(57)【要約】  本発明は、単離された収率および生成物分布によって測定される、ペプチド模倣物の大環状化の改善された方法を提供し、これは、１つまたは複数のバックボーンのアミドＣ＝Ｏ結合のターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）モチーフによる置換を含む。  この方法は一般的であり、さまざまなリングサイズで機能が強化される（例：トリペプチド、テトラペプチド、ペンタペプチド、およびヘキサペプチド）。  具体的には、本発明は、以下の構造を有するカルボニルバイオアイソステリックターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）エレメントを含むペプチド模倣大環状化合物を提供する。2021519347.tif 000106ここで、Ｘは、ヘテロ原子であり、そして、ここで、Ｒ１からＲ６は、それぞれ、アルキル、アリール、ヘテロアリールおよびＨから独立して選択される。
2021519347.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
カルボニルバイオアイソスターターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）エレメントを含むペプチド模倣大環状分子。
ここで、ターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）エレメントは、下記である:
【化１】
2021519347.tif 000096
ここで、
Ｘはヘテロ原子であり；そして、
ここで、
Ｒ１〜Ｒ６は、それぞれ独立して、アルキル、アリール、ヘテロアリールおよびＨから選択される。
【請求項２】
Ｘが、ＮＨ、Ｏ、またはＳである、請求項１に記載のペプチド模倣大環状分子。
【請求項３】
Ｘが、スルフィド、スルホン、またはスルホキシドである、請求項１に記載のペプチド模倣大環状分子。
【請求項４】
Ｘが、第二級または第三級アミンである、請求項１に記載のペプチド模倣大環状分子。
【請求項５】
ペプチド模倣大環状分子が、次の構造を有する、請求項１に記載のペプチド模倣大環状分子。
【化２】
2021519347.tif 000097
【請求項６】
ペプチド模倣大環状分子が、次の構造を有する、請求項１に記載のペプチド模倣大環状分子。
【化３】
2021519347.tif 000098
【請求項７】
複数のアミノ酸残基および／またはアミノ酸類似体残基を含み、前記残基が複数のペプチド結合によって連結されている、請求項１から６のいずれか一項に記載のペプチド模倣大環状化合物。
【請求項８】
アミノ酸残基が、以下の天然に存在するアミノ酸の残基から独立して選択される、請求項７に記載のペプチド模倣大環状分子：
2021519347.tif 000099
【請求項９】
大環状化合物のバックボーンが、５０原子まで、好ましくは１１〜３０原子、例えば１２〜２５原子で構成されている、前記請求項１〜８のいずれか１項に従うペプチド模倣大環状化合物。
【請求項１０】
請求項１に記載の式（Ｉａ）のペプチド模倣大環状化合物、またはその異性体または薬学的に許容される塩：
【化４】
2021519347.tif 000100
ここで
Ｘは、ヘテロ原子、好ましくは、ＯまたはＮＲｂであり、ここで、Ｒｂは、ＨおよびＣ１〜６アルキルから選択され；
Ｒ１〜Ｒ６は、それぞれ独立して、アルキル（たとえば、Ｃ１−６アルキル）、アリール、ヘテロアリールおよび水素から選択され；
各Ｒａは、アミノ酸側鎖（たとえば、天然に存在するまたは「天然の」アミノ酸の側鎖、または天然に存在しないまたは「非天然の」アミノ酸の側鎖）から独立して選択されるか、または隣接する−ＮＨ−基と一緒になって、Ｒａは飽和５員環を形成してもよい；
ｎは、０から５、好ましくは１、２または３の整数であり；そして
ｍは、０から５、好ましくは１、２または３の整数である。
ただし、ｍ＋ｎ≧２である。
【請求項１１】
請求項１に記載の式（Ｉｂ）のペプチド模倣大環状化合物、またはその異性体または薬学的に許容される塩：
【化５】
2021519347.tif 000101
ここで
Ｘは、ヘテロ原子、好ましくは、ＯまたはＮＲｂであり、ここで、Ｒｂは、ＨおよびＣ１〜６アルキルから選択され；
Ｒ１〜Ｒ６は、それぞれ独立して、アルキル（たとえば、Ｃ１−６アルキル）、アリール、ヘテロアリールおよび水素から選択され；
各Ｒａは、アミノ酸側鎖（たとえば、天然に存在するまたは「天然の」アミノ酸の側鎖、または天然に存在しないまたは「非天然の」アミノ酸の側鎖）から独立して選択されるか、または隣接する−ＮＨ−基と一緒になって、Ｒａは飽和５員環を形成してもよい；
ｐは、０から５、好ましくは０、１または２の整数であり；そして
ｑは、０から５、好ましくは０、１または２の整数である。
ただし、ｐ＋ｑ≧１である。
【請求項１２】
Ｒ１からＲ４がすべてＨである、請求項１〜１１のいずれか一項に記載のペプチド模倣大環状化合物。
【請求項１３】
Ｒ６がＨである、請求項１〜１２のいずれか一項に記載のペプチド模倣大環状化合物。
【請求項１４】
Ｒ５がＨまたはＣ１〜６アルキル（たとえば、メチル）である、請求項１から１３のいずれか一項に記載のペプチド模倣大環状化合物。
【請求項１５】
以下の工程を含む、請求項１から１４のいずれか一項に記載のペプチド模倣大環状化合物を合成する方法。
ａ．請求項１から６のいずれか一項に記載のカルボニルバイオアイソステリックターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）エレメントを含む直鎖状ペプチド模倣物を合成すること；そして
ｂ．直鎖状ペプチド模倣物の環化反応の実行。
【請求項１６】
環化反応が、ｈｅａｄ−ｔｏ−ｔａｉｌ反応である、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
環化反応が、ｓｉｄｅｃｈａｉｎ−ｔｏ−ｓｉｄｅｃｈａｉｎ反応である、請求項１５に記載の方法。
【請求項１８】
環化反応が、ｈｅａｄ−ｔｏ−ｓｉｄｅｃｈａｉｎ反応である、請求項１５に記載の方法。
【請求項１９】
環化反応が、ｓｉｄｅｃｈａｉｎ−ｔｏ−ｔａｉｌ反応である、請求項１５に記載の方法。
【請求項２０】
ｓｉｄｅｃｈａｉｎ−ｔｏ−ｓｉｄｅｃｈａｉｎ反応が、アミド、エステル、チオエステル、またはジスルフィド結合の形成によって達成される、請求項１７に記載の方法。
【請求項２１】
液相ペプチド合成を含む、請求項１５から２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２】
固相ペプチド合成を含む、請求項１５から２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２３】
カルボニルバイオアイソステリックターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）エレメントを導入するために使用される試薬が、
【化６】
2021519347.tif 000102
である、請求項１５から２２のいずれか一項に記載の方法である。
ここで、
Ｘは、ヘテロ原子であり、
Ｒ１からＲ５は、それぞれ、アルキル、アリール、ヘテロアリールおよびＨから独立して選択される。
【請求項２４】
Ｘが、ＮＨ、Ｏ、またはＳである、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
Ｘが、スルフィド、スルホン、またはスルホキシドである、請求項２３に記載の方法。
【請求項２６】
Ｘが、第二級または第三級アミンである、請求項２３に記載の方法。
【請求項２７】
試薬が以下である、請求項２３に記載の方法：
【化７】
2021519347.tif 000103
【請求項２８】
試薬が以下である、請求項２３に記載の方法：
【化８】
2021519347.tif 000104
ここで、
Ｒｂは、Ｈ、アルキル、アリール、ヘテロアリール、またはＢｏｃ、Ｆｍｏｃ、またはＣｂｚなどの除去可能な保護基である。
【請求項２９】
治療に使用するための、請求項１５から２８のいずれか一項に記載の方法により得られた、または得られうる、請求項１から１４のいずれか一項に記載のペプチド模倣大環状化合物、またはその異性体または薬学的に許容される塩。
【請求項３０】
請求項１５から２８のいずれか一項に記載の方法により得られた、または得られうる、請求項１から１４のいずれか一項に記載のペプチド模倣大環状化合物、またはその異性体または薬学的に許容される塩を、１以上の薬学的に許容される担体または賦形剤とともに含む、医薬組成物。
【請求項３１】
請求項１５から２８のいずれか一項に記載の方法により得られた、または得られうる、請求項１から１４のいずれか一項に記載のペプチド模倣大環状化合物、またはその異性体または薬学的に許容される塩の、治療において使用する薬剤の製造における使用。
【請求項３２】
状態、疾患または障害を治療または予防するためのヒトまたは非ヒト動物体の医学的治療の方法であって、
請求項１５から２８のいずれか一項に記載の方法により得られた、または得られうる、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の薬学的に有効な量のペプチド模倣大環状化合物またはその異性体または薬学的に許容される塩を前記体に投与するステップを含む、前記方法。
【請求項３３】
薬物候補を決定する方法であって、以下のステップを含む方法。
ａ．請求項１から１４のいずれか一項に記載の、または請求項１５から２８のいずれか一項に記載の方法によって得られた、または得ることができる複数のペプチド模倣大環状化合物、またはその異性体または薬学的に許容される塩を提供する工程：そして、
ｂ．前記複数のペプチド模倣大環状化合物に関して１つまたは複数の分析方法を実施して、前記薬物候補を決定する工程。
【請求項３４】
環状ペプチド薬物のバイオアイソスターである、請求項１に記載のペプチド模倣大環状化合物であって、
ここで、前記薬物に存在するカルボニル基のうちの１つまたは複数（たとえば、１つ）が、互いに独立して、式（ＩＩ）の部分によって置き換えられている、ペプチド模倣大環状化合物：
【化９】
2021519347.tif 000105
ここで：
Ｘは、ヘテロ原子、好ましくは、ＯまたはＮＲｂであり、
Ｒｂは、ＨおよびＣ１〜６アルキルから選択され；そして、
Ｒ１からＲ４は、それぞれ独立して、アルキル（たとえば、Ｃ１−６アルキル）、アリール、ヘテロアリールおよび水素から選択される。
【請求項３５】
環状ペプチド薬物が、環状テトラペプチド、環状ペンタペプチド、環状ヘキサペプチド、環状ヘプタペプチド、環状オクタペプチド、環状ノナペプチドおよびデカペプチド、環状ウンデカペプチド、環状ドデカ−およびトリデカペプチド、および環状テトラデカペプチドからなる群から選択される、請求項３４に記載のペプチド模倣大環状化合物。
【請求項３６】
環状ペプチド薬物が、アニデュラファンギン、ランレオチド、テラバンシン、ロミデプシン、ペギネサチド、リナクロチド、パシレオチド、ダルババンシン、オリタバンシン、ダプトマイシン、バンコマイシン、およびシクロスポリンＡからなる群から選択される、請求項３４に記載のペプチド模倣大環状分子。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の分野
本発明は、直鎖状ペプチド模倣物の環化を可能にするために、組成物、組み込み方法、およびペプチド鎖へのカルボニル模倣修飾の使用に関する。
より具体的には、本発明は、カルボニル基が生物学的等価性（ｂｉｏｉｓｏｔｅｒｉｃ）のターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）モチーフによって置換されているペプチド模倣大環状分子を作製するための新規な方法に関する。
そのような方法は、たとえば、創薬プログラムにおいて用途を見出すことができる環状ペプチドの信頼できる効率的な合成を可能にする。
【０００２】
本発明はさらに、生物学的等価性のターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）モチーフを含み、治療における医薬品として使用され得る新規のペプチド模倣大環状分子に関する。
【０００３】
カルボニル基がターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）モチーフによって置換されている、臨床使用中または臨床評価中の環状ペプチド薬物の生物学的等価体（Ｂｉｏｉｓｏｔｅｒｉｃ  ｆｏｒｍｓ）は、本発明の方法を使用してより効率的に合成することができる。
本発明はまた、そのような修飾された環状ペプチド薬物、それらの合成方法および治療におけるそれらの使用に関する。
【発明の背景】
【０００４】
現在、４０以上の環状ペプチド薬が臨床で使用されており、その大部分は天然物（シクロスポリン、バンコマイシンなど）に由来している（１）。
その対応する直鎖状のペプチドと比較して、環状ペプチドは、細胞透過性の向上、標的親和性の向上、およびタンパク質分解に対する耐性の恩恵を受ける（２）。
さらに、タンパク質間相互作用（ＰＰＩ）を含む最も困難な目的のいくつかに対して阻害剤として作用することができる（３）。
新しい環状ペプチド薬の発見と開発の大きな障害の１つは、その合成に関連する困難に関係している（４）。
７個以下のアミノ酸を含む短いペプチドの「ｈｅａｄ−ｔｏ−ｔａｉｌ」への環化は特に困難である。
環化中に遭遇する一般的な問題は、Ｃ末端エピマー化、シクロオリゴマー化、および重合から生じる副産物の出現である（スキーム１）。
その結果、さまざまな小さな環状ペプチド足場への容易なアクセスを提供できる新しい大環状化戦略を発見する差し迫った必要性がある（５）。
【０００５】
大環状環は、この文書内で、１１原子以上の単一の連続ループを意味するように定義されている。
環は、天然、非天然、またはアミノ酸類似体であり得る１０個以下のアミノ酸からなることが好ましい。
【０００６】
大環状環は、いくつかの閉環戦略を介して、直鎖状ペプチドまたはペプチド模倣体の環化反応を介して形成できる（４ｅ）。これらには以下が含まれる：
●ｈｅａｄ−ｔｏ−ｔａｉｌ環化（たとえば：アミド、Ｎ末端が、Ｃ末端のカルボン酸と反応して、アミド結合を形成する）、
●ｈｅａｄ−ｔｏ−ｓｉｄｅ−ｃｈａｉｎ環化（たとえば：アミド、Ｎ末端が、アスパラギン酸またはグルタミン酸のカルボキシルなどの側鎖Ｒ基と反応してアミド結合を形成する）
●ｓｉｄｅ−ｃｈａｉｎ−ｔｏ−ｔａｉｌ環化（たとえば：カルボキシル、Ｃ末端が、セリンまたはスレオニンのヒドロキシルなどの側鎖Ｒ基と反応してエステル結合を形成するか、またはシステインのチオール基と反応してチオエステル結合を形成する）、および
●側鎖から側鎖への環化（たとえば、２つのシステイン残基の側鎖が反応してジスルフィド結合を形成する）。
【０００７】
しかし、短いペプチド鎖に対するこれらの反応の効率は低く、８アミノ酸未満の大環状分子の合成は特に制限され、困難である（６）。
【０００８】
シュードプロリン、Ｎ−アルキル化、またはＤ−アミノ酸などのターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）エレメントを直鎖状ペプチドに組み込むと、ペプチドの大環状化の効率が向上すると報告されている（４ｃ、６）。
ただし、これらのターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）エレメントを使用する大環状化は、ペプチドの長さ、複数のターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）エレメントを組み込む必要性、ペプチド配列の要件などの要因の組み合わせによって制限される（たとえば、シュードプロリンと他の２つのプロリン（４ｅ）を使用したトリペプチドの環化、そして、さらに別の例として、テトラペプチドを高収率で環化するには、２つの交換する残基（ａｌｔｅｒｎａｔｉｎｇ  ｒｅｓｉｄｕｅｓ）がシュードプロリンに変換される必要があり、これにより、これらの残基は、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、またはＣｙｓのいずれかに制限される）（４ｅ）。
さらに、直鎖状ペプチド鎖内のこれらのターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）エレメントの位置は、大環状分子の収量において、重要かつ時には有害な役割を果たす（６ｂ）。
中央のアミド結合のＣ＝Ｏがカルボニルのバイオアイソスター（ｂｉｏｉｓｏｓｔｅｒｅ）であるオキセタン環で置き換えられたトリペプチドに関する私たちの研究室での最近の研究は、この要素がターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）であることを明らかにした（７）。
その結果、カルボニルのバイオアイソスターの直鎖状ペプチドのバックボーンへの導入は、Ｃ末端とＮ末端を近接させることで大環状化効率を改善する新しい方法を提供する（スキーム１）：
【化１】
2021519347.tif 000003
【０００９】
優れた立体模倣物であることに加えて、カルボニルのバイオアイソスターは、生成物の収量を増加させ（場合によっては３倍）、形成される二量体ペプチド環化などの副生成物の量を減少させることができるターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）エレメントである。
これは、環化を、より希薄でない条件下で、より大規模に実施して、より純粋な製品を生成できることを意味する。
さらに、カルボニルのバイオアイソステリックターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）エレメントは、ペプチド鎖の任意の点に組み込まれた場合のペプチド環化、および複数のタイプの環化に効率的である。
【００１０】
重要なことに、小分子薬物発見におけるバイオアイソスターとしてのオキセタンの使用は十分に確立されており（８）、ペプチド科学への応用が出現し始めている（９，１０）。たとえば、タンパク質や抗体のシステイン側鎖へのオキセタンの移植は、それらの安定性およびおよび活性を大幅に改善できる（９）。
これとは別に、Ｌｅｕ−エンケファリン（ｅｎｋｅｐｈａｌｉｎ）などの直鎖状ペプチドの血清半減期とｉｎ  ｖｉｖｏ鎮痛特性は、オキセタンを組み込むことで改善できる（１０）。
ただし、ペプチド模倣大環状化合物を合成する目的でターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）エレメントとして使用されているオキセタンまたは類似のバイオアイソステリックモチーフの例はない。
【００１１】
本発明は、多くの挑戦的なペプチド大環状化が、カルボニルのバイオアイソステリックターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）エレメントの組み込みによって有意に改善されることが示され、かつ、カルボニルバイオアイソスター修飾環状ペプチド（ＣＢＭＣＰ）が、生物活性アッセイに示されるように、従来の環状ペプチドの効果的な模倣物であり得ることを実証する。
これに基づいて、ＣＢＭＣＰは、創薬を含む生物医学的用途で使用するための貴重な新しいクラスのペプチド模倣体であると提案することができる。
【００１２】
発明の概略
本発明は、第１の態様として、以下を提供する：
１．カルボニルバイオアイソスターターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）エレメントを含むペプチド模倣大環状分子。
ここで、ターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）エレメントは、
【化２】
2021519347.tif 000004
ａ．Ｘはヘテロ原子；
ｂ．ここで、Ｒ１−６が、アルキル、アリール、ヘテロアリールまたはＨ。
２．Ｘが、ＮＨ、Ｏ、またはＳである、１に記載の構造。
３．Ｘが、スルフィド、スルホン、またはスルホキシドである、１に記載の構造。
４．Ｘが、第二級または第三級アミンである、１に記載の構造。
５．ターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）エレメントが、次のとおりである、１に記載の構造。
【化３】
2021519347.tif 000005
６．ターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）エレメントが次のとおりである、１に記載の構造。
【化４】
2021519347.tif 000006
【００１３】
本発明は、第２の態様として、以下を提供する：
７．以下の工程を含む、ペプチド模倣大環状分子を合成する方法：
ａ．ターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）エレメントを含む直鎖状ペプチドミメティックの合成；
ｂ．直鎖状ペプチドミメティックの環化反応の実行。
８．ターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）エレメントが、以下のとおりである７に記載の方法。
【化５】
2021519347.tif 000007
ａ．Ｘは、ヘテロ原子である；
ｂ．ここで、Ｒ１−６が、アルキル、アリール、ヘテロアリールまたはＨである。
９．Ｘが、ＮＨ、Ｏ、またはＳである、８に記載のターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）エレメントを用いる７に記載の方法。
１０．Ｘが、スルフィド、スルホン、またはスルホキシドである、８に記載のターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）エレメントを用いる７に記載の方法。
１１．Ｘが、第２級または第３級アミンである、８に記載のターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）エレメントを有する７に記載の方法。
１２．ターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）エレメントが以下である、７に記載の方法。
【化６】
2021519347.tif 000008
１３．ターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）エレメントが次のとおりである、７に記載の方法。
【化７】
2021519347.tif 000009
１４．環化が、ｈｅａｄ−ｔｏ−ｔａｉｌ反応である７に記載の方法。
１５．環化が、側鎖間反応である、７に記載の方法。
１６．環化が、ｈｅａｄ−ｔｏ−ｓｉｄｅｃｈａｉｎ反応である、７に記載の方法。
１７．環化が、ｓｉｄｅｃｈａｉｎ−ｔｏ−ｔａｉｌ反応である、７に記載の方法。
１８．側鎖から側鎖への環化が、アミド、エステル、チオエステル、またはジスルフィド結合の形成によって達成される、７による方法。
１９．液相ペプチド合成を使用する、７による方法。
２０．固相ペプチド合成を用いる、７による方法。
【００１４】
本発明は、第３の態様として、以下を提供する：
２１．ペプチド模倣大環状分子の合成のための、カルボニルバイオアイソスターターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）エレメントを導入するための以下の試薬の使用：
【化８】
2021519347.tif 000010
ａ．Ｘは、ヘテロ原子である；
ｂ．Ｒ１−５が、アルキル、アリール、ヘテロアリール、またはＨである。
２２．Ｘが、ＮＨ、Ｏ、またはＳである、２１に従った試薬の使用。
２３．Ｘが、スルフィド、スルホン、またはスルホキシドである、２１に記載の試薬の使用。
２４．Ｘが、第二級または第三級アミンである、２１に記載の試薬の使用。
２５．試薬が以下である、２１に記載の試薬の使用。
【化９】
2021519347.tif 000011
２６．試薬が次の場合の２１に従った試薬の使用：
【化１０】
2021519347.tif 000012
ａ．Ｒは、Ｈ、アルキル、アリール、ヘテロアリール、またはＢｏｃ、Ｃｂｚ、または当業者に知られている他の除去可能な保護基である。
【００１５】
本発明は、第４の態様として、以下を提供する。
２７．医薬品の製造に使用するための、ターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）機能を、１に含む、大環状ペプチド。
【００１６】
発明の詳細な説明
「大環状化合物」および「大環状環」という用語は、本明細書では交換可能に使用され、少なくとも１１個の共有結合した原子によって形成される連続環を含む化学構造を有する分子を指す。
本明細書で使用される「ペプチド模倣大環状化合物」という用語は、複数のペプチド結合によって連結された複数のアミノ酸残基および／またはアミノ酸類似体残基を含む化合物を指す。本明細書に開示されるペプチド模倣大環状化合物は、任意選択で、１つ以上のアミノ酸残基および／またはアミノ酸類似体残基の間の１つ以上の非ペプチド結合を含み得る。
本明細書で使用される場合、「アミノ酸」という用語は、α炭素と呼ばれる炭素に結合したアミノ基およびカルボキシル基の両方を含む分子を指す。適切なアミノ酸には、天然に存在するアミノ酸のＤ異性体およびＬ異性体（本明細書では「天然」アミノ酸とも呼ばれる）、ならびに、有機合成または他の代謝経路によって調製され得る、任意の非天然アミノ酸（本明細書では「非天然」とも呼ばれる）が含まれる。特に明記しない限り、「アミノ酸」という用語は、アミノ酸類似体を含むことを意図している。
【００１７】
理解されるように、「アミノ酸残基」または「アミノ酸類似体残基」の文脈で使用される場合の「残基」という用語は、アミノ酸またはアミノ酸類似体が以下の反応に関与したときに形成される部分を指す：直鎖状または環状ペプチドの形成において、それを少なくとも１つの他のアミノ酸またはアミノ酸類似体に共有結合させる。
【００１８】
アミノ酸またはアミノ酸類似体の共有結合は、末端基（たとえば、−ＯＨまたは−ＮＨ２）の反応から生じ得るか、またはアミノ酸またはアミノ酸類似体が官能基を有する側鎖を含む場合、その官能基の反応から生じ得る。
【００１９】
「天然に存在するアミノ酸」、「天然のアミノ酸」、および「天然のアミノ酸」という用語は、本明細書では互換的に使用され、自然界で合成されたペプチドに一般に見られ、一文字の略語Ａ、Ｒ、Ｎ、Ｃ、Ｄ、Ｑ、Ｅ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｌ、Ｋ、Ｍ、Ｆ、Ｐ、Ｓ、Ｔ、Ｗ、Ｙ、Ｕ、Ｖによって知られるアミノ酸のいずれか１つを指す。
【００２０】
「非天然に生じたアミノ酸」、「非天然アミノ酸」、および「非天然アミノ酸」という用語は、本明細書では互換的に使用され、自然界で合成されたペプチドには一般的に見られないアミノ酸を指し、たとえば、有機合成または他の代謝経路によって調製される。
非天然に生じたアミノ酸は、天然のアミノ酸と構造的に類似しており、本明細書に記載のペプチド模倣大環状化合物の形成においてアミノ酸の代わりに使用することができる。
それらは、たとえば、天然に存在するアミノ酸のＤ―異性体、非天然側鎖を有するアミノ酸、α炭素上に２つの置換基を有するアミノ酸、およびデヒドロアミノ酸を含む。
他の非限定的な例には、アミノ基とカルボキシル基の間に１つまたは複数の追加のメチレン基（たとえば、α−アミノβ−カルボキシ酸）が含まれること，または、アミノ基またはカルボキシ基を同様の反応性基で置換すること（たとえば、第一級アミンを、第二級または第三級アミンで置換すること、またはカルボキシ基をエステルで置換すること）を除いて、本明細書で定義される天然アミノ酸と構造的に同一である化合物が含まれる。
Ｎ−メチル化アミノ酸は、非天然アミノ酸の１つの非限定的な例である。
【００２１】
本明細書で使用される場合、「アミノ酸類似体」という用語は、アミノ酸の特性を模倣し、本明細書に記載のペプチド模倣大環状化合物の形成においてアミノ酸を置換することができる分子を指す。
アミノ酸類似体には、たとえば、アミノ酸のバックボーンの１つまたは複数の成分の操作によって作製された化合物が含まれる。
【００２２】
本明細書で使用される場合、「アミノ酸側鎖」という用語は、アミノ酸中のα炭素に結合した部分を指す。たとえば、アラニンのアミノ酸側鎖がメチルなどである。
他の非天然に生じたアミノ酸側鎖が本明細書で企図され、天然に存在するもの（たとえば、アミノ酸代謝産物）および合成的に作製され得るもの（たとえば、α、α二置換アミノ酸）を含む。
【００２３】
「α、α  二置換アミノ酸」という用語は、α炭素と呼ばれる炭素に結合し、２つの天然または非天然アミノ酸側鎖に結合しているアミノ基およびカルボキシル基の両方を含む分子を指す。
本明細書で使用される場合、「カルボニルバイオアイソステリック」または「カルボニルバイオアイソスター」という用語は、カルボニル基と同様の物理的および／または化学的特性を有する化学的置換基または基を有し、したがってカルボニル基と広く同様の生物学的特性を生じる部分を指す。
【００２４】
本明細書で使用される場合、「アルキル」という用語は、一価の飽和した直鎖状または分岐した炭化水素鎖を指す。
アルキル基の例には、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、イソペンチル、ネオ−ペンチル、ｎ−ヘキシルなどが含まれるが、これらに限定されない。
アルキル基は、好ましくは、１〜４個の炭素原子のような、１〜６個の炭素原子を含む。
特に明記しない限り、任意の「アルキル」基は、同一または異なることができる、１つまたは複数の置換基で置換することができる。
【００２５】
本明細書で使用される場合、「ハロアルキル」という用語は、１つまたは複数のハロ置換基を有する本明細書で定義されるアルキル基を指す。
このようなグループの例には、−ＣＨ２Ｆ、−ＣＨＦ２、−ＣＦ３、−ＣＣｌ３、ＣＨＣｌ２、−ＣＨ２ＣＦ３などがある。
【００２６】
本明細書で使用される場合、「アルコキシ」という用語は、−Ｏ−アルキル基を指し、ここで、アルキルは、本明細書で定義される通りである。
アルコキシ基の例には、これらに限定されないが、メトキシ、エトキシ、プロピルオキシなどが含まれる。
【００２７】
本明細書で使用される場合、「アリール」という用語は、芳香族の炭素環系をカバーすることを意図している。そのような環系は、単環式または多環式であり得る（たとえば、二環式）であり、少なくとも１つの不飽和芳香環を含む。これらが多環式環を含む場合、これらは融合または架橋され得る。
好ましくは、そのようなシステムは、６〜２０個の炭素原子、好ましくは、６または１０個の炭素原子のような６〜１４個の炭素原子を含む。
このようなグループの例には、フェニル、１−ナフチルおよび２−ナフチルが含まれる。
特に明記しない限り、任意の「アリール」基は、同一または異なることができる１つまたは複数の置換基で置換することができる。
【００２８】
本明細書で使用される場合、「ヘテロアリール」という用語は、複素環式芳香族基をカバーすることを意図している。
そのような基は、単環式または二環式であり得、少なくとも１つの不飽和ヘテロ芳香族環系を含む。
これらが単環式である場合、これらは、窒素、酸素、および硫黄から選択される少なくとも１つのヘテロ原子を含む５員または６員環を含み、芳香族系を形成するのに十分な共役結合を含む。
これらが二環式である場合、これらは、炭素環式または複素環式環と融合することができ、９−１１個の環原子を含むことができる。
ヘテロアリール基の例としては、チオフェン、チエニル、ピリジル、チアゾリル、フリル、ピロリル、トリアゾリル、イミダゾリル、オキサジアゾリル、オキサゾリル、ピラゾリル、イミダゾロニル、オキサゾロニル、チアゾロニル、テトラゾリル、チアジアゾリル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾフリル、インドリル、イソインドリル、ピリドニル、ピリダジニル、ピリミジニル、イミダゾピリジル、オキサピリジル、チアゾロピリジル、イミダゾピリダジニル、オキサゾピリダジニル、チアゾールピリダジニルおよびプリニルを含む。
特に明記しない限り、任意の「ヘテロアリール」は、同一または異なることができる１つまたは複数の置換基で置換することができる。
【００２９】
本明細書で使用される場合、「ヘテロ原子」という用語は、炭素または水素以外の任意の原子を指す。好ましくは、それは窒素、酸素または硫黄を指す。
【００３０】
特に明記しない限り、本明細書で定義される基のいずれかは、１つまたは複数の位置で適切な置換基で置換され得る。
複数の置換基が存在する場合、これらは同じでも異なっていてもよい。
適切な置換基は、Ｃ１−６アルキル（たとえば、Ｃ１−３アルキル、好ましくは−ＣＨ３）、Ｃ１−６ハロアルキル（たとえば、Ｃ１−３ハロアルキル）、ヒドロキシ、Ｃ１−６アルコキシ（たとえば、Ｃ１−３アルコキシ、好ましくは−ＯＣＨ３）、アミノ、シアノ、ニトロ、およびハロゲン原子（たとえば、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩ）である。
【００３１】
本明細書に記載のペプチド模倣大環状化合物は、１つまたは複数のキラル中心を含み得、したがって、異なる立体異性体形態で存在し得る。
「立体異性体」という用語は、同一の化学構成を有するが、原子または基の空間的配置に関して異なる化合物を指す。
立体異性体の例は、エナンチオマーおよびジアステレオマーである。
「エナンチオマー」という用語は、化合物の２つの立体異性体を指し、これらは互いに重ね合わせることができない鏡像である。
「ジアステレオマー」という用語は、互いの鏡像ではない、２つ以上のキラル中心を有する立体異性体を指す。
本発明は、本明細書に記載の化合物のいずれかの、ジアステレオマーおよびエナンチオマー、ならびにラセミ混合物にまで及ぶと考えられている。
【００３２】
本明細書に記載の化合物は、エナンチオ選択的またはジアステレオ選択的に合成され得るか、またはそれらのエナンチオマーおよび／またはジアステレオマーに分割され得る。
たとえば、これらが１つのキラル中心のみを含む場合、これらは、ラセミ体またはラセミ混合物（エナンチオマーの５０：５０混合物）の形態で、または非ラセミ形態のジアステレオマーまたはエナンチオマーの任意の混合物の形態で提供され得るか、または、純粋なエナンチオマーとして提供される。
ラセミ体として存在する化合物のいずれも、キラル相でのカラム分離などの当技術分野で知られている方法によって、または光学活性溶媒からの再結晶化によって、それらのエナンチオマーに分離することができる。
少なくとも二つの不斉炭素原子を有する化合物は、それ自体公知の方法を用いて（たとえば。クロマトグラフィー、生体触媒による速度論的分解、および／または分別結晶化によって）、それらの物理化学的差異に基づいてそれらのジアステレオマーに分割することができ、そして、これらの化合物がラセミ形態で得られる場合、それらはその後、それらのエナンチオマー（部分的にエナンチオマー／ジアステレオマーに富む混合物を得るか、または完全に実質的に純粋な化合物に）に分割され得る。
【００３３】
本明細書で使用される「薬学的に許容される塩」という用語は、本明細書に記載の化合物のいずれかの薬学的に許容される有機または無機の塩を指す。
【００３４】
「薬学的に許容される」という用語は、化合物または組成物が、たとえば、いわゆる薬局方（Ｐｈ、Ｅｕｒ、ＢＰ、ＵＳＰ、等）のような、医薬品に関する国内法または国際法で設定された基準に準拠していることを意味し、ヒトおよび獣医学的使用のための医薬品のためのフレームワークを定義する国内または国際ドキュメンテーションで定義された規則に準拠する。
そのような化合物または組成物は、単独で、または製剤の他の成分と組み合わせた場合、原則として、処置される対象（たとえば、ヒトまたは非ヒト）への医薬品の投与経路と化学的および／または毒物学的に適合性がなければならない。
【００３５】
「医薬組成物」とは、医療目的で使用するのに適した任意の形態の組成物を意味する。
【００３６】
本明細書で使用する場合、「治療」または「治療」は、ヒトまたは非ヒト動物（たとえば、非ヒト哺乳動物）に利益をもたらすことができる任意の治療用途を含む。
治療は、既存の疾患または状態に関して行われる場合もあれば、予防的である場合もある。
【００３７】
本明細書で使用する場合、「薬学的に有効な量」とは、所望の薬理学的および／または治療効果につながる量、すなわち、その意図された目的を達成するために効果的な薬剤の量に関する。
【００３８】
本明細書で使用される場合、「保護基」は、官能基の化学修飾によって分子に導入されて、その後の化学反応において化学選択性を得ることができる化学基に関する。
保護基を多官能性分子の特定の官能基に導入して、分子の他の場所で修飾を行うために必要な反応条件下でその反応性をブロックすることができる。
適切な保護基は、容易に、しかし選択的に、所望の官能基に導入され、後続の反応工程で使用される試薬に対して安定であり、理想的には、もはや必要とされない穏やかな条件下で除去され得る。
適切な保護基の非限定的な例には、Ｂｏｃ、Ｆｍｏｃ、Ｃｂｚ（ベンジルオキシカルボニル）、Ａｌｌｏｃ（アリルオキシカルボニル）、ｔＢｕ基、トリチル、２，４−ジメチルオキシベンジル、９−フルオレニルメチル、ベンジル、ＴＢＤＭＳ、アリル、ｏ−ニトロベンジル、Ｂｎ、ｐ−メチルベンジル、アセトアミドメチル、Ｐｂｆ（２，２，４，６，７−ペンタメチル−２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−スルホニル）、９−キサンテニル、トシル、ベンジルオキシルメチルおよびホルミルが含まれる。
適切な保護基は当業者によく知られている。
【００３９】
一態様では、本発明は、本明細書で定義されるようなカルボニルバイオアイソステリックターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）エレメントを含むペプチド模倣大環状化合物を提供する。
【００４０】
ペプチド模倣大環状化合物は、１つ以上のターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）エレメント、たとえば、そのようなターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）エレメントのうちの１つまたは２つを含み得る。
一実施形態では、大環状化合物は、本明細書で定義されるような１つのカルボニルバイオアイソステリックターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）エレメントを含む。
【００４１】
ターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）エレメントは、たとえば、以下の構造によって表すことができる。
【化１１】
2021519347.tif 000013
ここで：
Ｘは、ヘテロ原子、たとえば酸素、窒素または硫黄である。そして、
Ｒ１からＲ６は、それぞれ、アルキル、アリール、ヘテロアリールおよびＨから独立して選択される。
【００４２】
式（Ｉ）においてＸが酸素である場合、オキセタン環を含む部分が、ターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）エレメントとして提供される。
【００４３】
式（Ｉ）においてＸが窒素である場合、アゼチジン環を含む部分が、ターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）エレメントとして提供される。
理解されるように、Ｘが窒素である場合、窒素原子が別の原子または基に共有結合してその原子価を完成させることが意図されている。
窒素原子が、水素に結合している場合、Ｘは、第二級アミンであることが理解されるであろう。
窒素原子が、水素以外に結合している場合、Ｘは、第三級アミンであることが理解される。
一実施形態では、Ｘは、ＮＲｂであり、ここで、Ｒｂは、ＨまたはＣ１〜６アルキル、好ましくはＣ１-３アルキル、たとえばメチルである。
一実施形態では、Ｘは、ＮＨである。
【００４４】
式（Ｉ）においてＸが硫黄である場合、式（Ｉ）は硫黄を含む部分を含み得ることが理解されるであろう。
たとえば、Ｘは硫化物（−Ｓ−）、スルホン（−ＳＯ２−）、またはスルホキシド（−ＳＯ−）の場合がある。
【００４５】
一実施形態では、Ｒ１からＲ６のそれぞれは、アルキル（たとえば、Ｃ１〜６アルキル）およびＨから独立して選択される。
【００４６】
一実施形態では、Ｒ１からＲ６のそれぞれはＨである。
一実施形態では、Ｘは、酸素または窒素のいずれかであり、Ｒ１からＲ６のそれぞれは、アルキル（たとえば、Ｃ１〜６アルキル）およびＨから独立して選択される。
【００４７】
一実施形態では、Ｘは、酸素または窒素であり、Ｒ１からＲ６のそれぞれはＨであり、以下の構造のうちの１つまたは複数（たとえば、１つ）を組み込んだ本発明によるペプチド模倣大環状化合物をもたらす。
【化１２】
2021519347.tif 000014
本発明の説明および本明細書に提示された例から理解されるように、本発明によるペプチド模倣大環状化合物は、大環状化合物のバックボーンのカルボニル基の１つまたは複数（たとえば、１つ）が、たとえば、置換されてもよいオキセタンまたはアゼチジン環のような、置換されていてもよいヘテロ原子含有環で置換された、ペプチド含有大環状化合物のバイオアイソステリック形態である。
このように見ると、本明細書に記載のターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）エレメントは、あるいは、大環状環のアミノ酸残基またはアミノ酸類似体残基のＣ＝Ｏ基を置き換える以下の構造によって表すことができる：
【化１３】
2021519347.tif 000015
ここで、Ｘ、およびＲ１−４は、本明細書で定義したとおりである。
式（ＩＩ）の一実施形態では、Ｘは、ＯまたはＮＲｂであり、ここで、Ｒｂは、ＨおよびＣ１〜６アルキル（たとえば、メチル）から選択される。
式（ＩＩ）の一の実施形態では、各Ｒ１−４は独立して、ＨおよびＣ１−６アルキル（例、メチル）から選択される。
一実施形態では、Ｒ１からＲ４はすべて水素である。
式（ＩＩ）の部分の構造の例は次のとおりである。
【化１４】
2021519347.tif 000016
ここで、Ｒｂは、ＨまたはＣ１−６アルキル、好ましくはＣ１−３アルキル、たとえばメチルである。
好ましくは、ＲｂはＨである。
【００４８】
本明細書で定義されるターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）エレメントに加えて、本発明によるペプチド模倣大環状化合物は、複数のペプチド結合によって連結された複数のアミノ酸残基および／またはアミノ酸類似体残基を含む。
大環状化合物はまた、たとえば、分子内の２つのアミノ酸残基および／またはアミノ酸類似体残基の連結によって、大環状化合物を形成するのに役立つリンカーまたは「連結基」を含み得る。
ペプチド模倣大環状化合物はまた、１つ以上のアミノ酸残基および／またはアミノ酸類似体残基の間の１つ以上の非ペプチド結合を含み得る。
【００４９】
大環状環は、互いに共有結合して大環状化合物の「バックボーン」を形成する少なくとも１１個の原子の単一の繋がったループを含み得る。
大環状化合物の「バックボーン」は、互いに共有結合して環を形成する原子の連続した鎖であると理解されよう。
大環状環のバックボーン（骨格）は、互いに、共有結合されている、たとえば、５０個の原子までを含んでいてもよく、たとえば、１１〜３０原子、好ましくは、たとえば、１２〜２１個のような１２から２５原子である。
一実施形態では、大環状化合物のバックボーンは、１２、１５、１８または２１個の共有結合した原子を含むであろう。
【００５０】
本明細書に記載のターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）エレメントに加えて、大環状環は、一般に、最大１０個のアミノ酸またはアミノ酸類似体残基、好ましくは、たとえば２〜８のような２〜１０を含む。
いくつかの実施形態において、それは、２から６個のアミノ酸またはアミノ酸類似体残基、たとえば、２から５を含み得る。
ターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）エレメント（複数可）に加えて、大環状環は、たとえば、２、３、４、５または６のアミノ酸残基またはアミノ酸類似体残基を含むことができる。
【００５１】
本明細書に記載されるように、大環状環に存在するアミノ酸残基は、任意の天然（すなわち、天然）または非天然（すなわち、非天然）アミノ酸に由来し得るか、またはそれらは、本明細書に定義される任意のアミノ酸類似体に由来し得る。
適切なアミノ酸残基は、当業者によって容易に決定され得る。
【００５２】
一実施形態では、ペプチド模倣大環状化合物は、以下から独立して選択される天然（または「天然」）アミノ酸の１つまたは複数の残基を含む。
2021519347.tif 000017
アミノ酸残基がプロリンに由来する場合、「側鎖」は、アミノ酸の隣接する−ＮＨ−基と一緒に形成される飽和５員環を含むと見なすことができる。
したがって、プロリンに由来する大環状環に存在する任意のアミノ酸残基は、以下の構造によって表すことができる：
【化１５】
2021519347.tif 000018
本明細書に記載の大環状環は、一般に、対応する直鎖状ペプチド（すなわち、また、本明細書で直鎖状ペプチド「前駆体」という）の環化反応により形成される。
理解されるように、大環状化合物中のアミノ酸残基間の結合の性質は、大環状化合物を生成するために使用される特定の方法、特に閉環戦略によって決定されるであろう。
これは、次に、大環状環のバックボーンを構成する原子の性質に影響を与える。
【００５３】
大環状化合物が「ｈｅａｄ−ｔｏ−ｔａｉｌ」環化（すなわち、第１のアミノ酸残基のＮ末端が、第２のアミノ酸残基のＣ末端と反応してアミド結合を形成する）の結果として形成される場合、大環状化合物のバックボーン内の原子は、一般に、ＣおよびＮを含み、たとえば、それらは、ＣおよびＮのみからなり得る。
【００５４】
ここで、大員環が、ｈｅａｄ−ｔｏ−ｓｉｄｅ−ｃｈａｉｎ環化（すなわち、第一のアミノ酸のＮ末端が、第２のアミノ酸残基の「側鎖」（たとえば、アスパラギン酸またはグルタミン酸残基に存在するカルボン酸）の結果としてアミド結合を形成して）形成する場合、大環状分子のバックボーン中の原子は、一般的に、ＣおよびＮを含むであろうが、また、ＳおよびＯなどの他の原子を含んでもよい。
【００５５】
大環状化合物が「ｓｉｄｅ−ｃｈａｉｎ−ｔｏ−ｔａｉｌ」環化の結果として形成される場合（すなわち、第１のアミノ酸残基のＣ末端が、第２のアミノ酸残基の側鎖（たとえば、セリンまたはスレオニン残基のヒドロキシル）と反応して、エステル結合を形成するか、または、システインのチオール基と反応してチオエステル結合を形成する）、大環状化合物のバックボーンの原子は、一般に、ＣおよびＮを含むが、ＳとＯのような追加の原子も含む場合がある。
【００５６】
ｓｉｄｅ−ｃｈａｉｎ−ｔｏ−ｓｉｄｅ−ｃｈａｉｎ環化の結果として、大員環が形成される場合（すなわち、第一のアミノ酸の側鎖が、第二のアミノ酸の側鎖（たとえば。アスパラギン酸残基のカルボン酸がリジン残基のアミンと反応してアミド結合を形成するか、または、２つのシステインの側鎖がジスルフィド結合を形成する場合）、大環状化合物のバックボーン中の原子は、一般的にＣおよびＮを含むであろうが、ＳやＯなどの追加の原子が含まれる場合もある。
【００５７】
一実施形態では、本明細書に記載のペプチド模倣大環状化合物は、直鎖状ペプチド前駆体の「ｈｅａｄ−ｔｏ−ｔａｉｌ」の環化によって形成される。
そのような化合物は、式（Ｉａ）で表すことができ、そしてさらに、立体異性体およびその薬学的に許容される塩を含む：
【化１６】
2021519347.tif 000019
ここで
Ｘは、ヘテロ原子、好ましくはＯまたはＮＲｂであり、ＲｂはＨおよびＣ１〜６アルキルから選択される。
Ｒ１―６は、それぞれ独立して、アルキル（たとえば、Ｃ１−６アルキル）、アリール、ヘテロアリールおよび水素から選択される。
各Ｒａは、アミノ酸側鎖（たとえば、天然に存在するまたは「天然の」アミノ酸の側鎖、または天然に存在しないまたは「非天然の」アミノ酸の側鎖）から独立して選択されるか。または、隣接する−ＮＨ−基と一緒になって、Ｒａは、飽和５員環を形成してもよい。
ｎは、０から５、好ましくは１、２または３の整数であり、そして、
ｍは、０から５、好ましくは１、２または３の整数である。
ただし、ｍ＋ｎ≧２である。
【００５８】
一実施形態では、本発明は、Ｒ１からＲ４およびＲ６が、それぞれ、Ｈである、式（Ｉａ）の大環状化合物を提供する。
そのような化合物は、式（Ｉａ’）で表すことができ、そしてまた、立体異性体およびその薬学的に許容される塩を含む：
【化１７】
2021519347.tif 000020
ここで
Ｘは、ヘテロ原子、好ましくは、ＯまたはＮＲｂであり、ここで、Ｒｂは、ＨおよびＣ１〜６アルキルから選択される。
Ｒ５は、アルキル（たとえば、Ｃ１−６アルキル）、アリール、ヘテロアリールまたは水素、好ましくは水素であり；
各Ｒａは、アミノ酸側鎖（たとえば、天然に存在するまたは「天然の」アミノ酸の側鎖、または天然に存在しないまたは「非天然の」アミノ酸の側鎖）から、独立して選択されるか、または、隣接する−ＮＨ−基と一緒になって、Ｒａは、飽和５員環を形成してもよい。
ｎは、０から５、好ましくは１、２または３の整数であり、そして、
ｍは、０から５、好ましくは１、２または３の整数である。
ただし、ｍ＋ｎ≧２である。
【００５９】
式（Ｉａ）または（Ｉａ’）の一実施形態では、Ｒ５は水素またはＣ１〜６アルキル、好ましくは水素またはメチルである。
【００６０】
式（Ｉａ）または（Ｉａ’）の１つの実施形態では、ｎ＋ｍの和が２、３、４、５、または６である。
【００６１】
別の実施形態において、本明細書に記載のペプチド模倣大環状化合物は、たとえば、２つの隣接しないシステイン残基上のチオール基の反応による、直鎖状ペプチド前駆体の「ｓｉｄｅ−ｃｈａｉｎ−ｔｏ−ｓｉｄｅ−ｃｈａｉｎ」環化によって形成される。
このような化合物は、式（Ｉｂ）で表すことができ、立体異性体およびその薬学的に許容される塩も含む。
【００６２】
【化１８】
2021519347.tif 000021
ここで
Ｘは、ヘテロ原子、好ましくは、ＯまたはＮＲｂであり、ここで、Ｒｂは、ＨおよびＣ１〜６アルキルから選択される。
Ｒ１―６は、それぞれ独立して、アルキル（たとえば、Ｃ１−６アルキル）、アリール、ヘテロアリールおよび水素から選択される。
各Ｒａは、アミノ酸側鎖（たとえば、天然に存在するまたは「天然の」アミノ酸の側鎖、または天然に存在しないまたは「非天然の」アミノ酸の側鎖）から、独立して選択されるか、または、隣接する−ＮＨ−基と一緒になって、Ｒａは、飽和５員環を形成してもよい。
ｐは、０から５までの整数で、好ましくは０、１、または２であり、そして、
ｑは、０から５までの整数で、好ましくは０、１、または２です。
ただし、ｐ＋ｑは≧１である。
【００６３】
一実施形態では、本発明は、Ｒ１からＲ４およびＲ６がそれぞれＨである式（Ｉｂ）の大環状化合物を提供する。
このような化合物は、式（Ｉｂ’）で表すことができ、そしてまた、立体異性体およびその薬学的に許容される塩を示す。
【化１９】
2021519347.tif 000022
ここで
Ｘは、ヘテロ原子、好ましくは、ＯまたはＮＲｂであり、ＲｂはＨおよびＣ１〜６アルキルから選択される。
Ｒ５は、アルキル（たとえば、Ｃ１−６アルキル）、アリール、ヘテロアリールまたは水素、好ましくは水素であり；
各Ｒａは、アミノ酸側鎖（たとえば、天然に存在するまたは「天然の」アミノ酸の側鎖、または天然に存在しないまたは「非天然の」アミノ酸の側鎖）から独立して選択されるか、または、隣接する−ＮＨ−基と一緒になって、Ｒａは、飽和５員環を形成してもよい。
ｐは、０から５までの整数で、好ましくは、０、１、または２であり、そして、
ｑは、０から５までの整数で、好ましくは、０、１、または２である。
ただし、ｐ＋ｑ≧１である。
【００６４】
式（Ｉｂ）または（Ｉｂ’）の一実施形態では、Ｒ５は水素またはＣ１〜６アルキル、好ましくは水素またはメチルである。
【００６５】
式（Ｉｂ）または（Ｉｂ‘）の１つの実施形態において、ｐ＋ｑは、１、２、または３である。
【００６６】
式（Ｉｂ）または（Ｉｂ‘）の特定の実施態様において、ｐ＝ｑ、またはｐ＋１＝ｑ、またはｑ＋１＝ｐである。
【００６７】
別の態様では、本発明は、本明細書に記載のペプチド模倣大環状化合物のいずれかの保護誘導体、たとえば、１つまたは複数の官能基が１つまたは複数の保護基に置き換えられた、式（Ｉａ）、（Ｉａ’）、（Ｉｂ）または（Ｉｂ’）の化合物の保護誘導体を提供する。
適切な保護基の例としては、Ｂｏｃ、Ｆｍｏｃ、Ｃｂｚ（ベンジルオキシカルボニル）、Ａｌｌｏｃ（アリルオキシカルボニル）、ｔＢｕ基、トリチル、２，４−ジメトキシベンジル、９−フルオレニル、ベンジル、ＴＢＤＭＳ、アリル、ｏ−ニトロベンジル、Ｂｎ、ｐ−メチルベンジル、アセトアミドメチル、Ｐｂｆ（２，２，４，６，７−ペンタメチル−２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−スルホニル）、９−キサンテニル、トシル、ベンジルオキシルメチルおよびホルミルを含む。
一の実施形態では、保護基は、Ｂｏｃ、Ｆｍｏｃ、Ｃｂｚ、ｔＢｕ、トリチル、ベンジルおよびＴＢＤＭＳから選択できる。
たとえば、アミノ酸残基の１つまたは複数のＮＨ部分は、ＦｍｏｃおよびＢｏｃを含むがこれらに限定されない保護基によって保護され得る。
複数の保護基が存在する場合、これらは同じでも異なっていてもよい。
【００６８】
一実施形態では、式（Ｉａ）、（Ｉａ’）、（Ｉｂ）および（Ｉｂ’）のそれぞれにおけるＸは、ＮＲｂであり、ここで、Ｒｂは、ＨおよびＣ１〜６アルキルから選択される。
【００６９】
本明細書に記載の式（Ｉａ）、（Ｉａ’）、（Ｉｂ）および（Ｉｂ’）の化合物のいずれかにおいて、Ｒａは、好ましくは、グリシン、システイン、アラニン、ロイシン、チロシン、トリプトファン、バリン、イソロイシン、またはリジン、に存在する側鎖のいずれかから選択され得るか、または、Ｒａは、隣接する−ＮＨ−基と一緒になって、飽和５員環を形成していてもよい。
【００７０】
本発明による大環状ペプチド模倣化合物の例には、以下、それらの立体異性体、およびそれらの薬学的に許容される塩が含まれる：
【化２０】
2021519347.tif 000023
2021519347.tif 000024
2021519347.tif 000025
2021519347.tif 000026
【００７１】
本明細書に記載のペプチド模倣大環状化合物は、定義されたターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）エレメントを含む対応する直鎖状ペプチド（または直鎖状ペプチド「前駆体」）から合成される。
次に、これを大環状化反応に供して、所望の大環状化合物を形成する。
【００７２】
したがって、別の態様では、本発明は、本明細書で定義されるターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）エレメントを含むペプチド模倣大環状化合物を合成する方法を提供し、前記方法は以下のステップを含む：
ａ．ターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）エレメント（本明細書では「直鎖状ペプチド前駆体」とも呼ばれる）を含む直鎖状ペプチド模倣物を合成する。そして
ｂ．直鎖状ペプチド模倣物の環化反応を実行する。
【００７３】
直鎖状ペプチドを合成するための方法は、当技術分野で周知であり、液相および固相ペプチド合成（ＳＰＰＳ）法の両方を含む。
【００７４】
本明細書に記載の直鎖状ペプチド前駆体の調製には、そのような任意の方法を使用することができる。
アミノ酸およびアミノ酸類似体など、本明細書に記載の方法のいずれかの出発物質は、文献から知られているか、市販されているか、または文献で知られている方法によって作製することができる。
ＳＰＰＳは、本発明の大環状化合物の調製における使用に一般的に好ましい。
【００７５】
このタイプの合成の一般的な原理は次のとおりである。
（ａ）最初のＮ−保護アミノ酸（保護基は、通常、ｔ−ブトキシカルボニル、Ｂｏｃと略される）は、酸に不安定な結合を介して、そのＣ末端で固体支持体（通常は架橋ポリスチレン樹脂）に連結基（一般に、ベンジルエステル）で結合する。
（ｂ）最初のアミノ酸のＮ−保護基が除去される（固体支持体からのアミノ酸の脱離なしに）、そして、第２のＮ―保護アミノ酸が、最初のアミノ酸に結合される（一般に、カルボジイミドカップリング剤を使用することによる）。
（ｃ）この配列は、所望の直鎖状ペプチドが形成されるまで、必要な数のＮ−保護アミノ酸で繰り返され、そのカルボキシル末端で固体支持体にまだ付着している。
（ｄ）最終アミノ酸のＮ−保護基を除去し、そして、得られた直鎖状ペプチドは、連結基の開裂により、固体支持体から分離される（たとえば、トリフルオロエタノール、ＴＦＥを使用して）。
【００７６】
代替の実施形態において、ＳＰＰＳ法は、Ｃ−保護アミノ酸を用いて行うことができ、アミノ酸は、適切な連結基を介して、そのＮ−末端で、固体支持体に結合される。
上記Ｎ−保護アミノ酸について記載したのと同じ原理が、Ｃ−保護基が除去される以外、当てはまり、第二のＣ−保護アミノ酸が第一に結合され、そして、必要に応じてシーケンスが繰り返される。
次に、最後のＣ−保護基が除去され、そして、ペプチドは、連結基の切断によって固体支持体から分離される。
あるいは、直鎖状ペプチド前駆体は、所望のペプチドが形成されるまで、連続するアミノ酸が溶液中で連続的に結合される従来の液相ペプチド合成を使用して合成することができる。
【００７７】
ペプチドが合成されるペプチドおよびアミノ酸は、反応性側鎖ならびに反応性末端を有する傾向がある。
ペプチドを合成する場合、あるペプチドのアミノ基が別のペプチドのカルボキシル基と反応することが重要である。
側鎖またはアミノ酸の間違った末端での望ましくない反応は、望ましくない副産物を、時にはかなりの量で生成する。
これらは、歩留まりを著しく損なう可能性がある。
副反応を最小限に抑えるために、保護基を使用して、反応物の反応性側鎖と末端を適切にマスクするのが従来の慣行である。
アミノ酸（またはペプチド）のアミン基を含む副反応を回避するために、そのようなアミン基は、カップリング反応中に保護基でマスクすることができる。
２つのよく知られているアミン保護基はＢｏｃ基とＦｍｏｃ基である。
他の多くは、たとえば、文献に記載され、たとえば、Ｃｂｚ（ベンジルオキシカルボニル）およびＡｌｌｏｃ（アリルオキシカルボニル）である。
【００７８】
アミノ酸（またはペプチド）のカルボン酸基を伴う副反応を回避するために、そのようなカルボン酸基は、カップリング反応中に保護基でマスクすることができる。
よく知られているカルボン酸保護基はｔＢｕ基である。
他の多くのもの、たとえば、トリチル、２，４−ジメチルオキシベンジル、９−フルオレニルメチルおよびベンジルであり、文献に記載されている。
【００７９】
アミノ酸（またはペプチド）の側鎖の反応性基が関与する副反応を回避するために、追加の保護基を使用することができる。
たとえば、側鎖がヒドロキシル基を含む場合、ＴＢＤＭＳ、アリル、ｏ−ニトロベンジル、ＢｎおよびｔＢｕなどの適切な保護基を使用することができる。
側鎖にチオール基が含まれている場合は、ｐ−メチルベンジル、アセトアミドメチル、およびトリチルなどの保護基を使用できる。
側鎖が、グアニジノ基を含有する場合、Ｐｂｆ（２，２，４，６，７−ペンタメチルー２、３−ジヒドロベンゾフラン−５−スルホニル）およびＢｏｃなどの保護基を使用することができる。
側鎖にアミド基が含まれている場合は、９−キサンテニルやトリチルなどの保護基を使用できる。
側鎖にイミダゾールが含まれている場合は、トシル、ベンジルオキシルメチル、Ｂｏｃ、またはトリチルなどの保護基を使用できる。
側鎖にインドール基が含まれている場合は、ホルミルやＢｏｃなどの保護基を使用できる。
適切な保護基は当技術分野で周知であり、当業者によって容易に選択することができる。
【００８０】
ターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）エレメントを含む直鎖状ペプチド前駆体は、本明細書でより詳細に記載される２つの別個の方法を使用して作製することができる。
【００８１】
一方法において、ターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）モチーフ（たとえば、オキセタンまたはアゼチジン）の導入は、（ｉ）成長中のペプチドのＮ−末端を３−（ニトロメチレン）オキセタンまたは３−（ニトロメチレン）アゼチジンに共役付加し、ついで、
（ｉｉ）ニトロ基の還元と、得られたアミンを、次に、スクシニルエステルとして事前に活性化された、保護されたアミノ酸とｉｎ  ｓｉｔｕカップリングすることによって達成できる。
これは、以下のスキームで示される。
【化２１】
2021519347.tif 000027
ここで、ｍ、ｎ、Ｒａ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＸは、本明細書で定義されている通りである。
Ｒ６は、水素で、そして
Ｙは、Ｂｏｃ、Ｆｍｏｃ、Ｃｂｚ（ベンジルオキシカルボニル）、Ａｌｌｏｃ（アリルオキシカルボニル）、ｔＢｕ基、トリチル、２，４−ジメチルオキシベンジル、９−フルオレニルメチル、またはベンジルなどの従来の保護基である。
【００８２】
一実施形態では、式（ＩＩＩ）の化合物を使用して、ターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）エレメントを含む直鎖状前駆体を合成することができる。
【化２２】
2021519347.tif 000028
ここで、
ＸおよびＲ１−５は、本明細書で定義した通りである。
【００８３】
式（ＩＩＩ）の一実施形態では、Ｘは、ＯまたはＮＲｂのいずれかであり、ここで、Ｒｂは、本明細書で定義される通りである。
別の実施形態では、Ｒ１―５のそれぞれは水素である。
【００８４】
式（ＩＩＩ）の化合物の例には、以下が含まれる：
【化２３】
2021519347.tif 000029
ここで、
本明細書中のＲｂは、Ｈ、アルキル、アリール、ヘテロアリール、またはたとえば除去可能な保護基であるＢｏｃ、Ｆｍｏｃ、またはＣｂｚである。
【００８５】
さらなる態様において、本発明はまた、本明細書で定義されるペプチド模倣大環状化合物の調製において、カルボニルバイオアイソステリックターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）エレメントを導入するための式（ＩＩＩ）の試薬の使用を提供する。
【００８６】
別の方法では、ターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）エレメントを含む、事前に形成された保護されたジペプチドビルディングブロック（たとえば、オキセタンまたはアゼチジン）は、成長するペプチド鎖に組み込まれる。
これは、以下のスキームで示される。
【化２４】
2021519347.tif 000030
ここで、
ｍ，ｎ，Ｒａ，Ｒ１，Ｒ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５，Ｒ６およびＸは前記に定義されてとおりであり；そして、
Ｙは、Ｂｏｃ、Ｆｍｏｃ、Ｃｂｚ（ベンジルオキシカルボニル）、Ａｌｌｏｃ（アリルオキシカルボニル）、ｔＢｕ基、トリチル、２，４−ジメチルオキシベンジル、９−フルオレニルメチル、またはベンジルなどの従来の保護基である。
【００８７】
ターン誘導エレメントを組み込んだ直鎖状ペプチド前駆体の大環状化は、所望のペプチド模倣大環状化合物を提供する。
【００８８】
環化のステップは、以下のいずれかを含み得る：
ｈｅａｄ−ｔｏ−ｔａｉｌ反応；ｓｉｄｅｃｈａｉｎ−ｔｏ−ｓｉｄｅｃｈａｉｎ反応（たとえば、アミド、エステル、チオエステル、またはジスルフィド結合の形成）；ｈｅａｄ−ｔｏ−ｓｉｄｅｃｈａｉｎ反応、またはｓｉｄｅｃｈａｉｎ−ｔｏ−ｔａｉｌ反応。
Ｈｅａｄ−ｔｏ−ｔａｉｌおよびｓｉｄｅｃｈａｉｎ−ｔｏ−ｓｉｄｅｃｈａｉｎ反応が一般的に好ましく、以下の反応スキームによって説明することができる。
【００８９】
ｈｅａｄ−ｔｏ−ｔａｉｌ反応
【化２５】
2021519347.tif 000031
ここで、
ｍ，ｎ，Ｒａ，Ｒ１，Ｒ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５，Ｒ６およびＸは前記に定義されてとおりであり；そして、
Ｙは、Ｂｏｃ、Ｆｍｏｃ、Ｃｂｚ（ベンジルオキシカルボニル）、Ａｌｌｏｃ（アリルオキシカルボニル）、ｔＢｕ基、トリチル、２，４−ジメチルオキシベンジル、９−フルオレニルメチル、またはベンジルなどの従来の保護基である。
【００９０】
Ｓｉｄｅ−ｃｈａｉｎ−ｔｏ−ｓｉｄｅ−ｃｈａｉｎ反応：
【化２６】
2021519347.tif 000032
ここで、
ｍ，ｎ，Ｒａ，Ｒ１，Ｒ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５，Ｒ６およびＸは前記に定義されてとおりであり；そして、
Ｙは、Ｂｏｃ、Ｆｍｏｃ、Ｃｂｚ（ベンジルオキシカルボニル）、Ａｌｌｏｃ（アリルオキシカルボニル）、ｔＢｕ基、トリチル、２，４−ジメチルオキシベンジル、９−フルオレニルメチル、またはベンジルなどの従来の保護基である。
【００９１】
本明細書に記載の大環状環化法を実施する際に、直鎖状ペプチド模倣物に適した濃度は、たとえば、０．０００１から１Ｍの範囲であり得る（たとえば、０．００１〜１Ｍ）。
本明細書に記載のターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）エレメントの存在は、所望の大環状化合物の収率に悪影響を与えることなく、大環状化反応をより高い濃度で実施することを可能にし得ることが見出された。
【００９２】
本明細書に記載の合成方法のいずれかによって得られた、または得られうるペプチド模倣大環状化合物のいずれかは、本発明のさらなる態様を形成する。
【００９３】
本明細書で論じられるように、新しい環状ペプチド薬の発見および開発に対する主な障害は、それらの合成における現在の困難である。
本明細書に記載の改善された方法は、既知の環状ペプチドのバイオアイソスターならびに新しい環状ペプチド部分の迅速で信頼性が高く効率的な合成を可能にする。
本明細書に記載の技術の１つの用途は、創薬において、新しい薬物候補を決定するために、容易に、多数の環状ペプチドを含むライブラリーを生成し、そして、既知のスクリーニング方法を使用して分析できることである。
【００９４】
さらなる局面において、本発明は、したがって、薬物スクリーニングで使用するための化合物のライブラリーを提供し、ここで、前記ライブラリーは、本明細書に記載されるような複数のペプチド模倣大環状化合物を含む。
そのようなライブラリーに関して実施されるスクリーニングの方法もまた、本発明の一部を形成する。
【００９５】
本発明の化合物のいずれかの薬理学的特性は、機能的活性の標準的なアッセイを使用して分析することができる。
本明細書に記載のペプチド模倣大環状化合物の多くは、貴重な薬理学的特性を有するであろう。
【００９６】
したがって、さらなる態様において、本発明は、治療に使用するため、または薬剤として使用するために、本明細書に記載のペプチド模倣大環状化合物、またはその異性体または薬学的に許容される塩を提供する。
特に明記しない限り、本明細書で使用される「治療」という用語は、治療および予防の両方を含むことを意図している。
【００９７】
別の態様では、本発明は、治療に使用するための薬剤の製造において、本明細書に記載のペプチド模倣大環状化合物、またはその異性体または薬学的に許容される塩の使用を提供する。
【００９８】
別の局面において、本発明は、状態、疾患または障害を治療または予防するためのヒトまたは非ヒト動物体の医学的治療の方法を提供し、前記方法は、薬学的に有効な量の本明細書に記載のペプチド模倣大環状化合物またはその異性体または薬学的に許容される塩を前記体に投与するステップを含む。
【００９９】
治療に使用するために、本明細書に記載の化合物のいずれかは、薬学的に許容される塩の形態で提供され得る。
本明細書で使用される「薬学的に許容される塩」という用語は、本明細書に記載の化合物のいずれかの薬学的に許容される有機または無機の塩を指す。
薬学的に許容される塩は、対イオンなどの１つまたは複数の追加の分子を含み得る。
対イオンは、親化合物の電荷を安定化させる任意の有機または無機基であり得る。
【０１００】
本発明による化合物が塩基である場合、遊離塩基を有機酸または無機酸と反応させることにより、適切な薬学的に許容される塩を調製することができる。
この目的に使用できる酸の非限定的な例には、塩酸、臭化水素酸、硫酸、スルホン酸、メタンスルホン酸、リン酸、フマル酸、コハク酸、乳酸、クエン酸、酒石酸、マレイン酸、酢酸、トリフルオロ酢酸およびアスコルビン酸が含まれる。
本発明による化合物が酸である場合、適切な薬学的に許容される塩は、遊離酸と有機または無機塩基との反応によって調製され得る。
この目的に適している可能性のある塩基の非限定的な例には、たとえば、水酸化ナトリウム、水酸化カリウムまたは水酸化セシウムのようなアルカリおよびアルカリ土類金属水酸化物、、アンモニア、およびジエチルアミン、トリエチルアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、シクロヘキシルアミン、およびジシクロヘキシルアミンなどの有機アミンが含まれる。
塩形成の手順は、当技術分野では従来通りである。
【０１０１】
治療に使用される場合、本明細書に記載の化合物は、通常、医薬組成物の形態で投与される。
さらなる態様において、本明細書に記載のペプチド模倣大環状化合物、またはその異性体またはその薬学的に許容される塩を１種以上の薬学的に許容される担体または賦形剤と一緒に含む、薬学的処方物が提供される。
【０１０２】
医薬組成物は、容易に入手可能な成分を使用して従来の方法で処方することができる。
したがって、本発明の化合物は、１つまたは複数の従来の担体、希釈剤および／または賦形剤と組み込まれて、錠剤、ピル、粉末、トローチ、サシェ、カシェ、エリキシル、懸濁液（注射液または注入液として）、エマルジョン、溶液、シロップ、エアロゾル（固体または液体媒体として）、軟膏、軟質および硬質ゼラチンカプセル、坐剤、無菌注射用溶液、無菌包装粉末などの従来の生薬（ｇａｌｅｎｉｃ）製剤などの医薬組成物を生成することができる。
適切な賦形剤、担体または希釈剤は当業者によく知られている。
【０１０３】
治療の性質は、本明細書に記載の環状ペプチドの特性に依存するが、それらは、たとえば、細菌感染症、真菌感染症、および癌のいずれかの治療または予防に使用することができる。
【０１０４】
投与される活性化合物の正確な投与量および治療過程の長さは、たとえば、対象の年齢および体重、治療を必要とする特定の状態およびその重症度、ならびに投与の経路を含む多くの要因に依存するであろう。
適切な投与量は、当業者によって容易に決定することができる。
【０１０５】
派生された大環状ペプチドの生物活性に対するオキセタン修飾の影響に関する、本明細書に提示された結果は、オキセタンモチーフが、それが置換するアミド結合の優れたバイオアイソスターであることを示す。
この発見は、本明細書に記載のすべてのターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）エレメントにまで及ぶと予想され、臨床使用中または臨床評価中の環状ペプチド薬を、それらの生物学的活性に影響を与えることなく調製するための新しい方法の可能性を開く。
【０１０６】
したがって、広い態様において、本発明は、本明細書に記載された一つ以上のターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）エレメントを組み込んだ直鎖状ペプチド前駆体の環化の工程を含む環状ペプチド薬の調製のための方法を提供する。
この方法は、たとえば、本明細書に記載の方法のいずれかによる、直鎖状ペプチド前駆体の調製のステップをさらに含み得る。
【０１０７】
そのような方法によって作製された環状ペプチド薬物の任意のバイオアイソスターもまた、本発明の一部を形成する。
したがって、別の態様では、本発明は、本明細書に記載の１つまたは複数のターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）エレメントを組み込んだ環状ペプチド薬物のバイオアイソスターを提供する。
理解されるように、本明細書に記載のターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）エレメントの組み込みの結果として、バイオアイソステリック環状ペプチド薬物は、元のカルボニル基の１つまたは複数（たとえば、１つ）を、本明細書に記載されているターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）エレメントの一部を形成する４員複素環（たとえば、置換されていてもよいオキセタンまたはアゼチジン環）によって置換したことを除いて、すべての点で元の薬物分子と同一である。
【０１０８】
このように見た場合、本発明は、以下の式を有する少なくとも１つの部分を含む環状ペプチド薬物を提供すると見なすことができる。
【化２７】
2021519347.tif 000033
ここで、
Ｘ、およびＲ１−４は、本明細書で定義したとおりである。
【０１０９】
式（ＩＩ）の一実施形態では、ＸはＯまたはＮＲｂであり、ここで、Ｒｂは、ＨおよびＣ１〜６アルキル（たとえば、メチル）から選択される。
式（ＩＩ）の一実施形態では、Ｒ１からＲ４のそれぞれは、独立して、ＨおよびＣ１〜６アルキル（たとえば、メチル）から選択される。
一実施形態では、Ｒ１からＲ４はすべて水素である。
本明細書に記載の環状ペプチド薬物のバイオアイソスターの任意の立体異性体および／または薬学的に許容される塩もまた、本発明の一部を形成する。
【０１１０】
臨床使用または臨床評価における任意の環状ペプチド薬物は、本明細書に記載のように変更することができる。
このような薬物には、次のレビューに記載されているものが含まれる：
Ｚｏｒｚｉら、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎｉｏｎ  ｉｎ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ３８：２４−２９、２０１７および
Ｎｉｅｌｓｅｎら、Ｃｈｅｍ．  Ｒｅｖ．７：  ８０９４−８１２８，２０１７。
そして、その全内容は参照により本明細書に組み込まれる。
【０１１１】
ＦＤＡおよびＥＭＡによって承認されており、本明細書に記載されるように修飾することができる環状ペプチド薬物の非限定的な例としては、
アニデュラファンギン（ビクロン／ファイザー）、
ランレオチド（イプセン）、
テラバンシン（セラバンス）、
ロミデプシン（Ｇｌｏｕｃｅｓｔｅｒ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ／Ｃｅｌｇｅｎｅ）、
ペギネサチド（アフィマックス／武田）、
リナクロチド（フォレストラボ／アイアンウッドファーマシューティカルズ）、
パシレオチド（ノバルティス）、
ダルババンシン（Ｄｕｒａｔａ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ／Ｔｅｖａ）、
オリタバンシン（Ｔｈｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅｓ  Ｃｏｍｐａｎｙ）、
ダプトマイシン；そして
バンコマイシン；を含む。
【０１１２】
【化２８】
2021519347.tif 000034
2021519347.tif 000035
【０１１３】
本明細書に記載されるように改変され得る環状ペプチド薬物の他の非限定的な例には、以下が含まれる：
環状テトラペプチド（たとえば、ＣＪ−１５２０８、アピシジン、クラミドシン、Ｂｅａｕｖｅｒｉｏｌｉｄｅｓ（たとえば、Ｂｅａｕｖｅｒｉｏｌｉｄｅ  ＩおよびＩＩＩ）およびＨＩＶ融合阻害剤）；
環状ペンタペプチド（たとえば、ＤＭＰ−７２８、ｃｙｃｌｏｃｈｌｏｒｏｔｉｎｅとアスティンＣ、ＢＬ３０２０−１、ロミデプシン、Ｌａｒｇａｚｏｌｅ、補体のＣ５ａＲアンタゴニスト（たとえば、３Ｄ５３／ＰＭＸ５３）、アクチノマイシンＤ、ロイシン環状ペプチド（たとえば、シクロ［（Ｌ−Ｌｅｕ）５］、シクロ［（Ｌ−Ｌｅｕ）６］およびシクロ−［（Ｌ−Ｌｅｕ）５（Ｄ−Ｌｅｕ）］））
環状ヘキサペプチド（たとえば、ＤｅｓｍｏｐｒｅｓｓｉｎｍメラノタンＩＩ、オキシトシン、アニデュラファンギン、カスポファンギン、ミカファンギン、ソマトスタチン（たとえば、ソマトスタチン−１４）、オクトレオチド、Ｂｅａｕｖｅｒｉｃｉｎｅ、エニアチン、Ｎｅｐａｄｕｔａｎｔ、Ｂｏｕｖａｒｄｉｎ、プリスチナマイシン（たとえば、ＰｒｉｓｔｉｎａｍｙｃｉｎＩＡおよびＩＩＡ、ＮＸＬ１０３）、１−ＮＭｅ３、Ｃｙｃｌｏ−［Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−ＮａｐｔｈｙｌＡｌａ−Ｐｈｅ］）；
環状ヘプタペプチド（たとえば、ＳａｎｇｕｉｎａｍｉｄｅＡおよびＤａｎａｍｉｄｅｓ、ＲｈｉｚｏｎｉｎＡ、ミクロシスチンＬＲ、ＹＭ２５４８９０、ＣＨＥＣ−７、ポリミキシンＢ１およびＢ２、バシトラシンＡ）；
環状オクタペプチド（たとえばＰＦ１０２２Ａ、エモデプシド、ＷＨ１Ｆｕｎｇｉｎ、Ｇｒｉｓｅｌｉｍｙｃｉｎ、Ｄｉｈｙｄｒｏｍｙｃｏｐｌａｎｅｃｉｎ、Ｍｙｃｏｐｌａｎｅｃｉｎ）；
環状ノナおよびデカ−ペプチド（たとえば、ＣＨＥＣ−９、ＡＦＰｅｐ、Ａｎｔａｍａｎｉｄｅ、Ｃｙｃｌｏｌｉｎｏｐｅｐｔｉｄｅ、Ｃｙｃｌｏｐｅｐｔｏｌｉｄｅ  １、ＰｅｒｍｅｔｉｎＡ、Ｓｕｒｏｔｏｍｙｃｉｎ）；
環状ウンデカペプチド（たとえば、シクロスポリンＡ、ＮＩＭ８１１、ＴＨＲ−１２３）；
環状ドデカおよびトリデカペプチド（たとえば、ｃｅｒｕｌｉｄｅ、Ｌ−ｐｈｅｎｙｌａｌａｎｉｎｅ−ジピコリン酸の大環状化合物）；および、
環状テトラデカペプチド以降（たとえば、コノトキシン、デュラマイシン、およびＫａｌａｔａ  Ｂ１）。
【０１１４】
本発明に従って修飾され得る環状ペプチド薬物の特定の例は、シクロスポリンＡである：
【化２９】
2021519347.tif 000036
【図面の簡単な説明】
【０１１５】
ここで、本発明は、以下の非限定的な例によって、および添付の図を参照して、より詳細に説明される。
ここで、
【図１】図１：１〜３（上）および２〜４（下）は、ペプチド大環状化の抽出したイオンクロマトグラム。
【図２】図２：シクロ（Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ）（３３）のスペクトル；
【図３】図３：シクロ（Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−ＧＯｘ−Ｇｌｙ）（５）のスペクトル；
【図４】図４：シクロ（Ａｌａ−ＧＯｘ−Ａｌａ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ）（８）のスペクトル；
【図５】図５：シクロ（Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ）（１０）のスペクトル；
【図６】図６：シクロ（Ｈ−Ｃｙｓ−Ａｓｎ−ＧＯｘ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−ＯＨ（１２）のスペクトル；
【図７】図７：シクロ（Ｂｏｃ−Ｃｙｓ−ＧＯｘ−Ｃｙｓ−ＯｔＢｕ）（１３）のスペクトル；
【図８ａ】図８ａ：オキセタン修飾ペプチド１２によるＡＰＮの阻害。示されているデータは、重複して実行された２つの独立した実験の平均である。エラーバーは標準偏差を表示する。
【図８ｂ】図８ｂ：親ペプチド１５によるＡＰＮの阻害。示されているデータは、それぞれ２回および３回実行された２つの独立した実験の平均である。エラーバーは標準偏差を表示する。
【図９】図９：７４時間にわたる、直鎖状ペプチド６および７の環状ペプチド８および９および二量体４２への変換。
【図１０】図１０：２４時間後のＴＦＡ中のオキセタンおよびアゼチジン含有環状ペプチドのＬＣＭＳトレース。
【０１１６】
実施例
一般的な実験情報
反応混合物を磁気的に撹拌した。
すべての化学物質は、Ａｃｒｏｓ  Ｏｒｇａｎｉｃｓ、ＡｌｆａＡｅｓａｒ、Ｆｌｕｏｒｏｃｈｅｍ、またはＳｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈから購入し、特に明記されていない限り、受け取ったままの状態で使用した。
【０１１７】
プリロードされた２−クロロトリチル樹脂はＭｅｒｃｋから購入し、ポリマーマトリックスは、コポリ（スチレン−１％ＤＶＢ）、２００〜４００メッシュである。
【０１１８】
第一級アミンの検出用のＴＮＢＳテストキットｐｉｃｒｙｌｓｕｌｆｏｎｉｃ酸（約ＤＭＦ中１％）の１０ミリリットル／Ｎ、Ｎのジイソプロピルエチルアミン（約ＤＭＦ中１０％）の１０ミリリットルを、ＴＣＩ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓから購入した。
【０１１９】
無水溶媒は、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ社またはＡｃｒｏｓ  ＯｒｇａｎｉｃｓからＳｕｒｅ−ＳｅａｌＴＭボトルで購入した。
【０１２０】
他のすべての溶媒は試薬グレードであり、受け取ったままの状態で使用した。
【０１２１】
石油エーテルは、４０〜６０℃の範囲で沸騰する留分を指す。
【０１２２】
１Ｈ核磁気共鳴（ＮＭＲ）スペクトルは、ブルカーＨＤ４００（４００  ＭＨｚ）、ＡＶ５００（５００メガヘルツ）またはＡＶ６００（６００メガヘルツ）フーリエ変換分光計を用いて、ＣＤＣｌ３，ＣＤ３ＯＤまたはＤＭＳＯ−ｄ６中で記録した。
【０１２３】
化学シフト（δＨ）は百万分率（ｐｐｍ）で示され、ＣＤＣｌ３（７．２６  ｐｐｍ）、ＣＤ３ＯＤ（３．３１  ｐｐｍ）、またはＤＭＳＯ−ｄ６（２．５０  ｐｐｍ）の残留プロトン性溶媒シグナルを参照した。
【０１２４】
１Ｈ  ＮＭＲ結合定数はヘルツで報告され、明らかな多重度を参照する。
【０１２５】
データは次のように報告される：化学シフト、多重度（ｓ＝シングレット、ｂｒ．ｓ＝ブロードシングレット、ｄ＝ダブレット、ｔ＝トリプレット、ｑ＝カルテット、ｑｕｉｎｔ＝クインテット、ｓｅｘｔ＝セクステット、ｓｅｐｔ＝セプテット、ｍ＝マルチプレット、ｄｄ＝ダブレットのダブレッツなど）、結合定数、積分値、およびアサイン。
【０１２６】
１３Ｃ  ＮＭＲスペクトルは、１０１、１２６または１５１メガヘルツで記録した。
【０１２７】
化学シフト（δＣ）は、ＣＨＣｌ３（７７．１６  ｐｐｍ）、ＣＤ３ＯＤ（４９．００  ｐｐｍ）、またはＤＭＳＯ−ｄ６（３９．５２  ｐｐｍ）を基準にしたｐｐｍで表される。
【０１２８】
ＮＭＲの特定は、２Ｄ実験（ＣＯＳＹ、ＨＳＱＣ、およびＨＭＢＣ）を使用して推定された。
【０１２９】
ＮＨとＯＨは、プロトン性溶媒（ＣＤ３ＯＤ）では見えない。
【０１３０】
ほとんどの場合、アゼチジニルアミンＮＨ（１Ｈ）および第４級アゼチジン炭素（１３Ｃ）が欠落しており、そして、その他の選択された欠落ピークは、化合物ごとに記録される。
【０１３１】
低分解能マススペクトルは、Ａｇｉｌｅｎｔ  ６１３０Ｂシングルクワッド（ＥＳＩ）機器で記録された。
【０１３２】
ＢｒｕｋｅｒＭａＸｉｓＩｍｐａｃｔを使用して、高分解能マススペクトルを記録した。
【０１３３】
すべての赤外スペクトルは、４０００ｃｍ-１〜６００ｃｍ-１の照射で、ブルカーＡＬＰＨＡ−プラチナＦＴＩＲ分光計を使用することにより、ニートな化合物について記録された。
【０１３４】
強く、選択された吸光度（νｍａｘが）のみが報告されている。
【０１３５】
分析用ＴＬＣは、アルミニウムで裏打ちされたシリカプレート（Ｍｅｒｃｋ、シリカゲル６０  Ｆ２５４、０．２５ミリメートル）で実施された。
【０１３６】
化合物は、蛍光消光によって、またはプレートを、ｐｈｏｓｐｈｏｍｏｌｙｂｄｉｃ  Ｓ３  ａｃｉｄ（Ｈ３ＰＭｏ１２Ｏ４０）のエタノール１０％溶液または過マンガン酸カリウム（ＫＭｎＯ４）の１％溶液で染色し、続いて加熱することによって視覚化した。
【０１３７】
フラッシュカラムクロマトグラフィーは、シリカゲル（ＡｌｄｒｉｃｈまたはＦｌｕｏｒｏｃｈｅｍ、Ｓｉｌｉｃａ  Ｇｅｌ  ６０、４０〜６３マイクロメーター）で行った。
【０１３８】
すべての混合溶媒溶離液は、ｖ／ｖ溶液として報告される。
【０１３９】
旋光度は、パス長２  ｄｍのセル内で、ＡＡ１０００旋光計を使用して、５８９  ｎｍ（Ｎａ  Ｄ線）で取得した。
【０１４０】
比旋光度の値は、（ｄｅｇ  ミリリットル）／（ｇ  ｄｍ）で表される。
【０１４１】
Ｇａｌｌｅｎｋａｍｐ融点装置を用いて、融点を測定した。
【０１４２】
実施例１
ｈｅａｄ−ｔｏ−ｔａｉｌ環化合成
最初に、バックボーンにカルボニルバイオアイソステリックターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）エレメントを含む直鎖状ペプチドを合成するための一般的な経路が、ペンタペプチド１について以下に示すように開発された。
【化３０】
2021519347.tif 000037
【０１４３】
ターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）エレメントの導入は、以下によって達成された：
（ｉ）適切に置換されたニトロアルケン（たとえば、３−（ニトロメチレン）オキセタン）への成長中のペプチドのＮ末端の共役付加；
（ｉｉ）ニトロ基の還元、および得られたアミンの、スクシニルエステルとして事前に活性化された次の保護されたアミノ酸へのｉｎ  ｓｉｔｕカップリング（７，１１）。
従来のペプチド（たとえば、２）は、比較のために作成された。
【０１４４】
すべてのｈｅａｄ−ｔｏ−ｔａｉｌ環化では、Ｃ末端とＮ末端のＢｎエステル／Ｚ保護を使用して、最終水素化分解ステップを使用して、無塩前駆体を合成した。
これにより、異なる基質間で製品の収率について、信頼し得る比較ができるようにした。
【０１４５】
大環状化、１から３への閉環、における、このターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）エレメントの導入の影響は、種々の条件下で調べられた（表１のエントリー１〜５を参照）。
対応する未修飾ペンタペプチド２から４への環化は、高希釈下でも収率が非常に低いため、この基質が選択された（表１のエントリー６〜８）（１２）。
ターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）修飾を導入すると、３倍の収率向上が観察された。
ＤＥＰＢＴとＨＡＴＵも効果的であるが、ＰｙＢＯＰを使用して最良の結果が得られた（表１のエントリー３）。
実用上重要なのは、反応は、より大規模（０．５ミリモル）で、より希薄でない条件（０．００５Ｍ）で、収率を損なうことなく行うことができることである（表１のエントリー１）。
【０１４６】
表１．
ペンタペプチドの環化効率に対するオキセタン修飾の影響
ｂ３−（ジエトキシ−ホスホリルオキシ）−１，２，３−ベンゾトリアジン−４（３Ｈ）−オン（ＤＥＰＢＴ）；
Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ、Ｎ、Ｎ’、Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ）；
ベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリ（ピロリジノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（ＰｙＢＯＰ）；
１−プロピルホスホン酸無水物（Ｔ３Ｐ）。
ｃカラムクロマトグラフィー後の単離収量。
ｄ括弧内の収率は、高濃度（０．００５Ｍ）で実行される大規模反応（０．５ミリモル）に関連している。
ｅ  ｉＰｒ２ＥｔＮは省略した。
ｆ参考文献１２から引用。
【０１４７】
【表１】
2021519347.tif 000038
【０１４８】
この大環状化の効率に対するターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）エレメントの導入の影響に関する洞察は、ＬＣ−ＭＳ分析によって明らかになった（図１を参照）。
４の形成において、４８時間後でさえも、未反応の直鎖状のペンタペプチド２がかなりの量存在する。
対照的に、１を含むターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）エレメントの場合、このタイムスケールでは、出発物質の本質的に完全な消費が見られる。
反応はまた、副生成物がより少なく、はるかにクリーンである。
４への環化では、２番目の環状ペンタペプチドと並んで、基質の二量体化から生じる直鎖状および環状のデカペプチドが明らかである（図１下）。
対照的に、これらの副産物は、３の形成で、ごく微量しか見られない（図１上）。
したがって、この困難な大環状化の大幅な改善は、ターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）エレメントの導入によって実現することができる。
【０１４９】
この化学の範囲を決定するために、他のｈｅａｄ−ｔｏ−ｔａｉｌの大環状化が研究された：
【化３１】
2021519347.tif 000039
ｈｅａｄ−ｔｏ−ｔａｉｌ大環状化によるオキセタン修飾環状ペプチド。
ｂリング内に太字で示されている大環状化で形成された結合。括弧内は、バックボーンにオキセタンではなく、Ｃ＝Ｏを含む直鎖状ペプチドの環化の収量。
ｃアクティベーターとしてのＰｙＢＯＰ。
ｄ活性化剤としてのＤＭＴＭＭテトラフルオロボレート。
参考文献１３から取得したデータ。
【０１５０】
テトラペプチド５−７、ペンタペプチド８およびヘキサペプチド９は、すべての環化において、対応する非修飾ペプチドよりも高い収率である。
【０１５１】
実施例１ａ
カルボニルバイオアイソステリックターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）エレメントを使用しない、以前の環化法の詳細な実施例
環状テトラペプチド３３、３６、および３９の調製：
【化３２】
2021519347.tif 000040
【０１５２】
Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−ＯＢｎ（３０）：
ＣＨ２Ｃｌ２（１００ミリリットル）中のジペプチドＴｓＯＨ・Ｈ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−ＯＢｎ［３］（３．９４グラム、１０．０ミリモル、１．０当量）の溶液に、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ（２．４３グラム、１０．５ミリモル、１．０５当量）、ＥＤＣ・ＨＣｌ（２．０１グラム、１０．５ミリモル、１．０５当量）、ＨＯＢＴ・Ｈ２Ｏ（１．４２グラム、１０．５ミリモル、１．０５当量）およびＮＭＭ（４．４０ミリリットル、４０．０ミリモル、４．０当量）を添加し、混合物を室温で２４時間撹拌した。
混合物を、ＥｔＯＡｃ（１００ミリリットル）で希釈し、ブライン（３×１００ミリリットル）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。
残渣を、カラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＣＨ２Ｃｌ２／酢酸エチル＝１：１→ＥｔＯＡｃ）で精製して、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ―Ｇｌｙ−ＯＢｎ（３０）（２．９８グラム、６．８４ミリモル、６８％）を白色固体として得た。
【０１５３】
Ｃｂｚ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−ＯＢｎ（３１）：
Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−ＯＢｎ（３０）（０．９３グラム、２．１５ミリモル、１．０当量）のＣＨ２Ｃｌ２（２．５ミリリットル）溶液に、ＴＦＡ（２．５ミリリットル）を加え、そして、混合物を、室温で、１時間撹拌した（ガス発生！）。
混合物を減圧下で濃縮し、得られた残留物を繰り返し、ＣＨ２Ｃｌ２（３×２５ミリリットル）に溶解し、真空で濃縮して、粗アミンを得た。
残渣をＣＨ２Ｃｌ２（２２ミリリットル）に溶解し、Ｃｂｚ−Ｔｒｐ−ＯＨ（０．７３グラム、２．１５ミリモル、１．０当量）、ＥＤＣ・ＨＣｌ（０．４１グラム、２．１５ミリモル、１．０当量）、ＨＯＢｔ・Ｈ２Ｏ（０．２９グラム、２．１５ミリモル、１．０当量）およびＮＭＭ（０．９５ミリリットル、８．６０ミリモル、４．０当量）を加え、そして、混合物を室温で２４時間撹拌した。
混合物を、ＥｔＯＡｃ（２５ミリリットル）で希釈し、そして、ブライン（３×２５ミリリットル）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。
残渣を、カラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＣＨ２Ｃｌ２／メタノール＝４０：１）により精製し、Ｃｂｚ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−ＯＢｎ（３１）（１．２１グラム、１．８９ミリモル、８８％）を白色の固体として得た。
【０１５４】
Ｈ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−ＯＨ（３２）：
テトラペプチドＣｂｚ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−ＯＢｎ（３１）（９００ミリグラム、１．３７ミリモル、１．０当量）のメタノール（１５ミリリットル）溶液に、１０重量％のＰｄ／Ｃ（９０ミリグラム、１０重量％）を加え、そして、反応フラスコを排気し、窒素を充填し、排気し、そして、水素雰囲気（風船）下に置いた。
反応混合物を、室温で、１６時間撹拌し、窒素下に置き、セライトのプラグを通して濾過し、これをメタノール（３×）で洗浄した。
濾液を、真空下に濃縮し、Ｈ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−ＯＨ（３２）を白色固体として得（５９０ミリグラム、１．３７ミリモル、定量的収量）、これ以上の精製は必要なかった。
【０１５５】
シクロ（Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ）（３３）：
Ｈ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−ＯＨ（３２）（８６ミリグラム、０．２０ミリモル、１．０当量）の無水ＤＭＦ溶液（２００ミリリットル、０．００１Ｍ）に、窒素雰囲気下で、ＰｙＢＯＰ（２０８ミリグラム、０．４０ミリモル、２．０当量）およびＤＩＰＥＡ（７０マイクロリットル、０．４０ミリモル、２．０当量）を加え、混合物を、室温で、４８時間撹拌した。
溶媒を減圧下で除去し、残留物をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＤＣＭ／メタノール＝９２．５：７．５→４：１）により２回精製して、環状テトラペプチド３３を、黄色の固体として得た（１３ミリグラム、３１マイクロモル、１５％）。
【０１５６】
Ｒｆ  （ＣＨ２Ｃｌ２／メタノール＝９：１）０．２０；
ｍｐ  ２１６-２１９℃；
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）  δＨ  ７．５９  （ｄ，  Ｊ＝７．９Ｈｚ，  １Ｈ，  ＡｒＨ），  ７．３６  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．１  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＡｒＨ），  ７．２０  （ｓ，  １Ｈ，  ＡｒＨ），  ７．１１  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．５  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＡｒＨ），  ７．０２  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．５  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＡｒＨ），  ４．５５  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ８．２，  ５．２  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨα−Ｔｒｐ），  ４．２０  （ｄｄ，  Ｊ＝  １０．６，  ４．４  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨα−Ｌｅｕ），  ４．０１  （ｄ，  Ｊ＝１６．８  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨＨＧｌｙ），  ３．８６  （ｄ，  Ｊ  ＝  １６．１  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨＨＧｌｙ），  ３．７４  （ｄ，  Ｊ＝１６．１Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨＨＧｌｙ），  ３．６５  （ｄ，  Ｊ  ＝  １６．８  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨＨＧｌｙ），  ３．３９-３．３４  （ｍ，  １Ｈ，  ＣＨＨβ−Ｔｒｐ），  ３．２３  （ｄｄ，  Ｊ＝１４．９，  ８．３  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨＨβ−Ｔｒｐ），  １．７３-１．６５  （ｍ，  １Ｈ，  ＣＨＨβ−Ｌｅｕ），  １．５４  （ｄｄｄ，  Ｊ＝１３．９，  ９．６，  ４．５  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨＨβ−Ｌｅｕ），  １．３６-１．２６  （ｍ，  １Ｈ，  ＣＨγ−Ｌｅｕ），  ０．８４  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．６  Ｈｚ，  ３Ｈ，  ＣＨ３δ−Ｌｅｕ），  ０．７８  （ｄ，  Ｊ＝６．６  Ｈｚ，  ３Ｈ，  ＣＨ３δ−Ｌｅｕ）；  
１３Ｃ  ＮＭＲ（１２６  ＭＨｚ，  ＣＤ３ＯＤ）  δＣ  １７５．７  （Ｃ＝Ｏ），  １７４．９  （Ｃ＝Ｏ），  １７３．０  （Ｃ＝Ｏ），  １７２．６  （Ｃ＝Ｏ），  １３８．１  （Ｃ），  １２８．６  （Ｃ），  １２４．７  （ＣＨ），  １２２．６  （ＣＨ），  １２０．０  （ＣＨ），  １１９．２  （ＣＨ），  １１２．４  （ＣＨ），  １１０．５  （Ｃ），  ５６．８  （ＣＨ，  α−Ｔｒｐ），  ５４．０  （ＣＨ，  α−Ｌｅｕ），  ４４．１  （ＣＨ２，  Ｇｌｙ），  ４３．４  （ＣＨ２，  Ｇｌｙ），  ４０．６  （ＣＨ２，  β−Ｌｅｕ），  ２７．９  （ＣＨ２，  β−Ｔｒｐ），  ２５．７  （ＣＨ，  γ−Ｌｅｕ），  ２３．７  （ＣＨ３， δ−Ｌｅｕ），  ２１．６  （ＣＨ３， δ−Ｌｅｕ）；  
νｍａｘ（ｎｅａｔ）＝３２９８，２８６９，１６４５，１５２２，１２３４，７４２  ｃｍ-１；
ＭＳ  （ＥＳＩ＋）  ｍ／ｚ  ８４９［２Ｍ＋Ｎａ］＋；
ＨＲＭＳ  （ＥＳＩ＋）  ｃａｌｃｄ．  ｆｏｒ  Ｃ４２Ｈ５４Ｎ１０ＮａＯ８  ［２Ｍ＋Ｎａ］＋  ８４９．４０１８，  ｆｏｕｎｄ  ８４９．４０２０；  
2021519347.tif 000041
図２のスペクトル。
【０１５７】
実施例１ｂ
テトラペプチドのｈｅａｄ−ｔｏ−ｔａｉｌ環化の詳細な実施例
【化３３】
2021519347.tif 000042
【０１５８】
Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＧＯｘ−Ｇｌｙ−ＯＢｎ（２３）：
ＮＯ２−ＧＯｘ−Ｇｌｙ−ＯＢｎ（２）（１．７０グラム、６．０６ミリモル、１．０当量）のＴＨＦ（６０ミリリットル）の溶液に、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＳｕ（２．９８グラム、９．０９ミリモル、１．５当量）およびＲａｎｅｙ  Ｎｉ（Ｈ２Ｏ中のスラリー、６．０ミリリットル）を添加した。
溶液を、窒素雰囲気下に置き、排気して水素（風船）を満たした。
反応混合物を、室温で、４．０時間激しく撹拌した。
次に、混合物を、ＥｔＯＡｃで溶出するセライトのプラグを通して濾過し、減圧下で濃縮し、濾液をＥｔＯＡｃ（５０ミリリットル）に懸濁し、飽和Ｎａ２ＣＯ３（３×５０ミリリットル）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空下に、濃縮した。
Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＧＯｘ−Ｇｌｙ−ＯＢｎ（２３）は、カラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ／ＰＥ＝３：２）による精製後、無色の粘稠な油（１．９１グラム、４．１３ミリモル、６８％）として得られた。
【０１５９】
Ｃｂｚ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−ＧＯｘ−Ｇｌｙ−ＯＢｎ（２４）：
トリペプチドＢｏｃ−Ｌｅｕ−ＧＯｘ−Ｇｌｙ−ＯＢｎ２３（１．２９グラム、２．７９ミリモル、１．０当量）のＣＨ２Ｃｌ２（３．０ミリリットル）溶液に対して、ＴＦＡ（３．０ミリリットル）を加え、そして、混合物を室温で１時間撹拌した（注意-ガス発生！）。
反応混合物を減圧下で濃縮し、得られた残留物を繰り返し、ＣＨ２Ｃｌ２（３×２５ミリリットル）に溶解し、減圧下で濃縮して、粗アミンを得た。
残留物を、ＣＨ２Ｃｌ２（３０ミリリットル）に溶解し、Ｃｂｚ−Ｔｒｐ−ＯＨ（０．９４グラム、２．７９ミリモル、１．０当量）、ＥＤＣ・ＨＣｌ（０．５３グラム、２．７９ミリモル、１．０当量）、ＨＯＢｔ・Ｈ２Ｏ（０．３８グラム、２．７９ミリモル、１．０当量）およびＮＭＭ（１．２３ミリリットル、１１．２ミリモル、４．０当量）を続いて添加し、そして反応混合物を室温で２４時間撹拌した。
反応混合物をＥｔＯＡｃ（３０ミリリットル）で希釈し、ブライン（３０ミリリットル）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。
残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、４９：１＝ＣＨ２Ｃｌ２／メタノール）で精製し、テトラペプチドＣｂｚ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−ＧＯｘ−Ｇｌｙ−ＯＢｎ（２４）（８３４ミリグラム、１．２２ミリモル、４４％）を、無色の粘性油として得た。
【０１６０】
Ｈ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−ＧＯｘ−Ｇｌｙ−ＯＨ（２５）：
テトラペプチドＣｂｚ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−ＧＯｘ−Ｇｌｙ−ＯＢｎ（２４）（６８３ミリグラム、１．００ミリモル、１．０当量）のメタノール（１０ミリリットル）溶液へ、１０重量％のＰｄ／Ｃ（６８ミリグラム、１０重量％）を加え、反応フラスコを排気し、窒素を充填し、排気し、水素雰囲気（風船）下に置いた。
反応混合物を、室温で１６時間撹拌し、窒素下に置き、セライトのプラグを通して濾過し、これをメタノール（３×）で洗浄した。
濾液を、真空中で濃縮し、テトラペプチドＨ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−ＧＯｘ−Ｇｌｙ−ＯＨ（２５）を、黄色固体（４５８ミリグラム，１．００ミリモル）として、定量的収率で得た。
【０１６１】
シクロ（Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−ＧＯｘ−Ｇｌｙ）（５）：
テトラペプチドＨ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−ＧＯｘ−Ｇｌｙ−ＯＨ（２５）（４６ミリグラム、０．１０ミリモル、１．０当量）の無水ＤＭＦ（１００ミリリットル、０．００１Ｍ）溶液に、窒素雰囲気下に、ＤＥＰＢＴ（６０ミリグラム、０．１０ミリモル、２．０当量）およびＤＩＰＥＡ（３５マイクロリットル、０．１０ミリモル、２．０当量）を加え、反応混合物を室温で４８時間撹拌した。
溶媒を減圧下、６０℃で３０分かけて除去し、残留物を真空中で乾燥させた。
残留物をＬＣＭＳで分析し、カラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＣＨ２Ｃｌ２／メタノール＝１９：１→９：１）で２回精製して、環状テトラペプチド（５）を黄色の固体（２９ミリグラム、６５マイクロモル、６５％）として得た。
Ｒｆ  （ＣＨ２Ｃｌ２／メタノール＝９：１）  ０．４１；
ｍｐ  ２００-２０３℃；  
１Ｈ  ＮＭＲ（５００  ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δＨ  １０．８７  （ｓ，  １Ｈ，  ＮＨ），  ８．２５  （ｄ，  Ｊ  ＝  １０．４  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＮＨ），  ７．９７  （ｄ，  Ｊ＝９．１Ｈｚ，  １Ｈ，  ＮＨ），  ７．５６-７．５０  （ｍ，  ２Ｈ，  ＮＨ，  ＡｒＨ），  ７．３４  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＡｒＨ），  ７．１１  （ｓ，  １Ｈ，  ＡｒＨ），  ７．０８  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．５  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＡｒＨ），  ７．００  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．４  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＡｒＨ），  ４．５９  （ｑ，  Ｊ  ＝  ９．３  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨα−Ｔｒｐ），  ４．４１  （ｄ，  Ｊ＝６．３Ｈｚ，  １Ｈ，  ＯＣＨＨ−Ｏｘ），  ４．１８  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．９  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＯＣＨＨ−Ｏｘ），  ４．１５  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．３  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＯＣＨＨ−Ｏｘ），  ４．０４-３．９７  （ｍ，  １Ｈ，  ＣＨα−Ｌｅｕ），  ３．９０  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．９  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＯＣＨＨ−Ｏｘ），  ３．８１  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １３．３，  ７．７  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨＨＧｌｙ  ｏｒ  ＣＨＨＧＯｘ），  ３．４３-３．３７  （ｍ，  １Ｈ，  ＣＨＨＧｌｙ  ｏｒ  ＣＨＨＧＯｘ），  ３．２６-３．１８  （ｍ，  ２Ｈ，  ＣＨＨＧｌｙ  ｏｒ  ＣＨＨＧＯｘ，  ＣＨＨβ−Ｔｒｐ），  ３．０７-２．９７  （ｍ，  ２Ｈ，  ＣＨＨＧｌｙ  ｏｒ  ＣＨＨＧＯｘ，  ＣＨＨβ−Ｔｒｐ），  １．６５-１．５７  （ｍ，  ２Ｈ，  ＣＨＨβ−Ｌｅｕ，  ＣＨγ−Ｌｅｕ），  １．５３-１．４５  （ｍ，  １Ｈ，  ＣＨＨβ−Ｌｅｕ），  ０．９２  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．１  Ｈｚ，  ３Ｈ，  ＣＨ３δ−Ｌｅｕ），  ０．７９  （ｄ，  Ｊ＝  ６．１  Ｈｚ，  ３Ｈ，  ＣＨ３δ−Ｌｅｕ）．
注意：  二級アミンＮＨは観察されない。
１３Ｃ  ＮＭＲ（１２６  ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δＣ  １７３．２  （Ｃ＝Ｏ），  １７２．９  （Ｃ＝Ｏ），  １７１．４  （Ｃ＝Ｏ），  １３６．１  （Ｃ），  １２７．１  （Ｃ），  １２３．０  （ＣＨ），  １２１．０  （ＣＨ），  １１８．３  （ＣＨ），  １１８．１  （ＣＨ），  １１１．４  （ＣＨ），  １０９．５  （Ｃ），  ７８．１  （ＯＣＨ２），  ７６．３  （ＯＣＨ２），  ６０．３  （Ｃ，  Ｏｘ），  ５６．０  （ＣＨ，  α−Ｔｒｐ），  ５４．０  （ＣＨ，  α−Ｌｅｕ），  ４７．３  （ＣＨ２， ＧＯｘ  ｏｒ  ＣＨ２，  Ｇｌｙ），  ４４．２  （ＣＨ２， ＧＯｘ  ｏｒ  ＣＨ２，  Ｇｌｙ），  ３９．２  （ＣＨ２，  β−Ｌｅｕ），  ２６．５  （ＣＨ２，  β−Ｔｒｐ），  ２４．６  （ＣＨ， γ−Ｌｅｕ），  ２２．８  （ＣＨ３， δ−Ｌｅｕ），  ２１．３  （ＣＨ３， δ−Ｌｅｕ）；  
νｍａｘ（ｎｅａｔ）＝３２７８，２９５４，１６６０，１５１６，７４０ｃｍ-１；
ＭＳ  （ＥＳＩ＋）  ｍ／ｚ  ４６４［Ｍ＋Ｎａ］＋；
ＨＲＭＳ  （ＥＳＩ＋）  ｃａｌｃｄ．  ｆｏｒ  Ｃ２３Ｈ３１Ｎ５ＮａＯ４  ［Ｍ＋Ｎａ］＋  ４６４．２２６８，  ｆｏｕｎｄ  ４６４．２２７０；
2021519347.tif 000043
図３参照。
【０１６２】
実施例２
大環状化収量に対する、ターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）モチーフの場所の影響
４つの可能なアミド結合すべての形成による、ペンタペプチド８（ペンタペプチド４４、４９、５４、および６１から）に対する大環状化を、形成されるアミド結合に関連するターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）エレメントの位置が重要であるかどうかを確認した：
【化３４】
2021519347.tif 000044
収量は、同じ切断によってペンタペプチド１０を作るように得られたものと比較された。このアプローチは、異なるアミノ酸残基間のアミド結合形成に関連する環化効率の固有の違いを取り除く。
研究された環化の４つの組み合わせのすべてについて、ターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）修飾システムは、Ｃ＝Ｏシステムを上回り、より高い生成物収率をもたらした。
ただし、変更が、前駆体のバックボーンに沿ってより中央に配置されると、より大きな改善が見られるようである。
【０１６３】
ペンタペプチド８への大環状化の詳細
ペンタペプチド４４の調製：
【化３５】
2021519347.tif 000045
【０１６４】
ＮＯ２−ＧＯｘ−Ａｌａ−ＯＢｎ（４０）：
Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＯＢｎ（３．３６グラム、１２．０ミリモル、１．０当量）のＣＨ２Ｃｌ２（１２ミリリットル）溶液に、ＴＦＡ（１２ミリリットル）を加え、そして、混合物を、室温で１時間撹拌した。
混合物を減圧下で濃縮し、得られた残留物を繰り返しＣＨ２Ｃｌ２（３×２０ミリリットル）に溶解し、真空で濃縮して、粗アミンを得た。
第二の反応容器中で、オキセタン−３−オン（１．５４ミリリットル、２４．０ミリモル、２．０当量）、ニトロメタン（１．８２ミリリットル、３３．６ミリモル、２．８当量）およびトリエチルアミン（６７０マイクロリットル、４．８０ミリモル、０．４当量）を、０℃で合わせ、室温で１時間撹拌した。
混合物を、無水ＣＨ２Ｃｌ２（４０ミリリットル）に溶解し、−７８℃に冷却し、トリエチルアミン（６．７０ミリリットル、４８．０ミリモル、４．０当量）を添加し、続いてメタンスルホニルクロリド（１．８６ミリリットル、２４．０ミリモル、２．０当量）の無水ＣＨ２Ｃｌ２（１２ミリリットル）溶液を滴下した。
反応混合物を、−７８℃で、１．５時間撹拌し、無水ＣＨ２Ｃｌ２（４０ミリリットル）中の粗アミンおよびトリエチルアミン（２．５２ミリリットル、１８．０ミリモル、１．５当量）の溶液を、シリンジを介してゆっくりと加えた。
反応混合物を室温まで温め、１６時間撹拌した。
ＮＨ４Ｃｌ（５０ミリリットル）の飽和溶液を加え、１０分間撹拌した。
層を分離し、水層をＣＨ２Ｃｌ２（２×３０ミリリットル）およびＥｔＯＡｃ（２×３０ミリリットル）で抽出した。
合わせた有機相を、飽和ＮａＨＣＯ３溶液（５０ミリリットル）、ブライン（５０ミリリットル）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空で濃縮した。
残留物を、カラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝２：１→１：１）で精製して、４０（３．２８グラム、１１．１ミリモル、９３％）をオレンジ色の油として得た。
【０１６５】
Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＧＯｘ−Ａｌａ−ＯＢｎ（４１）：
ＮＯ２−ＧＯｘ−Ａｌａ−ＯＢｎ（４０）（３．１８グラム、１０．８ミリモル、１．０当量）のＴＨＦ（１０８ミリリットル）溶液に、Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＯＳｕ（６．１８グラム、２１．６ミリモル、２．０当量）、ＮａＨＣＯ３（３．６３グラム、４３．２ミリモル、４．０当量）およびＲａｎｅｙ  Ｎｉ（Ｈ２Ｏのスラリー、２２ミリリットル）を加えた。。
溶液を窒素雰囲気下に置き、排気して水素（風船）を満たした。
反応混合物を、室温で、４．０時間、激しく撹拌した。
次に、混合物を、セライトのプラグを通して、ＥｔＯＡｃで溶出濾過し、濾液を飽和Ｎａ２ＣＯ３（３×５０ミリリットル）で洗浄し、そして真空中で濃縮した。
【０１６６】
Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＧＯｘ−Ａｌａ−ＯＢｎ（４１）は、カラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝１：１→ＥｔＯＡｃ）で精製した後、淡黄色の油（３．２０グラム、７．３４ミリモル、６８％）として得られた。
【０１６７】
Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−ＧＯｘ−Ａｌａ−ＯＢｎ（４２）：
Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＧＯｘ−Ａｌａ−ＯＢｎ（４１）（９１５ミリグラム、２．１０ミリモル、１．０当量）のＣＨ２Ｃｌ２（２．５ミリリットル）溶液へ、ＴＦＡ（２．５ミリリットル）を加え、混合物を室温で１時間撹拌した。
反応混合物を減圧下で濃縮し、得られた残留物を繰り返し、ＣＨ２Ｃｌ２（３×１０ミリリットル）に溶解し、減圧下で濃縮して、粗アミンを得た。
残渣を、ＣＨ２Ｃｌ２（２１ミリリットル）に溶解し、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ（５８３ミリグラム、２．５０ミリモル、１．２当量）、ＨＡＴＵ（９５８ミリグラム、２．５０ミリモル、１．２当量）およびＤＩＰＥＡ（１．４６ミリリットル、８．４０ミリモル、４．０当量）を続いて加え、反応混合物を室温で１６時間撹拌した。
反応混合物を、ＣＨ２Ｃｌ２（３０ミリリットル）で希釈し、および１０％クエン酸溶液（２×５０ミリリットル）および飽和ＮａＨＣＯ３溶液（２×５０ミリリットル）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、および減圧下で濃縮した。
残留物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ）で精製して、テトラペプチド４２（８５５ミリグラム、１．５６ミリモル、７４％）をオフホワイトの固体として得た。
【０１６８】
Ｃｂｚ−Ｔｙｒ（Ｂｎ）−Ｌｅｕ−Ａｌａ−ＧＯｘ−Ａｌａ−ＯＢｎ（４３）：
Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−ＧＯｘ−Ａｌａ−ＯＢｎ（４２）（６３７ミリグラム、１．１６ミリモル、１．０当量）のＣＨ２Ｃｌ２（２．０ミリリットル）溶液に、ＴＦＡ（２．０ミリリットル）を加え、混合物を室温で１時間撹拌した。
混合物を減圧下で濃縮し、得られた残留物を繰り返し、ＣＨ２Ｃｌ２（３×１０ミリリットル）に溶解し、減圧下で濃縮して、粗アミンを得た。
【０１６９】
残渣を、ＣＨ２Ｃｌ２（１２ミリリットル）に溶解し、Ｃｂｚ−Ｔｙｒ（Ｂｎ）−ＯＨ（５６５ミリグラム、１．３９ミリモル、１．２当量）、ＨＡＴＵ（５６５ミリグラム、１．３９ミリモル、１．２当量）およびＤＩＰＥＡ（８０８マイクロリットル、４．６４ミリモル、４．０当量）を加え、反応混合物を室温で１６時間撹拌した。
反応混合物を、ＣＨ２Ｃｌ２（２０ミリリットル）で希釈し、および１０％クエン酸溶液（２×３０ミリリットル）および飽和ＮａＨＣＯ３溶液（２×３０ミリリットル）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、および減圧下で濃縮した。
残留物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＣＨ２Ｃｌ２／メタノール＝１９：１→９：１）で精製して、ペンタペプチド４３（４６３ミリグラム、０．５５ミリモル、４８％）をオフホワイトの固体として得た。
【０１７０】
Ｈ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−ＧＯｘ−Ａｌａ−ＯＨ（４４）：
無水メタノール（４．０ミリリットル）中のペンタペプチド４３（３４８ミリグラム、０．４２ミリモル）の溶液に、１０ｗｔ％Ｐｄ／Ｃ（３５ミリグラム、１０重量％）を加え、反応フラスコを排気し、窒素を充填し、排気し、水素雰囲気（風船）下に置いた。
反応混合物を、室温で１６時間撹拌し、窒素下に置き、セライトのプラグを通して濾過し、これをメタノール（３×）で洗浄した。
濾液を、真空で濃縮して、４４を、オフホワイトの固体（２７３ミリグラム、＞９９％）として得、これはさらなる精製を必要としなかった。
【０１７１】
ペンタペプチド４９の調製：
【化３６】
2021519347.tif 000046
【０１７２】
Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（Ｂｎ）−Ｌｅｕ−ＯＢｎ（４５）：
ＣＨ２Ｃｌ２（２５ミリリットル）中のＢｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＢｎ（８．０４グラム、２５．０ミリモル、１．０当量）の溶液に、ＴＦＡ（２５ミリリットル）を加え、混合物を室温で１時間撹拌した。
反応混合物を減圧下で濃縮し、得られた残留物を繰り返し、ＣＨ２Ｃｌ２（３×２０ミリリットル）に溶解し、減圧下で濃縮して、粗アミンを得た。
残渣を、ＣＨ２Ｃｌ２（２５０ミリリットル）に溶解し、Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（Ｂｎ）−ＯＨ（１１．１グラム、３０．０ミリモル、１．２当量）、ＨＡＴＵ（１１．４グラム、３０．０ミリモル、１．２当量）およびＤＩＰＥＡ（１７．４ミリリットル、１００ミリモル、４．０当量）を続いて加え、反応混合物を室温で１６時間撹拌した。
反応混合物を、１０％クエン酸溶液（２×１００ミリリットル）および飽和ＮａＨＣＯ３溶液（２×１００ミリリットル）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。
残渣を、カラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝２：１→１：１）で精製して、ジペプチド４５（１４．１グラム、２４．５ミリモル、９８％）を、白色固体として得た。
【０１７３】
Ｂｏｃ−Ａｌａ−Ｔｙｒ（Ｂｎ）−Ｌｅｕ−ＯＢｎ（４６）：
Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（Ｂｎ）−Ｌｅｕ−ＯＢｎ（４５）（１２．９グラム、２２．５ミリモル、１．０当量）のＣＨ２Ｃｌ２（２２．５ミリリットル）溶液に、ＴＦＡ（２２．５ミリリットル）を加え、混合物を室温で１時間撹拌した。
反応混合物を減圧下で濃縮し、得られた残留物を、繰り返し、ＣＨ２Ｃｌ２（３×２０ミリリットル）に溶解し、真空で濃縮して、粗アミンを得た。
残渣を、ＣＨ２Ｃｌ２（２２５ミリリットル）に溶解し、Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ（５．１１グラム、２７．０ミリモル、１．２当量）、ＨＡＴＵ（１０．３グラム、２７．０ミリモル、１．２当量）およびＤＩＰＥＡ（１５．７ミリリットル、９０．０ミリモル、４．０当量）を加え、混合物を室温で１６時間撹拌した。
反応混合物を，１０％クエン酸溶液（２×１００ミリリットル）および飽和ＮａＨＣＯ３溶液（２×１００ミリリットル）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。
残留物を，カラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝１：１）で精製して、トリペプチド４６（１３．４グラム、２０．７ミリモル、９２％）を白色泡状物として得た。
【０１７４】
ＮＯ２−ＧＯｘ−Ａｌａ−Ｔｙｒ（Ｂｎ）−Ｌｅｕ−ＯＢｎ（４７）：
Ｂｏｃ−Ａｌａ−Ｔｙｒ（Ｂｎ）−Ｌｅｕ−ＯＢｎ（４６）（３．８７グラム、６．００ミリモル、１．０当量）のＣＨ２Ｃｌ２（６．０ミリリットル）溶液に、ＴＦＡ（６．０ミリリットル）を加え、混合物を室温で１時間撹拌した。
反応混合物を減圧下で濃縮し、得られた残留物を、繰り返しＣＨ２Ｃｌ２（３×１０ミリリットル）に溶解し、減圧下で濃縮して、粗アミンを得た。
２番目の反応容器で、オキセタン−３−オン（７７０マイクロリットル、１２．０ミリモル、２．０当量）、ニトロメタン（９１０マイクロリットル、１６．８ミリモル、２．８当量）およびトリエチルアミン（３３５マイクロリットル、２．４０ミリモル、０．４当量）を０℃で混合し、室温で１時間撹拌した。
混合物を、無水ＣＨ２Ｃｌ２（２０ミリリットル）に溶解し、−７８℃に冷却し、およびトリエチルアミン（３．３５ミリリットル、２４．０ミリモル、４．０当量）の溶液を添加し、続いて、メタンスルホニルクロリド（９３０マイクロリットル、１２．０ミリモル、２．０当量）の無水ＣＨ２Ｃｌ２（６．０ミリリットル）溶液を滴下した。
反応混合物を、−７８℃で１．５時間撹拌し、無水ＣＨ２Ｃｌ２（２０ミリリットル）中の粗アミンおよびトリエチルアミン（１．２６ミリリットル、９．０ミリモル、１．５当量）の溶液を注射器を介してゆっくりと加えた。
反応混合物を室温まで温め、１６時間撹拌した。
ＮＨ４Ｃｌ（３０ミリリットル）の飽和溶液を加え、１０分間撹拌した。
層を分離し、水層をＣＨ２Ｃｌ２（２×２０ミリリットル）および酢酸エチル（２×２０ミリリットル）で抽出した。
合わせた有機相を、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（３０ミリリットル）、ブライン（３０ミリリットル）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。
残留物を、カラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝１：１→ＥｔＯＡｃ）で精製して、４７（１．９０グラム、２．８８ミリモル、４８％）をオフホワイトの固体として得た。
【０１７５】
Ｃｂｚ−Ａｌａ−ＧＯｘ−Ａｌａ−Ｔｙｒ（Ｂｎ）−Ｌｅｕ−ＯＢｎ（４８）：
ＮＯ２−ＧＯｘ−Ａｌａ−Ｔｙｒ（Ｂｎ）−Ｌｅｕ−ＯＢｎ（４７）（１．２６グラム、１．９０ミリモル、１．０当量）のＴＨＦ（２０ミリリットル）溶液に、Ｃｂｚ−Ａｌａ−ＯＳｕ（１．２２グラム、３．８０ミリモル、２．０当量）、ＮａＨＣＯ３（６３８ミリグラム、７．６０ミリモル、４．０当量）およびラネーニッケル（水スラリー、４．０ミリリットル）を添加した。
溶液を窒素雰囲気下に置き、排気して水素（風船）を満たした。
混合物を、室温で２．５時間撹拌し、ＥｔＯＡｃで溶出するセライトのプラグを通して濾過し、濾液を真空で濃縮した。
カラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ→ＣＨ２Ｃｌ２／メタノール＝９：１）による精製後、ペンタペプチド４８をオフホワイトの泡（９８９ミリグラム、１．１８ミリモル、８３％）として得た。
【０１７６】
Ｈ−Ａｌａ−ＧＯｘ−Ａｌａ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−ＯＨ（４９）：
無水メタノール（２１ミリリットル）中のペンタペプチド４８（１．７５グラム、２．０９ミリモル）の溶液に、１０ｗｔ％Ｐｄ／Ｃ（１７５ミリグラム、１０重量％）を加え、反応フラスコを排気し、窒素を充填し、排気し、水素雰囲気（風船）下に置いた。
反応混合物を、室温で１６時間撹拌し、窒素下に置き、セライトのプラグを通して濾過し、これをメタノール（３×）で洗浄した。
濾液を真空で濃縮して、４９を白色の固体として得（１．１４グラム、＞９９％）、これはさらなる精製を必要としなかった。
【０１７７】
ペンタペプチド５４の調製：
【化３７】
2021519347.tif 000047
【０１７８】
Ｂｏｃ−Ａｌａ−Ｔｙｒ（Ｂｎ）−ＯＢｎ（５０）：
Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（Ｂｎ）−ＯＢｎ（１１．３グラム、２５．０ミリモル、１．０当量）のＣＨ２Ｃｌ２（２５ミリリットル）の溶液に、ＴＦＡ（２５ミリリットル）を添加し、混合物を室温で３０分間撹拌した（注意-ガスの発生！）。
反応混合物を減圧下で濃縮し、得られた残留物を繰り返し、ＣＨ２Ｃｌ２（３×２０ミリリットル）に溶解し、減圧下で濃縮して、粗アミンを得た。
残渣を、ＣＨ２Ｃｌ２（２５０ミリリットル）に溶解し、Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ（５．６８グラム、３０．０ミリモル、１．２当量）、ＨＡＴＵ（１１．４グラム、３０．０ミリモル、１．２当量）およびＤＩＰＥＡ（１７．４ミリリットル、１００ミリモル、４．０当量）を続いて加え、そして、反応混合物を、室温で１６時間撹拌した。
反応混合物を、１０％クエン酸溶液（２×１００ミリリットル）および飽和ＮａＨＣＯ３溶液（２×１００ミリリットル）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。
残留物を、カラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝２：１→１：１）で精製して、ジペプチド５０（１３．１グラム、２４．５ミリモル、９８％）を白色固体として得た。
【０１７９】
Ｏ２Ｎ−ＧＯｘ−Ａｌａ−Ｔｙｒ（Ｂｎ）−ＯＢｎ（５１）：
Ｂｏｃ−Ａｌａ−Ｔｙｒ（Ｂｎ）−ＯＢｎ（５０）（３．２０グラム、６．００ミリモル、１．０当量）のＣＨ２Ｃｌ２（６．０ミリリットル）の溶液に、ＴＦＡ（６．０ミリリットル）を加え、混合物を室温で１時間撹拌した。
反応混合物を減圧下で濃縮し、得られた残留物を繰り返し、ＣＨ２Ｃｌ２（３×１０ミリリットル）に溶解し、減圧下で濃縮して、粗アミンを得た。
２番目の反応容器で、オキセタン−３−オン（７７０マイクロリットル、２２．０ミリモル、２．０当量）、ニトロメタン（９１０マイクロリットル、１６．８ミリモル、２．８当量）およびトリエチルアミン（３３５マイクロリットル、２．４０ミリモル、０．４当量）を０℃で混合し、室温で１時間撹拌した。
混合物を、無水ＣＨ２Ｃｌ２（４０ミリリットル）に溶解し、−７８℃に冷却し、およびトリエチルアミン（３．３５ミリリットル、２４．０ミリモル、４．０当量）の溶液を加え、続いて、メタンスルホニルクロリド（９３０マイクロリットル、１２．０ミリモル、２．０当量）の無水ＣＨ２Ｃｌ２（１２ミリリットル）で、滴下添加した。
反応混合物を、−７８℃で、１．５時間撹拌し、そして、無水ＣＨ２Ｃｌ２（２０ミリリットル）中の粗アミンおよびトリエチルアミン（１．２６ミリリットル、９．００ミリモル、１．５当量）の溶液を注射器を介してゆっくりと加えた。
反応混合物を、室温まで温め、１６時間撹拌した。
ＮＨ４Ｃｌ（５０ミリリットル）の飽和溶液を加え、１０分間撹拌した。
層を分離し、そして、水層をＣＨ２Ｃｌ２（２×３０ミリリットル）および酢酸エチル（２×３０ミリリットル）で抽出した。
合わせた有機層を、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（５０ミリリットル）、ブライン（５０ミリリットル）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。
残留物を、カラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝１：１→ＥｔＯＡｃ）で精製して、５１（２．７９グラム、５．０９ミリモル、８５％）を、オレンジ色のワックス状の固体として得た。
【０１８０】
Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＧＯｘ−Ａｌａ−Ｔｙｒ（Ｂｎ）−ＯＢｎ（５２）：
ＮＯ２−ＧＯｘ−Ａｌａ−Ｔｙｒ（Ｂｎ）−ＯＢｎ（５１）（２．６６グラム、４．８６ミリモル、１．０当量）のＴＨＦ（４８ミリリットル）に、Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＯＳｕ（２．７８グラム、９．７１ミリモル、２．０当量）、ＮａＨＣＯ３（１．６３グラム、１９．４ミリモル、４．０当量）およびＲａｎｅｙ  Ｎｉ（水スラリー１０ミリリットル）を加えた。
溶液を窒素雰囲気下に置き、排気して水素（風船）を満たした。
反応混合物を、室温で、４．０時間、激しく撹拌した。
次に、混合物を、ＥｔＯＡｃで溶出するセライトのプラグを通して濾過し、濾液を飽和Ｎａ２ＣＯ３（３×５０ミリリットル）で洗浄し、減圧下で濃縮した。
Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＧＯｘ−Ａｌａ−Ｔｙｒ（Ｂｎ）−ＯＢｎ（５２）を、カラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ）により精製し、オフホワイトの泡状物（１．９６グラム、２．８５ミリモル、５９％）として得た。
【０１８１】
Ｃｂｚ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−ＧＯｘ−Ａｌａ−Ｔｙｒ（Ｂｎ）−ＯＢｎ（５３）：
Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＧＯｘ−Ａｌａ−Ｔｙｒ（Ｂｎ）−ＯＢｎ（５２）（１．８１グラム、２．６３ミリモル、１．０当量）のＣＨ２Ｃｌ２（３．０ミリリットル）の溶液に、ＴＦＡ（３．０ミリリットル）を加え、混合物を室温で１０分間撹拌した。
混合物を、減圧下で濃縮し、得られた残留物を繰り返し、ＣＨ２Ｃｌ２（３×１０ミリリットル）に溶解し、真空で濃縮して、粗アミンを得た。
残留物を、ＣＨ２Ｃｌ２（２６ミリリットル）およびＤＭＦ（５．０ミリリットル）混合物に溶解し、Ｃｂｚ−Ｌｅｕ−ＯＨ（８３７ミリグラム、３．１５ミリモル、１．２当量）、ＨＡＴＵ（１．２０グラム、３．１５ミリモル、１．２当量）およびＤＩＰＥＡ（１．８３ミリリットル、１０．５ミリモル、４．０当量）を、続いて添加し、そして反応混合物を室温で１６時間撹拌した。
混合物を、ＣＨ２Ｃｌ２（３０ミリリットル）で希釈し、および１０％クエン酸溶液（２×５０ミリリットル）および飽和ＮａＨＣＯ３溶液（２×５０ミリリットル）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。
残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＣＨ２Ｃｌ２／メタノール＝９８：２→９７：３→９６：４）で精製して、ペンタペプチド５３（１．２１グラム、１．４５ミリモル、５５％）を白色泡状物として得た。
【０１８２】
Ｈ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−ＧＯｘ−Ａｌａ−Ｔｙｒ−ＯＨ（５４）：
無水メタノール（１４ミリリットル）中のペンタペプチド５３（１．１４グラム、１．３６ミリモル）の溶液に、１０重量％Ｐｄ／Ｃ（１１４ミリグラム、１０重量％）を加え、反応フラスコを排気し、窒素を充填し、排気し、水素（風船）の雰囲気下に置いた。
反応混合物を、室温で１６時間撹拌し、Ｎ２下に置き、セライトのプラグを通して濾過し、これをメタノール（３×）で洗浄した。
濾液を真空で濃縮して、５４をオフホワイトの固体（７４２ミリグラム）として定量的収率で得た。
【０１８３】
ペンタペプチド６１の調製：
【化３８】
2021519347.tif 000048
【０１８４】
Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＣｕｍｙｌ（５５）：
無水ジエチルエーテル（２８ミリリットル）中の水素化ナトリウム（鉱油に６０％分散、２８０ミリグラム、７．００ミリモル、０．５当量）に、新たに蒸留した２−フェニル−２−プロパノール（４．２０グラム、３０．８ミリモル、２．２当量）を、０℃で加え、そして、混合物を、室温で１時間撹拌した。
反応混合物を０℃に冷却し、２，２，２−トリクロロアセトニトリル（２．８０ミリリットル、２８．０ミリモル、２．０当量）をゆっくりと加え、そして、撹拌を周囲温度で３時間続けた。
溶媒を減圧下で除去し、残留物をＰＥ（７．０ミリリットル）に再溶解し、無水メタノール（２８３マイクロリットル、７．００ミリモル、０．５当量）を加え、そして、溶液を室温で１０分間撹拌した。
混合物を、ＰＥで溶出するセライトのプラグを通して濾過し、濾液を真空中で濃縮して、粗イミデートを得た。
ＣＨ２Ｃｌ２（８０ミリリットル）中のＦｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ（４．３６グラム、１４．０ミリモル、１．０当量）の懸濁液に、ＣＨ２Ｃｌ２（１５ミリリットル）中のイミデートの溶液を添加し、そして、混合物を室温で１６時間、攪拌した。
反応混合物を、ＣＨ２Ｃｌ２で溶出するセライトのプラグを通して濾過し、溶媒を真空で除去し、残留物をカラムクロマトグラフ（ＳｉＯ２、ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝４：１）で精製して、少量の２−フェニル−２−プロパノール（１Ｈ  ＮＭＲによって〜８５：１５）とコンタミした、Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＣｕｍｙｌ（５５）を淡黄色油状物として得た（６．００グラム、１４．０ミリモル、定量的）。
【０１８５】
Ｏ２Ｎ−ＧＯｘ−Ａｌａ−ＯＣｕｍｙｌ（５６）：
ＣＨ２Ｃｌ２（９．０ミリリットル）中のＦｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＣｕｍｙｌ（５５）（３．７０グラム、８．６０ミリモル、１．０当量）の溶液にジエチルアミン（９．０ミリリットル）を加えた。そして混合物を室温で１時間撹拌した。
反応混合物を減圧下で濃縮し、得られた残留物を繰り返し、ＣＨ２Ｃｌ２（３×１５ミリリットル）に溶解し、減圧下で濃縮して、粗アミンを得た。
２番目の反応容器で、オキセタン−３−オン（１．１０ミリリットル、１７．２ミリモル、２．０当量）、ニトロメタン（１．３０ミリリットル、２４．１ミリモル、２．８当量）、およびトリエチルアミン（４８０マイクロリットル、３．４４ミリモル、０．４当量）を０℃で混合し、および室温で１時間撹拌した。
混合物を、無水ＣＨ２Ｃｌ２（６０ミリリットル）に溶解し、−７８℃に冷却し、およびトリエチルアミン（４．８０ミリリットル、３４．４ミリモル、４．０当量）の溶液を添加し、続いて、メタンスルホニルクロリド（１．３３ミリリットル、１７．２ミリモル、２．０当量）の無水ＣＨ２Ｃｌ２（１８ミリリットル）溶液を滴下した。
反応混合物を、−７８℃で、１．５時間撹拌し、無水ＣＨ２Ｃｌ２（３０ミリリットル）中の粗アミンの溶液をシリンジを介してゆっくりと加えた。
反応混合物を室温まで温め、１６時間撹拌した。
ＮＨ４Ｃｌ（５０ミリリットル）の飽和溶液を加え、１０分間撹拌した。
層を分離し、水層を、ＣＨ２Ｃｌ２（２×３０ミリリットル）および酢酸エチル（２×３０ミリリットル）で抽出でした。
合わせた有機層を、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（５０ミリリットル）、ブライン（５０ミリリットル）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、そして真空中で濃縮した。
残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝２：１→１：１）で精製して、５６（２．０４グラム、６．３３ミリモル、７４％）を淡黄色の油状物として得た。
【０１８６】
Ｃｂｚ−ＧＯｘ−Ａｌａ−ＯＣｕｍｙｌ（５７）：
ＮＯ２−ＧＯｘ−Ａｌａ−ＯＣｕｍｙｌ（５６）（２．０４グラム、６．３２ミリモル、１．０当量）のＴＨＦ（６５ミリリットル）溶液に、Ｎ−（ベンジルオキシカルボニルオキシ）スクシンイミド（３．１５グラム、１２．６ミリモル、２．０当量）、ＮａＨＣＯ３（２．１２グラム、２５．２ミリモル、４．０当量）およびＲａｎｅｙ  Ｎｉ（Ｈ２Ｏスラリー、６．３ミリリットル）を添加した。
混合物を窒素雰囲気下に置き、排気し、水素（風船）で満たした。
反応混合物を、室温で、２．５時間激しく撹拌した。
次に、混合物を、ＥｔＯＡｃで溶出するセライトのプラグを通して濾過し、濾液を飽和Ｎａ２ＣＯ３（３×５０ミリリットル）溶液で洗浄し、および減圧下で濃縮した。
Ｃｂｚ−ＧＯｘ−Ａｌａ−ＯＣｕｍｙｌ（５７）を、カラムクロマトグラフィー（ＳＩＯ２、ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝２：１→１：１→酢酸エチル）により精製後、淡黄色油として得た（１．５５グラム、３．６３ミリモル、５８％）。
【０１８７】
Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−ＯＢｎ（５８）：
ＣＨ２Ｃｌ２（１６ミリリットル）中のＢｏｃ−Ａｌａ−ＯＢｎ（４．５６グラム、１６．３ミリモル、１．０当量）の溶液にＴＦＡ（１６ミリリットル）を加え、混合物を室温で１時間撹拌した。
反応混合物を、減圧下で濃縮し、そして、得られた残留物を、繰り返し、ＣＨ２Ｃｌ２（３×２０ミリリットル）に溶解し、減圧下で濃縮して、粗アミンを得た。
残渣を、ＣＨ２Ｃｌ２（１６０ミリリットル）に溶解し、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ（４．５３グラム、１９．６ミリモル、１．２当量）、ＨＡＴＵ（７．４５グラム、１９．６ミリモル、１．２当量）およびＤＩＰＥＡ（１１．４ミリリットル、６５．２ミリモル、４．０当量）を、続いて加え、そして、反応混合物を、室温で、１６時間撹拌した。
反応混合物をＣＨ２Ｃｌ２（５０ミリリットル）で希釈し、そして、１０％クエン酸溶液（２×１００ミリリットル）および飽和ＮａＨＣＯ３溶液（２×１００ミリリットル）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、ろ過し、減圧下で濃縮した。
残留物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝２：１→１：１）で精製して、ジペプチド５８（６．４０グラム、１６．３ミリモル、＞９９％）を、無色の粘稠な油状物として得た。
【０１８８】
Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（Ｂｎ）−Ｌｅｕ−Ａｌａ−ＯＢｎ（５９）：
Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−ＯＢｎ（５８）（５．８５グラム、１４．９ミリモル、１．０当量）のＣＨ２Ｃｌ２（１５ミリリットル）溶液にＴＦＡ（１５ミリリットル）を加え、そして、混合物を室温で１時間撹拌した。
反応混合物を、減圧下で濃縮し、得られた残留物を、繰り返し、ＣＨ２Ｃｌ２（３×２０ミリリットル）に溶解し、減圧下で濃縮して、粗アミンを得た。
残渣を、ＣＨ２Ｃｌ２（１５０ミリリットル）に溶解し、Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（Ｂｎ）−ＯＨ（６．４０グラム、１７．２ミリモル、１．２当量）、ＨＡＴＵ（６．５４グラム、１７．２ミリモル、１．２当量）およびＤＩＰＥＡ（１０．４ミリリットル、５９．６ミリモル、４．０当量）を続いて、加え、そして、反応混合物を、室温で、１６時間撹拌した。
混合物を、ＣＨ２Ｃｌ２（５０ミリリットル）で希釈し、１０％クエン酸溶液（２×１００ミリリットル）および飽和ＮａＨＣＯ３溶液（２×１００ミリリットル）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。
残留物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝２：１→１：１）で精製して、トリペプチド５９（９．６０グラム、１４．９ミリモル、＞９９％）を白色固体として得た。
【０１８９】
Ｃｂｚ-ＧＯｘ−Ａｌａ−Ｔｙｒ（Ｂｎ）−Ｌｅｕ−Ａｌａ−ＯＢｎ（６０）：
Ｃｂｚ−ＧＯｘ−Ａｌａ−ＯＣｕｍｙｌ（５７）（８５３ミリグラム、２．００ミリモル、１．０当量）を２％ＴＦＡ／ＣＨ２Ｃｌ２（４０ミリリットル）で、室温で、９０分間撹拌した。
反応混合物を、減圧下で濃縮し、そして、得られた残留物を、繰り返し、ＣＨ２Ｃｌ２（３×２０ミリリットル）に溶解し、減圧下で濃縮して、粗酸を得た。
別の反応フラスコで、Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（Ｂｎ）−Ｌｅｕ−Ａｌａ−ＯＢｎ（５９）（１．２９グラム、２．００ミリモル、１．０当量）をＣＨ２Ｃｌ２（２．０ミリリットル）に溶解し、ＴＦＡ（２．０ミリリットル）を加えて、混合物を、室温で、１時間撹拌した。
反応混合物を、減圧下で濃縮し、得られた残留物を、繰り返し、ＣＨ２Ｃｌ２（３×２０ミリリットル）に溶解し、減圧下で濃縮して、粗アミンを得た。
残渣を、ＣＨ２Ｃｌ２（２０ミリリットル）およびＤＭＦ（１．０ミリリットル）の混合物に溶解し、そして、粗製酸に添加した。
ＨＡＴＵ（７６０ミリグラム、２．００ミリモル、１．０当量）およびＤＩＰＥＡ（１．３９ミリリットル、８．００ミリモル、４．０当量）を、続いて加え、そして、反応混合物を、室温で１６時間撹拌した。
反応混合物を、ＥｔＯＡｃ（５０ミリリットル）で希釈し、ブライン（２×５０ミリリットル）、１．０Ｍ  ＨＣｌ（３×５０ミリリットル）、飽和ＮａＨＣＯ３溶液（３×５０ミリリットル）、ブライン（５０ミリリットル）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮した。
残留物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ）で精製して、ペンタペプチド６０（１．１５グラム、１．３７ミリモル、６８％）を白色泡状物として得た。
【０１９０】
Ｈ−ＧＯｘ−Ａｌａ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−ＯＨ（６１）：
無水メタノール（４．０ミリリットル）中のペンタペプチド６０（３１６ミリグラム、０．３８ミリモル）の溶液に、１０ｗｔ％Ｐｄ／Ｃ（３２ミリグラム、１０重量％）を加えて、そして、反応フラスコを排気し、窒素を充填し、排気し、水素雰囲気（風船）下に置いた。
反応混合物を、室温で５時間撹拌し、窒素下に置き、セライトのプラグを通して濾過し、これを、メタノール（３×）で洗浄した。
濾液を、真空で濃縮して、６１を、オフホワイトの固体（１８９ミリグラム、０．３６ミリモル、９５％）として得たが、これをさらに精製する必要はなかった。
【０１９１】
環化の代表的な例：シクロ（Ａｌａ−ＧＯｘ−Ａｌａ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ）（８）：
Ｈ−Ａｌａ−ＧＯｘ−Ａｌａ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−ＯＨ（４９）（５２ミリグラム、０．１０ミリモル、１．０当量）の無水ＤＭＦ（１００ミリリットルの、０．００１  Ｍ）溶液へ、ＤＥＰＢＴ（６０ミリグラム、０．２０ミリモル、２．０当量）およびＤＩＰＥＡ（３５マイクロリットル、０．２０ミリモル、２．０当量）を、窒素雰囲気下で、添加して、そして、反応混合物を、室温で、２４時間撹拌した。
溶媒を、減圧下で除去し、残留物をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＣＨ２Ｃｌ２／メタノール＝９：１→４：１）により２回精製して、環状ペンタペプチド（８）を白色固体として得た（２７ミリグラム、５４マイクロモル、５４％）。
Ｒｆ  （ＣＨ２Ｃｌ２／メタノール＝４：１）  ０．５７；
ｍｐ  ２１３-２１７℃；  
１Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＣＤ３ＯＤ）  δＨ  ｐｐｍ  ７．０６  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．３  Ｈｚ，  ２Ｈ，  ＡｒＨ），  ６．７２  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．３  Ｈｚ，  ２Ｈ，  ＡｒＨ），  ４．５３  （ｄ，  Ｊ  ＝  ７．８  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＯＣＨＨ−Ｏｘ），  ４．４９  （ｑ，  Ｊ  ＝  ７．１  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨα−Ａｌａ），  ４．４６  （ｄ，  Ｊ＝６．２Ｈｚ，  １Ｈ，  ＯＣＨＨ−Ｏｘ），  ４．３２-４．２５  （ｍ，  ３Ｈ，  ２  ×  ＯＣＨＨ−Ｏｘ，  ＣＨα−Ｌｅｕ），  ４．１９  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ９．９，  ６．１  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨα−Ｔｙｒ），  ３．７０  （ｄ，  Ｊ  ＝  １４．０  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨＨＧＯｘ），  ３．４９  （ｑ，  Ｊ  ＝  ６．９  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨα−Ａｌａ），  ３．４３  （ｄ，  Ｊ＝１４．０  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨＨＧＯｘ），  ３．２０  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １３．４，  １０．４  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨＨβ−Ｔｙｒ），  ３．０７  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １３．４，  ６．１  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨＨβ−Ｔｙｒ），  １．７９  （ｄｄｄ，  Ｊ  ＝  １３．９，  １１．２，  ４．７  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨＨβ−Ｌｅｕ），  １．７０-１．６２  （ｍ，  １Ｈ，  ＣＨＨβ−Ｌｅｕ），  １．５７-１．４８  （ｍ，  １Ｈ，  ＣＨγ−Ｌｅｕ），  １．３８  （ｄ，  Ｊ  ＝  ７．１  Ｈｚ，  ３Ｈ，  ＣＨ３β−Ａｌａ），  １．２０  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．９  Ｈｚ，  ３Ｈ，  ＣＨ３β−Ａｌａ），  ０．９４  （ｄ，  Ｊ＝  ６．６  Ｈｚ，  ３Ｈ，  ＣＨ３δ−Ｌｅｕ），  ０．８６  （ｄ，  Ｊ＝６．５Ｈｚ，  ３Ｈ，  ＣＨ３δ−Ｌｅｕ）；  
１３Ｃ  ＮＭＲ（１０１  ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）  δＣ  ｐｐｍ  １７８．７  （Ｃ＝Ｏ），  １７５．６  （Ｃ＝Ｏ），  １７４．３  （Ｃ＝Ｏ），  １７３．９  （Ｃ＝Ｏ），  １５７．４  （Ｃ），  １３１．３  （ＣＨ），  １２９．１  （Ｃ），  １１６．３  （ＣＨ），  ８１．６  （ＯＣＨ２），  ７９．０  （ＯＣＨ２），  ６２．０  （Ｃ，  Ｏｘ），  ５７．９  （ＣＨ，  α−Ｔｙｒ），  ５５．２  （ＣＨ，  α−Ｌｅｕ），  ５３．７  （ＣＨ，  α−Ａｌａ），  ５０．７  （ＣＨ，  α−Ａｌａ），  ４６．２  （ＣＨ２，  ＧＯｘ），  ４０．７  （ＣＨ２，  β−Ｌｅｕ），  ３５．７  （ＣＨ２，  β−Ｔｙｒ），  ２５．９  （ＣＨ，  γ−Ｌｅｕ），  ２３．５  （ＣＨ３，  δ−Ｌｅｕ），  ２１．５  （ＣＨ３，  β−Ａｌａ），  ２１．２  （ＣＨ３，  δ−Ｌｅｕ），  １７．９  （ＣＨ３，  β−Ａｌａ）；
νｍａｘ（ｎｅａｔ）＝３２６０，２９５８，１６４７，１５１３，１２３２，９６５，８２８  ｃｍ-１；
ＭＳ  （ＥＳＩ＋）  ｍ／ｚ  ５０４  ［Ｍ＋Ｈ］＋，  ５２６  ［Ｍ＋Ｎａ］＋；  
ＨＲＭＳ  （ＥＳＩ＋）  ｃａｌｃｄ．  ｆｏｒ  Ｃ２５Ｈ３８Ｎ５Ｏ６  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ５０４．２８１７，  ｆｏｕｎｄ  ５０４．２８１８；  
2021519347.tif 000049
スペクトルは、図４参照。
【０１９２】
ペンタペプチド１０の大環状化の詳細
ペンタペプチド６４の調製：
【化３９】
2021519347.tif 000050
【０１９３】
Ｂｏｃ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｔｙｒ（Ｂｎ）−Ｌｅｕ−ＯＢｎ（６２）：
Ｂｏｃ−Ａｌａ−Ｔｙｒ（Ｂｎ）−Ｌｅｕ−ＯＢｎ（４６）（１．００グラム、１．５５ミリモル、１．０当量）のＣＨ２Ｃｌ２（１０ミリリットル）溶液に、ＴＦＡ（２．０ミリリットル）を加え、そして、混合物を、室温で１時間撹拌した。
混合物を、減圧下で濃縮し、そして、得られた残留物を、繰り返し、ＣＨ２Ｃｌ２（３×１０ミリリットル）に溶解し、減圧下で濃縮して、粗アミンを得た。
残渣を、ＣＨ２Ｃｌ２（１６ミリリットル）に溶解し、Ｂｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ（３２６ミリグラム、１．８６ミリモル、１．２当量）、ＨＡＴＵ（７０７ミリグラム、１．８６ミリモル、１．２当量）およびＤＩＰＥＡ（１．０８ミリリットル、６．２０ミリモル、４．０当量）を、続いて加え、そして、混合物を、室温で、１６時間撹拌した。
反応混合物を、ＣＨ２Ｃｌ２（２０ミリリットル）で希釈し、および１０％クエン酸溶液（２×２０ミリリットル）および飽和ＮａＨＣＯ３溶液（２×２０ミリリットル）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、および減圧下で濃縮した。
残留物を、カラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝１：１→ＥｔＯＡｃ）で精製して、テトラペプチド６２（９１２ミリグラム、１．３０ミリモル、８４％）を、白色固体として得た。
【０１９４】
Ｃｂｚ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｔｙｒ（Ｂｎ）−Ｌｅｕ−ＯＢｎ（６３）：
Ｂｏｃ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｔｙｒ（Ｂｎ）−Ｌｅｕ−ＯＢｎ（６２）（８６１ミリグラム、１．２３ミリモル、１．０当量）のＣＨ２Ｃｌ２（１０ミリリットル）溶液に、ＴＦＡ（１．５ミリリットル）を加え、混合物を、室温で１時間撹拌した。
反応混合物を、減圧下で濃縮し、そして、得られた残留物を、繰り返し、ＣＨ２Ｃｌ２（３×１０ミリリットル）に溶解し、そして、減圧下で濃縮して、粗アミンを得た。
残渣を、ＣＨ２Ｃｌ２（１３ミリリットル）に溶解し、Ｃｂｚ−Ａｌａ−ＯＨ（３２８ミリグラム、１．４７ミリモル、１．２当量）、ＨＡＴＵ（５５９ミリグラム、１．４７ミリモル、１．２当量）およびＤＩＰＥＡ（８５３マイクロリットル、４．９０ミリモル、４．０当量）を、続いて加え、そして、混合物を、室温で、１６時間撹拌した。
反応混合物を、ＣＨ２Ｃｌ２（２０ミリリットル）で希釈し、および１０％クエン酸溶液（２×２０ミリリットル）および飽和ＮａＨＣＯ３溶液（２×２０ミリリットル）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、および減圧下濃縮した。
残留物を、カラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＣＨ２Ｃｌ２／メタノール＝１９：１→９：１）で精製して、ペンタペプチド６３（９２８ミリグラム、１．１５ミリモル、９３％）を、白色固体として得た。
【０１９５】
Ｈ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−ＯＨ（６４）：
無水ＤＭＦ（２０ミリリットル）中のペンタペプチド６３（８２０ミリグラム、１．０１ミリモル）の溶液に、１０重量％Ｐｄ／Ｃ（８２ミリグラム、１０重量％）を加え、そして反応フラスコを排気し、窒素を充填し、排気し、そして水素（風船）の雰囲気下に置いた。
反応混合物を、室温で２４時間撹拌し、窒素下に置き、セライトのプラグを通して濾過し、これをメタノール（３×）で洗浄した。
濾液を、真空で濃縮して、６４を黄褐色の固体（４１８ミリグラム、６５％）として得たが、これをさらに精製する必要はなかった。
注意：生成物は、２．０当量のＤＭＦとの複合体として単離された。
【０１９６】
ペンタペプチド６８の調製：
【化４０】
2021519347.tif 000051
【０１９７】
Ｂｏｃ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｔｙｒ（Ｂｎ）−ＯＢｎ（６５）：
Ｂｏｃ−Ａｌａ−Ｔｙｒ（Ｂｎ）−ＯＢｎ（５０）（２．６６グラム、５．００ミリモル、１．０当量）のＣＨ２Ｃｌ２（５．０ミリリットル）の溶液に、ＴＦＡ（５．０ミリリットル）を加え、そして、混合物を、室温で３０分間撹拌した（注意-ガスの発生！）。
反応混合物を、減圧下で濃縮し、得られた残留物を、繰り返し、ＣＨ２Ｃｌ２（３×１０ミリリットル）に溶解し、減圧下で濃縮して、粗アミンを得た。
残留物を、ＣＨ２Ｃｌ２（５０ミリリットル）およびＤＭＦ（１０ミリリットル）の混合物に溶解し、Ｂｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ（１．０５グラム、６．００ミリモル、１．２当量）、ＨＡＴＵ（２．２８グラム、６．００ミリモル、１．２当量）およびＤＩＰＥＡ（３．４８ミリリットル、２０．０ミリモル、４．０当量）を、続いて加え、そして、混合物を、室温で、１６時間撹拌した。
反応混合物を、１０％クエン酸溶液（２×５０ミリリットル）および飽和ＮａＨＣＯ３溶液（２×５０ミリリットル）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。
残渣を、カラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＰＥ／酢酸エチル＝１：１→酢酸エチル）で精製し、トリペプチドのＢｏｃ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｔｙｒ（Ｂｎ）−ＯＢｎ（６５）（２．５７グラム、４．３６ミリモル、８７％）を、白い泡として得た。
【０１９８】
Ｂｏｃ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｔｙｒ（Ｂｎ）−ＯＢｎ（６６）：
Ｂｏｃ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｔｙｒ（Ｂｎ）−ＯＢｎ（６５）（８８７ミリグラム、１．５０ミリモル、１．０当量）のＣＨ２Ｃｌ２（２．０ミリリットル）溶液に、ＴＦＡ（２．０ミリリットル）を加え、混合物を、室温で、３０分間撹拌した（注意-ガス発生！）。
反応混合物を、減圧下で濃縮し、得られた残留物を、繰り返し、ＣＨ２Ｃｌ２（３×１０ミリリットル）に溶解し、減圧下で濃縮して、粗アミンを得た。
残留物を、ＣＨ２Ｃｌ２（１５ミリリットル）およびＤＭＦ（５．０ミリリットル）の混合物に溶解し、Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ（３４１ミリグラム、１．８０ミリモル、１．２当量）、ＨＡＴＵ（６８４ミリグラム、１．８０ミリモル、１．２当量）およびＤＩＰＥＡ（１．０５ミリリットル、６．００ミリモル、４．０当量）ｎを、続いて加え、そして、混合物を、室温で、１６時間撹拌した。
反応混合物を、１０％クエン酸溶液（２×５０ミリリットル）および飽和ＮａＨＣＯ３溶液（２×５０ミリリットル）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。
残渣を、カラムクロマトグラフィー（ＳＩＯ２、酢酸エチルテトラ）により精製し、Ｂｏｃ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｔｙｒ（Ｂｎ）−ＯＢｎ（６６）（７２５ミリグラム、１．１０ミリモル、７３％）を、白色固体として得た。
【０１９９】
Ｃｂｚ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｔｙｒ（Ｂｎ）−ＯＢｎ（６７）：
Ｂｏｃ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｔｙｒ（Ｂｎ）−ＯＢｎ（６６）（６４２ミリグラム、０．９７ミリモル、１．０当量）のＣＨ２Ｃｌ２（２．０ミリリットル）溶液に、ＴＦＡ（１．０ミリリットル）を加え、そして、混合物を、室温で、３０分間撹拌した（注意-ガス発生！）。
反応混合物を、減圧下で濃縮し、得られた残留物を、繰り返し、ＣＨ２Ｃｌ２（３×１０ミリリットル）に溶解し、減圧下で濃縮して、粗アミンを得た。
残留物を、ＣＨ２Ｃｌ２（５．０ミリリットル）とＤＭＦ（５．０ミリリットル）の混合物に溶解し、Ｃｂｚ−Ｌｅｕ−ＯＨ（３０９ミリグラム、１．１６ミリモル、１．２当量）、ＨＡＴＵ（４４１ミリグラム、１．１６ミリモル、１．２当量）およびＤＩＰＥＡ（６９６マイクロリットル、３．８８ミリモル、４．０当量）を、続いて添加し、そして、混合物を、室温で、１６時間撹拌した。
反応混合物を、１０％クエン酸溶液（２×５０ミリリットル）および飽和ＮａＨＣＯ３溶液（２×５０ミリリットル）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。
残渣を、カラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＣＨ２Ｃｌ２／メタノール＝９８：２→９６：４）で精製し、ペンタペプチドＣｂｚ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｔｙｒ（Ｂｎ）−ＯＢｎ（６７）を、白色固体として得た（４９６ミリグラム、０．６１ミリモル、６３％）。
【０２００】
Ｈ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｔｙｒ−ＯＨ（６８）：
無水メタノール（１５ミリリットル）とＤＭＦ（５．０ミリリットル）の混合物中のペンタペプチド６７（４０２ミリグラム、０．５０ミリモル）の溶液に１０重量％Ｐｄ／Ｃ（４０ミリグラム、１０重量％）を加え、および反応フラスコを排気し、窒素を充填し、排気し、そして水素（風船）の雰囲気下に置いた。
反応混合物を、室温で１６時間撹拌し、窒素下に置き、セライトのプラグを通して濾過し、これをメタノール（３×）で洗浄した。
濾液を真空で濃縮して、６８を、オフホワイトの固体（１９９ミリグラム）として、６４％の収率で得た。
注意：生成物は、２．０当量のＤＭＦとの複合体として得られた。
【０２０１】
環化の代表的な例：シクロ（Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ）（１０）：
Ｈ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−ＯＨ（６４）（５０ミリグラム、０．１０ミリモル、１．０当量）の無水ＤＭＦ（１００ミリリットル、０．００１  Ｍ）溶液へ、窒素雰囲気下、ＤＥＰＢＴ（６０ミリグラム、０．２０ミリモル、２．０当量）およびＤＩＰＥＡ（３５マイクロリットル、０．２０ミリモル、２．０当量）を添加し、そして、混合物を、室温で、２４時間撹拌した。
溶媒を真空で除去し、残留物をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＣＨ２Ｃｌ２／メタノール＝９：１→４：１）で２回精製して、環状ペンタペプチド１０を白色固体（２０ミリグラム、４２マイクロモル、４２％）を得た。
Ｒｆ  （ＣＨ２Ｃｌ２／メタノール  ４：１）  ０．４８；  
ｍｐ  ２９４-２９６  ℃  （ｄｅｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ）．
Ｌｉｔ．  ２８４-２８６℃；（４）
１Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＣＤ３ＯＤ）  δＨ  ｐｐｍ  ７．０８  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  ２Ｈ，  ＡｒＨ），  ６．７０  （ｄ，  Ｊ＝８．４Ｈｚ，  ２Ｈ，  ＡｒＨ），  ４．５１  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨα−Ｔｙｒ），  ４．３４  （ｑ，  Ｊ  ＝  ７．０  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨα−Ａｌａ），  ４．１９  （ｑ，  Ｊ＝７．３Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨα−Ａｌａ），  ４．０４  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １０．５，  ５．２  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨα−Ｌｅｕ），  ３．９８  （ｄ，  Ｊ  ＝  １４．７  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨＨ−Ｇｌｙ），  ３．５９  （ｄ，  Ｊ  ＝  １４．７  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨＨ−Ｇｌｙ），  ３．０６  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １２．３，  ６．１  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨＨβ−Ｔｙｒ），  ３．０１  （ｄｄ，  Ｊ＝１２．３，  ７．５  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨＨβ−Ｔｙｒ），  １．８６  （ｄｄｄ，  Ｊ  ＝  １３．５，  １０．７，  ４．８  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨＨβ−Ｌｅｕ），  １．５７-１．４８  （ｍ，  １Ｈ，  ＣＨＨβ−Ｌｅｕ），  １．４７-１．４０  （ｍ，  １Ｈ，  ＣＨγ−Ｌｅｕ），  １．３７  （ｄ，  Ｊ＝７．１Ｈｚ，  ３Ｈ，  ＣＨ３β−Ａｌａ），  １．２８  （ｄ，  Ｊ＝７．３Ｈｚ，  ３Ｈ，  ＣＨ３β−Ａｌａ），  ０．９３  （ｄ，  Ｊ＝  ６．５  Ｈｚ，  ３Ｈ，  ＣＨ３δ−Ｌｅｕ），  ０．８６  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．４  Ｈｚ，  ３Ｈ，  ＣＨ３δ−Ｌｅｕ）；  
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１０１  ＭＨｚ，  ＣＤ３ＯＤ）  δＣ  ｐｐｍ  １７５．５  （Ｃ＝Ｏ），  １７５．０３  （Ｃ＝Ｏ），  １７４．９８  （Ｃ＝Ｏ），  １７３．７  （Ｃ＝Ｏ），  １７２．０  （Ｃ＝Ｏ），  １５７．４  （Ｃ），  １３１．３  （ＣＨ），  １２８．８  （Ｃ），  １１６．２  （ＣＨ），  ５７．２  （ＣＨ，  α−Ｔｙｒ），  ５６．２  （ＣＨ，  α−Ｌｅｕ），  ５１．８  （ＣＨ，  α−Ａｌａ），  ５０．６  （ＣＨ，  α−Ａｌａ），  ４４．４  （ＣＨ２，  Ｇｌｙ），  ４０．４  （ＣＨ２，  β−Ｌｅｕ），  ３７．０  （ＣＨ２，  β−Ｔｙｒ），  ２５．９  （ＣＨ，  γ−Ｌｅｕ），  ２３．４  （ＣＨ３，  δ−Ｌｅｕ），  ２１．７  （ＣＨ３，  δ−Ｌｅｕ），  １７．７  （ＣＨ３，  β−Ａｌａ），  １７．１  （ＣＨ３，  β−Ａｌａ）；  
νｍａｘ（ｎｅａｔ）＝  ３２７９，  １６４８，  １６３１，  １５３０，  １５１４，  １４４０，  １３８４，  １２２６，  １０８７  ｃｍ-１；  
ＭＳ  （ＥＳＩ＋）  ｍ／ｚ  ４９８  ［Ｍ＋Ｎａ］＋；  
ＨＲＭＳ  （ＥＳＩ＋）  ｃａｌｃｄ．  ｆｏｒ  Ｃ２３Ｈ３３Ｎ５ＮａＯ６  ［Ｍ＋Ｎａ］＋  ４９８．２３２３，  ｆｏｕｎｄ  ４９８．２３２２；  
2021519347.tif 000052
スペクトルについては、図５を参照。
【０２０２】
異なる結合形成による環状ペンタペプチド８および１０の調製を以下に要約する。
【０２０３】
【化４１】
2021519347.tif 000053
【０２０４】
実施例３
ｓｉｄｅｃｈａｉｎ−ｔｏ−ｓｉｄｅｃｈａｉｎ環化合成
この方法論は、システイン側鎖の酸化的環化により、ジスルフィド含有大環状化合物を作成するために使用できる。
【化４２】
2021519347.tif 000054
【０２０５】
１１をヨウ素で処理すると、トリチル脱保護とジスルフィド結合形成によって１７員の大環状化合物が得られた。
その後のＴＦＡとの反応により、側鎖保護基の除去が容易になり、逆相ＨＰＬＣ精製後に１２が得られた。
【０２０６】
重要なことに、４員のターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）エレメントは、側鎖を全体的に脱保護するために必要な強酸性条件に耐えるのに十分に安定している。
より小さな１１員および１４員の大環状化合物１３および１４も、この化学を使用して高収率で便利に製造された。
【０２０７】
実施例３ａ
ペンタペプチドにおける、ｓｉｄｅｃｈａｉｎ−ｔｏ−ｓｉｄｅｃｈａｉｎ環化の詳細な実施例
【化４３】
2021519347.tif 000055
【０２０８】
Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＣｕｍｙｌ（７６）：
無水ジエチルエーテル（２０ミリリットル）中の水素化ナトリウム（鉱油に６０％分散、２００ミリグラム、５．００ミリモル、０．５当量）に、新たに蒸留した２−フェニル−２−プロパノール（３．００グラム、２２．０ミリモル、２．２当量）を、０℃で加えた。そして、混合物を、室温で１時間撹拌した。
反応混合物を、０℃に冷却し、２，２，２−トリクロロアセトニトリル（２．００ミリリットル、２０．０ミリモル、２．０当量）をゆっくりと加え、そして、撹拌を周囲温度で３時間続けた。
溶媒を減圧下で除去し、そして、残留物を石油エーテル（５．０ミリリットル）に再溶解し、無水メタノール（２０２マイクロリットル、５．００ミリモル、０．５当量）を加え、そして、溶液を、室温で、１０分間撹拌した。
混合物を、ＰＥで溶出するセライトのプラグを通して濾過し、濾液を減圧下で濃縮して、粗イミデートを得た。
【０２０９】
Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＨ（６．４９グラム、１０．０ミリモル、１．０当量）のＣＨ２Ｃｌ２（６０ミリリットル）懸濁液へ、イミデートのＣＨ２Ｃｌ２（１５ミリリットル）溶液を加え、そして、混合物は、室温で、１６時間撹拌した。
反応混合物を、ＣＨ２Ｃｌ２で溶出するセライトのプラグを通して濾過し、溶媒を真空で除去し、残留物をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝１：１→ＥｔＯＡｃ）で精製して、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＣｕｍｙｌ（７６）（２．１０グラム、２．７４ミリモル、２７％）を、白色固体として得た。
【０２１０】
ＮＯ２−ＧＯｘ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＣｕｍｙｌ（７７）：
Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＣｕｍｙｌ（７６）（２．４０グラム、３．１３ミリモル、１．０当量）のＣＨ２Ｃｌ２（３．５ミリリットル）溶液に、ジエチルアミン（３．５ミリリットル）を加え、そして、混合物を、室温で、１時間撹拌した。
反応混合物を、減圧下で濃縮し、得られた残留物を、繰り返し、ＣＨ２Ｃｌ２（３×１０ミリリットル）に溶解し、減圧下で濃縮して、粗アミンを得た。
第二の反応容器中で、オキセタン−３−オン（４１０マイクロリットル、６．２６ミリモル、２．０当量）、ニトロメタン（４７５マイクロリットル、８．７６ミリモル、２．８当量）およびトリエチルアミン（１７４マイクロリットル、１．２５ミリモル、０．４当量）を、０℃で混ぜ、そして、室温で、１時間撹拌した。
混合物を、無水ＣＨ２Ｃｌ２（２４ミリリットル）に溶解し、−７８℃に冷却し、そして、トリエチルアミン（１．７４ミリリットル、１２．５ミリモル、４．０当量）を添加し、続いて、メタンスルホニルクロリド（４８５マイクロリットル、６．２６ミリモル、２．０当量）の無水ＣＨ２Ｃｌ２（６．０ミリリットル）溶液を滴下した。
反応混合物を、−７８℃で１．５時間撹拌し、そして、無水ＣＨ２Ｃｌ２（１２ミリリットル）中の粗アミンの溶液を、シリンジを介してゆっくりと加えた。
反応混合物を、室温まで温め、１６時間撹拌した。
ＮＨ４Ｃｌ（３０ミリリットル）の飽和溶液を加え、１０分間撹拌した。
層を分離し、水層をＣＨ２Ｃｌ２（２×２０ミリリットル）および酢酸エチル（２×２０ミリリットル）で抽出した。
合わせた有機層を、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（３０ミリリットル）、ブライン（３０ミリリットル）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、そして減圧下で濃縮した。
残留物を、カラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝１：１→ＥｔＯＡｃ）で精製して、７７（１．４１グラム、２．１４ミリモル、６８％）を、オレンジ色の泡として得た。
【０２１１】
Ｆｍｏｃ−ＧＯｘ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＣｕｍｙｌ（７８）：
ＴＨＦ（２２ミリリットル）中のＮＯ２−ＧＯｘ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＣｕｍｙｌ（７７）（１．４１グラム、２．１４ミリモル、１．０当量）の溶液に、Ｆｍｏｃ  Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル（１．４４グラム、４．２８ミリモル、２．０当量）、ＮａＨＣＯ３（７１９ミリグラム、８．５６ミリモル、４．０当量）およびラネーニッケル（Ｈ２Ｏスラリー、２．２ミリリットル）を添加した。
反応混合物を、窒素雰囲気下に置き、排気し、水素（風船）で満たした。
反応混合物を、室温で、２．５時間、激しく撹拌し、ＥｔＯＡｃで溶出するセライトのプラグを通して濾過し、そして、その濾液を減圧下で濃縮した。
Ｆｍｏｃ−ＧＯｘ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＣｕｍｙｌ（７８）は、カラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝１：１→ＥｔＯＡｃ）による精製後に、白色泡状物（１．２９グラム、１．５１ミリモル、７１％）として得られた。
【０２１２】
Ｆｍｏｃ−ＧＯｘ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−ＯｔＢｕ（７９）：
Ｂｅａｄｌｅら（５）の手順に従って、Ｆｍｏｃ−ＧＯｘ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＣｕｍｙｌ（７８）（２５６ミリグラム、０．３０ミリモル、１．０当量）を、２％ＴＦＡ／ＣＨ２Ｃｌ２（０．０５Ｍ）に溶解させて、室温で、２時間撹拌した。反応混合物を、減圧下で濃縮し、得られた残留物を、繰り返し、ＣＨ２Ｃｌ２（３×１５ミリリットル）に再懸濁し、そして、溶媒を減圧下で除去した。
一方、ジエチルアミン（２．０ミリリットル）を、Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−ＯｔＢｕ（８１）（２９８ミリグラム，０．４５ミリモル，１．５ｅｑｕｉｖ）のＣＨ２Ｃｌ２（２．０ミリリットル）溶液に添加し、そして、反応混合物を、室温で、１時間撹拌した。
混合物を、減圧下で濃縮し、得られた残留物を、繰り返し、ＣＨ２Ｃｌ２（３×１５ミリリットル）に溶解し、減圧下で濃縮して、粗アミンを得た。
粗Ｆｍｏｃ−ＧＯｘ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＨを、ＤＭＦ（５．０ミリリットル）に溶解し、およびＨＡＴＵ（１２５ミリグラム、０．３３ミリモル、１．１当量）、ジイソプロピルエチルアミン（２０４μＬ、１．２０ミリモル、４．０当量）および、粗アミンのＤＭＦ（２．０ミリリットル）を連続して加えた。
反応混合物を、室温で、４８時間撹拌し、そして溶媒を減圧下で除去した。
残留物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝１：１→５％メタノールのＣＨ２Ｃｌ２溶液）で精製して、トリペプチド７９（２６８ミリグラム、０．２４ミリモル、７９％）を、白色泡状物として得た。
【０２１３】
Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＧＯｘ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−ＯｔＢｕ（８０）：
ジエチルアミン（２．０ミリリットル）を、Ｆｍｏｃ−ＧＯｘ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−ＯｔＢｕ（７９）（２６２ミリグラム，０．２３ミリモル，１．０ｅｑｕｉｖ）のＣＨ２Ｃｌ２（２．０ミリリットル）溶液に添加し、そして、反応混合物を、室温で、１時間撹拌した。
混合物を、真空で濃縮し、そして、得られた残留物を、繰り返し、ＣＨ２Ｃｌ２（３×１５ミリリットル）に溶解し、減圧下で濃縮して、粗アミンを得た。
ＨＡＴＵ（１３２ミリグラム、０．３５ミリモル、１．５当量）、ジイソプロピルエチルアミン（１８１マイクロリットル、１．１０ミリモル、３．０当量）およびＦｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ（２０８ミリグラム，０．３５ミリモル，１．５当量）を、粗アミンのＣＨ２Ｃｌ２（５．０ミリリットル）に加えた。
反応混合物を、室温で、１６時間撹拌し、溶媒を真空で除去した。
残渣を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＣＨ２Ｃｌ２→ＣＨ２Ｃｌ２中５％メタノール）で精製して、テトラペプチド８０（２６２ミリグラム、０．１８ミリモル、７８％）を、白色の泡状物として得た。
【０２１４】
Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＧＯｘ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−ＯｔＢｕ（１１）：
ジエチルアミン（１．０ミリリットル）を、Ｆｍｏｃ−ＧＯｘ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−ＯｔＢｕ（８０）（２００ミリグラム、０．１４ミリモル、１．０当量）のＣＨ２Ｃｌ２（１．０ミリリットル）の溶液に添加した。そして、反応混合物を、１時間、室温で撹拌した。
反応混合物を減圧下で濃縮し、得られた残留物を、繰り返し、ＣＨ２Ｃｌ２（３×１５ミリリットル）に溶解し、そして、減圧下で濃縮して、粗アミンを得た。
ＨＡＴＵ（７６ミリグラム、０．２０ミリモル、１．４当量）、ジイソプロピルエチルアミン（１０５μＬ、０．６０ミリモル、３．０当量）およびＢｏｃ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ（９４ミリグラム、０．２０ミリモル、１．４当量）をＣＨ２Ｃｌ２（５．０ミリリットル）中の粗アミンに添加した。
反応混合物を、室温で１６時間撹拌し、溶媒を減圧下で除去した。
残渣を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＣＨ２Ｃｌ２→ＣＨ２Ｃｌ２中の５％メタノール）により精製して、ペンタペプチド１１（１９１ミリグラム、０．１１ミリモル、８１％）を、白色の泡状物として得た。
【０２１５】
シクロ（Ｈ−Ｃｙｓ−Ａｓｎ−ＧＯｘ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−ＯＨ）（１２）：
完全に保護されたペンタペプチド１１（６６．５ミリグラム、０．０４ミリモル、１．０当量）をメタノール（２．０ミリリットル）に溶解し、ヨウ素（３０ミリグラム、０．１２ミリモル、３．０当量）のメタノール（２．０ミリリットル）溶液に加えた。
混合物を、室温で１時間撹拌し、０℃に冷却し、ほぼ無色の溶液が得られるまで飽和Ｎａ２Ｓ２Ｏ２水溶液を加えた。
混合物を、真空中で約０．５ミリリットルの容量まで濃縮した。酢酸エチル（１０ミリリットル）を加え、０．１ＭのＮａ２Ｓ２Ｏ２水溶液（５．０ミリリットル）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過した。
粗生成物を、無水条件下、室温で、２．５時間、７０％ＴＦＡ／２０％ＣＨ２Ｃｌ２／１０％ＴＩＳで処理した。
切断カクテル（ｃｌｅａｖａｇｅ  ｃｏｃｋｔａｉｌ）を窒素蒸気下で除去し、そして、粗ペプチドを冷ジエチルエーテル中で沈殿させた。
遠心分離後、ペプチドを水に溶解し、ＨＰＬＣ（０〜３分３％、３〜１０分２５％、１０〜１５分１００％、Ｒｔ＝７．３２分）でさらに精製して、環状ペプチド１２を白色固体として得た（７．４ミリグラム、２ステップで３２％の収率）。
ｍｐ  １６１-１６５  ℃  （分解）；  
１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  Ｄ２Ｏ  ＠  ３２３  Ｋ）  δＨ  ｐｐｍ  ４．７０  （ｍ，  １Ｈ，  ＣＨα−Ａｓｎ）  ４．５６-４．５１  （ｍ，  ２Ｈ，  ＯＣＨＨ−Ｏｘ，  ＣＨα−Ｃｙｓ），  ４．４５-４．３６  （ｍ，  ３Ｈ，  ＯＣＨ２−Ｏｘ，  ＯＣＨＨ−Ｏｘ），  ４．１４  （ｔ，  Ｊ  ＝  ４．９  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨα−Ｃｙｓ），  ３．９８  （ｄ，  Ｊ＝１４．６Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨＨＧＯｘ），  ３．６４  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １４．７，  ５．５  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨＨβ−Ｃｙｓ），  ３．４５  （ｔ，  Ｊ＝  ６．２  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨα−Ａｒｇ），  ３．３５  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １４．７，  ４．５  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨＨβ−Ｃｙｓ），  ３．２１  （ｄ，  Ｊ＝１４．６Ｈｚ，  ２Ｈ，  ＣＨＨβ−Ｃｙｓ，  ＣＨＨＧＯｘ），  ３．１２  （ｔ，  Ｊ＝６．６  Ｈｚ，  ２Ｈ，  ＣＨ２δ−Ａｒｇ），  ２．８１  （ｄｄ，  Ｊ＝１４．６，  １０．６  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨＨβ−Ｃｙｓ），  ２．７８-２．６８  （ｍ，  ２Ｈ，  ＣＨ２β−Ａｓｎ），  １．７０-１．６１  （ｍ，  ２Ｈ，  ＣＨ２β−Ａｒｇ），  １．５９-１．４９  （ｍ，  ２Ｈ，  ＣＨ２γ−Ａｒｇ）．
注意：ＡｓｎのＣＨαは、水のピークに隠れている。  
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１２６  ＭＨｚ，  Ｄ２Ｏ  ＠  ３２３  Ｋ）  δＣ  ｐｐｍ  １７６．４  （Ｃ＝Ｏ），  １７６．１  （Ｃ＝Ｏ），  １７４．４  （Ｃ＝Ｏ），  １７２．７  （Ｃ＝Ｏ），  １７０．２  （Ｃ＝Ｏ），  １５６．７  （Ｃ＝ＮＨ），  ８０．２  （ＯＣＨ２），  ７８．７  （ＯＣＨ２），  ６０．４  （Ｃ，  Ｏｘ），  ５６．１  （ＣＨ，  α−Ａｒｇ），  ５４．３  （ＣＨ，  α−Ｃｙｓ），  ５２．６  （ＣＨ，  α−Ｃｙｓ），  ５０．８  （ＣＨ，  α−Ａｓｎ），  ４４．０  （ＣＨ２  β−Ｃｙｓ），  ４３．６  （ＣＨ２，  ＧＯｘ），  ４２．７  （ＣＨ２  β−Ｃｙｓ），  ４０．７  （ＣＨ２，  δ−Ａｒｇ），  ３６．２  （ＣＨ２，  β−Ａｓｎ），  ３１．３  （ＣＨ２，  β−Ａｒｇ），  ２４．２  （ＣＨ２，  γ−Ａｒｇ）；  
νｍａｘ（ｎｅａｔ）＝  ２９４３，  １６６０，  １４０９，  １２８５，  １１７０，  ６９７，  ４６６  ｃｍ-１；  
ＭＳ  （ＥＳＩ＋）  ｍ／ｚ  ５７８  ［Ｍ＋Ｈ］＋，  ６００  ［Ｍ＋Ｎａ］＋；  
ＨＲＭＳ  （ＥＳＩ＋）  ｃａｌｃｄ．  ｆｏｒ  Ｃ２０Ｈ３６Ｎ９Ｏ７Ｓ２  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ５７８．２１７４，  ｆｏｕｎｄ  ５７８．２１７８；  
2021519347.tif 000056
図６を参照。
【０２１６】
実施例３ｂ
トリペプチドについてのｓｉｄｅｃｈａｉｎ−ｔｏ−ｓｉｄｅｃｈａｉｎ環化の詳細な実施例
【化４４】
2021519347.tif 000057
【０２１７】
Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−ＯｔＢｕ（８１）：
Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ（１１．７グラム、２０．０ミリモル、１．０当量）の、無水ＣＨ２Ｃｌ２（１６０ミリリットル）の懸濁液に、ｔｅｒｔ−ブチル−２，２，２−トリクロロアセトイミデート（８．７４グラム、４０．０ミリモル、２．０当量）を加え、および混合物を周囲温度で３日間撹拌した。
混合物を、セライトのパッドを通して濾過し、固体をＥｔＯＡｃで洗浄した。
濾液を、真空で濃縮し、残留物をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝５：１）で精製して、８１（１１．６グラム、１８．１ミリモル、９０％）を白色固体として得た。
【０２１８】
ＮＯ２−ＧＯｘ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−ＯｔＢｕ（８２）：
Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−ＯｔＢｕ（８１）（３．８５グラム、６．００ミリモル、１．０当量）のＣＨ２Ｃｌ２（６．０ミリリットル）溶液に、ジエチルアミン（６．０ミリリットル）を加え、そして、混合物を室温で１時間撹拌した。
反応混合物を減圧下で濃縮し、得られた残留物を、繰り返し、ＣＨ２Ｃｌ２（３×２０ミリリットル）に溶解し、減圧下で濃縮して、粗アミンを得た。
２番目の反応容器に、オキセタン−３−オン（７７０マイクロリットル、１２．０ミリモル、２．０当量）、ニトロメタン（９１０マイクロリットル、１６．８ミリモル、２．８当量）およびトリエチルアミン（３３５マイクロリットル、２．４０ミリモル、０．４当量）を、０℃で混合し、および室温で１時間撹拌した。
混合物を、無水ＣＨ２Ｃｌ２（４０ミリリットル）に溶解し、−７８℃に冷却し、そして、トリエチルアミン（３．３５ミリリットル、２４．０ミリモル、４．０当量）の溶液を添加し、続いて、メタンスルホニルクロリド（９３０マイクロリットル、１２．０ミリモル、２．０当量）の無水ＣＨ２Ｃｌ２（１２ミリリットル）溶液を滴下した。
反応混合物を、−７８℃で、１．５時間撹拌し、次いで、無水ＣＨ２Ｃｌ２（２０ミリリットル）中の粗アミンの溶液を、シリンジを介してゆっくりと加えた。
反応混合物を室温まで温め、１６時間撹拌した。
ＮＨ４Ｃｌ（５０ミリリットル）の飽和溶液を加え、１０分間撹拌した。
層を分離し、そして、水層を、ＣＨ２Ｃｌ２（２×４０ミリリットル）および酢酸エチル（２×４０ミリリットル）で抽出した。
合わせた有機層を、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（３０ミリリットル）、ブライン（３０ミリリットル）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、そして減圧下で濃縮した。
残留物を、カラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝４：１→２：２→１：１）で精製して、８２（２．１８グラム、４．０８ミリモル、６８％）をオレンジ色の泡として得た。
【０２１９】
Ｂｏｃ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−ＧＯｘ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−ＯｔＢｕ（８３）：
８２（５３４ミリグラム、１．００ミリモル、１．０当量）のＴＨＦ（２０ミリリットル）溶液に、亜鉛粉末（１９６ミリグラム、３．００ミリモル、３．０当量）および酢酸（４５８マイクロリットル、８．００ミリモル、８．０当量）を加え、反応混合物を、激しくガラス被覆磁気攪拌棒で、１時間、室温で攪拌した。
追加の亜鉛粉末（１９６ミリグラム、３．００ミリモル、３．０当量）および酢酸（４５８マイクロリットル、８．００ミリモル、８．０当量）を添加し、混合物を１時間（繰り返し３回）を周囲温度で撹拌した。
混合物を、０℃に冷却し、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（２０ミリリットル）を加えて、続いてＢｏｃ−Ｃｙｓ−ＯＳｕ（８４１ミリグラム、１．５０ミリモル、１．５当量）を加え、溶液を、室温で、１６時間撹拌した。
ブライン（２０ミリリットル）を加え、混合物をＥｔＯＡｃ（３×１５ミリリットル）で抽出した。
合わせた有機層を、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（３０ミリリットル）およびブライン（３０ミリリットル）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、そして真空中で濃縮した。
カラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝２：１→１：１）による精製により、トリペプチド８３（３９１ミリグラム、０．４１ミリモル、４１％）を白色泡状物として得た。
【０２２０】
シクロ（Ｂｏｃ−Ｃｙｓ−ＧＯｘ−Ｃｙｓ−ＯｔＢｕ）（１３）：
無水メタノール（４０ミリリットル）中のヨウ素（３０５ミリグラム、１．２０ミリモル、３．０当量）の溶液に、Ｂｏｃ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−ＧＯｘ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−ＯｔＢｕ（８３）（３８０ミリグラム、０．４０ミリモル、１．０当量）４０ミリリットル）の無水メタノール（４０ミリリットル）溶液をゆっくりと加えた。
混合物を、室温で１時間撹拌し、０℃に冷却し、そして、ほぼ無色の溶液が得られるまで、Ｎａ２Ｓ２Ｏ２の飽和水溶液を加えた。
混合物を、真空中で約５ミリリットルの容量まで濃縮し、ＥｔＯＡｃ（２５ミリリットル）を加え、溶液を、０．１Ｍ  Ｎａ２Ｓ２Ｏ２水溶液（１０ミリリットル）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過した。
溶媒を真空で除去し、残留物をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝１：１→ＥｔＯＡｃ）で精製して、環状トリペプチド１３（１１９ミリグラム、０．２６ミリモル、６４％）を白色泡状物として得た。
Ｒｆ  （ＥｔＯＡｃ）  ０．５５；
ｍｐ  ９８-１００  ℃；  
１Ｈ  ＮＭＲ  （６００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３  ＠  ３２３  Ｋ）  δＨ  ｐｐｍ  ６．５８-６．５４  （ｍ，  １Ｈ，  ＮＨ），  ５．４３  （ｄ，  Ｊ  ＝  ４．２  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＮＨ），  ４．５９  （ｄ，  Ｊ＝  ６．５  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＯＣＨＨ−Ｏｘ），  ４．４８  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．５  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＯＣＨＨ−Ｏｘ），  ４．４３  （ｄ，  Ｊ＝６．５Ｈｚ，  ２Ｈ，  ２  ×  ＯＣＨＨ−Ｏｘ），  ４．２７  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨα−Ｃｙｓ），  ４．０４  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １４．０，  ６．８Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨＨＧＯｘ），  ３．６９  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １４．０，  ４．５  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨＨＧＯｘ），  ３．６３  （ｔ，  Ｊ  ＝  ５．８  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨα−Ｃｙｓ），  ３．３９  （ｄ，  Ｊ  ＝  １３．６  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨＨβ−Ｃｙｓ），  ３．２０  （ｂｒ．  ｍ，  １Ｈ，  ＣＨＨβ−Ｃｙｓ），  ２．９４  （ｄｄ，  Ｊ＝１４．０，  ５．１  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨＨβ−Ｃｙｓ），  ２．８２  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １４．０，  ５．６  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨＨβ−Ｃｙｓ），  ２．４５  （ｂｒ．  ｓ，  １Ｈ，  ＮＨ），  １．４８  （ｓ，  ９Ｈ，  ３  ×  ＣＨ３，  ｔＢｕ），  １．４５  （ｓ，  ９Ｈ，  ３  ×  ＣＨ３，  ｔＢｕ）；  
１３ＣＮＭＲ  （１５１  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３  ＠  ３２３  Ｋ）  δＣ  ｐｐｍ  １７２．７  （Ｃ＝Ｏ），  １７１．５  （Ｃ＝Ｏ），  １５５．１  （Ｃ＝Ｏ，  Ｂｏｃ），  ８２．８  （Ｃ，  ｔＢｕ），  ８２．３  （ＯＣＨ２），  ８０．９  （Ｃ，  Ｂｏｃ），  ７９．８  （ＯＣＨ２），  ６０．０  （Ｃ，  Ｏｘ），  ５７．１  （ＣＨ，  α−Ｃｙｓ），  ５５．７  （ＣＨ，  α−Ｃｙｓ），  ４６．４  （ＣＨ２， ＧＯｘ），  ４４．９  （ＣＨ２，  β−Ｃｙｓ），  ２８．５  （ＣＨ３，  ｔＢｕ），  ２８．２  （ＣＨ３，  ｔＢｕ）．
注意：β−ＣｙｓのＣＨ２の１つの炭素は見えない。
νｍａｘ（ｎｅａｔ）＝  ３３０６，  ２９３１，  １７１４，  １６５７，  １４９０，  １３６６，  １２４７，  １１４９，  ９７１，  ８４３，  ７５１  ｃｍ-１；  
ＭＳ  （ＥＳＩ＋）  ｍ／ｚ  ４６４  ［Ｍ＋Ｈ］＋，  ４８６  ［Ｍ＋Ｎａ］＋；  
ＨＲＭＳ  （ＥＳＩ＋）  ｃａｌｃｄ．  ｆｏｒ  Ｃ１９Ｈ３３Ｎ３ＮａＯ６Ｓ２  ［Ｍ＋Ｎａ］＋  ４８６．１７０３，  ｆｏｕｎｄ  ４８６．１７０５；  
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図７を参照してください。
【０２２１】
実施例４
環式のペプチドの性質に対するターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）エレメントの影響
誘導された環状ペプチドの特性に対するターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）エレメント修飾の影響を調査するための最初の研究が行われた。
ｃＣＮＧＲＣ（１５）は、血圧調節、細胞移動、ウイルス取り込み、細胞生存、血管新生などのさまざまなプロセスに関与する膜貫通型亜鉛依存性メタロプロテアーゼであるアミノペプチダーゼＮ（ＡＰＮ）を標的とすることが知られている（１４，１５）
変性された誘導体１２とｃＣＮＧＲＣ（１５）の両方は、分光光度（Ｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｉｃ）アッセイを用いて、ブタＡＰＮに対するそれらの阻害活性を調べた（表２参照）（１５）。
同様のＩＣ５０値が、１２と１５で観察され（図８ａと８ｂを参照）、ターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）モチーフがこのシステムのアミド結合の優れたバイオアイソスターであることを示唆する。
【０２２２】
【表２】
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使用したアッセイは、オキセタン修飾ペプチド１２および親ペプチド１５を用いたアミノペプチダーゼＮのｉｎ ｖｉｔｒｏ阻害アッセイであった。
【０２２３】
ペプチド１５は、カップリング試薬としてＨＣＴＵを使用し、ベースとしてＮＭＭを使用し、Ｐｉｒａｓら（７）による手順に従って合成された。
酸化は、ビオチン標識化合物について説明したように、樹脂上での環化によって実行された。
分析データは文献に従った。
【０２２４】
改変されたペプチド１２および親ペプチド１５のＩＣ５０値の決定のために、基質としてＬ−ロイシン−ｐ−ニトロアニリンおよびブタの腎臓からのミクロソームアミノペプチダーゼ（ｐＡＰＮ、Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ）（１８ユニット／ミリグラムタンパク質）を使用して、Ｐｉｒａｓら（７）によって出版されたプロトコルに従った。
ＩＣ５０値は、ｐ−ニトロアニリンの形成を追跡することによって計算された。
【０２２５】
ｐ−ニトロアニリンの形成は、Ｈｉｄｅｘ  Ｓｅｎｓｅプレートリーダーで、４０５ｎｍのＵＶ吸収を測定することによってモニターされた。
【０２２６】
アッセイは、ＰＢＳバッファー（ｐＨ  ７．２、１．４７ミリモルのＫＨ２ＰＯ４、７．８ミリモルのＮａ２ＨＰＯ４、１３７ミリモルの塩化ナトリウム、２．７ミリモルのＫＣｌ、１．８ミリモルのＣａＣｌ２、１．８ミリモルのＭｇＣｌ２）中、３７℃、総量１００マイクロリットルで、９６ウェルプレートで行った
ベスタチン塩酸塩を、陽性対照として使用した。
【０２２７】
ペプチドは、２．５マイクロＭおよび３．５マイクロモルとの間の勾配濃度で、そして、ベスタチンは、５０ナノモルと２５マイクロモルとの間の濃度で使用された。
Ｌ−ロイシン−ｐ−ニトロアニリンの溶液が、最終濃度２５０μＭで添加される前に、ペプチドを、酵素（１．０マイクログラム／ミリリットル）とともに、５分間、インキュベートした。
ｐ−ニトロアニリンが検出される前に、プレートを、３７℃で、１時間インキュベートした。
【０２２８】
ＩＣ５０は、最大ｐＡＰＮ触媒活性の５０％をもたらす濃度として定義された。
ＩＣ５０値の計算では、分析に非線形回帰（補間を伴う可変勾配（４つのパラメーター））を使用して、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ  ５のＵＶ吸収に対して、濃度のログをプロットした。
【０２２９】
実施例５
固相ペプチド合成（ＳＰＰＳ）を介した、オキセタン修飾環状ペプチド１８−２１の調製
直鎖状ペプチドを作製するための代替方法では、オキセタン修飾を含む予め形成されたＦｍｏｃ保護ジペプチドビルディングブロックを、成長中のペプチド鎖に組み込むことでできる。
この方法は、標準のＦｍｏｃ／ｔＢｕＳＰＰＳと完全に互換性があり、そして、成長するペプチド鎖を強力な還元条件にさらす必要がない。
【０２３０】
ＳＰＰＳによる合成は、中間体を精製する必要がなくなり、プロセスが簡素化および加速され、自動化が可能になる。
これは、市販のＨ−Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）−２−ＣｌＴｒｔ（１５）から印象的な３９％の収率で環状テトラペプチド１８を合成することによって実現された。
異なる環サイズに基づく、大員環１９-２１は、容易に、このＳＰＰＳアプローチのさらなる一般化を介して行われた。
【０２３１】
【化４５】
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【０２３２】
Ｆｍｏｃ−ＧＯｘ−Ｇｌｙ−ＯＨ（１６）の調製：
【化４６】
2021519347.tif 000061
【０２３３】
Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＣｕｍｙｌ（１２０）
【化４７】
2021519347.tif 000062
無水ＣＨ２Ｃｌ２（３０ミリリットル）溶液のＦｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ（２．００グラム、６．７２ミリモル、１．０当量）の溶液中に、２−フェニル−２−プロパノール（３．３６グラム、２４．７ミリモル、３．７当量）、ＤＣＣ（１．７０グラム、８．２４ミリモル、１．２当量）およびＤＭＡＰ（１６７ミリグラム、１．３７ミリモル、０．２当量）を加え、そして混合物を室温で２４時間撹拌した。
溶媒を真空で除去し、残留物をジエチルエーテル（１００ミリリットル）で希釈し、ジエチルエーテルで溶出するセライトのプラグを通して濾過した。
濾液を飽和ＮａＨＣＯ３溶液（１００ミリリットル）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして減圧下で濃縮した。
残渣を、カラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝９：１→４：１）で精製し、白色固体として、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＣｕｍｙｌ（１２０）（１．４３グラム、３．４４ミリモル、５１％）を得た。
Ｒｆ  （ＰＥ／ＥｔＯＡｃ  ２：１）  ０．４６；  
ｍｐ  １０９-１１１  ℃；  
１Ｈ  ＮＭＲ  （５００ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）  δＨ  ｐｐｍ  ７．７８  （ｄ，  Ｊ  ＝  ７．５  Ｈｚ，  ２Ｈ，  ＡｒＨ），  ７．６０  （ｄ，  Ｊ  ＝  ７．５  Ｈｚ，  ２Ｈ，  ＡｒＨ），  ７．４３-７．２６  （ｍ，  ９Ｈ，  ＡｒＨ），  ５．３１  （ｓ，  １Ｈ，  ＮＨ），  ４．４０  （ｄ，  Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  ２Ｈ，  ＣＨ２−Ｆｍｏｃ），  ４．２３  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨ−Ｆｍｏｃ），  ４．０１  （ｄ，  Ｊ  ＝  ５．３  Ｈｚ，  ２Ｈ，  ＣＨ２Ｇｌｙ），  １．８４  （ｓ，  ６Ｈ，  ２  ×  ＣＨ３，  ｃｕｍｙｌ）；  
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１２６  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）  δＣ  ｐｐｍ  １６８．７  （Ｃ＝Ｏ），  １５６．３  （Ｃ＝Ｏ，  Ｆｍｏｃ），  １４５．１  （Ｃ），  １４３．９  （Ｃ），  １４１．３  （Ｃ），  １２８．５  （ＣＨ），  １２７．８  （ＣＨ），  １２７．４  （ＣＨ），  １２７．１  （ＣＨ），  １２５．２  （ＣＨ），  １２４．４  （ＣＨ），  １２０．１  （ＣＨ），  ８３．４  （Ｃ，  ｃｕｍｙｌ），  ６７．２  （ＣＨ２，  Ｆｍｏｃ），  ４７．２  （ＣＨ，  Ｆｍｏｃ），  ４３．５  （ＣＨ２，  Ｇｌｙ），  ２８．６  （ＣＨ３，  ｃｕｍｙｌ）；  
νｍａｘ（ｎｅａｔ）＝  ３３０８，  ２９３８，  １７３８，  １６８７，  １５４６，  １２１４，  １０５３，  ７６０，  ６９７  ｃｍ-１；  
ＭＳ  （ＥＳＩ＋）  ｍ／ｚ  ４３８  ［Ｍ＋Ｎａ］＋，  ４５４  ［Ｍ＋Ｋ］＋；  
ＨＲＭＳ  （ＥＳＩ＋）  ｃａｌｃｄ．  ｆｏｒ  Ｃ２６Ｈ２５ＮＮａＯ４  ［Ｍ＋Ｎａ］＋  ４３８．１６７６，ｆｏｕｎｄ  ４３８．１６７４．
【０２３４】
Ｏ２Ｎ−ＧＯｘ−Ｇｌｙ−ＯＣｕｍｙｌ（１２１）
【化４８】
2021519347.tif 000063
ＣＨ２Ｃｌ２（４．０ミリリットル）中のＦｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＣｕｍｙｌ（１２０）（１．２９グラム、３．１０ミリモル、１．０当量）の溶液に、ジエチルアミン（４．０ミリリットル）を加え、混合物を室温で２時間撹拌した。
反応混合物を減圧下で濃縮し、得られた残留物を繰り返し、ＣＨ２Ｃｌ２（３×１５ミリリットル）に溶解し、減圧下で濃縮して、粗アミンを得た。
第二の反応容器中で、オキセタン−３−オン（３９８マイクロリットル、６．２１ミリモル、２．０当量）、ニトロメタン（４７０マイクロリットル、８．６８ミリモル、２．８当量）およびトリメチルアミン（１７３マイクロリットル、１．２４ミリモル、０．４当量）を０℃に合わせ、および室温で１時間撹拌した。
混合物を、無水ＣＨ２Ｃｌ２（２０ミリリットル）に溶解し、−７８℃に冷却し、およびトリメチルアミン（１．７３ミリリットル、１２．４ミリモル、４．０当量）の溶液を加え、続いてメタンスルホニルクロリド（４８１マイクロリットル、６．２１ミリモル、２．０当量）の無水ＣＨ２Ｃｌ２（６．０ミリリットル）溶液を、滴下添加した。
反応混合物を、−７８℃で１．５時間撹拌し、無水ＣＨ２Ｃｌ２（２０ミリリットル）中の粗アミンの溶液を、シリンジを介してゆっくりと加えた。
反応混合物を、室温まで温め、１６時間撹拌した。
ＮＨ４Ｃｌ（２０ミリリットル）の飽和溶液を加え、１０分間撹拌した。
層を分離し、そして、水層を、ＣＨ２Ｃｌ２（２×３０ミリリットル）および酢酸エチル（２×３０ミリリットル）で抽出した。
合わせた有機層を減圧下で濃縮し、残留物をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝４：１→２：１→１：１）で精製して、１２１（９４０ミリグラム、３．０５ミリモル、９８％）を、オフホワイトの固体として得る。
Ｒｆ  （ＰＥ／ＥｔＯＡｃ  ２：１）０．１５；
ｍｐ  ７１-７２  ℃；  
１Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）  δＨ  ｐｐｍ  ７．３９-７．２７  （ｍ，  ５Ｈ，  ＡｒＨ），  ４．７７  （ｓ，  ２Ｈ，  ＮＯ２ＣＨ２），  ４．５７  （ｄ，  Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  ２Ｈ，  ＯＣＨ２−Ｏｘ），  ４．５３  （ｄ，  Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  ２Ｈ，  ＯＣＨ２−Ｏｘ），  ３．５３  （ｓ，  ２Ｈ，  ＣＨ２Ｇｌｙ），  ２．２９  （ｓ，  １Ｈ，  ＮＨ），  １．８０  （ｓ，  ６Ｈ，  ２  ｘ  ＣＨ３，  ｃｕｍｙｌ）；  
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１０１  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）  δＣ  ｐｐｍ  １７０．６  （Ｃ＝Ｏ），  １４５．１  （Ｃ），  １２８．５  （ＣＨ），  １２７．５  （ＣＨ），  １２４．４  （ＣＨ），  ８３．３  （Ｃ，  ｃｕｍｙｌ），  ７８．９  （ＮＯ２ＣＨ２），  ７８．３  （２  ×  ＯＣＨ２），  ５９．６  （Ｃ，  Ｏｘ），  ４５．６  （ＣＨ２，  Ｇｌｙ），  ２８．６  （ＣＨ３，  ｃｕｍｙｌ）；  
νｍａｘ（ｎｅａｔ）＝  ３２９３，  ２９７９，  １７３６，  １５４５，  １３６４，  １２１５，  １１４０，  １１０１，  ９７８，  ７６２，  ６９５  ｃｍ-１；  
ＭＳ  （ＥＳＩ＋）  ｍ／ｚ  ３３１  ［Ｍ＋Ｎａ］＋；  
ＨＲＭＳ  （ＥＳＩ＋）  ｃａｌｃｄ．  ｆｏｒ  Ｃ１５Ｈ２０Ｎ２ＮａＯ５  ［Ｍ＋Ｎａ］＋  ３３１．１２６４，  ｆｏｕｎｄ  ３３１．１２６８．
【０２３５】
Ｆｍｏｃ−ＧＯｘ−Ｇｌｙ−ＯＣｕｍｙｌ（１２２）
【化４９】
2021519347.tif 000064
ＮＯ２−ＧＯｘ−Ｇｌｙ−ＯＣｕｍｙｌ（１２１）（９２８ミリグラム、３．００ミリモル、１．０当量）のＴＨＦ（３０ミリリットル）溶液に、Ｆｍｏｃ  Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル（２．０２グラム、６．００ミリモル、２．０当量）、炭酸水素ナトリウム（１．０１グラム、１２．０ミリモル、４．０当量）およびＲａｎｅｙ  Ｎｉ（Ｈ２Ｏスラリー、３．０ミリリットル）を加えた。
反応混合物を窒素雰囲気下に置き、排気し、水素（風船）で満たした。
混合物を室温で４時間激しく撹拌した。
次に、混合物を、ＥｔＯＡｃで溶出するセライトのプラグを通して濾過し、濾液を飽和Ｎａ２ＣＯ３（３×５０ミリリットル）で洗浄し、減圧下で濃縮した。
Ｆｍｏｃ−ＧＯｘ−Ｇｌｙ−ＯＣｕｍｙｌ（１２２）は、カラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝２：１→１：１→ＥｔＯＡｃ）で精製した後、白色の粘着性泡（８９７ミリグラム、１．７９ミリモル、６０％）として得られた。
Ｒｆ  （ＰＥ／ＥｔＯＡｃ  １：１）  ０．２１；
１Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）  δＨ  ｐｐｍ  ７．７２  （ｄ，  Ｊ  ＝  ７．４  Ｈｚ，  ２Ｈ，  ＡｒＨ），  ７．５４  （ｄ，  Ｊ  ＝  ７．４  Ｈｚ，  ２Ｈ，  ＡｒＨ），  ７．３８-７．２１  （ｍ，  ９Ｈ，  ＡｒＨ），  ５．２６  （ｓ，  １Ｈ，  ＮＨ），  ４．４８-４．２４  （ｍ，  ６Ｈ，  ＣＨ２−Ｆｍｏｃ，  ２  ｘ  ＯＣＨ２−Ｏｘ），  ４．１６  （ｔ，  Ｊ＝６．２  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨ−Ｆｍｏｃ），  ３．５０  （ｄ，  Ｊ＝  ５．１  Ｈｚ，  ２Ｈ，  ＣＨ２ＧＯｘ），  ３．４１  （ｓ，  ２Ｈ，  ＣＨ２Ｇｌｙ），  １．９２  （ｂｒ．  ｓ，  １Ｈ，  ＮＨ），  １．７６  （ｓ，  ６Ｈ，  ２  ×  ＣＨ３，  ｃｕｍｙｌ）；  
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１０１  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）  δＣ  ｐｐｍ  １７１．４  （Ｃ＝Ｏ），  １５７．０  （Ｃ＝Ｏ，  Ｆｍｏｃ），  １４５．１  （Ｃ），  １４４．０  （Ｃ），  １４１．４  （Ｃ），  １２８．５  （ＣＨ），  １２７．８  （ＣＨ），  １２７．５  （ＣＨ），  １２７．２  （ＣＨ），  １２５．２  （ＣＨ），  １２４．４  （ＣＨ），  １２０．１  （ＣＨ），  ８３．２  （Ｃ，  ｃｕｍｙｌ），  ７９．２  （２  ×  ＯＣＨ２），  ６６．９  （ＣＨ２，  Ｆｍｏｃ），  ５９．７  （Ｃ，  Ｏｘ），  ４７．３  （ＣＨ，  Ｆｍｏｃ），  ４５．５  （ＣＨ２，  ＧＯｘ  ｏｒ  Ｇｌｙ），  ４５．４  （ＣＨ２，  ＧＯｘ  ｏｒ  Ｇｌｙ），  ２８．６  （ＣＨ３，  ｃｕｍｙｌ）；  
νｍａｘ（ｎｅａｔ）＝  ３３０９，  ２９４１，  １７１６，  １５３５，  １４４８，  １２１４，  １１３４，  ９７４，  ７５８，  ７３９，  ６９８  ｃｍ-１；  
ＭＳ  （ＥＳＩ＋）  ｍ／ｚ  ５０１  ［Ｍ＋Ｈ］＋，  ５２３  ［Ｍ＋Ｎａ］＋．；  
ＨＲＭＳ  （ＥＳＩ＋）  ｃａｌｃｄ．  ｆｏｒ  Ｃ３０Ｈ３２Ｎ２ＮａＯ５  ［Ｍ＋Ｎａ］＋  ５２３．２２０３，  ｆｏｕｎｄ  ５２３．２１９７．
【０２３６】
シクロ（Ｌｅｕ−ＧＯｘ−Ｇｌｙ−Ｔｒｐ（Ｂｏｃ））（１８）の固相ペプチド合成：
【化５０】
2021519347.tif 000065
Ｆｍｏｃ−ＧＯｘ−Ｇｌｙ−Ｃｕｍｙｌ（１２２）（２００ミリグラム、０．４０ミリモル、４．０当量）を、クミルエステルの完全な脱保護がＴＬＣによって観察されるまで、ＣＨ２Ｃｌ２（８．０ミリリットル）中の２％ＴＦＡ中で、室温で、２〜３時間撹拌した。
得られた残留物を繰り返し、溶媒を減圧下で除去し、ＣＨ２Ｃｌ２（３×１０ミリリットル）に溶解し、減圧下で濃縮した。
粗製のＦｍｏｃ−ＧＯｘ−Ｇｌｙ−ＯＨ（１６）を、さらに精製することなくカップリングに使用した。
Ｈ−Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）−２−クロロトリチル樹脂（１５）（１４５ミリグラム、０．１０ミリモル、１．０当量）を、１０ミリリットルの反応容器に入れ、樹脂をＤＭＦ（２．０ミリリットル）で３０分間予備膨潤させた。
Ｆｍｏｃ−ＧＯｘ−Ｇｌｙ−ＯＨ（１６）をＤＭＦ（４．０ミリリットル）に溶解した。
ＨＡＴＵ（７２ミリグラム、０．１９ミリモル、１．９当量）およびＤＩＰＥＡ（７０μＬ、０．４０ミリモル、４．０当量）を、１６の２．０ミリリットル溶液に添加し、カップリング溶液を樹脂に添加した。
カップリング反応を、わずかに攪拌しながら、室温で２時間進行させた。
樹脂を濾過し、ＤＭＦ（１×２．０ミリリットル）で洗浄し、カップリングステップを繰り返した後、Ｆｍｏｃ基をＤＭＦ（２．０ミリリットル）中の２０％ピペリジンで、室温で、２０分間除去した。
レジンをＤＭＦ（５×２．０ミリリットル）で洗浄した後、Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ（１７７ミリグラム、０．５０ミリモル、５．０当量）を、ＨＡＴＵ（１８６ミリグラム、０．４９ミリモル、４．９当量）、ＤＩＰＥＡ（１７４μＬ、１．００ミリモル、１０当量）のＤＭＦ（２．０ミリリットル）溶液で、室温で１時間、カップリングした。
ＴＮＢＳテストが陽性の場合、カップリングステップが繰り返された。
前述のように、Ｆｍｏｃ基を除去する前に、樹脂をＤＭＦ（５×２．０ミリリットル）で洗浄した。
次に、テトラペプチドを、ＣＨ２Ｃｌ２（１：４、１．０ミリリットル）中のＴＦＥを用いて、室温で、１時間、樹脂から切断された。
これを２回繰り返し、合わせた開裂溶液を減圧下で蒸発乾固させた。
合成の成功は、質量分析およびＮＭＲによって確認された。
固相合成の粗収率は、約７０〜８０％であった。
【０２３７】
粗ペプチドをＤＭＦ（７６ミリリットル、約１ミリモル）に溶解し、ＤＥＰＢＴ（４５ミリグラム、０．１５ミリモル、２．０当量）およびＤＩＰＥＡ（２６μＬ、０．１５ミリモル、２．０当量）を添加した。
反応混合物を、６４時間室温で撹拌し、溶媒を減圧下、除去し、残渣を、カラムクロマトグラフィー（５〜１２パーセントのメタノールのＣＨ２Ｃｌ２溶液により）、２回精製した。
環状テトラペプチド１８は、完全な反応シーケンスについて、３９％の収率（２１．１ミリグラム、３９マイクロモル）で、粘着性のある白色／無色の固体として得られた。
Ｒｆ  （ＣＨ２Ｃｌ２／メタノール  ９：１）  ０．５５；  
１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δＨ  ８．２５  （ｄ，  Ｊ  ＝  １０．３  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＮＨ），  ８．０３  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．１  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＡｒＨ），  ７．９５  （ｄ，  Ｊ  ＝  ９．１  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＮＨ），  ７．６３  （ｄ，  Ｊ  ＝  ７．７  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＡｒＨ），  ７．４８  （ｓ，  １Ｈ，  ＡｒＨ），  ７．４７-７．４３  （ｍ，  １Ｈ，  ＮＨ），  ７．３４  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．７  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＡｒＨ），  ７．２７  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．５  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＡｒＨ），  ４．６１  （ｑ，  Ｊ＝８．８Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨα−Ｔｒｐ），  ４．４０  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．３  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＯＣＨＨ−Ｏｘ），  ４．１７  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．９  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＯＣＨＨ−Ｏｘ），  ４．１５  （ｄ，  Ｊ＝６．３Ｈｚ，  １Ｈ，  ＯＣＨＨ−Ｏｘ），  ４．０１  （ｔｄ，  Ｊ  ＝  ９．８，  ５．２  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨα−Ｌｅｕ），  ３．８９  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．９  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＯＣＨＨ−Ｏｘ），  ３．８０  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １３．４，  ７．８  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨＨＧＯｘ），  ３．４４-３．３５  （ｍ，  １Ｈ，  ＣＨＨＧｌｙ），  ３．２４  （ｄ，  Ｊ＝１５．２Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨＨＧｌｙ），  ３．１８  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １５．０，  ５．６  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨＨβ−Ｔｒｐ），  ３．０７-３．０３  （ｍ，  １Ｈ，  ＣＨＨβ−Ｔｒｐ），  ３．０１  （ｄ，  Ｊ＝１１．３Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨＨＧＯｘ），  １．６２  （ｓ，  ９Ｈ，  ３  ×  ＣＨ３，  Ｂｏｃ），  １．６１-１．５６  （ｍ，  ２Ｈ，  ＣＨＨβ−Ｌｅｕ，  ＣＨγ−Ｌｅｕ），  １．５２-１．４４  （ｍ，  １Ｈ，  ＣＨＨβ−Ｌｅｕ），  ０．９１  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．２  Ｈｚ，  ３Ｈ，  ＣＨ３δ−Ｌｅｕ），  ０．７８  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．２  Ｈｚ，  ３Ｈ，  ＣＨ３δ−Ｌｅｕ）．
注意：１つのＮＨは観察されなかった。  
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１２６  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δＣ  １７３．１３  （Ｃ＝Ｏ），  １７３．０９  （Ｃ＝Ｏ），  １７１．０  （Ｃ＝Ｏ），  １４８．９  （Ｃ＝Ｏ，  Ｂｏｃ），  １３４．７  （Ｃ），  １３０．０  （Ｃ），  １２４．５  （ＣＨ），  １２３．４  （ＣＨ），  １２２．６  （ＣＨ），  １１９．１  （ＣＨ），  １１６．１  （Ｃ），  １１４．８  （ＣＨ），  ８３．７  （Ｃ，  Ｂｏｃ），  ７８．１  （ＯＣＨ２），  ７６．３  （ＯＣＨ２），  ６０．３  （Ｃ，  Ｏｘ），  ５５．２  （ＣＨ，  α−Ｔｒｐ），  ５４．０  （ＣＨ，  α−Ｌｅｕ），  ４７．２  （ＣＨ２，  Ｇｌｙ），  ４４．３  （ＣＨ２，  ＧＯｘ），  ３９．６  （ＣＨ２，  β−Ｌｅｕ），  ２７．７  （ＣＨ３，  Ｂｏｃ），  ２５．８  （ＣＨ２，  β−Ｔｒｐ），  ２４．６  （ＣＨ，  γ−Ｌｅｕ），  ２２．９  （ＣＨ３， δ−Ｌｅｕ），  ２１．１  （ＣＨ３， δ−Ｌｅｕ）；  
νｍａｘ（ｎｅａｔ）＝  ３２６６，  ２９２５，  １６７２，  １５３２，  １２２５，  ７０４  ｃｍ-１；  
ＭＳ  （ＥＳＩ＋）  ｍ／ｚ  ５６４  ［Ｍ＋Ｎａ］＋；  
ＨＲＭＳ  （ＥＳＩ＋）  ｃａｌｃｄ．  ｆｏｒ  Ｃ２８Ｈ３９Ｎ５ＮａＯ６＋  ［Ｍ＋Ｎａ］＋  ５６４．２７９３，  ｆｏｕｎｄ  ５６４．２７９１；  
2021519347.tif 000066
【０２３８】
シクロ（Ａｌａ−Ｔｒｐ−ＧＯｘ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ）（１９）の固相ペプチド合成：
【化５１】
2021519347.tif 000067
環状ペプチド１９は、Ｈ−Ｌｅｕ−２−クロロトリチル樹脂（６７．５ミリグラム、０．０５ミリモル）から出発して、上記のように合成された。
トリプトファンは側鎖保護基なしで組み込まれた。
粗環状ペプチドを、分取ＨＰＬＣで精製した（溶媒Ａ：水中０．１％ＴＦＡ；溶媒Ｂ：ＭｅＣＮ中０．１％ＴＦＡ；
グラジエント：
０〜３分、５％Ｂ；
３〜２８分、３〜４０％Ｂ；
２８〜３２分、４０〜１００％Ｂ；
保持時間：２８．９分）。
【０２３９】
環状ペンタペプチド１９は、凍結乾燥後に、ＴＦＡ塩（２．４ミリグラム、６．５マイクロモル、１３％）として得られた。
ＨＲＭＳ  （ＥＳＩ＋）  ｃａｌｃｄ．  ｆｏｒ  Ｃ２６Ｈ３７Ｎ６Ｏ５＋  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ５１３．２８２０，  ｆｏｕｎｄ  ５１３．２８１６．
【０２４０】
シクロ（Ｍｅｔ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−ＧＯｘ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ）の固相ペプチド合成（２０）：
【化５２】
2021519347.tif 000068
環状ペプチド２０は、Ｈ−Ｌｅｕ−２−クロロトリチル樹脂（６７．５ミリグラム、０．０５ミリモル）から出発して、上記のように合成された。
トリプトファンは側鎖保護基なしで組み込まれた。
粗環状ペプチドを分取ＨＰＬＣで精製した
（溶媒Ａ：水中０．１％ＴＦＡ；
溶媒Ｂ：ＭｅＣＮ中０．１％ＴＦＡ；
グラジエント：
０〜３分、５％Ｂ；
３〜２８分、３〜５０％Ｂ；
２８〜３２分、５０〜１００％Ｂ；
保持時間：２５．３分）。
【０２４１】
凍結乾燥後、ＴＦＡ塩（２．５ミリグラム、６．５マイクロモル、７％）として、環状ヘキサペプチド２０が得られた。
ＨＲＭＳ  （ＥＳＩ＋）  ｃａｌｃｄ．  ｆｏｒ  Ｃ３１Ｈ４６Ｎ７Ｏ６Ｓ＋  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ６４４．３２２５，  ｆｏｕｎｄ  ６４４．３２２０．
【０２４２】
シクロ（Ｓｅｒ−Ｍｅｔ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−ＧＯｘ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ）（２１）の固相ペプチド合成：
【化５３】
2021519347.tif 000069
環状ペプチド２１は、Ｈ−Ｌｅｕ−２−クロロトリチル樹脂（６７．５ミリグラム、０．０５ミリモル）から出発して、上記のように合成された。
トリプトファンは側鎖保護基なしで組み込まれた。
粗環状ペプチドを、分取ＨＰＬＣで精製した
（溶媒Ａ：水中０．１％ＴＦＡ；
溶媒Ｂ：ＭｅＣＮ中０．１％ＴＦＡ；
グラジエント：
０〜３分、５％Ｂ；
３〜２８分、３〜５０％Ｂ；
２８〜３２分、５０〜１００％Ｂ；
保持時間：２６．８分）。
【０２４３】
環状ヘプタペプチド２１は、凍結乾燥後に、ＴＦＡ塩（６．２ミリグラム、６．５マイクロモル、１３％）として得られた。
ＨＲＭＳ  （ＥＳＩ＋）  ｃａｌｃｄ．  ｆｏｒ  Ｃ３４Ｈ５０Ｎ８ＮａＯ８Ｓ＋  ［Ｍ＋Ｎａ］＋  ７５３．３３６５，  ｆｏｕｎｄ  ７５３．３３５８．
【０２４４】
実施例  ６
シクロ（Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−ＡＯｘ−Ｇｌｙ）（１２）の調製
【化５４】
2021519347.tif 000070
Ｈ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−ＡＯｘ−Ｇｌｙ−ＯＨ（５３）（４７ミリグラム、０．１０ミリモル、１．０当量）の無水ＤＭＦ（１００ミリリットル、０．００１Ｍ）溶液に、窒素の雰囲気下、ＤＥＰＢＴ（６０ミリグラム、０．２０ミリモル、２．０当量）およびＤＩＰＥＡ（３５マイクロリットル、０．２０ミリモル、２．０当量）を加え、および混合物を、室温で、４８時間、撹拌した。
溶媒を、減圧下で除去し、残留物を、カラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＣＨ２Ｃｌ２／メタノール＝９：１→８５：１５）により、２回精製して、環状テトラペプチド１２を白色固体として得た（１回目の実行：２２．９ミリグラム、５０マイクロモル、５０％、２回目の実行（２８９マイクロモルスケール）：６４．４ミリグラム、１４２マイクロモル、４９％）。
Ｒｆ  （ＣＨ２Ｃｌ２／メタノール  ９：１）  ０．１９；
ｍｐ  ２２０-２２３℃；
１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）  δＨ  ７．６２  （ｄ，  Ｊ  ＝  ７．９  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＡｒＨ），  ７．３２  （ｄ，  Ｊ＝８．１Ｈｚ，  １Ｈ，  ＡｒＨ），  ７．１２  （ｓ，  １Ｈ，  ＡｒＨ），  ７．１０  （ｔ，  Ｊ＝７．７Ｈｚ，  １Ｈ，  ＡｒＨ），  ７．０３  （ｔ，  Ｊ＝７．４  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＡｒＨ），  ４．９３  （ｄｄ，  Ｊ＝１０．２，  ７．２  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨα−Ｔｒｐ），  ４．５７  （ｑ，  Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨα−ＡＯｘ），  ４．５０  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．８  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＯＣＨＨ−Ｏｘ），  ４．４０  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．８  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＯＣＨＨ−Ｏｘ），  ４．３８  （ｄ，  Ｊ  ＝  ７．８  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＯＣＨＨ−Ｏｘ），  ４．２０  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １０．９，  ４．２  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨα−Ｌｅｕ），  ４．０４  （ｄ，  Ｊ＝  ７．８  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＯＣＨＨ−Ｏｘ），  ３．６７  （ｄ，  Ｊ＝  １６．６  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨＨＧｌｙ），  ３．５７  （ｄ，  Ｊ  ＝  １６．６  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨＨＧｌｙ），  ３．３７-３．２７  （ｍ，  １Ｈ，  ＣＨＨβ−Ｔｒｐ），  ３．２１  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １５．１，  ７．２  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨＨβ−Ｔｒｐ），  １．７２-１．６３  （ｍ，  １Ｈ，  ＣＨＨβ−Ｌｅｕ），  １．５９-１．４８  （ｍ，  ２Ｈ，  ＣＨＨβ−Ｌｅｕ，  ＣＨγ−Ｌｅｕ），  １．１２  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．９  Ｈｚ，  ３Ｈ，  ＣＨ３β−ＡＯｘ），  ０．９０  （ｄ，  Ｊ＝６．０Ｈｚ，  ３Ｈ，  ＣＨ３δ−Ｌｅｕ），  ０．７３  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．０Ｈｚ，  ３Ｈ，  ＣＨ３δ−Ｌｅｕ）．
注意：  ＴｒｐのＣＨＨβ−は、溶媒ピークと重なる。；
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１２６  ＭＨｚ，  ＣＤ３ＯＤ）  δＣ  １７６．４  （Ｃ＝Ｏ），  １７５．３  （Ｃ＝Ｏ），  １７３．７  （Ｃ＝Ｏ），  １３８．０  （Ｃ），  １２８．５  （Ｃ），  １２３．８  （ＣＨ），  １２２．６  （ＣＨ），  １１９．９  （ＣＨ），  １１９．１  （ＣＨ），  １１２．３  （ＣＨ），  １１０．３  （Ｃ），  ７９．２  （ＯＣＨ２），  ７７．３  （ＯＣＨ２），  ６４．７  （Ｃ，  Ｏｘ），  ５７．７  （ＣＨ，  α−Ｔｒｐ），  ５５．３  （ＣＨ，  α−Ｌｅｕ），  ５１．６  （ＣＨ，  α−ＡＯｘ），  ４８．８  （ＣＨ２，  Ｇｌｙ），  ４０．６  （ＣＨ２，  β−Ｌｅｕ），  ２７．６  （ＣＨ２，  β−Ｔｒｐ），  ２６．２  （ＣＨ，  γ−Ｌｅｕ），  ２３．３  （ＣＨ３，  δ−Ｌｅｕ），  ２１．２  （ＣＨ３，  δ−Ｌｅｕ），  １３．５  （ＣＨ３，  ＡＯｘ）．
注意：ＧｌｙのＣＨ２のシグナルは、溶媒のピークと重複する。
νｍａｘ（ｎｅａｔ）＝  ３２５６，  ２９５６，  １６５９，  １５３２，  ７４０ｃｍ-１；  
ＭＳ  （ＥＳＩ＋）  ｍ／ｚ  ４７８  ［Ｍ＋Ｎａ］＋；  
ＨＲＭＳ  （ＥＳＩ＋）  ｃａｌｃｄ．  ｆｏｒ  Ｃ２４Ｈ３３Ｎ５ＮａＯ４  ［Ｍ＋Ｎａ］＋  ４７８．２４２５，  ｆｏｕｎｄ  ４７８．２４２３；  
2021519347.tif 000071
アラニン修飾残基を含む１２の形成の成功は、本明細書に記載の方法論がより広い適用性を有し、グリシン置換に限定されないことを確認する。
【０２４５】
実施例７
環化反応の速度論的測定
【化５５】
2021519347.tif 000072
反応速度と形成される生成物をより深く理解するために、本質的に環化が困難なテトラペプチドＷＬＧＧ（６）および対応するオキセタン修飾ＷＬＧＯｘＧ（７）（ここで、ＧＯｘ＝オキセタン修飾グリシン）の経時的研究を行った。
この調査では、トリプトファン残基を含む基質を使用して、ＵＶ分光法による定量的モニタリングを可能にした。
両方の基質をＤＥＰＢＴ法にかけ、そして、変換を７４時間にわたってモニターした。
これらのデータから、環状ペプチド９（上記の構造を参照）を含むオキセタンの初期形成速度は、線形前駆体６と７の両方が同様の速度で消費されたとしても（図９を参照）、８（上記の構造を参照）よりもかなり速いことが明らかである。
かなりの量の不要なダイマーとシクロダイマーが８の環化で生成され、変換率と分離収率が低いことを説明する。
対照的に、オキセタン修飾ペプチド７の場合、環状生成物９へのクリーンな変換が観察された。
【０２４６】
まとめると、これらの研究は、主鎖のカルボニル基の１つがオキセタン環で置き換えられると、小さな環状ペプチドを形成するためのｈｅａｄ−ｔｏ−ｔａｉｌの閉環がより速く進行し、より高い収率を与え、副産物が少なくなることを確立する。
ＨＰＬＣ測定は、Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｅｃｌｉｐｓｅ  Ｐｌｕｓ  Ｃ１８カラム（５．０マイクロモル、４．６×１５０ミリメートル）のＡｇｉｌｅｎｔ  １２６０  Ｉｎｆｉｎｉｔｙ分析ＨＰＬＣシステムで、流速１．０ミリリットル／分（
溶媒Ａ：水中０．１％ＴＦＡ、
溶媒Ｂ：ＭｅＣＮ中の０．１％ＴＦＡ；
グラジエント：
０〜３分、３％Ｂ；
３〜１４分、３〜２０％Ｂ；
１４〜２０分、２０％Ｂ；
２０〜４１分、２０〜５０％Ｂ；
４１〜４３分、５０〜１００％Ｂ；
４３〜４５分、１００％Ｂ）で行った。
【０２４７】
２０ミリリットルのバイアルを分離するために、直鎖状前駆体６または７（１０マイクロモル、１．０当量）と無水ＤＭＦ（１０ミリリットル）を添加した。
このとき、ＤＥＰＢＴ（２０マイクロモル、２．０当量）とＤＩＰＥＡ（２０マイクロモル、２．０当量）を溶液に加える前に、５００マイクロリットルのサンプルを取り出して分析用ＨＰＬＣでの初期値を決定した。
指定された時点で、５００マイクロリットルの反応混合物を取り、２００マイクロリットルの蒸留水で希釈した。
これらのサンプルの１０マイクロリットルを、直接分析用ＨＰＬＣに注入した。
０．５、１、２、３、４、５、６、７、８、１０、２６、３０、３４、５０、および７４時間後にさらにサンプルを採取し、同じ方法で処理した。
直鎖状前駆体６または７、および、環状ペプチド８または９、ならびに、二量体４２のシグナルは、２８０ｎｍで積分された。
２８０ｎｍでの積分の精度を確認するために、既知の濃度のストック溶液１０マイクロリットルを注入することにより、線形および環状オキセタン修飾ペプチド７および９の検量線を測定した。
２８０ｎｍのＵＶシグナルを積分し、得られた面積を注入された化合物の量（ナノモル）に対してプロットした。
【０２４８】
線形フィッティング（Ｌｉｎｅａｒ  ｆｉｔｔｉｎｇ）により、各化合物について以下に示す方程式が得られた。
得られたデータは、２８０ｎｍのピークの唯一の積分から得られた変換が、検量線から得られた収率と一致していることを示す。
親システム（化合物６および８）についても同じことが想定された。
変換は、カップリング試薬の添加前に決定された直鎖状前駆体の初期積分から計算され、環状ペプチド８で４９％、二量体４２で１１％、環状オキセタン修飾ペプチド９で８３％になった。
二量体について得られた変換は、構造内の２つのＴｒｐ残基のために、２つに分割された。
直鎖状前駆体および形成された生成物の保持時間は、同じＨＰＬＣ条件下および精製化合物の注入下でＬＣ−ＭＳ（Ｂｒｕｋｅｒ  Ａｍａｚｏｎ  Ｘ）によって確認された。
【０２４９】
実施例８
他のアミノ酸修飾との比較
本明細書に開示される方法論がペプチド大環状化のより広い文脈においてどれほど重要であるかを理解するために、ＬＡＧＡＹの中央Ｇ残基に一連の代替修飾を行い、閉環の効率を比較した。
グリシンの代わりに、Ｎ−メチルグリシン、２−メチルアラニン（Ａｉｂ）、エチレンジアミン、ジメチルエチレンジアミン、およびβ−アラニンがすべて導入された（表３を参照）。
【０２５０】
これらの修飾は、以下によって環化効率を改善する可能性がある。
（ｉ）アミド結合の１つを削除することにより、ペプチドバックボーンのコンフォメーションの柔軟性の増大；
（ｉｉ）追加のメチレン基の導入による大環状化合物のサイズの拡大；
（ｉｉｉ）ｃｉｓ−アミドコンフォメーションを優位することにより、反応末端を互いに近づける；または
（ｉｖ）潜在的に有益なソープ−インゴールド効果（Ｔｈｏｒｐｅ−Ｉｎｇｏｌｄ  ｅｆｆｅｃｔ）を導入する。
実際、オキセタン修飾のみが、誘導された環状ペプチドの単離された収率の著しい改善をもたらし、オキセタンの導入が特に有益であることを示唆している。
【０２５１】
【表３】
2021519347.tif 000073
【０２５２】
実施例９
シクロ（（Ｄ）Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−ＧＡｚ（Ｈ）−Ｇｌｙ）の液相合成（ＧＡｚ＝アゼチジン修飾グリシン）
【化５６】
2021519347.tif 000074
この例では、テトラペプチドは、液相合成およびアゼチジン環上のＢｏｃ基の脱保護によって作製された。
【０２５３】
ＮＯ２-ＧＡｚ（Ｂｏｃ）−Ｇｌｙ−ＯＢｎの調製：
【化５７】
2021519347.tif 000075
Ｈ−Ｇｌｙ−ＯＢｎ・ＴｓＯＨ（３．４９グラム、１０．４ミリモル、２．０当量）のＣＨ２Ｃｌ２溶液に、トリエチルアミン（１．４４ミリリットル、１０．４ミリモル、２．０当量）を加え、室温で、１５分間、撹拌した。
別の反応容器に、ニトロメタン（５．２ミリリットル）中のＮ−Ｂｏｃ−３−アゼチジノン（０．８９グラム、５．２ミリモル、１．０当量）をトリエチルアミン（１４４マイクロリットル、１．０ミリモル、０．２当量）に加え、そして、室温で１時間撹拌した。
溶媒を真空で除去した後、ＣＨ２Ｃｌ２（２１ミリリットル）に再懸濁し、−７８℃に冷却し、トリエチルアミン（１．４４ミリリットル、１０．４ミリモル、２．０当量）を加えた後、塩化メタンスルホニル（０．４０ミリリットル、５．２ミリモル、１．０当量）を滴下した。
反応混合物を、−７８℃で、１．５時間撹拌し、粗アミンの溶液を，シリンジを介してゆっくりと加えた。
反応混合物を、室温まで温め、１６時間撹拌した。
ＮＨ４Ｃｌ（１００ミリリットル）の飽和溶液を加え、１０分間撹拌した。
層を分離し、水層を、ＣＨ２Ｃｌ２（２×６０ミリリットル）およびＥｔＯＡｃ（２×６０ミリリットル）で抽出した。
合わせた有機層を、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（１００ミリリットル）、ブライン（１００ミリリットル）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。
残留物をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ／ＰＥ＝３：７）で精製して、ＮＯ２−ＧＡｚ（Ｂｏｃ）−Ｇｌｙ−ＯＢｎ（１．６６グラム、４．３７ミリモル、８４％）を、黄色の油として得た。
Ｒｆ  （ＥｔＯＡｃ／ＰＥ  ３：７）  ０．３４；
１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）  δ  ７．４１−７．３０  （ｍ，  ５Ｈ，  ＡｒＨ），  ５．１８  （ｓ，  ２Ｈ，  ＣＨ２Ｐｈ），  ４．６７  （ｓ，  ２Ｈ，  ＣＨ２ＮＯ２），  ４．０２−３．８３  （ｍ，  ４Ｈ，  ２  ×  ＮＣＨ２−Ａｚ），  ３．５１  （ｄ，  Ｊ  ＝  ４．５  Ｈｚ，  ２Ｈ，  ＣＨ２Ｇｌｙ），  ２．３３  （ｓ，  １Ｈ，  ＮＨ），  １．４４  （ｓ，  ９Ｈ，  ３  ×  ＣＨ３，  Ｂｏｃ）；  
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１２６  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）  δ  １７１．４  （Ｃ＝Ｏ），  １５６．２  （Ｃ＝Ｏ，  Ｂｏｃ），  １３５．２  （Ｃ），  １２８．９  （ＣＨ），  １２８．８  （ＣＨ），  １２８．７  （ＣＨ），  ８０．６  （Ｃ，  Ｂｏｃ），  ７８．７  （ＣＨ２ＮＯ２），  ６７．４  （ＣＨ２，  Ｂｎ），  ５４．３  （２  ×  ＮＣＨ２），  ４４．９  （ＣＨ２，  Ｇｌｙ），  ２８．４  （ＣＨ３，  Ｂｏｃ）；  
νｍａｘ（ｎｅａｔ）＝  ２９７６，  １７３９，  １６９２，  １５５２，  １３７８，  １１６３  ｃｍ-１；  
ＭＳ  （ＥＳＩ＋）  ｍ／ｚ  ４０２  ［Ｍ＋Ｎａ］＋；  
ＨＲＭＳ  （ＥＳＩ＋）  ｃａｌｃｄ．  ｆｏｒ  Ｃ１８Ｈ２５Ｎ３ＮａＯ６  ［Ｍ＋Ｎａ］＋  ４０２．１６３６，  ｆｏｕｎｄ  ４０２．１６３６；
【０２５４】
Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＧＡｚ（Ｂｏｃ）−Ｇｌｙ−ＯＢｎの調製：
【化５８】
2021519347.tif 000076
ＴＨＦ（４４ミリリットル）中のＮＯ２−ＧＡｚ（Ｂｏｃ）−Ｇｌｙ−ＯＢｎ（１．６６グラム、４．４ミリモル、１．０当量）の溶液に、Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＳｕ（３．８９グラム、８．６ミリモル、２．０当量）、ＮａＨＣＯ（１．４７グラム、１７．５ミリモル、４．０当量）およびＲａｎｅｙ  Ｎｉ（Ｈ２Ｏスラリー、８ミリリットル）を加えた。
溶液を窒素雰囲気下に置き、排気して水素（風船）を満たした。
反応混合物を，室温で４．０時間激しく撹拌した。
次に、混合物を、ＥｔＯＡｃで溶出するセライトのプラグを通して濾過し、減圧下で濃縮し、濾液をＥｔＯＡｃ（５０ミリリットル）に懸濁し、飽和Ｎａ２ＣＯ３（３×５０ミリリットル）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。そして真空で濃縮した。
Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＧＡｚ（Ｂｏｃ）−Ｇｌｙ−ＯＢｎを、カラムクロマトグラフィー（ＳＩＯ２、ＣＨ２Ｃｌ２／ＥＡ＝９：１→３：２）により精製した後に、白色の泡状物として得た（１．８４グラム、２．７ミリモル、６２％）。
Ｒｆ  （ＣＨ２Ｃｌ２／ＥｔＯＡｃ  ９：１）  ０．２６；
ｍｐ  ７７−７９  ℃；  
１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）  δ  ７．７６  （ｄ，  Ｊ  ＝  ７．５  Ｈｚ，  ２Ｈ，  ＡｒＨ），  ７．５９  （ｄ，  Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  ２Ｈ，  ＡｒＨ），  ７．４２−７．２９  （ｍ，  ９Ｈ，  ＡｒＨ），  ６．６９  （ｓ，  １Ｈ，  ＮＨ），  ５．２０  （ｄ，  Ｊ  ＝  ７．０  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＮＨ  Ｆｍｏｃ），  ５．１１  （ｓ，  ２Ｈ，  ＣＨ２Ｐｈ），  ４．４１  （ｄ，  Ｊ  ＝  ７．１  Ｈｚ，  ２Ｈ，  ＣＨ２，  Ｆｍｏｃ），  ４．２５−４．１５  （ｍ，  ２Ｈ，  ＣＨ，  Ｆｍｏｃ，  ＣＨα−Ｌｅｕ），  ３．６９−３．６０  （ｍ，  ４Ｈ，  ２  ×  ＮＣＨ２−Ａｚ），  ３．５２−３．３５  （ｍ，  ４Ｈ，  ＣＨ２  Ｇｌｙ，  ＣＨ２  ＧＡｚ），  １．６４−１．６０  （ｍ，  ３Ｈ，  ＣＨγ−Ｌｅｕ，  ＣＨ２β−Ｌｅｕ），  １．４２  （ｓ，  ９Ｈ，  ３  ×  ＣＨ３，  Ｂｏｃ），  ０．９８−０．９１  （ｍ，  ６Ｈ，  ２  ×  ＣＨ３δ−Ｌｅｕ）；  
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１２６  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）  δ  １７２．９  （Ｃ＝Ｏ），  １７２．６  （Ｃ＝Ｏ），  １５６．３  （Ｃ＝Ｏ，  Ｂｏｃ），  １４４．０  （Ｃ），  １４３．９  （Ｃ），  １４１．５  （Ｃ），  １３５．２  （Ｃ），  １３２．１  （Ｃ），  １２８．８２  （ＣＨ），  １２８．７７  （ＣＨ），  １２８．６  （ＣＨ），  １２７．９  （ＣＨ），  １２７．２  （ＣＨ），  １２５．２  （ＣＨ），  １２０．２  （ＣＨ），  ８０．１  （Ｃ，  Ｂｏｃ），  ６７．４  （ＣＨ２Ｐｈ，  Ｂｎ），  ６７．１  （ＣＨ２，  Ｆｍｏｃ），  ５５．０  （２  ×  ＮＣＨ２），  ５３．９  （ＣＨ，  α−Ｌｅｕ），  ４７．３  （ＣＨ，  Ｆｍｏｃ），  ４４．８  （ＣＨ２，  ＧＡｚ），  ４３．５  （ＣＨ２，  Ｇｌｙ），  ４１．８  （ＣＨ２，  β−Ｌｅｕ），  ２８．５  （ＣＨ３，  Ｂｏｃ），  ２４．９  （ＣＨ，  γ−Ｌｅｕ），  ２３．１  （ＣＨ３，  δ−Ｌｅｕ），  ２２．１  （ＣＨ３，  δ−Ｌｅｕ）．
注：ＦｍｏｃのＣ＝Ｏは、ＢｏｃのＣ＝Ｏと重複する。
νｍａｘ（ｎｅａｔ）＝  ２９５５，  １６９６，  １６５７，  １１２０，  ７５７  ｃｍ-１；  
ＭＳ  （ＥＳＩ＋）  ｍ／ｚ  ６８５  ［Ｍ＋Ｈ］＋，  ７０７  ［Ｍ＋Ｎａ］＋；  
ＨＲＭＳ  （ＥＳＩ＋）  ｃａｌｃｄ．  ｆｏｒ  Ｃ３９Ｈ４９Ｎ４Ｏ７  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ６８５．３５９６，  ｆｏｕｎｄ  ６８５．３６０４；  
【０２５５】
Ｃｂｚ−（Ｄ）Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−ＧＡｚ（Ｂｏｃ）−Ｇｌｙ−ＯＢｎの調製：
【化５９】
2021519347.tif 000077
トリペプチドＦｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＧＡｚ（Ｂｏｃ）−Ｇｌｙ−ＯＢｎ（７５２ミリグラム、１．１ミリモル、１．０当量）のＣＨ２Ｃｌ２（１ミリリットル）溶液に、ジエチルアミン（１ミリリットル）を加え、混合物を、１時間、室温で撹拌した。
反応混合物を、減圧下で濃縮し、得られた残留物を繰り返し、ＣＨ２Ｃｌ２（３×２５ミリリットル）に溶解し、減圧下で濃縮して、粗アミンを得た。
残渣を、ＣＨ２Ｃｌ２（１１ミリリットル）を溶解し、Ｃｂｚ−Ｄ−Ｐｒｏ−ＯＨ（２７４ミリグラム、１．１ミリモル、１．０当量）、ＥＤＣ−ＨＣｌ（２１１ミリグラム、１．１ミリモル、１．０当量）、ＨＯＢＴ・Ｈ２Ｏ（１４９ミリグラム、１．１ミリモル、１．０当量）およびＮＭＭ（４８４マイクロリットル、４．４ミリモル、４．０当量）を、続いて添加し、そして、反応混合物を、室温で、２４時間撹拌した。
反応混合物を、ＥｔＯＡｃ（５０ミリリットル）で希釈し、ブライン（５０ミリリットル）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。
残留物を、カラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＣＨ２Ｃｌ２／メタノール＝９７：３）で精製して、テトラペプチドＣｂｚ−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−ＧＡｚ（Ｂｏｃ）−Ｇｌｙ−ＯＢｎ（４７１ミリグラム、０．６８ミリモル、６２％）を、白い泡として得た。
Ｒｆ  （ＣＨ２Ｃｌ２／メタノール  ９７：３）  ０．１８；
ｍｐ  ６５−６７  ℃；  
１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ  ＠  ３７３  Ｋ）  δ  ７．６５  （ｓ，  １Ｈ，  ＮＨ），  ７．４６  （ｓ，  １Ｈ，  ＮＨ），  ７．４２−７．２６  （ｍ，  １０Ｈ，  ＡｒＨ），  ５．１５  （ｓ，  ２Ｈ，  ＣＨ２Ｐｈ  Ｂｎ），  ５．１２−５．０２  （ｍ，  ２Ｈ，  ＣＨ２Ｐｈ  Ｂｎ），  ４．３３−４．２３  （ｍ，  ２Ｈ，  ＣＨα−Ｐｒｏ，  ＣＨα−Ｌｅｕ），  ３．６６−３．５７  （ｍ，  ４Ｈ，  ２  ×  ＮＣＨ２−Ａｚ），  ３．５０−３．４２  （ｍ，  ４Ｈ，  ＣＨ２  ＧＡｚ，  ＣＨ２δ−Ｐｒｏ），  ３．３８−３．２８  （ｍ，  ２Ｈ，  ＣＨ２  Ｇｌｙ），  ２．１７−２．０９  （ｍ，  １Ｈ，  ＣＨＨγ−Ｐｒｏ），  １．９３−１．７８  （ｍ，  ３Ｈ，  ＣＨＨγ−Ｐｒｏ，  ＣＨ２β−Ｐｒｏ），  １．６４−１．４７  （ｍ，  ３Ｈ，  ＣＨγ−Ｌｅｕ，  ＣＨ２β−Ｌｅｕ），  １．３９  （ｓ，  ９Ｈ，  ３  ×  ＣＨ３，  Ｂｏｃ），  ０．８８  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．４  Ｈｚ，  ３Ｈ，  ＣＨ３δ−Ｌｅｕ），  ０．８５  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．３  Ｈｚ，  ３Ｈ，  ＣＨ３δ−Ｌｅｕ）；  
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１２６  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ  ＠  ３７３  Ｋ）  δ  １７１．９  （Ｃ＝Ｏ），  １７１．３  （Ｃ＝Ｏ），  １７１．２  （Ｃ＝Ｏ），  １５５．２  （Ｃ＝Ｏ  Ｃｂｚ），  １５３．８  （Ｃ＝Ｏ  Ｂｏｃ），  １３６．４  （Ｃ），  １３５．５  （Ｃ），  １２７．７  （ＣＨ），  １２７．６  （ＣＨ），  １２７．３  （ＣＨ），  １２７．２  （ＣＨ），  １２７．０  （ＣＨ），  １２６．６  （ＣＨ），  ７７．９  （Ｃ，  Ｂｏｃ），  ６５．６  （ＣＨ２Ｐｈ，  Ｂｎ），  ６５．２  （ＣＨ２Ｐｈ，  Ｂｎ），  ５９．７  （ＣＨ，  α−Ｐｒｏ），  ５６．７  （２  ×  ＮＣＨ２），  ５４．６  （Ｃ，  Ａｚ），  ５１．１  （ＣＨ，  α−Ｌｅｕ），  ４６．３  （ＣＨ２，  ＧＡｚ），  ４４．１  （ＣＨ２，  δ−Ｐｒｏ），  ４２．７  （ＣＨ２，  Ｇｌｙ），  ４０．３  （ＣＨ２，  β−Ｌｅｕ），  ２９．７  （ＣＨ２，  γ−Ｐｒｏ），  ２７．６  （ＣＨ３，  Ｂｏｃ），  ２３．８  （ＣＨ，  γ−Ｌｅｕ），  ２３．０  （ＣＨ２，  β−Ｐｒｏ），  ２２．２  （ＣＨ３，  δ−Ｌｅｕ），  ２１．１  （ＣＨ３，  δ−Ｌｅｕ）；  
νｍａｘ（ｎｅａｔ）＝  ２９５５，  １７４０，  １６６７，  １４０７，  １１２０  ｃｍ-１；  
ＭＳ  （ＥＳＩ＋）  ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋  ６９４，［Ｍ＋Ｎａ］＋  ７１６；  
ＨＲＭＳ  （ＥＳＩ＋）  ｃａｌｃｄ．  ｆｏｒ  Ｃ３７Ｈ５２Ｎ５Ｏ８  ６９４．３８１０  ［Ｍ＋Ｈ］＋，  ｆｏｕｎｄ  ６９４．３８０３；
【０２５６】
Ｈ−（Ｄ）Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−ＧＡｚ（Ｂｏｃ）−Ｇｌｙ−ＯＨの調製：
【化６０】
2021519347.tif 000078
メタノール（６．５ミリリットル）中のＣｂｚ−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−ＧＡｚ（Ｂｏｃ）−Ｇｌｙ−ＯＢｎ（４５０ミリグラム、０．６５ミリモル、１．０当量）の溶液に、１０重量％のＰｄ／Ｃ（４５ミリグラム、１０重量％）を加え、そして、反応フラスコを排気し、窒素を充填し、排気し、そして水素（風船）の雰囲気下に置いた。
混合物を、室温で、１６時間撹拌し、窒素下に置き、セライトのプラグを通して濾過し、これをメタノール（３×）で洗浄した。
濾液を濃縮し、真空下で白色の固体として表題化合物を得た（３０４ミリグラム、０．６４７ミリモル、定量）。さらなる精製を必要としなかった。
ｍｐ  ８９−９１℃；
１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＭｅＯＤ）  δ  ４．４１−４．３０  （ｍ，  ２Ｈ，  ＣＨα−Ｌｅｕ，  ＣＨα−Ｐｒｏ），  ３．７６−３．５７  （ｍ，  ５Ｈ，  ２  ×  ＮＣＨ２−Ａｚ，  ＣＨＨＧＡｚ），  ３．４４−３．３８  （ｍ，  １Ｈ，  ＣＨＨδ−Ｐｒｏ），  ３．３６−３．３１  （ｍ，  １Ｈ，  ＣＨＨδ−Ｐｒｏ），  ３．３０−３．２６  （ｍ，  １Ｈ，  ＣＨＨＧＡｚ），  ３．１７  （ｄ，  Ｊ  ＝  １７．４  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨＨＧｌｙ），  ３．０６  （ｄ，  Ｊ  ＝  １７．４  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨＨＧｌｙ），  ２．３９  （ｔｄ，  Ｊ  ＝  １３．３，  ７．８  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨＨγ−Ｐｒｏ），  ２．１６−２．０１  （ｍ，  ２Ｈ，  ＣＨ２β−Ｐｒｏ），  １．９６  （ｄｑ，  Ｊ  ＝  １５．６，  ７．８  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨＨγ−Ｐｒｏ），  １．７９−１．６２  （ｍ，  ２Ｈ，  ＣＨγ−Ｌｅｕ，  ＣＨＨβ−Ｌｅｕ），  １．６１−１．５４  （ｍ，  １Ｈ，  ＣＨＨβ−Ｌｅｕ），  １．４２  （ｓ，  ９Ｈ，  ＣＨ３  Ｂｏｃ），  ０．９８  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．５  Ｈｚ，  ３Ｈ，  ＣＨ３δ−Ｌｅｕ），  ０．９２  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．４  Ｈｚ，  ３Ｈ，  ＣＨ３δ−Ｌｅｕ）；  
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１２６  ＭＨｚ，  ＭｅＯＤ）  δ  １７８．５  （Ｃ＝Ｏ），  １７３．０  （Ｃ＝Ｏ），  １６９．２  （Ｃ＝Ｏ），  １５６．９  （Ｃ＝Ｏ  Ｂｏｃ），  ７９．８  （Ｃ，  Ｂｏｃ），  ６０．１  （ＣＨ，  α−Ｐｒｏ），  ５５．５  （２  ×  ＮＣＨ２），  ５２．５  （ＣＨ，  α−Ｌｅｕ），  ４６．２  （ＣＨ２，  Ｇｌｙ），  ４５．６  （ＣＨ２，  δ−Ｐｒｏ），  ４２．０  （ＣＨ２，  ＧＡｚ），  ３９．８  （ＣＨ２，  β−Ｌｅｕ），  ２９．０  （ＣＨ２，  γ−Ｐｒｏ），  ２７．２  （ＣＨ３，  Ｂｏｃ），  ２４．８  （ＣＨ，  γ−Ｌｅｕ），  ２３．８  （ＣＨ２，  β−Ｐｒｏ），  ２２．２  （ＣＨ３，  δ−Ｌｅｕ），  ２０．０  （ＣＨ３，  δ−Ｌｅｕ）；  
νｍａｘ（ｎｅａｔ）＝  ３２６２，  ３０５２，  １６５１，  １５５６，  １３８７，  １１１８  ｃｍ-１；  
ＭＳ  （ＥＳＩ＋）  ｍ／ｚ  ４７０  ［Ｍ＋Ｈ］＋，  ４９２  ［Ｍ＋Ｎａ］＋；  
ＨＲＭＳ  （ＥＳＩ＋）  ｃａｌｃｄ．  ｆｏｒ  Ｃ２２Ｈ４０Ｎ５Ｏ６  ４７０．２９７３  ［Ｍ＋Ｈ］＋，  ｆｏｕｎｄ  ４７０．２９７１；
【０２５７】
シクロ（（Ｄ）Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−ＧＡｚ（Ｂｏｃ）−Ｇｌｙ）の調製：
【化６１】
2021519347.tif 000079
Ｈ−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−ＧＡｚ（Ｂｏｃ）−Ｇｌｙ−ＯＨ（４７ミリグラム、０．１  ミリモル、１．０当量）のＤＭＦ（ミリリットル、０．００１  Ｍ）溶液に、ＤＥＰＢＴ（６０ミリグラム、０．２ミリモル、２．０当量）およびＤＩＰＥＡ（３６マイクロリットル、０．２ミリモル、２．０当量）を加え、および混合物を、室温で、４８時間、撹拌した。
溶媒を真空で除去し、残留物を、カラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＣＨ２Ｃｌ２／メタノール＝４０：１→１９：１）で精製して、環状テトラペプチドをガラス状の無色の固体として得た（３５．８ミリグラム、７９マイクロモル、７９％）；
Ｒｆ  （ＣＨ２Ｃｌ２／メタノール  １９：１）  ０．４０；  
ｍｐ  １２９−１３１  ℃；
１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＭｅＯＤ）  δ  ４．４９−４．４０  （ｍ，  ２Ｈ，  ＣＨα−Ｐｒｏ，  ＣＨα−Ｌｅｕ），  ３．９５  （ｓ，  １Ｈ，  ＮＣＨＨ−Ａｚ），  ３．８４−３．７８  （ｍ，  １Ｈ，  ＮＣＨＨ−Ａｚ），  ３．７４−３．５５  （ｍ，  ５Ｈ，  ＮＣＨＨ−Ａｚ，  ＮＣＨＨ−Ａｚ，  ＣＨＨδ−Ｐｒｏ，  ＣＨ２Ｇｌｙ），  ３．３７−３．３５  （ｍ，  ３Ｈ，  ＣＨＨδ−Ｐｒｏ，  ＣＨ２ＧＡｚ），  ２．３８−２．２９  （ｍ，  １Ｈ，  ＣＨＨγ−Ｐｒｏ），  ２．０５−１．８９  （ｍ，  ３Ｈ，  ＣＨＨγ−Ｐｒｏ，  ＣＨ２β−Ｐｒｏ），  １．７３−１．６５  （ｍ，  ２Ｈ，  ＣＨγ−Ｌｅｕ，  ＣＨＨβ−Ｌｅｕ），  １．６１−１．５６  （ｍ，  １Ｈ，  ＣＨＨβ−Ｌｅｕ），  １．４５  （ｓ，  ９Ｈ，  ３  ×  ＣＨ３  Ｂｏｃ），  １．００  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．１  Ｈｚ，  ３Ｈ，  ＣＨ３δ−Ｌｅｕ），  ０．９５  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．０  Ｈｚ，  ３Ｈ，  ＣＨ３δ−Ｌｅｕ），
注意：  ＣＨＨδ−Ｐｒｏ，  ＣＨ２ＧＡｚは、溶媒のシグナルと重なる。；  
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１２６  ＭＨｚ，  ＭｅＯＤ）  δ  １７６．３  （Ｃ＝Ｏ），  １７５．７  （Ｃ＝Ｏ），  １７３．０  （Ｃ＝Ｏ），  １５８．２  （Ｃ＝Ｏ，  Ｂｏｃ），  ８１．２  （Ｃ，  Ｂｏｃ），  ６２．１  （ＣＨ，  α−Ｌｅｕ），  ５７．０  （２  ×  ＮＣＨ２），  ５４．０  （ＣＨ，  α−Ｐｒｏ），  ４８．４  （ＣＨ２，  ＧＡｚ），  ４７．８  （ＣＨ２，  Ｇｌｙ），  ３８．３  （ＣＨ２，  β−Ｌｅｕ），  ３３．０  （ＣＨ２，  γ−Ｐｒｏ），  ２８．６  （ＣＨ３，  Ｂｏｃ），  ２６．１  （ＣＨ，  γ−Ｌｅｕ），  ２３．５  （ＣＨ２，  β−Ｐｒｏ），  ２３．０  （ＣＨ３，  δ−Ｌｅｕ），  ２２．５  （ＣＨ３，  δ−Ｌｅｕ），  注意：ＣＨ２，  δ−Ｐｒｏは、溶媒のシグナルと重なる。；
νｍａｘ（ｎｅａｔ）＝  ２９５４，  １６６２，  １６２３，  １４０４，  １１６４  ｃｍ-１；  
ＭＳ  （ＥＳＩ＋）  ｍ／ｚ  ４７４  ［Ｍ＋Ｎａ］＋，  ９２５  ［２Ｍ＋Ｎａ］＋；  
ＨＲＭＳ  （ＥＳＩ＋）  ｃａｌｃｄ．  ｆｏｒ  Ｃ２２Ｈ３７Ｎ５ＮａＯ５  ［Ｍ＋Ｎａ］＋  ４７４．２６８７，  ｆｏｕｎｄ  ４７４．２６８４；
【０２５８】
シクロ（（Ｄ）Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−ＧＡｚ（Ｈ）−Ｇｌｙ）の調製：
シクロ（（Ｄ）Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−ＧＡｚ（Ｂｏｃ）−Ｇｌｙ）（１７．５ミリグラム、３８．７モル、１．０当量）のＣＨ２Ｃｌ２溶液に（１ミリリットル）に、ＴＦＡ（１ミリリットル）を加えた。
溶液を、室温で、１時間、撹拌した。
溶媒を真空で除去して、表題化合物を、ＴＦＡ塩としての淡黄色のガラス状固体として、定量的収率で明らかにした。これは、さらなる精製を必要としなかった。
内部標準としてＴＦＥを用いて、１Ｈおよび１９Ｆ  ＮＭＲは、１当量を確認した。
ＴＦＡ塩；
ｍｐ  １２３−１２５  ℃  （分解）；
１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＭｅＯＤ）  δ  ４．４９  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ８．１，  ４．３  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨα−Ｐｒｏ），  ４．２７  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．７  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨα−Ｌｅｕ），  ４．０１  （ｄ，  Ｊ  ＝  １１．２  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＮＣＨＨ−Ａｚ），    ３．９８  （ｄ，  Ｊ  ＝  １１．４  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＮＣＨＨ−Ａｚ），  ３．８１  （ｄ，  Ｊ  ＝  １０．９  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＮＣＨＨ−Ａｚ），  ３．７５  （ｄ，  Ｊ  ＝  １１．１  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＮＣＨＨ−Ａｚ），  ３．７０  （ｄ，  Ｊ  ＝  １４．４  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨＨＧＡｚ），  ３．６５−３．６０  （ｍ，  １Ｈ，  ＣＨＨδ−Ｐｒｏ），  ３．５９−３．５４  （ｍ，  １Ｈ，  ＣＨＨδ−Ｐｒｏ），  ３．４１  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．５  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨＨＧｌｙ），  ３．３８  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．３  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨＨＧｌｙ），  ３．２３  （ｄ，  Ｊ  ＝  １４．２  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨＨＧＡｚ），  ２．３６  （ｄｔ，  Ｊ  ＝  １９．７，  ７．６  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨＨγ−Ｐｒｏ），  ２．０４−１．８８  （ｍ，  ３Ｈ，  ＣＨＨγ−Ｐｒｏ，  ＣＨ２β−Ｐｒｏ），  １．７１−１．６０  （ｍ，  ３Ｈ，  ＣＨ２β−Ｌｅｕ，  ＣＨγ−Ｌｅｕ），  ０．９９  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．４  Ｈｚ，  ３Ｈ，  ＣＨ３δ−Ｌｅｕ），  ０．９４  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．４  Ｈｚ，  ３Ｈ，  ＣＨ３δ−Ｌｅｕ）；  
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１２６  ＭＨｚ，  ＭｅＯＤ）  δ  １７６．２  （Ｃ＝Ｏ），  １７６．０  （Ｃ＝Ｏ），  １７３．１  （Ｃ＝Ｏ），  ６２．０  （ＣＨ，  α−Ｐｒｏ），  ５９．８  （Ｃ，  Ａｚ），  ５７．２  （ＮＣＨ２），  ５５．９  （ＣＨ，  α−Ｌｅｕ），  ５４．２  （ＮＣＨ２），  ４７．５  （ＣＨ２，  ＧＡｚ），  ４６．５  （ＣＨ２，  Ｇｌｙ），  ３９．２  （ＣＨ，  β−Ｌｅｕ），  ３３．０  （ＣＨ２，  γ−Ｐｒｏ），  ２６．１  （ＣＨ，  γ−Ｌｅｕ），  ２３．７  （ＣＨ２，  β−Ｐｒｏ），  ２２．９  （ＣＨ３，  δ−Ｌｅｕ），  ２２．５  （ＣＨ３，  δ−Ｌｅｕ）．
注：δ−ＰｒｏのＣＨ２は、溶媒のシグナルと重複した。  
νｍａｘ（ｎｅａｔ）＝  ２９５６，  １６６５，  １１９９，  １１７７，  １１２８  ｃｍ-１；  
ＭＳ  （ＥＳＩ＋）  ｍ／ｚ  ３５２  ［Ｍ＋Ｈ］＋，  ３７４  ［Ｍ＋Ｎａ］＋；  
ＨＲＭＳ  （ＥＳＩ＋）  ｃａｌｃｄ．  ｆｏｒ  Ｃ１７Ｈ３０Ｎ５Ｏ３  ３５２．２３４３  ［Ｍ＋Ｈ］＋，  ｆｏｕｎｄ  ３５２．２３３８；
【０２５９】
実施例１０
シクロ（Ｌｅｕ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｖａｌ−ＧＡｚ（Ｂｏｃ）−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ｐｈｅ）  （ＧＡｚ＝アゼチジン修飾グリシン）の液相合成
【化６２】
2021519347.tif 000080
この例では、ヘキサペプチドは液相合成によって作成された。
実施例は、アゼチジンターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）エレメントを用いた異なる環サイズに対するアクセスおよび側鎖脱保護（たとえば、チロシン、スレオニン）に対するアゼチジンの抵抗力を示す。
【０２６０】
ＮＯ２−ＧＡｚ（Ｂｏｃ）−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−ＯＣｕｍｙｌの調製：
【化６３】
2021519347.tif 000081
ＣＨ２Ｃｌ２（３．７ミリリットル）中のＦｍｏｃ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−ＯＣｕｍｙｌ（１．９１グラム、３．７１ミリモル、１．０当量）の溶液にジエチルアミン（３．７ミリリットル）を加え、混合物を室温で１時間撹拌した。
反応混合物を、減圧下で濃縮し、得られた残留物を、繰り返し、ＣＨ２Ｃｌ２（３×１５ミリリットル）に溶解し、減圧下で濃縮して、粗アミンを得た。
第２の反応容器において、Ｎ−Ｂｏｃ−３−アゼチジノン（０．６３グラム、３．７１ミリモル、１．０当量）、ニトロメタン（３．７ミリリットル）およびトリエチルアミン（１０３マイクロリットル、０．７４ミリモル、０．２当量）を合わせ、室温で、１時間、撹拌した。
溶媒を真空で除去し、ＣＨ２Ｃｌ２（１５ミリリットル）に再懸濁し、−７８℃に冷却し、トリエチルアミン（１．０３ミリリットル、７．４０ミリモル、２．０当量）を加えた後、塩化メタンスルホニル（２８７マイクロリットル、３．７１ミリモル、１．０当量）のＣＨ２Ｃｌ２（３．７ミリリットル）の溶液を滴下した。
反応混合物を、−７８℃で、１．５時間撹拌し、無水ＣＨ２Ｃｌ２（３０ミリリットル）中の粗アミンの溶液をシリンジを介してゆっくりと加えた。
反応混合物を、室温まで温め、１６時間撹拌した。
ＮＨ４Ｃｌ（５０ミリリットル）の飽和溶液を加え、１０分間撹拌した。
層を分離し、水層を、ＣＨ２Ｃｌ２（２×３０ミリリットル）および酢酸エチル（２×３０ミリリットル）で抽出した。
合わせた有機層を、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（５０ミリリットル）、ブライン（５０ミリリットル）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、そして真空中で濃縮した。
【０２６１】
残留物をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＣＨ２Ｃｌ２／ＥｔＯＡｃ＝４：１）で精製して、表題化合物（１．６２グラム、３．１８ミリモル、８６％）を淡黄色の油状物として得た。
Ｒｆ  （ＣＨ２Ｃｌ２／ＥｔＯＡｃ  ４：１）  ０．３０；
１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）  δ  ７．４６−７．４２  （ｍ，  ２Ｈ，  ＡｒＨ），  ７．３６−７．３１  （ｍ，  ３Ｈ，  ＡｒＨ），  ４．６２  （ｄ，  Ｊ  ＝  １３．１  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨＨＮＯ２），  ４．５３  （ｄ，  Ｊ  ＝  １３．１  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨＨＮＯ２），  ３．９３  （ｄ，  Ｊ  ＝  ９．４  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＮＣＨＨ−Ａｚ），  ３．８２−３．７２  （ｍ，  ４Ｈ，  ＮＣＨＨ−Ａｚ，  ＮＣＨ２−Ａｚ，  ＣＨα−Ｔｈｒ），  ３．２０  （ｄ，  Ｊ  ＝  ２．９  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨβ−Ｔｈｒ），  ２．６１−２．２５  （ｍ，  １Ｈ，  ＮＨ），  １．８３  （ｓ，  ３Ｈ，  ＣＨ３−Ｃｕｍｙｌ），  １．８０  （ｓ，  ３Ｈ，  ＣＨ３−Ｃｕｍｙｌ），  １．４３  （ｓ，  ９Ｈ，  ３  ×  ＣＨ３  Ｂｏｃ），  １．２０  （ｓ，  ９Ｈ，  ３  ×  ＣＨ３ ｔＢｕ），  １．０８  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．２  Ｈｚ，  ３Ｈ，  ＣＨ３γ−Ｔｈｒ）；  
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１２６  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）  δ  １７２．７  （Ｃ＝Ｏ），  １５６．２  （Ｃ＝Ｏ  Ｂｏｃ），  １４５．２  （Ｃ），  １２８．４  （ＣＨ），  １２７．５  （ＣＨ），  １２４．８  （ＣＨ），  ８３．３  （Ｃ，  Ｃｕｍｙｌ），  ８０．３  （Ｃ，  Ｂｏｃ），  ７９．０  （ＣＨ２ＮＯ２），  ７４．２  （Ｃ，  ｔＢｕ），  ６９．２  （α−ＣＨ，  Ｔｈｒ），  ６１．８  （β−ＣＨ，  Ｔｈｒ），  ５４．２  （２  ×  ＮＣＨ２），  ２８．６  （ＣＨ３，  ｔＢｕ），  ２８．４  （ＣＨ３，  Ｂｏｃ），  ２７．９  （２  ×  ＣＨ３，  Ｃｕｍｙｌ），  １９．４  （ＣＨ３，  γ−Ｔｈｒ）；  
νｍａｘ（ｎｅａｔ）＝  ２９７５，  １７００，  １５５５，  １３７７，  １１９４，  ６９９  ｃｍ-１；  
ＭＳ  （ＥＳＩ＋）  ｍ／ｚ  ５３０  ［Ｍ＋Ｎａ］＋；  
ＨＲＭＳ  （ＥＳＩ＋）  ｃａｌｃｄ．  ｆｏｒ  Ｃ２６Ｈ４１Ｎ３ＮａＯ７  ５３０．２８３７  ［Ｍ＋Ｎａ］＋，  ｆｏｕｎｄ  ５３０．２８３３；
【０２６２】
Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−ＧＡｚ（Ｂｏｃ）−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−ＯＣｕｍｙｌの調製：
【化６４】
2021519347.tif 000082
ＮＯ２-ＧＡｚ（Ｂｏｃ）−Ｔｈｒ（tＢｕ）−ＯＣｕｍｙｌ（１．６１グラム、３．１８ミリモル、１．０当量）のＴＨＦ（３２ミリリットル）中）溶液に、Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−ＯＳｕ（２．７７グラム、６．３５ミリモル、２．０当量）およびラネーＮｉ（Ｈ２Ｏスラリー、６ミリリットル）を加えた。
溶液を、窒素雰囲気下に置き、排気して、水素（風船）を満たした。
反応混合物を、室温で、４．０時間、激しく撹拌した。
次に、混合物を、ＥｔＯＡｃで溶出するセライトのプラグを通して濾過し、真空で濃縮し、濾液を、ＥｔＯＡｃ（５０ミリリットル）で希釈し、飽和Ｎａ２ＣＯ３（３×５０ミリリットル）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、そして減圧下で濃縮された。
Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−ＧＡｚ（Ｂｏｃ）−Ｔｈｒ（tＢｕ）−ＯＣｕｍｙｌは、カラムクロマトグラフィー（ＳＩＯ２、ＣＨ２Ｃｌ２／酢酸エチル＝１９：１）による精製後に、白色泡状物として得た（１．５３グラム、１．９１ミリモル、６０％）；
ｍｐ  ７３−７５  ℃；  
Ｒｆ  （ＣＨ２Ｃｌ２／ＥｔＯＡｃ  １９：１）  ０．１９；
１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）  δ  ７．７６  （ｄ，  Ｊ  ＝  ７．５  Ｈｚ，  ２Ｈ，  ＡｒＨ），  ７．５９  （ｄ，  Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  ２Ｈ，  ＡｒＨ），  ７．４３−７．３７  （ｍ，  ４Ｈ，  ＡｒＨ），  ７．３４−７．２８  （ｍ，  ４Ｈ，  ＡｒＨ），  ７．２５−７．２０  （ｍ，  １Ｈ，  ＡｒＨ），  ６．５０  （ｓ，  １Ｈ，  ＮＨ），  ５．４４  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．６  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＮＨ  Ｆｍｏｃ），  ４．４２  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １０．３，  ７．５  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨＨＦｍｏｃ），  ４．３４−４．２８  （ｍ，  １Ｈ，  ＣＨＨＦｍｏｃ），  ４．２１  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．０  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨＦｍｏｃ），  ４．００−３．９２  （ｍ，  １Ｈ，  ＣＨα−Ｔｈｒ），  ３．９０−３．８２  （ｍ，  １Ｈ，  ＣＨα−Ｖａｌ），  ３．８１−３．７０  （ｍ，  １Ｈ，  ＣＨＨＧＡｚ），  ３．６２  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．７  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＮＣＨＨ−Ａｚ），  ３．６０−３．４５  （ｍ，  ３Ｈ，  ＮＣＨＨ−Ａｚ，  ＮＣＨ２−Ａｚ），  ３．２３−２．７０  （ｍ，  ２Ｈ，  ＣＨＨＧＡｚ，  ＣＨβ−Ｔｈｒ），  ２．００−１．９２  （ｍ，  １Ｈ，  ＣＨβ−Ｖａｌ）  １．８３  （ｓ，  ３Ｈ，  ＣＨ３−Ｃｕｍｙｌ），  １．７５  （ｓ，  ３Ｈ，  ＣＨ３−Ｃｕｍｙｌ），  １．４２  （ｓ，  ９Ｈ，  ３  ×  ＣＨ３  Ｂｏｃ），  １．１９  （ｓ，  ９Ｈ，  ３  ×  ＣＨ３ ｔＢｕ），  １．１７  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．１  Ｈｚ，  ３Ｈ，  ＣＨ３γ−Ｔｈｒ），  ０．８９  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．５  Ｈｚ，  ３Ｈ，  ＣＨ３γ−Ｖａｌ），  ０．８５  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．６  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨ３γ−Ｖａｌ）；  
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１２６  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）  δ  １７４．０  （Ｃ＝Ｏ），  １７１．６  （Ｃ＝Ｏ），  １５６．４  （Ｃ＝Ｏ，  Ｂｏｃ，  Ｃ＝Ｏ  Ｆｍｏｃ）  １４５．０  （Ｃ），  １４４．１  （Ｃ），  １４４．０  （２  ×  Ｃ），  １４１．４  （Ｃ），  １２８．４  （ＣＨ），  １２７．８  （ＣＨ），  １２７．６  （ＣＨ），  １２７．２  （ＣＨ），  １２５．２７  （ＣＨ），  １２４．７  （ＣＨ），  １２０．１  （ＣＨ），  ８３．４  （Ｃ，  Ｃｕｍｙｌ），  ７９．８  （Ｃ，  Ｂｏｃ），  ７４．２  （Ｃ，  ｔＢｕ），  ６９．２  （ＣＨα−Ｔｈｒ），  ６７．１  （ＣＨ２，  Ｆｍｏｃ），  ６１．８  （ＣＨ，  β−Ｔｈｒ），  ６０．４  （ＣＨα−Ｖａｌ），  ５４．７  （２  ×  ＮＣＨ２），  ４７．３  （ＣＨ，  Ｆｍｏｃ），  ４４．０  （ＣＨ２，  ＧＡｚ），  ３１．５  （ＣＨ，  β−Ｖａｌ），  ２８．８  （ＣＨ３，  Ｃｕｍｙｌ），  ２８．７  （ＣＨ３，  Ｂｏｃ），  ２８．５  （ＣＨ３，  ｔＢｕ），  ２７．３  （２  ×  ＣＨ３，  Ｃｕｍｙｌ），  ２０．２  （ＣＨ３，  γ−Ｔｈｒ），  １９．３  （ＣＨ３，  γ−Ｖａｌ），  １７．８  （ＣＨ３，  γ−Ｖａｌ）；  
νｍａｘ（ｎｅａｔ）＝  ２９６８，  １７０２，  １６５８，  １３９９，  １３６５  ｃｍ-１；  
ＭＳ  （ＥＳＩ＋）  ｍ／ｚ  ７９９  ［Ｍ＋Ｈ］＋，  ８２１  ［Ｍ＋Ｎａ］＋；  
ＨＲＭＳ  （ＥＳＩ＋）  ｃａｌｃｄ．  ｆｏｒ  Ｃ４６Ｈ６２Ｎ４ＮａＯ８  ８２１．４４６０  ［Ｍ＋Ｎａ］＋，  ｆｏｕｎｄ  ８２１．４４６７；  
【０２６３】
Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−ＧＡｚ（Ｂｏｃ）−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ｐｈｅ−ＯＢｎの調製：
【化６５】
2021519347.tif 000083
Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−ＧＡｚ（Ｂｏｃ）−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−ＯＣｕｍｙｌ（１．４７グラム，  １．８４ミリモル，  １．０当量）を２％ＴＦＡ／ＣＨ２Ｃｌ２に溶解し、ＥＳＩ−ＭＳによってモニターして、完了するまで、室温で撹拌した。
混合物を減圧下で濃縮し、得られた残留物を、繰り返し、ＣＨ２Ｃｌ２（２０ミリリットル）に再溶解し、そして溶媒を減圧下で除去した。
ＣＨ２Ｃｌ２（２０ミリリットル）中の粗酸に、Ｈ−Ｐｈｅ−ＯＢｎ・ＨＣｌ（０．６５グラム、２．２２ミリモル、１．２当量）、ＮＭＭ（１．０１ミリリットル、９．２２ミリモル、５．０当量）、ＨＯＢｔ・Ｈ２Ｏ（０．２５グラム、１．８４ミリモル、１．０当量）およびＥＤＣ・ＨＣｌ（０．３５グラム、１．８４ミリモル、１．０当量）を加えた。
反応混合物を、窒素雰囲気下、室温で１８時間撹拌する。
混合物を、ＥｔＯＡｃ（５０ミリリットル）で希釈し、ブライン（３×５０ミリリットル）で洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、真空で濃縮して黄色の油を得て、これをフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＣＨ２Ｃｌ２／メタノール＝４９：１）。
Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−ＧＡｚ（Ｂｏｃ）−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ｐｈｅ−ＯＢｎを、黄色固体として得た（１．２６グラム、１．３７ミリモル、７４％）。
Ｒｆ  （ＣＨ２Ｃｌ２／メタノール ４９：１）  ０．４４；
ｍｐ  ５６−５８  oＣ；  
１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）  δ  ７．８０  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．１  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＮＨ），  ７．７６  （ｄ，  Ｊ  ＝  ７．５  Ｈｚ，  ２Ｈ，  ＡｒＨ），  ７．６３−７．５７  （ｍ，  ２Ｈ，  ＡｒＨ），  ７．４２−７．２７  （ｍ，  １０Ｈ，  ＡｒＨ），  ７．２２−７．１８  （ｍ，  ３Ｈ，  ＡｒＨ），  ７．０８−７．０２  （ｍ，  ２Ｈ，  １  ×  ＮＨ，  １  ×  ＡｒＨ），  ５．４９  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．８  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＮＨ  Ｆｍｏｃ），  ５．１８  （ｄ，  Ｊ  ＝  １２．１  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨＨＰｈ  Ｂｎ），  ５．１０  （ｄ，  Ｊ  ＝  １２．１  Ｈｚ，  １Ｈ．  ＣＨＨＰｈ  Ｂｎ），  ４．９０  （ｄｔ，  Ｊ  ＝  ７．９，  ５．９  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨα−Ｐｈｅ），  ４．４３  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １０．２，  ７．５  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨＨＦｍｏｃ），  ４．３３  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １０．１，  ７．５  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨＨＦｍｏｃ），  ４．２３  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．１  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨＦｍｏｃ），  ４．１２−４．０３  （ｍ，  １Ｈ，  ＣＨα−Ｖａｌ），  ３．７８  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．６  Ｈｚ，  ２Ｈ，  ＮＣＨＨ−Ａｚ，  ＣＨＨＧＡｚ），  ３．５９−３．４８  （ｍ，  ４Ｈ，  ＣＨα−Ｔｈｒ，  ＮＣＨＨ−Ａｚ，  ＮＣＨ２−Ａｚ），  ３．１７  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １３．９，  ５．５  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨＨβ−Ｐｈｅ），  ３．００  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １３．８，  ７．９  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨＨβ−Ｐｈｅ），  ２．９５−２．７０  （ｍ，  ２Ｈ，  ＣＨβ−Ｔｈｒ，  ＣＨＨＧＡｚ），  ２．４０  （ｓ，  １Ｈ，  ＮＨ），  ２．１５−２．０８  （ｍ，  １Ｈ，  ＣＨβ−Ｖａｌ），  １．４２  （ｓ，  ９Ｈ，  ３  ×  ＣＨ３  Ｂｏｃ），  １．０８  （ｓ，  ９Ｈ，  ３  ×  ＣＨ３ ｔＢｕ），  １．０１−０．９５  （ｍ，  ６Ｈ，  ＣＨ３γ−Ｔｈｒ，  ＣＨ３γ−Ｖａｌ），  ０．９３  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．６  Ｈｚ，  ３Ｈ，  ＣＨ３γ−Ｖａｌ）；  
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１２６  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）  δ  １７３．１  （Ｃ＝Ｏ），  １７２．１  （Ｃ＝Ｏ），  １５６．５  （Ｃ＝Ｏ  Ｆｍｏｃ），  １５６．４  （Ｃ＝Ｏ  Ｂｏｃ），  １４４．０４  （Ｃ），  １４３．９７  （Ｃ），  １４１．４  （Ｃ），  １３６．１  （２  ×  Ｃ），  １３５．１  （Ｃ），  １２９．３  （ＣＨ），  １２８．７５  （ＣＨ），  １２８．７４  （ＣＨ），  １２８．６９  （ＣＨ），  １２８．６６  （ＣＨ），  １２７．９  （ＣＨ），  １２７．３  （ＣＨ），  １２７．２  （ＣＨ），  １２５．３  （ＣＨ），  １２０．１  （ＣＨ），  ７９．８  （Ｃ，  Ｂｏｃ），  ７４．９  （Ｃ，  ｔＢｕ），  ６７．５  （ＣＨ２Ｐｈ，  Ｂｎ），  ６７．２  （ＣＨ２，  Ｆｍｏｃ），  ６０．６  （ＣＨ，  α−Ｖａｌ，  ＣＨ，  β−Ｔｈｒ），  ５５．６  （２  ×  ＮＣＨ２），  ５３．３  （ＣＨ，  α−Ｐｈｅ），  ４７．３  （ＣＨ，  Ｆｍｏｃ），  ３８．２  （ＣＨ２， β−Ｐｈｅ），  ３１．３  （ＣＨ，  β−Ｖａｌ），  ２８．５  （ＣＨ３，  Ｂｏｃ  ｏｒ  ｔＢｕ），  ２８．４  （ＣＨ３，  Ｂｏｃ  ｏｒ  ｔＢｕ），  １９．４  （ＣＨ３，  γ−Ｔｈｒ），  １８．０  （２  ×  ＣＨ３，  γ−Ｖａｌ），  
注：ＣＨ２（ＧＡｚ）およびＣＨα−Ｔｈｒは見えない。  
νｍａｘ（ｎｅａｔ）＝  ２９７０，  １７３４，  １６９８，  １６６７，  １３９０，  １１０６  ｃｍ-１；  
ＭＳ  （ＥＳＩ＋）  ｍ／ｚ  ９１８  ［Ｍ＋Ｈ］＋，  ９４０  ［Ｍ＋Ｎａ］＋；  
ＨＲＭＳ  （ＥＳＩ＋）  ｃａｌｃｄ．  ｆｏｒ  Ｃ５３Ｈ６８Ｎ５Ｏ９  ９１８．５０１２  ［Ｍ＋Ｈ］＋，  ｆｏｕｎｄ  ９１８．５０１０；
【０２６４】
Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｖａｌ−ＧＡｚ（Ｂｏｃ）−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ｐｈｅ−ＯＢｎの調製：
【化６６】
2021519347.tif 000084
テトラペプチドＦｍｏｃ−Ｖａｌ−ＧＡｚ（Ｂｏｃ）−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ｐｈｅ−ＯＢｎを（９９４ミリグラム、１．０８ミリモル、１．０当量）のＣＨ２Ｃｌ２（２ミリリットル）の溶液に、ジエチルアミン（２ミリリットル）を添加し、および混合物を室温で１時間撹拌した。
反応混合物を、減圧下で濃縮し、得られた残留物を、繰り返し、ＣＨ２Ｃｌ２（３×２０ミリリットル）に溶解し、減圧下で濃縮して、粗アミンを得た。
残渣を、ＣＨ２Ｃｌ２（１１ミリリットル）に溶かして、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔ−Ｂｕ）−ＯＨ（４９６ミリグラム、１．０８ミリモル、１．０当量）、ＥＤＣ・ＨＣｌ（２０７ミリグラム、１．０８ミリモル、１．０当量）、ＨＯＢＴ・Ｈ２Ｏ（１４６ミリグラム、１．０８ミリモル、１．０当量）およびＮＭＭ（４７５マイクロリットル、４．３２ミリモル、４．０当量）を、続いて添加し、そして、混合物を、室温で、２４時間撹拌した。
反応混合物を、ＥｔＯＡｃ（５０ミリリットル）で希釈し、ブライン（３×５０ミリリットル）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。
残渣を、カラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＣＨ２Ｃｌ２／メタノール＝４９：１）で精製し、ペンタペプチドのＦｍｏｃ−Ｔｙｒ（tＢｕ）−Ｖａｌ−ＧＡｚ（Ｂｏｃ）−Ｔｈｒ（tＢｕ）−Ｐｈｅ−ＯＢｎ（８９８ミリグラム、０．７９ミリモル、７３％）を、白色固体として得た。
Ｒｆ  （ＣＨ２Ｃｌ２／メタノール  ９７：３）  ０．２７；  
ｍｐ  １０３−１０５  ℃；  
１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）  δ  ７．８２  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＮＨ），  ７．７６  （ｄ，  Ｊ  ＝  ７．５  Ｈｚ，  ２Ｈ，  ＡｒＨ），  ７．５４  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ７．３，  ２．９  Ｈｚ，  ２Ｈ，  ＡｒＨ），  ７．４４−７．２７  （ｍ，  ９Ｈ，  ＡｒＨ），  ７．２５−７．１９  （ｍ，  ３Ｈ，  ＡｒＨ），  ７．１１−７．０４  （ｍ，  ４Ｈ，  ＡｒＨ），  ６．９０  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．１  Ｈｚ，  ２Ｈ，  ＡｒＨ），  ６．５３  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．６  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＮＨ），  ５．３５−５．２８  （ｍ，  １Ｈ，  Ｆｍｏｃ  ＮＨ），  ５．１８  （ｄ，  Ｊ  ＝  １２．１  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨＨＰｈ  Ｂｎ），  ５．１２  （ｄ，  Ｊ  ＝  １２．２  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨＨＰｈ  Ｂｎ），  ４．９１  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １３．８，  ７．６  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨα−Ｐｈｅ），  ４．５５−４．３６  （ｍ，  ２Ｈ，  ＣＨＨ  Ｆｍｏｃ，  ＣＨα−Ｔｙｒ），  ４．３６−４．２１  （ｍ，  ２Ｈ，  ＣＨＨ  Ｆｍｏｃ，  ＣＨα−Ｖａｌ），  ４．１８  （ｔ，  Ｊ  ＝  ６．９  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨ  Ｆｍｏｃ），  ３．８６−３．４１  （ｍ，  ６Ｈ，  ２  ×  ＮＣＨ２−Ａｚ，  ＣＨＨＧＡｚ，  ＣＨα−Ｔｈｒ），  ３．１６  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １３．９，  ５．７  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨＨβ−Ｐｈｅ），  ３．１２−２．７６  （ｍ，  ５Ｈ，  ＣＨβ−Ｔｈｒ，  ＣＨＨＧＡｚ，  ＣＨＨβ−Ｐｈｅ，  ＣＨ２β−Ｔｙｒ），  ２．１２−２．０５  （ｍ，  １Ｈ，  ｍ，  １Ｈ，  ＣＨβ−Ｖａｌ），  １．８０  （ｓ，  １Ｈ，  ＮＨ），  １．４１  （ｓ，  ９Ｈ，  ３  ×  ＣＨ３  Ｂｏｃ），  １．３１  （ｓ，  ９Ｈ，  ３  ×  ＣＨ３ ｔＢｕ），  １．１２  （ｓ，  ９Ｈ，  ３  ×  ＣＨ３ ｔＢｕ），  １．０２  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．２  Ｈｚ，  ３Ｈ，  ＣＨ３γ−Ｖａｌ），  ０．８８  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．７  Ｈｚ，  ３Ｈ，  ＣＨ３γ−Ｔｈｒ），  ０．８１  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．６  Ｈｚ，  ３Ｈ，  ＣＨ３γ−Ｖａｌ），  
注：１つのＮＨは見えない。
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１２６  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）  δ  １７３．１  （Ｃ＝Ｏ），  １７１．８  （Ｃ＝Ｏ），  １７１．４  （Ｃ＝Ｏ），  １７１．１  （Ｃ＝Ｏ），  １５６．４  （Ｃ＝Ｏ  Ｂｏｃ），  １５６．１  （Ｃ＝Ｏ  Ｆｍｏｃ），  １５４．６  （Ｃ），  １４３．９  （Ｃ），  １４３．８  （Ｃ），  １４１．４  （Ｃ），  １３６．１  （Ｃ），  １３５．１  （Ｃ），  １３１．２  （Ｃ），  １２９．３  （ＣＨ），  １２８．８  （ＣＨ），  １２８．７４  （ＣＨ），  １２８．６７  （ＣＨ），  １２８．６５  （ＣＨ），  １２７．９  （ＣＨ），  １２７．３  （ＣＨ），  １２７．２  （ＣＨ），  １２５．２０  （ＣＨ），  １２５．１６  （ＣＨ），  １２４．５  （ＣＨ），  １２０．１  （ＣＨ），  ７９．８  （Ｃ，  Ｂｏｃ），  ７８．６  （Ｃ，  ｔＢｕ），  ７４．９  （Ｃ，  ｔＢｕ），  ６７．５  （ＣＨ２Ｐｈ  Ｂｎ），  ６７．２  （ＣＨ２Ｐｈ  Ｆｍｏｃ），  ５８．９  （ＣＨ，  α−Ｖａｌ），  ５６．３  （ＣＨ，  α−Ｔｙｒ），  ５５．６  （２  ×  ＮＣＨ２），  ５３．４  （ＣＨ，  α−Ｐｈｅ），  ４７．２  （ＣＨ，  Ｆｍｏｃ），  ３８．２  （ＣＨ２，  β−Ｔｙｒ），  ３７．４  （ＣＨ２，  β−Ｐｈｅ），  ３０．９  （ＣＨ，  β−Ｖａｌ），  ２９．０  （ＣＨ３，  ｔＢｕ），  ２８．５  （ＣＨ３，  ｔＢｕ），  ２８．４５  （ＣＨ３，  Ｂｏｃ），  １９．４  （ＣＨ３，  γ−Ｖａｌ），  １８．０  （ＣＨ３，  γ−Ｔｈｒ，  ＣＨ３，  γ−Ｖａｌ），
注意：２つの芳香族性４級Ｃ，  ＣＨ２（ＧＡｚ），  ＣＨ（β−Ｔｈｒ）およびＣＨ（α−Ｔｈｒ）は見当たらない。；  
νｍａｘ（ｎｅａｔ）＝  ２９７０，  １６９８，  １６４３，  １５２９，  １２３２  ｃｍ-１；  
ＭＳ  （ＥＳＩ＋）  ｍ／ｚ  １１３７  ［Ｍ＋Ｈ］＋，  １１６０  ［Ｍ＋Ｎａ］＋；  
ＨＲＭＳ  （ＥＳＩ＋）  ｃａｌｃｄ．  ｆｏｒ  Ｃ６６Ｈ８４Ｎ６ＮａＯ１１  １１５９．６０９０  ［Ｍ＋Ｎａ］＋，  ｆｏｕｎｄ  １１５９．６１０１；
【０２６５】
Ｃｂｚ−Ｌｅｕ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｖａｌ−ＧＡｚ（Ｂｏｃ）−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ｐｈｅ−ＯＢｎの調製：
【化６７】
2021519347.tif 000085
ペンタペプチドＦｍｏｃ−Ｔｙｒ（tＢｕ）−Ｖａｌ−ＧＡｚ（Ｂｏｃ）−Ｔｈｒ（tＢｕ）−Ｐｈｅ−ＯＢｎを（８４５ミリグラム、０．７４ミリモル、１．０当量）のＣＨ２Ｃｌ２（２ミリリットル）の溶液へ、ジエチルアミン（２ミリリットル）を添加し、および混合物を、室温で、１時間撹拌した。
反応混合物を、減圧下で濃縮し、得られた残留物を繰り返し、ＣＨ２Ｃｌ２（３×２０ミリリットル）に溶解し、減圧下で濃縮して、粗アミンを得た。
残渣を、ＣＨ２Ｃｌ２（８ミリリットル）に溶解し、Ｃｂｚ−Ｌｅｕ−ＯＨ（１９７ミリグラム、０．７４ミリモル、１．０当量）、ＥＤＣ・ＨＣｌ（１４３ミリグラム、０．７４ミリモル、１．０当量）、ＨＯＢＴ・Ｈ２Ｏ（１０１ミリグラム、０．７４ミリモル、１．０当量）およびＮＭＭ（３２７マイクロリットル、２．９８ミリモル、４．０当量）を、続いて添加し、そして、混合物を、室温で２４時間撹拌した。
反応混合物を、ＥｔＯＡｃ（５０ミリリットル）で希釈し、ブライン（３×５０ミリリットル）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。
残渣を、カラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＣＨ２Ｃｌ２／メタノール＝９３：７）で精製し、ヘキサペプチド（Ｃｂｚ−Ｌｅｕ−Ｔｙｒ（tＢｕ）−Ｖａｌ−ＧＡｚ（Ｂｏｃ）−Ｔｈｒ（tＢｕ）−Ｐｈｅ−ＯＢｎ（７０８ミリグラム、０．６１ミリモル、８２％）を、白い泡として得た。
Ｒｆ  （ＣＨ２Ｃｌ２／メタノール  ９７：３）  ０．２３；  
ｍｐ  １２６−１２８  ℃；  
１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）  δ  ７．７９  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．１  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＮＨ），  ７．４３−７．１５  （ｍ，  １４Ｈ，  ＡｒＨ，  ＮＨ），  ７．１０−７．０４  （ｍ，  ４Ｈ，  ＡｒＨ），  ６．８８  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．１  Ｈｚ，  ２Ｈ，  ＡｒＨ），  ６．７７−６．６０  （ｍ，  ２Ｈ，  ２  ×  ＮＨ），  ５．１８−４．９６  （ｍ，  ５Ｈ，  ２  ×  ＣＨ２Ｐｈ，  Ｃｂｚ  ＮＨ），  ４．８８  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １３．９，  ７．３  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨα−Ｐｈｅ），  ４．５８−４．４９  （ｍ，  １Ｈ，  ＣＨα−Ｔｙｒ），  ４．３４−４．２５  （ｍ，  １Ｈ，  ＣＨα−Ｖａｌ），  ４．０７−４．００  （ｍ，  １Ｈ，  ＣＨα−Ｌｅｕ），  ３．８７−３．４８  （ｍ，  ６Ｈ，  ＣＨＨＧＡｚ，  ２  ×  ＮＣＨ２−Ａｚ，  ＣＨα−Ｔｈｒ），  ３．２１−２．８０  （ｍ，  ６Ｈ，  ＣＨＨＧＡｚ，  ＣＨ２β−Ｐｈｅ，  ＣＨ２β−Ｔｙｒ，  ＣＨβ−Ｔｈｒ），  ２．５７  （ｓ，  １Ｈ，  ＮＨ），  ２．２８−２．１４  （ｍ，  １Ｈ，  ＣＨβ−Ｖａｌ），  １．５９−１．４８  （ｍ，  ２Ｈ，  ＣＨＨβ−Ｌｅｕ，  ＣＨγ−Ｌｅｕ），  １．３９  （ｓ，  １０Ｈ，  ＣＨＨβ−Ｌｅｕ，  ３  ×  ＣＨ３ ｔＢｕ），  １．３０  （ｓ，  ９Ｈ，  ３  ×  ＣＨ３ ｔＢｕ），  １．１１  （ｓ，  ９Ｈ，  ３  ×  ＣＨ３ ｔＢｕ），  １．００  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．２  Ｈｚ，  ３Ｈ，  ＣＨ３γ−Ｔｈｒ），  ０．９１  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．４  Ｈｚ，  ３Ｈ，  ＣＨ３γ−Ｖａｌ），  ０．８７−０．８１  （ｍ，  ９Ｈ，  ＣＨ３γ−Ｖａｌ，  ２  ×  ＣＨ３δ−Ｌｅｕ）；  
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１２６  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）  δ  １７３．３  （Ｃ＝Ｏ），  １７２．９  （Ｃ＝Ｏ），  １７１．６  （Ｃ＝Ｏ），  １７１．５  （Ｃ＝Ｏ），  １７１．１  （Ｃ＝Ｏ），  １５６．５  （Ｃ＝Ｏ  Ｂｏｃ／Ｃｂｚ），  １５６．４  （Ｃ＝Ｏ  Ｂｏｃ／Ｃｂｚ），  １５４．５  （Ｃ），  １３６．１  （Ｃ），  １３６．０  （Ｃ），  １３５．１  （Ｃ），  １３１．５  （Ｃ），  １２９．８  （ＣＨ），  １２９．３  （ＣＨ），  １２８．８  （ＣＨ），  １２８．７３  （ＣＨ），  １２８．６９  （ＣＨ），  １２８．６４  （ＣＨ），  １２８．６３  （ＣＨ），  １２８．４  （ＣＨ），  １２８．３  （ＣＨ），  １２７．３  （ＣＨ），  １２４．５  （ＣＨ），  ７９．７  （Ｃ，  ｔＢｕ），  ７８．５  （Ｃ，  ｔＢｕ），  ７４．９  （Ｃ，  Ｂｏｃ），  ６７．４０  （ＣＨ２Ｐｈ  Ｂｎ），  ６７．３７  （ＣＨ２Ｐｈ  Ｂｎ），  ６１．１  （ＣＨ，  β−Ｔｈｒ），  ５９．０  （ＣＨ，  α−Ｖａｌ），  ５５．８  （ＣＨ，  α−Ｔｙｒ），  ５５．５  （２  ×  ＮＣＨ２），  ５４．１  （ＣＨ，  α−Ｌｅｕ），  ５３．５  （ＣＨ，  α−Ｐｈｅ），  ４１．０  （ＣＨ２，  β−Ｌｅｕ），  ３８．２  （ＣＨ２，  β−Ｐｈｅ），  ３６．４  （ＣＨ２，  β−Ｔｙｒ），  ３０．３  （ＣＨ，  γ−Ｖａｌ），  ２９．０  （ＣＨ３，  ｔＢｕ），  ２８．５  （ＣＨ３，  ｔＢｕ），  ２８．４  （ＣＨ３，  Ｂｏｃ），  ２４．８  （ＣＨ，  γ−Ｌｅｕ），  ２３．０  （ＣＨ３，  δ−Ｌｅｕ），  ２１．９  （ＣＨ３，  γ−Ｖａｌ），  １９．５  （ＣＨ３，  δ−Ｌｅｕ），  １７．７  （ＣＨ３，  γ−Ｖａｌ，  ＣＨ３，  γ−Ｔｈｒ）．
注：ＣＨ２（ＧＡｚ）およびＣＨ（α−Ｔｈｒ）は見えない。
νｍａｘ（ｎｅａｔ）＝  ２９７１，  １６９７，  １６３７，  １３６５，  ６９６  ｃｍ-１；  
ＭＳ  （ＥＳＩ＋）  ｍ／ｚ  １１８４  ［Ｍ＋Ｎａ］＋；  
ＨＲＭＳ  （ＥＳＩ＋）  ｃａｌｃｄ．  ｆｏｒ  Ｃ６５Ｈ９１Ｎ７ＮａＯ１２  １１８４．６６１８  ［Ｍ＋Ｎａ］＋，  ｆｏｕｎｄ  １１８４．６６２３．
【０２６６】
Ｈ−Ｌｅｕ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｖａｌ−ＧＡｚ（Ｂｏｃ）−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ｐｈｅ−ＯＨの調製：
【化６８】
2021519347.tif 000086
Ｃｂｚ−Ｌｅｕ−Ｔｙｒ（tＢｕ）−Ｖａｌ−ＧＡｚ（Ｂｏｃ）−Ｔｈｒ（tＢｕ）−Ｐｈｅ−ＯＢｎ（５９０ミリグラム、０．５１８ミリモル、１．０当量）のメタノール（５ミリリットル）溶液の中に、１０重量％Ｐｄ／Ｃ（５９ミリグラム、１０重量％）を加え、および反応フラスコを排気し、窒素を充填し、排気し、水素雰囲気（水素）下に置いた。
反応混合物を、室温で１６時間撹拌し、窒素下に置き、セライトのプラグを通して濾過し、これをメタノール（３×）で洗浄した。
濾液を真空で濃縮して、表題化合物を白色の固体として得た（４９１ミリグラム、０．５１７ミリモル、定量的）。
ｍｐ  １２６−１２８  oＣ；
１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＭｅＯＤ）  δ  ７．３１−７．２１  （ｍ，  ７Ｈ，  ＡｒＨ），  ６．９１  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．３  Ｈｚ，  ２Ｈ，  ＡｒＨ），  ４．７６−４．７０  （ｍ，  ２Ｈ，  ＣＨα−Ｔｙｒ，  ＣＨα−Ｐｈｅ），  ４．２１  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．９  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨα−Ｖａｌ），  ３．８７−３．８１  （ｍ，  １Ｈ，  ＣＨα−Ｌｅｕ），  ３．７１−３．４４  （ｍ，  ６Ｈ，  ＣＨＨＧＡｚ，  ２  ×  ＮＣＨ２−Ａｚ，  ＣＨα−Ｔｈｒ），  ３．２６−３．２１  （ｍ，  ２Ｈ，  ＣＨＨβ−Ｐｈｅ，  ＣＨＨβ−Ｔｙｒ），  ３．０７−２．８２  （ｍ，  ５Ｈ，  ＣＨＨＧＡｚ，  ＣＨＨβ−Ｐｈｅ，  ＣＨＨβ−Ｔｙｒ，  ＣＨβ−Ｔｈｒ），  ２．１０  （ｔｄ，  Ｊ  ＝  １３．５，  ６．８  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨβ−Ｖａｌ），  １．７２−１．６２  （ｍ，  ３Ｈ，  ＣＨ２β−Ｌｅｕ，  ＣＨγ−Ｌｅｕ），  １．４２  （ｓ，  ９Ｈ，  ＣＨ３  Ｂｏｃ），  １．３２  （ｓ，  ９Ｈ，  ＣＨ３ ｔＢｕ），  １．１４  （ｓ，  ９Ｈ，  ＣＨ３ ｔＢｕ），  １．０６  （ｄ，  Ｊ  ＝  ５．８  Ｈｚ，  ３Ｈ，  ＣＨ３γ−Ｔｈｒ），  ０．９７  （ｄ，  Ｊ  ＝  ３．２  Ｈｚ，  ３Ｈ，  ＣＨ３δ−Ｌｅｕ），  ０．９６  （ｄ，  Ｊ  ＝  ３．０  Ｈｚ，  ３Ｈ，  ＣＨ３δ−Ｌｅｕ），  ０．９４  （ｄ，  Ｊ  ＝  ３．３  Ｈｚ，  ３Ｈ，  ＣＨ３γ−Ｖａｌ），  ０．９３  （ｄ，  Ｊ  ＝  ３．２  Ｈｚ，  ３Ｈ，  ＣＨ３γ−Ｖａｌ）；  
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１２６  ＭＨｚ，  ＭｅＯＤ）  δ  １７５．４  （Ｃ＝Ｏ），  １７４．９  （Ｃ＝Ｏ），  １７３．８  （Ｃ＝Ｏ），  １７３．４  （Ｃ＝Ｏ），  １７０．８  （Ｃ＝Ｏ），  １５８．１  （Ｃ＝Ｏ  Ｂｏｃ），  １５５．４  （Ｃ），  １３８．４  （Ｃ），  １３３．４  （Ｃ），  １３０．８  （ＣＨ），  １３０．４  （ＣＨ），  １２９．７  （ＣＨ），  １２８．０  （ＣＨ），  １２５．３  （ＣＨ），  ８１．２  （Ｃ，  ｔＢｕ），  ７９．５  （Ｃ，  ｔＢｕ），  ７５．６  （Ｃ，  Ｂｏｃ），  ７０．７  （ＣＨ，  α−Ｔｈｒ），  ６３．７  （ＣＨ，  β−Ｔｈｒ），  ６０．５  （ＣＨ，  α−Ｖａｌ），  ５７．１  （２  ×  ＮＣＨ２），  ５６．６  （ＣＨ，  α−Ｔｙｒ／Ｐｈｅ），  ５４．９  （ＣＨ，  α−Ｔｙｒ／Ｐｈｅ），  ５２．８  （ＣＨ，  α−Ｌｅｕ），  ４４．９  （ＣＨ２，  ＧＡｚ），  ４１．８  （ＣＨ，  β−Ｌｅｕ），  ３８．７  （ＣＨ２，  β−Ｔｙｒ／Ｐｈｅ），  ３７．７  （ＣＨ２，  β−Ｔｙｒ／Ｐｈｅ），  ３２．０  （ＣＨ，  β−Ｖａｌ），  ２９．２  （ＣＨ３，  ｔＢｕ），  ２８．９  （ＣＨ３，  ｔＢｕ），  ２８．６  （ＣＨ３，  Ｂｏｃ），  ２５．３  （ＣＨ，  γ−Ｌｅｕ），  ２３．３  （ＣＨ３，  δ−Ｌｅｕ），  ２１．８  （ＣＨ３，  δ−Ｌｅｕ），  ２０．３  （ＣＨ３，  γ−Ｔｈｒ），  １９．９  （ＣＨ３，  γ−Ｖａｌ），  １８．６  （ＣＨ３，  γ−Ｖａｌ）．
νｍａｘ（ｎｅａｔ）＝  ３２８７，  ２９６７，  １６４１，  １６０８，  １５０６，  １１６０  ｃｍ-１；  
ＭＳ  （ＥＳＩ＋）  ｍ／ｚ  ９３８  ［Ｍ＋Ｈ］＋，  ９６０  ［Ｍ＋Ｎａ］＋；  
ＨＲＭＳ  （ＥＳＩ＋）  ｃａｌｃｄ．  ｆｏｒ  Ｃ５０Ｈ８０Ｎ７ＮａＯ１０  ９３８．５９６１  ［Ｍ＋Ｈ］＋，  ｆｏｕｎｄ  ９３８．５９６６．
【０２６７】
シクロ（Ｌｅｕ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｖａｌ−ＧＡｚ（Ｂｏｃ）−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ｐｈｅ）の調製：
【化６９】
2021519347.tif 000087
Ｈ−Ｌｅｕ−Ｔｙｒ（tＢｕ）−Ｖａｌ−ＧＡｚ（Ｂｏｃ）−Ｔｈｒ（tＢｕ）−Ｐｈｅ−ＯＨ（９４ミリグラム、０．１ミリモル、１．０当量）のＤＭＦ（２０ミリリットル、０．００５Ｍ）溶液に、ＤＥＰＢＴ（６０ミリグラム、０．２ミリモル、２．０当量）およびＤＩＰＥＡ（３６マイクロリットル、０．２ミリモル、２．０当量）を加え、反応混合物を、室温で、４８時間撹拌した。
溶媒を、減圧下、６０℃で３０分かけて除去し、残留物を真空中で乾燥させた。
残留物を、ＬＣＭＳで分析し、カラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＣＨ２Ｃｌ２／メタノール＝４９：１→１９：１）で精製して、環状ヘキサペプチドを白色ガラス状固体として得た（５２．１ミリグラム、５７マイクロモル、５７％）。
Ｒｆ  （ＣＨ２Ｃｌ２／メタノール  １９：１）  ０．３５；  
ｍｐ  １５６−１５８  ℃；
１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＭｅＯＤ）  δ  ７．３８−７．３１  （ｍ，  ２Ｈ，  ＡｒＨ），  ７．２９−７．２４  （ｍ，  ３Ｈ，  ＡｒＨ），  ７．１５  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．３  Ｈｚ，  ２Ｈ，  ＡｒＨ），  ６．９３  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．３  Ｈｚ，  ２Ｈ，  ＡｒＨ），  ４．６２  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ９．９，  ５．６  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨα−Ｐｈｅ），  ４．３６  （ｄ，  Ｊ  ＝  ９．０  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨα−Ｖａｌ），  ４．０８  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １１．５，  ３．３  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＮＣＨＨ  ＧＡｚ），  ３．９８−３．８３  （ｍ，  ２Ｈ，  ＮＣＨＨ  ＧＡｚ，  ＣＨＨ  ＧＡｚ），  ３．８１−３．７１  （ｍ，  ２Ｈ，  ＮＣＨＨ  ＧＡｚ，  ＣＨα−Ｌｅｕ），  ３．６６−３．４９  （ｍ，  ３Ｈ，  ＮＣＨＨ  ＧＡｚ，  ＣＨα−Ｔｙｒ，  ＣＨＨβ−Ｔｙｒ），  ３．３７  （ｍ，  ２Ｈ，  ＣＨＨβ−Ｔｙｒ，  ＣＨα−Ｔｈｒ），  ３．０２−２．９４  （ｍ，  １Ｈ，  ＣＨＨ  ＧＡｚ），  ２．９０−２．８２  （ｍ，  １Ｈ，  ＣＨβ−Ｔｈｒ），  ２．７４  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １３．４，  １０．８  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨＨβ−Ｐｈｅ），  ２．１８−１．８８  （ｍ，  １Ｈ，  ＣＨβ−Ｖａｌ），  １．５８−１．５１  （ｍ，  １Ｈ，  ＣＨＨβ−Ｌｅｕ），  １．４２  （ｓ，  ９Ｈ，  ＣＨ３  Ｂｏｃ），  １．３５−１．３０  （ｍ，  １０Ｈ，  ＣＨＨβ−Ｌｅｕ，  ＣＨ３ ｔＢｕ），  １．２６−１．２２  （ｍ，  １Ｈ，  ＣＨγ−Ｌｅｕ），  １．０９−０．９７  （ｍ，  １８Ｈ，  ＣＨ３ ｔＢｕ，  ２  ×  ＣＨ３γ−Ｖａｌ，  ＣＨ３γ−Ｔｈｒ），  ０．８１  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．５  Ｈｚ，  ３Ｈ，  ＣＨ３δ−Ｌｅｕ），  ０．７７  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．４  Ｈｚ，  ３Ｈ，  ＣＨ３δ−Ｌｅｕ）．
注：ＣＨＨβ−Ｐｈｅは、溶媒のシグナルと重複する。
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１２６  ＭＨｚ，  ＭｅＯＤ）  δ  １７６．２  （Ｃ＝Ｏ），  １７４．９  （Ｃ＝Ｏ），  １７４．７  （Ｃ＝Ｏ），  １７４．５  （Ｃ＝Ｏ），  １７２．８  （Ｃ＝Ｏ），  １５８．２  （Ｃ＝Ｏ  Ｂｏｃ），  １５５．３  （Ｃ），  １３７．７  （Ｃ），  １３４．９  （Ｃ），  １３０．６  （ＣＨ），  １３０．２  （ＣＨ），  １３０．０  （ＣＨ），  １２８．３  （ＣＨ），  １２５．３  （ＣＨ），  ８１．３  （Ｃ，  ｔＢｕ），  ７９．４  （Ｃ，  ｔＢｕ），  ７５．５  （Ｃ，  Ｂｏｃ），  ６９．５  （ＣＨ，  α−Ｔｈｒ），  ６５．１  （ＣＨ，  β−Ｔｈｒ），  ６２．６  （ＣＨ，  α−Ｖａｌ），  ５９．５  （ＣＨ，  α−Ｔｙｒ），  ５７．７  （２  ×  ＮＣＨ２），  ５５．８  （ＣＨ，  α−Ｌｅｕ），  ５４．７  （ＣＨ，  α−Ｐｈｅ），  ４０．３  （ＣＨ２，  β−Ｌｅｕ），  ３９．３  （ＣＨ２，  β−Ｐｈｅ），  ３５．１  （ＣＨ２，  β−Ｔｙｒ），  ３３．６  （ＣＨ２，  β−Ｖａｌ），  ２９．２  （ＣＨ３，  ｔＢｕ），  ２８．９  （ＣＨ３，  ｔＢｕ），  ２８．６  （ＣＨ３，  Ｂｏｃ），  ２５．２  （ＣＨ，  γ−Ｌｅｕ），  ２３．１  （ＣＨ３，  δ−Ｌｅｕ），  ２２．３  （ＣＨ３，  δ−Ｌｅｕ），  ２１．８  （ＣＨ３，  γ−Ｔｈｒ），  １９．９  （ＣＨ３，  γ−Ｖａｌ），  １９．５  （ＣＨ３，  γ−Ｖａｌ）．
注：Ｇａｚの  ＣＨ２  は見当たらない。  
νｍａｘ（ｎｅａｔ）＝  ２９７３，  １６４２，  １５０５，  １１６１  ｃｍ-１；  
ＭＳ  （ＥＳＩ＋）  ｍ／ｚ  ９２０  ［Ｍ＋Ｈ］＋，  ９４２  ［Ｍ＋Ｎａ］＋；  
ＨＲＭＳ  （ＥＳＩ＋）  ｃａｌｃｄ．  ｆｏｒ  Ｃ５２Ｈ７６Ｎ７Ｏ９  ９４２．５６９９  ［Ｍ＋Ｈ］＋，  ｆｏｕｎｄ  ９４２．５６９２；
【０２６８】
シクロ（Ｌｅｕ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−ＧＡｚ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ）の調製：
シクロ（Ｌｅｕ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｖａｌ−ＧＡｚ（Ｂｏｃ）−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ｐｈｅ）（１５．９ミリグラム，１６．３マイクロモル，１．０当量）のＣＨ２Ｃｌ２（１ミリリットル）溶液に、ＴＦＡ（１ミリリットル）を加えた。
溶液を室温で１．５時間撹拌した。
溶媒を真空で除去して、表題化合物を、ＴＦＡ塩としての白色ガラス状固体として定量的収率で明らかにし、それはさらなる精製を必要としなかった。
内部標準としてＴＦＥを用いて、１Ｈおよび１９Ｆ  ＮＭＲは、１当量のＴＦＡ塩を確認した。
ＴＦＡ塩；
ｍｐ  １８６−１８７  ℃  （分解）；  
１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＭｅＯＤ）  δ  ７．３７−７．２５  （ｍ，  ５Ｈ，  ＡｒＨ），  ７．０５  （ｄ，  Ｊ  ＝  ７．８  Ｈｚ，  ２Ｈ，  ＡｒＨ），  ６．７３  （ｄ，  Ｊ  ＝  ７．６  Ｈｚ，  ２Ｈ，  ＡｒＨ），  ４．６４  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ９．８，  ４．９  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨα−Ｐｈｅ），  ４．３３  （ｄ，  Ｊ  ＝  ９．２  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨα−Ｖａｌ），  ４．１８  （ｄ，  Ｊ  ＝  １１．０  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＮＣＨＨ  ＧＡｚ），  ４．１０  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １１．３，  ３．５  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨα−Ｔｙｒ），  ４．０５−３．９８  （ｍ，  ２Ｈ，  ＣＨＨ  ＧＡｚ，  ＮＣＨＨ  ＧＡｚ），  ３．９８−３．８８  （ｍ，  ２Ｈ，  ＮＣＨ２  ＧＡｚ），  ３．７５  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨα−Ｌｅｕ），  ３．４６  （ｍ，  １Ｈ，  ＣＨＨβ−Ｔｙｒ），  ３．０３  （ｄ，  Ｊ  ＝  １６．２  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨＨ  ＧＡｚ），  ２．８８−２．７６  （ｍ，  ２Ｈ，  ＣＨＨβ−Ｐｈｅ，  ＣＨβ−Ｔｈｒ），  ２．０５−１．９２  （ｍ，  １Ｈ，  ＣＨβ−Ｖａｌ），  １．５４−１．４７  （ｍ，  １Ｈ，  ＣＨＨβ−Ｌｅｕ），  １．４３−１．３２  （ｍ，  ２Ｈ，  ＣＨＨβ−Ｌｅｕ，  ＣＨγ−Ｌｅｕ），  １．０６  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．５  Ｈｚ，  ３Ｈ，  ＣＨ３γ−Ｔｈｒ），  １．０３  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．９  Ｈｚ，  ３Ｈ，  ＣＨ３γ−Ｖａｌ），  １．００  （ｄ，  Ｊ  ＝  ５．８  Ｈｚ，  ３Ｈ，  ＣＨ３γ−Ｖａｌ），  ０．８２  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．０  Ｈｚ，  ３Ｈ，  ＣＨ３δ−Ｌｅｕ），  ０．７９  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．１  Ｈｚ，  ３Ｈ，  ＣＨ３δ−Ｌｅｕ）  
注：ＣＨＨβ−Ｔｙｒ，  ＣＨα−ＴｈｒおよびＣＨＨβ−Ｐｈｅは、溶媒のシグナルと重複する。
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１２６  ＭＨｚ，  ＭｅＯＤ）  δ  １７５．４  （Ｃ＝Ｏ），  １７４．９  （Ｃ＝Ｏ），  １７４．７  （Ｃ＝Ｏ），  １７４．６  （Ｃ＝Ｏ），  １７３．０  （Ｃ＝Ｏ），  １５７．３  （Ｃ），  １３７．６  （Ｃ），  １３１．０  （ＣＨ），  １３０．２  （Ｃ），  １３０．１  （ＣＨ），  １２９．８  （ＣＨ），  １２８．２  （ＣＨ），  １１６．３  （ＣＨ），  ６９．２  （ＣＨ，  α−Ｔｈｒ），  ６６．０  （ＣＨ，  β−Ｔｈｒ），  ６２．８  （ＣＨ，  α−Ｖａｌ），  ６０．６  （Ｃ，  ＧＡｚ），  ５９．４  （ＣＨ，  α−Ｔｙｒ），  ５５．９  （２  ×  ＮＣＨ２），  ５５．８  （ＣＨ，  α−Ｌｅｕ）  ，  ５４．８  （ＣＨ，  α−Ｐｈｅ），  ４４．２  （ＣＨ２，  ＧＡｚ），  ４０．３  （ＣＨ２，  β−Ｌｅｕ），  ３８．９  （ＣＨ２，  β−Ｐｈｅ），  ３５．１  （ＣＨ２，  β−Ｔｙｒ），  ３３．４  （ＣＨ，  β−Ｖａｌ），  ２５．１  （ＣＨ，  γ−Ｌｅｕ），  ２２．８  （ＣＨ３，  δ−Ｌｅｕ），  ２２．６  （ＣＨ３，  δ−Ｌｅｕ），  ２０．８  （ＣＨ３，  γ−Ｔｈｒ），  １９．９  （ＣＨ３，  γ−Ｖａｌ），  １９．５  （ＣＨ３，  γ−Ｖａｌ）．
νｍａｘ（ｎｅａｔ）＝  ３３０２，  ３０２９，  １６３９，  １５１５，  １４３６，  １１９８，  １１３２  ｃｍ-１；  
ＭＳ  （ＥＳＩ＋）  ｍ／ｚ  ７０８  ［Ｍ＋Ｈ］＋，  ７３０  ［Ｍ＋Ｎａ］＋；  
ＨＲＭＳ  （ＥＳＩ＋）  ｃａｌｃｄ．  ｆｏｒ  Ｃ３７Ｈ５４Ｎ７Ｏ７  ７０８．４０７９  ［Ｍ＋Ｎａ］＋，  ｆｏｕｎｄ  ７０８．４０８２；
【０２６９】
実施例１２
シクロ（Ｐｈｅ−Ｇｌｕ−ＧＡｚ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ）（ＧＡｚ＝アゼチジン修飾グリシン）の固相合成
【化７０】
2021519347.tif 000088
この実施例では、ペンタペプチドは、例示した、側鎖およびＢｏｃ脱保護を用いた、固相ペプチド合成によって作成される。
【０２７０】
Ｆｍｏｃ−ＧＡｚ（Ｂｏｃ）−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−ＯＣｕｍｙｌの調製：
【化７１】
2021519347.tif 000089
ＮＯ２−ＧＡｚ（Ｂｏｃ）−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−ＯＣｕｍｙｌ（２．００グラム，３．９４ミリモル，１．０当量）のＴＨＦ（４０ミリリットル）に、Ｆｍｏｃ−ＯＳｕ（２．６７グラム、７．８８ミリモル、２．０当量）、ＮａＨＣＯ３（１．３２グラム、１５．７６ミリモル、４．０当量）およびラネーＮｉ（Ｈ２Ｏスラリー、８ミリリットル）を加えた。
溶液を、窒素雰囲気下に置き、排気して、水素（風船）を満たした。
反応混合物を、室温で４．０時間激しく撹拌した。
次に、混合物を、ＥｔＯＡｃで溶出するセライトのプラグを通して濾過し、真空で濃縮し、濾液をＥｔＯＡｃ（５０ミリリットル）で希釈し、飽和Ｎａ２ＣＯ３（３×５０ミリリットル）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、そして減圧下で濃縮された。
Ｆｍｏｃ−ＧＡｚ（Ｂｏｃ）−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−ＯＣｕｍｙｌは、カラムクロマトグラフィー（ＳＩＯ２、ＣＨ２Ｃｌ２／酢酸エチル＝１９：１）による精製後に、白色泡状物として、得た（１．４３グラム、２．０４ミリモル、５２％）。
Ｒｆ  （ＣＨ２Ｃｌ２／ＥｔＯＡｃ  １９：１）  ０．２３；  
ｍｐ  ６７−６９  ℃；
１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）  δ  ７．７６  （ｄ，  Ｊ  ＝  ７．５  Ｈｚ，  ２Ｈ，  ＡｒＨ），  ７．５９  （ｄ，  Ｊ  ＝  ４．５  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＡｒＨ），  ７．５８  （ｄ，  Ｊ  ＝  ４．４  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＡｒＨ），  ７．４５−７．３８  （ｍ，  ４Ｈ，  ＡｒＨ），  ７．３７−７．２９  （ｍ，  ４Ｈ，  ＡｒＨ），  ７．２８−７．２０  （ｍ，  １Ｈ，  ＡｒＨ），  ５．４２  （ｔ，  Ｊ  ＝  ５．０  Ｈｚ，  １Ｈ，  Ｆｍｏｃ  ＮＨ），  ４．４８−４．２９  （ｍ，  ２Ｈ，  ＣＨ２  Ｆｍｏｃ），  ４．１９  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．０  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨ  Ｆｍｏｃ），  ３．８２−３．７３  （ｍ，  １Ｈ，  ＣＨα−Ｔｈｒ），  ３．６８−３．５１  （ｍ，  ２Ｈ，  ２  ×  ＮＣＨ２−Ａｚ，  ＣＨＨＧＡｚ），  ３．３１−２．９８  （ｍ，  ２Ｈ，  ＣＨβ−Ｔｈｒ，  ＣＨＨＧＡｚ），  ２．０８  （ｓ，  １Ｈ，  ＮＨ），  １．８４  （ｓ，  ３Ｈ，  ＣＨ３−Ｃｕｍｙｌ），  １．８０  （ｓ，  ３Ｈ，  ＣＨ３−Ｃｕｍｙｌ），  １．４３  （ｓ，  ９Ｈ，  ＣＨ３  Ｂｏｃ），  １．２０  （ｓ，  ９Ｈ，  ＣＨ３ ｔＢｕ），  １．１６  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．１  Ｈｚ，  ３Ｈ，  ＣＨ３γ−Ｔｈｒ）；  
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１２６  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）  δ  １７３．６  （Ｃ＝Ｏ），  １５６．８  （Ｃ＝Ｏ，  Ｂｏｃ），  １５６．３  （Ｃ＝Ｏ，  Ｆｍｏｃ），  １４４．８  （Ｃ），  １４４．０  （Ｃ），  １４１．３  （Ｃ），  １２８．３  （ＣＨ），  １２７．７  （ＣＨ），  １２７．４  （ＣＨ），  １２７．０  （ＣＨ），  １２５．２  （ＣＨ），  １２４．７  （ＣＨ），  １２０．０  （ＣＨ），  ８３．２  （Ｃ，  Ｃｕｍｙｌ），  ７９．６  （Ｃ，  Ｂｏｃ），  ７４．３  （Ｃ，  ｔＢｕ），  ６９．１  （ＣＨ，  α−Ｔｈｒ），  ６６．８  （ＣＨ２，  Ｆｍｏｃ）  ６１．８  （ＣＨ，  β−Ｔｈｒ），  ５４．６  （２  ×  ＮＣＨ２），  ４７．３  （ＣＨ  Ｆｍｏｃ），  ４５．５  （ＣＨ２，  ＧＡｚ），  ２８．６  （ＣＨ３，  Ｂｏｃ），  ２８．４  （ＣＨ３，  ｔＢｕ），  ２７．５  （ＣＨ３，  Ｃｕｍｙｌ），  ２０．０  （ＣＨ３，  γ−Ｔｈｒ）．
注：１つのＣＨ３と  Ｃｕｍｙｌは重複している。
νｍａｘ（ｎｅａｔ）＝  ２９７４，  １６９９，  １３６４，  １１００，  ７５８  ｃｍ-１；  
ＭＳ  （ＥＳＩ＋）  ｍ／ｚ  ７００  ［Ｍ＋Ｈ］＋，  ７２２  ［Ｍ＋Ｎａ］＋；    
ＨＲＭＳ  （ＥＳＩ＋）  ｃａｌｃｄ．  ｆｏｒ  Ｃ４１Ｈ５３Ｎ３ＮａＯ７  ７２２．３７７６  ［Ｍ＋Ｎａ］＋，  ｆｏｕｎｄ  ７２２．３７８２．
【０２７１】
Ｈ−Ｐｈｅ−Ｇｌｕ（ｔＢｕ）−ＧＡｚ（Ｂｏｃ）−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ｇｌｙ−ＯＨの調製：
【化７２】
2021519347.tif 000090
Ｆｍｏｃ−ＧＡｚ（Ｂｏｃ）−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−ＯＣｕｍｙｌ（４２０ミリグラム，０．６０ミリモル，４．０当量）を、クミルエステルの完全な脱保護が、ＥＳＩ−ＭＳによって観察されるまで、２％ＴＦＡのＣＨ２Ｃｌ２（１２ミリリットル）溶液で、室温で攪拌した。
溶媒を減圧下で除去し、得られた残留物を繰り返し、ＣＨ２Ｃｌ２（３×２０ミリリットル）に溶解し、減圧下で濃縮した。
粗製のＦｍｏｃ−ＧＡｚ（Ｂｏｃ）−Ｔｈｒ（tＢｕ）−ＯＨをさらに精製せずに、カップリングするために使用した。
Ｈ−Ｇｌｙ−２−クロロトリチル樹脂（樹脂負荷０．５２ミリモル／グラム、２８８ミリグラム、０．１５ミリモル、１．０当量）を、１０ミリリットルの反応容器に入れ、樹脂をＤＭＦ（２．０ミリリットル）で３０分間予備膨潤させた。
ＦｍｏｃＧＡｚ（Ｂｏｃ）−Ｔｈｒ（tＢｕ）−ＯＨを、ＤＭＦ（３．０ミリリットル）に溶解した。
ＨＡＴＵ（２２８ミリグラム、０．６ミリモル、４．０当量）およびＤＩＰＥＡ（２０９マイクロリットル、１．２ミリモル、８．０当量）を添加し、この溶液を樹脂に直接添加した。
カップリング反応を、撹拌しながら、室温で２時間進行させた。
レジンをろ過し、ＤＭＦ（５×２．０ミリリットル）で洗浄し、ＴＮＢＳテストが陽性の場合は、カップリングステップを繰り返した。
Ｆｍｏｃ基は、ＤＭＦ（４．０ミリリットル）中の２０％ピペリジンで、室温で２０分間、除去した。
樹脂を、ＤＭＦ（５×２．０ミリリットル）で洗浄した後、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ｔＢｕ）−ＯＨ（３１９ミリグラム、０．７５ミリモル、５．０当量）を、ＨＡＴＵ（２８５ミリグラム、０．７５ミリモル、５．０当量）、ＤＩＰＥＡ（２６１マイクロリットル、１．５０ミリモル、１０当量）のＤＭＦ（３．０ミリリットル）溶液と、室温で１時間カップリングさせた。
Ｆｍｏｃ基を除去する前に、樹脂をＤＭＦ（５×２．０ミリリットル）で洗浄し、Ｆｍｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨ（２９０ミリグラム、０．７５ミリモル、５．０当量）とカップリングさせた後、前述のようにＦｍｏｃ脱保護を行った。
【０２７２】
次に、ペンタペプチドを、ＣＨ２Ｃｌ２（１：４、３．０ミリリットル）中のＴＦＥを用いて、室温で１時間、樹脂から切断しました。
これを２回繰り返し、合わせた開裂溶液を減圧下で蒸発乾固させて、さらなる精製を必要としないガラス状の白色固体（７４．３ミリグラム、０．１０ミリモル、６８％）として表題化合物を得た。
ｍｐ  １１８−１２０  ℃；  
１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＭｅＯＤ）  δ  ７．４２−７．２６  （ｍ，  ５Ｈ，  ＡｒＨ），  ４．３１  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ８．６，  ５．５  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨα−Ｇｌｕ），  ４．１９  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．４  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨα−Ｐｈｅ），  ３．９８−３．５７  （ｍ，  ８Ｈ，  ＣＨα−Ｔｈｒ，  ２  ×  ＮＣＨ２  ＧＡｚ，  ＣＨ２  Ｇｌｙ，  ＣＨＨ  ＧＡｚ），  ３．２０  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １３．６，  ７．４  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨＨβ−Ｐｈｅ），  ３．１２−２．９６  （ｍ，  ３Ｈ，  ＣＨＨβ−Ｐｈｅ，  ＣＨＨ  ＧＡｚ，  ＣＨβ−Ｔｈｒ），  ２．３４−２．１５  （ｍ，  ２Ｈ，  ＣＨ２γ−Ｇｌｕ），  ２．１１−２．０４  （ｍ，  １Ｈ，  ＣＨＨβ−Ｇｌｕ），  １．９９−１．８７  （ｍ，  １Ｈ，  ＣＨＨβ−Ｇｌｕ），  １．４８−１．４３  （ｍ，  １８Ｈ，  ＣＨ３  Ｂｏｃ，  ＣＨ３  ＣＯ２ｔＢｕ），  １．２５−１．１７  （ｍ，  １２Ｈ，  ＣＨ３ ｔＢｕ，  ＣＨ３γ−Ｔｈｒ）；  
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１２６  ＭＨｚ，  ＭｅＯＤ）  δ  １７５．９  （Ｃ＝Ｏ），  １７５．９  （Ｃ＝Ｏ），  １７４．０  （Ｃ＝Ｏ），  １７３．７  （Ｃ＝Ｏ），  １７０．１  （Ｃ＝Ｏ），  １５８．３  （Ｃ＝Ｏ  Ｂｏｃ），  １３６．０  （Ｃ），  １３０．６  （ＣＨ），  １３０．１  （ＣＨ），  １２８．７  （ＣＨ），  ８１．７  （Ｃ，  ｔＢｕ），  ８１．２  （Ｃ，  ｔＢｕ），  ７５．４  （Ｃ，  Ｂｏｃ），  ６９．９  （ＣＨ，  α−Ｔｈｒ），  ６４．３  （ＣＨ，  β−Ｔｈｒ），  ５７．４  （２  ×  ＮＣＨ２），  ５６．０  （ＣＨ，  α−Ｐｈｅ），  ５５．０  （ＣＨ，  α−Ｇｌｕ），  ４５．７  （ＣＨ２，  Ｇｌｙ），  ４４．１  （ＣＨ２，  ＧＡｚ），  ３８．７  （ＣＨ２，  β−Ｐｈｅ），  ３２．６  （ＣＨ２，  γ−Ｇｌｕ），  ２９．０  （ＣＨ３，  ＣＯ２ｔＢｕ），  ２８．６  （ＣＨ３，  Ｂｏｃ），  ２８．４  （ＣＨ３，  ｔＢｕ），  ２８．１  （ＣＨ２，  β−Ｇｌｕ），  ２１．４  （ＣＨ３，  γ−Ｔｈｒ）；  
νｍａｘ（ｎｅａｔ）  ＝  ２９７１，  １６５３，  １３９１，  １１５１  ｃｍ-１；  
ＭＳ  （ＥＳＩ＋）  ｍ／ｚ  ７４９  ［Ｍ＋Ｈ］＋，  ７７１  ［Ｍ＋Ｎａ］＋；  
ＨＲＭＳ  （ＥＳＩ＋）  ｃａｌｃｄ．  ｆｏｒ  Ｃ３７Ｈ６１Ｎ６Ｏ１０  ７４９．４４４４  ［Ｍ＋Ｎａ］＋，  ｆｏｕｎｄ  ７４９．４４３８．
【０２７３】
シクロ（Ｐｈｅ−Ｇｌｕ（ｔＢｕ）−ＧＡｚ（Ｂｏｃ）−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ｇｌｙ）の調製：
【化７３】
2021519347.tif 000091
ＤＭＦ（１６．２ミリリットル、０．００５  Ｍ）中のＨ−Ｐｈｅ−Ｇｌｕ（ｔＢｕ）−ＧＡｚ（Ｂｏｃ）−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ｇｌｙ−ＯＨ（６０．６ミリグラム、８１マイクロモル、１．０当量）の溶液にＤＥＰＢＴ（４８．４ミリグラム、０．１６ミリモル、２．０当量）およびＤＩＰＥＡ（２８マイクロリットル、０．１６ミリモル、２．０当量）および反応混合物を室温で６８時間撹拌した。
溶媒を減圧下、６０℃で３０分かけて除去し、残留物を真空で乾燥させた。
残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＣＨ２Ｃｌ２／メタノール＝４９：１→１９：１）で精製して、環状ヘキサペプチドを白色ガラス状固体（４３．２ミリグラム、５９マイクロモル、７３％）として得た。
Ｒｆ  （ＣＨ２Ｃｌ２／メタノール  １９：１）  ０．２９；  
ｍｐ  １２５−１２７  ℃；
１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＭｅＯＤ）  δ  ７．３６−７．２０  （ｍ，  ５Ｈ，  ＡｒＨ），  ４．４９  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ８．９，  ５．２  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨα−Ｇｌｕ），  ４．４５  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １０．０，  ３．９  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨα−Ｐｈｅ），  ４．００−３．９０  （ｍ，  ２Ｈ，  ＣＨＨＧｌｙ，  ＮＣＨＨ  ＧＡｚ），  ３．８３−３．７４  （ｍ，  ３Ｈ，  ＮＣＨＨ  ＧＡｚ，  ＣＨＨ  ＧＡｚ，  ＣＨα−Ｔｈｒ），  ３．６６  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．３  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＮＣＨＨＧＡｚ），  ３．６０  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．９  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＮＣＨＨ  ＧＡｚ），  ３．５２  （ｄ，  Ｊ  ＝  １４．６  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨＨＧｌｙ），  ３．２９  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １４．４，  ４．１  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨＨβ−Ｐｈｅ），  ３．１５  （ｄ，  Ｊ  ＝  ４．３  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨβ−Ｔｈｒ），  ３．０２−２．９４  （ｍ，  ２Ｈ，  ＣＨＨ  ＧＡｚ，  ＣＨＨβ−Ｐｈｅ），  ２．３４  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．５  Ｈｚ，  ２Ｈ，  ＣＨ２γ−Ｇｌｕ），  ２．２５−２．１４  （ｍ，  １Ｈ，  ＣＨＨβ−Ｇｌｕ），  ２．００−１．９１  （ｍ，  １Ｈ，  ＣＨＨβ−Ｇｌｕ），  １．５１−１．４４  （ｍ，  １８Ｈ，  ＣＨ３  Ｂｏｃ，  ＣＨ３  ＣＯ２ｔＢｕ），  １．２３  （ｓ，  ９Ｈ，  ＣＨ３ ｔＢｕ），  １．１０  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．２  Ｈｚ，  ３Ｈ，  ＣＨ３γ−Ｔｈｒ）；  
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１２６  ＭＨｚ，  ＭｅＯＤ）  δ  １７７．０  （Ｃ＝Ｏ），  １７４．１  （Ｃ＝Ｏ），  １７３．８２  （Ｃ＝Ｏ），  １７３．７９  （Ｃ＝Ｏ），  １５８．３  （Ｃ＝Ｏ  Ｂｏｃ），  １３８．４  （Ｃ），  １３０．０  （ＣＨ），  １２９．７  （ＣＨ），  １２８．０  （ＣＨ），  ８１．８  （Ｃ，  ｔＢｕ），  ８１．１  （Ｃ，  ｔＢｕ），  ７５．４  （Ｃ，  Ｂｏｃ），  ７１．２  （ＣＨ，  α−Ｔｈｒ），  ６２．５  （ＣＨ，  β−Ｔｈｒ），  ５８．５  （２  ×  ＮＣＨ２），  ５７．１  （ＣＨ，  α−Ｐｈｅ），  ５４．０  （ＣＨ，  α−Ｇｌｕ），  ４６．３  （ＣＨ２  ＧＡｚ），  ４４．８  （ＣＨ２  Ｇｌｙ），  ３７．７  （ＣＨ２，  β−Ｐｈｅ），  ３２．８  （ＣＨ２，  γ−Ｇｌｕ），  ２８．６４  （ＣＨ３，  ＣＯ２ｔＢｕ），  ２８．５８  （ＣＨ３，  Ｂｏｃ），  ２８．４  （ＣＨ３，  ｔＢｕ），  ２８．２  （ＣＨ２，  β−Ｇｌｕ），  １９．１  （ＣＨ３，  γ−Ｔｈｒ）．
注：１つのＣ＝Ｏは重なっていて見えない。
νｍａｘ（ｎｅａｔ）＝  ２９７４，  １６４９，  １５３２，  １３６６，  １１５２  ｃｍ-１；  
ＭＳ  （ＥＳＩ＋）  ｍ／ｚ  ７３１  ［Ｍ＋Ｈ］＋，  ７５３  ［Ｍ＋Ｎａ］＋；  
ＨＲＭＳ  （ＥＳＩ＋）  ｃａｌｃｄ．  ｆｏｒ  Ｃ３７Ｈ５８Ｎ６ＮａＯ９  ７５３．４１５７  ［Ｍ＋Ｎａ］＋，  ｆｏｕｎｄ  ７５３．４１６２．
【０２７４】
シクロ（Ｐｈｅ−Ｇｌｕ−ＧＡｚ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ）の調製：
シクロ（Ｐｈｅ−Ｇｌｕ（ｔＢｕ）−ＧＡｚ（Ｂｏｃ）−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ｇｌｙ）（２９ミリグラム、４０マイクロモル、１．０当量）のＣＨ２Ｃｌ２（１ミリリットル）溶液に、ＴＦＡ（１ミリリットル）を加えた。
溶液を室温で１時間撹拌した。溶媒を真空で除去して、表題化合物を、ＴＦＡ塩としての白色ガラス状固体として定量的収率で明らかにした。これは、さらなる精製を必要としなかった。
内部標準としてＴＦＥを使用した１Ｈおよび１９Ｆ  ＮＭＲにより、１当量が確認された。
ＴＦＡ塩；
ｍｐ  ８１−８３  ℃；
１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＭｅＯＤ）  δ  ７．３７−７．２９  （ｍ，  ５Ｈ，  ＡｒＨ），  ４．５０  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ９．７，  ４．３  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨα−Ｇｌｕ），  ４．３９  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １０．０，  ４．４  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨα−Ｐｈｅ），  ４．２６  （ｄ，  Ｊ  ＝  １０．９  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＮＣＨＨ  ＧＡｚ），  ４．０３  （ｄ，  Ｊ  ＝  １４．９  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨＨ  Ｇｌｙ），  ３．９１  （ｄ，  Ｊ  ＝  １１．０  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＮＣＨＨ  ＧＡｚ），  ３．７８  （ｄ，  Ｊ  ＝  １０．３  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＮＣＨＨ  ＧＡｚ），  ３．７４−３．６３  （ｍ，  ３Ｈ，  ＣＨＨ  ＧＡｚ，  ＮＣＨＨ  ＧＡｚ，  ＣＨα−Ｔｈｒ），  ３．５４  （ｄ，  Ｊ  ＝  １４．９  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨＨ  Ｇｌｙ），  ３．２５  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １４．４，  ４．４  Ｈｚ，  １Ｈ，  ＣＨＨβ−Ｐｈｅ），  ３．１０−２．９８  （ｍ，  ３Ｈ，  ＣＨＨ  ＧＡｚ，  ＣＨＨβ−Ｐｈｅ，  ＣＨβ−Ｔｈｒ），  ２．４３−２．２６  （ｍ，  ３Ｈ，  ＣＨ２γ−Ｇｌｕ，  ＣＨＨβ−Ｇｌｕ），  ２．０５−１．９２  （ｍ，  １Ｈ，  ＣＨＨβ−Ｇｌｕ），  １．２０  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．３  Ｈｚ，  ３Ｈ，  ＣＨ３γ−Ｔｈｒ）；  
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１２６  ＭＨｚ，  ＭｅＯＤ）  δ  １７６．５  （Ｃ＝Ｏ），  １７６．４  （Ｃ＝Ｏ），  １７５．１  （Ｃ＝Ｏ），  １７４．４  （Ｃ＝Ｏ），  １７３．９  （Ｃ＝Ｏ），  １３８．１  （Ｃ），  １３０．０  （ＣＨ），  １２９．７  （ＣＨ），  １２８．１  （ＣＨ），  ７０．４  （ＣＨ，  α−Ｔｈｒ），  ６３．３  （ＣＨ，  β−Ｔｈｒ），  ６０．３  （Ｃ，  Ａｚ），  ６０．０  （ＮＣＨ２），  ５９．１  （ＣＨ，  α−Ｐｈｅ），  ５３．５  （ＮＣＨ２），  ５３．５  （ＣＨ，  α−Ｇｌｕ），  ４５．９  （ＣＨ２  ＧＡｚ），  ４４．４  （ＣＨ２  Ｇｌｙ），  ３７．４  （ＣＨ２，  β−Ｐｈｅ），  ３１．３  （ＣＨ２，  γ−Ｇｌｕ），  ２７．８  （ＣＨ２，  β−Ｇｌｕ），  １９．２  （ＣＨ３，  γ−Ｔｈｒ）；  
νｍａｘ（ｎｅａｔ）＝  ３２７３，  ３０３３，  ２９２２，  １６４９，  １５３８，  １１７７  ｃｍ-１；  
ＭＳ  （ＥＳＩ＋）  ｍ／ｚ  ５１９  ［Ｍ＋Ｈ］＋，  ５４１  ［Ｍ＋Ｎａ］＋；  
ＨＲＭＳ  （ＥＳＩ＋）  ｃａｌｃｄ．  ｆｏｒ  Ｃ２４Ｈ３５Ｎ６Ｏ７  ５１９．２５６２  ［Ｍ＋Ｈ］＋，  ｆｏｕｎｄ  ５１９．２５５５．
【０２７５】
実施例１３
他のアゼチジン含有ペプチド大環状化合物の液相合成
以下の保護された環状ペプチドは、実施例１０および１１のものと類似の方法を使用する液相ペプチド合成によって調製された（構造の下の数字は収量を示す。）。
５０％ＴＦＡ／ＤＣＭを１時間使用して脱保護すると、対応する脱保護された類似体が得られた。
【化７４】
2021519347.tif 000092
【０２７６】
実施例１４
他のアゼチジン含有大環状化合物の固相合成
以下の環状ペプチドは、実施例１２と同様の方法を使用してＳＰＰＳによって調製された。
【化７５】
2021519347.tif 000093
ＬＰ＝樹脂からの直鎖状前駆体の収率
ＣＰ＝環化後の環状ペプチドの収率
【０２７７】
実施例１５
オキセタンおよびアゼチジンターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）エレメントを含む環状ペプチドの相対的安定性
酸（ＴＦＡ）中の以下のオキセタンおよびアゼチジン含有化合物の相対的安定性を決定するために実験を行った。
【化７６】
2021519347.tif 000094
各化合物を撹拌しながら７０％ＴＦＡに加えた。
２４時間後、得られた生成物を、１Ｈ  ＮＭＲおよびＬＣ−ＭＳによって分析した。
ＬＣ−ＭＳトレースを図１０に示す。
開環したアゼチジン生成物はＬＣ−ＭＳで見ることができるが、大量には存在せず、１Ｈ  ＮＭＲでは観察されなかった。
これは、ＬＣ−ＭＳで確認でき、明らかに高濃度で存在する開環オキセタンとは対照的である。それは、また、１Ｈ  ＮＭＲでも観察された。
これは、使用した強制条件下で、アゼチジン環を含む大環状化合物がオキセタン環を含む大環状化合物よりも安定していることを示す。
【０２７８】
実施例１６
オキセタンおよびアゼチジン含有ペプチドの大環状化の収率の比較
【化７７】
2021519347.tif 000095
【０２７９】
大環状化収率は、非修飾化合物１で最も低い。
オキセタンとアゼチジンを含む化合物２と３の両方で、より高い収率が得られる。
この実施例では、大環状化合物の最高収率は、アゼチジンターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）エレメントを含むペプチドで得られる。
【０２８０】
概要
我々は、ペプチドバックボーンへのカルボニルバイオアイソステリックターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）残基の導入が、困難なペプチド大環状化を改善するための新しい方法を提供することを確立した。
基質は簡単に作成でき、環化はさまざまなリングサイズで機能する。
これは、ｈｅａｄ−ｔｏ−ｔａｉｌ，ｈｅａｄ−ｔｏ−ｓｉｄｅ−ｃｈａｉｎ，ｓｉｄｅ−ｃｈａｉｎ−ｔｏ−ｔａｉｌ，および、ｓｉｄｅ−ｃｈａｉｎ−ｔｏ−ｓｉｄｅ−ｃｈａｉｎの環化に有益であり、形成されている結合に関して、ターン誘導（ｔｕｒｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ）エレメントの位置の変動を許容する。
これらの製品は、アミノ酸側鎖を脱保護するために必要な過酷な酸性条件に適合し、そして、ＣＢＭＣＰは従来の環状ペプチドのバイオアイソスターとしての明確な可能性を秘めている。
【０２８１】
参照文献：
1.Ｚｏｒｚｉ，Ａ．；  Ｄｅｙｌｅ，  Ｋ．；  Ｈｅｉｎｉｓ，  Ｃ．  Ｃｕｒｒ．  Ｏｐｉｎ．  Ｃｈｅｍ．  Ｂｉｏｌ．  ２０１７，  ３８，  ２４-２９．  
2.（ａ）  Ｎｉｅｌｓｅｎ，  Ｄ．  Ｓ．；  Ｓｈｅｐｈｅｒｄ，  Ｎ．  Ｅ．；  Ｘｕ，  Ｗ．；  Ｌｕｃｋｅ，  Ａ．  Ｊ．；  Ｓｔｏｅｒｍｅｒ，  Ｍ．  Ｊ．；  Ｆａｉｒｌｉｅ，  Ｄ．  Ｐ．  Ｃｈｅｍ．  Ｒｅｖ．  ２０１７，  １１７，  ８０９４-８１２８．  （ｂ）  Ｂｏｃｋｕｓ，  Ａ．  Ｔ．；  ＭｃＥｗｅｎ，  Ｃ．  Ｍ．；  Ｌｏｋｅｙ，  Ｒ．  Ｓ．  Ｃｕｒｒ．  Ｔｏｐ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  ２０１３，  １３，  ８２１-８３６．  
3.（ａ）  Ｄｏｕｇｈｅｒｔｙ，  Ｐ．  Ｇ．；  Ｑｉａｎ，  Ｚ．；  Ｐｅｉ，  Ｄ．  Ｂｉｏｃｈｅｍ．  Ｊ．  ２０１７，  ４７４，  １１０９-１１２５．  （ｂ）  Ｃａｒｄｏｔｅ，  Ｔ．  Ａ．  Ｆ．；  Ｃｉｕｌｌｉ，  Ａ．  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  ２０１６，  １１，  ７８７-７９４．
4.Ｆｏｒ  ｒｅｖｉｅｗｓ，  ｓｅｅ：  （ａ）  Ｐａｓｓｉｏｕｒａ，  Ｔ．；  Ｓｕｇａ，  Ｈ．  Ｃｈｅｍ．  Ｃｏｍｍｕｎ．  ２０１７，  ５３，  １９３１．  （ｂ）  Ｄｅ  Ｌｅｏｎ  Ｒｏｄｒｉｇｕｅｚ，  Ｌ．  Ｍ．；  Ｗｅｉｄｋａｍｐ，  Ａ．  Ｊ．；  Ｂｒｉｍｂｌｅ，  Ｍ．  Ａ．  Ｏｒｇ．  Ｂｉｏｍｏｌ．  Ｃｈｅｍ．  ２０１５，  １３，  ６９０６-６９２１．  （ｃ）  Ｍａｒ−ｔi−Ｃｅｎｔｅｌｌｅｓ，  Ｖ．；  Ｐａｎｄｅｙ，  Ｍ．  Ｄ．；  Ｂｕｒｇｕｅｔｅ，  Ｍ．  Ｉ．；  Ｌｕｉｓ，  Ｓ．  Ｖ．  Ｃｈｅｍ．  Ｒｅｖ．  ２０１５，  １１５，  ８７３６-８８３４．  （ｄ）  Ｙｕｄｉｎ，  Ａ．  Ｋ．  Ｃｈｅｍ．  Ｓｃｉ．  ２０１５，  ６，  ３０-４９．  （ｅ）Ｗｈｉｔｅ，  Ｃ．  Ｊ．；  Ｙｕｄｉｎ，  Ａ．  Ｋ．  Ｎａｔｕｒｅ  Ｃｈｅｍ．  ２０１１，  ３，  ５０９-５２４．
5.（ａ）  Ｈｕｂｅｒｔ，  Ｊ．  Ｇ．；  Ｓｔｅｐｅｋ，  Ｉ．  Ａ．；  Ｎｏｄａ，  Ｈ．；  Ｂｏｄｅ，  Ｊ．  Ｗ．  Ｃｈｅｍ．  Ｓｃｉ．  ２０１８，  ９，  ２１５９¬-２１６７．  （ｂ）  Ｍａｌｉｎｓ，  Ｌ．  Ｒ．；  ｄｅＧｒｕｙｔｅｒ，  Ｊ．  Ｎ．；  Ｒｏｂ−ｂｉｎｓ，  Ｋ．  Ｊ．；  Ｓｃｏｌａ，  Ｐ．  Ｍ．；  Ｅａｓｔｇａｔｅ，  Ｍ．  Ｄ．；  Ｇｈａｄｉｒｉ，  Ｍ．  Ｒ．；  Ｂａｒａｎ，  Ｐ．  Ｓ．  Ｊ．  Ａｍ．  Ｃｈｅｍ．  Ｓｏｃ．  ２０１７，  １３９，  ５２３３-５２４１．  （ｃ）  Ｊｏｈｎｓｏｎ，  Ａ．  Ｍ．；  Ａｎ−ｓｌｙｎ，  Ｅ．  Ｖ．  Ｏｒｇ．  Ｌｅｔｔ．  ２０１７，  １９，  １６５４-１６５７．  （ｄ）  Ｌｅ，  Ｄ．  Ｎ．；  Ｒｉｅｄｅｌ，  Ｊ．；  Ｋｏｚｌｙｕｋ，  Ｎ．；  Ｍａｒｔｉｎ，  Ｒ．  Ｗ．；  Ｄｏｎｇ，  Ｖ．  Ｍ．  Ｏｒｇ．  Ｌｅｔｔ．  ２０１７，  １９，  １１４-１１７．  （ｅ）  ＭｃＣａｒｖｅｒ，  Ｓ．  Ｊ．；  Ｑｉａｏ，  Ｊ．  Ｘ．；  Ｃａｒｐｅｎｔｅｒ，  Ｊ．；  Ｂｏｒｚｉｌｌｅｒｉ，  Ｒ．  Ｍ．；  Ｐｏｓｓ，  Ｍ．  Ａ．；  Ｅａｓｔｇａｔｅ，  Ｍ．  Ｄ．；  Ｍｉｌｌｅｒ，  Ｍ．  Ｍ．；  ＭａｃＭｉｌｌａｎ，  Ｄ．  Ｗ．  Ｃ．  Ａｎｇｅｗ．  Ｃｈｅｍ．  Ｉｎｔ．  Ｅｄ．  ２０１７，  ５６，  ７２８-７３２．  （ｆ）  Ｐｕｅｎｔｅｓ，  Ａ．  Ｒ．；  Ｍｏｒｅ−ｊoｎ，  Ｍ．  Ｃ．；  Ｒｉｖｅｒａ，  Ｄ．  Ｇ．；  Ｗｅｓｓｊｏｈａｎｎ，  Ｌ．  Ａ．  Ｏｒｇ．  Ｌｅｔｔ．  ２０１７，  １９，  ４０２２-４０２５．  （ｇ）  Ｔａｎｇ，  Ｊ．；  Ｈｅ，  Ｙ．；  Ｃｈｅｎ，  Ｈ．；  Ｓｈｅｎｇ，  Ｗ．；  Ｗａｎｇ，  Ｈ．  Ｃｈｅｍ．  Ｓｃｉ．  ２０１７，  ８，  ４５６５-４５７０．  （ｈ）  Ｒｏｊａｓ，  Ａ．  Ｊ．；  Ｚｈａｎｇ，  Ｃ．；  Ｖｉｎｏｇｒａｄｏｖａ，  Ｅ．  Ｖ．；  Ｂｕｃｈｗａｌｄ，  Ｎ．  Ｈ．；  Ｒｅｉｌｌｙ，  Ｊ．；  Ｐｅｎｔｅｌｕｔｅ，  Ｂ．  Ｌ．；  Ｂｕｃｈｗａｌｄ，  Ｓ．  Ｌ．  Ｃｈｅｍ．  Ｓｃｉ．  ２０１７，  ８，  ４２５７-４５６３．  （ｉ）  Ｓｔｅｐｈｅｎｓ，  Ｔ．  Ｃ．；  Ｌｏｄｉ，  Ｍ．；  Ｓｔｅｅｒ，  Ａ．  Ｍ．；  Ｌｉｎ，  Ｙ．；  Ｇｉｌｌ，  Ｍ．  Ｔ．；  Ｕｎｓｗｏｒｔｈ，  Ｗ．  Ｐ．  Ｃｈｅｍ．  Ｅｕｒ．  Ｊ．  ２０１７，  ２３，  １３３１４-１３３１８．  （ｊ）  Ｆｒｏｓｔ，  Ｊ．  Ｒ．；  Ｓｃｕｌｌｙ，  Ｃ．  Ｃ．  Ｇ．；  Ｙｕｄｉｎ，  Ａ．  Ｋ．  Ｎａｔｕｒｅ  Ｃｈｅｍ．  ２０１６，  ８，  １１０５-１１１１．
6.（ａ）  Ｓｋｒｏｐｅｔａ，  Ｄ．；  Ｊｏｌｌｉｆｆｅ，  Ｋ．  Ａ．；  Ｔｕｒｎｅｒ，  Ｐ．  Ｊ．  Ｏｒｇ．  Ｃｈｅｍ．  ２００４，  ６９，  ８８０４-８８０９．  （ｂ）  Ｆａｉｒｗｅａｔｈｅｒ，  Ｋ．  Ａ．；  Ｓａｙｙａｄｉ，  Ｎ．；  Ｌｕｃｋ，  Ｉ．  Ｊ．；  Ｃｌｅｇｇ，  Ｊ．  Ｋ．；  Ｊｏｌｌｉｆｆｅ，  Ｋ．  Ａ．  Ｏｒｇ．  Ｌｅｔｔ．  ２０１０，  １２，  ３１３６-３１３９．  
7.Ｐｏｗｅｌｌ，  Ｎ．  Ｈ．；  Ｃｌａｒｋｓｏｎ，  Ｇ．  Ｊ．；  Ｎｏｔｍａｎ，  Ｒ．；  Ｒａｕｂｏ，  Ｐ．；  Ｍａｒｔｉｎ，  Ｎ．  Ｇ．；  Ｓｈｉｐｍａｎ，  Ｍ．  Ｃｈｅｍ．  Ｃｏｍｍｕｎ．  ２０１４，  ５０，  ８７９７-８８００．  
8.（ａ）  Ｂｕｌｌ，  Ｊ．  Ａ．；  Ｃｒｏｆｔ，  Ｒ．  Ａ．；  Ｄａｖｉｓ，  Ｏ．  Ａ．；  Ｄｏｒａｎ，  Ｒ．；  Ｍｏｒｇａｎ，  Ｋ．  Ｆ．  Ｃｈｅｍ．  Ｒｅｖ．  ２０１６，  １１６，  １２１５０-１２２３３．  （ｂ）  Ｗｕｉｔｓｃｈｉｋ，  Ｇ．；  Ｃａｒ−ｒｅｉｒａ，  Ｅ．  Ｍ．；  Ｗａｇｎｅｒ，  Ｂ．；  Ｆｉｓｃｈｅｒ，  Ｈ．；  Ｐａｒｒｉｌｌａ，  Ｉ．；  Ｓｃｈｕｌｅｒ，  Ｆ．；  Ｒｏｇｅｒ−Ｅｖａｎｓ，  Ｍ．；  Ｍuｌｌｅｒ，  Ｋ．  Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  ２０１０，  ５３，  ３２２７-３２４６．
9.（ａ）  Ｂｏｕｔｕｒｅｉｒａ，  Ｏ．；  Ｍａｒｔiｎｅｚ−Ｓaｅｚ，  Ｎ．；  Ｂｒｉｎｄｌｅ，  Ｋ．  Ｍ．；  Ｎｅｖｅｓ，  Ａ．  Ａ．；  Ｃｏｒｚａｎａ，  Ｆ．；  Ｂｅｒｎａｒｄｅｓ，  Ｇ．  Ｊ．  Ｌ．  Ｃｈｅｍ．  Ｅｕｒ．  Ｊ．  ２０１７，  ２３，  ６４８３-６４８９．  （ｂ）  Ｍａｒｔiｎｅｚ−Ｓaｅｚ，  Ｎ．；  Ｓｕｎ，  Ｓ．；  Ｏｌｄｒｉｎｉ，  Ｄ．；  Ｓｏｒｍａｎｎｉ，  Ｐ．；  Ｂｏｕｔｕｒｅｉｒａ，  Ｏ．；  Ｃａｒｂｏｎｉ，  Ｆ．；  Ｃｏｍｐａnoｎ，  Ｉ．；  Ｄｅｅｒｙ，  Ｍ．  Ｊ．；  Ｖｅｎｄｒｕｓｃｏｌｏ，  Ｍ．；  Ｃｏｒｚａｎａ，  Ｆ．；  Ａｄａｍｏ，  Ｒ．；  Ｂｅｒｎａｒｄｅｓ，  Ｇ．  Ｊ．  Ｌ．  Ａｎ−ｇｅｗ．  Ｃｈｅｍ．  Ｉｎｔ．  Ｅｄ．  ２０１７，  ５６，  １４９６３-１４９６７．
10.Ｍｏｅｌｌｅｒ，  Ｇ．  Ｐ．；  Ｍuｌｌｅｒ，  Ｓ．；  Ｗｏｌｆｓｔaｄｔｅｒ，  Ｂ．  Ｔ．；  Ｗｏｌｆｒｕｍ，  Ｓ．；  Ｓｃｈｅｐｍａｎｎ，  Ｄ．；  Ｗuｎｓｃｈ，  Ｂ．；  Ｃａｒｒｅｉｒａ，  Ｅ．  Ｍ．  Ｏｒｇ．  Ｌｅｔｔ．  ２０１７，  １９，  ２５１０-２５１３．  
11.（ａ）  Ｂｅａｄｌｅ，  Ｊ．  Ｄ．；  Ｋｎｕｈｔｓｅｎ，  Ａ．；  Ｈｏｏｓｅ，  Ａ．；  Ｒａｕｂｏ，  Ｐ．；  Ｊａｍｉｅｓｏｎ，  Ａ．  Ｇ．；  Ｓｈｉｐｍａｎ，  Ｍ．  Ｏｒｇ．  Ｌｅｔｔ．  ２０１７，  １９，  ３３０３-３３０６．  （ｂ）  ＭｃＬａｕｇｈｌｉｎ，  Ｍ．；  Ｙａｚａｋｉ，  Ｒ．；  Ｆｅｓｓａｒｄ，  Ｔ．  Ｃ．；  Ｃａｒｒｅｉｒａ，  Ｅ．  Ｍ．  Ｏｒｇ．  Ｌｅｔｔ．  ２０１４，  １６，  ４０７０-４０７３．
12.Ｔａｎｇ，  Ｙ．；  Ｘｉｅ，  Ｈ．；  Ｔｉａｎ，  Ｇ．；  Ｙｅ，  Ｙ．  Ｊ．  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｒｅｓ．  ２００２，  ６０，  ９５-１０３．  
13.Ｗｏｎｇ，  Ｍ．  Ｓ．  Ｙ．；  Ｔａｌｅｓｋｉ，  Ｄ．；  Ｊｏｌｌｉｆｆｅ，  Ｋ．  Ａ．  Ａｕｓｔ．  Ｊ．  Ｃｈｅｍ．  ２０１５，  ６８，  ６２７-６３４．  
14.Ａｒａｐ，  Ｗ．；  Ｐａｓｑｕａｌｉｎｉ，  Ｒ．；  Ｒｕｏｓｌａｈｔｉ，  Ｅ．  Ｓｃｉｅｎｃｅ  １９９８，  ２７９，  ３７７-３８０．  
15.Ｇｒａｚｉａｄｉｏ，  Ａ．；  Ｚａｎｄａ，  Ｍ．；  Ｆｒａｕ，  Ｓ．；  Ｆｌｅｍｉｎｇ，  Ｉ．  Ｎ．；  Ｍｕｓｏｌｉｎｏ，  Ｍ．；  Ｄａｌｌ’Ａｎｇｅｌｏ，  Ｓ．；  Ｂａｌｄａｓｓａｒｒｅ，  Ｍ．；  Ｐｉｒａｓ，  Ｍ．  Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ．  ２０１６，  ２７，  １３３２-１３４０．
【図１】
2021519347.tif 000107
【図２】
2021519347.tif 000108
【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８ａ】
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【図８ｂ】
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【図９】
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【図１０】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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