(57)【要約】本発明は、懸濁物サンプルを分画するためのデバイスおよびこのようなデバイスの使用に関する。さらに、本発明はまた、懸濁物サンプルを液相および固相に分画する方法に関する。本発明はまた、溶媒および異なる分子量を有しかつ上記溶媒中に溶解された２またはこれより多くの構成要素を含むサンプルを、上記２またはこれより多くの構成要素に分離するためのデバイスおよび方法に関する。上記デバイスは、少なくとも１種のポリマーマトリクス要素を含み得る。【特許請求の範囲】
【請求項１】
溶媒および異なる分子量を有しかつ前記溶媒中に溶解された２種の構成要素を含むサンプルを、前記２種の構成要素に分離するために、または懸濁物サンプルを液相および固相に分画するために構成されたデバイスであって、前記デバイスは、少なくとも１種のポリマーマトリクス要素を含み、前記ポリマーマトリクス要素は、多孔性ポリマー足場および前記ポリマー足場内の間隙孔空間を含み、ここで前記多孔性ポリマー足場は、前記ポリマーマトリクス要素が、前記デバイスの使用中に曝される少なくとも１つの外部条件、例えば、ｐＨ、温度、塩条件、化学物質の存在または非存在、の変化に応答性のポリマーから構成される、デバイス。
【請求項２】
少なくとも１個のサンプル容器をさらに含み、前記少なくとも１個のサンプル容器は、前記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素を含むかまたは含むように構成され、前記少なくとも１個のサンプル容器は、溶媒および異なる分子量を有しかつ前記溶媒中に溶解された２種の構成要素を含むサンプル、または懸濁物サンプルを受容し得る、請求項１に記載のデバイス。
【請求項３】
前記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素は、好ましくはビーズ、球体、小塊、玉、立方体、直方体、ブロック、楕円体、もしくは不規則な形状の本体の形状にある、肉眼で見える独立粒子であるか、または前記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素は、前記デバイス内の基材の表面上に固定化された肉眼で見える本体もしくは層であるかのいずれかである、前述の請求項のいずれかに記載のデバイス。
【請求項４】
前記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素は、前記デバイスから切り離し可能または除去可能であり、好ましくは、前記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素は、使い捨ての１回使い切りポリマーマトリクス要素である、前述の請求項のいずれかに記載のデバイス。
【請求項５】
前記デバイスは、前記ポリマーマトリクス要素が、前記デバイスの使用中に曝露される少なくとも１つの外部条件の変化をもたらす手段をさらに含み、ここで好ましくは、少なくとも１つの外部条件の変化をもたらす前記手段は、加熱および／または冷却手段である、前述の請求項のいずれかに記載のデバイス。
【請求項６】
前記手段、好ましくは前記加熱および／または冷却手段は、前記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素を、少なくとも１つの外部条件の変化に曝露するように構成され、ここで好ましくは、前記手段は、前記デバイスの一部である、および／または前記デバイスに組み込まれる、および／または前記懸濁物サンプルと接触するようになるもしくは前記懸濁物サンプルと接続するようになるように構成される、請求項５に記載のデバイス。
【請求項７】
前記デバイスは、前記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素の取り扱いを可能にするように構成されたキャリアツールをさらに含み、前記キャリアツールは、前記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素が固定化される表面を有する基材として作用し、前記キャリアツールは、溶媒および異なる分子量を有しかつ前記溶媒中に溶解された２種の構成要素を含むサンプルに、または懸濁物サンプルに浸され得るような、ならびに前記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素を、前記サンプル、好ましくは前記懸濁物サンプルと接触し得るような寸法にされる、前述の請求項のいずれかに記載のデバイス。
【請求項８】
前記キャリアツールは、前記ポリマーマトリクス要素が、前記デバイスの使用中に曝露される少なくとも１つの外部条件、例えば、ｐＨ、温度、塩条件、化学物質の存在または非存在、の変化をもたらし得るように構成され、ここで好ましくは、前記キャリアツールは、温度の変化をもたらし得るように構成される、請求項７に記載のデバイス。
【請求項９】
前記キャリアツールは、前記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素を加熱および／もしくは冷却するための加熱および／または冷却手段を含むか、または前記キャリアツールは、前記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素を加熱および／または冷却するための加熱および／または冷却手段と接続されているかまたは接触しており、ここで好ましくは、前記加熱および／または冷却手段は、請求項５もしくは６に記載の加熱および／または冷却手段である、請求項８に記載のデバイス。
【請求項１０】
前記キャリアツールは、使い捨ての１回使い切りキャリアツールであり、前記加熱および／または冷却手段に、切り離し可能に接続されるか、切り離し可能に接触されるか、または切り離し可能に含むように構成され、ここで好ましくは、上記キャリアツールは、ペン、スティック、ロッド、シリンダー、バー、棒、バトンもしくは部材として構成され、ここで前記キャリアツールは、上記加熱および／または冷却手段に切り離し可能に接続するか、切り離し可能に接触するか、または切り離し可能に含むインターフェースを有する、請求項７〜９のいずれかに記載のデバイス。
【請求項１１】
前記デバイスは、少なくとも１個の液相収集容器をさらに含み、上記少なくとも１個の液相収集容器は、上記ポリマーマトリクス要素および／または存在する場合には、前記ポリマーマトリクス要素が前記キャリアツール上に固定化された上記キャリアツールを、取り込むように構成される、前述の請求項のいずれかに記載のデバイス。
【請求項１２】
ａ）前記サンプル容器および／もしくは存在する場合には、前記キャリアツール、ならびに／または存在する場合には、前記液相収集容器は、前記固相を前記ポリマーマトリクス要素から機械的に除去する手段、例えば、オリフィス、狭窄部、スライド式リング、リップ、縁部または開口部を含み、上記手段の内部寸法は、前記ポリマーマトリクス要素の外側寸法にマッチするか；あるいはｂ）前記サンプル容器および／もしくは存在する場合には、前記キャリアツール、ならびに／または存在する場合には、前記液相収集容器は、前記固相に対して親和性を有する物質を含み、前記物質に対して、前記固相は、前記物質と接触した状態にあるかまたは接触するようになる場合に、好ましくは接着するか；あるいはｃ）前記サンプル容器および／もしくは存在する場合には、前記キャリアツール、ならびに／または存在する場合には、前記液相収集容器は、前記固相を前記ポリマーマトリクス要素から洗い流す手段、例えば、前記固相を前記ポリマーマトリクス要素から洗い流す液体を排出するジェットを含むか；あるいはｄ）前記デバイスは、前記固相を前記ポリマーマトリクス要素から除去する分離ツール、例えば、スパチュラ、ブレード、スクレイパーをさらに含む、請求項２〜１１のいずれかに記載のデバイス。
【請求項１３】
溶媒および異なる分子量を有しかつ前記溶媒中に溶解された２種の構成要素を含む前記サンプルは、前記２種の構成要素のうちの一方としての高分子構成要素、例えば、タンパク質もしくはペプチドもしくは核酸、および前記２種の構成要素のうちのもう一方としての低分子構成要素、例えば、色素もしくは塩を含む水性サンプルであるか、あるいは前記懸濁物サンプルは、全血サンプルであり、前記全血サンプルの前記液相は、血漿であり、前記全血サンプルの前記固相は、前記全血サンプルの血球であるかまたは前記全血サンプルの血球を含む、前述の請求項のいずれかに記載のデバイス。
【請求項１４】
前記ポリマーマトリクス要素が、前記デバイスの使用中に曝露される少なくとも１つの外部条件の変化に応答性の前記ポリマーは、好ましくは、ポリ（Ｎ−イソプロピルアクリルアミド）（ｐＮＩＰＡＭ）、ポリ（Ｎ−イソプロピルアクリルアミド／Ｎ，Ｎ’−メチレンビス（アクリルアミド）、ポリ（Ｎ−イソプロピルアクリルアミド）−ｃｏ−（アクリル酸）、ポリ（Ｎ−イソプロピルアクリルアミド）−ｃｏ−（アクリル酸）−ｃｏ−（ポリ（エチレングリコール）メチルエーテルアクリレート、ポリ（Ｎ−イソプロピルアクリルアミド）−ｃｏ−（ポリ（エチレングリコール）ジアクリレート、ポリ（Ｎ−イソプロピルアクリルアミド）−ｃｏ−（ポリ（エチレングリコール）メチルエーテルアクリレート、ポリ［２−（ジメチルアミノ）エチルメタクリレート]（ｐＤＭＡＥＭＡ）、ヒドロキシプロピルセルロース、ポリ（ビニルカプロラクタム）（Ｐ（ＶＣＬ）、およびポリビニルメチルエーテルから選択される下限臨界溶液温度を有する熱応答性ポリマー（ＬＣＳＴポリマー）である熱応答性ポリマーであるか、または前記熱応答性ポリマーは、好ましくは、ポリ（Ｎ−アクリロイルグリシンアミド）（ＰＮＡＧＡ）、ポリ（アリルアミン）−ｃｏ−ポリ（アリルウレア）およびその誘導体、ポリ（メタクリルアミド）、ポリ（Ｎ−アクリロイルアスパラギンアミド）、ポリ（Ｎ−メタクリロイルグルタミンアミド）、ポリ（アクリルアミド）−ｃｏ−（アクリロニトリル）、ポリ（スルホベタイン）、ポリ（ホスホリルコリン）から選択される、上限臨界溶液温度（ＵＣＳＴ）を有する熱応答性ポリマーであるかのいずれかの熱応答性ポリマーであり、ここでより好ましくは、前記応答性ポリマー、特に、前記熱応答性ポリマーは、好ましくは、前記ポリマー内の異なるポリマー鎖の間を架橋および相互接続する少なくとも１種の架橋試薬によるか、または前記ポリマーマトリクス要素に隣接して、前記デバイス内に基材を、特に、実質的に平らなもしくは弯曲した基材を提供することによるかのいずれかによって、および前記基材に、特に、前記基材の表面に、前記ポリマーの異なるポリマー鎖を界面架橋することによって、架橋される、前述の請求項のいずれかに記載のデバイス。
【請求項１５】
前記間隙孔空間は、孔を有し、前記孔の平均直径は、＜５μｍ、好ましくは＜３μｍ、より好ましくは＜１μｍである、前述の請求項のいずれかに記載のデバイス。
【請求項１６】
前記デバイスは、１０μｌ〜５００μｌの範囲にある容積を有する懸濁物サンプルを分画するような寸法にされ、前記間隙孔空間は、前記懸濁物サンプルのうちの少なくとも５０％、好ましくは少なくとも７５％、より好ましくは少なくとも９０％、およびさらにより好ましくは少なくとも９５％を取り込む容積を有し、ここで好ましくは、前記懸濁物サンプルは、１０μｌ〜２００μｌ、好ましくは５０μｌ〜２００μｌ、より好ましくは１００μｌ〜２００μｌの容積を有する、前述の請求項のいずれかに記載のデバイス。
【請求項１７】
懸濁物サンプルを液相および固相に分画する方法であって、前記方法は、
ａ）  任意の順序において、しかし互いから別個に、請求項１〜１６のいずれかに記載のデバイス、および懸濁物サンプルを提供する工程であって、ここで前記デバイスの前記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素は、乾燥した状態にあるか、または前記デバイスの前記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素は、前記応答性ポリマーが収縮した状態にあるが、前記デバイスの前記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素は湿った状態にある条件下で提供される工程；
ｂ）前記デバイスの前記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素を、前記ポリマーマトリクス要素が膨張した状態を可逆的にとることを可能にし、従って、前記懸濁物サンプルにおける液相が前記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素の前記間隙孔空間に入ることを可能にする外部条件下で、前記懸濁物サンプルに曝露すると同時に、前記懸濁物サンプルにおける固相を前記間隙孔空間から排除する工程；
ｃ）  前記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素を前記サンプルから除去し、それによって、前記間隙孔空間内に含まれる前記液相を前記サンプルから除去し、それによって、前記液相を前記サンプルにおける固相から分離する工程、
を包含する方法。
【請求項１８】
工程ｃ）において、前記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素は、存在する場合には、請求項２において規定されるとおりのサンプル容器から除去され、存在する場合には、請求項１１に規定されるとおりの液相収集容器に移される、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記方法は、
ｄ）  前記ポリマーマトリクス要素が曝露される外部条件を、前記ポリマーマトリクス要素が収縮した状態を可逆的にとることを可能にする条件に変化させ、それによって、前記液相を前記ポリマーマトリクス要素から放出する工程、
をさらに包含する請求項１７〜１８のいずれかに記載の方法。
【請求項２０】
懸濁物サンプルを液相および固相に分画するための、好ましくは全血サンプルを血漿および血球に分画するための、請求項１〜１６のいずれかに規定されるとおりのデバイスの、または請求項１〜１４のいずれかに規定されるとおりの、少なくとも１つの外部条件、例えば、ｐＨ、温度、塩条件、化学物質の存在もしくは非存在の変化に応答性のポリマーの使用であって、ここで好ましくは、前記使用は、請求項１７〜１８のいずれかに規定されるとおりの工程ａ）〜ｃ）、および必要に応じて、請求項１９に規定されるとおりの工程ｄ）を含む、使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、懸濁物サンプルを分画するためのデバイス、およびこのようなデバイスの使用に関する。さらに、本発明はまた、懸濁物サンプルを液相および固相に分画する方法に関する。本発明はまた、溶媒および異なる分子量を有しかつ上記溶媒中に溶解された２またはこれより多くの構成要素を含むサンプルを、上記２またはこれより多くの構成要素に分離するためのデバイスおよび方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
懸濁物サンプルを異なる相に分離することは、熾烈な研究の対象であり、長年にわたって実践されてきた。ビールもしくはワインの清澄化またはミルクのスキミングは、代表例である。
血液は、水性の液体中に懸濁されている粒状画分のよい例と考えられ得る。全血の、細胞構成要素および血漿構成要素への分画は、多くの生体分析ワークフローの中で重要な工程を構成する。代表的には、これは、上記サンプルを、相当するサンプル採取容器の中で遠心分離することによって達成される。上記細胞構成要素を、遠心力場における密度によって、または凝固に続いて遠心分離によって、液体構成要素から分離した後に、血漿または血清はピペットで操作され、さらに処理される。遠心分離の間に、上記サンプル容器は、遠心分離機の回転軸の周りを動かされる。効果的な遠心力は、加速した沈降および事実上、血液の細胞画分である、いわゆる血餅（ｂｌｏｏｄ  ｃａｋｅ）もしくは血餅（ｂｌｏｏｄ  ｃａｋｅ）の固化を引き起こす。このような沈降した細胞画分の固体性は、血漿または血清のその後の引抜きのために決定的な影響を及ぼす。このような引抜きは、遠心分離チューブを直立位置にしてピペットを使用して行われる。その２相の混合を引き起こすと思われるピペットの先端で細胞画分に接触することは、回避されるべきである。これは、研究室において標準的な手順であるが、対応した実験用遠心分離機および適した実験技術者の存在を必要とする［１］。この方法論のさらなる変形において、血漿および細胞画分の分離を可能にするチキソトロピックゲルで満たされているサンプルチューブがある［２］。しかし、遠心分離なしに分画を達成することは、望ましい。異なるフィルターベースの方法が、文献に記載されている。代表的には、専用フィルターが、細胞構成要素を保持し、血漿液体の通過を可能にするために使用される［３］。細胞は、上記フィルターを塞ぐ傾向にあるので、代替のアプローチが開発されてきた（例えば、沈降支援濾過（ｓｅｄｉｍｅｎｔａｔｉｏｎ  ａｓｓｉｓｔｅｄ  ｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ）［４］、サンプル希釈［５］または接線流およびポンプを使用して膜フィルターまたは中空線維膜を使用することによる［６］）。血液サンプルは、非対称孔を有する中空線維を通ってポンプ輸送される。上記血漿は、上記中空線維壁に浸透し、上記中空線維の外側に収集され得る。細胞は、上記膜を透過できず、上記中空線維の内部容積の中に留まる。上記膜に関する接線流が原因で、上記膜穴の詰まりが回避される。上記サンプルを、上記中空線維を通して往き来させることによって、上記細胞画分は富化される、および／または血漿画分が分離され得る。しかし、上記方法は、使用される装置に関してかなりの努力を要し、その使用をかなり大容積のサンプルに制限する幾分顕著な死容積によって特徴づけられる。よって、ミリリットル未満の範囲の小さなサンプルは、この技術を使用して効率的に処理できない。血漿分離のための異なる方法は、濾過膜の下流表面と物理的に接触して配置されている可溶性マトリクスの使用に基づく。上記可溶性マトリクスは、血漿中での上記マトリクスの溶解プロセスを通じて生じた力によって、上記膜を通って受動的に上記サンプルを引き込むために使用される［７］。しかし、このアプローチは、上記マトリクス物質が下流の分析プロセスに干渉しない場合にのみ実現可能である。類似のアプローチは、血液を濾過するために固���モノリスの使用を示す［８］。代表的には、このアプローチにおいて、上記デバイスから血漿のサンプルを得るために、ある緩衝液を添加することが必要である。この方法の欠点は、得られたサンプルが希釈され、使用される緩衝液によって改変されることである。さらに、概して全てのフィルターベースのアプローチとしてのプロセスは、得られる血漿の容積に関して効率的ではない。微小流体ベースのツールは、血漿分離の目的に適っていることも示されている［９］。しかし、複雑な微小構造の必要性および低い血漿生成収量は、この技術が広く適用されることになることを妨げた。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００３】
【非特許文献１】Tuck,  M.K.,  et  al.,  Standard  operating  procedures  for  serum  and  plasma  collection:  early  detection  research  network  consensus  statement  standard  operating  procedure  integration  working  group.  J  Proteome  Res,  2009.  8(1):  p.  113-7.
【非特許文献２】Smith,  W.C.,  Improved  method  for  separating  the  cellular  components  of  blood  samples.  1989,  Google  Patents.
【非特許文献３】Pall  David  B,  R.E.N.Y.U.S.,  et  al.,  Device  and  method  for  blood  separation.  |  Vorrichtung  und  Verfahren  zur  Trennung  von  Blut.  |  Dispositif  et  methode  pour  la  separation  du  sang.  |  Device  and  method  for  blood  separation  |  Dispositif  et  methode  pour  la  separation  du  sang  |  Vorrichtung  und  Verfahren  zur  Trennung  von  Blut,  G.C.N.Y.U.S.  Pall  Corporation,  Editor.  1991:  EP.
【非特許文献４】Liu,  C.,  et  al.,  Membrane-based,  sedimentation-assisted  plasma  separator  for  point-of-care  applications.  Analytical  chemistry,  2013.  85(21):  p.  10463-10470.
【非特許文献５】Nakayama,  K.  and  K.  Morimoto,  Assessment  of  accuracy  of  immediate  blood  separation  method:  a  novel  blood  analysis  strategy.  Environ  Health  Prev  Med,  2011.  16(1):  p.  1-5.
【非特許文献６】Hagihara  Takeaki,  O.s.O.k.J.P.  and  O.s.O.k.J.P.  Aoki  Satoshi,  A  compact  plasma  separator  and  an  apparatus  containing  the  same.  |  Kompakter  Plasmaseparator  und  Vorrichtung  mit  einemsolchen  Separator.  |  Separateur  compact  de  plasma  et  dispositif  contenant  un  tel  separateur.  |  A  compact  plasma  separator  and  an  apparatus  containing  the  same  |  Separateur  compact  de  plasma  et  dispositif  contenant  un  tel  separateur  |  Kompakter  Plasmaseparator  und  Vorrichtung  mit  einem  solchen  Separator,  C.K.T.J.P.  Asahi  Medical  Co.  Ltd,  Editor.  1993:  EP.
【非特許文献７】McNeely  Michael  Ryan,  U.S.,  AUTOMATIC  PLASMA  SEPARATION  AND  METERING  |  SEPARATION  ET  DOSAGE  AUTOMATIQUES  DU  PLASMA,  U.S.M.M.R.U.S.  McNeely  Michael  Ryan,  Editor.  2017:  WO.
【非特許文献８】Rueda  Ivan,  P.C.A.U.S.,  et  al.,  PROCESSING  BLOOD  SAMPLES  TO  DETECT  TARGET  NUCLEIC  ACIDS,  C.C.A.U.S.M.I.N.C.U.S.M.I.N.C.  Monolythix  Inc,  Editor.  2017:  US.
【非特許文献９】Mukherjee,  S.,  et  al.,  Plasma  separation  from  blood:  the  'lab-on-a-chip'  approach.  Crit  Rev  Biomed  Eng,  2009.  37(6):  p.  517-29.
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
よって、懸濁物サンプルを異なる相、好ましくは液相および固相に分離／分画するための単純なツールが必要である。
【０００５】
溶媒および異なる分子量を有しかつ上記溶媒中に溶解された２種の構成要素を含むサンプルを、上記２種の構成要素に分離するための単純なツールもまた必要である。
【０００６】
広い範囲のサンプル容積にわたる相分離のためのツールが、さらに必要である。マイクロリットル範囲にある、すなわち、ごく小さな容積のサンプル（例えば、１ｍｌ未満）が利用可能である場合に、懸濁物サンプルの相分離のためのツールが、さらに必要である。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
第１の局面において、本発明は、溶媒および異なる分子量を有しかつ上記溶媒中に溶解された２種の成分を含むサンプルを、上記２種の構成要素に分離するために、または懸濁物サンプルを液相および固相に分画するために構成されたデバイスであって、上記デバイスは、少なくとも１種のポリマーマトリクス要素を含み、上記ポリマーマトリクス要素は、多孔性ポリマー足場および上記ポリマー足場内の間隙孔空間を含み、上記多孔性ポリマー足場は、上記ポリマーマトリクス要素が、上記デバイスの使用中に曝露される少なくとも１つの外部条件、例えば、ｐＨ、温度、塩条件、化学物質の存在または非存在の変化に応答性のポリマーから構成されるデバイスに関する。一実施形態において、上記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素は、選択的に（ａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅｌｙ）、膨張した状態および収縮した状態を可逆的にとる能力を有し、ここで膨張した状態または収縮した状態の可逆的適合は、上記ポリマーマトリクス要素が、上記デバイスの使用中に曝露される少なくとも１つの外部条件の変化に応じて起こる。好ましくは、上記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素は、反復して、このような膨張した状態および収縮した状態を可逆的にとる能力を有する。
【０００８】
一実施形態において、上記デバイスは、少なくとも１個のサンプル容器をさらに含み、上記少なくとも１個のサンプル容器は、上記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素を含むかまたは含むように構成され、上記少なくとも１個のサンプル容器は、溶媒および異なる分子量を有しかつ前記溶媒中に溶解された２種の構成要素を含むサンプル、または懸濁物サンプルを受容し得る。上記サンプル容器は、本明細書で使用される場合、異なる構成要素に分離されるかまたは分画される上記サンプルが、分離または分画の前に提供されるかまたは導入される容器である。
【０００９】
一実施形態において、上記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素は、好ましくはビーズ、球体、小塊、玉、立方体、直方体、ブロック、楕円体、もしくは不規則な形状の本体の形状にある、肉眼で見える独立粒子にあるか、または上記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素は、上記デバイス内の基材の表面上に固定化された肉眼で見える本体もしくは層であるかのいずれかである。
【００１０】
一実施形態において、上記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素は、上記デバイスから切り離し可能もしくは除去可能であるか、または切り離し可能もしくは除去可能であるように構成され、ここで好ましくは、上記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素は、使い捨ての１回使い切りポリマーマトリクス要素である。
【００１１】
一実施形態において、上記デバイスは、上記ポリマーマトリクス要素が、上記デバイスの使用中に曝露される少なくとも１つの外部条件の変化をもたらす手段をさらに含み、ここで好ましくは、少なくとも１つの外部条件の変化をもたらす上記手段は、加熱および／または冷却手段である。
【００１２】
一実施形態において、上記手段、好ましくは上記加熱および／または冷却手段は、上記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素を、少なくとも１つの外部条件の変化に曝露するように構成され、ここで好ましくは、上記手段は、上記デバイスの一部である、および／または上記デバイスに組み込まれる、および／または上記懸濁物サンプルと接触するようになるもしくは上記懸濁物サンプルと接続するようになるように構成される。
【００１３】
一実施形態において、上記デバイスは、上記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素の取り扱いを可能にするように構成されたキャリアツールをさらに含み、上記キャリアツールは、上記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素が固定化される表面を有する基材として作用し、上記キャリアツールは、溶媒および異なる分子量を有しかつ上記溶媒中に溶解された２種の構成要素を含むサンプルに、または懸濁物サンプルに浸され得るような、ならびに上記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素を、上記サンプル、好ましくは上記懸濁物サンプルと接触し得るような寸法にされる。
【００１４】
一実施形態において、上記キャリアツールは、上記ポリマーマトリクス要素が、上記デバイスの使用中に曝露される少なくとも１つの外部条件、例えば、ｐＨ、温度、塩条件、化学物質の存在または非存在、の変化をもたらし得るように構成され、ここで好ましくは、上記キャリアツールは、温度の変化をもたらし得るように構成される。
【００１５】
一実施形態において、上記キャリアツールは、上記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素を加熱および／もしくは冷却するための加熱および／または冷却手段を含むか、または上記キャリアツールは、上記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素を加熱および／または冷却するための加熱および／または冷却手段と接続されているかまたは接触しており、ここで好ましくは、上記加熱および／または冷却手段は、上記で規定されるとおりの加熱および／または冷却手段である。
【００１６】
一実施形態において、上記キャリアツールは、使い捨ての１回使い切りキャリアツールであり、上記加熱および／または冷却手段に、切り離し可能に接続されるか、切り離し可能に接触されるか、または切り離し可能に含むように構成され、ここで好ましくは、上記キャリアツールは、ペン、スティック、ロッド、シリンダー、バー、棒、バトンもしくは部材として構成され、ここで上記キャリアツールは、上記加熱および／または冷却手段に切り離し可能に接続するか、切り離し可能に接触するか、または切り離し可能に含むインターフェースを有する。
【００１７】
一実施形態において、上記デバイスは、少なくとも１個の液相収集容器をさらに含み、上記少なくとも１個の液相収集容器は、存在する場合には、上記ポリマーマトリクス要素および／または上記キャリアツールを、上記ポリマーマトリクス要素が上記キャリアツール上に固定化された状態で取り込むように構成される。このような液相収集容器が、上記サンプル容器とは異なる容器であることは、注記されるべきである。上記液相収集容器は、代表的には、存在する場合には、上記ポリマーマトリクス要素、および／または上記ポリマーマトリクス要素が上記キャリアツール上に固定化された上記キャリアツールが、上記ポリマーマトリクス要素が懸濁物サンプルに曝露された後および液相をこのような懸濁物サンプルから取り込んだ後に、移される容器である。事実上、上記液相収集容器は、上記ポリマーマトリクス要素から排出される液相を収集する目的に役立つ。
【００１８】
一実施形態において、上記液相収集容器は、上記液相の規定された容積を取り込むための手段および／または上記液相の容積を測定するための手段を含む。
【００１９】
上記ポリマーマトリクス要素が、液相を懸濁物サンプルから取り込んだ後に、上記懸濁物からの固相のうちのいくらかの部分が、上記ポリマーマトリクス要素に接着または取り付けられることがあり得ることは注記されるべきである。従って、このような固相を上記ポリマーマトリクス要素から、好ましくは上記ポリマーマトリクス要素の外側から除去することは必要であり得る。
【００２０】
一実施形態において、上記固相を上記ポリマーマトリクス要素から除去するために、特に、上記固相の一部が、上記ポリマーマトリクス要素に取り付けられているかまたは接着されている場合、ａ）上記サンプル容器および／もしくは存在する場合には、上記キャリアツール、ならびに／または存在する場合には、上記液相収集容器は、上記固相を上記ポリマーマトリクス要素から機械的に除去する手段、例えば、オリフィス、狭窄部、スライド式リング、リップ、縁部または開口部を含み、上記手段の内部寸法は、上記ポリマーマトリクス要素の外側寸法にマッチするか；あるいはｂ）上記サンプル容器および／もしくは存在する場合には、上記キャリアツール、ならびに／または存在する場合には、上記液相収集容器は、上記固相に対して親和性を有する物質を含み、上記物質に対して、上記固相は、上記物質と接触した状態にあるかまたは接触するようになる場合に、好ましくは接着するか；あるいはｃ）上記サンプル容器および／もしくは存在する場合には、上記キャリアツール、ならびに／または存在する場合には、上記液相収集容器は、上記固相を上記ポリマーマトリクス要素から洗い流す手段、例えば、上記固相を上記ポリマーマトリクス要素から洗い流す液体を排出するジェットを含むか；あるいはｄ）上記デバイスは、上記固相を上記ポリマーマトリクス要素から除去する分離ツール、例えば、スパチュラ、ブレード、スクレイパーをさらに含む。
【００２１】
一実施形態において、上記デバイスは、上記液相をさらに処理するおよび／または分析するための手段をさらに含み、ここで好ましくは、上記液相をさらに処理するおよび／または分析するための上記手段は、分光光度計および／または１もしくはいくつかの化学薬剤を上記液相に添加する手段を含む。
【００２２】
一実施形態において、溶媒および異なる分子量を有しかつ上記溶媒中に溶解された２種の構成要素を含む上記サンプルは、上記２種の構成要素のうちの一方としての高分子構成要素、例えば、タンパク質もしくはペプチドもしくは核酸、および上記２種の構成要素のうちのもう一方としての低分子構成要素、例えば、色素もしくは塩を含む水性サンプルである。一実施形態において、上記懸濁物サンプルは、全血サンプルであり、上記全血サンプルの上記液相は、血漿であり、上記全血サンプルの上記固相は、上記全血サンプルの血球であるかまたは上記全血サンプルの血球を含む。
【００２３】
一実施形態において、上記ポリマーマトリクス要素が、上記デバイスの使用中に曝露される少なくとも１つの外部条件の変化に応答性の上記ポリマーは、好ましくは、ポリ（Ｎ−イソプロピルアクリルアミド）（ｐＮＩＰＡＭ）、ポリ（Ｎ−イソプロピルアクリルアミド／Ｎ，Ｎ’−メチレンビス（アクリルアミド）、ポリ（Ｎ−イソプロピルアクリルアミド）−ｃｏ−（アクリル酸）、ポリ（Ｎ−イソプロピルアクリルアミド）−ｃｏ−（アクリル酸）−ｃｏ−（ポリ（エチレングリコール）メチルエーテルアクリレート、ポリ（Ｎ−イソプロピルアクリルアミド）−ｃｏ−（ポリ（エチレングリコール）ジアクリレート、ポリ（Ｎ−イソプロピルアクリルアミド）−ｃｏ−（ポリ（エチレングリコール）メチルエーテルアクリレート、ポリ［２−（ジメチルアミノ）エチルメタクリレート］（ｐＤＭＡＥＭＡ）、ヒドロキシプロピルセルロース、ポリ（ビニルカプロラクタム）（Ｐ（ＶＣＬ）、およびポリビニルメチルエーテルから選択される下限臨界溶液温度を有する熱応答性ポリマー（ＬＣＳＴポリマー）であるか、または上記熱応答性ポリマーは、好ましくは、ポリ（Ｎ−アクリロイルグリシンアミド）（ＰＮＡＧＡ）、ポリ（アリルアミン）−ｃｏ−ポリ（アリルウレア）およびその誘導体、ポリ（メタクリルアミド）、ポリ（Ｎ−アクリロイルアスパラギンアミド）、ポリ（Ｎ−メタクリロイルグルタミンアミド）、ポリ（アクリルアミド）−ｃｏ−（アクリロニトリル）、ポリ（スルホベタイン）、ポリ（ホスホリルコリン）から選択される上限臨界溶液温度（ＵＣＳＴ）を有する熱応答性ポリマーであるかのいずれかの熱応答性ポリマーである。
【００２４】
一実施形態において、上記応答性ポリマー、特に、上記熱応答性ポリマーは、好ましくは、上記ポリマー内の異なるポリマー鎖の間を架橋および相互接続する少なくとも１種の架橋試薬によるか、または上記ポリマーマトリクス要素に隣接して、上記デバイス内に基材を、特に、実質的に平らなもしくは弯曲した基材を提供することによるかのいずれかによって、および上記基材に、特に、上記基材の表面に、上記ポリマーの異なるポリマー鎖を界面架橋することによって、架橋される。
【００２５】
一実施形態において、上記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素は、膨張した状態および収縮した状態を可逆的に、好ましくは反復して可逆的に、とる能力を有し、ここで好ましくは、上記膨張した状態において、上記間隙孔空間は、上記ポリマーマトリクス要素が上記膨張した状態にある場合の上記ポリマーマトリクス要素の全容積の少なくとも５０％、好ましくは少なくとも６０％、より好ましくは少なくとも７０％、さらにより好ましくは少なくとも８０％およびさらにより好ましくは少なくとも９０％である容積を有する。
【００２６】
一実施形態において、上記間隙孔空間は、上記懸濁物サンプルの固相にアクセス可能でないが、上記懸濁物サンプルの液相にアクセス可能であり、好ましくは、上記懸濁物サンプルの上記液相の少なくとも５０％超、上記懸濁物サンプルの上記液相のより好ましくは７５％超、さらにより好ましくは９０％超を収容するような寸法にされる。
【００２７】
一実施形態において、上記間隙孔空間は、孔を有し、上記孔の平均直径は、＜５μｍ、好ましくは＜３μｍ、より好ましくは＜１μｍである。
【００２８】
一実施形態において、上記デバイスは、１０μｌ〜５００μｌの範囲の容積を有する懸濁物サンプルを分画するような寸法にされ、ここで上記間隙孔空間は、上記懸濁物サンプルのうちの少なくとも５０％、好ましくは少なくとも７５％、より好ましくは少なくとも９０％およびさらにより好ましくは少なくとも９５％を取り込む容積を有する。
【００２９】
一実施形態において、上記懸濁物サンプルは、１０μｌ〜２００μｌ、好ましくは５０μｌ〜２００μｌ、より好ましくは１００μｌ〜２００μｌの容積を有する。
【００３０】
さらなる局面において、本発明は、懸濁物サンプルを液相および固相に分画する方法であって、上記方法は、
ａ）  任意の順序において、しかし互いから別個に、本発明に従うデバイス（上記で規定されるとおり）、および懸濁物サンプルを提供する工程であって、ここで上記デバイスの上記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素は、乾燥した状態にあるか、または上記デバイスの上記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素は、上記応答性ポリマーが収縮した状態にあるが、上記デバイスの上記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素は湿った状態にある条件下で提供される工程；
ｂ）上記デバイスの上記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素を、上記ポリマーマトリクス要素が膨張した状態を可逆的にとることを可能にし、従って、上記懸濁物サンプルにおける液相が上記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素の上記間隙孔空間に入ることを可能にする外部条件下で、上記懸濁物サンプルに曝露すると同時に、上記懸濁物サンプルにおける固相を上記間隙孔空間から排除する工程；
ｃ）  上記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素を上記サンプルから除去し、それによって、上記間隙孔空間内に含まれる上記液相を上記サンプルから除去し、それによって、上記液相を上記サンプルにおける固相から分離する工程、を包含する方法に関する。
【００３１】
一実施形態において、工程ｃ）において、上記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素は、存在する場合には、サンプル容器（さらに上記で規定されるとおり）から除去され、存在する場合には、液相収集容器（さらに上記で規定されるとおり）に移される。
【００３２】
一実施形態において、上記方法は、
ｄ）  上記ポリマーマトリクス要素が曝露される外部条件を、上記ポリマーマトリクス要素が収縮した状態を可逆的にとることを可能にする条件に変化させ、それによって、上記液相を上記ポリマーマトリクス要素から放出する工程、をさらに包含する。
【００３３】
一実施形態において、少なくとも１つの外部条件の変化に応答性の上記ポリマーは、熱応答性ポリマー（さらに上記で規定されるとおり）であり、上記外部条件は、温度である。
【００３４】
一実施形態において、上記懸濁物サンプルは、全血サンプルであり、上記全血サンプルの上記液相は、血漿であり、上記全血サンプルの上記固相は、上記全血サンプルの血球、好ましくは全血球の大部分、より好ましくは上記全血サンプルの全血球であるかまたはこれらを含む。
【００３５】
さらなる局面において、本発明はまた、懸濁物サンプルを液相および固相に分画するための、好ましくは全血サンプルを血漿および血球に分画するための、デバイス（上記で規定されるとおり）の、または少なくとも１つの外部条件、例えば、ｐＨ、温度、塩条件、化学物質の存在または非存在の変化に応答性のポリマー（上記で規定されるとおり）の使用であって、ここで好ましくは、上記使用は、工程ａ）〜ｃ）（上記で規定されるとおり）、および必要に応じて工程ｄ）（同様に上記で規定されるとおり）を含む使用に関する。
【００３６】
さらなる局面において、本発明は、溶媒および異なる分子量を有しかつ上記溶媒中に溶解された２種の構成要素を含むサンプルを、上記２種の構成要素に分離する方法であって、上記方法は、
ａ）  任意の順序において、しかし互いから別個に、本発明に従うデバイス（上記で規定されるとおり）、ならびに溶媒および異なる分子量を有しかつ上記溶媒中に溶解された２種の構成要素を含むサンプル（この実施形態では本明細書中以降、「サンプル」）を提供する工程であって、ここで上記デバイスの上記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素は、乾燥した状態にあるか、または上記デバイスの上記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素は、上記応答性ポリマーが収縮した状態にあるが、上記デバイスの上記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素は湿った状態にある条件下で提供される工程；
ｂ）上記デバイスの上記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素を、上記ポリマーマトリクス要素が膨張した状態を可逆的にとることを可能にし、従って、溶媒（代表的には、水または水性溶液）およびこのような溶媒に溶解し、低分子量（および従って、上記孔に適合するために十分小さいサイズ）を有する構成要素が上記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素の上記間隙孔空間に入ることを可能にする外部条件下で、上記サンプルに曝露すると同時に、このような溶媒に溶解し、高分子量（および従って、上記孔に適合するには大きすぎるサイズ）を有する他の構成要素を上記間隙孔空間から排除する工程；
ｃ）  上記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素を上記サンプルから除去し、それによって、上記溶媒および上記溶媒に溶解し、上記間隙孔空間内に含まれる上記低分子構成要素を上記サンプルから除去し、それによって、上記溶媒に溶解した上記低分子構成要素を上記サンプルにおける高分子化合物から分離する工程、を包含する方法に関する。
【００３７】
一実施形態において、工程ｃ）において、上記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素は、存在する場合には、サンプル容器（さらに上記で規定されるとおり）から除去され、存在する場合には、液相収集容器（さらに上記で規定されるとおり）に移される。
【００３８】
一実施形態において、上記方法は、
ｄ）  上記ポリマーマトリクス要素が曝露される外部条件を、上記ポリマーマトリクス要素が収縮した状態を可逆的にとることを可能にする条件に変化させ、それによって、上記溶媒および上記溶媒に溶解した上記低分子量構成要素を上記ポリマーマトリクス要素から放出する工程、をさらに包含する。
【００３９】
一実施形態において、少なくとも１つの外部条件の変化に応答性の上記ポリマーは、熱応答性ポリマー（さらに上記で規定されるとおり）であり、上記外部条件は、温度である。
【００４０】
一実施形態において、溶媒および異なる分子量を有しかつ上記溶媒中に溶解された２種の構成要素を含む上記サンプルは、水性溶媒中の他の溶解した構成要素（例えば、緩衝液、および／または塩、および／または低分子量構成要素（例えば、色素など））をさらに含む生体分子（例えば、タンパク質または核酸）の水性溶液である。上記サンプルはまた、大きな高分子の生体分子複合体（例えば、タンパク質複合体、細胞オルガネラ、リボソームなど）の調製物であり得る。
【００４１】
さらなる局面において、本発明はまた、溶媒および異なる分子量を有しかつ上記溶媒中に溶解された２種の構成要素を含むサンプル（上記で規定されるとおり）を上記２種の構成要素に分離するための、デバイス（上記で規定されるとおり）の、または少なくとも１つの外部条件、例えば、ｐＨ、温度、塩条件、化学物質の存在または非存在の変化に応答性のポリマー（上記で規定されるとおり）の使用であって、ここで好ましくは、上記使用は、工程ａ）〜ｃ）（上記で規定されるとおり）および必要に応じて工程ｄ）（同様に上記で規定されるとおり）を含む使用に関する。
【００４２】
本発明者らは、懸濁物サンプルを液相および固相に分画するために構成されたデバイスであって、上記デバイスは、上記ポリマーが曝露される少なくとも１つの外部条件の変化に応答性のポリマーを利用するデバイスを発明した。
【００４３】
上記デバイスは、従って、固相を液相から分離するフィルターとして作用し得る。
【００４４】
同様に、ある種の実施形態において、上記デバイスはまた、サンプル内の溶媒に溶解される（および従って、もはやそれらの異なる相状態（「固体」対「液体」）によって区別できない）、それらの異なるサイズに従ってそれらの分子量によってのみ異なる２またはこれより多くの構成要素を分離するために使用され得る。よって、このような実施形態に従うデバイスは、モレュラーシーブとして作用し得る、および／またはそれは、規定された分子量（例えば、透析におけるような）の溶解した構成要素を富化するために使用され得る。よって、本発明の方法論は、水性媒体中に懸濁した（例えば、μｍ範囲にあるサイズの）固体粒子を、このような水性媒体内の液相から分離することから、異なる分子量を有しかつ液相に溶解される２種の構成要素（上記構成要素のうちの１種は、高分子量（例えば、生体分子、例えば、タンパク質、ペプチド、核酸、生体分子複合体のような）を有し、従って、ｎｍ範囲またはｎｍ未満の範囲にあるサイズであり、他方の溶解した構成要素は、低分子構成要素（例えば、塩もしくは緩衝液、または他の低分子量構成要素、例えば、色素のような）である）の分子量に従うサイズ分離にまで及ぶ。
【００４５】
よって、本発明に従う実施形態は、固相を液相から分離する濾過作用に関する。他の実施形態は、それらの分子量に従って２種の溶解した構成要素を分離するモレキュラーシーブ作用に関する。
【００４６】
モレキュラーシーブ作用を目指したいくつかの実施形態において、達成される分離は、完全でなくてもよく、これらの実施形態において、本発明に従うデバイスおよび方法は、いくつかの、例えば、２種の、構成要素のうちの１種を、それぞれの他の構成要素を上回って富化する目的に関する。ここでこれらの構成要素は、異なる分子量を有し、（最初に）溶媒および２種の（またはこれより多くの）構成要素（それらそれぞれの分子量において異なる）を含むサンプルに溶解される。
【００４７】
用語「２種の構成要素」とは、本明細書で使用される場合、２種の構成要素のみ（異なる分子量の）の存在に限定されると解釈されるべきではない。むしろ、異なる分子量を有するさらなる構成要素の存在を許容することも意図され、上記さらなる構成要素はまた、本発明に従うデバイスおよび方法を使用して分離され得る。２種を超える構成要素を伴うこれらの場合において、本発明に従うデバイスおよび方法は、反復して、異なるポリマーマトリクス要素を使用して、使用されてもよく、上記異なるポリマーマトリクス要素の間隙孔空間、特に上記孔サイズは、分離されるべき構成要素のそれぞれの分子量に適合される。本発明者らは、上記それぞれのポリマーマトリクス要素の平均孔サイズまたは平均孔直径が、異なる構成要素への分離が起こる分子量境界または分子量カットオフを規定することを予想する。
【００４８】
本発明に従う実施形態のうちのいずれかにおいて使用されるポリマーは、上記ポリマーが曝露される少なくとも１つの外部条件の変化に応答性であるポリマーである。代表的には、少なくとも１つの外部条件の変化に対する「応答」は、上記ポリマーの容積および／または相における変化である。このようなポリマーは、本明細書において、ときおり「応答性ポリマー」ともいわれる。より具体的には、上記デバイスは、多孔性ポリマー足場および上記ポリマー足場内の間隙孔空間を含む少なくとも１種のポリマーマトリクス要素を含み、ここで上記多孔性ポリマー足場は、上記ポリマーマトリクス要素が、前記デバイスの使用中に曝される少なくとも１つの外部条件の変化に応答性であるポリマーから構成される。このような外部条件の代表的な例は、ｐＨ、温度、塩条件、および／または特定の化学物質の存在もしくは非存在である。本発明の実施形態において、上記デバイスの上記ポリマーマトリクス要素、または複数のこのようなポリマーマトリクス要素は、懸濁物サンプルと接触させられる。外部条件の例として温度を挙げると、上記ポリマーマトリクス要素は、臨界温度に達した際に熱応答相変化挙動を示す熱応答性ポリマーから構成される。この場合、このような応答性ポリマーは、熱応答性ポリマーであってもよく、下限臨界溶液温度（ＬＣＳＴ）ポリマーまたは上限臨界溶液温度（ＵＣＳＴ）ポリマーを有してもよい。下限臨界溶液温度（ＬＣＳＴ）ポリマーが、その下限臨界溶液温度（ＬＣＳＴ）を下回る場合、その相当するポリマーマトリクス要素は、非常に多孔性であり、上記ポリマーマトリクス要素を、上記ＬＣＳＴを上回って加熱すると、収縮する。予め、上記ＬＣＳＴを下回るポリマーマトリクス要素が、水性環境の中にあった場合、上記ポリマーマトリクス要素内のそれぞれの間隙孔空間は、液体で満たされるのに対して、加熱して、上記下限臨界溶液温度に達してこれを超えた際に、上記ポリマーマトリクス要素は収縮し、上記間隙孔空間に含まれる任意の液体は排出される。少なくとも１つの外部条件の変化に応答性であるポリマー（例えば、熱応答性ポリマー）は、研究されており、公知である［１０−１２］。本発明者らの知っている限りでは、懸濁物サンプルを分画するためのこのような応答性ポリマーの使用は、以前に記載されていない。
【００４９】
一実施形態において、本発明に従うデバイスは、分画されるべき懸濁物サンプルまたは溶媒および異なる分子量を有しかつ上記溶媒中に溶解された２種の構成要素を含むサンプルを受容することが意図される少なくとも１個のサンプル容器をさらに含む。上記サンプル容器は、上記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素を含むかまたは含むように構成される。本発明に従うデバイスがまた、１種を超えるポリマーマトリクス要素、例えば、複数のポリマーマトリクス要素を含み得ることは、注記されるべきである。
【００５０】
一実施形態において、上記ポリマーマトリクス要素は、肉眼で見える独立粒子、例えば、ビーズ、球体、小塊、玉、立方体、直方体、ブロック、楕円体、または好ましくは、上記デバイスに、および好ましくは、存在する場合には上記サンプル容器に嵌まるような寸法にされる不規則な形状の本体である。別の実施形態において、上記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素は、上記デバイス内の基材の表面に固定化される、肉眼で見える本体、部分または層である。この実施形態において、上記ポリマーマトリクス要素が固定化される基材の表面は、上記デバイス内に位置した基材の任意の適切な表面であり得る。例として、上記デバイスがサンプル容器を含む場合、上記サンプル容器の内表面の一部は、上記内表面の一部に固定化された上記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素を有し得る。このような表面上での上記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素の固定化は、公知の手段によって（例えば、適切な共有結合／架橋化学現象によって）起こる。用語「肉眼で見える粒子」または「肉眼で見える本体、一部または層」とは、粒子、本体、部分または層であって、目視を使用して認められ得かつ観察され得、このような粒子を観察するために具体的な光学手段（例えば、顕微鏡）を要しないものに言及する。この状況における用語「独立（ｓｏｌｉｔａｒｙ）」とは、上記粒子が境界の範囲を定め、その周りから分離している適切な粒子として識別され得るという事実に言及する。
【００５１】
一実施形態において、上記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素は、上記デバイスから切り離し可能または除去可能である。これは、上記ポリマーマトリクス要素が、懸濁物サンプルの液相が取り込まれるリザーバー容積として作用するように働くことが理由である、懸濁物サンプルの液相または液相が、上記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素へといったん取り込まれた後は、上記懸濁物サンプルの他の相からの分離は、上記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素を上記デバイスから除去することによって容易に達成され得る。多くの場合に、いったん、上記ポリマーマトリクス要素が、懸濁物サンプルから液相を取り込み、上記デバイスから除去され、上記液相が、条件の適切な変化によって上記ポリマーマトリクスサンプルから排出された後、上記ポリマーマトリクス要素は、その目的に役立って、廃棄され得る。よって、好ましい実施形態において、上記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素は、使い捨ての１回使い切りポリマーマトリクス要素である。これは、上記デバイスが滅菌条件下で懸濁物サンプルの分離／分画のために使用されるべきでわる場合に、特に関連し得る。
【００５２】
一実施形態において、上記デバイスは、上記ポリマーマトリクス要素が、上記デバイスの使用中に曝露される少なくとも１つのさらなる外部条件の変化をもたらす手段をさらに含む。少なくとも１つの外部条件の変化をもたらすこのような手段は、複数の異なる形態をとり得る。例えば、上記手段は、上記懸濁物サンプルへのｐＨ調節薬剤の添加を可能にする、このようなｐＨ調節薬剤のリザーバーであり得る。別の実施形態において、上記手段は、ある種の緩衝液、塩溶液または他の化学物質を含むリザーバーであってもよく、上記リザーバーは、規定された量のこのような緩衝液、塩溶液または他の化学物質を上記懸濁物サンプルに添加することを可能にする。なお他の実施形態において、少なくとも１つの外部条件の変化をもたらすこのような手段は、加熱および／または冷却手段である。このような加熱および／または冷却手段は、上記応答性ポリマーが熱応答性ポリマーである場合に特に好ましい。一実施形態において、このような加熱および／または冷却手段は、単独で、または適切な冷却手段（例えば、ファンまたは冷却液が貫通して流れ得るチューブ）と連結した、例えば、加熱フィラメントの形態にあるヒーターであり得るかまたは上記ヒーターを含み得る。別の実施形態において、上記加熱および／または冷却手段は、加熱モードまたは冷却モードのいずれかにおいて作動し得る１またはいくつかのペルチェ素子であり得る。さらに別の実施形態において、上記加熱および／または冷却手段は、加熱手段を含み得るのみであり、ここで冷却は、対流熱伝達によって達成される。
【００５３】
一実施形態において、少なくとも１つの外部条件の変化をもたらす手段、好ましくは上記加熱および／または冷却手段は、上記少なくともポリマーマトリクス要素を少なくとも１つの外部条件の変化に曝露するように構成される。一実施形態において、上記手段、好ましくは上記加熱および／または冷却手段は、分画のための上記デバイスの一部を形成するか、またはそれらは、上記デバイスに組み込まれる、および／あるいはそれらは、上記懸濁物サンプルと接触するようになるか、または上記懸濁物サンプルと接続されるように構成される。一例として、上記手段が加熱および／または冷却手段である場合、ならびに上記デバイスが容器を含む場合、上記加熱および／または冷却手段は、上記容器を取り囲み、それによって必要な場合には、懸濁物サンプルの温度および上記懸濁物サンプルと接触するようになる上記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素の温度に影響を与え、制御し、修正するように形成され得る。
【００５４】
一実施形態において、懸濁物サンプルを分画するために構成されたデバイスは、上記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素の取り扱いを可能にするように構成されたキャリアツールをさらに含む。このようなキャリアツールは、上記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素が固定化され得る表面を有する基材として作用する。上記キャリアツールは、懸濁物サンプルに浸され得るような、および上記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素を上記懸濁物サンプルと接触した状態にするような寸法にされる。この実施形態において、上記キャリアツールは、上記キャリアツール上に固定化された上記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素を上記懸濁物サンプルに曝露し、必要でありかつ望ましい場合には、上記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素を上記懸濁物サンプルから除去することを可能にするという点で容易な様式において、上記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素を取り扱う目的に役立つ。このようなキャリアツールは、複数の方法で構成され得る。例えば、それは、上記ポリマーマトリクス要素を上記懸濁物サンプルに浸すことを可能にするロッド、スティックなどであり得る。さらに、好ましい実施形態において、上記キャリアツール自体は、上記ポリマーマトリクス要素が、上記デバイスの使用中に曝露される少なくとも１つの外部条件の変化をもたらし得るように構成され得る。好ましい実施形態において、上記キャリアツールは、温度の変化をもたらすように構成され、好ましくは、加熱および／もしくは冷却手段を含むか、あるいは上記デバイスの一部を形成する加熱および／もしくは冷却手段に接続されるかまたは接触される。好ましい実施形態において、このような加熱および／または冷却手段は、上記加熱および／または冷却手段（さらに上記で規定されるとおり）である。一実施形態において、上記キャリアツールは、使い捨ての１回使い切りキャリアツールであり、上記加熱および／もしくは冷却手段に切り離し可能に接続されるか、切り離し可能に接触させられるか、または切り離し可能に含むように構成される。上記キャリアツールが、ペン、スティック、ロッド、シリンダー、バー、棒、バトン、または部材として構成され、ここで上記キャリアツールは、上記加熱および／もしくは冷却手段に切り離し可能に接続されるか、切り離し可能に接触させられるか、または切り離し可能に含むインターフェースを有することは、好ましい。１つの具体的実施形態において、上記キャリアツールは、上記加熱および／または冷却手段が中に挿入される中空シリンダーとして構成される。この実施形態において、上記加熱および／または冷却手段の作動は、上記キャリアツールの温度、および従って、その上で固定化される任意の少なくとも１種のポリマーマトリクス要素の温度を変化させる。
【００５５】
一実施形態において、上記デバイスは、少なくとも１個の液相収集容器をさらに含み、上記少なくとも１個の液相収集容器は、上記ポリマーマトリクス要素および／または存在する場合には、上記ポリマーマトリクス要素が上記キャリアツール上に固定化された上記キャリアツールを取り込むように構成される。
【００５６】
一実施形態において、上記液相収集容器は、上記液相のためのリザーバーおよび／または貯蔵モジュールとして働く。一実施形態において、上記液相収集容器は、上記懸濁物サンプルの液相の少なくとも５０％、好ましくは少なくとも７５％、より好ましくは少なくとも９０％およびさらにより好ましくは少なくとも９５％を受容するような寸法にされる。一実施形態において、上記液相収集容器の総容積は、５ｍｌ、好ましくは２ｍｌ、より好ましくは１ｍｌおよびさらにより好ましくは０．５ｍｌを超えない。
【００５７】
一実施形態において、上記デバイスの使用中に、上記ポリマーマトリクス要素および／または存在する場合には、上記ポリマーマトリクス要素が上記キャリアツールの上に固定化された上記キャリアツールは、上記ポリマーマトリクス要素が懸濁物サンプルと接触した後に、上記ポリマーマトリクス要素が、上記懸濁物サンプルの上記液相のうちの少なくとも一部を取り込むことを可能にする条件下で、上記液相収集容器へと上記サンプル容器から移される。このような実施形態において、上記液相を含む上記ポリマーマトリクス要素を、上記液相収集容器に移した後に、上記ポリマーマトリクス要素に含まれる上記液相のうちの少なくとも一部が、上記ポリマーマトリクス要素から上記液相収集容器へと放出される条件が適用されることは、好ましい。
【００５８】
一実施形態において、上記液相収集容器は、上記液相のためのリザーバーおよび／または貯蔵デバイスとして供される。
【００５９】
一実施形態において、懸濁物サンプルを分画するための上記デバイスは、上記液相をさらに処理および／または分析するための手段をさらに含み、ここで好ましくは、上記液相をさらに処理および／または分析するための上記手段は、分光光度計および／または上記液相に化学薬剤を添加する手段を含む。このような化学薬剤は、上記液相をさらに改変するために使用され得る。例えば、分光光度計は、１または数種の分析物の存在または非存在を検出するために使用され得、このような検出のために、化学的試薬の添加は、このような検出を可能にするために必要であり得る。例えば、このような化学的試薬は、１または数種の色素、発色団、抗体、または他の適切な検出薬剤であり得る。
【００６０】
一実施形態において、上記液相収集容器は、上記液相の規定された容積を取り込むための手段および／または上記懸濁物サンプルの上記液相の容積を測定するための手段を含む。
【００６１】
一実施形態において、ａ）上記サンプル容器および／もしくは存在する場合には、上記キャリアツール、ならびに／または存在する場合には、上記液相収集容器は、上記固相を上記ポリマーマトリクス要素から機械的に除去する手段（例えば、オリフィス、狭窄部、スライド式リング、リップ、縁部もしくは開口部（その内部寸法は、上記ポリマーマトリクス要素の外部寸法に合う））を含む；あるいはｂ）上記サンプル容器および／もしくは存在する場合には、上記キャリアツール、ならびに／または存在する場合には、上記液相収集容器は、上記固相に対して親和性を有する物質であって、上記物質に対して、上記固相が、好ましくは、その物質と接触しているかまたは接触した状態になった場合に、接着する物質を含む；あるいはｃ）上記サンプル容器および／もしくは存在する場合には、上記キャリアツール、ならびに／または存在する場合には、上記液相収集容器は、上記固相を上記ポリマーマトリクス要素から洗い流す手段（例えば、上記固相を上記ポリマーマトリクス要素から洗い流す液体を排出するジェット）を含む；あるいはｄ）上記デバイスは、上記固相を上記ポリマーマトリクス要素から除去する分離ツール（例えば、スパチュラ、ブレード、スクレイパー）をさらに含む。
【００６２】
本発明に従うデバイスは、全血を血漿および血球へとそれぞれ液相および固相として分画する状況において特に有用である。よって、一実施形態において、上記懸濁物サンプルは、全血サンプルであり、上記デバイスは、全血を、血漿および血球を含む固相に分画するために構成される。一実施形態において、上記血漿は、血小板富化される。別の実施形態において、上記血漿は、血小板を欠く。一実施形態において、上記ポリマーマトリクス要素が曝露される少なくとも１つの外部条件の変化に応答性のポリマーは、熱応答性ポリマーである。このような熱応答性ポリマーは、下限臨界溶液温度（ＬＣＳＴ）を有する熱応答性ポリマーであるか、または上限臨界溶液温度（ＵＣＳＴ）を有する熱応答性ポリマーであるかのいずれかである。用語「熱応答性ポリマー」とは、ポリマーであって、その物理的質、特に、水に対する親和性が、上記ポリマーが曝露される外部温度に依存するものをいう。一実施形態において、本発明に従う熱応答性ポリマーは、温度に伴って水に対する親和性の変化を示す。例えば、下限臨界溶液温度（ＬＣＳＴ）を有する熱応答性ポリマーは、このようなＬＣＳＴを下回る温度において、水和し、膨張した状態にある。上記ＬＣＳＴを上回る温度では、上記ポリマーは、収縮した非水和状態にある。上記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素を上記２つの状態の間で循環させることによって、上記ポリマーマトリクス要素中の液体を反復して（望ましい場合）かつ可逆的に収容し、その後、望ましい場合におよび望ましいときに、上記液体を上記ポリマーマトリクス要素から再び排出することは、可能である。このような液体が、上記ポリマーマトリクス要素へと、上記ポリマーマトリクス要素内の間隙孔空間へと取り込まれる場合、上記懸濁物サンプルにおける固体粒子は、このようなポリマーマトリクス要素の外側に留まる。従って、上記ポリマーマトリクス要素内の液相および上記ポリマーマトリクス要素の外側の固相の分離が達成される。上記ポリマーマトリクス要素が膨張した状態にある場合、上記溶媒／液体は、上記孔の全てもしくは実質的に全て、または上記孔の規定された割合へのアクセスを有するのに対して、上記固相（例えば、血球）は、上記孔へのアクセスを有しない。このような膨潤した状態において、上記ポリマーマトリクス要素は、上記血球から除去および上記血球から分離され得、従って、異なる相への分画を達成し得る。
【００６３】
一実施形態において、上記応答性ポリマー、特に、上記熱応答性ポリマーは、好ましくは上記ポリマー内の異なるポリマー鎖間を架橋および相互接続する少なくとも１種の架橋試薬によるか、または上記ポリマーマトリクス要素に隣接して、上記デバイス内の基材、特に、実質的に平らなもしくは弯曲した基材を提供することによるかのいずれかによって、および上記基材、特に、上記基材の表面に、上記ポリマーの異なるポリマー鎖を界面架橋することによって、架橋される。一実施形態において、特にこの状況において、上記応答性ポリマーが架橋される（または固定化される）基材の表面は、存在する場合には、上記少なくとも１個のサンプル容器の表面であるか、または存在する場合には、上記キャリアツールの表面である。
【００６４】
本発明に従う実施形態において、上記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素は、上記応答性ポリマーの存在に起因して、膨張した状態および収縮した状態を可逆的にとる能力を有する。好ましくは、膨張した状態において、上記間隙孔空間は、上記ポリマーマトリクス要素が上記膨張した状態にある場合、上記ポリマーマトリクス要素の総容積の少なくとも５０％、好ましくは少なくとも６０％、より好ましくは少なくとも７０％、さらにより好ましくは少なくとも８０％およびさらにより好ましくは少なくとも９０％である容積を有する。
【００６５】
さらに、一実施形態において、上記間隙孔空間は、上記懸濁物サンプルの固相にアクセス可能ではないが、上記懸濁物サンプルの液相にアクセス可能である。例として全血を挙げると、上記間隙孔空間は、上記血液内の血漿にアクセス可能であるが、血球、好ましくは赤血球および白血球にはアクセス可能でない。上記間隙孔空間は、血小板富化血漿が望ましいか否かに依存して、血小板にアクセス可能であり得る。上記間隙孔空間は、孔を有するように適切に調節され得、上記孔の平均直径は、所望の固相の排除および所望の液相の間隙孔空間への含有／取り込みを可能にする。例えば、一実施形態において、上記間隙孔空間は、孔であって、上記孔の平均直径が、＜５μｍ、好ましくは＜３μｍ、より好ましくは＜１μｍである孔を有し得る。上記デバイスが、互いからそれらそれぞれの分子量によって異なる２種の溶解した構成要素のサイズ分離をもたらすために、および／またはこれら２種の構成要素のうちの１種を富化するために使用される場合、上記間隙孔空間は、孔であって、上記孔の平均直径が、μｍ範囲を十分下回る、例えば、０．１ｎｍ〜５００ｎｍ、好ましくは１ｎｍ〜１００ｎｍである孔を有し得る。上記孔のサイズは、上記デバイスの意図した目的に適するように選択される。
【００６６】
一実施形態において、上記間隙孔空間は、上記懸濁物サンプルの固相にアクセス可能でないが、上記懸濁物サンプルの液相にアクセス可能である。好ましくは、上記間隙孔空間は、上記懸濁物サンプルの液相の少なくとも５０％超、より好ましくは、上記懸濁物サンプルの上記液相の７５％超、さらにより好ましくは９０％超を収容するような寸法にされる。
【００６７】
一実施形態において、上記デバイスは、容積＜１ｍｌを有する懸濁物サンプルを分画するために特に適しておりかつそのために構成されている。一実施形態において、本発明に従うデバイスは、１０μｌ〜５００μｌの範囲の容積を有する懸濁物サンプルを分画するような寸法にされ、上記デバイスの上記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素の間隙孔空間は、上記懸濁物サンプルの少なくとも５０％、好ましくは少なくとも７５％、より好ましくは少なくとも９０％およびさらにより好ましくは少なくとも９５％を取り込む容積を有する。よって、一実施形態において、上記ポリマーマトリクス要素の間隙孔空間は、１０μｌ〜５００μｌという懸濁物サンプル容積の少なくとも５０％である容積を有する。すなわち、上記間隙孔空間の容積は、少なくとも５μｌ〜少なくとも２００μｌから２５０μｌである；好ましくは、上記間隙孔空間は、１０μｌ〜５００μｌという上記懸濁物サンプル容積の少なくとも７５％である容積を有する。すなわち、上記間隙孔空間は、少なくとも７．５μｌ〜少なくとも３７５μｌである容積を有する；より好ましくは、上記間隙孔空間は、１０μｌ〜５００μｌという上記懸濁物サンプル容積の少なくとも９０％である容積を有する。すなわち、上記間隙孔空間は、少なくとも９μｌ〜少なくとも４５０μｌである容積を有する；そしてさらにより好ましくは、上記間隙孔空間は、１０μｌ〜５００μｌという上記懸濁物サンプル容積の少なくとも９５％である容積を有する。すなわち、上記間隙孔空間は、少なくとも９．５μｌ〜少なくとも４７５μｌである容積を有する。この状況において、一実施形態において、上記ポリマーマトリクス要素の間隙孔空間の総容積は、上記懸濁物サンプルの容積を超えない。よって、例として、上記懸濁物サンプルの容積が５００μｌである場合、上記間隙孔空間の容積は、好ましくは５００μｌ以下である。一実施形態において、上記間隙孔空間の容積は、２５０μｌまたは３７５μｌまたは４５０μｌまたは４７５μｌである。別の例示的実施形態として、上記懸濁物サンプルが１０μｌ〜２００μｌの範囲の容積を有する場合、上記間隙孔空間の容積は、５μｌ〜２００μｌの範囲にある。別の実施形態において、上記懸濁物サンプルが５０μｌ〜２００μｌの容積を有する場合、上記間隙孔空間の容積は、２５μｌ〜２００μｌの範囲にある。さらに別の実施形態において、上記懸濁物サンプルが、１００μｌ〜２００μｌの範囲の容積を有する場合、上記間隙孔空間の容積は、５０μｌ〜２００μｌの範囲にある。
【００６８】
さらなる局面において、本発明はまた、懸濁物サンプルを液相および固相に分画する方法であって、ここで上記方法は、
ａ）  任意の順序において、しかし互いから別個に、本発明に従うデバイス（上記で規定されるとおり）、および懸濁物サンプルを提供する工程であって、ここで上記デバイスの上記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素は、乾燥した状態にあるか、または上記デバイスの上記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素は、上記応答性ポリマーが収縮した状態にあるが、上記デバイスの上記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素は湿った状態にある条件下で提供される工程；
ｂ）上記デバイスの上記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素を、上記ポリマーマトリクス要素が膨張した状態を可逆的にとることを可能にし、従って、上記懸濁物サンプルにおける液相が上記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素の上記間隙孔空間に入ることを可能にする外部条件下で、上記懸濁物サンプルに曝露すると同時に、上記懸濁物サンプルにおける固相を上記間隙孔空間から排除する工程；
ｃ）  上記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素を上記サンプルから除去し、それによって、上記間隙孔空間内に含まれる上記液相を上記サンプルから除去し、それによって、上記液相を上記サンプルにおける固相から分離する工程、を包含する方法に関する
【００６９】
一実施形態において、上記分画する方法において上記デバイスの使用中に、工程ｃ）において、上記ポリマーマトリクス要素および／または存在する場合には、上記ポリマーマトリクス要素が上記キャリアツール上に固定化された上記キャリアツールは、上記ポリマーマトリクス要素が上記懸濁物サンプルの上記液相のうちの少なくとも一部を取り込むことを可能にする条件下で上記ポリマーマトリクス要素が懸濁物サンプルと接触した後に、上記液相収集容器へと、上記サンプル容器から移される。このような実施形態において、上記液相を含む上記ポリマーマトリクス要素を上記液相収集容器に移した後に、上記ポリマーマトリクス要素に含まれる上記液相のうちの少なくとも一部が上記ポリマーマトリクス要素から上記液相収集容器に放出される条件が適用されることは、好ましい。
【００７０】
一実施形態において、上記液相収集容器は、上記液相のためのリザーバーおよび／または貯蔵デバイスとして供される。
【００７１】
上記方法の一実施形態において、上記方法は、
ｄ）  上記ポリマーマトリクス要素が曝露される外部条件を、上記ポリマーマトリクス要素が収縮した状態を可逆的にとることを可能にする条件に変化させ、それによって、上記液相を上記ポリマーマトリクス要素から放出する工程、をさらに包含し得る。
【００７２】
本発明に従う方法のある種の実施形態において、工程ａ）では、本発明に従うデバイス（および従って、上記デバイス内に含まれるポリマーマトリクス要素）は、乾燥している代わりに、湿っているが収縮した状態において提供され得る、すなわち、上記ポリマーマトリクス要素は、乾燥状態になく、しかし上記応答性ポリマーが収縮した状態にあるが、湿っていてもよい外部条件下で提供されることは、注記されるべきである。例えば、上記ポリマーマトリクス要素を覆う、ある特定の量の緩衝液（または他の液体）または緩衝液（または他の液体）の層が存在し得る。この実施形態において、引き続いて、工程ｂ）において、上記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素は、上記ポリマーマトリクス要素が、可逆的に膨張した状態をとることを可能にする、および従って、上記懸濁物サンプルにおける液相が、上記少なくとも１種のポリマーマトリクス要素の間隙孔空間に入ることを（上記ポリマーマトリクス要素が乾燥状態で提供される実施形態におけるように）可能にする外部条件下で上記懸濁物サンプルに曝露される。その後の工程ｃ）およびその後の選択肢的な工程ｄ）は、先に規定されるとおりである。
【００７３】
本発明に従う好ましい実施形態において、少なくとも１つの外部条件の変化に応答性のポリマー（すなわち、「応答性ポリマー」）は、熱応答性ポリマー（さらに上記で規定されるとおり）であり、上記外部条件は温度である。
【００７４】
本発明に従う方法の好ましい実施形態において、上記懸濁物サンプルは、全血サンプルであり、上記全血サンプルの液相は、血漿であり、上記全血サンプルの固相は、全血サンプルの血球であるか、または全血サンプルの血球を含む。好ましい実施形態において、上記全血サンプルの固相は、全血球の大部分、さらにより好ましくは上記全血サンプルの全血球であるか、それらを含む。
【００７５】
なおさらなる局面において、本発明はまた、懸濁物サンプルを液相および固相に分画するための、好ましくは全血サンプルを血漿および血球に分画するための、本発明に従うデバイス（上記で規定されるとおり）の、または少なくとも１つの外部条件、例えば、ｐＨ、温度、固体条件、化学物質の存在または非存在の変化に応答性のポリマー（さらに上記で規定されるとおり）の使用であって、ここで好ましくは、上記使用は、工程ａ）〜ｃ）（さらに上記で規定されるとおり）、および必要に応じて工程ｄ）（同様にさらに上記で規定されるとおり）を含む使用に関する。
【００７６】
いかなる理論によっても拘束されることは望まないが、本発明者らは、多孔性ポリマー足場および上記多孔性ポリマー足場内の間隙孔空間を形成する応答性ポリマーの使用が、これらが一緒になって、ポリマーマトリクス要素を構成し、懸濁物サンプルを液相および固相に効率的に分画することを可能にすることを見出した。これは、懸濁物サンプル容積が小さい、すなわち、＜１ｍｌである場合に、特にそのとおりである。本発明に従う好ましい実施形態において、上記使用されるサンプルサイズは、１ｍｌを十分下回り、例えば、＜２００μｌ、好ましくは＜１５０μｌである。例えば、一実施形態において、本発明に従って使用される代表的な血液サンプルは、毛細管によって得られるサンプルであり、このようなサンプルの容積は、代表的には、１４０μｌを超えず（すなわち、＜１４０μｌ）、このようなサンプルからは、血漿の代表的な量は、＜８０μｌである。本発明に従うデバイスは、極めて使用しやすく、異なる懸濁物サンプルタイプに容易に適合され得る。特に好ましい懸濁物サンプルタイプは、全血であり、本発明に従うデバイスは、使い捨てのポリマーマトリクス要素が、上記デバイスから切り離し可能または除去可能である上記デバイスのある種の実施形態内で使用される個々のポリマーマトリクス要素の好ましい廃棄性に起因して、複数のサンプルを短期間内に処理することを可能にする。本発明に従って懸濁物サンプルを分画するための１つのデバイスが、１種より多くのポリマーマトリクス要素、例えば、２種、３種、４種、５種、６種、１０種、２０種、３０種、４０種、５０種、…１００種、１０，０００種などのポリマーマトリクス要素を含み得ることも考えられる。
【００７７】
上記デバイスは、携帯型デバイスであってもよいし、ベンチトップ型デバイスとして、または多くのサンプルを同時に処理することを可能にする大規模ワークステーション型デバイスとして構成されてもよい。後者の場合には、上記デバイスはさらに、それぞれのポリマーマトリクス要素の動きをもたらす適切なコントロールユニット、ロボットアーム、ならびに膨張した状態と収縮した状態との間でポリマーマトリクス要素を切り替えるために、サンプルの添加、外部条件（例えば、ポリマーマトリクス要素への液相の取り込みをもたらす温度）の適合、上記サンプルからの上記ポリマーマトリクス要素の除去および外部条件（例えば、温度）の変化をもたらし得るコントロールユニットを調和させる適切な電子制御回路を含むように構成され得る。
【図面の簡単な説明】
【００７８】
さらに、本発明は、図面によって図示される。
【図１】図１は、血液サンプルを分画するために使用されるサンプル容器内に含まれるポリマーマトリクス要素を含む本発明に従うデバイスの一実施形態を示す。
【００７９】
【図２−１】図２（Ａ）〜Ｃ））は、図１に示される原理に従って行われる分画の写真を示し、（Ｄ）は、本発明に従って分画されるサンプルで行われる細胞計測分析の結果を示す。
【図２−２】図２（Ａ）〜Ｃ））は、図１に示される原理に従って行われる分画の写真を示し、（Ｄ）は、本発明に従って分画されるサンプルで行われる細胞計測分析の結果を示す。
【００８０】
【図３】図３は、ポリマーマトリクス要素が、加熱および／または冷却手段に切り離し可能に接続されるように構成されたキャリアツール上に固定化される、本発明に従うデバイスの別の実施形態を示す。
【００８１】
【図４】図４は、ポリマーマトリクス要素がキャリアツールの表面に固定化されたキャリアツールの一実施形態を示す。
【００８２】
【図５−１】図５は、加熱および／または冷却手段を含む携帯型機器の実施形態のプロトタイプ、（Ａ）＝分解組み立て図、およびＢ）＝アセンブルしたデバイス）、ならびに（Ｃ）本発明に従って、ポリマーマトリクス要素および加熱および／または冷却手段を固定化した状態の使い捨てのキャリアツールを含む分画のためのデバイスの一実施形態を示す。
【図５−２】図５は、加熱および／または冷却手段を含む携帯型機器の実施形態のプロトタイプ、（Ａ）＝分解組み立て図、およびＢ）＝アセンブルしたデバイス）、ならびに（Ｃ）本発明に従って、ポリマーマトリクス要素および加熱および／または冷却手段を固定化した状態の使い捨てのキャリアツールを含む分画のためのデバイスの一実施形態を示す。
【００８３】
【図６−１】図６（Ａ）〜Ｆ））は、図５に例証されるとおりの血漿分離デバイスを使用する全血サンプルの血漿分離プロセスの結果を示す。
【図６−２】図６（Ａ）〜Ｆ））は、図５に例証されるとおりの血漿分離デバイスを使用する全血サンプルの血漿分離プロセスの結果を示す。
【図６−３】図６（Ａ）〜Ｆ））は、図５に例証されるとおりの血漿分離デバイスを使用する全血サンプルの血漿分離プロセスの結果を示す。
【００８４】
【図７】図７は、２種の異なるポリマーマトリクス要素に室温において曝露された（その間に、上記ストック溶液の曝露部分が上記ポリマーマトリクス要素の間隙孔空間に入り得る）後の同じストック溶液の、および２種の異なるポリマーマトリクス要素が４０℃に加熱された後に、これらから排出される液体の、カルボキシ−フルオレセインおよびＲ−フィコエリトリン（Ｒ−ＰＥ）のストック溶液の蛍光発光スペクトルを示す。
【発明を実施するための形態】
【００８５】
より具体的には、図１は、乾燥状態にあるポリマーマトリクス要素を伴うサンプル容器を示す。サンプルを上記サンプル容器に添加した後に、上記ポリマーマトリクス要素は湿らされ、液体は、上記ポリマーマトリクス要素によって取り込まれるのに対して、上記サンプル内の固相は、上記ポリマーマトリクス要素の外側に留まる。上記液体と接触すると、上記ポリマーマトリクス要素はかなり膨潤し、およそ１０×倍率程度、その容積を大きくする。上記ポリマーマトリクス要素の中に組み込まれない残留サンプルは、多かれ少なかれ固相であるかまたは上記懸濁されたメンバー、例えば、細胞の富化されたサンプルである。対照的に、上記ポリマーマトリクス要素自体は、排除され懸濁された固体メンバーを含まない、上記サンプルの液相を含む。血液サンプルの場合、組み込まれた液相は血漿である。上記ポリマーマトリクス要素内の孔のサイズに依存して、これは、血小板ありまたはなしの血漿であり得る。さらなる工程において、上記富化された固相を有する相は、上記サンプル容器から除去されてもよいし、上記液相は、上記ポリマーマトリクス要素を上記サンプル容器から除去することによって除去され得る。その後、上記ポリマーマトリクス要素は、上記ポリマーが再び収縮する条件に曝露され、従って、上記ポリマーマトリクス要素の孔サイズを低減し、および従って液体を上記ポリマーマトリクス要素から移動させる。例えば、上記ポリマーがＬＣＳＴポリマーである場合、このような収縮は、温度を、ＬＣＳＴを上回る温度へと上昇させることによって達成され得る。このようにして放出された液相、例えば、放出された血漿は、上記容器から収集され得る。
【００８６】
図２は、図１に対して概説した原理に従って行われた分画の結果を示す。より具体的には、４種の異なるポリマーマトリクス要素を、肉眼で見える独立粒子として生成し、全血（Ａ）に曝露し、規定されたインキュベーションの後、そこから上記粒子を除去し、別個のさらなる容器に入れた（Ｂ）。次いで、それらを、液相（血漿）を上記ポリマーマトリクス要素から放出することを可能にする条件に曝露した（Ｃ）。図２  Ｄ）は、図２  Ａ）〜Ｃ）において処理した異なるサンプルの、ならびに全血のおよび遠心分離血漿の細胞計数分析の結果を示す。
【００８７】
図３は、本発明に従うデバイスの別の実施形態およびその使用を示す。この実施形態において、懸濁物サンプルを含むサンプル容器が提供され、キャリアツールに取り付けられたポリマーマトリクス要素は、上記懸濁物サンプルに導入される。上記キャリアツールは、好ましくは熱伝導性であり、従って、上記ポリマーマトリクス要素が曝露される温度は、上記キャリアツールを加熱および／または冷却手段に連結することによって容易に変化され得る。上記ポリマーマトリクス要素と上記懸濁物サンプルとを接触させると、上記ポリマーマトリクス要素は、液体を取り込み、懸濁された固相、例えば、細胞を排除する。繰り返すと、血液を例としてあげると、血漿は、上記間隙孔空間内の孔の収容力に達するまで、上記ポリマーマトリクス要素内に収集される。その後、次に上記ポリマーマトリクス要素は、上記サンプル容器から除去され、さらなる容器、すなわち、液相を収集するための容器（本明細書中以降、ときおり「液相収集容器」ともいわれる）に移され、ここで繰り返すと、上記外部条件は、上記ポリマーマトリクス要素を、膨張した状態から収縮した状態へとシフトし、従って、上記ポリマーマトリクス要素の中に組み込まれた液体を放出するように変化される。上記ポリマーマトリクス要素の応答性ポリマーがＬＣＳＴポリマーである場合、外部条件の変化は、ＬＣＳＴを上回る温度の上昇である。
【００８８】
図４は、本発明に従って、ポリマーマトリクス要素がキャリアツールの表面上に固定化された状態のキャリアツールの実施形態を示す。
【００８９】
図５は、使い捨てのキャリアツール上に固定化したポリマーマトリクス要素と接続するように構成された加熱および／または冷却手段（この場合、加熱ロッド）を含む、本発明に従うデバイスの一部を形成する携帯型機器の実施形態を示す。パネルＡは、携帯型機器の分解図を示し、パネルＢは、アセンブルされた形態の携帯型機器を示す；パネルＣ）は、固定化されたポリマーマトリクス要素ならびに加熱および／または冷却手段（ここでは：加熱ロット）を有する使い捨てのキャリアツールを含む、本発明に従う分画のためのデバイスの実施形態を示す。
【００９０】
図６は、図５に例示されるように、血漿分離デバイスを使用する血漿分離プロセスの結果を示す。パネルＡ）〜Ｆ）は、上記分離プロセスの異なる段階を示す：パネルＡ）は、全血を含むサンプル容器の実施形態を示す；パネルＢ）は、ポリマーマトリクス要素が、上記サンプル容器に挿入された使い捨てのキャリアツール上に固定化された使い捨てのキャリアツール（図４に示されるとおり）を示す；パネルＣ）は、上記加熱および／または冷却手段（加熱ロッド）によって上記使い捨てのキャリアツールと接続される、図５の携帯型機器を示す；パネルＤ）は、図５の携帯型機器と、上記サンプル容器から引き抜かれた後の上記使い捨てのキャリアツールとの組み合わせを示す；パネルｅ）は、図５の上記携帯型機器と、新たな容器（「液相収集容器」）の中に挿入した後の上記使い捨てのキャリアツールとの組み合わせを示す；そしてパネルＦ）は、上記図５の携帯型機器と上記使い捨てのキャリアツールとの組み合わせが引き抜かれた後の上記（第１の）サンプル容器および上記液相収集容器の両方を示す。
【００９１】
図７は、カルボキシ−フルオレセインおよびＲ−フィコエリトリン（Ｒ−ＰＥ）のストック溶液の、２種の異なるポリマーマトリクス要素に室温において曝露した（その間に、上記ストック溶液の曝露部分は、上記ポリマーマトリクス要素の間隙孔空間に入り得る）後の同じストック溶液の、ならびに上記２種の異なるポリマーマトリクス要素が４０℃に加熱された後にこれらから排出された液体の、蛍光発光スペクトルを示す。上記ポリマーマトリクス要素に入る液体からのＲ−フィコエリトリンの除去（および上記ポリマーマトリクス要素に入ることができない液体「上清」における相当する富化）が認められ得る。
【００９２】
さらに、以下の実施例に言及がなされる。実施例は、本発明を例示するために与えられ、限定するためではない。
【実施例】
【００９３】
実施例１
サンプル容器内のポリマーマトリクス要素の調製および血漿分離のためのその適用を記載する実施形態
ＬＣＳＴポリマーマトリクスの４種の異なる配合を調製し、サンプル容器の中に収容した。
【００９４】
適用したプロトコールは、以下のとおりであった。第１に、Ｎ−イソプロピルアクリルアミド（ＮＩＰＡＭ）およびＮ，Ｎ’−メチレンビスアクリルアミド（ＢＩＳ）モノマーおよび過硫酸アンモニウム（ＡＰＳ）を含む溶液を調製した（プレミックスＮＢＡ）。
【表１】
2021525880.tif 000002
【００９５】
上記配合に対する異なる添加剤の影響を評価するために、以下の変形を調製した：
【表２】
2021525880.tif 000003
【００９６】
およそ１００μＬのプラグ（すなわち、「肉眼で見える独立粒子」）を、このようにして、上記液体と２μＬの５％  ＴＥＭＥＤ（脱気済み）とをアルゴン下で混合することによって、０．５ｍＬ  マイクロ反応バイアルの中で形成した。その後、室温において３０分間、重合を生じさせた。
【００９７】
上記バイアルを、５０℃の温度のヒートブロック上に置いた。上記ポリマーの収縮が容易に観察できた。排出された液体を、マイクロピペットで収集し、廃棄した。上記プラグを、上記マイクロ反応バイアルから取り出し、２ｍｌ  反応チューブに移した。５００μｌのＰＢＳ緩衝液を上記チューブに添加し、続いて、２０℃において１時間インキュベートして、上記ポリマーを再度膨潤させた。過剰な上記ＰＢＳを除去し、上記チューブを、６０℃において１５分間インキュベートして、上記ポリマーを収縮させた。上記排出させた液体を廃棄した。この洗浄手順を、もう１回反復した。
【００９８】
ＥＤＴＡ被覆したバキュティナーチューブの中に新鮮に収集した１５０μＬの全血のサンプルを、図２Ａ）に示されるとおりの収縮させたポリマーを含むそれぞれのバイアルに添加し、３０分間、室温において静置した。
【００９９】
３０分後、上記サンプルを、膨潤したプラグを有するバイアルから除去した。図２Ｂ）は、上記４本のバイアルを上記プラグとともに示す。異なるマトリクスが、異なる量の液体を取り込んだことは明らかである。さらに、異なる量の全血が、それらの配合に応じて、上記プラグに貼り付いた。
【０１００】
次いで、上記プラグを伴うバイアルを、ヒートブロック上に、４０℃において１分間置いた。上記ポリマーを収縮させたところ、液体が上記マトリクス物質から排出された。上記排出された液体を、別個のバイアルに収集した。図２Ｃ）に示されるように、異なる量の液体が、規定された温度において排出され、同様に、捕捉された全血に起因して、上記サンプルの異なる着色レベルが観察され得る。
【０１０１】
上記収集したサンプルを、検査用血液分析器（Ｓｙｓｍｅｘ）で分析し、データを、全血で得た細胞数（「ＷＢＣ」＝白血球；「ＲＢＣ」＝赤血球；および「ＰＬＴ」＝血小板）、および２５０μｌのサンプルを１，５００ｇで１分間遠心分離することによって生成した血漿に対して比較した。１サンプルの全血に関して２つのアリコート（「白血球＃１」および「白血球＃２」）、全血の同じサンプルから遠心分離によって生成した２つの血漿サンプル（「遠心分離血漿＃１」および「遠心分離血漿＃２」）に関するデータ、ならびにＬＣＳＴポリマーマトリクスの異なる配合から収集した液体に関するデータ（「マトリクス１」、「マトリクス２」、「マトリクス３」、「マトリクス４」）を、図２Ｄ）にまとめる。
【０１０２】
上記マトリクスの適用によって達成される分離効果は、明らかに見て解る。さらに、上記ポリマー調製物に異なる試薬を添加することによる分離効果の最適化への単純なアプローチが示される。マトリクス１および２は、血球を、血液サンプルの液体構成要素から分離することにおいて最も効率的なものであるようである。
【０１０３】
実施例２
基材上に固定化されるポリマーマトリクス要素
アルミニウムシェルを、血漿分離のための使い捨て用品の一部としてデザインした。上記アルミニウムシェルは、ポリマーマトリクス要素が固定化される表面を有する基材として作用するキャリアツールとして機能する。上記シェル表面を紙やすりで粗くして、ポリマーマトリクス要素が上記表面によりよく接着するようにした。
【０１０４】
ポリマーマトリクス要素としてのＬＣＳＴポリマーマトリクスの配合を、以下のとおりに準備した：第１に、Ｎ−イソプロピルアクリルアミド（ＮＩＰＡＭ）およびＮ，Ｎ’−メチレンビスアクリルアミド（ＢＩＳ）モノマーおよび硫酸アンモニウム（ＡＰＳ）を含む溶液を、調製した（プレミックスＮＢＡ）。
【表３】
2021525880.tif 000004
【０１０５】
このミックスに、ＰＥＧメチルエーテルアクリレートおよび水を、以下のとおりに添加した：
【表４】
2021525880.tif 000005
【０１０６】
この溶液の１９４μｌ  アリコートを、Ｓａｒｓｔｅｄ  Ｍｉｃｒｏｖｅｔｔｅサンプリング容器に添加した。上記容器中の溶液を脱気し、４回の押し引きのサイクルにおいてアルゴンを飽和させた。
【０１０７】
これらのアリコートを４μｌの５％  ＴＥＭＥＤ（脱気済み）とアルゴン下で混合し、上記アルミニウムシェルを上記溶液に浸した。３０分間のインキュベーション時間後に、上記アルミニウムシェルを熱源に接触させ、上記ポリマーを上記シェル上で収縮させた。上記シェルと上記ポリマーとを、上記バイアルから外し、ＰＢＳ洗浄緩衝液を含む新しいバイアルに移した。上記ポリマーを、上記洗浄緩衝液の中で１時間にわたって再膨潤させた。上記洗浄工程を、２回反復した。
【０１０８】
この使い捨てのデバイスを図４に示し、これをその後、実施例３に記載される例示的プロセスに従うキャリアツールとして使用した。
【０１０９】
実施例３  
Ｂｌｉｎｋ  ＡＧによって開発されたとおりのプロトタイプの説明
本発明に基づいて考えられる製品として、携帯型分離デバイスを開発した。このような製品は、ポイントオブケアにおける診断適用を可能にする状況において特に有用であり得る。多くの診断検査は、サンプルマトリクスとして血漿を要する。しかし、多くの環境において、血漿を全血から、特に、一般的な指先穿刺法によって別の方法で容易に得られ得る毛細管血液サンプルから生成するために利用可能な適切な手段は存在しない。よって、本発明者らは、使い捨てのデバイスとの組み合わせにおいて、ペン様の携帯型バッテリーで作動する機器を記載する。
【０１１０】
上記機器は、図４に示されるとおりの使い捨てのキャリアツールとともに使用されることになる、図５Ａ）（分解図）および５Ｂ）（アセンブルされたデバイス）に示される基本的モジュールからなる。図５Ａ）およびＢ）の携帯型デバイスと使い捨てのキャリアツールとの組み合わせは、本発明に従う分画のために構成されたデバイスの一実施形態であり、図５Ｃ）に示される。
【０１１１】
図５Ａ）および５Ｂ）の携帯型機器は、金属ロッドを予め規定された（上記フィルターポリマーのＬＣＳＴを上回る）温度へと加熱するようにデザインされる。制御回路は、機器本体内に収容されるＡＡバッテリー、上記デバイスの状態を報告するためのＬＥＤ、および上記デバイスを作動するためのボタンに接続された電源管理回路を含む別個の電子基板上に収容される。上記制御回路は、上記キャリアツールの表面上に固定化されるポリマーマトリクス要素として作用するＬＣＳＴポリマー被覆を有する特別な「使い捨てのキャリアツール」（例えば、図４に示されるとおり）と組み合わせられ、かつこれに導入されることを可能にする寸法を有する加熱ロッド（「加熱および／または冷却手段」）に接続される。
【０１１２】
上記「使い捨てのキャリアツール」−デバイスは、上記デバイスの加熱ロッドをしっかりと収容する凹みを備えたプラスチック部分を含む。その外側表面上では、上記使い捨てのキャリアツールは、実施例２において概説されかつ図４に示されるとおりのＬＣＳＴポリマーで被覆される。
【０１１３】
上記使い捨てのキャリアツールは、サンプル容器、例えば、収集した全血の必要量（例えば、１００μＬ）を含む標準的Ｍｉｃｒｏｖｅｔｔｅサンプル容器に嵌まるようにデザインされる。上記使い捨てのキャリアツールを上記サンプル容器に導入すると、上記血漿はポリマーを塗らし、その内側空間を占有するのに対して、上記サンプルに含まれる任意の特定の物質は、上記ポリマーマトリクスの外側に留まる。十分なインキュベーション時間の後、上記使い捨てのキャリアツールは、図５Ａ）および５Ｂ）の携帯型機器、ならびにこれらの加熱および／または冷却手段、すなわち、加熱ロッドと、上記機器の加熱ロッドを上記使い捨てのキャリアツールの凹みに導入することによって、接触した状態にされる。上記ロッドを上記使い捨てのキャリアツールの中にかたく押し込むことによって、上記使い捨てのキャリアツールは、上記ロッドに取り付けられる。次いで、上記使い捨てのキャリアツールが取り付けられた状態の機器は、上記サンプル容器から外され、上記使い捨てのキャリアツールは、別の容器、すなわち、空の容器（「液相収集容器」）に導入される。ボタンを押し込むと、上記携帯型機器が作動される。緑色（または任意の他の適切な色）のＬＥＤが、ＬＣＳＴを上回る予め規定の温度に達するまで光る。上記ＬＥＤは、ここで緑色に常に光る。上記ポリマーは、上記使い捨てのキャリアツールの中で収縮し、捕捉された血漿を上記液相収集容器の中に放出する。上記使い捨てのキャリアツールは、上記液相収集容器から抜き取られ、図５Ａおよび５Ｂの携帯型機器から除去され、安全に廃棄される。上記携帯型機器はここで、新たな分離タスクのために使用され得る。上記デバイスは、上記ボタンを一度押し込むことによってスイッチが切られる。何らかの故障は、赤色の光によって示される。
【０１１４】
全体のワークフローは、図６Ａ）〜Ｆ）に示され、ここで図６Ａ）は、懸濁物サンプル（この場合は全血）を含む標準的なサンプル容器を示す；図６Ｂ）は、上記ポリマーマトリクス要素が、上記懸濁物サンプルに（すなわち、この場合には、上記全血に）曝露された状態になるように、上記サンプル容器に挿入された図４の使い捨てのキャリアツール（ポリマーマトリクス要素が上記キャリアツールに固定化されている）を示す；図６Ｃ）は、図５）の携帯型デバイスの加熱および／または冷却手段（この場合には、加熱ロッド）と接続された使い捨てのキャリアツールを示す；図６Ｄ）は、上記懸濁物サンプルに規定された期間にわたって曝された後かつ上記液相が上記ポリマーマトリクス要素によって結合されたかまたは上記ポリマーマトリクス要素に組み込まれた後の上記使い捨てのキャリアツールおよび上記サンプル容器から引き抜かれている携帯型デバイスの組み合わせを示す；図６Ｅ）は、さらなる空の容器、すなわち、液相収集容器に導入されている（使い捨てのキャリアツールおよび携帯型デバイスの）同じ組み合わせを示し、ここで上記加熱および／または冷却手段（この場合には、加熱ロッド）は、上記ポリマーマトリクス要素のＬＣＳＴを上回って加熱し、それによって、上記ポリマーマトリクス要素によって結合された液相を上記液相収集容器へと放出するように作動される；図６Ｅ）は（左側に）、全血が元々保持され、上記ポリマーマトリクス要素に曝露されていた（第１の）サンプル容器を、および（右側に）上記加熱ロッドが上記ポリマーマトリクス要素のＬＣＳＴを上回って加熱された後に液相が中に放出されている（さらなる）液相収集容器を示す。
【０１１５】
実施例４  
異なるサイズの可溶性蛍光化合物の富化および除去
発明した方法論を、溶液中の可溶性分子を小容積の液体において富化するために適用した。
【０１１６】
実施例＃１に記載される方法論に従って調製したポリマープラグ（すなわち、「ポリマーマトリクス要素」）を、１．６２μｍｏｌ／Ｌの小さな有機色素５−カルボキシフルオレセイン（Ｍ＝３７６．３２ｇ／ｍｏｌ；  Ｃ０５３７  ＳＩＧＭＡ−ＡＬＤＲＩＣＨ）（「５ＣＦ」）および０．４ｎｍｏｌ／Ｌの高分子蛍光タンパク質Ｒ−フィコエリトリン（Ｍ＝２５０ｋＤａ，  Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｐ８０１）（「Ｒ−ＰＥ」）を含むストック溶液の組成を変化させるために使用した。上記ストック溶液の蛍光スペクトルを、Ｌａｍｂｄａ  ５０  Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ  Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｅｒ（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）を使用して集めた。上記スペクトルは、図７において黒の実線で示される（発光ピークはＲ−ＰＥに関しては５７０ｎｍにある）。
【０１１７】
ＰＮＩＰＡＭ／ＰＥＧアクリレートおよびＰＮＩＰＡＭから構成される実施例＃１に概説されるとおりに調製したＬＣＳＴポリマーマトリクスの２種の異なるプラグを、上記液体の組成に対するマトリクスの効果を調査するために使用した。上記プラグを含むバイアルを、４０℃のヒートブロックに１分間置いた。排出された液体をマイクロピペットで収集し、廃棄した。５−カルボキシフルオレセインおよびＲ−フィコエリトリンを含む上記ストック溶液のうちの１５０μＬを、バイアルに添加し、室温において５分間静置した。その後、上清を収集し、蛍光スペクトルを両方のサンプル（「上清」）について得た。上記プラグを有するバイアルを、４０℃のヒートブロックに１分間置き、排出された液体をマイクロピペットで収集した。蛍光スペクトルを、それぞれ、排出された液体サンプル（「マトリクス１」（白丸）、および「マトリクス４」（白菱形）に関して得て、上記ストック溶液のスペクトル（黒の実線で示される）に対して、および上記上清（マトリクス１（黒丸）およびマトリクス４（黒菱形））に対して比較した。上記２種の異なるマトリクス調製物および上記ストック溶液の正規化したスペクトルを、図７に示す。両方のポリマーマトリクス要素は、Ｒ−フィコエリトリンを上記ポリマーマトリクス要素の間隙孔空間から排除し、それによって、Ｒ−フィコエリトリンを上記ポリマーマトリクス要素の間隙孔空間に入る液体から除去することによって、それぞれの上清中のＲ−フィコエリトリンを富化し得（図７：「上清マトリクス１」（黒丸）、および「上清マトリクス４」（黒菱形））、上記ポリマーマトリクス要素がそのＬＣＳＴを上回って加熱される場合に、Ｒ−フィコエリトリンがその後再び放出される（図７：「排出された液体マトリクス１」（白丸）、および「排出された液体マトリクス４」（白菱形））ことが認められ得る。よって、本発明に従うポリマーマトリクス要素は、異なる分子量の２種の溶解した構成要素を、それぞれ、分離する、および／またはそれらを富化／除去するために成功裡に使用され得る。上記異なるマトリクス調製物が、ある種の試薬を溶液から富化または除去する異なる能力を示すことはまた、データから明らかである。
参考文献：
【化１】
2021525880.tif 000006
【図１】
2021525880.tif 000007
【図２−１】
2021525880.tif 000008
【図２−２】
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【図３】
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【図４】
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【図５−１】
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【図５−２】
2021525880.tif 000013
【図６−１】
2021525880.tif 000014
【図６−２】
2021525880.tif 000015
【図６−３】
2021525880.tif 000016
【図７】
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【国際調査報告】
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2021525880.tif 000019
2021525880.tif 000020