(57)【要約】（Ｅ）−３−（（Ｒ）−４−（（（Ｒ）−６−（２−クロロ−４−フルオロフェニル）−５−（メトキシカルボニル）−２−（チアゾール−２−イル）−３，６−ジヒドロピリミジン−４−イル）メチル）モルホリン−２−イル）アクリル酸の固体形態、その調製方法、それを含む医薬組成物、及びウイルス性疾患を予防又は治療する薬物の調製におけるその使用を開示する。【選択図】  図１
2021523880.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
結晶形態ＡのＸ線粉末回折パターンが、回折角８．７±０．２°、１７．５±０．２°、１９．３±０．２°、２０．３±０．２°及び２１．４±０．２°で特性ピークを有することを特徴とする、式（Ｉ）の化合物の結晶形態Ａ。
【化１】
2021523880.tif 000020
【請求項２】
結晶形態ＡのＸ線粉末回折パターンが、回折角８．７±０．２°、１６．０±０．２°、１７．５±０．２°、１７．８±０．２°、１９．３±０．２°、２０．３±０．２°、２１．４±０．２°、２２．３±０．２°及び２３．１±０．２°で特性ピークを有し、好ましくは結晶形態ＡのＸ線粉末回折パターンが図１に示すとおりであることを特徴とする、請求項１に記載の結晶形態Ａ。
【請求項３】
式（Ｉ）の化合物の結晶形態ＡのＤＳＣ図における吸熱ピークが１７３±２℃で現れ、好ましくは結晶形態ＡのＤＳＣ図が図２に示すとおりであることを特徴とする、請求項１又は２に記載の結晶形態Ａ。
【請求項４】
式（Ｉ）の化合物の結晶形態Ａが、ＴＧＡ図に従って１９０±２℃で分解し始め、好ましくは結晶形態ＡのＴＧＡ図が図３に示すとおりであることを特徴とする、請求項１又は２に記載の結晶形態Ａ。
【請求項５】
遅い蒸発法、懸濁液撹拌法、浸透法又は再結晶法であることを特徴とする、請求項１〜４のいずれか一項に記載の式（Ｉ）の化合物の結晶形態Ａを調製する方法。
【請求項６】
前記遅い蒸発法が、以下のステップ：式（Ｉ）の化合物を第１の適切な溶媒中で溶解させて、透明な溶液を形成するステップ、次いでこの溶液を室温で放置するステップ、前記溶媒を蒸発させ、除去するステップ、及び固体を収集して結晶形態Ａを得るステップを含むことを特徴とする、請求項５に記載の結晶形態Ａを調製する方法。
【請求項７】
前記第１の適切な溶媒が、メタノール、エタノール、ｎ−プロパノール、イソプロパノール、ｎ−ブタノール、アセトン、ブタノン、酢酸エチル、酢酸ブチル、酢酸イソプロピル、炭酸ジメチル、テトラヒドロフラン、ジクロロメタン、クロロホルム、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル、アセトニトリル、アニソール、トルエン及びジエチルエーテルからなる群から選択されるものの１種又は複数であり、前記第１の適切な溶媒が式（Ｉ）の化合物の透明な溶液を形成することができる量で使用されることを特徴とする、請求項６に記載の結晶形態Ａを調製する方法。
【請求項８】
前記第１の適切な溶媒が溶媒Ａと溶媒Ｂとの混合溶媒であり、前記溶媒Ａがアセトン、テトラヒドロフラン、酢酸エチル、アセトニトリル、トルエン、ジクロロメタン、水及びメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルからなる群から選択されるものの１種又は複数であり、前記溶媒Ｂがメタノール、アセトン、テトラヒドロフラン、酢酸エチル、アセトニトリル、トルエン及びジクロロメタンからなる群から選択されるものの１種又は複数であり、
好ましくは、前記溶媒Ａの前記溶媒Ｂに対する体積比が１：２〜２：１、好ましくは、溶媒Ａの溶媒Ｂに対する体積比が１：１である
ことを特徴とする、請求項６に記載の結晶形態Ａを調製する方法。
【請求項９】
前記再結晶法が、以下のステップ：式（Ｉ）の化合物を第２の適切な溶媒中で加熱し撹拌して透明な溶液を形成するステップ、これを室温まで徐々に冷却し、次いで濾過するステップ、及び固体を収集して結晶形態Ａを得るステップを含み、
好ましくは、前記第２の適切な溶媒がイソプロパノール、アセトニトリル、トルエン及びｎ−プロパノールからなる群から選択され、好ましくは、式（Ｉ）の化合物の第２の適切な溶媒に対する重量／体積比（ｇ／ｍｌ）が１：（５〜１０）であり、
代わりに、前記第２の適切な溶媒がジエチルエーテルであり、式（Ｉ）の化合物のジエチルエーテルに対する重量／体積比（ｇ／ｍｌ）が１：６０である
ことを特徴とする、請求項５に記載の結晶形態Ａを調製する方法。
【請求項１０】
前記懸濁液撹拌法が、以下のステップ：式（Ｉ）の化合物又はそのアモルファス形態を、第３の適切な溶媒中に分散させ、懸濁させるステップ、次いで室温又は高温条件下で懸濁液を撹拌するステップ、及び固体を収集して結晶形態Ａを得るステップを含み、
好ましくは、前記第３の適切な溶媒がエタノール、ｎ−プロパノール、ｎ−ブタノール、ジエチルエーテル、イソプロピルエーテル、アセトニトリル、トルエン、ｎ−ヘキサン、ｎ−ヘプタン、シクロヘキサン、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル、水及び石油エーテルからなる群から選択されるものの１種又は複数であり、好ましくは、前記第３の適切な溶媒が溶質をその中で懸濁させることができる量で使用され、好ましくは、前記高温条件が６０℃である
ことを特徴とする、請求項５に記載の結晶形態Ａを調製する方法。
【請求項１１】
前記浸透法が、以下のステップ：式（Ｉ）の化合物を容器Ａに入れるステップ、適切な量の第４の適切な溶媒を含有する容器Ｂに、開放容器Ａを入れるステップ、容器Ｂを密封するステップ、容器Ｂを室温で放置するステップ、及び固体を収集して結晶形態Ａを得るステップを含み、
好ましくは、前記第４の適切な溶媒がメタノール、エタノール、酢酸イソプロピル、ｎ−ヘキサン、アセトニトリル、ジエチルエーテル、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル及びトルエンからなる群から選択されるものの１種又は複数であり、好ましくは、放置する時間が８日間以上である
ことを特徴とする、請求項５に記載の結晶形態Ａを調製する方法。
【請求項１２】
前記遅い蒸発法が、以下のステップ：式（Ｉ）の化合物を溶媒Ａに溶解させて透明な溶液を形成するステップ、溶媒Ｂを添加して混合するステップ、次いでその混合物を室温で放置するステップ、前記溶媒を蒸発させ、除去するステップ、及び固体を収集して結晶形態Ａを得るステップを含み、
好ましくは、前記溶媒Ａがメタノール、アセトン、テトラヒドロフラン、酢酸エチル、アセトニトリル、トルエン、ジクロロメタン、水及びメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルからなる群から選択されるものの１種又は複数であり、前記溶媒Ｂがメタノール、アセトン、テトラヒドロフラン、酢酸エチル、アセトニトリル、トルエン、ジクロロメタン及び水からなる群から選択されるものの１種又は複数であり、
好ましくは前記溶媒Ａの前記溶媒Ｂに対する体積比が１：２〜２：１であり、好ましくは前記溶媒Ａの前記溶媒Ｂに対する体積比が１：１である
ことを特徴とする、請求項５に記載の結晶形態Ａを調製する方法。
【請求項１３】
以下のステップ：式（Ｉ）の化合物を第５の適切な溶媒に溶解させて透明な溶液を形成し、その溶液を減圧下で回転蒸発させてアモルファス形態を得るステップを含み、
好ましくは、前記第５の適切な溶媒がジクロロメタン及びクロロホルムからなる群から選択されるものの１種又は複数であり、好ましくは水浴温度が４０〜５０℃であり、より好ましくは４５℃である
ことを特徴とする、式（Ｉ）の化合物のアモルファス形態を調製する方法。
【請求項１４】
請求項１〜４のいずれか一項に記載の結晶形態Ａ及び／又は請求項１３に記載の方法により調製されたアモルファス形態、並びに１種若しくは複数の薬学的に許容できる担体又は１種若しくは複数の追加の治療剤を含む医薬組成物。
【請求項１５】
請求項１〜４のいずれか一項に記載の結晶形態Ａ及び／又は請求項１３に記載の方法により調製されたアモルファス形態、並びに１種若しくは複数の薬学的に許容できる担体を含む医薬製剤。
【請求項１６】
好ましくはＡ型ウイルス性肝炎、Ｂ型ウイルス性肝炎、Ｃ型ウイルス性肝炎、インフルエンザ、ヘルペス又は後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）である、ウイルス性疾患を予防又は治療する薬剤の製造における、請求項１〜４のいずれか一項に記載の結晶形態Ａ、請求項１３に記載の方法により調製されたアモルファス形態、請求項１４に記載の医薬組成物、又は請求項１５に記載の医薬製剤の使用。
【請求項１７】
その必要がある患者に、請求項１〜４のいずれか一項に記載の結晶形態Ａ、請求項１３に記載の方法により調製されたアモルファス形態、請求項１４に記載の医薬組成物又は請求項１５に記載の医薬製剤を有効量投与するステップを含む、好ましくはＡ型ウイルス性肝炎、Ｂ型ウイルス性肝炎、Ｃ型ウイルス性肝炎、インフルエンザ、ヘルペス又は後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）であるウイルス性疾患を予防又は治療する方法。
【請求項１８】
好ましくはＡ型ウイルス性肝炎、Ｂ型ウイルス性肝炎、Ｃ型ウイルス性肝炎、インフルエンザ、ヘルペス又は後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）である、ウイルス性疾患の予防又は治療において使用するための、請求項１〜４のいずれか一項に記載の結晶形態Ａ、請求項１３に記載の方法により調製されたアモルファス形態、請求項１４に記載の医薬組成物、又は請求項１５に記載の医薬製剤。
【発明の詳細な説明】
【発明の分野】
【０００１】
本発明は、（Ｅ）−３−（（Ｒ）−４−（（（Ｒ）−６−（２−クロロ−４−フルオロフェニル）−５−（メトキシカルボニル）−２−（チアゾール−２−イル）−３，６−ジヒドロピリミジン−４−イル）メチル）モルホリン−２−イル）アクリル酸（以下「式（Ｉ）の化合物」と呼ぶ）の固体形態、この固体形態を調製する方法、この固体形態を含む医薬組成物、並びにＡ型ウイルス性肝炎、Ｂ型ウイルス性肝炎、Ｃ型ウイルス性肝炎、インフルエンザ、ヘルペス及び後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）を含むが、これらに限定されないウイルス性疾患の予防又は治療のための、この固体形態の使用に関する。
【発明の背景】
【０００２】
Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）は一般的な肝ＤＮＡウイルス病原体である。このウイルスは急性肝炎、慢性肝炎、肝線維症、肝硬変、肝がん等を引き起こすおそれがある。
【０００３】
Ｂ型肝炎を治療する薬物にはインターフェロンやヌクレオシド類似体（ラミブジン、アデホビルジピボキシル等）が挙げられる。それらのうちで、インターフェロンは細胞表面受容体と相互作用して、細胞が抗ウイルスタンパク質を産生し、それによってＢ型肝炎ウイルスの複製を阻害することができるようにする。その欠点は、有効奏功率が比較的低いこと及び長期的な注射投与の必要があることである。ヌクレオシド類似体は、主にウイルスポリメラーゼ（逆転写酵素）の複製を阻害することにより奏功する。その欠点は、この薬物は長期間投与する必要があり、その結果ウイルスが変異し、薬物耐性を生じることが多いことである。
【０００４】
さらに、Ｂ型ウイルス性肝炎は非ヌクレオシド類似体で治療することができる。Ｄｅｒｅｓらにより発見されたヘテロアリールジヒドロピリミジン化合物（Ｂａｙ４１〜４１０９）は、ウイルスカプシドタンパク質組織化を阻害することによりＨＢＶウイルス複製を防止することができる（Ｓｃｉｅｎｃｅ、２００３、２９９、８９３〜８９６）。詳細な作用機序は下記のとおりである：ジヒドロピリミジン化合物はコアタンパク質の欠陥のある組織化を誘導し、その結果不安定なカプシドタンパク質が形成され、コアタンパク質の分解の加速が生じる（Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．、２００３、６６、２２７３〜２２７９）。また、Ｚｌｏｔｎｉｃｋらにより発見されたヘテロアリールジヒドロピリミジン化合物ＨＡＰ１（Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．、２００５、１０２、８１３８〜８１４３）、及びＳＵＮＳＨＩＮＥ  ＬＡＫＥ  ＰＨＡＲＭＡ  Ｃｏ．，ＬＴＤ（Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．、２０１３、５７、５３４４〜５３５４、国際公開第２０１５０７８３９１号、米国特許第２０１６２０６６１６号及び国際公開第２０１５１４４０９３号）により報告されたヘテロアリールジヒドロピリミジン化合物（ＧＬＳ４）も、抗ＨＢＶ活性を有する。
【０００５】
上記の化合物はある程度のウイルス抑制を示すが、その抗ウイルス活性は依然として満足なものではない。その上、いくつかの化合物は、著しい毒性影響をも示している（たとえば、ＧＬＳ４は著しいｈＥＲＧ心臓毒性を示している）。
【０００６】
最近開発された式（Ｉ）の化合物は、強力な抗ウイルス作用を示すだけではなく、心臓毒性がなく、ウイルス性疾患の治療効果の改善に有利な良好な薬物動態特性を有している：
【化１】
2021523880.tif 000003
【０００７】
同一薬物の異なる結晶形態は、安定性及び生体利用率に関して著しく異なり、したがって薬物の有効性に影響する可能性がある。このため、薬物処理及び医薬組成物における使用により有利で、固体薬物の治療効果の研究のためにより定性的で定量的な情報を提供する、化合物の安定な結晶形態を開発することは非常に有意義である。これは薬物の開発においても緊急に必要なことである。
【発明の概要】
【０００８】
本発明は式（Ｉ）の化合物、化学名（Ｅ）−３−（（Ｒ）−４−（（（Ｒ）−６−（２−クロロ−４−フルオロフェニル）−５−（メトキシカルボニル）−２−（チアゾール−２−イル）−３，６−ジヒドロピリミジン−４−イル）メチル）モルホリン−２−イル）アクリル酸の固体形態を提供する：
【化２】
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【０００９】
本発明の一態様は、結晶形態ＡのＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）パターンが回折角（２θ）８．７±０．２°、１７．５±０．２°、１９．３±０．２°、２０．３±０．２°及び２１．４±０．２°で特性ピークを有することを特徴とする、式（Ｉ）の化合物の結晶形態Ａを提供する。
【００１０】
本発明の別の態様は、本発明の結晶形態Ａ又はアモルファス形態を調製する方法を提供する。
【００１１】
本発明の別の態様は、本発明の結晶形態Ａ及び／又はアモルファス形態、並びに１種若しくは複数の薬学的に許容できる担体又は１種若しくは複数の追加の治療剤を含む医薬組成物を提供する。
【００１２】
本発明の別の態様は、本発明の結晶形態Ａ及び／若しくはアモルファス形態、並びに１種若しくは複数の薬学的に許容できる担体を含む医薬製剤を提供する。
【００１３】
本発明の別の態様は、ウイルス性疾患を予防又は治療する薬剤の製造における、本発明の結晶形態Ａ及び／又はアモルファス形態、本発明の医薬組成物、及び／又は本発明の医薬製剤の使用を提供する。
【００１４】
本発明の別の態様は、ウイルス性疾患の予防又は治療において使用するための本発明の結晶形態Ａ及び／若しくはアモルファス形態、本発明の医薬組成物、及び／又は本発明の医薬製剤を提供する。
【００１５】
本発明の別の態様は、その必要がある患者に本発明の結晶形態Ａ及び／若しくはアモルファス形態、本発明の医薬組成物、及び／又は本発明の医薬製剤を有効量投与するステップを含む、ウイルス性疾患を予防又は治療する方法を提供する。
【発明の詳細な説明】
【００１６】
定義
【００１７】
文脈において別に定義しない限り、本明細書で使用される全ての技術的及び科学的用語は当業者により通常理解される意味と同様の意味を持つものとする。本明細書において用いる技術の言及は、当業者に明らかなその技術の変形形態又は同等の技術の追加形態を含めて、当該技術分野で通常理解される技術を指すものとする。以下の用語は当業者が容易に理解できると考えられるが、本発明をより良く説明するために以下の定義を提示する。
【００１８】
本明細書で使用する用語「を含有する（ｃｏｎｔａｉｎ）」、「を含む（ｉｎｃｌｕｄｅ）」、「を含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」、「を有する（ｈａｖｅ）」、又は「に関する（ｒｅｌａｔｅ  ｔｏ）」、及び他の変化形は包括的すなわちオープンエンドであり、追加の非記載の要素又は方法ステップが必ず存在するわけではないが、追加の非記載の要素又は方法ステップを除外しない（すなわち、これらの用語は用語「実質的に〜からなる（ｓｕｂｓｔａｎｔｉａｌｌｙ  ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｏｆ）及び「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｏｆ）」をも企図する）。
【００１９】
本明細書で使用する用語「約（ａｂｏｕｔ）」は当業者により理解されるように、±０．０５、±０．１、±０．２、±０．３、±０．５、±１、±２又は±３等、許容できる標準誤差の範囲内を指す。
【００２０】
本明細書で使用する用語「固体形態」は、結晶形態又はアモルファス形態等、式（Ｉ）の化合物の全固体形態を含む。
【００２１】
本明細書で使用する用語「アモルファス」は、三次元において秩序を欠いている任意の固体物質を指す。いくつかの例では、アモルファス固体はＸＲＰＤ結晶回折分析、固体核磁気共鳴（ｓｓＮＭＲ）スペクトル分析、示差走査熱量測定（ＤＳＣ）、又はこれらの技術のうちのいくつかの組合せを含む既知の技術により特徴づけることができる。以下に示すように、アモルファス固体は明確な回折特性ピークがないＸＲＰＤパターンを示す。
【００２２】
本明細書で使用する用語「結晶形態」又は「結晶」は、三次元秩序を示す任意の固体物質を指し、この形態はアモルファス固体物質と対照的に、明瞭なピークをもつ独特のＸＲＰＤパターンを示す。
【００２３】
本明細書で使用する用語「Ｘ線粉末回折パターン（ＸＲＰＤパターン）」は、実験的に観測される回折図又はパラメータ、そこから得られるデータ又は値を指す。ＸＲＰＤパターンは通常ピーク位置（横座標）及びピーク強度（縦座標）により特徴づけられる。
【００２４】
本明細書で使用する用語「２θ」は、Ｘ線回折実験の構成に基づく度（°）単位でのピーク位置を指し、一般に回折パターン中の横座標上の単位である。実験の構成には、反射が回折され、入射ビームがある結晶格子平面と角度シータ（θ）を形成する場合、反射ビームが角度２シータ（２θ）で記録されることが必要である。本明細書における具体的な結晶形態についての具体的な２θ値の言及は、本明細書で記載したようなＸ線回折実験条件を使用して測定される２θ値（単位は度）を意味するものとすることを理解されたい。
【００２５】
本明細書で使用する用語「示差走査熱量測定（ＤＳＣ）図」は、示差走査熱量計に記録される曲線を指す。
【００２６】
本明細書で使用する用語「熱重量分析（ＴＧＡ）図」は、熱重量分析装置に記録される曲線を指す。
【００２７】
本明細書で使用する用語「本質的に同様の」は、典型的なピーク位置及び／又は強度の変動を考慮している。たとえば、Ｘ線回折ピークの場合、当業者はピーク位置（２θ）が、典型的には０．１〜０．２度もの若干の変動を示し、回折を測定する機器も若干の変動へ導くことを理解することができる。さらに、当業者は相対的ピーク強度が機器間の差異とともに、結晶性の程度、好ましい方向、調製された試料の表面、及び当業者に既知の他の要因によっても異なることを理解されよう。
【００２８】
結晶形態及び調製方法
【００２９】
いくつかの実施形態では、本発明は結晶形態ＡのＸ線粉末回折パターンが回折角８．７±０．２°、１７．５±０．２°、１９．３±０．２°、２０．３±０．２°及び２１．４±０．２°で特性ピークを有することを特徴とする、式（Ｉ）の化合物の結晶形態Ａを提供する。
【化３】
2021523880.tif 000005
【００３０】
好ましい実施形態では、式（Ｉ）の化合物の結晶形態ＡのＸＲＰＤパターンは回折角（２θ）８．７±０．２°、１６．０±０．２°、１７．５±０．２°、１７．８±０．２°、１９．３±０．２°、２０．３±０．２°、２１．４±０．２°、２２．３±０．２°及び２３．１±０．２°で特性ピークを含む。
【００３１】
より好ましい実施形態では、式（Ｉ）の化合物の結晶形態ＡのＸＲＰＤパターンは回折角（２θ）８．７±０．２°、１０．８±０．２°、１５．８±０．２°、１６．０±０．２°、１７．５±０．２°、１７．８±０．２°、１９．３±０．２°、１９．５±０．２°、２０．３±０．２°、２１．１±０．２°、２１．４±０．２°、２２．３±０．２°、２３．１±０．２°及び２７．０±０．２°で特性ピークを含む。
【００３２】
特に好ましい実施形態では、式（Ｉ）の化合物の結晶形態ＡのＸＲＰＤパターンは以下の回折角（２θ）で特性ピークを含み、２θ値の誤差範囲は±０．２°である：
【００３３】
【表１】
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2021523880.tif 000007
【００３４】
より好ましい実施形態では、式（Ｉ）の化合物の結晶形態ＡのＸＲＰＤパターンは図１に示すものと本質的に同様の回折角（２θ）でピークを含む。もっとも好ましい実施形態では、式（Ｉ）の化合物の結晶形態ＡのＸＲＰＤパターンは図１に示すとおりである。
【００３５】
いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物の結晶形態Ａの示差走査熱量測定（ＤＳＣ）図における吸熱ピークは１７３±２℃で現れる。
【００３６】
より好ましい実施形態では、結晶形態ＡのＤＳＣ図は図２に示すとおりである。
【００３７】
いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物の結晶形態Ａは熱重量分析（ＴＧＡ）図によると１９０±２℃で分解し始める。
【００３８】
好ましい実施形態では、結晶形態ＡのＴＧＡ図は図３に示すとおりである。
【００３９】
本発明の別の態様は、前述のような式（Ｉ）の化合物の結晶形態Ａを調製する方法を提供し、この方法は遅い蒸発法、懸濁液撹拌法、浸透法又は再結晶法を含むが、これに限定されるものではない。
【００４０】
このうち、この方法で利用される溶媒は、メタノール、エタノール、ｎ−プロパノール、イソプロパノール、ｎ−ブタノール、アセトン、ブタノン、酢酸エチル、酢酸ブチル、酢酸イソプロピル、炭酸ジメチル、テトラヒドロフラン、ジクロロメタン、クロロホルム、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル、アセトニトリル、アニソール、トルエン、ジエチルエーテル、水、イソプロピルエーテル、ｎ−ヘキサン、ｎ−ヘプタン、シクロヘキサン及び石油エーテルからなる群から選択される。
【００４１】
本発明のいくつかの実施形態では、結晶形態Ａは以下のステップ：式（Ｉ）の化合物を第１の適切な溶媒中で溶解させて透明な溶液を形成するステップ、次いでこの溶液を室温で放置するステップ、溶媒を蒸発させ、除去するステップ、及び固体を収集して結晶形態Ａを得るステップを含み、
第１の適切な溶媒がメタノール、エタノール、ｎ−プロパノール、イソプロパノール、ｎ−ブタノール、アセトン、ブタノン、酢酸エチル、酢酸ブチル、酢酸イソプロピル、炭酸ジメチル、テトラヒドロフラン、ジクロロメタン、クロロホルム、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル、アセトニトリル、アニソール、トルエン及びジエチルエーテルからなる群から選択されるものの１種又は複数であり、溶媒が式（Ｉ）の化合物の透明な溶液を形成することができる量で使用される、遅い蒸発法で調製される。
【００４２】
好ましくは、式（Ｉ）の化合物の第１の適切な溶媒に対する重量／体積比（ｍｇ／ｍｌ）は１００：１〜１０：１である。
【００４３】
代わりに、第１の適切な溶媒は溶媒Ａと溶媒Ｂとの混合溶媒であり、溶媒Ａはアセトン、テトラヒドロフラン、酢酸エチル、アセトニトリル、トルエン、ジクロロメタン、水及びメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルからなる群から選択されるものの１種又は複数であり、溶媒Ｂはメタノール、アセトン、テトラヒドロフラン、酢酸エチル、アセトニトリル、トルエン及びジクロロメタンからなる群から選択されるものの１種又は複数であり、
好ましくは溶媒Ａの溶媒Ｂに対する体積比は１：２〜２：１であり、好ましくは溶媒Ａの溶媒Ｂに対する体積比は１：１であり、
好ましくは、溶媒Ａ又は溶媒Ｂは式（Ｉ）の化合物が完全に溶解することができる量で使用される。
【００４４】
本発明のいくつかの実施形態では、結晶形態Ａは以下のステップ：式（Ｉ）の化合物を溶媒Ａに溶解させて透明な溶液を形成するステップ、溶媒Ｂを添加して混合するステップ、次いでその混合物を室温で放置するステップ、溶媒を蒸発させ、除去するステップ、及び固体を収集して結晶形態Ａを得るステップを含み、好ましくは溶媒Ａがメタノール、アセトン、テトラヒドロフラン、酢酸エチル、アセトニトリル、トルエン、ジクロロメタン、水及びメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルからなる群から選択されるものの１種又は複数であり、溶媒Ｂがメタノール、アセトン、テトラヒドロフラン、酢酸エチル、アセトニトリル、トルエン、ジクロロメタン及び水からなる群から選択されるものの１種又は複数であり、
好ましくは、溶媒Ａの溶媒Ｂに対する体積比が１：２〜２：１であり、好ましくは、溶媒Ａの溶媒Ｂに対する体積比が１：１である、遅い蒸発法により調製される。
【００４５】
本発明の他の実施形態では、結晶形態Ａは、以下のステップ：式（Ｉ）の化合物を第２の適切な溶媒中で加熱し撹拌して透明な溶液を形成するステップ、これを室温まで徐々に冷却し、次いで濾過するステップ、及び固体を収集して結晶形態Ａを得るステップを含み、
好ましくは、第２の適切な溶媒がイソプロパノール、アセトニトリル、トルエン及びｎ−プロパノールからなる群から選択され、好ましくは、式（Ｉ）の化合物のこの溶媒に対する重量／体積比（ｇ／ｍｌ）が１：（５〜１０）であり、
代わりに、第２の適切な溶媒がジエチルエーテルであり、式（Ｉ）の化合物のジエチルエーテルに対する重量／体積比（ｇ／ｍｌ）が１：６０である、再結晶法により調製される。
【００４６】
本発明の他の実施形態では、結晶形態Ａは、以下のステップ：式（Ｉ）の化合物又はそのアモルファス形態を、第３の適切な溶媒中に分散させ、懸濁させるステップ、次いで室温又は高温条件下で懸濁液を撹拌するステップ、及び固体を収集して結晶形態Ａを得るステップを含み、
好ましくは第３の適切な溶媒がエタノール、ｎ−プロパノール、ｎ−ブタノール、ジエチルエーテル、イソプロピルエーテル、アセトニトリル、トルエン、ｎ−ヘキサン、ｎ−ヘプタン、シクロヘキサン、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル、水及び石油エーテルからなる群から選択されるものの１種又は複数であり、好ましくは、第３の適切な溶媒が溶質をその中で懸濁させることができる量で使用され（溶質の溶媒に対する重量／体積比（ｍｇ／ｍｌ）は好ましくは１５０：１〜１０：１である）、好ましくは、高温条件が６０℃である、懸濁液撹拌法により調製される。
【００４７】
本発明の他の実施形態では、結晶形態Ａは、以下のステップ：式（Ｉ）の化合物を容器Ａに入れるステップ、適切な量の第４の適切な溶媒を含有する容器Ｂに、開放容器Ａを入れるステップ、容器Ｂを密封するステップ、容器Ｂを室温で放置するステップ、及び固体を収集して結晶形態Ａを得るステップを含み、
好ましくは、第４の適切な溶媒がメタノール、エタノール、酢酸イソプロピル、ｎ−ヘキサン、アセトニトリル、ジエチルエーテル、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル及びトルエンからなる群から選択されるものの１種又は複数であり、好ましくは、放置する時間が８日間以上である、浸透法により調製される。
【００４８】
本発明の別の態様は、式（Ｉ）の化合物のアモルファス形態を提供し、このアモルファス形態のＸＲＰＤパターンは著しく鮮明な回折ピークを含まない。
【００４９】
好ましい実施形態では、アモルファス形態のＸＲＰＤパターンは図４に示すとおりである。
【００５０】
本発明の別の態様は、式（Ｉ）の化合物のアモルファス形態を調製する方法を提供し、この方法は以下のステップ：式（Ｉ）の化合物を第５の適切な溶媒に溶解させて透明な溶液を形成し、その溶液を減圧下で回転蒸発させてアモルファス形態を得るステップを含み、
好ましくは、第５の適切な溶媒はジクロロメタン及びクロロホルムからなる群から選択されるものの１種又は複数であり、
好ましくは、水浴温度は４０〜５０℃であり、より好ましくは４５℃である。
【００５１】
別の態様では、本発明の式（Ｉ）の化合物及び有機酸又は無機酸は、フマル酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、リン酸塩、マレイン酸塩、コハク酸塩、アジピン酸塩、硫酸塩、塩酸塩、炭酸塩、リン酸塩、臭化水素酸塩、硝酸塩、リンゴ酸塩、グリコール酸、ムチン酸塩、乳酸塩、ゲンチシン酸塩、メタンスルホン酸塩、樟脳スルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、エタンジスルホン酸塩、ナフタレンジスルホン酸塩、馬尿酸塩、ニコチン酸塩、シュウ酸塩、マロン酸塩、Ｌ−アルギニン、リシンを含むが、これらに限定されない式（Ｉ）の化合物の対応する塩を形成することができ、
式（Ｉ）の化合物の有機酸又は無機酸に対するモル比は、好ましくは１：１又は２：１又は３：１である。
【００５２】
一方、本発明の式（Ｉ）の化合物及び有機塩基又は無機塩基は、式（Ｉ）の化合物の対応する塩を形成することができる。
【００５３】
好ましくは、式（Ｉ）の化合物及び無機塩基により形成される塩は、アンモニウム塩、マグネシウム塩、カリウム塩、ナトリウム塩、カルシウム塩、リチウム塩等を含むが、それらに限定されるものではなく、
代わりに、有機塩基はメグルミン、ベンジルアミン、ベタイン、ジメチルエタノールアミン、ジエチルアミノエタノール、トロメタミン、ジエタノールアミン、エチレンジアミン、イミダゾール、ピペラジン、トロメタミン、トリエチルアミン、コリン等からなる群から選択され、
式（Ｉ）の化合物の有機塩基又は無機塩基に対するモル比は、好ましくは１：１又は２：１又は３：１である。
【００５４】
医薬組成物及び治療法
【００５５】
本発明の別の態様は、式（Ｉ）の化合物の結晶形態Ａ及び／又はアモルファス形態、並びに１種若しくは複数の薬学的に許容できる担体、又は１種若しくは複数の追加の治療剤を含む医薬組成物を提供する。
【００５６】
「追加の治療剤」は、本発明の式（Ｉ）の化合物の結晶形態Ａ及び／又はアモルファス形態以外の、追加の薬理学的に活性な物質、たとえば、式（Ｉ）の化合物との相乗的治療効果を達成することができる追加の抗ウイルス剤を指す。
【００５７】
本発明の別の態様は、本発明の式（Ｉ）の化合物の結晶形態Ａ及び／又はアモルファス形態、並びに１種又は複数の薬学的に許容できる担体を含む医薬製剤を提供する。
【００５８】
「薬学的に許容できる担体」は、治療薬とともに投与される希釈剤、補助材料、賦形剤又は媒体を指し、それらは正当な医学的判断の範囲内に含まれ、過度の毒性、炎症、アレルギー性反応、又は他の問題又は合併症なしにヒトや動物の組織と接触するのに適しており、妥当な利益／危険性比に見合っている。
【００５９】
本発明の医薬製剤は、全身的及び／又は局所的に作用することができる。この目的で、この製剤は、注射、静脈内、動脈内、皮下、腹腔内、筋肉内若しくは経皮投与等の適切な経路で投与することができ、又は経口、口腔、鼻腔、経粘膜、局所的に点眼剤として若しくは吸入により投与することができる。
【００６０】
これらの投与の経路のために、本発明の製剤は適切な剤形で投与することができる。
【００６１】
剤形は、錠剤、カプセル剤、粉末剤、顆粒剤、ロゼンジ剤、ハードキャンディ剤、粉末剤、スプレー剤、クリーム剤、軟膏剤、坐剤、ゲル剤、ペースト剤、ローション剤、軟膏剤、水性懸濁液剤、注射剤、懸濁剤、エリキシル剤及びシロップ剤を含むが、これらに限定されない固体、半固体、液体又は気体製剤でもよい。
【００６２】
本発明の医薬製剤は、当該技術分野で周知の任意の方法により、たとえば、混練、溶解、顆粒化、糖衣錠製造、ゲル化、乳化、凍結乾燥の各方法等によって製造してもよい。
【００６３】
医薬製剤中の本発明の化合物の量すなわち用量は約０．０１ｍｇ〜約１０００ｍｇ、適切には０．１〜５００ｍｇ、好ましくは０．５〜３００ｍｇ等であってもよい。
【００６４】
本発明の別の態様は、ウイルス性疾患を予防又は治療する薬剤の製造における、式（Ｉ）の化合物の結晶形態Ａ及び／又はアモルファス形態、本発明の医薬組成物及び／又は本発明の医薬製剤の使用を提供し、好ましくは、このウイルス性疾患はＡ型ウイルス性肝炎、Ｂ型ウイルス性肝炎、Ｃ型ウイルス性肝炎、インフルエンザ、ヘルペス及び後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）を含むが、それらに限定されるものではない。
【００６５】
本発明の別の態様は、その必要がある患者に、本発明の式（Ｉ）の化合物の結晶形態Ａ、アモルファス形態、本発明の医薬組成物及び／又は本発明の医薬製剤を有効量投与するステップを含む、ウイルス性疾患を予防又は治療する方法を提供する。好ましくは、このウイルス性疾患はＡ型ウイルス性肝炎、Ｂ型ウイルス性肝炎、Ｃ型ウイルス性肝炎、インフルエンザ、ヘルペス及び後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）を含むが、それらに限定されるものではない。
【００６６】
本発明の別の態様は、ウイルス性疾患の予防又は治療において使用するための、式（Ｉ）の化合物の結晶形態Ａ及び／又はアモルファス形態、本発明の医薬組成物又は本発明の医薬製剤を提供する。好ましくは、このウイルス性疾患はＡ型ウイルス性肝炎、Ｂ型ウイルス性肝炎、Ｃ型ウイルス性肝炎、インフルエンザ、ヘルペス及び後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）を含むが、それらに限定されるものではない。
【００６７】
本発明が提供する式（Ｉ）の化合物の結晶形態は、ウイルス性疾患を予防又は治療するのに優れた効果を有するだけでなく、良好な化学安定性、物理的安定性及び薬物動態特性をも示す。たとえば、本発明の式（Ｉ）の化合物の結晶形態は、良好な溶解性、低い吸湿性等を有し、したがって、その製剤の投与及び調製の際に十分に溶解するためにより有利であり、十分な生物活性を保持することができる。また、それは良好な高温耐性、多湿耐性及び流動性を有しており、大量生産にも製剤の形成にもより適切で好都合であり、輸送及び保管時に信頼性を維持することができ、それによって効果的にこの薬物の品質及び安全性を保証する。その上、それはさらに良好な光安定性を有し、光の影響を防止するための特殊な包装処理を必要とせず、それによって費用を減少させる。それは光の影響により劣化せず、それによってこの薬物の安全性を向上させ及び長期的な保管時の有効性を持続させる。
【図面の簡単な説明】
【００６８】
【図１】式（Ｉ）の化合物の結晶形態ＡのＸＲＰＤパターンの図である。
【図２】式（Ｉ）の化合物の結晶形態ＡのＤＳＣ図である。
【図３】式（Ｉ）の化合物の結晶形態ＡのＴＧＡ図である。
【図４】式（Ｉ）の化合物のアモルファス形態のＸＲＰＤパターンの図である。
【図５】式（Ｉ）の化合物の結晶形態ＡのＤＶＳ図である。
【図６】６０℃で０日間及び７日間放置した後の式（Ｉ）の化合物の結晶形態ＡのＸＲＰＤパターンの比較図である。
【図７】実施例１で調製された式（Ｉ）の化合物のＸＲＰＤパターンの図である。
【実施例】
【００６９】
本発明の技術的解決法を説明するために使用されるにすぎず、その適用範囲を限定しようとするものではない、以下の実施例を参照しながら本発明をさらに説明するが、当業者はいくつかの非本質的な改善及び調整をなすことができ、これらは依然として本発明の範囲内に含まれる。
【００７０】
この実験に利用される試験計器及び方法に関する情報：
Ｘ線粉末回折（ＸＲＰＤ）：
Ｃｕターゲット照射を使用したＸ’Ｐｅｒｔ３  Ｐｏｗｄｅｒ回折計を利用し、室温にて絶対スキャン（Ａｂｓｏｌｕｔｅ  ｓｃａｎ）で検出を実行した。検出範囲は３．５°〜４０°で、刻み幅は０．０１３°、データ取込み時間は５０秒間、スキャン回数は１回であった。
示差走査熱量測定（ＤＳＣ）試験のための計器はＤＳＣ１（ＭＥＴＴＬＥＲ  ＴＯＬＥＤＯ）であった。
熱重量分析（ＴＧＡ）試験のための計器はＭＥＴＴＬＥＲ  ＴＯＬＥＤＯであった。
ＤＳＣ、ＴＧＡ計器ともに加熱速度は１０Ｋ／分であった。
動的蒸気収着（ＤＶＳ）の実験条件は下記のとおりであった：
ＤＶＳ  Ｉｎｔｒｉｎｓｉｃ（ＳＭＳ）で２５℃にてｃｙｃｌｅ−ＤＭＤＴモードで検出を実行した。
【００７１】
実施例１：（Ｅ）−３−（（Ｒ）−４−（（（Ｒ）−６−（２−クロロ−４−フルオロフェニル）−５−（メトキシカルボニル）−２−（チアゾール−２−イル）−３，６−ジヒドロピリミジン−４−イル）メチル）モルホリン−２−イル）アクリル酸（式（Ｉ）の化合物）の調製
【化４】
2021523880.tif 000008
【００７２】
室温で、（Ｒ）−メチル  ６−（ブロモメチル）−４−（２−クロロ−４−フルオロフェニル）−２−（チアゾール−２−イル）−１，４−ジヒドロピリミジン−５−カルボキシレート（４００ｍｇ、０．９０ｍｍｏｌ）及び（Ｒ，Ｅ）−３−（モルホリン−２−イル）アクリル酸トリフルオロアセテート塩（４８８ｍｇ、１．８０ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１０ｍＬ）に溶解し、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（６９６ｍｇ、５．４０ｍｍｏｌ）を添加し、室温で一晩反応させた。その反応液を濃縮して粗生成物を得て、これを分取用液体クロマトグラフィーにより精製して、式（Ｉ）の化合物（２０５ｍｇ）を得た。得られた試料をＸＲＰＤ分析に供し、そのＸＲＰＤパターンを図７に示しており、図７は得られた固体が式（Ｉ）の化合物のアモルファス形態であることを示している。
【００７３】
その構造式は以下のように特徴づけられる：
1H NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ 12.44 (s, 1H), 9.68 (s,1H), 7.98 (dd, J = 27.6, 3.1 Hz, 2H), 7.48-7.36 (m, 2H), 7.18 (td, J = 8.5, 2.6Hz, 1H), 6.73 (dd, J = 15.8, 4.1 Hz, 1H), 6.04 (s, 1H), 5.93 (dd, J = 15.8, 1.6Hz, 1H), 4.23 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 4.01-3.90 (m, 3H), 3.68 (t, J = 10.2 Hz,1H), 3.52 (s, 3H), 2.94 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 2.82 (d, J = 11.1 Hz, 1H), 2.41(dd, J = 11.0, 8.6 Hz, 1H), 2.08 (t, J = 10.7 Hz, 1H). ESI-MS (m/z): 521.1 [M +H]+.
【００７４】
実施例２：式（Ｉ）の化合物の結晶形態Ａの調製
実施例１で調製された式（Ｉ）の化合物３０ｍｇを秤量し、メタノール０．９ｍＬに溶解して透明な溶液を形成し、次いでこの溶液を室温で放置した。この溶媒を蒸発させ除去し、結晶化を生じさせた。固体を収集し、得られた試料をＸＲＰＤ検出に供した。ＸＲＰＤパターンは図１に示すとおりであり、関連データは表１に示しており、表１は式（Ｉ）の化合物の結晶形態Ａが得られたことを示している。
【００７５】
【表２】
2021523880.tif 000009
2021523880.tif 000010
【００７６】
得られた試料をＤＳＣ検出に供し、ＤＳＣ図は図２に示すとおりであり、図２は吸熱ピークが１７３．１８℃に現れることを示している。
【００７７】
得られた試料をＴＧＡ検出に供し、ＴＧＡ図は図３に示すとおりであり、図３は分解が約１９０℃で開始することを示している。
【００７８】
実施例３：式（Ｉ）の化合物の結晶形態Ａの調製
式（Ｉ）の化合物の結晶形態Ａを実施例２と同様で、ただし実施例２のメタノールの代わりに下記の表２に示すとおりの量の溶媒が使われている、調製方法により調製した。得られた試料をＸＲＰＤ検出に供し、ＸＲＰＤ検出は得られた生成物が実施例２で得られた結晶形態Ａと同様であることを示した。
【００７９】
【表３】
2021523880.tif 000011
【００８０】
実施例４：式（Ｉ）の化合物の結晶形態Ａの調製
実施例１で調製された式（Ｉ）の化合物を溶媒Ａに溶解し、式（Ｉ）の化合物３０ｍｇ／ｍｌを含む溶液を得て、次いで溶媒Ａと等しい体積の溶媒Ｂを添加した（溶媒Ａ及び溶媒Ｂの種類及び体積比は表３に示すとおりである）。この溶液を室温で放置し、この溶媒を蒸発させ除去し、結晶化を生じさせ、固体を収集した。ＸＲＰＤ検出は得られた結晶形態が実施例２の結晶形態Ａと同様であることを示した。
【００８１】
【表４】
2021523880.tif 000012
【００８２】
実施例５：式（Ｉ）の化合物の結晶形態Ａの調製
実施例１で調製された式（Ｉ）の化合物５００ｍｇを秤量し、そこに一定量の溶媒（溶媒の種類及び添加の比率を表４に示す）を添加した。その混合物を加熱し撹拌して、透明な溶液を形成し、次いでこれを室温まで徐々に冷却し、次いで濾過した。固体を収集し、ＸＲＰＤ検出は得られた結晶形態が実施例２の結晶形態Ａと同様であることを示した。
【００８３】
【表５】
2021523880.tif 000013
【００８４】
実施例６：式（Ｉ）の化合物のアモルファス形態の懸濁液から結晶形態への変換
実施例１で調製された式（Ｉ）の化合物５０ｍｇを秤量し、次いでそこに溶媒０．５ｍＬ（溶媒の種類及び添加の比率を表５に示す）を添加した。その化合物を分散させ懸濁させ、次いでこの混合物を室温で７２時間密封しながら撹拌し、次いで濾過した。固体を収集し、ＸＲＰＤ検出は得られた結晶形態が実施例２の結晶形態Ａと同様であることを示した。
【００８５】
【表６】
2021523880.tif 000014
【００８６】
実施例７：式（Ｉ）の化合物の結晶形態Ａの調製
実施例１で調製された式（Ｉ）の化合物の試料２００ｍｇを秤量し、そこに溶媒４ｍＬ（溶媒の種類及び添加の比率を表６に示す）を添加した。その化合物を分散させ懸濁させ、次いでこの混合物を６０℃で８時間撹拌し、次いで濾過した。固体を収集し、ＸＲＰＤ検出は得られた結晶形態が実施例２の結晶形態Ａと同様であることを示した。
【００８７】
【表７】
2021523880.tif 000015
【００８８】
実施例８：式（Ｉ）の化合物の懸濁液から結晶形態への変換
実施例１で調製された式（Ｉ）の化合物の試料１５０ｍｇを秤量し、そこに適切な量の溶媒（溶媒の種類及び添加の比率を表７に示す）を添加した。その化合物を分散させ懸濁させ、次いでこの混合物を室温で７２時間密封しながら撹拌し、次いで濾過した。固体を収集し、ＸＲＰＤ検出は得られた結晶形態が実施例２の結晶形態Ａと同様であることを示した。
【００８９】
【表８】
2021523880.tif 000016
【００９０】
実施例９：式（Ｉ）の化合物の結晶形態Ａの調製
実施例１で調製された式（Ｉ）の化合物の試料３０ｍｇを秤量し、ペニシリン瓶に入れ、開いたペニシリン瓶を適切な量の溶媒を含有する５０ｍＬビーカーに入れた（溶媒の種類及び量を表８に示す）。このビーカーを密封し、室温で約８日間放置した。固体を収集し、ＸＲＰＤ検出は得られた結晶形態が実施例２の結晶形態Ａと同様であることを示した。
【００９１】
【表９】
2021523880.tif 000017
【００９２】
実施例１０：式（Ｉ）の化合物のアモルファス形態の調製
実施例１で調製された式（Ｉ）の化合物の試料３ｇを秤量し、溶媒５０ｍＬ（溶媒の種類及び添加の比率を表９に示す）を添加して透明な溶液を形成した。この溶液を濾過し、次いで減圧下で４５℃の水浴中、回転エバポレータで回転蒸発させて、固体を得た。得られた試料をＸＲＰＤ分析に供し、ＸＲＰＤパターンは図４に示すとおりであり、図４は式（Ｉ）の化合物のアモルファス形態が得られることを示した。
【００９３】
【表１０】
2021523880.tif 000018
【００９４】
［実験例］
実験例１．室温における結晶形態Ａの安定性に関する研究
式（Ｉ）の化合物の結晶形態Ａの試料を室温で放置し、５日目と１５日目にＸＲＰＤ検出のために試料を採取した。
試験結果：ＸＲＰＤ検出の結果によると、室温で１５日間放置した後、結晶形態は実施例２と同様であり、結晶形態Ａは変化しないことが分かった。
【００９５】
実験例２．高温における結晶形態Ａの安定性に関する研究
式（Ｉ）の化合物の結晶形態Ａの試料を真空下の６０℃で放置し、２、５及び７日目にそれぞれＸＲＰＤ検出のために試料を採取した。
試験結果：ＸＲＰＤ検出の結果によると、真空下で６０℃で７日間放置した後、結晶形態は実施例２と同様であり、結晶形態Ａは変化しないことが分かった（６０℃で０日間及び７日間放置した後の結晶形態ＡのＸＲＰＤパターンの比較は図６に示すとおりである）。
【００９６】
実験例３．粉砕下での結晶形態Ａの安定性に関する研究
式（Ｉ）の化合物の結晶形態Ａの試料を乳鉢で一定の速度で粉砕し、それぞれ２及び５分間粉砕を行った後ＸＲＰＤ検出のために試料を採取した。
試験結果：ＸＲＰＤ検出の結果によると、５分間粉砕した後結晶形態は実施例２と同様であり、結晶形態Ａは変化しないことが分かった。
【００９７】
実験例４．結晶形態ＡのＤＶＳ研究
式（Ｉ）の化合物の結晶形態Ａの試料の吸湿性を動的蒸気収着（ＤＶＳ）により測定し、その吸湿性を２５℃、湿度勾配１０％、範囲０％〜９０％〜０％で測定した。
ＤＶＳ図は図５に示すとおりであり、その結果、湿度８０％条件下で試料の吸湿性により増加した重量は０．２８％であることが分かった。２０１５版の中国薬局方によると吸湿性による重量の増加が０．２％〜２％の範囲である物質は「僅かな吸湿性をもつ」物質に属する。
【００９８】
実験例５．ラットにおける結晶形態Ａの薬物動態実験
【００９９】
１．試験試料
静脈内投与用の試験試料の製剤：実施例５の試料（結晶の調製において使用された溶媒はイソプロパノールであった）を取り、５％ＤＭＳＯ＋５％Ｓｏｌｕｔｏｌ（ＨＳ１５）＋９０％生理食塩水に溶解して、静脈内投与用の試験試料溶液を得た；
胃内投与用の試験試料の製剤：実施例５の試料（結晶の調製において使用された溶媒はイソプロパノールであった）を取り、９７．５％の０．５％メチルセルロース（ＭＣ）＋２．５％Ｓｏｌｕｔｏｌ（ＨＳ１５）に懸濁させて懸濁液を得て、それを胃内投与用の試験試料として使用した。
【０１００】
２．試験方法及び結果
ＳＤラット１２匹を無作為に２群Ａ及びＢに分類した（１群当たりラット６匹、半数は雄で半数は雌）。Ａ群のラットにはそれぞれ試料薬物の静脈内注射を１回投与し、Ｂ群のラットにはそれぞれ胃内投与で試料薬物を投与したが、用量はいずれも３ｍｇ／ｋｇである。静脈内及び胃内投与のための採血時点は投与前並びに投与後０．０８３、０．２５、０．５、１．０、２．０、４．０、６．０、８．０、１０及び２４時間後であった。薬物動態パラメータは血中薬物濃度により算出し、結果を表１０に示す。表１０のデータによると、ラットにおける結晶形態Ａの絶対的生体利用率は６２．４％であり（時間０から無限大までのＡＵＣを基準として算出する）、ラットによる良好な経口吸収を示した。
【０１０１】
【表１１】
2021523880.tif 000019
【０１０２】
実験例６．式（Ｉ）の化合物の結晶形態Ａの安全性実験
試験試料の製剤：必要量の実施例５の結晶形態Ａの試料（結晶の調製に使用された溶媒はイソプロパノールであった）を秤量し乳鉢に添加し、全体積の２．５％の量のポリエチレングリコール−１５ヒドロキシステアリン酸（ＨＳ１５）を添加し、試料を均等に粉砕した。目に見える残渣がなくなるまで粉砕しながら乳鉢を０．５％メチルセルロース（ＭＣ）溶液で洗浄した。この混合物を目盛り付きの容器に移し、次いで０．５％メチルセルロース溶液でその体積に希釈した。この溶液を磁気撹拌機で均一に撹拌して懸濁液を得て、これを試験試料として使用した。
【０１０３】
１．ＳＤラットにおける単一用量毒性
４群（１群当たり１０匹のラット、半数は雄で半数は雌）をＳＤラットにおける単一用量毒性試験に供し、これらの群はそれぞれに媒体対照投与群並びに式（Ｉ）の化合物の結晶形態Ａの低、中及び高用量群であった。胃内投与後、ラットを１４日間観察した。観察期間中、この動物は良好な状態にあり、体重及び摂食量に著しい変化はなく、血液学的及び血液生化学的指標は標準的であり、肉眼的形態に異常は観察されないことが判明した。試験の終わりに、式（Ｉ）の化合物の結晶形態Ａは本試験の条件下でＳＤラットによる良好な耐容性を示し、１４日間の投与後に異常は観察されなかった。
【０１０４】
２．ビーグル犬における単一用量毒性
３群（１群当たり４匹のイヌ、半数は雄で半数は雌）をビーグル犬における単一用量毒性試験に供し、これらの群は媒体対照投与群並びに式（Ｉ）の化合物の結晶形態Ａの低及び高用量群であった。胃内投与後、各群のイヌを１４日間観察した。観察期間中、この動物は良好な状態にあり、体重に著しい変化はなく、血液学的及び血液生化学的指標は標準的であり、第ＩＩ誘導心電図、呼吸数及び血圧に明らかな異常はなく、肉眼的形態に異常は観察されないことが判明した。
この試験結果により、単一用量の式（Ｉ）の化合物の結晶形態Ａはビーグル犬により良好な耐容性を示し、１４日間の投与後に異常は観察されないことが分かった。
【０１０５】
実験例７．結晶形態Ａの溶解性の測定
試験溶媒：メタノール、アセトニトリル、エタノール、イソプロパノール、塩酸の０．１ｍｏｌ／Ｌ水溶液及び水酸化ナトリウムの０．１ｍｏｌ／Ｌ水溶液。
試験方法：この研究は、中国薬局方（２０１５版）第ＩＶ巻の通則第１５条第２項により実施された。適当な量の実施例５で調製された結晶形態Ａの試料（結晶の調製に使用された溶媒はイソプロパノールであった）を秤量し、２５±２℃で一定の体積の溶媒に添加した。この混合物を５分間間隔で３０秒間大きく振動させた。溶解性挙動を３０分間観察した。溶質の粒子が全く観察されない場合に完全に可溶であると認められた。
試験結果：結晶形態Ａの試料はメタノール、アセトニトリル及びエタノールに可溶であり、イソプロパノールに僅かに可溶であり、塩酸の０．１ｍｏｌ／Ｌ水溶液及び水酸化ナトリウムの０．１ｍｏｌ／Ｌ水溶液にやや難溶であった。
【０１０６】
実験例８．結晶形態ＡのｌｏｇＰ値の測定
物理的及び化学的プロファイルの決定のために、Ｓｉｒｉｕｓ  Ｔ３計器により、実施例５で調製された結晶形態Ａの試料（結晶の調製に使用された溶媒はイソプロパノールであった）のｌｏｇＰ値を測定した。Ｓｉｒｉｕｓ  ｌｏｇＰ試験方法（ｐＨ計測媒質ｌｏｇＰ）を利用し、ｐＨ計測媒質ｌｏｇＰ測定モードを選択し、滴定順序は低いｐＨから高いｐＨとした。
試験結果：本生成物のｌｏｇＰ値は２．４〜２．６であった。このことは本発明の結晶形態Ａが優れた膜透過性を有することを示しており、これはインビボでのＡＤＭＥ過程及び受容体親和性に有益である。
【０１０７】
本出願で開示する式（Ｉ）の化合物の固体形態及びその調製方法は、当業者により、本明細書の開示を参照し、それと共に原材料及びプロセスパラメータ等を適当に改変して実施することができる。本出願の方法及び生成物は最適な例で記載している。当業者には、本発明の技術は本発明の内容、趣旨及び適用範囲から逸脱することなく、本明細書で記載した方法及び生成物の改変形態又は適当な補正及び組合せにより実施することができることが明らかである。全ての類似の交換及び改変形態が当業者に明らかであり、本発明の趣旨、適用範囲及び内容に含まれると認められることに留意することが特に重要である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【国際調査報告】
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