(57)【要約】  本発明は、R1、R2a、R2b、R3、R4、及びR5が本明細書に定義される通りである式(I)による化合物を開示する。本発明は、化合物、それらの製造の方法、それを含む医薬組成物、並びに本発明の化合物を投与することによるB型肝炎を含む疾病の予防及び／又は治療のための、それを使用する治療の方法に関する。【化１】2021505651.tif 000136【選択図】なし
2021505651.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Iによる化合物:
【化１】
2021505651.tif 000133
（式中
R1は、1つ以上の独立に選択されるハロにより任意に置換されているC3-6シクロアルキルであり;
各R2a及びR2bは:
−  H、
−  1つ以上の独立に選択される
〇  ハロ、
〇  -OH、
〇  -CN、
〇  C1-4アルコキシ、
〇  C1-4チオアルコキシ、又は
〇  -SO2-C1-4アルキル
により任意に置換されているC1-4アルキル;
−  1つ以上の独立に選択される
〇  -CN、
〇  ハロ、
〇  -OH、
〇  -SO2-C1-4アルキル、
〇  1つ以上の独立に選択されるハロにより任意に置換されているC1-4アルキル、又は
〇  1つ以上の独立に選択されるハロにより任意に置換されているC1-4アルコキシ
により任意に置換されているC3-7シクロアルキル;及び
−  1つ以上の独立に選択されるO、N、又はSヘテロ原子を含み、1つ以上の独立に選択される
〇  -CN、
〇  ハロ、
〇  -OH、
〇  -SO2-C1-4アルキル、
〇  =O、
〇  1つ以上の独立に選択されるハロにより任意に置換されているC1-4アルキル、又は
〇  1つ以上の独立に選択されるハロにより任意に置換されているC1-4アルコキシ
により任意に置換されている4〜7員単環式ヘテロシクロアルキル
から独立に選択され;
R3は
−  1つ以上の独立に選択される
〇  ハロ、
〇  CN、
〇  -OH、
〇  SO2-C1-4アルキル、
〇  C1-4アルコキシ、若しくは
〇  1つ以上の独立に選択されるO、N、若しくはSヘテロ原子を含む4〜7員単環式ヘテロシクロアルキル
により任意に置換されているC1-4アルキル、
−  ハロ、
−  -CN、又は
−  1つ以上の独立に選択されるR7基により任意に置換されているC1-4アルコキシ
であり;
R4は
−  H、
−  -SO2-C1-4アルキル、
−  ハロ、
−  CN、
−  1つ以上の独立に選択されるハロにより任意に置換されているC1-4アルキル、
−  C1-4アルコキシ
であり
R5は、H、-CN、ハロ、又は1つ以上の独立に選択されるハロにより任意に置換されているC1-4アルキルであり;且つ
各R6a、R6b、R6c、及びR6dは、独立に、H又はC1-4アルキルであり
各R7は、独立に
−  ハロ、
−  -CN、
−  -OH、
−  -SO2-C1-4アルキル、
−  C1-4アルコキシ、
−  -フェニル、
−  1つ以上の独立に選択されるO、N、又はSヘテロ原子を含む5〜6員単環式ヘテロアリール、
−  1つ以上の独立に選択されるR8aにより任意に置換されているC3-7シクロアルキル、
−  1つ以上の独立に選択されるO、N、又はSを含み、1つ以上の独立に選択されるR8bにより任意に置換されている単環式4〜7員ヘテロシクロアルキル、及び
−  1つ以上の独立に選択されるO、N、又はSを含み、1つ以上の独立に選択されるR8cにより任意に置換されている縮合/スピロ/架橋4〜10員ヘテロシクロアルキル
であり;
各R8a、R8b、及びR8cは:
−  ハロ、
−  -CN、
−  -SO2-C1-4アルキル、
−  =O、
−  1つ以上の独立に選択されるハロ又は-OHにより任意に置換されているアルキル、
−  -C(=O)NR6aR6b、
−  -C1-4アルコキシ、又は
−  -C(=O)C1-4アルキル
から独立に選択される);
又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、若しくは該溶媒和物の医薬として許容し得る塩。
【請求項２】
R1がシクロプロピル又はシクロブチルである、請求項１記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
【請求項３】
R2aが、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、又は-C(CH3)3である、請求項１又は２記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
【請求項４】
前記化合物が式IIIによるものである、請求項１記載の化合物又は医薬として許容し得る塩:
【化２】
2021505651.tif 000134
。
【請求項５】
R2bがC1-4アルキルである、請求項１〜４のいずれか一項記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
【請求項６】
R2bが、1つ以上の独立に選択される-CN、ハロ、-OH、-SO2-C1-4アルキル、=O、1つ以上の独立に選択されるハロにより任意に置換されているC1-4アルキル、又は1つ以上の独立に選択されるハロにより任意に置換されているC1-4アルコキシにより置換されているオキセタニルである、請求項１〜４のいずれか一項記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
【請求項７】
R2bが、1つ以上の独立に選択される-CN、F、-OH、-SO2-CH3、=O、-CH3、-CH2CH3、-CF3、-CHF2、-CH2CF3、-OCH3、-OCH2CH3、又は-OCF3により置換されているオキセタニルである、請求項１〜４のいずれか一項記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
【請求項８】
前記化合物が式IVa又はIVbによるものである、請求項１記載の化合物又は医薬として許容し得る塩:
【化３】
2021505651.tif 000135
。
【請求項９】
R4が、ハロ、-CN、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、-CF3、-OCH3、又は-OCH2CH3である、請求項１〜８のいずれか一項記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
【請求項１０】
R3が、F、Cl、-CN、-OCH3、-OCH2CH3、-OCH2CH2CH3、-OCH2CH(CH3)2、又は-OCH(CH3)2である、請求項１〜９のいずれか一項記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
【請求項１１】
R3が、-OCH3、-OCH2CH3、-OCH2CH2CH3、-OCH2CH(CH3)2、又は-OCH(CH3)2であり、そのそれぞれが、1、2、又は3つの独立に選択されるR7基により置換されている、請求項１〜９のいずれか一項記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
【請求項１２】
R7が、F、-CN、-OH、-SO2CH3、-SO2CH2CH3、-OCH3、-OCH2CH3、-OCH2CH2CH3、-OCH2CH(CH3)2、-OCH(CH3)2、フェニル、オキセタニル、オキサゾリジニル、アゼチジニル、又はピロリルである、請求項１１記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
【請求項１３】
医薬として許容し得る担体及び治療上有効な量の請求項１〜１２のいずれか一項記載の化合物又はその医薬として許容し得る塩を含む医薬組成物。
【請求項１４】
医薬に使用するための、請求項１〜１２のいずれか一項記載の化合物若しくはその医薬として許容し得る塩又は請求項１３記載の医薬組成物。
【請求項１５】
B型肝炎の予防及び／又は治療に使用するための、請求項１〜１２のいずれか一項記載の化合物若しくはその医薬として許容し得る塩又は請求項１３記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
(発明の分野)
本発明は、B型肝炎ウイルス(HBV)の予防及び／又は治療に有用な化合物に関する。本発明は、本発明の化合物の製造の方法、本発明の化合物を含む医薬組成物、本発明の化合物を投与することによるB型肝炎ウイルスの予防及び／又は治療の方法も提供する。
【背景技術】
【０００２】
(発明の背景)
世界中で2億4000万人がHBVに慢性感染していると推定されている。世界中で毎年75万を超える死亡が、肝硬変、肝不全、及び肝細胞癌(HCC)を含むHBVに関連する末期合併症に帰せられるが、それらは、曝露後数十年で起こり、世界的に癌死の2番目の主たる原因である(Dawoodらの文献、2017)。
【０００３】
B型肝炎ウイルス(HBV)はヘパドナウイルス科に属し、それぞれ、コア、ポリメラーゼ、エンベロープ、及びX-タンパク質をコードする4つの重複するオープンリーディングフレーム(ORF)からなる、小型のエンベロープがついた部分的に二本鎖のDNAウイルスである(Gomez-Moreno及びGaraigortaの文献、2017)。
【０００４】
HBVの感染は、通常、体液、血液、皮膚病変への曝露、性的関係、又は母から乳児への感染により起こる。HBVへの最初の曝露時に、肝細胞内で相当な自然免疫応答を引き起こすことができないこと及び免疫抑制肝臓微小環境が、感染した肝細胞の不完全な除去及び慢性B型肝炎(CHB)感染の確立を起こし得るが、それは5つの臨床期に分類できる:(1)高いHBV血清力価(〜2×109 IU/mL)及び活性に乏しいが完全にサイレントではないHBV特異的CD8+ T細胞を特徴とする免疫寛容;(2)免疫介在性の肝損傷の観察可能な炎症及びHBV力価の変動を特徴とする免疫反応性HBV e抗原(HBeAg)陽性;(3)低いHBV力価及び前述の免疫反応性期と比べてゆっくりとした肝臓損傷進行を特徴とする非活動性HBVキャリア;(4)検出不可能なHBV血清DNA及びHBV表面抗原を認識する抗体を特徴とする、疾患進行が停止するHBeAg陰性慢性肝炎(又は「機能的治癒」);並びに(5)ウイルスの共有結合性閉環状DNA(cccDNA)が肝臓内に存在したままだが、転写抑制(transcriptionally silent)されており、例えば免疫抑制療法の下で再活性化(reactived)し得る、HBV表面抗原(HBsAg)陰性期(Tuらの文献、2017)。
【０００５】
感染は、HBVビリオンが、プロテオグリカンとの初期の相互作用により肝細胞と相互作用することで始まり、それに続いて、HBVの証明された侵入因子であるタウロコール酸ナトリウム輸送体ペプチド(NTCP)によりウイルスが肝細胞に侵入する(Huanらの文献、2012)。内部移行に続いて、ウイルス粒子の外側タンパク膜が外されて内部カプシドが露出され、次いでそれが肝細胞の核に輸送されて侵入する。次いで、このカプシドは分解されて、放出されたDNAが最初に弛緩型環状DNA(rcDNA)に変換することが可能になり、次いで、ウイルスDNAの非常に安定な閉環状DNA(cccDNA)ミニ染色体形態に変換される。次いで、cccDNAは、全てのウイルスRNA転写物の産生のためのテンプレートとして機能し、次いで、それは、新たな感染性ウイルス粒子の組立てに要される異なるウイルスタンパク質に翻訳される。
【０００６】
ペグ化インターフェロン(Peg-IFN)-αは、免疫応答を促進してHBeAg及びHBsAg血清変換をもたらすように意図された、CHBのために現在使用される認可された療法であるが、これは、ウイルスが宿主免疫系の制御化にあり、循環しているHBV DNAを検出不可能なレベルに減少させ、ウイルスを宿主免疫系の制御下にすることを意味する。残念なことに、Peg-IFN-α治療は、数年の治療の後ですら限定された成功率を示し(van Zonneveldらの文献、2004)、さらに、IFNが多くの患者で相当な有害作用と関連しているため、それは、限定された数の患者において一時的にのみ使用されている。
【０００７】
第2の治療タイプは、新たなウイルス粒子中でHBV DNA形成を抑制するように作用するが、cccDNA集団には全く効果がないヌクレオシド（ヌクレオチド）(nucleos(t)ide)アナログ逆転写酵素阻害剤(NUC)である(Sussmanの文献、2009)。NUCによる治療は、肝臓壊死炎症の減少、肝線維症の退縮率の増加、アラニンアミノトランスフェラーゼ(ALT)レベルの正常化、肝硬変、代償不全、及びhCCのリスク減少、並びに生存率の増加と関連する(Ruanらの文献、2013)。
【０００８】
NUC療法を受けている患者において、HBsAg減少は、長期療法(5〜7年)によっても一般的に非常に低い(Butiらの文献、2015)。HBV複製がコントロール良好であっても、HBsAg除去が患者の生存期間の間に起こりそうにないことが示された(Chevaliezらの文献、2013)。この非常に低いHBsAg喪失の率、ウイルスリバウンドの高い率、及び中断と共に通常起こる生化学的再燃により、生涯のNUC療法が、一般的に大多数の患者に推奨されている。
【０００９】
このように、現在の薬物は満足できるものではなく、HBVの治療のための新規な作用様式を有する新たな療法に強い関心がある。例えば、新たに感染した肝細胞中のウイルス複製の遮断、及びcccDNA産生の予防、cccDNAの抑制、及び／又はcccDNA転写活性の遮断。
【発明の概要】
【００１０】
(発明の概要)
本発明は、HBVの予防及び/又は治療のための新規化合物の特定に基づいている。本発明は、これらの化合物の製造の方法、これらの化合物を含む医薬組成物、並びに本発明の化合物を投与することによるHBVの予防及び/又は治療の方法も提供する。
【００１１】
したがって、本発明の第1の態様において、式Iを有する本発明の化合物が提供される:
【化１】
2021505651.tif 000003
（式中
R1は、1つ以上の独立に選択されるハロにより任意に置換されているC3-6シクロアルキルであり;
各R2a及びR2bは:
−  H、
−  1つ以上の独立に選択される
〇  ハロ、
〇  -OH、
〇  -CN、
〇  C1-4アルコキシ、
〇  C1-4チオアルコキシ、又は
〇  -SO2-C1-4アルキル
により任意に置換されているC1-4アルキル;
−  1つ以上の独立に選択される
〇  -CN、
〇  ハロ、
〇  -OH、
〇  -SO2-C1-4アルキル、
〇  1つ以上の独立に選択されるハロにより任意に置換されているC1-4アルキル、又は
〇  1つ以上の独立に選択されるハロにより任意に置換されているC1-4アルコキシ
により任意に置換されているC3-7シクロアルキル;及び
−  1つ以上の独立に選択されるO、N、又はSヘテロ原子を含み、1つ以上の独立に選択される
〇  -CN、
〇  ハロ、
〇  -OH、
〇  -SO2-C1-4アルキル、
〇  =O、
〇  1つ以上の独立に選択されるハロにより任意に置換されているC1-4アルキル、又は
〇  1つ以上の独立に選択されるハロにより任意に置換されているC1-4アルコキシ
により任意に置換されている4〜7員単環式ヘテロシクロアルキル
から独立に選択され;
R3は
−  1つ以上の独立に選択される
〇  ハロ、
〇  CN、
〇  -OH、
〇  SO2-C1-4アルキル、
〇  C1-4アルコキシ、若しくは
〇  1つ以上の独立に選択されるO、N、若しくはSヘテロ原子を含む4〜7員単環式ヘテロシクロアルキル
により任意に置換されているC1-4アルキル、
−  ハロ、
−  -CN、又は
−  1つ以上の独立に選択されるR7基により任意に置換されているC1-4アルコキシ
であり;
R4は
−  H、
−  -SO2-C1-4アルキル、
−  ハロ、
−  CN
−  1つ以上の独立に選択されるハロにより任意に置換されているC1-4アルキル、又は
−  -C1-4アルコキシ
であり;
R5は、H、-CN、ハロ、又は1つ以上の独立に選択されるハロにより任意に置換されているC1-4アルキルであり;且つ
各R6a、R6b、R6c、及びR6dは、独立に、h又はC1-4アルキルであり;
各R7は、独立に、
−  ハロ、
−  -CN、
−  -OH、
−  -SO2-C1-4アルキル、
−  C1-4アルコキシ、
−  フェニル、
−  1つ以上の独立に選択されるO、N、又はSヘテロ原子を含む5〜6員単環式ヘテロアリール、
−  1つ以上の独立に選択されるR8aにより任意に置換されているC3-7シクロアルキル、
−  1つ以上の独立に選択されるO、N、又はSを含み、1つ以上の独立に選択されるR8bにより任意に置換されている単環式4〜7員ヘテロシクロアルキル、及び
−  1つ以上の独立に選択されるO、N、又はSを含み、1つ以上の独立に選択されるR8cにより任意に置換されている縮合/スピロ/架橋4〜10員ヘテロシクロアルキル
であり;
各R8a、R8b、及びR8cは:
−  ハロ、
−  -CN、
−  -SO2-C1-4アルキル、
−  =O、
−  1つ以上の独立に選択されるハロ若しくは-OHにより任意に置換されているアルキル、
−  -C(=O)NR6aR6b、
−  -C1-4アルコキシ、又は
−  -C(=O)C1-4アルキル
から独立に選択される）。
【００１２】
特定の態様において、本発明の化合物は、B型肝炎の予防及び/又は治療に使用するために提供される。
【００１３】
さらに、意外にも、本発明の化合物がインビボで良好な効力及び曝露を示すことも実証された。これにより、低い用量レジメン及び単独又は他の医薬品と組み合わせた使用の好適性がもたらされ得る。
【００１４】
さらなる態様において、本発明は、本発明の化合物、及び医薬担体、賦形剤、又は希釈剤を含む医薬組成物を提供する。特定の態様において、該医薬組成物は、本発明の化合物と組み合わせた使用に好適なさらなる治療上有効な成分をさらに含み得る。より特定の態様において、該さらなる治療上有効な成分は、HBVの治療のための薬剤である。
【００１５】
さらに、本明細書に開示の医薬組成物及び治療方法に有用な本発明の化合物は、調製され使用される状態で医薬として許容し得るものである。
【００１６】
本発明のさらなる態様において、本発明は、本明細書に列記のものから選択される病態、特にHBVを患っている哺乳動物、とりわけヒトを治療する方法であって、有効量の本明細書に記載の本発明の医薬組成物又は化合物を投与することを含む方法を提供する。
【００１７】
本発明は、医薬に使用するための、本発明の化合物、及び好適な医薬担体、賦形剤、又は希釈剤を含む医薬組成物も提供する。特定の態様において、該医薬組成物は、HBVの予防及び/又は治療に使用するものである。
【００１８】
追加の態様において、本発明は、本発明の化合物を合成する方法を、本明細書で後に開示される代表的な合成プロトコル及び経路と共に提供する。
【００１９】
他の目的及び利点は、以下の詳細な説明の考察から当業者に明らかになるだろう。
本発明の化合物が代謝されて、生物活性のある代謝物が生じ得ることが認識されるだろう。
【図面の簡単な説明】
【００２０】
(図面の簡単な説明)
【図１】図1は実施例3を指し、疾患ビヒクル群(黒菱形)、0.3mg/kgの例示的な化合物46により経口的に1日1回処置された群(星印)、3mg/kgの例示的な化合物46により経口的に1日1回処置された群(星印)、30mg/kgの例示的な化合物46により経口的に1日1回処置された群(黒四角)、1mg/kgの例示的な化合物44により経口的に1日1回処置された群(ばつ印)、及び10mg/kgの例示的な化合物44により経口的に1日1回処置された群(黒丸)の、感染マウスHBsAg血液レベルを示す。
【発明を実施するための形態】
【００２１】
(発明の詳細な説明)
(定義)
以下の用語は、それとともに以下に提示される意味を有するものとし、本発明の説明及び意図される範囲を理解する際に有用である。
【００２２】
化合物、そのような化合物を含む医薬組成物、並びにそのような化合物及び組成物を使用する方法を包含し得る本発明を説明する場合、以下の用語は、存在する場合、特記されない限り、以下の意味を有する。本明細書に記載される場合、以下に定義される部分はいずれも種々の置換基で置換され得ること、及びそれぞれの定義が、そのような置換部分を以下に述べられるその範囲内に含むように意図されていることも理解されるべきである。特記されない限り、「置換された」という用語は、以下に述べられるように定義されるものとする。「基」及び「ラジカル」という用語が、本明細書で使用される場合、互換的であるとみなされ得ることがさらに理解されるべきである。
【００２３】
「a」及び「an」という冠詞は、該冠詞の文法上の対象の1つ又は1つを超える（すなわち、少なくとも1つ）を指すように本明細書において使用され得る。例として、「アナログ(an analogue)」は、1つのアナログ又は1つを超えるアナログを意味する。
【００２４】
「アルキル」は、明示された数の炭素原子を有する直鎖又は分岐鎖の脂肪族炭化水素を意味する。特定のアルキル基は、1〜6個の炭素原子又は1〜4個の炭素原子を有する。分岐鎖は、メチル、エチル、又はプロピルなどの１個以上のアルキル基が直鎖アルキル鎖に結合されていることを意味する。特定のアルキル基は、メチル（-CH3）、エチル（-CH2-CH3）、n-プロピル（-CH2-CH2-CH3）、イソプロピル（-CH(CH3)2）、n-ブチル（-CH2-CH2-CH2-CH3）、tert-ブチル（-CH2-C(CH3)3）、sec-ブチル（-CH2-CH(CH3)2）、n-ペンチル（-CH2-CH2-CH2-CH2-CH3）、n-ヘキシル（-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-CH3）、及び1,2-ジメチルブチル（-CHCH3)-C(CH3)H2-CH2-CH3）である。特定のアルキル基は1〜4個の炭素原子を有する。
【００２５】
「アルケニル」は、明示された数の炭素原子を有する一価オレフィン系（不飽和）炭化水素基を指す。特定のアルケニルは、2〜8個の炭素原子、及びより具体的には2〜6個の炭素原子を有し、それは直鎖でも分岐鎖でもよく、且つ少なくとも一個、特に1〜2個のオレフィン系不飽和部位を有する。特定のアルケニル基は、エテニル（-CH=CH2）、n-プロペニル（-CH2CH=CH2）、イソプロペニル（-C(CH3)=CH2）などを包含する。
【００２６】
「アルキレン」は、直鎖でも分岐鎖でもよい、明示された数の炭素原子、具体的には1〜6個の炭素原子を、より具体的には1〜4個の炭素原子を有する、二価アルケンラジカル基を指す。この用語は、メチレン（-CH2-）、エチレン（-CH2-CH2-）、又は-CH(CH3)-などの基により例示される。
【００２７】
「アルキニレン」は、直鎖でも分岐鎖でもよい、明示された数の炭素原子及び三重結合を、具体的には2〜6個の炭素原子を、より具体的には2〜4個の炭素原子を有する、二価アルキンラジカル基を指す。この用語は、-C≡C-、-CH2-C≡C-、及び-C(CH3)H-C≡CH-などの基により例示される。
【００２８】
「アルコキシ」は、アルキル基が明示された数の炭素原子を有する基O-アルキルを指す。具体的には、該用語は、基-O-C1-6アルキルを指す。具体的なアルコキシ基は、メトキシ、エトキシ、n-プロポキシ、イソプロポキシ、n-ブトキシ、tert-ブトキシ、sec-ブトキシ、n-ペントキシ、n-ヘキソキシ、及び1,2-ジメチルブトキシである。具体的なアルコキシ基は、低級アルコキシ、すなわち1〜6個の炭素原子を有するものである。さらに具体的なアルコキシ基は、1〜4個の炭素原子を有する。
【００２９】
「アミノ」はラジカル-NH2を指す。
【００３０】
「アリール」は、親芳香環系の単一の炭素原子からの1個の水素原子の除去により誘導される一価芳香族炭化水素基を指す。具体的には、アリールは、明示された数の環原子を有する、単環式又は縮合多環式の芳香環構造を指す。具体的に、該用語は、6〜10個の環員を含む基を包含する。具体的なアリール基は、フェニル及びナフチルを包含する。
【００３１】
「シクロアルキル」は、明示された数の環原子を有する、単環式、縮合多環式、架橋多環式、又はスピロ環式の非芳香族ヒドロカルビル環構造を指す。シクロアルキルは、3〜12個の炭素原子、具体的には3〜10個、より具体的には3〜7個の炭素原子を有し得る。そのようなシクロアルキル基は、例としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、及びシクロヘプチルのような単環構造を包含する。
【００３２】
「シアノ」はラジカル-CNを指す。
【００３３】
「ハロ」又は「ハロゲン」は、フルオロ（F）、クロロ（Cl）、ブロモ（Br）、及びヨード（I）を指す。具体的なハロ基は、フルオロかクロロのいずれかである。
【００３４】
化合物又は化合物上に存在する基を説明するために使用される場合の「ヘテロ」は、該化合物又は基中の1個以上の炭素原子が窒素、酸素、又は硫黄ヘテロ原子により置き換えられていることを意味する。ヘテロは、1〜4個、具体的には1〜3個のヘテロ原子、より典型的には1又は2個のヘテロ原子、例えば単一のヘテロ原子を有するアルキル、例えばヘテロアルキル、シクロアルキル、例えばヘテロシクロアルキル、アリール、例えばヘテロアリールなど、上述のヒドロカルビル基のいずれにも適用され得る。
【００３５】
「ヘテロアリール」は、O、N及びSから独立に選択される1個以上のヘテロ原子及び明示された数の環原子を含む、単環式又は縮合多環式の芳香環構造を意味する。具体的には、芳香環構造は、5〜9個の環員を有し得る。ヘテロアリール基は、例えば、5員若しくは6員の単環式環又は、縮合5員環及び6員環から若しくは2個の縮合6員環から、若しくはさらなる例として2個の縮合5員環から形成された縮合二環式構造であり得る。各環は、典型的には窒素、硫黄及び酸素から選択される4個までのヘテロ原子を含有し得る。典型的には、ヘテロアリール環は、4個までのヘテロ原子を、より典型的には3個までのヘテロ原子を、より通常には2個まで、例えば単一のヘテロ原子を含有するであろう。一実施態様において、ヘテロアリール環は、少なくとも1個の環窒素原子を含む。ヘテロアリール環中の窒素原子は、イミダゾール又はピリジンの場合のように塩基性でも、インドール又はピロール窒素の場合のように本質的に非塩基性でもあり得る。一般的に、ヘテロアリール基中に存在する塩基性窒素原子の数は、環のあらゆるアミノ基置換基を含めて、5個未満であろう。
【００３６】
5員単環式ヘテロアリール基の例は、ピロリル、フラニル、チオフェニル、イミダゾリル、フラザニル、オキサゾリル、オキサジアゾリル、オキサトリアゾリル、イソキサゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、ピラゾリル、トリアゾリル及びテトラゾリル基を包含するが、これらに限定されない。
【００３７】
6員単環式ヘテロアリール基の例は、ピリジニル、ピラジニル、ピリダジニル、ピリミジニル及びトリアジニルを包含するが、これらに限定されない。
【００３８】
別の5員環に縮合した5員環を含む二環式ヘテロアリール基の具体例は、イミダゾチアゾリル及びイミダゾイミダゾリルを包含するが、これらに限定されない。
【００３９】
5員環に縮合した6員環を含む二環式ヘテロアリール基の具体例は、ベンゾフラニル、ベンゾチオフェニル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾキサゾリル、イソベンゾキサゾリル、ベンズイソキサゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾイソチアゾリル、イソベンゾフラニル、インドリル、イソインドリル、インドリジニル、プリニル（例えばアデニン、グアニン）、インダゾリル、ピラゾロピリミジニル、トリアゾロピリミジニル、及びピラゾロピリジニル基を包含するが、これらに限定されない。
【００４０】
2個の縮合した6員環を含む二環式ヘテロアリール基の具体例は、キノリニル、イソキノリニル、ピリドピリジニル、キノキサリニル、キナゾリニル、シンノリニル、フタラジニル、ナフチリジニル、及びプテリジニル基を包含するが、これらに限定されない。具体的なヘテロアリール基は、チオフェニル、ピロリル、ベンゾチオフェニル、ベンゾフラニル、インドリル、ピリジニル、キノリニル、イミダゾリル、オキサゾリル及びピラジニルから誘導されるものである。
【００４１】
代表的なヘテロアリールの例には、下記のものがある:
【化２】
2021505651.tif 000004
(式中、各Yは、＞C=O、NH、O、及びSから選択される）。
【００４２】
「ヘテロシクロアルキル」は、O、N、及びSから独立に選択される１個以上のヘテロ原子及び明示された数の環原子を含む、単環式、縮合多環式、スピロ環式、又は架橋多環式の非芳香族完全飽和環構造を意味する。ヘテロシクロアルキル環構造は、4〜12個の環員、具体的には4〜10個の環員、より具体的には4〜7個の環員を有し得る。各環は、典型的には窒素、硫黄、及び酸素から選択される、4個までのヘテロ原子を含み得る。典型的には、ヘテロシクロアルキル環は、4個までのヘテロ原子、より典型的には3個までのヘテロ原子、より普通には2個まで、例えば単一のヘテロ原子を含むであろう。ヘテロ環式環の例は、アゼチジニル、オキセタニル、チエタニル、ピロリジニル（例えば、1-ピロリジニル、2-ピロリジニル、及び3-ピロリジニル）、テトラヒドロフラニル（例えば、1-テトラヒドロフラニル、2-テトラヒドロフラニル、及び3-テトラヒドロフラニル）、テトラヒドロチオフェニル（例えば、1-テトラヒドロチオフェニル、2-テトラヒドロチオフェニル、及び3-テトラヒドロチオフェニル）、ピペリジニル（例えば、1-ピペリジニル、2-ピペリジニル、3-ピペリジニル、及び4-ピペリジニル）、テトラヒドロピラニル（例えば、4-テトラヒドロピラニル）、テトラヒドロチオピラニル（例えば、4-テトラヒドロチオピラニル)、モルホリニル、チオモルホリニル、ジオキサニル、又はピペラジニルを包含するが、これらに限定されない。
【００４３】
本明細書において使用される通り、「ヘテロシクロアルケニル」という用語は、少なくとも1個の二重結合を含む「ヘテロシクロアルキル」を意味する。ヘテロシクロアルケニル基の具体例は、以下の実例に示されている：
【化３】
2021505651.tif 000005
（式中、各Wは、CH2、NH、O、及びSから選択され;各Yは、NH、O、C(=O)、-SO2、及びSから選択され;及び各Zは、N又はCHから選択される）。
【００４４】
単環式環の特定の例は、以下の実例に示されている:
【化４】
2021505651.tif 000006
（式中、各W及びYは、-CH2-、-NH-、-O-、及び-S-から独立に選択される）。
【００４５】
縮合二環式環の特定の例は、以下の実例に示されている:
【化５】
2021505651.tif 000007
（式中、各W及びYは、-CH2-、-NH-、-O-、及び-S-から独立に選択される）。
【００４６】
架橋二環式環の特定の例は、以下の実例に示されている:
【化６】
2021505651.tif 000008
（式中、各W及びYは、-CH2-、-NH-、-O-、及び-S-から独立に選択され、及び各Zは、N又はCHから選択される）。
【００４７】
スピロ環式環の特定の例は、以下の実例に示されている:
【化７】
2021505651.tif 000009
（式中、各Yは、-CH2-、-NH-、-O-、及び-S-から選択される）。
【００４８】
「ヒドロキシル」はラジカル-OHを指す。
【００４９】
「オキソ」はラジカル=Oを指す。
【００５０】
「置換された」は、1個以上の水素原子が、それぞれ独立に、同じ又は異なる置換基（複数可）により置換されている基を指す。
【００５１】
「スルホ」又は「スルホン酸」は、-SO3Hなどのラジカルを指す。
【００５２】
「チオール」は基-SHを指す。
【００５３】
本明細書で使用される通り、「1個以上により置換された」という用語は、1〜4個の置換基を指す。一実施態様において、この用語は、1〜3個の置換基を指す。さらなる実施態様において、この用語は、1又は2個の置換基を指す。またさらなる実施態様において、この用語は、1個の置換基を指す。
【００５４】
「チオアルコキシ」は、基-S-アルキルを指し、ここで、アルキル基は、明示された数の炭素原子を有する。特に、該用語は、基-S-C1-6アルキルを指す。具体的なチオアルコキシ基は、チオメトキシ、チオエトキシ、n-チオプロポキシ、イソチオプロポキシ、n-チオブトキシ、tert-チオブトキシ、sec-チオブトキシ、n-チオペントキシ、n-チオヘキソキシ、及び1,2-ジメチルチオブトキシである。具体的なチオアルコキシ基は、低級チオアルコキシ、即ち、1〜6個の炭素原子を伴うものである。さらに具体的なアルコキシ基は、1〜4個の炭素原子を有する。
【００５５】
有機合成の分野の当業者は、安定で、化学的に実現可能なヘテロ環式環中のヘテロ原子の最大数が、芳香族であるか非芳香族であるかに関わらず、環のサイズ、不飽和度、及びヘテロ原子の原子価により決定されることを認識しているであろう。一般に、ヘテロ環式環は、芳香族ヘテロ環が化学的に実現可能で且つ安定である限り、1〜4個のヘテロ原子を有し得る。
【００５６】
「医薬として許容し得る」とは、動物、より具体的にはヒトでの使用について、連邦政府若しくは州政府の規制当局又は米国以外の国の対応する規制当局により承認されている又は承認され得ること、或いは米国薬局方又は他の一般に認められた薬局方に収載されていることを意味する。
【００５７】
「医薬として許容し得る塩」は、医薬として許容し得るものであり、親化合物の所望の薬理活性を有する本発明の化合物の塩を指す。具体的には、そのような塩は非毒性であり、無機又は有機の酸付加塩及び塩基付加塩であり得る。具体的には、そのような塩は：(1)塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などの無機酸により形成された；又は酢酸、プロピオン酸、ヘキサン酸、シクロペンタンプロピオン酸、グリコール酸、ピルビン酸、乳酸、マロン酸、コハク酸、リンゴ酸、マレイン酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、3-(4-ヒドロキシベンゾイル)安息香酸、ケイ皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、1,2-エタン-ジスルホン酸、2-ヒドロキシエタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、4-クロロベンゼンスルホン酸、2-ナフタレンスルホン酸、4-トルエンスルホン酸、カンファースルホン酸、4-メチルビシクロ[2.2.2]-オクタ-2-エン-1-カルボン酸、グルコヘプトン酸、3-フェニルプロピオン酸、トリメチル酢酸、tert-ブチル酢酸、ラウリル硫酸、グルコン酸、グルタミン酸、ヒドロキシナフトエ酸、サリチル酸、ステアリン酸、ムコン酸などの有機酸により形成された酸付加塩；或いは(2)親化合物中に存在する酸性プロトンが、金属イオン、例えば、アルカリ金属イオン、アルカリ土類イオン、若しくはアルミニウムイオンにより置換されているか；又はエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、N-メチルグルカミンなどのような有機塩基と配位するときに形成される塩を包含する。塩は、さらに一例としてのみであるが、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、アンモニウム、テトラアルキルアンモニウムなど；及び化合物が塩基性官能性を含有する場合、塩酸塩、臭化水素酸塩、酒石酸塩、メシル酸塩、酢酸塩、マレイン酸塩、シュウ酸塩などの無毒な有機酸又は無機酸の塩を包含する。「医薬として許容し得るカチオン」という用語は、酸性官能基の許容し得るカチオン性対イオンを指す。そのようなカチオンは、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、アンモニウム、テトラアルキルアンモニウムカチオンなどにより例示される。
【００５８】
「医薬として許容し得るビヒクル」は、それとともに本発明の化合物が投与される希釈剤、補助剤、賦形剤、又は担体を指す。
【００５９】
「プロドラッグ」は、開裂可能な基を有し、且つ加溶媒分解によるか又は生理的条件下で、インビボで医薬として活性がある本発明の化合物になる、本発明の化合物の誘導体を含む化合物を指す。そのような例は、コリンエステル誘導体など、N-アルキルモルホリンエステルなどを包含するが、これらに限定されない。
【００６０】
「溶媒和物」は、溶媒と、通常は溶媒和反応により会合している化合物の形態を指す。この物理的会合は水素結合を含む。従来の溶媒は、水、EtOH、酢酸などを包含する。本発明の化合物は、例えば、結晶形態で調製され得且つ溶媒和又は水和され得る。好適な溶媒和物は、水和物などの医薬として許容し得る溶媒和物を包含し、化学量論的溶媒和物と非化学量論的溶媒和物の両者をさらに包含する。ある例において、溶媒和物は、例えば、1個以上の溶媒分子が、結晶性固体の結晶格子中に組み込まれている場合、単離可能だろう。「溶媒和物」は、溶液相と単離可能溶媒和物との両者を包含する。代表的な溶媒和物は、水和物、エタノラート、及びメタノラートを包含する。
【００６１】
「対象」は、ヒトを包含する。「ヒト」、「患者」及び「対象」という用語は、本明細書において互換的に使用される。
【００６２】
「有効量」は、疾患を治療するために対象に投与されたとき、該疾患のために治療をもたらすのに充分である、本発明の化合物の量を意味する。「有効量」は、化合物、疾患及びその重症度、並びに治療されるべき対象の年齢、体重などにより多様となり得る。
【００６３】
「予防する」又は「予防」は、疾患を引き起こす原因物質に暴露され得るか、又は疾患に罹る素因を有し得る対象における、疾患の発症前に疾患又は障害を獲得又は発症するリスクの低下（すなわち、疾患の臨床症状の少なくとも1つを発症させないこと）を指す。
【００６４】
「予防(prophylaxis)」という用語は、「予防(prevention)」に関連し、その目的が、疾患を治療し又は治癒させることというよりは、疾患を予防することである対策又は処置を指す。予防対策の非限定的な例は、ワクチンの投与；例えば、動けないことが原因で血栓症のリスクがある入院患者への低分子量ヘパリンの投与；及びマラリアが風土病であるか、又はマラリアに罹るリスクが高い地理的地域への訪問に先立つ、クロロキンなどの抗マラリア剤の投与を包含し得る。
【００６５】
任意の疾患若しくは障害の「治療する」又は「治療」は、一実施態様において、疾患又は障害を改善させること（すなわち、疾患を止めること、又はその臨床症状のうちの少なくとも1つの徴候、範囲、若しくは重症度を低下させること）を指す。他の実施態様において、「治療する」又は「治療」は、対象により認識され得ない少なくとも1つの身体的パラメーターを改善させることを指す。また別の実施態様において、「治療する」又は「治療」は、疾患又は障害を、身体的に調節する（例えば、認識可能な症状の安定化）か若しくは生理的に調節すること（例えば、身体的パラメーターの安定化）、又はその両者を指す。さらなる実施態様において、「治療する」又は「治療」は、疾患の進行を遅らせることに関する。
【００６６】
本明細書で使用される通り、「炎症性疾患（複数可）」という用語は、関節リウマチ、変形性関節症、若年性特発性関節炎、乾癬、乾癬性関節炎、強直性脊椎炎、アレルギー性気道疾患（例えば、喘息、鼻炎）、慢性閉塞性肺疾患（COPD）、炎症性腸疾患（例えば、クローン病、潰瘍性大腸炎）、内毒素により推進される病態（例えば、バイパス手術後の合併症又は例えば慢性心不全の一因となる慢性内毒素状態）、及び関節の疾患などの軟骨が関与する関連疾患を含む病態の群を指す。具体的には、該用語は、関節リウマチ、変形性関節症、アレルギー性気道疾患（例えば、喘息）、慢性閉塞性肺疾患（COPD）、及び炎症性腸疾患を指す。より具体的には、該用語は、関節リウマチ、慢性閉塞性肺疾患（COPD）、及び炎症性腸疾患を指す。
【００６７】
本明細書で使用される通り、用語「HBV」又は「B型肝炎ウイルス」は、オルトヘパドナウイルス属のウイルスの種を指す。このウイルスはB型肝炎を起こす。
【００６８】
本明細書で使用される通り、用語「HBcAg」はB型肝炎ウイルスコア抗原を指す。それは、B型肝炎ウイルス複製の指標である。この抗原は、B型肝炎ウイルスの内部カプシドを形成する。HBcAgは、裸のカプシドとして血液中に分泌され得る。
【００６９】
本明細書で使用される通り、用語「HBeAg」は、特定の分泌されたB型肝炎ウイルスタンパク質を指し、患者の血清中のその存在は、慢性肝炎患者中のB型肝炎ウイルスの活発な複製のマーカーとして機能し得る。
【００７０】
本明細書で使用される通り、用語「HBsAg」は、HBVビリオンの外部タンパク膜を形成する3種のタンパク質のB型肝炎ウイルス表面抗原ファミリーを指す。それは、ウイルス粒子の一部としても、HBsAgのみを含む非感染性タンパク質複合体としても血液中に分泌され、慢性肝炎患者中のB型肝炎ウイルスの活発な複製のマーカーとして機能し得る。
【００７１】
本明細書で使用される通り、用語「HBV DNA」は、HBVのDNAを指す。このDNAは、血液中でしばしばみられる。それは、血液中にウイルス粒子内部のみで分泌され、慢性感染患者中のB型肝炎ウイルスの活発な複製のマーカーとして使用され得る。
【００７２】
「本発明の組成物（複数可）」及び等価な表現は、本明細書に記載される式（複数可）の化合物を包含することを意味し、文脈上許容される場合、その表現は、医薬として許容し得る塩、及び溶媒和物、例えば、水和物、並びに医薬として許容し得る塩の溶媒和物を包含する。同様に、中間体への言及は、それら自体が特許請求されているかどうかに関わらず、文脈上許容される場合、それらの塩及び溶媒和物を包含することを意味する。
【００７３】
本明細書において範囲が言及される場合、例えば非限定的にC1-8アルキルでは、範囲の引用は、該範囲の各々のメンバーの表示とみなされるべきである。
【００７４】
本発明の化合物の他の誘導体は、それらの酸形態と酸誘導体形態の両者で活性を有するが、しかし酸感受性形態において、多くの場合、哺乳動物生体での溶解性、組織適合性、又は遅延放出という利点を提供する（Bundgard, Hの文献、1985）。プロドラッグは、例えば、親酸と好適なアルコールとの反応により調製されるエステル、又は親酸化合物と置換若しくは非置換アミンとの反応により調製されるアミド、又は酸無水物、又は混合無水物など、その分野の熟練者に周知の酸誘導体を包含する。本発明の化合物についている酸性基から誘導される単純な脂肪族又は芳香族のエステル、アミド、及び無水物は、特に有用なプロドラッグである。場合によっては、（アシルオキシ）アルキルエステル又は（（アルコキシカルボニル）オキシ）アルキルエステルなどの二重エステル型プロドラッグを調製することが望ましい。特定のそのようなプロドラッグは、本発明の化合物のC1-8アルキル、C2-8アルケニル、任意に置換されたC6-10アリール、及び（C6-10アリール）-（C1-4アルキル）エステルである。
【００７５】
本開示は、(i)所与の原子番号の全原子が、自然界で優勢である質量数(又は質量数の混合物)を有する形態(本明細書で「天然の同位体形態(natural isotopic form」と称される)又は(ii)1つ以上の原子が、同じ原子番号を有するが、自然界で優勢である原子の質量数とは異なる質量数を有する原子に置き換えられている形態(本明細書で「非天然の変種同位体形態(unnatural variant isotopic form)」と称される)のいずれであろうと、本明細書に提供される本発明の化合物の全同位体形態を含む。原子が、自然界で質量数の混合物として存在し得ることが理解される。用語「非天然の変種同位体形態」は、自然界であまり見られない質量数を有する所与の原子番号の原子(本明細書で「まれな同位元素」と称される)の比率が天然に存在するものに比べて、例えば、その原子番号の原子の数で20%超、50%超、75%超、90%超、95%超、又は99%超のレベルに増加している実施態様も含む(後者(latter）の実施態様は「同位体濃縮された変種形態」と称される)。用語「非天然の変種同位体形態」は、まれな同位元素の比率が天然に存在するものに比べて減少している実施態様も含む。同位体形態は、放射性形態(すなわち、それらは放射性同位元素を組み込んでいる)も、非放射性形態も含み得る。放射性形態は、典型的には、同位体濃縮された変種形態だろう。
【００７６】
そのため、ある化合物の非天然の変種同位体形態は、1つ以上の原子において、1つ以上の人工又はまれな同位元素、例えば、重水素(2H又はD)、炭素-11(11C)、炭素-13(13C)、炭素-14(14C)、窒素-13(13N)、窒素-15(15N)、酸素-15(15O)、酸素-17(17O)、酸素-18(18O)、リン-32(32P)、硫黄-35(35S)、塩素-36(36Cl)、塩素-37(37Cl)、フッ素-18(18F)ヨウ素-123(123I)、ヨウ素-125(125I)などを含み得るか、又は1つ以上の原子において、自然界で優勢である比率と比べて増加した比率の前記同位元素を含み得る。
【００７７】
放射性同位元素を含む非天然の変種同位体形態は、例えば、薬物及び／又は基質組織分布試験に使用され得る。放射性同位元素、トリチウム、すなわち3H、及び炭素-14、すなわち14Cは、それらの組込みが容易であり且つ検出手段が整っていることを考慮すると、この目的に特に有用である。重水素すなわち2H又はDを組み込んでいる非天然の変種同位体形態は、より高い代謝安定性、例えば、インビボ半減期の増加又は用量要件の減少から生じる治療上の利点を与え得るので、いくつかの状況において好ましくなり得る。さらに、11C、18F、15O及び13Nなどの陽電子放出同位元素を組み込んだ非天然の変種同位体形態が調製されることがあるが、基質受容体占有率を調査するための陽電子放出トポグラフィー(Topography)(PET)試験に有用だろう。
【００７８】
同じ分子式を有するが、それらの原子の結合の性質若しくは配列、又はそれらの原子の空間内での配置が異なる化合物が「異性体」と称されることも理解されるべきである。それらの原子の空間内での配置が異なる異性体は、「立体異性体」と称される。
【００７９】
互いの鏡像でない立体異性体は「ジアステレオマー」と称され、互いの重ね合わせることのできない鏡像である立体異性体は「エナンチオマー」と称される。化合物が不斉中心を有する場合、例えば、それが4個の異なる基に結合されている場合、エナンチオマー対が可能である。エナンチオマーは、その不斉中心の絶対配置により特徴付けることができ、カーン及びプレローグのR-及びS-順位則又は右旋性若しくは左旋性として（すなわち、それぞれ(+)若しくは(-)-異性体として）指示される分子が偏光面を回転させる様式により記述される。キラル化合物は、個々のエナンチオマーとしても、又はその混合物としても存在し得る。同じ比率のエナンチオマーを含有する混合物は、「ラセミ混合物」と呼ばれる。
【００８０】
「互変異性体」は、特定の化合物構造の互換的形態であり、水素原子及び電子の転位の点で異なる化合物を指す。したがって、2つの構造は、π電子及び原子(通常はH)の移動を介して平衡となり得る。例えば、エノールとケトンは、それらが酸か塩基のいずれかによる処理により速やかに相互変換されるので、互変異性体である。互変異性の別の例は、フェニルニトロメタンのアシ形態及びニトロ形態であり、これらは酸又は塩基による処理により同様に形成される。
【００８１】
互変異性形態は、対象となる化合物の最適な化学反応性及び生物活性の実現に関連し得る。
【００８２】
本発明の化合物は、1個以上の不斉中心を有し得る;したがって、そのような化合物は、個々の(R)-又は(S)-立体異性体としても、それらの混合物としても製造され得る。
【００８３】
別途示されない限り、本明細書及び特許請求の範囲における特定の化合物の記載又は命名は、個々のエナンチオマーと、ラセミ体か否かを問わずその混合物の両者を含むものとする。立体化学の決定及び立体異性体の分離のための方法は、当技術分野において周知である。
【００８４】
本発明の化合物が代謝されて、生物活性のある代謝体を生じ得ることが認識されるであろう。
【００８５】
(本発明)
本発明は、HBVの予防及び/又は治療のための新規化合物の特定に基づいている。本発明は、これらの化合物の製造の方法、これらの化合物を含む医薬組成物、並びに本発明の化合物を投与することによるHBVの予防及び/又は治療の方法も提供する。
【００８６】
したがって、本発明の第1の態様において、式Iを有する本発明の化合物が提供される:
【化８】
2021505651.tif 000010
（式中
R1は、1つ以上の独立に選択されるハロにより任意に置換されているC3-6シクロアルキルであり;
各R2a及びR2bは:
−  H、
−  1つ以上の独立に選択される
〇  ハロ、
〇  -OH、
〇  -CN、
〇  C1-4アルコキシ、
〇  C1-4チオアルコキシ、又は
〇  -SO2-C1-4アルキル
により任意に置換されているC1-4アルキル;
−  1つ以上の独立に選択される
〇  -CN、
〇  ハロ、
〇  -OH、
〇  -SO2-C1-4アルキル、
〇  1つ以上の独立に選択されるハロにより任意に置換されているC1-4アルキル、又は
〇  1つ以上の独立に選択されるハロにより任意に置換されているC1-4アルコキシ
により任意で選択されているC3-7シクロアルキル;及び
−  1つ以上の独立に選択されるO、N、又はSヘテロ原子を含み、1つ以上の独立に選択される
〇  -CN、
〇  ハロ、
〇  -OH、
〇  -SO2-C1-4アルキル、
〇  =O、
〇  1つ以上の独立に選択されるハロにより任意に置換されているC1-4アルキル、又は
〇  1つ以上の独立に選択されるハロにより任意に置換されているC1-4アルコキシ
により任意に置換されている4〜7員単環式ヘテロシクロアルキル
から独立に選択され;
R3は
−  1つ以上の独立に選択される
〇  ハロ、
〇  CN、
〇  -OH、
〇  SO2-C1-4アルキル、
〇  C1-4アルコキシ、若しくは
〇  1つ以上の独立に選択されるO、N、若しくはSヘテロ原子を含む4〜7員単環式ヘテロシクロアルキル
により任意に置換されているC1-4アルキル、
−  ハロ、
−  -CN、又は
−  1つ以上の独立に選択されるR7基により任意に置換されているC1-4アルコキシ
であり;
R4は
−  H、
−  -SO2-C1-4アルキル、
−  ハロ、
−  CN、
−  1つ以上の独立に選択されるハロにより任意に置換されているC1-4アルキル、又は
−  C1-4アルコキシ
であり;
R5は、H、-CN、ハロ、又は1つ以上の独立に選択されるハロにより任意に置換されているC1-4アルキルであり;且つ
各R6a、R6b、R6c、及びR6dは、独立に、h又はC1-4アルキルであり;
各R7は、独立に
−  ハロ、
−  -CN、
−  -OH、
−  -SO2-C1-4アルキル、
−  C1-4アルコキシ、
−  フェニル、
−  1つ以上の独立に選択されるO、N、又はSヘテロ原子を含む5〜6員単環式ヘテロアリール、
−  1つ以上の独立に選択されるR8aにより任意に置換されているC3-7シクロアルキル、
−  1つ以上の独立に選択されるO、N、又はSを含み、1つ以上の独立に選択されるR8bにより任意に置換されている単環式4〜7員ヘテロシクロアルキル、及び
−  1つ以上の独立に選択されるO、N、又はSを含み、1つ以上の独立に選択されるR8cにより任意に置換されている縮合/スピロ/架橋4〜10員ヘテロシクロアルキル
であり;
各R8a、R8b、及びR8cは:
−  ハロ、
−  -CN、
−  -SO2-C1-4アルキル、
−  =O、
−  1つ以上の独立に選択されるハロ若しくは-OHにより任意に置換されているアルキル、
−  -C(=O)NR6aR6b、
−  -C1-4アルコキシ、又は
−  -C(=O)C1-4アルキル
から独立に選択される）。
【００８７】
一実施態様において、本発明の化合物は、R1がC3-6シクロアルキルである、式Iによるものである。具体的な実施態様において、R1はシクロプロピルである。別の実施態様において、R1はシクロブチルである。
【００８８】
一実施態様において、本発明の化合物は、R1が、1つ以上の独立に選択されるハロにより置換されているC3-6シクロアルキルである、式Iによるものである。具体的な実施態様において、R1は、シクロプロピル又はシクロブチルであり、そのそれぞれは、1つ以上の独立に選択されるハロにより置換されている。別の実施態様において、R1は、1つ以上の独立に選択されるFにより置換されているC3-6シクロアルキルである。具体的な実施態様において、R1は、シクロプロピル又はシクロブチルであり、そのそれぞれは、1、2、又は3つのFにより置換されている。
【００８９】
一実施態様において、R5は、H、-CN、ハロ、又は1つ以上の独立に選択されるハロにより任意に置換されているC1-4アルキルである。具体的な実施態様において、R5は、H、-CN、-CH3、-CF3、F、又はClである。より具体的な実施態様において、R5はHである。
【００９０】
一実施態様において、本発明の化合物は式IIによるものである:
【化９】
2021505651.tif 000011
（式中、R2a、R2b、R3、及びR4は先に記載された通りである）。
【００９１】
一実施態様において、本発明の化合物は、R2aがHである、式I又はIIによるものである。
【００９２】
一実施態様において、本発明の化合物は、R2aがC1-4アルキルである、式I又はIIによるものである。具体的な実施態様において、R2aは、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、又は-C(CH3)3である。より具体的な実施態様において、R2aは-CH(CH3)2である。
【００９３】
一実施態様において、本発明の化合物は、R2aが、1つ以上の独立に選択されるハロ、-OH、-CN、又はC1-4アルコキシ、-SO2-C1-4アルキルにより置換されているC1-4アルキルである、式I又はIIによるものである。具体的な実施態様において、R2aは、-CH3、CH2CH3、-CH(CH3)2、又は-C(CH3)3であり、そのそれぞれは、1つ以上の独立に選択されるハロ、-OH、-CN、C1-4アルコキシ、C1-4チオアルコキシ、又は-SO2-C1-4アルキルにより置換されている。別の具体的な実施態様において、R2aは、1つ以上の独立に選択されるF、Cl、-OH、-CN、-OCH3、-OCH2CH3、-SCH3、又は-SO2CH3により置換されているC1-4アルキルである。より具体的な実施態様において、R2aは、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、又は-C(CH3)3であり、そのそれぞれは、1つ以上の独立に選択されるF、Cl、-OH、-CN、-OCH3、-OCH2CH3、-SCH3、又は-SO2CH3により置換されている。最も具体的な実施態様において、R2aは、-CH2OH又は-C(CH3)2CH2OCH3である。
【００９４】
一実施態様において、本発明の化合物は、R2aが、1つ以上の独立に選択されるハロ、-OH、-CN、又はC1-4アルコキシ、-SO2-C1-4アルキルにより置換されているC1-4アルキルである、式I又はIIによるものである。具体的な実施態様において、R2aは、-CH3、CH2CH3、-CH(CH3)2、又は-C(CH3)3であり、そのそれぞれは、1つ以上の独立に選択されるハロ、-OH、-CN、又はC1-4アルコキシ、-SO2-C1-4アルキルにより置換されている。別の具体的な実施態様において、R2aは、1つ以上の独立に選択されるF、Cl、-OH、-CN、-OCH3、-OCH2CH3、又は-SO2CH3により置換されているC1-4アルキルである。より具体的な実施態様において、R2aは、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、又は-C(CH3)3であり、そのそれぞれは、1つ以上の独立に選択されるF、Cl、-OH、-CN、-OCH3、-OCH2CH3、又は-SO2CH3により置換されている。最も具体的な実施態様において、R2aは、-CH2OH又は-C(CH3)2CH2OCH3である。
【００９５】
一実施態様において、本発明の化合物は、R2aがC3-7シクロアルキルである、式I又はIIによるものである。具体的な実施態様において、R2aは、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、又はシクロヘキシルである。より具体的な実施態様において、R2aは、シクロプロピル又はシクロブチルである。
【００９６】
一実施態様において、本発明の化合物は、R2aが、1つ以上の独立に選択される-CN、ハロ、-OH、-SO2-C1-4アルキル、1つ以上の独立に選択されるハロにより任意に置換されているC1-4アルキル、又は1つ以上の独立に選択されるハロにより任意に置換されているC1-4アルコキシにより置換されているC3-7シクロアルキルである、式I又はIIによるものである。具体的な実施態様において、R2aは、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、又はシクロヘキシルであり、そのそれぞれは、1つ以上の独立に選択される-CN、ハロ、-OH、-SO2-C1-4アルキル、1つ以上の独立に選択されるハロにより任意に置換されているC1-4アルキル、又は1つ以上の独立に選択されるハロにより任意に置換されているC1-4アルコキシにより置換されている。別の具体的な実施態様において、R2aは、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、又はシクロヘキシルであり、そのそれぞれは、1つ以上の独立に選択される-CN、F、Cl、-OH、-SO2-CH3、-CH3、-CH2CH3、-CF3、-CHF2、-CH2CF3、-OCH3、-OCH2CH3、又は-OCF3により置換されている。より具体的な実施態様において、R2aは、1つの-CN、F、Cl、-OH、-SO2-CH3、-CH3、-CH2CH3、-CF3、CHF2、-CH2CF3、-OCH3、-OCH2CH3、又は-OCF3により置換されているシクロプロピルである。最も具体的な実施態様において、R2aは、1つの-CNにより置換されているシクロプロピルである。
【００９７】
一実施態様において、本発明の化合物は、R2aが、1つ以上の独立に選択されるO、N、又はSヘテロ原子を含む4〜7員単環式ヘテロシクロアルキルである、式I又はIIによるものである。具体的な実施態様において、R2aはオキセタニルである。
【００９８】
一実施態様において、本発明の化合物は、R2aが、1つ以上の独立に選択されるO、N、又はSヘテロ原子を含み、1つ以上の独立に選択される-CN、ハロ、-OH、-SO2-C1-4アルキル、=O、1つ以上の独立に選択されるハロにより任意に置換されているC1-4アルキル、又は1つ以上の独立に選択されるハロにより任意に置換されているC1-4アルコキシにより置換されている4〜7員単環式ヘテロシクロアルキルである、式I又はIIによるものである。具体的な実施態様において、R2aは、1つ以上の独立に選択される-CN、ハロ、-OH、-SO2-C1-4アルキル、=O、1つ以上の独立に選択されるハロにより任意に置換されているC1-4アルキル、又は1つ以上の独立に選択されるハロにより任意に置換されているC1-4アルコキシにより置換されているオキセタニルである。別の具体的な実施態様において、R2aは、1つ以上の独立に選択されるO、N、又はSヘテロ原子を含み、1つ以上の独立に選択される-CN、F、-OH、-SO2-CH3、=O、-CH3、-CH2CH3、-CF3、-CHF2、-CH2CF3、-OCH3、-OCH2CH3、又は-OCF3により置換されている4〜7員単環式ヘテロシクロアルキルである。より具体的な実施態様において、R2aは、1つ以上の独立に選択される-CN、F、-OH、-SO2-CH3、=O、-CH3、-CH2CH3、-CF3、-CHF2、-CH2CF3、-OCH3、-OCH2CH3、又は-OCF3により置換されているオキセタニルである。最も具体的な実施態様において、R2aは、１つの-CH3により置換されているオキセタニルである。
【００９９】
一実施態様において、本発明の化合物は式IIIによるものである:
【化１０】
2021505651.tif 000012
（式中、R2b、R3及びR4は先に記載された通りである）。
【０１００】
一実施態様において、本発明の化合物は、R2bがHである、式I、II、又はIIIによるものである。
【０１０１】
一実施態様において、本発明の化合物は、R2bがC1-4アルキルである、式I、II、又はIIIによるものである。具体的な実施態様において、R2bは、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、又は-C(CH3)3である。より具体的な実施態様において、R2bは-CH(CH3)2である。
【０１０２】
一実施態様において、本発明の化合物は、R2bが、1つ以上の独立に選択されるハロ、-OH、-CN、又はC1-4アルコキシ、-SO2-C1-4アルキルにより置換されているC1-4アルキルである、式I又はIIによるものである。具体的な実施態様において、R2bは、-CH3、CH2CH3、-CH(CH3)2、又は-C(CH3)3であり、そのそれぞれは、1つ以上の独立に選択されるハロ、-OH、-CN、C1-4アルコキシ、C1-4チオアルコキシ、又は-SO2-C1-4アルキルにより置換されている。別の具体的な実施態様において、R2bは、1つ以上の独立に選択されるF、Cl、-OH、-CN、-OCH3、-OCH2CH3、-SCH3、又は-SO2CH3により置換されているC1-4アルキルである。より具体的な実施態様において、R2bは、-CH3、CH2CH3、-CH(CH3)2、又は-C(CH3)3であり、そのそれぞれは、1つ以上の独立に選択されるF、Cl、-OH、-CN、-OCH3、-OCH2CH3、-SCH3、又は-SO2CH3により置換されている。最も具体的な実施態様において、R2bは、-CH2OH又は-C(CH3)2CH2OCH3である。
【０１０３】
一実施態様において、本発明の化合物は、R2bが、1つ以上の独立に選択されるハロ、-OH、-CN、又はC1-4アルコキシ、-SO2-C1-4アルキルにより置換されているC1-4アルキルである、式I、II、又はIIIによるものである。具体的な実施態様において、R2bは、-CH3、CH2CH3、-CH(CH3)2、又は-C(CH3)3であり、そのそれぞれは、1つ以上の独立に選択されるハロ、-OH、-CN、又はC1-4アルコキシ、-SO2-C1-4アルキルにより置換されている。別の具体的な実施態様において、R2bは、1つ以上の独立に選択されるF、Cl、-OH、-CN、-OCH3、-OCH2CH3、又は-SO2CH3により置換されているC1-4アルキルである。より具体的な実施態様において、R2bは、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、又は-C(CH3)3であり、そのそれぞれは、1つ以上の独立に選択されるF、Cl、-OH、-CN、-OCH3、-OCH2CH3、又は-SO2CH3により置換されている。最も具体的な実施態様において、R2bは、-CH2OH又は-C(CH3)2CH2OCH3である。
【０１０４】
一実施態様において、本発明の化合物は、R2bがC3-7シクロアルキルである、式I、II、又はIIIによるものである。具体的な実施態様において、R2bは、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、又はシクロヘキシルである。より具体的な実施態様において、R2bは、シクロプロピル又はシクロブチルである。
【０１０５】
一実施態様において、本発明の化合物は、R2bが、1つ以上の独立に選択される-CN、ハロ、-OH、-SO2-C1-4アルキル、1つ以上の独立に選択されるハロにより任意に置換されているC1-4アルキル、又は1つ以上の独立に選択されるハロにより任意に置換されているC1-4アルコキシにより置換されているC3-7シクロアルキルである、式I、II、又はIIIによるものである。具体的な実施態様において、R2bは、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、又はシクロヘキシルであり、そのそれぞれは、1つ以上の独立に選択される-CN、ハロ、-OH、-SO2-C1-4アルキル、1つ以上の独立に選択されるハロにより任意に置換されているC1-4アルキル、又は1つ以上の独立に選択されるハロにより任意に置換されているC1-4アルコキシにより置換されている。別の具体的な実施態様において、R2bは、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、又はシクロヘキシルであり、そのそれぞれは、1つ以上の独立に選択される-CN、F、Cl、-OH、-SO2-CH3、-CH3、-CH2CH3、-CF3、CHF2、-CH2CF3、-OCH3、-OCH2CH3、又は-OCF3により置換されている。より具体的な実施態様において、R2bは、1つの-CN、F、Cl、-OH、-SO2-CH3、-CH3、-CH2CH3、-CF3、-CHF2、-CH2CF3、-OCH3、-OCH2CH3、又は-OCF3により置換されているシクロプロピルである。最も具体的な実施態様において、R2bは、1つの-CNにより置換されているシクロプロピルである。
【０１０６】
一実施態様において、本発明の化合物は、R2bが、1つ以上の独立に選択されるO、N、又はSヘテロ原子を含む4〜7員単環式ヘテロシクロアルキルである、式I、II、又はIIIによるものである。具体的な実施態様において、R2bはオキセタニルである。
【０１０７】
一実施態様において、本発明の化合物は、R2bが、1つ以上の独立に選択されるO、N、又はSヘテロ原子を含み、1つ以上の独立に選択される-CN、ハロ、-OH、-SO2-C1-4アルキル、=O、1つ以上の独立に選択されるハロにより任意に置換されているC1-4アルキル、又は1つ以上の独立に選択されるハロにより任意に置換されているC1-4アルコキシにより置換されている4〜7員単環式ヘテロシクロアルキルである、式I、II、又はIIIによるものである。具体的な実施態様において、R2bは、1つ以上の独立に選択される-CN、ハロ、-OH、-SO2-C1-4アルキル、=O、1つ以上の独立に選択されるハロにより任意に置換されているC1-4アルキル、又は1つ以上の独立に選択されるハロにより任意に置換されているC1-4アルコキシにより置換されているオキセタニルである。別の具体的な実施態様において、R2bは、1つ以上の独立に選択されるO、N、又はSヘテロ原子を含み、1つ以上の独立に選択される-CN、F、-OH、-SO2-CH3、=O、-CH3、-CH2CH3、-CF3、CHF2、-CH2CF3、-OCH3、-OCH2CH3、又は-OCF3により置換されている4〜7員単環式ヘテロシクロアルキルである。より具体的な実施態様において、R2bは、1つ以上の独立に選択される-CN、F、-OH、-SO2-CH3、=O、-CH3、-CH2CH3、-CF3、-CHF2、-CH2CF3、-OCH3、-OCH2CH3、又は-OCF3により置換されているオキセタニルである。最も具体的な実施態様において、R2bは、１つの-CH3により置換されているオキセタニルである。
【０１０８】
一実施態様において、本発明の化合物は式IVa又はIVbによるものである:
【化１１】
2021505651.tif 000013
(式中、R3及びR4は先に記載された通りである）。
【０１０９】
一実施態様において、本発明の化合物は式Va又はVbによるものである:
【化１２】
2021505651.tif 000014
(式中、R3及びR4は先に記載された通りである）。
【０１１０】
一実施態様において、本発明の化合物は式VIa又はVIbによるものである:
【化１３】
2021505651.tif 000015
(式中、R3及びR4は先に記載された通りである）。
【０１１１】
一実施態様において、本発明の化合物は、R4がHである、式I〜VIbのいずれか1つによるものである。
【０１１２】
一実施態様において、本発明の化合物は、R4が-SO2-C1-4アルキルである、式I〜VIbのいずれか1つによるものである。具体的な実施態様において、R4は、-SO2CH3又は-SO2CH2CH3である。
【０１１３】
一実施態様において、本発明の化合物は、R4がハロである、式I〜VIbのいずれか1つによるものである。具体的な実施態様において、R4はFである。別の具体的な実施態様において、R4はClである。
【０１１４】
一実施態様において、本発明の化合物は、R4が-CNである、式I〜VIbのいずれか1つによるものである。
【０１１５】
一実施態様において、本発明の化合物は、R4が、1つ以上の独立に選択されるハロにより任意に置換されているC1-4アルキルである、式I〜VIbのいずれか1つによるものである。具体的な実施態様において、R4は、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、又は-CF3である。
【０１１６】
一実施態様において、本発明の化合物は、R4が、-OCH3又は-OCH2CH3である、式I〜VIbのいずれか1つによるものである。より具体的な実施態様において、R4は-OCH3である。
【０１１７】
一実施態様において、本発明の化合物は、R3がC1-4アルキルである、式I〜VIbのいずれか1つによるものである。具体的な実施態様において、R3は、-CH3、-CH2CH3、又は-CH2CH(CH3)2である。
【０１１８】
一実施態様において、本発明の化合物は、R3が、1つ以上の独立に選択されるハロ、-CN、-OH、-SO2C1-4アルキル、C1-4アルコキシ、又は1つ以上の独立に選択されるO、N、若しくはSヘテロ原子を含む4〜7員単環式ヘテロシクロアルキルにより置換されているC1-4アルキルである、式I〜VIbのいずれか1つによるものである。一実施態様において、R3は、-CH3、-CH2CH3、又は-CH2CH(CH3)2であり、そのそれぞれは、1つ以上の独立に選択されるハロ、-CN、-OH、-SO2C1-4アルキル、C1-4アルコキシ、又は1つ以上の独立に選択されるO、N、若しくはSヘテロ原子を含む4〜7員単環式ヘテロシクロアルキルにより置換されている。別の具体的な実施態様において、R3は、1つ以上の独立に選択されるF、-CN、-SO2CH3、-OCH3、オキセタニル、テトラヒドロフラニル、又はテトラヒドロピラニルにより置換されているC1-4アルキルである。より具体的な実施態様において、R3は、-CH3、-CH2CH3、又は-CH2CH(CH3)2であり、そのそれぞれは、1つ以上の独立に選択されるF、-CN、-SO2CH3、-OCH3、オキセタニル、テトラヒドロフラニル、又はテトラヒドロピラニルにより置換されている。
【０１１９】
一実施態様において、本発明の化合物は、R3がハロである、式I〜VIbのいずれか1つによるものである。具体的な実施態様において、R3は、F又はClである。
【０１２０】
一実施態様において、本発明の化合物は、R3が-CNである、式I〜VIbのいずれか1つによるものである。
【０１２１】
一実施態様において、本発明の化合物は、R3がC1-4アルコキシである、式I〜VIbのいずれか1つによるものである。具体的な実施態様において、R3は、-OCH3、-OCH2CH3、-OCH2CH2CH3、-OCH2CH(CH3)2、又は-OCH(CH3)2である。より具体的な実施態様において、R3は-OCH3である。
【０１２２】
一実施態様において、本発明の化合物は、R3が、1つ以上の独立に選択されるR7基により置換されているC1-4アルコキシである、式I〜VIbのいずれか1つによるものである。具体的な実施態様において、R3は、1、2、又は3つの独立に選択されるR7基により置換されているC1-4アルコキシである。別の具体的な実施態様において、R3は、-OCH3、-OCH2CH3、-OCH2CH2CH3、-OCH2CH(CH3)2、又は-OCH(CH3)2であり、そのそれぞれは、1、2、又は3つの独立に選択されるR7基により置換されている。より具体的な実施態様において、R3は、1つのR7基により置換されているC1-4アルコキシである。別のより具体的な実施態様において、R3は、-OCH3、-OCH2CH3、-OCH2CH2CH3、-OCH2CH(CH3)2、又は-OCH(CH3)2であり、そのそれぞれは、１つのR7基により置換されている。最も具体的な実施態様において、R3は、１つのR7基により置換されている-OCH2CH2CH3である。
【０１２３】
一実施態様において、本発明の化合物は、R3が先に記載された通りであり、1つ以上のR7がハロである、式I〜VIbのいずれか1つによるものである。具体的な実施態様において、R7はFである。
【０１２４】
一実施態様において、本発明の化合物は、R3が先に記載された通りであり、1つ以上のR7が-CNである、式I〜VIbのいずれか1つによるものである。
【０１２５】
一実施態様において、本発明の化合物は、R3が先に記載された通りであり、1つ以上のR7が-OHである、式I〜VIbのいずれか1つによるものである。
【０１２６】
一実施態様において、本発明の化合物は、R3が先に記載された通りであり、1つ以上のR7が-SO2C1-4アルキルである、式I〜VIbのいずれか1つによるものである。具体的な実施態様において、R7は-SO2CH3又は-SO2CH2CH3である。
【０１２７】
一実施態様において、本発明の化合物は、R3が先に記載された通りであり、1つ以上のR7がC1-4アルコキシである、式I〜VIbのいずれか1つによるものである。具体的な実施態様において、R7は、-OCH3、-OCH2CH3、-OCH2CH2CH3、-OCH2CH(CH3)2、又は-OCH(CH3)2である。より具体的な実施態様において、R7は、-OCH3又は-OCH2CH3である。
【０１２８】
一実施態様において、本発明の化合物は、R3が先に記載された通りであり、1つ以上のR7がフェニルである、式I〜VIbのいずれか1つによるものである。
【０１２９】
一実施態様において、本発明の化合物は、R3が先に記載された通りであり、1つ以上のR7が、1つ以上の独立に選択されるO、N、又はSヘテロ原子を含む5〜6員単環式ヘテロアリールである、式I〜VIbのいずれか1つによるものである。一実施態様において、R7は、イミダゾリル、ピラゾリル、トリアゾリル、フラニル、ピリジニル、ピラジニル、又はピリミジニルである。
【０１３０】
一実施態様において、本発明の化合物は、R3が先に記載された通りであり、1つ以上のR7がC3-7シクロアルキルである、式I〜VIbのいずれか1つによるものである。より具体的な実施態様において、R7は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、又はシクロヘキシルである。
【０１３１】
一実施態様において、本発明の化合物は、R3が先に記載された通りであり、1つ以上のR7が、1つ以上の独立に選択されるR8aにより置換されているC3-7シクロアルキルである、式I〜VIbのいずれか1つによるものである。より具体的な実施態様において、R7は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、又はシクロヘキシルであり、そのそれぞれは、1つ以上の独立に選択されるR8aにより置換されている。より具体的な実施態様において、R7は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、又はシクロヘキシルであり、そのそれぞれは1つのR8aにより置換されている。さらなるより具体的な実施態様において、各R8aは、独立に、F、-CN、-SO2CH3、=O、-CH3、-CH2CH3、-CF3、-CH2-OCH3、-C(=O)NH2、-C(=O)NHCH3、-C(=O)N(CH3)2、-OCH3、-OCH2CH3、又は-C(=O)CH3である。最も具体的な実施態様において、R8aは-CNである。
【０１３２】
一実施態様において、本発明の化合物は、R3が先に記載された通りであり、1つ以上のR7が、1つ以上の独立に選択されるO、N、又はSを含む単環式4〜7員ヘテロシクロアルキルである、式I〜VIbのいずれか1つによるものである。具体的な実施態様において、R7は、オキセタニル、テトラヒドロフラニル、又はジオキサニルである。
【０１３３】
一実施態様において、本発明の化合物は、R3が先に記載された通りであり、1つ以上のR7が、1つ以上の独立に選択されるO、N、又はSを含み、1つ以上の独立に選択されるR8bにより置換されている単環式4〜7員ヘテロシクロアルキルである、式I〜VIbのいずれか1つによるものである。具体的な実施態様において、R7は、1つ以上の独立に選択されるO、N、又はSを含み、1、2、又は3つの独立に選択されるR8bにより置換されている単環式4〜7員ヘテロシクロアルキルである。より具体的な実施態様において、R7は、オキセタニル、オキサゾリジニル、アゼチジニル、又はピロリルであり、そのそれぞれは、1、2、又は3つの独立に選択されるR8bにより置換されている。最も具体的な実施態様において、R8bは、F、-CN、-SO2CH3、=O、-CH3、-CH2CH3、CF3、-CH2-OCH3、-C(=O)NH2、-C(=O)NHCH3、-C(=O)N(CH3)2、-OCH3、-OCH2CH3、又は-C(=O)CH3である。さらなる最も具体的な実施態様において、R8bは、-CN、-SO2CH3、=O、又は-CH3である。
【０１３４】
一実施態様において、本発明の化合物は、R3が先に記載された通りであり、1つ以上のR7が、1つ以上の独立に選択されるO、N、又はSを含む縮合/スピロ/架橋4〜10員ヘテロシクロアルキルである、式I〜VIbのいずれか1つによるものである。具体的な実施態様において、R7。具体的な実施態様において、R7。
【０１３５】
一実施態様において、本発明の化合物は、R3が先に記載された通りであり、1つ以上のR7が、1つ以上の独立に選択されるO、N、又はSを含み、1つ以上の独立に選択されるR8bにより置換されている単環式4〜7員ヘテロシクロアルキルである、式I〜VIbのいずれか1つによるものである。具体的な実施態様において、R7は、1つ以上の独立に選択されるO、N、又はSを含み、1、2、又は3つの独立に選択されるR8bにより置換されている単環式4〜7員ヘテロシクロアルキルである。より具体的な実施態様において、R7は、オキセタニル、オキサゾリジニル、アゼチジニル、又はピロリルであり、そのそれぞれは、1、2、又は3つの独立に選択されるR8bにより置換されている。最も具体的な実施態様において、R8bは、F、-CN、-SO2CH3、=O、-CH3、-CH2CH3、-CF3、-CH2-OCH3、-C(=O)NH2、-C(=O)NHCH3、-C(=O)N(CH3)2、-OCH3、-OCH2CH3、又は-C(=O)CH3である。さらなる最も具体的な実施態様において、R8bは、-CN、-SO2CH3、=O、又は-CH3である。
【０１３６】
一実施態様において、本発明の化合物は、R3が先に記載された通りであり、1つ以上のR7が、1つ以上の独立に選択されるO、N、又はSを含む縮合/スピロ/架橋4〜10員のヘテロシクロアルキルである、式I〜VIbのいずれか1つによるものである。具体的な実施態様において、R7は、2-オキサ-6-アザ-スピロ[3.3]ヘプタニル、6-オキサ-2-アザ-スピロ[3.4]オクタニル、又はヘキサヒドロ-フロ[3,4-c]ピロリルである。
【０１３７】
一実施態様において、本発明の化合物は、R3が先に記載された通りであり、1つ以上のR7が、1つ以上の独立に選択されるO、N、又はSを含み、1つ以上の独立に選択されるR8cにより置換されている縮合/スピロ/架橋4〜10員のヘテロシクロアルキルである、式I〜VIbのいずれか1つによるものである。具体的な実施態様において、R7は、2-オキサ-6-アザ-スピロ[3.3]ヘプタニル、6-オキサ-2-アザ-スピロ[3.4]オクタニル、又はヘキサヒドロ-フロ[3,4-c]ピロリルであり、そのそれぞれは、1つ以上の独立に選択されるR8cにより置換されている。最も具体的な実施態様において、R8cは、F、-CN、-SO2CH3、=O、-CH3、-CH2CH3、-CF3、-CH2-OCH3、-C(=O)NH2、-C(=O)NHCH3、-C(=O-N(CH3)2、-OCH3、-OCH2CH3、又は-C(=O)CH3である。
【０１３８】
一実施態様において、本発明の化合物は、R3が、-OCH3又は-OCH2CH2CH2OCH3である、式I〜VIbのいずれか1つによるものである。最も具体的な実施態様において、R3は-OCH2CH2CH2OCH3である。
【０１３９】
一実施態様において、本発明の化合物は下記から選択される:
1-シクロプロピル-9-フルオロ-5-イソプロピル-8-(3-メトキシプロポキシ)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
9-クロロ-1-シクロプロピル-8-(3-メトキシプロポキシ)-5-(3-メチルオキセタン-3-イル)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
1-シクロプロピル-5-イソプロピル-8,9-ジメトキシ-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
9-クロロ-1-シクロプロピル-5-イソプロピル-8-(3-メトキシプロポキシ)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
9-クロロ-1-シクロプロピル-5-イソプロピル-8-(オキセタン-3-イルメトキシ)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
9-クロロ-1-シクロプロピル-8-(3-メトキシプロポキシ)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
9-クロロ-1-シクロプロピル-8-(1,4-ジオキサン-2-イルメトキシ)-5-イソプロピル-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
7-クロロ-1-シクロプロピル-5-イソプロピル-8-(3-メトキシプロポキシ)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
5-tert-ブチル-1-シクロプロピル-8,9-ジメトキシ-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
1-シクロプロピル-5-イソプロピル-9-メトキシ-8-(3-メトキシプロポキシ)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
9-クロロ-1-シクロプロピル-5-エチル-8-(3-メトキシプロポキシ)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
1-シクロプロピル-5-エチル-9-メトキシ-8-(3-メトキシプロポキシ)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
9-クロロ-1-シクロプロピル-8-(3-メトキシプロポキシ)-5-(オキセタン-3-イル)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
9-クロロ-1-シクロプロピル-8-(3-メトキシプロポキシ)-5,5-ジメチル-2-オキソ-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
1-シクロプロピル-5-エチル-8,9-ジメトキシ-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
1-シクロプロピル-5-エチル-9-フルオロ-8-(3-メトキシプロポキシ)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
9-クロロ-1-シクロブチル-5-イソプロピル-8-(3-メトキシプロポキシ)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
1-シクロプロピル-5-(ヒドロキシメチル)-8,9-ジメトキシ-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
9-クロロ-1-シクロプロピル-5-(2-メトキシ-1,1-ジメチル-エチル)-8-(3-メトキシプロポキシ)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
1-シクロプロピル-5-イソプロピル-9-メトキシ-2-オキソ-8-(トリジュウテリオメトキシ)-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
9-クロロ-1-シクロプロピル-8-メトキシ-5-(オキセタン-3-イル)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
9-クロロ-5-(1-シアノシクロプロピル)-1-シクロプロピル-8-(3-メトキシプロポキシ)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
9-クロロ-1-(3,3-ジフルオロシクロブチル)-5-イソプロピル-8-(3-メトキシプロポキシ)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
9-シアノ-1-シクロプロピル-5-イソプロピル-8-(3-メトキシプロポキシ)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
9-クロロ-1-シクロプロピル-8-(2-メトキシエトキシ)-5-(3-メチルオキセタン-3-イル)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
1-シクロブチル-9-フルオロ-8-(3-メトキシプロポキシ)-5-(3-メチルオキセタン-3-イル)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
9-フルオロ-8-(3-メトキシプロポキシ)-5-(3-メチルオキセタン-3-イル)-2-オキソ-1-(2,2,3,3-テトラジュウテリオシクロプロピル)-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
1-シクロプロピル-5-イソプロピル-9-メトキシ-8-[(3-メチルオキセタン-3-イル)メトキシ]-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
1-シクロプロピル-5-イソプロピル-9-メトキシ-8-[(3-メチル-2-オキソ-オキサゾリジン-5-イル)メトキシ]-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
8-(3-シアノプロポキシ)-1-シクロプロピル-5-イソプロピル-9-メトキシ-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
1-シクロプロピル-5-イソプロピル-9-メトキシ-8-(2-メトキシエトキシ)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
1-シクロプロピル-5-イソプロピル-9-メトキシ-8-[(1-メチルスルホニルアゼチジン-3-イル)メトキシ]-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
1-シクロプロピル-8-(1,4-ジオキサン-2-イルメトキシ)-5-イソプロピル-9-メトキシ-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
1-シクロプロピル-5-イソプロピル-9-メトキシ-8-(オキセタン-3-イルメトキシ)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
1-シクロプロピル-5-イソプロピル-9-メトキシ-2-オキソ-8-[(2-オキソオキサゾリジン-5-イル)メトキシ]-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
1-シクロプロピル-8-(3-ヒドロキシプロポキシ)-5-イソプロピル-9-メトキシ-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
1-シクロプロピル-8-エトキシ-5-イソプロピル-9-メトキシ-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
1-シクロプロピル-8-イソブトキシ-5-イソプロピル-9-メトキシ-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
1-シクロプロピル-8-イソプロポキシ-5-イソプロピル-9-メトキシ-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
1-シクロプロピル-5-イソプロピル-9-メトキシ-2-オキソ-8-プロポキシ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
8-ベンジルオキシ-1-シクロプロピル-5-イソプロピル-9-メトキシ-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
1-シクロプロピル-8-(2-エトキシエトキシ)-5-イソプロピル-9-メトキシ-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
8-[(1-シアノシクロブチル)メトキシ]-1-シクロプロピル-5-イソプロピル-9-メトキシ-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
(5S)-1-シクロプロピル-9-フルオロ-5-イソプロピル-8-(3-メトキシプロポキシ)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
(5R)-1-シクロプロピル-9-フルオロ-5-イソプロピル-8-(3-メトキシプロポキシ)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
(5R)-9-クロロ-1-シクロプロピル-8-(3-メトキシプロポキシ)-5-(3-メチルオキセタン-3-イル)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
(5S)-9-クロロ-1-シクロプロピル-8-(3-メトキシプロポキシ)-5-(3-メチルオキセタン-3-イル)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
9-クロロ-1-シクロブチル-8-(3-メトキシプロポキシ)-5-(3-メチルオキセタン-3-イル)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
1-シクロプロピル-9-フルオロ-8-(3-メトキシプロポキシ)-5-(3-メチルオキセタン-3-イル)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
9-クロロ-1-シクロプロピル-8-[[(2S)-1,4-ジオキサン-2-イル]メトキシ]-5-イソプロピル-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
9-クロロ-1-シクロプロピル-8-[[(2R)-1,4-ジオキサン-2-イル]メトキシ]-5-イソプロピル-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
9-クロロ-1-シクロプロピル-5-イソプロピル-8-[(3-メチルオキセタン-3-イル)メトキシ]-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
9-クロロ-1-シクロプロピル-8-(3-メトキシプロポキシ)-2-オキソ-5-テトラヒドロフラン-3-イル-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
9-クロロ-1-シクロプロピル-8-(3-メトキシプロポキシ)-2-オキソ-5-テトラヒドロピラン-4-イル-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
9-クロロ-1-シクロプロピル-8-メトキシ-5-(3-メチルオキセタン-3-イル)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
9-クロロ-1-シクロプロピル-8-エトキシ-5-(3-メチルオキセタン-3-イル)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
9-クロロ-1-シクロプロピル-8-(シクロプロピルメトキシ)-5-(3-メチルオキセタン-3-イル)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
9-クロロ-1-シクロプロピル-5-(3-メチルオキセタン-3-イル)-2-オキソ-8-(トリジュウテリオメトキシ)-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
1-シクロプロピル-8,9-ジフルオロ-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
9-クロロ-1-シクロプロピル-8-フルオロ-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
8,9-ジクロロ-1-シクロプロピル-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
1-シクロプロピル-5-イソプロピル-8-(3-メトキシプロポキシ)-2-オキソ-9-(トリフルオロメチル)-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
1-シクロプロピル-5-イソプロピル-8-(3-メトキシプロポキシ)-9-メチルスルホニル-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
1-シクロプロピル-9-フルオロ-5-イソプロピル-8-(オキセタン-3-イルメトキシ)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
1-シクロプロピル-9-フルオロ-5-イソプロピル-8-[(3-メチルオキセタン-3-イル)メトキシ]-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
(5S)-9-クロロ-1-シクロプロピル-8-メトキシ-5-(3-メチルオキセタン-3-イル)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
(5R)-9-クロロ-1-シクロプロピル-8-メトキシ-5-(3-メチルオキセタン-3-イル)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
9-クロロ-1-シクロプロピル-5-(3-メチルオキセタン-3-イル)-2-オキソ-8-(2,2,2-トリフルオロエトキシ)-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
9-クロロ-1-シクロプロピル-8-[[(2R)-1,4-ジオキサン-2-イル]メトキシ]-5-(3-メチルオキセタン-3-イル)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
9-クロロ-1-シクロプロピル-8-(ジフルオロメトキシ)-5-(3-メチルオキセタン-3-イル)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
9-ブロモ-1-シクロプロピル-5-イソプロピル-8-(3-メトキシプロポキシ)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
9-クロロ-1-シクロプロピル-5-(3-メチルオキセタン-3-イル)-8-[(1-メチルスルホニルアゼチジン-3-イル)メトキシ]-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
1-シクロプロピル-8-(3-メトキシプロポキシ)-5-(3-メチルオキセタン-3-イル)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
1-シクロプロピル-8,9-ジメトキシ-5-(メチルスルファニルメチル)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
9-クロロ-8-(3-メトキシプロポキシ)-5-(3-メチルオキセタン-3-イル)-2-オキソ-1-(1,2,2,3,3-ペンタジュウテリオシクロプロピル)-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸。
【０１４０】
具体的な実施態様において、本発明の化合物は、
9-クロロ-1-シクロプロピル-8-(3-メトキシプロポキシ)-5-(3-メチルオキセタン-3-イル)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
(5R)-9-クロロ-1-シクロプロピル-8-(3-メトキシプロポキシ)-5-(3-メチルオキセタン-3-イル)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、又は
(5S)-9-クロロ-1-シクロプロピル-8-(3-メトキシプロポキシ)-5-(3-メチルオキセタン-3-イル)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸である。
【０１４１】
別の具体的な実施態様において、本発明の化合物は、
9-クロロ-1-シクロプロピル-8-(3-メトキシプロポキシ)-5-(3-メチルオキセタン-3-イル)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、
(5R)-9-クロロ-1-シクロプロピル-8-(3-メトキシプロポキシ)-5-(3-メチルオキセタン-3-イル)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、又は
(5S)-9-クロロ-1-シクロプロピル-8-(3-メトキシプロポキシ)-5-(3-メチルオキセタン-3-イル)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸ではない。
【０１４２】
一実施態様において、本発明の化合物は、天然の同位体形態で提供される。
【０１４３】
一実施態様において、本発明の化合物は、非天然の変種同位体形態で提供される。具体的な実施態様において、非天然の変種同位体形態は、重水素(すなわち2H又はD)が、水素が化学構造において本発明の化合物の1つ以上の原子に明示されている場所に組み込まれている形態である。一実施態様において、本発明の化合物の原子は、放射性ではない同位体形態である。一実施態様において、本発明の化合物の1つ以上の原子は、放射性である同位体形態である。好適には、放射性同位元素は安定同位体である。好適には、非天然の変種同位体形態は医薬として許容し得る形態である。
【０１４４】
一実施態様において、本発明の化合物は、化合物の単一の原子が非天然の変種同位体形態で存在するにように提供される。別の実施態様において、本発明の化合物は、2つ以上の原子が非天然の変種同位体形態で存在するように提供される。
【０１４５】
非天然の同位体変種形態は、一般的に、当業者に公知である従来技法により、又は本明細書に記載のプロセスにより、例えば、天然の同位体形態を調製するための添付される実施例に記載のものに類似のプロセスにより調製できる。そのため、非天然の同位体変種形態は、例としての実例に使用した通常の試薬の代わりに、適切な同位体変種(又は標識された)試薬を使用することにより調製できる。
【０１４６】
一態様において、本明細書に記載の実施態様のいずれか1つに記載の本発明の化合物は遊離塩基として存在する。
【０１４７】
一態様において、本明細書に記載の実施態様のいずれか1つに記載の本発明の化合物は医薬として許容し得る塩である。
【０１４８】
一態様において、本明細書に記載の実施態様のいずれか1つに記載の本発明の化合物は、化合物の溶媒和物である。
【０１４９】
一態様において、本明細書に記載の実施態様のいずれか1つに記載の本発明の化合物は、化合物の医薬として許容し得る塩の溶媒和物である。
【０１５０】
各実施態様についての明示された基が全般的に上記で別々に列記されてきたが、本発明の化合物は、上記の式並びに本明細書に提示される他の式におけるいくつかの又は各々の実施態様が、各々の変数についてそれぞれ指定された特定のメンバー又は基の1個以上から選択される化合物を含む。したがって、本発明は、そのような実施態様の全ての組合せをその範囲内に含むことが意図される。
【０１５１】
各実施態様についての明示された基が全般的に上記で別々に列記されてきたが、本発明の化合物は、1個以上の変数（例えば、R基）が、先に列記された式（複数可）のいずれかによる1つ以上の実施態様から選択されるものであり得る。したがって、本発明は、開示された実施態様のいずれかに由来する変数の全ての組合せをその範囲内に含むことが意図されている。
【０１５２】
或いは、ある基若しくはある実施態様又はそれらの組合せからの、明示された変数の1つ以上の排除も本発明により企図されている。
【０１５３】
特定の態様において、本発明は、上記の式による化合物のプロドラッグ及び誘導体を提供する。プロドラッグは、代謝的に開裂可能な基を有し、加溶媒分解によるか又は生理的条件下で、インビボで医薬として活性がある本発明の化合物になる本発明の化合物の誘導体である。そのような例は、コリンエステル誘導体など、N-アルキルモルホリンエステルなどを包含するがこれらに限定されない。
【０１５４】
本発明の組成物の化合物の他の誘導体は、それらの酸形態と酸誘導体形態の両者で活性を有するが、酸感受性形態は、しばしば、哺乳動物生体における溶解性、組織適合性、又は遅延放出という利点を提供する（Bundgard, Hの文献、1985)。プロドラッグは、当業者に周知の酸誘導体、例えば、親酸と好適なアルコールとの反応により調製されるエステル、又は親酸化合物と置換若しくは非置換アミンとの反応により調製されるアミド、又は酸無水物、又は混合無水物などを包含する。本発明の化合物についている酸性基から誘導される単純な脂肪族又は芳香族のエステル、アミド、及び無水物は、好ましいプロドラッグである。場合によっては、（アシルオキシ）アルキルエステル又は（（アルコキシカルボニル）オキシ）アルキルエステルなどの二重エステル型プロドラッグを調製することが望ましい。特に有用であるのは、本発明の化合物のC1〜C8アルキル、C2〜C8アルケニル、アリール、C7〜C12置換アリール、及びC7〜C12アリールアルキルエステルである。
(条項)
1.  式Iによる化合物:
【化１４】
2021505651.tif 000016
（式中
R1は、1つ以上の独立に選択されるハロにより任意に置換されているC3-6シクロアルキルであり;
各R2a及びR2bは:
−  H、
−  1つ以上の独立に選択される
〇  ハロ、
〇  -OH、
〇  -CN、
〇  C1-4アルコキシ、
〇  C1-4チオアルコキシ、又は
〇  -SO2-C1-4アルキル
により任意に置換されているC1-4アルキル;
−  1つ以上の独立に選択される
〇  -CN、
〇  ハロ、
〇  -OH、
〇  -SO2-C1-4アルキル、
〇  1つ以上の独立に選択されるハロにより任意に置換されているC1-4アルキル、又は
〇  1つ以上の独立に選択されるハロにより任意に置換されているC1-4アルコキシ
により任意に置換されているC3-7シクロアルキル;及び
−  1つ以上の独立に選択されるO、N、若しくはSヘテロ原子を含み、1つ以上の独立に選択される
〇  -CN、
〇  ハロ、
〇  -OH、
〇  -SO2-C1-4アルキル、
〇  =O、
〇  1つ以上の独立に選択されるハロにより任意に置換されているC1-4アルキル、又は
〇  1つ以上の独立に選択されるハロにより任意に置換されているC1-4アルコキシ
により任意に置換されている4〜7員単環式ヘテロシクロアルキル
から独立に選択され;
R3は
−  1つ以上の独立に選択される
〇  ハロ、
〇  CN、
〇  -OH、
〇  -SO2-C1-4アルキル、
〇  C1-4アルコキシ、若しくは
〇  1つ以上の独立に選択されるO、N、若しくはSヘテロ原子を含む4〜7員単環式ヘテロシクロアルキル
により任意に置換されているC1-4アルキル、
−  ハロ、
−  -CN;
−  1つ以上の独立に選択されるR7基により任意に置換されているC1-4アルコキシ
であり
R4は
−  H、
−  -SO2-C1-4アルキル、
−  ハロ、
−  CN
−  1つ以上の独立に選択されるハロにより任意に置換されているC1-4アルキル、
−  C1-4アルコキシ
であり
R5は、H、-CN、ハロ、又は1つ以上の独立に選択されるハロにより任意に置換されているC1-4アルキルであり;且つ
各R6a、R6b、R6c、及びR6dは、独立に、H又はC1-4アルキルであり、
各R7は、独立に
−  ハロ、
−  -CN、
−  -OH、
−  -SO2-C1-4アルキル、
−  C1-4アルコキシ、
−  フェニル、
−  1つ以上の独立に選択されるO、N、若しくはSヘテロ原子を含む5〜6員単環式ヘテロアリール、
−  1つ以上の独立に選択されるR8aにより任意に置換されているC3-7シクロアルキル、
−  1つ以上の独立に選択されるO、N、又はSを含み、1つ以上の独立に選択されるR8bにより任意に置換されている単環式4〜7員ヘテロシクロアルキル、及び
−  1つ以上の独立に選択されるO、N、又はSを含み、1つ以上の独立に選択されるR8cにより任意に置換されている縮合/スピロ/架橋4〜10員ヘテロシクロアルキル
であり;
各R8a、R8b、及びR8cは:
−  ハロ、
−  -CN、
−  -SO2-C1-4アルキル、
−  =O、
−  1つ以上の独立に選択されるハロ若しくは-OHにより任意に置換されているアルキル、
−  -C(=O)NR6aR6b、
−  -C1-4アルコキシ、又は
−  -C(=O)C1-4アルキル
から独立に選択される);
又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、若しくは該溶媒和物の医薬として許容し得る塩。
2.  R1が、シクロプロピル又はシクロブチルである、条項1に記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
3.  R1がシクロプロピル又はシクロブチルであり、そのそれぞれが1つ以上の独立に選択されるハロにより置換されている、条項1に記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
4.  R1がシクロプロピル又はシクロブチルであり、そのそれぞれが1、2、又は3つのFにより置換されている、条項1に記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
5.  R5が、H、-CN、ハロ、又は1つ以上の独立に選択されるハロにより任意に置換されているC1-4アルキルである、条項1〜4のいずれか1つに記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
6.  R5が、H、-CN、-CH3、-CF3、F、又はClである、条項1〜4のいずれか1つに記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
7.  R5がHである、条項1〜4のいずれか1つに記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
8.  本発明の化合物が式IIによるものである、条項1に記載の化合物又は医薬として許容し得る塩:
【化１５】
2021505651.tif 000017
。
9.  R2aがHである、条項1〜8のいずれか1つに記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
10.  R2aが、-CH3、CH2CH3、-CH(CH3)2、又は-C(CH3)3である、条項1〜8のいずれか1つに記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
11.  R2aが-CH(CH3)2である、条項1〜8のいずれか1つに記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
12.  R2aが、-CH3、CH2CH3、-CH(CH3)2、又は-C(CH3)3であり、そのそれぞれが、1つ以上の独立に選択されるハロ、-OH、-CN、C1-4アルコキシ、C1-4チオアルコキシ、又は-SO2-C1-4アルキルにより置換されている、条項1〜8のいずれか1つに記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
13.  R2aが、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、又は-C(CH3)3であり、そのそれぞれが、1つ以上の独立に選択されるF、Cl、-OH、-CN、-OCH3、-OCH2CH3、-SCH3、又は-SO2CH3により置換されている、条項1〜8のいずれか1つに記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
14.  R2aが-CH2OH又は-C(CH3)2CH2OCH3である、条項1〜8のいずれか1つに記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
15.  R2aがC3-7シクロアルキルである、条項1〜8のいずれか1つに記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
16.  R2aが、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、又はシクロヘキシルである、条項1〜8のいずれか1つに記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
17.  R2aが、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、又はシクロヘキシルであり、そのそれぞれが、1つ以上の独立に選択される-CN、ハロ、-OH、-SO2-C1-4アルキル、1つ以上の独立に選択されるハロにより任意に置換されているC1-4アルキル、又は1つ以上の独立に選択されるハロにより任意に置換されているC1-4アルコキシにより置換されている、条項1〜8のいずれか1つに記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
18  R2aが、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、又はシクロヘキシルであり、そのそれぞれが、1つ以上の独立に選択される-CN、F、Cl、-OH、-SO2-CH3、-CH3、-CH2CH3、-CF3、-CHF2、-CH2CF3、-OCH3、-OCH2CH3、又は-OCF3により置換されている、条項1〜8のいずれか1つに記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
19.  R2aが、1つの-CN、F、Cl、-OH、-SO2-CH3、-CH3、-CH2CH3、-CF3、-CHF2、-CH2CF3、-OCH3、-OCH2CH3、又は-OCF3により置換されているシクロプロピルである、条項1〜8のいずれか1つに記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
20.  R2aが、1つ以上の独立に選択されるO、N、又はSヘテロ原子を含む4〜7員単環式ヘテロシクロアルキルである、条項1〜8のいずれか1つに記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
21.  R2aがオキセタニルである、条項1〜8のいずれか1つに記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
22.  R2aが、1つ以上の独立に選択されるO、N、又はSヘテロ原子を含み、1つ以上の独立に選択される-CN、ハロ、-OH、-SO2-C1-4アルキル、=O、1つ以上の独立に選択されるハロにより任意に置換されているC1-4アルキル、又は1つ以上の独立に選択されるハロにより任意に置換されているC1-4アルコキシにより置換されている4〜7員単環式ヘテロシクロアルキルである、条項1〜8のいずれか1つに記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
23.  R2aが、1つ以上の独立に選択される-CN、ハロ、-OH、-SO2-C1-4アルキル、=O、1つ以上の独立に選択されるハロにより任意に置換されているC1-4アルキル、又は1つ以上の独立に選択されるハロにより任意に置換されているC1-4アルコキシにより置換されているオキセタニルである、条項1〜8のいずれか1つに記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
24.  R2aが1つの-CH3により置換されているオキセタニルである、条項1〜8のいずれか1つに記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
25.  化合物が式IIIによるものである、条項1に記載の化合物又は医薬として許容し得る塩:
【化１６】
2021505651.tif 000018
。
26.  R2bがHである、条項1〜25のいずれか1つに記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
27.  R2bがC1-4アルキルである、条項1〜25のいずれか1つに記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
28.  R2bが、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、又は-C(CH3)3である、条項1〜25のいずれか1つに記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
29.  R2bが-CH(CH3)2である、条項1〜25のいずれか1つに記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
30.  R2bが、1つ以上の独立に選択されるハロ、-OH、-CN、C1-4アルコキシ、C1-4チオアルコキシ、又は-SO2-C1-4アルキルにより置換されているC1-4アルキルである、条項1〜25のいずれか1つに記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
31.  R2bが、-CH3、CH2CH3、-CH(CH3)2、又は-C(CH3)3であり、そのそれぞれが、1つ以上の独立に選択されるハロ、-OH、-CN、C1-4アルコキシ、C1-4チオアルコキシ、又は-SO2-C1-4アルキルにより置換されている、条項1〜25のいずれか1つに記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
32.  R2bが、-CH3、CH2CH3、-CH(CH3)2、又は-C(CH3)3であり、そのそれぞれが、1つ以上の独立に選択されるF、Cl、-OH、-CN、-OCH3、-OCH2CH3、-SCH3、又は-SO2CH3により置換されている、条項1〜25のいずれか1つに記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
33.  R2bがC3-7シクロアルキルである、条項1〜25のいずれか1つに記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
34.  R2bが、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、又はシクロヘキシルである、条項1〜25のいずれか1つに記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
35.  R2bが、1つ以上の独立に選択される-CN、ハロ、-OH、-SO2-C1-4アルキル、1つ以上の独立に選択されるハロにより任意に置換されているC1-4アルキル、又は1つ以上の独立に選択されるハロにより任意に置換されているC1-4アルコキシにより置換されているC3-7シクロアルキルである、条項1〜25のいずれか1つに記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
36.  R2bが、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、又はシクロヘキシルであり、そのそれぞれが、1つ以上の独立に選択される-CN、ハロ、-OH、-SO2-C1-4アルキル、1つ以上の独立に選択されるハロにより任意に置換されているC1-4アルキル、又は1つ以上の独立に選択されるハロにより任意に置換されているC1-4アルコキシにより置換されている、条項1〜25のいずれか1つに記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
37.  R2bが、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、又はシクロヘキシルであり、そのそれぞれが、1つ以上の独立に選択される-CN、F、Cl、-OH、-SO2-CH3、-CH3、-CH2CH3、-CF3、CHF2、-CH2CF3、-OCH3、-OCH2CH3、又は-OCF3により置換されている、条項1〜25のいずれか1つに記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
38.  R2bが、1つの-CN、F、Cl、-OH、-SO2-CH3、-CH3、-CH2CH3、-CF3、CHF2、-CH2CF3、-OCH3、-OCH2CH3、又は-OCF3により置換されているシクロプロピルである、条項1〜25のいずれか1つに記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
39.  R2bが、1つ以上の独立に選択されるO、N、又はSヘテロ原子を含む4〜7員単環式ヘテロシクロアルキルである、条項1〜25のいずれか1つに記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
40.  R2bがオキセタニルである、条項1〜25のいずれか1つに記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
41.  R2bが、1つ以上の独立に選択されるO、N、又はSヘテロ原子を含み、1つ以上の独立に選択される-CN、ハロ、-OH、-SO2-C1-4アルキル、=O、1つ以上の独立に選択されるハロにより任意に置換されているC1-4アルキル、又は1つ以上の独立に選択されるハロにより任意に置換されているC1-4アルコキシにより置換されている4〜7員単環式ヘテロシクロアルキルである、条項1〜25のいずれか1つに記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
42.  R2bが、1つ以上の独立に選択される-CN、ハロ、-OH、-SO2-C1-4アルキル、=O、1つ以上の独立に選択されるハロにより任意に置換されているC1-4アルキル、又は1つ以上の独立に選択されるハロにより任意に置換されているC1-4アルコキシにより置換されているオキセタニルである、条項1〜25のいずれか1つに記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
43.  R2bが、1つ以上の独立に選択される-CN、F、-OH、-SO2-CH3、=O、-CH3、-CH2CH3、-CF3、CHF2、-CH2CF3、-OCH3、-OCH2CH3、又は-OCF3により置換されているオキセタニルである、条項1〜25のいずれか1つに記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
44.  化合物が式IVa又はIVbによるものである、条項1に記載の化合物又は医薬として許容し得る塩:
【化１７】
2021505651.tif 000019
。
45.  R4がHである、条項1〜44のいずれか1つに記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
46.  R4が-SO2-C1-4アルキルである、条項1〜44のいずれか1つに記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
47.  R4が、-SO2CH3又は-SO2CH2CH3である、条項1〜44のいずれか1つに記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
48.  R4がハロである、条項1〜44のいずれか1つに記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
49.  R4がF又はClである、条項1〜44のいずれか1つに記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
50.  R4が-CNである、条項1〜44のいずれか1つに記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
51.  R4が、1つ以上の独立に選択されるハロにより任意に置換されているC1-4アルキルである、条項1〜44のいずれか1つに記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
52.  R4が、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、又は-CF3である、条項1〜44のいずれか1つに記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
53.  R4が、-OCH3又は-OCH2CH3である、条項1〜44のいずれか1つに記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
54.  R3がC1-4アルキルである、条項1〜53のいずれか1つに記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
55.  R3が、-CH3、-CH2CH3、又は-CH2CH(CH3)2である、条項1〜53のいずれか1つに記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
56.  R3が、1つ以上の独立に選択されるハロ、-CN、-OH、-SO2-C1-4アルキル、C1-4アルコキシ、又は1つ以上の独立に選択されるO、N、若しくはSヘテロ原子を含む4〜7員単環式ヘテロシクロアルキルにより置換されているC1-4アルキルである、条項1〜53のいずれか1つに記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
57.  R3が、-CH3、-CH2CH3、又は-CH2CH(CH3)2であり、そのそれぞれが、1つ以上の独立に選択されるハロ、-CN、-OH、-SO2-C1-4アルキル、C1-4アルコキシ、又は1つ以上の独立に選択されるO、N、若しくはSヘテロ原子を含む4〜7員単環式ヘテロシクロアルキルにより置換されている、条項1〜53のいずれか1つに記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
58.  R3が、1つ以上の独立に選択されるF、-CN、-SO2CH3、-OCH3、オキセタニル、テトラヒドロフラニル、又はテトラヒドロピラニルにより置換されているC1-4アルキルである、条項1〜53のいずれか1つに記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
59.  R3が、-CH3、-CH2CH3、又は-CH2CH(CH3)2であり、そのそれぞれが、1つ以上の独立に選択されるF、-CN、-SO2CH3、-OCH3、オキセタニル、テトラヒドロフラニル、又はテトラヒドロピラニルにより置換されている、条項1〜53のいずれか1つに記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
60.  R3がF又はClである、条項1〜53のいずれか1つに記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
61.  R3が-CNである、条項1〜53のいずれか1つに記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
62.  R3が、-OCH3、-OCH2CH3、-OCH2CH2CH3、-OCH2CH(CH3)2、又は-OCH(CH3)2である、条項1〜53のいずれか1つに記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
63.  R3が、1、2、又は3つの独立に選択されるR7基により置換されているC1-4アルコキシである、条項1〜53のいずれか1つに記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
64.  R3が、-OCH3、-OCH2CH3、-OCH2CH2CH3、-OCH2CH(CH3)2、又は-OCH(CH3)2であり、そのそれぞれが、1、2、又は3つの独立に選択されるR7基により置換されている、条項1〜53のいずれか1つに記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
65.  R3が、-OCH3、-OCH2CH3、-OCH2CH2CH3、-OCH2CH(CH3)2、又は-OCH(CH3)2であり、そのそれぞれが1つのR7基により置換されている、条項1〜53のいずれか1つに記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
66.  R7がFである、条項63、64、又は65に記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
67.  R7が-CNである、条項63、64、又は65に記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
68.  R7が-OHである、条項63、64、又は65に記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
69.  R7が-SO2CH3又は-SO2CH2CH3である、条項63、64、又は65に記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
70.  R7が、-OCH3、-OCH2CH3、-OCH2CH2CH3、-OCH2CH(CH3)2、又は-OCH(CH3)2である、条項63、64、又は65に記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
71.  R7がフェニルである、条項63、64、又は65に記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
72.  R7が、イミダゾリル、ピラゾリル、トリアゾリル、フラニル、ピリジニル、ピラジニル、又はピリミジニルである、条項63、64、又は65に記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
73.  R7が、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、又はシクロヘキシルである、条項63、64、又は65に記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
74.  R7が、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、又はシクロヘキシルであり、そのそれぞれが1つ以上の独立に選択されるR8aにより置換されている、条項63、64、又は65に記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
75.  R8aが、F、-CN、-SO2CH3、=O、-CH3、-CH2CH3、-CF3、-CH2-OCH3、-C(=O)NH2、-C(=O)NHCH3、-C(=O)N(CH3)2、-OCH3、-OCH2CH3、又は-C(=O)CH3である、条項74に記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
76.  R7が、オキセタニル、テトラヒドロフラニル、又はジオキサニルである、条項63、64、又は65に記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
77.  R7が、1つ以上の独立に選択されるO、N、又はSを含み、1、2、又は3つの独立に選択されるR8bにより置換されている単環式4〜7員ヘテロシクロアルキルである、条項63、64、又は65に記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
78.  R7が、オキセタニル、オキサゾリジニル、アゼチジニル、又はピロリルであり、そのそれぞれが、1、2、又は3つの独立に選択されるR8bにより置換されている、条項63、64、又は65に記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
79.  R8bが、F、-CN、-SO2CH3、=O、-CH3、-CH2CH3、-CF3、-CH2-OCH3、-C(=O)NH2、-C(=O)NHCH3、-C(=O)N(CH3)2、-OCH3、-OCH2CH3、又は-C(=O)CH3である、条項77又は78に記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
80.  R3が-OCH3又は-OCH2CH2CH2OCH3である、条項1〜53のいずれか1つに記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
81.  R3が-OCH2CH2CH2OCH3である、条項1〜53のいずれか1つに記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
82.  医薬として許容し得る担体及び治療上有効な量の条項1〜81のいずれか1つに記載の化合物又はその医薬として許容し得る塩を含む医薬組成物。
83.  医薬として許容し得る担体及び治療上有効な量の条項1〜81のいずれか1つに記載の化合物又はその医薬として許容し得る塩並びにさらなる治療剤を含む医薬組成物。
84.  医薬に使用するための、条項1〜81のいずれか1つに記載の化合物若しくはその医薬として許容し得る塩、又は条項82若しくは83に記載の医薬組成物(a pharmaceutically composition)。
85.  B型肝炎の予防及び／又は治療に使用するための、条項1〜81のいずれか1つに記載の化合物若しくはその医薬として許容し得る塩、又は条項82若しくは83に記載の医薬組成物。
【０１５５】
(医薬組成物)
医薬として使用される場合、本発明の化合物は、典型的には、医薬組成物の形態で投与される。そのような組成物は、医薬分野で周知の様式で調製され得、且つ式Iによる少なくとも1種の本発明の活性化合物を含む。通常、本発明の化合物は、医薬として有効な量で投与される。実際に投与される本発明の化合物の量は、典型的には、治療されるべき病態、選択された投与経路、投与される実際の本発明の化合物、個々の患者の年齢、体重、及び応答、患者の症状の重症度などを含む関連状況を考慮して、医師により決定されるであろう。
【０１５６】
本発明の医薬組成物は、経口、直腸、経皮、皮下、関節内、静脈内、筋肉内、及び鼻腔内を含む、種々の経路により投与され得る。意図される送達経路に応じて、本発明の化合物は、好ましくは、注射用若しくは経口組成物として、又は全て経皮投与用の、軟膏として、ローションとして、若しくはパッチとして製剤化される。
【０１５７】
経口投与用の組成物は、バルク液体溶液若しくは懸濁液、又はバルク粉末の形態を取り得る。しかし、より一般的には、該組成物は、正確な投薬を容易にするために単位剤形で提供される。「単位剤形」という用語は、ヒト対象及び他の哺乳動物用の単位投薬量として好適な物理的に別個の単位を指し、各々の単位は、所望の治療効果を与えるように計算された所定量の活性材料を、好適な医薬賦形剤、ビヒクル、又は担体と共に含有している。典型的な単位剤形は、液体組成物の予め充填され、予め測定されたアンプル若しくは注射器、又は固体組成物の場合、丸剤、錠剤、カプセル剤などを包含する。そのような組成物において、式Iによる本発明の化合物は、通常、より少ない成分(約0.1〜約50重量％又は好ましくは約1〜約40重量％)であり、残りは、所望の投薬形態を形成するのに役立つ、様々なビヒクル又は担体及び加工助剤である。
【０１５８】
経口投与に好適な液体形態は、緩衝剤、懸濁化及び分散化剤、着色料、香料などを伴う好適な水性又は非水性のビヒクルを包含し得る。固体形態は、例えば、以下の成分：微結晶性セルロース、トラガカントガム、若しくはゼラチンなどの結合剤；デンプン若しくはラクトースなどの賦形剤；アルギン酸、プリモゲル、若しくはトウモロコシデンプンなどの崩壊剤；ステアリン酸マグネシウムなどの滑沢剤；コロイド状二酸化ケイ素などの流動促進剤；スクロース若しくはサッカリンなどの甘味剤；ペパーミント若しくはオレンジ香料などの着香剤のうちのいずれか、或いは類似の性質の本発明の化合物を包含し得る。
【０１５９】
注射用組成物は、典型的には、当技術分野で公知の注射用滅菌生理食塩水若しくはリン酸緩衝生理食塩水又は他の注射用担体に基づく。上述の通り、そのような組成物中の式Iによる本発明の活性化合物は、典型的には、より少ない成分であり、しばしば、約0.05〜10重量％であり、残りは注射用担体などである。
【０１６０】
経皮組成物は、典型的には、有効成分（複数可）を、一般的には約0.01〜約20重量％、好ましくは約0.1〜約20重量％、好ましくは約0.1〜約10重量％、及びより好ましくは0.5〜約15重量％の範囲の量で含有する局所軟膏剤又はクリームとして製剤化される。軟膏剤として製剤化される場合、有効成分は、典型的には、パラフィン性軟膏基剤か水混和性軟膏基剤のいずれかと組み合わされるであろう。或いは、活性成分は、例えば、水中油型クリーム基剤とともにクリーム中に製剤化され得る。そのような経皮製剤は当技術分野で周知であり、通常、有効成分又は製剤の安定性の皮膚透過性(the dermal penetration of stability)を増大させる追加成分を含む。そのような公知の経皮製剤及び成分の全てが本発明の範囲内に含まれる。
【０１６１】
本発明の化合物は、経皮装置により投与され得る。したがって、経皮投与は、貯留槽型若しくは多孔性膜型又は固体マトリクス型のいずれかのパッチ剤を用いて達成され得る。
【０１６２】
経口投与可能な、注射可能な又は局所投与可能な組成物のための上記の成分は、代表的なものであるに過ぎない。他の材料及び加工技術などは、引用により本明細書中に組み込まれる、レミントンの医薬科学（Remington's Pharmaceutical Sciences）、第17版、1985、Mack Publishing Company, Easton, Pennsylvaniaのパート8に記載されている。
【０１６３】
本発明の化合物は、持続放出形態でも、又は持続放出薬物送達系からでも投与され得る。代表的な持続放出材料の説明は、レミントンの医薬科学(Remington's Pharmaceutical Sciences)に見出され得る。
【０１６４】
以下の製剤例は、本発明に従って調製され得る代表的な医薬組成物を例示するものである。しかしながら、本発明は、以下の医薬組成物に限定されない。
【０１６５】
(製剤1-錠剤)
式Iによる本発明の化合物は、乾燥粉末として、乾燥ゼラチン結合剤と約1:2の重量比で混合され得る。微量のステアリン酸マグネシウムが、滑沢剤として添加され得る。混合物は、打錠機で240〜270mg錠（1錠あたり、80〜90mgの式Iによる本発明の活性化合物）に成形され得る。
【０１６６】
(製剤2-カプセル)
式Iによる本発明の化合物は、乾燥粉末として、デンプン希釈剤と約1:1の重量比で混合され得る。混合物は、250mgカプセル（1カプセルあたり、125mgの式Iによる本発明の活性化合物）中に充填され得る。
【０１６７】
(製剤3-液剤)
式Iによる本発明の化合物(125mg)は、スクロース（1.75g）及びキサンタンガム（4mg）と混合され得、結果として得られる混合物は、ブレンドされ、No.10メッシュU.S.シーブに通され、その後、予め作製しておいた微結晶性セルロース及びカルボキシメチルセルロースナトリウム（11:89、50mg）の水溶液と混合され得る。安息香酸ナトリウム（10mg）、香料、及び着色料が水で希釈され、撹拌しながら添加され得る。その後、撹拌しながら、充分な水が添加され得る。その後、さらに充分な水が添加されて、5mLの総体積を生じさせ得る。
【０１６８】
（製剤4−錠剤）
式Iによる本発明の化合物は、乾燥粉末として、乾燥ゼラチン結合剤と約1:2の重量比で混合され得る。微量のステアリン酸マグネシウムが、滑沢剤として添加され得る。混合物は、打錠機で450〜900mg錠（150〜300mgの式Iによる本発明の活性化合物）に成形され得る。
【０１６９】
（製剤5−注射剤）
式Iによる本発明の化合物は、緩衝滅菌生理食塩水の注射用水性媒体に、約5mg/mLの濃度まで溶解又は懸濁され得る。
【０１７０】
（製剤6−局所剤）
ステアリルアルコール（250g）及び白色ワセリン（250g）は、約75℃で融解され得、その後、式Iによる本発明の化合物（50g）、メチルパラベン（0.25g）、プロピルパラベン（0.15g）、ラウリル硫酸ナトリウム（10g）、及び水（約370g）に溶解されたプロピレングリコール（120g）の混合物が添加され得、得られる混合物は、それが凝固するまで撹拌され得る。
【０１７１】
(治療の方法）
一実施態様において、本発明は、医薬における使用のための、本発明の化合物又は本発明の化合物を含む医薬組成物を提供する。具体的な実施態様において、本発明は、B型肝炎の予防及び/又は治療に使用するための、本発明の化合物又は本発明の化合物を含む医薬組成物を提供する。
【０１７２】
別の実施態様において、本発明は、B型肝炎の予防及び／又は治療に使用するための医薬の製造に使用するための、本発明の化合物又は本発明の化合物を含む医薬組成物を提供する。
【０１７３】
追加の治療方法の態様において、本発明は、B型肝炎に罹患している哺乳動物の予防及び／又は治療の方法であって、有効量の本発明の化合物又は本明細書に記載の医薬組成物の1種以上の、前記病態の治療又は予防のための投与を含む方法を提供する。
【０１７４】
一実施態様において、本発明は、本発明の化合物及び別の治療剤を含む医薬組成物を提供する。具体的な実施態様において、他の治療剤は、B型肝炎治療剤である。
【０１７５】
注射用量レベルは、全てが約1〜約120時間、特に24〜96時間の間に、約0.1mg/kg/時〜少なくとも10mg/kg/時の範囲である。適正な定常状態レベルを達成するために、約0.1mg/kg〜約10mg/kg又はそれを超える予充填ボーラスも投与され得る。最大総用量は、40〜80kgのヒト患者の場合、約1g/日を超えないと考えられる。
【０１７６】
変性状態などの長期間の病態の予防及び／又は治療のために、治療用レジメンは、通常、数カ月又は数年にわたり、したがって患者の便宜及び忍容性のために経口投与が好ましい。経口投与の場合、1日に1〜4回(1〜4)の常用量、特に、1日に1〜3回(1〜3)の常用量、典型的には、1日に1〜2回(1〜2)の常用量、及び最も典型的には、1日に1回(1)の常用量が代表的なレジメンである。或いは、長期持続作用型薬物について、経口投薬の場合、1週間おきに1回、1週間に1回、及び1日に1回が代表的なレジメンである。具体的には、投薬レジメンは、1〜14日おき、より具体的には1〜10日おき、さらにより具体的には1〜7日おき、及び最も具体的には1〜3日おきであり得る。
【０１７７】
これらの投薬パターンを用いて、各々の用量は、約1〜約1000mgの本発明の化合物を提供するが、具体的な用量は、各々約10〜約500mg、特に約30〜約250mgを提供する。
【０１７８】
経皮用量は、通常、注射用量を用いて達成されるのに類似又はそれよりも低い血液レベルを提供するように選択される。
【０１７９】
病態の発症を妨げるために使用する場合、本発明の化合物は、該病態を発症するリスクのある患者に、典型的には医師の助言に従い、且つその監督下で、上記の投薬量レベルで投与されるであろう。特定の病態を発症するリスクのある患者は、通常、該病態の家族歴を有する者、又は遺伝子検査若しくはスクリーニングにより該病態を特に発症しやすいことが確認されている者を包含する。
【０１８０】
本発明の化合物は、唯一の活性薬剤として投与できるが、同じ若しくは類似の治療活性を示し且つそのような併用投与に安全且つ有効であることが明らかにされている本発明の他の化合物を含む他の治療剤と組み合わせても投与できる。具体的な実施態様において、2種（又はそれより多く）の薬剤の共投与が、それぞれの著しく少ない用量の使用を可能とし、それにより、認められる副作用を低減させる。
【０１８１】
一実施態様において、本発明の化合物又は本発明の化合物を含む医薬組成物は、医薬として投与される。具体的な実施態様において、該医薬組成物は、さらなる有効成分を併せて含む。
【０１８２】
一実施態様において、本発明の化合物は、免疫応答を刺激する別の治療剤と共投与され、具体的な薬剤としては、PEG-IFN、TLRアゴニスト、治療用ワクチン、及び免疫チェックポイント遮断剤があるが、これらに限定されない。
【０１８３】
一実施態様において、本発明の化合物は、HBV DNAレベルを抑制する別の治療剤と共投与され、具合的な薬剤としては、ラミブジン、エンテカビル、テノホビル、テノホビルアラフェナミドのようなヌクレオシドアナログがあるが、これらに限定されない。
【０１８４】
一実施態様において、本発明の化合物は、HBV侵入受容体NTCPを遮断する別の治療剤と共投与され、具体的な薬剤としては、ミルクルデックス(Myrcludex)があるが、これに限定されない。
【０１８５】
一実施態様において、本発明の化合物は、カプシド集合を妨げる別の治療剤と共投与される。具体的な薬剤としては、AB-506及び／又はAB-423があるが、これらに限定されない。
【０１８６】
一実施態様において、本発明の化合物は、HBsAgレベルを抑制する別の治療剤と共投与される。具体的な実施態様において、HBsAgレベル抑制剤はRNA干渉剤である。具体的な薬剤には、ARB-1467があるが、これに限定されない。
【０１８７】
共投与には、当業者には明らかであるように、2種以上の治療剤を患者に同じ治療計画の一部として送達するあらゆる手段が含まれる。2種以上の薬剤は、単一の製剤で、すなわち単一の医薬組成物として同時に投与され得るが、これは必須ではない。薬剤は、異なる製剤で異なる時間に投与され得る。
【実施例】
【０１８８】
(化学合成手順)
(全般)
本発明の化合物は、以下の一般的方法及び手順を用いて、容易に入手可能な出発物質から調製され得る。典型的な又は好ましいプロセス条件（すなわち、反応温度、時間、反応物のモル比、溶媒、圧力その他）が与えられる場合、別途明記されない限り、他のプロセス条件も使用され得ることが理解されるであろう。最適な反応条件は、使用される具体的な反応物又は溶媒により異なり得るが、そのような条件は、当業者によりルーチンの最適化手順により決定され得る。
【０１８９】
さらに、当業者には明らかであるように、特定の官能基が望ましくない反応を受けるのを防ぐために、従来の保護基が必要となる場合がある。特定の官能基のための好適な保護基、並びに保護及び脱保護のための好適な条件の選択は、当技術分野において周知である（Greene, T W; Wuts, P G Mの文献;, 1991)。
【０１９０】
以下の方法は、本明細書において先に定義されている本発明の化合物の調製及び比較例に関する詳細と共に提示されている。本発明の化合物は、有機合成の分野の当業者により公知又は市販の出発材料及び試薬から調製され得る。
【０１９１】
試薬は全て商業グレードであり、特記されない限り、さらに精製せずに受け取ったまま使用した。市販の無水溶媒は、不活性雰囲気下で実施する反応に使用した。特記されない限り、試薬グレードの溶媒を他の全ての場合に使用した。カラムクロマトグラフィーは、シリカゲル60(35〜70μm)で実施した。薄層クロマトグラフィーは、プレコートされたシリカゲルF-254プレート(厚さ0.25mm)を使用して実施した。1H NMRスペクトルは、Bruker DPX 400 NMR分光計(400MHz)又はBruker Advance 300 NMR分光計(300MHz)で記録した。1H NMRスペクトルのケミカルシフト(δ)は、内部基準として、テトラメチルシラン(δ0.00)又は適切な残存溶媒ピーク、すなわちCHCl3(δ7.27)に対して、百万分率(ppm)で報告する。多重度は、シングレット(s)、ダブレット(d)、トリプレット(t)、カルテット(q)、クインツプレット(quin)、マルチプレット(m)、及びブロード(br)で与える。エレクトロスプレーMSスペクトルは、Waters platform LC/MS分光計又はWaters質量検出器3100分光計と接続されたWaters Acquity H-Class UPLCで得た。使用したカラム:Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7μm、2.1mm ID×50mm L、Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7μm、2.1mm ID×30mm L、又はWaters Xterra MS 5μm C18、100×4.6mm。方法は、MeCN/H2O勾配(H2Oは、0.1% TFAか0.1% NH3のいずれかを含む)かMeOH/H2O勾配(H2Oは0.05% TFAを含む)のいずれかを使用している。マイクロ波加熱は、Biotage Initiatorにより実施した。
表１.実験セクションで使用される略語のリスト
【表１】
2021505651.tif 000020
【０１９２】
(本発明の化合物の合成的調製）
（実施例1.  一般的合成方法)
(1.1.  例示的な本発明の化合物への中間体)
(一般的方法A:1,3-ビス-ヒドロキシルベンゼンのアセチル化)
【化１８】
2021505651.tif 000021
典型的な手順において、酢酸(2当量)を、1,3-ビス-ヒドロキシベンゼン(1当量)のBF3・O(C2H5)2(1.3M)中の混合物に滴加する。該混合物を90℃で16時間撹拌する。該混合物を放冷し、NaOAcの10%冷水溶液に注ぐ。該混合物を2時間撹拌し、次いで酢酸エチルで抽出する。有機層を洗浄し(飽和NaHCO3、H2O)、乾燥させ(Na2SO4)、濃縮すると、トリチュレーション後に所望の生成物が得られる。
【０１９３】
(方法Aの実例:中間体1、1-(5-フルオロ-2,4-ジヒドロキシ-フェニル)エタノンの合成)
【化１９】
2021505651.tif 000022
酢酸(13.4mL、234mmol、2当量)を、BF3・O(C2H5)2(90mL)中の4-フルオロベンゼン-1,3-ジオール(CAS:103068-41-3、15g、117mmol、1当量)の混合物に滴加する。該混合物を90℃で16時間撹拌する。該混合物を放冷し、NaOAcの10%冷水溶液(300mL)に注ぐ。該混合物を2時間撹拌し、酢酸エチルで抽出する。有機層を洗浄し(飽和NaHCO3、H2O)、乾燥させ(Na2SO4)、濃縮する。残渣をメチルtert-ブチルエーテル/石油エーテル混合物中でトリチュレートすると、所望の生成物が得られる。
【０１９４】
(一般的方法B:1,3-ビス-ヒドロキシルベンゼン誘導体のモノ-アルキル化)
【化２０】
2021505651.tif 000023
典型的な手順において、1,3-ビス-ヒドロキシルベンゼン誘導体(1当量)、ハロゲン化アルキル(0.9〜1当量)、及びK2CO3(1当量)のDMF中の混合物を室温で18〜24時間撹拌する。追加量のアルキル化剤を加え(0.2〜0.5当量)、該混合物をさらに24〜72時間撹拌する。該混合物を水及び有機溶媒で希釈する。2層を分離する。有機層を乾燥させ、濃縮すると、所望の生成物を与える。
【０１９５】
(方法Bの実例:中間体3、1-[5-クロロ-2-ヒドロキシ-4-(3-メトキシプロポキシ)フェニル]エタノンの合成)
【化２１】
2021505651.tif 000024
1-(5-クロロ-2,4-ジヒドロキシ-フェニル)エタノン(1g、5.4mmol、1当量)、1-ブロモ-3-メトキシ-プロパン(CAS:36865-41-5、0.6mL、5.4mmol、1当量)、及びK2CO3(741mg、5.4mmol、1当量)のDMF(8mL)中の混合物を室温で24時間撹拌する。さらに0.5当量の1-ブロモ-3-メトキシ-プロパンを加える。該反応混合物をさらに24時間撹拌する。該混合物を水及びジクロロメタンで希釈する。2層を分離する。有機層を乾燥させ(相分離器に通して濾過)、濃縮すると、所望の生成物を与える。
【０１９６】
(方法Bの実例:中間体4、1-[5-フルオロ-2-ヒドロキシ-4-(3-メトキシプロポキシ)フェニル]エタノンの合成)
【化２２】
2021505651.tif 000025
1-(5-フルオロ-2,4-ジヒドロキシ-フェニル)エタノン(5.8g、34mmol、1当量)、1-ブロモ-3-メトキシ-プロパン(CAS:36865-41-5、3.45mL、30.7mmol、0.9当量)、及びK2CO3(4.7g、34mmol、1当量)のDMF(50mL)中の混合物を室温で18時間撹拌する。さらに0.2当量の1-ブロモ-3-メトキシ-プロパンを加える。該反応混合物をさらに72時間撹拌する。該混合物を水及びジクロロメタンで希釈する。2層を分離する。有機層を乾燥させ(相分離器に通して濾過)、濃縮すると、所望の生成物を与える。
【０１９７】
(一般的方法C:クロマノン誘導体の合成)
【化２３】
2021505651.tif 000026
典型的な手順において、1-(2-ヒドロキシフェニル)-エタノン誘導体(1当量)、アルデヒド(0.9〜10当量)、及びピロリジン(0.2〜5当量)のメタノール中の混合物を60〜75℃で18〜30時間撹拌する。該混合物を有機溶媒で希釈し、水性の後処理を施す。有機層を乾燥させ、濃縮し、残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィーによりさらに精製できる。
【０１９８】
(方法Cの実例:中間体7、6-フルオロ-2-イソプロピル-7-(3-メトキシプロポキシ)クロマン-4-オンの合成)
【化２４】
2021505651.tif 000027
1-[5-フルオロ-2-ヒドロキシ-4-(3-メトキシプロポキシ)フェニル]エタノン(10g、41.3mmol、1当量)、2-メチルプロパナール(CAS:78-84-2、3.77mL、41.3mmol、1当量)、及びピロリジン(CAS:123-75-1、0.68mL、8.26mmol、0.2当量)のメタノール(59mL)中の混合物を60℃で18時間撹拌する。該混合物を水及びジクロロメタンで希釈し、2層を分離する。有機層を洗浄し(飽和NH4Cl及び飽和NaHCO3)、乾燥させ(相分離器に通して濾過)、濃縮する。残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー(SiO2、石油エーテル/酢酸エチル80:20)により精製すると、所望の生成物を与える。
【０１９９】
(方法Cの実例:中間体8、6-クロロ-7-(3-メトキシプロポキシ)-2-(3-メチルオキセタン-3-イル)クロマン-4-オンの合成)
【化２５】
2021505651.tif 000028
1-[5-クロロ-2-ヒドロキシ-4-(3-メトキシプロポキシ)フェニル]エタノン(2.5g、9.66mmol、1当量)、3-メチルオキセタン-3-カルボアルデヒド(CAS:99419-31-5、767mg、10.63mmol、1.1当量)、及びピロリジン(CAS:123-75-1、0.79mL、9.66mmol、1当量)のメタノール(24mL)中の混合物を60℃で22時間撹拌する。さらに0.3当量の3-メチルオキセタン-3-カルボアルデヒドを加え、該混合物を6時間撹拌する。該反応混合物を濃縮乾固させ、残渣を酢酸エチルと1N HClとの間で分配する。2相を分離し、有機層を洗浄(食塩水で洗浄)し、乾燥させ(Na2SO4)、濃縮する。残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー(SiO2、石油エーテル/酢酸エチル100:0〜40:60)により精製すると、所望の生成物を与える。
【０２００】
(中間体23、6-クロロ-7-(3-メトキシプロポキシ)-2,2-ジメチル-クロマン-4-オンの合成)
【化２６】
2021505651.tif 000029
1-[5-クロロ-2-ヒドロキシ-4-(3-メトキシプロポキシ)フェニル]エタノン(1g、3.87mmol、1当量)、アセトン(2.5mL、38.7mmol、10当量)、及びピロリジン(CAS:123-75-1、0.64mL、7.73mmol、2当量)のエタノール(4mL)中の混合物を、密封されたチューブ中で、75℃で3時間撹拌する。該混合物を水及びジクロロメタンで希釈し、2層を分離する。有機層を洗浄し(ブライン)、乾燥させ(MgSO4)、濃縮する。残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー(SiO2、石油エーテル/酢酸エチル95:5〜0:100)により精製すると、所望の生成物を与える。
【０２０１】
(一般的方法D:ヒドロキシル基を有するクロマノン誘導体の合成)
【化２７】
2021505651.tif 000030
典型的な手順において、2,4-ジヒドロキシ-フェニルエタノン誘導体(1当量)、アルデヒド(2〜18当量)、及びピロリジン(1.2〜5当量)のメタノール中の混合物を60〜75℃で18〜48時間撹拌する。該混合物を有機溶媒で希釈し、水性の後処理を施す。有機層を乾燥させ、濃縮し、残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィーによりさらに精製できる。
【０２０２】
(方法Dの実例:中間体24、6-クロロ-7-ヒドロキシ-2-イソプロピル-クロマン-4-オンの合成)
【化２８】
2021505651.tif 000031
1-(5-クロロ-2,4-ジヒドロキシ-フェニル)エタノン(5、26.8mmol、1当量)、3- 2-メチルプロパナール(CAS:78-84-2、4.9mL、53.6mmol、2当量)、及びピロリジン(2.2mL、32.2mmol、1.2当量)のメタノール(55mL)中の混合物を60℃で22時間撹拌する。該混合物をジクロロメタンで希釈し、有機層を洗浄し(飽和NaHCO3)、乾燥させ(MgSO4)、濃縮する。残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー(SiO2、石油エーテル/酢酸エチル90:10〜50:50)により精製すると、所望の生成物を与える。
【０２０３】
(一般的方法E:ヒドロキシル基を有するクロマノン誘導体のアルキル化)
【化２９】
2021505651.tif 000032
典型的な手順において、7-ヒドロキシ-クロマン-4-オン誘導体(1当量)、アルキル化剤(1〜1.5当量)、及びK2CO3(1〜2当量)のDMF又はアセトニトリル中の混合物を60〜80℃で15時間撹拌する。該混合物に水性の後処理を施し、残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィーによりさらに精製する。
【０２０４】
(方法Eの実例:中間体28、6-クロロ-2-イソプロピル-7-(3-メトキシプロポキシ)クロマン-4-オンの合成)
【化３０】
2021505651.tif 000033
6-クロロ-7-ヒドロキシ-2-イソプロピル-クロマン-4-オン(18.6mmol、1当量)、1-ブロモ-3-メトキシ-プロパン(CAS:36865-41-5、4.3g、27.9mmol、1.5当量)、及びK2CO3(3.2g、22.6mmol、1.2当量)のアセトニトリル(40mL)中の混合物を80℃で15時間撹拌する。該混合物をジクロロメタンで希釈する。有機混合物を水で洗浄する。2相を分離し、有機層を濃縮する。残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー(SiO2、石油エーテル/酢酸エチル100:0〜60:40)により精製すると、所望の生成物を与える。
【０２０５】
(中間体34、1-(3-クロロ-2,4-ジヒドロキシ-フェニル)エタノンの合成)
【化３１】
2021505651.tif 000034
10% NaClO水溶液(13.3mL、21mmol、1.3当量)を、1-(2,4-ジヒドロキシフェニル)エタノン(CAS:89-84-9、2.5g、16.4mmol、1当量)及びNaOH水溶液(1M、17.3mL、17.3mmol、1.05当量)のH2O(82mL)中の混合物に滴加する。該混合物を室温で16時間撹拌する。さらに14mLの10% NaClO水溶液を加え、反応物を室温で2時間撹拌する。さらに3mLの10% NaClO水溶液を加え、反応物を室温で2時間撹拌する。該混合物をpH 1に酸性化し、固形物を濾去する。濾液(filtrated)を酢酸エチルで抽出する。2層を分離する。有機層を固体と合わせて、濃縮する。残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー(SiO2、石油エーテル/酢酸エチル100:0〜75:25)により精製すると、所望の生成物を与える。
【０２０６】
(中間体35、1-(2,4,5-トリヒドロキシフェニル)エタノンの合成)
【化３２】
2021505651.tif 000035
1-(2,4,5-トリメトキシフェニル)エタノン(10g、47.6mmol、1当量)及びAlCl3(16.5g、124mmol、2.6当量)のトルエン(48mL)中の混合物を還流状態で24時間撹拌する。該混合物を濃縮乾固させ、冷却された1N HClによりクエンチする。該混合物を酢酸エチルで抽出する。有機層を乾燥させ(Na2SO4)、濃縮する。残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー(SiO2、ジクロロメタン/メタノール100:0〜95:5)により精製すると、所望の生成物を与える。
【０２０７】
(中間体36、1-(4-ベンジルオキシ-2,5-ジヒドロキシ-フェニル)エタノンの合成)
【化３３】
2021505651.tif 000036
1-(2,4,5-トリヒドロキシフェニル)エタノン(6.44g、38.3mmol、1当量)、ブロモメチルベンゼン(CAS:100-39-0、4.56mL、38.3mmol、1当量)、及びK2CO3(5.3g、38.3mmol、1当量)のアセトニトリル(103mL)中の混合物を、90℃で1時間撹拌し、室温で16時間撹拌する。該混合物を濃縮し、残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー(SiO2、石油エーテル/酢酸エチル100:0〜0:100)により精製すると、所望の生成物を与える。
【０２０８】
(中間体37、1-(4-ベンジルオキシ-2-ヒドロキシ-5-メトキシ-フェニル)エタノンの合成)
【化３４】
2021505651.tif 000037
1-(4-ベンジルオキシ-2,5-ジヒドロキシ-フェニル)エタノン(7.1g、27.5mmol、1当量)、ヨードメタン(CAS:74-88-4、1.71mL、27.5mmol、1当量)、及びK2CO3(3.8g、27.5mmol、1当量)のアセトニトリル(74mL)中の混合物を90℃で15時間撹拌する。0.3mLのヨードメタンを加え、該混合物をさらに3時間撹拌する。0.3mLのヨードメタンを加え、該混合物をさらに2時間撹拌する。該混合物を濃縮し、残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー(SiO2、石油エーテル/酢酸エチル100:0〜50:50)により精製すると、所望の生成物を与える。
【０２０９】
(中間体38、6-クロロ-2-イソプロピル-7-(2-トリメチルシリルエトキシメトキシ)クロマン-4-オンの合成)
【化３５】
2021505651.tif 000038
2-(トリメチルシリル)エトキシメチルクロリド(2.4mL、13.6mmol、1.2当量)を、非常にゆっくりと1時間かけて、6-クロロ-7-ヒドロキシ-2-イソプロピル-クロマン-4-オン(2.74g、11.4mmol、1当量)、及びN,N-ジイソプロピルエチルアミン(4.36mL、25mmol、2.2当量)の0℃の乾燥ジクロロメタン(56mL)中の混合物に加える。該反応混合物を、1時間0℃で撹拌し、室温でさらに1時間撹拌する。該混合物をジクロロメタンで希釈する。該有機混合物を洗浄し(H2O)、乾燥させ、濃縮すると、所望の生成物が得られる。
【０２１０】
(一般的方法F:クロマノン誘導体及び一級アミンからのエナミン形成)
【化３６】
2021505651.tif 000039
典型的な手順において、クロマノン誘導体(1当量)、一級アミン(2〜4当量)、及びTi(OiPr)4(1.2〜2当量)の1,2-ジクロロエタン中の混合物を室温から60℃で4〜18時間撹拌する。該混合物をジクロロメタンで希釈する。NaOH水溶液を加え、生じた混合物をセライトに通して濾過する。2相を分離する。有機層を乾燥させ、濃縮すると、所望の生成物を与える。
【０２１１】
(方法Fの実例:中間体39、N-シクロプロピル-6-フルオロ-2-イソプロピル-7-(3-メトキシプロポキシ)-2H-クロメン-4-アミンの合成)
【化３７】
2021505651.tif 000040
Ti(OiPr)4(3.6mL、12.1mmol、1.2当量)を、6-フルオロ-2-イソプロピル-7-(3-メトキシプロポキシ)クロマン-4-オン(3g、10.1mmol、1当量)、及びシクロプロパンアミン(CAS:765-30-0、1.16g、20.2mmol、2当量)の1,2-ジクロロエタン(50mL)中の混合物に加える。該混合物を50℃で4時間撹拌する。該混合物をジクロロメタンで希釈する。1N NaOHを加え、生じた混合物をセライトに通して濾過する。2相を分離する。有機層を乾燥させ(相分離器に通して濾過)、濃縮すると、所望の生成物を与える。
【０２１２】
(方法Fの実例:中間体40、6-クロロ-N-シクロプロピル-7-(3-メトキシプロポキシ)-2-(3-メチルオキセタン-3-イル)-2H-クロメン-4-アミンの合成)
【化３８】
2021505651.tif 000041
Ti(OiPr)4(1.4mL、4.9mmol、1.2当量)を、6-クロロ-7-(3-メトキシプロポキシ)-2-(3-メチルオキセタン-3-イル)クロマン-4-オン(1.39g、4.1mmol、1当量)及びシクロプロパンアミン(CAS:765-30-0、0.465g、8.2mmol、2当量)の1,2-ジクロロエタン(41mL)中の混合物に加える。該混合物を、室温で2時間撹拌し、60℃で1時間撹拌する。追加の0.3mLのシクロプロパンアミン(1.06当量)及び0.7mLのTi(OiPr)4(0.8当量)を加え、該混合物を60℃で16時間撹拌する。11mLの2M NaOHを加え、該混合物を1時間撹拌する。該混合物を濾過し、濾液をブラインで洗浄する。2相を分離する。有機層を乾燥させ(Na2SO4)、濃縮すると、所望の生成物を与える。
【０２１３】
(一般的方法G:エナミンとジエチル2-(エトキシメチレン)プロパンジオアートとの縮合)
【化３９】
2021505651.tif 000042
典型的な手順において、エナミン誘導体(1当量)及びジエチル2-(エトキシメチレン)プロパンジオアート(4〜5当量)の混合物を、130〜140℃で16〜90時間撹拌する。該混合物をシリカ上に吸着させ、フラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製すると、所望の生成物が生じる。
【０２１４】
(方法Gの実例:中間体64、エチル1-シクロプロピル-9-フルオロ-5-イソプロピル-8-(3-メトキシプロポキシ)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボキシラートの合成)
【化４０】
2021505651.tif 000043
N-シクロプロピル-6-フルオロ-2-イソプロピル-7-(3-メトキシプロポキシ)-2H-クロメン-4-アミン(10.1mmol)及びジエチル2-(エトキシメチレン)プロパンジオアート(CAS:87-13-8、13mL、45mmol、4.5当量)の混合物を130℃で16時間撹拌する。冷却後、該混合物をシリカ上に吸着させ、フラッシュカラムクロマトグラフィー(SiO2、ジクロロメタン/メタノール100:0〜98:2)により精製すると、所望の生成物が生じる。
【０２１５】
(方法Gの実例:中間体65、エチル9-クロロ-1-シクロプロピル-8-(3-メトキシプロポキシ)-5-(3-メチルオキセタン-3-イル)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボキシラートの合成)
【化４１】
2021505651.tif 000044
6-クロロ-N-シクロプロピル-7-(3-メトキシプロポキシ)-2-(3-メチルオキセタン-3-イル)-2H-クロメン-4-アミン(4.1mmol)及びジエチル2-(エトキシメチレン)プロパンジオアート(CAS:87-13-8、3.3mL、16.3mmol、4当量)の混合物を、130℃で16時間撹拌し、140℃で24時間撹拌する。冷却後、該混合物を希釈し(ジクロロメタン)、シリカ上に吸着させ、フラッシュカラムクロマトグラフィー(SiO2、カラムを、最初に石油エーテル/酢酸エチル100:0〜50:50により、次いでジクロロメタン/メタノール100:0〜97:3により溶離させる)により精製すると、所望の生成物が生じる。
【０２１６】
(一般的方法h:触媒的水素化によるベンジル基脱保護)
【化４２】
2021505651.tif 000045
ベンジル保護されたアリールオキシ誘導体(1当量)及びパラジウムカーボン(10重量%、0.1当量)の酢酸エチル又はメタノール中の混合物を室温で18時間撹拌する。該混合物を濾過し、濃縮すると、所望の生成物を与える。
【０２１７】
(方法Hの実例:中間体88、エチル1-シクロプロピル-8-ヒドロキシ-5-イソプロピル-9-メトキシ-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボキシラートの合成)
【化４３】
2021505651.tif 000046
エチル8-ベンジルオキシ-1-シクロプロピル-5-イソプロピル-9-メトキシ-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボキシラート(5.8g、11.9mmol、1当量)及び10% w/wパラジウムカーボン(1.3g、1.2mmol、0.1当量)の酢酸エチル(59mL)中の混合物を1気圧のh2下で室温で18時間撹拌する。該混合物にN2流を流し、セライトパッドで濾過する。濾液を濃縮し、ジクロロメタンに溶解させる。該有機混合物を乾燥させ(相分離器で濾過)、濃縮する。残渣を小体積のジクロロメタンに溶解させ、所望の生成物を石油エーテルの添加により沈殿させる。固体を、減圧した真空オーブン中でさらに乾燥させる。
【０２１８】
(中間体90、エチル9-クロロ-1-シクロプロピル-8-ヒドロキシ-5-イソプロピル-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボキシラートの合成)
【化４４】
2021505651.tif 000047
6-クロロ-N-シクロプロピル-2-イソプロピル-7-(2-トリメチルシリルエトキシメトキシ)-2H-クロメン-4-アミン(10.8mmol)及びジエチル2-(エトキシメチレン)プロパンジオアート(CAS:87-13-8、14mL、43.2mmol、4当量)の混合物を、130℃で14.5時間撹拌し、135℃で60時間撹拌する。冷却後、該混合物を希釈し(ジクロロメタン)、シリカ上に吸着させ、フラッシュカラムクロマトグラフィー(SiO2、石油エーテル/酢酸エチル90:10〜0:100)により精製する。生じた固体をアセトニトリル/MTBE中でトリチュレートすると、エチル9-クロロ-1-シクロプロピル-8-ヒドロキシ-5-イソプロピル-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボキシラートを与える。
【０２１９】
(中間体91、エチル1-シクロプロピル-5-イソプロピル-9-メトキシ-8-(3-メトキシプロポキシ)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボキシラートの合成)
【化４５】
2021505651.tif 000048
エチル1-シクロプロピル-8-ヒドロキシ-5-イソプロピル-9-メトキシ-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボキシラート(315mg、0.79mmol、1当量)、1-ブロモ-3-メトキシ-プロパン(CAS:36865-41-5、144mg、0.95mmol、1.2当量)及びK2CO3(218mg、1.58mmol、2当量)のDMF(2mL)中の混合物を室温で96時間撹拌する。該混合物を水で希釈し、ジクロロメタン及び酢酸エチルで抽出する。水層を濃縮し、ジクロロメタンに溶解させる。固体を全て濾去し、濾液を他の有機層と合わせる。合わせた有機層を濃縮し、残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー(SiO2、ジクロロメタン/メタノール100:0〜97:3)により精製すると、所望の生成物を与える。
【０２２０】
(中間体92、エチル1-シクロプロピル-5-(ヒドロキシメチル)-8,9-ジメトキシ-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボキシラートの合成)
【化４６】
2021505651.tif 000049
1M テトラ-n-ブチルアンモニウムフルオリドのTHF溶液(CAS:429-41-4、0.15mL、0.15mmol、1.2当量)を、エチル5-[[tert-ブチル(ジメチル)シリル]オキシメチル]-1-シクロプロピル-8,9-ジメトキシ-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボキシラート(64mg、0.124mmol、1当量)の0℃の乾燥THF溶液に加える。該混合物を室温で3時間撹拌する。該混合物を飽和NH4Cl水溶液によりクエンチする。該混合物を酢酸エチルで抽出する。2相を分離し、有機層を洗浄し(飽和NH4Cl水溶液及びブライン)、乾燥させ(MgSO4)、濃縮する。残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー(SiO2、カラムを、最初に石油エーテル/酢酸エチル50:50〜0:100により、次いで酢酸エチル/メタノール100:0〜95:5により溶離させる)により精製すると、所望の生成物を与える。
【０２２１】
(中間体93、エチル1-シクロプロピル-5-イソプロピル-9-メトキシ-2-オキソ-8-(トリジュウテリオメトキシ)-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボキシラートの合成)
【化４７】
2021505651.tif 000050
エチル1-シクロプロピル-8-ヒドロキシ-5-イソプロピル-9-メトキシ-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボキシラート(50mg、0.125mmol、1当量)、ヨードメタン-d3(CAS:865-50-9、36mg、0.25mmol、2当量)、及びK2CO3(35mg、0.25mmol、2当量)のDMF(1.5mL)中の混合物を70℃で2時間撹拌する。該混合物をジクロロメタンと水との間で分配する。2相を分離する。有機層を乾燥させ(相分離器に通して濾過)、濃縮すると、所望の生成物を与える。
【０２２２】
(中間体94、エチル9-シアノ-1-シクロプロピル-5-イソプロピル-8-(3-メトキシプロポキシ)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボキシラートの合成)
【化４８】
2021505651.tif 000051
エチル9-ブロモ-1-シクロプロピル-5-イソプロピル-8-(3-メトキシプロポキシ)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボキシラート(100mg、0.19mmol、1当量)、Zn(CN)2(23mg、0.19mmol、1当量)、及びPd(PPh3)4(23mg、0.02mmol、0.1当量)の混合物に、密封されたチューブ中でN2を流す。DMF(1mL)を加え、該混合物を100℃で16時間撹拌する。該混合物をジクロロメタン及び塩基性pHの水との間で分配する。2相を分離し、有機層を濃縮する。残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー(SiO2、石油エーテル/酢酸エチル90:10〜0:100)により精製すると、所望の生成物を与える。
【０２２３】
(1.2.  例示的な本発明の化合物)
(一般的方法I:エステル加水分解)
【化４９】
2021505651.tif 000052
典型的な手順において、エステル誘導体(1当量)及びLiOH・H2O(2.2〜5当量)の2:1 1,4-ジオキサン/H2O又は2:1〜4:1 THF/H2O中の混合物を室温から50℃で1〜16時間撹拌する。該混合物を1N HClにより酸性化し、有機溶媒で抽出する。有機層を濃縮すると、所望の生成物を与える。或いは、生成物を、後処理の前又は後に沈殿させることができ、それを、洗浄又は追加の後処理によりさらに精製できる。全ての場合に、最終生成物を、分取HPLCのフラッシュカラムクロマトグラフィーによりさらに精製できる。
【０２２４】
(方法Iの実例:化合物1、1-シクロプロピル-9-フルオロ-5-イソプロピル-8-(3-メトキシプロポキシ)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸の合成)
【化５０】
2021505651.tif 000053
エチル1-シクロプロピル-9-フルオロ-5-イソプロピル-8-(3-メトキシプロポキシ)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボキシラート(13g、28.3mmol、1当量)及びLiOH・H2O(2.72g、64.8mmol、2.3当量)の2:1 THF/H2O(140mL)中の混合物を室温で2時間撹拌する。該混合物を1M HClにより酸性化し、ジクロロメタンで抽出する。2相を分離する。有機層を乾燥させ(相分離器に通して濾過)、濃縮する。残渣をアセトニトリル/MTBEによりトリチュレートすると、所望の生成物を与える。
【０２２５】
(方法Iの実例:化合物2、9-クロロ-1-シクロプロピル-8-(3-メトキシプロポキシ)-5-(3-メチルオキセタン-3-イル)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸の合成)
【化５１】
2021505651.tif 000054
エチル9-クロロ-1-シクロプロピル-8-(3-メトキシプロポキシ)-5-(3-メチルオキセタン-3-イル)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボキシラート(1.47g、2.92mmol、1当量)及びLiOH・H2O(0.49g、11.7mmol、4当量)の4:1 THF/H2O(41mL)中の混合物を室温で1.5時間撹拌する。固体が形成され、濾過により除く。固体を石油エーテルで洗浄し、ジクロロメタンと1M HClとの間で分配する。2相を分離し、有機層を洗浄し(ブライン)、乾燥させ(Na2SO4)、濃縮する。残渣を、減圧したオーブン中でさらに乾燥させると、所望の化合物を与える。
【０２２６】
(化合物2、9-クロロ-1-シクロプロピル-8-(3-メトキシプロポキシ)-5-(3-メチルオキセタン-3-イル)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸の代替の合成)
【化５２】
2021505651.tif 000055
(工程i:1-(5-クロロ-2,4-ジヒドロキシ-フェニル)エタノン)
三フッ化ホウ素エーテラート(512mL、4.15mol、1.2当量)を、4-クロロレゾルシノール(500g、3.46mol、1.0当量)、無水酢酸(490mL、5.19mol、1.5当量)のEtOAc(1500mL)溶液に加えた。該反応混合物を還流状態で17時間撹拌した。次いで、該反応混合物を室温に冷却し、8% NaHCO3水溶液により3〜4のpHに中和した。水相をEtOAcで抽出した。合わせた有機相を、水及び20% NaCl水溶液で連続的に洗浄し、次いでおよそ500mLのEtOAcを残すなど、ある程度濃縮した。ヘプタンの該溶液への添加の後、期待された生成物は結晶化し、2回の収穫を得た。2回の収穫を合わせ、減圧したオーブン中でさらに乾燥させると、所望の化合物を与えた。
【０２２７】
(工程ii:1-[5-クロロ-2-ヒドロキシ-4-(3-メトキシプロポキシ)フェニル]エタノン)
1-ブロモ-3-メトキシプロパン(643mL、5.71mol、1.05当量)を、1-(5-クロロ-2,4-ジヒドロキシ-フェニル)エタノン(1015g、5.44mol、1.0当量)及びNa2CO3(605g、5.71mol、1.05当量)のブチロニトリル(7.5L)中の懸濁液に加えた。次いで、該反応混合物を、還流状態で60時間撹拌し、室温で12時間撹拌した。反応混合物を室温に冷却し、濾過した;ケーキをMTBEで洗浄した。濾液を2MのNaOH水溶液で数回抽出した。次いで、合わせた水相を、濃HCl水溶液により7付近のpHに中和して、生成物の結晶化を誘導した。該懸濁液を濾過し、ケーキを水及びヘプタンで連続的に洗浄した。固体を減圧したオーブン中で乾燥させると、所望の化合物を与えた。
【０２２８】
(工程iii:6-クロロ-7-(3-メトキシプロポキシ)-2-(3-メチルオキセタン-3-イル)クロマン-4-オン)
ピロリジン(97mL、1.16mol、0.25当量)を、1-[5-クロロ-2-ヒドロキシ-4-(3-メトキシプロポキシ)フェニル]エタノン(1200g、4.64mol、1.0当量)及び3-メチルオキセタン-3-カルボアルデヒド(604g、6.03mol、1.3当量)のMeOH(4000mL)中の懸濁液に加えた。該反応混合物を、還流状態で18時間撹拌し、室温に冷却した。水(2000mL)をゆっくりと加えて、生成物の結晶化を誘導した。該懸濁液を濾過し、ケーキをMeOH/水1:1(2000mL)で洗浄した。固体を回収し、減圧したオーブン中で乾燥させると、所望の化合物を与えた。
【０２２９】
(工程iv:6-クロロ-N-シクロプロピル-7-(3-メトキシプロポキシ)-2-(3-メチルオキセタン-3-イル)クロマン-4-イミン)
シクロプロピルアミン(870mL、12.5mol、4.0当量)及び酢酸(36mL、0.63mol、0.2当量)を、6-クロロ-7-(3-メトキシプロポキシ)-2-(3-メチルオキセタン-3-イル)クロマン-4-オン(1069g、3.14mol、1.0当量)のEtOH(5.3L)中の懸濁液に連続的に加えた。該反応混合物を還流状態で3時間30撹拌し、室温に冷却した。水(2.5L)を該反応混合物にゆっくりと加えて、生成物の結晶化を誘導した。該懸濁液を濾過し、ケーキをEtOH/水1:1(2L)で洗浄した。固体を回収し、減圧したオーブン中で乾燥させると、所望の化合物を与えた。
【０２３０】
(工程v:9-クロロ-1-シクロプロピル-8-(3-メトキシプロポキシ)-5-(3-メチルオキセタン-3-イル)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸)
5-(メトキシメチレン)-2,2-ジメチル-1,3-ジオキサン-4,6-ジオン(363g、1.95mol、1.3当量)を、6-クロロ-N-シクロプロピル-7-(3-メトキシプロポキシ)-2-(3-メチルオキセタン-3-イル)クロマン-4-イミン(570g、1.5mol、1.0当量)のDMSO(1200mL)中の懸濁液に加えた。該反応混合物を50℃で1時間30撹拌した。2MのNaOH水溶液(1200mL、2.4mol、1.6当量)を該反応混合物に加え、この後者(this latter)を50℃で45分間撹拌した。メタノール(3500mL)を該反応混合物に加え、次いでそれを室温に冷却した。該反応混合物を2M HCl水溶液(1200mL、2.4mol、1.6当量)によりゆっくりと中和した。結晶化が起こった。該懸濁液を濾過し、ケーキをMeOH(1500mL)で洗浄した。固体を回収し、減圧したオーブン中で乾燥させると、所望の化合物を与えた。
【０２３１】
(重水素化された化合物2、9-クロロ-8-(3-メトキシプロポキシ)-5-(3-メチルオキセタン-3-イル)-2-オキソ-1-(1,2,2,3,3-ペンタジュウテリオシクロプロピル)-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸の合成)
【化５３】
2021505651.tif 000056
(工程i:6-クロロ-7-(3-メトキシプロポキシ)-2-(3-メチルオキセタン-3-イル)-N-(1,2,2,3,3-ペンタジュウテリオシクロプロピル)クロマン-4-イミン)
DCM中の1M TiCl4(1.95mL、1.95mmol、0.5当量)を、6-クロロ-7-(3-メトキシプロポキシ)-2-(3-メチルオキセタン-3-イル)クロマン-4-オン(1.3g、3.82mol、1.0当量)及びシクロプロピルアミンD5(CAS番号53557-90-0、0.52g、8.39mmol、2.2当量)の氷浴により冷却したDCM(5mL)溶液に加えた。該反応混合物を1時間撹拌し、MTBE(10mL)を加えた。該反応混合物をダイカライトで濾過し、ダイカライトのケーキをMTBEで洗浄した。濾液を濃縮すると、所望の粗製化合物を与え、それをそのまま使用した。
【０２３２】
(工程ii:9-クロロ-8-(3-メトキシプロポキシ)-5-(3-メチルオキセタン-3-イル)-2-オキソ-1-(1,2,2,3,3-ペンタジュウテリオシクロプロピル)-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸)
5-(メトキシメチレン)-2,2-ジメチル-1,3-ジオキサン-4,6-ジオン(428mg、2.3mmol、1.7当量)を、6-クロロ-7-(3-メトキシプロポキシ)-2-(3-メチルオキセタン-3-イル)-N-(1,2,2,3,3-ペンタジュウテリオシクロプロピル)クロマン-4-イミン(520mg、1.35mol、1.0当量)のDMSO(1mL)中の懸濁液に加えた。該反応混合物を50℃で3時間撹拌した。2MのNaOH水溶液(1mL、2.0mmol、1.6当量)を該反応混合物に加え、この後者を50℃で45分間撹拌した。メタノール(5mL)を該反応混合物に加え、次いでそれを室温に冷却した。該反応混合物を、2M HCl水溶液(1mL、2.0mmol、1.6当量)によりゆっくりと中和した。結晶化が起こった。該懸濁液を濾過し、ケーキをMeOH(2mL)で洗浄した。固体を分取HPLCにより精製すると、所望の化合物を与えた。
【０２３３】
(方法Iの実例:化合物3、1-シクロプロピル-5-イソプロピル-8,9-ジメトキシ-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸の合成)
【化５４】
2021505651.tif 000057
エチル1-シクロプロピル-5-イソプロピル-8,9-ジメトキシ-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボキシラート(103mg、0.25mmol、1当量)及びLiOH・H2O(52mg、1.25mmol、5当量)の2:1 1,4-ジオキサン/H2O(1mL)中の混合物を50℃で1時間撹拌する。該混合物をH2Oで希釈し、1N HClにより酸性化する。沈殿物が形成し、濾去する。過剰の溶媒を凍結乾燥により除去すると、所望の生成物が得られる。
【０２３４】
(一般的方法J:光延反応によるアリールオキシ誘導体のアルキル化とそれに続く加水分解)
【化５５】
2021505651.tif 000058
典型的な手順において、アゾジカルボン酸ジ-tert-ブチル(2.4当量)を、アリールオキシ誘導体(1当量)、アルコール(1.2当量)、及びPPh3(2.4当量)のTHF溶液に、N2下0℃で加える。該混合物を室温で18時間撹拌する。該混合物をTHF及びH2Oで希釈すると、合計で2:1 THF/H2Oに達する。LiOH・H2O(3当量)を加え、該混合物を室温で40分から1時間撹拌する。該混合物を1N HClとジクロロメタンとの間で分配する。2相を分離し、有機層をブラインで洗浄し、乾燥させ、濃縮すると、所望の生成物を与える。
【０２３５】
(方法Jの実例:化合物5、9-クロロ-1-シクロプロピル-5-イソプロピル-8-(オキセタン-3-イルメトキシ)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸の合成)
【化５６】
2021505651.tif 000059
アゾジカルボン酸ジ-tert-ブチル(CAS:870-50-8、136mg、0.6mmol、2.4当量)を、エチル9-クロロ-1-シクロプロピル-8-ヒドロキシ-5-イソプロピル-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボキシラート(100mg、0.25mmol、1当量)、オキセタン-3-イルメタノール(CAS:6246-06-6、28mg、0.3mmol、1.2当量)及びPPh3(156mg、0.6mmol、2.4当量)のTHF溶液に、N2下0℃で加える。該混合物を室温で18時間撹拌する。同じ量を使用する第2の反応を開始し、室温で18時間撹拌する。追加の3-オキセタンメタノール(0.2当量)、PPh3(0.4当量)及びアゾジカルボン酸ジ-tert-ブチル(0.4当量)を加える。該混合物をさらに3時間撹拌すると、完了に達する。2つの反応物を一緒に混合し、THF及びH2Oで希釈すると、合計で2:1 THF/H2Oに達する。LiOH・H2O(62mg、1.5mmol、3当量)を加え、該混合物を40分間撹拌する。該混合物を1N HClとジクロロメタンとの間で分配する。2相を分離し、有機層をブラインで洗浄し、乾燥させ、濃縮する。残渣をメタノール及び石油エーテルによりトリチュレートする。固体を減圧したオーブン中で乾燥させると、所望の生成物を与える。
【０２３６】
(一般的方法K:ハロゲン化アルキルとの反応によるアリールオキシ誘導体のアルキル化とそれに続く加水分解)
【化５７】
2021505651.tif 000060
典型的な手順において、アリールオキシ誘導体(1当量)、アルキル化剤(1.1〜2当量)及びK2CO3(2当量)のDMF中の混合物を70℃で18時間撹拌する。該混合物を4:1 THF/H2Oで希釈し、LiOH・H2O(5当量)を加える。該混合物を室温で18〜70時間撹拌する。該混合物を酢酸エチルと1N HClとの間で分配する。2相を分離する。有機層を洗浄し(ブライン)、乾燥させ、濃縮する。残渣をメタノール及び石油エーテルによりトリチュレートすると、所望の生成物が得られ、それを分取HPLCによりさらに精製できる。トリチュレーションの濾液を回収して、分取HPLCにより精製できる。
【０２３７】
(方法Kの実例:化合物28、1-シクロプロピル-5-イソプロピル-9-メトキシ-8-[(3-メチルオキセタン-3-イル)メトキシ]-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸の合成)
【化５８】
2021505651.tif 000061
エチル1-シクロプロピル-8-ヒドロキシ-5-イソプロピル-9-メトキシ-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボキシラート(50mg、0.125mmol、1当量)、3-(ブロモメチル)-3-メチルオキセタン(CAS:78385-26-9、41mg、0.25mmol、2当量)及びK2CO3(35mg、0.25mmol、2当量)のDMF中の混合物を、70℃で18時間撹拌する。該混合物を4:1 THF/H2O(5mL)で希釈し、LiOH・H2O(5当量)を加える。該混合物を室温で70時間撹拌する。該混合物を酢酸エチルと1N HClとの間で分配する。2相を分離する。有機層を洗浄し(ブライン)、乾燥させ(Na2SO4)、濃縮する。残渣をメタノール及び石油エーテルによりトリチュレートすると、所望の生成物が得られる。
【０２３８】
(化合物43、8-[(1-シアノシクロブチル)メトキシ]-1-シクロプロピル-5-イソプロピル-9-メトキシ-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸の合成)
【化５９】
2021505651.tif 000062
アゾジカルボン酸ジ-tert-ブチル(CAS:870-50-8、69mg、0.3mmol、2.4当量)を、エチル9-クロロ-1-シクロプロピル-8-ヒドロキシ-5-イソプロピル-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボキシラート(50mg、0.125mmol、1当量)、1-(ヒドロキシメチル)シクロブタンカルボニトリル(CAS:956531-83-2、17mg、0.2mmol、1.2当量)及びPPh3(79mg、0.3mmol、2.4当量)のTHF溶液に、N2下0℃で加える。該混合物を室温で4.5時間撹拌する。(トリメチルホスホラニリデン)アセトニトリルのTHF溶液(0.5M、CAS:176325-83-0、0.4mL、0.2mmol、1.6当量)を加え、生じた混合物を40℃で16時間撹拌する。該混合物を4:1 THF/H2O(5mL)で希釈し、LiOH・H2O(15当量)を加える。該混合物を40℃で6時間撹拌する。該混合物を1N HClとジクロロメタンとの間で分配する。2相を分離し、有機層を洗浄し(ブライン)、乾燥させ(MgSO4及び相分離器に通して濾過)、濃縮する。残渣をメタノールによりトリチュレートし、減圧したオーブン中で乾燥させると、所望の生成物を与える。
【０２３９】
(例示的化合物44、(5S)-1-シクロプロピル-9-フルオロ-5-イソプロピル-8-(3-メトキシプロポキシ)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、及び45、(5R)-1-シクロプロピル-9-フルオロ-5-イソプロピル-8-(3-メトキシプロポキシ)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸)
【化６０】
2021505651.tif 000063
1-シクロプロピル-9-フルオロ-5-イソプロピル-8-(3-メトキシプロポキシ)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸(270mg、0.63mmol)を、キラル分離(カラム:Lux(登録商標) C4、21.2mm×250mm、5μm;移動相:勾配なし、MeCN(0.1% v/v TFA))にかけると、(5S)-1-シクロプロピル-9-フルオロ-5-イソプロピル-8-(3-メトキシプロポキシ)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸及び(5R)-1-シクロプロピル-9-フルオロ-5-イソプロピル-8-(3-メトキシプロポキシ)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸を与える。
【０２４０】
(例示的化合物46、(5S)-1-シクロプロピル-9-フルオロ-5-イソプロピル-8-(3-メトキシプロポキシ)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸、及び47、(5R)-1-シクロプロピル-9-フルオロ-5-イソプロピル-8-(3-メトキシプロポキシ)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸)
【化６１】
2021505651.tif 000064
9-クロロ-1-シクロプロピル-8-(3-メトキシプロポキシ)-5-(3-メチルオキセタン-3-イル)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸(809mg、0.63mmol)をキラル分離(カラム:Lux(登録商標) C4、21.2mm×250mm、5μm;移動相:勾配なし、MeCN(0.2% v/v TFA))にかけると、(5R)-9-クロロ-1-シクロプロピル-8-(3-メトキシプロポキシ)-5-(3-メチルオキセタン-3-イル)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸及び(5S)-9-クロロ-1-シクロプロピル-8-(3-メトキシプロポキシ)-5-(3-メチルオキセタン-3-イル)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸を与える。両生成物を以下の条件を利用して分取HPLCによりさらに精製する:カラム:Xselect CSH(30mm×150mm、5μm);移動相:勾配、水(0.1% v/vギ酸)/アセトニトリル。
【０２４１】
(中間体107、6-クロロ-2-(3-メチルオキセタン-3-イル)-7-(2-トリメチルシリルエトキシメトキシ)クロマン-4-オンの合成)
【化６２】
2021505651.tif 000065
2-(トリメチルシリル)エトキシメチルクロリド(3.7mL、20.7mmol、1.2当量)を、6-クロロ-7-ヒドロキシ-2-(3-メチルオキセタン-3-イル)クロマン-4-オン(4.6g、17.3mmol、1当量)、及びN,N-ジイソプロピルエチルアミン(6.8mL、38.0mmol、2.2当量)の0℃の乾燥ジクロロメタン(85mL)中の混合物に非常にゆっくりと1時間かけて加える。該反応混合物を、1時間0℃で撹拌し、室温でさらに1時間撹拌する。該混合物をジクロロメタンで希釈する。該有機混合物を洗浄し(H2O)、乾燥させ、濃縮すると、所望の生成物が得られる。
【０２４２】
(中間体114  エチル1-シクロプロピル-5-イソプロピル-8-(3-メトキシプロポキシ)-2-オキソ-9-(トリフルオロメチル)-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボキシラートの合成)
【化６３】
2021505651.tif 000066
:N2下で、エチル9-ブロモ-1-シクロプロピル-5-イソプロピル-8-(3-メトキシプロポキシ)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボキシラート(30mg、0.058mmol、1当量)、トリフルオロ酢酸カリウム(53mg、0.30mmol、6当量)及び銅ヨウ素(cupper iodine)(66mg、0.30mmol、6当量)のNMP(0.4mL、0.14M)中の混合物を150℃で18時間撹拌する。該混合物をジクロロメタンによりセライトで濾過する。濾液を酢酸エチルと水との間で分配する。2相を分離する。有機層を洗浄し(ブライン)、乾燥させ(Na2SO4)、濃縮する。残渣を分取HPLCにより精製すると、所望の生成物を与える。
【０２４３】
(中間体115  エチル1-シクロプロピル-5-イソプロピル-8-(3-メトキシプロポキシ)-9-メチルスルホニル-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボキシラートの合成)
【化６４】
2021505651.tif 000067
N2下で、エチル9-ブロモ-1-シクロプロピル-5-イソプロピル-8-(3-メトキシプロポキシ)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボキシラート(100mg、0.192mmol、1.0当量)、ピロ亜硫酸カリウム(85mg、0.384mmol、2.0当量)、テトラブチルアンモニウムブロミド(68mg、0.21mmol、1.1当量)、ギ酸ナトリウム(29mg、0.42mmol、2.2当量)、酢酸パラジウム(2.2mg、0.0096mmol、0.05当量)、トリフェニルホスフィン(7.6mg、0.029mmol、0.15当量) 1,10-フェナントロリン(5.2mg、0.029mmol、0.15当量)のアセトニトリル(1mL、0.3M)中の混合物を、70℃で2時間撹拌する。ヨウ化メチルを加える(41mg、0.29mmol、1.5当量)。該混合物を70℃で18時間撹拌する。該混合物をジクロロメタンと水との間で分配する。2相を分離する。有機層を乾燥させ(相分離器に通して濾過)、濃縮する。残渣を分取HPLCにより精製すると、所望の生成物を与える。
【０２４４】
(中間体123  メチル1-シクロプロピル-8-(3-メトキシプロポキシ)-5-(3-メチルオキセタン-3-イル)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボキシラートの合成)
【化６５】
2021505651.tif 000068
【０２４５】
N2下で、パラジウム炭素(45mg、0.04mmol、0.1当量)を、メタノール(10mL、0.04M)中の9-クロロ-1-シクロプロピル-8-(3-メトキシプロポキシ)-5-(3-メチルオキセタン-3-イル)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸(200mg、0.42mmol、1.0当量)に加える。該混合物を、1気圧のh2下で室温で18時間撹拌する。該混合物を、ジクロロメタンによりセライトで濾過し、濃縮すると、所望の生成物を与える。
【０２４６】
(中間体124  エチル9-クロロ-1-シクロプロピル-5-(3-メチルオキセタン-3-イル)-2-オキソ-8-(2,2,2-トリフルオロエトキシ)-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボキシラートの合成)
【化６６】
2021505651.tif 000069
0℃で、2,2,2-トリフルオロエチルトリフルオロメタンスルホナート(37μL、0.26mmol、1.2当量)を、エチル9-クロロ-1-シクロプロピル-8-ヒドロキシ-5-(3-メチルオキセタン-3-イル)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボキシラート(92mg、0.21mmol、1.0当量)及び炭酸セシウム(140mg、0.43mmol、2.0当量)の乾燥DMF(1.6mL、0.1M)中の混合物に加える。10分後、氷浴を外す。該反応混合物を、N2雰囲気下室温で1時間撹拌する。該混合物をジクロロメタンと水との間で分配する。2相を分離する。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮すると、所望の生成物を与える。
【０２４７】
(中間体127  6-クロロ-2-(3-メチルオキセタン-3-イル)-7-テトラヒドロピラン-2-イルオキシ-クロマン-4-オンの合成)
【化６７】
2021505651.tif 000070
p-トルエンスルホン酸一水和物(14mg、0.04mmol、0.02当量)を、6-クロロ-7-ヒドロキシ-2-(3-メチルオキセタン-3-イル)クロマン-4-オン(1.0g、3.72mmol、1.0当量)及び3,4-ジヒドロ-2H-ピラン(1.02mL、11.2mmol、3.0当量)の乾燥ジクロロメタン(8.0mL、0.5M)中の懸濁液に室温で加える。該混合物を室温で2時間撹拌する。該混合物をジクロロメタンと水との間で分配する。2相を分離する。有機層を洗浄し(飽和NaHCO3溶液及びブライン)、乾燥させ(Na2SO4)、濃縮する。残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー(SiO2、石油エーテル/酢酸エチル75:25〜0:100)により精製すると、所望の生成物を与える。
【０２４８】
(中間体130  6-クロロ-7-[[(2R)-1,4-ジオキサン-2-イル]メトキシ]-2-(3-メチルオキセタン-3-イル)クロマン-4-オンの合成)
【化６８】
2021505651.tif 000071
アゾジカルボン酸ジ-tert-ブチル(CAS:870-50-8、411mg、1.79mmol、2.4当量)を、6-クロロ-7-ヒドロキシ-2-(3-メチルオキセタン-3-イル)クロマン-4-オン(200mg、0.74mmol、1.0当量)、(S)-(1,4-ジオキサン-2-イル)メタノール(151μL、1.49mmol、2.0当量)及びPPh3(468mg、1.79mmol、2.4当量)のTHF(8.0mL、0.1M)溶液にN2下で加える。該混合物を室温で18時間撹拌する。該混合物をジクロロメタンと水との間で分配する。2相を分離する。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮する。残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー(SiO2、石油エーテル/酢酸エチル50:50〜0:100)により精製すると、所望の生成物を与える。
【０２４９】
(中間体133  6-クロロ-7-(ジフルオロメトキシ)-2-(3-メチルオキセタン-3-イル)クロマン-4-オンの合成)
【化６９】
2021505651.tif 000072
N2下で、クロロジフルオロ酢酸ナトリウム(227mg、1.49mmol、2.0当量)を、6-クロロ-7-ヒドロキシ-2-(3-メチルオキセタン-3-イル)クロマン-4-オン(200mg、0.74mmol、1.0当量)及び炭酸カリウム(154mg、1.11mmol、1.5当量)の乾燥DMF(5.6mL、0.13M)中の混合物に室温で加える。該反応混合物を70℃でN2雰囲気下で4時間撹拌する。該混合物をジクロロメタンと水との間で分配する。2相を分離する。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮する。残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー(SiO2、石油エーテル/酢酸エチル100:0〜50:50)により精製すると、所望の生成物を与える。
【０２５０】
(例示的化合物66、(5S)-9-クロロ-1-シクロプロピル-8-メトキシ-5-(3-メチルオキセタン-3-イル)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸及び67、(5R)-9-クロロ-1-シクロプロピル-8-メトキシ-5-(3-メチルオキセタン-3-イル)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸)
【化７０】
2021505651.tif 000073
9-クロロ-1-シクロプロピル-8-メトキシ-5-(3-メチルオキセタン-3-イル)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸(185mg、0.44mmol)を、キラル分離(カラム:Lux(登録商標)C4、21.2mm×250mm、5μm;移動相:勾配なし、MeCN/イソプロパノール9:1(0.2% v/vギ酸))にかけると、(5S)-9-クロロ-1-シクロプロピル-8-メトキシ-5-(3-メチルオキセタン-3-イル)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸及び(5R)-9-クロロ-1-シクロプロピル-8-メトキシ-5-(3-メチルオキセタン-3-イル)-2-オキソ-5H-クロメノ[4,3-b]ピリジン-3-カルボン酸を与える。
表II.  中間体の表
【表２】
2021505651.tif 000074
2021505651.tif 000075
2021505651.tif 000076
2021505651.tif 000077
2021505651.tif 000078
2021505651.tif 000079
2021505651.tif 000080
2021505651.tif 000081
2021505651.tif 000082
2021505651.tif 000083
2021505651.tif 000084
2021505651.tif 000085
2021505651.tif 000086
2021505651.tif 000087
2021505651.tif 000088
2021505651.tif 000089
2021505651.tif 000090
2021505651.tif 000091
2021505651.tif 000092
2021505651.tif 000093
2021505651.tif 000094
2021505651.tif 000095
2021505651.tif 000096
2021505651.tif 000097
2021505651.tif 000098
表III.  例示的な本発明の化合物
【表３】
2021505651.tif 000099
2021505651.tif 000100
2021505651.tif 000101
2021505651.tif 000102
2021505651.tif 000103
2021505651.tif 000104
2021505651.tif 000105
2021505651.tif 000106
2021505651.tif 000107
2021505651.tif 000108
2021505651.tif 000109
2021505651.tif 000110
2021505651.tif 000111
2021505651.tif 000112
2021505651.tif 000113
2021505651.tif 000114
2021505651.tif 000115
2021505651.tif 000116
2021505651.tif 000117
2021505651.tif 000118
2021505651.tif 000119
2021505651.tif 000120
表IV.  NMR表:最終化合物
【表４】
2021505651.tif 000121
2021505651.tif 000122
2021505651.tif 000123
2021505651.tif 000124
2021505651.tif 000125
2021505651.tif 000126
【０２５１】
(生物学的実施例)
(実施例2.  インビトロアッセイ)
(2.1.  Hepg2 NTCPアッセイ)
(2.1.1.  アッセイ)
hepG2-NTCPアッセイの原理は、参照化合物に対する、試験化合物のB型肝炎ウイルス(HBV)感染の阻害に対する効果を測定することである。肝細胞癌細胞(HepG2)をHBVに感染させることが可能であるために、HepG2細胞を、ナトリウム/胆汁酸コトランスポーター(SLC10A1)とも称される、HBV感染に必要であるNa+-タウロコール酸共輸送ポリペプチド(NTCP)受容体により安定的にトランスフェクトした。このアッセイにおいて、HBVコア抗原(HBcAg)を、HBV感染のマーカーとして使用する。核カウントを、化合物毒性のしるしとして使用する。
【０２５２】
(2.1.2.  手順の説明）
1日目に、HepG2-NTCP細胞((Niらの文献、2014))を、384ウェルプレート中で、アッセイ培地(10%熱非働化されていない(non HI)ウシ胎児血清(FBS)、1% P/S、1% L-グルタミン及び1% MEM NEAAを補ったDMEM高グルコース)中で、ウェルあたり50μL中5000細胞で播種し、37℃、5% CO2で一晩インキュベートする。
【０２５３】
化合物を、100% DMSOでの1/3希釈段階を利用して、10mMの最高濃度から始めて10点の段階希釈液として調製するが、非常に効力の高い化合物に対して別に要求される場合には、5mM又は1mMストックから始めた。化合物を、アッセイ培地で1/500にさらに希釈する。
【０２５４】
陰性対照(ビヒクル:0.2% DMSOを有する24ウェル)及び陽性対照(100nMミルクルデックスB(Cas番号:406461-66-3)、0.2% DMSOを有し10点DR中の24ウェル)を実験に含める。
【０２５５】
2日目に、40μl培地をプレートウォッシャー(Select 405マイクロプレートウォッシャー、Biotek社製)により細胞から除く。15μLの希釈された化合物系列をアッセイプレートに移し、細胞を15μLのHBVミックス(HBVウイルス、アッセイ培地中4%PEG、1%DMSO)により感染させる。感染を、最終濃度1%DMSOを含むアッセイ培地中で実施する。アッセイプレートを、37℃、5% CO2で一晩インキュベートする。
【０２５６】
次の日に、30μl化合物及びHBVミックスをプレートウォッシャーによりアッセイプレートから除き、最終濃度2.5% DMSOを含むアッセイ培地で1/500に希釈した30μLの化合物系列を細胞アッセイプレートに加える。アッセイプレートを、37℃、5% CO2で5日間インキュベートする。
【０２５７】
5日間のインキュベーションの後、上清を、プレートウォッシャーにより細胞から除く。細胞を、Well mate(Matrix technologies社製)により加えられた50μLの3.7%ホルムアルデヒドにより固定化し、30分間室温でインキュベートする。固定化の後、細胞を、リン酸緩衝生理食塩水(1xPBS、137mM NaCl、10mM na2HPO4、2.7mM KCl、1.8mM KH2PO4、pH7.4)により4回洗浄する。細胞を、最後にHBc染色に付す。
【０２５８】
最初に、アッセイプレートを、ブロッキングバッファー(PBS中2% FBS、3% BSA、0.2% TritonX100)により、1時間室温でブロッキングする(任意に一晩4℃でブロッキング)。
【０２５９】
プレートウォッシャーによるPBST(1XPBS+0.05% Tween)の4回洗浄の後、アッセイプレートを、30μLの希釈された一次抗体(1/700ウサギ-抗HBVコア抗原、Dako社製、B0586又は1/350ウサギ抗HBVコア抗原、Invitrogen社製、PA516368)と共にブロッキングバッファー中でインキュベートし、90分間室温でインキュベートする。
【０２６０】
プレートウォッシャーによるPBSTの4回洗浄の後、アッセイプレートを、ブロッキングバッファーで1/500に希釈した50μLの二次抗体(ロバ-抗-ウサギAlexa 488抗体、Lifetechnologies社製A21206)と共にインキュベートし、暗所で、60分間室温でインキュベートする。
【０２６１】
アッセイプレートを、プレートウォッシャー上でPBSTにより4回洗浄し、PBSで1/10000に希釈した50μLのDAPI(Sigma社製 D9542、ストック5mg/mL)と共に15〜30分間室温で、暗所でインキュベートする。アッセイプレートは、InCell Analyzer 2200(GE Healthcare社製)での読取りの用意が整った。
【０２６２】
(2.1.3.  データ分析)
生データは、InCell 2200で実施した読出しの後に生成し、上述の対照ウェルを利用する阻害パーセンテージ(PIN)及び核カウントによる毒性の自動計算並びに用量反応曲線の作成のためにgalapagos LIMSにインポートする。
表V.  例示的な本発明の化合物のHepg2 NTCPアッセイ活性
【表５】
2021505651.tif 000127
【０２６３】
(2.2.  iCell肝細胞アッセイ)
(2.2.1.  アッセイの原理）
iCell肝細胞2.0 96ウェルアッセイの原理は、B型肝炎ウイルス(HBV)感染に対する試験化合物の阻害効果を評価することである。このアッセイにおいて、HBVコア抗原(HBcAg)及び／又は細胞外抗原(HBeAg)及び／又は表面抗原(HBsAg)を、HBV感染のマーカーとして使用する。核カウントは、化合物毒性のしるしとして使用され得る。
【０２６４】
標準的なアッセイセットアップにおいて、HBV感染と化合物添加を同じ日に実施し、遅延アッセイにおいて、化合物をHBV感染の3日後に加える。iCell肝細胞2.0は、Cellular Dynamics international社(CDI、R1027)から購入した人工多能性幹細胞(iPSc)から誘導したヒト肝細胞である。
【０２６５】
(2.2.2.  アッセイ手順の説明)
0日目に、iCell肝細胞2.0(CDI、R1027)を解凍し、コラーゲンIコート96ウェルプレートに112000c/ウェル(100μL)で播種培地(B27サプリメント、20ng/mL組換え型ヒトオンコスタチンM(OSM)、25μg/mLゲンタマイシン、0.1μMデキサメタゾン、及びCDIにより提供されるiCell培地サプリメントを補ったRPMI)に播種する。プレートを37℃、5% CO2でインキュベートし、その後4日間毎日播種培地を新たに足す。
【０２６６】
5日目及び6日目に、プレートに、100μL維持培地(B27サプリメント、25μg/mLゲンタマイシン、0.1μMデキサメタゾン、及びCDIにより提供されるiCell培地サプリメントを補ったRPMI)を新たに足し、37℃、5% CO2で、次の日までインキュベートする。
【０２６７】
(2.2.2.1.  標準アッセイ)
7日目(感染の日)に、上清をアッセイプレートから除き、維持培地で1/250希釈した25μLの化合物及び25μLのHBVミックス(HBVウイルス、維持培地中8% PEG、0%又は4% DMSO)をアッセイプレートに加える。化合物系列を、0.2% DMSOに対して標準化して、100% DMSOでの1/5希釈段階を利用して6点の段階希釈液として、又は100% DMSOでの1/3希釈段階を利用して8点の段階希釈液として、又は1/4希釈段階を利用して8点の段階希釈液として手作業で調製する。アッセイプレートを、一晩37℃、5% CO2でインキュベートした。
【０２６８】
感染後1日目に(8日目)、50μLのHBV/化合物ミックスをアッセイプレートから除き、維持培地で1/500希釈した100μLの化合物系列を新たに足す。アッセイプレートを37℃、5% CO2でインキュベートし、維持培地で1/500希釈した化合物系列を1日おきに(感染後3日及び5日目に)、又は3日間のインキュベーションの後に(感染後4日目に)新たに足す。
【０２６９】
感染後7日目に(14日目)、100μLの上清を収集し、-20℃で凍結する。細胞を50μLの3.7%ホルムアルデヒドで固定化し、30分間室温でインキュベートした。固定化後、細胞をリン酸緩衝生理食塩水(PBS)により、プレートウォッシャー(Select 405、マイクロプレートウォッシャー、Biotek社製)を使用して4回洗浄し、HBc染色に付す。収集した上清をHBe及び／又はHBs ELISAに使用する。
【０２７０】
(2.2.2.2.  遅延アッセイ)
7日目(感染の日)に、維持培地をアッセイプレートから除き、細胞を、50μLのHBVミックス(HBVウイルス、維持培地中4% PEG、0%又は2% DMSO)により感染させる。アッセイプレートを、一晩、37℃、5% CO2でインキュベートした。
【０２７１】
感染後1日目に(8日目)、50μLのHBVミックスをアッセイプレートから除き、100μLの維持培地を新たに足す。アッセイプレートを、37℃、5% CO2で3日間インキュベートする。
【０２７２】
感染後4日目(11日目)及び感染後7日目(14日目)に、上清を除き、維持培地で1/500に希釈した100μLの化合物系列をアッセイプレートに加える(0.2% DMSOに対して標準化された、100% DMSOでの1/3希釈段階を利用する8点段階希釈液又は1/4希釈段階を利用する8点段階希釈液）。アッセイプレートを、37℃、5% CO2で3日間インキュベートした。
【０２７３】
感染後10日目に(17日目)、100μLの上清を収集し、-20℃に凍結する。細胞を50μLの3.7%ホルムアルデヒドにより固定化し、30分間室温でインキュベートする。固定化後、細胞を、リン酸緩衝生理食塩水(PBS)により、プレートウォッシャー(Select 405、マイクロプレートウォッシャー、Biotek社製)を使用して4回洗浄し、HBc染色に付す。収集した上清をHBe及び／又はHBs ELISAに使用する。
【０２７４】
(2.2.3.  HBc染色)
アッセイプレートを、ブロッキングバッファー(PBS中2% FBS、3% BSA、0.2% TritonX100)により1時間室温でブロッキングする。
【０２７５】
ブロッキング後、アッセイプレートを手でタッピングし、ブロッキングバッファー中の50μLの希釈された一次抗体(1/700ウサギ-抗-HBc Ag、Dako社製、B0586又は1/350ウサギ-抗-HBc Ag、Invitrogen社製、PA516368)と共にインキュベートし、90分間室温でインキュベートする。
【０２７６】
PBST(1XPBS+0.05% Tween)のプレートウォッシャーによる4回の洗浄後、アッセイプレートを、ブロッキングバッファーで1/500に希釈した100μLの二次抗体(ロバ-抗-ウサギAlexa 488、Lifetechnologies社製、A21206)と共にインキュベートし、60分間室温で、暗所でインキュベートし、次いで、PBSTによりプレートウォッシャー上で4回洗浄し、PBSで1/10000に希釈した100μLのDAPI(Sigma社製 D9542、ストック5mg/mL)と共に、15〜30分間室温で、暗所でインキュベートする。
【０２７７】
最後に、アッセイプレートをInCell Analyzer 2200(GE Healthcare社製)で読み取る。
【０２７８】
(2.2.4.  HBe ELISA)
白色のlumitrac 600 384ウェルプレートを、コーティングバッファー(0.1M炭酸ナトリウムpH 9.5)で1/2000希釈した40μLの捕捉抗体(モノクローナルマウス-抗-HBe Ag、Fitzgerald社製、10-H10)でコーティングし、一晩4℃でインキュベートする。
【０２７９】
翌日、捕捉抗体をタッピングにより除き、プレートを、80μLのブロッキングバッファー(PBS中1% BSA、0.01%アルカリ可溶性カゼイン)により1時間室温でブロッキングする。
【０２８０】
ブロッキング後、30μLの試料及びHBe Ag標準(組換え型B型肝炎ウイルスE抗原タンパク質、4mg/mL、Abcam社製、ab91273)をプレートに加える。HBe Ag標準を、1.25μg/mLから始めてブロッキングバッファーで1/3に希釈する。ビヒクル対照も含める。プレートを30分間室温でインキュベートする。
【０２８１】
試料インキュベーション後に、プレートを、プレートウォッシャー上でPBSTにより4回洗浄し、それに続いてPBSで2回洗浄する。プレートを、両洗浄工程の間及びPBSによる最後の洗浄の後でタッピングする。
【０２８２】
プレートを洗浄した後、ブロッキングバッファーで1/16000希釈した40μLの検出抗体(モノクローナルマウス-抗-HBe Ag HRP、Fitzgerald社製、61-H10K)をプレートに加え、30分間室温で、暗所でインキュベートする。
【０２８３】
アッセイプレートを、プレートウォッシャー上でPBSTにより4回洗浄し、それに続いてPBSで2回洗浄する。プレートを、両洗浄工程の間及びPBSによる最後の洗浄工程の後でタッピングする。
【０２８４】
読出しのために、50μLのルミノール基質(SuperSignal ELISA pico chemiluminescent substrate kit、Thermo Fisher, Scientific社製、37070)をプレートに加え、光から保護して1分間室温でインキュベートする。ルミネセンス読出しをenvision(PerkinElmer社製)で実施する。
【０２８５】
(2.2.5.  HBs ELISA)
HBs ELISAを、HBs ELISA kit(Diasource社製、KAPG4SGE3)に従って実施する。1.25μg/mLから始めてブロッキングバッファー(PBS中1% BSA、0.01%アルカリ可溶性カゼイン)で1/3に希釈したHBs Ag標準(活性型B型肝炎表面抗原(adw)完全長タンパク質、4mg/mL、Abcam社製、ab91276)及びビヒクル対照をアッセイに含める。吸収読出しをenvision(Perkin Elmer社製)で実施する。
【０２８６】
(2.2.6.  データ分析)
陰性(ビヒクル:0.2% DMSOを含む6ウェル)及び陽性(100nMミルクルデックスB(Cas番号:406461-66-3)0.2% DMSOを含み、8点DR中の6ウェル及び／又は非感染細胞、0.2% DMSOの6ウェル)対照を実験に含める。
【０２８７】
生データは、InCell Analyzer 2200(HBc Ag及び核カウント)及びenvision(HBe及びHBs Ag)で実施した読出し後に生じ、上述の対照ウェルを使用して阻害パーセンテージ(PIN)及び毒性を計算するために使用し、用量反応曲線を生成するために使用する。
表VI.  例示的な本発明の化合物の肝細胞アッセイ活性
【表６】
2021505651.tif 000128
【０２８８】
(実施例3.  インビボアッセイ)
(3.1.  ヒト-マウス肝臓キメラマウスにおけるHBV感染のヒト化マウスモデル)
(3.1.1.  動物)
6〜10週齢の雄性又は雌性FRG KOマウス(Fah-/-/Rag2-/-/Il2rg-/-トリプルノックアウト-Yecuris社製、P.O. Box 4645、Tualatin、OR 97062、USA)を使用する。それらに、濾過した水道水及び標準的な餌を適宜与え、22±2℃、55±10%湿度で、12時間の明暗周期に維持する。
【０２８９】
(3.1.2.  ヒト化プロセス）
各マウスを、1〜2 106ヒト肝細胞(Life Technologies社製、ref HMCS2SA)の脾臓内注射により再増殖させる。進行性で効能のある再増殖を可能にするため、飲料水に、定期的にニチシノン(Yecuris社製、ロットTNAK0002)を補う。再増殖率を、血清中のhAlb用量(Euromedex社製ref E88-129)により制御する。ヒト肝細胞注射の約3〜4か月後に、再増殖が成功したマウスは、1g/Lを超えるhAlbレベルに達し、HBV感染に使用できる。
【０２９０】
(3.1.3.  化合物調製）
経口投与用の試験化合物は、2%のSolutol(Sigma社製:Kolliphor hS15 12966-1kgロットBCBM0868V)及び98%のメチルセルロース0.5%中に製剤する。
【０２９１】
(3.1.4.  HBV感染)
各マウスに、1.38 108GE HBV(0.2mL)の接種物を有するHBV-2015バッチ(6.6 106コピー/μl)を尾静脈により注射する。
【０２９２】
感染の6〜7週後に、イソフルラン麻酔下で、後眼窩穿刺により血液を採取する。HBsAgを、血清中でElisaアッセイ(Immunodiagnostic社製、ref HBSAG EIA)により投与する。HBV DNAレベルを、マウス血清中で、qPCR(サイバーグリーン)を使用して測定する。1000UI/mLを超えるHBsAgのレベルに達するマウスのみを保存し、無作為割付する。
【０２９３】
処置を、体重に応じて5週間与える。
【０２９４】
体重を毎週記録する。
【０２９５】
7日と11日の間に、定常状態PKを、処置後T=0、1時間、3時間、6時間に、イソフルラン麻酔下での後眼窩穿刺により採血して実施する。血漿を凍結してから、無水エタノール80%により汚染除去し、LCMS-MSによる化合物用量のために生体分析研究所に送る。
【０２９６】
8日目、8日目、15日目、22日目、及び28日目に、イソフルラン麻酔下での後眼窩穿刺により採血する。化合物効能を追跡するために、HBsAgを、血清中でElisaアッセイ(Immunodiagnostic社製、ref HBSAG EIA)により投与し、HBV DNAレベルを、血清中でqPCR(サイバーグリーン)を使用して測定する。
【０２９７】
5週間の処置の後、マウスを、最後の投薬の2時間後に肝臓及び血液回収のために安楽死させる。
【０２９８】
血液中で、HBsAgをElisaアッセイにより、HBV DNAをqPCRにより、化合物レベルをLCMS-MSにより測定する。
【０２９９】
肝臓中で、HBV DNAをqPCRにより、化合物レベルをLCMS-MSにより、pgRNAをRT-qPCRにより、HBcAgを免疫組織染色(Dako社製、ref B0586)により測定する。
【０３００】
(3.1.5.  結果）
このプロトコルに従うと、例示的な本発明の化合物の以下の結果が得られる。
表VII.  感染マウスHBsAg 血液レベル変動
【表７】
2021505651.tif 000129
平均+標準誤差、一元配置ANOVA+ダネット  対照に対して-*p＜0.05、**p＜0.01***p＜0.001-n=6/群
【０３０１】
(実施例4.  薬物動態、ADME、及び毒性アッセイ)
(4.1.  熱力学的溶解度)
試験化合物を、ガラスバイアル中で0.2Mリン酸緩衝液(pH 7.4)又は0.1Mクエン酸緩衝液(pH 3.0)に、1mg/mLの濃度で加える。
【０３０２】
20mLガラスバイアル中で、1〜2mgの化合物の乾燥物質を加え、好適な緩衝液(摂食時人工腸液(Fed State Simulated Intestine Fluid)FeSSIF、又は絶食時人工腸液(Fasted State Simulated Intestine Fluid) FaSSIF、又は絶食時人工胃液(Fasted State Simulated gastric Fluid)FaSSGF、又はリン酸緩衝液(pH7.4))と共に、24時間、(pH7.4の緩衝液では)室温で又は(3種の生理学的緩衝液では）37℃で、磁気撹拌しながら(200tr/分)撹拌する。該混合物の濃度は1mg/mLである。
【０３０３】
24時間後、500μLの体積を採取し、10分間10000 rpmで遠心分離し、濾過する。試料を二連でDMSOで希釈する(F100及びF10)。次いで、内部標準(ワルファリン)を含む80/20水/アセトニトリル中の最終希釈液(100倍)を、LCMS-MS分析に使用する。
【０３０４】
乾燥物質から新たに調製した200,000ng/mLのDMSO中のストックから出発して、標準曲線を作成する。次いで、DMSO中15,000、10,000、2,500、1,000、200、及び75ng/mLの連続する濃度を、Tecan robotを使用して調製する。
【０３０５】
2つの品質対照試料を作製する:やはり200,000ng/mLのDMSO使用ストック溶液から出発して、1つはDMSO中 10,000ng/mLであり、1つは500ng/mLである。
【０３０６】
標準曲線及び品質対照を、80/20水/アセトニトリル(内部標準含む)で100倍に希釈し、LC-MS/MS(API4000又はAPI5500)で分析する。
【０３０７】
試料を、0.6mL/分の流量でLC-MSで分析する。移動相Aは、水中0.1%ギ酸であり、移動相Bはアセトニトリル中0.1%ギ酸である。試料を、Agilent社のPursuit C18-5μm(2.0×20mm)カラムで、ポジティブ又はネガティブイオンスプレーの下で試験する。
【０３０８】
標準曲線のピーク面積をグラフにプロットし、線形又は多項式の二次式を使用して、試験化合物の未知の濃度を計算する。
【０３０９】
溶解度値をμM及びμg/mLで報告する。
【０３１０】
(4.2.  水溶解度)
化合物の10mMストックDMSO溶液から出発して、DMSO中3mMの第2の濃度を調製する。
【０３１１】
両DMSO濃度を、200μLの緩衝液を2μLストックDMSO溶液に加えることにより、0.1Mリン酸緩衝液(pH 7.4)で希釈する。最終濃度は100及び30μMであり、最終DMSO濃度1%である。測定は二連で行う。
【０３１２】
沈殿の陽性対照として、ピレンを各96ウェルプレートの角の点に加え、それは、顕微鏡のZ軸の較正の基準点として機能する。陰性対照として、DMSOを、陽性対照ウェルの間に縦に12ウェルに加える。
【０３１３】
アッセイプレートを密封し、230rpmで振とうしながら1時間37℃でインキュベートする。
【０３１４】
次いで、プレートを、ニコン顕微鏡を使用して白色光顕微鏡の下でスキャンすると、濃度あたりの沈殿物の個別の画像(20×)が生じる。
【０３１５】
沈殿物を目視で分析する:
-沈殿物が100μM及び30μMで観察される場合、生じたデータは:＜30μMだろう
-沈殿物が100μMで観察されるが30μMでは観察されない場合、生じたデータは:＞30μMだろう
-沈殿物が全く(30μMでも100μMでも)観察されない場合、生じたデータは:＞100μMだろう。
【０３１６】
このプロトコルに従って測定した溶解度値をμM及びμg/mLで報告する。
【０３１７】
(4.3.  血漿タンパク結合PPB(平衡透析))
実験の開始に先立ち、透析膜(メンブランストリップ、分子量カットオフ12〜14kDa、HTDialysis社製、カタログ番号  1101)を脱イオン水に60分間浸し、移し、20%エタノール中に一晩おいておく。
【０３１８】
化合物の10mMストックDMSO溶液を、DMSOで10倍に希釈する。この溶液を、新たに解凍したヒト、ラット、マウス、又はイヌ血漿(BioReclamation社)により、5μMの最終濃度及び0.5%の最終DMSO濃度でさらに希釈する。
【０３１９】
平衡透析装置(96ウェル、HTD96b型、HTDialysis社製、カタログ番号  1006)を、製造者の説明に従って組み立てる。組立て直後に、100μLの体積の血漿(化合物によりスパイク)をウェルの片側に配置し、別の100μLのブランクPBS緩衝液をもう片方の側に、それぞれ加える。各化合物を二連で試験する。
【０３２０】
アセブトロール及びニカルジピンを、低い及び非常に高い結合対照として使用する。
【０３２１】
プレートを、230rpmで振とうしながら、4時間37℃でインキュベートする。
【０３２２】
その後、アリコートを、ウェルの各側から取り、マトリックスを合わせる(等体積のブランクPBS緩衝液を有するスパイクされた血漿とブランク血漿を有する緩衝液コンパートメントからの試料とのミックス)。
【０３２３】
マトリックスを合わせた試料を、4体積の停止液(ワルファリンを内部標準として含むアセトニトリル)とさらに混合する。短時間の混合及び遠心分離(2400rpmで15分間、+4℃)の後、上清を濾過し、LC-MS/MS(システムAPI4000又はAPI5500)での分析のために新たな96-ウェルプレートに移す。
【０３２４】
試料を、0.6mL/分の流量でLC/MS-MSで分析する。移動相Aは水中0.1%ギ酸であり、移動相Bはアセトニトリル中0.1%ギ酸である。試料を、Agilent社のPursuit C18-5μm(2.0×20mm)カラムでポジティブ又はネガティブイオンスプレーの下で試験する。溶媒勾配は、下記の勾配プロファイルで全ランタイム1.2分を有する。
【表８】
2021505651.tif 000130
【０３２５】
血漿中の結合パーセンテージ(PPB)を、以下の式を用いて決定する:
PPB=((C血漿-C緩衝液)/C血漿)×100
C血漿=血漿中の化合物濃度
C緩衝液=緩衝液中の化合物濃度
「濃度」は、化合物ピーク面積と内部標準ピーク面積との間の比である。
【０３２６】
PBS中の最終試験濃度の化合物の溶解度を顕微鏡により確認して、沈殿が観察されるか否かを示す。沈殿物が観察される場合、PPBのデータは全く生じない。
【０３２７】
(4.4.  肝臓ミクロソーム安定性)
化合物の10mMストックDMSO溶液を、DMSOで3倍に希釈する。このDMSOでの事前希釈液を、100mMリン酸緩衝液(pH 7.4)で2μMにさらに希釈し、37℃で事前に温める。この化合物希釈液を、300rpmで振とうしながら37℃で、ミクロソーム/補因子ミックスにより2倍に混合する(mixed factor 2)。
【０３２８】
各化合物を二連で試験する。ワルファリン及びベラパミルを、基準分子としてアッセイに含める。
【０３２９】
700U/mLのグルコース-6-リン酸デヒドロゲナーゼ(G6PDH、Sigma Aldrich社製)使用ストック溶液を、100mMリン酸緩衝液(pH7.4)で1:700に希釈する。0.528M MgCl2.6H2O(Sigma社製、M2670)、0.528Mグルコース-6-リン酸(Sigma社製、G-7879)及び0.208M NADP+(Sigma社製、N-0505)を含む補因子ミックスを、100mMリン酸緩衝液(pH 7.4)で1:8に希釈する。
【０３３０】
対象とする種(ヒト、マウス、ラット、イヌ)の1mg/mLの肝臓ミクロソーム、0.6U/mL G6PDH、及び補因子ミックス(6.6mM MgCl2、6.6mMグルコース-6-リン酸、2.6mM NADP+)を含む使用溶液を作製する。このミックスを、20分を決して超えないように、15分間室温でプレインキュベートする。
【０３３１】
プレインキュベーション後に、化合物希釈液及びミクロソームを含むミックスを等量で加えて一緒にし、30分間300rpm及び37℃でインキュベートする。
【０３３２】
インキュベーションの間の最終濃度は1μM試験化合物又は対照化合物、0.5mg/mLミクロソーム、0.6U/mL G6PDH、3.3mM MgCl2、3.3mMグルコース-6-リン酸、及び1.3mM NaDP+である。
【０３３３】
30分のインキュベーション後に、反応を、2体積の停止液(ジクロフェナクを内部標準として含むアセトニトリルを含む)により停止させる。0分の時点に関して、2体積の停止液を化合物希釈液に加えてから、ミクロソームミックスを加える。
【０３３４】
両時点の試料を遠心分離し、濾過し、上清をLC-MS/MS(API5500システム)での分析のために収集する。
【０３３５】
試料を、0.6mL/分の流量でLC/MS-MSで分析する。移動相Aは水中0.1%ギ酸であり、移動相Bはアセトニトリル中0.1%ギ酸である。試料を、Agilent社のPursuit C18-5μm(2.0×20mm)カラムでポジティブ又はネガティブイオンスプレーの下で試験する。溶媒勾配は、下記の勾配プロファイルで全ランタイム2.2分を有する。
【表９】
2021505651.tif 000131
【０３３６】
残存する化合物のパーセンテージを測定するために、装置応答(ピーク面積/内部標準ピーク面積)は、零時点試料(100%とみなす)を基準とする。
【０３３７】
ミクロソーム安定性のデータを、30分後に残存する化合物の総量のパーセンテージとして表す。
【０３３８】
100mM緩衝剤（pH 7.4）中の最終試験濃度の化合物の溶解度を顕微鏡により確認して、沈殿が観察されるか否かを示す。沈殿物が観察される場合、ミクロソーム安定性のデータは全く生じない。
【０３３９】
(4.5.  肝細胞安定性)
10mM DMSOストック溶液を、最初に、DMSOで希釈し(0.33mM及び3.3mM)、次いで、改変型クレブス-ヘンゼライト緩衝液(KHB、Sigma社製)で希釈する。さらに、第3の化合物希釈液を、10mM DMSOストック希釈液を直接KHBで希釈することにより得た。これらのKHB中の化合物希釈液(0.5μM、5μM及び50μM)を、プールされた凍結保存された肝細胞(Bioreclamation IVT社製)の懸濁液に、37℃で穏やかに振とうしながらさらに加えた。
【０３４０】
最終的な反応条件は、0.1μM、1μM、及び10μMの化合物(濃度あたりn=2)、0.03% DMSO(10μM濃度では0.1%)、50万の生存肝細胞/mL、75μLインキュベーション体積であった。
【０３４１】
テストステロン(1μM)及び7-ヒドロキシクマリン(1μM)を、第I相及び第II相反応対照として使用し、カフェインを陰性対照として使用した。
【０３４２】
全時間曲線(0、10、20、45、90、120及び180分のインキュベーションあり)を、対象とする種(マウス、ラット、イヌ、ミニブタ、サル、又はヒト)の肝細胞により実施する。
【０３４３】
インキュベーションのそれぞれの時間の後、反応物(75μL)を、100ng/mLのジクロフェナクを分析内部標準として含む225μLのアセトニトリル:メタノール(2:1)を加えることにより停止させた。試料を混合し、遠心分離し、上清をLC-MS/MSにより分析した。
【０３４４】
残存する化合物のパーセンテージを測定するために、装置応答(ピーク面積/内部標準ピーク面積)は、零時点試料(100%とみなす)を基準とする。
【０３４５】
(4.6.  MDCKII-MDR1透過性)
MDCKII-MDR1細胞は、ヒト多剤耐性(MDR1)遺伝子を過剰発現し、P糖タンパク質(P-gp)をコードするメイディン・ダービーイヌ腎臓上皮細胞である。細胞を、Netherlands Cancer Instituteから得て、24-ウェルMillicellセルカルチャーインサートプレート(Millipore社製、PSRP010R5)中での3〜4日の細胞培養の後に使用する。双方向MDCKII-MDR1透過性アッセイを以下に記載の通り実施する。
【０３４６】
3×105細胞/mL(1.2×105細胞/ウェル)を、DMEM+1%グルタマックス-100+1%抗生物質/抗真菌剤+10%FBS(Biowest社製、S1810)からなる播種培地に播種する。細胞をCO2インキュベーター中に3〜4日配置する。培地を、播種の24時間後及び実験の日に交換する。
【０３４７】
試験化合物及び参照化合物(アンプレナビル及びプロプラノロール)を、ダルベッコのリン酸緩衝生理食塩水(D-PBS、pH7.4)中に調製し、10μMの最終濃度(アンプレナビルの場合0.5μM)で最終DMSO濃度1%で、Millicellセルカルチャーインサートプレートアセンブリーの頂端側(400μL)又は側底側(800μL)チャンバーのいずれかに加える。
【０３４８】
ルシファーイエロー透過をモニターすることにより細胞単層の完全性を評価するために、100μMルシファーイエロー(Sigma社製)を全ドナー緩衝溶液に加える。ルシファーイエローは傍細胞経路の蛍光マーカーであり、それは、アッセイの間の密着結合完全性を証明するために全単層の内部対照として使用される。
【０３４９】
オービタルシェーカーで150rpmで振とうしながら37℃で1時間インキュベートした後、75μLアリコートを頂端側(A)チャンバーと基底(B)チャンバーの両方から採取し、96ウェルプレート内の分析内部標準(10ng/mLワルファリン)を含む225μLアセトニトリル:水溶液(2:1)に加える。アリコーティングを、実験の最初でもドナー溶液から実施して、初期(Co)濃度を得る。
【０３５０】
試料中の化合物の濃度を、高速液体クロマトグラフィー/質量分析法(LC-MS/MS)により測定する。
【０３５１】
ルシファーイエローを、全レシーバーウェル(側底側又は頂端側)からの150μLの液体を含む96ウェルプレート中でFluoroscan Ascent FL Thermo Scientific(励起485nm及び蛍光530nm)により測定する。
【０３５２】
(4.7.  齧歯動物における薬物動態的試験)
(4.7.1.  動物）
スプラーグ・ドーリーラット(雄性、5〜6週齢)及びCD1(雄性、18〜20g)マウスをJanvier社(フランス)から得る。ラットを、処置前に少なくとも4日間順化させ、12時間の明暗周期(0700-1900)に保つ。温度をおよそ22℃に保ち、食餌及び水を適宜与える。経口投薬前の少なくとも16時間及びその後4時間、ラット及びマウスに食餌を与えない。水を適宜与える。
【０３５３】
(4.7.2.  薬物動態的試験)
化合物を、静脈内経路にはPEG200/水(60/40)又はDMSO/PBS(1/99)±2当量NaOHに、経口経路にはSolutol/0.5%メチルセルロース(2/98)に製剤する。試験化合物を、単回の食道強制投与として、5mg/kgで、5mL/kgの投与体積で経口投与し、ボーラスとして尾静脈により、0.1mg/kgで5mL/kgの投与体積で静脈内投与する。各群は、3匹のラット又は3〜6匹のマウスからなった(複合デザイン(composite design)の場合)。血液試料を、軽い麻酔の下、後眼窩洞で、ヘパリンリチウムを抗凝固剤として使用して、以下の時点:0.05、0.25、0.5、1、3、6及び24時間(静脈内経路)、並びに0.25、0.5、1、3、5、6及び24時間(経口経路)で採取する。或いは、血液試料を、後眼窩洞で、ヘパリンリチウムを抗凝固剤として、以下の時点、0.25、1、3及び6時間(経口経路)で採取する。全血試料を、2,800xgで10分間遠心分離し、生じた血漿試料を分析まで-20℃で保存する。
【０３５４】
(4.7.3.  血漿中の化合物レベルの定量化）
各試験化合物の血漿濃度を、質量分析計がポジティブエレクトロスプレーモードで運転しているLC-MS/MS方法により測定する。
【０３５５】
(4.7.4.  薬物動態パラメーターの決定）
薬物動態パラメーターを、Phoenix(登録商標)(Certara(登録商標))を使用して計算する。
【０３５６】
(4.8.  QT延長を起こす傾向）
QT延長の可能性を、hERGパッチクランプアッセイで評価する。
【０３５７】
利用した方法は、外向きカリウム電流を記録するIonFlux HT自動化全細胞パッチ-クランプ装置である。
【０３５８】
ヒトhERG cDNAにより安定にトランスフェクトされているHEK-293細胞を使用する。細胞をトリプシン処理により収集し、記録前に無血清培地中で室温に保つ。細胞を洗浄し、細胞外液に再懸濁させてから、自動化パッチ-クランプ装置に適用する。
【０３５９】
試験溶液を、パッチ-クランプアッセイの日に細胞外液中に調製する。該アッセイは、1% DMSOまで耐えることができる。
【０３６０】
細胞内液は、(mMで)下記を含んでいた:70 KF、60 KCl、15 NaCl、5 HEPES、5 EGTA、4 MgATP(KOHによりpH 7.3)。
【０３６１】
細胞外液は(mMで)下記を含んでいた:137 NaCl、4 KCl、1 MgCl2、1.8 CaCl2、10 HEPES、10 グルコース(NaOHによりpH 7.35)。
【０３６２】
全細胞配置を達成した後、細胞を-80mVに保つ。-50mVへの50msパルスを送り、漏れ電流（leaking current）を測定し、それをテール電流から引く。次いで、細胞を、+30mVに800msの間脱分極し、それに続いて-50mVへの1200msパルスによりhERGテール電流を明らかにする。このパラダイムを、5秒ごとに1回送り、電流振幅をモニターする。該アッセイを室温で実施する。細胞外液(対照)を最初に適用し、細胞を該溶液中で3分間安定化させる。次いで、試験化合物を、低濃度から高濃度に、連続的に同じ細胞に適用して、細胞を各試験濃度で3分間灌流する。
【０３６３】
参照化合物(E-4031)を、複数の濃度で同時に試験して、IC50値を得る。
【０３６４】
化合物の適用前後でのテール電流振幅を比べることにより、hERGチャネルの阻害パーセントを計算する(電流の差を対照に対して標準化する)。
【０３６５】
（結語）
前述の説明は例示的且つ説明的な性質のものであり、本発明及びその好ましい実施態様を説明するように意図されていることが、当業者に理解されるであろう。ルーチンの実験を通じて、当業者は、本発明の趣旨を逸脱せずになされ得る明白な修飾及び変更を認識するであろう。添付の特許請求の範囲の範囲内に入る全てのそのような修飾は、その中に含まれることが意図されている。したがって、本発明は、上記の説明のみによるのではなく、以下の特許請求の範囲及びその等価物によっても定義されることが意図されている。
【０３６６】
本明細書中に引用される特許及び特許出願を含むがこれらに限定されない全ての刊行物は、各々の個々の刊行物が、あたかも完全に述べられているように、引用により本明細書中に組み込まれていることが具体的に且つ個別的に示されているかのように、引用により本明細書中に組み込まれている。
【０３６７】
様々な化合物の示差的な細胞透過能力などの因子が、インビトロの生化学的アッセイと細胞アッセイとの間の化合物の活性の違いに寄与し得ることが理解されるべきである。
【０３６８】
本出願で与えられ且つ記載されている本発明の化合物の化学名の少なくとも一部は、市販の化学物質命名ソフトウェアプログラムの使用により自動的に作り出された可能性があり、独立に確認されたものではない。この機能を実施する代表的なプログラムは、Open Eye Software社により販売されているLexichem命名ツール、及びMDL社により販売されているAutonom Softwareツールを包含する。示された化学名と図示された構造が異なる場合には、図示された構造が優先する。
（参考文献）
【化７１】
2021505651.tif 000132
【図１】
2021505651.tif 000137
【国際調査報告】
2021505651.tif 000138
2021505651.tif 000139
2021505651.tif 000140
2021505651.tif 000141