(57)【要約】  本発明は、Ｆａｂ  Ｉ阻害剤を含む経口投与用薬剤学的組成物及びその製造方法に関するものである。本発明は、抗生剤に耐性がある細菌の感染などに効果的に適用することができる。具体的に、本発明は、溶解度及び溶出率を向上させることにより、治療効果をさらに迅速に開始することができ、生体利用率を向上させうる。また、粒子サイズを調節することにより、製剤に対する混合及び容量の均一性を向上させうる。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
１−（３−アミノ−２−メチルベンジル）−４−（２−チオフェン−２−イル−エトキシ）−１Ｈ−ピリジン−２−オンまたはその塩を含む、経口投与用薬剤学的組成物。
【請求項２】
前記１−（３−アミノ−２−メチルベンジル）−４−（２−チオフェン−２−イル−エトキシ）−１Ｈ−ピリジン−２−オンまたはその塩のＤ９０粒子サイズが、０．１〜５００ｕｍである、請求項１に記載の経口投与用薬剤学的組成物。
【請求項３】
前記組成物が、錠剤またはカプセルの形態で提供される、請求項１に記載の経口投与用薬剤学的組成物。
【請求項４】
組成物総重量に対して、前記１−（３−アミノ−２−メチルベンジル）−４−（２−チオフェン−２−イル−エトキシ）−１Ｈ−ピリジン−２−オン、その塩、または、これらの組み合わせが、１０〜６０重量％である、請求項１に記載の経口投与用薬剤学的組成物。
【請求項５】
ジメチルホルムアミドに、４−ベンジルオキシ−１Ｈ−ピリドン、２−メチル−３−ニトロベンジルクロリド及びカリウムｔ−ブトキシドを投入して、加温下で混合及び反応させる段階と、
前記混合物を反応させた後、精製水を追加し、加温下で乾燥させる段階と、
前記乾燥物を有機溶媒に溶かし、精製水を追加して層分離させる段階と、
有機層を回収し、濾過及び濃縮させて濃縮物を製造する段階と、
前記濃縮物を再濃縮させてヘキサンを追加して沈殿物を製造する段階と、
前記収得された沈殿物を溶解、冷却、濾過及び乾燥して収得する段階と、
前記収得された乾燥物を有機溶媒に溶解した後、塩化鉄六水和物、活性炭及びヒドラジン一水和物を添加して反応させた後、冷却及び濾過させて収得された沈殿物を乾燥後、粉砕させる段階と、を含む、経口投与用薬剤学的組成物の製造方法。
【請求項６】
酸性物質を添加する段階をさらに含む、請求項５に記載の経口投与用薬剤学的組成物の製造方法。
【請求項７】
前記酸性物質が、塩酸、硫酸、硝酸、リン酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、酒石酸、ギ酸、クエン酸、酢酸、トリクロロ酢酸、トリフルオロ酢酸、グルコン酸、安息香酸、乳酸、シュウ酸、フマル酸、マロン酸、マレイン酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、ナフタレンスルホン酸、ＥＤＴＡ及びこれらの組み合わせを含む、請求項６に記載の経口投与用薬剤学的組成物の製造方法。
【請求項８】
前記沈殿物が、ナノ粒子を含む錠剤または固体分散体を含むカプセルの形態で製造される、請求項５に記載の経口投与用薬剤学的組成物の製造方法。
【請求項９】
前記組成物が、細菌感染症の治療用である、請求項１に記載の経口投与用薬剤学的組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、Ｆａｂ  Ｉを阻害する化合物またはその塩を含有している経口投与用薬剤学的組成物及びその製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
細菌による感染症は、人類の歴史ほどに長期間人類を苦しめてきた疾病であって、ペストのように人類歴史に大きな影響を及ぼした。このような細菌からの脅威を克服するために、人類は不断の努力をし、これにより、医術と医薬との飛躍的な発展をもたらした。近代的な概念の抗生剤の開発は、１９２８年Ａｌｅｘａｎｄｅｒ  Ｆｌｅｍｉｎｇが初めて見つけたペニシリン（ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎ）から始まった。以後、細菌による感染症を治療するための抗生剤の開発は、飛躍的な発展を遂げた。しかし、細菌自体の抗生剤に対する耐性が知られ始め、抗生剤の使用に制約を引き起こせた。
【０００３】
以後、新たな抗生剤の開発とそれに対する耐性菌の持続的な出現とが繰り返されながら、新たな抗生剤の開発は、細菌感染症の治療に必ず必要な課題となった。また、研究戦略も、耐性菌を克服するためのものに変わっている。既存に確立された細菌阻害作用機序を用いて薬効がより優れた新たな抗生剤を開発すれば、既に発現されている耐性を克服できないために、新たな作用機序を有する抗生剤の開発に関心が集中されている。また、全世界的にＢａｙｅｒ、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ、Ｍｅｒｃｋ、Ｇｌａｘｏ  Ｓｍｉｔｈｋｌｉｎｅ、Ａｓｔｒａｚｅｎｃａなどの巨大製薬会社が、今までの抗生剤とは全く異なる作用機作で耐性を克服することができる新たな概念の抗生剤を開発するために多くの努力を傾けている。このような耐性菌株のうち、最も治療が難しいものの１つがＭＲＳＡ（メチシリン耐性黄色ブドウ球菌（Ｍｅｔｈｉｃｉｌｌｉｎ−Ｒｅｓｉｓｔａｎｔ  Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  Ａｕｒｅｕｓ））である。ＭＲＳＡは、ペニシリン系抗生剤であるメチシリンに耐性を示すブドウ球菌であるが、単純にメチシリンのみに耐性を示すものではなく、ほとんどの抗生剤に強い耐性を有しており、極めて制限された抗生剤のみに治療が可能な病原菌である。ＭＲＳＡ感染の発生は、全世界的に増加しつつある。この菌株が注目を浴びている理由は、従来の抗生剤に耐性を有しているという理由だけではなく、病院内感染を誘発する病原菌のうち、最も頻繁に表われる原因菌であり、免疫力が弱い患者や老弱者には致命的であるという点である。最近、院内感染型（ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ−ａｃｑｕｉｒｅｄ）ＭＲＳＡ感染だけではなく、市中感染型（ｃｏｍｍｕｎｉｔｙ−ａｃｑｕｉｒｅｄ）ＭＲＳＡ感染が大きく増加しており、日常生活でも、ＭＲＳＡに容易に露出されていることが分かる。治療にバンコマイシン（ｖａｎｃｏｍｙｃｉｎ）が使われているが、これに対する耐性菌株も、既に報告されている。その他に、治療剤としてリネゾリド（Ｌｉｎｅｚｏｌｉｄ）、ダプトマイシン（Ｄａｐｔｏｍｙｃｉｎ）などがあるが、治療目的の抗生剤の選択が非常に制限的である。したがって、抗生剤に耐性がある細菌感染に使える新たな抗生剤の開発が切実である。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
前記課題を解決するために、本発明は、Ｆａｂ  Ｉ阻害剤及びその塩を有効成分として含む経口投与用薬剤学的組成物を提供する。
【０００５】
また、Ｆａｂ  Ｉ阻害剤及びその塩を有効成分として含む経口投与用薬剤学的組成物の製造方法を提供する。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明は、１−（３−アミノ−２−メチルベンジル）−４−（２−チオフェン−２−イル−エトキシ）−１Ｈ−ピリジン−２−オン、その塩またはこれらの組み合わせを含むものである、Ｆａｂ  Ｉ阻害剤を含む経口投与用薬剤学的組成物を提供する。
【０００７】
一具現例によれば、前記組成物のＤ９０粒子サイズは、０．１〜５００ｕｍである。
【０００８】
一具現例によれば、前記組成物は、錠剤またはカプセルの形態で提供されうる。
【０００９】
一具現例によれば、組成物総重量に対して、前記１−（３−アミノ−２−メチルベンジル）−４−（２−チオフェン−２−イル−エトキシ）−１Ｈ−ピリジン−２−オン、その塩またはこれらの組み合わせは、１０〜６０重量％に含まれる。
【００１０】
本発明の他の具現例によれば、ジメチルホルムアミド（ｄｉｍｅｔｈｙｌｆｏｒｍａｍｉｄｅ）に４−ベンジルオキシ−１Ｈ−ピリドン（４−ｂｅｎｚｙｌｏｘｙ−１Ｈ−ｐｙｒｉｄｏｎｅ）、２−メチル−３−ニトロベンジルクロリド（２−ｍｅｔｈｙｌ−３−ｎｉｔｒｏｂｅｎｚｙｌｃｈｌｏｒｉｄｅ）及びカリウムｔ−ブトキシド（ｐｏｔａｓｓｉｕｍ  ｔｅｒｔ−ｂｕｔｏｘｉｄｅ）を投入して、加温下で混合及び反応させる段階、前記混合物を反応させた後、精製水を追加し、加温下で乾燥させる段階、前記乾燥物を有機溶媒に溶かし、精製水を追加して層分離させる段階、有機層を回収し、濾過及び濃縮させて濃縮物を製造する段階、前記濃縮物を再濃縮させてヘキサンを追加して沈殿物を製造する段階、前記収得された沈殿物を溶解、冷却、濾過及び乾燥して収得する段階、前記収得された乾燥物を有機溶媒に溶解した後、塩化鉄六水和物、活性炭及びヒドラジン一水和物を添加して反応させた後、冷却及び濾過させて収得された沈殿物を乾燥後、粉砕させる段階、を含むものである、Ｆａｂ  Ｉ阻害剤を含む経口投与用薬剤学的組成物の製造方法を提供する。
【００１１】
一具現例によれば、本発明は、酸性物質を添加する段階をさらに含みうる。
【００１２】
一具現例によれば、前記酸性物質は、塩酸、硫酸、硝酸、リン酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、酒石酸、ギ酸、クエン酸、酢酸、トリクロロ酢酸、トリフルオロ酢酸、グルコン酸、安息香酸、乳酸、シュウ酸、フマル酸、マロン酸、マレイン酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、ナフタレンスルホン酸、ＥＤＴＡ及びこれらの組み合わせを含みうる。
【００１３】
一具現例によれば、前記沈殿物は、ナノ粒子を含む錠剤または固体分散体を含むカプセルの形態で製造可能である。
【００１４】
一具現例によれば、前記収得された沈殿物を、親水性高分子を含む固体分散体の形態でカプセルに充填させる段階をさらに含みうる。
【００１５】
一具現例によれば、本発明の組成物は、細菌感染症の治療用として使用することができる。
【００１６】
その他の本発明の具現例の具体的な事項は、以下の詳細な説明に含まれている。
【発明の効果】
【００１７】
本発明のＦａｂ  Ｉ阻害剤を含む経口投与用薬剤学的組成物は、抗生剤に耐性がある細菌の感染などに効果的に適用することができる。具体的に、本発明は、溶解度及び溶出率を向上させることにより、治療効果をさらに迅速に開始することができ、生体利用率を向上させうる。また、粒子サイズを調節することにより、製剤に対する混合及び容量の均一性を向上させうる。
【図面の簡単な説明】
【００１８】
【図１】ナノ粒子の粒度の測定結果を示すグラフである。
【図２】それぞれの製造例及び実施例の蒸留水に対する溶出パターンを示すグラフである。
【図３】それぞれの製造例及び実施例の蒸留水に対する溶出パターンを示すグラフである。
【図４】それぞれの実施例のｐＨ１．２水溶液に対する溶出パターンを示すグラフである。
【図５】Ｔ／ＭＩＣ値による抗菌効果を示すグラフである。
【図６】経時的な血清内の薬物濃度を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
本発明は、多様な変換を加え、さまざまな実施例を有することができるので、特定実施例を図面に例示し、詳細な説明で詳細に説明する。しかし、これは、本発明を特定の実施形態に対して限定するものではなく、本発明の思想及び技術範囲に含まれる、あらゆる変換、均等物または代替物を含むものと理解しなければならない。本発明を説明するに当って、関連した公知技術についての具体的な説明が、本発明の要旨を不明にする恐れがあると判断される場合、その詳細な説明を省略する。
【００２０】
以下、本発明の具現例による薬剤学的組成物についてより詳細に説明する。
【００２１】
本明細書に使われる用語、「薬剤学的組成物」は、「薬学的組成物」及び「薬学的に許容可能な組成物」と混用して記載し、投与対象に比較的非毒性であり、無害な有効作用ができる組成物であって、前記組成物から起因する副作用が薬物の効能を低下させず、化合物が投与される対象に深刻な刺激を誘発せず、化合物の生物学的活性と物性とを損傷させない任意の有機または無機化合物の剤型を意味する。
【００２２】
本発明で使われる用語「投与対象」とは、「投与個体」及び「投与有機体」と混用して記載し、細菌または耐性菌株の感染が誘発されたか、誘発されるヒトを含んだあらゆる動物を意味する。
【００２３】
また、「細菌感染症」とは、「細菌関連疾病」と混用して記載し、細菌感染によって発生する病気または疾患を意味する。前記病気または疾患としては、例えば、尿路、呼吸または皮膚組織感染、敗血症などを含み、これらに限定されるものではない。
【００２４】
本発明は、Ｆａｂ  Ｉ阻害剤を含む経口投与用薬剤学的組成物を提供する。具体的に、本発明は、Ｆａｂ  Ｉに対する選択的阻害剤として１−（３−アミノ−２−メチルベンジル）−４−（２−チオフェン−２−イル−エトキシ）−１Ｈ−ピリジン−２−オン、その塩またはこれらの組み合わせを含みうる。
【００２５】
１−（３−アミノ−２−メチルベンジル）−４−（２−チオフェン−２−イル−エトキシ）−１Ｈ−ピリジン−２−オンの構造は、下記化学式１と同じである。
【００２６】
【化１】
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【００２７】
前記化学式１の構造のようなＦａｂ  Ｉ選択的阻害剤は、従来の抗生剤であるβ−ラクタム系（ｂｅｔａ−ｌａｃｔａｍ）（ペニシリン、セファロスポリンなど）、グリコペプチド系（Ｇｌｙｃｏｐｅｐｔｉｄｅｓ）（バンコマイシンなど）、テトラサイクリン類（ｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅｓ）、アミノグリコシド類（Ａｍｉｎｏｇｌｙｃｏｓｉｄｅｓ）、グリシルサイクリン類（Ｇｌｙｃｙｌｃｌｉｎｅｓ）、マクロライド類（Ｍａｃｒｏｌｉｄｅｓ）、クロラムフェニコール（Ｃｈｌｏｒａｍｐｈｅｎｉｃｏｌ）、キノロン系（ｑｕｉｎｏｌｏｎｅ）、スルホンアミド類（Ｓｕｌｆｏｎａｍｉｄｅｓ）及びオキサゾリン系（ｏｘａｚｏｌｉｎｅ）系とは作用機序が完全に異なる化合物であって、細菌のタンパク質合成に必須的な酵素Ｆａｂ  Ｉ作用を抑制することにより、抗生効力を示す物質である。
【００２８】
脂肪酸（ｆａｔｔｙ  ａｃｉｄ）は、生命体にエネルギー源になるだけではなく、細胞膜の主成分であって、生命現象の保持に必須的な役割を果たす。したがって、細胞内のこれらの脂肪酸生合成過程は、あらゆる生きている細胞では必須的に存在する生化学的過程であり、これに関与する遺伝子は、細菌からヒトにまで必須的に存在する一種の必須遺伝子である。
【００２９】
Ｆａｂ  Ｉは、細菌脂肪酸生合成過程に関与する４個の酵素のうち、最終の段階のエノイルＡＣＰレダクターゼ（ｅｎｏｙｌ−ＡＣＰ  ｒｅｄｕｃｔａｓｅ）であって、エノイルＡＣＰ（ｅｎｏｙｌ−ＡＣＰ）を１，４還元反応を通じて、それに該当するアシルＡＣＰ（ａｃｙｌ−ＡＣＰ）に切り替える役割を果たすと報告されている（Ｐａｙｎｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  Ｔｏｄａｙ  ６，２００１，５３７−５４４）。Ｆａｂ  Ｉは、脂肪酸合成において最も重要なタンパク質であり、全体合成過程においての速度を決定する反応に関与する。しかし、ヒトのような哺乳類の場合、細菌とは異なって、このような脂肪酸の合成に脂肪酸合成酵素（ｆａｔｔｙ  ａｃｉｄ  ｓｙｎｔｈａｓｅ）という巨大な一塊の酵素が使われている。また、その構造は、細菌の脂肪酸合成経路にあるタンパク質と完全に異なる。したがって、選択的なＦａｂ  Ｉ阻害剤は、毒性がほとんどなく、今までは、そのいかなる抗生剤も標的としていない新たな標的タンパク質であるという点で、この標的タンパク質に作用する薬物の開発は、薬剤耐性、その中でも、多重薬剤耐性を有した細菌の治療成功率を向上させうる。
【００３０】
一具現例によれば、化学式１の化合物は、非結晶形、結晶形またはこれらの混合物の形態で提供され、例えば、化学式１の化合物、その塩またはこれらの組み合わせを１０〜６０重量％、例えば、２０〜４０重量％、例えば、１０〜３０重量％、例えば、３０〜６０％含みうる。
【００３１】
本発明の他の具現例によれば、ジメチルホルムアミドに４−ベンジルオキシ−１Ｈ−ピリドン、２−メチル−３−ニトロベンジルクロリド及びカリウムｔ−ブトキシドを投入して、加温下で混合及び反応させる段階、前記混合物を反応させた後、精製水を追加し、加温下で乾燥させる段階、前記乾燥物を有機溶媒に溶かし、精製水を追加して層分離させる段階、有機層を回収し、濾過及び濃縮させて濃縮物を製造する段階、前記濃縮物を再濃縮させてヘキサンを追加して沈殿物を製造する段階、前記収得された沈殿物を溶解、冷却、濾過及び乾燥して収得する段階、前記収得された乾燥物を有機溶媒に溶解した後、塩化鉄六水和物、活性炭及びヒドラジン一水和物を添加して反応させた後、冷却及び濾過させて収得された沈殿物を乾燥後、粉砕するものを含むものである、Ｆａｂ  Ｉ阻害剤を含む経口投与用薬剤学的組成物の製造方法を提供する。
【００３２】
一具現例によれば、化学式１の薬学的に許容可能な塩は、経口投与用薬剤学的組成物内に含有されうる。前記薬学的に許容可能な塩は、酸を用いて形成される酸付加塩である。酸の例としては、塩酸（ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｃ  ａｃｉｄ）、硫酸（ｓｕｌｆｕｒｉｃ  ａｃｉｄ）、硝酸（ｎｉｔｒｉｃ  ａｃｉｄ）、リン酸（ｐｈｏｓｐｈｏｒｉｃ  ａｃｉｄ）、臭化水素酸（ｈｙｄｒｏｂｒｏｍｉｃ  ａｃｉｄ）、ヨウ化水素酸（ｈｙｄｒｉｏｄｉｃ  ａｃｉｄ）、酒石酸（ｔａｒｔａｒｉｃ  ａｃｉｄ）、ギ酸（ｆｏｒｍｉｃ  ａｃｉｄ）、クエン酸（ｃｉｔｒｉｃ  ａｃｉｄ）、酢酸（ａｃｅｔｉｃ  ａｃｉｄ）、トリクロロ酢酸（ｔｒｉｃｈｌｏｒｏａｃｅｔｉｃ  ａｃｉｄ）、トリフルオロ酢酸（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ  ａｃｉｄ）、グルコン酸（ｇｌｕｃｏｎｉｃ  ａｃｉｄ）、安息香酸（ｂｅｎｚｏｉｃ  ａｃｉｄ）、乳酸（ｌａｃｔｉｃ  ａｃｉｄ）、シュウ酸（ｏｘａｌｉｃ  ａｃｉｄ）、フマル酸（ｆｕｍａｒｉｃ  ａｃｉｄ）、マロン酸（ｍａｌｏｎｉｃ  ａｃｉｄ）、マレイン酸（ｍａｌｅｉｃ  ａｃｉｄ）、メタンスルホン酸（ｍｅｔｈａｎｅ  ｓｕｌｆｏｎｉｃ  ａｃｉｄ）、ベンゼンスルホン酸（ｂｅｎｚｅｎｅｓｕｌｆｏｎｉｃ  ａｃｉｄ）、ｐ−トルエンスルホン酸（ｐ−ｔｏｌｕｅｎｅｓｕｌｆｏｎｉｃ  ａｃｉｄ）、ナフタレンスルホン酸（ｎａｐｈｔｈａｌｅｎｅｓｕｌｆｏｎｉｃａｃｉｄ）、エチレンジアミン四酢酸（ｅｔｈｙｌｅｎｅｄｉａｍｉｎｅｔｅｔｒａａｃｅｔｉｃ  ａｃｉｄ、ＥＤＴＡ）などが挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００３３】
一具現例によれば、本発明は、化学式１の化合物またはその塩の粒子サイズを調節して溶出率及び製剤の均一性を向上させうる。具体的に、化学式１の化合物またはその塩のＤ９０粒子サイズは、０．１〜５００ｕｍ、例えば、０．１〜３００ｕｍ、例えば、０．１〜５０ｕｍ、例えば、０．１〜２５ｕｍである。
【００３４】
一具現例によれば、前記化学式１の化合物またはその塩の粉砕は、湿式法、乾式法などによって粉砕することができるが、一般的な粉砕法であれば、特別に制限されず、適切に選択されうる。例えば、エアジェット粉砕機（ａｉｒ  ｊｅｔ  ｍｉｌｌ）、流体エネルギーミル（ｆｌｕｉｄ  ｅｎｅｒｇｙ  ｍｉｌｌ）、ミクロンミル（ｍｉｃｒｏｎ  ｍｉｌｌ）などがあるが、これらに限定されるものではない。
【００３５】
一具現例によれば、本発明は、経口投与の形態で提供され、固体または液体の形態で剤形化される。具体的には、本発明による組成物は、水または他の適当な液体媒質と共に再構成に適したタブレット、ペレット、顆粒、カプセル、懸濁液、エマルジョンまたは粉末の形態のような如何なる便利な形態にも提供されうる。
【００３６】
一具現例によれば、本発明の組成物は、カプセル（ｃａｐｓｕｌｅ）剤型または錠剤（ｔａｂｌｅｔ）の形態で提供されうる。カプセルまたは錠剤は、経口投与用として適した無毒性の薬学的に許容される賦形剤に可溶化または混合して製造可能である。
【００３７】
具体的な具現例によれば、本発明による組成物は、賦形剤及び可溶化剤をさらに添加して完全に溶解させた後、スプレー乾燥（ｓｐｒａｙ  ｄｒｙｉｎｇ）工程を適用して粉末を製造し、該製造した粉末を硬質カプセルに充填させて完製の形態で提供されうる。
【００３８】
例えば、賦形剤としては、水溶性高分子を使用し、具体的に、デキストリン（ｄｅｘｔｒｉｎ）、ポリデキストリン（ｐｏｌｙｄｅｘｔｒｉｎ）、デキストラン（ｄｅｘｔｒａｎ）、ペクチン（ｐｅｃｔｉｎ）及びペクチン誘導体、アルギン酸塩、澱粉、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ｈｙｄｒｏｘｙｐｒｏｐｙｌ  ｍｅｔｈｙｌｃｅｌｌｕｌｏｓｅ）、ヒドロキシプロピルセルロース（ｈｙｄｒｏｘｙｐｒｏｐｙｌｃｅｌｌｕｌｏｓｅ）、ヒドロキシメチルセルロース（ｈｙｄｒｏｘｙｍｅｔｈｙｌｃｅｌｌｕｌｏｓｅ）、ヒドロキシエチルセルロース（ｈｙｄｒｏｘｙｌｅｔｈｙｌｃｅｌｌｕｌｏｓｅ）、メチルセルロース（ｍｅｔｈｙｌ  ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ）、カルボキシメチルセルロースナトリウム（ｓｏｄｉｕｍ  ｃａｒｂｏｘｙｍｅｔｈｙｌ  ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ）、ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートサクシネート（ｈｙｄｒｏｘｙｐｒｏｐｙｌ  ｍｅｔｈｙｌｃｅｌｌｕｌｏｓｅ  ａｃｅｔａｔｅ  ｓｕｃｃｉｎａｔｅ）、ヒドロキシエチルメチルセルロース（ｈｙｄｒｏｘｙｌｅｔｈｙｌｍｅｔｈｙｌ  ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ）、グアーガム（ｇｕａｒ  ｇｕｍ）、ローカストビーンガム（ｌｏｃｕｓｔ  ｂｅａｎ  ｇｕｍ）、トラガカンタ（ｔｒａｇａｃａｎｔｈａ）、カラギーナン（ｃａｒｒａｇｅｅｎａｎ）、アカシアガム（ａｃａｃｉａ  ｇｕｍ）、アラビアガム（ａｒａｂｉｃ  ｇｕｍ）、ゲランガム（ｇｅｌｌａｎ  ｇｕｍ）、キサンタンガム（ｘａｎｔｈａｎ  ｇｕｍ）、ゼラチン（ｇｅｌａｔｉｎ）、カゼイン（ｃａｓｅｉｎ）、ポリビニルアルコール（ｐｏｌｙｖｉｎｙｌ  ａｌｃｏｈｏｌ）、ポリビニルピロリドン（ｐｏｌｙｖｉｎｙｌ  ｐｙｒｒｏｌｉｄｏｎｅ）、ポリビニルアセタールジエチルアミノアセテート（ｐｏｌｙｖｉｎｙｌａｃｅｔａｌｄｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｏａｃｅｔａｔｅ）、ポリ（ブチルメタクリレート、（２−ジメチルアミノエチル）メタクリレート、メチルメタクリレート）共重合体、ポリエチレングリコール（ｐｏｌｙｅｔｈｙｌｅｎｅ  ｇｌｙｃｏｌ）、ポリエチレンオキシド（ｐｏｌｙｅｔｈｙｌｅｎｅ  ｏｘｉｄｅ）、カルボマー（ｃａｒｂｏｍｅｒ）などを含みうる。さらに具体的な例としては、賦形剤としてポリビニルピロリドンを含み、組成物総重量に対して、例えば、１０〜６０重量％、例えば、３０〜５５重量％、例えば、４０〜５０重量％に含みうる。
【００３９】
例えば、可溶化剤としては、多価アルコール、界面活性剤などを使用することができる。具体的な例としては、プロピレングリコール（ｐｒｏｐｙｌｅｎｅ  ｇｌｙｃｏｌ）、ポリエチレングリコール、ジプロピレングリコール（ｄｉｐｒｏｐｙｌｅｎｅｇｌｙｃｏｌ）、ジエチレングリコール（ｄｉｅｔｈｙｌｅｎｅ  ｇｌｙｃｏｌ）、ジエチレングリコールモノエチルエーテル（ｄｉｅｔｈｙｌｅｎｅ  ｇｌｙｃｏｌ  ｍｏｎｏｅｔｈｙｌ  ｅｔｈｅｒ）、グリセロール（ｇｌｙｃｅｒｏｌ）、ツイン８０（ｔｗｅｅｎ  ８０）、クレモフォール（ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ）、トランスクトール（ｔｒａｎｓｃｕｔｏｌ）などを含みうるが、これらに限定されるものではない。さらに具体的に例を挙げれば、可溶化剤として界面活性剤ツイン８０を含み、組成物総重量に対して、例えば、０．５〜２０重量％、例えば、１〜１０重量％、例えば、２〜５重量％に含みうる。
【００４０】
一具現例によれば、組成物総重量に対して、化学式１の化合物、その塩またはこれらの組み合わせを、例えば、１０〜６０重量％、例えば、３０〜５５重量％、例えば、４０〜５０重量％含みうる。
【００４１】
具体的な具現例によれば、本発明は、賦形剤、崩壊剤及び滑沢剤をさらに添加して湿式顆粒の形態で練合、乾燥、整粒及び混合して錠剤の形態で提供されうる。
【００４２】
例えば、湿式顆粒のために使える溶媒としては、水、メタノール（ｍｅｔｈａｎｏｌ）、エタノール（ｅｔｈａｎｏｌ）、ジクロロメタン（ｄｉｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈａｎｅ）からなる群から選択される１つ以上を含みうる。具体的に、エタノールまたはエタノール水溶液を含みうるが、これらに限定されるものではない。
【００４３】
例えば、賦形剤としては、微結晶セルロース（ｍｉｃｒｏｃｒｙｓｔａｌｌｉｎｅ  ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ）、ケイ化微結晶セルロース（ｓｉｌｉｃｉｆｉｅｄ  ｍｉｃｒｏｃｒｙｓｔａｌｌｉｎｅ  ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ）、マンニトール、乳糖、二酸化ケイ素（ｓｉｌｉｃｏｎｅ  ｄｉｏｘｉｄｅ）などを含みうるが、これらに限定されるものではない。
例えば、崩壊剤としては、クロスカルメロースナトリウム（ｃｒｏｓｃａｒｍｅｌｌｏｓｅｓｏｄｉｕｍ）、澱粉などを含みうるが、これらに限定されるものではない。
例えば、滑沢剤としては、トウモロコシ澱粉、タルク（ｔａｌｃ）、ステアリン酸マグネシウム（ｍａｇｎｅｓｉｕｍ  ｓｔｅａｒａｔｅ）、ステアリン酸カルシウム（ｃａｌｃｉｕｍ  ｓｔｅａｒａｔｅ）、ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウム（ｓｏｄｉｕｍ  ｌａｕｒｙｌ  ｓｕｌｆａｔｅ）などを含みうるが、これらに限定されるものではない。
【００４４】
一具現例によれば、本発明の錠剤の形態の製造において結合剤をさらに含み、例えば、ゼラチン、澱粉、ブドウ糖、ポビドン（ｐｏｖｉｄｏｎｅ）、ヒドロキシプロピルセルロース（ｈｙｄｒｏｘｙｐｒｏｐｙｌ  ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ）、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ｈｙｄｒｏｘｙｐｒｏｐｙｌｍｅｔｈｙｌ  ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ）などを含みうるが、これらに限定されるものではない。
【００４５】
一具現例によれば、本発明は、例えば、賦形剤として微結晶セルロース、Ｄ−マンニトール（Ｄ−ｍａｎｎｉｔｏｌ）などを含み、それを単独または２種以上混合して使用し、崩壊剤としては、クロスカルメロースナトリウムなどを含み、滑沢剤としてステアリン酸マグネシウムなどを含有する経口投与用錠剤を提供することができる。
【００４６】
具体例として、本発明による錠剤は、化学式１の化合物、その塩またはこれらの組み合わせ１００重量部に対して、賦形剤１０〜１０００重量部、例えば、１００〜３００重量部、崩壊剤１〜３０重量部、例えば、１０〜２０重量部、結合剤０．１〜２０重量部、例えば、５〜１５重量部、滑沢剤０．１〜１０重量部、例えば、３〜５重量部を含みうる。
【００４７】
一具現例によれば、化学式１の化合物またはその塩を溶解するために薬学的に許容可能な溶媒を使用し、ｐＨ１〜ｐＨ３、例えば、ｐＨ１．２を示す酸を含有する水溶液、水、メタノール、エタノール、ジクロロメタンなどを使用することができるが、これらに限定されるものではない。
【００４８】
一具現例によれば、本発明は、ＭＲＳＡのようなグラム陽性細菌（ｇｒａｍ−ｐｏｓｉｔｉｖｅ  ｂａｃｔｅｒｉａ）性の感染疾患またはその多様な感染疾患の治療のために使用することができる。グラム陽性細菌は、例えば、スタフィロコッカス・アウレウス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ）及びスタフィロコッカス・エピデルミディス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ）のようなスタフィロコッカス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ）、ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａ）、ストレプトコッカス・ピオゲネス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｙｒｏｇｅｎｅｓ）、Ｃ、Ｆ及びＧ群のストレプトコッカス（ｇｒｏｕｐ  Ｃ／Ｆ／Ｇ  Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｉ）及びビリダン群のストレプトコッカス（ｖｉｒｉｄａｎｓ  ｇｒｏｕｐ  Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｉ）のようなストレプトコッカス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）を含みうる。
【００４９】
一具現例によれば、本発明は、薬剤学的に許容可能であり、生理学的に適した添加剤をさらに含みうる。例えば、充填剤、増量剤、結合剤、崩壊剤、潤滑剤、防腐剤、緩衝剤、被膜剤、甘味剤、溶解剤、懸濁剤、着色剤、水溶性添加剤、賦形剤、担体、フィラー、滑沢剤、吸湿剤など、それぞれの剤型に通常使われる薬剤学的に許容されるものであれば、如何なるものでも添加剤として使用することができる。例えば、前記添加剤は、組成物総重量に対して、５〜９０重量％、例えば、４０〜９０重量％に含まれる。
【００５０】
本発明による薬剤または薬学的組成物は、乳児、子供及び大人、動物を含んだヒトへの適用に適した如何なる形態でもよく、この分野の知識を有した者に知られた標準工程によって製造可能である。
【００５１】
以下、当業者が容易に実施できるように、本発明の実施例について詳しく説明する。しかし、本発明は、さまざまな異なる形態として具現可能であり、ここで説明する実施例に限定されるものではない。
【実施例】
【００５２】
製造例１：化学式１の化合物の製造
化学式１の化合物を製造するために、４−ベンジルオキシ−１Ｈ−ピリドン０．９ｍｏｌをジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）１０Ｌに投入後、撹拌しながらカリウムｔ−ブトキシド０．９ｍｏｌを添加した後、５５℃に加温しながら３０分間加熱及び混合する。
【００５３】
２−メチル−３−ニトロベンジルクロリド０．９ｍｏｌを徐々に添加し、追加的に２時間混合しながら反応させる。反応完了後、精製水４Ｌを入れた後、それを回転蒸発乾燥機（Ｒｏｔａｒｙ  ｅｖａｐｏｒａｔｏｒ、Ｒｏｔａｖａｐｏｒ（登録商標）Ｒ−２２０、ＢＵＣＨＩ  Ｋｏｒｅａ）を用いて６０℃に加温しながら乾燥を実施した。１４Ｌのジメチルクロリド（Ｄｉｍｅｔｈｙｌ  ｃｈｌｏｒｉｄｅ）を追加して乾燥物を溶解した後、７Ｌ蒸留水を追加して層分離させる。上澄み液を取って、硫酸マグネシウム及び活性炭をそれぞれ０．７ｋｇずつ追加して１時間撹拌後、それをセライトで濾過後、回転蒸発乾燥機を使用して乾燥した（収得率：６０％）。
【００５４】
収得された乾燥物約２ｋｇをエタノールに溶解した後、塩化鉄六水和物１００ｇ及び活性炭６００ｇ及びヒドラジン一水和物１０ｋｇ添加して反応させた溶液を冷却し、濾過させて、白色の沈殿物を収得及びそれを真空オーブンで４０℃で一晩（ｏｖｅｒｎｉｇｈｔ）乾燥させて、化学式１の化合物である、ピリジン置換体１−（３−アミノ−２−メチルベンジル）−４−（２−チオフェン−２−イル−エトキシ）−１Ｈ−ピリジン−２−オンを製造した。収得率は、８５％である。
【００５５】
合成過程で生成された柔軟物質を除去するために、必要に応じて精製作業を実施することができる。精製作業は、ジクロロメタン３０Ｌに合成された原料物質２ｋｇを溶解した後、精製水を追加して層分離させ、有機層を取って、硫酸ナトリウム０．７ｋｇを入れて撹拌し、追加的に活性炭０．７ｋｇを入れ、１時間撹拌した後、濾過させ、減圧濃縮して、ジクロロメタンを除去する過程に進行しうる。また、酢酸エチルを１０Ｌ添加して溶解後、濃縮させ、ヘキサン２０Ｌを添加して再結晶させた後、それを４０℃で乾燥させる。精製作業は、必要に応じて繰り返すことができる。
【００５６】
製造例２：化学式１の化合物の塩の製造
化学式１の化合物は、溶解度が蒸留水で２ｕｇ／ｍＬに非常に低く、これにより、体内投与後、低い溶解度による生体利用率の低下が引き起こされる。また、薬剤学的組成物の製造に使用することができるスプレー乾燥方法による高分子分散体の製造方法は、非常に複雑であるだけではなく、製造過程で原料の損失が相対的に大きいという短所がある。このような問題点を改善するために、化学式１の化合物の塩を製造した。
【００５７】
製造例１による化学式１の化合物（Ｍ．Ｗ．３４０．４５）６ｇを溶媒ジクロロメタン１００ｍＬに添加後、室温で３０分間撹拌して完全に溶解した（０．１７６Ｍ）。酸性物質は、液相の場合、そのまま使用し、固体の場合、水に溶解して使用した。溶媒に溶解された化学式１の化合物の溶液を１００ｒｐｍの速度で撹拌しながら酸性物質を徐々に添加した。酸性物質の種類及び添加による性状は、表１に示した。
【００５８】
【表１】
2021530435.tif 000004
【００５９】
多種の酸性物質を使用して塩の生成有無を調査した時、表１で示しているように、塩酸及び硫酸を添加した時、直ちに沈殿物が発生した。但し、硫酸の場合、経時的に沈殿物の色が漸進的に喝変された。それ以外に、他の酸性物質は、表から見るように、相分離または液相の形態をそのまま保持した。沈殿物が発生した場合、それを濾過後、沈殿物をジクロロメタンで希釈し、それを再濾過して残留する可能性がある酸性物質を除去した。本過程を２回繰り返し実施した後、収得された沈殿物を４０℃に予熱された真空オーブン（ｖａｃｕｕｍ  ｏｖｅｎ）で１２時間乾燥した。収得率は、９５〜９８％であり、乾燥物を粉末化させて溶解度を測定した。液相または相分離が起こって、サンプルの場合、それを回転蒸発装置（Ｔｏｋｙｏ  Ｒｉｋａｋｉｋａｉ  Ｃｏ．，Ｌｔｄ／Ｅｙｅｌａ  ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  ｅｖａｐｏｒａｔｏｒ  Ｎ−１０００）を使用して乾燥を実施した。収得されたそれぞれのサンプルは、溶解度を測定した。その結果値は、表１で示している。中性の水を持って測定した水溶解度は、リン酸塩で遊離塩（ｆｒｅｅ  ｂａｓｅ）に比べて、４５２倍に最も高く増加し、硫酸塩及び塩酸塩で３３０倍以上に増加した。そして、クエン酸塩及び酒石酸塩は、１５０倍以上増加し、アスコルビン酸（ａｓｃｏｒｂｉｃ  ａｃｉｄ）塩及びフマル酸塩の場合、それぞれ約４０倍及び１００倍、そして、最後に酢酸塩及びＥＤＴＡ塩は、ほぼ２０倍程度溶解度が増加した。製造の容易性、乾燥後、性状及び溶解度を総合的に考慮する時、塩酸塩が化学式１の化合物の塩の製造に適用することができる。
【００６０】
実施例１：カプセルの製造
化学式１の化合物の場合、水に対する溶解度が非常に低く、溶解度が低いほど低い生体利用率を示すと知られている。このような問題を解決するために、高分子固体分散体（ｐｏｌｙｍｅｒ  ｂａｓｅｄ  ｓｏｌｉｄ  ｄｉｓｐｅｒｓｉｏｎ  ｐａｒｔｉｃｌｅｓ）を製造して、それをカプセルに充填する方法で完製を製造した。より詳細には、まず、ジクロロメタン１．６Ｌにピリジン置換体１−（３−アミノ−２−メチルベンジル）−４−（２−チオフェン−２−イル−エトキシ）−１Ｈ−ピリジン−２−オン及びその塩またはその混合物を約８０ｇを溶解させた後、親水性高分子ポリビニルピロリドン８０ｇ及び可溶化剤ツイン８０  ３．２６ｇを添加して室温で３０分間撹拌して完全に溶解した。それをスプレー乾燥（ＧＥＡ／Ｎｉｒｏ  ＳＤＭＩＣＲＯＴＭ）を実施して粒子化した。スプレー乾燥工程は、下記表２のように実施して粒子を回収した後、追加的に４０℃に予熱された真空オーブンを使用して一晩乾燥を実施して、残留可能性があるジクロロメタンを除去し、製造された粉末をゼラチン硬質カプセルに充填してカプセルを製造した。
【００６１】
【表２】
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【００６２】
実施例２：塩を含む錠剤の製造
製造例２による化学式１の化合物の塩を含有する錠剤を製造した。まず、１錠当たり化学式１の化合物の塩酸塩４２．４％（ｗ／ｗ）、微結晶セルロース２７．１％（ｗ／ｗ）、Ｄ−マンニトール２０．３％（ｗ／ｗ）、クロスカルメロースナトリウム３．４％（ｗ／ｗ）及びアエロジル（ａｅｒｏｓｉｌ）（Ｔｏｍｉｔａ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ（Ｊａｐａｎ）、Ｆｌｏｒｉｔｅ（登録商標））１．４％（ｗ／ｗ）の混合物をエタノールに溶解させたヒドロキシプロピルセルロースが溶解された結合液１０％（ｗ／ｖ）、６０ｕＬを徐々に入れて顆粒を生成させた後、６０℃に予熱された熱風乾燥機で３〜４時間程度乾燥させた。乾燥物の水分含有量は、３％以下とした。乾燥された顆粒物は、１８ｍｅｃｈ篩で濾過した後、崩壊剤であるクロスカルメロースナトリウム２％（ｗ／ｗ）及び滑沢剤であるステアリン酸マグネシウム１．４％（ｗ／ｗ）を添加した後、混合して打錠を実施して、錠剤を製造した。
【００６３】
実施例３：ナノ粒子を含む錠剤の製造
製造例１による化学式１の化合物の水溶解度の改善のために、化学式１の化合物の粒度をナノ粒子化させることにより、原料の表面積を増加させて溶解度を改善しようとした。そのために、化学式１の化合物１ｇをジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）１０ｍＬに撹拌して、完全に溶解させて透明な溶液を製造した。ポロキサマー（ｐｏｌｏｘａｍｅｒ）４０７  ０．５ｇをミリスチルアルコール（ｍｙｒｉｓｔｙｌ  ａｌｃｏｈｏｌ）２０ｍＬに７０℃で溶解した後、化学式１の化合物の溶液を徐々に入れ、１５，０００ｒｐｍの速度で均質混合機（ｈｏｍｏｇｅｎｉｚｅｒ、ＩＫＡ（登録商標）−Ｗｅｒｋｅ  ＧｍｂＨ  ＆  Ｃｏ．ＫＧ、Ｄｅｍａｒｋ／ＩＫＡ（登録商標）  Ｔ２５  ｄｉｇｉｔａｌ  ＬＲ）を使用して、５分間混合して乳化させた。この際、乳化工程で使われた温度は、８０℃であった。前記乳化工程以後、それを常温で一定時間保管して、温度を急激に低下させて、生成された固形物を粉砕機（ｔｏｒｒｙ  Ｈｉｌｌｓ  Ｔ６５  ｔｈｒｅｅ  ｒｏｌｌ  ｍｉｌｌ）を使用して平均粒度サイズ約２９０ｎｍに粉砕した。製造された粉砕物を超臨界抽出機の反応器（日新オートクレーブ／ＳＣ−ＣＯ２  ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ  ｓｙｓｔｅｍ）に入れ、同時に二酸化炭素を注入させた。この際、反応器内の圧力は、７０気圧程度に保持させて、ミリスチルアルコール及びジメチルスルホキシドを除去し、固体粒子のみ残っているようにし、この際、得られた固体の重量は、１．４８ｇ、収率は、９８．７％である。収得した固体に対してＯｔｓｕｋａ  Ｅｌｅｃｔｒｏｎｉｃｅｓ  Ｋｏｒｅａ  Ｃｏ．，Ｌｔｄ、ゼータ電位測定システム（ＥＬＳ−２０００Ｚ）で粒度を測定した結果、平均粒度は、３１８ｎｍであり、その結果は、図１及び表３に示した。
【００６４】
【表３】
2021530435.tif 000006
【００６５】
前記のように製造された化学式１の化合物を含有するナノ粒子を主成分として４５．５％（ｗ／ｗ）、微結晶セルロース２２．７％（ｗ／ｗ）、Ｄ−マンニトール２２．７％（ｗ／ｗ）、クロスカルメロースナトリウム３．０％（ｗ／ｗ）及びアエロジル（Ｔｏｍｉｔａ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ（Ｊａｐａｎ）、Ｆｌｏｒｉｔｅ（登録商標））１．４％（ｗ／ｗ）の混合物をエタノールに溶解させたヒドロキシプロピルメチルセルロース（ｈｙｄｒｏｘｙｐｒｏｐｙｌｍｅｔｈｙｌ  ｃｅｌｌｕｌｓｅ、ＨＰＭＣ）結合液（１０％（ｗ／ｖ））６０ｕＬを徐々に入れ、顆粒を生成させた後、６０℃に予熱された温風乾燥機で約３〜４時間乾燥させた。乾燥物の水分含有量は、３％以下とした。乾燥された顆粒物は、１８ｍｅｃｈ篩で濾過した後、１錠当たり基準に、崩壊剤クロスカルメロースナトリウム１．８％（ｗ／ｗ）及び滑沢剤ステアリン酸マグネシウム１．２％（ｗ／ｗ）を添加した後、混合して打錠を実施して、錠剤を製造した。
【００６６】
実施例４ないし実施例８：錠剤の製造
塩の導入、高分子分散体及びナノ粒子化の方法において、原料物質の損失などで発生する生産性及び経済性の低下を解決するために、原料物質である化学式１の化合物をジェット粉砕機（韓国粉体機械株式会社／Ｍｉｃｒｏ  Ｊｅｔ  Ｍｉｌｌ）で粉砕して、表４のように原料物質粒度サイズ（Ｄ９０）値を異ならせて製造した。粒度を異ならせた化学式１の化合物に微結晶セルロース（ＭＣＣ）２４．０％（ｗ／ｗ）、Ｄ−マンニトール２１．７％（ｗ／ｗ）及びクロスカルメロースナトリウム０．８％（ｗ／ｗ）をそれぞれ篩でかけて、各原料内に含まれている塊を除去した後、それを均一に混合した。混合後、エタノールに溶かされたヒドロキシプロピルセルロース結合液６％（ｗ／ｖ）を１５０ｕＬを添加して顆粒を取って、それを水分含有量が２％以下になるまで乾燥した。それを整粒して、１錠当たり基準に、滑沢剤としてステアリン酸マグネシウム０．８％（ｗ／ｗ）を添加して混合後、打錠して錠剤を製造した。
【００６７】
【表４】
2021530435.tif 000007
【００６８】
実験例１：ＭＲＳＡ菌株の抑制評価
化学式１の化合物の抗生剤耐性菌株に対する抑制効果を確認するために、それぞれの患者から分離された黄色ブドウ球菌表現型（ｐｈｅｎｏｔｙｐｅ）に化学式１の化合物を処理して、薬物に対する感受性を評価した。抗生剤の開発のための試験管の試験で最も重要な結果値は、ＭＩＣ９０（全体細菌株の９０％の個体の成長を抑制することができる最小抑制濃度）であると言える。表５の結果は、世界的に抗感染の分野でその権威を認められている米国ハーシー病院のアペルバウム博士の実験室でメチシリン感受性菌株約１００種と現在社会的に問題になっているＭＲＳＡ菌株１００種とを対象にして、現在市販中である代表的な薬剤を対照薬物としてＭＩＣ９０試験を行った結果である。
【００６９】
【表５】
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【００７０】
表５に示されたように、感受性菌株と非感受性菌株であるＭＲＳＡに関係なくＭＩＣ９０値が０．２５ｕｇ／ｍＬであることを確認することができ、これは、対照薬物に比べて２倍から数十倍優れた結果であることが分かる。特に、これらの菌株中には、バンコマイシンに耐性を示すバンコマイシン低感受性黄色ブドウ球菌（ｖａｎｃｏｍｙｃｉｎ−ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａｔｅ  Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ、ＶＩＳＡ）株、スーパー細菌であるバンコマイシン耐性黄色ブドウ球菌（ｖａｎｃｏｍｙｃｉｎ−ｒｅｓｉｓｔａｎｔ  Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ、ＶＲＳＡ）株（ｖａｎｃｏｍｙｃｉｎ  ＭＩＣ＞６４ｕｇ／ｍＬ）が含まれている。このような結果を見る時、従来の薬物であるバンコマイシン、テイコプラニン（ｔｅｉｃｏｐｌａｎｉｎ）、リネゾリド(ｌｉｎｅｚｏｌｉｄ)、アモキシシリン−クラブラン酸（ａｍｏｘｉｃｉｌｌｉｎ−ｃｌａｖｕｌａｎａｔｅ）、ダプトマイシンなどに比べて、化学式１の化合物が細菌の感染によって発生する疾病または疾患の効果的な治療剤として用いられるということを確認することができる。具体的に、これに限定されるものではないが、尿路、呼吸器、皮膚組織感染、敗血症などを含む疾患と関連する細菌の感染症に対する治療剤として有用に使われる。
【００７１】
実験例２：化学式１の化合物の溶解度の分析
化学式１の化合物の塩を製造するのに先立って、多様な溶媒に対する溶解度を確認するために、化学式１の化合物の溶解度を分析した。まず、化学式１の化合物を表５のように薬学的に許容された溶媒に過飽和させて室温で１２時間暗室に保管しながら撹拌した。それを１次的に遠心分離して上澄み液を取った後、それを再び０．２５ｕｍ  ＰＶＤＦ濾過フィルターを使用して溶液内に残留する不溶物質を除去した。濾過溶液をメタノールで希釈した後、それをＨＰＬＣ分析を実施して、溶解度を定量化し、その結果値は、表６に示した。また、ＨＰＬＣ分析条件は、次の通りである。
【００７２】
検液及び標準液２０μＬずつを持って、次の条件で大韓民国薬典一般試験法の液体クロマトグラフ法（ＨＰＬＣ）によって試験して、各液の主成分のピーク面積を測定する。
【００７３】
操作条件及び計算
［操作条件］
検出器：紫外部吸光光度計（測定波長２８６ｎｍ）
カラム：Ａｅｇｉｓｐａｋ  Ｃ１８−Ｌ（４．６ｍｍ×２５０ｍｍ、５ｕｍ）カラム
カラム温度：２５℃
移動相：アセトニトリル：水＝３：２
流量：１．０ｍＬ／分
【００７４】
［計算］
【数１】
2021530435.tif 000009
ＡＴ：検液のうち、主成分のピーク面積
ＡＳ：標準液のうち、主成分のピーク面積
ＤＴ：検液希釈倍数
ＤＳ：標準液希釈倍数
Ｐ：主成分標準品の純度（％）
【００７５】
【表６】
2021530435.tif 000010
【００７６】
表６に示されたように、化学式１の化合物のｐＨが減少するにつれて溶解度が増加する傾向が分かる。例えば、水（中性）では、２．５ｕｇ／ｍＬの低い溶解度を有したが、ｐＨ１．２の強酸条件では、約０．９ｍｇ／ｍＬ程度の溶解度を示した。エタノール、メタノール及びグリセロールでは、溶解度は１０ｍｇ／ｍＬ以下に非常に低く、ジクロロメタン及びＤＭＳＯで溶解度は５０ｍｇ／ｍＬ以上に高かった。但し、ＤＭＳＯの高い沸点によって揮発性が低くて、乾燥の難しさが予想されて、塩の製造において利用することが不適切であると判断した。したがって、塩の製造工程では、例えば、揮発性が高く、相対的に溶解度が高いジクロロメタンを使用することができる。
【００７７】
実験例３：カプセルの安定性分析
実施例１によるカプセルの保管条件による安定性を調査した。保管条件は、長期及び加速条件で、詳細には、それぞれ温度２５±２℃及び湿度６０±５％と、温度４０±２℃及び湿度７５±５％である。その結果値は、表７に示した。
【００７８】
【表７】
2021530435.tif 000011
【００７９】
表７に示されたように、長期保管条件で少なくとも１２ヶ月、そして、加速条件で６ヶ月まで溶出、含量及び柔軟物質が基準内適していることを確認した。それを基準に考慮する時、製品の有効期間は、例えば、２４ヶ月と決定することができる。
【００８０】
実験例４：化学式１の化合物の塩酸塩を含む錠剤の安定性分析
実施例２による錠剤の保管条件による安定性を調査した。保管条件は、長期及び加速条件とし、溶出、含量及び柔軟物質の生成程度を調査項目で評価した。長期及び加速保管条件は、それぞれ温度２５±２℃及び湿度６０±５％と温度４０±２℃及び湿度７５±５％である。その結果値は、表８に示した。
【００８１】
【表８】
2021530435.tif 000012
【００８２】
表８に示されたように、２つの条件のあらゆる試験項目で結果値は、設定された範囲で安定性を保持し、それぞれの項目別に６ヶ月間有意な変化が観察されていない。したがって、化学式１の化合物の塩酸塩を含有する錠剤は、物理、化学的に非常に安定して保持されることが分かる。
【００８３】
実験例５：ナノ粒子含有錠剤の安定性分析
実施例３によるナノ粒子錠剤の保管条件による安定性を調査した。保管条件は、長期及び加速条件とし、溶出、含量及び柔軟物質の生成程度を調査項目で評価した。長期及び加速保管条件は、それぞれ温度２５±２℃及び湿度６０±５％と温度４０±２℃及び湿度７５±５％である。その結果値は、表９に示した。
【００８４】
【表９】
2021530435.tif 000013
【００８５】
表９に示されたように、２つの条件のあらゆる試験項目で６ヶ月間大きな変化が観察されていない。したがって、化学式１の化合物を含む錠剤は、非常に安定性に優れていることが分かる。
【００８６】
実験例６：溶解度及び溶出試験
製造例１、製造例２、実施例１及び実施例３から製造された化学式１の化合物及びその塩、そして、化学式１の化合物を用いて製造された高分子分散体及びナノ粒子化粉末の蒸留水に対する溶解度を調査した。まず、蒸留水にそれぞれの物質を過量投与して室温で１２時間混合した。以後、２時間静置して上澄み液を取った後、それを０．２５ｕｍの空隙を有したフィルターを用いて濾過した。それを再びメタノールに希釈後、ＨＰＬＣ分析を実施した。ＨＰＬＣ条件は、実験例２の溶解度の試験で分析条件と同一である。その結果値は、表１０に示した。
【００８７】
【表１０】
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【００８８】
表１０に示されたように、塩の導入、高分子分散体及びナノ粒子化を導入した時、遊離塩で存在するものに比べて、溶解度が向上したことを確認することができる。
【００８９】
また、前述した製造例１による化学式１の化合物、製造例２による化学式１の化合物の塩酸塩、実施例１による高分子分散体粉末及び実施例３によるナノ粒子化粉末をゼラチン硬質カプセルに充電後、蒸留水で大韓民国薬典一般試験法のうち、第２パドル溶出試験法を適用して溶出試験を実施した。その結果値は、図２に示した。実験過程で獲得したサンプルは、ＨＰＬＣ分析を実施して、各時間帯別に薬物の含量を定量化した。ＨＰＬＣ条件は、下記のようである。
【００９０】
［溶出試験条件］
−試験法：大韓民国薬典溶出試験法第２法（パドル法）
−試験液：蒸留水
−試験温度：３７±０．５℃
−回転速度：５０ｒｐｍ
【００９１】
次の条件で大韓民国薬典一般試験法の液体クロマトグラフ法（ＨＰＬＣ）によって試験して、各液の主成分のピーク面積を測定する。
【００９２】
操作条件及び計算
［操作条件］
実験例２の溶解度の試験で使われた含量試験の操作条件及び算式は、同一である。
【００９３】
図２に示されたように、製造例１に比べて、製造例２（塩の導入）、実施例１（高分子分散体）及び実施例２（ナノ粒子化）のような技術を適用した時、水で溶出パターンが画期的に改善されることが分かる。
【００９４】
実験例７：粒度による溶出パターンの分析
実施例４ないし実施例８による錠剤の溶出試験に先立って、製剤均一性試験を実施した。製剤均一性試験は、各実施例を通じて製造されたサンプルを１０個ずつ取って、それぞれの錠当たり含量を定量化し、大韓民国薬典一般試験法のうち、製剤均一性試験によって判定値を求めた。一般的に、判定値の大きさは、製剤均一性に反比例する。実施例４ないし実施例８の判定値は、表１１に示した。
【００９５】
【表１１】
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【００９６】
表１１に示されたように、使われた原料の粒度が増加するほど判定値は増加する傾向を示した。すなわち、粒度が増加するほど製剤の均一性は低下した。特に、粒度サイズ（Ｄ９０）が５０ｕｍ程度であった時、製剤均一度の判定値が急増し、これは、製剤均一性の低下を代弁すると判断される。
【００９７】
原料物質の粒度サイズによる溶出率の差を調査するために、大韓民国薬典一般試験法のうち、溶出試験第２法パドル法によって実験を実施した。蒸留水及びｐＨ１．２水溶液９００ｍＬを溶出液として使用し、実験条件は、回転速度５０ｒｐｍ及び温度３７±０．５℃の条件で実施した。溶出液として蒸留水を使用した結果は、図３に、ｐＨ１．２水溶液を使用した結果は、図４に示した。
【００９８】
一定時間隔で溶出液を取って、それを０．４５ｕｍのフィルターで濾過後、ＨＰＬＣ分析を実施して、溶出程度を評価した。ＨＰＬＣ分析条件は、実験例６で使われた溶出試験方法と同一である。図３及び図４に示されたように、原料物質の粒度が減少するにつれて蒸留水及びｐＨ１．２溶出液での溶出率が向上した。特に、実施例４の場合、蒸留水で製造例２（塩の導入）、実施例１（高分子分散体）及び実施例２（ナノ粒子化）技術を適用した物質と類似した溶出率を示した。
【００９９】
また、各サンプル別の溶出率の差も、漸進的に減少した。具体的に、実施例４及び実施例５の場合、溶出試験の偏差が１〜３％以内である一方、実施例６ないし実施例８の場合、３〜１０％に表われることを確認することができる。以上の結論を見る時、粒子のサイズが微細であるほど製剤均一性の向上、溶出率の向上及び溶出偏差の減少によって、今後の経口投与時に、より迅速かつ一定の生体吸収パターンを示すと予想され、これにより、迅速かつ一定の治療効果を保証することができると期待される。
【０１００】
実験例８：実施例４による錠剤の安定性分析
実施例４による錠剤をプラスチック瓶に保管後、２５±２℃、６０±５％ＲＨの長期条件及び４０±２℃、７５±５％ＲＨの加速条件で保管しながら製品の物理、化学的特性値において有意な変化が発生するかを観察した。その結果値は、表１２に示した。
【０１０１】
【表１２】
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【０１０２】
表１２に示されたように、長期及び加速条件で６ヶ月間保管した時、あらゆる試験項目において有意な変化が観察されていないので、製剤の安定性を確認することができる。実施例５ないし実施例８において、その結果を示していないが、同一条件及び期間の間に物理、化学的に非常に安定することを予測することができる。
【０１０３】
実験例９：マウス（ｍｏｕｓｅ）の薬物動態学及び薬力学の分析
化学式１の化合物に対して、マウス感染モデルを利用した薬物動態学／薬力学の実験を進行した。そのために、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ  ＡＴＣＣ  ２９２１３（ＭＳＳＡ、標準株）及び１３Ｂ−３８２（ＭＲＳＡ、臨床株）を対象にして実験を進行した。培地は、ミューラー・ヒントン（Ｍｕｅｌｌｅｒ−Ｈｉｎｔｏｎ）培地あるいはカチオン調整ミューラー・ヒントン（Ｃａｔｉｏｎ−ａｄｊｕｓｔｅｄ  Ｍｕｅｌｌｅｒ−Ｈｉｎｔｏｎ）培地を使用した。感受性検査（最小抑制濃度：ｍｉｎｉｍｕｍ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ  ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ（ＭＩＣ））には、化学式１の化合物を使用した。
【０１０４】
無菌（Ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｐａｔｈｏｇｅｎ  ｆｒｅｅ、ＳＰＦ）状態の雌、６週齢（２３〜２７ｇ）のＩＣＲマウス（ＩＣＲ  ｍｉｃｅ）（オリエントバイオ、加平、大韓民国）を使用し、動物保護法及び実験動物に関する法律に基づいた動物実験倫理委員会の許可を得て、その規定と手続きとを遵守して実施した。好中球減少（＜１００／ｍｍ３）の誘導のために、Ｃｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ（Ｂｅｘｔｅｒ、Ｆｒａｎｋｆｕｒｔ、Ｇｅｒｍａｎｙ）を皮下注射した。実験前、実験菌株をミューラー・ヒントンＩＩブロス（Ｍｕｌｌｅｒ  Ｈｉｎｔｏｎ  ＩＩ  ｂｒｏｔｈ）培地に２４時間３７℃で培養し、濃度を１０８ＣＦＵ／ｍＬ合わせた。その後、生理食塩水で希釈して、０．１ｍをマウスの大腿部に接種し（接種量１．０×１０５ＣＦＵ／ｍＬ）、２時間経過後、化学式１の化合物の経口投与を始めた。薬物投与は、７．５ｍｇ〜２４０ｍｇ／ｋｇ／日の容量で３、６、１２及び２４時間ごとに投与した。
【０１０５】
薬物投与２４時間経過後、二酸化炭素ガスで安楽死させた後、大腿部を分離して生理食塩水に入れ、ホモジナイザー（ｈｏｍｏｇｅｎｉｚｅｒ）（Ｋｉｎｅｍａｔｉｃａ  ＡＧ／Ｐｏｌｙｔｒｏｎ（登録商標））で細かく切断した。それを１０倍希釈後、ミューラー・ヒントンＩＩブロス（Ｍｕｌｌｅｒ  Ｈｉｎｔｏｎ  ＩＩ  ｂｒｏｔｈ）培地に塗抹後、２４時間３７℃で培養し、生菌数を数えて記録した。結果は、ｌｏｇ１０ＣＦＵ／大腿部（ｔｈｉｇｈ）で表記し、実験室の生菌数測定限界は、１×１０２ＣＦＵ／大腿部（ｔｈｉｇｈ）であった。
【０１０６】
抗菌剤の容量及び用法による抗菌作用と薬物動態学の結果と結合して抗生剤の効果を判断するための指標としてＴ／ＭＩＣを評価した。Ｔ／ＭＩＣ値は、血中内にＭＩＣ値以上の濃度を示す時間に比べて、投与間隔の比を示す。その結果は、図５に示した。図５に示されたように、Ｔ／ＭＩＣ値が増加するにつれて細菌撲滅効果は急増することが分かる。ほぼＴ／ＭＩＣ値が２０％以上である時、細菌が９９．９％以上撲滅された。また、ＡＵＣ０−２４ｈ／ＭＩＣ及びＣｍａｘ／ＭＩＣ値が増加する時、ＭＲＳＡのような細菌撲滅効果も、急増することを確認することができる。
【０１０７】
図５に示されたように、化学式１の化合物のＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ  ＡＴＣＣ  ２９２１３及び１３Ｂ−３８２に対するＭＩＣ値は、菌株に関係なく０．２５ｕｇ／ｍＬであることを確認することができ、この値は、オキサシリン（Ｏｘａｃｉｌｌｉｎ）（０．２５及び１６ｕｇ／ｍＬ）及びバンコマイシン（０．５及び１ｕｇ／ｍＬ）に比べて低い値である。
【０１０８】
実験例１０：ビーグル犬の薬力学の評価
実施例４及び実施例８による製剤に対してビーグル犬（ｎ＝５）に対する薬力学の評価を実施した。薬力学の試験に先立って、ビーグル犬を試験物質投与前、約３０分間前、個体に対して３０ｇ／ｈｅａｄ／ｄａｙを給与して非絶食下に試験物質投与を進行した。投与容量は、ほぼ５ｍｇ／ｋｇにして、設定された時間０、１０分、３０分、１時間、２時間、４時間、６時間、８時間及び２４時間別に各個体当たり総９ポイントを頸静脈から採血した。該採血されたサンプルは、処理後、血漿内の薬物の濃度を決定して、図６のような薬力学プロファイルを得た。
【０１０９】
薬力学プロファイルは、錠剤の製造に使われた原料の粒度に大きく影響を受けた。図６に示されたように、ＡＵＣ０−２４ｈ及びＣｍａｘ値は、粒度が減少するにつれて増加する傾向を示した。また、ＭＩＣ値を超える濃度保持時間（Ｔ＞ＭＩＣ）も、粒子が小さいほど増加する傾向を示した。実験例９による結果を根拠にする時、ＡＵＣ０−２４ｈ、Ｃｍａｘ値及びＭＩＣ濃度以上を保持する時間変化は、抗生剤において細菌撲滅効果に大きな影響を及ぼすことが分かる。前記ＡＵＣ０−２４ｈ、Ｃｍａｘ値及びＭＩＣ濃度に対する３種の指数が増加するほど抗菌作用は大きく増加する。
【０１１０】
前記のように、本発明は、多重薬剤耐性を有する細菌感染症の治療に効果的に適用できることを確認することができる。
【０１１１】
以上の説明は、本発明の技術思想を例示的に説明したものに過ぎないものであって、当業者ならば、本発明の本質的な特性から外れない範囲で多様な修正及び変形が可能である。また、本発明に開示された実施例は、本発明の技術思想を限定するためのものではなく、説明するためのものであり、このような実施例によって、本発明の技術思想の範囲が限定されるものではない。本発明の保護範囲は、下記の特許請求の範囲によって解釈されねばならず、それと同等な範囲内にあるあらゆる技術思想は、本発明の権利範囲に含まれると解釈されねばならない。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【国際調査報告】
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