(57)【要約】本開示は、増強された免疫調節特性を有するピリミジン誘導体ペプチドコンジュゲートのクラスに関する。より具体的には、ペプチドコンジュゲートは、ＴＬＲ７アゴニストを含み、これがカップリングされたペプチドの生物学的効果を増強し、免疫原性を増加する、および／またはペプチドの有効用量を低下させる。一部の実施形態では、ペプチドは、抗原、ワクチン、ペプチドベースの新生抗原ワクチンまたはエピトープである。一態様では、本開示は、合成ＴＬＲ７アゴニストに共有結合的にコンジュゲートしたペプチド抗原を記載する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉの構造を有するペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩
【化８４】
2021525773.tif 000094
（式中、
ペプチドは、ペプチドであって、（Ｃ＝Ｏ）が（ｉ）前記ペプチドのＮ末端、または（ｉｉ）前記ペプチドの側鎖に結合しているペプチドであり、Ｃ＝Ｏが結合している前記側鎖の官能基はＮＨ２であり、
Ｒ１ａはＨまたはＣ１〜Ｃ４アルキルであり、前記アルキルは、必要に応じて、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＮＨＡｃ、−ＣＯＯＨ、−ＳＯ２ＣＨ３、−ＳＣＨ３、−ＯＣＨ３、
【化８５】
2021525773.tif 000095
およびＡ１からなる群から選択される１〜３個の置換基で置換されており、
ＸはＨまたはＣ１〜Ｃ４アルキルであり、前記アルキルは、必要に応じて、Ａ２、−ＯＨおよび−Ｃ（ＣＨ３）２ＯＨからなる群から選択される１〜３個の置換基で置換されており、
Ｙは、結合、−ＣＨ２−、−ＣＦ２−、
【化８６】
2021525773.tif 000096
、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ２−、−ＮＨ−および−ＣＨ２ＣＨ２−からなる群から選択され、
Ａ１は、
【化８７】
2021525773.tif 000097
からなる群から選択され、
Ｌ１は、結合、−（ＣＨ２）ｎ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）ｎ−、
【化８８】
2021525773.tif 000098
、−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｎ−、−［Ｏ（Ｃ１〜Ｃ４アルキレン）］−、−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｎ−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＦ２−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２ＣＨ２−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｍ−および−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２ＣＨ２−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｍ−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＦ２−からなる群から選択され、
Ａ２は、
【化８９】
2021525773.tif 000099
からなる群から選択され、
Ｌ２は、結合、−（ＣＨ２）ｎ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）ｎ−、
【化９０】
2021525773.tif 000100
、−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｎ−、−［Ｏ（Ｃ１〜Ｃ４アルキレン）］−、−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｎ−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＦ２−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２ＣＨ２−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｍ−および−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２ＣＨ２−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｍ−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＦ２−からなる群から選択され、
ｍは０〜４の整数であり、
ｎおよびｐは独立に１〜４の整数であり、
ｏは０〜４の整数である）。
【請求項２】
式（１ａ）もしくは（２ａ）、またはその薬学的に許容される塩の構造
【化９１−１】
2021525773.tif 000101
【化９１−２】
2021525773.tif 000102
（式中、
各ＡＡは独立にアミノ酸であり、（ＡＡ）ｑは、（Ｃ＝Ｏ）がペプチドのＮ末端に結合している前記ペプチドであり、
ｑは８〜４０の整数であり、
Ｄは、Ｈまたはアミノ酸または２〜４０個のアミノ酸を含むペプチドであり、
Ｅは、ＯＨまたはアミノ酸または２〜４０個のアミノ酸を含むペプチドである）
を有する、請求項１に記載のペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項３】
式（１ｂ）もしくは（２ｂ）、またはその薬学的に許容される塩の構造
【化９２】
2021525773.tif 000103
を有する、請求項２に記載のペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項４】
Ｒ１ａがＣ１〜Ｃ４アルキルであり、前記アルキルが、必要に応じて、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＮＨＡｃ、−ＣＯＯＨ、−ＳＯ２ＣＨ３、−ＳＣＨ３、−ＯＣＨ３、
【化９３】
2021525773.tif 000104
およびＡ１からなる群から選択される１〜３個の置換基で置換されており、
ＸがＣ１〜Ｃ４アルキルであり、
Ｙが−ＣＨ２−である、
請求項１から３のいずれか一項に記載のペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項５】
Ｒ１ａがＣ１〜Ｃ４アルキルであり、アルキルが−ＳＯ２ＣＨ３で置換されている、請求項１から４のいずれか一項に記載のペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項６】
Ｒ１ａが
【化９４】
2021525773.tif 000105
である、請求項１から５のいずれか一項に記載のペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項７】
Ｘがメチルである、請求項１から６のいずれか一項に記載のペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項８】
ｐが３である、請求項１から７のいずれか一項に記載のペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項９】
ｏが１である、請求項１から８のいずれか一項に記載のペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１０】
Ｙが−ＣＨ２−である、請求項１から９のいずれか一項に記載のペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１１】
前記ペプチドが抗原である、請求項１から１０のいずれか一項に記載のペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１２】
前記抗原が細菌抗原またはウイルス抗原である、請求項１１に記載のペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１３】
前記抗原がエピトープである、請求項１１に記載のペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１４】
前記抗原が共有される腫瘍抗原である、請求項１１に記載のペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１５】
前記抗原が個別化新生抗原である、請求項１１に記載のペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１６】
前記ペプチドがワクチンである、請求項１から１０のいずれか一項に記載のペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１７】
前記ペプチドが固相合成によって調製される、請求項１から１６のいずれか一項に記載のペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１８】
請求項１から１７のいずれか一項に記載のペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩を含む医薬組成物。
【請求項１９】
腫瘍の処置をそれを必要とする対象において行う方法であって、請求項１から１７のいずれか一項に記載のペプチドコンジュゲート、もしくはその薬学的に許容される塩、または請求項１８に記載の医薬組成物を、前記それを必要とする対象に投与するステップを含む方法。
【請求項２０】
腫瘍に対してのワクチン接種をそれを必要とする対象において行う方法であって、請求項１から１７のいずれか一項に記載のペプチドコンジュゲート、もしくはその薬学的に許容される塩、または請求項１８に記載の医薬組成物を、前記それを必要とする対象に投与するステップを含む方法。
【請求項２１】
前記腫瘍が固形腫瘍である、請求項１９または２０に記載の方法。
【請求項２２】
請求項１から１７のいずれか一項に記載のコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩を作製する方法であって、ペプチドを、式（３ａ）
【化９５】
2021525773.tif 000106
（式中、
Ｒ１ａはＨまたはＣ１〜Ｃ４アルキルであり、前記アルキルは、必要に応じて、−ＯＺ、−ＮＨＺ、−ＮＨＡｃ、−ＣＯＯＺ、−ＳＯ２ＣＨ３、−ＳＣＨ３、−ＯＣＨ３、
【化９６】
2021525773.tif 000107
およびＡ１からなる群から選択される１〜３個の置換基で置換されており、
ＸはＨまたはＣ１〜Ｃ４アルキルであり、前記アルキルは、必要に応じて、Ａ２、−ＯＺおよび−Ｃ（ＣＨ３）２ＯＺからなる群から選択される１〜３個の置換基で置換されており、
Ｙは、結合、−ＣＨ２−、−ＣＦ２−、
【化９７】
2021525773.tif 000108
、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ２−、−ＮＨ−および−ＣＨ２ＣＨ２−からなる群から選択され、
Ａ１は、
【化９８】
2021525773.tif 000109
からなる群から選択され、
Ｌ１は、結合、−（ＣＨ２）ｎ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）ｎ−、
【化９９】
2021525773.tif 000110
、−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｎ−、−［Ｏ（Ｃ１〜Ｃ４アルキレン）］−、−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｎ−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＦ２−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２ＣＨ２−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｍ−および−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２ＣＨ２−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｍ−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＦ２−からなる群から選択され、
Ａ２は、
【化１００】
2021525773.tif 000111
からなる群から選択され、
Ｌ２は、結合、−（ＣＨ２）ｎ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）ｎ−、
【化１０１】
2021525773.tif 000112
、−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｎ−、−［Ｏ（Ｃ１〜Ｃ４アルキレン）］−、−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｎ−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＦ２−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２ＣＨ２−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｍ−および−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２ＣＨ２−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｍ−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＦ２−からなる群から選択され、
各Ｚは独立にＨまたは保護基であり、
ｍは０〜４の整数であり、
ｎおよびｐは独立に１〜４の整数であり、
ｏは０〜４の整数である）
の化合物とコンジュゲートするステップを含む方法。
【請求項２３】
前記ペプチドが固相に結合させられる、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記固相から前記コンジュゲートを切断するステップをさらに含む、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
治療における使用のための、請求項１から１７のいずれか一項に記載のペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項２６】
治療における使用のための、請求項１８に記載の医薬組成物。
【請求項２７】
医薬の製造における、請求項１から１７のいずれか一項に記載のペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願との相互参照
本出願は、その内容全体が参照により本明細書に組み込まれる、２０１８年６月４日に出願された米国仮特許出願第６２／６８０，３３２号に対する利益を主張するものである。
【０００２】
本開示は、増強された免疫調節特性を有するピリミジン誘導体ペプチドコンジュゲートのクラスに関する。
【背景技術】
【０００３】
さまざまなワクチンプラットフォームは、さまざまな程度の効力で免疫系の別個のアームを標的化することができる。例えば、ウイルス／核酸ワクチン（ベクター）は、ＣＤ８＋（キラー）Ｔ細胞応答を駆動するのに極めて有効である一方、サブユニットワクチンは、キラーＴ細胞の不十分な誘導物質であるが、抗体およびＣＤ４＋（ヘルパー）Ｔ細胞応答の強力な誘導物質である（D'Argenio  and  Wilson.    Immunity.  2010.  33:437-40）。ペプチドワクチンは、抗原提示細胞（ＡＰＣ）の主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）分子によるヘルパーおよび／またはキラーＴ細胞への提示のための既定のエピトープを提供するために日常的に使用されるプラットフォームである。ペプチドワクチンはまた、Ｂ細胞によって認識される線状エピトープに対する抗体応答を誘導するために使用することもできる（Winblad  et  al.  The  Lancet.  2012.  11:597-604）。
【０００４】
生弱毒化微生物、核酸ベクターおよび組換えタンパク質サブユニットと比較して、ペプチドワクチンは、規定の化学構造および迅速な製造という利点を有する。しかしながら、ペプチドワクチンは通常、注射後の短い半減期のために免疫原性が不十分であり、したがって、最適なワクチン効力を達成するためにアジュバントを要する。結果として、ほとんどのワクチンが、抗原（複数可）およびアジュバントで構成され、それにより抗原がＴおよび／またはＢ細胞受容体の特異的標的を提供し、アジュバント成分が抗原特異的応答の一般的な免疫エンハンサーとして働く（O'Hagan  and  Valiante  Nat  Rev  Drug  Discov.  2003.  9:727-35）。
【０００５】
ペプチドワクチンは、ウイルス感染症およびがんの予防および治療の文脈で最も広範囲に研究されており、キラーおよびヘルパーＴ細胞応答がこれらの疾患に対する宿主防御にとって重要である。近年、ペプチドワクチンで容易に標的化することができるＴ細胞抗原の重要なクラス（腫瘍新生抗原（neoantigen））が特定されている。次世代シーケンシング（ＮＧＳ）およびバイオインフォマティクスが、新生抗原として認識される可能性を有する腫瘍突然変異を特定するために使用されている。新生抗原の患者特異的な性質のために、個別化がんワクチンを開発するためにはエピトープの迅速な合成が必要である。よって、ペプチドベースの新生抗原ワクチンは、新たながん治療の基礎として相当な注目を集めている。科学論文が、黒色腫の患者に使用するための個別化新生抗原ワクチンを記載しており、このワクチンがヒトで免疫原性であることを示している（Wu  et.  al.  Nature,  2017,  547,  217-221）。このワクチンでは、ポリ−ＩＣ（ＴＬＲ３アゴニスト）が、合成ペプチド抗原と混和することによってアジュバントとして使用された。
しかしながら、非共有結合的に結合したペプチド抗原とアジュバントの同時投与は、注射後の分離をもたらし得る。ペプチド抗原とアジュバントが異なる組織で濃縮し、アジュバントの免疫原性増強利益が減少する可能性がある。これにより、ペプチド抗原の有効性が減少する。ワクチンの抗原特異的応答を増強し、同時投与したアジュバントの利益を改善する化合物および方法が必要である。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】D'Argenio  and  Wilson.    Immunity.  2010.  33:437-40
【非特許文献２】Winblad  et  al.  The  Lancet.  2012.  11:597-604
【非特許文献３】O'Hagan  and  Valiante  Nat  Rev  Drug  Discov.  2003.  9:727-35
【非特許文献４】Wu  et.  al.  Nature,  2017,  547,  217-221
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００７】
一態様では、本開示は、合成ＴＬＲ７アゴニストに共有結合的にコンジュゲートしたペプチド抗原を記載する。別の態様では、ペプチドが、従来の固相ペプチド合成を使用して合成され、樹脂切断前の最後のステップでＴＬＲ７アゴニストとカップリングされる。この方法は、現在のペプチド合成に最小限の複雑性を付け加えるだけで、Ｎ末端をＴＬＲ７アゴニストで修飾した配列を提供する。本明細書に記載されるペプチドコンジュゲートは、ペプチド抗原の免疫原性を増加させる、および／または有効用量を低下させる。複数のペプチド抗原を含むワクチンでは、免疫原性増強および／または用量節約アジュバント技術によって、ワクチンの全体的な有効性、利便性および費用対効果を大いに改善することができる。典型的には、ＴＬＲアゴニストと、抗原、ワクチン、ペプチドベースの新生抗原ワクチンまたはエピトープなどのペプチドとの間に共有結合を形成することによって、ペプチドコンジュゲートが調製される。
【０００８】
一態様では、本開示は、式Ｉの構造を有するペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩を提供する
【化１】
2021525773.tif 000002
（式中、
ペプチドは、ペプチドであって、（Ｃ＝Ｏ）が（ｉ）前記ペプチドのＮ末端、または（ｉｉ）前記ペプチドの側鎖に結合しているペプチドであり、Ｃ＝Ｏが結合している前記側鎖の官能基はＮＨ２であり、
Ｒ１ａはＨまたはＣ１〜Ｃ４アルキルであり、前記アルキルは、必要に応じて、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＮＨＡｃ、−ＣＯＯＨ、−ＳＯ２ＣＨ３、−ＳＣＨ３、−ＯＣＨ３、
【化２】
2021525773.tif 000003
およびＡ１からなる群から選択される１〜３個の置換基で置換されており、
ＸはＨまたはＣ１〜Ｃ４アルキルであり、前記アルキルは、必要に応じて、Ａ２、−ＯＨおよび−Ｃ（ＣＨ３）２ＯＨからなる群から選択される１〜３個の置換基で置換されており、
Ｙは、結合、−ＣＨ２−、−ＣＦ２−、
【化３】
2021525773.tif 000004
、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ２−、−ＮＨ−および−ＣＨ２ＣＨ２−からなる群から選択され、
Ａ１は、
【化４】
2021525773.tif 000005
からなる群から選択され、
Ｌ１は、結合、−（ＣＨ２）ｎ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）ｎ−、
【化５】
2021525773.tif 000006
、−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｎ−、−［Ｏ（Ｃ１〜Ｃ４アルキレン）］−、−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｎ−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＦ２−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２ＣＨ２−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｍ−および−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２ＣＨ２−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｍ−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＦ２−からなる群から選択され、
Ａ２は、
【化６】
2021525773.tif 000007
からなる群から選択され、
Ｌ２は、結合、−（ＣＨ２）ｎ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）ｎ−、
【化７】
2021525773.tif 000008
、−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｎ−、−［Ｏ（Ｃ１〜Ｃ４アルキレン）］−、−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｎ−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＦ２−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２ＣＨ２−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｍ−および−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２ＣＨ２−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｍ−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＦ２−からなる群から選択され、
ｍは０〜４の整数であり、
ｎおよびｐは独立に１〜４の整数であり、
ｏは０〜４の整数である）。
【０００９】
一態様では、本開示は、ペプチドが固相合成によって調製される、本明細書に記載のペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩を提供する。
【００１０】
一態様では、本開示は、本明細書に記載のペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩を含む医薬組成物を提供する。
【００１１】
別の態様では、本開示は、本明細書に記載のコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩を作製する方法であって、ペプチドを、式（３ａ）
【化８】
2021525773.tif 000009
（式中、
Ｒ１ａはＨまたはＣ１〜Ｃ４アルキルであり、前記アルキルは、必要に応じて、−ＯＺ、−ＮＨＺ、−ＮＨＡｃ、−ＣＯＯＺ、−ＳＯ２ＣＨ３、−ＳＣＨ３、−ＯＣＨ３、
【化９】
2021525773.tif 000010
およびＡ１からなる群から選択される１〜３個の置換基で置換されており、
ＸはＨまたはＣ１〜Ｃ４アルキルであり、前記アルキルは、必要に応じて、Ａ２、−ＯＺおよび−Ｃ（ＣＨ３）２ＯＺからなる群から選択される１〜３個の置換基で置換されており、
Ｙは、結合、−ＣＨ２−、−ＣＦ２−、
【化１０】
2021525773.tif 000011
、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ２−、−ＮＨ−および−ＣＨ２ＣＨ２−からなる群から選択され、
Ａ１は、
【化１１】
2021525773.tif 000012
からなる群から選択され、
Ｌ１は、結合、−（ＣＨ２）ｎ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）ｎ−、
【化１２】
2021525773.tif 000013
、−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｎ−、−［Ｏ（Ｃ１〜Ｃ４アルキレン）］−、−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｎ−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＦ２−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２ＣＨ２−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｍ−および−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２ＣＨ２−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｍ−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＦ２−からなる群から選択され、
Ａ２は、
【化１３】
2021525773.tif 000014
からなる群から選択され、
Ｌ２は、結合、−（ＣＨ２）ｎ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）ｎ−、
【化１４】
2021525773.tif 000015
、−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｎ−、−［Ｏ（Ｃ１〜Ｃ４アルキレン）］−、−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｎ−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＦ２−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２ＣＨ２−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｍ−および−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２ＣＨ２−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｍ−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＦ２−からなる群から選択され、
各Ｚは独立にＨまたは保護基であり、
ｍは０〜４の整数であり、
ｎおよびｐは独立に１〜４の整数であり、
ｏは０〜４の整数である）
の化合物とコンジュゲートするステップを含む方法を提供する。
【００１２】
別の態様では、本開示は、治療における使用のための、本明細書に記載のペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩を提供する。
【００１３】
別の態様では、本開示は、治療における使用のための、本明細書に記載の医薬組成物を提供する。
【００１４】
別の態様では、本開示は、医薬の製造における、本明細書に記載のペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩の使用を提供する。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
本開示の具体的な実施形態を本明細書で例示し、詳細に説明するが、本発明はこれらに限定されない。詳細な説明は、本発明の例示として提供され、本発明のいずれの限定を構成するとも解釈されるべきではない。改変は当業者に自明であり、本発明の精神を逸脱しない全ての改変が、添付の特許請求の範囲の範囲に含まれることを意図している。
用語
【００１６】
以下の定義は、定義される用語を明白にするものであり、限定するものではない。本明細書で使用される特定の用語が具体的に定義されていない場合、このような用語は不明確と解釈されるべきではない。むしろ、用語はその許容される意味の範囲内で使用される。
【００１７】
本明細書で使用される「アルキル」という用語は、直鎖または分岐の飽和炭化水素を指す。例えば、アルキル基は、１〜８個の炭素原子（すなわち、（Ｃ１〜Ｃ８）アルキル）または１〜６個の炭素原子（すなわち、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル）または１〜４個の炭素原子（すなわち、（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル）を有することができる。
【００１８】
本明細書で使用される「アルキレン」という用語は、親アルカンの同じまたは２個の異なる炭素原子から２個の水素原子を除去することによって誘導される２個の一価ラジカル中心を有する直鎖または分岐の飽和炭化水素ラジカルを指す。例えば、アルキレン基は、１〜８個の炭素原子、１〜６個の炭素原子、または１〜４個の炭素原子を有することができる。
【００１９】
本明細書で使用される「アルコキシ」という用語は、酸素原子を通して親分子部分に結合したアルキル基を指す。
【００２０】
本明細書で使用される「ペプチド」という用語は、ペプチド結合によって共有結合的に連結された２個またはそれよりも多いアミノ酸単位で構成される化合物を指す。ジペプチドは２個のアミノ酸残基を有し、トリペプチドは３個有し、テトラペプチドは４個有するなどである。ペプチドは、オリゴペプチド、ポリペプチドおよびタンパク質を含み得る。
【００２１】
本明細書で使用される「アミノ酸」という用語は、天然アミノ酸および合成アミノ酸、ならびにＤアミノ酸およびＬアミノ酸の両方を指す。「天然アミノ酸」は、ペプチド、ポリペプチドおよびタンパク質を典型的に形成する２０種類の主要な天然に存在するアミノ酸のいずれかを意味する。「合成アミノ酸」は、合成的に調製されたか天然源から誘導されたかに関わらず、任意の他のアミノ酸を意味する。本明細書で使用される場合、「合成アミノ酸」は、それだけに限らないが、塩、誘導体（アミドなど）および置換を含む化学的に修飾されたアミノ酸も包含する。本開示のペプチド内に含まれるアミノ酸は、特にカルボキシ末端またはアミノ末端で、メチル化、アミド化、アセチル化または他の化学基による置換によって修飾され得る。さらに、ジスルフィド結合が本開示のペプチド中に存在しても存在しなくてもよい。
【００２２】
本明細書で使用される「アミノ酸残基」という用語は、ペプチド中のアミノ酸単位を指す。
【００２３】
本明細書で使用される「残基」という用語は、アミノ酸がペプチド鎖に加わってペプチド結合を形成する際、Ｈ２Ｏが放出された後に残るものを指す。
【００２４】
本明細書で使用される「オリゴペプチド」という用語は、１２個超で約２０個未満のアミノ酸残基のペプチド鎖を指す。
【００２５】
本明細書で使用される「ポリペプチド」という用語は、約２０個超のアミノ酸残基のペプチド鎖を指す。
【００２６】
本明細書で使用される「タンパク質」という用語は、１つまたは複数のポリペプチド鎖で構成される分子を指す。
【００２７】
本明細書で使用される場合、「薬学的に許容される」という用語は、製剤の他の成分と適合性であり、医薬組成物のレシピエントにとって有害でない担体（複数可）、希釈剤（複数可）、賦形剤（複数可）または塩形態を指す。
【００２８】
本明細書で使用される場合、「医薬組成物」という用語は、１つまたは複数の薬学的に許容される担体、希釈剤、賦形剤またはアジュバントと必要に応じて混和された本開示の化合物を指す。医薬組成物は、好ましくは製造および商業化目的に適したものとなるよう環境条件に対する安定性の程度を呈する。
【００２９】
本明細書で使用される場合、「有効量」、「治療量」または「有効用量」という用語は、所望の薬理学的効果または治療効果を惹起し、よって障害の有効な予防または処置をもたらすのに十分な有効成分の量を指す。障害の予防は、障害の進行を遅延させるまたは予防する、ならびに障害に関連する症状の開始を遅延させるまたは予防することによって現れ得る。障害の処置は、症状の減少または排除、障害の進行の抑制または逆転、ならびに患者の健康への任意の他の寄与によって現れ得る。
【００３０】
有効用量は、患者の状態、障害の症状の重症度、および医薬組成物が投与される方法などの要因に応じて、変化し得る。典型的には、有効用量で投与されるためには、化合物は３０ｍｇ未満の量で投与される必要がある。通常、化合物は、約１ｍｇ未満〜約１００μｇ未満、時折約１０μｇ〜１００μｇ未満の量で投与され得る。前記有効用量は、典型的には、２４時間の期間にわたって投与される一もしくは複数用量としてまたは単一用量として投与される量を表す。ヒト患者については、化合物の有効用量が、少なくとも約１μｇ／２４時間／患者であるが、約２４００μｇ／２４時間／患者以下、通常約５００μｇ／２４時間／患者以下の量で化合物を投与することを必要とし得る。
ペプチドコンジュゲート
【００３１】
一態様では、本開示は、式Ｉの構造を有するペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩
【化１５】
2021525773.tif 000016
（式中、
ペプチドは、ペプチドであって、（Ｃ＝Ｏ）が（ｉ）前記ペプチドのＮ末端、または（ｉｉ）前記ペプチドの側鎖に結合しているペプチドであり、Ｃ＝Ｏが結合している前記側鎖の官能基はＮＨ２であり、
Ｒ１ａはＨまたはＣ１〜Ｃ４アルキルであり、前記アルキルは、必要に応じて、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＮＨＡｃ、−ＣＯＯＨ、−ＳＯ２ＣＨ３、−ＳＣＨ３、−ＯＣＨ３、
【化１６】
2021525773.tif 000017
およびＡ１からなる群から選択される１〜３個の置換基で置換されており、
ＸはＨまたはＣ１〜Ｃ４アルキルであり、前記アルキルは、必要に応じて、Ａ２、−ＯＨおよび−Ｃ（ＣＨ３）２ＯＨからなる群から選択される１〜３個の置換基で置換されており、
Ｙは、結合、−ＣＨ２−、−ＣＦ２−、
【化１７】
2021525773.tif 000018
、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ２−、−ＮＨ−および−ＣＨ２ＣＨ２−からなる群から選択され、
Ａ１は、
【化１８】
2021525773.tif 000019
からなる群から選択され、
Ｌ１は、結合、−（ＣＨ２）ｎ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）ｎ−、
【化１９】
2021525773.tif 000020
、−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｎ−、−［Ｏ（Ｃ１〜Ｃ４アルキレン）］−、−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｎ−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＦ２−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２ＣＨ２−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｍ−および−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２ＣＨ２−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｍ−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＦ２−からなる群から選択され、
Ａ２は、
【化２０】
2021525773.tif 000021
からなる群から選択され、
Ｌ２は、結合、−（ＣＨ２）ｎ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）ｎ−、
【化２１】
2021525773.tif 000022
、−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｎ−、−［Ｏ（Ｃ１〜Ｃ４アルキレン）］−、−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｎ−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＦ２−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２ＣＨ２−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｍ−および−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２ＣＨ２−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｍ−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＦ２−からなる群から選択され、
ｍは０〜４の整数であり、
ｎおよびｐは独立に１〜４の整数であり、
ｏは０〜４の整数である）を提供する。
【００３２】
一部の実施形態では、本開示は、式１が、式（１ａ）もしくは（２ａ）の構造
【化２２−１】
2021525773.tif 000023
【化２２−２】
2021525773.tif 000024
（式中、
各ＡＡは独立にアミノ酸であり、（ＡＡ）ｑは、（Ｃ＝Ｏ）がペプチドのＮ末端に結合している前記ペプチドであり、
ｑは８〜４０の整数であり、
Ｄは、Ｈまたはアミノ酸または２〜４０個のアミノ酸を含むペプチドであり、
Ｅは、ＯＨまたはアミノ酸または２〜４０個のアミノ酸を含むペプチドであり、および
Ｒ１ａ、Ｘ、Ｙ、ｐおよびｏは式Ｉについて定義される通りである）
を有する、式１の構造を有するペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩を提供する。
【００３３】
一部の実施形態では、本開示は、式１ｂの構造
【化２３】
2021525773.tif 000025
（式中、ＡＡおよびｑは式１ａおよび２ａについて定義される通りであり；
Ｒ１ａ、Ｘ、Ｙ、ｐおよびｏは式Ｉについて定義される通りである）
を有する式１ａのペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩を提供する。
【００３４】
一部の実施形態では、本開示は、式２ｂの構造
【化２４】
2021525773.tif 000026
（式中、ＤおよびＥは式１ａおよび２ａについて定義される通りであり；
Ｒ１ａ、Ｘ、Ｙ、ｐおよびｏは式Ｉについて定義される通りである）
を有する式２ａのペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩を提供する。
【００３５】
一部の実施形態では、本開示は、（Ｃ＝Ｏ）がペプチドのＮ末端に結合している、式Ｉ、式１ａ、式２ａ、式１ｂもしくは式２ｂのペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩を提供する。代替実施形態では、（Ｃ＝Ｏ）がペプチドの側鎖に結合しており、Ｃ＝Ｏが結合している側鎖の官能基がＮＨ２である。
【００３６】
一部の実施形態では、本開示は、アミノ酸が天然アミノ酸である、式Ｉ、式１ａ、式２ａ、式１ｂもしくは式２ｂのペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩を提供する。一部の実施形態では、アミノ酸が合成アミノ酸である。一部の実施形態では、アミノ酸が天然アミノ酸または合成アミノ酸である。
【００３７】
一部の実施形態では、本開示は、Ｒ１ａがＨである、式Ｉ、式１ａ、式２ａ、式１ｂもしくは式２ｂのペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩を提供する。代替実施形態では、Ｒ１ａがＣ１〜Ｃ４アルキルであり、アルキルが、必要に応じて、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＮＨＡｃ、−ＣＯＯＨ、−ＳＯ２ＣＨ３、−ＳＣＨ３、−ＯＣＨ３、
【化２５】
2021525773.tif 000027
およびＡ１からなる群から選択される１〜３個の置換基で置換されている。一部の実施形態では、Ｒ１ａがＣ１〜Ｃ４アルキルであり、アルキルが必要に応じて−ＳＯ２ＣＨ３で置換されている。一部の実施形態では、Ｒ１ａがＣ１〜Ｃ４アルキルであり、アルキルが−ＳＯ２ＣＨ３で置換されている。より具体的な実施形態では、Ｒ１ａが
【化２６】
2021525773.tif 000028
である。
【００３８】
一部の実施形態では、本開示は、ＸがＨである、式Ｉ、式１ａ、式２ａ、式１ｂもしくは式２ｂのペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩を提供する。代替実施形態では、ＸがＣ１〜Ｃ４アルキルである。具体的な実施形態では、Ｘがメチルである。一部の実施形態では、ＸがＣ１〜Ｃ４アルキルであり、アルキルが、必要に応じて、Ａ２、−ＯＨおよび−Ｃ（ＣＨ３）２ＯＨからなる群から選択される１〜３個の置換基で置換されている。
【００３９】
一部の実施形態では、本開示は、Ｙが−ＣＨ２−である、式Ｉ、式１ａ、式２ａ、式１ｂもしくは式２ｂのペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩を提供する。
【００４０】
一部の実施形態では、本開示は、ｏが０である、式Ｉ、式１ａ、式２ａ、式１ｂもしくは式２ｂのペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩を提供する。一部の実施形態では、ｏが１である。一部の実施形態では、ｏが２である。一部の実施形態では、ｏが３である。一部の実施形態では、ｏが４である。
【００４１】
一部の実施形態では、本開示は、ｐが１である、式Ｉ、式１ａ、式２ａ、式１ｂもしくは式２ｂのペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩を提供する。一部の実施形態では、ｐが２である。一部の実施形態では、ｐが３である。
【００４２】
一部の実施形態では、本開示は、Ｒ１ａがＣ１〜Ｃ４アルキルであり、アルキルが、必要に応じて、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＮＨＡｃ、−ＣＯＯＨ、−ＳＯ２ＣＨ３、−ＳＣＨ３、−ＯＣＨ３、
【化２７】
2021525773.tif 000029
およびＡ１からなる群から選択される１〜３個の置換基で置換されており；
ＸがＣ１〜Ｃ４アルキルであり；
Ｙが−ＣＨ２−である、
式Ｉ、式１ａ、式２ａ、式１ｂもしくは式２ｂのペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩を提供する。
【００４３】
一部の実施形態では、本開示は、以下の特徴：
ａ）Ｒ１ａがＣ１〜Ｃ４アルキルであり、アルキルが、必要に応じて、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＮＨＡｃ、−ＣＯＯＨ、−ＳＯ２ＣＨ３、−ＳＣＨ３、−ＯＣＨ３、
【化２８】
2021525773.tif 000030
およびＡ１からなる群から選択される１〜３個の置換基で置換されている；
ｂ）ＸがＣ１〜Ｃ４アルキルである；
ｃ）Ｙが−ＣＨ２−である；
ｄ）Ｃ１〜３アルコキシがＣＨ３Ｏ−である；
ｅ）ｏが１である；
ｆ）ｐが３である；および
ｇ）ペプチドが抗原またはワクチンである
のうちの１つ、２つもしくは３つまたはそれよりも多くを有する、式Ｉ、式１ａ、式２ａ、式１ｂもしくは式２ｂのペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩を提供する。
【００４４】
一部の実施形態では、本開示は、以下の特徴：
ａ）Ｒ１ａがＣ１〜Ｃ４アルキルであり、アルキルが−ＳＯ２ＣＨ３で置換されている；
ｂ）ＸがＣ１〜Ｃ４アルキルである；
ｃ）Ｙが−ＣＨ２−である；
ｄ）Ｃ１〜３アルコキシがＣＨ３Ｏ−である；
ｅ）ｏが１である；
ｆ）ｐが３である；および
ｇ）ペプチドが抗原またはワクチンである
のうちの１つ、２つもしくは３つまたはそれよりも多くを有する、式Ｉ、式１ａ、式２ａ、式１ｂもしくは式２ｂのペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩を提供する。
【００４５】
一部の実施形態では、本開示は、以下の特徴：
ａ）Ｒ１ａが
【化２９】
2021525773.tif 000031
である；
ｂ）Ｘがメチルである；
ｃ）Ｙが−ＣＨ２−である；
ｄ）Ｃ１〜３アルコキシがＣＨ３Ｏ−である；
ｅ）ｏが１である；
ｆ）ｐが３である；および
ｇ）ペプチドが抗原またはワクチンである
のうちの１つ、２つもしくは３つまたはそれよりも多くを有する、式Ｉ、式１ａ、式２ａ、式１ｂもしくは式２ｂのペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩を提供する。
ペプチド
【００４６】
本開示は、ペプチドがペプチドである、式Ｉ、式１ａ、式２ａ、式１ｂもしくは式２ｂの構造を有するペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩を提供する。一実施形態では、ペプチドがオリゴペプチドである。別の実施形態では、ペプチドがポリペプチドである。さらに別の実施形態では、ペプチドがタンパク質である。
【００４７】
本開示は、ペプチドコンジュゲートのペプチドが以下：
【化３０】
2021525773.tif 000032
に示される、式Ｉ、式１ａ、式２ａ、式１ｂもしくは式２ｂの構造を有するペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩を提供する。ある特定の実施形態では、ペプチドコンジュゲートのペプチドに関連する場合の「ペプチド」になされる言及は、上記の表に示されるペプチドコンジュゲートの部分を指す。
【００４８】
一部の実施形態では、ペプチドが天然アミノ酸で構成される。一部の実施形態では、ペプチドが合成アミノ酸で構成される。一部の実施形態では、ペプチドが天然アミノ酸と合成アミノ酸の両方で構成される。一部の実施形態では、ペプチドが天然アミノ酸からなる。一部の実施形態では、ペプチドが合成アミノ酸からなる。一部の実施形態では、ペプチドが天然アミノ酸と合成アミノ酸の両方からなる。
【００４９】
一部の実施形態では、本開示は、ペプチドが抗原である、式Ｉ、式１ａ、式２ａ、式１ｂもしくは式２ｂのペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩を提供する。一部の実施形態では、抗原が細菌抗原またはウイルス抗原である。一部の実施形態では、抗原がエピトープである。一部の実施形態では、抗原が共有される腫瘍抗原である。一部の実施形態では、抗原が個別化新生抗原である。一部の実施形態では、ペプチドがワクチンである。
【００５０】
一部の実施形態では、本開示は、ペプチドが２〜８０個のアミノ酸、２〜４０個のアミノ酸、２〜２０個のアミノ酸または２〜１０個のアミノ酸で構成される、式Ｉ、式１ａ、式２ａ、式１ｂもしくは式２ｂのペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩を提供する。一部の実施形態では、ペプチドが、１０〜８０個のアミノ酸、１０〜４０個のアミノ酸、１０〜３０個のアミノ酸または１０〜２５個のアミノ酸で構成される。一部の実施形態では、ペプチドが、２０〜８０個のアミノ酸、２０〜４０個のアミノ酸、２０〜３０個のアミノ酸または２０〜２５個のアミノ酸で構成される。
【００５１】
一部の実施形態では、本開示は、ｑが２〜８０；２〜４０；２〜２０；または２〜１０の整数である、式１ａ、式１ｂのペプチドコンジュゲート、およびその薬学的に許容される塩を提供する。一部の実施形態では、ｑが８〜８０；８〜４０；８〜３０；８〜２０；または８〜１０の整数である。
【００５２】
本開示は、ＤがＨであり、Ｅが１〜４０個のアミノ酸である、式２ａ、式２ｂのペプチドコンジュゲート、およびその薬学的に許容される塩を提供する。一部の実施形態では、Ｄが１〜４０個のアミノ酸であり、ＥがＯＨである。一部の実施形態では、Ｄが１〜２０個のアミノ酸であり、Ｅが１〜２０個のアミノ酸である。一部の実施形態では、Ｄが１〜３０個のアミノ酸であり、Ｅが１〜１０個のアミノ酸である。一部の実施形態では、Ｄが１〜１０個のアミノ酸であり、Ｅが１〜３０個のアミノ酸である。
ペプチドコンジュゲートの調製
【００５３】
一態様では、本開示は、ペプチドが固相合成によって調製される、本明細書に記載されるペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩を提供する。一実施形態では、本開示は、ペプチドとＴＬＲ７アゴニストとの間の共有結合の形成がペプチドが固相に結合されているときに起こる、本明細書に記載されるペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩を提供する。一部の実施形態では、ペプチドとＴＬＲ７アゴニストとの間の共有結合の形成がペプチドが固相に結合されているときに起こり、得られたペプチドコンジュゲートが固相から切断される。
【００５４】
別の態様では、本開示は、本明細書に記載されるペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩を作製する方法であって、ペプチドを、式（３ａ）
【化３１】
2021525773.tif 000033
（式中、
Ｒ１ａはＨまたはＣ１〜Ｃ４アルキルであり、アルキルは、必要に応じて、−ＯＺ、−ＮＨＺ、−ＮＨＡｃ、−ＣＯＯＺ、−ＳＯ２ＣＨ３、−ＳＣＨ３、−ＯＣＨ３、
【化３２】
2021525773.tif 000034
およびＡ１からなる群から選択される１〜３個の置換基で置換されており；
ＸはＨまたはＣ１〜Ｃ４アルキルであり、アルキルは、必要に応じて、Ａ２、−ＯＺおよび−Ｃ（ＣＨ３）２ＯＺからなる群から選択される１〜３個の置換基で置換されており；
Ｙは、結合、−ＣＨ２−、−ＣＦ２−、
【化３３】
2021525773.tif 000035
、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ２−、−ＮＨ−および−ＣＨ２ＣＨ２−からなる群から選択され；
Ａ１は
【化３４】
2021525773.tif 000036
からなる群から選択され；
Ｌ１は、結合、−（ＣＨ２）ｎ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）ｎ−、
【化３５】
2021525773.tif 000037
、−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｎ−、−［Ｏ（Ｃ１〜Ｃ４アルキレン）］−、−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｎ−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＦ２−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２ＣＨ２−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｍ−および−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２ＣＨ２−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｍ−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＦ２−からなる群から選択され；
Ａ２は
【化３６】
2021525773.tif 000038
からなる群から選択され；
Ｌ２は、結合、−（ＣＨ２）ｎ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）ｎ−、
【化３７】
2021525773.tif 000039
、−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｎ−、−［Ｏ（Ｃ１〜Ｃ４アルキレン）］−、−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｎ−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＦ２−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２ＣＨ２−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｍ−および−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２ＣＨ２−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｍ−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＦ２−からなる群から選択され；
各Ｚは独立にＨまたは保護基であり；
ｍは０〜４の整数であり；
ｎおよびｐは独立に１〜４の整数であり；
ｏは０〜４の整数である）
の化合物とコンジュゲートするステップを含む方法を提供する。
【００５５】
一部の具体的な実施形態では、３ａの式が、式３ｂの構造
【化３８】
2021525773.tif 000040
（式中、Ｒ１ａ、Ｘ、Ｙ、ｐおよびｏは式３ａについて定義される通りである）
を有する。
【００５６】
一部の実施形態では、本開示は、本明細書に記載されるペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩を作製する方法であって、ペプチドを、Ｒ１ａがＨである式３または式３ｂの化合物とコンジュゲートするステップを含む方法を提供する。代替実施形態では、Ｒ１ａがＣ１〜Ｃ４アルキルであり、アルキルが、必要に応じて、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＮＨＡｃ、−ＣＯＯＨ、−ＳＯ２ＣＨ３、−ＳＣＨ３、−ＯＣＨ３、
【化３９】
2021525773.tif 000041
およびＡ１からなる群から選択される１〜３個の置換基で置換されている。一部の実施形態では、Ｒ１ａがＣ１〜Ｃ４アルキルであり、アルキルが、必要に応じて、−ＳＯ２ＣＨ３で置換されている。一部の実施形態では、Ｒ１ａがＣ１〜Ｃ４アルキルであり、アルキルが−ＳＯ２ＣＨ３で置換されている。より具体的な実施形態では、Ｒ１ａが
【化４０】
2021525773.tif 000042
である。
【００５７】
一部の実施形態では、本開示は、本明細書に記載されるペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩を作製する方法であって、ペプチドを、ＸがＨである式３または式３ｂの化合物とコンジュゲートするステップを含む方法を提供する。代替実施形態では、ＸがＣ１〜Ｃ４アルキルである。具体的な実施形態では、Ｘがメチルである。一部の実施形態では、ＸがＣ１〜Ｃ４アルキルであり、アルキルが、必要に応じて、Ａ２、−ＯＨおよび−Ｃ（ＣＨ３）２ＯＨからなる群から選択される１〜３個の置換基で置換されている。
【００５８】
一部の実施形態では、本開示は、本明細書に記載されるペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩を作製する方法であって、ペプチドを、Ｙが−ＣＨ２−である式３または式３ｂの化合物とコンジュゲートするステップを含む方法を提供する。
【００５９】
一部の実施形態では、本開示は、本明細書に記載されるペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩を作製する方法であって、ペプチドを、ｏが１である式３または式３ｂの化合物とコンジュゲートするステップを含む方法を提供する。一部の実施形態では、ｏが０である。一部の実施形態では、ｏが２である。一部の実施形態では、ｏが３である。
【００６０】
一部の実施形態では、本開示は、本明細書に記載されるペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩を作製する方法であって、ペプチドを、ｐが１である式３または式３ｂの化合物とコンジュゲートするステップを含む方法を提供する。一部の実施形態では、ｐが２である。一部の実施形態では、ｐが３である。
【００６１】
一部の実施形態では、本開示は、本明細書に記載されるペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩を作製する方法であって、ペプチドを、Ｒ１ａがＣ１〜Ｃ４アルキルであり、アルキルが、必要に応じて、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＮＨＡｃ、−ＣＯＯＨ、−ＳＯ２ＣＨ３、−ＳＣＨ３、−ＯＣＨ３、
【化４１】
2021525773.tif 000043
およびＡ１からなる群から選択される１〜３個の置換基で置換されており；
ＸがＣ１〜Ｃ４アルキルであり；
Ｙが−ＣＨ２−である
式３または式３ｂの化合物とコンジュゲートするステップを含む方法を提供する。
【００６２】
一部の実施形態では、本開示は、本明細書に記載されるペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩を作製する方法であって、ペプチドを、式３または式３ｂの化合物とコンジュゲートするステップを含み、式３の化合物が以下の特徴：
ａ）Ｒ１ａがＣ１〜Ｃ４アルキルであり、アルキルが、必要に応じて、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＮＨＡｃ、−ＣＯＯＨ、−ＳＯ２ＣＨ３、−ＳＣＨ３、−ＯＣＨ３、
【化４２】
2021525773.tif 000044
およびＡ１からなる群から選択される１〜３個の置換基で置換されている；
ｂ）ＸがＣ１〜Ｃ４アルキルである；
ｃ）Ｙが−ＣＨ２−である；
ｄ）Ｃ１〜３アルコキシがＣＨ３Ｏ−である；
ｅ）ｏが１である；および
ｆ）ｐが３である
のうちの１つ、２つもしくは３つまたはそれよりも多くを有する、方法を提供する。
【００６３】
一部の実施形態では、本開示は、本明細書に記載されるペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩を作製する方法であって、ペプチドを、式３または式３ｂの化合物とコンジュゲートするステップを含み、式３の化合物が以下の特徴：
ａ）Ｒ１ａがＣ１〜Ｃ４アルキルであり、アルキルが−ＳＯ２ＣＨ３で置換されている；
ｂ）ＸがＣ１〜Ｃ４アルキルである；
ｃ）Ｙが−ＣＨ２−である；
ｄ）Ｃ１〜３アルコキシがＣＨ３Ｏ−である；
ｅ）ｏが１である；および
ｆ）ｐが３である
のうちの１つ、２つもしくは３つまたはそれよりも多くを有する、方法を提供する。
【００６４】
一部の実施形態では、本開示は、本明細書に記載されるペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩を作製する方法であって、ペプチドを、式３または式３ｂの化合物とコンジュゲートするステップを含み、式３の化合物が以下の特徴：
ａ）Ｒ１ａが
【化４３】
2021525773.tif 000045
である；
ｂ）Ｘがメチルである；
ｃ）Ｙが−ＣＨ２−である；
ｄ）Ｃ１〜３アルコキシがＣＨ３Ｏ−である；
ｅ）ｏが１である；および
ｆ）ｐが３である
のうちの１つ、２つもしくは３つまたはそれよりも多くを有する、方法を提供する。
【００６５】
感受性または反応性基のための保護基は、一般原則または合成化学に従って必要な場合に使用されることが十分に理解される。保護基は、有機合成の標準的な方法に従って操作される（T.  W.  Greene  and  P.  G.  M.  Wuts,  “Protective  Groups  in  Organic  Synthesis”,  Third  edition,  Wiley,  New  York  1999）。これらの基は、当業者に容易に明らかな方法を使用して、化合物合成の好都合な段階で除去される。方法ならびに反応条件およびその実行順序の選択は、本明細書に開示のペプチドコンジュゲートおよび化合物の調製と一致するものとする。
【００６６】
一部の実施形態では、Ｚがアミノ保護基である。アミノ保護基の非限定的な例としては、９−フルオレニルメチルカルバメート（Ｆｍｏｃ）、ｔ−ブチルカルバメート（ＢＯＣ）、ベンジルカルバメート（Ｃｂｚ）、アセトアミド（Ａｃ）、トリフルオロアセトアミド、フタルアミド、ベンジルアミン（Ｂｎ）、トリフェニルメチルアミン（トリチルアミン、Ｔｒ）、ベンジリデンアミン、ｐ−トルエンスルホンアミド（Ｔｓ、トシルアミド）が挙げられる。
【００６７】
一実施形態では、本開示は、本明細書に記載されるペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩を作製する方法であって、ペプチドを固相に結合する、方法を提供する。別の実施形態では、本方法は、固相からコンジュゲートを切断するステップをさらに含む。
【００６８】
コンジュゲートするステップは、ペプチドとＴＬＲ７アゴニストとの間に共有結合を形成することを含む。一実施形態では、ＴＬＲ７アゴニストが低分子量分子であり、ポリマー種と対照的に「小分子」として公知である。一実施形態では、共有結合が、ペプチドのＮ末端とＴＬＲ７アゴニストの−ＣＯＯＨ基との間で形成される。別の実施形態では、共有結合が、ペプチドの側鎖とＴＬＲ７アゴニストのＣＯＯＨ基との間で形成される。より具体的な実施形態では、側鎖がアミノ基である。別の実施形態では、側鎖がリシン残基である。
医薬組成物
【００６９】
別の態様では、本開示は、本明細書に記載されるペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩を含む医薬組成物を提供する。一部の実施形態では、本明細書に開示される医薬組成物が腫瘍ワクチンである。腫瘍ワクチンは、既存の腫瘍を処置することができる、または腫瘍の発生を予防することができる。
【００７０】
式Ｉ、式１ａ、式２ａ、式１ｂまたは式２ｂのペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩は、単独で使用され得るが、一般的には式Ｉ、式１ａ、式２ａ、式１ｂまたは式２ｂのペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩（有効成分）が薬学的に許容されるアジュバント、希釈剤または担体と一緒に医薬組成物の形態で投与される。適切な医薬製剤の選択および調製のための従来の手順は、例えば、"Pharmaceuticals  -  The  Science  of  Dosage  Form  Designs",  M.  E.  Aulton,  Churchill  Livingstone,  1988に記載される。
【００７１】
本開示は、本開示のペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩と、薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物を提供する。一実施形態では、薬学的に許容される担体がカルボキシメチルセルロース、生理食塩水、水または別の水溶液である。別の実施形態では、薬学的に許容される担体が水中０．１％〜５％カルボキシメチルセルロースである。
【００７２】
投与様式に応じて、医薬組成物は、約０．０５ｗｔ％〜約９９ｗｔ％（重量パーセント、またはｗ／ｗ％）、さらに詳細には約０．０５ｗｔ％〜約８０ｗｔ％、なおさらに詳細には約０．１０ｗｔ％〜約７０ｗｔ％、一層さらに詳細には約０．１０ｗｔ％〜約５０ｗｔ％の有効成分を含み、全ての重量パーセンテージは全組成物に基づく。
【００７３】
本開示はまた、薬学的に許容されるアジュバント、希釈剤または担体と一緒に上に定義される式Ｉ、式１ａ、式２ａ、式１ｂまたは式２ｂのペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩を含む医薬組成物を提供する。
【００７４】
本開示はさらに、本開示の医薬組成物を調製する方法であって、前に定義される式Ｉ、式１ａ、式２ａ、式１ｂまたは式２ｂのペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩を、薬学的に許容されるアジュバント、希釈剤または担体と混合するステップを含む方法を提供する。
使用方法
【００７５】
ある特定の抗原に対する免疫応答は、ワクチンアジュバントとして公知である免疫増強剤の使用を通して増強することができる。免疫学的アジュバントの議論は、"Current  Status  of  Immunological  Adjuvants",  Ann.  Rev.  Immunol.,  1986,  4,  pp.  369-388および"Recent  Advances  in  Vaccine  Adjuvants  and  Delivery  Systems"  by  D.  T.  O'Hagan  and  N.  M.  Valiante,  Nat.  Rev.  Drug  Discovery,  2003,  2(9),  727-35に見出すことができる。米国特許第４，８０６，３５２号；同第５，０２６，５４３号；および同第５，０２６，５４６号の開示は、特許文献に現れるさまざまなワクチンアジュバントを記載している。これらの参考文献の各々が、全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【００７６】
本開示は、本明細書に開示されるペプチドコンジュゲートを単独でまたは他の薬剤と組み合わせて投与することによって、ワクチンを投与する方法を提供する。別の実施形態では、合成ペプチド、細菌抗原またはウイルス抗原などの供給源からの抗原エピトープを含む本明細書に開示されるペプチドコンジュゲートの投与が、免疫応答をもたらす。他の実施形態では、本開示は、前記１つまたは複数の抗原に対する細胞媒介応答を刺激するのに有効な本明細書に開示されるペプチドコンジュゲートを含む免疫原性組成物を提供する。
【００７７】
別の態様では、本明細書に開示されるペプチドコンジュゲートの使用は、抗原用量節約効果をもたらす。抗原用量節約効果において、より低い抗原用量で同じまたは類似の抗原有効性が得られる。これはまた、抗原の有効用量が低下することを意味する。これは、不十分な溶解度を有する抗原にとって要因である。不十分な溶解度によって制限される抗原は、抗原が良好な溶解度を有し、より生物学的に利用可能である場合よりも高い抗原用量を要求し得る。溶解性に乏しい抗原をコンジュゲートして式Ｉ、式１ａ、式２ａ、式１ｂもしくは式２ｂに開示されるペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩に到達することによって、より低用量で同じまたは類似の抗原有効性を得ることができる。例えば、２０個またはそれよりも多いペプチドを含む、プールされた新生抗原ワクチンの製剤は、ペプチドの不十分な溶解度によって制限される。ペプチド部分がプールされた新生抗原ワクチンを含む、式Ｉ、式１ａ、式２ａ、式１ｂもしくは式２ｂのペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩は、より高用量で投与されるコンジュゲートされていないプールされた新生抗原ワクチンと同じまたは類似の有効性を達成し得る。一実施形態では、ペプチドが抗原である本明細書に開示されるペプチドコンジュゲートの使用は、コンジュゲートされていない抗原と比較して、抗原の有効用量を低下させる。別の実施形態では、ペプチドが抗原である本明細書に開示されるペプチドコンジュゲートの使用は、コンジュゲートされていない抗原と比較して、抗原の免疫原性を増加させる。
【００７８】
それを必要とする対象において障害を処置する方法における使用のための、式Ｉ、式１ａ、式２ａ、式１ｂもしくは式２ｂのペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩、あるいは前記ペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩のいずれかを含む医薬組成物が本明細書でさらに提供される。本明細書で提供される方法および使用の一部の実施形態では、障害が腫瘍である。
【００７９】
一態様では、本開示は、それを必要とする対象において腫瘍を処置する方法であって、本明細書に記載されるペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩を、それを必要とする対象に投与するステップを含む方法を提供する。
【００８０】
別の態様では、本開示は、腫瘍に対してのワクチン接種をそれを必要とする対象において行う方法であって、本明細書に記載されるペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩を、それを必要とする対象に投与するステップを含む方法を提供する。
【００８１】
本明細書で使用される固形腫瘍は、通常は嚢胞も液体領域も含まない組織の異常な塊を指す。固形腫瘍は良性または悪性であり得る。固形腫瘍は、いくつかの場所、例えば、骨、筋肉および臓器に生じ得る。固形腫瘍の例は、肉腫、癌腫およびリンパ腫である。肉腫は、血管、骨、脂肪組織、靭帯、リンパ管、筋肉または腱の腫瘍である。肉腫には、ユーイング肉腫および骨肉腫が含まれ、これらは共に骨がん肉腫である。横紋筋肉腫は、筋肉に見られる軟部組織肉腫である。癌腫は、上皮細胞に形成する腫瘍である。上皮細胞は、皮膚、腺および臓器の裏層に見られる。これらの臓器には、膀胱、尿管および腎臓の一部が含まれる。１つの一般的な癌腫は副腎皮質癌である。一般的な小児科固形腫瘍がんには、脳腫瘍、神経芽細胞腫、ウィルムス腫瘍、横紋筋肉腫、網膜芽細胞腫、骨肉腫およびユーイング肉腫が含まれる。
【００８２】
一部の実施形態では、腫瘍が固形腫瘍である。一部の実施形態では、固形腫瘍が、副腎皮質腫瘍、胞状軟部肉腫、癌腫、軟骨肉腫、結腸直腸癌、類腱腫、線維形成性小円形細胞腫瘍、内分泌腫瘍、卵黄嚢腫瘍、類上皮血管内皮腫、ユーイング肉腫、胚細胞腫瘍（固形腫瘍）、肝芽腫、肝細胞癌、黒色腫、腎腫、神経芽細胞腫、非横紋筋肉腫軟部組織肉腫（ＮＲＳＴＳ）、骨肉腫、傍脊柱肉腫、腎細胞癌、網膜芽細胞腫、横紋筋肉腫、滑膜肉腫およびウィルムス腫瘍からなる群から選択される。
【００８３】
一部の実施形態では、腫瘍が固形腫瘍ではない。
【００８４】
別の態様では、本開示は、治療における使用のための、本明細書に記載されるペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩を提供する。
【００８５】
別の態様では、本開示は、治療における使用のための、本明細書に記載される医薬組成物を提供する。
【００８６】
別の態様では、本開示は、医薬の製造における、本明細書に記載されるペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩の使用を提供する。
例示的な実施形態
【００８７】
実施形態Ｉ−１．式Ｉの構造を有するペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩
【化４４】
2021525773.tif 000046
（式中、
ペプチドは、ペプチドであって、（Ｃ＝Ｏ）が（ｉ）前記ペプチドのＮ末端、または（ｉｉ）前記ペプチドの側鎖に結合しているペプチドであり、Ｃ＝Ｏが結合している前記側鎖の官能基はＮＨ２であり、
Ｒ１ａはＨまたはＣ１〜Ｃ４アルキルであり、前記アルキルは、必要に応じて、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＮＨＡｃ、−ＣＯＯＨ、−ＳＯ２ＣＨ３、−ＳＣＨ３、−ＯＣＨ３、
【化４５】
2021525773.tif 000047
およびＡ１からなる群から選択される１〜３個の置換基で置換されており、
ＸはＨまたはＣ１〜Ｃ４アルキルであり、前記アルキルは、必要に応じて、Ａ２、−ＯＨおよび−Ｃ（ＣＨ３）２ＯＨからなる群から選択される１〜３個の置換基で置換されており、
Ｙは、結合、−ＣＨ２−、−ＣＦ２−、
【化４６】
2021525773.tif 000048
、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ２−、−ＮＨ−および−ＣＨ２ＣＨ２−からなる群から選択され、
Ａ１は、
【化４７】
2021525773.tif 000049
からなる群から選択され、
Ｌ１は、結合、−（ＣＨ２）ｎ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）ｎ−、
【化４８】
2021525773.tif 000050
、−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｎ−、−［Ｏ（Ｃ１〜Ｃ４アルキレン）］−、−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｎ−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＦ２−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２ＣＨ２−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｍ−および−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２ＣＨ２−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｍ−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＦ２−からなる群から選択され、
Ａ２は、
【化４９】
2021525773.tif 000051
からなる群から選択され、
Ｌ２は、結合、−（ＣＨ２）ｎ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）ｎ−、
【化５０】
2021525773.tif 000052
、−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｎ−、−［Ｏ（Ｃ１〜Ｃ４アルキレン）］−、−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｎ−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＦ２−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２ＣＨ２−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｍ−および−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２ＣＨ２−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｍ−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＦ２−からなる群から選択され、
ｍは０〜４の整数であり、
ｎ、ｏおよびｐは独立に１〜４の整数である）。
【００８８】
実施形態Ｉ−２．式（１ａ）もしくは（２ａ）、またはその薬学的に許容される塩の構造
【化５１】
2021525773.tif 000053
（式中、
各ＡＡは独立にアミノ酸であり、（ＡＡ）ｑは、（Ｃ＝Ｏ）がペプチドのＮ末端に結合している前記ペプチドであり、
ｑは８〜４０の整数であり、
Ｄは、Ｈまたはアミノ酸または２〜４０個のアミノ酸を含むペプチドであり、
Ｅは、ＯＨまたはアミノ酸または２〜４０個のアミノ酸を含むペプチドである）
を有する、実施形態Ｉ−１に記載のペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩。
【００８９】
実施形態Ｉ−３．式（１ｂ）もしくは（２ｂ）、またはその薬学的に許容される塩の構造
【化５２】
2021525773.tif 000054
を有する、実施形態Ｉ−２に記載のペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩。
【００９０】
実施形態Ｉ−４．Ｒ１ａがＣ１〜Ｃ４アルキルであり、前記アルキルが、必要に応じて、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＮＨＡｃ、−ＣＯＯＨ、−ＳＯ２ＣＨ３、−ＳＣＨ３、−ＯＣＨ３、
【化５３】
2021525773.tif 000055
およびＡ１からなる群から選択される１〜３個の置換基で置換されており、
ＸがＣ１〜Ｃ４アルキルであり、
Ｙが−ＣＨ２−である、
実施形態Ｉ−１からＩ−３のいずれか一項に記載のペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩。
【００９１】
実施形態Ｉ−５．Ｒ１ａがＣ１〜Ｃ４アルキルであり、アルキルが−ＳＯ２ＣＨ３で置換されている、実施形態Ｉ−１からＩ−４のいずれか一項に記載のペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩。
【００９２】
実施形態Ｉ−６．Ｒ１ａが
【化５４】
2021525773.tif 000056
である、実施形態Ｉ−１からＩ−５のいずれか一項に記載のペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩。
【００９３】
実施形態Ｉ−７．Ｘがメチルである、実施形態Ｉ−１からＩ−６のいずれか一項に記載のペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩。
【００９４】
実施形態Ｉ−８．ｐが３である、実施形態Ｉ−１からＩ−７のいずれか一項に記載のペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩。
【００９５】
実施形態Ｉ−９．ｏが１である、実施形態Ｉ−１からＩ−８のいずれか一項に記載のペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩。
【００９６】
実施形態Ｉ−１０．Ｙが−ＣＨ２−である、実施形態Ｉ−１からＩ−９のいずれか一項に記載のペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩。
【００９７】
実施形態Ｉ−１１．前記ペプチドが抗原である、実施形態Ｉ−１からＩ−１０のいずれか一項に記載のペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩。
【００９８】
実施形態Ｉ−１２．前記抗原が細菌抗原またはウイルス抗原である、実施形態Ｉ−１１に記載のペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩。
【００９９】
実施形態Ｉ−１３．前記抗原がエピトープである、実施形態Ｉ−１１に記載のペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩。
【０１００】
実施形態Ｉ−１４．前記抗原が共有される腫瘍抗原である、実施形態Ｉ−１１に記載のペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩。
【０１０１】
実施形態Ｉ−１５．前記抗原が個別化新生抗原である、実施形態Ｉ−１１に記載のペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩。
【０１０２】
実施形態Ｉ−１６．前記ペプチドがワクチンである、実施形態Ｉ−１からＩ−１０のいずれか一項に記載のペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩。
【０１０３】
実施形態Ｉ−１７．前記ペプチドが固相合成によって調製される、実施形態Ｉ−１からＩ−１６のいずれか一項に記載のペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩。
【０１０４】
実施形態Ｉ−１８．実施形態Ｉ−１からＩ−１７のいずれか一項に記載のペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩を含む医薬組成物。
【０１０５】
実施形態Ｉ−１９．実施形態Ｉ−１からＩ−１６のいずれか一項に記載のコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩を作製する方法であって、ペプチドを、式（３ａ）
【化５５】
2021525773.tif 000057
（式中、
Ｒ１ａはＨまたはＣ１〜Ｃ４アルキルであり、前記アルキルは、必要に応じて、−ＯＺ、−ＮＨＺ、−ＮＨＡｃ、−ＣＯＯＺ、−ＳＯ２ＣＨ３、−ＳＣＨ３、−ＯＣＨ３、
【化５６】
2021525773.tif 000058
およびＡ１からなる群から選択される１〜３個の置換基で置換されており、
ＸはＨまたはＣ１〜Ｃ４アルキルであり、前記アルキルは、必要に応じて、Ａ２、−ＯＺおよび−Ｃ（ＣＨ３）２ＯＺからなる群から選択される１〜３個の置換基で置換されており、
Ｙは、結合、−ＣＨ２−、−ＣＦ２−、
【化５７】
2021525773.tif 000059
、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ２−、−ＮＨ−および−ＣＨ２ＣＨ２−からなる群から選択され、
Ａ１は、
【化５８】
2021525773.tif 000060
からなる群から選択され、
Ｌ１は、結合、−（ＣＨ２）ｎ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）ｎ−、
【化５９】
2021525773.tif 000061
、−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｎ−、−［Ｏ（Ｃ１〜Ｃ４アルキレン）］−、−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｎ−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＦ２−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２ＣＨ２−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｍ−および−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２ＣＨ２−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｍ−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＦ２−からなる群から選択され、
Ａ２は、
【化６０】
2021525773.tif 000062
からなる群から選択され、
Ｌ２は、結合、−（ＣＨ２）ｎ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）ｎ−、
【化６１】
2021525773.tif 000063
、−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｎ−、−［Ｏ（Ｃ１〜Ｃ４アルキレン）］−、−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｎ−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＦ２−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２ＣＨ２−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｍ−および−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２ＣＨ２−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｍ−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＦ２−からなる群から選択され、
各Ｚは独立にＨまたは保護基であり、
ｍは０〜４の整数であり、
ｎ、ｏおよびｐは独立に１〜４の整数である）
の化合物とコンジュゲートするステップを含む方法。
【０１０６】
実施形態Ｉ−２０．前記ペプチドが固相に結合させられる、実施形態Ｉ−１９に記載の方法。
【０１０７】
実施形態Ｉ−２１．前記固相から前記コンジュゲートを切断するステップをさらに含む、実施形態Ｉ−２０に記載の方法。
【０１０８】
実施形態Ｉ−２２．治療における使用のための、実施形態Ｉ−１からＩ−１７のいずれか一項に記載のペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩。
【０１０９】
実施形態Ｉ−２３．治療における使用のための、実施形態Ｉ−１８に記載の医薬組成物。
【０１１０】
実施形態Ｉ−２４．医薬の製造における、実施形態Ｉ−１からＩ−１７のいずれか一項に記載のペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩の使用。
【０１１１】
実施形態ＩＩ−１．式Ｉの構造を有するペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩
【化６２】
2021525773.tif 000064
（式中、
ペプチドは、ペプチドであって、（Ｃ＝Ｏ）が（ｉ）前記ペプチドのＮ末端、または（ｉｉ）前記ペプチドの側鎖に結合しているペプチドであり、Ｃ＝Ｏが結合している前記側鎖の官能基はＮＨ２であり、
Ｒ１ａはＨまたはＣ１〜Ｃ４アルキルであり、前記アルキルは、必要に応じて、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＮＨＡｃ、−ＣＯＯＨ、−ＳＯ２ＣＨ３、−ＳＣＨ３、−ＯＣＨ３、
【化６３】
2021525773.tif 000065
およびＡ１からなる群から選択される１〜３個の置換基で置換されており、
ＸはＨまたはＣ１〜Ｃ４アルキルであり、前記アルキルは、必要に応じて、Ａ２、−ＯＨおよび−Ｃ（ＣＨ３）２ＯＨからなる群から選択される１〜３個の置換基で置換されており、
Ｙは、結合、−ＣＨ２−、−ＣＦ２−、
【化６４】
2021525773.tif 000066
、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ２−、−ＮＨ−および−ＣＨ２ＣＨ２−からなる群から選択され、
Ａ１は、
【化６５】
2021525773.tif 000067
からなる群から選択され、
Ｌ１は、結合、−（ＣＨ２）ｎ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）ｎ−、
【化６６】
2021525773.tif 000068
、−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｎ−、−［Ｏ（Ｃ１〜Ｃ４アルキレン）］−、−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｎ−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＦ２−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２ＣＨ２−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｍ−および−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２ＣＨ２−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｍ−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＦ２−からなる群から選択され、
Ａ２は、
【化６７】
2021525773.tif 000069
からなる群から選択され、
Ｌ２は、結合、−（ＣＨ２）ｎ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）ｎ−、
【化６８】
2021525773.tif 000070
、−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｎ−、−［Ｏ（Ｃ１〜Ｃ４アルキレン）］−、−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｎ−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＦ２−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２ＣＨ２−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｍ−および−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２ＣＨ２−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｍ−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＦ２−からなる群から選択され、
ｍは０〜４の整数であり、
ｎおよびｐは独立に１〜４の整数であり、
ｏは０〜４の整数である）。
【０１１２】
実施形態ＩＩ−２．式（１ａ）もしくは（２ａ）、またはその薬学的に許容される塩の構造
【化６９】
2021525773.tif 000071
（式中、
各ＡＡは独立にアミノ酸であり、（ＡＡ）ｑは、（Ｃ＝Ｏ）がペプチドのＮ末端に結合している前記ペプチドであり、
ｑは８〜４０の整数であり、
Ｄは、Ｈまたはアミノ酸または２〜４０個のアミノ酸を含むペプチドであり、
Ｅは、ＯＨまたはアミノ酸または２〜４０個のアミノ酸を含むペプチドである）
を有する、実施形態ＩＩ−１に記載のペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩。
【０１１３】
実施形態ＩＩ−３．式（１ｂ）もしくは（２ｂ）、またはその薬学的に許容される塩の構造
【化７０】
2021525773.tif 000072
を有する、実施形態ＩＩ−２に記載のペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩。
【０１１４】
実施形態ＩＩ−４．Ｒ１ａがＣ１〜Ｃ４アルキルであり、前記アルキルが、必要に応じて、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＮＨＡｃ、−ＣＯＯＨ、−ＳＯ２ＣＨ３、−ＳＣＨ３、−ＯＣＨ３、
【化７１】
2021525773.tif 000073
およびＡ１からなる群から選択される１〜３個の置換基で置換されており、
ＸがＣ１〜Ｃ４アルキルであり、
Ｙが−ＣＨ２−である、
実施形態ＩＩ−１からＩＩ−３のいずれか一項に記載のペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩。
【０１１５】
実施形態ＩＩ−５．Ｒ１ａがＣ１〜Ｃ４アルキルであり、アルキルが−ＳＯ２ＣＨ３で置換されている、実施形態ＩＩ−１からＩＩ−４のいずれか一項に記載のペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩。
【０１１６】
実施形態ＩＩ−６．Ｒ１ａが
【化７２】
2021525773.tif 000074
である、実施形態ＩＩ−１からＩＩ−５のいずれか一項に記載のペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩。
【０１１７】
実施形態ＩＩ−７．Ｘがメチルである、実施形態ＩＩ−１からＩＩ−６のいずれか一項に記載のペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩。
【０１１８】
実施形態ＩＩ−８．ｐが３である、実施形態ＩＩ−１からＩＩ−７のいずれか一項に記載のペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩。
【０１１９】
実施形態ＩＩ−９．ｏが１である、実施形態ＩＩ−１からＩＩ−８のいずれか一項に記載のペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩。
【０１２０】
実施形態ＩＩ−１０．Ｙが−ＣＨ２−である、実施形態ＩＩ−１からＩＩ−９のいずれか一項に記載のペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩。
【０１２１】
実施形態ＩＩ−１１．前記ペプチドが抗原である、実施形態ＩＩ−１からＩＩ−１０のいずれか一項に記載のペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩。
【０１２２】
実施形態ＩＩ−１２．前記抗原が細菌抗原またはウイルス抗原である、実施形態ＩＩ−１１に記載のペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩。
【０１２３】
実施形態ＩＩ−１３．前記抗原がエピトープである、実施形態ＩＩ−１１に記載のペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩。
【０１２４】
実施形態ＩＩ−１４．前記抗原が共有される腫瘍抗原である、実施形態ＩＩ−１１に記載のペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩。
【０１２５】
実施形態ＩＩ−１５．前記抗原が個別化新生抗原である、実施形態ＩＩ−１１に記載のペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩。
【０１２６】
実施形態ＩＩ−１６．前記ペプチドがワクチンである、実施形態ＩＩ−１からＩＩ−１０のいずれか一項に記載のペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩。
【０１２７】
実施形態ＩＩ−１７．前記ペプチドが固相合成によって調製される、実施形態ＩＩ−１からＩＩ−１６のいずれか一項に記載のペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩。
【０１２８】
実施形態ＩＩ−１８．実施形態ＩＩ−１からＩＩ−１７のいずれか一項に記載のペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩を含む医薬組成物。
【０１２９】
実施形態ＩＩ−１９．腫瘍の処置をそれを必要とする対象において行う方法であって、実施形態ＩＩ−１からＩＩ−１７のいずれか一項に記載のペプチドコンジュゲート、もしくはその薬学的に許容される塩、または実施形態ＩＩ−１８に記載の医薬組成物を、前記それを必要とする対象に投与するステップを含む方法。
【０１３０】
実施形態ＩＩ−２０．腫瘍に対してのワクチン接種をそれを必要とする対象において行う方法であって、実施形態ＩＩ−１からＩＩ−１７のいずれか一項に記載のペプチドコンジュゲート、もしくはその薬学的に許容される塩、または実施形態ＩＩ−１８に記載の医薬組成物を、前記それを必要とする対象に投与するステップを含む方法。
【０１３１】
実施形態ＩＩ−２１．前記腫瘍が固形腫瘍である、実施形態ＩＩ−１９または２０に記載の方法。
【０１３２】
実施形態ＩＩ−２２．実施形態ＩＩ−１からＩＩ−１７のいずれか一項に記載のコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩を作製する方法であって、ペプチドを、式（３ａ）
【化７３】
2021525773.tif 000075
（式中、
Ｒ１ａはＨまたはＣ１〜Ｃ４アルキルであり、前記アルキルは、必要に応じて、−ＯＺ、−ＮＨＺ、−ＮＨＡｃ、−ＣＯＯＺ、−ＳＯ２ＣＨ３、−ＳＣＨ３、−ＯＣＨ３、
【化７４】
2021525773.tif 000076
およびＡ１からなる群から選択される１〜３個の置換基で置換されており、
ＸはＨまたはＣ１〜Ｃ４アルキルであり、前記アルキルは、必要に応じて、Ａ２、−ＯＺおよび−Ｃ（ＣＨ３）２ＯＺからなる群から選択される１〜３個の置換基で置換されており、
Ｙは、結合、−ＣＨ２−、−ＣＦ２−、
【化７５】
2021525773.tif 000077
、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ２−、−ＮＨ−および−ＣＨ２ＣＨ２−からなる群から選択され、
Ａ１は、
【化７６】
2021525773.tif 000078
からなる群から選択され、
Ｌ１は、結合、−（ＣＨ２）ｎ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）ｎ−、
【化７７】
2021525773.tif 000079
、−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｎ−、−［Ｏ（Ｃ１〜Ｃ４アルキレン）］−、−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｎ−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＦ２−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２ＣＨ２−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｍ−および−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２ＣＨ２−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｍ−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＦ２−からなる群から選択され、
Ａ２は、
【化７８】
2021525773.tif 000080
からなる群から選択され、
Ｌ２は、結合、−（ＣＨ２）ｎ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）ｎ−、
【化７９】
2021525773.tif 000081
、−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｎ−、−［Ｏ（Ｃ１〜Ｃ４アルキレン）］−、−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｎ−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＦ２−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２ＣＨ２−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｍ−および−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２ＣＨ２−［Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２）］ｍ−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＦ２−からなる群から選択され、
各Ｚは独立にＨまたは保護基であり、
ｍは０〜４の整数であり、
ｎおよびｐは独立に１〜４の整数であり、
ｏは０〜４の整数である）
の化合物とコンジュゲートするステップを含む方法。
【０１３３】
実施形態ＩＩ−２３．前記ペプチドが固相に結合させられる、実施形態Ｉ−２２に記載の方法。
【０１３４】
実施形態ＩＩ−２４．前記固相から前記コンジュゲートを切断するステップをさらに含む、実施形態Ｉ−２３に記載の方法。
【０１３５】
実施形態ＩＩ−２５．治療における使用のための、実施形態ＩＩ−１からＩＩ−１７のいずれか一項に記載のペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩。
【０１３６】
実施形態ＩＩ−２６．治療における使用のための、実施形態Ｉ−１８に記載の医薬組成物。
【０１３７】
実施形態ＩＩ−２７．医薬の製造における、実施形態ＩＩ−１からＩＩ−１７のいずれか一項に記載のペプチドコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩の使用。
【実施例】
【０１３８】
以下の実施例は本開示を例示するために提供され、これを限定するものと解釈されるべきでない。これらの実施例では、別段の指示がない限り、全ての部およびパーセンテージは重量による。実施例中の略語を以下に述べる。
【表１】
2021525773.tif 000082
化学合成実施例
（合成実施例１）
ペプチドコンジュゲートにおける使用のための、ＴＬＲ７アゴニスト、化合物１の合成
（実施例１ａ）
ＴＬＲ７アゴニスト、化合物１の合成
【０１３９】
この実施例は、化合物１、（Ｓ）−２−（３−（（２−アミノ−４−メチル−６−（（１−（メチルスルホニル）ヘプタン−３−イル）アミノ）ピリミジン−５−イル）メチル）−４−メトキシフェニル）酢酸の調製を記載する。いったん得られたら、このＴＬＲ７アゴニストを、任意のアミノ酸のアルファ−アミノ基またはリシンの側鎖アミノ基上にコンジュゲートすることができる。
【化８０】
2021525773.tif 000083
ステップ１：メチル３−ヒドロキシ−２−メチレンブタノエート
【０１４０】
１：１ジオキサン／水（８．５Ｍ）中アクリル酸メチル（１．０当量）、アセトアルデヒド（３．０当量）およびＤＡＢＣＯ（１．０当量）の混合物をｒ．ｔ．で一晩撹拌した。混合物をＤＣＭ／水に分配した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮し、シリカフラッシュクロマトグラフィー（溶離液ＰＥ／ＥＡ＝１００：１〜２：１）によって精製して、標題化合物を得た。
ステップ２：メチル２−（５−（シアノメチル）−２−メトキシベンジル）−３−オキソブタノエート
【０１４１】
ＭｅＣＮ（０．４４Ｍ）中２−（３−ブロモ−４−メトキシフェニル）アセトニトリル（１．０当量）、メチル３−ヒドロキシ−２−メチレンブタノエート（２．０当量）、ＰｄＣｌ２（Ｐ（ｏ−ｔｏｌ）３）２（０．０３当量）、ＴＥＡ（２．０当量）の混合物を７０℃で一晩撹拌した。混合物をＥＡ／水に分配した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮し、シリカフラッシュクロマトグラフィー（溶離液ＰＥ／ＥＡ＝１００：１〜２：１）によって精製して、標題化合物を得た。
ステップ３：２−（３−（（２−アミノ−４−ヒドロキシ−６−メチルピリミジン−５−イル）メチル）−４−メトキシフェニル）アセトニトリル
【０１４２】
メチル２−（５−（シアノメチル）−２−メトキシベンジル）−３−オキソブタノエート（１．０当量）、ＭｅＯＨ（０．４６Ｍ）中炭酸グアニジン（１．０当量）の混合物を６５℃で一晩撹拌した。ｒ．ｔ．に冷却した後、反応混合物を濾過した。濾過ケークを真空下で乾燥させて、標題化合物を得た。
ステップ４：２−（３−（（２−アミノ−４−クロロ−６−メチルピリミジン−５−イル）メチル）−４−メトキシフェニル）アセトニトリル
【０１４３】
２−（３−（（２−アミノ−４−ヒドロキシ−６−メチルピリミジン−５−イル）メチル）−４−メトキシフェニル）アセトニトリル（１．０当量）のＰＯＣｌ３（０．９Ｍ）中溶液を、Ｎ２下１００℃で１６時間撹拌した。反応混合物をｒ．ｔ．に冷却し、ＰＯＣｌ３を減圧下で蒸発させた。残渣を水で希釈した。固体ＮａＨＣＯ３を添加することによって、ｐＨ値を８に調整した。次いで、混合物を５０℃で１時間撹拌し、ｒ．ｔ．に冷却し、沈殿を濾過によって回収した。濾過ケークを水で洗浄し、真空中で乾燥させて、標題化合物を白色固体として得た。
ステップ５：（Ｓ）−２−（３−（（２−アミノ−４−メチル−６−（（１−（メチルチオ）ヘプタン−３−イル）アミノ）ピリミジン−５−イル）メチル）−４−メトキシフェニル）アセトニトリル
【０１４４】
ＮＭＰ（１．７Ｍ）中２−（３−（（２−アミノ−４−クロロ−６−メチルピリミジン−５−イル）メチル）−４−メトキシフェニル）アセトニトリル（１．０当量）および（Ｓ）−１−（メチルチオ）ヘプタン−３−アミン（１．５当量）の混合物を、窒素下１２０℃で１６時間撹拌した。混合物を水で希釈し、水相をＥＡで抽出した。有機層を水およびブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝５０：１）によって精製して、標題化合物を黄色固体として得た。
ステップ６：（Ｓ）−２−（３−（（２−アミノ−４−メチル−６−（（１−（メチルスルホニル）ヘプタン−３−イル）アミノ）ピリミジン−５−イル）メチル）−４−メトキシフェニル）アセトニトリル
【０１４５】
（Ｓ）−２−（３−（（２−アミノ−４−メチル−６−（（１−（メチルチオ）ヘプタン−３−イル）アミノ）ピリミジン−５−イル）メチル）−４−メトキシフェニル）アセトニトリル（１当量）の１：１：１  ＴＨＦ／ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ（０．２Ｍ）中溶液に、ｒ．ｔ．でオキソン（１．２当量）を小分けで添加した。反応物をｒ．ｔ．で２時間撹拌し、次いで、ＤＣＭで希釈した。有機層を水およびブラインで洗浄し、乾燥させ、濃縮して、淡黄色固体を得て、これを次のステップに直接使用した。
ステップ７：（Ｓ）−２−（３−（（２−アミノ−４−メチル−６−（（１−（メチルスルホニル）ヘプタン−３−イル）アミノ）ピリミジン−５−イル）メチル）−４−メトキシフェニル）酢酸
【０１４６】
（Ｓ）−２−（３−（（２−アミノ−４−メチル−６−（（１−（メチルスルホニル）ヘプタン−３−イル）アミノ）ピリミジン−５−イル）メチル）−４−メトキシフェニル）アセトニトリル（１．０当量）の１：１  ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ（０．１Ｍ）中溶液に、ＫＯＨ（７．５当量）を添加した。反応物を１２０℃で４時間撹拌した。溶媒を除去し、ＨＣｌを添加してｐＨ９を達成した。混合物を分取ＨＰＬＣ（０．１％ＮＨ３．Ｈ２Ｏ／ＣＨ３ＣＮ）によって精製して、標題化合物１を淡黄色固体として得た。
ＬＣＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＋＝４７９．３
1H  NMR  (400  MHz,  CD3OD)  δ  7.16  (dd,  J  =  8.4,  2.0  Hz,  1H),  6.98  (d,  J  =  2.0  Hz,  1H),  6.91  (d,  J  =  8.4  Hz,  1H),  4.30-4.22  (m,  1H),  3.89  (s,  3H),  3.77-3.68  (m,  2H),  3.32  (s,  2H),  2.91-2.70  (m,  5H),  2.32  (s,  3H),  2.08-1.95  (m,  1H),  1.81-1.69  (m,  1H),  1.56-1.05  (m,  6H),  0.83  (t,  J  =  7.2  Hz,  3H).
（実施例１ｂ）
化合物中間体（Ｓ）−１−（メチルチオ）ヘプタン−３−アミンの合成
【０１４７】
以下のスキームは、上記のＴＬＲ７アゴニスト（化合物１）の調製に使用される、化合物中間体（Ｓ）−１−（メチルチオ）ヘプタン−３−アミンの合成を記載する。
【化８１】
2021525773.tif 000084
ステップ１：ｔｅｒｔ−ブチル（Ｅ）−ヘプタ−２−エノエート
【０１４８】
ペンタナール（１．０当量）およびＴＨＦ（１Ｍ）中ｔｅｒｔ−ブチル２−（トリフェニル−λ５−ホスファニリデン）アセテート（１．０５当量）の混合物を５０℃で１６時間撹拌した。混合物を減圧下で濃縮し、ＰＥを添加した。固体を濾別し、濾液を蒸発乾固した。粗残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（溶離液：ＰＥ〜ＰＥ／ＥＡ＝１００：１）によって精製して、標題化合物を黄色油状物として得た。
ステップ２：ｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−３−（ベンジル（（Ｓ）−１−フェニルエチル）アミノ）ヘプタノエート
【０１４９】
−７８℃の（Ｓ）−Ｎ−ベンジル−１−フェニルエタン−１−アミン（１．３当量）のＴＨＦ（０．９Ｍ）中溶液に、２．５Ｍ  ｎ−ＢｕＬｉ（１．２当量）を２０分間にわたって滴加した。混合物を−７８℃で１０分間撹拌し、次いで、ＴＨＦ（０．７Ｍ）中ｔｅｒｔ−ブチル（Ｅ）−ヘプタ−２−エノエート（１．０当量）を滴加した。得られた混合物を−７８℃で３０分間撹拌し、次いで、ＮＨ４Ｃｌ水溶液でクエンチし、ＥＡで抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（溶離液：ＰＥ〜ＰＥ／ＥＡ＝１００：１）によって精製して、標題化合物を黄色油状物として得た。
ステップ３：（Ｓ）−３−（ベンジル（（Ｓ）−１−フェニルエチル）アミノ）ヘプタン−１−オール
【０１５０】
０℃のｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−３−（ベンジル（（Ｓ）−１−フェニルエチル）アミノ）ヘプタノエート（１．０当量）の無水ＴＨＦ（０．４Ｍ）中溶液に、ＬｉＡｌＨ４（１．６当量）を少しずつ添加した。添加後、混合物をｒ．ｔ．で５時間撹拌した。混合物を１．０Ｍ  ＮａＯＨ溶液でクエンチし、濾過し、濾液をＥＡで抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（溶離液：ＰＥ〜ＰＥ／ＥＡ＝５：１）によって精製して、標題化合物を黄色油状物として得た。
ステップ４：（Ｓ）−３−アミノヘプタン−１−オール
【０１５１】
（Ｓ）−３−（ベンジル（（Ｓ）−１−フェニルエチル）アミノ）ヘプタン−１−オール（１．０当量）のＭｅＯＨ（０．１Ｍ）中溶液を、Ｈ２雰囲気下、Ｐｄ／Ｃ（１０％ｗｔ）の存在下で、５０℃で４８時間撹拌した。混合物を濾過し、濾液を減圧下で濃縮して、標題化合物を褐色油状物として得た。
ステップ５：ｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−（１−ヒドロキシヘプタン−３−イル）カルバメート
【０１５２】
０℃の（Ｓ）−３−アミノヘプタン−１−オール（１．０当量）の１：１  ジオキサン／Ｈ２Ｏ（０．５Ｍ）中溶液に、ＮａＯＨ（１．２当量）およびＢｏｃ２Ｏ（１．２当量）を添加し、ｒｔに加温した。反応が完了した後、混合物をＨ２Ｏ／ＥＡに分配した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（溶離液：ＰＥ〜ＰＥ／ＥＡ＝３：１）によって精製して、標題化合物を白色固体として得た。
ステップ６：（Ｓ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ヘプチルメタンスルホネート
【０１５３】
ＤＣＭ（０．４Ｍ）中ｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−（１−ヒドロキシヘプタン−３−イル）カルバメート（１．０当量）およびＴＥＡ（１．２当量）の混合物に塩化メタンスルホニル（１．１当量）を滴加し、０℃で１時間撹拌した。得られた混合物をＥＡと水に分配した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮して、標題化合物を褐色油状物として得た。
ステップ７：ｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−（１−（メチルチオ）ヘプタン−３−イル）カルバメート
【０１５４】
ＤＭＦ（０．７Ｍ）中（Ｓ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ヘプチルメタンスルホネート（１．０当量）およびＭｅＳＮａ（２．０当量）の混合物を７０℃で１６時間撹拌した。得られた混合物をＥＡと水に分配した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（溶離液：ＰＥ〜ＰＥ／ＥＡ＝１０：１）によって精製して、標題化合物を黄色がかった油状物として得た。
ステップ８：（Ｓ）−１−（メチルチオ）ヘプタン−３−アミン
【０１５５】
ｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−（１−（メチルチオ）ヘプタン−３−イル）カルバメート（１．０当量）のＤＣＭ（０．５Ｍ）中溶液に、過剰な４Ｍ  ＨＣｌ／ジオキサン（１／３体積当量）を添加した。得られた混合物をｒ．ｔ．で１６時間撹拌し、減圧下で濃縮した。残渣をＥｔ２Ｏで粉砕し、沈殿した固体を濾過によって回収して、標題化合物を白色固体（ＨＣｌ塩）として得た。LC-MS:  [M+H]+  =  162    1H  NMR  (400  MHz,  CDCl3)  δ  8.43  (br  s,  3H),  3.41-3.38  (m,  1H),  2.71  (t,  J  =  6.8  Hz,  2H),  2.13  (s,  3H),  2.11-2.03  (m,  1H),  2.00-1.91  (m,  1H),  1.82-1.66  (m,  2H),  1.52-1.32  (m,  4H),  0.92  (t,  J  =  7.2  Hz,  3H).
（合成実施例２）
ＴＬＲ７アゴニストとアミノ酸のコンジュゲーション
【０１５６】
この実施例は、ＨＡＴＵ化学を使用した、ＴＬＲ７アゴニストである化合物１（合成実施例１）とアラニンのアルファ−アミノ基のコンジュゲーションを実証する。
【化８２】
2021525773.tif 000085
【０１５７】
化合物１（１．０当量）のＤＭＦ（０．０４Ｍ）中溶液に、室温でエチルＬ−アラニネート塩酸塩（１．０当量）、ヘキサフルオロホスフェートアザベンゾトリアゾールテトラメチルウロニウム（ＨＡＴＵ、２．０当量）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＥＡ、４．０当量）を添加した。反応物を窒素下で４時間撹拌した。反応物を酢酸エチルで希釈し、有機層をブラインで洗浄し、乾燥させ、濃縮した。粗生成物を２：１  ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ（０．０４Ｍ）に溶解し、過剰なＮａＯＨ（３０．０当量）を添加した。反応物を８０℃で２時間撹拌した。反応混合物を分取ＨＰＬＣ（０．１％ＮＨ３／ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ）によって精製して、標題化合物を白色固体として得た。
ＬＣＭＳ：［Ｍ＋１］＋＝５５０
1H  NMR  (400  MHz,  MeOD)  δ  7.18  (dd,  J  =  8.4,  1.6  Hz,  1H),  6.98  (d,  J  =8.4  Hz,  1H),  6.91  (d,  J  =  1.6  Hz,  1H),  4.45-4.35  (m,  1H),  4.17-4.11  (m,  1H),  3.92  (s,  3H),  3.85-3.74  (m,  2H),  3.41  (s,  2H),  3.01-2.80  (m,  5H),  2.32  (s,  3H),  2.09-2.01  (m,  1H),  1.92-1.83  (m,  1H),  1.58-1.44  (m,  2H),  1.32-1.05  (m,  7H)  ,  0.83  (t,  J  =  6.8  Hz,  3H).
（合成実施例３）
ＴＬＲ７アゴニストとアミノ酸側鎖のコンジュゲーション
【０１５８】
この実施例は、ＮＨＳエステル化学を使用した、ＴＬＲ７アゴニストである化合物１（合成実施例１）とリシンの側鎖アミノ基のコンジュゲーションを実証する。
【化８３】
2021525773.tif 000086
【０１５９】
化合物１（１．０当量）のＤＭＦ（０．３６Ｍ）中溶液および１−ヒドロキシピロリジン−２，５−ジオン（２当量）に、ｒ．ｔ．でＤＣＣ（２．０当量）を添加した。反応物を窒素下ｒ．ｔ．で１６時間撹拌した。固体を濾別した。濾液をＥＡで希釈し、有機層をブラインで洗浄し、乾燥させ、濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝１０：１）によって精製して、ＮＨＳエステルを得た。ＮＨＳエステルを、ｒ．ｔ．で２：１  Ｈ２Ｏ／ＴＨＦ中アセチル−Ｌ−リシン（１５当量）と反応させた。反応は急速に進行し、５分以内に完了した。混合物を分取ＨＰＬＣ（移動相：ＮＨ３／ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ）によって精製して、標題化合物を白色固体として得た。
ＬＣＭＳ：［Ｍ＋１］＋＝６４９
1H  NMR  (400  MHz,  CD3OD)  δ  7.18  (dd,  J  =  8.4  Hz  2.0  Hz,  1H),  6.97  (d,  J  =8.4  Hz,  1H),  6.74  (d,  J  =  2.0  Hz,  1H),  4.46-4.40  (m,  1H),  4.23  (t,  J  =  6.4  Hz,  1H),  3.93  (s,  3H),  3.85-3.74  (m,  2H),  3.33  (s,  2H),  3.20-2.80  (m,  7H),  2.29  (s,  3H),  2.15-201  (m,  1H),  1.98  (s,  3H),  1.95-1.69  (m,  3H),  1.62-1.05  (m,  10H),  0.83  (t,  J  =  7.2  Hz,  3H).
（合成実施例４）
ペプチドコンジュゲーション
【０１６０】
この実施例は、マウスエピトープおよび合成実施例１に記載されるＴＬＲ７アゴニスト（化合物１）に基づくペプチドコンジュゲートの調製を記載する。
１．ペプチド配列
【０１６１】
以下は、ペプチドコンジュゲートに使用される１２個のＢａｌｂ／ｃ  Ｈ−２ｄエピトープのリストである。エピトープはＩＥＤＢ（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｉｅｄｂ．ｏｒｇ）から予測される。
【表２】
2021525773.tif 000087
1)  マウスMHC複合体はH-2と呼ばれる
2)  3つのMHCクラスI遺伝子座:  H-2D、H-2KおよびH-2Lが存在する
3)  2つのMHCクラスII遺伝子座:  H-2IAおよびH-2IEが存在する
4)  遺伝子が多型であるので、対立遺伝子は上付き文字で示される(例えば、Balb/cのH-2Dd)
5)  近交系マウスは、全ての遺伝子座について同じ対立遺伝子名を有する(例えば、Balb/cについてH-2d)
6)  全ての系統が全ての遺伝子座を有するわけではない(例えば、C57  Black/6はH-2Db、H-2KbおよびH-2IEbのみを有する)。これらは他の対立遺伝子についてヌルである
7)  最小エピトープは太字で強調される(クラスIIエピトープは通常、クラスIエピトープよりも長い)
２．ペプチドコンジュゲーション
【０１６２】
全てのペプチド合成が、標準的な固相ペプチド法に従った。示される具体的な配列については、Ｆｍｏｃ化学を使用し、カップリング試薬はＨＢＴＵとした。化合物１のコンジュゲーションを樹脂切断の直前にＮ末端で行った。例として、コンジュゲーションステップに使用される条件は、以下である：
・１〜２当量の合成実施例１からの化合物１
・等しい当量のＨＢＴＵ
・溶媒はＤＭＦである
・反応はｒ．ｔ．で一晩行われる
・樹脂切断後の純度は８０％超である。
【０１６３】
ペプチドコンジュゲートを、Ｃ１８カラムを使用して分取ＨＰＬＣによって精製した。移動相は、ＡにおいてＢを増加させる適切な勾配からなる（Ａ＝Ｈ２Ｏ中０．０５％ＴＦＡ；Ｂ＝ＣＨ３ＣＮ中０．０５％ＴＦＡ）。ペプチドおよびコンジュゲートされたペプチドの特性評価を以下に示す：
【表３−１】
2021525773.tif 000088
【表３−２】
2021525773.tif 000089
ａ（＊）は、ＴＬＲ７アゴニストである化合物１（合成実施例１）のペプチドコンジュゲートを示す
ｂ分析的ＨＰＬＣはＣ１８カラムで構成さ、移動相勾配０〜８０％、０．０５％ＴＦＡ／Ｈ２Ｏにおける０．０５％ＴＦＡ／ＭｅＣＮ
c質量分析データはApplied  Biosystem  Voyager  1099(正極性)で収集した
生物学的実施例
（生物学的実施例１）
ＨＥＫ  ＴＬＲ７アッセイ
【０１６４】
この実施例は、ＴＬＲ７アゴニストである化合物１が、アミノ酸とのコンジュゲーション（合成実施例２および３に記載されるコンジュゲート）後でさえＴＬＲ７アゴニスト活性を維持することを実証する。
【０１６５】
ＨＥＫ−Ｂｌｕｅ（商標）ＴＬＲ７細胞をＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎ（サンディエゴ、カリフォルニア）から購入した。以下の説明は製品情報シートから取った。
【０１６６】
「ＨＥＫ−Ｂｌｕｅ（商標）ｈＴＬＲ７細胞は、ＮＦ−ｋＢの活性化をモニタリングすることによって、ヒトＴＬＲ７（ｈＴＬＲ７）の刺激を試験するために設計されている。ＨＥＫ−Ｂｌｕｅ（商標）ｈＴＬＲ７細胞は、ｈＴＬＲ７遺伝子および最適化分泌型胚性アルカリホスファターゼ（ＳＥＡＰ）レポーター遺伝子のＨＥＫ２９３細胞へのコトランスフェクションによって得られた。ＳＥＡＰレポーター遺伝子は、５つのＮＦ−ｋＢおよびＡＰ−１結合部位に融合したＩＦＮ−ｂ最小プロモーターの制御下に置かれる。ＴＬＲ７リガンドによる刺激がＮＦ−ｋＢおよびＡＰ−１を活性化し、それによってＳＥＡＰの産生が誘導され、これがＨＥＫ−Ｂｌｕｅ（商標）検出細胞培養培地によって検出される。」
【０１６７】
典型的なアッセイプロトコールは以下のステップを含んでいた：
１．細胞を製品情報シートに従って培養した。
２．ＤＭＳＯ中１０ｍＭ化合物ストックを最初に３ｍＭに希釈し、次いで、ＤＭＳＯを使用して３倍段階希釈して、１０ｐｔ希釈を得た。
３．さらなる２０倍希釈のために３μｌの希釈ＤＭＳＯを５７μｌのＨＥＫ−Ｂｌｕｅ（商標）検出培地に添加した。
４．１０μｌのアッセイ培地中希釈化合物を、３８４ウェルプレート中の４０μｌの細胞培養物（ＨＥＫ−Ｂｌｕｅ（商標）検出培地中）に添加した。最終細胞濃度＝細胞８０００個／ウェル。
５．プレートを、３７℃、５％ＣＯ２で１６時間インキュベートした。６２０〜６５５ｎｍで分光光度計を使用してＳＥＡＰを決定した。
【０１６８】
以下の表は、ＨＥＫ−ＴＬＲ７活性の結果を要約している。
【表４】
2021525773.tif 000090
【０１６９】
ＨＥＫ−ＴＬＲ７データは、化合物１のＴＬＲ７アゴニスト活性が、アルファ位または側鎖（例えば、リシン）のいずれかでのアミノ酸との共有結合コンジュゲーション後であっても維持されることを実証している。
（生物学的実施例２）
免疫原性試験
【０１７０】
この予言的な実施例は、マウスにおいてペプチドコンジュゲート（＊ＡＰ）を、ペプチドおよび公知のアジュバントの混和物（ＡＰ−ｐ）、およびペプチド単独（ＡＰ）と比較する実験を記載する。
【数１】
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【０１７１】
Ｂａｌｂ／ｃマウスの免疫化後に、ペプチド−ＴＬＲ７コンジュゲート（＊ＡＰ）のＴ細胞刺激能力を、コンジュゲートされていないペプチド単独（ＡＰ）またはポリＩ：Ｃと混和したコンジュゲートされていないペプチド（ＡＰ−ｐ）と比較する。１２個の異なるエピトープ（ＡＰ１〜ＡＰ１２）を合わせて、２つのワクチン製剤にし（それぞれ６つのペプチド）、指示される用量で６〜８週齢の雌Ｂａｌｂ／ｃマウスを免疫化するために使用する（０日目および１４日目に２回ｉ．ｍ．）。対照動物をワクチン緩衝剤単独で免疫化する。試験の２１日目に、動物を屠殺し、脾臓を採取し、ホモジナイズして、脾細胞の単一細胞懸濁物を得る。脾細胞をｅｘ  ｖｉｖｏで、培地単独、各個々のコンジュゲートされていないペプチド、または１２個全てのコンジュゲートされていないペプチドのプールで再刺激する。培養後、細胞を、ＣＤ３、ＣＤ４およびＣＤ８に対する蛍光標識抗体で染色して、Ｔ細胞サブセットを特定する。次に、ＩＦＮ−ｇおよびＴＮＦ−ａに特異的な蛍光標識抗体を使用して、フローサイトメトリーによって、各ペプチドの個々に、およびプール全体に応答するＴ細胞の頻度を決定する。
【０１７２】
マウスのワクチン投与を以下に要約する：
【表５】
2021525773.tif 000092
（生物学的実施例３）
化合物１−ペプチドコンジュゲートのＨＥＫ  ＴＬＲ７活性
【０１７３】
この実施例は、化合物１  ＴＬＲ７アゴニストにコンジュゲートしたペプチド（２０〜３０アミノ酸長）が、ＴＬＲ７細胞活性を示すことを実証する。化合物１の非存在下では、「裸の」対応するペプチドは、測定可能なＴＬＲ７活性を示さない。
【表６】
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（＊）は、ＴＬＲ７アゴニストである化合物１（実施例１）のペプチドコンジュゲートを示す
均等物
【０１７４】
本発明を上に示される具体的な実施形態と合わせて説明してきたが、その多くの代替、改変およびその他の変形が当業者に明らかである。このような代替、改変および変形の全てが本発明の精神および範囲内に入ることが意図されている。
【配列表】
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【国際調査報告】
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