(57)【要約】【課題】形状状態を外部入力の存在において切り替えるタンパク質システムの新規設計は達成されていない。【解決手段】キーと呼ばれる第２の設計されたポリペプチドと組み合わされて生物活性ペプチドまたは結合ドメインを活性化（「オン」に）する立体構造変化を誘導するまで、生物活性ペプチドおよび／または結合ドメインを隔離して、それらを不活性（「オフ」）状態に保持することができるタンパク質スイッチ、そのようなタンパク質スイッチの成分、およびそれらの使用が開示される。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
非天然由来ポリペプチドであって、
（ａ）２〜７個のアルファ−ヘリックスを含む、ヘリックス束と、
（ｂ）各アルファヘリックスを接続するアミノ酸リンカーと、を含む、非天然由来ポリペプチド。
【請求項２】
各ヘリックスは、独立して、１８〜６０、１８〜５５、１８〜５０、１８〜４５、２２〜６０、２２〜５５、２２〜５０、２２〜４５、２５〜６０、２５〜５５、２５〜５０、２５〜４５、２８〜６０、２８〜５５、２８〜５０、２８〜４５、３２〜６０、３２〜５５、３２〜５０、３２〜４５、３５〜６０、３５〜５５、３５〜５０、３５〜４５、３８〜６０、３８〜５５、３８〜５０、３８〜４５、４０〜６０、４０〜５８、４０〜５５、４０〜５０、または４０〜４５アミノ酸長である、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項３】
各アミノ酸リンカーは、独立して、前記リンカーに融合され得るいずれのさらなる機能的配列も含まずに、３〜１０、４〜１０、５〜１０、６〜１０、７〜１０、８〜１０、９〜１０、２〜９、３〜９、４〜９、５〜９、６〜９、７〜９、８〜９、２〜８、３〜８、４〜８、５〜８、６〜８、７〜８、２〜７、３〜７、４〜７、５〜７、６〜７、２〜６、３〜６、４〜６、５〜６、２〜５、３〜５、４〜５、２〜４、３〜４、２〜３、または２、３、４、５、６、７、８、９、もしくは１０アミノ酸長である、請求項１または２に記載のポリペプチド。
【請求項４】
前記ポリペプチドは、１つ以上の生物活性ペプチドを前記アルファヘリックスのうちの少なくとも１つに含み、前記１つ以上の生物活性ペプチドは定められた標的に選択的に結合することができ、前記１つ以上の生物活性ペプチドは、配列番号６０、６２〜６４、６６、２７０５２〜２７０９３、および２７１１８〜２７１１９からなる非限定的な群から選択される１つ以上の生物活性ペプチドを含み得る、請求項１〜３のいずれか一項に記載のポリペプチド。
【請求項５】
非天然由来ポリペプチドであって、本明細書に開示されるか、または配列番号１〜４９、５１〜５２、５４〜５９、６１、６５、６７〜１４３１７、２７０９４〜２７１１７、２７１２０〜２７１２５、２７，２７８〜２７，３２１からなる群から選択されるケージポリペプチド、および表２、表３、または表４に列挙されるケージポリペプチドのアミノ酸配列に対してその長さに沿って、任意選択的なアミノ酸残基を含まず、少なくとも４０％の配列同一性を有するポリペプチドを含み、前記ポリペプチドのＮ末端および／またはＣ末端の６０個のアミノ酸は任意選択的である、非天然由来ポリペプチド。
【請求項６】
非天然由来ポリペプチドであって、表２、表３、および／または表４に列挙されるケージポリペプチドのアミノ酸配列に対してその長さに沿って、任意選択的なアミノ酸残基を含まず、少なくとも４０％の配列同一性を有するポリペプチドを含む、非天然由来ポリペプチド。
【請求項７】
前記ポリペプチドは、配列番号１〜９１、配列番号１〜４９、５１〜５２、５４〜５９、６１、６５、６７〜１４３１７、２７０９４〜２７１１７、２７１２０〜２７１２５、２７，２７８〜２７，３２１、ならびに表２、表３、および／または表４に列挙される前記ケージポリペプチドからなる群から選択されるアミノ酸配列に対してその長さに沿って、任意選択的なアミノ酸残基を含まず、少なくとも４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有するアミノ酸配列を含む、請求項５または６に記載の非天然由来ポリペプチド。
【請求項８】
前記ポリペプチドのラッチ領域内に、または前記ラッチ領域を置換する、１つ以上の生物活性ペプチドをさらに含み、前記１つ以上の生物活性ペプチドは、配列番号６０、６２〜６４、６６、２７０５２〜２７０９３、および２７１１８〜２７１１９からなる非限定的な群から選択される１つ以上の生物活性ペプチドを含み得る、請求項５〜７のいずれか一項に記載の非天然由来ポリペプチド。
【請求項９】
非天然由来ポリペプチドであって、本明細書に開示されるキーポリペプチド、または配列番号１４３１８〜２６６０１、２６６０２〜２７０１５、２７０１６〜２７０５０、２７，３２２〜２７，３５８からなる群から選択されるキーポリペプチド、ならびに表２、表３、および／または表４に列挙されるキーポリペプチドのアミノ酸配列に対してその長さに沿って、任意選択的なアミノ酸残基を含まず、少なくとも４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の配列同一性を有するポリペプチドを含む、非天然由来ポリペプチド。
【請求項１０】
前記ポリペプチドは、表２、表３、および／または表４に列挙されるキーポリペプチドからなる群から選択されるキータンパク質のアミノ酸配列に対してその長さに沿って、任意選択的なアミノ酸残基を含まず、少なくとも４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有するアミノ酸配列を含む、請求項９に記載の非天然由来ポリペプチド。
【請求項１１】
融合タンパク質であって、請求項９〜１０のいずれか一項に記載のポリペプチドに融合されている請求項１〜８のいずれか一項に記載のポリペプチドを含む、融合タンパク質。
【請求項１２】
請求項１〜８のいずれか一項に記載のポリペプチドは、ケージポリペプチドを含み、請求項９〜１０のいずれか一項に記載のポリペプチドはキーポリペプチドを含み、前記ケージポリペプチドは前記キーポリペプチドによって活性化されない、請求項１１に記載の融合タンパク質。
【請求項１３】
請求項１〜１２のいずれか一項に記載のポリペプチドをコードする、核酸。
【請求項１４】
プロモーターに操作可能に連結されている請求項１３に記載の核酸を含む、発現ベクター。
【請求項１５】
請求項１３に記載のポリヌクレオチドまたは請求項１４に記載の発現ベクターを含む、宿主細胞。
【請求項１６】
前記核酸または前記発現ベクターは、宿主細胞染色体に組み込まれている、請求項１５に記載の宿主細胞。
【請求項１７】
前記核酸または前記発現ベクターは、エピソームである、請求項１５に記載の宿主細胞。
【請求項１８】
（ａ）第１のプロモーターに操作可能に連結されている請求項１〜８のいずれか一項に記載のポリペプチドをコードする、第１の核酸と、
（ｂ）第２のプロモーターに操作可能に連結されている請求項９〜１０のいずれか一項に記載のポリペプチドをコードする、第２の核酸と、を含み、前記第２の核酸は前記第１の核酸によってコードされるケージポリペプチドの構造領域に結合することができるキーポリペプチドをコードし、前記ケージポリペプチドの前記構造領域に前記キーペプチドが結合することが、前記ケージポリペプチドにおける立体構造変化を誘導する、請求項１５〜１７のいずれか一項に記載の宿主細胞。
【請求項１９】
前記第１の核酸は、複数の異なるケージポリペプチドをコードする複数の第１の核酸を含む、請求項１８に記載の宿主細胞。
【請求項２０】
前記第２の核酸は、複数の異なるキーポリペプチドをコードする複数の第２の核酸を含み、前記複数の異なるキーポリペプチドは、前記複数の異なるケージポリペプチドのサブセットのみに結合して立体構造変化を誘導することができる１つ以上のキーポリペプチドを含む、請求項１９に記載の宿主細胞。
【請求項２１】
前記第２の核酸は、各異なるケージポリペプチドに結合し、立体構造変化を誘導することができる単一のキーポリペプチドをコードする、請求項１９に記載の宿主細胞。
【請求項２２】
（ａ）第１のプロモーターに操作可能に連結されている請求項１２に記載の融合タンパク質をコードする、第１の核酸と、
（ｂ）第２のプロモーターに操作可能に連結されている請求項１２に記載の融合タンパク質をコードする、第２の核酸と、を含み、
（ｉ）前記第１の核酸によってコードされる前記ケージポリペプチドは、前記第２の核酸によってコードされる前記キーポリペプチドによって活性化され、
（ｉｉ）前記第１の核酸によってコードされる前記ケージポリペプチドは、前記第１の核酸によってコードされる前記キーポリペプチドによって活性化されず、
（ｉｉｉ）前記第２の核酸によってコードされる前記ケージポリペプチドは、前記第１の核酸によってコードされる前記キーポリペプチドによって活性化され、
（ｉｖ）前記第２の核酸によってコードされる前記ケージポリペプチドは、前記第２の核酸によってコードされる前記キーポリペプチドによって活性化されない、請求項１５〜１７のいずれか一項に記載の宿主細胞。
【請求項２３】
キットであって、
（ａ）請求項１〜８のいずれか一項に記載の１つ以上のポリペプチドと、
（ｂ）請求項９〜１０のいずれか一項に記載の１つ以上のポリペプチドと、
（ｃ）任意選択的に、請求項１１〜１２のいずれか一項に記載の１つ以上の融合タンパク質と、を含む、キット。
【請求項２４】
キットであって、
（ａ）請求項１〜８のいずれか一項に記載の１つ以上のポリペプチドをコードする第１の核酸と、
（ｂ）請求項９〜１０のいずれか一項に記載の１つ以上のポリペプチドをコードする第２の核酸と、
（ｃ）任意選択的に、請求項１１〜１２のいずれか一項に記載の１つ以上の融合タンパク質をコードする第３の核酸と、を含む、キット。
【請求項２５】
前記第１の核酸、前記第２の核酸、および／または前記第３の核酸は、発現ベクターを含む、請求項２４に記載のキット。
【請求項２６】
ＬＯＣＫＲスイッチであって、
（ａ）構造領域、および１つ以上の生物活性ペプチドをさらに含むラッチ領域を含むケージポリペプチドであって、前記構造領域は前記ラッチ領域と相互作用して前記１つ以上の生物活性ペプチドの活性を防止する、ケージポリペプチドと、
（ｂ）前記ケージ構造領域に結合し、それによって前記ラッチ領域を置換して前記１つ以上の生物活性ペプチドを活性化する、任意選択的なキーポリペプチドと、
（ｃ）任意選択的に、前記１つ以上の生物活性ペプチドが活性化されるとき、前記１つ以上の生物活性ペプチドに結合する１つ以上のエフェクターポリペプチド（複数可）と、を含む、ＬＯＣＫＲスイッチ。
【請求項２７】
前記ケージポリペプチドが、請求項１〜８または１１〜１２のいずれか一項に記載のポリペプチドを含む、請求項２６に記載のＬＯＣＫＲスイッチ。
【請求項２８】
前記キーポリペプチドが存在し、前記キーポリペプチドが請求項９または１０に記載のポリペプチドを含む、請求項２６または２７に記載のＬＯＣＫＲスイッチ。
【請求項２９】
前記エフェクターポリペプチドが存在し、前記エフェクターポリペプチドは、限定されないが、Ｂｃｌ２、ＧＦＰ１〜１０、およびプロテアーゼを含む、前記生物活性ペプチドに選択的に結合するエフェクターポリペプチドを含む、請求項２６〜２８のいずれか一項に記載のＬＯＣＫＲスイッチ。
【請求項３０】
前記１つ以上のケージポリペプチドおよび前記１つ以上のキーポリペプチドは、表１、表２、表３、および／または表４の同じ行における、それぞれケージポリペプチドおよびキーポリペプチドに対してその長さに沿って、任意選択的な残基を含まず、少なくとも４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する少なくとも１つのケージポリペプチドおよび少なくとも１つのキーポリペプチドを含む、請求項１８〜２１のいずれか一項に記載の宿主細胞、請求項２３〜２５のいずれか一項に記載のキット、または請求項２６〜２９のいずれか一項に記載のＬＯＣＫＲスイッチ。
【請求項３１】
前記１つ以上のケージポリペプチドおよび前記１つ以上のキーポリペプチドは、表２、表３、および／または表４の同じ行における、それぞれケージポリペプチドおよびキーポリペプチドに対してその長さに沿って、任意選択的な残基を含まず、少なくとも４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する少なくとも１つのケージポリペプチドおよび少なくとも１つのキーポリペプチドを含む、請求項１８〜２１のいずれか一項に記載の宿主細胞、請求項２３〜２５のいずれか一項に記載のキット、または請求項２６〜２９のいずれか一項に記載のＬＯＣＫＲスイッチ。
【請求項３２】
前記１つ以上の生物活性ペプチドは、配列番号６０、６２〜６４、６６、２７０５２〜２７０９３、および２７１１８〜２７１１９からなる非限定的な群から選択される１つ以上の生物活性ペプチドを含み得る、請求項２６〜３１のいずれか一項に記載のＬＯＣＫＲスイッチ。
【請求項３３】
（ａ）前記１つ以上のケージポリペプチドは、配列番号１〜４９、５１〜５２、５４〜５９、６１、６５、６７〜１４３１７、２７０９４〜２７１１７、２７１２０〜２７１２５、２７，２７８〜２７，３２１からなる群から選択されるケージポリペプチド、ならびに表２、表３、および／または表４に列挙されるケージポリペプチドのアミノ酸配列に対してその長さに沿って、任意選択的なアミノ酸残基を含まず、少なくとも４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の配列同一性を有する１つ以上のケージポリペプチドを含み、前記ポリペプチドのＮ末端および／またはＣ末端の６０個のアミノ酸は任意選択的であり、
（ｂ）前記１つ以上のキーポリペプチドは、配列番号１４３１８〜２６６０１、２６６０２〜２７０１５、２７０１６〜２７０５０、２７，３２２〜２７，３５８からなる群から選択されるキーポリペプチド、ならびに表２、表３、および／または表４に列挙されるキーポリペプチドのアミノ酸配列に対してその長さに沿って、任意選択的なアミノ酸残基を含まず、少なくとも４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の配列同一性を有するポリペプチドからなる群から選択される１つ以上のポリペプチドを含む、請求項１８〜２１もしくは３０〜３２のいずれか一項に記載の宿主細胞、請求項２３〜２５もしくは３０〜３２のいずれか一項に記載のキット、または請求項２６〜３２のいずれか一項に記載のＬＯＣＫＲスイッチ。
【請求項３４】
ケージポリペプチドに生物活性ポリペプチドを隔離して、キーポリペプチドと組み合わされて前記生物活性ペプチドを活性化（「オン」に）する立体構造変化を誘導するまで、それらを不活性（「オフ」）状態に保持するための、本明細書に開示される前記ポリペプチド、融合タンパク質、核酸、発現ベクター、宿主細胞、キット、および／またはＬＯＣＫＲスイッチの使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
既に提出された出願の相互参照
本出願は、２０１８年７月１９日出願の米国仮特許出願第６２／７００６８１号、２０１８年１２月２７日出願の同第６２／７８５５３７号、および２０１９年１月４日出願の同第６２／７８８３９８号の優先権を主張し、各々は参照によってその全体が本明細書に組み込まれる。
【０００２】
ＥＦＳ−Ｗｅｂを介して電子的に提出された配列リストの参照
本出願とともに提出されたＡＳＣＩＩテキストファイル（名称：１８−１０５４−ＰＣＴ＿Ｓｅｑｕｅｎｃｅ−Ｌｉｓｔｉｎｇ＿ＳＴ２５．ｔｘｔ、サイズ：３２，２７８ｋｂ、および作成日：２０１９年７月１９日）で電子的に提出された配列リストの内容は、参照によってその全体が本明細書に組み込まれる。
【背景技術】
【０００３】
安定したタンパク質構造の新規設計は、タンパク質が最も低い自由エネルギー状態に折り畳まれるという原理に基づいてかなり進歩している。これらの取り組みは、所望の折り畳まれた構造と他のすべての構造との間の自由エネルギーギャップを最大化することに焦点があてられた。形状を切り替えることができるタンパク質を設計することはさらに困難であり、複数の状態は存在すべき自由エネルギーが非折り畳み状態と比べて十分低くなければならず、状態間の自由エネルギーの差は、状態の占有を外部入力によって切り替えることができるように十分に小さくなければならないためである。形状状態を外部入力の存在において切り替えるタンパク質システムの新規設計は達成されていない。
【発明の概要】
【０００４】
第１の態様において、開示される非天然由来ポリペプチドは、
（ａ）２〜７個のアルファ−ヘリックスを含むヘリックス束と、
（ｂ）各アルファヘリックスを接続するアミノ酸リンカーと、を含む。
【０００５】
一実施形態では、各ヘリックスは、独立して、１８〜６０、１８〜５５、１８〜５０、１８〜４５、２２〜６０、２２〜５５、２２〜５０、２２〜４５、２５〜６０、２５〜５５、２５〜５０、２５〜４５、２８〜６０、２８〜５５、２８〜５０、２８〜４５、３２〜６０、３２〜５５、３２〜５０、３２〜４５、３５〜６０、３５〜５５、３５〜５０、３５〜４５、３８〜６０、３８〜５５、３８〜５０、３８〜４５、４０〜６０、４０〜５８、４０〜５５、４０〜５０、または４０〜４５アミノ酸長である。別の実施形態では、各アミノ酸リンカーは、独立して、リンカーに融合され得るいかなるさらなる機能的配列も含まずに、３〜１０、４〜１０、５〜１０、６〜１０、７〜１０、８〜１０、９〜１０、２〜９、３〜９、４〜９、５〜９、６〜９、７〜９、８〜９、２〜８、３〜８、４〜８、５〜８、６〜８、７〜８、２〜７、３〜７、４〜７、５〜７、６〜７、２〜６、３〜６、４〜６、５〜６、２〜５、３〜５、４〜５、２〜４、３〜４、２〜３の間、あるいは２、３、４、５、６、７、８、９、または１０アミノ酸長である。さらなる実施形態において、ポリペプチドは、アルファヘリックスのうちの少なくとも１つに１つ以上の生物活性ペプチドを含み、１つ以上の生物活性ペプチドは、定められた標的に選択的に結合することができ、１つ以上の生物活性ペプチドは、配列番号６０、６２〜６４、６６、２７０５２〜２７０９３、および２７１１８〜２７１１９からなる非限定的な群から選択される１つ以上の生物活性ペプチドを含み得る。
【０００６】
別の態様において、本開示は、本明細書に開示されるか、または配列番号１〜４９、５１〜５２、５４〜５９、６１、６５、６７〜１４３１７、２７０９４〜２７１１７、２７１２０〜２７１２５、２７，２７８〜２７，３２１からなる群から選択されるケージポリペプチド、ならびに表２、表３、および／または表４に列挙されるケージポリペプチドのアミノ酸配列に対してその長さに沿って少なくとも４０％の配列同一性を有するポリペプチドを含む非天然ポリペプチドを提供し、ポリペプチドのＮ末端および／またはＣ末端の６０個のアミノ酸は任意選択的であり、配列同一性要件は任意選択的なアミノ酸残基を含まない。一態様では、本開示は、表２、表３、および／または表４に列挙されるケージポリペプチドのアミノ酸配列に対してその長さに沿って、任意選択的なアミノ酸残基を含まずに、少なくとも４０％の配列同一性を有するポリペプチドを含む非天然ポリペプチドを提供する。これらの態様の各々のうちの一実施形態では、ポリペプチドは、配列番号１〜９１、配列番号１〜４９、５１〜５２、５４〜５９、６１、６５、６７〜１４３１７、２７０９４〜２７１１７、２７１２０〜２７１２５、２７，２７８〜２７，３２１、ならびに表２、表３、および／または表４に列挙されるケージポリペプチドからなる群から選択されるアミノ酸配列に対してその長さに沿って、任意選択的なアミノ酸残基を含まず、少なくとも４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有するアミノ酸配列を含む。
【０００７】
本開示の態様のいずれかの一実施形態では、非天然ポリペプチドは、ポリペプチドのラッチ領域内に、またはラッチ領域を置換する１つ以上の生物活性ペプチドをさらに含み、１つ以上の生物活性ペプチドは、配列番号６０、６２〜６４、６６、２７０５２〜２７０９３、および２７１１８〜２７１１９からなる非限定な群から選択される１つ以上の生物活性ペプチドを含み得る。
【０００８】
別の態様では、本明細書に開示されるキーポリペプチド、または配列番号１４３１８〜２６６０１、２６６０２〜２７０１５、および２７０１６〜２７０５１からなる群から選択されるキーポリペプチド、ならびに表に列挙されるキーポリペプチドのアミノ酸配列に対して長さに沿って、任意選択的なアミノ酸残基を含まずに、少なくとも４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の配列同一性を有するポリペプチドを含む非天然由来ポリペプチドが提供される。一実施形態では、ポリペプチドは、表２、表３、および／または表４に列挙されるキーポリペプチドからなる群から選択されるキータンパク質のアミノ酸配列と、その長さに沿って、任意選択的な残基を含まずに、少なくとも４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有するアミノ酸配列を含む。
【０００９】
別の実施形態において、本開示は、本開示の任意の実施形態または実施形態の組み合わせのキーポリペプチドに融合された本開示の任意の実施形態または実施形態の組み合わせのケージポリペプチドを含む融合タンパク質を提供する。
【００１０】
他の態様では、本開示は、本開示の任意の実施形態または実施形態の組み合わせの融合タンパク質のケージポリペプチド、キーポリペプチドをコードする核酸、プロモーターに操作可能に連結された核酸を含む発現ベクター、および／または核酸および／または発現ベクターを含む宿主細胞を提供する。一実施形態では、核酸または発現ベクターは、宿主細胞染色体に組み込まれる。別の実施形態では、核酸または発現ベクターは、エピソームである。別の実施形態では、宿主細胞は、
（ａ）第１のプロモーターに操作可能に連結された本開示の任意の実施形態または実施形態の組み合わせのケージポリペプチドをコードする第１の核酸と、
（ｂ）第２のプロモーターに操作可能に連結された本開示の任意の実施形態または実施形態の実施形態のキーポリペプチドをコードする第２の核酸と、を含み、第２の核酸は、第１の核酸によってコードされるケージポリペプチドの構造領域に結合することができるキーポリペプチドをコードし、ケージポリペプチドの構造領域へのキーポリペプチドの結合は、ケージポリペプチドにおける立体構造変化を誘導する。
【００１１】
本開示の宿主細胞のさらなる実施形態において、第１の核酸は、複数の異なるケージポリペプチドをコードする複数の第１の核酸を含む。第２の核酸は、複数の異なるキーポリペプチドをコードする複数の第２の核酸を含み、複数の異なるキーポリペプチドは、複数の異なるケージポリペプチドのサブセットのみに結合してサブセットにおける立体構造変化を誘導することができる１つ以上のキーポリペプチドを含む。別の実施形態では、第２の核酸は、各異なるケージポリペプチドに結合して、各異なるケージポリペプチドにおける立体構造変化を誘導することができる単一のキーポリペプチドをコードする。
【００１２】
別の実施形態では、宿主細胞は、
（ａ）第１のプロモーターに操作可能に連結された本開示の任意の実施形態または実施形態の組み合わせによる融合タンパク質をコードする第１の核酸と、
（ｂ）第２のプロモーターに操作可能に連結された本開示の任意の実施形態または実施形態の組み合わせによる融合タンパク質をコードする第２の核酸と、を含み、
（ｉ）第１の核酸によってコードされるケージポリペプチドは、第２の核酸によってコードされるキーポリペプチドによって活性化され、
（ｉｉ）第１の核酸によってコードされるケージポリペプチドは、第１の核酸によってコードされるキーポリペプチドによって活性化されず、
（ｉｉｉ）第２の核酸によってコードされるケージポリペプチドは、第１の核酸によってコードされるキーポリペプチドによって活性化され、
（ｉｖ）第２の核酸によってコードされるケージポリペプチドは、第２の核酸によってコードされるキーポリペプチドによって活性化されない。
【００１３】
別の態様では、本開示はキットを提供し、
（ａ）本開示の任意の実施形態または実施形態の組み合わせによる１つ以上のケージポリペプチドと、
（ｂ）本開示の任意の実施形態または実施形態の組み合わせによる１つ以上のキーポリペプチドと、
（ｃ）任意選択的に、本開示の任意の実施形態または実施形態の組み合わせによる１つ以上の融合タンパク質と、を含む。
【００１４】
一態様では、本開示はキットを提供し、
（ａ）本開示の任意の実施形態または実施形態の組み合わせによる１つ以上のケージポリペプチドをコードする第１の核酸と、
（ｂ）本開示の任意の実施形態または実施形態の組み合わせによる１つ以上のキーポリペプチドをコードする第２の核酸と、
（ｃ）任意選択的に、本開示の任意の実施形態または実施形態の組み合わせによる１つ以上の融合タンパク質をコードする第３の核酸と、を含む。
【００１５】
様々な実施形態において、第１の核酸、第２の核酸、および／または第３の核酸は、発現ベクターを構成する。
【００１６】
別の態様では、本開示はＬＯＣＫＲスイッチを提供し、
（ａ）構造領域および１つ以上の生物活性ペプチドをさらに含むラッチ領域を含むケージポリペプチドであって、構造領域はラッチ領域と相互作用して１つ以上の生物活性ペプチドの活性を防止する、ケージポリペプチドと、
（ｂ）ケージ構造領域に結合し、それによってラッチ領域を置換して、１つ以上の生物活性ペプチドを活性化する、任意選択的なキーポリペプチドと、
（ｃ）任意選択的に、１つ以上の生物活性ペプチドが活性化されるときに１つ以上の生物活性ペプチドに結合する１つ以上のエフェクターポリペプチド（複数可）と、を含む。
【００１７】
一実施形態では、エフェクターポリペプチドが存在し、エフェクターポリペプチドは、限定されないが、Ｂｃｌ２、ＧＦＰ１−１０、およびプロテアーゼを含む、生物活性ペプチドに選択的に結合するエフェクターポリペプチドを含む。
【００１８】
様々な実施形態において、本開示の任意の実施形態または実施形態の組み合わせによる宿主細胞、キット、またはＬＯＣＫＲは、表１、表２、表３、および／または表４の同じ行におけるそれぞれケージポリペプチドおよびキーポリペプチド、または表２、表３、および／または表４の同じ行におけるそれぞれケージポリペプチドおよびキーポリペプチドに対して、その長さに沿って、任意選択的な残基を含まず、少なくとも４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または１００％の配列同一性を有するアミノ酸を有する１つ以上のケージポリペプチドおよび１つ以上のキーポリペプチドを含む。さらなる実施形態では、１つ以上の生物活性ペプチドは、配列番号６０、６２〜６４、６６、２７０５２〜２７０９３、および２７１１８〜２７１１９からなる非限定的な群から選択される１つ以上の生物活性ペプチドを含み得る。
【００１９】
他の実施形態では、本開示の任意の実施形態または実施形態の組み合わせによる宿主細胞、キット、またはＬＯＣＫＲは、
（ａ）配列番号１〜４９、５１〜５２、５４〜５９、６１、６５、６７〜１４３１７、２７０９４〜２７１１７、２７１２０〜２７１２５、２７，２７８〜２７，３２１からなる群から選択されるケージポリペプチド、ならびに表２、表３、および／または表４に列挙されるケージポリペプチドのアミノ酸配列に対してその長さに沿って、任意選択的なアミノ酸残基を含まず、少なくとも４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の配列同一性を有する１つ以上のケージポリペプチドを含む１つ以上のケージポリペプチドであって、ポリペプチドのＮ末端および／またはＣ末端の６０個のアミノ酸は任意選択的である、１つ以上のケージポリペプチドと、
（ｂ）配列番号１４３１８〜２６６０１、２６６０２〜２７０１５、２７０１６〜２７０５１からなる群から選択されるキーポリペプチド、ならびに表２、表３、および／または表４に列挙されるキーポリペプチドのアミノ酸配列に対してその長さに沿って、任意選択的なアミノ酸残基を含まず、少なくとも４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の配列同一性を有するポリペプチドからなる群から選択される１つ以上のポリペプチドを含む１つ以上のキーペプチドと、を含む。
【００２０】
別の態様では、本開示は、キーポリペプチドと組み合わされて前記生物活性ペプチドを活性化（「オン」に）する立体構造変化を誘導するまで、ケージポリペプチドに生物活性ポリペプチドを隔離して、それらを不活性（「オフ」）状態に保持するための、本明細書に開示されるポリペプチド、融合タンパク質、核酸、発現ベクター、宿主細胞、キット、および／またはＬＯＣＫＲスイッチの使用を提供する。
【図面の簡単な説明】
【００２１】
【図１】ＬＯＣＫＲスイッチシステムの設計。図１Ａは、設計目標を説明する熱力学モデルを示す。ケージにおける構造領域およびラッチ領域は、開状態および閉状態においてある程度平衡を有するスイッチを形成する。キーはケージに結合して開状態を促進することができ、標的がラッチに結合することを可能にする。図１Ｂは、（ａ）におけるモデルからのＫLTの２つの値についてプロットを示し、キーの追加（ＫCK＝１ｎＭ）によって、結合される標的がどのような割合で影響を受けるか示し、異なる着色をされた曲線は、Ｋopen＝［開］／［閉］の対数減少値の影響を示す。図１Ｃは、ループがホモ三量体５Ｌ６ＨＣ３＿１5に追加されて、単量体の５ヘリックスおよび６ヘリックスフレームワークを形成することを示し、二重変異体Ｖ２１７Ｓ／Ｉ２３２Ｓはラッチを弱め、それがキーによって置き換えられることを可能にし、外因性のキーに結合することができるＬＯＣＫＲシステムをもたらす。図１Ｄは、２２２ｎｍでの平均残基楕円率（ＭＲＥ）をモニタリングする塩化グアニジン（Ｇｄｍ）による化学的変性を示す。図１Ｅは、小角Ｘ線散乱（ＳＡＸＳ）を示し、モノマーフレームワークは、互いに、そして元のホモ三量体と密接に一致するスペクトルを示す。図１Ｆ、キーは切り詰められた５ヘリックスフレームワークおよびＬＯＣＫＲ（Ｖ２１７Ｓ／Ｉ２３２Ｓ）に結合するが、６ヘリックスモノマーに結合しないことを示すプルダウンアッセイであり、遊離ＧＦＰ−キーをヘキサヒスチジンタグを介してプレートに固定化された単量体フレームワークに加え、一連の洗浄ステップの後、結合をＧＦＰ蛍光によって測定した（ｎ＝２、エラーバーは標準偏差を示す）。
【図２】ＢｉｍＬＯＣＫＲ設計および活性。図２Ａ．ラッチ−ケージ接点の自由エネルギーは、準最適なＢｉｍ−ケージ相互作用（左、変化した疎水性パッキングおよび埋め込まれた水素結合として示されている）を通じて、そして接点の端（右）の疎水性残基をトーホールドとして露出することによって調整した。Ｂ）トーホールドの導入は、バイオレイヤー干渉法を介して５μＭキー（「オン」バー）の添加によって２５０ｎＭ  ＢｉｍＬＯＣＫＲの活性化を可能にする。Ｃ）バイオレイヤー干渉法は、２５０ｎＭ  ＢｉｍＬＯＣＫＲによるＢｃｌ２へのキー依存結合を示す。０〜５００秒で会合、そして５００〜１７００秒で解離。Ｄ）各点は、データをＩで適合させ、平衡状態での応答を抽出した結果である。曲線は、より短いキーで同様のデータを示し、ＬＯＣＫＲのＫCKを調整し、その活性化の範囲に影響を及ぼす能力を実証する。
【図３】直交ＢｉｍＬＯＣＫＲの設計および検証。Ａ）左：下絵的な表現におけるＬＯＣＫＲ。重ねられた３つの異なるラッチおよびマーカーによって印された水素結合ネットワークを有するケージ。右：直交ＬＯＣＫＲ接点を横切る水素結合ネットワーク。ｂ）Ｏｃｔｅｔで同族キーに応答してＢｃｌ２に結合するＢｉｍＬＯＣＫＲ。１回の繰り返し。ｃ）各スイッチ（２５０ｎＭ）およびキー（５μＭ）の対について５００秒後のＯｃｔｅｔにおける応答。２回の繰り返しの平均。
【図４】非対称化ＬＯＣＫＲスイッチ設計の実験的に決定されたＸ線結晶構造。（Ａ）コード化ＢＩＭペプチドを含む設計１−ｆｉｘ−ｓｈｏｒｔ−ＢＩＭ−ｔ０の結晶構造。（Ｂ）設計１ｆｉｘ−ｓｈｏｒｔ−ｎｏＢｉｍ（ＡＹＹＡ）−ｔ０の結晶構造は、（左）バックボーン、（中央）水素結合ネットワーク、および（右）疎水性パッキングに関して設計モデルと非常によく一致しており、ＢｉｍおよびＧｆｐ１１がエンコードされるラッチの領域が示され、電子密度マップがネットワークおよび疎水性断面（中央および右）について表示される。
【図５】キーが存在しない場合にスプリットＧＦＰ１１がＧＦＰ１−１０を補完することを防ぐことができるＬＯＣＫＲスイッチ。鎖１１を有するＧＦＰ（ｐｄｂ  ２ｙ０ｇ）の結晶構造が示される。Ｂ．ヘリックスとして安定化されたＧＦＰ１１を有するプロトタイプスイッチの結晶構造（メッシュは電子密度である）。Ｃ．コンピュータによる設計モデルは、０．８７Åの平均平方根偏差を有する結晶構造と一致する。設計されたＬＯＣＫＲスイッチ１ｆｉｘ−ｓｈｏｒｔ−ＧＦＰ−ｔ０の実験的に決定されたＸ線結晶構造は、エンコードされたＧＦＰの１１番目の鎖（ＧＦＰ１１）がアルファヘリックスであり、設計モデルと非常によく一致していることを示す。Ｄ．ＧＦＰ蛍光は、キーペプチドの存在下でのみ観察され、スイッチが機能していることを示す（キーが存在しない場合はオフ、キーが存在する場合はオン）。
【図６】共局在依存性であるように調整された、図４から設計したＧＦＰ１１−ＬＯＣＫＲスイッチ。（Ａ）共局在依存性が結合されたＳｐｙｃａｔｃｈｅｒ（商標）／Ｓｐｙｔａｇ（商標）融合によって制御されるテストシステムの概略図。このモデルでは、キーはＳｐｙｔａｇに融合された場合にのみ、ＬＯＣＫＲスイッチを活性化し（蛍光を生じる）、キーがケージに共局在される（右）。キーのみを加えると、ＬＯＣＫＲスイッチを活性化することができない（中央）。（Ｂ）（Ａ）の概略図に従って、設計されたＬＯＣＫＲスイッチの共局在依存性を示す蛍光データ。Ｓｐｙｃａｔｃｈｅｒ（商標）に融合された設計１ｆｉｘ−ｌａｔｃｈおよび１ｆｉｘ−ｓｈｏｒｔは、Ｓｐｙｔａｇ（商標）に融合されたそれらの同族のキーと混合するとより強い活性化を示す。Ｓｐｙｔａｇ（商標）を欠如するキーは、活性化が著しく低くなる。
【図７】ケージ化インテインＬＯＣＫＲスイッチ。ＶＭＡｃインテインをエンコードするケージ成分を有して設計されたＬＯＣＫＲスイッチは、ｓｆＧＦＰおよびＶＭＡｎインテインに融合するように設計されたキーと混合するとき、良好な活性化を示す。ＳＤＳ−ＰＡＧＥは、ＶＭＡｃ−ＶＭＡｎ反応の成功を示し、予想されるスプライシングされたタンパク質生成物の正しい分子量に対応するバンドをともなう。
【図８】元のＬＯＣＫＲ＿ａケージスキャホルドデザインをその非対称（１ｆｉｘ−ｓｈｏｒｔ−ｎｏＢｉｍ（ＡＹＹＡ）−ｔ０）および直交（ＬＯＣＫＲｂ−ｆ）設計対応物と比較する多重配列アラインメント（ＭＳＡ）。部位のうちの１５０個（４０．８％）のみがＭＳＡにわたって同一であり、６９．４％のペアワイズ％同一性を有する。ラッチ領域（Ｃ末端領域はこのＭＳＡで３１１の表示位置から開始される）は配列の同一性／類似性をほとんど有さない。（上から下にむかって、配列番号１７、３９、７、８、９、１０、１１）
【図９】ＬＯＣＫＲａ（図１）を作成するために使用されるベーススキャホルド５Ｌ６ＨＣ３＿１5（暗色）のＸ線結晶構造との１ｆｉｘ−ｓｈｏｒｔ−ｎｏＢｉｍ（ＡＹＹＡ）−ｔ０（図４Ｂ）の結晶構造（白色）の重ね合わせは、非対称化性変異（図８  ＭＳＡに示される可変位置）がタンパク質の３次元構造に影響を与えないことを示す。２つのタンパク質間のバックボーンＲＭＳＤは０．８５オングストロームである（鎖Ａ間のすべてのバックボーン原子の重ね合わせから）。
【図１０】ＬＯＣＫＲにおける変異を見い出すためのＧＦＰプレートアッセイ。異なる推定的ＬＯＣＫＲ構築体を６×−Ｈｉｓタグを介してＮｉコーティング９６ウェルプレートに接着させ、キー−ＧＦＰを加えて、十分洗浄した。得られる蛍光は、ＬＯＣＫＲ構築体に結合したキー−ＧＦＰを表す。キーは開いた接点に結合するため、切り詰めを陽性コントロールとして使用した。モノマーは、それがキーに結合しないため、陰性コントロール。エラーバーは、３回の繰り返しの標準偏差を表す。
【図１１】直交ＬＯＣＫＲ  ＧＦＰアッセイ。Ａ）５つの再設計したＬＯＣＫＲ構築体（ｂからｆ）において、ラッチを６×−Ｈｉｓタグ化ケージから切り詰めた。対応するキーはＧＦＰタグ化された。キー−ケージ結合は、ケージのＮｉプルダウンによって測定され、得られるＧＦＰ蛍光を測定する。エラーバーは、３回の繰り返しの標準偏差である。Ｂ）（ａ）のキーに結合する各完全ＬＯＣＫＲ構築体には、９残基のトーホールドを加え、ＧＦＰプルダウンアッセイにおいて４つの機能キー（ａからｄ）すべてに対する結合について試験した。エラーバーは、５回の繰り返しの標準偏差である。キーａは、ホモ三量体からのＬＯＣＫＲの疑似対称的生成のため、乱雑に結合しているが活性化しないと思われる。ＬＯＣＫＲｂは、それ自体のキーへの結合を示さず、（ａ）および図３ｂの結果から得られるラッチ強度に起因する。
【図１２】キー依存的転写抑制のために設計されたＭａｄ１−ＳＩＤＬＯＣＫＲスイッチ。（ａ）Ｍａｄ１−ＳＩＤドメイン（白色）とｍＳｉｎ３Ａ転写リプレッサーのＰＡＨ２ドメイン（黒）の間の相互作用の結晶構造（ＰＤＢ  ＩＤ：１Ｅ９１）。Ｍａｄ１−ＳＩＤドメインのケージ化は、正確なエピジェネティックな調節を可能にする転写サプレッサーｍＳｉｎ３Ａのキー依存性動員を可能にするべきである。（ｂ）設計されたＭａｄ１−ＬＯＣＫＲスイッチ、Ｍａｄ１−ＳＩＤ配列を異なる位置（濃灰色）でエンコードするケージ構成要素を有する。（ｃ）良好に精製された１ｆｉｘ＿３０２＿Ｍａｄ１（１）、１ｆｉｘ＿３０９＿Ｍａｄ１（２）、およびＭＢＰ＿Ｍａｄ１（３）を示すＳＤＳ−ＰＡＧＥゲル。（ｄ）精製されたｍＳｉｎ３Ａ−ＰＡＨ２ドメインとのＭａｄ１−ＬＯＣＫＲスイッチのキー活性化結合のバイオレイヤー干渉測定分析。ＭＢＰ−Ｍａｄ１は、ｍＳｉｎ３ａ−ＰＡＨ２結合における陽性コントロールである。１ｆｉｘ＿３０９＿Ｍａｄ１（３０９）は、設計したキーaと混合したときに良好な活性化を示す。１ｆｉｘ＿３０２＿Ｍａｄ１（３０２）は、Ｍａｄ１−ＳＩＤドメインの非常に強化なケージ化を示すが、キーaが存在する場合は活性化を示さない。速度アッセイは、０．１μｇのビオチン−ｍＳｉｎ３Ａ−ＰＡＨ２タンパク質をストレプトアビジンバイオセンサーチップ（ＦｏｒｔｅＢｉｏ）に固定化することによって実施した。タンパク質ケージは、５００ｎＭキーaの存在下または不在下において５０ｎＭで試験した。
【図１３】ケージ化ＳＴＲＥＰＩＩ−タグＬＯＣＫＲスイッチ、新規２プラス１および３プラス１ＬＯＣＫＲスイッチの実証。（Ａ）設計した２＋１（左）および３＋１（中央）のＬＯＣＫＲスイッチは、ＳＴＲＥＰＩＩ配列ＷＳＨＰＱＦＥＫ（配列番号６３）をエンコードするように設計された。（Ｂ〜Ｄ）ＳＴＲＥＰＩＩ−ＬＯＣＫＲ設計の機能を実証するバイオレイヤー干渉測定データ（Ｏｃｔｅｔ）データ：抗ｓｔｒｅｐ抗体を抗マウスＦＣチップに固定化してＳＴＲＥＰＩＩタグの結合を評価する：（Ｂ）設計したタンパク質は陽性コントロールよりも低い結合を示し、ＳＴＲＥＰＩＩが意図したように少なくとも部分的に隔離されていることを示唆する。（Ｃ）３ｐｌｕｓ１＿キー＿３による設計ＳＴＲＥＰＩＩ−３ｐｌｕｓ１＿Ｌｏｃｋ＿３の活性化：曲線は、キーのないケージの２５０ｎＭであり、キーの濃度が１２１ｎＭから６０００ｎＭの範囲で増加する存在下で２５０ｎＭケージと比較した。（Ｄ）３７０ｎＭ、１１１１ｎＭ、および３３３３ｎＭでのキーの存在における２５０ｎＭ  ＳＴＲＥＰＩＩ−３ｐｌｕｓ１＿Ｌｏｃｋ＿３：キーのない２５０ｎＭのケージは２５０ｎＭであり、他のプロットは同じ濃度（３７０ｎＭ、１１１１ｎＭ、および３３３３ｎＭ）でのキーであるが、ケージは存在しない。すべてのＯｃｔｅｔプロットにおいて、左半分は会合（結合）段階であり、右半分は解離段階である。
【図１４】３プラス１ＬＯＣＫＲスイッチはキーの発現に応じてＧＦＰ蛍光を活性化する。ＬＯＣＫＲスイッチは、３プラス１ケージを使用してＧＦＰの鎖１１（ＧＦＰ１１）を非活性な立体構造で隔離するように設計され、これによってスプリットＧＦＰ（ＧＦＰ１−１０およびＧＦＰ１１で構成される）の再構成を防ぎ、蛍光を生じる。発現プラスミドは、ケージ（ｐ１５ａ複製起点、スペクチノマイシン耐性、ＧＦＰ１−１０およびＬＯＣＫＲケージ化ＧＦＰ１１の発現を制御するアラビノース誘導性プロモーター）およびキー（ｃｏｌＥ１複製起点、カナマイシン耐性、およびＩＰＴＧ誘導性プロモーター）を誘導的に発現するために調製された。化学的にコンピテントな大腸菌Ｓｔｅｌｌａｒ細胞（Ｔａｋａｒａｂｉｏ）は、ケージプラスミド単独、またはケージプラスミドおよびキープラスミドの両方のいずれかを使用して、製造業者のプロトコルに従って形質転換された。これらの形質転換体は、スペクチノマイシン（ケージのみ）またはスペクチノマイシン＋カナマイシン（ケージおよびキー）を添加した液体ＬＢ培地で３７℃、一晩増殖させた。得られた培養物を、適切な抗生物質およびアラビノースのみ（ケージおよびＧＦＰ１−１０の発現を誘導）またはアラビノースとＩＰＴＧの両方（ケージ、ＧＦＰ１−１０、およびキーの発現を誘導）のいずれかを添加した新鮮なＬＢ培地で１／１００に希釈し、３７℃で１６時間増殖させた。２００μＬの各発現培養物を２００μＬのＰＢＳで１回洗浄し、２００μＬのＰＢＳに再懸濁し、黒色壁９６ウェルプレートに移した。ＧＦＰ蛍光を、Ｂｉｏｔｅｋ  Ｓｙｎｅｒｇｙ  Ｈ１ＭＦプレートリーダー（励起／発光４７９／５２０ｎｍ）で評価した。蛍光はケージ単独で最小であり、ＬＯＣＫＲタンパク質がキーの不在下でスプリットＧＦＰの活性化を防止したことを確証した。キー発現の誘導は、配列番号２７１９２、２７１９８、２７１９４、２７２０２、２７２０６、および２７２１０において蛍光の大幅な増加をもたらした。これらの結果は、３プラス１ＬＯＣＫＲアーキテクチャが生物活性ペプチドＧＦＰ１１の機能を制御することができることを示す。
【発明を実施するための形態】
【００２２】
引用されるすべての参考文献は、参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれる。本出願では、別途記載されない限り、利用される技法は以下などのいくつかのよく知られている参照のいずれかで認められ得る。Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ（Ｓａｍｂｒｏｏｋ，ｅｔ  ａｌ．，１９８９，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ）、Ｇｅｎｅ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ（Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．１８５，ｅｄｉｔｅｄ  ｂｙ  Ｄ．Ｇｏｅｄｄｅｌ，１９９１  Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）、“Ｇｕｉｄｅ  ｔｏ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ”ｉｎ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ（Ｍ．Ｐ．Ｄｅｕｔｓｈｃｅｒ，ｅｄ．，（１９９０）Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．）、ＰＣＲ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ：Ａ  Ｇｕｉｄｅ  ｔｏ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ（Ｉｎｎｉｓ，ｅｔ  ａｌ．１９９０．Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）、Ｃｕｌｔｕｒｅ  ｏｆ  Ａｎｉｍａｌ  Ｃｅｌｌｓ：Ａ  Ｍａｎｕａｌ  ｏｆ  Ｂａｓｉｃ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ，２nd  Ｅｄ．（Ｒ．Ｉ．Ｆｒｅｓｈｎｅｙ．１９８７．Ｌｉｓｓ，Ｉｎｃ．Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ＮＹ）、Ｇｅｎｅ  Ｔｒａｎｓｆｅｒ  ａｎｄ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ，ｐｐ．１０９−１２８，ｅｄ．Ｅ．Ｊ．Ｍｕｒｒａｙ，Ｔｈｅ  Ｈｕｍａｎａ  Ｐｒｅｓｓ  Ｉｎｃ．，Ｃｌｉｆｔｏｎ，Ｎ．Ｊ．）、およびＡｍｂｉｏｎ  １９９８  Ｃａｔａｌｏｇ（Ａｍｂｉｏｎ，Ａｕｓｔｉｎ，ＴＸ）。
【００２３】
本明細書で使用される場合、単数形「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」は、文脈からそうでないことが明確に示されない限り、複数の指示対象を含む。本明細書で使用される「および」は、特に明記しない限り、「または」と互換的に使用される。
【００２４】
本明細書で使用される場合、アミノ酸残基は以下のように省略される：アラニン（Ａｌａ；Ａ）、アスパラギン（Ａｓｎ；Ｎ）、アスパラギン酸（Ａｓｐ；Ｄ）、アルギニン（Ａｒｇ；Ｒ）、システイン（Ｃｙｓ；Ｃ）、グルタミン酸酸（Ｇｌｕ；Ｅ）、グルタミン（Ｇｌｎ；Ｑ）、グリシン（Ｇｌｙ；Ｇ）、ヒスチジン（Ｈｉｓ；Ｈ）、イソロイシン（Ｉｌｅ；Ｉ）、ロイシン（Ｌｅｕ；Ｌ）、リジン（Ｌｙｓ；Ｋ）、メチオニン（Ｍｅｔ；Ｍ）、フェニルアラニン（Ｐｈｅ；Ｆ）、プロリン（Ｐｒｏ；Ｐ）、セリン（Ｓｅｒ；Ｓ）、スレオニン（Ｔｈｒ；Ｔ）、トリプトファン（Ｔｒｐ；Ｗ）、チロシン（Ｔｙｒ；Ｙ）、およびバリン（Ｖａｌ；Ｖ）。
【００２５】
本開示の任意の態様のすべての実施形態は、文脈からそうでないことが明確に示されない限り、組み合わせて使用することができる。
【００２６】
文脈上明らかに別段に必要でない限り、発明を実施するための形態および特許請求の範囲全体を通して、「ｃｏｍｐｒｉｓｅ（備える）」、「ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ（備えている）」などの語は、排他的意味の対語としての包括的意味、または網羅的意味で、すなわち、「ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ、ｂｕｔ  ｎｏｔ  ｌｉｍｉｔｅｄ  ｔｏ（含むがそれらに限定されない）」の意味で解釈されたい。単数または複数を使用する語は、それぞれ、複数、単数も含む。さらに、「本明細書における（ｈｅｒｅｉｎ）」、「上に（ａｂｏｖｅ）」、および「以下に（ｂｅｌｏｗ）」という単語、ならびに類似の意味の単語は、本出願で使用される場合、全体としての本出願を指すものであり、本出願のいかなる特定の部分を指すものではない。
【００２７】
本開示の実施形態の説明は、網羅的であるようにも、本開示を、開示された正確な形態に限定するようにも意図されていない。本開示の特定の実施形態および実施例が例証目的で本明細書に記載されているが、当業者であれば認識するであろうように、様々な同等の修正が本開示の範囲内で可能である。
【００２８】
第１の態様では、本開示は、非天然由来ポリペプチドを提供し、
（ａ）２〜７個のアルファヘリックスを含むヘリックス束と、
（ｂ）各アルファヘリックスを接続するアミノ酸リンカーと、を含む。
【００２９】
本開示のこの第１の態様の非天然由来ポリペプチドは、例えば、本明細書に詳細に開示される新規タンパク質スイッチの「ケージ」ポリペプチド成分（本明細書では「ロック」とも呼ばれる）として使用することができる。タンパク質スイッチは、例えば、生物活性ペプチドをケージポリペプチドに隔離し、本明細書に開示される新規タンパク質スイッチの第２の成分（「キー」ポリペプチド）と組み合わされるまで、それらを不活性（「オフ」）状態に保持するために使用することができ、キーポリペプチドは、生物活性ペプチドを活性化（「オン」に）する立体構造変化を誘導する（図１Ａを参照）。本明細書に記載のポリペプチドは、タンパク質結合に応答して立体構造切り替えを受けることができる、初めての新規設計されたポリペプチドを含む。さらに、本明細書に開示されるポリペプチドのようなモジュール式の調整可能な方法で切り替えることができる既知の天然タンパク質は存在しない。
【００３０】
ポリペプチドは、ポリペプチド全体がいずれの天然由来ポリペプチドには認められず、「非天然由来」である。ポリペプチドの成分は、限定されないが、いくつかの実施形態に含まれ得る生物活性ペプチドを含む天然由来であり得ることが理解されるであろう。
【００３１】
ケージポリペプチドは、２〜７つのアルファヘリックスを含むヘリックス束を含む。様々な実施形態において、ヘリックス束は、３〜７、４〜７、５〜７、６〜７、２〜６、３〜６、４〜６、５〜６、２〜５、３〜５、４〜５、２〜４、３〜４、２〜３、２、３、４、５、６、または７つのアルファヘリックスを含む。
【００３２】
本開示のヘリックス束ケージポリペプチドの設計は、任意の好適な手段によって実行され得る。非限定的な一実施形態では、Ｒｏｓｅｔｔａ（商標）プログラムのＢｕｎｄｌｅＧｒｉｄＳａｍｐｌｅｒ（商標）を使用して、コイルドコイルのＣｒｉｃｋ式に基づいてバックボーン形状を作成し、コイルドコイル式パラメータ値の規則的なグリッドの効率的で並行したサンプリングを可能し、ペプチドバックボーン立体構造の連続体に対応する。これは、限定されないがＢｏｙｋｅｎら（Ｓｃｉｅｎｃｅ  ３５２、６８０−６８７（２０１６））によって報告されているようないずれかの好適な手段を使用した水素結合ネットワークに関する設計、続いてＲｏｓｅｔｔａ（商標）側鎖設計によって補われ得る。さらなる非限定的な実施形態において、総スコア、不十分な水素結合の数、およびタンパク質のコアにおける空隙の欠如に基づく最良のスコア化設計が、ヘリックス束ポリペプチド設計のために選択され得る。
【００３３】
各アルファヘリックスは、意図された使用に適した任意の好適な長さおよびアミノ酸組成のものであり得る。一実施形態では、各ヘリックスは、独立して、３８〜５８アミノ酸長である。様々な実施形態において、各ヘリックスは、独立して、１８〜６０、１８〜５５、１８〜５０、１８〜４５、２２〜６０、２２〜５５、２２〜５０、２２〜４５、２５〜６０、２５〜５５、２５〜５０、２５〜４５、２８〜６０、２８〜５５、２８〜５０、２８〜４５、３２〜６０、３２〜５５、３２〜５０、３２〜４５、３５〜６０、３５〜５５、３５〜５０、３５〜４５、３８〜６０、３８〜５５、３８〜５０、３８〜４５、４０〜６０、４０〜５８、４０〜５５、４０〜５０、または４０〜４５アミノ酸長である。
【００３４】
各アルファヘリックスを接続するアミノ酸リンカーは、意図された使用に適した任意の好適な長さまたはアミノ酸組成のものであることができる。非限定的な一実施形態において、各アミノ酸リンカーは、独立して、２〜１０アミノ酸長であり、リンカーに融合され得るいずれのさらなる機能的配列も含まない。様々な非限定的な実施形態において、各アミノ酸リンカーは、独立して、３〜１０、４〜１０、５〜１０、６〜１０、７〜１０、８〜１０、９〜１０、２〜９、３〜９、４〜９、５〜９、６〜９、７〜９、８〜９、２〜８、３〜８、４〜８、５〜８、６〜８、７〜８、２〜７、３〜７、４〜７、５〜７、６〜７、２〜６、３〜６、４〜６、５〜６、２〜５、３〜５、４〜５、２〜４、３〜４、２−３、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０アミノ酸長である。すべての実施形態において、リンカーは、構造化またはフレキシブル（例えば、ポリＧＳ）であり得る。これらのリンカーはさらなる機能的配列をコードし得、限定されないが、プロテアーゼ切断部位またはスプリットインテインシステムの半分が含まれる（以下の配列を参照）。
【００３５】
この第１の態様のポリペプチドは、生物活性ペプチドの挿入のために、「ラッチ領域」と呼ばれる領域を含む。したがって、ケージポリペプチドは、ラッチ領域および構造領域（すなわち、ラッチ領域ではないケージポリペプチドの残りの部分）を含む。ラッチ領域が１つ以上の生物活性ペプチドを含むように変更されると、ケージポリペプチドの構造領域は、ラッチ領域と相互作用して、生物活性ペプチドの活性を防止する。キーポリペプチドによる活性化では、ラッチ領域は構造領域とのその相互作用から解離して生物活性ペプチドを露出させ、ペプチドが機能することを可能にする。
【００３６】
本明細書で使用される場合、「生物活性ペプチド」は、定められた標的に選択的に結合することができる（すなわち、「エフェクター」ポリペプチドに結合することができる）任意の長さまたはアミノ酸組成の任意のペプチドである。そのような生物活性ペプチドは、不活性な立体構造における二次構造の３タイプである、アルファヘリックス、ベータ鎖、およびループのすべてのペプチドを含み得る。この態様のポリペプチドは、広範囲の機能性ペプチドの活性を制御するために使用することができる。これらの生物学的機能を厳密で誘導可能な制御によって利用する能力は、例えば、細胞の工学処理（機能の誘導可能な活性化、複雑な論理動作および回路の工学処理など）、センサーの開発、誘導性タンパク質ベースの治療法の開発、および新規生物材料の作成に有用である。
【００３７】
ラッチ領域は、ケージポリペプチドのいずれかの末端の近くに存在し得る。一実施形態では、ラッチ領域はＣ末端ヘリックスに配置され、それによって生物活性ペプチドを不活性状態に維持するために隔離されることが必要とされる機能性残基の最大の埋め込みに生物活性ペプチドを配置し、同時に疎水性残基を埋め込んで、極性残基の溶媒曝露／代償的水素結合を促進する。様々な実施形態において、ラッチ領域は、ケージポリペプチドにおける単一のアルファヘリックスの一部またはすべてをＮ末端またはＣ末端部分で含み得る。様々な他の実施形態において、ラッチ領域は、ケージポリペプチドにおける第１、第２、第３、第４、第５、第６、または第７のアルファヘリックスの一部またはすべてを含み得る。他の実施形態では、ラッチ領域は、ケージポリペプチドに２つ以上の異なるアルファヘリックスのすべてまたは一部を含み得、例えば、１つのアルファヘリックスのＣ末端部分と次のアルファヘリックスのＮ末端部分、２つの連続するアルファヘリックスすべて、などである。
【００３８】
別の実施形態では、この第１の態様のポリペプチドは、ラッチ領域内に１つ以上の生物活性ペプチドを含む。この実施形態では、生物活性ペプチド（複数可）は、ラッチ領域内の１つ以上のアミノ酸を置換し得、またはラッチ領域からいずれのアミノ酸残基も除去することなくラッチ領域に加えられ得る。様々な非限定的な実施形態において、生物活性ペプチドは、配列番号６０、６２〜６４、６６、２７０５２〜２７０９３、および２７１１８〜２７１１９、またはその変異体のうちの１つ以上（括弧内のすべての配列は任意選択的である）を含み得る。
●ＧＦＰ１１蛍光ペプチドおよびＧＦＰ１−１０と結合するペプチド：ＲＤＨＭＶＬＨＥＹＶＮＡＡＧＩＴ（配列番号２７０５２）
●ＢＩＭ結合ペプチドおよびＢＣＬ−２に対するアポトーシスペプチド：ＩｘｘｘＬＲｘＩＧＤｘＦｘｘｘＹ（配列番号５０）、ｘは任意のアミノ酸であり、一実施形態では、ペプチドは、ＥＩＷＩＡＱＥＬＲＲＩＧＤＥＦＮＡＹＹＡ（配列番号６０）である。
●ＢＣＬ−２に結合するために設計されたペプチド：ＫＭＡＱＥＬＩＤＫＶＲＡＡＳＬＱＩＮＧＤＡＦＹＡＩＬＲＡＬ（配列番号６２）
●ストレプタクチンに対するＳｔｒｅｐｔａｇＩＩ結合ペプチドまたは抗体：（Ｎ）ＷＳＨＰＱＦＥＫ（配列番号６３）
●ＴＥＶプロテアーゼ切断部位：ＥＮＬＹＦＱ（Ｇ）−Ｘ（配列番号６４）、（Ｇ）はＳであることができ、最後の位置であるＸはプロリン以外のいずれかであることができる。
●トロンビンプテアーゼ切断部位：ＬＶＰＲＧＳ（配列番号６６）
●カテプシン切断部位：ＲＬＶＧＦＥ（配列番号２７０５３）
●スパイキャッチャーとのスパイタグ共有結合架橋ペプチド：ＡＨＩＶＭＶＤＡＹＫ（ＰＴＫ）（配列番号２７０５４）
●タンパク質を核に向けるＮＬＳペプチド：ＡＡＡＫＲＡＲＴＳ（配列番号２７０５５）
●核からタンパク質を排除するＮＥＳ１ペプチド：ＬＡＬＫＬＡＧＬＤＩＮ（配列番号２７０５６）
●核からタンパク質を排除するＮＥＳ２ペプチド：ＥＬＡＥＫＬＡＧＬＤＩＮ（配列番号２７０５７）
●核からタンパク質を排除するＮＥＳ３ペプチド：ＥＬＡＥＫＬＲＡＧＬＤＬＮ（配列番号２７０５８）
●ＤＮＡ−メチラーゼを動員するＥＺＨ２結合ペプチド：ＴＭＦＳＳＮＲＱＫＩＬＥＲＴＥＴＬＮＱＥＷＫＱＲＲＩＱ（配列番号２７０５９）
●ｐ５３を動員するＭＤＭ２結合ペプチド：ＥＴＦＳＤＬＷＫＬＬ（配列番号２７０６０）
●ＣＰ５結合ペプチド：ＧＥＬＤＥＬＶＹＬＬＤＧＰＧＹＤＰＩＨＳＤＶＶＴＲＧＧＳＨＬＦＮＦ（配列番号２７０６１）
●転写活性化のための９ａａＴＡＤ１：ＴＭＤＤＶＹＮＹＬＦＤＤ（配列番号２７０６２）
●転写活性化のための９ａａＴＡＤ２：ＬＬＴＧＬＦＶＱＹＬＦＤＤ（配列番号２７０６３）
●転写活性化のための９ａａＴＡＤ３：ＤＤＡＶＶＥＳＦＦＳＳ（配列番号２７０６４）
●転写活性化のための９ａａＴＡＤ４：ＧＤＦＬＳＤＬＦＤ（配列番号２７０６５）
●転写活性化のための９ａａＴＡＤ５：ＧＤＶＬＳＤＬＶＤ（配列番号２７０６６）
●Ｍａｄ１−ＳＩＤ−エピジェネティック修飾：ＮＩＱＭＬＬＥＡＡＤＹＬＥ（配列番号２７０６７）
●Ｍａｄ１−ＳＩＤ（３Ａ変異体）−エピジェネティック修飾：ＮＩＡＭＬＬＡＡＡＡＹＬＥ（配列番号２７０６８）
●ＺＢＰ１からのＲＨＩＭドメイン１：ＩＱＩＧ（配列番号２７０６９）
●ＺＢＰ１からのＲＨＩＭドメイン２：ＶＱＬＧ（配列番号２７０７０）
●ｎａｎｏＢｉｔスプリットルシフェラーゼ：ＶＳＧＷＲＬＦＫＫＩＳ（配列番号２７０７１）
●ＣＣ−Ａ：ＧＬＥＱＥＩＡＡＬＥＫＥＮＡＡＬＥＷＥＩＡＡＬＥＱＧＧ（配列番号２７０７２）
●ＣＣ−Ｂ：ＧＬＫＱＫＩＡＡＬＫＹＫＮＡＡＬＫＫＫＩＡＡＬＫＱＧＧ（配列番号２７０７３）
●ＧＣＮ４：ＲＭＫＱＬＥＤＫＶＥＥＬＬＳＫＮＹＨＬＥＮＥＶＡＲＬＫＫＬＶＧＥＲ（配列番号２７０７４）
●ＣＣ−Ｄｉ：ＧＥＩＡＡＬＫＱＥＩＡＡＬＫＫＥＮＡＡＬＫＷＥＩＡＡＬＫＱＧ（配列番号２７０７５）
●膜破壊性／細胞透過性ペプチド：
●膜破壊のためのＧＡＬＡ：ＷＥＡＡＬＡＥＡＬＡＥＡＬＡＥＨＬＡＥＡＬＡＥＡＬＥＡＬＡＡ（配列番号２７０７６）
●オーレイン１．２：ＧＬＦＤＩＩＫＫＩＡＥＳＦ（配列番号２７０７７）
●マガイニン−１：ＧＩＧＫＦＬＨＳＡＧＫＦＧＫＡＦＶＧＥＩＭＫＳ（配列番号２７０７８）
●マガイニン−２：ＧＩＧＫＦＬＨＳＡＫＫＦＧＫＡＦＶＧＥＩＭＮＳ（配列番号２７０７９）
●メリチン：ＧＩＧＡＶＬＫＶＬＴＴＧＬＰＡＬＩＳＷＩＫＲＫＲＱＱ（配列番号２７０８０）
●マストパランＸ：ＩＮＷＫＧＩＡＡＭＡＫＫＬＬ（配列番号２７０８１）
●セクロピンＡ：ＫＷＫＬＦＫＫＩＥＫＶＧＱＮＩＲＤＧＩＩＫＡＧＰＡＶＡＶＶＧＱＡＴＱＩＡＫ（配列番号２７０８２）
●セクロピンＰ１：ＳＷＬＳＫＴＡＫＫＬＥＮＳＡＫＫＲＩＳＥＧＩＡＩＡＩＱＧＧＰＲ（配列番号２７０８３）
●シトロピン１．１：ＧＬＦＤＶＩＫＫＶＡＳＶＩＧＧＬ（配列番号２７０８４）
●テンポリン−１Ｌｂ：ＮＦＬＧＴＬＩＮＬＡＫＫＩＬ（配列番号２７０８５）
●ＨＰＶ３３Ｌ２ペプチド：ＳＹＦＩＬＲＲＲＲＫＲＦＰＹＦＦＴＤＶＲＶＡＡ（配列番号２７０８６）
●アデノウイルスｐＶＩ膜融合ドメイン：ＡＦＳＷＧＳＬＷＳＧＩＫＮＦＧＳＴＶＫＮＹ（配列番号２７０８７）
●フロックハウスウイルスに由来するガンマ−１ペプチド：ＡＳＭＷＥＲＶＫＳＩＩＫＳＳＬＡＡＡＳＮＩ（配列番号２７０８８）
●ポリオウイルス２Ｂ孔形成ペプチド：ＶＴＳＴＩＴＥＫＬＬＫＮＬＩＫＩＩＳＳＬＶＩＩＴＲＮＹＥＤＴＴＴＶＬＡＴＬＡＬＬＧＣＤＡＳＰＷＱＷＬ（配列番号２７０８９）
●ライノウイルス孔形成ペプチド：ＩＡＱＮＰＶＥＮＹＩＤＥＶＬＮＥＶＬＶＶＰＮＩＮ（配列番号２７０９０）
●インフルエンザＨＡ２孔形成ペプチド：ＦＬＧＩＡＥＡＩＤＩＧＮＧＷＥＧＭＥＦＧ（配列番号２７０９１）
●インフルエンザＨＡ２誘導体：ＧＬＦＧＡＩＡＧＦＩＥＮＧＷＥＧＭＩＤＧ（配列番号２７０９２）
●ＨＡ由来ＩＮＦ６：ＧＬＦＧＡＩＡＧＦＩＥＮＧＷＥＧＭＩＤＧＷＹＧ。（配列番号２７０９３）
●ＫＲＡＢドメイン−エピジェネティック修飾：（配列番号２７１１８）ＭＤＡＫＳＬＴＡＷＳＲＴＬＶＴＦＫＤＶＦＶＤＦＴＲＥＥＷＫＬＬＤＴＡＱＱＩＶＹＲＮＶＭＬＥＮＹＫＮＬＶＳＬＧＹＱＬＴＫＰＤＶＩＬＲＬＥＫＧＥＥＰＷＬＶ
●最小Ｋｒａｂドメイン（ＫＯＸ１１１−５５）−エピジェネティック修飾：（配列番号２７１１９）ＲＴＬＶＴＦＫＤＶＦＶＤＦＴＲＥＥＷＫＬＬＤＴＡＱＱＩＶＹＲＮＶＭＬＥＮＹＫＮＬＶＳＬＧＹ
【００３９】
一実施形態では、キーポリペプチドによる活性化のダイナミックレンジは、ラッチ領域の長さを構造領域のアルファヘリックスよりも短く切り詰め、同時にケージポリペプチド−ラッチ領域の相互作用を弱め、キーポリペプチドが「トーホールド」として結合できる露出領域をケージポリペプチドに開くことによって、調整することができる。（図２）。同様に、キーポリペプチドによる活性化のダイナミックレンジも、ケージのポリペプチド−ラッチ領域相互作用を弱めるラッチへの変異を設計することによって、同様な手段で調整することができる（図１〜２、および１０）。他の実施形態では、ラッチ領域は、１８〜１５０個のアミノ酸、１８〜１００個のアミノ酸、１８〜５８個のアミノ酸、またはこれらの範囲によって包含される任意の範囲の長さからなる１つ以上のヘリックスであり得る。他の実施形態では、ラッチ領域は、ヘリックス二次構造、ベータ鎖二次構造、ループ二次構造、またはそれらの組み合わせからなることができる。
【００４０】
第２の態様において、本開示は配列番号１〜４９、５１〜５２、５４〜５９、６１、６５、６７〜９１、９２〜２０３３（別添１として提出される２０１８年７月１９日出願された米国特許仮出願第６２／７００６８１号および／または２０１８年１２月２７日出願された第６２／７８５５３７）、配列番号２０３４〜１４３１７（別添２として提出される２０１８年７月１９日出願された米国特許仮出願第６２／７００６８１号および／または２０１８年１２月２７日出願された第６２／７８５５３７号）、２７０９４〜２７１１７、２７１２０〜２７１２５、２７，２７８〜２７，３２１、ならびに表２（配列番号２７１２６〜２７２７６における偶数の配列番号を有するポリペプチド）、表３、および／または表４に列挙されるケージポリペプチドなどの、本明細書に開示されるケージポリペプチドのアミノ酸配列に対してその長さに沿って、任意選択的なアミノ酸残基を含まず、任意選択的にラッチ領域におけるアミノ酸残基を含まず、少なくとも４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の配列同一性を有するポリペプチドを含む非天然由来ポリペプチドを提供する。各実施形態において、各ケージポリペプチドのＮ末端および／またはＣ末端の６０個のアミノ酸は任意選択的であり得、末端の６０個のアミノ酸残基は、ラッチの全部または一部分を生物活性ペプチドで置換することなどによって改変することができる。一実施形態では、Ｎ末端の６０個のアミノ酸残基は任意選択的であり、別の実施形態では、Ｃ末端の６０個のアミノ酸残基は任意選択的あり、さらなる実施形態において、Ｎ末端の６０個のアミノ酸残基およびＣ末端の６０個のアミノ酸残基の各々は任意選択的である。一実施形態では、これらの任意選択的なＮ末端および／またはＣ末端の６０個の残基は、配列同一性のパーセントを決定する際に含まれない。別の実施形態において、任意選択的な残基は、配列同一性のパーセントを決定する際に含まれ得る。
【００４１】
本明細書に開示されるように、本開示のポリペプチドによって隔離される生物活性ペプチドは、ラッチ領域内に配置される。ラッチ領域は、各ケージポリペプチドの配列において括弧によって示される。生物活性ペプチドは、ラッチ領域の残基を除去せずにラッチ領域に添加することができ、または最終的なポリペプチドを生成するためのケージスキャホルドラッチ領域における１つ以上（１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０以上）のアミノを置換し得る。したがって、ラッチ領域は、生物活性ペプチドの包含で大幅に改変され得る。一実施形態では、任意選択的な残基は、配列同一性パーセントの決定に含まれない。別の実施形態において、ラッチ領域残基は、配列同一性パーセントを決定する際に含まれ得る。さらなる実施形態では、任意選択的な残基およびラッチ残基の各々は、配列同一性パーセントの決定する際に含まれ得ない。
【００４２】
この第２の態様の一実施形態では、ポリペプチドは、第１の態様の任意の実施形態または実施形態の組み合わせによるポリペプチドであり、また、本明細書に開示されるリスト化された参照ケージポリペプチドのアミノ酸配列に対してその長さに沿って必要とされる４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の配列同一性を有する。別の実施形態では、ポリペプチドは、ケージポリペプチドのラッチ領域内に（または置換する）生物活性ペプチドをさらに含む。
【００４３】
ケージポリペプチドは、ケージスキャホルド（すなわち、生物活性ペプチドなし）であり得、例えば、配列番号１〜１７、２０３４〜１４３１７、ならびに表２、表３、および／または表４に列挙される特定のケージポリペプチドを参照し、またはケージスキャホルドポリペプチドのラッチ領域に隔離された生物活性ペプチド（ケージスキャホルドポリペプチドとの融合として存在する）をさらに含み得、本明細書でより詳細に説明される（例えば、配列番号１８〜４９、５１〜５２、５４〜５９、６１、６５、６７〜２０３３、２７０９４〜２７１１７、２７１２０〜２７１２５、および表２、３、および／または４に列挙される特定のケージポリペプチドを参照する）。特定の実施形態において、ケージポリペプチドは、表２、表３、および／または表４におけるケージポリペプチドのアミノ酸配列とそれらの長さに沿って、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の配列同一性を共有する。
【００４４】
別の実施形態において、ケージポリペプチドは、表３におけるケージポリペプチドのアミノ酸配列とそれらの長さに沿って、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の配列同一性を共有する。別の実施形態において、ケージポリペプチドは、表４におけるケージポリペプチドのアミノ酸配列とそれらの長さに沿って、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の配列同一性を共有する。これらの実施形態の各々の一実施形態では、これらの任意選択的なＮ末端および／またはＣ末端の６０個の残基は、配列同一性のパーセントを決定する際に含まれない。別の実施形態において、任意選択的な残基は、配列同一性のパーセントを決定する際に含まれ得る。
【００４５】
以下の実施例に開示されるように、本開示の例示的なケージおよびキーポリペプチドが特定され、突然変異分析が実施されている。さらに、同じ例示的なケージおよびキーポリペプチドから始まる異なる設計は、同じ意図された機能を維持しながら、異なるアミノ酸配列を生じる。様々な実施形態において、所与のアミノ酸は、同様な物理化学的特性を有する残基で置換することができ、例えば、１つの脂肪族残基を別のもの（互いにＩｌｅ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、またはＡｌａなど）に置換する、または、１つの極性残基を別のもの（ＬｙｓとＡｒｇ、ＧｌｕとＡｓｐ、またはＧｌｎとＡｓｎの間など）に置換することができる。他のそのような保存的置換、例えば類似の疎水性特性を有する領域全体の置換が知られている。保存的アミノ酸置換を含むポリペプチドは、所望の活性が保持されていることを確認するために、本明細書に記載のアッセイのいずれか１つで試験することができる。アミノ酸は、それらの側鎖の特性における類似性に従って分類することができる（Ａ．Ｌ．Ｌｅｈｎｉｎｇｅｒ，ｉｎ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，ｓｅｃｏｎｄ  ｅｄ．，ｐｐ．７３−７５，Ｗｏｒｔｈ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（１９７５））。（１）非極性：Ａｌａ（Ａ）、Ｖａｌ（Ｖ）、Ｌｅｕ（Ｌ）、Ｉｌｅ（Ｉ）、Ｐｒｏ（Ｐ）、Ｐｈｅ（Ｆ）、Ｔｒｐ（Ｗ）、Ｍｅｔ（Ｍ）、（２）非荷電極性：Ｇｌｙ（Ｇ）、Ｓｅｒ（Ｓ）、Ｔｈｒ（Ｔ）、Ｃｙｓ（Ｃ）、Ｔｙｒ（Ｙ）、Ａｓｎ（Ｎ）、Ｇｌｎ（Ｑ）、（３）酸性：Ａｓｐ（Ｄ）、Ｇｌｕ（Ｅ）、（４）塩基性：Ｌｙｓ（Ｋ）、Ａｒｇ（Ｒ）、Ｈｉｓ（Ｈ）。あるいは、天然由来残基は、共通の側鎖特性に基づいて分類することができる。（１）疎水性：ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、（２）中性親水性：Ｃｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、（３）酸性：Ａｓｐ、Ｇｌｕ、（４）塩基性：Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、（５）鎖の配向に影響する残基：Ｇｌｙ、Ｐｒｏ、（６）芳香族：Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ。非保存的置換では、これらのクラスの１つのメンバーを別のクラスに交換する必要がある。特定の保存的置換には、例えば、ＡｌａをＧｌｙにもしくはＳｅｒに、ＡｒｇをＬｙｓに、ＡｓｎをＧｌｎにもしくはＨｉｓに、ＡｓｐをＧｌｕに、ＣｙｓをＳｅｒに、ＧｌｎをＡｓｎに、ＧｌｕをＡｓｐに、ＧｌｙをＡｌａにもしくはＰｒｏに、ＨｉｓをＡｓｎにもしくはＧｌｎに、ＩｌｅをＬｅｕにもしくはＶａｌに、ＬｅｕをＩｌｅにもしくはＶａｌに、ＬｙｓをＡｒｇに、Ｇｌｎに、もしくはＧｌｕに、ＭｅｔをＬｅｕに、Ｔｙｒに、もしくはＩｌｅに、ＰｈｅをＭｅｔに、Ｌｅｕに、もしくはＴｙｒに、ＳｅｒをＴｈｒに、ＴｈｒをＳｅｒに、ＴｒｐをＴｙｒに、ＴｙｒをＴｒｐに、および／またはＰｈｅをＶａｌに、Ｉｌｅに、もしくはＬｅｕに、が含まれる。
【００４６】
例示的なケージポリペプチド（配列番号９２〜１４３１７、２７０９４〜２７１１７、２７１２０〜２７１２５、２７，７２８〜２７３２１、および表２、表３、および／または表４に列挙されるケージポリペプチドも参照）：
１）例示的な参照ケージポリペプチド：ラッチ領域は括弧［］で示される
●６Ｈｉｓ−ＭＢＰ−ＴＥＶ、６Ｈｉｓ−ＴＥＶ、およびフレキシブルリンカー配列は下線で示される
●融合機能ドメイン（ＤＡＲＰｉｎ、スプリットインテインの構成要素、および蛍光タンパク質）は太字で示される
●機能性ペプチドはイタリック体に下線で示される
●応答性を調整するために任意のアミノ酸に変異されている例示的な位置は、太字に下線で示される。これらの位置は例示的なものであり、応答性を調整することができる残基の完全なリストではない。
●応答性を調整するために削除することができるＣ末端配列は括弧内に含まれる。括弧内に含まれる１位（１）からすべての残基までの範囲は除去され得、Ｃ末端から始まり、そこで連続する残基を除去する。
●括弧内のすべての配列は任意選択的である
＞ＳＢ７６Ｌ（配列番号１）
【化１】
2021530475.tif 000002
＞ＳＢ７６Ｌ＿１７（配列番号２）
【化２】
2021530475.tif 000003
＞ＳＢ７６Ｌ＿１８（配列番号３）
【化３】
2021530475.tif 000004
＞ＬＯＣＫＲ＿ｅｘｔｅｎｄ５（配列番号４）
【化４】
2021530475.tif 000005
＞ＬＯＣＫＲ＿ｅｘｔｅｎｄ９（配列番号５）
【化５】
2021530475.tif 000006
＞ＬＯＣＫＲ＿ｅｘｔｅｎｄ１８（配列番号６）
【化６】
2021530475.tif 000007
＞ＬＯＣＫＲｂ（配列番号７）
【化７】
2021530475.tif 000008
＞ＬＯＣＫＲｃ（配列番号８）
【化８】
2021530475.tif 000009
＞ＬＯＣＫＲｄ（配列番号９）
【化９】
2021530475.tif 000010
＞ＬＯＣＫＲｅ（配列番号１０）
【化１０】
2021530475.tif 000011
＞ＬＯＣＫＲｆ（配列番号１１）
【化１１】
2021530475.tif 000012
＞ｍｉｎｉＬＯＣＫＲａ＿１（配列番号１２）
【化１２】
2021530475.tif 000013
＞ｍｉｎｉＬＯＣＫＲａ＿２（配列番号１３）
【化１３】
2021530475.tif 000014
＞ｍｉｎｉＬＯＣＫＲｃ＿１（配列番号１４）
【化１４】
2021530475.tif 000015
＞ｍｉｎｉＬＯＣＫＲｃ＿２（配列番号１５）
【化１５】
2021530475.tif 000016
＞１ｆｉｘ−ｓｈｏｒｔ−ｎｏＢｉｍ−ｔ０（配列番号１６）
【化１６】
2021530475.tif 000017
＞１ｆｉｘ−ｓｈｏｒｔ−ｎｏＢｉｍ（ＡＹＹＡ）−ｔ０（配列番号１７）
【化１７】
2021530475.tif 000018
「（３）ラッチにエンコードされた生物活性ペプチドを有する機能的ＬＯＣＫＲケージの設計」、
＞ａＢｃｌ２ＬＯＣＫＲ（配列番号１８）
【化１８】
2021530475.tif 000019
＞ｐＢｉｍＬＯＣＫＲ（配列番号１９）
【化１９】
2021530475.tif 000020
＞ＢｉｍＬＯＣＫＲ＿ｅｘｔｅｎｄ５（配列番号２０）
【化２０】
2021530475.tif 000021
＞ＢｉｍＬＯＣＫＲ＿ｅｘｔｅｎｄ９（配列番号２１）
【化２１】
2021530475.tif 000022
＞ＢｉｍＬＯＣＫＲ＿ｅｘｔｅｎｄ１８（配列番号２２）
【化２２】
2021530475.tif 000023
＞ＢｉｍＬＯＣＫＲｂ（配列番号２３）
【化２３】
2021530475.tif 000024
＞ＢｉｍＬＯＣＫＲｃ（配列番号２４）
【化２４】
2021530475.tif 000025
＞ＢｉｍＬＯＣＫＲｄ（配列番号２５）
【化２５】
2021530475.tif 000026
＞ＳｔｒｅｐＬＯＣＫＲａ＿３００（配列番号２６）
【化２６】
2021530475.tif 000027
＞ｓｔｒｅｐＬＯＣＫＲａ＿３０６（配列番号２７）
【化２７】
2021530475.tif 000028
＞ｓｔｒｅｐＬＯＣＫＲａ＿３０９（配列番号２８）
【化２８】
2021530475.tif 000029
＞ｓｔｒｅｐＬＯＣＫＲａ＿３１２（配列番号２９）
【化２９】
2021530475.tif 000030
＞ｓｔｒｅｐＬＯＣＫＲａ＿３１３（配列番号３０）
【化３０】
2021530475.tif 000031
＞ｓｔｒｅｐＬＯＣＫＲａ＿３１７（配列番号３１）
【化３１】
2021530475.tif 000032
＞ｓｔｒｅｐＬＯＣＫＲａ＿３２０（配列番号３２）
【化３２】
2021530475.tif 000033
＞ｓｔｒｅｐＬＯＣＫＲａ＿３２３（配列番号３３）
【化３３】
2021530475.tif 000034
＞ｓｔｒｅｐＬＯＣＫＲａ＿３２９（配列番号３４）
【化３４】
2021530475.tif 000035
＞ＳＢ１３＿ＬＯＣＫＲ（配列番号３５）
【化３５】
2021530475.tif 000036
＞ＺＣＸ１２＿ＬＯＣＫＲ（配列番号３６）
【化３６】
2021530475.tif 000037
＞ＳＢ１３＿ＬＯＣＫＲ＿ｅｘｔｅｎｄ１８（配列番号３７）
【化３７】
2021530475.tif 000038
＞ＺＣＸ１２＿ＬＯＣＫＲ＿ｅｘｔｅｎｄ１８（配列番号３８）
【化３８】
2021530475.tif 000039
＞ｆｒｅｔＬＯＣＫＲａ（配列番号３９）
【化３９】
2021530475.tif 000040
＞ｆｒｅｔＬＯＣＫＲｂ（配列番号４０）
【化４０】
2021530475.tif 000041
＞ｆｒｅｔＬＯＣＫＲｃ（配列番号４１）
【化４１】
2021530475.tif 000042
＞ｆｒｅｔＬＯＣＫＲｄ（配列番号４２）
【化４２】
2021530475.tif 000043
＞ｔｅｖＬＯＣＫＲ（配列番号４３）
【化４３】
2021530475.tif 000044
＞ｓｐｙＬＯＣＫＲ（配列番号４４）
【化４４】
2021530475.tif 000045
＞１＿ｎｅｓＬＯＣＫＲ（配列番号４５）
【化４５】
2021530475.tif 000046
＞２＿ｎｅｓＬＯＣＫＲ（配列番号４６）
【化４６】
2021530475.tif 000047
＞３＿ｎｅｓＬＯＣＫＲ（配列番号４７）
【化４７】
2021530475.tif 000048
＞ｎｌｓＬＯＣＫＲ（配列番号４８）
【化４８】
2021530475.tif 000049
＞ｅｚｈ２ＬＯＣＫＲ（配列番号４９）
【化４９】
2021530475.tif 000050
＞１ｆｉｘ＿ＶＭＡｃ＿Ｃ＿ＢＩＭｌａｔｃｈｔ９（配列番号５１）
【化５０】
2021530475.tif 000051
＞ｓｆＧＦＰ＿ＶＭＡｎ＿１ｆｉｘ＿ＢＩＭ＿ｔ０＿ｌａｔｃｈ（配列番号５２）
【化５１】
2021530475.tif 000052
ＢｉｍおよびＧＦＰ１１（すなわち：生物活性ペプチド）をエンコードする非対称化機能性ケージ
（６Ｈｉｓ−ＭＢＰ−ＴＥＶ、６Ｈｉｓ−ＴＥＶ、およびフレキシブルリンカー配列は下線で示される）
（共局在化ドメインは太字で示される）
（機能性ペプチドはイタリック体に下線で示される）
（応答性を調整するために任意のアミノ酸に変異させることができる位置は、太字に下線で示される）
（応答性を調整するために削除することができるＣ末端配列はイタリック体で示される）
（括弧内のすべての配列は任意選択的である）
＞１ｆｉｘ−ｌｏｎｇ−ＢＩＭ−ｔ０（配列番号５４）
【化５２】
2021530475.tif 000053
＞１ｆｉｘ−ｌｏｎｇ−ＧＦＰ−ｔ０（配列番号５５）
【化５３】
2021530475.tif 000054
＞１ｆｉｘ−ｓｈｏｒｔ−ＢＩＭ−ｔ０（配列番号５６）
【化５４】
2021530475.tif 000055
＞１ｆｉｘ−ｓｈｏｒｔ−ＧＦＰ−ｔ０（配列番号５７）
【化５５】
2021530475.tif 000056
＞Ｓｐｙｃａｔｃｈｅｒ−１ｆｉｘ−ｌｏｎｇ−ＧＦＰ−ｔ０（配列番号５８）
【化５６】
2021530475.tif 000057
＞Ｓｐｙｃａｔｃｈｅｒ−１ｆｉｘ−ｓｈｏｒｔ−ＧＦＰ−ｔ０（配列番号５９）
【化５７】
2021530475.tif 000058
＞１ｆｉｘ−ｌａｔｃｈ＿Ｍａｄ１ＳＩＤ＿ｔ０＿１（配列番号６１）
【化５８】
2021530475.tif 000059
＞１ｆｉｘ−ｌａｔｃｈ＿Ｍａｄ１ＳＩＤ＿Ｔ０＿２（配列番号６５）
【化５９】
2021530475.tif 000060
＞１ｆｉｘ−ｓｈｏｒｔ−Ｂｉｍ−ｔ０−ｒｅｌｏｏｐｅｄ（配列番号６７）
【化６０】
2021530475.tif 000061
＞１ｆｉｘ−ｓｈｏｒｔ−ｓｐｙｔａｇ−ｔ０＿２（配列番号６８）
【化６１】
2021530475.tif 000062
＞１ｆｉｘ−ｓｈｏｒｔ−ｓｐｙｔａｇ−ｔ０＿８（配列番号６９）
【化６２】
2021530475.tif 000063
＞１ｆｉｘ−ｓｈｏｒｔ−ＴＥＶ−ｔ０＿１（配列番号７０）
【化６３】
2021530475.tif 000064
＞１ｆｉｘ−ｓｈｏｒｔ−ＴＥＶ−ｔ０＿６（配列番号７１）
【化６４】
2021530475.tif 000065
＞１ｆｉｘ−ｓｈｏｒｔ−ｎａｎｏＢｉｔ−ｔ０＿１（配列番号７２）
【化６５】
2021530475.tif 000066
＞１ｆｉｘ−ｓｈｏｒｔ−ｎａｎｏＢｉｔ−ｔ０＿３（配列番号７３）
【化６６】
2021530475.tif 000067
＞１ｆｉｘ−ｓｈｏｒｔ−ＲＨＩＭ−ｔ０＿８（配列番号７４）
【化６７】
2021530475.tif 000068
＞１ｆｉｘ−ｓｈｏｒｔ−ＲＨＩＭ−ｔ０＿１９（配列番号７５）
【化６８】
2021530475.tif 000069
＞１ｆｉｘ−ｓｈｏｒｔ−ＲＨＩＭ−ｔ０＿２２（配列番号７６）
【化６９】
2021530475.tif 000070
＞１ｆｉｘ−ｓｈｏｒｔ−ｇｃｎ４−ｔ０＿４（配列番号７７）
【化７０】
2021530475.tif 000071
＞１ｆｉｘ−ｓｈｏｒｔ−ｃｃＤｉ−ｔ０＿６（配列番号７８）
【化７１】
2021530475.tif 000072
＞１ｆｉｘ−ｓｈｏｒｔ−ｃｃ−ａ−ｔ０＿６（配列番号７９）
【化７２】
2021530475.tif 000073
＞１ｆｉｘ−ｓｈｏｒｔ−ｃｃ−ｂ−ｔ０＿６（配列番号８０）
【化７３】
2021530475.tif 000074
ＳＴＲＥＰＩＩ−ＬＯＣＫＲ機能ケージ：
＞ＳＴＲＥＰＩＩ−２ｐｌｕｓ１＿ＬＯＣＫ＿１（配列番号８１）
【化７４】
2021530475.tif 000075
＞ＳＴＲＥＰＩＩ−２ｐｌｕｓ１＿ＬＯＣＫ＿２（配列番号８２）
【化７５】
2021530475.tif 000076
＞ＳＴＲＥＰＩＩ−２ｐｌｕｓ１＿ＬＯＣＫ＿３（配列番号８３）
【化７６】
2021530475.tif 000077
＞ＳＴＲＥＰＩＩ−２ｐｌｕｓ１＿ＬＯＣＫ＿４Ｃ（配列番号８４）
【化７７】
2021530475.tif 000078
＞ＳＴＲＥＰＩＩ−２ｐｌｕｓ１＿ＬＯＣＫ＿４Ｎ（配列番号８５）
【化７８】
2021530475.tif 000079
＞ＳＴＲＥＰＩＩ−３ｐｌｕｓ１＿ＬＯＣＫ＿１（配列番号８６）
【化７９】
2021530475.tif 000080
＞ＳＴＲＥＰＩＩ−３ｐｌｕｓ１＿ＬＯＣＫ＿２（配列番号８７）
【化８０】
2021530475.tif 000081
＞ＳＴＲＥＰＩＩ−３ｐｌｕｓ１＿ＬＯＣＫ＿３（配列番号８８）
【化８１】
2021530475.tif 000082
＞ＳＴＲＥＰＩＩ−３ｐｌｕｓ１＿ＬＯＣＫ＿４（配列番号８９）
【化８２】
2021530475.tif 000083
＞ＳＴＲＥＰＩＩ−３ｐｌｕｓ１＿ＬＯＣＫ＿３−再ループ（配列番号９０）
【化８３】
2021530475.tif 000084
＞ＳＴＲＥＰＩＩ−２ｐｌｕｓ１＿ＬＯＣＫ＿３−再ループ（配列番号９１）
【化８４】
2021530475.tif 000085
＞ＢｉｍＬＯＣＫＲ＿ａ＿ｓｈｏｒｔ＿Ｎｔｅｒｍ（配列番号２７０９４）
【化８５】
2021530475.tif 000086
＞ＢｉｍＬＯＣＫＲ＿ｇ（配列番号２７０９５）
【化８６】
2021530475.tif 000087
＞ｒｅｌｏｏｐ＿ｓｔｒｅｐＬＯＣＫＲｈ（配列番号２７０９６）
【化８７】
2021530475.tif 000088
＞ｒｅｌｏｏｐ＿ｓｔｒｅｐＬＯＣＫＲｉ（配列番号２７０９７）
【化８８】
2021530475.tif 000089
＞ｓｐｙＬＯＣＫＲａ＿２（配列番号２７０９８）
【化８９】
2021530475.tif 000090
＞ｓｐｙＬＯＣＫＲａ＿８（配列番号２７０９９）
【化９０】
2021530475.tif 000091
＞ｔｅｖＬＯＣＫＲａ＿１（配列番号２７１００）
【化９１】
2021530475.tif 000092
＞ｔｅｖＬＯＣＫＲａ＿６（配列番号２７１０１）
【化９２】
2021530475.tif 000093
＞ｌｕｃＬＯＣＫＲａ＿１（配列番号２７１０２）
【化９３】
2021530475.tif 000094
＞ｌｕｃＬＯＣＫＲａ＿３（配列番号２７１０３）
【化９４】
2021530475.tif 000095
＞ｒｈｉｍＬＯＣＫＲａ＿８（配列番号２７１０４）
【化９５】
2021530475.tif 000096
＞ｒｈｉｍＬＯＣＫＲａ＿１９（配列番号２７１０５）
【化９６】
2021530475.tif 000097
＞ｒｈｉｍＬＯＣＫＲａ＿２２（配列番号２７１０６）
【化９７】
2021530475.tif 000098
＞ｇｃｎ４ＬＯＣＫＲａ＿４（配列番号２７１０７）
【化９８】
2021530475.tif 000099
＞ｃｃ−ＤｉＬＯＣＫＲａ＿６（配列番号２７１０８）
【化９９】
2021530475.tif 000100
＞ｃｃ−ａＬＯＣＫＲａ＿６（配列番号２７１０９）
【化１００】
2021530475.tif 000101
＞ｃｃ−ｂＬＯＣＫＲａ＿６（配列番号２７１１０）
【化１０１】
2021530475.tif 000102
＞ｔｅｖ−ｓｐｙＬＯＣＫＲａ＿ｓｈｏｒｔ＿４０（配列番号２７１１１）
【化１０２】
2021530475.tif 000103
＞ｔｅｖ−ｓｐｙＬＯＣＫＲａ＿ｓｈｏｒｔ＿５７（配列番号２７１１２）
【化１０３】
2021530475.tif 000104
＞ｔｅｖ−ｓｐｙＬＯＣＫＲａ＿ｓｈｏｒｔ＿６３（配列番号２７１１３）
【化１０４】
2021530475.tif 000105
＞ｔｅｖ−ｓｐｙＬＯＣＫＲａ＿２９（配列番号２７１１４）
【化１０５】
2021530475.tif 000106
＞ｔｅｖ−ｓｐｙＬＯＣＫＲａ＿３２（配列番号２７１１５）
【化１０６】
2021530475.tif 000107
＞Ｂｉｍ−ｆｒｅｔＬＯＣＫＲａ＿ｓｈｏｒｔ（配列番号２７１１６）
【化１０７】
2021530475.tif 000108
＞ｆｒｅｔＬＯＣＫＲａ＿ｓｈｏｒｔ（配列番号２７１１７）
【化１０８】
2021530475.tif 000109
Ｅ１８＿ＫＲＡＢ＿ｆｕｌｌ（配列番号２７１２０）
【化１０９】
2021530475.tif 000110
Ｅ１８＿ＫＲＡＢ＿Ｎ１３ｔ（配列番号２７１２１）
【化１１０】
2021530475.tif 000111
Ｅ１８＿ＫＲＡＢ＿Ｃ９ｔ（配列番号２７１２２）
【化１１１】
2021530475.tif 000112
Ｅ１８＿ＫＲＡＢ＿Ｃｔｅｒｍ１（配列番号２７１２３）
【化１１２】
2021530475.tif 000113
Ｅ１８＿ＫＲＡＢ＿Ｃｔｅｒｍ２（配列番号２７１２４）
【化１１３】
2021530475.tif 000114
Ｅ１８＿ＫＲＡＢ＿Ｃｔｅｒｍ３（配列番号２７１２５）
【化１１４】
2021530475.tif 000115
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｃａｇｅ＿Ｎｔｅｒｍ＿ＧＦＰ１１＿６６８（配列番号２７，２７８）
ＤＥＡＫＥＬＬＤＥＩＲＫＡＶＫＥＳＥＤＲＬＥＫＬＬＲＤＹＥＫＥＬＲＲＤＨＭＶＬＨＥＹＶＮＡＡＧＩＴＬＥＥＬＲＲＧＳＬＤＡＫＥＬＬＫＴＬＥＤＬＬＲＥＶＬＥＶＡＲＲＶＶＥＴＬＫＥＬＮＲＲＶＬＥＶＶＲＥＤＩＥＡＮＥＲＬＬＲＲＶＬＤＴＬＲＲＧＧＶＤＥＲＲＩＫＤＬＥＲＬＩＲＥＳＬＫＫＡＥＥＶＬＲＥＡＡＥＫＳＲＥＩＶＤＥＩＲＥＶＬＫＲＡＤＥＡＬＫＲＩＩＫＫＩＲＥＴＲＧＡＤＡＬＳＲＬＬＥＥＬＬＲＶＶＤＤＬＩＲＶＬＫＥＬＩＤＫＳＲＫＶＩＥＥＬＬＥＬＬＫＲＩＮＥＥＮＬＫＶＬＡＥＩＩＫ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｃａｇｅ＿Ｃｔｅｒｍ＿ＧＦＰ１１＿６６８（配列番号２７，２７９）
ＤＥＡＫＥＬＬＤＥＩＲＫＡＶＫＥＳＥＤＲＬＥＫＬＬＲＤＹＥＫＥＬＲＲＬＥＫＥＬＲＤＬＫＲＲＩＥＥＫＬＥＥＬＲＲＧＳＬＤＡＫＥＬＬＫＴＬＥＤＬＬＲＥＶＬＥＶＡＲＲＶＶＥＴＬＫＥＬＮＲＲＶＬＥＶＶＲＥＤＩＥＲＮＥＲＬＬＲＲＶＬＤＴＬＲＲＧＧＶＤＥＲＲＩＫＤＬＥＲＬＩＲＥＳＬＫＫＡＥＥＶＬＲＥＡＡＥＫＳＲＥＩＶＤＥＩＲＥＶＬＫＲＡＤＥＡＬＫＲＩＩＫＫＩＲＥＴＲＧＡＤＡＤＨＭＶＬＨＥＹＶＮＡＡＧＩＴＩＲＶＬＫＥＬＩＤＫＳＲＫＶＩＥＥＬＬＥＬＬＫＲＩＮＥＥＮＬＫＶＬＡＥＩＩＫ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｃａｇｅ＿Ｃｔｅｒｍ＿ＧＦＰ１１＿６６８（配列番号２７，２８０）
ＤＥＡＫＥＬＬＤＥＩＲＫＡＶＫＥＳＥＤＲＬＥＫＬＬＲＤＹＥＫＥＬＲＲＬＥＫＥＬＲＤＬＫＲＲＩＥＥＫＬＥＥＬＲＲＧＳＬＤＡＫＥＬＬＫＴＬＥＤＬＬＲＥＶＬＥＶＡＲＲＶＶＥＴＬＫＥＬＮＲＲＶＬＥＶＶＲＥＤＩＥＲＮＥＲＬＬＲＲＶＬＤＴＬＲＲＧＧＶＤＥＲＲＩＫＤＬＥＲＬＩＲＥＳＬＫＫＡＥＥＶＬＲＥＡＡＥＫＳＲＥＩＶＤＥＩＲＥＶＬＫＲＡＤＥＡＬＫＲＩＩＫＫＩＲＥＴＲＧＡＤＡＲＤＨＭＶＬＨＥＹＶＮＡＡＧＩＴＲＶＬＫＥＬＩＤＫＳＲＫＶＩＥＥＬＬＥＬＬＫＲＩＮＥＥＮＬＫＶＬＡＥＩＩＫ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｃａｇｅ＿Ｃｔｅｒｍ＿ＧＦＰ１１＿６６８（配列番号２７，２８１）
ＤＥＡＫＥＬＬＤＥＩＲＫＡＶＫＥＳＥＤＲＬＥＫＬＬＲＤＹＥＫＥＬＲＲＬＥＫＥＬＲＤＬＫＲＲＩＥＥＫＬＥＥＬＲＲＧＳＬＤＡＫＥＬＬＫＴＬＥＤＬＬＲＥＶＬＥＶＡＲＲＶＶＥＴＬＫＥＬＮＲＲＶＬＥＶＶＲＥＤＩＥＲＮＥＲＬＬＲＲＶＬＤＴＬＲＲＧＧＶＤＥＲＲＩＫＤＬＥＲＬＩＲＥＳＬＫＫＡＥＥＶＬＲＥＡＡＥＫＳＲＥＩＶＤＥＩＲＥＶＬＫＲＡＤＥＡＬＫＲＩＩＫＫＩＲＥＴＲＧＡＤＡＬＳＲＤＨＭＶＬＨＥＹＶＮＡＡＧＩＴＬＫＥＬＩＤＫＳＲＫＶＩＥＥＬＬＥＬＬＫＲＩＮＥＥＮＬＫＶＬＡＥＩＩＫ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｃａｇｅ＿Ｃｔｅｒｍ＿ＧＦＰ１１＿６６８（配列番号２７，２８２）
ＤＥＡＫＥＬＬＤＥＩＲＫＡＶＫＥＳＥＤＲＬＥＫＬＬＲＤＹＥＫＥＬＲＲＬＥＫＥＬＲＤＬＫＲＲＩＥＥＫＬＥＥＬＲＲＧＳＬＤＡＫＥＬＬＫＴＬＥＤＬＬＲＥＶＬＥＶＡＲＲＶＶＥＴＬＫＥＬＮＲＲＶＬＥＶＶＲＥＤＩＥＲＮＥＲＬＬＲＲＶＬＤＴＬＲＲＧＧＶＤＥＲＲＩＫＤＬＥＲＬＩＲＥＳＬＫＫＡＥＥＶＬＲＥＡＡＥＫＳＲＥＩＶＤＥＩＲＥＶＬＫＲＡＤＥＡＬＫＲＩＩＫＫＩＲＤＨＭＶＬＨＥＹＶＮＡＡＧＩＴＬＲＶＶＤＤＬＩＲＶＬＫＥＬＩＤＫＳＲＫＶＩＥＥＬＬＥＬＬＫＲＩＮＥＥＮＬＫＶＬＡＥＩＩＫ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｃａｇｅ＿Ｎｔｅｒｍ＿ＧＦＰ１１＿６６９（配列番号２７，２８３）
ＳＥＫＥＫＬＬＫＥＳＥＥＥＶＲＲＬＲＲＴＬＥＥＬＬＲＫＹＲＥＶＬＥＲＬＲＤＨＭＶＬＨＥＹＶＮＡＡＧＩＴＲＬＫＥＶＬＤＲＳＧＬＤＩＤＴＩＩＫＥＶＥＤＬＬＫＴＶＬＤＲＬＲＥＬＬＤＫＩＡＲＬＴＫＥＡＩＥＶＶＲＥＩＩＥＲＩＶＲＨＡＥＲＶＫＤＥＬＲＫＧＧＡＤＫＲＫＬＤＲＶＤＲＬＩＫＥＮＴＲＨＬＫＥＩＬＤＲＩＥＤＬＶＲＲＳＥＫＫＬＲＤＩＩＲＥＶＲＲＬＩＥＥＬＲＫＫＡＥＥＩＫＫＤＰＤＥＲＬＶＫＴＬＩＥＤＶＥＲＶＩＫＲＩＬＥＬＩＴＲＶＡＥＤＮＥＲＶＬＥＲＩＩＲＥＬＴＤＮＬＥＲＨＬＫＩＶＲＥＩＶＫ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｃａｇｅ＿Ｎｔｅｒｍ＿ＧＦＰ１１＿６７０（配列番号２７，２８４）
ＳＥＫＥＤＬＡＲＫＬＲＫＬＶＥＥＬＴＲＥＹＥＥＬＶＫＫＬＥＲＬＩＥＥＩＥＲＤＨＭＶＬＨＥＹＶＮＡＡＧＩＴＩＳＥＥＶＲＫＬＧＴＤＥＲＶＬＫＲＬＬＥＲＬＲＲＩＩＥＥＤＨＥＬＮＴＥＬＬＫＲＬＬＤＬＬＫＥＩＬＤＴＳＲＥＬＬＫＲＬＬＤＩＬＲＫＧＶＲＤＥＥＶＬＲＤＬＥＲＴＬＲＥＶＬＥＥＮＥＲＡＩＥＥＡＥＲＶＬＲＫＶＬＥＤＳＥＲＡＶＲＤＡＲＲＶＬＡＥＶＤＫＳＰＴＧＤＥＡＬＲＫＬＶＥＬＬＶＥＶＬＲＲＬＩＲＶＮＲＥＬＶＫＬＬＲＥＶＬＥＲＬＬＲＩＬＲＥＳＶＫＫＬＫＲＬＩＥＫＶＩＫＤＡＴ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｃａｇｅ＿Ｃｔｅｒｍ＿ＧＦＰ１１＿６７０（配列番号２７，２８５）
ＳＥＫＥＤＬＡＲＫＬＲＫＬＶＥＥＬＴＲＥＹＥＥＬＶＫＫＬＥＲＬＩＥＥＩＥＫＶＳＥＥＳＶＲＫＬＥＫＬＬＲＥＩＳＥＥＶＲＫＬＧＴＤＥＲＶＬＫＲＬＬＥＲＬＲＲＩＩＥＥＤＨＥＬＮＴＥＬＬＫＲＬＬＤＬＬＫＥＩＬＤＴＳＲＥＬＬＫＲＬＬＤＩＬＲＫＧＶＲＤＥＥＶＬＲＤＬＥＲＴＬＲＥＶＬＥＥＮＥＲＡＩＥＥＡＥＲＶＬＲＫＶＬＥＤＳＥＲＡＶＲＤＡＲＲＶＬＡＥＶＤＫＳＰＴＧＤＥＡＲＤＨＭＶＬＨＥＹＶＮＡＡＧＩＴＲＶＮＲＥＬＶＫＬＬＲＥＶＬＥＲＬＬＲＩＬＲＥＳＶＫＫＬＫＲＬＩＥＫＶＩＫＤＡＴ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｃａｇｅ＿Ｃｔｅｒｍ＿ＧＦＰ１１＿６７０（配列番号２７，２８６）
ＳＥＫＥＤＬＡＲＫＬＲＫＬＶＥＥＬＴＲＥＹＥＥＬＶＫＫＬＥＲＬＩＥＥＩＥＫＶＳＥＥＳＶＲＫＬＥＫＬＬＲＥＩＳＥＥＶＲＫＬＧＴＤＥＲＶＬＫＲＬＬＥＲＬＲＲＩＩＥＥＤＨＥＬＮＴＥＬＬＫＲＬＬＤＬＬＫＥＩＬＤＴＳＲＥＬＬＫＲＬＬＤＩＬＲＫＧＶＲＤＥＥＶＬＲＤＬＥＲＴＬＲＥＶＬＥＥＮＥＲＡＩＥＥＡＥＲＶＬＲＫＶＬＥＤＳＥＲＡＶＲＤＡＲＲＶＬＡＥＶＤＫＳＰＴＧＤＥＲＤＨＭＶＬＨＥＹＶＮＡＡＧＩＴＩＲＶＮＲＥＬＶＫＬＬＲＥＶＬＥＲＬＬＲＩＬＲＥＳＶＫＫＬＫＲＬＩＥＫＶＩＫＤＡＴ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｃａｇｅ＿Ｃｔｅｒｍ＿ＧＦＰ１１＿６７０（配列番号２７，２８７）
ＳＥＫＥＤＬＡＲＫＬＲＫＬＶＥＥＬＴＲＥＹＥＥＬＶＫＫＬＥＲＬＩＥＥＩＥＫＶＳＥＥＳＶＲＫＬＥＫＬＬＲＥＩＳＥＥＶＲＫＬＧＴＤＥＲＶＬＫＲＬＬＥＲＬＲＲＩＩＥＥＤＨＥＬＮＴＥＬＬＫＲＬＬＤＬＬＫＥＩＬＤＴＳＲＥＬＬＫＲＬＬＤＩＬＲＫＧＶＲＤＥＥＶＬＲＤＬＥＲＴＬＲＥＶＬＥＥＮＥＲＡＩＥＥＡＥＲＶＬＲＫＶＬＥＤＳＥＲＡＶＲＤＡＲＲＶＬＡＥＶＤＫＳＰＴＧＲＤＨＭＶＬＨＥＹＶＮＡＡＧＩＴＲＬＩＲＶＮＲＥＬＶＫＬＬＲＥＶＬＥＲＬＬＲＩＬＲＥＳＶＫＫＬＫＲＬＩＥＫＶＩＫＤＡＴ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｃａｇｅ＿Ｎｔｅｒｍ＿ＧＦＰ１１＿６７０（配列番号２７，２８８）
ＳＥＫＥＤＬＡＲＫＬＲＫＬＶＥＥＬＴＲＥＹＥＥＬＶＫＫＬＥＲＬＩＥＥＩＲＤＨＭＶＬＨＥＹＶＮＡＡＧＩＴＥＩＳＥＥＶＲＫＬＧＴＤＥＲＶＬＫＲＬＬＥＲＬＲＲＩＩＥＥＤＨＥＬＮＴＥＬＬＫＲＬＬＤＬＬＫＥＩＬＤＴＳＲＥＬＬＫＲＬＬＤＩＬＲＫＧＶＲＤＥＥＶＬＲＤＬＥＲＴＬＲＥＶＬＥＥＮＥＲＡＩＥＥＡＥＲＶＬＲＫＶＬＥＤＳＥＲＡＶＲＤＡＲＲＶＬＡＥＶＤＫＳＰＴＧＤＥＡＬＲＫＬＶＥＬＬＶＥＶＬＲＲＬＩＲＶＮＲＥＬＶＫＬＬＲＥＶＬＥＲＬＬＲＩＬＲＥＳＶＫＫＬＫＲＬＩＥＫＶＩＫＤＡＴ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｃａｇｅ＿Ｃｔｅｒｍ＿ＧＦＰ１１＿６７０（配列番号２７，２８９）
ＳＥＫＥＤＬＡＲＫＬＲＫＬＶＥＥＬＴＲＥＹＥＥＬＶＫＫＬＥＲＬＩＥＥＩＥＫＶＳＥＥＳＶＲＫＬＥＫＬＬＲＥＩＳＥＥＶＲＫＬＧＴＤＥＲＶＬＫＲＬＬＥＲＬＲＲＩＩＥＥＤＨＥＬＮＴＥＬＬＫＲＬＬＤＬＬＫＥＩＬＤＴＳＲＥＬＬＫＲＬＬＤＩＬＲＫＧＶＲＤＥＥＶＬＲＤＬＥＲＴＬＲＥＶＬＥＥＮＥＲＡＩＥＥＡＥＲＶＬＲＫＶＬＥＤＳＥＲＡＶＲＤＡＲＲＶＬＡＥＶＤＫＳＰＴＲＤＨＭＶＬＨＥＹＶＮＡＡＧＩＴＲＲＬＩＲＶＮＲＥＬＶＫＬＬＲＥＶＬＥＲＬＬＲＩＬＲＥＳＶＫＫＬＫＲＬＩＥＫＶＩＫＤＡＴ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｃａｇｅ＿Ｎｔｅｒｍ＿ＧＦＰ１１＿６７０（配列番号２７，２９０）
ＳＥＫＥＤＬＡＲＫＬＲＫＬＶＥＥＬＴＲＥＹＥＥＬＶＫＫＬＥＲＬＩＥＲＤＨＭＶＬＨＥＹＶＮＡＡＧＩＴＬＲＥＩＳＥＥＶＲＫＬＧＴＤＥＲＶＬＫＲＬＬＥＲＬＲＲＩＩＥＥＤＨＥＬＮＴＥＬＬＫＲＬＬＤＬＬＫＥＩＬＤＴＳＲＥＬＬＫＲＬＬＤＩＬＲＫＧＶＲＤＥＥＶＬＲＤＬＥＲＴＬＲＥＶＬＥＥＮＥＲＡＩＥＥＡＥＲＶＬＲＫＶＬＥＤＳＥＲＡＶＲＤＡＲＲＶＬＡＥＶＤＫＳＰＴＧＤＥＡＬＲＫＬＶＥＬＬＶＥＶＬＲＲＬＩＲＶＮＲＥＬＶＫＬＬＲＥＶＬＥＲＬＬＲＩＬＲＥＳＶＫＫＬＫＲＬＩＥＫＶＩＫＤＡＴ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｃａｇｅ＿Ｎｔｅｒｍ＿ＧＦＰ１１＿６７０（配列番号２７，２９１）
ＳＥＫＥＤＬＡＲＫＬＲＫＬＶＥＥＬＴＲＥＹＥＥＬＶＫＫＬＥＲＬＩＥＥＩＥＫＲＤＨＭＶＬＨＥＹＶＮＡＡＧＩＴＳＥＥＶＲＫＬＧＴＤＥＲＶＬＫＲＬＬＥＲＬＲＲＩＩＥＥＤＨＥＬＮＴＥＬＬＫＲＬＬＤＬＬＫＥＩＬＤＴＳＲＥＬＬＫＲＬＬＤＩＬＲＫＧＶＲＤＥＥＶＬＲＤＬＥＲＴＬＲＥＶＬＥＥＮＥＲＡＩＥＥＡＥＲＶＬＲＫＶＬＥＤＳＥＲＡＶＲＤＡＲＲＶＬＡＥＶＤＫＳＰＴＧＤＥＡＬＲＫＬＶＥＬＬＶＥＶＬＲＲＬＩＲＶＮＲＥＬＶＫＬＬＲＥＶＬＥＲＬＬＲＩＬＲＥＳＶＫＫＬＫＲＬＩＥＫＶＩＫＤＡＴ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｃａｇｅ＿Ｎｔｅｒｍ＿ＧＦＰ１１＿６７０（配列番号２７，２９２）
ＳＥＫＥＤＬＡＲＫＬＲＫＬＶＥＥＬＴＲＥＹＥＥＬＶＫＫＬＥＲＬＩＥＥＩＥＫＶＳＥＥＳＲＤＨＭＶＬＨＥＹＶＮＡＡＧＩＴＫＬＧＴＤＥＲＶＬＫＲＬＬＥＲＬＲＲＩＩＥＥＤＨＥＬＮＴＥＬＬＫＲＬＬＤＬＬＫＥＩＬＤＴＳＲＥＬＬＫＲＬＬＤＩＬＲＫＧＶＲＤＥＥＶＬＲＤＬＥＲＴＬＲＥＶＬＥＥＮＥＲＡＩＥＥＡＥＲＶＬＲＫＶＬＥＤＳＥＲＡＶＲＤＡＲＲＶＬＡＥＶＤＫＳＰＴＧＤＥＡＬＲＫＬＶＥＬＬＶＥＶＬＲＲＬＩＲＶＮＲＥＬＶＫＬＬＲＥＶＬＥＲＬＬＲＩＬＲＥＳＶＫＫＬＫＲＬＩＥＫＶＩＫＤＡＴ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｃａｇｅ＿Ｎｔｅｒｍ＿ＧＦＰ１１＿６７０（配列番号２７，２９３）
ＳＥＫＥＤＬＡＲＫＬＲＫＬＶＥＥＬＴＲＥＹＥＥＬＶＫＫＬＥＲＬＩＥＥＩＥＫＶＳＥＥＳＶＲＤＨＭＶＬＨＥＹＶＮＡＡＧＩＴＬＧＴＤＥＲＶＬＫＲＬＬＥＲＬＲＲＩＩＥＥＤＨＥＬＮＴＥＬＬＫＲＬＬＤＬＬＫＥＩＬＤＴＳＲＥＬＬＫＲＬＬＤＩＬＲＫＧＶＲＤＥＥＶＬＲＤＬＥＲＴＬＲＥＶＬＥＥＮＥＲＡＩＥＥＡＥＲＶＬＲＫＶＬＥＤＳＥＲＡＶＲＤＡＲＲＶＬＡＥＶＤＫＳＰＴＧＤＥＡＬＲＫＬＶＥＬＬＶＥＶＬＲＲＬＩＲＶＮＲＥＬＶＫＬＬＲＥＶＬＥＲＬＬＲＩＬＲＥＳＶＫＫＬＫＲＬＩＥＫＶＩＫＤＡＴ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｃａｇｅ＿Ｃｔｅｒｍ＿ＧＦＰ１１＿６７１（配列番号２７，２９４）
ＳＥＥＥＤＬＬＥＲＶＫＲＶＬＤＥＬＩＥＩＶＤＲＮＨＥＬＮＲＲＶＶＥＴＳＡＡＬＶＥＲＬＬＥＥＶＥＲＡＬＥＴＬＥＲＥＩＰＧＳＳＬＬＤＫＡＩＫＤＬＲＤＶＬＲＲＶＫＥＫＶＫＲＳＩＥＥＬＫＥＶＬＥＥＳＲＲＶＬＥＥＶＶＲＫＬＲＥＶＩＤＲＶＲＲＬＶＥＫＧＶＤＬＲＤＬＩＲＥＬＫＲＶＬＥＥＡＶＫＬＩＥＲＬＶＲＬＮＴＲＡＡＥＫＤＮＥＳＬＲＥＬＶＲＡＩＫＥＡＬＫＲＡＶＤＡＶＲＫＧＧＬＤＳＲＡＶＫＫＬＤＲＤＨＭＶＬＨＥＹＶＮＡＡＧＩＴＮＥＥＬＷＲＡＬＶＥＬＮＫＥＳＶＲＲＬＲＥＩＶＥＲＶＡＲＤＬＥＥＴＡＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｃａｇｅ＿Ｃｔｅｒｍ＿ＧＦＰ１１＿６７１（配列番号２７，２９５）
ＳＥＥＥＤＬＬＥＲＶＫＲＶＬＤＥＬＩＥＩＶＤＲＮＨＥＬＮＲＲＶＶＥＴＳＡＡＬＶＥＲＬＬＥＥＶＥＲＡＬＥＴＬＥＲＥＩＰＧＳＳＬＬＤＫＡＩＫＤＬＲＤＶＬＲＲＶＫＥＫＶＫＲＳＩＥＥＬＫＥＶＬＥＥＳＲＲＶＬＥＥＶＶＲＫＬＲＥＶＩＤＲＶＲＲＬＶＥＫＧＶＤＬＲＤＬＩＲＥＬＫＲＶＬＥＥＡＶＫＬＩＥＲＬＶＲＬＮＴＲＡＡＥＫＤＮＥＳＬＲＥＬＶＲＡＩＫＥＡＬＫＲＡＶＤＡＶＲＫＧＧＬＤＳＲＡＲＤＨＭＶＬＨＥＹＶＮＡＡＧＩＴＤＶＶＲＲＮＥＥＬＷＲＡＬＶＥＬＮＫＥＳＶＲＲＬＲＥＩＶＥＲＶＡＲＤＬＥＥＴＡＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｃａｇｅ＿Ｃｔｅｒｍ＿ＧＦＰ１１＿６７１（配列番号２７，２９６）
ＳＥＥＥＤＬＬＥＲＶＫＲＶＬＤＥＬＩＥＩＶＤＲＮＨＥＬＮＲＲＶＶＥＴＳＡＡＬＶＥＲＬＬＥＥＶＥＲＡＬＥＴＬＥＲＥＩＰＧＳＳＬＬＤＫＡＩＫＤＬＲＤＶＬＲＲＶＫＥＫＶＫＲＳＩＥＥＬＫＥＶＬＥＥＳＲＲＶＬＥＥＶＶＲＫＬＲＥＶＩＤＲＶＲＲＬＶＥＫＧＶＤＬＲＤＬＩＲＥＬＫＲＶＬＥＥＡＶＫＬＩＥＲＬＶＲＬＮＴＲＡＡＥＫＤＮＥＳＬＲＥＬＶＲＡＩＫＥＡＬＫＲＡＶＤＡＶＲＫＧＧＬＤＳＲＲＤＨＭＶＬＨＥＹＶＮＡＡＧＩＴＥＤＶＶＲＲＮＥＥＬＷＲＡＬＶＥＬＮＫＥＳＶＲＲＬＲＥＩＶＥＲＶＡＲＤＬＥＥＴＡＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｃａｇｅ＿Ｃｔｅｒｍ＿ＧＦＰ１１＿６７１（配列番号２７，２９７）
ＳＥＥＥＤＬＬＥＲＶＫＲＶＬＤＥＬＩＥＩＶＤＲＮＨＥＬＮＲＲＶＶＥＴＳＡＡＬＶＥＲＬＬＥＥＶＥＲＡＬＥＴＬＥＲＥＩＰＧＳＳＬＬＤＫＡＩＫＤＬＲＤＶＬＲＲＶＫＥＫＶＫＲＳＩＥＥＬＫＥＶＬＥＥＳＲＲＶＬＥＥＶＶＲＫＬＲＥＶＩＤＲＶＲＲＬＶＥＫＧＶＤＬＲＤＬＩＲＥＬＫＲＶＬＥＥＡＶＫＬＩＥＲＬＶＲＬＮＴＲＡＡＥＫＤＮＥＳＬＲＥＬＶＲＡＩＫＥＡＬＫＲＡＶＤＡＶＲＫＧＧＬＲＤＨＭＶＬＨＥＹＶＮＡＡＧＩＴＫＫＬＥＤＶＶＲＲＮＥＥＬＷＲＡＬＶＥＬＮＫＥＳＶＲＲＬＲＥＩＶＥＲＶＡＲＤＬＥＥＴＡＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｃａｇｅ＿Ｃｔｅｒｍ＿ＧＦＰ１１＿６７２（配列番号２７，２９８）
ＤＥＴＥＥＶＩＫＫＩＡＫＬＩＤＥＬＩＥＴＬＫＫＩＶＥＤＳＡＫＬＩＫＥＬＩＤＬＬＥＥＩＩＫＲＳＡＤＬＩＲＥＬＥＫＶＳＫＲＧＤＲＤＲＬＫＫＬＩＤＲＭＲＲＥＴＥＲＡＬＥＥＬＲＲＶＩＥＥＬＫＥＡＴＥＲＡＬＫＴＩＥＤＬＩＲＥＩＥＥＡＩＲＲＥＬＧＤＥＤＬＡＲＥＩＬＥＶＩＲＲＩＬＥＬＬＲＥＤＭＥＬＮＬＲＡＬＥＥＩＬＲＬＬＥＥＶＩＫＬＮＫＤＡＩＤＥＩＬＥＬＬＫＲＤＨＭＶＬＨＥＹＶＮＡＡＧＩＴＥＳＫＫＬＶＲＤＶＶＥＥＡＫＲＬＬＫＥＮＲＤＳＴＲＫＩＩＥＤＩＲＲＬＬＲＫＩＥＤＳＴＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｃａｇｅ＿Ｃｔｅｒｍ＿ＧＦＰ１１＿６７２（配列番号２７，２９９）
ＤＥＴＥＥＶＩＫＫＩＡＫＬＩＤＥＬＩＥＴＬＫＫＩＶＥＤＳＡＫＬＩＫＥＬＩＤＬＬＥＥＩＩＫＲＳＡＤＬＩＲＥＬＥＫＶＳＫＲＧＤＲＤＲＬＫＫＬＩＤＲＭＲＲＥＴＥＲＡＬＥＥＬＲＲＶＩＥＥＬＫＥＡＴＥＲＡＬＫＴＩＥＤＬＩＲＥＩＥＥＡＩＲＲＥＬＧＤＥＤＬＡＲＥＩＬＥＶＩＲＲＩＬＥＬＬＲＥＤＭＥＬＮＬＲＡＬＥＥＩＬＲＬＬＥＥＶＩＫＬＮＫＤＡＩＤＥＩＬＥＬＬＫＧＲＤＨＭＶＬＨＥＹＶＮＡＡＧＩＴＳＫＫＬＶＲＤＶＶＥＥＡＫＲＬＬＫＥＮＲＤＳＴＲＫＩＩＥＤＩＲＲＬＬＲＫＩＥＤＳＴＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｃａｇｅ＿Ｎｔｅｒｍ＿ＧＦＰ１１＿６７＞３（配列番号２７，３００）
ＳＫＥＥＴＬＲＫＥＡＥＤＬＬＲＲＬＥＥＬＴＲＲＬＥＫＫＡＲＥＬＬＥＲＡＫＫＬＳＲＤＬＡＲＤＨＭＶＬＨＥＹＶＮＡＡＧＩＴＥＥＬＩＫＶＬＥＥＶＡＫＴＳＩＤＬＮＫＥＶＩＤＶＩＲＲＶＩＥＥＳＬＥＬＮＫＲＶＬＤＶＬＲＲＶＬＤＩＡＡＲＫＧＲＤＫＫＡＩＲＤＶＶＲＥＡＡＲＶＩＫＥＶＩＤＥＤＥＫＶＮＲＤＬＫＲＶＩＥＲＶＩＤＤＤＲＫＡＬＥＲＬＲＫＡＶＥＥＶＡＳＲＧＤＤＥＡＡＫＲＬＶＥＥＬＬＫＡＶＴＤＬＳＲＫＮＫＲＩＬＥＥＬＬＫＡＩＥＴＬＳＤＥＮＫＫＩＬＴＥＩＬＤＡＬＲＲＬＶＥＫＩＥＫ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｃａｇｅ＿Ｎｔｅｒｍ＿ＧＦＰ１１＿６７＞３（配列番号２７，３０１）
ＳＫＥＥＴＬＲＫＥＡＥＤＬＬＲＲＬＥＥＬＴＲＲＬＥＫＫＡＲＥＬＬＥＲＡＫＫＬＳＲＲＤＨＭＶＬＨＥＹＶＮＡＡＧＩＴＧＶＰＥＥＬＩＫＶＬＥＥＶＡＫＴＳＩＤＬＮＫＥＶＩＤＶＩＲＲＶＩＥＥＳＬＥＬＮＫＲＶＬＤＶＬＲＲＶＬＤＩＡＡＲＫＧＲＤＫＫＡＩＲＤＶＶＲＥＡＡＲＶＩＫＥＶＩＤＥＤＥＫＶＮＲＤＬＫＲＶＩＥＲＶＩＤＤＤＲＫＡＬＥＲＬＲＫＡＶＥＥＶＡＳＲＧＤＤＥＡＡＫＲＬＶＥＥＬＬＫＡＶＴＤＬＳＲＫＮＫＲＩＬＥＥＬＬＫＡＩＥＴＬＳＤＥＮＫＫＩＬＴＥＩＬＤＡＬＲＲＬＶＥＫＩＥＫ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｃａｇｅ＿Ｃｔｅｒｍ＿ＧＦＰ１１＿６７＞３（配列番号２７，３０２）
ＳＫＥＥＴＬＲＫＥＡＥＤＬＬＲＲＬＥＥＬＴＲＲＬＥＫＫＡＲＥＬＬＥＲＡＫＫＬＳＲＤＬＡＥＥＬＫＲＬＬＫＥＬＲＥＫＧＶＰＥＥＬＩＫＶＬＥＥＶＡＫＴＳＩＤＬＮＫＥＶＩＤＶＩＲＲＶＩＥＥＳＬＥＬＮＫＲＶＬＤＶＬＲＲＶＬＤＩＡＡＲＫＧＲＤＫＫＡＩＲＤＶＶＲＥＡＡＲＶＩＫＥＶＩＤＥＤＥＫＶＮＲＤＬＫＲＶＩＥＲＶＩＤＤＤＲＫＡＬＥＲＬＲＫＡＶＥＥＶＡＳＲＧＤＤＥＡＲＤＨＭＶＬＨＥＹＶＮＡＡＧＩＴＲＫＮＫＲＩＬＥＥＬＬＫＡＩＥＴＬＳＤＥＮＫＫＩＬＴＥＩＬＤＡＬＲＲＬＶＥＫＩＥＫ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｃａｇｅ＿Ｎｔｅｒｍ＿ＧＦＰ１１＿６７＞３（配列番号２７，３０３）
ＳＫＥＥＴＬＲＫＥＡＥＤＬＬＲＲＬＥＥＬＴＲＲＬＥＫＫＡＲＥＬＬＥＲＡＲＤＨＭＶＬＨＥＹＶＮＡＡＧＩＴＥＬＲＥＫＧＶＰＥＥＬＩＫＶＬＥＥＶＡＫＴＳＩＤＬＮＫＥＶＩＤＶＩＲＲＶＩＥＥＳＬＥＬＮＫＲＶＬＤＶＬＲＲＶＬＤＩＡＡＲＫＧＲＤＫＫＡＩＲＤＶＶＲＥＡＡＲＶＩＫＥＶＩＤＥＤＥＫＶＮＲＤＬＫＲＶＩＥＲＶＩＤＤＤＲＫＡＬＥＲＬＲＫＡＶＥＥＶＡＳＲＧＤＤＥＡＡＫＲＬＶＥＥＬＬＫＡＶＴＤＬＳＲＫＮＫＲＩＬＥＥＬＬＫＡＩＥＴＬＳＤＥＮＫＫＩＬＴＥＩＬＤＡＬＲＲＬＶＥＫＩＥＫ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｃａｇｅ＿Ｎｔｅｒｍ＿ＧＦＰ１１＿６７＞３（配列番号２７，３０４）
ＳＫＥＥＴＬＲＫＥＡＥＤＬＬＲＲＬＥＥＬＴＲＲＬＥＫＫＡＲＥＬＬＥＲＡＫＫＬＳＲＤＨＭＶＬＨＥＹＶＮＡＡＧＩＴＫＧＶＰＥＥＬＩＫＶＬＥＥＶＡＫＴＳＩＤＬＮＫＥＶＩＤＶＩＲＲＶＩＥＥＳＬＥＬＮＫＲＶＬＤＶＬＲＲＶＬＤＩＡＡＲＫＧＲＤＫＫＡＩＲＤＶＶＲＥＡＡＲＶＩＫＥＶＩＤＥＤＥＫＶＮＲＤＬＫＲＶＩＥＲＶＩＤＤＤＲＫＡＬＥＲＬＲＫＡＶＥＥＶＡＳＲＧＤＤＥＡＡＫＲＬＶＥＥＬＬＫＡＶＴＤＬＳＲＫＮＫＲＩＬＥＥＬＬＫＡＩＥＴＬＳＤＥＮＫＫＩＬＴＥＩＬＤＡＬＲＲＬＶＥＫＩＥＫ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｃａｇｅ＿Ｎｔｅｒｍ＿ＧＦＰ１１＿６７＞３（配列番号２７，３０５）
ＳＫＥＥＴＬＲＫＥＡＥＤＬＬＲＲＬＥＥＬＴＲＲＬＥＫＫＡＲＥＬＬＥＲＡＫＫＬＲＤＨＭＶＬＨＥＹＶＮＡＡＧＩＴＥＫＧＶＰＥＥＬＩＫＶＬＥＥＶＡＫＴＳＩＤＬＮＫＥＶＩＤＶＩＲＲＶＩＥＥＳＬＥＬＮＫＲＶＬＤＶＬＲＲＶＬＤＩＡＡＲＫＧＲＤＫＫＡＩＲＤＶＶＲＥＡＡＲＶＩＫＥＶＩＤＥＤＥＫＶＮＲＤＬＫＲＶＩＥＲＶＩＤＤＤＲＫＡＬＥＲＬＲＫＡＶＥＥＶＡＳＲＧＤＤＥＡＡＫＲＬＶＥＥＬＬＫＡＶＴＤＬＳＲＫＮＫＲＩＬＥＥＬＬＫＡＩＥＴＬＳＤＥＮＫＫＩＬＴＥＩＬＤＡＬＲＲＬＶＥＫＩＥＫ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｃａｇｅ＿Ｎｔｅｒｍ＿ＧＦＰ１１＿６７＞３（配列番号２７，３０６）
ＳＫＥＥＴＬＲＫＥＡＥＤＬＬＲＲＬＥＥＬＴＲＲＬＥＫＫＡＲＥＬＬＥＲＡＫＫＬＳＲＤＬＲＤＨＭＶＬＨＥＹＶＮＡＡＧＩＴＰＥＥＬＩＫＶＬＥＥＶＡＫＴＳＩＤＬＮＫＥＶＩＤＶＩＲＲＶＩＥＥＳＬＥＬＮＫＲＶＬＤＶＬＲＲＶＬＤＩＡＡＲＫＧＲＤＫＫＡＩＲＤＶＶＲＥＡＡＲＶＩＫＥＶＩＤＥＤＥＫＶＮＲＤＬＫＲＶＩＥＲＶＩＤＤＤＲＫＡＬＥＲＬＲＫＡＶＥＥＶＡＳＲＧＤＤＥＡＡＫＲＬＶＥＥＬＬＫＡＶＴＤＬＳＲＫＮＫＲＩＬＥＥＬＬＫＡＩＥＴＬＳＤＥＮＫＫＩＬＴＥＩＬＤＡＬＲＲＬＶＥＫＩＥＫ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｃａｇｅ＿Ｎｔｅｒｍ＿ＧＦＰ１１＿６７４（配列番号２７，３０７）
ＳＥＲＥＥＶＫＥＫＬＤＲＬＬＥＥＶＥＫＴＶＲＥＬＫＲＥＨＤＥＬＬＫＥＶＥＫＬＶＲＤＬＫＲＤＨＭＶＬＨＥＹＶＮＡＡＧＩＴＫＥＩＬＤＶＩＲＥＨＶＲＴＮＫＥＩＬＤＲＶＬＥＶＶＥＥＨＬＲＲＮＫＥＩＬＤＫＬＬＤＤＩＲＫＶＶＥＤＡＫＲＩＬＧＩＧＤＤＥＴＬＲＲＡＶＲＲＩＬＥＥＬＲＫＬＶＥＤＩＲＫＫＶＫＤＳＬＥＴＬＥＲＡＬＥＥＡＥＥＲＩＲＲＳＬＥＤＬＫＲＶＬＫＥＡＫＤＫＴＫＤＫＤＲＬＤＫＶＥＥＬＶＫＫＬＬＥＤＴＫＲＴＶＤＲＶＲＥＬＶＲＫＩＬＫＫＳＲＥＴＬＥＥＬＥＲＬＩＥＫＩＬＲＥＬＥＫＤＡＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｃａｇｅ＿Ｃｔｅｒｍ＿ＧＦＰ１１＿６７４（配列番号２７，３０８）
ＳＥＲＥＥＶＫＥＫＬＤＲＬＬＥＥＶＥＫＴＶＲＥＬＫＲＥＨＤＥＬＬＫＥＶＥＫＬＶＲＤＬＫＫＥＨＤＥＬＬＫＫＶＫＤＤＧＶＰＫＥＩＬＤＶＩＲＥＨＶＲＴＮＫＥＩＬＤＲＶＬＥＶＶＥＥＨＬＲＲＮＫＥＩＬＤＫＬＬＤＤＩＲＫＶＶＥＤＡＫＲＩＬＧＩＧＤＤＥＴＬＲＲＡＶＲＲＩＬＥＥＬＲＫＬＶＥＤＩＲＫＫＶＫＤＳＬＥＴＬＥＲＡＬＥＥＡＥＥＲＩＲＲＳＬＥＤＬＫＲＶＬＫＥＡＫＤＫＴＫＤＫＤＲＤＨＭＶＬＨＥＹＶＮＡＡＧＩＴＫＲＴＶＤＲＶＲＥＬＶＲＫＩＬＫＫＳＲＥＴＬＥＥＬＥＲＬＩＥＫＩＬＲＥＬＥＫＤＡＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｃａｇｅ＿Ｎｔｅｒｍ＿ＧＦＰ１１＿６７５（配列番号２７，３０９）
ＳＥＲＥＴＶＫＲＲＬＥＥＬＬＫＥＶＫＲＴＬＤＫＬＫＥＥＨＤＲＬＬＥＤＶＲＲＶＶＥＥＬＲＤＨＭＶＬＨＥＹＶＮＡＡＧＩＴＰＥＥＬＬＲＶＩＡＫＶＬＥＴＮＫＲＩＬＤＤＬＬＲＶＶＫＫＨＶＤＬＮＫＥＩＬＤＲＩＬＥＭＩＫＥＩＶＥＲＶＫＲＶＬＧＤＧＤＥＫＴＬＲＤＫＩＲＤＩＩＲＲＬＥＤＡＡＲＥＡＥＥＲＶＲＲＳＬＥＥＬＫＫＡＶＥＫＩＲＫＫＩＥＤＳＬＲＥＬＥＥＡＬＫＲＶＲＤＫＥＥＤＤＫＲＬＥＤＩＳＲＬＶＫＲＬＬＤＥＳＲＲＶＬＲＥＬＥＥＴＩＲＫＲＡＥＥＳＫＲＶＬＥＥＶＫＲＬＶＥＫＬＩＲＥＬＲＫＥＡＥ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｃａｇｅ＿Ｎｔｅｒｍ＿ＧＦＰ１１＿６７６（配列番号２７，３１０）
ＳＥＤＥＩＩＫＫＩＩＥＤＬＲＲＶＬＫＥＶＥＥＩＨＫＥＶＥＥＲＬＤＫＲＤＨＭＶＬＨＥＹＶＮＡＡＧＩＴＤＲＶＬＤＥＶＫＲＩＧＤＶＥＴＶＬＲＬＡＩＥＡＶＲＲＡＬＥＩＶＲＫＶＴＥＤＬＩＲＶＶＲＫＬＬＥＩＶＤＡＶＮＫＲＶＫＫＡＶＥＤＶＬＫＬＬＲＤＴＬＫＧＳＫＤＶＥＲＶＬＤＥＡＲＲＬＬＥＫＬＨＲＤＳＲＲＩＬＫＲＩＡＥＬＬＤＥＬＫＥＬＳＥＲＩＬＥＲＩＫＲＬＬＥＥＶＥＲＲＧＳＤＤＥＲＬＬＥＥＬＩＥＥＬＫＤＬＩＲＲＨＩＥＬＬＲＲＬＩＥＲＬＫＥＬＬＫＫＨＩＥＤＬＲＲＬＬＥＥＩＥＫＬＬＥＥＡＲＫ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｃａｇｅ＿Ｎｔｅｒｍ＿ＧＦＰ１１＿６７７（配列番号２７，３１１）
ＳＲＥＥＶＬＲＥＬＥＥＶＩＥＤＮＲＲＬＬＥＥＬＩＥＫＳＫＫＶＬＤＥＳＬＫＬＩＤＥＬＬＲＲＤＨＭＶＬＨＥＹＶＮＡＡＧＩＴＳＫＧＤＤＥＥＴＡＲＲＩＶＴＫＩＲＫＥＬＥＤＶＬＤＥＶＲＲＩＶＫＥＩＬＤＲＤＲＲＶＡＥＤＬＫＲＶＶＤＥＮＬＥＫＬＫＫＶＬＤＥＬＤＫＫＬＧＤＲＲＬＶＥＩＬＲＤＩＶＲＬＬＩＥＩＮＥＲＡＬＲＥＬＬＫＬＨＥＥＨＴＲＩＶＡＥＬＬＲＥＬＥＲＶＶＥＥＬＲＲＬＶＥＬＩＡＲＧＥＩＳＥＤＤＬＫＲＶＶＤＥＶＥＫＫＬＲＥＬＫＲＲＹＫＥＡＬＥＲＩＫＥＫＩＫＥＬＫＤＲＹＥＲＡＶＲＥＶＶＡＥＬＲＫＴＴＫ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｃａｇｅ＿Ｃｔｅｒｍ＿ＧＦＰ１１＿６７７（配列番号２７，３１２）
ＳＲＥＥＶＬＲＥＬＥＥＶＩＥＤＮＲＲＬＬＥＥＬＩＥＫＳＫＫＶＬＤＥＳＬＫＬＩＤＥＬＬＲＲＬＥＥＶＬＥＲＶＬＲＬＬＥＥＬＳＫＧＤＤＥＥＴＡＲＲＩＶＴＫＩＲＫＥＬＥＤＶＬＤＥＶＲＲＩＶＫＥＩＬＤＲＤＲＲＶＡＥＤＬＫＲＶＶＤＥＮＬＥＫＬＫＫＶＬＤＥＬＤＫＫＬＧＤＲＲＬＶＥＩＬＲＤＩＶＲＬＬＩＥＩＮＥＲＡＬＲＥＬＬＫＬＨＥＥＨＴＲＩＶＡＥＬＬＲＥＬＥＲＶＶＥＥＬＲＲＬＶＥＬＩＡＲＧＥＩＳＥＤＤＲＤＨＭＶＬＨＥＹＶＮＡＡＧＩＴＲＲＹＫＥＡＬＥＲＩＫＥＫＩＫＥＬＫＤＲＹＥＲＡＶＲＥＶＶＡＥＬＲＫＴＴＫ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｃａｇｅ＿Ｃｔｅｒｍ＿ＧＦＰ１１＿６７７（配列番号２７，３１３）
ＳＲＥＥＶＬＲＥＬＥＥＶＩＥＤＮＲＲＬＬＥＥＬＩＥＫＳＫＫＶＬＤＥＳＬＫＬＩＤＥＬＬＲＲＬＥＥＶＬＥＲＶＬＲＬＬＥＥＬＳＫＧＤＤＥＥＴＡＲＲＩＶＴＫＩＲＫＥＬＥＤＶＬＤＥＶＲＲＩＶＫＥＩＬＤＲＤＲＲＶＡＥＤＬＫＲＶＶＤＥＮＬＥＫＬＫＫＶＬＤＥＬＤＫＫＬＧＤＲＲＬＶＥＩＬＲＤＩＶＲＬＬＩＥＩＮＥＲＡＬＲＥＬＬＫＬＨＥＥＨＴＲＩＶＡＥＬＬＲＥＬＥＲＶＶＥＥＬＲＲＬＶＥＬＩＡＲＧＥＲＤＨＭＶＬＨＥＹＶＮＡＡＧＩＴＬＲＥＬＫＲＲＹＫＥＡＬＥＲＩＫＥＫＩＫＥＬＫＤＲＹＥＲＡＶＲＥＶＶＡＥＬＲＫＴＴＫ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｃａｇｅ＿Ｎｔｅｒｍ＿ＧＦＰ１１＿６７８（配列番号２７，３１４）
ＳＫＡＥＥＩＡＥＫＬＤＲＬＬＥＥＮＲＲＡＬＥＥＩＴＴＲＬＤＤＬＬＲＲＤＨＭＶＬＨＥＹＶＮＡＡＧＩＴＬＤＤＬＲＲＧＧＩＲＥＥＬＬＫＲＩＡＤＶＩＲＤＩＭＲＬＬＫＥＬＨＤＨＴＡＥＶＩＫＴＩＫＫＬＬＫＥＬＨＤＩＮＫＥＩＩＥＲＬＫＲＬＫＤＧＮＶＰＫＥＥＬＬＫＲＶＥＥＬＶＲＴＳＡＲＬＴＴＥＶＬＫＴＶＥＫＬＩＲＤＤＫＲＬＳＥＥＩＬＫＲＶＫＥＬＩＥＥＬＫＲＧＶＤＳＥＲＶＫＥＩＬＥＲＩＬＲＶＶＥＥＡＶＲＬＮＥＥＳＬＲＲＩＬＤＶＶＲＫＡＶＫＬＤＲＥＳＬＫＫＩＬＤＶＶＥＥＡＶＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｃａｇｅ＿Ｃｔｅｒｍ＿ＧＦＰ１１＿６７８（配列番号２７，３１５）
ＳＫＡＥＥＩＡＥＫＬＤＲＬＬＥＥＮＲＲＡＬＥＥＩＴＴＲＬＤＤＬＬＲＲＮＫＤＡＬＲＫＶＭＥＫＬＫＲＬＬＤＤＬＲＲＧＧＩＲＥＥＬＬＫＲＩＡＤＶＩＲＤＩＭＲＬＬＫＥＬＨＤＨＴＡＥＶＩＫＴＩＫＫＬＬＫＥＬＨＤＩＮＫＥＩＩＥＲＬＫＲＬＫＤＧＮＶＰＫＥＥＬＬＫＲＶＥＥＬＶＲＴＳＡＲＬＴＴＥＶＬＫＴＶＥＫＬＩＲＤＤＫＲＬＳＥＥＩＬＫＲＶＫＥＬＩＥＥＬＲＤＨＭＶＬＨＥＹＶＮＡＡＧＩＴＬＲＶＶＥＥＡＶＲＬＮＥＥＳＬＲＲＩＬＤＶＶＲＫＡＶＫＬＤＲＥＳＬＫＫＩＬＤＶＶＥＥＡＶＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｃａｇｅ＿Ｎｔｅｒｍ＿ＧＦＰ１１＿６７８（配列番号２７，３１６）
ＳＫＡＥＥＩＡＥＫＬＤＲＬＬＥＥＮＲＲＡＬＥＥＩＴＴＲＬＤＤＬＬＲＲＮＫＤＲＤＨＭＶＬＨＥＹＶＮＡＡＧＩＴＲＲＧＧＩＲＥＥＬＬＫＲＩＡＤＶＩＲＤＩＭＲＬＬＫＥＬＨＤＨＴＡＥＶＩＫＴＩＫＫＬＬＫＥＬＨＤＩＮＫＥＩＩＥＲＬＫＲＬＫＤＧＮＶＰＫＥＥＬＬＫＲＶＥＥＬＶＲＴＳＡＲＬＴＴＥＶＬＫＴＶＥＫＬＩＲＤＤＫＲＬＳＥＥＩＬＫＲＶＫＥＬＩＥＥＬＫＲＧＶＤＳＥＲＶＫＥＩＬＥＲＩＬＲＶＶＥＥＡＶＲＬＮＥＥＳＬＲＲＩＬＤＶＶＲＫＡＶＫＬＤＲＥＳＬＫＫＩＬＤＶＶＥＥＡＶＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｃａｇｅ＿Ｃｔｅｒｍ＿ＧＦＰ１１＿６７８（配列番号２７，３１７）
ＳＫＡＥＥＩＡＥＫＬＤＲＬＬＥＥＮＲＲＡＬＥＥＩＴＴＲＬＤＤＬＬＲＲＮＫＤＡＬＲＫＶＭＥＫＬＫＲＬＬＤＤＬＲＲＧＧＩＲＥＥＬＬＫＲＩＡＤＶＩＲＤＩＭＲＬＬＫＥＬＨＤＨＴＡＥＶＩＫＴＩＫＫＬＬＫＥＬＨＤＩＮＫＥＩＩＥＲＬＫＲＬＫＤＧＮＶＰＫＥＥＬＬＫＲＶＥＥＬＶＲＴＳＡＲＬＴＴＥＶＬＫＴＶＥＫＬＩＲＤＤＫＲＬＳＥＥＩＬＫＲＶＫＥＬＩＥＥＬＫＲＧＲＤＨＭＶＬＨＥＹＶＮＡＡＧＩＴＶＥＥＡＶＲＬＮＥＥＳＬＲＲＩＬＤＶＶＲＫＡＶＫＬＤＲＥＳＬＫＫＩＬＤＶＶＥＥＡＶＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｃａｇｅ＿Ｎｔｅｒｍ＿ＧＦＰ１１＿６７８（配列番号２７，３１８）
ＳＫＡＥＥＩＡＥＫＬＤＲＬＬＥＥＮＲＲＡＬＥＥＩＴＴＲＬＤＤＬＬＲＲＮＫＲＤＨＭＶＬＨＥＹＶＮＡＡＧＩＴＬＲＲＧＧＩＲＥＥＬＬＫＲＩＡＤＶＩＲＤＩＭＲＬＬＫＥＬＨＤＨＴＡＥＶＩＫＴＩＫＫＬＬＫＥＬＨＤＩＮＫＥＩＩＥＲＬＫＲＬＫＤＧＮＶＰＫＥＥＬＬＫＲＶＥＥＬＶＲＴＳＡＲＬＴＴＥＶＬＫＴＶＥＫＬＩＲＤＤＫＲＬＳＥＥＩＬＫＲＶＫＥＬＩＥＥＬＫＲＧＶＤＳＥＲＶＫＥＩＬＥＲＩＬＲＶＶＥＥＡＶＲＬＮＥＥＳＬＲＲＩＬＤＶＶＲＫＡＶＫＬＤＲＥＳＬＫＫＩＬＤＶＶＥＥＡＶＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｃａｇｅ＿Ｎｔｅｒｍ＿ＧＦＰ１１＿６７８（配列番号２７，３１９）
ＳＫＡＥＥＩＡＥＫＬＤＲＬＬＥＥＮＲＲＡＬＥＥＩＴＴＲＬＤＤＬＬＲＲＮＫＤＡＬＲＤＨＭＶＬＨＥＹＶＮＡＡＧＩＴＧＧＩＲＥＥＬＬＫＲＩＡＤＶＩＲＤＩＭＲＬＬＫＥＬＨＤＨＴＡＥＶＩＫＴＩＫＫＬＬＫＥＬＨＤＩＮＫＥＩＩＥＲＬＫＲＬＫＤＧＮＶＰＫＥＥＬＬＫＲＶＥＥＬＶＲＴＳＡＲＬＴＴＥＶＬＫＴＶＥＫＬＩＲＤＤＫＲＬＳＥＥＩＬＫＲＶＫＥＬＩＥＥＬＫＲＧＶＤＳＥＲＶＫＥＩＬＥＲＩＬＲＶＶＥＥＡＶＲＬＮＥＥＳＬＲＲＩＬＤＶＶＲＫＡＶＫＬＤＲＥＳＬＫＫＩＬＤＶＶＥＥＡＶＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｃａｇｅ＿Ｃｔｅｒｍ＿ＧＦＰ１１＿６７９（配列番号２７，３２０）
ＳＲＶＥＥＬＫＫＬＩＥＤＩＬＲＩＳＲＥＶＶＥＲＩＫＲＶＡＥＤＩＨＲＩＮＲＲＶＬＤＤＬＲＫＬＩＥＤＩＬＲＴＶＥＥＩＬＡＲＫＶＧＤＴＥＩＡＥＲＬＲＤＴＩＡＲＶＶＤＥＩＡＫＬＬＥＥＨＥＫＲＳＲＥＬＬＥＥＩＲＫＬＬＥＤＩＬＲＲＳＥＲＡＶＥＥＩＲＥＬＬＫＫＧＶＳＴＫＤＶＬＲＩＩＥＥＩＬＲＥＨＬＥＬＬＥＲＶＶＲＲＩＥＥＩＬＲＥＬＬＫＴＩＥＥＩＶＫＲＩＫＥＩＬＥＥＬＫＥＶＬＫＲＧＲＶＫＤＤＥＶＥＲＤＨＭＶＬＨＥＹＶＮＡＡＧＩＴＹＲＲＬＬＥＥＩＫＲＫＬＥＥＩＬＲＲＶＥＥＬＨＲＲＬＲＲＫＬＥＥＩＤＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｃａｇｅ＿Ｎｔｅｒｍ＿ＧＦＰ１１＿６７９（配列番号２７，３２１）
ＳＲＶＥＥＬＫＫＬＩＥＤＩＬＲＩＳＲＥＶＶＥＲＩＫＲＶＡＥＤＩＨＲＩＮＲＲＶＲＤＨＭＶＬＨＥＹＶＮＡＡＧＩＴＥＩＬＡＲＫＶＧＤＴＥＩＡＥＲＬＲＤＴＩＡＲＶＶＤＥＩＡＫＬＬＥＥＨＥＫＲＳＲＥＬＬＥＥＩＲＫＬＬＥＤＩＬＲＲＳＥＲＡＶＥＥＩＲＥＬＬＫＫＧＶＳＴＫＤＶＬＲＩＩＥＥＩＬＲＥＨＬＥＬＬＥＲＶＶＲＲＩＥＥＩＬＲＥＬＬＫＴＩＥＥＩＶＫＲＩＫＥＩＬＥＥＬＫＥＶＬＫＲＧＲＶＫＤＤＥＶＥＲＥＩＲＲＶＫＥＤＬＤＲＩＬＥＥＹＲＲＬＬＥＥＩＫＲＫＬＥＥＩＬＲＲＶＥＥＬＨＲＲＬＲＲＫＬＥＥＩＤＲ
【００４７】
第４の態様において、本開示は、配列番号１４３１８〜２６６０１（別添３として２０１８年７月１９日出願された米国特許仮出願第６２／７００６８１号および／または２０１８年１２月２７日出願された第６２／７８５５３７号で提出された）、２６６０２〜２７０１５（２０１８年７月１９日出願された米国特許仮出願第６２／７００６８１号および／または２０１８年１２月２７日出願された第６２／７８５５３７号で、３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１”番号１〜６７および９７〜１１７、３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿１”番号６８〜９６および１１８〜１４０、２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿”番号１〜１７３、およびＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿”番号１７４〜２７４として提出された）、２７０１６〜２７０５０、２７，３２２〜２７，３５８、ならびに表２（配列番号２７１２７〜２７２７７の間で奇数の配列番号を有するポリペプチド）、表３、および／または表４におけるキーポリペプチドから選択されるキーポリペプチドのアミノ酸配列に対してその長さに沿って、任意選択的なアミノ酸を含まずに、少なくとも４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の配列同一性配列を有するポリペプチドを含む非天然由来ポリペプチドを提供する。
【００４８】
本明細書に開示されるように、この態様のポリペプチドは、例えば、ケージポリペプチドと結合されたキーポリペプチドとして使用して、立体構造変化を誘発する競合的な分子間結合によってラッチを置換して、エンコードされた生物活性ペプチドまたは領域を露出させ、したがってシステムを活性化することができる（例えば、図１を参照）。
【００４９】
本開示に記載されているように、キーポリペプチドは、任意選択的である残基を含み得、これらの残基は括弧内に示され、一実施形態では、配列同一性パーセントを決定する際に含まれない。別の実施形態において、任意選択的な残基は、配列同一性のパーセントを決定する際に含まれ得る。
【００５０】
別の実施形態において、非天然由来ポリペプチドは、配列番号２６６０２〜２７０５０、および２７，３２２〜２７，３５８からなる群から選択されるキーポリペプチドのアミノ酸配列に対してその長さに沿って、少なくとも４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の配列同一性を有するポリペプチドを含み、以下に詳述される。
●キー配列は通常の文字である。
●６Ｈｉｓ−ＭＢＰ−ＴＥＶ、６Ｈｉｓ−ＴＥＶ、およびフレキシブルリンカー配列は下線で示される
●太字でイタリック体の配列は、ＭＢＰ＿ｋｅｙのビオチン化に必要である任意選択的な残基である。
●括弧内のすべての配列は任意選択的である
●任意選択的ではないキー配列におけるＮ末端またはＣ末端の任意の数の連続するアミノ酸は、応答性を調整するために削除され得る。
＞ＳＢ７６＿Ｃ−ヘリックス（配列番号２７０１６）
ＤＥＡＲＫＡＩＡＲＶＫＲＥＳＫＲＩＶＥＤＡＥＲＬＩＲＥＡＡＡＡＳＥＫＩＳ
＞ＳＢ７６＿Ｃ−ヘリックス−ビオチン（配列番号２７０１７）
ＤＥＡＲＫＡＩＡＲＶＫＲＥＳＫＲＩＶＥＤＡＥＲＬＩＲＥＡＡＡＡＳＥＫＩＳＧＳＧＫ−Ｂｉｏｔｉｎ
＞ｐ５＿ＭＢＰ（配列番号２７０１８）
【化１１５】
2021530475.tif 000116
＞ｐ９＿ＭＢＰ（配列番号２７０１９）
【化１１６】
2021530475.tif 000117
＞ｐ１８＿ＭＢＰ（配列番号２７０２０）
【化１１７】
2021530475.tif 000118
＞ＭＢＰ＿ｐ１８（別名ｐ７６）（配列番号２７０２１）
【化１１８】
2021530475.tif 000119
＞ｋｅｙ＿ｂ（配列番号２７０２２）
【化１１９】
2021530475.tif 000120
＞ｋｅｙ＿ｃ（配列番号２７０２３）
【化１２０】
2021530475.tif 000121
＞ｋｅｙ＿ｄ（配列番号２７０２４）
【化１２１】
2021530475.tif 000122
＞ｋｅｙ＿ｅ（配列番号２７０２５）
【化１２２】
2021530475.tif 000123
＞ｋｅｙ＿ｆ（配列番号２７０２６）
【化１２３】
2021530475.tif 000124
追加のキー：
キー配列は通常の文字である
（６Ｈｉｓ−ＭＢＰ−ＴＥＶ、６Ｈｉｓ−ＴＥＶ、およびフレキシブルリンカー配列は下線で示される）
（共局在化ドメインは太字で示される）
（応答性を調整するために任意のアミノ酸に変異させることができる位置は、太字に下線で示される。これらは例示的であり、網羅的ではない。）
（任意選択的ではないキー配列におけるＮ末端またはＣ末端の任意の数の連続するアミノ酸は、応答性を調整するために削除され得る）
（括弧内のすべての配列は任意選択的である）
＞ｐ７６−ｌｏｎｇ（配列番号２７０２７）
【化１２４】
2021530475.tif 000125
＞ｐ７６−ｓｈｏｒｔ（配列番号２７０２８）
【化１２５】
2021530475.tif 000126
＞ｋ７６−ｌｏｎｇ（配列番号２７０２９）
【化１２６】
2021530475.tif 000127
＞ｋ７６−ｓｈｏｒｔ（配列番号２７０３０）
【化１２７】
2021530475.tif 000128
＞ｐ７６＿ＧＬＩＳＥ（配列番号２７０３１）
【化１２８】
2021530475.tif 000129
＞ｐ７６＿ＧＳＳＥＫＩＳ（配列番号２７０３２）
【化１２９】
2021530475.tif 000130
＞ｐ７６＿Ｒ２６Ｇ（配列番号２７０３３）
【化１３０】
2021530475.tif 000131
＞ｐ７６−ｓｈｏｒｔ＿Ｅ１９Ｇ（配列番号２７０３４）
【化１３１】
2021530475.tif 000132
＞ｐ７６−ｓｈｏｒｔ＿ＧＬＩＳＥ＿Ｅ０１＿ＥＧＦＲ（配列番号２７０３５）
【化１３２】
2021530475.tif 000133
＞ｐ７６−ｓｈｏｒｔ＿ＡＥ＿ＥＧＦＲ（配列番号２７０３６）
【化１３３】
2021530475.tif 000134
＞ｐ７６−ｓｈｏｒｔ＿ＡＡＥ＿ＥＧＦＲ（配列番号２７０３７）
【化１３４】
2021530475.tif 000135
＞ｐ７６−ｓｈｏｒｔ＿ＥＥ＿ＥＧＦＲ（配列番号２７０３８）
【化１３５】
2021530475.tif 000136
＞ｐ７６−スパイタグ（配列番号２７０３９）
【化１３６】
2021530475.tif 000137
＞ｐ７６−ｓｈｏｒｔ−ｓｐｙｔａｇ（配列番号２７０４０）
【化１３７】
2021530475.tif 000138
＞ｓｆＧＦＰ＿ＶＭＡｎ＿ｐ１８（配列番号２７０４１）
【化１３８】
2021530475.tif 000139
＞ｐ１８＿ＶＭＡｃ＿ｍＣｈｅｒｒｙ（配列番号２７０４２）
【化１３９】
2021530475.tif 000140
（２ｐｌｕｓ１および３ｐｌｕｓ１ＳＴＲＥＰＩＩ−ＬＯＣＫＲ機能ケージ設計の同族キー）：
＞２ｐｌｕｓ１＿ＫＥＹ＿１０００００．ｆａｓｔａａｌｔ＿ＳＴＲＥＰ＿２ｐｌｕｓ１＿１（配列番号２７０４３）
ＤＫＶＲＫＶＡＥＶＡＥＫＶＬＲＤＩＤＫＬＤＲＥＳＫＥＡＦＲＲＴＮＧＥＩＳＫＬＤＥＤＴＲＲＶＡＥＲＶＫＫＡＩＥＤＬＡＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＫＥＹ＿２（配列番号２７０４４）
ＳＥＶＤＥＩＩＡＤＮＥＲＡＬＤＥＶＲＲＥＶＥＥＩＤＫＥＮＡＥＲＬＫＥＷＶＥＥＡＲＥＩＬＤＲＬＡＫＡＬＥＥＩＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＫＥＹ＿３（配列番号２７０４５）
ＰＥＥＡＬＳＫＡＩＫＤＶＲＤＩＶＫＫＶＫＤＥＬＫＥＷＲＤＲＮＫＥＬＶＤＲＬＳＥＥＬＫＥＷＬＫＤＶＥＲＶＬＫＥＬＴＤＫＤＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＫＥＹ＿４（配列番号２７０４６）
ＤＥＲＶＲＥＥＬＫＫＬＬＴＲＶＥＥＥＨＲＫＶＬＥＴＤＫＫＩＬＫＥＡＨＫＥＳＫＥＶＮＤＲＤＲＥＬＬＥＲＬＥＥＳＶＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＫＥＹ＿１（配列番号２７０４７）
ＳＲＬＶＫＫＬＤＥＩＶＫＥＶＡＫＫＬＥＤＶＶＲＡＮＥＥＬＷＲＫＬＶＥＬＮＫＥＳＶＡＲＬＲＥＡＶＥＲＶＡＲＤＬＥＥＴＡＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＫＥＹ＿２（配列番号２７０４８）
ＳＤＥＥＲＬＥＫＶＶＫＤＶＩＥＫＶＲＲＩＬＥＫＷＫＫＤＩＤＫＶＶＫＥＬＲＲＩＬＥＥＷＥＫＩＩＲＥＶＬＤＫＶＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＫＥＹ＿３（配列番号２７０４９）
ＤＫＤＡＶＩＫＶＩＥＫＬＩＲＡＮＡＡＶＷＤＡＬＬＫＩＮＥＤＬＶＲＶＮＫＴＶＷＫＥＬＬＲＶＮＥＫＬＡＲＤＬＥＲＶＶＫ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＫＥＹ＿４（配列番号２７０５０）
ＳＬＶＤＥＬＲＫＳＬＥＲＮＶＲＶＳＥＥＶＡＲＲＬＫＥＡＬＫＲＷＶＤＶＶＲＫＶＶＥＤＬＩＲＬＮＥＤＶＶＲＶＶＥＫ
配列番号２６，６０２〜２７，０１５：
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１（配列番号２６６０２）
ＳＧＳＫＥＶＬＤＩＬＥＲＡＶＥＶＶＲＲＶＩＫＡＬＫＥＶＬＥＲＨＶＤＡＴＲＥＶＩＥＲＶＫＲＶＮＫＲＬＬＥＡＶＲＥＶＶＴ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿２（配列番号２６６０３）
ＧＶＰＥＥＩＤＲＥＬＫＲＶＶＥＥＬＲＲＬＨＥＥＩＫＥＲＬＤＤＶＡＲＲＳＥＥＥＬＲＲＩＩＫＫＬＫＥＶＶＫＥＩＲＫＫＬＫ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿３（配列番号２６６０４）
ＤＬＬＲＫＬＥＥＥＬＲＲＩＫＥＫＬＲＫＡＬＥＥＬＥＲＥＨＲＥＬＥＫＥＬＤＫＬＨＤＥＳＲＫＥＨＥＲＩＥＥＥＬＲＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿４（配列番号２６６０５）
ＤＥＤＬＬＥＫＩＫＲＶＩＲＥＨＩＫＡＬＥＫＬＡＲＤＬＫＥＩＬＲＲＨＩＥＡＬＫＥＬＡＲＤＬＡＥＶＩＲＫＬＬＥＤＶＫＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿５（配列番号２６６０６）
ＤＬＥＲＬＲＲＫＶＥＥＬＥＤＲＬＲＲＬＬＥＫＬＡＲＤＳＡＥＬＭＲＥＬＥＲＩＬＤＲＹＡＲＥＳＥＥＬＤＲＲＬＡＥ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿６（配列番号２６６０７）
ＤＬＥＤＩＬＲＫＮＬＤＲＬＲＫＬＬＥＲＬＲＥＩＬＲＥＮＬＥＡＬＫＫＴＬＫＲＬＥＤＶＶＲＥＩＬＥＤＬＫＲＥＲＫ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿７（配列番号２６６０８）
ＤＬＥＲＬＲＲＫＶＥＥＬＥＤＲＬＲＲＬＬＥＫＬＡＲＤＳＡＥＬＭＲＥＬＥＲＩＬＤＲＹＡＲＥＳＥＥＬＤＲＲＬＡＥ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿８（配列番号２６６０９）
ＳＧＳＫＥＶＬＤＩＬＥＲＡＶＥＶＶＲＲＶＩＫＡＬＫＥＶＬＥＲＨＶＤＡＴＲＥＶＩＥＲＶＫＲＶＮＫＲＬＬＥＡＶＲＥＶＶＴ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿９（配列番号２６６１０）
ＤＬＥＲＬＲＲＫＶＥＥＬＥＤＲＬＲＲＬＬＥＫＬＡＲＤＳＡＥＬＭＲＥＬＥＲＩＬＤＲＹＡＲＥＳＥＥＬＤＲＲＬＡＥ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１０（配列番号２６６１１）
ＲＬＩＥＥＶＶＲＬＬＲＥＮＬＤＶＶＲＲＩＬＥＡＬＡＫＬＩＫＥＬＬＥＡＬＥＥＶＬＲＲＮＫＥＬＩＲＥＬＬＲＶＬＤＥＡＬＫ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１１（配列番号２６６１２）
ＤＩＶＲＡＭＥＥＶＩＲＲＬＩＥＩＬＲＲＤＶＥＬＮＬＤＶＡＫＫＬＬＥＬＬＫＥＤＳＫＬＮＬＤＶＡＲＥＬＬＥＬＬＤＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１２（配列番号２６６１３）
ＤＩＶＲＡＭＥＥＶＩＲＲＬＩＥＩＬＲＲＤＶＥＬＮＬＤＶＡＫＫＬＬＥＬＬＫＥＤＳＫＬＮＬＤＶＡＲＥＬＬＥＬＬＤＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１３（配列番号２６６１４）
ＲＬＩＥＥＶＶＲＬＬＲＥＮＬＤＶＶＲＲＩＬＥＡＬＡＫＬＩＫＥＬＬＥＡＬＥＥＶＬＲＲＮＫＥＬＩＲＥＬＬＲＶＬＤＥＡＬＫ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１４（配列番号２６６１５）
ＲＬＩＥＥＶＶＲＬＬＲＥＮＬＤＶＶＲＲＩＬＥＡＬＡＫＬＩＫＥＬＬＥＡＬＥＥＶＬＲＲＮＫＥＬＩＲＥＬＬＲＶＬＤＥＡＬＫ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１５（配列番号２６６１６）
ＤＬＬＲＫＬＥＥＥＬＲＲＩＫＥＫＬＲＫＡＬＥＥＬＥＲＥＨＲＥＬＥＫＥＬＤＫＬＨＤＥＳＲＫＥＨＥＲＩＥＥＥＬＲＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１６（配列番号２６６１７）
ＤＬＬＲＫＬＥＥＥＬＲＲＩＫＥＫＬＲＫＡＬＥＥＬＥＲＥＨＲＥＬＥＫＥＬＤＫＬＨＤＥＳＲＫＥＨＥＲＩＥＥＥＬＲＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１７（配列番号２６６１８）
ＥＬＡＲＥＶＥＲＶＩＫＥＬＬＤＫＳＫＥＩＬＥＲＩＥＲＡＩＤＥＬＬＫＶＳＥＥＩＬＫＬＳＥＤＡＳＥＥＬＬＫＩＬＲＥＦＡＫ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１８（配列番号２６６１９）
ＤＶＫＤＩＩＲＴＩＬＥＶＡＲＤＬＬＲＬＬＥＥＤＳＲＴＮＳＥＶＶＫＲＬＬＤＬＬＲＥＤＳＫＡＮＳＥＶＶＫＲＬＬＤＶＬＲＥ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１９（配列番号２６６２０）
ＤＬＥＲＬＲＲＫＶＥＥＬＥＤＲＬＲＲＬＬＥＫＬＡＲＤＳＡＥＬＭＲＥＬＥＲＩＬＤＲＹＡＲＥＳＥＥＬＤＲＲＬＡＥ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿２０（配列番号２６６２１）
ＤＬＥＲＬＲＲＫＶＥＥＬＥＤＲＬＲＲＬＬＥＫＬＡＲＤＳＡＥＬＭＲＥＬＥＲＩＬＤＲＹＡＲＥＳＥＥＬＤＲＲＬＡＥ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿２１（配列番号２６６２２）
ＲＬＩＥＥＶＶＲＬＬＲＥＮＬＤＶＶＲＲＩＬＥＡＬＡＫＬＩＫＥＬＬＥＡＬＥＥＶＬＲＲＮＫＥＬＩＲＥＬＬＲＶＬＤＥＡＬＫ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿２２（配列番号２６６２３）
ＤＬＥＤＩＬＲＫＮＬＤＲＬＲＫＬＬＥＲＬＲＥＩＬＲＥＮＬＥＡＬＫＫＴＬＫＲＬＥＤＶＶＲＥＩＬＥＤＬＫＲＥＲＫ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿２３（配列番号２６６２４）
ＤＬＬＲＫＬＥＥＥＬＲＲＩＫＥＫＬＲＫＡＬＥＥＬＥＲＥＨＲＥＬＥＫＥＬＤＫＬＨＤＥＳＲＫＥＨＥＲＩＥＥＥＬＲＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿２４（配列番号２６６２５）
ＤＥＤＬＬＥＫＩＫＲＶＩＲＥＨＩＫＡＬＥＫＬＡＲＤＬＫＥＩＬＲＲＨＩＥＡＬＫＥＬＡＲＤＬＡＥＶＩＲＫＬＬＥＤＶＫＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿２５（配列番号２６６２６）
ＥＬＶＲＩＡＩＥＶＬＫＲＬＬＥＩＩＥＥＬＶＲＬＮＮＥＩＬＥＲＬＬＫＩＶＲＥＬＨＫＤＮＩＫＩＬＥＤＬＬＲＩＩＥＥＶＬＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿２６（配列番号２６６２７）
ＥＬＶＲＩＡＩＥＶＬＫＲＬＬＥＩＩＥＥＬＶＲＬＮＮＥＩＬＥＲＬＬＫＩＶＲＥＬＨＫＤＮＩＫＩＬＥＤＬＬＲＩＩＥＥＶＬＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿２７（配列番号２６６２８）
ＲＬＡＲＬＬＫＡＬＡＤＫＬＩＲＶＬＥＥＩＬＫＩＮＥＥＬＮＲＫＩＩＫＦＡＲＥＮＬＥＲＮＲＲＶＮＫＫＶＩＥＶＬＲＥＡＡＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿２８（配列番号２６６２８）
ＤＬＥＲＬＲＲＫＶＥＥＬＥＤＲＬＲＲＬＬＥＫＬＡＲＤＳＡＥＬＭＲＥＬＥＲＩＬＤＲＹＡＲＥＳＥＥＬＤＲＲＬＡＥ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿２９（配列番号２６６３０）
ＥＬＶＲＩＡＩＥＶＬＫＲＬＬＥＩＩＥＥＬＶＲＬＮＮＥＩＬＥＲＬＬＫＩＶＲＥＬＨＫＤＮＩＫＩＬＥＤＬＬＲＩＩＥＥＶＬＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿３０（配列番号２６６３１）
ＥＬＶＲＩＡＩＥＶＬＫＲＬＬＥＩＩＥＥＬＶＲＬＮＮＥＩＬＥＲＬＬＫＩＶＲＥＬＨＫＤＮＩＫＩＬＥＤＬＬＲＩＩＥＥＶＬＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿３１（配列番号２６６３２）
ＤＩＶＲＡＭＥＥＶＩＲＲＬＩＥＩＬＲＲＤＶＥＬＮＬＤＶＡＫＫＬＬＥＬＬＫＥＤＳＫＬＮＬＤＶＡＲＥＬＬＥＬＬＤＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿３２（配列番号２６６３３）
ＲＫＩＡＫＩＩＥＥＬＫＲＬＬＥＤＬＡＲＤＴＲＲＶＩＥＥＡＫＲＬＬＫＥＷＲＤＲＮＫＥＶＡＤＴＬＫＫＬＬＥＤＬＩＲＫＩＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿３３（配列番号２６６３４）
ＤＬＬＲＫＬＥＥＥＬＲＲＩＫＥＫＬＲＫＡＬＥＥＬＥＲＥＨＲＥＬＥＫＥＬＤＫＬＨＤＥＳＲＫＥＨＥＲＩＥＥＥＬＲＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿３４（配列番号２６６３５）
ＤＬＬＲＫＬＥＥＥＬＲＲＩＫＥＫＬＲＫＡＬＥＥＬＥＲＥＨＲＥＬＥＫＥＬＤＫＬＨＤＥＳＲＫＥＨＥＲＩＥＥＥＬＲＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿３５（配列番号２６６３６）
ＲＫＩＡＫＩＩＥＥＬＫＲＬＬＥＤＬＡＲＤＴＲＲＶＩＥＥＡＫＲＬＬＫＥＷＲＤＲＮＫＥＶＡＤＴＬＫＫＬＬＥＤＬＩＲＫＩＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿３６（配列番号２６６３７）
ＥＬＶＲＩＡＩＥＶＬＫＲＬＬＥＩＩＥＥＬＶＲＬＮＮＥＩＬＥＲＬＬＫＩＶＲＥＬＨＫＤＮＩＫＩＬＥＤＬＬＲＩＩＥＥＶＬＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿３７（配列番号２６６３８）
ＴＶＲＲＬＲＥＡＬＫＫＬＥＤＤＬＲＫＩＥＲＤＡＥＲＥＹＫＫＬＫＤＥＬＥＥＬＴＥＲＹＲＲＥＩＲＫＬＫＥＥＬＫＡＤＲＫ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿３８（配列番号２６６３９）
ＤＥＡＥＲＲＲＲＥＬＫＤＫＬＤＲＬＲＥＥＨＥＥＶＫＲＲＬＥＥＥＬＴＲＬＲＥＴＨＫＫＩＥＫＥＬＲＥＡＬＫＲＶＲＤＲＳＴ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿３９（配列番号２６６４０）
ＤＥＡＥＲＲＲＲＥＬＫＤＫＬＤＲＬＲＥＥＨＥＥＶＫＲＲＬＥＥＥＬＴＲＬＲＥＴＨＫＫＩＥＫＥＬＲＥＡＬＫＲＶＲＤＲＳＴ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿４０（配列番号２６６４１）
ＤＬＥＤＩＬＲＫＮＬＤＲＬＲＫＬＬＥＲＬＲＥＩＬＲＥＮＬＥＡＬＫＫＴＬＫＲＬＥＤＶＶＲＥＩＬＥＤＬＫＲＥＲＫ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿４１（配列番号２６６４２）
ＤＬＥＲＬＲＲＫＶＥＥＬＥＤＲＬＲＲＬＬＥＫＬＡＲＤＳＡＥＬＭＲＥＬＥＲＩＬＤＲＹＡＲＥＳＥＥＬＤＲＲＬＡＥ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿４２（配列番号２６６４３）
ＤＥＡＥＲＲＲＲＥＬＫＤＫＬＤＲＬＲＥＥＨＥＥＶＫＲＲＬＥＥＥＬＴＲＬＲＥＴＨＫＫＩＥＫＥＬＲＥＡＬＫＲＶＲＤＲＳＴ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿４３（配列番号２６６４４）
ＤＥＡＥＲＲＲＲＥＬＫＤＫＬＤＲＬＲＥＥＨＥＥＶＫＲＲＬＥＥＥＬＴＲＬＲＥＴＨＫＫＩＥＫＥＬＲＥＡＬＫＲＶＲＤＲＳＴ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿４４（配列番号２６６４５）
ＤＥＡＥＲＲＲＲＥＬＫＤＫＬＤＲＬＲＥＥＨＥＥＶＫＲＲＬＥＥＥＬＴＲＬＲＥＴＨＫＫＩＥＫＥＬＲＥＡＬＫＲＶＲＤＲＳＴ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿４５（配列番号２６６４６）
ＤＫＡＶＥＥＬＥＫＡＬＥＥＩＫＲＲＬＫＥＶＩＤＲＹＥＤＥＬＲＫＬＲＫＥＹＫＥＫＩＤＫＹＥＲＫＬＥＥＩＥＲＲＥＲＴ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿４６（配列番号２６６４７）
ＤＶＫＲＡＬＥＥＬＶＳＲＬＲＫＬＬＥＤＶＫＫＡＳＥＤＩＶＲＥＶＥＲＩＶＲＥＬＡＫＲＳＤＥＩＬＫＫＬＥＤＩＶＥＫＬＲＥ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿４７（配列番号２６６４８）
ＤＶＫＲＡＬＥＥＬＶＳＲＬＲＫＬＬＥＤＶＫＫＡＳＥＤＩＶＲＥＶＥＲＩＶＲＥＬＡＫＲＳＤＥＩＬＫＫＬＥＤＩＶＥＫＬＲＥ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿４８（配列番号２６６４９）
ＤＥＡＥＲＲＲＲＥＬＫＤＫＬＤＲＬＲＥＥＨＥＥＶＫＲＲＬＥＥＥＬＴＲＬＲＥＴＨＫＫＩＥＫＥＬＲＥＡＬＫＲＶＲＤＲＳＴ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿４９（配列番号２６６５０）
ＤＶＫＲＡＬＥＥＬＶＳＲＬＲＫＬＬＥＤＶＫＫＡＳＥＤＩＶＲＥＶＥＲＩＶＲＥＬＡＫＲＳＤＥＩＬＫＫＬＥＤＩＶＥＫＬＲＥ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿５０（配列番号２６６５１）
ＥＶＫＲＲＬＥＥＫＥＲＲＩＲＴＲＹＥＥＬＲＲＲＬＲＫＲＶＫＤＹＥＤＫＬＲＥＩＥＫＫＶＲＲＤＡＥＲＩＥＥＥＬＥＲＡＫＫ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿５１（配列番号２６６５２）
ＤＥＡＥＲＲＲＲＥＬＫＤＫＬＤＲＬＲＥＥＨＥＥＶＫＲＲＬＥＥＥＬＴＲＬＲＥＴＨＫＫＩＥＫＥＬＲＥＡＬＫＲＶＲＤＲＳＴ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿５２（配列番号２６６５３）
ＫＩＡＥＥＩＥＲＥＬＥＥＬＲＲＭＩＫＲＬＨＥＤＬＥＲＫＬＫＥＳＥＤＥＬＲＥＩＥＡＲＬＥＥＫＩＲＲＬＥＥＫＬＥＲＫＲＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿５３（配列番号２６６５４）
ＫＩＡＥＥＩＥＲＥＬＥＥＬＲＲＭＩＫＲＬＨＥＤＬＥＲＫＬＫＥＳＥＤＥＬＲＥＩＥＡＲＬＥＥＫＩＲＲＬＥＥＫＬＥＲＫＲＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿５４（配列番号２６６５５）
ＤＫＡＶＥＥＬＥＫＡＬＥＥＩＫＲＲＬＫＥＶＩＤＲＹＥＤＥＬＲＫＬＲＫＥＹＫＥＫＩＤＫＹＥＲＫＬＥＥＩＥＲＲＥＲＴ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿５５（配列番号２６６５６）
ＫＩＡＥＥＩＥＲＥＬＥＥＬＲＲＭＩＫＲＬＨＥＤＬＥＲＫＬＫＥＳＥＤＥＬＲＥＩＥＡＲＬＥＥＫＩＲＲＬＥＥＫＬＥＲＫＲＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿５６（配列番号２６６５７）
ＥＬＶＲＩＡＩＥＶＬＫＲＬＬＥＩＩＥＥＬＶＲＬＮＮＥＩＬＥＲＬＬＫＩＶＲＥＬＨＫＤＮＩＫＩＬＥＤＬＬＲＩＩＥＥＶＬＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿５７（配列番号２６６５８）
ＤＥＶＥＲＥＩＲＲＶＫＥＤＬＤＲＩＬＥＥＹＲＲＬＬＥＥＩＫＲＫＬＥＥＩＬＲＲＶＥＥＬＨＲＲＬＲＲＫＬＥＥＩＤＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿５８（配列番号２６６５９）
ＤＶＫＲＡＬＥＥＬＶＳＲＬＲＫＬＬＥＤＶＫＫＡＳＥＤＩＶＲＥＶＥＲＩＶＲＥＬＡＫＲＳＤＥＩＬＫＫＬＥＤＩＶＥＫＬＲＥ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿５９（配列番号２６６６０）
ＤＥＡＥＲＲＲＲＥＬＫＤＫＬＤＲＬＲＥＥＨＥＥＶＫＲＲＬＥＥＥＬＴＲＬＲＥＴＨＫＫＩＥＫＥＬＲＥＡＬＫＲＶＲＤＲＳＴ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿６０（配列番号２６６６１）
ＤＥＡＥＲＲＲＲＥＬＫＤＫＬＤＲＬＲＥＥＨＥＥＶＫＲＲＬＥＥＥＬＴＲＬＲＥＴＨＫＫＩＥＫＥＬＲＥＡＬＫＲＶＲＤＲＳＴ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿６１（配列番号２６６６２）
ＴＬＲＥＶＶＲＫＶＬＥＥＡＫＲＬＬＤＥＬＥＥＶＨＫＲＶＫＫＥＬＥＤＩＩＥＥＮＲＲＶＶＫＲＶＲＤＥＬＲＥＩＫＲＥＬＤＥ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿６２（配列番号２６６６３）
ＤＶＫＲＡＬＥＥＬＶＳＲＬＲＫＬＬＥＤＶＫＫＡＳＥＤＩＶＲＥＶＥＲＩＶＲＥＬＡＫＲＳＤＥＩＬＫＫＬＥＤＩＶＥＫＬＲＥ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿６３（配列番号２６６６４）
ＤＶＫＲＡＬＥＥＬＶＳＲＬＲＫＬＬＥＤＶＫＫＡＳＥＤＩＶＲＥＶＥＲＩＶＲＥＬＡＫＲＳＤＥＩＬＫＫＬＥＤＩＶＥＫＬＲＥ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿６４（配列番号２６６６５）
ＤＥＡＥＲＲＲＲＥＬＫＤＫＬＤＲＬＲＥＥＨＥＥＶＫＲＲＬＥＥＥＬＴＲＬＲＥＴＨＫＫＩＥＫＥＬＲＥＡＬＫＲＶＲＤＲＳＴ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿６５（配列番号２６６６６）
ＤＥＡＥＲＲＲＲＥＬＫＤＫＬＤＲＬＲＥＥＨＥＥＶＫＲＲＬＥＥＥＬＴＲＬＲＥＴＨＫＫＩＥＫＥＬＲＥＡＬＫＲＶＲＤＲＳＴ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿６６（配列番号２６６６７）
ＫＩＡＥＥＩＥＲＥＬＥＥＬＲＲＭＩＫＲＬＨＥＤＬＥＲＫＬＫＥＳＥＤＥＬＲＥＩＥＡＲＬＥＥＫＩＲＲＬＥＥＫＬＥＲＫＲＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿６７（配列番号２６６６８）
ＤＶＫＲＡＬＥＥＬＶＳＲＬＲＫＬＬＥＤＶＫＫＡＳＥＤＩＶＲＥＶＥＲＩＶＲＥＬＡＫＲＳＤＥＩＬＫＫＬＥＤＩＶＥＫＬＲＥ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿６８（配列番号２６６６９）
ＳＥＡＥＲＬＡＤＥＶＲＫＡＶＫＫＳＥＥＤＮＥＴＬＶＲＥＶＥＫＡＶＲＥＬＫＫＮＮＫＴＷＶＤＥＶＲＫＬＭＫＲＬＶＤＬＬＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿６９（配列番号２６６７０）
ＳＥＡＥＲＬＡＤＥＶＲＫＡＶＫＫＳＥＥＤＮＥＴＬＶＲＥＶＥＫＡＶＲＥＬＫＫＮＮＫＴＷＶＤＥＶＲＫＬＭＫＲＬＶＤＬＬＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿７０（配列番号２６６７１）
ＤＫＤＫＲＬＥＥＬＬＫＲＬＫＥＬＮＤＫＴＦＥＥＬＥＲＩＬＥＥＬＫＲＡＮＥＡＳＬＲＥＡＥＲＩＬＥＥＬＲＡＲＩＥＧＧＮＬ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿７１（配列番号２６６７２）
ＳＥＡＥＤＬＥＥＬＩＫＥＬＡＥＬＬＫＤＶＩＲＫＬＥＫＩＮＲＲＬＶＫＩＬＥＤＩＩＲＲＬＫＥＩＳＫＥＡＥＥＥＬＲＫＧＴＶ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿７２（配列番号２６６７３）
ＳＤＫＥＥＩＫＲＲＶＥＫＴＡＲＤＬＥＴＥＨＤＫＩＫＫＲＬＥＤＴＶＲＤＩＫＲＥＬＤＥＬＬＥＫＹＥＲＶＬＲＫＩＥＫＴＬＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿７３（配列番号２６６７４）
ＳＥＡＥＫＩＲＥＡＬＥＴＮＬＲＬＬＥＥＬＩＫＲＬＫＥＩＬＤＴＨＮＥＬＬＲＲＶＩＥＴＬＥＲＬＬＫＥＬＬＥＬＬＥＥＧＧＬ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿７４（配列番号２６６７５）
ＳＥＡＥＫＩＲＥＡＬＥＴＮＬＲＬＬＥＥＬＩＫＲＬＫＥＩＬＤＴＨＮＥＬＬＲＲＶＩＥＴＬＥＲＬＬＫＥＬＬＥＬＬＥＥＧＧＬ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿７５（配列番号２６６７６）
ＳＫＥＥＲＬＲＥＶＡＥＫＨＫＫＤＬＥＤＩＶＫＲＶＤＥＡＡＫＥＴＡＲＲＬＥＥＩＬＫＲＬＥＥＶＬＫＫＩＬＤＤＬＥＫＧＰＤ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿７６（配列番号２６６７７）
ＳＬＥＥＩＴＫＲＬＬＥＬＶＥＥＮＬＡＲＨＥＥＩＬＲＥＬＬＥＬＡＫＲＬＡＫＥＤＲＤＩＬＥＥＶＬＫＬＩＥＥＬＬＫＬＬＥＤ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿７７（配列番号２６６７８）
ＳＫＥＥＴＬＫＲＬＬＤＥＬＥＫＲＮＲＥＴＶＥＲＬＥＲＬＬＫＥＬＥＤＲＮＲＡＳＬＥＥＬＥＡＶＬＥＥＬＥＲＫＩＥＥＳＧＬ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿７８（配列番号２６６７９）
ＳＫＥＥＴＬＫＲＬＬＤＥＬＥＫＲＮＲＥＴＶＥＲＬＥＲＬＬＫＥＬＥＤＲＮＲＡＳＬＥＥＬＥＡＶＬＥＥＬＥＲＫＩＥＥＳＧＬ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿７９（配列番号２６６８０）
ＳＫＥＥＴＬＫＲＬＬＤＥＬＥＫＲＮＲＥＴＶＥＲＬＥＲＬＬＫＥＬＥＤＲＮＲＡＳＬＥＥＬＥＡＶＬＥＥＬＥＲＫＩＥＥＳＧＬ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿８０（配列番号２６６８１）
ＳＴＲＥＫＡＫＫＶＬＤＴＬＲＡＤＮＥＤＭＫＲＶＶＥＫＩＬＲＡＬＫＲＴＮＥＲＡＥＫＬＡＲＥＩＴＥＥＩＫＲＩＬＫＥＶＧＶ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿８１（配列番号２６６８２）
ＤＡＥＥＶＶＫＲＬＡＤＶＬＲＥＮＤＥＴＩＲＫＶＶＥＤＬＶＲＩＡＥＥＮＤＲＬＷＫＫＬＶＥＤＩＡＥＩＬＲＲＩＶＥＬＬＲＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿８２（配列番号２６６８３）
ＳＫＥＥＴＬＫＲＬＬＤＥＬＥＫＲＮＲＥＴＶＥＲＬＥＲＬＬＫＥＬＥＤＲＮＲＡＳＬＥＥＬＥＡＶＬＥＥＬＥＲＫＩＥＥＳＧＬ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿８３（配列番号２６６８４）
ＳＴＲＥＫＡＫＫＶＬＤＴＬＲＡＤＮＥＤＭＫＲＶＶＥＫＩＬＲＡＬＫＲＴＮＥＲＡＥＫＬＡＲＥＩＴＥＥＩＫＲＩＬＫＥＶＧＶ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿８４（配列番号２６６８５）
ＳＫＥＥＥＶＥＫＶＬＲＫＷＥＥＩＬＲＲＬＩＥＥＮＫＲＡＮＤＫＩＲＲＥＹＥＥＬＶＫＥＩＲＲＶＬＥＥＩＫＥＶＡＥＲＬＧＶ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿８５（配列番号２６６８６）
ＤＲＥＫＳＶＲＤＩＥＥＤＬＫＲＶＬＤＫＬＲＲＲＶＥＴＳＫＥＥＬＫＫＶＬＫＡＤＫＥＮＡＤＥＬＥＫＴＬＲＤＶＶＲＥＬＤＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿８６（配列番号２６６８７）
ＳＤＫＥＥＩＫＲＲＶＥＫＴＡＲＤＬＥＴＥＨＤＫＩＫＫＲＬＥＤＴＶＲＤＩＫＲＥＬＤＥＬＬＥＫＹＥＲＶＬＲＫＩＥＫＴＬＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿８７（配列番号２６６８８）
ＳＴＲＥＫＡＫＫＶＬＤＴＬＲＡＤＮＥＤＭＫＲＶＶＥＫＩＬＲＡＬＫＲＴＮＥＲＡＥＫＬＡＲＥＩＴＥＥＩＫＲＩＬＫＥＶＧＶ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿８８（配列番号２６６８９）
ＳＫＤＥＥＬＡＲＬＬＥＥＬＶＥＲＷＲＫＩＶＥＤＬＥＲＤＨＲＲＬＶＫＥＩＲＥＬＶＥＲＩＲＫＫＬＥＥＬＶＤＲＩＲＫＮＧＩ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿８９（配列番号２６６９０）
ＳＥＡＥＲＬＡＤＥＶＲＫＡＶＫＫＳＥＥＤＮＥＴＬＶＲＥＶＥＫＡＶＲＥＬＫＫＮＮＫＴＷＶＤＥＶＲＫＬＭＫＲＬＶＤＬＬＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿９０（配列番号２６６９１）
ＳＫＤＥＥＬＡＲＬＬＥＥＬＶＥＲＷＲＫＩＶＥＤＬＥＲＤＨＲＲＬＶＫＥＩＲＥＬＶＥＲＩＲＫＫＬＥＥＬＶＤＲＩＲＫＮＧＩ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿９１（配列番号２６６９２）
ＫＥＩＥＥＴＬＫＥＬＥＤＬＮＲＥＭＶＥＴＮＲＲＶＬＥＥＴＲＲＬＮＫＥＴＶＤＲＶＫＡＴＬＤＥＬＡＫＭＬＫＫＬＶＤＤＶＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿９２（配列番号２６６９３）
ＳＥＡＥＲＬＡＤＥＶＲＫＡＶＫＫＳＥＥＤＮＥＴＬＶＲＥＶＥＫＡＶＲＥＬＫＫＮＮＫＴＷＶＤＥＶＲＫＬＭＫＲＬＶＤＬＬＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿９３（配列番号２６６９４）
ＳＫＥＥＴＬＫＲＬＬＤＥＬＥＫＲＮＲＥＴＶＥＲＬＥＲＬＬＫＥＬＥＤＲＮＲＡＳＬＥＥＬＥＡＶＬＥＥＬＥＲＫＩＥＥＳＧＬ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿９４（配列番号２６６９５）
ＤＫＡＥＶＬＲＥＡＬＫＬＬＫＤＬＬＥＥＬＩＫＩＨＥＥＳＬＫＲＩＬＤＬＩＤＴＬＶＫＶＨＥＤＡＬＲＡＬＫＥＬＬＥＲＳＧＬ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿９５（配列番号２６６９６）
ＳＫＥＥＥＶＥＫＶＬＲＫＷＥＥＩＬＲＲＬＩＥＥＮＫＲＡＮＤＫＩＲＲＥＹＥＥＬＶＫＥＩＲＲＶＬＥＥＩＫＥＶＡＥＲＬＧＶ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿９６（配列番号２６６９７）
ＳＫＥＥＴＬＫＲＬＬＤＥＬＥＫＲＮＲＥＴＶＥＲＬＥＲＬＬＫＥＬＥＤＲＮＲＡＳＬＥＥＬＥＡＶＬＥＥＬＥＲＫＩＥＥＳＧＬ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿９７（配列番号２６６９８）
ＳＥＲＶＫＥＩＬＥＲＩＬＲＶＶＥＥＡＶＲＬＮＥＥＳＬＲＲＩＬＤＶＶＲＫＡＶＫＬＤＲＥＳＬＫＫＩＬＤＶＶＥＥＡＶＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿９８（配列番号２６６９９）
ＳＥＲＶＫＥＩＬＥＲＩＬＲＶＶＥＥＡＶＲＬＮＥＥＳＬＲＲＩＬＤＶＶＲＫＡＶＫＬＤＲＥＳＬＫＫＩＬＤＶＶＥＥＡＶＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿９９（配列番号２６７００）
ＤＥＲＲＩＡＥＲＩＲＥＬＬＲＥＳＫＫＬＶＲＤＶＶＥＥＡＫＲＬＬＫＥＮＲＤＳＴＲＫＩＩＥＤＩＲＲＬＬＲＫＩＥＤＳＴＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１００（配列番号２６７０１）
ＤＡＬＳＲＬＬＥＥＬＬＲＶＶＤＤＬＩＲＶＬＫＥＬＩＤＫＳＲＫＶＩＥＥＬＬＥＬＬＫＲＩＮＥＥＮＬＫＶＬＡＥＩＩＫ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１０１（配列番号２６７０２）
ＤＥＲＲＩＡＥＲＩＲＥＬＬＲＥＳＫＫＬＶＲＤＶＶＥＥＡＫＲＬＬＫＥＮＲＤＳＴＲＫＩＩＥＤＩＲＲＬＬＲＫＩＥＤＳＴＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１０２（配列番号２６７０３）
ＥＡＬＲＫＬＶＥＬＬＶＥＶＬＲＲＬＩＲＶＮＲＥＬＶＫＬＬＲＥＶＬＥＲＬＬＲＩＬＲＥＳＶＫＫＬＫＲＬＩＥＫＶＩＫＤＡＴ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１０３（配列番号２６７０４）
ＥＡＬＲＫＬＶＥＬＬＶＥＶＬＲＲＬＩＲＶＮＲＥＬＶＫＬＬＲＥＶＬＥＲＬＬＲＩＬＲＥＳＶＫＫＬＫＲＬＩＥＫＶＩＫＤＡＴ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１０４（配列番号２６７０５）
ＡＡＫＲＬＶＥＥＬＬＫＡＶＴＤＬＳＲＫＮＫＲＩＬＥＥＬＬＫＡＩＥＴＬＳＤＥＮＫＫＩＬＴＥＩＬＤＡＬＲＲＬＶＥＫＩＥＫ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１０５（配列番号２６７０６）
ＥＡＬＲＫＬＶＥＬＬＶＥＶＬＲＲＬＩＲＶＮＲＥＬＶＫＬＬＲＥＶＬＥＲＬＬＲＩＬＲＥＳＶＫＫＬＫＲＬＩＥＫＶＩＫＤＡＴ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１０６（配列番号２６７０７）
ＥＡＬＲＫＬＶＥＬＬＶＥＶＬＲＲＬＩＲＶＮＲＥＬＶＫＬＬＲＥＶＬＥＲＬＬＲＩＬＲＥＳＶＫＫＬＫＲＬＩＥＫＶＩＫＤＡＴ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１０７（配列番号２６７０８）
ＤＡＬＳＲＬＬＥＥＬＬＲＶＶＤＤＬＩＲＶＬＫＥＬＩＤＫＳＲＫＶＩＥＥＬＬＥＬＬＫＲＩＮＥＥＮＬＫＶＬＡＥＩＩＫ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１０８（配列番号２６７０９）
ＤＡＬＳＲＬＬＥＥＬＬＲＶＶＤＤＬＩＲＶＬＫＥＬＩＤＫＳＲＫＶＩＥＥＬＬＥＬＬＫＲＩＮＥＥＮＬＫＶＬＡＥＩＩＫ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１０９（配列番号２６７１０）
ＲＡＶＫＫＬＤＥＩＶＫＥＶＡＫＫＬＥＤＶＶＲＡＮＥＥＬＷＲＡＬＶＥＬＮＫＥＳＶＲＲＬＲＥＩＶＥＲＶＡＲＤＬＥＥＴＡＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１１０（配列番号２６７１１）
ＤＲＬＤＫＶＥＥＬＶＫＫＬＬＥＤＴＫＲＴＶＤＲＶＲＥＬＶＲＫＩＬＫＫＳＲＥＴＬＥＥＬＥＲＬＩＥＫＩＬＲＥＬＥＫＤＡＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１１１（配列番号２６７１２）
ＤＡＬＳＲＬＬＥＥＬＬＲＶＶＤＤＬＩＲＶＬＫＥＬＩＤＫＳＲＫＶＩＥＥＬＬＥＬＬＫＲＩＮＥＥＮＬＫＶＬＡＥＩＩＫ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１１２（配列番号２６７１３）
ＲＡＶＫＫＬＤＥＩＶＫＥＶＡＫＫＬＥＤＶＶＲＡＮＥＥＬＷＲＡＬＶＥＬＮＫＥＳＶＲＲＬＲＥＩＶＥＲＶＡＲＤＬＥＥＴＡＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１１３（配列番号２６７１４）
ＲＡＶＫＫＬＤＥＩＶＫＥＶＡＫＫＬＥＤＶＶＲＡＮＥＥＬＷＲＡＬＶＥＬＮＫＥＳＶＲＲＬＲＥＩＶＥＲＶＡＲＤＬＥＥＴＡＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１１４（配列番号２６７１５）
ＳＥＤＤＬＫＲＶＶＤＥＶＥＫＫＬＲＥＬＫＲＲＹＡＥＡＬＥＲＩＫＥＫＩＫＥＬＫＤＲＹＥＲＡＶＲＥＶＶＡＥＬＲＫＴＴＫ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１１５（配列番号２６７１６）
ＲＡＶＫＫＬＤＥＩＶＫＥＶＡＫＫＬＥＤＶＶＲＡＮＥＥＬＷＲＡＬＶＥＬＮＫＥＳＶＲＲＬＲＥＩＶＥＲＶＡＲＤＬＥＥＴＡＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１１６（配列番号２６７１７）
ＤＥＶＥＲＥＩＲＲＶＫＥＤＬＤＲＩＬＥＥＹＲＲＬＬＥＥＩＫＲＫＬＥＥＩＬＲＲＶＥＥＬＨＲＲＬＲＲＫＬＥＥＩＤＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１１７（配列番号２６７１８）
ＳＥＤＤＬＫＲＶＶＤＥＶＥＫＫＬＲＥＬＫＲＲＹＡＥＡＬＥＲＩＫＥＫＩＫＥＬＫＤＲＹＥＲＡＶＲＥＶＶＡＥＬＲＫＴＴＫ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿１１８（配列番号２６７１９）
ＤＥＡＫＥＬＬＤＥＩＲＫＡＶＫＥＳＥＤＲＬＥＫＬＬＲＤＹＥＫＥＬＲＲＬＥＫＥＬＲＤＬＫＲＲＩＥＥＫＬＥＥＬＲＲＧＳＬ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿１１９（配列番号２６７２０）
ＳＥＫＥＤＡＡＲＫＬＲＫＬＶＥＥＬＴＲＥＹＥＥＬＶＫＫＬＥＲＬＩＥＥＩＥＫＶＳＥＥＳＶＲＫＬＥＫＬＬＡＥＩＳＥＥＶＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿１２０（配列番号２６７２１）
ＳＥＤＥＩＩＫＫＩＩＥＤＬＲＲＶＬＫＥＶＥＥＩＨＫＥＶＥＥＲＬＤＫＶＬＫＥＡＥＥＭＨＫＥＶＬＫＥＬＤＲＶＬＤＥＶＫＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿１２１（配列番号２６７２２）
ＳＫＡＥＥＩＡＥＫＬＤＲＬＬＥＥＮＲＲＡＬＥＥＩＴＴＲＬＤＤＬＬＲＲＮＫＤＡＬＲＫＶＭＥＫＬＫＲＬＬＤＤＬＲＲＧＧＩ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿１２２（配列番号２６７２３）
ＳＥＫＥＫＬＬＫＥＳＥＥＥＶＲＲＬＲＲＴＬＥＥＬＬＲＫＹＲＥＶＬＥＲＬＲＫＥＬＲＥＩＥＥＲＶＲＤＶＶＲＲＬＫＥＶＬＤ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿１２３（配列番号２６７２４）
ＳＥＫＥＤＡＡＲＫＬＲＫＬＶＥＥＬＴＲＥＹＥＥＬＶＫＫＬＥＲＬＩＥＥＩＥＫＶＳＥＥＳＶＲＫＬＥＫＬＬＡＥＩＳＥＥＶＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿１２４（配列番号２６７２５）
ＳＫＥＥＴＬＲＫＥＡＥＤＬＬＲＲＬＥＥＬＴＲＲＬＥＫＫＡＲＥＬＬＥＲＡＫＫＬＳＲＤＬＡＥＥＬＫＲＬＬＫＥＬＲＥＫＧＶ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿１２５（配列番号２６７２６）
ＳＥＫＥＤＡＡＲＫＬＲＫＬＶＥＥＬＴＲＥＹＥＥＬＶＫＫＬＥＲＬＩＥＥＩＥＫＶＳＥＥＳＶＲＫＬＥＫＬＬＡＥＩＳＥＥＶＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿１２６（配列番号２６７２７）
ＳＫＡＥＥＩＡＥＫＬＤＲＬＬＥＥＮＲＲＡＬＥＥＩＴＴＲＬＤＤＬＬＲＲＮＫＤＡＬＲＫＶＭＥＫＬＫＲＬＬＤＤＬＲＲＧＧＩ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿１２７（配列番号２６７２８）
ＳＥＫＥＤＡＡＲＫＬＲＫＬＶＥＥＬＴＲＥＹＥＥＬＶＫＫＬＥＲＬＩＥＥＩＥＫＶＳＥＥＳＶＲＫＬＥＫＬＬＡＥＩＳＥＥＶＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿１２８（配列番号２６７２９）
ＳＫＡＥＥＩＡＥＫＬＤＲＬＬＥＥＮＲＲＡＬＥＥＩＴＴＲＬＤＤＬＬＲＲＮＫＤＡＬＲＫＶＭＥＫＬＫＲＬＬＤＤＬＲＲＧＧＩ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿１２９（配列番号２６７３０）
ＳＫＥＥＴＬＲＫＥＡＥＤＬＬＲＲＬＥＥＬＴＲＲＬＥＫＫＡＲＥＬＬＥＲＡＫＫＬＳＲＤＬＡＥＥＬＫＲＬＬＫＥＬＲＥＫＧＶ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿１３０（配列番号２６７３１）
ＳＲＶＥＥＬＫＫＬＩＥＤＩＬＲＩＳＲＥＶＶＥＲＩＫＲＶＡＥＤＩＨＲＩＮＲＲＶＬＤＤＬＲＫＬＩＥＤＩＬＲＴＶＥＥＩＬＡ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿１３１（配列番号２６７３２）
ＳＫＥＥＴＬＲＫＥＡＥＤＬＬＲＲＬＥＥＬＴＲＲＬＥＫＫＡＲＥＬＬＥＲＡＫＫＬＳＲＤＬＡＥＥＬＫＲＬＬＫＥＬＲＥＫＧＶ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿１３２（配列番号２６７３３）
ＳＫＡＥＥＩＡＥＫＬＤＲＬＬＥＥＮＲＲＡＬＥＥＩＴＴＲＬＤＤＬＬＲＲＮＫＤＡＬＲＫＶＭＥＫＬＫＲＬＬＤＤＬＲＲＧＧＩ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿１３３（配列番号２６７３４）
ＳＫＥＥＴＬＲＫＥＡＥＤＬＬＲＲＬＥＥＬＴＲＲＬＥＫＫＡＲＥＬＬＥＲＡＫＫＬＳＲＤＬＡＥＥＬＫＲＬＬＫＥＬＲＥＫＧＶ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿１３４（配列番号２６７３５）
ＳＥＫＥＤＡＡＲＫＬＲＫＬＶＥＥＬＴＲＥＹＥＥＬＶＫＫＬＥＲＬＩＥＥＩＥＫＶＳＥＥＳＶＲＫＬＥＫＬＬＡＥＩＳＥＥＶＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿１３５（配列番号２６７３６）
ＳＫＥＥＴＬＲＫＥＡＥＤＬＬＲＲＬＥＥＬＴＲＲＬＥＫＫＡＲＥＬＬＥＲＡＫＫＬＳＲＤＬＡＥＥＬＫＲＬＬＫＥＬＲＥＫＧＶ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿１３６（配列番号２６７３７）
ＳＥＲＥＴＶＫＲＲＬＥＥＬＬＫＥＶＫＲＴＬＤＫＬＫＥＥＨＤＲＬＬＥＤＶＲＲＶＶＥＥＬＫＲＥＨＤＫＬＬＫＥＶＫＤＳＧＶ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿１３７（配列番号２６７３８）
ＳＥＫＥＤＡＡＲＫＬＲＫＬＶＥＥＬＴＲＥＹＥＥＬＶＫＫＬＥＲＬＩＥＥＩＥＫＶＳＥＥＳＶＲＫＬＥＫＬＬＡＥＩＳＥＥＶＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿１３８（配列番号２６７３９）
ＳＫＥＥＴＬＲＫＥＡＥＤＬＬＲＲＬＥＥＬＴＲＲＬＥＫＫＡＲＥＬＬＥＲＡＫＫＬＳＲＤＬＡＥＥＬＫＲＬＬＫＥＬＲＥＫＧＶ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿１３９（配列番号２６７４０）
ＫＥＲＥＥＶＫＥＫＬＤＲＬＬＥＥＶＥＫＴＶＲＥＬＫＲＥＨＤＥＬＬＫＥＶＥＫＬＶＲＤＬＫＫＥＨＤＥＬＬＫＫＶＫＤＤＧＶ
＞３ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿１４０（配列番号２６７４１）
ＳＲＥＥＶＬＲＥＬＥＥＶＩＥＤＮＲＲＬＬＥＥＬＩＥＫＳＫＫＶＬＤＥＳＬＫＬＩＤＥＬＬＲＲＬＥＥＶＬＥＲＶＬＲＬＬＥＥ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１（配列番号２６７４２）
ＤＥＶＶＫＲＶＲＤＬＬＤＴＶＲＲＲＮＥＫＶＮＥＤＶＫＲＭＮＤＫＬＲＲＤＮＥＤＶＩＲＲＶＥＫＬＬＲＥＬＥＥＫＲＲＴ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿２（配列番号２６７４３）
ＳＥＤＳＶＥＲＩＡＲＥＬＥＲＮＬＤＤＬＡＲＶＬＫＥＳＥＤＤＬＡＥＩＬＲＲＬＫＥＶＬＥＥＳＥＲＤＬＥＲＶＥＲＥＶＲＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿３（配列番号２６７４４）
ＳＫＥＬＬＥＫＡＫＡＶＶＤＥＩＫＲＬＡＥＥＳＬＫＲＬＥＤＬＳＲＤＨＫＲＲＡＫＥＬＮＤＥＩＡＫＶＶＤＥＬＡＫＲＡＴ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿４（配列番号２６７４５）
ＳＫＥＫＩＤＲＩＩＲＥＬＥＲＩＬＥＥＡＫＫＫＨＥＤＶＬＲＲＬＥＤＳＬＲＲＶＡＥＬＬＫＡＡＬＤＲＬＲＥＩＶＤＲＬＲＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿５（配列番号２６７４６）
ＤＥＶＶＫＲＶＲＤＬＬＤＴＶＲＲＲＮＥＫＶＮＥＤＶＫＲＭＮＤＫＬＲＲＤＮＥＤＶＩＲＲＶＥＫＬＬＲＥＬＥＥＫＲＲＴ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿６（配列番号２６７４７）
ＤＩＫＴＬＬＤＲＶＲＫＬＡＥＥＤＡＥＲＬＤＲＬＲＲＥＳＥＥＬＮＥＲＶＲＲＶＤＫＫＬＬＥＥＩＲＲＫＡＫＫＶＥＤＤＴＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿７（配列番号２６７４８）
ＤＡＥＴＬＬＲＥＬＥＫＬＳＲＤＮＫＥＬＬＫＫＩＥＫＥＩＲＤＬＩＫＥＤＫＥＲＮＩＥＬＳＥＲＬＲＫＬＶＥＥＬＫＫＫＡＴ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿８（配列番号２６７４９）
ＤＥＶＶＫＲＶＲＤＬＬＤＴＶＲＲＲＮＥＫＶＮＥＤＶＫＲＭＮＤＫＬＲＲＤＮＥＤＶＩＲＲＶＥＫＬＬＲＥＬＥＥＫＲＲＴ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿９（配列番号２６７５０）
ＤＩＫＴＬＬＤＲＶＲＫＬＡＥＥＤＡＥＲＬＤＲＬＲＲＥＳＥＥＬＮＥＲＶＲＲＶＤＫＫＬＬＥＥＩＲＲＫＡＫＫＶＥＤＤＴＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１０（配列番号２６７５１）
ＳＥＥＬＳＡＥＶＫＫＬＬＤＥＶＲＫＡＬＡＲＨＫＤＥＮＤＫＬＬＫＥＩＥＤＳＬＲＲＨＫＥＥＮＤＲＬＬＥＫＬＫＥＳＴＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１１（配列番号２６７５２）
ＤＡＤＤＶＬＡＲＶＥＥＬＡＫＲＡＨＤＥＮＥＲＬＩＲＥＶＥＥＬＶＲＡＨＮＫＲＮＫＥＬＶＤＥＶＫＲＬＶＥＫＶＩＥＥＥＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１２（配列番号２６７５３）
ＳＫＥＫＩＤＲＩＩＲＥＬＥＲＩＬＥＥＡＫＫＫＨＥＤＶＬＲＲＬＥＤＳＬＲＲＶＡＥＬＬＫＡＡＬＤＲＬＲＥＩＶＤＲＬＲＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１３（配列番号２６７５４）
ＤＥＶＶＫＲＶＲＤＬＬＤＴＶＲＲＲＮＥＫＶＮＥＤＶＫＲＭＮＤＫＬＲＲＤＮＥＤＶＩＲＲＶＥＫＬＬＲＥＬＥＥＫＲＲＴ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１４（配列番号２６７５５）
ＳＥＥＬＳＡＥＶＫＫＬＬＤＥＶＲＫＡＬＡＲＨＫＤＥＮＤＫＬＬＫＥＩＥＤＳＬＲＲＨＫＥＥＮＤＲＬＬＥＫＬＫＥＳＴＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１５（配列番号２６７５６）
ＤＡＥＴＶＬＲＳＡＥＤＩＶＡＫＮＲＫＬＡＥＥＶＬＲＲＶＫＫＩＶＥＥＮＲＫＩＡＳＥＶＬＤＤＶＲＫＬＶＥＤＶＬＡＲＡＳ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１６（配列番号２６７５７）
ＤＡＤＤＶＬＡＲＶＥＥＬＡＫＲＡＨＤＥＮＥＲＬＩＲＥＶＥＥＬＶＲＡＨＮＫＲＮＫＥＬＶＤＥＶＫＲＬＶＥＫＶＩＥＥＥＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１７（配列番号２６７５８）
ＳＫＥＫＩＤＲＩＩＲＥＬＥＲＩＬＥＥＡＫＫＫＨＥＤＶＬＲＲＬＥＤＳＬＲＲＶＡＥＬＬＫＡＡＬＤＲＬＲＥＩＶＤＲＬＲＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１８（配列番号２６７５９）
ＤＥＥＫＬＫＤＬＩＲＫＬＲＤＩＬＲＲＡＡＥＡＨＫＫＬＩＤＤＡＲＥＳＬＥＲＡＫＲＥＨＥＫＬＩＤＲＬＫＫＩＬＥＥＬＥＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１９（配列番号２６７６０）
ＤＩＫＴＬＬＤＲＶＲＫＬＡＥＥＤＡＥＲＬＤＲＬＲＲＥＳＥＥＬＮＥＲＶＲＲＶＤＫＫＬＬＥＥＩＲＲＫＡＫＫＶＥＤＤＴＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿２０（配列番号２６７６１）
ＤＡＴＲＶＩＥＥＡＫＲＩＬＤＥＡＲＫＬＮＥＥＴＩＲＲＳＥＥＬＶＲＲＩＥＲＶＩＥＥＩＩＫＲＳＥＫＬＬＥＤＶＡＲＥＳＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿２１（配列番号２６７６２）
ＳＥＥＬＳＡＥＶＫＫＬＬＤＥＶＲＫＡＬＡＲＨＫＤＥＮＤＫＬＬＫＥＩＥＤＳＬＲＲＨＫＥＥＮＤＲＬＬＥＫＬＫＥＳＴＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿２２（配列番号２６７６３）
ＤＡＥＴＶＬＲＳＡＥＤＩＶＡＫＮＲＫＬＡＥＥＶＬＲＲＶＫＫＩＶＥＥＮＲＫＩＡＳＥＶＬＤＤＶＲＫＬＶＥＤＶＬＡＲＡＳ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿２３（配列番号２６７６４）
ＤＡＤＤＶＬＡＲＶＥＥＬＡＫＲＡＨＤＥＮＥＲＬＩＲＥＶＥＥＬＶＲＡＨＮＫＲＮＫＥＬＶＤＥＶＫＲＬＶＥＫＶＩＥＥＥＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿２４（配列番号２６７６５）
ＳＫＥＬＬＥＫＡＫＡＶＶＤＥＩＫＲＬＡＥＥＳＬＫＲＬＥＤＬＳＲＤＨＫＲＲＡＫＥＬＮＤＥＩＡＫＶＶＤＥＬＡＫＲＡＴ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿２５（配列番号２６７６６）
ＤＥＥＶＬＫＫＬＡＥＩＶＲＲＶＫＥＥＮＲＫＶＮＥＥＶＥＫＲＬＲＥＬＥＥＥＮＫＫＶＩＥＤＬＫＳＴＶＥＥＬＶＥＲＬＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿２６（配列番号２６７６７）
ＤＥＥＶＬＫＫＬＡＥＩＶＲＲＶＫＥＥＮＲＫＶＮＥＥＶＥＫＲＬＲＥＬＥＥＥＮＫＫＶＩＥＤＬＫＳＴＶＥＥＬＶＥＲＬＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿２７（配列番号２６７６８）
ＤＫＬＬＫＥＡＲＤＬＩＲＥＩＥＫＲＬＥＥＬＬＫＲＶＥＫＬＴＥＤＡＫＲＤＬＥＲＳＮＲＥＨＫＥＬＡＤＲＩＫＥＴＡＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿２８（配列番号２６７６９）
ＤＫＤＳＡＲＥＬＥＲＩＶＫＥＮＡＥＬＡＥＲＶＦＲＥＶＥＫＩＶＲＥＮＴＫＬＡＥＤＳＶＲＥＬＫＲＬＶＥＥＬＫＫＲＡＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿２９（配列番号２６７７０）
ＳＫＥＫＩＤＲＩＩＲＥＬＥＲＩＬＥＥＡＫＫＫＨＥＤＶＬＲＲＬＥＤＳＬＲＲＶＡＥＬＬＫＡＡＬＤＲＬＲＥＩＶＤＲＬＲＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿３０（配列番号２６７７１）
ＤＥＥＫＬＫＤＬＩＲＫＬＲＤＩＬＲＲＡＡＥＡＨＫＫＬＩＤＤＡＲＥＳＬＥＲＡＫＲＥＨＥＫＬＩＤＲＬＫＫＩＬＥＥＬＥＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿３１（配列番号２６７７２）
ＤＥＶＶＫＲＶＲＤＬＬＤＴＶＲＲＲＮＥＫＶＮＥＤＶＫＲＭＮＤＫＬＲＲＤＮＥＤＶＩＲＲＶＥＫＬＬＲＥＬＥＥＫＲＲＴ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿３２（配列番号２６７７３）
ＤＥＥＶＬＲＴＬＥＥＩＩＲＲＬＴＫＥＬＥＤＶＬＲＥＹＥＲＥＬＲＲＬＥＥＥＮＫＲＶＩＤＫＴＥＥＥＩＲＲＬＡＤＲＬＲＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿３３（配列番号２６７７４）
ＤＥＲＩＬＲＥＬＥＥＲＶＫＥＬＥＫＥＡＲＥＩＬＫＲＳＥＤＥＴＤＫＬＲＥＫＡＥＲＩＬＥＤＬＥＲＡＮＲＲＴＭＤＥＡＲＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿３４（配列番号２６７７５）
ＳＥＥＬＳＡＥＶＫＫＬＬＤＥＶＲＫＡＬＡＲＨＫＤＥＮＤＫＬＬＫＥＩＥＤＳＬＲＲＨＫＥＥＮＤＲＬＬＥＫＬＫＥＳＴＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿３５（配列番号２６７７６）
ＬＰＥＥＶＬＲＥＬＥＥＬＬＫＥＳＥＥＲＩＫＲＩＥＥＥＩＫＫＩＩＤＫＳＲＥＤＩＫＲＶＬＥＥＩＥＲＬＮＡＫＡＡＤＤＬＲＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿３６（配列番号２６７７７）
ＤＡＤＤＶＬＡＲＶＥＥＬＡＫＲＡＨＤＥＮＥＲＬＩＲＥＶＥＥＬＶＲＡＨＮＫＲＮＫＥＬＶＤＥＶＫＲＬＶＥＫＶＩＥＥＥＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿３７（配列番号２６７７８）
ＤＥＥＶＬＫＫＬＡＥＩＶＲＲＶＫＥＥＮＲＫＶＮＥＥＶＥＫＲＬＲＥＬＥＥＥＮＫＫＶＩＥＤＬＫＳＴＶＥＥＬＶＥＲＬＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿３８（配列番号２６７７９）
ＤＫＬＬＫＥＡＲＤＬＩＲＥＩＥＫＲＬＥＥＬＬＫＲＶＥＫＬＴＥＤＡＫＲＤＬＥＲＳＮＲＥＨＫＥＬＡＤＲＩＫＥＴＡＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿３９（配列番号２６７８０）
ＤＥＥＶＬＲＴＬＥＥＩＩＲＲＬＴＫＥＬＥＤＶＬＲＥＹＥＲＥＬＲＲＬＥＥＥＮＫＲＶＩＤＫＴＥＥＥＩＲＲＬＡＤＲＬＲＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿４０（配列番号２６７８１）
ＤＲＲＩＥＫＶＬＫＥＩＥＥＫＩＲＥＶＩＫＥＷＥＲＶＨＲＥＶＥＥＬＬＫＲＬＩＤＥＮＲＫＶＬＤＥＩＲＫＬＬＥＥＫＳＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿４１（配列番号２６７８２）
ＤＥＲＩＬＲＥＬＥＥＲＶＫＥＬＥＫＥＡＲＥＩＬＫＲＳＥＤＥＴＤＫＬＲＥＫＡＥＲＩＬＥＤＬＥＲＡＮＲＲＴＭＤＥＡＲＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿４２（配列番号２６７８３）
ＳＥＥＬＳＡＥＶＫＫＬＬＤＥＶＲＫＡＬＡＲＨＫＤＥＮＤＫＬＬＫＥＩＥＤＳＬＲＲＨＫＥＥＮＤＲＬＬＥＫＬＫＥＳＴＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿４３（配列番号２６７８４）
ＤＥＥＶＬＫＫＬＡＥＩＶＲＲＶＫＥＥＮＲＫＶＮＥＥＶＥＫＲＬＲＥＬＥＥＥＮＫＫＶＩＥＤＬＫＳＴＶＥＥＬＶＥＲＬＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿４４（配列番号２６７８５）
ＳＫＥＫＩＤＲＩＩＲＥＬＥＲＩＬＥＥＡＫＫＫＨＥＤＶＬＲＲＬＥＤＳＬＲＲＶＡＥＬＬＫＡＡＬＤＲＬＲＥＩＶＤＲＬＲＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿４５（配列番号２６７８６）
ＤＲＲＩＥＫＶＬＫＥＩＥＥＫＩＲＥＶＩＫＥＷＥＲＶＨＲＥＶＥＥＬＬＫＲＬＩＤＥＮＲＫＶＬＤＥＩＲＫＬＬＥＥＫＳＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿４６（配列番号２６７８７）
ＴＬＲＥＬＡＲＳＩＲＫＬＳＡＥＮＫＥＲＬＫＥＬＬＲＥＬＫＫＬＳＤＥＮＫＥＲＩＫＫＬＬＳＤＡＥＫＩＩＥＤＶＡＲＲＡＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿４７（配列番号２６７８８）
ＤＥＲＩＬＲＥＬＥＥＲＶＫＥＬＥＫＥＡＲＥＩＬＫＲＳＥＤＥＴＤＫＬＲＥＫＡＥＲＩＬＥＤＬＥＲＡＮＲＲＴＭＤＥＡＲＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿４８（配列番号２６７８９）
ＥＫＬＫＥＬＲＤＶＩＡＥＶＡＫＲＩＤＥＬＤＥＹＴＲＥＳＩＲＲＡＫＫＥＩＥＲＬＮＲＥＴＫＫＶＩＥＥＶＶＫＲＩＥＥＥＲＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿４９（配列番号２６７９０）
ＤＥＲＶＲＥＥＬＫＫＬＬＴＲＶＥＥＥＨＲＫＶＬＥＴＤＫＫＩＬＫＥＡＨＫＥＳＫＥＶＮＤＲＤＲＥＬＬＥＲＬＥＥＳＶＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿５０（配列番号２６７９１）
ＤＡＤＤＶＬＡＲＶＥＥＬＡＫＲＡＨＤＥＮＥＲＬＩＲＥＶＥＥＬＶＲＡＨＮＫＲＮＫＥＬＶＤＥＶＫＲＬＶＥＫＶＩＥＥＥＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿５１（配列番号２６７９２）
ＴＶＫＲＬＬＤＥＬＲＥＬＬＥＲＬＫＲＴＩＥＥＬＬＫＲＮＲＤＬＬＡＤＡＥＥＫＡＲＲＬＬＥＥＮＲＫＬＬＫＡＡＲＤＴＡＴ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿５２（配列番号２６７９３）
ＤＥＥＶＬＫＫＬＡＥＩＶＲＲＶＫＥＥＮＲＫＶＮＥＥＶＥＫＲＬＲＥＬＥＥＥＮＫＫＶＩＥＤＬＫＳＴＶＥＥＬＶＥＲＬＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿５３（配列番号２６７９４）
ＳＫＥＫＩＤＲＩＩＲＥＬＥＲＩＬＥＥＡＫＫＫＨＥＤＶＬＲＲＬＥＤＳＬＲＲＶＡＥＬＬＫＡＡＬＤＲＬＲＥＩＶＤＲＬＲＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿５４（配列番号２６７９５）
ＤＥＲＩＬＲＥＬＥＥＲＶＫＥＬＥＫＥＡＲＥＩＬＫＲＳＥＤＥＴＤＫＬＲＥＫＡＥＲＩＬＥＤＬＥＲＡＮＲＲＴＭＤＥＡＲＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿５５（配列番号２６７９６）
ＤＡＴＲＶＩＥＥＡＫＲＩＬＤＥＡＲＫＬＮＥＥＴＩＲＲＳＥＥＬＶＲＲＩＥＲＶＩＥＥＩＩＫＲＳＥＫＬＬＥＤＶＡＲＥＳＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿５６（配列番号２６７９７）
ＥＡＡＲＥＩＩＫＲＬＲＥＶＮＫＲＴＫＥＫＬＤＥＬＩＫＨＳＥＥＶＬＥＲＶＫＲＬＩＤＥＬＲＫＨＳＥＥＶＬＥＤＬＲＲＲＡＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿５７（配列番号２６７９８）
ＥＫＬＫＥＬＲＤＶＩＡＥＶＡＫＲＩＤＥＬＤＥＹＴＲＥＳＩＲＲＡＫＫＥＩＥＲＬＮＲＥＴＫＫＶＩＥＥＶＶＫＲＩＥＥＥＲＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿５８（配列番号２６７９９）
ＥＬＬＲＲＩＫＫＬＬＤＥＩＫＫＡＩＥＤＳＳＲＥＩＫＲＬＬＥＥＳＥＲＶＭＫＲＳＳＥＤＩＫＲＴＬＤＤＴＲＲＶＶＥＥＶＲＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿５９（配列番号２６８００）
ＳＫＡＩＫＤＶＲＤＩＶＫＫＶＫＤＥＬＫＥＷＲＤＲＮＫＥＬＶＤＲＬＳＥＥＬＫＥＷＬＫＤＶＥＲＶＬＫＥＬＴＤＫＤＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿６０（配列番号２６８０１）
ＤＥＲＶＲＥＥＬＫＫＬＬＴＲＶＥＥＥＨＲＫＶＬＥＴＤＫＫＩＬＫＥＡＨＫＥＳＫＥＶＮＤＲＤＲＥＬＬＥＲＬＥＥＳＶＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿６１（配列番号２６８０２）
ＤＩＤＫＬＬＫＥＬＲＤＬＶＥＫＩＫＫＤＬＫＥＬＬＥＲＹＥＥＩＶＲＲＩＫＥＬＬＫＤＬＮＲＥＡＥＥＶＶＲＲＬＫＥＥＬＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿６２（配列番号２６８０３）
ＤＡＤＤＶＬＡＲＶＥＥＬＡＫＲＡＨＤＥＮＥＲＬＩＲＥＶＥＥＬＶＲＡＨＮＫＲＮＫＥＬＶＤＥＶＫＲＬＶＥＫＶＩＥＥＥＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿６３（配列番号２６８０４）
ＤＥＥＶＬＫＫＬＡＥＩＶＲＲＶＫＥＥＮＲＫＶＮＥＥＶＥＫＲＬＲＥＬＥＥＥＮＫＫＶＩＥＤＬＫＳＴＶＥＥＬＶＥＲＬＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿６４（配列番号２６８０５）
ＥＲＥＥＥＬＫＥＶＡＤＲＶＫＥＫＬＤＲＬＮＲＥＮＥＫＳＳＥＥＬＫＲＥＬＤＫＩＮＤＥＮＲＥＴＳＥＲＬＫＲＥＩＤＥＴＴＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿６５（配列番号２６８０６）
ＳＫＥＫＩＤＲＩＩＲＥＬＥＲＩＬＥＥＡＫＫＫＨＥＤＶＬＲＲＬＥＤＳＬＲＲＶＡＥＬＬＫＡＡＬＤＲＬＲＥＩＶＤＲＬＲＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿６６（配列番号２６８０７）
ＳＫＥＫＩＤＲＩＩＲＥＬＥＲＩＬＥＥＡＫＫＫＨＥＤＶＬＲＲＬＥＤＳＬＲＲＶＡＥＬＬＫＡＡＬＤＲＬＲＥＩＶＤＲＬＲＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿６７（配列番号２６８０８）
ＴＫＤＬＬＤＥＮＳＫＲＳＮＥＩＳＲＥＶＫＫＤＬＥＲＴＶＲＥＮＫＫＩＶＤＥＶＡＫＡＬＥＤＴＶＤＫＮＲＲＩＶＥＥＶＴＴ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿６８（配列番号２６８０９）
ＤＥＶＶＫＲＶＲＤＬＬＤＴＶＲＲＲＮＥＫＶＮＥＤＶＫＲＭＮＤＫＬＲＲＤＮＥＤＶＩＲＲＶＥＫＬＬＲＥＬＥＥＫＲＲＴ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿６９（配列番号２６８１０）
ＤＲＲＩＥＫＶＬＫＥＩＥＥＫＩＲＥＶＩＫＥＷＥＲＶＨＲＥＶＥＥＬＬＫＲＬＩＤＥＮＲＫＶＬＤＥＩＲＫＬＬＥＥＫＳＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿７０（配列番号２６８１１）
ＥＬＬＲＲＩＫＫＬＬＤＥＩＫＫＡＩＥＤＳＳＲＥＩＫＲＬＬＥＥＳＥＲＶＭＫＲＳＳＥＤＩＫＲＴＬＤＤＴＲＲＶＶＥＥＶＲＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿７１（配列番号２６８１２）
ＳＥＥＬＳＡＥＶＫＫＬＬＤＥＶＲＫＡＬＡＲＨＫＤＥＮＤＫＬＬＫＥＩＥＤＳＬＲＲＨＫＥＥＮＤＲＬＬＥＫＬＫＥＳＴＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿７２（配列番号２６８１３）
ＤＩＤＫＬＬＫＥＬＲＤＬＶＥＫＩＫＫＤＬＫＥＬＬＥＲＹＥＥＩＶＲＲＩＫＥＬＬＫＤＬＮＲＥＡＥＥＶＶＲＲＬＫＥＥＬＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿７３（配列番号２６８１４）
ＤＡＤＤＶＬＡＲＶＥＥＬＡＫＲＡＨＤＥＮＥＲＬＩＲＥＶＥＥＬＶＲＡＨＮＫＲＮＫＥＬＶＤＥＶＫＲＬＶＥＫＶＩＥＥＥＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿７４（配列番号２６８１５）
ＤＥＥＶＬＫＫＬＡＥＩＶＲＲＶＫＥＥＮＲＫＶＮＥＥＶＥＫＲＬＲＥＬＥＥＥＮＫＫＶＩＥＤＬＫＳＴＶＥＥＬＶＥＲＬＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿７５（配列番号２６８１６）
ＤＥＥＶＬＫＫＬＡＥＩＶＲＲＶＫＥＥＮＲＫＶＮＥＥＶＥＫＲＬＲＥＬＥＥＥＮＫＫＶＩＥＤＬＫＳＴＶＥＥＬＶＥＲＬＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿７６（配列番号２６８１７）
ＳＫＥＫＩＤＲＩＩＲＥＬＥＲＩＬＥＥＡＫＫＫＨＥＤＶＬＲＲＬＥＤＳＬＲＲＶＡＥＬＬＫＡＡＬＤＲＬＲＥＩＶＤＲＬＲＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿７７（配列番号２６８１８）
ＳＥＥＬＲＥＥＬＫＫＬＥＲＫＩＥＫＶＡＫＥＩＨＤＨＤＫＥＶＴＥＲＬＥＤＬＬＲＲＩＴＥＨＡＲＫＳＤＲＥＩＥＥＴＡＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿７８（配列番号２６８１９）
ＤＲＲＩＥＫＶＬＫＥＩＥＥＫＩＲＥＶＩＫＥＷＥＲＶＨＲＥＶＥＥＬＬＫＲＬＩＤＥＮＲＫＶＬＤＥＩＲＫＬＬＥＥＫＳＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿７９（配列番号２６８２０）
ＤＡＴＲＶＩＥＥＡＫＲＩＬＤＥＡＲＫＬＮＥＥＴＩＲＲＳＥＥＬＶＲＲＩＥＲＶＩＥＥＩＩＫＲＳＥＫＬＬＥＤＶＡＲＥＳＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿８０（配列番号２６８２１）
ＥＫＬＫＥＬＲＤＶＩＡＥＶＡＫＲＩＤＥＬＤＥＹＴＲＥＳＩＲＲＡＫＫＥＩＥＲＬＮＲＥＴＫＫＶＩＥＥＶＶＫＲＩＥＥＥＲＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿８１（配列番号２６８２２）
ＥＬＬＲＲＩＫＫＬＬＤＥＩＫＫＡＩＥＤＳＳＲＥＩＫＲＬＬＥＥＳＥＲＶＭＫＲＳＳＥＤＩＫＲＴＬＤＤＴＲＲＶＶＥＥＶＲＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿８２（配列番号２６８２３）
ＤＩＤＫＬＬＫＥＬＲＤＬＶＥＫＩＫＫＤＬＫＥＬＬＥＲＹＥＥＩＶＲＲＩＫＥＬＬＫＤＬＮＲＥＡＥＥＶＶＲＲＬＫＥＥＬＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿８３（配列番号２６８２４）
ＥＡＫＫＫＬＤＥＶＬＥＲＡＫＲＴＩＤＲＬＬＥＴＳＤＲＳＬＥＫＶＥＡＤＬＲＲＬＮＥＥＬＤＲＳＬＥＲＡＥＲＴＩＲＥＬＡＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿８４（配列番号２６８２５）
ＤＥＥＶＬＫＫＬＡＥＩＶＲＲＶＫＥＥＮＲＫＶＮＥＥＶＥＫＲＬＲＥＬＥＥＥＮＫＫＶＩＥＤＬＫＳＴＶＥＥＬＶＥＲＬＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿８５（配列番号２６８２６）
ＤＥＥＶＬＫＫＬＡＥＩＶＲＲＶＫＥＥＮＲＫＶＮＥＥＶＥＫＲＬＲＥＬＥＥＥＮＫＫＶＩＥＤＬＫＳＴＶＥＥＬＶＥＲＬＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿８６（配列番号２６８２７）
ＤＲＲＩＥＫＶＬＫＥＩＥＥＫＩＲＥＶＩＫＥＷＥＲＶＨＲＥＶＥＥＬＬＫＲＬＩＤＥＮＲＫＶＬＤＥＩＲＫＬＬＥＥＫＳＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿８７（配列番号２６８２８）
ＤＥＲＩＬＲＥＬＥＥＲＶＫＥＬＥＫＥＡＲＥＩＬＫＲＳＥＤＥＴＤＫＬＲＥＫＡＥＲＩＬＥＤＬＥＲＡＮＲＲＴＭＤＥＡＲＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿８８（配列番号２６８２９）
ＤＬＫＲＶＥＥＲＡＲＥＶＳＲＲＮＥＥＳＭＲＲＶＫＥＤＡＤＲＶＳＥＡＮＫＥＶＬＤＲＶＲＥＥＶＫＲＬＩＥＥＶＲＥＴＬＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿８９（配列番号２６８３０）
ＥＫＬＫＥＬＲＤＶＩＡＥＶＡＫＲＩＤＥＬＤＥＹＴＲＥＳＩＲＲＡＫＫＥＩＥＲＬＮＲＥＴＫＫＶＩＥＥＶＶＫＲＩＥＥＥＲＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿９０（配列番号２６８３１）
ＥＬＬＲＲＩＫＫＬＬＤＥＩＫＫＡＩＥＤＳＳＲＥＩＫＲＬＬＥＥＳＥＲＶＭＫＲＳＳＥＤＩＫＲＴＬＤＤＴＲＲＶＶＥＥＶＲＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿９１（配列番号２６８３２）
ＥＬＬＲＲＩＫＫＬＬＤＥＩＫＫＡＩＥＤＳＳＲＥＩＫＲＬＬＥＥＳＥＲＶＭＫＲＳＳＥＤＩＫＲＴＬＤＤＴＲＲＶＶＥＥＶＲＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿９２（配列番号２６８３３）
ＬＰＥＥＶＬＲＥＬＥＥＬＬＫＥＳＥＥＲＩＫＲＩＥＥＥＩＫＫＩＩＤＫＳＲＥＤＩＫＲＶＬＥＥＩＥＲＬＮＡＫＡＡＤＤＬＲＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿９３（配列番号２６８３４）
ＥＡＫＫＫＬＤＥＶＬＥＲＡＫＲＴＩＤＲＬＬＥＴＳＤＲＳＬＥＫＶＥＡＤＬＲＲＬＮＥＥＬＤＲＳＬＥＲＡＥＲＴＩＲＥＬＡＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿９４（配列番号２６８３５）
ＤＥＥＶＬＫＫＬＡＥＩＶＲＲＶＫＥＥＮＲＫＶＮＥＥＶＥＫＲＬＲＥＬＥＥＥＮＫＫＶＩＥＤＬＫＳＴＶＥＥＬＶＥＲＬＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿９５（配列番号２６８３６）
ＤＫＬＬＫＥＡＲＤＬＩＲＥＩＥＫＲＬＥＥＬＬＫＲＶＥＫＬＴＥＤＡＫＲＤＬＥＲＳＮＲＥＨＫＥＬＡＤＲＩＫＥＴＡＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿９６（配列番号２６８３７）
ＤＫＬＬＫＥＡＲＤＬＩＲＥＩＥＫＲＬＥＥＬＬＫＲＶＥＫＬＴＥＤＡＫＲＤＬＥＲＳＮＲＥＨＫＥＬＡＤＲＩＫＥＴＡＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿９７（配列番号２６８３８）
ＤＩＶＲＫＩＥＲＩＶＥＴＩＥＲＥＶＲＥＳＶＫＫＶＥＥＩＡＲＤＩＲＲＫＶＤＥＳＶＫＮＶＥＫＬＬＲＤＶＤＫＫＡＲＤＲＫＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿９８（配列番号２６８３９）
ＤＥＩＫＲＩＶＤＥＶＲＥＲＬＫＲＩＶＤＥＮＡＫＩＶＥＤＡＲＲＡＬＥＫＩＶＫＥＮＥＥＩＬＲＲＬＫＫＥＬＲＥＬＲＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿９９（配列番号２６８４０）
ＤＲＲＩＥＫＶＬＫＥＩＥＥＫＩＲＥＶＩＫＥＷＥＲＶＨＲＥＶＥＥＬＬＫＲＬＩＤＥＮＲＫＶＬＤＥＩＲＫＬＬＥＥＫＳＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１００（配列番号２６８４１）
ＤＬＫＲＶＥＥＲＡＲＥＶＳＲＲＮＥＥＳＭＲＲＶＫＥＤＡＤＲＶＳＥＡＮＫＥＶＬＤＲＶＲＥＥＶＫＲＬＩＥＥＶＲＥＴＬＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１０１（配列番号２６８４２）
ＤＡＴＲＶＩＥＥＡＫＲＩＬＤＥＡＲＫＬＮＥＥＴＩＲＲＳＥＥＬＶＲＲＩＥＲＶＩＥＥＩＩＫＲＳＥＫＬＬＥＤＶＡＲＥＳＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１０２（配列番号２６８４３）
ＤＡＥＴＩＥＲＶＶＲＥＬＬＥＥＮＫＥＶＬＲＫＴＥＥＡＶＫＲＳＴＥＴＮＫＲＬＬＥＡＳＫＥＶＡＤＲＬＲＥＲＩＫＥＡＡＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１０３（配列番号２６８４４）
ＥＫＬＫＥＬＲＤＶＩＡＥＶＡＫＲＩＤＥＬＤＥＹＴＲＥＳＩＲＲＡＫＫＥＩＥＲＬＮＲＥＴＫＫＶＩＥＥＶＶＫＲＩＥＥＥＲＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１０４（配列番号２６８４５）
ＥＬＬＲＲＩＫＫＬＬＤＥＩＫＫＡＩＥＤＳＳＲＥＩＫＲＬＬＥＥＳＥＲＶＭＫＲＳＳＥＤＩＫＲＴＬＤＤＴＲＲＶＶＥＥＶＲＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１０５（配列番号２６８４６）
ＤＥＶＶＥＲＡＥＲＩＳＥＥＮＫＲＲＶＥＤＶＡＲＫＳＫＥＬＶＥＤＶＲＲＨＳＥＥＶＶＲＲＶＥＥＬＶＫＥＶＥＥＲＶＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１０６（配列番号２６８４７）
ＥＡＫＫＫＬＤＥＶＬＥＲＡＫＲＴＩＤＲＬＬＥＴＳＤＲＳＬＥＫＶＥＡＤＬＲＲＬＮＥＥＬＤＲＳＬＥＲＡＥＲＴＩＲＥＬＡＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１０７（配列番号２６８４８）
ＴＡＥＲＡＲＥＴＬＫＲＬＬＤＥＮＲＤＲＳＫＫＶＫＥＥＩＲＲＩＬＥＤＬＴＲＴＴＥＲＶＫＲＥＩＡＫＬＬＫＥＬＥＤＴＡＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１０８（配列番号２６８４９）
ＥＡＶＲＲＬＫＥＩＬＥＲＬＫＥＥＶＲＲＳＬＥＥＬＲＫＥＶＥＲＬＫＫＥＶＥＤＳＬＲＥＬＫＫＳＬＥＥＷＶＫＳＬＥＥＡＴＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１０９（配列番号２６８５０）
ＤＥＲＩＬＲＥＬＥＥＲＶＫＥＬＥＫＥＡＲＥＩＬＫＲＳＥＤＥＴＤＫＬＲＥＫＡＥＲＩＬＥＤＬＥＲＡＮＲＲＴＭＤＥＡＲＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１１０（配列番号２６８５１）
ＤＡＴＲＶＩＥＥＡＫＲＩＬＤＥＡＲＫＬＮＥＥＴＩＲＲＳＥＥＬＶＲＲＩＥＲＶＩＥＥＩＩＫＲＳＥＫＬＬＥＤＶＡＲＥＳＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１１１（配列番号２６８５２）
ＤＫＡＲＫＶＡＥＶＡＥＫＶＬＲＤＩＤＫＬＤＲＥＳＫＥＡＦＲＡＴＮＥＥＩＡＫＬＤＥＤＴＡＲＶＡＥＲＶＫＫＡＩＥＤＬＡＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１１２（配列番号２６８５３）
ＥＫＬＫＥＬＲＤＶＩＡＥＶＡＫＲＩＤＥＬＤＥＹＴＲＥＳＩＲＲＡＫＫＥＩＥＲＬＮＲＥＴＫＫＶＩＥＥＶＶＫＲＩＥＥＥＲＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１１３（配列番号２６８５４）
ＥＬＬＲＲＩＫＫＬＬＤＥＩＫＫＡＩＥＤＳＳＲＥＩＫＲＬＬＥＥＳＥＲＶＭＫＲＳＳＥＤＩＫＲＴＬＤＤＴＲＲＶＶＥＥＶＲＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１１４（配列番号２６８５５）
ＤＫＶＥＲＶＶＲＥＶＥＫＬＨＥＥＤＲＫＲＬＥＥＳＴＲＳＶＲＫＬＬＥＥＬＫＲＥＬＥＫＳＴＲＳＶＫＡＬＶＤＥＬＲＥＲＶＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１１５（配列番号２６８５６）
ＤＥＶＶＥＲＡＥＲＩＳＥＥＮＫＲＲＶＥＤＶＡＲＫＳＫＥＬＶＥＤＶＲＲＨＳＥＥＶＶＲＲＶＥＥＬＶＫＥＶＥＥＲＶＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１１６（配列番号２６８５７）
ＥＡＫＫＫＬＤＥＶＬＥＲＡＫＲＴＩＤＲＬＬＥＴＳＤＲＳＬＥＫＶＥＡＤＬＲＲＬＮＥＥＬＤＲＳＬＥＲＡＥＲＴＩＲＥＬＡＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１１７（配列番号２６８５８）
ＴＡＥＲＡＲＥＴＬＫＲＬＬＤＥＮＲＤＲＳＫＫＶＫＥＥＩＲＲＩＬＥＤＬＴＲＴＴＥＲＶＫＲＥＩＡＫＬＬＫＥＬＥＤＴＡＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１１８（配列番号２６８５９）
ＤＥＲＩＬＲＥＬＥＥＲＶＫＥＬＥＫＥＡＲＥＩＬＫＲＳＥＤＥＴＤＫＬＲＥＫＡＥＲＩＬＥＤＬＥＲＡＮＲＲＴＭＤＥＡＲＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１１９（配列番号２６８６０）
ＤＥＲＩＬＲＥＬＥＥＲＶＫＥＬＥＫＥＡＲＥＩＬＫＲＳＥＤＥＴＤＫＬＲＥＫＡＥＲＩＬＥＤＬＥＲＡＮＲＲＴＭＤＥＡＲＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１２０（配列番号２６８６１）
ＤＬＫＲＶＥＥＲＡＲＥＶＳＲＲＮＥＥＳＭＲＲＶＫＥＤＡＤＲＶＳＥＡＮＫＥＶＬＤＲＶＲＥＥＶＫＲＬＩＥＥＶＲＥＴＬＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１２１（配列番号２６８６２）
ＤＫＡＲＫＶＡＥＶＡＥＫＶＬＲＤＩＤＫＬＤＲＥＳＫＥＡＦＲＡＴＮＥＥＩＡＫＬＤＥＤＴＡＲＶＡＥＲＶＫＫＡＩＥＤＬＡＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１２２（配列番号２６８６３）
ＥＬＬＲＲＩＫＫＬＬＤＥＩＫＫＡＩＥＤＳＳＲＥＩＫＲＬＬＥＥＳＥＲＶＭＫＲＳＳＥＤＩＫＲＴＬＤＤＴＲＲＶＶＥＥＶＲＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１２３（配列番号２６８６４）
ＳＫＡＩＫＤＶＲＤＩＶＫＫＶＫＤＥＬＫＥＷＲＤＲＮＫＥＬＶＤＲＬＳＥＥＬＫＥＷＬＫＤＶＥＲＶＬＫＥＬＴＤＫＤＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１２４（配列番号２６８６５）
ＤＫＶＥＲＶＶＲＥＶＥＫＬＨＥＥＤＲＫＲＬＥＥＳＴＲＳＶＲＫＬＬＥＥＬＫＲＥＬＥＫＳＴＲＳＶＫＡＬＶＤＥＬＲＥＲＶＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１２５（配列番号２６８６６）
ＤＩＤＫＬＬＫＥＬＲＤＬＶＥＫＩＫＫＤＬＫＥＬＬＥＲＹＥＥＩＶＲＲＩＫＥＬＬＫＤＬＮＲＥＡＥＥＶＶＲＲＬＫＥＥＬＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１２６（配列番号２６８６７）
ＥＡＫＫＫＬＤＥＶＬＥＲＡＫＲＴＩＤＲＬＬＥＴＳＤＲＳＬＥＫＶＥＡＤＬＲＲＬＮＥＥＬＤＲＳＬＥＲＡＥＲＴＩＲＥＬＡＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１２７（配列番号２６８６８）
ＤＫＬＬＫＥＡＲＤＬＩＲＥＩＥＫＲＬＥＥＬＬＫＲＶＥＫＬＴＥＤＡＫＲＤＬＥＲＳＮＲＥＨＫＥＬＡＤＲＩＫＥＴＡＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１２８（配列番号２６８６９）
ＴＡＥＲＡＲＥＴＬＫＲＬＬＤＥＮＲＤＲＳＫＫＶＫＥＥＩＲＲＩＬＥＤＬＴＲＴＴＥＲＶＫＲＥＩＡＫＬＬＫＥＬＥＤＴＡＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１２９（配列番号２６８７０）
ＤＥＩＫＲＩＶＤＥＶＲＥＲＬＫＲＩＶＤＥＮＡＫＩＶＥＤＡＲＲＡＬＥＫＩＶＫＥＮＥＥＩＬＲＲＬＫＫＥＬＲＥＬＲＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１３０（配列番号２６８７１）
ＤＲＩＥＥＥＬＫＲＬＩＤＴＬＲＥＫＮＲＥＶＥＫＲＡＲＤＳＮＲＤＬＫＲＴＮＤＥＩＡＫＥＶＲＥＬＩＫＫＬＲＥＤＬＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１３１（配列番号２６８７２）
ＤＥＲＩＬＲＥＬＥＥＲＶＫＥＬＥＫＥＡＲＥＩＬＫＲＳＥＤＥＴＤＫＬＲＥＫＡＥＲＩＬＥＤＬＥＲＡＮＲＲＴＭＤＥＡＲＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１３２（配列番号２６８７３）
ＤＡＥＴＩＥＲＶＶＲＥＬＬＥＥＮＫＥＶＬＲＫＴＥＥＡＶＫＲＳＴＥＴＮＫＲＬＬＥＡＳＫＥＶＡＤＲＬＲＥＲＩＫＥＡＡＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１３３（配列番号２６８７４）
ＤＫＡＲＫＶＡＥＶＡＥＫＶＬＲＤＩＤＫＬＤＲＥＳＫＥＡＦＲＡＴＮＥＥＩＡＫＬＤＥＤＴＡＲＶＡＥＲＶＫＫＡＩＥＤＬＡＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１３４（配列番号２６８７５）
ＤＫＶＥＲＶＶＲＥＶＥＫＬＨＥＥＤＲＫＲＬＥＥＳＴＲＳＶＲＫＬＬＥＥＬＫＲＥＬＥＫＳＴＲＳＶＫＡＬＶＤＥＬＲＥＲＶＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１３５（配列番号２６８７６）
ＤＩＥＲＩＬＲＥＬＥＡＶＬＫＫＬＴＤＥＳＥＲＬＮＲＥＶＥＲＶＳＲＤＴＫＫＫＳＫＥＬＮＥＥＬＫＡＶＬＤＥＶＫＲＫＡＤ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１３６（配列番号２６８７７）
ＤＥＶＶＥＲＡＥＲＩＳＥＥＮＫＲＲＶＥＤＶＡＲＫＳＫＥＬＶＥＤＶＲＲＨＳＥＥＶＶＲＲＶＥＥＬＶＫＥＶＥＥＲＶＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１３７（配列番号２６８７８）
ＥＡＫＫＫＬＤＥＶＬＥＲＡＫＲＴＩＤＲＬＬＥＴＳＤＲＳＬＥＫＶＥＡＤＬＲＲＬＮＥＥＬＤＲＳＬＥＲＡＥＲＴＩＲＥＬＡＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１３８（配列番号２６８７９）
ＴＡＥＲＡＲＥＴＬＫＲＬＬＤＥＮＲＤＲＳＫＫＶＫＥＥＩＲＲＩＬＥＤＬＴＲＴＴＥＲＶＫＲＥＩＡＫＬＬＫＥＬＥＤＴＡＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１３９（配列番号２６８８０）
ＤＥＩＫＲＩＶＤＥＶＲＥＲＬＫＲＩＶＤＥＮＡＫＩＶＥＤＡＲＲＡＬＥＫＩＶＫＥＮＥＥＩＬＲＲＬＫＫＥＬＲＥＬＲＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１４０（配列番号２６８８１）
ＤＲＲＩＥＫＶＬＫＥＩＥＥＫＩＲＥＶＩＫＥＷＥＲＶＨＲＥＶＥＥＬＬＫＲＬＩＤＥＮＲＫＶＬＤＥＩＲＫＬＬＥＥＫＳＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１４１（配列番号２６８８２）
ＤＬＫＲＶＥＥＲＡＲＥＶＳＲＲＮＥＥＳＭＲＲＶＫＥＤＡＤＲＶＳＥＡＮＫＥＶＬＤＲＶＲＥＥＶＫＲＬＩＥＥＶＲＥＴＬＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１４２（配列番号２６８８３）
ＤＡＥＴＩＥＲＶＶＲＥＬＬＥＥＮＫＥＶＬＲＫＴＥＥＡＶＫＲＳＴＥＴＮＫＲＬＬＥＡＳＫＥＶＡＤＲＬＲＥＲＩＫＥＡＡＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１４３（配列番号２６８８４）
ＤＫＡＲＫＶＡＥＶＡＥＫＶＬＲＤＩＤＫＬＤＲＥＳＫＥＡＦＲＡＴＮＥＥＩＡＫＬＤＥＤＴＡＲＶＡＥＲＶＫＫＡＩＥＤＬＡＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１４４（配列番号２６８８５）
ＥＬＬＲＲＩＫＫＬＬＤＥＩＫＫＡＩＥＤＳＳＲＥＩＫＲＬＬＥＥＳＥＲＶＭＫＲＳＳＥＤＩＫＲＴＬＤＤＴＲＲＶＶＥＥＶＲＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１４５（配列番号２６８８６）
ＤＫＶＥＲＶＶＲＥＶＥＫＬＨＥＥＤＲＫＲＬＥＥＳＴＲＳＶＲＫＬＬＥＥＬＫＲＥＬＥＫＳＴＲＳＶＫＡＬＶＤＥＬＲＥＲＶＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１４６（配列番号２６８８７）
ＥＡＫＫＫＬＤＥＶＬＥＲＡＫＲＴＩＤＲＬＬＥＴＳＤＲＳＬＥＫＶＥＡＤＬＲＲＬＮＥＥＬＤＲＳＬＥＲＡＥＲＴＩＲＥＬＡＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１４７（配列番号２６８８８）
ＴＡＥＲＡＲＥＴＬＫＲＬＬＤＥＮＲＤＲＳＫＫＶＫＥＥＩＲＲＩＬＥＤＬＴＲＴＴＥＲＶＫＲＥＩＡＫＬＬＫＥＬＥＤＴＡＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１４８（配列番号２６８８９）
ＤＥＩＫＲＩＶＤＥＶＲＥＲＬＫＲＩＶＤＥＮＡＫＩＶＥＤＡＲＲＡＬＥＫＩＶＫＥＮＥＥＩＬＲＲＬＫＫＥＬＲＥＬＲＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１４９（配列番号２６８９０）
ＤＫＡＲＫＶＡＥＶＡＥＫＶＬＲＤＩＤＫＬＤＲＥＳＫＥＡＦＲＡＴＮＥＥＩＡＫＬＤＥＤＴＡＲＶＡＥＲＶＫＫＡＩＥＤＬＡＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１５０（配列番号２６８９１）
ＤＥＶＴＫＶＫＫＶＡＤＤＶＬＡＥＩＫＫＬＤＤＥＴＲＲＶＩＥＤＴＮＫＫＩＡＤＬＤＫＡＴＲＤＶＶＲＫＶＬＥＥＶＫＫＬＥＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１５１（配列番号２６８９２）
ＤＩＤＫＬＬＫＥＬＲＤＬＶＥＫＩＫＫＤＬＫＥＬＬＥＲＹＥＥＩＶＲＲＩＫＥＬＬＫＤＬＮＲＥＡＥＥＶＶＲＲＬＫＥＥＬＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１５２（配列番号２６８９３）
ＴＡＥＲＡＲＥＴＬＫＲＬＬＤＥＮＲＤＲＳＫＫＶＫＥＥＩＲＲＩＬＥＤＬＴＲＴＴＥＲＶＫＲＥＩＡＫＬＬＫＥＬＥＤＴＡＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１５３（配列番号２６８９４）
ＤＥＩＫＲＩＶＤＥＶＲＥＲＬＫＲＩＶＤＥＮＡＫＩＶＥＤＡＲＲＡＬＥＫＩＶＫＥＮＥＥＩＬＲＲＬＫＫＥＬＲＥＬＲＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１５４（配列番号２６８９５）
ＲＬＶＲＥＶＥＤＬＶＲＲＬＶＲＲＳＥＫＳＮＥＥＶＫＲＴＶＥＥＬＶＲＲＭＥＥＳＮＤＲＶＲＤＬＶＲＲＬＶＥＥＬＫＲＡＶＤ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１５５（配列番号２６８９６）
ＤＫＡＲＫＶＡＥＶＡＥＫＶＬＲＤＩＤＫＬＤＲＥＳＫＥＡＦＲＡＴＮＥＥＩＡＫＬＤＥＤＴＡＲＶＡＥＲＶＫＫＡＩＥＤＬＡＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１５６（配列番号２６８９７）
ＥＡＫＫＫＬＤＥＶＬＥＲＡＫＲＴＩＤＲＬＬＥＴＳＤＲＳＬＥＫＶＥＡＤＬＲＲＬＮＥＥＬＤＲＳＬＥＲＡＥＲＴＩＲＥＬＡＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１５７（配列番号２６８９８）
ＲＬＶＲＥＶＥＤＬＶＲＲＬＶＲＲＳＥＫＳＮＥＥＶＫＲＴＶＥＥＬＶＲＲＭＥＥＳＮＤＲＶＲＤＬＶＲＲＬＶＥＥＬＫＲＡＶＤ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１５８（配列番号２６８９９）
ＤＫＡＲＫＶＡＥＶＡＥＫＶＬＲＤＩＤＫＬＤＲＥＳＫＥＡＦＲＡＴＮＥＥＩＡＫＬＤＥＤＴＡＲＶＡＥＲＶＫＫＡＩＥＤＬＡＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１５９（配列番号２６９００）
ＤＥＶＴＫＶＫＫＶＡＤＤＶＬＡＥＩＫＫＬＤＤＥＴＲＲＶＩＥＤＴＮＫＫＩＡＤＬＤＫＡＴＲＤＶＶＲＫＶＬＥＥＶＫＫＬＥＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１６０（配列番号２６９０１）
ＴＡＥＲＡＲＥＴＬＫＲＬＬＤＥＮＲＤＲＳＫＫＶＫＥＥＩＲＲＩＬＥＤＬＴＲＴＴＥＲＶＫＲＥＩＡＫＬＬＫＥＬＥＤＴＡＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１６１（配列番号２６９０２）
ＤＬＫＲＶＥＥＲＡＲＥＶＳＲＲＮＥＥＳＭＲＲＶＫＥＤＡＤＲＶＳＥＡＮＫＥＶＬＤＲＶＲＥＥＶＫＲＬＩＥＥＶＲＥＴＬＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１６２（配列番号２６９０３）
ＤＫＡＲＫＶＡＥＶＡＥＫＶＬＲＤＩＤＫＬＤＲＥＳＫＥＡＦＲＡＴＮＥＥＩＡＫＬＤＥＤＴＡＲＶＡＥＲＶＫＫＡＩＥＤＬＡＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１６３（配列番号２６９０４）
ＤＥＶＴＫＶＫＫＶＡＤＤＶＬＡＥＩＫＫＬＤＤＥＴＲＲＶＩＥＤＴＮＫＫＩＡＤＬＤＫＡＴＲＤＶＶＲＫＶＬＥＥＶＫＫＬＥＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１６４（配列番号２６９０５）
ＤＫＶＥＲＶＶＲＥＶＥＫＬＨＥＥＤＲＫＲＬＥＥＳＴＲＳＶＲＫＬＬＥＥＬＫＲＥＬＥＫＳＴＲＳＶＫＡＬＶＤＥＬＲＥＲＶＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１６５（配列番号２６９０６）
ＥＡＫＫＫＬＤＥＶＬＥＲＡＫＲＴＩＤＲＬＬＥＴＳＤＲＳＬＥＫＶＥＡＤＬＲＲＬＮＥＥＬＤＲＳＬＥＲＡＥＲＴＩＲＥＬＡＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１６６（配列番号２６９０７）
ＴＡＥＲＡＲＥＴＬＫＲＬＬＤＥＮＲＤＲＳＫＫＶＫＥＥＩＲＲＩＬＥＤＬＴＲＴＴＥＲＶＫＲＥＩＡＫＬＬＫＥＬＥＤＴＡＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１６７（配列番号２６９０８）
ＴＡＥＲＡＲＥＴＬＫＲＬＬＤＥＮＲＤＲＳＫＫＶＫＥＥＩＲＲＩＬＥＤＬＴＲＴＴＥＲＶＫＲＥＩＡＫＬＬＫＥＬＥＤＴＡＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１６８（配列番号２６９０９）
ＤＫＡＲＫＶＡＥＶＡＥＫＶＬＲＤＩＤＫＬＤＲＥＳＫＥＡＦＲＡＴＮＥＥＩＡＫＬＤＥＤＴＡＲＶＡＥＲＶＫＫＡＩＥＤＬＡＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１６９（配列番号２６９１０）
ＤＥＶＴＫＶＫＫＶＡＤＤＶＬＡＥＩＫＫＬＤＤＥＴＲＲＶＩＥＤＴＮＫＫＩＡＤＬＤＫＡＴＲＤＶＶＲＫＶＬＥＥＶＫＫＬＥＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１７０（配列番号２６９１１）
ＤＫＶＥＲＶＶＲＥＶＥＫＬＨＥＥＤＲＫＲＬＥＥＳＴＲＳＶＲＫＬＬＥＥＬＫＲＥＬＥＫＳＴＲＳＶＫＡＬＶＤＥＬＲＥＲＶＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１７１（配列番号２６９１２）
ＴＡＥＲＡＲＥＴＬＫＲＬＬＤＥＮＲＤＲＳＫＫＶＫＥＥＩＲＲＩＬＥＤＬＴＲＴＴＥＲＶＫＲＥＩＡＫＬＬＫＥＬＥＤＴＡＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１７２（配列番号２６９１３）
ＤＫＡＲＫＶＡＥＶＡＥＫＶＬＲＤＩＤＫＬＤＲＥＳＫＥＡＦＲＡＴＮＥＥＩＡＫＬＤＥＤＴＡＲＶＡＥＲＶＫＫＡＩＥＤＬＡＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿１７３（配列番号２６９１４）
ＲＬＶＲＥＶＥＤＬＶＲＲＬＶＲＲＳＥＫＳＮＥＥＶＫＲＴＶＥＥＬＶＲＲＭＥＥＳＮＤＲＶＲＤＬＶＲＲＬＶＥＥＬＫＲＡＶＤ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿１７４（配列番号２６９１５）
ＳＥＳＤＥＶＩＲＤＬＡＲＬＬＤＥＬＡＲＨＶＤＤＳＶＲＲＭＤＥＶＶＫＲＳＴＲＥＡＤＥＬＡＫＲＬＤＥＬＶＫＥＶＥＫＫＰＧ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿１７５（配列番号２６９１６）
ＳＲＡＥＴＶＬＫＥＶＴＤＫＩＫＫＬＡＤＳＳＤＥＬＬＲＲＮＫＥＮＩＤＥＬＫＫＳＳＥＥＬＬＲＲＬＴＫＡＩＥＥＩＥＫＧＳＶ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿１７６（配列番号２６９１７）
ＳＶＤＥＶＬＫＥＩＥＤＡＬＲＲＬＫＥＥＶＥＲＶＬＫＥＮＥＤＥＬＲＲＬＥＥＥＶＲＲＶＬＫＥＤＥＥＬＬＥＳＬＫＲＧＶＧＥ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿１７７（配列番号２６９１８）
ＳＥＶＤＥＩＩＫＥＬＥＲＬＬＡＥＩＡＲＥＮＥＲＩＩＲＥＳＲＫＬＡＤＥＶＲＫＲＮＥＤＡＩＲＫＬＥＥＬＶＡＲＬＡＤＡＶＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿１７８（配列番号２６９１９）
ＳＥＶＤＤＶＬＲＲＬＥＥＬＩＫＴＬＥＤＩＮＡＫＳＬＥＤＩＫＫＬＩＤＤＬＡＫＩＬＥＤＡＬＲＫＨＥＫＬＩＲＥＬＲＥＡＫＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿１７９（配列番号２６９２０）
ＳＥＶＤＤＶＬＲＲＬＥＥＬＩＫＴＬＥＤＩＮＡＫＳＬＥＤＩＫＫＬＩＤＤＬＡＫＩＬＥＤＡＬＲＫＨＥＫＬＩＲＥＬＲＥＡＫＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿１８０（配列番号２６９２１）
ＳＲＡＥＴＶＬＫＥＶＴＤＫＩＫＫＬＡＤＳＳＤＥＬＬＲＲＮＫＥＮＩＤＥＬＫＫＳＳＥＥＬＬＲＲＬＴＫＡＩＥＥＩＥＫＧＳＶ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿１８１（配列番号２６９２２）
ＫＥＶＥＤＡＶＫＥＬＥＤＬＬＲＡＮＥＤＫＴＲＳＩＶＥＤＭＲＡＳＮＫＤＬＥＤＨＳＲＡＳＥＥＥＶＲＫＬＬＤＤＬＲＲＡＧＶ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿１８２（配列番号２６９２３）
ＳＥＶＤＤＶＬＲＲＬＥＥＬＩＫＴＬＥＤＩＮＡＫＳＬＥＤＩＫＫＬＩＤＤＬＡＫＩＬＥＤＡＬＲＫＨＥＫＬＩＲＥＬＲＥＡＫＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿１８３（配列番号２６９２４）
ＳＥＳＤＥＶＩＲＤＬＡＲＬＬＤＥＬＡＲＨＶＤＤＳＶＲＲＭＤＥＶＶＫＲＳＴＲＥＡＤＥＬＡＫＲＬＤＥＬＶＫＥＶＥＫＫＰＧ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿１８４（配列番号２６９２５）
ＳＥＳＤＤＶＩＲＫＬＲＥＬＬＥＥＬＲＴＨＶＥＫＳＩＲＤＬＲＫＩＬＥＤＳＴＲＨＡＫＲＳＩＥＥＬＥＲＬＬＥＥＶＲＫＫＰＧ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿１８５（配列番号２６９２６）
ＳＲＡＥＴＶＬＫＥＶＴＤＫＩＫＫＬＡＤＳＳＤＥＬＬＲＲＮＫＥＮＩＤＥＬＫＫＳＳＥＥＬＬＲＲＬＴＫＡＩＥＥＩＥＫＧＳＶ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿１８６（配列番号２６９２７）
ＳＥＡＥＫＡＫＥＴＩＤＲＬＡＤＲＶＲＫＬＬＥＥＩＫＲＳＬＤＤＳＲＲＫＳＫＥＴＶＥＥＮＥＫＴＬＤＲＭＲＫＥＶＤＡＡＫＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿１８７（配列番号２６９２８）
ＳＥＡＥＫＡＫＥＴＩＤＲＬＡＤＲＶＲＫＬＬＥＥＩＫＲＳＬＤＤＳＲＲＫＳＫＥＴＶＥＥＮＥＫＴＬＤＲＭＲＫＥＶＤＡＡＫＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿１８８（配列番号２６９２９）
ＳＥＶＥＥＬＩＫＲＬＡＫＶＬＫＥＬＶＤＫＶＲＫＶＩＥＤＴＫＥＬＬＥＲＬＫＲＲＳＥＤＨＩＲＫＬＲＥＶＬＫＥＡＫＤＱＰＩ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿１８９（配列番号２６９３０）
ＳＥＬＥＥＩＥＫＫＶＲＥＬＴＫＲＨＲＥＬＶＥＲＶＲＫＴＶＫＥＬＩＥＴＮＲＲＬＬＥＴＬＴＥＲＩＫＲＶＬＥＥＶＲＤＬＥＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿１９０（配列番号２６９３１）
ＳＳＥＥＲＬＲＡＶＩＥＤＬＫＲＬＡＥＥＳＲＫＲＨＫＥＬＩＤＥＬＡＫＡＶＥＲＩＥＲＲＨＫＫＬＬＤＥＩＫＡＶＶＤＤＩＲＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿１９１（配列番号２６９３２）
ＤＥＩＲＫＶＶＫＥＩＴＤＬＬＫＡＳＮＤＫＮＲＫＶＶＥＥＩＲＤＬＬＲＫＳＫＫＬＡＤＥＬＶＥＲＬＲＡＬＶＥＤＬＲＲＲＩＤ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿１９２（配列番号２６９３３）
ＳＴＡＥＴＶＡＥＥＶＥＲＶＬＫＨＳＤＤＬＩＫＥＶＥＤＶＮＲＲＶＥＥＥＩＫＲＶＩＲＥＬＥＥＥＮＥＲＬＶＡＥＶＲＫＧＶＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿１９３（配列番号２６９３４）
ＳＥＶＤＥＩＩＫＥＬＥＲＬＬＡＥＩＡＲＥＮＥＲＩＩＲＥＳＲＫＬＡＤＥＶＲＫＲＮＥＤＡＩＲＫＬＥＥＬＶＡＲＬＡＤＡＶＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿１９４（配列番号２６９３５）
ＳＥＩＤＥＶＬＴＲＬＲＫＩＳＫＤＬＮＥＴＳＤＲＶＮＥＲＡＲＫＩＩＤＤＩＫＫＥＳＫＲＶＮＤＥＡＲＥＩＶＥＲＬＫＲＥＩＤ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿１９５（配列番号２６９３６）
ＳＥＤＥＤＬＤＲＶＡＥＫＬＡＲＥＨＫＫＳＶＥＥＩＫＲＶＬＫＳＡＤＥＥＳＫＫＬＶＲＤＴＥＲＶＩＥＥＩＫＲＥＶＥＥＡＲＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿１９６（配列番号２６９３７）
ＳＳＶＥＥＬＬＥＲＬＲＲＩＳＥＥＮＫＲＲＩＥＫＬＬＲＥＶＥＫＶＬＲＥＬＫＤＲＨＲＫＬＬＫＲＶＥＥＩＩＲＫＶＫＥＥＩＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿１９７（配列番号２６９３８）
ＳＡＡＤＥＶＶＥＲＭＫＥＬＶＡＴＶＫＲＥＮＤＥＶＶＫＥＬＫＫＬＶＫＥＬＥＤＤＮＲＲＶＶＥＥＳＫＫＳＶＥＤＬＡＲＲＶＧ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿１９８（配列番号２６９３９）
ＳＥＳＤＥＶＩＲＤＬＡＲＬＬＤＥＬＡＲＨＶＤＤＳＶＲＲＭＤＥＶＶＫＲＳＴＲＥＡＤＥＬＡＫＲＬＤＥＬＶＫＥＶＥＫＫＰＧ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿１９９（配列番号２６９４０）
ＫＥＶＥＤＡＶＫＥＬＥＤＬＬＲＡＮＥＤＫＴＲＳＩＶＥＤＭＲＡＳＮＫＤＬＥＤＨＳＲＡＳＥＥＥＶＲＫＬＬＤＤＬＲＲＡＧＶ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２００（配列番号２６９４１）
ＤＥＩＲＫＶＶＫＥＩＴＤＬＬＫＡＳＮＤＫＮＲＫＶＶＥＥＩＲＤＬＬＲＫＳＫＫＬＡＤＥＬＶＥＲＬＲＡＬＶＥＤＬＲＲＲＩＤ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２０１（配列番号２６９４２）
ＳＲＶＥＥＩＩＥＤＬＲＲＬＬＥＥＩＲＫＥＮＥＤＳＩＲＲＳＫＥＬＬＤＲＶＫＥＩＮＤＴＩＩＡＥＬＥＲＬＬＫＤＩＥＫＥＶＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２０２（配列番号２６９４３）
ＳＲＶＥＥＩＩＥＤＬＲＲＬＬＥＥＩＲＫＥＮＥＤＳＩＲＲＳＫＥＬＬＤＲＶＫＥＩＮＤＴＩＩＡＥＬＥＲＬＬＫＤＩＥＫＥＶＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２０３（配列番号２６９４４）
ＳＥＶＤＤＶＬＲＲＬＥＥＬＩＫＴＬＥＤＩＮＡＫＳＬＥＤＩＫＫＬＩＤＤＬＡＫＩＬＥＤＡＬＲＫＨＥＫＬＩＲＥＬＲＥＡＫＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２０４（配列番号２６９４５）
ＳＫＬＥＥＶＥＫＡＶＲＫＶＩＥＤＳＲＲＶＮＥＥＶＮＲＲＳＥＥＶＶＲＥＬＥＫＶＨＲＥＶＮＤＡＳＲＲＶＶＥＫＡＲＲＶＬＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２０５（配列番号２６９４６）
ＳＥＳＤＥＶＩＲＤＬＡＲＬＬＤＥＬＡＲＨＶＤＤＳＶＲＲＭＤＥＶＶＫＲＳＴＲＥＡＤＥＬＡＫＲＬＤＥＬＶＫＥＶＥＫＫＰＧ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２０６（配列番号２６９４７）
ＳＥＳＤＥＶＩＲＤＬＡＲＬＬＤＥＬＡＲＨＶＤＤＳＶＲＲＭＤＥＶＶＫＲＳＴＲＥＡＤＥＬＡＫＲＬＤＥＬＶＫＥＶＥＫＫＰＧ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２０７（配列番号２６９４８）
ＳＥＳＤＤＶＩＲＫＬＲＥＬＬＥＥＬＲＴＨＶＥＫＳＩＲＤＬＲＫＩＬＥＤＳＴＲＨＡＫＲＳＩＥＥＬＥＲＬＬＥＥＶＲＫＫＰＧ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２０８（配列番号２６９４９）
ＤＥＶＲＥＬＬＥＲＮＲＲＬＬＥＥＩＫＫＴＶＫＤＬＩＲＡＮＥＥＬＬＫＲＩＥＤＤＡＫＲＬＩＤＲＮＥＥＬＬＤＥＬＥＫＧＬＳ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２０９（配列番号２６９５０）
ＤＥＩＲＫＶＶＫＥＩＴＤＬＬＫＡＳＮＤＫＮＲＫＶＶＥＥＩＲＤＬＬＲＫＳＫＫＬＡＤＥＬＶＥＲＬＲＡＬＶＥＤＬＲＲＲＩＤ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２１０（配列番号２６９５１）
ＳＲＡＥＴＶＬＫＥＶＴＤＫＩＫＫＬＡＤＳＳＤＥＬＬＲＲＮＫＥＮＩＤＥＬＫＫＳＳＥＥＬＬＲＲＬＴＫＡＩＥＥＩＥＫＧＳＶ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２１１（配列番号２６９５２）
ＤＥＥＥＤＬＥＲＡＩＫＫＬＬＤＥＮＲＥＬＬＫＲＩＡＥＥＬＲＲＬＬＥＥＬＲＲＬＴＥＥＳＡＤＲＬＲＲＬＬＫＥＬＫＤＲＧＶ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２１２（配列番号２６９５３）
ＤＥＩＲＫＶＶＫＥＩＴＤＬＬＫＡＳＮＤＫＮＲＫＶＶＥＥＩＲＤＬＬＲＫＳＫＫＬＡＤＥＬＶＥＲＬＲＡＬＶＥＤＬＲＲＲＩＤ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２１３（配列番号２６９５４）
ＳＫＥＤＲＬＲＥＥＬＫＫＬＬＡＲＬＡＥＥＩＥＲＬＫＲＡＬＥＥＳＮＫＤＬＫＲＴＩＤＡＳＥＫＨＬＲＤＶＮＥＤＶＫＲＧＧＶ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２１４（配列番号２６９５５）
ＳＥＳＤＥＶＩＲＤＬＡＲＬＬＤＥＬＡＲＨＶＤＤＳＶＲＲＭＤＥＶＶＫＲＳＴＲＥＡＤＥＬＡＫＲＬＤＥＬＶＫＥＶＥＫＫＰＧ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２１５（配列番号２６９５６）
ＳＥＳＤＥＶＩＲＤＬＡＲＬＬＤＥＬＡＲＨＶＤＤＳＶＲＲＭＤＥＶＶＫＲＳＴＲＥＡＤＥＬＡＫＲＬＤＥＬＶＫＥＶＥＫＫＰＧ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２１６（配列番号２６９５７）
ＳＥＳＤＤＶＩＲＫＬＲＥＬＬＥＥＬＲＴＨＶＥＫＳＩＲＤＬＲＫＩＬＥＤＳＴＲＨＡＫＲＳＩＥＥＬＥＲＬＬＥＥＶＲＫＫＰＧ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２１７（配列番号２６９５８）
ＳＲＶＥＥＩＩＥＤＬＲＲＬＬＥＥＩＲＫＥＮＥＤＳＩＲＲＳＫＥＬＬＤＲＶＫＥＩＮＤＴＩＩＡＥＬＥＲＬＬＫＤＩＥＫＥＶＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２１８（配列番号２６９５９）
ＳＥＶＤＥＩＩＫＥＬＥＲＬＬＡＥＩＡＲＥＮＥＲＩＩＲＥＳＲＫＬＡＤＥＶＲＫＲＮＥＤＡＩＲＫＬＥＥＬＶＡＲＬＡＤＡＶＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２１９（配列番号２６９６０）
ＳＳＶＥＥＬＬＥＲＬＲＲＩＳＥＥＮＫＲＲＩＥＫＬＬＲＥＶＥＫＶＬＲＥＬＫＤＲＨＲＫＬＬＫＲＶＥＥＩＩＲＫＶＫＥＥＩＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２２０（配列番号２６９６１）
ＳＥＬＥＥＶＬＲＲＩＥＡＬＶＲＫＡＨＫＥＮＥＤＶＬＲＥＩＥＲＬＶＲＴＡＨＲＬＮＫＫＶＤＤＤＳＡＫＩＡＥＤＬＫＲＧＧＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２２１（配列番号２６９６２）
ＳＥＳＤＥＶＩＲＤＬＡＲＬＬＤＥＬＡＲＨＶＤＤＳＶＲＲＭＤＥＶＶＫＲＳＴＲＥＡＤＥＬＡＫＲＬＤＥＬＶＫＥＶＥＫＫＰＧ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２２２（配列番号２６９６３）
ＳＥＳＤＤＶＩＲＫＬＲＥＬＬＥＥＬＲＴＨＶＥＫＳＩＲＤＬＲＫＩＬＥＤＳＴＲＨＡＫＲＳＩＥＥＬＥＲＬＬＥＥＶＲＫＫＰＧ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２２３（配列番号２６９６４）
ＳＲＡＥＴＶＬＫＥＶＴＤＫＩＫＫＬＡＤＳＳＤＥＬＬＲＲＮＫＥＮＩＤＥＬＫＫＳＳＥＥＬＬＲＲＬＴＫＡＩＥＥＩＥＫＧＳＶ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２２４（配列番号２６９６５）
ＤＥＶＲＥＬＬＥＲＮＲＲＬＬＥＥＩＫＫＴＶＫＤＬＩＲＡＮＥＥＬＬＫＲＩＥＤＤＡＫＲＬＩＤＲＮＥＥＬＬＤＥＬＥＫＧＬＳ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２２５（配列番号２６９６６）
ＳＴＥＥＶＬＤＥＩＲＫＬＨＫＴＬＴＥＤＩＫＲＶＬＲＥＩＥＥＬＨＲＲＴＩＥＥＮＫＥＶＬＤＫＩＡＥＤＹＫＲＶＩＤＤＶＲＴ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２２６（配列番号２６９６７）
ＳＥＩＥＫＩＬＫＥＩＥＤＬＡＲＲＤＥＥＶＳＫＫＩＶＥＤＩＲＲＬＡＫＥＶＥＤＴＳＲＤＩＶＲＫＩＥＥＬＡＫＲＶＬＤＲＬＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２２７（配列番号２６９６８）
ＳＥＡＥＲＬＥＡＲＡＲＥＬＬＲＡＮＥＥＬＭＤＤＬＲＡＫＡＥＥＬＬＫＲＮＤＲＬＶＫＥＩＥＫＫＶＲＥＶＬＡＡＩＥＥＬＫＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２２８（配列番号２６９６９）
ＤＤＬＥＲＡＲＥＥＶＡＤＬＩＲＫＨＥＥＫＴＲＲＩＬＥＥＳＲＲＬＮＥＲＨＲＥＬＳＡＲＩＬＤＥＩＲＫＬＡＥＲＩＥＥＬＩＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２２９（配列番号２６９７０）
ＤＥＥＥＤＬＥＲＡＩＫＫＬＬＤＥＮＲＥＬＬＫＲＩＡＥＥＬＲＲＬＬＥＥＬＲＲＬＴＥＥＳＡＤＲＬＲＲＬＬＫＥＬＫＤＲＧＶ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２３０（配列番号２６９７１）
ＤＥＩＲＫＶＶＫＥＩＴＤＬＬＫＡＳＮＤＫＮＲＫＶＶＥＥＩＲＤＬＬＲＫＳＫＫＬＡＤＥＬＶＥＲＬＲＡＬＶＥＤＬＲＲＲＩＤ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２３１（配列番号２６９７２）
ＤＥＩＲＫＶＶＫＥＩＴＤＬＬＫＡＳＮＤＫＮＲＫＶＶＥＥＩＲＤＬＬＲＫＳＫＫＬＡＤＥＬＶＥＲＬＲＡＬＶＥＤＬＲＲＲＩＤ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２３２（配列番号２６９７３）
ＳＴＡＥＴＶＥＫＫＶＥＥＶＩＲＥＮＥＫＳＭＲＥＳＥＥＫＶＤＲＳＴＫＲＩＥＤＶＬＲＲＬＥＥＴＩＲＫＴＳＤＤＩＡＫＧＶＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２３３（配列番号２６９７４）
ＳＲＶＥＥＩＩＥＤＬＲＲＬＬＥＥＩＲＫＥＮＥＤＳＩＲＲＳＫＥＬＬＤＲＶＫＥＩＮＤＴＩＩＡＥＬＥＲＬＬＫＤＩＥＫＥＶＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２３４（配列番号２６９７５）
ＳＲＶＥＥＩＩＥＤＬＲＲＬＬＥＥＩＲＫＥＮＥＤＳＩＲＲＳＫＥＬＬＤＲＶＫＥＩＮＤＴＩＩＡＥＬＥＲＬＬＫＤＩＥＫＥＶＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２３５（配列番号２６９７６）
ＲＥＶＥＥＭＩＫＥＬＥＥＬＬＫＤＬＫＥＫＮＥＲＡＳＫＲＮＲＥＬＶＲＲＬＥＥＥＮＫＲＶＩＥＥＬＫＫＬＶＫＥＬＥＤＬＶＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２３６（配列番号２６９７７）
ＳＥＶＤＤＶＬＲＲＬＥＥＬＩＫＴＬＥＤＩＮＡＫＳＬＥＤＩＫＫＬＩＤＤＬＡＫＩＬＥＤＡＬＲＫＨＥＫＬＩＲＥＬＲＥＡＫＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２３７（配列番号２６９７８）
ＳＫＬＥＥＶＥＫＡＶＲＫＶＩＥＤＳＲＲＶＮＥＥＶＮＲＲＳＥＥＶＶＲＥＬＥＫＶＨＲＥＶＮＤＡＳＲＲＶＶＥＫＡＲＲＶＬＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２３８（配列番号２６９７９）
ＤＥＶＥＤＶＬＲＫＩＥＫＩＬＤＤＨＲＫＲＩＥＫＮＳＲＤＭＡＲＩＩＤＥＨＲＲＫＶＥＥＮＳＲＥＭＫＫＬＶＤＤＬＫＫＡＶＤ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２３９（配列番号２６９８０）
ＳＳＶＥＥＬＬＥＲＬＲＲＩＳＥＥＮＫＲＲＩＥＫＬＬＲＥＶＥＫＶＬＲＥＬＫＤＲＨＲＫＬＬＫＲＶＥＥＩＩＲＫＶＫＥＥＩＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２４０（配列番号２６９８１）
ＤＥＶＥＫＶＬＥＥＩＫＲＡＬＤＤＬＲＫＫＶＥＥＳＫＲＥＩＫＥＡＬＫＡＶＥＫＨＴＲＤＳＤＴＡＮＫＲＴＬＡＥＩＥＲＧＶＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２４１（配列番号２６９８２）
ＳＥＳＤＥＶＩＲＤＬＡＲＬＬＤＥＬＡＲＨＶＤＤＳＶＲＲＭＤＥＶＶＫＲＳＴＲＥＡＤＥＬＡＫＲＬＤＥＬＶＫＥＶＥＫＫＰＧ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２４２（配列番号２６９８３）
ＫＥＶＥＤＡＶＫＥＬＥＤＬＬＲＡＮＥＤＫＴＲＳＩＶＥＤＭＲＡＳＮＫＤＬＥＤＨＳＲＡＳＥＥＥＶＲＫＬＬＤＤＬＲＲＡＧＶ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２４３（配列番号２６９８４）
ＤＥＩＲＫＶＶＫＥＩＴＤＬＬＫＡＳＮＤＫＮＲＫＶＶＥＥＩＲＤＬＬＲＫＳＫＫＬＡＤＥＬＶＥＲＬＲＡＬＶＥＤＬＲＲＲＩＤ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２４４（配列番号２６９８５）
ＳＴＡＥＴＶＡＥＥＶＥＲＶＬＫＨＳＤＤＬＩＫＥＶＥＤＶＮＲＲＶＥＥＥＩＫＲＶＩＲＥＬＥＥＥＮＥＲＬＶＡＥＶＲＫＧＶＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２４５（配列番号２６９８６）
ＳＲＶＥＥＩＩＥＤＬＲＲＬＬＥＥＩＲＫＥＮＥＤＳＩＲＲＳＫＥＬＬＤＲＶＫＥＩＮＤＴＩＩＡＥＬＥＲＬＬＫＤＩＥＫＥＶＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２４６（配列番号２６９８７）
ＳＥＶＤＥＩＩＫＥＬＥＲＬＬＡＥＩＡＲＥＮＥＲＩＩＲＥＳＲＫＬＡＤＥＶＲＫＲＮＥＤＡＩＲＫＬＥＥＬＶＡＲＬＡＤＡＶＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２４７（配列番号２６９８８）
ＳＥＶＤＤＶＬＲＲＬＥＥＬＩＫＴＬＥＤＩＮＡＫＳＬＥＤＩＫＫＬＩＤＤＬＡＫＩＬＥＤＡＬＲＫＨＥＫＬＩＲＥＬＲＥＡＫＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２４８（配列番号２６９８９）
ＳＫＬＥＥＶＥＫＡＶＲＫＶＩＥＤＳＲＲＶＮＥＥＶＮＲＲＳＥＥＶＶＲＥＬＥＫＶＨＲＥＶＮＤＡＳＲＲＶＶＥＫＡＲＲＶＬＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２４９（配列番号２６９９０）
ＳＡＥＥＶＫＥＥＬＫＲＩＡＴＫＬＫＥＥＩＫＥＮＩＲＲＬＥＥＳＶＥＫＩＡＫＥＬＡＥＮＩＫＲＬＥＤＩＬＲＤＶＫＲＧＬＲＤ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２５０（配列番号２６９９１）
ＳＤＶＤＲＶＬＥＥＩＲＫＬＬＥＤＬＫＲＨＳＥＫＶＳＥＥＮＥＤＬＬＲＡＮＴＥＬＮＫＲＶＳＥＤＮＥＲＬＬＥＥＬＫＲＬＲＥ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２５１（配列番号２６９９２）
ＤＥＶＥＤＶＬＲＫＩＥＫＩＬＤＤＨＲＫＲＩＥＫＮＳＲＤＭＡＲＩＩＤＥＨＲＲＫＶＥＥＮＳＲＥＭＫＫＬＶＤＤＬＫＫＡＶＤ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２５２（配列番号２６９９３）
ＳＳＶＥＥＬＬＥＲＬＲＲＩＳＥＥＮＫＲＲＩＥＫＬＬＲＥＶＥＫＶＬＲＥＬＫＤＲＨＲＫＬＬＫＲＶＥＥＩＩＲＫＶＫＥＥＩＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２５３（配列番号２６９９４）
ＤＲＥＲＥＶＫＫＲＬＤＥＶＲＥＲＩＥＲＬＬＲＲＶＥＥＥＳＲＲＶＡＥＥＩＲＲＬＩＥＥＶＲＲＲＮＫＫＶＴＥＥＩＲＥＬＬＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２５４（配列番号２６９９５）
ＳＲＡＥＴＶＬＫＥＶＴＤＫＩＫＫＬＡＤＳＳＤＥＬＬＲＲＮＫＥＮＩＤＥＬＫＫＳＳＥＥＬＬＲＲＬＴＫＡＩＥＥＩＥＫＧＳＶ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２５５（配列番号２６９９６）
ＳＥＩＥＫＩＬＫＥＩＥＤＬＡＲＲＤＥＥＶＳＫＫＩＶＥＤＩＲＲＬＡＫＥＶＥＤＴＳＲＤＩＶＲＫＩＥＥＬＡＫＲＶＬＤＲＬＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２５６（配列番号２６９９７）
ＳＥＡＥＫＡＫＥＴＩＤＲＬＡＤＲＶＲＫＬＬＥＥＩＫＲＳＬＤＤＳＲＲＫＳＫＥＴＶＥＥＮＥＫＴＬＤＲＭＲＫＥＶＤＡＡＫＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２５７（配列番号２６９９８）
ＳＥＶＥＥＬＩＫＲＬＡＫＶＬＫＥＬＶＤＫＶＲＫＶＩＥＤＴＫＥＬＬＥＲＬＫＲＲＳＥＤＨＩＲＫＬＲＥＶＬＫＥＡＫＤＱＰＩ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２５８（配列番号２６９９９）
ＤＥＩＲＫＶＶＫＥＩＴＤＬＬＫＡＳＮＤＫＮＲＫＶＶＥＥＩＲＤＬＬＲＫＳＫＫＬＡＤＥＬＶＥＲＬＲＡＬＶＥＤＬＲＲＲＩＤ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２５９（配列番号２７０００）
ＤＥＩＲＫＶＶＫＥＩＴＤＬＬＫＡＳＮＤＫＮＲＫＶＶＥＥＩＲＤＬＬＲＫＳＫＫＬＡＤＥＬＶＥＲＬＲＡＬＶＥＤＬＲＲＲＩＤ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２６０（配列番号２７００１）
ＳＴＡＥＴＶＥＫＫＶＥＥＶＩＲＥＮＥＫＳＭＲＥＳＥＥＫＶＤＲＳＴＫＲＩＥＤＶＬＲＲＬＥＥＴＩＲＫＴＳＤＤＩＡＫＧＶＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２６１（配列番号２７００２）
ＳＲＶＥＥＩＩＥＤＬＲＲＬＬＥＥＩＲＫＥＮＥＤＳＩＲＲＳＫＥＬＬＤＲＶＫＥＩＮＤＴＩＩＡＥＬＥＲＬＬＫＤＩＥＫＥＶＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２６２（配列番号２７００３）
ＲＥＶＥＥＭＩＫＥＬＥＥＬＬＫＤＬＫＥＫＮＥＲＡＳＫＲＮＲＥＬＶＲＲＬＥＥＥＮＫＲＶＩＥＥＬＫＫＬＶＫＥＬＥＤＬＶＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２６３（配列番号２７００４）
ＤＡＶＥＥＡＥＫＬＩＲＫＶＩＡＤＳＥＫＬＬＲＤＬＡＤＬＮＡＫＳＩＲＲＳＥＫＬＶＥＤＤＲＲＡＮＥＤＶＩＲＫＬＥＥＬＲＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２６４（配列番号２７００４）
ＳＥＶＤＤＶＬＲＲＬＥＥＬＩＫＴＬＥＤＩＮＡＫＳＬＥＤＩＫＫＬＩＤＤＬＡＫＩＬＥＤＡＬＲＫＨＥＫＬＩＲＥＬＲＥＡＫＫ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２６５（配列番号２７００６）
ＳＥＩＥＲＶＫＫＲＬＥＥＬＬＡＥＶＥＥＳＴＲＲＬＥＥＲＬＫＲＬＬＥＥＡＫＲＳＳＥＥＶＥＫＥＬＲＲＬＬＥＡＶＲＲＧＬＳ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２６６（配列番号２７００７）
ＳＤＶＤＲＶＬＥＥＩＲＫＬＬＥＤＬＫＲＨＳＥＫＶＳＥＥＮＥＤＬＬＲＡＮＴＥＬＮＫＲＶＳＥＤＮＥＲＬＬＥＥＬＫＲＬＲＥ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２６７（配列番号２７００８）
ＤＥＶＥＤＶＬＲＫＩＥＫＩＬＤＤＨＲＫＲＩＥＫＮＳＲＤＭＡＲＩＩＤＥＨＲＲＫＶＥＥＮＳＲＥＭＫＫＬＶＤＤＬＫＫＡＶＤ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２６８（配列番号２７００９）
ＳＥＳＤＥＶＩＲＤＬＡＲＬＬＤＥＬＡＲＨＶＤＤＳＶＲＲＭＤＥＶＶＫＲＳＴＲＥＡＤＥＬＡＫＲＬＤＥＬＶＫＥＶＥＫＫＰＧ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２６９（配列番号２７０１０）
ＳＲＡＥＴＶＬＫＥＶＴＤＫＩＫＫＬＡＤＳＳＤＥＬＬＲＲＮＫＥＮＩＤＥＬＫＫＳＳＥＥＬＬＲＲＬＴＫＡＩＥＥＩＥＫＧＳＶ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２７０（配列番号２７０１１）
ＤＥＥＥＤＬＥＲＡＩＫＫＬＬＤＥＮＲＥＬＬＫＲＩＡＥＥＬＲＲＬＬＥＥＬＲＲＬＴＥＥＳＡＤＲＬＲＲＬＬＫＥＬＫＤＲＧＶ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２７１（配列番号２７０１２）
ＤＥＩＲＫＶＶＫＥＩＴＤＬＬＫＡＳＮＤＫＮＲＫＶＶＥＥＩＲＤＬＬＲＫＳＫＫＬＡＤＥＬＶＥＲＬＲＡＬＶＥＤＬＲＲＲＩＤ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２７２（配列番号２７０１３）
ＤＡＶＥＥＡＥＫＬＩＲＫＶＩＡＤＳＥＫＬＬＲＤＬＡＤＬＮＡＫＳＩＲＲＳＥＫＬＶＥＤＤＲＲＡＮＥＤＶＩＲＫＬＥＥＬＲＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２７３（配列番号２７０１４）
ＳＥＤＥＤＬＤＲＶＡＥＫＬＡＲＥＨＫＫＳＶＥＥＩＫＲＶＬＫＳＡＤＥＥＳＫＫＬＶＲＤＴＥＲＶＩＥＥＩＫＲＥＶＥＥＡＲＲ
＞２ｐｌｕｓ１＿ＧＦＰ１１＿Ｋｅｙ＿Ｎｔｅｒｍ＿２７４（配列番号２７０１５）
ＳＫＥＤＲＬＲＥＥＬＫＫＬＬＡＲＬＡＥＥＩＥＲＬＫＲＡＬＥＥＳＮＫＤＬＫＲＴＩＤＡＳＥＫＨＬＲＤＶＮＥＤＶＫＲＧＧＶ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｋｅｙ＿６６８＿Ｎｔｅｒｍ（配列番号２７，３２２）
ＤＥＡＫＥＬＬＤＥＩＲＫＡＶＫＥＳＥＤＲＬＥＫＬＬＲＤＹＥＫＥＬＲＲＬＥＫＥＬＲＤＬＫＲＲＩＥＥＫＬＥＥＬＲＲＧＳＬ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｋｅｙ＿６６８＿Ｃｔｅｒｍ（配列番号２７，３２３）
ＲＧＡＤＡＬＳＲＬＬＥＥＬＬＲＶＶＤＤＬＩＲＶＬＫＥＬＩＤＫＳＲＫＶＩＥＥＬＬＥＬＬＫＲＩＮＥＥＮＬＫＶＬＡＥＩＩＫ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｋｅｙ＿６６８＿Ｃｔｅｒｍ（配列番号２７，３２４）
ＳＥＫＥＫＬＬＫＥＳＥＥＥＶＲＲＬＲＲＴＬＥＥＬＬＲＫＹＲＥＶＬＥＲＬＲＫＥＬＲＥＩＥＥＲＶＲＤＶＶＲＲＬＫＥＶＬＤ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｋｅｙ＿６６８＿Ｃｔｅｒｍ（配列番号２７，３２５）
ＳＥＫＥＤＡＡＲＫＬＲＫＬＶＥＥＬＴＲＥＹＥＥＬＶＫＫＬＥＲＬＩＥＥＩＥＫＶＳＥＥＳＶＲＫＬＥＫＬＬＡＥＩＳＥＥＶＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｋｅｙ＿６６８＿Ｃｔｅｒｍ（配列番号２７，３２６）
ＥＡＬＲＫＬＶＥＬＬＶＥＶＬＲＲＬＩＲＶＮＲＥＬＶＫＬＬＲＥＶＬＥＲＬＬＲＩＬＲＥＳＶＫＫＬＫＲＬＩＥＫＶＩＫＤＡＴ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｋｅｙ＿６６９＿Ｎｔｅｒｍ（配列番号２７，３２７）
ＲＡＶＫＫＬＤＥＩＶＫＥＶＡＫＫＬＥＤＶＶＲＡＮＥＥＬＷＲＡＬＶＥＬＮＫＥＳＶＲＲＬＲＥＩＶＥＲＶＡＲＤＬＥＥＴＡＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｋｅｙ＿６７０＿Ｎｔｅｒｍ（配列番号２７，３２８）
ＳＤＥＲＲＩＡＥＲＩＲＥＬＬＲＥＳＫＫＬＶＲＤＶＶＥＥＡＫＲＬＬＫＥＮＲＤＳＴＲＫＩＩＥＤＩＲＲＬＬＲＫＩＥＤＳＴＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｋｅｙ＿６７０＿Ｃｔｅｒｍ（配列番号２７，３２９）
ＳＫＥＥＴＬＲＫＥＡＥＤＬＬＲＲＬＥＥＬＴＲＲＬＥＫＫＡＲＥＬＬＥＲＡＫＫＬＳＲＤＬＡＥＥＬＫＲＬＬＫＥＬＲＥＫＧＶ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｋｅｙ＿６７０＿Ｃｔｅｒｍ（配列番号２７，３３０）
ＡＡＫＲＬＶＥＥＬＬＫＡＶＴＤＬＳＲＫＮＫＲＩＬＥＥＬＬＫＡＩＥＴＬＳＤＥＮＫＫＩＬＴＥＩＬＤＡＬＲＲＬＶＥＫＩＥＫ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｋｅｙ＿６７０＿Ｃｔｅｒｍ（配列番号２７，３３１）
ＫＥＲＥＥＶＫＥＫＬＤＲＬＬＥＥＶＥＫＴＶＲＥＬＫＲＥＨＤＥＬＬＫＥＶＥＫＬＶＲＤＬＫＫＥＨＤＥＬＬＫＫＶＫＤＤＧＶ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｋｅｙ＿６７０＿Ｎｔｅｒｍ（配列番号２７，３３２）
ＤＲＬＤＫＶＥＥＬＶＫＫＬＬＥＤＴＫＲＴＶＤＲＶＲＥＬＶＲＫＩＬＫＫＳＲＥＴＬＥＥＬＥＲＬＩＥＫＩＬＲＥＬＥＫＤＡＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｋｅｙ＿６７０＿Ｃｔｅｒｍ（配列番号２７，３３３）
ＳＥＲＥＴＶＫＲＲＬＥＥＬＬＫＥＶＫＲＴＬＤＫＬＫＥＥＨＤＲＬＬＥＤＶＲＲＶＶＥＥＬＫＲＥＨＤＫＬＬＫＥＶＫＤＳＧＶ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｋｅｙ＿６７０＿Ｎｔｅｒｍ（配列番号２７，３３４）
ＳＥＤＥＩＩＫＫＩＩＥＤＬＲＲＶＬＫＥＶＥＥＩＨＫＥＶＥＥＲＬＤＫＶＬＫＥＡＥＥＭＨＫＥＶＬＫＥＬＤＲＶＬＤＥＶＫＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｋｅｙ＿６７０＿Ｎｔｅｒｍ（配列番号２７，３３５）
ＳＲＥＥＶＬＲＥＬＥＥＶＩＥＤＮＲＲＬＬＥＥＬＩＥＫＳＫＫＶＬＤＥＳＬＫＬＩＤＥＬＬＲＲＬＥＥＶＬＥＲＶＬＲＬＬＥＥ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｋｅｙ＿６７０＿Ｎｔｅｒｍ（配列番号２７，３３６）
ＩＳＥＤＤＬＫＲＶＶＤＥＶＥＫＫＬＲＥＬＫＲＲＹＡＥＡＬＥＲＩＫＥＫＩＫＥＬＫＤＲＹＥＲＡＶＲＥＶＶＡＥＬＲＫＴＴＫ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｋｅｙ＿６７０＿Ｎｔｅｒｍ（配列番号２７，３３７）
ＳＫＡＥＥＩＡＥＫＬＤＲＬＬＥＥＮＲＲＡＬＥＥＩＴＴＲＬＤＤＬＬＲＲＮＫＤＡＬＲＫＶＭＥＫＬＫＲＬＬＤＤＬＲＲＧＧＩ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｋｅｙ＿６７１＿Ｃｔｅｒｍ（配列番号２７，３３８）
ＶＤＳＥＲＶＫＥＩＬＥＲＩＬＲＶＶＥＥＡＶＲＬＮＥＥＳＬＲＲＩＬＤＶＶＲＫＡＶＫＬＤＲＥＳＬＫＫＩＬＤＶＶＥＥＡＶＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｋｅｙ＿６７１＿Ｃｔｅｒｍ（配列番号２７，３３９）
ＶＫＤＤＥＶＥＲＥＩＲＲＶＫＥＤＬＤＲＩＬＥＥＹＲＲＬＬＥＥＩＫＲＫＬＥＥＩＬＲＲＶＥＥＬＨＲＲＬＲＲＫＬＥＥＩＤＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｋｅｙ＿６７１＿Ｃｔｅｒｍ（配列番号２７，３４０）
ＳＲＶＥＥＬＫＫＬＩＥＤＩＬＲＩＳＲＥＶＶＥＲＩＫＲＶＡＥＤＩＨＲＩＮＲＲＶＬＤＤＬＲＫＬＩＥＤＩＬＲＴＶＥＥＩＬＡ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｋｅｙ＿６７１＿Ｃｔｅｒｍ（配列番号２７，３４１）
ＲＧＡＤＡＬＳＲＬＬＥＥＬＬＲＶＶＤＤＬＩＲＶＬＫＥＬＩＤＫＳＲＫＶＩＥＥＬＬＥＬＬＫＲＩＮＥＥＮＬＫＶＬＡＥＩＩＫ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｋｅｙ＿６７２＿Ｃｔｅｒｍ（配列番号２７，３４２）
ＲＧＡＤＡＬＳＲＬＬＥＥＬＬＲＶＶＤＤＬＩＲＶＬＫＥＬＩＤＫＳＲＫＶＩＥＥＬＬＥＬＬＫＲＩＮＥＥＮＬＫＶＬＡＥＩＩＫ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｋｅｙ＿６７＞３＿Ｎｔｅｒｍ（配列番号２７，３４３）
ＥＡＬＲＫＬＶＥＬＬＶＥＶＬＲＲＬＩＲＶＮＲＥＬＶＫＬＬＲＥＶＬＥＲＬＬＲＩＬＲＥＳＶＫＫＬＫＲＬＩＥＫＶＩＫＤＡＴ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｋｅｙ＿６７＞３＿Ｃｔｅｒｍ（配列番号２７，３４４）
ＳＥＫＥＤＡＡＲＫＬＲＫＬＶＥＥＬＴＲＥＹＥＥＬＶＫＫＬＥＲＬＩＥＥＩＥＫＶＳＥＥＳＶＲＫＬＥＫＬＬＡＥＩＳＥＥＶＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｋｅｙ＿６７＞３＿Ｎｔｅｒｍ（配列番号２７，３４５）
ＳＥＫＥＤＡＡＲＫＬＲＫＬＶＥＥＬＴＲＥＹＥＥＬＶＫＫＬＥＲＬＩＥＥＩＥＫＶＳＥＥＳＶＲＫＬＥＫＬＬＡＥＩＳＥＥＶＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｋｅｙ＿６７４＿Ｎｔｅｒｍ（配列番号２７，３４６）
ＳＥＫＥＤＡＡＲＫＬＲＫＬＶＥＥＬＴＲＥＹＥＥＬＶＫＫＬＥＲＬＩＥＥＩＥＫＶＳＥＥＳＶＲＫＬＥＫＬＬＡＥＩＳＥＥＶＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｋｅｙ＿６７４＿Ｃｔｅｒｍ（配列番号２７，３４７）
ＲＡＶＫＫＬＤＥＩＶＫＥＶＡＫＫＬＥＤＶＶＲＡＮＥＥＬＷＲＡＬＶＥＬＮＫＥＳＶＲＲＬＲＥＩＶＥＲＶＡＲＤＬＥＥＴＡＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｋｅｙ＿６７５＿Ｎｔｅｒｍ（配列番号２７，３４８）
ＲＡＶＫＫＬＤＥＩＶＫＥＶＡＫＫＬＥＤＶＶＲＡＮＥＥＬＷＲＡＬＶＥＬＮＫＥＳＶＲＲＬＲＥＩＶＥＲＶＡＲＤＬＥＥＴＡＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｋｅｙ＿６７６＿Ｎｔｅｒｍ（配列番号２７，３４９）
ＲＡＶＫＫＬＤＥＩＶＫＥＶＡＫＫＬＥＤＶＶＲＡＮＥＥＬＷＲＡＬＶＥＬＮＫＥＳＶＲＲＬＲＥＩＶＥＲＶＡＲＤＬＥＥＴＡＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｋｅｙ＿６７７＿Ｎｔｅｒｍ（配列番号２７，３５０）
ＳＤＥＲＲＩＡＥＲＩＲＥＬＬＲＥＳＫＫＬＶＲＤＶＶＥＥＡＫＲＬＬＫＥＮＲＤＳＴＲＫＩＩＥＤＩＲＲＬＬＲＫＩＥＤＳＴＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｋｅｙ＿６７７＿Ｃｔｅｒｍ（配列番号２７，３５１）
ＳＫＥＥＴＬＲＫＥＡＥＤＬＬＲＲＬＥＥＬＴＲＲＬＥＫＫＡＲＥＬＬＥＲＡＫＫＬＳＲＤＬＡＥＥＬＫＲＬＬＫＥＬＲＥＫＧＶ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｋｅｙ＿６７８＿Ｎｔｅｒｍ（配列番号２７，３５２）
ＳＫＥＥＴＬＲＫＥＡＥＤＬＬＲＲＬＥＥＬＴＲＲＬＥＫＫＡＲＥＬＬＥＲＡＫＫＬＳＲＤＬＡＥＥＬＫＲＬＬＫＥＬＲＥＫＧＶ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｋｅｙ＿６７８＿Ｃｔｅｒｍ（配列番号２７，３５３）
ＳＫＥＥＴＬＲＫＥＡＥＤＬＬＲＲＬＥＥＬＴＲＲＬＥＫＫＡＲＥＬＬＥＲＡＫＫＬＳＲＤＬＡＥＥＬＫＲＬＬＫＥＬＲＥＫＧＶ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｋｅｙ＿６７８＿Ｃｔｅｒｍ（配列番号２７，３５４）
ＩＳＥＤＤＬＫＲＶＶＤＥＶＥＫＫＬＲＥＬＫＲＲＹＡＥＡＬＥＲＩＫＥＫＩＫＥＬＫＤＲＹＥＲＡＶＲＥＶＶＡＥＬＲＫＴＴＫ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｋｅｙ＿６７８＿Ｎｔｅｒｍ（配列番号２７，３５５）
ＳＫＡＥＥＩＡＥＫＬＤＲＬＬＥＥＮＲＲＡＬＥＥＩＴＴＲＬＤＤＬＬＲＲＮＫＤＡＬＲＫＶＭＥＫＬＫＲＬＬＤＤＬＲＲＧＧＩ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｋｅｙ＿６７８＿Ｎｔｅｒｍ（配列番号２７，３５６）
ＶＤＳＥＲＶＫＥＩＬＥＲＩＬＲＶＶＥＥＡＶＲＬＮＥＥＳＬＲＲＩＬＤＶＶＲＫＡＶＫＬＤＲＥＳＬＫＫＩＬＤＶＶＥＥＡＶＲ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｋｅｙ＿６７９＿Ｃｔｅｒｍ（配列番号２７，３５７）
ＳＫＡＥＥＩＡＥＫＬＤＲＬＬＥＥＮＲＲＡＬＥＥＩＴＴＲＬＤＤＬＬＲＲＮＫＤＡＬＲＫＶＭＥＫＬＫＲＬＬＤＤＬＲＲＧＧＩ
＞３ｐｌｕｓ１＿Ｋｅｙ＿６７９＿Ｎｔｅｒｍ（配列番号２７，３５８）
ＳＫＡＥＥＩＡＥＫＬＤＲＬＬＥＥＮＲＲＡＬＥＥＩＴＴＲＬＤＤＬＬＲＲＮＫＤＡＬＲＫＶＭＥＫＬＫＲＬＬＤＤＬＲＲＧＧＩ
【００５１】
特定の実施形態において、キーポリペプチドは、表２（配列番号２７１２７〜２７２７７の間で奇数の配列番号を有するポリペプチド）、表３、および／または表４におけるキーポリペプチドのアミノ酸配列に対してそれらの長さに沿って、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の配列同一性を共有する。別の実施形態において、キーポリペプチドは、表３におけるキーポリペプチドのアミノ酸配列とそれらの長さに沿って、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の配列同一性を共有する。別の実施形態において、キーポリペプチドは、表４におけるキーポリペプチドのアミノ酸配列とそれらの長さに沿って、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の配列同一性を共有する。上記のそれぞれの一実施形態において、パーセント特定は、任意選択的なＮ末端およびＣ末端の６０個のアミノ酸を伴わずに決定され得、別の実施形態では、パーセント特定は、任意選択的なＮ末端およびＣ末端の６０個のアミノ酸とともに決定され得る。
【００５２】
本開示のポリペプチド（すなわち、ケージポリペプチドおよびキーポリペプチド）は、ポリペプチドのＮ末端、Ｃ末端、内部、またはそれらの組み合わせに追加の残基を含み得、これらの追加の残基は、参照ポリペプチドと比較して本発明のポリペプチドのパーセント同一性を決定する際に含まれない。そのような残基は、意図された使用に好適な任意の残基であり得、限定されないがタグを含む。本明細書で使用される場合、「タグ」には、一般的な検出可能な部分（すなわち、蛍光タンパク質、抗体エピトープタグなど）、治療薬、精製タグ（Ｈｉｓタグなど）、リンカー、精製の目的に好適なリガンド、ポリペプチドの局在化を促進するリガンド、ポリペプチドに機能性を加えるペプチド領域などが含まれる。実施例が本明細書で示される。
【００５３】
一実施形態では、ポリペプチドは、本明細書に開示されるキーポリペプチドに融合された、本明細書に開示されるケージポリペプチドを含む融合タンパク質である。一実施形態では、融合タンパク質は、キーポリペプチドに融合されたケージポリペプチドを含み、ケージポリペプチドは、キーポリペプチドによって活性化されない。本明細書で記載されるように、直交ＬＯＣＫＲ設計（図３参照）は小文字の添え字が付されており、ＬＯＣＫＲaはケージaおよびキーaからなり、ＬＯＣＫＲbはケージbおよびキーbからなるなどであり、これによりケージaはキーaによってのみ活性化され、ケージbはキーbによってのみ活性化される、などである。したがって、例えば、融合タンパク質は、キーbポリペプチドに融合されたケージaポリペプチドを含み得る。そのような実施形態は、例えば、直交ＬＯＣＫＲ設計の制御を改善するために組み合わせて使用され得る（例えば、ＬＯＣＫＲ１は、ケージa−キーb融合ポリペプチドを含み、ＬＯＣＫＲ２は、ケージb−キーa融合ポリペプチドを含み、そのため同一細胞で発現させることができる）。
【００５４】
本明細書に開示される融合タンパク質の一実施形態では、融合タンパク質のケージポリペプチドおよびキーポリペプチド成分は、表１、表２、表３、および／または表４の異なる行におけるケージポリペプチドおよびキーポリペプチド（すなわち、表の１行目、１列目の各ケージポリペプチドは、１行目、２列目のいずれかのキーポリペプチドと融合することができる、など）に対して、それぞれその長さに沿って、少なくとも４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する少なくとも１つのケージポリペプチドおよび少なくとも１つのキーポリペプチドを含む。
【表１−１】
2021530475.tif 000141
【表１−２】
2021530475.tif 000142
【表２−１】
2021530475.tif 000143
【表２−２】
2021530475.tif 000144
【表２−３】
2021530475.tif 000145
【表２−４】
2021530475.tif 000146
【表２−５】
2021530475.tif 000147
【表２−６】
2021530475.tif 000148
【表２−７】
2021530475.tif 000149
【表２−８】
2021530475.tif 000150
【表２−９】
2021530475.tif 000151
【表２−１０】
2021530475.tif 000152
【表２−１１】
2021530475.tif 000153
【表２−１２】
2021530475.tif 000154
【表２−１３】
2021530475.tif 000155
【表２−１４】
2021530475.tif 000156
【表２−１５】
2021530475.tif 000157
【表２−１６】
2021530475.tif 000158
【表２−１７】
2021530475.tif 000159
【表２−１８】
2021530475.tif 000160
【表３】
2021530475.tif 000161
【表４−１】
2021530475.tif 000162
【表４−２】
2021530475.tif 000163
【表４−３】
2021530475.tif 000164
【表４−４】
2021530475.tif 000165
【表４−５】
2021530475.tif 000166
【表４−６】
2021530475.tif 000167
【表４−７】
2021530475.tif 000168
【表４−８】
2021530475.tif 000169
【表４−９】
2021530475.tif 000170
【表４−１０】
2021530475.tif 000171
【表４−１１】
2021530475.tif 000172
【表４−１２】
2021530475.tif 000173
【００５５】
本出願全体を通して使用される場合、「ポリペプチド」という用語は、その最も広い意味で使用され、サブユニットアミノ酸の配列を指す。本発明のポリペプチドは、Ｌ−アミノ酸＋グリシン、Ｄ−アミノ酸＋グリシン（インビボでＬ−アミノ酸特異的プロテアーゼに耐性である）、またはＤ−およびＬ−アミノ酸＋グリシンの組み合わせを含み得る。本明細書に記載のポリペプチドは、化学合成または組換え発現させることができる。ポリペプチドは、ペグ化、ＨＥＳ化、ＰＡＳ化、グリコシル化によってなど、他の化合物に結合させてインビボでの半減期の増加を促進し得、あるいはＦｃ融合として、または脱免疫化変異体で生成し得る。そのような結合は、共有結合または非共有結合であることができ、当業者によって理解される。
【００５６】
第５の態様において、本開示は、本明細書に開示される各態様の任意の実施形態または実施形態の組み合わせのポリペプチドをコードする核酸を提供する。核酸配列は、ゲノムまたはｃＤＮＡ形態で一本鎖または二本鎖のＲＮＡまたはＤＮＡ、あるいはＤＮＡ−ＲＮＡハイブリッドを含み得、これらの各々は、化学的または生化学的に修飾された、非天然の、または誘導体化されたヌクレオチド塩基を含み得る。そのような組換え核酸配列は、コードされたタンパク質の発現および／または精製を促進するために有用である追加の配列を含み得、限定されないが、ポリＡ配列、修飾コザック配列、ならびにエピトープタグ、搬出シグナル、分泌シグナル、核局在化シグナル、および血漿膜局在化シグナルをコードする配列が含まれる。本明細書の教示に基づいて、どの核酸配列が本開示の融合タンパク質をコードするかは、当業者には明らかであろう。
【００５７】
第６の態様では、本開示は、好適な制御配列に操作可能に連結された本開示の任意の態様の核酸を含む発現ベクターを提供する。「発現ベクター」は、核酸コード領域または遺伝子を、遺伝子産物の発現をもたらすことができる任意の制御配列に操作可能に連結するベクターを含む。本開示の核酸配列に操作可能に連結された「制御配列」は、核酸分子の発現をもたらすことができる核酸配列である。制御配列はそれらがその発現を指示するように機能する限り、核酸配列と隣接する必要はない。したがって、例えば、介在する非翻訳であるがすでに転写された配列は、プロモーター配列と核酸配列との間に存在し得、プロモーター配列は、依然としてコード配列に「操作可能に連結された」とみなされ得る。他のそのような制御配列には、ポリアデニル化シグナル、終結シグナル、およびリボソーム結合部位が含まれるが、これらに限定されない。そのような発現ベクターは任意のタイプのものであることができ、限定されないが、プラスミドおよびウイルスベースの発現ベクターが含まれる。哺乳動物系において開示される核酸の発現を促進するために使用されるコントロール配列は、構成的（限定されないが、ＣＭＶ、ＳＶ４０、ＲＳＶ、アクチン、ＥＦを含む様々なプロモーターのいずれかによって促進される）または誘導性（限定されないが、テトラサイクリン、エクジソン、ステロイド応答性を含む多数の誘導性プロモーターのいずれかによって促進される）であり得る。発現ベクターは、エピソームとして、または宿主染色体ＤＮＡへの組み込みによって、宿主生物において複製可能でなければならない。様々な実施形態において、発現ベクターは、プラスミド、ウイルスベースのベクター、または他の好適な発現ベクターを含むことができる。
【００５８】
第７の態様において、本開示は、本明細書に開示される核酸または発現ベクター（すなわち、エピソームまたは染色体に組み込まれた）を含む宿主細胞を提供し、宿主細胞は、原核生物または真核生物のいずれかであることができる。細胞は、本開示の発現ベクターを組み込むように一時的または安定的に工学処理することができ、限定されないが、細菌形質転換、リン酸カルシウム共沈降、エレクトロポレーション、またはリポソーム媒介性、ＤＥＡＥデキストラン媒介性、ポリカチオン媒介性、もしくはウイルス媒介性トランスフェクションを含む技術を使用する。一実施形態では、組換え宿主細胞は、
（ａ）第１のプロモーターに操作可能に連結された、本開示の態様１〜３のケージポリペプチドの任意の実施形態または実施形態の組み合わせのポリペプチドをコードする第１の核酸と、
（ｂ）本開示の態様４のキーポリペプチドの任意の実施形態または実施形態の組み合わせのポリペプチドをコードする第２の核酸であって、キーポリペプチドは、ケージポリペプチドの構造領域に結合して、ケージポリペプチドにおける立体構造変化を誘導し、第２の核酸は第２のプロモーターに操作可能に連結されている、第２の核酸と、を含む。
【００５９】
組換え宿主細胞は、単一のケージポリペプチドコード化核酸および単一のキーポリペプチドコード化核酸を含み得、または複数（すなわち、２、３、４、５、６、７、８、９、１０以上）の第１および第２の核酸を含み得、そのような一実施形態では、各第２の核酸は、構造領域に結合し、複数の第１の核酸によってコードされる異なるケージポリペプチドの立体構造変化を誘導することができるキーポリペプチドをコードし得る。別の実施形態において、各第２の核酸は、構造領域に結合し、複数の第１の核酸によってコードされる１つを超えるケージポリペプチドの立体構造変化を誘導することができるキーポリペプチドをコードし得る。
【００６０】
したがって、一実施形態では、第１の核酸は、複数の異なるケージポリペプチドをコードする複数の第１の核酸を含む。そのような一実施形態では、第２の核酸は、複数の異なるキーポリペプチドをコードする複数の第２の核酸を含み、複数の異なるキーポリペプチドは、複数の異なるケージポリペプチドのサブセットのみに結合してサブセットにおける立体構造変化を誘導することができる１つ以上のキーポリペプチドを含む。別のそのような実施形態では、第２の核酸は、各々の異なるケージポリペプチドに結合して、立体構造変化を誘導することができる単一のキーポリペプチドをコードする。
【００６１】
別の実施形態において、宿主細胞は、本明細書に開示される融合タンパク質を発現することができる核酸および／または発現ベクターを含み、宿主細胞は、
（ａ）第１のプロモーターに連結された第１の融合タンパク質（すなわち、キーポリペプチドに融合されたケージポリペプチド）をコードする第１の核酸と、
（ｂ）第２のプロモーターに操作可能に連結された第２の融合タンパク質をコードする第２の核酸と、を含み、
（ｉ）第１の核酸によってコードされるケージポリペプチドは、第２の核酸によってコードされるキーポリペプチドによって活性化され、
（ｉｉ）第１の核酸によってコードされるケージポリペプチドは、第１の核酸によってコードされるキーポリペプチドによって活性化されず、
（ｉｉｉ）第２の核酸によってコードされるケージポリペプチドは、第１の核酸によってコードされるキーポリペプチドによって活性化され、
（ｉｖ）第２の核酸によってコードされるケージポリペプチドは、第２の核酸によってコードされるキーポリペプチドによって活性化されない。
【００６２】
これらすべての実施形態において、第１および／または第２の核酸は、例えば、発現ベクターの形態であり得る。他の実施形態では、第１および／または第２の核酸は、宿主細胞ゲノムに組み込まれた核酸の形態であり得る。
【００６３】
本開示によるポリペプチドを生成する方法は、本開示の追加部分である。一実施形態において、本方法は、（ａ）本開示のこの態様による宿主を、ポリペプチドの発現を促す条件下で培養するステップと、（ｂ）任意選択的に、発現されたポリペプチドを回収するステップと、を含む。発現されたポリペプチドは、無細胞抽出物から回収するか、または培養培地から回収することができる。別の実施形態では、本方法は、ポリペプチドを化学的に合成することを含む。
【００６４】
第８の態様において、本開示はキットを提供する。一実施形態では、キットは、
（ａ）本開示の態様１〜３の任意の実施形態または実施形態の組み合わせの１つ以上のポリペプチド（すなわち、ケージポリペプチド）と、
（ｂ）本開示の態様４の任意の実施形態または実施形態の組み合わせの１つ以上のポリペプチド（すなわち、キーポリペプチド）と、
（ｃ）任意選択的に、本明細書に開示される任意の実施形態の１つ以上の融合タンパク質と、を含む。
【００６５】
別の実施形態では、キットは、
（ａ）本開示の態様１〜３の任意の実施形態または実施形態の組み合わせのケージポリペプチドをコードする第１の核酸と、
（ｂ）本開示の態様４の任意の実施形態または実施形態の組み合わせのキーポリペプチドをコードする第２の核酸と、
（ｃ）任意選択的に、本明細書に開示される任意の実施形態の融合タンパク質をコードする第３の核酸と、を含む。
【００６６】
別の実施形態では、キットは、
（ａ）本開示の態様１〜３の任意の実施形態または実施形態の組み合わせのケージポリペプチドをコードする第１の核酸を含む第１の発現ベクターであって、第１の核酸は第１のプロモーターに操作可能に連結されている、第１の発現ベクターと、
（ｂ）本開示の態様４の任意の実施形態または実施形態の組み合わせのキーポリペプチドをコードする第２の核酸を含む第２の発現ベクターであって、第２の核酸は第２のプロモーターに操作可能に連結されている、第２の発現ベクターと、を含む。
【００６７】
キットの実施形態の各々において、第１の核酸、第２の核酸、第１の発現ベクター、および／または第２の発現ベクターは、ケージまたはキーポリペプチドを、コードする単一の核酸または発現することができる発現ベクターを含み得るか、または複数（すなわち、２、３、４、５、６、７、８、９、１０以上）の第１の核酸、第２の核酸、第１の発現ベクター、および／または第２の発現ベクターを含み得る。様々なそのような実施形態において、構造領域に結合し、複数の第１の核酸によってコードされるか、または第１の発現ベクターによって発現することができる、異なるケージポリペプチドの立体構造変化を誘導することができるキーポリペプチドを、各第２の核酸はコードし得、または各第２の発現ベクターは発現することができ得る。他の実施形態では、構造領域に結合し、複数の第１の核酸によってコードされるか、または複数の第１の発現ベクターによって発現することができる、１つ以上のケージポリペプチドの立体構造変化を誘導することができるキーポリペプチドを、各第２の核酸はコードし得、または各第２の発現ベクターは発現することができ得る。
【００６８】
一実施形態では、ケージポリペプチドをコードする核酸に操作可能に連結されたプロモーター（第１のプロモーター）は、キーポリペプチドをコードする核酸に操作可能に連結されたプロモーター（第２のプロモーター）とは異なり、キーポリペプチドの発現を制御することによって、ケージポリペプチドおよび任意の機能性ポリペプチドの調整可能な制御を可能にする。他の実施形態では、ケージポリペプチドをコードする核酸に操作可能に連結されたプロモーター（第１のプロモーター）は、キーポリペプチドをコードする核酸に操作可能に連結されたプロモーター（第２のプロモーター）と同じである。他の実施形態では、第１のプロモーターおよび／または第２のプロモーターは、誘導性プロモーターであり得る。
【００６９】
第９の態様では、本開示はＬＯＣＫＲスイッチを提供し、
（ａ）構造ドメインおよびラッチドメインを含み、ラッチドメインはさらに１つ以上の生物活性ペプチドを含むケージポリペプチドであって、構造ドメインはラッチドメインと相互作用して生物活性ペプチド（複数可）の活性を防止する、ケージポリペプチドと、
（ｂ）ケージ構造ドメインに結合する任意選択的なキーポリペプチドであって、それによってラッチドメインを置換して生物活性ペプチド（複数可）を活性化する、任意選択的なキーポリペプチドと、
（ｃ）任意選択的に、生物活性ペプチド（複数可）が活性化されるときに生物活性ペプチド（複数可）に結合するエフェクターポリペプチド（複数可）と、を含む。
【００７０】
ケージポリペプチドおよびその構造領域とラッチ領域は、上記で考察され、生物活性ペプチド、エフェクターポリペプチド、およびキーポリペプチドである。本明細書に開示されるケージポリペプチド、生物活性ペプチド、およびキーポリペプチドの任意の実施形態は、本開示のＬＯＣＫＲスイッチおよびキットで使用され得る。例えば、一実施形態では、ケージポリペプチドは、
（ａ）２〜７個のアルファヘリックスを含むヘリックス束と、
（ｂ）各アルファヘリックスを接続するアミノ酸リンカーと、を含む。
一実施形態では、キーポリペプチドが存在し、キーポリペプチドは本明細書に開示される任意の実施形態または実施形態の組み合わせのキーポリペプチドを含み得る。
【００７１】
別の実施形態では、エフェクターポリペプチドが存在し、エフェクターポリペプチドは、生物活性ペプチドに選択的に結合するポリペプチドを含む。任意の好適なエフェクターポリペプチドを、目的の生物活性ペプチドに応じて使用することができる。様々な非限定的な実施形態において、エフェクターペプチドは、Ｂｃｌ２、ＧＦＰ１〜１０、プロテアーゼなどを含み得る。
【００７２】
本開示はまた、本明細書で説明されるケージポリペプチドおよびキーポリペプチドを含むＬＯＣＫＲスイッチを提供する。いくつかの態様において、ＬＯＣＫＲスイッチは、（ａ）構造領域およびラッチ領域を含み、ラッチ領域はさらに１つ以上の生物活性ペプチドを含むケージポリペプチドと、（ｂ）ケージ構造領域に結合するキーポリペプチドと、を含む。いくつかの態様において、ＬＯＣＫＲスイッチは、（ａ）構造領域およびラッチ領域を含み、ラッチ領域はさらに１つ以上の生物活性ペプチドを含むケージポリペプチドと、（ｂ）ケージ構造領域に結合するキーポリペプチドと、を含み、ラッチ領域における１つ以上の生物活性ペプチドは、１つ以上のエフェクターポリペプチド（複数可）に結合するか、または相互作用する。他の態様において、ＬＯＣＫＲスイッチは、（ａ）構造領域およびラッチ領域を含み、ラッチ領域はさらに１つ以上の生物活性ペプチドを含むケージポリペプチドであって、構造領域はラッチ領域と相互作用して、１つ以上の生物活性ペプチドの活性を防止するケージポリペプチドと、（ｂ）ケージ構造領域に結合するキーポリペプチドであって、それによってラッチ領域を置換し、１つ以上の生物活性ペプチドを活性化する、キーポリペプチドと、を含む。いくつかの他の態様において、ＬＯＣＫＲは、１つ以上の生物活性ペプチドが活性化されるときに、１つ以上の生物活性ペプチドに結合する１つ以上のエフェクターポリペプチド（複数可）をさらに含む。
【００７３】
いくつかの態様において、ラッチ領域およびキーポリペプチドの両方は、対応するケージポリペプチドにおける構造領域と結合または相互作用することができる。ケージポリペプチドにおけるラッチ領域と構造領域との間の相互作用は分子内相互作用であることができ、キーポリペプチドと対応するケージポリペプチドの構造領域との間の相互作用は分子間相互作用であることができる。しかしながら、いくつかの態様において、ケージポリペプチドの構造領域に対するラッチ領域の親和性は、エフェクターポリペプチドの不在下においてケージポリペプチドの構造領域に対するキーポリペプチドの親和性よりも高い。
【００７４】
いくつかの態様において、ケージポリペプチドの構造領域に対するラッチ領域の親和性は、エフェクターポリペプチドの不在下においてケージポリペプチドの構造領域に対するキーポリペプチドの親和性よりも、少なくとも約１．５倍、少なくとも約２倍、少なくとも約３倍、少なくとも約４倍、少なくとも約５倍、少なくとも約６倍、少なくとも約７倍、少なくとも約８倍、少なくとも約９倍、少なくとも約１０倍、少なくとも約１１倍、少なくとも約１２倍、少なくとも約１３倍、少なくとも約１４倍、少なくとも約１５倍、少なくとも約１６倍、少なくとも約１７倍、少なくとも約１８倍、少なくとも約１９倍、少なくとも約２０倍、少なくとも約２１倍、少なくとも約２２倍、少なくとも約２３倍、少なくとも約２４倍、少なくとも約２５倍、少なくとも約２６倍、少なくとも約２７倍、少なくとも約２８倍、少なくとも約２９倍、または少なくとも約３０倍高い。いくつかの態様において、ケージポリペプチドの構造領域に対するラッチ領域の親和性は、エフェクターポリペプチドの不在下でのケージポリペプチドの構造領域に対するキーポリペプチドの親和性よりも、少なくとも約１．１倍、少なくとも約１．２倍、少なくとも約１．３倍、少なくとも約１．４倍、少なくとも約１．５倍、少なくとも約１．６倍、少なくとも約１．７倍、少なくとも約１．８倍、少なくとも約１．９倍、少なくとも約２．０倍、少なくとも約２．１倍、少なくとも約２．２倍、少なくとも約２．３倍、少なくとも約２．４倍、少なくとも約２．５倍、少なくとも約２．６倍、少なくとも約２．７倍、少なくとも約２．８倍、少なくとも約２．９倍、または少なくとも約３．０倍高い。いくつかの態様において、ケージポリペプチドの構造領域に対するラッチ領域の親和性は、エフェクターポリペプチドの不在下でのケージポリペプチドの構造領域に対するキーポリペプチドの親和性よりも、少なくとも約３０倍、少なくとも約４０倍、少なくとも約５０倍、少なくとも約６０倍、少なくとも約７０倍、少なくとも約８０倍、少なくとも約９０倍、少なくとも約１００倍、少なくとも約１１０倍、少なくとも約１２０倍、少なくとも約１３０倍、少なくとも約１４０倍、少なくとも約１５０倍、少なくとも約１６０倍、少なくとも約１７０倍、少なくとも約１８０倍、少なくとも約１９０倍、少なくとも約２００倍、少なくとも約２１０倍、少なくとも約２２０倍、少なくとも約２３０倍、少なくとも約２４０倍、少なくとも約２５０倍、少なくとも約２６０倍、少なくとも約２７０倍、少なくとも約２８０倍、少なくとも約２９０倍、少なくとも約３００倍、例えば、約３０倍〜約３００倍、例えば、約１００倍〜約３００倍、約５０倍〜約１００倍高い。
【００７５】
他の実施形態では、分子内ラッチ−ケージ親和性は分子間キー−ケージ親和性よりも高く、エフェクタータンパク質の存在下では、分子間キー−ケージ親和性は分子内ラッチ−ケージ親和性よりも高い。結果として、生物活性ペプチドの機能は、ケージ、キー、およびエフェクタータンパク質の存在に依存する。
【００７６】
特定の実施形態では、分子間キー−ケージ相互作用は、エフェクタータンパク質の不在下でラッチ−ケージ相互作用を凌駕し得る。キーが存在しない場合、ラッチ−ケージ親和性はラッチ−エフェクタータンパク質親和性よりも高く（生物活性ペプチドのエフェクタータンパク質への結合を介して）、キーが存在する場合、ラッチ−エフェクタータンパク質親和性（エフェクタータンパク質への生物活性ペプチドの結合を介して）は、ラッチ−ケージ親和性よりも高い。結果として、生物活性ペプチドの機能は、ケージ、キー、およびエフェクタータンパク質の存在に依存する。
【００７７】
本明細書に開示されるように、ケージポリペプチドを使用して生物活性ペプチドをラッチ領域に隔離することによって、ケージポリペプチドをキーポリペプチドと一緒に使用することができ、それはキーポリペプチドが立体構造変化を誘導する競合的分子間結合によってラッチを置換し、エンコード化生物活性ペプチドまたはドメインを露出させ、システムを活性化するまで、不活性のままである（図１を参照）。ケージとキーポリペプチドを組み合わせた使用は、以下の実施例で本明細書において詳細に説明され、ＬＯＣＫＲスイッチと呼ばれる。ＬＯＣＫＲはラッチ化直交ケージ−キータンパク質（Ｌａｔｃｈｉｎｇ  Ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ  Ｃａｇｅ−Ｋｅｙ  ｐＲｏｔｉｅｎｓ）の略であり、各ＬＯＣＫＲ設計は、２つの別個のポリペプチド鎖であるケージポリペプチドおよびキーポリペプチドからなる。直交ＬＯＣＫＲ設計（図３参照）は小文字の添え字が付されており、ＬＯＣＫＲaはケージaおよびキーaからなり、ＬＯＣＫＲbはケージbおよびキーbからなる、などであり、これによりケージaはキーaによってのみ活性化され、ケージbはキーbによってのみ活性化される、などである。ポリペプチドおよびＬＯＣＫＲ名における接頭辞は、ＬＯＣＫＲスイッチによってエンコードおよび制御される機能性の基を示す。例えば、ＢｉｍＬＯＣＫＲはＢｉｍペプチドをエンコードする設計されたスイッチを指し、ＧＦＰ１１−ＬＯＣＫＲはＧＦＰ１１（ＧＦＰの１１番目の鎖）をエンコードする設計されたスイッチを指す。元のＬＯＣＫＲ＿ａケージスキャホルド設計をその非対称（１ｆｉｘ−ｓｈｏｒｔ−ｎｏＢｉｍ（ＡＹＹＡ）−ｔ０）および直交（ＬＯＣＫＲｂ〜ｆ）設計対応物と比較する配列アラインメントについて、図８を参照する。
【００７８】
別の実施形態では、ケージの命名法は、１ｆｉｘ−ｓｈｏｒｔおよび１ｆｉｘ−ｌａｔｃｈによって識別され、上記で定義されたケージaの類似しているが別個の実施形態を示す。これらは、すべてのキーaによって活性化される。ラッチにエンコードされた機能性の基は、名前の３番目の部分で識別され、接尾辞はトーホールドの存在を示す。例えば、１ｆｉｘ−ｓｈｏｒｔ−Ｂｉｍ−ｔ０は、トーホールドのない１ｆｉｘ−ｓｈｏｒｔスキャホルドでＢｉｍをエンコードする。別の例では、１ｆｉｘ−ｌａｔｃｈ＿Ｍａｄ１ＳＩＤ＿Ｔ０＿２は、１ｆｉｘ−ｌａｔｃｈスキャホルドが残基なしでＭａｄ１ＳＩＤをエンコードするために使用されたことを示す。接尾辞２は、機能的配列がラッチ領域で異なる位置にエンコードされている２つの型があることを示す。
【００７９】
本開示の第８および第９の態様の一実施形態では、１つ以上のケージポリペプチドおよび１つ以上のキーポリペプチドは、表１、２、３、および／または４の同じ行における少なくとも１つのケージポリペプチドおよび少なくとも１つのキーポリペプチドを含む。本明細書における教示に基づいて当業者によって理解されるように、そのようなキットは、ＬＯＣＫＲスイッチとして一緒に使用できる複数（すなわち、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、２０、５０、１００以上）のケージポリペプチドとキーポリペプチドの対を含み得る。
【００８０】
本明細書に開示されるキットまたはスイッチの一実施形態では、１つ以上のケージポリペプチドおよび１つ以上のキーポリペプチドは、表１、２、３、および／または４の同じ行における、それぞれケージポリペプチドおよびキーポリペプチドとその長さに沿って、少なくとも４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する少なくとも１つのケージポリペプチドおよび少なくとも１つのキーポリペプチドを含む。
【００８１】
第１０の態様では、本開示は、キーポリペプチドと組み合わされて前記生物活性ペプチドを活性化（「オン」に）する立体構造変化を誘導するまで、ケージポリペプチドに生物活性ポリペプチドを隔離して、それらを不活性（「オフ」）状態に保持するための、本明細書に開示されるポリペプチド、キット、および／またはＬＯＣＫＲスイッチの使用を提供する。例示的なそのような使用および方法の詳細は、全体を通して開示される。
【００８２】
本明細書に開示されるキットまたはスイッチの一実施形態では、１つ以上のケージポリペプチドおよび１つ以上のキーポリペプチドは、表１、２、３、および／または４の同じ行における、それぞれケージポリペプチドおよびキーポリペプチドとその長さに沿って、少なくとも４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する少なくとも１つのケージポリペプチドおよび少なくとも１つのキーポリペプチドを含む。
【００８３】
本開示の第８および第９の態様の別の実施形態では、１つ以上のケージポリペプチドおよび１つ以上のキーポリペプチドは、本明細書で使用される命名規則における識別番号によって一致する少なくとも１つのケージポリペプチドおよび少なくとも１つのキーポリペプチドを含む。前述のように、直交ＬＯＣＫＲ設計（図３参照）は小文字の添え字が付されており、ＬＯＣＫＲaはケージaおよびキーaからなり、ＬＯＣＫＲbはケージbおよびキーbからなる、などであり、これによりケージaはキーaによってのみ活性化され、ケージbはキーbによってのみ活性化される、などである。ポリペプチドおよびＬＯＣＫＲ名における接頭辞は、ＬＯＣＫＲスイッチによってエンコードおよび制御される機能性の基を示す。一実施形態では、本明細書に開示されるすべての３プラス１（３＋１）および２プラス１（２＋１）ケージおよびキーポリペプチドは、識別番号によって一致される。
【００８４】
いくつかの実施形態では、ケージおよびキーポリペプチド名は、接頭辞２プラス１または３プラス１を含み、最初の番号は構造領域におけるヘリックスの数を定義し、第２の番号はラッチ領域におけるヘリックスの数を定義する。ＮｔｅｒｍまたはＣｔｅｒｍの接尾辞は、キットのケージ成分におけるラッチがそれぞれＮまたはＣ末端を含むかどうかを定義し、括弧［］で示される。Ｎｔｅｒｍ対Ｃｔｅｒｍおよび数値の接尾辞は、それが活性化されるキーにおける同じ接尾辞に対応する。例えば、ケージ２ｐｌｕｓ１＿Ｃａｇｅ＿Ｃｔｅｒｍ＿２４０６（配列番号２７１２６）は、２ｐｌｕｓ２＿Ｋｅｙ＿Ｃｔｅｒｍ＿２４０６（配列番号２７１２７）によって活性化される。
【実施例】
【００８５】
概要
生物活性ペプチドおよび／または結合ドメインを隔離し、生物活性ペプチドまたは結合ドメインを活性化（「オン」に）する立体構造変化を誘導するキーと呼ばれる第２の設計されたポリペプチドと組み合わされるまで、それらを不活性（「オフ」）状態に保持することができる、新規タンパク質スイッチを設計する一般的な方法を開発している。
【００８６】
ＬＯＣＫＲスイッチを定義する命名法および構造上の特徴：
●ＬＯＣＫＲはラッチ化直交ケージ−キータンパク質（Ｌａｔｃｈｉｎｇ  Ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ  Ｃａｇｅ−Ｋｅｙ  ｐＲｏｔｉｅｎｓ）の略であり、各ＬＯＣＫＲ設計は、２つの別個のポリペプチド鎖であるケージタンパク質およびキータンパク質からなる。
●ケージは、ラッチと呼ばれるケージスキャホルドの領域に隔離された生物活性ペプチドまたは結合ドメインをエンコードする。一般的な戦略は、エンコードされたペプチドまたは結合ドメインの位置を、隔離する必要のある機能的残基の最大の埋め込みのために最適化することであり、同時に疎水性残基の埋め込みのため、および極性残基の溶媒曝露／代償的水素結合のために最適化する。
●キーは、立体構造変化を誘導する競合的な分子間結合によってラッチを置き換え、エンコードされた生物活性ペプチドまたはドメインを露出させ、システムを活性化する（図１）。
●直交ＬＯＣＫＲ設計（図３）は小文字の添え字が付されており、ＬＯＣＫＲaはケージaおよびキーaからなり、ＬＯＣＫＲbはケージbおよびキーbからなる、などであり、これによりケージaはキーaによってのみ活性化され、ケージbはキーbによってのみ活性化される、などである。
●接頭辞は、ＬＯＣＫＲスイッチによってエンコードおよび制御される機能性の基を示す。例えば、ＢｉｍＬＯＣＫＲはＢｉｍペプチドをエンコードする設計されたスイッチを指し、ＧＦＰ１１−ＬＯＣＫＲはＧＦＰ１１（ＧＦＰの１１番目の鎖）をエンコードする設計されたスイッチを指す。
●トーホールド：キーによるＬＯＣＫＲ活性化のダイナミックレンジは、ラッチ長を切り詰め、同時に、ケージ−ラッチ相互作用を弱め、キーが「トーホールド」として結合することができるケージに露出された領域を開くことによって調整することができる（図２）。ＬＯＣＫＲはまた、ケージ−ラッチ相互作用を弱める変異をラッチに設計することによって、同様の方法で調整することができる（図１〜２、図１０）。トーホールドの長さは、デザイン名の接尾辞として含まれる。例えば、「−ｔ０」はトーホールドがないことを意味し、「−ｔ９」は９残基のトーホールドを意味する（つまり、ラッチは９残基切り詰められる）。
●「ロック」という用語が単一のポリペプチド鎖に関連して使用されている場合（ＬＯＣＫＲの頭字語と関連していない）、「ケージ」と同義であることを想定している。
【００８７】
これらの設計は、タンパク質結合に応答して立体構造切り替えを受けることができる初めての新規設計タンパク質を含む。それらは、不活性立体構造における二次構造であるアルファヘリックス、ベータ鎖、およびループの３タイプすべての生物活性ペプチドをエンコードすることができるモジュール方式であり、そしてそれらの応答性は調整可能であり、長さ（ケージスキャホルドおよび／またはラッチトーホールドの長さ）を変化させることによって、および／またはケージ−ラッチ接点における残基を変異させることによって、広いダイナミックレンジにわたって調整することができる。設計されたＬＯＣＫＲスイッチを使用して、広い範囲の機能性ペプチドの活性を制御することができる。これらの生物学的機能を厳密で誘導可能な制御によって利用する能力は、例えば、細胞の工学処理（機能の誘導可能な活性化、複雑な論理動作および回路の工学処理）、センサーの開発、誘導性タンパク質ベースの治療法の開発、および新規生物材料の作成に有用である。
【００８８】
ＬＯＣＫＲスイッチの設計
以下の全般的な考慮によって導かれる新規の切り替え可能なタンパク質システムを設計するように設定した。最初に、スイッチトリガー入力の追加時に最大のダイナミックレンジを達成するために必要な自由エネルギー調整は、分子間相互作用と分子内相互作用の間の競合によって支配されるシステムでは、離れた部位より同じ部位の方が複雑でない（アロステリック生物学的システムにおいて一般的であるように）。第二に、競合する相互作用に利用できる拡張された結合表面を有する安定したタンパク質フレームワークは、結合時にのみ秩序化されるフレームワークを超える利点を有しており、前者の方がプログラム可能であり、標的外相互作用に関与する可能性が低いためである。これらの特徴は、図１ａに示される抽象的なシステムによって説明され、結合能力のない状態と結合能力のある状態の間で熱力学的に引き起こされる切り替えを受ける。ラッチ（青色）は、ケージ（青緑色）に対する分子内相互作用によってブロックされない限り、標的（黄色）に結合することができるペプチド配列（オレンジ色）を含み、より緊密に結合するキー（赤紫色）はラッチを凌駕し、ペプチドが標的に結合することを可能にする。そのようなシステムの挙動は、個別の下位反応における結合平衡定数によって支配され（図１ａ）、Ｋopenはケージからラッチの解離、ＫLTはラッチの標的との結合、およびＫCKはキーのケージとの結合である。この一連の方程式の解は、ラッチ−ケージ相互作用が弱すぎる場合（赤とオレンジの曲線）、システムは漏れやすく、キーによる折り畳みの誘導性は低いが、一方、ラッチ−ケージ相互作用が強すぎる場合（紫色の曲線）、システムはたとえ高いキー濃度でも、部分的にのみ活性化される。最適な切り替えを得るラッチ−ケージ相互作用（図１ｂ、左の青色曲線、右の緑色曲線）は、ラッチ−標的結合親和性の関数である。以下のセクションで説明するように、このモデルを使用して、最適な切り替え可能なタンパク質システムの設計を導き出した。
【００８９】
ＬＯＣＫＲ設計戦略
このような切り替え可能なシステムを設計するために、ケージ−ラッチとケージ−キーの相互作用の親和性を広いダイナミックレンジにわたって調整することを受け入れられる構造的特性を選択した。アルファヘリックスはベータ鎖を超える利点を有し、ヘリックス間の接点は側鎖−側鎖相互作用によって支配されるため、ベータシートに必要な協調的バックボーン水素結合よりも容易に調整することができる。ケージ−ラッチおよびケージ−キーの相互作用の相対的な親和性を細かく制御することを可能にするために、埋め込まれた水素結合ネットワークを含む接点を設計することを選択し、ワトソンクリックの塩基対によって示されるように、水素結合供与体および受容体4、5の位置の比較的わずかな変更によって、かなりの特異性を得ることができる。出発点として、水素結合ネットワークを介したサブユニット−サブユニット相互作用特異性（５Ｌ６ＨＣ３＿１）5を有するα−ヘリックスヘアピンの設計されたホモ三量体を選択した。サブユニットを接続する短い非構造化ループを設計することによって、５つまたは６つのヘリックスおよびヘリックスあたり４０残基を有する単量体タンパク質フレームワークを生成した（図１ｃ）。５−ヘリックスフレームワークには、トランスで追加された第６のヘリックスにおける開いた結合部位があり、一方、この部位は、６−ヘリックスフレームワークにおけるシスで第６のヘリックスによって満たされる。
【００９０】
５ヘリックス（ケージ）および６ヘリックス（ケージとラッチ）の設計は、大腸菌で組換えによって発現された場合に可溶性であり、精製されたタンパク質は、多角度光散乱を備えるサイズ排除クロマトグラフィーによって大部分が単量体であり、非常に熱安定性であり、９５℃を超えおよび５Ｍ塩酸グアニジンで折り畳まれたままであった。（図１ｄ）。小角Ｘ線散乱（ＳＡＸＳ）スペクトルは、設計モデルおよび先の元の三量体（図１ｅ）と密接に一致しており、構造がループによって変化されなかったことを示唆した。５−ヘリックスフレームワークは、６−ヘリックスフレームワークにではなく、プルダウンアッセイでＧＦＰに融合した第６のヘリックスに結合し（図１ｆ）、接点が他の点では同一である場合、分子内相互作用のＫopenは、分子内相互作用の形成における減少したエントロピー損失によってその対応する分子間、ＫCKを凌駕するため、後者の結果は予測される。Ｋopenを調整するために、ラッチにおける不安定化変異（アラニンまたはセリンに対する大型疎水性物質、および大型疎水性物質またはセリンに対するアラニン残基）をスクリーニングし、ＧＦＰプルダウンアッセイを使用して、キーに対する親和性範囲を有する変異体を特定した。二重変異体であるＶ２２３Ｓ／Ｉ２３８Ｓは、ラッチを有さない５−ヘリックスケージと同じくらい強くキーに結合し（図１ｅ、１０）、２つのセリンは、側鎖ヒドロキシルを埋め込むことと関連する脱溶媒和損失のため、およびそれらがラッチのラセン傾向を低下させるため、ケージ−ラッチ相互作用を弱める可能性がある。ＳＡＸＳおよびＣＤスペクトルは、キーが存在しない場合、Ｖ２２３Ｓ、Ｉ２３８Ｓは、元のモノマーと同様の構造を有する十分折り畳まれた６−ヘリックス束であることを示す（図１ｄ）。このケージ−ラッチ−キーシステムは、ラッチ化直交ケージ−キータンパク質（Ｌａｔｃｈｉｎｇ  Ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ  Ｃａｇｅ−Ｋｅｙ  ｐＲｏｔｅｉｎｓ）としてＬＯＣＫＲと呼ばれる。
【００９１】
Ｂｉｍ−Ｂｃｌ２結合を制御すること、および活性化のダイナミックレンジを調整すること：
ＬＯＣＫＲに機能を取り付けるために、モデルシステムとして、アポトーシスの中心となるＢｉｍ−Ｂｃｌ２相互作用を選択し、Ｂｃｌ２への結合がキーの存在下でのみ発生するようにＢｉｍをケージ化することを試みた。ラッチ上に設計された２つの可能性のあるＢｉｍ関連配列を有する構築体として、設計されたＢｃｌ２結合ペプチド（ａＢｃｌ２ＬＯＣＫＲ）またはＢｃｌ２結合に重要なＢｉｍ残基のみ（ｐＢｉｍＬＯＣＫＲ）を設計した。各々はＢｃｌ２に対して異なる親和性を有し、最初の一連の設計においてＫLT値の範囲をサンプリングすることが可能である。Ｂｃｌ２への結合に関与する残基がケージ−ラッチ接点に隔離され（データは示さず）、疎水性残基の埋め込みおよび極性残基の表面露出を最適化するように、異なるヘリカルレジスタをサンプリングすることによって、Ｂｉｍ関連配列をラッチ上にグラフトした。Ｋopenは、ケージとＢｉｍ残基の間の非最適相互作用によって、またはラッチの長さを変更することによって調整することができる（図２ａ）。初期設計は、Ｂｃｌ２との結合についてバイオレイヤー干渉法によって試験し、キーの存在下でもＢｃｌ２結合はほとんどなく、またはキーの不在でもＢｃｌ２結合がほとんどないことが示された。このシステムでアクセス可能であるＫopen値とＫCK値の範囲は、この例では明らかにＫLTと一致しておらず、キー誘導性応答は、図１ｂの理想的な曲線から離れていた。
【００９２】
システムはケージに提示される接点領域を拡張することによって改善することができると想定し、それは、ラッチを拡張することによって、ケージとの親和性が増加して（Ｋopenを減少する）、キーがない場合にシステムを「オフ」にし易くなり、一方、キーを長く拡張することによって、ラッチを凌駕することを可能し（Ｋopenに比べてＫCKを減少する）、システムをより誘導可能にした。新規パラメトリックヘリックス束のモジュールの性質を利用して、ケージ、ラッチ、およびキーは各々５、９、または１８残基拡張した。キーがラッチを凌駕することを可能にするために、後者はＫopen値の範囲にアクセスするように４〜９残基切り詰められ、これはキーを結合するために「トーホールド」をケージ上に生じる）。９残基のトーホールドを有する１８残基の伸長は、強力に誘導可能な結合をもたらし（図２ｂ、ｃ、バイオレイヤー干渉法のシグナルは、キー結合したＢｃｌ２または不活性ＬＯＣＫＲに加えたキー容積によるものでもない。キーによる結合の活性化は約４０倍であり（図２ｃ）、タンパク質相互作用によって調節される多くの自然発生プロセスに匹敵するか、それよりも優れている。
【００９３】
ＢｉｍＬＯＣＫＲが活性化されるキー濃度範囲は、キーの長さを変化させてＫCKを調節することによって制御することができ、これは、相互作用エネルギーは相互作用する残基の全表面積にほぼ比例するためである。５８長の設計されたキーにおけるＥＣ５０は、５５．６＋／−３４ｎＭ（図２ｃ、ｄ）であり、４５残基のキーでは２３０＋／−５８ｎＭである。追加の５残基を切り詰めることによってキーの活性化が完全に無効になり、モデルから予想されるように、平衡は自由エネルギーにおける小さな変化に非常に敏感であることを示す（図２ｄ）。ＫLTの３桁の範囲にわたるＢｉｍＬＯＣＫＲの機能を調べるために、Ｂｃｌ２ホモログであるＢｃｌＢおよびＢａｋに対するキー誘導性結合を試験した（Ｂｉｍに０．１７ｎＭ（Ｂｃｌ２）、２０ｎＭ（ＢｃｌＢ）、および５００ｎＭ（Ｂａｋ）のＫｄで結合する）6。バイオレイヤー干渉測定実験は、溶液中でキーの有無にかかわらずスイッチに対してアッセイされた固定化標的によって、および溶液中でスイッチに対して単独または標的とともに固定化されてアッセイされたキーによって実施された。これらの結果から、標的またはキー結合の割合を、スイッチ、キー、および標的の濃度の関数として得ることができる。Ｋopen、ＫCK、およびＫLTに関するこれらのデータとのモデルの全体的なフィッティングによって、Ｋopen＝．０１＋／−０．００３３、ＫCK＝２．１＋／−１．１ｎＭ、ＫLT（Ｂｃｌ２）＝２８＋／−７．８ｎＭ、およびＫLT（ＢｃｌＢ）＝３２＋／−２２ｎＭの推定値が得られ、スイッチの活性化がほとんど観察されなかったため、ＫLT（Ｂａｋ）の推定値はない。このフィッティングは、観察されたＢＬＩデータに対して０．０７２ｎｍのＲＭＳＥ（平均二乗誤差の平方根）を有する。これらの推定値とＢｉｍ結合Ｋｄ（フィッティングでは使用されなかった）とのおおよその一致は、標的結合に影響を及ぼすシステムの小さな特性が欠落している可能性があるものの、熱力学モデル（図１ａ）がシステムの優れた表現であることを示す。
【００９４】
次に、不均一な混合物において選択的に活性化することができる複数のスイッチを工学処理することを目的として、一連の直交ＬＯＣＫＲシステムを設計することを試みた。特異性は、様々な水素結合ネットワークをケージ−キー接点で使用するために設計した。ラッチヘリックスを元の拡張ＬＯＣＫＲaモデルから削除し、新たな第６のヘリックスのためのバックボーンを、新たなラッチ／キーヘリックスの半径、ヘリカル相、およびｚオフセットをパラメータとしてサンプリングすることによって作成した。得られた構造を、新たな第６のヘリックスとケージの間の接点にまたがる新たな水素結合ネットワークについて、水素結合に関与するすべての埋め込まれた極性原子とともにスキャンし、ネットワーク周辺の残りの接点に、Ｒｏｓｅｔｔａ（商標）設計を使用して完全な配列および側鎖回転異性体の最適化を加えた。５つの設計を、パッキング品質、配列の非類似性、および水素結合に関与しない埋め込まれた極性原子の欠如に基づいて選択した。切り詰めおよびトーホールド変異体を、図１ｃのＧＦＰプルダウンアッセイを使用して、同族および標的外キー結合についてアッセイした。新しい設計のうちの３つは、それらの同族のキーに結合し（図１１）、互いに直交したことが認められた。ある程度結合したキーaはいまだすべて不明である。Ｂｉｍ配列は、これら３つの設計のラッチにねじ込ませ、それは元のデザインであるＢｉｍＬＯＣＫＲaについてであった。（図２）。ＢｉｍＬＯＣＫＲbおよびＢｉｍＬＯＣＫＲラッチcは、ラッチに９残基のトーホールドを加えたそれらの同族キーよりも、それぞれ２２倍および８倍の活性化を示した（図３ａ、ｂ）。ＢｉｍＬＯＣＫＲa、ＢｉｍＬＯＣＫＲb、およびＢｉｍＬＯＣＫＲcも直交しており、各々は５ｕＭ濃度までのその同族キーによってのみ活性化される（図３ｃ）。特異性を達成するために埋め込まれた水素結合ネットワークアプローチの効果は、６つの設計されたＢｉｍＬＯＣＫＲタンパク質のうち、３つが良好に切り替わり、直交して活性化することができるという事実によって示され、単一スキャホルドから開始する成功率は５０％であった。
【００９５】
非対称化されたＬＯＣＫＲスイッチ
元のＬＯＣＫＲスイッチの設計（図１〜２）は、６つのヘリックスを含む新たに設計された対称的ホモ三量体である５Ｌ６ＨＣ３＿１から開始して構築された5。対称的な反復配列モチーフは、誤った折り畳みと凝集の機会を生じる。これらの影響を軽減するために、元のＬＯＣＫＲスイッチを非対称になるように再設計した（本文書の最後にリスト化されている配列）。非対称設計はより優れた挙動を示し、より単量体的であり、エンコードされたＢＩＭペプチドの添加（図４Ａ）、およびＢＩＭペプチドの無添加（図４Ｂ）の両方で、Ｘ線結晶構造（図４）によって実験的に分析した。ＢＩＭを添加しない実験構造は、コンピュータ設計モデル（図４Ｂ）とほぼ同じであり、設計戦略の原子レベルの精度を示す。コンピュータ設計および実験的試験の詳細は、方法のセクションで示す。ＬＯＣＫＲａ（図１）の作製に使用される、ベーススキャホルド５Ｌ６ＨＣ３＿１5（暗色）のＸ線結晶構造との１ｆｉｘ−ｓｈｏｒｔ−ｎｏＢｉｍ（ＡＹＹＡ）−ｔ０（図４Ｂ）の結晶構造の重ね合わせについて、図９を参照する。
【００９６】
ｇｆｐＬＯＣＫＲ（ＧＦＰ１１−ＬＯＣＫＲ）
非対称設計を出発点として使用して、ＧＦＰの１１番目の鎖を設計されたＬＯＣＫＲスイッチに良好にエンコードした（図５）。一般的なスプリットＧＦＰは鎖１−１０および鎖１１の２つの部分からなり、混合すると、１−１０が１１と結合して蛍光を生じる。ここでは、１１番目の鎖はキーの不在下で隔離され、ＧＦＰ−１−１０と結合できないが、ＧＦＰ−１−１０の存在下でキーと混合すると容易に蛍光を生じることを実証する（図５）。設計されたタンパク質のＸ線結晶構造を実験的に決定し、ＧＦＰ−１１はコンピュータ設計モデルとほぼ同じ立体構造で、アルファヘリックスとして構造的にエンコード化されていることを示し（図５）、この結果は、ＬＯＣＫＲシステムの効果およびモジュール性を強調しており、非ラセンである二次構造傾向を有する生物活性ペプチドをエンコードできることを示唆する。
【００９７】
共局在依存性の調整
図１〜２は、ＬＯＣＫＲ活性化のダイナミックレンジを予測的に調整することができることを示し、システムはケージおよびキーが共局在している場合にのみ応答するように調節することができることを示唆しており、幅広い範囲の機能にとって有利である。図４のＧＦＰ１１−ＬＯＣＫＲを使用して、これが実際に当てはまり、その設計されたＬＯＣＫＲスイッチがＳｐｙｃａｔｃｈｅｒ（商標）／Ｓｐｙｔａｇ（商標）融合を使用して共局在化依存性であるように調整することができることを実証した（図６）。Ｓｐｙｃａｔｃｈｅｒ（商標）はＳｐｙｔａｇ（商標）に共有結合によって融合し、Ｓｐｙｃａｔｃｈｅｒ（商標）融合ケージがＳｐｙｔａｇ（商標）融合キーと混合されるとき、Ｓｐｙｔａｇ（商標）に融合されていないキーと混合したときよりも有意に高い蛍光を示した（図６）。
【００９８】
ケージ化インテインＬＯＣＫＲスイッチ
設計されたＬＯＣＫＲスイッチは、ＶＭＡｃインテインをエンコードするケージ成分を有し、ｓｆＧＦＰおよびＶＭＡｎインテインに融合された設計されたキーと混合されると良好な活性化を示す（図７）。ＳＤＳ−ＰＡＧＥは、良好なＶＭＡｃ−ＶＭＡｎ反応を示し、予想されるスプライシングされたタンパク質生成物の正しい分子量に対応するバンドを有する（図７）。
【００９９】
ＬＯＣＫＲスイッチの大規模ハイスループット設計
元のＬＯＣＫＲスイッチの設計（図１〜２）は、６つのヘリックスを含む新たに設計された対称的ホモ三量体である５Ｌ６ＨＣ３＿１から開始して構築された5。３つまたは４つのヘリックスからなる小さなＬＯＣＫＲスイッチを作製すべきであると判断した。元のＬＯＣＫＲスイッチの試験および実験的検証から学んだすべてを使用して、Ｃｒｉｃｋヘリックスパラメータを徹底的にサンプリングすることによって、何千もの新しいＬＯＣＫＲスイッチスキャホルドの設計を自動化するコンピュータパイプラインを作成した4、9。
これらの２プラス１および３プラス１ＬＯＣＫＲスイッチは、元の設計よりも小さいペイロードを有し（細胞工学処理取り組みにとって有利）、対称性の欠如によって、十分な挙動を示し、凝集傾向がない可能性がある。（コンピュータ設計および実験的試験の詳細については、方法のセクションを参照する）。
【０１００】
ｓｔｒｅｐＬＯＣＫＲ（ＳＴＲＥＰＩＩ−ＬＯＣＫＲ）
大規模なハイスループット設計から新しい２＋１および３＋１ＬＯＣＫＲスキャホルドを使用して、ＳＴＲＥＰＩＩ配列である（Ｎ）ＷＳＨＰＱＦＥＫ（配列番号６３）をエンコードおよび制御する新規ＬＯＣＫＲスキャホルドを設計および試験した（詳細は方法のセクションを参照する）。本設計（図１３Ａ）は、陽性コントロールと比較してＳＴＲＥＰＩＩタグを隔離し（図１３Ｂ）、バイオレイヤー干渉法（Ｏｃｔｅｔ）データによって決定されるように、キーの存在下で活性化することができる（図１３Ｃ〜Ｄ）。
【０１０１】
図１２のデータは、ｍＳｉｎ３Ａ転写リプレッサーのＰＡＨ２ドメインのケージ化を示す。詳細については、図の凡例を参照する。
【０１０２】
図１４のデータは、キーの発現に応答してＧＦＰ蛍光を活性化する３プラス１ＬＯＣＫＲスイッチを示す。詳細については、図の凡例を参照する。
【０１０３】
考察
ここでは、キーによって誘導的に活性化されるタンパク質間相互作用をケージ化することによるＬＯＣＫＲプラットフォームの効果を示す。Ｂｉｍペプチドを、そのファミリーメンバーに結合することから、ＧＦＰ鎖１１が切り詰めた１−１０構築体を完成することから、そして抗ＳｔｒｅｐＴａｇ（商標）ＩＩ抗体がケージ化ＳｔｒｅｐＴａｇ（商標）ＩＩに結合することから、ケージ化するインビトロデータを示す。新規設計タンパク質のモジュール性および超安定性によって、競合するケージ−キーおよびケージ−ラッチ接点の強度を調整することによって、広いダイナミックレンジにわたってスイッチ活性化の調整が可能になる。この方法を使用して、これらの概念実証設計を超えて、より複雑な応用のためのケージペプチドまで、現在スイッチを設計することができる。ＬＯＣＫＲは、ネイティブなシグナル伝達ネットワークを制御するために有用であり、一般に、新規シグナル伝達分子の完全に合成されたネットワークを介して生物学的機能を制御するために有用である。
【０１０４】
ＬＯＣＫＲは、ＤＮＡ切り替え技術のモジュール性をタンパク質にもたらすが、タンパク質および生物活性ペプチド（核酸よりはるかに多様で広範囲である）によって実行される幅広い生化学的機能を制御および結合することができるという利点を有する。
【０１０５】
方法
ＰＣＲ突然変異誘発および等温組み立て
突然変異誘発用のためのプライマーはすべて、Ｉｎｔｅｇｒａｔｅｄ  ＤＮＡ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ（ＩＤＴ）から入手した。変異原性プライマーは、プライマーにコードされる所望の変異によって変異誘発のために部位のどちらかの側で＞１８ｂｐをアニーリングするように設計された。ＰＣＲを使用して、変異部位の上流と下流に、所望のｐＥＴベクターを用いて２０ｂｐを超えるオーバーラップを有するフラグメントを作成した。得られたアンプリコンは、ＸｈｏＩおよびＮｄｅＩで消化されたｐＥＴ２１ｂ、ｐＥＴ２８ｂ、またはｐＥＴ２９ｂ制限のいずれかに等温によって組み立てられ、化学的にコンピテントな大腸菌ＸＬ１−Ｂｌｕｅ細胞を形質転換した。モノクローナルコロニーはサンガー法によってシーケンシングされた。配列検証したプラスミドは、Ｑｉａｇｅｎ  ｍｉｎｉｐｒｅｐキットを使用して精製され、タンパク質発現のために化学的にコンピテントな大腸菌ＢＬ２１（ＤＥ３）Ｓｔａｒ、ＢＬ２１（ＤＥ３）Ｓｔａｒ−ｐＬｙｓＳ細胞（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）、またはＬｅｍｏ２１（ＤＥ３）細胞（ＮＥＢ）を形質転換した。
【０１０６】
合成遺伝子構築
合成遺伝子はＧｅｎｓｃｒｉｐｔ  Ｉｎｃ．（Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ，ＮＪ，ＵＳＡ）に発注し、ｐＥＴ  ２８ｂ＋、ｐＥＴ２１ｂ＋、またはｐＥＴ２９ｂ＋大腸菌発現ベクターで送られ、各ベクターのＮｄｅＩおよびＸｈｏＩ部位に挿入した。ｐＥＴ２８ｂ＋構築体では、合成されたＤＮＡは、Ｎ末端のヘキサヒスチジンタグおよびトロンビン切断部位とともにインフレームでクローニングし、ストップコドンをＣ末端に加えた。ｐＥＴ２１ｂ＋構築体では、タンパク質がヘキサヒスチジンタグを伴わずに発現されるように、ストップコドンを末端に加えた。ｐＥＴ２９ｂ＋構築体では、合成したＤＮＡはＣ末端ヘキサヒスチジンタグとともにインフレームでクローン化された。プラスミドによって、タンパク質発現のために、化学的にコンピテントな大腸菌ＢＬ２１（ＤＥ３）Ｓｔａｒ、ＢＬ２１（ＤＥ３）Ｓｔａｒ−ｐＬｙｓＳ細胞（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）、またはＬｅｍｏ２１（ＤＥ３）細胞（ＮＥＢ）を形質転換した。
【０１０７】
細菌によるタンパク質の発現および精製
種培養は、溶原ブロス（ＬＢ）またはＴｅｒｒｉｆｉｃ（商標）Ｂｒｏｔｈ  ＩＩ（ＴＢＩＩ）で、５０μｇ／ｍＬカルベニシリン（ｐＥＴ２１ｂ＋）または３０μｇ／ｍＬ（ＬＢ用）から６０μｇ／ｍＬ（ＴＢＩＩ用）のカナマイシン（ｐＥＴ２８ｂ＋およびｐＥＴ２９ｂ＋）の存在において、一晩培養した。種培養を使用して、抗生物質を含む５００ｍＬのＳｔｕｄｉｅｒ  ＴＢＭ−５０５２自動誘導培地に接種し、３７℃で２４時間増殖させた。細胞は４０００ｒｃｆで４℃、２０分間遠心分離して収集し、溶解緩衝液（２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ、３００ｍＭ  ＮａＣｌ、２０ｍＭイミダゾール、室温でｐＨ８．０）に再懸濁させ、１ｍＭ  ＰＭＳＦ存在下でマイクロ流動化によって溶解した。。溶解物は、４℃で少なくとも３０分間、２４，０００ｒｃｆで遠心分離して澄明化した。溶解緩衝液で前平衡化したＮｉ−ＮＴＡ（Ｑｉａｇｅｎ）カラムに上清を加えた。カラムを１５カラム容量（ＣＶ）の洗浄緩衝液（２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ、３００ｍＭ  ＮａＣｌ、４０ｍＭイミダゾール、室温でｐＨ８．０）で２回洗浄した後、１５ＣＶの高塩濃度洗浄緩衝液（２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ、１Ｍ  ＮａＣｌ、４０ｍＭイミダゾール、室温でｐＨ８．０）、そして１５ＣＶの洗浄緩衝液で洗浄した。タンパク質は、２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ、３００ｍＭ  ＮａＣｌ、２５０ｍＭイミダゾール、室温でｐＨ８．０によって溶出した。タンパク質は、ＦＰＬＣおよびＳｕｐｅｒｄｅｘ（商標）７５増加１０／３００ＧＬ（ＧＥ）サイズ排除カラムを使用してゲルろ過によってさらに精製され、単量体タンパク質を含む画分をプールした。
【０１０８】
サイズ排除クロマトグラフィー、多角度光散乱（ＳＥＣ−ＭＡＬＳ）
ＳＥＣ−ＭＡＬＳ実験では、ｍｉｎｉＤＡＷＮ（商標）ＴＲＥＯＳ多角度静的光散乱およびＯｐｔｉｌａｂＴ−ｒＥＸ（商標）（拡張範囲の屈折計）検出器（Ｗｙａｔｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｓａｎｔａ  Ｂａｒｂａｒａ  ＣＡ，ＵＳＡ）に接続されたＳｕｐｅｒｄｅｘ（商標）７５増加１０／３００ＧＬ（ＧＥ）サイズ排除カラムを使用した。タンパク質試料は、ＴＢＳ（ｐＨ８．０）に３〜５ｍｇ／ｍＬの濃度で注入した。ＡＳＴＲＡＴＭ（商標）（Ｗｙａｔｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）ソフトウェアを使用してデータを分析し、溶出された種の重量平均モル質量（Ｍｗ）、ならびに数平均モル質量（Ｍｎ）を見積り、多分散性指数（ＰＤＩ）＝Ｍｗ／Ｍｎによって単分散性を評価した。
【０１０９】
円二色性（ＣＤ）測定
ＣＤ波長スキャン（２６０〜１９５ｎｍ）および温度溶融（２５〜９５Ｃ）は、ＡＶＩＶモデル４２０ＣＤ分光計を使用して測定した。温度溶融は２２２ｎｍで吸収シグナルをモニタリングし、４℃／分の加熱速度で実行した。タンパク質試料は、０．１ｃｍキュベット中でＰＢＳ，ｐＨ７．４中に０．３ｍｇ／ｍＬであった。塩化グアニジニウム（ＧｄｍＣｌ）滴定は、２５ＣのでＰＢＳ，ｐＨ７．４において自動滴定装置を用いて同じ分光計で行われ、撹拌棒付きの１ｃｍキュベット中で０．０３ｍｇ／ｍＬのタンパク質試料によって２２２ｎｍでモニタリングされた。各滴定は、均一に分布した濃度の少なくとも４０ポイントからなり、各ステップの混合時間は１分であった。滴定溶液は、ＰＢＳ＋ＧｄｍＣｌ中の同じ濃度のタンパク質からなった。ＧｄｍＣｌ濃度は屈折率によって決定された。
【０１１０】
小角Ｘ線散乱（ＳＡＸＳ）
試料は、ゲルろ過によってＳＡＸＳ緩衝液（２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、２％グリセロール、室温ｐＨ８．０）に交換された。散乱測定は、Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｌｉｇｈｔ  ＳｏｕｒｃｅにおいてＳＩＢＹＬＳ（商標）１２．３．１ビームラインで実施した。Ｘ線波長（λ）は１．２７Åであり、Ｍａｒ１６５検出器の試料から検出器までの距離は１．５ｍであり、０．０１〜０．５９Å-1の散乱ベクトルｑ（ｑ＝４π×ｓｉｎ（θ／λ）、２θは散乱角）範囲に対応した。データセットは、６ｍｇ／ｍＬの濃度のタンパク質を用いて、１１ｋｅＶで７秒間にわたって３４回の０．２秒の露光を使用して収集された。データは３ｍｇ／ｍＬの濃度でも収集されて濃度依存性を決定し、すべての提示されるデータは、濃度依存的な凝集が観察されない高い濃度で収集された。３２回の露光からのデータは、各領域およびフレームのにわたるシグナル品質に応じて、Ｇｕｎｉｅｒ、Ｐａｒｏｄ、およびＷｉｄｅ−ｑ領域で個別に平均化した。平均は、ＳｃÅｔｔｅｒソフトウェアパッケージを使用して分析し、データを分析して統計を報告した。ＦｏＸＳを使用して、設計モデルを実験的な散乱プロファイルと比較し、適合品質（Ｘ）値を計算した。ＬＯＣＫＲタンパク質のＮ末端上におけるヘキサヒスチジンタグおよびトロンビン切断部位は、設計配列が実験的に試験したタンパク質の配列と一致するように、Ｒｏｓｅｔｔａ  Ｒｅｍｏｄｅｌ（商標）を使用してモデル化された。これら残基の立体構造のフレキシビリティーをとらえるため、１００例の独立したモデルを作成し、クラスター化し、最大クラスターのクラスター中心をバイアスのないＦｏＸＳフィッティングの代表的なモデルとして選択した。
【０１１１】
ＧＦＰプルダウンアッセイ
Ｈｉｓ−タグ化ＬＯＣＫＲはｐＥＴ２８ｂ＋から上記のプロトコルに従って発現し、キーはｐＥＴ２１ｂ＋におけるｈｉｓタグなしでスーパーフォルダーＧＦＰ（ｓｆＧＦＰ）に融合して発現された。ｈｉｓ−タグ化ＬＯＣＫＲは完全に精製され、ＴＢＳ（２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、室温でｐＨ８．０）で透析され、キー−ＧＦＰはこのアッセイのために溶解物として維持した。１ｕＭを超える１００μＬのＬＯＣＫＲを９６ウェルの黒色Ｐｉｅｒｃｅ（登録商標）ニッケルコーティングプレート（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ）に加え、室温で１時間インキュベートした。試料をプレートから廃棄し、２００μＬのＴＢＳＴ（ＴＢＳ＋０．０５％Ｔｗｅｅｎ−２０）で３回洗浄した。キー−ＧＦＰを含む１００μＬの溶解物を各ウェルに加え、室温で１時間インキュベートした。試料をプレートから廃棄し、２００μＬのＴＢＳＴ（ＴＢＳ＋０．０５％Ｔｗｅｅｎ−２０）で３回洗浄した。プレートをＴＢＳで１回洗浄し、１００μＬのＴＢＳを各ウェルに加えた。ｓｆＧＦＰ蛍光は、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ  ＳｐｅｃｔｒａＭａｘ（商標）Ｍ５プレートリーダーまたはＢｉｏＴｅｋ  Ｓｙｎｅｒｇｙ  Ｎｅｏ２プレートリーダーで測定された。蛍光は、４８５ｎｍの励起および５３０ｎｍの発光で測定し、励起および発光について２０ｎｍの帯幅を有した。
【０１１２】
バイオレイヤー干渉法（ＢＬＩ）
ＢＬＩ測定は、ストレプトアビジン（ＳＡ）コーティングバイオセンサーを備えるＯｃｔｅｔ（登録商標）ＲＥＤ９６システム（ＦｏｒｔｅＢｉｏ）で行われ、すべての分析はＦｏｒｔｅＢｉｏデータ分析ソフトウェアバージョン９．０．０．１０で実行された。アッセイは、ＧＥからのＨＢＳ−ＥＰ＋緩衝液（１０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、３ｍＭ  ＥＤＴＡ、０．０５％ｖ／ｖ界面活性剤Ｐ２０、０．５％脱脂粉乳、室温でｐＨ７．４）で希釈したタンパク質によって実施された。ビオチン化Ｂｃｌ２は、装置のプロトコルにプログラムされた０．５ｎｍの閾値までＳＡチップに加えた。ベースラインは、加えられたバイオセンサーをＨＢＳ−ＥＰ＋緩衝液に浸すことによって得られ、結合速度は所定濃度のＬＯＣＫＲおよびキーを含むウェルに浸漬することにより観察し、次に解離速度はベースラインを得るために使用した緩衝液に浸漬することによって観察された。平衡での速度定数および応答は、１：１結合モデルをフィッティングすることによって計算された。
【０１１３】
熱力学的ＬＯＣＫＲモデル
図１ａにおける熱力学モデルは、５つの平衡におけの３つの自由パラメータを示す。これは、すべての種（開いたまたは閉じたスイッチ、キー、標的、スイッチ−キー、スイッチ−標的、およびスイッチ−キー−標的）の濃度を平衡状態で関連させる３つの方程式を定める。
Ｋopen＝［スイッチopen］／［スイッチclosed］
ＫCK＝［スイッチopen］［キー］／［スイッチ−キー］＝［スイッチ−標的］［キー］／［スイッチ−キー−標的］
ＫLT＝［スイッチ−キー］［標的］／［スイッチ−キー−標的］＝［スイッチopen］［標的］／［スイッチ−標的］
【０１１４】
各構成要素（スイッチ、キー、および標的）の合計量も一定であり、平衡状態にある各種の値を制約する。このことは、次の方程式をモデルに導入する。
［スイッチ］合計＝［スイッチopen］＋［スイッチclosed］＋［スイッチ−キー］＋［スイッチ−標的］＋［スイッチ−キー−標的］
［キー］合計＝［キー］＋［スイッチ−キー］＋［スイッチ−キー−標的］
［標的］合計＝［標的］＋［スイッチ−標的］＋［スイッチ−キー−標的］
【０１１５】
これらの６つの方程式をｓｙｍｐｙ．ｎｓｏｌｖｅ（）に入力して、６つの定数（３つの平衡定数、３つの合計濃度）を得る解を認めた。結合割合をこの解から取り出して、対応する図にプロットした。
【０１１６】
Ｒｏｓｅｔｔａを使用して機能配列をＬＯＣＫＲ上にグラフトする
生物活性配列をラッチにグラフトすることによって作製される機能的なＬＯＣＫＲのモデルは、ラッチにおけるすべてのヘリックスレジスタで開始する試料グラフトにＲｏｓｅｔｔａ（商標）ＸＭＬを使用して設計された。このプロトコルは、２つのＲｏｓｅｔｔａムーバーである、ラッチにおけるアミノ酸配列を変化させるＳｉｍｐｌｅＴｈｒｅａｄｉｎｇＭｏｖｅｒ、および最低のエネルギー構造を与える機能的変異を見い出すためのデフォルト設定を有するＦａｓｔＲｅｌａｘ（商標）を使用する。設計はＰｙＭｏｌ（商標）２．０で眼によって選択され、高品質のグラフトはケージと相互作用する重要な結合残基を有し、埋め込まれた満たされない水素結合残基の数を最小限にした。
【０１１７】
直交ＬＯＣＫＲのＲｏｓｅｔｔａ設計
ＬＯＣＫＲaの使用する直交ケージ−キー対への再設計は、スコア関数ｂｅｔａ＿ｎｏｖ１６を備えるＲｏｓｅｔｔａを使用して実行された。拡張したＬＯＣＫＲモデルから５−ヘリックスケージのモデルを抽出し、Ｒｏｓｅｔｔａ（商標）ＢｕｎｄｌｅＧｒｉｄＳａｍｐｌｅｒモジュールを使用して、新しいラッチ形状のバックボーンの組み合わせを作成した。ＢｕｎｄｌｅＧｒｉｄＳａｍｐｌｅｒは、コイルドコイルのＣｒｉｃｋ数式に基づいてバックボーン形状を作成し、ペプチドバックボーン立体構造の連続体に対応するコイルドコイル式パラメータ値の規則的なグリッドの効率的な並列サンプリングを可能にする。サンプリングされたパラメトリックに作成された各ラッチ立体構造について、Ｒｏｓｅｔｔａ（商標）残基セレクターは、水素結合ネットワーク（ＨＢＮｅｔ）の設計、それに続くＲｏｓｅｔｔａ（商標）側鎖設計のために、ケージとラッチの接点を特定した。残基は、ＩｎｔｅｒｆａｃｅＢｙＶｅｃｔｏｒ残基セレクターを介してラッチとケージ接点を選択することによって、Ｒｏｓｅｔｔａ残基セレクターを介した設計のために選択された。この残基選択は、ＨＢＮｅｔおよび側鎖設計の両方に渡され、ケージをその元のＬＯＣＫＲ配列のままにして、切り替え接点を厳密に設計した。水素結合ネットワークは、接点で選択された残基についてＨＢＮｅｔＳｔａｐｌｅＩｎｔｅｒｆａｃｅを使用して設計された。アウトプットは、接点を構成する３つのヘリックスにまたがる２つまたは３つの水素結合ネットワークを伴う設計を含んだ。次に、ＨＢＮｅｔからのすべてのアウトプットは、ＰａｃｋＲｏｔａｍｅｒｓＭｏｖｅｒを使用して設計され、水素結合ネットワークを維持しながら、接点に残基を配置した。２ラウンドの設計が行われた。最初にｂｅｔａ＿ｓｏｆｔを使用して、接点での相互作用エネルギーを最適化しながら、衝突する可能性のある回転異性体を有する接点を積極的に納め、次に、ベータを使用して構造を最小化し、完全なＲｏｓｅｔｔａスコア関数に従って衝突する可能性のある原子を解決した。設計の最終ラウンドでは、完全なベータＲｏｓｅｔｔａスコア関数によって回転異性体を配置して、ケージ−ラッチ接点にわたる相互作用を最終的に最適化した。
【０１１８】
候補の直交ＬＯＣＫＲ設計は、満たされない埋め込まれた水素結合残基の欠如、パッキング品質の代用としてのアラニン残基の数、および直交するのに十分である異なる極性／疎水性パターンを見い出すための測定基準としての配列の非類似性に基づいて選択された。満たされない水素結合原子は、ＢｕｒｉｅｄＵｎｓａｔＨｂｏｎｄｓフィルターを使用してフィルター除去され、フィルターの規準に従って、満たされない極性原子をなくすことを可能にした。パッキング品質は、アラニン数が多いことは、残基の嵌合が不十分であることを意味するため、接点でアラニン残基を数えることによって決定された。最大１５個のアラニン残基が３つのヘリックス接点全体で可能であった。ｓｅｑ＿ａｌｉｇｎｍｅｎｔ．ｐｙで示されるように、ＢｉｏＰｙｔｈｏｎのＢｉｏ．ｐａｉｒｗｉｓｅ２パッケージを使用して配列をアラインメントすることによって、設計されたすべてのラッチの対での配列の非類似性をＢＬＯＳＵＭ６２によってスコア化された。アラインメントは、大きい開口と疎水性極性パターンに基づいて最も類似した重ね合わせを見い出すために、２つのヘリックスの構造アラインメントに類似する伸長の不利益による配列内のギャップを許容せずに実施される。各スコアを最大スコアから差し引いて、スコアを距離規準に変換し、最も多様な配列は、最大の距離に変換される最小のＢＬＯＳＵＭ６２スコアを有する。次に、ＨｅｉｒＣｌｕｓｔ＿ｆｒｏｍＲＭＳＤ．ｐｙを使用して配列をクラスター化し、カットオフ１７０でクラスター化して、１３のクラスターをもたらした。各クラスターの中心は、選択された１３の中心間の距離を最大化することによって選択された。次に、１３の候補を、満たされない水素結合原子と質的なパッキング品質について、ＰｙＭｏｌ（商標）２．０で眼によって選別した。これら３つの測定基準によって５つの最も優れた設計をＬＯＣＫＲb〜fとして整理した。
【０１１９】
非対称化されたＬＯＣＫＲスイッチ
元のＬＯＣＫＲスイッチaはＲｏｓｅｔｔａ（商標）を使用してＨＢＮｅｔによって再設計され、ＬＯＣＫＲ機能に重要であることがわかっている残基は固定されたままであり、残りの残基は疎水性パッキングを維持するように最適化され、反復するアミノ酸配列およびモチーフの数を最小限に抑える配列多様性を導入した。設計をコードする合成ＤＮＡは前述のように得られ、設計は前述のように発現、精製、および生物物理学的に特徴付けられた。結晶化試験は、次のセクションで説明するように設定された。
【０１２０】
Ｘ線結晶学
タンパク質試料の結晶化
精製されたタンパク質試料を、２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ，ｐＨ８．０および１００ｍＭ  ＮａＣｌで１２〜５０ｍｇ／ｍｌに濃縮した。試料は、結晶化スクリーンであるＪＣＳＧ＋（Ｑｉａｇｅｎ）、ＪＣＳＧＣｏｒｅＩ−ＩＶ（Ｑｉａｇｅｎ）、ＰＥＧ／Ｉｏｎ（Ｈａｍｐｔｏｎ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ）、およびＭｏｒｐｈｅｕｓ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｉｍｅｎｓｉｏｎｓ）を利用して、アクティブ湿度チャンバーを備える５−ｐｏｓｉｔｉｏｎ  ｄｅｃｋ  Ｍｏｓｑｕｉｔｏ  ｃｒｙｓｔａｌ（ｔｔｐｌａｂｔｅｃｈ）によってスクリーン化された。異なる設計の結晶化における最適な条件は、以下の通りであった。
●１−ｆｉｘ−ｓｈｏｒｔ−ＢＩＭ−ｔ０：０．１Ｍ  Ｔｒｉｓ，ｐＨ８．５、５％（ｗ／ｖ）ＰＥＧ８０００、２０％（ｖ／ｖ）ＰＥＧ３００、１０％（ｖ／ｖ）グリセロール（低温不要）
●１ｆｉｘ−ｓｈｏｒｔ−ＧＦＰ−ｔ０：０．２Ｍ塩化ナトリウム、０．１Ｍカコジル酸ナトリウム、ｐＨ６．５、２．０Ｍ硫酸アンモニウム（低温のために２０％グリセロールを添加）
●１ｆｉｘ−ｓｈｏｒｔ−ｎｏＢｉｍ（ＡＹＹＡ）−ｔ０：０．２Ｍ酒石酸二ナトリウム、２０％（ｗ／ｖ）ＰＥＧ３３５０（低温添加なし）
【０１２１】
Ｘ線データ収集および構造決定
設計したタンパク質の結晶をループ化し、凍結防止剤が含まれていない場合は２０％（ｖ／ｖ）グリセロールを含有する対応するリザーバー溶液に加え、液体窒素で瞬間冷凍した。Ｘ線データセットは、ローレンスバークレー国立研究所のＡｄｖａｎｃｅｄ  Ｌｉｇｈｔ  Ｓｏｕｒｃｅでビームライン８．２．１および８．２．２によって取得された。データセットは、ＸＤＳ35またはＨＫＬ２０００36のいずれかを使用して索引付けおよびスケーリングされた。初期モデルは、設計モデルを初期検索モデルとして使用して、Ｐｈｅｎｉｘ（商標）ソフトウェアスイート38内のプログラムＰＨＡＳＥＲ（商標）37を用いる分子置換法によって作成された。Ｐｈｅｎｉｘ．ｒｅｆｉｎｅを使用したｓｉｍｕｌａｔｅｄ  ａｎｎｅａｌｉｎｇによる改良を通して、または解像度が十分である場合は、Ｐｈｅｎｉｘ．ａｕｔｏｂｕｉｌｄ40を使用してｒｅｂｕｉｌｄ−ｉｎ−ｐｌａｃｅをｆａｌｓｅに設定し、ｓｉｍｕｌａｔｅｄ  ａｎｎｅａｌｉｎｇおよびｐｒｉｍｅ−ａｎｄ−ｓｗｉｔｃｈ  ｐｈａｓｉｎｇを用いて、モデルのバイアスを低減するように取り組んだ。ＣＯＯＴでの手動構築およびＰｈｅｎｉｘ（商標）での改良の反復処理を使用して、最終モデルを作成した。コイルドコイル様タンパク質における高度な自己相似性継承のため、報告された構造に関するデータセットは、Ｐｈｅｎｉｘ．Ｘｔｒｉａｇｅ（商標）による報告のように、構造改良を複雑にしており、報告されたＲ値の予測よりも高いことを説明し得る。理想的な形状の結合長、角度、二面角のＲＭＳＤは、Ｐｈｅｎｉｘ（商標）を使用して計算された。最終モデルすべての全体的な品質は、プログラムＭＯＬＰＲＯＢＩＴＹ（商標）を使用して評価された。
【０１２２】
ｇｆｐＬＯＣＫＲ：（ＧＦＰ１１−ＬＯＣＫＲ）スイッチ設計および特性評価
非対称ＬＯＣＫＲa設計スキャホルドを使用して、ＧＦＰの１１番目の鎖を上記セクション「Ｒｏｓｅｔｔａ（商標）を使用して機能配列をＬＯＣＫＲにグラフトする」で説明されるようにラッチにコード化し、設計したタンパク質をコードする合成遺伝子を上記のように得た。タンパク質は、上記のように精製して生物物理学的に特徴付けした。キーの添加による蛍光の誘導を試験するために、タンパク質をピペッティングで混合し、直ちにＢｉｏｔｅｋ  Ｓｙｎｅｒｇｙ  Ｎｅｏ２プレートリーダーを使用して黒色９６ウェルプレートでアッセイし、相対的なＧＦＰ蛍光をモニタリングした（Ｅｘ：４８８、Ｅｍ：５０８、読み取りまで１０分）。キーの不在下で経時的にＧＦＰ蛍光を測定することによって、ケージの漏れを評価した。
【０１２３】
ｇｆｐＬＯＣＫＲ（ＧＦＰ１１−ＬＯＣＫＲ）によるインビトロでの共局在依存的切り替え
ＧｆｐＬＯＣＫＲケージはフロッピーリンカーを介してそのＮ末端に融合したＳｐｙＣａｔｃｈｅｒ（商標）とともにクローニングし、ｇｆｐＬＯＣＫＲキーはフロッピーリンカーを介してＣ末端に融合したＳｐｙＴａｇ（商標）とともにクローニングし、ＧＦＰ１−１０はそれ自体のｐＥＴ２１ベクターにクローン化した。これらのタンパク質は、Ｓｔｕｄｉｅｒの自動誘導培地を用いて１８℃で一晩、大腸菌Ｌｅｍｏ２１細胞で発現させた。発現後、プロデューサー細胞を遠心分離によって収集し、マイクロフルイダイザーによって溶解した。所望のタンパク質を、Ｎｉ−ＮＴＡアフィニティークロマトグラフィーによって澄明化溶解物から精製し、ナノドロップでＡ280によって定量化した。タンパク質をＰＢＳで最終濃度に希釈し（ケージ：１．５ｕＭ、０．８ｕＭ、０．４ｕＭ、０．２ｕＭ、０．０９４ｕＭ、キー：１．５ｕＭ、０．８ｕＭ、０．４ｕＭ、０．２ｕＭ、０．０９４ｕＭのすべての試料でＧＦＰ１−１０：１．９ｕＭ）、ＳｐｙＣａｔｃｈｅｒ（商標）−ケージ単独（キーなし）、ＳｐｙＣａｔｃｈｅｒ（商標）−ケージをネイキッドキーと（ＳｐｙＴａｇ（商標）なし）、およびＳｐｙＣａｔｃｈｅｒ−ケージをＳｐｙＴａｇ−キーと、プールした。タンパク質をピペッティングで混合し、直ちにＢｉｏｔｅｋ  Ｓｙｎｅｒｇｙ  Ｎｅｏ２プレートリーダーを使用して黒色９６ウェルプレートでアッセイし、相対的なＧＦＰ蛍光をモニタリングした（Ｅｘ：４８８、Ｅｍ：５０８、読み取りまで１０分）。キーの不在下で経時的にＧＦＰ蛍光を測定することによって、ケージの漏れを評価した。共局在依存性は、ＳｐｙＴａｇ（商標）−キーがネイキッドキーよりも速くＧＦＰ蛍光を活性化したことを示すことによって確認した。
【０１２４】
ケージ化インテインＬＯＣＫＲスイッチ
ＶＭＡＣインテイン配列は、ＬＯＣＫＲaのラッチにエンコードされるように設計した。ＶＭＡｎインテイン配列をキーaに融合させた。構築体は、上記の先のＬＯＣＫＲ設計のようにクローニングおよび精製した。インテイン活性（スプライシング）はＳＤＳ−ＰＡＧＥによって評価した。
【０１２５】
ＬＯＣＫＲスイッチの大規模ハイスループット設計
何千もの新しいＬＯＣＫＲスイッチスキャホルドをゼロから設計するためのコンピュータパイプラインでは、バックボーンを、３ヘリックス束（２ヘリックススキャホルドと１ヘリックスラッチのため２プラス１または２＋１と表記）および４ヘリックスバンドル（３ヘリックスと１ヘリックスラッチのために３プラス１または３＋１と表記）に関するＣｒｉｃｋラセンパラメータを使用して徹底的にサンプリングし、サンプリングしたパラメータは、ｚオフセット（−１．５１、０、および１．５１）、０〜１００の間の１０度ごとのラセン位相、および中央の超ラセン軸（ｚ軸）から５〜１０オングストロームの範囲の各ヘリックスにおける超ラセン半径を含み、元のＬＯＣＫＲ設計の成功に基づいて、ストレートヘリックスを用いて、スーパーコイル化を用いず（スーパーヘリカルツイストを０．０に固定）に設計に合わせた。作成された各ヘリックスは長さが５８残基であり、Ｒｏｓｅｔｔａループクロージャー法を使用して、すべてのヘリックスを単一のポリペプチド鎖（ケージスキャホルド）に接続するループを追加した。配列および側鎖の設計は、ＨＢＮｅｔ、ＭＣ−ＨＢＮｅｔ、およびＲｏｓｅｔｔａＤｅｓｉｇｎ（商標）を使用して実行した。追加の設計は、ヘリックス束をより短いスキャホルドに切り詰め、Ｎ末端またはＣ末端ヘリックスとしてラッチを有する型を作成することによって、そして異なるトーホールド長（極性残基で終わり、元の設計から少なくとも１つまたは２つの疎水性パッキング残基を除去するラッチヘリックスの切り詰め）を試みることによって作成した。設計は、先のＬＯＣＫＲスキャホルドおよびＨＢＮｅｔヘリックス束の反復試験および設計から学んだコンピュータ法に基づいて選択し、重要な基準には、二次構造の形状相補性（ｓｓ＿ｓｃ）＞０．６５（最良の設計はｓｓ＿ｓｃ＞０．７）、スキャホルドのコアにおいて水素結合ネットワークと隣接して大きな孔を有する設計を排除するために水素結合ネットワークを囲む領域でのＲｏｓｅｔｔａＨｏｌｅｓ（商標）フィルター、設計モデルのすべてのヘリックスにまたがる少なくとも２つの異なる水素結合ネットワークを有することを必要とする設計（つまり、各ヘリックスはネットワークに少なくとも１つのアミノ酸側鎖を与えなければならない）、ならびにＩｌｅ、Ｌｅｕ、およびＶａｌ残基の数、そして密な、互いにかみ合った疎水性パッキングを有する設計とよく相関し、安定なタンパク質スキャホルドにとって重要である代替えとしても機能するＡｌａ（より小さいアミノ酸）と比較して、これらのアミノ酸型によってなされる接触の数が含まれる。
【０１２６】
ｓｔｒｅｐＬＯＣＫＲ（ＳＴＲＥＰＩＩ−ＬＯＣＫＲ）コンピュータ設計：
ＳＴＲＥＰＩＩタグである（Ｎ）ＷＳＨＰＱＦＥＫ（配列番号６３）をエンコードするＬＯＣＫＲスイッチは、大規模ハイスループットＬＯＣＫＲ設計セットから２プラス１および３プラス１スイッチを使用して設計された。この配列は、Ｐｒｏ（アルファヘリックスをねじる）およびＴｒｐとＨｉｓのためエンコードするのが困難であり、埋め込まれている場合は水素結合に関与している可能性がある。これらの問題に対処するために、すべてのヘリックス残基をサンプリングするよりも、大規模な設計セットを掘り出して、設計の水素結合ネットワークにすでに前編成されたＴｒｐ（Ｗ）、Ｈｉｓ（Ｈ）をすでに含むＬＯＣＫＲスキャホルドを見つけ出した。前編成されたＰｈｅ（Ｆ）を有する設計も考慮した。
【０１２７】
ｓｔｒｅｐＬＯＣＫＲ（ＳＴＲＥＰＩＩ−ＬＯＣＫＲ）実験的試験：
精製したタンパク質は、バイオレイヤー干渉法（Ｏｃｔｅｔ（登録商標）ＲＥＤ９６システム、ＰＡＬＬ  ＦｏｒｔｅＢｉｏ）を使用して、キーの不在下でＳＴＲＥＰＩＩ配列を隔離し、キーの存在下で活性化する能力について試験し、ＴＨＥ（商標）ＮＷＳＨＰＱＦＥＫ（配列番号６３）タグ抗体（ｍＡｂマウス、Ｇｅｎｓｃｒｉｐｔ  Ａ０１７３２−２００）を抗マウスＩｇＧ  Ｆｃ  Ｃａｐｔｕｒｅ（ＡＭＣ）バイオセンサー（ＰＡＬＬ  ＦｏｒｔｅＢｉｏ）に加え、チップは、グリシン，ｐＨ１．６５とＯｃｔｅｔアッセイ緩衝液であるＧＥのＨＢＳ−ＥＰ＋緩衝液（１０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、３ｍＭ  ＥＤＴＡ、０．０５％ｖ／ｖ界面活性剤Ｐ２０、０．５％脱脂粉乳、室温でｐＨ７．４）の間で循環させることによって前条件化した。タンパク質試料をＯｃｔｅｔアッセイ緩衝液で希釈し、ノイズを最小限に抑えるために希釈係数を一定に維持した。抗体添加チップは、グリシン、ｐＨ１．６５とＯｃｔｅｔアッセイ緩衝液の間を循環させる推奨再生プロトコルを使用して最大８回再利用した（チップを前条件化するときに添加の最小損失を観察し、シグナル閾値を設定して各回でチップの一定した添加を確実にした）。
【０１２８】
ＴＨＥ（商標）ＮＷＳＨＰＱＦＥＫ（配列番号６３）タグ抗体（ｍＡｂマウス、ＧｅｎｓｃｒｉｐｔＡ０１７３２−２００）は、Ｏｃｔｅｔアッセイ緩衝液で５ｕｇ／ｍＬの濃度で使用し、抗体のストックは４００ｕｌのミリＱ処理Ｈ２Ｏで０．５ｍｇ／ｍＬにし、小分けして−８０Ｃに保存し、使用直前に解凍した。
【０１２９】
前述されていない細菌調製物からのタンパク質の精製：
種培養は、５０μｇ／ｍｌカルベニシリン（ｐＥＴ２１−ＮＥＳＧ）もしくは５０μｇ／ｍｌカナマイシン（ｐＥＴ−２８ｂ＋）の存在下、３７℃で、ルリア−ベルターニ（ＬＢ）培地において一晩、またはＴｅｒｒｉｆｉｃブロスにおいて８時間、のいずれかで増殖させた。種培養を使用して、５００ｍＬのＬＢ（ＯＤ６００で約０．６〜０．９の０．２ｍＭ  ＩＰＴＧによって誘導）または抗生物質を含むＳｔｕｄｉｅｒ自動誘導培地に接種した。培養は１８℃で一晩発現させた（多くの設計は、後に３７℃で４時間発現させたが、収量に顕著な差はなかった）。細胞は、５０００  ｒｃｆで４℃、１５分間遠心分離して収集し、溶解緩衝液（２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ、３００ｍＭ  ＮａＣｌ、２０ｍＭイミダゾール、室温でｐＨ８．０）に再懸濁させ、次いでリゾチーム、ＤＮＡｓｅ、およびＥＤＴＡフリーカクテルプロテアーゼ阻害剤（Ｒｏｃｈｅ）または１ｍＭ  ＰＭＳＦの存在下で超音波処理によって溶解させた。溶解物を１８，０００ｒｐｍ、４℃で少なくとも３０分間遠心分離して澄明化し、溶解緩衝液で前平衡化したＮｉ−ＮＴＡ（Ｑｉａｇｅｎ）カラムに加えた。カラムを５カラム容量（ＣＶ）の洗浄緩衝液（２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ、３００ｍＭ  ＮａＣｌ、４０ｍＭイミダゾール、室温でｐＨ８．０）で３回洗浄した後、３〜５  ＣＶの高塩濃度洗浄緩衝液（２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ、１Ｍ  ＮａＣｌ、４０ｍＭイミダゾール、室温でｐＨ８．０）、そして５ＣＶの洗浄緩衝液で洗浄した。タンパク質は、２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ、３００ｍＭ  ＮａＣｌ、２５０ｍＭイミダゾール、室温でｐＨ８．０によって溶出した。設計したタンパク質はいずれもシステインを含まなかったため、還元剤は添加しなかった。
参考文献
１．Ｈｕａｎｇ，Ｐ．−Ｓ．，Ｂｏｙｋｅｎ，Ｓ．Ｅ．＆  Ｂａｋｅｒ，Ｄ．Ｔｈｅ  ｃｏｍｉｎｇ  ｏｆ  ａｇｅ  ｏｆ  ｄｅ  ｎｏｖｏ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｄｅｓｉｇｎ．Ｎａｔｕｒｅ  ５３７，３２０−３２７（２０１６）．
２．Ｊｏｈ，Ｎ．Ｈ．ｅｔ  ａｌ．Ｄｅ  ｎｏｖｏ  ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  ａ  ｔｒａｎｓｍｅｍｂｒａｎｅ  Ｚｎ2+−ｔｒａｎｓｐｏｒｔｉｎｇ  ｆｏｕｒ−ｈｅｌｉｘ  ｂｕｎｄｌｅ．Ｓｃｉｅｎｃｅ  ３４６，１５２０−１５２４（２０１４）．
３．Ｄａｖｅｙ，Ｊ．Ａ．，Ｄａｍｒｙ，Ａ．Ｍ．，Ｇｏｔｏ，Ｎ．Ｋ．＆  Ｃｈｉｃａ，Ｒ．Ａ．Ｒａｔｉｏｎａｌ  ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｔｈａｔ  ｅｘｃｈａｎｇｅ  ｏｎ  ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  ｔｉｍｅｓｃａｌｅｓ．Ｎａｔ．Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．１３，１２８０−１２８５（２０１７）．
４．Ｈｕａｎｇ，Ｐ．−Ｓ．ｅｔ  ａｌ．Ｈｉｇｈ  ｔｈｅｒｍｏｄｙｎａｍｉｃ  ｓｔａｂｉｌｉｔｙ  ｏｆ  ｐａｒａｍｅｔｒｉｃａｌｌｙ  ｄｅｓｉｇｎｅｄ  ｈｅｌｉｃａｌ  ｂｕｎｄｌｅｓ．Ｓｃｉｅｎｃｅ  ３４６，４８１−４８５（２０１４）．
５．Ｂｏｙｋｅｎ，Ｓ．Ｅ．ｅｔ  ａｌ．Ｄｅ  ｎｏｖｏ  ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｈｏｍｏ−ｏｌｉｇｏｍｅｒｓ  ｗｉｔｈ  ｍｏｄｕｌａｒ  ｈｙｄｒｏｇｅｎ−ｂｏｎｄ  ｎｅｔｗｏｒｋ−ｍｅｄｉａｔｅｄ  ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ．Ｓｃｉｅｎｃｅ  ３５２，６８０−６８７（２０１６）．
６．Ｂｅｒｇｅｒ，Ｓ．ｅｔ  ａｌ．Ｃｏｍｐｕｔａｔｉｏｎａｌｌｙ  ｄｅｓｉｇｎｅｄ  ｈｉｇｈ  ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｄｅｌｉｎｅａｔｅ  ｔｈｅ  ｒｏｌｅｓ  ｏｆ  ＢＣＬ２  ｆａｍｉｌｙ  ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｉｎ  ｃａｎｃｅｒ．Ｅｌｉｆｅ  ５，１４２２（２０１６）．
７．Ｌｅａｖｅｒ−Ｆａｙ，Ａ．ｅｔ  ａｌ．ＲＯＳＥＴＴＡ３：ａｎ  ｏｂｊｅｃｔ−ｏｒｉｅｎｔｅｄ  ｓｏｆｔｗａｒｅ  ｓｕｉｔｅ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｓｉｍｕｌａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ．Ｍｅｔｈ  Ｅｎｚｙｍｏｌ  ４８７，５４５−５７４（２０１１）．
８．Ｋｕｈｌｍａｎ，Ｂ．＆  Ｂａｋｅｒ，Ｄ．Ｎａｔｉｖｅ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ａｒｅ  ｃｌｏｓｅ  ｔｏ  ｏｐｔｉｍａｌ  ｆｏｒ  ｔｈｅｉｒ  ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ．Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ  ９７，１０３８３−１０３８８（２０００）．
９．Ｃｒｉｃｋ，Ｆ．Ｈ．Ｃ．Ｔｈｅ  ｐａｃｋｉｎｇ  ｏｆ［ａｌｐｈａ］−ｈｅｌｉｃｅｓ：ｓｉｍｐｌｅ  ｃｏｉｌｅｄ−ｃｏｉｌｓ．Ａｃｔａ  Ｃｒｙｓｔ（１９５３）．Ｑ６，６８９−６９７［ｄｏｉ：１０．１１０７／Ｓ０３６５１１０Ｘ５３００１９６４］６，１−９（１９５３）．
１０．Ｇｌａｎｔｚ，Ｓ．Ｔ．ｅｔ  ａｌ．Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  ａｎｄ  ｔｏｐｏｌｏｇｉｃａｌ  ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  ＬＯＶ  ｄｏｍａｉｎ  ｐｈｏｔｏｒｅｃｅｐｔｏｒｓ．Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ  １１３，Ｅ１４４２−５１（２０１６）．
１１．Ｄｕｅｂｅｒ，Ｊ．Ｅ．，Ｍｉｒｓｋｙ，Ｅ．Ａ．＆  Ｌｉｍ，Ｗ．Ａ．Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ  ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｗｉｔｈ  ｕｌｔｒａｓｅｎｓｉｔｉｖｅ  ｉｎｐｕｔ／ｏｕｔｐｕｔ  ｃｏｎｔｒｏｌ．２５，６６０−６６２（２００７）．
１２．Ｄｕｅｂｅｒ，Ｊ．Ｅ．，Ｙｅｈ，Ｂ．Ｊ．，Ｃｈａｋ，Ｋ．＆  Ｌｉｍ，Ｗ．Ａ．Ｒｅｐｒｏｇｒａｍｍｉｎｇ  ｃｏｎｔｒｏｌ  ｏｆ  ａｎ  ａｌｌｏｓｔｅｒｉｃ  ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  ｓｗｉｔｃｈ  ｔｈｒｏｕｇｈ  ｍｏｄｕｌａｒ  ｒｅｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ．Ｓｃｉｅｎｃｅ  ３０１，１９０４−１９０８（２００３）．
１３．Ｈｕａｎｇ，Ｐ．−Ｓ．ｅｔ  ａｌ．ＲｏｓｅｔｔａＲｅｍｏｄｅｌ：Ａ  Ｇｅｎｅｒａｌｉｚｅｄ  Ｆｒａｍｅｗｏｒｋ  ｆｏｒ  Ｆｌｅｘｉｂｌｅ  Ｂａｃｋｂｏｎｅ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｄｅｓｉｇｎ．ＰＬｏＳ  ＯＮＥ  ６，ｅ２４１０９（２０１１）．
１４．Ｓｃｈｎｅｉｄｍａｎ−Ｄｕｈｏｖｎｙ，Ｄ．，Ｈａｍｍｅｌ，Ｍ．＆  Ｓａｌｉ，Ａ．ＦｏＸＳ：ａ  ｗｅｂ  ｓｅｒｖｅｒ  ｆｏｒ  ｒａｐｉｄ  ｃｏｍｐｕｔａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｆｉｔｔｉｎｇ  ｏｆ  ＳＡＸＳ  ｐｒｏｆｉｌｅｓ．Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ  ３８，Ｗ５４０−４（２０１０）．
１５．Ｍａｇｕｉｒｅ，Ｊ．Ｂ．，Ｂｏｙｋｅｎ，Ｓ．Ｅ．，Ｂａｋｅｒ，Ｄ．＆  Ｋｕｈｌｍａｎ，Ｂ．Ｒａｐｉｄ  Ｓａｍｐｌｉｎｇ  ｏｆ  Ｈｙｄｒｏｇｅｎ  Ｂｏｎｄ  Ｎｅｔｗｏｒｋｓ  ｆｏｒ  Ｃｏｍｐｕｔａｔｉｏｎａｌ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｄｅｓｉｇｎ．Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｔｈｅｏｒｙ  Ｃｏｍｐｕｔ  １４，２７５１−２７６０（２０１８）．
【図１】
2021530475.tif 000174
【図２】
2021530475.tif 000175
【図３】
2021530475.tif 000176
【図４】
2021530475.tif 000177
【図５】
2021530475.tif 000178
【図６】
2021530475.tif 000179
【図７】
2021530475.tif 000180
【図８】
2021530475.tif 000181
【図９】
2021530475.tif 000182
【図１０】
2021530475.tif 000183
【図１１】
2021530475.tif 000184
【図１２】
2021530475.tif 000185
【図１３】
2021530475.tif 000186
【図１４】
2021530475.tif 000187
【配列表】
2021530475000001.app
【国際調査報告】
2021530475.tif 000188
2021530475.tif 000189
2021530475.tif 000190
2021530475.tif 000191
2021530475.tif 000192
2021530475.tif 000193
2021530475.tif 000194