(57)【要約】  本明細書に提供されるカチオン性脂質は、例えば、リポソーム送達ビヒクルの成分として、ｍＲＮＡおよびコードされたタンパク質の送達および発現に有用であり得、それ故に、１つ以上のタンパク質の欠乏に関連するもの等の様々な疾患、障害、および状態の治療に有用であり得る。【化２９７】2021525743.tif 000382
2021525743.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
タンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソームであって、前記リポソームが、１つ以上のカチオン性脂質、１つ以上の非カチオン性脂質、１つ以上のコレステロールベースの脂質、および１つ以上のＰＥＧ修飾脂質を含み、少なくとも１つのカチオン性脂質が、式（Ｉ）に従う構造を有するカチオン性脂質であり、
【化２６５】
2021525743.tif 000346
式中、
Ｌ１が、共有結合、Ｃ１−Ｃ１０アルキレン、Ｃ２−Ｃ１０アルケニレン、またはＣ２−Ｃ１０アルキニレンであり、
Ｘ１が、ＣＨ３、Ｃｌ、ＯＲａ、Ｃ（＝Ｘ１ａ）ＲＸ１ａ、ＮＲｂＲｃ、または５もしくは６員窒素含有ヘテロアリールであり、
Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、およびＸ５が各々独立して、ＣＨ２、Ｏ、またはＮＲｄであり、
Ｒ１が、Ｈ、Ｃｌ、ＯＲｆ、ＮＲｇＲｈ、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ２−Ｃ１０アルケニル、またはＣ２−Ｃ１０アルキニルであり、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、Ｃ２−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ２−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルケニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキニル、ポリマー、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、５もしくは６員ヘテロシクロアルキル、５もしくは６員アリール、または５もしくは６員ヘテロアリールであり、
Ｒａ、Ｒｄ、およびＲｆが各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、Ｃ２−Ｃ６−アルケニル、またはＣ２−Ｃ６−アルキニルであり、
ＲｂおよびＲｃが各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、Ｃ２−Ｃ６−アルケニル、またはＣ２−Ｃ６−アルキニルであるか、または
ＲｂおよびＲｃが、それらが結合している窒素原子と一緒になって、飽和または不飽和５〜６員複素環式環を形成し、
ＲｇおよびＲｈが各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、Ｃ２−Ｃ６−アルケニル、またはＣ２−Ｃ６−アルキニルであるか、または
ＲｇおよびＲｈが、それらが結合している窒素原子と一緒になって、飽和または不飽和５〜６員複素環式環を形成し、
ＲＸ１ａが、ＯＨまたはＯＲａであり、
Ｘ１ａが、ＯまたはＳであるが、
但し、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５のうちの少なくとも１つが、Ｃ６−Ｃ３０−アルキル、Ｃ６−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ６−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ６−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ６−Ｃ３０−アルケニル、またはヘテロ−Ｃ６−Ｃ３０−アルキニルであることを条件とする、タンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
【請求項２】
前記カチオン性脂質が、式（ＩＩ）に従う構造を有し、
【化２６６】
2021525743.tif 000347
Ｌ１が、共有結合またはＣ１−Ｃ１０アルキレンであり、
Ｘ１が、ＮＲｂＲｃまたは５もしくは６員窒素含有ヘテロアリールであり、
Ｒ１が、ＯＲｆ、Ｎ（ＣＨ３）２、またはＣ１−Ｃ１０アルキルであり、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、Ｃ２−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ２−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルケニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキニル、ポリマー、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、５もしくは６員ヘテロシクロアルキル、５もしくは６員アリール、または５もしくは６員ヘテロアリールであり、
ＲｂおよびＲｃが各々、Ｃ１−Ｃ６−アルキルである、請求項１に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
【請求項３】
Ｌ１が、共有結合またはＣ１−Ｃ１０アルキレンである、請求項１または２に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
【請求項４】
Ｌ１が、共有結合である、請求項３に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
【請求項５】
Ｌ１が、−ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２−、または−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−である、請求項３に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
【請求項６】
Ｘ１が、ＮＲｂＲｃまたは５もしくは６員窒素含有ヘテロアリールである、請求項１〜５のいずれか一項に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
【請求項７】
Ｘ１が、ピリジニルまたはジアルキルアミノである、請求項６に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
【請求項８】
Ｒ１が、メチル、ジメチルアミノ、またはＯＨである、請求項１〜７のいずれか一項に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
【請求項９】
前記カチオン性脂質が、式（ＩＩａ）に従う構造を有し、
【化２６７】
2021525743.tif 000348
式中、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、Ｃ２−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ２−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルケニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキニル、ポリマー、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、５もしくは６員ヘテロシクロアルキル、５もしくは６員アリール、または５もしくは６員ヘテロアリールである、請求項１に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
【請求項１０】
前記カチオン性脂質が、式（ＩＩｂ）に従う構造を有し、
【化２６８】
2021525743.tif 000349
式中、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、Ｃ２−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ２−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルケニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキニル、ポリマー、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、５もしくは６員ヘテロシクロアルキル、５もしくは６員アリール、または５もしくは６員ヘテロアリールである、請求項１に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
【請求項１１】
前記カチオン性脂質が、式（ＩＩｃ）に従う構造を有し、
【化２６９】
2021525743.tif 000350
式中、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、Ｃ２−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ２−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルケニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキニル、ポリマー、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、５もしくは６員ヘテロシクロアルキル、５もしくは６員アリール、または５もしくは６員ヘテロアリールである、請求項１に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
【請求項１２】
前記カチオン性脂質が、式（ＩＩｄ）に従う構造を有し、
【化２７０】
2021525743.tif 000351
式中、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、Ｃ２−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ２−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルケニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキニル、ポリマー、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、５もしくは６員ヘテロシクロアルキル、５もしくは６員アリール、または５もしくは６員ヘテロアリールである、請求項１に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
【請求項１３】
前記カチオン性脂質が、式（ＩＩｅ）に従う構造を有し、
【化２７１】
2021525743.tif 000352
式中、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、Ｃ２−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ２−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルケニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキニル、ポリマー、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、５もしくは６員ヘテロシクロアルキル、５もしくは６員アリール、または５もしくは６員ヘテロアリールである、請求項１に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
【請求項１４】
前記カチオン性脂質が、式（ＩＩｆ）に従う構造を有し、
【化２７２】
2021525743.tif 000353
式中、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、Ｃ２−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ２−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルケニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキニル、ポリマー、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、５もしくは６員ヘテロシクロアルキル、５もしくは６員アリール、または５もしくは６員ヘテロアリールである、請求項１に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
【請求項１５】
前記カチオン性脂質が、式（ＩＩｇ）に従う構造を有し、
【化２７３】
2021525743.tif 000354
式中、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、Ｃ２−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ２−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルケニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキニル、ポリマー、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、５もしくは６員ヘテロシクロアルキル、５もしくは６員アリール、または５もしくは６員ヘテロアリールである、請求項１に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
【請求項１６】
前記カチオン性脂質が、式（ＩＩｈ）に従う構造を有し、
【化２７４】
2021525743.tif 000355
式中、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、Ｃ２−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ２−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルケニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキニル、ポリマー、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、５もしくは６員ヘテロシクロアルキル、５もしくは６員アリール、または５もしくは６員ヘテロアリールである、請求項１に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
【請求項１７】
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、Ｃ６−Ｃ３０−アルキルである、請求項１〜１６のいずれか一項に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
【請求項１８】
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、非置換Ｃ６−Ｃ３０−アルキルである、請求項１７に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
【請求項１９】
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、−Ｃ６Ｈ１３、−Ｃ７Ｈ１５、−Ｃ８Ｈ１７、−Ｃ９Ｈ１９、−Ｃ１０Ｈ２１、−Ｃ１１Ｈ２３、−Ｃ１２Ｈ２５、−Ｃ１３Ｈ２７、−Ｃ１４Ｈ２９、−Ｃ１５Ｈ３１、−Ｃ１６Ｈ３３、−Ｃ１７Ｈ３５、−Ｃ１８Ｈ３７、−Ｃ１９Ｈ３９、−Ｃ２０Ｈ４１、−Ｃ２１Ｈ４３、−Ｃ２２Ｈ４５、−Ｃ２３Ｈ４７、−Ｃ２４Ｈ４９、および−Ｃ２５Ｈ５１から選択される、請求項１８に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
【請求項２０】
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、＝Ｏ、ハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、チオール、エステル、およびチオエステルから選択される１つまたは複数の置換基で置換されたＣ６−Ｃ３０−アルキルである、請求項１７に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
【請求項２１】
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、＝Ｏ、ハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、チオール、エステル、およびチオエステルから選択される１つまたは複数の置換基で置換されたＣ１−Ｃ１０−アルキル−Ｏ−Ｃ１−Ｃ１０−アルキルである、請求項１〜１６のいずれか一項に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
【請求項２２】
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、Ｃ６−Ｃ３０−アルケニルまたはＣ８−Ｃ２０−アルケニルである、請求項１〜１６のいずれか一項に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
【請求項２３】
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、Ｃ８−アルケニル、Ｃ９−アルケニル、Ｃ１０−アルケニル、Ｃ１１−アルケニル、Ｃ１２−アルケニル、Ｃ１３−アルケニル、Ｃ１４−アルケニル、Ｃ１５−アルケニル、Ｃ１６−アルケニル、Ｃ１７−アルケニル、Ｃ１８−アルケニル、Ｃ１９−アルケニル、およびＣ２０−アルケニルから選択される、請求項１〜１６のいずれか一項に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
【請求項２４】
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、非置換Ｃ８−アルケニル、非置換Ｃ９−アルケニル、非置換Ｃ１０−アルケニル、非置換Ｃ１１−アルケニル、非置換Ｃ１２−アルケニル、非置換Ｃ１３−アルケニル、非置換Ｃ１４−アルケニル、非置換Ｃ１５−アルケニル、非置換Ｃ１６−アルケニル、非置換Ｃ１７−アルケニル、非置換Ｃ１８−アルケニル、非置換Ｃ１９−アルケニル、および非置換Ｃ２０−アルケニルから選択される、請求項１〜１６のいずれか一項に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
【請求項２５】
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、−（ＣＨ２）４ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）５ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）６ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）７ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）８ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）９ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１０ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１１ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１２ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１３ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１４ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１５ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１６ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１７ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１８ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）７ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）３ＣＨ３、−（ＣＨ２）７ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）５ＣＨ３、−（ＣＨ２）４ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）８ＣＨ３、−（ＣＨ２）７ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）７ＣＨ３、−（ＣＨ２）６ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）４ＣＨ３、−（ＣＨ２）７ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）４ＣＨ３、−（ＣＨ２）７ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ３、−（ＣＨ２）３ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）４ＣＨ３、−（ＣＨ２）３ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ３、−（ＣＨ２）１１ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）７ＣＨ３、および−（ＣＨ２）２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ３から選択される、請求項１〜１６のいずれか一項に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
【請求項２６】
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５のうちの少なくとも１つが、５もしくは６員ヘテロアリールである、請求項１〜１６のいずれか一項に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
【請求項２７】
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々、５もしくは６員ヘテロアリールである、請求項１〜１６のいずれか一項に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
【請求項２８】
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が、イミダゾールまたはその誘導体である、請求項１〜１６のいずれか一項に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
【請求項２９】
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、
【化２７５】
2021525743.tif 000356
から選択される、請求項１〜１６のいずれか一項に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
【請求項３０】
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、
【化２７６】
2021525743.tif 000357
から選択される、請求項１〜１６に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
【請求項３１】
前記カチオン性脂質が、カチオン性脂質（１）、（２）、（３）、（４）、（５）、（６）、（７）、（８）、（９）、または（１０）である、請求項１に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
【化２７７】
2021525743.tif 000358
【表２２】
2021525743.tif 000359
【請求項３２】
前記カチオン性脂質が、カチオン性脂質（１）である、請求項３１に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
【化２７８】
2021525743.tif 000360
【請求項３３】
前記カチオン性脂質が、カチオン性脂質（１１）、（１２）、（１３）、（１４）、（１５）、（１６）、（１７）、（１８）、（１９）、または（２０）である、請求項１に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
【化２７９】
2021525743.tif 000361
【表２３】
2021525743.tif 000362
【請求項３４】
前記カチオン性脂質が、カチオン性脂質（１１）である、請求項３３に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
【化２８０】
2021525743.tif 000363
【請求項３５】
請求項１〜３４のいずれか一項に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソームを含む、組成物。
【請求項３６】
１つ以上のカチオン性脂質、１つ以上の非カチオン性脂質、および１つ以上のＰＥＧ修飾脂質からなる群から選択されるもう１つの脂質をさらに含む、請求項３５に記載の組成物。
【請求項３７】
前記核酸が、ペプチドまたはポリペプチドをコードするｍＲＮＡである、請求項３５または３６に記載の組成物。
【請求項３８】
前記ｍＲＮＡが、対象の肺もしくは肺細胞への送達またはその治療で使用するためのペプチドまたはポリペプチドをコードする、請求項３５〜３７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３９】
嚢胞性線維症膜コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）タンパク質をコードするｍＲＮＡを含む、請求項３８に記載の組成物。
【請求項４０】
前記ｍＲＮＡが、対象の肝臓もしくは肝臓細胞への送達またはその治療で使用するためのペプチドまたはポリペプチドをコードする、請求項３５〜３７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項４１】
オルニチントランスカルバミラーゼ（ＯＴＣ）タンパク質をコードするｍＲＮＡを含む、請求項４０に記載の組成物。
【請求項４２】
前記ｍＲＮＡが、ワクチンに使用するためのペプチドまたはポリペプチドをコードする、請求項３５〜３７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項４３】
前記ｍＲＮＡが、抗原をコードする、請求項４２に記載の組成物。
【請求項４４】
前記抗原が感染病原体由来である、請求項４３に記載の組成物。
【請求項４５】
リポソーム内に封入された核酸であって、前記リポソームが、式（Ｉ）に従う構造を有するカチオン性脂質を含み、
【化２８１】
2021525743.tif 000364
式中、
Ｌ１が、共有結合、Ｃ１−Ｃ１０アルキレン、Ｃ２−Ｃ１０アルケニレン、またはＣ２−Ｃ１０アルキニレンであり、
Ｘ１が、ＣＨ３、Ｃｌ、ＯＲａ、Ｃ（＝Ｘ１ａ）ＲＸ１ａ、ＮＲｂＲｃ、または５もしくは６員窒素含有ヘテロアリールであり、
Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、およびＸ５が各々独立して、ＣＨ２、Ｏ、またはＮＲｄであり、
Ｒ１が、Ｈ、Ｃｌ、ＯＲｆ、ＮＲｇＲｈ、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ２−Ｃ１０アルケニル、またはＣ２−Ｃ１０アルキニルであり、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、Ｃ２−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ２−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルケニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキニル、ポリマー、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、５もしくは６員ヘテロシクロアルキル、５もしくは６員アリール、または５もしくは６員ヘテロアリールであり、
Ｒａ、Ｒｄ、およびＲｆが各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、Ｃ２−Ｃ６−アルケニル、またはＣ２−Ｃ６−アルキニルであり、
ＲｂおよびＲｃが各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、Ｃ２−Ｃ６−アルケニル、またはＣ２−Ｃ６−アルキニルであるか、または
ＲｂおよびＲｃが、それらが結合している窒素原子と一緒になって、飽和または不飽和５〜６員複素環式環を形成し、
ＲｇおよびＲｈが各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、Ｃ２−Ｃ６−アルケニル、またはＣ２−Ｃ６−アルキニルであるか、または
ＲｇおよびＲｈが、それらが結合している窒素原子と一緒になって、飽和または不飽和５〜６員複素環式環を形成し、
ＲＸ１ａが、ＯＨまたはＯＲａであり、および
Ｘ１ａが、ＯまたはＳであり、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５のうちの少なくとも１つが、Ｃ６−Ｃ３０−アルキル、Ｃ６−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ６−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ６−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ６−Ｃ３０−アルケニル、またはヘテロ−Ｃ６−Ｃ３０−アルキニルであることを提供する、リポソーム内に封入された核酸。
【請求項４６】
前記カチオン性脂質が、式（ＩＩ）に従う構造を有し、
【化２８２】
2021525743.tif 000365
Ｌ１が、共有結合またはＣ１−Ｃ１０アルキレンであり、
Ｘ１が、ＮＲｂＲｃまたは５もしくは６員窒素含有ヘテロアリールであり、
Ｒ１が、ＯＲｆ、Ｎ（ＣＨ３）２、またはＣ１−Ｃ１０アルキルであり、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、Ｃ２−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ２−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルケニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキニル、ポリマー、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、５もしくは６員ヘテロシクロアルキル、５もしくは６員アリール、または５もしくは６員ヘテロアリールであり、
ＲｂおよびＲｃが各々、Ｃ１−Ｃ６−アルキルである、請求項４５に記載のリポソーム内に封入された核酸。
【請求項４７】
Ｌ１が、共有結合またはＣ１−Ｃ１０アルキレンである、請求項４５または４６に記載のリポソーム内に封入された核酸。
【請求項４８】
Ｌ１が、共有結合である、請求項４７に記載のリポソーム内に封入された核酸。
【請求項４９】
Ｌ１が、−ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２−、または−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−である、請求項４７に記載のリポソーム内に封入された核酸。
【請求項５０】
Ｘ１が、ＮＲｂＲｃまたは５もしくは６員窒素含有ヘテロアリールである、請求項４５〜４９のいずれか一項に記載のリポソーム内に封入された核酸。
【請求項５１】
Ｘ１が、ピリジニルまたはジアルキルアミノである、請求項５０に記載のリポソーム内に封入された核酸。
【請求項５２】
Ｒ１が、メチル、ジメチルアミノ、またはＯＨである、請求項４５〜５１のいずれか一項に記載のリポソーム内に封入された核酸。
【請求項５３】
前記カチオン性脂質が、式（ＩＩａ）に従う構造を有し、
【化２８３】
2021525743.tif 000366
式中、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、Ｃ２−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ２−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルケニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキニル、ポリマー、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、５もしくは６員ヘテロシクロアルキル、５もしくは６員アリール、または５もしくは６員ヘテロアリールである、請求項４５に記載のリポソーム内に封入された核酸。
【請求項５４】
前記カチオン性脂質が、式（ＩＩｂ）に従う構造を有し、
【化２８４】
2021525743.tif 000367
式中、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、Ｃ２−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ２−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルケニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキニル、ポリマー、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、５もしくは６員ヘテロシクロアルキル、５もしくは６員アリール、または５もしくは６員ヘテロアリールである、請求項４５に記載のリポソーム内に封入された核酸。
【請求項５５】
前記カチオン性脂質が、式（ＩＩｃ）に従う構造を有し、
【化２８５】
2021525743.tif 000368
式中、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、Ｃ２−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ２−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルケニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキニル、ポリマー、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、５もしくは６員ヘテロシクロアルキル、５もしくは６員アリール、または５もしくは６員ヘテロアリールである、請求項４５に記載のリポソーム内に封入された核酸。
【請求項５６】
前記カチオン性脂質が、式（ＩＩｄ）に従う構造を有し、
【化２８６】
2021525743.tif 000369
式中、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、Ｃ２−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ２−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルケニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキニル、ポリマー、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、５もしくは６員ヘテロシクロアルキル、５もしくは６員アリール、または５もしくは６員ヘテロアリールである、請求項４５に記載のリポソーム内に封入された核酸。
【請求項５７】
前記カチオン性脂質が、式（ＩＩｅ）に従う構造を有し、
【化２８７】
2021525743.tif 000370
式中、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、Ｃ２−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ２−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルケニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキニル、ポリマー、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、５もしくは６員ヘテロシクロアルキル、５もしくは６員アリール、または５もしくは６員ヘテロアリールである、請求項４５に記載のリポソーム内に封入された核酸。
【請求項５８】
前記カチオン性脂質が、式（ＩＩｆ）に従う構造を有し、
【化２８８】
2021525743.tif 000371
式中、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、Ｃ２−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ２−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルケニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキニル、ポリマー、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、５もしくは６員ヘテロシクロアルキル、５もしくは６員アリール、または５もしくは６員ヘテロアリールである、請求項４５に記載のリポソーム内に封入された核酸。
【請求項５９】
前記カチオン性脂質が、式（ＩＩｇ）に従う構造を有し、
【化２８９】
2021525743.tif 000372
式中、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、Ｃ２−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ２−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルケニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキニル、ポリマー、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、５もしくは６員ヘテロシクロアルキル、５もしくは６員アリール、または５もしくは６員ヘテロアリールである、請求項４５に記載のリポソーム内に封入された核酸。
【請求項６０】
前記カチオン性脂質が、式（ＩＩｈ）に従う構造を有し、
【化２９０】
2021525743.tif 000373
式中、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、Ｃ２−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ２−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルケニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキニル、ポリマー、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、５もしくは６員ヘテロシクロアルキル、５もしくは６員アリール、または５もしくは６員ヘテロアリールである、請求項４５に記載のリポソーム内に封入された核酸。
【請求項６１】
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、Ｃ６−Ｃ３０−アルキルである、請求項４５〜６０のいずれか一項に記載のリポソーム内に封入された核酸。
【請求項６２】
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、非置換Ｃ６−Ｃ３０−アルキルである、請求項６１に記載のリポソーム内に封入された核酸。
【請求項６３】
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、−Ｃ６Ｈ１３、−Ｃ７Ｈ１５、−Ｃ８Ｈ１７、−Ｃ９Ｈ１９、−Ｃ１０Ｈ２１、−Ｃ１１Ｈ２３、−Ｃ１２Ｈ２５、−Ｃ１３Ｈ２７、−Ｃ１４Ｈ２９、−Ｃ１５Ｈ３１、−Ｃ１６Ｈ３３、−Ｃ１７Ｈ３５、−Ｃ１８Ｈ３７、−Ｃ１９Ｈ３９、−Ｃ２０Ｈ４１、−Ｃ２１Ｈ４３、−Ｃ２２Ｈ４５、−Ｃ２３Ｈ４７、−Ｃ２４Ｈ４９、および−Ｃ２５Ｈ５１から選択される、請求項６２に記載のリポソーム内に封入された核酸。
【請求項６４】
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、＝Ｏ、ハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、チオール、エステル、およびチオエステルから選択される１つまたは複数の置換基で置換されたＣ６−Ｃ３０−アルキルである、請求項６１に記載のリポソーム内に封入された核酸。
【請求項６５】
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、＝Ｏ、ハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、チオール、エステル、およびチオエステルから選択される１つまたは複数の置換基で置換されたＣ１−Ｃ１０−アルキル−Ｏ−Ｃ１−Ｃ１０−アルキルである、請求項４５〜６０のいずれか一項に記載のリポソーム内に封入された核酸。
【請求項６６】
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、Ｃ６−Ｃ３０−アルケニルまたはＣ８−Ｃ２０−アルケニルである、請求項４５〜６０のいずれか一項に記載のリポソーム内に封入された核酸。
【請求項６７】
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、Ｃ８−アルケニル、Ｃ９−アルケニル、Ｃ１０−アルケニル、Ｃ１１−アルケニル、Ｃ１２−アルケニル、Ｃ１３−アルケニル、Ｃ１４−アルケニル、Ｃ１５−アルケニル、Ｃ１６−アルケニル、Ｃ１７−アルケニル、Ｃ１８−アルケニル、Ｃ１９−アルケニル、およびＣ２０−アルケニルから選択される、請求項４５〜６０のいずれか一項に記載のリポソーム内に封入された核酸。
【請求項６８】
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、非置換Ｃ８−アルケニル、非置換Ｃ９−アルケニル、非置換Ｃ１０−アルケニル、非置換Ｃ１１−アルケニル、非置換Ｃ１２−アルケニル、非置換Ｃ１３−アルケニル、非置換Ｃ１４−アルケニル、非置換Ｃ１５−アルケニル、非置換Ｃ１６−アルケニル、非置換Ｃ１７−アルケニル、非置換Ｃ１８−アルケニル、非置換Ｃ１９−アルケニル、および非置換Ｃ２０−アルケニルから選択される、請求項４５〜６０のいずれか一項に記載のリポソーム内に封入された核酸。
【請求項６９】
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、−（ＣＨ２）４ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）５ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）６ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）７ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）８ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）９ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１０ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１１ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１２ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１３ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１４ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１５ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１６ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１７ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１８ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）７ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）３ＣＨ３、−（ＣＨ２）７ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）５ＣＨ３、−（ＣＨ２）４ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）８ＣＨ３、−（ＣＨ２）７ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）７ＣＨ３、−（ＣＨ２）６ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）４ＣＨ３、−（ＣＨ２）７ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）４ＣＨ３、−（ＣＨ２）７ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ３、−（ＣＨ２）３ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）４ＣＨ３、−（ＣＨ２）３ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ３、−（ＣＨ２）１１ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）７ＣＨ３、および−（ＣＨ２）２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ３から選択される、請求項４５〜６０のいずれか一項に記載のリポソーム内に封入された核酸。
【請求項７０】
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５のうちの少なくとも１つが、５もしくは６員ヘテロアリールである、請求項４５〜６０のいずれか一項に記載のリポソーム内に封入された核酸。
【請求項７１】
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々、５もしくは６員ヘテロアリールである、請求項４５〜６０のいずれか一項に記載のリポソーム内に封入された核酸。
【請求項７２】
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が、イミダゾールまたはその誘導体である、請求項４５〜６０のいずれか一項に記載のリポソーム内に封入された核酸。
【請求項７３】
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、
【化２９１】
2021525743.tif 000374
から選択される、請求項４５〜６０のいずれか一項に記載のリポソーム内に封入された核酸。
【請求項７４】
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、
【化２９２】
2021525743.tif 000375
から選択される、請求項４５〜６０のいずれか一項に記載のリポソーム内に封入された核酸。
【請求項７５】
前記カチオン性脂質が、カチオン性脂質（１）、（２）、（３）、（４）、（５）、（６）、（７）、（８）、（９）、または（１０）である、請求項４５に記載のリポソーム内に封入された核酸。
【化２９３】
2021525743.tif 000376
【表２４】
2021525743.tif 000377
【請求項７６】
前記カチオン性脂質が、カチオン性脂質（１）である、請求項７５に記載のリポソーム内に封入された核酸。
【化２９４】
2021525743.tif 000378
【請求項７７】
前記カチオン性脂質が、カチオン性脂質（１１）、（１２）、（１３）、（１４）、（１５）、（１６）、（１７）、（１８）、（１９）、または（２０）である、請求項４５に記載のリポソーム内に封入された核酸。
【化２９５】
2021525743.tif 000379
【表２５】
2021525743.tif 000380
【請求項７８】
前記カチオン性脂質が、カチオン性脂質（１１）である、請求項７７に記載のリポソーム内に封入された核酸。
【化２９６】
2021525743.tif 000381
【請求項７９】
請求項４５〜７８のいずれか一項に記載のリポソーム内に封入された核酸を含む、組成物。
【請求項８０】
１つ以上のカチオン性脂質、１つ以上の非カチオン性脂質、および１つ以上のＰＥＧ修飾脂質からなる群から選択されるもう１つの脂質をさらに含む、請求項７９に記載の組成物。
【請求項８１】
前記核酸が、ペプチドまたはポリペプチドをコードするｍＲＮＡである、請求項７９または８０に記載の組成物。
【請求項８２】
前記ｍＲＮＡが、対象の肺もしくは肺細胞への送達またはその治療で使用するためのペプチドまたはポリペプチドをコードする、請求項７９〜８１のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項８３】
前記ｍＲＮＡが、嚢胞性線維症膜コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）タンパク質をコードする、請求項８２に記載の組成物。
【請求項８４】
前記ｍＲＮＡが、対象の肝臓もしくは肝臓細胞への送達またはその治療で使用するためのペプチドまたはポリペプチドをコードする、請求項７９〜８１のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項８５】
前記ｍＲＮＡが、オルニチントランスカルバミラーゼ（ＯＴＣ）タンパク質をコードする、請求項８４に記載の組成物。
【請求項８６】
前記ｍＲＮＡが、ワクチンに使用するためのペプチドまたはポリペプチドをコードする、請求項７９〜８１のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項８７】
前記ｍＲＮＡが、抗原をコードする、請求項８６に記載の組成物。
【請求項８８】
前記抗原が感染病原体由来である、請求項８７に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、各々参照によりその全体が組み込まれる、２０１８年５月３０日に出願された米国仮出願第６２／６７７，８０３号および２０１８年１０月２５日に出願された米国仮出願第６２／７５０，４３０号の利益を主張する。
【背景技術】
【０００２】
核酸の送達は、ある特定の病状に対する潜在的な治療的選択肢として広範に研究されている。具体的には、メッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）療法が１つ以上のタンパク質の欠乏に関連するものを含む様々な疾患の治療に対するますます重要な選択肢になっている。
【発明の概要】
【０００３】
本発明は、とりわけ、ｍＲＮＡの送達に有用なカチオン性脂質を提供する。本明細書に記載のカチオン性脂質によって提供されるｍＲＮＡの送達は、標的送達をもたらし、投与頻度を減少させ、患者の耐容性を改善し、がん、心臓血管疾患、嚢胞性線維症、感染性疾患、および神経系疾患を含むが、これらに限定されない様々な疾患の治療のためのより効果的かつ低毒性のｍＲＮＡ療法を提供することができる。
【０００４】
第１の態様では、本発明は、リン酸エステルカチオン性脂質であるカチオン性脂質を提供する。
【０００５】
第２の態様では、本発明は、タンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソームであって、当該リポソームが、１つ以上のカチオン性脂質、１つ以上の非カチオン性脂質、１つ以上のコレステロールベースの脂質、および１つ以上のＰＥＧ修飾脂質を含み、少なくとも１つのカチオン性脂質が、リン酸エステルカチオン性脂質である、タンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソームを提供する。
【０００６】
第３の態様では、本発明は、リポソーム内に封入された核酸であって、当該リポソームが、リン酸エステルカチオン性脂質であるカチオン性脂質を含む、リポソーム内に封入された核酸を提供する。
【０００７】
複数の実施形態では、カチオン性脂質は、式（Ｉ）に従う構造を有するリン酸エステルカチオン性脂質であり、
【化１】
2021525743.tif 000003
式中、
Ｌ１が、共有結合、Ｃ１−Ｃ１０アルキレン、Ｃ２−Ｃ１０アルケニレン、またはＣ２−Ｃ１０アルキニレンであり、
Ｘ１が、ＣＨ３、Ｃｌ、ＯＲａ、Ｃ（＝Ｘ１ａ）ＲＸ１ａ、ＮＲｂＲｃ、または５もしくは６員窒素含有ヘテロアリールであり、
Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、およびＸ５が各々独立して、ＣＨ２、Ｏ、またはＮＲｄであり、
Ｒ１が、Ｈ、Ｃｌ、ＯＲｆ、ＮＲｇＲｈ、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ２−Ｃ１０アルケニル、またはＣ２−Ｃ１０アルキニルであり、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、Ｃ２−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ２−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルケニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキニル、ポリマー、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、５もしくは６員ヘテロシクロアルキル、５もしくは６員アリール、または５もしくは６員ヘテロアリールであり、
Ｒａ、Ｒｄ、およびＲｆが各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、Ｃ２−Ｃ６−アルケニル、またはＣ２−Ｃ６−アルキニルであり、
ＲｂおよびＲｃが各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、Ｃ２−Ｃ６−アルケニル、またはＣ２−Ｃ６−アルキニルであるか、または
ＲｂおよびＲｃが、それらが結合している窒素原子と一緒になって、飽和または不飽和５〜６員複素環式環を形成し、
ＲｇおよびＲｈが各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、Ｃ２−Ｃ６−アルケニル、またはＣ２−Ｃ６−アルキニルであるか、または
ＲｇおよびＲｈが、それらが結合している窒素原子と一緒になって、飽和または不飽和５〜６員複素環式環を形成し、
ＲＸ１ａが、ＯＨまたはＯＲａであり、
Ｘ１ａが、ＯまたはＳであるが、
但し、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５のうちの少なくとも１つが、Ｃ６−Ｃ３０−アルキル、Ｃ６−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ６−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ６−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ６−Ｃ３０−アルケニル、またはヘテロ−Ｃ６−Ｃ３０−アルキニルであることを条件とする。
【０００８】
複数の実施形態では、Ｌ１は、共有結合またはＣ１−Ｃ１０アルキレンである。
【０００９】
複数の実施形態では、Ｌ１は、共有結合である。
【００１０】
複数の実施形態では、Ｌ１は、−ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２−、または−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−である。
【００１１】
複数の実施形態では、Ｘ１は、ＮＲｂＲｃまたは５〜６員窒素含有ヘテロアリールである。
【００１２】
複数の実施形態では、Ｘ１は、ＮＲｂＲｃである。複数の実施形態では、ＲｂおよびＲｃの一方がＨであり、他方がＣ１−Ｃ６−アルキルである。複数の実施形態では、ＲｂおよびＲｃは各々、Ｃ１−Ｃ６−アルキルである。複数の実施形態では、ＲｂおよびＲｃの一方または両方が、非置換Ｃ１−Ｃ６−アルキルである。複数の実施形態では、ＲｂおよびＲｃの少なくとも一方が、ヒドロキシルによって置換されたＣ１−Ｃ６−アルキルである（例えば、ＲｂおよびＲｃの少なくとも一方が、（ＣＨ２）ＯＨ、（ＣＨ２）２ＯＨ、（ＣＨ２）３ＯＨ、（ＣＨ２）４ＯＨ、（ＣＨ２）５ＯＨ、または（ＣＨ２）６ＯＨである）。複数の実施形態では、ＲｂおよびＲｃの一方が、Ｈであり、他方が、ヒドロキシルによって置換されたＣ１−Ｃ６−アルキルである（例えば、ＲｂおよびＲｃの少なくとも一方が、（ＣＨ２）ＯＨ、（ＣＨ２）２ＯＨ、（ＣＨ２）３ＯＨ、（ＣＨ２）４ＯＨ、（ＣＨ２）５ＯＨ、または（ＣＨ２）６ＯＨである）。複数の実施形態では、ＲｂおよびＲｃの一方が、非置換Ｃ１−Ｃ６−アルキル（例えば、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、またはヘキシル）であり、他方が、ヒドロキシルによって置換されたＣ１−Ｃ６−アルキルである（例えば、ＲｂおよびＲｃの少なくとも一方が、（ＣＨ２）ＯＨ、（ＣＨ２）２ＯＨ、（ＣＨ２）３ＯＨ、（ＣＨ２）４ＯＨ、（ＣＨ２）５ＯＨ、または（ＣＨ２）６ＯＨである）。
【００１３】
複数の実施形態では、Ｘ１は、５〜６員窒素含有ヘテロアリールである。
【００１４】
複数の実施形態では、Ｘ１は、ピリジニルまたはジアルキルアミノである。
【００１５】
複数の実施形態では、Ｘ２は、Ｏである。
【００１６】
複数の実施形態では、Ｘ３は、Ｏである。
【００１７】
複数の実施形態では、Ｘ４は、Ｏである。
【００１８】
複数の実施形態では、Ｘ５は、Ｏである。
【００１９】
複数の実施形態では、Ｒ１は、メチル、ジメチルアミノ、またはＯＨである。
【００２０】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、Ｃ６−Ｃ３０−アルキルである。
【００２１】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、非置換Ｃ６−Ｃ３０−アルキルである。
【００２２】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、−Ｃ６Ｈ１３、−Ｃ７Ｈ１５、−Ｃ８Ｈ１７、−Ｃ９Ｈ１９、−Ｃ１０Ｈ２１、−Ｃ１１Ｈ２３、−Ｃ１２Ｈ２５、−Ｃ１３Ｈ２７、−Ｃ１４Ｈ２９、−Ｃ１５Ｈ３１、−Ｃ１６Ｈ３３、−Ｃ１７Ｈ３５、−Ｃ１８Ｈ３７、−Ｃ１９Ｈ３９、−Ｃ２０Ｈ４１、−Ｃ２１Ｈ４３、−Ｃ２２Ｈ４５、−Ｃ２３Ｈ４７、−Ｃ２４Ｈ４９、および−Ｃ２５Ｈ５１から選択される。
【００２３】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、＝Ｏ、ハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、チオール、エステル、およびチオエステルから選択される１つまたは複数の置換基で置換されたＣ６−Ｃ３０−アルキルである。
【００２４】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、＝Ｏ、ハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、チオール、エステル、およびチオエステルから選択される１つまたは複数の置換基で置換されたＣ１−Ｃ１０−アルキル−Ｏ−Ｃ１−Ｃ１０−アルキルである。
【００２５】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、Ｃ６−Ｃ３０−アルケニルまたはＣ８−Ｃ２０−アルケニルである。
【００２６】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、Ｃ８−アルケニル、Ｃ９−アルケニル、Ｃ１０−アルケニル、Ｃ１１−アルケニル、Ｃ１２−アルケニル、Ｃ１３−アルケニル、Ｃ１４−アルケニル、Ｃ１５−アルケニル、Ｃ１６−アルケニル、Ｃ１７−アルケニル、Ｃ１８−アルケニル、Ｃ１９−アルケニル、およびＣ２０−アルケニルから選択される。
【００２７】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、非置換Ｃ８−アルケニル、非置換Ｃ９−アルケニル、非置換Ｃ１０−アルケニル、非置換Ｃ１１−アルケニル、非置換Ｃ１２−アルケニル、非置換Ｃ１３−アルケニル、非置換Ｃ１４−アルケニル、非置換Ｃ１５−アルケニル、非置換Ｃ１６−アルケニル、非置換Ｃ１７−アルケニル、非置換Ｃ１８−アルケニル、非置換Ｃ１９−アルケニル、および非置換Ｃ２０−アルケニルから選択される。
【００２８】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、−（ＣＨ２）４ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）５ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）６ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）７ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）８ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）９ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１０ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１１ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１２ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１３ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１４ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１５ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１６ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１７ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１８ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）７ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）３ＣＨ３、−（ＣＨ２）７ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）５ＣＨ３、−（ＣＨ２）４ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）８ＣＨ３、−（ＣＨ２）７ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）７ＣＨ３、−（ＣＨ２）６ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）４ＣＨ３、−（ＣＨ２）７ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）４ＣＨ３、−（ＣＨ２）７ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ３、−（ＣＨ２）３ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）４ＣＨ３、−（ＣＨ２）３ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ３、−（ＣＨ２）１１ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）７ＣＨ３、および−（ＣＨ２）２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ３から選択される。
【００２９】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５のうちの少なくとも１つは、５もしくは６員ヘテロアリールである。
【００３０】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々、５もしくは６員ヘテロアリールである。
【００３１】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は、イミダゾールまたはその誘導体である。
【００３２】
複数の実施形態では、カチオン性脂質は、式（Ｉａ）、（Ｉｂ）、（Ｉｃ）、（Ｉｄ）、（Ｉｅ）、（Ｉｆ）、（Ｉｇ）、または（Ｉｈ）の構造を有する。
【化２】
2021525743.tif 000004
【００３３】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、
【化３】
2021525743.tif 000005
【化４】
2021525743.tif 000006
から選択される。
【００３４】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、
【化５】
2021525743.tif 000007
から選択される。
【００３５】
複数の実施形態では、カチオン性脂質は、式（ＩＩ）に従う構造を有するリン酸エステルカチオン性脂質であり、
【化６】
2021525743.tif 000008
式中、
Ｌ１が、共有結合またはＣ１−Ｃ１０アルキレンであり、
Ｘ１が、ＮＲｂＲｃまたは５もしくは６員窒素含有ヘテロアリールであり、
Ｒ１が、ＯＲｆ、Ｎ（ＣＨ３）２、またはＣ１−Ｃ１０アルキルであり、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、Ｃ２−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ２−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルケニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキニル、ポリマー、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、５もしくは６員ヘテロシクロアルキル、５もしくは６員アリール、または５もしくは６員ヘテロアリールであり、
ＲｂおよびＲｃが各々、Ｃ１−Ｃ６−アルキルである。
【００３６】
複数の実施形態では、Ｌ１は、共有結合である。
【００３７】
複数の実施形態では、Ｘ１は、ＮＲｂＲｃである。複数の実施形態では、ＲｂおよびＲｃの一方がＨであり、他方がＣ１−Ｃ６−アルキルである。複数の実施形態では、ＲｂおよびＲｃは各々、Ｃ１−Ｃ６−アルキルである。複数の実施形態では、ＲｂおよびＲｃの一方または両方が、非置換Ｃ１−Ｃ６−アルキルである。複数の実施形態では、ＲｂおよびＲｃの少なくとも一方が、ヒドロキシルによって置換されたＣ１−Ｃ６−アルキルである（例えば、ＲｂおよびＲｃの少なくとも一方が、（ＣＨ２）ＯＨ、（ＣＨ２）２ＯＨ、（ＣＨ２）３ＯＨ、（ＣＨ２）４ＯＨ、（ＣＨ２）５ＯＨ、または（ＣＨ２）６ＯＨである）。複数の実施形態では、ＲｂおよびＲｃの一方が、Ｈであり、他方が、ヒドロキシルによって置換されたＣ１−Ｃ６−アルキルである（例えば、ＲｂおよびＲｃの少なくとも一方が、（ＣＨ２）ＯＨ、（ＣＨ２）２ＯＨ、（ＣＨ２）３ＯＨ、（ＣＨ２）４ＯＨ、（ＣＨ２）５ＯＨ、または（ＣＨ２）６ＯＨである）。複数の実施形態では、ＲｂおよびＲｃの一方が、非置換Ｃ１−Ｃ６−アルキル（例えば、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、またはヘキシル）であり、他方が、ヒドロキシルによって置換されたＣ１−Ｃ６−アルキルである（例えば、ＲｂおよびＲｃの少なくとも一方が、（ＣＨ２）ＯＨ、（ＣＨ２）２ＯＨ、（ＣＨ２）３ＯＨ、（ＣＨ２）４ＯＨ、（ＣＨ２）５ＯＨ、または（ＣＨ２）６ＯＨである）。
【００３８】
複数の実施形態では、Ｘ１は、５〜６員窒素含有ヘテロアリールである。
【００３９】
複数の実施形態では、Ｘ１は、ピリジニルである。
【００４０】
複数の実施形態では、Ｘ１は、ジメチルアミノである。
【００４１】
複数の実施形態では、Ｘ１は、メチルペンチルアミノである。
【００４２】
複数の実施形態では、Ｒ１は、ＣＨ３である。
【００４３】
複数の実施形態では、Ｒ１は、ＯＨである。
【００４４】
複数の実施形態では、Ｒ１は、ジメチルアミノである。
【００４５】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、Ｃ６−Ｃ３０−アルキルである。
【００４６】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、非置換Ｃ６−Ｃ３０−アルキルである。
【００４７】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、−Ｃ６Ｈ１３、−Ｃ７Ｈ１５、−Ｃ８Ｈ１７、−Ｃ９Ｈ１９、−Ｃ１０Ｈ２１、−Ｃ１１Ｈ２３、−Ｃ１２Ｈ２５、−Ｃ１３Ｈ２７、−Ｃ１４Ｈ２９、−Ｃ１５Ｈ３１、−Ｃ１６Ｈ３３、−Ｃ１７Ｈ３５、−Ｃ１８Ｈ３７、−Ｃ１９Ｈ３９、−Ｃ２０Ｈ４１、−Ｃ２１Ｈ４３、−Ｃ２２Ｈ４５、−Ｃ２３Ｈ４７、−Ｃ２４Ｈ４９、および−Ｃ２５Ｈ５１から選択される。
【００４８】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、＝Ｏ、ハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、チオール、エステル、およびチオエステルから選択される１つまたは複数の置換基で置換されたＣ６−Ｃ３０−アルキルである。
【００４９】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、＝Ｏ、ハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、チオール、エステル、およびチオエステルから選択される１つまたは複数の置換基で置換されたＣ１−Ｃ１０−アルキル−Ｏ−Ｃ１−Ｃ１０−アルキルである。
【００５０】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、Ｃ６−Ｃ３０−アルケニルまたはＣ８−Ｃ２０−アルケニルである。
【００５１】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、Ｃ８−アルケニル、Ｃ９−アルケニル、Ｃ１０−アルケニル、Ｃ１１−アルケニル、Ｃ１２−アルケニル、Ｃ１３−アルケニル、Ｃ１４−アルケニル、Ｃ１５−アルケニル、Ｃ１６−アルケニル、Ｃ１７−アルケニル、Ｃ１８−アルケニル、Ｃ１９−アルケニル、およびＣ２０−アルケニルから選択される。
【００５２】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、非置換Ｃ８−アルケニル、非置換Ｃ９−アルケニル、非置換Ｃ１０−アルケニル、非置換Ｃ１１−アルケニル、非置換Ｃ１２−アルケニル、非置換Ｃ１３−アルケニル、非置換Ｃ１４−アルケニル、非置換Ｃ１５−アルケニル、非置換Ｃ１６−アルケニル、非置換Ｃ１７−アルケニル、非置換Ｃ１８−アルケニル、非置換Ｃ１９−アルケニル、および非置換Ｃ２０−アルケニルから選択される。
【００５３】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、−（ＣＨ２）４ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）５ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）６ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）７ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）８ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）９ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１０ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１１ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１２ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１３ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１４ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１５ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１６ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１７ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１８ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）７ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）３ＣＨ３、−（ＣＨ２）７ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）５ＣＨ３、−（ＣＨ２）４ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）８ＣＨ３、−（ＣＨ２）７ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）７ＣＨ３、−（ＣＨ２）６ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）４ＣＨ３、−（ＣＨ２）７ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）４ＣＨ３、−（ＣＨ２）７ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ３、−（ＣＨ２）３ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）４ＣＨ３、−（ＣＨ２）３ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ３、−（ＣＨ２）１１ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）７ＣＨ３、および−（ＣＨ２）２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ３から選択される。
【００５４】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５のうちの少なくとも１つは、５もしくは６員ヘテロアリールである。
【００５５】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々、５もしくは６員ヘテロアリールである。
【００５６】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は、イミダゾールまたはその誘導体である。
【００５７】
複数の実施形態では、カチオン性脂質は、式（ＩＩａ）、（ＩＩｂ）、（ＩＩｃ）、（Ｉｄ）、（ＩＩｅ）、（ＩＩｆ）、（ＩＩｇ）、または（ＩＩｈ）の構造を有する。
【化７】
2021525743.tif 000009
【００５８】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、
【化８】
2021525743.tif 000010
から選択される。
【００５９】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、
【化９】
2021525743.tif 000011
から選択される。
【００６０】
複数の実施形態では、カチオン性脂質は、式（ＩＩａ）に従う構造を有するリン酸エステルカチオン性脂質であり、
【化１０】
2021525743.tif 000012
式中、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、Ｃ２−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ２−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルケニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキニル、ポリマー、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、５もしくは６員ヘテロシクロアルキル、５もしくは６員アリール、または５もしくは６員ヘテロアリールである。
【００６１】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、
【化１１】
2021525743.tif 000013
から選択される。
【００６２】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、
【化１２】
2021525743.tif 000014
から選択される。
【００６３】
複数の実施形態では、カチオン性脂質は、式（ＩＩｂ）に従う構造を有するリン酸エステルカチオン性脂質であり、
【化１３】
2021525743.tif 000015
式中、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、Ｃ２−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ２−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルケニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキニル、ポリマー、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、５もしくは６員ヘテロシクロアルキル、５もしくは６員アリール、または５もしくは６員ヘテロアリールである。
【００６４】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、
【化１４】
2021525743.tif 000016
【化１５】
2021525743.tif 000017
から選択される。
【００６５】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、
【化１６】
2021525743.tif 000018
から選択される。
【００６６】
複数の実施形態では、カチオン性脂質は、式（ＩＩｃ）に従う構造を有するリン酸エステルカチオン性脂質であり、
【化１７】
2021525743.tif 000019
式中、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、Ｃ２−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ２−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルケニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキニル、ポリマー、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、５もしくは６員ヘテロシクロアルキル、５もしくは６員アリール、または５もしくは６員ヘテロアリールである。
【００６７】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、
【化１８】
2021525743.tif 000020
から選択される。
【００６８】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、
【化１９】
2021525743.tif 000021
から選択される。
【００６９】
複数の実施形態では、カチオン性脂質は、式（ＩＩｄ）に従う構造を有するリン酸エステルカチオン性脂質であり、
【化２０】
2021525743.tif 000022
式中、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、Ｃ２−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ２−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルケニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキニル、ポリマー、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、５もしくは６員ヘテロシクロアルキル、５もしくは６員アリール、または５もしくは６員ヘテロアリールである。
【００７０】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、
【化２１】
2021525743.tif 000023
から選択される。
【００７１】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、
【化２２】
2021525743.tif 000024
から選択される。
【００７２】
複数の実施形態では、カチオン性脂質は、式（ＩＩｅ）に従う構造を有するリン酸エステルカチオン性脂質であり、
【化２３】
2021525743.tif 000025
式中、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、Ｃ２−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ２−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルケニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキニル、ポリマー、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、５もしくは６員ヘテロシクロアルキル、５もしくは６員アリール、または５もしくは６員ヘテロアリールである。
【００７３】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、
【化２４】
2021525743.tif 000026
から選択される。
【００７４】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、
【化２５】
2021525743.tif 000027
から選択される。
【００７５】
複数の実施形態では、カチオン性脂質は、カチオン性脂質（１）、（２）、（３）、（４）、（５）、（６）、（７）、（８）、（９）、または（１０）である。
【化２６】
2021525743.tif 000028
【表６】
2021525743.tif 000029
【００７６】
複数の実施形態では、カチオン性脂質は、カチオン性脂質（１）である。
【化２７】
2021525743.tif 000030
【００７７】
複数の実施形態では、カチオン性脂質は、式（ＩＩｆ）に従う構造を有するリン酸エステルカチオン性脂質であり、
【化２８】
2021525743.tif 000031
式中、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、Ｃ２−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ２−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルケニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキニル、ポリマー、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、５もしくは６員ヘテロシクロアルキル、５もしくは６員アリール、または５もしくは６員ヘテロアリールである。
【００７８】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、
【化２９】
2021525743.tif 000032
から選択される。
【００７９】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、
【化３０】
2021525743.tif 000033
から選択される。
【００８０】
複数の実施形態では、カチオン性脂質は、カチオン性脂質（１１）、（１２）、（１３）、（１４）、（１５）、（１６）、（１７）、（１８）、（１９）、または（２０）である。
【化３１】
2021525743.tif 000034
【表７】
2021525743.tif 000035
【００８１】
複数の実施形態では、カチオン性脂質は、カチオン性脂質（１１）である。
【化３２】
2021525743.tif 000036
【００８２】
複数の実施形態では、カチオン性脂質は、式（ＩＩｇ）に従う構造を有するリン酸エステルカチオン性脂質であり、
【化３３】
2021525743.tif 000037
式中、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、Ｃ２−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ２−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルケニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキニル、ポリマー、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、５もしくは６員ヘテロシクロアルキル、５もしくは６員アリール、または５もしくは６員ヘテロアリールである。
【００８３】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、
【化３４】
2021525743.tif 000038
から選択される。
【００８４】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、
【化３５】
2021525743.tif 000039
から選択される。
【００８５】
複数の実施形態では、カチオン性脂質は、式（ＩＩｈ）に従う構造を有するリン酸エステルカチオン性脂質であり、
【化３６】
2021525743.tif 000040
式中、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、Ｃ２−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ２−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルケニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキニル、ポリマー、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、５もしくは６員ヘテロシクロアルキル、５もしくは６員アリール、または５もしくは６員ヘテロアリールである。
【００８６】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、
【化３７】
2021525743.tif 000041
から選択される。
【００８７】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、
【化３８】
2021525743.tif 000042
から選択される。
【００８８】
別の態様では、本発明は、本明細書に記載のいずれかのリポソーム（例えば、タンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム）を含む組成物を特色とする。
【００８９】
複数の実施形態では、ｍＲＮＡは、嚢胞性線維症膜コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）タンパク質をコードする。
【００９０】
複数の実施形態では、ｍＲＮＡは、オルニチントランスカルバミラーゼ（ＯＴＣ）タンパク質をコードする。
【００９１】
別の態様では、本発明は、本明細書に記載のリポソーム内に封入された核酸を含む組成物を特色とする。
【００９２】
複数の実施形態では、組成物は、１つ以上のカチオン性脂質、１つ以上の非カチオン性脂質、および１つ以上のＰＥＧ修飾脂質からなる群から選択されるもう１つの脂質をさらに含む。
【００９３】
複数の実施形態では、核酸は、ペプチドまたはポリペプチドをコードするｍＲＮＡである。
【００９４】
複数の実施形態では、ｍＲＮＡは、対象の肺もしくは肺細胞への送達またはその治療で使用するためのペプチドまたはポリペプチドをコードする。
【００９５】
複数の実施形態では、ｍＲＮＡは、対象の肺もしくは肺細胞への送達またはその治療で使用するためのペプチドまたはポリペプチドをコードする。
【００９６】
複数の実施形態では、ｍＲＮＡは、嚢胞性線維症膜コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）タンパク質をコードする。
【００９７】
複数の実施形態では、ｍＲＮＡは、対象の肝臓または肝臓細胞への送達またはその治療で使用するためのペプチドまたはポリペプチドをコードする。
【００９８】
複数の実施形態では、ｍＲＮＡは、オルニチントランスカルバミラーゼ（ＯＴＣ）タンパク質をコードする。
【００９９】
複数の実施形態では、ｍＲＮＡは、ワクチンに使用するためのペプチドまたはポリペプチドをコードする。
【０１００】
複数の実施形態では、ｍＲＮＡは、抗原をコードする。
【０１０１】
いくつかの態様では、本発明は、対象における疾患を治療する方法であって、対象に、本明細書に記載の組成物を投与することを含む、方法を提供する。
【発明を実施するための形態】
【０１０２】
定義
本発明がより容易に理解されるように、ある特定の用語が以下で最初に定義される。以下の用語および他の用語の追加の定義は、明細書全体を通して記載される。本発明の背景を説明し、かつその実施に関するさらなる詳細を提供するために本明細書で参照される刊行物および他の参考資料は、参照により本明細書に組み込まれる。
【０１０３】
アミノ酸：本明細書で使用される場合、「アミノ酸」という用語は、その最も広範な意味で、ポリペプチド鎖に組み込まれ得る任意の化合物および／または物質を指す。いくつかの実施形態では、アミノ酸は、一般構造Ｈ２Ｎ−Ｃ（Ｈ）（Ｒ）−ＣＯＯＨを有する。いくつかの実施形態では、アミノ酸は、天然に生じるアミノ酸である。いくつかの実施形態では、アミノ酸は合成アミノ酸であり、いくつかの実施形態では、アミノ酸はＤ−アミノ酸であり、いくつかの実施形態では、アミノ酸はＬ−アミノ酸である。「標準アミノ酸」とは、天然に生じたペプチドに通常見られる２０個の標準Ｌ−アミノ酸のうちのいずれかを指す。「非標準アミノ酸」とは、合成的に調製されるか天然源から得られるかにかかわらず、標準アミノ酸以外の任意のアミノ酸を指す。本明細書で使用される場合、「合成アミノ酸」は、塩、アミノ酸誘導体（アミド等）、および／または置換基を含むが、これらに限定されない化学修飾されたアミノ酸を包含する。ペプチド中のカルボキシ末端アミノ酸および／またはアミノ末端アミノ酸を含むアミノ酸は、メチル化、アミド化、アセチル化、保護基、および／またはそれらの活性に悪影響を及ぼすことなくペプチドの循環半減期を変化させることができる他の化学基との置換によって修飾され得る。アミノ酸は、ジスルフィド結合に関与し得る。アミノ酸は、１つまたは複数の翻訳後修飾、例えば、１つ以上の化学物質（例えば、メチル基、塩酸基、アセチル基、リン酸基、ホルミル部分、イソプレノイド基、硫酸基、ポリエチレングリコール部分、脂質部分、炭水化物部分、ビオチン部分等）との会合を含み得る。「アミノ酸」という用語は、「アミノ酸残基」と互換的に使用され、遊離アミノ酸および／またはペプチドのアミノ酸残基を指し得る。この用語が遊離アミノ酸を指すか、ペプチドの残基を指すかは、それが使用される文脈から明らかになる。
【０１０４】
動物：本明細書で使用される場合、「動物」という用語は、動物界の任意のメンバーを指す。いくつかの実施形態では、「動物」とは、任意の発育段階のヒトを指す。いくつかの実施形態では、「動物」とは、任意の発育段階の非ヒト動物を指す。ある特定の実施形態では、非ヒト動物は、哺乳動物（例えば、齧歯類、マウス、ラット、ウサギ、サル、イヌ、ネコ、ヒツジ、ウシ、霊長類、および／またはブタ）である。いくつかの実施形態では、動物には、哺乳動物、鳥、爬虫類、両生類、魚、昆虫、および／または寄生虫が含まれるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、動物は、トランスジェニック動物、遺伝子操作された動物、および／またはクローンであり得る。
【０１０５】
およそまたは約：本明細書で使用される場合、目的とする１つ以上の値に適用される「およそ」または「約」という用語は、提示される参照値と同様の値を指す。ある特定の実施形態では、「およそ」または「約」という用語は、別途提示されない限り、または文脈から明らかではない限り（かかる数が可能な値の１００％を超える場合を除く）、提示される参照値のいずれか（それよりも大きいまたは小さい）の方向で２５％、２０％、１９％、１８％、１７％、１６％、１５％、１４％、１３％、１２％、１１％、１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、１％、またはそれ未満内に収まる値の範囲を指す。
【０１０６】
生物学的に活性：本明細書で使用される場合、「生物学的に活性な」という用語は、生体系、特に生物において活性を有する任意の薬剤の特徴を指す。例えば、生物に投与されると、その生物に生物学的影響を及ぼす薬剤は、生物学的に活性であるとみなされる。
【０１０７】
送達：本明細書で使用される場合、「送達」という用語は、局所送達および全身送達の両方を包含する。例えば、ｍＲＮＡの送達は、ｍＲＮＡが標的組織に送達され、コードされたタンパク質が発現し、標的組織中に保持される状況（「局所分布」または「局所送達」とも称される）、およびｍＲＮＡが標的組織に送達され、コードされたタンパク質が発現し、患者の循環系（例えば、血清）に分泌され、全身に分布し、他の組織によって取り込まれる状況（「全身分布」または「全身送達」とも称される）を包含する。
【０１０８】
発現：本明細書で使用される場合、核酸配列の「発現」とは、ｍＲＮＡのポリペプチドへの翻訳、複数のポリペプチドのインタクトなタンパク質（例えば、酵素）への集合、および／またはポリペプチドもしくは完全に集合したタンパク質（例えば、酵素）の翻訳後修飾を指す。本出願では、「発現」および「産生」という用語、ならびに文法的同義語は、互換的に使用される。
【０１０９】
機能性：本明細書で使用される場合、「機能性」生体分子は、それが特徴付けられる特性および／または活性を呈する形態での生体分子である。
【０１１０】
半減期：本明細書で使用される場合、「半減期」という用語は、核酸またはタンパク質濃度または活性等の量が、ある期間の最初に測定されたその値の半分に下がるのに必要な時間である。
【０１１１】
改善する、増加させる、または減少させる：本明細書で使用される場合、「改善する」、「増加させる」、もしくは「減少させる」、または文法的同義語は、ベースライン測定、例えば、本明細書に記載の治療の開始前の同じ個体における測定、または本明細書に記載の治療の不在下での対照対象（または複数の対照対象）における測定と比較した値を示す。「対照対象」とは、治療されている対象と同じ疾患形態に罹患しており、治療されている対象とほぼ同じ年齢の対象である。
【０１１２】
インビトロ：本明細書で使用される場合、「インビトロ」という用語は、多細胞生物内ではなく、人工環境下で、例えば、試験管または反応容器内、細胞培養下等で生じる事象を指す。
【０１１３】
インビボ：本明細書で使用される場合、「インビボ」という用語は、ヒトおよび非ヒト動物等の多細胞生物内で生じる事象を指す。細胞ベースの系との関連で、この用語は、（例えば、インビトロ系とは対照的に）生きている細胞内で生じる事象を指すために使用され得る。
【０１１４】
単離された：本明細書で使用される場合、「単離された」という用語は、（１）（自然界および／または実験的環境かにかかわらず）最初に産生されたときに会合していた成分のうちの少なくともいくつかから分離しており、かつ／または（２）人工的に産生、調製、および／または製造された物質および／または実体を指す。単離された物質および／または実体は、それらが最初に会合していた他の成分の約１０％、約２０％、約３０％、約４０％、約５０％、約６０％、約７０％、約８０％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％、または約９９％超から分離され得る。いくつかの実施形態では、単離された薬剤は、約８０％、約８５％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％、または約９９％超純粋である。本明細書で使用される場合、物質は、他の成分を実質的に含まない場合、「純粋」である。本明細書で使用される場合、単離された物質および／または実体の純度パーセントの計算は、賦形剤（例えば、緩衝液、溶媒、水等）を含むべきではない。
【０１１５】
リポソーム：本明細書で使用される場合、「リポソーム」という用語は、任意の層状、多重層状、または固体ナノ粒子小胞を指す。典型的には、本明細書で使用されるリポソームは、１つ以上の脂質を混合することによって、または１つ以上の脂質とポリマー（複数可）を混合することによって形成され得る。いくつかの実施形態では、本発明に好適なリポソームは、カチオン性脂質（複数可）および任意に非カチオン性脂質（複数可）、任意にコレステロールベースの脂質（複数可）、および／または任意にＰＥＧ修飾脂質（複数可）を含む。
【０１１６】
メッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）：本明細書で使用される場合、「メッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）」または「ｍＲＮＡ」という用語は、少なくとも１つのポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを指す。本明細書で使用されるｍＲＮＡは、修飾されたＲＮＡおよび修飾されていないＲＮＡの両方を包含する。「修飾されたｍＲＮＡ」という用語は、少なくとも１つの化学修飾されたヌクレオチドを含むｍＲＮＡと関連する。ｍＲＮＡは、１つ以上のコーディング領域および非コーディング領域を含み得る。ｍＲＮＡは、天然源から精製され得、組換え発現系を使用して産生され得、かつ任意に、精製され得、化学的に合成され得る等である。必要に応じて、例えば、化学的に合成された分子の場合、ｍＲＮＡは、化学修飾された塩基または糖類、骨格修飾等を有する類似体等のヌクレオシド類似体を含み得る。ｍＲＮＡ配列は、別途指示されない限り、５’から３’の方向に提示される。いくつかの実施形態では、ｍＲＮＡは、天然ヌクレオシド（例えば、アデノシン、グアノシン、シチジン、ウリジン）、ヌクレオシド類似体（例えば、２−アミノアデノシン、２−チオチミジン、イノシン、ピロロ−ピリミジン、３−メチルアデノシン、５−メチルシチジン、Ｃ−５プロピニル−シチジン、Ｃ−５プロピニル−ウリジン、２−アミノアデノシン、Ｃ５−ブロモウリジン、Ｃ５−フルオロウリジン、Ｃ５−ヨードウリジン、Ｃ５−プロピニル−ウリジン、Ｃ５−プロピニル−シチジン、Ｃ５−メチルシチジン、２−アミノアデノシン、７−デアザアデノシン、７−デアザグアノシン、８−オキソアデノシン、８−オキソグアノシン、Ｏ（６）−メチルグアニン、２−チオシチジン）、化学修飾された塩基、生物学的に修飾された塩基（例えば、メチル化塩基）、介在塩基（ｉｎｔｅｒｃａｌａｔｅｄ  ｂａｓｅ）、修飾された糖類（例えば、２’−フルオロリボース、リボース、２’−デオキシリボース、アラビノース、およびヘキソース）、ならびに／または修飾されたリン酸基（例えば、ホスホロチオエートおよび５’−Ｎ−ホスホルアミダイト結合）であるか、またはそれを含む。
【０１１７】
核酸：本明細書で使用される場合、「核酸」という用語は、その最も広範な意味で、ポリヌクレオチド鎖に組み込まれるか、または組み込まれ得る任意の化合物および／または物質を指す。いくつかの実施形態では、核酸は、ホスホジエステル結合を介してポリヌクレオチド鎖に組み込まれるか、または組み込まれ得る化合物および／または物質である。いくつかの実施形態では、「核酸」とは、個々の核酸残基（例えば、ヌクレオチドおよび／またはヌクレオシド）を指す。いくつかの実施形態では、「核酸」とは、個々の核酸残基を含むポリヌクレオチド鎖を指す。いくつかの実施形態では、「核酸」は、ＲＮＡ、ならびに一本鎖および／または二本鎖ＤＮＡおよび／またはｃＤＮＡを包含する。いくつかの実施形態では、「核酸」は、干渉ＲＮＡ（ＲＮＡｉ）、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、短いヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）、アンチセンスＲＮＡ（ａＲＮＡ）、メッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）、修飾されたメッセンジャーＲＮＡ（ｍｍＲＮＡ）、長い非コーディングＲＮＡ（ｌｎｃＲＮＡ）、マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）、多量体コード核酸（ＭＣＮＡ）、ポリマーコード核酸（ＰＣＮＡ）、ガイドＲＮＡ（ｇＲＮＡ）、およびＣＲＩＳＰＲ  ＲＮＡ（ｃｒＲＮＡ）のうちのいずれか１つ以上を含むが、これらに限定されないリボ核酸（ＲＮＡ）を包含する。いくつかの実施形態では、「核酸」は、一本鎖ＤＮＡ（ｓｓＤＮＡ）、二本鎖ＤＮＡ（ｄｓＤＮＡ）、および相補的ＤＮＡ（ｃＤＮＡ）のうちのいずれか１つ以上を含むが、これらに限定されないデオキシリボ核酸（ＤＮＡ）を包含する。いくつかの実施形態では、「核酸」は、ＲＮＡおよびＤＮＡの両方を包含する。複数の実施形態では、ＤＮＡは、アンチセンスＤＮＡ、プラスミドＤＮＡ、プラスミドＤＮＡの一部、事前縮合（ｐｒｅ−ｃｏｎｄｅｎｓｅｄ）ＤＮＡ、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）産物、ベクター（例えば、Ｐ１、ＰＡＣ、ＢＡＣ、ＹＡＣ、人工染色体）、発現カセット、キメラ配列、染色体ＤＮＡ、またはこれらの群の誘導体の形態であり得る。複数の実施形態では、ＲＮＡは、メッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）、リボソームＲＮＡ（ｒＲＮＡ）、シグナル認識粒子ＲＮＡ（７  ＳＬ  ＲＮＡまたはＳＲＰ  ＲＮＡ）、トランスファーＲＮＡ（ｔＲＮＡ）、トランスファー−メッセンジャーＲＮＡ（ｔｍＲＮＡ）、低分子核ＲＮＡ（ｓｎＲＮＡ）、低分子核小体ＲＮＡ（ｓｎｏＲＮＡ）、ＳｍＹ  ＲＮＡ、低分子カハール体特異的ＲＮＡ（ｓｃａＲＮＡ）、ガイドＲＮＡ（ｇＲＮＡ）、リボヌクレアーゼＰ（ＲＮａｓｅ  Ｐ）、Ｙ  ＲＮＡ、テロメラーゼＲＮＡ成分（ＴＥＲＣ）、スプライスリーダーＲＮＡ（ＳＬ  ＲＮＡ）、アンチセンスＲＮＡ（ａＲＮＡまたはａｓＲＮＡ）、シス−天然アンチセンス転写物（シス−ＮＡＴ）、ＣＲＩＳＰＲ  ＲＮＡ（ｃｒＲＮＡ）、長い非コーディングＲＮＡ（ｌｎｃＲＮＡ）、マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）、Ｐｉｗｉ結合ＲＮＡ（ｐｉＲＮＡ）、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、トランス作用性ｓｉＲＮＡ（ｔａｓｉＲＮＡ）、リピート関連ｓｉＲＮＡ（ｒａｓｉＲＮＡ）、７３Ｋ  ＲＮＡ、レトロトランスポゾン、ウイルスゲノム、ウイロイド、サテライトＲＮＡ、またはこれらの群���誘導体の形態であり得る。いくつかの実施形態では、核酸は、酵素等のタンパク質をコードするｍＲＮＡである。
【０１１８】
患者：本明細書で使用される場合、「患者」または「対象」という用語は、例えば、実験、診断、予防、美容、および／または治療目的のために、提供される組成物が投与され得る任意の生物を指す。典型的な患者には、動物（例えば、マウス、ラット、ウサギ、非ヒト霊長類、および／またはヒト等の哺乳動物）が含まれる。いくつかの実施形態では、患者は、ヒトである。ヒトには、出生前形態および出生後形態が含まれる。
【０１１９】
薬学的に許容される：「薬学的に許容される」という用語は、本明細書で使用される場合、正しい医学的判断の範囲内で、過度の毒性、刺激、アレルギー応答、または他の問題もしくは合併症を伴うことなくヒトおよび動物の組織と接触した状態での使用に好適であり、合理的な利益／リスク比に見合う物質を指す。
【０１２０】
薬学的に許容される塩：薬学的に許容される塩は、当該技術分野で周知である。例えば、Ｓ．Ｍ．Ｂｅｒｇｅらは、薬学的に許容される塩についてＪ．Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（１９７７）６６：１−１９で詳述している。本発明の化合物の薬学的に許容される塩には、好適な無機酸および有機酸ならびに無機塩基および有機塩基に由来するものが含まれる。薬学的に許容される非毒性酸付加塩の例には、塩酸、臭化水素酸、リン酸、硫酸、および過塩素酸等の無機酸と形成されるか、または酢酸、シュウ酸、マレイン酸、酒石酸、クエン酸、コハク酸、もしくはマロン酸等の有機酸と形成されるか、またはイオン交換等の当該技術分野で使用されている他の方法を使用して形成されたアミノ基の塩である。他の薬学的に許容される塩には、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスコルビン酸塩、アスパラギン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、重硫酸塩、ホウ酸塩、酪酸塩、樟脳酸塩、カンファースルホン酸塩、クエン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ジグルコン酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、グルコヘプトン酸塩、グリセロリン酸塩、グルコン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−ヒドロキシ−エタンスルホン酸塩、ラクトビオン酸塩、乳酸塩、ラウリン酸塩、ラウリル硫酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、メタンスルホン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、オレイン酸塩、シュウ酸塩、パルミチン酸塩、パモ酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３−フェニルプロピオン酸塩、リン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、ウンデカン酸塩、吉草酸塩等が挙げられる。適切な塩基に由来する塩には、アルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩、アンモニウム塩、およびＮ＋（Ｃ１−４アルキル）４塩が挙げられる。代表的なアルカリ金属塩またはアルカリ土類金属塩には、ナトリウム、リチウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム等が挙げられる。さらなる薬学的に許容される塩には、適切な場合、ハロゲン化物、水酸化物、カルボン酸塩、硫酸塩、リン酸塩、硝酸塩、スルホン酸塩、およびアリールスルホン酸塩等の対イオンを使用して形成された非毒性アンモニウムカチオン、四級アンモニウムカチオン、およびアミンカチオンが挙げられる。さらなる薬学的に許容される塩には、適切な求電子剤、例えば、ハロゲン化アルキルを使用して四級化アルキル化アミノ塩を形成する、アミンの四級化から形成された塩が挙げられる。
【０１２１】
全身分布または送達：本明細書で使用される場合、「全身分布」、「全身送達」という用語、または文法的同義語は、全身または全生物に影響を及ぼす送達または分布機構またはアプローチを指す。典型的には、全身分布または送達は、身体の循環系、例えば、血流を介して達成される。「局所分布または送達」の定義と比較される。
【０１２２】
対象：本明細書で使用される場合、「対象」という用語は、ヒトまたは任意の非ヒト動物（例えば、マウス、ラット、ウサギ、イヌ、ネコ、ウシ、ブタ、ヒツジ、ウマ、または霊長類）を指す。ヒトには、出生前形態および出生後形態が含まれる。多くの実施形態では、対象は、ヒトである。対象は、患者であり得る。疾患の診断または治療のために医療提供者に受診するヒトを指す。「対象」という用語は、本明細書では「個体」または「患者」と互換的に使用される。対象は、疾患または障害に罹患している場合があるか、またはそれに罹り易いが、疾患または障害の症状を呈する場合も呈さない場合もある。
【０１２３】
実質的に：本明細書で使用される場合、「実質的に」という用語は、目的とする特徴または特性の全てまたはほぼ全ての範囲または程度を呈する質的状態を指す。生物学技術分野の当業者であれば、生物学的および化学的現象が、完了すること、および／または完了に至ること、または絶対的結果を達成もしくは回避することが、仮にあったとしても稀であることを理解する。したがって、「実質的に」という用語は、多くの生物学的および化学的現象に固有の潜在的な完全性の欠如を捕捉するために本明細書で使用される。
【０１２４】
標的組織：本明細書で使用される場合、「標的組織」という用語は、治療される疾患に罹患している任意の組織を指す。いくつかの実施形態では、標的組織には、疾患に関連する病態、症状、または特徴を呈する組織が含まれる。
【０１２５】
治療有効量：本明細書で使用される場合、治療薬の「治療有効量」という用語は、疾患、障害、および／または状態に罹患しているか、またはそれに罹り易い対象に投与されたときに、疾患、障害、および／または状態の症状（複数可）を治療する、診断する、予防する、および／またはその発症を遅延させるのに十分な量を意味する。当業者であれば、治療有効量が、典型的には、少なくとも１つの単位用量を含む投薬レジメンにより投与されることを理解する。
【０１２６】
治療すること：本明細書で使用される場合、「治療する」、「治療」、または「治療すること」という用語は、特定の疾患、障害、および／または状態の１つ以上の症状または特徴を部分的にまたは完全に緩和する、改善する、軽減する、抑制する、予防、その発症を遅延させる、その重症度を低下させる、および／またはその発生率を低下させるために使用される任意の方法を指す。治療は、疾患の兆候を呈していない対象および／または疾患の初期の兆候のみを呈している対象に、その疾患に関連する病態を発症させるリスクを減少させる目的のために投与され得る。
【０１２７】
脂肪族：本明細書で使用される場合、脂肪族という用語は、Ｃ１−Ｃ４０炭化水素を指し、飽和炭化水素および不飽和炭化水素の両方を含む。脂肪族は、直鎖状、分岐状、または環状であり得る。例えば、Ｃ１−Ｃ２０脂肪族には、Ｃ１−Ｃ２０アルキル（例えば、直鎖状または分岐状Ｃ１−Ｃ２０飽和アルキル）、Ｃ２−Ｃ２０アルケニル（例えば、直鎖状または分岐状Ｃ４−Ｃ２０ジエニル、直鎖状または分岐状Ｃ６−Ｃ２０トリエニル等）、およびＣ２−Ｃ２０アルキニル（例えば、直鎖状または分岐状Ｃ２−Ｃ２０アルキニル）が含まれ得る。Ｃ１−Ｃ２０脂肪族には、Ｃ３−Ｃ２０環状脂肪族（例えば、Ｃ３−Ｃ２０シクロアルキル、Ｃ４−Ｃ２０シクロアルケニル、またはＣ８−Ｃ２０シクロアルキニル）が含まれ得る。ある特定の実施形態では、脂肪族は、１つ以上の環状脂肪族および／または１つ以上のヘテロ原子、例えば、酸素、窒素、または硫黄を含み得、任意に、アルキル、ハロ、アルコキシル、ヒドロキシ、アミノ、アリール、エーテル、エステル、またはアミド等の１つ以上の置換基で置換され得る。脂肪族基は、非置換であるか、または本明細書に記載の１つ以上の置換基で置換されている。例えば、脂肪族は、ハロゲン、−ＣＯＲ’、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２Ｒ’、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＯＲ’、−ＯＣＯＲ’、−ＯＣＯ２Ｒ’、−ＮＨ２、−ＮＨＲ’、−Ｎ（Ｒ’）２、−ＳＲ’、または−ＳＯ２Ｒ’のうちの１つ以上（例えば、１、２、３、４、５、または６つの独立して選択される置換基）で置換され得、式中、Ｒ’の各例は独立して、Ｃ１−Ｃ２０脂肪族（例えば、Ｃ１−Ｃ２０アルキル、Ｃ１−Ｃ１５アルキル、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、またはＣ１−Ｃ３アルキル）である。複数の実施形態では、Ｒ’は独立して、非置換アルキル（例えば、非置換Ｃ１−Ｃ２０アルキル、Ｃ１−Ｃ１５アルキル、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、またはＣ１−Ｃ３アルキル）である。複数の実施形態では、Ｒ’は独立して、非置換Ｃ１−Ｃ３アルキルである。複数の実施形態では、脂肪族は、非置換である。複数の実施形態では、脂肪族は、いずれのヘテロ原子も含まない。
【０１２８】
アルキル：本明細書で使用される場合、「アルキル」という用語は、非環状直鎖状および分岐状炭化水素基を意味し、例えば、「Ｃ１−Ｃ２０アルキル」は、１〜２０個の炭素を有するアルキル基を指す。アルキル基は、直鎖状または分岐状であり得る。アルキル基の例には、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、イソペンチル、ｔｅｒｔ−ペンチルヘキシル、イソヘキシル等が挙げられるが、これらに限定されない。他のアルキル基は、本開示の利益を考慮して、当業者に容易に明らかである。アルキル基は、非置換であり得るか、または本明細書に記載の１つ以上の置換基で置換され得る。例えば、アルキル基は、ハロゲン、−ＣＯＲ’、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２Ｒ’、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＯＲ’、−ＯＣＯＲ’、−ＯＣＯ２Ｒ’、−ＮＨ２、−ＮＨＲ’、−Ｎ（Ｒ’）２、−ＳＲ’、または−ＳＯ２Ｒ’のうちの１つ以上（例えば、１、２、３、４、５、または６つの独立して選択される置換基）で置換され得、式中、Ｒ’の各例は独立して、Ｃ１−Ｃ２０脂肪族（例えば、Ｃ１−Ｃ２０アルキル、Ｃ１−Ｃ１５アルキル、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、またはＣ１−Ｃ３アルキル）である。複数の実施形態では、Ｒ’は独立して、非置換アルキル（例えば、非置換Ｃ１−Ｃ２０アルキル、Ｃ１−Ｃ１５アルキル、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、またはＣ１−Ｃ３アルキル）である。複数の実施形態では、Ｒ’は独立して、非置換Ｃ１−Ｃ３アルキルである。複数の実施形態では、アルキルは、（例えば、本明細書に記載の１、２、３、４、５、または６つの置換基で）置換されている。複数の実施形態では、アルキル基は、−ＯＨ基で置換され、本明細書で「ヒドロキシアルキル」基とも称され得、ここで、接頭辞は−ＯＨ基を示し、「アルキル」は本明細書に記載されるとおりである。
【０１２９】
アルキレン：本明細書で使用される「アルキレン」という用語は、飽和二価直鎖または分岐鎖炭化水素基を表し、メチレン、エチレン、イソプロピレン等によって例示される。同様に、本明細書で使用される「アルケニレン」という用語は、鎖に沿って任意の安定した点で生じ得る１つ以上の不飽和炭素−炭素二重結合を有する不飽和二価直鎖または分岐鎖炭化水素基を表し、本明細書における「アルキニレン」という用語は、鎖に沿って任意の安定した点で生じ得る１つ以上の不飽和炭素−炭素三重結合を有する不飽和二価直鎖または分岐鎖炭化水素基を表す。ある特定の実施形態では、アルキレン基、アルケニレン基、またはアルキニレン基は、１つ以上の環状脂肪族および／または酸素、窒素、もしくは硫黄等の１つ以上のヘテロ原子を含み得、アルキル、ハロ、アルコキシル、ヒドロキシ、アミノ、アリール、エーテル、エステル、またはアミド等の１つ以上の置換基で任意に置換され得る。例えば、アルキレン、アルケニレン、またはアルキニレンは、ハロゲン、−ＣＯＲ’、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２Ｒ’、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＯＲ’、−ＯＣＯＲ’、−ＯＣＯ２Ｒ’、−ＮＨ２、−ＮＨＲ’、−Ｎ（Ｒ’）２、−ＳＲ’、または−ＳＯ２Ｒ’のうちの１つ以上（例えば、１、２、３、４、５、または６つの独立して選択される置換基）で置換され得、式中、Ｒ’の各例は独立して、Ｃ１−Ｃ２０脂肪族（例えば、Ｃ１−Ｃ２０アルキル、Ｃ１−Ｃ１５アルキル、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、またはＣ１−Ｃ３アルキル）である。複数の実施形態では、Ｒ’は独立して、非置換アルキル（例えば、非置換Ｃ１−Ｃ２０アルキル、Ｃ１−Ｃ１５アルキル、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、またはＣ１−Ｃ３アルキル）である。複数の実施形態では、Ｒ’は独立して、非置換Ｃ１−Ｃ３アルキルである。ある特定の実施形態では、アルキレン、アルケニレン、またはアルキニレンは、非置換である。ある特定の実施形態では、アルキレン、アルケニレン、またはアルキニレンは、いずれのヘテロ原子も含まない。
【０１３０】
アルケニル：本明細書で使用される場合、「アルケニル」とは、鎖に沿って任意の安定した点で生じ得る１つ以上の不飽和炭素−炭素二重結合を有する任意の直鎖状または分岐状炭化水素鎖を意味し、例えば、「Ｃ２−Ｃ２０アルケニル」とは、２〜２０個の炭素を有するアルケニル基を指す。例えば、アルケニル基には、プロプ−２−エニル、ブタ−２−エニル、ブタ−３−エニル、２−メチルプロプ−２−エニル、ヘキサ−２−エニル、ヘキサ−５−エニル、２，３−ジメチルブタ−２−エニル等が含まれる。複数の実施形態では、アルケニルは、１、２、または３つの炭素−炭素二重結合を含む。複数の実施形態では、アルケニルは、単一の炭素−炭素二重結合を含む。複数の実施形態では、複数の二重結合（例えば、２つまたは３つ）が共役している。アルケニル基は、非置換であり得るか、または本明細書に記載の１つ以上の置換基で置換され得る。例えば、アルケニル基は、ハロゲン、−ＣＯＲ’、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２Ｒ’、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＯＲ’、−ＯＣＯＲ’、−ＯＣＯ２Ｒ’、−ＮＨ２、−ＮＨＲ’、−Ｎ（Ｒ’）２、−ＳＲ’、または−ＳＯ２Ｒ’のうちの１つ以上（例えば、１、２、３、４、５、または６つの独立して選択される置換基）で置換され得、式中、Ｒ’の各例は独立して、Ｃ１−Ｃ２０脂肪族（例えば、Ｃ１−Ｃ２０アルキル、Ｃ１−Ｃ１５アルキル、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、またはＣ１−Ｃ３アルキル）である。複数の実施形態では、Ｒ’は独立して、非置換アルキル（例えば、非置換Ｃ１−Ｃ２０アルキル、Ｃ１−Ｃ１５アルキル、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、またはＣ１−Ｃ３アルキル）である。複数の実施形態では、Ｒ’は独立して、非置換Ｃ１−Ｃ３アルキルである。複数の実施形態では、アルケニルは、非置換である。複数の実施形態では、アルケニルは、（例えば、本明細書に記載の１、２、３、４、５、または６つの置換基で）置換されている。複数の実施形態では、アルケニル基は、−ＯＨ基で置換され、本明細書で「ヒドロキシアルケニル」基とも称され得、ここで、接頭辞は−ＯＨ基を示し、「アルケニル」は本明細書に記載されるとおりである。
【０１３１】
アルキニル：本明細書で使用される場合、「アルキニル」とは、鎖に沿って任意の安定した点で生じる１つ以上の炭素−炭素三重結合を有する直鎖状配置または分岐状配置のいずれかの任意の炭化水素鎖を意味し、例えば、「Ｃ２−Ｃ２０アルキニル」は、２〜２０個の炭素を有するアルキニル基を指す。アルキニル基の例には、プロプ−２−イニル、ブタ−２−イニル、ブタ−３−イニル、ペンタ−２−イニル、３−メチルペンタ−４−イニル、ヘキサ−２−イニル、ヘキサ−５−イニル等が挙げられる。複数の実施形態では、アルキニルは、１つの炭素−炭素三重結合を含む。アルキニル基は、非置換であり得るか、または本明細書に記載の１つ以上の置換基で置換され得る。例えば、アルキニル基は、ハロゲン、−ＣＯＲ’、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２Ｒ’、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＯＲ’、−ＯＣＯＲ’、−ＯＣＯ２Ｒ’、−ＮＨ２、−ＮＨＲ’、−Ｎ（Ｒ’）２、−ＳＲ’、または−ＳＯ２Ｒ’のうちの１つ以上（例えば、１、２、３、４、５、または６つの独立して選択される置換基）で置換され得、式中、Ｒ’の各例は独立して、Ｃ１−Ｃ２０脂肪族（例えば、Ｃ１−Ｃ２０アルキル、Ｃ１−Ｃ１５アルキル、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、またはＣ１−Ｃ３アルキル）である。複数の実施形態では、Ｒ’は独立して、非置換アルキル（例えば、非置換Ｃ１−Ｃ２０アルキル、Ｃ１−Ｃ１５アルキル、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、またはＣ１−Ｃ３アルキル）である。複数の実施形態では、Ｒ’は独立して、非置換Ｃ１−Ｃ３アルキルである。複数の実施形態では、アルキニルは、非置換である。複数の実施形態では、アルキニルは、（例えば、本明細書に記載の１、２、３、４、５、または６つの置換基で）置換されている。
【０１３２】
アリール：単独でまたはより大きい部分の一部として使用される「アリール」および「アル−（ａｒ−）」、例えば、「アラルキル」、「アラルコキシ」、または「アリールオキシアルキル」という用語は、１〜３つの芳香環を含む任意に置換されたＣ６−１４芳香族炭化水素部分を指す。例えば、アリール基は、Ｃ６−１０アリール基（すなわち、フェニルおよびナフチル）である。アリール基には、任意に置換されたフェニル、ナフチル、またはアントラセニルが含まれるが、これらに限定されない。本明細書で使用される「アリール」および「アル−（ａｒ−）」という用語は、アリール環が１つ以上の脂環式環に縮合して、テトラヒドロナフチル環、インデニル環、またはインダニル環等の任意に置換された環状構造を形成する基も含む。「アリール」という用語は、「アリール基」、「アリール環」、および「芳香環」という用語と互換的に使用され得る。
【０１３３】
シクロアルキル：本明細書で使用される場合、「シクロアルキル」という用語は、非芳香族の飽和環状基、例えば、「Ｃ３−Ｃ１０シクロアルキル」を意味する。複数の実施形態では、シクロアルキルは、単環式である。複数の実施形態では、シクロアルキルは、多環式（例えば、二環式または三環式）である。多環式シクロアルキル基では、個々の環は縮合され得るか、架橋され得るか、またはスピロ環式であり得る。シクロアルキル基の例には、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、ノルボルナニル、ビシクロ［３．２．１］オクタニル、オクタヒドロ−ペンタレニル、およびスピロ［４．５］デカニル等が挙げられる。「シクロアルキル」という用語は、「炭素環」という用語と互換的に使用され得る。シクロアルキル基は、非置換であり得るか、または本明細書に記載の１つ以上の置換基で置換され得る。例えば、シクロアルキル基は、ハロゲン、−ＣＯＲ’、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２Ｒ’、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＯＲ’、−ＯＣＯＲ’、−ＯＣＯ２Ｒ’、−ＮＨ２、−ＮＨＲ’、−Ｎ（Ｒ’）２、−ＳＲ’、または−ＳＯ２Ｒ’のうちの１つ以上（例えば、１、２、３、４、５、または６つの独立して選択される置換基）で置換され得、式中、Ｒ’の各例は独立して、Ｃ１−Ｃ２０脂肪族（例えば、Ｃ１−Ｃ２０アルキル、Ｃ１−Ｃ１５アルキル、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、またはＣ１−Ｃ３アルキル）である。複数の実施形態では、Ｒ’は独立して、非置換アルキル（例えば、非置換Ｃ１−Ｃ２０アルキル、Ｃ１−Ｃ１５アルキル、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、またはＣ１−Ｃ３アルキル）である。複数の実施形態では、Ｒ’は独立して、非置換Ｃ１−Ｃ３アルキルである。複数の実施形態では、シクロアルキルは、非置換である。複数の実施形態では、シクロアルキルは、（例えば、本明細書に記載の１、２、３、４、５、または６つの置換基で）置換されている。
【０１３４】
ハロゲン：本明細書で使用される場合、「ハロゲン」という用語は、フッ素、塩素、臭素、またはヨウ素を意味する。
【０１３５】
ヘテロアルケニル．「ヘテロアルケニル」という用語は、Ｎ、Ｏ、Ｓ、およびＰからなる群から独立して選択される１、２、３、または４個のヘテロ原子に加えて、２〜１４個の炭素原子を有する分岐状または非分岐状アルケニル基を意味する。ヘテロアルケニルは、任意に、単環式、二環式、または三環式環を含み得、これらの環は各々、望ましくは、３〜６つの員を有する。ヘテロアルケニル基は、置換または非置換であり得る。
【０１３６】
ヘテロアルキニル．「ヘテロアルキニル」という用語は、Ｎ、Ｏ、Ｓ、およびＰからなる群から独立して選択される１、２、３、または４個のヘテロ原子に加えて、２〜１４個の炭素原子を有する分岐状または非分岐状アルキニル基を意味する。ヘテロアルキニルは、任意に、単環式、二環式、または三環式環を含み得、これらの環は各々、望ましくは、３〜６つの員を有する。ヘテロアルキニル基は、置換または非置換であり得る。
【０１３７】
ヘテロアルキル．「ヘテロアルキル」という用語は、Ｎ、Ｏ、Ｓ、およびＰからなる群から独立して選択される１、２、３、または４個のヘテロ原子に加えて、１〜１４個の炭素原子を有する、分岐状または非分岐状アルキル基を意味する。ヘテロアルキルには、三級アミン、二級アミン、エーテル、チオエーテル、アミド、チオアミド、カルバメート、チオカルバメート、ヒドラゾン、イミン、リン酸ジエステル、ホスホルアミデート、スルホンアミド、およびジスルフィドが含まれるが、これらに限定されない。ヘテロアルキル基は、任意に、単環式、二環式、または三環式環を含み得、これらの環は各々、望ましくは、３〜６つの員を有する。ヘテロアルキル基は、置換または非置換であり得る。ヘテロアルキルの例には、メトキシメチルおよびエトキシエチル等のポリエーテルが含まれるが、これらに限定されない。
【０１３８】
ヘテロアリール：単独でまたはより大きい部分の一部として使用される「ヘテロアリール」および「ヘテロアル−（ｈｅｔｅｒｏａｒ−）」、例えば、「ヘテロアラルキル」、または「ヘテロアラルコキシ」という用語は、５〜１４個の環原子、好ましくは、５、６、９、または１０個の環原子を有し、環状アレイで共有される６、１０、または１４個のπ電子を有し、かつ炭素原子に加えて１〜５個のヘテロ原子を有する基を指す。ヘテロアリール基は、単環式、二環式、三環式、または多環式、例えば、単環式、二環式、または三環式（例えば、単環式または二環式）であり得る。「ヘテロ原子」という用語は、窒素、酸素、または硫黄を指し、窒素または硫黄の任意の酸化形態、および塩基性窒素の任意の四級化形態を含む。例えば、ヘテロアリールの窒素原子は、塩基性窒素原子であり得、さらに対応するＮ−オキシドに任意に酸化され得る。ヘテロアリールがヒドロキシ基によって置換されている場合、これは、その対応する互変異性体も含む。本明細書で使用される「ヘテロアリール」および「ヘテロアル−（ｈｅｔｅｒｏａｒ−）」という用語は、ヘテロ芳香族環が１つ以上のアリール環、脂環式環、またはヘテロ脂環式環に縮合した基も含む。ヘテロアリール基の非限定的な例には、チエニル、フラニル、ピロリル、イミダゾリル、ピラゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、オキサゾリル、イソキサゾリル、オキサジアゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、チアジアゾリル、ピリジル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、インドリジニル、プリニル、ナフチリジニル、プテリジニル、インドリル、イソインドリル、ベンゾチエニル、ベンゾフラニル、ジベンゾフラニル、インダゾリル、ベンズイミダゾリル、ベンズチアゾリル、キノリル、イソキノリル、シンノリニル、フタラジニル、キナゾリニル、キノキサリニル、４Ｈ−キノリジニル、カルバゾリル、アクリジニル、フェナジニル、フェノチアジニル、フェノキサジニル、テトラヒドロキノリニル、テトラヒドロイソキノリニル、およびピリド［２，３−ｂ］−１，４−オキサジン−３（４Ｈ）−オンが含まれる。「ヘテロアリール」という用語は、「ヘテロアリール環」、「ヘテロアリール基」、または「ヘテロ芳香族」という用語と互換的に使用され得、これらの用語はいずれも、任意に置換される環を含む。「ヘテロアラルキル」という用語は、ヘテロアリールによって置換されたアルキル基を指し、アルキル部分およびヘテロアリール部分は独立して、任意に置換される。
【０１３９】
ヘテロシクリル．本明細書で使用される場合、「複素環」、「ヘテロシクリル」、「複素環式ラジカル」、および「複素環式環」という用語は、互換的に使用され、飽和または部分不飽和のいずれかであり、かつ上で定義されるように、炭素原子に加えて１〜４個等の１個以上のヘテロ原子を有する、安定した３〜８員単環式または７〜１０員二環式複素環式部分を指す。複素環の環原子に関して使用される場合、「窒素」という用語は、置換窒素を含む。例として、酸素、硫黄、もしくは窒素から選択される０〜３個のヘテロ原子を有する飽和環または部分不飽和環では、窒素は、Ｎ（３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピロリルと同様）、ＮＨ（ピロリジニルと同様）、またはＮＲ＋（Ｎ−置換ピロリジニルと同様）であり得る。
【０１４０】
複素環式環は、安定した構造をもたらす任意のヘテロ原子または炭素原子でそのペンダント基と結合することができ、それらの環原子のいずれかも任意に置換され得る。かかる飽和または部分不飽和複素環式ラジカルの例には、テトラヒドロフラン、テトラヒドロフラン、ピペリジニル、デカヒドロキノリニル、オキサゾリジニル、ピペラジニル、ジオキサニル、ジオキソラニル、ジアゼピニル、オキサゼピニル、チアゼピニル、モルホリニル、およびチアモルホリニルが含まれるが、これらに限定されない。ヘテロシクリル基は、単環式、二環式、三環式、または多環式、好ましくは、単環式、二環式、または三環式、より好ましくは、単環式または二環式であり得る。「ヘテロシクリルアルキル」という用語は、ヘテロシクリルによって置換されたアルキル基を指し、アルキル部分およびヘテロシクリル部分は独立して、任意に置換される。加えて、複素環式環には、複素環式環が１つ以上のアリール環に縮合した基も含まれる。
【０１４１】
カチオン性脂質
リポソームベースのビヒクルは、治療薬の魅力的な担体とみなされ、依然として継続的な開発努力の対象である。カチオン性脂質成分を含むリポソームベースのビヒクルが封入、安定性、および部位局在性に関して有望な結果を示しているが、リポソームベースの送達系の改善に対するニーズが依然として高い。例えば、リポソーム送達系の有意な欠点は、所望の標的細胞および／または細胞内コンパートメントに到達するのに十分な細胞培養またはインビボ安定性を有するリポソームの構築、およびそれらの封入された材料をかかる標的細胞に効率的に放出するかかるリポソーム送達系の能力に関する。
【０１４２】
具体的には、改善された薬物動態特性を示し、かつ核酸等の巨大分子を多種多様の細胞型および組織に増強された効率で送達することができる改善されたカチオン性脂質に対するニーズが依然として存在する。重要なことには、低下した毒性を有するものとして特徴付けられ、かつ封入された核酸およびポリヌクレオチドを標的細胞、組織、および臓器に効率的に送達することができる新規カチオン性脂質に対する特定のニーズも依然として存在する。
【０１４３】
新規リン酸エステルカチオン性脂質、かかる脂質を含む組成物、およびそれらを使用する関連方法が本明細書に記載される。複数の実施形態では、本明細書に記載の化合物は、１つ以上の標的細胞への送達、およびその後のそのトランスフェクションを促進するためのリポソーム組成物またはリポソーム組成物の成分として有用である。
【０１４４】
本明細書に開示されるリン酸エステルカチオン性脂質は、天然または荷電形態で存在する塩基性イオン性官能基（例えば、アミンまたは本明細書に記載の窒素含有ヘテロアリール）を含む。
【０１４５】
例えば、塩基性イオン性官能基は、酸によるプロトン化または塩基による脱プロトン化によって荷電基に変換され得る窒素官能基（例えば、ＮＨ２、グアニジン、アミジン、モノもしくはジアルキルアミン、５〜６員ヘテロシクロアルキル、または５〜６員窒素含有ヘテロアリール）を指し得る。したがって、複数の実施形態では、Ｘ１は、ＮＨ２、グアニジン、アミジン、モノもしくはジアルキルアミン、５〜６員ヘテロシクロアルキル、または５〜６員窒素含有ヘテロアリールである。例えば、複数の実施形態では、イオン性窒素含有基は、
【化３９】
2021525743.tif 000043
である。
【０１４６】
複数の実施形態では、本明細書に記載のリン酸エステルカチオン性脂質は、１つ以上の所望の特徴または特性を提供し得る。すなわち、ある特定の実施形態では、本明細書に記載のカチオン性脂質は、他の同様に分類された脂質と比較してかかる化合物の利点をもたらす１つ以上の特性を有するものとして特徴付けられ得る。例えば、本明細書に開示されるカチオン性脂質は、それらの成分であるリポソーム組成物（例えば、脂質ナノ粒子）の特性の制御および調整を可能にし得る。具体的には、本明細書に開示されるカチオン性脂質は、増強されたトランスフェクション効率および特定の生物学的結果をもたらすそれらの能力を特徴とし得る。かかる結果には、例えば、増強された細胞取り込み、エンドソーム／リソソーム破壊能力、および／または細胞内での封入された材料（例えば、ポリヌクレオチド）の放出の促進が含まれ得る。
【０１４７】
式（Ｉ）のリン酸エステルカチオン性脂質
複数の実施形態では、カチオン性脂質は、式（Ｉ）に従う構造を有するリン酸エステルカチオン性脂質であり、
【化４０】
2021525743.tif 000044
式中、
Ｌ１が、共有結合、Ｃ１−Ｃ１０アルキレン、Ｃ２−Ｃ１０アルケニレン、またはＣ２−Ｃ１０アルキニレンであり、
Ｘ１が、ＣＨ３、Ｃｌ、ＯＲａ、Ｃ（＝Ｘ１ａ）ＲＸ１ａ、ＮＲｂＲｃ、または５もしくは６員窒素含有ヘテロアリールであり、
Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、およびＸ５が各々独立して、ＣＨ２、Ｏ、またはＮＲｄであり、
Ｒ１が、Ｈ、Ｃｌ、ＯＲｆ、ＮＲｇＲｈ、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ２−Ｃ１０アルケニル、またはＣ２−Ｃ１０アルキニルであり、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、Ｃ２−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ２−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルケニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキニル、ポリマー、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、５もしくは６員ヘテロシクロアルキル、５もしくは６員アリール、または５もしくは６員ヘテロアリールであり、
Ｒａ、Ｒｄ、およびＲｆが各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、Ｃ２−Ｃ６−アルケニル、またはＣ２−Ｃ６−アルキニルであり、
ＲｂおよびＲｃが各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、Ｃ２−Ｃ６−アルケニル、またはＣ２−Ｃ６−アルキニルであるか、または
ＲｂおよびＲｃが、それらが結合している窒素原子と一緒になって、飽和または不飽和５〜６員複素環式環を形成し、
ＲｇおよびＲｈが各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、Ｃ２−Ｃ６−アルケニル、またはＣ２−Ｃ６−アルキニルであるか、または
ＲｇおよびＲｈが、それらが結合している窒素原子と一緒になって、飽和または不飽和５〜６員複素環式環を形成し、
ＲＸ１ａが、ＯＨまたはＯＲａであり、
Ｘ１ａが、ＯまたはＳであるが、
但し、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５のうちの少なくとも１つが、Ｃ６−Ｃ３０−アルキル、Ｃ６−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ６−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ６−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ６−Ｃ３０−アルケニル、またはヘテロ−Ｃ６−Ｃ３０−アルキニルであることを条件とする。
【０１４８】
複数の実施形態では、Ｌ１は、共有結合またはＣ１−Ｃ１０アルキレンである。
【０１４９】
複数の実施形態では、Ｌ１は、共有結合である。
【０１５０】
複数の実施形態では、Ｌ１は、−ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２−、または−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−である。
【０１５１】
複数の実施形態では、Ｘ１は、ＮＲｂＲｃまたは５〜６員窒素含有ヘテロアリールである。
【０１５２】
複数の実施形態では、Ｘ１は、ＮＲｂＲｃである。複数の実施形態では、ＲｂおよびＲｃの一方がＨであり、他方がＣ１−Ｃ６−アルキルである。複数の実施形態では、ＲｂおよびＲｃは各々、Ｃ１−Ｃ６−アルキルである。複数の実施形態では、ＲｂおよびＲｃの一方または両方が、非置換Ｃ１−Ｃ６−アルキルである。複数の実施形態では、ＲｂおよびＲｃの少なくとも一方が、ヒドロキシルによって置換されたＣ１−Ｃ６−アルキルである（例えば、ＲｂおよびＲｃの少なくとも一方が、（ＣＨ２）ＯＨ、（ＣＨ２）２ＯＨ、（ＣＨ２）３ＯＨ、（ＣＨ２）４ＯＨ、（ＣＨ２）５ＯＨ、または（ＣＨ２）６ＯＨである）。複数の実施形態では、ＲｂおよびＲｃの一方が、Ｈであり、他方が、ヒドロキシルによって置換されたＣ１−Ｃ６−アルキルである（例えば、ＲｂおよびＲｃの少なくとも一方が、（ＣＨ２）ＯＨ、（ＣＨ２）２ＯＨ、（ＣＨ２）３ＯＨ、（ＣＨ２）４ＯＨ、（ＣＨ２）５ＯＨ、または（ＣＨ２）６ＯＨである）。複数の実施形態では、ＲｂおよびＲｃの一方が、非置換Ｃ１−Ｃ６−アルキル（例えば、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、またはヘキシル）であり、他方が、ヒドロキシルによって置換されたＣ１−Ｃ６−アルキルである（例えば、ＲｂおよびＲｃの少なくとも一方が、（ＣＨ２）ＯＨ、（ＣＨ２）２ＯＨ、（ＣＨ２）３ＯＨ、（ＣＨ２）４ＯＨ、（ＣＨ２）５ＯＨ、または（ＣＨ２）６ＯＨである）。
【０１５３】
複数の実施形態では、Ｘ１は、５〜６員窒素含有ヘテロアリールである。
【０１５４】
複数の実施形態では、Ｘ１は、ピリジニルまたはジアルキルアミノである。
【０１５５】
複数の実施形態では、Ｘ２は、Ｏである。
【０１５６】
複数の実施形態では、Ｘ３は、Ｏである。
【０１５７】
複数の実施形態では、Ｘ４は、Ｏである。
【０１５８】
複数の実施形態では、Ｘ５は、Ｏである。
【０１５９】
複数の実施形態では、Ｒ１は、メチル、ジメチルアミノ、またはＯＨである。
【０１６０】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、Ｃ６−Ｃ３０−アルキルである。
【０１６１】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、非置換Ｃ６−Ｃ３０−アルキルである。
【０１６２】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、−Ｃ６Ｈ１３、−Ｃ７Ｈ１５、−Ｃ８Ｈ１７、−Ｃ９Ｈ１９、−Ｃ１０Ｈ２１、−Ｃ１１Ｈ２３、−Ｃ１２Ｈ２５、−Ｃ１３Ｈ２７、−Ｃ１４Ｈ２９、−Ｃ１５Ｈ３１、−Ｃ１６Ｈ３３、−Ｃ１７Ｈ３５、−Ｃ１８Ｈ３７、−Ｃ１９Ｈ３９、−Ｃ２０Ｈ４１、−Ｃ２１Ｈ４３、−Ｃ２２Ｈ４５、−Ｃ２３Ｈ４７、−Ｃ２４Ｈ４９、および−Ｃ２５Ｈ５１から選択される。
【０１６３】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、＝Ｏ、ハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、チオール、エステル、およびチオエステルから選択される１つまたは複数の置換基で置換されたＣ６−Ｃ３０−アルキルである。
【０１６４】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、＝Ｏ、ハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、チオール、エステル、およびチオエステルから選択される１つまたは複数の置換基で置換されたＣ１−Ｃ１０−アルキル−Ｏ−Ｃ１−Ｃ１０−アルキルである。
【０１６５】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、Ｃ６−Ｃ３０−アルケニルまたはＣ８−Ｃ２０−アルケニルである。
【０１６６】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、Ｃ８−アルケニル、Ｃ９−アルケニル、Ｃ１０−アルケニル、Ｃ１１−アルケニル、Ｃ１２−アルケニル、Ｃ１３−アルケニル、Ｃ１４−アルケニル、Ｃ１５−アルケニル、Ｃ１６−アルケニル、Ｃ１７−アルケニル、Ｃ１８−アルケニル、Ｃ１９−アルケニル、およびＣ２０−アルケニルから選択される。
【０１６７】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、非置換Ｃ８−アルケニル、非置換Ｃ９−アルケニル、非置換Ｃ１０−アルケニル、非置換Ｃ１１−アルケニル、非置換Ｃ１２−アルケニル、非置換Ｃ１３−アルケニル、非置換Ｃ１４−アルケニル、非置換Ｃ１５−アルケニル、非置換Ｃ１６−アルケニル、非置換Ｃ１７−アルケニル、非置換Ｃ１８−アルケニル、非置換Ｃ１９−アルケニル、および非置換Ｃ２０−アルケニルから選択される。
【０１６８】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、−（ＣＨ２）４ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）５ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）６ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）７ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）８ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）９ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１０ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１１ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１２ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１３ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１４ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１５ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１６ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１７ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１８ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）７ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）３ＣＨ３、−（ＣＨ２）７ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）５ＣＨ３、−（ＣＨ２）４ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）８ＣＨ３、−（ＣＨ２）７ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）７ＣＨ３、−（ＣＨ２）６ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）４ＣＨ３、−（ＣＨ２）７ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）４ＣＨ３、−（ＣＨ２）７ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ３、−（ＣＨ２）３ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）４ＣＨ３、−（ＣＨ２）３ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ３、−（ＣＨ２）１１ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）７ＣＨ３、および−（ＣＨ２）２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ３から選択される。
【０１６９】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５のうちの少なくとも１つは、５もしくは６員ヘテロアリールである。
【０１７０】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々、５もしくは６員ヘテロアリールである。
【０１７１】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は、イミダゾールまたはその誘導体である。
【０１７２】
式（Ｉａ）〜（１ｈ）のリン酸エステルカチオン性脂質
複数の実施形態では、カチオン性脂質は、式（Ｉａ）、（Ｉｂ）、（Ｉｃ）、（Ｉｄ）、（Ｉｅ）、（Ｉｆ）、（Ｉｇ）、または（Ｉｈ）の構造を有する。
【化４１】
2021525743.tif 000045
【０１７３】
複数の実施形態では、カチオン性脂質は、式（Ｉａ）に従う構造を有する。
【０１７４】
複数の実施形態では、カチオン性脂質は、式（Ｉｂ）に従う構造を有する。
【０１７５】
複数の実施形態では、カチオン性脂質は、式（Ｉｃ）に従う構造を有する。
【０１７６】
複数の実施形態では、カチオン性脂質は、式（Ｉｄ）に従う構造を有する。
【０１７７】
複数の実施形態では、カチオン性脂質は、式（Ｉｅ）に従う構造を有する。
【０１７８】
複数の実施形態では、カチオン性脂質は、式（Ｉｆ）に従う構造を有する。
【０１７９】
複数の実施形態では、カチオン性脂質は、式（Ｉｇ）に従う構造を有する。
【０１８０】
複数の実施形態では、カチオン性脂質は、式（Ｉｈ）に従う構造を有する。
【０１８１】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、
【化４２】
2021525743.tif 000046
から選択される。
【０１８２】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、
【化４３】
2021525743.tif 000047
から選択される。
【０１８３】
複数の実施形態では、カチオン性脂質は、以下の式に従う構造を有する。
【化４４】
2021525743.tif 000048
【０１８４】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、
【化４５】
2021525743.tif 000049
から選択される。
【０１８５】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、
【化４６】
2021525743.tif 000050
から選択される。
【０１８６】
複数の実施形態では、カチオン性脂質は、以下の式に従う構造を有する。
【化４７】
2021525743.tif 000051
【０１８７】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、
【化４８】
2021525743.tif 000052
から選択される。
【０１８８】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、
【化４９】
2021525743.tif 000053
から選択される。
【０１８９】
複数の実施形態では、カチオン性脂質は、以下の式に従う構造を有する。
【化５０】
2021525743.tif 000054
【０１９０】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、
【化５１】
2021525743.tif 000055
から選択される。
【０１９１】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、
【化５２】
2021525743.tif 000056
から選択される。
【０１９２】
複数の実施形態では、カチオン性脂質は、以下の式に従う構造を有する。
【化５３】
2021525743.tif 000057
【０１９３】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、
【化５４】
2021525743.tif 000058
から選択される。
【０１９４】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、
【化５５】
2021525743.tif 000059
から選択される。
【０１９５】
複数の実施形態では、カチオン性脂質は、以下の式に従う構造を有する。
【化５６】
2021525743.tif 000060
【０１９６】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、
【化５７】
2021525743.tif 000061
から選択される。
【０１９７】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、
【化５８】
2021525743.tif 000062
から選択される。
【０１９８】
複数の実施形態では、カチオン性脂質は、以下の式に従う構造を有する。
【化５９】
2021525743.tif 000063
【０１９９】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、
【化６０】
2021525743.tif 000064
から選択される。
【０２００】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、
【化６１】
2021525743.tif 000065
から選択される。
【０２０１】
複数の実施形態では、カチオン性脂質は、以下の式に従う構造を有する。
【化６２】
2021525743.tif 000066
【０２０２】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、
【化６３】
2021525743.tif 000067
から選択される。
【０２０３】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、
【化６４】
2021525743.tif 000068
から選択される。
【０２０４】
複数の実施形態では、カチオン性脂質は、以下の式に従う構造を有する。
【化６５】
2021525743.tif 000069
【０２０５】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、
【化６６】
2021525743.tif 000070
から選択される。
【０２０６】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、
【化６７】
2021525743.tif 000071
から選択される。
式（ＩＩ）のリン酸エステルカチオン性脂質
【化６８】
2021525743.tif 000072
式中、
Ｌ１が、共有結合またはＣ１−Ｃ１０アルキレンであり、
Ｘ１が、ＮＲｂＲｃまたは５もしくは６員窒素含有ヘテロアリールであり、
Ｒ１が、ＯＲｆ、Ｎ（ＣＨ３）２、またはＣ１−Ｃ１０アルキルであり、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、Ｃ２−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ２−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルケニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキニル、ポリマー、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、５もしくは６員ヘテロシクロアルキル、５もしくは６員アリール、または５もしくは６員ヘテロアリールであり、
ＲｂおよびＲｃが各々、Ｃ１−Ｃ６−アルキルである。
【０２０７】
複数の実施形態では、Ｌ１は、共有結合である。
【０２０８】
複数の実施形態では、Ｘ１は、ＮＲｂＲｃである。複数の実施形態では、ＲｂおよびＲｃの一方がＨであり、他方がＣ１−Ｃ６−アルキルである。複数の実施形態では、ＲｂおよびＲｃは各々、Ｃ１−Ｃ６−アルキルである。複数の実施形態では、ＲｂおよびＲｃの一方または両方が、非置換Ｃ１−Ｃ６−アルキルである。複数の実施形態では、ＲｂおよびＲｃの少なくとも一方が、ヒドロキシルによって置換されたＣ１−Ｃ６−アルキルである（例えば、ＲｂおよびＲｃの少なくとも一方が、（ＣＨ２）ＯＨ、（ＣＨ２）２ＯＨ、（ＣＨ２）３ＯＨ、（ＣＨ２）４ＯＨ、（ＣＨ２）５ＯＨ、または（ＣＨ２）６ＯＨである）。複数の実施形態では、ＲｂおよびＲｃの一方が、Ｈであり、他方が、ヒドロキシルによって置換されたＣ１−Ｃ６−アルキルである（例えば、ＲｂおよびＲｃの少なくとも一方が、（ＣＨ２）ＯＨ、（ＣＨ２）２ＯＨ、（ＣＨ２）３ＯＨ、（ＣＨ２）４ＯＨ、（ＣＨ２）５ＯＨ、または（ＣＨ２）６ＯＨである）。複数の実施形態では、ＲｂおよびＲｃの一方が、非置換Ｃ１−Ｃ６−アルキル（例えば、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、またはヘキシル）であり、他方が、ヒドロキシルによって置換されたＣ１−Ｃ６−アルキルである（例えば、ＲｂおよびＲｃの少なくとも一方が、（ＣＨ２）ＯＨ、（ＣＨ２）２ＯＨ、（ＣＨ２）３ＯＨ、（ＣＨ２）４ＯＨ、（ＣＨ２）５ＯＨ、または（ＣＨ２）６ＯＨである）。
【０２０９】
複数の実施形態では、Ｘ１は、５〜６員窒素含有ヘテロアリールである。
【０２１０】
複数の実施形態では、Ｘ１は、ピリジニルである。
【０２１１】
複数の実施形態では、Ｘ１は、ジメチルアミノである。
【０２１２】
複数の実施形態では、Ｘ１は、メチルペンチルアミノである。
【０２１３】
複数の実施形態では、Ｒ１は、ＣＨ３である。
【０２１４】
複数の実施形態では、Ｒ１は、ＯＨである。
【０２１５】
複数の実施形態では、Ｒ１は、ジメチルアミノである。
【０２１６】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、Ｃ６−Ｃ３０−アルキルである。
【０２１７】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、非置換Ｃ６−Ｃ３０−アルキルである。
【０２１８】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、−Ｃ６Ｈ１３、−Ｃ７Ｈ１５、−Ｃ８Ｈ１７、−Ｃ９Ｈ１９、−Ｃ１０Ｈ２１、−Ｃ１１Ｈ２３、−Ｃ１２Ｈ２５、−Ｃ１３Ｈ２７、−Ｃ１４Ｈ２９、−Ｃ１５Ｈ３１、−Ｃ１６Ｈ３３、−Ｃ１７Ｈ３５、−Ｃ１８Ｈ３７、−Ｃ１９Ｈ３９、−Ｃ２０Ｈ４１、−Ｃ２１Ｈ４３、−Ｃ２２Ｈ４５、−Ｃ２３Ｈ４７、−Ｃ２４Ｈ４９、および−Ｃ２５Ｈ５１から選択される。
【０２１９】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、＝Ｏ、ハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、チオール、エステル、およびチオエステルから選択される１つまたは複数の置換基で置換されたＣ６−Ｃ３０−アルキルである。
【０２２０】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、＝Ｏ、ハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、チオール、エステル、およびチオエステルから選択される１つまたは複数の置換基で置換されたＣ１−Ｃ１０−アルキル−Ｏ−Ｃ１−Ｃ１０−アルキルである。
【０２２１】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、Ｃ６−Ｃ３０−アルケニルまたはＣ８−Ｃ２０−アルケニルである。
【０２２２】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、Ｃ８−アルケニル、Ｃ９−アルケニル、Ｃ１０−アルケニル、Ｃ１１−アルケニル、Ｃ１２−アルケニル、Ｃ１３−アルケニル、Ｃ１４−アルケニル、Ｃ１５−アルケニル、Ｃ１６−アルケニル、Ｃ１７−アルケニル、Ｃ１８−アルケニル、Ｃ１９−アルケニル、およびＣ２０−アルケニルから選択される。
【０２２３】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、非置換Ｃ８−アルケニル、非置換Ｃ９−アルケニル、非置換Ｃ１０−アルケニル、非置換Ｃ１１−アルケニル、非置換Ｃ１２−アルケニル、非置換Ｃ１３−アルケニル、非置換Ｃ１４−アルケニル、非置換Ｃ１５−アルケニル、非置換Ｃ１６−アルケニル、非置換Ｃ１７−アルケニル、非置換Ｃ１８−アルケニル、非置換Ｃ１９−アルケニル、および非置換Ｃ２０−アルケニルから選択される。
【０２２４】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、−（ＣＨ２）４ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）５ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）６ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）７ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）８ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）９ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１０ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１１ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１２ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１３ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１４ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１５ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１６ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１７ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１８ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）７ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）３ＣＨ３、−（ＣＨ２）７ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）５ＣＨ３、−（ＣＨ２）４ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）８ＣＨ３、−（ＣＨ２）７ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）７ＣＨ３、−（ＣＨ２）６ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）４ＣＨ３、−（ＣＨ２）７ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）４ＣＨ３、−（ＣＨ２）７ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ３、−（ＣＨ２）３ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）４ＣＨ３、−（ＣＨ２）３ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ３、−（ＣＨ２）１１ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）７ＣＨ３、および−（ＣＨ２）２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ３から選択される。
【０２２５】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５のうちの少なくとも１つは、５もしくは６員ヘテロアリールである。
【０２２６】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々、５もしくは６員ヘテロアリールである。
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は、イミダゾールまたはその誘導体である。
【０２２７】
式（ＩＩａ）〜（ＩＩｈ）のリン酸エステルカチオン性脂質
複数の実施形態では、カチオン性脂質は、式（ＩＩａ）、（ＩＩｂ）、（ＩＩｃ）、（Ｉｄ）、（ＩＩｅ）、（ＩＩｆ）、（ＩＩｇ）、または（ＩＩｈ）の構造を有する。
【化６９】
2021525743.tif 000073
【０２２８】
複数の実施形態では、カチオン性脂質は、式（ＩＩａ）に従う構造を有する。
【０２２９】
複数の実施形態では、カチオン性脂質は、式（ＩＩｂ）に従う構造を有する。
【０２３０】
複数の実施形態では、カチオン性脂質は、式（ＩＩｃ）に従う構造を有する。
【０２３１】
複数の実施形態では、カチオン性脂質は、式（ＩＩｄ）に従う構造を有する。
【０２３２】
複数の実施形態では、カチオン性脂質は、式（ＩＩｅ）に従う構造を有する。
【０２３３】
複数の実施形態では、カチオン性脂質は、式（ＩＩｆ）に従う構造を有する。
【０２３４】
複数の実施形態では、カチオン性脂質は、式（ＩＩｇ）に従う構造を有する。
【０２３５】
複数の実施形態では、カチオン性脂質は、式（ＩＩｈ）に従う構造を有する。
【０２３６】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、
【化７０】
2021525743.tif 000074
から選択される。
【０２３７】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、
【化７１】
2021525743.tif 000075
から選択される。
【０２３８】
複数の実施形態では、カチオン性脂質は、式（ＩＩａ）に従う構造を有するリン酸エステルカチオン性脂質であり、
【化７２】
2021525743.tif 000076
式中、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、Ｃ２−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ２−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルケニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキニル、ポリマー、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、５もしくは６員ヘテロシクロアルキル、５もしくは６員アリール、または５もしくは６員ヘテロアリールである。
【０２３９】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、
【化７３】
2021525743.tif 000077
から選択される。
【０２４０】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、
【化７４】
2021525743.tif 000078
から選択される。
【０２４１】
複数の実施形態では、カチオン性脂質は、式（ＩＩｂ）に従う構造を有するリン酸エステルカチオン性脂質であり、
【化７５】
2021525743.tif 000079
式中、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、Ｃ２−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ２−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルケニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキニル、ポリマー、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、５もしくは６員ヘテロシクロアルキル、５もしくは６員アリール、または５もしくは６員ヘテロアリールである。
【０２４２】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、
【化７６】
2021525743.tif 000080
から選択される。
【０２４３】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、
【化７７】
2021525743.tif 000081
から選択される。
【０２４４】
複数の実施形態では、カチオン性脂質は、式（ＩＩｃ）に従う構造を有するリン酸エステルカチオン性脂質であり、
【化７８】
2021525743.tif 000082
式中、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、Ｃ２−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ２−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルケニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキニル、ポリマー、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、５もしくは６員ヘテロシクロアルキル、５もしくは６員アリール、または５もしくは６員ヘテロアリールである。
【０２４５】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、
【化７９】
2021525743.tif 000083
から選択される。
【０２４６】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、
【化８０】
2021525743.tif 000084
から選択される。
【０２４７】
複数の実施形態では、カチオン性脂質は、式（ＩＩｄ）に従う構造を有するリン酸エステルカチオン性脂質であり、
【化８１】
2021525743.tif 000085
式中、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、Ｃ２−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ２−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルケニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキニル、ポリマー、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、５もしくは６員ヘテロシクロアルキル、５もしくは６員アリール、または５もしくは６員ヘテロアリールである。
【０２４８】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、
【化８２】
2021525743.tif 000086
から選択される。
【０２４９】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、
【化８３】
2021525743.tif 000087
【化８４】
2021525743.tif 000088
から選択される。
【０２５０】
複数の実施形態では、カチオン性脂質は、式（ＩＩｅ）に従う構造を有するリン酸エステルカチオン性脂質であり、
【化８５】
2021525743.tif 000089
式中、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、Ｃ２−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ２−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルケニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキニル、ポリマー、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、５もしくは６員ヘテロシクロアルキル、５もしくは６員アリール、または５もしくは６員ヘテロアリールである。
【０２５１】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、
【化８６】
2021525743.tif 000090
から選択される。
【０２５２】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、
【化８７】
2021525743.tif 000091
から選択される。
【０２５３】
複数の実施形態では、カチオン性脂質は、式（ＩＩｆ）に従う構造を有するリン酸エステルカチオン性脂質であり、
【化８８】
2021525743.tif 000092
式中、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、Ｃ２−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ２−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルケニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキニル、ポリマー、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、５もしくは６員ヘテロシクロアルキル、５もしくは６員アリール、または５もしくは６員ヘテロアリールである。
【０２５４】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、
【化８９】
2021525743.tif 000093
から選択される。
【０２５５】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、
【化９０】
2021525743.tif 000094
から選択される。
【０２５６】
複数の実施形態では、カチオン性脂質は、式（ＩＩｇ）に従う構造を有するリン酸エステルカチオン性脂質であり、
【化９１】
2021525743.tif 000095
式中、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、Ｃ２−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ２−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルケニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキニル、ポリマー、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、５もしくは６員ヘテロシクロアルキル、５もしくは６員アリール、または５もしくは６員ヘテロアリールである。
【０２５７】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、
【化９２】
2021525743.tif 000096
【化９３】
2021525743.tif 000097
から選択される。
【０２５８】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、
【化９４】
2021525743.tif 000098
から選択される。
【０２５９】
複数の実施形態では、カチオン性脂質は、式（ＩＩｈ）に従う構造を有するリン酸エステルカチオン性脂質であり、
【化９５】
2021525743.tif 000099
式中、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、Ｃ２−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ２−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルケニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキニル、ポリマー、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、５もしくは６員ヘテロシクロアルキル、５もしくは６員アリール、または５もしくは６員ヘテロアリールである。
【０２６０】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、
【化９６】
2021525743.tif 000100
から選択される。
【０２６１】
複数の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５は各々独立して、
【化９７】
2021525743.tif 000101
から選択される。
【０２６２】
例示的なカチオン性脂質
例示的なカチオン性脂質には、カチオン性脂質（１）、（２）、（３）、（４）、（５）、（６）、（７）、（８）、（９）、および（１０）等のカチオン性脂質が含まれる。
【化９８】
2021525743.tif 000102
【表８】
2021525743.tif 000103
【０２６３】
複数の実施形態では、カチオン性脂質は、化合物（１）である。複数の実施形態では、カチオン性脂質は、化合物（２）である。複数の実施形態では、カチオン性脂質は、化合物（３）である。複数の実施形態では、カチオン性脂質は、化合物（４）である。複数の実施形態では、カチオン性脂質は、化合物（５）である。複数の実施形態では、カチオン性脂質は、化合物（６）である。複数の実施形態では、カチオン性脂質は、化合物（７）である。複数の実施形態では、カチオン性脂質は、化合物（８）である。複数の実施形態では、カチオン性脂質は、化合物（９）である。複数の実施形態では、カチオン性脂質は、化合物（１０）である。
【０２６４】
例示的なカチオン性脂質には、カチオン性脂質（１１）、（１２）、（１３）、（１４）、（１５）、（１６）、（１７）、（１８）、（１９）、および（２０）等のカチオン性脂質も含まれる。
【化９９】
2021525743.tif 000104
【表９】
2021525743.tif 000105
【０２６５】
複数の実施形態では、カチオン性脂質は、化合物（１１）である。複数の実施形態では、カチオン性脂質は、化合物（１２）である。複数の実施形態では、カチオン性脂質は、化合物（１３）である。複数の実施形態では、カチオン性脂質は、化合物（１４）である。複数の実施形態では、カチオン性脂質は、化合物（１５）である。複数の実施形態では、カチオン性脂質は、化合物（１６）である。複数の実施形態では、カチオン性脂質は、化合物（１７）である。複数の実施形態では、カチオン性脂質は、化合物（１８）である。複数の実施形態では、カチオン性脂質は、化合物（１９）である。複数の実施形態では、カチオン性脂質は、化合物（２０）である。
【０２６６】
カチオン性脂質の合成
本明細書に記載のカチオン性脂質は、当該技術分野で既知の方法に従って調製され得る。
【０２６７】
核酸
本明細書に記載のカチオン性脂質（例えば、式（Ｉ）もしくは（ＩＩ）、例えば、式（Ｉａ）〜（１ｈ）および式（ＩＩａ）〜（ＩＩｈ）、または化合物（１）〜（２０）のカチオン性脂質）を使用して、核酸の送達に有用な組成物を調製することができる。
【０２６８】
核酸の合成
本発明による核酸は、任意の既知の方法に従って合成され得る。例えば、本発明によるｍＲＮＡは、インビトロ転写（ＩＶＴ）により合成され得る。簡潔には、ＩＶＴは、典型的には、プロモーター、リボヌクレオチド三リン酸のプール、ＤＴＴおよびマグネシウムイオンを含み得る緩衝系、および適切なＲＮＡポリメラーゼ（例えば、Ｔ３、Ｔ７、変異Ｔ７、またはＳＰ６  ＲＮＡポリメラーゼ）を含む線状または環状ＤＮＡ鋳型、ＤＮＡｓｅ  Ｉ、ピロホスファターゼ、および／またはＲＮＡｓｅ阻害剤を用いて行われる。正確な条件は、特定の用途により異なる。
【０２６９】
いくつかの実施形態では、本発明によるｍＲＮＡの調製のために、ＤＮＡ鋳型がインビトロで転写される。好適なＤＮＡ鋳型は、典型的には、インビトロ転写のためのプロモーター、例えば、Ｔ３、Ｔ７、変異Ｔ７、またはＳＰ６プロモーター、続いて、所望のｍＲＮＡの所望のヌクレオチド配列および終結シグナルを有する。
【０２７０】
本発明による所望のｍＲＮＡ配列（複数可）が決定され、標準の方法を使用してＤＮＡ鋳型に組み込まれ得る。例えば、所望のアミノ酸配列（例えば、酵素配列）から開始して、仮想逆翻訳が遺伝コードの縮重に基づいて行われる。その後、最適化アルゴリズムが好適なコドンの選択のために使用され得る。典型的には、Ｇ／Ｃ含有量は、一方で可能な限り高いＧ／Ｃ含有量を達成し、他方ではコドン使用に従ってｔＲＮＡの頻度を最大限考慮するように最適化され得る。最適化されたＲＮＡ配列は、確立され、例えば、適切なディスプレイデバイスを用いてディスプレイされ、元の（野生型）配列と比較され得る。それぞれ、ＲＮＡの安定化特性および不安定化特性または領域を計算するために、二次構造も分析され得る。
【０２７１】
上述のように、「核酸」という用語は、その最も広範な意味で、ポリヌクレオチド鎖に組み込まれるか、または組み込まれ得る任意の化合物および／または物質を指す。ＤＮＡは、アンチセンスＤＮＡ、プラスミドＤＮＡ、プラスミドＤＮＡの一部、事前縮合ＤＮＡ、リメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）の産物、ベクター（例えば、Ｐ１、ＰＡＣ、ＢＡＣ、ＹＡＣ、人工染色体）、発現カセット、キメラ配列、染色体ＤＮＡ、またはこれらの群の誘導体の形態であり得る。ＲＮＡは、メッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）、リボソームＲＮＡ（ｒＲＮＡ）、シグナル認識粒子ＲＮＡ（７  ＳＬ  ＲＮＡまたはＳＲＰ  ＲＮＡ）、トランスファーＲＮＡ（ｔＲＮＡ）、トランスファー−メッセンジャーＲＮＡ（ｔｍＲＮＡ）、低分子核ＲＮＡ（ｓｎＲＮＡ）、低分子核小体ＲＮＡ（ｓｎｏＲＮＡ）、ＳｍＹ  ＲＮＡ、低分子カハール体特異的ＲＮＡ（ｓｃａＲＮＡ）、ガイドＲＮＡ（ｇＲＮＡ）、リボヌクレアーゼＰ（ＲＮａｓｅ  Ｐ）、Ｙ  ＲＮＡ、テロメラーゼＲＮＡ成分（ＴＥＲＣ）、スプライスリーダーＲＮＡ（ＳＬ  ＲＮＡ）、アンチセンスＲＮＡ（ａＲＮＡまたはａｓＲＮＡ）、シス−天然アンチセンス転写物（シス−ＮＡＴ）、ＣＲＩＳＰＲ  ＲＮＡ（ｃｒＲＮＡ）、長い非コーディングＲＮＡ（ｌｎｃＲＮＡ）、マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）、ｐｉｗｉ結合ＲＮＡ（ｐｉＲＮＡ）、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、トランス作用性ｓｉＲＮＡ（ｔａｓｉＲＮＡ）、リピート関連ｓｉＲＮＡ（ｒａｓｉＲＮＡ）、７３Ｋ  ＲＮＡ、レトロトランスポゾン、ウイルスゲノム、ウイロイド、サテライトＲＮＡ、またはこれらの群の誘導体の形態であり得る。いくつかの実施形態では、核酸は、タンパク質をコードするｍＲＮＡである。
【０２７２】
ｍＲＮＡの合成
本発明によるｍＲＮＡは、様々な既知の方法のうちのいずれかに従って合成され得る。例えば、本発明によるｍＲＮＡは、インビトロ転写（ＩＶＴ）により合成され得る。簡潔には、ＩＶＴは、典型的には、プロモーター、リボヌクレオチド三リン酸のプール、ＤＴＴおよびマグネシウムイオンを含み得る緩衝系、および適切なＲＮＡポリメラーゼ（例えば、Ｔ３、Ｔ７、またはＳＰ６  ＲＮＡポリメラーゼ）を含む線状または環状ＤＮＡ鋳型、ＤＮＡｓｅ  Ｉ、ピロホスファターゼ、および／またはＲＮＡｓｅ阻害剤を用いて行われる。正確な条件は、特定の用途により異なる。正確な条件は、特定の用途により異なる。これらの試薬の存在は、いくつかの実施形態による最終産物中では望ましくなく、それ故に、不純物と称され得、これらの不純物のうちの１つ以上を含む調製物は、不純調製物と称され得る。いくつかの実施形態では、インビトロ転写は、単一バッチで生じる。
【０２７３】
いくつかの実施形態では、本発明によるｍＲＮＡの調製のために、ＤＮＡ鋳型がインビトロで転写される。好適なＤＮＡ鋳型は、典型的には、インビトロ転写のためのプロモーター、例えば、Ｔ３、Ｔ７、またはＳＰ６プロモーター、続いて、所望のｍＲＮＡの所望のヌクレオチド配列および終結シグナルを有する。
【０２７４】
本発明による所望のｍＲＮＡ配列（複数可）が決定され、標準の方法を使用してＤＮＡ鋳型に組み込まれ得る。例えば、所望のアミノ酸配列（例えば、酵素配列）から開始して、仮想逆翻訳が遺伝コードの縮重に基づいて行われる。その後、最適化アルゴリズムが好適なコドンの選択のために使用され得る。典型的には、Ｇ／Ｃ含有量は、一方で可能な限り高いＧ／Ｃ含有量を達成し、他方ではコドン使用に従ってｔＲＮＡの頻度を最大限考慮するように最適化され得る。最適化されたＲＮＡ配列は、確立され、例えば、適切なディスプレイデバイスを用いてディスプレイされ、元の（野生型）配列と比較され得る。それぞれ、ＲＮＡの安定化特性および不安定化特性または領域を計算するために、二次構造も分析され得る。
【０２７５】
修飾ｍＲＮＡ
いくつかの実施形態では、本発明によるｍＲＮＡは、未修飾ｍＲＮＡまたは修飾ｍＲＮＡとして合成され得る。修飾ｍＲＮＡは、ＲＮＡにヌクレオチド修飾を含む。したがって、本発明による修飾ｍＲＮＡは、例えば、骨格修飾、糖修飾、または塩基修飾であるヌクレオチド修飾を含み得る。いくつかの実施形態では、ｍＲＮＡは、プリン（アデニン（Ａ）、グアニン（Ｇ））またはピリミジン（チミン（Ｔ）、シトシン（Ｃ）、ウラシル（Ｕ））を含むが、これらに限定されない天然に存在するヌクレオチドおよび／またはヌクレオチド類似体（修飾ヌクレオチド）から合成され得、かつプリンおよびピリミジンの修飾ヌクレオチド類似体または誘導体、例えば、１−メチル−アデニン、２−メチル−アデニン、２−メチルチオ−Ｎ−６−イソペンテニル−アデニン、Ｎ６−メチル−アデニン、Ｎ６−イソペンテニル−アデニン、２−チオ−シトシン、３−メチル−シトシン、４−アセチル−シトシン、５−メチル−シトシン、２，６−ジアミノプリン、１−メチル−グアニン、２−メチル−グアニン、２，２−ジメチル−グアニン、７−メチル−グアニン、イノシン、１−メチル−イノシン、プソイドウラシル（５−ウラシル）、ジヒドロ−ウラシル、２−チオ−ウラシル、４−チオ−ウラシル、５−カルボキシメチルアミノメチル−２−チオ−ウラシル、５−（カルボキシヒドロキシメチル）−ウラシル、５−フルオロ−ウラシル、５−ブロモ−ウラシル、５−カルボキシメチルアミノメチル−ウラシル、５−メチル−２−チオ−ウラシル、５−メチル−ウラシル、Ｎ−ウラシル−５−オキシ酢酸メチルエステル、５−メチルアミノメチル−ウラシル、５−メトキシアミノメチル−２−チオ−ウラシル、５’−メトキシカルボニルメチル−ウラシル、５−メトキシ−ウラシル、ウラシル−５−オキシ酢酸メチルエステル、ウラシル−５−オキシ酢酸（ｖ）、１−メチル−プソイドウラシル、クエオシン、ベータ−Ｄ−マンノシル−クエオシン、ワイブトキソシン、およびホスホロアミダイト、ホスホロチオエート、ペプチドヌクレオチド、メチルホスホネート、７−デアザグアノシン、５−メチルシトシン、およびイノシン等として合成され得る。かかる類似体の調製は、例えば、米国特許第４，３７３，０７１号、米国特許第４，４０１，７９６号、米国特許第４，４１５，７３２号、米国特許第４，４５８，０６６号、米国特許第４，５００，７０７号、米国特許第４，６６８，７７７号、米国特許第４，９７３，６７９号、米国特許第５，０４７，５２４号、米国特許第５，１３２，４１８号、米国特許第５，１５３，３１９号、米国特許第５，２６２，５３０号、および同第５，７００，６４２号から当業者に既知であり、これらの開示は、参照によりそれらの全体が組み込まれる。
【０２７６】
いくつかの実施形態では、ｍＲＮＡは、ＲＮＡ骨格修飾を含み得る。典型的には、骨格修飾は、ＲＮＡに含まれるヌクレオチドの骨格のリン酸塩が化学的に修飾される修飾である。例示的な骨格修飾には、典型的には、メチルホスホネート、メチルホスホロアミダイト、ホスホロアミダイト、ホスホロチオエート（例えば、シチジン５’−Ｏ−（１−チオホスフェート））、ボラノホスフェート、正荷電グアニジウム基等からなる群からの修飾が含まれるが、これらに限定されず、これは、ホスホジエステル結合を他のアニオン性基、カチオン性基、または中性基で置き換えることを意味する。
【０２７７】
いくつかの実施形態では、ｍＲＮＡは、糖修飾を含み得る。典型的な糖修飾は、４’−チオ−リボヌクレオチド（例えば、参照により本明細書に組み込まれる米国特許出願公開第ＵＳ２０１６／００３１９２８号を参照のこと）、２’−デオキシ−２’−フルオロ−オリゴリボヌクレオチド（２’−フルオロ−２’−デオキシシチジン５’−三リン酸、２’−フルオロ−２’−デオキシウリジン５’−三リン酸）、２’−デオキシ−２’−デアミン−オリゴリボヌクレオチド（２’−アミノ−２’−デオキシシチジン５’−三リン酸、２’−アミノ−２’−デオキシウリジン５’−三リン酸）、２’−Ｏ−アルキルオリゴリボヌクレオチド、２’−デオキシ−２’−Ｃ−アルキルオリゴリボヌクレオチド（２’−Ｏ−メチルシチジン５’−三リン酸、２’−メチルウリジン５’−三リン酸）、２’−Ｃ−アルキルオリゴリボヌクレオチド、およびそれらの異性体（２’−アラシチジン５’−三リン酸、２’−アラウリジン５’−三リン酸）、またはアジド三リン酸（２’−アジド−２’−デオキシシチジン５’−三リン酸、２’−アジド−２’−デオキシウリジン５’−三リン酸）からなる群から選択される糖修飾を含むが、これらに限定されない、それが含むヌクレオチドの糖の化学的修飾である。
【０２７８】
いくつかの実施形態では、ｍＲＮＡは、ヌクレオチドの塩基の修飾（塩基修飾）を含み得る。塩基修飾を含む修飾ヌクレオチドは、塩基修飾ヌクレオチドとも呼ばれる。かかる塩基修飾ヌクレオチドの例には、２−アミノ−６−クロロプリンリボシド５’−三リン酸、２−アミノアデノシン５’−三リン酸、２−チオシチジン５’−三リン酸、２−チオウリジン５’−三リン酸、４−チオウリジン５’−三リン酸、５−アミノアリルシチジン５’−三リン酸、５−アミノアリルウリジン５’−三リン酸、５−ブロモシチジン５’−三リン酸、５−ブロモウリジン５’−三リン酸、５−ヨードシチジン５’−三リン酸、５−ヨードウリジン５’−三リン酸、５−メチルシチジン５’−三リン酸、５−メチルウリジン５’−三リン酸、６−アザシチジン５’−三リン酸、６−アザウリジン５’−三リン酸、６−クロロプリンリボシド５’−三リン酸、７−デアザアデノシン５’−三リン酸、７−デアザグアノシン５’−三リン酸、８−アザアデノシン５’−三リン酸、８−アジドアデノシン５’−三リン酸、ベンゾイミダゾールリボシド５’−三リン酸、Ｎ１−メチルアデノシン５’−三リン酸、Ｎ１−メチルグアノシン５’−三リン酸、Ｎ６−メチルアデノシン５’−三リン酸、Ｏ６−メチルグアノシン５’−三リン酸、プソイドウリジン５’−三リン酸、ピューロマイシン５’−三リン酸、またはキサントシン５’−三リン酸が挙げられるが、これらに限定されない。
【０２７９】
典型的には、ｍＲＮＡ合成は、Ｎ末端（５’）上への「キャップ」の付加、およびＣ末端（３’）上への「テール」の付加を含む。キャップの存在は、大半の真核細胞で見られるヌクレアーゼへの耐性を提供するのに重要である。「テール」の存在は、ｍＲＮＡをエキソヌクレアーゼ分解から保護する役割を果たす。
【０２８０】
したがって、いくつかの実施形態では、ｍＲＮＡは、５’キャップ構造を含む。５’キャップは、典型的には、以下のように付加される：最初に、ＲＮＡ末端ホスファターゼが５’ヌクレオチドから末端リン酸基のうちの１つを除去して２つの末端リン酸を残し、その後、グアノシン三リン酸（ＧＴＰ）がグアニリルトランスフェラーゼを介して末端リン酸に付加されて５’５’５三リン酸結合をもたらし、その後、グアニンの７−窒素がメチルトランスフェラーゼによりメチル化される。キャップ構造の例には、ｍ７Ｇ（５’）ｐｐｐ（５’）Ａ、Ｇ（５’）ｐｐｐ（５’）Ａ、およびＧ（５’）ｐｐｐ（５’）Ｇが挙げられるが、これらに限定されない。
【０２８１】
いくつかの実施形態では、ｍＲＮＡは、３’ポリ（Ａ）テール構造を含む。ｍＲＮＡの３’末端上のポリ−Ａテールは、典型的には、約１０〜３００個のアデノシンヌクレオチド（例えば、約１０〜２００個のアデノシンヌクレオチド、約１０〜１５０個のアデノシンヌクレオチド、約１０〜１００個のアデノシンヌクレオチド、約２０〜７０個のアデノシンヌクレオチド、または約２０〜６０個のアデノシンヌクレオチド）を含む。いくつかの実施形態では、ｍＲＮＡは、３’ポリ（Ｃ）テール構造を含む。ｍＲＮＡの３’末端上の好適なポリ−Ｃテールは、典型的には、約１０〜２００個のシトシンヌクレオチド（例えば、約１０〜１５０個のシトシンヌクレオチド、約１０〜１００個のシトシンヌクレオチド、約２０〜７０個のシトシンヌクレオチド、約２０〜６０個のシトシンヌクレオチド、または約１０〜４０個のシトシンヌクレオチド）を含む。ポリ−Ｃテールは、ポリ−Ａテールに付加され得るか、またはポリ−Ａテールの代わりになり得る。
【０２８２】
いくつかの実施形態では、ｍＲＮＡは、５’および／または３’非翻訳領域を含む。いくつかの実施形態では、５’非翻訳領域は、ｍＲＮＡの安定性または翻訳に影響を及ぼす要素、例えば、鉄応答性要素を１つ以上含む。いくつかの実施形態では、５’非翻訳領域は、約５０〜５００ヌクレオチド長であり得る。
【０２８３】
いくつかの実施形態では、３’非翻訳領域は、ポリアデニル化シグナル、細胞におけるｍＲＮＡの位置安定性に影響を及ぼすタンパク質の結合部位、またはｍｉＲＮＡの１つ以上の結合部位のうちの１つ以上を含む。いくつかの実施形態では、３’非翻訳領域は、５０〜５００ヌクレオチド長またはそれ以上であり得る。
【０２８４】
キャップ構造
いくつかの実施形態では、ｍＲＮＡは、５’キャップ構造を含む。５’キャップは、典型的には、以下のように付加される：最初に、ＲＮＡ末端ホスファターゼが５’ヌクレオチドから末端リン酸基のうちの１つを除去して２つの末端リン酸を残し、その後、グアノシン三リン酸（ＧＴＰ）がグアニリルトランスフェラーゼを介して末端リン酸に付加されて５’５’５三リン酸結合をもたらし、その後、グアニンの７−窒素がメチルトランスフェラーゼによりメチル化される。キャップ構造の例には、ｍ７Ｇ（５’）ｐｐｐ（５’）Ａ、Ｇ（５’）ｐｐｐ（５’）Ａ、およびＧ（５’）ｐｐｐ（５’）Ｇが挙げられるが、これらに限定されない。
【０２８５】
天然に存在するキャップ構造は、三リン酸架橋により第１の転写ヌクレオチドの５’末端に連結され、結果としてｍ７Ｇ（５’）ｐｐｐ（５’）Ｎ（ここで、Ｎは任意のヌクレオシドである）のジヌクレオチドキャップをもたらす７−メチルグアノシンを含む。インビボでは、キャップは酵素的に付加される。キャップが核に付加され、酵素であるグアニリルトランスフェラーゼによって触媒される。キャップのＲＮＡの５’末端への付加は、転写開始直後に起こる。末端ヌクレオシドは、典型的には、グアノシンであり、全ての他のヌクレオチドに対して逆配向、すなわち、Ｇ（５’）ｐｐｐ（５’）ＧｐＮｐＮｐである。
【０２８６】
インビトロ転写によって産生されるｍＲＮＡの一般的なキャップは、ｍ７Ｇ（５’）ｐｐｐ（５’）Ｇであり、それらの５’末端にキャップ構造を有するＲＮＡを得るためにＴ７またはＳＰ６  ＲＮＡポリメラーゼでのインビトロ転写時にジヌクレオチドキャップとして使用されている。ｃａＰＰＥｄ  ｍＲＮＡのインビトロ合成のための一般的な方法は、転写開始剤として形態ｍ７Ｇ（５’）ｐｐｐ（５’）Ｇ（「ｍ７ＧｐｐｐＧ」）の予め形成されたジヌクレオチドを用いる。
【０２８７】
これまで、インビトロ翻訳実験で使用される合成ジヌクレオチドキャップの通常の形態は、反逆方向キャップ類似体（「ＡＲＣＡ」）または修飾ＡＲＣＡであり、これは、一般に、２’または３’ＯＨ基が−ＯＣＨ３で置き換えられている修飾されたキャップ類似体である。
【０２８８】
追加のキャップ類似体には、ｍ７ＧｐｐｐＧ、ｍ７ＧｐｐｐＡ、ｍ７ＧｐｐｐＣからなる群から選択される化学的構造、非メチル化キャップ類似体（例えば、ＧｐｐｐＧ）、ジメチル化キャップ類似体（例えば、ｍ２，７ＧｐｐｐＧ）、トリメチル化キャップ類似体（例えば、ｍ２，２，７ＧｐｐｐＧ）、ジメチル化対称性キャップ類似体（例えば、ｍ７Ｇｐｐｐｍ７Ｇ）、または反逆方向キャップ類似体（例えば、ＡＲＣＡ、ｍ７，２’ＯｍｅＧｐｐｐＧ、ｍ７２’ｄＧｐｐｐＧ、ｍ７，３’ＯｍｅＧｐｐｐＧ、ｍ７，３’ｄＧｐｐｐＧ、およびそれらの四リン酸誘導体）（例えば、Ｊｅｍｉｅｌｉｔｙ，Ｊ．ｅｔ  ａｌ．，“Ｎｏｖｅｌ‘ａｎｔｉ−ｒｅｖｅｒｓｅ’ｃａｐ  ａｎａｌｏｇｓ  ｗｉｔｈ  ｓｕｐｅｒｉｏｒ  ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌ  ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ”，ＲＮＡ，９：１１０８−１１２２（２００３）を参照のこと）が含まれるが、これらに限定されない。
【０２８９】
いくつかの実施形態では、好適なキャップは、三リン酸架橋により第１の転写ヌクレオチドの５’末端に連結され、結果としてｍ７Ｇ（５’）ｐｐｐ（５’）Ｎ（ここで、Ｎは任意のヌクレオシドである）をもたらす７−メチルグアニル酸（「ｍ７Ｇ」）である。本発明の実施形態で利用されるｍ７Ｇキャップの好ましい実施形態は、ｍ７Ｇ（５’）ｐｐｐ（５’）Ｇである。
【０２９０】
いくつかの実施形態では、キャップは、キャップ０構造である。キャップ０構造は、塩基１および２に結合したリボース２’−Ｏ−メチル残基を欠く。いくつかの実施形態では、キャップは、キャップ１構造である。キャップ１構造は、塩基２に２’−Ｏ−メチル残基を有する。いくつかの実施形態では、キャップは、キャップ２構造である。キャップ２構造は、塩基２および塩基３の両方に結合した２’−Ｏ−メチル残基を有する。
【０２９１】
様々なｍ７Ｇキャップ類似体は当該技術分野で既知であり、それらの多くが商業的に入手可能である。これらには、上述のｍ７ＧｐｐｐＧ、ならびにＡＲＣＡ  ３’−ＯＣＨ３キャップ類似体および２’−ＯＣＨ３キャップ類似体（Ｊｅｍｉｅｌｉｔｙ，Ｊ．ｅｔ  ａｌ．，ＲＮＡ，９：１１０８−１１２２（２００３））が含まれる。本発明の実施形態で使用するための追加のキャップ類似体には、Ｎ７−ベンジル化ジヌクレオシド四リン酸類似体（Ｇｒｕｄｚｉｅｎ，Ｅ．ｅｔ  ａｌ．，ＲＮＡ，１０：１４７９−１４８７（２００４）に記載のもの）、ホスホロチオエートキャップ類似体（Ｇｒｕｄｚｉｅｎ−Ｎｏｇａｌｓｋａ，Ｅ．，ｅｔ  ａｌ．，ＲＮＡ，１３：１７４５−１７５５（２００７）に記載のもの）、および参照により本明細書に組み込まれる米国特許第８，０９３，３６７号および同第８，３０４，５２９号に記載のキャップ類似体（ビオチン化キャップ類似体を含む）が含まれる。
【０２９２】
テール構造
典型的には、「テール」の存在は、ｍＲＮＡをエキソヌクレアーゼ分解から保護する役割を果たす。ポリＡテールは、天然メッセンジャーおよび合成センスＲＮＡを安定させると考えられている。したがって、ある特定の実施形態では、長いポリＡテールがｍＲＮＡ分子に付加されて、結果としてＲＮＡをより安定したものにすることができる。ポリＡテールは、当該技術分野で認識されている様々な技法を使用して付加され得る。例えば、長いポリＡテールは、ポリＡポリメラーゼを使用して合成またはインビトロ転写ＲＮＡに付加され得る（Ｙｏｋｏｅ，ｅｔ  ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ．１９９６；１４：１２５２−１２５６）。転写ベクターも長いポリＡテールをコードすることができる。加えて、ポリＡテールは、ＰＣＲ産物から直接転写によって付加され得る。ポリＡは、ＲＮＡリガーゼを用いてセンスＲＮＡの３’末端にライゲーションされる場合もある（例えば、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ  Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，２ｎｄ  Ｅｄ．，ｅｄ．ｂｙ  Ｓａｍｂｒｏｏｋ，Ｆｒｉｔｓｃｈ  ａｎｄ  Ｍａｎｉａｔｉｓ（Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ：１９９１  ｅｄｉｔｉｏｎ）を参照のこと）。
【０２９３】
いくつかの実施形態では、ｍＲＮＡは、３’ポリ（Ａ）テール構造を含む。典型的には、ポリＡテールの長さは、少なくとも約１０、５０、１００、２００、３００、４００、少なくとも５００ヌクレオチドであり得る。いくつかの実施形態では、ｍＲＮＡの３’末端のポリＡテールは、典型的には、約１０〜３００個のアデノシンヌクレオチド（例えば、約１０〜２００個のアデノシンヌクレオチド、約１０〜１５０個のアデノシンヌクレオチド、約１０〜１００個のアデノシンヌクレオチド、約２０〜７０個のアデノシンヌクレオチド、または約２０〜６０個のアデノシンヌクレオチド）を含む。いくつかの実施形態では、ｍＲＮＡは、３’ポリ（Ｃ）テール構造を含む。ｍＲＮＡの３’末端上の好適なポリ−Ｃテールは、典型的には、約１０〜２００個のシトシンヌクレオチド（例えば、約１０〜１５０個のシトシンヌクレオチド、約１０〜１００個のシトシンヌクレオチド、約２０〜７０個のシトシンヌクレオチド、約２０〜６０個のシトシンヌクレオチド、または約１０〜４０個のシトシンヌクレオチド）を含む。ポリ−Ｃテールは、ポリ−Ａテールに付加され得るか、またはポリ−Ａテールの代わりになり得る。
【０２９４】
いくつかの実施形態では、ポリＡテールまたはポリＣテールの長さが調整されて、本発明の修飾センスｍＲＮＡ分子の安定性、ひいてはタンパク質の転写を制御する。例えば、ポリＡテールの長さがセンスｍＲＮＡ分子の半減期に影響を及ぼし得るため、ポリＡテールの長さが調整されて、ｍＲＮＡのヌクレアーゼに対する耐性レベルを修正し、それにより、標的細胞でのポリヌクレオチド発現および／またはポリペプチド産生の時間経過を制御することができる。
【０２９５】
５’および３’非翻訳領域
いくつかの実施形態では、ｍＲＮＡは、５’および／または３’非翻訳領域を含む。いくつかの実施形態では、５’非翻訳領域は、ｍＲＮＡの安定性または翻訳に影響を及ぼす要素、例えば、鉄応答性要素を１つ以上含む。いくつかの実施形態では、５’非翻訳領域は、約５０〜５００ヌクレオチド長であり得る。
【０２９６】
いくつかの実施形態では、３’非翻訳領域は、ポリアデニル化シグナル、細胞におけるｍＲＮＡの位置安定性に影響を及ぼすタンパク質の結合部位、またはｍｉＲＮＡの１つ以上の結合部位のうちの１つ以上を含む。いくつかの実施形態では、３’非翻訳領域は、５０〜５００ヌクレオチド長またはそれ以上であり得る。
【０２９７】
例示的な３’および／または５’非翻訳配列は、センスｍＲＮＡ分子の安定性を増加させるために、安定しているｍＲＮＡ分子（例えば、グロビン、アクチン、ＧＡＰＤＨ、チューブリン、ヒストン、またはクエン酸サイクル酵素）から得られ得る。例えば、５’非翻訳配列は、ヌクレアーゼ耐性を改善するおよび／またはポリヌクレオチドの半減期を改善するために、ＣＭＶ前初期１（ＩＥ１）遺伝子の部分配列またはその断片を含み得る。ポリヌクレオチドをさらに安定させるために、ヒト成長ホルモン（ｈＧＨ）をコードする配列またはその断片のポリヌクレオチド（例えば、ｍＲＮＡ）の３’末端または非翻訳領域への包含も企図される。概して、これらの修飾は、ポリヌクレオチドの安定性および／または薬物動態特性（例えば、半減期）を、それらの修飾されていない対応物と比較して改善し、例えば、かかるポリヌクレオチドのインビボヌクレアーゼ消化に対する耐性を改善するために行われる修飾を含む。
【０２９８】
カチオン性脂質および核酸の薬学的製剤
ある特定の実施形態では、本明細書に記載のカチオン性脂質（例えば、式（Ｉ）もしくは（ＩＩ）、例えば、式（Ｉａ）〜（１ｈ）および式（ＩＩａ）〜（ＩＩｈ）、または化合物（１）〜（２０）のカチオン性脂質）、ならびにかかる脂質を含む薬学的組成物およびリポソーム組成物が製剤中で使用されて、封入された材料（例えば、ｍＲＮＡ等の１つ以上のポリヌクレオチド）の１つ以上の標的細胞への送達、その後のそのトランスフェクションを促進することができる。例えば、ある特定の実施形態では、本明細書に記載のカチオン性脂質（およびかかる脂質を含むリポソーム組成物等の組成物）は、受容体媒介性エンドサイトーシス、クラスリン媒介性、およびカベオラ媒介性エンドサイトーシス、食作用、およびマクロピノサイトーシス、融合性、エンドソームもしくはリソソーム破壊、および／または他の同様に分類された脂質と比較してかかる化合物の利点をもたらす放出可能な特性のうちの１つ以上をもたらすものとして特徴付けられ得る。
【０２９９】
本発明によれば、本明細書に記載の核酸、例えば、タンパク質をコードするｍＲＮＡ（例えば、タンパク質の全長、断片、または一部分）は、本明細書に記載のカチオン性脂質（例えば、式（Ｉ）もしくは（ＩＩ）、例えば、式（Ｉａ）〜（１ｈ）および式（ＩＩａ）〜（ＩＩｈ）、または化合物（１）〜（２０）のカチオン性脂質）を含む送達ビヒクルにより送達され得る。
【０３００】
本明細書で使用される場合、「送達ビヒクル」、「移入ビヒクル」、「ナノ粒子」という用語、または文法的同義語は、互換的に使用される。
【０３０１】
例えば、本発明は、本明細書に記載のカチオン性脂質（例えば、式（Ｉ）もしくは（ＩＩ）、例えば、式（Ｉａ）〜（１ｈ）および式（ＩＩａ）〜（ＩＩｈ）、または化合物（１）〜（２０）のカチオン性脂質）と、１つ以上のポリヌクレオチドとを含む組成物（例えば、薬学的組成物）を提供する。組成物（例えば、薬学的組成物）は、１つ以上のカチオン性脂質、１つ以上の非カチオン性脂質、１つ以上のコレステロールベースの脂質、および／または１つ以上のＰＥＧ修飾脂質をさらに含み得る。
【０３０２】
ある特定の実施形態では、組成物は、１つ以上の標的細胞をトランスフェクトする能力の増強（例えば、向上）を呈する。したがって、１つ以上の標的細胞をトランスフェクトする方法も本明細書に提供される。かかる方法は、一般に、１つ以上の標的細胞を、本明細書に開示されるカチオン性脂質および／または薬学的組成物（例えば、１つ以上のポリヌクレオチドを封入する、本明細書に記載のカチオン性脂質（例えば、式（Ｉ）もしくは（ＩＩ）、例えば、式（Ｉａ）〜（１ｈ）および式（ＩＩａ）〜（ＩＩｈ）、または化合物（１）〜（２０）のカチオン性脂質）を含むリポソーム製剤）と接触させるステップを含み、これにより、１つ以上の標的細胞がその中に封入された材料（例えば、１つ以上のポリヌクレオチド）でトランスフェクトされるようになる。本明細書で使用される場合、「トランスフェクト」または「トランスフェクション」という用語は、１つ以上の封入された材料（例えば、核酸および／またはポリヌクレオチド）の、細胞、または好ましくは標的細胞への細胞内導入を指す。導入されたポリヌクレオチドは、安定しているか、または標的細胞中で一時的に維持され得る。「トランスフェクション効率」という用語は、トランスフェクションの対象である標的細胞によって取り込まれる、それに導入される、および／またはそれによって発現されるかかる封入された材料（例えば、ポリヌクレオチド）の相対量を指す。実際には、トランスフェクション効率は、トランスフェクション後に標的細胞によって産生されるレポーターポリヌクレオチド産物の量によって推定され得る。ある特定の実施形態では、本明細書に記載の化合物および薬学的組成物は、高いトランスフェクション効率を示し、それにより、封入された材料（例えば、１つ以上のポリヌクレオチド）の適切な投薬量が病態部位に送達され、その後、発現される可能性を改善すると同時に、化合物またはそれらの封入された内容物に関連する潜在的な全身性副作用または毒性を最小限に抑える。
【０３０３】
例えば、本明細書に開示される薬学的組成物またはリポソーム組成物を含む１つ以上の脂質ナノ粒子中に封入されたポリヌクレオチドによる１つ以上の標的細胞のトランスフェクション後、かかるポリヌクレオチドによってコードされた産物（例えば、ポリペプチドまたはタンパク質）の産生は、好ましくは刺激され得、ポリヌクレオチドを発現させ、かつ例えば、目的とするポリペプチドまたはタンパク質を産生するかかる標的細胞の能力が増強される。例えば、ｍＲＮＡを封入する１つ以上の化合物または薬学的組成物による標的細胞のトランスフェクションは、かかるｍＲＮＡによってコードされたタンパク質または酵素の産生を増強する（すなわち、増加させる）。
【０３０４】
さらに、本明細書に記載の送達ビヒクル（例えば、リポソーム送達ビヒクル）は、他の標的組織、細胞、または臓器、例えば、心臓、肺、腎臓、脾臓に優先的に分配されるように調製され得る。複数の実施形態では、本発明の脂質ナノ粒子は、標的細胞および組織への増強された送達を達成するように調製され得る。例えば、本明細書に記載の化合物または薬学的組成物およびリポソーム組成物のうちの１つ以上に封入されたポリヌクレオチド（例えば、ｍＲＮＡ）は、標的細胞または組織に送達され得る、および／またはそれをトランスフェクトし得る。いくつかの実施形態では、封入されたポリヌクレオチド（例えば、ｍＲＮＡ）が発現され、機能的ポリペプチド産物が標的細胞によって産生され（かついくつかの例では排出され）、それにより、有益な特性を、例えば、標的細胞または組織に付与することができる。かかる封入されたポリヌクレオチド（例えば、ｍＲＮＡ）は、例えば、ホルモン、酵素、受容体、ポリペプチド、ペプチド、または他の目的とするタンパク質をコードし得る。
【０３０５】
リポソーム送達ビヒクル
いくつかの実施形態では、組成物は、好適な送達ビヒクルである。複数の実施形態では、組成物は、リポソーム送達ビヒクル、例えば、脂質ナノ粒子である。
【０３０６】
「リポソーム送達ビヒクル」および「リポソーム組成物」という用語は、互換的に使用される。
【０３０７】
リポソーム組成物の本明細書に開示されるカチオン性脂質のうちの１つ以上での濃縮は、毒性を改善する（例えば、低下させる）手段として、またはさもなければ１つ以上の所望の特性（例えば、封入されたポリヌクレオチドの１つ以上の標的細胞への送達の改善および／またはリポソーム組成物のインビボ毒性の低下）をかかる濃縮されたリポソーム組成物に付与する手段として使用され得る。したがって、本明細書に開示されるカチオン性脂質のうちの１つ以上を含む薬学的組成物、具体的には、リポソーム組成物も企図される。
【０３０８】
したがって、ある特定の実施形態では、本明細書に記載の化合物（例えば、式（Ｉ）もしくは（ＩＩ）、例えば、式（Ｉａ）〜（１ｈ）および式（ＩＩａ）〜（ＩＩｈ）、または化合物（１）〜（２０）のカチオン性脂質）は、（例えば、かかる標的細胞の脂質膜を透過するか、またはそれと融合することによって）封入された材料（例えば、１つ以上の治療薬）の１つ以上の標的細胞への送達および放出を促進または増強するためのリポソーム組成物の成分として使用され得るカチオン性脂質である。
【０３０９】
本明細書で使用される場合、リポソーム送達ビヒクル、例えば、脂質ナノ粒子は、通常、１つ以上の二重層の膜によって外部媒体から隔離された内部水空間を有する微細小胞として特徴付けられる。リポソームの二重層膜は、典型的には、空間的に分離された親水性ドメインおよび疎水性ドメインを含む合成起源または天然起源の脂質等の両親媒性分子によって形成される（Ｌａｓｉｃ，Ｔｒｅｎｄｓ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．，１６：３０７−３２１，１９９８）。リポソームの二重層膜は、両親媒性ポリマーおよび界面活性剤（例えば、ポリメロソーム、ニオソーム等）によって形成される場合もある。本発明との関連で、リポソーム送達ビヒクルは、典型的には、所望のｍＲＮＡを標的細胞または組織に輸送する役割を果たす。
【０３１０】
ある特定の実施形態では、かかる組成物（例えば、リポソーム組成物）は、例えば、１つ以上の生物学的に活性なポリヌクレオチド（例えば、ｍＲＮＡ）等の材料を装填しているか、またはそれを封入している。
【０３１１】
複数の実施形態では、組成物（例えば、薬学的組成物）は、リポソーム内に封入されたタンパク質をコードするｍＲＮＡを含む。複数の実施形態では、リポソームは、１つ以上のカチオン性脂質、１つ以上の非カチオン性脂質、１つ以上のコレステロールベースの脂質、および１つ以上のＰＥＧ修飾脂質を含み、少なくとも１つのカチオン性脂質は、本明細書に記載のカチオン性脂質（例えば、式（Ｉ）もしくは（ＩＩ）、例えば、式（Ｉａ）〜（１ｈ）および式（ＩＩａ）〜（ＩＩｈ）、または化合物（１）〜（２０）のカチオン性脂質）である。複数の実施形態では、組成物は、タンパク質（例えば、本明細書に記載のいずれかのタンパク質）をコードするｍＲＮＡを含む。複数の実施形態では、組成物は、嚢胞性線維症膜コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）タンパク質をコードするｍＲＮＡを含む。複数の実施形態では、組成物は、オルニチントランスカルバミラーゼ（ＯＴＣ）タンパク質をコードするｍＲＮＡを含む。
【０３１２】
複数の実施形態では、組成物（例えば、薬学的組成物）は、リポソーム内に封入された核酸を含み、リポソームは、本明細書に記載のいずれかのカチオン性脂質（例えば、式（Ｉ）もしくは（ＩＩ）、例えば、式（Ｉａ）〜（１ｈ）および式（ＩＩａ）〜（ＩＩｈ）、または化合物（１）〜（２０）のカチオン性脂質）を含む。
【０３１３】
複数の実施形態では、核酸は、ペプチドまたはポリペプチドをコードするｍＲＮＡである。複数の実施形態では、ｍＲＮＡは、対象の肺または肺細胞への送達またはその治療で使用するためのペプチドまたはポリペプチドをコードする（例えば、ｍＲＮＡは、嚢胞性線維症膜コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）タンパク質をコードする）。複数の実施形態では、ｍＲＮＡは、対象の肝臓または肝臓細胞への送達またはその治療で使用するためのペプチドまたはポリペプチドをコードする（例えば、ｍＲＮＡは、オルニチントランスカルバミラーゼ（ＯＴＣ）タンパク質をコードする）。なお他の例示的なｍＲＮＡが本明細書に記載される。
【０３１４】
複数の実施形態では、リポソーム送達ビヒクル（例えば、脂質ナノ粒子）は、正味の正電荷を有し得る。
【０３１５】
複数の実施形態では、リポソーム送達ビヒクル（例えば、脂質ナノ粒子）は、正味の負電荷を有し得る。
【０３１６】
複数の実施形態では、リポソーム送達ビヒクル（例えば、脂質ナノ粒子）は、正味の中性電荷を有し得る。
【０３１７】
複数の実施形態では、核酸（例えば、ペプチドまたはポリペプチドをコードするｍＲＮＡ）を封入する脂質ナノ粒子は、本明細書に記載の１つ以上のカチオン性脂質（例えば、式（Ｉ）もしくは（ＩＩ）、例えば、式（Ｉａ）〜（１ｈ）および式（ＩＩａ）〜（ＩＩｈ）、または化合物（１）〜（２０）のカチオン性脂質）を含む。
【０３１８】
例えば、組成物中の本明細書に記載のカチオン性脂質（例えば、式（Ｉ）もしくは（ＩＩ）、例えば、式（Ｉａ）〜（１ｈ）および式（ＩＩａ）〜（ＩＩｈ）、または化合物（１）〜（２０）のカチオン性脂質）の量は、組成物の全ての脂質の組み合わせられた乾燥重量（例えば、リポソーム組成物中に存在する全ての脂質の組み合わせられた乾燥重量）のパーセンテージ（「重量％」）として記載され得る。
【０３１９】
本明細書に記載の薬学的組成物の実施形態では、本明細書に記載のカチオン性脂質（例えば、式（Ｉ）もしくは（ＩＩ）、例えば、式（Ｉａ）〜（１ｈ）および式（ＩＩａ）〜（ＩＩｈ）、または化合物（１）〜（２０）のカチオン性脂質）は、組成物（例えば、リポソーム組成物）中に存在する全ての脂質の組み合わせられた乾燥重量の約０．５重量％〜約３０重量％（例えば、約０．５重量％〜約２０重量％）の量で存在する。
【０３２０】
複数の実施形態では、本明細書に記載のカチオン性脂質（例えば、式（Ｉ）もしくは（ＩＩ）、例えば、式（Ｉａ）〜（１ｈ）および式（ＩＩａ）〜（ＩＩｈ）、または化合物（１）〜（２０）のカチオン性脂質）は、組成物（例えば、リポソーム組成物）中に存在する全ての脂質の組み合わせられた乾燥重量の約１重量％〜約３０重量％、約１重量％〜約２０重量％、約１重量％〜約１５重量％、約１重量％〜約１０重量％、または約５重量％〜約２５重量％の量で存在する。複数の実施形態では、本明細書に記載のカチオン性脂質（例えば、式（Ｉ）もしくは（ＩＩ）、例えば、式（Ｉａ）〜（１ｈ）および式（ＩＩａ）〜（ＩＩｈ）、または化合物（１）〜（２０）のカチオン性脂質）は、リポソーム送達ビヒクル等の組成物中に存在する全ての脂質の組み合わせられたモル量の約０．５重量％〜約５重量％、約１重量％〜約１０重量％、約５重量％〜約２０重量％、または約１０重量％〜約２０重量％の量で存在する。
【０３２１】
複数の実施形態では、本明細書に記載のカチオン性脂質（例えば、式（Ｉ）もしくは（ＩＩ）、例えば、式（Ｉａ）〜（１ｈ）および式（ＩＩａ）〜（ＩＩｈ）、または化合物（１）〜（２０）のカチオン性脂質）の量は、組成物（例えば、リポソーム組成物）中の総脂質の組み合わせられた乾燥重量の少なくとも約５重量％、約１０重量％、約１５重量％、約２０重量％、約２５重量％、約３０重量％、約３５重量％、約４０重量％、約４５重量％、約５０重量％、約５５重量％、約６０重量％、約６５重量％、約７０重量％、約７５重量％、約８０重量％、約８５重量％、約９０重量％、約９５重量％、約９６重量％、約９７重量％、約９８重量％、または約９９重量％の量で存在する。
【０３２２】
複数の実施形態では、本明細書に記載のカチオン性脂質（例えば、式（Ｉ）もしくは（ＩＩ）、例えば、式（Ｉａ）〜（１ｈ）および式（ＩＩａ）〜（ＩＩｈ）、または化合物（１）〜（２０）のカチオン性脂質）は、組成物（例えば、リポソーム組成物）中の総脂質の組み合わせられた乾燥重量の約５重量％、約１０重量％、約１５重量％、約２０重量％、約２５重量％、約３０重量％、約３５重量％、約４０重量％、約４５重量％、約５０重量％、約５５重量％、約６０重量％、約６５重量％、約７０重量％、約７５重量％、約８０重量％、約８５重量％、約９０重量％、約９５重量％、約９６重量％、約９７重量％、約９８重量％、または約９９重量％以下の量で存在する。
【０３２３】
複数の実施形態では、組成物（例えば、脂質ナノ粒子等のリポソーム送達ビヒクル）は、約０．１重量％〜約２０重量％（例えば、約０．１重量％〜約１５重量％）の本明細書に記載のカチオン性脂質（例えば、式（Ｉ）もしくは（ＩＩ）、例えば、式（Ｉａ）〜（１ｈ）および式（ＩＩａ）〜（ＩＩｈ）、または化合物（１）〜（２０）のカチオン性脂質）を含む。複数の実施形態では、送達ビヒクル（例えば、脂質ナノ粒子等のリポソーム送達ビヒクル）は、約０．５重量％、約１重量％、約３重量％、約５重量％、または約１０重量％の本明細書に記載のカチオン性脂質（例えば、式（Ｉ）もしくは（ＩＩ）、例えば、式（Ｉａ）〜（１ｈ）および式（ＩＩａ）〜（ＩＩｈ）、または化合物（１）〜（２０）のカチオン性脂質）を含む。複数の実施形態では、送達ビヒクル（例えば、脂質ナノ粒子等のリポソーム送達ビヒクル）は、最大約０．５重量％、約１重量％、約３重量％、約５重量％、約１０重量％、約１５重量％、または約２０重量％の本明細書に記載のカチオン性脂質（例えば、式（Ｉ）もしくは（ＩＩ）、例えば、式（Ｉａ）〜（１ｈ）および式（ＩＩａ）〜（ＩＩｈ）、または化合物（１）〜（２０）のカチオン性脂質）を含む。複数の実施形態では、このパーセンテージにより、改善された有益な効果（例えば、肝臓または肺等の標的組織への送達の改善）がもたらされる。
【０３２４】
組成物中の本明細書に記載のカチオン性脂質（例えば、式（Ｉ）もしくは（ＩＩ）、例えば、式（Ｉａ）〜（１ｈ）および式（ＩＩａ）〜（ＩＩｈ）、または化合物（１）〜（２０）のカチオン性脂質）の量は、組成物の総脂質の組み合わせられたモル量（例えば、リポソーム送達ビヒクル中に存在する全ての脂質の組み合わせられたモル量）のパーセンテージ（「モル％」）としても記載される。
【０３２５】
本明細書に記載の薬学的組成物の実施形態では、本明細書に記載のカチオン性脂質（例えば、式（Ｉ）もしくは（ＩＩ）、例えば、式（Ｉａ）〜（１ｈ）および式（ＩＩａ）〜（ＩＩｈ）、または化合物（１）〜（２０）のカチオン性脂質）は、リポソーム送達ビヒクル等の組成物中に存在する全ての脂質の組み合わせられたモル量の約０．５モル％〜約３０モル％（例えば、約０．５モル％〜約２０モル％）の量で存在する。
【０３２６】
複数の実施形態では、本明細書に記載のカチオン性脂質（例えば、式（Ｉ）もしくは（ＩＩ）、例えば、式（Ｉａ）〜（１ｈ）および式（ＩＩａ）〜（ＩＩｈ）、または化合物（１）〜（２０）のカチオン性脂質）は、リポソーム送達ビヒクル等の組成物中に存在する全ての脂質の組み合わせられたモル量の約０．５モル％〜約５モル％、約１モル％〜約１０モル％、約５モル％〜約２０モル％、または約１０モル％〜約２０モル％の量で存在する。複数の実施形態では、本明細書に記載のカチオン性脂質（例えば、式（Ｉ）もしくは（ＩＩ）、例えば、式（Ｉａ）〜（１ｈ）および式（ＩＩａ）〜（ＩＩｈ）、または化合物（１）〜（２０）のカチオン性脂質）は、リポソーム送達ビヒクル等の組成物中に存在する全ての脂質の組み合わせられた乾燥重量の約１モル％〜約３０モル％、約１モル％〜約２０モル％、約１モル％〜約１５モル％、約１モル％〜約１０モル％、または約５モル％〜約２５モル％の量で存在する。
【０３２７】
ある特定の実施形態では、本明細書に記載のカチオン性脂質（例えば、式（Ｉ）もしくは（ＩＩ）、例えば、式（Ｉａ）〜（１ｈ）および式（ＩＩａ）〜（ＩＩｈ）、または化合物（１）〜（２０）のカチオン性脂質）は、組成物（例えば、リポソーム送達ビヒクル）中の総脂質量の約０．１モル％〜約５０モル％、または０．５モル％〜約５０モル％、または約１モル％〜約２５モル％、または約１モル％〜約１０モル％を構成し得る。
【０３２８】
ある特定の実施形態では、本明細書に記載のカチオン性脂質（例えば、式（Ｉ）もしくは（ＩＩ）、例えば、式（Ｉａ）〜（１ｈ）および式（ＩＩａ）〜（ＩＩｈ）、または化合物（１）〜（２０）のカチオン性脂質）は、脂質ナノ粒子中の総脂質量の約０．１モル％超、または約０．５モル％超、または約１モル％超、または約５モル％超を構成し得る。
【０３２９】
ある特定の実施形態では、本明細書に記載のカチオン性脂質（例えば、式（Ｉ）もしくは（ＩＩ）、例えば、式（Ｉａ）〜（１ｈ）および式（ＩＩａ）〜（ＩＩｈ）、または化合物（１）〜（２０）のカチオン性脂質）は、組成物（例えば、リポソーム送達ビヒクル）中の総脂質量の約２５モル％未満、または約１０モル％未満、または約５モル％未満、または約１モル％未満を構成し得る。
【０３３０】
複数の実施形態では、本明細書に記載のカチオン性脂質（例えば、式（Ｉ）もしくは（ＩＩ）、例えば、式（Ｉａ）〜（１ｈ）および式（ＩＩａ）〜（ＩＩｈ）、または化合物（１）〜（２０）のカチオン性脂質）の量は、組成物（例えば、リポソーム組成物）中の総脂質の組み合わせられた乾燥重量の少なくとも約５モル％、約１０モル％、約１５モル％、約２０モル％、約２５モル％、約３０モル％、約３５モル％、約４０モル％、約４５モル％、約５０モル％、約５５モル％、約６０モル％、約６５モル％、約７０モル％、約７５モル％、約８０モル％、約８５モル％、約９０モル％、約９５モル％、約９６モル％、約９７モル％、約９８モル％、または約９９モル％の量で存在する。
【０３３１】
複数の実施形態では、本明細書に記載のカチオン性脂質（例えば、式（Ｉ）もしくは（ＩＩ）、例えば、式（Ｉａ）〜（１ｈ）および式（ＩＩａ）〜（ＩＩｈ）、または化合物（１）〜（２０）のカチオン性脂質）の量は、組成物（例えば、リポソーム組成物）中の総脂質の組み合わせられた乾燥重量約５モル％、約１０モル％、約１５モル％、約２０モル％、約２５モル％、約３０モル％、約３５モル％、約４０モル％、約４５モル％、約５０モル％、約５５モル％、約６０モル％、約６５モル％、約７０モル％、約７５モル％、約８０モル％、約８５モル％、約９０モル％、約９５モル％、約９６モル％、約９７モル％、約９８モル％、または約９９モル％以下の量で存在する。
【０３３２】
複数の実施形態では、このパーセンテージにより、改善された有益な効果（例えば、肝臓または肺等の標的組織への送達の改善）がもたらされる。
【０３３３】
複数の実施形態では、組成物は、もう１つの脂質（例えば、１つ以上のカチオン性脂質、１つ以上の非カチオン性脂質、および１つ以上のＰＥＧ修飾脂質からなる群から選択されるもう１つの脂質）をさらに含む。
【０３３４】
ある特定の実施形態では、かかる薬学的組成物（例えば、リポソーム組成物）は、ＰＥＧ修飾脂質、非カチオン性脂質、およびコレステロール脂質のうちの１つ以上を含む。複数の実施形態では、かかる薬学的組成物（例えば、リポソーム組成物）は、１つ以上のＰＥＧ修飾脂質、１つ以上の非カチオン性脂質、および１つ以上のコレステロール脂質を含む。複数の実施形態では、かかる薬学的組成物（例えば、リポソーム組成物）は、１つ以上のＰＥＧ修飾脂質および１つ以上のコレステロール脂質を含む。
【０３３５】
複数の実施形態では、核酸（例えば、ペプチドまたはポリペプチドをコードするｍＲＮＡ）を封入する組成物（例えば、脂質ナノ粒子）は、本明細書に記載の１つ以上のカチオン性脂質（例えば、式（Ｉ）もしくは（ＩＩ）、例えば、式（Ｉａ）〜（１ｈ）および式（ＩＩａ）〜（ＩＩｈ）、または化合物（１）〜（２０）のカチオン性脂質）と、カチオン性脂質、非カチオン性脂質、およびＰＥＧ化脂質からなる群から選択される１つ以上の脂質とを含む。
【０３３６】
複数の実施形態では、核酸（例えば、ペプチドまたはポリペプチドをコードするｍＲＮＡ）を封入する組成物（例えば、脂質ナノ粒子）は、本明細書に記載の１つ以上のカチオン性脂質（例えば、式（Ｉ）もしくは（ＩＩ）、例えば、式（Ｉａ）〜（１ｈ）および式（ＩＩａ）〜（ＩＩｈ）、または化合物（１）〜（２０）のカチオン性脂質）と、カチオン性脂質、非カチオン性脂質、およびＰＥＧ化脂質からなる群から選択される１つ以上の脂質とを含み、コレステロールベースの脂質をさらに含む。
【０３３７】
複数の実施形態では、核酸（例えば、ペプチドまたはポリペプチドをコードするｍＲＮＡ）を封入する脂質ナノ粒子は、本明細書に記載の１つ以上のカチオン性脂質（例えば、式（Ｉ）もしくは（ＩＩ）、例えば、式（Ｉａ）〜（１ｈ）および式（ＩＩａ）〜（ＩＩｈ）、または化合物（１）〜（２０）のカチオン性脂質）と、カチオン性脂質、非カチオン性脂質、ＰＥＧ化脂質、およびコレステロールベースの脂質からなる群から選択される１つ以上の脂質とを含む。
【０３３８】
様々な実施形態によれば、脂質ナノ粒子を含むカチオン性脂質、非カチオン性脂質、および／またはＰＥＧ修飾脂質の選択、ならびにかかる脂質の互いに対する相対モル割合の選択は、選択される脂質（複数可）の特徴、対象とする標的細胞の性質、送達されるｍＲＮＡの特徴に基づく。さらなる考慮すべき事項には、例えば、選択される脂質（複数可）のアルキル鎖の飽和度、ならびにサイズ、電荷、ｐＨ、ｐＫａ、融合性、および毒性が含まれる。したがって、モル比は、適宜に調整され得る。
【０３３９】
さらなるカチオン性脂質
本明細書に記載のカチオン性脂質（例えば、式（Ｉ）もしくは（ＩＩ）、例えば、式（Ｉａ）〜（１ｈ）および式（ＩＩａ）〜（ＩＩｈ）、または化合物（１）〜（２０）のカチオン性脂質）のうちのいずれかに加えて、組成物は、１つ以上のさらなるカチオン性脂質を含み得る。
【０３４０】
いくつかの実施形態では、リポソームは、１つ以上のさらなるカチオン性脂質を含み得る。本明細書で使用される場合、「カチオン性脂質」という語句は、生理学的ｐＨ等の選択されたｐＨで正味の正電荷を有するいくつかの脂質種のうちのいずれかを指す。いくつかのカチオン性脂質は文献に記載されており、それらの多くは市販されている。
【０３４１】
【０３４２】
本組成物における使用に好適な追加のカチオン性脂質には、参照により本明細書に組み込まれる国際特許公開第ＷＯ２０１０／１４４７４０号に記載のカチオン性脂質が含まれる。ある特定の実施形態では、本組成物は、以下の化合物構造を有するカチオン性脂質４−（ジメチルアミノ）ブタン酸（６Ｚ，９Ｚ，２８Ｚ，３１Ｚ）−ヘプタトリアコンタ−６，９，２８，３１−テトラエン−１９−イル、
【化１００】
2021525743.tif 000106
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【０３４３】
本組成物における使用に好適な他のカチオン性脂質には、参照により本明細書に組み込まれる国際特許公開第ＷＯ２０１３／１４９１４０号に記載のイオン化可能なカチオン性脂質が含まれる。いくつかの実施形態では、本組成物は、以下の式のうちの１つのカチオン性脂質、
【化１０１】
2021525743.tif 000107
またはその薬学的に許容される塩を含み、式中、Ｒ１およびＲ２が各々独立して、水素、任意に置換される可変飽和または不飽和Ｃ１−Ｃ２０アルキル、および任意に置換される可変飽和または不飽和Ｃ６−Ｃ２０アシルからなる群から選択され、Ｌ１およびＬ２が各々独立して、水素、任意に置換されるＣ１−Ｃ３０アルキル、任意に置換される可変不飽和Ｃ１−Ｃ３０アルケニル、および任意に置換されるＣ１−Ｃ３０アルキニルからなる群から選択され、ｍおよびｏが各々独立して、ゼロおよび任意の正の整数（例えば、ｍが３である）からなる群から選択され、ｎが、ゼロまたは任意の正の整数（例えば、ｎが１である）である。ある特定の実施形態では、本組成物は、以下の化合物構造を有するカチオン性脂質（１５Ｚ，１８Ｚ）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−６−（９Ｚ，１２Ｚ）−オクタデカ−９，１２−ジエン−ｌ−イル）テトラコサ−１５，１８−ジエン−１−アミン（「ＨＧＴ５０００」）、
【化１０２】
2021525743.tif 000108
およびその薬学的に許容される塩を含む。ある特定の実施形態では、本組成物は、以下の化合物構造を有するカチオン性脂質（１５Ｚ，１８Ｚ）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−６−（（９Ｚ，１２Ｚ）−オクタデカ−９，１２−ジエン−１−イル）テトラコサ−４，１５，１８−トリエン−ｌ−アミン（「ＨＧＴ５００１」）、
【化１０３】
2021525743.tif 000109
およびその薬学的に許容される塩を含む。ある特定の実施形態では、本組成物は、以下の化合物構造を有するカチオン性脂質および（１５Ｚ，１８Ｚ）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−６−（（９Ｚ，１２Ｚ）−オクタデカ−９，１２−ジエン−１−イル）テトラコサ−５，１５，１８−トリエン−１−アミン（「ＨＧＴ５００２」）、
【化１０４】
2021525743.tif 000110
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【０３４４】
本組成物における使用に好適な他のカチオン性脂質には、参照により本明細書に組み込まれる国際特許公開第ＷＯ２０１０／０５３５７２号にアミノアルコールリピドイドとして記載のカチオン性脂質が含まれる。ある特定の実施形態では、本組成物は、以下の化合物構造を有するカチオン性脂質、
【化１０５】
2021525743.tif 000111
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【０３４５】
本組成物における使用に好適な他のカチオン性脂質には、参照により本明細書に組み込まれる国際特許公開第ＷＯ２０１６／１１８７２５号に記載のカチオン性脂質が含まれる。ある特定の実施形態では、本組成物は、以下の化合物構造を有するカチオン性脂質、
【化１０６】
2021525743.tif 000112
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【０３４６】
本組成物における使用に好適な他のカチオン性脂質には、参照により本明細書に組み込まれる国際特許公開第ＷＯ２０１６／１１８７２４号に記載のカチオン性脂質が含まれる。ある特定の実施形態では、本組成物は、以下の化合物構造を有するカチオン性脂質、
【化１０７】
2021525743.tif 000113
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【０３４７】
本組成物における使用に好適な他のカチオン性脂質には、１４，２５−ジトリデシル１５，１８，２１，２４−テトラアザ−オクタトリアコンタンの式を有するカチオン性脂質、およびその薬学的に許容される塩が含まれる。
【０３４８】
本組成物における使用に好適な他のカチオン性脂質には、参照により本明細書に組み込まれる国際特許公開第ＷＯ２０１３／０６３４６８号および国際特許公開第ＷＯ２０１６／２０５６９１号に記載のカチオン性脂質が含まれる。いくつかの実施形態では、本組成物は、以下の式のカチオン性脂質、
【化１０８】
2021525743.tif 000114
またはその薬学的に許容される塩を含み、式中、ＲＬの各例は独立して、任意に置換されるＣ６−Ｃ４０アルケニルである。ある特定の実施形態では、本組成物は、以下の化合物構造を有するカチオン性脂質、
【化１０９】
2021525743.tif 000115
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【０３４９】
ある特定の実施形態では、本組成物は、以下の化合物構造を有するカチオン性脂質、
【化１１０】
2021525743.tif 000116
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【０３５０】
ある特定の実施形態では、本組成物は、以下の化合物構造を有するカチオン性脂質、
【化１１１】
2021525743.tif 000117
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【０３５１】
ある特定の実施形態では、本組成物は、以下の化合物構造を有するカチオン性脂質、
【化１１２】
2021525743.tif 000118
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【０３５２】
本組成物における使用に好適な他のカチオン性脂質には、参照により本明細書に組み込まれる国際特許公開第ＷＯ２０１５／１８４２５６号に記載のカチオン性脂質が含まれる。いくつかの実施形態では、本組成物は、以下の式のカチオン性脂質、
【化１１３】
2021525743.tif 000119
またはその薬学的に許容される塩を含み、式中、Ｘは各々独立して、ＯまたはＳであり、Ｙは各々独立して、ＯまたはＳであり、ｍは各々独立して、０〜２０であり、ｎは各々独立して、１〜６であり、ＲＡは各々独立して、水素、任意に置換されるＣ１−５０アルキル、任意に置換されるＣ２−５０アルケニル、任意に置換されるＣ２−５０アルキニル、任意に置換されるＣ３−１０カルボシクリル、任意に置換される３〜１４員ヘテロシクリル、任意に置換されるＣ６−１４アリール、任意に置換される５〜１４員ヘテロアリール、またはハロゲンであり、ＲＢは各々独立して、水素、任意に置換されるＣ１−５０アルキル、任意に置換されるＣ２−５０アルケニル、任意に置換されるＣ２−５０アルキニル、任意に置換されるＣ３−１０カルボシクリル、任意に置換される３〜１４員ヘテロシクリル、任意に置換されるＣ６−１４アリール、任意に置換される５〜１４員ヘテロアリール、またはハロゲンである。ある特定の実施形態では、本組成物は、以下の化合物構造を有するカチオン性脂質「ターゲット２３」、
【化１１４】
2021525743.tif 000120
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【０３５３】
本組成物における使用に好適な他のカチオン性脂質には、参照により本明細書に組み込まれる国際特許公開第ＷＯ２０１６／００４２０２号に記載のカチオン性脂質が含まれる。いくつかの実施形態では、本組成物は、以下の化合物構造を有するカチオン性脂質、
【化１１５】
2021525743.tif 000121
またはその薬学的に許容される塩を含む。
【０３５４】
いくつかの実施形態では、本組成物は、以下の化合物構造を有するカチオン性脂質、
【化１１６】
2021525743.tif 000122
またはその薬学的に許容される塩を含む。
【０３５５】
いくつかの実施形態では、本組成物は、以下の化合物構造を有するカチオン性脂質、
【化１１７】
2021525743.tif 000123
またはその薬学的に許容される塩を含む。
【０３５６】
本組成物における使用に好適な他のカチオン性脂質には、参照により本明細書に組み込まれる、Ｊ．ＭｃＣｌｅｌｌａｎ，Ｍ．Ｃ．Ｋｉｎｇ，Ｃｅｌｌ  ２０１０，１４１，２１０−２１７およびＷｈｉｔｅｈｅａｄ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ（２０１４）５：４２７７に記載のカチオン性脂質が含まれる。ある特定の実施形態では、本組成物のカチオン性脂質は、以下の化合物構造を有するカチオン性脂質、
【化１１８】
2021525743.tif 000124
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【０３５７】
本組成物における使用に好適な他のカチオン性脂質には、参照により本明細書に組み込まれる国際特許公開第ＷＯ２０１５／１９９９５２号に記載のカチオン性脂質が含まれる。いくつかの実施形態では、本組成物は、以下の化合物構造を有するカチオン性脂質、
【化１１９】
2021525743.tif 000125
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【０３５８】
いくつかの実施形態では、本組成物は、以下の化合物構造を有するカチオン性脂質、
【化１２０】
2021525743.tif 000126
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【０３５９】
いくつかの実施形態では、本組成物は、以下の化合物構造を有するカチオン性脂質、
【化１２１】
2021525743.tif 000127
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【０３６０】
いくつかの実施形態では、本組成物は、以下の化合物構造を有するカチオン性脂質、
【化１２２】
2021525743.tif 000128
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【０３６１】
いくつかの実施形態では、本組成物は、以下の化合物構造を有するカチオン性脂質、
【化１２３】
2021525743.tif 000129
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【０３６２】
いくつかの実施形態では、本組成物は、以下の化合物構造を有するカチオン性脂質、
【化１２４】
2021525743.tif 000130
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【０３６３】
いくつかの実施形態では、本組成物は、以下の化合物構造を有するカチオン性脂質、
【化１２５】
2021525743.tif 000131
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【０３６４】
いくつかの実施形態では、本組成物は、以下の化合物構造を有するカチオン性脂質、
【化１２６】
2021525743.tif 000132
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【０３６５】
いくつかの実施形態では、本組成物は、以下の化合物構造を有するカチオン性脂質、
【化１２７】
2021525743.tif 000133
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【０３６６】
いくつかの実施形態では、本組成物は、以下の化合物構造を有するカチオン性脂質、
【化１２８】
2021525743.tif 000134
【０３６７】
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【０３６８】
いくつかの実施形態では、本組成物は、以下の化合物構造を有するカチオン性脂質、
【化１２９】
2021525743.tif 000135
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【０３６９】
いくつかの実施形態では、本組成物は、以下の化合物構造を有するカチオン性脂質、
【化１３０】
2021525743.tif 000136
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【０３７０】
いくつかの実施形態では、本組成物は、以下の化合物構造を有するカチオン性脂質、
【化１３１】
2021525743.tif 000137
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【０３７１】
本組成物における使用に好適な他のカチオン性脂質には、参照により本明細書に組み込まれる国際特許公開第ＷＯ２０１７／００４１４３号に記載されるカチオン性脂質が含まれる。
【０３７２】
いくつかの実施形態では、本組成物は、以下の化合物構造を有するカチオン性脂質、
【化１３２】
2021525743.tif 000138
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【０３７３】
いくつかの実施形態では、本組成物は、以下の化合物構造を有するカチオン性脂質、
【化１３３】
2021525743.tif 000139
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【０３７４】
いくつかの実施形態では、本組成物は、以下の化合物構造を有するカチオン性脂質、
【化１３４】
2021525743.tif 000140
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【０３７５】
いくつかの実施形態では、本組成物は、以下の化合物構造を有するカチオン性脂質、
【化１３５】
2021525743.tif 000141
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【０３７６】
いくつかの実施形態では、本組成物は、以下の化合物構造を有するカチオン性脂質、
【化１３６】
2021525743.tif 000142
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【０３７７】
いくつかの実施形態では、本組成物は、以下の化合物構造を有するカチオン性脂質、
【化１３７】
2021525743.tif 000143
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【０３７８】
いくつかの実施形態では、本組成物は、以下の化合物構造を有するカチオン性脂質、
【化１３８】
2021525743.tif 000144
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【０３７９】
いくつかの実施形態では、本組成物は、以下の化合物構造を有するカチオン性脂質、
【化１３９】
2021525743.tif 000145
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【０３８０】
いくつかの実施形態では、本組成物は、以下の化合物構造を有するカチオン性脂質、
【化１４０】
2021525743.tif 000146
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【０３８１】
いくつかの実施形態では、本組成物は、以下の化合物構造を有するカチオン性脂質、
【化１４１】
2021525743.tif 000147
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【０３８２】
いくつかの実施形態では、本組成物は、以下の化合物構造を有するカチオン性脂質、
【化１４２】
2021525743.tif 000148
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【０３８３】
いくつかの実施形態では、本組成物は、以下の化合物構造を有するカチオン性脂質、
【化１４３】
2021525743.tif 000149
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【０３８４】
いくつかの実施形態では、本組成物は、以下の化合物構造を有するカチオン性脂質、
【化１４４】
2021525743.tif 000150
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【０３８５】
いくつかの実施形態では、本組成物は、以下の化合物構造を有するカチオン性脂質、
【化１４５】
2021525743.tif 000151
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【０３８６】
いくつかの実施形態では、本組成物は、以下の化合物構造を有するカチオン性脂質、
【化１４６】
2021525743.tif 000152
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【０３８７】
いくつかの実施形態では、本組成物は、以下の化合物構造を有するカチオン性脂質、
【化１４７】
2021525743.tif 000153
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【０３８８】
いくつかの実施形態では、本組成物は、以下の化合物構造を有するカチオン性脂質、
【化１４８】
2021525743.tif 000154
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【０３８９】
本組成物における使用に好適な他のカチオン性脂質には、参照により本明細書に組み込まれる国際特許公開第ＷＯ２０１７／０７５５３１号に記載のカチオン性脂質が含まれる。いくつかの実施形態では、本組成物は、以下の式のカチオン性脂質、
【化１４９】
2021525743.tif 000155
またはその薬学的に許容される塩を含み、式中、Ｌ１またはＬ２の一方は、−Ｏ（Ｃ＝Ｏ）−、−（Ｃ＝Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｏ−、−Ｓ（Ｏ）ｘ、−Ｓ−Ｓ−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｓ−、−ＳＣ（＝Ｏ）−、−ＮＲａＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲａ−、ＮＲａＣ（＝Ｏ）ＮＲａ−、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＲａ−、または−ＮＲａＣ（＝Ｏ）Ｏ−であり、Ｌ１またはＬ２の他方は、−Ｏ（Ｃ＝Ｏ）−、−（Ｃ＝Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｏ−、−Ｓ（Ｏ）ｘ、−Ｓ−Ｓ−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｓ−、ＳＣ（＝Ｏ）−、−ＮＲａＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲａ−、ＮＲａＣ（＝Ｏ）ＮＲａ−、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＲａ−または−ＮＲａＣ（＝Ｏ）Ｏ−または直接結合であり、Ｇ１およびＧ２は各々独立して、非置換Ｃ１−Ｃ１２アルキレンまたはＣ１−Ｃ１２アルケニレンであり、Ｇ３は、Ｃ１−Ｃ２４アルキレン、Ｃ１−Ｃ２４アルケニレン、Ｃ３−Ｃ８シクロアルキレン、Ｃ３−Ｃ８シクロアルケニレンであり、Ｒａは、ＨまたはＣ１−Ｃ１２アルキルであり、Ｒ１およびＲ２は各々独立して、Ｃ６−Ｃ２４アルキルまたはＣ６−Ｃ２４アルケニルであり、Ｒ３は、Ｈ、ＯＲ５、ＣＮ、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ４、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ４または−ＮＲ５Ｃ（＝Ｏ）Ｒ４であり、Ｒ４は、Ｃ１−Ｃ１２アルキルであり、Ｒ５は、ＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルであり、ｘは、０、１、または２である。
【０３９０】
本組成物における使用に好適な他のカチオン性脂質には、参照により本明細書に組み込まれる国際特許公開第ＷＯ２０１７／１１７５２８号に記載のカチオン性脂質が含まれる。いくつかの実施形態では、本組成物は、以下の化合物構造を有するカチオン性脂質、
【化１５０】
2021525743.tif 000156
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【０３９１】
いくつかの実施形態では、本組成物は、以下の化合物構造を有するカチオン性脂質、
【化１５１】
2021525743.tif 000157
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【０３９２】
いくつかの実施形態では、本組成物は、以下の化合物構造を有するカチオン性脂質、
【化１５２】
2021525743.tif 000158
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【０３９３】
本組成物における使用に好適な他のカチオン性脂質には、参照により本明細書に組み込まれる国際特許公開第ＷＯ２０１７／０４９２４５号に記載のカチオン性脂質が含まれる。いくつかの実施形態では、本発明の組成物および方法のカチオン性脂質は、以下の式のうちの１つの化合物、
【化１５３】
2021525743.tif 000159
およびその薬学的に許容される塩を含む。これらの４つの式のうちのいずれか１つについて、Ｒ４は独立して、−（ＣＨ２）ｎＱおよび−（ＣＨ２）ｎＣＨＱＲから選択され、Ｑは、ＯＲ、−ＯＨ、−Ｏ（ＣＨ２）ｎＮ（Ｒ）２、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ、−ＣＸ３、−ＣＮ、−Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）Ｒ、−Ｎ（Ｈ）Ｃ（Ｏ）Ｒ、−Ｎ（Ｒ）Ｓ（Ｏ）２Ｒ、−Ｎ（Ｈ）Ｓ（Ｏ）２Ｒ、−Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２、−Ｎ（Ｈ）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２、−Ｎ（Ｈ）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｈ）（Ｒ）、−Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｓ）Ｎ（Ｒ）２、−Ｎ（Ｈ）Ｃ（Ｓ）Ｎ（Ｒ）２、−Ｎ（Ｈ）Ｃ（Ｓ）Ｎ（Ｈ）（Ｒ）、および複素環からなる群から選択され、Ｒは独立して、Ｃ１−３アルキル、Ｃ２−３アルケニル、およびＨからなる群から選択され、ｎは、１、２、または３である。
【０３９４】
ある特定の実施形態では、本組成物は、以下の化合物構造を有するカチオン性脂質、
【化１５４】
2021525743.tif 000160
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【０３９５】
ある特定の実施形態では、本組成物は、以下の化合物構造を有するカチオン性脂質、
【化１５５】
2021525743.tif 000161
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【０３９６】
ある特定の実施形態では、本組成物は、以下の化合物構造を有するカチオン性脂質、
【化１５６】
2021525743.tif 000162
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【０３９７】
ある特定の実施形態では、本組成物は、以下の化合物構造を有するカチオン性脂質、
【化１５７】
2021525743.tif 000163
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【０３９８】
本組成物における使用に好適な他のカチオン性脂質には、各々参照により本明細書に組み込まれる国際特許公開第ＷＯ２０１７／１７３０５４号および国際特許公開第ＷＰ２０１５／０９５３４０号に記載のカチオン性脂質が含まれる。
【０３９９】
ある特定の実施形態では、本組成物は、以下の化合物構造を有するカチオン性脂質、
【化１５８】
2021525743.tif 000164
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【０４００】
ある特定の実施形態では、本組成物は、以下の化合物構造を有するカチオン性脂質、
【化１５９】
2021525743.tif 000165
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【０４０１】
ある特定の実施形態では、本組成物は、以下の化合物構造を有するカチオン性脂質、
【化１６０】
2021525743.tif 000166
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【０４０２】
ある特定の実施形態では、本組成物は、以下の化合物構造を有するカチオン性脂質、
【化１６１】
2021525743.tif 000167
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【０４０３】
本組成物における使用に好適な他の追加のカチオン性脂質には、コレステロールベースのカチオン性脂質が含まれる。ある特定の実施形態では、本組成物は、以下の化合物構造を有するイミダゾールコレステロールエステルまたは「ＩＣＥ」、
【化１６２】
2021525743.tif 000168
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【０４０４】
本組成物における使用に好適な他の追加のカチオン性脂質には、参照により本明細書に組み込まれる国際特許公開第ＷＯ２０１２／１７０８８９号に記載の切断可能カチオン性脂質が含まれる。いくつかの実施形態では、本組成物は、以下の式のカチオン性脂質、
【化１６３】
2021525743.tif 000169
を含み、式中、Ｒ１は、イミダゾール、グアニジニウム、アミノ、イミン、エナミン、任意に置換されるアルキルアミノ（例えば、ジメチルアミノ等のアルキルアミノ）、およびピリジルからなる群から選択され、Ｒ２は、以下の２つの式の一方からなる群から選択され、
【化１６４】
2021525743.tif 000170
式中、Ｒ３およびＲ４は各々独立して、任意に置換される可変飽和または不飽和Ｃ６−Ｃ２０アルキルおよび任意に置換される可変飽和または不飽和Ｃ６−Ｃ２０アシルからなる群から選択され、ｎは、ゼロまたは任意の正の整数（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、またはそれ以上）である。
【０４０５】
ある特定の実施形態では、本組成物は、以下の化合物構造を有するカチオン性脂質「ＨＧＴ４００１」、
【化１６５】
2021525743.tif 000171
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【０４０６】
ある特定の実施形態では、本組成物は、以下の化合物構造を有するカチオン性脂質「ＨＧＴ４００２」、
【化１６６】
2021525743.tif 000172
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【０４０７】
ある特定の実施形態では、本組成物は、以下の化合物構造を有するカチオン性脂質「ＨＧＴ４００３」、
【化１６７】
2021525743.tif 000173
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【０４０８】
ある特定の実施形態では、本組成物は、以下の化合物構造を有するカチオン性脂質「ＨＧＴ４００４」、
【化１６８】
2021525743.tif 000174
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【０４０９】
ある特定の実施形態では、本組成物は、以下の化合物構造を有するカチオン性脂質「ＨＧＴ４００５」、
【化１６９】
2021525743.tif 000175
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【０４１０】
いくつかの実施形態では、本組成物は、カチオン性脂質、Ｎ−［ｌ−（２，３−ジオレイルオキシ）プロピル］−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルアンモニウムクロリド（「ＤＯＴＭＡ」）を含む。Ｆｅｉｇｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ  Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．８４，７４１３（１９８７）、米国特許第４，８９７，３５５号（各々参照により本明細書に組み込まれる）。ＤＯＴＭＡは、単独で製剤化されるか、または中性脂肪（例えば、ジオレオイルホスファチジル−エタノールアミンもしくは「ＤＯＰＥ」）またはなお他のカチオン性脂質もしくは非カチオン性脂質と組み合わせられて、リポソーム移入ビヒクルまたは脂質ナノ粒子にすることができ、かかるリポソームを使用して、核酸の標的細胞への送達を増強することができる。本組成物に好適な他のカチオン性脂質には、例えば、５−カルボキシスペルミルグリシンジオクタデシルアミド（「ＤＯＧＳ」）、２，３−ジオレイルオキシ−Ｎ−［２（スペルミン−カルボキサミド）エチル］−Ｎ，Ｎ−ジメチル−ｌ−プロパンアミニウム（「ＤＯＳＰＡ」）（Ｂｅｈｒ  ｅｔ  ａｌ．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ．’ｌ  Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．８６，６９８２（１９８９）、米国特許第５，１７１，６７８号、米国特許第５，３３４，７６１号）、ｌ，２−ジオレオイル−３−ジメチルアンモニウム−プロパン（「ＤＯＤＡＰ」）、ｌ，２−ジオレオイル−３−トリメチルアンモニウム−プロパン（「ＤＯＴＡＰ」）が含まれる。
【０４１１】
本組成物に好適な追加の例示的なカチオン性脂質には、ｌ，２−ジステアリルオキシ−Ｎ，Ｎ−ジメチル−３−アミノプロパン（「ＤＳＤＭＡ」）、１，２−ジオレイルオキシ−Ｎ，Ｎ−ジメチル−３−アミノプロパン（「ＤＯＤＭＡ」）、１，２−ジリノレイロキシオキシ−Ｎ，Ｎ−ジメチル−３−アミノプロパン（「ＤＬｉｎＤＭＡ」）、ｌ，２−ジリノレニルオキシ−Ｎ，Ｎ−ジメチル−３−アミノプロパン（「ＤＬｅｎＤＭＡ」）、Ｎ−ジオレイル−Ｎ，Ｎ−ジメチルアンモニウムクロリド（「ＤＯＤＡＣ」）、Ｎ，Ｎ−ジステアリル−Ｎ，Ｎ−ジメチルアンモニウムブロミド（「ＤＤＡＢ」）、Ｎ−（ｌ，２−ジミリチルチルオキシプロップ−３−イル）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−Ｎ−ヒドロキシエチルアンモニウムブロミド（「ＤＭＲＩＥ」）、３−ジメチルアミノ−２−（コレスト−５−エン−３−ベータ−オキシブタン−４−オキシ）−ｌ−（シス，シス−９，１２−オクタデカジエンオキシ）プロパン（「ＣＬｉｎＤＭＡ」）、２−［５’−（コレスト−５−エン−３−ベータ−オキシ）−３’−オキサペントキシ）−３−ジメチｌ−ｌ−（シス，シス−９’，ｌ−２’−オクタデカジエンオキシ）プロパン（「ＣｐＬｉｎＤＭＡ」）、Ｎ，Ｎ−ジメチル−３，４−ジオレイルオキシベンジルアミン（「ＤＭＯＢＡ」）、１，２−Ｎ，Ｎ’−ジオレイルカルバミル−３−ジメチルアミノプロパン（「ＤＯｃａｒｂＤＡＰ」）、２，３−ジリノレオイロイルオキシ−Ｎ，Ｎ−ジメチルプロピルアミン（「ＤＬｉｎＤＡＰ」）、ｌ，２−Ｎ，Ｎ’−ジリノレイルカルバミル−３−ジメチルアミノプロパン（「ＤＬｉｎｃａｒｂＤＡＰ」）、ｌ，２−ジリノレイルカルバミル−３−ジメチルアミノプロパン（「ＤＬｉｎＣＤＡＰ」）、２，２−ジリノレイル−４−ジメチルアミノメチル−［ｌ，３］−ジオキソラン（「ＤＬｉｎ−Ｋ−ＤＭＡ」）、２−（（８−［（３Ｐ）−コレスト−５−エン−３−イルオキシ］オクチル）オキシ）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−３−［（９Ｚ，１２Ｚ）−オクタデカ−９，１２−ジエン−１−イルオキシ］プロパン−１−アミン（「オクチル−ＣＬｉｎＤＭＡ」）、（２Ｒ）−２−（（８−［（３ベータ）−コレスト−５−エン−３−イルオキシ］オクチル）オキシ）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−３−［（９Ｚ，１２Ｚ）−オクタデカ−９，１２−ジエン−１−イルオキシ］プロパン−１−アミン（「オクチル−ＣＬｉｎＤＭＡ（２Ｒ）」）、（２Ｓ）−２−（（８−［（３Ｐ）−コレスト−５−エン−３−イルオキシ］オクチル）オキシ）−Ｎ、ｆｓｌ−ジメチ３−［（９Ｚ，１２Ｚ）−オクタデカ−９，１２−ジエン−１−イルオキシ］プロパン−１−アミン（「オクチル−ＣＬｉｎＤＭＡ（２Ｓ）」）、２，２−ジリノレイル−４−ジメチルアミノエチル−［ｌ，３］−ジオキソラン（「ＤＬｉｎ−Ｋ−ＸＴＣ２−ＤＭＡ」）、および２−（２，２−ジ（（９Ｚ，１２Ｚ）−オクタデカ−９，ｌ  ２−ジエン−１−イル）−ｌ，３−ジオキソラン−４−イル）−Ｎ，Ｎ−ジメチルエタンアミン（「ＤＬｉｎ−ＫＣ２−ＤＭＡ」）も含まれる（参照により本明細書に組み込まれる国際公開第ＷＯ２０１０／０４２８７７号、Ｓｅｍｐｌｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈ．２８：１７２���１７６（２０１０）を参照のこと）。（Ｈｅｙｅｓ，Ｊ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ  １０７：２７６−２８７（２００５）、Ｍｏｒｒｉｓｓｅｙ，ＤＶ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．２３（８）：１００３−１００７（２００５）、国際特許公開第ＷＯ２００５／１２１３４８号）。いくつかの実施形態では、カチオン性脂質のうちの１つ以上は、イミダゾール、ジアルキルアミノ、またはグアニジニウム部分のうちの少なくとも１つを含む。
【０４１２】
いくつかの実施形態では、本組成物に好適な１つ以上のカチオン性脂質には、２，２−ジリノレイル−４−ジメチルアミノエチル−［１，３］−ジオキソラン（「ＸＴＣ」）、（３ａＲ，５ｓ，６ａＳ）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−２，２−ジ（（９Ｚ，１２Ｚ）−オクタデカ−９，１２−ジエニル）テトラヒドロ−３ａＨ−シクロペンタ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−アミン（「ＡＬＮＹ−１００」）、および／または４，７，１３−トリス（３−オキソ−３−（ウンデシルアミノ）プロピル）−Ｎ１，Ｎ１６−ジウンデシル−４，７，１０，１３−テトラアザヘキサデカン−１，１６−ジアミド（「ＮＣ９８−５」）が含まれる。
【０４１３】
いくつかの実施形態では、組成物（例えば、リポソーム組成物）中の総カチオン性脂質のパーセンテージは、モル比（モル％）または重量（重量％）によって測定される、総脂質の１０％以下、２０％以下、３０％以下、４０％以下、５０％以下、６０％以下、７０％以下、８０％以下、９０％以下、または９５％以下であり得る。
【０４１４】
いくつかの実施形態では、組成物（例えば、リポソーム組成物）中の総カチオン性脂質のパーセンテージは、モル比（モル％）または重量（重量％）によって測定される、総脂質の１０％超、２０％超、３０％超、４０％超、５０％超、６０％超、７０％超、８０％超、９０％超、または９５％超であり得る。
【０４１５】
いくつかの実施形態では、総カチオン性脂質（複数可）は、重量で、リポソームの約３０〜５０％（例えば、約３０〜４５％、約３０〜４０％、約３５〜５０％、約３５〜４５％、または約３５〜４０％）を構成する。いくつかの実施形態では、カチオン性脂質は、モル比で、組成物（例えば、リポソーム組成物）の約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、または約５０％を構成する。いくつかの実施形態では、総カチオン性脂質（複数可）は、重量で、リポソームの約３０〜５０％（例えば、約３０〜４５％、約３０〜４０％、約３５〜５０％、約３５〜４５％、または約３５〜４０％）を構成する。いくつかの実施形態では、カチオン性脂質は、重量で、組成物（例えば、リポソーム組成物）の約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、または約５０％を構成する。
【０４１６】
非カチオン性／ヘルパー脂質
組成物（例えば、リポソーム組成物）は、１つ以上の非カチオン性（「ヘルパー」）脂質も含み得る。本明細書で使用される場合、「非カチオン性脂質」という語句は、任意の中性脂質、両性イオン性脂質、またはアニオン性脂質を指す。本明細書で使用される場合、「アニオン性脂質」という語句は、生理学的ｐＨ等の選択されたｐＨで正味の負電荷を有するいくつかの脂質種のうちのいずれかを指す。非カチオン性脂質には、ジステアロイルホスファチジルコリン（ＤＳＰＣ）、ジオレオイルホスファチジルコリン（ＤＯＰＣ）、ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）、ジオレオイルホスファチジルグリセロール（ＤＯＰＧ）、ジパルミトイルホスファチジルグリセロール（ＤＰＰＧ）、ジオレオイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＯＰＥ）、パルミトイルオレオイルホスファチジルコリン（ＰＯＰＣ）、パルミトイルオレオイル−ホスファチジルエタノールアミン（ＰＯＰＥ）、ジオレオイル−ホスファチジルエタノールアミン４−（Ｎ−マレイミドメチル）−シクロヘキサン−ｌ−カルボキシレート（ＤＯＰＥ−ｍａｌ）、ジパルミトイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＰＰＥ）、ジミリストイルホスホエタノールアミン（ＤＭＰＥ）、ジステアロイル−ホスファチジル−エタノールアミン（ＤＳＰＥ）、１６−Ｏ−モノメチルＰＥ、１６−Ｏ−ジメチルＰＥ、１８−１−トランスＰＥ、１−ステアロイル−２−オレオイル−ホスファチジエタノールアミン（ＳＯＰＥ）、またはそれらの混合物が含まれるが、これらに限定されない。
【０４１７】
複数の実施形態では、非カチオン性またはヘルパー脂質は、ジオレオイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＯＰＥ）である。
【０４１８】
いくつかの実施形態では、非カチオン性脂質は、中性脂質、すなわち、組成物が製剤化および／または投与される条件下で正味の電荷を有しない脂質である。
【０４１９】
いくつかの実施形態では、非カチオン性脂質は、組成物中に存在する総脂質の約５％〜約９０％、約５％〜約７０％、約５％〜約５０％、約５％〜約４０％、約５％〜約３０％、約１０％〜約７０％、約１０％〜約５０％、または約１０％〜約４０％のモル比（モル％）で存在し得る。いくつかの実施形態では、総非カチオン性脂質は、組成物中に存在する総脂質の約５％〜約９０％、約５％〜約７０％、約５％〜約５０％、約５％〜約４０％、約５％〜約３０％、約１０％〜約７０％、約１０％〜約５０％、または約１０％〜約４０％のモル比（モル％）で存在し得る。いくつかの実施形態では、リポソーム中の非カチオン性脂質のパーセンテージは、約５モル％超、約１０モル％超、約２０モル％超、約３０モル％超、または約４０モル％超であり得る。いくつかの実施形態では、リポソーム中の総非カチオン性脂質のパーセンテージは、約５モル％超、約１０モル％超、約２０モル％超、約３０モル％超、または約４０モル％超であり得る。いくつかの実施形態では、リポソーム中の非カチオン性脂質のパーセンテージは、約５モル％以下、約１０モル％以下、約２０モル％以下、約３０モル％以下、または約４０モル％以下である。いくつかの実施形態では、リポソーム中の総非カチオン性脂質のパーセンテージは、約５モル％以下、約１０モル％以下、約２０モル％以下、約３０モル％以下、または約４０モル％以下であり得る。
【０４２０】
いくつかの実施形態では、非カチオン性脂質は、組成物中に存在する組成物総脂質の約５％〜約９０％、約５％〜約７０％、約５％〜約５０％、約５％〜約４０％、約５％〜約３０％、約１０％〜約７０％、約１０％〜約５０％、または約１０％〜約４０％の重量比（重量％）で存在し得る。いくつかの実施形態では、総非カチオン性脂質は、組成物中に存在する組成物総脂質の約５％〜約９０％、約５％〜約７０％、約５％〜約５０％、約５％〜約４０％、約５％〜約３０％、約１０％〜約７０％、約１０％〜約５０％、または約１０％〜約４０％の重量比（重量％）で存在し得る。いくつかの実施形態では、リポソーム中の非カチオン性脂質のパーセンテージは、約５重量％超、約１０重量％超、約２０重量％超、約３０重量％超、または約４０重量％超であり得る。いくつかの実施形態では、リポソーム中の総非カチオン性脂質のパーセンテージは、約５重量％超、約１０重量％超、約２０重量％超、約３０重量％超、または約４０重量％超であり得る。いくつかの実施形態では、リポソーム中の非カチオン性脂質のパーセンテージは、約５重量％以下、約１０重量％以下、約２０重量％以下、約３０重量％以下、または約４０重量％以下である。いくつかの実施形態では、リポソーム中の総非カチオン性脂質のパーセンテージは、約５重量％以下、約１０重量％以下、約２０重量％以下、約３０重量％以下、または約４０重量％以下であり得る。
【０４２１】
コレステロールベースの脂質
いくつかの実施形態では、組成物（例えば、リポソーム組成物）は、１つ以上のコレステロールベースの脂質を含む。例えば、好適なコレステロールベースの脂質は、コレステロールと、例えば、ＤＣ−Ｃｈｏｌ（Ｎ，Ｎ−ジメチル−Ｎ−エチルカルボキシアミドコレステロール）、１，４−ビス（３−Ｎ−オレイルアミノ−プロピル）ピペラジン（Ｇａｏ，ｅｔ  ａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍ．１７９，２８０（１９９１）、Ｗｏｌｆ  ｅｔ  ａｌ．ＢｉｏＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  ２３，１３９（１９９７）、米国特許第５，７４４，３３５号）、または以下の構造を有するイミダゾールコレステロールエステル（ＩＣＥ）とを含む。
【化１７０】
2021525743.tif 000176
【０４２２】
複数の実施形態では、コレステロールベースの脂質は、コレステロールである。
【０４２３】
いくつかの実施形態では、コレステロールベースの脂質は、リポソーム中に存在する総脂質の約１％〜約３０％、または約５％〜約２０％のモル比（モル％）で存在し得る。いくつかの実施形態では、脂質ナノ粒子中のコレステロールベースの脂質のパーセンテージは、約５モル％超、約１０モル％超、約２０モル％超、約３０モル％超、または約４０モル％超であり得る。いくつかの実施形態では、脂質ナノ粒子中のコレステロールベースの脂質のパーセンテージは、約５モル％以下、約１０モル％以下、約２０モル％以下、約３０モル％以下、または約４０モル％以下であり得る。
【０４２４】
いくつかの実施形態では、コレステロールベースの脂質は、リポソーム中に存在する総脂質の約１％〜約３０％、または約５％〜約２０％の重量比（重量％）で存在し得る。いくつかの実施形態では、脂質ナノ粒子中のコレステロールベースの脂質のパーセンテージは、約５重量％超、約１０重量％超、約２０重量％超、約３０重量％超、または約４０重量％超であり得る。いくつかの実施形態では、脂質ナノ粒子中のコレステロールベースの脂質のパーセンテージは、約５重量％以下、約１０重量％以下、約２０重量％以下、約３０重量％以下、または約４０重量％以下であり得る。
【０４２５】
ＰＥＧ化脂質
いくつかの実施形態では、組成物（例えば、リポソーム組成物）は、１つ以上のＰＥＧ化脂質を含む。
【０４２６】
例えば、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）修飾リン脂質および誘導体化脂質、例えば、Ｎ−オクタノイル−スフィンゴシン−１−［スクシニル（メトキシポリエチレングリコール）−２０００］（Ｃ８  ＰＥＧ−２０００セラミド）を含む誘導体化セラミド（ＰＥＧ−ＣＥＲ）の使用も、リポソームを構成するカチオン性脂質およびいくつかの実施形態では他の脂質のうちの１つ以上と組み合わせて、本発明によって企図される。いくつかの実施形態では、特に有用な交換可能な脂質は、より短いアシル鎖（例えば、Ｃ１４またはＣ１８）を有するＰＥＧ−セラミドである。
【０４２７】
複数の実施形態では、ＰＥＧ修飾脂質は、１，２−ジミリストイル−ｓｎ−グリセロール、メトキシポリエチレングリコール（ＤＭＧ−ＰＥＧ２０００）である。
【０４２８】
企図されるＰＥＧ修飾脂質（本明細書ではＰＥＧ化脂質とも称され、この用語はＰＥＧ修飾脂質と互換的である）には、Ｃ６〜Ｃ２０長のアルキル鎖（複数可）を有する脂質に共有結合している最大５ｋＤａの長さのポリエチレングリコール鎖が含まれるが、これに限定されない。いくつかの実施形態では、ＰＥＧ修飾またはＰＥＧ化脂質は、ＰＥＧ化コレステロールまたはＰＥＧ−２Ｋである。かかる成分の付加は、複合体の凝集を阻止することができ、循環寿命を増加させ、かつ脂質−核酸組成物の標的細胞への送達を増加させるための手段を提供することもできる（Ｋｌｉｂａｎｏｖ  ｅｔ  ａｌ．（１９９０）ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔｅｒｓ，２６８（１）：２３５−２３７）か、またはこれらの成分は、インビボで製剤から迅速に交換するように選択され得る（米国特許第５，８８５，６１３号を参照のこと）。
【０４２９】
本発明のＰＥＧ修飾リン脂質および誘導体化脂質は、組成物（例えば、リポソーム組成物）中に存在する総脂質の約０％〜約１５％、約０．５％〜約１５％、約１％〜約１５％、約４％〜約１０％、または約２％のモル比（モル％）で存在し得る。
【０４３０】
本発明のＰＥＧ修飾リン脂質および誘導体化脂質は、組成物（例えば、リポソーム組成物）中に存在する総脂質の約０％〜約１５％、約０．５％〜約１５％、約１％〜約１５％、約４％〜約１０％、または約２％の重量比（重量％）で存在し得る。
【０４３１】
薬学的製剤および治療的使用
本明細書に記載のカチオン性脂質（例えば、式（Ｉ）もしくは（ＩＩ）、例えば、式（Ｉａ）〜（１ｈ）および式（ＩＩａ）〜（ＩＩｈ）、または化合物（１）〜（２０）のカチオン性脂質）は、（例えば、かかる標的細胞の脂質膜を透過するか、またはそれと融合することによって）封入された材料（例えば、１つ以上の治療用ポリヌクレオチド）の１つ以上の標的細胞への送達および放出を促進または増強する組成物の調製で（例えば、リポソーム組成物を構築するために）使用され得る。
【０４３２】
例えば、リポソーム組成物（例えば、脂質ナノ粒子）が本明細書に開示される化合物のうちの１つ以上を含むか、またはさもなければそれで濃縮されている場合、１つ以上の標的細胞の脂質二重層における相転移は、封入された材料（例えば、脂質ナノ粒子中に封入された１つ以上の治療用ポリヌクレオチド）の１つ以上の標的細胞への送達を促進し得る。
【０４３３】
同様に、ある特定の実施形態では、本明細書に記載のカチオン性脂質（例えば、式（Ｉ）もしくは（ＩＩ）、例えば、式（Ｉａ）〜（１ｈ）および式（ＩＩａ）〜（ＩＩｈ）、または化合物（１）〜（２０）のカチオン性脂質）は、インビボでの毒性の低下を特徴とするリポソームビヒクルを調製するために使用され得る。ある特定の実施形態では、毒性の低下は、減少した量のかかる組成物が対象に投与されて、所望の治療応答または結果を達成することができるように、本明細書に開示される組成物に関連する高いトランスフェクション効率の関数である。
【０４３４】
したがって、本明細書に記載のカチオン性脂質（例えば、式（Ｉ）もしくは（ＩＩ）、例えば、式（Ｉａ）〜（１ｈ）および式（ＩＩａ）〜（ＩＩｈ）、または化合物（１）〜（２０）のカチオン性脂質）と、本発明によって提供される核酸とを含む薬学的製剤は、様々な治療目的のために使用され得る。インビボでの核酸の送達を促進するために、カチオン性脂質（例えば、式（Ｉ）もしくは（ＩＩ）、例えば、式（Ｉａ）〜（１ｈ）および式（ＩＩａ）〜（ＩＩｈ）、または化合物（１）〜（２０）のカチオン性脂質）と核酸が、１つ以上の追加の薬学的担体、標的リガンド、または安定化試薬と組み合わせて製剤化され得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のカチオン性脂質（例えば、式（Ｉ）もしくは（ＩＩ）、例えば、式（Ｉａ）〜（１ｈ）および式（ＩＩａ）〜（ＩＩｈ）、または化合物（１）〜（２０）のカチオン性脂質）は、予混合脂質溶液を用いて製剤化され得る。他の実施形態では、カチオン性脂質（例えば、式（Ｉ）もしくは（ＩＩ）、例えば、式（Ｉａ）〜（１ｈ）および式（ＩＩａ）〜（ＩＩｈ）、または化合物（１）〜（２０）のカチオン性脂質）を含む組成物は、ナノ粒子の脂質膜への後挿入技法を使用して製剤化され得る。製剤化技法および薬物投与は、「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，」Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐａ．（最新版）で見つけることができる。
【０４３５】
好適な投与経路には、例えば、経口投与、直腸投与、膣投与、経粘膜投与、気管内投与もしくは吸入投与を含む肺投与、または腸投与、皮内注射、経皮（局所）注射、筋肉内注射、皮下注射、髄内注射を含む非経口送達、ならびに髄腔内、直接脳室内、静脈内、腹腔内、もしくは鼻腔内が含まれる。特定の実施形態では、筋肉内投与は、骨格筋、平滑筋、および心筋からなる群から選択される筋肉に行われる。いくつかの実施形態では、この投与により、核酸の筋肉細胞への送達がもたらされる。いくつかの実施形態では、この投与により、核酸の肝細胞（すなわち、肝臓細胞）への送達がもたらされる。複数の実施形態では、投与は、筋肉内である。複数の実施形態では、投与は、静脈内である。
【０４３６】
あるいはまたは加えて、本発明の薬学的製剤は、全身様式ではなく局所様式で、例えば、薬学的製剤を標的とされる組織に直接注射することにより、好ましくは、持続放出製剤で投与され得る。局所送達は、標的とされる組織に応じて様々な方式で達成され得る。送達されるｍＲＮＡが送達および／または発現され得る組織の例には、肝臓、腎臓、心臓、脾臓、血清、脳、骨格筋、リンパ節、皮膚、および／または脳脊髄液が挙げられるが、これらに限定されない。複数の実施形態では、標的とされる組織は、肝臓である。例えば、本発明の組成物を含むエアロゾルが吸引され得（鼻送達、気管送達、または気管支送達の場合）、本発明の組成物が、例えば、損傷、疾患兆候、または疼痛の部位に注射され得、組成物が、経口、気管、または食道用のトローチ剤で提供され得るか、胃もしくは腸への投与用に液体、錠剤、もしくはカプセル形態で供給され得るか、直腸もしくは膣用に坐剤形態で供給され得るか、またはクリーム、液滴、もしくはさらには注射を使用することにより眼にも送達され得る。
【０４３７】
複数の実施形態では、投与は、肺送達による。本明細書で使用される場合、肺送達とは、例えば、鼻腔、気管、気管支、細気管支、および／または他の肺系を介した肺への送達を指す。複数の実施形態では、本明細書に記載の組成物は、噴霧用に製剤化されている。複数の実施形態では、送達ビヒクルは、吸入され得るエアロゾル化組成物であり得る。複数の実施形態では、肺送達は、吸入を伴う（例えば、鼻、気管、または気管支送達の場合）。複数の実施形態では、組成物は、吸入前に噴霧化される。
【０４３８】
本発明は、対象、例えば、ヒト対象またはヒト対象の細胞または治療されてヒト対象に送達される細胞の治療で使用するための目的とするペプチドまたはポリペプチドをコードする全長ｍＲＮＡ分子を有する組成物を送達するための方法を提供する。
【０４３９】
したがって、ある特定の実施形態では、本発明は、対象の肺または肺細胞への送達またはその治療で使用するためのペプチドまたはポリペプチドをコードする全長ｍＲＮＡを含む治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、嚢胞性線維症膜コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）タンパク質をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、ＡＴＰ結合カセットサブファミリーＡメンバー３タンパク質をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、ダイニン軸糸中間鎖１タンパク質をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、ダイニン軸糸重鎖５（ＤＮＡＨ５）タンパク質をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、アルファ−１−アンチトリプシンタンパク質をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、フォークヘッドボックスＰ３（ＦＯＸＰ３）タンパク質をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、１つ以上のサーファクタントタンパク質、例えば、サーファクタントＡタンパク質、サーファクタントＢタンパク質、サーファクタントＣタンパク質、およびサーファクタントＤタンパク質のうちの１つ以上をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。
【０４４０】
ある特定の実施形態では、本発明は、対象の肝臓または肝臓細胞への送達またはその治療で使用するためのペプチドまたはポリペプチドをコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。かかるペプチドおよびポリペプチドは、尿素サイクル障害に関連するもの、リソソーム貯蔵障害に関連するもの、グリコーゲン貯蔵障害に関連するもの、アミノ酸代謝障害に関連するもの、脂質代謝もしくは線維性障害に関連するもの、メチルマロン酸血症に関連するもの、または濃縮された全長ｍＲＮＡの肝臓または肝臓細胞への送達またはそれでの治療が治療的利益を提供する任意の他の代謝性障害に関連するものを含み得る。
【０４４１】
ある特定の実施形態では、本発明は、尿素サイクル障害に関連するタンパク質をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、オルニチントランスカルバミラーゼ（ＯＴＣ）タンパク質をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、アルギニノコハク酸シンテターゼ１タンパク質をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、カルバモイルリン酸シンテターゼＩタンパク質をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、アルギニノコハク酸リアーゼタンパク質をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、アルギナーゼタンパク質をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。
【０４４２】
ある特定の実施形態では、本発明は、リソソーム貯蔵障害に関連するタンパク質をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、アルファ−ガラクトシダーゼタンパク質をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、グルコセレブロシダーゼタンパク質をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、イズロン酸−２−スルファターゼタンパク質をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、イズロニダーゼタンパク質をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、Ｎ−アセチル−アルファ−Ｄ−グルコサミニダーゼタンパク質をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、ヘパランＮ−スルファターゼタンパク質をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、ガラクトサミン−６スルファターゼタンパク質をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、ベータ−ガラクトシダーゼタンパク質をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、リソソームリパーゼタンパク質をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、アリールスルファターゼＢ（Ｎ−アセチルガラクトサミン−４−スルファターゼ）タンパク質をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、転写因子ＥＢ（ＴＦＥＢ）をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。
【０４４３】
ある特定の実施形態では、本発明は、グリコーゲン貯蔵障害に関連するタンパク質をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、酸アルファ−グルコシダーゼタンパク質をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、グルコース−６−ホスファターゼ（Ｇ６ＰＣ）タンパク質をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、肝臓グリコーゲンホスホリラーゼタンパク質をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、筋ホスホグリセリン酸ムターゼタンパク質をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、グリコーゲン脱分岐酵素をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。
【０４４４】
ある特定の実施形態では、本発明は、アミノ酸代謝に関連するタンパク質をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、フェニルアラニンヒドロキシラーゼ酵素をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、グルタリル−ＣｏＡデヒドロゲナーゼ酵素をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、プロピオニル−ＣｏＡカルボキシラーゼ酵素をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、オキサラーゼ（ｏｘａｌａｓｅ）アラニン−グリオキシルアミノトランスフェラーゼ酵素をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。
【０４４５】
ある特定の実施形態では、本発明は、脂質代謝または線維性障害に関連するタンパク質をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、ｍＴＯＲ阻害剤をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、ＡＴＰａｓｅリン脂質輸送８Ｂ１（ＡＴＰ８Ｂ１）タンパク質をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、１つ以上のＮＦ−カッパＢ阻害剤、例えば、Ｉ−カッパＢアルファ、インターフェロン関連発生制御因子１（ＩＦＲＤ１）、およびサーチュイン１（ＳＩＲＴ１）のうちの１つ以上をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、ＰＰＡＲ−ガンマタンパク質または活性バリアントをコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。
【０４４６】
ある特定の実施形態では、本発明は、タンパク質に関連するメチルマロン酸血症をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。例えば、ある特定の実施形態では、本発明は、メチルマロニルＣｏＡムターゼタンパク質をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、メチルマロニルＣｏＡエピメラーゼタンパク質をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。
【０４４７】
ある特定の実施形態では、本発明は、肝臓への送達またはその治療が治療的利益を提供することができる全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、ＡＴＰ７Ｂタンパク質、別名、ウィルソン病タンパク質をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、ポルホビリノーゲンデアミナーゼ酵素をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、第ＶＩＩＩ因子、第ＩＸ因子、第ＶＩＩ因子、および第Ｘ因子等の１つまたは複数の凝固酵素をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、ヒトヘモクロマトーシス（ＨＦＥ）タンパク質をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。
【０４４８】
ある特定の実施形態では、本発明は、対象の心臓血管構造または心臓血管細胞への送達またはその治療で使用するためのペプチドまたはポリペプチドをコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、血管内皮成長因子Ａタンパク質をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、レラキシンタンパク質をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、骨形成タンパク質−９タンパク質をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、骨形成タンパク質−２受容体タンパク質をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。
【０４４９】
ある特定の実施形態では、本発明は、対象の筋肉または筋肉細胞への送達またはその治療で使用するためのペプチドまたはポリペプチドをコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、ジストロフィンタンパク質をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、フラタキシンタンパク質をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、対象の心筋または心筋細胞への送達またはその治療で使用するためのペプチドまたはポリペプチドをコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、筋肉組織または筋肉細胞におけるカリウムチャネルおよびナトリウムチャネルの一方または両方を調節するタンパク質をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、筋肉組織または筋肉細胞におけるＫｖ７．１チャネルを調節するタンパク質をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、筋肉組織または筋肉細胞におけるＮａｖ１．５チャネルを調節するタンパク質をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。
【０４５０】
ある特定の実施形態では、本発明は、対象の神経系または神経系細胞への送達またはその治療で使用するためのペプチドまたはポリペプチドをコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。例えば、ある特定の実施形態では、本発明は、生存運動ニューロン１タンパク質をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。例えば、ある特定の実施形態では、本発明は、生存運動ニューロン２タンパク質をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、フラタキシンタンパク質をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、ＡＴＰ結合カセットサブファミリーＤメンバー１（ＡＢＣＤ１）タンパク質をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、ＣＬＮ３タンパク質をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。
【０４５１】
ある特定の実施形態では、本発明は、対象の血液もしくは骨髄または血液もしくは骨髄細胞への送達またはその治療で使用するためのペプチドまたはポリペプチドをコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、ベータ−グロビンタンパク質をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、ブルトンチロシンキナーゼタンパク質をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、１つまたは複数の凝固酵素、例えば、第ＶＩＩＩ因子、第ＩＸ因子、第ＶＩＩ因子、および第Ｘ因子をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。
【０４５２】
ある特定の実施形態では、本発明は、対象の腎臓または腎臓細胞への送達またはその治療で使用するためのペプチドまたはポリペプチドをコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、ＩＶ型コラーゲンアルファ５鎖（ＣＯＬ４Ａ５）タンパク質をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。
【０４５３】
ある特定の実施形態では、本発明は、対象の眼または眼細胞への送達またはその治療で使用するためのペプチドまたはポリペプチドをコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、ＡＴＰ結合カセットサブファミリーＡメンバー４（ＡＢＣＡ４）タンパク質をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、レチノスキシンタンパク質をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、網膜色素上皮特異的６５ｋＤａ（ＲＰＥ６５）タンパク質をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、２９０ｋＤａ中心体タンパク質（ＣＥＰ２９０）をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。
【０４５４】
ある特定の実施形態では、本発明は、対象または対象の細胞のためのワクチンの送達またはそれでの治療で使用するためのペプチドまたはポリペプチドをコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。例えば、ある特定の実施形態では、本発明は、ウイルス等の感染病原体由来の抗原をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、インフルエンザウイルス由来の抗原をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、呼吸器合胞体ウイルス由来の抗原をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、狂犬病ウイルス由来の抗原をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、サイトメガロウイルス由来の抗原をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、ロタウイルス由来の抗原をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、Ａ型肝炎ウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、またはＣ型肝炎ウイルス等の肝炎ウイルス由来の抗原をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、ヒトパピローマウイルス由来の抗原をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、単純ヘルペスウイルス１型または単純ヘルペスウイルス２型等の単純ヘルペスウイルス由来の抗原をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、ヒト免疫不全ウイルス１型またはヒト免疫不全ウイルス２型等のヒト免疫不全ウイルス由来の抗原をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、ヒトメタニューモウイルス由来の抗原をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、ヒトパラインフルエンザウイルス１型、ヒトパラインフルエンザウイルス２型、またはヒトパラインフルエンザウイルス３型等のヒトパラインフルエンザウイルス由来の抗原をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、マラリアウイルス由来の抗原をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、ジカウイルス由来の抗原をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、チクングンヤウイルス由来の抗原をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。
【０４５５】
ある特定の実施形態では、本発明は、対象のがんに関連する抗原または対象のがん細胞から特定された抗原をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、対象自身のがん細胞から決定された抗原をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための、すなわち、個別化がんワクチンを提供するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、変異ＫＲＡＳ遺伝子から発現した抗原をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。
【０４５６】
ある特定の実施形態では、本発明は、抗体をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、抗体は、二重特異性抗体であり得る。ある特定の実施形態では、抗体は、融合タンパク質の一部であり得る。ある特定の実施形態では、本発明は、ＯＸ４０に対する抗体をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、ＶＥＧＦに対する抗体をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、組織壊死因子アルファに対する抗体をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、ＣＤ３に対する抗体をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、ＣＤ１９に対する抗体をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。
【０４５７】
ある特定の実施形態では、本発明は、免疫調節因子をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、インターロイキン１２をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、インターロイキン２３をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、インターロイキン３６ガンマをコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、１つ以上のインターフェロン遺伝子刺激因子（ＳＴＩＮＧ）タンパク質の構成的に活性なバリアントをコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。
【０４５８】
ある特定の実施形態では、本発明は、エンドヌクレアーゼをコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、Ｃａｓ  ９タンパク質等のＲＮＡガイドＤＮＡエンドヌクレアーゼタンパク質をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、メガヌクレアーゼタンパク質をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、転写活性化因子様エフェクターヌクレアーゼタンパク質をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、亜鉛フィンガーヌクレアーゼタンパク質をコードする全長ｍＲＮＡを有する治療用組成物を産生するための方法を提供する。
【０４５９】
複数の実施形態では、例示的な治療的使用は、分泌タンパク質をコードするｍＲＮＡの送達に起因する。したがって、複数の実施形態では、本発明の組成物および方法は、分泌タンパク質をコードするｍＲＮＡの送達を提供する。いくつかの実施形態では、本発明の組成物および方法は、表１に列記される１つ以上の分泌タンパク質をコードするｍＲＮＡの送達を提供し、したがって、本発明の組成物は、表１に列記されるタンパク質（またはその相同体）をコードするｍＲＮＡを本明細書に記載の他の成分とともに含み得、本発明の方法は、表１に列記されるタンパク質（またはその相同体）をコードするｍＲＮＡを本明細書に記載の他の成分とともに含む組成物を調製および／または投与することを含み得る。
【表１−１】
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【表１−２】
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【表１−３】
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【表１−４】
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【表１−５】
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【表１−６】
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【表１−７】
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【表１−８】
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【表１−９】
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【表１−１０】
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【表１−１１】
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【表１−１２】
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【表１−１３】
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【表１−１４】
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【表１−１５】
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【表１−１６】
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【表１−１７】
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【表１−１８】
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【表１−１９】
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【表１−２０】
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【表１−２１】
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【表１−２２】
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【表１−２３】
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【表１−２４】
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【表１−２５】
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【表１−２６】
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【表１−２７】
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【表１−２８】
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【表１−２９】
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【表１−３０】
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【表１−３１】
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【表１−３２】
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【表１−３３】
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【表１−３４】
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【表１−３５】
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【表１−３６】
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【表１−３７】
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【表１−３８】
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【表１−３９】
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【表１−４０】
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【表１−４１】
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【表１−４２】
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【表１−４３】
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【表１−４４】
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【表１−４５】
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【表１−４６】
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【表１−４７】
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【表１−４８】
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【表１−４９】
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【表１−５０】
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【０４６０】
いくつかの実施形態では、本発明の組成物および方法は、表２に列記される１つ以上の追加の例示的なタンパク質をコードする１つ以上のｍＲＮＡの送達を提供し、したがって、本発明の組成物は、表２に列記されるタンパク質（またはその相同体）をコードするｍＲＮＡを本明細書に記載の他の成分とともに含み得、本発明の方法は、表２に列記されるタンパク質（またはその相同体）から選択されるタンパク質をコードするｍＲＮＡを本明細書に記載の他の成分とともに含む組成物を調製および／または投与することを含み得る。
【表２】
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【０４６１】
表１および表２に記載のＵｎｉｐｒｏｔ  ＩＤは、列記されるタンパク質のヒトバージョンを指し、各々の配列は、Ｕｎｉｐｒｏｔデータベースから入手可能である。列記されるタンパク質の配列は、様々な哺乳動物および獣医学的または産業的目的の動物を含む様々な動物に対しても利用可能である。したがって、いくつかの実施形態では、本発明の組成物および方法は、表１および表２に列記される分泌タンパク質の哺乳類相同体または獣医学的もしくは産業的目的の動物由来の相同体から選択される１つ以上のタンパク質をコードする１つ以上のｍＲＮＡの送達を提供し、したがって、本発明の組成物は、表１および表２に列記されるタンパク質の哺乳類相同体または獣医学的もしくは産業的目的の動物由来の相同体から選択されるタンパク質をコードするｍＲＮＡを、本明細書に記載の他の成分とともに含み得、本発明の方法は、表１および表２に列記されるタンパク質の哺乳類相同体または獣医学的もしくは産業的目的の動物由来の相同体から選択されるタンパク質をコードするｍＲＮＡを、本明細書に記載の他の成分とともに含む組成物を調製および／または投与することを含み得る。いくつかの実施形態では、哺乳類相同体は、マウス、ラット、ハムスター、スナネズミ、ウマ、ブタ、ウシ、ラマ、アルパカ、ミンク、イヌ、ネコ、フェレット、ヒツジ、ヤギ、またはラクダ相同体から選択される。いくつかの実施形態では、獣医学的または産業的目的の動物は、上述の哺乳動物、および／またはニワトリ、カモ、シチメンチョウ、サケ、ナマズ、もしくはテラピアから選択される。
【０４６２】
複数の実施形態では、本発明の組成物および方法は、表３から選択されるリソソームタンパク質をコードするｍＲＮＡの送達を提供する。いくつかの実施形態では、本発明の組成物および方法は、表３に列記される１つ以上のリソソームタンパク質および／または関連タンパク質をコードする１つ以上のｍＲＮＡの送達を提供し、したがって、本発明の組成物は、表３に列記されるタンパク質（またはその相同体）をコードするｍＲＮＡを本明細書に記載の他の成分とともに含み得、本発明の方法は、表３に列記されるタンパク質（またはその相同体）から選択されるタンパク質をコードするｍＲＮＡを本明細書に記載の他の成分とともに含む組成物を調製および／または投与することを含み得る。
【表３−１】
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【表３−２】
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【０４６３】
リソソームタンパク質に関する情報は、Ｌｕｂｋｅ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｐｒｏｔｅｏｍｉｃｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｌｙｓｏｓｏｍｅ，”Ｂｉｏｃｈｉｍ  Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ａｃｔａ．（２００９）１７９３：６２５−６３５から入手可能である。いくつかの実施形態では、表３に列記されており、かつ本発明の組成物および方法におけるｍＲＮＡによってコードされるタンパク質は、ヒトタンパク質である。列記されるタンパク質の配列は、上述のように、様々な哺乳動物および獣医学的または産業的目的の動物を含む様々な動物に対しても利用可能である。
【０４６４】
いくつかの実施形態では、本発明の組成物および方法は、表４に列記されるもの等の治療用タンパク質（例えば、細胞質、膜貫通、または分泌）をコードするｍＲＮＡの送達を提供する。いくつかの実施形態では、本発明の組成物および方法は、表４に列記される疾患または障害（すなわち、適応症）の治療に有用な治療用タンパク質をコードするｍＲＮＡの送達を提供し、したがって、本発明の組成物は、表４に列記される疾患または障害（すなわち、適応症）の治療のための表４に列記されているか、または列記されていない治療用タンパク質（または以下で考察されるその相同体）をコードするｍＲＮＡを本明細書に記載の他の成分とともに含み得、本発明の方法は、表４に列記される疾患または障害の治療のためのかかるタンパク質（または以下で考察されるその相同体）をコードするｍＲＮＡを本明細書に記載の他の成分とともに含む組成物を調製および／または投与することを含み得る。
【表４−１】
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【表４−２】
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【表４−３】
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【表４−４】
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【表４−５】
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【表４−６】
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【表４−７】
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【表４−８】
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【表４−９】
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【０４６５】
いくつかの実施形態では、本発明は、表１、２、３、または４に列記されている疾患または障害、またはそれらに列記されているタンパク質に関連する疾患または障害に罹患している対象を予防、治療、および／または治癒するために使用される。いくつかの実施形態では、ｍＲＮＡは、嚢胞性線維症膜コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）、アルギニノコハク酸シンテターゼ（ＡＳＳ１）、第ＩＸ因子、生存運動ニューロン１（ＳＭＮ１）、またはフェニルアラニンヒドロキシラーゼ（ＰＡＨ）のうちの１つ以上をコードする。
【０４６６】
本発明のある特定の化合物、組成物、および方法が、ある特定の実施形態に従って具体的に説明されているが、以下の実施例は、本発明の化合物を例証する役割のみを果たし、それを限定するようには意図されていない。
【実施例】
【０４６７】
実施例１：カチオン性脂質の例示的な合成
本明細書に記載のカチオン性脂質は、当該技術分野で既知の方法に従って調製され得る。カチオン性脂質（１）の例示的な合成（スキーム１）が本明細書に提供される。
【化１７１】
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【０４６８】
テトラオクチル（１−ヒドロキシ−３−（メチル（ペンチル）アミノ）プロパン−１，１−ジイル）ビス（ホスホネート）（カチオン性脂質１）の合成
【化１７２】
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Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）およびジクロロメタン（３ｍＬ）中イバンドロン酸（３１９ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）の溶液に、１−オクタノール（０．６３ｍＬ、４．０ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（９７６ｍｇ、８．０ｍｍｏｌ）、およびＥＤＣＩ（７６０ｍｇ、４．０ｍｍｏｌ）を添加し、結果として生じた混合物を一晩かけて５０〜６０℃に加熱した。反応混合物を真空下で蒸発させた。残渣をジクロロメタン（１００ｍＬ）中に溶解させ、ブライン（６０ｍＬ×３）で洗浄した。無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた後、溶媒を蒸発させ、粗物をカラムクロマトグラフィー（８０ｇのＳｉＯ２、ジクロロメタン中０〜５０％メタノールの勾配）により精製して、無色の油としてテトラオクチル（１−ヒドロキシ−３−（メチル（ペンチル）アミノ）プロパン−１，１−ジイル）ビス（ホスホネート）（カチオン性脂質１）を得た（５２ｍｇ、７％）。
【０４６９】
実施例２：リン酸エステルカチオン性脂質を使用した脂質ナノ粒子の製剤化およびＣＤ１マウスにおけるｈＥＰＯのインビボ発現
本明細書に記載のカチオン性脂質を当該技術分野で既知の方法に従って脂質ナノ粒子の調製で使用することができる。例えば、好適な方法には、参照により全体が本明細書に組み込まれる国際公開第ＷＯ２０１８／０８９８０１号に記載の方法が含まれる。
【０４７０】
脂質ナノ粒子の製剤化のための１つの例示的なプロセスは、ＷＯ２０１８／０８９８０１のプロセスＡ（例えば、ＷＯ２０１８／０８９８０１の実施例１および図１を参照のこと）である。プロセスＡ（「Ａ」）は、最初に脂質を脂質ナノ粒子に予め形成することなくｍＲＮＡを脂質混合物と混合することによってｍＲＮＡを封入する従来の方法に関する。例示的なプロセスでは、エタノール脂質溶液とｍＲＮＡ緩衝水溶液を別個に調製した。脂質混合物（カチオン性脂質、ヘルパー脂質、両性イオン性脂質、ＰＥＧ脂質等）の溶液を、脂質をエタノール中に溶解させることによって調製した。ｍＲＮＡ溶液を、ｍＲＮＡをクエン酸緩衝液中に溶解させることによって調製し、ｐＨ４．５のクエン酸緩衝液中０．０８３３ｍｇ／ｍＬの濃度のｍＲＮＡを得た。その後、両方の混合物を６５℃まで加熱した後に混合した。その後、これらの２つの溶液を、ポンプシステムを使用して混合した。いくつかの例では、これらの２つの溶液を、ギアポンプシステムを使用して混合した。ある特定の実施形態では、これらの２つの溶液を、「Ｔ」接合部（または「Ｙ」接合部）を使用して混合した。その後、混合物を、ＴＦＦプロセスを用いる透析濾過により精製した。結果として得られた製剤を濃縮し、さらに使用するまで２〜８℃で保管した。
【０４７１】
脂質ナノ粒子の製剤化のための第２の例示的なプロセスは、ＷＯ２０１８／０８９８０１のプロセスＢ（例えば、ＷＯ２０１８／０８９８０１の実施例２および図２を参照のこと）である。プロセスＢ（「Ｂ」）は、予め形成された脂質ナノ粒子をｍＲＮＡと混合することによってメッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）を封入するプロセスに関する。異なる条件範囲、例えば、異なる温度（すなわち、混合物を加熱するか加熱しない）、緩衝液、および濃度をプロセスＢで使用することができる。例示的なプロセスでは、エタノールおよびクエン酸緩衝液中に溶解させた脂質を、ポンプシステムを使用して混合した。２つの流れの瞬時混合により、空の脂質ナノ粒子が形成され、これは自己集合プロセスであった。結果として得られた製剤混合物は、アルコールを含有するクエン酸緩衝液中の空の脂質ナノ粒子であった。その後、製剤をＴＦＦ精製プロセスに供し、バッファ交換を行った。その後、結果として得られた予め形成された空の脂質ナノ粒子の懸濁液を、ポンプシステムを使用してｍＲＮＡと混合した。ある特定のカチオン性脂質の場合、混合後の溶液の加熱により、ｍＲＮＡを含有する脂質ナノ粒子のパーセンテージが高くなり、ｍＲＮＡの全収率が高くなった。
【０４７２】
例示的な脂質ナノ粒子製剤をＷＯ２０１８／０８９８０１に記載のプロセスＡによって調製した。例示的な脂質ナノ粒子製剤は、以下のモル％比でｈＥＰＯ  ｍＲＮＡおよび異なる脂質を含んだ。カチオン性脂質：ＤＭＧ−ＰＥＧ２０００、コレステロール：ＤＯＰＥ＝４０：５：２５：３０。
【表５】
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【０４７３】
例示的なリン酸エステルカチオン性脂質およびｈＥＰＯをコードするｍＲＮＡを含む脂質ナノ粒子製剤の静脈内（ＩＶ）投与を行い、ｍＲＮＡ送達および結果として生じるｈＥＰＯ発現を研究した。カチオン性脂質（１）およびｈＥＰＯ  ｍＲＮＡのナノ粒子製剤を、以下のモル％比で静脈内投与について上述のプロセスＡによって調製した。カチオン性脂質：ＤＭＧ−ＰＥＧ２０００、コレステロール：ＤＯＰＥ＝４０：５：２５：３０。
【０４７４】
６〜８週齢の雄ＣＤ１マウスに１ｍｇ／ｋｇの投薬量レベルでＬＮＰ製剤を単回静脈内注射した。投与後６時間および２４時間時点で血液試料を尾部切断により収集した。ｈＥＰＯタンパク質発現量をＥＬＩＳＡにより血清試料中で測定し、およそ０．０８ｕｇ／ｍＬの血清中でのｈＥＰＯ発現を示した。この研究は、本明細書に記載のリン酸エステルカチオン性脂質がｍＲＮＡのインビボ送達に非常に効果的であり、送達されたｍＲＮＡによってコードされたタンパク質またはポリペプチドを高度に発現することを示す。
一組の例示的な実施形態
１．タンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソームであって、前記リポソームが、１つ以上のカチオン性脂質、１つ以上の非カチオン性脂質、１つ以上のコレステロールベースの脂質、および１つ以上のＰＥＧ修飾脂質を含み、少なくとも１つのカチオン性脂質が、式（Ｉ）に従う構造を有するカチオン性脂質であり、
【化１７３】
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式中、
Ｌ１が、共有結合、Ｃ１−Ｃ１０アルキレン、Ｃ２−Ｃ１０アルケニレン、またはＣ２−Ｃ１０アルキニレンであり、
Ｘ１が、ＣＨ３、Ｃｌ、ＯＲａ、Ｃ（＝Ｘ１ａ）ＲＸ１ａ、ＮＲｂＲｃ、または５もしくは６員窒素含有ヘテロアリールであり、
Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、およびＸ５が各々独立して、ＣＨ２、Ｏ、またはＮＲｄであり、
Ｒ１が、Ｈ、Ｃｌ、ＯＲｆ、ＮＲｇＲｈ、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ２−Ｃ１０アルケニル、またはＣ２−Ｃ１０アルキニルであり、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、Ｃ２−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ２−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルケニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキニル、ポリマー、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、５もしくは６員ヘテロシクロアルキル、５もしくは６員アリール、または５もしくは６員ヘテロアリールであり、
Ｒａ、Ｒｄ、およびＲｆが各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、Ｃ２−Ｃ６−アルケニル、またはＣ２−Ｃ６−アルキニルであり、
ＲｂおよびＲｃが各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、Ｃ２−Ｃ６−アルケニル、またはＣ２−Ｃ６−アルキニルであるか、または
ＲｂおよびＲｃが、それらが結合している窒素原子と一緒になって、飽和または不飽和５〜６員複素環式環を形成し、
ＲｇおよびＲｈが各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、Ｃ２−Ｃ６−アルケニル、またはＣ２−Ｃ６−アルキニルであるか、または
ＲｇおよびＲｈが、それらが結合している窒素原子と一緒になって、飽和または不飽和５〜６員複素環式環を形成し、
ＲＸ１ａが、ＯＨまたはＯＲａであり、
Ｘ１ａが、ＯまたはＳであるが、
但し、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５のうちの少なくとも１つが、Ｃ６−Ｃ３０−アルキル、Ｃ６−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ６−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ６−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ６−Ｃ３０−アルケニル、またはヘテロ−Ｃ６−Ｃ３０−アルキニルであることを条件とする、タンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
２．Ｌ１が、共有結合またはＣ１−Ｃ１０アルキレンである、実施形態１に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
３．Ｌ１が、共有結合である、実施形態２に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
４．Ｌ１が、−ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２−、または−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−である、実施形態２に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
５．Ｘ１が、ＮＲｂＲｃまたは５もしくは６員窒素含有ヘテロアリールである、実施形態１〜４のいずれか１つに記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
６．Ｘ１が、ピリジニルまたはジアルキルアミノである、実施形態５に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
７．Ｘ２が、Ｏである、実施形態１〜６のいずれか１つに記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
８．Ｘ３が、Ｏである、実施形態１〜７のいずれか１つに記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
９．Ｘ４が、Ｏである、実施形態１〜８のいずれか１つに記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
１０．Ｘ５が、Ｏである、実施形態１〜９のいずれか１つに記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
１１．Ｒ１が、メチル、ジメチルアミノ、またはＯＨである、実施形態１〜１０のいずれか１つに記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
１２．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、Ｃ６−Ｃ３０−アルキルである、実施形態１〜１１のいずれか１つに記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
１３．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、非置換Ｃ６−Ｃ３０−アルキルである、実施形態１２に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
１４．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、−Ｃ６Ｈ１３、−Ｃ７Ｈ１５、−Ｃ８Ｈ１７、−Ｃ９Ｈ１９、−Ｃ１０Ｈ２１、−Ｃ１１Ｈ２３、−Ｃ１２Ｈ２５、−Ｃ１３Ｈ２７、−Ｃ１４Ｈ２９、−Ｃ１５Ｈ３１、−Ｃ１６Ｈ３３、−Ｃ１７Ｈ３５、−Ｃ１８Ｈ３７、−Ｃ１９Ｈ３９、−Ｃ２０Ｈ４１、−Ｃ２１Ｈ４３、−Ｃ２２Ｈ４５、−Ｃ２３Ｈ４７、−Ｃ２４Ｈ４９、および−Ｃ２５Ｈ５１から選択される、実施形態１３に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
１５．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、＝Ｏ、ハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、チオール、エステル、およびチオエステルから選択される１つまたは複数の置換基で置換されたＣ６−Ｃ３０−アルキルである、実施形態１〜１１のいずれか１つに記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
１６．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、＝Ｏ、ハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、チオール、エステル、およびチオエステルから選択される１つまたは複数の置換基で置換されたＣ１−Ｃ１０−アルキル−Ｏ−Ｃ１−Ｃ１０−アルキルである、実施形態１〜１１のいずれか１つに記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
１７．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、Ｃ６−Ｃ３０−アルケニルまたはＣ８−Ｃ２０−アルケニルである、実施形態１〜１１のいずれか１つに記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
１８．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、Ｃ８−アルケニル、Ｃ９−アルケニル、Ｃ１０−アルケニル、Ｃ１１−アルケニル、Ｃ１２−アルケニル、Ｃ１３−アルケニル、Ｃ１４−アルケニル、Ｃ１５−アルケニル、Ｃ１６−アルケニル、Ｃ１７−アルケニル、Ｃ１８−アルケニル、Ｃ１９−アルケニル、およびＣ２０−アルケニルから選択される、実施形態１〜１１のいずれか１つに記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
１９．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、非置換Ｃ８−アルケニル、非置換Ｃ９−アルケニル、非置換Ｃ１０−アルケニル、非置換Ｃ１１−アルケニル、非置換Ｃ１２−アルケニル、非置換Ｃ１３−アルケニル、非置換Ｃ１４−アルケニル、非置換Ｃ１５−アルケニル、非置換Ｃ１６−アルケニル、非置換Ｃ１７−アルケニル、非置換Ｃ１８−アルケニル、非置換Ｃ１９−アルケニル、および非置換Ｃ２０−アルケニルから選択される、実施形態１〜１１のいずれか１つに記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
２０．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、−（ＣＨ２）４ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）５ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）６ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）７ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）８ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）９ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１０ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１１ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１２ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１３ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１４ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１５ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１６ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１７ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１８ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）７ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）３ＣＨ３、−（ＣＨ２）７ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）５ＣＨ３、−（ＣＨ２）４ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）８ＣＨ３、−（ＣＨ２）７ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）７ＣＨ３、−（ＣＨ２）６ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）４ＣＨ３、−（ＣＨ２）７ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）４ＣＨ３、−（ＣＨ２）７ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ３、−（ＣＨ２）３ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）４ＣＨ３、−（ＣＨ２）３ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ３、−（ＣＨ２）１１ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）７ＣＨ３、および−（ＣＨ２）２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ３から選択される、実施形態１〜１１のいずれか１つに記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
２１．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５のうちの少なくとも１つが、５もしくは６員ヘテロアリールである、実施形態１〜１１のいずれか１つに記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
２２．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々、５もしくは６員ヘテロアリールである、実施形態１〜１１のいずれか１つに記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
２３．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が、イミダゾールまたはその誘導体である、実施形態１、２１、または２２に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
２４．前記カチオン性脂質が、式（Ｉａ）、（Ｉｂ）、（Ｉｃ）、（Ｉｄ）、（Ｉｅ）、（Ｉｆ）、（Ｉｇ）、もしくは（Ｉｈ）、または式（ＩＩａ）、（ＩＩｂ）、（ＩＩｃ）、（ＩＩｄ）、（ＩＩｅ）、（ＩＩｆ）、（ＩＩｇ）、もしくは（ＩＩｈ）の構造を有する、実施形態１に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
【化１７４】
2021525743.tif 000243
【化１７５】
2021525743.tif 000244
２５．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、
【化１７６】
2021525743.tif 000245
から選択される、実施形態２４に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
２６．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、
【化１７７】
2021525743.tif 000246
から選択される、実施形態２４に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
２７．前記カチオン性脂質が、カチオン性脂質（１）、（２）、（３）、（４）、（５）、（６）、（７）、（８）、（９）、または（１０）である、実施形態１に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
【化１７８】
2021525743.tif 000247
【表１０】
2021525743.tif 000248
２８．前記カチオン性脂質が、カチオン性脂質（１）である、実施形態２７に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
【化１７９】
2021525743.tif 000249
２９．前記カチオン性脂質が、カチオン性脂質（１１）、（１２）、（１３）、（１４）、（１５）、（１６）、（１７）、（１８）、（１９）、または（２０）である、実施形態１に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
【化１８０】
2021525743.tif 000250
【表１１】
2021525743.tif 000251
３０．前記カチオン性脂質が、カチオン性脂質（１１）である、実施形態２９に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
【化１８１】
2021525743.tif 000252
３１．実施形態１〜３０のいずれか１つに記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソームを含む、組成物。
３２．嚢胞性線維症膜コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）タンパク質をコードするｍＲＮＡを含む、実施形態３１に記載の組成物。
３３．オルニチントランスカルバミラーゼ（ＯＴＣ）タンパク質をコードするｍＲＮＡを含む、実施形態３１に記載の組成物。
３４．リポソーム内に封入された核酸であって、前記リポソームが、式（Ｉ）に従う構造を有するカチオン性脂質を含み、
【化１８２】
2021525743.tif 000253
式中、
Ｌ１が、共有結合、Ｃ１−Ｃ１０アルキレン、Ｃ２−Ｃ１０アルケニレン、またはＣ２−Ｃ１０アルキニレンであり、
Ｘ１が、ＣＨ３、Ｃｌ、ＯＲａ、Ｃ（＝Ｘ１ａ）ＲＸ１ａ、ＮＲｂＲｃ、または５もしくは６員窒素含有ヘテロアリールであり、
Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、およびＸ５が各々独立して、ＣＨ２、Ｏ、またはＮＲｄであり、
Ｒ１が、Ｈ、Ｃｌ、ＯＲｆ、ＮＲｇＲｈ、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ２−Ｃ１０アルケニル、またはＣ２−Ｃ１０アルキニルであり、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、Ｃ２−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ２−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルケニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキニル、ポリマー、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、５もしくは６員ヘテロシクロアルキル、５もしくは６員アリール、または５もしくは６員ヘテロアリールであり、
Ｒａ、Ｒｄ、およびＲｆが各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、Ｃ２−Ｃ６−アルケニル、またはＣ２−Ｃ６−アルキニルであり、
ＲｂおよびＲｃが各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、Ｃ２−Ｃ６−アルケニル、またはＣ２−Ｃ６−アルキニルであるか、または
ＲｂおよびＲｃが、それらが結合している窒素原子と一緒になって、飽和または不飽和５〜６員複素環式環を形成し、
ＲｇおよびＲｈが各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、Ｃ２−Ｃ６−アルケニル、またはＣ２−Ｃ６−アルキニルであるか、または
ＲｇおよびＲｈが、それらが結合している窒素原子と一緒になって、飽和または不飽和５〜６員複素環式環を形成し、
ＲＸ１ａが、ＯＨまたはＯＲａであり、
Ｘ１ａが、ＯまたはＳであるが、
但し、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５のうちの少なくとも１つが、Ｃ６−Ｃ３０−アルキル、Ｃ６−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ６−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ６−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ６−Ｃ３０−アルケニル、またはヘテロ−Ｃ６−Ｃ３０−アルキニルであることを条件とする、リポソーム内に封入された核酸。
３５．Ｌ１が、共有結合またはＣ１−Ｃ１０アルキレンである、実施形態３４に記載のリポソーム内に封入された核酸。
３６．Ｌ１が、共有結合である、実施形態３５に記載のリポソーム内に封入された核酸。
３７．Ｌ１が、−ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２−、または−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−である、実施形態３５に記載のリポソーム内に封入された核酸。
３８．Ｘ１が、ＮＲｂＲｃまたは５もしくは６員窒素含有ヘテロアリールである、実施形態３４〜３７のいずれか１つに記載のリポソーム内に封入された核酸。
３９．Ｘ１が、ピリジニルまたはジアルキルアミノである、実施形態３８に記載のリポソーム内に封入された核酸。
４０．Ｘ２が、Ｏである、実施形態３４〜３９に記載のリポソーム内に封入された核酸。
４１．Ｘ３が、Ｏである、実施形態３４〜４０のいずれか１つに記載のリポソーム内に封入された核酸。
４２．Ｘ４が、Ｏである、実施形態３４〜４１のいずれか１つに記載のリポソーム内に封入された核酸。
４３．Ｘ５が、Ｏである、実施形態３４〜４２のいずれか１つ実施形態に記載のリポソーム内に封入された核酸。
４４．Ｒ１が、メチル、ジメチルアミノ、またはＯＨである、実施形態３４〜４３のいずれか１つに記載のリポソーム内に封入された核酸。
４５．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、Ｃ６−Ｃ３０−アルキルである、実施形態３４〜４４のいずれか１つに記載のリポソーム内に封入された核酸。
４６．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、非置換Ｃ６−Ｃ３０−アルキルである、実施形態４５に記載のリポソーム内に封入された核酸。
４７．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、−Ｃ６Ｈ１３、−Ｃ７Ｈ１５、−Ｃ８Ｈ１７、−Ｃ９Ｈ１９、−Ｃ１０Ｈ２１、−Ｃ１１Ｈ２３、−Ｃ１２Ｈ２５、−Ｃ１３Ｈ２７、−Ｃ１４Ｈ２９、−Ｃ１５Ｈ３１、−Ｃ１６Ｈ３３、−Ｃ１７Ｈ３５、−Ｃ１８Ｈ３７、−Ｃ１９Ｈ３９、−Ｃ２０Ｈ４１、−Ｃ２１Ｈ４３、−Ｃ２２Ｈ４５、−Ｃ２３Ｈ４７、−Ｃ２４Ｈ４９、および−Ｃ２５Ｈ５１から選択される、実施形態４６に記載のリポソーム内に封入された核酸。
４８．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、＝Ｏ、ハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、チオール、エステル、およびチオエステルから選択される１つまたは複数の置換基で置換されたＣ６−Ｃ３０−アルキルである、実施形態３４〜４４のいずれか１つに記載のリポソーム内に封入された核酸。
４９．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、＝Ｏ、ハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、チオール、エステル、およびチオエステルから選択される１つまたは複数の置換基で置換されたＣ１−Ｃ１０−アルキル−Ｏ−Ｃ１−Ｃ１０−アルキルである、実施形態３４〜４４のいずれか１つに記載のリポソーム内に封入された核酸。
５０．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、Ｃ６−Ｃ３０−アルケニルまたはＣ８−Ｃ２０−アルケニルである、実施形態３４〜４４のいずれか１つに記載のリポソーム内に封入された核酸。
５１．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、Ｃ８−アルケニル、Ｃ９−アルケニル、Ｃ１０−アルケニル、Ｃ１１−アルケニル、Ｃ１２−アルケニル、Ｃ１３−アルケニル、Ｃ１４−アルケニル、Ｃ１５−アルケニル、Ｃ１６−アルケニル、Ｃ１７−アルケニル、Ｃ１８−アルケニル、Ｃ１９−アルケニル、およびＣ２０−アルケニルから選択される、実施形態３４〜４４のいずれか１つに記載のリポソーム内に封入された核酸。
５２．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、非置換Ｃ８−アルケニル、非置換Ｃ９−アルケニル、非置換Ｃ１０−アルケニル、非置換Ｃ１１−アルケニル、非置換Ｃ１２−アルケニル、非置換Ｃ１３−アルケニル、非置換Ｃ１４−アルケニル、非置換Ｃ１５−アルケニル、非置換Ｃ１６−アルケニル、非置換Ｃ１７−アルケニル、非置換Ｃ１８−アルケニル、非置換Ｃ１９−アルケニル、および非置換Ｃ２０−アルケニルから選択される、実施形態３４〜４４のいずれか１つに記載のリポソーム内に封入された核酸。
５３．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、−（ＣＨ２）４ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）５ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）６ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）７ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）８ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）９ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１０ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１１ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１２ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１３ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１４ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１５ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１６ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１７ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１８ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）７ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）３ＣＨ３、−（ＣＨ２）７ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）５ＣＨ３、−（ＣＨ２）４ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）８ＣＨ３、−（ＣＨ２）７ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）７ＣＨ３、−（ＣＨ２）６ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）４ＣＨ３、−（ＣＨ２）７ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）４ＣＨ３、−（ＣＨ２）７ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ３、−（ＣＨ２）３ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）４ＣＨ３、−（ＣＨ２）３ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ３、−（ＣＨ２）１１ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）７ＣＨ３、および−（ＣＨ２）２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ３から選択される、実施形態３４〜４４のいずれか１つに記載のリポソーム内に封入された核酸。
５４．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５のうちの少なくとも１つが、５もしくは６員ヘテロアリールである、実施形態３４〜４４のいずれか１つに記載のリポソーム内に封入された核酸。
５５．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々、５もしくは６員ヘテロアリールである、実施形態３４〜４４のいずれか１つに記載のリポソーム内に封入された核酸。
５６．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が、イミダゾールまたはその誘導体である、実施形態３４、５４、または５５に記載のリポソーム内に封入された核酸。
５７．前記カチオン性脂質が、式（Ｉａ）、（Ｉｂ）、（Ｉｃ）、（Ｉｄ）、（Ｉｅ）、（Ｉｆ）、（Ｉｇ）、もしくは（Ｉｈ）、または式（ＩＩａ）、（ＩＩｂ）、（ＩＩｃ）、（ＩＩｄ）、（ＩＩｅ）、（ＩＩｆ）、（ＩＩｇ）、もしくは（ＩＩｈ）の構造を有する、実施形態３４に記載のリポソーム内に封入された核酸。
【化１８３】
2021525743.tif 000254
【化１８４】
2021525743.tif 000255
５８．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、
【化１８５】
2021525743.tif 000256
から選択される、実施形態５７に記載のリポソーム内に封入された核酸。
５９．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、
【化１８６】
2021525743.tif 000257
から選択される、実施形態５７に記載のリポソーム内に封入された核酸。
６０．前記カチオン性脂質が、カチオン性脂質（１）、（２）、（３）、（４）、（５）、（６）、（７）、（８）、（９）、または（１０）である、実施形態３４に記載のリポソーム内に封入された核酸。
【化１８７】
2021525743.tif 000258
【表１２】
2021525743.tif 000259
６１．前記カチオン性脂質が、カチオン性脂質（１）である、実施形態６０に記載のリポソーム内に封入された核酸。
【化１８８】
2021525743.tif 000260
６２．前記カチオン性脂質が、カチオン性脂質（１１）、（１２）、（１３）、（１４）、（１５）、（１６）、（１７）、（１８）、（１９）、または（２０）である、実施形態３４に記載のリポソーム内に封入された核酸。
【化１８９】
2021525743.tif 000261
【表１３】
2021525743.tif 000262
６３．前記カチオン性脂質が、カチオン性脂質（１１）である、実施形態６２に記載のリポソーム内に封入された核酸。
【化１９０】
2021525743.tif 000263
６４．実施形態３４〜６３のいずれか１つに記載のリポソーム内に封入された核酸を含む、組成物。
６５．１つ以上のカチオン性脂質、１つ以上の非カチオン性脂質、および１つ以上のＰＥＧ修飾脂質からなる群から選択されるもう１つの脂質をさらに含む、実施形態６４に記載の組成物。
６６．前記核酸が、ペプチドまたはポリペプチドをコードするｍＲＮＡである、実施形態６４または６５に記載の組成物。
６７．前記ｍＲＮＡが、対象の肺もしくは肺細胞への送達またはその治療で使用するためのペプチドまたはポリペプチドをコードする、実施形態６４〜６６のいずれか１つに記載の組成物。
６８．前記ｍＲＮＡが、嚢胞性線維症膜コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）タンパク質をコードする、実施形態６７に記載の組成物。
６９．前記ｍＲＮＡが、対象の肝臓もしくは肝臓細胞への送達またはその治療で使用するためのペプチドまたはポリペプチドをコードする、実施形態６４〜６６のいずれか１つに記載の組成物。
７０．前記ｍＲＮＡが、オルニチントランスカルバミラーゼ（ＯＴＣ）タンパク質をコードする、実施形態６９に記載の組成物。
７１．前記ｍＲＮＡが、ワクチンに使用するためのペプチドまたはポリペプチドをコードする、実施形態６４〜６６のいずれか１つに記載の組成物。
７２．前記ｍＲＮＡが、抗原をコードする、実施形態７１に記載の組成物。
７３．タンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソームであって、前記リポソームが、１つ以上のカチオン性脂質と、任意に、１つ以上の非カチオン性脂質、１つ以上のコレステロールベースの脂質、および／または１つ以上のＰＥＧ修飾脂質と、を含み、少なくとも１つのカチオン性脂質が、式（ＩＩ）に従う構造を有するカチオン性脂質であり、
【化１９１】
2021525743.tif 000264
式中、
Ｌ１が、共有結合またはＣ１−Ｃ１０アルキレンであり、
Ｘ１が、ＮＲｂＲｃまたは５もしくは６員窒素含有ヘテロアリールであり、
Ｒ１が、ＯＲｆ、Ｎ（ＣＨ３）２、またはＣ１−Ｃ１０アルキルであり、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、Ｃ２−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ２−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルケニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキニル、ポリマー、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、５もしくは６員ヘテロシクロアルキル、５もしくは６員アリール、または５もしくは６員ヘテロアリールであり、
ＲｂおよびＲｃが各々、Ｃ１−Ｃ６−アルキルである、タンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
７４．Ｌ１が、共有結合である、実施形態７３に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
７５．Ｌ１が、−ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２−、または−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−である、実施形態７３に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
７６．４．Ｘ１が、ピリジニルである、実施形態７３〜７５のいずれか１つに記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
７７．Ｘ１が、ジメチルアミノである、実施形態７３〜７５のいずれか１つに記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
７８．Ｘ１が、メチルペンチルアミノである、実施形態７３〜７５のいずれか１つに記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
７９．Ｒ１が、ＣＨ３である、実施形態７３〜７８のいずれか１つに記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
８０．Ｒ１が、ＯＨである、実施形態７３〜７８のいずれか１つに記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
８１．Ｒ１が、ジメチルアミノである、実施形態７３〜７８のいずれか１つに記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
８２．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、Ｃ６−Ｃ３０−アルキルである、実施形態７３〜８１のいずれか１つに記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
８３．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、非置換Ｃ６−Ｃ３０−アルキルである、実施形態８２に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
８４．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、−Ｃ６Ｈ１３、−Ｃ７Ｈ１５、−Ｃ８Ｈ１７、−Ｃ９Ｈ１９、−Ｃ１０Ｈ２１、−Ｃ１１Ｈ２３、−Ｃ１２Ｈ２５、−Ｃ１３Ｈ２７、−Ｃ１４Ｈ２９、−Ｃ１５Ｈ３１、−Ｃ１６Ｈ３３、−Ｃ１７Ｈ３５、−Ｃ１８Ｈ３７、−Ｃ１９Ｈ３９、−Ｃ２０Ｈ４１、−Ｃ２１Ｈ４３、−Ｃ２２Ｈ４５、−Ｃ２３Ｈ４７、−Ｃ２４Ｈ４９、および−Ｃ２５Ｈ５１から選択される、実施形態８３に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
８５．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、＝Ｏ、ハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、チオール、エステル、およびチオエステルから選択される１つまたは複数の置換基で置換されたＣ６−Ｃ３０−アルキルである、実施形態７３〜８１のいずれか１つ実施形態のいずれか１つに記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
８６．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、＝Ｏ、ハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、チオール、エステル、およびチオエステルから選択される１つまたは複数の置換基で置換されたＣ１−Ｃ１０−アルキル−Ｏ−Ｃ１−Ｃ１０−アルキルである、実施形態７３〜８１のいずれか１つに記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
８７．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、Ｃ６−Ｃ３０−アルケニルまたはＣ８−Ｃ２０−アルケニルである、実施形態７３〜８１のいずれか１つに記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
８８．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、Ｃ８−アルケニル、Ｃ９−アルケニル、Ｃ１０−アルケニル、Ｃ１１−アルケニル、Ｃ１２−アルケニル、Ｃ１３−アルケニル、Ｃ１４−アルケニル、Ｃ１５−アルケニル、Ｃ１６−アルケニル、Ｃ１７−アルケニル、Ｃ１８−アルケニル、Ｃ１９−アルケニル、およびＣ２０−アルケニルから選択される、実施形態７３〜８１のいずれか１つに記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
８９．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、非置換Ｃ８−アルケニル、非置換Ｃ９−アルケニル、非置換Ｃ１０−アルケニル、非置換Ｃ１１−アルケニル、非置換Ｃ１２−アルケニル、非置換Ｃ１３−アルケニル、非置換Ｃ１４−アルケニル、非置換Ｃ１５−アルケニル、非置換Ｃ１６−アルケニル、非置換Ｃ１７−アルケニル、非置換Ｃ１８−アルケニル、非置換Ｃ１９−アルケニル、および非置換Ｃ２０−アルケニルから選択される、実施形態７３〜８１のいずれか１つに記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
９０．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、−（ＣＨ２）４ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）５ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）６ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）７ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）８ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）９ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１０ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１１ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１２ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１３ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１４ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１５ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１６ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１７ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１８ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）７ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）３ＣＨ３、−（ＣＨ２）７ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）５ＣＨ３、−（ＣＨ２）４ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）８ＣＨ３、−（ＣＨ２）７ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）７ＣＨ３、−（ＣＨ２）６ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）４ＣＨ３、−（ＣＨ２）７ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）４ＣＨ３、−（ＣＨ２）７ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ３、−（ＣＨ２）３ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）４ＣＨ３、−（ＣＨ２）３ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ３、−（ＣＨ２）１１ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）７ＣＨ３、および−（ＣＨ２）２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ３から選択される、実施形態７３〜８１のいずれか１つに記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
９１．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５のうちの少なくとも１つが、５もしくは６員ヘテロアリールである、実施形態７３〜８１のいずれか１つに記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
９２．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々、５もしくは６員ヘテロアリールである、実施形態７３〜８１のいずれか１つに記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
９３．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が、イミダゾールまたはその誘導体である、実施形態７３、９１、または９２に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
９４．前記カチオン性脂質が、式（ＩＩａ）、（ＩＩｂ）、（ＩＩｃ）、（Ｉｄ）、（ＩＩｅ）、（ＩＩｆ）、（ＩＩｇ）、または（ＩＩｈ）の構造を有する、実施形態７３に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
【化１９２】
2021525743.tif 000265
９５．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、
【化１９３】
2021525743.tif 000266
【化１９４】
2021525743.tif 000267
から選択される、実施形態９４に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
９６．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、
【化１９５】
2021525743.tif 000268
から選択される、実施形態９４に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
９７．前記カチオン性脂質が、カチオン性脂質（１）、（２）、（３）、（４）、（５）、（６）、（７）、（８）、（９）、または（１０）である、実施形態７３に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
【化１９６】
2021525743.tif 000269
【表１４】
2021525743.tif 000270
９８．前記カチオン性脂質が、カチオン性脂質（１）である、実施形態９７に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
【化１９７】
2021525743.tif 000271
９９．前記カチオン性脂質が、カチオン性脂質（１１）、（１２）、（１３）、（１４）、（１５）、（１６）、（１７）、（１８）、（１９）、または（２０）である、実施形態７３に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
【化１９８】
2021525743.tif 000272
【表１５】
2021525743.tif 000273
１００．前記カチオン性脂質が、カチオン性脂質（１１）である、実施形態９９に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
【化１９９】
2021525743.tif 000274
１０１．実施形態７３〜９６のいずれか１つに記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソームを含む、組成物。
１０２．嚢胞性線維症膜コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）タンパク質をコードするｍＲＮＡを含む、実施形態９７に記載の組成物。
１０３．オルニチントランスカルバミラーゼ（ＯＴＣ）タンパク質をコードするｍＲＮＡを含む、実施形態９７に記載の組成物。
１０４．リポソーム内に封入された核酸であって、前記リポソームが、式（ＩＩ）に従う構造を有するカチオン性脂質を含み、
【化２００】
2021525743.tif 000275
式中、
Ｌ１が、共有結合またはＣ１−Ｃ１０アルキレンであり、
Ｘ１が、ＮＲｂＲｃまたは５もしくは６員窒素含有ヘテロアリールであり、
Ｒ１が、ＯＲｆ、Ｎ（ＣＨ３）２、またはＣ１−Ｃ１０アルキルであり、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、Ｃ２−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ２−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルケニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキニル、ポリマー、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、５もしくは６員ヘテロシクロアルキル、５もしくは６員アリール、または５もしくは６員ヘテロアリールであり、
ＲｂおよびＲｃが各々、Ｃ１−Ｃ６−アルキルである、リポソーム内に封入された核酸。
１０５．Ｌ１が、共有結合である、実施形態１０４に記載のリポソーム内に封入された核酸。
１０６．Ｌ１が、−ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２−、または−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−である、実施形態１０４に記載のリポソーム内に封入された核酸。
１０７．Ｘ１が、ピリジニルである、実施形態１０４〜１０６のいずれか１つに記載のリポソーム内に封入された核酸。
１０８．Ｘ１が、ジメチルアミノである、実施形態１０４〜１０６のいずれか１つに記載のリポソーム内に封入された核酸。
１０９．Ｘ１が、メチルペンチルアミノである、実施形態１０４〜１０６のいずれか１つに記載のリポソーム内に封入された核酸。
１１０．Ｒ１が、ＣＨ３である、実施形態１０４〜１０９のいずれか１つに記載のリポソーム内に封入された核酸。
１１１．Ｒ１が、ＯＨである、実施形態１０４〜１０９のいずれか１つに記載のリポソーム内に封入された核酸。
１１２．Ｒ１が、ジメチルアミノである、実施形態１０４〜１０９のいずれか１つに記載のリポソーム内に封入された核酸。
１１３．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、Ｃ６−Ｃ３０−アルキルである、実施形態１０４〜１１２のいずれか１つに記載のリポソーム内に封入された核酸。
１１４．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、非置換Ｃ６−Ｃ３０−アルキルである、実施形態１１３に記載のリポソーム内に封入された核酸。
１１５．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、−Ｃ６Ｈ１３、−Ｃ７Ｈ１５、−Ｃ８Ｈ１７、−Ｃ９Ｈ１９、−Ｃ１０Ｈ２１、−Ｃ１１Ｈ２３、−Ｃ１２Ｈ２５、−Ｃ１３Ｈ２７、−Ｃ１４Ｈ２９、−Ｃ１５Ｈ３１、−Ｃ１６Ｈ３３、−Ｃ１７Ｈ３５、−Ｃ１８Ｈ３７、−Ｃ１９Ｈ３９、−Ｃ２０Ｈ４１、−Ｃ２１Ｈ４３、−Ｃ２２Ｈ４５、−Ｃ２３Ｈ４７、−Ｃ２４Ｈ４９、および−Ｃ２５Ｈ５１から選択される、実施形態１１４に記載のリポソーム内に封入された核酸。
１１６．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、＝Ｏ、ハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、チオール、エステル、およびチオエステルから選択される１つまたは複数の置換基で置換されたＣ６−Ｃ３０−アルキルである、実施形態１０４〜１１２のいずれか１つ実施形態のいずれか１つに記載のリポソーム内に封入された核酸。
１１７．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、＝Ｏ、ハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、チオール、エステル、およびチオエステルから選択される１つまたは複数の置換基で置換されたＣ１−Ｃ１０−アルキル−Ｏ−Ｃ１−Ｃ１０−アルキルである、実施形態１０４〜１１２のいずれか１つに記載のリポソーム内に封入された核酸。
１１８．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、Ｃ６−Ｃ３０−アルケニルまたはＣ８−Ｃ２０−アルケニルである、実施形態１０４〜１１２のいずれか１つに記載のリポソーム内に封入された核酸。
１１９．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、Ｃ８−アルケニル、Ｃ９−アルケニル、Ｃ１０−アルケニル、Ｃ１１−アルケニル、Ｃ１２−アルケニル、Ｃ１３−アルケニル、Ｃ１４−アルケニル、Ｃ１５−アルケニル、Ｃ１６−アルケニル、Ｃ１７−アルケニル、Ｃ１８−アルケニル、Ｃ１９−アルケニル、およびＣ２０−アルケニルから選択される、実施形態１０４〜１１２のいずれか１つに記載のリポソーム内に封入された核酸。
１２０．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、非置換Ｃ８−アルケニル、非置換Ｃ９−アルケニル、非置換Ｃ１０−アルケニル、非置換Ｃ１１−アルケニル、非置換Ｃ１２−アルケニル、非置換Ｃ１３−アルケニル、非置換Ｃ１４−アルケニル、非置換Ｃ１５−アルケニル、非置換Ｃ１６−アルケニル、非置換Ｃ１７−アルケニル、非置換Ｃ１８−アルケニル、非置換Ｃ１９−アルケニル、および非置換Ｃ２０−アルケニルから選択される、実施形態１０４〜１１２のいずれか１つに記載のリポソーム内に封入された核酸。
１２１．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、−（ＣＨ２）４ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）５ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）６ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）７ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）８ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）９ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１０ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１１ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１２ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１３ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１４ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１５ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１６ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１７ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）１８ＣＨ＝ＣＨ２、−（ＣＨ２）７ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）３ＣＨ３、−（ＣＨ２）７ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）５ＣＨ３、｜−（ＣＨ２）４ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）８ＣＨ３、−（ＣＨ２）７ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）７ＣＨ３、−（ＣＨ２）６ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）４ＣＨ３、−（ＣＨ２）７ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）４ＣＨ３、−（ＣＨ２）７ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ３、−（ＣＨ２）３ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）４ＣＨ３、−（ＣＨ２）３ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ３、−（ＣＨ２）１１ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）７ＣＨ３、および−（ＣＨ２）２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ３から選択される、実施形態１０４〜１１２のいずれか１つに記載のリポソーム内に封入された核酸。
１２２．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５のうちの少なくとも１つが、５もしくは６員ヘテロアリールである、実施形態１０４〜１１２のいずれか１つに記載のいずれか１つに記載のリポソーム内に封入された核酸。
１２３．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々、５もしくは６員ヘテロアリールである、実施形態１０４〜１１２のいずれか１つに記載のリポソーム内に封入された核酸。
１２４．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が、イミダゾールまたはその誘導体である、実施形態１０４、１２２、または１２３に記載のリポソーム内に封入された核酸。
１２５．前記カチオン性脂質が、式（ＩＩａ）、（ＩＩｂ）、（ＩＩｃ）、（ＩｄＩ）、（ＩＩｅ）、（ＩＩｆ）、（ＩＩｇ）、または（ＩＩｈ）の構造を有する、実施形態１０４に記載のリポソーム内に封入された核酸。
【化２０１】
2021525743.tif 000276
１２６．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、
【化２０２】
2021525743.tif 000277
から選択される、実施形態１２５に記載のリポソーム内に封入された核酸。
１２７．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、
【化２０３】
2021525743.tif 000278
から選択される、実施形態１２５に記載のリポソーム内に封入された核酸。
１２８．前記カチオン性脂質が、カチオン性脂質（１）、（２）、（３）、（４）、（５）、（６）、（７）、（８）、（９）、または（１０）である、実施形態１０４に記載のリポソーム内に封入された核酸。
【化２０４】
2021525743.tif 000279
【表１６】
2021525743.tif 000280
１２９．前記カチオン性脂質が、カチオン性脂質（１）である、実施形態１２８に記載のリポソーム内に封入された核酸。
【化２０５】
2021525743.tif 000281
１３０．前記カチオン性脂質が、カチオン性脂質（１１）、（１２）、（１３）、（１４）、（１５）、（１６）、（１７）、（１８）、（１９）、または（２０）である、実施形態１０４に記載のリポソーム内に封入された核酸。
【化２０６】
2021525743.tif 000282
【表１７】
2021525743.tif 000283
１３１．前記カチオン性脂質が、カチオン性脂質（１１）である、実施形態１３０に記載のリポソーム内に封入された核酸。
【化２０７】
2021525743.tif 000284
１３２．実施形態１０４〜１２７のいずれか１つに記載のリポソーム内に封入された核酸を含む、組成物。
１３３．１つ以上のカチオン性脂質、１つ以上の非カチオン性脂質、および１つ以上のＰＥＧ修飾脂質からなる群から選択されるもう１つの脂質をさらに含む、実施形態１２８に記載の組成物。
１３４．前記核酸が、ペプチドまたはポリペプチドをコードするｍＲＮＡである、実施形態１２８または１３３に記載の組成物。
１３５．前記ｍＲＮＡが、対象の肺もしくは肺細胞への送達またはその治療で使用するためのペプチドまたはポリペプチドをコードする、実施形態１２８〜１３４のいずれか１つに記載の組成物。
１３６．前記ｍＲＮＡが、嚢胞性線維症膜コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）タンパク質をコードする、実施形態１３５に記載の組成物。
１３７．前記ｍＲＮＡが、対象の肝臓もしくは肝臓細胞への送達またはその治療で使用するためのペプチドまたはポリペプチドをコードする、実施形態１２８〜１３４のいずれか１つに記載の組成物。
１３８．前記ｍＲＮＡが、オルニチントランスカルバミラーゼ（ＯＴＣ）タンパク質をコードする、実施形態１３７に記載の組成物。
１３９．前記ｍＲＮＡが、ワクチンに使用するためのペプチドまたはポリペプチドをコードする、実施形態１２８〜１３４のいずれか１つに記載の組成物。
１４０．前記ｍＲＮＡが、抗原をコードする、実施形態１３９に記載の組成物。
１４１．タンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソームであって、前記リポソームが、１つ以上のカチオン性脂質、１つ以上の非カチオン性脂質、１つ以上のコレステロールベースの脂質、および１つ以上のＰＥＧ修飾脂質を含み、少なくとも１つのカチオン性脂質が、式（ＩＩａ）に従う構造を有するカチオン性脂質であり、
【化２０８】
2021525743.tif 000285
式中、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、Ｃ２−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ２−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルケニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキニル、ポリマー、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、５もしくは６員ヘテロシクロアルキル、５もしくは６員アリール、または５もしくは６員ヘテロアリールである、タンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
１４２．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、
【化２０９】
2021525743.tif 000286
から選択される、実施形態１４１に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
１４３．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、
【化２１０】
2021525743.tif 000287
から選択される、実施形態１４１に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
１４４．実施形態１４１〜１４３のいずれか１つに記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソームを含む、組成物。
１４５．嚢胞性線維症膜コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）タンパク質をコードするｍＲＮＡを含む、実施形態１４４に記載の組成物。
１４６．オルニチントランスカルバミラーゼ（ＯＴＣ）タンパク質をコードするｍＲＮＡを含む、実施形態１４５に記載の組成物。
１４７．リポソーム内に封入された核酸であって、前記リポソームが、式（ＩＩａ）に従う構造を有するカチオン性脂質を含み、
【化２１１】
2021525743.tif 000288
式中、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、Ｃ２−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ２−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルケニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキニル、ポリマー、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、５もしくは６員ヘテロシクロアルキル、５もしくは６員アリール、または５もしくは６員ヘテロアリールである、リポソーム内に封入された核酸。
１４８．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、
【化２１２】
2021525743.tif 000289
から選択される、実施形態１４７に記載のリポソーム内に封入された核酸。
１４９．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、
【化２１３】
2021525743.tif 000290
から選択される、実施形態１４７に記載のリポソーム内に封入された核酸。
１５０．実施形態１４７〜１４９のいずれか１つに記載のリポソーム内に封入された核酸を含む、組成物。
１５１．１つ以上のカチオン性脂質、１つ以上の非カチオン性脂質、および１つ以上のＰＥＧ修飾脂質からなる群から選択されるもう１つの脂質をさらに含む、実施形態１５０に記載の組成物。
１５２．前記核酸が、ペプチドまたはポリペプチドをコードするｍＲＮＡである、実施形態１５０または１５１に記載の組成物。
１５３．前記ｍＲＮＡが、対象の肺もしくは肺細胞への送達またはその治療で使用するためのペプチドまたはポリペプチドをコードする、実施形態１５０〜１５２のいずれか１つに記載の組成物。
１５４．前記ｍＲＮＡが、嚢胞性線維症膜コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）タンパク質をコードする、実施形態１５３に記載の組成物。
１５５．前記ｍＲＮＡが、対象の肝臓もしくは肝臓細胞への送達またはその治療で使用するためのペプチドまたはポリペプチドをコードする、実施形態１５０〜１５２のいずれか１つに記載の組成物。
１５６．前記ｍＲＮＡが、オルニチントランスカルバミラーゼ（ＯＴＣ）タンパク質をコードする、実施形態１５５に記載の組成物。
１５７．前記ｍＲＮＡが、ワクチンに使用するためのペプチドまたはポリペプチドをコードする、実施形態１５０〜１５２のいずれか１つに記載の組成物。
１５８．前記ｍＲＮＡが、抗原をコードする、実施形態１５７に記載の組成物。
１５９．タンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソームであって、前記リポソームが、１つ以上のカチオン性脂質、１つ以上の非カチオン性脂質、１つ以上のコレステロールベースの脂質、および１つ以上のＰＥＧ修飾脂質を含み、少なくとも１つのカチオン性脂質が、式（ＩＩｂ）に従う構造を有するカチオン性脂質であり、
【化２１４】
2021525743.tif 000291
式中、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、Ｃ２−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ２−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルケニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキニル、ポリマー、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、５もしくは６員ヘテロシクロアルキル、５もしくは６員アリール、または５もしくは６員ヘテロアリールである、タンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
１６０．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、
【化２１５】
2021525743.tif 000292
から選択される、実施形態１５９に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
１６１．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、
【化２１６】
2021525743.tif 000293
から選択される、実施形態１５９に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
１６２．実施形態１５９〜１６１のいずれか１つに記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソームを含む、組成物。
１６３．嚢胞性線維症膜コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）タンパク質をコードするｍＲＮＡを含む、実施形態１６２に記載の組成物。
１６４．オルニチントランスカルバミラーゼ（ＯＴＣ）タンパク質をコードするｍＲＮＡを含む、実施形態１６２に記載の組成物。
１６５．リポソーム内に封入された核酸であって、前記リポソームが、式（ＩＩｂ）に従う構造を有するカチオン性脂質を含み、
【化２１７】
2021525743.tif 000294
式中、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、Ｃ２−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ２−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルケニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキニル、ポリマー、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、５もしくは６員ヘテロシクロアルキル、５もしくは６員アリール、または５もしくは６員ヘテロアリールである、リポソーム内に封入された核酸。
１６６．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、
【化２１８】
2021525743.tif 000295
から選択される、実施形態１６５に記載のリポソーム内に封入された核酸。
１６７．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、
【化２１９】
2021525743.tif 000296
から選択される、実施形態１６５に記載のリポソーム内に封入された核酸。
１６８．実施形態１６５〜１６７のいずれか１つに記載のリポソーム内に封入された核酸を含む、組成物。
１６９．１つ以上のカチオン性脂質、１つ以上の非カチオン性脂質、および１つ以上のＰＥＧ修飾脂質からなる群から選択されるもう１つの脂質をさらに含む、実施形態１６８に記載の組成物。
１７０．前記核酸が、ペプチドまたはポリペプチドをコードするｍＲＮＡである、実施形態１６７または１６８に記載の組成物。
１７１．前記ｍＲＮＡが、対象の肺もしくは肺細胞への送達またはその治療で使用するためのペプチドまたはポリペプチドをコードする、実施形態１６８〜１７０のいずれか１つに記載の組成物。
１７２．前記ｍＲＮＡが、嚢胞性線維症膜コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）タンパク質をコードする、実施形態１７１に記載の組成物。
１７３．前記ｍＲＮＡが、対象の肝臓もしくは肝臓細胞への送達またはその治療で使用するためのペプチドまたはポリペプチドをコードする、実施形態１６８〜１７０のいずれか１つに記載の組成物。
１７４．前記ｍＲＮＡが、オルニチントランスカルバミラーゼ（ＯＴＣ）タンパク質をコードする、実施形態１７３に記載の組成物。
１７５．前記ｍＲＮＡが、ワクチンに使用するためのペプチドまたはポリペプチドをコードする、実施形態１６８〜１７０のいずれか１つに記載の組成物。
１７６．前記ｍＲＮＡが、抗原をコードする、実施形態１７５に記載の組成物。
１７７．タンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソームであって、前記リポソームが、１つ以上のカチオン性脂質、１つ以上の非カチオン性脂質、１つ以上のコレステロールベースの脂質、１つ以上のＰＥＧ修飾脂質を含み、少なくとも１つのカチオン性脂質が、式（ＩＩｃ）に従う構造を有するカチオン性脂質であり、
【化２２０】
2021525743.tif 000297
式中、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、Ｃ２−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ２−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルケニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキニル、ポリマー、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、５もしくは６員ヘテロシクロアルキル、５もしくは６員アリール、または５もしくは６員ヘテロアリールである、タンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
１７８．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、
【化２２１】
2021525743.tif 000298
から選択される、実施形態１７７に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
１７９．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、
【化２２２】
2021525743.tif 000299
から選択される、実施形態１７７に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
１８０．実施形態１７７〜１７９のいずれか１つに記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソームを含む、組成物。
１８１．嚢胞性線維症膜コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）タンパク質をコードするｍＲＮＡを含む、実施形態１８０に記載の組成物。
１８２．オルニチントランスカルバミラーゼ（ＯＴＣ）タンパク質をコードするｍＲＮＡを含む、実施形態１８０に記載の組成物。
１８３．リポソーム内に封入された核酸であって、前記リポソームが、式（ＩＩｃ）に従う構造を有するカチオン性脂質を含み、
【化２２３】
2021525743.tif 000300
式中、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、Ｃ２−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ２−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルケニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキニル、ポリマー、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、５もしくは６員ヘテロシクロアルキル、５もしくは６員アリール、または５もしくは６員ヘテロアリールである、リポソーム内に封入された核酸。
１８４．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、
【化２２４】
2021525743.tif 000301
から選択される、実施形態１８３に記載のリポソーム内に封入された核酸。
１８５．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、
【化２２５】
2021525743.tif 000302
から選択される、実施形態１８３に記載のリポソーム内に封入された核酸。
１８６．実施形態１８３〜１８５のいずれか１つに記載のリポソーム内に封入された核酸を含む、組成物。
１８７．１つ以上のカチオン性脂質、１つ以上の非カチオン性脂質、および１つ以上のＰＥＧ修飾脂質からなる群から選択されるもう１つの脂質をさらに含む、実施形態１８６に記載の組成物。
１８８．前記核酸が、ペプチドまたはポリペプチドをコードするｍＲＮＡである、実施形態１８６または１８７に記載の組成物。
１８９．前記ｍＲＮＡが、対象の肺もしくは肺細胞への送達またはその治療で使用するためのペプチドまたはポリペプチドをコードする、実施形態１８６〜１８８のいずれか１つに記載の組成物。
１９０．前記ｍＲＮＡが、嚢胞性線維症膜コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）タンパク質をコードする、実施形態１８９に記載の組成物。
１９１．前記ｍＲＮＡが、対象の肝臓もしくは肝臓細胞への送達またはその治療で使用するためのペプチドまたはポリペプチドをコードする、実施形態１８６〜１８８のいずれか１つに記載の組成物。
１９２．前記ｍＲＮＡが、オルニチントランスカルバミラーゼ（ＯＴＣ）タンパク質をコードする、実施形態１９１に記載の組成物。
１９３．前記ｍＲＮＡが、ワクチンに使用するためのペプチドまたはポリペプチドをコードする、実施形態１８６〜１８８のいずれか１つに記載の組成物。
１９４．前記ｍＲＮＡが、抗原をコードする、実施形態１９３に記載の組成物。
１９５．タンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソームであって、前記リポソームが、１つ以上のカチオン性脂質、１つ以上の非カチオン性脂質、１つ以上のコレステロールベースの脂質、および１つ以上のＰＥＧ修飾脂質を含み、少なくとも１つのカチオン性脂質が、式（ＩＩｄ）に従う構造を有するカチオン性脂質であり、
【化２２６】
2021525743.tif 000303
式中、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、Ｃ２−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ２−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルケニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキニル、ポリマー、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、５もしくは６員ヘテロシクロアルキル、５もしくは６員アリール、または５もしくは６員ヘテロアリールである、タンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
１９６．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、
【化２２７】
2021525743.tif 000304
から選択される、実施形態１９５に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
１９７．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、
【化２２８】
2021525743.tif 000305
から選択される、実施形態１９５に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
１９８．実施形態１９５〜１９７のいずれか１つに記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソームを含む、組成物。
１９９．嚢胞性線維症膜コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）タンパク質をコードするｍＲＮＡを含む、実施形態１９８に記載の組成物。
２００．オルニチントランスカルバミラーゼ（ＯＴＣ）タンパク質をコードするｍＲＮＡを含む、実施形態１９８に記載の組成物。
２０１．リポソーム内に封入された核酸であって、前記リポソームが、式（ＩＩｄ）に従う構造を有するカチオン性脂質を含み、
【化２２９】
2021525743.tif 000306
式中、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、Ｃ２−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ２−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルケニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキニル、ポリマー、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、５もしくは６員ヘテロシクロアルキル、５もしくは６員アリール、または５もしくは６員ヘテロアリールである、リポソーム内に封入された核酸。２０２．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、
【化２３０】
2021525743.tif 000307
から選択される、実施形態２０１に記載のリポソーム内に封入された核酸。
２０３．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、
【化２３１】
2021525743.tif 000308
から選択される、実施形態２０１に記載のリポソーム内に封入された核酸。
２０４．実施形態２０１〜２０３のいずれか１つに記載のリポソーム内に封入された核酸を含む、組成物。
２０５．１つ以上のカチオン性脂質、１つ以上の非カチオン性脂質、および１つ以上のＰＥＧ修飾脂質からなる群から選択されるもう１つの脂質をさらに含む、実施形態２０４に記載の組成物。
２０６．前記核酸が、ペプチドまたはポリペプチドをコードするｍＲＮＡである、実施形態２０４または２０５に記載の組成物。
２０７．前記ｍＲＮＡが、対象の肺もしくは肺細胞への送達またはその治療で使用するためのペプチドまたはポリペプチドをコードする、実施形態２０４〜２０６のいずれか１つに記載の組成物。
２０８．前記ｍＲＮＡが、嚢胞性線維症膜コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）タンパク質をコードする、実施形態２０７に記載の組成物。
２０９．前記ｍＲＮＡが、対象の肝臓もしくは肝臓細胞への送達またはその治療で使用するためのペプチドまたはポリペプチドをコードする、実施形態２０４〜２０６のいずれか１つに記載の組成物。
２１０．前記ｍＲＮＡが、オルニチントランスカルバミラーゼ（ＯＴＣ）タンパク質をコードする、実施形態２０９に記載の組成物。
２１１．前記ｍＲＮＡが、ワクチンに使用するためのペプチドまたはポリペプチドをコードする、実施形態２０４〜２０６のいずれか１つに記載の組成物。
２１２．前記ｍＲＮＡが、抗原をコードする、実施形態２１１に記載の組成物。
２１３．タンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソームであって、前記リポソームが、１つ以上のカチオン性脂質、１つ以上の非カチオン性脂質、１つ以上のコレステロールベースの脂質、および１つ以上のＰＥＧ修飾脂質を含み、少なくとも１つのカチオン性脂質が、式（ＩＩｅ）に従う構造を有するカチオン性脂質であり、
【化２３２】
2021525743.tif 000309
式中、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、Ｃ２−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ２−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルケニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキニル、ポリマー、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、５もしくは６員ヘテロシクロアルキル、５もしくは６員アリール、または５もしくは６員ヘテロアリールである、タンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
２１４．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、
【化２３３】
2021525743.tif 000310
から選択される、実施形態２１３に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
２１５．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、
【化２３４】
2021525743.tif 000311
から選択される、実施形態２１３に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
２１６．前記カチオン性脂質が、カチオン性脂質（１）、（２）、（３）、（４）、（５）、（６）、（７）、（８）、（９）、または（１０）である、実施形態２１３に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
【化２３５】
2021525743.tif 000312
【表１８】
2021525743.tif 000313
２１７．前記カチオン性脂質が、カチオン性脂質（１）である、実施形態２１６に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
【化２３６】
2021525743.tif 000314
２１８．実施形態２１３〜２１５のいずれか１つに記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソームを含む、組成物。
２１９．嚢胞性線維症膜コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）タンパク質をコードするｍＲＮＡを含む、実施形態２１６に記載の組成物。
２２０．オルニチントランスカルバミラーゼ（ＯＴＣ）タンパク質をコードするｍＲＮＡを含む、実施形態２１６に記載の組成物。
２２１．リポソーム内に封入された核酸であって、前記リポソームが、式（ＩＩｅ）に従う構造を有するカチオン性脂質を含み、
【化２３７】
2021525743.tif 000315
式中、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、Ｃ２−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ２−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルケニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキニル、ポリマー、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、５もしくは６員ヘテロシクロアルキル、５もしくは６員アリール、または５もしくは６員ヘテロアリールである、リポソーム内に封入された核酸。
２２２．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、
【化２３８】
2021525743.tif 000316
から選択される、実施形態２２１に記載のリポソーム内に封入された核酸。
２２３．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、
【化２３９】
2021525743.tif 000317
から選択される、実施形態２２１に記載のリポソーム内に封入された核酸。
２２４．前記カチオン性脂質が、カチオン性脂質（１）、（２）、（３）、（４）、（５）、（６）、（７）、（８）、（９）、または（１０）である、実施形態２２１に記載のリポソーム内に封入された核酸。
【化２４０】
2021525743.tif 000318
【表１９】
2021525743.tif 000319
２２５．前記カチオン性脂質が、カチオン性脂質（１）である、実施形態２２４に記載のリポソーム内に封入された核酸。
【化２４１】
2021525743.tif 000320
２２６．実施形態２２１〜２２３のいずれか１つに記載のリポソーム内に封入された核酸を含む、組成物。
２２７．１つ以上のカチオン性脂質、１つ以上の非カチオン性脂質、および１つ以上のＰＥＧ修飾脂質からなる群から選択されるもう１つの脂質をさらに含む、実施形態２２４に記載の組成物。
２２８．前記核酸が、ペプチドまたはポリペプチドをコードするｍＲＮＡである、実施形態２２４または２２７に記載の組成物。
２２９．前記ｍＲＮＡが、対象の肺もしくは肺細胞への送達またはその治療で使用するためのペプチドまたはポリペプチドをコードする、実施形態２２４〜２２８のいずれか１つに記載の組成物。
２３０．前記ｍＲＮＡが、嚢胞性線維症膜コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）タンパク質をコードする、実施形態２２９に記載の組成物。
２３１．前記ｍＲＮＡが、対象の肝臓もしくは肝臓細胞への送達またはその治療で使用するためのペプチドまたはポリペプチドをコードする、実施形態２２４〜２２８のいずれか１つに記載の組成物。
２３２．前記ｍＲＮＡが、オルニチントランスカルバミラーゼ（ＯＴＣ）タンパク質をコードする、実施形態２３１に記載の組成物。
２３３．前記ｍＲＮＡが、ワクチンに使用するためのペプチドまたはポリペプチドをコードする、実施形態２２４〜２２８のいずれか１つに記載の組成物。
２３４．前記ｍＲＮＡが、抗原をコードする、実施形態２３３に記載の組成物。
２３５．タンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソームであって、前記リポソームが、１つ以上のカチオン性脂質、１つ以上の非カチオン性脂質、１つ以上のコレステロールベースの脂質、および１つ以上のＰＥＧ修飾脂質を含み、少なくとも１つのカチオン性脂質が、式（ＩＩｆ）に従う構造を有するカチオン性脂質であり、
【化２４２】
2021525743.tif 000321
式中、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、Ｃ２−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ２−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルケニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキニル、ポリマー、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、５もしくは６員ヘテロシクロアルキル、５もしくは６員アリール、または５もしくは６員ヘテロアリールである、タンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
２３６．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、
【化２４３】
2021525743.tif 000322
【化２４４】
2021525743.tif 000323
から選択される、実施形態２３５に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、
【化２４５】
2021525743.tif 000324
から選択される、実施形態２３５に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
２３７．前記カチオン性脂質が、カチオン性脂質（１１）、（１２）、（１３）、（１４）、（１５）、（１６）、（１７）、（１８）、（１９）、または（２０）である、実施形態２３５に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
【化２４６】
2021525743.tif 000325
【表２０】
2021525743.tif 000326
２３８．前記カチオン性脂質が、カチオン性脂質（１１）である、実施形態２３７に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
【化２４７】
2021525743.tif 000327
２３９．実施形態２３５〜２３６のいずれか１つに記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソームを含む、組成物。
２４０．嚢胞性線維症膜コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）タンパク質をコードするｍＲＮＡを含む、実施形態２３７に記載の組成物。
２４１．オルニチントランスカルバミラーゼ（ＯＴＣ）タンパク質をコードするｍＲＮＡを含む、実施形態２３７に記載の組成物。
２４２．リポソーム内に封入された核酸であって、前記リポソームが、式（ＩＩｆ）に従う構造を有するカチオン性脂質を含み、
【化２４８】
2021525743.tif 000328
式中、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、Ｃ２−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ２−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルケニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキニル、ポリマー、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、５もしくは６員ヘテロシクロアルキル、５もしくは６員アリール、または５もしくは６員ヘテロアリールである、リポソーム内に封入された核酸。
２４３．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、
【化２４９】
2021525743.tif 000329
から選択される、実施形態２４２に記載のリポソーム内に封入された核酸。
２４４．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、
【化２５０】
2021525743.tif 000330
から選択される、実施形態２４２に記載のリポソーム内に封入された核酸。
２４５．前記カチオン性脂質が、カチオン性脂質（１１）、（１２）、（１３）、（１４）、（１５）、（１６）、（１７）、（１８）、（１９）、または（２０）である、実施形態２４２に記載のリポソーム内に封入された核酸。
【化２５１】
2021525743.tif 000331
【表２１】
2021525743.tif 000332
２４６．前記カチオン性脂質が、カチオン性脂質（１１）である、実施形態２４５に記載のリポソーム内に封入された核酸。
【化２５２】
2021525743.tif 000333
２４７．実施形態２４２〜２４４のいずれか１つに記載のリポソーム内に封入された核酸を含む、組成物。
２４８．１つ以上のカチオン性脂質、１つ以上の非カチオン性脂質、および１つ以上のＰＥＧ修飾脂質からなる群から選択されるもう１つの脂質をさらに含む、実施形態２４５に記載の組成物。
２４９．前記核酸が、ペプチドまたはポリペプチドをコードするｍＲＮＡである、実施形態２４５または２４８に記載の組成物。
２５０．前記ｍＲＮＡが、対象の肺もしくは肺細胞への送達またはその治療で使用するためのペプチドまたはポリペプチドをコードする、実施形態２４５〜２４９のいずれか１つに記載の組成物。
２５１．前記ｍＲＮＡが、嚢胞性線維症膜コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）タンパク質をコードする、実施形態２５０に記載の組成物。
２５２．前記ｍＲＮＡが、対象の肝臓もしくは肝臓細胞への送達またはその治療で使用するためのペプチドまたはポリペプチドをコードする、実施形態２４５〜２４９のいずれか１つに記載の組成物。
２５３．前記ｍＲＮＡが、オルニチントランスカルバミラーゼ（ＯＴＣ）タンパク質をコードする、実施形態２５２に記載の組成物。
２５４．前記ｍＲＮＡが、ワクチンに使用するためのペプチドまたはポリペプチドをコードする、実施形態２４５〜２４９のいずれか１つに記載の組成物。
２５５．前記ｍＲＮＡが、抗原をコードする、実施形態２５４に記載の組成物。
２５６．タンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソームであって、前記リポソームが、１つ以上のカチオン性脂質、１つ以上の非カチオン性脂質、１つ以上のコレステロールベースの脂質、および１つ以上のＰＥＧ修飾脂質を含み、少なくとも１つのカチオン性脂質が、式（ＩＩｇ）に従う構造を有するカチオン性脂質であり、
【化２５３】
2021525743.tif 000334
式中、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、Ｃ２−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ２−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルケニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキニル、ポリマー、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、５もしくは６員ヘテロシクロアルキル、５もしくは６員アリール、または５もしくは６員ヘテロアリールである、タンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
２５７．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、
【化２５４】
2021525743.tif 000335
から選択される、実施形態２５６に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
２５８．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、
【化２５５】
2021525743.tif 000336
から選択される、実施形態２５６に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
２５９．実施形態２５６〜２５８のいずれか１つに記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソームを含む、組成物。
２６０．嚢胞性線維症膜コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）タンパク質をコードするｍＲＮＡを含む、実施形態２５９に記載の組成物。
２６１．オルニチントランスカルバミラーゼ（ＯＴＣ）タンパク質をコードするｍＲＮＡを含む、実施形態２５９に記載の組成物。
２６２．リポソーム内に封入された核酸であって、前記リポソームが、式（ＩＩｇ）に従う構造を有するカチオン性脂質を含み、
【化２５６】
2021525743.tif 000337
式中、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、Ｃ２−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ２−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルケニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキニル、ポリマー、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、５もしくは６員ヘテロシクロアルキル、５もしくは６員アリール、または５もしくは６員ヘテロアリールである、リポソーム内に封入された核酸。
２６３．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、
【化２５７】
2021525743.tif 000338
から選択される、実施形態２６２に記載のリポソーム内に封入された核酸。
２６４．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、
【化２５８】
2021525743.tif 000339
から選択される、実施形態２６２に記載のリポソーム内に封入された核酸。
２６５．実施形態２６２〜２６４のいずれか１つに記載のリポソーム内に封入された核酸を含む、組成物。
２６６．１つ以上のカチオン性脂質、１つ以上の非カチオン性脂質、および１つ以上のＰＥＧ修飾脂質からなる群から選択されるもう１つの脂質をさらに含む、実施形態２６５に記載の組成物。
２６７．前記核酸が、ペプチドまたはポリペプチドをコードするｍＲＮＡである、実施形態２６５または２６６に記載の組成物。
２６８．前記ｍＲＮＡが、対象の肺もしくは肺細胞への送達またはその治療で使用するためのペプチドまたはポリペプチドをコードする、実施形態２６５〜２６７のいずれか１つに記載の組成物。
２６９．前記ｍＲＮＡが、嚢胞性線維症膜コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）タンパク質をコードする、実施形態２６８に記載の組成物。
２７０．前記ｍＲＮＡが、対象の肝臓もしくは肝臓細胞への送達またはその治療で使用するためのペプチドまたはポリペプチドをコードする、実施形態２６５〜２６７のいずれか１つに記載の組成物。
２７１．前記ｍＲＮＡが、オルニチントランスカルバミラーゼ（ＯＴＣ）タンパク質をコードする、実施形態２７０に記載の組成物。
２７２．前記ｍＲＮＡが、ワクチンに使用するためのペプチドまたはポリペプチドをコードする、実施形態２６５〜２６７のいずれか１つに記載の組成物。
２７３．前記ｍＲＮＡが、抗原をコードする、実施形態２７２に記載の組成物。
２７４．タンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソームであって、前記リポソームが、１つ以上のカチオン性脂質、１つ以上の非カチオン性脂質、１つ以上のコレステロールベースの脂質、および１つ以上のＰＥＧ修飾脂質を含み、少なくとも１つのカチオン性脂質が、式（ＩＩｈ）に従う構造を有するカチオン性脂質であり、
【化２５９】
2021525743.tif 000340
式中、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、Ｃ２−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ２−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルケニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキニル、ポリマー、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、５もしくは６員ヘテロシクロアルキル、５もしくは６員アリール、または５もしくは６員ヘテロアリールである、タンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
２７５．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、
【化２６０】
2021525743.tif 000341
から選択される、実施形態２７４に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
２７６．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、
【化２６１】
2021525743.tif 000342
から選択される、実施形態２７４に記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソーム。
２７７．実施形態２７４〜２７６のいずれか１つに記載のタンパク質をコードするｍＲＮＡを封入したリポソームを含む、組成物。
２７８．嚢胞性線維症膜コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）タンパク質をコードするｍＲＮＡを含む、実施形態２７７に記載の組成物。
２７９．オルニチントランスカルバミラーゼ（ＯＴＣ）タンパク質をコードするｍＲＮＡを含む、実施形態２７７に記載の組成物。
２８０．リポソーム内に封入された核酸であって、前記リポソームが、式（ＩＩｈ）に従う構造を有するカチオン性脂質を含み、
【化２６２】
2021525743.tif 000343
式中、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、Ｃ２−Ｃ３０−アルケニル、Ｃ２−Ｃ３０−アルキニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルケニル、ヘテロ−Ｃ１−Ｃ３０−アルキニル、ポリマー、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、５もしくは６員ヘテロシクロアルキル、５もしくは６員アリール、または５もしくは６員ヘテロアリールである、リポソーム内に封入された核酸。
２８１．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、
【化２６３】
2021525743.tif 000344
から選択される、実施形態２８０に記載のリポソーム内に封入された核酸。
２８２．Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、および／またはＲ５が各々独立して、
【化２６４】
2021525743.tif 000345
から選択される、実施形態２８０に記載のリポソーム内に封入された核酸。
２８３．実施形態２８０〜２８２のいずれか１つに記載のリポソーム内に封入された核酸を含む、組成物。
２８４．１つ以上のカチオン性脂質、１つ以上の非カチオン性脂質、および１つ以上のＰＥＧ修飾脂質からなる群から選択されるもう１つの脂質をさらに含む、実施形態２８３に記載の組成物。
２８５．前記核酸が、ペプチドまたはポリペプチドをコードするｍＲＮＡである、実施形態２８３または２８４に記載の組成物。
２８６．前記ｍＲＮＡが、対象の肺もしくは肺細胞への送達またはその治療で使用するためのペプチドまたはポリペプチドをコードする、実施形態２８３〜２８５のいずれか１つに記載の組成物。
２８７．前記ｍＲＮＡが、嚢胞性線維症膜コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）タンパク質をコードする、実施形態２８６に記載の組成物。
２８８．前記ｍＲＮＡが、対象の肝臓もしくは肝臓細胞への送達またはその治療で使用するためのペプチドまたはポリペプチドをコードする、実施形態２８３〜２８５のいずれか１つに記載の組成物。
２８９．前記ｍＲＮＡが、オルニチントランスカルバミラーゼ（ＯＴＣ）タンパク質をコードする、実施形態２８８に記載の組成物。
２９０．前記ｍＲＮＡが、ワクチンに使用するためのペプチドまたはポリペプチドをコードする、実施形態２８３〜２８５のいずれか１つに記載の組成物。
２９１．前記ｍＲＮＡが、抗原をコードする、実施形態２９０に記載の組成物。
【国際調査報告】
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