(57)【要約】ＧＷ５０７４のアンモニウム塩が提供され、それはがんの治療のために単独で又はｃ−Ｒａｆ阻害剤と組み合わせて使用可能である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）の化合物であって、
【化１】
2021533117.tif 000007
Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は、独立して水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール若しくはヘテロアリールであり、又は
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及び窒素を統合して６員環ヘテロシクリルを形成し、
前記アルキル、前記アルケニル、前記アルキニル、前記アリール、前記ヘテロアリール若しくは前記６員環ヘテロシクリルは、選択的に、−ＯＨ、−ＮＲａＲｂ及びその組合せからなる群から選択される少なくとも１つの置換基で置換され、Ｒａ及びＲｂは独立して水素、アルキル、アリール又はヘテロアリールである、化合物。
【請求項２】
前記式（Ｉ）において、Ｒ１及びＲ２は独立して水素であり、Ｒ３は少なくとも１つのヒドロキシルで置換されたターシャリーブチルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
前記式（Ｉ）において、Ｒ１及びＲ２は独立して水素であり、Ｒ３は選択的に少なくとも１つのアミノ又はヒドロキシで置換されたエチルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
前記式（Ｉ）において、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は独立してヒドロキシルで置換されたエチルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
前記式（Ｉ）において、Ｒ１は水素であり、Ｒ２はメチルであり、Ｒ３は６個のヒドロキシ基で置換されたヘキシルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
前記式（Ｉ）において、Ｒ１は水素であり、Ｒ２はベンジルであり、Ｒ３は−ＮＨ−ベンジルで置換されたエチルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項７】
前記式（Ｉ）において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及び窒素が統合されて、ピペラジン、モルホリン又は４−（ジメチルアミノ）ピリジンを形成する、請求項１に記載の化合物。
【請求項８】
薬学的キットであって
ソラフェニブ及び薬学的に許容可能な担体を備える第１の処方と、
請求項１に記載の化合物及び薬学的に許容可能な担体を備える第２の処方と、
を備える薬学的キット。
【請求項９】
前記第２の処方の前記式（Ｉ）の化合物において、Ｒ１及びＲ２は独立して水素であり、Ｒ３は少なくとも１つのヒドロキシルで置換されたターシャリーブチルである、請求項８に記載の薬学的キット。
【請求項１０】
前記第２の処方の前記式（Ｉ）の化合物において、Ｒ１及びＲ２は独立して水素であり、Ｒ３は選択的に少なくとも１つのアミノ又はヒドロキシで置換されたエチルである、請求項８に記載の薬学的キット。
【請求項１１】
前記第２の処方の前記式（Ｉ）の化合物において、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は独立してヒドロキシルで置換されたエチルである、請求項８に記載の薬学的キット。
【請求項１２】
前記第２の処方の前記式（Ｉ）の化合物において、Ｒ１は水素であり、Ｒ２はメチルであり、Ｒ３は６個のヒドロキシ基で置換されたヘキシルである、請求項８に記載の薬学的キット。
【請求項１３】
前記第２の処方の前記式（Ｉ）の化合物において、Ｒ１は水素であり、Ｒ２はベンジルであり、Ｒ３は−ＮＨ−ベンジルで置換されたエチルである、請求項８に記載の薬学的キット。
【請求項１４】
前記第２の処方の前記式（Ｉ）の化合物において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及び窒素が統合されて、ピペラジン、モルホリン又は４−（ジメチルアミノ）ピリジンを形成する、請求項８に記載の薬学的キット。
【請求項１５】
癌を有する被検体を処置する方法であって
（ａ）被検体の癌細胞が細胞死関連プロテインキナーゼ（ＤＡＰＫ）のセリン３０８のリン酸化を有するか否かを検出するステップと、
（ｂ）ステップ（ａ）の検出に基づいて、
前記癌細胞におけるＤＡＰＫのセリン３０８の前記リン酸化が検出された場合に、（ｉ）有効量のソラフェニブ及び（ｉｉ）有効量の請求項1に記載の化合物を前記被検体に投与することにより、前記被検体を処置するステップと、
を備える方法。
【請求項１６】
前記式（Ｉ）の化合物において、Ｒ１及びＲ２は独立して水素であり、Ｒ３は少なくとも１つのヒドロキシルで置換されたターシャリーブチルである、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記第２の処方の前記式（Ｉ）の化合物において、Ｒ１及びＲ２は独立して水素であり、Ｒ３は選択的に少なくとも１つのアミノ又はヒドロキシで置換されたエチルである、請求項１５に記載の方法。
【請求項１８】
前記第２の処方の前記式（Ｉ）の化合物において、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は独立してヒドロキシルで置換されたエチルである、請求項１５に記載の方法。
【請求項１９】
前記第２の処方の前記式（Ｉ）の化合物において、Ｒ１は水素であり、Ｒ２はメチルであり、Ｒ３は６個のヒドロキシ基で置換されたヘキシルである、請求項１５に記載の方法。
【請求項２０】
前記第２の処方の前記式（Ｉ）の化合物において、Ｒ１は水素であり、Ｒ２はベンジルであり、Ｒ３は−ＮＨ−ベンジルで置換されたエチルである、請求項１５に記載の方法。
【請求項２１】
前記第２の処方の前記式（Ｉ）の化合物において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及び窒素が統合されて、ピペラジン、モルホリン又は４−（ジメチルアミノ）ピリジンを形成する、請求項１５に記載の方法。
【請求項２２】
前記癌が腎細胞癌、腎芽細胞腫、移行上皮癌、前立腺癌、乳癌、肺癌、子宮頸癌、口腔癌、神経膠腫、尿路上皮細胞癌及び黒色腫からなる群から選択される、請求項１５に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１８年８月７日に出願された米国特許出願第６２／７１５，２９６号の優先権を主張し、その内容は参照によりその全体がここに組み込まれる。
【０００２】
本開示は、概略として３−（３，５−ジブロモ−４−ヒドロキシベンジリデン）−５−ヨード−１，３−ジヒドロインドール−２−オン（ＧＷ５０７４）のアンモニウム塩及びＧＷ５０７４のアンモニウム塩を使用して癌を治療する方法に向けられる。
【背景技術】
【０００３】
癌患者をｃ−Ｒａｆ阻害剤（例えば、ソラフェニブ）で早期に治療することは、腫瘍のサイズを効果的に阻害し得るが、まだ腫瘍を完全に排除できない。そこで、治療されることを目的とする癌が細胞死関連プロテインキナーゼ（ＤＡＰＫ）のリン酸化を有する場合に、ソラフェニブ及びＧＷ５０７４の併用療法による癌を治療する改善された方法が提案されている（米国特許第９，２７３，０３４号及び第９，３９３，２３４号参照）。
【０００４】
したがって、本開示は、癌の治療のために単独で又はｃ−Ｒａｆ阻害剤との組合せで使用され得るＧＷ５０４７の新規塩を提供することを目的としている。驚くべきことに、本開示で同定されたＧＷ５０４７の新規塩は、非塩形態のものと比較して、改善された薬物動態（ＰＫ）特性を示す。
【発明の概要】
【０００５】
以下に、基本的な理解を読者に与えるために開示の簡略化した概要を提示する。この概要は、開示の網羅的な概観ではなく、本発明の鍵となる／重要な要素を特定するものでも本発明の範囲を記述するものでもない。その専らの目的は、ここに開示される幾つかの概念を、後述のさらに詳細な説明の序章としての簡略な形態で提示することである。
【０００６】
本開示は、３−（３，５−ジブロモ−４−ヒドロキシベンジリデン）−５−ヨード−１，３−ジヒドロインドール−２−オン（ＧＷ５０７４）の新規アンモニウム塩、及び単独で又はｃ−Ｒａｆ阻害剤（例えば、ソラフェニブ）との組合せのいずれかでＧＷ５０７４のアンモニウム塩を使用して癌を治療する方法に関する。
【０００７】
より具体的には、本開示は、ＧＷ５０７４のアンモニウム塩である式（Ｉ）の化合物に関し、
【化１】
2021533117.tif 000002
Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は、独立して水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール若しくはヘテロアリールであり、又は
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及び窒素を統合して６員環ヘテロシクリルを形成し、
アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール若しくは６員環ヘテロシクリルは、選択的に、−ＯＨ、−ＮＲａＲｂ及びその組合せからなる群から選択される少なくとも１つの置換基で置換され、Ｒａ及びＲｂは独立して水素、アルキル、アリール又はヘテロアリールである。
【０００８】
本開示のある好ましい実施形態によれば、式（Ｉ）において、Ｒ１及びＲ２は独立して水素であり、Ｒ３は少なくとも１つのヒドロキシルで置換されたターシャリーブチルである。
【０００９】
本開示の更なる好ましい実施形態によれば、式（Ｉ）において、Ｒ１及びＲ２は独立して水素であり、Ｒ３は選択的に少なくとも１つのアミノ又はヒドロキシで置換されたエチルである。
【００１０】
本開示の更なる好ましい実施形態によれば、式（Ｉ）において、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は、独立してヒドロキシルで置換されたエチルである。
【００１１】
本開示の更なる好ましい実施形態によれば、式（Ｉ）において、Ｒ１は水素であり、Ｒ２はメチルであり、Ｒ３は６個のヒドロキシ基で置換されたヘキシルである。
【００１２】
本開示の更なる好ましい実施形態によれば、式（Ｉ）において、Ｒ１は水素であり、Ｒ２はベンジルであり、Ｒ３は−ＮＨ−ベンジルで置換されたエチルである。
【００１３】
本開示の更なる好ましい実施形態によれば、式（Ｉ）において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及び窒素が統合されて、ピペラジン、モルホリン又は４−（ジメチルアミノ）ピリジンを形成する。
【００１４】
本開示は、癌の治療に対して有用な薬学的キットにも関する。キットは、ソラフェニブ及び薬学的に許容可能な担体を備える第１の処方と、上記の式（Ｉ）の化合物及び薬学的に許容可能な担体を備える第２の処方とを含む。
【００１５】
本開示のある好ましい実施形態によれば、第２の処方の式（Ｉ）の化合物において、Ｒ１及びＲ２は独立して水素であり、Ｒ３は少なくとも１つのヒドロキシルで置換されたターシャリーブチルである。
【００１６】
本開示の更なる好ましい実施形態によれば、第２の処方の式（Ｉ）の化合物において、Ｒ１及びＲ２は独立して水素であり、Ｒ３は選択的に少なくとも１つのアミノ又はヒドロキシルで置換されたエチルである。
【００１７】
本開示の更なる好ましい実施形態によれば、第２の処方の式（Ｉ）の化合物において、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は、独立してヒドロキシルで置換されたエチルである。
【００１８】
本開示の更なる好ましい実施形態によれば、第２の処方の式（Ｉ）の化合物において、Ｒ１は水素であり、Ｒ２はメチルであり、Ｒ３は６個のヒドロキシ基で置換されたヘキシルである。
【００１９】
本開示の更なる好ましい実施形態によれば、第２の処方の式（Ｉ）の化合物において、Ｒ１は水素であり、Ｒ２はベンジルであり、Ｒ３はベンジルアミノで置換されたエチルである。
【００２０】
本開示の更なる好ましい実施形態によれば、第２の処方の式（Ｉ）の化合物において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及び窒素が統合されて、ピペラジン、モルホリン又は４−（ジメチルアミノ）ピリジンを形成する。
【００２１】
癌を有する被検体を処置する方法も、本開示に包含される。方法は、
（ａ）被検体の癌細胞が細胞死関連プロテインキナーゼ（ＤＡＰＫ）のセリン３０８のリン酸化を有するか否かを検出するステップと、
（ｂ）ステップ（ａ）の検出に基づいて、
癌細胞におけるＤＡＰＫのセリン３０８のリン酸化が検出された場合に、（ｉ）有効量のソラフェニブ及び（ｉｉ）有効量の式（Ｉ）の化合物を被検体に投与することにより、被検体を処置するステップと、
を含む。
【００２２】
本開示のある実施形態によれば、式（Ｉ）の化合物において、Ｒ１及びＲ２は独立して水素であり、Ｒ３は少なくとも１つのヒドロキシルで置換されたターシャリーブチルである。
【００２３】
本開示の更なる実施形態によれば、式（Ｉ）の化合物において、ｖ。
【００２４】
本方法によって治療可能な例示的な癌は、腎細胞癌、腎芽細胞腫、移行上皮癌、前立腺癌、乳癌、肺癌、子宮頸癌、口腔癌、神経膠腫、尿路上皮細胞癌及び黒色腫を含むが、これに限定されない。
【００２５】
本開示の付随する構成及び効果の多くは、添付図面との関連で検討される以下の詳細な説明を参照してより深く理解されることになる。
【００２６】
本説明は、添付の図面に照らして読まれる以下の詳細な説明からより深く理解される。
【図面の簡単な説明】
【００２７】
【図１】図１は、本発明の一実施形態による、実施例１のＧＷ５０７４の塩でそれぞれ（Ａ）４８時間及び（Ｂ）７２時間処置されたＳＵＮ−１細胞の生存率を示す棒グラフである。
【発明を実施するための形態】
【００２８】
添付図面との関連で以下に与えられる詳細な説明は、本実施例の説明としてのものであり、本実施例が構成又は利用され得る形態のみを示すものではない。その説明は、実施例の機能及び実施例を構成及び動作させるステップのシーケンスを説明する。ただし、同一又は同等の機能及びシーケンスが、異なる実施例によって実現されてもよい。
【００２９】
１．定義
便宜上、明細書、実施例及び付随の特許請求の範囲で採用される所定の用語をここにまとめる。特に断りがない限り、ここで使用する全ての技術的及び科学的用語は、本発明が属する当業者によって一般的に理解されるものと同一の意味を有する。
【００３０】
用語「アルキル」は、１〜１０個の炭素原子を有する直鎖又は分岐飽和炭化水素基のラジカルをいう（「Ｃ１−１０アルキル」）。いくつかの実施形態では、アルキル基は、１〜６個の炭素原子を有する（「Ｃ１−６アルキル」）。Ｃ１−６アルキル基の例は、メチル（Ｃ１）、エチル（Ｃ２）、プロピル（Ｃ３）（例えば、ｎ−プロピル、イソプロピル）、ブチル（Ｃ４）（例えば、ｎ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｉｓｏ−ブチル）、ペンチル（Ｃ５）（例えば、ｎ−ペンチル、３−ペンタニル、アミル、ネオペンチル、３−メチル−２−ブタニル、ターシャリーアミル）及びヘキシル（Ｃ６）（例えば、ｎ−ヘキシル）を含む。アルキル基の追加の例は、ｎ−ヘプチル（Ｃ７）及びｎ−オクチル（Ｃ８）などを含む。特に断りがない限り、アルキル基の各例は、１以上の置換基（例えば、ヒドロキシル又はＣｌのようなハロゲン）で独立して選択的に置換される（「置換アルキル」又は「非置換アルキル」）。ある実施形態では、アルキル基は、置換されたＣ２アルキル（例えば、−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ）である。他の実施形態では、アルキルは、置換されたＣ４アルキル（例えば、ヒドロキシで置換されたｔｅｒｔ−ブチル）である。
【００３１】
用語「アルケニル」は、２〜１０個の炭素原子を有し、１以上の炭素−炭素二重結合を有し、三重結合を有さない直鎖又は分岐炭化水素基のラジカルをいう（「Ｃ２−１０アルケニル」）。いくつかの実施形態では、アルケニル基は２〜９個の炭素原子を有する（「Ｃ２−９アルケニル」）。いくつかの実施形態では、アルケニル基は２〜８個の炭素原子を有する（「Ｃ２−８アルケニル」）。いくつかの実施形態では、アルケニル基は２〜７個の炭素原子を有する（「Ｃ２−７アルケニル」）。いくつかの実施形態では、アルケニル基は２〜６個の炭素原子を有する（「Ｃ２−６アルケニル」）。いくつかの実施形態では、アルケニル基は２〜５個の炭素原子を有する（「Ｃ２−５アルケニル」）。いくつかの実施形態では、アルケニル基は２〜４個の炭素原子を有する（「Ｃ２−４アルケニル」）。いくつかの実施形態では、アルケニル基は２〜３個の炭素原子を有する（「Ｃ２−３アルケニル」）。いくつかの実施形態では、アルケニル基は２個の炭素原子を有する（「Ｃ２アルケニル」）。１以上の炭素−炭素二重結合は、（２−ブテニルなどの）内部又は（１−ブテニルなどの）末端であり得る。Ｃ２−４アルケニル基の例は、エテニル（Ｃ２）、１−プロペニル（Ｃ３）、２−プロペニル（Ｃ３）、１−ブテニル（Ｃ４）、２−ブテニル（Ｃ４）及びブタジエニル（Ｃ４）などを含む。Ｃ２−６アルケニル基の例は、ペンテニル（Ｃ５）、ペンタジエニル（Ｃ５）及びヘキセニル（Ｃ６）などと同様に前述のＣ２−４アルケニル基を含む。アルケニルの追加の例は、ヘプテニル（Ｃ７）、オクテニル（Ｃ８）及びオクタトリエニル（Ｃ８）などを含む。特に断りがない限り、アルケニル基の各例は、１以上の置換基で独立して選択的に置換され、すなわち、非置換（「非置換アルケニル」）であり又は置換（「置換アルケニル」）される。ある実施形態では、アルケニル基は、非置換Ｃ２−１０アルケニルである。ある実施形態では、アルケニル基は、置換Ｃ２−１０アルケニルである。アルケニル基において、立体化学が特定されていないＣ＝Ｃ二重結合（例えば、−ＣＨ＝ＣＨＣＨ３又は
【化２】
2021533117.tif 000003
）は、（Ｅ）−又は（Ｚ）−二重結合であり得る。
【００３２】
「アルキニル」は、２〜１０個の炭素原子、１以上の炭素−炭素三重結合及び選択的に１以上の二重結合を有する直鎖又は分岐炭化水素基のラジカルをいう（「Ｃ２−１０アルキニル」）。いくつかの実施形態では、アルキニル基は２〜９個の炭素原子を有する（「Ｃ２−９アルキニル」）。いくつかの実施形態では、アルキニル基は２〜８個の炭素原子を有する（「Ｃ２−８アルキニル」）。いくつかの実施形態では、アルキニル基は２〜７個の炭素原子を有する（「Ｃ２−７アルキニル」）。いくつかの実施形態では、アルキニル基は２〜６個の炭素原子を有する（「Ｃ２−６アルキニル」）。いくつかの実施形態では、アルキニル基は２〜５個の炭素原子を有する（「Ｃ２−５アルキニル」）。いくつかの実施形態では、アルキニル基は２〜４個の炭素原子を有する（「Ｃ２−４アルキニル」）。いくつかの実施形態では、アルキニル基は２〜３個の炭素原子を有する（「Ｃ２−３アルキニル」）。いくつかの実施形態では、アルキニル基は２個の炭素原子を有する（「Ｃ２アルキニル」）。１以上の炭素−炭素三重結合は、（２−ブチニルなどの）内部又は（１−ブチニルなどの）末端であり得る。Ｃ２−４アルキニル基の例は、エチニル（Ｃ２）、１−プロピニル（Ｃ３）、２−プロピニル（Ｃ３）、１−ブチニル（Ｃ４）及び２−ブチニル（Ｃ４）などを限定することなく含む。Ｃ２−６アルケニル基の例は、ペンチニル（Ｃ５）及びヘキシニル（Ｃ６）などと同様に前述のＣ２−４アルキニル基を含む。アルキニルの追加の例は、ヘプチニル（Ｃ７）及びオクチニル（Ｃ８）などを含む。特に断りがない限り、アルキニル基の各例は、１以上の置換基で独立して選択的に置換され、すなわち、非置換（「非置換アルキニル」）であり又は置換（「置換アルキニル」）される。ある実施形態では、アルキニル基は、非置換Ｃ２−１０アルキニルである。ある実施形態では、アルキニル基は、置換Ｃ２−１０アルキニルである。
【００３３】
「アリール」は、芳香族環系で与えられた６〜１４個の炭素原子の環及び０個のヘテロ原子を有する（例えば、環状アレイにおいて共有される６、１０又は１４個のパイ電子を有する）単環式又は多環式（例えば、二環式又は三環式）の４ｎ＋２芳香族環系のラジカルをいう（「Ｃ６−１４アリール」）。いくつかの実施形態では、アリール基は、６個の炭素原子の環を有する（「Ｃ６アリール」、例えば、フェニル）。いくつかの実施形態では、アリール基は、１０個の炭素原子の環を有する（「Ｃ１０アリール」、例えば、１−ナフチル及び２−ナフチルのようなナフチル）。いくつかの実施形態では、アリール基は、１４個の炭素原子の環を有する（「Ｃ１４アリール」、例えば、アントラシル）。「アリール」は環系も含み、アリール環が１以上のカルボシクリル又はヘテロシクリル基と融合し、そのラジカル又は結合点がアリール環上にあり、そのような例では、炭素原子の数は、引き続きアリール環系における炭素原子の数を示す。特に断りがない限り、アリール基の各例は、１以上の置換基で独立して選択的に置換され、すなわち、非置換（「非置換アリール」）であり又は置換（「置換アリール」）される。ある実施形態では、アリール基は、非置換Ｃ６−１４アリールである。ある実施形態では、アリール基は、置換Ｃ６−１４アリールである。
【００３４】
用語「ヘテロシクリル」、「ヘテロサイクル」又は「ヘテロサイクリック」は、炭素原子の環及び１〜４個のヘテロ原子の環を有する５〜１０員環の芳香族環又は非芳香族環系のラジカルをいい、各ヘテロ原子は、窒素、酸素、硫黄、ホウ素、リン及びケイ素から独立して選択される（「５〜１０員環ヘテロシクリル」）。ヘテロシクリル基は、飽和又は部分的に不飽和であり得る。ヘテロシクリルはヘテロアリールを含む。特に断りがない限り、ヘテロシクリルの各例は、１以上の置換基で独立して選択的に置換され、すなわち、非置換（「非置換ヘテロシクリル」）であり又は置換（「置換ヘテロシクリル」）される。ある実施形態では、ヘテロシクリル基は、非置換５〜１０員環ヘテロシクリルである。ある実施形態では、ヘテロシクリル基は、置換５〜１０員環ヘテロシクリルである。いくつかの実施形態では、ヘテロシクリル基は、炭素原子の環及び１〜４個のヘテロ原子の環を有する５〜８員環の環系であり、各ヘテロ原子は、窒素、酸素及び硫黄から独立して選択される（「５〜８員環ヘテロシクリル」）。いくつかの実施形態では、ヘテロシクリル基は、炭素原子の環及び１〜４個のヘテロ原子の環を有する５〜６員環の環系であり、各ヘテロ原子は、窒素、酸素及び硫黄から独立して選択される（「５〜６員環ヘテロシクリル」）。いくつかの実施形態では、５〜６員環ヘテロシクリルは、窒素、酸素及び硫黄から選択される１〜３個のヘテロ原子の環を有する。いくつかの実施形態では、５〜６員環ヘテロシクリルは、窒素、酸素及び硫黄から選択される１〜２個のヘテロ原子の環を有する。いくつかの実施形態では、５〜６員環ヘテロシクリルは、窒素、酸素及び硫黄から選択される１個のヘテロ原子の環を有する。１個のヘテロ原子を含む例示の５員環ヘテロシクリル基は、限定することなく、テトラヒドロフラニル、ジヒドロフラニル、テトラヒドロチオフェニル、ジヒドロチオフェニル、フラニル、ピロリジニル、ジヒドロピロリル、チエニル及びピロリル−２，５−ジオンを含む。２個のヘテロ原子を含む例示の５員環ヘテロシクリル基は、限定することなく、ジオキソラニル、オキサスルフラニル、ジスルフラニル、チアゾリル及びオキサゾリジン−２−オンを含む。３個のヘテロ原子を含む例示の５員環ヘテロシクリル基は、限定することなく、トリアゾリニル、オキサジアゾリニル及びチアジアゾリニルを含む。１個のヘテロ原子を含む例示の６員環ヘテロシクリル基は、限定することなく、ピペリジニル、テトラヒドロピラニル、オピラニル、ジヒドロピリジニル、ピリジニル及びチアニルを含む。２個のヘテロ原子を含む例示の６員環ヘテロシクリル基は、限定することなく、ピペラジニル、モルホリニル、ジチアニル、ジオキサニルを含む。２個のヘテロ原子を含む例示の６員環ヘテロシクリル基は、限定することなく、トリアジナニルを含む。１個のヘテロ原子を含む例示の７員環ヘテロシクリル基は、限定することなく、アゼパニル、オキセパニル及びチエパニルを含む。１個のヘテロ原子を含む例示の８員環ヘテロシクリル基は、限定することなく、アゾカニル、オキセカニル及びチオカニルを含む。
【００３５】
「ヘテロアリール」は、芳香族環系で与えられた炭素原子の環及び１〜４個のヘテロ原子の環を有する（例えば、環状アレイにおいて共有される６又は１０個のパイ電子を有する）５〜１０員環の単環式又は二環式の４ｎ＋２芳香族環系のラジカルをいい、各ヘテロ原子は窒素、酸素及び硫黄から独立して選択される（「５〜１０員環ヘテロアリール」）。ヘテロアリール二環式の環系は、一方又は双方の環に１以上のヘテロ原子を含み得る。「ヘテロアリール」は環系を含み、ヘテロアリール環が１以上のカルボシクリル又はヘテロシクリル基と融合し、その結合点がヘテロアリール環上にあり、そのような例では、環員数は引き続きヘテロアリール環系の環員数を示す。「ヘテロアリール」はまた環系を含み、ヘテロアリール環が１以上のアリール基と融合し、その結合点がアリール又はヘテロアリール環のいずれかにあり、そのような例では、環員数は融合された（アリール／ヘテロアリール）環系の環員数を示す。二環式ヘテロアリール基において、１つの環がヘテロ原子を含まず（例えば、インドリル、キノリニル及びカルバゾリルなど）、その結合点がいずれかの環上、すなわち、ヘテロ原子を含む環（例えば、２−インドリル）又はヘテロ原子を含まない環（例えば、５−インドリル）のいずれかにあってもよい。いくつかの実施形態では、ヘテロアリール基は、芳香族環系で与えられた炭素原子の環及び１〜４個のヘテロ原子の環を有する５〜１０員環の芳香族環系であり、各ヘテロ原子は、窒素、酸素及び硫黄から独立して選択される（「５〜１０員環ヘテロアリール」）。いくつかの実施形態では、ヘテロアリール基は、芳香族環系で与えられた炭素原子の環及び１〜４個のヘテロ原子の環を有する５〜８員環の芳香族環系であり、各ヘテロ原子は、窒素、酸素及び硫黄から独立して選択される（「５〜８員環ヘテロアリール」）。いくつかの実施形態では、ヘテロアリール基は、芳香族環系で与えられた炭素原子の環及び１〜４個のヘテロ原子の環を有する５〜６員環の芳香族環系であり、各ヘテロ原子は、窒素、酸素及び硫黄から独立して選択される（「５〜６員環ヘテロアリール」）。いくつかの実施形態では、５〜６員環ヘテロアリールは、窒素、酸素及び硫黄から選択される１〜３個のヘテロ原子の環を有する。いくつかの実施形態では、５〜６員環ヘテロアリールは、窒素、酸素及び硫黄から選択される１〜２個のヘテロ原子の環を有する。いくつかの実施形態では、５〜６員環ヘテロアリールは、窒素、酸素及び硫黄から選択される１個のヘテロ原子の環を有する。特に断りがない限り、ヘテロアリール基の各例は、１以上の置換基で独立して選択的に置換され、すなわち、非置換（「非置換ヘテロアリール」）であり又は置換（「置換ヘテロアリール」）される。ある実施形態では、ヘテロアリール基は、非置換５〜１４員環ヘテロアリールである。ある実施形態では、ヘテロアリール基は、置換５〜１４員環ヘテロアリールである。１個のヘテロ原子を含む例示の５員環ヘテロアリール基は、限定することなく、ピロリル、フラニル及びチオフェニルを含む。２個のヘテロ原子を含む例示の５員環ヘテロアリール基は、限定することなく、イミダゾリル、ピラゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリル及びイソチアゾリルを含む。３個のヘテロ原子を含む例示の５員環ヘテロアリール基は、限定することなく、トリアゾリル、オキサジアゾリル及びチアジアゾリルを含む。４個のヘテロ原子を含む例示の５員環ヘテロアリール基は、限定することなく、テトラゾリルを含む。１個のヘテロ原子を含む例示の６員環ヘテロアリール基は、限定することなく、ピリジニルを含む。２個のヘテロ原子を含む例示の６員環ヘテロアリール基は、限定することなく、ピリダジニル、ピリミジニル及びピラジニルを含む。３又は４個のヘテロ原子を含む例示の６員環ヘテロアリール基は、限定することなく、それぞれトリアジニル及びテトラジニルを含む。１個のヘテロ原子を含む例示の７員環ヘテロアリール基は、限定することなく、アゼピニル、オキセピニル及びチエピニルを含む。例示の５，６−二環式ヘテロアリール基は、限定することなく、インドリル、イソインドリル、インダゾリル、ベンゾトリアゾリル、ベンゾチオフェニル、イソベンゾチオフェニル、ベンゾフラニル、ベンゾイソフラニル、ベンズイミダゾリル、ベンゾオキサゾリル、ベンズイソオキサゾリル、ベンゾオキサジアゾリル、ベンズチアゾリル、ベンズイソチアゾリル、ベンズチアジアゾリル、インドリジニル及びプリニルを含む。例示の６，６−二環式ヘテロアリール基は、限定することなく、ナフチリジニル、プテリジニル、キノリニル、イソキノリニル、シンノリニル、キノキサリニル、フタラジニル及びキナゾリニルを含む。
【００３６】
ここに説明される原子、部位又は基は、明示の断りがない限り、原子価が許す限り、非置換であってもよいし又は置換されてもよい。用語「選択的に置換された」は、置換され又は非置換であることをいう。明示の断りがない限り、基は選択的に置換される。用語「選択的に置換された」は、置換され又は非置換であることをいう。ある実施形態では、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロシクリル及びヘテロアリール基は、選択的に置換される（例えば、「置換」若しくは「非置換」アルキル、「置換」若しくは「非置換」アルケニル、「置換」若しくは「非置換」アルキニル、「置換」若しくは「非置換」アリール、「置換」若しくは「非置換」ヘテロシクリル、又は「置換」若しくは「非置換」ヘテロアリール基）。一般に、用語「置換（された）」は、用語「選択的に」が前に付くか否かに関わらず、基（例えば、炭素又は窒素原子）に存在する少なくとも１つの水素が、許容可能な置換基、例えば、置換が安定な化合物、例えば、転位、環化、脱離又は他の反応などによる自発的な変換を受けない化合物をもたらす置換基で置換されることを意味する。特に断りがない限り、「置換（された）」基は、基の１以上の置換可能な位置に置換基を有し、任意の所与の構造において２以上の位置が置換される場合、置換基は各位置で同一又は異なるいずれかである。用語「置換（された）」は、有機化合物のすべての許容可能な置換基、安定な化合物の形成をもたらすここに説明する置換基のいずれかによる置換を含むものと考えられる。本開示は、安定な化合物に到達するために、いずれか及びすべてのそのような組合せが考えられる。本開示の目的のために、窒素のようなヘテロ原子は、ヘテロ原子の原子価を満たし、安定な部位の形成をもたらす、ここに説明されるような水素置換基及び／又は任意の適切な置換基を有し得る。ある実施形態では、置換基は炭素原子の置換基である。ある実施形態では、置換基は窒素原子の置換基である。ある実施形態では、置換基は酸素原子の置換基である。ある実施形態では、置換基は硫黄原子の置換基である。
【００３７】
本開示で使用するように、用語「Ｃｍａｘ」は、血漿中の活性化合物又は薬物（例えば、ＧＷ５０７４）の最大濃度のことをいうのに対し、用語「Ｔｍａｘ」は、上記活性化合物又は薬物の最大血漿濃度を達成する時間を意味する。用語「ＡＵＣ０−ｔ」は、ゼロから測定可能な薬物濃度の最後の測定時点までの曲線下面積のことをいう。
【００３８】
単数形「ａ」、「ａｎ」及び「ｔｈｅ」は、そうでないことを文脈が明示しない限り、複数の参照を含むものとして使用される。ここで使用する用語「約」は、所与の値又は範囲の１０％、５％、１％又は０．５％内を一般に意味する。あるいは、用語「約」は、当業者によって考慮される場合の平均の許容標準誤差内を意味する。有効な／効果的な実施例以外においても、明示の断りがない限り、ここに開示されるその材料の量、継続時間、温度、動作条件、量の比率又は反射角に対するものなどの数値範囲、量、値及び割合の全ては、いずれの場合においても用語「約」によって変更されるものとして理解されるべきである。したがって、逆のことが示されない限り、本開示及び添付の特許請求の範囲で説明される数値パラメータは、所望のように変化し得る概数である。少なくとも、各数値パラメータは、報告される有効数字の数を考慮してかつ通常の四捨五入手段を適用して少なくとも解釈されるべきである。
【００３９】
ここで使用する用語「治療／処置（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」は、例えば、被検体における腫瘍のサイズを低減する所望の薬理学的及び／又は生理学的効果を得ることを意味する。効果は、疾患若しくはその症状を完全に若しくは部分的に防止する観点では予防的であり、並びに／又は疾患及び／若しくはその疾患に起因する有害な影響の部分的若しくは完全な治癒の観点では治療的となり得る。ここで使用する「治療／処置」は、哺乳類、特にヒトにおける疾患の防止的（例えば、予防的）、治癒的又は一時的な緩和の処置を含み、それに限定されないが、（１）疾患に罹患しやすいが未だにそれを有しているとは診断されていない個人において疾患又は状態（例えば、癌）が発生することの防止的（例えば、予防的）、治癒的又は一時的な緩和の処置、（２）疾患を（例えば、癌細胞の増殖を抑制することによって）阻害すること、又は（３）疾患を軽減すること（例えば、その疾患に関連する症状を軽減すること）を含む。
【００４０】
用語「投与され」、「投与する」又は「投与」は、限定することなく、本発明の薬剤（例えば、化合物又は組成物）を経口的に、静脈内に、筋肉内に、腹腔内に、動脈内に、頭蓋内に、経粘膜的（例えば、吸入及び鼻腔内）に、又は皮下に投与することを含む送達のモードをいうのにここでは互換可能に使用される。好ましい実施形態では、ＧＷ５０７４のアンモニウム塩は、経口投与に適した組成物に処方される。
【００４１】
ここで使用される用語「有効量」は、高血糖症からもたらされる疾患の処置に関して所望の結果を達成するのに必要な期間にわたる用量での有効量のことである。例えば、癌の治療において、癌に関連するいずれかの症状を軽減させ、予防し、遅延させ、抑制し又は停止させる薬剤（すなわち、ＧＷ５０７４のアンモニウム塩）が有効となる。薬剤の有効量は、疾患又は状態を治癒することは要件とされないが、疾患若しくは状態の発症が遅延、妨害若しくは予防され、又は疾患若しくは状態の症状が改善されるように、疾患又は状態に対する処置を与えることになる。具体的な有効又は充分な量は、処置されている特定の状態、患者の肉体的状態（例えば、患者の体重、年齢又は性別）、処置されている哺乳類又は動物の種類、処置の継続期間、（それがある場合には）同時に行われる処置の性質、並びに採用される具体的処方などの要因で変化することになる。有効量は、例えば、活性薬剤の（例えば、グラム、ミリグラム又はマイクログラムを単位とする）一日あたりの合計質量又は体重１キログラムあたりの活性薬剤の重量として表現され得る。有効量は、指定期間を通じて１回、２回又はそれ以上の回数で投与される適切な形態で１又は２以上の用量に分割され得る。また、当業者であれば、本開示の効果的な実施例で説明される動物モデルから決定された用量に基づいて（本開示の化合物のような）医薬品についてのヒト等価用量（ＨＥＤ）を計算できるはずである。例えば、ヒト被検体での使用に対する最大安全用量を推定する際に、米国食品医薬品局（ＦＤＡ）によって発行された工業用ガイダンス「Ｅｓｔｉｍａｔｉｎｇ  ｔｈｅ  Ｍａｘｉｍｕｍ  Ｓａｆｅ  Ｓｔａｒｔｉｎｇ  Ｄｏｓｅ  ｉｎ  Ｉｎｉｔｉａｌ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｔｒｉａｌｓ  ｆｏｒ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ  ｉｎ  Ａｄｕｌｔ  Ｈｅａｌｔｈｙ  Ｖｏｌｕｎｔｅｅｒｓ」に従うことができる。
【００４２】
用語「被検体」又は「患者」は、ここでは互換可能に使用され、本発明の化合物によって処置可能なヒト種を含む哺乳類を意味するものとする。用語「哺乳類」は、ヒト、霊長類、ウサギ、ブタ、ヒツジ及びウシのような飼育動物及び家畜、その他動物園、競技用又はペット用動物並びにマウス及びラットのような齧歯類を含む哺乳網の全てのメンバーのことである。また、用語「被検体」又は「患者」は、ある性別が具体的に示されない限り雄及び雌の両性別をいうものとする。したがって、用語「被検体」又は「患者」は、本開示の処置方法から利益を得ることができる任意の哺乳類からなる。「被検体」又は「患者」の例は、これに限定されないが、ヒト、ラット、マウス、モルモット、サル、ブタ、ヤギ、ウシ、ウマ、イヌ、ネコ、トリ及び家禽を含む。好ましい実施形態では、被検体はヒトである。
【００４３】
ここで使用する用語「担体」は、活性薬剤のビヒクルを形成する任意の不活性物質（粉末又は液体など）を意味する。担体は、一般に、安全で非毒性であり、広義には、充填剤、希釈剤、凝着剤、結合剤、潤滑剤、滑剤、安定化剤、着色剤、湿潤剤、崩壊剤などのような薬学的組成物を調製するのに有用な製薬業において公知の任意の物質も含み得る。
【００４４】
ＩＩ．ＧＷ５０７４のアンモニウム塩
本発明は、一般に、ＧＷ５０７４の新規の薬学的塩に関する。ＧＷ５０４７は酸又は電子供与体であるため、ＧＷ５０４７の所望の薬学的に許容可能な塩は、ＧＷ５０４７を無機塩基（例えば、ＮａＯＨ）又は有機塩基（例えば、第一級、第二級又は第三級アミン）で処理して薬学的に許容可能な塩を形成することにより調製され得る。したがって、本発明は、式（Ｉ）の構造を有するＧＷ５０４７の新規のアンモニウム塩に関し、
【化３】
2021533117.tif 000004
Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は、独立して水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール若しくはヘテロアリールであり、又は
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及び窒素を統合して６員環ヘテロシクリルを形成し、
アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール若しくは６員環ヘテロシクリルは、選択的に、−ＯＨ、−ＮＲａＲｂ及びその組合せからなる群から選択される少なくとも１つの置換基で置換され、Ｒａ及びＲｂは独立して水素、アルキル、アリール又はヘテロアリールである。
【００４５】
式（Ｉ）の化合物は、効果的な実施例において説明される手順によって調製され得る。一般に、式（Ｉ）の化合物は、アミン、好ましくはヒドロキシルで置換されたアミンを懸濁液に添加してＧＷ５０４７を溶解する前に、最初にＧＷ５０４７を極性非プロトン性溶媒（例えば、アセトン、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、Ｎ−メチル−２−ピロリドン（ＮＭＰ）、ジクロロメタン（ＤＣＭ）及びテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）など）又は極性非プロトン性溶媒（例えば、メタノール、エタノール、２−プロパノール及びプロパノールなど）に懸濁することにより得られ得る。結果として得られた混合物を、ＧＷ５０４７の所望のアンモニウム塩が形成されるまで激しく撹拌する。ＧＷ５０４７の本発明のアンモニウム塩の生成に適切なアミンの例は、エタノールアミン（例えば、モノ−、ジ−及び／又はトリ−エタノールアミン）、プロパノールアミン（例えば、１−アミノ−２−プロパノール）、ブタノールアミン（例えば、１−アミノ−２−ブタノール、１−アミノ−３−ブタノール、１−アミノ−４−ブタノール、２−アミノ−１−ブタノール、ヒドロキシルｓｅｃ−ブチルアミン、ヒドロキシルｔｅｒ−ブチルアミン）、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン、エチレンジアミン、ピペラジン、モルホリン、４−（ジメチルアミノ）ピリジン、Ｎ、Ｎ’−ジベンジルエチルジアミン並びにＮ−メチルグルカミンなどを含むが、これらに限定されない。好ましい一実施形態では、十分な量のトリエタノールアミンが、ＧＷ５０４７懸濁液に添加されて対応するＧＷ５０４７のアンモニウム塩を生成する。好ましい他の実施形態では、十分な量のヒドロキシルｔｅｒｔ−ブチルアミンが、ＧＷ５０４７懸濁液に添加されて対応するＧＷ５０４７のアンモニウム塩を生成する。更なる実施形態では、十分な量のピペラジンが、ＧＷ５０４７懸濁液に添加されて対応するＧＷ５０４７のアンモニウム塩を生成する。また更なる実施形態では、十分な量の４−（ジメチルアミノ）ピリジンが、ＧＷ５０４７懸濁液に添加されて対応するＧＷ５０４７のアンモニウム塩を生成する。
【００４６】
本開示のＧＷ５０４７のアンモニウム塩は、０．０１ｍｇ／１００ｍＬから１０００ｍｇ／１００ｍＬ、好ましくは０．１ｍｇ／１００ｍＬから５００ｍｇ／１００ｍＬ、より好ましくは１ｍｇ／１００ｍＬから３００ｍｇ／１００ｍＬの範囲の水溶性を有する。一実施形態では、ＧＷ５０４７のトリエタノールアンモニウム塩は、２．３６ｍｇ／１００ｍＬの水溶性を有する。他の実施形態では、ＧＷ５０４７の４−（ジメチルアミノ）ピリジン塩は、１．５ｍｇ／１００ｍＬの水溶性を有する。更なる実施形態では、ＧＷ５０４７のピペラジン塩は、０．７４ｍｇ／１００ｍＬの水溶性を有する。他の更なる実施形態では、ＧＷ５０４７のエチレンジアミン塩は、１．０ｍｇ／１００ｍＬの水溶性を有する。他の実施形態では、ＧＷ５０４７のモルホリン塩は、０．５７ｍｇ／１００ｍＬの水溶性を有する。また更なる実施形態では、ＧＷ５０４７のＮ−メチルグルカミン塩は、２７５ｍｇ／１００ｍＬの水溶性を有する。
【００４７】
薬物動態（ＰＫ）研究では、活性化合物／薬物の有効性又は生物学的同等性を評価するのに活性化合物又は薬物のＡＵＣ０−ｔが使用されることが多い。本開示によれば、活性化合物（すなわち、ＧＷ５０７４）の血中レベルは、摂取後１２、２４、４８又は７２時間で測定され得る。本開示のいくつかの実施形態によれば、ＧＷ５０４７の本アンモニウム塩は、約０．５時間の平均のＴｍａｘの間に約６４４７ｎｇ／ｍＬの範囲におけるＧＷ５０４７の平均の血中レベルＣｍａｘ及び２４時間後に測定された約７９３６ｎｇ・ｈ／ｍＬの範囲におけるＧＷ５０４７のＡＵＣ０−ｔを提供し得る。他の実施形態では、ＧＷ５０４７の本アンモニウム塩は、約０．５時間の平均のＴｍａｘの間に約６８４４ｎｇ／ｍＬの範囲におけるＧＷ５０４７の平均の血中レベルＣｍａｘ及び２４時間後に測定された約８２５９ｎｇ・ｈ／ｍＬの範囲におけるＧＷ５０４７のＡＵＣ０−ｔを提供し得る。
【００４８】
ＩＩＩ．薬学的キット
本開示の特定の実施形態において、上記の式（Ｉ）の化合物又はＧＷ５０４７のアンモニウム塩は、単独で又はｃ−Ｒａｆ阻害剤（例えば、ソラフェニブ）と組み合わせて使用され、癌、特に細胞死関連プロテインキナーゼ（ＤＡＰＫ）のセリン３０８のリン酸化を有する癌細胞を処置する。
【００４９】
本開示のある実施形態によれば、式（Ｉ）の化合物は単独で胃癌細胞の増殖を抑制し、増殖した胃癌細胞の数を低減することにおいて、既知のｃ−Ｒａｆ阻害剤（例えば、ソラフェニブ）と相乗的に作用し得る。そこで、式（Ｉ）の化合物は、癌がＤＡＰＫのセリン３０８のリン酸化を有する場合に、癌の処置のための任意の既知のｃ−Ｒａｆ阻害剤との追加の薬剤として使用され得る。
【００５０】
そこで、本開示は、癌の処置に対して有用な薬学的なキットにも関する。キットは、ソラフェニブ及び薬学的に許容可能な担体を備える第１の処方並びに上記の式（Ｉ）の化合物及び薬学的に許容可能な担体を含む第２の処方を含む。
【００５１】
本開示のある好ましい実施形態によれば、第２の処方の式（Ｉ）の化合物において、Ｒ１及びＲ２は独立して水素であり、Ｒ３は選択的に少なくとも１つのアミノ又はヒドロキシルで置換されたエチルである。
【００５２】
本開示の更なる好ましい実施形態によれば、第２の処方の式（Ｉ）の化合物において、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は、独立してヒドロキシルで置換されたエチルである。
【００５３】
本開示の更なる好ましい実施形態によれば、第２の処方の式（Ｉ）の化合物において、Ｒ１は水素であり、Ｒ２はメチルであり、Ｒ３は６個のヒドロキシ基（又は１−デオキシソルビトール）で置換されたヘキシルである。
【００５４】
本開示の更なる好ましい実施形態によれば、第２の処方の式（Ｉ）の化合物において、Ｒ１は水素であり、Ｒ２はベンジルであり、Ｒ３は−ＮＨ−ベンジルで置換されたエチルである。
【００５５】
本開示の更なる好ましい実施形態によれば、第２の処方の式（Ｉ）の化合物において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及び窒素が統合されて、ピペラジン、モルホリン又は４−（ジメチルアミノ）ピリジンを形成する。
【００５６】
本開示の第１及び第２の処方は、通常、任意の所望の経路による被検体への投与に適切な投薬形態で提供される。当業者は、本発明における使用に適切な種々の投薬形態に精通している。任意の所与の場合において最適な経路は、治療及び／又は管理されている疾患の性質及び重症度に依存する。例えば、処方は、経口、静脈内、筋肉内、腹腔内、動脈内、頭蓋内、経粘膜（例えば、吸入、口腔内及び鼻腔内）又は皮下投与について処方され得る。好ましくは、処方は経口的に投与される。経口投与に適切な処方の投薬形態は、例えば、タブレット、ピル、顆粒、粉末、溶液、懸濁液、シロップ又はカプセルを含む。タブレット、ピル、顆粒又は粉末のような固体投薬形態を製造する方法として、それは、賦形剤、結合剤又は崩壊剤などのような薬学的に許容可能な担体を使用する従来の技術によって形成され得る。経口投与用の固体投薬形態は、選択的に、浸入コーティングのようなコーティング及びシェル並びに放出の速度を変更するコーティングで分割又は調製され得る。さらに、固体投薬形態のいずれも、当技術分野で既知のいずれかの賦形剤を使用して、ソフト及びハードゼラチンカプセルにカプセル化され得る。
【００５７】
式（Ｉ）の化合物（すなわち、ＧＷ５０４７のアンモニウム塩）又はｃ−Ｒａｆ阻害剤は、経口投与用の液体投薬形態にも処方され得る。適切な処方は、乳濁液、溶液、懸濁液又はシロップを含み、水、グリセロールエステル、アルコール及び植物油などのような当技術分野で一般に使用される希釈剤を使用する従来の技術によって製造され得る。液体処方は、選択的に、湿潤剤、乳化剤及び懸濁剤のような補助剤、甘味料、香味料、着色剤並びに防腐剤を含み得る。液体処方は、また、ソフトゼラチンカプセルに充填されてもよい。例えば、液体は、ＧＷ５０４７のアンモニウム塩若しくはｃ−Ｒａｆ阻害剤を担持する溶液、懸濁液、乳濁液、沈殿物又は他の任意の所望の液体媒体を含み得る。液体は、放出に際してＧＷ５０４７のアンモニウム塩又はｃ−Ｒａｆ阻害剤の溶解度を改善するように設計されてもよいし、放出に際して薬物含有乳濁液又は分散相を形成するように設計されてもよい。そのような技術の例は、関連技術において既知である。ソフトゼラチンカプセルは、必要に応じて、薬物の放出を遅らせるように機能的コーティングでコーティングされ得る。
【００５８】
非経口投与の場合、ＧＷ５０４７のアンモニウム塩又はｃ−Ｒａｆ阻害剤は、静脈内、皮下又は筋肉内投与用の注射可能な形態に処方され得る。注入は、ＧＷ５０４７のアンモニウム塩又はｃ−Ｒａｆ阻害剤を、生理食塩水のような水溶性溶液又はプロピレングリコール、ポリエチレングリコール若しくは植物油（例えば、ゴマ油）のような有機エステルからなる水不溶性溶液に溶解することによって調製され得る。
【００５９】
経皮投与の場合、例えば、軟膏又はクリームとしての投薬形態が採用され得る。軟膏はＧＷ５０４７のアンモニウム塩又はｃ−Ｒａｆ阻害剤を脂肪又は油などと混合することによって生成されることができ、クリームはＧＷ５０４７のアンモニウム塩又はｃ−Ｒａｆ阻害剤を乳化剤と混合することによって生成されることができる。経皮処方は、液体又は粉末処方の形態であり得る。液体処方では、水、塩溶液、リン酸緩衝液及び酢酸緩衝液などが塩基として使用されてもよいし、それは界面活性剤、酸化防止剤、安定化剤、防腐剤又は粘着付与剤も含んでいてもよい。粉末処方では、それは水溶性ポリアクリレート、セルロース低アルキルエステル、ポリエチレングリコール、ポリビニルピロリドン及びアミラーゼなどのような吸水性材料並びにセルロース、デンプン、ガム、植物油又は架橋ポリマーのような非吸水性材料を含み得る。さらに、酸化防止剤、着色剤、防腐剤は、粉末処方に付加され得る。液体又は粉末処方は、スプレー装置の使用によって投与され得る。
【００６０】
直腸投与の場合、それはソフトゼラチンカプセルを使用する坐剤の形態であり得る。
【００６１】
鼻口又は口腔を介する吸入の場合、ＧＷ５０４７のアンモニウム塩（又はｃ−Ｒａｆ阻害剤）及びこの目的のために一般に許容されている薬学的賦形剤を含む溶液又は懸濁液は、吸入エアゾールスプレーを介して吸入される。あるいは、粉末の形態でのＧＷ５０４７のアンモニウム塩又はｃ−Ｒａｆ阻害剤は、肺との粉末の直接接触を可能にする吸入器を介して投与され得る。これらの処方に、必要に応じて、等張剤、防腐剤、分散液又は安定化剤のような薬学的に許容可能な担体が添加され得る。さらに、必要に応じて、これらの処方は、濾過によって、又は熱若しくは放射線の処理によって滅菌され得る。
【００６２】
一般に、ＧＷ５０４７のアンモニウム塩又はｃ−Ｒａｆ阻害剤を含む処方は、各日単回又は２、３、４、５若しくは６回以上の分割用量で被検体に投与される。あるいは、用量は、２、３、４、５又は６日以上に１回送達されてもよい。好ましい一実施形態では、処方は、１日に１回投与される。他の実施形態では、処方は、１日に２回投与される。
【００６３】
ＩＶ．処置の方法
癌を有する被検体を処置する方法も、本開示に包含される。方法は、
（ａ）被検体の癌細胞が細胞死関連プロテインキナーゼ（ＤＡＰＫ）のセリン３０８のリン酸化を有するか検出するステップ、並びに
（ｂ）ステップ（ａ）の検出に基づいて、
癌細胞におけるＤＡＰＫのセリン３０８のリン酸化が検出された場合に、（ｉ）有効量のソラフェニブ及び（ｉｉ）有効量の式（Ｉ）の化合物を被検体に投与することにより、被検体を処置するステップ
を含む。
【００６４】
式（Ｉ）の化合物（すなわち、ＧＷ５０４７のアンモニウム塩）は、好ましくは、本開示の効果的な実施例で説明される方法に従って調製される。
【００６５】
本開示の実施形態によれば、式（Ｉ）の化合物は、
【化４】
2021533117.tif 000005
の構造を有し、
Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は、独立して水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール若しくはヘテロアリールであり、又は
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及び窒素を統合して６員環ヘテロシクリルを形成し、
アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール若しくは６員環ヘテロシクリルは、選択的に、−ＯＨ、−ＮＲａＲｂ及びその組合せからなる群から選択される少なくとも１つの置換基で置換され、Ｒａ及びＲｂは独立して水素、アルキル、アリール又はヘテロアリールである。
【００６６】
本開示の好ましい一実施形態によれば、式（Ｉ）において、Ｒ１及びＲ２は独立して水素であり、Ｒ３は、選択的に少なくとも１つのアミノ又はヒドロキシルで置換されたエチルである。
【００６７】
本開示の更なる好ましい実施形態によれば、第２の処方の式（Ｉ）の化合物において、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は、独立してヒドロキシルで置換されたエチルである。
【００６８】
本開示の更なる好ましい実施形態によれば、第２の処方の式（Ｉ）の化合物において、Ｒ１は水素であり、Ｒ２はメチルであり、Ｒ３は６個のヒドロキシ基で置換されたヘキシルである。
【００６９】
本開示の更なる好ましい実施形態によれば、第２の処方の式（Ｉ）の化合物において、Ｒ１は水素であり、Ｒ２はベンジルであり、Ｒ３は−ＮＨ−ベンジルで置換されたエチルである。
【００７０】
本開示の更なる好ましい実施形態によれば、第２の処方の式（Ｉ）の化合物において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及び窒素が統合されて、ピペラジン、モルホリン又は４−（ジメチルアミノ）ピリジンを形成する。
【００７１】
好ましい実施形態によれば、式（Ｉ）の化合物は、癌細胞がＤＡＰＫのＳｅｒ３０８のリン酸化を有する場合に、被検体での癌細胞の成長を抑制するように、ｃ−Ｒａｆ阻害剤とともに投与される。任意の既知のｃ−Ｒａｆ阻害剤が使用され得る。好ましくは、ｃ−Ｒａｆ阻害剤は、ソラフェニブ、ＺＭ３３６３７２、ＴＫ−６３２、ＮＶＰ−ＢＨＧ７１２又はその組合せである。
【００７２】
本方法によって処置可能な例示的な癌は、腎細胞癌、腎芽細胞腫、移行上皮癌、前立腺癌、乳癌、肺癌、子宮頸癌、口腔癌、神経膠腫、尿路上皮細胞癌及び黒色腫を含むが、これに限定されない。
【００７３】
本開示の実施形態によれば、式（Ｉ）の化合物及びｃ−Ｒａｆ阻害剤は、それぞれ、そのような処置を必要とする被検体に有効な投与量で投与され得る。ある実施形態では、投与される量は、０．０１、０．０２、０．０３、０．０４、０．０５、０．０６、０．０７、０．０８、０．０９、０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９及び１００ｍｇ／Ｋｇなどの０．０１〜１００ｍｇ／Ｋｇの範囲であり、好ましくは、式（Ｉ）の化合物及びｃ−Ｒａｆ阻害剤は、それぞれ、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０ｍｇ／Ｋｇなどの約０．５〜５０ｍｇ／Ｋｇの量で投与され、より好ましくは、式（Ｉ）の化合物及びｃ−Ｒａｆ阻害剤は、それぞれ、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９及び２０ｍｇ／Ｋｇなどの約１〜２０ｍｇ／Ｋｇの量で投与される。本開示の実施形態によれば、式（Ｉ）の化合物及びｃ−Ｒａｆ阻害剤は、経口、静脈内、筋肉内、腹腔内、動脈内、頭蓋内及び皮下経路を含むがこれに限定されない任意の適切な経路を介して独立して投与され得る。好ましい実施形態では、有効量の式（Ｉ）の化合物又はｃ−Ｒａｆ阻害剤は、それを必要とする被検体に経口的に投与される。
【００７４】
ここで、本発明を以下の実施例を参照してさらに詳細に説明する。ただし、本発明は特定の実施例に限定されないことが理解されるべきである。
【実施例】
【００７５】
材料及び方法
細胞株及び細胞培養
胃癌細胞株ＳＵＮ−１を、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ；バージニア州、マナサス、米国）から購入し、１．５ｇ／Ｌの重炭酸ナトリウム、１０％のウシ胎児血清（ＦＢＳ）、１．０％の抗生物質−抗真菌剤、Ｌ−グルタミン（２．０×１０−３Ｍ）及び１．０％の非必須アミノ酸を添加したＲｏｓｗｅｌｌ  Ｐａｒｋ  Ｍｅｍｏｒｉａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ−１６４０（ＲＰＭＩ−１６４０）で維持した。
【００７６】
溶解
サイズ０のゼラチンカプセルに、試験化合物（２０ｍｇ）及びＰＲＯＳＯＬＶ（登録商標）ＳＭＣＣ９０（１００ｍｇ）を充填して蓋をした。充填したカプセルを激しく振り、内容物を完全に混合した。そして、カプセルを３％のＳＬＳバッファー（４０ｍＬ）を含む５０ｍＬのコニカルバイアルに滴下した。そして、コニカルバイアルを、室温で５０ｒｐｍに設定された回転速度で、水平から約６０度の角度を付けたローターに固定した。各サンプリング時点で、回転を停止し、０．５ｍＬの培地を取り除き、バイアルに再度蓋をして、回転を再開した。サンプリングした培地を３０００ｒｐｍで２分間遠心分離し、５０μＬの母液を等分し、１００μＬの１ＮのＮａＯＨで希釈した。希釈したサンプルの３５５ｎｍでの吸光度をプレートリーダーで測定した。
【００７７】
動物
約６〜８週齢のＢ６マウス（国立実験動物センター、台湾、台北）は、本研究で使用された。すべての動物は、温度（２０〜２４℃）、湿度（５０〜８０％）及び１２時間／１２時間の明／暗サイクル（午前７：００に点灯）で制御され、餌と水が適宜提供された動物施設で飼育された。動物を取り扱う実験手順は、ＡＡＡＬＡＣ認定の実験動物施設において「Ｇｕｉｄｅ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｃａｒｅ  ａｎｄ  Ｕｓｅ  ｏｆ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ａｎｉｍａｌｓ：Ｅｉｇｈｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ」（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ａｃａｄｅｍｉｅｓ  Ｐｒｅｓｓ、ワシントンＤ．Ｃ．、２０１１年）に記載される関連規制に準拠した。
【００７８】
細胞生存率アッセイ
ＭＴＳ細胞増殖アッセイキット（Ａｂｃａｍ、英国、ケンブリッジ）を使用して細胞生存率を評価した。簡潔には、ＳＮＵ−１細胞を９６ウェルプレートの各ウェルに８０００細胞／ウェルの密度で播種し、３７℃で一晩インキュベートした。そして、細胞を試験薬物で４８時間又は７２時間３７℃で処置した。そして、各ウェルに２０μｌのＭＴＳを加え、３７℃で３時間インキュベートした。細胞生存率を、マイクロプレートリーダーで４９０ｎｍでの吸光度によって測定した。
【００７９】
統計
結果を平均±平均の標準誤差（ＳＥＭ）として表した。対応のないスチューデントのｔ検定又は一元配置分散分析（ＡＮＯＶＡ）を、物質処置とビヒクル処置のグループ間の統計的比較のために用いた。差は、ビヒクルコントロールに対してＰ＜０．０５で有意であると見なされる。
比較例１
【００８０】
比較例１  ＧＷ５０７４のカリウム又はナトリウム塩の調製
１．１  ＧＷ５０７４のカリウム塩
ＧＷ５０７４のカリウム塩は、ＫＯＨがＧＷ５０７４懸濁液に添加されることを除き、実施例１．１で説明する一般的な手順に従って調製された。
1H NMR (400 MHz, D6-DMSO) (δ10.42(app,d,1H), 8.74(2H,s), 7.98-7.81(app,t,2H), 7.53-7.31(2H,m),
6.64(1H,2xd))
融点：２９３℃
溶解度：０．５ｍｇ／１００ｍＬ
【００８１】
１．２  ＧＷ５０７４のナトリウム塩（ＭＧ−Ａ１）
ＧＷ５０７４のナトリウム塩は、ＮａＯＨがＧＷ５０７４懸濁液に添加されることを除き、実施例１．１で説明する一般的な手順に従って調製された。
1H NMR (400 MHz, D6-DMSO) (δ10.34(app,d,1H), 8.742(1H,s), 8.05-7.76(app,t,2H), 7.48-7.27(2H,m),
6.63(1H,2xd))
融点：３２７℃
溶解度：０．５ｍｇ／１００ｍＬ
【実施例１】
【００８２】
実施例１  ＧＷ５０７４のアンモニウム塩の調製
１．１  ＧＷ５０７５の２−アミノ−２−メチルプロピルアミン塩（ＭＧ−Ａ２）
室温のアセトン（２０ｍＬ）中のＧＷ５０７４（２．０５ｇ）の懸濁液に、２−アミノ−２−メチルプロパノール（０．４１ｍＬ、１．１当量）を添加した。結果として得られる透明な赤色の溶液を室温で１６時間撹拌し、そしてジイソプロピルエーテル（６０ｍＬ）で処置した。得られたオレンジ色の懸濁液を３０分間激しく撹拌し、そして真空で濾過した。濾過ケーキを大量のジイソプロピルエーテルでリンスし、室温で真空乾燥して、明るいオレンジ色の固体（２．０３ｇ）として所望の生成物を得た。
1H NMR (400 MHz, D6-DMSO) (δ10.33 (1H,s), 8.72(2H,s), 7.85 (1H,s), 7.64 (2H,s), 7.48(1H,s), 7.28(1H,d), 6.57 (1H,t), 5.48(1H,s), 2.08(2H,d), 1.11(6H,m))
融点：２４７℃。
溶解度：０．１９ｍｇ／１００ｍＬ
【００８３】
１．２  ＧＷ５０７５のトリエタノールアミン塩（ＭＧ−Ａ３）
ＧＷ５０７４のアンモニウム塩は、トリエタノールアミンがＧＷ５０７４懸濁液に添加されることを除き、実施例１．１で説明する一般的な手順に従って調製された。
1H NMR (400 MHz, D6-DMSO) (δ10.42 (1H,s), 8.73(2H,s), 7.87 (1H,s), 7.53 (1H,s), 7.32 (1H,q), 6.32 (1H,d), 5.01 (3H,s), 3.32(6H, s), 3.08(6H, s))
融点：１０３℃
溶解度：２．３６ｍｇ／１００ｍＬ
【００８４】
１．３  ＧＷ５０７５のジエチルアミン塩
ＧＷ５０７４のアンモニウム塩は、ジエチルアミンがＧＷ５０７４懸濁液に添加されることを除き、実施例１．１で説明する一般的な手順に従って調製された。
1H NMR (400 MHz, D6-DMSO) (δ10.35 (1H,s), 8.73(2H,s), 8.25(2H,s), 7.85 (1H,d), 7.49(1H,s), 7.29(1H,q), 6.58(1H,d), 2.92(4H,m), 1.15(6H, t))
融点：２５０℃
溶解度：０．１２ｍｇ／１００ｍＬ
【００８５】
１．４  ＧＷ５０７５のＮ−メチルグルカミン塩
ＧＷ５０７４のアンモニウム塩は、Ｎ−メチルグルカミンがＧＷ５０７４懸濁液に添加されることを除き、実施例１．１で説明する一般的な手順に従って調製された。
1H NMR (400 MHz, D6-DMSO) (δ10.38 (1H,s), 8.73 (1H,s), 8.05-7.85 (1H, 2xs), 7.76(1H,s), 7.49-7.41(1H,m), 7.33(1H, t), 6.68(1H,q), 3.80(2H,m), 2.87(5H,m))
融点：１７５℃
溶解度：２７５ｍｇ／１００ｍＬ
【００８６】
１．５  ＧＷ５０７５のＮ、Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン塩
ＧＷ５０７４のアンモニウム塩は、Ｎ、Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミンがＧＷ５０７４懸濁液に添加されることを除き、実施例１．１で説明する一般的な手順に従って調製された。
1H NMR (400 MHz, D6-DMSO) (δ10.53 (1H,s), 8.76 (2H,s), 7.59 (app, d,1H), 7.62(1H,s), 7.38(11H,m), 6.62(1H,d), 3.99(4H,s), 2.96(4H,s))
融点：２１５℃
溶解度：＜０．０２ｍｇ／１００ｍＬ
【００８７】
１．６  ＧＷ５０７５のピペラジン塩
ＧＷ５０７４のアンモニウム塩は、ピペラジンがＧＷ５０７４懸濁液に添加されることを除き、実施例１．１で説明する一般的な手順に従って調製された。
1H NMR (400 MHz, D6-DMSO) (δ10.41 (1H,s), 8.05 (2H,s), 7.815 (2H, 2xs), 7.40(2H,4xs), 6.66(1H,2xd), 2.88(8H,s))
融点：２４４℃
溶解度：０．７４ｍｇ／１００ｍＬ
【００８８】
１．７  ＧＷ５０７５の４−（ジメチルアミノ）ピリジン塩
ＧＷ５０７４のアンモニウム塩は、４−（ジメチルアミノ）ピリジンがＧＷ５０７４懸濁液に添加されることを除き、実施例１．１で説明する一般的な手順に従って調製された。
1H NMR (400 MHz, D6-DMSO) (δ10.40 (1H,s), 8.74 (2H,s), 8.19(2H,d), 7.87 (app,t,2H), 7.53 (1H, s), 7.31(1H,d), 6.90(2H,d), 6.59(1H,d), 3.13(6H,s)
融点：２４２℃
溶解度：１．５ｍｇ／１００ｍＬ
【００８９】
１．８  ＧＷ５０７５のモルホリン塩
ＧＷ５０７４のアンモニウム塩は、モルホリンがＧＷ５０７４懸濁液に添加されることを除き、実施例１．１で説明する一般的な手順に従って調製された。
1H NMR (400 MHz, D6-DMSO) (δ10.40(app,d,1H), 8.02 (1H,s), 7.82 (app,d,1H), 7.75-7.35(2H,m), 6.63(1H,2xd), 3.74(4H,q), 2.49(4H,m))
融点：２６６℃
溶解度：０．５７ｍｇ／１００ｍＬ
【００９０】
１．９  ＧＷ５０７５のトリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン塩
ＧＷ５０７４のアンモニウム塩は、トリス塩基（トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン）がＧＷ５０７４懸濁液に添加されることを除き、実施例１．１で説明される一般的な手順に従って調製された。
1H NMR (400 MHz, D6-DMSO) (δ10.35(1H,s), 8.72(1H,s), 8.05-7.76 (app,t,2H), 7.29(2H,m), 6.62(1H,q), 5.71(2H,s), 4.87(3H,s), 3.35(6H,d))
融点：１４２℃
溶解度：＜０．０２ｍｇ／１００ｍＬ
【００９１】
１．１０  ＧＷ５０７５のエチレンジアミン塩
ＧＷ５０７４のアンモニウム塩は、エチレンジアミンがＧＷ５０７４懸濁液に添加されることを除き、実施例１．１で説明する一般的な手順に従って調製された。
1H NMR (400 MHz, D6-DMSO) (δ10.37(1H,s), 8.73(2H,s), 7.85(1H,s), 7.50(1H,s), 7.29(1H,q), 6.59(1H,2xd), 3.36(4H,s))
融点：１８５℃
溶解度：１ｍｇ／１００ｍＬ
【実施例２】
【００９２】
実施例２  実施例１のＧＷ５０７４のアンモニウム塩の特性評価
実施例１のＧＷ５０７４のアンモニウム塩の生物活性を検証するために、他の細胞増殖阻害剤−ソラフェニブの添加あり又は添加なしでの細胞増殖に対するそれらの効果を、製造業者のプロトコルに従ってＭＴＳ細胞増殖アッセイキットを用いて調査した。結果を図１Ａ及び１Ｂに示す。
【００９３】
図１Ａに示すように、胃癌細胞（ＳＥＴＮ−１細胞）をソラフェニブ（５ｍＭ）、ＧＷ５０７４（１０ｍＭ）、ＭＧ−Ａ１（ＧＷ５０７４のナトリウム塩）（１０ｍＭ）、ＭＧ−Ａ２（１０ｍＭ）又はＭＧ−Ａ３（１０ｍＭ）で４８時間処置することによって、ＳＵＮ−１細胞の成長のわずかな抑制（コントロールと比較して約１０〜２０％の阻害）を結果としてもたらしたが、ＳＵＮ−１細胞が薬物との組合せ（ＧＷ５０７４、ＭＧ−Ａ１、ＭＧ−Ａ２又はＭＧ−Ａ３と組み合わせたソラフェニブ）で処置された場合には、抑制の程度は、コントロールの程度と比較して約５５〜６０％の阻害まで上昇し得る。
【００９４】
細胞が試験物質で７２時間処置された場合には、成長阻害がより大きかった。図１Ｂに示すように、約４０〜６０％の成長阻害が単独のソラフェニブ、ＧＷ５０７４、ＭＧ−Ａ１、ＭＧ−Ａ２又はＭＧ−Ａ３によって達成され、約７０％の成長阻害は、細胞が薬剤との組合せ（すなわち、ソラフェニブと、ＧＷ５０７４、ＭＧ−Ａ１、ＭＧ−Ａ２又はＭＧ−Ａ３との組合せ）で処置された場合に達成された。
【実施例３】
【００９５】
実施例３  実施例１のＧＷ５０７４のアンモニウム塩のパイロット薬物動態（ＰＫ）研究
パイロットＰＫ研究をマウスで実施した。各マウスは、陽性コントロール処方（ＧＷ５０７４）又は実施例１．１及び１．２のそれぞれのアンモニウム塩のいずれかの単回用量の投薬治療を受け、そして各試験被検体でのＧＷ５０７４のＰＫ特性が分析及び記録された。
【００９６】
マウスは、投薬前に８時間絶食した。それらをＧＷ５０７４グループ、ＭＧ−Ａ２（すなわち、実施例１．１のＧＷ５０７４のアンモニウム塩）グループ及びＭＧ−Ａ３（すなわち、実施例１．２のＧＷ５０７４のアンモニウム塩）グループである３つのグループにランダムに割当てた。各用量（４０ｍｇ／Ｋｇ）を、活性化合物（ＧＷ５０７４又はＧＷ５０７４の塩）を４：１：５の体積比のＳＯＬＵＴＯＬ（商標）（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ、米国、ミズーリ州、セントルイス）、水及びエタノールからなる溶液に溶解することによって調製した。血液サンプルを、事前に指定された時点で尾静脈から採取した。各サンプルを８０％のエタノールで３０分間抽出し、０．２２μｍのＰＶＤＦフィルターを介して個別に濾過し、そしてＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳに供した。
【００９７】
最大血漿中濃度（Ｃｍａｘ）、ピーク濃度に到達するまでの時間（Ｔｍａｘ）、血漿薬剤濃度が半減するのに必要な時間（Ｔ１／２）及びゼロから最後に測定された時点までの時間に対する血漿中濃度曲線下面積（ＡＵＣ０−ｔ）を含むＰＫ特性を、薬剤投与の直前（０時間）並びに投与後０．５、１、２、４、８及び２４時間に評価した。それにより得られた各グループのＧＷ５０７４のＰＫ特性を表１にまとめる。
【００９８】
表１  マウスにおけるＧＷ５０７４、ＭＧ−Ａ２及びＭＧ−Ａ３のＰＫ特性
【表１】
2021533117.tif 000006
【００９９】
表１の結果は、ＧＷ５０７４のアンモニウム塩（ＭＧ−Ａ２又はＭＧ−Ａ３のいずれか）がピーク濃度に到達するのに必要とされる時間はコントロールのＧＷ５０７４のものと同一であるが、最大濃度（Ｃｍａｘ）はＭＧ−Ａ２又はＭＧ−Ａ３の塩の形態についてはより高くなり、したがって、血漿薬剤濃度が半減するには非常に長く時間がかかることが明らかとなり、ＧＷ５０７４のアンモニウム塩（ＭＧ−Ａ２又はＭＧ−Ａ３のいずれか）が、コントロールのＧＷ５０７４と比較して、生体内において比較的安定し又は分解されにくいことを示した。
【０１００】
実施形態の上記説明は例示のみのために与えられ、種々の変形が当業者によってなされ得ることが理解されるはずである。上記仕様、実施例及びデータは、発明の例示的実施形態の構造及び使用の完全な説明を与える。発明の種々の実施形態がある程度の特殊性で又は１以上の個別の実施形態を参照して上述されたが、当業者であれば、本発明の趣旨又は範囲から逸脱することなく開示の実施形態に対して多数の変更を行うことができるはずである。
【図１（Ａ）】
2021533117.tif 000008
【図１（Ｂ）】
2021533117.tif 000009
【手続補正書】
【提出日】令和3年3月11日(2021.3.11)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）の化合物であって、
【化１】
2021533117.tif 000010
Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は、独立して水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール若しくはヘテロアリールであり、又は
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及び窒素を統合して６員環ヘテロシクリルを形成し、
前記アルキル、前記アルケニル、前記アルキニル、前記アリール、前記ヘテロアリール若しくは前記６員環ヘテロシクリルは、選択的に、−ＯＨ、−ＮＲａＲｂ及びその組合せからなる群から選択される少なくとも１つの置換基で置換され、Ｒａ及びＲｂは独立して水素、アルキル、アリール又はヘテロアリールである、化合物。
【請求項２】
前記式（Ｉ）において、Ｒ１及びＲ２は独立して水素であり、Ｒ３は少なくとも１つのヒドロキシルで置換されたターシャリーブチルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
前記式（Ｉ）において、Ｒ１及びＲ２は独立して水素であり、Ｒ３は選択的に少なくとも１つのアミノ又はヒドロキシで置換されたエチルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
前記式（Ｉ）において、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は独立してヒドロキシルで置換されたエチルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
前記式（Ｉ）において、Ｒ１は水素であり、Ｒ２はメチルであり、Ｒ３は６個のヒドロキシ基で置換されたヘキシルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
前記式（Ｉ）において、Ｒ１は水素であり、Ｒ２はベンジルであり、Ｒ３は−ＮＨ−ベンジルで置換されたエチルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項７】
前記式（Ｉ）において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及び窒素が統合されて、ピペラジン、モルホリン又は４−（ジメチルアミノ）ピリジンを形成する、請求項１に記載の化合物。
【請求項８】
癌を治療するための薬学的キットであって
ソラフェニブ及び薬学的に許容可能な担体を備える第１の処方と、
請求項１に記載の化合物及び薬学的に許容可能な担体を備える第２の処方と、
を備える薬学的キット。
【請求項９】
前記第２の処方の前記式（Ｉ）の化合物において、Ｒ１及びＲ２は独立して水素であり、Ｒ３は少なくとも１つのヒドロキシルで置換されたターシャリーブチルである、請求項８に記載の薬学的キット。
【請求項１０】
前記第２の処方の前記式（Ｉ）の化合物において、Ｒ１及びＲ２は独立して水素であり、Ｒ３は選択的に少なくとも１つのアミノ又はヒドロキシで置換されたエチルである、請求項８に記載の薬学的キット。
【請求項１１】
前記第２の処方の前記式（Ｉ）の化合物において、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は独立してヒドロキシルで置換されたエチルである、請求項８に記載の薬学的キット。
【請求項１２】
前記第２の処方の前記式（Ｉ）の化合物において、Ｒ１は水素であり、Ｒ２はメチルであり、Ｒ３は６個のヒドロキシ基で置換されたヘキシルである、請求項８に記載の薬学的キット。
【請求項１３】
前記第２の処方の前記式（Ｉ）の化合物において、Ｒ１は水素であり、Ｒ２はベンジルであり、Ｒ３は−ＮＨ−ベンジルで置換されたエチルである、請求項８に記載の薬学的キット。
【請求項１４】
前記第２の処方の前記式（Ｉ）の化合物において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及び窒素が統合されて、ピペラジン、モルホリン又は４−（ジメチルアミノ）ピリジンを形成する、請求項８に記載の薬学的キット。
【請求項１５】
前記癌が細胞死関連プロテインキナーゼ（ＤＡＰＫ）のセリン３０８のリン酸化を有し；前記癌が腎細胞癌、腎芽細胞腫、移行上皮癌、前立腺癌、乳癌、肺癌、子宮頸癌、口腔癌、神経膠腫、尿路上皮細胞癌及び黒色腫からなる群から選択される、請求項８に記載の薬学的キット。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００１
【補正方法】削除
【補正の内容】
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２３
【補正方法】削除
【補正の内容】
【国際調査報告】
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