(57)【要約】  本発明は、従来の方法より有利である、［１８Ｆ］標識ピリダベン誘導体を含む注射可能な組成物の合成の方法を提供する。特に、本発明の方法は、固相抽出（ＳＰＥ）を使用してより容易な精製を可能にする、放射性合成の方法を含む。【特許請求の範囲】
【請求項１】
（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−１−イル）オキシル（ＴＥＭＰＯ）の存在下、前駆体化合物を１８Ｆフッ化物と反応させて１８Ｆ標識化合物を得るステップを含む方法であって、
前記前駆体化合物が、式Ｉ
ＢＴＭ−リンカー−ＬＧ      （Ｉ）
（式中、
ＢＴＭは、ピリダベンの類似体であり、
リンカーは、アルキレンまたはアルコキシアルキレンであり、
ＬＧは、スルホネート含有脱離基である）
であり、
前記１８Ｆ標識化合物が、式ＩＩ
ＢＴＭ−リンカー−１８Ｆ      （ＩＩ）
（式中、ＢＴＭおよびリンカーは、式Ｉに定義されている通りである）
である、方法。
【請求項２】
前記前駆体化合物が、式Ｉａ
【化１】
2021519755.tif 000010
の化合物であり、
前記１８Ｆ標識化合物が、式ＩＩａ
【化２】
2021519755.tif 000011
（式中、
Ｒ１は、場合によって置換されているＣ１〜６アルキルであり、
Ｒ２は、水素またはハロであり、
Ｗは、場合によって置換されているアルキレンまたはヘテロアルキレンであり、
リンカーおよびＬＧは、請求項１に定義されている通りである）
の化合物である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
Ｒ１が、Ｃ１〜６アルキルである、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
Ｒ１が、メチル、エチル、プロピル、ｎ−ブチル、ｓ−ブチル、またはｔ−ブチルである、請求項２または請求項３に記載の方法。
【請求項５】
Ｒ２が、ハロである、請求項２から４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
Ｒ２が、クロロである、請求項２から５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
Ｗが、ヘテロアルキレンである、請求項２から６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
Ｗが、アルコキシアルキレンである、請求項２から７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
式Ｉの前記化合物が、式Ｉｂ
【化３】
2021519755.tif 000012
の化合物であり、
式ＩＩの前記化合物が、式ＩＩｂ
【化４】
2021519755.tif 000013
（式中、Ｒ１は、請求項２から４に定義されている通りであり、Ｒ２は、請求項２、５および６に定義されている通りであり、リンカーおよびＬＧは、請求項１に定義されている通りである）
の化合物である、請求項１から８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
式Ｉの前記化合物が、
【化５】
2021519755.tif 000014
（式中、ＬＧは、請求項１に定義されている通りである）
であり、
式ＩＩの前記化合物が、
【化６】
2021519755.tif 000015
である、請求項１から９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
ＬＧが、メシレート、トシレート、トリフレート、ノシレート、または１，２−環状スルフェートから選択される、請求項１から１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
ＬＧが、トシレートである、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記前駆体化合物が、アセトニトリル中に溶解される、請求項１から１２のいずれかに記載の方法。
【請求項１４】
前記ＴＥＭＰＯが、前駆体化合物に対するモル比が０．０１：１から５：１、好ましくは０．１：１から２：１、最も好ましくは０．４：１から０．６：１、とりわけ好ましくはおよそ０．５：１で存在する、請求項１から１３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
出発放射能が、少なくとも１００ＧＢｑである、請求項１から１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６】
出発放射能が、１００〜１０００ＧＢｑである、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
出発放射能が、１００〜７５０ＧＢｑである、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
固相抽出（ＳＰＥ）による前記１８Ｆ標識化合物の精製をさらに含む、請求項１から１７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９】
前記ＳＰＥが、１つまたは複数のＳＰＥカートリッジを使用して実行される、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記１つまたは複数のＳＰＥカートリッジが、ｔＣ１８およびミックスモードＳＰＥカートリッジから選択される、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記１つまたは複数のＳＰＥカートリッジが、ｔＣ１８カートリッジである、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記１つまたは複数のＳＰＥカートリッジが、２個のｔＣ１８カートリッジである、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
加水分解試薬が、前記精製の間に添加される、請求項１８から２２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２４】
前記加水分解試薬が、酸性である、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
前記酸性加水分解試薬が、ＨＣｌである、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
前記加水分解試薬が、アルカリ性である、請求項２３に記載の方法。
【請求項２７】
前記アルカリ性加水分解試薬が、ＮａＯＨ、ＮＨ４ＯＨ、ＮａＯＭｅから選択される、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
ｉ）請求項１に記載の前駆体化合物を含有する容器、
ｉｉ）水を含有する容器、
ｉｉｉ）１つまたは複数のＳＰＥカートリッジ、
ｉｖ）有機溶媒を含む溶液を含有する容器、
ｖ）エタノールを含む溶液を含有する容器、
ｖｉ）加水分解試薬を含有する容器、
ｖｉｉ）容器に含有されたまたは前記前駆体化合物を含有する前記容器に含有されたＴＥＭＰＯ、
ｖｉｉｉ）反応容器、
ｉｘ）１８Ｆの適切な供給源で（ｉ）の容器を溶出するための手段、
ｘ）前記前駆体化合物および１８Ｆの適切な供給源を前記反応容器へ移動させる手段、
ｘｉ）請求項１に記載の粗反応混合物を前記１つまたは複数のＳＰＥカートリッジへ移動させる手段、
ｘｉｉ）前記水、前記有機溶媒を含む溶液、および前記エタノールを含む溶液を前記１つまたは複数のＳＰＥカートリッジへ選択的に移動させる手段、ならびに
ｘｉｉｉ）請求項１に記載の式ＩＩの前記精製された化合物を生成物収集バイアルへ移動させる手段
を含む、請求項１に記載の方法を実行するためのカセット。
【請求項２９】
請求項２３から２７のいずれか一項に記載の加水分解試薬を含有するバイアルをさらに含む、請求項２８に記載のカセット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、陽電子放射断層撮影（ＰＥＴ）の造影にとって有用な画像診断用造影剤、ならびにかかる造影剤を生成するための改善された手段に関する。より詳細には、本発明は、精製後に心筋灌流画像法のための注射にとって適切な組成物に製剤できる、粗［１８Ｆ］標識ピリダベン誘導体を精製する方法、ならびにそれを調製する方法およびデバイスに対する。より詳細には、本発明は、固相抽出（ＳＰＥ）による［１８Ｆ］標識ピリダベン誘導体の自動合成および精製に対する。
【背景技術】
【０００２】
［１８Ｆ］標識ピリダベン誘導体は、対象における循環器疾患または状態の有無を決定するのに使用できることが知られている。これらの［１８Ｆ］標識ピリダベン誘導体の合成のための方法は、国際公開第２０１１／０９７６４９号パンフレットに記載され、造影剤を形成するための造影剤前駆体の求核［１８Ｆ］フッ素付加を含む。化合物［１８Ｆ］フルルピリダズ（［１８Ｆ］−ＦＰＺ）を含む注射可能な組成物の合成が記載され、方法は、トシレート前駆体化合物の求核［１８Ｆ］フッ素付加、水による希釈、続いて、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）精製を含む。
【発明の概要】
【０００３】
ＨＰＬＣを回避する、［１８Ｆ］−ＦＰＺのための精製方法の発見は、非常に望ましく、商業適用にとってより利用しやすくなるという結果をもたらし得る。
【０００４】
しかしながら、精製の唯一の手段として固相抽出（ＳＰＥ）を用いる方法を開発する中で、今日までＨＰＬＣを含む精製方法を使用してしか除去できない、所望の生成物の非常に近く溶出する、遅れて溶出する生成物の割合が多いことが観察された。本発明者らは、この放射性不純物を最高で２２％観察した。放射性不純物が［１８Ｆ］ＦＰＺの後に溶出し、ＳＰＥ溶出において存在し得るので、これは、工程歩留まり率の低下および最終生成物の低い放射化学的純度（ＲＣＰ）をもたらす。したがって、［１８Ｆ］ＦＰＺの合成のための改善された方法の必要性がある。
【０００５】
本発明は、以下を提供する。
一態様において、本発明は、（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−１−イル）オキシル（ＴＥＭＰＯ）の存在下、前駆体化合物を１８Ｆフッ化物と反応させて１８Ｆ標識化合物を得るステップを含む方法であって、
前記前駆体化合物が、式Ｉ
ＢＴＭ−リンカー−ＬＧ      （Ｉ）
（式中、
ＢＴＭは、ピリダベンの類似体であり、
リンカーは、アルキレンまたはアルコキシアルキレンであり、
ＬＧは、スルホネート含有脱離基である）
であり、
前記１８Ｆ標識化合物が、式ＩＩ
ＢＴＭ−リンカー−１８Ｆ      （ＩＩ）
（式中、ＢＴＭおよびリンカーは、式Ｉに定義されている通りである）
である、方法を提供し、
別の態様において、本発明は、
ｉ）請求項１に定義された前駆体化合物を含有する容器
ｉｉ）水を含有する容器、
ｉｉｉ）１つまたは複数のＳＰＥカートリッジ、
ｉｖ）有機溶媒を含む溶液を含有する容器、
ｖ）エタノールを含む溶液を含有する容器、
ｖｉ）加水分解試薬を含有する容器、
ｖｉｉ）容器に含有されたまたは前駆体化合物を含有する前記容器に含有されたＴＥＭＰＯ、
ｖｉｉｉ）反応容器、
ｉｘ）１８Ｆの適切な供給源で（ｉ）の容器を溶出するための手段、
ｘ）前駆体化合物および１８Ｆの適切な供給源を反応容器へ移動させる手段、
ｘｉ）請求項１に定義された粗反応混合物を前記１つまたは複数のＳＰＥカートリッジへ移動させる手段、
ｘｉｉ）前記水、前記有機溶媒を含む溶液および前記エタノールを含む溶液を前記１つまたは複数のＳＰＥカートリッジへ選択的に移動させる手段、ならびに
ｘｉｉｉ）請求項１に定義された式ＩＩの前記精製された化合物を生成物収集バイアルへ移動させる手段
を含む、本発明の方法を実行するためのカセットを提供する。
【０００６】
本発明者らは、放射性不純物が、放射性標識反応の間の［１８Ｆ］ＦＰＺの放射線分解に起因して形成されることを明らかにした。多くの放射性安定剤を試験した。前駆体へのＴＥＭＰＯの添加は、放射線分解を大幅に、例えば、出発放射能１００ＧＢｑで、最高で２２％から１％に低減させる。
【０００７】
したがって、標識反応へのＴＥＭＰＯの添加は、遅れて溶出する放射線分解生成物の量を削減し、結果として、その後の精製がより容易な方法で実行されるのを可能にすることが分かった。より詳細には、本発明によるとまた、［１８Ｆ］ＦＰＺの精製のために固相抽出（ＳＰＥ）のみを使用すればよい。
【図面の簡単な説明】
【０００８】
【図１】標識反応への（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−１−イル）オキシル（ＴＥＭＰＯ）の添加あり（上）およびなし（下）の粗生成物の比較の図である。
【図２】標識反応後のＮａＯＨでの加水分解あり（上）およびなし（下）の粗生成物の比較の図である。４〜５分域の種は、加水分解反応によってほとんど完全に除去される。
【図３】生成物バイアル中にアスコルビン酸が存在する（上）および存在しない（下）ＳＰＥ精製物の比較の図である。
【図４】本発明の方法を実行するのに適切なＦＡＳＴｌａｂ（商標）カセットの設計を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【０００９】
請求項にかかる発明の主題をより明確におよび簡潔に説明し指摘するため、本明細書および特許請求の範囲全体にわたって使用される特定の用語について、以下に定義を示す。本明細書における特定の用語の例証は、非限定的例として考えられるべきである。
【００１０】
用語「含む」は、本出願全体にわたってその従来の意味を有し、剤または組成物が、リストアップされた、本質的特徴または成分を有さなければならないが、その他の特徴または成分もさらに存在してもよいことを暗示する。用語「含む」は、組成物が、その他の特徴または成分が存在することなく、リストアップされた成分を有することを意味する「から本質的になること」を、好ましいサブセットとして含む。
【００１１】
「前駆体化合物」は、インビボ検出可能な標識の好都合な化学形態との化学反応が部位特異的に起こり、最小数のステップ（理想的には単一のステップ）で実行でき、ならびに多大な精製の必要なく（理想的にはさらなる精製がない）、所望のインビボ造影剤を得るように設計された、放射性標識化合物の非放射性誘導体を含む。かかる前駆体化合物は合成され、良好な化学的純度で好都合に得ることができる。
【００１２】
用語「アルキレン」は、−（ＣＨ２）ｎ−の二価基のことであり、ｎは、好ましくは、１〜６の整数である。
【００１３】
用語「アルコキシアルキレン」は、エーテル結合を含む、上に定義されたアルキレンを意味し、用語「エーテル結合」は、−Ｃ−Ｏ−Ｃ−基のことである。
【００１４】
用語「脱離基」は、置換または置き換え放射性フッ素付加反応の間に安定した種として置き換えられる、原子または原子団のことである。本発明にとって適切な脱離基は、スルホネート含有脱離基であり、「スルホネート」は、−ＳＯ３を意味する。
【００１５】
用語「１８Ｆフッ化物」は、求核置換反応において式ＩのＬＧを置き換えて、式ＩＩの化合物をもたらすのに適切な化学形態の１８Ｆフッ化物のことである。１８Ｆフッ化物は、核反応１８Ｏ（ｐ，ｎ）１８Ｆから水溶液として通常得られ、カチオン性対イオンを添加し、その後、水を除去することによって反応性になる。適切なカチオン性対イオンは、１８Ｆ−の溶解性を維持するために、無水反応溶媒内での十分な溶解性を持つべきである。適切な対イオンとしては、ルビジウムもしくはセシウムなどの大きいが柔らかい金属イオン、Ｋｒｙｐｔｏｆｉｘ（商標）２２２（Ｋ２２２）などのクリプタンドと錯体を形成したカリウム、またはテトラアルキルアンモニウム塩が挙げられる。適切なテトラアルキルアンモニウム塩は、炭酸水素テトラブチルアンモニウムである。周知の１８Ｆ標識技術の詳細な論考は、“Handbook of Radiopharmaceuticals” (2003; John Wiley and Sons: M.J. Welch and C.S. Redvanly, Eds.)の第６章にある。
【００１６】
本発明の方法は、ＴＥＭＰＯを含有させることを含む。
【００１７】
テトラメチルピペリジン−１−イル）オキシル（ＴＥＭＰＯ）は、反応ステップ（ａ）に含まれる。一実施形態において、ＴＥＭＰＯは、前駆体化合物に対するモル比が０．０１：１から５：１、好ましくは０．１：１から２：１、最も好ましくは０．４：１から０．６：１、とりわけ好ましくはおよそ０．５：１、例えば、０．５６：１で存在する。
【００１８】
本発明の方法の一実施形態において、出発放射能は、１００〜１０００ＧＢｑである。
【００１９】
本発明の方法の一実施形態において、出発放射能は、１００〜７５０ＧＢｑである。
【００２０】
一実施形態において、本発明の方法は、固相抽出（ＳＰＥ）による前記１８Ｆ標識化合物の精製をさらに含む。
【００２１】
一実施形態において、前記ＳＰＥは、１つまたは複数のＳＰＥカートリッジを使用して実行される。
【００２２】
一実施形態において、前記１つまたは複数のＳＰＥカートリッジは、ｔＣ１８およびミックスモードＳＰＥカートリッジから選択される。
【００２３】
一実施形態において、前記１つまたは複数のＳＰＥカートリッジは、ｔＣ１８カートリッジである。
【００２４】
一実施形態において、前記１つまたは複数のＳＰＥカートリッジは、２個のｔＣ１８カートリッジである。
【００２５】
用語「固相抽出（ＳＰＥ）」は、溶液中の化合物が、試料が通過する固体（「固相」または「固定相」）および試料が溶解する溶媒（「移動相」または「液相」）に対する各々の親和性に基づいて互いから分離される、周知の試料調製方法のことである。その結果、目的の化合物は、固相に保持されるか、または移動相にあるかのいずれかとなる。固相を通過する部分は、目的の化合物を含有するかどうかによって、収集されるか、または廃棄される。固定相に保持された部分は、目的の化合物を含む場合、次に、追加のステップにおいて収集のために固定相から除去でき、このステップにおいて、固定相は、「溶離剤」として知られる別の溶液ですすがれる。本発明のために、ＳＰＥは、少なくとも１つの「ＳＰＥカートリッジ」（「ＳＰＥカラム」ともしばしば呼ばれる）を使用して適切に実行され、多様な種類のＳＰＥカートリッジが、固相を充填したカラムとして、商業的および典型的に、容易に入手可能である。最も知られている固相は、特定の官能基、例えば、様々な長さの炭化水素鎖（逆相ＳＰＥにとって適切）、四級アンモニウムまたはアミノ基（アニオン交換にとって適切）、およびスルホン酸またはカルボキシル基（カチオン交換にとって適切）に結合したシリカをベースとする。本発明の文脈におけるＳＰＥは、ＨＰＬＣを特に除外する。一実施形態において、連続して流体接続された２個のＳＰＥカートリッジが、本発明において使用される。
【００２６】
ある実施形態において、当業者に知られているであろう通り、ＳＰＥカートリッジで使用される移動相は、ＳＰＥカートリッジの選択に依存することになる。例えば、ＳＰＥがＡｆｆｉｎｉｓｅｐのポリマーである一実施形態において、水性アセトニトリルは、ステップ（ｉｉｉ）にとって適切な有機溶媒であり、その非限定的例は、アセトニトリル４０％および水６０％となる。同じＳＰＥカートリッジのための溶離剤は、水性エタノールであり得て、その非限定的例は、エタノール６０％および水４０％である。一実施形態において、ＳＰＥがＣ１８である場合、ステップ（ｉｉｉ）および溶出のためのエタノールベースの有機溶媒を使用できる。非限定的例として、ステップ（ｉｉｉ）の溶媒のための水中に３０〜４０％のエタノールであり、続いて、エタノール溶出し、これは、１００％未満のエタノールであり得る。
【００２７】
一実施形態において、加水分解試薬は、精製の間に添加される。
【００２８】
用語「加水分解試薬」は、加水分解を可能にする試薬のことであり、「加水分解」は、当業者にとって周知の専門用語、すなわち、水を用いた分子中の結合の破壊に関わる反応であり、反応は、イオンと水分子との間で主に起こり、溶液のｐＨをしばしば変化させる。化学において、加水分解には３つの主な種類、すなわち塩加水分解、酸加水分解、および塩基加水分解がある。
【００２９】
一実施形態において、前記加水分解試薬は、酸性である。いずれの適切な酸を使用してもよい。一実施形態において、前記酸性の加水分解試薬は、塩酸、硫酸またはリン酸を含む。
【００３０】
一実施形態において、前記酸性の加水分解試薬は、ＨＣｌである。
【００３１】
一実施形態において、前記加水分解試薬は、アルカリ性である。いずれの適切な塩基を使用してもよい。一実施形態において、アルコキシド、アルカリ金属水酸化物、またはチオオキシド塩基が使用できる。さらなる実施形態において、塩基は、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水素化ナトリウム、ナトリウムチオメトキシド、ナトリウムエトキシド、アンモニア／水酸化アンモニウムおよびナトリウムメトキシドからなる群から選択される。
【００３２】
一実施形態において、前記アルカリ性の加水分解試薬は、ＮａＯＨ、ＮＨ４ＯＨおよびＮａＯＭｅから選択される。別の実施形態において、前記アルカリ性の加水分解試薬は、ＮａＯＨである。
【００３３】
前記ＢＴＭはピリダベンの類似体である。適切なピリダベン類似体を得る方法は、当技術分野において既知である。
【００３４】
一実施形態において、式Ｉのある化合物は、国際公開第２０１１／０９７６４９号パンフレットに記載された方法にしたがってまたは適応させて得ることができ、式
【００３５】
【化１】
2021519755.tif 000002
（ｎは、１、２、３、４、または５であり、Ｒ１は、アルキルであり、場合によって置換されており、Ｒ２は、水素またはハロゲン化物であり、Ｒ３は、同じまたは異なり得るが、アルキル、ヘテロアルキル、またはカルボニル含有基であり、それぞれが場合によって置換されており、Ｒ５は、ヒドロキシルまたはハロゲン化物であり、Ｒ６は、アルキル、ヘテロアルキル、またはカルボニル含有基であり、それぞれが場合によって置換されている、ここで、Ｒ５がヒドロキシルの場合、Ｒ６およびＲ３の少なくとも１つは、脱離基を含み、Ｒ５がハロゲン化物の場合、Ｒ６またはＲ３の少なくとも１つは、ヒドロキシルを含む）
を含む、出発化合物のエーテル化から出発して、
式
【００３６】
【化２】
2021519755.tif 000003
（Ｗは、アルキルまたはヘテロアルキルであり、場合によって置換されており、Ｒ１は、アルキルであり、場合によって置換されており、Ｒ２は、水素またはハロゲン化物であり、それぞれのＲ３は、同じまたは異なり得るが、ヒドロキシルで場合によって置換されているアルキル、またはヒドロキシルで場合によって置換されているヘテロアルキルであり、少なくとも１つのＲ３は、ヒドロキシルを含み、ｎは、１、２、３、４、または５であり、Ｒ１は、アルキルであり、場合によって置換されており、Ｒ２は、水素またはハロゲン化物であり、Ｒ３は、同じまたは異なり得るが、アルキル、ヘテロアルキル、またはカルボニル含有基であり、それぞれが場合によって置換されている）
を含む化合物を生成する。次に、この化合物を、少なくとも１つのＲ３がスルホネート含有基で置換されているアルキル、またはスルホネート含有基で置換されているヘテロアルキルに転換されるように、スルホネート含有種と反応させる。このスルホネート含有化合物は、本発明の式Ｉの前駆体化合物である。次に、スルホネート含有前駆体を１８Ｆフッ化物と反応させて、本発明の式ＩＩの化合物を得ることができる。
【００３７】
本発明の一実施形態において、前記前駆体化合物は、式Ｉａ
【００３８】
【化３】
2021519755.tif 000004
の化合物であり、
前記１８Ｆ標識化合物は、式ＩＩａ
【００３９】
【化４】
2021519755.tif 000005
（式中、
Ｒ１は、場合によって置換されているＣ１〜６アルキルであり、
Ｒ２は、水素またはハロであり、
Ｗは、場合によって置換されているアルキレンまたはヘテロアルキレンであり、
リンカーおよびＬＧは、請求項１に定義されている通りである）
の化合物である。
【００４０】
一実施形態において、式Ｉａおよび式ＩＩａのＲ１は、Ｃ１〜６アルキルである。
【００４１】
一実施形態において、式Ｉａおよび式ＩＩａのＲ１は、メチル、エチル、プロピル、ｎ−ブチル、ｓ−ブチル、またはｔ−ブチルである。
【００４２】
一実施形態において、式Ｉａおよび式ＩＩａのＲ２は、ハロである。
【００４３】
一実施形態において、式Ｉａおよび式ＩＩａのＲ２は、クロロである。
【００４４】
一実施形態において、式Ｉａおよび式ＩＩａのＷは、ヘテロアルキレンである。
【００４５】
一実施形態において、式Ｉａおよび式ＩＩａのＷは、アルコキシアルキレンである。
【００４６】
本発明の一実施形態において、式Ｉの前記化合物は、式Ｉｂ
【００４７】
【化５】
2021519755.tif 000006
の化合物であり、
式ＩＩの前記化合物は、式ＩＩｂ
【００４８】
【化６】
2021519755.tif 000007
（式中、Ｒ１、Ｒ２、リンカーおよびＬＧは、式Ｉおよび式ＩＩについて本明細書に様々に定義されている通りである）
の化合物である。
【００４９】
本発明の一実施形態において、式Ｉの前記化合物は、
【００５０】
【化７】
2021519755.tif 000008
（式中、ＬＧは、本明細書に様々に定義されている通りである）
であり、
式ＩＩの前記化合物は、
【００５１】
【化８】
2021519755.tif 000009
である。
【００５２】
本発明の一実施形態において、ＬＧは、メシレート、トシレート、トリフレート、ノシレート、または１，２−環状スルフェートから選択される。
【００５３】
本発明の一実施形態において、ＬＧは、トシレートである。
【００５４】
一実施形態において、前記前駆体化合物は、アセトニトリル中に溶解される。
【００５５】
本発明の方法は、自動合成機の装置を使用して実行できる。用語「自動合成機」は、Satyamurthy et al (1999 Clin Positr Imag; 2(5): 233-253)により記載された単位操作の原理に基づいた自動化モジュールを意味する。用語「単位操作」は、複雑な過程が一連の単純な操作または反応に縮小されることを意味し、広範な材料に適用できる。かかる自動合成機は、広範な供給元、例えば、ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ、ＣＴＩ  Ｉｎｃ、Ｉｏｎ  Ｂｅａｍ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  Ｓ．Ａ．（Ｃｈｅｍｉｎ  ｄｕ  Ｃｙｃｌｏｔｒｏｎ３、Ｂ−１３４８  Ｌｏｕｖａｉｎ−Ｌａ−Ｎｅｕｖｅ、ベルギー）、Ｒａｙｔｅｓｔ（ドイツ）およびＢｉｏｓｃａｎ（ＵＳＡ）から市販されている。
【００５６】
代表的な自動合成機は、カセットによって放射性合成を実行する。用語「カセット」は、合成機の可動部品の機械的運動がカセットの外からカセットの作動を制御するように、自動合成機の装置へ着脱自在で交換可能に取り付けられるよう設計された１つの装置を意味する。適切なカセットは、直線配列のバルブを含み、それぞれのバルブは、倒立セプタムシールバイアル（inverted septum-sealed vial）の針穿刺または気密連結ジョイントのいずれかによって、試薬またはバイアルを装着することができるポートにつながっている。それぞれのバルブは、自動合成機の対応する可動アームと接合するオスメスジョイントを有する。カセットを自動合成機に装着した場合、アームの外部回転が、したがって、バルブの開閉を制御する。自動合成機の追加の可動部品は、シリンジのプランジャー先端にクリップし、したがってシリンジ筒を上げ、下げするように、設計されている。
【００５７】
典型的なカセットは、試薬のためのいくつかの位置、および試薬のシリンジバイアルまたはクロマトグラフィーカートリッジ（例えば、ＳＰＥ）を装着するのに適切ないくつかの位置を有する。カセットは、反応容器を常に含む。かかる反応容器は、体積が、好ましくは１から１０ｃｍ３、最も好ましくは２から５ｃｍ３であり、カセットの３個以上のポートが反応容器へ接続されて、カセット上の様々なポートからの試薬または溶媒の移動を可能にするように配置される。好ましくは、カセットは、直線配列の１５から４０個、最も好ましくは２０から３０個のバルブを有し、２５個がとりわけ好ましい。カセットのバルブは、好ましくは、それぞれが同一で、最も好ましくは三方バルブである。カセットは、放射性医薬品製造業にとって適切であるように設計され、したがって、医薬品グレードの材料から製造され、理想的には放射線分解にもまた抵抗性がある。
【００５８】
一実施形態において、カセットは、本発明の方法を実行するのに必要である、全ての試薬、反応容器および装置を含む、使い捨てで単回使用のカセットである。
【００５９】
カセット手法は、装置構成の単純化、オペレーターミスの危険性の低減、ＧＭＰ（医薬品および医薬部外品の製造管理および品質管理規則）法令遵守の向上、マルチトレーサー性能、生産工程間の迅速な変更、カセットおよび試薬の作業前自動診断検査、実行される合成と化学試薬との自動バーコード照合、試薬トレーサビリティ、単回使用で、したがって二次汚染の危険性がないこと、不正な変更および誤用防止という利点を有する。
【００６０】
したがって、本発明はまた、
ｉ）本明細書に定義された前駆体化合物を含有する容器、
ｉｉ）水を含有する容器、
ｉｉｉ）１つまたは複数のＳＰＥカートリッジ、
ｉｖ）有機溶媒を含む溶液を含有する容器、
ｖ）エタノールを含む溶液を含有する容器、
ｖｉ）加水分解試薬を含有する容器、
ｖｉｉ）容器に含有されたまたは前駆体化合物を含有する前記容器に含有されたＴＥＭＰＯ、
ｖｉｉｉ）反応容器、
ｉｘ）１８Ｆの適切な供給源で（ｉ）の容器を溶出するための手段、
ｘ）前駆体化合物および１８Ｆの適切な供給源を反応容器へ移動させる手段、
ｘｉ）本明細書に定義された粗反応混合物を前記１つまたは複数のＳＰＥカートリッジへ移動させる手段、
ｘｉｉ）前記水、前記有機溶媒を含む溶液および前記エタノールを含む溶液を前記１つまたは複数のＳＰＥカートリッジへ選択的に移動させる手段、ならびに
ｘｉｉｉ）本明細書に定義された式ＩＩの前記精製された化合物を生成物収集バイアルへ移動させる手段
を含む、本発明の方法を実行するためのカセットを提供する。
【００６１】
一実施形態において、ＴＥＭＰＯは、カセット上の専用容器に存在する。一実施形態において、ＴＥＭＰＯは、例えばアセトニトリル中に溶解された、前駆体化合物を含有する容器中に存在する。
【００６２】
「有機溶媒」は、ＳＰＥ溶出のための当業者に既知の溶媒、例えば、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、エチルアセテートおよびジクロロメタン（ＤＣＭ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、アセトニトリル（ＭｅＣＮ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、酢酸、ｔ−ブタノール、イソプロパノール、ｎ−プロパノール、エタノール（ＥｔＯＨ）およびメタノール（ＭｅＯＨ）を適切に含む。有機溶媒は、前記溶媒の水溶液として用意されてよい。
【００６３】
一実施形態において、カセットは、本明細書に定義された加水分解試薬を含有するバイアルをさらに含む。
【００６４】
この記載された説明は、実施例を使用して、最良の形態を含んで本発明を開示し、また、いずれのデバイスまたはシステムも作り使用すること、およびいずれの組み込まれた方法も実践することを含んで、いずれの当業者もが本発明を実施することを可能にする。本発明の特許を受けることができる範囲は、特許請求の範囲に定義されていて、当業者が気付くその他の実施例を含んでよい。かかるその他の実施例は、特許請求の範囲の文字通りの言語と異ならない構造要素を有する場合、または請求項の範囲の文字通りの言語とのごくわずかな差異を有する同等の構造要素を含む場合、特許請求の範囲内にあることが意図される。本文書に言及された全ての特許および特許出願は、個々に組み込まれるかの如く、その全体を参照によって本明細書に組み込まれる。
【実施例】
【００６５】
実施例の簡単な説明
実施例１は、粗［１８Ｆ］フルルピリダズの放射性合成を記載する。
実施例２は、ＴＥＭＰＯを添加する、粗［１８Ｆ］フルルピリダズの放射性合成を記載する。
実施例３および４は、ＳＰＥ精製を行う、［１８Ｆ］フルルピリダズの放射性合成を記載する。
実施例５は、［１８Ｆ］フルルピリダズの自動化された合成および精製を記載する。
実施例６は、ＳＰＥ精製を行う、［１８Ｆ］フルルピリダズの放射性合成のための代替方法を記載する。
【００６６】
実施例に使用される略語のリスト
ＥｔＯＨ          エタノール
ＨＰＬＣ          高速液体クロマトグラフィー
ＭｅＣＮ          アセトニトリル
ＰＢＳ            リン酸緩衝食塩水
ＱＭＡ            四級メチルアンモニウム
ＲＡＣ            放射能濃度
ＳＰＥ            固相抽出
ＴＥＭＰＯ        （２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−１−イル）オキシル
【００６７】
[実施例１]
粗［１８Ｆ］フルルピリダズの放射性合成
［１８Ｆ］フッ化物（約１００ＧＢｑ）を、ＧＥ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  ＰＥＴｔｒａｃｅサイクロトロンを使用して、［１８Ｏ］（ｐ，ｎ）［１８Ｆ］核反応を介した銀標的によって生成した。総標的体積３．２〜４．８ｍＬを使用した。放射性フッ化物を、Ｗａｔｅｒｓ  ＱＭＡカートリッジ（カーボネートによるプレコンディショニング）上に捕捉し、フッ化物を、水（１００μＬ）およびアセトニトリル（４００μＬ）中の炭酸水素テトラブチルアンモニウム（２２ｍｇ）の溶液で溶出した。窒素を使用して、ＱＭＡカートリッジから反応容器へ溶液を押し出した。［１８Ｆ］フッ化物を、定常窒素流および真空下１２０℃で９分間、乾燥した。ＭｅＣＮ（１．７ｍＬ）中の前駆体（１０．２ｍｇ、既知の方法にしたがって合成）を、乾燥した［１８Ｆ］フッ化物に添加し、反応混合物を、１０分間１２０℃で加熱した。粗生成物を、水（９．３ｍＬ）で希釈し、ＨＰＬＣにより分析した。
【００６８】
粗生成物中の［１８Ｆ］フルルピリダズの％は、８１％であり、１３％は、遅れて溶出する放射線分解生成物であった（図１）。放射性合成の一つの例において、本発明者らは、７２％のみの［１８Ｆ］フルルピリダズを観察した。
【００６９】
[実施例２]
ＴＥＭＰＯを添加する、粗［１８Ｆ］フルルピリダズの放射性合成
［１８Ｆ］フッ化物（約１００ＧＢｑ）を、ＧＥ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  ＰＥＴｔｒａｃｅサイクロトロンを使用して、［１８Ｏ］（ｐ，ｎ）［１８Ｆ］核反応を介した銀標的によって生成した。総標的体積３．２〜４．８ｍＬを使用した。放射性フッ化物を、Ｗａｔｅｒｓ  ＱＭＡカートリッジ（カーボネートによるプレコンディショニング）上に捕捉し、フッ化物を、水（１００μＬ）およびアセトニトリル（４００μＬ）中の炭酸水素テトラブチルアンモニウム（２２ｍｇ）の溶液で溶出した。窒素を使用して、ＱＭＡカートリッジから反応容器へ溶液を押し出した。［１８Ｆ］フッ化物を、定常窒素流および真空下１２０℃で９分間、乾燥した。ＭｅＣＮ（１．７ｍＬ）中の前駆体（１０．２ｍｇ）とＴＥＭＰＯ（１．７ｍｇ）の混合物を、乾燥した［１８Ｆ］フッ化物に添加し、反応混合物を、１０分間１２０℃で加熱した。粗生成物を、水（９．３ｍＬ）で希釈し、ＨＰＬＣにより分析した。
【００７０】
粗生成物中の［１８Ｆ］フルルピリダズの％は、９２％であり、１％は、遅れて溶出する放射線分解生成物であった。標識反応へのＴＥＭＰＯの添加は、遅れて溶出する放射線分解生成物の量を削減する（図１）。本発明者らは、高い放射能で実行される場合でさえも、放射性標識反応へのＴＥＭＰＯの添加が、遅れて溶出する放射線分解生成物を削減するように作用することを、これらの結果から推論する。
【００７１】
[実施例３]
ＥｔＯＨベースのＳＰＥ精製を行う、［１８Ｆ］フルルピリダズの放射性合成
［１８Ｆ］フッ化物（約１００ＧＢｑ）を、ＧＥ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  ＰＥＴｔｒａｃｅサイクロトロンを使用して、［１８Ｏ］（ｐ，ｎ）［１８Ｆ］核反応を介した銀標的によって生成した。総標的体積３．２〜４．８ｍＬを使用した。放射性フッ化物を、Ｗａｔｅｒｓ  ＱＭＡカートリッジ（カーボネートによるプレコンディショニング）上に捕捉し、フッ化物を、水（１００μＬ）およびアセトニトリル（４００μＬ）中の炭酸水素テトラブチルアンモニウム（２２ｍｇ）の溶液で溶出した。窒素を使用して、ＱＭＡカートリッジから反応容器へ溶液を押し出した。［１８Ｆ］フッ化物を、定常窒素流および真空下１２０℃で９分間、乾燥した。ＭｅＣＮ（１．７ｍＬ）中の前駆体（１０．２ｍｇ）を、乾燥した［１８Ｆ］フッ化物に添加し、反応混合物を、１０分間１２０℃で加熱した。粗生成物を、２Ｍ  ＮａＯＨ（１．３ｍＬ）および水（４ｍＬ）で希釈し、６０秒間、放置した（ＮａＯＨ加水分解ありおよびなしの比較のための図２を参照）。次に、粗生成物を、ｔＣ１８ＳＰＥカートリッジ（Ｗａｔｅｒｓ、製品番号ＷＡＴ０３６８００）に投入し、下に記載の方法を使用して精製した。
【００７２】
ＳＰＥカートリッジを、水（３０ｍＬ）で洗浄して、アセトニトリル、ＮａＯＨならびに親水性化学的および放射性化学的不純物を洗い流した。次に、ＳＰＥカートリッジを、水（２５ｍＬ）中の３５％のエタノール溶液で洗浄して、ヒドロキシ不純物を除去した。この後、第１のＳＰＥカートリッジを、第２のＳＰＥカートリッジ（Ｗａｔｅｒｓ、製品番号ＷＡＴ０３６８００）に連続して接続し、２つのカートリッジを、４０％のエタノールの水溶液（１４ｍＬ）で洗浄し、続いて窒素流によって、第２のカートリッジ上へ［１８Ｆ］フルルピリダズを移動させ、より多くの親油性化学的および放射性化学的不純物を捕捉した。次に、第２のＳＰＥカートリッジを、７０％のエタノールの溶液（３ｍＬ）で溶出して、生成物バイアル中へ［１８Ｆ］フルルピリダズを溶出した。２５ｍＬの生成物バイアルは、水（２３ｍＬ）、エタノール（２ｍＬ）およびアスコルビン酸（５０ｍｇ／ｍＬ）から成った。アスコルビン酸が存在するおよび存在しないＳＰＥ精製物のクロマトグラムについては図３を参照されたい。
【００７３】
非減衰補正収率は、４３％であり、ＲＡＣが１，８００ＭＢｑ／ｍＬの生成物をもたらす。最終生成物のＲＣＰは、９７％であった。２つの放射線分解生成物を観察した（それぞれ１％および２％）。アスコルビン酸を生成物バイアルから除外した場合、ＲＣＰは、８５〜８８％である（図３）。
【００７４】
[実施例４]
ＥｔＯＨベースのＳＰＥ精製を行う、［１８Ｆ］フルルピリダズの放射性合成
［１８Ｆ］フッ化物（約１００ＧＢｑ）を、ＧＥ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  ＰＥＴｔｒａｃｅサイクロトロンを使用して、［１８Ｏ］（ｐ，ｎ）［１８Ｆ］核反応を介した銀標的によって生成した。総標的体積３．２〜４．８ｍＬを使用した。放射性フッ化物を、Ｗａｔｅｒｓ  ＱＭＡカートリッジ（カーボネートによるプレコンディショニング）上に捕捉し、フッ化物を、水（１００μＬ）およびアセトニトリル（４００μＬ）中の炭酸水素テトラブチルアンモニウム（２２ｍｇ）の溶液で溶出した。窒素を使用して、ＱＭＡカートリッジから反応容器へ溶液を押し出した。［１８Ｆ］フッ化物を、定常窒素流および真空下１２０℃で９分間、乾燥した。ＭｅＣＮ（１．７ｍＬ）中の前駆体（１０．２ｍｇ）を、乾燥した［１８Ｆ］フッ化物に添加し、反応混合物を、１０分間１２０℃で加熱した。粗生成物を、２Ｍ  ＮａＯＨ（１．３ｍＬ）および水（４ｍＬ）で希釈し、６０秒間、放置した（ＮａＯＨ加水分解ありおよびなしの比較のための図２を参照）。次に、粗生成物を、ｔＣ１８ＳＰＥカートリッジ（Ｗａｔｅｒｓ、製品番号ＷＡＴ０３６８００）に投入し、下に記載の方法を使用して精製した。
【００７５】
ＳＰＥカートリッジを、水（３０ｍＬ）で洗浄して、アセトニトリル、ＮａＯＨならびに親水性化学的および放射性化学的不純物を洗い流した。次に、ＳＰＥカートリッジを、水（１０ｍＬ）中の４０％のアセトニトリル溶液で洗浄して、ヒドロキシ不純物を除去した。この後、第１のＳＰＥカートリッジを、第２のＳＰＥカートリッジ（Ｗａｔｅｒｓ、製品番号ＷＡＴ０３６８００）に連続して接続し、２つのカートリッジを、４０％のアセトニトリル（２５ｍＬ）で洗浄して、続いて窒素流によって第２のカートリッジ上へ［１８Ｆ］フルルピリダズを移動させ、より多くの親油性化学的および放射性化学的不純物を捕捉した。次に、第２のＳＰＥカートリッジを、４５％のエタノールの溶液（７ｍＬ）で溶出して、生成物バイアル中へ［１８Ｆ］フルルピリダズを溶出した。４５ｍＬの生成物バイアルは、水（４２ｍＬ）、エタノール（３ｍＬ）およびアスコルビン酸（５０ｍｇ／ｍＬ）から成った。
【００７６】
非減衰補正収率は、４０〜４４％であり、ＲＡＣが１，７００〜２，０００ＭＢｑ／ｍＬの生成物をもたらす。最終生成物のＲＣＰは、９７〜９８％であった。２つの放射線分解生成物を観察した（それぞれ１％および１〜２％）。
【００７７】
[実施例５]
［１８Ｆ］フルルピリダズの自動化された合成および精製
カセット付きのＦＡＳＴｌａｂ（商標）自動合成機（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  Ｌｔｄ）を使用した。ｔＣ１８カートリッジを、Ｗａｔｅｒｓ  Ｌｉｍｉｔｅｄ（住所は上述の通り）から得た。前駆体１を、実施例３にしたがってＦＡＳＴｌａｂ（商標）上で［１８Ｆ］フッ化物と反応させて、［１８Ｆ］フルルピリダズを得た。
【００７８】
精製
カセット配置図を、図４に示す。３つの外部溶媒バイアルが、製剤バイアルに加えてＳＰＥ精製のためのカセットに使用される。
位置９＝水中３５％のエタノール（または４０％のアセトニトリル）
位置１０＝水中４０％のエタノール（または４５％のエタノール）
位置２２＝１００％のエタノール
位置２３＝製剤のための水２３ｍＬ
【００７９】
その他のカセットの位置
位置１４＝水中７０％のエタノール（または空）
位置１７：位置１８のｔＣ１８カートリッジ（ＳＰＥ１）への配管
位置１８：ｔＣ１８カートリッジ
位置１９：位置１８のｔＣ１８カートリッジ（ＳＰＥ２）への配管
位置２０：ｔＣ１８カートリッジ
【００８０】
ＦＡＳＴｌａｂ（商標）手順
以下において、Ｐは、カセットの位置のことである。Ｓ２およびＳ３は、シリンジ２およびシリンジ３のことである。
（ｉ）精製方法の最初の部分は、Ｐ２２からエタノールを完全に満たしたＳ２でコンディショニングし、続いてＰ１５から水を完全に満たしたＳ２でコンディショニングすることであった。
（ｉｉ）加水分解された粗生成物を、Ｓ２において総体積７ｍＬに水で希釈し、次に、ＳＰＥ１上にゆっくり捕捉した。
（ｉｉｉ）ＳＰＥ１を、Ｓ２によって位置９からの３５％のエタノール５ｘ５ｍＬ（または４０％のアセトニトリル１０〜１４ｍＬ）で洗浄した。
（ｉｖ）ＳＰＥ１およびＳＰＥ２を、Ｓ２によって位置１０からの４０％のエタノール３ｘ５ｍＬ（または４０％のアセトニトリル２１〜２５ｍＬ）で洗浄して、ＳＰＥ１からＳＰＥ２上へ［１８Ｆ］フルルピリダズを移動させた。
（ｖ）生成物を、Ｐ１４からの７０％のエタノール（またはアセトニトリル法の場合４５％のエタノール）溶液でＳＰＥ２から溶出させた。
（ｖｉ）ＳＰＥ２を、窒素流で乾燥させて、確実に、全ての生成物を、生成物収集バイアルに移動させた（図４）。
【００８１】
[実施例６]
ＭｅＣＮベースのＳＰＥ精製を行う、［１８Ｆ］フルルピリダズの放射性合成
［１８Ｆ］フッ化物（約１００ＧＢｑ）を、ＧＥ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  ＰＥＴｔｒａｃｅサイクロトロンを使用して、［１８Ｏ］（ｐ，ｎ）［１８Ｆ］核反応を介した銀標的によって生成する。総標的体積３．２〜４．８ｍＬを使用する。放射性フッ化物を、Ｗａｔｅｒｓ  ＱＭＡカートリッジ（カーボネートによるプレコンディショニング）上に捕捉し、フッ化物を、水（１００μＬ）およびアセトニトリル（４００μＬ）中の炭酸水素テトラブチルアンモニウム（２２ｍｇ）の溶液で溶出する。窒素を使用して、ＱＭＡカートリッジから反応容器へ溶液を押し出す。
【００８２】
［１８Ｆ］フッ化物を、定常窒素流および真空下１２０℃で９分間、乾燥する。ＭｅＣＮ（１．７ｍＬ）中の前駆体（１０．２ｍｇ）を、乾燥した［１８Ｆ］フッ化物に添加し、反応混合物を、１０分間１２０℃で加熱する。粗生成物を、水（５．３ｍＬ）で希釈し、ｔＣ１８ＳＰＥカートリッジ（Ｗａｔｅｒｓ、製品番号ＷＡＴ０３６８００）に投入し、下に記載の方法を使用して精製する。
【００８３】
水酸化ナトリウム（２Ｍ、約３ｍＬ）を、低流速でＳＰＥカートリッジを通過させて、粗生成物を加水分解する。次に、ＳＰＥカートリッジを、水溶液（１４ｍＬ）で洗浄して、アセトニトリル、ＮａＯＨならびに親水性化学的および放射性化学的不純物を洗い流す。次に、ＳＰＥカートリッジを、水（１０．５ｍＬ）中の４０％のアセトニトリル溶液で洗浄して、ヒドロキシ不純物を除去する。代替方法において、ＳＰＥカートリッジは、初期のＮａＯＨステップの代わりかまたは初期のＮａＯＨステップに添加するかのいずれかで、ここで、ＮａＯＨにより洗浄され得る。この後、第１のＳＰＥカートリッジを、第２のＳＰＥカートリッジ（Ｗａｔｅｒｓ、製品番号ＷＡＴ０３６８００）に連続して接続し、２つのカートリッジを、さらなる４０％のアセトニトリル水溶液（２４．５ｍＬ）で洗浄して、続いて窒素流によって第２のカートリッジ上へ［１８Ｆ］フルルピリダズを移動させ、より多くの親油性化学的および放射性化学的不純物を捕捉する。次に、第２のＳＰＥカートリッジ（エタノール溶出の前に場合によって洗浄される）を、４５％のエタノールの溶液（９ｍＬ、生成物バイアル中に収集された３〜９ｍＬ部分）で溶出して、続いて、水（４ｍＬ）および窒素流によって生成物バイアル中へ［１８Ｆ］フルルピリダズを溶出する。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【国際調査報告】
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2021519755.tif 000021