびＣＰペイロードＢＥＶプールを提供する。次いで、こうした２つのＢＥＶプールを保管し、将来の産生工程に使用してもよく、または次いでＶＰＣへとトランスフェクトして、Ｒｅｐ／ＣａｐＢＩＩＣプールおよびペイロードＢＩＩＣプールを産生してもよい。
【０１３６】
図２は、ウイルス産生細胞（ＶＰＣ）およびバキュロウイルス感染昆虫細胞（ＢＩＩＣ）を使用してＡＡＶ粒子を産生するための系の概略の一実施形態およびプロセスの一実施形態のフローダイヤグラムを示す。細胞バンク（ＣＢ）からのウイルス産生細胞（ＶＰＣ）を解凍および拡大増殖して、標的の作業容積およびＶＰＣ濃度を提供する。この拡大増殖は、最大で２５００〜５０００ｍＬの作業容積の１つまたは複数の少容積拡大増殖工程、それに続く最大で２５〜５００Ｌの作業容積の大規模バイオリアクター（例えば、Ｗａｖｅバイオリアクターおよび／またはＮ−１バイオリアクター）での１つまたは複数の大容積拡大増殖工程を含む。ウイルス産生細胞の作業容積を生産用バイオリアクターに播種し、ＢＩＩＣ感染の標的ＶＰＣ濃度で２００〜２０００Ｌの作業容積へとさらに拡大増殖することができる。
【０１３７】
次いで、生産用バイオリアクター中のＶＰＣの作業容積に、Ｒｅｐ／Ｃａｐ  ＢＩＩＣおよびペイロードＢＩＩＣを、標的ＶＰＣ：ＢＩＩＣ比および標的ＢＩＩＣ：ＢＩＩＣ比で同時感染させる。ＶＣＤ感染は、ＢＥＶも利用することができる。同時感染させたＶＰＣを、生産用バイオリアクター中でインキュベートおよび拡大増殖し、ＡＡＶ粒子およびＶＰＣのバルク回収物を産生する。
【０１３８】
図３は、ＡＡＶ粒子およびウイルス産生細胞のバルク回収物を処理、清澄化、および精製することにより原薬を生産するための系の一実施形態の概略図およびプロセスの一実施形態のフローダイヤグラムを示す。ＡＡＶ粒子およびＶＰＣのバルク回収物（生産用バイオリアクター内）を、細胞破壊および溶解（例えば、化学的溶解および／または機械的溶解）、それに続く溶解プールのヌクレアーゼ処置により処理し、それにより粗溶解物プールを生産する。粗溶解物プールを、深層濾過および精密濾過を含む１つまたは複数の濾過および清澄化工程により処理して、清澄化溶解物プールを提供する。清澄化溶解物プールを、親和性クロマトグラフィー（ＡＦＣ）およびイオン交換クロマトグラフィー（ＡＥＸまたはＣＥＸ）を含む１つまたは複数のクロマトグラフィーおよび精製工程により処理して、精製産物プールを提供する。次いで、任意選択で、精製産物プールを、ナノ濾過により、次いで接線流濾過（ＴＦＦ）により処理する。ＴＦＦプロセスは、連続または交互のいずれでもよい１つまたは複数のダイアフィルトレーション（ＤＦ）工程および１つまたは複数の限外濾過（ＵＦ）工程を含む。産物プールを、ウイルス保持濾過（ＶＲＦ）および最終濾過ステップによりさらに処理して、原薬プールを提供する。原薬プールをさらに濾過し、次いで保管および処置のためにバイアルへとアリコートする。
【０１３９】
ウイルス構築物
ウイルス発現構築物
本開示のウイルス産生系は、ウイルス産生細胞へとトランスフェクト／形質導入することができる１つまたは複数のウイルス発現構築物を含む。ウイルス発現構築物は、１つまたは複数のプロモーターの制御下にあるパルボウイルス遺伝子を含有してもよい。パルボウイルス遺伝子は、Ｒｅｐ５２、Ｒｅｐ４０、Ｒｅｐ６８、またはＲｅｐ７８タンパク質をコードするＲｅｐ遺伝子など、非構造ＡＡＶ複製タンパク質をコードするヌクレオチド配列を含んでいてもよい。パルボウイルス遺伝子は、ＶＰ１、ＶＰ２、およびＶＰ３タンパク質をコードするＣａｐ遺伝子など、構造ＡＡＶタンパク質をコードするヌクレオチド配列を含んでいてもよい。
【０１４０】
ある特定の実施形態では、ウイルス発現構築物は、Ｒｅｐ５２コード領域を含んでいてもよく、Ｒｅｐ５２コード領域は、Ｒｅｐ５２タンパク質をコードするＲｅｐ５２ヌクレオチド配列を含むヌクレオチド配列である。ある特定の実施形態では、ウイルス発現構築物は、Ｒｅｐ７８コード領域を含んでいてもよく、Ｒｅｐ７８コード領域は、Ｒｅｐ７８タンパク質をコードするＲｅｐ７８ヌクレオチド配列を含むヌクレオチド配列である。ある特定の実施形態では、ウイルス発現構築物は、Ｒｅｐ４０コード領域を含んでいてもよく、Ｒｅｐ４０コード領域は、Ｒｅｐ４０タンパク質をコードするＲｅｐ４０ヌクレオチド配列を含むヌクレオチド配列である。ある特定の実施形態では、ウイルス発現構築物は、Ｒｅｐ６８コード領域を含んでいてもよく、Ｒｅｐ６８コード領域は、Ｒｅｐ６８タンパク質をコードするＲｅｐ６８ヌクレオチド配列を含むヌクレオチド配列である。
【０１４１】
ある特定の実施形態では、ウイルス発現構築物は、ＶＰコード領域を含んでいてもよく、ＶＰコード領域は、ＶＰ１、ＶＰ２、ＶＰ３、またはそれらの組合せをコードするＶＰヌクレオチド配列を含むヌクレオチド配列である。ある特定の実施形態では、ウイルス発現構築物は、ＶＰ１コード領域を含んでいてもよく、ＶＰ１コード領域は、ＶＰ１タンパク質をコードするＶＰ１ヌクレオチド配列を含むヌクレオチド配列である。ある特定の実施形態では、ウイルス発現構築物は、ＶＰ２コード領域を含んでいてもよく、ＶＰ２コード領域は、ＶＰ２タンパク質をコードするＶＰ２ヌクレオチド配列を含むヌクレオチド配列である。ある特定の実施形態では、ウイルス発現構築物は、ＶＰ３コード領域を含んでいてもよく、ＶＰ３コード領域は、ＶＰ３タンパク質をコードするＶＰ３ヌクレオチド配列を含むヌクレオチド配列である。
【０１４２】
プロモーターとしては、バキュロウイルス主要後期プロモーター、昆虫ウイルスプロモーター、非昆虫ウイルスプロモーター、脊椎動物ウイルスプロモーター、核遺伝子プロモーター、ウイルスエレメントおよび非ウイルスエレメントを含む１つもしくは複数の種に由来するキメラプロモーター、ならびに／または合成プロモーターを挙げることができるが、これらに限定されない。ある特定の実施形態では、プロモーターは、Ｏｐ−ＥＩ、ＥＩ、ΔＥＩ、ＥＩ−１、ｐＨ、ＰＩＯ、ｐｏｌｈ（多面体）、ΔｐｏｌＨ、Ｄｍｈｓｐ７０、Ｈｒ１、Ｈｓｐ７０、４ｘＨｓｐ２７  ＥｃＲＥ＋最小Ｈｓｐ７０、ＩＥ、ＩＥ−１、ΔＩＥ−１、ΔＩＥ、ｐ１０、Δｐ１０（ｐ１０の修飾変異体または誘導体）、ｐ５、ｐ１９、ｐ３５、ｐ４０、およびそれらの変異体または誘導体から選択することができる。ある特定の実施形態では、プロモーターは、組織特異的プロモーター、細胞タイプ特異的プロモーター、細胞周期特異的プロモーター、およびそれらの変異体または誘導体から選択することができる。ある特定の実施形態では、プロモーターは、ＣＭＶプロモーター、アルファ１−アンチトリプシン（α１−ＡＴ）プロモーター、甲状腺ホルモン結合グロブリンプロモーター、チロキシン結合グロブリン（ＬＰＳ）プロモーター、ＨＣＲ−ＡｐｏＣＩＩハイブリッドプロモーター、ＨＣＲ−ｈＡＡＴハイブリッドプロモーター、アルブミンプロモーター、アポリポタンパク質Ｅプロモーター、α１−ＡＴ＋ＥａＩｂプロモーター、腫瘍選択的Ｅ２Ｆプロモーター、単核血ＩＬ−２プロモーター、およびそれらの変異体または誘導体から選択することができる。ある特定の実施形態では、プロモーターは、低発現プロモーター配列である。ある特定の実施形態では、プロモーターは、高発現プロモーター配列である。ある特定の実施形態では、プロモーターは、その内容をその全体で本願明細書に援用する米国特許出願公開第２０１１０１３６２２７号明細書に記載の通りのＲｅｐプロモーターまたはＣａｐプロモーターを含んでいてもよい。
【０１４３】
ある特定の実施形態では、ウイルス発現構築物は、すべてのヌクレオチド配列に同じプロモーターを含んでいてもよい。ある特定の実施形態では、ウイルス発現構築物は、２つ以上のヌクレオチド配列に同じプロモーターを含んでいてもよい。ある特定の実施形態では、ウイルス発現構築物は、２つ以上のヌクレオチド配列に異なるプロモーターを含んでいてもよい。ある特定の実施形態では、ウイルス発現構築物は、すべてのヌクレオチド配列に異なるプロモーターを含んでいてもよい。
【０１４４】
本開示のウイルス産生系は、パルボウイルス機能をウイルス複製細胞へと導入するために使用されるウイルス発現ベクターに限定されない。ウイルス複製細胞におけるウイルス発現構築物の存在は、恒久的である必要はない。ウイルス発現構築物は、任意の公知の手段により、例えば、細胞の化学的処置、エレクトロポレーション、または感染により導入することができる。
【０１４５】
本開示のウイルス発現構築物としては、核酸による細胞の形質転換、トランスフェクション、または形質導入を容易にする、生物学的であるかまたは化学的である任意の化合物または製剤を挙げることができる。例示的な生物学的ウイルス発現構築物としては、プラスミド、直鎖核酸分子、およびバキュロウイルスを含む組換えウイルスが挙げられる。例示的な化学的ベクターとしては、脂質複合体が挙げられる。ウイルス発現構築物は、本開示に従って核酸配列をウイルス複製細胞へと組み込むために使用される。（その各々の内容をその全体で本願明細書に援用する、オライリー（Ｏ’Ｒｅｉｌｌｙ），デビッド  Ｒ．（Ｄａｖｉｄ  Ｒ．），ロイス  Ｋ．ミラー（Ｌｏｉｓ  Ｋ．Ｍｉｌｌｅｒ），およびベルン  Ａ．ルッコウ（Ｖｅｒｎｅ  Ａ．Ｌｕｃｋｏｗ）．Ｂａｃｕｌｏｖｉｒｕｓ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｖｅｃｔｏｒｓ：ａ  ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  ｍａｎｕａｌ．オックスフォード大学出版局（Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ），１９９４．；マニアティスら編（Ｍａｎｉａｔｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，ｅｄｓ．）Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ．ＣＳＨラボラトリー社（ＣＳＨ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ）［米国ニューヨーク州ニューヨーク市（ＮＹ，Ｎ．Ｙ．）所在］（１９８２）；およびフィリポートおよびスクーバ編（Ｐｈｉｌｉｐｏｒｔ  ａｎｄ  Ｓｃｌｕｂｅｒ，ｅｄｓ．）Ｌｉｐｏｓｏｅｓ  ａｓ  ｔｏｏｌｓ  ｉｎ  Ｂａｓｉｃ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ａｎｄ  Ｉｎｄｕｓｔｒｙ．ＣＲＣプレス社（ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ）［米国ミシガン州アンアーバー市（Ａｎｎ  Ａｒｂｏｒ）所在］（１９９５）。
【０１４６】
ある特定の実施形態では、ウイルス発現構築物は、非構造ＡＡＶ複製タンパク質、構造ＡＡＶ複製タンパク質、またはそれらの組合せをコードする１つまたは複数のヌクレオチド配列を含むＡＡＶ発現構築物である。
【０１４７】
ある特定の実施形態では、本開示のウイルス発現構築物は、プラスミドベクターであってもよい。ある特定の実施形態では、本開示のウイルス発現構築物は、バキュロウイルス構築物であってもよい。
【０１４８】
本開示は、ＡＡＶ粒子またはウイルスベクターを産生するために採用されるウイルス発現構築物の数により限定されない。ある特定の実施形態では、１、２、３、４、５、６つ、またはそれよりも多くのウイルス発現構築物を採用し、本開示に従ってウイルス産生細胞においてＡＡＶ粒子を産生させることができる。１つの非限定的な例では、５つの発現構築物が、ＡＡＶ  ＶＰ１、ＡＡＶ  ＶＰ２、ＡＡＶ  ＶＰ３、Ｒｅｐ５２、Ｒｅｐ７８を個々にコードしてもよく、付帯するペイロード構築物は、ペイロードポリヌクレオチドおよび少なくとも１つのＡＡＶ  ＩＴＲを含む。別の実施形態では、例えば、Ｒｅｐ５２およびＲｅｐ４０またはＲｅｐ７８およびＲｅｐ６８を発現する発現構築物を採用してもよい。発現構築物は、ＶＰ１、ＶＰ２、ＶＰ３、Ｒｅｐ５２／Ｒｅｐ４０、およびＲｅｐ７８／Ｒｅｐ６８コード配列の任意の組合せを含んでいてもよい。
【０１４９】
ある特定の実施形態では、ウイルス発現構築物は、ある特定の細胞タイプでの発現を最適化するためのエレメントをコードする。さらなる実施形態では、発現構築物は、哺乳動物細胞または昆虫細胞において所望の遺伝子を発現させるために、ｐｏｌｈおよび／またはΔＩＥ−１昆虫転写プロモーター、ＣＭＶ哺乳動物転写プロモーター、および／またはｐ１０昆虫特異的プロモーターを含んでいてもよい。
【０１５０】
本開示のある特定の実施形態では、ウイルス発現構築物は、昆虫細胞においてＡＡＶ粒子を産生させるために使用することができる。ある特定の実施形態では、例えば、感染力もしくは特異性の増加などのウイルス粒子の属性を向上させるために、または産生収量を増強するために、カプシド遺伝子および／またはｒｅｐ遺伝子の野生型ＡＡＶ配列に対して修飾をなすことができる。
【０１５１】
ある特定の実施形態では、ウイルス発現構築物は、１つまたは複数の開始コドン領域を含むＡＡＶカプシドタンパク質をコードする配列など、開始コドン領域を含むヌクレオチド配列を含有してもよい。開始コドンは、ＡＴＧであってもよくまたは非ＡＴＧコドン（つまり、ＡＡＶ  ＶＰ１カプシドタンパク質の開始コドンが非ＡＴＧである最適未満の開始コドン）であってもよい。ある特定の実施形態では、ウイルス発現構築物は、ＡＡＶ  ＶＰ１カプシドタンパク質の開始コドンが非ＡＴＧ、つまり最適未満の開始コドンであり、修飾された比率のウイルスカプシドタンパク質を昆虫細胞産生系で発現させることが可能にされており、宿主細胞の感染力の向上が提供される、ＡＡＶカプシドタンパク質をコードするヌクレオチド配列を含有してもよい。非限定的な例では、本開示のウイルス発現構築物は、ＡＡＶ  ＶＰ１、ＶＰ２、およびＶＰ３カプシドタンパク質をコードするヌクレオチド配列を含み、ＡＡＶ  ＶＰ１カプシドタンパク質を翻訳するための開始コドンが、その内容をその全体で本願明細書に援用する米国特許第８１６３５４３号明細書に記載の通り、ＣＴＧ、ＴＴＧ、またはＧＴＧである核酸構築物を含有してもよい。
【０１５２】
ある特定の実施形態では、ウイルス発現構築物は、発現制御配列を含む発現制御領域を含んでいてもよい。ある特定の実施形態では、ウイルス発現構築物は、内部リボソーム侵入部位（ＩＲＥＳ）をコードするＩＲＥＳヌクレオチド配列を含むＩＲＥＳ配列領域を含んでいてもよい。内部リボソーム侵入部位（ＩＲＥＳ）は、口蹄疫ウイルスに由来するＦＭＤＶ−ＩＲＥＳ、脳心筋炎ウイルスに由来するＥＭＣＶ−ＩＲＥＳ、およびそれらの組合せからなる群から選択することができる。
【０１５３】
ある特定の実施形態では、ウイルス発現構築物は、ウイルス２Ａペプチドをコードする２Ａヌクレオチド配列を含む２Ａ配列領域を含んでいてもよい。ウイルス２Ａ配列は、Ａｓｐ−Ｖａｌ／Ｉｌｅ−Ｇｌｕ−Ｘ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏのコンセンサス配列を含有する比較的短い（およそ２０個のアミノ酸）配列である。この配列は、単一のオープンリーディングフレーム（ＯＲＦ）内の複数ポリペプチドの同時翻訳を可能にする。ＯＲＦが翻訳されると共に、２Ａ配列のグリシン残基およびプロリン残基が正常なペプチド結合の形成を防止し、それによりポリペプチド鎖内でのリボソーム「スキップ」および「自己切断」がもたらされる。ウイルス２Ａペプチドは、口蹄疫ウイルスに由来するＦ２Ａ、トセア・アシグナ（Ｔｈｏｓｅａ  ａｓｉｇｎａ）ウイルスに由来するＴ２Ａ、ウマ鼻炎Ａウイルスに由来するＥ２Ａ、ブタテッショウウイルス−１に由来するＰ２Ａ、細胞質多角体病ウイルスに由来するＢｍＣＰＶ２Ａ、Ｂ．モリフラケリウイルス（Ｂ．ｍｏｒｉ  ｆｌａｃｈｅｒｉｅ）に由来するＢｍＩＦＶ２Ａ、およびそれらの組合せからなる群から選択することができる。
【０１５４】
ある特定の実施形態では、ＡＡＶ産生のために使用されるウイルス発現構築物は、ＡＡＶ  ＶＰ１カプシドタンパク質の開始コドンが非ＡＴＧ、つまり最適未満の開始コドンであり、修飾された比率のウイルスカプシドタンパク質を産生系で発現させることが可能にされており、宿主細胞の感染力の向上が提供される、ＡＡＶカプシドタンパク質をコードするヌクレオチド配列を含有してもよい。非限定的な例では、ウイルス構築物ベクターは、ＡＡＶ  ＶＰ１、ＶＰ２、およびＶＰ３カプシドタンパク質をコードするヌクレオチド配列を含み、ＡＡＶ  ＶＰ１カプシドタンパク質を翻訳するための開始コドンが、その内容をその全体で本願明細書に援用する米国特許第８，１６３，５４３号明細書に記載の通り、ＣＴＧ、ＴＴＧ、またはＧＴＧである核酸構築物を含有してもよい。
【０１５５】
ある特定の実施形態では、本開示のウイルス発現構築物は、昆虫細胞での発現のためにパルボウイルスｒｅｐタンパク質をコードするプラスミドベクターまたはバキュロウイルス構築物であってもよい。ある特定の実施形態では、Ｒｅｐ７８タンパク質およびＲｅｐ５２タンパク質のために単一のコード配列を使用し、Ｒｅｐ７８タンパク質を翻訳するための開始コドンは、その内容をその全体で本願明細書に援用する米国特許第８，５１２，９８１号明細書に記載の通りの、昆虫細胞での発現時に部分的エクソンスキップを起こして、例えばＲｅｐ５２と比較してＲｅｐ７８のより少量の発現を促進し、それにより高ベクター収量を促進することができる、ＡＣＧ、ＴＴＧ、ＣＴＧ、およびＧＴＧからなる群から選択される最適未満の開始コドンである。
【０１５６】
ある特定の実施形態では、ウイルス発現構築物は、例えば、その内容をその全体で本願明細書に援用する米国特許第８，６９７，４１７号明細書に教示されている通り、例えば、Ｒｅｐタンパク質、例えばＲｅｐ７８およびＲｅｐ５２の比率の向上を実現し、それにより昆虫細胞におけるウイルス発現構築物および／またはペイロード構築物ベクターの大規模（商業的）生産を向上させるような示差的コドンバイアスを有する反復コドンを含有する昆虫細胞での発現のためのプラスミドベクターまたはバキュロウイルス構築物であってもよい。
【０１５７】
別の実施形態では、ｒｅｐタンパク質の比率の向上は、その内容をその全体で本願明細書に援用する米国特許第８，６４２，３１４号明細書に記載の方法および構築物を使用して実現することができる。
【０１５８】
ある特定の実施形態では、ウイルス発現構築物は、大規模生産のためのより高いウイルス力価の調製など、それらの対応する野生型Ｒｅｐポリペプチドと比較して１つまたは複数の特性が向上されている突然変異体パルボウイルスＲｅｐポリペプチドをコードしていてもよい。あるいは、ウイルス発現構築物は、より高品質のウイルス粒子の産生を可能にするか、またはウイルスのより安定した産生を維持することができてもよい。非限定的な例では、ウイルス発現構築物は、その内容をその全体で本願明細書に援用する米国特許出願公開第２０１３００２３０３４号明細書に記載の通り、突然変異型核移行配列またはジンクフィンガードメインを有する突然変異体Ｒｅｐポリペプチドをコードしてもよい。
【０１５９】
ある特定の実施形態では、ウイルス発現構築物は、その内容をその全体で本願明細書に援用する米国特許出願公開第２０１１０１７１２６２号明細書に記載の通り、免疫浸潤配列として機能することができるＧｌｙ−Ａｌａ反復領域が組み込まれているパルボウイルスカプシドの成分をコードしていてもよい。
【０１６０】
本開示のある特定の実施形態では、ウイルス発現構築物は、昆虫細胞においてＡＡＶ粒子を産生させるために使用することができる。ある特定の実施形態では、例えば、感染力もしくは特異性の増加などのウイルス粒子の属性を向上させるために、または産生収量を増強するために、カプシド遺伝子および／またはｒｅｐ遺伝子の野生型ＡＡＶ配列に対して修飾をなすことができる。
【０１６１】
ある特定の実施形態では、ＶＰコード領域は、特定のＡＡＶ血清型の１つまたは複数のＡＡＶカプシドタンパク質をコードする。ＶＰコード領域のＡＡＶ血清型は、同じであってもよくまたは異なっていてもよい。ある特定の実施形態では、ＶＰコード領域は、コドン最適化されていてもよい。ある特定の実施形態では、ＶＰコード領域またはヌクレオチド配列は、哺乳動物細胞に対してコドン最適化されていてもよい。ある特定の実施形態では、ＶＰコード領域またはヌクレオチド配列は、昆虫細胞に対してコドン最適化されていてもよい。ある特定の実施形態では、ＶＰコード領域またはヌクレオチド配列は、スポドプテラ・フルギペルダ（Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ  ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ）細胞に対してコドン最適化されていてもよい。ある特定の実施形態では、ＶＰコード領域またはヌクレオチド配列は、Ｓｆ９またはＳｆ２１細胞株に対してコドン最適化されていてもよい。
【０１６２】
ある特定の実施形態では、１つまたは複数のＶＰカプシドタンパク質をコードするヌクレオチド配列は、参照ヌクレオチド配列とのヌクレオチド相同性が１００％未満であるようにコドン最適化されていてもよい。ある特定の実施形態では、コドン最適化ＶＰヌクレオチド配列と参照ＶＰヌクレオチド配列とのヌクレオチド相同性は、１００％未満、９９％未満、９８％未満、９７％未満、９６％未満、９５％未満、９４％未満、９３％未満、９２％未満、９１％未満、９０％未満、８９％未満、８８％未満、８７％未満、８６％未満、８５％未満、８４％未満、８３％未満、８２％未満、８１％未満、８０％未満、７８％未満、７６％未満、７４％未満、７２％未満、７０％未満、６８％未満、６６％未満、６４％未満、６２％未満、６０％未満、５５％未満、５０％未満、および４０％未満である。
【０１６３】
ある特定の実施形態では、その各々の内容をその全体で本願明細書に援用する、米国特許第８，５１２，９８１号明細書、米国特許第８，１６３，５４３号明細書、米国特許第８，６９７，４１７号明細書、米国特許第８，６４２，３１４号明細書、米国特許出願公開第２０１３０２９６５３２号明細書、米国特許出願公開第２０１１０１１９７７７号明細書、米国特許出願公開第２０１１０１３６２２７号明細書、米国特許出願公開第２０１１０１７１２６２号明細書、米国特許出願公開第２０１３００２３０３４号明細書、国際特許出願第ＰＣＴ／ＮＬ２００８／０５０６１３号パンフレット、ＰＣＴ／ＮＬ２００９／０５００７６号パンフレット、ＰＣＴ／ＮＬ２００９／０５０３５２号パンフレット、ＰＣＴ／ＮＬ２０１１／０５０１７０号パンフレット、ＰＣＴ／ＮＬ２０１２／０５０６１９号パンフレット、および米国特許出願第１４／１４９，９５３号明細書で教示されているウイルス発現構築物を使用してもよい。
【０１６４】
ある特定の実施形態では、本開示のウイルス発現構築物は、その各々の内容をその全体で本願明細書に援用する、米国特許第６，４６８，５２４号明細書、米国特許第６，９８４，５１７号明細書、米国特許第７，４７９，５５４号明細書、米国特許第６，８５５，３１４号明細書、米国特許第７，２７１，００２号明細書、米国特許第６，７２３，５５１号明細書、米国特許第６，７２３，５５１号明細書、米国特許出願公開第２０１４０１０７１８６号明細書、米国特許出願第０９／７１７，７８９号明細書、米国特許出願第１１／９３６，３９４号明細書、米国特許出願第１４／００４，３７９号明細書、欧州特許出願ＥＰ１０８２４１３号明細書、欧州特許出願ＥＰ２５００４３４号明細書、欧州特許出願ＥＰ２６８３８２９号明細書、欧州特許出願ＥＰ１５７２８９３号明細書、および国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ９９／１１９５８号パンフレット、国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ０１／０９１２３号パンフレット、国際特許出願第ＰＣＴ／ＥＰ２０１２／０５４３０３号パンフレット、および国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００２／０３５８２９号パンフレットに教示されているウイルス発現構築物に由来してもよい。
【０１６５】
ある特定の実施形態では、ウイルス発現構築物は、サル種に由来する配列を含んでいてもよい。ある特定の実施形態では、ウイルス発現構築物は、これらに限定されないが、その各々の内容をその全体で本願明細書に援用する以下の文献に由来するカプシド配列およびｒｅｐ配列を含む配列を含有してもよい：国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ１９９７／０１５６９４号パンフレット、国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ２０００／０３３２５６号パンフレット、国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００２／０１９７３５号パンフレット、国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００２／０３３６４５号パンフレット、国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００８／０１３０６７号パンフレット、国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００８／０１３０６６号パンフレット、国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００８／０１３０６５号パンフレット、国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００９／０６２５４８号パンフレット、国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００９／００１３４４号パンフレット、国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ２０１０／０３６３３２号パンフレット、国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ２０１１／０６１６３２号パンフレット、国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ２０１３／０４１５６５号パンフレット、米国特許出願第１３／４７５５３５号明細書、米国特許出願第１３／８９６７２２号明細書、米国特許出願第１０／７３９０９６号明細書、米国特許出願第１４／０７３９７９号明細書、米国特許出願公開第２００１００４９１４４号明細書、米国特許出願公開第２０１２００９３８５３号明細書、米国特許出願公開第２００９０２１５８７１号明細書、米国特許出願公開第２００４０１３６９６３号明細書、米国特許出願公開第２００８０２１９９５４号明細書、米国特許出願公開第２００４０１７１８０７号明細書、米国特許出願公開第２０１２００９３７７８号明細書、米国特許出願公開第２００８００９０２８１号明細書、米国特許出願公開第２００５００６９８６６号明細書、米国特許出願公開第２０１００２６０７９９号明細書、米国特許出願公開第２０１００２４７４９０号明細書、米国特許出願公開第２０１４００４４６８０号明細書、米国特許出願公開第２０１００２５４９４７号明細書、米国特許出願公開第２０１１０２２３１３５号明細書、米国特許出願公開第２０１３０３０９２０５号明細書、米国特許出願公開第２０１２０１８９５８２号明細書、米国特許出願公開第２０１３０００４４６１号明細書、米国特許出願公開第２０１３０３１５８７１号明細書、米国特許第６０８３７１６号明細書、米国特許第７８３８２７７号明細書、米国特許第７３４４８７２号明細書、米国特許第８６０３４５９号明細書、米国特許第８１０５５７４号明細書、米国特許第７２４７４７２号明細書、米国特許第８２３１８８０号明細書、米国特許第８５２４２１９号明細書、米国特許第８４７０３１０号明細書、欧州特許出願第ＥＰ２３０１５８２号明細書、欧州特許出願ＥＰ２２８６８４１号明細書、欧州特許出願ＥＰ１９４４０４３号明細書、欧州特許出願ＥＰ１４５３５４３号明細書、欧州特許出願ＥＰ１４０９７４８号明細書、欧州特許出願ＥＰ２４６３３６２号明細書、欧州特許出願ＥＰ２２２０２１７号明細書、欧州特許出願ＥＰ２２２０２４１号明細書、欧州特許出願ＥＰ２２２０２４２号明細書、欧州特許出願ＥＰ２３５０２６９号明細書、欧州特許出願ＥＰ２２５０２５５号明細書、欧州特許出願ＥＰ２４３５５５９号明細書、欧州特許出願ＥＰ２６４３４６５号明細書、欧州特許出願ＥＰ１４０９７４８号明細書、欧州特許出願ＥＰ２３２５２９８号明細書、欧州特許出願ＥＰ１２４０３４５号明細書。
【０１６６】
ある特定の実施形態では、本開示のウイルス発現構築物は、その各々の内容をその全体で本願明細書に援用する以下の文献に記載の１つまたは複数のウイルス構築物に由来する１つまたは複数のヌクレオチド配列を含んでいてもよい：国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００２／０２５０９６号パンフレット、国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００２／０３３６２９号パンフレット、国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００３／０１２４０５号パンフレット、米国特許出願第１０／２９１５８３号明細書、米国特許出願第１０／４２０２８４号明細書、米国特許出願第７，３１９，００２号明細書、米国特許出願公開第２００４０１９１７６２号明細書、米国特許出願公開第２０１３００４５１８６号明細書、米国特許出願公開第２０１１０２６３０２７号明細書、米国特許出願公開第２０１１０１５１４３４号明細書、米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書、米国特許出願公開第２００３０２０７２５９号明細書、欧州特許出願第ＥＰ２３３８９００号明細書、欧州特許出願第ＥＰ１４５６４１９号明細書、欧州特許出願第ＥＰ１３１０５７１号明細書、欧州特許出願第ＥＰ１３５９２１７号明細書、欧州特許出願第ＥＰ１４２７８３５号明細書、欧州特許出願第ＥＰ２３３８９００号明細書、欧州特許出願第ＥＰ１４５６４１９号明細書、欧州特許出願第ＥＰ１３１０５７１号明細書、欧州特許出願第ＥＰ１３５９２１７号明細書、ならびに米国特許第７，２３５，３９３号明細書、および米国特許第８，５２４，４４６号明細書。
【０１６７】
ある特定の実施形態では、本開示のウイルス発現構築物は、以下の文献に記載の配列または組成物を含んでいてもよい：国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ１９９９／０２５６９４号パンフレット、国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ１９９９／０１００９６号パンフレット、国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００１／０１３０００号パンフレット、国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００２／２５９７６号パンフレット、国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００２／０３３６３１号パンフレット、国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００２／０３３６３０号パンフレット、国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００９／０４１６０６号パンフレット、国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ２０１２／０２５５５０号パンフレット、米国特許第８６３７２５５号明細書、米国特許第Ｓ８６３７２５５号明細書、米国特許第７１８６５５２号明細書、米国特許第７１０５３４５号明細書、米国特許第６７５９２３７号明細書、米国特許第７０５６５０２号明細書、米国特許第７１９８９５１号明細書、米国特許第８３１８４８０号明細書、米国特許第７７９０４４９号明細書、米国特許第７２８２１９９号明細書、米国特許出願公開第２０１３００５９２８９号明細書、米国特許出願公開第２００４００５７９３３号明細書、米国特許出願公開第２００４００５７９３２号明細書、米国特許出願公開第２０１００２７８７９１号明細書、米国特許出願公開第２００８００５０３４５号明細書、米国特許出願公開第２００８００５０３４３号明細書、米国特許出願公開第２００８０００８６８４号明細書、米国特許出願公開第２００６０２０４４７９号明細書、米国特許出願公開第２００４００５７９３１号明細書、米国特許出願公開第２００４００５２７６４号明細書、米国特許出願公開第２００３００１３１８９号明細書、米国特許出願公開第２００９０２２７０３０号明細書、米国特許出願公開第２００８００７５７４０号明細書、米国特許出願公開第２００８００７５７３７号明細書、米国特許出願公開第２００３０２２８２８２号明細書、米国特許出願公開第２０１３０３２３２２６号明細書、米国特許出願公開第２００５００１４２６２号明細書、米国特許出願第１４／１３６３３１号明細書、米国特許出願第０９／０７６３６９号明細書、米国特許出願第１０／７３８６０９号明細書、欧州特許出願第ＥＰ２５７３１７０号明細書、欧州特許出願第ＥＰ１１２７１５０号明細書、欧州特許出願第ＥＰ２３４１０６８号明細書、欧州特許出願第ＥＰ１８４５１６３号明細書、欧州特許出願第ＥＰ１１２７１５０号明細書、欧州特許出願第ＥＰ１０７８０９６号明細書、欧州特許出願第ＥＰ１２８５０７８号明細書、欧州特許出願第ＥＰ１４６３８０５号明細書、欧州特許出願第ＥＰ２０１０１７８９４０号明細書、米国特許出願公開第２０１４０００４１４３号明細書、欧州特許出願第ＥＰ２３５９８６９号明細書、欧州特許出願第ＥＰ１４５３５４７号明細書、欧州特許出願第ＥＰ２３４１０６８号明細書、および欧州特許出願第ＥＰ２６７５９０２号明細書。
【０１６８】
ある特定の実施形態では、本開示のウイルス発現構築物は、その各々の内容をその全体で本願明細書に援用する以下の文献に記載されているものの１つまたは複数に由来する１つまたは複数のヌクレオチド配列を含んでいてもよい：米国特許第７１８６５５２号明細書、米国特許第７１０５３４５号明細書、米国特許第６７５９２３７号明細書、米国特許第７０５６５０２号明細書、米国特許第７１９８９５１号明細書、米国特許第８３１８４８０号明細書、米国特許第７７９０４４９号明細書、米国特許第７２８２１９９号明細書、米国特許出願公開第２０１３００５９２８９号明細書、米国特許出願公開第２００４００５７９３３号明細書、米国特許出願公開第２００４００５７９３２号明細書、米国特許出願公開第２０１００２７８７９１号明細書、米国特許出願公開第２００８００５０３４５号明細書、米国特許出願公開第２００８００５０３４３号明細書、米国特許出願公開第２００８０００８６８４号明細書、米国特許出願公開第２００６０２０４４７９号明細書、米国特許出願公開第２００４００５７９３１号明細書、米国特許出願公開第２０１４０００４１４３号明細書、米国特許出願公開第２００９０２２７０３０号明細書、米国特許出願公開第２００８００７５７４０号明細書、米国特許出願公開第２００８００７５７３７号明細書、米国特許出願公開第２００３０２２８２８２号明細書、米国特許出願公開第２００４００５２７６４号明細書、米国特許出願公開第２００３００１３１８９号明細書、米国特許出願公開第２００５００１４２６２号明細書、米国特許出願公開第２０１３０３２３２２６号明細書、米国特許出願第１４／１３６３３１号明細書、米国特許出願第１０／７３８６０９号明細書、欧州特許出願第ＥＰ１１２７１５０号明細書、欧州特許出願第ＥＰ２３４１０６８号明細書、欧州特許出願第ＥＰ１８４５１６３号明細書、欧州特許出願第ＥＰ１１２７１５０号明細書、欧州特許出願第ＥＰ１０７８０９６号明細書、欧州特許出願第ＥＰ１２８５０７８号明細書、欧州特許出願第ＥＰ２５７３１７０号明細書、欧州特許出願第ＥＰ１４６３８０５号明細書、欧州特許出願第ＥＰ２６７５９０２号明細書、欧州特許出願第ＥＰ２３５９８６９号明細書、欧州特許出願第ＥＰ１４５３５４７号明細書、欧州特許出願第ＥＰ２３４１０６８号明細書。
【０１６９】
ある特定の実施形態では、本開示のウイルス発現構築物は、その各々の内容をその全体で本願明細書に援用する以下の文献に記載の通りの修飾ＡＡＶの構築物を含んでいてもよい：国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ１９９５／０１４０１８号パンフレット、国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ２０００／０２６４４９号パンフレット、国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２８８１７号パンフレット、国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００６／０１３３７５号パンフレット、国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００７／０１００５６号パンフレット、国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ２０１０／０３２１５８号パンフレット、国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ２０１０／０５０１３５号パンフレット、国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ２０１１／０３３５９６号パンフレット、米国特許出願第１２／４７３９１７号明細書、米国特許出願第０８／３３１３８４号明細書、米国特許出願第０９／６７０２７７号明細書、米国特許第５８７１９８２号明細書、米国特許第５８５６１５２号明細書、米国特許第６２５１６７７号明細書、米国特許第６３８７３６８号明細書、米国特許第６３９９３８５号明細書、米国特許第７９０６１１１号明細書、欧州特許出願第ＥＰ２０００１０３６００号明細書、欧州特許出願第ＥＰ７９７６７８号明細書、欧州特許出願第ＥＰ１０４６７１１号明細書、欧州特許出願第ＥＰ１６６８１４３号明細書、欧州特許出願第ＥＰ２３５９８６６号明細書、欧州特許出願第ＥＰ２３５９８６５号明細書、欧州特許出願第ＥＰ２３５７０１０号明細書、欧州特許出願第ＥＰ１０４６７１１号明細書、欧州特許出願第ＥＰ１２１８０３５号明細書、欧州特許出願第ＥＰ２３４５７３１号明細書、欧州特許出願第ＥＰ２２９８９２６号明細書、欧州特許出願第ＥＰ２２９２７８０号明細書、欧州特許出願第ＥＰ２２９２７７９号明細書、欧州特許出願第ＥＰ１６６８１４３号明細書、米国特許出願公開第２００９０１９７３３８号明細書、欧州特許出願第ＥＰ２３８３３４６号明細書、欧州特許出願第ＥＰ２３５９８６７号明細書、欧州特許出願第ＥＰ２３５９８６６号明細書、欧州特許出願第ＥＰ２３５９８６５号明細書、欧州特許出願第ＥＰ２３５７０１０号明細書、欧州特許出願第ＥＰ１８６６４２２号明細書、米国特許出願公開第２００９０３１７４１７号明細書、欧州特許出願第ＥＰ２０１６１７４号明細書、米国特許出願公開第２０１１０２３６３５３号明細書、米国特許出願公開第２００７００３６７６０号明細書、米国特許出願公開第２０１００１８６１０３号明細書、米国特許出願公開第２０１２０１３７３７９号明細書、および米国特許出願公開第２０１３０２８１５１６号明細書。
【０１７０】
ある特定の実施形態では、本開示のウイルス発現構築物は、その各々の内容をその全体で本願明細書に援用する以下の文献に記載の１つまたは複数の構築物を含んでいてもよい：国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ１９９９／００４３６７号パンフレット、国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０１０９６５号パンフレット、国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００５／０１４５５６号パンフレット、国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００６／００９６９９号パンフレット、国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ２０１０／０３２９４３号パンフレット、国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ２０１１／０３３６２８号パンフレット、国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ２０１１／０３３６１６号パンフレット、国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ２０１２／０３４３５５号パンフレット、米国特許第８３９４３８６号明細書、ＥＰ１７４２６６８号明細書、米国特許出願公開第２００８０２４１１８９号明細書、米国特許出願公開第２０１２００４６３４９号明細書、米国特許出願公開第２０１３０１９５８０１号明細書、米国特許出願公開第２０１４００３１４１８号明細書、欧州特許出願第ＥＰ２４２５０００号明細書、米国特許出願公開第２０１３０１０１５５８号明細書、欧州特許出願第ＥＰ１７４２６６８号明細書、欧州特許出願第ＥＰ２５６１０７５号明細書、欧州特許出願第ＥＰ２５６１０７３号明細書、欧州特許出願第ＥＰ２６９９６８８号明細書。
【０１７１】
ペイロード構築物：一般
本開示のＡＡＶ粒子は、少なくとも１つのペイロード領域を含む少なくとも１つのペイロード構築物を含んでいてもよく、またはそれを使用して産生してもよい。本明細書で使用される場合、「ペイロード」または「ペイロード領域」は、ウイルスゲノムによりもしくはそれ内にコードされる１つもしくは複数のポリヌクレオチドもしくはポリヌクレオチド領域、またはそのようなポリヌクレオチドもしくはポリヌクレオチド領域（例えば導入遺伝子、ポリペプチド、もしくはマルチポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、または調節性核酸もしくは制御性核酸）の発現産物を指す。
【０１７２】
ペイロード領域は、ｍＲＮＡの天然構成と類似するまたは再現する領域を反映するように構築されていてもよい。
ペイロード領域は、コードおよび非コード核酸配列の組合せを含んでいてもよい。ある特定の実施形態では、ＡＡＶペイロード領域は、コードもしくは非コードＲＮＡまたはそれらの組合せをコードしてもよい。
【０１７３】
また、ペイロード領域は、任意選択で、転写発現および／またはポリペプチド翻訳を促進するために１つまたは複数の機能性または制御性エレメントを含んでいてもよい。本明細書で開示される核酸配列およびポリペプチドは、調節性ポリヌクレオチドおよび／または調節性のポリヌクレオチドに基づく組成物の発現を可能にするようにアセンブルされたモジュール式のエレメントおよび／または配列モチーフを含有するように遺伝子操作されていてもよい。一部の実施形態では、ペイロード領域を含む核酸配列は、プロモーター領域、イントロン、コザック配列、エンハンサー、またはポリアデニル化配列の１つまたは複数を含んでいてもよい。本明細書に開示されるペイロード領域は、典型的には、少なくとも１つのセンス配列およびアンチセンス配列、ｓｉＲＮＡに基づく組成物、または前述のものの断片を、互いに組み合わせてまたは他のポリペプチド部分と組み合わせてコードする。
【０１７４】
本開示のＡＡＶ粒子のウイルスゲノム内のペイロード領域は、１つまたは複数の標的細胞、組織、臓器、または生物に送達することができる。
ある特定の実施形態では、ペイロード領域は、ペイロード構築物のウイルスゲノムなどのウイルスゲノム内に位置していてもよい。ペイロード領域の５’末端および／または３’末端には、少なくとも１つの逆位末端反復配列（ＩＴＲ）が存在してもよい。ペイロード領域内には、プロモーター領域、イントロン領域、およびコード領域が存在してもよい。
【０１７５】
ある特定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子は、神経学的疾患および／または障害を含む疾患および／または障害を処置、予防、緩和、または改善するための医学分野に有用である。
【０１７６】
ある特定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子は、フリードライヒ運動失調症、またはフラタキシンタンパク質の喪失もしくは部分的喪失に起因する任意の疾患を処置、予防、緩和、または改善するための医学分野に有用である。
【０１７７】
ある特定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子は、パーキンソン病を処置、予防、緩和、または改善するための医学分野に有用である。
ある特定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子は、筋萎縮性側索硬化症を処置、予防、緩和、または改善するための医学分野に有用である。
【０１７８】
ある特定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子は、ハンチントン病を処置、予防、緩和、または改善するための医学分野に有用である。
ある特定の実施形態では、ＡＡＶ粒子のペイロード領域は、目的のポリペプチドまたはタンパク質をコードする１つまたは複数の核酸配列を含む。
【０１７９】
ある特定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、１つよりも多くの目的のポリペプチドをコードする核酸配列を含むペイロード領域を有するウイルスゲノムを含む。ある特定の実施形態では、１つまたは複数のポリペプチドをコードするウイルスゲノムは、ウイルス粒子へと複製またはパッケージングされていてもよい。ベクターゲノムを含むウイルス粒子で形質導入した標的細胞は、単一の標的細胞において１つまたは複数のポリペプチドの各々を発現することができる。
【０１８０】
ＡＡＶ粒子ペイロード領域がポリペプチドをコードする場合、ポリペプチドは、ペプチド、ポリペプチド、またはタンパク質であってもよい。非限定的な例として、ペイロード領域は、少なくとも１つの目的の治療用タンパク質をコードしていてもよい。本明細書に記載のポリペプチドをコードするＡＡＶウイルスゲノムは、ヒト疾患、ウイルス、感染症、獣医学的応用の分野、ならびに様々なｉｎ  ｖｉｖｏおよびｉｎ  ｖｉｔｒｏ設定において有用であってもよい。
【０１８１】
ある特定の実施形態では、製剤化ＡＡＶ粒子（ウイルスゲノムを含む）の対象への投与は、対象におけるタンパク質の発現を増加させることになる。ある特定の実施形態では、タンパク質の発現の増加は、ペイロードによりコードされるポリペプチドに関連付けられる疾患または病気の影響および／または症状を低減することになる。
【０１８２】
ある特定の実施形態では、本開示の製剤化ＡＡＶ粒子は、これに限定されないが総機能的能力（ＴＦＣ）尺度など、標準的な評価方式により測定される通りの機能的能力および日常生活活動の低下を低減するために使用することができる。
【０１８３】
ある特定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、目的のタンパク質（つまりペイロードタンパク質、治療用タンパク質）をコードする核酸配列を含むペイロード領域を有するウイルスゲノムを含む。
【０１８４】
ある特定の実施形態では、ペイロード領域は、これらに限定されないが、以下のものを含むタンパク質をコードする核酸配列を含む：抗体、芳香族Ｌ−アミノ酸デカルボキシラーゼ（ＡＡＤＣ）、ＡｐｏＥ２、フラタキシン、生存運動ニューロン（ＳＭＮ）タンパク質、グルコセレブロシダーゼ、Ｎ−スルホグルコサミンスルホヒドロラーゼ、Ｎ−アセチル−アルファ−グルコサミニダーゼ、イズロン酸２−スルファターゼ、アルファ−Ｌ−イズロニダーゼ、パルミトイルタンパク質チオエステラーゼ１、トリペプチジルペプチダーゼ１、バテニン、ＣＬＮ５、ＣＬＮ６（リンクリン）、ＭＦＳＤ８、ＣＬＮ８、アスパルトアシラーゼ（ＡＳＰＡ）、プログラニュリン（ＧＲＮ）、ＭｅＣＰ２、ベータ−ガラクトシダーゼ（ＧＬＢ１）、および／またはギガキソニン（ＧＡＮ）。
【０１８５】
ある特定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、ＡＡＤＣ、またはパーキンソン病を処置するための当技術分野で公知の任意の他のペイロードをコードする核酸配列を含むペイロード領域を有するウイルスゲノムを含む。非限定的な例として、ペイロードは、ＮＭ＿００１０８２９７１．１（ＧＩ：１３２８１４４４７）、ＮＭ＿０００７９０．３（ＧＩ：１３２８１４４５９）、ＮＭ＿００１２４２８８６．１（ＧＩ：３３８９６８９１３）、ＮＭ＿００１２４２８８７．１（ＧＩ：３３８９６８９１６）、ＮＭ＿００１２４２８８８．１（ＧＩ：３３８９６８９１８）、ＮＭ＿００１２４２８８９．１（ＧＩ：３３８９６８９２０）、ＮＭ＿００１２４２８９０．１（ＧＩ：３３８９６８９２２）、およびそれらの断片またはバリアントなどの配列を含んでいてもよい。
【０１８６】
ある特定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、フラタキシン、またはフリートライヒ運動失調症を処置するための当技術分野で公知の任意の他のペイロードをコードする核酸配列を含むペイロード領域を有するウイルスゲノムを含む。非限定的な例として、ペイロードは、ＮＭ＿０００１４４．４（ＧＩ：２３９７８７１６７）、ＮＭ＿１８１４２５．２（ＧＩ：２３９７８７１８５）、ＮＭ＿００１１６１７０６．１（ＧＩ：２３９７８７１９７）、およびそれらの断片またはバリアントなどの配列を含んでいてもよい。
【０１８７】
ある特定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、ＳＭＮ、または脊髄性筋萎縮症（ＳＭＡ）を処置するための当技術分野で公知の任意の他のペイロードをコードする核酸配列を含むペイロード領域を有するウイルスゲノムを含む。非限定的な例として、ペイロードは、ＮＭ＿００１２９７７１５．１（ＧＩ：６６３０７０９９３）、ＮＭ＿０００３４４．３（ＧＩ：１９６１１５０５５）、ＮＭ＿０２２８７４．２（ＧＩ：１９６１１５０４０）、およびそれらの断片またはバリアントなどの配列を含んでいてもよい。
【０１８８】
ある特定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、その内容をその全体で本願明細書に援用する米国特許出願公開第２０１８０２５８２４号明細書（に記載の疾患関連タンパク質（およびその断片またはバリアント）のいずれかをコードする核酸配列を含むペイロード領域を有するウイルスゲノムを含む。
【０１８９】
ある特定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、その各々の内容をその全体で本願明細書に援用する以下の国際公開文献のいずれか１つに記載の疾患関連タンパク質（およびそれらの断片またはバリアント）のいずれかをコードする核酸配列を含むペイロード領域を有するウイルスゲノムを含む：国際公開第２０１６０７３６９３号パンフレット、国際公開第２０１７０２３７２４号パンフレット、国際公開第２０１８２３２０５５号パンフレット、国際公開第２０１６０７７６８７号パンフレット、国際公開第２０１６０７７６８９号パンフレット、国際公開第２０１８２０４７８６号パンフレット、国際公開第２０１７２０１２５８号パンフレット、国際公開第２０１７２０１２４８号パンフレット、国際公開第２０１８２０４８０３号パンフレット、国際公開第２０１８２０４７９７号パンフレット、国際公開第２０１７１８９９５９号パンフレット、国際公開第２０１７１８９９６３号パンフレット、国際公開第２０１７１８９９６４号パンフレット、国際公開第２０１５１９１５０８号パンフレット、国際公開第２０１６０９４７８３号パンフレット、国際公開第２０１６０１３７９４９号パンフレット、国際公開第２０１７０７５３３５号パンフレット。
【０１９０】
ペイロード：目的の遺伝子を標的とする調節性ポリヌクレオチド
一般
本開示は、そのベクターゲノムが調節性ポリヌクレオチド、例えば、ＲＮＡ分子またはＤＮＡ分子をコードする製剤化ＡＡＶ粒子の使用を含む。本明細書で使用される場合、「調節性ポリヌクレオチド」は、標的遺伝子のレベルまたは量、例えば、ｍＲＮＡまたはタンパク質レベルを調節するように（増加または減少のいずれか）機能する任意の核酸配列である。したがって、本開示は、細胞内部の目的の遺伝子を標的とすることができるＲＮＡ分子へとプロセシングされ得るポリヌクレオチドをコードするベクターゲノムを提供し、そのようなＲＮＡ分子としては、二本鎖ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）、ｐｒｅ−ｍｉＲＮＡ、または他のＲＮＡｉ作用剤が挙げられるが、これらに限定されない。また、本開示は、疾患、障害、および／または状態を処置するために目的の遺伝子の対立遺伝子の遺伝子発現およびタンパク質産生を阻害するためのそれらの使用方法を提供する。
【０１９１】
ある特定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、１つまたは複数の調節性ポリペプチドをコードするかまたは含む核酸配列を含むペイロード領域を有するウイルスゲノムを含む。ある特定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、目的の調節性ポリペプチドをコードする核酸配列を含むペイロード領域を有するウイルスゲノムを含む。本開示のある特定の実施形態では、調節性ポリヌクレオチド、例えば、ＲＮＡ分子またはＤＮＡ分子は、治療剤として提示される。ＲＮＡ干渉媒介性遺伝子サイレンシングは、標的遺伝子発現を特異的に阻害することができる。
【０１９２】
ある特定の実施形態では、ペイロード領域は、標的遺伝子発現および／または標的タンパク質産生に干渉する調節性ポリヌクレオチドをコードする核酸配列を含む。ある特定の実施形態では、阻害／修飾しようとする遺伝子発現またはタンパク質産生としては、以下のものが挙げられるが、これらに限定されない：スーパーオキシドジスムターゼ１（ＳＯＤ１）、第９染色体オープンリーディングフレーム７２（Ｃ９ＯＲＦ７２）、ＴＡＲ  ＤＮＡ結合タンパク質（ＴＡＲＤＢＰ）、アタキシン−３（ＡＴＸＮ３）、ハンチンチン（ＨＴＴ）、アミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）、アポリポタンパク質Ｅ（ＡｐｏＥ）、微小管関連タンパク質タウ（ＭＡＰＴ）、アルファ−シヌクレイン（ＳＮＣＡ）、電位開口型ナトリウムチャネルアルファサブユニット９（ＳＣＮ９Ａ）、および／または電位開口型ナトリウムチャネルアルファサブユニット１０（ＳＣＮ１０Ａ）。
【０１９３】
本開示は、ＳＯＤ１  ｍＲＮＡを標的として、ＳＯＤ１の遺伝子発現および／またはタンパク質産生に干渉する低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）二重鎖（およびそれらをコードする調節性ポリヌクレオチド）を提供する。また、本開示は、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）を処置するためにＳＯＤ１の対立遺伝子の遺伝子発現およびタンパク質産生を阻害するためのそれらの使用方法を提供する。ある特定の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ二重鎖は、対応するヌクレオチド配列の任意のセグメントに沿ってＳＯＤ１を標的とすることができる。ある特定の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ二重鎖は、ヌクレオチド配列内のＳＮＰまたはバリアントの位置でＳＯＤ１を標的とすることができる。
【０１９４】
本開示は、ＨＴＴ  ｍＲＮＡを標的としてＨＴＴの遺伝子発現および／またはタンパク質産生に干渉する低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）二重鎖（およびそれらをコードする調節性ポリヌクレオチド）を提供する。また、本開示は、ハンチントン病（ＨＤ）を処置するためにＨＴＴの対立遺伝子の遺伝子発現およびタンパク質産生を阻害するためのそれらの使用方法を提供する。ある特定の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ二重鎖は、対応するヌクレオチド配列の任意のセグメントに沿ってＨＴＴを標的とすることができる。ある特定の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ二重鎖は、ヌクレオチド配列内のＳＮＰまたはバリアントの位置でＨＴＴを標的とすることができる。
【０１９５】
ある特定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、その各々の内容をその全体で本願明細書に援用する以下の国際公開文献のいずれか１つに記載の調節性ポリペプチド、ＲＮＡｉ分子、ｓｉＲＮＡ分子、ｄｓＲＮＡ分子、および／またはＲＮＡ二重鎖のいずれかをコードする核酸配列を含むペイロード領域を有するウイルスゲノムを含む：国際公開第２０１６０７３６９３号パンフレット、国際公開第２０１７０２３７２４号パンフレット、国際公開第２０１８２３２０５５号パンフレット、国際公開第２０１６０７７６８７号パンフレット、国際公開第２０１６０７７６８９号パンフレット、国際公開第２０１８２０４７８６号パンフレット、国際公開第２０１７２０１２５８号パンフレット、国際公開第２０１７２０１２４８号パンフレット、国際公開第２０１８２０４８０３号パンフレット、国際公開第２０１８２０４７９７号パンフレット、国際公開第２０１７１８９９５９号パンフレット、国際公開第２０１７１８９９６３号パンフレット、国際公開第２０１７１８９９６４号パンフレット、国際公開第２０１５１９１５０８号パンフレット、国際公開第２０１６０９４７８３号パンフレット、国際公開第２０１６０１３７９４９号パンフレット、国際公開第２０１７０７５３３５号パンフレット。
【０１９６】
ある特定の実施形態では、そのようなｓｉＲＮＡ分子、またはｓｉＲＮＡ分子の単一鎖をコードする核酸配列は、アデノ随伴ウイルスベクターへと挿入され、細胞、具体的には中枢神経系の細胞へと導入される。
【０１９７】
ＡＡＶ粒子は、幾つかの固有な特徴を有するため、ｓｉＲＮＡ送達に関して研究されている。そうした特徴の非限定的な例としては、（ｉ）分裂細胞および非分裂細胞の両方に感染することができること；（ｉｉ）感染の宿主範囲が広範であり、ヒト細胞を含むこと；（ｉｉｉ）野生型ＡＡＶは、いかなる疾患とも関連付けられておらず、感染細胞の複製が示されていないこと；（ｉｖ）ベクターに対する細胞媒介性免疫応答を欠如すること、および（ｖ）宿主染色体に組み込まれないという性質があり、それにより長期発現の可能性が低減されることが挙げられる。さらに、ＡＡＶ粒子による感染は、細胞の遺伝子発現パターンの変化に対して最小限の影響しか及ぼさない（スティルウェルおよびサムルスキら（Ｓｔｉｌｗｅｌｌ  ａｎｄ  Ｓａｍｕｌｓｋｉ  ｅｔ  ａｌ．），Ｂｉｏｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ，２００３，３４，１４８）。
【０１９８】
ある特定の実施形態では、本開示のコード化ｓｉＲＮＡ二重鎖は、共にハイブリダイズしたアンチセンス鎖およびセンス鎖を含有し、アンチセンス鎖は目的の標的遺伝子の核酸配列に相補的であり、センス鎖は目的の標的遺伝子の核酸配列と相同性である。他の態様では、各鎖の３’末端には、０、１、または２ヌクレオチドのオーバーハングが存在する。
【０１９９】
本開示によると、目的の遺伝子を標的とするｓｉＲＮＡ二重鎖の各鎖は、約１９ヌクレオチド長、２０ヌクレオチド長、２１ヌクレオチド長、２２ヌクレオチド長、２３ヌクレオチド長、２４ヌクレオチド長、または２５ヌクレオチド長など、約１９〜２５、１９〜２４、または１９〜２１ヌクレオチド長であってもよい。
【０２００】
ある特定の実施形態では、ｓｉＲＮＡまたはｄｓＲＮＡは、互いに相補的である少なくとも２つの配列を含む。ｄｓＲＮＡは、第１の配列を有するセンス鎖および第２の配列を有するアンチセンス鎖を含む。アンチセンス鎖は、目的の遺伝子をコードするｍＲＮＡの少なくとも一部と実質的に相補的なヌクレオチド配列を含み、相補性領域は、３０ヌクレオチド長またはそれ未満であり、かつ少なくとも１５ヌクレオチド長である。一般に、ｄｓＲＮＡは、１９〜２５、１９〜２４、または１９〜２１ヌクレオチド長である。ある特定の実施形態では、ｄｓＲＮＡは、約１５〜約２５ヌクレオチド長であり、ある特定の実施形態では、ｄｓＲＮＡは、約２５〜約３０ヌクレオチド長である。
【０２０１】
目的の遺伝子によりコードされているタンパク質を発現する細胞と接触すると、発現ベクターにコードされているｄｓＲＮＡは、目的の遺伝子によりコードされているタンパク質の発現を、当技術分野で公知の方法または本明細書に記載の通りの方法によりアッセイして、少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、またはそれよりも大幅に阻害する。
【０２０２】
本開示によると、ｓｉＲＮＡ分子を設計し、培養細胞においてｍＲＮＡレベルを低下させる能力に関して試験する。
ある特定の実施形態では、ｓｉＲＮＡ分子を設計し、培養細胞において目的の遺伝子のレベルを低下させる能力について試験する。
【０２０３】
また、本開示は、目的の遺伝子を標的とする少なくとも１つのｓｉＲＮＡ二重鎖および薬学的に許容される担体を含む医薬組成物を提供する。一部の態様では、ｓｉＲＮＡ二重鎖は、ＡＡＶ粒子中のベクターゲノムによりコードされている。
【０２０４】
ある特定の実施形態では、本開示は、細胞における遺伝子発現を阻害／サイレンシングするための方法を提供する。一部の態様では、遺伝子発現の阻害は、少なくとも約３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％、および１００％などの少なくとも約２０％、または少なくとも２０〜３０％、２０〜４０％、２０〜５０％、２０〜６０％、２０〜７０％、２０〜８０％、２０〜９０％、２０〜９５％、２０〜１００％、３０〜４０％、３５〜４０％、３０〜５０％、３０〜６０％、３０〜７０％、３０〜８０％、３０〜９０％、３０〜９５％、３０〜１００％、４０〜５０％、４０〜６０％、４０〜７０％、４０〜８０％、４０〜９０％、４０〜９５％、４０〜１００％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜９０％、５０〜９５％、５０〜１００％、６０〜７０％、６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９５％、６０〜１００％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９５％、７０〜１００％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜１００％、９０〜９５％、９０〜１００％、もしくは９５〜１００％の阻害を指す。したがって、標的遺伝子のタンパク質産物を、少なくとも約３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％、および１００％などの少なくとも約２０％、または少なくとも２０〜３０％、２０〜４０％、２０〜５０％、２０〜６０％、２０〜７０％、２０〜８０％、２０〜９０％、２０〜９５％、２０〜１００％、３０〜４０％、３０〜５０％、３０〜６０％、３０〜７０％、３０〜８０％、３０〜９０％、３０〜９５％、３０〜１００％、４０〜５０％、４０〜６０％、４０〜７０％、４０〜８０％、４０〜９０％、４０〜９５％、４０〜１００％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜９０％、５０〜９５％、５０〜１００％、６０〜７０％、６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９５％、６０〜１００％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９５％、７０〜１００％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜１００％、９０〜９５％、９０〜１００％、もしくは９５〜１００％阻害することができる。
【０２０５】
ある特定の実施形態では、コード化ｓｉＲＮＡ二重鎖を使用して、目的の遺伝子によりコードされているタンパク質の発現を、少なくとも約２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％、および１００％、または少なくとも２０〜３０％、２０〜４０％、２０〜５０％、２０〜６０％、２０〜７０％、２０〜８０％、２０〜９０％、２０〜９５％、２０〜１００％、３０〜４０％、３５〜４０％、３０〜５０％、３０〜６０％、３０〜７０％、３０〜８０％、３０〜９０％、３０〜９５％、３０〜１００％、４０〜５０％、４０〜６０％、４０〜７０％、４０〜８０％、４０〜９０％、４０〜９５％、４０〜１００％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜９０％、５０〜９５％、５０〜１００％、６０〜７０％、６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９５％、６０〜１００％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９５％、７０〜１００％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜１００％、９０〜９５％、９０〜１００％、もしくは９５〜１００％低減することができる。非限定的な例として、タンパク質の発現を５０〜９０％低減することができる。非限定的な例として、タンパク質の発現を３０〜７０％低減することができる。非限定的な例として、タンパク質の発現を４０〜７０％低減することができる。
【０２０６】
ある特定の実施形態では、コード化ｓｉＲＮＡ二重鎖を使用して、目的の遺伝子から転写されるｍＲＮＡの発現を、少なくとも約２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％、および１００％、または少なくとも２０〜３０％、２０〜４０％、２０〜５０％、２０〜６０％、２０〜７０％、２０〜８０％、２０〜９０％、２０〜９５％、２０〜１００％、３０〜４０％、３５〜４０％、３０〜５０％、３０〜６０％、３０〜７０％、３０〜８０％、３０〜９０％、３０〜９５％、３０〜１００％、４０〜５０％、４０〜６０％、４０〜７０％、４０〜８０％、４０〜９０％、４０〜９５％、４０〜１００％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜９０％、５０〜９５％、５０〜１００％、６０〜７０％、６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９５％、６０〜１００％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９５％、７０〜１００％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜１００％、９０〜９５％、９０〜１００％、もしくは９５〜１００％低減することができる。非限定的な例として、ｍＲＮＡの発現を５０〜９０％低減することができる。
【０２０７】
ある特定の実施形態では、コード化ｓｉＲＮＡ二重鎖を使用して、ＣＮＳの少なくとも１つの領域において、目的の遺伝子および／または転写されたｍＲＮＡによりコードされているタンパク質の発現を低減することができる。タンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、ＣＮＳの少なくとも１つの領域において、少なくとも約２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％、および１００％、または少なくとも２０〜３０％、２０〜４０％、２０〜５０％、２０〜６０％、２０〜７０％、２０〜８０％、２０〜９０％、２０〜９５％、２０〜１００％、３０〜４０％、３５〜４０％、３０〜５０％、３０〜６０％、３０〜７０％、３０〜８０％、３０〜９０％、３０〜９５％、３０〜１００％、４０〜５０％、４０〜６０％、４０〜７０％、４０〜８０％、４０〜９０％、４０〜９５％、４０〜１００％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜９０％、５０〜９５％、５０〜１００％、６０〜７０％、６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９５％、６０〜１００％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９５％、７０〜１００％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜１００％、９０〜９５％、９０〜１００％、もしくは９５〜１００％阻害される。非限定的な例として、領域は、ニューロン（例えば、皮質ニューロン）である。
【０２０８】
ある特定の実施形態では、そのようなコード化ｓｉＲＮＡ分子を含む製剤化ＡＡＶ粒子は、対象の中枢神経系へと直接的に、例えば、被殻への注入により導入してもよい。
ある特定の実施形態では、そのようなコード化ｓｉＲＮＡ分子を含む製剤化ＡＡＶ粒子は、対象の中枢神経系へと直接的に、例えば、対象の視床への注入により導入してもよい。
【０２０９】
ある特定の実施形態では、そのようなコード化ｓｉＲＮＡ分子を含む製剤化ＡＡＶ粒子は、対象の中枢神経系へと直接的に、例えば、対象の白質への注入により導入してもよい。
【０２１０】
ある特定の実施形態では、そのようなコード化ｓｉＲＮＡ分子を含む製剤化ＡＡＶ粒子は、対象の中枢神経系に、例えば、対象への静脈内投与により導入してもよい。
ある特定の実施形態では、本開示の医薬組成物は、単独療法として使用される。
【０２１１】
ある特定の実施形態では、本開示の医薬組成物は、併用治療として使用される。併用療法は、運動ニューロン変性に対するそれらの神経保護効果に関して試験されている小分子化合物、成長因子、およびホルモンなどの１つまたは複数の神経保護剤との組合せであってもよい。
【０２１２】
ｓｉＲＮＡ分子
本開示の製剤化ＡＡＶ粒子のペイロードは、ＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）誘導性遺伝子発現阻害に供される１つまたは複数の作用剤をコードしてもよい。本明細書では、目的の遺伝子を標的とするコード化ｓｉＲＮＡ二重鎖またはコード化ｄｓＲＮＡ（本明細書では総称して「ｓｉＲＮＡ分子」と呼ばれる）が提供される。そのようなｓｉＲＮＡ分子、例えば、コード化ｓｉＲＮＡ二重鎖、コード化ｄｓＲＮＡ、またはコード化ｓｉＲＮＡもしくはｄｓＲＮＡ前駆体は、細胞、例えば、アストロサイトもしくはミクログリア、皮質ニューロン、海馬ニューロン、嗅内ニューロン、視床ニューロン、感覚ニューロン、または運動ニューロンにおける遺伝子発現を低減またはサイレンシングすることができる。
【０２１３】
ＲＮＡｉ（転写後遺伝子サイレンシング（ＰＴＧＳ）、クエリング（ｑｕｅｌｌｉｎｇ）、共抑制としても知られている）は、ＲＮＡ分子が、典型的には特定のｍＲＮＡ分子の破壊を引き起こすことにより、配列特異的な様式で遺伝子発現を阻害する転写後遺伝子サイレンシングプロセスである。ＲＮＡｉの活性成分は、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）と呼ばれる短鎖／低分子二本鎖ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）であり、これらは、典型的には、１５〜３０ヌクレオチド（例えば、１９〜２５、１９〜２４、または１９〜２１ヌクレオチド）および２ヌクレオチドの３’オーバーハングを含有し、標的遺伝子の核酸配列と一致する。こうした短鎖ＲＮＡ種は、より大型のｄｓＲＮＡのダイサー媒介性切断により天然にｉｎ  ｖｉｖｏで産生させることができ、それらは、哺乳動物細胞において機能性である。
【０２１４】
一部の実施形態では、ベクターゲノムの調節性ポリヌクレオチドは、少なくとも１つのｓｉＲＮＡ分子をコードする少なくとも１つの核酸配列を含んでいてもよい。核酸配列は、１つよりも多く存在する場合は独立して、１、２、３、４、５、６、７、８、９つ、または９つよりも多くのｓｉＲＮＡ分子をコードしてもよい。
【０２１５】
マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）として知られている天然で発現される低分子ＲＮＡ分子は、ｍＲＮＡの発現を制御することにより遺伝子サイレンシングを誘発する。ｍｉＲＮＡ含有ＲＮＡ誘導サイレンシング複合体（ＲＩＳＣ）は、シード領域と呼ばれるｍｉＲＮＡの５’領域のヌクレオチド２〜７との完全な配列相補性およびその３’領域との他の塩基対を示すｍＲＮＡを標的とする。遺伝子発現のｍｉＲＮＡ媒介性下方制御は、標的ｍＲＮＡの切断、標的ｍＲＮＡの翻訳阻害、またはｍＲＮＡ分解により引き起こされる場合がある。ｍｉＲＮＡ標的指向性配列は、通常、標的ｍＲＮＡの３’ＵＴＲに位置する。単一のｍｉＲＮＡで、種々の遺伝子の１００個よりも多くの転写物を標的としてもよく、１つのｍＲＮＡを、異なるｍｉＲＮＡで標的としてもよい。
【０２１６】
特定のｍＲＮＡを標的とするｓｉＲＮＡ二重鎖またはｄｓＲＮＡを、ＡＡＶ粒子のペイロードとして設計し、ＲＮＡｉプロセスを活性化させるために細胞へと導入することができる。エルバシールら（Ｅｌｂａｓｈｉｒ  ｅｔ  ａｌ．）は、２１ヌクレオチドのｓｉＲＮＡ二重鎖（低分子干渉ＲＮＡと称される）が、哺乳動物細胞において免疫応答を誘導することなく強力で特異的な遺伝子ノックダウンをもたらすことが可能であることを実証した（エルバシール  ＳＭら（Ｅｌｂａｓｈｉｒ  ＳＭ  ｅｔ  ａｌ．），Ｎａｔｕｒｅ，２００１，４１１，４９４−４９８）。この最初の報告以来、ｓｉＲＮＡによる転写後遺伝子サイレンシングは、哺乳動物細胞における有力な遺伝子分析ツールとして急速に出現し、新規療法を生み出す可能性を有している。
【０２１７】
標的ｍＲＮＡに相同的なセンス鎖および標的ｍＲＮＡに相補的なアンチセンス鎖で構成されるｓｉＲＮＡ二重鎖は、標的ＲＮＡ破壊の効率の点で、一本鎖（ｓｓ）−ｓｉＲＮＡ（例えば、アンチセンス鎖ＲＮＡまたはアンチセンスオリゴヌクレオチド）の使用と比較して、非常により大きな利点を提供する。多くの場合、対応する二重鎖の効果的な遺伝子サイレンシング効力を実現するには、より高い濃度のｓｓ−ｓｉＲＮＡが必要とされる。
【０２１８】
細胞への導入−ＡＡＶ粒子
本開示のコード化ｓｉＲＮＡ分子（例えば、ｓｉＲＮＡ二重鎖）は、ＡＡＶ粒子のベクターゲノムにコードすることにより細胞へと導入することができる。こうしたＡＡＶ粒子は、トランスフェクション／形質導入に直ちには適さない細胞への進入を促進するように遺伝子操作および最適化される。また、一部の合成ウイルスベクターは、ｓｈＲＮＡを細胞ゲノムへと組み込む能力を所有し、それにより安定的なｓｉＲＮＡ発現および標的遺伝子の長期ノックダウンに結び付く。このように、ウイルスベクターは、野生型ウイルスに見出される有害な複製および／または組込み特徴を欠如しつつ特異的送達のビヒクルとして遺伝子操作される。
【０２１９】
ある特定の実施形態では、コード化ｓｉＲＮＡ分子は、細胞において転写されるとｓｉＲＮＡ分子を産生することが可能な核酸配列を含むＡＡＶ粒子を細胞にトランスフェクトするか、感染させるか、または形質導入することにより細胞に導入される。ある特定の実施形態では、ｓｉＲＮＡ分子は、細胞において転写されるとｓｉＲＮＡ分子を産生することが可能な核酸配列を含むＡＡＶ粒子を細胞または組織を注射することにより細胞へと導入される。
【０２２０】
ある特定の実施形態では、トランスフェクション／形質導入の前に、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子を細胞へとトランスフェクトしてもよい。
本明細書に記載のｓｉＲＮＡ分子の核酸配列を含むＡＡＶ粒子を導入するための他の方法としては、その内容をその全体で本願明細書に援用する米国特許出願公開第２０１２０２６４８０７号明細書に記載の通りの光化学的内部移行を挙げることができる。
【０２２１】
ある特定の実施形態では、本明細書に記載の製剤は、本明細書に記載のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含む少なくとも１つのＡＡＶ粒子を含有してもよい。ある特定の実施形態では、ｓｉＲＮＡ分子は、１つの標的部位にある目的の遺伝子を標的とすることができる。別の実施形態では、製剤は、複数のＡＡＶ粒子を含み、各ＡＡＶ粒子は、異なる標的部位にある目的の遺伝子を標的とするｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含む。２、３、４、５つ、または５つよりも多くの部位にある目的の遺伝子を標的とすることができる。
【０２２２】
ある特定の実施形態では、これらに限定されないが、ヒト、ブタ、イヌ、マウス、ラット、またはサルなど、任意の関連種に由来するＡＡＶ粒子を、細胞へと導入することができる。
【０２２３】
ある特定の実施形態では、製剤化ＡＡＶ粒子は、処置しようとする疾患に関連性のある細胞または組織へと導入してもよい。
ある特定の実施形態では、製剤化ＡＡＶ粒子は、標的配列の内因性発現レベルが高い細胞へと導入してもよい。
【０２２４】
別の実施形態では、製剤化ＡＡＶ粒子は、標的配列の内因性発現レベルが低い細胞へと導入してもよい。
ある特定の実施形態では、細胞は、高いＡＡＶ形質導入効率を有するものであってもよい。
【０２２５】
ある特定の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含む製剤化ＡＡＶ粒子を使用して、ｓｉＲＮＡ分子を中枢神経系に送達することができる（例えば、その内容をその全体で本願明細書に援用する米国特許第６，１８０，６１３号明細書）。
【０２２６】
一部の態様では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含む製剤化ＡＡＶ粒子は、非ウイルス起源のペプチドを含む修飾カプシドをさらに含んでいてもよい。他の態様では、ＡＡＶ粒子は、コード化ｓｉＲＮＡ二重鎖の脳および脊髄への送達を促進するために、ＣＮＳ特異的キメラカプシドを含有してもよい。例えば、ＣＮＳ向性を呈するＡＡＶバリアントに由来するｃａｐヌクレオチド配列のアラインメントを構築して、可変領域（ＶＲ）配列および構造を同定することができる。
【０２２７】
ある特定の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含む製剤化ＡＡＶ粒子は、ポリシストロン性分子であるｓｉＲＮＡ分子をコードしていてもよい。加えて、ｓｉＲＮＡ分子は、ｓｉＲＮＡ分子の領域間に１つまたは複数のリンカーを含んでいてもよい。
【０２２８】
ある特定の実施形態では、製剤化ＡＡＶ粒子は、本明細書に記載のｓｉＲＮＡ配列または二重鎖の少なくとも１つをコードする調節性ポリヌクレオチドの少なくとも１つを含んでいてもよい。
【０２２９】
ある特定の実施形態では、発現ベクターは、ＩＴＲからＩＴＲまで５’から３’に挙げると、ＩＴＲ、プロモーター、イントロン、調節性ポリヌクレオチド、ポリＡ配列、およびＩＴＲを含んでいてもよい。
【０２３０】
ある特定の実施形態では、コード化ｓｉＲＮＡ分子は、これらに限定されないが、ＣＭＶ、Ｕ６、Ｈ１、ＣＢＡ、またはＳＶ４０イントロンを有するＣＢＡプロモーターなど、発現ベクターのプロモーターの下流に位置してもよい。さらに、コード化ｓｉＲＮＡ分子はまた、発現ベクターのポリアデニル化配列の上流に位置してもよい。非限定的な例として、コード化ｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターのプロモーターの下流および／またはポリアデニル化配列の上流の１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０個、または３０個よりも多くのヌクレオチド以内に位置してもよい。別の非限定的な例として、コード化ｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターのプロモーターの下流および／またはポリアデニル化配列の上流の１〜５、１〜１０、１〜１５、１〜２０、１〜２５、１〜３０、５〜１０、５〜１５、５〜２０、５〜２５、５〜３０、１０〜１５、１０〜２０、１０〜２５、１０〜３０、１５〜２０、１５〜２５、１５〜３０、２０〜２５、２０〜３０、または２５〜３０ヌクレオチド以内に位置してもよい。非限定的な例として、コード化ｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターのプロモーターの下流および／またはポリアデニル化配列の上流のヌクレオチドの最初の１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１５％、２０％、２５％、または２５％よりも多くのヌクレオチド以内に位置してもよい。別の非限定的な例として、コード化ｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターのプロモーターの下流および／またはポリアデニル化配列の上流の最初の１〜５％、１〜１０％、１〜１５％、１〜２０％、１〜２５％、５〜１０％、５〜１５％、５〜２０％、５〜２５％、１０〜１５％、１０〜２０％、１０〜２５％、１５〜２０％、１５〜２５％、または２０〜２５％に位置してもよい。
【０２３１】
ある特定の実施形態では、コード化ｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターのポリアデニル化配列の上流に位置してもよい。さらに、コード化ｓｉＲＮＡ分子は、これらに限定されないが、ＣＭＶ、Ｕ６、ＣＢＡ、またはＳＶ４０イントロンを有するＣＢＡプロモーターなど、発現ベクターのプロモーターの下流に位置してもよい。非限定的な例として、コード化ｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターのプロモーターの下流および／またはポリアデニル化配列の上流の１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０個、または３０個よりも多くのヌクレオチド以内に位置してもよい。別の非限定的な例として、コード化ｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターのプロモーターの下流および／またはポリアデニル化配列の上流の１〜５、１〜１０、１〜１５、１〜２０、１〜２５、１〜３０、５〜１０、５〜１５、５〜２０、５〜２５、５〜３０、１０〜１５、１０〜２０、１０〜２５、１０〜３０、１５〜２０、１５〜２５、１５〜３０、２０〜２５、２０〜３０、または２５〜３０ヌクレオチド以内に位置してもよい。非限定的な例として、コード化ｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターのプロモーターの下流および／またはポリアデニル化配列の上流のヌクレオチドの最初の１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１５％、２０％、２５％、または２５％よりも多くのヌクレオチド以内に位置してもよい。別の非限定的な例として、コード化ｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターのプロモーターの下流および／またはポリアデニル化配列の上流の最初の１〜５％、１〜１０％、１〜１５％、１〜２０％、１〜２５％、５〜１０％、５〜１５％、５〜２０％、５〜２５％、１０〜１５％、１０〜２０％、１０〜２５％、１５〜２０％、１５〜２５％、または２０〜２５％に位置してもよい。
【０２３２】
ある特定の実施形態では、コード化ｓｉＲＮＡ分子は、ｓｃＡＡＶに位置してもよい。
ある特定の実施形態では、コード化ｓｉＲＮＡ分子は、ｓｓＡＡＶに位置してもよい。
ある特定の実施形態では、コード化ｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターのフリップＩＴＲの５’末端付近に位置してもよい。別の実施形態では、コード化ｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターのフリップＩＴＲの３’末端付近に位置してもよい。さらに別の実施形態では、コード化ｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターのフロップＩＴＲの５’末端付近に位置してもよい。さらに別の実施形態では、コード化ｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターのフロップＩＴＲの３’末端付近に位置してもよい。ある特定の実施形態では、コード化ｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターのフリップＩＴＲの５’末端とフロップＩＴＲの３’末端との間に位置してもよい。ある特定の実施形態では、コード化ｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターのフリップＩＴＲの３’末端とフリップＩＴＲの５’末端との間に（例えば、フリップＩＴＲの５’末端とフロップＩＴＲの３’末端との間の、またはフロップＩＴＲの３’末端とフリップＩＴＲの５’末端との間の中間に）位置してもよい。非限定的な例として、コード化ｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターのＩＴＲ（例えばフリップＩＴＲまたはフロップＩＴＲ）の５’末端または３’末端の下流の１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０個、または３０個よりも多くのヌクレオチド以内に位置してもよい。非限定的な例として、コード化ｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターのＩＴＲ（例えばフリップＩＴＲまたはフロップＩＴＲ）の５’末端または３’末端の上流の１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０個、または３０個よりも多くのヌクレオチド以内に位置してもよい。別の非限定的な例として、コード化ｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターのＩＴＲ（例えばフリップＩＴＲまたはフロップＩＴＲ）の５’末端または３’末端の下流の１〜５、１〜１０、１〜１５、１〜２０、１〜２５、１〜３０、５〜１０、５〜１５、５〜２０、５〜２５、５〜３０、１０〜１５、１０〜２０、１０〜２５、１０〜３０、１５〜２０、１５〜２５、１５〜３０、２０〜２５、２０〜３０、または２５〜３０ヌクレオチド以内に位置してもよい。別の非限定的な例として、コード化ｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターのＩＴＲ（例えばフリップＩＴＲまたはフロップＩＴＲ）の５’末端または３’末端の上流の１〜５、１〜１０、１〜１５、１〜２０、１〜２５、１〜３０、５〜１０、５〜１５、５〜２０、５〜２５、５〜３０、１０〜１５、１０〜２０、１０〜２５、１０〜３０、１５〜２０、１５〜２５、１５〜３０、２０〜２５、２０〜３０、または２５〜３０以内に位置してもよい。非限定的な例として、コード化ｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターのＩＴＲ（例えばフリップＩＴＲまたはフロップＩＴＲ）の５’末端または３’末端の上流のヌクレオチドの最初の１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１５％、２０％、２５％、または２５％よりも多くのヌクレオチド以内に位置してもよい。別の非限定的な例として、コード化ｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターのＩＴＲ（例えばフリップＩＴＲまたはフロップＩＴＲ）の５’末端または３’末端の下流の最初の１〜５％、１〜１０％、１〜１５％、１〜２０％、１〜２５％、５〜１０％、５〜１５％、５〜２０％、５〜２５％、１０〜１５％、１０〜２０％、１０〜２５％、１５〜２０％、１５〜２５％、または２０〜２５％に位置してもよい。
【０２３３】
ある特定の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子の核酸配列を含むＡＡＶ粒子は、ＣＮＳ送達用に製剤化することができる。脳血液関門を越える作用剤を使用することができる。例えば、ｓｉＲＮＡ分子を脳血液関門内皮に対して標的化することができるある細胞透過性ペプチドを使用して、目的の遺伝子を標的とするｓｉＲＮＡ二重鎖を製剤化することができる。
【０２３４】
ある特定の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含む製剤化ＡＡＶ粒子は、ＣＮＳ送達に直接投与することができる。非限定的な例として、ベクターは、目的の遺伝子を標的とするｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含む。
【０２３５】
具体的な実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含む製剤化ＡＡＶ粒子の組成物は、ベクターまたはｓｉＲＮＡ分子が中枢神経系に進入し、運動ニューロンへと浸透することを容易にするように投与することができる。
【０２３６】
ある特定の実施形態では、製剤化ＡＡＶ粒子は、ｓｉＲＮＡ二重鎖またはｄｓＲＮＡが脊髄および／または脳幹の運動ニューロンおよびアストロサイトを標的とするための治療有効量で対象に（例えば、髄腔内投与により対象のＣＮＳに）投与することができる。非限定的な例として、ｓｉＲＮＡ二重鎖またはｄｓＲＮＡは、タンパク質またはｍＲＮＡの発現を低減することができる。
【０２３７】
ウイルス産生細胞およびベクター
哺乳動物産生系
本明細書に開示される本開示のウイルス産生には、標的細胞と接触してペイロード構築物、例えば、ペイロード分子をコードするヌクレオチドを含む組換えＡＡＶ粒子またはウイルス構築物を送達するＡＡＶ粒子またはウイルスベクターを産生するためのプロセスおよび方法が記載される。ウイルス産生細胞は、原核生物（例えば、細菌）細胞、ならびに昆虫細胞、酵母細胞、および哺乳動物細胞を含む真核細胞を含む、任意の生物学的生物から選択することができる。
【０２３８】
ある特定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子は、哺乳動物細胞を含むウイルス産生細胞において産生することができる。ウイルス産生細胞は、Ａ５４９、ＷＥＨ１、３Ｔ３、１０Ｔ１／２、ＢＨＫ、ＭＤＣＫ、ＣＯＳ１、ＣＯＳ７、ＢＳＣ１、ＢＳＣ４０、ＢＭＴ１０、ＶＥＲＯ．Ｗ１３８、ＨｅＬａ、ＨＥＫ２９３、ＨＥＫ２９３Ｔ（２９３Ｔ）、Ｓａｏｓ、Ｃ２Ｃ１２、Ｌ細胞、ＨＴ１０８０、ＨｅｐＧ２、ならびに哺乳動物由来の初代線維芽細胞、肝実質細胞、および筋芽細胞などの哺乳動物細胞を含んでいてもよい。ウイルス産生細胞としては、これらに限定されないが、ヒト、サル、マウス、ラット、ウサギ、およびハムスターを含む哺乳動物種に由来する細胞、またはこれらに限定されないが、線維芽細胞、肝実質細胞、腫瘍細胞、細胞株形質転換細胞などを含む細胞タイプを挙げることができる。
【０２３９】
組換えＡＡＶ粒子の産生に一般的に使用されるＡＡＶウイルス産生細胞としては、これらに限定されないが、ＨＥＫ２９３細胞、ＣＯＳ細胞、Ｃ１２７、３Ｔ３、ＣＨＯ、ＨｅＬａ細胞、ＫＢ細胞、ＢＨＫ、およびその各々の内容をその全体で本願明細書に援用する以下の文献に記載の通りの他の哺乳動物細胞株が挙げられる：米国特許第６，１５６，３０３号明細書、米国特許第５，３８７，４８４号明細書、米国特許第５，７４１，６８３号明細書、米国特許第５，６９１，１７６号明細書、米国特許第６，４２８，９８８号明細書、および米国特許第５，６８８，６７６号明細書；米国特許出願第２００２／００８１７２１号明細書、および国際公開第００／４７７５７号パンフレット、国際公開第００／２４９１６号パンフレット、および国際公開第９６／１７９４７号パンフレット。ある特定の実施形態では、ＡＡＶウイルス産生細胞は、複製欠損ヘルパーウイルスから欠損されている機能を提供するトランス補完パッケージング細胞株、例えば、ＨＥＫ２９３細胞または他のＥａトランス補完細胞である。
【０２４０】
ある特定の実施形態では、パッケージング細胞株２９３−１０−３（ＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−２３６１）を使用して、その内容をその全体で本願明細書に援用する米国特許第６，２８１，０１０号明細書に記載の通りに、ＡＡＶ粒子を産生することができる。
【０２４１】
本開示のある特定の実施形態では、ホスホグリセリン酸キナーゼ（ＰＧＫ）プロモーターの制御下のアデノウイルスＥ１ａおよびアデノウイルスＥ１ｂをコードするＥ１欠損アデノウイルスベクターをトランス補完するための、ＨｅＬＡ細胞株などの細胞株を、その各々の内容をその全体で本願明細書に援用する米国特許第６３６５３９４号明細書に記載の通り、ＡＡＶ粒子産生に使用することができる。
【０２４２】
ある特定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、三重トランスフェクション法を使用して哺乳動物細胞において産生される。この場合、ペイロード構築物、パルボウイルスＲｅｐおよびパルボウイルスＣａｐ、ならびにヘルパー構築物は、３つの異なる構築物内に含まれている。ＡＡＶ粒子を産生するための３つの成分の三重トランスフェクション法を利用すると、形質導入効率、標的組織（向性）評価、および安定性を含むアッセイのための小ロットのウイルスを産生することができる。
【０２４３】
製剤化しようとするＡＡＶ粒子は、三重トランスフェクション、またはバキュロウイルス媒介性ウイルス産生、または当技術分野で公知である任意の他の方法により産生することができる。当技術分野で公知である任意の適切な許容細胞またはパッケージング細胞を採用して、ベクターを産生することができる。ある特定の実施形態では、複製欠損ヘルパーウイルスから欠損されている機能を提供するトランス補完パッケージング細胞株、例えば、２９３細胞または他のＥ１ａトランス補完細胞が使用される。
【０２４４】
遺伝子カセットは、パルボウイルス（例えば、ＡＡＶ）ｃａｐ遺伝子およびｒｅｐ遺伝子の一部またはすべてを含んでいてもよい。ある特定の実施形態では、ｃａｐ機能およびｒｅｐ機能の一部またはすべては、カプシドタンパク質および／またはＲｅｐタンパク質をコードするパッケージングベクターを細胞へと導入することによりトランスで提供される。ある特定の実施形態では、遺伝子カセットは、カプシドタンパク質もＲｅｐタンパク質もコードしない。あるいは、ｃａｐ遺伝子および／またはｒｅｐ遺伝子を発現するように安定的に形質転換されているパッケージング細胞株が使用される。
【０２４５】
組換えＡＡＶウイルス粒子は、ある特定の実施形態では、その内容を援用する米国特許出願公開第２０１６／００３２２５４号明細書に記載の通りの手順に従って産生され、培養上清から精製される。また、産生には、２９３Ｔ細胞を使用する方法、三重トランスフェクション、または任意の適切な産生方法を含む当技術分野で公知の方法が関与してもよい。
【０２４６】
ある特定の実施形態では、哺乳動物ウイルス産生細胞（例えば、２９３Ｔ細胞）は、接着／付着状態で（例えば、リン酸カルシウムを用いて）であってもよく、または懸濁状態（例えば、ポリエチレンイミン（ＰＥＩ）を用いて）であってもよい。哺乳動物ウイルス産生細胞に、ＡＡＶの産生に必要なプラスミド（つまり、ＡＡＶ  ｒｅｐ／ｃａｐ構築物、アデノウイルスヘルパー構築物、および／またはＩＴＲフランキングペイロード構築物）をトランスフェクトする。ある特定の実施形態では、トランスフェクションプロセスは、任意選択の培地交換を含んでいてもよい（例えば、接着形態の細胞の場合は培地交換し、懸濁形態の細胞の場合は培地交換せず、懸濁形態の細胞の場合は必要に応じて培地交換する）。ある特定の実施形態では、トランスフェクションプロセスは、ＤＭＥＭまたはＦ１７などのトランスフェクション培地を含んでいてもよい。ある特定の実施形態では、トランスフェクション培地は、血清を含んでいてもよく、または無血清であってもよい（例えば、接着状態の細胞ではリン酸カルシウムおよび血清を用い、懸濁状態の細胞ではＰＥＩを用いるが血清は用いない）。
【０２４７】
その後、擦過することにより（付着形態）および／またはペレット化することにより（懸濁形態および擦過された付着形態）細胞を収集し、入れ物へと移してもよい。産生された細胞を完全に収集するために、収集工程を必要に応じて繰り返してもよい。次に、連続的な凍結解凍サイクル（−８０Ｃ〜３７Ｃ）、化学的溶解（界面活性剤であるｔｒｉｔｏｎの添加など）、機械的溶解、または約０％生存率に達した後で細胞培養の分解を可能にすることにより細胞溶解を実現することができる。細胞残渣を、遠心分離および／または深層濾過により除去する。試料中のＡＡＶ粒子を、ＤＮＡ  ｑＰＣＲによるＤＮａｓｅ耐性ゲノム滴定により定量化する。
【０２４８】
ＡＡＶ粒子力価を、ゲノムコピー数（１ミリリットルあたりのゲノム粒子）に従って測定する。ゲノム粒子濃度は、以前に報告されている通り、ベクターＤＮＡのＤＮＡ  ｑＰＣＲに基づく（クラークら（Ｃｌａｒｋ  ｅｔ  ａｌ．）（１９９９）Ｈｕｍ．Ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒ．，１０：１０３１−１０３９；フェルトワイクら（Ｖｅｌｄｗｉｊｋ  ｅｔ  ａｌ．）（２００２）Ｍｏｌ．Ｔｈｅｒ．，６：２７２−２７８）。
【０２４９】
昆虫細胞
本開示のウイルス産生は、標的細胞と接触してペイロード構築物、例えば、ペイロード分子をコードするヌクレオチドを含む組換えウイルス構築物を送達するＡＡＶ粒子またはウイルスベクターを産生するためのプロセスおよび方法を含む。ある特定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子またはウイルスベクターは、昆虫細胞を含むウイルス産生細胞において産生することができる。
【０２５０】
培養中の昆虫細胞の成長条件、および培養中の昆虫細胞での異種性産物の産生は当技術分野において周知である。その内容をその全体で本願明細書に援用する米国特許第６，２０４，０５９号明細書を参照されたい。
【０２５１】
パルボウイルスの複製を可能にし、培養中で維持することができる任意の昆虫細胞を、本開示に従って使用することができる。組換えＡＡＶ粒子の産生に一般的に使用されるＡＡＶウイルス産生細胞としては、これらに限定されないがＳｆ９細胞株またはＳｆ２１細胞株を含むスポドプテラ・フルギペルダ（Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ  ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ）、ショウジョウバエ（Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａ）細胞株、またはヒトスジシマカ（Ａｅｄｅｓ  ａｌｂｏｐｉｃｔｕｓ）由来細胞株などの蚊細胞株が挙げられるが、これらに限定されない。異種性タンパク質を発現させるための昆虫細胞の使用は、ベクター、例えば昆虫細胞適合性ベクターなどの核酸をそのような細胞へと導入する方法およびそのような細胞を培養中で維持する方法と同様に、十分に文書化されている。例えば、その各々の内容をその全体で本願明細書に援用する、Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，リチャード編（ｅｄ．Ｒｉｃｈａｒｄ），ヒューマナプレス社（Ｈｕｍａｎａ  Ｐｒｅｓｓ）［米国ニュージャージー州所在］（１９９５）；オライリーら（Ｏ’Ｒｅｉｌｌｙ  ｅｔ  ａｌ．），Ｂａｃｕｌｏｖｉｒｕｓ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  Ｖｅｃｔｏｒｓ，Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，オックスフォード大学出版局（Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖ．Ｐｒｅｓｓ）（１９９４）；サムルスキら（Ｓａｍｕｌｓｋｉ  ｅｔ  ａｌ．），Ｊ．Ｖｉｒ．６３：３８２２−８（１９８９）；カジガヤら（Ｋａｊｉｇａｙａ  ｅｔ  ａｌ．），Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８８：４６４６−５０（１９９１）；ラフィングら（Ｒｕｆｆｉｎｇ  ｅｔ  ａｌ．），Ｊ．Ｖｉｒ．６６：６９２２−３０（１９９２）；キムバウアーら（Ｋｉｍｂａｕｅｒ  ｅｔ  ａｌ．），Ｖｉｒ．２１９：３７−４４（１９９６）；チャオら（Ｚｈａｏ  ｅｔ  ａｌ．），Ｖｉｒ．２７２：３８２−９３（２０００）；およびサムルスキら（Ｓａｍｕｌｓｋｉ  ｅｔ  ａｌ．）米国特許第６，２０４，０５９号明細書を参照されたい。
【０２５２】
一実施形態では、ＡＡＶ粒子は、その内容をその全体で本願明細書に援用する国際公開第２０１５／１９１５０８号パンフレットに記載の方法を使用して作製される。
ある特定の実施形態では、昆虫宿主細胞系は、バキュロウイルス系（例えば、ルッコウら（Ｌｕｋｏｗ  ｅｔ  ａｌ．），Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ６：４７（１９８８）に記載の通りの）と組み合わせて使用してもよい。ある特定の実施形態では、キメラペプチドを調製するための発現系は、その内容をその全体で本願明細書に援用する米国特許第６６５０５２１号明細書）に記載の通り、高レベルのタンパク質に使用することができるイラクサギンウワバ（Ｔｒｉｃｈｏｐｌｕｓｉａ  ｎｉ）Ｔｎ  ５Ｂ１−４昆虫細胞／バキュロウイルス系である。
【０２５３】
昆虫細胞の拡大増殖、培養、トランスフェクション、感染、および保管は、Ｈｙｃｌｏｎｅ  ＳＦＸ昆虫細胞培養培地、発現系ＥＳＦ  ＡＦ昆虫細胞培養培地、ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ  Ｓｆ９００ＩＩ培地、ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ  Ｓｆ９００ＩＩＩ培地、またはＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ  Ｇｒａｃｅ’ｓ昆虫培地を含む、当技術分野で公知の任意の細胞培養培地、細胞トランスフェクション培地、または保管培地で実行することができる。また、本開示の昆虫細胞混合物は、塩、酸、塩基、緩衝液、表面活性物質（ポロキサマー１８８／Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ−６８など）、および他の公知の培養培地要素を含む（しかしながらこれらに限定されない）、本開示に記載の製剤添加剤または要素のいずれを含んでいてもよい。製剤添加剤は、徐々にまたは「スパイク」（短時間で大容積の組込み）として組み込むことができる。
【０２５４】
バキュロウイルス産生系
ある特定の実施形態では、本開示のプロセスは、ウイルス発現構築物およびペイロード構築物ベクターが使用される、バキュロウイルス系でのＡＡＶ粒子またはウイルスベクターの産生を含んでいてもよい。ある特定の実施形態では、バキュロウイルス系は、バキュロウイルス発現ベクター（ＢＥＶ）および／またはバキュロウイルス感染昆虫細胞（ＢＩＩＣ）を含む。ある特定の実施形態では、本開示のウイルス発現構築物ベクターおよびペイロード構築物ベクターは各々、相同組換え（トランスポゾンドナー／アクセプター系）により、バキュロウイルスプラスミドとしても知られているバクミドへと、公知であり当業者により実施される標準的な分子生物学的技法により組み込まれる。別々のウイルス複製細胞集団のトランスフェクションは、バキュロウイルス（ＢＥＶ）の２つまたはそれよりも多くのグループ（例えば、２つ、３つ）、ウイルス発現構築物（発現ＢＥＶ）を含む１つまたは複数のグループ、およびペイロード構築物（ペイロードＢＥＶ）を含む１つまたは複数のグループを産生する。ＡＡＶ粒子またはウイルスベクターを産生するために、バキュロウイルスを使用してウイルス産生細胞を感染させてもよい。
【０２５５】
ある特定の実施形態では、プロセスは、ウイルス発現構築物およびペイロード構築物を両方とも含む単一のバキュロウイルス（ＢＥＶ）グループを産生するための単一ウイルス複製細胞集団のトランスフェクションを含む。ＡＡＶ粒子またはウイルスベクターを産生するために、こうしたバキュロウイルスを使用してウイルス産生細胞を感染させてもよい。
【０２５６】
ある特定の実施形態では、ＢＥＶは、Ｐｒｏｍｅｇａ  ＦｕＧＥＮＥ  ＨＤ、ＷＦＩ水、またはＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ  Ｃｅｌｌｆｅｃｔｉｎ  ＩＩ試薬などのバクミドトランスフェクション剤を使用して産生される。ある特定の実施形態では、ＢＥＶは、昆虫細胞などのウイルス産生細胞において産生および拡大増殖される。
【０２５７】
ある特定の実施形態では、本方法は、バキュロウイルス感染昆虫細胞（ＢＩＩＣ）を含む１つまたは複数のＢＥＶを含むウイルス産生細胞のシード培養物を利用する。シードＢＩＩＣには、ウイルス発現構築物を含む発現ＢＥＶおよびペイロード構築物を含むペイロードＢＥＶがトランスフェクト／形質導入／感染している。ある特定の実施形態では、シード培養物を回収し、アリコートに分割し、凍結し、後の時点で、産生細胞の未感作集団のトランスフェクション／形質導入／感染を開始するために使用してもよい。ある特定の実施形態では、シードＢＩＩＣのバンクを、−８０℃でまたはＬＮ２蒸気で保管する。
【０２５８】
バキュロウイルスは、複製タンパク質、エンベロープタンパク質、およびカプシドタンパク質などの、バキュロウイルスの機能および複製に必須である幾つかの必須タンパク質でできている。したがって、バキュロウイルスゲノムは、必須タンパク質をコードする幾つかの必須遺伝子ヌクレオチド配列を含む。非限定的な例として、ゲノムは、バキュロウイルス構築物の必須タンパク質をコードする必須遺伝子ヌクレオチド配列を含む必須遺伝子領域を含んでいてもよい。必須タンパク質としては、ＧＰ６４バキュロウイルスエンベロープタンパク質、ＶＰ３９バキュロウイルスカプシドタンパク質、またはバキュロウイルス構築物の他の類似の必須タンパク質を挙げることができる。
【０２５９】
これに限定されないがスポドプテラ・フルギペルダ（Ｓｆ９）細胞を含む、昆虫細胞にてＡＡＶ粒子を産生するためのバキュロウイルス発現ベクター（ＢＥＶ）は、高力価のウイルスベクター産物を提供する。ウイルス発現構築物およびペイロード構築物をコードする組換えバキュロウイルスは、ウイルスベクター複製細胞の増殖性感染を開始させる。一次感染で放出される感染性バキュロウイルス粒子は、培養中の追加の細胞に二次感染し、何回かの感染サイクルで指数関数的に細胞培養物集団全体に感染し、感染サイクルの回数は初期感染多重度の関数である。その内容をその全体で本願明細書に援用する、ウラベ，Ｍら（Ｕｒａｂｅ，Ｍ．ｅｔ  ａｌ．）Ｊ  Ｖｉｒｏｌ．２００６  Ｆｅｂ；８０（４）：１８７４−８５を参照されたい。
【０２６０】
昆虫細胞系でのバキュロウイルスによるＡＡＶ粒子の産生は、既知のバキュロウイルスの遺伝的および物理的不安定性に対処することができる。
ある特定の実施形態では、本開示の産生系は、タイターレス感染細胞保存およびスケールアップ系を利用することにより複数継代にわたってバキュロウイルス不安定性に対処する。ウイルス産生細胞の小規模シード培養物に、ＡＡＶ粒子の構造成分および／または非構造成分をコードするウイルス発現構築物をトランスフェクトする。バキュロウイルス感染ウイルス産生細胞を回収してアリコートし、アリコートを液体窒素で凍結保存してもよい。アリコートは、大規模ウイルス産生細胞培養物に感染するための生存能および感染力を維持する。その内容をその全体で本願明細書に援用する、ワシルコ  ＤＪら（Ｗａｓｉｌｋｏ  ＤＪ  ｅｔ  ａｌ．）Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｘｐｒ  Ｐｕｒｉｆ．２００９  Ｊｕｎ；６５（２）：１２２−３２。
【０２６１】
遺伝的に安定なバキュロウイルスを使用して、無脊椎動物細胞にてＡＡＶ粒子を産生するための成分の１つまたは複数の供給源を産生することができる。ある特定の実施形態では、欠損バキュロウイルス発現ベクターは、昆虫細胞のエピソームに維持されてもよい。そのような実施形態では、バクミドベクターは、これらに限定されないが、プロモーター、エンハンサー、および／または細胞周期制御性複製エレメントを含む複製制御エレメントを有するように遺伝子操作されている。
【０２６２】
ある特定の実施形態では、バキュロウイルスは、キチナーゼ／カテプシン遺伝子座への組換えのための（非）選択可能なマーカーを有するように遺伝子操作されていてもよい。ｃｈｉａ／ｖ−ｃａｔｈ遺伝子座は、組織培養でのバキュロウイルス繁殖に非必須であり、Ｖ−ｃａｔｈ（ＥＣ３．４．２２．５０）は、Ａｒｇ−Ａｒｇジペプチド含有基質に対して最も活性であるシステインエンドプロテアーゼである。Ａｒｇ−Ａｒｇジペプチドは、デンソウイルスカプシド構造タンパク質およびパルボウイルスカプシド構造タンパク質に存在するが、ディペンドウイルスＶＰ１には希にしか生じない。
【０２６３】
ある特定の実施形態では、バキュロウイルス感染に許容性の安定ウイルス産生細胞は、これらに限定されないが、ＡＡＶゲノム全体、Ｒｅｐ遺伝子およびＣａｐ遺伝子、Ｒｅｐ遺伝子、Ｃａｐ遺伝子、別々の転写カセットとしての各Ｒｅｐタンパク質、別々の転写カセットとしての各ＶＰタンパク質、ＡＡＰ（アセンブリー活性化タンパク質）、または天然もしくは非天然プロモーターを有するバキュロウイルスヘルパー遺伝子の少なくとも１つを含む、ＡＡＶ複製およびベクター産生に必要なエレメントのいずれかの少なくとも１つの安定組込みコピーを有するように遺伝子操作されている。
【０２６４】
ある特定の実施形態では、バキュロウイルス発現ベクター（ＢＥＶ）は、ＡｃＭＮＰＶバキュロウイルスまたはＢｍＮＰＶバキュロウイルスＢｍＮＰＶに基づく。
ある特定の実施形態では、バキュロウイルス発現ベクター（ＢＥＶ）は、バキュロウイルスｖ−ｃａｔｈ遺伝子が欠失されているか（「ｖ−ｃａｔｈ欠失ＢＥＶ」）または突然変異されているＢＥＶである。
【０２６５】
その他
ある特定の実施形態では、発現宿主としては、エシェリキア属（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ）、バチルス属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）、シュードモナス属（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）、サルモネラ属（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ）内の細菌種が挙げられるが、これらに限定されない。
【０２６６】
ある特定の実施形態では、細胞の染色体内に安定的に組み込まれたＡＡＶ  ｒｅｐ遺伝子およびＡＡＶ  ｃａｐ遺伝子を含む宿主細胞を、ＡＡＶ粒子産生に使用してもよい。非限定的な例では、その染色体にＡＡＶ  ｒｅｐ遺伝子およびＡＡＶ  ｃａｐ遺伝子の少なくとも２つのコピーが安定的に組み込まれている宿主細胞を使用して、その内容をその全体で本願明細書に援用する米国特許第７２３５２６号明細書）に記載の方法および構築物に従ってＡＡＶ粒子を産生することができる。
【０２６７】
ある特定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、その内容をその全体で本願明細書に援用する米国特許出願公開第２００３００９２１６１号明細書および欧州特許第１１８３３８０号明細書に記載の通り、宿主細胞における稀少制限酵素の発現制御を可能にする核酸配列を含む分子で安定的に形質転換されている宿主細胞において産生することができる。
【０２６８】
ある特定の実施形態では、ＡＡＶ粒子を産生するための産生方法および細胞株としては、その各々の内容をその全体で本願明細書に援用する以下の文献に教示されているものを挙げることができるが、それらに限定されない：ＰＣＴ／ＵＳ１９９６／０１０２４５号パンフレット、ＰＣＴ／ＵＳ１９９７／０１５７１６号パンフレット、ＰＣＴ／ＵＳ１９９７／０１５６９１号パンフレット、ＰＣＴ／ＵＳ１９９８／０１９４７９号パンフレット、ＰＣＴ／ＵＳ１９９８／０１９４６３号パンフレット、ＰＣＴ／ＵＳ２０００／０００４１５号パンフレット、ＰＣＴ／ＵＳ２０００／０４０８７２号パンフレット、ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０１６６１４号パンフレット、ＰＣＴ／ＵＳ２００７／０１００５５号パンフレット、ＰＣＴ／ＵＳ１９９９／００５８７０号パンフレット、ＰＣＴ／ＵＳ２０００／００４７５５号パンフレット、米国特許出願第０８／５４９４８９号明細書、米国特許出願第０８／４６２０１４号明細書、米国特許出願第０９／６５９２０３号明細書、米国特許出願第１０／２４６４４７号明細書、米国特許出願第１０／４６５３０２号明細書、米国特許第６２８１０１０号明細書、米国特許第６２７０９９６号明細書、米国特許第６２６１５５１号明細書、米国特許第５７５６２８３号明細書（ＮＩＨに帰属）、米国特許第６４２８９８８号明細書、米国特許第６２７４３５４号明細書、米国特許第６９４３０１９号明細書、米国特許第６４８２６３４号明細書（ＮＩＨに帰属：米国特許第７２３８５２６号明細書、米国特許第６４７５７６９号明細書）、米国特許第６３６５３９４号明細書（ＮＩＨに帰属）、米国特許第７４９１５０８号明細書、米国特許第７２９１４９８号明細書、米国特許第７０２２５１９号明細書、米国特許第６４８５９６６号明細書、米国特許第６９５３６９０号明細書、米国特許第６２５８５９５号明細書、欧州特許第２０１８４２１号明細書、欧州特許第１０６４３９３号明細書、欧州特許第１１６３３５４号明細書、欧州特許第８３５３２１号明細書、欧州特許第９３１１５８号明細書、欧州特許第９５０１１１号明細書、欧州特許第１０１５６１９号明細書、欧州特許第１１８３３８０号明細書、欧州特許第２０１８４２１号明細書、欧州特許第１２２６２６４号明細書、欧州特許第１６３６３７０号明細書、欧州特許第１１６３３５４号明細書、欧州特許第１０６４３９３号明細書、米国特許出願公開第２００３００３２６１３号明細書、米国特許出願公開第２００２０１０２７１４号明細書、米国特許出願公開第２００３００７３２３２号明細書、米国特許出願公開第２００３００４０１０１号明細書（ＮＩＨに帰属）、米国特許出願公開第２００６０００３４５１号明細書、米国特許出願公開第２００２００９０７１７号明細書、米国特許出願公開第２００３００９２１６１号明細書、米国特許出願公開第２００７０２３１３０３号明細書、米国特許出願公開第２００６０２１１１１５号明細書、米国特許出願公開第２００９０２７５１０７号明細書、米国特許出願公開第２００７００４０４２号明細書、米国特許出願公開第２００３０１１９１９１号明細書、米国特許出願公開第２００２００１９０５０号明細書。
【０２６９】
ウイルス産生系
大規模産生
ある特定の実施形態では、ＡＡＶ粒子産生は、産生の規模が増加するように改変することができる。本開示による大規模ウイルス産生方法としては、その各々の内容をその全体で本願明細書に援用する以下の文献に教示されているプロセスまたは処理工程のいずれかを挙げることができる：米国特許第５，７５６，２８３号明細書、米国特許第６，２５８，５９５号明細書、米国特許第６，２６１，５５１号明細書、米国特許第６，２７０，９９６号明細書、米国特許第６，２８１，０１０号明細書、米国特許第６，３６５，３９４号明細書、米国特許第６，４７５，７６９号明細書、米国特許第６，４８２，６３４号明細書、米国特許第６，４８５，９６６号明細書、米国特許第６，９４３，０１９号明細書、米国特許第６，９５３，６９０号明細書、米国特許第７，０２２，５１９号明細書、米国特許第７，２３８，５２６号明細書、米国特許第７，２９１，４９８号明細書、および米国特許第７，４９１，５０８号明細書、または国際公開第１９９６０３９５３０号パンフレット、国際公開第１９９８０１００８８号パンフレット、国際公開第１９９９０１４３５４号パンフレット、国際公開第１９９９０１５６８５号パンフレット、国際公開第１９９９０４７６９１号パンフレット、国際公開第２００００５５３４２号パンフレット、国際公開第２００００７５３５３号パンフレット、および国際公開第２００１０２３５９７号パンフレット。
【０２７０】
ＡＡＶ粒子産生規模を増加させる方法は、典型的には、ウイルス産生細胞の数を増加させる工程を含む。ある特定の実施形態では、ウイルス産生細胞は、付着細胞を含む。付着ウイルス産生細胞によるＡＡＶ粒子産生の規模を増加させるためには、より大きな細胞培養表面が必要である。ある特定の実施形態では、大規模産生法は、細胞培養表面を増加させるためにローラーボトルを使用する工程を含む。表面積が増加されている他の細胞培養基材が当技術分野で公知である。表面積が増加されている追加の付着細胞培養製品の例としては、ＣＥＬＬＳＴＡＣＫ（登録商標）、ＣＥＬＬＣＵＢＥ（登録商標）（コーニング社（Ｃｏｒｎｉｎｇ  Ｃｏｒｐ．）［米国ニューヨーク州コーニング（Ｃｏｒｎｉｎｇ）所在］）、およびＮＵＮＣ（商標）ＣＥＬＬ  ＦＡＣＴＯＲＹ（商標）（サーモサイエンティフィック社（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）［米国マサチューセッツ州ウォルサム（Ｗａｌｔｈａｍ）所在）が挙げられるが、これらに限定されない。ある特定の実施形態では、大規模付着細胞表面としては、約１，０００ｃｍ２〜約１００，０００ｃｍ２を挙げることができる。
【０２７１】
ある特定の実施形態では、本開示の大規模ウイルス産生法は、懸濁細胞培養の使用を含んでいてもよい。懸濁細胞培養は、細胞数の著しい増加を可能にすることができる。典型的には、約１０〜５０ｃｍ２の表面積で成長させることのできる付着細胞数を、懸濁中では約１ｃｍ３の容積で成長させることができる。
【０２７２】
ある特定の実施形態では、大規模細胞培養物は、約１０７〜約１０９個の細胞、約１０８〜約１０１０個の細胞、約１０９〜約１０１２個の細胞、または少なくとも１０１２個の細胞を含むことができる。ある特定の実施形態では、大規模培養物は、約１０９〜約１０１２、約１０１０〜約１０１３、約１０１１〜約１０１４、約１０１２〜約１０１５、または少なくとも１０１５個のＡＡＶ粒子を産生することができる。
【０２７３】
大規模培養形式での複製細胞のトランスフェクションは、当技術分野において公知の任意の方法により実行することができる。大規模付着細胞培養の場合、トランスフェクション法としては、無機化合物（例えば、リン酸カルシウム）、有機化合物（例えば、ポリエチレンイミン（ＰＥＩ））の使用、または非化学的方法（例えば、エレクトロポレーション）の使用を挙げることができるが、これらに限定されない。懸濁中での細胞成長では、トランスフェクション法としては、無機化合物（例えば、リン酸カルシウム）、有機化合物（例えば、ポリエチレンイミン（ＰＥＩ））の使用、または非化学的方法（例えば、エレクトロポレーション）の使用を挙げることができるが、これらに限定されない。ある特定の実施形態では、大規模懸濁培養物のトランスフェクションは、フェン，Ｌら（Ｆｅｎｇ，Ｌ．ｅｔ  ａｌ．），２００８．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ  Ａｐｐｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍ．５０：１２１−３２に記載の「トランスフェクション手順（Ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ  Ｐｒｏｃｅｄｕｒｅ）」という表題のセクションに従って実行することができる。そのような実施形態によると、トランスフェクトしようとするプラスミドを導入するためのＰＥＩ−ＤＮＡ複合体を形成してもよい。ある特定の実施形態では、トランスフェクション前に、ＰＥＩ−ＤＮＡ複合体をトランスフェクトする細胞に「ショック」を与えてもよい。ショックは、細胞培養温度を約１時間の期間にわたって４℃に下げることを含む。ある特定の実施形態では、約１０分〜約５時間の期間にわたって細胞培養物にショックを与えてもよい。ある特定の実施形態では、約０℃〜約２０℃の温度で細胞培養物にショックを与えてもよい。
【０２７４】
ある特定の実施形態では、トランスフェクションは、１つまたは複数のペイロード構築物からの核酸の発現を低減するために、ＲＮＡエフェクター分子を発現するための１つまたは複数の発現ベクターを含んでいてもよい。そのような方法は、ペイロード構築物の発現に浪費される細胞資源を低減することによりＡＡＶ粒子の産生を増強することができる。ある特定の実施形態では、そのような方法は、その内容をその全体で本願明細書に援用する米国特許出願公開第２０１４／００９９６６６号明細書に教示されているものに従って実行することができる。
【０２７５】
バイオリアクター
ある特定の実施形態では、ＡＡＶ粒子の大規模生産には細胞培養バイオリアクターを使用することができる。ある特定の実施形態では、バイオリアクターとしては、撹拌タンク型リアクターが挙げられる。そのようなリアクターは、一般に、撹拌器（例えば、インペラー）を有する、典型的には円筒形状の槽を含む。ある特定の実施形態では、そのようなバイオリアクター槽は、槽温度を制御するために、および／または周囲温度の変化による影響を最小限に抑えるために、水ジャケット内に設置されていてもよい。
【０２７６】
バイオリアクター槽容積は、サイズが約５００ｍｌ〜約２Ｌ、約１Ｌ〜約５Ｌ、約２．５Ｌ〜約２０Ｌ、約１０Ｌ〜約５０Ｌ、約２５Ｌ〜約１００Ｌ、約７５Ｌ〜約５００Ｌ、約２５０Ｌ〜約２，０００Ｌ、約１，０００Ｌ〜約１０，０００Ｌ、約５，０００Ｌ〜約５０，０００Ｌ、または少なくとも５０，０００Ｌの範囲であってもよい。槽底部は、丸みを帯びていてもよくまたは平坦であってもよい。ある特定の実施形態では、動物細胞培養物は、丸みを帯びた槽底部を有するバイオリアクターで維持してもよい。
【０２７７】
ある特定の実施形態では、バイオリアクター槽は、熱循環装置を使用することにより加温してもよい。熱循環装置は、加熱水を水ジャケットに圧送する。ある特定の実施形態では、加熱水を、バイオリアクター槽内に存在する管（例えば、コイル管）に圧送してもよい。ある特定の実施形態では、これに限定されないが培養培地の直上にある空気空間を含むバイオリアクター周囲に温風を循環させてもよい。加えて、細胞生存率を最適化するようにｐＨおよびＣＯ２レベルを維持してもよい。
【０２７８】
ある特定の実施形態では、バイオリアクターは、中空繊維リアクターを含んでいてもよい。中空繊維バイオリアクターは、足場依存性細胞および足場非依存性細胞の培養を両方とも支援することができる。さらなるバイオリアクターとしては、充填床バイオリアクターまたは固定床バイオリアクターを挙げることができるが、これらに限定されない。そのようなバイオリアクターは、付着細胞アタッチメント用のガラスビーズを有する槽を含んでいてもよい。さらなる充填床リアクターは、セラミックビーズを含んでいてもよい。
【０２７９】
ある特定の実施形態では、ウイルス粒子は、使い捨てバイオリアクターを使用することにより産生される。ある特定の実施形態では、バイオリアクターとしては、ＧＥ  ＷＡＶＥバイオリアクター、ＧＥ  Ｘｃｅｌｌｅｒａｘバイオリアクター、Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ  Ｂｉｏｓｔａｔバイオリアクター、ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ  Ｈｙｃｌｏｎｅバイオリアクター、またはＰａｌｌ  Ａｌｌｅｇｒｏバイオリアクターを挙げることができる。
【０２８０】
ある特定の実施形態では、細胞バイオリアクター培養物でのＡＡＶ粒子産生は、その各々の内容をその全体で本願明細書に援用する以下の文献に教示されている方法または系に従って実行することができる：米国特許第５，０６４７６４号明細書、米国特許第６，１９４，１９１号明細書、米国特許第６，５６６，１１８号明細書、米国特許第８，１３７，９４８号明細書、または米国特許出願公開第２０１１／０２２９９７１号明細書。
【０２８１】
ウイルス産生細胞（ＶＰＣ）混合物の拡大増殖
ある特定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子またはウイルスベクターは、昆虫細胞などのウイルス産生細胞（ＶＰＣ）において産生することができる。産生細胞は、細胞バンク（ＣＢ）から調達することができ、凍結細胞バンクに保管されていることが多い。
【０２８２】
ある特定の実施形態では、細胞バンクからのウイルス産生細胞は、凍結形態で提供される。凍結細胞のバイアルを、典型的には氷結晶が消散するまで解凍する。ある特定の実施形態では、凍結細胞を、１０〜５０℃、１５〜４０℃、２０〜３０℃、２５〜５０℃、３０〜４５℃、３５〜４０℃、３７〜３９℃の温度で解凍する。ある特定の実施形態では、加熱水浴を使用して凍結ウイルス産生細胞を解凍する。
【０２８３】
ある特定の実施形態では、解凍したＣＢ細胞混合物は、１．０×１０４〜１．０×１０９細胞／ｍＬの細胞密度を有することになる。ある特定の実施形態では、解凍したＣＢ細胞混合物は、以下の細胞密度を有する：１．０ｘ１０４〜２．５ｘ１０４細胞／ｍＬ、２．５ｘ１０４〜５．０ｘ１０４細胞／ｍＬ、５．０ｘ１０４〜７．５ｘ１０４細胞／ｍＬ、７．５ｘ１０４〜１．０ｘ１０５細胞／ｍＬ、１．０ｘ１０５〜２．５ｘ１０５細胞／ｍＬ、２．５ｘ１０５〜５．０ｘ１０５細胞／ｍＬ、５．０ｘ１０５〜７．５ｘ１０５細胞／ｍＬ、７．５ｘ１０５〜１．０ｘ１０６細胞／ｍＬ、１．０ｘ１０６〜２．５ｘ１０６細胞／ｍＬ、２．５ｘ１０６〜５．０ｘ１０６細胞／ｍＬ、５．０ｘ１０６〜７．５ｘ１０６細胞／ｍＬ、７．５ｘ１０６〜１．０ｘ１０７細胞／ｍＬ、１．０ｘ１０７〜２．５ｘ１０７細胞／ｍＬ、２．５ｘ１０７〜５．０ｘ１０７細胞／ｍＬ、５．０ｘ１０７〜７．５ｘ１０７細胞／ｍＬ、７．５ｘ１０７〜１．０ｘ１０８細胞／ｍＬ、１．０ｘ１０８〜２．５ｘ１０８細胞／ｍＬ、２．５ｘ１０８〜５．０ｘ１０８細胞／ｍＬ、５．０ｘ１０８〜７．５ｘ１０８細胞／ｍＬ、または７．５ｘ１０８〜１．０ｘ１０９細胞／ｍＬ。
【０２８４】
ある特定の実施形態では、ＣＢ細胞混合物の容積を拡大増殖させる。このプロセスは、一般的に、シードトレイン（Ｓｅｅｄ  Ｔｒａｉｎ）、シード拡大増殖、またはＣＢ細胞拡大増殖と呼ばれる。細胞／シード拡大増殖は、連続的により大きくなる作業容積を使用する複数の拡大増殖工程により、細胞混合物を播種および拡大増殖する連続工程を含んでいてもよい。ある特定の実施形態では、細胞拡大増殖は、１、２、３、４、５、６、７、または７つよりも多くの拡大増殖工程を含んでいてもよい。ある特定の実施形態では、細胞拡大増殖における作業容積は、以下の作業容積または作業容積範囲の１つまたは複数を含んでいてもよい：５ｍＬ、１０ｍＬ、２０ｍＬ、５〜２０ｍＬ、２５ｍＬ、３０ｍＬ、４０ｍＬ、５０ｍＬ、２０〜５０ｍＬ、７５ｍＬ、１００ｍＬ、１２５ｍＬ、１５０ｍＬ、１７５ｍＬ、２００ｍＬ、５０〜２００ｍＬ、２５０ｍＬ、３００ｍＬ、４００ｍＬ、５００ｍＬ、７５０ｍＬ、１０００ｍＬ、２５０〜１０００ｍＬ、１２５０ｍＬ、１５００ｍＬ、１７５０ｍＬ、２０００ｍＬ、１０００〜２０００ｍＬ、２２５０ｍＬ、２５００ｍＬ、２７５０ｍＬ、３０００ｍＬ、２０００〜３０００ｍＬ、３５００ｍＬ、４０００ｍＬ、４５００ｍＬ、５０００ｍＬ、３０００〜５０００ｍＬ、５．５Ｌ、６．０Ｌ、７．０Ｌ、８．０Ｌ、９．０Ｌ、１０．０Ｌ、および５．０〜１０．０Ｌ。
【０２８５】
ある特定の実施形態では、第１の拡大増殖細胞混合物に由来するある容積の細胞を使用して、第２の別々のシードトレイン／シード拡大増殖に播種してもよい（解凍したＣＢ細胞混合物を使用する代わりに）。このプロセスは、一般的にローリング接種（ｒｏｌｌｉｎｇ  ｉｎｏｃｕｌｕｍ）と呼ばれる。ある特定の実施形態では、ローリング接種を、一連の２つまたはそれよりも多くの（例えば、２、３、４、または５つの）別々のシードトレイン／シード拡大増殖に使用する。
【０２８６】
ある特定の実施形態では、大容積細胞拡大増殖は、ＧＥ  ＷＡＶＥバイオリアクター、ＧＥ  Ｘｃｅｌｌｅｒａｘバイオリアクター、Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ  Ｂｉｏｓｔａｔバイオリアクター、ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ  Ｈｙｃｌｏｎｅバイオリアクター、またはＰａｌｌ  Ａｌｌｅｇｒｏバイオリアクターなどのバイオリアクターの使用を含んでいてもよい。
【０２８７】
ある特定の実施形態では、作業容積内の細胞密度は、標的産出細胞密度になるまで拡大増殖される。ある特定の実施形態では、拡大増殖工程の産出細胞密度は、１．０ｘ１０５〜５．０ｘ１０５、５．０ｘ１０５〜１．０ｘ１０６、１．０ｘ１０６〜５．０ｘ１０６、５．０ｘ１０６〜１．０ｘ１０７、１．０ｘ１０７〜５．０ｘ１０７、５．０ｘ１０７〜１．０ｘ１０８、５．０ｘ１０５、６．０ｘ１０５、７．０ｘ１０５、８．０ｘ１０５、９．０ｘ１０５、１．０ｘ１０６、２．０ｘ１０６、３．０ｘ１０６、４．０ｘ１０６、５．０ｘ１０６、６．０ｘ１０６、７．０ｘ１０６、８．０ｘ１０６、９．０ｘ１０６、１．０ｘ１０７、２．０ｘ１０７、３．０ｘ１０７、４．０ｘ１０７、５．０ｘ１０７、６．０ｘ１０７、７．０ｘ１０７、８．０ｘ１０７、または９．０×１０７細胞／ｍＬである。
【０２８８】
ある特定の実施形態では、作業容積の産出細胞密度は、より大きな連続した作業容積のための播種細胞密度を提供する。ある特定の実施形態では、拡大増殖工程の播種細胞密度は、１．０ｘ１０５〜５．０ｘ１０５、５．０ｘ１０５〜１．０ｘ１０６、１．０ｘ１０６〜５．０ｘ１０６、５．０ｘ１０６〜１．０ｘ１０７、１．０ｘ１０７〜５．０ｘ１０７、５．０ｘ１０７〜１．０ｘ１０８、５．０ｘ１０５、６．０ｘ１０５、７．０ｘ１０５、８．０ｘ１０５、９．０ｘ１０５、１．０ｘ１０６、２．０ｘ１０６、３．０ｘ１０６、４．０ｘ１０６、５．０ｘ１０６、６．０ｘ１０６、７．０ｘ１０６、８．０ｘ１０６、９．０ｘ１０６、１．０ｘ１０７、２．０ｘ１０７、３．０ｘ１０７、４．０ｘ１０７、５．０ｘ１０７、６．０ｘ１０７、７．０ｘ１０７、８．０ｘ１０７、または９．０×１０７細胞／ｍＬである。
【０２８９】
ある特定の実施形態では、細胞拡大増殖は、１〜５０日間にわたって継続させることができる。各細胞拡大増殖ステップまたは全細胞拡大増殖は、１〜１０日間、１〜５日間、１〜３日間、２〜３日間、２〜４日間、２〜５日間、２〜６日間、３〜４日間、３〜５日間、３〜６日間、３〜８日間、４〜５日間、４〜６日間、４〜８日間、５〜６日間、または５〜８日間にわたって継続させることができる。ある特定の実施形態では、各細胞拡大増殖工程または全細胞拡大増殖は、１〜１００世代、１〜１０００世代、１００〜１０００世代、１００世代以上、または１０００世代以上にわたって継続させることができる。
【０２９０】
ある特定の実施形態では、感染またはトランスフェクト産生細胞は、本開示に示されている通り、ＣＢ細胞混合物と同じ様式で拡大増殖させることができる。
ウイルス産生細胞の感染
ある特定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子は、ＡＡＶ発現構築物を含むウイルスベクターおよび／またはＡＡＶペイロード構築物を含むウイルスベクターをＶＰＣに感染させることにより、昆虫細胞などのウイルス産生細胞（ＶＰＣ）において産生される。ある特定の実施形態では、ＶＰＣに、ＡＡＶ発現構築物を含む発現ＢＥＶおよびＡＡＶペイロード構築物を含むペイロードＢＥＶを感染させる。
【０２９１】
ある特定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、ＡＡＶ発現構築物およびＡＡＶペイロード構築物を両方とも含むウイルスベクターをＶＰＣに感染させることにより産生される。ある特定の実施形態では、ＶＰＣに、ＡＡＶ発現構築物およびＡＡＶペイロード構築物を両方とも含む単一のＢＥＶを感染させる。
【０２９２】
ある特定の実施形態では、ＶＰＣ（昆虫細胞など）は、以下の工程を含む感染プロセスにおいて感染ＢＩＩＣを使用して感染させる；（ｉ）ＶＰＣの収集物を産生バイオリアクターへと播種する；（ｉｉ）播種したＶＰＣを、任意選択で、標的作業容積および細胞密度に拡大増殖することができる；（ｉｉｉ）発現ＢＥＶを含む感染ＢＩＩＣおよびペイロードＢＥＶを含む感染ＢＩＩＣを、産生バイオリアクターへとインジェクトし、感染ウイルス生産細胞をもたらす；および（ｉｖ）感染ウイルス産生細胞をインキュベーションして、ウイルス産生細胞内でＡＡＶ粒子を産生する。
【０２９３】
ある特定の実施形態では、感染時のＶＰＣ密度は、１．０×１０５〜２．５×１０５、２．５×１０５〜５．０×１０５、５．０×１０５〜７．５×１０５、７．５×１０５〜１．０ｘ１０６、１．０ｘ１０６〜５．０ｘ１０６、１．０ｘ１０６〜２．０ｘ１０６、１．５ｘ１０６〜２．５ｘ１０６、２．０ｘ１０６〜３．０ｘ１０６、２．５ｘ１０６〜３．５ｘ１０６、３．０ｘ１０６〜４．０ｘ１０６、３．５ｘ１０６〜４．５ｘ１０６、４．０ｘ１０６〜５．０ｘ１０６、４．５ｘ１０６〜５．５ｘ１０６、５．０ｘ１０６〜１．０ｘ１０７、５．０ｘ１０６〜６．０ｘ１０６、５．５ｘ１０６〜６．５ｘ１０６、６．０ｘ１０６〜７．０ｘ１０６、６．５ｘ１０６〜７．５ｘ１０６、７．０ｘ１０６〜８．０ｘ１０６、７．５ｘ１０６〜８．５ｘ１０６、８．０ｘ１０６〜９．０ｘ１０６、８．５ｘ１０６〜９．５ｘ１０６、９．０ｘ１０６〜１．０ｘ１０７、９．５ｘ１０６〜１．５ｘ１０７、１．０ｘ１０７〜５．０ｘ１０７、または５．０×１０７〜１．０×１０８細胞／ｍＬである。ある特定の実施形態では、感染時のＶＰＣ密度は、５．０ｘ１０５、６．０ｘ１０５、７．０ｘ１０５、８．０ｘ１０５、９．０ｘ１０５、１．０ｘ１０６、１．５ｘ１０６、２．０ｘ１０６、２．５ｘ１０６、３．０ｘ１０６、３．５ｘ１０６、４．０ｘ１０６、４．５ｘ１０６、５．０ｘ１０６、５．５ｘ１０６、６．０ｘ１０６、６．５ｘ１０６、７．０ｘ１０６、７．５ｘ１０６、８．０ｘ１０６、８．５ｘ１０６、９．０ｘ１０６、９．５ｘ１０６、１．０ｘ１０７、１．５ｘ１０７、２．０ｘ１０７、２．５ｘ１０７、３．０ｘ１０７、４．０ｘ１０７、５．０ｘ１０７、６．０ｘ１０７、７．０ｘ１０７、８．０ｘ１０７、または９．０×１０７細胞／ｍＬである。
【０２９４】
ある特定の実施形態では、感染ＢＩＩＣを、標的ＶＰＣ対ＢＩＩＣ比でＶＰＣと組み合わせる。ある特定の実施形態では、ＶＰＣ対ＢＩＩＣ感染比（容積対容積）は、１ＶＰＣ当たり１．０ｘ１０３〜５．０ｘ１０３、５．０ｘ１０３〜１．０ｘ１０４、１．０ｘ１０４〜５．０ｘ１０４、５．０ｘ１０４〜１．０ｘ１０５、１．０ｘ１０５〜５．０ｘ１０５、５．０ｘ１０５〜１．０ｘ１０６、１．０ｘ１０３、２．０ｘ１０３、３．０ｘ１０３、４．０ｘ１０３、５．０ｘ１０３、６．０ｘ１０３、７．０ｘ１０３、８．０ｘ１０３、９．０ｘ１０３、１．０ｘ１０４、２．０ｘ１０４、３．０ｘ１０４、４．０ｘ１０４、５．０ｘ１０４、６．０ｘ１０４、７．０ｘ１０４、８．０ｘ１０４、または９．０ｘ１０４、１．０ｘ１０５、２．０ｘ１０５、３．０ｘ１０５、４．０ｘ１０５、５．０ｘ１０５、６．０ｘ１０５、７．０ｘ１０５、８．０ｘ１０５、または９．０×１０５ＢＩＩＣである。ある特定の実施形態では、ＶＰＣ対ＢＩＩＣ感染比（細胞対細胞）は、１ＶＰＣ当たり１．０ｘ１０３〜５．０ｘ１０３、５．０ｘ１０３〜１．０ｘ１０４、１．０ｘ１０４〜５．０ｘ１０４、５．０ｘ１０４〜１．０ｘ１０５、１．０ｘ１０５〜５．０ｘ１０５、５．０ｘ１０５〜１．０ｘ１０６、１．０ｘ１０３、２．０ｘ１０３、３．０ｘ１０３、４．０ｘ１０３、５．０ｘ１０３、６．０ｘ１０３、７．０ｘ１０３、８．０ｘ１０３、９．０ｘ１０３、１．０ｘ１０４、２．０ｘ１０４、３．０ｘ１０４、４．０ｘ１０４、５．０ｘ１０４、６．０ｘ１０４、７．０ｘ１０４、８．０ｘ１０４、または９．０ｘ１０４、１．０ｘ１０５、２．０ｘ１０５、３．０ｘ１０５、４．０ｘ１０５、５．０ｘ１０５、６．０ｘ１０５、７．０ｘ１０５、８．０ｘ１０５、または９．０×１０５ＢＩＩＣである。
【０２９５】
ある特定の実施形態では、発現ＢＥＶを含む感染ＢＩＩＣおよびペイロードＢＥＶを含む感染ＢＩＩＣを、標的ＢＩＩＣ対ＢＩＩＣ比でＶＰＣと組み合わせる。ある特定の実施形態では、発現（Ｒｅｐ／Ｃａｐ）ＢＩＩＣのペイロードＢＩＩＣに対する比は、１０：１、９：１、８：１、７：１、６：１、５：１、４．５：１、４：１、３．５：１、３：１、２．５：１、２：１、１．５：１、１：１、１：１．５、１：２、１：２．５、１：３、１：３．５、１：４、１：４．５、１：５、１：５．５、１：６、１：６．５、１：７、１：７．５、１：８、１：９、１：１０、３．５〜４．５：１、３〜４：１、２．５〜３．５：１、２〜３：１、１．５〜２．５：１、１〜２：１、１〜１．５：１、１：１〜１．５、１：１〜２、１：１．５〜２．５、１：２〜３、１：２．５〜３．５、１：３〜４、１：３．５〜４．５、１：４〜５、１：４．５〜５．５、１：５〜６、１：５．５〜６．５、１：６〜７、または１：６．５〜７．５である。
【０２９６】
細胞溶解
ウイルス産生細胞を含むがそれらに限定されない本開示の細胞を、当技術分野で公知の任意の方法により細胞溶解に供してもよい。細胞溶解を実行して、本開示の任意の細胞内に存在する１つまたは複数の作用剤（例えば、ウイルス粒子）を得ることができる。ある特定の実施形態では、ＡＡＶ粒子およびウイルス産生細胞のバルク回収物を、本開示による細胞溶解に供する。
【０２９７】
ある特定の実施形態では、細胞溶解は、その各々の内容をその全体で本願明細書に援用する以下の文献に提示されている方法または系のいずれかに従って実行することができる：米国特許第７，３２６，５５５号明細書、米国特許第７，５７９，１８１号明細書、米国特許第７，０４８，９２０号明細書、米国特許第６，４１０，３００号明細書、米国特許第６，４３６，３９４号明細書、米国特許第７，７３２，１２９号明細書、米国特許第７，５１０，８７５号明細書、米国特許第７，４４５，９３０号明細書、米国特許第６，７２６，９０７号明細書、米国特許第６，１９４，１９１号明細書、米国特許第７，１２５，７０６号明細書、米国特許第６，９９５，００６号明細書、米国特許第６，６７６，９３５号明細書、米国特許第７，９６８，３３３号明細書、米国特許第５，７５６，２８３号明細書、米国特許第６，２５８，５９５号明細書、米国特許第６，２６１，５５１号明細書、米国特許第６，２７０，９９６号明細書、米国特許第６，２８１，０１０号明細書、米国特許第６，３６５，３９４号明細書、米国特許第６，４７５，７６９号明細書、米国特許第６，４８２，６３４号明細書、米国特許第６，４８５，９６６号明細書、米国特許第６，９４３，０１９号明細書、米国特許第６，９５３，６９０号明細書、米国特許第７，０２２，５１９号明細書、米国特許第７，２３８，５２６号明細書、米国特許第７，２９１，４９８明細書、および米国特許第７，４９１，５０８号明細書、または国際公開第１９９６０３９５３０号パンフレット、国際公開第１９９８０１００８８号パンフレット、国際公開第１９９９０１４３５４号パンフレット、国際公開第１９９９０１５６８５号パンフレット、国際公開第１９９９０４７６９１号パンフレット、国際公開第２００００５５３４２号パンフレット、国際公開第２００００７５３５３号パンフレット、および国際公開第２００１０２３５９７号パンフレット。
【０２９８】
細胞溶解法および系は、化学的であってもよくまたは機械的であってもよい。化学的細胞溶解は、典型的には、１つまたは複数の細胞を、化学的溶解条件下で１つまたは複数の溶解剤と接触させることを含む。機械的溶解は、典型的には、１つまたは複数の細胞を、１つもしくは複数の溶解条件および／または１つもしくは複数の溶解力に供することを含む。また、溶解は、生存率が約０％に達した後で細胞の分解を可能にすることにより完了することができる。
【０２９９】
ある特定の実施形態では、化学的溶解を使用して細胞を溶解してもよい。本明細書で使用される場合、用語「溶解剤」は、細胞の破壊を助けることができる任意の作用剤を指す。ある特定の実施形態では、溶解剤は溶液に導入され、溶解溶液または溶解緩衝液と称される。本明細書で使用される場合、用語「溶解溶液」は、１つまたは複数の溶解剤を含む溶液（典型的には、水性）を指す。溶解剤に加えて、溶解溶液は、１つまたは複数の緩衝剤、可溶化剤、界面活性剤、保存剤、凍結保護物質、酵素、酵素阻害剤、および／またはキレート剤を含んでいてもよい。溶解緩衝液は、１つまたは複数の緩衝剤を含む溶解溶液である。溶解溶液の追加成分としては、１つまたは複数の可溶化剤を挙げることができる。本明細書で使用される場合、用語「可溶化剤」は、溶液の１つもしくは複数の成分の溶解度および／または溶液に適用される１つもしくは複数の実体の溶解度を増強する化合物を指す。ある特定の実施形態では、可溶化剤は、タンパク質溶解度を増強する。ある特定の実施形態では、可溶化剤は、タンパク質の立体構造および／または活性を維持しつつタンパク質溶解度を増強する能力に基づいて選択される。
【０３００】
例示的な溶解剤としては、その各々の内容をその全体で本願明細書に援用する以下の文献に記載されているもののいずれかを挙げることができる：米国特許第８，６８５，７３４号明細書、第７，９０１，９２１号明細書、第７，７３２，１２９号明細書、第７，２２３，５８５号明細書、第７，１２５，７０６号明細書、第８，２３６，４９５号明細書、第８，１１０，３５１号明細書、第７，４１９，９５６号明細書、第７，３００，７９７号明細書、第６，６９９，７０６号明細書、および第６，１４３，５６７号明細書。ある特定の実施形態では、溶解剤は、溶解塩、両性作用剤、陽イオン性作用剤、イオン性界面活性剤、および非イオン性界面活性剤から選択することができる。溶解塩としては、塩化ナトリウム（ＮａＣｌ）および塩化カリウム（ＫＣｌ）を挙げることができるが、これらに限定されない。さらなる溶解塩としては、その各々の内容をその全体で本願明細書に援用する以下の文献に記載されているもののいずれかを挙げることができる：米国特許第８，６１４，１０１号明細書、米国特許第７，３２６，５５５号明細書、米国特許第７，５７９，１８１号明細書、米国特許第７，０４８，９２０号明細書、米国特許第６，４１０，３００号明細書、米国特許第６，４３６，３９４号明細書、米国特許第７，７３２，１２９号明細書、米国特許第７，５１０，８７５号明細書、米国特許第７，４４５，９３０号明細書、米国特許第６，７２６，９０７号明細書、米国特許第６，１９４，１９１号明細書、米国特許第７，１２５，７０６号明細書、米国特許第６，９９５，００６号明細書、米国特許第６，６７６，９３５号明細書、および米国特許第７，９６８，３３３号明細書。
【０３０１】
ある特定の実施形態では、細胞溶解物溶液は、安定化添加剤を含む。ある特定の実施形態では、安定化添加剤は、トレハロース、グリシンベタイン、マンニトール、クエン酸カリウム、ＣｕＣｌ２、プロリン、キシリトール、ＮＤＳＢ２０１、ＣＴＡＢ、およびＫ２ＰＯ４を含んでいてもよい。ある特定の実施形態では、安定化添加剤は、アルギニンなどのアミノ酸、またはアルギニンＨＣｌなどの酸性化アミノ酸混合物を含んでいてもよい。ある特定の実施形態では、安定化添加剤は、０．１ＭのアルギニンまたはアルギニンＨＣｌを含んでいてもよい。ある特定の実施形態では、安定化添加剤は、０．２ＭのアルギニンまたはアルギニンＨＣｌを含んでいてもよい。ある特定の実施形態では、安定化添加剤は、０．２５ＭのアルギニンまたはアルギニンＨＣｌを含んでいてもよい。ある特定の実施形態では、安定化添加剤は、０．３ＭのアルギニンまたはアルギニンＨＣｌを含んでいてもよい。ある特定の実施形態では、安定化添加剤は、０．４ＭのアルギニンまたはアルギニンＨＣｌを含んでいてもよい。ある特定の実施形態では、安定化添加剤は、０．５ＭのアルギニンまたはアルギニンＨＣｌを含んでいてもよい。ある特定の実施形態では、安定化添加剤は、０．６ＭのアルギニンまたはアルギニンＨＣｌを含んでいてもよい。ある特定の実施形態では、安定化添加剤は、０．７ＭのアルギニンまたはアルギニンＨＣｌを含んでいてもよい。ある特定の実施形態では、安定化添加剤は、０．８ＭのアルギニンまたはアルギニンＨＣｌを含んでいてもよい。ある特定の実施形態では、安定化添加剤は、０．９ＭのアルギニンまたはアルギニンＨＣｌを含んでいてもよい。ある特定の実施形態では、安定化添加剤は、１．０ＭのアルギニンまたはアルギニンＨＣｌを含んでいてもよい。
【０３０２】
塩の濃度を増加または減少させて、細胞膜の破砕に有効な濃度を得ることができる。両性作用剤は、本明細書で参照される場合、酸または塩基として反応することが可能な化合物である。両性作用剤としては、リゾホスファチジルコリン、３−（（３−コラミドプロピル）ジメチルアンモニウム）−１−プロパンスルホネート（ＣＨＡＰＳ）、およびＺＷＩＴＴＥＲＧＥＮＴ（登録商標）などを挙げることができるが、これらに限定されない。陽イオン性作用剤としては、臭化セチルトリメチルアンモニウム（Ｃ（１６）ＴＡＢ）および塩化ベンザルコニウムを挙げることができるが、これらに限定されない。界面活性剤を含む溶解剤としては、イオン性界面活性剤または非イオン性界面活性剤を挙げることができる。
【０３０３】
界面活性剤は、これらに限定されないが、細胞膜、細胞壁、脂質、炭水化物、リポタンパク質、および糖タンパク質を含む細胞構造を解体または溶解するように機能することができる。例示的なイオン性界面活性剤としては、その各々の内容をその全体で本願明細書に援用する、米国特許第７，６２５，５７０号明細書および米国特許第６，５９３，１２３号明細書または米国特許出願公開第２０１４／００８７３６１号明細書に教示されているもののいずれかが挙げられる。ある特定の実施形態では、溶解溶液は、１つまたは複数のイオン性界面活性剤を含む。溶解溶液に使用するためのイオン性界面活性剤の例としては、ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）、コレート、およびデオキシコレートが挙げられるが、これらに限定されない。ある特定の実施形態では、溶解溶液中にはイオン性界面活性剤が可溶化剤として含まれてもよい。ある特定の実施形態では、溶解溶液は、１つまたは複数の非イオン性界面活性剤を含む。溶解溶液に使用するための非イオン性界面活性剤としては、オクチルグルコシド、ジギトニン、ルブロール、Ｃ１２Ｅ８、ＴＷＥＥＮ（登録商標）−２０、ＴＷＥＥＮ（登録商標）−８０、Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００、Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１１４、Ｂｒｉｊ−３５、Ｂｒｉｊ−５８、およびＮｏｎｉｏｄｅｔ  Ｐ−４０を挙げることができるが、これらに限定されない。非イオン性界面活性剤は、典型的には、より弱い溶解剤であるが、細胞タンパク質および／またはウイルスタンパク質を可溶化するための可溶化剤として含まれていてもよい。ある特定の実施形態では、溶解溶液は、１つまたは複数の双性イオン性界面活性剤を含む。溶解溶液に使用するための双性イオン性界面活性剤としては、以下のものを挙げることができるが、それらに限定されない：ラウリルジメチルアミンＮ−オキシド（ＬＤＡＯ）、Ｎ，Ｎ−ジメチル−Ｎ−ドデシルグリシンベタイン（Ｅｍｐｉｇｅｎ  ＢＢ）；３−（Ｎ，Ｎ−ジメチルミリスチルアンモニオ）プロパンスルホネート（Ｚｗｉｔｔｅｒｇｅｎｔ  ３−１０）；ｎ−ドデシル−Ｎ，Ｎ−ジメチル−３−アンモニオ−１−プロパンスルホネート（Ｚｗｉｔｔｅｒｇｅｎｔ  ３−１２）；ｎ−テトラデシル−Ｎ，Ｎ−ジメチル−３−アンモニオ−１−プロパンスルホネート（Ｚｗｉｔｔｅｒｇｅｎｔ  ３−１４）；３−（Ｎ，Ｎ−ジメチルパルミチルアンモニオ）プロパンスルホネート（Ｚｗｉｔｔｅｒｇｅｎｔ  ３−１６）；３−（（３−コラミドプロピル）ジメチルアンモニオ）−１−プロパンスルホネート（ＣＨＡＰＳ）；および３−（［３−コラミドプロピル］ジメチルアンモニオ）−２−ヒドロキシ−１−プロパンスルホネート（ＣＨＡＰＳＯ）。
【０３０４】
ある特定の実施形態では、溶解溶液は、０．５ｗ／ｖ％のＴｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００などのＴｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００を含む。ある特定の実施形態では、溶解溶液は、０．１８４ｗ／ｖ％（４×ＣＭＣ）のラウリルジメチルアミンＮ−オキシド（ＬＤＡＯ）などのＬＤＡＯを含む。ある特定の実施形態では、溶解溶液は、Ｅｃｏｓｕｒｆ  ＳＡ−９などの、種子油表面活性物質を含む。ある特定の実施形態では、溶解溶液は、Ｎ，Ｎ−ジメチル−Ｎ−ドデシルグリシンベタイン（Ｅｍｐｉｇｅｎ  ＢＢ）を含む。ある特定の実施形態では、溶解溶液は、Ｚｗｉｔｔｅｒｇｅｎｔ  ３−１２（ｎ−ドデシル−Ｎ，Ｎ−ジメチル−３−アンモニオ−１−プロパンスルホネート）、Ｚｗｉｔｔｅｒｇｅｎｔ  ３−１４（ｎ−テトラデシル−Ｎ，Ｎ−ジメチル−３−アンモニオ−１−プロパンスルホネート）、またはＺｗｉｔｔｅｒｇｅｎｔ  ３−１６（３−（Ｎ，Ｎ−ジメチルパルミチルアンモニオ）プロパンスルホネート）などのＺｗｉｔｔｅｒｇｅｎｔ界面活性剤を含む。
【０３０５】
さらなる溶解剤としては、酵素および尿素を挙げることができる。ある特定の実施形態では、細胞溶解およびタンパク質溶解度の１つまたは複数を増強するために、溶解溶液中に１つまたは複数の溶解剤を組み合わせてもよい。ある特定の実施形態では、細胞膜破壊により誘起され得るタンパク質分解を防止するために、溶解溶液中には酵素阻害剤が含まれてもよい。
【０３０６】
ある特定の実施形態では、溶解溶液は、０．１〜１．０ｗ／ｖ％、０．２〜０．８ｗ／ｖ％、０．３〜０．７ｗ／ｖ％、０．４〜０．６ｗ／ｖ％、または約０．５ｗ／ｖ％の細胞溶解剤（例えば、界面活性剤）を含む。ある特定の実施形態では、溶解溶液は、０．３〜０．３５ｗ／ｖ％、０．３５〜０．４ｗ／ｖ％、０．４〜０．４５ｗ／ｖ％、０．４５〜０．５ｗ／ｖ％、０．５〜０．５５ｗ／ｖ％、０．５５〜０．６ｗ／ｖ％、０．６〜０．６５ｗ／ｖ％、または０．６５〜０．７ｗ／ｖ％の細胞溶解剤（例えば、界面活性剤）を含む。
【０３０７】
ある特定の実施形態では、付着細胞培養から生成された細胞溶解物を、Ｂｅｎｚｏｎａｓｅヌクレアーゼ（グレードＩ、純度９９％）またはｃ−ＬＥｃｔａ  Ｄｅｎａｒａｓｅヌクレアーゼ（以前はＳａｒｔｏｒｉｕｓ  Ｄｅｎａｒａｓｅ）などの１つまたは複数のヌクレアーゼで処置してもよい。ある特定の実施形態では、ヌクレアーゼを添加して、遊離されたＤＮＡにより引き起こされる溶解物の粘度を低下させる。
【０３０８】
ある特定の実施形態では、化学的溶解には、単一の化学的溶解混合物が使用される。ある特定の実施形態では、化学的溶解には、連続して添加される幾つかの溶解剤が使用され、最終的な化学的溶解混合物が提供される。
【０３０９】
ある特定の実施形態では、化学的溶解混合物は、酸性化アミノ酸混合物（アルギニンＨＣｌなど）、非イオン性界面活性剤（Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００など）、およびヌクレアーゼ（Ｂｅｎｚｏｎａｓｅヌクレアーゼなど）を含む。ある特定の実施形態では、化学的溶解混合物は、標的溶解ｐＨを提供するための酸または塩基を含んでいてもよい。
【０３１０】
ある特定の実施形態では、化学的溶解は、化学的溶解条件下で実施される。本明細書で使用される場合、用語「化学的溶解条件」は、標的細胞が溶解剤により溶解され得る環境条件（例えば、温度、圧力、ｐＨなど）の任意の組合せを指す。
【０３１１】
ある特定の実施形態では、溶解ｐＨは、３．０〜３．５、３．５〜４．０、４．０〜４．５、４．５〜５．０、５．０〜５．５、５．５〜６．０、６．０〜６．５、６．５〜７．０、７．０〜７．５、または７．５〜８．０である。
【０３１２】
ある特定の実施形態では、溶解温度は、１５〜３５℃、２０〜３０℃、２５〜３９℃、２０〜２１℃、２０〜２２℃、２１〜２２℃、２１〜２３℃、２２〜２３℃、２２〜２４℃、２３〜２４℃、２３〜２５℃、２４〜２５℃、２４〜２６℃、２５〜２６℃、２５〜２７℃、２６〜２７℃、２６〜２８℃、２７〜２８℃、２７〜２９℃、２８〜２９℃、２８〜３０℃、２９〜３０℃、２９〜３１℃、３０〜３１℃、３０〜３２℃、３１〜３２℃、または３１〜３３℃である。
【０３１３】
ある特定の実施形態では、機械的細胞溶解が実行される。機械的細胞溶解法としては、１つもしくは複数の溶解条件および／または１つもしくは複数の溶解力の使用を挙げることができる。本明細書で使用される場合、用語「溶解条件」は、細胞破壊を助長する状態または状況を指す。溶解条件は、ある特定の温度、圧力、浸透圧純度、および塩分などを含んでいてもよい。ある特定の実施形態では、溶解条件は、温度の増加または減少を含む。ある特定の実施形態によると、溶解条件は、細胞破壊を助長する温度変化を含む。そのような実施形態により実行される細胞溶解は、凍結解凍溶解を含んでいてもよい。本明細書で使用される場合、用語「凍結解凍溶解」は、細胞溶液が１または複数回の凍結解凍サイクルに供される細胞溶解を指す。凍結解凍溶解法によると、溶液中の細胞を凍結させて、氷結晶の形成および拡大により引き起こされる細胞膜の機械的破壊を誘導する。凍結解凍溶解法により使用される細胞溶液は、１つもしくは複数の溶解剤、可溶化剤、緩衝剤、凍結保護物質、表面活性物質、保存剤、酵素、酵素阻害剤、および／またはキレート剤をさらに含んでいてもよい。凍結に供した細胞溶液を解凍すると、そのような成分は、所望の細胞産物の回収を増強することができる。ある特定の実施形態では、凍結解凍溶解を受ける細胞溶液中には、１つまたは複数の凍結保護物質が含まれている。本明細書で使用される場合、用語「凍結保護物質」は、１つまたは複数の物質を凍結による損傷から保護するために使用される作用剤を指す。凍結保護物質としては、その各々の内容をその全体で本願明細書に援用する、米国特許出願公開第２０１３／０３２３３０２号明細書または米国特許第６，５０３，８８８号明細書、米国特許第６，１８０，６１３号明細書、米国特許第７，８８８，０９６号明細書、米国特許第７，０９１，０３０号明細書に教示されるもののいずれかを挙げることができる。ある特定の実施形態では、凍結保護物質としては、ジメチルスルホキシド、１，２−プロパンジオール、２，３−ブタンジオール、ホルムアミド、グリセロール、エチレングリコール、１，３−プロパンジオールおよびｎ−ジメチルホルムアミド、ポリビニルピロリドン、ヒドロキシエチルデンプン、アガロース、デキストラン、イノシトール、グルコース、ヒドロキシエチルデンプン、ラクトース、ソルビトール、メチルグルコース、スクロース、および尿素を挙げることができるが、これらに限定されない。ある特定の実施形態では、凍結解凍溶解は、その内容をその全体で本願明細書に援用する米国特許第７，７０４，７２１号明細書に記載の方法のいずれかにより実行してもよい。
【０３１４】
本明細書で使用される場合、用語「溶解力」は、細胞を破壊するために使用される物理的活性を指す。溶解力としては、機械的力、音波的力、重力、光学的力、および電気的力などを挙げることができるが、これらに限定されない。機械的力により実行される細胞溶解は、本明細書では「機械的溶解」と呼ばれる。機械的溶解により使用することができる機械的力としては、高剪断流体力を挙げることができる。そのような機械的溶解法によると、マイクロフルイダイザーを使用してもよい。マイクロフルイダイザーは、典型的には、細胞溶液をアプライすることができる入口リザーバを含む。次いで、細胞溶液を、ポンプ（例えば、高圧ポンプ）により高速および／または高圧で相互作用チャンバへと圧送して、剪断流体力を生み出すことができる。次いで、得られた溶解物を１つまたは複数の出口リザーバにて収集することができる。ポンプ速度および／または圧力を調整して、細胞溶解を調節し、産物（例えば、ウイルス粒子）の回収を増強することができる。他の機械的溶解法としては、擦過による細胞の物理的破壊を挙げることができる。
【０３１５】
細胞溶解法は、溶解しようとする細胞の細胞培養形式に基づいて選択してもよい。例えば、付着細胞培養では、ある化学的および機械的溶解法を使用してもよい。そのような機械的溶解法としては、凍結解凍溶解または擦過を挙げることができる。別の例では、Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００などの表面活性物質を含む溶解溶液と共にインキュベーションすることにより付着細胞培養物の化学的溶解を実行してもよい。
【０３１６】
ある特定の実施形態では、効率的で拡張可能なＡＡＶ粒子産生のために、溶解を行わないＡＡＶ粒子の回収方法を使用してもよい。非限定的な例では、ＡＡＶ粒子は、その内容をその全体で本願明細書に援用する米国特許出願公開第２００９０２７５１０７号明細書に記載の通り、ヘパリン結合部位を欠如するＡＡＶ粒子を培養し、それによりＡＡＶ粒子を細胞培養の上清へと通過させ、培養から上清を収集すること；および上清からＡＡＶ粒子を単離することにより産生することができる。
【０３１７】
清澄化および精製：一般
ウイルス粒子を含む細胞溶解物を清澄化および精製に供してもよい。清澄化は、一般に、細胞溶解物からのウイルス粒子の精製で行われる初期工程を指し、バルク溶解回収物からより大きな不溶性残渣を除去することにより、さらなる精製のための溶解物を調製する役目を果たす。ウイルス産生は、ウイルス産生プロセスの任意の時点に清澄化工程を含むことができる。清澄化工程としては、遠心分離および濾過を挙げることができるが、これらに限定されない。清澄化中に低速での遠心分離を実行して、より大きな残渣のみを除去してもよい。同様に、濾過は、より大きな残渣のみが除去されるようにより大きな孔径を有するフィルターを使用して実行することができる。
【０３１８】
精製は、一般に、清澄化溶解回収物からより小さな残渣を除去することにより、細胞溶解物からウイルス粒子を精製および濃縮して最終プール原薬を調製する際に行われる最終工程を指す。ウイルス産生は、ウイルス産生プロセスの任意の時点に精製工程を含むことができる。精製工程としては、濾過およびクロマトグラフィーを挙げることができるが、これらに限定されない。濾過は、産物からより小さな残渣を除去するためにより小さな孔径を有するフィルターを使用して実行してもよく、または産物に由来するより大きな残渣を保持するためにより大きな孔径を有するフィルターを使用して実行してもよい。濾過を使用して、ウイルス産生プールまたは流動の濃度および／または内容物を変更することができる。クロマトグラフィーを実行して、不純物のプールから標的粒子を選択的に分離してもよい。
【０３１９】
高濃度ＡＡＶ製剤の大規模生産は、高濃度のＡＡＶ粒子には凝集または塊成する傾向があるため困難である。透析カセットまたはスピン遠心分離などの小規模清澄化および濃縮系は、一般に、大規模生産のための十分な拡張性がない。本開示は、大容積の高濃度ＡＡＶ産生製剤を処理するための清澄化、精製、および濃縮系の実施形態を提供する。ある特定の実施形態では、大容積清澄化系は、以下の処理工程の１つまたは複数を含む：深層濾過、精密濾過（例えば、０．２μｍ濾過）、親和性クロマトグラフィー、陰イオン交換クロマトグラフィー（ＡＥＸ）または陽イオン交換クロマトグラフィー（ＣＥＸ）などのイオン交換クロマトグラフィー、接線流濾過系（ＴＦＦ）、ナノ濾過（例えば、ウイルス保持濾過（ＶＲＦ））、最終濾過（ＦＦ）、および充填濾過を含む。
【０３２０】
ウイルス清澄化および精製の目的としては、細胞溶解物のハイスループット処理および最終ウイルス回収率の最適化が挙げられる。本開示の清澄化および精製工程を含めることの利点としては、より大容積の溶解物を処理するための拡張性が挙げられる。ある特定の実施形態では、清澄化および精製は、その各々の内容をその全体で本願明細書に援用する以下の文献に提示されている方法または系のいずれかに従って実行することができる：米国特許第８，５２４，４４６号明細書、米国特許第５，７５６，２８３号明細書、米国特許第６，２５８，５９５号明細書、米国特許第６，２６１，５５１号明細書、米国特許第６，２７０，９９６号明細書、米国特許第６，２８１，０１０号明細書、米国特許第６，３６５，３９４号明細書、米国特許第６，４７５，７６９号明細書、米国特許第６，４８２，６３４号明細書、米国特許第６，４８５，９６６号明細書、米国特許第６，９４３，０１９号明細書、米国特許第６，９５３，６９０号明細書、米国特許第７，０２２，５１９号明細書、米国特許第７，２３８，５２６号明細書、米国特許第７，２９１，４９８号明細書、米国特許第７，４９１，５０８号明細書、米国特許出願公開第２０１３／００４５１８６号明細書、米国特許出願公開第２０１１／０２６３０２７号明細書、米国特許出願公開第２０１１／０１５１４３４号明細書、米国特許出願公開第２００３／０１３８７７２号明細書、および国際公開第２００２０１２４５５号パンフレット、国際公開第１９９６０３９５３０号パンフレット、国際公開第１９９８０１００８８号パンフレット、国際公開第１９９９０１４３５４号パンフレット、国際公開第１９９９０１５６８５号パンフレット、国際公開第１９９９０４７６９１号パンフレット、国際公開第２００００５５３４２号パンフレット、国際公開第２００００７５３５３号パンフレット、および国際公開第２００１０２３５９７号パンフレット。
【０３２１】
ある特定の実施形態では、少なくとも１つのＡＡＶ粒子を含む組成物は、その内容をその全体で本願明細書に援用する、米国特許第８５２４４４６号明細書、米国特許第６６６０５１４号明細書、米国特許第８２８３１５１号明細書、または米国特許第８５２４４４６号明細書に記載の方法または系を使用して単離または精製することができる。
【０３２２】
清澄化および精製：遠心分離
ある特定の実施形態によると、細胞溶解物は、１つまたは複数の遠心分離工程により清澄化することができる。遠心分離を使用して、溶解物中の不溶性粒子をペレット化してもよい。清澄化中の遠心分離強度（標準重力の倍数を表す重力単位（ｇ）で表記することができる）は、その後の精製工程での遠心分離強度よりも低くてもよい。ある特定の実施形態では、細胞溶解物に対する遠心分離は、約２００ｇ〜約８００ｇ、約５００ｇ〜約１５００ｇ、約１０００ｇ〜約５０００ｇ、約１２００ｇ〜約１００００ｇ、または約８０００ｇ〜約１５０００ｇで実施してもよい。ある特定の実施形態では、細胞溶解物の遠心分離は、８０００ｇにて１５分間実行される。ある特定の実施形態では、細胞溶解物中の粒子状物質を沈降速度により分配するために密度勾配遠心分離を実行してもよい。本開示の方法または系により使用される勾配としては、塩化セシウム勾配およびイオジキサノール段階勾配を挙げることができるが、これらに限定されない。ある特定の実施形態では、遠心分離には、デカンター型遠心分離系が使用される。ある特定の実施形態では、遠心分離には、ディスク積層型遠心分離系が使用される。ある特定の実施形態では、遠心分離は、２サイクルＣｓＣｌ勾配超遠心分離またはイオジキサノール不連続密度勾配超遠心分離などの超遠心分離を含む。
【０３２３】
清澄化および精製：濾過
ある特定の実施形態では、１つまたは複数の精密濾過、ナノ濾過、および／または限外濾過工程を、清澄化、精製、および／または滅菌中に使用することができる。１つまたは複数の精密濾過、ナノ濾過、または限外濾過工程は、ＥＭＤ  Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ  Ｅｘｐｒｅｓｓ  ＳＨＣ  ＸＬ１０  ０．５／０．２μｍフィルター、ＥＭＤ  Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ  Ｅｘｐｒｅｓｓ  ＳＨＣＸＬ６０００  ０．５／０．２μｍフィルター、ＥＭＤ  Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ  Ｅｘｐｒｅｓｓ  ＳＨＣＸＬ１５０フィルター、ＥＭＤ  ＭｉｌｌｉｐｏｒｅＭｉｌｌｉｐａｋ  Ｇａｍｍａ  Ｇｏｌｄ０．２２μｍフィルター（デュアルインライン滅菌等級フィルター）、Ｐａｌｌ  Ｓｕｐｏｒ  ＥＫＶ，０．２μｍ滅菌等級フィルター、Ａｓａｈｉ  Ｐｌａｎｏｖａ  ３５Ｎ、Ａｓａｈｉ  Ｐｌａｎｏｖａ  ２０Ｎ、Ａｓａｈｉ  Ｐｌａｎｏｖａ  ７５Ｎ、Ａｓａｈｉ  Ｐｌａｎｏｖａ  ＢｉｏＥｘ、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ  Ｖｉｒｅｓｏｌｖｅ  ＮＦＲ、またはＳａｒｔｏｒｉｕｓ  Ｓａｒｔｏｐｏｒｅ  ２ＸＬＧ０．８／０．２μｍなどの濾過系の使用を含んでいてもよい。
【０３２４】
ある特定の実施形態では、１つまたは複数の精密濾過工程を、清澄化、精製、および／または滅菌中に使用することができる。精密濾過には、典型的には０．１μｍ〜１０μｍの孔径を有する精密濾過膜が利用される。精密濾過は、一般に、微粒子の基本的な清澄化、滅菌、および除去に使用される。ある特定の実施形態では、精密濾過を使用して、ウイルス粒子の凝集塊を除去する。ある特定の実施形態では、本開示の生産プロセスまたは系は、少なくとも１つの精密濾過工程を含む。１つまたは複数の精密濾過工程は、ＥＭＤ  Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ  Ｍｉｌｌｉｓｔａｋ＋ＰＯＤフィルター（Ｄ０ＨＣメディアシリーズ）、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ  ＭＣ０ＳＰ２３ＣＬ３フィルター（Ｃ０ＳＰメディアシリーズ）、またはＳａｒｔｏｒｉｕｓＳａｒｔｏｐｏｒｅフィルターシリーズなどの深層濾過系による深層濾過工程を含んでいてもよい。本開示の精密濾過系を、本開示のＡＡＶ医薬用処理および保管製剤を含む当業者に公知の製剤で、事前にすすぎ、充填し、平衡化し、洗い流し、処理し、溶出し、洗浄し、または浄化してもよい。
【０３２５】
ある特定の実施形態では、１つまたは複数の限外濾過工程を、清澄化および精製中に使用することができる。限外濾過工程を、本開示の処理および／または製剤溶液のいずれかを濃縮、製剤化、脱塩、または脱水するために使用してもよい。限外濾過には、典型的には０．００１〜０．１μｍの孔径を有する限外濾過膜が利用される。限外濾過膜は、分子量カットオフ（ＭＷＣＯ）により規定することもでき、１ｋＤ〜５００ｋＤの範囲を有することができる。限外濾過は、一般に、タンパク質、ペプチド、プラスミド、ウイルス粒子、核酸、および炭水化物などの溶解生体分子を濃縮および製剤化するために使用される。本開示の限外濾過系を、本開示のＡＡＶ医薬用処理および保管製剤を含む当業者に公知の製剤で、事前にすすぎ、充填し、平衡化し、洗い流し、処理し、溶出し、洗浄し、または浄化してもよい。
【０３２６】
ある特定の実施形態では、１つまたは複数のナノ濾過工程を、清澄化および精製中に使用することができる。ナノ濾過には、典型的には１００ｎｍ未満の孔径を有するナノ濾過膜が利用される。ナノ濾過は、一般に、不要な内因性ウイルス不純物（例えば、バキュロウイルス）の除去に使用される。ある特定の実施形態では、ナノ濾過は、ウイルス除去濾過（ＶＲＦ）を含んでいてもよい。ＶＲＦフィルターは、典型的には１５ｎｍ〜１００ｎｍの濾過サイズを有していてもよい。ＶＲＦフィルターの例としては、Ｐｌａｎｏｖａ  １５Ｎ、Ｐｌａｎｏｖａ  ２０Ｎ、およびＰｌａｎｏｖａ  ３５Ｎ（旭化成株式会社（Ａｓａｈｉ−Ｋａｓｅｉ  Ｃｏｒｐ）［日本国東京都所在］）；ならびにＶｉｒｅｓｏｌｖｅＮＦＰおよびＶｉｒｅｓｏｌｖｅＮＦＲ（ミリポア社（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ  Ｃｏｒｐ）［米国マサチューセッツ州ビレリカ（Ｂｉｌｌｅｒｉｃａ）所在］）が挙げられる（しかしながら、これらに限定されない）。本開示のナノ濾過系を、本開示のＡＡＶ医薬用処理および保管製剤を含む当業者に公知の製剤で、事前にすすぎ、充填し、平衡化し、洗い流し、処理し、溶出し、洗浄し、または浄化してもよい。ある特定の実施形態では、ナノ濾過を使用して、ウイルス粒子の凝集塊を除去する。
【０３２７】
ある特定の実施形態では、１つまたは複数の接線流濾過（ＴＦＦ）（クロスフロー濾過としても知られている）工程を、清澄化および精製中に使用してもよい。接線流濾過は、供給流動（清澄化および濃縮しようとする標的作用剤／粒子を含む）が供給タンクから濾過モジュールまたはカートリッジへと流れる膜濾過の形態である。供給流動は、ＴＦＦ濾過モジュール内を膜表面に対して平行に通過し、流動の一部分は膜を通過し（透過液／濾液）、流動の残り（保持液）は濾過系を通っておよび供給タンクへと再循環して戻る。
【０３２８】
ある特定の実施形態では、ＴＦＦ濾過モジュールは、平板式モジュール（積層平面カセット）、渦巻き式モジュール（渦巻き状の膜層）、または中空繊維モジュール（膜管の束）であってもよい。本開示で使用するためのＴＦＦ系の例としては、以下のものが挙げられるが、これらに限定されない：Ｓｐｅｃｔｒｕｍ  ｍＰＥＳ中空繊維ＴＦＦ系（０．５ｍｍ繊維ＩＤ、１００ｋＤＡ  ＭＷＣＯ）またはＰｅｌｌｉｃｏｎ−３カセットを有するＭｉｌｌｉｐｏｒｅ  Ｕｌｔｒａｃｅｌ  ＰＬＣＴＫ系（０．５７ｍ２、３０ｋＤＡ  ＭＷＣＯ）。
【０３２９】
供給流動がＴＦＦ濾過系を通って循環する間に、新しい緩衝液材料をＴＦＦ供給タンクに添加してもよい。ある特定の実施形態では、流動流がＴＦＦ濾過系を通って循環する間に緩衝液材料を完全に補充してもよい。この実施形態では、透過液で失われた緩衝液材料と等しい量の緩衝液材料を流動に添加して、一定の濃度をもたらす。ある特定の実施形態では、流動流が濾過系を通って循環する間に緩衝液材料を低減させてもよい。この実施形態では、透過液で失われた緩衝液材料と比べて低減された量の緩衝液材料を流動に添加して、濃度の増加をもたらす。ある特定の実施形態では、流動流が濾過系を通って循環する間に、緩衝液材料を置き換えてもよい。この実施形態では、流動に添加される緩衝液は、透過液で失われる緩衝液材料とは異なるため、流動中の緩衝液材料の最終的な置き換えがもたらされる。本開示のＴＦＦ系を、本開示のＡＡＶ医薬用処理および保管製剤を含む当業者に公知の製剤で、事前にすすぎ、充填し、平衡化し、洗い流し、処理し、溶出し、洗浄し、または浄化してもよい。
【０３３０】
ある特定の実施形態では、濾過前に、ＴＦＦ負荷プールを、賦形剤または希釈剤でスパイクしてもよい。ある特定の実施形態では、濾過前に、ＴＦＦ負荷プールを高塩混合物（塩化ナトリウムまたは塩化カリウムなど）でスパイクする。ある特定の実施形態では、濾過前に、ＴＦＦ負荷プールを高糖混合物（５０ｗ／ｖ％スクロースなど）でスパイクする。
【０３３１】
ＴＦＦ処理の有効性は、以下のものを含む（しかしながら、これらに限定されない）幾つかの要因に依存する場合がある：フロー設計に由来する剪断応力、クロスフロー速度、濾液フロー制御、膜間圧力（ＴＭＰ）、膜調整、膜組成（例えば、中空繊維構造）、および設計（例えば、表面積）、システムフロー設計、リザーバ設計、および混合戦略。ある特定の実施形態では、濾過膜は、前ＴＦＦ膜調整に曝露されていてもよい。
【０３３２】
ある特定の実施形態では、ＴＦＦ処理は、１つまたは複数の精密濾過段階を含んでいてもよい。ある特定の実施形態では、ＴＦＦ処理は、１つまたは複数の限外濾過段階を含んでいてもよい。ある特定の実施形態では、ＴＦＦ処理は、１つまたは複数のナノ濾過段階を含んでいてもよい。
【０３３３】
ある特定の実施形態では、ＴＦＦ処理は、限外濾過（ＵＦ）または精密濾過（ＭＦ）濃縮段階などの、１つまたは複数の濃縮段階を含んでいてもよい。濃縮段階では、流動が濾過系を通って循環する間に、（透過液として失われる緩衝液材料の量と比べて）低減された量の緩衝液材料が置き換えられる。透過液で失われる緩衝液材料のすべてを完全に置き換えすることができないことにより、濾過流動内のウイルス粒子濃度の増加がもたらされる。ある特定の実施形態では、流動が濾過系を通って循環する間に、増加された量の緩衝液材料が置き換えられる。透過液で失われる緩衝液材料の量と比べて過剰な緩衝液材料を組み込むことにより、濾過流動内のウイルス粒子濃度の減少がもたらされる。
【０３３４】
ある特定の実施形態では、ＴＦＦ処理は、１つまたは複数のダイアフィルトレーション（ＤＦ）段階を含んでいてもよい。ダイアフィルトレーション段階は、第１の緩衝液材料（高塩材料など）を第２の緩衝液材料（低塩またはゼロ塩材料など）と置き換えることを含む。この実施形態では、透過液で失われる第１の緩衝液材料とは異なる第２の緩衝液を流動流に添加して、流動中の緩衝液材料の最終的な置き換えがもたらされる。
【０３３５】
ある特定の実施形態では、ＴＦＦ処理は、複数の段階を連続して含んでいてもよい。ある特定の実施形態では、ＴＦＦ処理プロセスは、限外濾過（ＵＦ）濃縮段階、それに続くダイアフィルトレーション段階（ＤＦ）を含んでいてもよい。ある特定の実施形態では、ＴＦＦ処理プロセスは、ダイアフィルトレーション段階、それに続く限外濾過濃度段階を含んでいてもよい。ある特定の実施形態では、ＴＦＦ処理プロセスは、第１のダイアフィルトレーション段階、それに続く限外濾過濃度段階、それに続く第２のダイアフィルトレーション段階を含んでいてもよい。ある特定の実施形態では、ＴＦＦ処理は、高塩低糖緩衝液材料を流動流に組み込む第１のダイアフィルトレーション段階、それに続く流動流中に高濃度のウイルス材料をもたらす限外濾過／濃縮段階、それに続く低塩高糖またはゼロ塩高糖の緩衝液材料を流動流に組み込む第２のダイアフィルトレーション段階を含んでいてもよい。ある特定の実施形態では、塩は、塩化ナトリウム、リン酸ナトリウム、塩化カリウム、リン酸カリウム、またはそれらの組合せであってもよい。ある特定の実施形態では、糖は、５ｗ／ｖ％のスクロース混合物または７ｗ／ｖ％スクロース混合物などのスクロースであってもよい。
【０３３６】
ある特定の実施形態では、ＴＦＦ処理は、同時に生じる複数の段階を含んでいてもよい。非限定的な例として、ＴＦＦ清澄化プロセスは、濃縮段階と同時に生じる限外濾過段階を含んでいてもよい。
【０３３７】
濾過による細胞溶解物清澄化および精製の方法は、当技術分野で十分に理解されており、これらに限定されないが、受動濾過および流動濾過を含む、様々な利用可能な方法により実行することができる。使用されるフィルターは、様々な材料および孔径を含んでいてもよい。例えば、細胞溶解物フィルターは、約１μＭ〜約５μＭ、約０．５μＭ〜約２μＭ、約０．１μＭ〜約１μＭ、約０．０５μＭ〜約０．０５μＭ、および約０．００１μＭ〜約０．１μＭの孔径を含んでいてもよい。細胞溶解物フィルターの例示的な孔径としては、以下のものが挙げられるが、これらに限定されない：２．０、１．９、１．８、１．７、１．６、１．５、１．４、１．３、１．２、１．１、１、０．９、０．８、０．７、０．６、０．５、０．４、０．３、０．２、０．１、０．９５、０．９、０．８５、０．８、０．７５、０．７、０．６５、０．６、０．５５、０．５、０．４５、０．４、０．３５、０．３、０．２５、０．２、０．１５、０．１、０．０５、０．２２、０．２１、０．２０、０．１９、０．１８、０．１７、０．１６、０．１５、０．１４、０．１３、０．１２、０．１１、０．１、０．０９、０．０８、０．０７、０．０６、０．０５、０．０４、０．０３、０．０２、０．０１、０．０２、０．０１９、０．０１８、０．０１７、０．０１６、０．０１５、０．０１４、０．０１３、０．０１２、０．０１１、０．０１、０．００９、０．００８、０．００７、０．００６、０．００５、０．００４、０．００３、０．００２、０．００１、および０．００１μＭ。ある特定の実施形態では、清澄化は、大きな残渣を除去するために２．０μＭの孔径を有するフィルターで濾過すること、それに続いてインタクトな細胞を除去するために０．４５μＭの孔径を有するフィルターを通過させることを含んでいてもよい。
【０３３８】
フィルター材料は、様々な材料で構成されていてもよい。そのような材料としては、ポリマー材料および金属材料（例えば、焼結金属および有孔アルミニウム）を挙げることができるが、それらに限定されない。例示的な材料としては、ナイロン、セルロース材料（例えば、酢酸セルロース）、ポリフッ化ビニリデン（ＰＶＤＦ）、ポリエーテルスルホン、ポリアミド、ポリスルホン、ポリプロピレン、およびポリエチレンテレフタレートを挙げることができるが、これらに限定されない。ある特定の実施形態では、細胞溶解物の清澄化に有用なフィルターとしては、ＵＬＴＩＰＬＥＡＴ  ＰＲＯＦＩＬＥ（商標）フィルター（ポールコーポレーション社（Ｐａｌｌ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）［米国ニューヨーク州ポートワシントン（Ｐｏｒｔ  Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ）所在］）、ＳＵＰＯＲ（商標）膜フィルター（ポールコーポレーション社（Ｐａｌｌ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）［米国ニューヨーク州ポートワシントン（Ｐｏｒｔ  Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ）所在］を挙げることができるが、これらに限定されない。
【０３３９】
ある特定の実施形態では、フロー濾過を実行して、濾過速度および／または有効性を増加させることができる。ある特定の実施形態では、フロー濾過は、真空濾過を含んでいてもよい。そのような方法によると、濾過しようとする細胞溶解物の側と反対側のフィルターの側に真空が作出される。ある特定の実施形態では、細胞溶解物を遠心力によりフィルターに通してもよい。ある特定の実施形態では、ポンプを使用して、細胞溶解物を強制的に清澄化フィルターに通す。１つまたは複数のフィルターを通る細胞溶解物の流速は、チャネルサイズおよび／または流体圧力の一方を調整することにより調節することができる。
【０３４０】
清澄化および精製：クロマトグラフィー
ある特定の実施形態では、製剤中のＡＡＶ粒子は、１つまたは複数の異なるクロマトグラフィー法を使用する１つまたは複数のクロマトグラフィー工程により、細胞溶解物から清澄化および精製することができる。クロマトグラフィーは、混合物から１つまたは複数の要素を選択的に分離するための当技術分野で公知の任意の数の方法を指す。そのような方法としては、イオン交換クロマトグラフィー（例えば、陽イオン交換クロマトグラフィーおよび陰イオン交換クロマトグラフィー）、親和性クロマトグラフィー（例えば、免疫親和性クロマトグラフィー、金属親和性クロマトグラフィー、Ｂｌｕｅ  Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ樹脂などの疑似親和性クロマトグラフィー）、疎水性相互作用クロマトグラフィー、サイズ除外クロマトグラフィー、およびマルチモーダルクロマトグラフィー（固定相と分析物との間の１つよりも多くの形態の相互作用を利用するクロマトグラフィー法）が挙げられるが、これらに限定されない。ある特定の実施形態では、ウイルスクロマトグラフィーの方法または系としては、その各々の内容をその全体で本願明細書に援用する以下の文献に教示されているもののいずれかを挙げることができる：米国特許第５，７５６，２８３号明細書、米国特許第６，２５８，５９５号明細書、米国特許第６，２６１，５５１号明細書、米国特許第６，２７０，９９６号明細書、米国特許第６，２８１，０１０号明細書、米国特許第６，３６５，３９４号明細書、米国特許第６，４７５，７６９号明細書、米国特許第６，４８２，６３４号明細書、米国特許第６，４８５，９６６号明細書、米国特許第６，９４３，０１９号明細書、米国特許第６，９５３，６９０号明細書、米国特許第７，０２２，５１９号明細書、米国特許第７，２３８，５２６号明細書、米国特許第７，２９１，４９８号明細書、および米国特許第７，４９１，５０８号明細書、または国際公開第１９９６０３９５３０号パンフレット、国際公開第１９９８０１００８８号パンフレット、国際公開第１９９９０１４３５４号パンフレット、国際公開第１９９９０１５６８５号パンフレット、国際公開第１９９９０４７６９１号パンフレット、国際公開第２００００５５３４２号パンフレット、国際公開第２００００７５３５３号パンフレット、および国際公開第２００１０２３５９７号パンフレット。
【０３４１】
本開示のクロマトグラフィー系を、本開示のＡＡＶ医薬用処理および保管製剤を含む当業者に公知の製剤で、事前にすすぎ、充填し、平衡化し、洗い流し、処理し、溶出し、洗浄し、または浄化してもよい。
【０３４２】
ある特定の実施形態では、１つまたは複数のイオン交換（ＩＥＸ）クロマトグラフィー工程を使用して、ウイルス粒子を単離してもよい。イオン交換工程は、陰イオン交換（ＡＥＸ）クロマトグラフィー、陽イオン交換（ＣＥＸ）クロマトグラフィー、またはそれらの組合せを含んでいてもよい。ある特定の実施形態では、イオン交換クロマトグラフィーは、結合／溶出モードで使用される。結合／溶出ＩＥＸは、ウイルス粒子のカプシドタンパク質（または他の荷電成分）と固定相に存在する荷電部位との間の電荷間相互作用に基づいて、ウイルス粒子を固定相に結合させることにより使用することができる。このプロセスは、ウイルス調製物（例えば、清澄化溶解物）が通過するカラムの使用を含んでいてもよい。ウイルス調製物を荷電固定相（例えば、カラム）にアプライした後、溶出溶液をアプライして電荷間相互作用を破壊することにより、結合したウイルス粒子を固定相から溶出させることができる。溶出溶液は、結合したウイルス粒子の回収が増強されるように塩濃度および／またはｐＨを調整することにより最適化することができる。単離されるウイルスカプシドの電荷に応じて、陽イオンまたは陰イオン交換クロマトグラフィー法を選択することができる。ある特定の実施形態では、イオン交換クロマトグラフィーは、フロースルーモードで使用される。フロースルーＩＥＸは、非ウイルス不純物または不要なウイルス粒子を固定相に結合させ（電荷間相互作用に基づき）、ウイルス調製物中の標的ウイルス粒子がＩＥＸ系を「フロースルー」して収集プールに至ることを可能にすることにより使用することができる。
【０３４３】
イオン交換クロマトグラフィーの方法または系としては、その各々の内容をその全体で本願明細書に援用する以下の文献に教示されるもののいずれかを挙げることができるが、それらに限定されない：米国特許第７，４１９，８１７号明細書、米国特許第６，１４３，５４８号明細書、米国特許第７，０９４，６０４号明細書、米国特許第６，５９３，１２３号明細書、米国特許第７，０１５，０２６号明細書、および米国特許第８，１３７，９４８号明細書。ある特定の実施形態では、ＩＥＸプロセスには、Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ  ＳａｒｔｏｂｉｎｄＱ膜、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ  Ｆｒａｃｔｏｇｅｌ  ＴＭＡＥ  ＨｉＣａｐ（ｍ）フロースルー膜、ＧＥ  Ｑ  Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ  ＨＰ膜、Ｐｏｒｏｓ  ＸＱ、またはＰｏｒｏｓ  ＨＱなどのＡＥＸクロマトグラフィー系が使用される。ある特定の実施形態では、ＩＥＸプロセスには、Ｐｏｒｏｓ  ＸＳ膜などのＣＥＸ系が使用される。ある特定の実施形態では、ＡＥＸ系は、トリメチルアンモニウムエチル（ＴＭＡＥ）官能基を含む固定相を含む。
【０３４４】
ある特定の実施形態では、免疫親和性クロマトグラフィーなどの１つまたは複数の親和性クロマトグラフィー工程を使用して、ウイルス粒子を単離することができる。免疫親和性クロマトグラフィーは、１つまたは複数の免疫化合物（例えば、抗体または抗体関連構造）を利用してウイルス粒子を保持するクロマトグラフィーの形態である。免疫化合物は、これらに限定されないが、１つまたは複数のウイルスコートタンパク質を含む、ウイルス粒子表面上の１つまたは複数の構造と特異的に結合することができる。ある特定の実施形態では、免疫化合物は、特定のウイルスバリアントに対して特異的であってもよい。ある特定の実施形態では、免疫化合物は、複数のウイルスバリアントに結合してもよい。ある特定の実施形態では、免疫化合物は、組換え単鎖抗体を含んでもよい。そのような組換え単鎖抗体としては、その内容をその全体で本願明細書に援用する、スミス，Ｒ．Ｈ．ら（Ｓｍｉｔｈ，Ｒ．Ｈ．ｅｔ  ａｌ．），２００９．Ｍｏｌ．Ｔｈｅｒ．１７（１１）：１８８８−９６に記載されているものを挙げることができる。そのような免疫化合物は、これらに限定されないが、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ６、およびＡＡＶ８、または本明細書に教示されているもののいずれかを含む、幾つかのＡＡＶカプシドバリアントに結合することが可能である。ある特定の実施形態では、ＡＦＣプロセスには、ＧＥ  ＡＶＢセファロースＨＰカラム樹脂、Ｐｏｒｏｓ  ＣａｐｔｅｒＳｅｃｌｅ  ＡＡＶ８樹脂（サーモフィッシャー社（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ））、Ｐｏｒｏｓ  ＣａｐｔｅｒｃｅＳｅｌｃｅ  ＡＡＶ９樹脂（サーモフィッシャー社（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ））、およびＰｏｒｏｓ  ＣａｐｔｅｒｃｅＳｅｌｃｅ  ＡＡＶＸ樹脂（サーモフィッシャー社（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ））が使用される。
【０３４５】
ある特定の実施形態では、１つまたは複数のサイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）工程を使用して、ウイルス粒子を単離してもよい。ＳＥＣは、サイズにより粒子を分離するためのゲルの使用を含んでいてもよい。ウイルス粒子精製では、ＳＥＣ濾過は、「ポリッシング」と呼ばれることもある。ある特定の実施形態では、ＳＥＣを実行して、ほぼ均質な最終産物を生成することができる。そのような最終産物は、ある特定の実施形態では、前臨床研究および／または臨床研究で使用することができる（その内容をその全体で本願明細書に援用する、コーチン，Ｒ．Ｍ．（Ｋｏｔｉｎ，Ｒ．Ｍ．）２０１１．Ｈｕｍａｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ．２０（１）：Ｒ２−Ｒ６）。ある特定の実施形態では、ＳＥＣは、その各々の内容をその全体で本願明細書に援用する以下の文献に教示されている方法のいずれかにより実行することができる：米国特許第６，１４３，５４８号明細書、米国特許第７，０１５，０２６号明細書、米国特許第８，４７６，４１８号明細書、米国特許第６，４１０，３００号明細書、米国特許第８，４７６，４１８号明細書、米国特許第７，４１９，８１７号明細書、米国特許第７，０９４，６０４号明細書、米国特許第６，５９３，１２３号明細書、および米国特許第８，１３７，９４８号明細書。
【０３４６】
ＩＩＩ．組成物および製剤
一般
遺伝子治療用薬物製品（ｒＡＡＶ粒子など）は、液体状態での安定性が限定的であり、低濃度でも大規模に凝集する傾向が高いため、組成物および製剤に組み込むことが困難である。遺伝子治療用薬物製品は、多くの場合、処置領域（ＣＮＳ組織を含む）に直接送達されるが、それには、賦形剤および製剤パラメーターが、組織機能、微小環境、および容積制限と適合することが必要とされる。
【０３４７】
本開示によると、ＡＡＶ粒子は、医薬組成物として調製されてもよく、または医薬組成物に含まれていてもよい。そのような組成物は、１つまたは複数の活性成分を必ず含み、ほとんどの場合で１つまたは複数の薬学的に許容される賦形剤を含むことが理解されるだろう。
【０３４８】
本開示による医薬組成物中の活性成分（例えば、ＡＡＶ粒子）、薬学的に許容される賦形剤、および／または任意の追加成分の相対量は、処置されている対象の出自、サイズ、および／または状態に応じて、さらには組成物が投与されることになる経路に応じて様々であってもよい。例えば、組成物は、０．１％〜９９％（ｗ／ｗ）の活性成分を含んでいてもよい。例として、組成物は、０．１％〜１００％、例えば、０．５〜５０％、１〜３０％、５〜８０％、または少なくとも８０％（ｗ／ｗ）の活性成分を含んでいてもよい。
【０３４９】
ある特定の実施形態では、本明細書に記載のＡＡＶ粒子医薬組成物は、本開示の少なくとも１つのペイロードを含んでいてもよい。非限定的な例として、医薬組成物は、１、２、３、４、または５つのペイロードを有するＡＡＶ粒子を含有してもよい。
【０３５０】
本明細書で提供される医薬組成物の記載は、主にヒトへの投与に適切な医薬組成物を対象とするが、当業者であれば、そのような組成物が、一般に任意の他の動物、例えば非ヒト動物、例えば非ヒト哺乳動物への投与に適切であることを理解するであろう。組成物を種々の動物への投与に対して適切にするための、ヒト投与に適切な医薬組成物の改変は十分に理解されており、獣医薬理学の当業者であれば、たとえあったにしても単なる通常の実験作業で、そのような改変を設計および／または実施することができる。医薬組成物の投与が企図される対象としては、ヒトおよび／または他の霊長類；ウシ、ブタ、ウマ、ヒツジ、ネコ、イヌ、マウス、ラットなど、商業的に関連性のある哺乳動物を含む哺乳動物；家禽、ニワトリ、アヒル、ガチョウ、および／またはシチメンチョウなど商業的に関連性のあるトリを含む鳥類が挙げられるが、それらに限定されない。
【０３５１】
ある特定の実施形態では、組成物は、ヒト、ヒト患者、または対象に投与される。
本開示の製剤は、限定ではないが、生理食塩水、リポソーム、脂質ナノ粒子、ポリマー、ペプチド、タンパク質、ＡＡＶ粒子をトランスフェクトした細胞（例えば、対象へと移送または移植するための）、およびそれらの組合せを含んでいてもよい。
【０３５２】
本明細書に記載の医薬組成物の製剤は、薬理学の技術分野にて公知のまたは今後開発される任意の方法により調製されてもよい。本明細書で使用される場合、「医薬組成物」という用語は、少なくとも１つの活性成分および任意選択で１つまたは複数の薬学的に許容される賦形剤を含む組成物を指す。
【０３５３】
一般に、そのような調製方法は、活性成分を、賦形剤および／または１つもしくは複数の他の補助成分と付随させる工程を含む。本明細書で使用される場合、「活性成分」という語句は、一般に、本開示のポリヌクレオチドもしくはポリペプチドをコードするペイロード領域を保有するＡＡＶ粒子、または本明細書に記載の通りのＡＡＶ粒子のウイルスゲノムによりコードされる最終産物のいずれかを指す。
【０３５４】
一部の実施形態では、製剤は、少なくとも１つの不活性成分を含んでいてもよい。本明細書で使用される場合、「非活性成分」という用語は、製剤中に含まれる１つまたは複数の非活性作用剤を指す。一部の実施形態では、本開示の製剤に使用することができる非活性成分は、すべてが米国食品医薬品局（ＦＤＡ）により承認されていてもよく、いずれも承認されていなくともよく、または一部が承認されていてもよい。
【０３５５】
本明細書に記載のＡＡＶ粒子および医薬組成物の製剤は、薬理学の技術分野にて公知のまたは今後開発される任意の方法により調製されてもよい。一般に、そのような調製方法は、活性成分を、賦形剤および／または１つもしくは複数の他の補助成分と付随させる工程、および次いで、必要に応じておよび／または望ましい場合には、製品を所望の単回または複数回用量単位に分割、成形、および／または包装する工程を含む。
【０３５６】
本開示による医薬組成物は、バルクで、単回単位用量として、および／または複数の単回単位用量として、調製、包装、および／または販売することができる。本明細書で使用される場合、「単位用量」は、所定量の活性成分を含む医薬組成物の個別の量を指す。活性成分の量は、一般に、対象に投与されることになる活性成分の投薬量に等しく、および／またはそのような投薬量のしかるべき割合、例えば、そのような投薬量の２分の１または３分の１である。
【０３５７】
ある特定の実施形態では、本開示の製剤は、水性製剤（つまり、水を含む製剤）である。ある特定の実施形態では、本開示の製剤は、水、消毒された水、または注射用水（ＷＦＩ）を含む。
【０３５８】
ある特定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子は、０．００１％〜０．１％（ｗ／ｖ）ポロキサマー１８８（例えばＰｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ−６８）を有するｐＨが約７．０のＰＢＳで製剤化されていてもよい。
【０３５９】
ある特定の実施形態では、本明細書に記載のＡＡＶ製剤は、少なくとも１つの発現機能性ペイロードの発現に十分なＡＡＶ粒子を含有することができる。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、１、２、３、４、または５つの機能性ペイロードをコードするウイルスゲノムを含有することができる。
【０３６０】
本開示によると、ＡＡＶ粒子は、ＣＮＳ送達用に製剤化することができる。脳血液関門を越える作用剤を使用することができる。例えば、分子を脳血液関門内皮へと標的化することができるある細胞透過性ペプチドを製剤に使用することができる（例えば、その内容をその全体で本願明細書に援用する、マスウパラ（Ｍａｔｈｕｐａｌａ），Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ  Ｔｈｅｒ  Ｐａｔ．，２００９，１９，１３７−１４０）。
【０３６１】
ある特定の実施形態では、本明細書に記載のＡＡＶ製剤は、リン酸塩、トリス、および／またはヒスチジンを含む緩衝系を含んでいてもよい。リン酸塩、トリス、および／またはヒスチジンの緩衝剤は、独立して、２〜１２ｍＭの範囲で製剤に使用することができる。
【０３６２】
本開示の製剤は、本開示のＡＡＶ粒子およびウイルスベクターを産生、処理、調製、保管、拡大増殖、または投与するいずれの工程でも使用することができる。ある特定の実施形態では、医薬製剤および成分は、本開示のＡＡＶ産生系、ＡＡＶ処理系、ＡＡＶ清澄化系、ＡＡＶ精製系、およびＡＡＶ仕上げ系において使用することができ、これらはすべて、本開示のＡＡＶ医薬製剤、処理製剤、および保管製剤を含む当業者に公知の製剤で、事前にすすぎ、充填し、平衡化し、洗い流し、処理し、溶出し、洗浄し、または浄化することができる。
【０３６３】
賦形剤および希釈剤
本開示のＡＡＶ粒子は、（１）安定性を増加させるための、（２）細胞トランスフェクションまたは形質導入を増加させるための、（３）ペイロードの持続放出または遅延放出を可能にするための、（４）生体内分布を変更するための（例えば、ウイルス粒子を、特定の組織または細胞タイプへと標的化するための）、（５）コード化タンパク質の翻訳を増加させるための、（６）コード化タンパク質の放出プロファイルを変更するための、および／または（７）本開示のペイロードの制御可能な発現を可能にするための１つまたは複数の賦形剤または希釈剤を含む医薬組成物へと製剤化することができる。
【０３６４】
本開示による医薬組成物中の活性成分（例えば、ＡＡＶ粒子）、薬学的に許容される賦形剤、および／または任意の追加成分の相対量は、処置されている対象の出自、サイズ、および／または状態に応じて、さらには組成物が投与されることになる経路に応じて様々であってもよい。ある特定の実施形態では、組成物は、０．００１％〜９９％（ｗ／ｗ）の活性成分を含んでいてもよい。例として、組成物は、０．００１％〜１００％、例えば、０．５〜５０％、１〜３０％、５〜８０％、または少なくとも８０％（ｗ／ｗ）の活性成分を含んでいてもよい。ある特定の実施形態では、組成物は、０．００１％〜９９％（ｗ／ｗ）の賦形剤および希釈剤を含んでいてもよい。例として、組成物は、０．００１％〜１００％、例えば、０．５〜５０％、１〜３０％、５〜８０％、または少なくとも８０％（ｗ／ｗ）の賦形剤および希釈剤を含んでいてもよい。
【０３６５】
ある特定の実施形態では、薬学的に許容される賦形剤は、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の純度であってもよい。ある特定の実施形態では、賦形剤は、ヒト使用および動物使用が承認されている。ある特定の実施形態では、賦形剤は、米国食品医薬品局により承認されていてもよい。ある特定の実施形態では、賦形剤は、医薬品等級であってもよい。ある特定の実施形態では、賦形剤は、米国薬局方（ＵＳＰ）、欧州薬局方（ＥＰ）、英国薬局方、および／または国際薬局方の規格を満たしていてもよい。
【０３６６】
賦形剤としては、本明細書で使用される場合、所望の特定の剤形に適するありとあらゆる溶媒、分散媒、希釈剤、または他の液体ビヒクル、分散または懸濁助剤、表面活性剤、等張剤、増粘または乳化剤、および保存剤などが挙げられるが、これらに限定されない。医薬組成物を製剤化するための種々の賦形剤および組成物を調製するための技法は当技術分野にて公知である（その全体で本願明細書に援用する、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，２１ｓｔ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ａ．Ｒ．ジェンナロ（Ａ．Ｒ．Ｇｅｎｎａｒｏ），リッピンコット，ウィリアムズ＆ウィルキンス社（Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｉｌｋｉｎｓ）［米国メリーランド州ボルチモア（Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ）所在］，２００６を参照されたい）。従来の賦形剤媒体の使用は、本開示の範囲内で企図することができるが、但し、任意の望ましくない生物学的効果を生み出すこと、またはその他の形で医薬組成物の任意の他の成分と有害な様式で相互作用することなどにより、任意の従来の賦形剤媒体が物質またはその誘導体と適合し得ない場合は除く。
【０３６７】
本開示の製剤に含まれていてもよい例示的な賦形剤および希釈剤としては、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、リン酸カルシウム、リン酸二カルシウム、硫酸カルシウム、リン酸水素カルシウム、リン酸ナトリウム  ラクトース、スクロース、セルロース、微結晶性セルロース、カオリン、マンニトール、ソルビトール、イノシトール、塩化ナトリウム、乾燥デンプン、コーンスターチ、粉末糖など、および／またはこれらの組合せが挙げられるが、それらに限定されない。
【０３６８】
本開示の製剤に含めることができる例示的な賦形剤および希釈剤としては、以下のものが挙げられるが、これらに限定されない：１，２，６−ヘキサントリオール；１，２−ジミリストイル−Ｓｎ−グリセロ−３−（ホスホ−Ｓ−（１−グリセロール））；１，２−ジミリストイル−Ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン；１，２−ジオレオイル−Ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン；１，２−ジパルミトイル−Ｓｎ−グリセロ−３−（ホスホ−Ｒａｃ−（１−グリセロール））；１，２−ジステアロイル−Ｓｎ−グリセロ−３−（ホスホ−Ｒａｃ−（１−グリセロール））；１，２−ジステアロイル−Ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン；１−Ｏ−トリルビグアニド；２−エチル−１，６−ヘキサンジオール；酢酸；氷酢酸；無水酢酸；アセトン；アセトン重亜硫酸ナトリウム；アセチル化ラノリンアルコール；アセチル化モノグリセリド；アセチルシステイン；ＤＬ−アセチルトリプトファン；アクリレートコポリマー；アクリル酸−アクリル酸イソオクチルコポリマー；アクリル接着剤７８８；活性炭；Ａｄｃｏｔｅ  ７２Ａ１０３；接着テープ；アジピン酸；Ａｅｒｏｔｅｘ樹脂３７３０；アラニン；凝集アルブミン；コロイド状アルブミン；ヒトアルブミン；アルコール；無水アルコール；変性アルコール；希釈アルコール；アルファデクス；アルギン酸；アルキルアンモニウムスルホン酸ベタイン；アルキルアリールスルホン酸ナトリウム；アラントイン；アリル．アルファ．−イオノン；アーモンド油；アルファ−テルピネオール；アルファ−トコフェロール；Ｄｌ−アルファ−トコフェロールアセテート；Ｄｌ−アルファ−トコフェロール；酢酸アルミニウム；アルミニウムクロルヒドロキシアラントイネート；水酸化アルミニウム；水和水酸化アルミニウム−スクロース；水酸化アルミニウムゲル；水酸化アルミニウムゲル  Ｆ５００；水酸化アルミニウムゲル  Ｆ５０００；モノステアリン酸アルミニウム；酸化アルミニウム；アルミニウムポリエステル；ケイ酸アルミニウム；オクテニルコハク酸デンプンアルミニウム；ステアリン酸アルミニウム；塩基性酢酸アルミニウム；無水硫酸アルミニウム；Ａｍｅｒｃｈｏｌ  Ｃ；Ａｍｅｒｃｈｏｌ  Ｃａｂ；アミノメチルプロパノール；アンモニア；アンモニア水；強アンモニア水；酢酸アンモニウム；水酸化アンモニウム；ラウリル硫酸アンモニウム；アンモニウムノノキシノール−４スルフェート；Ｃ−１２〜Ｃ−１５直鎖第一級アルコールエトキシレートのアンモニウム塩；硫酸アンモニウム；Ａｍｍｏｎｙｘ；Ａｍｐｈｏｔｅｒｉｃ−２；Ａｍｐｈｏｔｅｒｉｃ−９；アネトール；無水クエン酸；無水デキストロース；無水ラクトース；無水クエン酸三ナトリウム；アニス油；Ａｎｏｘｉｄ  Ｓｂｎ；泡止剤；アンチピリン；アパフルラン；杏仁油Ｐｅｇ−６エステル；Ａｑｕａｐｈｏｒ；アルギニン；Ａｒｌａｃｅｌ；アスコルビン酸；アスコルビン酸パルミテート；アスパラギン酸；ペルーバルサム；硫酸バリウム；みつろう；合成みつろう；ベヘネス−１０；ベントナイト；塩化ベンザルコニウム；ベンゼンスルホン酸；塩化ベンゼトニウム；臭化ベンゾドデシニウム；安息香酸；ベンジルアルコール；安息香酸ベンジル；塩化ベンジル；ベータデクス；ビバプシチド（Ｂｉｂａｐｃｉｔｉｄｅ）；塩基性没食子酸ビスマス；ホウ酸；ブロクリナト；ブタン；ブチルアルコール；ビニルメチルエーテルのブチルエステル／無水マレイン酸コポリマー（１２５０００Ｍｗ）；ステアリン酸ブチル；ブチル化ヒドロキシアニソール；ブチル化ヒドロキシトルエン；ブチレングリコール；ブチルパラベン；酪酸；Ｃ２０〜４０パレス−２４；カフェイン；カルシウム；炭酸カルシウム；塩化カルシウム；グルセプト酸カルシウム；水酸化カルシウム；乳酸カルシウム；カルコブトロール（Ｃａｌｃｏｂｕｔｒｏｌ）；カルジアミドナトリウム；カロキセト酸三ナトリウム（Ｃａｌｏｘｅｔａｔｅ  Ｔｒｉｓｏｄｉｕｍ）；カルテリドールカルシウム；カナダバルサム；カプリル酸／カプリン酸トリグリセリド；カプリル酸／カプリン酸／ステアリン酸トリグリセリド；カプタン；Ｃａｐｔｉｓｏｌ；カラメル；カルボマー１３４２；カルボマー１３８２；カルボマー９３４；カルボマー９３４ｐ；カルボマー９４０；カルボマー９４１；カルボマー９８０；カルボマー９８１；カルボマーホモポリマータイプＢ（架橋アリルペンタエリトリトール）；カルボマーホモポリマータイプＣ（架橋アリルペンタエリトリトール）；二酸化炭素；カルボキシビニルコポリマー；カルボキシメチルセルロース；カルボキシメチルセルロースナトリウム；カルボキシポリメチレン；カラギナン；カラギナン塩；ヒマシ油；ニオイヒバ油；セルロース；微結晶性セルロース；Ｃｅｒａｓｙｎｔ−Ｓｅ；セレシン；セテアレス−１２；セテアレス−１５；セテアレス−３０；セテアリルアルコール／セテアレス−２０；エチルヘキサン酸セテアリール；セテス−１０；セテス−２；セテス−２０；セテス−２３；セトステアリルアルコール；塩化セトリモニウム；セチルアルコール；セチルエステルワックス；パルミチン酸セチル；塩化セチルピリジウム；クロロブタノール；クロロブタノール半水和物；無水クロロブタノール；クロロクレゾール；クロロキシレノール；コレステロール；コレス；コレス−２４；シトレート；クエン酸；クエン酸一水和物；含水クエン酸；コカミドエーテルスルフェート；コカミンオキシド；ココベタイン；ココジエタノールアミド；ココモノエタノールアミド；カカオ脂；ココ−グリセリド；ヤシ油；水添ヤシ油；水添ヤシ油／パーム核油グリセリド；カプリロカプリン酸ココイル；コーラニチダ（Ｃｏｌａ  ｎｉｔｉｄａ）種子抽出物；コラーゲン；着色料懸濁物；トウモロコシ油；綿実油；クリーム基剤；クレアチン；クレアチニン；クレゾール；クロスカルメロースナトリウム；クロスポビドン；硫酸銅；無水硫酸銅；シクロメチコーン；シクロメチコーン／ジメチコーンコポリオール；システイン；塩酸システイン；無水塩酸システイン；Ｄｌ−システイン；Ｄ＆ＣレッドＮｏ．２８；Ｄ＆ＣレッドＮｏ．３３；Ｄ＆ＣレッドＮｏ．３６；Ｄ＆ＣレッドＮｏ．３９；Ｄ＆ＣイエローＮｏ．１０；ダルファムプリジン；Ｄａｕｂｅｒｔ  １−５  Ｐｅｓｔｒ（Ｍａｔｔｅ）１６４ｚ；デシルメチルスルホキシド；ＤｅｈｙｄａｇワックスＳｘ；デヒドロ酢酸；Ｄｅｈｙｍｕｌｓ  Ｅ；安息香酸デナトニウム；デオキシコール酸；デキストラン；デキストラン４０；デキス��リン；デキストロース；デキストロース一水和物；デキストロース溶液；ジアトリゾ酸；ジアゾリジニル尿素；ジクロロベンジルアルコール；ジクロロジフルオロメタン；ジクロロテトラフルオロエタン；ジエタノールアミン；ピロ炭酸ジエチル；セバシン酸ジエチル；ジエチレングリコールモノエチルエーテル；フタル酸ジエチルヘキシル；アミノ酢酸ジヒドキシアルミニウム；ジイソプロパノールアミン；アジピン酸ジイソプロピル；ジリノール酸ジイソプロピル；ジメチコーン３５０；ジメチコーンコポリオール；ジメチコーンＭｄｘ４−４２１０；ジメチコーン医療用流体３６０；ジメチルイソソルビド；ジメチルスルホキシド；メタクリル酸ジメチルアミノエチル−メタクリル酸ブチル−メタクリル酸メチルコポリマー；ジメチルジオクタデシルアンモニウムベントナイト；ジメチルシロキサン／ジメチルビニルシロキサンコポリマー；ジノセブアンモニウム塩；Ｄｌ−ジパルミトイルホスファチジルグリセロール；ジプロピレングリコール；ココアンホ二酢酸二ナトリウム；ラウレススルホコハク酸二ナトリウム；ラウリルスルホコハク酸二ナトリウム；スルホサリチル酸二ナトリウム；ジソフェニン；ジビニルベンゼンスチレンコポリマー；Ｄｍｄｍヒダントイン；ドコサノール；ドキュセートナトリウム；Ｄｕｒｏ−Ｔａｋ２８０−２５１６；Ｄｕｒｏ−Ｔａｋ３８７−２５１６；Ｄｕｒｏ−Ｔａｋ８０−１１９６；Ｄｕｒｏ−Ｔａｋ８７−２０７０；Ｄｕｒｏ−Ｔａｋ８７−２１９４；Ｄｕｒｏ−Ｔａｋ８７−２２８７；Ｄｕｒｏ−Ｔａｋ８７−２２９６；Ｄｕｒｏ−Ｔａｋ８７−２８８８；Ｄｕｒｏ−Ｔａｋ８７−２９７９；エデト酸カルシウム二ナトリウム；エデト酸二ナトリウム；無水エデト酸二ナトリウム；エデト酸ナトリウム；エデト酸；卵リン脂質；エンツホン；エンツホンナトリウム；エピラクトース；エピテトラサイクリン塩酸塩；Ｅｓｓｅｎｃｅ  Ｂｏｕｑｕｅｔ９２００；エタノールアミン塩酸塩；酢酸エチル；オレイン酸エチル；エチルセルロース；エチレングリコール；エチレン酢酸ビニルコポリマー；エチレンジアミン；エチレンジアミン二塩酸塩；エチレン−プロピレンコポリマー；エチレン−酢酸ビニルコポリマー（２８％酢酸ビニル）；エチレン−酢酸ビニルコポリマー（９％酢酸ビニル）；ヒドロキシステアリン酸エチルヘキシル；エチルパラベン；オイカリプトール；エキサメタジム；食用脂肪；硬質脂肪；脂肪酸エステル；脂肪酸ペンタエリトリオールエステル；脂肪酸；脂肪アルコールシトレート；脂肪アルコール；Ｆｄ＆ＣブルーＮｏ．１；Ｆｄ＆ＣグリーンＮｏ．３；Ｆｄ＆ＣレッドＮｏ．４；Ｆｄ＆ＣレッドＮｏ．４０；Ｆｄ＆ＣイエローＮｏ．１０（リストから除外）；Ｆｄ＆ＣイエローＮｏ．５；Ｆｄ＆ＣイエローＮｏ．６；塩化第二鉄；酸化第二鉄；香味料８９−１８６；香味料８９−２５９；香味料Ｄｆ−１１９；香味料Ｄｆ−１５３０；香味増強剤；いちじく香味料８２７１１８；ラズベリー香味料Ｐｆｃ−８４０７；香味料Ｒｈｏｄｉａ医薬品Ｎｏ．Ｒｆ  ４５１；フルオロクロロ炭化水素；ホルムアルデヒド；ホルムアルデヒド溶液；分留ヤシ油；芳香剤３９４９−５；芳香剤５２０ａ；芳香剤６．００７；芳香剤９１−１２２；芳香剤９１２８−���；芳香剤９３４９８ｇ；芳香剤バルサムマツ（Ｂａｌｓａｍ  Ｐｉｎｅ）Ｎｏ．５１２４；芳香剤Ｂｏｕｑｕｅｔ  １０３２８；芳香剤Ｃｈｅｍｏｄｅｒｍ  ６４０１−Ｂ；芳香剤Ｃｈｅｍｏｄｅｒｍ  ６４１１；芳香剤Ｃｒｅａｍ  Ｎｏ．７３４５７；芳香剤Ｃｓ−２８１９７；芳香剤Ｆｅｌｔｏｎ  ０６６ｍ；芳香剤Ｆｉｒｍｅｎｉｃｈ  ４７３７３；芳香剤Ｇｉｖａｕｄａｎ  Ｅｓｓ  ９０９０／１ｃ；芳香剤Ｈ−６５４０；芳香剤Ｈｅｒｂａｌ  １０３９６；芳香剤Ｎｊ−１０８５；芳香剤Ｐ  Ｏ  Ｆｌ−１４７；芳香剤Ｐａ  ５２８０５；芳香剤Ｐｅｒａ  Ｄｅｒｍ  Ｄ；芳香剤Ｒｂｄ−９８１９；芳香剤  Ｓｈａｗ  Ｍｕｄｇｅ  Ｕ−７７７６；芳香剤Ｔｆ０４４０７８；芳香剤Ｕｎｇｅｒｅｒ  Ｈｏｎｅｙｓｕｃｋｌｅ  Ｋ  ２７７１；芳香剤Ｕｎｇｅｒｅｒ  Ｎ５１９５；フルクトース；酸化ガドリニウム；ガラクトース；ガンマシクロデキストリン；ゼラチン；架橋ゼラチン；ゲルフォームスポンジ；ジェランガム（低アシル）；Ｇｅｌｖａ  ７３７；ゲンチシン酸；ゲンチシン酸エタノールアミド；グルセプテートナトリウム；グルセプテートナトリウム二水和物；グルコノラクトン；グルクロン酸；Ｄｌ−グルタミン酸；グルタチオン；グリセリン；水素化ロジンのグリセロールエステル；クエン酸グリセリル；イソステアリン酸グリセリル；ラウリン酸グリセリル；モノステアリン酸グリセリル；オレイン酸グリセリル；オレイン酸グリセリル／プロピレングリコール；パルミチン酸グリセリル；リシノール酸グリセリル；ステアリン酸グリセリル；ステアリン酸グリセリル−ラウレス−２３；ステアリン酸グリセリル／Ｐｅｇステアレート；ステアリン酸グリセリル／Ｐｅｇ−１００ステアレート；ステアリン酸グリセリル／Ｐｅｇ−４０ステアレート；ステアリン酸グリセリル−ステアルアミドエチルジエチルアミン；トリオレイン酸グリセリル；グリシン；グリシン塩酸塩；ジステアリン酸グリコール；ステアリン酸グリコール；グアニジン塩酸塩；グアーガム；ヘアコンディショナー（１８ｎ１９５−１ｍ）；ヘプタン；ヘタスターチ；エチレングリコール；高密度ポリエチレン；ヒスチジン；ヒトアルブミンマイクロスフェア；ヒアルロン酸ナトリウム；炭化水素；可塑化炭化水素ゲル；塩酸；希塩酸；ヒドロコルチゾン；ヒドロゲルポリマー；過酸化水素；水添ヒマシ油；水添パーム油；水添パーム／パーム核油Ｐｅｇ−６エス
テル；水添ポリブテン６３５−６９０；水酸化物イオン；ヒドロキシエチルセルロース；ヒドロキシエチルピペラジンエタンスルホン酸；ヒドロキシメチルセルロース；ヒドロキシステアリン酸ヒドロキシオクタコサニル；ヒドロキシプロピルセルロース；ヒドロキシプロピルメチルセルロース２９０６；ヒドロキシプロピル−ベータ−シクロデキストリン；ヒプロメロース２２０８（１５０００Ｍｐａ．Ｓ）；ヒプロメロース２９１０（１５０００Ｍｐａ．Ｓ）；ヒプロメロース；イミド尿素；ヨウ素；ヨードキサム酸；イオフェタミン塩酸塩；アイリッシュモス抽出物；イソブタン；イソセテス−２０；イソロイシン；アクリル酸イソオクチル；イソプロピルアルコール；イソステアリン酸イソプロピル；ミリスチン酸イソプロピル；ミリスチン酸イソプロピル−ミリスチルアルコール；ミリスチン酸イソプロピル；ステアリン酸イソプロピル；イソステアリン酸；イソステアリルアルコール；等張性塩化ナトリウム溶液；Ｊｅｌｅｎｅ；カオリン；カトンＣｇ；カトンＣｇ  ＩＩ；ラクテート；乳酸；Ｄｌ−乳酸；Ｌ−乳酸；ラクトビオン酸；ラクトース；ラクトース一水和物；含水ラクトース；ラネス；ラノリン；ラノリンアルコール−鉱油；ラノリンアルコール；無水ラノリン；ラノリンコレステロール；ラノリン非イオン性誘導体；エトキシル化ラノリン；水添ラノリン；塩化ラウラルコニウム；酸化ラウラミン；ラウルジモニウム加水分解動物コラーゲン；ラウレス硫酸塩；ラウレス−２；ラウレス−２３；ラウレス−４；ラウリン酸ジエタノールアミド；ラウリン酸ミリスチン酸ジエタノールアミド；ラウロイルサルコシン；乳酸ラウリル；硫酸ラウリル；ラベンデュラ・アングスチホリア（Ｌａｖａｎｄｕｌａ  Ａｎｇｕｓｔｉｆｏｌｉａ）花頂部；レシチン；無漂白レシチン；卵レシチン；水添レシチン；水添大豆レシチン；大豆レシチン；レモン油；ロイシン；レブリン酸；リドフェニン；軽油；軽油（８５Ｓｓｕ）；（＋／−）−リモネン；リポコールＳｃ−１５；リシン；酢酸リシン；リシン一水和物；ケイ酸アルミニウムマグネシウム；ケイ酸アルミニウムマグネシウム水和物；塩化マグネシウム硝酸マグネシウム；ステアリン酸マグネシウム；マレイン酸；マンニトール；Ｍａｐｒｏｆｉｘ；メブロフェニン；医療用接着剤改変型Ｓ−１５；医療用泡止剤Ａ−Ｆエマルジョン；メドロン酸二ナトリウム；メドロン酸；メグルミン；メントール；メタクレゾール；メタリン酸；メタンスルホン酸；メチオニン；メチルアルコール；メチルグルセス−１０；メチルグルセス−２０；セスキステアリン酸メチルグルセス−２０；セスキステアリン酸メチルグルコース；ラウリン酸メチル；メチルピロリドン；サリチル酸メチル；ステアリン酸メチル；メチルボロン酸；メチルセルロース（４０００Ｍｐａ．Ｓ）；メチルセルロース；メチルクロロイソチアゾリノン；メチレンブルー；メチルイソチアゾリノン；メチルパラベン；微結晶性ワックス；鉱油；モノおよびジグリセリド；クエン酸モノステアリル；モノチオグリセロール；マルチステロール抽出物；ミリスチルアルコール；乳酸ミリスチル；ミリスチル−．ガンマ．−ピコリニウムクロリド；Ｎ−（カルバモイル−メトキシＰｅｇ−４０）−１，２��ジステアロイル−ケファリンナトリウム；Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド；ナイアシンアミド；ニオキシム；硝酸；窒素；ノノキシノールヨウ素；ノノキシノール−１５；ノノキシノール−９；ノルフルラン；オートミール；オクタデセン−１／マレイン酸コポリマー；オクタン酸；オクチサレート；オクトキシノール−１；オクトキシノール−４０；オクトキシノール−９；オクチルドデカノール；オクチルフェノールポリメチレン；オレイン酸；オレス−１０／オレス−５；オレス−２；オレス−２０；オレイルアルコール；オレイン酸オレイル；オリーブ油；オキシドロン酸二ナトリウム；オキシキノリン；パーム核油；パルミタミンオキシド；パラベン；パラフィン；白色軟質パラフィン；香料Ｃｒｅｍｅ４５／３；ピーナッツ油；精製ピーナッツ油；ペクチン；Ｐｅｇ６−３２ステアレート／ステアリン酸グリコール；Ｐｅｇ植物油；Ｐｅｇ−１００ステアレート；Ｐｅｇ−１２ラウリン酸グリセリル；Ｐｅｇ−１２０ステアリン酸グリセリル；Ｐｅｇ−１２０ジオレイン酸メチルグルコース；Ｐｅｇ−１５コカミン；Ｐｅｇ−１５０ジステアレート；Ｐｅｇ−２ステアレート；Ｐｅｇ−２０イソステアリン酸ソルビタン；Ｐｅｇ−２２メチルエーテル／ドデシルグリコールコポリマー；Ｐｅｇ−２５ステアリン酸プロピレングリコール；Ｐｅｇ−４ジラウレート；Ｐｅｇ−４ラウレート；Ｐｅｇ−４０ヒマシ油；Ｐｅｇ−２０ジイソステアリン酸ソルビタン；Ｐｅｇ−４５／ドデシルグリコールコポリマー；Ｐｅｇ−５オレエート；Ｐｅｇ−５０ステアレート；Ｐｅｇ−５４水添ヒマシ油；Ｐｅｇ−６イソステアレート；Ｐｅｇ−６０ヒマシ油；Ｐｅｇ−６０水添ヒマシ油；Ｐｅｇ−７メチルエーテル；Ｐｅｇ−７５ラノリン；Ｐｅｇ−８ラウレートＰｅｇ−８ステアレートＰｅｇｏｘｏｌ７ステアレート；ペンタデカラクトン；ペンタエリトリトールココエート；ペンテト酸五ナトリウム；ペンテト酸カルシウム三ナトリウム；ペンテト酸；ハッカ油；ペルフルトレン；香料２５６７７；香料Ｂｏｕｑｕｅｔ；香料Ｅ−１９９１；香料Ｇｄ５６０４；香料Ｔａｎａ９０／４２Ｓｃｂａ；香料Ｗ−１９５２−１；ワセリン；白色ワセリン；石油蒸留物；フェノール；液化フェノール；Ｐｈｅｎｏｎｉｐ；フェノキシエタノール；フェニルアラニン；フェニルエチルアルコール；酢酸フェニル水銀；硝酸フェニル水銀；卵ホスファチジルグリセロール；リン脂質；卵リン脂質；ホスフォリポン９０ｇ；リン酸；松葉油（パイナス・シルヴェストリス（Ｐｉｎｕｓ  Ｓｙｌｖｅｓｔｒｉｓ））；ピペラジン六水和物；プラスチベース−５０ｗ；ポラクリリン；塩化ポリドロニウム；ポロキサマー１２４；ポロキサマー１８１；ポロキサマー１８２；ポロキサマー１８８；ポロキサマー２３７；ポロキサマー４０７；ポリ（ビス（Ｐ−カルボキシフェノキシ）プロパン無水物）：セバシン酸；ジメチルビニルまたはジメチルヒドロキシまたはトリメチル末端ブロック化ポリ（ジメチルシロキサン／メチルビニルシロキシ／メチル水素シロキサン）；ポリ（Ｄｌ−乳酸−Ｃｏ−グリコール酸）（５０：５０；エチルエステル末端化ポリ（Ｄｌ−乳酸−Ｃｏ−グリコール酸）（５０：５０；ポリアクリル酸（２５００００Ｍｗ）；ポリブテン（１４００Ｍｗ）；ポリカルボフィル；ポリエステル；ポリエステルポリアミンコポリマー；ポリエステルレーヨン；ポリエチレングリコール１０００；ポリエチレングリコール１４５０；ポリエチレングリコール１５００；ポリエチレングリコール１５４０；ポリエチレングリコール２００；ポリエチレングリコール３００；ポリエチレングリコール３００−１６００；ポリエチレングリコール３３５０；ポリエチレングリコール４００；ポリエチレングリコール４０００；ポリエチレングリコール５４０；ポリエチレングリコール６００；ポリエチレングリコール６０００；ポリエチレングリコール８０００；ポリエチレングリコール９００；酸化第二鉄ブラック含有高密度ポリエチレン（＜１％）；硫酸バリウム含有低密度ポリエチレン（２０〜２４％）；ポリエチレンＴ；テレフタル酸ポリエチレン；ポリグラクチン；ポリグルセリル−３オレエート；ポリグルセリル−４オレエート；メタクリル酸ポリヒドロキシエチル；ポリイソブチレン；ポリイソブチレン（１１０００００Ｍｗ）；ポリイソブチレン（３５０００Ｍｗ）；ポリイソブチレン１７８−２３６；ポリイソブチレン２４１−２９４；ポリイソブチレン３５−３９；低分子量ポリイソブチレン；中分子量ポリイソブチレン；ポリイソブチレン／ポリブテン接着剤；ポリラクチド；ポリオール；ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレン１８００；ポリオキシエチレンアルコール；ポリオキシエチレン脂肪酸エステル；ポリオキシエチレンプロピレン；ポリオキシル２０セトステアリルエーテル；ポリオキシル３５ヒマシ油；ポリオキシル４０水添ヒマシ油；ステアリン酸ポリオキシル４０；ステアリン酸ポリオキシル４００パルミトステアリン酸ポリオキシル６およびポリオキシル３２；ジステアリン酸ポリオキシル；ポリオキシルグリセリルステアレート；ポリオキシルラノリン；パルミチン酸ポリオキシル；ステアリン酸ポリオキシル；ポリプロピレン；ポリプロピレングリコール；ポリクオタニウム−１０；ポリクオタニウム−７（７０／３０アクリルアミド／Ｄａｄｍａｃ；ポリシロキサン；ポリソルベート２０；ポリソルベート４０；ポリソルベート６０；ポリソルベート６５；ポリソルベート８０；ポリウレタン；ポリ酢酸ビニル；ポリビニルアルコール；ポリ塩化ビニル；ポリ塩化ビニルポリ酢酸ビニルコポリマー；ポリビニルピリジン；ケシ油；カリ；酢酸カリウム；カリウムミョウバン；炭酸水素カリウム；亜硫酸水素カリウム；塩化カリウムクエン酸カリウム；水酸化カリウム；メタ重亜硫酸カリウム；リン酸水素二カリウム；リン酸二水素カリウム；カリウム石鹸；ソルビン酸カリウム；ポビドンアクリレートコポリマー；ポビドンヒドロゲル；ポビドンＫ１７；ポビドンＫ２５；ポビドンＫ２９／３２；ポビドンＫ３０；ポビドンＫ９０；ポビドンＫ９０ｆ；ポビドン／エイコサエンコポリマー；ポビドン；Ｐｐｇ−１２／Ｓｍｄｉコポリマー；Ｐｐｇ−１５ステアリルエーテル；Ｐｐｇ−２０メチルグルコースエーテルジステアレート；Ｐｐｇ−２６オレエート；プロダクトワット（Ｐｒｏｄｕｃｔ  Ｗａｔ）；プロリン；Ｐｒｏｍｕｌｇｅｎ  Ｄ；Ｐｒｏｍｕｌｇｅｎ  Ｇ；プロパン；噴霧剤Ａ−４６；没食子酸プロピル；炭酸プロピレン；プロピレングリコール；プロピレングリコールジアセテート；プロピレングリコールジカプリレート；プロピレングリコールモノラウレート；プロピレングリコールモノパルミトステアレート；プロピレングリコールパルミトステアレート；プロピレングリコールリシノレエート；プロピレングリコール／ジアゾリジニル；尿素／メチルパラベン／プロピルパルベン；プロピルパラベン；硫酸プロタミン；タンパク質加水分解物；Ｐｖｍ／Ｍａコポリマー；クアテルニウム−１５；シス型クアテルニウム−１５；クアテルニウム−５２；Ｒａ−２３９７；Ｒａ−３０１１；サッカリン；サッカリンナトリウム；無水サッカリンナトリウム；サフラワー油；Ｓｄアルコール３ａ；Ｓｄアルコール４０；Ｓｄアルコール４０−２；Ｓｄアルコール４０ｂ；Ｓｅｐｉｎｅｏ  Ｐ６００；セリン；ゴマ油；シアバター；Ｓｉｌａｓｔｉｃ商標医療等級チュービング；Ｓｉｌａｓｔｉｃ医療用接着剤シリコーンタイプＡ；歯科用シリカ；ケイ素；二酸化ケイ素；コロイド状二酸化ケイ素；シリコーン；シリコーン接着剤４１０２；シリコーン接着剤４５０２；シリコーン粘着剤Ｂｉｏ−Ｐｓａ  Ｑ７−４２０１；シリコーン粘着剤Ｂｉｏ−Ｐｓａ  Ｑ７−４３０１；シリコーンエマルジョン；シリコーン／ポリエステルフィルムストリップ；シメチコン；シメチコンエマルジョン；Ｓｉｐｏｎ  Ｌｓ  ２０ｎｐ；ソーダ灰；酢酸ナトリウム；無水酢酸ナトリウム；アルキル硫酸ナトリウム；アスコルビン酸ナトリウム；安息香酸ナトリウム；重炭酸ナトリウム；重硫酸ナトリウム；重亜硫酸ナトリウム；ホウ酸ナトリウム；ホウ酸ナトリウム十水和物；炭酸ナトリウム；炭酸ナトリウム十水和物；炭酸ナトリウム一水和物；セトステアリル硫酸ナトリウム；塩素酸ナトリウム；塩化ナトリウム；塩化ナトリウム注射剤；静菌性塩化ナトリウム注射剤；コレステリル硫酸ナトリウム；クエン酸ナトリウム；ココイルサルコシンナトリウム；デスオキシコール酸ナトリウム；亜ジチオン酸ナトリウム；ドデシルベンゼンスルホン酸ナトリウム；ホルムアルデヒドスルホキシル酸ナトリウム；グルコン酸ナトリウム；水酸化ナトリウム；次亜塩素酸ナトリウム；ヨウ化ナトリウム；乳酸ナトリウム；Ｌ−乳酸ナトリウム；ラウレス−２硫酸ナトリウム；ラウレス−３硫酸ナトリウムラウレス−５硫酸ナトリウムラウロイルサルコシンナトリウム；ラウリル硫酸ナトリウム；ラ
ウリルスルホ酢酸ナトリウム；メタ重亜硫酸ナトリウム；硝酸ナトリウム；リン酸ナトリウム；リン酸ナトリウム二水和物；リン酸水素ナトリウム；無水リン酸水素ナトリウム；リン酸水素ナトリウム二水和物；リン酸水素ナトリウム十二水和物；リン酸水素ナトリウム七水和物；リン酸二水素ナトリウム；無水リン酸二水素ナトリウム；リン酸二水素ナトリウム二水和物；リン酸二水素ナトリウム一水和物；ポリアクリル酸ナトリウム（２５０００００Ｍｗ）；ピロリン酸ナトリウム；ピロリドンカルボン酸ナトリウム；デンプングリコール酸ナトリウム；琥珀酸ナトリウム六水化物；硫酸ナトリウム；無水硫酸ナトリウム；硫酸ナトリウム十水和物；亜硫酸ナトリウム；スルホコハク酸ナトリウム化ウンデシレン酸モノアルキロールアミド（Ｓｏｄｉｕｍ  Ｓｕｌｆｏｓｕｃｃｉｎａｔｅｄ  Ｕｎｄｅｃｙｃｌｅｎｉｃ  Ｍｏｎｏａｌｋｙｌｏｌａｍｉｄｅ）；酒石酸ナトリウム；チオグリコール酸ナトリウム；チオリンゴ酸ナトリウム；チオ硫酸ナトリウム；無水チオ硫酸ナトリウム；トリメタリン酸ナトリウム；キシレンスルホン酸ナトリウム；Ｓｏｍａｙ４４；ソルビン酸；ソルビタン；イソステアリン酸ソルビタン；モノラウリン酸ソルビタン；モノオレイン酸ソルビタン；モノパルミチン酸ソルビタン；モノステアリン酸ソルビタン；セスキオレイン酸ソルビタン；トリオレイン酸ソルビタン；トリステアリン酸ソルビタン；ソルビトール；ソルビトール溶液；大豆粉；大豆油；スペアミント油；鯨ろう；スクアラン；安定化オキシクロロ錯体；２−エチルヘキサン酸第一スズ；塩化第一スズ；無水塩化第一スズ；フッ化第一スズ；酒石酸第一スズ；デンプン；アルファ化デンプン１５００；トウモロコシデンプン；塩化ステアラルコニウム；ステアラルコニウムヘクトライト／炭酸プロピレン；ステアルアミドエチルジエチルアミン；ステアレス−１０；ステアレス−１００；ステアレス−２；ステアレス−２０；ステアレス−２１；ステアレス−４０；ステアリン酸；ステアリン酸ジエタノールアミド；ステアロキシトリメチルシラン；ステアルトリモニウム加水分解動物コラーゲン；ステアリルアルコール；吸入用滅菌水；スチレン／イソプレン／スチレンブロックコポリマー；サクシマー；コハク酸；スクラロース；スクロース；ジステアリン酸スクロース；スクロースポリエステル；スルファセタミドナトリウム；スルホブチルエーテル．ベータ．−シクロデキストリン；二酸化硫黄；硫酸；亜硫酸；Ｓｕｒｆａｃｔｏｌ  Ｑ；Ｄ−タガトース；タルク；トール油；獣脂グリセリド；酒石酸；Ｄｌ−酒石酸；テノックス；テノックス−２；Ｔｅｒｔ−ブチルアルコール；Ｔｅｒｔ−ブチルヒドロペルオキシド；Ｔｅｒｔ−ブチルヒドロキノン；テトラキス（２−メトキシイソブチルイソシアニド）銅（Ｉ）テトラフルオロボレート；オルトケイ酸テトラプロピル；テトロホスミン；テオフィリン；チメロサール；トレオニン；チモール；スズ；二酸化チタン；トコフェロール；トコフェルソラン；完全非経口栄養剤、脂質エマルジョン；トリアセチン；トリカプリリン；トリクロロモノフルオロメタン；トリデセス−１０；ラウリル硫酸トリエタノールアミン；トリフルオロ酢酸；中鎖トリグリセリド；トリヒ���ロキシステアリン；トリラネス−４ホスフェート；トリラウレス−４ホスフェートクエン酸三ナトリウム二水和物；Ｈｅｄｔａ三ナトリウム；Ｔｒｉｔｏｎ７２０；Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−２００トロラミン；トロマンタジン；トロメタミン（ＴＲＩＳ）；トリプトファン；チロキサポール；チロシン；ウンデシレン酸；ユニオン７６  Ａｍｓｃｏ−Ｒｅｓ６０３８；尿素；バリン；植物油；水添植物油グリセリド；水添植物油；ベルセタミド；Ｖｉｓｃａｒｉｎ；ビスコース／コットン；ビタミンＥ；乳化ワックス；Ｗｅｃｏｂｅｅ  Ｆｓ；白色セレシンワックス；白ろう；キサンタンガム；亜鉛；酢酸亜鉛；炭酸亜鉛；塩化亜鉛；および酸化亜鉛。
【０３６９】
本明細書で開示されるＡＡＶ粒子の医薬製剤は、陽イオンまたは陰イオンを含んでいてもよい。ある特定の実施形態では、製剤は、これらに限定されないが、Ｚｎ２＋、Ｃａ２＋、Ｃｕ２＋、Ｍｎ２＋、Ｍｇ＋、およびこれらの組合せなどの、金属陽イオンを含む。非限定的な例として、製剤は、金属陽イオンとのポリマーおよび錯体を含んでいてもとい（例えば、その各々の内容をその全体で本願明細書に援用する米国特許第６，２６５，３８９号明細書および米国特許第６，５５５，５２５号明細書を参照されたい）。
【０３７０】
また、本開示の製剤は、１つまたは複数の薬学的に許容される塩を含んでいてもよい。本明細書で使用される場合、「薬学的に許容される塩」は、既存の酸部分または塩基部分をその塩形態へと変換することにより（例えば、遊離塩基基を適切な有機酸と反応させることにより）親化合物が修飾されている本開示の化合物の誘導体を指す。
【０３７１】
ある特定の実施形態では、医薬組成物の製剤化に使用することができる追加の賦形剤としては、塩化マグネシウム（ＭｇＣｌ２）、アルギニン、ソルビトール、および／またはトレハロースを挙げることができる。
【０３７２】
本開示の製剤は、ＡＡＶ粒子に加えて、少なくとも１つの賦形剤および／または希釈剤を含んでいてもよい。製剤は、ＡＡＶ粒子に加えて、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０種、または１０種よりも多くの賦形剤および／または希釈剤を含んでいてもよい。
【０３７３】
ある特定の実施形態では、製剤は、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）を含んでいてもよいが、これに限定されない。非限定的な例として、ＰＢＳは、塩化ナトリウム、塩化カリウム、リン酸二ナトリウム、リン酸一カリウム、および蒸留水を含んでいてもよい。一部の場合では、ＰＢＳは、カリウムもマグネシウムも含有しない。他の場合では、ＰＢＳは、カルシウムおよびマグネシウムを含有する。
【０３７４】
リン酸ナトリウム
ある特定の実施形態では、製剤中の成分の少なくとも１つは、リン酸ナトリウムである。製剤は、リン酸二水素ナトリウム、リン酸水素ナトリウム、またはリン酸二水素ナトリウムおよびリン酸水素ナトリウムの両方の組合せを含んでいてもよい。
【０３７５】
ある特定の実施形態では、製剤中のリン酸ナトリウムの濃度は、０．１ｍＭ、０．２ｍＭ、０．３ｍＭ、０．４ｍＭ、０．５ｍＭ、０．６ｍＭ、０．７ｍＭ、０．８ｍＭ、０．９ｍＭ、１ｍＭ、１．１ｍＭ、１．２ｍＭ、１．３ｍＭ、１．４ｍＭ、１．５ｍＭ、１．６ｍＭ、１．７ｍＭ、１．８ｍＭ、１．９ｍＭ、２ｍＭ、２．１ｍＭ、２．２ｍＭ、２．３ｍＭ、２．４ｍＭ、２．５ｍＭ、２．６ｍＭ、２．７ｍＭ、２．８ｍＭ、２．９ｍＭ、３ｍＭ、３．１ｍＭ、３．２ｍＭ、３．３ｍＭ、３．４ｍＭ、３．５ｍＭ、３．６ｍＭ、３．７ｍＭ、３．８ｍＭ、３．９ｍＭ、４ｍＭ、４．１ｍＭ、４．２ｍＭ、４．３ｍＭ、４．４ｍＭ、４．５ｍＭ、４．６ｍＭ、４．７ｍＭ、４．８ｍＭ、４．９ｍＭ、５ｍＭ、５．１ｍＭ、５．２ｍＭ、５．３ｍＭ、５．４ｍＭ、５．５ｍＭ、５．６ｍＭ、５．７ｍＭ、５．８ｍＭ、５．９ｍＭ、６ｍＭ、６．１ｍＭ、６．２ｍＭ、６．３ｍＭ、６．４ｍＭ、６．５ｍＭ、６．６ｍＭ、６．７ｍＭ、６．８ｍＭ、６．９ｍＭ、７ｍＭ、７．１ｍＭ、７．２ｍＭ、７．３ｍＭ、７．４ｍＭ、７．５ｍＭ、７．６ｍＭ、７．７ｍＭ、７．８ｍＭ、７．９ｍＭ、８ｍＭ、８．１ｍＭ、８．２ｍＭ、８．３ｍＭ、８．４ｍＭ、８．５ｍＭ、８．６ｍＭ、８．７ｍＭ、８．８ｍＭ、８．９ｍＭ、９ｍＭ、９．１ｍＭ、９．２ｍＭ、９．３ｍＭ、９．４ｍＭ、９．５ｍＭ、９．６ｍＭ、９．７ｍＭ、９．８ｍＭ、９．９ｍＭ、１０ｍＭ、１０．１ｍＭ、１０．２ｍＭ、１０．３ｍＭ、１０．４ｍＭ、１０．５ｍＭ、１０．６ｍＭ、１０．７ｍＭ、１０．８ｍＭ、１０．９ｍＭ、１１ｍＭ、１１．１ｍＭ、１１．２ｍＭ、１１．３ｍＭ、１１．４ｍＭ、１１．５ｍＭ、１１．６ｍＭ、１１．７ｍＭ、１１．８ｍＭ、１１．９ｍＭ、１２ｍＭ、１２．１ｍＭ、１２．２ｍＭ、１２．３ｍＭ、１２．４ｍＭ、１２．５ｍＭ、１２．６ｍＭ、１２．７ｍＭ、１２．８ｍＭ、１２．９ｍＭ、１３ｍＭ、１３．１ｍＭ、１３．２ｍＭ、１３．３ｍＭ、１３．４ｍＭ、１３．５ｍＭ、１３．６ｍＭ、１３．７ｍＭ、１３．８ｍＭ、１３．９ｍＭ、１４ｍＭ、１４．１ｍＭ、１４．２ｍＭ、１４．３ｍＭ、１４．４ｍＭ、１４．５ｍＭ、１４．６ｍＭ、１４．７ｍＭ、１４．８ｍＭ、１４．９ｍＭ、または１５ｍＭであってもよいが、これらに限定されない。
【０３７６】
製剤は、０〜０．５ｍＭ、０．１〜０．６ｍＭ、０．２〜０．７ｍＭ、０．３〜０．８ｍＭ、０．４〜０．９ｍＭ、０．５〜１ｍＭ、０．６〜１．１ｍＭ、０．７〜１．２ｍＭ、０．８〜１．３ｍＭ、０．９〜１．４ｍＭ、１〜１．５ｍＭ、１．１〜１．６ｍＭ、１．２〜１．７ｍＭ、１．３〜１．８ｍＭ、１．４〜１．９ｍＭ、１．５〜２ｍＭ、１．６〜２．１ｍＭ、１．７〜２．２ｍＭ、１．８〜２．３ｍＭ、１．９〜２．４ｍＭ、２〜２．５ｍＭ、２．１〜２．６ｍＭ、２．２〜２．７ｍＭ、２．３〜２．８ｍＭ、２．４〜２．９ｍＭ、２．５〜３ｍＭ、２．６〜３．１ｍＭ、２．７〜３．２ｍＭ、２．８〜３．３ｍＭ、２．９〜３．４ｍＭ、３〜３．５ｍＭ、３．１〜３．６ｍＭ、３．２〜３．７ｍＭ、３．３〜３．８ｍＭ、３．４〜３．９ｍＭ、３．５〜４ｍＭ、３．６〜４．１ｍＭ、３．７〜４．２ｍＭ、３．８〜４．３ｍＭ、３．９〜４．４ｍＭ、４〜４．５ｍＭ、４．１〜４．６ｍＭ、４．２〜４．７ｍＭ、４．３〜４．８ｍＭ、４．４〜４．９ｍＭ、４．５〜５ｍＭ、４．６〜５．１ｍＭ、４．７〜５．２ｍＭ、４．８〜５．３ｍＭ、４．９〜５．４ｍＭ、５〜５．５ｍＭ、５．１〜５．６ｍＭ、５．２〜５．７ｍＭ、５．３〜５．８ｍＭ、５．４〜５．９ｍＭ、５．５〜６ｍＭ、５．６〜６．１ｍＭ、５．７〜６．２ｍＭ、５．８〜６．３ｍＭ、５．９〜６．４ｍＭ、６〜６．５ｍＭ、６．１〜６．６ｍＭ、６．２〜６．７ｍＭ、６．３〜６．８ｍＭ、６．４〜６．９ｍＭ、６．５〜７ｍＭ、６．６〜７．１ｍＭ、６．７〜７．２ｍＭ、６．８〜７．３ｍＭ、６．９〜７．４ｍＭ、７〜７．５ｍＭ、７．１〜７．６ｍＭ、７．２〜７．７ｍＭ、７．３〜７．８ｍＭ、７．４〜７．９ｍＭ、７．５〜８ｍＭ、７．６〜８．１ｍＭ、７．７〜８．２ｍＭ、７．８〜８．３ｍＭ、７．９〜８．４ｍＭ、８〜８．５ｍＭ、８．１〜８．６ｍＭ、８．２〜８．７ｍＭ、８．３〜８．８ｍＭ、８．４〜８．９ｍＭ、８．５〜９ｍＭ、８．６〜９．１ｍＭ、８．７〜９．２ｍＭ、８．８〜９．３ｍＭ、８．９〜９．４ｍＭ、９〜９．５ｍＭ、９．１〜９．６ｍＭ、９．２〜９．７ｍＭ、９．３〜９．８ｍＭ、９．４〜９．９ｍＭ、９．５〜１０ｍＭ、９．６〜１０．１ｍＭ、９．７〜１０．２ｍＭ、９．８〜１０．３ｍＭ、９．９〜１０．４ｍＭ、１０〜１０．５ｍＭ、１０．１〜１０．６ｍＭ、１０．２〜１０．７ｍＭ、１０．３〜１０．８ｍＭ、１０．４〜１０．９ｍＭ、１０．５〜１１ｍＭ、１０．６〜１１．１ｍＭ、１０．７〜１１．２ｍＭ、１０．８〜１１．３ｍＭ、１０．９〜１１．４ｍＭ、１１〜１１．５ｍＭ、１１．１〜１１．６ｍＭ、１１．２〜１１．７ｍＭ、１１．３〜１１．８ｍＭ、１１．４〜１１．９ｍＭ、１１．５〜１２ｍＭ、１１．６〜１２．１ｍＭ、１１．７〜１２．２ｍＭ、１１．８〜１２．３ｍＭ、１１．９〜１２．４ｍＭ、１２〜１２．５ｍＭ、１２．１〜１２．６ｍＭ、１２．２〜１２．７ｍＭ、１２．３〜１２．８ｍＭ、１２．４〜１２．９ｍＭ、１２．５〜１３ｍＭ、１２．６〜１３．１ｍＭ、１２．７〜１３．２ｍＭ、１２．８〜１３．３ｍＭ、１２．９〜１３．４ｍＭ、１３〜１３．５ｍＭ、１３．１〜１３．６ｍＭ、１３．２〜１３．７ｍＭ、１３．３〜１３．８ｍＭ、１３．４〜１３．９ｍＭ、１３．５〜１４ｍＭ、１３．６〜１４．１ｍＭ、１３．７〜１４．２ｍＭ、１３．８〜１４．３ｍＭ、１３．９〜１４．４ｍＭ、１４〜１４．５ｍＭ、１４．１〜１４．６ｍＭ、１４．２〜１４．７ｍＭ、１４．３〜１４．８ｍＭ、１４．４〜１４．９ｍＭ、１４．５〜１５ｍＭ、０〜１ｍＭ、１〜２ｍＭ、２〜３ｍＭ、３〜４ｍＭ、４〜５ｍＭ、５〜６ｍＭ、６〜７ｍＭ、７〜８ｍＭ、８〜９ｍＭ、９〜１０ｍＭ、１０〜１１ｍＭ、１１〜１２ｍＭ、１２〜１３ｍＭ、１３〜１４ｍＭ、１４〜１５ｍＭ、１５〜１６ｍＭ、０〜２ｍＭ、１〜３ｍＭ、２〜４ｍＭ、３〜５ｍＭ、４〜６ｍＭ、５〜７ｍＭ、６〜８ｍＭ、７〜９ｍＭ、８〜１０ｍＭ、９〜１１ｍＭ、１０〜１２ｍＭ、１１〜１３ｍＭ、１２〜１４ｍＭ、１３〜１５ｍＭ、０〜３ｍＭ、１〜４ｍＭ、２〜５ｍＭ、３〜６ｍＭ、４〜７ｍＭ、５〜８ｍＭ、６〜９ｍＭ、７〜１０ｍＭ、８〜１１ｍＭ、９〜１２ｍＭ、１０〜１３ｍＭ、１１〜１４ｍＭ、１２〜１５ｍＭ、０〜４ｍＭ、１〜５ｍＭ、２〜６ｍＭ、３〜７ｍＭ、４〜８ｍＭ、５〜９ｍＭ、６〜１０ｍＭ、７〜１１ｍＭ、８〜１２ｍＭ、９〜１３ｍＭ、１０〜１４ｍＭ、１１〜１５ｍＭ、０〜５ｍＭ、１〜６ｍＭ、２〜７ｍＭ、３〜８ｍＭ、４〜９ｍＭ、５〜１０ｍＭ、６〜１１ｍＭ、７〜１２ｍＭ、８〜１３ｍＭ、９〜１４ｍＭ、１０〜１５ｍＭ、０〜６ｍＭ、１〜７ｍＭ、２〜８ｍＭ、３〜９ｍＭ、４〜１０ｍＭ、５〜１１ｍＭ、６〜１２ｍＭ、７〜１３ｍＭ、８〜１４ｍＭ、９〜１５ｍＭ、０〜７ｍＭ、１〜８ｍＭ、２〜９ｍＭ、３〜１０ｍＭ、４〜１１ｍＭ、５〜１２ｍＭ、６〜１３ｍＭ、７〜１４ｍＭ、８〜１５ｍＭ、０〜８ｍＭ、１〜９ｍＭ、２〜１０ｍＭ、３〜１１ｍＭ、４〜１２ｍＭ、５〜１３ｍＭ、６〜１４ｍＭ、７〜１５ｍＭ、０〜９ｍＭ、１〜１０ｍＭ、２〜１１ｍＭ、３〜１２ｍＭ、４〜１３ｍＭ、５〜１４ｍＭ、６〜１５ｍＭ、０〜１０ｍＭ、１〜１１ｍＭ、２〜１２ｍＭ、３〜１３ｍＭ、４〜１４ｍＭ、５〜１５ｍＭ、０〜１１ｍＭ、１〜１２ｍＭ、２〜１３ｍＭ、３〜１４ｍＭ、４〜１５ｍＭ、０〜１２ｍＭ、１〜１３ｍＭ、２〜１４ｍＭ、３〜１５ｍＭ、０〜１３ｍＭ、１〜１４ｍＭ、２〜１５ｍＭ、０〜１４ｍＭ、１〜１５ｍＭ、または０〜１５ｍＭの範囲のリン酸ナトリウムを含んでいてもよい。
【０３７７】
ある特定の実施形態では、製剤は、０〜１０ｍＭのリン酸ナトリウムを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、２〜１２ｍＭのリン酸ナトリウムを含んでいてもよい。
【０３７８】
ある特定の実施形態では、製剤は、２〜３ｍＭのリン酸ナトリウムを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、９〜１０ｍＭのリン酸ナトリウムを含んでいてもよい。
【０３７９】
ある特定の実施形態では、製剤は、１０〜１１ｍＭのリン酸ナトリウムを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、２．７ｍＭのリン酸ナトリウムを含んでいてもよい。
【０３８０】
ある特定の実施形態では、製剤は、１０ｍＭのリン酸ナトリウムを含んでいてもよい。
リン酸カリウム
ある特定の実施形態では、製剤中の成分の少なくとも１つは、リン酸カリウムである。製剤は、リン酸二水素カリウム、リン酸水素二カリウム、またはリン酸二水素カリウムおよびリン酸水素二カリウムの両方の組合せを含んでいてもよい。
【０３８１】
ある特定の実施形態では、製剤中のリン酸カリウムの濃度は、０．１ｍＭ、０．２ｍＭ、０．３ｍＭ、０．４ｍＭ、０．５ｍＭ、０．６ｍＭ、０．７ｍＭ、０．８ｍＭ、０．９ｍＭ、１ｍＭ、１．１ｍＭ、１．２ｍＭ、１．３ｍＭ、１．４ｍＭ、１．５ｍＭ、１．６ｍＭ、１．７ｍＭ、１．８ｍＭ、１．９ｍＭ、２ｍＭ、２．１ｍＭ、２．２ｍＭ、２．３ｍＭ、２．４ｍＭ、２．５ｍＭ、２．６ｍＭ、２．７ｍＭ、２．８ｍＭ、２．９ｍＭ、３ｍＭ、３．１ｍＭ、３．２ｍＭ、３．３ｍＭ、３．４ｍＭ、３．５ｍＭ、３．６ｍＭ、３．７ｍＭ、３．８ｍＭ、３．９ｍＭ、４ｍＭ、４．１ｍＭ、４．２ｍＭ、４．３ｍＭ、４．４ｍＭ、４．５ｍＭ、４．６ｍＭ、４．７ｍＭ、４．８ｍＭ、４．９ｍＭ、５ｍＭ、５．１ｍＭ、５．２ｍＭ、５．３ｍＭ、５．４ｍＭ、５．５ｍＭ、５．６ｍＭ、５．７ｍＭ、５．８ｍＭ、５．９ｍＭ、６ｍＭ、６．１ｍＭ、６．２ｍＭ、６．３ｍＭ、６．４ｍＭ、６．５ｍＭ、６．６ｍＭ、６．７ｍＭ、６．８ｍＭ、６．９ｍＭ、７ｍＭ、７．１ｍＭ、７．２ｍＭ、７．３ｍＭ、７．４ｍＭ、７．５ｍＭ、７．６ｍＭ、７．７ｍＭ、７．８ｍＭ、７．９ｍＭ、８ｍＭ、８．１ｍＭ、８．２ｍＭ、８．３ｍＭ、８．４ｍＭ、８．５ｍＭ、８．６ｍＭ、８．７ｍＭ、８．８ｍＭ、８．９ｍＭ、９ｍＭ、９．１ｍＭ、９．２ｍＭ、９．３ｍＭ、９．４ｍＭ、９．５ｍＭ、９．６ｍＭ、９．７ｍＭ、９．８ｍＭ、９．９ｍＭ、１０ｍＭ、１０．１ｍＭ、１０．２ｍＭ、１０．３ｍＭ、１０．４ｍＭ、１０．５ｍＭ、１０．６ｍＭ、１０．７ｍＭ、１０．８ｍＭ、１０．９ｍＭ、１１ｍＭ、１１．１ｍＭ、１１．２ｍＭ、１１．３ｍＭ、１１．４ｍＭ、１１．５ｍＭ、１１．６ｍＭ、１１．７ｍＭ、１１．８ｍＭ、１１．９ｍＭ、１２ｍＭ、１２．１ｍＭ、１２．２ｍＭ、１２．３ｍＭ、１２．４ｍＭ、１２．５ｍＭ、１２．６ｍＭ、１２．７ｍＭ、１２．８ｍＭ、１２．９ｍＭ、１３ｍＭ、１３．１ｍＭ、１３．２ｍＭ、１３．３ｍＭ、１３．４ｍＭ、１３．５ｍＭ、１３．６ｍＭ、１３．７ｍＭ、１３．８ｍＭ、１３．９ｍＭ、１４ｍＭ、１４．１ｍＭ、１４．２ｍＭ、１４．３ｍＭ、１４．４ｍＭ、１４．５ｍＭ、１４．６ｍＭ、１４．７ｍＭ、１４．８ｍＭ、１４．９ｍＭ、または１５ｍＭであってもよいが、これらに限定されない。
【０３８２】
製剤は、０〜０．５ｍＭ、０．１〜０．６ｍＭ、０．２〜０．７ｍＭ、０．３〜０．８ｍＭ、０．４〜０．９ｍＭ、０．５〜１ｍＭ、０．６〜１．１ｍＭ、０．７〜１．２ｍＭ、０．８〜１．３ｍＭ、０．９〜１．４ｍＭ、１〜１．５ｍＭ、１．１〜１．６ｍＭ、１．２〜１．７ｍＭ、１．３〜１．８ｍＭ、１．４〜１．９ｍＭ、１．５〜２ｍＭ、１．６〜２．１ｍＭ、１．７〜２．２ｍＭ、１．８〜２．３ｍＭ、１．９〜２．４ｍＭ、２〜２．５ｍＭ、２．１〜２．６ｍＭ、２．２〜２．７ｍＭ、２．３〜２．８ｍＭ、２．４〜２．９ｍＭ、２．５〜３ｍＭ、２．６〜３．１ｍＭ、２．７〜３．２ｍＭ、２．８〜３．３ｍＭ、２．９〜３．４ｍＭ、３〜３．５ｍＭ、３．１〜３．６ｍＭ、３．２〜３．７ｍＭ、３．３〜３．８ｍＭ、３．４〜３．９ｍＭ、３．５〜４ｍＭ、３．６〜４．１ｍＭ、３．７〜４．２ｍＭ、３．８〜４．３ｍＭ、３．９〜４．４ｍＭ、４〜４．５ｍＭ、４．１〜４．６ｍＭ、４．２〜４．７ｍＭ、４．３〜４．８ｍＭ、４．４〜４．９ｍＭ、４．５〜５ｍＭ、４．６〜５．１ｍＭ、４．７〜５．２ｍＭ、４．８〜５．３ｍＭ、４．９〜５．４ｍＭ、５〜５．５ｍＭ、５．１〜５．６ｍＭ、５．２〜５．７ｍＭ、５．３〜５．８ｍＭ、５．４〜５．９ｍＭ、５．５〜６ｍＭ、５．６〜６．１ｍＭ、５．７〜６．２ｍＭ、５．８〜６．３ｍＭ、５．９〜６．４ｍＭ、６〜６．５ｍＭ、６．１〜６．６ｍＭ、６．２〜６．７ｍＭ、６．３〜６．８ｍＭ、６．４〜６．９ｍＭ、６．５〜７ｍＭ、６．６〜７．１ｍＭ、６．７〜７．２ｍＭ、６．８〜７．３ｍＭ、６．９〜７．４ｍＭ、７〜７．５ｍＭ、７．１〜７．６ｍＭ、７．２〜７．７ｍＭ、７．３〜７．８ｍＭ、７．４〜７．９ｍＭ、７．５〜８ｍＭ、７．６〜８．１ｍＭ、７．７〜８．２ｍＭ、７．８〜８．３ｍＭ、７．９〜８．４ｍＭ、８〜８．５ｍＭ、８．１〜８．６ｍＭ、８．２〜８．７ｍＭ、８．３〜８．８ｍＭ、８．４〜８．９ｍＭ、８．５〜９ｍＭ、８．６〜９．１ｍＭ、８．７〜９．２ｍＭ、８．８〜９．３ｍＭ、８．９〜９．４ｍＭ、９〜９．５ｍＭ、９．１〜９．６ｍＭ、９．２〜９．７ｍＭ、９．３〜９．８ｍＭ、９．４〜９．９ｍＭ、９．５〜１０ｍＭ、９．６〜１０．１ｍＭ、９．７〜１０．２ｍＭ、９．８〜１０．３ｍＭ、９．９〜１０．４ｍＭ、１０〜１０．５ｍＭ、１０．１〜１０．６ｍＭ、１０．２〜１０．７ｍＭ、１０．３〜１０．８ｍＭ、１０．４〜１０．９ｍＭ、１０．５〜１１ｍＭ、１０．６〜１１．１ｍＭ、１０．７〜１１．２ｍＭ、１０．８〜１１．３ｍＭ、１０．９〜１１．４ｍＭ、１１〜１１．５ｍＭ、１１．１〜１１．６ｍＭ、１１．２〜１１．７ｍＭ、１１．３〜１１．８ｍＭ、１１．４〜１１．９ｍＭ、１１．５〜１２ｍＭ、１１．６〜１２．１ｍＭ、１１．７〜１２．２ｍＭ、１１．８〜１２．３ｍＭ、１１．９〜１２．４ｍＭ、１２〜１２．５ｍＭ、１２．１〜１２．６ｍＭ、１２．２〜１２．７ｍＭ、１２．３〜１２．８ｍＭ、１２．４〜１２．９ｍＭ、１２．５〜１３ｍＭ、１２．６〜１３．１ｍＭ、１２．７〜１３．２ｍＭ、１２．８〜１３．３ｍＭ、１２．９〜１３．４ｍＭ、１３〜１３．５ｍＭ、１３．１〜１３．６ｍＭ、１３．２〜１３．７ｍＭ、１３．３〜１３．８ｍＭ、１３．４〜１３．９ｍＭ、１３．５〜１４ｍＭ、１３．６〜１４．１ｍＭ、１３．７〜１４．２ｍＭ、１３．８〜１４．３ｍＭ、１３．９〜１４．４ｍＭ、１４〜１４．５ｍＭ、１４．１〜１４．６ｍＭ、１４．２〜１４．７ｍＭ、１４．３〜１４．８ｍＭ、１４．４〜１４．９ｍＭ、１４．５〜１５ｍＭ、０〜１ｍＭ、１〜２ｍＭ、２〜３ｍＭ、３〜４ｍＭ、４〜５ｍＭ、５〜６ｍＭ、６〜７ｍＭ、７〜８ｍＭ、８〜９ｍＭ、９〜１０ｍＭ、１０〜１１ｍＭ、１１〜１２ｍＭ、１２〜１３ｍＭ、１３〜１４ｍＭ、１４〜１５ｍＭ、１５〜１６ｍＭ、０〜２ｍＭ、１〜３ｍＭ、２〜４ｍＭ、３〜５ｍＭ、４〜６ｍＭ、５〜７ｍＭ、６〜８ｍＭ、７〜９ｍＭ、８〜１０ｍＭ、９〜１１ｍＭ、１０〜１２ｍＭ、１１〜１３ｍＭ、１２〜１４ｍＭ、１３〜１５ｍＭ、０〜３ｍＭ、１〜４ｍＭ、２〜５ｍＭ、３〜６ｍＭ、４〜７ｍＭ、５〜８ｍＭ、６〜９ｍＭ、７〜１０ｍＭ、８〜１１ｍＭ、９〜１２ｍＭ、１０〜１３ｍＭ、１１〜１４ｍＭ、１２〜１５ｍＭ、０〜４ｍＭ、１〜５ｍＭ、２〜６ｍＭ、３〜７ｍＭ、４〜８ｍＭ、５〜９ｍＭ、６〜１０ｍＭ、７〜１１ｍＭ、８〜１２ｍＭ、９〜１３ｍＭ、１０〜１４ｍＭ、１１〜１５ｍＭ、０〜５ｍＭ、１〜６ｍＭ、２〜７ｍＭ、３〜８ｍＭ、４〜９ｍＭ、５〜１０ｍＭ、６〜１１ｍＭ、７〜１２ｍＭ、８〜１３ｍＭ、９〜１４ｍＭ、１０〜１５ｍＭ、０〜６ｍＭ、１〜７ｍＭ、２〜８ｍＭ、３〜９ｍＭ、４〜１０ｍＭ、５〜１１ｍＭ、６〜１２ｍＭ、７〜１３ｍＭ、８〜１４ｍＭ、９〜１５ｍＭ、０〜７ｍＭ、１〜８ｍＭ、２〜９ｍＭ、３〜１０ｍＭ、４〜１１ｍＭ、５〜１２ｍＭ、６〜１３ｍＭ、７〜１４ｍＭ、８〜１５ｍＭ、０〜８ｍＭ、１〜９ｍＭ、２〜１０ｍＭ、３〜１１ｍＭ、４〜１２ｍＭ、５〜１３ｍＭ、６〜１４ｍＭ、７〜１５ｍＭ、０〜９ｍＭ、１〜１０ｍＭ、２〜１１ｍＭ、３〜１２ｍＭ、４〜１３ｍＭ、５〜１４ｍＭ、６〜１５ｍＭ、０〜１０ｍＭ、１〜１１ｍＭ、２〜１２ｍＭ、３〜１３ｍＭ、４〜１４ｍＭ、５〜１５ｍＭ、０〜１１ｍＭ、１〜１２ｍＭ、２〜１３ｍＭ、３〜１４ｍＭ、４〜１５ｍＭ、０〜１２ｍＭ、１〜１３ｍＭ、２〜１４ｍＭ、３〜１５ｍＭ、０〜１３ｍＭ、１〜１４ｍＭ、２〜１５ｍＭ、０〜１４ｍＭ、１〜１５ｍＭ、または０〜１５ｍＭの範囲のリン酸カリウムを含んでいてもよい。
【０３８３】
ある特定の実施形態では、製剤は、０〜１０ｍＭのリン酸カリウムを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、１〜３ｍＭのリン酸カリウムを含んでいてもよい。
【０３８４】
ある特定の実施形態では、製剤は、１〜２ｍＭのリン酸カリウムを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、２〜３ｍＭのリン酸カリウムを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、２〜１２ｍＭのリン酸カリウムを含んでいてもよい。
【０３８５】
ある特定の実施形態では、製剤は、１．５ｍＭのリン酸カリウムを含んでいてもよい。非限定的な例として、製剤は、１．５４ｍＭのリン酸カリウムを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、２ｍＭのリン酸カリウムを含んでいてもよい。
【０３８６】
塩化ナトリウム
ある特定の実施形態では、製剤中の成分の少なくとも１つは、塩化ナトリウムである。
ある特定の実施形態では、製剤中の塩化ナトリウムの濃度は、７５ｍＭ、７６ｍＭ、７７ｍＭ、７８ｍＭ、７９ｍＭ、８０ｍＭ、８１ｍＭ、８２ｍＭ、８３ｍＭ、８４ｍＭ、８５ｍＭ、８６ｍＭ、８７ｍＭ、８８ｍＭ、８９ｍＭ、９０ｍＭ、９１ｍＭ、９２ｍＭ、９３ｍＭ、９４ｍＭ、９５ｍＭ、９６ｍＭ、９７ｍＭ、９８ｍＭ、９９ｍＭ、１００ｍＭ、１０１ｍＭ、１０２ｍＭ、１０３ｍＭ、１０４ｍＭ、１０５ｍＭ、１０６ｍＭ、１０７ｍＭ、１０８ｍＭ、１０９ｍＭ、１１０ｍＭ、１１１ｍＭ、１１２ｍＭ、１１３ｍＭ、１１４ｍＭ、１１５ｍＭ、１１６ｍＭ、１１７ｍＭ、１１８ｍＭ、１１９ｍＭ、１２０ｍＭ、１２１ｍＭ、１２２ｍＭ、１２３ｍＭ、１２４ｍＭ、１２５ｍＭ、１２６ｍＭ、１２７ｍＭ、１２８ｍＭ、１２９ｍＭ、１３０ｍＭ、１３１ｍＭ、１３２ｍＭ、１３３ｍＭ、１３４ｍＭ、１３５ｍＭ、１３６ｍＭ、１３７ｍＭ、１３８ｍＭ、１３９ｍＭ、１４０ｍＭ、１４１ｍＭ、１４２ｍＭ、１４３ｍＭ、１４４ｍＭ、１４５ｍＭ、１４６ｍＭ、１４７ｍＭ、１４８ｍＭ、１４９ｍＭ、１５０ｍＭ、１５１ｍＭ、１５２ｍＭ、１５３ｍＭ、１５４ｍＭ、１５５ｍＭ、１５６ｍＭ、１５７ｍＭ、１５８ｍＭ、１５９ｍＭ、１６０ｍＭ、１６１ｍＭ、１６２ｍＭ、１６３ｍＭ、１６４ｍＭ、１６５ｍＭ、１６６ｍＭ、１６７ｍＭ、１６８ｍＭ、１６９ｍＭ、１７０ｍＭ、１７１ｍＭ、１７２ｍＭ、１７３ｍＭ、１７４ｍＭ、１７５ｍＭ、１７６ｍＭ、１７７ｍＭ、１７８ｍＭ、１７９ｍＭ、１８０ｍＭ、１８１ｍＭ、１８２ｍＭ、１８３ｍＭ、１８４ｍＭ、１８５ｍＭ、１８６ｍＭ、１８７ｍＭ、１８８ｍＭ、１８９ｍＭ、１９０ｍＭ、１９１ｍＭ、１９２ｍＭ、１９３ｍＭ、１９４ｍＭ、１９５ｍＭ、１９６ｍＭ、１９７ｍＭ、１９８ｍＭ、１９９ｍＭ、２００ｍＭ、２０１ｍＭ、２０２ｍＭ、２０３ｍＭ、２０４ｍＭ、２０５ｍＭ、２０６ｍＭ、２０７ｍＭ、２０８ｍＭ、２０９ｍＭ、２１０ｍＭ、２１１ｍＭ、２１２ｍＭ、２１３ｍＭ、２１４ｍＭ、２１５ｍＭ、２１６ｍＭ、２１７ｍＭ、２１８ｍＭ、２１９ｍＭ、または２２０ｍＭであってもよいが、これらに限定されない。
【０３８７】
製剤は、７５〜８５ｍＭ、８０〜９０ｍＭ、８５〜９５ｍＭ、９０〜１００ｍＭ、９５〜１０５ｍＭ、１００〜１１０ｍＭ、１０５〜１１５ｍＭ、１１０〜１２０ｍＭ、１１５〜１２５ｍＭ、１２０〜１３０ｍＭ、１２５〜１３５ｍＭ、１３０〜１４０ｍＭ、１３５〜１４５ｍＭ、１４０〜１５０ｍＭ、１４５〜１５５ｍＭ、１５０〜１６０ｍＭ、１５５〜１６５ｍＭ、１６０〜１７０ｍＭ、１６５〜１７５ｍＭ、１７０〜１８０ｍＭ、１７５〜１８５ｍＭ、１８０〜１９０ｍＭ、１８５〜１９５ｍＭ、１９０〜２００ｍＭ、７５〜９５ｍＭ、８０〜１００ｍＭ、８５〜１０５ｍＭ、９０〜１１０ｍＭ、９５〜１１５ｍＭ、１００〜１２０ｍＭ、１０５〜１２５ｍＭ、１１０〜１３０ｍＭ、１１５〜１３５ｍＭ、１２０〜１４０ｍＭ、１２５〜１４５ｍＭ、１３０〜１５０ｍＭ、１３５〜１５５ｍＭ、１４０〜１６０ｍＭ、１４５〜１６５ｍＭ、１５０〜１７０ｍＭ、１５５〜１７５ｍＭ、１６０〜１８０ｍＭ、１６５〜１８５ｍＭ、１７０〜１９０ｍＭ、１７５〜１９５ｍＭ、１８０〜２００ｍＭ、７５〜１００ｍＭ、８０〜１０５ｍＭ、８５〜１１０ｍＭ、９０〜１１５ｍＭ、９５〜１２０ｍＭ、１００〜１２５ｍＭ、１０５〜１３０ｍＭ、１１０〜１３５ｍＭ、１１５〜１４０ｍＭ、１２０〜１４５ｍＭ、１２５〜１５０ｍＭ、１３０〜１５５ｍＭ、１３５〜１６０ｍＭ、１４０〜１６５ｍＭ、１４５〜１７０ｍＭ、１５０〜１７５ｍＭ、１５５〜１８０ｍＭ、１６０〜１８５ｍＭ、１６５〜１９０ｍＭ、１７０〜１９５ｍＭ、１７５〜２００ｍＭ、７５〜１０５ｍＭ、８０〜１１０ｍＭ、８５〜１１５ｍＭ、９０〜１２０ｍＭ、９５〜１２５ｍＭ、１００〜１３０ｍＭ、１０５〜１３５ｍＭ、１１０〜１４０ｍＭ、１１５〜１４５ｍＭ、１２０〜１５０ｍＭ、１２５〜１５５ｍＭ、１３０〜１６０ｍＭ、１３５〜１６５ｍＭ、１４０〜１７０ｍＭ、１４５〜１７５ｍＭ、１５０〜１８０ｍＭ、１５５〜１８５ｍＭ、１６０〜１９０ｍＭ、１６５〜１９５ｍＭ、１７０〜２００ｍＭ、７５〜１１５ｍＭ、８０〜１２０ｍＭ、８５〜１２５ｍＭ、９０〜１３０ｍＭ、９５〜１３５ｍＭ、１００〜１４０ｍＭ、１０５〜１４５ｍＭ、１１０〜１５０ｍＭ、１１５〜１５５ｍＭ、１２０〜１６０ｍＭ、１２５〜１６５ｍＭ、１３０〜１７０ｍＭ、１３５〜１７５ｍＭ、１４０〜１８０ｍＭ、１４５〜１８５ｍＭ、１５０〜１９０ｍＭ、１５５〜１９５ｍＭ、１６０〜２００ｍＭ、７５〜１２０ｍＭ、８０〜１２５ｍＭ、８５〜１３０ｍＭ、９０〜１３５ｍＭ、９５〜１４０ｍＭ、１００〜１４５ｍＭ、１０５〜１５０ｍＭ、１１０〜１５５ｍＭ、１１５〜１６０ｍＭ、１２０〜１６５ｍＭ、１２５〜１７０ｍＭ、１３０〜１７５ｍＭ、１３５〜１８０ｍＭ、１４０〜１８５ｍＭ、１４５〜１９０ｍＭ、１５０〜１９５ｍＭ、１５５〜２００ｍＭ、７５〜１２５ｍＭ、８０〜１３０ｍＭ、８５〜１３５ｍＭ、９０〜１４０ｍＭ、９５〜１４５ｍＭ、１００〜１５０ｍＭ、１０５〜１５５ｍＭ、１１０〜１６０ｍＭ、１１５〜１６５ｍＭ、１２０〜１７０ｍＭ、１２５〜１７５ｍＭ、１３０〜１８０ｍＭ、１３５〜１８５ｍＭ、１４０〜１９０ｍＭ、１４５〜１９５ｍＭ、１５０〜２００ｍＭ、７５〜１２５ｍＭ、８０〜１３０ｍＭ、８５〜１３５ｍＭ、９０〜１４０ｍＭ、９５〜１４５ｍＭ、１００〜１５０ｍＭ、１０５〜１５５ｍＭ、１１０〜１６０ｍＭ、１１５〜１６５ｍＭ、１２０〜１７０ｍＭ、１２５〜１７５ｍＭ、１３０〜１８０ｍＭ、１３５〜１８５ｍＭ、１４０〜１９０ｍＭ、１４５〜１９５ｍＭ、１５０〜２００ｍＭ、７５〜１３５ｍＭ、８０〜１４０ｍＭ、８５〜１４５ｍＭ、９０〜１５０ｍＭ、９５〜１５５ｍＭ、１００〜１６０ｍＭ、１０５〜１６５ｍＭ、１１０〜１７０ｍＭ、１１５〜１７５ｍＭ、１２０〜１８０ｍＭ、１２５〜１８５ｍＭ、１３０〜１９０ｍＭ、１３５〜１９５ｍＭ、１４０〜２００ｍＭ、７５〜１４５ｍＭ、８０〜１５０ｍＭ、８５〜１５５ｍＭ、９０〜１６０ｍＭ、９５〜１６５ｍＭ、１００〜１７０ｍＭ、１０５〜１７５ｍＭ、１１０〜１８０ｍＭ、１１５〜１８５ｍＭ、１２０〜１９０ｍＭ、１２５〜１９５ｍＭ、１３０〜２００ｍＭ、７５〜１５５ｍＭ、８０〜１６０ｍＭ、８５〜１６５ｍＭ、９０〜１７０ｍＭ、９５〜１７５ｍＭ、１００〜１８０ｍＭ、１０５〜１８５ｍＭ、１１０〜１９０ｍＭ、１１５〜１９５ｍＭ、１２０〜２００ｍＭ、７５〜１６５ｍＭ、８０〜１７０ｍＭ、８５〜１７５ｍＭ、９０〜１８０ｍＭ、９５〜１８５ｍＭ、１００〜１９０ｍＭ、１０５〜１９５ｍＭ、１１０〜２００ｍＭ、７５〜１７５ｍＭ、８０〜１８０ｍＭ、８５〜１８５ｍＭ、９０〜１９０ｍＭ、９５〜１９５ｍＭ、１００〜２００ｍＭ、８０〜２２０ｍＭ、９０〜２２０ｍＭ、１００〜２２０ｍＭ、１１０〜２２０ｍＭ、１２０〜２２０ｍＭ、１３０〜２２０ｍＭ、１４０〜２２０ｍＭ、１５０〜２２０ｍＭ、１６０〜２２０ｍＭ、１７０〜２２０ｍＭ、１８０〜２２０ｍＭ、１９０〜２２０ｍＭ、２００〜２２０ｍＭ、または２１０〜２２０ｍＭの範囲の塩化ナトリウムであってもよい。
【０３８８】
ある特定の実施形態では、製剤は、８０〜２２０ｍＭの塩化ナトリウムを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、８０〜１５０ｍＭの塩化ナトリウムを含んでいてもよい。
【０３８９】
ある特定の実施形態では、製剤は、７５ｍＭの塩化ナトリウムを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、８３ｍＭの塩化ナトリウムを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、９２ｍＭの塩化ナトリウムを含んでいてもよい。
【０３９０】
ある特定の実施形態では、製剤は、９５ｍＭの塩化ナトリウムを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、９８ｍＭの塩化ナトリウムを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、１００ｍＭの塩化ナトリウムを含んでいてもよい。
【０３９１】
ある特定の実施形態では、製剤は、１０７ｍＭの塩化ナトリウムを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、１０９ｍＭの塩化ナトリウムを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、１１８ｍＭの塩化ナトリウムを含んでいてもよい。
【０３９２】
ある特定の実施形態では、製剤は、１２５ｍＭの塩化ナトリウムを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、１２７ｍＭの塩化ナトリウムを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、１３３ｍＭの塩化ナトリウムを含んでいてもよい。
【０３９３】
ある特定の実施形態では、製剤は、１４２ｍＭの塩化ナトリウムを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、１５０ｍＭの塩化ナトリウムを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、１５５ｍＭの塩化ナトリウムを含んでいてもよい。
【０３９４】
ある特定の実施形態では、製剤は、１９２ｍＭの塩化ナトリウムを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、２１０ｍＭの塩化ナトリウムを含んでいてもよい。
塩化カリウム
ある特定の実施形態では、製剤中の成分の少なくとも１つは、塩化カリウムである。
【０３９５】
ある特定の実施形態では、製剤中の塩化カリウムの濃度は、０．１ｍＭ、０．２ｍＭ、０．３ｍＭ、０．４ｍＭ、０．５ｍＭ、０．６ｍＭ、０．７ｍＭ、０．８ｍＭ、０．９ｍＭ、１ｍＭ、１．１ｍＭ、１．２ｍＭ、１．３ｍＭ、１．４ｍＭ、１．５ｍＭ、１．６ｍＭ、１．７ｍＭ、１．８ｍＭ、１．９ｍＭ、２ｍＭ、２．１ｍＭ、２．２ｍＭ、２．３ｍＭ、２．４ｍＭ、２．５ｍＭ、２．６ｍＭ、２．７ｍＭ、２．８ｍＭ、２．９ｍＭ、３ｍＭ、３．１ｍＭ、３．２ｍＭ、３．３ｍＭ、３．４ｍＭ、３．５ｍＭ、３．６ｍＭ、３．７ｍＭ、３．８ｍＭ、３．９ｍＭ、４ｍＭ、４．１ｍＭ、４．２ｍＭ、４．３ｍＭ、４．４ｍＭ、４．５ｍＭ、４．６ｍＭ、４．７ｍＭ、４．８ｍＭ、４．９ｍＭ、５ｍＭ、５．１ｍＭ、５．２ｍＭ、５．３ｍＭ、５．４ｍＭ、５．５ｍＭ、５．６ｍＭ、５．７ｍＭ、５．８ｍＭ、５．９ｍＭ、６ｍＭ、６．１ｍＭ、６．２ｍＭ、６．３ｍＭ、６．４ｍＭ、６．５ｍＭ、６．６ｍＭ、６．７ｍＭ、６．８ｍＭ、６．９ｍＭ、７ｍＭ、７．１ｍＭ、７．２ｍＭ、７．３ｍＭ、７．４ｍＭ、７．５ｍＭ、７．６ｍＭ、７．７ｍＭ、７．８ｍＭ、７．９ｍＭ、８ｍＭ、８．１ｍＭ、８．２ｍＭ、８．３ｍＭ、８．４ｍＭ、８．５ｍＭ、８．６ｍＭ、８．７ｍＭ、８．８ｍＭ、８．９ｍＭ、９ｍＭ、９．１ｍＭ、９．２ｍＭ、９．３ｍＭ、９．４ｍＭ、９．５ｍＭ、９．６ｍＭ、９．７ｍＭ、９．８ｍＭ、９．９ｍＭ、１０ｍＭ、１０．１ｍＭ、１０．２ｍＭ、１０．３ｍＭ、１０．４ｍＭ、１０．５ｍＭ、１０．６ｍＭ、１０．７ｍＭ、１０．８ｍＭ、１０．９ｍＭ、１１ｍＭ、１１．１ｍＭ、１１．２ｍＭ、１１．３ｍＭ、１１．４ｍＭ、１１．５ｍＭ、１１．６ｍＭ、１１．７ｍＭ、１１．８ｍＭ、１１．９ｍＭ、１２ｍＭ、１２．１ｍＭ、１２．２ｍＭ、１２．３ｍＭ、１２．４ｍＭ、１２．５ｍＭ、１２．６ｍＭ、１２．７ｍＭ、１２．８ｍＭ、１２．９ｍＭ、１３ｍＭ、１３．１ｍＭ、１３．２ｍＭ、１３．３ｍＭ、１３．４ｍＭ、１３．５ｍＭ、１３．６ｍＭ、１３．７ｍＭ、１３．８ｍＭ、１３．９ｍＭ、１４ｍＭ、１４．１ｍＭ、１４．２ｍＭ、１４．３ｍＭ、１４．４ｍＭ、１４．５ｍＭ、１４．６ｍＭ、１４．７ｍＭ、１４．８ｍＭ、１４．９ｍＭ、または１５ｍＭであってもよいが、これらに限定されない。
【０３９６】
製剤は、０〜０．５ｍＭ、０．１〜０．６ｍＭ、０．２〜０．７ｍＭ、０．３〜０．８ｍＭ、０．４〜０．９ｍＭ、０．５〜１ｍＭ、０．６〜１．１ｍＭ、０．７〜１．２ｍＭ、０．８〜１．３ｍＭ、０．９〜１．４ｍＭ、１〜１．５ｍＭ、１．１〜１．６ｍＭ、１．２〜１．７ｍＭ、１．３〜１．８ｍＭ、１．４〜１．９ｍＭ、１．５〜２ｍＭ、１．６〜２．１ｍＭ、１．７〜２．２ｍＭ、１．８〜２．３ｍＭ、１．９〜２．４ｍＭ、２〜２．５ｍＭ、２．１〜２．６ｍＭ、２．２〜２．７ｍＭ、２．３〜２．８ｍＭ、２．４〜２．９ｍＭ、２．５〜３ｍＭ、２．６〜３．１ｍＭ、２．７〜３．２ｍＭ、２．８〜３．３ｍＭ、２．９〜３．４ｍＭ、３〜３．５ｍＭ、３．１〜３．６ｍＭ、３．２〜３．７ｍＭ、３．３〜３．８ｍＭ、３．４〜３．９ｍＭ、３．５〜４ｍＭ、３．６〜４．１ｍＭ、３．７〜４．２ｍＭ、３．８〜４．３ｍＭ、３．９〜４．４ｍＭ、４〜４．５ｍＭ、４．１〜４．６ｍＭ、４．２〜４．７ｍＭ、４．３〜４．８ｍＭ、４．４〜４．９ｍＭ、４．５〜５ｍＭ、４．６〜５．１ｍＭ、４．７〜５．２ｍＭ、４．８〜５．３ｍＭ、４．９〜５．４ｍＭ、５〜５．５ｍＭ、５．１〜５．６ｍＭ、５．２〜５．７ｍＭ、５．３〜５．８ｍＭ、５．４〜５．９ｍＭ、５．５〜６ｍＭ、５．６〜６．１ｍＭ、５．７〜６．２ｍＭ、５．８〜６．３ｍＭ、５．９〜６．４ｍＭ、６〜６．５ｍＭ、６．１〜６．６ｍＭ、６．２〜６．７ｍＭ、６．３〜６．８ｍＭ、６．４〜６．９ｍＭ、６．５〜７ｍＭ、６．６〜７．１ｍＭ、６．７〜７．２ｍＭ、６．８〜７．３ｍＭ、６．９〜７．４ｍＭ、７〜７．５ｍＭ、７．１〜７．６ｍＭ、７．２〜７．７ｍＭ、７．３〜７．８ｍＭ、７．４〜７．９ｍＭ、７．５〜８ｍＭ、７．６〜８．１ｍＭ、７．７〜８．２ｍＭ、７．８〜８．３ｍＭ、７．９〜８．４ｍＭ、８〜８．５ｍＭ、８．１〜８．６ｍＭ、８．２〜８．７ｍＭ、８．３〜８．８ｍＭ、８．４〜８．９ｍＭ、８．５〜９ｍＭ、８．６〜９．１ｍＭ、８．７〜９．２ｍＭ、８．８〜９．３ｍＭ、８．９〜９．４ｍＭ、９〜９．５ｍＭ、９．１〜９．６ｍＭ、９．２〜９．７ｍＭ、９．３〜９．８ｍＭ、９．４〜９．９ｍＭ、９．５〜１０ｍＭ、９．６〜１０．１ｍＭ、９．７〜１０．２ｍＭ、９．８〜１０．３ｍＭ、９．９〜１０．４ｍＭ、１０〜１０．５ｍＭ、１０．１〜１０．６ｍＭ、１０．２〜１０．７ｍＭ、１０．３〜１０．８ｍＭ、１０．４〜１０．９ｍＭ、１０．５〜１１ｍＭ、１０．６〜１１．１ｍＭ、１０．７〜１１．２ｍＭ、１０．８〜１１．３ｍＭ、１０．９〜１１．４ｍＭ、１１〜１１．５ｍＭ、１１．１〜１１．６ｍＭ、１１．２〜１１．７ｍＭ、１１．３〜１１．８ｍＭ、１１．４〜１１．９ｍＭ、１１．５〜１２ｍＭ、１１．６〜１２．１ｍＭ、１１．７〜１２．２ｍＭ、１１．８〜１２．３ｍＭ、１１．９〜１２．４ｍＭ、１２〜１２．５ｍＭ、１２．１〜１２．６ｍＭ、１２．２〜１２．７ｍＭ、１２．３〜１２．８ｍＭ、１２．４〜１２．９ｍＭ、１２．５〜１３ｍＭ、１２．６〜１３．１ｍＭ、１２．７〜１３．２ｍＭ、１２．８〜１３．３ｍＭ、１２．９〜１３．４ｍＭ、１３〜１３．５ｍＭ、１３．１〜１３．６ｍＭ、１３．２〜１３．７ｍＭ、１３．３〜１３．８ｍＭ、１３．４〜１３．９ｍＭ、１３．５〜１４ｍＭ、１３．６〜１４．１ｍＭ、１３．７〜１４．２ｍＭ、１３．８〜１４．３ｍＭ、１３．９〜１４．４ｍＭ、１４〜１４．５ｍＭ、１４．１〜１４．６ｍＭ、１４．２〜１４．７ｍＭ、１４．３〜１４．８ｍＭ、１４．４〜１４．９ｍＭ、１４．５〜１５ｍＭ、０〜１ｍＭ、１〜２ｍＭ、２〜３ｍＭ、３〜４ｍＭ、４〜５ｍＭ、５〜６ｍＭ、６〜７ｍＭ、７〜８ｍＭ、８〜９ｍＭ、９〜１０ｍＭ、１０〜１１ｍＭ、１１〜１２ｍＭ、１２〜１３ｍＭ、１３〜１４ｍＭ、１４〜１５ｍＭ、１５〜１６ｍＭ、０〜２ｍＭ、１〜３ｍＭ、２〜４ｍＭ、３〜５ｍＭ、４〜６ｍＭ、５〜７ｍＭ、６〜８ｍＭ、７〜９ｍＭ、８〜１０ｍＭ、９〜１１ｍＭ、１０〜１２ｍＭ、１１〜１３ｍＭ、１２〜１４ｍＭ、１３〜１５ｍＭ、０〜３ｍＭ、１〜４ｍＭ、２〜５ｍＭ、３〜６ｍＭ、４〜７ｍＭ、５〜８ｍＭ、６〜９ｍＭ、７〜１０ｍＭ、８〜１１ｍＭ、９〜１２ｍＭ、１０〜１３ｍＭ、１１〜１４ｍＭ、１２〜１５ｍＭ、０〜４ｍＭ、１〜５ｍＭ、２〜６ｍＭ、３〜７ｍＭ、４〜８ｍＭ、５〜９ｍＭ、６〜１０ｍＭ、７〜１１ｍＭ、８〜１２ｍＭ、９〜１３ｍＭ、１０〜１４ｍＭ、１１〜１５ｍＭ、０〜５ｍＭ、１〜６ｍＭ、２〜７ｍＭ、３〜８ｍＭ、４〜９ｍＭ、５〜１０ｍＭ、６〜１１ｍＭ、７〜１２ｍＭ、８〜１３ｍＭ、９〜１４ｍＭ、１０〜１５ｍＭ、０〜６ｍＭ、１〜７ｍＭ、２〜８ｍＭ、３〜９ｍＭ、４〜１０ｍＭ、５〜１１ｍＭ、６〜１２ｍＭ、７〜１３ｍＭ、８〜１４ｍＭ、９〜１５ｍＭ、０〜７ｍＭ、１〜８ｍＭ、２〜９ｍＭ、３〜１０ｍＭ、４〜１１ｍＭ、５〜１２ｍＭ、６〜１３ｍＭ、７〜１４ｍＭ、８〜１５ｍＭ、０〜８ｍＭ、１〜９ｍＭ、２〜１０ｍＭ、３〜１１ｍＭ、４〜１２ｍＭ、５〜１３ｍＭ、６〜１４ｍＭ、７〜１５ｍＭ、０〜９ｍＭ、１〜１０ｍＭ、２〜１１ｍＭ、３〜１２ｍＭ、４〜１３ｍＭ、５〜１４ｍＭ、６〜１５ｍＭ、０〜１０ｍＭ、１〜１１ｍＭ、２〜１２ｍＭ、３〜１３ｍＭ、４〜１４ｍＭ、５〜１５ｍＭ、０〜１１ｍＭ、１〜１２ｍＭ、２〜１３ｍＭ、３〜１４ｍＭ、４〜１５ｍＭ、０〜１２ｍＭ、１〜１３ｍＭ、２〜１４ｍＭ、３〜１５ｍＭ、０〜１３ｍＭ、１〜１４ｍＭ、２〜１５ｍＭ、０〜１４ｍＭ、１〜１５ｍＭ、または０〜１５ｍＭの範囲の塩化カリウムを含んでいてもよい。
【０３９７】
ある特定の実施形態では、製剤は、０〜１０ｍＭの塩化カリウムを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、１〜３ｍＭの塩化カリウムを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、１〜２ｍＭの塩化カリウムを含んでいてもよい。
【０３９８】
ある特定の実施形態では、製剤は、２〜３ｍＭの塩化カリウムを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、１．５ｍＭの塩化カリウムを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、２．７ｍＭの塩化カリウムを含んでいてもよい。
【０３９９】
塩化マグネシウム
ある特定の実施形態では、製剤中の成分の少なくとも１つは、塩化マグネシウムである。
【０４００】
ある特定の実施形態では、塩化マグネシウムの濃度は、１ｍＭ、２ｍＭ、３ｍＭ、４ｍＭ、５ｍＭ、６ｍＭ、７ｍＭ、８ｍＭ、９ｍＭ、１０ｍＭ、１１ｍＭ、１２ｍＭ、１３ｍＭ、１４ｍＭ、１５ｍＭ、１６ｍＭ、１７ｍＭ、１８ｍＭ、１９ｍＭ、２０ｍＭ、２１ｍＭ、２２ｍＭ、２３ｍＭ、２４ｍＭ、２５ｍＭ、２６ｍＭ、２７ｍＭ、２８ｍＭ、２９ｍＭ、３０ｍＭ、３１ｍＭ、３２ｍＭ、３３ｍＭ、３４ｍＭ、３５ｍＭ、３６ｍＭ、３７ｍＭ、３８ｍＭ、３９ｍＭ、４０ｍＭ、４１ｍＭ、４２ｍＭ、４３ｍＭ、４４ｍＭ、４５ｍＭ、４６ｍＭ、４７ｍＭ、４８ｍＭ、４９ｍＭ、５０ｍＭ、５１ｍＭ、５２ｍＭ、５３ｍＭ、５４ｍＭ、５５ｍＭ、５６ｍＭ、５７ｍＭ、５８ｍＭ、５９ｍＭ、６０ｍＭ、６１ｍＭ、６２ｍＭ、６３ｍＭ、６４ｍＭ、６５ｍＭ、６６ｍＭ、６７ｍＭ、６８ｍＭ、６９ｍＭ、７０ｍＭ、７１ｍＭ、７２ｍＭ、７３ｍＭ、７４ｍＭ、７５ｍＭ、７６ｍＭ、７７ｍＭ、７８ｍＭ、７９ｍＭ、８０ｍＭ、８１ｍＭ、８２ｍＭ、８３ｍＭ、８４ｍＭ、８５ｍＭ、８６ｍＭ、８７ｍＭ、８８ｍＭ、８９ｍＭ、９０ｍＭ、９１ｍＭ、９２ｍＭ、９３ｍＭ、９４ｍＭ、９５ｍＭ、９６ｍＭ、９７ｍＭ、９８ｍＭ、９９ｍＭ、または１００ｍＭであってもよいが、これらに限定されない。
【０４０１】
製剤は、０〜５ｍＭ、１〜５ｍＭ、２〜５ｍＭ、３〜５ｍＭ、４〜５ｍＭ、０〜１０ｍＭ、１〜１０ｍＭ、２〜１０ｍＭ、３〜１０ｍＭ、４〜１０ｍＭ、５〜１０ｍＭ、６〜１０ｍＭ、７〜１０ｍＭ、８〜１０ｍＭ、９〜１０ｍＭ、０〜２５ｍＭ、１〜２５ｍＭ、２〜２５ｍＭ、３〜２５ｍＭ、４〜２５ｍＭ、５〜２５ｍＭ、６〜２５ｍＭ、７〜２５ｍＭ、８〜２５ｍＭ、９〜２５ｍＭ、１０〜２５ｍＭ、１１〜２５ｍＭ、１２〜２５ｍＭ、１３〜２５ｍＭ、１４〜２５ｍＭ、１５〜２５ｍＭ、１６〜２５ｍＭ、１７〜２５ｍＭ、１８〜２５ｍＭ、１９〜２５ｍＭ、２０〜２５ｍＭ、２１〜２５ｍＭ、２２〜２５ｍＭ、２３〜２５ｍＭ、２４〜２５ｍＭ、０〜５０ｍＭ、１〜５０ｍＭ、２〜５０ｍＭ、３〜５０ｍＭ、４〜５０ｍＭ、５〜５０ｍＭ、６〜５０ｍＭ、７〜５０ｍＭ、８〜５０ｍＭ、９〜５０ｍＭ、１０〜５０ｍＭ、１１〜５０ｍＭ、１２〜５０ｍＭ、１３〜５０ｍＭ、１４〜５０ｍＭ、１５〜５０ｍＭ、１６〜５０ｍＭ、１７〜５０ｍＭ、１８〜５０ｍＭ、１９〜５０ｍＭ、２０〜５０ｍＭ、２１〜５０ｍＭ、２２〜５０ｍＭ、２３〜５０ｍＭ、２４〜５０ｍＭ、２５〜５０ｍＭ、２６〜５０ｍＭ、２７〜５０ｍＭ、２８〜５０ｍＭ、２９〜５０ｍＭ、３０〜５０ｍＭ、３１〜５０ｍＭ、３２〜５０ｍＭ、３３〜５０ｍＭ、３４〜５０ｍＭ、３５〜５０ｍＭ、３６〜５０ｍＭ、３７〜５０ｍＭ、３８〜５０ｍＭ、３９〜５０ｍＭ、４０〜５０ｍＭ、４１〜５０ｍＭ、４２〜５０ｍＭ、４３〜５０ｍＭ、４４〜５０ｍＭ、４５〜５０ｍＭ、４６〜５０ｍＭ、４７〜５０ｍＭ、４８〜５０ｍＭ、４９〜５０ｍＭ、０〜７５ｍＭ、１〜７５ｍＭ、２〜７５ｍＭ、３〜７５ｍＭ、４〜７５ｍＭ、５〜７５ｍＭ、６〜７５ｍＭ、７〜７５ｍＭ、８〜７５ｍＭ、９〜７５ｍＭ、１０〜７５ｍＭ、１１〜７５ｍＭ、１２〜７５ｍＭ、１３〜７５ｍＭ、１４〜７５ｍＭ、１５〜７５ｍＭ、１６〜７５ｍＭ、１７〜７５ｍＭ、１８〜７５ｍＭ、１９〜７５ｍＭ、２０〜７５ｍＭ、２１〜７５ｍＭ、２２〜７５ｍＭ、２３〜７５ｍＭ、２４〜７５ｍＭ、２５〜７５ｍＭ、２６〜７５ｍＭ、２７〜７５ｍＭ、２８〜７５ｍＭ、２９〜７５ｍＭ、３０〜７５ｍＭ、３１〜７５ｍＭ、３２〜７５ｍＭ、３３〜７５ｍＭ、３４〜７５ｍＭ、３５〜７５ｍＭ、３６〜７５ｍＭ、３７〜７５ｍＭ、３８〜７５ｍＭ、３９〜７５ｍＭ、４０〜７５ｍＭ、４１〜７５ｍＭ、４２〜７５ｍＭ、４３〜７５ｍＭ、４４〜７５ｍＭ、４５〜７５ｍＭ、４６〜７５ｍＭ、４７〜７５ｍＭ、４８〜７５ｍＭ、４９〜７５ｍＭ、５０〜７５ｍＭ、５１〜７５ｍＭ、５２〜７５ｍＭ、５３〜７５ｍＭ、５４〜７５ｍＭ、５５〜７５ｍＭ、５６〜７５ｍＭ、５７〜７５ｍＭ、５８〜７５ｍＭ、５９〜７５ｍＭ、６０〜７５ｍＭ、６１〜７５ｍＭ、６２〜７５ｍＭ、６３〜７５ｍＭ、６４〜７５ｍＭ、６５〜７５ｍＭ、６６〜７５ｍＭ、６７〜７５ｍＭ、６８〜７５ｍＭ、６９〜７５ｍＭ、７０〜７５ｍＭ、７１〜７５ｍＭ、７２〜７５ｍＭ、７３〜７５ｍＭ、７４〜７５ｍＭ、５０〜１００ｍＭ、６０〜１００ｍＭ、７５〜１００ｍＭ、８０〜１００ｍＭ、または９０〜１００ｍＭの範囲の塩化マグネシウムを含んでいてもよい。
【０４０２】
ある特定の実施形態では、製剤は、０〜７５ｍＭの塩化マグネシウムを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、０〜５ｍＭの塩化マグネシウムを含んでいてもよい。
【０４０３】
ある特定の実施形態では、製剤は、５０〜１００ｍＭの塩化マグネシウムを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、２ｍＭの塩化マグネシウムを含んでいてもよい。
【０４０４】
ある特定の実施形態では、製剤は、７５ｍＭの塩化マグネシウムを含んでいてもよい。
トリス
ある特定の実施形態では、製剤中の成分の少なくとも１つは、トリス（トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン、トロメタミン、またはＴＨＡＭとも呼ばれる）である。
【０４０５】
ある特定の実施形態では、製剤中のトリスの濃度は、０．１ｍＭ、０．２ｍＭ、０．３ｍＭ、０．４ｍＭ、０．５ｍＭ、０．６ｍＭ、０．７ｍＭ、０．８ｍＭ、０．９ｍＭ、１ｍＭ、１．１ｍＭ、１．２ｍＭ、１．３ｍＭ、１．４ｍＭ、１．５ｍＭ、１．６ｍＭ、１．７ｍＭ、１．８ｍＭ、１．９ｍＭ、２ｍＭ、２．１ｍＭ、２．２ｍＭ、２．３ｍＭ、２．４ｍＭ、２．５ｍＭ、２．６ｍＭ、２．７ｍＭ、２．８ｍＭ、２．９ｍＭ、３ｍＭ、３．１ｍＭ、３．２ｍＭ、３．３ｍＭ、３．４ｍＭ、３．５ｍＭ、３．６ｍＭ、３．７ｍＭ、３．８ｍＭ、３．９ｍＭ、４ｍＭ、４．１ｍＭ、４．２ｍＭ、４．３ｍＭ、４．４ｍＭ、４．５ｍＭ、４．６ｍＭ、４．７ｍＭ、４．８ｍＭ、４．９ｍＭ、５ｍＭ、５．１ｍＭ、５．２ｍＭ、５．３ｍＭ、５．４ｍＭ、５．５ｍＭ、５．６ｍＭ、５．７ｍＭ、５．８ｍＭ、５．９ｍＭ、６ｍＭ、６．１ｍＭ、６．２ｍＭ、６．３ｍＭ、６．４ｍＭ、６．５ｍＭ、６．６ｍＭ、６．７ｍＭ、６．８ｍＭ、６．９ｍＭ、７ｍＭ、７．１ｍＭ、７．２ｍＭ、７．３ｍＭ、７．４ｍＭ、７．５ｍＭ、７．６ｍＭ、７．７ｍＭ、７．８ｍＭ、７．９ｍＭ、８ｍＭ、８．１ｍＭ、８．２ｍＭ、８．３ｍＭ、８．４ｍＭ、８．５ｍＭ、８．６ｍＭ、８．７ｍＭ、８．８ｍＭ、８．９ｍＭ、９ｍＭ、９．１ｍＭ、９．２ｍＭ、９．３ｍＭ、９．４ｍＭ、９．５ｍＭ、９．６ｍＭ、９．７ｍＭ、９．８ｍＭ、９．９ｍＭ、１０ｍＭ、１０．１ｍＭ、１０．２ｍＭ、１０．３ｍＭ、１０．４ｍＭ、１０．５ｍＭ、１０．６ｍＭ、１０．７ｍＭ、１０．８ｍＭ、１０．９ｍＭ、１１ｍＭ、１１．１ｍＭ、１１．２ｍＭ、１１．３ｍＭ、１１．４ｍＭ、１１．５ｍＭ、１１．６ｍＭ、１１．７ｍＭ、１１．８ｍＭ、１１．９ｍＭ、１２ｍＭ、１２．１ｍＭ、１２．２ｍＭ、１２．３ｍＭ、１２．４ｍＭ、１２．５ｍＭ、１２．６ｍＭ、１２．７ｍＭ、１２．８ｍＭ、１２．９ｍＭ、１３ｍＭ、１３．１ｍＭ、１３．２ｍＭ、１３．３ｍＭ、１３．４ｍＭ、１３．５ｍＭ、１３．６ｍＭ、１３．７ｍＭ、１３．８ｍＭ、１３．９ｍＭ、１４ｍＭ、１４．１ｍＭ、１４．２ｍＭ、１４．３ｍＭ、１４．４ｍＭ、１４．５ｍＭ、１４．６ｍＭ、１４．７ｍＭ、１４．８ｍＭ、１４．９ｍＭ、または１５ｍＭであってもよいが、これらに限定されない。
【０４０６】
製剤は、０〜０．５ｍＭ、０．１〜０．６ｍＭ、０．２〜０．７ｍＭ、０．３〜０．８ｍＭ、０．４〜０．９ｍＭ、０．５〜１ｍＭ、０．６〜１．１ｍＭ、０．７〜１．２ｍＭ、０．８〜１．３ｍＭ、０．９〜１．４ｍＭ、１〜１．５ｍＭ、１．１〜１．６ｍＭ、１．２〜１．７ｍＭ、１．３〜１．８ｍＭ、１．４〜１．９ｍＭ、１．５〜２ｍＭ、１．６〜２．１ｍＭ、１．７〜２．２ｍＭ、１．８〜２．３ｍＭ、１．９〜２．４ｍＭ、２〜２．５ｍＭ、２．１〜２．６ｍＭ、２．２〜２．７ｍＭ、２．３〜２．８ｍＭ、２．４〜２．９ｍＭ、２．５〜３ｍＭ、２．６〜３．１ｍＭ、２．７〜３．２ｍＭ、２．８〜３．３ｍＭ、２．９〜３．４ｍＭ、３〜３．５ｍＭ、３．１〜３．６ｍＭ、３．２〜３．７ｍＭ、３．３〜３．８ｍＭ、３．４〜３．９ｍＭ、３．５〜４ｍＭ、３．６〜４．１ｍＭ、３．７〜４．２ｍＭ、３．８〜４．３ｍＭ、３．９〜４．４ｍＭ、４〜４．５ｍＭ、４．１〜４．６ｍＭ、４．２〜４．７ｍＭ、４．３〜４．８ｍＭ、４．４〜４．９ｍＭ、４．５〜５ｍＭ、４．６〜５．１ｍＭ、４．７〜５．２ｍＭ、４．８〜５．３ｍＭ、４．９〜５．４ｍＭ、５〜５．５ｍＭ、５．１〜５．６ｍＭ、５．２〜５．７ｍＭ、５．３〜５．８ｍＭ、５．４〜５．９ｍＭ、５．５〜６ｍＭ、５．６〜６．１ｍＭ、５．７〜６．２ｍＭ、５．８〜６．３ｍＭ、５．９〜６．４ｍＭ、６〜６．５ｍＭ、６．１〜６．６ｍＭ、６．２〜６．７ｍＭ、６．３〜６．８ｍＭ、６．４〜６．９ｍＭ、６．５〜７ｍＭ、６．６〜７．１ｍＭ、６．７〜７．２ｍＭ、６．８〜７．３ｍＭ、６．９〜７．４ｍＭ、７〜７．５ｍＭ、７．１〜７．６ｍＭ、７．２〜７．７ｍＭ、７．３〜７．８ｍＭ、７．４〜７．９ｍＭ、７．５〜８ｍＭ、７．６〜８．１ｍＭ、７．７〜８．２ｍＭ、７．８〜８．３ｍＭ、７．９〜８．４ｍＭ、８〜８．５ｍＭ、８．１〜８．６ｍＭ、８．２〜８．７ｍＭ、８．３〜８．８ｍＭ、８．４〜８．９ｍＭ、８．５〜９ｍＭ、８．６〜９．１ｍＭ、８．７〜９．２ｍＭ、８．８〜９．３ｍＭ、８．９〜９．４ｍＭ、９〜９．５ｍＭ、９．１〜９．６ｍＭ、９．２〜９．７ｍＭ、９．３〜９．８ｍＭ、９．４〜９．９ｍＭ、９．５〜１０ｍＭ、９．６〜１０．１ｍＭ、９．７〜１０．２ｍＭ、９．８〜１０．３ｍＭ、９．９〜１０．４ｍＭ、１０〜１０．５ｍＭ、１０．１〜１０．６ｍＭ、１０．２〜１０．７ｍＭ、１０．３〜１０．８ｍＭ、１０．４〜１０．９ｍＭ、１０．５〜１１ｍＭ、１０．６〜１１．１ｍＭ、１０．７〜１１．２ｍＭ、１０．８〜１１．３ｍＭ、１０．９〜１１．４ｍＭ、１１〜１１．５ｍＭ、１１．１〜１１．６ｍＭ、１１．２〜１１．７ｍＭ、１１．３〜１１．８ｍＭ、１１．４〜１１．９ｍＭ、１１．５〜１２ｍＭ、１１．６〜１２．１ｍＭ、１１．７〜１２．２ｍＭ、１１．８〜１２．３ｍＭ、１１．９〜１２．４ｍＭ、１２〜１２．５ｍＭ、１２．１〜１２．６ｍＭ、１２．２〜１２．７ｍＭ、１２．３〜１２．８ｍＭ、１２．４〜１２．９ｍＭ、１２．５〜１３ｍＭ、１２．６〜１３．１ｍＭ、１２．７〜１３．２ｍＭ、１２．８〜１３．３ｍＭ、１２．９〜１３．４ｍＭ、１３〜１３．５ｍＭ、１３．１〜１３．６ｍＭ、１３．２〜１３．７ｍＭ、１３．３〜１３．８ｍＭ、１３．４〜１３．９ｍＭ、１３．５〜１４ｍＭ、１３．６〜１４．１ｍＭ、１３．７〜１４．２ｍＭ、１３．８〜１４．３ｍＭ、１３．９〜１４．４ｍＭ、１４〜１４．５ｍＭ、１４．１〜１４．６ｍＭ、１４．２〜１４．７ｍＭ、１４．３〜１４．８ｍＭ、１４．４〜１４．９ｍＭ、１４．５〜１５ｍＭ、０〜１ｍＭ、１〜２ｍＭ、２〜３ｍＭ、３〜４ｍＭ、４〜５ｍＭ、５〜６ｍＭ、６〜７ｍＭ、７〜８ｍＭ、８〜９ｍＭ、９〜１０ｍＭ、１０〜１１ｍＭ、１１〜１２ｍＭ、１２〜１３ｍＭ、１３〜１４ｍＭ、１４〜１５ｍＭ、１５〜１６ｍＭ、０〜２ｍＭ、１〜３ｍＭ、２〜４ｍＭ、３〜５ｍＭ、４〜６ｍＭ、５〜７ｍＭ、６〜８ｍＭ、７〜９ｍＭ、８〜１０ｍＭ、９〜１１ｍＭ、１０〜１２ｍＭ、１１〜１３ｍＭ、１２〜１４ｍＭ、１３〜１５ｍＭ、０〜３ｍＭ、１〜４ｍＭ、２〜５ｍＭ、３〜６ｍＭ、４〜７ｍＭ、５〜８ｍＭ、６〜９ｍＭ、７〜１０ｍＭ、８〜１１ｍＭ、９〜１２ｍＭ、１０〜１３ｍＭ、１１〜１４ｍＭ、１２〜１５ｍＭ、０〜４ｍＭ、１〜５ｍＭ、２〜６ｍＭ、３〜７ｍＭ、４〜８ｍＭ、５〜９ｍＭ、６〜１０ｍＭ、７〜１１ｍＭ、８〜１２ｍＭ、９〜１３ｍＭ、１０〜１４ｍＭ、１１〜１５ｍＭ、０〜５ｍＭ、１〜６ｍＭ、２〜７ｍＭ、３〜８ｍＭ、４〜９ｍＭ、５〜１０ｍＭ、６〜１１ｍＭ、７〜１２ｍＭ、８〜１３ｍＭ、９〜１４ｍＭ、１０〜１５ｍＭ、０〜６ｍＭ、１〜７ｍＭ、２〜８ｍＭ、３〜９ｍＭ、４〜１０ｍＭ、５〜１１ｍＭ、６〜１２ｍＭ、７〜１３ｍＭ、８〜１４ｍＭ、９〜１５ｍＭ、０〜７ｍＭ、１〜８ｍＭ、２〜９ｍＭ、３〜１０ｍＭ、４〜１１ｍＭ、５〜１２ｍＭ、６〜１３ｍＭ、７〜１４ｍＭ、８〜１５ｍＭ、０〜８ｍＭ、１〜９ｍＭ、２〜１０ｍＭ、３〜１１ｍＭ、４〜１２ｍＭ、５〜１３ｍＭ、６〜１４ｍＭ、７〜１５ｍＭ、０〜９ｍＭ、１〜１０ｍＭ、２〜１１ｍＭ、３〜１２ｍＭ、４〜１３ｍＭ、５〜１４ｍＭ、６〜１５ｍＭ、０〜１０ｍＭ、１〜１１ｍＭ、２〜１２ｍＭ、３〜１３ｍＭ、４〜１４ｍＭ、５〜１５ｍＭ、０〜１１ｍＭ、１〜１２ｍＭ、２〜１３ｍＭ、３〜１４ｍＭ、４〜１５ｍＭ、０〜１２ｍＭ、１〜１３ｍＭ、２〜１４ｍＭ、３〜１５ｍＭ、０〜１３ｍＭ、１〜１４ｍＭ、２〜１５ｍＭ、０〜１４ｍＭ、１〜１５ｍＭ、または０〜１５ｍＭの範囲のトリスを含んでいてもよい。
【０４０７】
ある特定の実施形態では、製剤は、０〜１０ｍＭのトリスを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、２〜１２ｍＭのトリスを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、１０ｍＭのトリスを含んでいてもよい。
【０４０８】
ヒスチジン
ある特定の実施形態では、製剤中の成分の少なくとも１つは、ヒスチジンである。
ある特定の実施形態では、製剤中のヒスチジンの濃度は、０．１ｍＭ、０．２ｍＭ、０．３ｍＭ、０．４ｍＭ、０．５ｍＭ、０．６ｍＭ、０．７ｍＭ、０．８ｍＭ、０．９ｍＭ、１ｍＭ、１．１ｍＭ、１．２ｍＭ、１．３ｍＭ、１．４ｍＭ、１．５ｍＭ、１．６ｍＭ、１．７ｍＭ、１．８ｍＭ、１．９ｍＭ、２ｍＭ、２．１ｍＭ、２．２ｍＭ、２．３ｍＭ、２．４ｍＭ、２．５ｍＭ、２．６ｍＭ、２．７ｍＭ、２．８ｍＭ、２．９ｍＭ、３ｍＭ、３．１ｍＭ、３．２ｍＭ、３．３ｍＭ、３．４ｍＭ、３．５ｍＭ、３．６ｍＭ、３．７ｍＭ、３．８ｍＭ、３．９ｍＭ、４ｍＭ、４．１ｍＭ、４．２ｍＭ、４．３ｍＭ、４．４ｍＭ、４．５ｍＭ、４．６ｍＭ、４．７ｍＭ、４．８ｍＭ、４．９ｍＭ、５ｍＭ、５．１ｍＭ、５．２ｍＭ、５．３ｍＭ、５．４ｍＭ、５．５ｍＭ、５．６ｍＭ、５．７ｍＭ、５．８ｍＭ、５．９ｍＭ、６ｍＭ、６．１ｍＭ、６．２ｍＭ、６．３ｍＭ、６．４ｍＭ、６．５ｍＭ、６．６ｍＭ、６．７ｍＭ、６．８ｍＭ、６．９ｍＭ、７ｍＭ、７．１ｍＭ、７．２ｍＭ、７．３ｍＭ、７．４ｍＭ、７．５ｍＭ、７．６ｍＭ、７．７ｍＭ、７．８ｍＭ、７．９ｍＭ、８ｍＭ、８．１ｍＭ、８．２ｍＭ、８．３ｍＭ、８．４ｍＭ、８．５ｍＭ、８．６ｍＭ、８．７ｍＭ、８．８ｍＭ、８．９ｍＭ、９ｍＭ、９．１ｍＭ、９．２ｍＭ、９．３ｍＭ、９．４ｍＭ、９．５ｍＭ、９．６ｍＭ、９．７ｍＭ、９．８ｍＭ、９．９ｍＭ、１０ｍＭ、１０．１ｍＭ、１０．２ｍＭ、１０．３ｍＭ、１０．４ｍＭ、１０．５ｍＭ、１０．６ｍＭ、１０．７ｍＭ、１０．８ｍＭ、１０．９ｍＭ、１１ｍＭ、１１．１ｍＭ、１１．２ｍＭ、１１．３ｍＭ、１１．４ｍＭ、１１．５ｍＭ、１１．６ｍＭ、１１．７ｍＭ、１１．８ｍＭ、１１．９ｍＭ、１２ｍＭ、１２．１ｍＭ、１２．２ｍＭ、１２．３ｍＭ、１２．４ｍＭ、１２．５ｍＭ、１２．６ｍＭ、１２．７ｍＭ、１２．８ｍＭ、１２．９ｍＭ、１３ｍＭ、１３．１ｍＭ、１３．２ｍＭ、１３．３ｍＭ、１３．４ｍＭ、１３．５ｍＭ、１３．６ｍＭ、１３．７ｍＭ、１３．８ｍＭ、１３．９ｍＭ、１４ｍＭ、１４．１ｍＭ、１４．２ｍＭ、１４．３ｍＭ、１４．４ｍＭ、１４．５ｍＭ、１４．６ｍＭ、１４．７ｍＭ、１４．８ｍＭ、１４．９ｍＭ、または１５ｍＭであってもよいが、これらに限定されない。
【０４０９】
製剤は、０〜０．５ｍＭ、０．１〜０．６ｍＭ、０．２〜０．７ｍＭ、０．３〜０．８ｍＭ、０．４〜０．９ｍＭ、０．５〜１ｍＭ、０．６〜１．１ｍＭ、０．７〜１．２ｍＭ、０．８〜１．３ｍＭ、０．９〜１．４ｍＭ、１〜１．５ｍＭ、１．１〜１．６ｍＭ、１．２〜１．７ｍＭ、１．３〜１．８ｍＭ、１．４〜１．９ｍＭ、１．５〜２ｍＭ、１．６〜２．１ｍＭ、１．７〜２．２ｍＭ、１．８〜２．３ｍＭ、１．９〜２．４ｍＭ、２〜２．５ｍＭ、２．１〜２．６ｍＭ、２．２〜２．７ｍＭ、２．３〜２．８ｍＭ、２．４〜２．９ｍＭ、２．５〜３ｍＭ、２．６〜３．１ｍＭ、２．７〜３．２ｍＭ、２．８〜３．３ｍＭ、２．９〜３．４ｍＭ、３〜３．５ｍＭ、３．１〜３．６ｍＭ、３．２〜３．７ｍＭ、３．３〜３．８ｍＭ、３．４〜３．９ｍＭ、３．５〜４ｍＭ、３．６〜４．１ｍＭ、３．７〜４．２ｍＭ、３．８〜４．３ｍＭ、３．９〜４．４ｍＭ、４〜４．５ｍＭ、４．１〜４．６ｍＭ、４．２〜４．７ｍＭ、４．３〜４．８ｍＭ、４．４〜４．９ｍＭ、４．５〜５ｍＭ、４．６〜５．１ｍＭ、４．７〜５．２ｍＭ、４．８〜５．３ｍＭ、４．９〜５．４ｍＭ、５〜５．５ｍＭ、５．１〜５．６ｍＭ、５．２〜５．７ｍＭ、５．３〜５．８ｍＭ、５．４〜５．９ｍＭ、５．５〜６ｍＭ、５．６〜６．１ｍＭ、５．７〜６．２ｍＭ、５．８〜６．３ｍＭ、５．９〜６．４ｍＭ、６〜６．５ｍＭ、６．１〜６．６ｍＭ、６．２〜６．７ｍＭ、６．３〜６．８ｍＭ、６．４〜６．９ｍＭ、６．５〜７ｍＭ、６．６〜７．１ｍＭ、６．７〜７．２ｍＭ、６．８〜７．３ｍＭ、６．９〜７．４ｍＭ、７〜７．５ｍＭ、７．１〜７．６ｍＭ、７．２〜７．７ｍＭ、７．３〜７．８ｍＭ、７．４〜７．９ｍＭ、７．５〜８ｍＭ、７．６〜８．１ｍＭ、７．７〜８．２ｍＭ、７．８〜８．３ｍＭ、７．９〜８．４ｍＭ、８〜８．５ｍＭ、８．１〜８．６ｍＭ、８．２〜８．７ｍＭ、８．３〜８．８ｍＭ、８．４〜８．９ｍＭ、８．５〜９ｍＭ、８．６〜９．１ｍＭ、８．７〜９．２ｍＭ、８．８〜９．３ｍＭ、８．９〜９．４ｍＭ、９〜９．５ｍＭ、９．１〜９．６ｍＭ、９．２〜９．７ｍＭ、９．３〜９．８ｍＭ、９．４〜９．９ｍＭ、９．５〜１０ｍＭ、９．６〜１０．１ｍＭ、９．７〜１０．２ｍＭ、９．８〜１０．３ｍＭ、９．９〜１０．４ｍＭ、１０〜１０．５ｍＭ、１０．１〜１０．６ｍＭ、１０．２〜１０．７ｍＭ、１０．３〜１０．８ｍＭ、１０．４〜１０．９ｍＭ、１０．５〜１１ｍＭ、１０．６〜１１．１ｍＭ、１０．７〜１１．２ｍＭ、１０．８〜１１．３ｍＭ、１０．９〜１１．４ｍＭ、１１〜１１．５ｍＭ、１１．１〜１１．６ｍＭ、１１．２〜１１．７ｍＭ、１１．３〜１１．８ｍＭ、１１．４〜１１．９ｍＭ、１１．５〜１２ｍＭ、１１．６〜１２．１ｍＭ、１１．７〜１２．２ｍＭ、１１．８〜１２．３ｍＭ、１１．９〜１２．４ｍＭ、１２〜１２．５ｍＭ、１２．１〜１２．６ｍＭ、１２．２〜１２．７ｍＭ、１２．３〜１２．８ｍＭ、１２．４〜１２．９ｍＭ、１２．５〜１３ｍＭ、１２．６〜１３．１ｍＭ、１２．７〜１３．２ｍＭ、１２．８〜１３．３ｍＭ、１２．９〜１３．４ｍＭ、１３〜１３．５ｍＭ、１３．１〜１３．６ｍＭ、１３．２〜１３．７ｍＭ、１３．３〜１３．８ｍＭ、１３．４〜１３．９ｍＭ、１３．５〜１４ｍＭ、１３．６〜１４．１ｍＭ、１３．７〜１４．２ｍＭ、１３．８〜１４．３ｍＭ、１３．９〜１４．４ｍＭ、１４〜１４．５ｍＭ、１４．１〜１４．６ｍＭ、１４．２〜１４．７ｍＭ、１４．３〜１４．８ｍＭ、１４．４〜１４．９ｍＭ、１４．５〜１５ｍＭ、０〜１ｍＭ、１〜２ｍＭ、２〜３ｍＭ、３〜４ｍＭ、４〜５ｍＭ、５〜６ｍＭ、６〜７ｍＭ、７〜８ｍＭ、８〜９ｍＭ、９〜１０ｍＭ、１０〜１１ｍＭ、１１〜１２ｍＭ、１２〜１３ｍＭ、１３〜１４ｍＭ、１４〜１５ｍＭ、１５〜１６ｍＭ、０〜２ｍＭ、１〜３ｍＭ、２〜４ｍＭ、３〜５ｍＭ、４〜６ｍＭ、５〜７ｍＭ、６〜８ｍＭ、７〜９ｍＭ、８〜１０ｍＭ、９〜１１ｍＭ、１０〜１２ｍＭ、１１〜１３ｍＭ、１２〜１４ｍＭ、１３〜１５ｍＭ、０〜３ｍＭ、１〜４ｍＭ、２〜５ｍＭ、３〜６ｍＭ、４〜７ｍＭ、５〜８ｍＭ、６〜９ｍＭ、７〜１０ｍＭ、８〜１１ｍＭ、９〜１２ｍＭ、１０〜１３ｍＭ、１１〜１４ｍＭ、１２〜１５ｍＭ、０〜４ｍＭ、１〜５ｍＭ、２〜６ｍＭ、３〜７ｍＭ、４〜８ｍＭ、５〜９ｍＭ、６〜１０ｍＭ、７〜１１ｍＭ、８〜１２ｍＭ、９〜１３ｍＭ、１０〜１４ｍＭ、１１〜１５ｍＭ、０〜５ｍＭ、１〜６ｍＭ、２〜７ｍＭ、３〜８ｍＭ、４〜９ｍＭ、５〜１０ｍＭ、６〜１１ｍＭ、７〜１２ｍＭ、８〜１３ｍＭ、９〜１４ｍＭ、１０〜１５ｍＭ、０〜６ｍＭ、１〜７ｍＭ、２〜８ｍＭ、３〜９ｍＭ、４〜１０ｍＭ、５〜１１ｍＭ、６〜１２ｍＭ、７〜１３ｍＭ、８〜１４ｍＭ、９〜１５ｍＭ、０〜７ｍＭ、１〜８ｍＭ、２〜９ｍＭ、３〜１０ｍＭ、４〜１１ｍＭ、５〜１２ｍＭ、６〜１３ｍＭ、７〜１４ｍＭ、８〜１５ｍＭ、０〜８ｍＭ、１〜９ｍＭ、２〜１０ｍＭ、３〜１１ｍＭ、４〜１２ｍＭ、５〜１３ｍＭ、６〜１４ｍＭ、７〜１５ｍＭ、０〜９ｍＭ、１〜１０ｍＭ、２〜１１ｍＭ、３〜１２ｍＭ、４〜１３ｍＭ、５〜１４ｍＭ、６〜１５ｍＭ、０〜１０ｍＭ、１〜１１ｍＭ、２〜１２ｍＭ、３〜１３ｍＭ、４〜１４ｍＭ、５〜１５ｍＭ、０〜１１ｍＭ、１〜１２ｍＭ、２〜１３ｍＭ、３〜１４ｍＭ、４〜１５ｍＭ、０〜１２ｍＭ、１〜１３ｍＭ、２〜１４ｍＭ、３〜１５ｍＭ、０〜１３ｍＭ、１〜１４ｍＭ、２〜１５ｍＭ、０〜１４ｍＭ、１〜１５ｍＭ、または０〜１５ｍＭの範囲のヒスチジンを含んでいてもよい。
【０４１０】
ある特定の実施形態では、製剤は、０〜１０ｍＭのヒスチジンを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、２〜１２ｍＭのヒスチジンを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、１０ｍＭのヒスチジンを含んでいてもよい。
【０４１１】
アルギニン
ある特定の実施形態では、製剤中の成分の少なくとも１つは、アルギニンである。
ある特定の実施形態では、アルギニンの濃度は、１ｍＭ、２ｍＭ、３ｍＭ、４ｍＭ、５ｍＭ、６ｍＭ、７ｍＭ、８ｍＭ、９ｍＭ、１０ｍＭ、１１ｍＭ、１２ｍＭ、１３ｍＭ、１４ｍＭ、１５ｍＭ、１６ｍＭ、１７ｍＭ、１８ｍＭ、１９ｍＭ、２０ｍＭ、２１ｍＭ、２２ｍＭ、２３ｍＭ、２４ｍＭ、２５ｍＭ、２６ｍＭ、２７ｍＭ、２８ｍＭ、２９ｍＭ、３０ｍＭ、３１ｍＭ、３２ｍＭ、３３ｍＭ、３４ｍＭ、３５ｍＭ、３６ｍＭ、３７ｍＭ、３８ｍＭ、３９ｍＭ、４０ｍＭ、４１ｍＭ、４２ｍＭ、４３ｍＭ、４４ｍＭ、４５ｍＭ、４６ｍＭ、４７ｍＭ、４８ｍＭ、４９ｍＭ、５０ｍＭ、５１ｍＭ、５２ｍＭ、５３ｍＭ、５４ｍＭ、５５ｍＭ、５６ｍＭ、５７ｍＭ、５８ｍＭ、５９ｍＭ、６０ｍＭ、６１ｍＭ、６２ｍＭ、６３ｍＭ、６４ｍＭ、６５ｍＭ、６６ｍＭ、６７ｍＭ、６８ｍＭ、６９ｍＭ、７０ｍＭ、７１ｍＭ、７２ｍＭ、７３ｍＭ、７４ｍＭ、７５ｍＭ、７６ｍＭ、７７ｍＭ、７８ｍＭ、７９ｍＭ、８０ｍＭ、８１ｍＭ、８２ｍＭ、８３ｍＭ、８４ｍＭ、８５ｍＭ、８６ｍＭ、８７ｍＭ、８８ｍＭ、８９ｍＭ、９０ｍＭ、９１ｍＭ、９２ｍＭ、９３ｍＭ、９４ｍＭ、９５ｍＭ、９６ｍＭ、９７ｍＭ、９８ｍＭ、９９ｍＭ、または１００ｍＭであってもよいが、これらに限定されない。
【０４１２】
製剤は、０〜５ｍＭ、１〜５ｍＭ、２〜５ｍＭ、３〜５ｍＭ、４〜５ｍＭ、０〜１０ｍＭ、１〜１０ｍＭ、２〜１０ｍＭ、３〜１０ｍＭ、４〜１０ｍＭ、５〜１０ｍＭ、６〜１０ｍＭ、７〜１０ｍＭ、８〜１０ｍＭ、９〜１０ｍＭ、０〜２５ｍＭ、１〜２５ｍＭ、２〜２５ｍＭ、３〜２５ｍＭ、４〜２５ｍＭ、５〜２５ｍＭ、６〜２５ｍＭ、７〜２５ｍＭ、８〜２５ｍＭ、９〜２５ｍＭ、１０〜２５ｍＭ、１１〜２５ｍＭ、１２〜２５ｍＭ、１３〜２５ｍＭ、１４〜２５ｍＭ、１５〜２５ｍＭ、１６〜２５ｍＭ、１７〜２５ｍＭ、１８〜２５ｍＭ、１９〜２５ｍＭ、２０〜２５ｍＭ、２１〜２５ｍＭ、２２〜２５ｍＭ、２３〜２５ｍＭ、２４〜２５ｍＭ、０〜５０ｍＭ、１〜５０ｍＭ、２〜５０ｍＭ、３〜５０ｍＭ、４〜５０ｍＭ、５〜５０ｍＭ、６〜５０ｍＭ、７〜５０ｍＭ、８〜５０ｍＭ、９〜５０ｍＭ、１０〜５０ｍＭ、１１〜５０ｍＭ、１２〜５０ｍＭ、１３〜５０ｍＭ、１４〜５０ｍＭ、１５〜５０ｍＭ、１６〜５０ｍＭ、１７〜５０ｍＭ、１８〜５０ｍＭ、１９〜５０ｍＭ、２０〜５０ｍＭ、２１〜５０ｍＭ、２２〜５０ｍＭ、２３〜５０ｍＭ、２４〜５０ｍＭ、２５〜５０ｍＭ、２６〜５０ｍＭ、２７〜５０ｍＭ、２８〜５０ｍＭ、２９〜５０ｍＭ、３０〜５０ｍＭ、３１〜５０ｍＭ、３２〜５０ｍＭ、３３〜５０ｍＭ、３４〜５０ｍＭ、３５〜５０ｍＭ、３６〜５０ｍＭ、３７〜５０ｍＭ、３８〜５０ｍＭ、３９〜５０ｍＭ、４０〜５０ｍＭ、４１〜５０ｍＭ、４２〜５０ｍＭ、４３〜５０ｍＭ、４４〜５０ｍＭ、４５〜５０ｍＭ、４６〜５０ｍＭ、４７〜５０ｍＭ、４８〜５０ｍＭ、４９〜５０ｍＭ、０〜７５ｍＭ、１〜７５ｍＭ、２〜７５ｍＭ、３〜７５ｍＭ、４〜７５ｍＭ、５〜７５ｍＭ、６〜７５ｍＭ、７〜７５ｍＭ、８〜７５ｍＭ、９〜７５ｍＭ、１０〜７５ｍＭ、１１〜７５ｍＭ、１２〜７５ｍＭ、１３〜７５ｍＭ、１４〜７５ｍＭ、１５〜７５ｍＭ、１６〜７５ｍＭ、１７〜７５ｍＭ、１８〜７５ｍＭ、１９〜７５ｍＭ、２０〜７５ｍＭ、２１〜７５ｍＭ、２２〜７５ｍＭ、２３〜７５ｍＭ、２４〜７５ｍＭ、２５〜７５ｍＭ、２６〜７５ｍＭ、２７〜７５ｍＭ、２８〜７５ｍＭ、２９〜７５ｍＭ、３０〜７５ｍＭ、３１〜７５ｍＭ、３２〜７５ｍＭ、３３〜７５ｍＭ、３４〜７５ｍＭ、３５〜７５ｍＭ、３６〜７５ｍＭ、３７〜７５ｍＭ、３８〜７５ｍＭ、３９〜７５ｍＭ、４０〜７５ｍＭ、４１〜７５ｍＭ、４２〜７５ｍＭ、４３〜７５ｍＭ、４４〜７５ｍＭ、４５〜７５ｍＭ、４６〜７５ｍＭ、４７〜７５ｍＭ、４８〜７５ｍＭ、４９〜７５ｍＭ、５０〜７５ｍＭ、５１〜７５ｍＭ、５２〜７５ｍＭ、５３〜７５ｍＭ、５４〜７５ｍＭ、５５〜７５ｍＭ、５６〜７５ｍＭ、５７〜７５ｍＭ、５８〜７５ｍＭ、５９〜７５ｍＭ、６０〜７５ｍＭ、６１〜７５ｍＭ、６２〜７５ｍＭ、６３〜７５ｍＭ、６４〜７５ｍＭ、６５〜７５ｍＭ、６６〜７５ｍＭ、６７〜７５ｍＭ、６８〜７５ｍＭ、６９〜７５ｍＭ、７０〜７５ｍＭ、７１〜７５ｍＭ、７２〜７５ｍＭ、７３〜７５ｍＭ、７４〜７５ｍＭ、５０〜１００ｍＭ、６０〜１００ｍＭ、７５〜１００ｍＭ、８０〜１００ｍＭ、または９０〜１００ｍＭの範囲のアルギニンを含んでいてもよい。
【０４１３】
ある特定の実施形態では、製剤は、０〜７５ｍＭのアルギニンを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、５０〜１００ｍＭのアルギニンを含んでいてもよい。
【０４１４】
ある特定の実施形態では、製剤は、７５ｍＭのアルギニンを含んでいてもよい。
塩酸
ある特定の実施形態では、製剤中の成分の少なくとも１つは、塩酸である。
【０４１５】
ある特定の実施形態では、製剤中の塩酸の濃度は、０．１ｍＭ、０．２ｍＭ、０．３ｍＭ、０．４ｍＭ、０．５ｍＭ、０．６ｍＭ、０．７ｍＭ、０．８ｍＭ、０．９ｍＭ、１ｍＭ、１．１ｍＭ、１．２ｍＭ、１．３ｍＭ、１．４ｍＭ、１．５ｍＭ、１．６ｍＭ、１．７ｍＭ、１．８ｍＭ、１．９ｍＭ、２ｍＭ、２．１ｍＭ、２．２ｍＭ、２．３ｍＭ、２．４ｍＭ、２．５ｍＭ、２．６ｍＭ、２．７ｍＭ、２．８ｍＭ、２．９ｍＭ、３ｍＭ、３．１ｍＭ、３．２ｍＭ、３．３ｍＭ、３．４ｍＭ、３．５ｍＭ、３．６ｍＭ、３．７ｍＭ、３．８ｍＭ、３．９ｍＭ、４ｍＭ、４．１ｍＭ、４．２ｍＭ、４．３ｍＭ、４．４ｍＭ、４．５ｍＭ、４．６ｍＭ、４．７ｍＭ、４．８ｍＭ、４．９ｍＭ、５ｍＭ、５．１ｍＭ、５．２ｍＭ、５．３ｍＭ、５．４ｍＭ、５．５ｍＭ、５．６ｍＭ、５．７ｍＭ、５．８ｍＭ、５．９ｍＭ、６ｍＭ、６．１ｍＭ、６．２ｍＭ、６．３ｍＭ、６．４ｍＭ、６．５ｍＭ、６．６ｍＭ、６．７ｍＭ、６．８ｍＭ、６．９ｍＭ、７ｍＭ、７．１ｍＭ、７．２ｍＭ、７．３ｍＭ、７．４ｍＭ、７．５ｍＭ、７．６ｍＭ、７．７ｍＭ、７．８ｍＭ、７．９ｍＭ、８ｍＭ、８．１ｍＭ、８．２ｍＭ、８．３ｍＭ、８．４ｍＭ、８．５ｍＭ、８．６ｍＭ、８．７ｍＭ、８．８ｍＭ、８．９ｍＭ、９ｍＭ、９．１ｍＭ、９．２ｍＭ、９．３ｍＭ、９．４ｍＭ、９．５ｍＭ、９．６ｍＭ、９．７ｍＭ、９．８ｍＭ、９．９ｍＭ、１０ｍＭ、１０．１ｍＭ、１０．２ｍＭ、１０．３ｍＭ、１０．４ｍＭ、１０．５ｍＭ、１０．６ｍＭ、１０．７ｍＭ、１０．８ｍＭ、１０．９ｍＭ、１１ｍＭ、１１．１ｍＭ、１１．２ｍＭ、１１．３ｍＭ、１１．４ｍＭ、１１．５ｍＭ、１１．６ｍＭ、１１．７ｍＭ、１１．８ｍＭ、１１．９ｍＭ、１２ｍＭ、１２．１ｍＭ、１２．２ｍＭ、１２．３ｍＭ、１２．４ｍＭ、１２．５ｍＭ、１２．６ｍＭ、１２．７ｍＭ、１２．８ｍＭ、１２．９ｍＭ、１３ｍＭ、１３．１ｍＭ、１３．２ｍＭ、１３．３ｍＭ、１３．４ｍＭ、１３．５ｍＭ、１３．６ｍＭ、１３．７ｍＭ、１３．８ｍＭ、１３．９ｍＭ、１４ｍＭ、１４．１ｍＭ、１４．２ｍＭ、１４．３ｍＭ、１４．４ｍＭ、１４．５ｍＭ、１４．６ｍＭ、１４．７ｍＭ、１４．８ｍＭ、１４．９ｍＭ、または１５ｍＭであってもよいが、これらに限定されない。
【０４１６】
製剤は、０〜０．５ｍＭ、０．１〜０．６ｍＭ、０．２〜０．７ｍＭ、０．３〜０．８ｍＭ、０．４〜０．９ｍＭ、０．５〜１ｍＭ、０．６〜１．１ｍＭ、０．７〜１．２ｍＭ、０．８〜１．３ｍＭ、０．９〜１．４ｍＭ、１〜１．５ｍＭ、１．１〜１．６ｍＭ、１．２〜１．７ｍＭ、１．３〜１．８ｍＭ、１．４〜１．９ｍＭ、１．５〜２ｍＭ、１．６〜２．１ｍＭ、１．７〜２．２ｍＭ、１．８〜２．３ｍＭ、１．９〜２．４ｍＭ、２〜２．５ｍＭ、２．１〜２．６ｍＭ、２．２〜２．７ｍＭ、２．３〜２．８ｍＭ、２．４〜２．９ｍＭ、２．５〜３ｍＭ、２．６〜３．１ｍＭ、２．７〜３．２ｍＭ、２．８〜３．３ｍＭ、２．９〜３．４ｍＭ、３〜３．５ｍＭ、３．１〜３．６ｍＭ、３．２〜３．７ｍＭ、３．３〜３．８ｍＭ、３．４〜３．９ｍＭ、３．５〜４ｍＭ、３．６〜４．１ｍＭ、３．７〜４．２ｍＭ、３．８〜４．３ｍＭ、３．９〜４．４ｍＭ、４〜４．５ｍＭ、４．１〜４．６ｍＭ、４．２〜４．７ｍＭ、４．３〜４．８ｍＭ、４．４〜４．９ｍＭ、４．５〜５ｍＭ、４．６〜５．１ｍＭ、４．７〜５．２ｍＭ、４．８〜５．３ｍＭ、４．９〜５．４ｍＭ、５〜５．５ｍＭ、５．１〜５．６ｍＭ、５．２〜５．７ｍＭ、５．３〜５．８ｍＭ、５．４〜５．９ｍＭ、５．５〜６ｍＭ、５．６〜６．１ｍＭ、５．７〜６．２ｍＭ、５．８〜６．３ｍＭ、５．９〜６．４ｍＭ、６〜６．５ｍＭ、６．１〜６．６ｍＭ、６．２〜６．７ｍＭ、６．３〜６．８ｍＭ、６．４〜６．９ｍＭ、６．５〜７ｍＭ、６．６〜７．１ｍＭ、６．７〜７．２ｍＭ、６．８〜７．３ｍＭ、６．９〜７．４ｍＭ、７〜７．５ｍＭ、７．１〜７．６ｍＭ、７．２〜７．７ｍＭ、７．３〜７．８ｍＭ、７．４〜７．９ｍＭ、７．５〜８ｍＭ、７．６〜８．１ｍＭ、７．７〜８．２ｍＭ、７．８〜８．３ｍＭ、７．９〜８．４ｍＭ、８〜８．５ｍＭ、８．１〜８．６ｍＭ、８．２〜８．７ｍＭ、８．３〜８．８ｍＭ、８．４〜８．９ｍＭ、８．５〜９ｍＭ、８．６〜９．１ｍＭ、８．７〜９．２ｍＭ、８．８〜９．３ｍＭ、８．９〜９．４ｍＭ、９〜９．５ｍＭ、９．１〜９．６ｍＭ、９．２〜９．７ｍＭ、９．３〜９．８ｍＭ、９．４〜９．９ｍＭ、９．５〜１０ｍＭ、９．６〜１０．１ｍＭ、９．７〜１０．２ｍＭ、９．８〜１０．３ｍＭ、９．９〜１０．４ｍＭ、１０〜１０．５ｍＭ、１０．１〜１０．６ｍＭ、１０．２〜１０．７ｍＭ、１０．３〜１０．８ｍＭ、１０．４〜１０．９ｍＭ、１０．５〜１１ｍＭ、１０．６〜１１．１ｍＭ、１０．７〜１１．２ｍＭ、１０．８〜１１．３ｍＭ、１０．９〜１１．４ｍＭ、１１〜１１．５ｍＭ、１１．１〜１１．６ｍＭ、１１．２〜１１．７ｍＭ、１１．３〜１１．８ｍＭ、１１．４〜１１．９ｍＭ、１１．５〜１２ｍＭ、１１．６〜１２．１ｍＭ、１１．７〜１２．２ｍＭ、１１．８〜１２．３ｍＭ、１１．９〜１２．４ｍＭ、１２〜１２．５ｍＭ、１２．１〜１２．６ｍＭ、１２．２〜１２．７ｍＭ、１２．３〜１２．８ｍＭ、１２．４〜１２．９ｍＭ、１２．５〜１３ｍＭ、１２．６〜１３．１ｍＭ、１２．７〜１３．２ｍＭ、１２．８〜１３．３ｍＭ、１２．９〜１３．４ｍＭ、１３〜１３．５ｍＭ、１３．１〜１３．６ｍＭ、１３．２〜１３．７ｍＭ、１３．３〜１３．８ｍＭ、１３．４〜１３．９ｍＭ、１３．５〜１４ｍＭ、１３．６〜１４．１ｍＭ、１３．７〜１４．２ｍＭ、１３．８〜１４．３ｍＭ、１３．９〜１４．４ｍＭ、１４〜１４．５ｍＭ、１４．１〜１４．６ｍＭ、１４．２〜１４．７ｍＭ、１４．３〜１４．８ｍＭ、１４．４〜１４．９ｍＭ、１４．５〜１５ｍＭ、０〜１ｍＭ、１〜２ｍＭ、２〜３ｍＭ、３〜４ｍＭ、４〜５ｍＭ、５〜６ｍＭ、６〜７ｍＭ、７〜８ｍＭ、８〜９ｍＭ、９〜１０ｍＭ、１０〜１１ｍＭ、１１〜１２ｍＭ、１２〜１３ｍＭ、１３〜１４ｍＭ、１４〜１５ｍＭ、１５〜１６ｍＭ、０〜２ｍＭ、１〜３ｍＭ、２〜４ｍＭ、３〜５ｍＭ、４〜６ｍＭ、５〜７ｍＭ、６〜８ｍＭ、７〜９ｍＭ、８〜１０ｍＭ、９〜１１ｍＭ、１０〜１２ｍＭ、１１〜１３ｍＭ、１２〜１４ｍＭ、１３〜１５ｍＭ、０〜３ｍＭ、１〜４ｍＭ、２〜５ｍＭ、３〜６ｍＭ、４〜７ｍＭ、５〜８ｍＭ、６〜９ｍＭ、７〜１０ｍＭ、８〜１１ｍＭ、９〜１２ｍＭ、１０〜１３ｍＭ、１１〜１４ｍＭ、１２〜１５ｍＭ、０〜４ｍＭ、１〜５ｍＭ、２〜６ｍＭ、３〜７ｍＭ、４〜８ｍＭ、５〜９ｍＭ、６〜１０ｍＭ、７〜１１ｍＭ、８〜１２ｍＭ、９〜１３ｍＭ、１０〜１４ｍＭ、１１〜１５ｍＭ、０〜５ｍＭ、１〜６ｍＭ、２〜７ｍＭ、３〜８ｍＭ、４〜９ｍＭ、５〜１０ｍＭ、６〜１１ｍＭ、７〜１２ｍＭ、８〜１３ｍＭ、９〜１４ｍＭ、１０〜１５ｍＭ、０〜６ｍＭ、１〜７ｍＭ、２〜８ｍＭ、３〜９ｍＭ、４〜１０ｍＭ、５〜１１ｍＭ、６〜１２ｍＭ、７〜１３ｍＭ、８〜１４ｍＭ、９〜１５ｍＭ、０〜７ｍＭ、１〜８ｍＭ、２〜９ｍＭ、３〜１０ｍＭ、４〜１１ｍＭ、５〜１２ｍＭ、６〜１３ｍＭ、７〜１４ｍＭ、８〜１５ｍＭ、０〜８ｍＭ、１〜９ｍＭ、２〜１０ｍＭ、３〜１１ｍＭ、４〜１２ｍＭ、５〜１３ｍＭ、６〜１４ｍＭ、７〜１５ｍＭ、０〜９ｍＭ、１〜１０ｍＭ、２〜１１ｍＭ、３〜１２ｍＭ、４〜１３ｍＭ、５〜１４ｍＭ、６〜１５ｍＭ、０〜１０ｍＭ、１〜１１ｍＭ、２〜１２ｍＭ、３〜１３ｍＭ、４〜１４ｍＭ、５〜１５ｍＭ、０〜１１ｍＭ、１〜１２ｍＭ、２〜１３ｍＭ、３〜１４ｍＭ、４〜１５ｍＭ、０〜１２ｍＭ、１〜１３ｍＭ、２〜１４ｍＭ、３〜１５ｍＭ、０〜１３ｍＭ、１〜１４ｍＭ、２〜１５ｍＭ、０〜１４ｍＭ、１〜１５ｍＭ、または０〜１５ｍＭの範囲の塩酸を含んでいてもよい。
【０４１７】
ある特定の実施形態では、製剤は、０〜１０ｍＭの塩酸を含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、６．２〜６．３ｍＭの塩酸を含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、８．９〜９ｍＭの塩酸を含んでいてもよい。
【０４１８】
ある特定の実施形態では、製剤は、６．２ｍＭの塩酸を含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、６．３ｍＭの塩酸を含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、８．９ｍＭの塩酸を含んでいてもよい。
【０４１９】
ある特定の実施形態では、製剤は、９ｍＭの塩酸を含んでいてもよい。
糖
ある特定の実施形態では、製剤は、少なくとも１つの糖および／または糖代替物を含んでいてもよい。
【０４２０】
ある特定の実施形態では、製剤は、製剤の安定性を増加させるために、少なくとも１つの糖および／または糖代替物を含んでいてもよい。この安定性の増加は、工程内プールのより長い保持時間を提供することができ、より長い「保管寿命」を提供することができ、溶液中のＡＡＶ粒子の濃度を増加させることができ（例えば、製剤は、ｒＡＡＶを溶液から脱離させずに、より高濃度のＡＡＶ粒子を有することができる）、および／または製剤中での凝集の発生もしくは形成を低減することができる。ある特定の実施形態では、製剤中に少なくとも１つの糖および／または糖代替物を含めることにより、製剤の安定性を、糖および／または糖代替物を有しない同じ製剤と比較して、１％、２％、３％、４％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９５％よりも大きく、１〜５％、５〜１５％、５〜２０％、５〜２５％、５〜３０％、５〜３５％、５〜４０％、５〜４５％、５〜５０％、５〜５５％、５〜６０％、５〜６５％、５〜７０％、５〜７５％、５〜８０％、５〜８５％、５〜９０％、５〜９５％、１０〜２０％、１０〜２５％、１０〜３０％、１０〜３５％、１０〜４０％、１０〜４５％、１０〜５０％、１０〜５５％、１０〜６０％、１０〜６５％、１０〜７０％、１０〜７５％、１０〜８０％、１０〜８５％、１０〜９０％、１０〜９５％、１５〜２５％、１５〜３０％、１５〜３５％、１５〜４０％、１５〜４５％、１５〜５０％、１５〜５５％、１５〜６０％、１５〜６５％、１５〜７０％、１５〜７５％、１５〜８０％、１５〜８５％、１５〜９０％、１５〜９５％、２０〜３０％、２０〜３５％、２０〜４０％、２０〜４５％、２０〜５０％、２０〜５５％、２０〜６０％、２０〜６５％、２０〜７０％、２０〜７５％、２０〜８０％、２０〜８５％、２０〜９０％、２０〜９５％、２５〜３５％、２５〜４０％、２５〜４５％、２５〜５０％、２５〜５５％、２５〜６０％、２５〜６５％、２５〜７０％、２５〜７５％、２５〜８０％、２５〜８５％、２５〜９０％、２５〜９５％、３０〜４０％、３０〜４５％、３０〜５０％、３０〜５５％、３０〜６０％、３０〜６５％、３０〜７０％、３０〜７５％、３０〜８０％、３０〜８５％、３０〜９０％、３０〜９５％、３５〜４５％、３５〜５０％、３５〜５５％、３５〜６０％、３５〜６５％、３５〜７０％、３５〜７５％、３５〜８０％、３５〜８５％、３５〜９０％、３５〜９５％、４０〜５０％、４０〜５５％、４０〜６０％、４０〜６５％、４０〜７０％、４０〜７５％、４０〜８０％、４０〜８５％、４０〜９０％、４０〜９５％、４５〜５５％、４５〜６０％、４５〜６５％、４５〜７０％、４５〜７５％、４５〜８０％、４５〜８５％、４５〜９０％、４５〜９５％、５０〜６０％、５０〜６５％、５０〜７０％、５０〜７５％、５０〜８０％、５０〜８５％、５０〜９０％、５０〜９５％、５５〜６５％、５５〜７０％、５５〜７５％、５５〜８０％、５５〜８５％、５５〜９０％、５５〜９５％、６０〜７０％、６０〜７５％、６０〜８０％、６０〜８５％、６０〜９０％、６０〜９５％、６５〜７５％、６５〜８０％、６５〜８５％、６５〜９０％、６５〜９５％、７０〜８０％、７０〜８５％、７０〜９０％、７０〜９５％、７５〜８５％、７５〜９０％、７５〜９５％、８０〜９０％、８０〜９５％、または９０〜９５％増加させることができる。
【０４２１】
ある特定の実施形態では、糖および／または糖代替物は、安定性を増加させるためにリン酸緩衝液と組み合わせて使用される。糖および／または糖代替物をリン酸緩衝液と組み合わせることにより、安定性を、糖および／または糖代替物を有しない同じ製剤と比較して、１％、２％、３％、４％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９５％よりも大きく、１〜５％、５〜１５％、５〜２０％、５〜２５％、５〜３０％、５〜３５％、５〜４０％、５〜４５％、５〜５０％、５〜５５％、５〜６０％、５〜６５％、５〜７０％、５〜７５％、５〜８０％、５〜８５％、５〜９０％、５〜９５％、１０〜２０％、１０〜２５％、１０〜３０％、１０〜３５％、１０〜４０％、１０〜４５％、１０〜５０％、１０〜５５％、１０〜６０％、１０〜６５％、１０〜７０％、１０〜７５％、１０〜８０％、１０〜８５％、１０〜９０％、１０〜９５％、１５〜２５％、１５〜３０％、１５〜３５％、１５〜４０％、１５〜４５％、１５〜５０％、１５〜５５％、１５〜６０％、１５〜６５％、１５〜７０％、１５〜７５％、１５〜８０％、１５〜８５％、１５〜９０％、１５〜９５％、２０〜３０％、２０〜３５％、２０〜４０％、２０〜４５％、２０〜５０％、２０〜５５％、２０〜６０％、２０〜６５％、２０〜７０％、２０〜７５％、２０〜８０％、２０〜８５％、２０〜９０％、２０〜９５％、２５〜３５％、２５〜４０％、２５〜４５％、２５〜５０％、２５〜５５％、２５〜６０％、２５〜６５％、２５〜７０％、２５〜７５％、２５〜８０％、２５〜８５％、２５〜９０％、２５〜９５％、３０〜４０％、３０〜４５％、３０〜５０％、３０〜５５％、３０〜６０％、３０〜６５％、３０〜７０％、３０〜７５％、３０〜８０％、３０〜８５％、３０〜９０％、３０〜９５％、３５〜４５％、３５〜５０％、３５〜５５％、３５〜６０％、３５〜６５％、３５〜７０％、３５〜７５％、３５〜８０％、３５〜８５％、３５〜９０％、３５〜９５％、４０〜５０％、４０〜５５％、４０〜６０％、４０〜６５％、４０〜７０％、４０〜７５％、４０〜８０％、４０〜８５％、４０〜９０％、４０〜９５％、４５〜５５％、４５〜６０％、４５〜６５％、４５〜７０％、４５〜７５％、４５〜８０％、４５〜８５％、４５〜９０％、４５〜９５％、５０〜６０％、５０〜６５％、５０〜７０％、５０〜７５％、５０〜８０％、５０〜８５％、５０〜９０％、５０〜９５％、５５〜６５％、５５〜７０％、５５〜７５％、５５〜８０％、５５〜８５％、５５〜９０％、５５〜９５％、６０〜７０％、６０〜７５％、６０〜８０％、６０〜８５％、６０〜９０％、６０〜９５％、６５〜７５％、６５〜８０％、６５〜８５％、６５〜９０％、６５〜９５％、７０〜８０％、７０〜８５％、７０〜９０％、７０〜９５％、７５〜８５％、７５〜９０％、７５〜９５％、８０〜９０％、８０〜９５％、または９０〜９５％増加させることができる。非限定的な例として、糖はスクロースである。別の非限定的な例として、糖はトレハロースである。別の非限定的な例として、糖代替物はソルビトールである。
【０４２２】
ある特定の実施形態では、製剤の保持時間を、糖および／または糖代替物を有しない同じ製剤と比較して、１％、２％、３％、４％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９５％よりも大きく、１〜５％、５〜１５％、５〜２０％、５〜２５％、５〜３０％、５〜３５％、５〜４０％、５〜４５％、５〜５０％、５〜５５％、５〜６０％、５〜６５％、５〜７０％、５〜７５％、５〜８０％、５〜８５％、５〜９０％、５〜９５％、１０〜２０％、１０〜２５％、１０〜３０％、１０〜３５％、１０〜４０％、１０〜４５％、１０〜５０％、１０〜５５％、１０〜６０％、１０〜６５％、１０〜７０％、１０〜７５％、１０〜８０％、１０〜８５％、１０〜９０％、１０〜９５％、１５〜２５％、１５〜３０％、１５〜３５％、１５〜４０％、１５〜４５％、１５〜５０％、１５〜５５％、１５〜６０％、１５〜６５％、１５〜７０％、１５〜７５％、１５〜８０％、１５〜８５％、１５〜９０％、１５〜９５％、２０〜３０％、２０〜３５％、２０〜４０％、２０〜４５％、２０〜５０％、２０〜５５％、２０〜６０％、２０〜６５％、２０〜７０％、２０〜７５％、２０〜８０％、２０〜８５％、２０〜９０％、２０〜９５％、２５〜３５％、２５〜４０％、２５〜４５％、２５〜５０％、２５〜５５％、２５〜６０％、２５〜６５％、２５〜７０％、２５〜７５％、２５〜８０％、２５〜８５％、２５〜９０％、２５〜９５％、３０〜４０％、３０〜４５％、３０〜５０％、３０〜５５％、３０〜６０％、３０〜６５％、３０〜７０％、３０〜７５％、３０〜８０％、３０〜８５％、３０〜９０％、３０〜９５％、３５〜４５％、３５〜５０％、３５〜５５％、３５〜６０％、３５〜６５％、３５〜７０％、３５〜７５％、３５〜８０％、３５〜８５％、３５〜９０％、３５〜９５％、４０〜５０％、４０〜５５％、４０〜６０％、４０〜６５％、４０〜７０％、４０〜７５％、４０〜８０％、４０〜８５％、４０〜９０％、４０〜９５％、４５〜５５％、４５〜６０％、４５〜６５％、４５〜７０％、４５〜７５％、４５〜８０％、４５〜８５％、４５〜９０％、４５〜９５％、５０〜６０％、５０〜６５％、５０〜７０％、５０〜７５％、５０〜８０％、５０〜８５％、５０〜９０％、５０〜９５％、５５〜６５％、５５〜７０％、５５〜７５％、５５〜８０％、５５〜８５％、５５〜９０％、５５〜９５％、６０〜７０％、６０〜７５％、６０〜８０％、６０〜８５％、６０〜９０％、６０〜９５％、６５〜７５％、６５〜８０％、６５〜８５％、６５〜９０％、６５〜９５％、７０〜８０％、７０〜８５％、７０〜９０％、７０〜９５％、７５〜８５％、７５〜９０％、７５〜９５％、８０〜９０％、８０〜９５％、または９０〜９５％増加させることができる。
【０４２３】
ある特定の実施形態では、製剤の保管寿命を、糖および／または糖代替物を有しない同じ製剤と比較して、１％、２％、３％、４％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９５％よりも大きく、１〜５％、５〜１５％、５〜２０％、５〜２５％、５〜３０％、５〜３５％、５〜４０％、５〜４５％、５〜５０％、５〜５５％、５〜６０％、５〜６５％、５〜７０％、５〜７５％、５〜８０％、５〜８５％、５〜９０％、５〜９５％、１０〜２０％、１０〜２５％、１０〜３０％、１０〜３５％、１０〜４０％、１０〜４５％、１０〜５０％、１０〜５５％、１０〜６０％、１０〜６５％、１０〜７０％、１０〜７５％、１０〜８０％、１０〜８５％、１０〜９０％、１０〜９５％、１５〜２５％、１５〜３０％、１５〜３５％、１５〜４０％、１５〜４５％、１５〜５０％、１５〜５５％、１５〜６０％、１５〜６５％、１５〜７０％、１５〜７５％、１５〜８０％、１５〜８５％、１５〜９０％、１５〜９５％、２０〜３０％、２０〜３５％、２０〜４０％、２０〜４５％、２０〜５０％、２０〜５５％、２０〜６０％、２０〜６５％、２０〜７０％、２０〜７５％、２０〜８０％、２０〜８５％、２０〜９０％、２０〜９５％、２５〜３５％、２５〜４０％、２５〜４５％、２５〜５０％、２５〜５５％、２５〜６０％、２５〜６５％、２５〜７０％、２５〜７５％、２５〜８０％、２５〜８５％、２５〜９０％、２５〜９５％、３０〜４０％、３０〜４５％、３０〜５０％、３０〜５５％、３０〜６０％、３０〜６５％、３０〜７０％、３０〜７５％、３０〜８０％、３０〜８５％、３０〜９０％、３０〜９５％、３５〜４５％、３５〜５０％、３５〜５５％、３５〜６０％、３５〜６５％、３５〜７０％、３５〜７５％、３５〜８０％、３５〜８５％、３５〜９０％、３５〜９５％、４０〜５０％、４０〜５５％、４０〜６０％、４０〜６５％、４０〜７０％、４０〜７５％、４０〜８０％、４０〜８５％、４０〜９０％、４０〜９５％、４５〜５５％、４５〜６０％、４５〜６５％、４５〜７０％、４５〜７５％、４５〜８０％、４５〜８５％、４５〜９０％、４５〜９５％、５０〜６０％、５０〜６５％、５０〜７０％、５０〜７５％、５０〜８０％、５０〜８５％、５０〜９０％、５０〜９５％、５５〜６５％、５５〜７０％、５５〜７５％、５５〜８０％、５５〜８５％、５５〜９０％、５５〜９５％、６０〜７０％、６０〜７５％、６０〜８０％、６０〜８５％、６０〜９０％、６０〜９５％、６５〜７５％、６５〜８０％、６５〜８５％、６５〜９０％、６５〜９５％、７０〜８０％、７０〜８５％、７０〜９０％、７０〜９５％、７５〜８５％、７５〜９０％、７５〜９５％、８０〜９０％、８０〜９５％、または９０〜９５％増加させることができる。保管寿命は、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４時間、または１、２、３、４週間、または１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４か月、または１、２、３、４、５、６、７年、または７年よりも長期であってもよい。
【０４２４】
ある特定の実施形態では、製剤中のＡＡＶ粒子の濃度を、糖および／または糖代替物を有しない同じ製剤と比較して、１％、２％、３％、４％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９５％よりも大きく、１〜５％、５〜１５％、５〜２０％、５〜２５％、５〜３０％、５〜３５％、５〜４０％、５〜４５％、５〜５０％、５〜５５％、５〜６０％、５〜６５％、５〜７０％、５〜７５％、５〜８０％、５〜８５％、５〜９０％、５〜９５％、１０〜２０％、１０〜２５％、１０〜３０％、１０〜３５％、１０〜４０％、１０〜４５％、１０〜５０％、１０〜５５％、１０〜６０％、１０〜６５％、１０〜７０％、１０〜７５％、１０〜８０％、１０〜８５％、１０〜９０％、１０〜９５％、１５〜２５％、１５〜３０％、１５〜３５％、１５〜４０％、１５〜４５％、１５〜５０％、１５〜５５％、１５〜６０％、１５〜６５％、１５〜７０％、１５〜７５％、１５〜８０％、１５〜８５％、１５〜９０％、１５〜９５％、２０〜３０％、２０〜３５％、２０〜４０％、２０〜４５％、２０〜５０％、２０〜５５％、２０〜６０％、２０〜６５％、２０〜７０％、２０〜７５％、２０〜８０％、２０〜８５％、２０〜９０％、２０〜９５％、２５〜３５％、２５〜４０％、２５〜４５％、２５〜５０％、２５〜５５％、２５〜６０％、２５〜６５％、２５〜７０％、２５〜７５％、２５〜８０％、２５〜８５％、２５〜９０％、２５〜９５％、３０〜４０％、３０〜４５％、３０〜５０％、３０〜５５％、３０〜６０％、３０〜６５％、３０〜７０％、３０〜７５％、３０〜８０％、３０〜８５％、３０〜９０％、３０〜９５％、３５〜４５％、３５〜５０％、３５〜５５％、３５〜６０％、３５〜６５％、３５〜７０％、３５〜７５％、３５〜８０％、３５〜８５％、３５〜９０％、３５〜９５％、４０〜５０％、４０〜５５％、４０〜６０％、４０〜６５％、４０〜７０％、４０〜７５％、４０〜８０％、４０〜８５％、４０〜９０％、４０〜９５％、４５〜５５％、４５〜６０％、４５〜６５％、４５〜７０％、４５〜７５％、４５〜８０％、４５〜８５％、４５〜９０％、４５〜９５％、５０〜６０％、５０〜６５％、５０〜７０％、５０〜７５％、５０〜８０％、５０〜８５％、５０〜９０％、５０〜９５％、５５〜６５％、５５〜７０％、５５〜７５％、５５〜８０％、５５〜８５％、５５〜９０％、５５〜９５％、６０〜７０％、６０〜７５％、６０〜８０％、６０〜８５％、６０〜９０％、６０〜９５％、６５〜７５％、６５〜８０％、６５〜８５％、６５〜９０％、６５〜９５％、７０〜８０％、７０〜８５％、７０〜９０％、７０〜９５％、７５〜８５％、７５〜９０％、７５〜９５％、８０〜９０％、８０〜９５％、または９０〜９５％増加させることができる。
【０４２５】
ある特定の実施形態では、糖および／または糖代替物の添加の結果として、製剤中での凝集体の形成（ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ）または発生を、糖および／または糖代替物を有しない同じ製剤と比較して、１％、２％、３％、４％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９５％よりも大きく、１〜５％、５〜１５％、５〜２０％、５〜２５％、５〜３０％、５〜３５％、５〜４０％、５〜４５％、５〜５０％、５〜５５％、５〜６０％、５〜６５％、５〜７０％、５〜７５％、５〜８０％、５〜８５％、５〜９０％、５〜９５％、１０〜２０％、１０〜２５％、１０〜３０％、１０〜３５％、１０〜４０％、１０〜４５％、１０〜５０％、１０〜５５％、１０〜６０％、１０〜６５％、１０〜７０％、１０〜７５％、１０〜８０％、１０〜８５％、１０〜９０％、１０〜９５％、１５〜２５％、１５〜３０％、１５〜３５％、１５〜４０％、１５〜４５％、１５〜５０％、１５〜５５％、１５〜６０％、１５〜６５％、１５〜７０％、１５〜７５％、１５〜８０％、１５〜８５％、１５〜９０％、１５〜９５％、２０〜３０％、２０〜３５％、２０〜４０％、２０〜４５％、２０〜５０％、２０〜５５％、２０〜６０％、２０〜６５％、２０〜７０％、２０〜７５％、２０〜８０％、２０〜８５％、２０〜９０％、２０〜９５％、２５〜３５％、２５〜４０％、２５〜４５％、２５〜５０％、２５〜５５％、２５〜６０％、２５〜６５％、２５〜７０％、２５〜７５％、２５〜８０％、２５〜８５％、２５〜９０％、２５〜９５％、３０〜４０％、３０〜４５％、３０〜５０％、３０〜５５％、３０〜６０％、３０〜６５％、３０〜７０％、３０〜７５％、３０〜８０％、３０〜８５％、３０〜９０％、３０〜９５％、３５〜４５％、３５〜５０％、３５〜５５％、３５〜６０％、３５〜６５％、３５〜７０％、３５〜７５％、３５〜８０％、３５〜８５％、３５〜９０％、３５〜９５％、４０〜５０％、４０〜５５％、４０〜６０％、４０〜６５％、４０〜７０％、４０〜７５％、４０〜８０％、４０〜８５％、４０〜９０％、４０〜９５％、４５〜５５％、４５〜６０％、４５〜６５％、４５〜７０％、４５〜７５％、４５〜８０％、４５〜８５％、４５〜９０％、４５〜９５％、５０〜６０％、５０〜６５％、５０〜７０％、５０〜７５％、５０〜８０％、５０〜８５％、５０〜９０％、５０〜９５％、５５〜６５％、５５〜７０％、５５〜７５％、５５〜８０％、５５〜８５％、５５〜９０％、５５〜９５％、６０〜７０％、６０〜７５％、６０〜８０％、６０〜８５％、６０〜９０％、６０〜９５％、６５〜７５％、６５〜８０％、６５〜８５％、６５〜９０％、６５〜９５％、７０〜８０％、７０〜８５％、７０〜９０％、７０〜９５％、７５〜８５％、７５〜９０％、７５〜９５％、８０〜９０％、８０〜９５％、または９０〜９５％低減させることができる。
【０４２６】
ある特定の実施形態では、糖および／または糖代替物の添加の結果として、凝集体の形成または発生は、当技術分野で公知の方法（例えば、ＤＬＳ測定）により決定して、糖および／または糖代替物を有しない同じ製剤と比較して、１％、２％、３％、４％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９５％よりも大きくてもよく、１〜５％、５〜１５％、５〜２０％、５〜２５％、５〜３０％、５〜３５％、５〜４０％、５〜４５％、５〜５０％、５〜５５％、５〜６０％、５〜６５％、５〜７０％、５〜７５％、５〜８０％、５〜８５％、５〜９０％、５〜９５％、１０〜２０％、１０〜２５％、１０〜３０％、１０〜３５％、１０〜４０％、１０〜４５％、１０〜５０％、１０〜５５％、１０〜６０％、１０〜６５％、１０〜７０％、１０〜７５％、１０〜８０％、１０〜８５％、１０〜９０％、１０〜９５％、１５〜２５％、１５〜３０％、１５〜３５％、１５〜４０％、１５〜４５％、１５〜５０％、１５〜５５％、１５〜６０％、１５〜６５％、１５〜７０％、１５〜７５％、１５〜８０％、１５〜８５％、１５〜９０％、１５〜９５％、２０〜３０％、２０〜３５％、２０〜４０％、２０〜４５％、２０〜５０％、２０〜５５％、２０〜６０％、２０〜６５％、２０〜７０％、２０〜７５％、２０〜８０％、２０〜８５％、２０〜９０％、２０〜９５％、２５〜３５％、２５〜４０％、２５〜４５％、２５〜５０％、２５〜５５％、２５〜６０％、２５〜６５％、２５〜７０％、２５〜７５％、２５〜８０％、２５〜８５％、２５〜９０％、２５〜９５％、３０〜４０％、３０〜４５％、３０〜５０％、３０〜５５％、３０〜６０％、３０〜６５％、３０〜７０％、３０〜７５％、３０〜８０％、３０〜８５％、３０〜９０％、３０〜９５％、３５〜４５％、３５〜５０％、３５〜５５％、３５〜６０％、３５〜６５％、３５〜７０％、３５〜７５％、３５〜８０％、３５〜８５％、３５〜９０％、３５〜９５％、４０〜５０％、４０〜５５％、４０〜６０％、４０〜６５％、４０〜７０％、４０〜７５％、４０〜８０％、４０〜８５％、４０〜９０％、４０〜９５％、４５〜５５％、４５〜６０％、４５〜６５％、４５〜７０％、４５〜７５％、４５〜８０％、４５〜８５％、４５〜９０％、４５〜９５％、５０〜６０％、５０〜６５％、５０〜７０％、５０〜７５％、５０〜８０％、５０〜８５％、５０〜９０％、５０〜９５％、５５〜６５％、５５〜７０％、５５〜７５％、５５〜８０％、５５〜８５％、５５〜９０％、５５〜９５％、６０〜７０％、６０〜７５％、６０〜８０％、６０〜８５％、６０〜９０％、６０〜９５％、６５〜７５％、６５〜８０％、６５〜８５％、６５〜９０％、６５〜９５％、７０〜８０％、７０〜８５％、７０〜９０％、７０〜９５％、７５〜８５％、７５〜９０％、７５〜９５％、８０〜９０％、８０〜９５％、または０〜９５％であってもよい。非限定的な例として、製剤の凝集は、少なくとも１つの糖および／または糖代替物を製剤に添加することにより、２％未満であってもよい。追加の凝集体は、当技術分野で公知の方法により除去することができる。
【０４２７】
ある特定の実施形態では、製剤は、０．１％、０．２％、０．３％、０．４％、０．５％、０．６％、０．７％、０．８％、０．９％、１％、１．１％、１．２％、１．３％、１．４％、１．５％、１．６％、１．７％、１．８％、１．９％、２％、２．１％、２．２％、２．３％、２．４％、２．５％、２．６％、２．７％、２．８％、２．９％、３％、３．１％、３．２％、３．３％、３．４％、３．５％、３．６％、３．７％、３．８％、３．９％、４％、４．１％、４．２％、４．３％、４．４％、４．５％、４．６％、４．７％、４．８％、４．９％、５％、５．１％、５．２％、５．３％、５．４％、５．５％、５．６％、５．７％、５．８％、５．９％、６％、６．１％、６．２％、６．３％、６．４％、６．５％、６．６％、６．７％、６．８％、６．９％、７％、７．１％、７．２％、７．３％、７．４％、７．５％、７．６％、７．７％、７．８％、７．９％、８％、８．１％、８．２％、８．３％、８．４％、８．５％、８．６％、８．７％、８．８％、８．９％、９％、９．１％、９．２％、９．３％、９．４％、９．５％、９．６％、９．７％、９．８％、９．９％、または１０ｗ／ｖ％の糖および／または糖代替物を含んでいてもよい。
【０４２８】
ある特定の実施形態では、製剤は、０〜１％、０．１〜１％、０．２〜１％、０．３〜１％、０．４〜１％、０．５〜１％、０．６〜１％、０．７〜１％、０．８〜１％、０．９〜１％、０〜１．５％、０．１〜１．５％、０．２〜１．５％、０．３〜１．５％、０．４〜１．５％、０．５〜１．５％、０．６〜１．５％、０．７〜１．５％、０．８〜１．５％、０．９〜１．５％、１〜１．５％、１．１〜１．５％、１．２〜１．５％、１．３〜１．５％、１．４〜１．５％、０〜２％、０．１〜２％、０．２〜２％、０．３〜２％、０．４〜２％、０．５〜２％、０．６〜２％、０．７〜２％、０．８〜２％、０．９〜２％、１〜２％、１．１〜２％、１．２〜２％、１．３〜２％、１．４〜２％、１．５〜２％、１．６〜２％、１．７〜２％、１．８〜２％、１．９〜２％、０〜２．５％、０．１〜２．５％、０．２〜２．５％、０．３〜２．５％、０．４〜２．５％、０．５〜２．５％、０．６〜２．５％、０．７〜２．５％、０．８〜２．５％、０．９〜２．５％、１〜２．５％、１．１〜２．５％、１．２〜２．５％、１．３〜２．５％、１．４〜２．５％、１．５〜２．５％、１．６〜２．５％、１．７〜２．５％、１．８〜２．５％、１．９〜２．５％、２〜２．５％、２．１〜２．５％、２．２〜２．５％、２．３〜２．５％、２．４〜２．５％、０〜３％、０．１〜３％、０．２〜３％、０．３〜３％、０．４〜３％、０．５〜３％、０．６〜３％、０．７〜３％、０．８〜３％、０．９〜３％、１〜３％、１．１〜３％、１．２〜３％、１．３〜３％、１．４〜３％、１．５〜３％、１．６〜３％、１．７〜３％、１．８〜３％、１．９〜３％、２〜３％、２．１〜３％、２．２〜３％、２．３〜３％、２．４〜３％、２．５〜３％、２．６〜３％、２．７〜３％、２．８〜３％、２．９〜３％、０〜３．５％、０．１〜３．５％、０．２〜３．５％、０．３〜３．５％、０．４〜３．５％、０．５〜３．５％、０．６〜３．５％、０．７〜３．５％、０．８〜３．５％、０．９〜３．５％、１〜３．５％、１．１〜３．５％、１．２〜３．５％、１．３〜３．５％、１．４〜３．５％、１．５〜３．５％、１．６〜３．５％、１．７〜３．５％、１．８〜３．５％、１．９〜３．５％、２〜３．５％、２．１〜３．５％、２．２〜３．５％、２．３〜３．５％、２．４〜３．５％、２．５〜３．５％、２．６〜３．５％、２．７〜３．５％、２．８〜３．５％、２．９〜３．５％、３〜３．５％、３．１〜３．５％、３．２〜３．５％、３．３〜３．５％、３．４〜３．５％、０〜４％、０．１〜４％、０．２〜４％、０．３〜４％、０．４〜４％、０．５〜４％、０．６〜４％、０．７〜４％、０．８〜４％、０．９〜４％、１〜４％、１．１〜４％、１．２〜４％、１．３〜４％、１．４〜４％、１．５〜４％、１．６〜４％、１．７〜４％、１．８〜４％、１．９〜４％、２〜４％、２．１〜４％、２．２〜４％、２．３〜４％、２．４〜４％、２．５〜４％、２．６〜４％、２．７〜４％、２．８〜４％、２．９〜４％、３〜４％、３．１〜４％、３．２〜４％、３．３〜４％、３．４〜４％、３．５〜４％、３．６〜４％、３．７〜４％、３．８〜４％、３．９〜４％、０〜４．５％、０．１〜４．５％、０．２〜４．５％、０．３〜４．５％、０．４〜４．５％、０．５〜４．５％、０．６〜４．５％、０．７〜４．５％、０．８〜４．５％、０．９〜４．５％、１〜４．５％、１．１〜４．５％、１．２〜４．５％、１．３〜４．５％、１．４〜４．５％、１．５〜４．５％、１．６〜４．５％、１．７〜４．５％、１．８〜４．５％、１．９〜４．５％、２〜４．５％、２．１〜４．５％、２．２〜４．５％、２．３〜４．５％、２．４〜４．５％、２．５〜４．５％、２．６〜４．５％、２．７〜４．５％、２．８〜４．５％、２．９〜４．５％、３〜４．５％、３．１〜４．５％、３．２〜４．５％、３．３〜４．５％、３．４〜４．５％、３．５〜４．５％、３．６〜４．５％、３．７〜４．５％、３．８〜４．５％、３．９〜４．５％、４〜４．５％、４．１〜４．５％、４．２〜４．５％、４．３〜４．５％、４．４〜４．５％、０〜５％、０．１〜５％、０．２〜５％、０．３〜５％、０．４〜５％、０．５〜５％、０．６〜５％、０．７〜５％、０．８〜５％、０．９〜５％、１〜５％、１．１〜５％、１．２〜５％、１．３〜５％、１．４〜５％、１．５〜５％、１．６〜５％、１．７〜５％、１．８〜５％、１．９〜５％、２〜５％、２．１〜５％、２．２〜５％、２．３〜５％、２．４〜５％、２．５〜５％、２．６〜５％、２．７〜５％、２．８〜５％、２．９〜５％、３〜５％、３．１〜５％、３．２〜５％、３．３〜５％、３．４〜５％、３．５〜５％、３．６〜５％、３．７〜５％、３．８〜５％、３．９〜５％、４〜５％、４．１〜５％、４．２〜５％、４．３〜５％、４．４〜５％、４．５〜５％、４．６〜５％、４．７〜５％、４．８〜５％、４．９〜５％、０〜５．５％、０．１〜５．５％、０．２〜５．５％、０．３〜５．５％、０．４〜５．５％、０．５〜５．５％、０．６〜５．５％、０．７〜５．５％、０．８〜５．５％、０．９〜５．５％、１〜５．５％、１．１〜５．５％、１．２〜５．５％、１．３〜５．５％、１．４〜５．５％、１．５〜５．５％、１．６〜５．５％、１．７〜５．５％、１．８〜５．５％、１．９〜５．５％、２〜５．５％、２．１〜５．５％、２．２〜５．５％、２．３〜５．５％、２．４〜５．５％、２．５〜５．５％、２．６〜５．５％、２．７〜５．５％、２．８〜５．５％、２．９〜５．５％、３〜５．５％、３．１〜５．５％、３．２〜５．５％、３．３〜５．５％、３．４〜５．５％、３．５〜５．５％、３．６〜５．５％、３．７〜５．５％、３．８〜５．５％、３．９〜５．５％、４〜５．５％、４．１〜５．５％、４．２〜５．５％、４．３〜５．５％、４．４〜５．５％、４．５〜５．５％、４．６〜５．５％、４．７〜５．５％、４．８〜５．５％、４．９〜５．５％、５〜５．５％、５．１〜５．５％、５．２〜５．５％、５．３〜５．５％、５．４〜５．５％、０〜６％、０．１〜６％、０．２〜６％、０．３〜６％、０．４〜６％、０．５〜６％、０．６〜６％、０．７〜６％、０．８〜６％、０．９〜６％、１〜６％、１．１〜６％、１．２〜６％、１．３〜６％、１．４〜６％、１．５〜６％、１．６〜６％、１．７〜６％、１．８〜６％、１．９〜６％、２〜６％、２．１〜６％、２．２〜６％、２．３〜６％、２．４〜６％、２．５〜６％、２．６〜６％、２．７〜６％、２．８〜６％、２．９〜６％、３〜６％、３．１〜６％、３．２〜６％、３．３〜６％、３．４〜６％、３．５〜６％、３．６〜６％、３．７〜６％、３．８〜６％、３．９〜６％、４〜６％、４．１〜６％、４．２〜６％、４．３〜６％、４．４〜６％、４．５〜６％、４．６〜６％、４．７〜６％、４．８〜６％、４．９〜６％、５〜６％、５．１〜６％、５．２〜６％、５．３〜６％、５．４〜６％、５．５〜６％、５．６〜６％、５．７〜６％、５．８〜６％、５．９〜６％、０〜６．５％、０．１〜６．５％、０．２〜６．５％、０．３〜６．５％、０．４〜６．５％、０．５〜６．５％、０．６〜６．５％、０．７〜６．５％、０．８〜６．５％、０．９〜６．５％、１〜６．５％、１．１〜６．５％、１．２〜６．５％、１．３〜６．５％、１．４〜６．５％、１．５〜６．５％、１．６〜６．５％、１．７〜６．５％、１．８〜６．５％、１．９〜６．５％、２〜６．５％、２．１〜６．５％、２．２〜６．５％、２．３〜６．５％、２．４〜６．５％、２．５〜６．５％、２．６〜６．５％、２．７〜６．５％、２．８〜６．５％、２．９〜６．５％、３〜６．５％、３．１〜６．５％、３．２〜６．５％、３．３〜６．５％、３．４〜６．５％、３．５〜６．５％、３．６〜６．５％、３．７〜６．５％、３．８〜６．５％、３．９〜６．５％、４〜６．５％、４．１〜６．５％、４．２〜６．５％、４．３〜６．５％、４．４〜６．５％、４．５〜６．５％、４．６〜６．５％、４．７〜６．５％、４．８〜６．５％、４．９〜６．５％、５〜６．５％、５．１〜６．５％、５．２〜６．５％、５．３〜６．５％、５．４〜６．５％、５．５〜６．５％、５．６〜６．５％、５．７〜６．５％、５．８〜６．５％、５．９〜６．５％、６〜６．５％、６．１〜６．５％、６．２〜６．５％、６．３〜６．５％、６．４〜６．５％、０〜７％、０．１〜７％、０．２〜７％、０．３〜７％、０．４〜７％、０．５〜７％、０．６〜７％、０．７〜７％、０．８〜７％、０．９〜７％、１〜７％、１．１〜７％、１．２〜７％、１．３〜７％、１．４〜７％、１．５〜７％、１．６〜７％、１．７〜７％、１．８〜７％、１．９〜７％、２〜７％、２．１〜７％、２．２〜７％、２．３〜７％、２．４〜７％、２．５〜７％、２．６〜７％、２．７〜７％、２．８〜７％、２．９〜７％、３〜７％、３．１〜７％、３．２〜７％、３．３〜７％、３．４〜７％、３．５〜７％、３．６〜７％、３．７〜７％、３．８〜７％、３．９〜７％、４〜７％、４．１〜７％、４．２〜７％、４．３〜７％、４．４〜７％、４．５〜７％、４．６〜７％、４．７〜７％、４．８〜７％、４．９〜７％、５〜７％、５．１〜７％、５．２〜７％、５．３〜７％、５．４〜７％、５．５〜７％、５．６〜７％、５．７〜７％、５．８〜７％、５．９〜７％、６〜７％、６．１〜７％、６．２〜７％、６．３〜７％、６．４〜７％、６．５〜７％、６．６〜７％、６．７〜７％、６．８〜７％、６．９〜７％、０〜７．５％、０．１〜７．５％、０．２〜７．５％、０．３〜７．５％、０．４〜７．５％、０．５〜７．５％、０．６〜７．５％、０．７〜７．５％、０．８〜７．５％、０．９〜７．５％、１〜７．５％、１．１〜７．５％、１．２〜７．５％、１．３〜７．５％、１．４〜７．５％、１．５〜７．５％、１．６〜７．５％、１．７〜７．５％、１．８〜７．５％、１．９〜７．５％、２〜７．５％、２．１〜７．５％、２．２〜７．５％、２．３〜７．５％、２．４〜７．５％、２．５〜７．５％、２．６〜７．５％、２．７〜７．５％、２．８〜７．５％、２．９〜７．５％、３〜７．５％、３．１〜７．５％、３．２〜７．５％、３．３〜７．５％、３．４〜７．５％、３．５〜７．５％、３．６〜７．５％、３．７〜７．５％、３．８〜７．５％、３．９〜７．５％、４〜７．５％、４．１〜７．５％、４．２〜７．５％、４．３〜７．５％、４．４〜７．５％、４．５〜７．５％、４．６〜７．５％、４．７〜７．５％、４．８〜７．５％、４．９〜７．５％、５〜７．５％、５．１〜７．５％、５．２〜７．５％、５．３〜７．５％、５．４〜７．５％、５．５〜７．５％、５．６〜７．５％、５．７〜７．５％、５．８〜７．５％、５．９〜７．５％、６〜７．５％、６．１〜７．５％、６．２〜７．５％、６．３〜７．５％、６．４〜７．５％、６．５〜７．５％、６．６〜７．５％、６．７〜７．５％、６．８〜７．５％、６．９〜７．５％、７〜７．５％、７．１〜７．５％、７．２〜７．５％、７．３〜７．５％、７．４〜７．５％、０〜８％、０．１〜８％、０．２〜８％、０．３〜８％、０．４〜８％、０．５〜８％、０．６〜８％、０．７〜８％、０．８〜８％、０．９〜８％、１〜８％、１．１〜８％、１．２〜８％、１．３〜８％、１．４〜８％、１．５〜８％、１．６〜８％、１．７〜８％、１．８〜８％、１．９〜８％、２〜８％、２．１〜８％、２．２〜８％、２．３〜８％、２．４〜８％、２．５〜８％、２．６〜８％、２．７〜８％、２．８〜８％、２．９〜８％、３〜８％、３．１〜８％、３．２〜８％、３．３〜８％、３．４〜８％、３．５〜８％、３．６〜８％、３．７〜８％、３．８〜８％、３．９〜８％、４〜８％、４．１〜８％、４．２〜８％、４．３〜８％、４．４〜８％、４．５〜８％、４．６〜８％、４．７〜８％、４．８〜８％、４．９〜８％、５〜８％、５．１〜８％、５．２〜８％、５．３〜８％、５．４〜８％、５．５〜８％、５．６〜８％、５．７〜８％、５．８〜８％、５．９〜８％、６〜８％、６．１〜８％、６．２〜８％、６．３〜８％、６
．４〜８％、６．５〜８％、６．６〜８％、６．７〜８％、６．８〜８％、６．９〜８％、７〜８％、７．１〜８％、７．２〜８％、７．３〜８％、７．４〜８％、７．５〜８％、７．６〜８％、７．７〜８％、７．８〜８％、７．９〜８％、０〜８．５％、０．１〜８．５％、０．２〜８．５％、０．３〜８．５％、０．４〜８．５％、０．５〜８．５％、０．６〜８．５％、０．７〜８．５％、０．８〜８．５％、０．９〜８．５％、１〜８．５％、１．１〜８．５％、１．２〜８．５％、１．３〜８．５％、１．４〜８．５％、１．５〜８．５％、１．６〜８．５％、１．７〜８．５％、１．８〜８．５％、１．９〜８．５％、２〜８．５％、２．１〜８．５％、２．２〜８．５％、２．３〜８．５％、２．４〜８．５％、２．５〜８．５％、２．６〜８．５％、２．７〜８．５％、２．８〜８．５％、２．９〜８．５％、３〜８．５％、３．１〜８．５％、３．２〜８．５％、３．３〜８．５％、３．４〜８．５％、３．５〜８．５％、３．６〜８．５％、３．７〜８．５％、３．８〜８．５％、３．９〜８．５％、４〜８．５％、４．１〜８．５％、４．２〜８．５％、４．３〜８．５％、４．４〜８．５％、４．５〜８．５％、４．６〜８．５％、４．７〜８．５％、４．８〜８．５％、４．９〜８．５％、５〜８．５％、５．１〜８．５％、５．２〜８．５％、５．３〜８．５％、５．４〜８．５％、５．５〜８．５％、５．６〜８．５％、５．７〜８．５％、５．８〜８．５％、５．９〜８．５％、６〜８．５％、６．１〜８．５％、６．２〜８．５％、６．３〜８．５％、６．４〜８．５％、６．５〜８．５％、６．６〜８．５％、６．７〜８．５％、６．８〜８．５％、６．９〜８．５％、７〜８．５％、７．１〜８．５％、７．２〜８．５％、７．３〜８．５％、７．４〜８．５％、７．５〜８．５％、７．６〜８．５％、７．７〜８．５％、７．８〜８．５％、７．９〜８．５％、８〜８．５％、８．１〜８．５％、８．２〜８．５％、８．３〜８．５％、８．４〜８．５％、０〜９％、０．１〜９％、０．２〜９％、０．３〜９％、０．４〜９％、０．５〜９％、０．６〜９％、０．７〜９％、０．８〜９％、０．９〜９％、１〜９％、１．１〜９％、１．２〜９％、１．３〜９％、１．４〜９％、１．５〜９％、１．６〜９％、１．７〜９％、１．８〜９％、１．９〜９％、２〜９％、２．１〜９％、２．２〜９％、２．３〜９％、２．４〜９％、２．５〜９％、２．６〜９％、２．７〜９％、２．８〜９％、２．９〜９％、３〜９％、３．１〜９％、３．２〜９％、３．３〜９％、３．４〜９％、３．５〜９％、３．６〜９％、３．７〜９％、３．８〜９％、３．９〜９％、４〜９％、４．１〜９％、４．２〜９％、４．３〜９％、４．４〜９％、４．５〜９％、４．６〜９％、４．７〜９％、４．８〜９％、４．９〜９％、５〜９％、５．１〜９％、５．２〜９％、５．３〜９％、５．４〜９％、５．５〜９％、５．６〜９％、５．７〜９％、５．８〜９％、５．９〜９％、６〜９％、６．１〜９％、６．２〜９％、６．３〜９％、６．４〜９％、６．５〜９％、６．６〜９％、６．７〜９％、６．８〜９％、６．９〜９％、７〜９％、７．１〜９％、７．２〜９％、７．３〜９％、７．４〜９％、７．５〜９％、７．６〜９％、７．７〜９％、７．８〜９％、７．９〜９％、８〜９％、８．１〜９％、８．２〜９％、８．３〜９％、８．４〜９％、８．５〜９％、８．６〜９％、８．７〜９％、８．８〜９％、８．９〜９％、０〜９．５％、０．１〜９．５％、０．２〜９．５％、０．３〜９．５％、０．４〜９．５％、０．５〜９．５％、０．６〜９．５％、０．７〜９．５％、０．８〜９．５％、０．９〜９．５％、１〜９．５％、１．１〜９．５％、１．２〜９．５％、１．３〜９．５％、１．４〜９．５％、１．５〜９．５％、１．６〜９．５％、１．７〜９．５％、１．８〜９．５％、１．９〜９．５％、２〜９．５％、２．１〜９．５％、２．２〜９．５％、２．３〜９．５％、２．４〜９．５％、２．５〜９．５％、２．６〜９．５％、２．７〜９．５％、２．８〜９．５％、２．９〜９．５％、３〜９．５％、３．１〜９．５％、３．２〜９．５％、３．３〜９．５％、３．４〜９．５％、３．５〜９．５％、３．６〜９．５％、３．７〜９．５％、３．８〜９．５％、３．９〜９．５％、４〜９．５％、４．１〜９．５％、４．２〜９．５％、４．３〜９．５％、４．４〜９．５％、４．５〜９．５％、４．６〜９．５％、４．７〜９．５％、４．８〜９．５％、４．９〜９．５％、５〜９．５％、５．１〜９．５％、５．２〜９．５％、５．３〜９．５％、５．４〜９．５％、５．５〜９．５％、５．６〜９．５％、５．７〜９．５％、５．８〜９．５％、５．９〜９．５％、６〜９．５％、６．１〜９．５％、６．２〜９．５％、６．３〜９．５％、６．４〜９．５％、６．５〜９．５％、６．６〜９．５％、６．７〜９．５％、６．８〜９．５％、６．９〜９．５％、７〜９．５％、７．１〜９．５％、７．２〜９．５％、７．３〜９．５％、７．４〜９．５％、７．５〜９．５％、７．６〜９．５％、７．７〜９．５％、７．８〜９．５％、７．９〜９．５％、８〜９．５％、８．１〜９．５％、８．２〜９．５％、８．３〜９．５％、８．４〜９．５％、８．５〜９．５％、８．６〜９．５％、８．７〜９．５％、８．８〜９．５％、８．９〜９．５％、９〜９．５％、９．１〜９．５％、９．２〜９．５％、９．３〜９．５％、９．４〜９．５％、０〜１０％、０．１〜１０％、０．２〜１０％、０．３〜１０％、０．４〜１０％、０．５〜１０％、０．６〜１０％、０．７〜１０％、０．８〜１０％、０．９〜１０％、１〜１０％、１．１〜１０％、１．２〜１０％、１．３〜１０％、１．４〜１０％、１．５〜１０％、１．６〜１０％、１．７〜１０％、１．８〜１０％、１．９〜１０％、２〜１０％、２．１〜１０％、２．２〜１０％、２．３〜１０％、２．４〜１０％、２．５〜１０％、２．６〜１０％、２．７〜１０％、２．８〜１０％、２．９〜１０％、３〜１０％、３．１〜１０％、３．２〜１０％、３．３〜１０％、３．４〜１０％、３．５〜１０％、３．６〜１０％、３．７〜１０％、３．８〜１０％、３．９〜１０％、４〜１０％、４．１〜１０％、４．２〜１０％、４．３〜１０％、４．４〜１０％、４．５〜１０％、４．６〜１０％、４．７〜１０％、４．８〜１０％、４．９〜１０％、５〜１０％、５．１〜１０％、５．２〜１０％、５．３〜１０％、５．４〜１０％、５．５〜１０％、５．６〜１０％、５．７〜１０％、５．８〜１０％、５．９〜１０％、６〜１０％、６．１〜１０％、６．２〜１０％、６．３〜１０％、６．４〜１０％、６．５〜１０％、６．６〜１０％、６．７〜１０％、６．８〜１０％、６．９〜１０％、７〜１０％、７．１〜１０％、７．２〜１０％、７．３〜１０％、７．４〜１０％、７．５〜１０％、７．６〜１０％、７．７〜１０％、７．８〜１０％、７．９〜１０％、８〜１０％、８．１〜１０％、８．２〜１０％、８．３〜１０％、８．４〜１０％、８．５〜１０％、８．６〜１０％、８．７〜１０％、８．８〜１０％、８．９〜１０％、９〜１０％、９．１〜１０％、９．２〜１０％、９．３〜１０％、９．４〜１０％、９．５〜１０％、９．６〜１０％、９．７〜１０％、９．８〜１０％、または９．９〜１０ｗ／ｖ％の範囲の糖および／または糖代替物を含んでいてもよい。
【０４２９】
ある特定の実施形態では、製剤は、０〜１０ｗ／ｖ％の糖および／または糖代替物を含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、０〜９ｗ／ｖ％の糖および／または糖代替物を含んでいてもよい。
【０４３０】
ある特定の実施形態では、製剤は、１ｗ／ｖ％の糖および／または糖代替物を含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、２ｗ／ｖ％の糖および／または糖代替物を含んでいてもよい。
【０４３１】
ある特定の実施形態では、製剤は、３ｗ／ｖ％の糖および／または糖代替物を含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、４ｗ／ｖ％の糖および／または糖代替物を含んでいてもよい。
【０４３２】
ある特定の実施形態では、製剤は、５ｗ／ｖ％の糖および／または糖代替物を含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、６ｗ／ｖ％の糖および／または糖代替物を含んでいてもよい。
【０４３３】
ある特定の実施形態では、製剤は、７ｗ／ｖ％の糖および／または糖代替物を含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、８ｗ／ｖ％の糖および／または糖代替物を含んでいてもよい。
【０４３４】
ある特定の実施形態では、製剤は、９ｗ／ｖ％の糖および／または糖代替物を含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、１０ｗ／ｖ％の糖および／または糖代替物を含んでいてもよい。
【０４３５】
一部の実施形態では、本明細書に記載の医薬組成物の製剤は、二糖を含んでいてもよい。本明細書に記載の製剤に使用することができる適切な二糖としては、スクロース、ラクツロース、ラクトース、マルトース、トレハロース、セロビオース、キトビオース、コージビオース、ニゲロース、イソマルトース、β，β−トレハロース、α，β−トレハロース、ソホロース、ラミナリビオース、ゲンチオビオース、ツラノース、マルツロース、パラチノース、ゲンチオビウロース、マンノビオース、メリビオース、メリビウロース、ルチノース、ルチヌロース、およびキシロビオースを挙げることができる。製剤に使用される二糖の濃度（ｗ／ｖ）は、１％〜１５％、例えば、１％〜５％、３％〜６％、５％〜８％、７％〜１０％、または１０％〜１５％であってもよい。
【０４３６】
一部の実施形態では、本明細書に記載の医薬組成物の製剤は、糖アルコールを含んでいてもよい。非限定的な例として、本明細書に記載の製剤に使用することができる糖アルコールとしては、ソルビトールを挙げることができる。製剤に使用される糖アルコールの濃度（ｗ／ｖ）は、１％〜１５％、例えば、１％〜５％、３％〜６％、５％〜８％、７％〜１０％、または１０％〜１５％であってもよい。
【０４３７】
スクロース
ある特定の実施形態では、製剤は、これに限定されないが、スクロースなどの二糖である少なくとも１つの糖を含んでいてもよい。
【０４３８】
ある特定の実施形態では、製剤は、０．１％、０．２％、０．３％、０．４％、０．５％、０．６％、０．７％、０．８％、０．９％、１％、１．１％、１．２％、１．３％、１．４％、１．５％、１．６％、１．７％、１．８％、１．９％、２％、２．１％、２．２％、２．３％、２．４％、２．５％、２．６％、２．７％、２．８％、２．９％、３％、３．１％、３．２％、３．３％、３．４％、３．５％、３．６％、３．７％、３．８％、３．９％、４％、４．１％、４．２％、４．３％、４．４％、４．５％、４．６％、４．７％、４．８％、４．９％、５％、５．１％、５．２％、５．３％、５．４％、５．５％、５．６％、５．７％、５．８％、５．９％、６％、６．１％、６．２％、６．３％、６．４％、６．５％、６．６％、６．７％、６．８％、６．９％、７％、７．１％、７．２％、７．３％、７．４％、７．５％、７．６％、７．７％、７．８％、７．９％、８％、８．１％、８．２％、８．３％、８．４％、８．５％、８．６％、８．７％、８．８％、８．９％、９％、９．１％、９．２％、９．３％、９．４％、９．５％、９．６％、９．７％、９．８％、９．９％、または１０ｗ／ｖ％のスクロースを含んでいてもよい。
【０４３９】
ある特定の実施形態では、製剤は、０〜１％、０．１〜１％、０．２〜１％、０．３〜１％、０．４〜１％、０．５〜１％、０．６〜１％、０．７〜１％、０．８〜１％、０．９〜１％、０〜１．５％、０．１〜１．５％、０．２〜１．５％、０．３〜１．５％、０．４〜１．５％、０．５〜１．５％、０．６〜１．５％、０．７〜１．５％、０．８〜１．５％、０．９〜１．５％、１〜１．５％、１．１〜１．５％、１．２〜１．５％、１．３〜１．５％、１．４〜１．５％、０〜２％、０．１〜２％、０．２〜２％、０．３〜２％、０．４〜２％、０．５〜２％、０．６〜２％、０．７〜２％、０．８〜２％、０．９〜２％、１〜２％、１．１〜２％、１．２〜２％、１．３〜２％、１．４〜２％、１．５〜２％、１．６〜２％、１．７〜２％、１．８〜２％、１．９〜２％、０〜２．５％、０．１〜２．５％、０．２〜２．５％、０．３〜２．５％、０．４〜２．５％、０．５〜２．５％、０．６〜２．５％、０．７〜２．５％、０．８〜２．５％、０．９〜２．５％、１〜２．５％、１．１〜２．５％、１．２〜２．５％、１．３〜２．５％、１．４〜２．５％、１．５〜２．５％、１．６〜２．５％、１．７〜２．５％、１．８〜２．５％、１．９〜２．５％、２〜２．５％、２．１〜２．５％、２．２〜２．５％、２．３〜２．５％、２．４〜２．５％、０〜３％、０．１〜３％、０．２〜３％、０．３〜３％、０．４〜３％、０．５〜３％、０．６〜３％、０．７〜３％、０．８〜３％、０．９〜３％、１〜３％、１．１〜３％、１．２〜３％、１．３〜３％、１．４〜３％、１．５〜３％、１．６〜３％、１．７〜３％、１．８〜３％、１．９〜３％、２〜３％、２．１〜３％、２．２〜３％、２．３〜３％、２．４〜３％、２．５〜３％、２．６〜３％、２．７〜３％、２．８〜３％、２．９〜３％、０〜３．５％、０．１〜３．５％、０．２〜３．５％、０．３〜３．５％、０．４〜３．５％、０．５〜３．５％、０．６〜３．５％、０．７〜３．５％、０．８〜３．５％、０．９〜３．５％、１〜３．５％、１．１〜３．５％、１．２〜３．５％、１．３〜３．５％、１．４〜３．５％、１．５〜３．５％、１．６〜３．５％、１．７〜３．５％、１．８〜３．５％、１．９〜３．５％、２〜３．５％、２．１〜３．５％、２．２〜３．５％、２．３〜３．５％、２．４〜３．５％、２．５〜３．５％、２．６〜３．５％、２．７〜３．５％、２．８〜３．５％、２．９〜３．５％、３〜３．５％、３．１〜３．５％、３．２〜３．５％、３．３〜３．５％、３．４〜３．５％、０〜４％、０．１〜４％、０．２〜４％、０．３〜４％、０．４〜４％、０．５〜４％、０．６〜４％、０．７〜４％、０．８〜４％、０．９〜４％、１〜４％、１．１〜４％、１．２〜４％、１．３〜４％、１．４〜４％、１．５〜４％、１．６〜４％、１．７〜４％、１．８〜４％、１．９〜４％、２〜４％、２．１〜４％、２．２〜４％、２．３〜４％、２．４〜４％、２．５〜４％、２．６〜４％、２．７〜４％、２．８〜４％、２．９〜４％、３〜４％、３．１〜４％、３．２〜４％、３．３〜４％、３．４〜４％、３．５〜４％、３．６〜４％、３．７〜４％、３．８〜４％、３．９〜４％、０〜４．５％、０．１〜４．５％、０．２〜４．５％、０．３〜４．５％、０．４〜４．５％、０．５〜４．５％、０．６〜４．５％、０．７〜４．５％、０．８〜４．５％、０．９〜４．５％、１〜４．５％、１．１〜４．５％、１．２〜４．５％、１．３〜４．５％、１．４〜４．５％、１．５〜４．５％、１．６〜４．５％、１．７〜４．５％、１．８〜４．５％、１．９〜４．５％、２〜４．５％、２．１〜４．５％、２．２〜４．５％、２．３〜４．５％、２．４〜４．５％、２．５〜４．５％、２．６〜４．５％、２．７〜４．５％、２．８〜４．５％、２．９〜４．５％、３〜４．５％、３．１〜４．５％、３．２〜４．５％、３．３〜４．５％、３．４〜４．５％、３．５〜４．５％、３．６〜４．５％、３．７〜４．５％、３．８〜４．５％、３．９〜４．５％、４〜４．５％、４．１〜４．５％、４．２〜４．５％、４．３〜４．５％、４．４〜４．５％、０〜５％、０．１〜５％、０．２〜５％、０．３〜５％、０．４〜５％、０．５〜５％、０．６〜５％、０．７〜５％、０．８〜５％、０．９〜５％、１〜５％、１．１〜５％、１．２〜５％、１．３〜５％、１．４〜５％、１．５〜５％、１．６〜５％、１．７〜５％、１．８〜５％、１．９〜５％、２〜５％、２．１〜５％、２．２〜５％、２．３〜５％、２．４〜５％、２．５〜５％、２．６〜５％、２．７〜５％、２．８〜５％、２．９〜５％、３〜５％、３．１〜５％、３．２〜５％、３．３〜５％、３．４〜５％、３．５〜５％、３．６〜５％、３．７〜５％、３．８〜５％、３．９〜５％、４〜５％、４．１〜５％、４．２〜５％、４．３〜５％、４．４〜５％、４．５〜５％、４．６〜５％、４．７〜５％、４．８〜５％、４．９〜５％、０〜５．５％、０．１〜５．５％、０．２〜５．５％、０．３〜５．５％、０．４〜５．５％、０．５〜５．５％、０．６〜５．５％、０．７〜５．５％、０．８〜５．５％、０．９〜５．５％、１〜５．５％、１．１〜５．５％、１．２〜５．５％、１．３〜５．５％、１．４〜５．５％、１．５〜５．５％、１．６〜５．５％、１．７〜５．５％、１．８〜５．５％、１．９〜５．５％、２〜５．５％、２．１〜５．５％、２．２〜５．５％、２．３〜５．５％、２．４〜５．５％、２．５〜５．５％、２．６〜５．５％、２．７〜５．５％、２．８〜５．５％、２．９〜５．５％、３〜５．５％、３．１〜５．５％、３．２〜５．５％、３．３〜５．５％、３．４〜５．５％、３．５〜５．５％、３．６〜５．５％、３．７〜５．５％、３．８〜５．５％、３．９〜５．５％、４〜５．５％、４．１〜５．５％、４．２〜５．５％、４．３〜５．５％、４．４〜５．５％、４．５〜５．５％、４．６〜５．５％、４．７〜５．５％、４．８〜５．５％、４．９〜５．５％、５〜５．５％、５．１〜５．５％、５．２〜５．５％、５．３〜５．５％、５．４〜５．５％、０〜６％、０．１〜６％、０．２〜６％、０．３〜６％、０．４〜６％、０．５〜６％、０．６〜６％、０．７〜６％、０．８〜６％、０．９〜６％、１〜６％、１．１〜６％、１．２〜６％、１．３〜６％、１．４〜６％、１．５〜６％、１．６〜６％、１．７〜６％、１．８〜６％、１．９〜６％、２〜６％、２．１〜６％、２．２〜６％、２．３〜６％、２．４〜６％、２．５〜６％、２．６〜６％、２．７〜６％、２．８〜６％、２．９〜６％、３〜６％、３．１〜６％、３．２〜６％、３．３〜６％、３．４〜６％、３．５〜６％、３．６〜６％、３．７〜６％、３．８〜６％、３．９〜６％、４〜６％、４．１〜６％、４．２〜６％、４．３〜６％、４．４〜６％、４．５〜６％、４．６〜６％、４．７〜６％、４．８〜６％、４．９〜６％、５〜６％、５．１〜６％、５．２〜６％、５．３〜６％、５．４〜６％、５．５〜６％、５．６〜６％、５．７〜６％、５．８〜６％、５．９〜６％、０〜６．５％、０．１〜６．５％、０．２〜６．５％、０．３〜６．５％、０．４〜６．５％、０．５〜６．５％、０．６〜６．５％、０．７〜６．５％、０．８〜６．５％、０．９〜６．５％、１〜６．５％、１．１〜６．５％、１．２〜６．５％、１．３〜６．５％、１．４〜６．５％、１．５〜６．５％、１．６〜６．５％、１．７〜６．５％、１．８〜６．５％、１．９〜６．５％、２〜６．５％、２．１〜６．５％、２．２〜６．５％、２．３〜６．５％、２．４〜６．５％、２．５〜６．５％、２．６〜６．５％、２．７〜６．５％、２．８〜６．５％、２．９〜６．５％、３〜６．５％、３．１〜６．５％、３．２〜６．５％、３．３〜６．５％、３．４〜６．５％、３．５〜６．５％、３．６〜６．５％、３．７〜６．５％、３．８〜６．５％、３．９〜６．５％、４〜６．５％、４．１〜６．５％、４．２〜６．５％、４．３〜６．５％、４．４〜６．５％、４．５〜６．５％、４．６〜６．５％、４．７〜６．５％、４．８〜６．５％、４．９〜６．５％、５〜６．５％、５．１〜６．５％、５．２〜６．５％、５．３〜６．５％、５．４〜６．５％、５．５〜６．５％、５．６〜６．５％、５．７〜６．５％、５．８〜６．５％、５．９〜６．５％、６〜６．５％、６．１〜６．５％、６．２〜６．５％、６．３〜６．５％、６．４〜６．５％、０〜７％、０．１〜７％、０．２〜７％、０．３〜７％、０．４〜７％、０．５〜７％、０．６〜７％、０．７〜７％、０．８〜７％、０．９〜７％、１〜７％、１．１〜７％、１．２〜７％、１．３〜７％、１．４〜７％、１．５〜７％、１．６〜７％、１．７〜７％、１．８〜７％、１．９〜７％、２〜７％、２．１〜７％、２．２〜７％、２．３〜７％、２．４〜７％、２．５〜７％、２．６〜７％、２．７〜７％、２．８〜７％、２．９〜７％、３〜７％、３．１〜７％、３．２〜７％、３．３〜７％、３．４〜７％、３．５〜７％、３．６〜７％、３．７〜７％、３．８〜７％、３．９〜７％、４〜７％、４．１〜７％、４．２〜７％、４．３〜７％、４．４〜７％、４．５〜７％、４．６〜７％、４．７〜７％、４．８〜７％、４．９〜７％、５〜７％、５．１〜７％、５．２〜７％、５．３〜７％、５．４〜７％、５．５〜７％、５．６〜７％、５．７〜７％、５．８〜７％、５．９〜７％、６〜７％、６．１〜７％、６．２〜７％、６．３〜７％、６．４〜７％、６．５〜７％、６．６〜７％、６．７〜７％、６．８〜７％、６．９〜７％、０〜７．５％、０．１〜７．５％、０．２〜７．５％、０．３〜７．５％、０．４〜７．５％、０．５〜７．５％、０．６〜７．５％、０．７〜７．５％、０．８〜７．５％、０．９〜７．５％、１〜７．５％、１．１〜７．５％、１．２〜７．５％、１．３〜７．５％、１．４〜７．５％、１．５〜７．５％、１．６〜７．５％、１．７〜７．５％、１．８〜７．５％、１．９〜７．５％、２〜７．５％、２．１〜７．５％、２．２〜７．５％、２．３〜７．５％、２．４〜７．５％、２．５〜７．５％、２．６〜７．５％、２．７〜７．５％、２．８〜７．５％、２．９〜７．５％、３〜７．５％、３．１〜７．５％、３．２〜７．５％、３．３〜７．５％、３．４〜７．５％、３．５〜７．５％、３．６〜７．５％、３．７〜７．５％、３．８〜７．５％、３．９〜７．５％、４〜７．５％、４．１〜７．５％、４．２〜７．５％、４．３〜７．５％、４．４〜７．５％、４．５〜７．５％、４．６〜７．５％、４．７〜７．５％、４．８〜７．５％、４．９〜７．５％、５〜７．５％、５．１〜７．５％、５．２〜７．５％、５．３〜７．５％、５．４〜７．５％、５．５〜７．５％、５．６〜７．５％、５．７〜７．５％、５．８〜７．５％、５．９〜７．５％、６〜７．５％、６．１〜７．５％、６．２〜７．５％、６．３〜７．５％、６．４〜７．５％、６．５〜７．５％、６．６〜７．５％、６．７〜７．５％、６．８〜７．５％、６．９〜７．５％、７〜７．５％、７．１〜７．５％、７．２〜７．５％、７．３〜７．５％、７．４〜７．５％、０〜８％、０．１〜８％、０．２〜８％、０．３〜８％、０．４〜８％、０．５〜８％、０．６〜８％、０．７〜８％、０．８〜８％、０．９〜８％、１〜８％、１．１〜８％、１．２〜８％、１．３〜８％、１．４〜８％、１．５〜８％、１．６〜８％、１．７〜８％、１．８〜８％、１．９〜８％、２〜８％、２．１〜８％、２．２〜８％、２．３〜８％、２．４〜８％、２．５〜８％、２．６〜８％、２．７〜８％、２．８〜８％、２．９〜８％、３〜８％、３．１〜８％、３．２〜８％、３．３〜８％、３．４〜８％、３．５〜８％、３．６〜８％、３．７〜８％、３．８〜８％、３．９〜８％、４〜８％、４．１〜８％、４．２〜８％、４．３〜８％、４．４〜８％、４．５〜８％、４．６〜８％、４．７〜８％、４．８〜８％、４．９〜８％、５〜８％、５．１〜８％、５．２〜８％、５．３〜８％、５．４〜８％、５．５〜８％、５．６〜８％、５．７〜８％、５．８〜８％、５．９〜８％、６〜８％、６．１〜８％、６．２〜８％、６．３〜８％、６
．４〜８％、６．５〜８％、６．６〜８％、６．７〜８％、６．８〜８％、６．９〜８％、７〜８％、７．１〜８％、７．２〜８％、７．３〜８％、７．４〜８％、７．５〜８％、７．６〜８％、７．７〜８％、７．８〜８％、７．９〜８％、０〜８．５％、０．１〜８．５％、０．２〜８．５％、０．３〜８．５％、０．４〜８．５％、０．５〜８．５％、０．６〜８．５％、０．７〜８．５％、０．８〜８．５％、０．９〜８．５％、１〜８．５％、１．１〜８．５％、１．２〜８．５％、１．３〜８．５％、１．４〜８．５％、１．５〜８．５％、１．６〜８．５％、１．７〜８．５％、１．８〜８．５％、１．９〜８．５％、２〜８．５％、２．１〜８．５％、２．２〜８．５％、２．３〜８．５％、２．４〜８．５％、２．５〜８．５％、２．６〜８．５％、２．７〜８．５％、２．８〜８．５％、２．９〜８．５％、３〜８．５％、３．１〜８．５％、３．２〜８．５％、３．３〜８．５％、３．４〜８．５％、３．５〜８．５％、３．６〜８．５％、３．７〜８．５％、３．８〜８．５％、３．９〜８．５％、４〜８．５％、４．１〜８．５％、４．２〜８．５％、４．３〜８．５％、４．４〜８．５％、４．５〜８．５％、４．６〜８．５％、４．７〜８．５％、４．８〜８．５％、４．９〜８．５％、５〜８．５％、５．１〜８．５％、５．２〜８．５％、５．３〜８．５％、５．４〜８．５％、５．５〜８．５％、５．６〜８．５％、５．７〜８．５％、５．８〜８．５％、５．９〜８．５％、６〜８．５％、６．１〜８．５％、６．２〜８．５％、６．３〜８．５％、６．４〜８．５％、６．５〜８．５％、６．６〜８．５％、６．７〜８．５％、６．８〜８．５％、６．９〜８．５％、７〜８．５％、７．１〜８．５％、７．２〜８．５％、７．３〜８．５％、７．４〜８．５％、７．５〜８．５％、７．６〜８．５％、７．７〜８．５％、７．８〜８．５％、７．９〜８．５％、８〜８．５％、８．１〜８．５％、８．２〜８．５％、８．３〜８．５％、８．４〜８．５％、０〜９％、０．１〜９％、０．２〜９％、０．３〜９％、０．４〜９％、０．５〜９％、０．６〜９％、０．７〜９％、０．８〜９％、０．９〜９％、１〜９％、１．１〜９％、１．２〜９％、１．３〜９％、１．４〜９％、１．５〜９％、１．６〜９％、１．７〜９％、１．８〜９％、１．９〜９％、２〜９％、２．１〜９％、２．２〜９％、２．３〜９％、２．４〜９％、２．５〜９％、２．６〜９％、２．７〜９％、２．８〜９％、２．９〜９％、３〜９％、３．１〜９％、３．２〜９％、３．３〜９％、３．４〜９％、３．５〜９％、３．６〜９％、３．７〜９％、３．８〜９％、３．９〜９％、４〜９％、４．１〜９％、４．２〜９％、４．３〜９％、４．４〜９％、４．５〜９％、４．６〜９％、４．７〜９％、４．８〜９％、４．９〜９％、５〜９％、５．１〜９％、５．２〜９％、５．３〜９％、５．４〜９％、５．５〜９％、５．６〜９％、５．７〜９％、５．８〜９％、５．９〜９％、６〜９％、６．１〜９％、６．２〜９％、６．３〜９％、６．４〜９％、６．５〜９％、６．６〜９％、６．７〜９％、６．８〜９％、６．９〜９％、７〜９％、７．１〜９％、７．２〜９％、７．３〜９％、７．４〜９％、７．５〜９％、７．６〜９％、７．７〜９％、７．８〜９％、７．９〜９％、８〜９％、８．１〜９％、８．２〜９％、８．３〜９％、８．４〜９％、８．５〜９％、８．６〜９％、８．７〜９％、８．８〜９％、８．９〜９％、０〜９．５％、０．１〜９．５％、０．２〜９．５％、０．３〜９．５％、０．４〜９．５％、０．５〜９．５％、０．６〜９．５％、０．７〜９．５％、０．８〜９．５％、０．９〜９．５％、１〜９．５％、１．１〜９．５％、１．２〜９．５％、１．３〜９．５％、１．４〜９．５％、１．５〜９．５％、１．６〜９．５％、１．７〜９．５％、１．８〜９．５％、１．９〜９．５％、２〜９．５％、２．１〜９．５％、２．２〜９．５％、２．３〜９．５％、２．４〜９．５％、２．５〜９．５％、２．６〜９．５％、２．７〜９．５％、２．８〜９．５％、２．９〜９．５％、３〜９．５％、３．１〜９．５％、３．２〜９．５％、３．３〜９．５％、３．４〜９．５％、３．５〜９．５％、３．６〜９．５％、３．７〜９．５％、３．８〜９．５％、３．９〜９．５％、４〜９．５％、４．１〜９．５％、４．２〜９．５％、４．３〜９．５％、４．４〜９．５％、４．５〜９．５％、４．６〜９．５％、４．７〜９．５％、４．８〜９．５％、４．９〜９．５％、５〜９．５％、５．１〜９．５％、５．２〜９．５％、５．３〜９．５％、５．４〜９．５％、５．５〜９．５％、５．６〜９．５％、５．７〜９．５％、５．８〜９．５％、５．９〜９．５％、６〜９．５％、６．１〜９．５％、６．２〜９．５％、６．３〜９．５％、６．４〜９．５％、６．５〜９．５％、６．６〜９．５％、６．７〜９．５％、６．８〜９．５％、６．９〜９．５％、７〜９．５％、７．１〜９．５％、７．２〜９．５％、７．３〜９．５％、７．４〜９．５％、７．５〜９．５％、７．６〜９．５％、７．７〜９．５％、７．８〜９．５％、７．９〜９．５％、８〜９．５％、８．１〜９．５％、８．２〜９．５％、８．３〜９．５％、８．４〜９．５％、８．５〜９．５％、８．６〜９．５％、８．７〜９．５％、８．８〜９．５％、８．９〜９．５％、９〜９．５％、９．１〜９．５％、９．２〜９．５％、９．３〜９．５％、９．４〜９．５％、０〜１０％、０．１〜１０％、０．２〜１０％、０．３〜１０％、０．４〜１０％、０．５〜１０％、０．６〜１０％、０．７〜１０％、０．８〜１０％、０．９〜１０％、１〜１０％、１．１〜１０％、１．２〜１０％、１．３〜１０％、１．４〜１０％、１．５〜１０％、１．６〜１０％、１．７〜１０％、１．８〜１０％、１．９〜１０％、２〜１０％、２．１〜１０％、２．２〜１０％、２．３〜１０％、２．４〜１０％、２．５〜１０％、２．６〜１０％、２．７〜１０％、２．８〜１０％、２．９〜１０％、３〜１０％、３．１〜１０％、３．２〜１０％、３．３〜１０％、３．４〜１０％、３．５〜１０％、３．６〜１０％、３．７〜１０％、３．８〜１０％、３．９〜１０％、４〜１０％、４．１〜１０％、４．２〜１０％、４．３〜１０％、４．４〜１０％、４．５〜１０％、４．６〜１０％、４．７〜１０％、４．８〜１０％、４．９〜１０％、５〜１０％、５．１〜１０％、５．２〜１０％、５．３〜１０％、５．４〜１０％、５．５〜１０％、５．６〜１０％、５．７〜１０％、５．８〜１０％、５．９〜１０％、６〜１０％、６．１〜１０％、６．２〜１０％、６．３〜１０％、６．４〜１０％、６．５〜１０％、６．６〜１０％、６．７〜１０％、６．８〜１０％、６．９〜１０％、７〜１０％、７．１〜１０％、７．２〜１０％、７．３〜１０％、７．４〜１０％、７．５〜１０％、７．６〜１０％、７．７〜１０％、７．８〜１０％、７．９〜１０％、８〜１０％、８．１〜１０％、８．２〜１０％、８．３〜１０％、８．４〜１０％、８．５〜１０％、８．６〜１０％、８．７〜１０％、８．８〜１０％、８．９〜１０％、９〜１０％、９．１〜１０％、９．２〜１０％、９．３〜１０％、９．４〜１０％、９．５〜１０％、９．６〜１０％、９．７〜１０％、９．８〜１０％、または９．９〜１０ｗ／ｖ％の範囲のスクロースを含んでいてもよい。
【０４４０】
ある特定の実施形態では、製剤は、０〜１０ｗ／ｖ％のスクロースを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、０〜９ｗ／ｖ％のスクロースを含んでいてもよい。
【０４４１】
ある特定の実施形態では、製剤は、０〜８ｗ／ｖ％のスクロースを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、０〜７ｗ／ｖ％のスクロースを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、０〜６ｗ／ｖ％のスクロースを含んでいてもよい。
【０４４２】
ある特定の実施形態では、製剤は、０〜５ｗ／ｖ％のスクロースを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、０〜４ｗ／ｖ％のスクロースを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、０〜３ｗ／ｖ％のスクロースを含んでいてもよい。
【０４４３】
ある特定の実施形態では、製剤は、０〜２ｗ／ｖ％のスクロースを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、０〜１ｗ／ｖ％のスクロースを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、１ｗ／ｖ％のスクロースを含んでいてもよい。
【０４４４】
ある特定の実施形態では、製剤は、２ｗ／ｖ％のスクロースを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、３ｗ／ｖ％のスクロースを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、４ｗ／ｖ％のスクロースを含んでいてもよい。
【０４４５】
ある特定の実施形態では、製剤は、５ｗ／ｖ％のスクロースを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、６ｗ／ｖ％のスクロースを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、７ｗ／ｖ％のスクロースを含んでいてもよい。
【０４４６】
ある特定の実施形態では、製剤は、８ｗ／ｖ％のスクロースを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、９ｗ／ｖ％のスクロースを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、１０ｗ／ｖ％のスクロースを含んでいてもよい。
【０４４７】
トレハロース
ある特定の実施形態では、製剤は、これに限定されないが、トレハロースなどの二糖である少なくとも１つの糖を含んでいてもよい。
【０４４８】
ある特定の実施形態では、製剤は、０．１％、０．２％、０．３％、０．４％、０．５％、０．６％、０．７％、０．８％、０．９％、１％、１．１％、１．２％、１．３％、１．４％、１．５％、１．６％、１．７％、１．８％、１．９％、２％、２．１％、２．２％、２．３％、２．４％、２．５％、２．６％、２．７％、２．８％、２．９％、３％、３．１％、３．２％、３．３％、３．４％、３．５％、３．６％、３．７％、３．８％、３．９％、４％、４．１％、４．２％、４．３％、４．４％、４．５％、４．６％、４．７％、４．８％、４．９％、５％、５．１％、５．２％、５．３％、５．４％、５．５％、５．６％、５．７％、５．８％、５．９％、６％、６．１％、６．２％、６．３％、６．４％、６．５％、６．６％、６．７％、６．８％、６．９％、７％、７．１％、７．２％、７．３％、７．４％、７．５％、７．６％、７．７％、７．８％、７．９％、８％、８．１％、８．２％、８．３％、８．４％、８．５％、８．６％、８．７％、８．８％、８．９％、９％、９．１％、９．２％、９．３％、９．４％、９．５％、９．６％、９．７％、９．８％、９．９％、または１０ｗ／ｖ％のトレハロースを含んでいてもよい。
【０４４９】
ある特定の実施形態では、製剤は、０〜１％、０．１〜１％、０．２〜１％、０．３〜１％、０．４〜１％、０．５〜１％、０．６〜１％、０．７〜１％、０．８〜１％、０．９〜１％、０〜１．５％、０．１〜１．５％、０．２〜１．５％、０．３〜１．５％、０．４〜１．５％、０．５〜１．５％、０．６〜１．５％、０．７〜１．５％、０．８〜１．５％、０．９〜１．５％、１〜１．５％、１．１〜１．５％、１．２〜１．５％、１．３〜１．５％、１．４〜１．５％、０〜２％、０．１〜２％、０．２〜２％、０．３〜２％、０．４〜２％、０．５〜２％、０．６〜２％、０．７〜２％、０．８〜２％、０．９〜２％、１〜２％、１．１〜２％、１．２〜２％、１．３〜２％、１．４〜２％、１．５〜２％、１．６〜２％、１．７〜２％、１．８〜２％、１．９〜２％、０〜２．５％、０．１〜２．５％、０．２〜２．５％、０．３〜２．５％、０．４〜２．５％、０．５〜２．５％、０．６〜２．５％、０．７〜２．５％、０．８〜２．５％、０．９〜２．５％、１〜２．５％、１．１〜２．５％、１．２〜２．５％、１．３〜２．５％、１．４〜２．５％、１．５〜２．５％、１．６〜２．５％、１．７〜２．５％、１．８〜２．５％、１．９〜２．５％、２〜２．５％、２．１〜２．５％、２．２〜２．５％、２．３〜２．５％、２．４〜２．５％、０〜３％、０．１〜３％、０．２〜３％、０．３〜３％、０．４〜３％、０．５〜３％、０．６〜３％、０．７〜３％、０．８〜３％、０．９〜３％、１〜３％、１．１〜３％、１．２〜３％、１．３〜３％、１．４〜３％、１．５〜３％、１．６〜３％、１．７〜３％、１．８〜３％、１．９〜３％、２〜３％、２．１〜３％、２．２〜３％、２．３〜３％、２．４〜３％、２．５〜３％、２．６〜３％、２．７〜３％、２．８〜３％、２．９〜３％、０〜３．５％、０．１〜３．５％、０．２〜３．５％、０．３〜３．５％、０．４〜３．５％、０．５〜３．５％、０．６〜３．５％、０．７〜３．５％、０．８〜３．５％、０．９〜３．５％、１〜３．５％、１．１〜３．５％、１．２〜３．５％、１．３〜３．５％、１．４〜３．５％、１．５〜３．５％、１．６〜３．５％、１．７〜３．５％、１．８〜３．５％、１．９〜３．５％、２〜３．５％、２．１〜３．５％、２．２〜３．５％、２．３〜３．５％、２．４〜３．５％、２．５〜３．５％、２．６〜３．５％、２．７〜３．５％、２．８〜３．５％、２．９〜３．５％、３〜３．５％、３．１〜３．５％、３．２〜３．５％、３．３〜３．５％、３．４〜３．５％、０〜４％、０．１〜４％、０．２〜４％、０．３〜４％、０．４〜４％、０．５〜４％、０．６〜４％、０．７〜４％、０．８〜４％、０．９〜４％、１〜４％、１．１〜４％、１．２〜４％、１．３〜４％、１．４〜４％、１．５〜４％、１．６〜４％、１．７〜４％、１．８〜４％、１．９〜４％、２〜４％、２．１〜４％、２．２〜４％、２．３〜４％、２．４〜４％、２．５〜４％、２．６〜４％、２．７〜４％、２．８〜４％、２．９〜４％、３〜４％、３．１〜４％、３．２〜４％、３．３〜４％、３．４〜４％、３．５〜４％、３．６〜４％、３．７〜４％、３．８〜４％、３．９〜４％、０〜４．５％、０．１〜４．５％、０．２〜４．５％、０．３〜４．５％、０．４〜４．５％、０．５〜４．５％、０．６〜４．５％、０．７〜４．５％、０．８〜４．５％、０．９〜４．５％、１〜４．５％、１．１〜４．５％、１．２〜４．５％、１．３〜４．５％、１．４〜４．５％、１．５〜４．５％、１．６〜４．５％、１．７〜４．５％、１．８〜４．５％、１．９〜４．５％、２〜４．５％、２．１〜４．５％、２．２〜４．５％、２．３〜４．５％、２．４〜４．５％、２．５〜４．５％、２．６〜４．５％、２．７〜４．５％、２．８〜４．５％、２．９〜４．５％、３〜４．５％、３．１〜４．５％、３．２〜４．５％、３．３〜４．５％、３．４〜４．５％、３．５〜４．５％、３．６〜４．５％、３．７〜４．５％、３．８〜４．５％、３．９〜４．５％、４〜４．５％、４．１〜４．５％、４．２〜４．５％、４．３〜４．５％、４．４〜４．５％、０〜５％、０．１〜５％、０．２〜５％、０．３〜５％、０．４〜５％、０．５〜５％、０．６〜５％、０．７〜５％、０．８〜５％、０．９〜５％、１〜５％、１．１〜５％、１．２〜５％、１．３〜５％、１．４〜５％、１．５〜５％、１．６〜５％、１．７〜５％、１．８〜５％、１．９〜５％、２〜５％、２．１〜５％、２．２〜５％、２．３〜５％、２．４〜５％、２．５〜５％、２．６〜５％、２．７〜５％、２．８〜５％、２．９〜５％、３〜５％、３．１〜５％、３．２〜５％、３．３〜５％、３．４〜５％、３．５〜５％、３．６〜５％、３．７〜５％、３．８〜５％、３．９〜５％、４〜５％、４．１〜５％、４．２〜５％、４．３〜５％、４．４〜５％、４．５〜５％、４．６〜５％、４．７〜５％、４．８〜５％、４．９〜５％、０〜５．５％、０．１〜５．５％、０．２〜５．５％、０．３〜５．５％、０．４〜５．５％、０．５〜５．５％、０．６〜５．５％、０．７〜５．５％、０．８〜５．５％、０．９〜５．５％、１〜５．５％、１．１〜５．５％、１．２〜５．５％、１．３〜５．５％、１．４〜５．５％、１．５〜５．５％、１．６〜５．５％、１．７〜５．５％、１．８〜５．５％、１．９〜５．５％、２〜５．５％、２．１〜５．５％、２．２〜５．５％、２．３〜５．５％、２．４〜５．５％、２．５〜５．５％、２．６〜５．５％、２．７〜５．５％、２．８〜５．５％、２．９〜５．５％、３〜５．５％、３．１〜５．５％、３．２〜５．５％、３．３〜５．５％、３．４〜５．５％、３．５〜５．５％、３．６〜５．５％、３．７〜５．５％、３．８〜５．５％、３．９〜５．５％、４〜５．５％、４．１〜５．５％、４．２〜５．５％、４．３〜５．５％、４．４〜５．５％、４．５〜５．５％、４．６〜５．５％、４．７〜５．５％、４．８〜５．５％、４．９〜５．５％、５〜５．５％、５．１〜５．５％、５．２〜５．５％、５．３〜５．５％、５．４〜５．５％、０〜６％、０．１〜６％、０．２〜６％、０．３〜６％、０．４〜６％、０．５〜６％、０．６〜６％、０．７〜６％、０．８〜６％、０．９〜６％、１〜６％、１．１〜６％、１．２〜６％、１．３〜６％、１．４〜６％、１．５〜６％、１．６〜６％、１．７〜６％、１．８〜６％、１．９〜６％、２〜６％、２．１〜６％、２．２〜６％、２．３〜６％、２．４〜６％、２．５〜６％、２．６〜６％、２．７〜６％、２．８〜６％、２．９〜６％、３〜６％、３．１〜６％、３．２〜６％、３．３〜６％、３．４〜６％、３．５〜６％、３．６〜６％、３．７〜６％、３．８〜６％、３．９〜６％、４〜６％、４．１〜６％、４．２〜６％、４．３〜６％、４．４〜６％、４．５〜６％、４．６〜６％、４．７〜６％、４．８〜６％、４．９〜６％、５〜６％、５．１〜６％、５．２〜６％、５．３〜６％、５．４〜６％、５．５〜６％、５．６〜６％、５．７〜６％、５．８〜６％、５．９〜６％、０〜６．５％、０．１〜６．５％、０．２〜６．５％、０．３〜６．５％、０．４〜６．５％、０．５〜６．５％、０．６〜６．５％、０．７〜６．５％、０．８〜６．５％、０．９〜６．５％、１〜６．５％、１．１〜６．５％、１．２〜６．５％、１．３〜６．５％、１．４〜６．５％、１．５〜６．５％、１．６〜６．５％、１．７〜６．５％、１．８〜６．５％、１．９〜６．５％、２〜６．５％、２．１〜６．５％、２．２〜６．５％、２．３〜６．５％、２．４〜６．５％、２．５〜６．５％、２．６〜６．５％、２．７〜６．５％、２．８〜６．５％、２．９〜６．５％、３〜６．５％、３．１〜６．５％、３．２〜６．５％、３．３〜６．５％、３．４〜６．５％、３．５〜６．５％、３．６〜６．５％、３．７〜６．５％、３．８〜６．５％、３．９〜６．５％、４〜６．５％、４．１〜６．５％、４．２〜６．５％、４．３〜６．５％、４．４〜６．５％、４．５〜６．５％、４．６〜６．５％、４．７〜６．５％、４．８〜６．５％、４．９〜６．５％、５〜６．５％、５．１〜６．５％、５．２〜６．５％、５．３〜６．５％、５．４〜６．５％、５．５〜６．５％、５．６〜６．５％、５．７〜６．５％、５．８〜６．５％、５．９〜６．５％、６〜６．５％、６．１〜６．５％、６．２〜６．５％、６．３〜６．５％、６．４〜６．５％、０〜７％、０．１〜７％、０．２〜７％、０．３〜７％、０．４〜７％、０．５〜７％、０．６〜７％、０．７〜７％、０．８〜７％、０．９〜７％、１〜７％、１．１〜７％、１．２〜７％、１．３〜７％、１．４〜７％、１．５〜７％、１．６〜７％、１．７〜７％、１．８〜７％、１．９〜７％、２〜７％、２．１〜７％、２．２〜７％、２．３〜７％、２．４〜７％、２．５〜７％、２．６〜７％、２．７〜７％、２．８〜７％、２．９〜７％、３〜７％、３．１〜７％、３．２〜７％、３．３〜７％、３．４〜７％、３．５〜７％、３．６〜７％、３．７〜７％、３．８〜７％、３．９〜７％、４〜７％、４．１〜７％、４．２〜７％、４．３〜７％、４．４〜７％、４．５〜７％、４．６〜７％、４．７〜７％、４．８〜７％、４．９〜７％、５〜７％、５．１〜７％、５．２〜７％、５．３〜７％、５．４〜７％、５．５〜７％、５．６〜７％、５．７〜７％、５．８〜７％、５．９〜７％、６〜７％、６．１〜７％、６．２〜７％、６．３〜７％、６．４〜７％、６．５〜７％、６．６〜７％、６．７〜７％、６．８〜７％、６．９〜７％、０〜７．５％、０．１〜７．５％、０．２〜７．５％、０．３〜７．５％、０．４〜７．５％、０．５〜７．５％、０．６〜７．５％、０．７〜７．５％、０．８〜７．５％、０．９〜７．５％、１〜７．５％、１．１〜７．５％、１．２〜７．５％、１．３〜７．５％、１．４〜７．５％、１．５〜７．５％、１．６〜７．５％、１．７〜７．５％、１．８〜７．５％、１．９〜７．５％、２〜７．５％、２．１〜７．５％、２．２〜７．５％、２．３〜７．５％、２．４〜７．５％、２．５〜７．５％、２．６〜７．５％、２．７〜７．５％、２．８〜７．５％、２．９〜７．５％、３〜７．５％、３．１〜７．５％、３．２〜７．５％、３．３〜７．５％、３．４〜７．５％、３．５〜７．５％、３．６〜７．５％、３．７〜７．５％、３．８〜７．５％、３．９〜７．５％、４〜７．５％、４．１〜７．５％、４．２〜７．５％、４．３〜７．５％、４．４〜７．５％、４．５〜７．５％、４．６〜７．５％、４．７〜７．５％、４．８〜７．５％、４．９〜７．５％、５〜７．５％、５．１〜７．５％、５．２〜７．５％、５．３〜７．５％、５．４〜７．５％、５．５〜７．５％、５．６〜７．５％、５．７〜７．５％、５．８〜７．５％、５．９〜７．５％、６〜７．５％、６．１〜７．５％、６．２〜７．５％、６．３〜７．５％、６．４〜７．５％、６．５〜７．５％、６．６〜７．５％、６．７〜７．５％、６．８〜７．５％、６．９〜７．５％、７〜７．５％、７．１〜７．５％、７．２〜７．５％、７．３〜７．５％、７．４〜７．５％、０〜８％、０．１〜８％、０．２〜８％、０．３〜８％、０．４〜８％、０．５〜８％、０．６〜８％、０．７〜８％、０．８〜８％、０．９〜８％、１〜８％、１．１〜８％、１．２〜８％、１．３〜８％、１．４〜８％、１．５〜８％、１．６〜８％、１．７〜８％、１．８〜８％、１．９〜８％、２〜８％、２．１〜８％、２．２〜８％、２．３〜８％、２．４〜８％、２．５〜８％、２．６〜８％、２．７〜８％、２．８〜８％、２．９〜８％、３〜８％、３．１〜８％、３．２〜８％、３．３〜８％、３．４〜８％、３．５〜８％、３．６〜８％、３．７〜８％、３．８〜８％、３．９〜８％、４〜８％、４．１〜８％、４．２〜８％、４．３〜８％、４．４〜８％、４．５〜８％、４．６〜８％、４．７〜８％、４．８〜８％、４．９〜８％、５〜８％、５．１〜８％、５．２〜８％、５．３〜８％、５．４〜８％、５．５〜８％、５．６〜８％、５．７〜８％、５．８〜８％、５．９〜８％、６〜８％、６．１〜８％、６．２〜８％、６．３〜８％、６
．４〜８％、６．５〜８％、６．６〜８％、６．７〜８％、６．８〜８％、６．９〜８％、７〜８％、７．１〜８％、７．２〜８％、７．３〜８％、７．４〜８％、７．５〜８％、７．６〜８％、７．７〜８％、７．８〜８％、７．９〜８％、０〜８．５％、０．１〜８．５％、０．２〜８．５％、０．３〜８．５％、０．４〜８．５％、０．５〜８．５％、０．６〜８．５％、０．７〜８．５％、０．８〜８．５％、０．９〜８．５％、１〜８．５％、１．１〜８．５％、１．２〜８．５％、１．３〜８．５％、１．４〜８．５％、１．５〜８．５％、１．６〜８．５％、１．７〜８．５％、１．８〜８．５％、１．９〜８．５％、２〜８．５％、２．１〜８．５％、２．２〜８．５％、２．３〜８．５％、２．４〜８．５％、２．５〜８．５％、２．６〜８．５％、２．７〜８．５％、２．８〜８．５％、２．９〜８．５％、３〜８．５％、３．１〜８．５％、３．２〜８．５％、３．３〜８．５％、３．４〜８．５％、３．５〜８．５％、３．６〜８．５％、３．７〜８．５％、３．８〜８．５％、３．９〜８．５％、４〜８．５％、４．１〜８．５％、４．２〜８．５％、４．３〜８．５％、４．４〜８．５％、４．５〜８．５％、４．６〜８．５％、４．７〜８．５％、４．８〜８．５％、４．９〜８．５％、５〜８．５％、５．１〜８．５％、５．２〜８．５％、５．３〜８．５％、５．４〜８．５％、５．５〜８．５％、５．６〜８．５％、５．７〜８．５％、５．８〜８．５％、５．９〜８．５％、６〜８．５％、６．１〜８．５％、６．２〜８．５％、６．３〜８．５％、６．４〜８．５％、６．５〜８．５％、６．６〜８．５％、６．７〜８．５％、６．８〜８．５％、６．９〜８．５％、７〜８．５％、７．１〜８．５％、７．２〜８．５％、７．３〜８．５％、７．４〜８．５％、７．５〜８．５％、７．６〜８．５％、７．７〜８．５％、７．８〜８．５％、７．９〜８．５％、８〜８．５％、８．１〜８．５％、８．２〜８．５％、８．３〜８．５％、８．４〜８．５％、０〜９％、０．１〜９％、０．２〜９％、０．３〜９％、０．４〜９％、０．５〜９％、０．６〜９％、０．７〜９％、０．８〜９％、０．９〜９％、１〜９％、１．１〜９％、１．２〜９％、１．３〜９％、１．４〜９％、１．５〜９％、１．６〜９％、１．７〜９％、１．８〜９％、１．９〜９％、２〜９％、２．１〜９％、２．２〜９％、２．３〜９％、２．４〜９％、２．５〜９％、２．６〜９％、２．７〜９％、２．８〜９％、２．９〜９％、３〜９％、３．１〜９％、３．２〜９％、３．３〜９％、３．４〜９％、３．５〜９％、３．６〜９％、３．７〜９％、３．８〜９％、３．９〜９％、４〜９％、４．１〜９％、４．２〜９％、４．３〜９％、４．４〜９％、４．５〜９％、４．６〜９％、４．７〜９％、４．８〜９％、４．９〜９％、５〜９％、５．１〜９％、５．２〜９％、５．３〜９％、５．４〜９％、５．５〜９％、５．６〜９％、５．７〜９％、５．８〜９％、５．９〜９％、６〜９％、６．１〜９％、６．２〜９％、６．３〜９％、６．４〜９％、６．５〜９％、６．６〜９％、６．７〜９％、６．８〜９％、６．９〜９％、７〜９％、７．１〜９％、７．２〜９％、７．３〜９％、７．４〜９％、７．５〜９％、７．６〜９％、７．７〜９％、７．８〜９％、７．９〜９％、８〜９％、８．１〜９％、８．２〜９％、８．３〜９％、８．４〜９％、８．５〜９％、８．６〜９％、８．７〜９％、８．８〜９％、８．９〜９％、０〜９．５％、０．１〜９．５％、０．２〜９．５％、０．３〜９．５％、０．４〜９．５％、０．５〜９．５％、０．６〜９．５％、０．７〜９．５％、０．８〜９．５％、０．９〜９．５％、１〜９．５％、１．１〜９．５％、１．２〜９．５％、１．３〜９．５％、１．４〜９．５％、１．５〜９．５％、１．６〜９．５％、１．７〜９．５％、１．８〜９．５％、１．９〜９．５％、２〜９．５％、２．１〜９．５％、２．２〜９．５％、２．３〜９．５％、２．４〜９．５％、２．５〜９．５％、２．６〜９．５％、２．７〜９．５％、２．８〜９．５％、２．９〜９．５％、３〜９．５％、３．１〜９．５％、３．２〜９．５％、３．３〜９．５％、３．４〜９．５％、３．５〜９．５％、３．６〜９．５％、３．７〜９．５％、３．８〜９．５％、３．９〜９．５％、４〜９．５％、４．１〜９．５％、４．２〜９．５％、４．３〜９．５％、４．４〜９．５％、４．５〜９．５％、４．６〜９．５％、４．７〜９．５％、４．８〜９．５％、４．９〜９．５％、５〜９．５％、５．１〜９．５％、５．２〜９．５％、５．３〜９．５％、５．４〜９．５％、５．５〜９．５％、５．６〜９．５％、５．７〜９．５％、５．８〜９．５％、５．９〜９．５％、６〜９．５％、６．１〜９．５％、６．２〜９．５％、６．３〜９．５％、６．４〜９．５％、６．５〜９．５％、６．６〜９．５％、６．７〜９．５％、６．８〜９．５％、６．９〜９．５％、７〜９．５％、７．１〜９．５％、７．２〜９．５％、７．３〜９．５％、７．４〜９．５％、７．５〜９．５％、７．６〜９．５％、７．７〜９．５％、７．８〜９．５％、７．９〜９．５％、８〜９．５％、８．１〜９．５％、８．２〜９．５％、８．３〜９．５％、８．４〜９．５％、８．５〜９．５％、８．６〜９．５％、８．７〜９．５％、８．８〜９．５％、８．９〜９．５％、９〜９．５％、９．１〜９．５％、９．２〜９．５％、９．３〜９．５％、９．４〜９．５％、０〜１０％、０．１〜１０％、０．２〜１０％、０．３〜１０％、０．４〜１０％、０．５〜１０％、０．６〜１０％、０．７〜１０％、０．８〜１０％、０．９〜１０％、１〜１０％、１．１〜１０％、１．２〜１０％、１．３〜１０％、１．４〜１０％、１．５〜１０％、１．６〜１０％、１．７〜１０％、１．８〜１０％、１．９〜１０％、２〜１０％、２．１〜１０％、２．２〜１０％、２．３〜１０％、２．４〜１０％、２．５〜１０％、２．６〜１０％、２．７〜１０％、２．８〜１０％、２．９〜１０％、３〜１０％、３．１〜１０％、３．２〜１０％、３．３〜１０％、３．４〜１０％、３．５〜１０％、３．６〜１０％、３．７〜１０％、３．８〜１０％、３．９〜１０％、４〜１０％、４．１〜１０％、４．２〜１０％、４．３〜１０％、４．４〜１０％、４．５〜１０％、４．６〜１０％、４．７〜１０％、４．８〜１０％、４．９〜１０％、５〜１０％、５．１〜１０％、５．２〜１０％、５．３〜１０％、５．４〜１０％、５．５〜１０％、５．６〜１０％、５．７〜１０％、５．８〜１０％、５．９〜１０％、６〜１０％、６．１〜１０％、６．２〜１０％、６．３〜１０％、６．４〜１０％、６．５〜１０％、６．６〜１０％、６．７〜１０％、６．８〜１０％、６．９〜１０％、７〜１０％、７．１〜１０％、７．２〜１０％、７．３〜１０％、７．４〜１０％、７．５〜１０％、７．６〜１０％、７．７〜１０％、７．８〜１０％、７．９〜１０％、８〜１０％、８．１〜１０％、８．２〜１０％、８．３〜１０％、８．４〜１０％、８．５〜１０％、８．６〜１０％、８．７〜１０％、８．８〜１０％、８．９〜１０％、９〜１０％、９．１〜１０％、９．２〜１０％、９．３〜１０％、９．４〜１０％、９．５〜１０％、９．６〜１０％、９．７〜１０％、９．８〜１０％、または９．９〜１０ｗ／ｖ％の範囲のトレハロースを含んでいてもよい。
【０４５０】
ある特定の実施形態では、製剤は、０〜１０ｗ／ｖ％のトレハロースを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、０〜９ｗ／ｖ％のトレハロースを含んでいてもよい。
【０４５１】
ある特定の実施形態では、製剤は、０〜８ｗ／ｖ％のトレハロースを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、０〜７ｗ／ｖ％のトレハロースを含んでいてもよい。
【０４５２】
ある特定の実施形態では、製剤は、０〜６ｗ／ｖ％のトレハロースを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、０〜５ｗ／ｖ％のトレハロースを含んでいてもよい。
【０４５３】
ある特定の実施形態では、製剤は、０〜４ｗ／ｖ％のトレハロースを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、０〜３ｗ／ｖ％のトレハロースを含んでいてもよい。
【０４５４】
ある特定の実施形態では、製剤は、０〜２ｗ／ｖ％のトレハロースを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、０〜１ｗ／ｖ％のトレハロースを含んでいてもよい。
【０４５５】
ある特定の実施形態では、製剤は、１ｗ／ｖ％のトレハロースを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、２ｗ／ｖ％のトレハロースを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、３ｗ／ｖ％のトレハロースを含んでいてもよい。
【０４５６】
ある特定の実施形態では、製剤は、４ｗ／ｖ％のトレハロースを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、５ｗ／ｖ％のトレハロースを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、６ｗ／ｖ％のトレハロースを含んでいてもよい。
【０４５７】
ある特定の実施形態では、製剤は、７ｗ／ｖ％のトレハロースを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、８ｗ／ｖ％のトレハロースを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、９ｗ／ｖ％のトレハロースを含んでいてもよい。
【０４５８】
ある特定の実施形態では、製剤は、１０ｗ／ｖ％のトレハロースを含んでいてもよい。
ソルビトール
ある特定の実施形態では、製剤は、ソルビトールである少なくとも１つの糖代替物（例えば、糖アルコール）を含んでいてもよい。
【０４５９】
ある特定の実施形態では、製剤は、０．１％、０．２％、０．３％、０．４％、０．５％、０．６％、０．７％、０．８％、０．９％、１％、１．１％、１．２％、１．３％、１．４％、１．５％、１．６％、１．７％、１．８％、１．９％、２％、２．１％、２．２％、２．３％、２．４％、２．５％、２．６％、２．７％、２．８％、２．９％、３％、３．１％、３．２％、３．３％、３．４％、３．５％、３．６％、３．７％、３．８％、３．９％、４％、４．１％、４．２％、４．３％、４．４％、４．５％、４．６％、４．７％、４．８％、４．９％、５％、５．１％、５．２％、５．３％、５．４％、５．５％、５．６％、５．７％、５．８％、５．９％、６％、６．１％、６．２％、６．３％、６．４％、６．５％、６．６％、６．７％、６．８％、６．９％、７％、７．１％、７．２％、７．３％、７．４％、７．５％、７．６％、７．７％、７．８％、７．９％、８％、８．１％、８．２％、８．３％、８．４％、８．５％、８．６％、８．７％、８．８％、８．９％、９％、９．１％、９．２％、９．３％、９．４％、９．５％、９．６％、９．７％、９．８％、９．９％、または１０ｗ／ｖ％のソルビトールを含んでいてもよい。
【０４６０】
ある特定の実施形態では、製剤は、０〜１％、０．１〜１％、０．２〜１％、０．３〜１％、０．４〜１％、０．５〜１％、０．６〜１％、０．７〜１％、０．８〜１％、０．９〜１％、０〜１．５％、０．１〜１．５％、０．２〜１．５％、０．３〜１．５％、０．４〜１．５％、０．５〜１．５％、０．６〜１．５％、０．７〜１．５％、０．８〜１．５％、０．９〜１．５％、１〜１．５％、１．１〜１．５％、１．２〜１．５％、１．３〜１．５％、１．４〜１．５％、０〜２％、０．１〜２％、０．２〜２％、０．３〜２％、０．４〜２％、０．５〜２％、０．６〜２％、０．７〜２％、０．８〜２％、０．９〜２％、１〜２％、１．１〜２％、１．２〜２％、１．３〜２％、１．４〜２％、１．５〜２％、１．６〜２％、１．７〜２％、１．８〜２％、１．９〜２％、０〜２．５％、０．１〜２．５％、０．２〜２．５％、０．３〜２．５％、０．４〜２．５％、０．５〜２．５％、０．６〜２．５％、０．７〜２．５％、０．８〜２．５％、０．９〜２．５％、１〜２．５％、１．１〜２．５％、１．２〜２．５％、１．３〜２．５％、１．４〜２．５％、１．５〜２．５％、１．６〜２．５％、１．７〜２．５％、１．８〜２．５％、１．９〜２．５％、２〜２．５％、２．１〜２．５％、２．２〜２．５％、２．３〜２．５％、２．４〜２．５％、０〜３％、０．１〜３％、０．２〜３％、０．３〜３％、０．４〜３％、０．５〜３％、０．６〜３％、０．７〜３％、０．８〜３％、０．９〜３％、１〜３％、１．１〜３％、１．２〜３％、１．３〜３％、１．４〜３％、１．５〜３％、１．６〜３％、１．７〜３％、１．８〜３％、１．９〜３％、２〜３％、２．１〜３％、２．２〜３％、２．３〜３％、２．４〜３％、２．５〜３％、２．６〜３％、２．７〜３％、２．８〜３％、２．９〜３％、０〜３．５％、０．１〜３．５％、０．２〜３．５％、０．３〜３．５％、０．４〜３．５％、０．５〜３．５％、０．６〜３．５％、０．７〜３．５％、０．８〜３．５％、０．９〜３．５％、１〜３．５％、１．１〜３．５％、１．２〜３．５％、１．３〜３．５％、１．４〜３．５％、１．５〜３．５％、１．６〜３．５％、１．７〜３．５％、１．８〜３．５％、１．９〜３．５％、２〜３．５％、２．１〜３．５％、２．２〜３．５％、２．３〜３．５％、２．４〜３．５％、２．５〜３．５％、２．６〜３．５％、２．７〜３．５％、２．８〜３．５％、２．９〜３．５％、３〜３．５％、３．１〜３．５％、３．２〜３．５％、３．３〜３．５％、３．４〜３．５％、０〜４％、０．１〜４％、０．２〜４％、０．３〜４％、０．４〜４％、０．５〜４％、０．６〜４％、０．７〜４％、０．８〜４％、０．９〜４％、１〜４％、１．１〜４％、１．２〜４％、１．３〜４％、１．４〜４％、１．５〜４％、１．６〜４％、１．７〜４％、１．８〜４％、１．９〜４％、２〜４％、２．１〜４％、２．２〜４％、２．３〜４％、２．４〜４％、２．５〜４％、２．６〜４％、２．７〜４％、２．８〜４％、２．９〜４％、３〜４％、３．１〜４％、３．２〜４％、３．３〜４％、３．４〜４％、３．５〜４％、３．６〜４％、３．７〜４％、３．８〜４％、３．９〜４％、０〜４．５％、０．１〜４．５％、０．２〜４．５％、０．３〜４．５％、０．４〜４．５％、０．５〜４．５％、０．６〜４．５％、０．７〜４．５％、０．８〜４．５％、０．９〜４．５％、１〜４．５％、１．１〜４．５％、１．２〜４．５％、１．３〜４．５％、１．４〜４．５％、１．５〜４．５％、１．６〜４．５％、１．７〜４．５％、１．８〜４．５％、１．９〜４．５％、２〜４．５％、２．１〜４．５％、２．２〜４．５％、２．３〜４．５％、２．４〜４．５％、２．５〜４．５％、２．６〜４．５％、２．７〜４．５％、２．８〜４．５％、２．９〜４．５％、３〜４．５％、３．１〜４．５％、３．２〜４．５％、３．３〜４．５％、３．４〜４．５％、３．５〜４．５％、３．６〜４．５％、３．７〜４．５％、３．８〜４．５％、３．９〜４．５％、４〜４．５％、４．１〜４．５％、４．２〜４．５％、４．３〜４．５％、４．４〜４．５％、０〜５％、０．１〜５％、０．２〜５％、０．３〜５％、０．４〜５％、０．５〜５％、０．６〜５％、０．７〜５％、０．８〜５％、０．９〜５％、１〜５％、１．１〜５％、１．２〜５％、１．３〜５％、１．４〜５％、１．５〜５％、１．６〜５％、１．７〜５％、１．８〜５％、１．９〜５％、２〜５％、２．１〜５％、２．２〜５％、２．３〜５％、２．４〜５％、２．５〜５％、２．６〜５％、２．７〜５％、２．８〜５％、２．９〜５％、３〜５％、３．１〜５％、３．２〜５％、３．３〜５％、３．４〜５％、３．５〜５％、３．６〜５％、３．７〜５％、３．８〜５％、３．９〜５％、４〜５％、４．１〜５％、４．２〜５％、４．３〜５％、４．４〜５％、４．５〜５％、４．６〜５％、４．７〜５％、４．８〜５％、４．９〜５％、０〜５．５％、０．１〜５．５％、０．２〜５．５％、０．３〜５．５％、０．４〜５．５％、０．５〜５．５％、０．６〜５．５％、０．７〜５．５％、０．８〜５．５％、０．９〜５．５％、１〜５．５％、１．１〜５．５％、１．２〜５．５％、１．３〜５．５％、１．４〜５．５％、１．５〜５．５％、１．６〜５．５％、１．７〜５．５％、１．８〜５．５％、１．９〜５．５％、２〜５．５％、２．１〜５．５％、２．２〜５．５％、２．３〜５．５％、２．４〜５．５％、２．５〜５．５％、２．６〜５．５％、２．７〜５．５％、２．８〜５．５％、２．９〜５．５％、３〜５．５％、３．１〜５．５％、３．２〜５．５％、３．３〜５．５％、３．４〜５．５％、３．５〜５．５％、３．６〜５．５％、３．７〜５．５％、３．８〜５．５％、３．９〜５．５％、４〜５．５％、４．１〜５．５％、４．２〜５．５％、４．３〜５．５％、４．４〜５．５％、４．５〜５．５％、４．６〜５．５％、４．７〜５．５％、４．８〜５．５％、４．９〜５．５％、５〜５．５％、５．１〜５．５％、５．２〜５．５％、５．３〜５．５％、５．４〜５．５％、０〜６％、０．１〜６％、０．２〜６％、０．３〜６％、０．４〜６％、０．５〜６％、０．６〜６％、０．７〜６％、０．８〜６％、０．９〜６％、１〜６％、１．１〜６％、１．２〜６％、１．３〜６％、１．４〜６％、１．５〜６％、１．６〜６％、１．７〜６％、１．８〜６％、１．９〜６％、２〜６％、２．１〜６％、２．２〜６％、２．３〜６％、２．４〜６％、２．５〜６％、２．６〜６％、２．７〜６％、２．８〜６％、２．９〜６％、３〜６％、３．１〜６％、３．２〜６％、３．３〜６％、３．４〜６％、３．５〜６％、３．６〜６％、３．７〜６％、３．８〜６％、３．９〜６％、４〜６％、４．１〜６％、４．２〜６％、４．３〜６％、４．４〜６％、４．５〜６％、４．６〜６％、４．７〜６％、４．８〜６％、４．９〜６％、５〜６％、５．１〜６％、５．２〜６％、５．３〜６％、５．４〜６％、５．５〜６％、５．６〜６％、５．７〜６％、５．８〜６％、５．９〜６％、０〜６．５％、０．１〜６．５％、０．２〜６．５％、０．３〜６．５％、０．４〜６．５％、０．５〜６．５％、０．６〜６．５％、０．７〜６．５％、０．８〜６．５％、０．９〜６．５％、１〜６．５％、１．１〜６．５％、１．２〜６．５％、１．３〜６．５％、１．４〜６．５％、１．５〜６．５％、１．６〜６．５％、１．７〜６．５％、１．８〜６．５％、１．９〜６．５％、２〜６．５％、２．１〜６．５％、２．２〜６．５％、２．３〜６．５％、２．４〜６．５％、２．５〜６．５％、２．６〜６．５％、２．７〜６．５％、２．８〜６．５％、２．９〜６．５％、３〜６．５％、３．１〜６．５％、３．２〜６．５％、３．３〜６．５％、３．４〜６．５％、３．５〜６．５％、３．６〜６．５％、３．７〜６．５％、３．８〜６．５％、３．９〜６．５％、４〜６．５％、４．１〜６．５％、４．２〜６．５％、４．３〜６．５％、４．４〜６．５％、４．５〜６．５％、４．６〜６．５％、４．７〜６．５％、４．８〜６．５％、４．９〜６．５％、５〜６．５％、５．１〜６．５％、５．２〜６．５％、５．３〜６．５％、５．４〜６．５％、５．５〜６．５％、５．６〜６．５％、５．７〜６．５％、５．８〜６．５％、５．９〜６．５％、６〜６．５％、６．１〜６．５％、６．２〜６．５％、６．３〜６．５％、６．４〜６．５％、０〜７％、０．１〜７％、０．２〜７％、０．３〜７％、０．４〜７％、０．５〜７％、０．６〜７％、０．７〜７％、０．８〜７％、０．９〜７％、１〜７％、１．１〜７％、１．２〜７％、１．３〜７％、１．４〜７％、１．５〜７％、１．６〜７％、１．７〜７％、１．８〜７％、１．９〜７％、２〜７％、２．１〜７％、２．２〜７％、２．３〜７％、２．４〜７％、２．５〜７％、２．６〜７％、２．７〜７％、２．８〜７％、２．９〜７％、３〜７％、３．１〜７％、３．２〜７％、３．３〜７％、３．４〜７％、３．５〜７％、３．６〜７％、３．７〜７％、３．８〜７％、３．９〜７％、４〜７％、４．１〜７％、４．２〜７％、４．３〜７％、４．４〜７％、４．５〜７％、４．６〜７％、４．７〜７％、４．８〜７％、４．９〜７％、５〜７％、５．１〜７％、５．２〜７％、５．３〜７％、５．４〜７％、５．５〜７％、５．６〜７％、５．７〜７％、５．８〜７％、５．９〜７％、６〜７％、６．１〜７％、６．２〜７％、６．３〜７％、６．４〜７％、６．５〜７％、６．６〜７％、６．７〜７％、６．８〜７％、６．９〜７％、０〜７．５％、０．１〜７．５％、０．２〜７．５％、０．３〜７．５％、０．４〜７．５％、０．５〜７．５％、０．６〜７．５％、０．７〜７．５％、０．８〜７．５％、０．９〜７．５％、１〜７．５％、１．１〜７．５％、１．２〜７．５％、１．３〜７．５％、１．４〜７．５％、１．５〜７．５％、１．６〜７．５％、１．７〜７．５％、１．８〜７．５％、１．９〜７．５％、２〜７．５％、２．１〜７．５％、２．２〜７．５％、２．３〜７．５％、２．４〜７．５％、２．５〜７．５％、２．６〜７．５％、２．７〜７．５％、２．８〜７．５％、２．９〜７．５％、３〜７．５％、３．１〜７．５％、３．２〜７．５％、３．３〜７．５％、３．４〜７．５％、３．５〜７．５％、３．６〜７．５％、３．７〜７．５％、３．８〜７．５％、３．９〜７．５％、４〜７．５％、４．１〜７．５％、４．２〜７．５％、４．３〜７．５％、４．４〜７．５％、４．５〜７．５％、４．６〜７．５％、４．７〜７．５％、４．８〜７．５％、４．９〜７．５％、５〜７．５％、５．１〜７．５％、５．２〜７．５％、５．３〜７．５％、５．４〜７．５％、５．５〜７．５％、５．６〜７．５％、５．７〜７．５％、５．８〜７．５％、５．９〜７．５％、６〜７．５％、６．１〜７．５％、６．２〜７．５％、６．３〜７．５％、６．４〜７．５％、６．５〜７．５％、６．６〜７．５％、６．７〜７．５％、６．８〜７．５％、６．９〜７．５％、７〜７．５％、７．１〜７．５％、７．２〜７．５％、７．３〜７．５％、７．４〜７．５％、０〜８％、０．１〜８％、０．２〜８％、０．３〜８％、０．４〜８％、０．５〜８％、０．６〜８％、０．７〜８％、０．８〜８％、０．９〜８％、１〜８％、１．１〜８％、１．２〜８％、１．３〜８％、１．４〜８％、１．５〜８％、１．６〜８％、１．７〜８％、１．８〜８％、１．９〜８％、２〜８％、２．１〜８％、２．２〜８％、２．３〜８％、２．４〜８％、２．５〜８％、２．６〜８％、２．７〜８％、２．８〜８％、２．９〜８％、３〜８％、３．１〜８％、３．２〜８％、３．３〜８％、３．４〜８％、３．５〜８％、３．６〜８％、３．７〜８％、３．８〜８％、３．９〜８％、４〜８％、４．１〜８％、４．２〜８％、４．３〜８％、４．４〜８％、４．５〜８％、４．６〜８％、４．７〜８％、４．８〜８％、４．９〜８％、５〜８％、５．１〜８％、５．２〜８％、５．３〜８％、５．４〜８％、５．５〜８％、５．６〜８％、５．７〜８％、５．８〜８％、５．９〜８％、６〜８％、６．１〜８％、６．２〜８％、６．３〜８％、６
．４〜８％、６．５〜８％、６．６〜８％、６．７〜８％、６．８〜８％、６．９〜８％、７〜８％、７．１〜８％、７．２〜８％、７．３〜８％、７．４〜８％、７．５〜８％、７．６〜８％、７．７〜８％、７．８〜８％、７．９〜８％、０〜８．５％、０．１〜８．５％、０．２〜８．５％、０．３〜８．５％、０．４〜８．５％、０．５〜８．５％、０．６〜８．５％、０．７〜８．５％、０．８〜８．５％、０．９〜８．５％、１〜８．５％、１．１〜８．５％、１．２〜８．５％、１．３〜８．５％、１．４〜８．５％、１．５〜８．５％、１．６〜８．５％、１．７〜８．５％、１．８〜８．５％、１．９〜８．５％、２〜８．５％、２．１〜８．５％、２．２〜８．５％、２．３〜８．５％、２．４〜８．５％、２．５〜８．５％、２．６〜８．５％、２．７〜８．５％、２．８〜８．５％、２．９〜８．５％、３〜８．５％、３．１〜８．５％、３．２〜８．５％、３．３〜８．５％、３．４〜８．５％、３．５〜８．５％、３．６〜８．５％、３．７〜８．５％、３．８〜８．５％、３．９〜８．５％、４〜８．５％、４．１〜８．５％、４．２〜８．５％、４．３〜８．５％、４．４〜８．５％、４．５〜８．５％、４．６〜８．５％、４．７〜８．５％、４．８〜８．５％、４．９〜８．５％、５〜８．５％、５．１〜８．５％、５．２〜８．５％、５．３〜８．５％、５．４〜８．５％、５．５〜８．５％、５．６〜８．５％、５．７〜８．５％、５．８〜８．５％、５．９〜８．５％、６〜８．５％、６．１〜８．５％、６．２〜８．５％、６．３〜８．５％、６．４〜８．５％、６．５〜８．５％、６．６〜８．５％、６．７〜８．５％、６．８〜８．５％、６．９〜８．５％、７〜８．５％、７．１〜８．５％、７．２〜８．５％、７．３〜８．５％、７．４〜８．５％、７．５〜８．５％、７．６〜８．５％、７．７〜８．５％、７．８〜８．５％、７．９〜８．５％、８〜８．５％、８．１〜８．５％、８．２〜８．５％、８．３〜８．５％、８．４〜８．５％、０〜９％、０．１〜９％、０．２〜９％、０．３〜９％、０．４〜９％、０．５〜９％、０．６〜９％、０．７〜９％、０．８〜９％、０．９〜９％、１〜９％、１．１〜９％、１．２〜９％、１．３〜９％、１．４〜９％、１．５〜９％、１．６〜９％、１．７〜９％、１．８〜９％、１．９〜９％、２〜９％、２．１〜９％、２．２〜９％、２．３〜９％、２．４〜９％、２．５〜９％、２．６〜９％、２．７〜９％、２．８〜９％、２．９〜９％、３〜９％、３．１〜９％、３．２〜９％、３．３〜９％、３．４〜９％、３．５〜９％、３．６〜９％、３．７〜９％、３．８〜９％、３．９〜９％、４〜９％、４．１〜９％、４．２〜９％、４．３〜９％、４．４〜９％、４．５〜９％、４．６〜９％、４．７〜９％、４．８〜９％、４．９〜９％、５〜９％、５．１〜９％、５．２〜９％、５．３〜９％、５．４〜９％、５．５〜９％、５．６〜９％、５．７〜９％、５．８〜９％、５．９〜９％、６〜９％、６．１〜９％、６．２〜９％、６．３〜９％、６．４〜９％、６．５〜９％、６．６〜９％、６．７〜９％、６．８〜９％、６．９〜９％、７〜９％、７．１〜９％、７．２〜９％、７．３〜９％、７．４〜９％、７．５〜９％、７．６〜９％、７．７〜９％、７．８〜９％、７．９〜９％、８〜９％、８．１〜９％、８．２〜９％、８．３〜９％、８．４〜９％、８．５〜９％、８．６〜９％、８．７〜９％、８．８〜９％、８．９〜９％、０〜９．５％、０．１〜９．５％、０．２〜９．５％、０．３〜９．５％、０．４〜９．５％、０．５〜９．５％、０．６〜９．５％、０．７〜９．５％、０．８〜９．５％、０．９〜９．５％、１〜９．５％、１．１〜９．５％、１．２〜９．５％、１．３〜９．５％、１．４〜９．５％、１．５〜９．５％、１．６〜９．５％、１．７〜９．５％、１．８〜９．５％、１．９〜９．５％、２〜９．５％、２．１〜９．５％、２．２〜９．５％、２．３〜９．５％、２．４〜９．５％、２．５〜９．５％、２．６〜９．５％、２．７〜９．５％、２．８〜９．５％、２．９〜９．５％、３〜９．５％、３．１〜９．５％、３．２〜９．５％、３．３〜９．５％、３．４〜９．５％、３．５〜９．５％、３．６〜９．５％、３．７〜９．５％、３．８〜９．５％、３．９〜９．５％、４〜９．５％、４．１〜９．５％、４．２〜９．５％、４．３〜９．５％、４．４〜９．５％、４．５〜９．５％、４．６〜９．５％、４．７〜９．５％、４．８〜９．５％、４．９〜９．５％、５〜９．５％、５．１〜９．５％、５．２〜９．５％、５．３〜９．５％、５．４〜９．５％、５．５〜９．５％、５．６〜９．５％、５．７〜９．５％、５．８〜９．５％、５．９〜９．５％、６〜９．５％、６．１〜９．５％、６．２〜９．５％、６．３〜９．５％、６．４〜９．５％、６．５〜９．５％、６．６〜９．５％、６．７〜９．５％、６．８〜９．５％、６．９〜９．５％、７〜９．５％、７．１〜９．５％、７．２〜９．５％、７．３〜９．５％、７．４〜９．５％、７．５〜９．５％、７．６〜９．５％、７．７〜９．５％、７．８〜９．５％、７．９〜９．５％、８〜９．５％、８．１〜９．５％、８．２〜９．５％、８．３〜９．５％、８．４〜９．５％、８．５〜９．５％、８．６〜９．５％、８．７〜９．５％、８．８〜９．５％、８．９〜９．５％、９〜９．５％、９．１〜９．５％、９．２〜９．５％、９．３〜９．５％、９．４〜９．５％、０〜１０％、０．１〜１０％、０．２〜１０％、０．３〜１０％、０．４〜１０％、０．５〜１０％、０．６〜１０％、０．７〜１０％、０．８〜１０％、０．９〜１０％、１〜１０％、１．１〜１０％、１．２〜１０％、１．３〜１０％、１．４〜１０％、１．５〜１０％、１．６〜１０％、１．７〜１０％、１．８〜１０％、１．９〜１０％、２〜１０％、２．１〜１０％、２．２〜１０％、２．３〜１０％、２．４〜１０％、２．５〜１０％、２．６〜１０％、２．７〜１０％、２．８〜１０％、２．９〜１０％、３〜１０％、３．１〜１０％、３．２〜１０％、３．３〜１０％、３．４〜１０％、３．５〜１０％、３．６〜１０％、３．７〜１０％、３．８〜１０％、３．９〜１０％、４〜１０％、４．１〜１０％、４．２〜１０％、４．３〜１０％、４．４〜１０％、４．５〜１０％、４．６〜１０％、４．７〜１０％、４．８〜１０％、４．９〜１０％、５〜１０％、５．１〜１０％、５．２〜１０％、５．３〜１０％、５．４〜１０％、５．５〜１０％、５．６〜１０％、５．７〜１０％、５．８〜１０％、５．９〜１０％、６〜１０％、６．１〜１０％、６．２〜１０％、６．３〜１０％、６．４〜１０％、６．５〜１０％、６．６〜１０％、６．７〜１０％、６．８〜１０％、６．９〜１０％、７〜１０％、７．１〜１０％、７．２〜１０％、７．３〜１０％、７．４〜１０％、７．５〜１０％、７．６〜１０％、７．７〜１０％、７．８〜１０％、７．９〜１０％、８〜１０％、８．１〜１０％、８．２〜１０％、８．３〜１０％、８．４〜１０％、８．５〜１０％、８．６〜１０％、８．７〜１０％、８．８〜１０％、８．９〜１０％、９〜１０％、９．１〜１０％、９．２〜１０％、９．３〜１０％、９．４〜１０％、９．５〜１０％、９．６〜１０％、９．７〜１０％、９．８〜１０％、または９．９〜１０ｗ／ｖ％の範囲のソルビトールを含んでいてもよい。
【０４６１】
ある特定の実施形態では、製剤は、０〜１０ｗ／ｖ％のソルビトールを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、０〜９ｗ／ｖ％のソルビトールを含んでいてもよい。
【０４６２】
ある特定の実施形態では、製剤は、０〜８ｗ／ｖ％のソルビトールを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、０〜７ｗ／ｖ％のソルビトールを含んでいてもよい。
【０４６３】
ある特定の実施形態では、製剤は、０〜６ｗ／ｖ％のソルビトールを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、０〜５ｗ／ｖ％のソルビトールを含んでいてもよい。
【０４６４】
ある特定の実施形態では、製剤は、０〜４ｗ／ｖ％のソルビトールを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、０〜３ｗ／ｖ％のソルビトールを含んでいてもよい。
【０４６５】
ある特定の実施形態では、製剤は、０〜２ｗ／ｖ％のソルビトールを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、０〜１ｗ／ｖ％のソルビトールを含んでいてもよい。
【０４６６】
ある特定の実施形態では、製剤は、１ｗ／ｖ％のソルビトールを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、２ｗ／ｖ％のソルビトールを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、３ｗ／ｖ％のソルビトールを含んでいてもよい。
【０４６７】
ある特定の実施形態では、製剤は、４ｗ／ｖ％のソルビトールを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、５ｗ／ｖ％のソルビトールを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、６ｗ／ｖ％のソルビトールを含んでいてもよい。
【０４６８】
ある特定の実施形態では、製剤は、７ｗ／ｖ％のソルビトールを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、８ｗ／ｖ％のソルビトールを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、９ｗ／ｖ％のソルビトールを含んでいてもよい。
【０４６９】
ある特定の実施形態では、製剤は、１０ｗ／ｖ％のソルビトールを含んでいてもよい。
表面活性物質
一部の実施形態では、本明細書に記載の医薬組成物の製剤は、表面活性物質を含んでいてもよい。表面活性物質は、懸濁培養におけるせん断力の制御に役立つ場合がある。本明細書で使用される表面活性物質は、陰イオン性、双性イオン性、または非イオン性表面活性物質であってもよく、医薬製剤での使用に適切な当技術分野で公知のものを挙げることができる。陰イオン性表面活性物質の例としては、スルフェート、スルホネート、リン酸エステル、およびカルボキシレートが挙げられるが、これらに限定されない。非イオン性表面活性物質の例としては、これらに限定されないが、エホキシラート（ｅｈｏｘｙｌａｔｅ）、脂肪アルコールエトキシレート、アルキルフェノールエトキシレート（例えば、ノノキシノール、Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００）、脂肪酸エトキシレート、エトキシル化アミンおよび／または脂肪酸アミド（例えば、ポリエトキシル化獣脂アミン、コカミドモノエタノールアミン、コカミドジエタノールアミン）、エチレンオキシド／プロピレンオキシドコポリマー（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ−６８またはＦ−１２７などのポロキサマー）、脂肪酸および多価アルコールのエステル、脂肪酸アルカノールアミド、エトキシル化脂肪族酸、エトキシル化脂肪族アルコール、エトキシル化ソルビトール脂肪酸エステル、エトキシル化グリセリド、ＥＤＴＡ（エチレンジアミン四酢酸）とのエトキシル化ブロックコポリマー、エトキシル化環状エーテル付加物、エトキシル化アミドおよびイミダゾリン付加物、エトキシル化アミン付加物、エトキシル化メルカプタン付加物、アルキルフェノールとのエトキシル化凝縮物、エトキシル化窒素に基づく疎水性物質、エトキシル化ポリオキシプロピレン、ポリマーシリコーン、フッ素化表面活性物質、および重合性表面活性物質が挙げられる。双性イオン性表面活性物質の例としては、これらに限定されないが、アルキルアミドベタインおよびそれらのアミンオキシド、アルキルベタインおよびそれらのアミンオキシド、スルホベタイン、ヒドロキシスルホベタイン、アンホグリシネート（ａｍｐｈｏｇｌｙｃｉｎａｔｅ）、アンホプロピオネート（ａｍｐｈｏｐｒｏｐｉｏｎａｔｅ）、バランスアンホポリカルボキシグリシネート（ｂａｌａｎｃｅｄ  ａｍｐｈｏｐｏｌｙｃａｒｂｏｘｙｇｌｙｃｉｎａｔｅ）、およびアルキルポリアミノグリシネートが挙げられる。タンパク質は、ｐＨに応じて帯電するかまたは帯電しない能力を有する。したがって、ｐＨが適正であれば、修飾ウシ血清アルブミンまたはキモトリプシノーゲンなどの、好ましくは約８〜９のｐＩを有するタンパク質は、双性イオン性表面活性物質として機能することができる。必要に応じて、表面活性物質の種々の混合物を使用することができる。
【０４７０】
コポリマー
ある特定の実施形態では、製剤中の成分の少なくとも１つは、コポリマーである。
ある特定の実施形態では、製剤は、０．００００１％、０．０００１％、０．００１％、０．０１％、０．１％、または１ｗ／ｖ％の濃度の少なくとも１つのコポリマーを含んでいてもよい。
【０４７１】
ある特定の実施形態では、製剤は、０．００００１％〜０．０００１％、０．００００１％〜０．００１％、０．００００１％〜０．０１％、０．００００１％〜０．１％、０．００００１％〜１％、０．０００１％〜０．００１％、０．０００１％〜０．０１％、０．０００１％〜０．１％、０．０００１％〜１％、０．００１％〜０．０１％、０．００１％〜０．１％、０．００１％〜１％、０．０１％〜０．１％、０．０１％〜１％、または０．１〜１ｗ／ｖ％の範囲の少なくとも１つのコポリマーを含んでいてもよい。
【０４７２】
ある特定の実施形態では、製剤は、０．００１ｗ／ｖ％のコポリマーを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、コポリマーは、エチレンオキシド／プロピレンオキシドコポリマーである。
【０４７３】
ある特定の実施形態では、製剤は、０．００００１％、０．０００１％、０．００１％、０．０１％、０．１％、または１ｗ／ｖ％の濃度の少なくとも１つのエチレンオキシド／プロピレンオキシドコポリマーを含んでいてもよい。
【０４７４】
ある特定の実施形態では、製剤は、０．００００１％〜０．０００１％、０．００００１％〜０．００１％、０．００００１％〜０．０１％、０．００００１％〜０．１％、０．００００１％〜１％、０．０００１％〜０．００１％、０．０００１％〜０．０１％、０．０００１％〜０．１％、０．０００１％〜１％、０．００１％〜０．０１％、０．００１％〜０．１％、０．００１％〜１％、０．０１％〜０．１％、０．０１％〜１％、または０．１〜１ｗ／ｖ％の範囲の少なくとも１つのエチレンオキシド／プロピレンオキシドコポリマーを含んでいてもよい。
【０４７５】
ある特定の実施形態では、製剤は、０．００１ｗ／ｖ％のエチレンオキシド／プロピレンオキシドコポリマーを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、ポロキサマーである少なくとも１つのエチレンオキシド／プロピレンオキシドコポリマーを含んでいてもよい。ある特定の実施形態では、製剤は、０．００００１％、０．０００１％、０．００１％、０．０１％、０．１％、または１ｗ／ｖ％の濃度のポロキサマーを含んでいてもよい。
【０４７６】
ある特定の実施形態では、製剤は、０．００００１％〜０．０００１％、０．００００１％〜０．００１％、０．００００１％〜０．０１％、０．００００１％〜０．１％、０．００００１％〜１％、０．０００１％〜０．００１％、０．０００１％〜０．０１％、０．０００１％〜０．１％、０．０００１％〜１％、０．００１％〜０．０１％、０．００１％〜０．１％、０．００１％〜１％、０．０１％〜０．１％、０．０１％〜１％、または０．１〜１ｗ／ｖ％の範囲のポロキサマーを含んでいてもよい。
【０４７７】
ある特定の実施形態では、製剤は、０．００１ｗ／ｖ％のポロキサマーを含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、ポロキサマー１８８（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ−６８）である少なくとも１つのエチレンオキシド／プロピレンコポリマーを含んでいてもよい。ある特定の実施形態では、製剤は、０．００００１％、０．０００１％、０．００１％、０．０１％、０．１％、または１ｗ／ｖ％の濃度のポロキサマー１８８を含んでいてもよい。
【０４７８】
ある特定の実施形態では、製剤は、０．００００１％〜０．０００１％、０．００００１％〜０．００１％、０．００００１％〜０．０１％、０．００００１％〜０．１％、０．００００１％〜１％、０．０００１％〜０．００１％、０．０００１％〜０．０１％、０．０００１％〜０．１％、０．０００１％〜１％、０．００１％〜０．０１％、０．００１％〜０．１％、０．００１％〜１％、０．０１％〜０．１％、０．０１％〜１％、または０．１〜１ｗ／ｖ％の範囲のポロキサマー１８８を含んでいてもよい。
【０４７９】
ある特定の実施形態では、製剤は、０．００１％〜０．１ｗ／ｖ％のポロキサマー１８８を含んでいてもよい。
ある特定の実施形態では、製剤は、０．００１ｗ／ｖ％のポロキサマー１８８を含んでいてもよい。
【０４８０】
ある特定の実施形態では、製剤は、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ−６８である少なくとも１つのエチレンオキシド／プロピレンオキシドコポリマーを含んでいてもよい。ある特定の実施形態では、製剤は、０．００００１％、０．０００１％、０．００１％、０．０１％、０．１％、または１ｗ／ｖ％の濃度のＰｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ−６８を含んでいてもよい。
【０４８１】
ある特定の実施形態では、製剤は、０．００００１％〜０．０００１％、０．００００１％〜０．００１％、０．００００１％〜０．０１％、０．００００１％〜０．１％、０．００００１％〜１％、０．０００１％〜０．００１％、０．０００１％〜０．０１％、０．０００１％〜０．１％、０．０００１％〜１％、０．００１％〜０．０１％、０．００１％〜０．１％、０．００１％〜１％、０．０１％〜０．１％、０．０１％〜１％、または０．１〜１ｗ／ｖ％の範囲のＰｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ−６８を含んでいてもよい。
【０４８２】
ある特定の実施形態では、製剤は、０．００１％〜０．１ｗ／ｖ％のＰｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ−６８を含んでいてもよい。
製剤特性
ある特定の実施形態では、製剤は、特定のｐＨ、オスモル濃度、濃度、ＡＡＶ粒子の濃度、および／またはＡＡＶ粒子の総用量を有するように最適化されている。
【０４８３】
ｐＨ
ある特定の実施形態では、製剤は、特定のｐＨになるように最適化されていてもよい。ある特定の実施形態では、製剤は、弱酸または弱塩基であるｐＨ緩衝剤（本明細書では「緩衝剤」とも呼ばれる）を含んでいてもよく、ｐＨ緩衝剤は、別の酸または塩基が製剤に添加された後でも製剤のｐＨを選択値付近に維持するために製剤中で使用される。製剤のｐＨは、０、０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９、１、１．１、１．２、１．３、１．４、１．５、１．６、１．７、１．８、１．９、２、２．１、２．２、２．３、２．４、２．５、２．６、２．７、２．８、２．９、３、３．１、３．２、３．３、３．４、３．５、３．６、３．７、３．８、３．９、４、４．１、４．２、４．３、４．４、４．５、４．６、４．７、４．８、４．９、５、５．１、５．２、５．３、５．４、５．５、５．６、５．７、５．８、５．９、６、６．１、６．２、６．３、６．４、６．５、６．６、６．７、６．８、６．９、７、７．１、７．２、７．３、７．４、７．５、７．６、７．７、７．８、７．９、８、８．１、８．２、８．３、８．４、８．５、８．６、８．７、８．８、８．９、９、９．１、９．２、９．３、９．４、９．５、９．６、９．７、９．８、９．９、１０、１０．１、１０．２、１０．３、１０．４、１０．５、１０．６、１０．７、１０．８、１０．９、１１、１１．１、１１．２、１１．３、１１．４、１１．５、１１．６、１１．７、１１．８、１１．９、１２、１２．１、１２．２、１２．３、１２．４、１２．５、１２．６、１２．７、１２．８、１２．９、１３、１３．１、１３．２、１３．３、１３．４、１３．５、１３．６、１３．７、１３．８、１３．９、および１４であってもよいが、これらに限定されない。
【０４８４】
ある特定の実施形態では、製剤は、特定のｐＨ範囲になるように最適化されていてもよい。ｐＨ範囲は、０〜４、１〜５、２〜６、３〜７、４〜８、５〜９、６〜１０、７〜１１、８〜１２、９〜１３、１０〜１４、０〜１．５、１〜２．５、２〜３．５、３〜４．５、４〜５．５、５〜６．５、６〜７．５、７〜８．５、８〜９．５、９〜１０．５、１０〜１１．５、１１〜１２．５、１２〜１３．５、０〜１、１〜２、２〜３、３〜４、４〜５、５〜６、６〜７、７〜８、８〜９、９〜１０、１０〜１１、１１〜１２、１２〜１３、１３〜１４、０〜０．５、０．５〜１、１〜１．５、１．５〜２、２〜２．５、２．５〜３、３〜３．５、３．５〜４、４〜４．５、４．５〜５、５〜５．５、５．５〜６、６〜６．５、６．５〜７、７〜７．５、７．２〜８．２、７．２〜７．６、７．３〜７．７、７．５〜８、７．８〜８．２、８〜８．５、８．５〜９、９〜９．５、９．５〜１０、１０〜１０．５、１０．５〜１１、１１〜１１．５、１１．５〜１２、１２〜１２．５、１２．５〜１３、１３〜１３．５、または１３．５〜１４であってもよいが、これらに限定されない。
【０４８５】
ある特定の実施形態では、製剤のｐＨは、６〜８．５である。
ある特定の実施形態では、製剤のｐＨは、７〜８．５である。
ある特定の実施形態では、製剤のｐＨは、７〜７．６である。
【０４８６】
ある特定の実施形態では、製剤のｐＨは、７である。
ある特定の実施形態では、製剤のｐＨは、７．１である。
ある特定の実施形態では、製剤のｐＨは、７．２である。
【０４８７】
ある特定の実施形態では、製剤のｐＨは、７．３である。
ある特定の実施形態では、製剤のｐＨは、７．４である。
ある特定の実施形態では、製剤のｐＨは、７．５である。
【０４８８】
ある特定の実施形態では、製剤のｐＨは、７．６である。
ある特定の実施形態では、製剤のｐＨは、７．７である。
ある特定の実施形態では、製剤のｐＨは、７．８である。
【０４８９】
ある特定の実施形態では、製剤のｐＨは、７．９である。
ある特定の実施形態では、製剤のｐＨは、８である。
ある特定の実施形態では、製剤のｐＨは、８．１である。
【０４９０】
ある特定の実施形態では、製剤のｐＨは、８．２である。
ある特定の実施形態では、製剤のｐＨは、８．３である。
ある特定の実施形態では、製剤のｐＨは、８．４である。
【０４９１】
ある特定の実施形態では、製剤のｐＨは、８．５である。
ある特定の実施形態では、ｐＨは、製剤が５℃である際に決定される。
ある特定の実施形態では、ｐＨは、製剤が２５℃である際に決定される。
【０４９２】
適切な緩衝剤としては、これらに限定されないが、トリスＨＣｌ、トリス塩基、リン酸ナトリウム（リン酸一ナトリウムおよび／またはリン酸二ナトリウム）、リン酸カリウム（リン酸一カリウムおよび／またはリン酸二カリウム）、ヒスチジン、ホウ酸、クエン酸、グリシン、ＨＥＰＥＳ（４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジンエタンスルホン酸）、およびＭＯＰＳ（３−（Ｎ−モルホリノ）プロパンスルホン酸）を挙げることができる。
【０４９３】
製剤中の緩衝剤の濃度は、１〜５０ｍＭ、１〜２５ｍＭ、５〜３０ｍＭ、５〜２０ｍＭ、５〜１５ｍＭ、１０〜４０ｍＭ、または１５〜３０ｍＭであってもよい。製剤中の緩衝剤の濃度は、約１ｍＭ、５ｍＭ、７．５ｍＭ、１０ｍＭ、１２．５ｍＭ、１５ｍＭ、２０ｍＭ、２５ｍＭ、３０ｍＭ、３５ｍＭ、４０ｍＭ、または５０ｍＭであってもよい。
【０４９４】
一部の実施形態では、製剤は、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）を含んでいてもよいが、これに限定されない。非限定的な例として、ＰＢＳは、塩化ナトリウム、塩化カリウム、リン酸二ナトリウム、リン酸一カリウム、および蒸留水を含んでいてもよい。一部の場合では、ＰＢＳは、カリウムもマグネシウムも含有しない。他の場合では、ＰＢＳは、カルシウムおよびマグネシウムを含有する。
【０４９５】
一部の実施形態では、本明細書に記載の医薬組成物の製剤に使用される緩衝剤は、リン酸ナトリウム（リン酸一ナトリウムおよび／またはリン酸二ナトリウム）を含んでいてもよい。非限定的な例として、リン酸ナトリウムは、７．４±０．２の範囲内のｐＨ（５℃での）に調整することができる。一部の実施形態では、本明細書に記載の医薬組成物の製剤に使用される緩衝剤は、トリス塩基を含んでいてもよい。トリス塩基は、塩酸を用いて７．１〜９．１の範囲内の任意のｐＨに調整されていてもよい。非限定的な例として、本明細書に記載の製剤に使用されるトリス塩基は、８．０±０．２に調整されていてもよい。非限定的な例として、本明細書に記載の製剤に使用されるトリス塩基は、７．５±０．２に調整されていてもよい。
【０４９６】
オスモル濃度
ある特定の実施形態では、製剤は、特定のオスモル濃度になるように最適化されていてもよい。製剤のオスモル濃度は、３５０、３５１、３５２、３５３、３５４、３５５、３５６、３５７、３５８、３５９、３６０、３６１、３６２、３６３、３６４、３６５、３６６、３６７、３６８、３６９、３７０、３７１、３７２、３７３、３７４、３７５、３７６、３７７、３７８、３７９、３８０、３８１、３８２、３８３、３８４、３８５、３８６、３８７、３８８、３８９、３９０、３９１、３９２、３９３、３９４、３９５、３９６、３９７、３９８、３９９、４００、４０１、４０２、４０３、４０４、４０５、４０６、４０７、４０８、４０９、４１０、４１１、４１２、４１３、４１４、４１５、４１６、４１７、４１８、４１９、４２０、４２１、４２２、４２３、４２４、４２５、４２６、４２７、４２８、４２９、４３０、４３１、４３２、４３３、４３４、４３５、４３６、４３７、４３８、４３９、４４０、４４１、４４２、４４３、４４４、４４５、４４６、４４７、４４８、４４９、４５０、４５１、４５２、４５３、４５４、４５５、４５６、４５７、４５８、４５９、４６０、４６１、４６２、４６３、４６４、４６５、４６６、４６７、４６８、４６９、４７０、４７１、４７２、４７３、４７４、４７５、４７６、４７７、４７８、４７９、４８０、４８１、４８２、４８３、４８４、４８５、４８６、４８７、４８８、４８９、４９０、４９１、４９２、４９３、４９４、４９５、４９６、４９７、４９８、４９９、または５００ｍＯｓｍ／ｋｇ（ミリオスモル／ｋｇ）であってもよいが、これらに限定されない。
【０４９７】
ある特定の実施形態では、製剤は、特定のオスモル濃度の範囲になるように最適化されていてもよい。範囲は、３５０〜３６０、３６０〜３７０、３７０〜３８０、３８０〜３９０、３９０〜４００、４００〜４１０、４１０〜４２０、４２０〜４３０、４３０〜４４０、４４０〜４５０、４５０〜４６０、４６０〜４７０、４７０〜４８０、４８０〜４９０、４９０〜５００、３５０〜３７０、３６０〜３８０、３７０〜３９０、３８０〜４００、３９０〜４１０、４００〜４２０、４１０〜４３０、４２０〜４４０、４３０〜４５０、４４０〜４６０、４５０〜４７０、４６０〜４８０、４７０〜４９０、４８０〜５００、３５０〜３７５、３７５〜４００、４００〜４２５、４２５〜４５０、４５０〜４７５、４７５〜５００、３５０〜３８０、３６０〜３９０、３７０〜４００、３８０〜４１０、３９０〜４２０、４００〜４３０、４１０〜４４０、４２０〜４５０、４３０〜４６０、４４０〜４７０、４５０〜４８０、４６０〜４９０、４７０〜５００、３５０〜３９０、３６０〜４００、３７０〜４１０、３８０〜４２０、３９０〜４３０、４００〜４４０、４１０〜４５０、４２０〜４６０、４３０〜４７０、４４０〜４８０、４５０〜４９０、４６０〜５００、３５０〜４００、３６０〜４１０、３７０〜４２０、３８０〜４３０、３９０〜４４０、４００〜４５０、４１０〜４６０、４２０〜４７０、４３０〜４８０、４４０〜４９０、４５０〜５００、３５０〜４１０、３６０〜４２０、３７０〜４３０、３８０〜４４０、３９０〜４５０、４００〜４６０、４１０〜４７０、４２０〜４８０、４３０〜４９０、４４０〜５００、３５０〜４２０、３６０〜４３０、３７０〜４４０、３８０〜４５０、３９０〜４６０、４００〜４７０、４１０〜４８０、４２０〜４９０、４３０〜５００、３５０〜４３０、３６０〜４４０、３７０〜４５０、３８０〜４６０、３９０〜４７０、４００〜４８０、４１０〜４９０、４２０〜５００、３５０〜４４０、３６０〜４５０、３７０〜４６０、３８０〜４７０、３９０〜４８０、４００〜４９０、４１０〜５００、３５０〜４５０、３６０〜４６０、３７０〜４７０、３８０〜４８０、３９０〜４９０、４００〜５００、３５０〜４６０、３６０〜４７０、３７０〜４８０、３８０〜４９０、３９０〜５００、３５０〜４７０、３６０〜４８０、３７０〜４９０、３８０〜５００、３５０〜４８０、３６０〜４９０、３７０〜５００、３５０〜４９０、３６０〜５００、または３５０〜５００ｍＯｓｍ／ｋｇであってもよいが、これらに限定されない。
【０４９８】
ある特定の実施形態では、製剤のオスモル濃度は、３５０〜５００ｍＯｓｍ／ｋｇである。
ある特定の実施形態では、製剤のオスモル濃度は、４００〜５００ｍＯｓｍ／ｋｇである。
【０４９９】
ある特定の実施形態では、製剤のオスモル濃度は、４００〜４８０ｍＯｓｍ／ｋｇである。
ある特定の実施形態では、オスモル濃度は、３９５ｍＯｓｍ／ｋｇである。
【０５００】
ある特定の実施形態では、オスモル濃度は、４１３ｍＯｓｍ／ｋｇである。
ある特定の実施形態では、オスモル濃度は、４２０ｍＯｓｍ／ｋｇである。
ある特定の実施形態では、オスモル濃度は、４３２ｍＯｓｍ／ｋｇである。
【０５０１】
ある特定の実施形態では、オスモル濃度は、４４７ｍＯｓｍ／ｋｇである。
ある特定の実施形態では、オスモル濃度は、４５０ｍＯｓｍ／ｋｇである。
ある特定の実施形態では、オスモル濃度は、４５２ｍＯｓｍ／ｋｇである。
【０５０２】
ある特定の実施形態では、オスモル濃度は、４５９ｍＯｓｍ／ｋｇである。
ある特定の実施形態では、オスモル濃度は、４７２ｍＯｓｍ／ｋｇである。
ある特定の実施形態では、オスモル濃度は、４９０ｍＯｓｍ／ｋｇである。
【０５０３】
ある特定の実施形態では、オスモル濃度は、４９６ｍＯｓｍ／ｋｇである。
ＡＡＶ粒子の濃度
ある特定の実施形態では、製剤中のＡＡＶ粒子の濃度は、約１×１０６ＶＧ／ｍｌ〜約１×１０１６ＶＧ／ｍｌであってもよい。本明細書で使用される場合、「ＶＧ／ｍｌ」は、１ミリリットル（ｍｌ）当たりのベクターゲノム（ＶＧ）を表す。また、ＶＧ／ｍｌは、１ミリリットル当たりのゲノムコピーまたは１ミリリットル当たりのＤＮａｓｅ耐性粒子を表す場合もある。
【０５０４】
ある特定の実施形態では、製剤は、約１ｘ１０６、２ｘ１０６、３ｘ１０６、４ｘ１０６、５ｘ１０６、６ｘ１０６、７ｘ１０６、８ｘ１０６、９ｘ１０６、１ｘ１０７、２ｘ１０７、３ｘ１０７、４ｘ１０７、５ｘ１０７、６ｘ１０７、７ｘ１０７、８ｘ１０７、９ｘ１０７、１ｘ１０８、２ｘ１０８、３ｘ１０８、４ｘ１０８、５ｘ１０８、６ｘ１０８、７ｘ１０８、８ｘ１０８、９ｘ１０８、１ｘ１０９、２ｘ１０９、３ｘ１０９、４ｘ１０９、５ｘ１０９、６ｘ１０９、７ｘ１０９、８ｘ１０９、９ｘ１０９、１ｘ１０１０、２ｘ１０１０、３ｘ１０１０、４ｘ１０１０、５ｘ１０１０、６ｘ１０１０、７ｘ１０１０、８ｘ１０１０、９ｘ１０１０、１ｘ１０１１、２ｘ１０１１、２．１ｘ１０１１、２．２ｘ１０１１、２．３ｘ１０１１、２．４ｘ１０１１、２．５ｘ１０１１、２．６ｘ１０１１、２．７ｘ１０１１、２．８ｘ１０１１、２．９ｘ１０１１、３ｘ１０１１、４ｘ１０１１、５ｘ１０１１、６ｘ１０１１、７ｘ１０１１、７．１ｘ１０１１、７．２ｘ１０１１、７．３ｘ１０１１、７．４ｘ１０１１、７．５ｘ１０１１、７．６ｘ１０１１、７．７ｘ１０１１、７．８ｘ１０１１、７．９ｘ１０１１、８ｘ１０１１、９ｘ１０１１、１ｘ１０１２、１．１ｘ１０１２、１．２ｘ１０１２、１．３ｘ１０１２、１．４ｘ１０１２、１．５ｘ１０１２、１．６ｘ１０１２、１．７ｘ１０１２、１．８ｘ１０１２、１．９ｘ１０１２、２ｘ１０１２、２．１ｘ１０１２、２．２ｘ１０１２、２．３ｘ１０１２、２．４ｘ１０１２、２．５ｘ１０１２、２．６ｘ１０１２、２．７ｘ１０１２、２．８ｘ１０１２、２．９ｘ１０１２、３ｘ１０１２、４ｘ１０１２、４．１ｘ１０１２、４．２ｘ１０１２、４．３ｘ１０１２、４．４ｘ１０１２、４．５ｘ１０１２、４．６ｘ１０１２、４．７ｘ１０１２、４．８ｘ１０１２、４．９ｘ１０１２、５ｘ１０１２、６ｘ１０１２、７ｘ１０１２、７．１ｘ１０１２、７．２ｘ１０１２、７．３ｘ１０１２、７．４ｘ１０１２、７．５ｘ１０１２、７．６ｘ１０１２、７．７ｘ１０１２、７．８ｘ１０１２、７．９ｘ１０１２、８ｘ１０１２、８．１ｘ１０１２、８．２ｘ１０１２、８．３ｘ１０１２、８．４ｘ１０１２、８．５ｘ１０１２、８．６ｘ１０１２、８．７ｘ１０１２、８．８ｘ１０１２、８．９ｘ１０１２、９ｘ１０１２、１ｘ１０１３、１．１ｘ１０１３、１．２ｘ１０１３、１．３ｘ１０１３、１．４ｘ１０１３、１．５ｘ１０１３、１．６ｘ１０１３、１．７ｘ１０１３、１．８ｘ１０１３、１．９ｘ１０１３、２ｘ１０１３、２．１ｘ１０１３、２．２ｘ１０１３、２．３ｘ１０１３、２．４ｘ１０１３、２．５ｘ１０１３、２．６ｘ１０１３、２．７ｘ１０１３、２．８ｘ１０１３、２．９ｘ１０１３、３ｘ１０１３、３．１ｘ１０１３、３．２ｘ１０１３、３．３ｘ１０１３、３．４ｘ１０１３、３．５ｘ１０１３、３．６ｘ１０１３、３．７ｘ１０１３、３．８ｘ１０１３、３．９ｘ１０１３、４ｘ１０１３、５ｘ１０１３、６ｘ１０１３、６．７ｘ１０１３、７ｘ１０１３、８ｘ１０１３、９ｘ１０１３、１ｘ１０１４、２ｘ１０１４、３ｘ１０１４、４ｘ１０１４、５ｘ１０１４、６ｘ１０１４、７ｘ１０１４、８ｘ１０１４、９ｘ１０１４、１ｘ１０１５、２ｘ１０１５、３ｘ１０１５、４ｘ１０１５、５ｘ１０１５、６ｘ１０１５、７ｘ１０１５、８ｘ１０１５、９ｘ１０１５、または１×１０１６ＶＧ／ｍｌのＡＡＶ粒子濃度を含んでいてもよい。
【０５０５】
ある特定の実施形態では、製剤中のＡＡＶ粒子の濃度は、１ｘ１０１１〜５ｘ１０１３、１ｘ１０１２〜５ｘ１０１２、２ｘ１０１２〜１ｘ１０１３、５ｘ１０１２〜１ｘ１０１３、１ｘ１０１３〜２ｘ１０１３、２ｘ１０１３〜３ｘ１０１３、２ｘ１０１３〜２．５ｘ１０１３、２．５ｘ１０１３〜３ｘ１０１３、または５×１０１３ＶＧ／ｍｌ以下である。
【０５０６】
ある特定の実施形態では、製剤中のＡＡＶ粒子の濃度は、２．７×１０１１ＶＧ／ｍｌである。
ある特定の実施形態では、製剤中のＡＡＶ粒子の濃度は、９×１０１１ＶＧ／ｍｌである。
【０５０７】
ある特定の実施形態では、製剤中のＡＡＶ粒子の濃度は、１．２×１０１２ＶＧ／ｍｌである。
ある特定の実施形態では、製剤中のＡＡＶ粒子の濃度は、２．７×１０１２ＶＧ／ｍｌである。
【０５０８】
ある特定の実施形態では、製剤中のＡＡＶ粒子の濃度は、４×１０１２ＶＧ／ｍｌである。
ある特定の実施形態では、製剤中のＡＡＶ粒子の濃度は、６×１０１２ＶＧ／ｍｌである。
【０５０９】
ある特定の実施形態では、製剤中のＡＡＶ粒子の濃度は、７．９×１０１２ＶＧ／ｍｌである。
ある特定の実施形態では、製剤中のＡＡＶ粒子の濃度は、８×１０１２ＶＧ／ｍｌである。
【０５１０】
ある特定の実施形態では、製剤中のＡＡＶ粒子の濃度は、１×１０１３ＶＧ／ｍｌである。
ある特定の実施形態では、製剤中のＡＡＶ粒子の濃度は、１．８×１０１３ＶＧ／ｍｌである。
【０５１１】
ある特定の実施形態では、製剤中のＡＡＶ粒子の濃度は、２．２×１０１３ＶＧ／ｍｌである。
ある特定の実施形態では、製剤中のＡＡＶ粒子の濃度は、２．７×１０１３ＶＧ／ｍｌである。
【０５１２】
ある特定の実施形態では、製剤中のＡＡＶ粒子の濃度は、３．５×１０１３ＶＧ／ｍｌである。
ある特定の実施形態では、製剤中のＡＡＶ粒子の濃度は、２．７〜３．５×１０１３ＶＧ／ｍｌである。
【０５１３】
ある特定の実施形態では、製剤中のＡＡＶ粒子の濃度は、７．０×１０１３ＶＧ／ｍｌである。
ある特定の実施形態では、製剤中のＡＡＶ粒子の濃度は、５．０×１０１２ＶＧ／ｍＬである。
【０５１４】
ある特定の実施形態では、製剤中のＡＡＶ粒子の濃度は、約１×１０６総カプシド／ｍＬ〜約１×１０１６総カプシド／ｍｌであってもよい。ある特定の実施形態では、送達は、約１ｘ１０６、２ｘ１０６、３ｘ１０６、４ｘ１０６、５ｘ１０６、６ｘ１０６、７ｘ１０６、８ｘ１０６、９ｘ１０６、１ｘ１０７、２ｘ１０７、３ｘ１０７、４ｘ１０７、５ｘ１０７、６ｘ１０７、７ｘ１０７、８ｘ１０７、９ｘ１０７、１ｘ１０８、２ｘ１０８、３ｘ１０８、４ｘ１０８、５ｘ１０８、６ｘ１０８、７ｘ１０８、８ｘ１０８、９ｘ１０８、１ｘ１０９、２ｘ１０９、３ｘ１０９、４ｘ１０９、５ｘ１０９、６ｘ１０９、７ｘ１０９、８ｘ１０９、９ｘ１０９、１ｘ１０１０、２ｘ１０１０、３ｘ１０１０、４ｘ１０１０、５ｘ１０１０、６ｘ１０１０、７ｘ１０１０、８ｘ１０１０、９ｘ１０１０、１ｘ１０１１、２ｘ１０１１、３ｘ１０１１、４ｘ１０１１、５ｘ１０１１、６ｘ１０１１、７ｘ１０１１、８ｘ１０１１、９ｘ１０１１、１ｘ１０１２、１．１ｘ１０１２、１．２ｘ１０１２、１．３ｘ１０１２、１．４ｘ１０１２、１．５ｘ１０１２、１．６ｘ１０１２、１．７ｘ１０１２、１．８ｘ１０１２、１．９ｘ１０１２、２ｘ１０１２、２．１ｘ１０１２、２．２ｘ１０１２、２．３ｘ１０１２、２．４ｘ１０１２、２．５ｘ１０１２、２．６ｘ１０１２、２．７ｘ１０１２、２．８ｘ１０１２、２．９ｘ１０１２、３ｘ１０１２、３．１ｘ１０１２、３．２ｘ１０１２、３．３ｘ１０１２、３．４ｘ１０１２、３．５ｘ１０１２、３．６ｘ１０１２、３．７ｘ１０１２、３．８ｘ１０１２、３．９ｘ１０１２、４ｘ１０１２、４．１ｘ１０１２、４．２ｘ１０１２、４．３ｘ１０１２、４．４ｘ１０１２、４．５ｘ１０１２、４．６ｘ１０１２、４．７ｘ１０１２、４．８ｘ１０１２、４．９ｘ１０１２、５ｘ１０１２、６ｘ１０１２、７ｘ１０１２、８ｘ１０１２、９ｘ１０１２、１ｘ１０１３、２ｘ１０１３、２．１ｘ１０１３、２．２ｘ１０１３、２．３ｘ１０１３、２．４ｘ１０１３、２．５ｘ１０１３、２．６ｘ１０１３、２．７ｘ１０１３、２．８ｘ１０１３、２．９ｘ１０１３、３ｘ１０１３、４ｘ１０１３、５ｘ１０１３、６ｘ１０１３、６．７ｘ１０１３、７ｘ１０１３、８ｘ１０１３、９ｘ１０１３、１ｘ１０１４、２ｘ１０１４、３ｘ１０１４、４ｘ１０１４、５ｘ１０１４、６ｘ１０１４、７ｘ１０１４、８ｘ１０１４、９ｘ１０１４、１ｘ１０１５、２ｘ１０１５、３ｘ１０１５、４ｘ１０１５、５ｘ１０１５、６ｘ１０１５、７ｘ１０１５、８ｘ１０１５、９ｘ１０１５、または１×１０１６総カプシド／ｍｌの組成物濃度を含んでいてもよい。
【０５１５】
ＡＡＶ粒子の総用量
ある特定の実施形態では、製剤中のＡＡＶ粒子の総用量は、約１×１０６ＶＧ〜約１×１０１６ＶＧであってもよい。ある特定の実施形態では、製剤は、約１ｘ１０６、２ｘ１０６、３ｘ１０６、４ｘ１０６、５ｘ１０６、６ｘ１０６、７ｘ１０６、８ｘ１０６、９ｘ１０６、１ｘ１０７、２ｘ１０７、３ｘ１０７、４ｘ１０７、５ｘ１０７、６ｘ１０７、７ｘ１０７、８ｘ１０７、９ｘ１０７、１ｘ１０８、２ｘ１０８、３ｘ１０８、４ｘ１０８、５ｘ１０８、６ｘ１０８、７ｘ１０８、８ｘ１０８、９ｘ１０８、１ｘ１０９、２ｘ１０９、３ｘ１０９、４ｘ１０９、５ｘ１０９、６ｘ１０９、７ｘ１０９、８ｘ１０９、９ｘ１０９、１ｘ１０１０、２ｘ１０１０、３ｘ１０１０、４ｘ１０１０、５ｘ１０１０、６ｘ１０１０、７ｘ１０１０、８ｘ１０１０、９ｘ１０１０、１ｘ１０１１、２ｘ１０１１、２．１ｘ１０１１、２．２ｘ１０１１、２．３ｘ１０１１、２．４ｘ１０１１、２．５ｘ１０１１、２．６ｘ１０１１、２．７ｘ１０１１、２．８ｘ１０１１、２．９ｘ１０１１、３ｘ１０１１、４ｘ１０１１、５ｘ１０１１、６ｘ１０１１、７ｘ１０１１、７．１ｘ１０１１、７．２ｘ１０１１、７．３ｘ１０１１、７．４ｘ１０１１、７．５ｘ１０１１、７．６ｘ１０１１、７．７ｘ１０１１、７．８ｘ１０１１、７．９ｘ１０１１、８ｘ１０１１、９ｘ１０１１、１ｘ１０１２、１．１ｘ１０１２、１．２ｘ１０１２、１．３ｘ１０１２、１．４ｘ１０１２、１．５ｘ１０１２、１．６ｘ１０１２、１．７ｘ１０１２、１．８ｘ１０１２、１．９ｘ１０１２、２ｘ１０１２、２．１ｘ１０１２、２．２ｘ１０１２、２．３ｘ１０１２、２．４ｘ１０１２、２．５ｘ１０１２、２．６ｘ１０１２、２．７ｘ１０１２、２．８ｘ１０１２、２．９ｘ１０１２、３ｘ１０１２、４ｘ１０１２、４．１ｘ１０１２、４．２ｘ１０１２、４．３ｘ１０１２、４．４ｘ１０１２、４．５ｘ１０１２、４．６ｘ１０１２、４．７ｘ１０１２、４．８ｘ１０１２、４．９ｘ１０１２、５ｘ１０１２、６ｘ１０１２、７ｘ１０１２、７．１ｘ１０１２、７．２ｘ１０１２、７．３ｘ１０１２、７．４ｘ１０１２、７．５ｘ１０１２、７．６ｘ１０１２、７．７ｘ１０１２、７．８ｘ１０１２、７．９ｘ１０１２、８ｘ１０１２、８．１ｘ１０１２、８．２ｘ１０１２、８．３ｘ１０１２、８．４ｘ１０１２、８．５ｘ１０１２、８．６ｘ１０１２、８．７ｘ１０１２、８．８ｘ１０１２、８．９ｘ１０１２、９ｘ１０１２、１ｘ１０１３、１．１ｘ１０１３、１．２ｘ１０１３、１．３ｘ１０１３、１．４ｘ１０１３、１．５ｘ１０１３、１．６ｘ１０１３、１．７ｘ１０１３、１．８ｘ１０１３、１．９ｘ１０１３、２ｘ１０１３、２．１ｘ１０１３、２．２ｘ１０１３、２．３ｘ１０１３、２．４ｘ１０１３、２．５ｘ１０１３、２．６ｘ１０１３、２．７ｘ１０１３、２．８ｘ１０１３、２．９ｘ１０１３、３ｘ１０１３、３．１ｘ１０１３、３．２ｘ１０１３、３．３ｘ１０１３、３．４ｘ１０１３、３．５ｘ１０１３、３．６ｘ１０１３、３．７ｘ１０１３、３．８ｘ１０１３、３．９ｘ１０１３、４ｘ１０１３、５ｘ１０１３、６ｘ１０１３、６．７ｘ１０１３、７ｘ１０１３、８ｘ１０１３、９ｘ１０１３、１ｘ１０１４、２��１０１４、３ｘ１０１４、４ｘ１０１４、５ｘ１０１４、６ｘ１０１４、７ｘ１０１４、８ｘ１０１４、９ｘ１０１４、１ｘ１０１５、２ｘ１０１５、３ｘ１０１５、４ｘ１０１５、５ｘ１０１５、６ｘ１０１５、７ｘ１０１５、８ｘ１０１５、９ｘ１０１５、または１×１０１６ＶＧの総用量のＡＡＶを含んでいてもよい。
【０５１６】
ある特定の実施形態では、製剤中のＡＡＶ粒子の総用量は、１×１０１１〜５×１０１３ＶＧである。
ある特定の実施形態では、製剤中のＡＡＶ粒子の総用量は、１×１０１１〜２×１０１４ＶＧである。
【０５１７】
ある特定の実施形態では、製剤中のＡＡＶ粒子の総用量は、１．４×１０１１ＶＧである。
ある特定の実施形態では、製剤中のＡＡＶ粒子の総用量は、４．５×１０１１ＶＧである。
【０５１８】
ある特定の実施形態では、製剤中のＡＡＶ粒子の総用量は、６．８×１０１１ＶＧである。
ある特定の実施形態では、製剤中のＡＡＶ粒子の総用量は、１．４×１０１２ＶＧである。
【０５１９】
ある特定の実施形態では、製剤中のＡＡＶ粒子の総用量は、２．２×１０１２ＶＧである。
ある特定の実施形態では、製剤中のＡＡＶ粒子の総用量は、４．６×１０１１ＶＧである。
【０５２０】
ある特定の実施形態では、製剤中のＡＡＶ粒子の総用量は、９．２×１０１２ＶＧである。
ある特定の実施形態では、製剤中のＡＡＶ粒子の総用量は、１．０×１０１３ＶＧである。
【０５２１】
ある特定の実施形態では、製剤中のＡＡＶ粒子の総用量は、２．３×１０１３ＶＧである。
例示的な製剤
下記には、本開示の例示的で非限定的な製剤が記載されている。製剤は、ＡＡＶ粒子製剤を含んでいてもよい。表２は、本開示のある特定の例示的な製剤の成分および特性の要約を提示する。各製剤は、任意選択で、０．００１％〜０．１％（ｗ／ｖ）のポロキサマー１８８（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ−６８）を含んでいてもよい。
【０５２２】
【表２】
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【０５２３】
ある特定の実施形態では、製剤は、リン酸ナトリウム、リン酸カリウム、塩化ナトリウム、スクロース、および任意選択で、ポロキサマー１８８（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ−６８）などのコポリマーを含んでいてもよい。ある特定の実施形態では、製剤は、１０ｍＭリン酸ナトリウム、１．５ｍＭリン酸カリウム、１００ｍＭ塩化ナトリウム、５ｗ／ｖ％スクロース、および任意選択でポロキサマー１８８を含んでいてもよい（緩衝液ｐＨは７．５）。ある特定の実施形態では、製剤は、１０ｍＭリン酸ナトリウム、１．５ｍＭリン酸カリウム、２２０ｍＭ塩化ナトリウム、５ｗ／ｖ％スクロース、および任意選択でポロキサマー１８８を含んでいてもよい（緩衝液ｐＨは７．５）。ある特定の実施形態では、製剤は、１０ｍＭリン酸ナトリウム、１．５ｍＭリン酸カリウム、１００ｍＭ塩化ナトリウム、７ｗ／ｖ％スクロース、および任意選択でポロキサマー１８８を含んでいてもよい（緩衝液ｐＨは７．５）。
【０５２４】
ある特定の実施形態では、製剤は、リン酸ナトリウム、リン酸カリウム、塩化ナトリウム、塩化カリウム、スクロースまたはトレハロース、および任意選択でポロキサマー１８８（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ−６８）などのコポリマーを含んでいてもよい。
【０５２５】
ある特定の実施形態では、製剤は、リン酸カリウム、塩化ナトリウム、塩化カリウム、ヒスチジン、糖、および任意選択でポロキサマー１８８（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ−６８）などのコポリマーを含んでいてもよい。
【０５２６】
ある特定の実施形態では、製剤は、塩化ナトリウム、塩化カリウム、スクロース、トリス、および任意選択でポロキサマー１８８（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ−６８）などのコポリマーを含んでいてもよい。
【０５２７】
ある特定の実施形態では、製剤は、塩化ナトリウム、塩化カリウム、スクロース、トリス、塩酸、および任意選択でポロキサマー１８８（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ−６８）などのコポリマーを含んでいてもよい。
【０５２８】
ある特定の実施形態では、製剤は、塩化ナトリウム、スクロース、トリス、および任意選択でポロキサマー１８８（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ−６８）などのコポリマーを含んでいてもよい。
【０５２９】
ある特定の実施形態では、製剤は、塩化ナトリウム、スクロース、トリス、塩化マグネシウム、および任意選択でポロキサマー１８８（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ−６８）などのコポリマーを含んでいてもよい。
【０５３０】
ある特定の実施形態では、製剤は、塩化ナトリウム、スクロース、トリス、アルギニン、および任意選択でポロキサマー１８８（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ−６８）などのコポリマーを含んでいてもよい。
【０５３１】
ある特定の実施形態では、製剤は、塩化ナトリウム、ソルビトール、トリス、および任意選択でポロキサマー１８８（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ−６８）などのコポリマーを含んでいてもよい。
【０５３２】
ある特定の実施形態では、製剤は、塩化ナトリウム、スクロース、ヒスチジン、および任意選択でポロキサマー１８８（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ−６８）などのコポリマーを含んでいてもよい。
【０５３３】
ある特定の実施形態では、製剤は、塩化ナトリウム、スクロース、および任意選択でポロキサマー１８８（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ−６８）などのコポリマーを含んでいてもよい。ある特定の実施形態では、製剤は、１０５ｍＭ塩化ナトリウム、５％（ｗ／ｖ）スクロース、および任意選択でポロキサマー１８８などのコポリマーを含んでいてもよい。ある特定の実施形態では、製剤は、９５ｍＭ塩化ナトリウム、５％（ｗ／ｖ）スクロース、および任意選択でポロキサマー１８８などのコポリマーを含んでいてもよい。ある特定の実施形態では、製剤は、２２０ｍＭ塩化ナトリウム、５％（ｗ／ｖ）スクロース、および任意選択でポロキサマー１８８などのコポリマーを含んでいてもよい。
【０５３４】
ある特定の実施形態では、製剤は、リン酸カリウム、スクロース、トリス、および任意選択でポロキサマー１８８（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ−６８）などのコポリマーを含んでいてもよい。
【０５３５】
ある特定の実施形態では、製剤は、塩化カリウム、スクロース、トリス、および任意選択でポロキサマー１８８（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ−６８）などのコポリマーを含んでいてもよい。
【０５３６】
ある特定の実施形態では、製剤は、塩化ナトリウム、トリス、および任意選択でポロキサマー１８８（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ−６８）などのコポリマーを含んでいてもよい。ある特定の実施形態では、製剤は、１００ｍＭ塩化ナトリウム、２０ｍＭトリス、および任意選択でポロキサマー１８８などのコポリマーを含んでいてもよい（混合物ｐＨは８．０）。ある特定の実施形態では、製剤は、２２０ｍＭ塩化ナトリウム、２０ｍＭトリス、および任意選択でポロキサマー１８８などのコポリマーを含んでいてもよい（混合物ｐＨは７．０〜８．０）。ある特定の実施形態では、製剤は、２９０ｍＭ塩化ナトリウム、２０ｍＭトリス、および任意選択でポロキサマー１８８などのコポリマーを含んでいてもよい（混合物ｐＨは８．０）。ある特定の実施形態では、製剤は、３０５ｍＭ塩化ナトリウム、２０ｍＭトリス、および任意選択でポロキサマー１８８などのコポリマーを含んでいてもよい（混合物ｐＨは８．０）。ある特定の実施形態では、製剤は、２Ｍ塩化ナトリウム、２０ｍＭトリス、および任意選択でポロキサマー１８８などのコポリマーを含んでいてもよい（混合物ｐＨは８．０）。ある特定の実施形態では、製剤は、１７０ｍＭ塩化ナトリウム、４０ｍＭトリス、および任意選択でポロキサマー１８８などのコポリマーを含んでいてもよい（混合物ｐＨは８．５）。ある特定の実施形態では、製剤は、２Ｍ塩化ナトリウム、１Ｍトリス、および任意選択でポロキサマー１８８などのコポリマーを含んでいてもよい（混合物ｐＨは７．５）。
【０５３７】
ある特定の実施形態では、製剤は、塩化ナトリウム、トリス−ビスプロパン、および任意選択でポロキサマー１８８（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ−６８）などのコポリマーを含んでいてもよい。ある特定の実施形態では、製剤は、２００ｍＭ塩化ナトリウム、５０ｍＭトリス−ビスプロパン、および任意選択でポロキサマー１８８などのコポリマーを含んでいてもよい（混合物ｐＨは９．０）。
【０５３８】
ある特定の実施形態では、製剤は、リン酸ナトリウム、塩化ナトリウム、および任意選択でポロキサマー１８８などのコポリマーを含んでいてもよい。ある特定の実施形態では、製剤は、１０ｍＭリン酸ナトリウム、１８０ｍＭ塩化ナトリウム、および任意選択でポロキサマー１８８などのコポリマーを含んでいてもよい（混合物ｐＨは７．３）。ある特定の実施形態では、製剤は、２０ｍＭリン酸ナトリウム、３５０ｍＭ塩化ナトリウム、および任意選択でポロキサマー１８８などのコポリマーを含んでいてもよい（混合物ｐＨは７．４）。ある特定の実施形態では、製剤は、５０ｍＭリン酸ナトリウム、３５０ｍＭ塩化ナトリウム、および任意選択でポロキサマー１８８などのコポリマーを含んでいてもよい（混合物ｐＨは７．４）。
【０５３９】
ある特定の実施形態では、製剤は、リン酸ナトリウム、リン酸カリウム、塩化カリウム、塩化ナトリウム、および任意選択でポロキサマー１８８などのコポリマーを含んでいてもよい。ある特定の実施形態では、製剤は、１０ｍＭリン酸ナトリウム、２ｍＭリン酸カリウム、２．７ｍＭ塩化カリウム、１９２ｍＭ塩化ナトリウム、および任意選択でポロキサマー１８８などのコポリマーを含んでいてもよい（混合物ｐＨは７．５）。
【０５４０】
ある特定の実施形態では、製剤は、クエン酸ナトリウム、塩化ナトリウム、および任意選択でポロキサマー１８８などのコポリマーを含んでいてもよい。ある特定の実施形態では、製剤は、２０ｍＭクエン酸ナトリウム、１０ｍＭ塩化ナトリウム、および任意選択でポロキサマー１８８などのコポリマーを含んでいてもよい（混合物ｐＨは６．０）。ある特定の実施形態では、製剤は、１０ｍＭクエン酸ナトリウム、３５０ｍＭ塩化ナトリウム、および任意選択でポロキサマー１８８などのコポリマーを含んでいてもよい（混合物ｐＨは６．０）。ある特定の実施形態では、製剤は、２０ｍＭクエン酸ナトリウム、３５０ｍＭ塩化ナトリウム、および任意選択でポロキサマー１８８などのコポリマーを含んでいてもよい（混合物ｐＨは３．０）。
【０５４１】
ある特定の実施形態では、製剤は、ＰＢＳを含んでいてもよい。ある特定の実施形態では、製剤は、ＰＢＳならびに糖および／または糖代替物を含んでいてもよい。製剤は、製剤の安定性を増加させるために、３〜５％（ｗ／ｖ）の糖および／または糖代替物を含んでいてもよい。非限定的な例として、製剤は、ＰＢＳおよび３％（ｗ／ｖ）スクロース（ＶＹＦＯＲＭ３０）である。別の非限定的な例として、製剤は、ＰＢＳおよび５％（ｗ／ｖ）スクロース（ＶＹＦＯＲＭ３１）である。別の非限定的な例として、製剤は、ＰＢＳおよび７％（ｗ／ｖ）スクロースである。ある特定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子は、エチレンオキシド／プロピレンオキシドコポリマー（ｐｌｕｒｏｎｉｃまたはポロキサマーとしても知られている）と組み合わせてＰＢＳで製剤化されていてもよい。
【０５４２】
ある特定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子は、３％（ｗ／ｖ）スクロースおよび０．００１％〜０．１％（ｗ／ｖ）ポロキサマー１８８（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ−６８）を有するＰＢＳで製剤化されていてもよい。
【０５４３】
ある特定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子は、５％（ｗ／ｖ）スクロースおよび０．００１％〜０．１％（ｗ／ｖ）ポロキサマー１８８（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ−６８）を有するＰＢＳで製剤化されていてもよい。
【０５４４】
ある特定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子は、０．００１％〜０．１％（ｗ／ｖ）ポロキサマー１８８（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ−６８）を有するｐＨが約７．０のＰＢＳで製剤化されていてもよい。
【０５４５】
ある特定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子は、０．００１％〜０．１％（ｗ／ｖ）ポロキサマー１８８（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ−６８）を有するｐＨが約７．３のＰＢＳで製剤化されていてもよい。
【０５４６】
ある特定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子は、０．００１％〜０．１％（ｗ／ｖ）ポロキサマー１８８（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ−６８）を有するｐＨが約７．４のＰＢＳで製剤化されていてもよい。
【０５４７】
ある特定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子は、塩化ナトリウム、リン酸ナトリウム、およびエチレンオキシド／プロピレンオキシドコポリマーを含む溶液で製剤化されていてもよい。
【０５４８】
ある特定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子は、９５ｍＭ塩化ナトリウム、５ｍＭリン酸水素ナトリウム、５ｍＭリン酸二水素ナトリウム、１．５ｍＭリン酸カリウム、７ｗ／ｖ％スクロース、および０．００１％ポロキサマー１８８（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ−６８）を含む溶液で製剤化されていてもよい。
【０５４９】
ある特定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子は、約１８０ｍＭ塩化ナトリウム、約１０ｍＭリン酸ナトリウム、および約０．００１％ポロキサマー１８８を含むｐＨが７．３の溶液で製剤化されていてもよい。最終溶液中の塩化ナトリウムの濃度は、１５０ｍＭ〜２００ｍＭであってもよい。非限定的な例として、最終溶液中の塩化ナトリウムの濃度は、１５０ｍＭ、１６０ｍＭ、１７０ｍＭ、１８０ｍＭ、１９０ｍＭ、または２００ｍＭであってもよい。最終溶液中のリン酸ナトリウムの濃度は、１ｍＭ〜５０ｍＭであってもよい。非限定的な例として、最終溶液中のリン酸ナトリウムの濃度は、１ｍＭ、２ｍＭ、３ｍＭ、４ｍＭ、５ｍＭ、６ｍＭ、７ｍＭ、８ｍＭ、９ｍＭ、１０ｍＭ、１５ｍＭ、２０ｍＭ、２５ｍＭ、３０ｍＭ、４０ｍＭ、または５０ｍＭであってもよい。ポロキサマー１８８（Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ−６８）の濃度は、０．０００１％〜１％（ｗ／ｖ）であってもよい。非限定的な例として、ポロキサマー１８８（Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ−６８）の濃度は、０．０００１％、０．０００５％、０．００１％、０．００５％、０．０１％、０．０５％、０．１％、０．５％、または１％（ｗ／ｖ）であってもよい。最終溶液は、６．８〜７．７のｐＨを有してもよい。最終溶液のｐＨの非限定的な例としては、６．８、６．９、７．０、７．１、７．２、７．３、７．４、７．５、７．６、または７．７のｐＨが挙げられる。
【０５５０】
ある特定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子は、約１．０５％（ｗ／ｖ）塩化ナトリウム、約０．２１２％（ｗ／ｖ）リン酸水素ナトリウム七水和物、約０．０２５％（ｗ／ｖ）リン酸二水素ナトリウム一水和物、および０．００１％（ｗ／ｖ）ポロキサマー１８８を含むｐＨが約７．４の溶液で製剤化されていてもよい。非限定的な例では、この製剤化溶液中のＡＡＶ粒子の濃度は、約０．００１％（ｗ／ｖ）であってもよい。最終溶液中の塩化ナトリウムの濃度は、０．１〜２．０％（ｗ／ｖ）であってもよく、非限定的な例は、０．１％、０．２５％、０．５％、０．７５％、０．９５％、０．９６％、０．９７％、０．９８％、０．９９％、１．００％、１．０１％、１．０２％、１．０３％、１．０４％、１．０５％、１．０６％、１．０７％、１．０８％、１．０９％、１．１０％、１．２５％、１．５％、１．７５％、または２％（ｗ／ｖ）である。最終溶液中のリン酸水素ナトリウムの濃度は、０．１００〜０．３００％（ｗ／ｖ）であってもよく、非限定的な例としては、０．１００％、０．１２５％、０．１５０％、０．１７５％、０．２００％、０．２１０％、０．２１１％、０．２１２％、０．２１３％、０．２１４％、０．２１５％、０．２２５％、０．２５０％、０．２７５％、０．３００％（ｗ／ｖ）が挙げられる。最終溶液中のリン酸二水素ナトリウムの濃度は、０．０１０〜０．０５０％（ｗ／ｖ）であってもよく、非限定的な例は、０．０１０％、０．０１５％、０．０２０％、０．０２１％、０．０２２％、０．０２３％、０．０２４％、０．０２５％、０．０２６％、０．０２７％、０．０２８％、０．０２９％、０．０３０％、０．０３５％、０．０４０％、０．０４５％、または０．０５０％（ｗ／ｖ）である。ポロキサマー１８８（Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ−６８）の濃度は、０．０００１％〜１％（ｗ／ｖ）であってもよい。非限定的な例として、ポロキサマー１８８（Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ−６８）の濃度は、０．０００１％、０．０００５％、０．００１％、０．００５％、０．０１％、０．０５％、０．１％、０．５％、または１％（ｗ／ｖ）であってもよい。最終溶液は、６．８〜７．７のｐＨを有してもよい。最終溶液のｐＨの非限定的な例としては、６．８、６．９、７．０、７．１、７．２、７．３、７．４、７．５、７．６、または７．７のｐＨが挙げられる。
【０５５１】
ある特定の実施形態では、製剤は、以下のＣＡＳ（ケミカルアブストラクトサービス）登録番号を有する成分を含む：７６４７−１４−１５（塩化ナトリウム）、７７８２−８５−６（リン酸水素ナトリウム七水和物）、１００４９−２１−５（リン酸二水素ナトリウム一水和物）、および９００３−１１−６（ポロキサマー１８８）。
【０５５２】
注射用製剤
注射用調製物、例えば、無菌注射用水溶液または油質懸濁物は、公知の技術に従って適切な分散剤、湿潤剤、および／または懸濁化剤を使用して製剤化することができる。無菌注射用調製物は、無毒性であり非経口的に許容される希釈剤および／または溶媒、例えば１，３−ブタンジオールの溶液など、無菌注射用液剤、懸濁物、および／またはエマルジョンであってもよい。採用することができる許容されるビヒクルおよび溶媒には、水、リンゲル溶液、Ｕ．Ｓ．Ｐ．、および等張性塩化ナトリウム溶液がある。溶媒または懸濁化媒体として無菌固定油が従来採用されている。この目的のため、合成モノまたはジグリセリドを含む任意の非刺激性固定油を採用することができる。オレイン酸などの脂肪酸を、注射剤の調製に使用することができる。
【０５５３】
注射用製剤は、例えば、細菌保持フィルターによる濾過により、および／または使用前に滅菌水もしくは他の無菌注射用媒体に溶解もしくは分散することができる無菌固形組成物の形態の滅菌剤を組み込むことにより、滅菌することができる。
【０５５４】
活性成分の効果を延長させるために、皮下または筋肉内注射からの活性成分の吸収を遅らせることが望ましいことが多い。これは、不良な水溶解度を有する結晶性または非晶性物質の液体懸濁物の使用により達成することができる。活性成分の吸収速度は、溶解速度に依存し、ひいては結晶サイズおよび結晶形態に依存する場合がある。あるいは、非経口投与される薬物形態の遅延吸収は、薬物を油ビヒクルに溶解または懸濁することにより達成される。注射用デポー形態は、ポリラクチド−ポリグリコリドなどの生分解性ポリマー中の薬物のマイクロ被包マトリックスを形成することにより作製される。薬物のポリマーに対する比および採用される特定のポリマーの性質に応じて、薬物放出速度を制御することができる。他の生分解性ポリマーの例としては、ポリ（オルトエステル）およびポリ（無水物）が挙げられる。デポー注射用製剤は、薬物を、体内組織と適合性であるリポソームまたはマイクロエマルジョンに閉じ込めることにより調製される。
【０５５５】
デポー製剤
本開示のある特定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子製剤は、長期放出のためにデポーに製剤化される。一般に、特定の臓器または組織（「標的組織」）が、投与の標的とされる。
【０５５６】
本開示のある特定の実施形態では、本開示の医薬組成物、ＡＡＶ粒子製剤は、標的組織内または近傍に空間的に保持される。標的組織（１つまたは複数の標的細胞を含む）を、医薬組成物、ＡＡＶ粒子製剤と、それらが標的組織に実質的に保持される条件下で、つまり、組成物の少なくとも１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、９９．９、９９．９９％、または９９．９９％よりも多くが標的組織に保持されるような条件下で接触させることにより、医薬組成物、ＡＡＶ粒子を哺乳動物対象の標的組織へと提供する方法が提供される。有利には、保持は、１つまたは複数の標的細胞に進入する医薬組成物、ＡＡＶ粒子製剤の量を測定することにより決定される。例えば、対象に投与された医薬組成物、ＡＡＶ粒子製剤の少なくとも１％、５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、９９．９％、９９．９９％、または９９．９９％よりも多くが、投与後のある期間に細胞内に存在する。
【０５５７】
本開示のある特定の態様は、標的組織（１つまたは複数の標的細胞を含む）を、医薬組成物、ＡＡＶ粒子製剤と、それらがそのような標的組織に実質的に保持されるような条件下で接触させることにより、本開示の医薬組成物、ＡＡＶ粒子製剤を哺乳動物対象の標的組織へと提供する方法を対象とする。医薬組成物、ＡＡＶ粒子は、目的の効果が少なくとも１つの標的細胞で生み出されるのに十分な活性成分を含む。
【０５５８】
測定および分析
ウイルスゲノムからのペイロードの発現またはそのようなペイロードの下方制御効果は、これらに限定されないが、免疫化学（例えば、ＩＨＣ）、ｉｎ  ｓｉｔｕハイブリダイゼーション（ＩＳＨ）、酵素結合免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ）、親和性ＥＬＩＳＡ、ＥＬＩＳＰＯＴ、フローサイトメトリー、免疫細胞学、表面プラズモン共鳴分析、結合平衡除外法（ｋｉｎｅｔｉｃ  ｅｘｃｌｕｓｉｏｎ  ａｓｓａｙ）、液体クロマトグラフィー−質量分析（ＬＣＭＳ）、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、ＢＣＡアッセイ、免疫電気泳動法、ウエスタンブロット、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ、タンパク質免疫沈殿法、および／またはＰＣＲなどの、当技術分野で公知の種々の方法を使用して決定することができる。
【０５５９】
ＩＶ．投与
本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子は、治療上有効な転帰をもたらす任意の経路により投与することができる。そのような経路としては、これらに限定されないが以下のものなどの臓器の実質内が挙げられるが、それらに限定されない：脳（例えば実質内）、線条体（線条体内）、経腸（腸の中）、胃腸、硬膜上、経口（口を介して）、経皮、硬膜外、大脳内（大脳の中）、脳室内（脳室の中）、軟膜下（軟膜の下）、皮膚上（皮膚への塗布）、皮内（皮膚それ自体の中）、皮下（皮膚の下）、鼻腔投与（鼻を通して）、静脈内（静脈の中）、静脈内ボーラス、静脈内点滴、動脈内（動脈の中）、筋肉内（筋肉の中）、心臓内（心臓の中）、骨内注入（骨髄の中）、髄腔内（脊柱管の中）、神経節内（神経節の中）、腹腔内（腹膜への注入または注射）、膀胱内注入、硝子体内（眼を通して）、海綿体内注射（病的腔の中）、腔内（陰茎の基部の中）、腟内投与、子宮内、羊膜外投与、経皮（全身分布のためのインタクトな皮膚を通じた拡散）、経粘膜（粘膜を通じた拡散）、経腟、インサフレーション（鼻から吸い込む）、舌下、唇下、浣腸、点眼薬（結膜上）、点耳薬で、耳介（耳内または耳を介して）、頬側（頬の方に向けて）、結膜、皮膚、歯科（１本または複数本の歯に対して）、電気浸透、子宮頚管内、副鼻腔内、気管内、体外、血液透析、浸潤、間質内、腹腔内、羊膜内、関節内、胆管内、気管支内、嚢内、軟骨内（軟骨の範囲内）、尾内（馬尾（ｃａｕｄａ  ｅｑｕｉｎｅ）の範囲内）、大槽内（大槽小脳延髄槽の範囲内）、角膜内（角膜の範囲内）、歯冠内、冠内（冠動脈の範囲内）、海綿体内（ｉｎｔｒａｃｏｒｐｏｒｕｓ  ｃａｖｅｒｎｏｓｕｍ）（陰茎海綿体（ｃｏｒｐｏｒｕｓ  ｃａｖｅｒｎｏｓａ）の可膨張性腔の範囲内）、椎間板内（椎間板の範囲内）、管内（腺管の範囲内）、十二指腸内（十二指腸の範囲内）、硬膜内（硬膜の範囲内または真下）、表皮内（表皮に対して）、食道内（食道に対して）、胃内（胃の範囲内）、歯肉内（歯肉の範囲内）、回腸内（小腸の遠位部分の範囲内）、病巣内（局所病変の範囲内、またはそこに直接導入される）、管腔内（管の管腔の範囲内）、リンパ内（リンパの範囲内）、髄内（骨の髄腔の範囲内）、髄膜内（髄膜の範囲内）、眼内（眼の範囲内）、卵巣内（卵巣の範囲内）、心膜内（心膜の範囲内）、胸膜内（胸膜の範囲内）、前立腺内（前立腺の範囲内）、肺内（肺、またはその気管支の範囲内）、洞内（鼻洞または眼窩周囲洞の範囲内）、脊髄内（脊柱の範囲内）、滑液嚢内（関節の滑膜腔の範囲内）、腱内（腱の範囲内）、精巣内（精巣の範囲内）、髄腔内（脳脊髄軸の任意のレベルにおける脳脊髄液の範囲内）、胸腔内（胸郭の範囲内）、細管内（臓器の細管の範囲内）、腫瘍内（腫瘍の範囲内）、鼓室内（中耳（ａｕｒｕｓ  ｍｅｄｉａ）の範囲内）、血管内（１つまたは複数の血管の範囲内）、脳室内（脳室の範囲内）、イオントフォレシス（電流によるものであり、可溶性塩のイオンが体内の組織へと遊走する）、潅注（開放創または体腔を浸すまたは洗い流す）、喉頭（喉頭に対して直接）、経鼻胃（鼻を通して胃の中に）、密封包帯療法（局所経路投与し、次いで包帯で覆い、包帯がその範囲を閉塞する）、���（外眼部に対して）、中咽頭（口および咽頭に対して直接）、非経口、経皮、関節周囲、硬膜外、神経周囲、歯周、直腸、呼吸器（局所的または全身性効果のために経口的または鼻腔的に吸入することにより気道の範囲内に）、球後（橋の後ろまたは眼球の後ろ）、軟部組織、くも膜下、結膜下、粘膜下、局所、経胎盤（胎盤を通してまたは越えて）、経気管（気管の壁を通して）、経鼓室（鼓室を越えてまたは通して）、尿管（尿管に対して）、尿道（尿道に対して）、腟、仙骨ブロック、診断的、神経ブロック、胆管灌流、心灌流、フォトフェレーシス、または脊髄。
【０５６０】
具体的な実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子の組成物は、ベクターまたはｓｉＲＮＡ分子が中枢神経系に進入し、中型有棘ニューロンおよび／または皮質ニューロンおよび／またはアストロサイトへと浸透することを容易にするように投与することができる。
【０５６１】
一部の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子は、筋肉内注射により投与することができる。
一部の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子は、実質内注射により投与することができる。
【０５６２】
一部の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子は、実質内注射および髄腔内注射により投与することができる。
一部の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子は、線条体内注射により投与することができる。
【０５６３】
一部の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子は、線条体内注射および本明細書に記載の別の投与経路により投与することができる。
一部の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ二重鎖を発現するＡＡＶ粒子は、末梢注射（例えば、静脈内）および／または鼻腔内送達により対象に投与してもよい。当技術分野では、ｓｉＲＮＡ二重鎖の場合、ＡＡＶ粒子の末梢投与により、中枢神経系へと、例えばニューロンへと輸送することができることが開示されていた（例えば、その各々の内容をその全体で本願明細書に援用する米国特許出願公開第２０１００２４０７３９号明細書および米国特許出願公開第２０１００１３０５９４号明細書）。
【０５６４】
他の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含む少なくとも１つのＡＡＶ粒子を含む組成物は、頭蓋内送達により対象に投与してもよい（例えば、その内容をその全体で本願明細書に援用する米国特許第８，１１９，６１１号明細書を参照されたい）。
【０５６５】
本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子は、任意の好適な形態で、液体溶液または懸濁物として、液体溶液または液体溶液中の懸濁物に適切な固体形態としてのいずれで投与してもよい。ｓｉＲＮＡ二重鎖は、任意の好適で薬学的に許容される賦形剤と共に製剤化することができる。
【０５６６】
本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子は、「治療有効」量で、つまり、疾患に関連付けられる少なくとも１つの症状を軽減および／または予防するのに十分な量で、または対象の状態の改善を提供するのに十分な量で投与することができる。
【０５６７】
一部の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、中型有棘ニューロン、皮質ニューロン、および／またはアストロサイトを形質導入するための治療有効量で大槽に投与してもよい。非限定的な例として、ベクターは、髄腔内に投与してもよい。
【０５６８】
一部の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、中型有棘ニューロン、皮質ニューロン、および／またはアストロサイトを形質導入するための治療有効量で髄腔内注入を使用して投与してもよい。非限定的な例として、ベクターは、髄腔内に投与してもよい。
【０５６９】
一部の実施形態では、調節性ポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子を製剤化してもよい。非限定的な例として、中枢神経系または中枢神経系の領域もしくは構成部分における最適な薬物分布が確保されるように、製剤のバリシティおよび／またはオスモル濃度を最適化してもよい。
【０５７０】
一部の実施形態では、調節性ポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子は、単一の投与経路により対象に送達してもよい。
一部の実施形態では、調節性ポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子は、複数部位投与経路により対象に送達してもよい。対象には、調節性ポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子を、２、３、４、５つ、または５つよりも多くの部位に投与してもよい。
【０５７１】
一部の実施形態では、対象には、本明細書に記載の調節性ポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子を、ボーラス注射を使用して投与してもよい。
一部の実施形態では、対象には、本明細書に記載の調節性ポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子を、数分間、数時間、または数日間の期間にわたる持続送達を使用して投与してもよい。注入速度は、対象、分布、製剤、または別の送達パラメーターに応じて変更してもよい。
【０５７２】
一部の実施形態では、本明細書に記載のＡＡＶ粒子は、被殻および尾状核注入により投与される。非限定的な例として、二重注入は、広範な線条体分布ならびに前頭および側頭皮質分布を提供する。
【０５７３】
一部の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、片側性被殻注入により投与されるＡＡＶ−ＤＪ８である。非限定的な例として、投与されるＡＡＶ−ＤＪ８の分布は、片側性被殻注入により送達されるＡＡＶ１の分布と同様である。
【０５７４】
一部の実施形態では、本明細書に記載のＡＡＶ粒子は、Ｃ１にて髄腔内（ＩＴ）注入により投与される。注入は、１、２、３、４、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５時間、または１５時間よりも長期であってもよい。
【０５７５】
一部の実施形態では、本明細書に記載のＡＡＶ粒子を投与するための対象の選択、ならびに／または用量、投与経路、および／もしくは投与容積の有効性は、フィルヒョーロバン腔としても知られている血管周囲腔（ＰＶＳ）の画像診断を使用して評価することができる。ＰＶＳは、細動脈および細静脈が脳実質に穿在するため細動脈および細静脈を取り囲み、脳脊髄液（ＣＳＦ）／間質液で満たされている。ＰＶＳは、中脳、基底核、および半卵円中心によくみられる。理論により束縛されることは望まないが、ＰＶＳは、代謝産物の正常なクリアランスに役割を果たすことができ、認知の悪化およびパーキンソン病を含む幾つかの病態に関連付けられている。ＰＶＳは、通常は正常サイズであるが、幾つもの病態では増加する場合がある。ポッターら（Ｐｏｔｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．）（その内容をその全体で本願明細書に援用する、Ｃｅｒｅｂｒｏｖａｓｃ  Ｄｉｓ．２０１５  Ｊａｎ；３９（４）：２２４−２３１）は、全域のＰＶＳを研究し、基底核、半卵円中心、および中脳ＰＶＳを採点する類別法を開発した。ポッターら（Ｐｏｔｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ）は、マックおよびルリッチら（Ｍａｃ  ａｎｄ  Ｌｕｌｌｉｃｈ  ｅｔ  ａｌ．）（その内容をその全体で本願明細書に援用する、Ｊ  Ｎｅｕｒｏｌ  Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇ  Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ．２００４  Ｎｏｖ；７５（１１）：１５１９−２３）が使用したＰＶＳの頻度および範囲を使用し、ポッターら（Ｐｏｔｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ）は、基底核および半卵円中心ＰＶＳに、５段階評点：０（無し）、１（１〜１０個）、２（１１〜２０個）、３（２１〜４０個）、および４（＞４０個）を付与し、中脳ＰＶＳには２段階評点：０（目視不能）または１（目視可能）を付与した。ポッターら（Ｐｏｔｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ）らによる採点方式のユーザーガイドは、ｗｗｗ．ｓｂｉｒｃ．ｅｄ．ａｃ．ｕｋ／ｄｏｃｕｍｅｎｔｓ／ｅｐｖｓ−ｒａｔｉｎｇ−ｓｃａｌｅ−ｕｓｅｒ−ｇｕｉｄｅ．ｐｄｆに見出すことができる。
【０５７６】
一部の実施形態では、本明細書に記載のＡＡＶ粒子は、視床注入により投与される。視床への注入は、両側性であってもよくまたは片側性であってもよい。
一部の実施形態では、本明細書に記載のＡＡＶ粒子は、被殻注入により投与される。視床への注入は、両側性であってもよくまたは片側性であってもよい。
【０５７７】
一部の実施形態では、本明細書に記載のＡＡＶ粒子は、被殻および視床注入により投与される。被殻および視床への二重注入は、皮質領域への軸索輸送により脳分布を最大化することができる。エバンスら（Ｅｖｅｒｓ  ｅｔ  ａｌ．）は、ｔｇＨＤミニブタの被殻および視床へのＡＡＶ５−ＧＦＰの両側性注射後に、運動皮質および頭頂皮質の一部にあるニューロンの陽性形質導入を観察した（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ（２０１８），ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ｙｍｔｈｅ．２０１８．０６．０２１）。被殻および視床への注入は、独立して、両側性であってもよくまたは片側性であってもよい。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、脳の両側から被殻および視床へと注入してもよい。別の非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、左被殻および左視床へと、または右被殻および右視床へと注入してもよい。さらに別の非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、左被殻および右視床へと、または右被殻および左視床へと注入してもよい。二重注入は、連続的または同時に生じてもよい。
【０５７８】
一部の実施形態では、調節性ポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子は、遺伝子治療関連体重変化の非存在下で対象に送達してもよい。
一部の実施形態では、調節性ポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子は、これらに限定されないが、協調不能、食欲不振、摂食低下、および全体的衰弱を含む、遺伝子治療関連臨床兆候の非存在下で対象に送達してもよい。
【０５７９】
一部の実施形態では、調節性ポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子は、対象の血液に対する遺伝子治療関連変化の非存在下で対象に送達してもよい。ある特定の実施形態では、対象の血液における変化は、血液生化学検査および凝固パラメーターである。
【０５８０】
一部の実施形態では、調節性ポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子は、対象の組織（例えば、対象の脳）に対する病理学的変化の非存在下で対象に送達してもよい。ある特定の実施形態では、病理学的変化は、これに限定されないが、萎縮など、肉眼的な病理学的変化である。ある特定の実施形態では、病理学的変化は、これに限定されないが、標的特異的（例えば、ＨＴＴ）包含を含む、組織病理学的変化である。
【０５８１】
Ｖ．使用方法
一般
本開示は、ヒト対象を含む哺乳動物対象において疾患、障害および／または状態を処置する方法であって、対象に本明細書において記載されるウイルス粒子または製剤のいずれかを投与する工程または対象に本明細書において記載される医薬組成物または製剤を含む記載される組成物のいずれかを投与する工程を含む、方法を提供する。
【０５８２】
ある特定の実施形態では、根底にある疾患の経過の変更を伴わない対象への製剤化されたＡＡＶ粒子の投与は、対象において症状を改善する。
ある特定の実施形態では、本開示のウイルス粒子は、対象に予防的に投与される。
【０５８３】
ある特定の実施形態では、本開示のウイルス粒子は、本明細書において記載される疾患のうち少なくとも１つを有する対象に投与される。
ある特定の実施形態では、本開示のウイルス粒子は、本明細書において記載される疾患または障害を処置するために対象に投与される。対象は、疾患もしくは障害を有し得る、または疾患もしくは障害を発症するリスクにあり得る。
【０５８４】
本開示は、疾患進行を減速、停止または逆転させるために、ヒト対象を含むそれを必要とする対象に本開示のＡＡＶ粒子の治療有効量を投与する方法を提供する。非限定的な例として、疾患進行は、当業者に公知の試験または診断ツール（複数可）によって測定され得る。別の非限定的な例として、疾患進行は、対象の脳、ＣＳＦまたは他の組織の病理学的特徴の変化によって測定され得る。
【０５８５】
ある特定の実施形態では、神経学的疾患を含む種々の非感染性疾患が、本開示の医薬組成物を用いて処置され得る。本開示のＡＡＶ粒子、特に、血液脳関門通過性ＡＡＶ粒子は、種々の神経学的疾患の処置において特に有用である。非限定的な例として、神経学的疾患は、透明中隔欠損、酸性リパーゼ病、酸性マルターゼ欠乏症、後天性てんかん性失語症、急性散在性脳脊髄炎、注意欠陥多動性障害（ＡＤＨＤ）、アディー瞳孔、アディー症候群、副腎白質ジストロフィー、脳梁欠損症、失語症、アイカルディ症候群、アイカルディ・グティエール症候群障害、ＡＩＤＳ−神経学的合併症、アレキサンー病、アルパース病、交代性片麻痺、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、無脳症、動脈瘤、アンジェルマン症候群、血管腫症、無酸素症、抗リン脂質症候群、失語症、失行症、くも膜嚢胞、くも膜炎、アーノルド・キアリ奇形、動静脈奇形、アスペルガー症候群、運動失調、毛細血管拡張性運動失調症、運動失調症および小脳または脊髄小脳変性症、心房細動および脳卒中、注意欠陥多動性障害、自閉症スペクトラム障害、自律機能障害、背痛、バース症候群、バッテン病、ベッカー型筋硬直症、ベーチェット病、ベル麻痺、良性本態性眼瞼痙攣、良性限局性筋委縮症、良性頭蓋内圧亢進症、ベルンハルト−ロス症候群、ビンスワンガー病、眼性痙攣、ブロッホ−ズルツベルガー症候群、腕神経叢出生時損傷、腕神経叢損傷、ブラッドバリー・エグルストン（Ｂｒａｄｂｕｒｙ−Ｅｇｇｌｅｓｔｏｎ）症候群、脳および脊髄腫瘍、脳動脈瘤、脳損傷、ブラウン・セカール症候群、球脊髄性筋萎縮症、皮質下梗塞と白質脳症を伴う常染色体優性脳動脈症（ＣＡＤＡＳＩＬ）、カナバン病、手根管症候群、灼熱痛、海綿腫、海綿状血管腫、海綿状奇形、中心性頸髄症候群、中心性脊髄症候群、中枢痛症候群、橋中心髄鞘崩壊症、頭部障害、セラミダーゼ欠乏症、小脳変性症、小脳低形成、脳動脈瘤、脳動脈硬化症、脳萎縮、脳性脚気、脳海綿状形成異常、脳性巨人症、脳低酸素症、脳性麻痺、脳・眼・顔・骨格症候群（ＣＯＦＳ）、シャルコー・マリー・トゥース病、キアリ奇形、コレステロールエステル蓄積症、舞踏病、有棘赤血球舞踏病、慢性炎症性脱髄性多発ニューロパチー（ＣＩＤＰ）、慢性起立性調節障害、慢性疼痛、コケイン症候群ＩＩ型、コフェイン・ローリー症候群、脳梁欠損症、昏睡、複合性局所疼痛症候群、先天性両側顔面神経麻痺、先天性筋無力症、先天性筋疾患、先天性血管性海綿状形成異常、大脳皮質基底核変性症、頭部動脈炎、頭蓋縫合早期癒合症、クリー脳炎、クロイツフェルト・ヤコブ病、累積外傷性障害、クッシング症候群、巨細胞封入体症、サイトメガロウイルス感染、ダンシングアイズ−ダンシングフィート（Ｄａｎｃｉｎｇ  Ｅｙｅｓ−Ｄａｎｃｉｎｇ  Ｆｅｅｔ）症候群、ダンディ・ウォーカー症候群、ドーソン（Ｄａｗｓｏｎ）病、ドモルシア症候群、デジェリン・クリンプケ（Ｄｅｊｅｒｉｎｅ−Ｋｌｕｍｐｋｅ）麻痺、認知症、多発脳梗塞性認知症、意味性認知症、皮質下認知症、レビー小体型認知症、小脳歯状核性運動失調、歯状核赤核萎縮、皮膚筋炎、発達性総合運動障害、デビック症候群、糖尿病性ニューロパチー、びまん性硬化症、ドラベ症候群、自律神経障��、書字障害、失読症、嚥下障害、総合運動障害、ミオクロヌス性小脳性共同運動障害、進行性小脳性共同運動障害、ジストニア、早期乳児てんかん性脳症、トルコ鞍空洞症候群、脳炎、嗜眠性脳炎、脳ヘルニア、脳症、脳症（家族性小児性）、脳三叉神経血管腫症、てんかん、てんかん性片麻痺、エルブ麻痺、エルプ・デュシェンヌおよびデジェリン・クルンプケ麻痺、本態性振戦、橋外ミエリン崩壊症（Ｅｘｔｒａｐｏｎｔｉｎｅ  Ｍｙｅｌｉｎｏｌｙｓｉｓ）、ファブリー病、ファール症候群、失神、家族性自律神経障害、家族性血管腫、家族性発性大脳基底核石灰化、家族性周期性四肢麻痺、家族性痙性麻痺、ファーバー病、熱性痙攣、線維筋性形成異常症、フィッシャー症候群、筋緊張低下児症候群、下垂足、フリードライヒ運動失調症、前頭側頭型認知症、ゴーシェ病、全身性ガングリオシドーシス、ゲルストマン症候群、ゲルストマン・シュトロイスラー・シャインカー病、巨大軸索ニューロパチー、巨細胞性動脈炎、巨細胞性封入体病、グロボイド細胞白質ジストロフィー、舌咽神経痛、グリコーゲン蓄積症、ギラン・バレー症候群、ハラーホルデン・スパッツ病、頭部外傷、頭痛、持続性片側頭痛、片側顔面痙攣、交代性片麻痺、遺伝性ニューロパチー、遺伝性痙性対麻痺、遺伝性多発神経炎性失調、帯状疱疹、耳帯状疱疹、平山症候群、ホームズ・アディ症候群、全前脳症、ＨＴＬＶ−１に関連付けられた脊髄症、ヒューズ症候群、ハンチントン舞踏病、水頭無脳症、水頭症、正常圧水頭症、水脊髄症、副腎皮質ホルモン過剰症、過眠症、筋緊張亢進、筋緊張低下、低酸素症、免疫媒介性脳脊髄炎、封入体筋炎、色素失調症、小児筋緊張低下、小児神経軸索ジストロフィー、小児フィタン酸蓄積症、小児レフサム病、小児攣縮、炎症性筋疾患、後頭孔脳脱出症、腸脂肪異栄養症、頭蓋内嚢胞、頭蓋内圧亢進症、アイザックス症候群、ジュベール症候群、カーンズ・セイヤー症候群、ケネディ病、キンズボーン症候群、クライネ・レヴィン症候群、クリッペル・ファイル症候群、クリッペル・トレノネー症候群（ＫＴＳ）、クリューバー・ビューシー症候群、コルサコフ健紡性症候群、クラッベ病、クーゲルベルク・ヴェランダー病、クールー病、ランバート・イートン筋無力症症候群、ランドウ・クレフナー症候群、外側大腿皮神経絞扼、延髄外側症候群、学習障害、リー病、レノックス・ガストー症候群、レッシュ・ナイハン症候群、白質ジストロフィー、レヴィン・クリッチュリー症候群、レビー小体型認知症、脂質蓄積症、類脂質蛋白症、滑脳症、閉じ込め症候群、ルー・ゲーリック病、ループス−神経学的後遺症、ライム病−神経学的合併症、マシャド・ジョセフ病、巨大脳髄症、巨脳症、メルカーソン・ローゼンタール症候群、髄膜炎、髄膜炎および脳炎、メンケス病、異常感覚性大腿痛、異染性白質ジストロフィー、小頭症、片頭痛、ミラー・フィッシャー症候群、小発作、ミトコンドリア筋症、メビウス症候群、単肢筋萎縮症、運動ニューロン疾患、もやもや病、ムコリピドーシス、ムコ多糖症、多発脳梗塞性認知症、多巣性運動ニューロパチー、多発性硬化症、多系統萎縮症、起立性低血圧症を伴う多系統萎縮症、筋ジストロフィー、先天性筋無力症、重症筋無力症、髄鞘分解性びまん性硬化症、小児のミオクロニー脳症、ミオクロヌス、筋疾患、先天性筋疾患、甲状腺中毒性ミオパチー、筋強直症、先天性筋強直、ナルコレプシー、神経有棘赤血球症、脳鉄蓄積を伴う神経変性、神経線維腫症、神経遮断性悪性症候群、ＡＩＤＳの神経学的合併症、ライム病の神経学的合併症、サイトメガロウイルス感染の神経学的結果、ポンぺ病の神経症状、ループスの神経学的後遺症、視神経脊髄炎、神経性筋強直症、神経セロイドリポフスチン症、ニューロン移動障害、遺伝性ニューロパチー、神経サルコイドーシス、神経梅毒、神経毒性、海綿状母斑、ニーマン・ピック病、オサリバン・マクラウド症候群、後頭神経痛、大田原症候群、オリーブ橋小脳萎縮症、眼球クローヌス・ミオクロヌス、起立性低血圧症、オーバーユース症候群、慢性疼痛、パントテン酸キナーゼ関連神経変性症、腫瘍随伴症候群、異常知覚、パーキンソン病、発作性舞踏病アテトーゼ、発作性片側頭痛、パリー・ロンベルク、ペリツェウス・メルツバッハ病、ペナ・ショッカーＩＩ症候群、神経周囲嚢胞、周期性四肢麻痺、末梢神経障害、脳室周囲白質軟化症、遷延性植物状態、広汎性発達障害、フィタン酸蓄積症、ピック病、圧迫された神経（Ｐｉｎｃｈｅｄ  Ｎｅｒｖｅ）、梨状筋症候群、下垂体腫瘍、多発性筋炎、ポンぺ病、孔脳症、ポリオ後症候群、帯状疱疹後神経痛、感染後脳脊髄炎、体位性低血圧、体位性起立性頻拍症候群、体位性瀕伯症候群、原発性歯状核萎縮症、原発性側索硬化症、原発性進行性失語症、プリオン病、進行性顔面半側萎縮症、進行性歩行運動失調、進行性多巣性白質脳症、進行性硬化性灰白質萎縮症、進行性核上性麻痺、相貌失認、偽トーチ症候群、偽トキソプラズマ症候群、偽性脳腫瘍、心因性運動、ラムゼイ・ハント症候群Ｉ、ラムゼイ・ハント症候群ＩＩ、ラスムッセン脳炎、反射性交感神経性ジストロフィー症候群、レフサム病、小児レフサム病、反射性運動障害、反復性ストレス傷害、下肢静止不能症候群、レトロウイルスに関連付けられる脊髄症、レット症候群、ライ症候群、リウマチ性脳炎、ライリー・デイ症候群、仙椎神経根嚢胞、聖ヴィトゥス舞踏病、唾液腺疾患、サンドホフ病、シルダー病、裂脳症、ザイテルベルガー病、発作性疾患、意味性認知症、中隔視神経形成異常症、乳児期の重症ミオクロヌス性てんかん（ＳＭＥＩ）、揺さぶられっ子症候群、帯状疱疹、シャイ・ドレーガー症候群、シェーグレン症候群、睡眠時無呼吸、睡眠病、ソトス症候群、痙縮、二分脊椎症、脊髄梗塞、脊髄損傷、脊髄腫瘍、脊髄性筋萎縮症、脊髄小脳失調症、脊髄小脳変性症、スティール・リチャードソン・オルゼウスキー症候群、全身硬直症候群、線条体黒質変性症、脳卒中、スタージ・ウェーバー症候群、亜急性硬化性全脳炎、皮質下動脈硬化性脳症、短時間性、片側性、神経痛様（ＳＵＮＣＴ）頭痛、嚥下障害、シデハム舞踏病、失神、梅毒性脊髄硬化症、脊髄水空洞症、脊髄空洞症、全身性エリテマトーデス、脊髄癆、遅発性ジスキネジア、ターロブ嚢胞、テイ・サックス病、側頭動脈炎、脊髄係留症候群、トムゼン筋強直症、胸郭出口症候群、甲状腺毒性筋疾患、三叉神経痛、トッド麻痺、トゥレット症候群、一過性脳虚血発作、伝達性海綿状脳症、横断性脊髄炎、外傷性脳損傷、振戦、三叉神経痛、熱帯���痙攣性不全対麻痺、トロイアー症候群、結節性硬化症、勃起性血管腫瘍、中枢および末梢神経系の脈管炎症候群、フォンエコノモ疾患、フォンヒッペル・リンダウ病（ＶＨＬ）、フォンレックリングハウゼン病、ワレンベルグ症候群、ウェルドニッヒ・ホフマン病、ウェルドニッヒ・ホフマン症候群、ウエスト症候群、むちうち症、ウィップル病、ウィリアムズ症候群、ウィルソン病、ウォルマン病、Ｘ連鎖球脊髄性萎縮症であり得る。
【０５８６】
本開示は、ヒト対象を含む哺乳動物対象において神経学的疾患を処置する方法であって、対象に、本開示のＡＡＶ粒子または医薬組成物のいずれかを投与する工程を含む、方法をさらに提供する。ある特定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、血液脳関門通過性粒子である。ある特定の実施形態では、本明細書において記載される方法に従って処置される神経学的疾患として、それだけに限られないが、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、ハンチントン舞踏病（ＨＤ）、パーキンソン病（ＰＤ）および／またはフリートライヒ運動失調（ＦＡ）が挙げられる。
【０５８７】
キットおよびデバイス
キット
一部の実施形態では、本開示は、本開示の方法を好都合におよび／または有効に実施するためのさまざまなキットを提供する。通常、キットは、ユーザーが、対象（複数可）の複数の処置を実施することおよび／または複数の実験を実施することを可能にするための十分な量および／または数の成分を含む。
【０５８８】
本開示のＡＡＶ粒子のいずれも、キット中に含まれ得る。一部の実施形態では、キットは、本開示の化合物および／または組成物を作出および／または合成するための試薬および／または使用説明書をさらに含み得る。一部の実施形態では、キットはまた、１つまたは複数の緩衝液を含み得る。一部の実施形態では、本開示のキットは、タンパク質または核酸アレイまたはライブラリーを作製するための成分を含むことができ、したがって、例えば、固相支持体を含み得る。
【０５８９】
一部の実施形態では、キット成分は、水性媒体中または凍結乾燥形態のいずれかでパッケージングすることができる。キットの容器手段は、一般に、成分を入れることができ、好ましくは、適切にアリコートることができる、少なくとも１つのバイアル、試験管、フラスコ、瓶、シリンジまたは他の容器手段を含む。２つ以上のキット成分（標識試薬および標識は一緒にパッケージングされ得る）がある場合には、キットはまた、一般に、さらなる成分を別個に入れることができる第２、第３または他のさらなる容器を含有し得る。一部の実施形態では、キットはまた、無菌の薬学的に許容される緩衝液および／または他の希釈剤を含有するための第２の容器手段を含み得る。一部の実施形態では、成分の種々の組合せが、１つまたは複数のバイアル中に含まれ得る。本開示のキットはまた、通常、本開示の化合物および／または組成物、例えば、タンパク質、核酸および商用販売のための厳重に閉じ込められた任意の他の試薬容器を含有するための手段を含み得る。このような容器は、注射または所望のバイアルが保持されるブロー成型プラスチック容器を含み得る。
【０５９０】
一部の実施形態では、キット成分は、１種および／または複数の液体溶液中で提供される。一部の実施形態では、液体溶液は、水溶液であり、無菌水溶液が特に好ましい。一部の実施形態では、キット成分は、乾燥粉末（複数可）として提供され得る。試薬および／または成分が乾燥粉末として提供される場合には、このような粉末は、適した容積の溶媒の添加によって再構成され得る。一部の実施形態では、溶媒はまた、別の容器手段中で提供され得るということが想定される。一部の実施形態では、標識色素は、乾燥粉末として提供される。一部の実施形態では、本開示のキットにおいて１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１２０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、２００、３００、４００、５００、６００、７００、８００、９００、１０００マイクログラムまたは少なくとももしくは多くともそれらの量の乾燥色素が提供されることが企図される。このような実施形態では、色素は、次いで、任意の適した溶媒、例えば、ＤＭＳＯに再懸濁され得る。
【０５９１】
一部の実施形態では、キットは、キット中に含まれない任意の他の試薬の使用と同様に、キット成分を使用するための使用説明書を含み得る。使用説明書は、実行され得る変法を含み得る。
【０５９２】
デバイス
一部の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、ＡＡＶ粒子を送達するためのデバイスおよび頭部固定アセンブリーを使用して対象に送達され得る。頭部固定アセンブリーは、これらに限定されないが、ＭＲＩ介入によって販売される頭部固定アセンブリーのいずれかであり得る。非限定的な例として、頭部固定アセンブリーは、各々の内容をその全体で本願明細書に援用する、米国特許第８，０９９，１５０号明細書、同８，５４８，５６９号明細書および同９，０３１，６３６号明細書ならびに国際公開第２０１１０８４９５号パンフレットおよび国際公開第２０１４０１４５８５号パンフレットに記載されるアセンブリーのいずれかであり得る。頭部固定アセンブリーは、ＭＲＩ適合ドリル、例えば、これらに限定されないが、その内容をその全体で本願明細書に援用する、国際公開第２０１３１８１００８号パンフレットおよび米国特許出願公開第２０１３０３２５０１２号明細書に記載されるＭＲＩ適合ドリルと組み合わせて使用され得る。
【０５９３】
一部の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、ＡＡＶ粒子を送達するために対象上の標的点に装置を配置するための方法、システムおよび／またはコンピュータプログラムを使用して送達され得る。非限定的な例として、方法、システムおよび／またはコンピュータプログラムは、その内容をその全体で本願明細書に援用する米国特許第８，３４０，７４３号明細書に記載される、方法、システムおよび／またはコンピュータプログラムであり得る。方法は、身体中の標的点および参照点を決定し、標的点および参照点が、各々を通って伸びる計画された軌道線（ＰＴＬ）を規定することと、可視化面を決定し、ＰＴＬが照準点で可視化面と交差することと、ガイドデバイスを身体に対して取り付けて、ＰＴＬに対して移動し、ガイドデバイスは、可視化面と交差しないことと、ガイド軸と可視化面の間の交点（ＧＰＰ）を決定することと、ＧＰＰを可視化面中の照準点と並べることとを含み得る。
【０５９４】
一部の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、従来の増強された送達デバイスを使用して対象に送達され得る。対流を使用する薬物の標的化送達の非限定的な例は、その内容をその全体で本願明細書に援用する、米国特許出願公開第２０１００２１７２２８号明細書、同２０１３００３５５７４号明細書および同２０１３００３５６６０号明細書ならびに国際公開第２０１３０１９８３０号パンフレットおよび国際公開第２００８１４４５８５号パンフレットに記載されている。
【０５９５】
一部の実施形態では、対象は、ＡＡＶ粒子の送達の前、その間および／またはその後に画像化され得る。画像化方法は、当技術分野で公知のおよび／または本明細書において記載される方法、例えば、これに限定されないが、磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）であり得る。非限定的な例として、画像化は、治療効果を評価するために使用され得る。別の非限定的な例として、画像化は、ＡＡＶ粒子の送達を評価するために使用され得る。
【０５９６】
一部の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、ＭＲＩ誘導デバイスを使用して送達され得る。ＭＲＩ誘導デバイスの非限定的な例は、その内容をその全体で本願明細書に援用する、米国特許第９，０５５，８８４号明細書、同９，０４２，９５８号明細書、同８，８８６，２８８号明細書、同８，７６８，４３３号明細書、同８，３９６，５３２号明細書、同８，３６９，９３０号明細書、同８，３７４，６７７号明細書および同８，１７５，６７７号明細書および米国特許出願公開第２０１４００２４９２７号明細書に記載されている。非限定的な例として、その内容をその全体で本願明細書に援用する、米国特許第８，８８６，２８８号明細書および同８，７６８，４３３号明細書に記載されるものなどのＭＲＩ誘導デバイスは、リアルタイムでデータを提供することができる場合がある。別の非限定的な例として、ＭＲＩ誘導デバイスまたはシステムは、その内容をその全体で本願明細書に援用する、米国特許第８，１７５，６７７号明細書および同８，３７４，６７７号明細書に記載されるシステムなどの標的化カニューレとともに使用され得る。さらに別の非限定的な例として、ＭＲＩ誘導デバイスは、例えば、その内容をその全体で本願明細書に援用する、米国特許第９，０５５，８８４号明細書および米国特許出願公開第２０１４００２４９２７号明細書に記載されるような、例えば、介入的デバイスをガイドするための軌道ガイドフレームを含む。
【０５９７】
一部の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、ＭＲＩ適合チップアセンブリーを使用して送達され得る。ＭＲＩ適合チップアセンブリーの非限定的な例は、その内容をその全体で本願明細書に援用する、米国特許出願公開第２０１４０２７５９８０号明細書に記載されている。
【０５９８】
一部の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、ＭＲＩ適合であるカニューレを使用して送達され得る。ＭＲＩ適合カニューレの非限定的な例として、その内容をその全体で本願明細書に援用する、国際公開第２０１１１３０１０７号パンフレットにおいて教示されるものが挙げられる。一部の実施形態では、カニューレまたはその一部分またはカニューレと関連付けられる管類が、手術部位／手術野を周囲の組織に取り付けられる、備え付けられる、接着される、固定される、またはその他の形で可逆性に接触させられる。このような接触は、手順のすべてまたは一部分の間、１つの位置に限局され得る、および／または安定化され得る。
【０５９９】
一部の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、ＭＲＩ適合であるカテーテルを使用して送達され得る。ＭＲＩ適合カテーテル非限定的な例として、その内容をその全体で本願明細書に援用する、国際公開第２０１２１１６２６５号パンフレット、米国特許第８，８２５，１３３号明細書および米国特許出願公開第２０１４００２４９０９号明細書において教示されるものが挙げられる。
【０６００】
一部の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、その内容をその全体で本願明細書に援用する、米国特許出願公開第２０１４０２７６５８２号明細書および同２０１４０２７６６１４号明細書に記載されるような、細長い管状本体およびダイヤフラムを備えたデバイスを使用して送達され得る。
【０６０１】
一部の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、ＭＲＩ適合局在性および／または誘導システム、例えば、これらに限定されないが、その内容をその全体で本願明細書に援用する、米国特許出願公開第２０１５０２２３９０５号明細書および同２０１５０２３０８７１号明細書に記載されるものを使用して送達され得る。非限定的な例として、ＭＲＩ適合局在性および／または誘導システムは、患者への固定に適応しているマウント、少なくとも３つの寸法で制御可能に変換できるようにマウントを取り付けるように構成された管腔を有する標的化カニューレ、および標的化カニューレ管腔中で滑走によってぴったりと前進し、後退するように構成された細長いプローブを含むことができ、細長いプローブは、刺激電極または記録電極のうち少なくとも一方を含む。
【０６０２】
一部の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、その内容をその全体で本願明細書に援用する、米国特許出願公開第２０１５００３１９８２号明細書および同２０１４００６６７５０号明細書ならびに国際公開第２０１５０５７８０７号パンフレットおよび国際公開第２０１４０３９４８１号パンフレットに記載されるような、軌道フレームを使用して対象に送達され得る。
【０６０３】
一部の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、遺伝子銃を使用して対象に送達され得る。
タンパク質ペイロードをコードするＡＡＶ粒子の使用
本開示の方法およびシステムに従って作製されたＡＡＶ粒子を細胞中に導入する方法が本開示において提供され、方法は、ベクターのいずれかを標的ｍＲＮＡおよびタンパク質の生成の増大が生じるのに十分な量で前記細胞中に導入する工程を含む。一部の態様では、細胞は、筋肉細胞、幹細胞、ニューロン、例えば、これらに限定されないが、運動、海馬、嗅内、視床または皮質ニューロンおよびグリア細胞、例えば、アストロサイトまたはミクログリアであり得る。
【０６０４】
処置を必要とする対象における不十分な機能／標的タンパク質の存在と関連付けられる神経学的疾患を処置するための方法が本開示において開示される。方法は、任意選択で、対象に本開示のＡＡＶ粒子を含む組成物の治療有効量を投与する工程を含む。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、標的遺伝子発現を増大することができ、標的タンパク質産生を増大することができ、ひいては、対象において１つまたは複数の神経学的疾患の症状を低減でき、その結果、対象が治療的に処置される。
【０６０５】
ある特定の実施形態では、タンパク質ペイロードをコードする核酸を含む本開示のＡＡＶ粒子は、静脈内投与後に血液脳関門を通過することを可能にするＡＡＶカプシドを含む。
【０６０６】
ある特定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子を含む組成物は、全身投与によって対象の中枢神経系に投与される。ある特定の実施形態では、全身投与は、静脈内注射である。
ある特定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子を含む組成物は、対象の中枢神経系に投与される。ある特定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子を含む組成物は、対象の組織（例えば、対象の脳）に投与される。
【０６０７】
ある特定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子を含む組成物は、実質内注射によって対象の中枢神経系に投与される。実質内注射の非限定的な例として、視床内、線条体内、海馬内または嗅内皮質を標的化することが挙げられる。
【０６０８】
ある特定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子を含む組成物は、実質内注射およびくも膜下腔内注射によって対象の中枢神経系に投与される。
ある特定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子は、これらに限定されないが、海馬、皮質、運動または嗅内ニューロン；乏突起膠細胞、アストロサイトおよびミクログリアを含むグリア細胞ならびに／またはＴ細胞などのニューロンの周囲の他の細胞を含む特定の種類の標的とされる細胞中に送達され得る。
【０６０９】
ある特定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子は、線条体（例えば、被殻）および／または皮質中のニューロンに送達され得る。
ある特定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子は、神経学的疾患の療法として使用され得る。
【０６１０】
ある特定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子は、対象において標的タンパク質を増大し、神経学的疾患の症状を低減するために使用され得る。標的タンパク質の増大および／または神経学的疾患の症状の低減は独立に、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％または９５％よりも多く、５〜１５％、５〜２０％、５〜２５％、５〜３０％、５〜３５％、５〜４０％、５〜４５％、５〜５０％、５〜５５％、５〜６０％、５〜６５％、５〜７０％、５〜７５％、５〜８０％、５〜８５％、５〜９０％、５〜９５％、１０〜２０％、１０〜２５％、１０〜３０％、１０〜３５％、１０〜４０％、１０〜４５％、１０〜５０％、１０〜５５％、１０〜６０％、１０〜６５％、１０〜７０％、１０〜７５％、１０〜８０％、１０〜８５％、１０〜９０％、１０〜９５％、１５〜２５％、１５〜３０％、１５〜３５％、１５〜４０％、１５〜４５％、１５〜５０％、１５〜５５％、１５〜６０％、１５〜６５％、１５〜７０％、１５〜７５％、１５〜８０％、１５〜８５％、１５〜９０％、１５〜９５％、２０〜３０％、２０〜３５％、２０〜４０％、２０〜４５％、２０〜５０％、２０〜５５％、２０〜６０％、２０〜６５％、２０〜７０％、２０〜７５％、２０〜８０％、２０〜８５％、２０〜９０％、２０〜９５％、２５〜３５％、２５〜４０％、２５〜４５％、２５〜５０％、２５〜５５％、２５〜６０％、２５〜６５％、２５〜７０％、２５〜７５％、２５〜８０％、２５〜８５％、２５〜９０％、２５〜９５％、３０〜４０％、３０〜４５％、３０〜５０％、３０〜５５％、３０〜６０％、３０〜６５％、３０〜７０％、３０〜７５％、３０〜８０％、３０〜８５％、３０〜９０％、３０〜９５％、３５〜４５％、３５〜５０％、３５〜５５％、３５〜６０％、３５〜６５％、３５〜７０％、３５〜７５％、３５〜８０％、３５〜８５％、３５〜９０％、３５〜９５％、４０〜５０％、４０〜５５％、４０〜６０％、４０〜６５％、４０〜７０％、４０〜７５％、４０〜８０％、４０〜８５％、４０〜９０％、４０〜９５％、４５〜５５％、４５〜６０％、４５〜６５％、４５〜７０％、４５〜７５％、４５〜８０％、４５〜８５％、４５〜９０％、４５〜９５％、５０〜６０％、５０〜６５％、５０〜７０％、５０〜７５％、５０〜８０％、５０〜８５％、５０〜９０％、５０〜９５％、５５〜６５％、５５〜７０％、５５〜７５％、５５〜８０％、５５〜８５％、５５〜９０％、５５〜９５％、６０〜７０％、６０〜７５％、６０〜８０％、６０〜８５％、６０〜９０％、６０〜９５％、６５〜７５％、６５〜８０％、６５〜８５％、６５〜９０％、６５〜９５％、７０〜８０％、７０〜８５％、７０〜９０％、７０〜９５％、７５〜８５％、７５〜９０％、７５〜９５％、８０〜９０％、８０〜９５％、または９０〜９５％変更され得る（標的タンパク質の産生に対して増大される、および神経学的疾患の症状について低減される）。
【０６１１】
ＲＮＡｉ  ポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子の使用
本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子を、細胞に導入する方法であって、前記細胞中に、標的ｍＲＮＡの分解が生じるのに十分な量のベクターのいずれかを導入し、それによって、細胞において標的特異的ＲＮＡｉを活性化する工程を含む方法が、本開示において提供される。一部の態様では、細胞は、筋肉細胞、幹細胞、ニューロン、例えば、これらに限定されないが、運動、海馬、嗅内、視床または皮質ニューロン、およびグリア細胞、例えば、アストロサイトまたはミクログリアであり得る。
【０６１２】
処置を必要とする対象における標的タンパク質の機能障害と関連付けられる神経学的疾患を処置するための方法が、本開示において開示される。方法は、任意選択で、対象に、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子を含む組成物の治療有効量を投与する工程を含む。非限定的な例として、ｓｉＲＮＡ分子は、標的遺伝子発現をサイレンシングでき、標的タンパク質産生を阻害でき、対象において１つまたは複数の神経学的疾患の症状を低減でき、その結果、対象が治療的に処置される。
【０６１３】
ある特定の実施形態では、ｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含む本開示のＡＡＶ粒子を含む組成物は、静脈内投与後に血液脳関門を通過することを可能にするＡＡＶカプシドを含む。
【０６１４】
ある特定の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子を含む組成物は、対象の中枢神経系に投与される。ある特定の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子を含む組成物は、対象の組織（例えば、対象の脳）に投与される。
【０６１５】
ある特定の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子を含む組成物は、全身投与によって対象の中枢神経系に投与される。ある特定の実施形態では、全身投与は、静脈内注射である。
【０６１６】
ある特定の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子を含む組成物は、実質内注射によって対象の中枢神経系に投与される。実質内注射の非限定的な例として、視床内、線条体内、海馬内または嗅内皮質を標的化することが挙げられる。
【０６１７】
ある特定の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子を含む組成物は、実質内注射およびくも膜下腔内注射によって対象の中枢神経系に投与される。
【０６１８】
ある特定の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子は、これらに限定されないが、海馬、皮質、運動または嗅内ニューロン；乏突起膠細胞、アストロサイトおよびミクログリアを含むグリア細胞ならびに／またはＴ細胞などのニューロンの周囲の他の細胞を含む特定の種類の標的とされる細胞中に送達され得る。
【０６１９】
ある特定の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子は、線条体および／または皮質中のニューロンに送達され得る。
ある特定の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子は、神経学的疾患の療法として使用され得る。
【０６２０】
ある特定の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子は、筋萎縮性側索硬化症の療法として使用され得る。
ある特定の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子は、ハンチントン舞踏病の療法として使用され得る。
【０６２１】
ある特定の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子は、パーキンソン病の療法として使用され得る。
ある特定の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子は、フリートライヒ運動失調の療法として使用され得る。
【０６２２】
ある特定の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子は、神経学的疾患を処置するために標的を抑制するために使用され得る。アストロサイトにおいて標的タンパク質は、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％または９５％よりも多く、５〜１５％、５〜２０％、５〜２５％、５〜３０％、５〜３５％、５〜４０％、５〜４５％、５〜５０％、５〜５５％、５〜６０％、５〜６５％、５〜７０％、５〜７５％、５〜８０％、５〜８５％、５〜９０％、５〜９５％、１０〜２０％、１０〜２５％、１０〜３０％、１０〜３５％、１０〜４０％、１０〜４５％、１０〜５０％、１０〜５５％、１０〜６０％、１０〜６５％、１０〜７０％、１０〜７５％、１０〜８０％、１０〜８５％、１０〜９０％、１０〜９５％、１５〜２５％、１５〜３０％、１５〜３５％、１５〜４０％、１５〜４５％、１５〜５０％、１５〜５５％、１５〜６０％、１５〜６５％、１５〜７０％、１５〜７５％、１５〜８０％、１５〜８５％、１５〜９０％、１５〜９５％、２０〜３０％、２０〜３５％、２０〜４０％、２０〜４５％、２０〜５０％、２０〜５５％、２０〜６０％、２０〜６５％、２０〜７０％、２０〜７５％、２０〜８０％、２０〜８５％、２０〜９０％、２０〜９５％、２５〜３５％、２５〜４０％、２５〜４５％、２５〜５０％、２５〜５５％、２５〜６０％、２５〜６５％、２５〜７０％、２５〜７５％、２５〜８０％、２５〜８５％、２５〜９０％、２５〜９５％、３０〜４０％、３０〜４５％、３０〜５０％、３０〜５５％、３０〜６０％、３０〜６５％、３０〜７０％、３０〜７５％、３０〜８０％、３０〜８５％、３０〜９０％、３０〜９５％、３５〜４５％、３５〜５０％、３５〜５５％、３５〜６０％、３５〜６５％、３５〜７０％、３５〜７５％、３５〜８０％、３５〜８５％、３５〜９０％、３５〜９５％、４０〜５０％、４０〜５５％、４０〜６０％、４０〜６５％、４０〜７０％、４０〜７５％、４０〜８０％、４０〜８５％、４０〜９０％、４０〜９５％、４５〜５５％、４５〜６０％、４５〜６５％、４５〜７０％、４５〜７５％、４５〜８０％、４５〜８５％、４５〜９０％、４５〜９５％、５０〜６０％、５０〜６５％、５０〜７０％、５０〜７５％、５０〜８０％、５０〜８５％、５０〜９０％、５０〜９５％、５５〜６５％、５５〜７０％、５５〜７５％、５５〜８０％、５５〜８５％、５５〜９０％、５５〜９５％、６０〜７０％、６０〜７５％、６０〜８０％、６０〜８５％、６０〜９０％、６０〜９５％、６５〜７５％、６５〜８０％、６５〜８５％、６５〜９０％、６５〜９５％、７０〜８０％、７０〜８５％、７０〜９０％、７０〜９５％、７５〜８５％、７５〜９０％、７５〜９５％、８０〜９０％、８０〜９５％、または９０〜９５％抑制され得る。アストロサイトにおいて標的タンパク質は、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％または９５％よりも多く、５〜１５％、５〜２０％、５〜２５％、５〜３０％、５〜３５％、５〜４０％、５〜４５％、５〜５０％、５〜５５％、５〜６０％、５〜６５％、５〜７０％、５〜７５％、５〜８０％、５〜８５％、５〜９０％、５〜９５％、１０〜２０％、１０〜２５％、１０〜３０％、１０〜３５％、１０〜４０％、１０〜４５％、１０〜５０％、１０〜５５％、１０〜６０％、１０〜６５％、１０〜７０％、１０〜７５％、１０〜８０％、１０〜８５％、１０〜９０％、１０〜９５％、１５〜２５％、１５〜３０％、１５〜３５％、１５〜４０％、１５〜４５％、１５〜５０％、１５〜５５％、１５〜６０％、１５〜６５％、１５〜７０％、１５〜７５％、１５〜８０％、１５〜８５％、１５〜９０％、１５〜９５％、２０〜３０％、２０〜３５％、２０〜４０％、２０〜４５％、２０〜５０％、２０〜５５％、２０〜６０％、２０〜６５％、２０〜７０％、２０〜７５％、２０〜８０％、２０〜８５％、２０〜９０％、２０〜９５％、２５〜３５％、２５〜４０％、２５〜４５％、２５〜５０％、２５〜５５％、２５〜６０％、２５〜６５％、２５〜７０％、２５〜７５％、２５〜８０％、２５〜８５％、２５〜９０％、２５〜９５％、３０〜４０％、３０〜４５％、３０〜５０％、３０〜５５％、３０〜６０％、３０〜６５％、３０〜７０％、３０〜７５％、３０〜８０％、３０〜８５％、３０〜９０％、３０〜９５％、３５〜４５％、３５〜５０％、３５〜５５％、３５〜６０％、３５〜６５％、３５〜７０％、３５〜７５％、３５〜８０％、３５〜８５％、３５〜９０％、３５〜９５％、４０〜５０％、４０〜５５％、４０〜６０％、４０〜６５％、４０〜７０％、４０〜７５％、４０〜８０％、４０〜８５％、４０〜９０％、４０〜９５％、４５〜５５％、４５〜６０％、４５〜６５％、４５〜７０％、４５〜７５％、４５〜８０％、４５〜８５％、４５〜９０％、４５〜９５％、５０〜６０％、５０〜６５％、５０〜７０％、５０〜７５％、５０〜８０％、５０〜８５％、５０〜９０％、５０〜９５％、５５〜６５％、５５〜７０％、５５〜７５％、５５〜８０％、５５〜８５％、５５〜９０％、５５〜９５％、６０〜７０％、６０〜７５％、６０〜８０％、６０〜８５％、６０〜９０％、６０〜９５％、６５〜７５％、６５〜８０％、６５〜８５％、６５〜９０％、６５〜９５％、７０〜８０％、７０〜８５％、７０〜９０％、７０〜９５％、７５〜８５％、７５〜９０％、７５〜９５％、８０〜９０％、８０〜９５％、または９０〜９５％低減され得る。
【０６２３】
ある特定の実施形態では、対象への本開示のｓｉＲＮＡをコードするＡＡＶ粒子の投与は、対象において標的タンパク質レベルを低下させ得る。標的タンパク質レベルは、対象、例えば、これらに限定されないが、対象のＣＮＳ、ＣＮＳの領域またはＣＮＳの特定の細胞において約３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％または少なくとも２０〜３０％、２０〜４０％、２０〜５０％、２０〜６０％、２０〜７０％、２０〜８０％、２０〜９０％、２０〜９５％、２０〜１００％、３０〜４０％、３０〜５０％、３０〜６０％、３０〜７０％、３０〜８０％、３０〜９０％、３０〜９５％、３０〜１００％、４０〜５０％、４０〜６０％、４０〜７０％、４０〜８０％、４０〜９０％、４０〜９５％、４０〜１００％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜９０％、５０〜９５％、５０〜１００％、６０〜７０％、６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９５％、６０〜１００％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９５％、７０〜１００％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜１００％、９０〜９５％、９０〜１００％、または９５〜１００％低下され得る。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、標的タンパク質のタンパク質レベルを、少なくとも５０％低下させ得る。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、標的タンパク質のタンパク質レベルを、少なくとも４０％低下させ得る。
【０６２４】
治療適応症
パーキンソン病
パーキンソン病（ＰＤ）は、特に、脳の黒質に影響を及ぼす神経系の進行性の障害である。ＰＤ発症は、ドーパミン産生脳細胞の喪失の結果である。ＰＤの通常の早期症状として、手足、例えば、手、腕、下肢、足および顔面の揺れまたは振戦が挙げられる。追加の特徴的症状として、四肢および胴体のこわばり、遅い動きまたは動けないこと、平衡および協調が損なわれていること、認知の変化および精神医学的状態、例えば、鬱病および幻視がある。ＰＤは、家族性および特発性形態の両方を有し、遺伝的および環境的原因と関与していると示唆される。ＰＤは、世界中で４００万人超に影響を及ぼしている。米国では、毎年およそ６０，０００の症例が同定される。全般的に、ＰＤは、５０歳以上の年齢で始まる。早期発症型の状態は、５０歳よりも若い年齢で始まり、若年発症ＰＤは、２０歳前で始まる。
【０６２５】
ＰＤと関連するドーパミン産生脳細胞の死滅は、アルファ−シヌクレインタンパク質の凝集、枯渇および機能障害と関連付けられてきた（例えば、マカクおよびオーテイロ（Ｍａｒｑｕｅｓ  ａｎｄ  Ｏｕｔｅｉｒｏ）、２０１２、Ｃｅｌｌ  Ｄｅａｔｈ  Ｄｉｓ．  ３：ｅ３５０、ジェンナー（Ｊｅｎｎｅｒ）、１９８９、Ｊ  Ｎｅｕｒｏｌ  Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇ  Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ．  Ｓｐｅｃｉａｌ  Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ、２２−２８およびその中の参考文献を参照のこと）。研究は、アルファ−シヌクレインは、シナプス前シグナル伝達、膜輸送ならびにドーパミン放出および輸送の調節において役割を有することを示唆した。例えば、オリゴマーの形態でのアルファ−シヌクレイン凝集物は、ニューロンの機能障害および死滅に関与する種であると示唆された。アルファ−シヌクレイン遺伝子（ＳＮＣＡ）の突然変異が、ＰＤの家族性形態において同定されているが、環境因子、例えば、神経毒も、アルファ−シヌクレイン凝集に影響を及ぼす。他のものは、ＰＤにおける脳細胞死滅の原因は、プロテオソームおよびリソソーム系の機能障害、ミトコンドリア活性の低減であると示唆した。
【０６２６】
ＰＤは、「シヌクレイン病」と呼ばれるアルファ−シヌクレイン凝集と関連している他の疾患と関連している。このような疾患として、これらに限定されないが、パーキンソン病認知症（ＰＤＤ）、多系統萎縮症（ＭＳＡ）、レビー小体型認知症、若年発症全身性神経軸索ジストロフィー（ハラーホルデン・スパッツ病）、純粋自律神経失調症（ＰＡＦ）、脳鉄蓄積１型を伴う神経変性（ＮＢＩＡ−１）およびアルツハイマー病とパーキンソン病の複合が挙げられる。
【０６２７】
今日の時点で、ＰＤの治癒または予防療法は同定されていない。利用可能なさまざまな薬物療法は、症状の軽減を提供する。対症的医学的処置の非限定的な例として、こわばりおよび遅い動きを低減するカルビドパおよびレボドパの組合せならびに振戦およびこわばりを低減する抗コリン薬が挙げられる。他の任意選択の療法として、例えば、脳深部刺激および手術が挙げられる。根底にある病態生理に影響を及ぼす療法が依然として必要である。例えば、アルファ−シヌクレインタンパク質またはＰＤにおける脳細胞死と関連性のある他のタンパク質を標的とする抗体が、ＰＤを予防および／または処置するために使用され得る。
【０６２８】
ある特定の実施形態では、本開示の方法は、ＰＤおよび他のシヌクレイン病を患っている対象を処置するために使用され得る。ある特定の実施形態では、本開示の方法は、ＰＤおよび他のシヌクレイン病を発症する疑いのある対象を処置するために使用され得る。
【０６２９】
本開示において記載されるＡＡＶ粒子、医薬製剤およびウイルス粒子を使用する方法は、ＰＤを予防、管理および／または処置するために使用され得る。
脊髄性筋萎縮症
脊髄性筋萎縮症（ＳＭＡ）は、乳児および小児の腕および下肢における随意筋の遺伝病によって引き起こされる脱力および消耗である。ＳＭＡは、生存運動ニューロン遺伝子１（ＳＭＮ１）のタンパク質産生における異常と関連付けられる。タンパク質の欠如は、下位運動ニューロンの変性および死滅に影響を及ぼす。通常の症状は、筋緊張低下した四肢および体幹、腕および下肢の弱い動き、嚥下および摂食の困難および呼吸障害が挙げられる。ＳＭＡは、２歳未満の小児の死亡につながる最も一般的な遺伝的障害である。ＳＭＡは、６，０００〜１０，０００人に１人に影響を及ぼす。
【０６３０】
今日の時点で、ＳＭＡの治癒はない。利用可能な療法は、症状の管理および追加の合併症の予防を目的としている。このような療法は、例えば、心臓病学、運動管理、呼吸ケアおよびメンタルヘルスと関連付けられている。ＳＭＡおよび関連疾患および病気の根底にある病態生理に影響を及ぼす療法は必要なままである。
【０６３１】
ある特定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子および方法は、ＳＭＡおよび関連疾患および病気を患っている対象を処置するために使用され得る。ある特定の実施形態では、本開示の方法は、ＳＭＡまたは関連疾患および病気を発症する疑いのある対象を処置するために使用され得る。
【０６３２】
本開示において記載されるＡＡＶ粒子、医薬製剤およびウイルス粒子を使用する方法は、ＳＭＡおよび関連疾患および病気を予防、管理および／または処置するために使用され得る。
【０６３３】
アルツハイマー病
アルツハイマー病（ＡＤ）は、衰弱性神経変性性疾患であり、記憶、思考および挙動に影響を及ぼす認知症の最も一般的な形態である。通常の初期症状は、新しく学習した情報を思い出すことが困難であることである。疾患が進行するにつれ、症状は、失見当識、睡眠の変化、気分および挙動の変化、錯乱、根拠のない疑念および最終的に話すこと、嚥下および歩行が困難であることを含む。ＡＤは、現在世界中で３５００万人超を苦しめており、その数は、今後１０年間で二倍になると予測される。
【０６３４】
今日の時点で、ＡＤ治癒または予防療法は同定されていない。記憶喪失、挙動変化および睡眠変化を処置するための、ＡＤの進行を減速するための薬物療法が利用可能である。しかし、これらの対症的処置は、根底にある病態生理に対処しない。
【０６３５】
ある特定の実施形態では、本開示の方法は、ＡＤおよび関連疾患および病気を患っている対象を処置するために使用され得る。ある特定の実施形態では、本開示の方法は、ＡＤまたは関連疾患および病気を発症する疑いのある対象を処置するために、療法として使用され得る。
【０６３６】
本開示において記載されるＡＡＶ粒子、医薬製剤およびウイルス粒子を使用する方法は、ＡＤおよび関連疾患および病気を予防、管理および／または処置するために使用され得る。
【０６３７】
筋萎縮性側索硬化症
筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）は、ルー・ゲーリック病または古典的運動ニューロン疾患としても知られ、迅速に進行する、致死性神経学的疾患である。ＡＬＳは、筋肉運動の使用可能性、衰弱、消耗および随意筋運動を上回る制御の喪失につながる、上位および下位運動ニューロンの細胞変性および死滅と関連付けられている。早期症状は、手、下肢および嚥下筋の筋肉脱力を含み、横隔膜不全によって呼吸ができなくなることまでに最終的に進行する。疾病予防管理センター（ＣＤＣ）によれば、ＡＬＳは、米国では推定１２，０００〜１５，０００人に影響を及ぼしている。症例の約５〜１０％が家族性である。
【０６３８】
ＡＬＳは、他の非感染性神経変性性疾患と同様に、ミスフォールディングされたタンパク質の存在を特徴としている。家族性ＡＬＳは、ＴＡＲ  ＤＮＡ結合タンパク質４３（ＴＤＰ−４３）およびＲＮＡ結合タンパク質ＦＵＳ／ＴＬＳの突然変異と関連付けられている。これらに限定されないが、成長因子、例えば、インスリン様成長因子１（ＩＧＦ−１）、グリア細胞株由来成長因子、脳由来成長因子、血管性内皮成長因子および繊毛様神経栄養因子または筋肉成長を促進する成長因子、例えば、ミオスタチンなど、ＡＬＳの進行を減速するためのいくつかのタンパク質が同定されている。
【０６３９】
今日の時点で、ＡＬＳの予防または治癒はない。ＦＤＡ承認薬リルゾール（ｎｉｌｕｚｏｌｅ）は、寿命を延長するために承認されているが、症状に対しては効果を有さない。さらに、ＡＬＳと関連付けられる疼痛および攻撃に耐えるために薬物および医学デバイスが利用可能である。根底にある病態生理に影響を及ぼす療法は依然として必要である。
【０６４０】
ある特定の実施形態では、本開示の方法は、ＡＬＳおよび関連疾患および病気を患っている対象を処置するために使用され得る。ある特定の実施形態では、本開示の方法は、ＡＬＳまたは関連疾患および病気を発症する疑いのある対象を処置するために使用され得る。
【０６４１】
本開示において記載されるＡＡＶ粒子、医薬製剤およびウイルス粒子を使用する方法は、ＡＬＳおよび関連疾患および病気を予防、管理および／または処置するために使用され得る。
【０６４２】
ハンチントン舞踏病
ハンチントン舞踏病（ＨＤ）は、脳の運動制御領域ならびに他の分野においてニューロンの変性を引き起こす稀な遺伝性障害である、一遺伝子性致死的神経変性性疾患である。ＨＤは、米国においておよそ３０，０００人に影響を及ぼしている。ＨＤは、ハンチントン（ＨＴＴ）タンパク質と関連付けられる遺伝子における突然変異によって引き起こされる。突然変異により、ＤＮＡの（ＣＡＧ）ブロックが異常に多くの回数繰り返される。一部の実施形態では、対象は、ＨＴＴ遺伝子が、４１以上のＣＡＧリピート（例えば、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、または９０より多いＣＡＧリピート）を有する場合に、十分に浸透性のＨＤを有する。一部の実施形態では、対象は、ＨＴＴ遺伝子が、３６から４０の間のＣＡＧリピート（例えば、３６、３７、３８、３９および４０のＣＡＧリピート）を有する場合に不完全な浸透率を有する。
【０６４３】
ハンチントン舞踏病は、ハンチントン（ＨＴＴ）タンパク質のＮ末端においてポリグルタミンをコードする常染色体優性トリプレット（ＣＡＧ）反復拡大増殖によって引き起こされることが知られている。疾患の発生の拡大増殖閾値は、およそ３５〜４０残基であると考えられている。この反復拡大増殖は、ＨＴＴの機能の毒性獲得をもたらし、最終的に線条体神経変性につながり、これは広範な脳萎縮に進行する。線条体の中型有棘ニューロンは、ＨＤにおいて特に脆弱であると思われ、介在ニューロンはほとんど温存されるのに対し最大９５％が喪失する。
【０６４４】
特に、ＨＤは、ＨＴＴのＮ末端領域によって形成された線条体のニューロンにおけるベータシートが豊富な凝集とも関連付けられている。拡大増殖および凝集は、ＨＤが進行するにつれ、ニューロンの段階的な喪失につながる。さらに、ＨＤにおける細胞死は、アポトーシスを誘導すると知られている細胞死受容体６（ＤＲ６）と関連付けられている。症状は、通常、３５〜４４歳の間で現れ、発症後の寿命予測値は、１０〜２５年である。興味深いことに、ＨＴＴ拡大増殖の長さは、発症年齢および疾患進行の速度の両方と相関し、拡大増殖が長いほど、疾患の重症度の大きさと連関される。ＨＤ集団の小さいパーセンテージ（約６％）において、疾患発症は、２〜２０歳の年齢で起こり、運動不能−強剛症候群の出現を伴う。これらの症例は、後期発症変種のものよりも迅速に進行する傾向があり、若年型またはウェストファール型バリアントＨＤとして分類されている。米国および欧州においておよそ３５，０００〜７０，０００人がＨＤを現在患っていると推測される。現在、対症的軽減および支持療法のみがＨＤの処置のために利用可能であり、治癒はまだ同定されていない。最終的に、ＨＤを有する個体は、他の疾患（例えば、肺炎、心不全）、息詰まり、窒息または転倒からの身体的損傷などの他の合併症に屈する。
【０６４５】
ＣＡＧ拡大増殖ＨＴＴが神経毒性をもたらす機序は、十分に理解されていない。ハンチントンタンパク質は、その濃度は脳において最高であるが、すべての細胞において発現される。ＨＴＴの正常機能は、未知であるが、ＨＤ患者の脳では、ＨＴＴは、異常な核封入体に凝集する。神経毒性をもたらすものは、関連付けられたタンパク質中間体（すなわち、可溶性種および毒性Ｎ末端断片）ととものミスフォールディングおよび凝集のこのプロセスであると現在と考えられている。
【０６４６】
ハンチントン舞踏病は、生活の質に対して深刻な影響を有する。症状は、通常、３５〜４４歳の間で現れ、発症後の寿命予測値は、１０〜２５年である。ＨＤ集団の小さいパーセンテージ（約６％）において、疾患発症は、２１歳の前に起こり、運動不能−強剛症候群の出現を伴う。これらの症例は、後期発症変種のものよりも迅速に進行する傾向があり、若年型またはウェストファール型バリアントＨＤとして分類されている。米国および欧州においておよそ３５，０００〜７０，０００人がＨＤを現在患っていると推測される。現在、対症的軽減および支持療法のみがＨＤの処置のために利用可能であり、治癒はまだ同定されていない。最終的に、ＨＤを有する個体は、肺炎、心不全または転倒からの身体的損傷などの他の合併症に屈する。
【０６４７】
ＨＤの症状は、これらに限定されないが、舞踏病（制御されない動き）、ジストニア、動作緩慢、協調運動障害、易刺激性および鬱病、問題解決能力の低下、挙動、判断および認知（例えば、精神神経および認知機能障害）の変化による普通の日常生活において機能する人の能力の低減、言語能力の減少および嚥下困難などのＣＮＳ変性に起因する特徴、ならびにこれらに限定されないが、体重減少（例えば、食物を嚥下する困難性からの）、筋肉消耗、代謝的機能障害および内分泌攪乱などのＣＮＳ変性に起因しない特徴を含み得る。
【０６４８】
今日の時点で、治癒または疾患の進行を防ぐための療法はない。利用可能な薬物療法は、症状の管理を目的とする。例えば、ＦＤＡは、テトラベンジンが舞踏病の予防のために処方されることを承認している。さらに、例えば、抗精神病薬が、妄想、幻覚および暴力的振る舞いを制御するのに役立ち得る。根底にある病態生理に影響を及ぼす療法、例えば、ＨＴＴタンパク質、ＤＲ６タンパク質および／または他のＨＤと関連付けられるタンパク質を標的とする抗体療法が、依然として必要である。
【０６４９】
アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）は、パルボウイルスファミリーのメンバーであり、主に、このウイルスが見かけ上非病原性であるために、遺伝子治療のための魅力的なベクターとして現れた。実際、ＡＡＶは、任意のヒト疾患と関連付けられていない。さらなる魅力は、分裂細胞および非分裂細胞を形質導入するその能力（ニューロンの効率的な形質導入を含む）、ヒトにおける炎症促進性反応および免疫反応の減少、ヘルペスウイルスを伴わないと自己複製できないこと（ＡＡＶは、ディペンドウイルス属（Ｄｅｐｅｎｄｏｖｉｒｕｓ）に属するヘルパー依存性ＤＮＡパルボウイルスである）およびその長期遺伝子発現による。１０を超える組換えＡＡＶ血清型（ｒＡＡＶ）がベクター中に操作されているが、ｒＡＡＶ２が、遺伝子治療治験のために最も頻繁に使用される血清型である。さらなるｒＡＡＶ血清型が開発され、ニューロン形質導入でより効率的である動物モデルにおいて試験された。
【０６５０】
ＨＤの動物モデルにおける研究は、例えば、調節された発現モデルにおける遺伝子停止後に表現型の逆転が実現可能であるということを示唆した。９４ポリグルタミンリピートＨＴＴタンパク質の発現の停止を可能にするマウスモデルでは、臨床症候群が逆転されただけでなく、細胞内凝集も解消された。さらに、ＨＴＴのサイレンシングが試験された動物モデルは、十分に許容され、潜在的な治療的利益を示す療法を用いて有望な結果を実証した。これらの知見は、ＨＴＴサイレンシングは、ＨＤの処置の潜在的な治療標的として役立ち得ることを示す。
【０６５１】
本明細書において記載される調節性ポリヌクレオチドおよびＡＡＶ粒子とともに使用され得るハンチントン舞踏病を研究するためのモデル系として、これらに限定されないが、細胞モデル（例えば、一次ニューロンおよび誘導多能性幹細胞）、無脊椎動物モデル（例えば、ショウジョウバエまたはエレガンス線虫）、マウスモデル（例えば、ＹＡＣ１２８マウスモデル、Ｒ６／２マウスモデル、ＢＡＣおよびノックインマウスモデル）、ラットモデル（例えば、ＢＡＣ）および大型哺乳動物モデル（例えば、ミニブタ、ブタ、ヒツジまたはサル）が挙げられる。
【０６５２】
処置を必要とする対象においてＨＴＴタンパク質と関連付けられるハンチントン舞踏病（ＨＤ）を処置する方法が、本明細書において開示される。方法は、任意選択で、対象に、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子を少なくとも含む組成物の治療有効量を投与する工程を含む。非限定的な例として、ｓｉＲＮＡ分子は、ＨＴＴ遺伝子発現をサイレンシングでき、ＨＴＴタンパク質産生を阻害でき、対象において１つまたは複数のＨＤの症状を低減でき、その結果、ＨＤが治療的に処置される。
【０６５３】
一部の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子およびその製剤は、ＨＤの処置のために対象（例えば、ＨＤを有すると診断された、またはＨＤの徴候を示す対象）においてＣＡＧ拡大増殖ＨＴＴの発現を阻害または防止するために使用され得る。一部の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子およびその製剤は、ＨＤの処置のためにＨＴＴ  ｍＲＮＡを標的とするために使用され得る。ＡＡＶ粒子は、二本鎖ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）構築物およびｓｉＲＮＡ構築物をコードする調節性ポリヌクレオチドを含み得る。
【０６５４】
ある特定の実施形態では、本開示の方法は、ＨＤおよび関連疾患および病気を患っている対象を処置するために使用され得る。ある特定の実施形態では、本開示の方法は、ＨＤまたは関連疾患および病気を発症する疑いのある対象を処置するために使用され得る。
【０６５５】
本開示において記載されるＡＡＶ粒子、医薬製剤およびウイルス粒子を使用する方法は、ＨＤおよび関連疾患および病気を予防、管理および／または処置するために使用され得る。
【０６５６】
一部の実施形態では、本明細書において記載されるＡＡＶ粒子は、それを必要とする対象においてＨＴＴの量を低減し、ひいては、本明細書において記載されるような治療的利益を提供するために使用され得る。
【０６５７】
ハンチントン舞踏病（ＨＤ）関連症状および障害の処置、予防、緩和および／または寛解のための、ｓｉＲＮＡ分子をコードする調節性ポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子の投与のための組成物、方法、プロセス、キットおよび／またはデバイスが、本明細書において記載される。
【０６５８】
本開示は、薬学的に許容される製剤中のＨＴＴ  ｍＲＮＡを標的とする調節性ポリヌクレオチド（例えば、ｓｉＲＮＡ）を含むＡＡＶ粒子を含むハンチントン舞踏病（ＨＤ）の処置において使用するための医薬組成物を提供する。
【０６５９】
一部の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、配列番号４１〜８２からなる群から選択されるポリヌクレオチド配列またはその少なくとも９５％の同一性を有するバリアントを含むＡＡＶウイルスゲノムを含む。一部の実施形態では、ポリヌクレオチド配列は、配列番号４１またはその少なくとも９５％の同一性を有するバリアントである。
【０６６０】
一部の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、これらに限定されないが、本明細書において列挙される血清型のいずれかなどの血清型を含み得る。一部の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、ＡＡＶ１血清型を含む。
【０６６１】
一部の実施形態では、医薬組成物中のＡＡＶ粒子の濃度は、５×１０１３ＶＧ／ｍＬ以下である。一部の実施形態では、ＡＡＶ粒子の濃度は、２．５×１０１３〜３×１０１３ＶＧ／ｍＬである。一部の実施形態では、ＡＡＶ粒子の濃度は、５×１０１１〜１×１０１３ＶＧ／ｍＬである。一部の実施形態では、ＡＡＶ粒子の濃度は、２．７×１０１３ＶＧ／ｍＬである。一部の実施形態では、ＡＡＶ粒子の濃度は、２．７×１０１２ＶＧ／ｍＬである。
【０６６２】
一部の実施形態では、薬学的に許容される製剤は、ａ）１種または複数の塩、ｂ）少なくとも１種の二糖およびｃ）緩衝剤を含む水溶液である。
一部の実施形態では、１種または複数の塩は、塩化ナトリウム、塩化カリウムおよび／またはリン酸カリウムまたはそれらの組合せを含み得る。
【０６６３】
一部の実施形態では、塩は、塩化ナトリウムを含み得る。製剤中の塩化ナトリウムの濃度は、８０〜２２０ｍＭであり得る。塩化ナトリウムの濃度は、８５〜１１０ｍＭであり得る。一部の実施形態では、塩化ナトリウムの濃度は、９５ｍＭである。一部の実施形態では、塩化ナトリウムの濃度は、１００ｍＭである。
【０６６４】
一部の実施形態では、塩は、塩化カリウムを含み得る。塩化カリウムの濃度は、１〜３ｍＭであり得る。一部の実施形態では、塩化カリウムの濃度は、１．５ｍＭである。
一部の実施形態では、塩は、リン酸カリウムを含み得る。リン酸カリウムの濃度は、１〜３ｍＭであり得る。一部の実施形態では、リン酸カリウムの濃度は、１．５ｍＭであり得る。
【０６６５】
一部の実施形態では、塩は、塩化ナトリウムおよび塩化カリウムを含み得る。
一部の実施形態では、塩は、塩化ナトリウムおよびリン酸カリウムを含み得る。
一部の実施形態では、塩は、塩化ナトリウム、塩化カリウムおよびリン酸カリウムを含み得る。
【０６６６】
一部の実施形態では、二糖は、スクロース、ラクツロース、ラクトース、マルトース、トレハロース、セルビオース、キトビオース、コージビオース、ニゲロース、イソマルトース、β，β−トレハロース、α，β−トレハロース、ソホロース、ラミナリビオース、ゲンチオビオース、ツラノース、マルツロース、パラチノース、ゲンチオビウロース、マンノビオース、メリビオース、メリビウロース、ルチノース、ルチヌロースおよびキシロビオースからなる群から選択される少なくとも１つを含み得る。
【０６６７】
一部の実施形態では、二糖は、スクロースを含む。スクロースの濃度は、製剤の総容積に対して５〜９重量％であり得る。一部の実施形態では、スクロースの濃度は、製剤の総容積に対して５重量％であり得る。一部の実施形態では、スクロースの濃度は、製剤の総容積に対して７重量％であり得る。
【０６６８】
一部の実施形態では、緩衝剤は、Ｔｒｉｓ  ＨＣｌ、Ｔｒｉｓ塩基、リン酸ナトリウム、リン酸カリウム、ヒスチジン、ホウ酸、クエン酸、グリシン、ＨＥＰＥＳ（４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジンエタンスルホン酸）およびＭＯＰＳ（３−（Ｎ−モルホリノ）プロパンスルホン酸）からなる群から選択される任意の１種を含み得る。
【０６６９】
一部の実施形態では、緩衝剤は、５℃で７．２〜８．２のｐＨを提供する。一部の実施形態では、緩衝剤は、１〜２０ｍＭの濃度である。一部の実施形態では、緩衝剤は、１０ｍＭの濃度である。
【０６７０】
一部の実施形態では、緩衝剤は、リン酸ナトリウムであり、ｐＨは、５℃で７．２〜７．６である。
一部の実施形態では、緩衝剤は、Ｔｒｉｓ塩基であり、塩酸を用いて５℃で７．８〜８．２のｐＨに調整される。
【０６７１】
一部の実施形態では、緩衝剤は、Ｔｒｉｓ塩基であり、塩酸を用いて５℃で７．３〜７．７のｐＨに調整される。
一部の実施形態では、薬学的に許容される製剤は、表面活性物質をさらに含む。  
【０６７２】
一部の実施形態では、表面活性物質は、ポロキサマー１８８（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ−６８）であり得る。ポロキサマー１８８の濃度は、製剤の総容積に対して０．０００１％〜０．０１重量％（ｍｇ／Ｌ）であり得る。一部の実施形態では、ポロキサマー１８８の濃度は、製剤の総容積に対して０．００１重量％である。
【０６７３】
一部の実施形態では、製剤は、４００〜５００ｍＯｓｍ／ｋｇの浸透圧を有する。一部の実施形態では、浸透圧は、４００〜４８０ｍＯｓｍ／ｋｇであり得る。
対象に本明細書において記載される医薬組成物の治療有効量を投与することによって、対象においてハンチントン舞踏病を処置する方法が、本明細書においてさらに提供される。一部の実施形態では、医薬組成物は、対象の被殻および視床への注入によって投与され得る。注入は、独立に、被殻および視床への両側性または片側性であり得る。医薬組成物は、磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）誘導対流増強送達法（ＣＥＤ）を使用して投与され得る。一部の実施形態では、用量容積は、漸増注入速度を使用して注入部位中に投与され得る。
【０６７４】
一部の実施形態では、被殻に投与される医薬組成物の容積は、１５００μＬ／半球以下であり得る。一部の実施形態では、被殻に投与される医薬組成物の容積は、３００〜１５００μＬ／半球であり得る。一部の実施形態では、被殻に投与される医薬組成物の容積は、９００μＬ／半球であり得る。一部の実施形態では、被殻に投与される用量は、８×１０１１〜４×１０１３ＶＧ／半球の間であり得る。
【０６７５】
一部の実施形態では、視床に投与される医薬組成物の容積は、２５００μＬ／半球以下であり得る。視床に投与される医薬組成物の容積は、１３００〜２５００μＬ／半球であり得る。一部の実施形態では、視床に投与される医薬組成物の容積は、１７００μＬ／半球であり得る。一部の実施形態では、視床に投与される用量は、３．５×１０１２〜６．８×１０１３ＶＧ／半球の間であり得る。
【０６７６】
一部の実施形態では、対象に投与される総用量は、８．６×１０１２〜２×１０１４ＶＧの間であり得る。
一部の実施形態では、本明細書において記載される方法は、対象の線条体においてハンチントン（ＨＴＴ）遺伝子の発現を阻害または抑制する。一部の実施形態では、ＨＴＴ遺伝子の発現は、被殻において阻害または抑制される。ＨＴＴ遺伝子の発現は、被殻の１つまたは複数の中型有棘ニューロンおよび／またはアストロサイトにおいて阻害または抑制され得る。一部の実施形態では、ＨＴＴ遺伝子の発現は、尾状核において阻害または抑制される。被殻におけるＨＴＴ遺伝子の発現は、少なくとも３０％低減され得る。一部の実施形態では、被殻におけるＨＴＴの発現は、４０〜７０％低減され得る。一部の実施形態では、被殻におけるＨＴＴの発現は、５０〜８０％低減され得る。尾状核におけるＨＴＴ遺伝子の発現は、少なくとも３０％低減され得る。一部の実施形態では、尾状核におけるＨＴＴの発現は、４０〜７０％低減され得る。一部の実施形態では、尾状核におけるＨＴＴの発現は、５０〜８０％低減され得る。
【０６７７】
一部の実施形態では、本明細書において記載される方法は、対象の視床におけるハンチントン（ＨＴＴ）遺伝子の発現を阻害または抑制する。ＨＴＴ遺伝子の発現は、視床の１つまたは複数の視床ニューロンおよび／またはアストロサイトにおいて阻害または抑制され得る。視床におけるＨＴＴ遺伝子の発現は、少なくとも３０％低減され得る。一部の実施形態では、視床におけるＨＴＴの発現は、４０〜８０％低減され得る。
【０６７８】
一部の実施形態では、本明細書において記載される方法は、対象の大脳皮質におけるハンチントン（ＨＴＴ）遺伝子の発現を阻害または抑制する。ＨＴＴ遺伝子の発現は、一次運動および体性感覚皮質において阻害または抑制され得る。ＨＴＴ遺伝子の発現は、一次運動および体性感覚皮質の錐体ニューロンにおいて阻害または抑制される。ＨＴＴ遺伝子の発現は、少なくとも２０％低減される。一部の実施形態では、ＨＴＴの発現は、３０〜７０％低減される。
【０６７９】
一部の実施形態では、本明細書において記載される方法は、対象の線条体および大脳皮質の両方におけるハンチントン（ＨＴＴ）遺伝子発現を阻害または抑制する。
ＨＴＴを標的とするｓｉＲＮＡ分子
一部の実施形態では、調節性ポリヌクレオチド、例えば、ＲＮＡまたはＤＮＡ分子は、神経変性性疾患、特に、ハンチントン舞踏病（ＨＤ）を処置するために使用され得る。非限定的な例として、ハンチントン舞踏病などのポリグルタミン拡大増殖疾患を引き起こすポリグルタミンリピートタンパク質をコードする核酸配列を標的とするように設計されたＲＮＡｉ分子が、その内容をその全体で本願明細書に援用する米国特許第９，１６９，４８３号明細書および同９，１８１，５４４号明細書ならびに国際公開第２０１５１７９５２５号パンフレットに記載されている。米国特許第９，１６９，４８３号明細書および同９，１８１，５４４号明細書ならびに国際公開第２０１５１７９５２５号パンフレットは各々、ＲＮＡの第１鎖（例えば、１５の連続ヌクレオチド）およびＲＮＡの第２鎖（例えば、第１鎖の少なくとも１２の連続ヌクレオチドと相補的である）を含む単離ＲＮＡ二重鎖を提供し、ＲＮＡ二重鎖は、約１５〜３０塩基対の長さである。ＲＮＡの第１鎖およびＲＮＡの第２鎖は、ＲＮＡループ（約４〜５０ヌクレオチド）によって作動可能に連結され、ヘアピン構造を形成することができ、これが、発現カセット中に挿入され得る。ループ部分の非限定的な例として、その内容をその全体で本願明細書に援用する米国特許第９，１６９，４８３号明細書の配列番号９〜１４が挙げられる。ＲＮＡ二重鎖を形成する、全配列または配列の一部のいずれかのＲＮＡの鎖の非限定的な例として、その内容をその全体で本願明細書に援用する米国特許第９，１６９，４８３号明細書の配列番号１〜８ならびに米国特許第９，１８１，５４４号明細書の配列番号１〜１１、３３〜５９、２０８〜２１０、２１３〜２１５および２１８〜２２１が挙げられる。ＲＮＡｉ分子の非限定的な例として、各々の内容をその全体で本願明細書に援用する、米国特許第９，１６９，４８３号明細書の配列番号１〜８、米国特許第９，１８１，５４４号明細書の配列番号１〜１１、３３〜５９、２０８〜２１０、２１３〜２１５および２１８〜２２１ならびに国際公開第２０１５１７９５２５号パンフレットの配列番号１、６、７および３５〜３８が挙げられる。
【０６８０】
一部の実施形態では、ＨＴＴ  ｍＲＮＡを標的とし、ＨＴＴ遺伝子発現および／またはＨＴＴタンパク質産生に干渉する低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）二重鎖（およびそれらをコードする調節性ポリヌクレオチド）が、本発明におけるＡＡＶ粒子およびその製剤中に含まれる。
【０６８１】
ｓｉＲＮＡを設計するためのいくつかのガイドラインが、当技術分野で提案されている。これらのガイドラインは、全般的に、１９ヌクレオチドの二重鎖領域、対称性２〜３ヌクレオチドの３’オーバーハング、サイレンシングされるべき遺伝子中の５’−リン酸および３’−ヒドロキシル基標的化領域を作製することを推奨する。ｓｉＲＮＡ配列優先度を支配し得る他のルールとして、これらに限定されないが、（ｉ）アンチセンス鎖の５’末端でのＡ／Ｕ；（ｉｉ）センス鎖の５’末端でのＧ／Ｃ；（ｉｉｉ）少なくとも５つのアンチセンス鎖の５’末端１／３中のＡ／Ｕ残基および（ｉｖ）９より多いヌクレオチドの長さの任意のＧＣストレッチの不在が挙げられる。このような考慮と一致して、標的遺伝子の特定の配列と一緒に、哺乳動物標的遺伝子発現を抑制するために必須である高度に有効なｓｉＲＮＡ分子は、容易に設計され得る。
【０６８２】
本開示によれば、ＨＴＴ遺伝子を標的とするｓｉＲＮＡ分子（例えば、ｓｉＲＮＡ二重鎖またはコード化ｄｓＲＮＡ）が設計される。このようなｓｉＲＮＡ分子は、ＨＴＴ遺伝子発現およびタンパク質産生を特異的に抑制できる。一部の態様では、ｓｉＲＮＡ分子は、細胞においてＨＴＴ遺伝子バリアント、すなわち、ＨＤ疾患を有する患者において同定される突然変異されたＨＴＴ転写物を選択的に「ノックアウト」するように設計され、使用される。一部の態様では、ｓｉＲＮＡ分子は、細胞においてＨＴＴ遺伝子バリアントを選択的に「ノックダウン」するように設計され、使用される。他の態様では、ｓｉＲＮＡ分子は、野生型および突然変異ＨＴＴ遺伝子の両方を阻害または抑制できる。
【０６８３】
一部の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子は、センス鎖および相補的アンチセンス鎖を含み、両鎖は一緒にハイブリダイズされて、二本鎖構造を形成する。アンチセンス鎖は、ＨＴＴ  ｍＲＮＡ配列に対して十分な相補性を有し、標的特異的ＲＮＡｉに向かわせる、すなわち、ｓｉＲＮＡ分子は、ＲＮＡｉ機構またはプロセスによって標的ｍＲＮＡの破壊を引き起こすのに十分な配列を有する。
【０６８４】
一部の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子は、センス鎖および相補的アンチセンス鎖を含み、両鎖は一緒にハイブリダイズして二本鎖構造を形成し、ＨＴＴ  ｍＲＮＡとのハイブリダイゼーションの開始部位は、ＨＴＴ  ｍＲＮＡ配列上のヌクレオチド１００から７０００の間である。非限定的な例として、開始部位は、ＨＴＴ  ｍＲＮＡ配列上のヌクレオチド１００〜１５０、１５０〜２００、２００〜２５０、２５０〜３００、３００〜３５０、３５０〜４００、４００〜４５０、４５０〜５００、５００〜５５０、５５０〜６００、６００〜６５０、６５０〜７００、７００〜７０、７５０〜８００、８００〜８５０、８５０〜９００、９００〜９５０、９５０〜１０００、１０００〜１０５０、１０５０〜１１００、１１００〜１１５０、１１５０〜１２００、１２００〜１２５０、１２５０〜１３００、１３００〜１３５０、１３５０〜１４００、１４００〜１４５０、１４５０〜１５００、１５００〜１５５０、１５５０〜１６００、１６００〜１６５０、１６５０〜１７００、１７００〜１７５０、１７５０〜１８００、１８００〜１８５０、１８５０〜１９００、１９００〜１９５０、１９５０〜２０００、２０００〜２０５０、２０５０〜２１００、２１００〜２１５０、２１５０〜２２００、２２００〜２２５０、２２５０〜２３００、２３００〜２３５０、２３５０〜２４００、２４００〜２４５０、２４５０〜２５００、２５００〜２５５０、２５５０〜２６００、２６００〜２６５０、２６５０〜２７００、２７００〜２７５０、２７５０〜２８００、２８００〜２８５０、２８５０〜２９００、２９００〜２９５０、２９５０〜３０００、３０００〜３０５０、３０５０〜３１００、３１００〜３１５０、３１５０〜３２００、３２００〜３２５０、３２５０〜３３００、３３００〜３３５０、３３５０〜３４００、３４００〜３４５０、３４５０〜３５００、３５００〜３５５０、３５５０〜３６００、３６００〜３６５０、３６５０〜３７００、３７００〜３７５０、３７５０〜３８００、３８００〜３８５０、３８５０〜３９００、３９００〜３９５０、３９５０〜４０００、４０００〜４０５０、４０５０〜４１００、４１００〜４１５０、４１５０〜４２００、４２００〜４２５０、４２５０〜４３００、４３００〜４３５０、４３５０〜４４００、４４００〜４４５０、４４５０〜４５００、４５００〜４５５０、４５５０〜４６００、４６００〜４６５０、４６５０〜４７００、４７００〜４７５０、４７５０〜４８００、４８００〜４８５０、４８５０〜４９００、４９００〜４９５０、４９５０〜５０００、５０００〜５０５０、５０５０〜５１００、５１００〜５１５０、５１５０〜５２００、５２００〜５２５０、５２５０〜５３００、５３００〜５３５０、５３５０〜５４００、５４００〜５４５０、５４５０〜５５００、５５００〜５５５０、５５５０〜５６００、５６００〜５６５０、５６５０〜５７００、５７００〜５７５０、５７５０〜５８００、５８００〜５８５０、５８５０〜５９００、５９００〜５９５０、５９５０〜６０００、６０００〜６０５０、６０５０〜６１００、６１００〜６１５０、６１５０〜６２００、６２００〜６２５０、６２５０〜６３００、６３００〜６３５０、６３５０〜６４００、６４００〜６４５０、６４５０〜６５００、６５００〜６５５０、６５５０〜６６００、６６００〜６６５０、６６５０〜６７００、６７００〜６７５０、６７５０〜６８００、６８００〜６８５０、６８５０〜６９００、６９００〜６９５０、６９５０〜７０００、７０００〜７０５０、７０５０〜７１００、７１００〜７１５０、７１５０〜７２００、７２００〜７２５０、７２５０〜７３００、７３００〜７３５０、７３５０〜７４００、７４００〜７４５０、７４５０〜７５００、７５００〜７５５０、７５５０〜７６００、７６００〜７６５０、７６５０〜７７００、７７００〜７７５０、７７５０〜７８００、７８００〜７８５０、７８５０〜７９００、７９００〜７９５０、７９５０〜８０００、８０００〜８０５０、８０５０〜８１００、８１００〜８１５０、８１５０〜８２００、８２００〜８２５０、８２５０〜８３００、８３００〜８３５０、８３５０〜８４００、８４００〜８４５０、８４５０〜８５００、８５００〜８５５０、８５５０〜８６００、８６００〜８６５０、８６５０〜８７００、８７００〜８７５０、８７５０〜８８００、８８００〜８８５０、８８５０〜８９００、８９００〜８９５０、８９５０〜９０００、９０００〜９０５０、９０５０〜９１００、９１００〜９１５０、９１５０〜９２００、９２００〜９２５０、９２５０〜９３００、９３００〜９３５０、９３５０〜９４００、９４００〜９４５０、９４５０〜９５００、９５００〜９５５０、９５５０〜９６００、９６００〜９６５０、９６５０〜９７００、９７００〜９７５０、９７５０〜９８００、９８００〜９８５０、９８５０〜９９００、９９００〜９９５０、９９５０〜１００００、１００００〜１００５０、１００５０〜１０１００、１０１００〜１０１５０、１０１５０〜１０２００、１０２００〜１０２５０、１０２５０〜１０３００、１０３００〜１０３５０、１０３５０〜１０４００、１０４００〜１０４５０、１０４５０〜１０５００、１０５００〜１０５５０、１０５５０〜１０６００、１０６００〜１０６５０、１０６５０〜１０７００、１０７００〜１０７５０、１０７５０〜１０８００、１０８００〜１０８５０、１０８５０〜１０９００、１０９００〜１０９５０、１０９５０〜１１０００、１１０５０〜１１１００、１１１００〜１１１５０、１１１５０〜１１２００、１１２００〜１１２５０、１１２５０〜１１３００、１１３００〜１１３５０、１１３５０〜１１４００、１１４００〜１１４５０、１１４５０〜１１５００、１１５００〜１１５５０、１１５５０〜１１６００、１１６００〜１１６５０、１１６５０〜１１７００、１１７００〜１１７５０、１１７５０〜１１８００、１１８００〜１１８５０、１１８５０〜１１９００、１１９００〜１１９５０、１１９５０〜１２０００、１２０００〜１２０５０、１２０５０〜１２１００、１２１００〜１２１５０、１２１５０〜１２２００、１２２００〜１２２５０、１２２５０〜１２３００、１２３００〜１２３５０、１２３５０〜１２４００、１２４００〜１２４５０、１２４５０〜１２５００、１２５００〜１２５５０、１２５５０〜１２６００、１２６００〜１２６５０、１２６５０〜１２７００、１２７００〜１２７５０、１２７５０〜１２８００、１２８００〜１２８５０、１２８５０〜１２９００、１２９００〜１２９５０、１２９５０〜１３０００、１３０５０〜１３１００、１３１００〜１３１５０、１３１５０〜１３２００、１３２００〜１３２５０、１３２５０〜１３３００、１３３００〜１３３５０、１３３５０〜１３４００、１３４００〜１３４５０、および１３４５０〜１３５００の間であり得る。さらに別の非限定的な例として、開始部位は、ＨＴＴ  ｍＲＮＡ配列上のヌクレオチド３１５、３１６、３１７、３１８、３１９、３２０、３２１、３２２、３２３、３２４、３２５、３２６、３２７、３２８、３２９、３３０、３３１、３３２、３３３、３３４、３３５、３３６、３３７、３３８、３３９、３４０、３４１、３４２、３４３、３４４、３４５、３４６、３４７、３４８、３４９、３５０、５９５、５９６、５９７、５９８、５９９、６００、６０１、６０２、６０３、６０４、６０５、６０６、６０７、６０８、６０９、６１０、６１１、６１２、６１３、６１４、６１５、６１６、６１７、６１８、６１９、６２０、６２１、６２２、６２３、６２４、６２５、７１５、７１６、７１７、７１８、７１９、７２０、７２１、７２２、７２３、７２４、７２５、８７５、８７６、８７７、８７８、８７９、８８０、８８１、８８２、８８３、８８４、８８５、８８６、８８７、８８８、８８９、８９０、８９１、８９２、８９３、８９４、８９５、８９６、８９７、８９８、８９９、９００、１３７５、１３７６、１３７７、１３７８、１３７９、１３８０、１３８１、１３８２、１３８３、１３８４、１３８５、１３８６、１３８７、１３８８、１３８９、１３９０、１３９１、１３９２、１３９３、１３９４、１３９５、１３９６、１３９７、１３９８、１３９９、１４００、１４０１、１４０２、１４０３、１４０４、１４０５、１４０６、１４０７、１４０８、１４０９、１４１０、１４１１、１４１２、１４１３、１４１４、１４１５、１４１６、１４１７、１４１８、１４１９、１４２０、１４２１、１４２２、１４２３、１４２４、１４２５、１４２６、１４２７、１４２８、１４２９、１４３０、１４３１、１４３２、１４３３、１４３４、１４３５、１４３６、１４３７、１４３８、１４３９、１４４０、１４４１、１４４２、１４４３、１４４４、１４４５、１４４６、１４４７、１４４８、１４４９、１４５０、１６６０、１６６１、１６６２、１６６３、１６６４、１６６５、１６６６、１６６７、１６６８、１６６９、１６７０、１６７１、１６７２、１６７３、１６７４、１６７５、２０５０、２０５１、２０５２、２０５３、２０５４、２０５５、２０５６、２０５７、２０５８、２０５９、２０６０、２０６１、２０６２、２０６３、２０６４、２０６５、２０６６、２０６７、２０６８、２０６９、２０７０、２０７１、２０７２、２０７３、２０７４、２０７５、２０７６、２０７７、２０７８、２０７９、２０８０、２０８１、２０８２、２０８３、２０８４、２０８５、２０８６、２０８７、２０８８、２０８９、２０９０、２０９１、２０９２、２０９３、２０９４、２０９５、２０９６、２０９７、２０９８、２���９９、２１００、２５８０、２５８１、２５８２、２５８３、２５８４、２５８５、２５８６、２５８７、２５８８、２５８９、２５９０、２５９１、２５９２、２５９３、２５９４、２５９５、２５９６、２５９７、２５９８、２５９９、２６００、２６０１、２６０２、２６０３、２６０４、２６０５、４５２５、４５２６、４５２７、４５２８、４５２９、４５３０、４５３１、４５３２、４５３３、４５３４、４５３５、４５３６、４５３７、４５３８、４５３９、４５４０、４５４１、４５４２、４５４３、４５４４、４５４５、４５４６、４５４７、４５４８、４５４９、４５５０、４５７５、４５７６、４５７７、４５７８、４５７９、４５８０、４５８１、４５８２、４５８３、４５８４、４５８５、４５８６、４５８７、４５８８、４５８９、４５９０、４５９１、４５９２、４５９３、４５９４、４５９５、４５９６、４５９７、４５９８、４５９９、４６００、４８５０、４８５１、４８５２、４８５３、４８５４、４８５５、４８５６、４８５７、４８５８、４８５９、４８６０、４８６１、４８６２、４８６３、４８６４、４８６５、４８６６、４８６７、４８６８、４８６９、４８７０、４８７１、４８７２、４８７３、４８７４、４８７５、４８７６、４８７７、４８７８、４８７９、４８８０、４８８１、４８８２、４８８３、４８８４、４８８５、４８８６、４８８７、４８８８、４８８９、４８９０、４８９１、４８９２、４８９３、４８９４、４８９５、４８９６、４８９７、４８９８、４８９９、４９００、５４６０、５４６１、５４６２、５４６３、５４６４、５４６５、５４６６、５４６７、５４６８、５４６９、５４７０、５４７１、５４７２、５４７３、５４７４、５４７５、５４７６、５４７７、５４７８、５４７９、５４８０、６１７５、６１７６、６１７７、６１７８、６１７９、６１８０、６１８１、６１８２、６１８３、６１８４、６１８５、６１８６、６１８７、６１８８、６１８９、６１９０、６１９１、６１９２、６１９３、６１９４、６１９５、６１９６、６１９７、６１９８、６１９９、６２００、６３１５、６３１６、６３１７、６３１８、６３１９、６３２０、６３２１、６３２２、６３２３、６３２４、６３２５、６３２６、６３２７、６３２８、６３２９、６３３０、６３３１、６３３２、６３３３、６３３４、６３３５、６３３６、６３３７、６３３８、６３３９、６３４０、６３４１、
６３４２、６３４３、６３４４、６３４５、６６００、６６０１、６６０２、６６０３、６６０４、６６０５、６６０６、６６０７、６６０８、６６０９、６６１０、６６１１、６６１２、６６１３、６６１４、６６１５、６７２５、６７２６、６７２７、６７２８、６７２９、６７３０、６７３１、６７３２、６７３３、６７３４、６７３５、６７３６、６７３７、６７３８、６７３９、６７４０、６７４１、６７４２、６７４３、６７４４、６７４５、６７４６、６７４７、６７４８、６７４９、６７５０、６７５１、６７５２、６７５３、６７５４、６７５５、６７５６、６７５７、６７５８、６７５９、６７６０、６７６１、６７６２、６７６３、６７６４、６７６５、６７６６、６７６７、６７６８、６７６９、６７７０、６７７１、６７７２、６７７３、６７７４、６７７５、７６５５、７６５６、７６５７、７６５８、７６５９、７６６０、７６６１、７６６２、７６６３、７６６４、７６６５、７６６６、７６６７、７６６８、７６６９、７６７０、７６７１、７６７２、８５１０、８５１１、８５１２、８５１３、８５１４、８５１５、８５１６、８７１５、８７１６、８７１７、８７１８、８７１９、８７２０、８７２１、８７２２、８７２３、８７２４、８７２５、８７２６、８７２７、８７２８、８７２９、８７３０、８７３１、８７３２、８７３３、８７３４、８７３５、８７３６、８７３７、８７３８、８７３９、８７４０、８７４１、８７４２、８７４３、８７４４、８７４５、９２５０、９２５１、９２５２、９２５３、９２５４、９２５５、９２５６、９２５７、９２５８、９２５９、９２６０、９２６１、９２６２、９２６３、９２６４、９２６５、９２６６、９２６７、９２６８、９２６９、９２７０、９４８０、９４８１、９４８２、９４８３、９４８４、９４８５、９４８６、９４８７、９４８８、９４８９、９４９０、９４９１、９４９２、９４９３、９４９４、９４９５、９４９６、９４９７、９４９８、９４９９、９５００、９５７５、９５７６、９５７７、９５７８、９５７９、９５８０、９５８１、９５８２、９５８３、９５８４、９５８５、９５８６、９５８７、９５８８、９５８９、９５９０、１０５２５、１０５２６、１０５２７、１０５２８、１０５２９、１０５３０、１０５３１、１０５３２、１０５３３、１０５３４、１０５３５、１０５３６、１０５３７、１０５３８、１０５３９、１０５４０、１１５４５、１１５４６、１１５４７、１１５４８、１１５４９、１１５５０、１１５５１、１１５５２、１１５５３、１１５５４、１１５５５、１１５５６、１１５５７、１１５５８、１１５５９、１１５６０、１１８７５、１１８７６、１１８７７、１１８７８、１１８７９、１１８８０、１１８８１、１１８８２、１１８８３、１１８８４、１１８８５、１１８８６、１１８８７、１１８８８、１１８８９、１１８９０、１１８９１、１１８９２、１１８９３、１１８９４、１１８９５、１１８９６、１１８９７、１１８９８、１１８９９、１１９００、１１９１５、１１９１６、１１９１７、１１９１８、１１９１９、１１９２０、１１９２１、１１９２２、１１９２３、１１９２４、１１９２５、１１９２６、１１９２７、１１９２８、１１９２９、１１９３０、１１９３１、１１９３２、１１９３３、１１９３４、１１９３５、１１９３６、１１９３７、１１９３８、１１９３９、１１９４０、１３３７５、１３３７６、１３３７７、１３３７８、１３３７９、１３３８０、１３３８１、１３３８２、１３３８３、１３３８４、１３３８５、１３３８６、１３３８７、１３３８８、１３３８９および１３３９０であり得る。
【０６８５】
一部の実施形態では、アンチセンス鎖および標的ｍＲＮＡ配列は、１００％の相補性を有する。アンチセンス鎖は、標的ｍＲＮＡ配列の任意の部分と相補的であり得る。
他の実施形態では、アンチセンス鎖および標的ｍＲＮＡ配列は、少なくとも１つのミスマッチを含む。非限定的な例として、アンチセンス鎖および標的ｍＲＮＡ配列は、少なくとも３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％もしくは９９％または少なくとも２０〜３０％、２０〜４０％、２０〜５０％、２０〜６０％、２０〜７０％、２０〜８０％、２０〜９０％、２０〜９５％、２０〜９９％、３０〜４０％、３０〜５０％、３０〜６０％、３０〜７０％、３０〜８０％、３０〜９０％、３０〜９５％、３０〜９９％、４０〜５０％、４０〜６０％、４０〜７０％、４０〜８０％、４０〜９０％、４０〜９５％、４０〜９９％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜９０％、５０〜９５％、５０〜９９％、６０〜７０％、６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９５％、６０〜９９％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９５％、７０〜９９％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜９９％、９０〜９５％、９０〜９９％、もしくは９５〜９９％の相補性を有する。
【０６８６】
一部の実施形態では、ｓｉＲＮＡまたはｄｓＲＮＡは、互いに相補的である少なくとも２つの配列を含む。
本開示によれば、コード化ｓｉＲＮＡ分子は、約１０〜５０またはそれより多いヌクレオチドの長さを有する、すなわち、各鎖は１０〜５０のヌクレオチド（またはヌクレオチド類似体）を含む。好ましくは、ｓｉＲＮＡ分子は、各鎖において約１５〜３０、例えば、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９または３０ヌクレオチドの長さを有し、鎖の一方は、標的領域に対して十分に相補性である。一部の実施形態では、ｓｉＲＮＡ分子の各鎖は、約１９〜２５、１９〜２４または１９〜２１ヌクレオチドの長さを有する。一部の実施形態では、ｓｉＲＮＡ分子の少なくとも一方の鎖は、１９ヌクレオチドの長さを有する。一部の実施形態では、ｓｉＲＮＡ分子の少なくとも一方の鎖は、２０ヌクレオチドの長さを有する。一部の実施形態では、ｓｉＲＮＡ分子の少なくとも一方の鎖は、２１ヌクレオチドの長さを有する。一部の実施形態では、ｓｉＲＮＡ分子の少なくとも一方の鎖は、２２ヌクレオチドの長さを有する。一部の実施形態では、ｓｉＲＮＡ分子の少なくとも一方の鎖は、２３ヌクレオチドの長さを有する。一部の実施形態では、ｓｉＲＮＡ分子の少なくとも一方の鎖は、２４ヌクレオチドの長さを有する。一部の実施形態では、ｓｉＲＮＡ分子の少なくとも一方の鎖は、２５ヌクレオチドの長さを有する。
【０６８７】
一部の実施形態では、本開示のコード化ｓｉＲＮＡ分子は、約１９ヌクレオチド〜約２５ヌクレオチドおよび３’末端に２つのオーバーハングヌクレオチドを含む合成ＲＮＡ二本鎖であり得る。一部の態様では、ｓｉＲＮＡ分子は、未修飾ＲＮＡ分子であり得る。他の態様では、ｓｉＲＮＡ分子は、少なくとも１つの修飾ヌクレオチド、例えば、塩基、糖または骨格修飾を含有し得る。
【０６８８】
一部の実施形態では、本開示のコード化ｓｉＲＮＡ分子は、ヌクレオチド配列、例えば、これらに限定されないが、アンチセンス（ガイド）配列またはその断片またはバリアントを含み得る。非限定的な例として、本開示のｓｉＲＮＡ分子において使用されるアンチセンス配列は、表１中のヌクレオチド配列の少なくとも３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％もしくは９９％または少なくとも２０〜３０％、２０〜４０％、２０〜５０％、２０〜６０％、２０〜７０％、２０〜８０％、２０〜９０％、２０〜９５％、２０〜９９％、３０〜４０％、３０〜５０％、３０〜６０％、３０〜７０％、３０〜８０％、３０〜９０％、３０〜９５％、３０〜９９％、４０〜５０％、４０〜６０％、４０〜７０％、４０〜８０％、４０〜９０％、４０〜９５％、４０〜９９％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜９０％、５０〜９５％、５０〜９９％、６０〜７０％、６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９５％、６０〜９９％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９５％、７０〜９９％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜９９％、９０〜９５％、９０〜９９％もしくは９５〜９９％であり、その内容をその全体で本願明細書に援用するＷＯ２０１７２０１２５８の配列番号３〜１０２を含む。別の非限定的な例として、本開示のｓｉＲＮＡ分子において使用されるアンチセンス配列は、その内容をその全体で本願明細書に援用するＷＯ２０１７２０１２５８の、配列番号３〜１０２を含む、表１中のヌクレオチド配列の少なくとも３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１または２１よりも多い連続ヌクレオチドを含む。さらに別の非限定的な例として、本開示のｓｉＲＮＡ分子において使用されるアンチセンス配列は、その内容をその全体で本願明細書に援用するＷＯ２０１７２０１２５８の配列番号３〜１０２を含む表１中の配列のヌクレオチド１〜２２、１〜２２、１〜２１、１〜２０、１〜１９、１〜１８、１〜１７、１〜１６、１〜１５、１〜１４、１〜１３、１〜１２、１〜１１、１〜１０、１〜９、１〜８、２〜２２、２〜２１、２〜２０、２〜１９、２〜１８、２〜１７、２〜１６、２〜１５、２〜１４、２〜１３、２〜１２、２〜１１、２〜１０、２〜９、２〜８、３〜２２、３〜２１、３〜２０、３〜１９、３〜１８、３〜１７、３〜１６、３〜１５、３〜１４、３〜１３、３〜１２、３〜１１、３〜１０、３〜９、３〜８、４〜２２、４〜２１、４〜２０、４〜１９、４〜１８、４〜１７、４〜１６、４〜１５、４〜１４、４〜１３、４〜１２、４〜１１、４〜１０、４〜９、４〜８、５〜２２、５〜２１、５〜２０、５〜１９、５〜１８、５〜１７、５〜１６、５〜１５、５〜１４、５〜１３、５〜１２、５〜１１、５〜１０、５〜９、５〜８、６〜２２、６〜２１、６〜２０、６〜１９、６〜１８、６〜１７、６〜１６、６〜１５、６〜１４、６〜１３、６〜１２、６〜１１、６〜１０、７〜２２、７〜２１、７〜２０、７〜１９、７〜１８、７〜１７、７〜１６、７〜１５、７〜１４、７〜１３、７〜１２、８〜２２、８〜２１、８〜２０、８〜１９、８〜１８、８〜１７、８〜１６、８〜１５、８〜１４、８〜１３、８〜１２、９〜２２、９〜２１、９〜２０、９〜１９、９〜１８、９〜１７、９〜１６、９〜１５、９〜１４、１０〜２２、１０〜２１、１０〜２０、１０〜１９、１０〜１８、１０〜１７、１０〜１６、１０〜１５、１０〜１４、１１〜２２、１１〜２１、１１〜２０、１１〜１９、１１〜１８、１１〜１７、１１〜１６、１１〜１５、１１〜１４、１２〜２２、１２〜２１、１２〜２０、１２〜１９、１２〜１８、１２〜１７、１２〜１６、１３〜２２、１３〜２１、１３〜２０、１３〜１９、１３〜１８、１３〜１７、１３〜１６、１４〜２２、１４〜２１、１４〜２０、１４〜１９、１４〜１８、１４〜１７、１５〜２２、１５〜２１、１５〜２０、１５〜１９、１５〜１８、１６〜２２、１６〜２１、１６〜２０、１７〜２２、１７〜２１、または１８〜２２を含む。
【０６８９】
一部の実施形態では、本開示のコード化ｓｉＲＮＡ分子は、その内容をその全体で本願明細書に援用するＷＯ２０１７２０１２５８の配列番号１０３〜２４９を含む表２中のヌクレオチド配列、例えば、これらに限定されないが、センス（パッセンジャー）配列またはその断片またはバリアントを含み得る。非限定的な例として、本開示のｓｉＲＮＡ分子において使用されるセンス配列は、その内容をその全体で本願明細書に援用するＷＯ２０１７２０１２５８の配列番号１０３〜２４９を含む表２中のヌクレオチド配列の少なくとも３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％もしくは９９％または少なくとも２０〜３０％、２０〜４０％、２０〜５０％、２０〜６０％、２０〜７０％、２０〜８０％、２０〜９０％、２０〜９５％、２０〜９９％、３０〜４０％、３０〜５０％、３０〜６０％、３０〜７０％、３０〜８０％、３０〜９０％、３０〜９５％、３０〜９９％、４０〜５０％、４０〜６０％、４０〜７０％、４０〜８０％、４０〜９０％、４０〜９５％、４０〜９９％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜９０％、５０〜９５％、５０〜９９％、６０〜７０％、６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９５％、６０〜９９％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９５％、７０〜９９％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜９９％、９０〜９５％、９０〜９９％もしくは９５〜９９％である。別の非限定的な例として、本開示のｓｉＲＮＡ分子において使用されるセンス配列は、その内容をその全体で本願明細書に援用するＷＯ２０１７２０１２５８の配列番号１０３〜２４９を含む表２中のヌクレオチド配列の少なくとも３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１または２１よりも多い連続ヌクレオチドを含む。さらに別の非限定的な例として、本開示のｓｉＲＮＡ分子において使用されるセンス配列は、その内容をその全体で本願明細書に援用するＷＯ２０１７２０１２５８の配列番号１０３〜２４９を含む表２中の配列のヌクレオチド１〜２２、１〜２２、１〜２１、１〜２０、１〜１９、１〜１８、１〜１７、１〜１６、１〜１５、１〜１４、１〜１３、１〜１２、１〜１１、１〜１０、１〜９、１〜８、２〜２２、２〜２１、２〜２０、２〜１９、２〜１８、２〜１７、２〜１６、２〜１５、２〜１４、２〜１３、２〜１２、２〜１１、２〜１０、２〜９、２〜８、３〜２２、３〜２１、３〜２０、３〜１９、３〜１８、３〜１７、３〜１６、３〜１５、３〜１４、３〜１３、３〜１２、３〜１１、３〜１０、３〜９、３〜８、４〜２２、４〜２１、４〜２０、４〜１９、４〜１８、４〜１７、４〜１６、４〜１５、４〜１４、４〜１３、４〜１２、４〜１１、４〜１０、４〜９、４〜８、５〜２２、５〜２１、５〜２０、５〜１９、５〜１８、５〜１７、５〜１６、５〜１５、５〜１４、５〜１３、５〜１２、５〜１１、５〜１０、５〜９、５〜８、６〜２２、６〜２１、６〜２０、６〜１９、６〜１８、６〜１７、６〜１６、６〜１５、６〜１４、６〜１３、６〜１２、６〜１１、６〜１０、７〜２２、７〜２１、７〜２０、７〜１９、７〜１８、７〜１７、７〜１６、７〜１５、７〜１４、７〜１３、７〜１２、８〜２２、８〜２１、８〜２０、８〜１９、８〜１８、８〜１７、８〜１６、８〜１５、８〜１４、８〜１３、８〜１２、９〜２２、９〜２１、９〜２０、９〜１９、９〜１８、９〜１７、９〜１６、９〜１５、９〜１４、１０〜２２、１０〜２１、１０〜２０、１０〜１９、１０〜１８、１０〜１７、１０〜１６、１０〜１５、１０〜１４、１１〜２２、１１〜２１、１１〜２０、１１〜１９、１１〜１８、１１〜１７、１１〜１６、１１〜１５、１１〜１４、１２〜２２、１２〜２１、１２〜２０、１２〜１９、１２〜１８、１２〜１７、１２〜１６、１３〜２２、１３〜２１、１３〜２０、１３〜１９、１３〜１８、１３〜１７、１３〜１６、１４〜２２、１４〜２１、１４〜２０、１４〜１９、１４〜１８、１４〜１７、１５〜２２、１５〜２１、１５〜２０、１５〜１９、１５〜１８、１６〜２２、１６〜２１、１６〜２０、１７〜２２、１７〜２１、または１８〜２２を含む。
【０６９０】
一部の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子は、その内容をその全体で本願明細書に援用するＷＯ２０１７２０１２５８の表３〜５に記載されるようなセンスおよびアンチセンスｓｉＲＮＡ二重鎖を含み得る。非限定的な例として、これらのｓｉＲＮＡ二重鎖は、内因性ＨＴＴ遺伝子発現に対するｉｎ  ｖｉｔｒｏ阻害活性について試験され得る。センスおよびアンチセンス配列の開始部位は、ＮＣＢＩ由来のＮＭ＿００２１１１．７として公知である  ＨＴＴ遺伝子配列に対して比較される。
【０６９１】
本開示のコード化ｓｉＲＮＡ二重鎖は、一緒にハイブリダイズされて二本鎖構造を形成するアンチセンス鎖およびセンス鎖を含有し、アンチセンス鎖は、標的とされるＨＴＴ遺伝子の核酸配列と相補的であり、センス鎖は、標的とされるＨＴＴ遺伝子の核酸配列に対して相同である。一部の態様では、アンチセンス鎖の５’末端は、５’リン酸基を有し、センス鎖の３’末端は、３’ヒドロキシル基を含有する。他の態様では、各鎖の３’末端にオーバーハングがない、１または２ヌクレオチドのオーバーハングがある。
【０６９２】
一部の実施形態では、製剤化されたＡＡＶ粒子は、ＨＴＴ  ｍＲＮＡを抑制（または分解）するｓｉＲＮＡ二重鎖またはｄｓＲＮＡをコードする。したがって、ｓｉＲＮＡ二重鎖またはｄｓＲＮＡは、細胞、例えば、ニューロンにおいてＨＴＴ遺伝子発現を実質的に阻害するために使用され得る。一部の態様では、ＨＴＴ遺伝子発現の阻害とは、少なくとも約２０％の、好ましくは、少なくとも約３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％または少なくとも２０〜３０％、２０〜４０％、２０〜５０％、２０〜６０％、２０〜７０％、２０〜８０％、２０〜９０％、２０〜９５％、２０〜１００％、３０〜４０％、３０〜５０％、３０〜６０％、３０〜７０％、３０〜８０％、３０〜９０％、３０〜９５％、３０〜１００％、４０〜５０％、４０〜６０％、４０〜７０％、４０〜８０％、４０〜９０％、４０〜９５％、４０〜１００％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜９０％、５０〜９５％、５０〜１００％、６０〜７０％、６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９５％、６０〜１００％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９５％、７０〜１００％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜１００％、９０〜９５％、９０〜１００％もしくは９５〜１００％の阻害を指す。したがって、標的とされる遺伝子のタンパク質産物は、少なくとも約２０％、好ましくは、少なくとも約３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％または少なくとも２０〜３０％、２０〜４０％、２０〜５０％、２０〜６０％、２０〜７０％、２０〜８０％、２０〜９０％、２０〜９５％、２０〜１００％、３０〜４０％、３０〜５０％、３０〜６０％、３０〜７０％、３０〜８０％、３０〜９０％、３０〜９５％、３０〜１００％、４０〜５０％、４０〜６０％、４０〜７０％、４０〜８０％、４０〜９０％、４０〜９５％、４０〜１００％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜９０％、５０〜９５％、５０〜１００％、６０〜７０％、６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９５％、６０〜１００％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９５％、７０〜１００％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜１００％、９０〜９５％、９０〜１００％もしくは９５〜１００％阻害され得る。
【０６９３】
一部の実施形態では、ｓｉＲＮＡ分子は、ガイド鎖に位置するＨＴＴに対するｍｉＲＮＡシードマッチを含む。別の実施形態では、ｓｉＲＮＡ分子は、パッセンジャー鎖に位置するＨＴＴに対するｍｉＲＮＡシードマッチを含む。さらに別の実施形態では、ＨＴＴ遺伝子を標的とするｓｉＲＮＡ二重鎖またはコード化ｄｓＲＮＡは、ガイドまたはパッセンジャー鎖に位置するＨＴＴに対するシードマッチを含まない。
【０６９４】
一部の実施形態では、ＨＴＴ遺伝子を標的とするｓｉＲＮＡ二重鎖またはコード化ｄｓＲＮＡは、ガイド鎖に対して有意な全長オフターゲット効果をほとんど有さない場合がある。別の実施形態では、ＨＴＴ遺伝子を標的とするｓｉＲＮＡ二重鎖またはコード化ｄｓＲＮＡは、パッセンジャー鎖に対して有意な全長オフターゲット効果をほとんど有さない場合がある。ＨＴＴ遺伝子を標的とするｓｉＲＮＡ二重鎖またはコード化ｓＲＮＡは、パッセンジャー鎖に対して１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１１％、１２％、１３％、１４％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、１〜５％、２〜６％、３〜７％、４〜８％、５〜９％、５〜１０％、６〜１０％、５〜１５％、５〜２０％、５〜２５％  ５〜３０％、１０〜２０％、１０〜３０％、１０〜４０％、１０〜５０％、１５〜３０％、１５〜４０％、１５〜４５％、２０〜４０％、２０〜５０％、２５〜５０％、３０〜４０％、３０〜５０％、３５〜５０％、４０〜５０％、４５〜５０％未満の全長オフターゲット効果を有する場合がある。さらに別の実施形態では、ＨＴＴ遺伝子を標的とするｓｉＲＮＡ二重鎖またはコード化ｄｓＲＮＡは、ガイド鎖またはパッセンジャー鎖に対して有意な全長オフターゲット効果をほとんど有さない場合がある。ＨＴＴ遺伝子を標的とするｓｉＲＮＡ二重鎖またはコード化ｄｓＲＮＡは、ガイドまたはパッセンジャー鎖に対して１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１１％、１２％、１３％、１４％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、１〜５％、２〜６％、３〜７％、４〜８％、５〜９％、５〜１０％、６〜１０％、５〜１５％、５〜２０％、５〜２５％  ５〜３０％、１０〜２０％、１０〜３０％、１０〜４０％、１０〜５０％、１５〜３０％、１５〜４０％、１５〜４５％、２０〜４０％、２０〜５０％、２５〜５０％、３０〜４０％、３０〜５０％、３５〜５０％、４０〜５０％、４５〜５０％未満の全長オフターゲット効果を有する場合がある。
【０６９５】
一部の実施形態では、ＨＴＴ遺伝子を標的とするｓｉＲＮＡ二重鎖またはコード化ｄｓＲＮＡは、ｉｎ  ｖｉｔｒｏで高い活性を有し得る。別の実施形態では、ｓｉＲＮＡ分子は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏで低い活性を有し得る。さらに別の実施形態では、ＨＴＴ遺伝子を標的とするｓｉＲＮＡ二重鎖またはｄｓＲＮＡは、ｉｎ  ｖｉｔｒｏで高いガイド鎖活性および低いパッセンジャー鎖活性を有し得る。
【０６９６】
一部の実施形態では、ｓｉＲＮＡ分子は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏで高いガイド鎖活性および低いパッセンジャー鎖活性を有する。ガイド鎖による標的ノックダウン（ＫＤ）は、少なくとも３０％、４０％、５０％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９９％、９９．５％または１００％であり得る。ガイド鎖による標的ノックダウンは、３０〜４０％、３５〜４０％、４０〜５０％、４５〜５０％、５０〜５５％、５０〜６０％、６０〜６５％、６０〜７０％、６０〜７５％、６０〜８０％、６０〜８５％、６０〜９０％、６０〜９５％、６０〜９９％、６０〜９９．５％、６０〜１００％、６５〜７０％、６５〜７５％、６５〜８０％、６５〜８５％、６５〜９０％、６５〜９５％、６５〜９９％、６５〜９９．５％、６５〜１００％、７０〜７５％、７０〜８０％、７０〜８５％、７０〜９０％、７０〜９５％、７０〜９９％、７０〜９９．５％、７０〜１００％、７５〜８０％、７５〜８５％、７５〜９０％、７５〜９５％、７５〜９９％、７５〜９９．５％、７５〜１００％、８０〜８５％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜９９％、８０〜９９．５％、８０〜１００％、８５〜９０％、８５〜９５％、８５〜９９％、８５〜９９．５％、８５〜１００％、９０〜９５％、９０〜９９％、９０〜９９．５％、９０〜１００％、９５〜９９％、９５〜９９．５％、９５〜１００％、９９〜９９．５％、９９〜１００％または９９．５〜１００％であり得る。非限定的な例として、ガイド鎖による標的ノックダウン（ＫＤ）は、７０％より大きい。非限定的な例として、ガイド鎖による標的ノックダウン（ＫＤ）は、６０％より大きい。
【０６９７】
一部の実施形態では、ｓｉＲＮＡ二重鎖は、非ＨＴＴ配列に対するセンスまたはアンチセンス配列のｍｉＲＮＡシードマッチがないように設計される。
一部の実施形態では、最も近いオフターゲットに対するガイド鎖のＩＣ５０は、１００にオンターゲット遺伝子、ＨＴＴに対するガイド鎖のＩＣ５０が乗じられたものより大きい。非限定的な例として、最も近いオフターゲットに対するガイド鎖のＩＣ５０が、１００に標的に対するガイド鎖のＩＣ５０が乗じられたものより大きい場合には、ｓｉＲＮＡ分子は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏでＨＴＴを阻害するための高いガイド鎖選択性を有すると言われる。
【０６９８】
一部の実施形態では、ガイド鎖の５’プロセシングは、ｉｎ  ｖｉｔｒｏまたはｉｎ  ｖｉｖｏで時間の少なくとも７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９９％または１００％、５’末端に正しい開始（ｎ）を有する。非限定的な例として、ガイド鎖の５’プロセシングは正確であり、ｉｎ  ｖｉｔｒｏで時間の少なくとも９９％、５’末端で正しい開始（ｎ）を有する。非限定的な例として、ガイド鎖の５’プロセシングは正確であり、ｉｎ  ｖｉｖｏで時間の少なくとも９９％、５’末端で正しい開始（ｎ）を有する。非限定的な例として、ガイド鎖の５’プロセシングは正確であり、ｉｎ  ｖｉｔｒｏで時間の少なくとも９０％、５’末端で正しい開始（ｎ）を有する。非限定的な例として、ガイド鎖の５’プロセシングは正確であり、ｉｎ  ｖｉｖｏで時間の少なくとも９０％、５’末端で正しい開始（ｎ）を有する。非限定的な例として、ガイド鎖の５’プロセシングは正確であり、ｉｎ  ｖｉｔｒｏで時間の少なくとも８５％、５’末端で正しい開始（ｎ）を有する。非限定的な例として、ガイド鎖の５’プロセシングは正確であり、ｉｎ  ｖｉｖｏで時間の少なくとも８５％、５’末端で正しい開始（ｎ）を有する。
【０６９９】
一部の実施形態では、ｉｎ  ｖｉｔｒｏまたはｉｎ  ｖｉｖｏで表されるガイド対パッセンジャー（Ｇ：Ｐ）（アンチセンス対センスとも呼ばれる）鎖比は、１：１０、１：９、１：８、１：７、１：６、１：５、１：４、１：３、１：２、１；１、２：１０、２：９、２：８、２：７、２：６、２：５、２：４、２：３、２：２、２：１、３：１０、３：９、３：８、３：７、３：６、３：５、３：４、３：３、３：２、３：１、４：１０、４：９、４：８、４：７、４：６、４：５、４：４、４：３、４：２、４：１、５：１０、５：９、５：８、５：７、５：６、５：５、５：４、５：３、５：２、５：１、６：１０、６：９、６：８、６：７、６：６、６：５、６：４、６：３、６：２、６：１、７：１０、７：９、７：８、７：７、７：６、７：５、７：４、７：３、７：２、７：１、８：１０、８：９、８：８、８：７、８：６、８：５、８：４、８：３、８：２、８：１、９：１０、９：９、９：８、９：７、９：６、９：５、９：４、９：３、９：２、９：１、１０：１０、１０：９、１０：８、１０：７、１０：６、１０：５、１０：４、１０：３、１０：２、１０：１、１：９９、５：９５、１０：９０、１５：８５、２０：８０、２５：７５、３０：７０、３５：６５、４０：６０、４５：５５、５０：５０、５５：４５、６０：４０、６５：３５、７０：３０、７５：２５、８０：２０、８５：１５、９０：１０、９５：５、または９９：１である。ガイド対パッセンジャー比とは、プリ−マイクロＲＮＡの細胞内プロセシング後のガイド鎖対パッセンジャー鎖の比を指す。例えば、８０：２０ガイド対パッセンジャー比は、２の前駆体からプロセシングされたパッセンジャー鎖毎に８のガイド鎖を有する。非限定的な例として、ガイド対パッセンジャー鎖比は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏで８：２である。非限定的な例として、ガイド対パッセンジャー鎖比は、ｉｎ  ｖｉｖｏで８：２である。非限定的な例として、ガイド対パッセンジャー鎖比は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏで９：１である。非限定的な例として、ガイド対パッセンジャー鎖比は、ｉｎ  ｖｉｖｏで９：１である。
【０７００】
一部の実施形態では、表されるガイド対パッセンジャー（Ｇ：Ｐ）（アンチセンス対センスとも呼ばれる）鎖比は、１より大きい。
一部の実施形態では、表されるガイド対パッセンジャー（Ｇ：Ｐ）（アンチセンス対センスとも呼ばれる）鎖比は、２より大きい。
【０７０１】
一部の実施形態では、表されるガイド対パッセンジャー（Ｇ：Ｐ）（アンチセンス対センスとも呼ばれる）鎖比は、５より大きい。
一部の実施形態では、表されるガイド対パッセンジャー（Ｇ：Ｐ）（アンチセンス対センスとも呼ばれる）鎖比は、１０より大きい。
【０７０２】
一部の実施形態では、表されるガイド対パッセンジャー（Ｇ：Ｐ）（アンチセンス対センスとも呼ばれる）鎖比は、２０より大きい。
一部の実施形態では、表されるガイド対パッセンジャー（Ｇ：Ｐ）（アンチセンス対センスとも呼ばれる）鎖比は、５０より大きい。
【０７０３】
一部の実施形態では、表されるガイド対パッセンジャー（Ｇ：Ｐ）（アンチセンス対センスとも呼ばれる）鎖比は、少なくとも３：１である。
一部の実施形態では、表されるガイド対パッセンジャー（Ｇ：Ｐ）（アンチセンス対センスとも呼ばれる）鎖比は、少なくとも５：１である。
【０７０４】
一部の実施形態では、表されるガイド対パッセンジャー（Ｇ：Ｐ）（アンチセンス対センスとも呼ばれる）鎖比は、少なくとも１０：１である。
［一部の実施形態では、表されるガイド対パッセンジャー（Ｇ：Ｐ）（アンチセンス対センスとも呼ばれる）鎖比は、少なくとも２０：１である。
【０７０５】
一部の実施形態では、表されるガイド対パッセンジャー（Ｇ：Ｐ）（アンチセンス対センスとも呼ばれる）鎖比は、少なくとも５０：１である。
一部の実施形態では、表されるパッセンジャー対ガイド（Ｐ：Ｇ）（センス対アンチセンスとも呼ばれる）鎖比は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏまたはｉｎ  ｖｉｖｏで、１：１０、１：９、１：８、１：７、１：６、１：５、１：４、１：３、１：２、１；１、２：１０、２：９、２：８、２：７、２：６、２：５、２：４、２：３、２：２、２：１、３：１０、３：９、３：８、３：７、３：６、３：５、３：４、３：３、３：２、３：１、４：１０、４：９、４：８、４：７、４：６、４：５、４：４、４：３、４：２、４：１、５：１０、５：９、５：８、５：７、５：６、５：５、５：４、５：３、５：２、５：１、６：１０、６：９、６：８、６：７、６：６、６：５、６：４、６：３、６：２、６：１、７：１０、７：９、７：８、７：７、７：６、７：５、７：４、７：３、７：２、７：１、８：１０、８：９、８：８、８：７、８：６、８：５、８：４、８：３、８：２、８：１、９：１０、９：９、９：８、９：７、９：６、９：５、９：４、９：３、９：２、９：１、１０：１０、１０：９、１０：８、１０：７、１０：６、１０：５、１０：４、１０：３、１０：２、１０：１、１：９９、５：９５、１０：９０、１５：８５、２０：８０、２５：７５、３０：７０、３５：６５、４０：６０、４５：５５、５０：５０、５５：４５、６０：４０、６５：３５、７０：３０、７５：２５、８０：２０、８５：１５、９０：１０、９５：５、または９９：１である。パッセンジャー対ガイド比とは、プリ−マイクロＲＮＡの細胞内プロセシング後のパッセンジャー鎖対ガイド鎖の比を指す。例えば、８０：２０のパッセンジャー対ガイド比は、２の前駆体からプロセシングされたガイド鎖毎に８のパッセンジャー鎖を有する。非限定的な例として、パッセンジャー対ガイド鎖比は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏで８０：２０である。非限定的な例として、パッセンジャー対ガイド鎖比は、ｉｎ  ｖｉｖｏで８０：２０である。非限定的な例として、パッセンジャー対ガイド鎖比は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏで８：２である。非限定的な例として、パッセンジャー対ガイド鎖比は、ｉｎ  ｖｉｖｏで８：２である。非限定的な例として、パッセンジャー対ガイド鎖比は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏで９：１である。非限定的な例として、パッセンジャー対ガイド鎖比は、ｉｎ  ｖｉｖｏで９：１である。
【０７０６】
一部の実施形態では、表されるパッセンジャー対ガイド（Ｐ：Ｇ）（センス対アンチセンスとも呼ばれる）鎖比は、１より大きい。
一部の実施形態では、表されるパッセンジャー対ガイド（Ｐ：Ｇ）（センス対アンチセンスとも呼ばれる）鎖比は、２より大きい。
【０７０７】
一部の実施形態では、表されるパッセンジャー対ガイド（Ｐ：Ｇ）（センス対アンチセンスとも呼ばれる）鎖比は、５より大きい。
一部の実施形態では、表されるパッセンジャー対ガイド（Ｐ：Ｇ）（センス対アンチセンスとも呼ばれる）鎖比は、１０より大きい。
【０７０８】
一部の実施形態では、表されるパッセンジャー対ガイド（Ｐ：Ｇ）（センス対アンチセンスとも呼ばれる）鎖比は、２０より大きい。
一部の実施形態では、表されるパッセンジャー対ガイド（Ｐ：Ｇ）（センス対アンチセンスとも呼ばれる）鎖比は、５０より大きい。
【０７０９】
一部の実施形態では、表されるパッセンジャー対ガイド（Ｐ：Ｇ）（センス対アンチセンスとも呼ばれる）鎖比は、少なくとも３：１である。
一部の実施形態では、表されるパッセンジャー対ガイド（Ｐ：Ｇ）（センス対アンチセンスとも呼ばれる）鎖比は、少なくとも５：１である。
【０７１０】
一部の実施形態では、表されるパッセンジャー対ガイド（Ｐ：Ｇ）（センス対アンチセンスとも呼ばれる）鎖比は、少なくとも１０：１である。
一部の実施形態では、表されるパッセンジャー対ガイド（Ｐ：Ｇ）（センス対アンチセンスとも呼ばれる）鎖比は、少なくとも２０：１である。
【０７１１】
一部の実施形態では、表されるパッセンジャー対ガイド（Ｐ：Ｇ）（センス対アンチセンスとも呼ばれる）鎖比は、少なくとも５０：１である。
一部の実施形態では、パッセンジャー−ガイド鎖二重鎖は、当技術分野で公知の方法および本明細書において記載される方法ではなく、プリ−またはプレ−マイクロＲＮＡが、プロセシングが測定される場合に、２倍超のガイド対パッセンジャー鎖比を実証する場合に、有効と考えられる。非限定的な例として、プリーまたはプレ−マイクロＲＮＡは、プロセシングが測定される場合に、２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、１０倍、１１倍、１２倍、１３倍、１４倍、１５倍または２〜５倍、２〜１０倍、２〜１５倍、３〜５倍、３〜１０倍、３〜１５倍、４〜５倍、４〜１０倍、４〜１５倍、５〜１０倍、５〜１５倍、６〜１０倍、６〜１５倍、７〜１０倍、７〜１５倍、８〜１０倍、８〜１５倍、９〜１０倍、９〜１５倍、１０〜１５倍、１１〜１５倍、１２〜１５倍、１３〜１５倍、または１４〜１５倍を超えるガイド対パッセンジャー鎖比を実証する。
【０７１２】
一部の実施形態では、ｄｓＲＮＡをコードするベクターゲノムは、構築物の全長の少なくとも６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９９％または９９％超である配列を含む。非限定的な例として、ベクターゲノムは、構築物の全長配列の少なくとも８０％である配列を含む。
【０７１３】
一部の実施形態では、ｓｉＲＮＡ分子は、ＨＴＴ配列上の少なくとも１つのエクソンを標的とすることによって野生型および／または突然変異体ＨＴＴをサイレンシングするために使用され得る。エクソンは、エクソン１、エクソン２、エクソン３、エクソン４、エクソン５、エクソン６、エクソン７、エクソン８、エクソン９、エクソン１０、エクソン１１、エクソン１２、エクソン１３、エクソン１４、エクソン１５、エクソン１６、エクソン１７、エクソン１８、エクソン１９、エクソン２０、エクソン２１、エクソン２２、エクソン２３、エクソン２４、エクソン２５、エクソン２６、エクソン２７、エクソン２８、エクソン２９、エクソン３０、エクソン３１、エクソン３２、エクソン３３、エクソン３４、エクソン３５、エクソン３６、エクソン３７、エクソン３８、エクソン３９、エクソン４０、エクソン４１、エクソン４２、エクソン４３、エクソン４４、エクソン４５、エクソン４６、エクソン４７、エクソン４８、エクソン４９、エクソン５０、エクソン５１、エクソン５２、エクソン５３、エクソン５４、エクソン５５、エクソン５６、エクソン５７、エクソン５８、エクソン５９、エクソン６０、エクソン６１、エクソン６２、エクソン６３、エクソン６４、エクソン６５、エクソン６６、および／またはエクソン６７であり得る。非限定的な例として、ｓｉＲＮＡ分子は、エクソン１を標的とすることによって野生型および／または突然変異体ＨＴＴをサイレンシングするために使用され得る。別の非限定的な例として、ｓｉＲＮＡ分子は、エクソン１以外のエクソンを標的とすることによって野生型および／または突然変異体ＨＴＴをサイレンシングするために使用され得る。別の非限定的な例として、ｓｉＲＮＡ分子は、エクソン５０を標的とすることによって野生型および／または突然変異体ＨＴＴをサイレンシングするために使用され得る。別の非限定的な例として、ｓｉＲＮＡ分子は、エクソン６７を標的とすることによって野生型および／または突然変異体ＨＴＴをサイレンシングするために使用され得る。
【０７１４】
本開示に従って、ＨＴＴ  ｍＲＮＡを標的とするｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸を含むＡＡＶ粒子が生産され、ＡＡＶ血清型は、表１に列挙される血清型のいずれかであり得る。ＡＡＶ血清型の非限定的な例として、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ９．４７、ＡＡＶ９（ｈｕ１４）、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、ＡＡＶ１２、ＡＡＶｒｈ８、ＡＡＶｒｈ１０、ＡＡＶ−ＤＪ８、ＡＡＶ−ＤＪ、ＡＡＶ−ＰＨＰ．Ａ、および／またはＡＡＶ−ＰＨＰ．Ｂ、およびそのバリアントが挙げられる。
【０７１５】
ＨＴＴ調節性ポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子
一部の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、調節性ポリヌクレオチド配列を含むペイロード領域を有するウイルスゲノムを含む。このような実施形態では、２つ以上のポリペプチドをコードするウイルスゲノムは、複製され、ウイルス粒子中にパッケージングされ得る。調節性ポリヌクレオチドを含むウイルス粒子を用いて形質導入された標的細胞は、単一細胞においてコードされたセンスおよび／またはアンチセンス配列を発現し得る。
【０７１６】
一部の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、神経学的疾患および／または障害の処置、予防、緩和または寛解のための薬の分野において有用である。  
ＨＴＴを標的とするｓｉＲＮＡ分子を有する調節性ポリヌクレオチドを含むペイロード領域を有するウイルスゲノムを含むＡＡＶ粒子のＩＴＲからＩＴＲ配列の非限定的な例は、表３に記載されている。
【０７１７】
【表３】
2021530548.tif 000007
【０７１８】
一部の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、配列番号４１〜８２のいずれかに対して同一性パーセントを有する配列を含むウイルスゲノムを含む。ウイルスゲノムは、配列番号４１〜８２のいずれかに対して１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９９％または１００％の同一性を有し得る。ウイルスゲノムは、配列番号４１〜８２のいずれかに対して、１〜１０％、１０〜２０％、３０〜４０％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜９０％、５０〜９９％、５０〜１００％、６０〜７０％、６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９９％、６０〜１００％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９９％、７０〜１００％、８０〜８５％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜９９％、８０〜１００％、９０〜９５％、９０〜９９％、または９０〜１００％を有し得る。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、配列番号４１〜８２のいずれかに対して８０％の同一性を有する配列を含む。別の非限定的な例として、ウイルスゲノムは、配列番号４１〜８２のいずれかに対して８５％の同一性を有する配列を含む。別の非限定的な例として、ウイルスゲノムは、配列番号４１〜８２のいずれかに対して９０％の同一性を有する配列を含む。別の非限定的な例として、ウイルスゲノムは、配列番号４１〜８２のいずれかに対して９５％の同一性を有する配列を含む。別の非限定的な例として、ウイルスゲノムは、配列番号４１〜８２のいずれかに対して９９％の同一性を有する配列を含む。
【０７１９】
一部の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、配列番号４１に対応する配列または少なくとも９５％の同一性を有するそのバリアントを含むウイルスゲノムを含む。ＡＡＶ粒子は、ＡＡＶ１血清型を含み得る。
【０７２０】
一部の実施形態では、少なくとも１つのｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含む調節性ポリヌクレオチド配列を含むＡＡＶ粒子が、哺乳動物細胞中に導入され得る。
ＡＡＶ粒子ペイロード領域が、調節性ポリヌクレオチドを含む場合には、調節性ポリヌクレオチドは、標的遺伝子をノックダウンするためにセンスおよび／またはアンチセンス配列を含み得る。本明細書において記載される調節性ポリヌクレオチドをコードするＡＡＶウイルスゲノムは、ヒト疾患、ウイルス、感染症獣医学適用の分野において、ならびにさまざまなｉｎ  ｖｉｖｏおよびｉｎ  ｖｉｔｒｏ設定において有用であり得る。
【０７２１】
ＡＡＶ粒子は、送達の効率を増強するために修飾され得る。本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むこのような修飾されたＡＡＶ粒子は、効率的にパッケージングでき、高頻度で最小の毒性をともなって標的細胞に成功裏に感染するために使用できる。
【０７２２】
一部の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子は、ヒト血清型ＡＡＶ粒子であり得る。このようなヒトＡＡＶ粒子は、任意の公知の血清型に、例えば、血清型ＡＡＶ１〜ＡＡＶ１１のうち任意の１つに由来し得る。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、ＡＡＶ１由来カプシド中にＡＡＶ１由来ゲノムを含むベクター、ＡＡＶ２由来カプシド中にＡＡＶ２由来ゲノムを含むベクター、ＡＡＶ４由来カプシド中にＡＡＶ４由来ゲノムを含むベクター、ＡＡＶ６由来カプシド中にＡＡＶ６由来ゲノムを含むベクターまたはＡＡＶ９由来カプシド中にＡＡＶ９由来ゲノムを含むベクターであり得る。
【０７２３】
他の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子は、少なくとも２つの異なるＡＡＶ血清型を起源とする配列および／または成分を含有する、シュードタイプハイブリッドまたはキメラＡＡＶ粒子であり得る。シュードタイプＡＡＶ粒子は、あるＡＡＶ血清型に由来するＡＡＶゲノムおよび異なるＡＡＶ血清型に少なくとも幾分かは由来するカプシドタンパク質を含むベクターであり得る。非限定的な例として、このようなシュードタイプＡＡＶ粒子は、ＡＡＶ１由来カプシド中にＡＡＶ２由来ゲノムを含むベクターまたはＡＡＶ６由来カプシド中にＡＡＶ２由来ゲノムを含むベクターまたはＡＡＶ４由来カプシド中にＡＡＶ２由来ゲノムもしくはＡＡＶ９由来カプシド中にＡＡＶ２由来ゲノムを含むベクターであり得る。同様の様式で、本開示は、任意のハイブリッドまたはキメラＡＡＶ粒子を企図する。
【０７２４】
他の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子は、ｓｉＲＮＡ分子を中枢神経系に送達するために使用され得る（例えば、米国特許第６，１８０，６１３号明細書；その内容をその全体で本願明細書に援用する）。
【０７２５】
一部の態様では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子は、非ウイルス起源由来のペプチドを含む修飾されたカプシドをさらに含み得る。他の態様では、ＡＡＶ粒子は、コード化ｓｉＲＮＡ二重鎖の脳および脊髄への送達を促進するためにＣＮＳ特異的キメラカプシドを含有し得る。例えば、ＣＮＳ指向性を示すＡＡＶバリアント由来のｃａｐヌクレオチド配列のアラインメントを構築して、可変領域（ＶＲ）配列および構造を同定してもよい。
【０７２６】
投与および投薬
投与
一部の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、ハンチントン舞踏病（ＨＤ）を有する対象の機能および／または生存を改善するためにＣＮＳに治療有効量で投与され得る。非限定的な例として、ベクターが、線条体への直接注入によって投与され得る。
【０７２７】
一部の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、ｓｉＲＮＡ二重鎖またはｄｓＲＮＡが、中型有棘ニューロン、皮質ニューロンおよび／またはアストロサイトを標的とするために対象に（例えば、くも膜下腔内投与によって対象のＣＮＳに）治療有効量で投与され得る。非限定的な例として、ｓｉＲＮＡ二重鎖またはｄｓＲＮＡは、ＨＴＴタンパク質またはｍＲＮＡの発現を低減し得る。別の非限定的な例として、ｓｉＲＮＡ二重鎖またはｄｓＲＮＡは、ＨＴＴを抑制し、ＨＴＴ媒介性毒性を低減し得る。ＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡならびにＨＴＴ媒介性毒性の低減は、炎症の増強をほとんど伴わずに達成され得る。
【０７２８】
一部の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、対象の機能低下（例えば、統一ハンチントン病評価尺度（ＵＨＤＲＳ）などの公知の評価方法を使用して決定された）を減速するために、対象に（例えば、対象のＣＮＳに）治療有効量で投与され得る。非限定的な例として、ベクターは、実質内注射によって投与され得る。
【０７２９】
投薬
本開示の医薬組成物は、ＨＴＴと関連付けられる障害（例えば、ハンチントン病（ＨＤ））を低減、予防および／または処置するのに有効な任意の量を使用して対象に投与され得る。必要な正確な量は、対象の種、年齢および全身状態、疾患の重症度、特定の組成物、その投与様式、その活性様式などに応じて対象毎に変わる。
【０７３０】
本開示の組成物は、通常、投与の容易性および投与量の均一性のために単位投与形で製剤化される。しかし、本開示の組成物の総一日使用量は、健全な医学的判断の範囲内で主治医によって決定され得るということは理解される。任意の特定の患者のための特定の治療有効性は、処置されている障害および障害の重症度；使用される特定の化合物の活性；使用される特定の組成物；患者の年齢、体重、全身の健康、性別および食事；使用されるｓｉＲＮＡ二重鎖の投与の時間、投与経路および排泄速度；処置の期間；使用される特定の化合物と組み合わせて、または同時に使用される薬物；および医学の技術分野で周知の同様の因子を含むさまざまな因子に応じて変わる。
【０７３１】
一部の実施形態では、対象の年齢および性別は、本開示の組成物の用量を決定するために使用され得る。非限定的な例として、高齢の対象が、若い対象と比較して、より多い用量（例えば、５〜１０％、１０〜２０％、１５〜３０％、２０〜５０％、２５〜５０％または少なくとも１％、２％、３％、４％、５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％もしくは９０％よりも多い）の組成物を受け取る場合がある。別の非限定的な例として、若い対象が、高齢の対象と比較して、より多い用量（例えば、５〜１０％、１０〜２０％、１５〜３０％、２０〜５０％、２５〜５０％または少なくとも１％、２％、３％、４％、５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％もしくは９０％よりも多い）の組成物を受け取る場合がある。さらに別の非限定的な例として、女性である対象が、男性対象と比較して、より多い用量（例えば、５〜１０％、１０〜２０％、１５〜３０％、２０〜５０％、２５〜５０％または少なくとも１％、２％、３％、４％、５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％もしくは９０％よりも多い）の組成物を受け取る場合がある。さらに別の非限定的な例として、男性である対象が、女性対象と比較して、より多い用量（例えば、５〜１０％、１０〜２０％、１５〜３０％、２０〜５０％、２５〜５０％または少なくとも１％、２％、３％、４％、５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％もしくは９０％よりも多い）の組成物を受け取る場合がある。
【０７３２】
一部の特定の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ二重鎖を送達するためのＡＡＶ粒子の用量は、疾患状態、対象および処置に応じて適応され得る。
一部の実施形態では、細胞への本開示に従う組成物の送達は、［ＶＧ／時間＝ｍＬ／時間＊ＶＧ／ｍＬ］（式中、ＶＧは、ウイルスゲノムであり、ＶＧ／ｍＬは、組成物濃度であり、ｍＬ／時間は、長期送達の速度である）によって定義される送達の速度を含む。
【０７３３】
一部の実施形態では、細胞への本開示に従う組成物の送達は、約１×１０６ＶＧから約１×１０１６ＶＧの間の対象あたりの総濃度を含み得る。一部の実施形態では、送達は、約１×１０６、２ｘ１０６、３ｘ１０６、４ｘ１０６、５ｘ１０６、６ｘ１０６、７ｘ１０６、８ｘ１０６、９ｘ１０６、１ｘ１０７、２ｘ１０７、３ｘ１０７、４ｘ１０７、５ｘ１０７、６ｘ１０７、７ｘ１０７、８ｘ１０７、９ｘ１０７、１ｘ１０８、２ｘ１０８、３ｘ１０８、４ｘ１０８、５ｘ１０８、６ｘ１０８、７ｘ１０８、８ｘ１０８、９ｘ１０８、１ｘ１０９、２ｘ１０９、３ｘ１０９、４ｘ１０９、５ｘ１０９、６ｘ１０９、７ｘ１０９、８ｘ１０９、９ｘ１０９、１ｘ１０１０、２ｘ１０１０、３ｘ１０１０、４ｘ１０１０、５ｘ１０１０、６ｘ１０１０、７ｘ１０１０、８ｘ１０１０、９ｘ１０１０、１ｘ１０１１、１．１ｘ１０１１、１．２ｘ１０１１、１．３ｘ１０１１、１．４ｘ１０１１、１．５ｘ１０１１、１．６ｘ１０１１、１．７ｘ１０１１、１．８ｘ１０１１、１．９ｘ１０１１、２ｘ１０１１、２．１ｘ１０１１、２．２ｘ１０１１、２．３ｘ１０１１、２．４ｘ１０１１、２．５ｘ１０１１、２．６ｘ１０１１、２．７ｘ１０１１、２．８ｘ１０１１、２．９ｘ１０１１、３ｘ１０１１、４ｘ１０１１、５ｘ１０１１、６ｘ１０１１、７ｘ１０１１、７．１ｘ１０１１、７．２ｘ１０１１、７．３ｘ１０１１、７．４ｘ１０１１、７．５ｘ１０１１、７．６ｘ１０１１、７．７ｘ１０１１、７．８ｘ１０１１、７．９ｘ１０１１、８ｘ１０１１、９ｘ１０１１、１ｘ１０１２、１．１ｘ１０１２、１．２ｘ１０１２、１．３ｘ１０１２、１．４ｘ１０１２、１．５ｘ１０１２、１．６ｘ１０１２、１．７ｘ１０１２、１．８ｘ１０１２、１．９ｘ１０１２、２ｘ１０１２、２．１ｘ１０１２、２．２ｘ１０１２、２．３ｘ１０１２、２．４ｘ１０１２、２．５ｘ１０１２、２．６ｘ１０１２、２．７ｘ１０１２、２．８ｘ１０１２、２．９ｘ１０１２、３ｘ１０１２、３．１ｘ１０１２、３．２ｘ１０１２、３．３ｘ１０１２、３．４ｘ１０１２、３．５ｘ１０１２、３．６ｘ１０１２、３．７ｘ１０１２、３．８ｘ１０１２、３．９ｘ１０１２、４ｘ１０１２、４．１ｘ１０１２、４．２ｘ１０１２、４．３ｘ１０１２、４．４ｘ１０１２、４．５ｘ１０１２、４．６ｘ１０１２、４．７ｘ１０１２、４．８ｘ１０１２、４．９ｘ１０１２、５ｘ１０１２、６ｘ１０１２、６．１ｘ１０１２、６．２ｘ１０１２、６．３ｘ１０１２、６．４ｘ１０１２、６．５ｘ１０１２、６．６ｘ１０１２、６．７ｘ１０１２、６．８ｘ１０１２、６．９ｘ１０１２、７ｘ１０１２、８ｘ１０１２、８．１ｘ１０１２、８．２ｘ１０１２、８．３ｘ１０１２、８．４ｘ１０１２、８．５ｘ１０１２、８．６ｘ１０１２、８．７ｘ１０１２、８．８ｘ１０１２、８．９ｘ１０１２、９ｘ１０１２、１ｘ１０１３、１．１ｘ１０１３、１．２ｘ１０１３、１．３ｘ１０１３、１．４ｘ１０１３、１．５ｘ１０１３、１．６ｘ１０１３、１．７ｘ１０１３、１．８ｘ１０１３、１．９ｘ１０１３、２ｘ１０１３、２．７ｘ１０１３、３ｘ１０１３、４ｘ１０１３、５ｘ１０１３、６ｘ１０１３、６．７ｘ１０１３、７ｘ１０１３、８ｘ１０１３、９ｘ１０１３、１ｘ１０１４、２ｘ１０１４、３ｘ１０１４、４ｘ１０１４、５ｘ１０１４、６ｘ１０１４、７ｘ１０１４、８ｘ１０１４、９ｘ１０１４、１ｘ１０１５、２ｘ１０１５、３ｘ１０１５、４ｘ１０１５、５ｘ１０１５、６ｘ１０１５、７ｘ１０１５、８ｘ１０１５、９ｘ１０１５、または１×１０１６ＶＧ／対象またはＶＧ／用量の組成物濃度を含み得る。
【０７３４】
一部の実施形態では、細胞への本開示に従う組成物の送達は、約１×１０６ＶＧ／ｋｇから約１×１０１６ＶＧ／ｋｇの間の対象あたりの総濃度を含み得る。一部の実施形態では、送達は、約１×１０６、２ｘ１０６、３ｘ１０６、４ｘ１０６、５ｘ１０６、６ｘ１０６、７ｘ１０６、８ｘ１０６、９ｘ１０６、１ｘ１０７、２ｘ１０７、３ｘ１０７、４ｘ１０７、５ｘ１０７、６ｘ１０７、７ｘ１０７、８ｘ１０７、９ｘ１０７、１ｘ１０８、２ｘ１０８、３ｘ１０８、４ｘ１０８、５ｘ１０８、６ｘ１０８、７ｘ１０８、８ｘ１０８、９ｘ１０８、１ｘ１０９、２ｘ１０９、３ｘ１０９、４ｘ１０９、５ｘ１０９、６ｘ１０９、７ｘ１０９、８ｘ１０９、９ｘ１０９、１ｘ１０１０、２ｘ１０１０、３ｘ１０１０、４ｘ１０１０、５ｘ１０１０、６ｘ１０１０、７ｘ１０１０、８ｘ１０１０、９ｘ１０１０、１ｘ１０１１、１．１ｘ１０１１、１．２ｘ１０１１、１．３ｘ１０１１、１．４ｘ１０１１、１．５ｘ１０１１、１．６ｘ１０１１、１．７ｘ１０１１、１．８ｘ１０１１、１．９ｘ１０１１、２ｘ１０１１、２．１ｘ１０１１、２．２ｘ１０１１、２．３ｘ１０１１、２．４ｘ１０１１、２．５ｘ１０１１、２．６ｘ１０１１、２．７ｘ１０１１、２．８ｘ１０１１、２．９ｘ１０１１、３ｘ１０１１、４ｘ１０１１、５ｘ１０１１、６ｘ１０１１、７ｘ１０１１、７．１ｘ１０１１、７．２ｘ１０１１、７．３ｘ１０１１、７．４ｘ１０１１、７．５ｘ１０１１、７．６ｘ１０１１、７．７ｘ１０１１、７．８ｘ１０１１、７．９ｘ１０１１、８ｘ１０１１、９ｘ１０１１、１ｘ１０１２、１．１ｘ１０１２、１．２ｘ１０１２、１．３ｘ１０１２、１．４ｘ１０１２、１．５ｘ１０１２、１．６ｘ１０１２、１．７ｘ１０１２、１．８ｘ１０１２、１．９ｘ１０１２、２ｘ１０１２、２．１ｘ１０１２、２．２ｘ１０１２、２．３ｘ１０１２、２．４ｘ１０１２、２．５ｘ１０１２、２．６ｘ１０１２、２．７ｘ１０１２、２．８ｘ１０１２、２．９ｘ１０１２、３ｘ１０１２、３．１ｘ１０１２、３．２ｘ１０１２、３．３ｘ１０１２、３．４ｘ１０１２、３．５ｘ１０１２、３．６ｘ１０１２、３．７ｘ１０１２、３．８ｘ１０１２、３．９ｘ１０１２、４ｘ１０１２、４．１ｘ１０１２、４．２ｘ１０１２、４．３ｘ１０１２、４．４ｘ１０１２、４．５ｘ１０１２、４．６ｘ１０１２、４．７ｘ１０１２、４．８ｘ１０１２、４．９ｘ１０１２、５ｘ１０１２、６ｘ１０１２、６．１ｘ１０１２、６．２ｘ１０１２、６．３ｘ１０１２、６．４ｘ１０１２、６．５ｘ１０１２、６．６ｘ１０１２、６．７ｘ１０１２、６．８ｘ１０１２、６．９ｘ１０１２、７ｘ１０１２、８ｘ１０１２、８．１ｘ１０１２、８．２ｘ１０１２、８．３ｘ１０１２、８．４ｘ１０１２、８．５ｘ１０１２、８．６ｘ１０１２、８．７ｘ１０１２、８．８ｘ１０１２、８．９ｘ１０１２、９ｘ１０１２、１ｘ１０１３、１．１ｘ１０１３、１．２ｘ１０１３、１．３ｘ１０１３、１．４ｘ１０１３、１．５ｘ１０１３、１．６ｘ１０１３、１．７ｘ１０１３、１．８ｘ１０１３、１．９ｘ１０１３、２ｘ１０１３、２．７ｘ１０１３、３ｘ１０１３、４ｘ１０１３、５ｘ１０１３、６ｘ１０１３、６．７ｘ１０１３、７ｘ１０１３、８ｘ１０１３、９ｘ１０１３、１ｘ１０１４、２ｘ１０１４、３ｘ１０１４、４ｘ１０１４、５ｘ１０１４、６ｘ１０１４、７ｘ１０１４、８ｘ１０１４、９ｘ１０１４、１ｘ１０１５、２ｘ１０１５、３ｘ１０１５、４ｘ１０１５、５ｘ１０１５、６ｘ１０１５、７ｘ１０１５、８ｘ１０１５、９ｘ１０１５、または１×１０１６ＶＧ／ｋｇの組成物濃度を含み得る。
【０７３５】
一部の実施形態では、細胞への本開示に従う組成物の送達は、約１×１０６ＶＧ／ｍＬから約１×１０１６ＶＧ／ｍＬの間の総濃度を含み得る。一部の実施形態では、送達は、約１×１０６、２ｘ１０６、３ｘ１０６、４ｘ１０６、５ｘ１０６、６ｘ１０６、７ｘ１０６、８ｘ１０６、９ｘ１０６、１ｘ１０７、２ｘ１０７、３ｘ１０７、４ｘ１０７、５ｘ１０７、６ｘ１０７、７ｘ１０７、８ｘ１０７、９ｘ１０７、１ｘ１０８、２ｘ１０８、３ｘ１０８、４ｘ１０８、５ｘ１０８、６ｘ１０８、７ｘ１０８、８ｘ１０８、９ｘ１０８、１ｘ１０９、２ｘ１０９、３ｘ１０９、４ｘ１０９、５ｘ１０９、６ｘ１０９、７ｘ１０９、８ｘ１０９、９ｘ１０９、１ｘ１０１０、２ｘ１０１０、３ｘ１０１０、４ｘ１０１０、５ｘ１０１０、６ｘ１０１０、７ｘ１０１０、８ｘ１０１０、９ｘ１０１０、１ｘ１０１１、１．１ｘ１０１１、１．２ｘ１０１１、１．３ｘ１０１１、１．４ｘ１０１１、１．５ｘ１０１１、１．６ｘ１０１１、１．７ｘ１０１１、１．８ｘ１０１１、１．９ｘ１０１１、２ｘ１０１１、３ｘ１０１１、４ｘ１０１１、５ｘ１０１１、６ｘ１０１１、７ｘ１０１１、８ｘ１０１１、９ｘ１０１１、１ｘ１０１２、１．１ｘ１０１２、１．２ｘ１０１２、１．３ｘ１０１２、１．４ｘ１０１２、１．５ｘ１０１２、１．６ｘ１０１２、１．７ｘ１０１２、１．８ｘ１０１２、１．９ｘ１０１２、２ｘ１０１２、２．１ｘ１０１２、２．２ｘ１０１２、２．３ｘ１０１２、２．４ｘ１０１２、２．５ｘ１０１２、２．６ｘ１０１２、２．７ｘ１０１２、２．８ｘ１０１２、２．９ｘ１０１２、３ｘ１０１２、３．１ｘ１０１２、３．２ｘ１０１２、３．３ｘ１０１２、３．４ｘ１０１２、３．５ｘ１０１２、３．６ｘ１０１２、３．７ｘ１０１２、３．８ｘ１０１２、３．９ｘ１０１２、４ｘ１０１２、４．１ｘ１０１２、４．２ｘ１０１２、４．３ｘ１０１２、４．４ｘ１０１２、４．５ｘ１０１２、４．６ｘ１０１２、４．７ｘ１０１２、４．８ｘ１０１２、４．９ｘ１０１２、５ｘ１０１２、６ｘ１０１２、６．１ｘ１０１２、６．２ｘ１０１２、６．３ｘ１０１２、６．４ｘ１０１２、６．５ｘ１０１２、６．６ｘ１０１２、６．７ｘ１０１２、６．８ｘ１０１２、６．９ｘ１０１２、７ｘ１０１２、８ｘ１０１２、９ｘ１０１２、１ｘ１０１３、１．１ｘ１０１３、１．２ｘ１０１３、１．３ｘ１０１３、１．４ｘ１０１３、１．５ｘ１０１３、１．６ｘ１０１３、１．７ｘ１０１３、１．８ｘ１０１３、１．９ｘ１０１３、２ｘ１０１３、２．７ｘ１０１３、３ｘ１０１３、４ｘ１０１３、５ｘ１０１３、６ｘ１０１３、６．７ｘ１０１３、７ｘ１０１３、８ｘ１０１３、９ｘ１０１３、１ｘ１０１４、２ｘ１０１４、３ｘ１０１４、４ｘ１０１４、５ｘ１０１４、６ｘ１０１４、７ｘ１０１４、８ｘ１０１４、９ｘ１０１４、１ｘ１０１５、２ｘ１０１５、３ｘ１０１５、４ｘ１０１５、５ｘ１０１５、６ｘ１０１５、７ｘ１０１５、８ｘ１０１５、９ｘ１０１５、または１×１０１６ＶＧ／ｍＬの組成物濃度を含み得る。
【０７３６】
一部の実施形態では、送達されるべき本開示に従う組成物は、９×１０１１ＶＧ／ｍＬから２．７×１０１３ＶＧ／ｍＬの間の濃度を含み得る。一部の実施形態では、送達されるべき本開示に従う組成物は、２．７×１０１３ＶＧ／ｍＬの濃度を含み得る。
【０７３７】
一部の実施形態では、細胞への本開示に従う組成物の送達は、約１×１０６総カプシド／ｍＬから約１×１０１６総カプシド／ｍＬの間の総濃度を含み得る。一部の実施形態では、送達は、約１×１０６、２ｘ１０６、３ｘ１０６、４ｘ１０６、５ｘ１０６、６ｘ１０６、７ｘ１０６、８ｘ１０６、９ｘ１０６、１ｘ１０７、２ｘ１０７、３ｘ１０７、４ｘ１０７、５ｘ１０７、６ｘ１０７、７ｘ１０７、８ｘ１０７、９ｘ１０７、１ｘ１０８、２ｘ１０８、３ｘ１０８、４ｘ１０８、５ｘ１０８、６ｘ１０８、７ｘ１０８、８ｘ１０８、９ｘ１０８、１ｘ１０９、２ｘ１０９、３ｘ１０９、４ｘ１０９、５ｘ１０９、６ｘ１０９、７ｘ１０９、８ｘ１０９、９ｘ１０９、１ｘ１０１０、２ｘ１０１０、３ｘ１０１０、４ｘ１０１０、５ｘ１０１０、６ｘ１０１０、７ｘ１０１０、８ｘ１０１０、９ｘ１０１０、１ｘ１０１１、２ｘ１０１１、３ｘ１０１１、４ｘ１０１１、５ｘ１０１１、６ｘ１０１１、７ｘ１０１１、８ｘ１０１１、９ｘ１０１１、１ｘ１０１２、１．１ｘ１０１２、１．２ｘ１０１２、１．３ｘ１０１２、１．４ｘ１０１２、１．５ｘ１０１２、１．６ｘ１０１２、１．７ｘ１０１２、１．８ｘ１０１２、１．９ｘ１０１２、２ｘ１０１２、２．１ｘ１０１２、２．２ｘ１０１２、２．３ｘ１０１２、２．４ｘ１０１２、２．５ｘ１０１２、２．６ｘ１０１２、２．７ｘ１０１２、２．８ｘ１０１２、２．９ｘ１０１２、３ｘ１０１２、３．１ｘ１０１２、３．２ｘ１０１２、３．３ｘ１０１２、３．４ｘ１０１２、３．５ｘ１０１２、３．６ｘ１０１２、３．７ｘ１０１２、３．８ｘ１０１２、３．９ｘ１０１２、４ｘ１０１２、４．１ｘ１０１２、４．２ｘ１０１２、４．３ｘ１０１２、４．４ｘ１０１２、４．５ｘ１０１２、４．６ｘ１０１２、４．７ｘ１０１２、４．８ｘ１０１２、４．９ｘ１０１２、５ｘ１０１２、６ｘ１０１２、７ｘ１０１２、８ｘ１０１２、９ｘ１０１２、１ｘ１０１３、２ｘ１０１３、２．７ｘ１０１３、３ｘ１０１３、４ｘ１０１３、５ｘ１０１３、６ｘ１０１３、６．７ｘ１０１３、７ｘ１０１３、８ｘ１０１３、９ｘ１０１３、１ｘ１０１４、２ｘ１０１４、３ｘ１０１４、４ｘ１０１４、５ｘ１０１４、６ｘ１０１４、７ｘ１０１４、８ｘ１０１４、９ｘ１０１４、１ｘ１０１５、２ｘ１０１５、３ｘ１０１５、４ｘ１０１５、５ｘ１０１５、６ｘ１０１５、７ｘ１０１５、８ｘ１０１５、９ｘ１０１５、または１×１０１６総カプシド／ｍＬの組成物濃度を含み得る。
【０７３８】
ある特定の実施形態では、所望のｓｉＲＮＡ二重鎖投与量は、複数回投与（例えば、２回、３回、４回、５回、６回、７回、８回、９回、１０回、１１回、１２回、１３回、１４回またはそれより多い投与）を使用して送達され得る。複数回投与が使用される場合には、本明細書において記載されるものなどの分割投薬レジメンが使用され得る。本明細書において使用される場合、「分割用量」は、単回単位用量または総一日用量の、２またはそれより多い用量、例えば、単回単位用量の２またはそれより多い投与への分割である。本明細書において使用される場合、「単回単位用量」は、１用量で／一回／単一経路／単一接触点、すなわち、単回投与事象で投与される任意の調節性ポリヌクレオチド治療薬の用量である。本明細書において使用される場合、「総一日用量」は、２４時間の期間で与えられるまたは処方される量である。それは、単回単位用量として投与され得る。一部の実施形態では、本開示の調節性ポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子は、分割用量で対象に投与される。それらは、緩衝液のみで、または本明細書において記載される製剤で製剤化され得る。
【０７３９】
一部の実施形態では、本明細書において記載される組成物の用量、濃度および／または容積は、投与後の皮質および皮質下分布への尾状核または被殻の寄与に応じて調整され得る。投与は、脳室内、被殻内、視床内、実質内、軟膜下および／またはくも膜下腔内投与であり得る。
【０７４０】
一部の実施形態では、本明細書において記載される組成物の用量、濃度および／または容積は、脳室内、被殻内、視床内、実質内、軟膜下および／またはくも膜下腔内送達による投与後の皮質および脳幹脊髄性分布に応じて調整され得る。
【０７４１】
投与されるべき医薬組成物の容積は、対象、標的とされる構造の容積および／または組成物の用量に基づいて決定され得る。一部の実施形態では、対象は、霊長類である。一部の実施形態では、対象は、非ヒト霊長類である。一部の実施形態では、対象は、ヒトである。
【０７４２】
一部の実施形態では、対象の被殻または視床へ注入されるべき医薬組成物の容積は、片側あたり約１〜３０００μＬの間であり得る。一部の実施形態では、被殻または視床へ注入されるべき組成物の容積は、片側あたり約１０μｌ、２５μｌ、５０μｌ、７５μｌ、１００μｌ、１２５μｌ、１５０μｌ、１７５μｌ、２００μｌ、２２５μｌ、２５０μｌ、２７５μｌ、３００μｌ、３２５μｌ、３５０μｌ、３７５μｌ、４００μｌ、４２５μｌ、４５０μｌ、４７５μｌ、５００μｌ、５２５μｌ、５５０μｌ、５７５μｌ、６００μｌ、６２５μｌ、６５０μｌ、６７５μｌ、７００μｌ、７２５μｌ、７５０μｌ、７７５μｌ、８００μｌ、８２５μｌ、８５０μｌ、８７５μｌ、９００μｌ、９２５μｌ、９５０μｌ、９７５μｌ、１０００μｌ、１０２５μｌ、１０５０μｌ、１０７５μｌ、１１００μｌ、１１２５μｌ、１１５０μｌ、１１７５μｌ、１２００μｌ、１２２５μｌ、１２５０μｌ、１２７５μｌ、１３００μｌ、１３２５μｌ、１３５０μｌ、１３７５μｌ、１４００μｌ、１４２５μｌ、１４５０μｌ、１４７５μｌ、１５００μｌ、１６００μｌ、１７００μｌ、１８００μｌ、１９００μｌ、２０００μｌ、２２５０μｌ、２５００μｌ、２７５０μｌ、または３０００μｌであり得る。
【０７４３】
一部の実施形態では、本明細書において記載される医薬組成物は、非ヒト霊長類である対象に投与される。一部の実施形態では、非ヒト霊長類の被殻に注入されるべき組成物の容積は、片側あたり５０〜１５０μＬである。一部の実施形態では、非ヒト霊長類の被殻に注入されるべき組成物の容積は、片側あたり１００〜２００μＬである。一部の実施形態では、非ヒト霊長類の被殻に注入されるべき組成物の容積は、片側あたり１７５〜５２５μＬである。
【０７４４】
一部の実施形態では、非ヒト霊長類の視床に注入されるべき組成物の容積は、片側あたり７０〜２５０μＬである。一部の実施形態では、非ヒト霊長類の視床に注入されるべき組成物の容積は、片側あたり２００〜３００μＬである。一部の実施形態では、非ヒト霊長類の視床に注入されるべき組成物の容積は、片側あたり４５０〜１５００μＬである。
【０７４５】
一部の実施形態では、本明細書において記載される医薬組成物は、ヒトである対象に投与される。一部の実施形態では、ヒトの被殻に投与される医薬組成物の容積は、２０００μＬ／半球以下であり得る。一部の実施形態では、ヒトの被殻に注入されるべき組成物の容積は、片側あたり１５００μＬ／半球以下である。
【０７４６】
一部の実施形態では、ヒトの被殻に注入されるべき組成物の容積は、片側あたり３００〜１５００μＬである。一部の実施形態では、ヒトの被殻に注入されるべき組成物の容積は、片側あたり約３００μｌ、３２５μｌ、３５０μｌ、３７５μｌ、４００μｌ、４２５μｌ、４５０μｌ、４７５μｌ、５００μｌ、５２５μｌ、５５０μｌ、５７５μｌ、６００μｌ、６２５μｌ、６５０μｌ、６７５μｌ、７００μｌ、７２５μｌ、７５０μｌ、７７５μｌ、８００μｌ、８２５μｌ、８５０μｌ、８７５μｌ、９００μｌ、９２５μｌ、９５０μｌ、９７５μｌ、１０００μｌ、１０２５μｌ、１０５０μｌ、１０７５μｌ、１１００μｌ、１１２５μｌ、１１５０μｌ、１１７５μｌ、１２００μｌ、１２２５μｌ、１２５０μｌ、１２７５μｌ、１３００μｌ、１３２５μｌ、１３５０μｌ、１３７５μｌ、１４００μｌ、１４２５μｌ、１４５０μｌ、１４７５μｌ、または１５００μｌであり得る。一部の実施形態では、ヒトの被殻に注入されるべき組成物の容積は、片側あたり９００μｌである。
【０７４７】
一部の実施形態では、ヒトの視床に投与される医薬組成物の容積は、３０００μＬ／半球以下であり得る。一部の実施形態では、ヒトの視床に注入されるべき組成物の容積は、片側あたり２５００μＬ以下である。
【０７４８】
一部の実施形態では、ヒトの視床に注入されるべき組成物の容積は、片側あたり１３００〜２５００μＬである。一部の実施形態では、ヒトの視床に注入されるべき組成物の容積は、片側あたり１３００μＬ、１３２５μＬ、１３５０μＬ、１３７５μＬ、１４００μＬ、１４２５μＬ、１４５０μＬ、１４７５μＬ、１５００μＬ、１５２５μＬ、１５５０μＬ、１５７５μＬ、１６００μＬ、１６２５μＬ、１６５０μＬ、１６７５μＬ、１７００μＬ、１７２５μＬ、１７５０μＬ、１７７５μＬ、１８００μＬ、１８２５μＬ、１８５０μＬ、１８７５μＬ、１９００μＬ、１９２５μＬ、１９５０μＬ、１９７５μＬ、２０００μＬ、２０２５μＬ、２０５０μＬ、２０７５μＬ、２１００μＬ、２１２５μＬ、２１５０μＬ、２１７５μＬ、２２００μＬ、２２２５μＬ、２２５０μＬ、２２７５μＬ、２３００μＬ、２３２５μＬ、２３５０μＬ、２３７５μＬ、２４００μＬ、２４２５μＬ、２４５０μＬ、２４７５μＬ、または２５００μＬであり得る。一部の実施形態では、ヒトの視床に注入されるべき組成物の容積は、片側あたり１７００μｌである。
【０７４９】
一部の実施形態では、対象の被殻に投与される用量は、片側あたり約１×１０１０〜１×１０１５ＶＧであり得る。一部の実施形態では、対象の被殻に投与される用量は、片側あたり約１×１０１０、５ｘ１０１０、１ｘ１０１１、２ｘ１０１１、３ｘ１０１１、４ｘ１０１１、５ｘ１０１１、６ｘ１０１１、７ｘ１０１１、８ｘ１０１１、９ｘ１０１１、１ｘ１０１２、１．５ｘ１０１２、２ｘ１０１２、２．５ｘ１０１２、３ｘ１０１２、３．５ｘ１０１２、４ｘ１０１２、４．５ｘ１０１２、５ｘ１０１２、５．５ｘ１０１２、６ｘ１０１２、６．５ｘ１０１２、７ｘ１０１２、７．５ｘ１０１２、８ｘ１０１２、８．５ｘ１０１２、９ｘ１０１２、９．５ｘ１０１２、１ｘ１０１３、１．５ｘ１０１３、２ｘ１０１３、２．５ｘ１０１３、３ｘ１０１３、３．５ｘ１０１３、４ｘ１０１３、４．５ｘ１０１３、５ｘ１０１３、５．５ｘ１０１３、６ｘ１０１３、６．５ｘ１０１３、７ｘ１０１３、７．５ｘ１０１３、８ｘ１０１３、８．５ｘ１０１３、９ｘ１０１３、１ｘ１０１４、２ｘ１０１４、３ｘ１０１４、４ｘ１０１４、５ｘ１０１４、６ｘ１０１４、７ｘ１０１４、８ｘ１０１４、９ｘ１０１４、または１×１０１５ＶＧであり得る。
【０７５０】
一部の実施形態では、対象の視床に投与される用量は、片側あたり約１×１０１０〜１×１０１５ＶＧであり得る。一部の実施形態では、対象の視床に投与される用量は、片側あたり約１×１０１０、５ｘ１０１０、１ｘ１０１１、２ｘ１０１１、３ｘ１０１１、４ｘ１０１１、５ｘ１０１１、６ｘ１０１１、７ｘ１０１１、８ｘ１０１１、９ｘ１０１１、１ｘ１０１２、１．５ｘ１０１２、２ｘ１０１２、２．５ｘ１０１２、３ｘ１０１２、３．５ｘ１０１２、４ｘ１０１２、４．５ｘ１０１２、５ｘ１０１２、５．５ｘ１０１２、６ｘ１０１２、６．５ｘ１０１２、７ｘ１０１２、７．５ｘ１０１２、８ｘ１０１２、８．５ｘ１０１２、９ｘ１０１２、９．５ｘ１０１２、１ｘ１０１３、１．５ｘ１０１３、２ｘ１０１３、２．５ｘ１０１３、３ｘ１０１３、３．５ｘ１０１３、４ｘ１０１３、４．５ｘ１０１３、５ｘ１０１３、５．５ｘ１０１３、６ｘ１０１３、６．５ｘ１０１３、７ｘ１０１３、７．５ｘ１０１３、８ｘ１０１３、８．５ｘ１０１３、９ｘ１０１３、１ｘ１０１４、２ｘ１０１４、３ｘ１０１４、４ｘ１０１４、５ｘ１０１４、６ｘ１０１４、７ｘ１０１４、８ｘ１０１４、９ｘ１０１４、または１×１０１５ＶＧであり得る。
【０７５１】
一部の実施形態では、被殻および視床注入によって対象に投与される総用量は、１×１０１０〜５×１０１５ＶＧである。一部の実施形態では、被殻および視床注入によって対象に投与される総用量は、約１×１０１０、５ｘ１０１０、１ｘ１０１１、２ｘ１０１１、３ｘ１０１１、４ｘ１０１１、５ｘ１０１１、６ｘ１０１１、７ｘ１０１１、８ｘ１０１１、９ｘ１０１１、１ｘ１０１２、１．５ｘ１０１２、２ｘ１０１２、２．５ｘ１０１２、３ｘ１０１２、３．５ｘ１０１２、４ｘ１０１２、４．５ｘ１０１２、５ｘ１０１２、５．５ｘ１０１２、６ｘ１０１２、６．５ｘ１０１２、７ｘ１０１２、７．５ｘ１０１２、８ｘ１０１２、８．５ｘ１０１２、９ｘ１０１２、９．５ｘ１０１２、１ｘ１０１３、１．５ｘ１０１３、２ｘ１０１３、２．５ｘ１０１３、３ｘ１０１３、３．５ｘ１０１３、４ｘ１０１３、４．５ｘ１０１３、５ｘ１０１３、５．５ｘ１０１３、６ｘ１０１３、６．５ｘ１０１３、７ｘ１０１３、７．５ｘ１０１３、８ｘ１０１３、８．５ｘ１０１３、９ｘ１０１３、１ｘ１０１４、２ｘ１０１４、３ｘ１０１４、４ｘ１０１４、５ｘ１０１４、６ｘ１０１４、７ｘ１０１４、８ｘ１０１４、９ｘ１０１４、１ｘ１０１５、２ｘ１０１５、３ｘ１０１５、４ｘ１０１５、または５×１０１５ＶＧであり得る。
【０７５２】
一部の実施形態では、非ヒト霊長類の被殻に投与される用量は、片側あたり約９×１０１０〜５．５×１０１２ＶＧであり得る。一部の実施形態では、非ヒト霊長類の被殻に投与される用量は、片側あたり約９×１０１０、１ｘ１０１１、２ｘ１０１１、３ｘ１０１１、４ｘ１０１１、５ｘ１０１１、６ｘ１０１１、７ｘ１０１１、８ｘ１０１１、９ｘ１０１１、１ｘ１０１２、１．５ｘ１０１２、２ｘ１０１２、２．５ｘ１０１２、３ｘ１０１２、３．５ｘ１０１２、４ｘ１０１２、４．５ｘ１０１２、５ｘ１０１２、または５．５×１０１２ＶＧであり得る。
【０７５３】
一部の実施形態では、非ヒト霊長類の視床に投与される用量は、片側あたり約１．５×１０１１〜８．５×１０１２ＶＧであり得る。一部の実施形態では、非ヒト霊長類の視床に投与される用量は、片側あたり約１．５×１０１１、１．８ｘ１０１１、２ｘ１０１１、３ｘ１０１１、４ｘ１０１１、５ｘ１０１１、６ｘ１０１１、７ｘ１０１１、８ｘ１０１１、９ｘ１０１１、１ｘ１０１２、１．５ｘ１０１２、２ｘ１０１２、２．５ｘ１０１２、３ｘ１０１２、３．５ｘ１０１２、４ｘ１０１２、４．５ｘ１０１２、５ｘ１０１２、５．５ｘ１０１２、６ｘ１０１２、６．５ｘ１０１２、７ｘ１０１２、７．５ｘ１０１２、８ｘ１０１２、または８．５×１０１２ＶＧであり得る。
【０７５４】
一部の実施形態では、被殻および視床注入によって非ヒト霊長類に投与される総用量は、５×１０１１〜３×１０１３ＶＧである。一部の実施形態では、被殻および視床注入によって非ヒト霊長類に投与される総用量は、約５×１０１１、６ｘ１０１１、７ｘ１０１１、８ｘ１０１１、９ｘ１０１１、１ｘ１０１２、１．５ｘ１０１２、２ｘ１０１２、２．５ｘ１０１２、３ｘ１０１２、３．５ｘ１０１２、４ｘ１０１２、４．５ｘ１０１２、５ｘ１０１２、５．５ｘ１０１２、６ｘ１０１２、６．５ｘ１０１２、７ｘ１０１２、７．５ｘ１０１２、８ｘ１０１２、８．５ｘ１０１２、９ｘ１０１２、９．５ｘ１０１２、１ｘ１０１３、１．５ｘ１０１３、２ｘ１０１３、２．５ｘ１０１３、または３×１０１３ＶＧであり得る。
【０７５５】
一部の実施形態では、ヒトの被殻に投与される用量は、片側あたり約２．５×１０１１〜４．５×１０１３ＶＧであり得る。一部の実施形態では、ヒトの被殻に投与される用量は、片側あたり、約２．５ｘ１０１１、３ｘ１０１１、４ｘ１０１１、５ｘ１０１１、６ｘ１０１１、７ｘ１０１１、８ｘ１０１１、９ｘ１０１１、１ｘ１０１２、１．５ｘ１０１２、２ｘ１０１２、２．５ｘ１０１２、３ｘ１０１２、３．５ｘ１０１２、４ｘ１０１２、４．５ｘ１０１２、５ｘ１０１２、５．５ｘ１０１２、６ｘ１０１２、６．５ｘ１０１２、７ｘ１０１２、７．５ｘ１０１２、８ｘ１０１２、８．５ｘ１０１２、９ｘ１０１２、９．５ｘ１０１２、１ｘ１０１３、１．５ｘ１０１３、２ｘ１０１３、２．５ｘ１０１３、３ｘ１０１３、３．５ｘ１０１３、４ｘ１０１３、または４．５×１０１３ＶＧであり得る。一部の実施形態では、ヒトの被殻に投与される用量は、片側あたり８×１０１１〜４×１０１３ＶＧの間であり得る。
【０７５６】
一部の実施形態では、ヒトの視床に投与される用量は、片側あたり約１×１０１２〜７×１０１３ＶＧであり得る。一部の実施形態では、ヒトの視床に投与される用量は、片側あたり約１×１０１２、１．５ｘ１０１２、２ｘ１０１２、２．５ｘ１０１２、３ｘ１０１２、３．５ｘ１０１２、４ｘ１０１２、４．５ｘ１０１２、５ｘ１０１２、５．５ｘ１０１２、６ｘ１０１２、６．５ｘ１０１２、７ｘ１０１２、７．５ｘ１０１２、８ｘ１０１２、８．５ｘ１０１２、９ｘ１０１２、９．５ｘ１０１２、１ｘ１０１３、１．５ｘ１０１３、２ｘ１０１３、２．５ｘ１０１３、３ｘ１０１３、３．５ｘ１０１３、４ｘ１０１３、４．５ｘ１０１３、５ｘ１０１３、５．５ｘ１０１３、６ｘ１０１３、６．５ｘ１０１３、６．８ｘ１０１３、７×１０１３ＶＧであり得る。一部の実施形態では、視床に投与される用量は、片側あたり３．５×１０１２〜６．８×１０１３ＶＧの間である。
【０７５７】
一部の実施形態では、被殻および視床注入によってヒトに投与される総用量は、２．５×１０１２〜２．５×１０１４ＶＧである。一部の実施形態では、被殻および視床注入によってヒトに投与される総用量は、約２．５×１０１２、３ｘ１０１２、３．５ｘ１０１２、４ｘ１０１２、４．５ｘ１０１２、５ｘ１０１２、５．５ｘ１０１２、６ｘ１０１２、６．５ｘ１０１２、７ｘ１０１２、７．５ｘ１０１２、８ｘ１０１２、８．５ｘ１０１２、８．６ｘ１０１２、９ｘ１０１２、９．５ｘ１０１２、１ｘ１０１３、１．５ｘ１０１３、２ｘ１０１３、２．５ｘ１０１３、３ｘ１０１３、３．５ｘ１０１３、４ｘ１０１３、４．５ｘ１０１３、５ｘ１０１３、５．５ｘ１０１３、６ｘ１０１３、６．５ｘ１０１３、７ｘ１０１３、７．５ｘ１０１３、８ｘ１０１３、８．５ｘ１０１３、９ｘ１０１３、１ｘ１０１４、２ｘ１０１４、２．１ｘ１０１４、２．２ｘ１０１４、２．３ｘ１０１４、２．４ｘ１０１４、または２．５×１０１４ＶＧであり得る。一部の実施形態では、対象に投与される総用量は、８．６×１０１２〜２×１０１４ＶＧ間である。
【０７５８】
一部の実施形態では、用量容積は、漸増注入速度を使用して注入部位中に堆積され得る。非限定的な例として、用量容積は、総用量容積を完了する適当な期間を用いて３つの異なる段階で（例えば、１、３、５μＬ／分の用量速度で）注入部位中に蓄積され得る。
【０７５９】
例示的製剤
一部の実施形態では、製剤は、リン酸ナトリウム、リン酸カリウム、塩化ナトリウム、塩化カリウムおよび任意選択で、表面活性物質、例えば、ポロキサマー１８８（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ−６８）を含み得る。非限定的な例として、製剤は、１０ｍＭリン酸ナトリウム、２ｍＭリン酸カリウム、１９２ｍＭ塩化ナトリウム、２．７ｍＭ塩化カリウムおよび０．００１％（ｗ／ｖ）ポロキサマー１８８を含み得る。製剤化は、ＡＡＶ粒子を約２．７×１０１２ＶＧ／ｍＬの濃度で製剤化するために使用され得る。
【０７６０】
一部の実施形態では、製剤は、リン酸緩衝生理食塩水、スクロースおよび任意選択で、表面活性物質、例えば、ポロキサマー１８８を含み得る。非限定的な例として、製剤は、リン酸緩衝生理食塩水、５％スクロースおよび０．００１％（ｗ／ｖ）ポロキサマー１８８を含み得る。製剤化は、ＡＡＶ粒子を約２．２×１０１２ＶＧ／ｍＬの濃度で製剤化するために使用され得る。
【０７６１】
一部の実施形態では、製剤は、リン酸ナトリウム、リン酸カリウム、塩化ナトリウム、スクロースおよび任意選択で、表面活性物質、例えば、ポロキサマー１８８を含み得る。非限定的な例として、製剤は、ｐＨ７．２で２．７ｍＭリン酸ナトリウム、１．５４ｍＭリン酸カリウム、１５５ｍＭ塩化ナトリウムおよび５％（ｗ／ｖ）スクロースを含んでもよく、４５０ｍＯｓｍ／ｋｇの浸透圧を有する。
【０７６２】
一部の実施形態では、製剤は、リン酸ナトリウム、リン酸カリウム、塩化ナトリウム、スクロースおよび任意選択で、表面活性物質、例えば、ポロキサマー１８８を含み得る。非限定的な例として、製剤は、１０ｍＭリン酸ナトリウム、１．５ｍＭリン酸カリウム、９５ｍＭ塩化ナトリウム、７％（ｗ／ｖ）スクロースおよび０．００１％（ｗ／ｖ）ポロキサマー１８８、５℃でｐＨ７．４±０．２を含んでもよい。製剤化は、ＡＡＶ粒子を約２．７×１０１３ＶＧ／ｍＬの濃度で製剤化するために使用され得る。
【０７６３】
一部の実施形態では、製剤は、Ｔｒｉｓ塩基、塩酸、塩化カリウム、塩化ナトリウム、スクロースおよび任意選択で、表面活性物質、例えば、ポロキサマー１８８を含み得る。非限定的な例として、製剤は、１０ｍＭ  Ｔｒｉｓ  塩基、６．３ｍＭ  ＨＣｌ、１．５ｍＭ塩化カリウム、１００ｍＭ塩化ナトリウム、７％（ｗ／ｖ）スクロースおよび０．００１％（ｗ／ｖ）ポロキサマー１８８、５℃でｐＨ８．０±０．２を含み得る。別の非限定的な例として、製剤は、１０ｍＭ  Ｔｒｉｓ塩基、９ｍＭ  ＨＣｌ、１．５ｍＭ塩化カリウム、１００ｍＭ塩化ナトリウム、７％（ｗ／ｖ）スクロースおよび０．００１％（ｗ／ｖ）ポロキサマー１８８、５℃でｐＨ７．５±０．２を含み得る。製剤化は、ＡＡＶ粒子を約２．７×１０１３ＶＧ／ｍＬの濃度で製剤化するために使用され得る。
【０７６４】
ハンチントン舞踏病の処置の方法
本開示は、ＨＴＴ遺伝子を標的とするｓｉＲＮＡ分子をコードする調節性ポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子、その設計および作製のための方法を提供する。操作性の単一の理論により束縛されることは望まないが、本明細書において記載されるＡＡＶ粒子は、ＨＴＴ突然変異体および／または野生型ＨＴＴ遺伝子発現を含むＨＴＴ発現に干渉するｓｉＲＮＡを含む調節性ポリヌクレオチドを提供する。特に、本開示は、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする調節性ポリヌクレオチド配列を含むアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）のウイルスゲノムなどのウイルスゲノムを使用する。本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする調節性ポリヌクレオチドを含むＡＡＶベクターは、目的のニューロン、例えば、線条体の中型有棘ニューロンおよび皮質ニューロンへの活性物質の送達を増大し得る。ＨＴＴ遺伝子を標的とするｓｉＲＮＡ二重鎖またはコード化ｄｓＲＮＡは、細胞の内側でＨＴＴ遺伝子発現（例えば、ｍＲＮＡレベル）を著しく阻害でき、細胞の内側のＨＴＴ発現誘導性ストレス、例えば、タンパク質の凝集および封入体の形成、フリーラジカルの増大、ミトコンドリア機能障害およびＲＮＡ代謝を低減する場合がある。
【０７６５】
本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする調節性ポリヌクレオチド配列を含むＡＡＶ粒子を、細胞に導入する方法が本開示において提供され、方法は、前記細胞にＡＡＶ粒子のいずれかを、標的ＨＴＴ  ｍＲＮＡの分解が生じるのに十分な量で導入し、それによって、細胞において標的特異的ＲＮＡｉを活性化する工程を含む。一部の態様では、細胞は、幹細胞、ニューロン、例えば、中型有棘または皮質ニューロン、筋肉細胞およびグリア細胞、例えば、アストロサイトであり得る。
【０７６６】
一部の実施形態では、本開示は、本明細書において記載されるプラスミドまたはＡＡＶベクターの治療有効量を、それを必要とする対象に投与することによって、ハンチントン舞踏病（ＨＤ）を処置するまたは緩解させる方法を提供する。
【０７６７】
一部の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする調節性ポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子は、ＨＤについて処置および／または改善するために使用され得る。
一部の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする調節性ポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子は、ＨＤを有する対象の認知および／または運動低下を低減するために使用される場合があり、低下量は、標準評価システム、例えば、これらに限定されないが、統一ハンチントン舞踏病評価尺度（ＵＨＤＲＳ）およびサブスコアおよび認知試験によって決定される。
【０７６８】
一部の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする調節性ポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子は、標準評価システム、例えば、これに限定されないが、総機能的能力（ＴＦＣ）尺度によって測定されるような、機能的能力および日常生活の活動の低下を低減するために使用され得る。
【０７６９】
一部の実施形態では、本開示は、処置を必要とする対象において、ＨＴＴ遺伝子および／またはＨＴＴタンパク質と関連付けられるハンチントン舞踏病を処置する、または寛解させる方法を提供し、方法は、対象に、ＨＴＴ遺伝子を標的とする少なくとも１つのｓｉＲＮＡ二重鎖をコードする調節性ポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子の薬学的に有効な量を投与して、ＨＴＴ遺伝子発現およびタンパク質産生を阻害することならびに対象のＨＤの症状を寛解させることを含む。
【０７７０】
一部の実施形態では、本開示のＡＡＶベクターは、処置を必要とする対象においてハンチントン舞踏病を処置する方法として使用され得る。前記対象（複数可）を同定するために、処置を必要とする対象を規定するための当技術分野で公知の任意の方法が使用され得る。対象は、ハンチントン舞踏病の臨床診断を有し得る、または症状が出る前であり得る。これらに限定されないが、認知評価および／または神経学的もしくは精神神経的実験、運動試験、感覚試験、精神医学的評価、脳画像化、家族歴および／または遺伝子検査を含め、ＨＤを診断するための任意の公知の方法が利用され得る。
【０７７１】
一部の実施形態では、ＨＤ対象選択は、ハンチントン舞踏病の予後指数またはその誘導物を使用して決定される（その内容をその全体で本願明細書に援用する、ロング  ジェイディーら（Ｌｏｎｇ  ＪＤ  ｅｔ  ａｌ．）、Ｍｏｖｅｍｅｎｔ  Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ、２０１７、３２（２）、２５６−２６３）。この予後指数は、４つの成分を使用して、運動診断の可能性を予測する、（１）統一ハンチントン舞踏病評価尺度（ＵＨＤＲＳ）からの総運動スコア（ＴＭＳ）、（２）符号数字モダリティー検査（ＳＤＭＴ）、（３）ベースライン年齢および（４）シトシン−アデニン−グアニン（ＣＡＧ）拡大増殖。
【０７７２】
一部の実施形態では、ハンチントン舞踏病の予後指数は、以下の式：ＰＩＨＤ＝５１×ＴＭＳ＋（−３４）×ＳＤＭＴ＋７×年齢×（ＣＡＧ−３４）を用いて算出され、ＰＩＨＤのより大きい値は、診断または症状の発生のより大きいリスクを示す。
【０７７３】
別の実施形態では、ハンチントン舞踏病の予後指数は、５０％  １０年生存に関連して解釈されるべき標準偏差単位をもたらす以下の正規化された式を用いて算出され：ＰＩＮＨＤ＝（ＰＩＨＤ−８８３）／１０４４、ここで、ＰＩＮＨＤ＜０は、５０％より大きい１０年生存を示し、ＰＩＮＨＤ＞０は、５０％未満の１０年生存を示唆する。
【０７７４】
一部の実施形態では、予後指数は、数年以内にＨＤの症状を発症するであろうが、未だ臨床的に診断可能な症状を有さない対象を同定するために使用され得る。さらに、これらの無症候性患者は、無症候性期間の間の本開示のＡＡＶベクターおよび組成物を使用する処置のために選択され、受けることができる。
【０７７５】
一部の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、バイオマーカー評価を受けている対象に投与され得る。ＨＤの不顕性期および早期進行の血液中の潜在的なバイオマーカーとして、これらに限定されないが、８−ＯｈｄＧ酸化ストレスマーカー、代謝マーカー（例えば、クレアチンキナーゼ、分岐鎖アミノ酸）、コレステロール代謝産物（例えば、２４−ＯＨコレステロール）、免疫および炎症タンパク質（例えば、クラスタリン、補体成分、インターロイキン６および８）、遺伝子発現変化（例えば、トランスクリプトームマーカー）、内分泌マーカー（例えば、コルチゾール、グレリンおよびレプチン）、ＢＤＮＦ、アデノシン２Ａ受容体が挙げられる。ＨＤの不顕性期および早期進行の脳画像化の潜在的なバイオマーカーとして、これらに限定されないが、線条体の容積、皮質下白質容積、皮質厚、全脳および脳室容積、機能的画像化（例えば、機能的ＭＲＩ）、ＰＥＴ（例えば、フルオロデオキシグルコースを用いる）および磁気共鳴分光法（例えば、乳酸塩）が挙げられる。ハンチントンの測定とは別に、他の潜在的なバイオマーカーの中に、神経変性の潜在的なマーカーである神経フィラメント軽鎖があり、脳脊髄液などの生体液中で、または神経画像化アプローチを使用して評価され得る。ＨＤの不顕性期および早期進行の定量的臨床ツールの潜在的なバイオマーカーとして、これらに限定されないが、定量的運動評価、運動生理学的評価（例えば、経頭蓋磁気刺激）および定量的眼球運動測定が挙げられる。定量的臨床バイオマーカー評価の非限定的な例として、舌力変動、メトロノーム誘導タッピング、グリップ力、眼球運動評価および認知テストが挙げられる。多施設観察研究の非限定的な例として、ＰＲＥＤＩＣＴ−ＨＤおよびＴＲＡＣＫ−ＨＤが挙げられる。対象は、ＨＤの症状を有し得る、ＨＤと診断され得る、またはＨＤについて無症候性であり得る。
【０７７６】
一部の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、神経画像化を使用してバイオマーカー評価を受けている対象に投与され得る。対象は、ＨＤの症状を有し得る、ＨＤと診断され得る、またはＨＤについて無症候性であり得る。
【０７７７】
一部の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、ＨＤについて無症候性である対象に投与され得る。対象は、無症候性であり得るが、ＨＤのリスクにあるか否かを決定するために予測的遺伝子検査もしくはバイオマーカー評価を受けている場合がある、および／または対象は、ＨＤと診断されている家族の一員（例えば、母、父、兄弟、姉妹、甥、叔父、祖父母）を有し得る。
【０７７８】
一部の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、ＨＤの早期段階にある対象に投与され得る。早期段階では、対象は、協調、随意運動の一部（舞踏病）のわずかな変化、易刺激性および鬱病などの気分の変化、問題解決能力の低下、普通の日常生活において機能する人の能力の低減を有する。
【０７７９】
一部の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、ＨＤの中期段階にある対象に投与され得る。中期段階では、対象は、運動障害の増大、言語能力の消失、嚥下困難を有し、通常の活動を行うことが困難となる。この段階で、対象は、随意運動の制御を維持することを保持する作業療法士および理学療法士を有する場合があり、対象は、言語病理学者を有する場合がある。
【０７８０】
一部の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、ＨＤの後期段階にある対象に投与され得る。後期段階では、ＨＤを有する対象は、もはや歩行できず、話すことができないので、ケアを他者にほぼ完全にまたは完全に依存する。対象は、一般に、言語を依然として理解でき、家族および友人を承知していが、窒息が大きな懸案事項である。
【０７８１】
一部の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、ＨＤの発症が２０歳より以前、早ければ２歳である若年型のＨＤを有する対象を処置するために使用され得る。
一部の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、ＨＴＴ遺伝子が４１以上のＣＡＧリピート（例えば、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０または９０より多いＣＡＧリピート）を有する完全浸透型ＨＤを有するＨＤを有する対象を処置するために使用され得る。
【０７８２】
一部の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、ＨＴＴ遺伝子が３６から４０の間のＣＡＧリピート（例えば、３６、３７、３８、３９および４０のＣＡＧリピート）を有する不完全浸透率を有するＨＤを有する対象を処置するために使用され得る。
【０７８３】
一部の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする調節性ポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子を含む組成物は、対象の中枢神経系に投与される。他の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする調節性ポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子を含む組成物は、対象の組織（例えば、対象の脳）に投与される。
【０７８４】
一部の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする調節性ポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子は、これらに限定されないが、中型有棘または皮質ニューロンを含むニューロン；乏突起膠細胞、アストロサイトおよびミクログリアを含むグリア細胞ならびに／またはＴ細胞などのニューロンの周囲の他の細胞を含む特定の種類の標的とされる細胞中に送達され得る。
【０７８５】
一部の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする調節性ポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子は、線条体中のニューロンおよび／または皮質のニューロンに送達され得る。
【０７８６】
一部の実施形態では、ＨＤを処置するための本開示の組成物は、必要とする対象に、静脈内に、筋肉内に、皮下に、腹膜内に、実質内に、軟膜下に、くも膜下腔内におよび／または脳室内に投与され、ｓｉＲＮＡ分子またはｓｉＲＮＡ分子を含むベクターが、血液脳関門および血液脊髄関門のうち一方もしくは両方を通過すること、または脳および／もしくは脊髄に直接接近することを可能にする。一部の態様では、方法は、本開示のｓｉＲＮＡ分子の核酸配列をコードするＡＡＶ粒子を含む組成物の治療有効量を、（例えば、注入ポンプおよび／または送達スキャフォールドを使用して）対象の中枢神経系（ＣＮＳ）へ直接投与すること（例えば、実質内投与、軟膜下投与、脳室内投与および／またはくも膜下腔内投与）を含む。ベクターは、ＨＴＴ遺伝子発現をサイレンシングまたは抑制する、および／または対象においてＨＤの１つまたは複数の症状を低減し、その結果、ＨＤが治療上処置されるために使用され得る。
【０７８７】
一部の実施形態では、ｓｉＲＮＡ分子またはこのようなｓｉＲＮＡ分子を含むＡＡＶベクターは、例えば、対象の白質への注入によって対象の中枢神経系に直接的に導入され得る。理論により束縛されることは望まないが、直接白質注入による分布は、ハンチントン舞踏病を有する対象では損なわれている可能性がある軸索輸送機序とは独立したものである場合があり、これは、白質注入が、ＡＡＶベクターのより多くの輸送を可能にし得ることを意味する。
【０７８８】
一部の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする調節性ポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子を含む組成物は、対象の中枢神経系に実質内注射によって投与される。
一部の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする調節性ポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子組成物は、対象の中枢神経系に実質内注射およびくも膜下腔内注射によって投与される。
【０７８９】
一部の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする調節性ポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子組成物は、対象の中枢神経系に実質内注射および脳室内注射によって投与される。
【０７９０】
一部の実施形態では、ＨＤを処置するための本開示の組成物は、必要とする対象に実質内投与によって投与される。
一部の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする調節性ポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子組成物は、対象の中枢神経系に、例えば、被殻への注入によって直接的に導入され得る。
【０７９１】
一部の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする調節性ポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子組成物は、対象の中枢神経系に、例えば、対象の視床への注入によって直接的に導入され得る。理論により束縛されることは望まないが、視床は、ハンチントン舞踏病を有する対象において比較的温存される脳の分野であり、これは、ＡＡＶベクターの軸索輸送によって、より広い皮質形質導入を可能にする可能性があることを意味する。
【０７９２】
一部の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする調節性ポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子組成物は、対象の中枢神経系に、例えば、静脈内投与によって間接的に導入され得る。
【０７９３】
一部の実施形態では、本明細書において記載されるＡＡＶ粒子は、被殻および視床注入によって投与される。被殻および視床への二重注入は、独立に両側性または片側性であり得る。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、脳の両側に由来する被殻および視床に注入され得る。別の非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、左被殻および左視床に、または右被殻および右視床に注入され得る。さらに別の非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、左被殻および右視床、または右被殻および左視床に注入され得る。二重注入は逐次または同時に起こり得る。
【０７９４】
中程度のＨＴＴ発現
一部の実施形態では、対象へのＡＡＶ粒子の投与は、対象におけるＨＴＴの発現を低減し、ＨＴＴの発現の低減は、対象におけるＨＤの効果を低減する。
【０７９５】
一部の実施形態では、ひとたび発現され、ＨＴＴタンパク質を発現する細胞と接触するコード化ｄｓＲＮＡは、ＨＴＴタンパク質の発現を、例えば、本明細書において記載される方法によってアッセイされた場合に、少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％または少なくとも４０％またはそれより多く阻害する。
【０７９６】
一部の実施形態では、対象への本開示のｓｉＲＮＡをコードする調節性ポリヌクレオチド配列を含むＡＡＶ粒子の投与は、対象においてＨＴＴ（例えば、突然変異体ＨＴＴ、野生型ＨＴＴならびに／または突然変異体および野生型ＨＴＴ）を低下させ得る。一部の実施形態では、対象へのＡＡＶ粒子の投与は、対象において野生型ＨＴＴを低下させ得る。さらに別の実施形態では、対象へのＡＡＶ粒子の投与は、対象において突然変異体ＨＴＴおよび野生型ＨＴＴの両方を低下させ得る。突然変異体および／または野生型ＨＴＴは、対象、例えば、これらに限定されないが、対象のＣＮＳ、ＣＮＳの領域またはＣＮＳの特定の細胞において約２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％または少なくとも２０〜３０％、２０〜４０％、２０〜５０％、２０〜６０％、２０〜７０％、２０〜８０％、２０〜９０％、２０〜９５％、２０〜１００％、３０〜４０％、３０〜５０％、３０〜６０％、３０〜７０％、３０〜８０％、３０〜９０％、３０〜９５％、３０〜１００％、４０〜５０％、４０〜６０％、４０〜７０％、４０〜８０％、４０〜９０％、４０〜９５％、４０〜１００％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜９０％、５０〜９５％、５０〜１００％、６０〜７０％、６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９５％、６０〜１００％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９５％、７０〜１００％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜１００％、９０〜９５％、９０〜１００％または９５〜１００％低下され得る。突然変異体ＨＴＴは、対象、例えば、これらに限定されないが、対象のＣＮＳ、ＣＮＳの領域またはＣＮＳの特定の細胞において約２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％または少なくとも２０〜３０％、２０〜４０％、２０〜５０％、２０〜６０％、２０〜７０％、２０〜８０％、２０〜９０％、２０〜９５％、２０〜１００％、３０〜４０％、３０〜５０％、３０〜６０％、３０〜７０％、３０〜８０％、３０〜９０％、３０〜９５％、３０〜１００％、４０〜５０％、４０〜６０％、４０〜７０％、４０〜８０％、４０〜９０％、４０〜９５％、４０〜１００％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜９０％、５０〜９５％、５０〜１００％、６０〜７０％、６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９５％、６０〜１００％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９５％、７０〜１００％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜１００％、９０〜９５％、９０〜１００％または９５〜１００％低下され得る。野生型ＨＴＴは、対象、例えば、これらに限定されないが、対象のＣＮＳ、ＣＮＳの領域またはＣＮＳの特定の細胞において約２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％または少なくとも２０〜３０％、２０〜４０％、２０〜５０％、２０〜６０％、２０〜７０％、２０〜８０％、２０〜９０％、２０〜９５％、２０〜１００％、３０〜４０％、３０〜５０％、３０〜６０％、３０〜７０％、３０〜８０％、３０〜９０％、３０〜９５％、３０〜１００％、４０〜５０％、４０〜６０％、４０〜７０％、４０〜８０％、４０〜９０％、４０〜９５％、４０〜１００％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜９０％、５０〜９５％、５０〜１００％、６０〜７０％、６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９５％、６０〜１００％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９５％、７０〜１００％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜１００％、９０〜９５％、９０〜１００％または９５〜１００％低下され得る。突然変異体および野生型ＨＴＴは、対象、例えば、これらに限定されないが、対象のＣＮＳ、ＣＮＳの領域またはＣＮＳの特定の細胞において約２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％または少なくとも２０〜３０％、２０〜４０％、２０〜５０％、２０〜６０％、２０〜７０％、２０〜８０％、２０〜９０％、２０〜９５％、２０〜１００％、３０〜４０％、３０〜５０％、３０〜６０％、３０〜７０％、３０〜８０％、３０〜９０％、３０〜９５％、３０〜１００％、４０〜５０％、４０〜６０％、４０〜７０％、４０〜８０％、４０〜９０％、４０〜９５％、４０〜１００％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜９０％、５０〜９５％、５０〜１００％、６０〜７０％、６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９５％、６０〜１００％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９５％、７０〜１００％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜１００％、９０〜９５％、９０〜１００％または９５〜１００％低下され得る。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、中型有棘ニューロンにおいてＨＴＴの発現を少なくとも５０％低下し得る。非限定的な例として、ベクター、例えば、ＡＡＶベクターは、中型有棘ニューロンにおいてＨＴＴの発現を少なくとも４０％低下し得る。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、被殻の中型有棘ニューロンにおいてＨＴＴの発現を少なくとも４０％低下し得る。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、被殻の中型有棘ニューロンにおいてＨＴＴの発現を少なくとも３０％低下し得る。さらに別の非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、被殻および皮質におけるＨＴＴの発現を少なくとも４０％低下し得る。さらに別の非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、被殻および皮質におけるＨＴＴの発現を少なくとも３０％低下し得る。さらに別の非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、被殻におけるＨＴＴの発現を少なくとも３０％低下し得る。さらに別の非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、被殻におけるＨＴＴの発現を少なくとも３０％および皮質において少なくとも１５％低下し得る。
【０７９７】
一部の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、ＨＴＴタンパク質の発現を少なくとも約３０％、３１％、３２％、３３％、３４％、３５％、３６％、３７％、３８％、３９％、４０％、４１％、４２％、４３％、４４％、４５％、４６％、４７％、４８％、４９％、５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、５６％、５７％、５８％、５９％、６０％、６１％、６２％、６３％、６４％、６５％、６６％、６７％、６８％、６９％、７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％または少なくとも２０〜３０％、２０〜４０％、２０〜５０％、２０〜６０％、２０〜７０％、２０〜８０％、２０〜９０％、２０〜９５％、２０〜１００％、３０〜４０％、３０〜５０％、３０〜６０％、３０〜７０％、３０〜８０％、３０〜９０％、３０〜９５％、３０〜１００％、４０〜５０％、４０〜６０％、４０〜７０％、４０〜８０％、４０〜９０％、４０〜９５％、４０〜１００％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜９０％、５０〜９５％、５０〜１００％、５５〜６０％、５５〜７０％、５５〜８０％、５５〜９０％、５５〜９５％、５５〜１００％、６０〜７０％、６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９５％、６０〜１００％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９５％、７０〜１００％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜１００％、９０〜９５％、９０〜１００％または９５〜１００％低減するために使用され得る。非限定的な例として、ＨＴＴタンパク質発現の発現は、５０〜９０％低減され得る。非限定的な例として、ＨＴＴタンパク質発現の発現は、３０〜７０％低減され得る。
【０７９８】
一部の実施形態では、ｓｉＲＮＡ二重鎖またはコード化ｄｓＲＮＡは、ＨＴＴ  ｍＲＮＡの発現を少なくとも約３０％、３１％、３２％、３３％、３４％、３５％、３６％、３７％、３８％、３９％、４０％、４１％、４２％、４３％、４４％、４５％、４６％、４７％、４８％、４９％、５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、５６％、５７％、５８％、５９％、６０％、６１％、６２％、６３％、６４％、６５％、６６％、６７％、６８％、６９％、７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％または少なくとも２０〜３０％、２０〜４０％、２０〜５０％、２０〜６０％、２０〜７０％、２０〜８０％、２０〜９０％、２０〜９５％、２０〜１００％、３０〜４０％、３０〜５０％、３０〜６０％、３０〜７０％、３０〜８０％、３０〜９０％、３０〜９５％、３０〜１００％、４０〜５０％、４０〜６０％、４０〜７０％、４０〜８０％、４０〜９０％、４０〜９５％、４０〜１００％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜８５％、５０〜９０％、５０〜９５％、５０〜１００％、５５〜６０％、５５〜７０％、５５〜８０％、５５〜９０％、５５〜９５％、５５〜１００％、６０〜７０％、６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９５％、６０〜１００％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９５％、７０〜１００％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜１００％、９０〜９５％、９０〜１００％または９５〜１００％低減するために使用され得る。非限定的な例として、ＨＴＴ  ｍＲＮＡの発現は、５０〜９０％低減され得る。非限定的な例として、ＨＴＴ  ｍＲＮＡの発現は、３０〜７０％低減され得る。非限定的な例として、ＨＴＴ  ｍＲＮＡの発現は、４０〜７０％低減され得る。非限定的な例として、ＨＴＴ  ｍＲＮＡの発現は、５０〜８０％低減され得る。非限定的な例として、ＨＴＴ  ｍＲＮＡの発現は、５０〜８５％低減され得る。非限定的な例として、ＨＴＴ  ｍＲＮＡの発現は、６０〜９０％低減され得る。
【０７９９】
一部の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、対象においてＨＴＴタンパク質を減少させるために使用され得る。減少は、独立に５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％または９５％より多く、５〜１５％、５〜２０％、５〜２５％、５〜３０％、５〜３５％、５〜４０％、５〜４５％、５〜５０％、５〜５５％、５〜６０％、５〜６５％、５〜７０％、５〜７５％、５〜８０％、５〜８５％、５〜９０％、５〜９５％、１０〜２０％、１０〜２５％、１０〜３０％、１０〜３５％、１０〜４０％、１０〜４５％、１０〜５０％、１０〜５５％、１０〜６０％、１０〜６５％、１０〜７０％、１０〜７５％、１０〜８０％、１０〜８５％、１０〜９０％、１０〜９５％、１５〜２５％、１５〜３０％、１５〜３５％、１５〜４０％、１５〜４５％、１５〜５０％、１５〜５５％、１５〜６０％、１５〜６５％、１５〜７０％、１５〜７５％、１５〜８０％、１５〜８５％、１５〜９０％、１５〜９５％、２０〜３０％、２０〜３５％、２０〜４０％、２０〜４５％、２０〜５０％、２０〜５５％、２０〜６０％、２０〜６５％、２０〜７０％、２０〜７５％、２０〜８０％、２０〜８５％、２０〜９０％、２０〜９５％、２５〜３５％、２５〜４０％、２５〜４５％、２５〜５０％、２５〜５５％、２５〜６０％、２５〜６５％、２５〜７０％、２５〜７５％、２５〜８０％、２５〜８５％、２５〜９０％、２５〜９５％、３０〜４０％、３０〜４５％、３０〜５０％、３０〜５５％、３０〜６０％、３０〜６５％、３０〜７０％、３０〜７５％、３０〜８０％、３０〜８５％、３０〜９０％、３０〜９５％、３５〜４５％、３５〜５０％、３５〜５５％、３５〜６０％、３５〜６５％、３５〜７０％、３５〜７５％、３５〜８０％、３５〜８５％、３５〜９０％、３５〜９５％、４０〜５０％、４０〜５５％、４０〜６０％、４０〜６５％、４０〜７０％、４０〜７５％、４０〜８０％、４０〜８５％、４０〜９０％、４０〜９５％、４５〜５５％、４５〜６０％、４５〜６５％、４５〜７０％、４５〜７５％、４５〜８０％、４５〜８５％、４５〜９０％、４５〜９５％、５０〜６０％、５０〜６５％、５０〜７０％、５０〜７５％、５０〜８０％、５０〜８５％、５０〜９０％、５０〜９５％、５５〜６５％、５５〜７０％、５５〜７５％、５５〜８０％、５５〜８５％、５５〜９０％、５５〜９５％、６０〜７０％、６０〜７５％、６０〜８０％、６０〜８５％、６０〜９０％、６０〜９５％、６５〜７５％、６５〜８０％、６５〜８５％、６５〜９０％、６５〜９５％、７０〜８０％、７０〜８５％、７０〜９０％、７０〜９５％、７５〜８５％、７５〜９０％、７５〜９５％、８０〜９０％、８０〜９５％、または９０〜９５％であり得る。非限定的な例として、対象は、ＨＴＴタンパク質の５０％減少を有し得る。非限定的な例として、対象は、ＨＴＴタンパク質の７０％の減少および野生型ＨＴＴタンパク質の１０％の減少を有し得る。非限定的な例として、被殻の中型有棘ニューロンにおけるＨＴＴの減少は、約４０％であり得る。非限定的な例として、尾状核のニューロンにおけるＨＴＴの減少は、約３０％であり得る。非限定的な例として、視床のニューロンにおけるＨＴＴの減少は、約４０％であり得る。非限定的な例として、皮質におけるＨＴＴの減少は、約２０％であり得る。非限定的な例として、一次運動および体性感覚皮質の錐体ニューロンにおけるＨＴＴの減少は、約３０％であり得る。非限定的な例として、被殻および皮質におけるＨＴＴの減少は、約４０％であり得る。非限定的な例として、被殻、尾状核および皮質におけるＨＴＴの減少は、約４０％であり得る。非限定的な例として、被殻、尾状核、皮質および視床におけるＨＴＴの減少は、約４０％であり得る。非限定的な例として、被殻の中型有棘ニューロンにおけるＨＴＴの減少は、４０％〜７０％であり得る。非限定的な例として、尾状核のニューロンにおけるＨＴＴの減少は、３０％〜７０％であり得る。非限定的な例として、被殻および皮質におけるＨＴＴの減少は、４０％〜７０％であり得る。非限定的な例として、被殻、尾状核および皮質におけるＨＴＴの減少は、４０％〜７０％であり得る。非限定的な例として、被殻、尾状核、皮質および視床におけるＨＴＴの減少は、４０％〜８０％であり得る。
【０８００】
一部の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、対象において野生型ＨＴＴタンパク質を減少させるために使用され得る。減少は、独立に、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９５％より多く、５〜１５％、５〜２０％、５〜２５％、５〜３０％、５〜３５％、５〜４０％、５〜４５％、５〜５０％、５〜５５％、５〜６０％、５〜６５％、５〜７０％、５〜７５％、５〜８０％、５〜８５％、５〜９０％、５〜９５％、１０〜２０％、１０〜２５％、１０〜３０％、１０〜３５％、１０〜４０％、１０〜４５％、１０〜５０％、１０〜５５％、１０〜６０％、１０〜６５％、１０〜７０％、１０〜７５％、１０〜８０％、１０〜８５％、１０〜９０％、１０〜９５％、１５〜２５％、１５〜３０％、１５〜３５％、１５〜４０％、１５〜４５％、１５〜５０％、１５〜５５％、１５〜６０％、１５〜６５％、１５〜７０％、１５〜７５％、１５〜８０％、１５〜８５％、１５〜９０％、１５〜９５％、２０〜３０％、２０〜３５％、２０〜４０％、２０〜４５％、２０〜５０％、２０〜５５％、２０〜６０％、２０〜６５％、２０〜７０％、２０〜７５％、２０〜８０％、２０〜８５％、２０〜９０％、２０〜９５％、２５〜３５％、２５〜４０％、２５〜４５％、２５〜５０％、２５〜５５％、２５〜６０％、２５〜６５％、２５〜７０％、２５〜７５％、２５〜８０％、２５〜８５％、２５〜９０％、２５〜９５％、３０〜４０％、３０〜４５％、３０〜５０％、３０〜５５％、３０〜６０％、３０〜６５％、３０〜７０％、３０〜７５％、３０〜８０％、３０〜８５％、３０〜９０％、３０〜９５％、３５〜４５％、３５〜５０％、３５〜５５％、３５〜６０％、３５〜６５％、３５〜７０％、３５〜７５％、３５〜８０％、３５〜８５％、３５〜９０％、３５〜９５％、４０〜５０％、４０〜５５％、４０〜６０％、４０〜６５％、４０〜７０％、４０〜７５％、４０〜８０％、４０〜８５％、４０〜９０％、４０〜９５％、４５〜５５％、４５〜６０％、４５〜６５％、４５〜７０％、４５〜７５％、４５〜８０％、４５〜８５％、４５〜９０％、４５〜９５％、５０〜６０％、５０〜６５％、５０〜７０％、５０〜７５％、５０〜８０％、５０〜８５％、５０〜９０％、５０〜９５％、５５〜６５％、５５〜７０％、５５〜７５％、５５〜８０％、５５〜８５％、５５〜９０％、５５〜９５％、６０〜７０％、６０〜７５％、６０〜８０％、６０〜８５％、６０〜９０％、６０〜９５％、６５〜７５％、６５〜８０％、６５〜８５％、６５〜９０％、６５〜９５％、７０〜８０％、７０〜８５％、７０〜９０％、７０〜９５％、７５〜８５％、７５〜９０％、７５〜９５％、８０〜９０％、８０〜９５％、または９０〜９５％であり得る。非限定的な例として、対象は、野生型ＨＴＴタンパク質の５０％減少を有し得る。非限定的な例として、被殻の中型有棘ニューロンにおける野生型ＨＴＴの減少は、約４０％であり得る。非限定的な例として、尾状核のニューロンにおける野生型ＨＴＴの減少は、約３０％であり得る。非限定的な例として、視床のニューロンにおける野生型ＨＴＴの減少は、約４０％であり得る。非限定的な例として、皮質における野生型ＨＴＴの減少は、約２０％であり得る。非限定的な例として、一次運動および体性感覚皮質の錐体ニューロンにおける野生型ＨＴＴの減少は、約３０％であり得る。非限定的な例として、被殻および皮質における野生型ＨＴＴの減少は、約４０％であり得る。非限定的な例として、被殻、尾状核および皮質における野生型ＨＴＴの減少は、約４０％であり得る。非限定的な例として、被殻、尾状核、皮質および視床における野生型ＨＴＴの減少は、約４０％であり得る。非限定的な例として、被殻の中型有棘ニューロンにおける野生型ＨＴＴの減少は、４０％〜７０％であり得る。非限定的な例として、尾状核のニューロンにおける野生型ＨＴＴの減少は、３０％〜７０％であり得る。非限定的な例として、被殻および皮質における野生型ＨＴＴの減少は、４０％〜７０％であり得る。非限定的な例として、被殻、尾状核および皮質における野生型ＨＴＴの減少は、４０％〜７０％であり得る。非限定的な例として、被殻、尾状核、皮質および視床における野生型ＨＴＴの減少は、４０％〜８０％であり得る。
【０８０１】
一部の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、対象において突然変異体ＨＴＴタンパク質を減少させるために使用され得る。減少は、独立に、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％または９５％より多く、５〜１５％、５〜２０％、５〜２５％、５〜３０％、５〜３５％、５〜４０％、５〜４５％、５〜５０％、５〜５５％、５〜６０％、５〜６５％、５〜７０％、５〜７５％、５〜８０％、５〜８５％、５〜９０％、５〜９５％、１０〜２０％、１０〜２５％、１０〜３０％、１０〜３５％、１０〜４０％、１０〜４５％、１０〜５０％、１０〜５５％、１０〜６０％、１０〜６５％、１０〜７０％、１０〜７５％、１０〜８０％、１０〜８５％、１０〜９０％、１０〜９５％、１５〜２５％、１５〜３０％、１５〜３５％、１５〜４０％、１５〜４５％、１５〜５０％、１５〜５５％、１５〜６０％、１５〜６５％、１５〜７０％、１５〜７５％、１５〜８０％、１５〜８５％、１５〜９０％、１５〜９５％、２０〜３０％、２０〜３５％、２０〜４０％、２０〜４５％、２０〜５０％、２０〜５５％、２０〜６０％、２０〜６５％、２０〜７０％、２０〜７５％、２０〜８０％、２０〜８５％、２０〜９０％、２０〜９５％、２５〜３５％、２５〜４０％、２５〜４５％、２５〜５０％、２５〜５５％、２５〜６０％、２５〜６５％、２５〜７０％、２５〜７５％、２５〜８０％、２５〜８５％、２５〜９０％、２５〜９５％、３０〜４０％、３０〜４５％、３０〜５０％、３０〜５５％、３０〜６０％、３０〜６５％、３０〜７０％、３０〜７５％、３０〜８０％、３０〜８５％、３０〜９０％、３０〜９５％、３５〜４５％、３５〜５０％、３５〜５５％、３５〜６０％、３５〜６５％、３５〜７０％、３５〜７５％、３５〜８０％、３５〜８５％、３５〜９０％、３５〜９５％、４０〜５０％、４０〜５５％、４０〜６０％、４０〜６５％、４０〜７０％、４０〜７５％、４０〜８０％、４０〜８５％、４０〜９０％、４０〜９５％、４５〜５５％、４５〜６０％、４５〜６５％、４５〜７０％、４５〜７５％、４５〜８０％、４５〜８５％、４５〜９０％、４５〜９５％、５０〜６０％、５０〜６５％、５０〜７０％、５０〜７５％、５０〜８０％、５０〜８５％、５０〜９０％、５０〜９５％、５５〜６５％、５５〜７０％、５５〜７５％、５５〜８０％、５５〜８５％、５５〜９０％、５５〜９５％、６０〜７０％、６０〜７５％、６０〜８０％、６０〜８５％、６０〜９０％、６０〜９５％、６５〜７５％、６５〜８０％、６５〜８５％、６５〜９０％、６５〜９５％、７０〜８０％、７０〜８５％、７０〜９０％、７０〜９５％、７５〜８５％、７５〜９０％、７５〜９５％、８０〜９０％、８０〜９５％、または９０〜９５％であり得る。非限定的な例として、対象は、突然変異体ＨＴＴタンパク質の５０％減少を有し得る。非限定的な例として、被殻の中型有棘ニューロンにおける突然変異体ＨＴＴの減少は、約４０％であり得る。非限定的な例として、尾状核のニューロンにおける突然変異体ＨＴＴの減少は、約３０％であり得る。非限定的な例として、視床のニューロンにおける突然変異体ＨＴＴの減少は、約４０％であり得る。非限定的な例として、皮質における突然変異体ＨＴＴの減少は、約２０％であり得る。非限定的な例として、一次運動および体性感覚皮質の錐体ニューロンにおける突然変異体ＨＴＴの減少は、約３０％であり得る。非限定的な例として、被殻および皮質における突然変異体ＨＴＴの減少は、約４０％であり得る。非限定的な例として、被殻、尾状核および皮質における突然変異体ＨＴＴの減少は、約４０％であり得る。非限定的な例として、被殻、尾状核、皮質および視床における突然変異体ＨＴＴの減少は、約４０％であり得る。非限定的な例として、被殻の中型有棘ニューロンにおける突然変異体ＨＴＴの減少は、４０％〜７０％であり得る。非限定的な例として、尾状核のニューロンにおける突然変異体ＨＴＴの減少は、３０％〜７０％であり得る。非限定的な例として、被殻および皮質における突然変異体ＨＴＴの減少は、４０％〜７０％であり得る。非限定的な例として、被殻、尾状核および皮質における突然変異体ＨＴＴの減少は、４０％〜７０％であり得る。非限定的な例として、被殻、尾状核、皮質および視床における突然変異体ＨＴＴの減少は、４０％〜８０％であり得る。
【０８０２】
一部の実施形態では、本開示は、細胞においてＨＴＴ遺伝子発現を阻害／サイレンシングする方法を提供する。したがって、ｓｉＲＮＡ二重鎖またはコード化ｄｓＲＮＡは、細胞において、特に、ニューロンにおいてＨＴＴ遺伝子発現を実質的に阻害するために使用され得る。一部の態様では、ＨＴＴ遺伝子発現の阻害とは、少なくとも約２０％、例えば、少なくとも約３０％、３１％、３２％、３３％、３４％、３５％、３６％、３７％、３８％、３９％、４０％、４１％、４２％、４３％、４４％、４５％、４６％、４７％、４８％、４９％、５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、５６％、５７％、５８％、５９％、６０％、６１％、６２％、６３％、６４％、６５％、６６％、６７％、６８％、６９％、７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％または少なくとも２０〜３０％、２０〜４０％、２０〜５０％、２０〜６０％、２０〜７０％、２０〜８０％、２０〜９０％、２０〜９５％、２０〜１００％、３０〜４０％、３０〜５０％、３０〜６０％、３０〜７０％、３０〜８０％、３０〜９０％、３０〜９５％、３０〜１００％、４０〜５０％、４０〜６０％、４０〜７０％、４０〜８０％、４０〜９０％、４０〜９５％、４０〜１００％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜９０％、５０〜９５％、５０〜１００％、５５〜６０％、５５〜７０％、５５〜８０％、５５〜９０％、５５〜９５％、５５〜１００％、６０〜７０％、６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９５％、６０〜１００％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９５％、７０〜１００％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜１００％、９０〜９５％、９０〜１００％または９５〜１００％の阻害を指す。したがって、標的とされる遺伝子のタンパク質産物は、少なくとも約２０％、好ましくは、少なくとも約３０％、３１％、３２％、３３％、３４％、３５％、３６％、３７％、３８％、３９％、４０％、４１％、４２％、４３％、４４％、４５％、４６％、４７％、４８％、４９％、５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、５６％、５７％、５８％、５９％、６０％、６１％、６２％、６３％、６４％、６５％、６６％、６７％、６８％、６９％、７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％または少なくとも２０〜３０％、２０〜４０％、２０〜５０％、２０〜６０％、２０〜７０％、２０〜８０％、２０〜９０％、２０〜９５％、２０〜１００％、３０〜４０％、３０〜５０％、３０〜６０％、３０〜７０％、３０〜８０％、３０〜９０％、３０〜９５％、３０〜１００％、４０〜５０％、４０〜６０％、４０〜７０％、４０〜８０％、４０〜９０％、４０〜９５％、４０〜１００％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜９０％、５０〜９５％、５０〜１００％、６０〜７０％、６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９５％、６０〜１００％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９５％、７０〜１００％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜１００％、９０〜９５％、９０〜１００％または９５〜１００％阻害され得る。
【０８０３】
一部の実施形態では、本開示は、細胞において、特に、中型有棘ニューロンにおいてＨＴＴ遺伝子発現を阻害／サイレンシングする方法を提供する。一部の態様では、ＨＴＴ遺伝子発現の阻害とは、少なくとも約２０％、例えば、少なくとも約３０％、３１％、３２％、３３％、３４％、３５％、３６％、３７％、３８％、３９％、４０％、４１％、４２％、４３％、４４％、４５％、４６％、４７％、４８％、４９％、５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、５６％、５７％、５８％、５９％、６０％、６１％、６２％、６３％、６４％、６５％、６６％、６７％、６８％、６９％、７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％または少なくとも２０〜３０％、２０〜４０％、２０〜５０％、２０〜６０％、２０〜７０％、２０〜８０％、２０〜９０％、２０〜９５％、２０〜１００％、３０〜４０％、３０〜５０％、３０〜６０％、３０〜７０％、３０〜８０％、３０〜９０％、３０〜９５％、３０〜１００％、４０〜５０％、４０〜６０％、４０〜７０％、４０〜８０％、４０〜９０％、４０〜９５％、４０〜１００％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜９０％、５０〜９５％、５０〜１００％、５５〜６０％、５５〜７０％、５５〜８０％、５５〜９０％、５５〜９５％、５５〜１００％、６０〜７０％、６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９５％、６０〜１００％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９５％、７０〜１００％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜１００％、９０〜９５％、９０〜１００％または９５〜１００％の阻害を指す。したがって、標的とされる遺伝子のタンパク質産物は、少なくとも約２０％、好ましくは、少なくとも約３０％、３１％、３２％、３３％、３４％、３５％、３６％、３７％、３８％、３９％、４０％、４１％、４２％、４３％、４４％、４５％、４６％、４７％、４８％、４９％、５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、５６％、５７％、５８％、５９％、６０％、６１％、６２％、６３％、６４％、６５％、６６％、６７％、６８％、６９％、７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％または少なくとも２０〜３０％、２０〜４０％、２０〜５０％、２０〜６０％、２０〜７０％、２０〜８０％、２０〜９０％、２０〜９５％、２０〜１００％、３０〜４０％、３０〜５０％、３０〜６０％、３０〜７０％、３０〜８０％、３０〜９０％、３０〜９５％、３０〜１００％、４０〜５０％、４０〜６０％、４０〜７０％、４０〜８０％、４０〜９０％、４０〜９５％、４０〜１００％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜９０％、５０〜９５％、５０〜１００％、５５〜６０％、５５〜７０％、５５〜８０％、５５〜９０％、５５〜９５％、５５〜１００％、６０〜７０％、６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９５％、６０〜１００％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９５％、７０〜１００％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜１００％、９０〜９５％、９０〜１００％または９５〜１００％阻害され得る。
【０８０４】
一部の実施形態では、本開示は、細胞において、特に、アストロサイトにおいてＨＴＴ遺伝子発現を阻害／サイレンシングする方法を提供する。一部の態様では、ＨＴＴ遺伝子発現の阻害とは、少なくとも約２０％、例えば、少なくとも約３０％、３１％、３２％、３３％、３４％、３５％、３６％、３７％、３８％、３９％、４０％、４１％、４２％、４３％、４４％、４５％、４６％、４７％、４８％、４９％、５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、５６％、５７％、５８％、５９％、６０％、６１％、６２％、６３％、６４％、６５％、６６％、６７％、６８％、６９％、７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％または少なくとも２０〜３０％、２０〜４０％、２０〜５０％、２０〜６０％、２０〜７０％、２０〜８０％、２０〜９０％、２０〜９５％、２０〜１００％、３０〜４０％、３０〜５０％、３０〜６０％、３０〜７０％、３０〜８０％、３０〜９０％、３０〜９５％、３０〜１００％、４０〜５０％、４０〜６０％、４０〜７０％、４０〜８０％、４０〜９０％、４０〜９５％、４０〜１００％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜９０％、５０〜９５％、５０〜１００％、５５〜６０％、５５〜７０％、５５〜８０％、５５〜９０％、５５〜９５％、５５〜１００％、６０〜７０％、６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９５％、６０〜１００％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９５％、７０〜１００％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜１００％、９０〜９５％、９０〜１００％または９５〜１００％の阻害を指す。したがって、標的とされる遺伝子のタンパク質産物は、少なくとも約２０％、好ましくは、少なくとも約３０％、３１％、３２％、３３％、３４％、３５％、３６％、３７％、３８％、３９％、４０％、４１％、４２％、４３％、４４％、４５％、４６％、４７％、４８％、４９％、５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、５６％、５７％、５８％、５９％、６０％、６１％、６２％、６３％、６４％、６５％、６６％、６７％、６８％、６９％、７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％または少なくとも２０〜３０％、２０〜４０％、２０〜５０％、２０〜６０％、２０〜７０％、２０〜８０％、２０〜９０％、２０〜９５％、２０〜１００％、３０〜４０％、３０〜５０％、３０〜６０％、３０〜７０％、３０〜８０％、３０〜９０％、３０〜９５％、３０〜１００％、４０〜５０％、４０〜６０％、４０〜７０％、４０〜８０％、４０〜９０％、４０〜９５％、４０〜１００％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜９０％、５０〜９５％、５０〜１００％、５５〜６０％、５５〜７０％、５５〜８０％、５５〜９０％、５５〜９５％、５５〜１００％、６０〜７０％、６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９５％、６０〜１００％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９５％、７０〜１００％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜１００％、９０〜９５％、９０〜１００％または９５〜１００％阻害され得る。
【０８０５】
一部の実施形態では、ｓｉＲＮＡ二重鎖またはコード化ｄｓＲＮＡは、ＣＮＳの少なくとも１つの領域、例えば、それだけに限られないが、中脳において、ＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現を低減するために使用され得る。ＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、ＣＮＳの少なくとも１つの領域において、少なくとも約３０％、３１％、３２％、３３％、３４％、３５％、３６％、３７％、３８％、３９％、４０％、４１％、４２％、４３％、４４％、４５％、４６％、４７％、４８％、４９％、５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、５６％、５７％、５８％、５９％、６０％、６１％、６２％、６３％、６４％、６５％、６６％、６７％、６８％、６９％、７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％または少なくとも２０〜３０％、２０〜４０％、２０〜５０％、２０〜６０％、２０〜７０％、２０〜８０％、２０〜９０％、２０〜９５％、２０〜１００％、３０〜４０％、３０〜５０％、３０〜６０％、３０〜７０％、３０〜８０％、３０〜９０％、３０〜９５％、３０〜１００％、４０〜５０％、４０〜６０％、４０〜７０％、４０〜８０％、４０〜９０％、４０〜９５％、４０〜１００％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜９０％、５０〜９５％、５０〜１００％、５５〜６０％、５５〜７０％、５５〜８０％、５５〜９０％、５５〜９５％、５５〜１００％、６０〜７０％、６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９５％、６０〜１００％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９５％、７０〜１００％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜１００％、９０〜９５％、９０〜１００％または９５〜１００％低減される。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は、５０〜９０％低減される。非限定的な例として、線条体におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は、４０〜５０％低減される。非限定的な例として、皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は、４０〜５０％低減される。非限定的な例として、皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は、３０〜７０％低減される。非限定的な例として、皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は、少なくとも３０％低減される。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は、４０〜７０％低減される。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は、４０〜５０％低減される。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は、５０〜７０％低減される。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は、５０〜６０％低減される。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は、５０％低減される。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は、５１％低減される。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は、５２％低減される。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は、５３％低減される。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は、５４％低減される。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は、５５％低減される。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は、５６％低減される。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は、５７％低減される。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は、５８％低減される。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は、５９％低減される。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は、６０％低減される。非限定的な例として、線条体、視床および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は、少なくとも２０％低減される。非限定的な例として、線条体、視床および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は、少なくとも３０％低減される。非限定的な例として、線条体、視床および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は、３０〜７０％低減される。非限定的な例として、線条体、視床および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は、４０〜８０％低減される。非限定的な例として、線条体、視床および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は、４０〜７０％低減される。非限定的な例として、線条体、視床および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は、４０〜６０％低減される。非限定的な例として、線条体、視床および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は、５０〜８０％低減される。非限定的な例として、線条体、視床および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は、５０〜７０％低減される。
【０８０６】
一部の実施形態では、本開示は、細胞において、特に、一次運動皮質または一次体性感覚皮質の錐体ニューロンにおいてＨＴＴ遺伝子発現を阻害／サイレンシングする方法を提供する。一部の態様では、ＨＴＴ遺伝子発現の阻害とは、少なくとも約２０％、例えば、少なくとも約３０％、３１％、３２％、３３％、３４％、３５％、３６％、３７％、３８％、３９％、４０％、４１％、４２％、４３％、４４％、４５％、４６％、４７％、４８％、４９％、５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、５６％、５７％、５８％、５９％、６０％、６１％、６２％、６３％、６４％、６５％、６６％、６７％、６８％、６９％、７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％または少なくとも２０〜３０％、２０〜４０％、２０〜５０％、２０〜６０％、２０〜７０％、２０〜８０％、２０〜９０％、２０〜９５％、２０〜１００％、３０〜４０％、３０〜５０％、３０〜６０％、３０〜７０％、３０〜８０％、３０〜９０％、３０〜９５％、３０〜１００％、４０〜５０％、４０〜６０％、４０〜７０％、４０〜８０％、４０〜９０％、４０〜９５％、４０〜１００％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜９０％、５０〜９５％、５０〜１００％、５５〜６０％、５５〜７０％、５５〜８０％、５５〜９０％、５５〜９５％、５５〜１００％、６０〜７０％、６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９５％、６０〜１００％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９５％、７０〜１００％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜１００％、９０〜９５％、９０〜１００％もしくは９５〜１００％の阻害を指す。したがって、標的とされる遺伝子のタンパク質産物は、少なくとも約２０％、好ましくは、少なくとも約３０％、３１％、３２％、３３％、３４％、３５％、３６％、３７％、３８％、３９％、４０％、４１％、４２％、４３％、４４％、４５％、４６％、４７％、４８％、４９％、５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、５６％、５７％、５８％、５９％、６０％、６１％、６２％、６３％、６４％、６５％、６６％、６７％、６８％、６９％、７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％または少なくとも２０〜３０％、２０〜４０％、２０〜５０％、２０〜６０％、２０〜７０％、２０〜８０％、２０〜９０％、２０〜９５％、２０〜１００％、３０〜４０％、３０〜５０％、３０〜６０％、３０〜７０％、３０〜８０％、３０〜９０％、３０〜９５％、３０〜１００％、４０〜５０％、４０〜６０％、４０〜７０％、４０〜８０％、４０〜９０％、４０〜９５％、４０〜１００％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜９０％、５０〜９５％、５０〜１００％、５５〜６０％、５５〜７０％、５５〜８０％、５５〜９０％、５５〜９５％、５５〜１００％、６０〜７０％、６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９５％、６０〜１００％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９５％、７０〜１００％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜１００％、９０〜９５％、９０〜１００％もしくは９５〜１００％阻害され得る。
【０８０７】
一部の実施形態では、ｓｉＲＮＡ二重鎖またはコード化ｄｓＲＮＡは、ＣＮＳの少なくとも１つの領域、例えば、限定されるものではないが、前脳におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現を低減するために使用され得る。ＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、ＣＮＳの少なくとも１つの領域において少なくとも約３０％、３１％、３２％、３３％、３４％、３５％、３６％、３７％、３８％、３９％、４０％、４１％、４２％、４３％、４４％、４５％、４６％、４７％、４８％、４９％、５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、５６％、５７％、５８％、５９％、６０％、６１％、６２％、６３％、６４％、６５％、６６％、６７％、６８％、６９％、７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％または少なくとも２０〜３０％、２０〜４０％、２０〜５０％、２０〜６０％、２０〜７０％、２０〜８０％、２０〜９０％、２０〜９５％、２０〜１００％、３０〜４０％、３０〜５０％、３０〜６０％、３０〜７０％、３０〜８０％、３０〜９０％、３０〜９５％、３０〜１００％、４０〜５０％、４０〜６０％、４０〜７０％、４０〜８０％、４０〜９０％、４０〜９５％、４０〜１００％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜９０％、５０〜９５％、５０〜１００％、５５〜６０％、５５〜７０％、５５〜８０％、５５〜９０％、５５〜９５％、５５〜１００％、６０〜７０％、６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９５％、６０〜１００％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９５％、７０〜１００％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜１００％、９０〜９５％、９０〜１００％もしくは９５〜１００％低減される。非限定的な例として、被殻におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５０〜９０％低減される。非限定的な例として、線条体におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、４０〜５０％低減される。非限定的な例として、皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、４０〜５０％低減される。非限定的な例として、皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、３０〜７０％低減される。
【０８０８】
非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、４０〜７０％低減される。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、４０〜５０％低減される。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５０〜７０％低減される。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５０〜６０％低減される。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５０％低減される。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５１％低減される。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５２％低減される。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５３％低減される。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５４％低減される。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５５％低減される。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５６％低減される。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５７％低減される。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５８％低減される。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５９％低減される。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、６０％低減される。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、６１％低減される。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、６２％低減される。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、６３％低減される。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、６４％低減される。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、６５％低減される。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、６６％低減される。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、６７％低減される。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、６８％低減される。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、６９％低減される。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、７０％低減される。
【０８０９】
一部の実施形態では、ｓｉＲＮＡ二重鎖またはコード化ｄｓＲＮＡは、線条体におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現を低減するために使用され得る。ＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、少なくとも約３０％、３１％、３２％、３３％、３４％、３５％、３６％、３７％、３８％、３９％、４０％、４１％、４２％、４３％、４４％、４５％、４６％、４７％、４８％、４９％、５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、５６％、５７％、５８％、５９％、６０％、６１％、６２％、６３％、６４％、６５％、６６％、６７％、６８％、６９％、７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％または少なくとも２０〜３０％、２０〜４０％、２０〜５０％、２０〜６０％、２０〜７０％、２０〜８０％、２０〜９０％、２０〜９５％、２０〜１００％、３０〜４０％、３０〜５０％、３０〜６０％、３０〜７０％、３０〜８０％、３０〜９０％、３０〜９５％、３０〜１００％、４０〜５０％、４０〜６０％、４０〜７０％、４０〜８０％、４０〜９０％、４０〜９５％、４０〜１００％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜９０％、５０〜９５％、５０〜１００％、６０〜７０％、６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９５％、６０〜１００％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９５％、７０〜１００％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜１００％、９０〜９５％、９０〜１００％もしくは９５〜１００％低減される。非限定的な例として、線条体におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、４０〜５０％低減される。非限定的な例として、線条体におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、３０〜７０％低減される。非限定的な例として、線条体におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、少なくとも３０％低減される。非限定的な例として、線条体におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、４０〜７０％低減される。非限定的な例として、線条体におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、４０〜５０％低減される。非限定的な例として、線条体におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５０〜７０％低減される。非限定的な例として、線条体におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５０〜６０％低減される。非限定的な例として、線条体におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５０％低減される。非限定的な例として、線条体におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５１％低減される。非限定的な例として、線条体におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５２％低減される。非限定的な例として、線条体におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５３％低減される。非限定的な例として、線条体におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５４％低減される。非限定的な例として、線条体におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５５％低減される。非限定的な例として、線条体におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５６％低減される。非限定的な例として、線条体におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５７％低減される。非限定的な例として、線条体におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５８％低減される。非限定的な例として、線条体におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５９％低減される。非限定的な例として、線条体におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、６０％低減される。非限定的な例として、線条体におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、６１％低減される。非限定的な例として、線条体におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、６２％低減される。非限定的な例として、線条体におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、６３％低減される。非限定的な例として、線条体におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、６４％低減される。非限定的な例として、線条体におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、６５％低減される。非限定的な例として、線条体におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、６６％低減される。非限定的な例として、線条体におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、６７％低減される。非限定的な例として、線条体におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、６８％低減される。非限定的な例として、線条体におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、６９％低減される。非限定的な例として、線条体におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、７０％低減される。
【０８１０】
一部の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする調節性ポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子は、線条体および／または皮質のニューロンおよび／またはアストロサイトにおいてＨＴＴタンパク質を抑制するために使用され得る。非限定的な例として、ＨＴＴタンパク質の抑制は、線条体の中型有棘ニューロンおよび／または皮質のニューロンにおいてである。非限定的な例として、ＨＴＴタンパク質の抑制は、線条体の中型有棘ニューロンおよび／または一次運動皮質および一次体性感覚皮質の錐体ニューロンにおいてである。
【０８１１】
一部の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする調節性ポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子は、線条体および／または皮質のニューロンおよび／またはアストロサイトにおいてＨＴＴタンパク質を抑制する、および関連付けられるニューロン毒性を低減するために使用され得る。線条体および／または皮質のニューロンおよび／またはアストロサイトにおけるＨＴＴタンパク質の抑制は、独立に、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％または９５％より多く、５〜１５％、５〜２０％、５〜２５％、５〜３０％、５〜３５％、５〜４０％、５〜４５％、５〜５０％、５〜５５％、５〜６０％、５〜６５％、５〜７０％、５〜７５％、５〜８０％、５〜８５％、５〜９０％、５〜９５％、１０〜２０％、１０〜２５％、１０〜３０％、１０〜３５％、１０〜４０％、１０〜４５％、１０〜５０％、１０〜５５％、１０〜６０％、１０〜６５％、１０〜７０％、１０〜７５％、１０〜８０％、１０〜８５％、１０〜９０％、１０〜９５％、１５〜２５％、１５〜３０％、１５〜３５％、１５〜４０％、１５〜４５％、１５〜５０％、１５〜５５％、１５〜６０％、１５〜６５％、１５〜７０％、１５〜７５％、１５〜８０％、１５〜８５％、１５〜９０％、１５〜９５％、２０〜３０％、２０〜３５％、２０〜４０％、２０〜４５％、２０〜５０％、２０〜５５％、２０〜６０％、２０〜６５％、２０〜７０％、２０〜７５％、２０〜８０％、２０〜８５％、２０〜９０％、２０〜９５％、２５〜３５％、２５〜４０％、２５〜４５％、２５〜５０％、２５〜５５％、２５〜６０％、２５〜６５％、２５〜７０％、２５〜７５％、２５〜８０％、２５〜８５％、２５〜９０％、２５〜９５％、３０〜４０％、３０〜４５％、３０〜５０％、３０〜５５％、３０〜６０％、３０〜６５％、３０〜７０％、３０〜７５％、３０〜８０％、３０〜８５％、３０〜９０％、３０〜９５％、３５〜４５％、３５〜５０％、３５〜５５％、３５〜６０％、３５〜６５％、３５〜７０％、３５〜７５％、３５〜８０％、３５〜８５％、３５〜９０％、３５〜９５％、４０〜５０％、４０〜５５％、４０〜６０％、４０〜６５％、４０〜７０％、４０〜７５％、４０〜８０％、４０〜８５％、４０〜９０％、４０〜９５％、４５〜５５％、４５〜６０％、４５〜６５％、４５〜７０％、４５〜７５％、４５〜８０％、４５〜８５％、４５〜９０％、４５〜９５％、５０〜６０％、５０〜６５％、５０〜７０％、５０〜７５％、５０〜８０％、５０〜８５％、５０〜９０％、５０〜９５％、５５〜６５％、５５〜７０％、５５〜７５％、５５〜８０％、５５〜８５％、５５〜９０％、５５〜９５％、６０〜７０％、６０〜７５％、６０〜８０％、６０〜８５％、６０〜９０％、６０〜９５％、６５〜７５％、６５〜８０％、６５〜８５％、６５〜９０％、６５〜９５％、７０〜８０％、７０〜８５％、７０〜９０％、７０〜９５％、７５〜８５％、７５〜９０％、７５〜９５％、８０〜９０％、８０〜９５％、または９０〜９５％抑制され得る。関連付けられるニューロン毒性の低減は、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％または９５％より多く、５〜１５％、５〜２０％、５〜２５％、５〜３０％、５〜３５％、５〜４０％、５〜４５％、５〜５０％、５〜５５％、５〜６０％、５〜６５％、５〜７０％、５〜７５％、５〜８０％、５〜８５％、５〜９０％、５〜９５％、１０〜２０％、１０〜２５％、１０〜３０％、１０〜３５％、１０〜４０％、１０〜４５％、１０〜５０％、１０〜５５％、１０〜６０％、１０〜６５％、１０〜７０％、１０〜７５％、１０〜８０％、１０〜８５％、１０〜９０％、１０〜９５％、１５〜２５％、１５〜３０％、１５〜３５％、１５〜４０％、１５〜４５％、１５〜５０％、１５〜５５％、１５〜６０％、１５〜６５％、１５〜７０％、１５〜７５％、１５〜８０％、１５〜８５％、１５〜９０％、１５〜９５％、２０〜３０％、２０〜３５％、２０〜４０％、２０〜４５％、２０〜５０％、２０〜５５％、２０〜６０％、２０〜６５％、２０〜７０％、２０〜７５％、２０〜８０％、２０〜８５％、２０〜９０％、２０〜９５％、２５〜３５％、２５〜４０％、２５〜４５％、２５〜５０％、２５〜５５％、２５〜６０％、２５〜６５％、２５〜７０％、２５〜７５％、２５〜８０％、２５〜８５％、２５〜９０％、２５〜９５％、３０〜４０％、３０〜４５％、３０〜５０％、３０〜５５％、３０〜６０％、３０〜６５％、３０〜７０％、３０〜７５％、３０〜８０％、３０〜８５％、３０〜９０％、３０〜９５％、３５〜４５％、３５〜５０％、３５〜５５％、３５〜６０％、３５〜６５％、３５〜７０％、３５〜７５％、３５〜８０％、３５〜８５％、３５〜９０％、３５〜９５％、４０〜５０％、４０〜５５％、４０〜６０％、４０〜６５％、４０〜７０％、４０〜７５％、４０〜８０％、４０〜８５％、４０〜９０％、４０〜９５％、４５〜５５％、４５〜６０％、４５〜６５％、４５〜７０％、４５〜７５％、４５〜８０％、４５〜８５％、４５〜９０％、４５〜９５％、５０〜６０％、５０〜６５％、５０〜７０％、５０〜７５％、５０〜８０％、５０〜８５％、５０〜９０％、５０〜９５％、５５〜６５％、５５〜７０％、５５〜７５％、５５〜８０％、５５〜８５％、５５〜９０％、５５〜９５％、６０〜７０％、６０〜７５％、６０〜８０％、６０〜８５％、６０〜９０％、６０〜９５％、６５〜７５％、６５〜８０％、６５〜８５％、６５〜９０％、６５〜９５％、７０〜８０％、７０〜８５％、７０〜９０％、７０〜９５％、７５〜８５％、７５〜９０％、７５〜９５％、８０〜９０％、８０〜９５％、または９０〜９５％であり得る。
【０８１２】
一部の実施形態では、ｓｉＲＮＡ二重鎖またはコード化ｄｓＲＮＡは、皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現を低減するために使用され得る。ＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、少なくとも約３０％、３１％、３２％、３３％、３４％、３５％、３６％、３７％、３８％、３９％、４０％、４１％、４２％、４３％、４４％、４５％、４６％、４７％、４８％、４９％、５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、５６％、５７％、５８％、５９％、６０％、６１％、６２％、６３％、６４％、６５％、６６％、６７％、６８％、６９％、７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％または少なくとも２０〜３０％、２０〜４０％、２０〜５０％、２０〜６０％、２０〜７０％、２０〜８０％、２０〜９０％、２０〜９５％、２０〜１００％、３０〜４０％、３０〜５０％、３０〜６０％、３０〜７０％、３０〜８０％、３０〜９０％、３０〜９５％、３０〜１００％、４０〜５０％、４０〜６０％、４０〜７０％、４０〜８０％、４０〜９０％、４０〜９５％、４０〜１００％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜９０％、５０〜９５％、５０〜１００％、６０〜７０％、６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９５％、６０〜１００％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９５％、７０〜１００％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜１００％、９０〜９５％、９０〜１００％もしくは９５〜１００％低減される。非限定的な例として、皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、４０〜５０％低減される。非限定的な例として、皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、３０〜７０％低減される。非限定的な例として、皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、少なくとも３０％低減される。非限定的な例として、皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、４０〜７０％低減される。非限定的な例として、皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、４０〜５０％低減される。非限定的な例として、皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５０〜７０％低減される。非限定的な例として、皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５０〜６０％低減される。非限定的な例として、皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５０％低減される。非限定的な例として、皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５１％低減される。非限定的な例として、皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５２％低減される。非限定的な例として、皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５３％低減される。非限定的な例として、皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５４％低減される。非限定的な例として、皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５５％低減される。非限定的な例として、皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５６％低減される。非限定的な例として、皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５７％低減される。非限定的な例として、皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５８％低減される。非限定的な例として、皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５９％低減される。非限定的な例として、皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、６０％低減される。
【０８１３】
一部の実施形態では、ｓｉＲＮＡ二重鎖またはコード化ｄｓＲＮＡは、運動皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現を低減するために使用され得る。ＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、少なくとも約３０％、３１％、３２％、３３％、３４％、３５％、３６％、３７％、３８％、３９％、４０％、４１％、４２％、４３％、４４％、４５％、４６％、４７％、４８％、４９％、５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、５６％、５７％、５８％、５９％、６０％、６１％、６２％、６３％、６４％、６５％、６６％、６７％、６８％、６９％、７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％または少なくとも２０〜３０％、２０〜４０％、２０〜５０％、２０〜６０％、２０〜７０％、２０〜８０％、２０〜９０％、２０〜９５％、２０〜１００％、３０〜４０％、３０〜５０％、３０〜６０％、３０〜７０％、３０〜８０％、３０〜９０％、３０〜９５％、３０〜１００％、４０〜５０％、４０〜６０％、４０〜７０％、４０〜８０％、４０〜９０％、４０〜９５％、４０〜１００％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜９０％、５０〜９５％、５０〜１００％、６０〜７０％、６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９５％、６０〜１００％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９５％、７０〜１００％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜１００％、９０〜９５％、９０〜１００％もしくは９５〜１００％低減される。非限定的な例として、運動皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、２０〜３０％低減される。非限定的な例として、運動皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、４０〜５０％低減される。非限定的な例として、運動皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、３０〜７０％低減される。非限定的な例として、運動皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、少なくとも３０％低減される。非限定的な例として、運動皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、４０〜７０％低減される。非限定的な例として、運動皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、４０〜５０％低減される。非限定的な例として、運動皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５０〜７０％低減される。非限定的な例として、運動皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５０〜６０％低減される。非限定的な例として、運動皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５０％低減される。非限定的な例として、運動皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５１％低減される。非限定的な例として、運動皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５２％低減される。非限定的な例として、運動皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５３％低減される。非限定的な例として、運動皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５４％低減される。非限定的な例として、運動皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５５％低減される。非限定的な例として、運動皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５６％低減される。非限定的な例として、運動皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５７％低減される。非限定的な例として、運動皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５８％低減される。非限定的な例として、運動皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５９％低減される。非限定的な例として、運動皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、６０％低減される。
【０８１４】
一部の実施形態では、ｓｉＲＮＡ二重鎖またはコード化ｄｓＲＮＡは、体性感覚皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現を低減するために使用され得る。ＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、少なくとも  約３０％、３１％、３２％、３３％、３４％、３５％、３６％、３７％、３８％、３９％、４０％、４１％、４２％、４３％、４４％、４５％、４６％、４７％、４８％、４９％、５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、５６％、５７％、５８％、５９％、６０％、６１％、６２％、６３％、６４％、６５％、６６％、６７％、６８％、６９％、７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％または少なくとも２０〜３０％、２０〜４０％、２０〜５０％、２０〜６０％、２０〜７０％、２０〜８０％、２０〜９０％、２０〜９５％、２０〜１００％、３０〜４０％、３０〜５０％、３０〜６０％、３０〜７０％、３０〜８０％、３０〜９０％、３０〜９５％、３０〜１００％、４０〜５０％、４０〜６０％、４０〜７０％、４０〜８０％、４０〜９０％、４０〜９５％、４０〜１００％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜９０％、５０〜９５％、５０〜１００％、６０〜７０％、６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９５％、６０〜１００％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９５％、７０〜１００％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜１００％、９０〜９５％、９０〜１００％もしくは９５〜１００％低減される。非限定的な例として、体性感覚皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、２０〜３０％低減される。非限定的な例として、体性感覚皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、４０〜５０％低減される。非限定的な例として、体性感覚皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、３０〜７０％低減される。非限定的な例として、体性感覚皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、少なくとも３０％低減される。非限定的な例として、体性感覚皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、４０〜７０％低減される。非限定的な例として、体性感覚皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、４０〜５０％低減される。非限定的な例として、体性感覚皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５０〜７０％低減される。非限定的な例として、体性感覚皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５０〜６０％低減される。非限定的な例として、体性感覚皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５０％低減される。非限定的な例として、体性感覚皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５１％低減される。非限定的な例として、体性感覚皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５２％低減される。非限定的な例として、体性感覚皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５３％低減される。非限定的な例として、体性感覚皮質におけるＨＴＴタンパク質および���またはｍＲＮＡの発現は、５４％低減される。非限定的な例として、体性感覚皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５５％低減される。非限定的な例として、体性感覚皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５６％低減される。非限定的な例として、体性感覚皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５７％低減される。非限定的な例として、体性感覚皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５８％低減される。非限定的な例として、体性感覚皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５９％低減される。非限定的な例として、体性感覚皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、６０％低減される。
【０８１５】
一部の実施形態では、ｓｉＲＮＡ二重鎖またはコード化ｄｓＲＮＡは、側頭皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現を低減するために使用され得る。ＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、少なくとも約３０％、３１％、３２％、３３％、３４％、３５％、３６％、３７％、３８％、３９％、４０％、４１％、４２％、４３％、４４％、４５％、４６％、４７％、４８％、４９％、５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、５６％、５７％、５８％、５９％、６０％、６１％、６２％、６３％、６４％、６５％、６６％、６７％、６８％、６９％、７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％または少なくとも２０〜３０％、２０〜４０％、２０〜５０％、２０〜６０％、２０〜７０％、２０〜８０％、２０〜９０％、２０〜９５％、２０〜１００％、３０〜４０％、３０〜５０％、３０〜６０％、３０〜７０％、３０〜８０％、３０〜９０％、３０〜９５％、３０〜１００％、４０〜５０％、４０〜６０％、４０〜７０％、４０〜８０％、４０〜９０％、４０〜９５％、４０〜１００％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜９０％、５０〜９５％、５０〜１００％、６０〜７０％、６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９５％、６０〜１００％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９５％、７０〜１００％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜１００％、９０〜９５％、９０〜１００％もしくは９５〜１００％低減される。非限定的な例として、側頭皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、４０〜５０％低減される。非限定的な例として、側頭皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、３０〜７０％低減される。非限定的な例として、側頭皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、少なくとも３０％低減される。非限定的な例として、側頭皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、４０〜７０％低減される。非限定的な例として、側頭皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、４０〜５０％低減される。非限定的な例として、側頭皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５０〜７０％低減される。非限定的な例として、側頭皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５０〜６０％低減される。非限定的な例として、側頭皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５０％低減される。非限定的な例として、側頭皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５１％低減される。非限定的な例として、側頭皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５２％低減される。非限定的な例として、側頭皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５３％低減される。非限定的な例として、側頭皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５４％低減される。非限定的な例として、側頭皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５５％低減される。非限定的な例として、側頭皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５６％低減される。非限定的な例として、側頭皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５７％低減される。非限定的な例として、側頭皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５８％低減される。非限定的な例として、側頭皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５９％低減される。非限定的な例として、側頭皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、６０％低減される。
【０８１６】
一部の実施形態では、ｓｉＲＮＡ二重鎖またはコード化ｄｓＲＮＡは、被殻におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現を低減するために使用され得る。ＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、被殻において少なくとも約３０％、３１％、３２％、３３％、３４％、３５％、３６％、３７％、３８％、３９％、４０％、４１％、４２％、４３％、４４％、４５％、４６％、４７％、４８％、４９％、５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、５６％、５７％、５８％、５９％、６０％、６１％、６２％、６３％、６４％、６５％、６６％、６７％、６８％、６９％、７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％または少なくとも２０〜３０％、２０〜４０％、２０〜５０％、２０〜６０％、２０〜７０％、２０〜８０％、２０〜９０％、２０〜９５％、２０〜１００％、３０〜４０％、３０〜５０％、３０〜６０％、３０〜７０％、３０〜８０％、３０〜９０％、３０〜９５％、３０〜１００％、４０〜５０％、４０〜６０％、４０〜７０％、４０〜８０％、４０〜９０％、４０〜９５％、４０〜１００％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜９０％、５０〜９５％、５０〜１００％、５５〜６０％、５５〜７０％、５５〜８０％、５５〜９０％、５５〜９５％、５５〜１００％、６０〜７０％、６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９５％、６０〜１００％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９５％、７０〜１００％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜１００％、９０〜９５％、９０〜１００％もしくは９５〜１００％低減される。非限定的な例として、被殻におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、４０〜７０％低減される。非限定的な例として、被殻におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、３０〜４０％低減される。非限定的な例として、被殻におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、４０〜５０％低減される。非限定的な例として、被殻におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５０〜８０％低減される。非限定的な例として、被殻におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５０〜７０％低減される。非限定的な例として、被殻におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５０〜６０％低減される。非限定的な例として、被殻におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、６０〜７０％低減される。非限定的な例として、被殻におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５０％低減される。非限定的な例として、被殻におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５１％低減される。非限定的な例として、被殻におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５２％低減される。非限定的な例として、被殻におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５３％低減される。非限定的な例として、被殻におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５４％低減される。非限定的な例として、被殻におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５５％低減される。非限定的な例として、被殻におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５６％低減される。非限定的な例として、被殻におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５７％低減される。非限定的な例として、被殻におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５８％低減される。非限定的な例として、被殻におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５９％低減される。非限定的な例として、被殻におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、６０％低減される。非限定的な例として、被殻におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、６１％低減される。非限定的な例として、被殻におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、６２％低減される。非限定的な例として、被殻におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、６３％低減される。非限定的な例として、被殻におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、６４％低減される。非限定的な例として、被殻におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、６５％低減される。非限定的な例として、被殻におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、６６％低減される。非限定的な例として、被殻におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、６７％低減される。非限定的な例として、被殻におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、６８％低減される。非限定的な例として、被殻におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、６９％低減される。非限定的な例として、被殻におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、７０％低減される。
【０８１７】
一部の実施形態では、ｓｉＲＮＡ二重鎖またはコード化ｄｓＲＮＡは、尾状核におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現を低減するために使用され得る。ＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、尾状核において少なくとも約３０％、３１％、３２％、３３％、３４％、３５％、３６％、３７％、３８％、３９％、４０％、４１％、４２％、４３％、４４％、４５％、４６％、４７％、４８％、４９％、５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、５６％、５７％、５８％、５９％、６０％、６１％、６２％、６３％、６４％、６５％、６６％、６７％、６８％、６９％、７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％または少なくとも２０〜３０％、２０〜４０％、２０〜５０％、２０〜６０％、２０〜７０％、２０〜８０％、２０〜９０％、２０〜９５％、２０〜１００％、３０〜４０％、３０〜５０％、３０〜６０％、３０〜７０％、３０〜８０％、３０〜９０％、３０〜９５％、３０〜１００％、４０〜５０％、４０〜６０％、４０〜７０％、４０〜８０％、４０〜９０％、４０〜９５％、４０〜１００％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜８５％、５０〜９０％、５０〜９５％、５０〜１００％、５５〜６０％、５５〜７０％、５５〜８０％、５５〜９０％、５５〜９５％、５５〜１００％、６０〜７０％、６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９５％、６０〜１００％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９５％、７０〜１００％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜１００％、９０〜９５％、９０〜１００％もしくは９５〜１００％低減される。非限定的な例として、尾状核におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、４０〜７０％低減される。非限定的な例として、尾状核におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、４０〜５０％低減される。非限定的な例として、尾状核におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５０〜８５％低減される。非限定的な例として、尾状核におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５０〜８０％低減される。非限定的な例として、尾状核におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５０〜７０％低減される。非限定的な例として、尾状核におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５０〜６０％低減される。非限定的な例として、尾状核におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、６０〜７０％低減される。非限定的な例として、尾状核におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５０％低減される。非限定的な例として、尾状核におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５１％低減される。非限定的な例として、尾状核におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５２％低減される。非限定的な例として、尾状核におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５３％低減される。非限定的な例として、尾状核におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５４％低減される。非限定的な例として、尾状核におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、５５볯躽룦閁苣讂胣麝駩骮髧ꪁ뻤ꢁ臣ꚁ胣뺰諧뢠臣誁臣讂볯뒼볯뾂菣醃苣ꪳ臣袂臣込臣龁臣趽볯꺼볯꺁駧뺏臣膀볯隼볯躽룦閁苣讂胣麝駩骮髧ꪁ뻤ꢁ臣ꚁ胣뺰諧뢠臣誁臣讂볯뒼볯뾂菣醃苣ꪳ臣袂臣込臣龁臣趽볯꺼볯꺁駧뺏臣膀볯鞼볯躽룦閁苣讂胣麝駩骮髧ꪁ뻤ꢁ臣ꚁ胣뺰諧뢠臣誁臣讂볯뒼볯뾂菣醃苣ꪳ臣袂臣込臣龁臣趽볯꺼볯꺁駧뺏臣膀볯颼볯躽룦閁苣讂胣麝駩骮髧ꪁ뻤ꢁ臣ꚁ胣뺰諧뢠臣誁臣讂볯뒼볯뾂菣醃苣ꪳ臣袂臣込臣龁臣趽볯꺼볯꺁駧뺏臣膀볯馼볯躽룦閁苣讂胣麝駩骮髧ꪁ뻤ꢁ臣ꚁ胣뺰諧뢠臣誁臣讂볯뒼볯뾂菣醃苣ꪳ臣袂臣込臣龁臣趽볯꺼볯꺁駧뺏臣膀볯邼볯躽룦閁苣讂胣麝駩骮髧ꪁ뻤ꢁ臣ꚁ胣뺰諧뢠臣誁臣讂볯뒼볯뾂菣醃苣ꪳ臣袂臣込臣龁臣趽볯꺼볯꺁駧뺏臣膀볯醼볯躽룦閁苣讂胣麝駩骮髧ꪁ뻤ꢁ臣ꚁ胣뺰諧뢠臣誁臣讂볯뒼볯뾂菣醃苣ꪳ臣袂臣込臣龁臣趽볯꺼볯꺁駧뺏臣膀볯銼볯躽룦閁苣讂胣麝駩骮髧ꪁ뻤ꢁ臣ꚁ胣뺰諧뢠臣誁臣讂볯뒼볯뾂菣醃苣ꪳ臣袂臣込臣龁臣趽볯꺼볯꺁駧뺏臣膀볯鎼볯躽룦閁苣讂胣麝駩骮髧ꪁ뻤ꢁ臣ꚁ胣뺰諧뢠臣誁臣讂볯뒼볯뾂菣醃苣ꪳ臣袂臣込臣龁臣趽볯꺼볯꺁駧뺏臣膀볯钼볯躽룦閁苣讂胣麝駩骮髧ꪁ뻤ꢁ臣ꚁ胣뺰諧뢠臣誁臣讂볯뒼볯뾂菣醃苣ꪳ臣袂臣込臣龁臣趽볯꺼볯꺁駧뺏臣膀볯閼볯躽룦閁苣讂胣麝駩骮髧ꪁ뻤ꢁ臣ꚁ胣뺰諧뢠臣誁臣讂볯뒼볯뾂菣醃苣ꪳ臣袂臣込臣龁臣趽볯꺼볯꺁駧뺏臣膀볯隼볯躽룦閁苣讂胣麝駩骮髧ꪁ뻤ꢁ臣ꚁ胣뺰諧뢠臣誁臣讂볯뒼볯뾂菣醃苣ꪳ臣袂臣込臣龁臣趽볯꺼볯꺁駧뺏臣膀볯鞼볯躽룦閁苣讂胣麝駩骮髧ꪁ뻤ꢁ臣ꚁ胣뺰諧뢠臣誁臣讂볯뒼볯뾂菣醃苣ꪳ臣袂臣込臣龁臣趽볯꺼볯꺁駧뺏臣膀볯颼볯躽룦閁苣讂胣麝駩骮髧ꪁ뻤ꢁ臣ꚁ胣뺰諧뢠臣誁臣讂볯뒼볯뾂菣醃苣ꪳ臣袂臣込臣龁臣趽볯꺼볯꺁駧뺏臣膀볯馼볯躽룦閁苣讂胣麝駩骮髧ꪁ뻤ꢁ臣ꚁ胣뺰諧뢠臣誁臣讂볯뒼볯뾂菣醃苣ꪳ臣袂臣込臣龁臣趽볯꺼볯꺁駧뺏臣膀볯邼볯躽룦閁苣讂胣ં⼼䥄㹖㰊䥄㹖䐼噉邀볯颼볯颼胣㲑䐯噉ਾ†룤ꢃ臣龮雦ꊽ藦ꞁ臣膀뷯覽볯꺼볯貺蟩階臣龁臣뎂菣覃賥蒽뷯늼볯ꆼ臣膀ꛨ誺臣誁臣讂볯뒼볯뾂菣醃苣ꪳ臣袂臣込臣龁臣趽볯꺼볯꺁駧뺏苣躽룦馁苣龁苣ꮁ뷤ꢔ臣貂뻥讂胣ꢼ볯뒼苣뎃菣꾂돨誁苣뎁볯뺁臣꾁뷯늼볯ꆼ臣몙迧꾁胣隦뫥ꮁ臣蒁臣醰臣辁臣节듧鎼볯薼胣鎼볯薼胣鎼볯薼胣鎼볯薼胣鎼볯薼胣鎼볯薼胣鎼볯薼胣鎼볯薼胣鎼볯薼胣鎼볯薼胣钼볯薼胣钼볯薼胣钼볯薼胣钼볯薼胣钼볯薼胣钼볯薼胣钼볯薼胣钼볯薼胣钼볯薼胣钼볯薼胣閼볯薼胣閼볯薼胣閼볯薼胣閼볯薼胣閼볯薼胣閼볯薼胣閼볯薼胣閼볯薼胣閼볯薼胣閼볯薼胣隼볯薼胣隼볯薼胣隼볯薼胣隼볯薼胣隼볯薼胣隼볯薼胣隼볯薼胣隼볯薼胣隼볯薼胣隼볯薼胣鞼볯薼胣鞼볯薼胣鞼볯薼胣鞼볯薼胣鞼볯薼胣鞼볯薼胣鞼볯薼胣鞼볯薼胣鞼볯薼胣鞼볯薼胣颼볯薼胣颼볯薼胣馼볯薼胣馼볯薼臣袂臣醼볯邼볯뺁臣꾁냥ꪁ臣ꢁ苣銼볯鲀볯邼볯膀볯邼胣钼볯薼胣銼볯鲀볯邼볯膀볯邼胣隼볯薼胣銼볯鲀볯邼볯膀볯邼胣颼볯薼胣銼볯鲀볯邼볯膀볯邼胣馼볯薼胣銼볯鲀볯邼볯薼胣鎼볯鲀볯邼볯膀볯邼胣閼볯薼胣鎼볯鲀볯邼볯膀볯邼胣鞼볯薼胣鎼볯鲀볯邼볯膀볯邼胣馼볯薼胣鎼볯鲀볯閼볯膀볯邼胣醼볯邼볯膀볯邼胣閼볯薼胣钼볯鲀볯邼볯膀볯邼胣鞼볯薼胣钼볯鲀볯邼볯膀볯邼胣馼볯薼胣钼볯鲀볯閼볯膀볯邼胣醼볯邼볯膀볯邼胣隼볯薼胣閼볯鲀볯邼볯膀볯邼胣颼볯薼胣閼볯鲀볯閼볯膀볯邼胣馼볯薼胣閼볯鲀볯閼볯膀볯邼胣醼볯邼볯膀볯閼胣隼볯薼胣閼볯鲀볯邼볯膀볯閼胣颼볯薼胣閼볯鲀볯邼볯膀볯閼胣馼볯薼胣閼볯鲀볯邼볯薼胣隼볯鲀볯邼볯膀볯邼胣颼볯薼胣隼볯鲀볯邼볯膀볯邼胣馼볯薼胣隼볯鲀볯邼볯薼胣鞼볯鲀볯邼볯膀볯邼胣馼볯薼胣鞼볯鲀볯閼볯膀볯邼胣醼볯邼볯膀볯邼胣馼볯薼胣颼볯鲀볯閼볯膀볯邼胣醼볯邼볯膀볯邼胣馼볯薼胣馼볯鲀볯邼볯薼苣鞁臣꾁볯閼胣醼볯邼볯躽룦閁苣讂胣麝駩骮髧ꪁ뻤ꢁ臣ꚁ胣隦뫥ꮁ臣醁苣ꢼ볯뒼苣뎃菣꾂돨誁苣뎁볯뺁臣꾁뷯늼볯ꆼ臣몙迧꾁胣醰臣辁臣节볯邼볯躽룦閁苣讂胣麝駩骮髧ꪁ뻤ꢁ臣ꚁ胣隦뫥ꮁ臣醁苣ꢼ볯뒼苣뎃菣꾂돨誁苣뎁볯뺁臣꾁뷯늼볯ꆼ臣몙迧꾁胣钼볯鲀볯邼볯躽룦閁苣讂胣麝駩骮髧ꪁ뻤ꢁ臣ꚁ胣隦뫥ꮁ臣醁苣ꢼ볯뒼苣뎃菣꾂돨誁苣뎁볯뺁臣꾁뷯늼볯ꆼ臣몙迧꾁胣钼볯鲀볯邼볯躽룦閁苣讂胣麝駩骮髧ꪁ뻤ꢁ臣ꚁ胣隦뫥ꮁ臣醁苣ꢼ볯뒼苣뎃菣꾂돨誁苣뎁볯뺁臣꾁뷯늼볯ꆼ臣몙迧꾁胣隼볯鲀볯邼볯躽룦閁苣讂胣麝駩骮髧ꪁ뻤ꢁ臣ꚁ胣隦뫥ꮁ臣醁苣ꢼ볯뒼苣뎃菣꾂돨誁苣뎁볯뺁臣꾁뷯늼볯ꆼ臣몙迧꾁胣隼볯鲀볯邼볯躽룦閁苣讂胣麝駩骮髧ꪁ뻤ꢁ臣ꚁ胣隦뫥ꮁ臣醁苣ꢼ볯뒼苣뎃菣꾂돨誁苣뎁볯뺁臣꾁뷯늼볯ꆼ臣몙迧꾁胣隼볯鲀볯邼볯躽룦閁苣讂胣麝駩骮髧ꪁ뻤ꢁ臣ꚁ胣隦뫥ꮁ臣醁苣ꢼ볯뒼苣뎃菣꾂돨誁苣뎁볯뺁臣꾁뷯늼볯ꆼ臣몙迧꾁胣隼볯薼뷤鮸臣貂苣芀鷩邙껥蒚臣设臣鞁臣膀ꛨ誺臣誁臣讂볯뒼볯뾂菣醃苣ꪳ臣袂臣込臣龁臣趽볯꺼볯꺁駧뺏臣膀볯醼볯躽룦閁苣讂胣麝駩骮髧ꪁ뻤ꢁ臣ꚁ胣隦뫥ꮁ臣醁苣ꢼ볯뒼苣뎃菣꾂돨誁苣뎁볯뺁臣꾁뷯늼볯ꆼ臣몙迧꾁胣隼볯薼뷤鮸臣貂苣芀鷩邙껥蒚臣设臣鞁臣膀ꛨ誺臣誁臣讂볯뒼볯뾂菣醃苣ꪳ臣袂臣込臣龁臣趽볯꺼볯꺁駧뺏臣膀볯鎼볯躽룦閁苣讂胣麝駩骮髧ꪁ뻤ꢁ臣ꚁ胣隦뫥ꮁ臣醁苣ꢼ볯뒼苣뎃菣꾂돨誁苣뎁볯뺁臣꾁뷯늼볯ꆼ臣몙迧꾁胣隼볯薼뷤鮸臣貂苣芀鷩邙껥蒚臣设臣鞁臣膀ꛨ誺臣誁臣讂볯뒼볯뾂菣醃苣ꪳ臣袂臣込臣龁臣趽볯꺼볯꺁駧뺏臣膀볯閼볯躽룦閁苣讂胣麝駩骮髧ꪁ뻤ꢁ臣ꚁ胣隦뫥ꮁ臣醁苣ꢼ볯뒼苣뎃菣꾂돨誁苣뎁볯뺁臣꾁뷯늼볯ꆼ臣몙迧꾁胣隼볯薼뷤鮸臣貂苣芀鷩邙껥蒚臣设臣鞁臣膀ꛨ誺臣誁臣讂볯뒼볯뾂菣醃苣ꪳ臣袂臣込臣龁臣趽볯꺼볯꺁駧뺏臣膀볯鞼볯躽룦閁苣讂胣麝駩骮髧ꪁ뻤ꢁ臣ꚁ胣隦뫥ꮁ臣醁苣ꢼ볯뒼苣뎃菣꾂돨誁苣뎁볯뺁臣꾁뷯늼볯ꆼ臣몙迧꾁胣隼볯薼뷤鮸臣貂苣芀鷩邙껥蒚臣设臣鞁臣膀ꛨ誺臣誁臣讂볯뒼볯뾂菣醃苣ꪳ臣袂臣込臣龁臣趽볯꺼볯꺁駧뺏臣膀볯馼볯躽룦閁苣讂胣麝駩骮髧ꪁ뻤ꢁ臣ꚁ胣隦뫥ꮁ臣醁苣ꢼ볯뒼苣뎃菣꾂돨誁苣뎁볯뺁臣꾁뷯늼볯ꆼ臣몙迧꾁胣鞼볯薼뷤鮸臣貂苣芀鷩邙껥蒚臣设臣鞁臣膀ꛨ誺臣誁臣讂볯뒼볯뾂菣醃苣ꪳ臣袂臣込臣龁臣趽볯꺼볯꺁駧뺏臣膀볯醼볯躽룦閁苣讂胣麝駩骮髧ꪁ뻤ꢁ臣ꚁ胣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