(57)【要約】本明細書では、アプリケータ、内視鏡、トロカール、またはこれに類するもの、ジェネレータ、および薬剤送達装置を含み得る、エレクトロポレーションのためのシステム、方法、および装置が提供される。アプリケータは、制御部分と、制御部分に接続された挿入管と、制御部分と係合するアクチュエータと、第一の先端を有する第一の電極および第二の先端を有する第二の電極を含む複数の電極とを含み得る。複数の電極は、アクチュエータによる作動に応答して、格納位置と展開位置との間で移動するよう構成され得る。第一の電極の第一の先端と第二の電極の第二の先端との間の距離が、格納位置においてよりも展開位置において大きくてもよい。また、さまざまな治療方法が提供される。【選択図】図４７
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
抗ＰＤ−１または抗ＰＤ−Ｌ１療法に非応答性または非応答性であると予測される対象の肺における病変を治療する方法であって、
ＩＬ−１２をコードする少なくとも一つのプラスミドの有効用量を前記病変に投与することと、
エレクトロポレーション療法を前記病変に施すことと、
前記対象に、少なくとも一つのチェックポイント阻害剤の有効用量を投与することと、を含み、
前記エレクトロポレーション療法を施すことが、エレクトロポレーションシステムを使用して、前記病変に電気パルスを施すことを含み、前記エレクトロポレーションシステムが、
アプリケータであって、
第一の先端を有する第一の電極および第二の先端を有する第二の電極を含む複数の電極であって、前記複数の電極が格納位置と展開位置との間で動くように構成され、
前記第一の電極の前記第一の先端と前記第二の電極の前記第二の先端との間の距離が、前記格納位置においてよりも前記展開位置において大きい、複数の電極を含む、アプリケータと、
前記複数の電極に電気的に接続されたジェネレータと、を含み、
前記電気パルスを前記病変に施すことが、前記第一の電極および前記第二の電極を前記病変内または前記病変に隣接して配置することと、前記ジェネレータから前記第一の電極および前記第二の電極に前記電気パルスを送達することと、を含む、方法。
【請求項２】
前記アプリケータが、制御部分と、前記制御部分に接続された挿入管と、前記制御部分と係合するアクチュエータとをさらに含み、前記アクチュエータの少なくとも一部分は、前記制御部分および前記挿入管に対して移動可能であり、前記複数の電極を前記格納位置と前記展開位置との間で移動させる、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記エレクトロポレーションシステムが、少なくとも一つの作業チャネルを画定する剛性トロカールまたは可撓性内視鏡のうちの一つを含む挿入デバイスをさらに含み、前記アプリケータの少なくとも一部分は、前記病変にアクセスするために前記少なくとも一つの作業チャネルを通過するように構成される、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記エレクトロポレーションシステムが、前記少なくとも一つのプラスミドまたは前記少なくとも一つのチェックポイント阻害剤のうちの少なくとも一つを前記挿入デバイスの前記少なくとも一つの作業チャネルを通して送達するように構成された薬剤送達装置をさらに含む、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記アプリケータが、前記少なくとも一つのプラスミドまたは前記少なくとも一つのチェックポイント阻害剤のうちの少なくとも一つを前記病変に送達するように構成された薬剤送達チャネルをさらに画定する、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記エレクトロポレーションシステムが、前記少なくとも一つのプラスミド、前記少なくとも一つのチェックポイント阻害剤、または前記エレクトロポレーション療法の少なくとも一つの投与中に、前記アプリケータの位置を制御するために前記アプリケータと係合する少なくとも一つのロボットアームをさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記エレクトロポレーションシステムが、前記少なくとも一つのプラスミド、前記少なくとも一つのチェックポイント阻害剤、または前記エレクトロポレーション療法の少なくとも一つの投与前または投与中に、前記病変の画像を生成するように構成された少なくとも一つの可視化装置をさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記少なくとも一つの可視化装置が、コンピューター断層撮影スキャナーを含む、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記ジェネレータが低電圧電気パルスを出力するよう構成される、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
前記電気パルスが７００Ｖ／ｃｍ以下の電界強度を有する、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記ジェネレータが、高電圧電気パルスを出力するよう構成される、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
前記少なくとも一つのプラスミドが、タボキノーゲンテルセプラスミドを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
前記チェックポイント阻害剤が全身に投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
前記チェックポイント阻害剤が、抗ＰＤ−１抗体または抗ＰＤ−Ｌ１抗体である、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記チェックポイント阻害剤が、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、ピジリズマブ、またはＭＰＤＬ３２８０Ａを含む、請求項１３に記載の方法。
【請求項１６】
抗ＰＤ−１または抗ＰＤＬ１療法に非応答性、または非応答性であると予測される対象の肺の病変を治療するためのシステムであって、
第一の先端を有する第一の電極および第二の先端を有する第二の電極を含む複数の電極、を含むアプリケータであって、前記複数の電極が格納位置と展開位置との間を移動するように構成され、前記第一の電極の前記第一の先端と前記第二の電極の前記第二の先端との間の距離が、前記格納位置においてよりも前記展開位置において大きい、アプリケータと、
前記複数の電極に電気的に接続されたジェネレータであって、前記病変に電気パルスを施すために、前記第一の電極および第二の電極に前記電気パルスを送達するように構成される、ジェネレータと、
ＩＬ−１２をコードする少なくとも一つのプラスミドの有効用量、および少なくとも一つのチェックポイント阻害剤の有効用量を前記対象に送達するように構成された少なくとも一つの薬剤送達装置と、を含む、システム。
【請求項１７】
前記アプリケータが、制御部分と、前記制御部分に接続された挿入管と、前記制御部分と係合するアクチュエータとをさらに含み、前記アクチュエータの少なくとも一部分は、前記制御部分および前記挿入管に対して移動可能であり、前記複数の電極を前記格納位置と前記展開位置との間で移動させる、請求項１６に記載のシステム。
【請求項１８】
少なくとも一つの作業チャネルを画定する剛性トロカールまたは可撓性内視鏡のうちの一つを含む挿入デバイスをさらに含み、前記アプリケータの少なくとも一部分が前記少なくとも一つの作業チャネルを通過して前記病変にアクセスするように構成される、請求項１６に記載のシステム。
【請求項１９】
前記少なくとも一つのプラスミドを前記挿入デバイスの前記少なくとも一つの作業チャネルを通して送達するように構成された薬剤送達装置をさらに含む、請求項１８に記載のシステム。
【請求項２０】
前記アプリケータが、前記少なくとも一つのプラスミドを前記病変に送達するように構成された薬剤送達チャネルをさらに画定する、請求項１６に記載のシステム。
【請求項２１】
前記少なくとも一つのプラスミドまたは前記エレクトロポレーション療法のうちの少なくとも一つの投与中に、前記アプリケータの位置を制御するために前記アプリケータと係合する少なくとも一つのロボットアームをさらに含む、請求項１６に記載のシステム。
【請求項２２】
前記少なくとも一つのプラスミドまたは前記エレクトロポレーション療法の少なくとも一つの投与前または投与中に前記病変の画像を生成するように構成された少なくとも一つの可視化装置をさらに含む、請求項１６に記載のシステム。
【請求項２３】
前記少なくとも一つの可視化装置がコンピューター断層撮影スキャナーを含む、請求項２２に記載のシステム。
【請求項２４】
前記ジェネレータが、低電圧電気パルスを出力するよう構成される、請求項１６に記載のシステム。
【請求項２５】
前記電気パルスが７００Ｖ／ｃｍ以下の電界強度を有する、請求項２４に記載のシステム。
【請求項２６】
前記ジェネレータが、高電圧電気パルスを出力するよう構成される、請求項１６に記載のシステム。
【請求項２７】
前記少なくとも一つのプラスミドが、タボキノーゲンテルセプラスミドを含む、請求項１６に記載のシステム。
【請求項２８】
対象の肺における病変を治療する方法であって、
少なくとも一つの治療剤の有効用量を前記病変に投与することと、
エレクトロポレーション療法を前記病変に施すことと、を含み、前記エレクトロポレーション療法が、エレクトロポレーションシステムを使って前記病変に電気パルスを施すことを含み、前記エレクトロポレーションシステムが、
アプリケータであって、
第一の先端を有する第一の電極および第二の先端を有する第二の電極を含む複数の電極であって、前記複数の電極が格納位置と展開位置との間で動くように構成され、
前記第一の電極の前記第一の先端と前記第二の電極の前記第二の先端との間の距離が、前記格納位置においてよりも前記展開位置において大きい、複数の電極を含むアプリケータと、
前記複数の電極に電気的に接続されたジェネレータと、を含み、
前記電気パルスを前記病変に施すことが、前記第一の電極および前記第二の電極を前記病変内または前記病変に隣接して配置することと、前記ジェネレータから前記第一の電極および前記第二の電極に前記電気パルスを送達することと、を含む、方法。
【請求項２９】
前記アプリケータが、制御部分と、前記制御部分に接続された挿入管と、前記制御部分と係合するアクチュエータとをさらに含み、前記アクチュエータの少なくとも一部分は、前記制御部分および前記挿入管に対して移動可能であり、前記複数の電極を前記格納位置と前記展開位置との間で移動させる、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
前記エレクトロポレーションシステムが、少なくとも一つの作業チャネルを画定する挿入デバイスをさらに含み、前記アプリケータの少なくとも一部分が、前記少なくとも一つの作業チャネルを通過して前記病変にアクセスするように構成される、請求項２８に記載の方法。
【請求項３１】
前記エレクトロポレーションシステムが、前記挿入デバイスの前記少なくとも一つの作業チャネルを通して前記少なくとも一つの治療剤を送達するように構成された薬剤送達装置をさらに含む、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
前記アプリケータが、前記少なくとも一つの治療剤を前記病変に送達するよう構成された薬剤送達チャネルをさらに画定する、請求項２８に記載の方法。
【請求項３３】
前記エレクトロポレーションシステムが、前記少なくとも一つの治療剤または前記エレクトロポレーション療法の少なくとも一つの投与中に、前記アプリケータの位置を制御するために前記アプリケータと係合する少なくとも一つのロボットアームをさらに含む、請求項２８に記載の方法。
【請求項３４】
前記エレクトロポレーションシステムが、前記少なくとも一つの治療剤または前記エレクトロポレーション療法の少なくとも一つの投与の前または投与中に、前記病変の画像を生成するように構成された少なくとも一つの可視化装置をさらに含む、請求項２８に記載の方法。
【請求項３５】
前記ジェネレータが低電圧電気パルスを出力するよう構成される、請求項２８に記載の方法。
【請求項３６】
前記電気パルスが７００Ｖ／ｃｍ以下の電界強度を有する、請求項３５に記載の方法。
【請求項３７】
前記ジェネレータが、高電圧電気パルスを出力するよう構成される、請求項２８に記載の方法。
【請求項３８】
前記対象に前記少なくとも一つの治療剤の前記有効用量を投与することが、サイトカインをコードする少なくとも一つのプラスミドの有効用量を投与することを含む、請求項２８に記載の方法。
【請求項３９】
前記少なくとも一つのプラスミドが、タボキノーゲンテルセプラスミドを含む、請求項３８に記載の方法。
【請求項４０】
前記対象に前記少なくとも一つの治療剤の前記有効用量を投与することが、前記対象に少なくとも一つのチェックポイント阻害剤の有効用量を投与することをさらに含む、請求項３８に記載の方法。
【請求項４１】
前記アプリケータの一部分を、前記対象の食道を介して前記対象の前記肺に挿入することをさらに含む、請求項２８に記載の方法。
【請求項４２】
対象の肺における病変を治療するためのシステムであって、
第一の先端を有する第一の電極および第二の先端を有する第二の電極を含む複数の電極、を含むアプリケータであって、前記複数の電極が格納位置と展開位置との間を移動するように構成され、前記第一の電極の前記第一の先端と前記第二の電極の前記第二の先端との間の距離が、前記格納位置においてよりも前記展開位置において大きい、アプリケータと、
前記複数の電極に電気的に接続されたジェネレータであって、前記病変に電気パルスを施すために、前記第一の電極および前記第二の電極に前記電気パルスを送達するように構成される、ジェネレータと、
前記対象に少なくとも一つの治療剤の有効用量を送達するよう構成された少なくとも一つの薬剤送達チャネルと、を含む、システム。
【請求項４３】
前記アプリケータが、制御部分と、前記制御部分に接続された挿入管と、前記制御部分と係合するアクチュエータとをさらに含み、前記アクチュエータの少なくとも一部分は、前記制御部分および前記挿入管に対して移動可能であり、前記複数の電極を前記格納位置と前記展開位置との間で移動させる、請求項４２に記載のシステム。
【請求項４４】
少なくとも一つの作業チャネルを画定する挿入デバイスをさらに含み、前記アプリケータの少なくとも一部分が前記少なくとも一つの作業チャネルを通過して前記病変にアクセスするように構成される、請求項４２に記載のシステム。
【請求項４５】
前記少なくとも一つの治療剤を前記挿入デバイスの前記少なくとも一つの作業チャネルを通して送達するよう構成された薬剤送達装置をさらに含む、請求項４４に記載のシステム。
【請求項４６】
前記挿入デバイスが気管支鏡を含み、前記アプリケータが少なくとも部分的に可撓性である、請求項４４に記載のシステム。
【請求項４７】
前記アプリケータが、前記少なくとも一つの治療剤を前記病変に送達するよう構成された薬剤送達チャネルをさらに画定する、請求項４２に記載のシステム。
【請求項４８】
前記少なくとも一つの治療剤または前記エレクトロポレーション療法の少なくとも一つの送達中に、前記アプリケータの位置を制御するために前記アプリケータと係合する少なくとも一つのロボットアームをさらに含む、請求項４２に記載のシステム。
【請求項４９】
前記少なくとも一つの治療剤または前記エレクトロポレーション療法の少なくとも一つの送達前または送達中に前記病変の画像を生成するように構成された少なくとも一つの可視化装置をさらに含む、請求項４２に記載のシステム。
【請求項５０】
前記ジェネレータが、低電圧電気パルスを出力するよう構成される、請求項４２に記載のシステム。
【請求項５１】
前記電気パルスが７００Ｖ／ｃｍ以下の電界強度を有する、請求項５０に記載のシステム。
【請求項５２】
前記ジェネレータが、高電圧電気パルスを出力するよう構成される、請求項４２に記載のシステム。
【請求項５３】
対象の膵臓における内臓病変を治療する方法であって、
前記対象に、少なくとも一つの治療剤の有効用量を投与することと、
エレクトロポレーション療法を前記内臓病変に施すことと、を含み、前記エレクトロポレーション療法が、エレクトロポレーションシステムを使って前記内臓病変に電気パルスを施すことを含み、前記エレクトロポレーションシステムが、
アプリケータであって、
第一の先端を有する第一の電極および第二の先端を有する第二の電極を含む複数の電極であって、前記複数の電極が格納位置と展開位置との間で動くように構成され、
前記第一の電極の前記第一の先端と前記第二の電極の前記第二の先端との間の距離が、前記格納位置においてよりも前記展開位置において大きい、複数の電極、を含む、アプリケータと、
前記複数の電極に電気的に接続されたジェネレータと、を含み、
前記電気パルスを前記内臓病変に施すことが、前記第一の電極および前記第二の電極を前記内臓病変内または前記内臓病変に隣接して配置することと、前記ジェネレータから前記第一の電極および前記第二の電極に前記電気パルスを送達することとを含む、方法。
【請求項５４】
前記アプリケータが、制御部分と、前記制御部分に接続された挿入管と、前記制御部分と係合するアクチュエータとをさらに含み、前記アクチュエータの少なくとも一部分は、前記制御部分および前記挿入管に対して移動可能であり、前記複数の電極を前記格納位置と前記展開位置との間で移動させる、請求項５３に記載の方法。
【請求項５５】
前記エレクトロポレーションシステムが、少なくとも一つの作業チャネルを画定する挿入デバイスをさらに含み、前記アプリケータの少なくとも一部分が、前記少なくとも一つの作業チャネルを通過して前記内臓病変にアクセスするように構成される、請求項５３に記載の方法。
【請求項５６】
前記エレクトロポレーションシステムが、前記挿入デバイスの前記少なくとも一つの作業チャネルを通して前記少なくとも一つの治療剤を送達するように構成された薬剤送達装置をさらに含む、請求項５５に記載の方法。
【請求項５７】
前記挿入デバイスが内視鏡を含み、前記アプリケータが少なくとも部分的に可撓性である、請求項５５に記載の方法。
【請求項５８】
前記アプリケータが、前記少なくとも一つの治療剤を前記内臓病変に送達するよう構成された薬剤送達チャネルをさらに画定する、請求項５３に記載の方法。
【請求項５９】
前記エレクトロポレーションシステムが、前記少なくとも一つの治療剤または前記エレクトロポレーション療法の少なくとも一つの投与中に、前記アプリケータの位置を制御するために前記アプリケータと係合する少なくとも一つのロボットアームをさらに含む、請求項５３に記載の方法。
【請求項６０】
前記エレクトロポレーションシステムが、前記少なくとも一つの治療剤または前記エレクトロポレーション療法の少なくとも一つの投与の前または投与中に、前記内臓病変の画像を生成するように構成された少なくとも一つの可視化装置をさらに含む、請求項５３に記載の方法。
【請求項６１】
前記少なくとも一つの可視化装置が、コンピューター断層撮影スキャナーを含む、請求項６０に記載の方法。
【請求項６２】
前記ジェネレータが低電圧電気パルスを出力するよう構成される、請求項５３に記載の方法。
【請求項６３】
前記電気パルスが７００Ｖ／ｃｍ以下の電界強度を有する、請求項６２に記載の方法。
【請求項６４】
前記ジェネレータが、高電圧電気パルスを出力するよう構成される、請求項５３に記載の方法。
【請求項６５】
前記対象に前記少なくとも一つの治療剤の前記有効用量を投与することが、サイトカインをコードする少なくとも一つのプラスミドの有効用量を投与することを含む、請求項５３に記載の方法。
【請求項６６】
前記少なくとも一つのプラスミドが、タボキノーゲンテルセプラスミドを含む、請求項６５に記載の方法。
【請求項６７】
前記対象に前記少なくとも一つの治療剤の前記有効用量を投与することが、前記対象に少なくとも一つのチェックポイント阻害剤の有効用量を投与することをさらに含む、請求項６５に記載の方法。
【請求項６８】
前記アプリケータが、貫通先端をさらに含み、前記方法が、
前記アプリケータの一部分を前記対象の胃に挿入することと、
前記貫通先端で胃壁を貫通することと、
前記複数の電極を前記格納位置から前記展開位置まで移動させることと、をさらに含む、請求項５３に記載の方法。
【請求項６９】
対象の膵臓における内臓病変を治療するためのシステムであって、
第一の先端を有する第一の電極および第二の先端を有する第二の電極を含む複数の電極、を含むアプリケータであって、前記複数の電極が、前記アクチュエータの作動に応答して格納位置と展開位置との間を移動するように構成され、前記第一の電極の前記第一の先端と前記第二の電極の前記第二の先端との間の距離が、前記格納位置においてよりも前記展開位置において大きい、アプリケータと、
前記複数の電極に電気的に接続されたジェネレータであって、前記内臓病変に電気パルスを施すために、前記第一の電極および前記第二の電極に前記電気パルスを送達するように構成される、ジェネレータと、
前記対象に少なくとも一つの治療剤の有効用量を送達するよう構成された少なくとも一つの薬剤送達チャネルと、を含む、システム。
【請求項７０】
前記アプリケータが、制御部分と、前記制御部分に接続された挿入管と、前記制御部分と係合するアクチュエータとをさらに含み、前記アクチュエータの少なくとも一部分は、前記制御部分および前記挿入管に対して移動可能であり、前記複数の電極を前記格納位置と前記展開位置との間で移動させる、請求項６９に記載のシステム。
【請求項７１】
少なくとも一つの作業チャネルを画定する挿入デバイスをさらに含み、前記アプリケータの少なくとも一部分が、前記少なくとも一つの作業チャネルを通過して前記内臓病変にアクセスするように構成される、請求項６９に記載のシステム。
【請求項７２】
前記少なくとも一つの治療剤を前記挿入デバイスの前記少なくとも一つの作業チャネルを通して送達するよう構成された薬剤送達装置をさらに含む、請求項７１に記載のシステム。
【請求項７３】
前記挿入デバイスが気管支鏡を含み、前記アプリケータが少なくとも部分的に可撓性である、請求項７１に記載のシステム。
【請求項７４】
前記アプリケータが、前記少なくとも一つの治療剤を前記内臓病変に送達するよう構成された薬剤送達チャネルをさらに画定する、請求項６９に記載のシステム。
【請求項７５】
前記少なくとも一つの治療剤または前記エレクトロポレーション療法の少なくとも一つの送達中に、前記アプリケータの位置を制御するために前記アプリケータと係合する少なくとも一つのロボットアームをさらに含む、請求項６９に記載のシステム。
【請求項７６】
前記少なくとも一つの治療剤または前記エレクトロポレーション療法の少なくとも一つの送達の前または送達中に、前記内臓病変の画像を生成するように構成された少なくとも一つの可視化装置をさらに含む、請求項６９に記載のシステム。
【請求項７７】
前記少なくとも一つの可視化装置がコンピューター断層撮影スキャナーを含む、請求項７６に記載のシステム。
【請求項７８】
前記ジェネレータが、低電圧電気パルスを出力するよう構成される、請求項６９に記載のシステム。
【請求項７９】
前記電気パルスが７００Ｖ／ｃｍ以下の電界強度を有する、請求項７８に記載のシステム。
【請求項８０】
前記ジェネレータが、高電圧電気パルスを出力するよう構成される、請求項６９に記載のシステム。
【請求項８１】
前記アプリケータが、前記膵臓上の前記内臓病変に、または前記膵臓上の前記内臓病変に近接して、前記少なくとも一つの治療剤または前記電気パルスの少なくとも一つを投与するために、前記対象の胃壁を貫通するように構成された貫通先端をさらに含む、請求項６９に記載のシステム。
【請求項８２】
対象の病変を治療する方法であって、
前記対象に、少なくとも一つの治療剤の有効用量を投与することと、
エレクトロポレーション療法を前記病変に施すことと、を含み、前記エレクトロポレーション療法が、エレクトロポレーションシステムを使って前記病変に電気パルスを施すことを含み、前記エレクトロポレーションシステムが、
第一の先端を有する第一の電極および第二の先端を有する第二の電極を含む複数の電極を含むアプリケータと、
前記複数の電極に電気的に接続されたジェネレータと、を含み、
前記電気パルスを前記病変に施すことが、前記第一の電極および前記第二の電極を前記病変内または前記病変に隣接して配置することと、前記ジェネレータから前記第一の電極および前記第二の電極に前記電気パルスを送達することと、を含む、方法。
【請求項８３】
前記複数の電極が、格納位置と展開位置との間を移動するように構成され、前記第一の電極の前記第一の先端と前記第二の電極の前記第二の先端との間の距離が、前記格納位置においてよりも前記展開位置において大きい、請求項８２に記載の方法。
【請求項８４】
前記アプリケータが、制御部分と、前記制御部分に接続された挿入管と、前記制御部分と係合するアクチュエータとをさらに含み、前記アクチュエータの少なくとも一部分は、前記制御部分および前記挿入管に対して移動可能であり、前記複数の電極を前記格納位置と前記展開位置との間で移動させる、請求項８３に記載の方法。
【請求項８５】
前記エレクトロポレーションシステムが、少なくとも一つの作業チャネルを画定する挿入デバイスをさらに含み、前記アプリケータの少なくとも一部分が、前記少なくとも一つの作業チャネルを通過して前記病変にアクセスするように構成される、請求項８２に記載の方法。
【請求項８６】
前記エレクトロポレーションシステムが、前記挿入デバイスの前記少なくとも一つの作業チャネルを通して前記少なくとも一つの治療剤を送達するように構成された薬剤送達装置をさらに含む、請求項８５に記載の方法。
【請求項８７】
前記挿入デバイスが内視鏡を含み、前記アプリケータが少なくとも部分的に可撓性である、請求項８５に記載の方法。
【請求項８８】
前記挿入デバイスがトロカールを含み、前記アプリケータが実質的に剛性である、請求項８５に記載の方法。
【請求項８９】
前記アプリケータが、前記少なくとも一つの治療剤を前記病変に送達するよう構成された薬剤送達チャネルをさらに画定する、請求項８２に記載の方法。
【請求項９０】
前記エレクトロポレーションシステムが、前記少なくとも一つの治療剤または前記エレクトロポレーション療法の少なくとも一つの投与中に、前記アプリケータの位置を制御するために前記アプリケータと係合する少なくとも一つのロボットアームをさらに含む、請求項８２に記載の方法。
【請求項９１】
前記エレクトロポレーションシステムが、前記少なくとも一つの治療剤または前記エレクトロポレーション療法の少なくとも一つの投与の前または投与中に、前記病変の画像を生成するように構成された少なくとも一つの可視化装置をさらに含む、請求項８２に記載の方法。
【請求項９２】
前記ジェネレータが低電圧電気パルスを出力するよう構成される、請求項８２に記載の方法。
【請求項９３】
前記電気パルスが７００Ｖ／ｃｍ以下の電界強度を有する、請求項９２に記載の方法。
【請求項９４】
前記ジェネレータが、高電圧電気パルスを出力するよう構成される、請求項８２に記載の方法。
【請求項９５】
前記病変を治療することが、サイトカインをコードする少なくとも一つのプラスミドの有効用量を投与することを含む、請求項８２に記載の方法。
【請求項９６】
前記サイトカインがＩＬ−１２を含む、請求項９５に記載の方法。
【請求項９７】
前記少なくとも一つのプラスミドが、タボキノーゲンテルセプラスミドを含む、請求項９５に記載の方法。
【請求項９８】
前記病変を治療することが、前記対象に、少なくとも一つのチェックポイント阻害剤の有効用量を投与することをさらに含む、請求項９５に記載の方法。
【請求項９９】
前記治療剤が、免疫調節性ポリペプチドをコードする少なくとも一つのプラスミドを含む、請求項８２に記載の方法。
【請求項１００】
前記免疫調節性ポリペプチドが、サイトカイン、共刺激分子、遺伝学的アジュバント、抗原、遺伝学的アジュバント−抗原融合ポリペプチド、ケモカイン、または抗原結合ポリペプチドを含む、請求項９９に記載の方法。
【請求項１０１】
前記免疫調節性ポリペプチドが、ＣＸＣＬ９、抗ＣＤ３  ｓｃＦｙ、または抗ＣＴＬＡ  ｓｃＦｙを含む、請求項１００に記載の方法。
【請求項１０２】
対象の病変を治療するためのシステムであって、
第一の先端を有する第一の電極および第二の先端を有する第二の電極を含む複数の電極を含むアプリケータと、
前記複数の電極に電気的に接続されたジェネレータであって、前記病変に電気パルスを施すために、前記第一の電極および前記第二の電極に前記電気パルスを送達するように構成される、ジェネレータと、
前記対象に少なくとも一つの治療剤の有効用量を送達するよう構成された少なくとも一つの薬剤送達チャネルと、を含む、システム。
【請求項１０３】
前記複数の電極が、格納位置と展開位置との間を移動するように構成され、前記第一の電極の前記第一の先端と前記第二の電極の前記第二の先端との間の距離が、前記格納位置においてよりも前記展開位置において大きい、請求項１０２に記載のシステム。
【請求項１０４】
前記アプリケータが、制御部分と、前記制御部分に接続された挿入管と、前記制御部分と係合するアクチュエータとをさらに含み、前記アクチュエータの少なくとも一部分は、前記制御部分および前記挿入管に対して移動可能であり、前記複数の電極を前記格納位置と前記展開位置との間で移動させる、請求項１０３に記載のシステム。
【請求項１０５】
少なくとも一つの作業チャネルを画定する挿入デバイスをさらに含み、前記アプリケータの少なくとも一部分が前記少なくとも一つの作業チャネルを通過して前記病変にアクセスするように構成される、請求項１０２に記載のシステム。
【請求項１０６】
前記少なくとも一つの治療剤を前記挿入デバイスの前記少なくとも一つの作業チャネルを通して送達するよう構成された薬剤送達装置をさらに含む、請求項１０５に記載のシステム。
【請求項１０７】
前記挿入デバイスが内視鏡を含み、前記アプリケータが少なくとも部分的に可撓性である、請求項１０５に記載のシステム。
【請求項１０８】
前記挿入デバイスがトロカールを含み、前記アプリケータが実質的に剛性である、請求項１０５に記載のシステム。
【請求項１０９】
前記アプリケータが、前記少なくとも一つの治療剤を前記病変に送達するよう構成された薬剤送達チャネルをさらに画定する、請求項１０２に記載のシステム。
【請求項１１０】
前記少なくとも一つの治療剤または前記電気パルスの少なくとも一つの送達中に、前記アプリケータの位置を制御するために前記アプリケータと係合する少なくとも一つのロボットアームをさらに含む、請求項１０２に記載のシステム。
【請求項１１１】
前記少なくとも一つの治療剤または前記電気パルスの少なくとも一つの送達前または送達中に前記病変の画像を生成するように構成された少なくとも一つの可視化装置をさらに含む、請求項１０２に記載のシステム。
【請求項１１２】
前記少なくとも一つの可視化装置がコンピューター断層撮影スキャナーを含む、請求項１１１に記載のシステム。
【請求項１１３】
前記ジェネレータが、低電圧電気パルスを出力するよう構成される、請求項１０２に記載のシステム。
【請求項１１４】
前記電気パルスが７００Ｖ／ｃｍ以下の電界強度を有する、請求項１１３に記載のシステム。
【請求項１１５】
前記ジェネレータが、高電圧電気パルスを出力するよう構成される、請求項１０２に記載のシステム。
【請求項１１６】
前記病変を治療することが、サイトカインをコードする少なくとも一つのプラスミドの有効用量を送達することを含む、請求項１０２に記載のシステム。
【請求項１１７】
前記少なくとも一つのプラスミドが、タボキノーゲンテルセプラスミドを含む、請求項１１６に記載のシステム。
【請求項１１８】
前記病変に前記少なくとも一つの治療剤の前記有効用量を送達することが、前記対象に少なくとも一つのチェックポイント阻害剤の有効用量を送達することをさらに含む、請求項１１６に記載のシステム。
【請求項１１９】
前記治療剤が、免疫調節性ポリペプチドをコードする少なくとも一つのプラスミドを含む、請求項１０２に記載のシステム。
【請求項１２０】
前記免疫調節性ポリペプチドが、サイトカイン、共刺激分子、遺伝学的アジュバント、抗原、遺伝学的アジュバント−抗原融合ポリペプチド、ケモカイン、または抗原結合ポリペプチドを含む、請求項１１９に記載のシステム。
【請求項１２１】
前記免疫調節性ポリペプチドが、ＣＸＣＬ９、抗ＣＤ３  ｓｃＦｖ、または抗ＣＴＬＡ−４  ｓｃＦｖを含む、請求項１２０に記載のシステム。
【請求項１２２】
エレクトロポレーション用のアプリケータであって、
制御部分と、
前記制御部分に接続された挿入管と、
前記制御部分と係合するアクチュエータであって、前記アクチュエータの少なくとも一部分は、前記制御部分および前記挿入管に対して移動可能である、アクチュエータと、
第一の先端を有する第一の電極と、第二の先端を有する第二の電極とを含む複数の電極であって、前記アクチュエータによる作動に応答して、格納位置と展開位置との間で移動するように構成され、
前記第一の電極の前記第一の先端と前記第二の電極の前記第二の先端との間の距離が、前記格納位置においてよりも、前記展開位置において大きい、複数の電極と、を含む、アプリケータ。
【請求項１２３】
前記第一の先端および前記第二の先端が、前記格納位置において前記挿入管内に完全に埋め込まれ、少なくとも前記第一の先端および前記第二の先端が、前記挿入管から前記展開位置の隣接する組織に延在するように構成される、請求項１２２に記載のアプリケータ。
【請求項１２４】
前記展開位置において、前記第一の電極の前記第一の先端と前記第二の電極の前記第二の先端との間の前記距離が、前記挿入管の遠位端の外径よりも大きい、請求項１２２に記載のアプリケータ。
【請求項１２５】
前記挿入管が、前記挿入管の遠位端に画定される第一の角度付きチャネルおよび第二の角度付きチャネルを含み、
前記第一の角度付きチャネルおよび前記第二の角度付きチャネルが、前記挿入管の長手方向軸に対して鋭角にそれぞれ配向され、
前記第一の電極が、前記展開位置の前記第一の角度付きチャネルを少なくとも部分的に通って延在するように構成され、
前記第二の電極が、前記展開位置の前記第二の角度付きチャネルを少なくとも部分的に通って延在するように構成され、
前記格納位置において、前記第一の電極および前記第二の電極が、前記挿入管内で互いに平行に配置され、
前記展開位置において、前記第一の電極の少なくとも一部分および前記第二の電極の少なくとも一部分が、前記第一の角度付きチャネルおよび前記第二の角度付きチャネルのそれぞれの鋭角に配置される、請求項１２２に記載のアプリケータ。
【請求項１２６】
前記第一の電極および前記第二の電極と係合するブラダーであって、前記格納位置の前記挿入管内に完全に配置され、前記展開位置の前記挿入管の外に少なくとも部分的に配置される、ブラダーをさらに含む、請求項１２２に記載のアプリケータ。
【請求項１２７】
前記第一の電極および前記第二の電極の少なくとも一部分は、ニチノールを含み、前記ニチノールは、前記複数の電極が前記展開位置にある場合、形状を変化させるように構成され、前記ニチノールは、人体温度を超えると形状が変化するように構成されている、請求項１２２に記載のアプリケータ。
【請求項１２８】
前記第一の電極および第二の電極のそれぞれに取り付けられたニチノールスリーブをさらに含み、前記ニチノールは、前記複数の電極が前記展開位置にある場合、形状を変化させるように構成され、前記ニチノールは、人体温度を超えると形状が変化するように構成されている、請求項１２２に記載のアプリケータ。
【請求項１２９】
前記第一の電極および前記第二の電極が非線形である、請求項１２２に記載のアプリケータ。
【請求項１３０】
前記挿入管内に少なくとも部分的に移動可能に配置されたキャリアをさらに含み、前記第一の電極および前記第二の電極はそれぞれ、少なくとも部分的に前記キャリア内に配置され、前記キャリアは、前記第一の電極に関連する第一の部分および前記第二の電極に関連する第二の部分を画定し、前記第一の部分および前記第二の部分は、前記格納位置から前記拡張位置に移動するときに、互いに半径方向に離れて拡張するように構成される、請求項１２２に記載のアプリケータ。
【請求項１３１】
前記キャリアの前記第一の部分および前記第二の部分を半径方向外側に拡張するために、前記アクチュエータから力を受けるように構成された内側部材をさらに含む、請求項１３０に記載のアプリケータ。
【請求項１３２】
前記第一の部分と前記第二の部分との間に配置されるばねをさらに含み、前記ばねが、前記キャリアの前記第一の部分および前記第二の部分を半径方向外側に拡張するように構成される、請求項１３０に記載のアプリケータ。
【請求項１３３】
前記アプリケータの前記挿入管を介して、薬剤送達装置を標的部位と流体接続するように構成された薬剤送達チャネルをさらに含む、請求項１２２に記載のアプリケータ。
【請求項１３４】
前記アクチュエータが、前記薬剤送達チャネルを前記標的部位に向かって変位させるように構成される、請求項１３３に記載のアプリケータ。
【請求項１３５】
前記薬剤送達チャネルが、前記アクチュエータによる作動に応答して、前記薬剤送達チャネルの格納位置と前記薬剤送達チャネルの前記展開位置との間を、前記複数の電極と同時に移動するように構成される、請求項１３４に記載のアプリケータ。
【請求項１３６】
前記挿入管が、遠位端で貫通先端を画定する、請求項１２２に記載のアプリケータ。
【請求項１３７】
前記挿入管が可撓性部分を含み、前記可撓性部分が前記挿入管の遠位端を操縦するように構成される、請求項１２２に記載のアプリケータ。
【請求項１３８】
前記挿入管は剛性部分を含み、前記剛性部分は、前記挿入管の前記遠位端と前記アプリケータの前記制御部分との間に配置され、前記アプリケータが、前記挿入管内に配置された少なくとも１本のケーブルを含み、前記少なくとも１本のケーブルが、前記挿入管の前記遠位端と前記剛性部分との間の前記アプリケータに取り付けられて、前記挿入管の前記遠位端を操縦する、請求項１３７に記載のアプリケータ。
【請求項１３９】
エレクトロポレーションのためのシステムであって、
アプリケータであって、
制御部分と、
前記制御部分に接続された挿入管と、
前記制御部分と係合するアクチュエータであって、前記アクチュエータの少なくとも一部分は、前記制御部分および前記挿入管に対して移動可能である、アクチュエータと、
第一の先端を有する第一の電極と、第二の先端を有する第二の電極とを含む複数の電極であって、前記アクチュエータによる作動に応答して、格納位置と展開位置との間で移動するように構成され、
前記第一の電極の前記第一の先端と前記第二の電極の前記第二の先端との間の距離が、前記格納位置においてよりも前記展開位置において大きい、複数の電極とを含む、アプリケータと、
作業チャネルを画定する挿入デバイスであって、前記アプリケータの前記挿入管の少なくとも一部分が前記作業チャネルを通過するように構成される、挿入デバイスと、
前記複数の電極に電気的に接続されたジェネレータであって、前記複数の電極に電気信号を送達するように構成される、ジェネレータと、
一つまたは複数の治療剤を前記挿入デバイスの前記作業チャネルを通して送達するよう構成された薬剤送達装置と、を含む、システム。
【請求項１４０】
前記展開位置において、前記第一の電極の前記第一の先端と前記第二の電極の前記第二の先端との間の前記距離が、前記作業チャネルの内径よりも大きい、請求項１３９に記載のシステム。
【請求項１４１】
前記格納位置において、前記挿入管の前記一部分および複数の電極が、前記挿入デバイスの前記作業チャネルを通過するように構成される、請求項１３９に記載のシステム。
【請求項１４２】
前記ジェネレータに、電気信号を前記第一の電極および前記第二の電極に送信させ、前記第一の電極と前記第二の電極との間に配置される組織のインピーダンスを示す電気信号を受信させるように構成されたプロセッサをさらに含む、請求項１３９に記載のシステム。
【請求項１４３】
前記挿入デバイスが内視鏡を含む、請求項１３９に記載のシステム。
【請求項１４４】
前記内視鏡が気管支鏡を含む、請求項１４３に記載のシステム。
【請求項１４５】
前記アプリケータが、前記アプリケータの前記挿入管を介して標的部位と薬剤送達装置を流体接続するよう構成された薬剤送達チャネルをさらに含む、請求項１３９に記載のシステム。
【請求項１４６】
前記アクチュエータが、前記薬剤送達チャネルを前記標的部位に向かって変位させるように構成される、請求項１４５に記載のシステム。
【請求項１４７】
前記薬剤送達チャネルが、前記アクチュエータによる作動に応答して、前記薬剤送達チャネルの格納位置と前記薬剤送達チャネルの前記展開位置との間を、前記複数の電極と同時に移動するように構成される、請求項１４６に記載のシステム。
【請求項１４８】
前記挿入管が可撓性部分を含み、前記可撓性部分が前記挿入管の遠位端を操縦するように構成される、請求項１３９に記載のシステム。
【請求項１４９】
前記挿入管は剛性部分を含み、前記剛性部分は、前記挿入管の前記遠位端と前記アプリケータの前記制御部分との間に配置され、前記アプリケータが、前記挿入管内に配置された少なくとも１本のケーブルを含み、前記少なくとも１本のケーブルが、前記挿入管の前記遠位端と前記剛性部分との間の前記アプリケータに取り付けられて、前記挿入管の前記遠位端を操縦する、請求項１４８に記載のシステム。
【請求項１５０】
前記アプリケータが薬剤送達チャネルを含み、前記薬剤送達装置が前記薬剤送達チャネルを介して前記一つまたは複数の治療剤を送達するよう構成される、請求項１３９に記載のシステム。
【請求項１５１】
腫瘍を治療する方法であって、
挿入デバイスの遠位端が標的部位に隣接して配置されるまで、前記挿入デバイスを患者に挿入することと、
複数の電極を含む挿入管の遠位端が前記標的部位に隣接して位置付けられるように、アプリケータの前記挿入管を前記挿入デバイスの前記作業チャネルに挿入することと、
前記挿入デバイスの作業チャネルを介して、薬剤送達装置から前記標的部位に治療剤を投与することと、
一つまたは複数の電気パルスをジェネレータから前記電極に送達して、前記標的部位で前記組織を電気穿孔することと、
前記患者から前記アプリケータおよび前記挿入デバイスを取り外すことと、を含む、方法。
【請求項１５２】
治療剤を投与することが、前記薬剤送達装置の一部分が前記標的部位に隣接して位置するように、前記薬剤送達装置の前記一部分を前記挿入デバイスの前記作業チャネルに挿入することを含み、
前記方法が、前記薬剤送達装置の前記一部分を前記挿入デバイスから取り除くことをさらに含む、請求項１５１に記載の方法。
【請求項１５３】
前記アプリケータの前記挿入管を前記作業チャネルに挿入することが、前記標的部位に隣接する薬剤送達チャネルを位置付けることをさらに含む、請求項１５１に記載の方法。
【請求項１５４】
前記複数の電極および前記薬剤送達チャネルを、前記挿入管を挿入した後、および前記治療剤を投与する前、または前記一つまたは複数の電気パルスを送達する前に、展開位置に移動させるように前記アプリケータを作動させることをさらに含む、請求項１５３に記載の方法。
【請求項１５５】
腫瘍を有する対象を治療する方法であって、
ａ）前記対象に、治療剤の有効用量を投与することと、
ｂ）エレクトロポレーション療法を前記腫瘍に施すことであって、前記エレクトロポレーション療法が、請求項１０２〜１２１または１３９〜１５０のいずれか１項に記載のシステムを使用して前記腫瘍に電気パルスを投与することを含む、施すことと、を含む、方法。
【請求項１５６】
前記治療剤が、前記アプリケータの薬剤送達装置を介して投与される、請求項１５５に記載の方法。
【請求項１５７】
前記治療剤が治療用ポリペプチドをコードする発現ベクターを含む、請求項１５５に記載の方法。
【請求項１５８】
前記発現ベクターが、共刺激ポリペプチド、免疫調節性ポリペプチド、免疫刺激性サイトカイン、チェックポイント阻害剤、アジュバント、抗原、遺伝学的アジュバント−抗原融合ポリペプチド、ケモカイン、または抗原結合ポリペプチドのうちの一つまたは複数をコードする、請求項１５７に記載の方法。
【請求項１５９】
前記共刺激分子が、ＧＩＴＲ、ＣＤ１３７、ＣＤ１３４、ＣＤ４０Ｌ、およびＣＤ２７作動薬からなる群から選択される、請求項１５８に記載の方法。
【請求項１６０】
前記発現ベクターが、ＣＸＣＬ９、抗ＣＤ３  ｓｃＦｖ、または抗ＣＴＬＡ−４  ｓｃＦｖを含むポリペプチドをコードする、請求項１５８に記載の方法。
【請求項１６１】
前記免疫刺激性サイトカインが、ＴＮＦα、ＩＬ−１、ＩＬ−１０、ＩＬ−１２、ＩＬ−１２  ｐ３５、ＩＬ−１２  ｐ４０、ＩＬ−１５、ＩＬ−１５Ｒα、ＩＬ−２３、ＩＬ−２７、ＩＦＮα、ＩＦＮβ、ＩＦＮγ、ＩＬ−２、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−７、ＩＬ−９、ＩＬ−２１、ＴＧＦβ、およびＴＮＦα、ＩＬ−１、ＩＬ−１０、ＩＬ−１２、ＩＬ−１２  ｐ３５、ＩＬ−１２  ｐ４０、ＩＬ−１５、ＩＬ−１５Ｒα、ＩＬ−２３、ＩＬ−２７、ＩＦＮα、ＩＦＮβ、ＩＦＮγ、ＩＬ−２、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−７、ＩＬ−９、ＩＬ−２１、ＴＧＦβのいずれか二つの組み合わせからなる群から選択される、請求項１５８に記載の方法。
【請求項１６２】
前記方法が、前記対象にチェックポイント阻害剤の有効用量を投与することをさらに含む、請求項１５５に記載の方法。
【請求項１６３】
前記チェックポイント阻害剤が全身に投与される、請求項１６２に記載の方法。
【請求項１６４】
前記チェックポイント阻害剤が、免疫刺激性サイトカインをコードする前記発現ベクター上、または第二の発現ベクター上にコードされ、前記エレクトロポレーション療法によって癌性腫瘍に送達される、請求項１６２に記載の方法。
【請求項１６５】
前記チェックポイント阻害剤が、前記免疫刺激性サイトカインのエレクトロポレーションの前に、同時に、および／または後に投与される、請求項１６２に記載の方法。
【請求項１６６】
前記発現ベクターが、
ａ）Ｐ−Ａ−Ｔ−Ｃ、
ｂ）Ｐ−Ａ−Ｔ−Ｂ−Ｔ−Ｃ、または
ｃ）Ｐ−Ｃ−Ｔ−Ａ−Ｔ−Ｂを含み、
式中、Ｐはプロモーターであり、Ｔは翻訳修飾要素であり、Ａは、免疫調節分子、免疫調節分子の鎖、または共刺激分子をコードし、Ｂは、免疫調節分子、免疫調節分子の鎖、または共刺激分子をコードし、Ｃは、免疫調節分子、免疫調節分子の鎖、共刺激分子、遺伝学的アジュバント、抗原、遺伝学的アジュバント−抗原融合ポリペプチド、ケモカイン、または抗原結合ポリペプチドをコードする、請求項１５７に記載の方法。
【請求項１６７】
前記発現ベクターが、ＣＸＣＬ９、抗ＣＤ３  ｓｃＦｖ、または抗ＣＴＬＡ−４  ｓｃＦｖを含むポリペプチドをコードする、請求項１６６に記載の方法。
【請求項１６８】
前記腫瘍にアクセスするために、前記アプリケータの遠位端で組織を貫通することをさらに含む、請求項１５７に記載の方法。
【請求項１６９】
哺乳類組織における腫瘍細胞増殖の再発を減少させる方法であって、
ａ）治療剤を前記腫瘍および／または腫瘍辺縁組織に投与することと、
ｂ）ジェネレータおよび請求項１０２〜１５０のいずれか１項に記載のアプリケータを使用して、前記腫瘍および／または前記腫瘍辺縁組織にエレクトロポレーション療法を施すことと、を含む、方法。
【請求項１７０】
治療剤を投与することが、前記治療剤をコードする発現ベクターを前記腫瘍および／または腫瘍辺縁組織に注射することを含む、請求項１６９に記載の方法。
【請求項１７１】
前記エレクトロポレーション療法が、前記腫瘍の外科的切除または切断の前または後に施される、請求項１６９に記載の方法。
【請求項１７２】
前記ジェネレータが低電圧ジェネレータを含む、請求項１６９に記載の方法。
【請求項１７３】
前記エレクトロポレーション療法が、４００Ｖ／ｃｍ以下の電界を生成する前記低電圧ジェネレータを使用して施される、請求項１７２に記載の方法。
【請求項１７４】
前記ジェネレータが高電圧ジェネレータを含む、請求項１６９に記載の方法。
【請求項１７５】
腫瘍を有する対象を治療する方法であって、
前記対象に、少なくとも一つのＤＮＡベースの治療剤の有効用量を投与することと、
前記少なくとも一つのＤＮＡベースの治療剤を、エレクトロポレーションアプリケータおよびジェネレータを使用して前記腫瘍の複数の細胞にトランスフェクトすることと、を含み、
前記ジェネレータが、前記エレクトロポレーションアプリケータを介して前記腫瘍に低電圧エレクトロポレーションパルスを印加するよう構成され、
前記少なくとも一つのＤＮＡベースの治療剤の８〜１０％が、前記腫瘍の細胞にトランスフェクトされる、方法。
【請求項１７６】
前記アプリケータが、
制御部分と、
前記制御部分に接続された挿入管と、
前記制御部分と係合するアクチュエータであって、前記アクチュエータの少なくとも一部分は、前記制御部分および前記挿入管に対して移動可能である、アクチュエータと、
第一の先端を有する第一の電極と、第二の先端を有する第二の電極とを含む複数の電極であって、前記アクチュエータによる作動に応答して、格納位置と展開位置との間で移動するように構成され、
前記第一の電極の前記第一の先端と前記第二の電極の前記第二の先端との間の距離が、前記格納位置においてよりも、前記展開位置において大きい、複数の電極と、を含む、請求項１７５に記載の方法。
【請求項１７７】
前記ジェネレータが前記複数の電極に電気的に接続され、前記ジェネレータが前記複数の電極に電気信号を送達するように構成される、請求項１７６に記載の方法。
【請求項１７８】
各低電圧エレクトロポレーションパルスが、１ｍｓ以上の持続時間を規定する、請求項１７５に記載の方法。
【請求項１７９】
各低電圧エレクトロポレーションパルスが、０．５ｍｓ〜１ｓの持続時間を規定する、請求項１７８に記載の方法。
【請求項１８０】
前記低電圧エレクトロポレーションパルスが、６００Ｖ以下の電圧を含む、請求項１７５に記載の方法。
【請求項１８１】
前記低電圧エレクトロポレーションパルスが、６００Ｖ〜５Ｖの電圧を含む、請求項１８０に記載の方法。
【請求項１８２】
前記低電圧エレクトロポレーションパルスが、７００Ｖ／ｃｍ以下の電界を含む、請求項１７５に記載の方法。
【請求項１８３】
腫瘍を有する対象を治療する方法であって、
前記対象に、少なくとも一つのＤＮＡベースの治療剤の有効用量を投与することと、
前記少なくとも一つのＤＮＡベースの治療剤を、エレクトロポレーションアプリケータおよびジェネレータを使用して前記腫瘍の複数の細胞にトランスフェクトすることと、を含み、
前記ジェネレータが、前記エレクトロポレーションアプリケータを介して前記腫瘍に高電圧エレクトロポレーションパルスを印加するように構成され、
前記少なくとも一つのＤＮＡベースの治療剤の８〜１０％が、前記腫瘍の細胞にトランスフェクトされる、方法。
【請求項１８４】
対象におけるチェックポイント阻害剤療法に対する応答性を増加させる方法であって、
サイトカインをコードする少なくとも一つのプラスミドの有効用量を前記対象中の腫瘍に注射することと、
前記腫瘍にエレクトロポレーション療法を施すことと、を含む、方法。
【請求項１８５】
前記腫瘍が肝臓内にある、請求項１８４に記載の方法。
【請求項１８６】
前記腫瘍が肝細胞癌である、請求項１８５に記載の方法。
【請求項１８７】
前記サイトカインが、ＴＮＦα、ＩＬ−１、ＩＬ−１０、ＩＬ−１２、ＩＬ−１２  ｐ３５、ＩＬ−１２  ｐ４０、ＩＬ−１５、ＩＬ−１５Ｒα、ＩＬ−２３、ＩＬ−２７、ＩＦＮα、ＩＦＮβ、ＩＦＮγ、ＩＬ−２、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−７、ＩＬ−９、ＩＬ−２１、ＴＧＦβ、およびＴＮＦα、ＩＬ−１、ＩＬ−１０、ＩＬ−１２、ＩＬ−１２  ｐ３５、ＩＬ−１２  ｐ４０、ＩＬ−１５、ＩＬ−１５Ｒα、ＩＬ−２３、ＩＬ−２７、ＩＦＮα、ＩＦＮβ、ＩＦＮγ、ＩＬ−２、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−７、ＩＬ−９、ＩＬ−２１、ＴＧＦβのいずれか二つの組み合わせからなる群から選択される、請求項１８５に記載の方法。
【請求項１８８】
前記サイトカインがＩＬ−１２である、請求項１８４に記載の方法。
【請求項１８９】
前記対象が、チェックポイント阻害剤療法に対して低い応答性または非応答性を有した、有している、または有すると予測される、請求項１８４に記載の方法。
【請求項１９０】
チェックポイント阻害剤療法を調節することが、前記対象に少なくとも一つのチェックポイント阻害剤の有効用量を投与することをさらに含む、請求項１８４に記載の方法。
【請求項１９１】
エレクトロポレーション用のトロカール系システムであって、
アプリケータであって、
制御部分と、
前記制御部分に接続された挿入管と、
前記制御部分と係合するアクチュエータであって、前記アクチュエータの少なくとも一部分は、前記制御部分および前記挿入管に対して移動可能である、アクチュエータと、
第一の先端を有する第一の電極と、第二の先端を有する第二の電極とを含む複数の電極であって、前記アクチュエータによる作動に応答して、格納位置と展開位置との間で移動するように構成され、
前記第一の電極の前記第一の先端と前記第二の電極の前記第二の先端との間の距離が、前記格納位置においてよりも前記展開位置において大きい、複数の電極とを含む、アプリケータと、
作業チャネルを画定するトロカールであって、前記アプリケータの前記挿入管の少なくとも一部分が前記作業チャネルを通過するように構成される、トロカールと、
前記複数の電極に電気的に接続されたジェネレータであって、前記複数の電極に電気信号を送達するように構成される、ジェネレータと、
前記トロカールの前記作業チャネルを通して一つまたは複数の治療剤を送達するよう構成された薬剤送達装置と、を含む、システム。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
関連出願の参照
本出願は、２０１８年５月２日に提出された米国仮特許出願第６２／６６５，５５３号、２０１８年１０月８日に提出された米国仮特許出願第６２／７４２，６８４号、２０１８年１０月１５日に提出された米国仮特許出願第６２／７４５，６９９号、２０１８年１１月２日に提出された米国仮特許出願第６２／７５５，００１号、そして２０１９年３月２６日に提出された米国仮特許出願第６２／８２４，０１１号の利益を主張し、これらのそれぞれは、本出願において完全に記載されるかのように、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０００２】
電界は、エレクトロポレーションとして知られるプロセスを通して細胞内に孔を形成するために使用されて、標的細胞の透過性を増加させ、患者にさまざまな局所的な治療を施すことができる。肺内の腫瘍の治療など、届きにくい身体の領域にはエレクトロポレーション療法の必要性があり、また、これらの届きにくい領域にエレクトロポレーション装置を取り付けることができる一方で、大きな治療領域を提供する必要がある。また、高い精度と最小限の侵襲性で、さまざまな治療剤および療法を施す必要性がある。
【０００３】
適用された努力、創意工夫、および革新を通して、これらの特定された問題の多くは、本発明の実施形態に含まれる解決策を開発することによって解決されており、その多くの例が本明細書に詳述される。
【発明の概要】
【０００４】
本明細書では、エレクトロポレーションシステム、アプリケータ、関連する治療および使用方法、ならびに関連する装置が開示される。いくつかの実施形態では、エレクトロポレーション用のアプリケータが提供され得る。アプリケータが、制御部分と、制御部分に接続された挿入管と、制御部分と係合するアクチュエータと、第一の先端を有する第一の電極および第二の先端を有する第二の電極を含む複数の電極とを含み得る。いくつかの実施形態では、アクチュエータの少なくとも一部分は、制御部分および挿入管に対して移動可能であり得る。複数の電極が、アクチュエータによる作動に応答して、格納位置と展開位置との間で動くように構成され得る。いくつかの実施形態では、第一の電極の第一の先端と第二の電極の第二の先端との間の距離が、格納位置よりも展開位置において大きくてもよい。
【０００５】
いくつかの実施形態では、複数の電極が、格納位置の挿入管内に完全に埋め込まれてもよい。第一の電極および第二の電極の少なくとも一部分は、挿入管から展開位置の隣接する組織に延長するように構成され得る。
【０００６】
展開位置では、第一の電極の第一の先端と第二の電極の第二の先端との間の距離が、挿入管の外径よりも大きくてもよい。
【０００７】
いくつかの実施形態では、挿入管は、挿入管の遠位端に画定される第一の角度付きチャネルおよび第二の角度付きチャネルを含み得る。第一の角度付きチャネルおよび第二の角度付きチャネルはそれぞれ、挿入管の長手方向軸に対して鋭角に配向され得る。第一の電極は、展開位置の第一の角度付きチャネルを少なくとも部分的に通って延在するように構成され得る。いくつかの実施形態では、第二の電極は、展開位置の第二の角度付きチャネルを少なくとも部分的に通って延在するように構成され得る。格納位置では、第一の電極および第二の電極は、挿入管内で互いに平行に配置され得る。展開位置では、第一の電極の少なくとも一部分および第二の電極の少なくとも一部分は、第一の角度付きチャネルおよび第二の角度付きチャネルのそれぞれの鋭角に配置され得る。
【０００８】
いくつかの実施形態では、アプリケータが、第一の電極および第二の電極と係合するブラダーを含み得る。ブラダーは、格納位置の挿入管内に完全に配置されてもよく、ブラダーは、展開位置の挿入管の外に少なくとも部分的に配置され得る。
【０００９】
いくつかの実施形態では、第一の電極および第二の電極の少なくとも一部分は、ニチノールを含み得る。ニチノールは、複数の電極が展開位置にある場合、形状を変更するように構成されてもよく、ニチノールは、人体温度を超えると形状を変更するように構成され得る。
【００１０】
いくつかの実施形態では、アプリケータが、第一の電極および第二の電極のそれぞれに取り付けられたニチノールスリーブを含み得、ニチノールは、複数の電極が展開位置にある場合、形状を変化させるように構成され、ニチノールは、人体温度を超えると形状が変化するように構成されている。
【００１１】
いくつかの実施形態では、第一の電極および第二の電極は、非線形であり得る。
【００１２】
アプリケータが、少なくとも部分的に挿入管内に可動式に配置されたキャリアを含んでもよい。第一の電極および第二の電極はそれぞれ、キャリア内に少なくとも部分的に配置され得る。キャリアは、第一の電極と関連する第一の部分および第二の電極と関連する第二の部分を画定することができ、第一の部分および第二の部分は、格納位置から拡張位置へと移動するときに、互いに半径方向に離れて拡張するように構成され得る。アプリケータが、キャリアの第一の部分および第二の部分を半径方向外側に拡張するためにアクチュエータから力を受けるように構成された内側部材を含み得る。アプリケータが、第一の部分と第二の部分との間に配置されるばねを含み得る。ばねは、キャリアの第一の部分および第二の部分を半径方向外側に拡張するように構成され得る。いくつかの実施形態では、アプリケータが、アプリケータの挿入管を介して標的部位と薬剤送達装置を流体接続するよう構成された薬剤送達チャネルを含み得る。
【００１３】
いくつかの実施形態では、アクチュエータは、薬剤送達チャネルを標的部位に向かって変位させるように構成され得る。薬剤送達チャネルは、アクチュエータによる作動に応答して、薬剤送達チャネルの格納位置と薬剤送達チャネルの展開位置との間を、複数の電極と同時に移動するように構成され得る。いくつかの実施形態では、挿入管は、遠位端で貫通先端を画定する。
【００１４】
別の実施形態では、エレクトロポレーションのためのシステムが提供される。システムは、制御部分、制御部分に接続された挿入管と、制御部分と係合するアクチュエータと、第一の先端を有する第一の電極および第二の先端を有する第二の電極とを含む複数の電極を含み得るアプリケータを含み得る。システムは、作業チャネルを画定する内視鏡、トロカールなど、複数の電極に電気的に接続されたジェネレータ、および内視鏡（例えば、可撓性内視鏡、剛性内視鏡、トロカールなど）の作業チャネルを介して一つまたは複数の治療剤を送達するように構成された薬剤送達装置をさらに含み得る。
【００１５】
本明細書で使用される場合、「制御部分」という用語は、電気パルスおよび／または一つまたは複数の治療剤をそれぞれ受けるための一つまたは複数の電気的接続および／または油圧接続を持つアプリケータのユーザー操作可能な部分を指し得る。本明細書で使用される場合、「挿入管」という用語は、任意の断面形状を有するアプリケータの任意の細長い中空部分を指し、その少なくとも一部分は、患者に挿入されるように構成され、それを通して電気パルスおよび／または一つまたは複数の治療剤が、標的治療部位に向けられるように構成される。
【００１６】
いくつかの実施形態では、アクチュエータの少なくとも一部分は、制御部分および挿入管に対して移動可能である。複数の電極が、アクチュエータによる作動に応答して、格納位置と展開位置との間で動くように構成され得る。第一の電極の第一の先端と第二の電極の第二の先端との間の距離が、格納位置においてよりも展開位置において大きくてもよい。アプリケータの挿入管の少なくとも一部分は、作業チャネルを通過するように構成され得る。ジェネレータは、電気信号を複数の電極に送達するように構成され得る。
【００１７】
いくつかの実施形態では、展開位置において、第一の電極の第一の先端と第二の電極の第二の先端との間の距離が、作業チャネルの内径よりも大きくてもよい。
【００１８】
いくつかの実施形態では、格納位置では、挿入管および複数の電極が、内視鏡または同類のもの作業チャネルを通過するように構成され得る。
【００１９】
システムは、ジェネレータが、電気信号を第一の電極および第二の電極に送信し、第一の電極と第二の電極との間に配置される組織のインピーダンスを示す電気信号を受信するように構成されたプロセッサを含み得る。
【００２０】
いくつかの実施形態では、内視鏡は気管支鏡であり得る。
【００２１】
さらに別の実施形態では、腫瘍を内視鏡的または腹腔鏡下で治療する方法が提供され得る。この方法は、内視鏡の遠位端が標的部位に隣接して配置されるまで、内視鏡などを患者に挿入することと、薬剤送達装置の一部分が標的部位に隣接して配置されるように、薬剤送達装置の一部分を内視鏡の作業チャネルに挿入することと、薬剤送達装置から標的部位に治療剤を投与し、内視鏡から薬剤送達装置の一部分を除去することと、複数の電極を含む挿入管の遠位端が標的部位に隣接して配置されるように、内視鏡の作業チャネルにアプリケータの挿入管を挿入することと、ジェネレータから電極に一つまたは複数の電気パルスを供給して、標的部位の組織を電気穿孔することと、アプリケータと内視鏡を患者から取り外すこととを含み得る。
【００２２】
別の実施形態では、エレクトロポレーションのためのシステムが提供され得る。システムは、制御部分、制御部分に接続された挿入管と、制御部分と係合するアクチュエータと、第一の先端を有する第一の電極および第二の先端を有する第二の電極とを含む複数の電極を含み得るアプリケータを含み得る。システムは、作業チャネルを画定するトロカールと、複数の電極に電気的に接続されたジェネレータと、トロカールの作業チャネルを通して一つまたは複数の治療剤を送達するように構成された薬剤送達装置とをさらに含み得る。いくつかの実施形態では、トロカールは、ガイドされた画像の下で対象の体腔に穿刺、またはそうでなければアクセスして、一つまたは複数の療法を施すように構成され得る。
【００２３】
いくつかの実施形態では、アクチュエータの少なくとも一部分は、制御部分および挿入管に対して移動可能であり得る。複数の電極が、アクチュエータによる作動に応答して、格納位置と展開位置との間で動くように構成され得る。いくつかの実施形態では、第一の電極の第一の先端と第二の電極の第二の先端との間の距離が、格納位置においてよりも展開位置において大きい。アプリケータの挿入管の少なくとも一部分は、作業チャネルを通過して内臓病変にアクセスするように構成され得る。ジェネレータは、電気信号を複数の電極に送達するように構成され得る。
【００２４】
いくつかの実施形態では、内臓病変を治療する方法が提供される。方法は、トロカールの遠位端が、内臓病変を含む標的部位に隣接して配置されるまで、トロカールを患者に挿入することと、薬剤送達装置の一部分が標的部位に隣接して配置されるように、薬剤送達装置の一部分をトロカールの作業チャネルに挿入することと、薬剤送達装置から標的部位に治療剤を投与することと、薬剤送達装置の一部分をトロカールから取り外すことと、複数の電極を含む挿入管の遠位端が標的部位に隣接して配置されるように、アプリケータの挿入管をトロカールの作業チャネルに挿入することと、一つまたは複数の電気パルスをジェネレータから電極に送達して、標的部位の組織を電気穿孔することと、アプリケータとトロカールを患者から取り外すこととを含み得る。
【００２５】
いくつかの実施形態では、腫瘍を有する対象を治療する方法が提供される。方法は、対象に治療用分子の有効用量を投与することと、腫瘍にエレクトロポレーション療法を施すこととを含む。エレクトロポレーション療法は、本明細書に記載のエレクトロポレーションシステムのいずれかを使用して、腫瘍に電気パルスを施すことを含み得る。腫瘍は、癌性または非癌性であり得る。腫瘍は、固形腫瘍、表面病変、非表面病変、体表面から１５ｃｍ以内の病変、または内臓病変であり得るが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、記載された方法は、原発性腫瘍、ならびに遠位腫瘍および転移を治療するのに使用され得る。いくつかの実施形態では、記載された方法は、腫瘍のサイズの縮小、または腫瘍の増殖の減量、阻害、癌細胞の増殖の阻害、転移の阻害または低減、転移性癌の進展の低減または阻害、および／または癌に苦しんでいる対象の癌の再発の低減を提供する。腫瘍は、特定のタイプの腫瘍または癌に限定されるものではない。
【００２６】
いくつかの実施形態では、治療用分子は、アプリケータの薬剤送達装置で投与される。治療用分子は、治療用ポリペプチドをコードする発現ベクターを含み得る。いくつかの実施形態では、発現ベクターは、共刺激ポリペプチド、免疫調節性ポリペプチド、免疫刺激性サイトカイン、チェックポイント阻害剤、アジュバント、抗原、または遺伝学的アジュバント−抗原融合ポリペプチドのうちの一つまたは複数をコードする。共刺激分子は、ＧＩＴＲ、ＣＤ１３７、ＣＤ１３４、ＣＤ４０Ｌ、およびＣＤ２７作動薬からなる群から選択されることができる。いくつかの実施形態では、発現ベクターは、ＣＸＣＬ９、抗ＣＤ３  ｓｃＦｖ、または抗ＣＴＬＡ−４  ｓｃＦｖを含むポリペプチドをコードする。免疫刺激性サイトカインは、ＴＮＦα、ＩＬ−１、ＩＬ−１０、ＩＬ−１２、ＩＬ−１２  ｐ３５、ＩＬ−１２  ｐ４０、ＩＬ−１５、ＩＬ−１５Ｒα、ＩＬ−２３、ＩＬ−２７、ＩＦＮα、ＩＦＮβ、ＩＦＮγ、ＩＬ−２、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−７、ＩＬ−９、ＩＬ−２１、ＴＧＦβ、およびＴＮＦα、ＩＬ−１、ＩＬ−１０、ＩＬ−１２、ＩＬ−１２  ｐ３５、ＩＬ−１２  ｐ４０、ＩＬ−１５、ＩＬ−１５Ｒα、ＩＬ−２３、ＩＬ−２７、ＩＦＮα、ＩＦＮβ、ＩＦＮγ、ＩＬ−２、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−７、ＩＬ−９、ＩＬ−２１、ＴＧＦβのいずれか二つの組み合わせからなる群から選択されることができる。いくつかの実施形態では、発現ベクターは、抗ＣＤ３  ｓｃＦｖ、ＣＸＣＬ９、または抗ＣＴＬＡ−４  ｓｃＦｖをコードする。いくつかの実施形態では、発現ベクターは、抗ＣＤ３  ｓｃＦｖおよびＩＬ−１２をコードする。いくつかの実施形態では、発現ベクターは、ＩＬ−１２およびＣＸＣＬ９をコードする。
【００２７】
方法は、対象にチェックポイント阻害剤の有効用量を投与することをさらに含み得る。いくつかの実施形態では、チェックポイント阻害剤は、全身に投与される。チェックポイント阻害剤は、免疫刺激性サイトカインをコードする発現ベクター上、または第二の発現ベクター上にコードされてもよく、エレクトロポレーション療法によって癌性腫瘍に送達され得る。チェックポイント阻害剤は、免疫刺激性サイトカインのエレクトロポレーションの前、同時、または後に投与され得る。
【００２８】
いくつかの実施形態では、発現ベクターは、
ａ）Ｐ−Ａ−Ｔ−Ｃ、
ｂ）Ｐ−Ａ−Ｔ−Ｂ−Ｔ−Ｃ、または
ｃ）Ｐ−Ｃ−Ｔ−Ａ−Ｔ−Ｂを含む。
式中、Ｐはプロモーターであり、Ｔは翻訳修飾要素であり、Ａは、免疫調節分子、免疫調節分子の鎖、または共刺激分子をコードし、Ｂは、免疫調節分子、免疫調節分子の鎖、または共刺激分子をコードし、Ｃは、免疫調節分子、免疫調節分子の鎖、共刺激分子、遺伝学的アジュバント、抗原、遺伝学的アジュバント−抗原融合ポリペプチド、ケモカイン、または抗原結合ポリペプチドをコードする。
【００２９】
方法はまた、腫瘍にアクセスするためにアプリケータの遠位端で組織を貫通することを含み得る。方法は、ＥＩＳを使用してエレクトロポレーションパラメーターを最適化することをさらに含んでもよい。
【００３０】
いくつかの実施形態では、哺乳類組織における腫瘍細胞増殖の再発を減少させる方法が提供される。方法は、治療用分子を腫瘍および／または腫瘍辺縁組織へ投与することと、本明細書で開示されるエレクトロポレーションシステムのいずれかを使用して、エレクトロポレーション療法を腫瘍および／または腫瘍辺縁組織へ施すこととを含み得る。
【００３１】
いくつかの実施形態では、治療用分子を投与することは、治療用分子をコードする発現ベクターを腫瘍および／または腫瘍辺縁組織に注射することを含む。エレクトロポレーション療法は、腫瘍細胞増殖の外科的切除または切断の前または後に実施され得る。
【００３２】
いくつかの実施形態では、腫瘍を有する対象を治療する方法が提供される。方法は、対象に、少なくとも一つのＤＮＡベースの治療剤の有効用量を投与することと、少なくとも一つのＤＮＡベースの治療剤を、エレクトロポレーションアプリケータおよびジェネレータを使用して腫瘍の複数の細胞にトランスフェクトすることとを含み得る。いくつかの実施形態では、ジェネレータは、エレクトロポレーションアプリケータを介して低電圧エレクトロポレーションパルスを腫瘍に適用し得る。いくつかの実施形態では、治療領域内の腫瘍細胞の少なくとも４％、少なくとも５％、少なくとも６％、少なくとも７％、少なくとも８％、少なくとも９％、または少なくとも１０％がトランスフェクトされる。
【００３３】
いくつかの実施形態では、低電圧エレクトロポレーションパルスは、７００Ｖ／ｃｍ以下の電界を含む。いくつかの実施形態では、低電圧エレクトロポレーションパルスは、６００Ｖ／ｃｍ以下の電界を含む。いくつかの実施形態では、低電圧エレクトロポレーションパルスは、５００Ｖ／ｃｍ以下の電界を含む。いくつかの実施形態では、低電圧エレクトロポレーションパルスは、４００Ｖ／ｃｍ以下の電界を含む。
【００３４】
いくつかの実施形態では、各低電圧エレクトロポレーションパルスが、１ｍｓ以上の持続時間を規定する。いくつかの実施形態では、各低電圧エレクトロポレーションパルスが、１ｍｓ〜１ｓの持続時間を規定する。
【００３５】
いくつかの実施形態では、低電圧エレクトロポレーションパルスは、６００Ｖ以下の電圧を画定する。いくつかの実施形態では、低電圧エレクトロポレーションパルスは、６００Ｖ〜５Ｖの電圧を含む。
【００３６】
いくつかの実施形態では、アプリケータが、制御部分と、制御部分に接続された挿入管と、制御部分と係合するアクチュエータと、第一の先端および第二の先端を有する第一の電極および第二の電極を含む複数の電極とを含み得る。アクチュエータの少なくとも一部分は、制御部分および挿入管に対して移動可能であり得る。いくつかの実施形態では、複数の電極が、アクチュエータによる作動に応答して、格納位置と展開位置との間で移動するよう構成され得る。第一の電極の第一の先端と第二の電極の第二の先端との間の距離が、格納位置においてよりも展開位置において大きくてもよい。いくつかの実施形態では、ジェネレータは、複数の電極に電気的に接続されてもよく、ジェネレータは、複数の電極に電気信号を送達し得る。
【００３７】
いくつかの実施形態では、腫瘍を有する対象を治療する方法が提供される。この方法は、対象に少なくとも一つのＤＮＡベースの治療剤の有効用量を投与することと、エレクトロポレーションアプリケータおよびジェネレータを使用して、少なくとも一つのＤＮＡベースの治療剤を腫瘍の複数の細胞にトランスフェクトすることとを含み得、ジェネレータは、エレクトロポレーションアプリケータを介して腫瘍に高電圧エレクトロポレーションパルスを印加するように構成され、少なくとも一つのＤＮＡベースの治療剤の８〜１０％が腫瘍の細胞にトランスフェクトされる。
【００３８】
いくつかの実施形態では、非応答性対象におけるチェックポイント阻害剤非応答性を調節する方法が提供され得る。方法は、非応答性対象に少なくとも一つのチェックポイント阻害剤を投与することと、非応答性対象に、サイトカインをコードする少なくとも一つのプラスミドの有効用量で腫瘍を注射することと、腫瘍にエレクトロポレーション療法を施すこととを含み得る。
【００３９】
方法のいくつかの実施形態では、腫瘍は肝臓内にあり得る。いくつかの実施形態では、腫瘍は肝細胞癌であり得る。いくつかの実施形態では、サイトカインは、ＴＮＦα、ＩＬ−１、ＩＬ−１０、ＩＬ−１２、ＩＬ−１２  ｐ３５、ＩＬ−１２  ｐ４０、ＩＬ−１５、ＩＬ−１５Ｒα、ＩＬ−２３、ＩＬ−２７、ＩＦＮα、ＩＦＮβ、ＩＦＮγ、ＩＬ−２、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−７、ＩＬ−９、ＩＬ−２１、およびＴＧＦβ、ならびにＴＮＦα、ＩＬ−１、ＩＬ−１０、ＩＬ−１２、ＩＬ−１２  ｐ３５、ＩＬ−１２  ｐ４０、ＩＬ−１５、ＩＬ−１５Ｒα、ＩＬ−２３、ＩＬ−２７、ＩＦＮα、ＩＦＮβ、ＩＦＮγ、ＩＬ−２、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−７、ＩＬ−９、ＩＬ−２１、およびＴＧＦβのいずれか二つの組み合わせからなる群から選択されることができる。いくつかの実施形態では、サイトカインはＩＬ−１２であり得る。いくつかの実施形態では、ＣＸＣＬ９、抗ＣＤ３  ｓｃＦｖ、または抗ＣＴＬＡ−４  ｓｃＦｖをコードするプラスミドは、肝臓腫瘍に投与され得る。
【００４０】
いくつかの実施形態では、エレクトロポレーション用のトロカール系システムが提供され得る。いくつかの実施形態では、トロカール系システムは、制御部分と、制御部分に接続された挿入管と、制御部分と係合するアクチュエータとを含むアプリケータを含み得、アクチュエータの少なくとも一部分は、制御部分および挿入管に対して可動であり、複数の電極は第一の先端を有する第一の電極と第二の先端を有する第二の電極とを含み、複数の電極が、アクチュエータによる作動に応答して、格納位置と展開位置との間を移動するように構成される。いくつかの実施形態では、第一の電極の第一の先端と第二の電極の第二の先端との間の距離が、格納位置においてよりも展開位置において大きい。システムは、作業チャネルを画定するトロカールをさらに含み得、アプリケータの挿入管の少なくとも一部分は、作業チャネルを通過するように構成される。いくつかの実施形態では、システムは、複数の電極に電気的に接続されたジェネレータを含んでもよく、ジェネレータは、複数の電極に電気信号を送達するように構成される。システムはさらに、トロカールの作業チャネルを通して一つまたは複数の治療剤を送達するように構成された薬剤送達装置を含み得る。
【００４１】
一態様では、本開示は、組織のエレクトロポレーション用のアプリケータに関する。いくつかの実施形態では、アプリケータが、制御部分、制御部分に接続された挿入管、制御部分と係合するアクチュエータ、および複数の電極を含む。複数の電極が、第一の先端を有する第一の電極と、第二の先端を有する第二の電極とを含む。複数の電極が、アクチュエータの作動に応答して、格納位置と展開位置との間で動くように構成される。
【００４２】
いくつかの実施形態では、第一の電極の第一の先端と第二の電極の第二の先端との間の距離が、格納位置においてよりも展開位置において大きい。いくつかの実施形態では、挿入管は、その中に配置される薬剤送達チャネルを含み、薬剤送達チャネルは少なくとも一つの治療剤を受けるように構成される。いくつかの実施例では、薬剤送達チャネルは、複数の電極とともに格納および配備するように構成される。いくつかの実施形態では、システムはアプリケータおよび別個の薬剤送達アプリケータを含む。いくつかの実施形態では、システムは、アプリケータおよびアプリケータに動作可能なように接続された低電圧ジェネレータを含む。
【００４３】
一態様では、本開示は、組織のエレクトロポレーションのためのシステムに関する。いくつかの実施形態では、システムのアプリケータが、挿入管を有する本体と、本体と係合するアクチュエータと、少なくとも一つの電極とを含む。少なくとも一つの電極は、第一の先端を有する第一の電極を含む。少なくとも一つの電極は、アクチュエータの作動に応答して、格納位置と展開位置との間で動くように構成される。ジェネレータは低電圧で、少なくとも一つの電極に電気的に接続されている。
【００４４】
いくつかの実施形態では、システムは、その中に挿入管を配置するように構成された内視鏡を含む。いくつかの実施形態では、アプリケータが、その中に配置された薬剤送達チャネルを含み、薬剤送達チャネルは少なくとも一つの治療剤を送達するよう構成される。
【００４５】
一態様では、本開示は、内臓病変などの罹患組織を治療する方法に関する。いくつかの実施形態では、方法は、内視鏡の遠位端が罹患組織を含む標的部位に隣接して配置されるまで、内視鏡を患者に挿入することと、アプリケータの一部分が標的部位に隣接して配置され、内視鏡が標的部位に隣接して配置されるように、アプリケータの一部分を内視鏡の作業チャネルに挿入することと、アプリケータを介して標的部位に少なくとも一つの治療剤を投与することと、アプリケータを作動させて、アプリケータの複数の電極を展開することと、ジェネレータから電極に一つまたは複数の電気パルスを供給して、標的部位の組織を電気穿孔することと、を含む。
【００４６】
いくつかの実施形態では、罹患組織を治療する方法は、内視鏡の遠位端が罹患組織を含む標的部位に隣接して配置されるまで、内視鏡を患者に挿入することと、薬剤送達装置の一部分が標的部位に隣接して配置され、内視鏡が標的部位に隣接して配置されるように、薬剤送達装置の一部分を内視鏡の作業チャネルに挿入することと、薬剤送達装置から標的部位に少なくとも一つの治療剤を投与することと、内視鏡から薬剤送達装置の一部分を取り除くことと、複数の電極を含む挿入管の遠位端が標的部位に隣接して配置され、内視鏡が標的部位に隣接して配置されるように、内視鏡の作業チャネルにアプリケータの挿入管を挿入することと、一つまたは複数の電気パルスをジェネレータから電極に送達して、標的部位の組織を電気穿孔することと、アプリケータと内視鏡を患者から取り外すこととを含む。
【００４７】
いくつかの実施形態では、罹患組織を治療する方法は、薬剤送達装置の一部分が、罹患組織を含む標的部位に隣接して配置されるまで、薬剤送達装置を患者に挿入することと、薬剤送達装置から標的部位に治療剤を投与することと、患者から薬剤送達装置を取り外すことと、内視鏡の遠位端が罹患組織を含む標的部位に隣接して配置されるまで、内視鏡を、患者に挿入することと、複数の電極を含む挿入管の遠位端が標的部位に隣接して配置され、内視鏡が標的部位に隣接して配置されるように、アプリケータの挿入管を内視鏡の作業チャネルに挿入することと、一つまたは複数の電気パルスをジェネレータから電極に送達して、標的部位の組織を電気穿孔することと、アプリケータと内視鏡を患者から取り外すこととを含む。
【００４８】
例示的な実施形態において、抗ＰＤ−１または抗ＰＤ−Ｌ１療法に対して非応答性または非応答性であると予測される対象の肺の病変を治療する方法は、ＩＬ−１２をコードする少なくとも一つのプラスミドの有効用量を病変に投与することと、病変にエレクトロポレーション療法を施すことと、対象に少なくとも一つのチェックポイント阻害剤の有効用量を投与することとを含み得て、エレクトロポレーション療法を施すことは、第一の先端を有する第一の電極および第二の先端を有する第二の電極を含む複数の電極を含むアプリケータを含むエレクトロポレーションシステムを使用して病変に電気パルスを施すことを含み、複数の電極が、格納位置と展開位置との間を移動するように構成され、第一の電極の第一の先端と第二の電極の第二の先端との間の距離が、格納位置においてよりも展開位置において大きい。システムは、複数の電極に電気的に接続されたジェネレータをさらに含み得、病変に電気パルスを施すことは、第一の電極および第二の電極を病変内または病変に隣接して配置し、電気パルスをジェネレータから第一の電極および第二の電極に送達することをさらに含む。
【００４９】
いくつかの実施形態では、アプリケータが、制御部分と、制御部分に接続された挿入管と、制御部分と係合するアクチュエータとをさらに含み、アクチュエータの少なくとも一部分は、制御部分および挿入管に対して移動可能であり、複数の電極を格納位置と展開位置との間で移動させる。
【００５０】
いくつかの実施形態では、エレクトロポレーションシステムが、少なくとも一つの作業チャネルを画定する剛性トロカールまたは可撓性内視鏡のうちの一つを含む挿入デバイスをさらに含み、アプリケータの少なくとも一部分は、病変にアクセスするために少なくとも一つの作業チャネルを通過するように構成される。
【００５１】
いくつかの実施形態では、エレクトロポレーションシステムが、少なくとも一つのプラスミドまたは少なくとも一つのチェックポイント阻害剤のうちの少なくとも一つを、挿入デバイスの少なくとも一つの作業チャネルを通して送達するように構成された薬剤送達装置をさらに含む。
【００５２】
いくつかの実施形態では、アプリケータが、少なくとも一つのプラスミドまたは少なくとも一つのチェックポイント阻害剤のうちの少なくとも一つを病変に送達するように構成された薬剤送達チャネルをさらに画定する。
【００５３】
いくつかの実施形態では、エレクトロポレーションシステムが、少なくとも一つのプラスミド、少なくとも一つのチェックポイント阻害剤、またはエレクトロポレーション療法のうちの少なくとも一つの投与中にアプリケータの位置を制御するためにアプリケータと係合する少なくとも一つのロボットアームをさらに含む。
【００５４】
いくつかの実施形態では、エレクトロポレーションシステムが、少なくとも一つのプラスミド、少なくとも一つのチェックポイント阻害剤、またはエレクトロポレーション療法の少なくとも一つの投与の前または投与中に、病変の画像を生成するように構成された少なくとも一つの可視化装置をさらに含む。いくつかの実施形態では、少なくとも一つの可視化装置は、コンピューター断層撮影スキャナーを含む。
【００５５】
いくつかの実施形態では、ジェネレータは低電圧電気パルスを出力するように構成される。電気パルスは、７００Ｖ／ｃｍ以下の電界強度を有し得る。
【００５６】
いくつかの実施形態では、ジェネレータは高電圧電気パルスを出力するように構成される。
【００５７】
いくつかの実施形態では、少なくとも一つのプラスミドは、タボキノーゲンテルセプラスミドを含む。
【００５８】
いくつかの実施形態では、チェックポイント阻害剤は、全身に投与される。
【００５９】
いくつかの実施形態では、チェックポイント阻害剤は、抗ＰＤ−１抗体または抗ＰＤ−Ｌ１抗体である。
【００６０】
いくつかの実施形態では、チェックポイント阻害剤は、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、ピジリズマブ、またはＭＰＤＬ３２８０Ａを含む。
【００６１】
別の例示的な実施形態では、抗ＰＤ−１または抗ＰＤＬ１療法に非応答性または非応答性であると予測される対象の肺の病変を治療するためのシステムは、第一の先端を有する第一の電極および第二の先端を有する第二の電極を含む複数の電極であって、格納位置と展開位置との間を移動するように構成され、第一の電極の第一の先端と第二の電極の第二の先端との間の距離が、格納位置においてよりも展開位置において大きい、複数の電極と、複数の電極に電気的に接続されたジェネレータであって、電気パルスを第一の電極および第二の電極に送達して、電気パルスを病変に投与するように構成される、ジェネレータと、ＩＬ−１２をコードする少なくとも一つのプラスミドの有効用量および少なくとも一つのチェックポイント阻害剤の有効用量を対象に送達するように構成された少なくとも一つの薬剤送達装置とを含むアプリケータを含み得る。
【００６２】
いくつかの実施形態では、アプリケータが、制御部分と、制御部分に接続された挿入管と、制御部分と係合するアクチュエータとをさらに含み、アクチュエータの少なくとも一部分は、制御部分および挿入管に対して移動可能であり、複数の電極を格納位置と展開位置との間で移動させる。
【００６３】
いくつかの実施形態では、システムは、少なくとも一つの作業チャネルを画定する剛性トロカールまたは可撓性内視鏡のうちの一つを含む挿入デバイスを含んでもよく、アプリケータの少なくとも一部分は、病変にアクセスするために少なくとも一つの作業チャネルを通過するように構成される。
【００６４】
いくつかの実施形態では、システムは、挿入デバイスの少なくとも一つの作業チャネルを通して少なくとも一つのプラスミドを送達するように構成された薬剤送達装置を含み得る。
【００６５】
いくつかの実施形態では、アプリケータが、少なくとも一つのプラスミドを病変に送達するように構成された薬剤送達チャネルをさらに画定する。
【００６６】
いくつかの実施形態では、システムは、少なくとも一つのプラスミドまたはエレクトロポレーション療法の少なくとも一つの投与中にアプリケータの位置を制御するためにアプリケータと係合する少なくとも一つのロボットアームを含み得る。
【００６７】
いくつかの実施形態では、システムは、少なくとも一つのプラスミドまたはエレクトロポレーション療法の少なくとも一つの投与前または投与中に、病変の画像を生成するように構成された少なくとも一つの可視化装置を含み得る。少なくとも一つの可視化装置は、コンピューター断層撮影スキャナーを含み得る。
【００６８】
いくつかの実施形態では、ジェネレータは低電圧電気パルスを出力するように構成される。いくつかの実施形態では、電気パルスは７００Ｖ／ｃｍ以下の電界強度を有する。
【００６９】
いくつかの実施形態では、ジェネレータは高電圧電気パルスを出力するように構成される。
【００７０】
いくつかの実施形態では、少なくとも一つのプラスミドは、タボキノーゲンテルセプラスミドを含む。
【００７１】
さらに別の例示的な実施形態では、対象の肺の病変を治療する方法は、病変に少なくとも一つの治療剤の有効用量を投与することと、病変にエレクトロポレーション療法を施すこととを含み得、エレクトロポレーション療法は、第一の先端を有する第一の電極および第二の先端を有する第二の電極を含む複数の電極であって、格納位置と展開位置との間を移動するように構成され、第一の電極の第一の先端と第二の電極の第二の先端との間の距離が、格納位置においてよりも展開位置において大きい、複数の電極を含むアプリケータを含む、エレクトロポレーションシステムを使用して病変に電気パルスを施すことを含む。システムは、複数の電極に電気的に接続されたジェネレータをさらに含み得、病変に電気パルスを施すことは、第一の電極および第二の電極を病変内または病変に隣接して配置し、電気パルスをジェネレータから第一の電極および第二の電極に送達することをさらに含む。
【００７２】
いくつかの実施形態では、アプリケータが、制御部分と、制御部分に接続された挿入管と、制御部分と係合するアクチュエータとをさらに含み、アクチュエータの少なくとも一部分は、制御部分および挿入管に対して移動可能であり、複数の電極を格納位置と展開位置との間で移動させる。
【００７３】
いくつかの実施形態では、エレクトロポレーションシステムが、少なくとも一つの作業チャネルを画定する挿入デバイスをさらに含み得、アプリケータの少なくとも一部分は、少なくとも一つの作業チャネルを通過して病変にアクセスするように構成される。
【００７４】
いくつかの実施形態では、エレクトロポレーションシステムが、挿入デバイスの少なくとも一つの作業チャネルを通して少なくとも一つの治療剤を送達するように構成された薬剤送達装置をさらに含み得る。いくつかの実施形態では、挿入デバイスは気管支鏡を含んでもよく、アプリケータは少なくとも部分的に可撓性である。
【００７５】
いくつかの実施形態では、アプリケータが、少なくとも一つの治療剤を病変に送達するように構成された薬剤送達チャネルをさらに画定する。
【００７６】
いくつかの実施形態では、エレクトロポレーションシステムが、少なくとも一つの治療剤またはエレクトロポレーション療法の少なくとも一つの投与中にアプリケータの位置を制御するためにアプリケータと係合する少なくとも一つのロボットアームをさらに含む。
【００７７】
いくつかの実施形態では、エレクトロポレーションシステムが、少なくとも一つの治療剤またはエレクトロポレーション療法の少なくとも一つの投与の前または投与中に病変の画像を生成するように構成された少なくとも一つの可視化装置をさらに含む。少なくとも一つの可視化装置は、コンピューター断層撮影スキャナーを含み得る。
【００７８】
いくつかの実施形態では、ジェネレータは低電圧電気パルスを出力するように構成される。電気パルスは、７００Ｖ／ｃｍ以下の電界強度を有し得る。
【００７９】
いくつかの実施形態では、ジェネレータは高電圧電気パルスを出力するように構成される。
【００８０】
いくつかの実施形態では、少なくとも一つの治療剤の有効用量を対象に投与することは、サイトカインをコードする少なくとも一つのプラスミドの有効用量を投与することを含む。少なくとも一つのプラスミドは、タボキノーゲンテルセプラスミドを含み得る。いくつかの実施形態では、少なくとも一つの治療剤の有効用量を対象に投与することは、少なくとも一つのチェックポイント阻害剤の有効用量を対象に投与することをさらに含むことができる。
【００８１】
いくつかの実施形態では、方法は、アプリケータの一部分を対象の食道を介して対象の肺に挿入することを含み得る。
【００８２】
別の例示的な実施形態では、対象の肺の病変を治療するためのシステムは、第一の先端を有する第一の電極および第二の先端を有する第二の電極を含む複数の電極であって、格納位置と展開位置との間を移動するように構成され、第一の電極の第一の先端と第二の電極の第二の先端との間の距離が、格納位置においてよりも展開位置において大きい、複数の電極を含むアプリケータと、複数の電極に電気的に接続されたジェネレータであって、電気パルスを第一の電極および第二の電極に送達して、電気パルスを病変に施すように構成されるジェネレータと、対象に少なくとも一つの治療剤の有効用量を送達するように構成された少なくとも一つの薬剤送達チャネルと、を含み得る。
【００８３】
いくつかの実施形態では、アプリケータが、制御部分と、制御部分に接続された挿入管と、制御部分と係合するアクチュエータとをさらに含み、アクチュエータの少なくとも一部分は、制御部分および挿入管に対して移動可能であり、複数の電極を格納位置と展開位置との間で移動させる。
【００８４】
いくつかの実施形態では、システムは、少なくとも一つの作業チャネルを画定する挿入デバイスを含んでもよく、アプリケータの少なくとも一部分は、少なくとも一つの作業チャネルを通過して病変にアクセスするように構成される。
【００８５】
いくつかの実施形態では、システムは、挿入デバイスの少なくとも一つの作業チャネルを通して少なくとも一つの治療剤を送達するように構成された薬剤送達装置を含み得る。挿入デバイスは気管支鏡を含んでもよく、アプリケータは少なくとも部分的に可撓性である。
【００８６】
いくつかの実施形態では、アプリケータが、少なくとも一つの治療剤を病変に送達するように構成された薬剤送達チャネルをさらに画定する。
【００８７】
いくつかの実施形態では、システムは、少なくとも一つの治療剤またはエレクトロポレーション療法の少なくとも一つの送達中に、アプリケータの位置を制御するためにアプリケータと係合する少なくとも一つのロボットアームを含み得る。
【００８８】
いくつかの実施形態では、システムは、少なくとも一つの治療剤またはエレクトロポレーション療法の少なくとも一つの送達前または送達中に病変の画像を生成するように構成された少なくとも一つの可視化装置を含み得る。少なくとも一つの可視化装置は、コンピューター断層撮影スキャナーを含み得る。
【００８９】
いくつかの実施形態では、ジェネレータは低電圧電気パルスを出力するように構成される。電気パルスは、７００Ｖ／ｃｍ以下の電界強度を有し得る。
【００９０】
いくつかの実施形態では、ジェネレータは高電圧電気パルスを出力するように構成される。
【００９１】
例示的な実施形態において、対象の膵臓における内臓病変を治療する方法は、対象に少なくとも一つの治療剤の有効用量を投与することと、内臓病変にエレクトロポレーション療法を施すことを含んでもよく、エレクトロポレーション療法は、第一の先端を有する第一の電極と第二の先端を有する第二の電極とを含む複数の電極であって、格納位置と展開位置との間を移動するように構成され、第一の電極の第一の先端と第二の電極の第二の先端との間の距離が、格納位置においてよりも展開位置において大きい、複数の電極を含むアプリケータを含むエレクトロポレーションシステムを使用して、内臓病変に電気パルスを施すことを含む。システムは、複数の電極に電気的に接続されたジェネレータをさらに含み得、電気パルスを内臓病変に施すことは、第一の電極および第二の電極を内臓病変内またはそれに隣接して配置し、電気パルスをジェネレータから第一の電極および第二の電極に送達することを含む。
【００９２】
いくつかの実施形態では、アプリケータが、制御部分と、制御部分に接続された挿入管と、制御部分と係合するアクチュエータとをさらに含み、アクチュエータの少なくとも一部分は、制御部分および挿入管に対して移動可能であり、複数の電極を格納位置と展開位置との間で移動させる。
【００９３】
いくつかの実施形態では、システムは、少なくとも一つの作業チャネルを画定する挿入デバイスを含んでもよく、アプリケータの少なくとも一部分は、少なくとも一つの作業チャネルを通過して内臓病変にアクセスするように構成される。いくつかの実施形態では、エレクトロポレーションシステムが、挿入デバイスの少なくとも一つの作業チャネルを通して少なくとも一つの治療剤を送達するよう構成された薬剤送達装置をさらに含む。いくつかの実施形態では、挿入デバイスは内視鏡を含み、アプリケータは少なくとも部分的に可撓性である。
【００９４】
いくつかの実施形態では、アプリケータが、少なくとも一つの治療剤を内臓病変に送達するように構成された薬剤送達チャネルをさらに画定する。
【００９５】
いくつかの実施形態では、エレクトロポレーションシステムが、少なくとも一つの治療剤またはエレクトロポレーション療法の少なくとも一つの投与中にアプリケータの位置を制御するためにアプリケータと係合する少なくとも一つのロボットアームをさらに含む。
【００９６】
いくつかの実施形態では、エレクトロポレーションシステムが、少なくとも一つの治療剤またはエレクトロポレーション療法の少なくとも一つの投与の前または投与中に内臓病変の画像を生成するように構成された少なくとも一つの可視化装置をさらに含む。少なくとも一つの可視化装置は、コンピューター断層撮影スキャナーを含み得る。
【００９７】
いくつかの実施形態では、ジェネレータは低電圧電気パルスを出力するように構成される。電気パルスは、７００Ｖ／ｃｍ以下の電界強度を有し得る。
【００９８】
いくつかの実施形態では、ジェネレータは高電圧電気パルスを出力するように構成される。
【００９９】
いくつかの実施形態では、少なくとも一つの治療剤の有効用量を対象に投与することは、サイトカインをコードする少なくとも一つのプラスミドの有効用量を投与することを含む。少なくとも一つのプラスミドは、タボキノーゲンテルセプラスミドを含み得る。
【０１００】
いくつかの実施形態では、少なくとも一つの治療剤の有効用量を対象に投与することは、対象に少なくとも一つのチェックポイント阻害剤の有効用量を投与することをさらに含む。
【０１０１】
一部の実施例では、アプリケータはさらに貫通先端から成る。方法は、アプリケータの一部分を対象の胃に挿入することと、胃壁を貫通先端で貫通することと、複数の電極を格納位置から展開位置に移動させることとをさらに含み得る。
【０１０２】
例示的な実施形態では、対象の膵臓の内臓病変を治療するためのシステムは、第一の先端を有する第一の電極および第二の先端を有する第二の電極を含む複数の電極であって、アクチュエータによる作動に応答して格納位置と展開位置との間を移動するように構成され、第一の電極の第一の先端と第二の電極の第二の先端との間の距離が、格納位置においてよりも展開位置において大きい、複数の電極を含むアプリケータと、複数の電極に電気的に接続されたジェネレータであって、電気パルスを第一の電極および第二の電極に送達して、電気パルスを内臓病変に施すように構成されるジェネレータと、対象に少なくとも一つの治療剤の有効用量を送達するように構成された少なくとも一つの薬剤送達チャネルとを含み得る。
【０１０３】
いくつかの実施形態では、アプリケータが、制御部分と、制御部分に接続された挿入管と、制御部分と係合するアクチュエータとをさらに含み、アクチュエータの少なくとも一部分は、制御部分および挿入管に対して移動可能であり、複数の電極を格納位置と展開位置との間で移動させる。
【０１０４】
いくつかの実施形態では、システムは、少なくとも一つの作業チャネルを画定する挿入デバイスを含んでもよく、アプリケータの少なくとも一部分は、少なくとも一つの作業チャネルを通過して内臓病変にアクセスするように構成される。いくつかの実施形態では、システムは、挿入デバイスの少なくとも一つの作業チャネルを通して少なくとも一つの治療剤を送達するように構成された薬剤送達装置を含み得る。いくつかの実施形態では、挿入デバイスは気管支鏡を含み、アプリケータは少なくとも部分的に可撓性である。
【０１０５】
いくつかの実施形態では、アプリケータが、少なくとも一つの治療剤を内臓病変に送達するように構成された薬剤送達チャネルをさらに画定する。
【０１０６】
いくつかの実施形態では、システムは、少なくとも一つの治療剤またはエレクトロポレーション療法の少なくとも一つの送達中に、アプリケータの位置を制御するためにアプリケータと係合する少なくとも一つのロボットアームを含み得る。
【０１０７】
いくつかの実施形態では、システムは、少なくとも一つの治療剤またはエレクトロポレーション療法の少なくとも一つの送達前または送達中に内臓病変の画像を生成するように構成された少なくとも一つの可視化装置を含み得る。少なくとも一つの可視化装置は、コンピューター断層撮影スキャナーを含み得る。
【０１０８】
いくつかの実施形態では、ジェネレータは低電圧電気パルスを出力するように構成される。電気パルスは、７００Ｖ／ｃｍ以下の電界強度を有し得る。
【０１０９】
いくつかの実施形態では、ジェネレータは高電圧電気パルスを出力するように構成される。
【０１１０】
いくつかの実施形態では、アプリケータが、膵臓上の内臓病変に、または膵臓上の内臓病変に近接して、少なくとも一つの治療剤または電気パルスの少なくとも一つを投与するために、対象の胃壁を貫通するように構成された貫通先端をさらに含む。
【０１１１】
例示的な実施形態では、対象の病変を治療する方法は、対象に少なくとも一つの治療剤の有効用量を投与することと、病変にエレクトロポレーション療法を施すこととを含み、エレクトロポレーション療法は、第一の先端を有する第一の電極および第二の先端を有する第二の電極を含む複数の電極を含むアプリケータを含む、エレクトロポレーションシステムを使用して病変に電気パルスを投与することを含む。エレクトロポレーションシステムが、複数の電極に電気的に接続されたジェネレータをさらに含み得、病変に電気パルスを施すことは、第一の電極および第二の電極を病変内または病変に隣接して配置し、電気パルスをジェネレータから第一の電極および第二の電極に送達することを含む。
【０１１２】
いくつかの実施形態では、複数の電極が、格納位置と展開位置との間で移動するよう構成され、第一の電極の第一の先端と第二の電極の第二の先端との間の距離が、格納位置においてよりも展開位置において大きい。
【０１１３】
いくつかの実施形態では、アプリケータが、制御部分と、制御部分に接続された挿入管と、制御部分と係合するアクチュエータとをさらに含み、アクチュエータの少なくとも一部分は、制御部分および挿入管に対して移動可能であり、複数の電極を格納位置と展開位置との間で移動させる。
【０１１４】
いくつかの実施形態では、エレクトロポレーションシステムが、少なくとも一つの作業チャネルを画定する挿入デバイスをさらに含み、アプリケータの少なくとも一部分は、少なくとも一つの作業チャネルを通過して病変にアクセスするように構成される。
【０１１５】
いくつかの実施形態では、エレクトロポレーションシステムが、挿入デバイスの少なくとも一つの作業チャネルを通して少なくとも一つの治療剤を送達するよう構成された薬剤送達装置をさらに含む。
【０１１６】
いくつかの実施形態では、挿入デバイスは内視鏡を含み、アプリケータは少なくとも部分的に可撓性である。
【０１１７】
いくつかの実施形態では、挿入デバイスはトロカールを含み、アプリケータは実質的に剛性である。
【０１１８】
いくつかの実施形態では、アプリケータが、少なくとも一つの治療剤を病変に送達するように構成された薬剤送達チャネルをさらに画定する。
【０１１９】
いくつかの実施形態では、エレクトロポレーションシステムが、少なくとも一つの治療剤またはエレクトロポレーション療法の少なくとも一つの投与中にアプリケータの位置を制御するためにアプリケータと係合する少なくとも一つのロボットアームをさらに含む。
【０１２０】
いくつかの実施形態では、エレクトロポレーションシステムが、少なくとも一つの治療剤またはエレクトロポレーション療法の少なくとも一つの投与の前または投与中に病変の画像を生成するように構成された少なくとも一つの可視化装置をさらに含む。少なくとも一つの可視化装置は、コンピューター断層撮影スキャナーを含み得る。
【０１２１】
いくつかの実施形態では、ジェネレータは低電圧電気パルスを出力するように構成される。電気パルスは、７００Ｖ／ｃｍ以下の電界強度を有し得る。
【０１２２】
いくつかの実施形態では、ジェネレータは高電圧電気パルスを出力するように構成される。
【０１２３】
いくつかの実施形態では、病変を治療することは、サイトカインをコードする少なくとも一つのプラスミドの有効用量を投与することを含む。いくつかの実施形態では、サイトカインはＩＬ−１２を含む。いくつかの実施形態では、少なくとも一つのプラスミドは、タボキノーゲンテルセプラスミドを含む。いくつかの実施形態では、病変を治療することは、対象に少なくとも一つのチェックポイント阻害剤の有効用量を投与することをさらに含む。
【０１２４】
いくつかの実施形態では、治療剤は、免疫調節性ポリペプチドをコードする少なくとも一つのプラスミドを含む。いくつかの実施形態では、免疫調節性ポリペプチドは、サイトカイン、共刺激分子、遺伝学的アジュバント、抗原、遺伝学的アジュバント−抗原融合ポリペプチド、ケモカイン、または抗原結合ポリペプチドを含む。
【０１２５】
例示的な実施形態では、対象の病変を治療するためのシステムは、第一の先端を有する第一の電極および第二の先端を有する第二の電極を含む複数の電極を含むアプリケータと、複数の電極に電気的に接続されたジェネレータであって、電気パルスを第一の電極および第二の電極に送達して、電気パルスを病変に投与するように構成されるジェネレータと、対象に少なくとも一つの治療剤の有効用量を送達するように構成された少なくとも一つの薬剤送達チャネルとを含んでもよい。
【０１２６】
いくつかの実施形態では、複数の電極が、格納位置と展開位置との間で移動するよう構成され、第一の電極の第一の先端と第二の電極の第二の先端との間の距離が、格納位置においてよりも展開位置において大きい。
【０１２７】
いくつかの実施形態では、アプリケータが、制御部分と、制御部分に接続された挿入管と、制御部分と係合するアクチュエータとをさらに含み、アクチュエータの少なくとも一部分は、制御部分および挿入管に対して移動可能であり、複数の電極を格納位置と展開位置との間で移動させる。
【０１２８】
いくつかの実施形態では、システムは、少なくとも一つの作業チャネルを画定する挿入デバイスを含んでもよく、アプリケータの少なくとも一部分は、少なくとも一つの作業チャネルを通過して病変にアクセスするように構成される。
【０１２９】
いくつかの実施形態では、システムは、挿入デバイスの少なくとも一つの作業チャネルを通して少なくとも一つの治療剤を送達するように構成された薬剤送達装置を含み得る。
【０１３０】
いくつかの実施形態では、挿入デバイスは内視鏡を含み、アプリケータは少なくとも部分的に可撓性である。
【０１３１】
いくつかの実施形態では、挿入デバイスはトロカールを含み、アプリケータは実質的に剛性である。
【０１３２】
いくつかの実施形態では、アプリケータが、少なくとも一つの治療剤を病変に送達するように構成された薬剤送達チャネルをさらに画定する。
【０１３３】
いくつかの実施形態では、システムは、少なくとも一つの治療剤または電気パルスの少なくとも一つの送達中に、アプリケータの位置を制御するためにアプリケータと係合する少なくとも一つのロボットアームを含み得る。
【０１３４】
いくつかの実施形態では、システムは、少なくとも一つの治療剤または電気パルスの少なくとも一つの送達前または送達中に病変の画像を生成するように構成された少なくとも一つの可視化装置を含み得る。少なくとも一つの可視化装置は、コンピューター断層撮影スキャナーを含み得る。
【０１３５】
いくつかの実施形態では、ジェネレータは低電圧電気パルスを出力するように構成される。電気パルスは、７００Ｖ／ｃｍ以下の電界強度を有し得る。
【０１３６】
いくつかの実施形態では、ジェネレータは高電圧電気パルスを出力するように構成される。
【０１３７】
いくつかの実施形態では、病変を治療することは、サイトカインをコードする少なくとも一つのプラスミドの有効用量を送達することを含む。いくつかの実施形態では、少なくとも一つのプラスミドは、タボキノーゲンテルセプラスミドを含む。いくつかの実施形態では、少なくとも一つの治療剤の有効用量を病変に送達することは、対象に少なくとも一つのチェックポイント阻害剤の有効用量を送達することをさらに含む。
【０１３８】
いくつかの実施形態では、治療剤は、免疫調節性ポリペプチドをコードする少なくとも一つのプラスミドを含む。
【０１３９】
いくつかの実施形態では、免疫調節性ポリペプチドは、サイトカイン、共刺激分子、遺伝学的アジュバント、抗原、遺伝学的アジュバント−抗原融合ポリペプチド、ケモカイン、または抗原結合ポリペプチドを含む。
【０１４０】
いくつかの実施形態では、免疫調節分子は、ＣＸＣＬ９、抗ＣＤ３  ｓｃＦｖ、または抗ＣＴＬＡ−４  ｓｃＦｖを含む。
【図面の簡単な説明】
【０１４１】
本発明の実施形態を一般用語で説明したが、必ずしも縮尺通りに描かれていない添付図面を参照する。
【０１４２】
【図１】図１は、いくつかの実施形態によるエレクトロポレーションシステムのブロック図を示す。
【０１４３】
【図２】図２は、いくつかの実施形態によるアプリケータの一部分の断面図を示す。
【０１４４】
【図３】図３は、いくつかの実施形態によるジェネレータおよび簡易化されたアプリケータを示す。
【０１４５】
【図４】図４は、いくつかの実施形態による内視鏡を示す。
【０１４６】
【図５】図５は、いくつかの実施形態による、格納位置にあるアプリケータの挿入管および電極の一部分を示す。
【０１４７】
【図６】図６は、展開位置にある図５の挿入管および電極の部分を示す。
【０１４８】
【図７】図７は、いくつかの実施形態による、格納位置にあるアプリケータの挿入管、電極、およびブラダーの一部分を示す。
【０１４９】
【図８】図８は、展開位置にある図７の挿入管、電極、およびブラダーの部分を示す。
【０１５０】
【図９】図９は、いくつかの実施形態による、格納位置にあるアプリケータの挿入管および電極の一部分を示す。
【０１５１】
【図１０】図１０は、展開位置にある図９の挿入管および電極の部分を示す。
【０１５２】
【図１１】図１１は、いくつかの実施形態によるニチノールスリーブを有する電極を示す。
【０１５３】
【図１２】図１２は、いくつかの実施形態による、格納位置にあるアプリケータの挿入管および電極の一部分を示す。
【０１５４】
【図１３】図１３は、展開位置にある図１２の挿入管および電極の部分を示す。
【０１５５】
【図１４】図１４は、いくつかの実施形態による、格納位置にあるアプリケータの挿入管、キャリア、および電極の一部分を示す。
【０１５６】
【図１５】図１５は、展開位置にある図１４の挿入管、キャリア、および電極の部分を示す。
【０１５７】
【図１６】図１６は、いくつかの実施形態による、格納位置にあるアプリケータの挿入管、キャリア、および電極の一部分を示す。
【０１５８】
【図１７】図１７は、展開位置にある図１６の挿入管、キャリア、および電極の部分を示す。
【０１５９】
【図１８】図１８は、いくつかの実施形態による、例示的な治療方法のフローチャートを示す。
【０１６０】
【図１９】図１９は、いくつかの実施形態によるアプリケータの側面図を示す。
【０１６１】
【図２０】図２０は、いくつかの実施形態による、展開位置にある電極を有するアプリケータの斜視図を示す。
【０１６２】
【図２１】図２１は、いくつかの実施形態による、格納位置にあるアプリケータの挿入管および電極の一部分を示す。
【０１６３】
【図２２】図２２は、いくつかの実施形態による、電極が展開位置にあるアプリケータの側面図を示す。
【０１６４】
【図２３】図２３は、いくつかの実施形態による、アプリケータの制御部分およびアクチュエータの部分図を示す。
【０１６５】
【図２４】図２４は、いくつかの実施形態による、展開位置にある挿入管および電極の一部分を示す。
【０１６６】
【図２５】図２５は、いくつかの実施形態による、電極が格納位置にあるアプリケータの斜視図を示す。
【０１６７】
【図２６】図２６は、いくつかの実施形態による、展開位置にある挿入管および電極の一部分を示す。
【０１６８】
【図２７】図２７は、いくつかの実施形態によるアプリケータの断面上面図を示す。
【０１６９】
【図２８】図２８は、いくつかの実施形態による、電極が展開位置にあるアプリケータの側面図を示す。
【０１７０】
【図２９】図２９は、いくつかの実施形態による、挿入管、キャリア、および電極の斜視図を示す。
【０１７１】
【図３０】図３０は、いくつかの実施形態による、展開位置にある挿入管、キャリア、および電極の部分断面図を示す。
【０１７２】
【図３１】図３１は、いくつかの実施形態による、展開位置にある電極を有するアプリケータの斜視図を示す。
【０１７３】
【図３２】図３２は、いくつかの実施形態による、電極が格納位置にあるアプリケータの斜視図を示す。
【０１７４】
【図３３】図３３は、いくつかの実施形態による、挿入管、キャリア、押圧要素、ワイヤ、および内側部材の部分断面図を示す。
【０１７５】
【図３４】図３４は、いくつかの実施形態によるアプリケータの側面断面図を示す。
【０１７６】
【図３５】図３５は、いくつかの実施形態による、電極が展開位置にあるアプリケータの側面図を示す。
【０１７７】
【図３６】図３６は、いくつかの実施形態による、ワイヤ、押圧要素、挿入管、および中空マンドレルの断面図を示す。
【０１７８】
【図３７】図３７は、いくつかの実施形態による第二のアクチュエータを示す。
【０１７９】
【図３８】図３８は、いくつかの実施形態による、挿入管、キャリア、内側部材、電極、押圧要素、およびワイヤの一部分の断面図を示す。
【０１８０】
【図３９】図３９は、いくつかの実施形態による、制御部分およびアクチュエータの部分斜視図を示す。
【０１８１】
【図４０】図４０は、いくつかの実施形態による、電極が格納位置にあるアプリケータの斜視図を示す。
【０１８２】
【図４１】図４１は、いくつかの実施形態による、展開位置にある挿入管および電極の一部分を示す。
【０１８３】
【図４２】図４２は、いくつかの実施形態による、展開位置にある挿入管および電極の一部分を示す。
【０１８４】
【図４３】図４３は、いくつかの実施形態による、電極が格納位置にあるアプリケータの斜視図を示す。
【０１８５】
【図４４】図４４は、いくつかの実施形態による、ケーブルおよびコネクターを示す。
【０１８６】
【図４５】図４５は、図４４のケーブルおよびコネクターを示す。
【０１８７】
【図４６】図４６は、線Ａ−Ａに沿った図４４のコネクターの断面図を示す。
【０１８８】
【図４７】図４７は、いくつかの実施形態による、電極が格納位置にあるアプリケータの斜視図を示す。
【０１８９】
【図４８】図４８は、図４７のアプリケータの拡大斜視図を示す。
【０１９０】
【図４９】図４９は、図４７のアプリケータの別の拡大斜視図を示す。
【０１９１】
【図５０】図５０は、図４７のアプリケータの遠位端の斜視図を示す。
【０１９２】
【図５１】図５１は、図４７のアプリケータの断面図を示す。
【０１９３】
【図５２】図５２は、図４７のアプリケータの別の拡大断面図を示す。
【０１９４】
【図５３】図５３は、図４７のアプリケータの挿入管、電極、押圧要素の一部分の断面図を示す。
【０１９５】
【図５４】図５４は、いくつかの実施形態による、展開位置にある電極を持つ図４７のアプリケータの斜視図を示す。
【０１９６】
【図５５】図５５は、図５４のアプリケータの拡大側面図を示す。
【０１９７】
【図５６】図５６は、図５４のアプリケータの遠位端の斜視図を示す。
【０１９８】
【図５７】図５７は、図５４のアプリケータの断面図を示す。
【０１９９】
【図５８】図５８は、図５４のアプリケータの遠位端の断面図を示す。
【０２００】
【図５９】図５９は、いくつかの実施形態による、電気パルスを運ぶことができる押圧要素を示す。
【０２０１】
【図６０】図６０は、一部の実施形態による、展開位置にあるアプリケータの挿入管、電極、および薬剤送達管の一部分を示す。
【０２０２】
【図６１】図６１は、一部の実施形態による、展開位置にある図６０のアプリケータの挿入管、電極、および薬剤送達管の断面図を示す。
【０２０３】
【図６２】図６２は、一部の実施形態による、展開位置にあるアプリケータの挿入管、電極、および薬剤送達管の一部分を示す。
【０２０４】
【図６３】図６３は、一部の実施形態による、展開位置にある図６２のアプリケータの挿入管、電極、および薬剤送達管の断面図を示す。
【０２０５】
【図６４】図６４は、一部の実施形態による、展開位置にあるアプリケータの挿入管、電極、および薬剤送達管の一部分を示す。
【０２０６】
【図６５】図６５は、一部の実施形態による、展開位置にある図６４のアプリケータの挿入管、電極、および薬剤送達管の断面図を示す。
【０２０７】
【図６６】図６６は、一部の実施形態による、展開位置にあるアプリケータの挿入管、キャリア、内側部材、電極、および薬剤送達管の一部分を示す。
【０２０８】
【図６７】図６７は、いくつかの実施形態による、例示的な治療方法の別のフローチャートを示す。
【０２０９】
【図６８】図６８は、いくつかの実施形態による、例示的な治療方法のさらに別のフローチャートを示す。
【０２１０】
【図６９】図６９は、一部の実施形態による、膵臓にアクセスするために胃内に延在するアプリケータおよび内視鏡の例を示す。
【０２１１】
【図７０】図７０は、図６９のアプリケータ、内視鏡、胃、および膵臓の切り取り図を示す。
【０２１２】
【図７１】図７１は、図６９の内視鏡およびアプリケータの遠位端の拡大斜視図を示す。
【０２１３】
【図７２】図７２は、胃壁を貫通する、図６９の内視鏡およびアプリケータの遠位端の拡大斜視図を示す。
【０２１４】
【図７３】図７３は、胃壁を貫通する、図６９の内視鏡およびアプリケータの遠位端の別の拡大斜視図を示す。
【０２１５】
【図７４】図７４は、膵臓を貫通する展開位置に電極および薬剤送達チャネルを有する、図６９の内視鏡およびアプリケータの遠位端の拡大斜視図を示す。
【０２１６】
【図７５】図７５は、いくつかの実施形態による、病変にアクセスするために肺内に延在するアプリケータおよび気管支鏡の例を示す。
【０２１７】
【図７６】図７６は、図７５のアプリケータ、気管支鏡、および肺の切り取り図を示す。
【０２１８】
【図７７】図７７は、図７５のアプリケータおよび気管支鏡の遠位端の拡大斜視図を示す。
【０２１９】
【図７８】図７８は、電極および薬剤送達チャネルを病変を貫通する展開位置に持つ、図７５の気管支鏡およびアプリケータの遠位端の拡大斜視図を示す。
【０２２０】
【図７９】図７９は、五つの異なる試験についての腫瘍体積対時間の実験結果を示す。
【０２２１】
【図８０】図８０は、高電圧および低電圧ＲＦＰ−Ｌｕｃのトランスフェクション速度のプロットを示す。
【０２２２】
【図８１】図８１は、確立されたＢ１６−Ｆ１０腫瘍へのエレクトロポレーションによるｍＩＬ−１２ｐ７０の発現を示す。
【０２２３】
【図８２】図８２は、Ｂ１６−Ｆ１０腫瘍におけるＬａｘ  Ｚ発現プラスミドのエレクトロポレーション後のＬａｃＺ染色を示す。
【０２２４】
【図８３】図８３は、Ｂ１６−Ｆ１０腫瘍におけるエレクトロポレーションによる三量体ＣＤ４０Ｌの発現を示す。
【０２２５】
【図８４】図８４は、Ｂ１６−Ｆ１０腫瘍におけるエレクトロポレーションによる三量体ＣＤ８０の発現を示す。
【０２２６】
【図８５】図８５は、Ｂ１６−Ｆ１０腫瘍におけるエレクトロポレーションによるｓｄＡｂのＩＴ発現を示す。
【０２２７】
【図８６】図８６は、いくつかの実施形態によるアプリケータの斜視図を示す。
【０２２８】
【図８７】図８７は、いくつかの実施形態による可撓性アプリケータを示す。
【０２２９】
【図８８】図８８は、いくつかの実施形態による、使用中の可撓性アプリケータを示す。
【０２３０】
【図８９】図８９は、いくつかの実施形態による、格納された電極を持つアプリケータの部分図を示す。
【０２３１】
【図９０】図９０は、いくつかの実施形態による、配置された電極を有するアプリケータの部分図を示す。
【０２３２】
【図９１】図９１は、いくつかの実施形態による、剛性のトロカールベースのアプリケータを示す。
【０２３３】
【図９２】図９２〜１０２は、本開示の一部の実施形態による、低電圧ジェネレータ用のデジタル基板の概略図を示す。
【図９３】同上。
【図９４】同上。
【図９５】同上。
【図９６】同上。
【図９７】同上。
【図９８】同上。
【図９９】同上。
【図１００】同上。
【図１０１】同上。
【図１０２】同上。
【０２３４】
【図１０３】図１０３は、本開示の一部の実施形態による低電圧ジェネレータ用の発電基板のブロック図を示す。
【０２３５】
【図１０４】図１０４〜１０９は、本開示の一部の実施形態による、低電圧ジェネレータ用の発電基板の概略図を示す。
【図１０５】同上。
【図１０６】同上。
【図１０７】同上。
【図１０８】同上。
【図１０９】同上。
【発明を実施するための形態】
【０２３６】
本発明の一部の実施形態は、添付図面を参照して、本明細書にさらに詳細に説明され、本発明の一部の実施形態は示されるが、本発明の全ての実施形態は示されるわけではない。実際に、本発明のさまざまな実施形態は、多くの異なる形態で具現化されてもよく、本明細書に記述される実施形態に限定されないと解釈されるべきではない。むしろ、これらの実施形態は、本開示が適用される法的要件を満足するように提供される。同様の参照番号は、全体を通して同様の要素を指す。
【０２３７】
システム概要
本明細書では、さまざまなエレクトロポレーションシステム、装置、および方法が開示される。いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるエレクトロポレーションシステム、装置、および方法は、狭い開口部を介してアプリケータの一部を患者に挿入し、いくつかの実施形態では、それを通してさまざまな療法および治療剤を投与することを含む低侵襲手順に関連して使用され得る。本明細書で使用されるシステム、装置、および方法は、任意の治療剤（例えば、核酸系療法）を送達し、任意のエレクトロポレーション療法を内臓的に適用するために使用され得る。いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるエレクトロポレーションシステム、装置、および方法は、挿入デバイスに関連して使用され得る。
【０２３８】
本明細書で使用される場合、「挿入デバイス」という用語は、例えば、カニューレまたは他の作業チャネルを介して、アプリケータの一部分を患者に挿入することを可能にすることができる任意の装置または構造を意味する。いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるエレクトロポレーションシステム、装置、および方法は、患者内の遠隔組織（例えば、腫瘍などの内臓病変）に到達し治療するための内視鏡装置および処置に関連して使用され得る。いくつかの実施形態では、気管支鏡装置、腹腔鏡装置、またはそのような遠隔組織にアクセスを提供するのに適した他のカニューレ挿入装置など、遠隔組織の特定の位置に応じて、本明細書に開示されるエレクトロポレーションシステム、装置、および方法とともに、さまざまなタイプの内視鏡装置を使用することができる。こうした内視鏡装置は、例えば、可撓性内視鏡機器または剛性内視鏡機器（例えば、腹腔鏡処置での使用のためのトロカールなど）のいずれかを含む、任意のタイプのものであってもよく、予想される処置および／または遠隔組織の位置に基づいて選択され得る。いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるエレクトロポレーションシステム、装置、および方法は、治療管内の任意の場所または治療管に隣接した任意の場所の病変にアクセスするために使用され得る。いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるエレクトロポレーションシステム、装置、および方法は、肺の病変にアクセスするために使用され得る。いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるエレクトロポレーションシステム、装置、および方法は、低侵襲性エレクトロポレーションに関連して使用することができ、一例は、任意の前述の内視鏡機器に関連し得る。
【０２３９】
さまざまな医学的治療において、エレクトロポレーションは、永久的な損傷（例えば、可逆的エレクトロポレーション）を引き起こすことなく、電気電界を使用して生物学的細胞内に孔を形成することによって細胞の透過性を増加させるために使用され得る。場合によっては、可逆性エレクトロポレーションの透過性の増加は、薬剤投与または遺伝子療法などの同時治療が細胞に浸透するより良好な治療能力を有するため、より効果的な治療を可能にし得る。エレクトロポレーションの間、電圧は、二つ以上の電極にわたって印加されて、その間に電界を生成し得る。いくつかの実施例では、電極は、電界に供される細胞組織の一方の側上に配置されてもよく、埋め込まれてもよく、またはそうでなければ、細胞組織に対して配置され得る。電界は、細胞組織内の細孔を形成し、その後、細胞が一つまたは複数の治療剤によって浸透されることを可能にする。本明細書に記載される低電圧ジェネレータを用いたエレクトロポレーションの性能は、可逆的エレクトロポレーションを達成するために必要な条件を満たす上で特に有利である。標的部位の周囲の組織はさまざまな電界閾値を有する可能性があるが、低電圧の印加は、閾値の現存する範囲の中でも、エレクトロポレーション手順中の組織への損傷を最小化または回避するためにそのような閾値よりも低い電圧量を印加することを意図している。
【０２４０】
図１〜３を参照すると、例示的なエレクトロポレーションシステム１０が示される。図示した実施形態では、システム１０は、電気信号を生成して少なくとも二つの電極１００に送達するためのジェネレータ１２と、少なくとも二つの電極を含むアプリケータ１４とを含む。参照番号１４を使用して本明細書に記述されたアプリケータ１４は、各アプリケータが個別に議論されたかのように、本明細書に記述された特定のアプリケータ１４、６０、７０、１１０、１０００の実施例のそれぞれを一般的に代表し得る。参照番号１００を使用して本明細書に記述された電極１００は、各電極が個別に議論されたかのように、本明細書に記述された電極１００、２００、３００、４００、５００、６００、７００、８００の実施形態のそれぞれを一般的に代表し得る。本開示のさまざまな実施形態において、アプリケータおよび電極のさまざまな実施形態間に差異がある限り、かかる差異は、該当するものとして説明される。いくつかの実施形態では、電極１００は、二つ以上の電極を含んでもよく、それぞれ、標的部位で組織を貫通するための遠位端で尖った先端を画定することができる。いくつかの実施形態では、電極の先端は露出される一方、電極の隣接する表面は、電流が先端のみを通過するように絶縁される。いくつかの実施形態では、先端から離れたそれぞれの電極上の領域が露出される一方、周囲の表面は絶縁され、電流は電極間のこれらの露出した表面を通してのみ方向付けられる。露出位置は、電極が展開位置にあるときに、電極の露出部分がアプリケータの挿入管１５の外側にあるように、先端および／または先端に十分近くてもよい。いくつかの実施形態では、以下でさらに詳細に論じられるように、電極１００の先端は、（例えば、作業チャネルを介して）患者に挿入するために格納位置で互いに接近し得、および所定の位置に配置されると、電極は、より広い治療領域にエレクトロポレーションを施すために、電極の先端がさらに離れて広げられている展開位置に展開され得る。いくつかの実施形態では、電極は、電極が格納位置または展開位置のいずれにあるかにかかわらず、間隔が一定であるように、所定の間隔を有するアプリケータの一部として含まれる。一実施例では、このような実施形態の電極の間隔は約４ｍｍである。電極は、これらの実施形態において、管またはその他の送達構造に依然として収容され得る。また別の例では、アプリケータは単一の電極１００のみを含んでもよく、一方で第二の電極は、例えば、ハウジングチューブの最も遠位の部分またはアプリケータ本体または同様の構造のその他の部分によって構成され得る。こうした実施例では、アプリケータが、所望の組織に電圧を提供し、アーク放電を防止するのに効果があるように、第二の電極を構成する構造から十分な距離だけ離間している必要がある（従って、固定または展開可能であり得る）単一の針のみを有する。
【０２４１】
いくつかの実施形態では、システム１０のアプリケータ１４は、一つまたは複数の治療剤（例えば、薬剤および／またはプラスミド）を投与するために使用され得る。例えば、アプリケータが、治療剤の送達経路として機能する挿入管１５を含み得る。いくつかの実施例では、また本出願の他の箇所でより詳細に記載されるように、指定された薬剤送達チャネル１８は、治療剤の投与のために挿入管１５内に含まれ得る（例えば、図４７〜６７に示す通り）。薬剤送達チャネル１８は、電極および治療剤の共局在化のためにアプリケータ１４を通って延在し得る。薬剤送達チャネル１８は、エレクトロポレーション部位に隣接する電極１００で終了して、電気穿孔される細胞に隣接する、または可能な限り近い一つまたは複数の治療剤を投与し得る。いくつかの実施例では、薬剤送達チャネルは、電極先端のわずかに近位で終了し得る。またその他の例では、送達チャネルは、送達チャネルが電極先端でまたは電極先端の遠位に延長するように、針などの電気穿孔される組織への挿入に適した形状も持ち得る。
【０２４２】
いくつかの実施形態では、エレクトロポレーションシステム１０は、一つまたは複数の治療剤（例えば、薬剤および／またはプラスミド）をエレクトロポレーション部位に投与するための薬剤送達装置１６をさらに含み得る。図１は、薬剤送達装置１６がシステム内に位置付けられる方法のいくつかの例を示し、より大きな文脈では、流体流路を示す破線矢印および電気的接続を示す実矢印を含む。図１を参照すると、薬剤送達装置１６は、治療剤を投与するための遠位チューブまたは針を持つ注射器を規定し得る。いくつかの実施形態では、薬剤送達装置１６は、一つまたは複数の治療剤を受容するように構成された少なくとも一つのリザーバー、およびエレクトロポレーション部位に治療剤を送達するように構成された少なくとも一つのポンプを含み得る。いくつかの実施形態では、薬剤送達装置１６は、一つまたは複数の治療剤を標的部位に直接投与する一方、アプリケータ１４は標的部位でのエレクトロポレーションを実施するために使用される。いくつかの実施形態では、薬剤送達装置１６は、一つまたは複数の治療剤をアプリケータ１４に投与し、次に、該治療剤を標的部位に直接投与する。このように、アプリケータ１４は、治療剤の投与およびエレクトロポレーションの実施に使用される。いくつかの実施例では、治療剤は、アプリケータ１４内の薬剤送達チャネル１８を通して送達される。
【０２４３】
いくつかの実施形態では、および本明細書の他の場所で論じられるように、一つまたは複数の治療剤は、図１に示すように、アプリケータ１４自体を介して投与される代わりに、別個の薬剤送達アプリケータ１９（例えば、長い遠位針、内視鏡機器を通過する導管など）を介して投与され得る。さらに、薬剤送達アプリケータ１９は、エレクトロポレーション部位に直接送達するよりもむしろ、治療剤の少なくとも一つを全身に送達し得る。別個の薬剤送達アプリケータ１９（またはその他の投与装置）は、エレクトロポレーションアプリケータ１４とともに順次使用して、一つまたは複数の治療剤をエレクトロポレーション部位に投与し得る。いくつかの実施例では、薬剤送達アプリケータ１９のみを使用して、一つまたは複数の治療剤を投与する。他の実施例では、薬剤送達アプリケータ１６は、図１に示すように、一つまたは複数の治療剤投与するために、薬剤送達装置１９と併せて使用される。これらの実施例では、アプリケータ１４は別々にエレクトロポレーションを実施する。
【０２４４】
システムアーキテクチャーの例
いくつかの実施形態では、ジェネレータ１２およびアプリケータ１４は、少なくともプロセッサ３０およびメモリ３６を含む一つまたは複数のコントローラー２４によって制御される。いくつかの実施形態では、コントローラー２４は、ジェネレータ１２内に配置されてもよく、それとともにアプリケータ１４を制御し得る。薬剤送達装置１６が電子制御を必要とする実施形態では、一つまたは複数のコントローラーが薬剤送達装置を操作することができ、薬剤送達装置１６が電子制御を持たない実施形態では、薬剤送達装置は手動で（例えば、注射器を押すことによって）操作することができる。いくつかの実施形態では、電子制御は、本明細書の他の箇所で説明されるロボット工学の形態であり得る。いくつかの実施形態では、ジェネレータ１２、アプリケータ１４および薬剤送達装置１６のそれぞれは、独自のコントローラーを持ち得る。いくつかの実施形態では、コントローラーのうちの一つまたは複数は、別のコントローラーによって制御され得る（例えば、マスタ−スレーブ関係において）。いくつかの実施形態では、各コントローラー２４は、単一のデバイスとして、または分散処理システムとして具現化されてもよく、その一部または全ては、制御するそれぞれのデバイスから遠隔であり得る。エレクトロポレーションシステムおよび対応する電子制御方法、信号、および装置、治療剤、並びに治療法の例は、米国特許第７，４１２，２８４号および第９，０２０，６０５号ならびに国際出願第ＷＯ２０１６／１６１２０１号に記載されており、これらのそれぞれは、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０２４５】
引き続き図１を参照すると、いくつかの実施形態では、ジェネレータ１２は、エレクトロポレーション療法を施す、および／または本明細書に記載の電気化学インピーダンス分光法（ＥＩＳ）を実施するための低電圧ジェネレータであり得る。いくつかの実施形態では、ジェネレータ１２は、エレクトロポレーション中の電極の励起のための波形を生成するように構成されたパルス回路３３を含み得る。いくつかの実施形態では、ジェネレータ１２は、エレクトロポレーション療法のみを実施するように構成される。いくつかの実施形態では、ジェネレータ１２は、電極１００からの信号（例えば、本明細書に記載されるＥＩＳ信号）を受信し、標的組織の特性の分析を促進するように構成された検出回路３１を含み得る。本明細書に記述したように、いくつかの実施形態では、ジェネレータ１２は、検出回路３１によって決定された標的組織の検知されたパラメーターおよび治療剤に応答して、パルス回路３３から出力されたパルスを制御し得る。検出回路３１を有するシステムの実施形態では、エレクトロポレーション療法のパラメーターの制御を、システムによって受信されるＥＩＳ信号の分析に基づいて起動または停止するように、回路を切り替えてもよい。このようにして、回路がオフに切り替わる場合、治療は、センサーによってシステムに報告されたインピーダンスのいかなる変動にかかわらず、プリセット電圧およびパルス持続時間（または所定の電圧およびパルス持続時間パターン）を維持する。
【０２４６】
システムのジェネレータの構造を参照すると、いくつかの実施形態では、低電圧ジェネレータは、デジタル基板および発電基板を含む。各基板を含む低電圧ジェネレータの詳細を図９２〜１０９に図示する。デジタル基板は、信号処理、周辺出力、およびジェネレータの安全機能を実装する中央コンピューティングシステムを提供し、発電基板はエレクトロポレーション処理中のパルス送達のための全ての電気部品を含む。
【０２４７】
デジタル基板には、マイクロコントローラー（ＭＣ）、デジタルアナログコンバータ（ＤＡＣ）、二つのアナログデジタルコンバータ（ＡＤＣ）、レジスタバンク回路、プリアンプ回路、および周辺回路が含まれている。これらの各構成要素は、デバイスの出力およびＥＩＳの信号処理に貢献する。また、ＭＣはソフトウェアベースの安全機能も計算し、危険な治療が行われるのを防ぐ。
【０２４８】
デジタル基板全体を概略する概略図が、図９２に示される。高レベル回路は全て灰色で表示される。各高レベル回路は、デジタル信号処理およびジェネレータの動作中に使用される周辺構成要素の動作のためにＭＣに接続されている。周辺構成要素は、図１０２に示されるものを含む。
【０２４９】
図９３に示す電源回路は、ＭＣおよび様々な周辺装置を含むデジタル基板構成要素に電圧を供給する。この回路は、大部分のデジタル基板に３．３Ｖを分配するが、対応する構成要素要件に応じて最大５Ｖまでステップアップする。さまざまなテストポイントとＬＥＤライトにより、基板のトラブルシューティングが可能である。
【０２５０】
図１０１に示すＭＣは、デジタル基板および発電基板の両方を制御する中央プロセッサである。デジタル基板の他の要素を参照すると、ＤＡＣはＥＩＳ信号生成を制御する。ＡＤＣには、ＡＤＣｉとＡＤＣｖが含まれる。ＡＤＣｉはレジスタバンクの電圧を測定し、ＡＤＣｖはＭＣの右側にある電極リード線の電圧を測定する。図１０１に示すＳＷリレー制御は、出力パルス送達のための各リレースイッチの正確な制御を提供する。Ｉ２Ｃバスは、Ｉ／Ｏポート、ＥＥＰＲＯＭ読み取り／書き込み、レオスタット、不揮発性メモリのレギュレーションを提供する。また、図１０１に、異なる抵抗を循環する際にＥＩＳ信号で使用される特定の周波数および電圧を分離するレジスタバンクロジックを示す。レジスタバンク回路は、ＥＩＳ信号の較正にも使用される。
【０２５１】
ＭＣは、ＥＩＳ信号処理を通じてソフトウェアベースの安全機能を実装するために使用される。電極リード線で測定された電圧および電流情報は、負荷／組織の状態を識別し、危険なパラメーターの検出時の治療の実施を防止するために使用される。
【０２５２】
図９４に示すＤＡＣ回路は、ＭＣデジタル入力によって定義される特定の周波数および電圧でのＥＩＳ  ＡＣ信号生成を可能にする。高周波差動計測アンプは、２．５ＭＨｚに設定された高次カットオフ周波数で使用され、差動出力を駆動し、スイッチングノイズを除去する。
【０２５３】
図９５に示すＡＤＣｉ回路は、電極リード線を通して受信した電流のアナログ信号を処理し、レジスタバンクの電圧を直接測定して負荷／組織特性を計算する情報を処理する外部構成要素である。電流は、電流検出抵抗の電位降下を測定することによって計算され、抵抗／ゲイン値に従って補正される。高周波差動計測アンプは、高次カットオフ周波数を２．５ＭＨｚに設定して使用される。追加の２次ローパスアンチエイリアジングフィルターが計測フィルターの出力と１４ビットＡＤＣの入力の間に使用される。差動計測アンプの出力と１４ビットＡＤＣの入力の間に、１５．９ｋＨｚのカットオフ周波数を持つ追加の２次ローパスアンチエイリアジングフィルターを使用する。
【０２５４】
図９６に示すＡＤＣｖ回路は、電極リード線を通して受信したアナログ信号を電圧のために処理し、電極負荷の電圧を直接測定して、負荷／組織特性を計算する情報を処理する外部構成要素である。電圧は、ＤＡＣ計測アンプとハイエンドの電流検出抵抗の正出力の電位降下を測定することによって計算される。高周波差動計測アンプは、高次カットオフ周波数を２．５ＭＨｚに設定して使用される。追加の２次ローパスアンチエイリアジングフィルターが計測フィルターの出力と１４ビットＡＤＣの入力の間に使用される。差動計測アンプの出力と１４ビットＡＤＣの入力の間に、１５．９ｋＨｚのカットオフ周波数を持つ追加の２次ローパスアンチエイリアジングフィルターを使用する。
【０２５５】
二つのレジスタバンク回路（図９７および図９８に示す）は、ＥＩＳ信号処理を循環させるときに使用される。光学的に絶縁されたＩ／ＯポートＰＧ０−ＰＧ１２を介してＭＣＵによって有効化される、許容誤差０．１％の１０オーム〜１０Ｍオームの１３の異なる電流検出抵抗のセットがある。抵抗は、ＤＡＣに関連付けられた計測アンプのリターンパスに接続される。抵抗は、１０．０Ω、４７．０Ω、１００Ω、４７０Ω、１．００ｋΩ、４．７０ｋΩ、１０．０ｋΩ、４７．０ｋΩ、１００ｋΩ、４７０ｋΩ、１．００ＭΩ、４．７ＭΩ、１０．０ＭΩに選択される。これらの抵抗は、それぞれＳＷ＿ＧＡＩＮ０〜ＳＷ＿ＧＡＩＮ１２を使用して設定される。並列のこれらの抵抗の組み合わせを使用して、次の表を生成する。
【表１】
2021523763.tif 000003
【０２５６】
１００ｋオームのハードセット値を有する図９９に示す内部較正抵抗は、ＥＩＳ信号を較正して、出力および入力値の大きさを決定するのに使用される基準信号を与えるために使用される。
【０２５７】
図１００に示すプリアンプ回路は、ＤＡＣから負荷およびリターンラインを通って戻るアンプ回路からのＥＩＳ信号生成の経路を概説する。リターン信号はＡＤＣを介して処理される。そのような処理を通して得られたデータ（例えば、電圧および電流応答などの信号値）は、短絡送達を防止し得る安全機能を決定するための負荷／組織分析のための回路モデル計算に使用される。負荷／組織分析は、組織特性の特定や電気出力の最適化を含む大きな利点を提供する。
【０２５８】
発電基板を参照すると、図１０３および１０４は、ブロック図および概略図でそれぞれ基板の詳細を示す。発電基板は、いくつかの異なるサブ基板間で組織的に分割することができ、各サブ基板は固有の機能を表す。例えば、発電基板は、主充電回路、絶縁壁、リレー制御回路、療法出力回路、およびクローバーおよびウォッチドッグ回路を含み得る。主充電回路は、フライバックコンバータ回路および１０ミリファラドコンデンサーを介して療法電圧を供給し得る。絶縁壁は、ＰＣＢＡのアナログ側に任意のデジタル信号をバッファする複数のソリッドステートデジタルアイソレータを含んでもよい。リレー制御回路は、低電圧パルスの送達を制御し得、いくつかの監視フィードバックループを含む。ウォッチドッグおよびクローバー回路は、ウォッチドッグタイマーおよび高電圧ラインに対しトリガーおよび無効化する機構などのいくつかの機能を含み得る。
【０２５９】
発電基板の主充電回路を図１０５に示す。回路のコアはＬＴ３７５０コンデンサー充電器コントローラー内にあり、ＤＡ２０３４フライバック変圧器、ＳＴＢ４２Ｎ６０Ｍ２パワーＭＯＳＦＥＴ、およびＭＵＲＳ１６０Ｔ３Ｇパワー整流ダイオードと組み合わせて、必須のフライバックコンバータコンデンサー充電回路（本明細書では「フライバック回路」とも呼ばれる）を形成する。ＬＴ３７５０コンデンサー充電器コントローラーは、例えば、Ｌｉｎｅａｒ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｉｎｃ．によって供給され得る。
【０２６０】
フライバックコンバータコンデンサー充電回路の動作には、エネルギー貯蔵とフライバックという二つの動作フェーズがある。エネルギー貯蔵フェーズでは、ＮＭＯＳはアクティブモードにあり、一次電流はランピングしている。変圧器にエネルギーが蓄えられている。二次電圧は負であるため、Ｄ１は逆バイアスされ、コンデンサーを絶縁する。図示した実施形態では、Ｄ１は整流ダイオードである。Ｄ１は、フライバックコンバータ回路の文脈で動作し得、ＭＯＳＦＥＴがオフのときにエネルギーがコンデンサーに伝達されるのを防止し得る。フライバックコンバータ回路の二次ループに電流が流れている場合は、変圧器にエネルギーが蓄積されていない。フライバックフェーズでは、ＮＭＯＳはカットオフモードにあり、一次電流は低下している。フライバックフェーズでは、蓄えられたエネルギーがコンデンサーを充電する。この回路には、ゲート電圧（電流制限機能）と、負荷（振幅変調）の要求を満たすために一次電流振幅を変調するＤＣＭ（非連続モード）機能を制御する追加のフィードバックループがある。ＤＣＭを実現するために、ＬＴ３７５０コントローラーはＮＭＯＳドレイン−ソース間電圧を調べてフライバックフェーズからエネルギー貯蔵フェーズに切り替える（ＮＭＯＳをオンに戻す）前のドレイン−ソース間電圧が入力電圧と等しいときを決定し、従って、一次電流がないことを保証することにより、ＮＭＯＳのエネルギー損失を最小限に抑える。
【０２６１】
また、ＡＤ５２７４ＢＲＭＺ（Ｕ１１およびＵ２）には、ＬＴ３７５０コントローラーの出力電圧検出ピン（ＲＢＧ）を設定するために設計されたデジタルレオスタットが含まれている。フライバックコンバータ充電回路には、出力コンデンサーにさまざまな電圧（０〜３００Ｖ）を印加できるレオスタットが含まれている。監視信号ＶＯＵＴ＿ＳＥＮＳＥはバッファ／コンパレータ（Ｕ７Ａ／Ｕ７Ｂ）に供給される。アナログ信号は、ＳＴＭ３２メインマイクロコントローラーに供給するためにデジタル基板にフィルターされる。
【０２６２】
本開示では、発電基板は、ヒートシンクを有する三つの４７０オーム、１００Ｗ抵抗器を有する。その効果は、電流が約１４秒（例えば、１４１０オーム＊１０ｍＦ＝１４．１秒）で急速に放電し、より速い速度で考えられるリスク要因を排除することである。発電基板には、二次電流検出用のホール効果センサーＵ２７が含まれ、クローバー過電流回路に使用することができる。また、電圧モニターＵ２３も含まれており、クローバー過電圧に使用することができる。マイクロコントローラー、５Ｖ、＋１２Ｖ、および９Ｖレールを監視するために、ウォッチドッグ回路Ｕ２２（および支持構成要素）が含まれている。
【０２６３】
この回路は、ＤＡ２０３４変圧器の包含が、ハンド半田付けおよび超音波洗浄に対する応答性を改善することが見出されたという点で有利である。さらに、変圧器（Ｔ１）の一次電流は、電流制限が７８Ｖ／Ｒ検出のＲ１４検出抵抗で５．２アンペアである。電流検出回路は、高電圧ライン上の電流を制限することにより、さらなる安全層をもたらす。電流検出回路は、デバイスの出力への高電圧コンデンサーラインを監視する。電流検出回路は、フィルター処理してＳＴＭ３２メインマイクロコントローラーに送信される検出電流に比例する電圧（ＶＩＯＵＴ）を生成する。
【０２６４】
別の利点は、図１０９に示すように、クローバー保護回路、サイリスタＱ１２（Ｑ６Ｎ３ＲＰ）に起因する。サイリスタは、＋５Ｖ電源レールとアースにわたって接続される。適切な電流／電圧感知アナログ／デジタル信号によって起動されると、サイリスタは伝導状態にラッチする。＋５Ｖ電源レールは、オームを表すＲ７６とＲ７７で２０にわたって伝導している。この増加した電流は、５００ｍＡ電流制限を有する図１０５（ＸＦ３）のヒューズＦ３を切る。この結果、＋５Ｖ電源レール全体が電源（Ｌ７８０５ＣＤ２Ｔ電圧レギュレータ（Ｕ５））から絶縁され、高電圧回路が効果的に遮断され、最も重要なこととして、リレーＲＥＬ１Ｂ（Ｇ２ＲＬ−１−Ｅ  ＤＣ５）が、高ワットの抵抗Ｒ４、Ｒ７、およびＲ１２を介して高電圧ラインを直接アースに接続する通常の状態にリセットされる。結果として、高電圧コンデンサーは素早くアースに放電され、潜在的なリスク要因が排除される。
【０２６５】
図１０６は、デジタル基板から来る３．３Ｖ信号をバッファし電力基板上の論理回路（図１０７を参照）に電力を供給するために使用される５Ｖに駆動する絶縁壁を詳述する。
【０２６６】
図１０７は、絶縁回路からのデジタル信号をバッファし駆動し制御信号をリレーするリレー制御回路を詳述する。ＮＯＲゲートＵ１８Ａ、Ｕ１８Ｂ、Ｕ１９Ａ、Ｕ１９Ｂは、パルスを可能にするために、所定の射出パターンで開閉するようにリレーを同期させる。
【０２６７】
図１０８は、リレーを通る高電圧ラインの、本開示の装置の治療出力への印加を詳述する。図の左から、ＰＵＬＳＥ＿Ｐ信号は、（図１０５のＵ１に加えて）高電圧ラインのコンデンサー電流を監視し、クローバー回路に信号（ＯＶＥＲ＿ＣＵＲＲＥＮＴ）を送ることができる、ＡＣＳ７１０ホール効果電流センサー（Ｕ２７）を通る。高電圧ラインは、高電圧ラインが治療出力に接続される前の、二つの安全対策である、リレーＳＳＲ５およびヒューズＦ１を通過する。また、Ｒ７４はパワーＭＯＳＦＥＴ  Ｑ６のフィードバックループに使用される電流検出抵抗である。Ｑ６の目的は、リニア領域で動作することにより電流出力（Ｒ７４で定義）を制限することである。このアクティブ回路は、Ｑ６の電圧を落とすことによって治療電流を設定値に制限する。Ｑ６のゲートは、ＢＵＦＦ＿ＨＶ＿ＡＰＰＬＹによって駆動されるＱ８によって有効化される。この信号により、高電圧治療パルスの印加が可能になる。Ｑ９は、パルス・イネーブル信号がＣ４０コンデンサーの放電時間より長い場合、パルス・イネーブル信号を自動的に無効にする追加の安全機能である。最後に、射出パターンを決定するリレーを見ると、ＥＩＳ信号と高電圧信号が同じ二つの電極で一致していることは注目すべき点である。リレーの同期は、高電圧信号とＥＩＳ信号が回路を通して適切に導通されることを保証する。
【０２６８】
図１０９は、発電基板のウォッチドッグ回路およびクローバー回路を詳述する。クローバー回路は、複数の信号が、高電圧ラインを効果的に「クローバー」する一連のイベントに拍車をかけるＱ１２サイリスタをトリップするのを可能にする。ＴＰＳ３８６０００電圧スーパーバイザー（Ｕ２２）を介したウォッチドッグ回路は、電源レールを監視し、ソフトウェアのハングアップを検出して、メインマイクロコントローラーにリセット信号を送信する。また、メインマイクロコントローラーはＵ２２のステータスも確認する。
【０２６９】
組み合わされて、デジタル基板は、両方のデータ収集構成要素とマイクロコントローラーユニットを統合し、二つの基板間のケーブルアセンブリーをやめることで信号品質を高める。
【０２７０】
いくつかの実施形態では、ジェネレータ１２は、電気本線から電力を受け取り、電気エネルギーをシステム１０に供給するように構成された電源２９を含み得る。いくつかの実施形態では、ジェネレータ１２は、図５１に示され、および本開示の他の場所で説明されるケーブル１３６などの有線接続を介してアプリケータに接続する。いくつかの実施形態では、ジェネレータ１２とアプリケータとの間の接続は無線接続である。いくつかの実施例では、無線接続は、信号を送受信するように構成されるそれぞれの要素と低エネルギー通信を利用し得る。低エネルギー通信技術は、Ｂｌｕｅｔｏｏｔｈ（登録商標）であり得る。いくつかの実施形態では、ジェネレータは高電圧ジェネレータであり得る。
【０２７１】
プロセッサ３０は、いくつかの異なる方法で具現化され得る。例えば、プロセッサ３０は、一つまたは複数のマイクロプロセッサまたは他の処理要素、コプロセッサ、コントローラー、または、例えば、ＡＳＩＣ（特定用途向け集積回路）、ＦＰＧＡ（フィールドプログラマーブルゲートアレイ）などの集積回路を含むさまざまな他のコンピューティングまたは処理デバイスなどのさまざまな処理手段として具体化することができる。単一のプロセッサとして図示されるが、プロセッサ３０は、システムの各デバイス内に複数のプロセッサ、または複数のデバイスのための単一または複数の集中型プロセッサを含み得ることが理解されるであろう。プロセッサは、本明細書に記述されるエレクトロポレーションシステム１０の装置のための一つまたは複数の機能を実行するように動作可能に通信してもよく、またそのように構成され得る。プロセッサは、単一のコンピューティングデバイス上に具体化されてもよく、またはコントローラー２４として機能するように集合的に構成された複数のコンピューティングデバイスに分散され得る。例えば、スマートフォン、タブレット、パーソナルコンピューターおよび／または同類のものなどのユーザーデバイスは、Ｂｌｕｅｔｏｏｔｈ（登録商標）通信などの手段によって、またはローカルエリアネットワークを介して、プロセッサとリンクした検出デバイスと通信するように構成され得る。追加的に、または代替的に、リモートサーバーデバイスは、センサーのいずれかによって収集されたデータを処理し、結果として得られるデータを他のデバイスに適宜提供または通信するなど、本明細書に記載の動作の一部を実行し得る。
【０２７２】
いくつかの実施形態では、プロセッサ３０は、メモリ３６内に格納されたまたはプロセッサにアクセスできる命令を実行するように構成され得る。従って、ハードウェアによって構成されようと、ハードウェアとソフトウェアの組み合わせによって構成されようと、プロセッサ３０は、それに応じて構成される間、本発明の実施形態による動作を実行することができるエンティティ（例えば、回路に物理的に具体化される−処理回路の形態で）を表すことができる、。従って、例えば、プロセッサ３０がＡＳＩＣ、ＦＰＧＡ等として具現化されるとき、プロセッサ３０は、本明細書に記載の動作を実施するために特別に構成されたハードウェアであり得る。あるいは、別の例として、プロセッサ３０がソフトウェア命令の実行者として具現化される場合、命令は、本明細書に記述された一つまたは複数の動作を実施するようにプロセッサ３０を具体的に構成し得る。
【０２７３】
一部の実施例では、アプリケータ１４はさらに、アプリケータに関連する情報を保存するメモリ３８を含み得る。コントローラー２４は、アプリケータのメモリ３８に問い合わせて、アプリケータおよびメモリ３８に保存されたデータに基づいてエレクトロポレーションを実行するために必要な任意のステップまたは命令を識別し得る。このように、コントローラー２４は、エレクトロポレーションを開始する前にアプリケータ１４を識別し得る。いくつかの実施形態では、メモリ３８は、ケーブルアセンブリー（例えば、図１９に示す、ケーブル７６およびコネクター７８）に配置され得る。
【０２７４】
一部の例示的な実施形態では、ジェネレータおよびアプリケータのメモリ３６、３８はそれぞれ、例えば、固定または取り外し可能のいずれかであり得る揮発性および／または不揮発性メモリなどの一つまたは複数の非一時的メモリデバイスを含み得る。この点に関して、各メモリ３６、３８は、非一時的コンピューター可読記憶媒体を含んでもよい。各メモリ３６、３８は、各デバイスの単一メモリとして図示されるが、各メモリ３６、３８は、一つまたは複数のデバイス内に複数のメモリ、または単一メモリ、または集中型メモリ、または複数のデバイス用の複数のメモリを含んでもよいことが理解されるであろう。集中型メモリは、単一のコンピューティングデバイス上に具体化されてもよく、または複数のコンピューティングデバイスに分散され得る。各メモリ３６、３８（または集中型メモリ（複数可））は、一つまたは複数の例示的な実施形態に従って、エレクトロポレーションシステム１０がさまざまな機能を実行できるように、情報、データ、アプリケーション、コンピュータープログラムコード、命令および／または同類のものを保存するように構成され得る。
【０２７５】
各メモリ３６、３８（または任意の集中型メモリなど）は、プロセッサ３０による処理のために入力データをバッファするように構成され得る。追加的に、または代替的に、こうしたメモリは、プロセッサ３０によって実行される命令を格納するように構成され得る。いくつかの実施形態では、このようなメモリは、さまざまなファイル、コンテンツ、またはデータセットを記憶し得る一つまたは複数のデータベースを含み得る。例えば、各メモリ３６、３８の内容のうち、プロセッサ３０によって実行するためにアプリケーションを保存して、それぞれのアプリケーションに関連する機能を実行し得る。さらなる例として、各メモリ３６、３８は、実施形態の例に従って、検出デバイスのセンサーによって検出されたデータ、および／またはそのようなデータを処理するためのアプリケーションコードを保存し得る。一部の事例では、各メモリ３６、３８は、プロセッサ３０、電極１００、ジェネレータ１２、薬剤送達装置１６、および／または他の装置およびセンサーのうちの一つまたは複数と通信し得る。いくつかの実施形態では、各メモリ３６、３８は、プロセッサによって実行され得る特定の外科手術処置のためのステップバイステップコマンドを記憶し得る。例えば、これには、気管支鏡検査のためにアプリケータを標的部位までナビゲートするための詳細が含まれ得る。さらなる実施例では、こうした詳細は、アプリケータを標的部位に移動させる、および／または処置を実施するロボットのためのコマンドとして使用され得る（そのような例では、集中型メモリまたはメモリが好ましく、そのようなメモリはロボット自体に含まれ得る）。このタイプの保管はまた、本開示の他の箇所に記載される他の手順についても意図される。いくつかの実施形態では、メモリ３６、３８のうちの一つまたは複数は、電気的に消去可能なプログラム可能な読み取り専用メモリ（ＥＥＰＲＯＭ）を含んでもよい。いくつかの実施形態では、アプリケータ１４メモリ３８は、ＥＥＰＲＯＭチップを含み得る。
【０２７６】
図３を参照すると、例示的なジェネレータ１２および簡易化されたアプリケータ１４が示される。ジェネレータは、標的組織を電気穿孔するための電気信号を生成し得る。ジェネレータ１２は、電気信号の特性（例えば、電圧、振幅、周波数、持続時間など）を調節して、標的組織を損傷することなく組織の可逆的エレクトロポレーションを引き起こし得る。いくつかの実施形態では、ジェネレータ１２は、使用者がジェネレータおよびエレクトロポレーションを作動させて操作することを可能にするためのフットペダル５８を含み得る。フットペダル５８は、有線接続を介して、またはＢｌｕｅｔｏｏｔｈ（登録商標）などの低エネルギー無線接続を介して、ジェネレータに接続され得る。無線接続が使用される場合、フットペダル５８およびジェネレータの各々は、フットペダル５８の状態の変化を伝える信号を送受信するためのセンサーを含み得る。ジェネレータの動作は、ロボットシステムによって支援されてもよく、または完全に制御され得る。例えば、ロボットアームは、エレクトロポレーションのための所望の電気パラメーターを達成するために、ジェネレータを制御するように構成され得る。エレクトロポレーションシステムおよび対応する電子制御方法、信号、および装置の例は、米国特許第７，４１２，２８４号および第９，０２０，６０５号ならびに国際出願第ＷＯ２０１６／１６１２０１号に記載されており、その各々は参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０２７７】
エレクトロポレーションアプリケータの例
いくつかの実施形態では、エレクトロポレーションシステム１０は、内視鏡または同類のものなどのアクセス器具と併用するために動作可能であり得る。内視鏡検査は、患者の空洞内に内視鏡を挿入し、内視鏡（例えば、図４に示す内視鏡５２）を使って、少なくとも治療の一部を局所的に施すことを含む。内視鏡は、剛性（例えば、トロカール）または可撓性であってもよく、内視鏡を用いて外科医を支援するための撮像、照射、または手術機能を含んでもよい。エレクトロポレーションシステム１０に組み込まれ得る内視鏡の一例は、米国特許第６，１８１，９６４号に記述され、参照により全体が本明細書に援用される。図４を参照すると、いくつかの実施形態では、内視鏡５２はまた、内視鏡の上端または近位端（例えば、ユーザーによって作動される制御セクション）から、内視鏡処置を実施するために、アプリケータ１４などの一つまたは複数の器具を挿入することができる内視鏡の遠位端５６に延びる作業チャネル５４を含む。場合によっては、可撓性内視鏡は、剛性内視鏡よりも狭い作業チャネルを有し得る。当技術分野で公知のように、可撓性内視鏡は通常、アクセス経路が、肺に到達するための食道アプローチなど、導管を介している手順で使用され、一方、剛性内視鏡は通常、アクセス経路が、多くの腹部手術で使用されるような、患者および特定の組織への「視線」である手順に使用される。
【０２７８】
内視鏡エレクトロポレーションは、アプリケータの遠位端で、内視鏡の作業チャネルを介して、電極（例えば、電極１００）を有するアプリケータの少なくとも一部分（例えば、図２に示されるアプリケータ６０の挿入管１５、図１９に示されるアプリケータ７０の挿入管１５、または図４７に示されるアプリケータ１１０の挿入管１５）を挿入し、内視鏡の遠位端に隣接する組織に電界を印加することを含み得る。いくつかの例では、アプリケータと内視鏡を一緒に保持するスライド可能な接続は、内視鏡がエレクトロポレーション療法の標的部位に近づく体内の位置に進められると、アプリケータが、アプリケータの遠位端が標的部位に到達するように内視鏡に対して制御可能に前進することができ、一方で内視鏡が標的部位に対して距離を置いたままであるように、制御可能であり得る。本明細書の他の箇所で考察したように、アプリケータの実施形態は、先端がアプリケータのハンドルでの、またはそのハンドルに近接したコントロールを介して標的部位に操縦され得るように、機械的に操縦可能であり得る。制御メカニズムは、直接の視覚化（例えば、内視鏡に関連付けられたカメラ）、外科的ナビゲーション、アプリケータ表面と内視鏡の内面との間の予想される摩擦に基づく手動ガイダンス、またはシステムに含まれる特定の構造に適用可能な他のパラメーターに基づいて確立することができる。内視鏡に対するアプリケータのこの制御可能な前進は、標的部位へのアクセスが直径の小さい内部血管を通る場合、特に有利である。そのような状況では、内視鏡に対するアプリケータの直径が小さいため、患者にとっての小さいリスクで、アプリケータを独立して進めることができる。この状況は、例えば、治療される腫瘍が大脳内にあり、頭蓋内血管を横断して腫瘍に到達しなければならない場合などに発生し得る。
【０２７９】
エレクトロポレーションシステム１０は、その使用および目的を満たすために望ましい任意の内視鏡アクセスアプローチで使用することができる。例えば、いくつかの実施形態では、エレクトロポレーションシステム１０は、気管支鏡検査を実施するためにオリンパスＥＢＵＳ（登録商標）気管支鏡と併用され得る。いくつかの実施形態では、柔軟な腹腔鏡用器具は、その中に配置されるアプリケータの挿入管と併用され得る。さらに、いくつかの実施形態では、アプリケータが、（例えば、図８６に示す腹腔鏡装置を使用して）患者の鍵穴開口部に直接挿入され得る。この配置では、患者の身体の鍵穴開口部は、エレクトロポレーション処置の間、作業チャネルとして動作する。従って、いくつかの実施例では、システムは、挿入デバイスによって閉鎖されていない標的部位に前進するように構成された挿入端を有するアプリケータを含み得る。いくつかの実施例では、挿入管の特性および構造は、処置におけるスタンドアロンアクセス要素としてのアプリケータの使用を収容するように修正され得る。上述の例では、システムは任意のタイプの所望の内視鏡機器とともに使用され得るが、内視鏡なしで完成している。さらに、上述のシステムの一部の実施例では、アプリケータ１４、６０、７０、１１０、１０００は、システムのアプリケータであり得る。
【０２８０】
いくつかの実施例では、エレクトロポレーションシステム１０は、内視鏡、薬剤送達チャネルまたはアプリケータ、エレクトロポレーションアプリケータ、ステアリングシステム、ビジョンシステム、および／または撮像システム（例えば、超音波）のうちの一つまたは複数の任意の組み合わせを有する、一体型の「オールインワン」システムを含み得る。前述の構成要素のそれぞれの実施形態は、本明細書の他の箇所で考察されるものを含み得る。こうした実施形態では、アプリケータ（例えば、電極および／または薬剤送達チャネルを含む）は、本明細書に開示されるアプリケータ１４、６０、７０、１１０、１０００のいずれかであり得る。いくつかの実施形態では、アプリケータが、オールインワンシステムの格納可能な部分とし得る。
【０２８１】
ここでアプリケータ自体の構造を参照すると、図２を参照すると、例示的なアプリケータ６０は、挿入管１５、アクチュエータ４２、および制御部分４８を有することが示される。挿入管１５は、挿入管が作業チャネルに挿入され、外端（例えば、患者の外側の端）で内視鏡の外側の制御部分４８から内視鏡の遠位端にある患者内の内視鏡部位に延びることができるように、内視鏡の作業チャネル（例えば、図４に示される内視鏡５２の作業チャネル５４）の内径よりも小さい直径を有し得る。挿入管１５は、内視鏡の作業チャネルよりも長くてもよい。挿入管１５はまた、それを通って延在する一つまたは複数のチャネルを含んでもよく、本明細書に記載のさまざまな構成要素が治療のために患者に延在することを可能にする。例えば、アクチュエータ４２は、制御部分４８の少なくとも一部分と移動可能に係合され得、挿入管１５を通って延在して電極と相互作用し、ユーザーがトリガー４４から力を加えて、電極を本明細書に記載の挿入管１５の遠位端に展開することを可能にし得る。図２に示される実施形態では、アクチュエータ４２は、トリガーが作動したとき、押圧要素４６が挿入管１５に沿って軸方向に移動して電極を移動するように、制御部分４８に枢動可能に取り付けられたトリガー４４と、トリガー４４を電極に接続する押圧要素４６とを含む。
【０２８２】
いくつかの実施例では、電極は、トリガー４４に力が加えられないとき、電極が格納位置にあるように付勢される。いくつかの実施例では、トリガー４４は、トリガーが解放されるときはいつでも、電極がそれらの収納状態に戻るように、電極の展開を維持するために保持されなければならない。いくつかの実施例では、アクチュエータは、トリガーを作動位置に保持するためのロックを含むように、またはトリガーに加えられる力が止まった後に電極の後退が遅延および／または制御されるように、ゆっくりした解放を含むように修正され得る。これらの原理は、物理的動作を必要とするもの、および電気的接続の制御のみによって動作する他のもの両方である、他のアクチュエータにも適用され得ることが意図される。いくつかの実施例では、制御部分４８、挿入管１５、およびアクチュエータ４２の各々は、別個の要素である。他の実施例では、制御部分、挿入管、およびアクチュエータのうちの二つ以上が互いに一体である。
【０２８３】
図１９を参照すると、挿入管１５、アクチュエータ７４、および制御部分７２を有する別の例のアプリケータ７０が示される。挿入管１５は、挿入管が内視鏡の作業チャネルに挿入され、外端（例えば、患者の外側の端）で内視鏡の外側の制御部分７２から内視鏡の遠位端にある患者内の内視鏡部位に延びることができるように、内視鏡の作業チャネル（例えば、図４に示される内視鏡５２の作業チャネル５４）の内径よりも小さい直径を有し得る。挿入管１５は、内視鏡の作業チャネルよりも長くてもよい。さらに、挿入管１５の少なくとも一部分は、例えば、鼻または口から肺への曲がりくねった経路を通ってすでに配置された可撓性内視鏡を通過することを可能にするために、可撓性であり得るか、または剛性カニューレを通過するのに、またはさらに、いかなる種類のアクセス器具を必要とせずに患者の体内に通過するのに、またはもちろん、剛性内視鏡と併用するのにより適しているように、剛性であり得る。挿入管１５およびアクセス器具のこれらの構成は、当然ながら、柔軟な挿入管１５を有する構成が、剛性内視鏡などの剛性カニューレとともに使用され得るため、例にすぎない。挿入管１５はまた、それを通って延在する一つまたは複数のチャネルを含んでもよく、本明細書に記載のさまざまな構成要素が治療のために患者に延在することを可能にする。例えば、アクチュエータ７４は、制御部分７２の少なくとも一部分と移動可能に係合することができ、挿入管１５を通って延在して、ユーザーが、（例えば、スイッチ８０を介して）制御部分７２から手動の力を加え、本明細書に記載されるように、挿入管１５の遠位端に電極を配置することを可能にすることができる。制御部分７２は、本体９０と、挿入管１５および／またはその中にケーブル７６を支持し得る少なくとも一つのエンドキャップ８８とを含み得る。図１９、図２７、および図３４に示す実施形態では、アクチュエータ７４は、制御部分７２にスライド式に取り付けられ、コネクター８４を介して中空マンドレル８６と係合するサムスイッチ８０を含む。図３６を参照すると、マンドレル８６は、アクチュエータ７４がユーザースライドスイッチ８０によって制御部分７２上で前方にスライドされるとき、スイッチ８０が、中空マンドレル８６を軸方向前方に押し、押圧要素９２を軸方向前方に駆動して、（例えば、直接または電極キャリア２０６、６０２、８０２またはバルーン３０２などの他の中間構成要素を駆動することにより）電極１００を挿入管１５から延ばすように、（例えば、圧着することによって）押圧要素９２に取り付けられ得る。電極展開のためのこのような手動作動機構は、図示したサムスイッチ８０以外の任意の構造であってもよく、例えば、スイッチ８０はサムホイール、押しボタン、トリガー機構、または同類のものであり得る。
【０２８４】
図４７を参照すると、挿入管１５、アクチュエータ１１２、および制御部分１１４を有する、さらに別の例のアプリケータ１１０が示される。いくつかの例では、挿入管１５は、挿入管が作業チャネルに挿入され、制御部分１１４から、外端（例えば、患者の外側の端）の内視鏡の外側の位置まで、内視鏡の遠位端にある患者内の内視鏡部位まで、延びることができるように、内視鏡などのカニューレを挿入されたアクセス器具の作業チャネル（例えば、図４に示される内視鏡５２の作業チャネル５４）の内径よりも小さい直径を有し得る。挿入管１５は、内視鏡の作業チャネルよりも長くてもよい。挿入管１５はまた、それを通って延在する一つまたは複数のチャネルを含んでもよく、本明細書に記載のさまざまな構成要素が治療のために患者に延在することを可能にする。例えば、アクチュエータ１１２は、制御部分１１４の少なくとも一部分と移動可能に係合することができ、アクチュエータの一部分は、挿入管１５内に延在して、ユーザーがスイッチ１１６から力を加えて、電極を本明細書に記載の挿入管１５の遠位端１１８に展開することを可能にすることができる。制御部分１１４は、本体１２０と、中に挿入管１５を支持し得る少なくとも一つのエンドキャップ１２２とを含み得る。図４７、図５１、図５２、および図５７に示す実施形態では、アクチュエータ１１２は、制御部分１１４にスライド式に取り付けられ、コネクター１２６（例えば、ルアーロック）を介してアクチュエータの中空マンドレル１２４と係合するサムスイッチ１１６を含む。マンドレル１２４は、アクチュエータ１１２がユーザースライドスイッチ１１６によって制御部分１１４上で前方にスライドされるとき、スイッチ１１６が、中空マンドレル１２４を軸方向前方に押し、押圧要素１２８を軸方向前方に駆動して、（例えば、直接または電極キャリア２０６、６０２、８０２またはバルーン３０２などの他の中間構成要素を駆動することにより）電極１００を挿入管１５から延ばすように、（例えば、図３６の実施形態に示されるように圧着することによって）押圧要素１２８に取り付けられ得る。このようにして、スイッチ１１６、マンドレル１２４、および押圧要素１２８を含むアクチュエータ１１２は、挿入管１５内に少なくとも部分的に延在して電極（例えば、電極１００）を駆動し得る。
【０２８５】
アプリケータ１４、１１０は、本開示の他の場所でより詳細に説明される、アクチュエータ４２、７４構造、第二のアクチュエータ９４（図３５）、二次ボタン８２、および／または、個々の機能が各実施形態に関して記述されるかのように、およびそのような機能が、そのような組み合わされた実施形態におけるそれらの意図された目的に従って動作し得るように、本明細書に記載のアプリケータ１４、６０、７０、１０００からの他の機能のいずれかをさらに含み得る。同様に、いくつかの実施形態では、任意の一つのアプリケータ１４、６０、７０、１１０、１０００の機能は、他のアプリケータのうちの一つに含まれてもよい。
【０２８６】
図４９、５０、および５６を参照すると、アプリケータ１１０は、挿入管１５の遠位端１１８で貫通先端１３０を画定することができる。貫通先端１３０は、尖った端部１３２と、それを通して電極（例えば、電極１００）および／または薬剤送達チャネル１８が通過し得る中空コアとを有する、一般に針形状の突起部を画定し得る。貫通先端１３０は、電極（例えば、電極１００）および／または治療剤を配置する前に、標的部位に到達するように身体組織を穿刺するように構成され得る。例えば、貫通先端１３０は、膵臓または肝臓などの近くの臓器に到達するために患者の胃ライナーを貫通するために使用され得る。いくつかの実施形態では、遠位端１１８は、図５および６に示されるように、本明細書に考察される他の実施形態による平坦な非貫通先端を含んでもよい。
【０２８７】
図５３、５８、５９を参照すると、いくつかの実施形態では、押圧要素１２８は、電極用の配線の一部分を含み得る。ジェネレータ（例えば、図１に示すジェネレータ１２）は、図５１および５７に示すように、ケーブル開口部１３４を介して制御部分１１４の本体１２０に入るケーブルを介して、電気インパルスを供給し得る。図５１を参照すると、ケーブル１３６は、ケーブル開口部１３４を通過し、マンドレルまたはその中の一つまたは複数のワイヤ（例えば、図３６に示すワイヤ１７）に接続され得る。ワイヤは、図５３に示すように、電気インパルスをケーブル１３６から押圧要素１２８に、および押圧要素１２８から電極５００に伝達し得る。
【０２８８】
図５９に図示した実施形態を参照すると、押圧要素１２８は、二つのそれぞれの電極（例えば、本明細書で考察した電極１００）に向けられたインパルスを運ぶ、二つのコイル状および電気的に絶縁されたワイヤ１３８、１４０を含んでもよい。コイル状ワイヤ１３８、１４０は、例えば、絶縁ケーシング（例えば、ポリエチレン、ＰＶＣ、ゴム様ポリマーなどから作製される）で絶縁されてもよく、それを通る導電性コアを有し得る。コイル状ワイヤ１３８、１４０は、電極のそれぞれの対向する信号（例えば、正および負の電気接点）がショートしないように絶縁され得る。押圧要素１２８およびマンドレル１２４は、薬剤送達チャネル（例えば、薬剤送達チャネル１８）または追加の治療関連装置が通過し得る中央空洞１４２を画定し得る。アプリケータの制御部分１１４に最も近いコイル状ワイヤ１３８、１４０の端部は、対応する電気ワイヤ（例えば、ケーブル１３６のワイヤ）に電気的に接続し得る。ケーブル１３６のこれらの対応する電気ワイヤは、コイル状ワイヤ１３８、１４０から、マンドレル１２４に沿って（例えば、マンドレルの外に浮かぶように）、ケーブル開口部１３４を介してアプリケータから外に走ってもよい。
【０２８９】
図１、５１〜５３および５６〜５８を参照すると、アプリケータ１１０は、薬剤送達装置１６（図１に示す）から患者の標的部位（例えば、腫瘍または病変）に流体を向けるように構成された薬剤送達チャネル１８を含み得る。薬剤送達装置１６（図１に示す）は、（例えば、ねじ山付き接続１４６を介して）アプリケータ１１０のシュラウド１４４に連結されてもよく、このシュラウド１４４は薬剤送達チャネル１８の第二の遠位端１４８と係合し得る。システムの代替構成では、治療剤は、第二の遠位端１４８を介して薬剤送達チャネル１８に直接供給され得る。薬剤送達チャネル１８は、シュラウド１４４での第二の遠位端１４８から、それを通して一つまたは複数の治療剤が送達され得る第一の遠位端１６４まで延在し得る。薬剤送達チャネル１８は、コネクター１２６でのアクチュエータ１１２、マンドレル１２４、および／または押圧要素１２８に連結されてもよく、薬剤送達チャネル１８は、挿入管１５に対してアクチュエータ１１２とともに軸方向に移動し得る。いくつかの実施形態では、薬剤送達チャネル１８は、押圧要素１２８に接合され得る。いくつかの実施形態では、例えば、図５１〜５３および５６〜５８に示すように、シュラウド１４４は、薬剤送達チャネル１８に取り付けられ、それとともに移動し得る。いくつかの実施形態では、薬剤送達チャネル１８は、マンドレルおよび押圧要素１２８の中央空洞１４２内に配置され得る。薬剤送達チャネル１８は、図５２〜５３に示されるように、一つまたは複数の治療剤がそれを通してシュラウド１４４から治療部位に送達され得る、第一の遠位端１６４から第二の遠位端１４８まで延在する送達チャネル１６６を含み得る。薬剤送達チャネル１８の第一の遠位端１６４は、標的部位で組織を貫通するように先が尖っているか、または代わりに標的部位での組織への非外傷性送達のための鈍端を持ち得る。薬剤送達管１８は、管が制御部分１１４から標的組織へと望ましい任意の方向に下方に延在し得るように、可撓性であり得る。
【０２９０】
いくつかの実施形態では、薬剤送達チャネルは、非円形の断面形状を持ち得る。例えば、形状は、多角形、長方形、楕円形、楕円形などであり得る。いくつかの実施形態では、送達チャネル１８は、挿入管１５を通る経路の周辺上に位置付けられ得る。いくつかの実施例では、送達チャネル１８は、電極の経路の外側に位置付けられ得る。いくつかの実施例では、送達チャネル１８は、挿入管１８の内壁に当接する。いくつかの実施例では、送達チャネル１８は、挿入管１８の内壁で形成され、方法の実行中に薬剤送達のために挿入管から外に前進するためにそれを通過するさらなるチューブを含む。いくつかの実施形態では、薬剤送達チャネル１８は、ハイポチューブであり得る。
【０２９１】
いくつかの実施形態では、薬剤送達チャネル１８は、非導電性材料で作製され得る。いくつかの実施形態では、薬剤送達チャネル１８は、セラミック材料で作製され得る。いくつかの態様において、薬剤送達チャネル１８は、ステンレス鋼で作製され得る。導電性の実施形態（例えば、ステンレス鋼）では、電極に隣接する薬剤送達チャネル１８の遠位端は、非導電性材料（例えば、非導電性セラミック）で被覆され得る。いくつかの実施形態では、薬剤送達チャネル１８はプラスチックで作製され得る。いくつかの実施例では、薬剤送達チャネルは、約０．０２５インチの直径を定義し得る。薬剤送達チャネル１８は、治療剤を送達するためにアプリケータ内に保護された構造を提供するという点で有利である。従って、エレクトロポレーション用の電極および治療剤は全て、一つの構造内で安全に運ばれ、外科手術処置を簡略化することができる。
【０２９２】
図５３、５６、および５８を参照すると、電極５００（例えば、本明細書で考察した電極１００のいずれか）および薬剤送達チャネル１８は、アクチュエータ１１２によって同時に作動され得る。いくつかの実施形態では、電極５００（例えば、本明細書に考察される電極１００、２００、３００、４００、６００、７００、８００のいずれか）および薬剤送達チャネル１８は、単一のユニットとして移動し得る。いくつかの実施例では、電極および薬剤送達チャネルは、単一のユニットとして移動し、電極は薬剤送達チャネル１８に対して固定される。他の例では、薬剤送達チャネルは、電極とは独立して移動可能であり得、アプリケータが、薬剤送達チャネルおよび電極のそれぞれについて、ユーザーにアクセス可能であるか、そうでなければ制御可能である別個の作動機構を含み得る（および同様に、電極は、集合的かつ同時に作動するか、または別個の作動動作によって個別に作動させることができる）。このように、アプリケータが、使用者が両方を同時にまたは連続的に作動させることを決定できるように、薬剤送達チャネルの展開が電極の展開から独立して発生し得るように構成され得る。平坦な平面状の標的部位を仮定すると、電極が薬剤送達チャネル１８の前に標的部位を貫通するように、薬剤送達チャネル１８の第一の遠位端１６４は電極の先端５０１からオフセットされ得る。他の実施例では、薬剤送達チャネル１８の第一の遠位端１６４は、電極５００の先端５０１に近接し得る。いくつかの実施形態では、薬剤送達チャネル１８の第一の遠位端１６４は、エンドキャップ５１０の外向きの面のすぐ内側に位置付けられ、電極５００が展開されるとき、静止したままである。
【０２９３】
代替的実施形態では、薬剤送達チャネルは、電極が治療剤の流路を提供するためにカニューレ状になるように、電極の一つと一体化し得る。こうした代替構成では、電極は、最初に標的組織内に位置付けられ、次いで、治療剤は、電極を通してカニューレ状経路を介して組織に送達される。
【０２９４】
図６１を参照すると、挿入管１５の遠位端１１８は、作動中に薬剤送達チャネル１８を整列させ位置付けるための各例において、アライメントチャネル１６８および／またはアライメント開口部５１２を含むエンドキャップ５１０を含み得る。図５３に示すように、アライメントチャネル１６８は、その移動の全範囲にわたって薬剤送達チャネル１８と係合して、位置ずれを防止し得る。同様に、アライメントチャネル１６８は、挿入管１５の一部のみを表す長さを有してもよく、または長さのかなり大部分にわたって延在し得る。いくつかの実施形態では、アライメントチャネル１６８および／またはエンドキャップ５１０は、治療剤または体液がアプリケータ１１０に入るのを防ぐために、挿入管１５の端部を密封し得る。
【０２９５】
図８６を参照すると、操縦可能な挿入管１０１５を有する別の例のアプリケータ１０００が示される。アプリケータ１０００は、特にアプリケータが可撓性本体を有する場合、アプリケータの追加的な制御を提供する操縦機構を含む。例えば、アプリケータ１０００は、ユーザーが遠位端１０１８、電極５００および送達チャネル１８を患者内の標的部位に操縦することを可能にするために、挿入管１０１５の制御部分１０１４から遠位端１０１８まで延在する一つまたは複数のケーブルを含み得る。挿入管１０１５は、操縦中にアプリケータの所望の部分のみが曲がることを可能にするために、可撓性部分１００５および剛性部分１０１０を含み得る（例えば、ケーブルは、一つまたは複数のケーブルに力を加えると、可撓性部分１００５がケーブルの方向に曲がるように、挿入管の軸方向中心からオフセットされ得る）。ケーブルは、制御部分１０１４で、または制御部分１０１４の近くで、および剛性部分１０１０と第一の遠位端１０１８との間にアプリケータに取り付けられて、制御部分からのケーブルに力が加えられると、可撓性部分１００５を曲げることができる。
【０２９６】
アプリケータ１０００は、電極５００、送達チャネル１８、制御部分１０１４、およびアクチュエータ１０１２を含み得るが、アプリケータ１４、６０、７０、１１０のそれらのような、本明細書に記載の電極、制御部分、アクチュエータ、および送達チャネルのいずれかの機能、構造、および動作を含み得、およびジェネレータおよび薬剤送達装置を含む、本明細書に開示されるエレクトロポレーションシステムの他の構成要素と協力し得る。挿入管１０１５および操縦可能な構成要素は、まるで個々の機能が各実施形態に関して説明されたかのように、本明細書で論じられる他の任意の実施形態の挿入管１５の代わりになり得、そしてそのような機能は、そのような組み合わされた実施形態におけるそれらの意図された目的に従って動作し得る。挿入管１０１５は、操縦可能な構成要素の追加とともに、本明細書に記載の挿入管１５の寸法または構成のいずれかを含み得る。
【０２９７】
いくつかの実施形態では、アプリケータ１０００は、操縦可能な腹腔鏡用アプリケータであり得る。本明細書に記載されるように、操縦可能な腹腔鏡用アプリケータが、内視鏡用アプリケータの代わりに使用され得る。例えば、いくつかの実施形態では、アプリケータ１０００は、トロカールを介して内部解剖学的構造にアクセスすることができる。挿入管１０１５の剛性部分１０１０は、容易に操作できるようにしてもよく、可撓性部分１００５は、ケーブルを介した操縦を可能にする。アプリケータ１０００は、各方向に剛性部分１０１０に対してアプリケータの先端の動きを１２０度以下まで上下にトリガーする回転可能なノブを有し得る。いくつかの実施形態では、操縦可能な先端は、二つ以上の方向（例えば、上下に）９０度以上移動し得る。
【０２９８】
いくつかの実施形態では、本明細書に考察されるように、内視鏡は、トロカール、可撓性カニューレ、または患者への挿入のための他の挿入器具であり得る。いくつかの実施形態では、アプリケータ１４は、別個の挿入デバイスなしで患者に挿入され得る操縦可能な装置（例えば、図８６に示す腹腔鏡用アプリケータ１０００）であり得る。いくつかの実施形態では、アプリケータが、その遠位端でＸ線不透過性であり得る。
【０２９９】
さまざまな内視鏡検査に使用される内視鏡の作業チャネル（例えば、図４に示される内視鏡５２の作業チャネル５４）は、エレクトロポレーションシステム１０の一つまたは複数の部分が内視鏡部位（例えば、図４に示される内視鏡５２の隣接する遠位端５６）に到達するために挿入され得る限られた直径を有し得る。システムの一部として内視鏡を含む実施形態では、内視鏡内に延在するエレクトロポレーションシステム１０の部分は、内視鏡の作業チャネル内に適合しなければならない。例えば、気管支鏡検査などのいくつかの例において、内視鏡の作業チャネルは、直径が２．２ｍｍ以下であってもよく、内視鏡に入るエレクトロポレーションシステム１０の部分（例えば、挿入管１５）は、直径が２．０ｍｍ以下であり得る。いくつかの実施形態では、内視鏡の作業チャネルは、直径が４ｍｍ以下であり得る。いくつかの実施形態では、挿入管１５は、内視鏡の作業チャネルの任意の曲線または屈曲に従うように可撓性である。
【０３００】
いくつかの実施形態では、アプリケータ１４は、挿入管１５の遠位端（例えば、制御部分４８、７２、１１４の反対側の端部）に少なくとも二つの電極１００を含み得、一つまたは複数のワイヤまたは他の導電性材料がジェネレータ１２（図１に示される）から挿入管１５を介して電極１００まで延びる。いくつかの実施形態では（例えば、図４７〜６７に関して以下に記載されるように）、アプリケータ１４は、挿入管１５を通って、薬剤送達装置１６（図１に示す）から、薬剤挿入管１５の遠位端まで延在する薬剤送達チャネル１８などの他の構成要素も含み得る。そのような実施形態では、電極１００および薬剤送達チャネル１８の配線は、アプリケータ１４の制御部分（例えば、図２に示される制御部分４８、図１９に示される制御部分７２または、図４７に示される制御部分１１４）から遠位端まで挿入管１５を下って互いに平行に走ることができる。一部の実施例では、アプリケータ６０、７０、１１０、１０００は、前述の機能を含み得る。
【０３０１】
いくつかの実施形態では、アプリケータ１４は、挿入管１５を通って遠位端まで延在する少なくとも二つの電極１００を含んでもよく、別個の薬剤送達アプリケータ１９は、プラスミド、薬剤、および／または他の治療剤をエレクトロポレーション部位に送達し得る。薬剤送達アプリケータ１９は、一つまたは複数の治療剤をエレクトロポレーションを用いて、または異なるチャネルまたはベクターを通して同時に、連続的に投与し得る。一部の実施例では、アプリケータ６０、７０、１１０、１０００は、前述の機能を含み得る。
【０３０２】
例えば、内視鏡を備えたシステムでは、内視鏡が患者内の所定の位置に配置されると、薬剤送達アプリケータ１９の遠位端が、内視鏡の遠位端でのまたはその近くの標的エレクトロポレーション部位（例えば、腫瘍または他の内臓病変）に到達するまで、薬剤送達アプリケータ１９を最初に内視鏡に挿入することができ、その後、治療剤を投与することができる。次いで、薬剤送達アプリケータ１９は、エレクトロポレーションのために内視鏡内でアプリケータ１４によって除去および交換されてもよく、標的エレクトロポレーション部位は、細胞内への治療剤の浸透を促進するために電気穿孔され得る。
【０３０３】
いくつかの実施形態では、一つまたは複数の治療剤は、内視鏡または薬剤送達アプリケータ１９を介して治療剤を投与する代わりに、またはそれに加えて、他の手段を介して投与され得る。例えば、一つまたは複数の治療剤は、エレクトロポレーションの前、間、または後に筋肉内（ＩＭ）、髄腔内（ＩＴ）、または静脈内（ＩＶ）注射によって投与され得る。
【０３０４】
図４４〜４６を参照すると、ケーブル７６および対応するコネクター７８は、アプリケータ１４、６０、７０、１１０、１０００をジェネレータ１２に接続するために示される。
【０３０５】
いくつかの実施形態では、アプリケータが、作動時に物理的に静止したままのアクチュエータを含み得る。例えば、アクチュエータは、挿入管内の電極の展開を制御するように動作可能なタッチスクリーンディスプレイ上のボタンであり得る。タッチスクリーンは、スクリーンとの接触を検出し、それによって、アプリケータ内の制御要素にリンクされた回路が制御要素を回路の開閉に応答して軸方向に移動させるかどうかを制御するセンサー（例えば、圧力、静電容量式タッチ、および／またはジェスチャセンサー）を含み得る。要素は、制御要素の軸方向移動が電極の軸方向移動とともに起こるように、電極と物理的に関連付けられてもよい。いくつかの実施例では、回路は、回路の開閉に応答して電極を直接移動させるように構成され得る。いくつかの実施例では、アプリケータの作動は、無線接続を介してアプリケータに連結された遠隔装置上で発生し得る。この配置では、電極の動きを制御するために、アクチュエータからの信号がアプリケータで受信される。いくつかの実施例では、電極に対して軸方向に固定された薬剤送達チャネルは、この電子作動手段を介して同時に制御され得る。他の実施例では、第二の電気制御（例えば、タッチスクリーン）は、電極とは別個に薬剤送達チャネルの展開を制御するために含まれてもよい。
【０３０６】
電極展開
エレクトロポレーション中、電極（例えば、電極１００）間の距離が、治療領域のサイズおよびエレクトロポレーションに必要な電気信号の必要な振幅、周波数、および／または波長に影響を及ぼし得る。内視鏡またはアプリケータの挿入管内の作業チャネルのサイズは、電極が作業チャネル内に収まらなければならないため、電極間の間隔を制限することができる。従って、エレクトロポレーション治療領域のサイズは、内視鏡治療中に、非内視鏡的方法および装置または非低侵襲的手順では必要とされない方法で制限され得る。
【０３０７】
本開示のいくつかの実施形態では、アプリケータ１４および電極１００は、電極が内視鏡の遠位端を通過できる場合、電極が作業チャネルよりも広い間隔に展開できるように構成され得る。いくつかの実施形態では、電極１００は、患者のアクセスポイントで開口部（例えば、鍵穴開口部）よりも広く拡張し得る。いくつかの実施形態では、電極１００は、挿入管１５の遠位端よりも広く拡張し得る。いくつかの実施形態では、電極１００は、挿入管１５内の一つまたは複数のチャネル（例えば、チャネル２０４、４０４など）よりも広く拡張し得る。いくつかの実施形態では、電極は、挿入管１５の遠位端とほぼ等しい、または一つまたは複数のチャネルの幅とほぼ等しい間隔まで拡張し得る。いくつかの実施形態では、電極は、挿入管１５の遠位端よりも小さい間隔まで膨張し得る。いくつかの実施形態では、アクチュエータ４２、７４、１１２は、アプリケータ１４の挿入管１５を通って、またはその上に延在してもよく、電極１００に軸方向の力（例えば、挿入管１５の長手方向軸に沿って構成要素を有する力）を印加するように構成され得る。この軸方向の力は、電極を、アプリケータ１４の挿入管１５の遠位端から軸方向および／または半径方向外側に延ばして、エレクトロポレーション部位で標的組織を電気穿孔させ得る。いくつかの実施例では、電極の拡張の様式は、挿入管の断面サイズおよび格納位置のチューブ内の電極位置を考慮して利用可能な空間の関数であり得る。一つの特定の例では、格納位置で電極が非常に接近しているアプリケータが、電極先端が展開時にアプリケータの安全で効果的な操作に必要な間隔に達するように（例えば、電極間の電気アークの可能性を最小限に抑える）、そのような電極の半径方向に拡張する展開を含み得る。
【０３０８】
いくつかの実施形態では、挿入管１５は、約２ｍｍの直径を画定し得る。格納位置では、挿入管１５内に保存され、電極１００の先端は、約１．８ｍｍ離間し得る。展開位置では、電極１００の先端は、約３ｍｍ離間し得る。いくつかの実施形態では、展開位置において、電極１００の先端は、挿入管の遠位端の外径よりも大きく離間され得る。いくつかの実施形態では、展開位置において、電極１００の先端は、挿入デバイス（例えば、内視鏡）の遠位端の外径よりも離間し得る。いくつかの実施形態では、展開位置において、電極１００の先端は、２ｍｍよりも大きく離間し得る。いくつかの実施形態では、展開位置において、電極１００の先端は、３ｍｍよりも大きく離間し得る。いくつかの実施形態では、展開位置において、電極１００の先端は、２ｍｍ〜３ｍｍ離間し得る。いくつかの実施形態では、展開位置において、電極１００の先端は、約４ｍｍ離間し得る。いくつかの実施形態では、展開位置において、電極１００の先端は、４ｍｍよりも大きく離間し得る。いくつかの実施形態では、展開位置において、電極１００の先端は、４ｍｍ未満離間し得る。いくつかの実施形態では、展開位置において、電極１００の先端は、５ｍｍよりも大きく離間し得る。いくつかの実施形態では、展開位置において、電極１００の先端は、３ｍｍ〜５ｍｍ離間し得る。いくつかの実施形態では、展開位置において、電極１００の先端は、２ｍｍ〜５ｍｍ離間し得る。いくつかの実施形態では、展開位置において、電極１００の先端は、約５ｍｍ離間し得る。いくつかの実施形態では、展開位置において、電極１００の先端は、５ｍｍ未満離間し得る。一つの特定の実施例では、電極間隔は、低電圧ジェネレータのエレクトロポレーションと併せて記載されるアプリケータに対して約５ｍｍ以下であることが好ましい。上記の構成のいずれかでは、低電圧または高電圧のエレクトロポレーションのいずれかを実施し得る。
【０３０９】
いくつかの実施形態では、電極１００は、ステンレス鋼で作製され、金でコーティングされ得る。いくつかの実施形態では、電極１００は、実質的に可撓性であってもよく、刺鍼法針と類似の構造を有する。電極１００は、いくつかの実施形態では、直径０．２５ｍｍであり得る。電極１００は、一部の実施形態では、約６ｍｍの長さで延在し得る。いくつかの実施形態では、電極の直径および長さは、本明細書に記載の特定の寸法から変化し得る。いくつかの実施形態では、アクチュエータ４２、７４、１１２および本体９０、１２０およびエンドキャップ８８、１２２などのアプリケータ１４、６０、７０、１１０、１０００の残りの非金属構成要素は、プラスチック材料（例えば、高密度ポリエチレン、編組ポリウレタン（ＦＥＰ、ＰＥＥＫなど）など）で作製され得る。
【０３１０】
図２、図１９、図４７、および図８６を参照すると、上述したように、アプリケータ１４、６０、７０、１１０、１０００は、挿入管１５、１０１５、制御部分４８、７２、１１４、１０１４、およびアクチュエータ４２、７４、１１２、１０１２を含み得る。アクチュエータ４２、７４、１１２、１０１２は、トリガー４４、スイッチ８０、１１６またはその他の作動要素、および一部の実施形態においては剛性であり、一部の実施形態においては可撓性内視鏡とともに曲がるのに十分な柔軟性を有する押圧要素４６、９２、１２８を含み得る。例えば、一部の喉頭用途では、挿入管１５およびアクチュエータ４２、７４、１１２は剛性であり得る。図２を参照すると、トリガー４４は、トリガーを引くことにより、押圧要素４６がアプリケータ６０の挿入管１５に沿って、挿入管１５の遠位端の内視鏡部位に向かって押し出され、およびトリガー４４を伸ばす（例えば、トリガーを図２に示される位置に戻す）ことにより、押圧要素４６を制御部分４８に向かって後退させるように、制御部分４８および押圧要素４６に枢動可能に取り付けられ得る。図１９を参照すると、スイッチ８０は、スイッチをスライドさせることにより、押圧要素９２がアプリケータ７０の挿入管１５に沿って、挿入管１５の遠位端の内視鏡部位に向かって押し出され、およびスイッチ８０を後退させる（例えば、スイッチをユーザーの方に戻す）ことにより、押圧要素９２を制御部分７２に向かって後退させるように、中空マンドレル８６を介して制御部分７２および押圧要素９２にスライド式に取り付けられ得る。図４７を参照すると、スイッチ１１６は、スイッチをスライドさせることにより、押圧要素１２８がアプリケータ１１０の挿入管１５に沿って、挿入管１５の遠位端の内視鏡部位に向かって押し出され、およびスイッチ１１６を後退させる（例えば、スイッチをユーザーの方に戻す）ことにより、押圧要素１２８を制御部分１１４に向かって後退させるように、制御部分１２６および中空マンドレル１２４にスライド式に取り付けられ得る。
【０３１１】
図５〜４１および６０〜６６を参照すると、アプリケータ１４の挿入管１５の遠位端アセンブリーのいくつかの実施形態が示される。各実施形態において、電極は、軸方向および半径方向外向きに駆動されて、電極の端部間のより大きな間隔を作り出すことができる。いくつかの実施形態では、展開位置に移動すると、電極の端部は、アクチュエータ１４の挿入管１５の外径よりも離れて配置される。いくつかの実施形態では、展開位置に移動すると、電極の端部は、作業チャネル（例えば、図４にしめす内視鏡５２の作業チャネル５４）の内径よりも離れて配置される。各実施形態において、電極は、外側方向（例えば、展開する）および内側方向（例えば、格納する）の両方において、押圧要素を介してアクチュエータによって直接的または間接的に作動され得る。
【０３１２】
図５、６、２０〜２１、６２、６３を参照すると、本明細書に記載のいくつかの実施形態による、一対の電極２００が、格納位置（図５、２１、６３）および展開位置（図６、２０、６２）を有することが示される。電極２００はそれぞれ、挿入管１５の反対側のその遠位端に先端２０１を含み得る。電極２００の先端２０１は、エレクトロポレーションのために標的組織を貫通するように構成された尖った端部を画定し得る。図示した実施形態では、アプリケータ１４、１１０は、中に画定される少なくとも二つの角度付きチャネル２０４を有する挿入管１５の遠位端に、エンドキャップ２０２、２１０を含む。図示した実施形態の二つの角度付きチャネル２０４は、電極の端部間の間隔が増加するように、展開位置（図６、図２０、図６２）で電極を外側に角度付けするように構成される。図６２および６３の実施形態は、電極２００が角度付きチャネル２０４を介して延びてもよく、またその中に薬剤送達チャネル１８を支持するアライメント開口部２１２およびアライメントチャネル１６８も図示する、挿入管１５およびエンドキャップ２１０の別の実施形態を図示する。図６２〜６３の実施形態は、それを通って延びる薬剤送達チャネル１８を有する挿入管１５を有する図５、６、２０〜２１の実施形態を図示する。薬剤送達チャネル１８および電極２００は、本明細書の実施形態のいずれかに従って操作および構成され得る。
【０３１３】
図５および６３を参照すると、角度付きチャネル２０４は、長手方向軸５０に対してそれぞれの角度α、βで配向される。いくつかの実施形態では、角度α、βは、電極２００が展開位置の軸５０に対して実質的に鏡面角度で配向されるように、等しくてもよい。いくつかの実施形態では、角度α、βは、わずかに異なっていてもよいが、軸５０に対して異なる方向に延在する。いくつかの実施形態では、角度α、βは、押圧要素４６が電極２００に直接または間接的に軸方向の力をエンドキャップ２０２、２１０に向けて加えるとき、電極がエンドキャップ２０２から図６および６２に示される展開位置に外向きに延びるとき、チャネル２０４の角度が、電極を旋回させて、チャネル２０４の方向に電極を角度付けするように、それぞれ鋭角である。同様に、押圧要素４６、１２８が上記のように制御部分４８、１１４に向かって後退するとき、電極２００は、アプリケータ１４、１１０のエンドキャップ２０２、２１０、および挿入管１５の内部空洞に引き戻され得、電極が挿入管１５内で再配向することを可能にする。従って、格納位置（図５、２１、６３）では、電極２００は互いに実質的に平行であり、展開位置では、電極２００の少なくとも一部分は、アクチュエータが電極を角度付きチャネルに押し込んだ結果として、角度付きチャネル２０４によって画定されるように互いに、ある角度（例えば、α＋β）にある。
【０３１４】
本明細書に記述した実施形態のいずれかでは、電極（例えば、針）は、格納位置と展開位置との間で移動するときに電極が曲がるのを可能にするのに十分な柔軟性のある材料で作製され得る。いくつかの実施形態では、電極１００は、ステンレス鋼で作製され、金でコーティングされ得る。例えば、いくつかの実施形態では、電極は、刺鍼法針と実質的に同一であり得る。図２１を参照すると、キャリア２０６は、電極がキャリア（例えば、５ｍｍ）から所定の距離だけ突出するように、電極２００を固定的に保持し得る。こうした実施形態では、電極２００は、電極の遠位端が角度付きチャネルの方向に配向され、一方で電極の基部（遠位端の反対側）が平行であるように、角度付きチャネル２０４に沿ってエンドキャップ２０２、２１０を通過するときに曲げられ得る。電極キャリアを含む本明細書の実施形態のいずれかでは、キャリアは、その中の電極の配置のための通路および薬剤送達チャネルの配置のためのさらなる通路を含み得る。
【０３１５】
図２０〜２１に示す実施形態では、キャリア２０６は、押圧要素９２（図３３、３６に示す）によって格納位置と展開位置との間で作動され、押圧要素は、遠位端の反対側のキャリアの近接する後面に当接し得る。電極２００に電気信号を供給する電線１７は、キャリア２０６内のチャネル２０８を通過して、ジェネレータを電極に接続し得る。いくつかの実施形態では、押圧要素９２は、キャリア２０６に固定され得る。
【０３１６】
図７、図８、および図２２〜２５を参照すると、本明細書に記述したいくつかの実施形態による、一対の電極３００が、格納位置（図７、図２５）および展開位置（図８、図２２、２４）を有することが示される。電極３００はそれぞれ、挿入管１５の反対側のその遠位端に先端３０１を含み得る。電極３００の先端３０１は、エレクトロポレーションのために標的組織を貫通するように構成された尖った端部を画定し得る。図示した実施形態では、アプリケータ１４、６０、７０、１１０、１０００は、電極３００の端部が埋め込まれている拡張可能なブラダー３０２を含む。いくつかの実施形態では、ブラダーはゴムなどの柔軟な弾性材料で作製され得る。使用中、ブラダー３０２は、挿入管１５内で格納位置（図７、２５）内に格納および圧縮され得る。格納位置では、ブラダー３０２が挿入管１５によって半径方向内側に圧縮されるため、電極３００は、挿入管１５の内径より小さい距離で互いに近接して位置付けられる。
【０３１７】
動作中、押圧要素４６、９２は、直接的または間接的に、ブラダー３０２に軸方向の力を加え、ブラダーを挿入管１５の遠位端から出させる。挿入管１５の遠位端を通過すると、ブラダー３０２は、展開された形状（例えば、実質的に球状の形状）へと拡張し得る。いくつかの実施形態では、ブラダー３０２は、ブラダー３０２の上流の空気供給部から供給される空気圧によって（例えば、アプリケータを通って走る導管を介して）拡張し得る。例えば、図２２〜図２３を参照すると、制御部分７２は、ブラダー３０２を膨張させるために空気圧供給部を作動させるための二次ボタン８２を含み得る。いくつかの実施形態では、ブラダー３０２は、空気による補助の有無にかかわらず、自然に拡張された形状に戻るブラダーの弾性回復力のため、機械的に拡張し得る。同様に、押圧要素４６が上述のように制御部分４８に向かって後退すると、電極３００はアプリケータ１４の挿入管１５に引き戻され、ブラダー３０２を再圧縮および変形させ、電極３００を共に近くに動かす。
【０３１８】
電極３００は、格納位置（図７）および拡張位置（図８）の両方で平行であり得る。いくつかの実施形態では、電極３００は、格納位置および拡張位置のいずれかまたは両方で角度付けられてもよい。例えば、電極は、ブラダー３０２上の任意の位置および任意の所望の配向（例えば、図５〜６の実施形態に類似した、外向きに傾斜した）に取り付けられ得る。
【０３１９】
図９、図１０、図６４、および図６５を参照すると、電極４００の別の実施形態が示されており、電極４００はニッケルチタン（ニチノール）で作製される。ニチノールは、プログラムされた形状を「記憶」し、特定の温度条件下でプログラムされた形状に戻ることができる形状記憶合金である。ニチノールは、ニチノールを所定の位置に保持し、ニチノールを約５００°Ｃ（９３２°Ｆ）に加熱して、ニチノールの形状を設定することによって、特定の形状（例えば、図１０に示す「Ｓ」形状）にプログラムされ得る。形状設定の後、ニチノールは、室温に冷却され、第二の形状（例えば、図９に示す直線形状）に機械的に変形する。使用中、ニチノールが変態温度を超えて加熱されると、ニチノールはプログラムされた形状に戻る。電極４００はそれぞれ、挿入管１５の反対側のその遠位端に先端４０１を含み得る。電極４００の先端４０１は、エレクトロポレーションのために標的組織を貫通するように構成された尖った端部を画定し得る。
【０３２０】
ニチノール中のニッケルとチタンの比率を調整することにより、ニチノールの変態温度（例えば、ニチノールの５０％が図９、６５に示される形状から図１０、６４に示される位置に変化する温度）は、ニチノールが患者の体組織の温度と接触すると形が変わるように、人体温度に関連して調整することができる。使用において、ニチノールは、変態形がそれぞれ開始および終了する「開始」温度および「終了」温度を有し得る。いくつかの実施形態では、終了温度は、体温以下であり得る。例えば、いくつかの実施形態では、ニチノールは、５４．５％のニッケルおよび４５．５％のチタンを含むことができ、６０℃の変態温度を有し得る。いくつかの実施形態では、ニチノールの遷移温度は、人体温度であり得る。あるいは、ニチノールを温めるために患者の体温に頼るのではなく、代わりに、電極４００は、エレクトロポレーションに使用される実際の電圧であろうと、電極の形状変化を支援することのみを目的としたより小さな電圧など、ある程度のプレ電圧であろうと、それを通過する電圧によって形状を変えることができる。形状が変更されると、標準電圧が電極を通過する。
【０３２１】
押圧要素４６、１２８は、電極４００が変形した実質的に直線の形状（例えば、図９、６５に示す形状）にあるとき、電極４００に軸方向の力を直接的または間接的に遠位端およびエンドキャップ４０２、４２０に向かって印加することによって、電極４００を配置し得る。押圧要素４６、１２８は、電極の一部分がアプリケータ１４の遠位端から延びるまで、電極４００をチャネル４０４エンドキャップ４０２、４２０を通して軸方向に並進移動させ得る。いくつかの実施形態では、チャネル４０４は、アプリケータ１４の軸５０に実質的に平行であり得る。変態温度を超えて温度を変えると、電極４００は、図１０、６４に示されるように、電極の端部間の間隔を広げるために、電極が外向きに湾曲する、プログラムされた形状に形状を変え得る。図６４および図６５の実施形態は、電極４００がチャネル４０４を介して延び得、またその中に薬剤送達チャネル１８を支持するアライメント開口部４２２およびアライメントチャネル１６８図示する挿入管１５およびエンドキャップ４２０の別の実施形態を図示する。図６４および図６５の実施形態は、それを通って延びる薬剤送達チャネル１８を有する挿入管１５を有する図９〜１０の実施形態を図示する。薬剤送達チャネル１８および電極４００は、本明細書の実施形態のいずれかに従って操作および構成され得る。
【０３２２】
いくつかの実施形態では、電極４００の先端４０１は、格納位置（図９、６５）および展開位置（図１０、６４）の両方で互いに実質的に平行であり得、一方、電極の中央部分は、格納位置から展開位置に移行するときに「Ｓ」字型に湾曲する。同様に、上記のように、押圧要素４６、１２８が制御部分４８、１１４に向かって後退すると、電極４００は、アプリケータ１４のエンドキャップ４０２および挿入管１５の空洞に引き戻され得、ニチノールがチャネル４０４に対して強制されるとき、ニチノールを機械的に変形させて実質的に直線位置に戻す。
【０３２３】
図１１を参照すると、いくつかの実施形態では、電極４００は、外側ニチノールスリーブ４１０およびスリーブを通って走るワイヤ１７（例えば、別個のワイヤ１７または伝導性押圧要素１２８に接続されたワイヤ）と係合し得る。例えば、電極４００は、一端でニチノールスリーブ４１０に貼り付けられた剛性の針（例えば、エンドキャップ４０２から出る時の遠位端）であってもよく、ワイヤ１７は、電極をジェネレータ（例えば、本明細書に記載のジェネレータ１２）に接続し得る。こうした実施形態では、ニチノールはエレクトロポレーションのために電気信号を運ぶ必要はなく、代わりに伝導性素子の周りで形状を変えるスリーブを形成する。いくつかの実施形態では、電極４００は、導電性材料にコーティングされたニチノールで作製されて、その上に電気信号を運ぶことができる。例えば、電極４００は、ニッケル基コーティングおよびニッケルコーティング上の金導電性コーティングを有するニチノール構造を有し得る。
【０３２４】
図２６〜３０は、図１１の開示に従い、別の実施形態を示す。特に、図２６〜３０の実施形態は、電極８００、および図９〜１１の実施形態に関して説明したのと実質的に同じ方法で、形状を変化させる二つの少なくとも部分的に円筒形の半片８０４を有し、アクチュエータ７４が電極を展開した後、体温以上で事前にプログラムされた「Ｓ」字型に戻ることによって展開された場合、電極８００をより広い位置に配置する、ニチノールキャリア８０２（スリーブとも呼ばれる）を含む。いくつかの実施形態では、電極８００は、ワイヤ１７がキャリア８０２の形状変更部分に配置される状態で、キャリア半片８０４の直線部分に取り付けられてもよい。電極８００は、標的組織内に延びるように構成された先端８０１を含み得る。
【０３２５】
キャリア８０２は、二つの半片８０４を接続する円筒形部分８０６を含み得る。図２９〜３０を参照すると、押圧要素９２は、キャリア８０２の円筒形部分８０６と係合して電極８００を作動させてもよく、電極はキャリアに固定して取り付けられてもよい。いくつかの実施形態では、円筒形部分８０６は、押圧要素９２に固定され得る。図示した実施形態では、ジェネレータから電気信号を供給するためのワイヤ１７は、ニチノールキャリア８０２を通過し得、（図３０に示される）電極８００に接続され得る。いくつかの実施形態では、ワイヤ１７は、キャリア半片８０４が形状を変化させるとき、ワイヤがキャリアに対してスライドし得るように、キャリア８０２に取り付けられなくてもよい。いくつかの実施形態では、ニチノールキャリア８０２は、まっすぐに伸ばされたとき、長さが２０〜２５ｍｍであり得る。いくつかの実施形態では、押圧要素９２は、ニチノールキャリアの基端でニチノールキャリア８０２に固定され得る。
【０３２６】
図１２、１３、３１、３２、６０、および６１を参照すると、電極５００の実施形態は、図１０に示すニチノール電極４００と同じ展開された形状（図１３、３１、６０に示す）有するように示される。電極５００はそれぞれ、挿入管１５の反対側のその遠位端に先端５０１を含み得る。電極５００の先端５０１は、エレクトロポレーションのために標的組織を貫通するように構成された尖った端部を画定し得る。図１２、１３、３１、３２、６０、および６１の実施形態では、電極５００は、ある程度柔軟であり得るが、応力力が取り除かれた時に弾性的に元の形状に戻る従来的な導電性材料で作製されている。例えば、上で考察したように、電極５００は、刺鍼法針の特性を有する可撓性の針で作製され得る。図示した実施形態では、電極５００は、格納位置（図１２、３２、６１）において半径方向内側に圧縮され、次いで、展開位置（図１３、３１、６２）において外向きに拡張することができる。
【０３２７】
アプリケータ１４、６０、７０、１１０、１０００の挿入管１５は、電極５００がそれを通って延び得る、その中にチャネル５０４を画定するエンドキャップ５０２、５１０を含み得る。図示した実施形態では、電極５００は、常に湾曲した「Ｓ」形状を有し、エンドキャップ５０２、５１０を通して電極を強制することは、電極のいくらかの変形を必要とし得る。押圧要素４６、９２、１２８は、挿入管１５の遠位端およびエンドキャップ５０２、５１０に向かって、直接的または間接的に軸方向の力を印加することによって電極５００を展開し得る。押圧要素４６、９２、１２８は、電極５００をエンドキャップ５０２、５１０を通して押し込み、電極５００が展開位置の最終幅まで拡張することを可能にし得る。いくつかの実施形態では、電極５００の端部は、少なくとも展開位置において実質的に平行であり得る。押圧要素４６、９２、１２８は次に、電極を挿入管１５に引き戻すことによって電極５００を格納し得る。いくつかの実施形態では、キャリア（例えば、図２１に示すキャリア２０６）は、電極５００および押圧要素４６、９２、１２８と係合して、アクチュエータ４２、７４、１１２から電極に軸方向の力を伝達することができる。図６０および図６１の実施形態は、電極５００がチャネル５０４を介して延び得、またその中に薬剤送達チャネル１８を支持するアライメント開口部５１２およびアライメントチャネル１６８図示する挿入管１５およびエンドキャップ５１０の別の実施形態を図示する。図６０および６１の実施形態は、それを通って延在する薬剤送達チャネル１８を有する挿入管１５を有する、図１２、１３、３１、および３２の実施形態を図示する。薬剤送達チャネル１８および電極５００は、本明細書の実施形態のいずれかに従って操作および構成され得る。
【０３２８】
本明細書に記述した電極１００の実施形態のいずれかでは、先端に最も近い電極１００の部分は、配置位置および格納位置の両方で互いに平行に画定され得る。いくつかの実施形態では、先端から最も遠い電極１００の部分は、展開位置および格納位置の両方で平行であってもよく、この最も遠い部分の少なくとも一部は、展開位置および格納位置の両方で挿入管１５内に留まり得る。先端から最も遠い部分と先端に最も近い部分との間に、電極は、電極の直線または湾曲した部分１００を含み得る。例えば、「Ｓ」形状の曲線は、電極のそれぞれの端部の間に画定され得る。いくつかの実施形態では、電極の中央部分は、格納位置で直線であり、展開位置で湾曲し得る。
【０３２９】
図１４、１５、３３〜４１、および６６を参照すると、電極６００の実施形態は、電極が延在する拡張可能センターキャリア６０２内に配置されて示される。電極６００はそれぞれ、挿入管１５の反対側のその遠位端に先端６０１を含み得る。電極６００の先端６０１は、エレクトロポレーションのために標的組織を貫通するように構成された尖った端部を画定し得る。いくつかの実施形態では、格納位置（図１４）では、電極６００はキャリア６０２内に引き込まれてもよく、キャリアは挿入管１５の遠位端内に引き込まれてもよい。いくつかの実施形態では（図３３〜４１）、電極６００は、キャリア６０２に固定されてもよく、キャリアは、格納位置（図３８、４０）で挿入管１５の遠位端に引き込まれてもよい。図３３を参照すると、いくつかの実施形態では、ワイヤ１７は、チャネル６１２を介して、キャリア６０２を通って電極６００に通過し得る。
【０３３０】
いくつかの実施形態では、押圧要素４６、９２、１２８は、内側部材６０６、６１０、６２０に軸方向の力を直接的または間接的に印加してもよく、キャリア６０２の半片６０４を分離して電極６００を外側に広げてもよい。いくつかの実施形態では、内側部材は、キャリア６０２内のくさび６０６（図１５に示す）であり得る。いくつかの実施形態では、内側部材は、シリンダー６１０（図３３、３８に示す）であり得る。いくつかの実施形態では、内側部材６０６、６１０は、キャリア６０２に対して軸方向に５０並進移動してもよく、一方で、キャリアを少なくとも部分的に挿入管１５の遠位端から押し出す。図６６の実施形態は、キャリア６０２および電極６００を展開し得る挿入管１５および内側部材６２０の別の実施形態を図示する。図６６の実施形態は、挿入管１５およびそれを通って延在する薬剤送達チャネル１８を有する内側部材６２０を有する、図１４、１５、および３３〜４１の実施形態を図示する。薬剤送達チャネル１８、内側部材６２０、および電極６００は、本明細書の実施形態のいずれかに従って操作および構成され得る。
【０３３１】
いくつかの実施形態では、内側部材６０６、６１０は、第二のアクチュエータ９４（図３５、３７、３９、および４０に示す）によって別個に作動され得る。動作中、図３５、３７、３９、および４０を参照して、アクチュエータ７４がキャリア８０２を挿入管１５の遠位端から前方に展開した後、第二のアクチュエータ９４は、制御部分７２の本体９０に内向きに押し込まれて、第二のアクチュエータの遠位端９８を（例えば、図１４に示される軸５０に沿って）、中空マンドレル８６の開口部と位置合わせすることができ、屈曲部分９７を有する第二のアクチュエータは、遠位端が中空マンドレル内により深く到達することを可能にする。アクチュエータ７４による中空マンドレル８６の作動は、第二のアクチュエータ９４が、その開口部と並んで中空マンドレルの後ろに収まることを可能にし得る。内側部材６０６、６１０（図１５、４１）は、第二のアクチュエータの遠位端９８が内側部材６０６、６１０のベース表面６１４（図３３、３８に示す）と係合するように、ユーザーが第二のスイッチ９６を（例えば、挿入管１５の遠位端に向かって）軸方向前方にスライドさせることによって第二のアクチュエータ９４を作動させることができるように、中空マンドレル８６に対して、中空マンドレル内の位置から並進するように構成され得る。これにより、第二のアクチュエータ９４は、キャリア６０２の半片６０４を、キャリア６０２がアクチュエータ７４によって作動された後（例えば、キャリア６０２が、第一のアクチュエータの作動によって挿入管１５内から軸方向に前進した後に）、中空マンドレル８６を通して内側部材６０６、６１０を作動させることによって、（図１５および４１に示すように）分離させることができる。
【０３３２】
内側部材６０６、６１０とキャリア６０２との間の相対的軸方向移動は、キャリアの二つの半片６０４内の勾配表面に半径方向の力を加え、半片６０４を半径方向外側に拡張させ得る。例えば、図３８を参照すると、キャリア６０２は、内側部材６０６、６１０によって操作されるとき、キャリアの半片６０４を外側に拡張させる、その内部に先細り表面６１６を含み得る。図１５、３５、および４１は、展開位置において互いに実質的に平行に関節運動されるキャリア６０２および電極６００の一部分を示しているが、いくつかの実施形態では、キャリア６０２および電極６００は、キャリア６０２の半片６０４のみが実質的に隣接する材料片であるくさび６０６の作動に応答して、半径方向外向きに湾曲（例えば、図５の角度と同様）し得る。
【０３３３】
いくつかの実施形態では、キャリア６０２は、遠位端の近くに二つの半片６０４のみを画定することができ、キャリアの残りの部分は、二つの半片がまだ互いに固定されるように（例えば、円筒形部分６０６）、単一の固体片であり得る。
【０３３４】
いくつかの実施形態では、図４１を参照すると、内側部材６０６、６１０は、キャリア６０２の半片６０４が分離した後、内側部材が治療剤を標的領域に投与するように、薬剤送達装置（例えば、図１に示される薬剤送達装置１６）に流体的に接続された針を規定し得る。こうした実施形態では、治療剤は、本明細書に記載の挿入管１５を通って延在する薬剤送達チャネル（例えば、図１に示す薬剤送達チャネル１８）を介して送達され得る。
【０３３５】
図１６、１７、４２、および４３を参照すると、電極７００の別の実施形態が示される。図示の実施形態では、電極７００、キャリア７０２、およびアプリケータ１４、６０、７０は、内側部材（例えば、くさび６０６またはシリンダー６１０）、および第二のアクチュエータ９４が、キャリアの半片７０４を半径方向外向きに拡張するばね７０６と交換され、一方、押圧要素４６、９２が、電極７００およびキャリア７０２を、アプリケータ１４、６０、７０から軸方向に離れて展開位置に駆動する（図１７、４２）ことを除いて、図１４、１５、および３３〜４１の実施形態と実質的に同じ方法で動作することができる。電極７００はそれぞれ、挿入管１５の反対側のその遠位端に先端７０１を含み得る。電極７００の先端７０１は、エレクトロポレーションのために標的組織を貫通するように構成された尖った端部を画定し得る。いくつかの実施例では、ばね７０６は、挿入管１５からの展開時に、ばねがその付勢位置へと拡張し、それによって電極および電極先端７０１と広がるように付勢され得る。
【０３３６】
追加的に、または代替的に、プッシャー部材は、使用者による作動時に、電極がばね式アクチュエータによって展開位置に強制的に押し込まれるように、同様にばね付勢され得る。そして、存在する場合、ばね７０６は、電極を互いに離れて同時に拡張し得る（または上述のように、別の機構がこの動作を完了し得る）。
【０３３７】
本明細書に記載の実施形態のほとんどにおいて、電極は、治療される組織を貫通することができる、尖った先端を有する針の形状であるが、他の実施形態では、電極は、組織を貫通できるチップを含んでもよいし、含まなくてもよい、針以外の何かの形状をとることができる。例えば、一つまたは複数の電極が、治療される組織を貫通するのではなく、治療される組織を単に押し付ける平坦な形状、丸みを帯びた形状、または同類のものを持ち得る。そのような場合、電極は非外傷性であるため、電極は必ずしも作動可能である必要はなく、代わりに互いに対して固定された位置に位置付けることができる。当然ながら、アプリケータが内視鏡などのアクセス器具を通るようにサイズ決めされる場合、治療される組織上の電極間の適切な間隔を許容するために、少なくとも一つの電極の作動が必要とされ得る。従って、電極のうちの少なくとも一つは、他の電極のうちの少なくとも一つが動作可能であってもよく、または上述のように、電極の各々が独立してまたは集合的に動作可能であり得る一方で、固定され得る。
【０３３８】
このように、前に論じたように、特定の実施形態では、一つまたは複数の電極が、治療される組織を圧迫または貫通するのに適した針形状または他の何らかの突出形状を有し得、一方、他の電極（例えば、対極または負極）が、治療される組織に隣接して配置され、故に、電極として機能するのに適していることができる、アプリケータまたは内視鏡の遠位先端に配置するか、実際に遠位先端であることができる。さらに、この例示的な実施形態では、一つまたは複数の正極は、作動可能である必要はなく、代わりに、アプリケータの遠位先端から十分に離れた位置に遠位に突出するように、固定された場所に単に配置（または内視鏡または他のアクセス器具の遠位端から適切な距離に配置）することができ、本明細書に記載されるように、電気パルスの供給を可能にする。
【０３３９】
いくつかの実施形態では、電極の展開を制御するための作動機構は、受動的であり得る（例えば、電極４００用の形状記憶材料、電極７００用のばね７０６）。いくつかの実施形態では、電極の展開を制御する作動機構は、能動的であり得る（例えば、電極６００が離れるように、第二のアクチュエータを通る内側部材６０６、６１０の前進）。
【０３４０】
いくつかの実施形態では、アプリケータが、アプリケータからの展開の前後に、エレクトロポレーションのために動作可能な間隔にある複数の電極を含み得る。このように、電極間の間隔は、展開の前後で同じままである。この構成における展開の効果は、単に、アプリケータの挿入管に対して電極を軸方向に前進させることである。
【０３４１】
いくつかの実施形態では、アプリケーションのさまざまな実施形態に記載されるアプリケータが、三つの電極、四つの電極、またはそれ以上を含み得る。これらの配置の図示された例は、本開示の他の箇所に提供される。各アプリケータについて、より多くの数の電極が、既存の設計の構造構成に従って組み込まれ得ることが意図される。従って、例えば、図２１に示す挿入管１５は、管１５の中心線から外側に角度付けられた先端にチャネル２０４を含む。三つの電極を有する本実施形態の変形では、それぞれが等間隔に、管中心線から管の外周に向かって離れて延在する、三つのチャネル２０４が含まれ得る。
【０３４２】
いくつかの実施例では、アプリケータが、四つの電極を含み得る。アプリケータが、約５ｍｍ間隔の電極を有する長方形の形状であり得る。いくつかの実施例では、アプリケータが、直径約５ｍｍの円周の周りに周辺に配置される六つの電極を含み得る。前述の二つの配置は、検討の一部として高電圧および低電圧の両方の条件下でエレクトロポレーション手順において使用された。実行された処理の詳細および低電圧エレクトロポレーションの利点を説明する結果は、Ｂｕｒｋａｒｔ等の「新規プラスミド設計および改変パラメーターによるＩＬ−１２腫瘍内遺伝子エレクトロトランスファーの治療効果の改善、遺伝子治療、２５、９３−１０３（２０１８年３月９日）」に記載されており、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０３４３】
上述の実施形態のいずれかでは、一つまたは複数の電極が、全ての電極または電極の総数の任意の部分と同時に、およびまとめて展開され得る。あるいは、各個々の電極は、他の電極とは独立して作動および展開され得る。
【０３４４】
さらに別の実施形態では、電極は、ハープーンとして動作してもよく、それによって、各電極は、各電極が、電極への電気的接続を提供するワイヤまたは同様の構造によってのみつながれたアプリケータ１４から分離するように、組織に挿入される。従って、各電極は、所望の任意の位置で組織に位置付けることができる。例えば、各電極は、アプリケータから、標的組織内およびその周囲のさまざまな場所で一度に一つずつ展開される。各電極は、アプリケータおよび／または別の電極に繋がっている。処置の完了後、スプールリール、ワイヤの引っ張り、アプリケータと電極との間の磁気引力などによって、各電極がアプリケータに引き戻される。
【０３４５】
上述のように、電極は通常、ワイヤを介して電源に接続されるが、ほとんどの実施形態ではまた、プッシャー部材および挿入管である。いくつかの実施形態では、プッシャー部材または挿入管は、電極の少なくとも一つへの電気的接続として動作し得、それによって、ワイヤの少なくとも一つの必要性を排除する。一例として、二つの電極を有する場合、電極のうちの一つへの正の接続はプッシャー部材を介し得るが、他方の電極への負または戻り接続は挿入管本体であり得る。当然ながら、電極のアーク放電および／または使用者への傷害を回避するために、これらの構造の適切な絶縁が必要である。
【０３４６】
また別の実施形態では、電源と少なくとも一つの電極との間の電気的接続は、例えば、電磁場を介した誘導電力伝達の使用を介して、無線であり得る。このような電力接続は、標的組織と電源との間を通過するのにワイヤを必要としないように、経皮的に完了され得る。このような電気的接続を継続して、特定の実施形態では、前述したハープーン様電極は、ワイヤを介して電源に接続されない標的組織内に位置付けられてもよい。このように、薬剤送達は任意の所望の処置によって生じ得、エレクトロポレーションは外科手術設定に入らないで起こり得る。例えば、電極が標的組織に埋め込まれると、治療剤が患者および／または標的組織に供給されたかどうかにかかわらず、患者は手術室から動かされ、治療は、針などの薬剤送達装置、および電極への経皮電力送達を使用する外科手術設定の外で１回以上提供されることができる。電極はその後、後日、除去されるか、または生分解性であってもよく、またはそれらが非外傷性（例えば、組織に対して縫合された円盤形状の電極）であるか、またはそうでなければ、緩みの心配なく、患者に固定される形状のものである場合、移植片は、永久に患者の内部に留まり得る。
【０３４７】
電気パラメーターの例
ジェネレータ１２によって生成される電界の性質は、組織の性質、選択された組織のサイズ、およびその位置によって決定される。磁場は、可能な限り均質で、正しい振幅であることが望ましい。過剰な電界強度は細胞を溶解させるが、低い電界強度は有効性を低下させる。電極は、本明細書に記載されるものを含むがこれに限定されない多くの方法で取り付けられ、操作され得る。本明細書に記述したシステム１０を使用して、エレクトロポレーションのパラメーター（例えば、電圧、パルス持続時間など）は全て（例えば、本明細書に記述した一つまたは複数のコントローラーを介して）プログラム可能および最適化可能である。いくつかの実施形態では、パルスのパラメーターは、エレクトロポレーション手順全体を通して一貫した方法であらかじめ決定され、使用される。いくつかの実施形態では、パルスのパラメーターは、エレクトロポレーション（例えば、ＥＩＳ）中にパルスのパラメーターを継続的に調整するために電気がアプリケータに供給される間、フィードバック機構を使用して決定され得る。
【０３４８】
場合によっては、エレクトロポレーションは、腫瘍の治療のために高電圧および短いパルス持続時間を使用する。１２００〜１３００Ｖ／ｃｍおよび１００マイクロ秒の電界条件は、ブレオマイシン、シスプラチン、ペプロマイシン、マイトマイシンおよびカルボプラチンなどの抗癌剤とともに生体外および生体内で使用されてきた。これらの結果は、生体外および生体内での研究を指す。このような電気的状態は、臨床状況で患者に忍容され得るが、このような治療は、典型的には、筋肉の収縮および時折の不快感を患者に生じさせ、特定の治療剤（例えば、より大きな分子）でより悪い結果をもたらし得る。これらの問題の一部は、電気化学療法に低電圧高パルス持続時間を使用することで大幅に低減され得る。本開示によって意図される低電圧エレクトロポレーションは、約６００Ｖ以下の電圧、約７００Ｖ／ｃｍ以下の電界、および約０．５ミリ秒〜約１秒のパルス長さの印加の使用を含む。いくつかの実施例では、４００Ｖ／ｃｍ以下の電界を低電圧ジェネレータ構成で利用し得る。いくつかの実施形態では、ジェネレータ１２は、３００Ｖ以下の電圧を電極１００に印加し得る。いくつかの実施形態では、ジェネレータ１２は、６０〜３００Ｖの電圧を電極１００に印加し得る。いくつかの実施形態では、ジェネレータ１２は、１５０〜２００Ｖの電圧を印加し得る。いくつかの実施形態では、１０００Ｖを超える高電圧は、不可逆的エレクトロポレーション（ＩＲＥ）を引き起こし得る。従って、低電圧ジェネレータを組み込んだエレクトロポレーションシステムが、より高い電圧を用いる治療と比較して、ＩＲＥのリスクが低いという点で有利である。
【０３４９】
ジェネレータ１２によって提供される電気信号の波形は、指数関数的に減衰するパルス、正方形パルス、単極振動パルス列、双極振動パルス列、またはこれらの形態のいずれかの組み合わせとすることができる。いくつかの実施形態では、低電圧ジェネレータと高電圧ジェネレータの両方の範囲を含むジェネレータの電気パラメーターは、約１０Ｖ／ｃｍから約２０ｋＶ／ｃｍの公称電界強度を含み得る（公称電界強度は、電極針間の電圧を針間の距離で割って計算することによって決定される）。低電圧ジェネレータおよび高電圧ジェネレータの両方の範囲を包含するいくつかの実施形態では、パルス長さは、約１０マイクロ秒〜約１００ミリ秒であり得る。低電圧ジェネレータの範囲を包含するいくつかの実施形態では、パルス長さは、約１ミリ秒〜約１秒であり得る。任意の所望の数のパルス、典型的には毎秒１〜１００パルスであり得る。パルスセット間の待機は、例えば１秒などの任意の所望の時間であり得る。波形、電界強度およびパルス持続時間はまた、細胞の種類およびエレクトロポレーションを介して細胞に入る分子の種類に依存し得る。任意の既知のセルのエレクトロポレーションに必要な電界強度を含むさまざまなパラメーターは、その主題について報告する多くの研究論文から一般的に入手可能である。パルス強度と持続時間の関係の概要は、Ｗｅａｖｅｒ等の「Ａ  ｂｒｉｅｆ  ｏｖｅｒｖｉｅｗ  ｏｆ  ｅｌｅｃｔｒｏｐｏｒａｔｉｏｎ  ｐｕｌｓｅ  ｓｔｒｅｎｇｔｈ−ｄｕｒａｔｉｏｎ  ｓｐａｃｅ：Ａ  ｒｅｇｉｏｎ  ｗｈｅｒｅ  ａｄｄｉｔｉｏｎａｌ  ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  ｅｆｆｅｃｔｓ  ａｒｅ  ｅｘｐｅｃｔｅｄ，Ｂｉｏｅｌｅｃｔｒｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２０１２  Ｏｃｔｏｂｅｒ；８７：２３６−２４３．ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ｂｉｏｅｌｅｃｈｅｍ．２０１２．０２．００７」に記載され、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。いくつかの実施形態では、任意の数のパルスを治療に使用することができる。いくつかの実施形態では、６のパルスが使用される。いくつかの実施形態では、８のパルスが使用される。いくつかの実施形態では、１０のパルスが使用される。
【０３５０】
図示した実施形態では、公称電界は、「高」または「低」のいずれかで指定され得る。以降の項では、高電圧ジェネレータを含むシステムの電気パラメーターと、それに続く低電圧ジェネレータを含むシステムについて説明する。
【０３５１】
高電圧システム、すなわち、高電界を有する高電圧システムに関し、いくつかの実施形態では、公称電界が約７００Ｖ／ｃｍ〜１５００Ｖ／ｃｍであることが好ましい。いくつかの実施形態では、公称電界は、約１０００Ｖ／ｃｍ〜１５００Ｖ／ｃｍであることがさらに好ましい。いくつかの実施形態では、高電界は、約１５００Ｖ／ｃｍであり得る。高電圧システムのパルス持続時間に関して、いくつかの実施形態では、１ｍｓ未満のパルス持続時間が使用され得る。いくつかの実施形態では、１００マイクロ秒〜１ミリ秒の間のパルス持続時間を使用し得る。
【０３５２】
低電圧システムを参照すると、具体的には、いくつかの実施形態では、ジェネレータは低電圧ジェネレータであり得る。エレクトロポレーション療法は、７００Ｖ／ｃｍ以下、６００Ｖ／ｃｍ以下、５００Ｖ／ｃｍ以下、４００Ｖ／ｃｍ以下、３００Ｖ／ｃｍ以下、２００Ｖ／ｃｍ以下、または１００Ｖ／ｃｍ以下の電界を生成する低電圧ジェネレータを使用して実施され得る。エレクトロポレーション療法は、７００Ｖ／ｃｍ〜１０Ｖ／ｃｍの電界を生成する低電圧ジェネレータを使用して実施され得る。エレクトロポレーション療法は、６００Ｖ／ｃｍ〜１０Ｖ／ｃｍの電界を生成する低電圧ジェネレータを使用して実施され得る。エレクトロポレーション療法は、５００Ｖ／ｃｍ〜１０Ｖ／ｃｍの電界を生成する低電圧ジェネレータを使用して実施され得る。エレクトロポレーション療法は、４００Ｖ／ｃｍ〜１０Ｖ／ｃｍの電界を生成する低電圧ジェネレータを使用して実施され得る。エレクトロポレーション療法は、３００Ｖ／ｃｍ〜１０Ｖ／ｃｍの電界を生成する低電圧ジェネレータを使用して実施され得る。エレクトロポレーション療法は、７００Ｖ／ｃｍ〜６０Ｖ／ｃｍの電界を生成する低電圧ジェネレータを使用して実施され得る。エレクトロポレーション療法は、６００Ｖ／ｃｍ〜６０Ｖ／ｃｍの電界を生成する低電圧ジェネレータを使用して実施され得る。エレクトロポレーション療法は、５００Ｖ／ｃｍ〜６０Ｖ／ｃｍの電界を生成する低電圧ジェネレータを使用して実施され得る。エレクトロポレーション療法は、４００Ｖ／ｃｍ〜６０Ｖ／ｃｍの電界を生成する低電圧ジェネレータを使用して実施され得る。エレクトロポレーション療法は、３００Ｖ／ｃｍ〜６０Ｖ／ｃｍの電界を生成する低電圧ジェネレータを使用して実施され得る。エレクトロポレーション療法は、７００Ｖ／ｃｍ〜１００Ｖ／ｃｍの電界を生成する低電圧ジェネレータを使用して実施され得る。エレクトロポレーション療法は、６００Ｖ／ｃｍ〜１００Ｖ／ｃｍの電界を生成する低電圧ジェネレータを使用して実施され得る。エレクトロポレーション療法は、５００Ｖ／ｃｍ〜１００Ｖ／ｃｍの電界を生成する低電圧ジェネレータを使用して実施され得る。エレクトロポレーション療法は、４００Ｖ／ｃｍ〜１００Ｖ／ｃｍの電界を生成する低電圧ジェネレータを使用して実施され得る。エレクトロポレーション療法は、３００Ｖ／ｃｍ〜１００Ｖ／ｃｍの電界を生成する低電圧ジェネレータを使用して実施され得る。エレクトロポレーション療法は、３００Ｖ／ｃｍ〜２００Ｖ／ｃｍの電界を生成する低電圧ジェネレータを使用して実施され得る。エレクトロポレーション療法は、４００Ｖ／ｃｍ〜３００Ｖ／ｃｍの電界を生成する低電圧ジェネレータを使用して実施され得る。いくつかの実施形態では、低電圧ジェネレータのパルス持続時間は、１ミリ秒（ｍｓ）〜１秒（ｓ）であり得る。
【０３５３】
好ましくは、低電界が使用されるとき、公称電界は、約１０Ｖ／ｃｍ〜４００Ｖ／ｃｍである。いくつかの実施形態では、公称電界は、約２５Ｖ／ｃｍ〜７５Ｖ／ｃｍであり得る。いくつかの実施形態では、低公称電界は、約４００Ｖ／ｃｍであり得る。特定の実施形態において、電界が低いとき、パルス長さは、高電界パルスに対して長いことが好ましい。例えば、公称電界が本明細書に記述される「低」範囲内にある場合、パルス長さが約１０ミリ秒であることが好ましい。
【０３５４】
低電圧ジェネレータを有するシステムを引き続き参照すると、いくつかの実施形態では、低電圧ジェネレータは、６００Ｖ〜５Ｖの範囲の電圧を生成し得る。いくつかの実施形態では、低電圧ジェネレータは、５００Ｖ〜５Ｖの範囲の電圧を生成し得る。いくつかの実施形態では、低電圧ジェネレータは、４００Ｖ〜５Ｖの範囲の電圧を生成し得る。いくつかの実施形態では、低電圧ジェネレータは、３００Ｖ〜５Ｖの範囲の電圧を生成し得る。いくつかの実施形態では、低電圧ジェネレータは、２００Ｖ〜５Ｖの範囲の電圧を生成し得る。いくつかの実施形態では、低電圧ジェネレータは、１００Ｖ〜５Ｖの範囲の電圧を生成し得る。いくつかの実施形態では、低電圧ジェネレータは、６００Ｖ〜１０Ｖの範囲の電圧を生成し得る。いくつかの実施形態では、低電圧ジェネレータは、５００Ｖ〜１０Ｖの範囲の電圧を生成し得る。いくつかの実施形態では、低電圧ジェネレータは、４００Ｖ〜１０Ｖの範囲の電圧を生成し得る。いくつかの実施形態では、低電圧ジェネレータは、３００Ｖ〜１０Ｖの範囲の電圧を生成し得る。いくつかの実施形態では、低電圧ジェネレータは、２００Ｖ〜１０Ｖの範囲の電圧を生成し得る。いくつかの実施形態では、低電圧ジェネレータは、１００Ｖ〜１０Ｖの範囲の電圧を生成し得る。いくつかの実施形態では、低電圧ジェネレータは、６００Ｖ〜５０Ｖの範囲の電圧を生成し得る。いくつかの実施形態では、低電圧ジェネレータは、５００Ｖ〜５０Ｖの範囲の電圧を生成し得る。いくつかの実施形態では、低電圧ジェネレータは、４００Ｖ〜５０Ｖの範囲の電圧を生成し得る。いくつかの実施形態では、低電圧ジェネレータは、３００Ｖ〜５０Ｖの範囲の電圧を生成し得る。いくつかの実施形態では、低電圧ジェネレータは、２００Ｖ〜５０Ｖの範囲の電圧を生成し得る。いくつかの実施形態では、低電圧ジェネレータは、１００Ｖ〜５０Ｖの範囲の電圧を生成し得る。いくつかの実施形態では、低電圧ジェネレータは、６００Ｖ〜１００Ｖの範囲の電圧を生成し得る。いくつかの実施形態では、低電圧ジェネレータは、５００Ｖ〜１００Ｖの範囲の電圧を生成し得る。いくつかの実施形態では、低電圧ジェネレータは、４００Ｖ〜１００Ｖの範囲の電圧を生成し得る。いくつかの実施形態では、低電圧ジェネレータは、３００Ｖ〜１００１Ｖの範囲の電圧を生成し得る。いくつかの実施形態では、低電圧ジェネレータは、２００Ｖ〜１００Ｖの範囲の電圧を生成し得る。いくつかの実施形態では、低電圧ジェネレータは、６００Ｖ〜２００Ｖの範囲の電圧を生成し得る。いくつかの実施形態では、低電圧ジェネレータは、５００Ｖ〜２００Ｖの範囲の電圧を生成し得る。いくつかの実施形態では、低電圧ジェネレータは、４００Ｖ〜２００Ｖの範囲の電圧を生成し得る。いくつかの実施形態では、低電圧ジェネレータは、３００Ｖ〜２００Ｖの範囲の電圧を生成し得る。いくつかの実施形態では、低電圧ジェネレータは、６００Ｖ〜３００Ｖの範囲の電圧を生成し得る。いくつかの実施形態では、低電圧ジェネレータは、５００Ｖ〜３００Ｖの範囲の電圧を生成し得る。いくつかの実施形態では、低電圧ジェネレータは、４００Ｖ〜３００Ｖの範囲の電圧を生成し得る。いくつかの実施形態では、低電圧ジェネレータは、６００Ｖ〜４００Ｖの範囲の電圧を生成し得る。いくつかの実施形態では、低電圧ジェネレータは、５００Ｖ〜４００Ｖの範囲の電圧を生成し得る。いくつかの実施形態では、低電圧ジェネレータは、６００Ｖ〜５００Ｖの範囲の電圧を生成し得る。
【０３５５】
低電圧ジェネレータの利点は、高電圧ジェネレータのそれよりもトランスフェクトされた治療剤の発現の改善を含み得る。いくつかの実施形態では、本明細書の他の箇所に記載される組織検出システムの存在は、別のジェネレータの性能よりも性能をさらに向上させ得る。低電圧ジェネレータ出力を通して達成された組織検出は、治療部位の特性化を可能にし得る。特に、安全でない治療を決定し、治療状態を最適化するために療法からフィードバックを収集する可能性は非常に包括的である可能性がある。従って、治療における一連のパルスの後、治療剤の発現は、本明細書に記載の例示的な実施形態の下で、著しく高く、より耐久性があり得る。さらに、本開示の他の箇所で言及したように、低電圧ジェネレータを用いて７００Ｖ／ｃｍ未満の電界を生成する６００Ｖ未満の電圧を生成することは、治療のための標的位置内およびその周辺の組織に損傷をもたらし得る不可逆的エレクトロポレーションのリスクを軽減する。さらに、これらのパラメーターを用いたエレクトロポレーションは、全体的により長い治療期間を可能にし、それによって治療剤の送達が成功する可能性を高める。
【０３５６】
好ましくは、本発明の治療方法は、アプリケータ、アプリケータから延在するように構成された複数の電極、および電極に電気信号を印加するためのジェネレータを含み得る、本明細書に記載のシステムを利用する。いくつかの実施形態では、システムはまた、適用の他の箇所、例えば内視鏡などの挿入デバイスを含んでもよい。いくつかの実施形態では、ジェネレータからの電気パルスは、特定の手術の電界強度が、電極先端が互いに離れているアプリケータを含むシステムの方が高くなるように、所定の強度の電場を生成するための前述の距離に比例し得る。いくつかの実施形態では、低電圧ジェネレータを含むシステムは、約４ｍｍ離間した先端を有する電極を有するアプリケータを含み得る。いくつかの実施形態では、高電圧または低電圧ジェネレータを有するシステムのための、上記電気パラメーターが、エレクトロポレーション手順中に印加された電圧を制御し、そうでなければ更新するために、検出回路からのフィードバックを使用することなく使用され得る。
【０３５７】
いくつかの実施形態では、電気パルスは、エレクトロポレーション中に連続的に電極１００および標的組織のパラメーターを測定し得る検出回路３１からのフィードバックを介して制御され得る。いくつかの実施形態では、検出パルスは、ジェネレータが治療的エレクトロポレーションの適用と電極および組織のパラメーターの検出との間を素早く交互するように、エレクトロポレーションパルス間で伝達され得る。いくつかの実施形態では、適応制御方法を使用して、エレクトロポレーションパラメーターをリアルタイムで設定し得る。ジェネレータが（例えば、検出回路３１、パルス回路３３、およびコントローラー２４を介して）エレクトロポレーションパラメーターを測定し、ジェネレータのパルスを制御する一つの方法は、電気化学インピーダンス分光法（ＥＩＳ）を介し得る。いくつかの実施形態では、ＥＩＳは、低電圧ジェネレータとともに使用され得る。
【０３５８】
エレクトロポレーションシステム１０を使用して細胞または組織のエレクトロポレーション中に、エレクトロポレーションパルスパラメーターを制御するための適応制御方法は、エレクトロポレーションパルスパラメーターを含むエレクトロポレーションパルスパラメーターを最適化するための適応制御のための、システム（例えば、ジェネレータ１２およびその対応する回路）を提供することと、（例えば、パルス回路３３を介して）セルに電圧および電流励起信号を適用することと、（例えば、検出回路３１を介して）電流と電圧の測定値からデータを取得することと、（例えば、コントローラー２４およびプロセッサ３０を介して）データを処理して、望ましいデータを望ましくないデータから分離することと、（例えば、コントローラー２４およびプロセッサ３０を介して）望ましいデータから関連する機能を抽出することと、（例えば、コントローラー２４およびプロセッサ３０を介して）関連する機能の少なくとも一部分を、本明細書では「訓練されたモデル」とも呼ばれる、訓練された診断モデルに適用することと、（例えば、コントローラー２４およびプロセッサ３０を介して）適用された関連機能の結果に基づいてエレクトロポレーションパルスパラメーターを推定することであって、初期化されたエレクトロポレーションパルスパラメーターが、訓練されたモデルと関連する機能に基づいて、エレクトロポレーションパルスパラメーターを最適化するように、推定することと、ジェネレータによって、第一のパルスパラメーターに基づいて第一のエレクトロポレーションパルスを印加することとを含む。
【０３５９】
エレクトロポレーションの有効性を最大化するには、リアルタイムで測定可能な膜完全性の定量化可能なメトリックが望ましい。本明細書に記載されるように、ＥＩＳは、生理学的および化学システムの特性化のための方法であり、本明細書に記述される電極である「ＥＰ」とも称される、任意の標準的なエレクトロポレーションを用いて実施され得る。この技術は、一連の周波数にわたるシステムの電気応答を測定し、エネルギー貯蔵と散逸特性を明らかにする。生物系では、細胞外および細胞内マトリックスは電流の流れに抵抗するため、抵抗器として電気的に表すことができる。無傷の細胞膜および細胞小器官の脂質はエネルギーを貯蔵し、コンデンサーとして表される。電気インピーダンスは、一連の周波数にわたるこれらの抵抗素子と容量素子の合計である。これらのパラメーターのそれぞれを定量化するために、組織インピーダンスデータを等価回路モデルに適合させることができる。組織の電気特性のリアルタイムモニターリングにより、エレクトロポレーションパラメーターのフィードバック制御が可能になり、異種腫瘍における最適なトランスフェクションが可能になる。ＥＩＳフィードバックを使用して、（１）リアルタイムで照射パラメーターを調整すること、（２）治療反応を生成するために必要なパルスのみ供給すること、（３）結果として、全体的なＥＰ介在性組織損傷を低減することを可能にする。
【０３６０】
さらに、いくつかの実施形態では、これらのＥＩＳ測定は、本明細書に記載の理想的なエレクトロポレーション条件を決定するために使用され得る。いくつかの実施形態では、本発明の方法は、標的部位の組織を一対の電極１００と接触させることを含み得る。電極１００に電気的に接続された低電圧電源を使用して、低電圧励起信号を電極に印加することができる。インピーダンスおよび／または静電容量を感知する方法には、フェーズロックループ、方形波パルス、高周波パルス、およびチャープパルスなどの波形が含まれ得るが、これらに限定されない。電圧センサーおよび電流センサーは、回路を流れる電圧降下および電流を感知するために使用され、その後、これらのパラメーターは、図１に示すようにコントローラー２４によって処理されて、測定領域内の全てのセルの平均インピーダンスを決定することができる。次いで、この検出されたインピーダンスは、（例えば、上述の訓練されたモデルを介して）エレクトロポレーションパラメーターに対する任意の必要な変更を決定し得る。
【０３６１】
いくつかの実施形態では、（例えば、検出回路３１を介して）ジェネレータ１２は、細胞および組織の誘電特性および導電特性を測定するように構成されており、感知目的のための励起信号および／または組織に適用されるエレクトロポレーションパルスのそれぞれから生じる組織全体の電圧を測定するための電圧センサーと、感知目的のための励起信号および／または少なくとも一つの印加されたエレクトロポレーションパルスのそれぞれから生じる組織全体の電流を測定するための電流センサーとを含む。
【０３６２】
パルス回路３３は、細胞または組織においてエレクトロポレーションを実行するためのエレクトロポレーションパルスパラメーターを初期化するように構成された初期化モジュールを含み得るが、初期化されたエレクトロポレーションパルスパラメーターは、本開示の他の場所で説明される訓練されたモデルなど、少なくとも一つの訓練されたモデルに少なくとも部分的に基づいている。いくつかの実施形態では、コントローラー２４は、パルス回路３３の出力を指示し得る。ジェネレータ１２は、励起信号および／またはエレクトロポレーションパルスの少なくとも一つを組織に印加するように構成される。検出回路３１の電圧センサーおよび電流センサーは、励起信号の印加に応答して、組織のセルにわたる電圧および電流を測定し得る。コントローラー２４は、励起信号およびエレクトロポレーションパルスのうちの少なくとも一つに対応する、検出回路３１からの測定されたセンサーデータに関連する信号を受信し、データを少なくとも一つの訓練されたモデルに適合させ、データを診断および更新された制御パラメーターに変換する。
【０３６３】
低電圧動作では、ジェネレータは、例えば、１００〜１０ミリ秒の範囲のパルス持続時間を有する最小１０Ｖおよび最大３００Ｖを含む、本明細書に記載のパラメーターのいずれかを出力し得る。ＥＩＳは、１０年ごとに１０個のデータポイントが取得された１００Ｈｚ〜１０ｋＨｚの範囲にわたって、パルスの前およびパルス間で捕捉され、ジェネレータ１２によって取得されるデータであり得る。このスペクトル上のＥＩＳデータの取得は、（１）次のパルスの時定数を決定するためのルーチンを実行し、（２）ポスト分析のためのＥＩＳデータの保存し、および（３）臨床的に使用されるエレクトロポレーション条件を中断しないために十分高速である、２５０ミリ秒で達成される。ジェネレータは、開回路の２０オームの最小出力負荷インピーダンスおよび最大負荷インピーダンスを可能とし得る。ジェネレータのハンズフリー操作を可能にするために、エレクトロポレーションプロセスをトリガー、一時停止、または中止するためにフットペダル（例えば、フットペダル５８）を追加し得る。
【０３６４】
コントローラー２４は、電流および電圧測定からのデータに関連する信号を受信し、データを処理して、望ましくないデータから望ましいデータを分離するための前処理モジュールと、望ましいデータから関連する機能を抽出するための機能抽出モジュールと、望ましいデータの関連する機能の少なくとも一部分を少なくとも一つの訓練された診断モデルに適用するための診断モジュールと、測定データ、診断モジュールおよび機能抽出モジュールの少なくとも一つの結果に基づいて、初期化されたパルスパラメーターおよび後続のパルスパラメーターのうちの少なくとも一つを推定するためのパルスパラメーター推定モジュールと、を含み得る。メモリ３６は、コントローラーによる機能抽出のための望ましいおよび望ましくないデータ、センサーデータ、および訓練されたモデルを保存する。
操作方法
【０３６５】
エレクトロポレーションシステム１０に関連するさまざまな方法について説明する。本明細書に記載される実施形態のいずれかにおいて、かかる方法は、一つまたは複数の癌の治療に使用されてもよく、より具体的には、腫瘍または他の内臓病変、特に患者内部に見出され、表在性または真皮層にない病変を治療するために使用され得る。このような腫瘍または他の病変は、原発性または転移性の悪性腫瘍のいずれかであり得る。
【０３６６】
図１８を参照すると、本明細書に記載のエレクトロポレーションシステム１０を使用する例示的な方法を示す。いくつかの実施形態では、図１８の方法は、一つまたは複数の癌の治療に使用される。いくつかの実施形態では、図１８の方法を使用して、腫瘍または他の内臓病変を治療する。図示したステップ１５０で、方法は、挿入デバイスの遠位端が標的部位に隣接して位置付けられるまで、挿入デバイスを患者に挿入することを含み得る。挿入デバイスは、例えば、下記の特定の例で説明されるように、さまざまな方法で内部通路を通して前進させてもよい。いくつかの実施形態では、挿入デバイスは、可撓性内視鏡またはトロカールなどの剛性内視鏡を含む内視鏡であり得る。いくつかの実施例では、アプリケータが、挿入デバイスなしでそれ自体を挿入することができる。図示したステップ１５２で、方法は、薬剤送達装置の一部分が標的部位に隣接して位置付けられるように、薬剤送達装置の一部分を挿入デバイスの作業チャネルに挿入することを含み得る。図示したステップ１５４で、方法は、薬剤送達装置から標的部位に治療剤を投与することを含み得る。図示したステップ１５６で、方法は、薬剤送達装置の部分を挿入デバイスから取り除くことを含み得る。図示したステップ１５８で、方法は、複数の電極を含む挿入管の遠位端が標的部位に隣接して位置付けられるように、アプリケータの挿入管を挿入デバイスの作業チャネルに挿入することを含み得る。図示したステップ１６０で、方法は、一つまたは複数の電気パルスを電極に送達して、標的部位で組織を電気穿孔することを含み得る。ステップ１６２で、方法は、患者からアプリケータおよび挿入デバイスを取り外すことを含み得る。いくつかの実施形態では、アプリケータが、電気インパルスおよび／または治療剤を送達する前に、方法が患者の一つまたは複数の組織を貫通することをさらに含むことができるように、貫通先端１３０を含み得る。いくつかの実施形態では、上述のように、薬剤および／またはプラスミドは、ＩＭ、ＩＴ、およびＩＶ送達を含む多数の手段のいずれかを介して投与され得る。薬剤送達装置がアプリケータを通して動作する実施形態では、ステップ１５２〜１５６はステップ１５８〜１６２と組み合わされ得る。上述の方法では、本明細書に記述した特定の構成を含む、低電圧または高電圧のジェネレータを使用し得る。方法は、ＥＩＳの有無に関係なく実施され得る。低電圧ジェネレータを使用し、ＥＩＳを使用せずに実行される方法の一例では、印加される電圧は、遭遇する組織の特性（例えば、メソッドの実行を通じて遭遇する可能性のある組織の可変インピーダンス）に関係なく、治療の各パルスに対して同じであり得、組織の特性に影響されない結果が得られるはずである。さらに、本開示の他の箇所で言及したように、このアプローチを用いた治療は成功し、高電圧ジェネレータを用いる治療に対する利点を有することが実証される。
【０３６７】
本明細書に記載の低電圧ジェネレータおよびアプリケータを使用して方法を実施すことの利点は、エレクトロポレーション中に標的部位の細胞により少ない熱応力が加えられ、それによって、細胞が処理の間および処理後に生存する可能性が高まることを含む。さらに、低電圧では、電気パルスは、高電圧エレクトロポレーション手順と比較して、より長い期間にわたって送達され得る。より長い期間の処理では、細胞はより長い期間にわたって開いたままであり、より多くの量の治療剤が細胞によって吸収され、処理が成功する可能性が高まる。
【０３６８】
図６７を参照すると、本明細書に記載のエレクトロポレーションシステム１０を使用する別の方法の例が示される。いくつかの実施形態では、図６７の方法は、一つまたは複数の癌の治療に使用される。いくつかの実施形態では、図６７の方法を使用して、腫瘍または他の内臓病変を治療する。図示したステップ６７００で、方法は、挿入デバイスの遠位端が標的部位に隣接して位置付けられるまで、挿入デバイスを患者に挿入することを含み得る。いくつかの実施形態では、挿入デバイスは、可撓性内視鏡またはトロカールなどの剛性内視鏡を含む内視鏡であり得る。あるいは、アプリケータが、挿入デバイスなしでそれ自体を挿入し得る。図示したステップ６７０５で、方法は、複数の電極および薬剤送達チャネルを含む挿入管の遠位端が標的部位に隣接して位置付けられるように、アプリケータの挿入管を挿入デバイスの作業チャネルに挿入することを含み得る。図示したステップ６７１０で、方法は、薬剤送達チャネルに接続された薬剤送達装置から標的部位に治療剤を投与することを含み得る。図示したステップ６７１５で、方法は、一つまたは複数の電気パルスを電極に送達して、標的部位で組織を電気穿孔することを含み得る。ステップ６７２０で、方法は、患者からアプリケータおよび挿入デバイスを取り外すことを含み得る。いくつかの実施形態では、アプリケータが、電気インパルスおよび／または治療剤を送達する前に、方法が患者の一つまたは複数の組織を貫通することをさらに含むことができるように、貫通先端１３０を含み得る。いくつかの実施形態では、上述のように、薬剤および／またはプラスミドは、ＩＭ、ＩＴ、およびＩＶ送達を含む多数の手段のいずれかを介して投与され得る。上述の方法では、本明細書に記述した特定の構成を含む、低電圧または高電圧のジェネレータを使用し得る。方法は、ＥＩＳの有無に関係なく実施され得る。
【０３６９】
図６８を参照すると、本明細書に記載のエレクトロポレーションシステム１０を使用する別の方法の例が示される。いくつかの実施形態では、図６８の方法は、一つまたは複数の癌の治療に使用される。いくつかの実施形態では、図６８の方法を使用して、腫瘍または他の内臓病変を治療する。図示したステップ６８００で、方法は、複数の電極および薬剤送達チャネルを含む挿入管の遠位端が標的部位に隣接して位置付けられるように、アプリケータの挿入管を患者に挿入することを含む。図示したステップ６８０５で、方法は、薬剤送達チャネルに接続された薬剤送達装置から標的部位に治療剤を投与することを含む。図示したステップ６８１０で、方法は、一つまたは複数の電気パルスを電極に送達して標的部位で組織を電気穿孔することを含む。ステップ６８１５で、方法は、患者からアプリケータを取り外すことを含む。ステップ６８０５および６８１０は同時に発生してもよく、またはステップ６８０５はステップ６８１０の前に発生し得る。いくつかの実施形態では、アプリケータが、電気インパルスおよび／または治療剤を送達する前に、方法が患者の一つまたは複数の組織を貫通することをさらに含むことができるように、貫通先端１３０を含み得る。いくつかの実施形態では、上述のように、薬剤および／またはプラスミドは、ＩＭ、ＩＴ、およびＩＶ送達を含む多数の手段のいずれかを介して投与され得る。
【０３７０】
本明細書に記載の方法、システム、および装置は、呼吸管（例えば、鼻鏡検査または気管支鏡検査）、腹腔、一般的な軟組織および／または骨、胃腸管（例えば、腸内視鏡検査、直腸内視鏡検査、結腸内視鏡検査、肛門鏡検査、Ｓ状結腸鏡検査、または食道胃十二指腸内視鏡検査）、泌尿器系および大脳内の処置を含むがこれらに限定されない、いくつかの内視鏡処置とともに使用することができる。これらの手順における方法の印加の例は、以下により詳細に示される。当然のことながら、本開示全体を通して説明されるこれらおよびその他の手順において、罹患組織への言及は、腫瘍、癌細胞、およびその他の病変全般を含むがこれに限定されない。治療する癌には軟組織肉腫が含まれることがある。本開示の方法を通して治療するために意図される腫瘍には、例えば、原発性腫瘍、転移性腫瘍、またはその両方が含まれる。
【０３７１】
いくつかの実施形態では、本開示は、呼吸管内の罹患組織（例えば、原発性腫瘍および／または転移性腫瘍）を治療する方法に関する。方法のいくつかの実施形態では、肺は、気管支鏡を使用してアクセスされ得る。いくつかの実施形態では、手術の実施前に、手術前計画を実施して、罹患組織の特定の位置を確認し、アプリケータ前進経路または内視鏡経路計画を実施すことができる。術前外科手術計画には、コーンビームコンピューター断層撮影（ＣＢＣＴ）を使用して画像をキャプチャし、患者の肺の３Ｄモデルを生成するためにそのような画像を使用することを伴い得る。また、コンピューター断層撮影、磁気共鳴、陽電子放射断層撮影、蛍光透視、およびＸ線を含む、画像を撮影するために他の技術を使用することもできる。上記のモダリティの任意の数から取得された画像データは、患者の解剖学的構造の３Ｄモデルを作成するために外挿され得る。次いで、３Ｄモデルの解析を実行して、罹患組織の位置を特定する。一旦特定されると、罹患組織へのアクセスのための外科手術計画が開発され得る。特定された標的部位に基づいて、その部位に対するアプローチの詳細が確立され得る。いくつかの実施形態では、術前計画は、罹患組織を特定する他の既知のアプローチを伴い得る。例えば、罹患組織がオリフィスに近い場合、３Ｄモデルの作成なしに外科手術計画を確立することができる。他の例では、解析および外挿することなく患者の画像をキャプチャするために、罹患組織の位置を特定し、アクセス経路を確立するために、モダリティのうちの一つまたは複数を使用することは十分であり得る。
【０３７２】
気管支鏡の性能に関して、いくつかの実施形態では、患者は座位または仰臥位に調節される。その後、患者体内への前進に備えて、アプリケータを内視鏡または気管支鏡に挿入する。特に、アプリケータの挿入管は内視鏡に挿入される。内視鏡は、可撓性または剛性であり得る。確立された術前外科手術計画を使用して、内視鏡は、鼻または口を通して上気道、気管、および気管支系の中へ、およびその後、いくつかの例において肺の中へ挿入される。内視鏡に付属する視覚化ツールは、標的部位の罹患組織に到達する際に役立つ。内視鏡の遠位先端が標的部位の近位または接触するまで内視鏡を進める。いくつかの実施形態では、内視鏡の前進は、接続されたナビゲーションシステムを用いて監視され得る。術前計画に３Ｄモデルの生成が含まれる場合、元の画像が撮影されて３Ｄモデルを作成してから状態が変化したことを証拠が示唆している場合は、外科医の裁量で前進ステップ中に追加の画像を撮影して、実際の状態に基づいて調整を行うことができる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の視覚化ツールは、薬剤の送達とエレクトロポレーションを協調させるため、注射部位の特定とアプリケータ（例えば、アプリケータ１４および個別のアプリケータ１９）の位置合わせを容易にするため、別個の薬剤送達アプリケータ（例えば、本明細書で論じられる別個の薬剤送達アプリケータ１９）の実施形態とともに使用することができる。
【０３７３】
標的部位に位置するアプリケータの遠位端で、エレクトロポレーションおよび／または薬剤送達は、本明細書に記述される実施形態のいずれかに記載されるような方法で開始され得る。いくつかの実施形態では、エレクトロポレーションおよび治療剤の送達は、同時またはほぼ同時に発生し得る。いくつかの実施形態では、エレクトロポレーションは、治療剤の送達前に開始され得る。いくつかの実施形態では、治療剤の送達に続いてエレクトロポレーションが行われる。
【０３７４】
いくつかの実施例では、記載される気管支鏡処置は、同様に、鼻鏡処置または呼吸管内の他の処置に用いられ得る。
【０３７５】
いくつかの実施例では、呼吸管内の罹患組織を治療する方法は、ロボットの助けを借りて実施され得る。例えば、アプリケータが、気管支鏡検査を実施するためにロボットシステムとともに使用され得る。特に、アプリケータが、患者の身体を通して前進してもよく、および／またはアプリケータの電極は、ロボットシステムのロボットデバイスの制御を通して展開され得る。これらの機能を実施するために、例えば、ロボットデバイスのアームは、処置中にアプリケータを回転させ、位置決めするように操作され得る。同様に、ロボットデバイスのアームは、アプリケータへの電気流を制御するように操作され得る。いくつかの実施例では、方法の他のステップも、ロボットシステムの使用によって支援され得る。
【０３７６】
いくつかの実施形態では、本開示は、腹腔内の罹患組織を治療する方法に関する。いくつかの実施形態では、方法は、上記に詳述した術前外科手術計画で開始することができる。罹患組織の位置および特定された罹患組織にアクセスする経路によって、標的部位へのアクセスおよび治療を開始することができる。挿入の準備として、アプリケータは内視鏡に挿入され得るが、内視鏡は、それを通してアプリケータを挿入する前に、少なくとも部分的に患者に位置付けられてもよい。
【０３７７】
いくつかの実施形態では、使用されるアプリケータが、例えば、アプリケータ１１０上の先端１３０などの鋭利な先端を含む。最初は、内視鏡は患者の口から食道を通って胃内に留置される。胃内から、アプリケータを胃壁まで進めて、先端１３０を使用して胃開口部を生成し、それによって、その中にアプリケータを有する内視鏡を腹膜腔内に前進させる。あるいは、標準的なトロカールまたは他の器具を使用して胃壁を貫通し得る。内視鏡に付随する可視化補助具を、オプションのナビゲーションシステムおよび撮像情報と併せて使用して、内視鏡およびアプリケータを、ガイドされた画像下で腹膜腔の壁上の標的部位に向けることができる。
【０３７８】
標的部位に位置する内視鏡の遠位端で、エレクトロポレーションおよび／または薬剤送達は、本明細書に記述される実施形態のいずれかに記載されるような方法で開始され得る。いくつかの実施形態では、エレクトロポレーションおよび治療剤の送達は、同時またはほぼ同時に発生し得る。いくつかの実施形態では、エレクトロポレーションは、治療剤の送達前に開始され得る。いくつかの実施形態では、治療剤の送達に続いてエレクトロポレーションが行われる。
【０３７９】
別の実施形態では、腹部の罹患組織を治療するための方法は、腹腔鏡を使用して実施されてもよく、それによって、腹腔鏡およびアプリケータが通過し、標的組織にナビゲートされる、患者に一つまたは複数のキーホール切断が形成され得る。上述のように、薬剤送達は、アプリケータを使用して実施すことができ、または別の方法として、別の器具を使用して、治療剤を標的組織に送達することができる。少なくとも一つの追加的カニューレを使用して、アプリケータおよび／または薬剤送達装置のための標的組織への通路を提供することができる。典型的には、剛性カニューレが使用され、従って、剛直な挿入管を有するアプリケータも使用され得る。
【０３８０】
いくつかの実施例では、腹部の罹患組織を治療方法は、ロボットの助けを借りて実施され得る。例えば、アプリケータが、処置を実施するためにロボットシステムとともに使用され得る。特に、アプリケータが、患者の身体を通して前進してもよく、および／またはアプリケータの電極は、ロボットシステムのロボットデバイスの制御を通して展開され得る。これらの機能を実施するために、例えば、ロボットデバイスのアームは、処置中にアプリケータを回転させ、位置決めするように操作され得る。同様に、ロボットデバイスのアームは、アプリケータへの電気流を制御するように操作され得る。いくつかの実施例では、方法の他のステップも、ロボットシステムの使用によって支援され得る。
【０３８１】
いくつかの実施形態では、本開示は、膵臓などの胃腸管内の罹患組織を処置する方法に関する。この方法のいくつかの実施形態では、超音波内視鏡は、アプリケータが中に挿入された状態で使用される。超音波内視鏡は、高周波の音波を使用して、胃および膵臓のライニングおよび壁を含む解剖学的構造の詳細な画像を生成する。上述のように、いくつかの実施形態では、術前外科手術計画は、罹患組織の特定の位置を特定し、アプリケータおよび／または内視鏡の意図された挿入経路を評価するために実施され得る。手術の準備が整ったら、アプリケータは超音波内視鏡に挿入されるが、内視鏡は、それを通してアプリケータを挿入する前に、少なくとも部分的に患者に位置付けられてもよい。超音波内視鏡は、内視鏡または気管支鏡や腹腔鏡などの他の内視鏡タイプの器具が使用される、本明細書に記述される他の方法にも利用され得ることに留意されたい。
【０３８２】
罹患組織の標的部位にアクセスするために、超音波内視鏡を口から胃に挿入する。超音波によって生成された画像、および術前計画によって利用された情報を使用して、内視鏡を使用する場合、内視鏡は、その遠位先端が罹患組織を有する膵臓の一部分に当接する胃壁に面するように胃内で操作される。その後、アプリケータの先の尖った先端が胃壁を貫通し、膵臓上の標的部位に当接する位置に到達できるように、アプリケータを内視鏡から前進させる。あるいは、標準的なトロカールまたは他の器具を使用して胃壁を貫通し得る。膵臓上の標的部位が胃に当接していない状況では、内視鏡は、腹膜腔内に一旦さらに誘導されて、アプリケータを標的部位に向けることができる。さらに、可視化補助具は、オプションのナビゲーションシステムおよび術前計画からの撮像情報とともに内視鏡に付随して、アプリケータの標的部位への方向を補助し得る。
【０３８３】
いくつかの実施例では、本開示の他の箇所に記載されるように、内視鏡は、口を通して、アプリケータが、可撓性本体とともに、連続的なプラスミド注射およびエレクトロポレーションのために、膵病変内に誘導され得る胃／小腸内に位置付けられてもよい。可撓性本体（例えば、挿入管１５）は、特定の適用および／または腫瘍表示に応じて、内視鏡または腹腔鏡を介して標的病変へのナビゲーションを可能にする約１００ｃｍの長さを有し得る。
【０３８４】
標的部位に位置する内視鏡の遠位端で、エレクトロポレーションおよび／または薬剤送達は、本明細書に記述される実施形態のいずれかに記載されるような方法で開始され得る。いくつかの実施形態では、エレクトロポレーションおよび治療剤の送達は、同時またはほぼ同時に発生し得る。いくつかの実施形態では、エレクトロポレーションは、治療剤の送達前に開始され得る。いくつかの実施形態では、治療剤の送達に続いてエレクトロポレーションが行われる。エレクトロポレーションが完了したら、アプリケータおよび内視鏡などの適切な誘導装置を取り外し、必要に応じて胃切開部を閉じる。
【０３８５】
膵臓について上述した処置が、大腸内視鏡検査のために同様に実施され得ることがさらに意図される。
【０３８６】
いくつかの実施例では、胃腸管内の罹患組織を処置する方法は、ロボットの助けを借りて実施され得る。例えば、アプリケータが、超音波内視鏡または同類のものを用いて膵臓に到達するための処置を実施するために、ロボットシステムとともに使用され得る。特に、アプリケータが、患者の身体を通して前進してもよく、および／またはアプリケータの電極は、ロボットシステムのロボットデバイスの制御を通して展開され得る。これらの機能を実施するために、例えば、ロボットデバイスのアームは、処置中にアプリケータを回転させ、位置決めするように操作され得る。同様に、ロボットデバイスのアームは、アプリケータへの電気流を制御するように操作され得る。いくつかの実施例では、方法の他のステップも、ロボットシステムの使用によって支援され得る。
【０３８７】
いくつかの実施形態では、本開示は、尿道または膀胱などの泌尿器系内の罹患組織を処置する方法に関する。一部の実施例において、内視鏡は、アプリケータをその中に挿入して使用される。いくつかの実施形態では、内視鏡は剛性であるが、他の実施形態では、可撓性である。いくつかの実施形態では、尿道カテーテルはアプリケータとともに使用される。いくつかの実施形態では、アプリケータが、誘導装置なしで単独で使用される。上述のように、いくつかの実施形態では、術前外科手術計画は、罹患組織の特定の位置を特定し、アプリケータおよび／または内視鏡の意図された挿入経路を評価するために実施され得る。手術の準備が整ったら、アプリケータを内視鏡または尿道カテーテルに挿入するか、それともアプリケータを単独で使用する場合は、そのまま使用できる。上述の他の例示的方法と同様に、アプリケータが、どちらかのアクセス器具（何らかのタイプのアクセス器具が使用されると仮定する）を患者に挿入する前に、内視鏡または尿道カテーテル内に位置付けられる必要はない。
【０３８８】
いくつかの実施形態では、内視鏡（または尿道カテーテル）は、患者の外側から尿道に直接前進し、内視鏡の先端は罹患組織に向けられる。いくつかの実施形態では、内視鏡は、患者の外側から尿道へと、および尿道から膀胱へと前進する。膀胱内から、内視鏡の先端は膀胱上の罹患組織に向けられる。尿道内または膀胱内のいずれであっても、アプリケータは内視鏡内から前進し、アプリケータがエレクトロポレーション処置の所定の位置に来るようにする。さらに、可視化補助具は、内視鏡、オプションのナビゲーションシステム、および術前計画からの撮像情報とともに、アプリケータの罹患組織への前進を助けるために付属し得る。
【０３８９】
標的部位に位置する内視鏡の遠位端で、エレクトロポレーションおよび／または薬剤送達は、本明細書に記述される実施形態のいずれかに記載されるような方法で開始され得る。いくつかの実施形態では、エレクトロポレーションおよび治療剤の送達は、同時またはほぼ同時に発生し得る。いくつかの実施形態では、エレクトロポレーションは、治療剤の送達前に開始され得る。いくつかの実施形態では、治療剤の送達に続いてエレクトロポレーションが行われる。
【０３９０】
いくつかの実施例では、泌尿器系内の罹患組織を処置する方法は、ロボットの助けを借りて実施され得る。例えば、アプリケータが、処置を実施するためにロボットシステムとともに使用され得る。特に、アプリケータが、患者の身体を通して前進してもよく、および／またはアプリケータの電極は、ロボットシステムのロボットデバイスの制御を通して展開され得る。これらの機能を実施するために、例えば、ロボットデバイスのアームは、処置中にアプリケータを回転させ、位置決めするように操作され得る。同様に、ロボットデバイスのアームは、アプリケータへの電気流を制御するように操作され得る。いくつかの実施例では、方法の他のステップも、ロボットシステムの使用によって支援され得る。
【０３９１】
いくつかの実施形態では、本開示は、脳内の罹患組織を神経外科手術処置を通して治療する方法に関する。いくつかの実施例では、処置は、脳またはより一般的には神経系内のさまざまなタイプの腫瘍を治療するために使用され得る。いくつかの実施形態では、内視鏡は、それを通して挿入されたアプリケータとともに使用される。いくつかの実施形態では、カテーテルはアプリケータとともに使用される。いくつかの実施形態では、アプリケータが、アクセス装置なしで単独で使用される。上述のように、いくつかの実施形態では、術前外科手術計画は、罹患組織の特定の位置を特定し、アプリケータおよび／または内視鏡の意図された挿入経路を評価するために実施され得る。
【０３９２】
いくつかの実施形態では、脳内の罹患組織への血管内アプローチが使用される。このアプローチは、例えば、膠芽腫、多形性膠芽腫などの治療に使用することができる。一実施例では、カテーテルまたは内視鏡内に配置されるアプリケータが、大腿動脈を通して患者の体内に経皮的に導入され、次いで大動脈、大静脈、頸動脈または椎骨動脈を通して上方に誘導される。また、その他のアクセスポイントも大脳への進入に適している。あるいは、カテーテルまたは内視鏡は、アプリケータをその中に位置付ける前に、まず患者の血管系内に位置付けられる。頸動脈または椎骨動脈からアプリケータを操縦する位置を決定するために、罹患組織の位置をアプリケータの位置と比較する。その後、アプリケータを脳の適切な血管通して前進させる。いくつかのユニークな状況では、必要に応じて、頭蓋内血管を通してアプリケータをさらに操縦することが可能であり得る。しかし、その前に、外科医は、内視鏡またはカテーテルの外径を、横断する頭蓋内血管と比較することによって、このようなアクセスが可能かどうかを評価する。いくつかの実施例では、アプリケータが、内視鏡またはカテーテルに対して前進可能であるように構成されてもよく、それによって、エレクトロポレーションのための装置へのアクセスに必要な最小直径を減少する。さらに、可視化補助具は、内視鏡、オプションのナビゲーションシステム、および術前計画からの撮像情報とともに、アプリケータの罹患組織への前進を助けるために付属し得る。標的部位の罹患組織へのアプリケータの前進が完了したら、エレクトロポレーションを実施し得る。
【０３９３】
いくつかの実施形態では、脳の周囲の領域は、経蝶形骨洞処置を介して鼻を通してアクセスされ得る。これは、罹患組織が下垂体上またはその近くにある場合、または罹患組織が硬膜（脳周囲の膜）から増殖する腫瘍である場合に望ましい場合がある。従って、この処置は、例えば、下垂体腺腫、頭蓋咽頭腫、ラットケの裂隙嚢胞、髄膜腫、および索状腫を治療するために使用され得る。いくつかの実施例では、アプリケータが、内視鏡またはカテーテル内に配置され、その後、鼻および蝶形骨洞を通って前進して、エレクトロポレーションを実施するために罹患組織に到達する。いくつかの実施形態では、鼻中隔、蝶形骨洞、および涙液のうち一つまたは複数に小さな切開を行い、罹患組織に到達することができる。鼻領域内に小さな穴を作ることを含む同様のアプローチを使用して、罹患組織を口を通してアクセスすることもできる。上述の実施形態の一部の実施例では、顕微鏡が、処置においてアプリケータを相補するために使用され得る。
【０３９４】
大脳内および大脳周囲の組織にアクセスする上述の方法のそれぞれにおいて、アプリケータの遠位端が標的部位に位置付けられたら、エレクトロポレーションおよび／または薬剤送達は、本明細書に記述される実施形態のいずれかに記載されるような方法で開始され得る。いくつかの実施形態では、エレクトロポレーションおよび治療剤の送達は、同時またはほぼ同時に発生し得る。いくつかの実施形態では、エレクトロポレーションは、治療剤の送達前に開始され得る。いくつかの実施形態では、治療剤の送達に続いてエレクトロポレーションが行われる。
【０３９５】
いくつかの実施例では、大脳内の罹患組織を治療する方法は、ロボットの助けを借りて実施され得る。例えば、アプリケータが、処置を実施するためにロボットシステムとともに使用され得る。特に、アプリケータが、患者の身体を通して前進してもよく、および／またはアプリケータの電極は、ロボットシステムのロボットデバイスの制御を通して展開され得る。これらの機能を実施するために、例えば、ロボットデバイスのアームは、処置中にアプリケータを回転させ、位置決めするように操作され得る。同様に、ロボットデバイスのアームは、アプリケータへの電気流を制御するように操作され得る。いくつかの実施例では、方法の他のステップも、ロボットシステムの使用によって支援され得る。
【０３９６】
上述の方法は、本明細書に記載のエレクトロポレーション技術およびシステムが、さまざまな外科手術用途に用いられ得ることを示す。概説した具体的な例は、システムが特定の用途にどのように採用されるかを示すことを意図しており、いかなる形であれ制限することを意図するものではない。明確にするために、システムを使用して、アプリケータのみ、内視鏡、またはカテーテルを用いて罹患組織にアクセスすることに加えて、トロカールを使用して標的部位にアクセスし、エレクトロポレーションを行うことがさらに意図される。トロカールは、例えば原発性または続発性肉腫などの骨悪性腫瘍への直接アクセスを提供するのに有利であり得る。
【０３９７】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の方法は、本出願の他の箇所で記載されるものに加えて、組織撮像手順と組み合わせて使用され得る。例えば、蛍光撮像、白色光撮像、またはそれらの組み合わせを含む手順を使用し得る。いくつかの実施例では、蛍光撮像は、薬剤または染料の使用を採用し得る。このような薬剤の周知の例には、インドシアニングリーンが含まれる。こうした蛍光撮像剤および可視化能力を使用して、エレクトロポレーションアプリケータを標的組織に向けることができる。場合によっては、腫瘍を通る血流は、腫瘍内の染色の発生を引き起こし、可視化下で腫瘍を照射し得る。このようなプロセスは、操作者が、正常な白色光の可視化下では観察されなかった腫瘍の領域を見ることができ、それゆえに治療し得るため、エレクトロポレーションの有効性を増加させる。
【０３９８】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の方法、システム、および装置は、腹腔鏡を含む他の外科手術処置とともに使用され得る。本明細書に記載される方法、システム、および装置はまた、遺伝子療法（例えば、プラスミド療法）または多数の癌およびその他の疾患のいずれかに対する薬剤治療を含むが、これに限定されない、いくつかの治療とともに使用され得る。
【０３９９】
図１を再び参照すると、いくつかの実施形態では、電極１００は、エレクトロポレーション部位の電極間の身体組織のインピーダンスを検出するために使用され得る。特に、組織の電気応答は、電気化学インピーダンス分光法を介して電極を通して伝達される一連の尋問周波数にわたって測定され得る。次いで、収集されたデータは、組織の電気特性を決定するために、等価回路モデルに適合し得る。いくつかの実施形態では、本明細書に開示される方法および装置の任意の電気パルスは、低電圧ジェネレータによって供給され得る。
【０４００】
エレクトロポレーションプロセスを制御するコントローラー２４は、ジェネレータ１２とインターフェイスして、電極で検出されたインピーダンスに基づいて、ジェネレータ出力を所望のレベルに微調整するフィードバックループを提供し得る。このプロセスは、本明細書に考察される電極およびエレクトロポレーションシステム、方法、および装置のいずれかに対して実施され得る。
【０４０１】
従って、フローチャートのブロックは、指定された関数を実行するための手段の組み合わせおよび指定された関数を実行するための動作の組み合わせをサポートする。また、フローチャートの一つまたは複数のブロック、およびフローチャートのブロックの組み合わせは、指定された機能を実行する専用ハードウェアベースのコンピューターシステム、または専用ハードウェアおよびコンピューター命令の組み合わせによって実装され得ることも理解されるであろう。
【０４０２】
治療方法
本明細書に記載のエレクトロポレーション装置は、療法的治療および治療剤の送達に使用され得る。いくつかの実施形態では、療法的治療は、細胞、細胞群、または組織への一つまたは複数の治療剤（例えば、分子）の送達のための、および細胞、細胞群、または組織に対してエレクトロポレーションを行うための記載された装置を使用して、本明細書ではエレクトロポレーション療法（ＥＰＴ）とも呼ばれる電気療法を含む。いくつかの実施形態では、分子または治療剤は、薬剤（すなわち、アクティブな医薬品成分）である。本明細書に考察された、または本明細書に考察されたように、当技術分野で一般的に知られている任意の治療剤をＥＰＴと組み合わせることは、それ自体で治療剤に反応しなかった患者にも有効な治療を提供し得る。いくつかの実施形態では、薬剤は低分子である。いくつかの実施形態では、薬剤は高分子である。薬剤は、化学療法剤であり得るが、これに限定されない。高分子は、化学療法剤、核酸（ポリヌクレオチド、オリゴヌクレオチド、ＤＮＡ、ｃＤＮＡ、ＲＮＡ、ペプチド核酸、アンチセンスオリゴヌクレオチド、ｓｉＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ、リボザイム、プラスミド、および発現ベクターなどであるが、これらに限定されない）、およびポリペプチド（ペプチド、抗体、タンパク質などであるが、これらに限定されない）であることができるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、療法的治療は、記載されるエレクトロポレーション装置のいずれかを使用して、細胞、細胞群、または組織への治療的電気パルスの送達を含む。細胞、細胞群、または組織は、腫瘍細胞または腫瘍組織であり得るが、これに限定されない。
【０４０３】
方法と併用するために意図される薬剤または治療剤には、抗腫瘍効果または細胞毒性効果を有する化学療法剤が含まれる。薬剤は、外因性薬剤または内因性薬剤とすることができる。いくつかの実施形態では、薬剤は低分子外因性薬剤である。低分子外因性薬剤としては、ブレオマイシン、ネオカルチノスタチン、スラミン、ドキソルビシン、カルボプラチン、タキソール、マイトマイシンＣ、およびシスプラチンが挙げられるが、これらに限定されない。他の化学療法剤は、当業者に公知である（例えば、メルク指数を参照）。いくつかの実施形態では、薬剤は膜作用剤である。「膜作用」剤は、主に細胞膜を損傷することによって作用する。膜作用剤の非限定的な例としては、Ｎ−アルキルメラミドおよびパラクロロ水銀安息香酸が挙げられる。いくつかの実施形態では、薬剤は、サイトカイン、ケモカイン、リンホカイン、またはホルモンである。いくつかの実施形態では、薬剤は核酸である。いくつかの実施形態では、核酸は、一つまたは複数のサイトカイン、ケモカイン、リンホカイン、治療用ポリペプチド、アジュバント、またはそれらの組み合わせをコードする。
【０４０４】
分子または治療剤は、電気パルスの投与前、投与中、または投与後に対象に投与することができる。分子は、患者の細胞、細胞群、または組織で、またはその近くに投与することができる。いくつかの実施形態では、分子は、電極およびそれを通って延在する薬剤送達チャネル（例えば、アプリケータ１１０、電極１００、２００、４００、５００、６００、および図４７〜６６に示す薬剤送達チャネル１８）を有するアプリケータを使用して、電気パルスと共局在化され得る。治療剤の化学組成物は、電気パルスの投与に関して薬剤を投与する最も適切な時間を決定する。例えば、特定の理論に拘束されることを望まないが、等電点が低い薬剤（例えば、ネオカルジノスタチン、ＩＥＰ＝３．７８）は、フィールド内の高電荷の薬の静電相互作用を回避するためにエレクトロポレーション後に投与された場合、より効果的である可能性が高いと考えられている。さらに、非常に負のｌｏｇＰ（Ｐはオクタノールと水の分配係数である）を持つ、ブレオマイシンなどの薬剤は、サイズが非常に大きく（ＭＷ＝１４００）、親水性であり、それにより、脂質膜と密接に関連し、腫瘍細胞内に非常にゆっくりと拡散し、通常、電気パルスの前に、または実質的に同時に投与される。さらに、特定の治療剤は、細胞内へのより効率的な侵入を可能にするために、修飾を必要とし得る。例えば、タキソールなどの薬剤は、細胞内へのより効率的な侵入を可能にする水への溶解性を増加させるように変更することができる。いくつかの実施形態では、エレクトロポレーションは、細胞膜に細孔を形成することによって、分子の細胞内への侵入を促進する。
【０４０５】
いくつかの実施形態では、分子または治療剤は、遺伝子の発現を調節するために送達される。「調節する」という用語は、遺伝子の発現の減少（抑制）または増加（刺激）を想定している。細胞増殖性障害が遺伝子の発現と関連している場合、翻訳レベルでの遺伝子の発現を阻害する核酸配列が使用され得る。いくつかの実施形態では、一つまたは複数のアンチセンス核酸、リボザイム、ｓｉＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ、三本鎖物質、またはこれに類するものが、エレクトロポレーションを介して送達され、特定のｍＲＮＡの転写または翻訳を阻害する。いくつかの実施形態では、核酸は、ＲＮＡまたはポリペプチドを発現するように送達される。核酸は、組み換え型、一本鎖もしくは二本鎖、ＤＮＡもしくはＲＮＡ、またはＤＮＡとＲＮＡの組み合わせ、円形もしくは直線状、および／またはスーパーコイル状もしくは弛緩性であり得る。核酸はまた、タンパク質、脂質、ウイルス、ウイルスベクター、キメラウイルス、またはウイルス粒子のうちの一つまたは複数と関連付けられ得る。核酸はまた、裸でもよい。ウイルスは、アデノウイルス、ヘルペスウイルス、ワクシニア、ＤＮＡウイルス、ＲＮＡウイルス、レトロウイルス、ネズミレトロウイルス、トリレトロウイルス、モロニーネズミ白血病ウイルス（ＭｏＭｕＬＶ）、ハーベイネズミ肉腫ウイルス（ＨａＭｕＳＶ）、ネズミ乳腺腫瘍ウイルス（ＭｕＭＴＶ）、ラウス肉腫ウイルス（ＲＳＶ）、ギボンエイプ白血病ウイルス（ＧａＬＶ）であり得るが、これに限定されない。同様に、ウイルスベクター、キメラウイルス、および／またはウイルス粒子は、上述のウイルスのいずれかに由来することができる。
【０４０６】
治療用ポリペプチド
治療用ポリペプチド（上記に列挙した一つのタイプの治療剤）には、免疫調節剤、生物学的応答修飾剤、共刺激分子、代謝酵素およびタンパク質、抗体、チェックポイント阻害剤、およびアジュバントが含まれるがこれらに限定されない。
【０４０７】
「免疫調節剤」という用語は、免疫応答の修飾に関与する物質を包含することを意味する。免疫応答修飾剤の例としては、サイトカイン、ケモカイン、リンホカイン、および抗原結合ポリペプチドが挙げられるがこれらに限定されない。リンホカインは、腫瘍壊死因子、インターロイキン（ＩＬ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５などの、ただしこれらに限定されないＩＬ）、リンホトキシン、マクロファージ活性化因子、遊走阻害因子、コロニー刺激因子、およびアルファインターフェロン、ベータインターフェロン、ガンマ−インターフェロン、およびそれらのサブタイプであり得るが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、免疫応答修飾剤は、一つまたは複数のサイトカイン、ケモカイン、リンホカインまたはサイトカインのサブユニット、ケモカイン、およびリンホカインをコードする核酸を含む。いくつかの実施形態では、免疫調節剤は、免疫刺激剤である。免疫刺激剤の非限定的な例としては、ＩＬ−３３、フラゲリン、ＩＬ−１０受容体、刺激受容体、ＩＲＦ３が挙げられる。「サイトカイン」という用語は、可溶性タンパク質およびペプチドの多様なグループの総称として使用され、ナノからピコモル濃度で液性調節因子として作用し、正常または病的条件下で個々の細胞および組織の機能活性を調節する。本明細書で使用される場合、「免疫刺激性サイトカイン」は、ウイルス、細菌、または腫瘍抗原を含む外来抗原に対する免疫応答を介在または強化するサイトカインを含む。免疫刺激性サイトカインとしては、ＴＮＦα、ＩＬ−１、ＩＬ−１０、ＩＬ−１２、ＩＬ−１２  ｐ３５、ＩＬ−１２  ｐ４０、ＩＬ−１５、ＩＬ−１５Ｒα、ＩＬ−２３、ＩＬ−２７、ＩＦＮα、ＩＦＮβ、ＩＦＮγ、ＩＬ−２、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−７、ＩＬ−９、ＩＬ−２１、およびＴＧＦβが挙げられるが、それらに以下に限定されない。いくつかの実施形態では、免疫刺激性サイトカインは、ＴＮＦα、ＩＬ−１、ＩＬ−１０、ＩＬ−１２、ＩＬ−１２  ｐ３５、ＩＬ−１２  ｐ４０、ＩＬ−１５、ＩＬ−１５Ｒα、ＩＬ−２３、ＩＬ−２７、ＩＦＮα、ＩＦＮβ、ＩＦＮγ、ＩＬ−２、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−７、ＩＬ−９、ＩＬ−２１、およびＴＧＦβの一つまたは複数をコードする核酸である。
【０４０８】
別の治療剤である「共刺激剤」は、Ｔ細胞と抗原提示細胞との間で係合し、抗原提示細胞上の抗原のＴ細胞受容体（「ＴＣＲ」）認識に起因するＴ細胞の刺激信号（すなわち、「共刺激」）と結合するＴ細胞の刺激信号を生成する免疫細胞表面受容体／リガンドのグループのいずれかを指す。共刺激活性は、サイトカインの産生によってＴ細胞について測定することができる。本明細書で使用される場合、「共刺激分子」という用語は、可溶性共刺激剤または共刺激剤の作動薬を含む。共刺激分子には、ＧＩＴＲ、ＣＤ１３７、ＣＤ１３４、ＣＤ４０Ｌ、ＣＤ２７などの作動薬が含まれるがこれらに限定されない。共刺激作動薬には、作動薬抗体、共刺激リガンド（多量体可溶性および膜貫通共刺激リガンドを含む）、共刺激リガンドペプチド、共刺激リガンド模倣物、および共刺激剤の生物学的活性に関与して誘導する他の分子を含むが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、抗原提示細胞に由来する可溶性共刺激分子は、ＧＩＴＲ−Ｌ、ＣＤ１３７−Ｌ、ＣＤ１３４−Ｌ（別名ＯＸ４０−Ｌ）、ＣＤ４０、ＣＤ２８であり得るが、これらに限定されない。共刺激分子の作動薬は、少なくともＧＩＴＲ−Ｌの細胞外ドメイン（ＥＣＤ）を含む、可溶性ＧＩＴＲ−Ｌなどの可溶性分子であり得る。抗原提示細胞に由来する共刺激分子の可溶型は、Ｔ細胞上の同族の受容体／リガンドに結合してＴ細胞の活性化を刺激する天然の共刺激分子の能力を保持している。他の共刺激分子も同様に膜貫通ドメインおよび細胞内ドメインを欠くが、結合パートナーに結合し、生物学的効果を誘発することができる。いくつかの実施形態では、エレクトロポレーションによる腫瘍内送達のために、共刺激分子は、腫瘍細胞で発現される発現ベクターにコードされる。いくつかの実施形態では、共刺激分子は、ＧＩＴＲ、ＧＩＴＲ−Ｌ、ＣＤ１３７、ＣＤ１３７−Ｌ、ＣＤ１３４、ＣＤ１３４−Ｌ、ＣＤ４０、ＣＤ４０Ｌ、ＣＤ２７、およびＤ２８のうちの一つまたは複数をコードする核酸、ならびに類似のものまたはそれらの機能的断片である。共刺激分子は、共刺激分子として生物学的機能を有し、少なくとも８０％のアミノ酸配列同一性、少なくとも９０％の配列同一性、少なくとも９５％の配列同一性、または少なくとも９８％の配列同一性ＧＩＴＲ、ＧＩＴＲ−Ｌ、ＣＤ１３７、ＣＤ１３７−Ｌ、ＣＤ１３４、ＣＤ１３４−Ｌ、ＣＤ４０、ＣＤ４０Ｌ、ＣＤ２７、またはＤ２８、またはそれらの機能的断片を共有する分子を含む。いくつかの実施形態では、共刺激作動薬は、抗体または抗体断片の形態であってもよく、その両方は、プラスミド内でコードされ、エレクトロポレーションによって腫瘍に送達され得る。
【０４０９】
代謝酵素およびタンパク質などの他の治療剤には、抗血管形成化合物が含まれるが、これに限定されない。抗血管形成化合物としては、因子ＶＩＩＩおよび因子ＩＸが含まれるが、これに限定されない。いくつかの実施形態では、代謝酵素またはタンパク質は、一つまたは複数の代謝酵素またはタンパク質、またはその機能的断片をコードしている核酸を含む。
【０４１０】
「抗体」という用語は本明細書で使用される場合、Ｂ細胞の産物およびその変種である免疫グロブリン、ならびにＴ細胞の産物およびその変種であるＴ細胞受容体（ＴｃＲ）を含む別の治療剤である。免疫グロブリンは、免疫グロブリンカッパおよびラムダ、アルファ、ガンマ、デルタ、イプシロンおよびミュー定常領域遺伝子、ならびに無数の免疫グロブリン可変領域遺伝子によって実質的にコードされる一つまたは複数のポリペプチドを含むタンパク質である。軽鎖はカッパまたはラムダのいずれかに分類される。重鎖は、ガンマ、ミュー、アルファ、デルタ、またはイプシロンとして分類され、次に免疫グロブリンクラス、ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、およびＩｇＥをそれぞれ定義する。また、重鎖のサブクラスも公知である。例えば、ヒトにおけるＩｇＧ重鎖は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、およびＩｇＧ４サブクラスのいずれかであり得る。抗体は、完全長の無傷な抗体として、またはその多くのよく特徴付けられた断片として存在する。抗体断片は、全抗体、または合成されたディノーボまたは組み換えＤＮＡ法を用いて得られた抗体および断片の修飾によって生成することができる。抗体断片には、Ｆ（ａｂ′）２、Ｆａｂ′、ｓｃＦｖ、およびＢｙＴＥ断片が含まれるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、抗体は、一つまたは複数の抗体または抗体断片をコードする核酸を含む。
【０４１１】
さらに別の治療剤である「アジュバント」は、抗原に対する免疫応答を強化する物質である。いくつかの実施形態では、アジュバントは、フロイントのアジュバント（完全および不完全）、水酸化アルミニウムやリン酸アルミニウムなどのミネラル塩、さまざまなサイトカイン、リゾレシチン、プルロニックポリオール、ポリアニオン、ペプチド、オイルエマルジョンなどの界面活性物質、およびＢＣＧ（ｂａｃｉｌｌｅ  Ｃａｌｍｅｔｔｅ−Ｇｕｅｒｉｎ）やＣｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｐａｒｖｕｍなどの潜在的に有用なヒトアジュバントを含む、がこれに限定されない。いくつかの実施形態では、アジュバントは、キーホールリンペットヘモシアニン、破傷風トキソイド、ジフテリアトキソイド、オボアルブミン、コレラ毒素、またはそれらの機能的断片であるか、またはそれを含む。いくつかの実施形態では、アジュバントは、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）、Ｆｌｔ３リガンド、ＬＡＭＰ１、カルレティキュリン、ヒト熱ショックタンパク質９６、ＣＳＦ受容体１またはその機能的断片であるか、またはこれらを含む。いくつかの実施形態では、アジュバントは、一つまたは複数のアジュバントまたはアジュバント断片（すなわち、遺伝学的アジュバント）をコードする核酸を含む。いくつかの実施形態では、遺伝学的アジュバントは抗原に融合される。抗原は、腫瘍抗原、共有腫瘍抗原、またはウイルス抗原であり得るが、これらに限定されない。抗原の非限定的な例としては、ＮＹ−ＥＳＯ−１またはその断片、ＭＡＧＥ−Ａ１、ＭＡＧＥ−Ａ２、ＭＡＧＥ−Ａ３、ＭＡＧＥ−Ａ１０、ＳＳＸ−２、ＭＡＲＴ−１、チロシナーゼ、Ｇｐ１００、サバイビン、ｈＴＥＲＴ、ＰＲＳ  ｐａｎ−ＤＲ、Ｂ７−Ｈ６、ＨＰＶ−７、ＨＰＶ１６  Ｅ６／Ｅ７、ＨＰＶ１１  Ｅ６、ＨＰＶ６ｂ／１１  Ｅ７、ＨＣＶ−ＮＳ３、インフルエンザＨＡ、インフルエンザＮＡ、およびポリオーマウイルスを含む。いくつかの実施形態では、遺伝学的アジュバントは、サイトカイン、または共刺激分子に融合される。
【０４１２】
別の治療剤である免疫チェックポイント分子は、Ｔ細胞機能不全またはアポトーシスを誘発する免疫細胞表面受容体／リガンドの群のいずれかを指す。これらの免疫阻害性標的は，過剰な免疫反応を減弱させ，自己寛容性を確保する。本明細書で使用される場合、「チェックポイント阻害剤」は、免疫チェックポイント分子の効果を遮断することによって免疫抑制を防止する分子を含む。チェックポイント阻害剤としては、抗体および抗体断片、ナノボディ、ダイアボディ、チェックポイント分子の可溶性結合パートナー、低分子治療剤、ペプチド拮抗薬などが挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、チェックポイント阻害剤は、ＣＴＬＡ−４拮抗薬、ＰＤ−１拮抗薬、ＰＤ−Ｌ１拮抗薬、ＬＡＧ−３拮抗薬、ＴＩＭ３拮抗薬、ＫＩＲ拮抗薬、ＢＴＬＡ拮抗薬、Ａ２ａＲ拮抗薬、ＨＶＥＭ拮抗薬であり得るが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、チェックポイント阻害剤は、ニボルマブ（ＯＮＯ−４５３８／ＢＭＳ−９３６５５８、ＭＤＸ１  １０６、ＯＰＤＩＶＯ）、ペンブロリズマブ（ＭＫ−３４７５、ＫＥＹＴＲＵＤＡ）、ピジリズマブ（ＣＴ−０１１）、およびＭＰＤＬ３２８０Ａ（ＲＯＣＨＥ）を含む群から選択される。いくつかの実施形態では、チェックポイント阻害剤ポリペプチドは、腫瘍への送達である核酸によってコードされ得る。
【０４１３】
発現ベクター
記載されるポリペプチドのいずれかは、核酸上にコードされて、さらに別の治療剤を形成し得る。核酸は、発現ベクターまたはプラスミドであり得るが、これに限定されない。「プラスミド」または「ベクター」という用語は、細菌送達ベクター、ウイルスベクター送達ベクター、エピソームプラスミド、組込みプラスミド、またはファージベクターを含む任意の公知の送達ベクターを含む。「ベクター」という用語は、細胞内で一つまたは複数のポリペプチドを発現することができる構築物を指す。
【０４１４】
コードされたポリペプチドは、発現ベクター中で、第二のポリペプチドをコードする配列に連結され得る。いくつかの実施形態では、発現ベクターは、融合タンパク質をコードする。「融合タンパク質」という用語は、ペプチド結合または他の化学結合によって互いに連結された二つ以上のポリペプチドを含むタンパク質を指す。いくつかの実施形態では、融合タンパク質は、二つのポリペプチドを含有する一本鎖ポリペプチドとして組換え発現される。二つ以上のポリペプチドは、直接、または一つまたは複数のアミノ酸を含むリンカーを介して連結され得る。
【０４１５】
いくつかの実施形態では、核酸（すなわち、発現ベクター）は、両方のポリペプチドが単一の多シストロン性伝令から発現されることを可能にする介在するエクソンスキッピングモチーフにより、単一のプロモーターから発現される二つのポリペプチドをコードする。いくつかの実施形態では、発現ベクターは、
Ｐ−Ａ−Ｔ−Ｃ、Ｐ−Ｃ−Ｔ−Ａ、またはＰ−Ａ−Ｔ−Ｂを含む。
Ｐは、プロモーターであり、Ａ、Ｂ、およびＣは、治療用ポリペプチドをコードする核酸配列であり、Ｔは、翻訳修飾要素である。翻訳修飾要素は、内部リボソーム侵入部位（ＩＲＥＳ）、およびＰ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２Ａ、またはＦ２Ａなどであるがこれらに限定されないリボソームスキップ調節因子であり得るが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、ＡおよびＢは、免疫調節分子をコードする核酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡおよびＢは、ＩＬ−１２  ｐ３５およびＩＬ−１２  ｐ４０などのサイトカインまたはサイトカインサブユニットをコードするが、これらに限定されない。
【０４１６】
いくつかの実施形態では、核酸（すなわち、発現ベクター）は、三つのタンパク質全てが単一の多シストロン性伝令から発現されることを可能にする介在するリボソームスキップモチーフにより、単一のプロモーターから発現される三つのポリペプチドをコードする。いくつかの実施形態では、発現ベクターは、
Ｐ−Ａ−Ｔ−Ｂ−Ｔ−ＣまたはＰ−Ｃ−Ｔ−Ａ−Ｔ−Ｂを含む。
Ｐは、プロモーターであり、Ａ、Ｂ、およびＣは、治療用ポリペプチドをコードする核酸配列であり、Ｔは、翻訳修飾要素である。翻訳修飾要素は、内部リボソーム侵入部位（ＩＲＥＳ）およびＰ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２ＡまたはＦ２Ａなどであるがこれらに限定されないリボソームスキップ調節因子を含むが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、ＡおよびＢは、免疫調節分子および／または共刺激分子、またはそのサブユニットをコードする核酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡおよびＢは、ヘテロ二量体サイトカインの鎖をコードする。いくつかの実施形態では、Ｃは、共刺激分子、遺伝学的アジュバント、抗原、遺伝学的アジュバント−抗原融合ポリペプチド、ケモカイン、または抗原結合ポリペプチドをコードする核酸配列を含む。ケモカインには、ＣＸＣＬ９が含まれるが、これらに限定されない。抗原結合ポリペプチドは、ｓｃＦｖであり得るが、これに限定されない。ｓｃＦｖは、抗ＣＤ３  ｓｃＦｖおよび抗ＣＴＬＡ−４  ｓｃＦｖであり得るが、これらに限定されない。
【０４１７】
プロモーターは、ヒトＣＭＶプロモーター、シミアンＣＭＶプロモーター、ＳＶ−４０プロモーター、ｍＰＧＫプロモーター、およびβアクチンプロモーターであり得るが、これらに限定されない。
【０４１８】
いくつかの実施形態では、ＡはＩＬ−１２  ｐ３５、ＩＬ−２３ｐ１９、ＥＢＩ３、またはＩＬ−１５をコードし、ＢはＩＬ−１２  ｐ４０、ＩＬ−２７ｐ２８、またはＩＬ−１５Ｒαをコードする。
【０４１９】
いくつかの実施形態では、遺伝学的アジュバントは、Ｆｌｔ３リガンド、ＬＡＭＰ−１、カルレティキュリン、ヒト熱ショックタンパク質９６、ＧＭ−ＣＳＦ、およびＣＳＦ受容体１を含む。
【０４２０】
いくつかの実施形態では、抗原は、ＮＹＥＳＯ−１、ＯＶＡ、ＲＮＥＵ、ＭＡＧＥ−Ａ１、ＭＡＧＥ−Ａ２、Ｍａｇｅ−Ａ１０、ＳＳＸ−２、Ｍｅｌａｎ−Ａ、ＭＡＲＴ−１、Ｔｙｒ、Ｇｐ１００、ＬＡＧＥ−１、Ｓｕｒｖｉｖｉｎ、ＰＲＳ  ｐａｎ−ＤＲ、ＣＥＡペプチドＣＡＰ−１、ＯＶＡ、ＨＣＶ−ＮＳ３、ＨＰＶワクチンペプチドを含む。
【０４２１】
ＩＬ−１２  ｐ３５およびＩＬ−１２  ｐ４０ポリペプチドは、マウスまたはヒトのＩＬ−１２  ｐ３５およびＩＬ−１２  ｐ４０であり得る。
【０４２２】
一部の実施形態では、ＰはＣＭＶプロモーターであり、ＡはＩＬ−１２  ｐ３５ポリペプチドをコードし、ＴはＩＲＥＳであり、ＢはＩＬ−１２  ｐ４０ポリペプチドをコードする。
【０４２３】
一部の実施形態では、ＰはＣＭＶプロモーターであり、ＡはＩＬ−１２  ｐ３５ポリペプチドをコードし、ＴはＰ２Ａ要素であり、ＢはＩＬ−１２  ｐ４０ポリペプチドをコードする。
【０４２４】
一部の実施形態では、ＰはＣＭＶプロモーターであり、ＡはヒトＩＬ−１２  ｐ３５（ｈ  ＩＬ−１２  ｐ３５）ポリペプチドをコードし、ＴはＩＲＥＳであり、ＢはヒトＩＬ−１２  ｐ４０（ｈＩＬ−１２  ｐ４０）ポリペプチドをコードする。
【０４２５】
一部の実施形態では、ＰはＣＭＶプロモーターであり、ＡはヒトＩＬ−１２  ｐ３５ポリペプチドをコードし、ＴはＰ２Ａ要素であり、ＢはヒトＩＬ−１２  ｐ４０ポリペプチドをコードする。
【０４２６】
いくつかの実施形態では、ＡはＩＬ−１２  ｐ３５をコードし、ＢはＩＬ−１２  ｐ４０ポリペプチドをコードし、Ｃは共刺激ポリペプチドをコードする。
【０４２７】
いくつかの実施形態では、ＡはＩＬ−１２  ｐ３５をコードし、ＢはＩＬ−１２  ｐ４０ポリペプチドをコードし、ＣはＮＹ−ＥＳＯ１−Ｆｌｔ３ＬまたはＦｌｔ３Ｌ−ＮＹ−ＥＳＯ１融合ポリペプチドをコードする。
【０４２８】
いくつかの実施形態では、ＡはｈＩＬ−１２  ｐ３５ポリペプチドをコードし、ＴはＰ２Ａ要素であり、ＢはｈＩＬ−１２  ｐ４０ポリペプチドをコードし、ＣはＦＬＴ３Ｌ−ＮＹＥＳＯ１融合ポリペプチドをコードする。
【０４２９】
いくつかの実施形態では、ＡはｈＩＬ−１２  ｐ３５ポリペプチドをコードし、ＴはＩＲＥＳ要素であり、ＢはｈＩＬ−１２  ｐ４０ポリペプチドをコードし、ＣはＦＬＴ３Ｌ−ＮＹＥＳＯ１融合ポリペプチドをコードする。
【０４３０】
いくつかの実施形態では、ＰはＣＭＶプロモーターであり、ＡはｈＩＬ−１２  ｐ３５ポリペプチドをコードし、ＴはＰ２Ａ要素であり、ＢはｈＩＬ−１２  ｐ４０ポリペプチドをコードし、ＣはＦＬＴ３Ｌ−ＮＹＥＳＯ１融合ポリペプチドをコードする。
【０４３１】
いくつかの実施形態では、ＰはＣＭＶプロモーターであり、ＡはｈＩＬ−１２  ｐ３５ポリペプチドをコードし、ＴはＩＲＥＳ要素であり、ＢはｈＩＬ−１２  ｐ４０ポリペプチドをコードし、ＣはＦＬＴ３Ｌ−ＮＹＥＳＯ１融合ポリペプチドをコードする。
【０４３２】
いくつかの実施形態では、ＡはＩＬ−１２  ｐ３５をコードし、ＢはＩＬ−１２  ｐ４０ポリペプチドをコードし、Ｃは抗ＣＤ３  ｓｃＦｖを含むポリペプチドをコードする。いくつかの実施形態では、ＡはｈＩＬ−１２  ｐ３５ポリペプチドをコードし、ＴはＰ２Ａ要素であり、ＢはｈＩＬ−１２  ｐ４０ポリペプチドをコードし、Ｃは抗ＣＤ３  ｓｃＦｖを含むポリペプチドをコードする。いくつかの実施形態では、ＡはｈＩＬ−１２  ｐ３５ポリペプチドをコードし、ＴはＩＲＥＳ要素であり、ＢはｈＩＬ−１２  ｐ４０ポリペプチドをコードし、Ｃは抗ＣＤ３  ｓｃＦｖを含むポリペプチドをコードする。いくつかの実施形態では、ＰはＣＭＶプロモーターであり、ＡはｈＩＬ−１２  ｐ３５ポリペプチドをコードし、ＴはＰ２Ａ要素であり、ＢはｈＩＬ−１２  ｐ４０ポリペプチドをコードし、Ｃは抗ＣＤ３  ｓｃＦｖを含むポリペプチドをコードする。いくつかの実施形態では、ＰはＣＭＶプロモーターであり、ＡはｈＩＬ−１２  ｐ３５ポリペプチドをコードし、ＴはＩＲＥＳ要素であり、ＢはｈＩＬ−１２  ｐ４０ポリペプチドをコードし、Ｃは抗ＣＤ３  ｓｃＦｖを含むポリペプチドをコードする。
【０４３３】
いくつかの実施形態では、ＡはＩＬ−１２  ｐ３５をコードし、ＢはＩＬ−１２  ｐ４０ポリペプチドをコードし、ＣはＣＸＣＬ９をコードする。いくつかの実施形態では、ＡはｈＩＬ−１２  ｐ３５ポリペプチドをコードし、ＴはＰ２Ａ要素であり、ＢはｈＩＬ−１２  ｐ４０ポリペプチドをコードし、ＣはＣＸＣＬ９をコードする。いくつかの実施形態では、ＡはｈＩＬ−１２  ｐ３５ポリペプチドをコードし、ＴはＩＲＥＳ要素であり、ＢはｈＩＬ−１２  ｐ４０ポリペプチドをコードし、ＣはＣＸＣＬ９をコードする。いくつかの実施形態では、ＰはＣＭＶプロモーターであり、ＡはｈＩＬ−１２  ｐ３５ポリペプチドをコードし、ＴはＰ２Ａ要素であり、ＢはｈＩＬ−１２  ｐ４０ポリペプチドをコードし、ＣはＣＸＣＬ９をコードする。いくつかの実施形態では、ＰはＣＭＶプロモーターであり、ＡはｈＩＬ−１２  ｐ３５ポリペプチドをコードし、ＴはＩＲＥＳ要素であり、ＢはｈＩＬ−１２  ｐ４０ポリペプチドをコードし、ＣはＣＸＣＬ９をコードする。
【０４３４】
いくつかの実施形態では、ＡはＩＬ−１２  ｐ３５をコードし、ＢはＩＬ−１２  ｐ４０ポリペプチドをコードし、ＣはＣＴＬＡ−４  ｓｃＦｖをコードする。いくつかの実施形態では、ＡはｈＩＬ−１２  ｐ３５ポリペプチドをコードし、ＴはＰ２Ａ要素であり、ＢはｈＩＬ−１２  ｐ４０ポリペプチドをコードし、ＣはＣＴＬＡ−４  ｓｃＦｖをコードする。いくつかの実施形態では、ＡはｈＩＬ−１２  ｐ３５ポリペプチドをコードし、ＴはＩＲＥＳ要素であり、ＢはｈＩＬ−１２  ｐ４０ポリペプチドをコードし、ＣはＣＴＬＡ−４  ｓｃＦｖをコードする。いくつかの実施形態では、ＰはＣＭＶプロモーターであり、ＡはｈＩＬ−１２  ｐ３５ポリペプチドをコードし、ＴはＰ２Ａ要素であり、ＢはｈＩＬ−１２  ｐ４０ポリペプチドをコードし、ＣはＣＴＬＡ−４  ｓｃＦｖをコードする。いくつかの実施形態では、ＰはＣＭＶプロモーターであり、ＡはｈＩＬ−１２  ｐ３５ポリペプチドをコードし、ＴはＩＲＥＳ要素であり、ＢはｈＩＬ−１２  ｐ４０ポリペプチドをコードし、ＣはＣＴＬＡ−４  ｓｃＦｖをコードする。
【０４３５】
悪性腫瘍の治療方法であって、一つまたは複数の治療用ポリペプチドをコードするプラスミドまたは発現ベクターをエレクトロポレーションと組み合わせて投与することが、病変（例えば、原発性または二次性腫瘍）に対する治療効果を有する、方法が記載される。また、一つまたは複数の治療用ポリペプチドをコードするプラスミドまたは発現ベクターをエレクトロポレーションと組み合わせて投与することが、原発性腫瘍ならびに遠位腫瘍および転移に対する治療効果を有する、悪性腫瘍の治療のための方法が記載される。いくつかの実施形態では、プラスミドまたは発現ベクターは、免疫調節剤、生物学的応答修飾剤、共刺激分子、代謝酵素およびタンパク質、抗体、チェックポイント阻害剤、および／またはアジュバントのうちの一つまたは複数をコードする。
【０４３６】
いくつかの実施形態では、プラスミドまたは発現ベクターは、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、およびＩＬ−１２とＩＬ−１５の組み合わせから選択される少なくとも一つの免疫刺激性サイトカインをコードする。
【０４３７】
いくつかの実施形態では、プラスミドまたは発現ベクターは、共刺激分子をコードする。共刺激分子は、ＧＩＴＲ、ＣＤ１３７、ＣＤ１３４、ＣＤ４０Ｌ、およびＣＤ２７作動薬であり得るが、これらに限定されない。共刺激作動薬は、抗体または抗体断片の形態であってもよく、その両方は、プラスミドまたは発現ベクターでコードされ得、エレクトロポレーションによって腫瘍に送達される。
【０４３８】
いくつかの実施形態では、プラスミドまたは発現ベクターは、ＣＸＣＬ９、抗ＣＤ３  ｓｃＦｖ、または抗ＣＴＬＡ−４  ｓｃＦｖをコードする。
【０４３９】
記載されるエレクトロポレーションシステムおよびアプリケータを使用して、記載される発現ベクターのうちの一つまたは複数の治療有効量をエレクトロポレーションにより対象に投与することを含む、癌を治療する方法が記載される。一つまたは複数の発現ベクターが、腫瘍、腫瘍微小環境、腫瘍辺縁組織、腫瘍周囲領域、リンパ節、皮内領域、および／または筋肉に注射され、エレクトロポレーション療法が、腫瘍、腫瘍微小環境、腫瘍辺縁組織、腫瘍周囲領域、リンパ節、皮内領域、および／または筋肉に適用される。エレクトロポレーション療法は、記載されたエレクトロポレーションシステムおよび／またはアプリケータによって適用され得る。記載された発現ベクターは、記載されたエレクトロポレーションシステムおよびアプリケータを使用して送達された場合、コードされたタンパク質の局所発現をもたらし、Ｔ細胞動員および抗腫瘍活性をもたらす。いくつかの実施形態では、本方法はまた、アブスコパル効果、すなわち、一つまたは複数の未治療の腫瘍の退縮をもたらす。いくつかの実施形態では、退縮は、固形腫瘍の減量を含む。
【０４４０】
いくつかの実施形態では、エレクトロポレーションを用いて治療用ポリペプチドをコードするプラスミドまたは発現ベクターの腫瘍内送達によって、療法が達成される。
【０４４１】
併用療法
いくつかの実施形態では、治療方法は、併用療法を含む。併用療法は、治療用分子または治療の組み合わせを含む。療法的治療には、電気パルス（すなわち、エレクトロポレーション）、放射線、抗体療法、および化学療法が含まれるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、併用療法の実施は、エレクトロポレーションのみで達成される。いくつかの実施形態では、併用療法の実施は、エレクトロポレーションと全身送達の組み合わせによって達成される。いくつかの実施形態では、一つまたは複数の免疫調節性ペプチドを発現するプラスミドは、腫瘍内エレクトロポレーションにより投与され、チェックポイント阻害剤は、全身に投与される。いくつかの実施形態では、免疫調節性ペプチドは、ＩＬ−１２、ＣＤ３  ｈａｌｆ−ＢｉＴＥ、ＣＸＣＬ９、またはＣＴＬＡ−４  ｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、一つまたは複数の免疫調節性ペプチドは、ＩＬ−１２およびＣＤ３  ｈａｌｆ−ＢｉＴＥ、ＣＸＣＬ９、またはＣＴＬＡ−４  ｓｃＦｖを含む。いくつかの実施形態では、併用療法の実施は、エレクトロポレーションと放射線の組み合わせによって達成される。治療的エレクトロポレーションは、一つまたは複数の追加の療法的治療と組み合わせるか、またはそれによって実施すことができる。一つまたは複数の追加の治療は、全身送達、腫瘍内送達、および／または放射線によって送達することができる。一つまたは複数の追加の治療は、エレクトロポレーション療法の前、エレクトロポレーション療法と同時に、またはエレクトロポレーション療法の後に実施すことができる。いくつかの実施形態では、治療（すなわち、治療剤）は、電極およびそれを通って延びる薬剤送達チャネルの両方を有するアプリケータを使用して（例えば、図４７〜６６に示されるアプリケータ１１０、電極１００、２００、４００、５００、６００、および薬剤送達チャネル１８）、電気パルスまたは他の治療と共局所的に投与することができる。こうした実施形態では、ジェネレータは、電極に電気パルスを送達して標的組織を電気穿孔し、薬剤送達チャネルを介して投与される治療剤が標的組織に浸透して治療することを可能にし得る。
【０４４２】
いくつかの実施形態では、共刺激作動薬をコードする発現ベクターの腫瘍内エレクトロポレーションは、他の治療エンティティとともに投与することができ、その全てが治療剤であり得る。いくつかの実施形態では、共刺激分子は、ＣＴＬＡ４、サイトカイン（すなわち、ＩＬ−１２またはＩＬ−２）、腫瘍ワクチン、低分子薬剤、低分子阻害剤、標的放射線、抗ＰＤ１拮抗薬、および抗ＰＤＬ１拮抗薬Ａｂの一つまたは複数と組み合わせる。低分子薬剤は、ブレオマイシン、ゲムザール、サイトザン、５−フルオロ−ウラシル、アドリアマイシン、およびその他の化学療法薬剤であり得るが、これらに限定されない。低分子阻害剤は、スニチニブ、イマチニブ、ベムラフェニブ、ベバシズマブ、セトキシム、ラパマイシン、ボルテゾミブ、ＰＩ３Ｋ−ＡＫＴ阻害剤、およびＩＡＰ阻害剤であり得るが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、共刺激分子は、ＴＬＲ作動薬（例えば、フラゲリン、ＣｐＧ）、ＩＬ−１０拮抗薬（例えば、抗ＩＬ−１０または抗ＩＬ−１０Ｒ抗体）、ＴＧＦβ拮抗薬（例えば、抗ＴＧＦβ抗体）、ＰＧＥ２阻害剤、Ｃｂｌ−ｂ（Ｅ３リガーゼ）阻害剤、ＣＤ３作動薬、テロメラーゼ拮抗薬等の一つまたは複数と組み合わせることができる。特に、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒａ、および／またはＧＩＴＲ−Ｌのさまざまな組み合わせが意図される。ＩＬ−１２およびＩＬ−１５は相乗的な抗腫瘍効果を有することが示される。いくつかの実施形態では、腫瘍内エレクトロポレーション療法により二つ以上の治療用ポリペプチドが送達される。治療用ポリペプチドは、単一発現ベクターもしくはプラスミド、または多重発現ベクターもしくはプラスミドから発現され得る。
【０４４３】
いくつかの実施形態では、併用療法は、チェックポイント阻害剤および免疫刺激性サイトカインを含む治療剤の投与を含む。いくつかの実施形態では、チェックポイント阻害剤は、発現ベクター上にコードされ、エレクトロポレーション療法によって腫瘍に送達される。いくつかの実施形態では、免疫刺激性サイトカインは、発現ベクター上でコードされ、エレクトロポレーション療法によって腫瘍に送達される。いくつかの実施形態では、チェックポイント阻害剤および免疫刺激性サイトカインは、発現ベクター上でコードされ、発現は、単一のプロモーターによって駆動され、エレクトロポレーション療法によって癌性腫瘍に送達される。いくつかの実施形態では、チェックポイント阻害剤は全身投与ポリペプチドであり、免疫刺激性サイトカインは、免疫刺激性サイトカインをコードする発現ベクターの腫瘍内エレクトロポレーションによって投与される。いくつかの実施形態では、免疫刺激性サイトカインをコードする発現ベクターは、ＣＤ３  ｈａｌｆ−ＢｉＴＥ、ＣＸＣＬ９またはＣＴＬＡ−４  ｓｃＦｖをさらにコードする。
【０４４４】
チェックポイント阻害剤療法は、免疫刺激性サイトカインのエレクトロポレーションによって、腫瘍内送達の前、間、または後に起こり得る。チェックポイント阻害剤は、抗体または抗体断片の形態であってもよく、その両方はプラスミド内でコードされ、エレクトロポレーションによって腫瘍に送達されてもよく、またはタンパク質／ペプチドとして全身に送達され得る。いくつかの実施形態では、チェックポイント阻害剤は、発現ベクター上にコードされ、エレクトロポレーション療法によって腫瘍に送達される。いくつかの実施形態では、チェックポイント阻害剤は、免疫刺激性サイトカインのエレクトロポレーションの後に投与され、それによって特定の治療剤の投与は、エレクトロポレーションステップに対して異なる時間に互い違いに配置され、投与される。
治療
【０４４５】
「治療」という用語は、癌細胞の増殖の阻害または減少、癌細胞の破壊、癌細胞の増殖の防止または悪性細胞の開始の防止、または形質転換された前悪性細胞の悪性疾患への進行の停止または逆転、または疾患の改善を含むが、これらに限定されない。
【０４４６】
いくつかの実施形態では、対象における腫瘍の大きさを縮小させるか、または癌細胞の増殖を阻害するか、または癌に罹患する対象における転移性癌の発生を低減または阻害するための方法が提供される。
【０４４７】
いくつかの実施形態では、本方法のうちの一つまたは複数は、癌性腫瘍を有する対象を治療することを含み、癌性腫瘍に、治療用分子または治療剤の有効用量を注射することと、エレクトロポレーション療法を、腫瘍に施すこととを含む。いくつかの実施形態では、方法のうちの一つまたは複数は、癌性腫瘍を有する対象を治療することを含み、癌性腫瘍に、治療用ポリペプチドをコードする発現プラスミドの有効用量を注射することと、エレクトロポレーション療法を腫瘍に施すこととを含む。
【０４４８】
いくつかの実施形態では、記載される装置は、対象の細胞、細胞群、または組織に、その中の細胞を損傷または殺傷するための電気パルスを治療用途に使用することができる。一部の実施形態では、細胞は癌細胞である。いくつかの実施形態では、癌細胞は悪性である。
【０４４９】
いくつかの実施形態では、記載される装置は、対象の細胞、細胞群、または組織への電気パルスの治療用途に使用され得、それによって、細胞、細胞群、または組織への治療用分子の侵入を促進する。いくつかの実施形態では、記載される装置は、細胞、細胞群、または組織に治療用分子を投与することができる。いくつかの実施形態では、記載されたデバイスは、電気パルスと治療用分子が、アプリケータの位置を変えたり、治療装置を変更したりすることなく、同じ細胞、細胞群、または組織に共局在するように、電気パルスの治療用途および治療用分子の投与の両方に使用することができる。一部の実施形態では、細胞は癌細胞である。いくつかの実施形態では、癌細胞は悪性である。
【０４５０】
いくつかの実施形態では、治療用分子または発現ベクターは、エレクトロポレーション処理と実質的に同時に投与される。「実質的に同時に」という用語は、分子およびエレクトロポレーション処理が、時間に関して、すなわち、細胞に対する電気パルスの効果が低下する前に、合理的に互いに近くに投与されることを意味する。分子または治療剤の投与は、例えば、腫瘍の性質、患者の状態、分子のサイズおよび化学特性、ならびに分子の半減期などの因子に依存する。
【０４５１】
治療剤の一部の実施形態では、分子は、一つまたは複数の薬学的に許容可能な賦形剤と組み合わされる。薬学的に許容可能な賦形剤（賦形剤）は、ＡＰＩ（分子）とともに意図的に含有される活性医薬品成分（ＡＰＩ、治療用製品）以外の物質である。賦形剤は、意図される用量で治療効果を行使しない、または行使することを意図しない。賦形剤は、ａ）製造中のＡＰＩの処理を支援するように、ｂ）ＡＰＩの安定性、バイオアベイラビリティ、または患者の受容性を保護、サポート、または強化するように、ｃ）製品の識別を支援するように、および／またはｄ）保管中または使用中のＡＰＩの送達の全体的な安全性、有効性のその他の属性を強化するように作用することができる。薬学的に許容可能な賦形剤は、不活性物質であっても、そうでなくてもよい。賦形剤には、吸収促進剤、付着防止剤、消泡剤、酸化防止剤、結合剤、緩衝剤、キャリア、コーティング剤、着色剤、送達促進剤、送達ポリマー、デキストラン、デキストロース、希釈剤、崩壊剤、乳化剤、エクステンダー、フィラー、フレーバー、滑剤、保湿剤、潤滑剤、油、ポリマー、防腐剤、生理食塩水、塩、溶剤、糖、懸濁剤、徐放性マトリックス、甘味料、増粘剤、張性剤、展色剤、撥水剤、および湿潤剤が含まれるが、これらに限定されない。
【０４５２】
記載されたエレクトロポレーション装置および方法は、細胞、細胞群、または組織を治療するために使用され得る。いくつかの実施形態では、記載したエレクトロポレーション装置および方法は、一つまたは複数の病変を治療するために使用され得る。いくつかの実施形態では、記載したエレクトロポレーション装置および方法は、腫瘍細胞を治療するために使用され得る。腫瘍細胞は、癌細胞であり得るが、これに限定されない。「癌」という用語は、不適切な細胞増殖、異常または過剰な細胞増殖によって一般的に特徴付けられる無数の疾患を含む。癌は、固形癌、肉腫、癌腫、およびリンパ腫であり得るが、これらに限定されない。癌はまた、膵臓、皮膚、脳、肝臓、胆嚢、胃、リンパ節、乳房、肺、頭頸部、喉頭、咽頭、口唇、喉、心臓、腎臓、筋肉、結腸、前立腺、胸腺、精巣、子宮、卵巣、皮膚および皮下癌であり得るが、これらに限定されない。皮膚癌は、黒色腫および基底細胞癌であり得るが、これらに限定されない。黒色腫は、皮膚および皮下黒色腫であり得るが、これらに限定されない。乳癌は、ＥＲ陽性乳癌、ＥＲ陰性乳癌、およびトリプルネガティブ乳癌であり得るが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、腫瘍細胞は、膠芽腫を含み得る。癌は、皮膚病変または皮下病変であり得るが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、記載された装置および方法は、細胞増殖性障害を治療するために使用され得る。「細胞増殖性障害」という用語は、悪性細胞集団および非悪性細胞集団を示し、形態学的にも遺伝学的にも、周囲組織とは異なるように見えることが多い。いくつかの実施形態では、記載された装置および方法は、ヒトを治療するために使用され得る。いくつかの実施形態では、記載される装置および方法は、非ヒト動物または哺乳類を治療するために使用され得る。非ヒト哺乳類は、マウス、ラット、ウサギ、イヌ、ネコ、ブタ、ウシ、ヒツジ、およびウマであり得るが、これらに限定されない。分子または治療剤およびエレクトロポレーションの投与は、例えば、腫瘍の性質、患者の状態、分子のサイズおよび化学特性、ならびに分子の半減期などの因子に応じて、任意の間隔で発生し得る。
【０４５３】
記載されたエレクトロポレーション装置および方法は、癌または他の非癌性（良性）増殖物に罹患した患者での使用が意図される。これらの増殖は、病変、ポリープ、新生物（例えば、乳頭状尿路上皮腫瘍）、乳頭腫、悪性腫瘍、腫瘍（例えば、クラトスキン腫瘍、肺門腫瘍、非浸潤性乳頭状尿路上皮腫瘍、胚細胞腫瘍、ユーイング腫瘍、アスキン腫瘍、原始神経外胚葉性腫瘍、レイディグ細胞腫瘍、ウィルムス腫瘍、セルトリ細胞腫瘍）、肉腫、癌腫（例えば、扁平上皮癌、閉鎖性癌、腺癌、腺扁平上皮癌、胆管癌、肝細胞癌、浸潤性乳頭状尿路上皮癌、扁平上皮癌）、しこり、またはその他の種類の癌性または非癌性の増殖のいずれかとして現れる可能性がある。本実施形態の装置および方法で治療される腫瘍は、非侵襲的、侵襲的、表在的、乳頭状、平坦、転移性、局所的、一中心的、多中心的、低悪性度、および高悪性度のいずれかであり得る。
【０４５４】
記載したエレクトロポレーション装置および方法は、多数の種類の悪性腫瘍（すなわち、癌）および良性腫瘍での使用のために意図される。例えば、本明細書に記載される装置および方法は、副腎皮質癌、肛門がん、胆管癌（例えば、求心性周毛膜癌、遠位胆管癌、肝内胆管癌）、膀胱癌、良性および癌性骨癌（例えば、骨腫、類骨骨腫、骨芽細胞腫、骨軟骨腫、血管腫、軟骨類線維腫、骨肉腫、軟骨肉腫、線維肉腫、悪性線維性組織球腫、骨の巨細胞腫瘍、コルドマ、リンパ腫、多発性骨髄腫）、脳および中枢神経系がん（例えば、髄膜腫、星細胞腫、乏突起膠腫、上衣腫、グリオマス、髄芽腫、神経節神経膠腫、シュワンノマ、胚芽腫、頭蓋咽頭腫）、乳癌（例えば、管状上皮内癌、浸潤性乳管癌、浸潤性小葉癌、上皮内小葉癌、女性化乳房）、キャッスルマン病（例えば、巨大リンパ節過形成、血管濾胞リンパ節過形成）、子宮頸がん、大腸癌、子宮内膜がん（例えば、子宮内膜腺がん、アデノカントーマ、乳頭状漿液性腺がん、透明細胞）、食道癌、胆嚢癌（粘液腺癌、小細胞癌）、消化管カルチノイド腫瘍（例えば、脈絡アデノーマデストリエンス、破壊性絨毛腺腫）、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、カポジ肉腫、腎臓がん（例えば、腎細胞がん）、喉頭および下咽頭がん、肝癌（例えば、血管腫、肝腺腫、限局性結節性過形成、肝細胞癌）、肺がん（例えば、小細胞肺がん、非小細胞肺癌）、中皮腫、形質細胞腫、鼻腔および副鼻腔癌（例えば、筋腫、正中線肉芽腫）、上咽頭癌、神経芽腫、口腔および口腔咽頭がん、卵巣癌、膵癌、陰茎癌、下垂体がん、前立腺癌、網膜芽細胞腫、横紋筋肉腫（例えば、胚性横紋筋肉腫、肺胞横紋筋肉腫、多形性横紋筋肉腫）、唾液腺癌、皮膚癌、メラノーマと非メラノーマの両方の皮膚がん）、胃がん、精巣がん（例えば、精上皮腫、非セミノーマ生殖細胞がん）、胸腺癌、甲状腺癌（例えば、濾胞癌、未分化癌、低分化癌、甲状腺髄様癌、甲状腺リンパ腫）、膣がん、外陰癌、および子宮癌（例えば、子宮平滑筋肉腫）での使用が意図されている。本明細書に記載されるように、病変は、病変が存在する、またはその上にある器官または領域に関連して記載され得る。例えば、病変が、肺および／または肺組織の任意の部分に付着され、その上に配置される、またはその中に配置される場合、またはそうでなければ、本開示に鑑み、当業者によって肺と関連付けられる場合、病変は「肺にある」とみなされ得る。
【０４５５】
いくつかの実施形態では、電気エネルギーの電気パルスは、標的部位（例えば、腫瘍辺縁組織）の近くまたはその周囲の組織に印加される。電気パルスは、腫瘍の切除前または切除後のいずれかで、腫瘍部位の近くまたはその周囲の組織に印加することができる。電気パルスおよび随意に治療用分子は、癌細胞を殺すまたは損傷するため、または一つまたは複数の治療用分子を送達するために、腫瘍部位の近くまたはその周囲の組織に適用され得る。治療用分子は、対象または組織に静脈内に、または腫瘍上および腫瘍の周りに直接注射することによって投与することができる。電気パルスおよび随意に治療用分子を腫瘍辺縁組織に送達して、対象から切除された腫瘍の局所における、または隣接した哺乳類組織における腫瘍細胞の増殖、腫瘍分枝、および／または顕微鏡的転移の再発を低減することができる。治療用分子は、エレクトロポレーティング電気パルスの投与の前または投与と同時に、辺縁組織に投与することができる。電気パルスおよび随意に治療用分子は、腫瘍の外科的切除または切断の前または後に投与することができる。いくつかの実施形態では、腫瘍の外科的切除または切断は、２４時間の電気研磨的電気パルス印加で実施される。腫瘍辺縁組織は、腫瘍の周囲０．５〜２．０ｃｍ以内の組織を含む。いくつかの実施形態では、腫瘍辺縁組織は、開放外科手術創傷辺縁を含む。
【０４５６】
いくつかの実施形態では、癌性腫瘍を有する対象を治療する方法は、ａ）癌性腫瘍に、治療用分子（例えば、治療剤）の有効用量を注射することと、ｂ）記載されたエレクトロポレーション装置を使用して、腫瘍に電気パルスを施すこととを含む。いくつかの実施形態では、治療用分子は核酸を含む。いくつかの実施形態では、治療用分子は、一つまたは複数の共刺激分子、代謝酵素、抗体、チェックポイント阻害剤、またはアジュバントをコードする。
【０４５７】
いくつかの実施形態では、癌性腫瘍を有する対象を治療する方法は、ａ）少なくとも一つの免疫刺激性サイトカインおよび少なくとも一つの共刺激分子をコードする少なくとも一つの発現ベクターの有効用量を癌性腫瘍に注射することと、ｂ）記載されるエレクトロポレーション装置を使用して腫瘍にエレクトロポレーション療法を施すこととを含む。
【０４５８】
いくつかの実施形態では、本方法は、対象に一つまたは複数のチェックポイント阻害剤の有効用量を投与することをさらに含む。いくつかの実施形態では、癌性腫瘍を有する対象を治療する方法は、ａ）少なくとも一つの免疫刺激性サイトカインをコードする少なくとも一つのプラスミドの有効用量を癌性腫瘍に注射することと、ｂ）記載されるエレクトロポレーション装置を使用して、腫瘍にエレクトロポレーション療法を施すことと、ｃ）有効用量の一つまたは複数のチェックポイント阻害剤を対象に投与することとを含む。
【０４５９】
いくつかの実施形態では、エレクトロポレーション療法は、本明細書に詳述される療法のいずれかであり得る。いくつかの実施形態では、エレクトロポレーション療法は、ＥＩＳの性能なしに低電圧療法を含み得る。いくつかの実施形態では、システムのコントローラーは、ジェネレータに低電圧療法のパルス間のＥＩＳを実行させ、動作状態および使用される治療剤に基づいてジェネレータのパラメーターを決定および最適化し得る。例えば、ジェネレータのパラメーター（例えば、電圧、パルス持続時間など）は、治療剤の最適な浸透を引き起こすようにコントローラーによって制御され得る。
【０４６０】
いくつかの実施形態では、エレクトロポレーション療法は、それぞれ約０．１ミリ秒の期間を有する一つまたは複数の電圧パルスの印加を含む。腫瘍に送達され得る電圧パルスは、低電圧ジェネレータについては約４００Ｖ／ｃｍ、高電圧ジェネレータについては１５００Ｖ／ｃｍであり得る。別の実施形態では、チェックポイント阻害剤は全身に投与される。いくつかの実施形態では、高電圧または低電圧のいずれかを、本明細書に開示される治療療法および装置とともに使用し得る。
【０４６１】
実施例Ａ
図６９〜７４を参照すると、本明細書に記載の療法的治療が、消化管を介してアクセスされる膵臓上の病変に施される例が示される。図６９〜７０を参照すると、アプリケータ１１０は、内視鏡５２内に配置された挿入管１５を有することが示される。内視鏡５２および挿入管１５は、胃９００に食道９０２を介して挿入され、膵臓９０４に隣接する胃壁にアクセスする。
【０４６２】
図７１を参照すると、内視鏡５２の遠位端５６の拡大図が、胃９００内の作業チャネル５４から突出するアプリケータの挿入管１５を持つことが示される。図７１に示すように、電極および薬剤送達チャネルは、アプリケータ内の格納位置にある。図示の挿入管１５は、胃壁を貫通するためのその遠位端１１８に貫通先端１３０を含む。追加の機能が、撮像用レンズ、一つまたは複数の照明ライト、および／または一つまたは複数の追加の作業チャネルなどの内視鏡の残りの部分に含まれてもよい。例えば、図７１に示す内視鏡５２は、本明細書に考察した手順を促進するための大きな撮像レンズ（中央上部）および二つの照明ライト（中央左および中央右）を含む。
【０４６３】
図７２〜７３を参照すると、内視鏡５２の遠位端５６の拡大図が示されており、アプリケータの挿入管１５は、遠位端１１８の貫通先端１３０を有する胃９００の壁に穿刺９０６を作成している。電極および薬剤送達チャネルは、図７２〜７３では格納されたままである。
【０４６４】
図７４では、図６９〜７３のアプリケータが、その電極５００および薬剤送達チャネル１８が展開位置に移動した状態で、胃９００の穿刺部を通って延びることが示される。図示した電極５００および薬剤送達チャネル１８は、腫瘍またはその他の悪性腫瘍などの内臓病変であり得る標的部位９０８で膵臓９０４を貫通している。図７４に図示した構成から、本明細書に開示される療法のいずれかを、治療剤、エレクトロポレーション療法、およびさまざまな併用療法を含み、標的部位９０８に投与することができる。
【０４６５】
実施例Ｂ
図７５〜７８を参照すると、本明細書に記載の療法的治療が、気管を介してアクセスされる肺の病変に施される別の例が示される。図７５〜７６を参照すると、アプリケータ１１０は、気管支鏡５２内に配置された挿入管１５を持つことが示される。気管支鏡５２および挿入管１５は、気管９１２を介して肺９１０に挿入され、原発性気管支９１６内の内臓病変９１４にアクセスする。
【０４６６】
図７７を参照すると、内視鏡５２の遠位端５６の拡大図が、気管支９１６内の作業チャネル５４から突出するアプリケータの挿入管１５を持つことが示される。図７７に示すように、電極および薬剤送達チャネルは、アプリケータ内の格納位置にある。図示した挿入管１５は、病変９１４が気管支内にあるため、貫通先端のない平坦で鈍端を含む。
【０４６７】
図７８を参照すると、アプリケータの挿入管１５は、電極５００および薬剤送達チャネル１８を病変９１４を貫通する展開位置に持つように図示される。図示された電極５００および薬剤送達チャネル１８は、腫瘍またはその他の悪性腫瘍などの内臓病変であり得る標的病変９１４で病変９１４を貫通している。図７８に図示した構成から、本明細書に開示される療法のいずれかは、治療剤、エレクトロポレーション療法、およびさまざまな併用療法を含み、標的病変９１４に施され得る。
【０４６８】
実施例Ｃ
また、いくつかの試験が、特定の例示的なエレクトロポレーションシステムの有効性に関して実施された。図７９を参照すると、腫瘍体積対時間の四つのプロットで表される、さまざまな治療剤およびエレクトロポレーションシステムを使用して、五つの試験の結果が示される。プロットの凡例を参照すると、試験には（１）未治療の対照（Ｕｔｘ）と、（２）低電圧エレクトロポレーションを備えた空ベクター（ＥＶ  ５０ｕｇ  ＧＥＮＥＳＩＳ）と、（３）高電圧エレクトロポレーションでＩＬ１２  ＩＲＥＳプラスミド（ＩＬ１２  ＩＲＥＳ  ５０ｕｇ  ＧｅｎＰｕｌｓｅｒ）を投与することと、（４）低電圧エレクトロポレーションでＩＬ１２  ＩＲＥＳプラスミド（ＩＬ１２  ＩＲＥＳ  ５０ｕｇジェネシス）を投与することと、（５）低電圧エレクトロポレーションでＩＬ１２Ｐ２Ａプラスミド（ＩＬ１２  ＩＲＥＳ  ５０ｕｇ  ＧＥＮＥＳＩＳ）を投与することと、が含まれた。
【０４６９】
各試験は、-１０日目にＢ１６−Ｆ１０腫瘍細胞を２箇所（一次側および対側）において接種したマウスを用いて、実施した（一次側１×１０６、対側０．２５×１０６）。治療時、一次側腫瘍は６０〜１２０ｍ３、対側腫瘍は２０〜５０ｍｍ３であった。治療は、一次側腫瘍に直接適用した。各試験を、１治療当たり一次側腫瘍に対して５０ｕｇのプラスミド（投与された場合）を用いて実施した。高電圧試験では、各々６回の０．１ミリ秒パルスにおいて１５００Ｖ／ｃｍの電界を一次側腫瘍に印加した。低電圧試験では、８回の１０ミリ秒パルスのそれぞれにおいて、４００Ｖ／ｃｍの電界を一次側腫瘍に印加した（すなわち、低電圧試験は高電圧試験よりも長く、電界強度が低い）。治療が、試験１日目、５日目および８日目に施された。
【０４７０】
引き続き図７９を参照すると、エレクトロポレーション試験（２、３、４、５）の各々が、対照よりも改善された腫瘍体積変化をもたらし、試験の結果は、最大の腫瘍減少から最小まで、５、４、３、２、１の順であることがわかる。この点において、低電圧ジェネレータは、高電圧ジェネレータよりも改善された腫瘍減少を示した。従って、本開示全体を通して記載される多くの利点に加えて、低電圧ジェネレータを含むシステムでエレクトロポレーションが実施されると、腫瘍治療の全体的な成功が改善される。
【０４７１】
実施例Ｄ
上記の研究の前に、Ｃｈｒｉｓｔｏｐｈ  Ｂｕｒｋａｒｔ等は、上記の実施例Ｃからの試験（３）および（５）のプラスミドおよびジェネレータの組み合わせを試験し、ＩＬ１２  Ｐ２Ａプラスミドと低電圧ジェネレータが、ＩＬ１２  ＩＲＥＳプラスミドと高電圧ジェネレータよりも改善された腫瘍減少をもたらしたことを示し、それらの試験パラメーターに関して実質的に同じ結果を示した。しかし、追加データが、上記の検討の試験（４）で捕捉された、エレクトロポレーションシステムにおける低電圧ジェネレータの有益性を確認するためにプラスミドを制御することはＢｕｒｋａｒｔの試験にはなかった。
【０４７２】
試験グループ（１）、（２）、（３）、および（５）、試験方法、および結果を含む予備試験のさらなる議論はＢｕｒｋａｒｔ等の「新規プラスミド設計および改変パラメーターによるＩＬ−１２腫瘍内遺伝子エレクトロトランスファーの治療効果の改善、遺伝子治療、２５、９３−１０３（２０１８年３月９日）」に含まれ、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。いくつかの実施形態では、高電圧ジェネレータが使用されてもよく、例えば、高電圧ジェネレータはより大きな腫瘍サイズに適用され得る。
【０４７３】
実施例Ｅ
６〜８週齢の雌のＣ５７Ｂｌ／６ＪまたはＢａｌｂ／ｃマウスをＪａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓから入手し、ＡＡＬＡＭガイドラインに従って収容した。Ｂ１６−Ｆ１０細胞を、１０％ＦＢＳおよび５０μｇ／ｍｌのゲンタマイシンを添加したＭｃＣｏｙの５Ａ培地（２ｍＭのＬ−グルタミン）で培養した。細胞を０．２５％トリプシンで収穫し、ハンク平衡塩溶液（ＨＢＳＳ）中に再懸濁した。麻酔したマウスに全量０．１ｍｌで１００万個の細胞を、各マウスの右脇腹に皮下注射した。全量０．１ｍｌで２５万個の細胞を各マウスの左脇腹に皮下注射した。腫瘍増殖は、平均腫瘍体積が約１００ｍｍ３に達するまで、８日目からデジタルキャリパー測定により監視された。腫瘍が所望される体積までステージ化されると、非常に大きいまたは小さい腫瘍を有するマウスを選別した。残りのマウスを、それぞれ１０匹のマウスの群に分け、右脇腹に移植された腫瘍体積によって無作為に割り付けた。Ｃ５７Ｂｌ／６ＪマウスのＢ１６ＯＶＡ、ならびにＢａｌｂ／ｃマウスのＣＴ２６および４Ｔ１を含む追加の腫瘍細胞タイプを試験した。また肺転移は、４Ｔ１腫瘍を有するＢａｌｂ／ｃマウスにおいても定量化された。
【０４７４】
治療のためマウスをイソフルランで麻酔した。円形プラスミドＤＮＡを、滅菌０．９％生理食塩水中１μｇ／μｌに希釈した。５０μｌのプラスミドＤＮＡを、２６Ｇａ針付き１ｍｌシリンジを使用して一次側腫瘍に中央で注射した。注射直後にエレクトロポレーションを実施した。ＤＮＡのエレクトロポレーションは、４００Ｖ／ｃｍ、１０ミリ秒パルスで達成された。腫瘍体積を週２回測定した。一次側と対側の腫瘍負荷の合計が２０００ｍｍ３に達した時点でマウスを安楽死させた。
【０４７５】
フローサイトメトリー分析のための腫瘍の解離。Ｂ１６−Ｆ１０腫瘍から単一細胞懸濁液を調製した。マウスをＣＯ２で殺処分し、皮膚および非腫瘍組織を後に残して、腫瘍を慎重に切除した。切除された腫瘍は、その後、さらなる処理のために氷冷したＨＢＳＳ（Ｇｉｂｃｏ）中に貯蔵された。腫瘍を切断し、１．２５ｍｇ／ｍｌのコラゲナーゼＩＶ、０．１２５ｍｇ／ｍｌのヒアルロニダーゼ、および２５Ｕ／ｍｌのＤＮａｓｅ  ＩＶを含む５ｍｌのＨＢＳＳ中、３７℃で２０〜３０分間穏やかに攪拌しながらインキュベートした。酵素的解離後、懸濁液を４０μｍのナイロン細胞ストレーナー（Ｃｏｒｎｉｎｇ製）に通し、ＡＣＫ溶解緩衝液（Ｑｕａｌｉｔｙ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ社）で赤血球を除去した。単一細胞を、遠心分離によりペレット化したＰＢＳフロー緩衝液（ＰＦＢ：２％のＦＣＳと１ｍＭのＥＤＴＡを含有するＣａ＋＋およびＭｇ＋＋を含まないＰＢＳ）で洗浄し、直ちにフローサイトメトリー分析のためにＰＦＢに再懸濁した。
【０４７６】
タンパク質抽出のための腫瘍溶解。腫瘍内エレクトロポレーション（ＩＴ−ＥＰ）（４００ｖ／ｃｍ、８回の１０ミリ秒パルス）の１日後、２日後または７日後、腫瘍組織を、殺処分されたマウスから単離して、導入遺伝子の発現を決定した。腫瘍をマウスから切開し、液体窒素中でクライオチューブに移した。凍結した腫瘍を、３００μＬの腫瘍溶解緩衝液（５０ｍＭのＴＲＩＳ  ｐＨ７．５、１５０ｍＭのＮａＣｌ、１ｍＭのＥＤＴＡ、０．５％のＴｒｉｔｏｎＸ−１００、プロテアーゼ阻害剤カクテル）を含有する４ｍｌのチューブに移し、氷上に置き、３０秒間均質化した（ＬａｂＧｅｎ７１０ホモジナイザー）。溶解物を１．５ｍｌの遠心分離管に移し、１０，０００×ｇで１０分間４℃で遠心分離した。上澄みを新しいチューブに移した。スピンおよびトランスファー操作を３回繰り返した。腫瘍抽出物が、製造元の指示（Ｍｏｕｓｅ  Ｃｙｔｏｋｉｎｅ／Ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ  Ｍａｇｎｅｔｉｃ  Ｂｅａｄ  Ｐａｎｅｌ  ＭＣＹＴＯＭＡＧ−７０Ｋ，Ｍｉｌｌｅｐｏｒｅ）に従って直ちに分析された、または−８０℃で冷凍された。組換えＦｌｔ３Ｌ−ＯＶＡタンパク質が、捕捉のための抗ＦＬＴ３Ｌ抗体（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｍｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ  ＭＮ  ｃａｔ．＃  ＤＹ３０８）、および検出用の卵白アルブミン抗体（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ，ｃａｔ．＃  ＰＡ１−１９６）を使用して、標準的なＥＬＩＳＡプロトコル（Ｒ＆Ｄシステム）によって検出された。
【０４７７】
表１：低電圧条件下でｈＩＬ−１２をコードするｐＯＭＩ多シストロン性プラスミドのエレクトロポレーション後のｈＩＬ−１２サイトカインの腫瘍内発現
【表２】
2021523763.tif 000004
【０４７８】
ＦＬＴ３Ｌ追跡抗原融合タンパク質の発現および機能について試験するために、ＦＬＴ３Ｌ（細胞外ドメイン）とＯＭＩＰ２Ａベクター中のオボアルブミン遺伝子からのペプチドの融合を構築し、上記のように、腫瘍内で電気穿孔した。
【０４７９】
表２：ＥＬＩＳＡ（ｎ＝８）により解析した低電圧条件下でのエレクトロポレーションの２日後のＦＬＴ３Ｌ−ＯＶＡ融合タンパク質（共通腫瘍抗原を伴う遺伝学的アジュバント）の腫瘍内発現
【表３】
2021523763.tif 000005
【０４８０】
免疫調節タンパク質のマウスホモログを含有するｐＯＭＩＰ２Ａベクターの腫瘍内エレクトロポレーション後、有意なレベルのＩＬ−１２ｐ７０（表１）およびＦＬＴ３Ｌ−ＯＶＡ組換えタンパク質（表２）が、ＥＬＩＳＡにより腫瘍均一化中に検出された。
【０４８１】
両側の脇腹に二つの腫瘍を有するマウスを作製するための上述のプロトコルを標準モデルとして使用し、治療された腫瘍（一次側）および治療されていない腫瘍（対側）に対する効果を同時に試験した。また肺転移は、４Ｔ１腫瘍を有するＢａｌｂ／ｃマウスにおいても定量化された。
【０４８２】
表３：腫瘍細胞接種後の８、１２および１５日目に、４００Ｖ／ｃｍ、８回の１０ミリ秒パルスでのＩＴ−ＥＰ後の一次側腫瘍および遠位腫瘍に対するＢ１６−Ｆ１０腫瘍退縮
【表４】
2021523763.tif 000006
【０４８３】
表３のデータは、低電圧でエレクトロポレーションを行った場合、エレクトロポレーションした腫瘍病変と遠隔の未治療病変の両方で腫瘍増殖阻害が認められたことを示している。
【０４８４】
腫瘍細胞接種後、１０日目に１回投与後の異なる用量のｐＯＭＩ−ＩＬ１２Ｐ２Ａプラスミドを試験した。
【０４８５】
表４：異なる用量のＯＭＩ−ｍＩＬ１２Ｐ２Ａを用いたＩＴ−ＥＰ後の一次側腫瘍および遠位腫瘍に対するＢ１６−Ｆ１０腫瘍退縮  ４００Ｖ／ｃｍ、８回の１０ミリ秒パルスのパラメーターでエレクトロポレーションを移植１０日後に１回実施した。
【表５】
2021523763.tif 000007
【０４８６】
一次側、治療腫瘍および遠隔、未治療腫瘍の両方の退縮の程度は、ｐＯＭＩ−ｍＩＬ１２Ｐ２Ａプラスミドの増量用量のエレクトロポレーションに伴って増加した。ｐＯＭＩ−ＩＬ１２Ｐ２Ａでは、１０μｇのプラスミドが最大限の効果を得るのに十分であり、新しいプラスミド設計および低電圧エレクトロポレーション条件を用いた単回投与治療で有意な腫瘍増殖制御があった。
【０４８７】
ｐＩＬ１２−Ｐ２Ａ＋低電圧処置マウスの一次側（治療）および対側（未治療）腫瘍はいずれも、腫瘍増殖の抑制が高まることを示した。また、低電圧でＥＰを有する腫瘍内エレクトロポレーションＰＯＭＩ−ＩＬ１２Ｐ２Ａの治療効果は、統計学的に有意な生存上の利点（５／６匹のマウスが、ｐＯＭＩ−ＩＬ１２Ｐ２Ａ／ｌｏｗＶで試験が終了するまで生存した）に反映された。
【０４８８】
また、ｐＯＭＩ−ｍＩＬ１２Ｐ２ＡのＩＴ−ＥＰが、Ｂａｌｂ／ｃマウスの４Ｔ１一次側腫瘍増殖および肺転移に影響を及ぼす能力についても試験した。１００万個の４Ｔ１細胞をマウスの右脇腹に皮下注射し、２５万個の４Ｔ１細胞を左脇腹に注射した。右側脇腹の大きな腫瘍は、空ベクター（ｐＵＭＶＣ３、Ａｌｄｅｖｒｏｎ）またはｐＯＭＩ−ｍＩＬ１２Ｐ２ＡでＩＴ−ＥＰを受けた。腫瘍体積を２日ごとに測定し、１９日目にマウスを殺処分し、肺を切除し、重量を測定した。
【０４８９】
表５：移植８日後、および１５日後に４００Ｖ／ｃｍ、８回の１０ミリ秒パルスで、電気穿孔したマウスの一次側腫瘍増殖および肺の死後重量  一次側腫瘍体積は、１７日目に、肺重量は１８日目に測定した。
【表６】
2021523763.tif 000008
【０４９０】
このモデルでは、腫瘍の局所ＩＴ−ＥＰ治療により、これらの腫瘍細胞の肺への転移も減少することが示された（表５）。
【０４９１】
Ｂ１６Ｆ１０腫瘍に加えて、ｐＯＭＩ−ｍＩＬ１２Ｐ２Ａのエレクトロポレーションも、一次側（治療済）と対側（未治療）Ｂ１６ＯＶＡおよびＣＴ２６腫瘍の両方の退縮をもたらした。４Ｔ１腫瘍モデルでは、ＥＰ／ｐＯＭＩ−ｍＩＬ１２Ｐ２Ａ後に一次側腫瘍が退縮し、マウスは肺重量の有意な減少を示し、肺転移の減少を示した。データは、二つの異なるマウス系統の四つの異なる腫瘍モデルにおいて、ＯＭＩ−ｍＩＬ１２Ｐ２ＡのＩＴ−ＥＰが腫瘍負担を減少させることができることを示している。
【０４９２】
表６：腫瘍細胞接種の７日後、および１４日後に４００Ｖ／ｃｍ、および８回の１０ミリ秒パルスを使用して、ｍＩＬ−１２およびＦＬＴ３Ｌ−ＯＶＡをコードする遺伝子を含有するｐＯＭＩＰ２Ａプラスミドの腫瘍内エレクトロポレーション後の治療腫瘍および未治療腫瘍に対するＢ１６−Ｆ１０腫瘍退縮、１６日目から示される腫瘍測定
【表７】
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【０４９３】
表７：腫瘍細胞接種の７日後に４００Ｖ／ｃｍ、および８回の１０ミリ秒パルスを使用して、ｐＯＭＩ−ＰＩＩＭ（マウスＩＬ−１２を含むバージョン）のＩＴ−ＥＰ後の治療腫瘍および未治療腫瘍に対するＢ１６−Ｆ１０腫瘍退縮、１５日目から示される腫瘍測定値
【表８】
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【０４９４】
マウスＩＬ−１２  ｐ７０およびヒトＦＬＴ３Ｌ−ＮＹ−ＥＳＯ−１融合タンパク質の両方を発現するｐＯＭＩ−ＰＩＩＭのエレクトロポレーションは、単一の治療のみで、治療された一次側腫瘍、および治療されていない遠隔腫瘍の両方の増殖を有意に減少させた（表７）。
【０４９５】
空ベクター対照のエレクトロポレーションと比較して、免疫調節遺伝子がエレクトロポレーションによって導入されたマウスでは、一次側腫瘍と対側腫瘍の両方の体積が大幅に減少し、治療された腫瘍微小環境内の局所効果だけでなく、全身性免疫の増加も示す。
実施例Ｆ
【０４９６】
導入遺伝子をコードする核酸ベクターが、低電圧エレクトロポレーションを使用して生体内で腫瘍細胞に効率的に送達される。図８０を参照すると、低電圧および高電圧のエレクトロポレーションを使用したトランスフェクションの例が示される。悪性黒色腫腫瘍をマウスで確立することを可能にした。特に、Ｃ５７Ｂｌ／６マウスに１×１０＾６  Ｂ１６−Ｆ１０黒色腫細胞を皮下（ｓ．ｃ．）注射し、腫瘍を確立することが可能となった。
【０４９７】
７５〜１５０ｍｍ＾３に達すると、腫瘍に、ｍＣｈｅｒｒｙ（ＲＦＰ）として知られる赤色蛍光タンパク質変種をコードするプラスミドＤＮＡが注射され、その後、二つの異なるエレクトロポレーションパラメーターを使用して電気パルスが印加された。高電圧および低電圧  特に、腫瘍に、５０ｕｇのルシフェラーゼ−ｍチェリーＤＮＡプラスミドを腫瘍内に注射し、続いて高電圧（１５００Ｖ／ｃｍ）または低電圧（４００Ｖ／ｃｍ）条件のいずれかを使用してエレクトロポレーションした。エレクトロポレーションは、２針（例えば、二つの電極）アプリケータを使用して実施された。
【０４９８】
４８時間後、マウスを安楽死させ、腫瘍を摘出し、酵素カクテルを用いて解離させ、フローサイトメトリー（ＦＡＣＳ）による解析のために単一細胞懸濁液に作製した。フローサイトメトリーは、生きた「赤血球」の数を数えるために実施され、生きたｍＣｈｅｒｒｙ＋細胞の割合としてスコアされた。示されたデータは、エレクトロポレーションなしのＲＦＰプラスミドの注射によって生成されたバックグラウンドＲＦＰシグナルに対して正規化された。これらの細胞は通常、赤色蛍光タンパク質を発現しないため、全ての赤血球はエレクトロポレーション媒介性細胞トランスフェクションに由来する必要がある。低電圧エレクトロポレーション条件を使用して、腫瘍内の細胞の８〜１０％がトランスフェクトされたことが見出された。
【０４９９】
実施例Ｇ
低電圧エレクトロポレーションは、さまざまなプラスミドおよび発現ベクターを生体内で腫瘍細胞に送達するのに有効である。
【０５００】
Ｂ１６−Ｆ１０腫瘍は、上述のようにマウスで形成された。確立された腫瘍に、腫瘍内エレクトロポレーションパルス（ＩＴ−ＥＰ）の印加に続いて、示されたプラスミドまたは発現ベクターを注射した。
【０５０１】
図８１は、確立されたＢ１６−Ｆ１０腫瘍へのプラスミドの低電圧（４００Ｖ／ｃｍ）ＩＴ−ＥＰ後の、ｍＩＬ−１２ｐ７０の発現のプロットを示す。ＩＬ−１２ｐ７０の発現は、標準的なＲ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  ＩＬ−１２ｐ７０  ＤｕｏＳｅｔ  ＥＬＩＳＡを用いたエレクトロポレーションの４８時間後に検出可能であった。エレクトロポレーションは、２針（例えば、二つの電極）アプリケータを使用して実施された。
【０５０２】
図８２は、確立されたＢ１６−Ｆ１０腫瘍におけるＬａｃＺの発現を示す。確立されたＢ１６−Ｆ１０腫瘍内にＬａｘ  Ｚ発現プラスミドの低電圧（４００Ｖ／ｃｍ）ＩＴ−ＥＰ後にＬａｃＺ染色を行った。エレクトロポレーションは、２針（例えば、二つの電極）アプリケータを使用して実施された。
【０５０３】
図８３は、ｍＣＤ４０Ｌ３プラスミドまたは空ベクター（５０μｇ）の低電圧（４００Ｖ／ｃｍ）ＩＴ−ＥＰ後のＢ１６−Ｆ１０腫瘍における三量体ＣＤ４０Ｌの発現を示す。腫瘍を４８時間で抽出し、発現を決定するためにＥＬＩＳＡを行った。ｍＣＤ４０Ｌは、標準的なＲ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  ｍＣＤ４０Ｌ  ＥＬＩＳＡ（内因性＋外因性）により、または抗ｈＩｇＧ−Ｆｃ捕捉抗体（外因性のみ）でＥＬＩＳＡを改変することにより、ＥＰ（４００Ｖ／ｃｍ）後に容易に検出可能であった。エレクトロポレーションは、２針（例えば、二つの電極）アプリケータを使用して実施された。
【０５０４】
図８４は、Ｂ１６−Ｆ１０腫瘍における低電圧（４００Ｖ／ｃｍ）ＩＴ−ＥＰ後のＢ１６−Ｆ１０腫瘍における三量体ＣＤ８０の発現を示す。本検討では、ｍＣＤ８０３または空ベクター（５０μｇ）を、確立されたＢ１６−Ｆ１０腫瘍に電気穿孔した。腫瘍を４８時間で抽出し、ＥＬＩＳＡｓを実行して発現を決定した。抗ｈＩｇＧ−Ｆｃ捕捉抗体を有する修正Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  ｍＣＤ８０を使用して、ＥＰ（４００Ｖ／ｃｍ）後、ｍＣＤ８０は容易に検出可能であった。エレクトロポレーションは、２針（例えば、二つの電極）アプリケータを使用して実施された。
【０５０５】
図８５は、低電圧（４００Ｖ／ｃｍ）ＩＴ−ＥＰ後のＢ１６−Ｆ１０腫瘍におけるｓｄＡｂの発現を示す。多量体化ナノボディは、ウェスタンブロットにより、エレクトロポレーションの４８時間後に腫瘍溶解物中に検出された。エレクトロポレーションは、４針アレイを用いて実施した。
【０５０６】
従って、図８０および実施例Ｆに示されるｍＣｈｅｒｒｙ（ＲＦＰ）に加えて、図８１〜８５の検討により、以下のＤＮＡ包含分子、（１）ｍＩＬ１２−ｐ７０、（２）ＬａｃＺ、（３）ＣＤ４０Ｌ、（４）ＣＤ８０、および（５）ナノボディの低電圧エレクトロポレーション後の腫瘍における発現を示す。腫瘍細胞の発現は、組織ＥＬＩＳＡ、フローサイトメトリー、およびウェスタンブロットを含むさまざまな技術を通して検証された。
【０５０７】
実施例Ｈ
実施例Ｈは、本開示のアプリケータの一実施形態、およびアプリケータの使用および利点の例を提供する。
【０５０８】
肝癌および膵癌は、重要な未対応の医療ニーズのある領域である。２０１８年、４２，０００人を超える患者が肝癌と診断され、その大半は根治的切除ができない進行疾患を有していた。数十年にわたる進歩と、近年の複数の局所的および標的療法の導入にもかかわらず、３０，０００人を超える患者が肝癌に罹患した。膵癌の状況はさらに緊急性が高い。２０１８年に５５，０００人を超える患者が膵癌と診断され、４４，０００人を超える患者がこの悪性腫瘍により死亡した。膵癌と診断された患者１０人に１人未満が５年以上生存し、切除不能の疾患を有する患者では２０人に１人まで減少する。膵癌症例の約１０％のみが根治的切除が可能な段階で診断され、癌は一般に非常に攻撃的であり、疾患が進行するにつれて患者に重い症状負担を与える。本明細書に開示されるシステム、関連するアプリケータ、ジェネレータ、および方法の実施形態は、強力な免疫療法を腫瘍に直接送達し、既存の標準治療に対する患者の応答を潜在的に増加させることによって、これらの患者の治療パラダイムを変えることができる（例えば、チェックポイント阻害剤療法）。
【０５０９】
エレクトロポレーションは、電気パルスを使用して細胞膜に一時的な細孔を形成することができる物理的なトランスフェクション方法であり、核酸などの物質はそれを通して細胞に通過することができる。これは、多くの細胞タイプに外来核酸を導入するための非常に効率的な戦略である。細胞が短いエネルギーパルスに曝される間、細胞膜は外因性分子に対して透過性が高くなり、細胞膜の孔を通過する（トランスフェクションとして知られるプロセス）。電気パルスは、最適化された電圧でもよく、数マイクロ秒〜１ミリ秒しか継続しない場合がある。これは、イオン化されたリン脂質二重層である細胞膜を乱し、この細胞バリアに一時的な細孔を形成する。細胞膜にわたる電位は同時に上昇し得、ＤＮＡプラスミドのような電荷分子を膜にわたって駆動することが可能である。ＥＰのエネルギーは、本明細書に記述した実施形態のいずれかによるマイクロニードル電極、および本明細書に記述した実施形態のいずれかによる電気パルスジェネレータを有し得る電極アプリケータを使用して印加され得る。針電極により、ＥＰを生体内で実施できるため、医療用途を可能にする。
【０５１０】
ＥＰは、他の細胞トランスフェクション方法よりも重要な利点がある。ＥＰの主な利点は、あらゆる細胞タイプの迅速なトランスフェクションに適用できることである。これは、標的細胞の生物学的構造および機能に限定的な変化を生じさせる非侵襲的、生体電子的、非化学的方法である。従来の化学的または生物学的細胞トランスフェクション技術よりも実行が容易で、迅速である。プロセスは無毒性であり、物理的方法であるため、幅広い細胞タイプに適用できる。同様に、幅広い分子がトランスフェクトされる可能性がありＥＰは非常に多用途である。
【０５１１】
一部の実施形態によれば、ＥＰは、患者自身の細胞をプログラムして、これらの薬剤を長期間にわたって作製するために、何百万もの特定の成分（免疫学的に関連性がありかつ選択の重要な成分）を有する細胞をトランスフェクトするためのマイクロインジェクション技術として使用され得る。
【０５１２】
発明者らは、ＥＰの明確な利点を認識し、これを、本明細書に記載される癌を治療するための強力な免疫調節剤を送達するための強力なツールへと変えた。上述のように、ＥＰの臨床使用は、細胞の周囲の領域に外因性分子を堆積させることを伴い得る。外因性分子は、外部に印加された電界によって誘発される瞬間的な細胞膜不安定化の間、膜細孔を通過することができ、電界が停止すると、これらの分子は細胞内に閉じ込められ得る。免疫調節タンパク質を産生するようにコードされたプラスミド系ＤＮＡを使用して、その後、細胞周囲の領域にＤＮＡを堆積させてもよい。
【０５１３】
細胞内に入ると、ＤＮＡプラスミドは細胞の機能を共選択して、免疫調節タンパク質を生産または「発現」させる。この配列は、数百万の細胞で一度に実行することができ、免疫調節タンパク質の細胞内放出を持続させる。
【０５１４】
ＥＰは、標的細胞の生物学的構造または機能を負に変化させない非侵襲的、非化学的方法によって、多様な外因性分子を幅広い種類の細胞に効率的にトランスフェクトすることができる。がん免疫療法は、強力かつ安全な免疫療法を作製するために、がん患者自身の腫瘍を使用して、プラスミドＤＮＡのＥＰを介して送達され得る。これは、炎症促進性サイトカインインターロイキン（ＩＬ）−１２などの免疫関連タンパク質の持続する細胞内放出を引き起こす。ＩＬ−１２は、自然免疫と適応免疫の協調により、免疫抑制腫瘍を免疫学的に活性な病変に変換するように構成される。
【０５１５】
いくつかの異なるタイプのＤＮＡプラスミドは、治験のヒトＩＬ−１２（タボキノーゲンテルセプラスミド、またはＴＡＶＯ（登録商標）、ＯｎｃｏＳｅｃ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｉｎｃｏｒｐｏｒａｔｅｄ製）などの免疫学的に関連する遺伝子をコードする。本明細書に開示される治療システムおよび方法の実施形態を使用して、ＴＡＶＯは病変内に注射され、ＥＰパルスを介して発現される。次いで、トランスフェクトされた細胞は、局所的および全身性の免疫応答を開始するＩＬ−１２タンパク質を発現および分泌する。
【０５１６】
研究によると、ＥＰを介して送達される腫瘍内プラスミド系ＩＬ−１２は、免疫学的に冷たい腫瘍をＴ細胞に炎症した熱い腫瘍に変換することができる局所的および全身性の免疫応答を生じ得ることが示される。出願人は、進行性黒色腫および子宮頸癌を対象とした２件の登録に向けた臨床試験を行い、頭頸部扁平上皮癌、メルケル細胞癌、および胸壁病変を介したトリプルネガティブ乳癌（ＴＮＢＣ）を含む他の皮膚腫瘍表示において有効性を実証している。
【０５１７】
多腫瘍の臨床試験における重要な経験から派生し、研究のＴＡＶＯは、腫瘍非依存的であり、腫瘍の組織構造、遺伝子、および／または免疫学的状態とは無関係であり、重要な点として、内部腫瘍を含む多数の腫瘍表示にわたって実行可能な治療である。
【０５１８】
いくつかの実施形態では、システムは、皮膚腫瘍および皮下腫瘍を治療するために使用される。さらに、本明細書に開示されるシステムの実施形態は、皮膚腫瘍および皮下腫瘍を超える病変を治療するように構成される。
【０５１９】
本明細書に開示されるシステムは、胃腸（ＧＩ）腫瘍、膵臓腫瘍、および肝細胞癌を含むがこれらに限定されない、体内に位置する腫瘍である、内臓病変に位置する細胞への、免疫学的に関連する広範囲の遺伝子のＥＰを可能にするアプリケータおよびジェネレータ（ＨＣＣ、本明細書に開示される実施形態のいずれかによる「内臓病変アプリケータ」または「ＶＬＡ」）を含む。
【０５２０】
例えば、ＨＣＣの臨床的進行に関連する関連する免疫機構には、腫瘍微小環境および末梢の両方で免疫抑制を確立することができる腫瘍浸潤性制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）およびＭ２偏光性腫瘍関連マクロファージ（ＴＡＭ）の増加が含まれる。この免疫阻害ネットワークは、追加の腫瘍内在性抑制機構と複合体化された場合、有意な治療モダリティに有意な課題をもたらした。しかし、抗プログラム細胞死タンパク質１／リガンド１（ＰＤ−［Ｌ］１）療法の出現は、特にこれらの抑制バリアを標的にすることができる局所領域療法との組み合わせで、意義のある臨床的利益をもたらし得る。
【０５２１】
本明細書に開示される腫瘍内ＩＬ−１２ＥＰプラットフォームは、機能的Ｔ細胞の動員と腫瘍微小環境における適応抵抗の誘導を介して、抗ＰＤ−［Ｌ］１活性を増強する（現在、抗ＰＤ−１難治性黒色腫患者をペンブロリズマブ［Ｋｅｙｔｒｕｄａ（登録商標）］とＫＥＹＮＯＴＥ−６９５試験におけるその治験中のＴＡＶＯで治療中）だけではなく、ＣＤ８＋腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）のＴｒｅｇおよびＭ２マクロファージに対する比率を決定的に調節するため、この組み合わせはこの腫瘍設定で特に魅力的である。
【０５２２】
アプリケータが、本明細書に開示されるジェネレータおよびアプリケータの実施形態と連携して、プラスミド最適化されたＥＰを利用して、トランスフェクションの深さおよび頻度を高め、前臨床モデルにおいて有意な治療上の利益をもたらすことができる。ＥＰにおけるこの次のステップは、優れたＩＬ−１２発現を、このカスタマイズ可能なベクター骨格に容易にコードされる相補的な免疫調節遺伝子とともに促進する、次世代プラスミド療法によってさらに増強される。
【０５２３】
本明細書に記載されるシステムは、特に、小動物モデルにおけるプラスミド系免疫療法を促進する。
【０５２４】
電極幅１．５ｍｍの小型化された２針アプリケータを用いた前臨床試験では、ＣＴ２６結腸直腸腫瘍を用いた治療が困難な実験的リンパ節転移モデルにおいてＩＬ−１２依存性腫瘍退縮が認められた。これらの予備的データは、０．５ｃｍの２針アプリケータを用いた複数の腫瘍モデルにおける大規模な前臨床試験と相まって、この小型化されたアプリケータを臨床クに向けて進める実現可能性を確実に確立する。
【０５２５】
本明細書に開示されるアプリケータのいくつかの実施形態は、本明細書で開示される任意の実施形態による、（例えば、図８７〜８８を含む本明細書で示されるように）可撓性カテーテルベースのアプリケータ、または（例えば、図９１を含む本明細書で示されるように）より剛性トロカールベースのアプリケータのいずれかとして開発される。いくつかの実施形態では、カテーテルベースのアプリケータが、直径２ｍｍで、現在利用可能な内視鏡、気管支鏡または腹腔鏡を通過するサイズである、可撓性本体を含むことができる。
【０５２６】
例えば、内視鏡を、口から、連続的なプラスミド注射およびＥＰのために、柔軟なアプリケータを膵病変内に誘導することができる、胃／小腸内に配置することができる。可撓性本体（例えば、挿入管１５）は、適用および／または腫瘍表示に応じて、内視鏡または腹腔鏡を介して標的病変へのナビゲーションを可能にする約１００ｃｍの長さを有し得る。
【０５２７】
いくつかの実施形態では、本明細書で考察したとおり、アプリケータが、その近位端に人間工学的なハンドルを持つ手持ち式器具でもよい。可撓性本体（例えば、挿入管）の遠位端は、二重電極で隣接した中央局所注射針を含み得る。電極および注射針は、格納位置と展開位置との間で作動され得る。図８９〜９０に図示するように、電極は、約３ｍｍの間隔において展開位置において互いに付勢され得る。この間隔は、電極間の電気的アーク放電の可能性を最小化しながら、より広い範囲のＥＰを達成することを容易にし得る。その他の利点は、本開示全体を通して説明される。
【０５２８】
アプリケータの遠位先端が腫瘍部位に適切に位置付けられると、治療用プラスミドは、アプリケータ内に収容された注射針を介して病変内に送達され得る。次いで、共局在化された電極は、本明細書に開示されるジェネレータ（例えば、フットペダル制御ジェネレータ）のいずれかを介して電気パルスを腫瘍内に伝達することができる。これらの電気パルスは、プラスミドの腫瘍細胞へのトランスフェクションおよびその後の免疫活性化サイトカインの局所分泌を可能にし得る（例えば、図７１〜７４に示す通り）。
【０５２９】
いくつかの実施形態では、剛性アプリケータ（例えば、図９１に示す通り）はまた、内臓腫瘍にアクセスすることができるが、わずかに異なるアプローチを用いる。このトロカール針ベースの内臓病変アプリケータが、標的病変への超音波またはコンピューター断層撮影（ＣＴ）ガイダンスにより、直視下または腹腔鏡下手術で軟組織に直接進入することができる剛体（例えば、挿入管１５）を含み得る。例えば、いくつかの実施形態では、挿入管１５は、２ｍｍの直径および２０ｃｍの長さを有し得る。カテーテルベースの柔軟なアプリケータと同様に、剛性トロカールベースのアプリケータが、その近位端に人間工学に基づいたハンドルで操作できる。また、カテーテルベースのアプリケータと同様に、剛性本体の遠位端は、本明細書に記載のように、格納されたコンパクトな位置および展開された拡張位置を有する二重電極に隣接した類似の中央局所注射針を含み得る。
【０５３０】
いくつかの実施形態では、カテーテルベースのアプリケータのいくつかの実施形態とは異なり、トロカールベースのアプリケータが、肝臓病変の治療に特に有用であり得る、低侵襲経皮アプローチを使用して内臓腫瘍にアクセスすることができる。剛性本体の遠位端が腫瘍部位に到達すると、電極および注射針は、展開位置に作動し、プラスミドを投与してもよく、その後、治療用ＥＰの送達のためにフットペダルを介してジェネレータからの電気パルスを印加し得る。
【０５３１】
アプリケータのプロファイルが最小限であれば、その「臨床フットプリント」を低減することができ、また、その相対的有用性は、直接または一般的な内視鏡および腹腔鏡と組み合わせて、ＧＩベースの癌におけるさまざまな未対応の医療ニーズに対処するのに理想的なものとなる。これらの新規アプリケータが、内臓腫瘍表示に本明細書に記載の免疫療法プラットフォームを導入して、この強力なサイトカインベースの療法の臨床的影響を拡大することができる。
【０５３２】
一例示的な実施形態では、トロカールベースのアプリケータを使用して、切除不能なＨＣＣ腫瘍を有する患者の原発性腫瘍にアクセスすることができる。ＨＣＣ患者は切除可能な腫瘍を呈するが、多くの場合、根底にある肝疾患（すなわち肝硬変）により、これらの患者を外科的切除または移植の候補として除外する。欧米では新たに診断されたＨＣＣ患者の約７０％を占めるこれらの患者では、治療の選択肢は経動脈化学塞栓術（ＴＡＣＥ）、放射線塞栓術、および全身療法に限定され、多くは介入なしにホスピスに直接紹介される。これらの病変に強力な免疫療法で腫瘍内にアクセスすることができることは、これらの患者の治療パラダイムをシフトさせる可能性がある。本明細書に記述したトロカールベースの内臓病変アプリケータの実施形態は、肝生検に一般的に使用される経皮的針の中心内腔を通過するために十分に小型化される。このアプローチにより、ＣＴ誘導画像を利用してインターベンション室で処置を実施すことができる。アプリケータは腹腔鏡手術で使用するように構成できるが、経皮的アプローチにはいくつかの利点がある。それは、全身麻酔の必要性を最小限に抑え、投与レジメンが必要とされる場合には、週１回、手術を繰り返すことができる。装置はまた、内視鏡と併用するように構成されてもよく、経胃的アプローチを可能にする。これは、胃の近位の肝臓の左側部分に位置する疾患には魅力的であり得るが、胃から遠位の疾患には経皮的または腹腔鏡的アプローチが必要である。本明細書で考察したアプリケータの多用途性は、単一のジェネレータおよび送達システムを使用した外科手術、放射線、および内視鏡用途での幅広い使用の可能性を促進する。
【０５３３】
本明細書に記載の発明の実施形態は、従来の肝臓標的療法に対する主要な潜在的利点を提供する。マイクロ波による切断およびＲＦＡは、比較的小さな腫瘍にのみ有用であるという点で制限される。さらに、一部の病変は、主要な血管構造や中心胆管などの重要な構造に近接しているため、切断で安全に治療できない。切断に関連する熱は、マイクロ波および無線周波切断に内在する制限である。化学塞栓術および放射線塞栓術では十分な肝機能が必要である。そのため、手術不能なＨＣＣ患者の多くは、解剖学的または肝機能上の懸念により、切断または他の肝標的療法で治療できない。高周波電流（ＲＦＡ）、マイクロ波、または凍結（冷凍）を伴う切断など、原発性肝臓腫瘍に対する経皮的治療の選択肢は、典型的には早期の病期に限定され、転移する前に疾患を改善することが期待される。例えば、マイクロ波切断は、プローブを使用して悪性組織に熱パルスを送達し、その結果、切断ゾーンとなる。マイクロ波による切断は、より大きなサイズの病変を標的とすることができることにおいて、ＲＦＡよりも優れていると考えられる。しかし、最近の研究によると、治療病変の再発率は極めて低いもの、マイクロ波切断で治療した４ｃｍ未満の肝病変を有する患者の７２％で新たな肝病変が発症したことが判明した。従って、マイクロ波切断効果は治療した病変に限定されるように見える。これはまた、放射線療法ミクロスフェアの塞栓化など、他の局所的アプローチでも実証される。対照的に、ＴＡＶＯ技術は、腫瘍細胞を直接切除するよりも、これらの病変を一時的にチェックポイント阻害剤などの他の免疫療法とともに作用し得る、免疫刺激サイトカインのための細胞工場に転化する可能性がある。ＫＥＹＮＯＴＥ−６９５でＴＡＶＯおよびペンブロリズマブで治療中の抗ＰＤ−１難治性黒色腫患者に例証されるように、腫瘍反応は治療された病変だけでなく、遠隔部位１４でも生じる可能性がある。従って、ＴＡＶＯは全身抗癌効果を媒介できる局所療法である。
【０５３４】
いくつかの実施形態では、進行した、またはチェックポイント療法に反応しない非応答体患者を治療する方法が説明される。方法は、一つまたは複数の免疫調節性ペプチドをコードするプラスミドの有効用量を非応答体内の癌性腫瘍に注射することと、癌性腫瘍にエレクトロポレーション療法を施すことと、対象にチェックポイント阻害剤の有効用量を投与することとを含む。一つまたは複数の免疫調節性ペプチドは、ＩＬ−１２、ＣＤ３  ｈａｌｆ−ＢｉＴＥ、ＣＸＣＬ９、ＣＴＬＡ−４  ｓｃＦｖ、ＩＬ１２およびＣＤ３  ｈａｌｆ−ＢｉＴＥ、ＩＬ−１２およびＣＸＣＬ９、ならびにＩＬ−１２およびＣＴＬＡ−４  ｓｃＦｖであり得るが、これらに限定されない。チェックポイント阻害剤は、ニボルマブ（ＯＮＯ−４５３８／ＢＭＳ−９３６５５８、ＭＤＸ１  １０６、ＯＰＤＩＶＯ）、ペンブロリズマブ（ＭＫ−３４７５、ＫＥＹＴＲＵＤＡ）、ピジリズマブ（ＣＴ−０１１）、およびＭＰＤＬ３２８０Ａ（Ｒｏｃｈｅ）であり得るが、これらに限定されない。
【０５３５】
「非応答体」または「非応答」とは、がんを患っており、およびａ）進行中、進行した、またはがん治療に反応しなかった、ｂ）がん治療による治療後、有益な臨床反応を示さない、ｃ）癌治療に対する臨床的寛解または臨床的反応を達成できない、および／またはｄ）がん治療に対する目標の反応に到達するために提出した、患者を指す。いくつかの実施形態では、非応答体は、癌療法に反応して癌を除去していない。いくつかの実施形態では、非応答体は、癌療法での治療後の癌のぶり返し、再発、または転移を有した。いくつかの実施形態では、非応答体は、癌治療後の負の癌予後を有する。癌療法は、チェックポイント療法であり得るが、これに限定されない。チェックポイント療法は、抗ＰＤ−１または抗ＰＤ−Ｌ１抗体療法であり得るが、これらに限定されない。
【０５３６】
ＴＡＶＯなどの新規免疫療法アプローチに対する未対応の医療ニーズは強い。ニボルマブ（オプジーボ（登録商標））とペンブロリズマブの両方は、試験全体の奏効率はわずか１４％〜１７％であった早期フェーズ試験における有効性と安全性の結果に基づき、肝癌治療に対するＦＤＡの承認が加速された。患者の大半は、これらの新しいモダリティに応答しなかった。チェックポイント阻害剤難治性疾患は、人口の増加と新たな治療上の課題を象徴している。転移性黒色腫患者を対象とした進行中の臨床試験（ＫＥＹＮＯＴＥ−６９５）では、ＴＡＶＯと抗ＰＤ−１抗体の併用により、病気が抗ＰＤ−１抗体単剤療法に本当に抵抗性であった患者（抗ＰＤ−１抗体療法非応答体）において２４％の予備奏効率が観察された。ペンブロリズマブなどの抗ＰＤ−１薬剤を、ＩＬ−１２などの効果的なＴ細胞応答を駆動することができる薬剤と組み合わせることにより、非応答体個体群の免疫原性を増加させ、チェックポイント療法に対する応答を増強することができる。
【０５３７】
いくつかの実施形態では、チェックポイント療法に非応答性または非応答性であると予測される対象は、ＩＬ−１２の腫瘍内エレクトロポレーションと抗ＰＤ−１療法の全身投与との組み合わせで治療される。非応答体には、投与スケジュールを使用して、プラスミド（例えば、ＴＡＶＯ）がコードされた免疫刺激性サイトカインおよびチェックポイント阻害剤が投与される。ここで、投薬スケジュールは、以下を含む。ａ）第一週の治療の第一のサイクル、ここで、ｉ）プラスミドにコードされた免疫刺激性サイトカインが、１日目（±２日）、５日目（±２日）、および８日目（±３日）にエレクトロポレーションによって腫瘍に送達されること。ｉｉ）チェックポイント阻害剤が、１日目（±２日）に患者に全身投与されること。ｂ）治療の第二のサイクル、ここで、チェックポイント阻害剤は、第一のサイクルの３週間後に患者に全身に送達されること。ｃ）継続されるその後の治療サイクル、ここで第一および第二のサイクルは、３週間ごとに交互に繰り返されること。いくつかの実施形態では、プラスミドコード免疫刺激サイトカインは、各サイクルで投与される。いくつかの実施形態では、プラスミドコード免疫刺激サイトカインは、代替サイクルで投与される。いくつかの実施形態では、プラスミドコード免疫刺激性サイトカインおよびチェックポイント阻害剤は、各サイクルの１日目に同時に送達される。いくつかの実施形態では、二つの療法は奇数サイクルで同時に投与され、チェックポイント阻害剤は偶数サイクルで単独で投与される。いくつかの実施形態では、プラスミドコード免疫刺激性サイトカインは、各サイクルまたは交互サイクルの少なくとも１日目、２日目、または３日目にエレクトロポレーションによって送達される。各サイクル間の介在期間は、約１週間〜約６週間、約２週間〜約５週間とすることができる。いくつかの実施形態では、サイクル間の介在期間は、約３週間である。
【０５３８】
ＩＬ−１２（例えば、ＴＡＶＯ）の腫瘍非依存的な力と組み合わせて、本明細書に記載の内臓病変アプリケータシステムは、内視鏡、気管支鏡、カテーテル、トロカール、またはこれに類するものでアクセスすることができるほとんどの内部腫瘍表示に適用され得る。ＴＡＶＯは、ＴＮＢＣと同様に、チェックポイント阻害剤治療に抵抗性の転移性黒色腫を含む治療困難な患者集団において、強力な有効性を示すことがすでに証明される。特に、ＴＡＶＯは、強力なアブスコパル効果を示し、また引き続き示す。早期のフェーズ１単剤療法試験では、ＴＡＶＯは転移性黒色腫の未治療の病変において４６％の奏効率を示した。癌が転移した後は、通常は根治的切除は不可能である。結果として、切除不能肝癌の新規症例は約２３，５００例、切除不能膵癌の新規症例は毎年４９，９００例であり、予後不良に関連する診断であることが多い。
【０５３９】
局所治療の選択肢は、切除手技に大部分限定されており、標準治療よりも有意な効果は得られず、有意なアブスコパル効果はほとんどまたは全く認められないと考えられる。肝癌に対する局所療法は、典型的には、細胞減少性であり、治癒的ではなく、性質上、典型的には、疾患の経過全体に大きな影響を与えない。例えば、ｙｔｔｒｉｕｍ  ９０（Ｙ９０）を用いた放射線塞栓術と標的療法（ソラフェニブ）を用いた治療を比較した試験では、Ｙ９０治療がソラフェニブでの治療と比較して肝臓での疾患進行を有意に遅延させたが、生存上の利点はなかったことが分かった。実際に、肝臓外での進行率は、ソラフェニブよりもＹ９０治療の方が有意に高く、その差は統計的有意性には達しなかったが、生存率はより短かった。
【０５４０】
これらの腫瘍を直接強力なサイトカインで注射し、ＥＰを介してその治療を同時に送達することができることは、これらの患者に意味のある治療選択肢をもたらす可能性がある。ＴＡＶＯは、ＨＣＣにおいて、転移性黒色腫およびＴＮＢＣにおいてと同様のアブスコパル応答を送達でき得る。
【０５４１】
本明細書に開示されるシステムおよび方法は、腫瘍内送達（例えば、ブレオマイシン）を意図する任意の核酸系療法または化学療法に適用することができる。
【０５４２】
本明細書に記載される主題は、以下の特定の実施形態を含むが、これらに限定されない。
【０５４３】
実施形態１
抗ＰＤ−１または抗ＰＤ−Ｌ１療法に非応答性または非応答性であると予測される対象の肺における病変を治療する方法であって、
ＩＬ−１２をコードする少なくとも一つのプラスミドの有効用量を病変に投与することと、
エレクトロポレーション療法を病変に施すことと、
対象に、少なくとも一つのチェックポイント阻害剤の有効用量を投与することと、を含み、
エレクトロポレーション療法を施すことが、エレクトロポレーションシステムを使用して、病変に電気パルスを施すことを含み、エレクトロポレーションシステムが、
アプリケータであって、
第一の先端を有する第一の電極および第二の先端を有する第二の電極を含む複数の電極であって、複数の電極が格納位置と展開位置との間で動くように構成され、
第一の電極の第一の先端と第二の電極の第二の先端との間の距離が、格納位置においてよりも展開位置において大きい、複数の電極を含むアプリケータと、
複数の電極に電気的に接続されたジェネレータと、を含み、
電気パルスを病変に施すことが、第一の電極および第二の電極を病変内または病変に隣接して配置することと、ジェネレータから第一の電極および第二の電極に電気パルスを送達することと、を含む、方法。
【０５４４】
実施形態２
アプリケータが、制御部分と、制御部分に接続された挿入管と、制御部分と係合するアクチュエータとをさらに含み、アクチュエータの少なくとも一部分は、制御部分および挿入管に対して移動可能であり、複数の電極を格納位置と展開位置との間で移動させる、実施形態１の方法。
【０５４５】
実施形態３
エレクトロポレーションシステムが、少なくとも一つの作業チャネルを画定する剛性トロカールまたは可撓性内視鏡のうちの一つを含む挿入デバイスをさらに含み、アプリケータの少なくとも一部分は、病変にアクセスするために少なくとも一つの作業チャネルを通過するように構成される、実施形態１または実施形態２の方法。
【０５４６】
実施形態４
エレクトロポレーションシステムが、少なくとも一つのプラスミドまたは少なくとも一つのチェックポイント阻害剤のうちの少なくとも一つを挿入デバイスの少なくとも一つの作業チャネルを通して送達するように構成された薬剤送達装置をさらに含む、実施形態１〜３のいずれか一つの方法。
【０５４７】
実施形態５
アプリケータが、少なくとも一つのプラスミドまたは少なくとも一つのチェックポイント阻害剤のうちの少なくとも一つを病変に送達するように構成された薬剤送達チャネルをさらに画定する、実施形態１〜４のいずれか一つの方法。
【０５４８】
実施形態６
エレクトロポレーションシステムが、少なくとも一つのプラスミド、少なくとも一つのチェックポイント阻害剤、またはエレクトロポレーション療法の少なくとも一つの投与中に、アプリケータの位置を制御するためにアプリケータと係合する少なくとも一つのロボットアームをさらに含む、実施形態１〜５のいずれか一つの方法。
【０５４９】
実施形態７
エレクトロポレーションシステムが、少なくとも一つのプラスミド、少なくとも一つのチェックポイント阻害剤、またはエレクトロポレーション療法の少なくとも一つの投与前または投与中に、病変の画像を生成するように構成された少なくとも一つの可視化装置をさらに含む、実施形態１〜６のいずれか一つの方法。
【０５５０】
実施形態８
少なくとも一つの可視化装置が、コンピューター断層撮影スキャナーを含む、実施形態７の方法。
【０５５１】
実施形態９
ジェネレータが、低電圧電気パルスを出力するよう構成される、実施形態１〜８のいずれか一つの方法。
【０５５２】
実施形態１０
電気パルスが７００Ｖ／ｃｍ以下の電界強度を有する、実施形態１〜９のいずれか一つの方法。
【０５５３】
実施形態１１
ジェネレータが、高電圧電気パルスを出力するよう構成される、実施形態１〜８のいずれか一つの方法。
【０５５４】
実施形態１２
少なくとも一つのプラスミドが、タボキノーゲンテルセプラスミドを含む、実施形態１〜１１のいずれか一つの方法。
【０５５５】
実施形態１３
チェックポイント阻害剤が全身に投与される、実施形態１〜１２のいずれか一つの方法。
【０５５６】
実施形態１４
チェックポイント阻害剤が、抗ＰＤ−１抗体または抗ＰＤ−Ｌ１抗体である、実施形態１〜１３のいずれか一つの方法。
【０５５７】
実施形態１５
チェックポイント阻害剤が、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、ピジリズマブ、またはＭＰＤＬ３２８０Ａを含む、実施形態１〜１４のいずれか一つの方法。
【０５５８】
実施形態１６
抗ＰＤ−１または抗ＰＤＬ１療法に非応答性、または非応答性であると予測される対象の肺の病変を治療するためのシステムであって、
第一の先端を有する第一の電極および第二の先端を有する第二の電極を含む複数の電極、を含むアプリケータであって、複数の電極が格納位置と展開位置との間を移動するように構成され、第一の電極の第一の先端と第二の電極の第二の先端との間の距離が、格納位置においてよりも展開位置において大きい、アプリケータと、
複数の電極に電気的に接続されたジェネレータであって、病変に電気パルスを施すために、第一の電極および第二の電極に電気パルスを送達するように構成される、ジェネレータと、
ＩＬ−１２をコードする少なくとも一つのプラスミドの有効用量および少なくとも一つのチェックポイント阻害剤の有効用量を対象に送達するように構成された少なくとも一つの薬剤送達装置と、を含む、システム。
【０５５９】
実施形態１７
アプリケータが、制御部分と、制御部分に接続された挿入管と、制御部分と係合するアクチュエータとをさらに含み、アクチュエータの少なくとも一部分は、制御部分および挿入管に対して移動可能であり、複数の電極を格納位置と展開位置との間で移動させる、実施形態１６のシステム。
【０５６０】
実施形態１８
少なくとも一つの作業チャネルを画定する剛性トロカールまたは可撓性内視鏡のうちの一つを含む挿入デバイスをさらに含み、アプリケータの少なくとも一部分が少なくとも一つの作業チャネルを通過して病変にアクセスするように構成される、実施形態１６または実施形態１７のシステム。
【０５６１】
実施形態１９
少なくとも一つのプラスミドを挿入デバイスの少なくとも一つの作業チャネルを通して送達するように構成された薬剤送達装置をさらに含む、実施形態１６〜１８のいずれか一つのシステム。
【０５６２】
実施形態２０
アプリケータが、少なくとも一つのプラスミドを病変に送達するように構成された薬剤送達チャネルをさらに画定する、実施形態１６〜１９のいずれか一つのシステム。
【０５６３】
実施形態２１
少なくとも一つのプラスミドまたはエレクトロポレーション療法のうちの少なくとも一つの投与中に、アプリケータの位置を制御するためにアプリケータと係合する少なくとも一つのロボットアームをさらに含む、実施形態１６〜２０のいずれか一つのシステム。
【０５６４】
実施形態２２
少なくとも一つのプラスミドまたはエレクトロポレーション療法の少なくとも一つの投与前または投与中に病変の画像を生成するように構成された少なくとも一つの可視化装置をさらに含む、実施形態１６〜２１のいずれか一つのシステム。
【０５６５】
実施形態２３
少なくとも一つの可視化装置が、コンピューター断層撮影スキャナーを含む、実施形態２２のシステム。
【０５６６】
実施形態２４
ジェネレータが、低電圧電気パルスを出力するよう構成される、実施形態１６〜２３のいずれか一つのシステム。
【０５６７】
実施形態２５
電気パルスが７００Ｖ／ｃｍ以下の電界強度を有する、実施形態１６〜２４のいずれか一つのシステム。
【０５６８】
実施形態２６
ジェネレータが高電圧電気パルスを出力するよう構成される、実施形態１６〜２３のいずれか一つのシステム。
【０５６９】
実施形態２７
少なくとも一つのプラスミドが、タボキノーゲンテルセプラスミドを含む、実施形態１６〜２６のいずれか一つのシステム。
【０５７０】
実施形態２８
対象の肺における病変を治療する方法であって、
少なくとも一つの治療剤の有効用量を病変に投与することと、
エレクトロポレーション療法を病変に施すことと、を含み、エレクトロポレーション療法が、エレクトロポレーションシステムを使って病変に電気パルスを施すことを含み、エレクトロポレーションシステムが、
アプリケータであって、
第一の先端を有する第一の電極および第二の先端を有する第二の電極を含む複数の電極であって、複数の電極が格納位置と展開位置との間で動くように構成され、
第一の電極の第一の先端と第二の電極の第二の先端との間の距離が、格納位置においてよりも展開位置において大きい、複数の電極を含むアプリケータと、
複数の電極に電気的に接続されたジェネレータと、を含み、
電気パルスを病変に施すことが、第一の電極および第二の電極を病変内または病変に隣接して配置することと、ジェネレータから第一の電極および第二の電極に電気パルスを送達することと、を含む、方法。
【０５７１】
実施形態２９
アプリケータが、制御部分と、制御部分に接続された挿入管と、制御部分と係合するアクチュエータとをさらに含み、アクチュエータの少なくとも一部分は、制御部分および挿入管に対して移動可能であり、複数の電極を格納位置と展開位置との間で移動させる、実施形態２８の方法。
【０５７２】
実施形態３０
エレクトロポレーションシステムが、少なくとも一つの作業チャネルを画定する挿入デバイスをさらに含み、アプリケータの少なくとも一部分が、少なくとも一つの作業チャネルを通過して内臓病変にアクセスするように構成される、実施形態２８または実施形態２９の方法。
【０５７３】
実施形態３１
エレクトロポレーションシステムが、挿入デバイスの少なくとも一つの作業チャネルを通して少なくとも一つの治療剤を送達するように構成された薬剤送達装置をさらに含む、実施形態２８〜３０のいずれか一つの方法。
【０５７４】
実施形態３２
アプリケータが、少なくとも一つの治療剤を内臓病変に送達するよう構成された薬剤送達チャネルをさらに画定する、実施形態２８〜３１のいずれか一つの方法。
【０５７５】
実施形態３３
エレクトロポレーションシステムが、少なくとも一つの治療剤またはエレクトロポレーション療法の少なくとも一つの投与中に、アプリケータの位置を制御するためにアプリケータと係合する少なくとも一つのロボットアームをさらに含む、実施形態２８〜３２のいずれか一つの方法。
【０５７６】
実施形態３４
エレクトロポレーションシステムが、少なくとも一つの治療剤またはエレクトロポレーション療法の少なくとも一つの投与の前または投与中に、内臓病変の画像を生成するように構成された少なくとも一つの可視化装置をさらに含む、実施形態２８〜３３のいずれか一つの方法。
【０５７７】
実施形態３５
ジェネレータが、低電圧電気パルスを出力するよう構成される、実施形態２８〜３４のいずれか一つの方法。
【０５７８】
実施形態３６
電気パルスが７００Ｖ／ｃｍ以下の電界強度を有する、実施形態２８〜３５のいずれか一つの方法。
【０５７９】
実施形態３７
ジェネレータが、高電圧電気パルスを出力するよう構成される、実施形態２８〜３４のいずれか一つの方法。
【０５８０】
実施形態３８
少なくとも一つの治療剤の有効用量を対象に投与することが、サイトカインをコードする少なくとも一つのプラスミドの有効用量を投与することを含む、実施形態２８〜３７のいずれか一つの方法。
【０５８１】
実施形態３９
少なくとも一つのプラスミドが、タボキノーゲンテルセプラスミドを含む、実施形態３８の方法。
【０５８２】
実施形態４０
少なくとも一つの治療剤の有効用量を対象に投与することが、少なくとも一つのチェックポイント阻害剤の有効用量を対象に投与することをさらに含む、実施形態２８〜３９のいずれか一つの方法。
【０５８３】
実施形態４１
アプリケータの一部分を、対象の食道を介して対象の肺に挿入することをさらに含む、実施形態２８〜４０のいずれか一つの方法。
【０５８４】
実施形態４２
対象の肺における病変を治療するためのシステムであって、
第一の先端を有する第一の電極および第二の先端を有する第二の電極を含む複数の電極、を含むアプリケータであって、複数の電極が格納位置と展開位置との間を移動するように構成され、第一の電極の第一の先端と第二の電極の第二の先端との間の距離が、格納位置においてよりも展開位置において大きい、アプリケータと、
複数の電極に電気的に接続されたジェネレータであって、病変に電気パルスを施すために、第一の電極および第二の電極に電気パルスを送達するように構成される、ジェネレータと、
対象に少なくとも一つの治療剤の有効用量を送達するよう構成された少なくとも一つの薬剤送達チャネルと、を含む、システム。
【０５８５】
実施形態４３
アプリケータが、制御部分と、制御部分に接続された挿入管と、制御部分と係合するアクチュエータとをさらに含み、アクチュエータの少なくとも一部分は、制御部分および挿入管に対して移動可能であり、複数の電極を格納位置と展開位置との間で移動させる、実施形態４２のシステム。
【０５８６】
実施形態４４
少なくとも一つの作業チャネルを画定する挿入デバイスをさらに含み、アプリケータの少なくとも一部分が少なくとも一つの作業チャネルを通過して病変にアクセスするように構成される、実施形態４２または実施形態４３のシステム。
【０５８７】
実施形態４５
少なくとも一つの治療剤を挿入デバイスの少なくとも一つの作業チャネルを通して送達するよう構成された薬剤送達装置をさらに含む、実施形態４２〜４４のいずれか一つのシステム。
【０５８８】
実施形態４６
挿入デバイスが気管支鏡を含み、アプリケータが少なくとも部分的に可撓性である、実施形態４２〜４５のいずれか一つのシステム。
【０５８９】
実施形態４７
アプリケータが、少なくとも一つの治療剤を病変に送達するよう構成された薬剤送達チャネルをさらに画定する、実施形態４２〜４６のいずれか一つのシステム。
【０５９０】
実施形態４８
少なくとも一つの治療剤またはエレクトロポレーション療法の少なくとも一つの送達中に、アプリケータの位置を制御するためにアプリケータと係合する少なくとも一つのロボットアームをさらに含む、実施形態４２〜４７のいずれか一つのシステム。
【０５９１】
実施形態４９
少なくとも一つの治療剤またはエレクトロポレーション療法の少なくとも一つの送達前または送達中に病変の画像を生成するように構成された少なくとも一つの可視化装置をさらに含む、実施形態４２〜４８のいずれか一つのシステム。
【０５９２】
実施形態５０
ジェネレータが、低電圧電気パルスを出力するよう構成される、実施形態４２〜４９のいずれか一つのシステム。
【０５９３】
実施形態５１
電気パルスが７００Ｖ／ｃｍ以下の電界強度を有する、実施形態４２〜５０のいずれか一つのシステム。
【０５９４】
実施形態５２
ジェネレータが高電圧電気パルスを出力するよう構成される、実施形態４２〜４９のいずれか一つのシステム。
【０５９５】
実施形態５３
対象の膵臓における内臓病変を治療する方法であって、
対象に、少なくとも一つの治療剤の有効用量を投与することと、
エレクトロポレーション療法を内臓病変に施すことと、を含み、エレクトロポレーション療法が、エレクトロポレーションシステムを使って、内臓病変に電気パルスを施すことを含み、エレクトロポレーションシステムが、
アプリケータであって、
第一の先端を有する第一の電極および第二の先端を有する第二の電極を含む複数の電極であって、複数の電極が格納位置と展開位置との間で動くように構成され、
第一の電極の第一の先端と第二の電極の第二の先端との間の距離が、格納位置においてよりも展開位置において大きい、複数の電極を含むアプリケータと、
複数の電極に電気的に接続されたジェネレータと、を含み、
電気パルスを内臓病変に施すことが、第一の電極および第二の電極を内臓病変内または内臓病変に隣接して配置することと、ジェネレータから第一の電極および第二の電極に電気パルスを送達することとを含む、方法。
【０５９６】
実施形態５４
アプリケータが、制御部分と、制御部分に接続された挿入管と、制御部分と係合するアクチュエータとをさらに含み、アクチュエータの少なくとも一部分は、制御部分および挿入管に対して移動可能であり、複数の電極を格納位置と展開位置との間で移動させる、実施形態５３の方法。
【０５９７】
実施形態５５
エレクトロポレーションシステムが、少なくとも一つの作業チャネルを画定する挿入デバイスをさらに含み、アプリケータの少なくとも一部分が、少なくとも一つの作業チャネルを通過して内臓病変にアクセスするように構成される、実施形態５３または実施形態５４の方法。
【０５９８】
実施形態５６
エレクトロポレーションシステムが、挿入デバイスの少なくとも一つの作業チャネルを通して少なくとも一つの治療剤を送達するように構成された薬剤送達装置をさらに含む、実施形態５３〜５５のいずれか一つの方法。
【０５９９】
実施形態５７
挿入デバイスが内視鏡を含み、アプリケータが少なくとも部分的に可撓性である、実施形態５３〜５６のいずれか一つの方法。
【０６００】
実施形態５８
アプリケータが、少なくとも一つの治療剤を内臓病変に送達するよう構成された薬剤送達チャネルをさらに画定する、実施形態５３〜５７のいずれか一つの方法。
【０６０１】
実施形態５９
エレクトロポレーションシステムが、少なくとも一つの治療剤またはエレクトロポレーション療法の少なくとも一つの投与中に、アプリケータの位置を制御するためにアプリケータと係合する少なくとも一つのロボットアームをさらに含む、実施形態５３〜５８のいずれか一つの方法。
【０６０２】
実施形態６０
エレクトロポレーションシステムが、少なくとも一つの治療剤またはエレクトロポレーション療法の少なくとも一つの投与の前または投与中に、内臓病変の画像を生成するように構成された少なくとも一つの可視化装置をさらに含む、実施形態５３〜５９のいずれか一つの方法。
【０６０３】
実施形態６１
少なくとも一つの可視化装置が、コンピューター断層撮影スキャナーを含む、実施形態６０の方法。
【０６０４】
実施形態６２
ジェネレータが、低電圧電気パルスを出力するよう構成される、実施形態５３〜６１のいずれか一つの方法。
【０６０５】
実施形態６３
電気パルスが７００Ｖ／ｃｍ以下の電界強度を有する、実施形態５３〜６２のいずれか一つの方法。
【０６０６】
実施形態６４
ジェネレータが、高電圧電気パルスを出力するよう構成される、実施形態５３〜６１のいずれか一つの方法。
【０６０７】
実施形態６５
少なくとも一つの治療剤の有効用量を対象に投与することが、サイトカインをコードする少なくとも一つのプラスミドの有効用量を投与することを含む、実施形態５３〜６４のいずれか一つの方法。
【０６０８】
実施形態６６
少なくとも一つのプラスミドが、タボキノーゲンテルセプラスミドを含む、実施形態６５の方法。
【０６０９】
実施形態６７
少なくとも一つの治療剤の有効用量を対象に投与することが、少なくとも一つのチェックポイント阻害剤の有効用量を対象に投与することをさらに含む、実施形態５３〜６６のいずれか一つの方法。
【０６１０】
実施形態６８
アプリケータが、貫通先端をさらに含み、方法が、
アプリケータの一部分を対象の胃に挿入することと、
貫通先端で胃壁を貫通することと、
複数の電極を格納位置から展開位置まで移動させることと、をさらに含む、実施形態５３〜６７のいずれか一つの方法。
【０６１１】
実施形態６９
対象の膵臓における内臓病変を治療するためのシステムであって、
第一の先端を有する第一の電極および第二の先端を有する第二の電極を含む複数の電極、を含むアプリケータであって、複数の電極が、アクチュエータの作動に応答して、格納位置と展開位置との間を移動するように構成され、第一の電極の第一の先端と第二の電極の第二の先端との間の距離が、格納位置においてよりも展開位置において大きい、アプリケータと、
複数の電極に電気的に接続されたジェネレータであって、内臓病変に電気パルスを施すために、第一の電極および第二の電極に電気パルスを送達するように構成される、ジェネレータと、
対象に少なくとも一つの治療剤の有効用量を送達するよう構成された少なくとも一つの薬剤送達チャネルと、を含む、システム。
【０６１２】
実施形態７０
アプリケータが、制御部分と、制御部分に接続された挿入管と、制御部分と係合するアクチュエータとをさらに含み、アクチュエータの少なくとも一部分は、制御部分および挿入管に対して移動可能であり、複数の電極を格納位置と展開位置との間で移動させる、実施形態６９のシステム。
【０６１３】
実施形態７１
少なくとも一つの作業チャネルを画定する挿入デバイスをさらに含み、アプリケータの少なくとも一部分が少なくとも一つの作業チャネルを通過して内臓病変にアクセスするように構成される、実施形態６９または実施形態７０のシステム。
【０６１４】
実施形態７２
少なくとも一つの治療剤を挿入デバイスの少なくとも一つの作業チャネルを通して送達するよう構成された薬剤送達装置をさらに含む、実施形態６９〜７１のいずれか一つのシステム。
【０６１５】
実施形態７３
挿入デバイスが気管支鏡を含み、アプリケータが少なくとも部分的に可撓性である、実施形態６９〜７２のいずれか一つのシステム。
【０６１６】
実施形態７４
アプリケータが、少なくとも一つの治療剤を内臓病変に送達するよう構成された薬剤送達チャネルをさらに画定する、実施形態６９〜７３のいずれか一つのシステム。
【０６１７】
実施形態７５
少なくとも一つの治療剤またはエレクトロポレーション療法の少なくとも一つの送達中に、アプリケータの位置を制御するためにアプリケータと係合する少なくとも一つのロボットアームをさらに含む、実施形態６９〜７４のいずれか一つのシステム。
【０６１８】
実施形態７６
少なくとも一つの治療剤またはエレクトロポレーション療法の少なくとも一つの送達前または送達中に内臓病変の画像を生成するように構成された少なくとも一つの可視化装置をさらに含む、実施形態６９〜７５のいずれか一つのシステム。
【０６１９】
実施形態７７
少なくとも一つの可視化装置が、コンピューター断層撮影スキャナーを含む、実施形態７６のシステム。
【０６２０】
実施形態７８
ジェネレータが、低電圧電気パルスを出力するよう構成される、実施形態６９〜７７のいずれか一つのシステム。
【０６２１】
実施形態７９
電気パルスが７００Ｖ／ｃｍ以下の電界強度を有する、実施形態６９〜７８のいずれか一つのシステム。
【０６２２】
実施形態８０
ジェネレータが高電圧電気パルスを出力するよう構成される、実施形態６９〜７７のいずれか一つのシステム。
【０６２３】
実施形態８１
アプリケータが、膵臓上の内臓病変に、または膵臓上の内臓病変に近接して、少なくとも一つの治療剤または電気パルスの少なくとも一つを投与するために、対象の胃壁を貫通するように構成された貫通先端をさらに含む、実施形態６９〜８０のいずれか一つのシステム。
【０６２４】
実施形態８２
対象の病変を治療する方法であって、
対象に、少なくとも一つの治療剤の有効用量を投与することと、
エレクトロポレーション療法を病変に施すことと、を含み、エレクトロポレーション療法が、エレクトロポレーションシステムを使って病変に電気パルスを施すことを含み、エレクトロポレーションシステムが、
第一の先端を有する第一の電極および第二の先端を有する第二の電極を含む複数の電極を含むアプリケータと、
複数の電極に電気的に接続されたジェネレータと、を含み、
電気パルスを病変に施すことが、第一の電極および第二の電極を病変内または病変に隣接して配置することと、ジェネレータから第一の電極および第二の電極に電気パルスを送達することと、を含む、方法。
【０６２５】
実施形態８３
複数の電極が、格納位置と展開位置との間を移動するように構成され、第一の電極の第一の先端と第二の電極の第二の先端との間の距離が、格納位置においてよりも展開位置において大きい、実施形態８２の方法。
【０６２６】
実施形態８４
アプリケータが、制御部分と、制御部分に接続された挿入管と、制御部分と係合するアクチュエータとをさらに含み、アクチュエータの少なくとも一部分は、制御部分および挿入管に対して移動可能であり、複数の電極を格納位置と展開位置との間で移動させる、実施形態８２または実施形態８３の方法。
【０６２７】
実施形態８５
エレクトロポレーションシステムが、少なくとも一つの作業チャネルを画定する挿入デバイスをさらに含み、アプリケータの少なくとも一部分が、少なくとも一つの作業チャネルを通過して病変にアクセスするように構成される、実施形態８２〜８４のいずれか一つの方法。
【０６２８】
実施形態８６
エレクトロポレーションシステムが、挿入デバイスの少なくとも一つの作業チャネルを通して少なくとも一つの治療剤を送達するように構成された薬剤送達装置をさらに含む、実施形態８２〜８５のいずれか一つの方法。
【０６２９】
実施形態８７
挿入デバイスが内視鏡を含み、アプリケータが少なくとも部分的に可撓性である、実施形態８２〜８６のいずれか一つの方法。
【０６３０】
実施形態８８
挿入デバイスがトロカールを含み、アプリケータが実質的に剛性である、実施形態８２〜８７のいずれか一つの方法。
【０６３１】
実施形態８９
アプリケータが、少なくとも一つの治療剤を病変に送達するよう構成された薬剤送達チャネルをさらに画定する、実施形態８２〜８８のいずれか一つの方法。
【０６３２】
実施形態９０
エレクトロポレーションシステムが、少なくとも一つの治療剤またはエレクトロポレーション療法の少なくとも一つの投与中に、アプリケータの位置を制御するためにアプリケータと係合する少なくとも一つのロボットアームをさらに含む、実施形態８２〜８９のいずれか一つの方法。
【０６３３】
実施形態９１
エレクトロポレーションシステムが、少なくとも一つの治療剤またはエレクトロポレーション療法の少なくとも一つの投与の前または投与中に、病変の画像を生成するように構成された少なくとも一つの可視化装置をさらに含む、実施形態８２〜９０のいずれか一つの方法。
【０６３４】
実施形態９２
ジェネレータが、低電圧電気パルスを出力するよう構成される、実施形態８２〜９１のいずれか一つの方法。
【０６３５】
実施形態９３
電気パルスが７００Ｖ／ｃｍ以下の電界強度を有する、実施形態８２〜９２のいずれか一つの方法。
【０６３６】
実施形態９４
ジェネレータが、高電圧電気パルスを出力するよう構成される、実施形態８２〜９１のいずれか一つの方法。
【０６３７】
実施形態９５
病変を治療することが、サイトカインをコードする少なくとも一つのプラスミドの有効用量を投与することを含む、実施形態８２〜９４のいずれか一つの方法。
【０６３８】
実施形態９６
サイトカインがＩＬ−１２を含む、実施形態９５の方法。
【０６３９】
実施形態９７
少なくとも一つのプラスミドが、タボキノーゲンテルセプラスミドを含む、実施形態９５の方法。
【０６４０】
実施形態９８
病変を治療することが、対象に少なくとも一つのチェックポイント阻害剤の有効用量を投与することをさらに含む、実施形態８２〜９７のいずれか一つの方法。
【０６４１】
実施形態９９
治療剤が、免疫調節性ポリペプチドをコードする少なくとも一つのプラスミドを含む、実施形態８２〜９８のいずれか一つの方法。
【０６４２】
実施形態１００
免疫調節性ポリペプチドが、サイトカイン、共刺激分子、遺伝学的アジュバント、抗原、遺伝学的アジュバント−抗原融合ポリペプチド、ケモカイン、または抗原結合ポリペプチドを含む、実施形態９９の方法。
【０６４３】
実施形態１０１
免疫調節性ポリペプチドが、ＣＸＣＬ９、抗ＣＤ３  ｓｃＦｙ、または抗ＣＴＬＡ  ｓｃＦｙを含む、実施形態１００の方法。
【０６４４】
実施形態１０２
対象の病変を治療するためのシステムであって、
第一の先端を有する第一の電極および第二の先端を有する第二の電極を含む複数の電極を含むアプリケータと、
複数の電極に電気的に接続されたジェネレータであって、病変に電気パルスを施すために、第一の電極および第二の電極に電気パルスを送達するように構成される、ジェネレータと、
対象に少なくとも一つの治療剤の有効用量を送達するよう構成された少なくとも一つの薬剤送達チャネルと、を含む、システム。
【０６４５】
実施形態１０３
複数の電極が、格納位置と展開位置との間を移動するように構成され、第一の電極の第一の先端と第二の電極の第二の先端との間の距離が、格納位置においてよりも展開位置において大きい、実施形態１０２のシステム。
【０６４６】
実施形態１０４
アプリケータが、制御部分と、制御部分に接続された挿入管と、制御部分と係合するアクチュエータとをさらに含み、アクチュエータの少なくとも一部分は、制御部分および挿入管に対して移動可能であり、複数の電極を格納位置と展開位置との間で移動させる、実施形態１０２または実施形態１０３のシステム。
【０６４７】
実施形態１０５
少なくとも一つの作業チャネルを画定する挿入デバイスをさらに含み、アプリケータの少なくとも一部分が少なくとも一つの作業チャネルを通過して病変にアクセスするように構成される、実施形態１０２〜１０４のいずれか一つのシステム。
【０６４８】
実施形態１０６
少なくとも一つの治療剤を挿入デバイスの少なくとも一つの作業チャネルを通して送達するよう構成された薬剤送達装置をさらに含む、実施形態１０２〜１０５のいずれか一つのシステム。
【０６４９】
実施形態１０７
挿入デバイスが内視鏡を含み、アプリケータが少なくとも部分的に可撓性である、実施形態１０２〜１０６のいずれか一つのシステム。
【０６５０】
実施形態１０８
挿入デバイスがトロカールを含み、アプリケータが実質的に剛性である、実施形態１０２〜１０７のいずれか一つのシステム。
【０６５１】
実施形態１０９
アプリケータが、少なくとも一つの治療剤を病変に送達するよう構成された薬剤送達チャネルをさらに画定する、実施形態１０２〜１０８のいずれか一つのシステム。
【０６５２】
実施形態１１０
少なくとも一つの治療剤または電気パルスの少なくとも一つの送達中に、アプリケータの位置を制御するためにアプリケータと係合する少なくとも一つのロボットアームをさらに含む、実施形態１０２〜１０９のいずれか一つのシステム。
【０６５３】
実施形態１１１
少なくとも一つの治療剤または電気パルスの少なくとも一つの送達前または送達中に病変の画像を生成するように構成された少なくとも一つの可視化装置をさらに含む、実施形態１０２〜１１０のいずれか一つのシステム。
【０６５４】
実施形態１１２
少なくとも一つの可視化装置が、コンピューター断層撮影スキャナーを含む、実施形態１１１のシステム。
【０６５５】
実施形態１１３
ジェネレータが、低電圧電気パルスを出力するよう構成される、実施形態１０２〜１１２のいずれか一つのシステム。
【０６５６】
実施形態１１４
電気パルスが７００Ｖ／ｃｍ以下の電界強度を有する、実施形態１０２〜１１３のいずれか一つのシステム。
【０６５７】
実施形態１１５
ジェネレータが高電圧電気パルスを出力するよう構成される、実施形態１０２〜１１２のいずれか一つのシステム。
【０６５８】
実施形態１１６
病変を治療することが、サイトカインをコードする少なくとも一つのプラスミドの有効用量を送達することを含む、実施形態１０２〜１１５のいずれか一つのシステム。
【０６５９】
実施形態１１７
少なくとも一つのプラスミドがタボキノーゲンテルセプラスミドを含む、実施形態１１６のシステム。
【０６６０】
実施形態１１８
少なくとも一つの治療剤の有効用量を対象に送達することが、少なくとも一つのチェックポイント阻害剤の有効用量を対象に送達することをさらに含む、実施形態１０２〜１１７のいずれか一つのシステム。
【０６６１】
実施形態１１９
治療剤が、免疫調節性ポリペプチドをコードする少なくとも一つのプラスミドを含む、実施形態１０２〜１１８のいずれか一つのシステム。
【０６６２】
実施形態１２０
免疫調節性ポリペプチドが、サイトカイン、共刺激分子、遺伝学的アジュバント、抗原、遺伝学的アジュバント−抗原融合ポリペプチド、ケモカイン、または抗原結合ポリペプチドを含む、実施形態１１９のシステム。
【０６６３】
実施形態１２１
免疫調節性ポリペプチドが、ＣＸＣＬ９、抗ＣＤ３  ｓｃＦｖ、または抗ＣＴＬＡ−４  ｓｃＦｖを含む、実施形態１１９、または実施形態１２０の方法。
【０６６４】
実施形態１２２
エレクトロポレーション用のアプリケータであって、
制御部分と、
制御部分に接続された挿入管と、
制御部分と係合するアクチュエータであって、アクチュエータの少なくとも一部分は、制御部分および挿入管に対して移動可能である、アクチュエータと、
第一の先端を有する第一の電極と、第二の先端を有する第二の電極とを含む複数の電極であって、アクチュエータによる作動に応答して、格納位置と展開位置との間で移動するように構成され、
第一の電極の第一の先端と第二の電極の第二の先端との間の距離が、格納位置においてよりも、展開位置において大きい、複数の電極と、を含む、アプリケータ。
【０６６５】
実施形態１２３
第一の先端および第二の先端が、格納位置において挿入管内に完全に埋め込まれ、少なくとも第一の先端および第二の先端が、挿入管から展開位置の隣接する組織に延在するように構成される、実施形態１２２のアプリケータ。
【０６６６】
実施形態１２４
展開位置において、第一の電極の第一の先端と第二の電極の第二の先端との間の距離が、挿入管の遠位端の外径よりも大きい、実施形態１２２または実施形態１２３のアプリケータ。
【０６６７】
実施形態１２５
挿入管が、挿入管の遠位端に画定される第一の角度付きチャネルおよび第二の角度付きチャネルを含み、
第一の角度付きチャネルおよび第二の角度付きチャネルが、挿入管の長手方向軸に対して鋭角にそれぞれ配向され、
第一の電極が、展開位置の第一の角度付きチャネルを少なくとも部分的に通って延在するように構成され、
第二の電極が、展開位置の第二の角度付きチャネルを少なくとも部分的に通って延在するように構成され、
格納位置において、第一の電極および第二の電極が、挿入管内で互いに平行に配置され、
展開位置において、第一の電極の少なくとも一部分および第二の電極の少なくとも一部分が、第一の角度付きチャネルおよび第二の角度付きチャネルのそれぞれの鋭角に配置される、実施形態１２２〜１２４のいずれか一つに記載アプリケータ。
【０６６８】
実施形態１２６
第一の電極および第二の電極と係合するブラダーであって、格納位置の挿入管内に完全に配置され、展開位置の挿入管の外に少なくとも部分的に配置される、ブラダーをさらに含む、実施形態１２２〜１２４のいずれか一つのアプリケータ。
【０６６９】
実施形態１２７
第一の電極および第二の電極の少なくとも一部分は、ニチノールを含み、ニチノールは、複数の電極が展開位置にある場合、形状を変化させるように構成され、ニチノールは、人体温度を超えると形状が変化するように構成されている、実施形態１２２〜１２６のいずれか一つのアプリケータ。
【０６７０】
実施形態１２８
第一の電極および第二の電極のそれぞれに取り付けられたニチノールスリーブをさらに含み、ニチノールは、複数の電極が展開位置にある場合、形状を変化させるように構成され、ニチノールは、人体温度を超えると形状が変化するように構成されている、実施形態１２２〜１２７のいずれか一つのアプリケータ。
【０６７１】
実施形態１２９
第一の電極および第二の電極が非線形である、実施形態１２２〜１２８のいずれか一つのアプリケータ。
【０６７２】
実施形態１３０
挿入管内に少なくとも部分的に移動可能に配置されたキャリアをさらに含み、第一の電極および第二の電極はそれぞれ、少なくとも部分的にキャリア内に配置され、キャリアは、第一の電極に関連する第一の部分および第二の電極に関連する第二の部分を画定し、第一の部分および第二の部分は、格納位置から拡張位置に移動するときに、互いに半径方向に離れて拡張するように構成される、実施形態１２２〜１２４または１２７〜１２９のいずれか一つのアプリケータ。
【０６７３】
実施形態１３１
キャリアの第一の部分および第二の部分を半径方向外側に拡張するために、アクチュエータから力を受けるように構成された内側部材をさらに含む、実施形態１３０のアプリケータ。
【０６７４】
実施形態１３２
第一の部分と第二の部分との間に配置されるばねをさらに含み、ばねが、キャリアの第一の部分および第二の部分を半径方向外側に拡張するように構成される、実施形態１３０または実施形態１３１のアプリケータ。
【０６７５】
実施形態１３３
アプリケータの挿入管を介して薬剤送達装置を標的部位と流体接続するよう構成された薬剤送達チャネルをさらに含む、実施形態１２２〜１３２のいずれか一つのアプリケータ。
【０６７６】
実施形態１３４
アクチュエータは、薬剤送達チャネルを標的部位に向かって移動させるように構成される、実施形態１３３のアプリケータ。
【０６７７】
実施形態１３５
薬剤送達チャネルが、アクチュエータによる作動に応答して、薬剤送達チャネルの格納位置と薬剤送達チャネルの展開位置との間を、複数の電極と同時に移動するように構成される、実施形態１３４のアプリケータ。
【０６７８】
実施形態１３６
挿入管は、遠位端で貫通先端を画定する、実施形態１２２〜１３５のいずれか一つのアプリケータ。
【０６７９】
実施形態１３７
挿入管が可撓性部分を含み、可撓性部分が挿入管の遠位端を操縦するように構成される、実施形態１２２〜１３６のいずれか一つのアプリケータ。
【０６８０】
実施形態１３８
挿入管は剛性部分を含み、剛性部分は、挿入管の遠位端とアプリケータの制御部分との間に配置され、アプリケータが、挿入管内に配置された少なくとも１本のケーブルを含み、少なくとも１本のケーブルが、挿入管の遠位端と剛性部分との間のアプリケータに取り付けられて、挿入管の遠位端を操縦する、実施形態１２２〜１３７のいずれか一つのアプリケータ。
【０６８１】
実施形態１３９
エレクトロポレーションのためのシステムであって、
アプリケータであって、
制御部分と、
制御部分に接続された挿入管と、
制御部分と係合するアクチュエータであって、アクチュエータの少なくとも一部分は、制御部分および挿入管に対して移動可能である、アクチュエータと、
第一の先端を有する第一の電極と、第二の先端を有する第二の電極とを含む複数の電極であって、アクチュエータによる作動に応答して、格納位置と展開位置との間で移動するように構成され、
第一の電極の第一の先端と第二の電極の第二の先端との間の距離が、格納位置においてよりも、展開位置において大きい、複数の電極とを含む、アプリケータと、
作業チャネルを画定する挿入デバイスであって、アプリケータの挿入管の少なくとも一部分が作業チャネルを通過するように構成される、挿入デバイスと、
複数の電極に電気的に接続されたジェネレータであって、複数の電極に電気信号を送達するように構成される、ジェネレータと、
一つまたは複数の治療剤を挿入デバイスの作業チャネルを通して送達するよう構成された薬剤送達装置と、を含む、システム。
【０６８２】
実施形態１４０
展開位置において、第一の電極の第一の先端と第二の電極の第二の先端との間の距離が、作業チャネルの内径よりも大きい、実施形態１３９のシステム。
【０６８３】
実施形態１４１
格納位置において、挿入管の一部分および複数の電極が、挿入デバイスの作業チャネルを通過するように構成される、実施形態１３９または実施形態１４０のシステム。
【０６８４】
実施形態１４２
ジェネレータに、電気信号を第一の電極および第二の電極に送信させ、第一の電極と第二の電極との間に配置される組織のインピーダンスを示す電気信号を受信させるように構成されたプロセッサをさらに含む、実施形態１３９〜１４１のいずれか一つのシステム。
【０６８５】
実施形態１４３
挿入デバイスが内視鏡を含む、実施形態１３９〜１４２のいずれか一つのシステム。
【０６８６】
実施形態１４４
内視鏡が気管支鏡を含む、実施形態１４３のシステム。
【０６８７】
実施形態１４５
アプリケータが、アプリケータの挿入管を介して標的部位と薬剤送達装置を流体接続するよう構成された薬剤送達チャネルをさらに含む、実施形態１３９〜１４４のいずれか一つのシステム。
【０６８８】
実施形態１４６
アクチュエータが、薬剤送達チャネルを標的部位に向かって移動させるように構成される、実施形態１４５のシステム。
【０６８９】
実施形態１４７
薬剤送達チャネルが、アクチュエータによる作動に応答して、薬剤送達チャネルの格納位置と薬剤送達チャネルの展開位置との間を、複数の電極と同時に移動するように構成される、実施形態１３９〜１４６のいずれか一つのシステム。
【０６９０】
実施形態１４８
挿入管が可撓性部分を含み、可撓性部分が挿入管の遠位端を操縦するように構成される、実施形態１３９〜１４７のいずれか一つのシステム。
【０６９１】
実施形態１４９
挿入管は剛性部分を含み、剛性部分は、挿入管の遠位端とアプリケータの制御部分との間に配置され、アプリケータが、挿入管内に配置された少なくとも１本のケーブルを含み、少なくとも１本のケーブルが、挿入管の遠位端と剛性部分との間のアプリケータに取り付けられて、挿入管の遠位端を操縦する、実施形態１３９〜１４８のいずれか一つのシステム。
【０６９２】
実施形態１５０
アプリケータが薬剤送達チャネルを含み、薬剤送達装置が薬剤送達チャネルを介して一つまたは複数の治療剤を送達するよう構成される、実施形態１３９〜１４９のいずれか一つのシステム。
【０６９３】
実施形態１５１
腫瘍を治療する方法であって、
挿入デバイスの遠位端が標的部位に隣接して配置されるまで、挿入デバイスを患者に挿入することと、
複数の電極を含む挿入管の遠位端が標的部位に隣接して位置付けられるように、アプリケータの挿入管を挿入デバイスの作業チャネルに挿入することと、
挿入デバイスの作業チャネルを介して、薬剤送達装置から標的部位に治療剤を投与することと、
一つまたは複数の電気パルスをジェネレータから電極に送達して、標的部位で組織を電気穿孔することと、
患者からアプリケータおよび挿入デバイスを取り外すことと、を含む、方法。
【０６９４】
実施形態１５２
治療剤を投与することが、薬剤送達装置の一部分が標的部位に隣接して位置するように、薬剤送達装置の一部分を挿入デバイスの作業チャネルに挿入することを含み、
方法が、薬剤送達装置の一部分を挿入デバイスから取り除くことをさらに含む、実施形態１５１の方法。
【０６９５】
実施形態１５３
アプリケータの挿入管を作業チャネルに挿入することが、標的部位に隣接する薬剤送達チャネルを位置付けることをさらに含む、実施形態１５１または実施形態１５２の方法。
【０６９６】
実施形態１５４
複数の電極および薬剤送達チャネルを、挿入管を挿入した後、および治療剤を投与する前、または一つまたは複数の電気パルスを送達する前に、展開位置に移動させるようにアプリケータを作動させることをさらに含む、実施形態１５１〜１５３のいずれか一つの方法。
【０６９７】
実施形態１５５
腫瘍を有する対象を治療する方法であって、
ａ）対象に、治療剤の有効用量を投与することと、
ｂ）エレクトロポレーション療法を腫瘍に施すことであって、エレクトロポレーション療法が、実施形態１０２〜１２１または１３９〜１５０のいずれか一つのシステムを使用して腫瘍に電気パルスを投与することを含む、施すことと、を含む、方法。
【０６９８】
実施形態１５６
治療剤がアプリケータの薬剤送達装置を介して投与される、実施形態１５５の方法。
【０６９９】
実施形態１５７
治療剤が治療用ポリペプチドをコードする発現ベクターを含む、実施形態１５５または実施形態１５６の方法。
【０７００】
実施形態１５８
発現ベクターが、共刺激ポリペプチド、免疫調節性ポリペプチド、免疫刺激性サイトカイン、チェックポイント阻害剤、アジュバント、抗原、遺伝学的アジュバント−抗原融合ポリペプチド、ケモカイン、または抗原結合ポリペプチドのうちの一つまたは複数をコードする、実施形態１５７の方法。
【０７０１】
実施形態１５９
共刺激分子が、ＧＩＴＲ、ＣＤ１３７、ＣＤ１３４、ＣＤ４０Ｌ、およびＣＤ２７作動薬からなる群から選択される、実施形態１５８の方法。
【０７０２】
実施形態１６０
発現ベクターが、ＣＸＣＬ９、抗ＣＤ３  ｓｃＦｖ、または抗ＣＴＬＡ−４  ｓｃＦｖを含むポリペプチドをコードする、実施形態１５８または実施形態１５９の方法。
【０７０３】
実施形態１６１
免疫刺激性サイトカインが、ＴＮＦα、ＩＬ−１、ＩＬ−１０、ＩＬ−１２、ＩＬ−１２  ｐ３５、ＩＬ−１２  ｐ４０、ＩＬ−１５、ＩＬ−１５Ｒα、ＩＬ−２３、ＩＬ−２７、ＩＦＮα、ＩＦＮβ、ＩＦＮγ、ＩＬ−２、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−７、ＩＬ−９、ＩＬ−２１、ＴＧＦβ、およびＴＮＦα、ＩＬ−１、ＩＬ−１０、ＩＬ−１２、ＩＬ−１２  ｐ３５、ＩＬ−１２  ｐ４０、ＩＬ−１５、ＩＬ−１５Ｒα、ＩＬ−２３、ＩＬ−２７、ＩＦＮα、ＩＦＮβ、ＩＦＮγ、ＩＬ−２、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−７、ＩＬ−９、ＩＬ−２１、ＴＧＦβのいずれか二つの組み合わせからなる群から選択される、実施形態１５８〜１６０のいずれかに一つに記載の方法。
【０７０４】
実施形態１６２
方法が、対象にチェックポイント阻害剤の有効用量を投与することをさらに含む、実施形態１５５〜１６１のいずれか一つの方法。
【０７０５】
実施形態１６３
チェックポイント阻害剤が全身に投与される、実施形態１６２の方法。
【０７０６】
実施形態１６４
チェックポイント阻害剤が、免疫刺激性サイトカインをコードする発現ベクター、または第二の発現ベクター上でコードされ、エレクトロポレーション療法によって癌性腫瘍に送達される、実施形態１６２または実施形態１６３の方法。
【０７０７】
実施形態１６５
チェックポイント阻害剤が、免疫刺激性サイトカインのエレクトロポレーションの前に、免疫刺激性サイトカインのエレクトロポレーションと同時に、および／または免疫刺激性サイトカインのエレクトロポレーションの後に投与される、実施形態１６２〜１６４のいずれか一つの方法。
【０７０８】
実施形態１６６
発現ベクターが、
ａ）Ｐ−Ａ−Ｔ−Ｃ、
ｂ）Ｐ−Ａ−Ｔ−Ｂ−Ｔ−Ｃ、または
ｃ）Ｐ−Ｃ−Ｔ−Ａ−Ｔ−Ｂを含み、
式中、Ｐはプロモーターであり、Ｔは翻訳修飾要素であり、Ａは、免疫調節分子、免疫調節分子の鎖、または共刺激分子をコードし、Ｂは、免疫調節分子、免疫調節分子の鎖、または共刺激分子をコードし、Ｃは、免疫調節分子、免疫調節分子の鎖、共刺激分子、遺伝学的アジュバント、抗原、遺伝学的アジュバント−抗原融合ポリペプチド、ケモカイン、または抗原結合ポリペプチドをコードする、実施形態１５７〜１６５のいずれか一つの方法。
【０７０９】
実施形態１６７
発現ベクターが、ＣＸＣＬ９、抗ＣＤ３  ｓｃＦｖ、または抗ＣＴＬＡ−４  ｓｃＦｖを含むポリペプチドをコードする、実施形態１５７〜１６６のいずれか一つの方法。
【０７１０】
実施形態１６８
腫瘍にアクセスするために、アプリケータの遠位端を有する組織を貫通することをさらに含む、実施形態１５５〜１６７のいずれか一つの方法。
【０７１１】
実施形態１６９
哺乳類組織における腫瘍細胞増殖の再発を減少させる方法であって、
ａ）治療剤を腫瘍および／または腫瘍辺縁組織に投与することと、
ｂ）ジェネレータおよび実施形態１０２〜１５０のいずれか一つのアプリケータを使用して、腫瘍および／または腫瘍辺縁組織にエレクトロポレーション療法を施すことと、を含む、方法。
【０７１２】
実施形態１７０
治療剤を投与することが、治療剤をコードする発現ベクターを腫瘍および／または腫瘍辺縁組織に注射することを含む、実施形態１６９の方法。
【０７１３】
実施形態１７１
エレクトロポレーション療法が、腫瘍の外科的切除または切断の前または後に施される、実施形態１６９または実施形態１７０の方法。
【０７１４】
実施形態１７２
ジェネレータが低電圧ジェネレータを含む、実施形態１６９〜１７１のいずれか一つの方法。
【０７１５】
実施形態１７３
エレクトロポレーション療法が、４００Ｖ／ｃｍ以下の電界を生成する低電圧ジェネレータを使用して実施される、実施形態１６９〜１７２のいずれか一つの方法。
【０７１６】
実施形態１７４
ジェネレータが高電圧ジェネレータを含む、実施形態１６９〜１７１のいずれか一つの方法。
【０７１７】
実施形態１７５
腫瘍を有する対象を治療する方法であって、
対象に、少なくとも一つのＤＮＡベースの治療剤の有効用量を投与することと、
少なくとも一つのＤＮＡベースの治療剤を、エレクトロポレーションアプリケータおよびジェネレータを使用して腫瘍の複数の細胞にトランスフェクトすることと、を含み、
ジェネレータが、エレクトロポレーションアプリケータを介して腫瘍に低電圧エレクトロポレーションパルスを印加するよう構成され、
少なくとも一つのＤＮＡベースの治療剤の８〜１０％が、腫瘍の細胞にトランスフェクトされる、方法。
【０７１８】
実施形態１７６
アプリケータが、
制御部分と、
制御部分に接続された挿入管と、
制御部分と係合するアクチュエータであって、アクチュエータの少なくとも一部分は、制御部分および挿入管に対して移動可能である、アクチュエータと、
第一の先端を有する第一の電極と、第二の先端を有する第二の電極とを含む複数の電極であって、アクチュエータによる作動に応答して、格納位置と展開位置との間で移動するように構成され、
第一の電極の第一の先端と第二の電極の第二の先端との間の距離が、格納位置においてよりも、展開位置において大きい、複数の電極と、を含む、実施形態１７５の方法。
【０７１９】
実施形態１７７
ジェネレータが複数の電極に電気的に接続され、ジェネレータが複数の電極に電気信号を送達するように構成される、実施形態１７６の方法。
【０７２０】
実施形態１７８
各低電圧エレクトロポレーションパルスが、１ｍｓ以上の持続時間を規定する、実施形態１７５〜１７７のいずれか一つの方法。
【０７２１】
実施形態１７９
各低電圧エレクトロポレーションパルスが、０．５ｍｓ〜１ｓの持続時間を規定する、実施形態１７８の方法。
【０７２２】
実施形態１８０
低電圧エレクトロポレーションパルスが、６００Ｖ以下の電圧を含む、実施形態１７５〜１７９のいずれか一つの方法。
【０７２３】
実施形態１８１
低電圧エレクトロポレーションパルスが、６００Ｖ〜５Ｖの電圧を含む、実施形態１７５〜１８０のいずれか一つの方法。
【０７２４】
実施形態１８２
低電圧エレクトロポレーションパルスが、７００Ｖ／ｃｍ以下の場を含む、実施形態１７５〜１８１のいずれか一つの方法。
【０７２５】
実施形態１８３
腫瘍を有する対象を治療する方法であって、
対象に、少なくとも一つのＤＮＡベースの治療剤の有効用量を投与することと、
少なくとも一つのＤＮＡベースの治療剤を、エレクトロポレーションアプリケータおよびジェネレータを使用して腫瘍の複数の細胞にトランスフェクトすることと、を含み、
ジェネレータが、エレクトロポレーションアプリケータを介して腫瘍に高電圧エレクトロポレーションパルスを印加するように構成され、
少なくとも一つのＤＮＡベースの治療剤の８〜１０％が、腫瘍の細胞にトランスフェクトされる、方法。
【０７２６】
実施形態１８４
対象におけるチェックポイント阻害剤療法に対する応答性を増加させる方法であって、
サイトカインをコードする少なくとも一つのプラスミドの有効用量を対象中の腫瘍に注射することと、
腫瘍にエレクトロポレーション療法を施すことと、を含む、方法。
【０７２７】
実施形態１８５
腫瘍が肝臓内にある、実施形態１８４の方法。
【０７２８】
実施形態１８６
腫瘍が肝細胞癌である、実施形態１８４または実施形態１８５の方法。
【０７２９】
実施形態１８７
免疫刺激性サイトカインが、ＴＮＦα、ＩＬ−１、ＩＬ−１０、ＩＬ−１２、ＩＬ−１２  ｐ３５、ＩＬ−１２  ｐ４０、ＩＬ−１５、ＩＬ−１５Ｒα、ＩＬ−２３、ＩＬ−２７、ＩＦＮα、ＩＦＮβ、ＩＦＮγ、ＩＬ−２、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−７、ＩＬ−９、ＩＬ−２１、ＴＧＦβ、およびＴＮＦα、ＩＬ−１、ＩＬ−１０、ＩＬ−１２、ＩＬ−１２  ｐ３５、ＩＬ−１２  ｐ４０、ＩＬ−１５、ＩＬ−１５Ｒα、ＩＬ−２３、ＩＬ−２７、ＩＦＮα、ＩＦＮβ、ＩＦＮγ、ＩＬ−２、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−７、ＩＬ−９、ＩＬ−２１、ＴＧＦβのいずれか二つの組み合わせからなる群から選択される、実施形態１８４〜１８６のいずれかに一つに記載の方法。
【０７３０】
実施形態１８８
サイトカインが、ＩＬ−１２である、実施形態１８４〜１８７のいずれか一つの方法。
【０７３１】
実施形態１８９
対象が、チェックポイント阻害剤療法に対して低い応答性または非応答性を有した、有している、または有すると予測される、実施形態１８４〜１８８のいずれか一つの方法。
【０７３２】
実施形態１９０
チェックポイント阻害剤療法を調節することが、対象に、少なくとも一つのチェックポイント阻害剤の有効用量を投与することをさらに含む、実施形態１８４〜１８９のいずれか一つの方法。
【０７３３】
実施形態１９１
エレクトロポレーション用のトロカール系システムであって、
アプリケータであって、
制御部分と、
制御部分に接続された挿入管と、
制御部分と係合するアクチュエータであって、アクチュエータの少なくとも一部分は、制御部分および挿入管に対して移動可能である、アクチュエータと、
第一の先端を有する第一の電極と、第二の先端を有する第二の電極とを含む複数の電極であって、アクチュエータによる作動に応答して、格納位置と展開位置との間で移動するように構成され、
第一の電極の第一の先端と第二の電極の第二の先端との間の距離が、格納位置においてよりも、展開位置において大きい、複数の電極とを含む、アプリケータと、
作業チャネルを画定するトロカールであって、アプリケータの挿入管の少なくとも一部分が作業チャネルを通過するように構成される、トロカールと、
複数の電極に電気的に接続されたジェネレータであって、複数の電極に電気信号を送達するように構成される、ジェネレータと、
トロカールの作業チャネルを通して一つまたは複数の治療剤を送達するよう構成された薬剤送達装置と、を含む、システム。
【０７３４】
本明細書に記述された本発明の多くの修正および他の実施形態は、これらの発明が、前述の説明および関連する図面に提示された教示の利益を得ることに関連する、当業者に思い浮かぶであろう。従って、当然のことながら、本発明は開示された特定の実施形態に限定されないこと、および修正および他の実施形態は添付の特許請求の範囲の範囲内に含まれることが意図される。また、前述の説明および関連する図面は、要素および／または機能の特定の例示的な組み合わせの文脈における例示的な実施形態を説明しているが、要素および／または機能の異なる組み合わせが、添付の特許請求の範囲から逸脱することなく、代替の実施形態によって提供され得ることが理解されるべきである。この点に関して、例えば、上記に明示的に記述されたものとは異なる要素および／または機能の異なる組み合わせも、添付の特許請求の範囲の一部に記載され得るように意図される。本明細書には特定の用語が用いられるが、それらは、制限の目的でではなく、一般的かつ記述的な意味でのみ使用される。
【図１】
2021523763.tif 000011
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５】
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【図２６】
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【図２７】
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【図２８】
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【図２９】
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【図３０】
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【図３１】
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【図３２】
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【図３３】
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【図３４】
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【図３５】
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【図３６】
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【図３７】
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【図３８】
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【図３９】
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【図４０】
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【図４１】
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【図４２】
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【図４３】
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【図４４】
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【図４５】
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【図４６】
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【図４７】
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【図４８】
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【図４９】
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【図５０】
2021523763.tif 000060
【図５１】
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【図５２】
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【図５３】
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【図５４】
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【図５５】
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【図５６】
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【図５７】
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【図５８】
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【図５９】
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【図６０】
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【図６１】
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【図６２】
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【図６３】
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【図６４】
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【図６５】
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【図６６】
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【図６７】
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【図６８】
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【図６９】
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【図７０】
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【図７１】
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【図７２】
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【図７３】
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【図７４】
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【図７５】
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【図７６】
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【図７７】
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【図７８】
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【図７９】
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【図８０】
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【図８１】
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【図８２】
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【図８３】
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【図８４】
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【図８５】
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【図８６】
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【図８７】
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【図８８】
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【図８９】
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【図９０】
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【図９１】
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【図９２】
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【図９３】
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【図９４】
2021523763.tif 000104
【図９５】
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【図９６】
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【図９７】
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【図９８】
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【図９９】
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【図１００】
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【図１０１】
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【図１０２】
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【図１０３】
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【図１０４】
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【図１０５】
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【図１０６】
2021523763.tif 000116
【図１０７】
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【図１０８】
2021523763.tif 000118
【図１０９】
2021523763.tif 000119
【国際調査報告】
2021523763.tif 000120
2021523763.tif 000121
2021523763.tif 000122
2021523763.tif 000123
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