(57)【要約】  本発明は、ポリグルタミン酸に亜鉛を結合させて水によく溶ける安定した亜鉛ポリグルタミン酸複合体を作り、これをカプセル又は注射剤型に製造し、これが我が身に必要な亜鉛供給体としての役割をするだけでなく、このような物質は癌細胞に対する抗癌活性と花粉が粘膜を刺激して発生する花粉症（ｐｏｌｌｉｎｏｓｉｓ）の緩和にも効果を示すことを確認し、ヒト及び動植物に使用可能な組成物を製造して提供するためのものである。【選択図】  図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
ポリガンマグルタミン酸及び亜鉛供給体から製造される、亜鉛／ポリグルタミン酸複合体。
【請求項２】
前記複合体は、ポリガンマグルタミン酸１００重量部に対して、亜鉛供給体３０〜１５０重量部から製造される、請求項１に記載の亜鉛／ポリグルタミン酸複合体。
【請求項３】
ヒスチジン、ポリガンマグルタミン酸及び亜鉛供給体から製造される、亜鉛／ヒスチジン／ポリグルタミン酸複合体。
【請求項４】
前記複合体は、ヒスチジン２００重量部に対して、ポリガンマグルタミン酸３０〜７０重量部、及び亜鉛供給体３０〜１５０重量部から製造される、請求項３に記載の亜鉛／ヒスチジン／ポリグルタミン酸複合体。
【請求項５】
前記亜鉛供給体は、酸化亜鉛、酢酸及び炭酸亜鉛のいずれか１種以上を含む、請求項３に記載の亜鉛／ヒスチジン／ポリグルタミン酸複合体。
【請求項６】
前記複合体は、複合体総重量に対して、亜鉛含量が１５重量％以上である、請求項３に記載の亜鉛／ヒスチジン／ポリグルタミン酸複合体。
【請求項７】
前記複合体は、水にヒスチジン、ポリガンマグルタミン酸及び亜鉛供給体を添加し、還流した後、炭素数１〜５の低級アルコールを用いて複合体を析出することによって製造される、請求項３に記載の亜鉛／ヒスチジン／ポリグルタミン酸複合体。
【請求項８】
請求項３〜７のいずれか一項に記載の亜鉛／ヒスチジン／ポリグルタミン酸複合体の製造方法であって、
（ａ）水にヒスチジン、ポリガンマグルタミン酸及び亜鉛供給体を添加して還流する段階と、
（ｂ）還流された混合物を蒸留する段階と、
（ｃ）炭素数１〜５の低級アルコールを添加して複合体を析出する段階とを含む、亜鉛／ヒスチジン／ポリグルタミン酸複合体の製造方法。
【請求項９】
前記（ａ）段階は、ヒスチジン２００重量部に対して、ポリガンマグルタミン酸３０〜７０重量部及び亜鉛供給体３０〜１５０重量部を添加して還流する、請求項８に記載の亜鉛／ヒスチジン／ポリグルタミン酸複合体の製造方法。
【請求項１０】
前記還流は３０分〜４時間行い、前記炭素数１〜５の低級アルコールはイソプロパノール、ブタノール及びエタノールのいずれか１種以上である、請求項８に記載の亜鉛／ヒスチジン／ポリグルタミン酸複合体の製造方法。
【請求項１１】
請求項１又は２に記載の亜鉛／ポリグルタミン酸複合体、又は請求項３〜７のいずれか一項に記載の亜鉛／ヒスチジン／ポリグルタミン酸複合体を含む、亜鉛供給用健康食品組成物。
【請求項１２】
請求項１又は２に記載の亜鉛／ポリグルタミン酸複合体、又は請求項３〜７のいずれか一項に記載の亜鉛／ヒスチジン／ポリグルタミン酸複合体を含む、花粉症予防又は緩和用食品組成物。
【請求項１３】
請求項１又は２に記載の亜鉛／ポリグルタミン酸複合体、又は請求項３〜７のいずれか一項に記載の亜鉛／ヒスチジン／ポリグルタミン酸複合体を含む、抗癌活性がある食品組成物。
【請求項１４】
請求項１又は２に記載の亜鉛／ポリグルタミン酸複合体、又は請求項３〜７のいずれか一項に記載の亜鉛／ヒスチジン／ポリグルタミン酸複合体を含む、花粉症予防、緩和又は治療用薬学組成物。
【請求項１５】
請求項１又は２に記載の亜鉛／ポリグルタミン酸複合体、又は請求項３〜７のいずれか一項に記載の亜鉛／ヒスチジン／ポリグルタミン酸複合体を含む、抗癌用薬学組成物。
【請求項１６】
前記癌は、ホジキン悪性リンパ腫、乳房癌、膠芽細胞腫及び肺癌のいずれか１種以上である、請求項１５に記載の抗癌用薬学組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本明細書は新規の亜鉛ポリグルタミン酸ヒスチジン複合体とその用途に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
恒常性と健康のために我が身体に必ず必要な亜鉛は水にほとんど溶けない状態である酸化亜鉛の形態として最近まで供給されているから、身体への吸収率が非常に低い。
【０００３】
したがって、亜鉛の身体吸収率を高めるための研究があった。アメリカのＳＳＶセラピューティクス社は一般アミノ酸と亜鉛の複合体を製造し、銅による毒性を緩和させることができるという特許を２０１２年に発表した(Om P. Goel, US 8,247,398 B2 (2012年8月21日))。スイスのベルン大学のタミスらは酢酸亜鉛を使って亜鉛と一般アミノ酸の複合体を製造してアルドール縮合（Ａｌｄｏｌ  ｃｏｎｄｅｎｓａｔｉｏｎ）の触媒として使用した結果を発表し(Tamis Darbre et al. Chem Comm. 2003, 1090-1091)、イランのソマイエらは亜鉛と一般アミノ酸の複合体が植物においてアミノ酸単独の使用よりずっと長い間に土壌内に存続するということを発表した(Somayeh Ghasemi et al. Soil Biology & Biochemistry. 2013, 63, 73-79)。フェレルらは亜鉛とヒスチジン複合体を炭酸亜鉛から作る方法を発表した(P. Ferrer et al, Journal of Physical Chemistry, 2014, 118, 2842-2850)。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】米国特許第８，２４７，３９８Ｂ２号公報
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】Tamis Darbre et al. Chem Comm. 2003, 1090-1091
【非特許文献２】Somayeh Ghasemi et al. Soil Biology & Biochemistry. 2013, 63, 73-79
【非特許文献３】P. Ferrer et al, Journal of Physical Chemistry, 2014, 118, 2842-2850
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
前記のように恒常性と健康のために我が身体に必ず必要な亜鉛は水にほとんど溶けない状態である酸化亜鉛の形態として最近まで供給されているから、身体への吸収率が非常に低かった。したがって、本発明の発明者らは亜鉛の吸収率を高めるための研究を行っているうち、ヒスチジン、ポリグルタミン酸を亜鉛と反応させて亜鉛がキレートされた複合体の新規の物質を製造し、前記新規物質は水によく溶ける性質があることを確認した。また、前記新規の物質は相当な抗癌活性効能があることを確認し、花粉が粘膜を刺激して発生する花粉症（ｐｏｌｌｉｎｏｓｉｓ）の緩和にも効果があることを確認した。
【０００７】
本発明の一側面は、ヒスチジン、ポリグルタミン酸に亜鉛を結合させて水によく溶ける安定した亜鉛ポリグルタミン酸複合体（Ａｌｅｘ２）を提供しようとする。
【０００８】
本発明の一側面は、前記複合体をカプセルに作り、これを我が身に必要な亜鉛供給体として提供しようとする。
【０００９】
本発明の一側面は、前記複合体をカプセルに作り、抗癌活性と花粉が粘膜を刺激して発生する花粉症（ｐｏｌｌｉｎｏｓｉｓ）の緩和効果を提供しようとする。
【００１０】
本発明の一側面は、前記複合体を注射剤型に作り、これを我が身に必要な亜鉛供給体として提供しようとする。
【００１１】
本発明の一側面は、前記複合体を注射剤型に作り、抗癌活性と花粉が粘膜を刺激して発生する花粉症（ｐｏｌｌｉｎｏｓｉｓ）の緩和効果を提供しようとする。
【００１２】
本発明の目的は以上で言及した目的に制限されない。本発明の目的は以下の説明によってより明らかになるはずであり、特許請求範囲に記載した手段及びその組合せによって実現されるであろう。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
本発明の一側面は、ポリガンマグルタミン酸及び亜鉛供給体から製造される亜鉛／ポリグルタミン酸複合体を提供する。
【００１４】
本発明の一側面で、前記複合体は、ポリガンマグルタミン酸１００重量部に対して、亜鉛供給体３０〜１５０重量部から製造される亜鉛／ポリグルタミン酸複合体を提供する。
【００１５】
本発明の一側面は、ヒスチジン、ポリガンマグルタミン酸及び亜鉛供給体から製造される亜鉛／ヒスチジン／ポリグルタミン酸複合体を提供する。
【００１６】
本発明の一側面で、前記複合体は、ヒスチジン２００重量部に対して、ポリガンマグルタミン酸３０〜７０重量部、及び亜鉛供給体３０〜１５０重量部から製造される亜鉛／ヒスチジン／ポリグルタミン酸複合体を提供する。
【００１７】
本発明の一側面で、前記亜鉛供給体は、酸化亜鉛、酢酸及び炭酸亜鉛のいずれか１種以上を含む亜鉛／ヒスチジン／ポリグルタミン酸複合体を提供する。
【００１８】
本発明の一側面で、前記複合体は、亜鉛含量が複合体総重量に対して１５重量％以上である亜鉛／ヒスチジン／ポリグルタミン酸複合体を提供する。
【００１９】
本発明の一側面で、前記複合体は、水にヒスチジン、ポリガンマグルタミン酸及び亜鉛供給体を添加し、還流した後、炭素数１〜５の低級アルコールを用いて複合体を析出することによって製造される亜鉛／ヒスチジン／ポリグルタミン酸複合体を提供する。
【００２０】
本発明の他の側面は、本発明の一側面による亜鉛／ヒスチジン／ポリグルタミン酸複合体の製造方法であって、
【００２１】
（ａ）水にヒスチジン、ポリガンマグルタミン酸及び亜鉛供給体を添加して還流する段階と、
【００２２】
（ｂ）還流された混合物を蒸留する段階と、
【００２３】
（ｃ）炭素数１〜５の低級アルコールを添加して複合体を析出する段階とを含む亜鉛／ヒスチジン／ポリグルタミン酸複合体の製造方法を提供する。
【００２４】
本発明の他の側面で、前記（ａ）段階は、ヒスチジン２００重量部に対してポリガンマグルタミン酸３０〜７０重量部及び亜鉛供給体３０〜１５０重量部を添加して還流する亜鉛／ヒスチジン／ポリグルタミン酸複合体の製造方法を提供する。
【００２５】
本発明の他の側面で、前記還流は３０分〜４時間行い、前記炭素数１〜５の低級アルコールは、イソプロパノール、ブタノール及びエタノールのいずれか１種以上である亜鉛／ヒスチジン／ポリグルタミン酸複合体の製造方法を提供する。
【００２６】
本発明のさらに他の側面は、本発明の一側面による亜鉛／ポリグルタミン酸複合体又は本発明の一側面による亜鉛／ヒスチジン／ポリグルタミン酸複合体を含む亜鉛供給用健康食品組成物を提供する。
【００２７】
本発明のさらに他の側面は、本発明の一側面による亜鉛／ポリグルタミン酸複合体又は本発明の一側面による亜鉛／ヒスチジン／ポリグルタミン酸複合体を含む花粉症予防又は緩和用食品組成物を提供する。
【００２８】
本発明のさらに他の側面は、本発明の一側面による亜鉛／ヒスチジン／ポリグルタミン酸複合体を含む抗癌活性がある食品組成物を提供する。
【００２９】
本発明のさらに他の側面は、本発明の一側面による亜鉛／ポリグルタミン酸複合体又は本発明の一側面による亜鉛／ヒスチジン／ポリグルタミン酸複合体を含む花粉症予防、緩和又は治療用薬学組成物を提供する。
【００３０】
本発明のさらに他の側面は、本発明の一側面による亜鉛／ポリグルタミン酸複合体又は本発明の一側面による亜鉛／ヒスチジン／ポリグルタミン酸複合体を含む抗癌用薬学組成物を提供する。
【００３１】
本発明のさらに他の側面で、前記癌は、ホジキン悪性リンパ腫、乳房癌、膠芽細胞腫及び肺癌などのいずれか１種以上である抗癌用薬学組成物を提供する。
【発明の効果】
【００３２】
本発明が提供する水溶性亜鉛アミノ酸複合体は亜鉛が必要なヒトや動植物に供給して亜鉛不足による異常現象を防止し、またこれらの化合物は抗癌活性を提供するとともに春期の花粉によって生ずる花粉症の症状を緩和させるのに用いることができる。
【００３３】
本発明の効果は以上で言及した効果に限定されない。本発明の効果は以下の説明で推論可能な全ての効果を含むものと理解されなければならないであろう。
【図面の簡単な説明】
【００３４】
【図１】本発明の実験例３−１によるホジキン悪性リンパ腫細胞に対する抗癌活性を測定したものであり、Ａｌｅｘ１は亜鉛とヒスチジン複合体（比較例１）、Ａｌｅｘ２は亜鉛、ヒスチジンポリガンマグルタミン酸複合体（実施例１）、ＨＤＬＭ２はホジキン悪性リンパ腫細胞である。
【図２】本発明の実験例３−２による血清がある状態で乳房癌細胞、脳の膠芽細胞腫及び肺癌細胞に対する抗癌活性を測定したものであり、Ａｌｅｘ１は亜鉛とヒスチジン複合体（比較例１）、Ａｌｅｘ２は亜鉛、ヒスチジンポリガンマグルタミン酸複合体（実施例１）、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１は乳房癌細胞、Ｕ８７−ＭＧは脳の膠芽細胞腫、Ａ５４９は肺癌細胞である。
【図３】本発明の実験例３−３による血清がない状態で乳房癌細胞、脳の膠芽細胞腫及び肺癌細胞に対する抗癌活性を測定したものであり、Ａｌｅｘ１は亜鉛とヒスチジン複合体（比較例１）、Ａｌｅｘ２は亜鉛、ヒスチジンポリガンマグルタミン酸複合体（実施例１）、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１は乳房癌細胞、Ｕ８７−ＭＧは脳の膠芽細胞腫、Ａ５４９は肺癌細胞である。
【図４】本発明の実験例３−４によるＮＫ細胞に対する活性測定結果である。
【図５】本発明の実験例４による一般細胞に対する毒性測定結果である。
【発明を実施するための形態】
【００３５】
他に明示しない限り、本明細書で使用した成分、反応条件、成分の含量を表現する全ての数字、値及び／又は表現は、このような数字が本質的に他のものの中でこのような値を得るのに発生する測定の多様な不確実性が反映された近似値であるので、全ての場合に“約”という用語で修飾されるものと理解されなければならない。また、本記載で数値範囲を開示する場合、このような範囲は連続的であり、他に指示しない限り、このような範囲の最小値から最大値が含まれた前記最大値までの全ての値を含む。さらに、このような範囲が整数を指示する場合、他に指示しない限り、最小値から最大値が含まれた前記最大値までを含む全ての整数が含まれる。
【００３６】
本明細書において、範囲を変数に対して記載する場合、前記変数は前記範囲の記載された終了点を含む記載した範囲内の全ての値を含むものと理解されるであろう。例えば、“５〜１０”の範囲は５、６、７、８、９、及び１０の値だけではなく、６〜１０、７〜１０、６〜９、７〜９などの任意の下位範囲を含み、５．５、６．５、７．５、５．５〜８．５及び６．５〜９などの記載した範囲の範疇に妥当な整数間の任意の値も含むものと理解されるであろう。また、例えば、“１０％〜３０％”の範囲は１０％、１１％、１２％、１３％などの値と３０％までを含む全ての整数だけではなく、１０％〜１５％、１２％〜１８％、２０％〜３０％などの任意の下位範囲を含み、１０．５％、１５．５％、２５．５％などのように記載された範囲の範疇内の妥当な整数間の任意の値も含むものと理解されるであろう。
【００３７】
以下、本発明について詳細に説明する。
【００３８】
本発明は、ポリグルタミン酸に亜鉛を結合させるか又はポリグルタミン酸にＬ−ヒスチジンと亜鉛を結合させて水によく溶ける安定した亜鉛／ポリグルタミン酸複合体又は亜鉛／ポリグルタミン酸／ヒスチジン複合体を作り、これを単独で又は多くの補助剤と混合してカプセル、注射剤型に作るか又はパウダーに製造して我が身に非常によく吸収される亜鉛供給体としての役割をするだけでなく、このような物質は癌細胞に対する抗癌活性と花粉が粘膜を刺激して発生する花粉症（ｐｏｌｌｉｎｏｓｉｓ）の緩和にも効果を示すことを確認し、ヒト、動物及び植物に使うためのものである。
【００３９】
前記亜鉛／ポリグルタミン酸複合体又は亜鉛／ポリグルタミン酸／ヒスチジン複合体の合成に関しては論文と特許に説明されて公示されていなく、ただ亜鉛と一般的なアミノ酸の複合体の製造は論文と特許に記述されていた。このような先行技術の特許と論文等はポリグルタミン酸、ヒスチジン亜鉛複合体を製造する方法についての説明と用途に関する内容も発表されたものがない。
【００４０】
よって、我が身によく吸収される水溶性亜鉛含有ポリグルタミン酸複合体又は水溶性亜鉛含有ポリグルタミン酸ヒスチジン複合体を製造し、吸収効率に優れた水溶性亜鉛供給体としての役割をするだけでなく、このような物質は癌細胞に対する抗癌活性と花粉が粘膜を刺激して発生する花粉症（ｐｏｌｌｉｎｏｓｉｓ）の緩和にも効果を示すことを実験的に確認したところ、ヒト及び動植物に使用可能な組成物を製造及び提供するためのものである。
【００４１】
本発明の一具現例で、水にポリガンマグルタミン酸及び酸化亜鉛を入れるか、水にヒスチジン、ポリガンマグルタミン酸及び酸化亜鉛を入れて２〜１０時間還流し、全部溶けた後、水がある程度残っている状態まで蒸留し、これにエタノールを含めたイソプロパノール、ブタノールなどの無害な種々のアルコールを使って固体を析出し、１２〜３６時間の間に室温で乾燥して所望の亜鉛／ポリグルタミン酸複合体又は亜鉛／ヒスチジン／ポリグルタミン酸複合体を製造する。
【００４２】
また、本発明の一具現例で、水にポリガンマグルタミン酸及び酢酸亜鉛を入れるか、ヒスチジン、ポリガンマグルタミン酸及び酢酸亜鉛を入れて２〜１０時間還流し、全部溶けた後、水がある程度残っている状態まで蒸留し、これにエタノールを含めたイソプロパノール、ブタノールなどの無害な種々のアルコールを使って固体を析出し、１２〜３６時間の間に室温で乾燥して所望の亜鉛／ポリグルタミン酸複合体又は亜鉛／ヒスチジン／ポリグルタミン酸複合体を製造する。
【００４３】
また、本発明の一具現例で、水にポリガンマグルタミン酸及び炭酸亜鉛を入れるか、ヒスチジン、ポリガンマグルタミン酸及び炭酸亜鉛を入れて２〜１０時間還流し、全部溶けた後、水がある程度残っている状態まで蒸留し、これにエタノールを含めたイソプロパノール、ブタノールなどの無害な種々のアルコールを使って固体を析出し、１２〜３６時間の間に室温で乾燥して所望の亜鉛／ポリグルタミン酸複合体又は亜鉛／ヒスチジン／ポリグルタミン酸複合体を製造する。
【００４４】
以下では本発明の多様な側面を説明する。
【００４５】
本発明の一側面は、ポリガンマグルタミン酸及び亜鉛供給体から製造される亜鉛／ポリグルタミン酸複合体を提供する。
【００４６】
本発明の一側面は、ヒスチジン、ポリガンマグルタミン酸及び亜鉛供給体から製造される亜鉛／ヒスチジン／ポリグルタミン酸複合体を提供する。
【００４７】
本発明の一側面で、前記複合体は、ヒスチジン２００重量部に対してポリガンマグルタミン酸３０〜７０重量部及び亜鉛供給体３０〜１５０重量部から製造される、亜鉛／ヒスチジン／ポリグルタミン酸複合体を提供する。
【００４８】
本発明の一側面で、前記亜鉛供給体は、酸化亜鉛、酢酸及び炭酸亜鉛のいずれか１種以上を含む、亜鉛／ポリグルタミン酸複合体又は亜鉛／ヒスチジン／ポリグルタミン酸複合体を提供する。
【００４９】
本発明の一側面で、前記複合体は、亜鉛含量が１５重量％以上である、亜鉛／ヒスチジン／ポリグルタミン酸複合体を提供する。
【００５０】
本発明の一側面で、前記複合体は、水にヒスチジン、ポリガンマグルタミン酸及び亜鉛供給体を添加して還流した後、炭素数１〜５の低級アルコールを用いて複合体を析出することによって製造される、亜鉛／ヒスチジン／ポリグルタミン酸複合体を提供する。
【００５１】
本発明の他の側面は、本発明の一側面による亜鉛／ヒスチジン／ポリグルタミン酸複合体の製造方法であって、
【００５２】
（ａ）水にヒスチジン、ポリガンマグルタミン酸及び亜鉛供給体を添加して還流する段階と、
【００５３】
（ｂ）還流された混合物を蒸留する段階と、
【００５４】
（ｃ）炭素数１〜５の低級アルコールを添加して複合体を析出する段階と、を含む亜鉛／ヒスチジン／ポリグルタミン酸複合体の製造方法を提供する。
【００５５】
本発明の他の側面で、前記（ａ）段階は、ヒスチジン２００重量部に対してポリガンマグルタミン酸３０〜７０重量部及び亜鉛供給体３０〜１５０重量部を添加して還流する、亜鉛／ヒスチジン／ポリグルタミン酸複合体の製造方法を提供する。
【００５６】
本発明の他の側面で、前記還流は３０分〜４時間行い、前記炭素数１〜５の低級アルコールは、イソプロパノール、ブタノール及びエタノールのいずれか１種以上である、亜鉛／ヒスチジン／ポリグルタミン酸複合体の製造方法を提供する。
【００５７】
本発明のさらに他の側面は、本発明の一側面による亜鉛／ヒスチジン／ポリグルタミン酸複合体を含む亜鉛供給用健康食品組成物を提供する。亜鉛が不足な場合、花粉などのアレルギー源に対する抵抗性が低くなることはもちろんのこと、免疫機能の悪化、紅板症、脱毛、圧迫点の痂皮形成、頭垢、身の開口部付近の化膿、かゆみ、荒い被毛及び過度な皮脂、続発性細菌感染、角化亢進、過度な色素沈着などの症状が現れることが知られている。特に、亜鉛が不足な場合、免疫機能の悪化による花粉症の可能性が高くなる。よって、亜鉛供給体としての食品組成物は前記のような疾患又は症状を予防あるいは緩和することができ、特に免疫機能の悪化による花粉症を予防あるいは緩和することができる。
【００５８】
本発明のさらに他の側面は、本発明の一側面による亜鉛／ヒスチジン／ポリグルタミン酸複合体を含む花粉症予防又は緩和用食品組成物を提供する。
【００５９】
本発明のさらに他の側面は、本発明の一側面による亜鉛／ヒスチジン／ポリグルタミン酸複合体を含む抗癌活性がある食品組成物を提供する。
【００６０】
本発明のさらに他の側面による食品組成物は、活性成分として亜鉛／ヒスチジン／ポリグルタミン酸複合体を含む。前記活性成分は、錠剤、カプセル剤、粉末剤、顆粒剤、丸剤、液状剤、懸濁剤などに製造した食品として摂取するか、あるいは一般食品に添加して摂取することができる。前記健康食品は、一般薬品とは違い、食品を原料とするので、薬品の長期服用の際に発生し得る副作用などがない利点がある。活性成分の含有量はその使用目的（予防又は改善用）によって適宜決定することができる。一般的に、健康食品組成物中に活性成分は０．１〜９０重量％含まれることができる。しかし、健康及び衛生を目的とするか又は健康調節を目的とする長期間の摂取の場合には、前記量は前記範囲以下であることができ、安全性の面で何らの問題がないから、活性成分は前記範囲以上の量でも使われることができる。
【００６１】
前記食品の種類には特別な制限はない。前記活性成分を添加することができる食品の例としては、ドリンク剤、飲料水、イオン飲料、乳製品、肉類、ソーセージ、パン、麺類、キャンティー類、スナック類、ガム、お茶、ビタミン複合剤を含む通常的な意味の健康機能食品を全部含む。前記食品の性状も特に制限されなく、固状、半固体状、ゲル状、液状、粉末状などのいずれでもよい。
【００６２】
本発明の健康食品組成物を用いて飲料に製造することができる。飲料に含まれる成分として活性成分以外に他の成分の選択に特別な制限がなく、通常の飲料のようにさまざまな香味剤又は天然炭水化物などを追加成分として含むことができる。上述した天然炭水化物の例は、単糖類、例えば葡萄糖、果糖など、二糖類、例えばマルトース、スクロースなど、及び多糖類、例えばデキストリン、シクロデキストリンなどのような通常の糖、及びキシリトール、ソルビトール、エリトリトールなどの糖アルコールである。上述したもの以外の香味剤として、天然香味剤（タウマチン）、ステビア抽出物（例えば、レバウジオシドＡ、グリシルリジンなど）及び合成香味剤（サッカリン、アスパルテームなど）を有利に使うことができる。前記天然炭水化物の量は、本発明の組成物１００ｍｌ当たり、一般的に約１〜２０ｇ、好ましくは約５〜１２ｇである。
【００６３】
また、本発明の食品組成物は、活性成分以外にもさまざまな営養剤、ビタミン、鉱物（電解質）、合成風味剤及び天然風味剤などの風味剤、着色剤及び充填剤（チーズ、チョコレートなど）、ペクチン酸及びその塩、アルギン酸及びその塩、有機酸、保護性コロイド増粘剤、ｐＨ調節剤、安定化剤、防腐剤、グリセリン、アルコール、炭酸飲料に使われる炭酸化剤などを添加剤として含むことができる。その他にも、天然果物ジュース及び果物ジュース飲料及び野菜飲料の製造のための果肉を含むことができる。このような成分は独立的に又は組合せで使うことができる。このような添加剤の比はそんなに重要ではないが、本発明の健康食品組成物中に０．１〜２０重量％の範囲で選択されることが一般的である。
【００６４】
本発明のさらに他の側面は、本発明の一側面による亜鉛／ヒスチジン／ポリグルタミン酸複合体を含む花粉症の予防、緩和又は治療用薬学組成物を提供する。
【００６５】
本発明のさらに他の側面は、本発明の一側面による亜鉛／ヒスチジン／ポリグルタミン酸複合体を含む抗癌用薬学組成物を提供する。
【００６６】
本発明のさらに他の側面で、前記癌は、ホジキン悪性リンパ腫、乳房癌、膠芽細胞腫及び肺癌などのいずれか１種以上である抗癌用薬学組成物を提供する。
【００６７】
本発明のさらに他の側面による薬学組成物は、通常の無毒性薬剤学的に許容可能な担体、補強剤及び賦形剤などを添加して薬剤学的分野で通常的な製剤、例えば錠剤、カプセル剤、トローチ剤、液剤、懸濁剤などの経口投与用製剤に製造することができる。本発明の複合体組成物に使用可能な賦形剤としては、甘味剤、結合剤、溶解剤、溶解補助剤、湿潤剤、乳化剤、等張化剤 、吸着剤、崩壊剤、酸化防止剤、防腐剤、滑沢剤、充填剤、芳香剤などを含むことができる。例えば、ラクトース、デキストロース、スクロース、マンニトール、ソルビトール、セルロース、グリシン、シリカ、タルク、ステアリン酸、ステアリン、マグネシウムステアリン酸塩、マグネシウムアルミニウム珪酸塩、澱粉、ゼラチン、トラガカントゴム、アルギニン酸、アルギン酸ナトリウム、メチルセルロース、ソジウムカルボキシルメチルセルロース、寒天、水、エタノール、ポリエチレングリコール、ポリビニルピロリドン、塩化ナトリウム、塩化カルシウム、オレンジエッセンス、いちごエッセンス、バニラ香などを挙げることができる。
【００６８】
また、本発明の複合体又はこれを含む薬学組成物の人体に対する投与量は、患者のお年、体重、性別、投与形態、健康状態及び疾病程度によって変わることができ、体重が７０ｋｇの大人患者を基準とするとき、一般的に１日に０．０１ｍｇ〜５０００ｍｇであり、一定の時間間隔で１日に１回〜数回で分割服用することもできる。
発明の実施のための形態
【００６９】
以上で説明したような本発明を次の実施例に基づいてより詳細に説明するが、本発明がこれに限定されるものではない。
【００７０】
［実施例］
【００７１】
実施例１．酸化亜鉛を使った亜鉛ヒスチジンポリガンマグルタミン酸複合体（Ａｌｅｘ２）の合成
【００７２】
水１０００ｍＬにヒスチジン２００ｇ、ポリガンマグルタミン酸５０ｇ、酸化亜鉛４９．８ｇを入れ、２時間還流し、全部溶けた後、水を蒸留する。エタノール１０００ｍＬを入れて固体を得て濾過し、室温で２４時間乾燥して白色パウダーの固体２７０ｇを得る。
【００７３】
1H-NMR (400 MHz, D 2O) δ7.61 (s, 1H), 6.90 (s, 1H), 3.86 (m, 1H), 3.07 (m, 2H), 2.22 (m, 0.5H), 1.82 (m, 0.5H); Atomic absorption spectroscopy (AAS) 亜鉛含量15.4%
【００７４】
実施例２．酢酸亜鉛を使用した亜鉛ヒスチジンポリガンマグルタミン酸複合体の合成
【００７５】
水１０００ｍＬにヒスチジン２００ｇ、ポリガンマグルタミン酸５０ｇ、酢酸亜鉛１３４．３ｇを入れ、２時間還流し、全部溶けた後、水を蒸留する。エタノール１０００ｍＬを入れて固体を得て濾過し、室温で２４時間乾燥して白色パウダーの固体２６０ｇを得る。
【００７６】
1H-NMR (400 MHz, D 2O) δ7.61 (s, 1H), 6.90 (s, 1H), 3.86 (m, 1H), 3.07 (m, 2H), 2.22 (m, 0.5H), 1.82 (m, 0.5H); Atomic absorption spectroscopy (AAS) 亜鉛含量15.9%
【００７７】
実施例４．炭酸亜鉛を使った亜鉛ヒスチジンポリガンマグルタミン酸複合体の合成
【００７８】
水１０００ｍＬにヒスチジン２００ｇ、ポリガンマグルタミン酸５０ｇ、炭酸亜鉛７６．７ｇを入れ、２時間還流し、全部溶けた後、水を蒸留する。エタノール１０００ｍＬを入れて固体を得て濾過し、室温で２４時間乾燥して白色パウダーの固体２５０ｇを得る。
【００７９】
1H-NMR (400 MHz, D 2O) δ7.61 (s, 1H), 6.90 (s, 1H), 3.86 (m, 1H), 3.07 (m, 2H), 2.22 (m, 0.5H), 1.82 (m, 0.5H); Atomic absorption spectroscopy (AAS) 亜鉛含量16.9%
【００８０】
実施例５．酸化亜鉛を使った亜鉛とポリガンマグルタミン酸複合体の合成
【００８１】
水２００ｍＬにポリガンマグルタミン酸１０ｇ、酸化亜鉛３．５４ｇを入れ、２時間還流して得た固体を濾過し、室温で２４時間乾燥して白色パウダーの固体１３ｇを得る。
【００８２】
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6 + D 2O) δ8.20 (s, 1H), 4.10 (s, 1H), 2.20 (bs, 2H), 1.98 (bs, 1H), 1.89 (bs, 1H)
【００８３】
実施例６．酢酸亜鉛を使用した亜鉛とポリガンマグルタミン酸複合体の合成
【００８４】
水２００ｍＬにポリガンマグルタミン酸１０ｇ、酢酸亜鉛９．５４ｇを入れ、２時間還流して得た固体を濾過し、室温で２４時間乾燥して白色パウダーの固体１１ｇを得る。
【００８５】
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6 + D 2O) δ8.20 (s, 1H), 4.10 (s, 1H), 2.20 (bs, 2H), 1.98 (bs, 1H), 1.89 (bs, 1H)
【００８６】
実施例７．炭酸亜鉛を使った亜鉛とポリガンマグルタミン酸複合体の合成
【００８７】
水２００ｍＬにポリガンマグルタミン酸１０ｇ、炭酸亜鉛５．４５ｇを入れ、２時間還流して得た固体を濾過し、室温で２４時間乾燥して白色パウダーの固体１０ｇを得る。
【００８８】
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6 + D 2O) δ8.20 (s, 1H), 4.10 (s, 1H), 2.20 (bs, 2H), 1.98 (bs, 1H), 1.89 (bs, 1H)
【００８９】
比較例１．亜鉛ヒスチジン複合体（Ａｌｅｘ１）の合成
【００９０】
水２０００ｍＬにヒスチジン２５０ｇ、酸化亜鉛６５．６ｇを入れ、２時間還流する。約１５００ｍＬの水を蒸留し、エタノール５００ｍＬを入れて固体を析出させる。析出された固体を濾過し、室温で２４時間乾燥して２９８．０ｇの亜鉛ヒスチジン複合体を得る。
【００９１】
収率99%; 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6 + D 2O) δ7.65 (s, 1H), 6.96 (s, 1H), 3.89 (m, 1H), 3.10 (m, 2H); Atomic absorption spectroscopy (AAS) 亜鉛含量14.5%
【００９２】
［実験例］
【００９３】
前記で製造された実施例と比較例を対象として下記のような実験を行った。
【００９４】
実験例１．亜鉛ヒスチジンポリグルタミン酸複合体（Ａｌｅｘ２）の水溶性
【００９５】
室温（約２５℃、１気圧）で水２５ｍＬに酸化亜鉛１ｇを入れる場合、溶液はほとんど溶けない状態である反面、実施例１〜４の亜鉛ヒスチジンポリグルタミン酸複合体は同じ条件で水に入れた途端溶解した。
【００９６】
実施例５〜７の亜鉛とポリグルタミン酸複合体は同じ条件で亜鉛、ヒスチジン、ポリグルタミン酸複合体よりはよく溶けないが、比較的よく溶解した。
【００９７】
実験例２．亜鉛ヒスチジンポリグルタミン酸複合体の亜鉛含量
【００９８】
原子吸光分光学法（Ａｔｏｍｉｃ  ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ  ｓｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｙ、ＡＡＳ）を用いて比較例１の亜鉛ヒスチジン複合体と実施例１の亜鉛ヒスチジンポリガンマグルタミン酸複合体の亜鉛含量を調査した結果、比較例１は１４．５％、実施例１は１５．４％（重量比）を示した。また、実施例５の亜鉛とポリグルタミン酸複合体の亜鉛含量は１６．６％（重量比）を示した。
【００９９】
実験例３．亜鉛ヒスチジンポリグルタミン酸複合体の抗癌性
【０１００】
実験例３−１．ホジキン悪性リンパ腫に対する抗癌活性測定
【０１０１】
前記実施例１と比較例１を対象としてホジキン悪性リンパ腫細胞に対する抗癌活性を測定した。
【０１０２】
実施例１と比較例１を対象として結晶性硬化性ホジキン病４期の７４歳男性の胸膜滲出液から得たＨＤＬＭ２ホジキン悪性リンパ腫細胞血清がある状態と血清がない状態に区分し、２４時間の間にそれぞれ０、１、５、１０、５０、１００、２００及び３００μｇ／ｍｌの濃度で処理したとき、細胞の生存能力（ｃｅｌｌ  ｖｉａｂｉｌｉｔｙ）をＭＴＴ  ａｓｓａｙ法を用いてＥＬＩＳＡ  ｒｅａｄｅｒで測定した。
【０１０３】
実験結果は図１の通りであった。
【０１０４】
実験例３−２．乳房癌、膠芽細胞腫及び肺癌細胞に対して血清がある状態で抗癌活性測定
【０１０５】
前記実施例１と比較例１を対象として、乳房癌、膠芽細胞腫及び肺癌細胞に対して血清がある状態で各癌細胞に対する抗癌活性を測定した。
【０１０６】
乳房癌細胞はヒトの乳房癌細胞であるＭＤＡ−ＭＢ−２３１、
【０１０７】
膠芽細胞腫細胞は４４歳女性から得た神経膠芽癌細胞であるＵ８７−ＭＧ、
【０１０８】
肺癌細胞は５８歳男性から得た腺癌細胞であるＡ５４９を使った。
【０１０９】
前記細胞に対して、血清がある状態で２４時間の間にそれぞれ０、１、５、１０、５０、１００、２００及び３００μｇ／ｍｌの濃度で処理したとき、細胞の生存能力（ｃｅｌｌ  ｖｉａｂｉｌｉｔｙ）を測定した。
【０１１０】
実験結果は図２の通りであった。
【０１１１】
実験例３−３．乳房癌、膠芽細胞腫及び肺癌細胞に対して血清がない状態で抗癌活性測定
【０１１２】
前記実施例１と比較例１を対象として、乳房癌、膠芽細胞腫及び肺癌細胞に対して血清がない状態で各癌細胞に対する抗癌活性を測定した。
【０１１３】
実験結果は図３の通りであった。
【０１１４】
実験例３−４．兔疫細胞であるＮＫ細胞活性測定
【０１１５】
前記実施例１と比較例１を対象として、ＮＫ細胞の活性を測定した。ＮＫ細胞は癌細胞の除去に重要な役割をするものと知られている。
【０１１６】
ＮＫ細胞株（ｃｅｌｌ  ｌｉｎｅ）としてＮＫ細胞リンパ腫を病む患者に由来のＮＫ−９２を使用し、実施例１と比較例１を処理してＮＫ細胞の活性を測定した。
【０１１７】
実験結果は図４の通りであった。図４で確認することができるように、ヒスチジン／亜鉛／ポリグルタミン酸複合体は、比較例１に比べ、癌細胞の除去に重要な役割をするＮＫ細胞の増殖を向上させることにより、癌の進行を抑制する能力が優秀であることを確認した。
【０１１８】
実験例４．一般細胞に対する実施例１及び比較例１の毒性実験
【０１１９】
実施例１と比較例１を用いて正常細胞であるヒトＥＳ細胞株（Ｈｕｍａｎ  ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ  ｋｉｄｎｅｙ  ｃｅｌｌ  ｌｉｎｅ）を対象として毒性を測定した。ヒトの腎臓細胞に由来の２９３Ｔ細胞を実施例１と比較例１で処理した後、毒性を測定した。
【０１２０】
実験結果は図５の通りであった。図５で確認することができるように、実施例１のヒスチジン／亜鉛／ポリグルタミン酸複合体は、比較例１に比べ、正常細胞で細胞毒性が減少した。よって、実施例１の複合体は、比較例１の複合体に比べ、特異的に癌細胞の細胞毒性に作用することを確認することができる。
【０１２１】
前記実験例で確認したように、本発明による新規の亜鉛ヒスチジンポリグルタミン酸複合体又は亜鉛ポリグルタミン酸複合体は、これをカプセル又は注射剤型に作り、これを我が身に必要な亜鉛供給体としての役割をするだけでなく、このような物質は癌細胞に対する抗癌活性を提供するとともに花粉が粘膜を刺激して発生する花粉症（ｐｏｌｌｉｎｏｓｉｓ）の緩和にも効果を示すことを確認し、よってヒト及び動植物に使用可能な組成物を製造して提供するためのものである。
【０１２２】
〔製剤例〕
一方、本発明による亜鉛／ポリグルタミン酸複合体又は亜鉛／ヒスチジン／ポリグルタミン酸複合体は目的によってさまざまな形態に製剤化が可能である。次は本発明による亜鉛／ポリグルタミン酸複合体の中で実施例５、及び亜鉛／ヒスチジン／ポリグルタミン酸複合体の中で実施例１の化合物を含有させたいくつかの製剤化方法を例示したものであり、本発明がこれに限定されるものではない。
【０１２３】
製剤例１．錠剤（直接加圧）
【０１２４】
実施例１の５．０ｍｇを篩にかけた後、ラクトース１４．１ｍｇ、クロスポビドンＵＳＮＦ０．８ｍｇ及びステアリン酸マグネシウム０．１ｍｇを混合し、加圧して錠剤に製造した。
【０１２５】
製剤例２．錠剤（湿式造粒）
【０１２６】
実施例１の５．０ｍｇを篩にかけた後、ラクトース１６．０ｍｇと澱粉４．０ｍｇを混合した。ポリソルベート８００．３ｍｇを純粋な水に溶かした後、この溶液の適量を添加した後、微粒化した。乾燥の後、微粒を篩にかけた後、コロイダル二酸化ケイ素２．７ｍｇ及びステアリン酸マグネシウム２．０ｍｇと混合した。微粒を加圧して錠剤に製造した。
【０１２７】
製剤例３．粉末とカプセル剤
【０１２８】
実施例１の５．０ｍｇを篩にかけた後、ラクトース１４．８ｍｇ、ポリビニルピロリドン１０．０ｍｇ、ステアリン酸マグネシウム０．２ｍｇとともに混合した。混合物を適当な装置を使って硬いＮｏ．５ゼラチンカプセルに満たした。
【０１２９】
製剤例４．注射剤
【０１３０】
実施例１の１００ｍｇを含有させ、その他にもマンニトール１８０ｍｇ、Ｎａ2ＨＰＯ4／Ｈ2Ｏ２６ｍｇ及び蒸留水２９７４ｍｇを含有させて注射剤を製造した。
【０１３１】
製剤例５．錠剤（直接加圧）
【０１３２】
実施例５の５．０ｍｇを篩にかけた後、ラクトース１４．１ｍｇ、クロスポビドンＵＳＮＦ０．８ｍｇ及びステアリン酸マグネシウム０．１ｍｇを混合し、加圧して錠剤に製造した。
【０１３３】
製剤例６．錠剤（湿式造粒）
【０１３４】
実施例５の５．０ｍｇを篩にかけた後、ラクトース１６．０ｍｇと澱粉４．０ｍｇを混合した。ポリソルベート８００．３ｍｇを純粋な水に溶かした後、この溶液の適量を添加した後、微粒化した。乾燥の後、微粒を篩にかけた後、コロイダル二酸化ケイ素２．７ｍｇ及びステアリン酸マグネシウム２．０ｍｇと混合した。微粒を加圧して錠剤に製造した。
【０１３５】
製剤例７．粉末とカプセル剤
【０１３６】
実施例５の５．０ｍｇを篩にかけた後、ラクトース１４．８ｍｇ、ポリビニルピロリドン１０．０ｍｇ、ステアリン酸マグネシウム０．２ｍｇとともに混合した。混合物を適当な装置で硬いＮｏ．５ゼラチンカプセルに満たした。
【０１３７】
製剤例８．注射剤
【０１３８】
実施例５の１００ｍｇを含有させ、その他にもマンニトール１８０ｍｇ、Ｎａ2ＨＰＯ4／Ｈ2Ｏ２６ｍｇ及び蒸留水２９７４ｍｇを含有させて注射剤を製造した。
【０１３９】
以上、添付図面に基づいて本発明の実施例を説明したが、本発明が属する技術分野で通常の知識を有する者は本発明がその技術的思想又は必須な特徴を変更せずに他の具体的な形態に実施できるということが理解可能である。したがって、以上で記述した実施例は全ての面で例示的なものであり、限定的なものではないと理解しなければならない。
【図１】
2021530208.tif 000003
【図２】
2021530208.tif 000004
【図３】
2021530208.tif 000005
【図４】
2021530208.tif 000006
【図５】
2021530208.tif 000007
【国際調査報告】
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2021530208.tif 000009
2021530208.tif 000010
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