(57)【要約】  本発明は、少なくとも１：２．２のテベレリクスとトリフルオロアセテート組成物とのモル比を有する、テベレリクス−ＴＦＡ組成物に関する。このようなモル比は、望ましくないゲル形成を防止し、均一懸濁液を提供することになり、それによって、独特なテベレリクスの生物学的利用能が得られる。【選択図】図２
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも１：２．２のテベレリクス（Ａｃ−Ｄ−Ｎａｌ−Ｄ−ｐＣｌＰｈｅ−Ｄ−Ｐａｌ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｄ−Ｈｃｉ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ（ｉＰｒ）−Ｐｒｏ−Ｄ−Ａｌａ−ＮＨ２）とトリフルオロアセテートとのモル比を有する、テベレリクス−ＴＦＡ組成物。
【請求項２】
テベレリクスとトリフルオロアセテートとのモル比が、少なくとも１：２．４である、請求項１に記載のテベレリクス−ＴＦＡ組成物。
【請求項３】
テベレリクスとトリフルオロアセテートとのモル比が、１：２．８以下である、請求項１または２に記載のテベレリクス−ＴＦＡ組成物。
【請求項４】
医薬として使用するための、請求項１から３のいずれか一項に記載のテベレリクス−ＴＦＡ組成物。
【請求項５】
ゴナドトロピンホルモンの放出に関連する症状または疾患の治療に使用するための、請求項１から３のいずれか一項に記載のテベレリクス−ＴＦＡ組成物。
【請求項６】
症状または疾患が、良性前立腺過形成；急性閉尿；子宮内膜症；前立腺がん、乳がん、もしくは子宮頸がんなどのがん；化学的去勢；ホルモン不均衡；アンドロゲン感受性症状；エストロゲン感受性症状；またはこれらの組み合わせである、請求項５に記載のテベレリクス−ＴＦＡ組成物。
【請求項７】
請求項１から６のいずれか一項に記載のテベレリクス−ＴＦＡ組成物を含む、薬学的製剤。
【請求項８】
微結晶均一水性懸濁液の形態であり、テベレリクスとトリフルオロアセテートとのモル比が１：２．２から１：２．８である、請求項７に記載の薬学的製剤。
【請求項９】
請求項１から６のいずれか一項に記載のテベレリクス−ＴＦＡ組成物、または請求項７もしくは８に記載の薬学的製剤を充填した、包装。
【請求項１０】
単位投与量の、請求項１から５のいずれか一項に記載のテベレリクス−ＴＦＡ組成物、または請求項６に記載の薬学的製剤を含む、請求項９に記載の包装。
【請求項１１】
包装が、皮下および／または筋肉内注射を提供するのに好適なシリンジである、請求項９または１０に記載の包装。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、テベレリクス−ＴＦＡ組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
テベレリクスは、下垂体前葉で受容体に結合する内因性神経ホルモンＧｎＲＨ（別名、黄体化ホルモン放出ホルモン、ＬＨＲＨとして知られる）に競合する、合成ゴナドトロピン放出ホルモンアンタゴニスト（ＧｎＲＨアンタゴニスト）である。ＧｎＲＨアンタゴニストは、ＧｎＲＨの作用を低下させる、またはブロックすることによって、卵胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）および黄体化ホルモン（ＬＨ）が下垂体前葉から放出されることを抑制する。
【０００３】
ＦＳＨおよびＬＨはいずれも、正常な生殖機能に関与する。女性においては、ＦＳＨは、未成熟なグラーフ卵胞の成長を刺激して成熟させ、ＬＨレベルの変化は、排卵を制御する。一方、男性においては、ＦＳＨは、精子形成に重要な役割を果たし、ＬＨは、精巣においてテストステロンの生成を刺激する。
【０００４】
したがって、テベレリクスは、良性前立腺肥大、ホルモン依存性前立腺がん、子宮内膜症、および子宮横紋筋肉腫のような、ホルモン依存性症状の治療に好適である。
【０００５】
テベレリクス（Ａｃ−Ｄ−Ｎａｌ−Ｄ−ｐＣｌＰｈｅ−Ｄ−Ｐａｌ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｄ−Ｈｃｉ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ（ｉＰｒ）−Ｐｒｏ−Ｄ−Ａｌａ−ＮＨ２）は疎水性ペプチドであるため、多くの対イオンの存在下で、ゲルを形成する傾向がある。この問題は、ゲルの形成は、テベレリクスペプチドを対イオン、例えばトリフルオロアセテート（ＴＦＡ）と、少なくとも１：１．６のペプチドと対イオンとのモル比で接触させることによって防止することができ、それにより流動的で乳状のテベレリクス塩（例えば、テベレリクス−ＴＦＡ）の微結晶水性懸濁液を提供することを開示している、ＷＯ２００３／０２２２４３によって解決されている。
【０００６】
ＷＯ２００３／０２２２４３によれば、所望の微結晶懸濁液を確実に得るためには、少なくとも１：１．６というテベレリクスと対イオンのトリフルオロアセテートの比は必須であり、そうでなければ、ゲルが形成されることになる。しかしながら、本発明の発明者は、このようなモル比は、望ましくないゲル形成と、均一でない懸濁液との両方を生じるであろうことを見出した。これは、このような懸濁液は注射が困難であろうためだけでなく、このペプチドの所望の持続作用にゲルが干渉するので、テベレリクスペプチドの生物学的利用能が損なわれるため、問題である。
【発明の概要】
【０００７】
したがって、テベレリクスの均一微結晶水性懸濁液を提供することができ、テベレリクスの持続放出を提供するであろう、新しいテベレリクス−ＴＦＡ組成物を提供することに、需要が存在する。
【０００８】
この態様およびさらなる態様は、少なくとも１：２．２のテベレリクスとトリフルオロアセテートとのモル比を有する、テベレリクス−ＴＦＡ組成物を提供することにより、本発明によって達成される。
【０００９】
本発明の内容の範囲内で、「テベレリクスとトリフルオロアセテートとのモル比」という用語は、テベレリクスとトリフルオロアセテートとの間のモルによる関係を指し、モル比の第１の数は、組成物中のテベレリクスのモル含有量であり、第２の数は、組成物中のＴＦＡのモル含有量を指す。例えば、１：２．２のモル比とは、組成物中のテベレリクス１ｍｏｌにつき、この組成物が２．２ｍｏｌのＴＦＡを含むことを意味し、少なくとも１：２．２のモル比とは、組成物中のテベレリクス１モルにつき、組成物が少なくとも２．２ｍｏｌのトリフルオロアセテート（ＴＦＡ）を含むことを意味する。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１ａ−１ｇ】懸濁液Ａ１〜Ｇ１の顕微鏡写真である。
【図２】異なるモル比における、可溶型および不溶型テベレリクスの濃度を示すグラフである。
【図３】可溶型対不溶型テベレリクスの割合を示すグラフである。
【図４】異なるＴＦＡ：テベレリクスのモル比における、１時間時点のテベレリクスの血漿濃度を示すグラフである。
【図５】異なるＴＦＡとテベレリクスとのモル比における、テベレリクスＴＦＡの投与についての全選択平均ＰＫプロファイルを示すグラフである。
【図６】４０℃で保管中の溶液において、異なるＴＦＡとテベレリクスとのモル比における、溶液中のテベレリクスＴＦＡの不純物の増加を示すグラフである。
【図７】４０℃で１箇月保管中の溶液において、ＴＦＡとテベレリクスとの異なるモル比における、１０ｍｇ／ｍＬ溶液中のテベレリクスＴＦＡの不純物の増加を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
本発明の発明者は、テベレリクスとトリフルオロアセテートとのモル比が、少なくとも１：２．２である場合、組成物は、可溶型テベレリクスと不溶型テベレリクスとの両方を含み、それによって、独特なテベレリクスの生物学的利用能を提供することを見出した。
【００１２】
テベレリクスが体内に吸収されるためには、この成分が、吸収の部位において、溶液の形態で存在しなければならない。テベレリクスのような溶解性が低い薬剤の溶解度を増強するために、様々な技法が用いられるが、発明者は、テベレリクスとトリフルオロアセテートとがテベレリクスペプチドの組織化を提供する、改善された物理化学的特性（例えば、溶解度および安定性）ならびに改善された有効性（例えば、生物学的利用能）を有する結晶工学を見出し、結晶構造中の対イオンは、効果的なテベレリクスの持続放出を提供する。
【００１３】
理論に束縛されるものではないが、可溶型テベレリクスは水溶液の形態であり、いくつかの状況ではゲルである。ゲルの存在によって、いずれの自由な水性テベレリクスも阻害されることとなり、そのため、即時の放出は防止されるか、少なくとも減少する。不溶型テベレリクスは、微結晶の形態である。この微結晶は、ゲル形成を防止することとなり、そのため、水性テベレリクスを「開放」する。時間が経つにつれて、本発明による組成物中のＴＦＡは、体に吸収されて比率が低下することとなり、その後、微結晶がゲルとなって、徐放性デポを形成する。したがって、非ゲル−可溶型テベレリクスは直ちに利用可能であって、ほぼ即時の作用の発生を提供し、ゲル−可溶型および不溶型テベレリクス（微結晶）は、テベレリクスの持続放出を提供することを支援することとなる。したがって、本発明による組成物は、投与部位における可溶型−不溶型転移、ひいてはテベレリクスの持続放出を提供する。
【００１４】
したがって、本発明による組成物は、ゴナドトロピンの迅速な抑制を招く作用の即時発生だけでなく、アンタゴニストの持続放出との両方を有することによって、対象が、血液血漿内の療法的有効濃度を維持することを確保する。これは、ゴナドトロピンに関連する（gonadotropin relates）疾患および症状の治療のための、より信頼のおける組成物を提供するだけでなく、より少ない投与（例えば注射）が必要となるため、患者への適合性も改善するであろう。
【００１５】
テベレリクスとトリフルオロアセテートとのモル比は、好ましくは少なくとも１：２．２であり、すなわち、テベレリクス１モルにつき、組成物は少なくとも２．２ｍｏｌのトリフルオロアセテート（ＴＦＡ）を含み、さらにより好ましくは、少なくとも１：２．４を含むが、これは、直接用いてもよい水性薬学的製剤を提供することになるためであり、すなわち、この製剤は、すぐに使用できる。
【００１６】
テベレリクスは、水および酸に接触して配置される場合、脱アミド化するため、保管中に、望ましくない分解生成物（不純物）が、組成物／製剤中に現れるであろう。この不純物は、テベレリクス組成物／製剤の品質、安全性、および有効性に影響を及ぼす場合があり、それによって、潜在的に深刻な健康への危険性を生じる。
【００１７】
本発明の発明者は、テベレリクスとＴＦＡとのモル比が１：２．８以下である場合、すなわち、テベレリクス１ｍｏｌ当たりのＴＦＡのモル含有量が２．８以下である場合、不純物のレベルが、許容されるレベルに保たれることを見出した。したがって、本発明による組成物中の最適なモル比は、好ましくは、１：２．２（または１：２．４）から１：２．８の間である。
【００１８】
本発明による組成物は、テストステロンおよびジヒドロテストステロン（ＤＨＴ）のようなゴナドトロピンの抑制を通じて、前立腺がんのような症状を治療するのにとりわけ好適である。このような組成物は、テストステロンの完全な抑制を招く作用の即時発生と、アンタゴニストの持続放出との両方を有することによって、対象が化学的去勢を維持することを確保することになるため、組成物は、疾患の迅速な制御が必要な前立腺がんを有する患者の治療においても、持続放出のみが関係する患者についても、両方に価値がある。
【００１９】
しかしながら、本発明による組成物は同様に、ゴナドトロピンホルモンの放出に関連する他の疾患または症状を、少なくとも部分的に改善するために、よく用いられうる。このような疾患または症状は、良性前立腺過形成；急性閉尿；子宮内膜症；前立腺がん、乳がん、もしくは子宮頸がんなどのがん；化学的去勢；ホルモン不均衡；アンドロゲン感受性症状；エストロゲン感受性症状；またはこれらの組み合わせでありうる。
【００２０】
本発明はまた、少なくとも１：２．２、好ましくは少なくとも約１：２．４のテベレリクスとトリフルオロアセテートとのモル比を有する、本発明によるテベレリクス−ＴＦＡ組成物からなる、またはこれを含む、水性薬学的製剤、好ましくは乳状の微結晶均一水性懸濁液に関する。水性薬学的製剤の好ましい実施形態では、テベレリクスとトリフルオロアセテートとのモル比は、１：２．８を下回り、すなわち、１ｍｏｌのテベレリクス当たり、製剤は２．８ｍｏｌ以下のＴＦＡを含有する。
【００２１】
所望により、水性薬学的製剤は、マンニトールおよび／または薬学的に許容される添加物などの等張剤を含有してもよい。
【００２２】
本発明による単純かつ好ましい実施形態では、テベレリクス−ＴＦＡ組成物は、少なくとも１：２．２、さらにより好ましくは約１：２．４のテベレリクスとＴＦＡとのモル比を有する単位投与量として提供され、それによって、提供される懸濁液が、実質的にゲルを含有しない、または懸濁液を注射に用いることができるほど少なくとも低濃度のゲルを含有することが確保される。
【００２３】
したがって、本発明の別の態様は、単位投与量のテベレリクス−ＴＦＡ組成物を充填した包装、例えばシリンジまたはバイアルを特徴とする。本発明の文脈の範囲内では、「単位投与量」という用語は、単回投与量において患者に投与される活性成分（テベレリクス）の量である。この単位投与量は、容易な投与を提供するために、例えば、好適なシリンジ内に配置される。
【００２４】
一実施形態では、単位投与量は、１：２．４のテベレリクスと対イオンとのモル比を有する、最終的な水性テベレリクス−ＴＦＡ製剤を提供する。好ましくは、テベレリクスの濃度は、３０ｍｇ／ｍｌから１００ｍｇ／ｍｌの間、さらにより好ましくは４５ｍｇ／ｍｌから９０ｍｇ／ｍｌの間、例えば約７５ｍｇ／ｍｌである。テベレリクスの濃度は、いくつかの状況では、約１００ｍｇ／ｍｌよりも高くてもよい。体積は、０．４ｍｌから１．６ｍｌの間、例えば約１．２ｍｌでありうる。この濃度および体積において、皮下および／または筋肉内に与えられる注射は、穏やかな注射部位反応のみを提供することが実証されている。
【実施例】
【００２５】
テベレリクスと対イオンのトリフルオロアセテートとのモル比の影響を確かめるために、複数の試験を実行した。
【００２６】
実施例１：異なるモル比を有するテベレリクス−ＴＦＡ組成物の調製
低いＴＦＡ含有量を有するテベレリクスの特別製造バッチ、バッチＡを入手した。このバッチの特性を、表１に示す。
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【００２７】
７５ｍｇのテベレリクスを含有する初期組成物である、組成物Ａを所望する場合、次のように計算して、８８．２８ｍｇのバッチＡを用いなければならない。
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【００２８】
次いで、組成物Ａ中のテベレリクスとＴＦＡとのモル比を計算することができる：８８．２８ｍｇのバッチＡ中のＴＦＡ含有量は、８８．２８ｍｇ×１０．９／１００（％ＴＦＡ含有量）＝９．６２ｍｇと計算することができる。
【００２９】
ＴＦＡのモル質量ＭＴＦＡは１１４ｇ／ｍｏｌであり、テベレリクスのモル質量ＭＴＥＶは１４５９ｇ／ｍｏｌであるため、７５ｍｇのテベレリクス組成物中のＴＦＡのモル濃度は０．０８４ｍｍｏｌ、テベレリクスのモル濃度は０．０５１ｍｍｏｌと計算することができる。したがって、組成物Ａ中のテベレリクスとＴＦＡとのモル比は、１：１．６４である。
【００３０】
異なるモル比を有する、複数の異なる水性テベレリクス−ＴＦＡ組成物を調製するために、４４．１４ｍｇ＋５％（４１．９３〜４６．３５ｍｇ）の組成物Ａを含有する２１個の試料を、マイクロピペットによって復元溶液を加えることができる蓋を有する、２ｍｌガラスチューブに正確に秤量した。
【００３１】
５％マンニトール中にＴＦＡを含有する７種のＴＦＡ溶液を、Ａｃｒｏｓ  Ｏｒｇａｎｉｃｓ（Ｇｅｅｌ，Ｂｅｌｇｉｕｍ）から入手したＴＦＡ組成物を用いて調製した。このＴＦＡ組成物は、９９％純粋であり、１．５３５ｇ／ｍｌの密度を有していた。各復元溶液を表２に示す。
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【００３２】
マイクロピペットを用いて、４４．１４ｍｇ＋５％（４１．９３〜４６．３５ｍｇ）の組成物Ａを含有する２１個のガラスチューブの蓋を通じて、０．５ｍｌの上の復元溶液のそれぞれを加えることによって、各水性テベレリクス−ＴＦＡ組成物を調製し、すなわち、同じモル比を有する３つの水性テベレリクス−ＴＦＡ組成物を調製した。ボルテックスを用いて混合物を１分間撹拌し、所望されるテベレリクス−ＴＦＡの流動的で乳状の微結晶均一水性懸濁液を得たか、または代わりにゲルが形成されたかを確かめるために、溶液を１０分間、視覚的に観察した。結果を下の表３にまとめる。
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【００３３】
第１の試験チューブ内の水性テベレリクス−ＴＦＡ組成物の微結晶内容物を、Ｒｅａｌｕｘ（Ｆｒａｎｃｅ）によって供給された偏光顕微鏡でさらに観察した。
【００３４】
それぞれのモル比についての結果を、図１ａ〜図１ｇに示す。これらの観察から、１：１．８５以下のモル比については、微結晶形成が観察されないことは明らかであり、したがって、所望の微結晶形成が開始されるためには、テベレリクスと対イオンのＴＦＡとのモル比が、１：１．８５を上回らなければならない。
【００３５】
さらに、表３から明白であるように、１：２．１以下のモル比では、テベレリクス−ＴＦＡの均一懸濁液は得られず、したがって、水性テベレリクス−ＴＦＡ懸濁液中のモル比は、１：２．２を上回り、好ましくは少なくとも１：２．３６（約１：２．４）のようにより高いことが好ましく、そうでなければ、この組成物を、注射によって投与することができない。
【００３６】
実施例２：モル比に対する可溶型テベレリクスおよび不溶型テベレリクスの含有量
各試験チューブにおける、不溶型テベレリクスに対する可溶型テベレリクスの含有量を決定するために、それぞれのモル比の第２および第３の試験チューブを、１０〜２０分間、１０，０００ｒｐｍで遠心分離し、上清およびペレット中のテベレリクスの濃度を、ＨＰＬＣ分析を用いて測定した。
【００３７】
ＨＰＬＣ分析についてのクロマトグラフィー条件を、表４に示す。
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【００３８】
５９．９ｍｇのテベレリクスアセテート（バッチ０８０１１３）を、メスフラスコに秤量し、水：アセトニトリル＝６５：３５（ｖ／ｖ）により体積を１００ｍｌまで満たすことによって、２つの１００％標準を調製した。１０ｍｌのこの溶液を、同じ溶媒によって５０ｍｌまで満たし、０．１ｍｇ／ｍｌの濃度のテベレリクスペプチドを準備した。
【００３９】
２ｍｌの１００％標準を、同じ溶媒によって２００ｍｌに希釈することによって、１％標準溶液を調製し、０．００１ｍｇ／ｍｌの濃度のテベレリクスペプチドを準備した。
【００４０】
２つの１００％標準を用いて、内部標準法を行った。１％標準を用いて、応答の直線性を確認した。１００％標準による回収は、区間９５％〜１０５％になければならない。
【００４１】
遠心分離後に得たペレットを、水：アセトニトリル＝６５：３５（ｖ／ｖ）に可溶化し、同じ溶媒によって、体積を１００ｍＬまで満たした。この溶液を、５倍に希釈し（５０ｍＬ中の１０ｍＬ）、ＨＰＬＣを実行した。
【００４２】
上清をメスフラスコに移し、同じ溶媒、すなわち、水：アセトニトリル＝６５：３５（ｖ／ｖ）によって、体積を１００ｍＬまで満たした。この溶液を、５倍に希釈し（５０ｍＬ中の１０ｍＬ）、ＨＰＬＣを実行した。ＨＰＬＣ分析の結果を、表５に示す。
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【００４３】
それぞれのモル比の平均濃度を計算したので、表６を参照されたい。結果を図２および３に図示する。
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【００４４】
表５および６、ならびに図２および３から明白であるように、テベレリクスに対するトリフルオロアセテートの量が増加すると、不溶型テベレリクスの度合いが増加し、したがって、１：２．１のモル比においては、薬学的製剤の約５０％は不溶型テベレリクスからなり、薬学的製剤中の不溶型（微結晶）テベレリクスの量は、１：２．２のモル比においては約８０％であり、１：２．３６（約１：２．４）のモル比モル比においては約８２％である。
【００４５】
実施例３：モル比に対する血漿濃度
テベレリクスの血漿濃度に対するモル比の関連性を評価するため、異なるモル比を含有する５つのガラスバイアルを、実施例１に論じたように調製し、表７に示す水性テベレリクス−ＴＦＡ組成物を含む試験チューブを準備した。
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【００４６】
それぞれのモル比に対して、５匹のラットを試験した。２５ｍｍ  ２１Ｇルアー６％レギュラーベベル針（Ｔｅｒｕｍｏ（Ｌｅｕｖｅｎ，Ｂｅｌｇｉｕｍ）から入手可能）、および１００μｌルアースリップシリンジ（Ｈａｍｉｌｔｏｎ  Ｃｏｍｐａｎｙ（Ｒｅｎｏ，ＵＳＡ）から入手可能）を用いて、それぞれのラットに６０μｌの各溶液を注射した。投与の前、次いで、投与後１時間、６時間、２４時間、４８時間、７日目、１０日目、１４日目、２１日目、および２８日目に、血漿濃度を測定した。
【００４７】
それぞれのラット個体への注射後のテベレリクスのピーク血漿濃度Ｃｍａｘを、表８に示し、図４に図示する。
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【００４８】
これらの結果から明らかであるように、テベレリクスのＣｍａｘは、１：２．１のモル比までは上昇し、その後、血漿濃度は実質的に安定する。
【００４９】
定期的な間隔で血液試料を採取することによって、４週間の期間にわたる血漿濃度も測定した。
【００５０】
４週間の期間における平均血漿レベルを図５に示すが、テベレリクスの放出プロファイルが、モル比に依存することは明らかである。
【００５１】
実施例４：モル比に対するテベレリクスの安定性
テベレリクスの安定性に関するテベレリクスと対イオンのトリフルオロアセテートとのモル比の影響を確かめるために、次の試験を実行した。
【００５２】
テベレリクスとＴＦＡとの異なるモル比（低１：１．７；中位１：２．１６；高１：２．８；および超高１：４．０）を有する、４種のバッチのテベレリクスＴＦＡ溶液を、２つの濃度、１０ｍｇ／ｍＬ（ベーステベレリクスとして表す）および１ｍｇ／ｍＬ（ベーステベレリクスとして表す）において調製した。
【００５３】
乾燥粉末として供給される、復元可能なテベレリクスＴＦＡ組成物を入手した。このバッチの特性を、表９に示す。
2021529165.tif 000012
【００５４】
出発材料のモル比を、次の計算を用いて決定した。
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【００５５】
８つのバッチ：一方は、１０ｍｇ／ｍｌの４種のモル比のそれぞれ、一方は、１ｍｇ／ｍｌの４種のモル比のそれぞれを、以下のように調製した。
【００５６】
１０ｍｇ／ｍＬにおける低モル比（１：１．７）
１．  ０．３１２ｇのテベレリクスＴＦＡ（正味重量テベレリクス）を、注射用水によって復元して、懸濁液を３．０ｍＬに調合し、１０４ｍｇ／ｍＬの均一乳状懸濁液を形成した。この濃度では、テベレリクスの９６％が固体テベレリクスを形成することを、先行調査が実証しており、そのため、遠心分離後、およそ３００ｍｇのテベレリクスが、固体テベレリクスとして回収されることになる。
２．  調製物を、４℃において、１０，０００ｒｐｍ（８，５００ｇ）で１０分間、直ちに遠心分離した。
３．  遠心分離された材料の上清を廃棄した。固体テベレリクスが、およそ１：１．７のテベレリクスとＴＦＡとのモル比を有することを、先行調査が実証している。
４．  遠心分離ペレットを、注射用水によって再懸濁させて、３０ｍＬに調合し、およそ１０ｍｇ／ｍＬの、およそ１：１．７のモル比の溶液を形成した。
【００５７】
１０ｍｇ／ｍＬにおける中位モル比（Mid-molar range ratio）（１：２．１６）
１．  ０．１ｇのテベレリクスＴＦＡ（正味重量テベレリクス）を、１０ｍＬ三角フラスコ中で注射用水によって復元して、１０．０ｍＬ体積の溶液を作製し、１０ｍｇ／ｍＬにおける、１：２．１６のテベレリクスとＴＦＡとのモル比のテベレリクスの溶液を形成した。
【００５８】
１０ｍｇ／ｍＬにおける高モル比（１：２．８）
１．  ０．１ｇのテベレリクスＴＦＡ（正味重量テベレリクス）を、１０ｍＬ三角フラスコ中で、５ｍＬの０．００９７Ｍ注射用水中トリフルオロ酢酸によって復元した。
２．  溶液を注射用水によって１０．０ｍＬに調合して、１０ｍｇ／ｍＬにおける、１：２．８のテベレリクスとＴＦＡとのモル比のテベレリクスの溶液を形成した。
【００５９】
１０ｍｇ／ｍＬにおける超高モル比（１：４．０）
１．  ０．１ｇのテベレリクスＴＦＡ（正味重量テベレリクス）を、１０ｍＬ三角フラスコ中で、５ｍＬの０．０２５２Ｍ注射用水中トリフルオロ酢酸によって復元した。
２．  溶液を注射用水によって１０．０ｍＬに調合して、１０ｍｇ／ｍＬにおける、１：４．０のテベレリクスとＴＦＡとのモル比のテベレリクスの溶液を形成した。
【００６０】
１ｍｇ／ｍＬにおける低モル比（１：１．７）
１．  ０．３１２ｇのテベレリクスＴＦＡ（正味テベレリクス）を、注射用水によって復元して、懸濁液を３．０ｍＬに調合し、１０４ｍｇ／ｍＬの均一ミルク懸濁液を形成した。
２．  調製物を、４℃において、１０，０００ｒｐｍ（８，５００ｇ）で１０分間、直ちに遠心分離した。
３．  遠心分離された材料の上清を廃棄した。
３．  遠心分離ペレットを、注射用水中に再懸濁させて（最終体積３００ｍＬ）、およそ１ｍｇ／ｍＬの、およそ１：１．７のテベレリクスとＴＦＡとのモル比の溶液を調合した。
４．  １０．０ｍＬを、１０ｍＬ三角フラスコに移した。
【００６１】
１ｍｇ／ｍＬにおける中位モル比（Mid-molar range ratio）（１：２．１６）
１．  注射用水中テベレリクスＴＦＡの１ｍｇ／ｍＬ溶液を調製した。
【００６２】
１ｍｇ／ｍＬにおける高モル比（１：２．８）
１．  ０．０１０ｇのテベレリクスＴＦＡ（正味重量テベレリクス）を、１０ｍＬ三角フラスコ中で、５ｍＬの０．００１Ｍ注射用水中トリフルオロ酢酸によって復元した。
２．  ＷＦＩによって、体積を１０ｍＬまで満たした。
【００６３】
１ｍｇ／ｍＬにおける超高モル比（１：４．０）
１．  ０．０１０ｇのテベレリクスＴＦＡ（正味重量テベレリクス）を、１０ｍＬ三角フラスコ中で、５ｍＬの０．０２０５Ｍ注射用水中トリフルオロ酢酸によって復元した。
２．  ＷＦＩによって、体積を１０ｍＬまで満たした。
【００６４】
すべての溶液を、テベレリクス純度についての分析の前に、研究室温度（２０℃）に保った。
【００６５】
溶液それぞれから、試料を２回採取し、従来のＲＰ−ＨＰＬＣ方法を用いて、テベレリクス純度について分析した。染色（chromatic）条件は、表１０に示した通りである。
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【００６６】
調製後、すなわち時間０における溶液中のテベレリクスの純度を、表１１に示す。
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【００６７】
経時的な安定性を評価するために、＋４０℃、７５％の相対湿度のチャンバー内で、各溶液を共栓付きガラス三角フラスコに保管した。
【００６８】
１０ｍｇ／ｍＬ溶液については１箇月後、１ｍｇ／ｍＬ溶液については２週間後、既に記載した方法を用いて、テベレリクス純度分析を繰り返した。該当期間の後の溶液の純度を、下の表１２に提示する。
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【００６９】
安定性の結果を図６および７に示し、保管中の不純物のパーセンテージの増加を、溶液のモル比によって図示する。
【００７０】
これらの図から、溶媒中のより高濃度のトリフルオロアセテートは、有意により高濃度の不純物をもたらすことは明らかであり、したがって、テベレリクスが高濃度の酸（トリフルオロアセテート）と接触して配置される場合、望ましくない分解生成物（不純物）が少量現れることを、結果が証拠立てている。したがって、安定なテベレリクス−ＴＦＡ製剤を得るためには、低濃度／含有量のトリフルオロアセテートを有する組成物を準備すること、すなわち、テベレリクス１ｍｏｌについてのトリフルオロアセテートのモル含有量を、可能な限り低く保つことが重要である。
【００７１】
図６および７から、懸濁液中のテベレリクスとトリフルオロアセテートとのモル比が１：２．８を下回る（すなわち、１ｍｏｌのテベレリクス対２．８ｍｏｌ以下のＴＦＡ）場合、不純物、すなわち、例えば脱アミド化によって生じる、望ましくない分解生成物のレベルは、許容されるレベルに保たれることが見て取れる。
【００７２】
これらの図から、テベレリクスの濃度もまた、不純物のレベルに関係することも明らかである。しかしながら、注射体積を減少させるためには、懸濁液が、少なくとも１０ｍｇ／ｍｌ、好ましくは少なくとも３０ｍｇ／ｍｌのテベレリクスの濃度を含むことが関係し、したがって、最終的な製剤中のテベレリクスの濃度を単純に低下させることは、現実的には不可能である。しかしながら、低レベルの酸はより安定な生成物を提供することとなるため、この因子によって、組成物中の酸（トリフルオロアセテート）の含有量は、保管中にはいっそうより重要となる。
【００７３】
したがって、テベレリクス１モルにつき、ＴＦＡのモル含有量は、２．２以上２．８以下であるべきである。
【００７４】
テベレリクス１ｍｏｌ当たり２．２以上のＴＦＡのモル含有量は、組成物／製剤／懸濁液が、可溶型テベレリクスと不溶型テベレリクスとの両方を確実に含み、それによって、独特なテベレリクスの生物学的利用能を提供するとともに、懸濁液が、皮下および／または筋肉内注射によって容易に投与されることを確保するためには必須である。１：２．２を下回るモル比は、望ましくないゲル形成をもたらし、懸濁液を注射することを非常に困難にするであろう。さらに、テベレリクス１モル当たり２．８以下のＴＦＡのモル含有量は、不純物、例えば望ましくない脱アミド化生成物の量が許容されるレベルに保たれた、安定なテベレリクス−ＴＦＡ生成物を提供することに関係する。
【００７５】
本発明において提供する組成物および製剤は、製造に費用がかさまず、使用の容易さに起因して、非常に単純な投与体制（regime）も提供する。
【００７６】
上の原理の修正および組み合わせ、ならびにその組み合わせは、本発明の範囲内で予見される。
【図１ａ−１ｇ】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【手続補正書】
【提出日】令和2年8月7日(2020.8.7)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも１：２．４、かつ１：２．８以下のテベレリクス（Ａｃ−Ｄ−Ｎａｌ−Ｄ−ｐＣｌＰｈｅ−Ｄ−Ｐａｌ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｄ−Ｈｃｉ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ（ｉＰｒ）−Ｐｒｏ−Ｄ−Ａｌａ−ＮＨ２）とトリフルオロアセテートとのモル比を有し、組成物中のテベレリクス１モルにつき、組成物が、少なくとも２．２ｍｏｌのトリフルオロアセテート、かつ２．８ｍｏｌ以下のトリフルオロアセテートを含み、前記組成物中の不溶型微結晶テベレリクスの量が、均一テベレリクス−ＴＦＡ組成物の重量を基準として、少なくとも８０重量％である、均一テベレリクス−ＴＦＡ組成物。
【請求項２】
医薬として使用するための、請求項１に記載のテベレリクス−ＴＦＡ組成物。
【請求項３】
ゴナドトロピンホルモンの放出に関連する症状または疾患の治療に使用するための、請求項１または２に記載のテベレリクス−ＴＦＡ組成物。
【請求項４】
症状または疾患が、良性前立腺過形成；急性閉尿；子宮内膜症；前立腺がん、乳がん、もしくは子宮頸がんなどのがん；化学的去勢；ホルモン不均衡；アンドロゲン感受性症状；エストロゲン感受性症状；またはこれらの組み合わせである、請求項３に記載のテベレリクス−ＴＦＡ組成物。
【請求項５】
請求項１から４のいずれか一項に記載のテベレリクス−ＴＦＡ組成物を含む、薬学的製剤。
【請求項６】
微結晶均一水性懸濁液の形態であり、テベレリクスとトリフルオロアセテートとのモル比が１：２．２から１：２．８の間であり、組成物中のテベレリクス１モルにつき、組成物が、２．２から２．８ｍｏｌの間のトリフルオロアセテートを含む、請求項５に記載の薬学的製剤。
【請求項７】
請求項１から４のいずれか一項に記載のテベレリクス−ＴＦＡ組成物、または請求項５もしくは６に記載の薬学的製剤を充填した、包装。
【請求項８】
単位投与量の、請求項１から４のいずれか一項に記載のテベレリクス−ＴＦＡ組成物、または請求項５もしくは６に記載の薬学的製剤を含む、請求項７に記載の包装。
【請求項９】
包装が、皮下および／または筋肉内注射を提供するのに好適なシリンジである、請求項７または８に記載の包装。
【国際調査報告】
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