(57)【要約】  本明細書では、（ｉ）約１％〜２５％のα−１，２分枝で変性されたデキストランを含む主鎖と、（ｉｉ）少なくとも約５０％のα−１，３グリコシド結合を含む１つ以上のα−１，３−グルカン側鎖とを含むグラフトコポリマーを含む組成物が開示される。そのようなグラフトコポリマーを生成する反応並びに誘導体、フィルム及び様々な他の用途におけるその使用が更に開示される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
グラフトコポリマー又はそのエーテル誘導体若しくはエステル誘導体を含む組成物であって、前記グラフトコポリマーは、
（ｉ）約１％〜２５％のα−１，２分枝で変性されたデキストランを含む主鎖と、
（ｉｉ）少なくとも約５０％のα−１，３グリコシド結合を含む１つ以上のα−１，３−グルカン側鎖と
を含む、組成物。
【請求項２】
前記デキストランは、約１％〜２５％のα−１，２分枝で変性された実質的に直鎖のデキストランである、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記デキストランは、約５％〜２０％のα−１，２分枝で変性されている、請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
前記α−１，２分枝の１つ以上は、長さにおいて単一のグルコースモノマーである、請求項１に記載の組成物。
【請求項５】
前記主鎖の重量平均重合度（ＤＰｗ）は、約１０〜５００である、請求項１に記載の組成物。
【請求項６】
前記α−１，３−グルカン側鎖は、少なくとも約９０％のα−１，３グリコシド結合を含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項７】
前記１つ以上のα−１，３−グルカン側鎖のＤＰ又はＤＰｗは、少なくとも約１０又は１００である、請求項１に記載の組成物。
【請求項８】
前記グラフトコポリマーは、水性条件下で不溶性である、請求項１に記載の組成物。
【請求項９】
前記グラフトコポリマーは、少なくとも水、スクロース、前記デキストラン及び少なくとも約５０％のα−１，３グリコシド結合を有するα−１，３−グルカンを合成するグルコシルトランスフェラーゼ酵素を含む反応組成物中で生成される、請求項１に記載の組成物。
【請求項１０】
家庭用ケア製品、パーソナルケア製品、工業製品、医薬製品又は食品である、請求項１に記載の組成物。
【請求項１１】
（ａ）フィルム若しくはコーティング、又は
（ｂ）任意選択的に織物ケア組成物である洗剤組成物
である、請求項１に記載の組成物。
【請求項１２】
グラフトコポリマーを生成する方法であって、
（ａ）少なくとも（ｉ）水、（ｉｉ）スクロース、（ｉｉｉ）約１％〜２５％のα−１，２分枝で変性されたデキストラン、及び（ｉｖ）少なくとも約５０％のα−１，３グリコシド結合を含むα−１，３−グルカンを合成するグルコシルトランスフェラーゼ酵素を接触させることであって、それにより、請求項１に記載の組成物によるグラフトコポリマーが生成される、接触させることと、
（ｂ）任意選択的に、工程（ａ）で生成された前記グラフトコポリマーを単離することと
を含む方法。
【請求項１３】
前記デキストランは、約１％〜２５％のα−１，２分枝で変性された実質的に直鎖のデキストランである、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記デキストランは、約５％〜２０％のα−１，２分枝で変性されている、請求項１２に記載の方法。
【請求項１５】
フィルムを生成するための方法であって、
（ａ）請求項１に記載のグラフトコポリマー又はそのエーテル誘導体若しくはエステル誘導体を溶媒中に溶解させて溶液を提供することと、
（ｂ）前記溶液を表面と接触させることと、
（ｃ）前記溶媒を除去してフィルムを形成することと
を含む方法。
【請求項１６】
前記（ａ）の溶液は、１５ｗｔ％未満の前記グラフトコポリマー又はそのエーテル誘導体若しくはエステル誘導体を含む、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
α−１，３−グルカンを生成する方法であって、
（ａ）少なくとも（ｉ）水、（ｉｉ）スクロース、（ｉｉｉ）約１％〜５０％のα−１，２分枝で変性されたデキストラン、及び（ｉｖ）少なくとも約５０％のα−１，３グリコシド結合を含むα−１，３−グルカンを合成するグルコシルトランスフェラーゼ酵素を接触させ、それにより酵素反応を提供することであって、それにより、少なくとも約５０％のα−１，３グリコシド結合を含むα−１，３−グルカンが生成される、提供することと、
（ｂ）任意選択的に、工程（ａ）で生成された前記α−１，３−グルカンを単離することと
を含む方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本願は、米国仮特許出願第６２／５９８，６８５号明細書（２０１７年１２月１４日出願）及び同第６２／７３３，７２９号明細書（２０１８年９月２０日出願）の利益を主張するものであり、これらは、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０００２】
本発明は、多糖類の分野におけるものである。例えば、本開示は、デキストラン／α−１，３−グルカングラフトコポリマーを含む組成物、その誘導体及びこれらの材料を用いた様々な用途に関する。
【０００３】
電子的に提出された配列表の参照
配列表の正式な写しは、約３８７キロバイトのサイズを有して本明細書と同時に提出される、２０１８年１２月５日に作成された２０１８１２０５＿ＣＬ６５９１ＷＯＰＣＴ＿ＳｅｑｕｅｎｃｅＬｉｓｔｉｎｇ．ｔｘｔという名称のファイルにより、ＡＳＣＩＩフォーマットの配列表としてＥＦＳ−Ｗｅｂを介して電子的に提出される。このＡＳＣＩＩフォーマット文献に含まれる配列表は、本明細書の一部であり、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【背景技術】
【０００４】
多糖類を様々な用途に使用することが望まれているため、研究者らは、生分解性であり、再生可能に供給される原料から経済的に製造することができる多糖類を探求してきた。このような多糖類の１つは、α−１，３−グルカン、すなわちα−１，３−グリコシド結合を有することを特徴とする不溶性グルカンポリマーである。このポリマーは、例えば、ストレプトコッカス・サリバリウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｓａｌｉｖａｒｉｕｓ）から単離されたグルコシルトランスフェラーゼ酵素を使用して調製されている（非特許文献１）。また、例えば、特許文献１は、酵素的に製造されたα−１，３−グルカンから紡糸繊維を調製することを開示している。様々な他のグルカン材料も、新規又は改良された用途を開発するために研究されてきた。例えば、特許文献２は、α−１，３及びα−１，６結合の混在を有するいくつかの不溶性グルカンの酵素的合成を開示している。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】米国特許第７００００００号明細書
【特許文献２】米国特許出願公開第２０１５／０２３２８１９号明細書
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Ｓｉｍｐｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ  １４１：１４５１−１４６０，１９９５
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
この研究にも関わらず、α−１，３−グルカンの新たな形態は、様々な用途でこの材料の経済的価値及び性能特性を向上させるように所望される。グラフトコポリマーの形態でα−１，３−グルカンを含む組成物は、現在、このニーズに対処するために開示されている。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
一実施形態では、本開示は、グラフトコポリマー又はそのエーテル誘導体若しくはエステル誘導体を含む組成物であって、グラフトコポリマーは、（ｉ）約１％〜２５％のα−１，２分枝で変性されたデキストランを含む主鎖と、（ｉｉ）少なくとも約５０％のα−１，３グリコシド結合を含む１つ以上のα−１，３−グルカン側鎖とを含む、組成物に関する。
【０００９】
別の実施形態では、本開示は、グラフトコポリマーを生成する方法であって、（ａ）少なくとも（ｉ）水、（ｉｉ）スクロース、（ｉｉｉ）約１％〜２５％のα−１，２分枝で変性されたデキストラン、及び（ｉｖ）少なくとも約５０％のα−１，３−グリコシド結合を含むα−１，３−グルカンを合成するグルコシルトランスフェラーゼ酵素を接触させることであって、それにより、本開示のグラフトコポリマーが生成される、接触させることと、（ｂ）任意選択的に、工程（ａ）で生成されたグラフトコポリマーを単離することとを含む方法に関する。
【００１０】
別の実施形態では、本開示は、フィルムを生成するための方法であって、（ａ）本開示の不溶性グラフトコポリマー又はそのエーテル誘導体若しくはエステル誘導体を溶媒中に溶解させて溶液を提供することと、（ｂ）溶液を表面と接触させることと、（ｃ）溶媒を除去してフィルムを形成することとを含む方法に関する。
【００１１】
別の実施形態では、本開示は、α−１，３−グルカンを生成する方法であって、（ａ）少なくとも（ｉ）水、（ｉｉ）スクロース、（ｉｉｉ）約１％〜５０％のα−１，２分枝で変性されたデキストラン、及び（ｉｖ）少なくとも約５０％のα−１，３−グリコシド結合を含むα−１，３−グルカンを合成するグルコシルトランスフェラーゼ酵素を接触させ、それにより酵素反応を提供することであって、それにより、少なくとも約５０％のα−１，３グリコシド結合を含むα−１，３−グルカンが生成される、提供することと、（ｂ）任意選択的に、工程（ａ）で生成されたα−１，３−グルカンを単離することとを含む方法に関する。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
配列の簡単な説明
【００１３】
【表１】
2021507955.tif 000002
【００１４】
【表２】
2021507955.tif 000003
【００１５】
【表３】
2021507955.tif 000004
【００１６】
引用する全ての特許文献及び非特許文献の開示は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【００１７】
別段の開示がなされていなければ、本明細書で使用される用語「１つの（ａ）」及び「１つの（ａｎ）」は、参照されるものの１つ以上（すなわち少なくとも１つ）を包含するものとする。
【００１８】
存在する場合、特に記載しない限り、全ての範囲は、包括的であり、結合可能である。例えば、「１〜５」（すなわち１〜５）の範囲が挙げられる場合、挙げられた範囲は、「１〜４」、「１〜３」、「１〜２」、「１〜２及び４〜５」、「１〜３及び５」などを含むものと解釈されるべきである。
【００１９】
本明細書の用語「コポリマー」は、少なくとも異なる２種類のα−グルカン、例えばデキストラン及びα−１，３−グルカンなどを含むポリマーを指す。
【００２０】
本明細書の用語「グラフトコポリマー」、「分枝状コポリマー」などは、一般的に、「主鎖」（又は「主な鎖」）と、主鎖から分枝する側鎖とを含むコポリマーを指す。側鎖は、主鎖と構造的に異なる。本明細書のグラフトコポリマーの例は、約１％〜３５％のα−１，２分枝で変性されたデキストラン主鎖及び少なくとも約５０％のα−１，３グリコシド結合を含む少なくとも１つのα−１，３−グルカンの側鎖を含む。いくつかの態様では、デキストランの非還元末端は、グルコシルトランスフェラーゼ酵素によるα−１，３−グルカン合成をプライムすることができるため、デキストラン主鎖は、α−１，３−グルカン伸長部を有することができる。主鎖は、場合により、α−１，３−グルカンデキストラン直鎖コポリマーであり得る。
【００２１】
用語「α−１，３−グルカン側鎖」及び「α−１，３−グルカンアーム」などは、本明細書では同じ意味で用いることができる。α−１，３−グルカン側鎖は、（ｉ）α−１，２分枝が、グルコシルトランスフェラーゼ酵素によるα−１，３−グルカン合成を場合によりプライムすることができる非還元末端を提供するため、α−１，２分枝の伸長部であり、（ｉｉ）デキストラン主鎖に直接α−１，３結合を介して結合され、この場合、α−１，３−グルカン側鎖合成が、グルコシルトランスフェラーゼ酵素が最初にデキストラン主鎖からα−１，３分枝を作り、続いて酵素によるこの分枝の伸長により生じ、及び／又は（ｉｉｉ）デキストラン主鎖に他のα−グリコシド結合（例えば、α−１，４又はα−１，２）を介して結合される（場合により、そのような他の結合は、α−１，３−グルカン−合成グルコシルトランスフェラーゼ酵素の無差別な活性に起因し得る）と考えられる。
【００２２】
用語「α−グルカン」、「α−グルカンポリマー」などは、本明細書では同じ意味で用いられる。α−グルカンは、α−グリコシド結合によって互いに連結されるグルコースモノマー単位を含むポリマーである。典型的な実施形態では、本明細書のα−グルカンは、少なくとも約８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％のα−グリコシド結合を含む。本明細書のα−グルカンポリマーの例としては、本開示のグラフトコポリマーが挙げられる。
【００２３】
用語「ポリα−１，３−グルカン」、「α−１，３−グルカン」、「α−１，３−グルカンポリマー」などは、本明細書では同じ意味で用いられる。α−１，３−グルカンは、グリコシド結合により互いに連結されるグルコースモノマー単位を含むポリマーであり、少なくとも約３０％のグリコシド結合がα−１，３である。特定の実施形態では、α−１，３−グルカンは、少なくとも約９０％又は９５％のα−１，３グリコシド結合を含む。本明細書のα−１，３−グルカンにおける他の結合の大部分又は全ては、典型的には、α−１，６であるが、いくつかの結合は、α−１，２及び／又はα−１，４であり得る。本明細書で定義されるα−１，３−グルカンは、本明細書のα−１，３−グルカン側鎖を特徴付けることができる。いくつかの態様では、α−１，３−グルカンは、（ｉ）グラフトコポリマーの一部でなく、（ｉｉ）デキストラン−α−１，３−グルカン直鎖コポリマーの一部でもないα−１，３−グルカンであるα−１，３−グルカン「ホモポリマー」を特徴付けることができる。
【００２４】
本明細書の用語「デキストラン」、「デキストランポリマー」、「デキストラン分子」などは、少なくとも９０％のα−１，６グリコシド結合（結合の残余は、典型的には、α−１，３である）を含む水溶性α−グルカンを指す。スクロースからデキストランを合成することができる酵素は、「デキストランスクラーゼ」（ＥＣ  ２．４．１．５）として記載され得る。
【００２５】
本明細書の「実質的に直鎖の」デキストランは、１％〜２５％のα−１，２分枝を含有するように変性される前に５％以下の分枝を有する。「完全に直鎖の」デキストランは、１％〜２５％のα−１，２分枝を含有するように変性される前に分枝を有さない。α−１，２分枝で変性する前に存在する場合、デキストラン分枝は、典型的には短く、長さにおいて１つ（ペンダント）〜３つのグルコースモノマーであり、デキストランポリマーのグルコースモノマーの全ての約１０％未満を占める。α−１，３−グルカン合成のために、本明細書のグルコシルトランスフェラーゼ反応で使用されたようなデキストランは、任意選択的に、「プライマー」として特徴付けることができる。
【００２６】
本明細書でいう「α−１，２分枝」（及び同様の用語）は、デキストラン主鎖にα−１，２−結合しているグルコースを含む。したがって、本明細書のα−１，２分枝は、α−１，２，６結合と呼ばれることもある。本明細書のα−１，２分枝（α−１，３−グルカン−合成グルコシルトランスフェラーゼによる可能な伸長前）は、典型的に、１つのグルコース基（任意選択的にペンダントグルコースと呼ぶこともできる）を有する。
【００２７】
本明細書でいう「α−１，３分枝」（及び同様の用語）は、デキストラン主鎖にα−１，３−結合しているグルコースを含む。したがって、本明細書のα−１，３分枝は、α−１，３，６結合と呼ばれることもある。本明細書のα−１，３分枝は、グルコシルトランスフェラーゼ酵素が最初にデキストラン主鎖からα−１，３分枝を作り、続いて酵素によるこの分枝の伸長から場合により生じると考えられる。
【００２８】
本明細書のα−グルカン中の分枝の割合は、分枝点に相当するα−グルカン中の全ての結合のパーセンテージを指す。例えば、本明細書のα−グルカン中のα−１，２分枝の割合は、α−１，２分枝点に相当するグルカン中の全ての結合のパーセンテージを指す。
【００２９】
用語「結合」、「グリコシド結合（ｌｉｎｋａｇｅ）」、「グリコシド結合（ｂｏｎｄ）」などは、糖化合物（オリゴ糖及び／又は多糖類）内の糖モノマーを連結する共有結合を指す。グリコシド結合の例としては、１，６−α−Ｄ−グリコシド結合（本明細書では「α−１，６」結合とも呼ばれる）；１，３−α−Ｄ−グリコシド結合（本明細書では「α−１，３」結合とも呼ばれる）；１，４−α−Ｄ−グリコシド結合（本明細書では「α−１，４」結合とも呼ばれる）；及び１，２−α−Ｄ−グリコシド結合（本明細書では「α−１，２」結合とも呼ばれる）；並びに典型的に分枝状糖オリゴマーに関連するこのような結合の組み合わせを有するα−結合グルコースオリゴマーが挙げられる。本明細書のグルカンポリマーのグリコシド結合は、「グルコシド結合」とも呼ぶことができる。本明細書では、「α−Ｄ−グルコース」は、「グルコース」と称される。α−１，２結合は、典型的には、分枝点でのみ生じ、タンデムで発生しない（すなわち２つ以上の連続したグルコースモノマーが連続したα−１，２結合によって結合されていない）。
【００３０】
本明細書のα−グルカンのグリコシド結合プロファイルは、当技術分野で既知の任意の方法を使用して求めることができる。例えば、結合プロファイルは、核磁気共鳴（ＮＭＲ）分光法（例えば、１３Ｃ  ＮＭＲ又は１Ｈ  ＮＭＲ）を使用する方法を用いて決定することができる。使用し得るこれらの方法及び他の方法は、例えば、Ｆｏｏｄ  Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅｓ：Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｐｈｙｓｉｃａｌ  Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ（Ｓ．Ｗ．Ｃｕｉ，Ｅｄ，Ｃｈａｐｔｅｒ  ３，Ｓ．Ｗ．Ｃｕｉ，Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  ｏｆ  Ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ，Ｔａｙｌｏｒ＆Ｆｒａｎｃｉｓ  Ｇｒｏｕｐ  ＬＬＣ，Ｂｏｃａ  Ｒａｔｏｎ，ＦＬ，２００５）に開示されており、これらは、参照により本明細書に組み込まれる。
【００３１】
本明細書の大きいα−グルカンポリマーの「分子量」は、重量平均分子量（Ｍｗ）又は数平均分子量（Ｍｎ）として表すことができ、その単位は、ダルトン又はグラム／モルである。代わりに、大きいα−グルカンポリマーの分子量は、ＤＰｗ（重量平均重合度）又はＤＰｎ（数平均重合度）として表すことができる。オリゴ糖などのより小さいα−グルカンポリマーの分子量は、典型的には、「ＤＰ」（重合度）として提供され得、これは、単にα−グルカン内に含まれるグルコースの数を指す。「ＤＰ」は、個々の分子基準でポリマーの分子量を特徴付けることもできる。高圧液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）又はゲル浸透クロマトグラフィー（ＧＰＣ）によるなど、これらの様々な分子量の測定値を算出するための様々な手法が当技術分野で知られている。
【００３２】
本明細書の用語「スクロース」は、α−１，２−グリコシド結合によって連結されたα−Ｄ−グルコース分子及びβ−Ｄ−フルクトース分子から構成される非還元二糖を指す。スクロースは、一般には砂糖として知られている。代わりに、スクロースは、「α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→２）−β−Ｄ−フルクトフラノシド」と称され得る。「α−Ｄ−グルコピラノシル」及び「グルコシル」は、本明細書では同じ意味で用いられる。
【００３３】
用語「グルコシルトランスフェラーゼ」、「グルコシルトランスフェラーゼ酵素」、「ＧＴＦ」、「グルカンスクラーゼ」などは、本明細書では同じ意味で用いられる。本明細書のグルコシルトランスフェラーゼの活性は、生成物α−グルカン及びフルクトースを製造するための基質スクロースの反応を触媒する。ＧＴＦ反応の他の生成物（副生成物）としては、グルコース、様々な可溶性グルコ−オリゴ糖及びロイクロースを挙げることができる。グルコシルトランスフェラーゼ酵素の野生型形態は、一般に、（Ｎ末端からＣ末端の方向に）、シグナルペプチド（これは、典型的には、切断プロセスにより除かれる）、可変ドメイン、触媒ドメイン及びグルカン結合ドメインを含有する。本明細書のグルコシルトランスフェラーゼは、ＣＡＺｙ（Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ−Ａｃｔｉｖｅ  ＥｎＺｙｍｅｓ）データベース（Ｃａｎｔａｒｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．３７：Ｄ２３３−２３８，２００９）によれば、グリコシドヒドロラーゼファミリー７０（ＧＨ７０）の下に分類される。用語「デキストランスクラーゼ」（及び同様の用語）を任意選択的に使用して、デキストランを生成するグルコシルトランスフェラーゼ酵素を特徴付けることができる。用語「α−１，２−分枝酵素」（及び同様の用語）を任意選択的に使用して、１つ以上のα−１，２分枝をデキストラン主鎖に導入するグルコシルトランスフェラーゼ酵素を特徴付けることができる。
【００３４】
本明細書の用語「グルコシルトランスフェラーゼ触媒ドメイン」は、グルコシルトランスフェラーゼ酵素にα−グルカン合成活性を付与するグルコシルトランスフェラーゼ酵素のドメインを指す。グルコシルトランスフェラーゼ触媒ドメインは、典型的には、この活性を有する任意の他のドメインの存在を必要としない。
【００３５】
用語「酵素反応」、「グルコシルトランスフェラーゼ反応」、「グルカン合成反応」、「反応組成物」、「反応配合物」などは、本明細書では同じ意味で用いられ、通常、水と、スクロースと、少なくとも１つの活性グルコシルトランスフェラーゼ酵素とを最初に含み、任意選択的に本明細書のデキストランなどの他の成分も最初に含む反応を指す。グルコシルトランスフェラーゼ反応が典型的に開始した後、グルコシルトランスフェラーゼ反応に更に存在し得る構成成分としては、フルクトース、グルコース、ロイクロース、可溶性グルコ−オリゴ糖（例えば、ＤＰ２〜ＤＰ７）（これらは、使用されるグルコシルトランスフェラーゼに応じて生成物又は副生成物と考えられ得る）及び／又はＤＰ８以上の不溶性α−グルカン生成物が挙げられる。少なくとも８又は９の重合度（ＤＰ）を有するα−１，３−グルカンなどの特定のグルカン生成物は、非水溶性であるため、グルカン合成反応で溶解されず、むしろ溶液外に存在する（例えば、反応から沈殿したため）可能性があることが理解されるであろう。それは、水、スクロース及びグルコシルトランスフェラーゼ酵素を接触させる工程が実施されるグルカン合成反応中である。本明細書で使用される用語「好適な反応条件下」は、グルコシルトランスフェラーゼ酵素活性によってスクロースからα−グルカン生成物への変換を支援する反応条件を指す。このような反応中、中に入れたスクロースに元々由来するグルコシル基は、酵素的に転移され、α−グルカンポリマー合成に使用される。したがって、このプロセスに関与するグルコシル基は、任意選択的に、グルコシルトランスフェラーゼ反応のグルコシル構成成分又は部分（又は同様の用語）と称され得る。
【００３６】
本明細書のいくつかの態様におけるグルコシルトランスフェラーゼ反応での不溶性α−グルカン生成物の「収率」は、変換されたスクロースに基づくモル収率を表す。α−グルカン生成物のモル収率は、変換されたスクロースのモルで除した不溶性α−グルカン生成物のモルに基づいて算出することができる。変換されたスクロースのモルは、以下のように算出することができる：（初期スクロースの質量−最終スクロースの質量）／スクロースの分子量［３４２ｇ／ｒｍｏｌ］。このモル収率計算は、α−グルカンに対する反応の選択性の尺度であると見なすことができる。いくつかの態様では、グルコシルトランスフェラーゼ反応における不溶性α−グルカン生成物の「収率」は、反応のグルコシル構成成分に基づき得る。このような収率（グルコシルに基づく収率）は、次式を用いて評価することができる：
不溶性α−グルカン収率＝（（ＩＳ／２−（ＦＳ／２＋ＬＥ／２＋ＧＬ＋ＳＯ））／（ＩＳ／２−ＦＳ／２））×１００％。
グルコシルトランスフェラーゼ反応のフルクトース残余を評価して、該当する場合、ＨＰＬＣデータが範囲外ではない（９０〜１１０％は、許容されると見なされる）ことを保証し得る。フルクトース残余は、次式を使用して評価することができる：
フルクトース残余＝（（１８０／３４２×（ＦＳ＋ＬＥ）＋ＦＲ）／（１８０／３４２×ＩＳ））×１００％。
上の２つの式では、ＩＳは、［初期のスクロース］であり、ＦＳは、［最終のスクロース］であり、ＬＥは、［ロイクロース］であり、ＧＬは、［グルコース］であり、ＳＯは、［可溶性オリゴマー］（グルコ−オリゴ糖）であり、ＦＲは、［フルクトース］である（二重括弧で示された前述の各基質／生成物の濃度は、グラム／Ｌ単位であり、例えばＨＰＬＣにより測定した際の濃度である）。
【００３７】
用語「体積パーセント（ｐｅｒｃｅｎｔ  ｂｙ  ｖｏｌｕｍｅ）」、「体積パーセント（ｖｏｌｕｍｅ  ｐｅｒｃｅｎｔ）」、「ｖｏｌ％」、「ｖ／ｖ％」などは、本明細書では同じ意味で用いられる。溶液中の溶質の体積パーセントは、次式を用いて求めることができる：［（溶質の体積）／（溶液の体積）］×１００％。
【００３８】
用語「重量パーセント」、「重量パーセンテージ（ｗｔ％）」、「重量−重量パーセンテージ（％ｗ／ｗ）」などは、本明細書では同じ意味で用いられる。重量パーセントは、組成物、混合物又は溶液中に含まれる質量を基準とした材料のパーセンテージを指す。
【００３９】
本明細書で用いられる用語「水性液体」、「水性流体」などは、水又は水溶液を指し得る。本明細書の「水溶液」は、１つ以上の溶解塩を含むことができ、ここで、いくつかの実施形態では、最大全塩濃度は、約３．５ｗｔ％であり得る。本明細書の水性液体は、典型的には、液体中の唯一の溶媒として水を含むが、水性液体は、任意選択的に、水に混和する１つ以上の他の溶媒（例えば、極性有機溶媒）を含むことができる。したがって、水溶液は、少なくとも約１０ｗｔ％の水を有する溶媒を含むことができる。
【００４０】
本明細書の「水性組成物」は、例えば、少なくとも約１０ｗｔ％の水を含む液体成分を有する。水性組成物の例としては、例えば、混合物、溶液、分散液（例えば、コロイド分散液）、懸濁液及びエマルションが挙げられる。特定の実施形態における水性組成物は、本明細書に開示のグラフトコポリマーの不溶性形態を含むことができ、この場合、グラフトコポリマーの不溶性であるとすると、水性組成物は、任意選択的に、液体中固体組成物と特徴付けることができる。
【００４１】
本明細書で使用する場合、用語「コロイド分散液」は、分散相及び分散媒体を有する不均一系を、すなわち微視的に分散した不溶性粒子が別の物質（例えば、水又は水性溶液などの水性組成物）全体に懸濁していることを指す。本明細書のコロイド分散液の例は、親水コロイドである。親水コロイドなどのコロイド分散液の粒子の全て又は一部は、本明細書のグラフトコポリマーを含み得る。用語「分散剤（ｄｉｓｐｅｒｓａｎｔ）」及び「分散剤（ｄｉｓｐｅｒｓｉｏｎ  ａｇｅｎｔ）」は、分散液の形成及び／又は安定化を促進する材料を意味するため、本明細書では同じ意味で用いられる。
【００４２】
「不溶性」、「水不溶性（ａｑｕｅｏｕｓ−ｉｎｓｏｌｕｂｌｅ）」、「水不溶性（ｗａｔｅｒ−ｉｎｓｏｌｕｂｌｅ）」（及び同様の用語）（例えば、８以上のＤＰを有するα−１，３−グルカン）であるグルカン（又はそのエーテル誘導体若しくはエステル誘導体）は、水又は他の水性条件に溶解しない（又は認め得るほどに溶解しない（ここで、水性条件は、任意選択的に、４〜９のｐＨ（例えば、ｐＨ６〜８）及び／又は約１〜８５℃（例えば、２０〜２５℃）の温度を有することを更に特徴とする）。対照的に、「可溶性」、「水溶性（ａｑｕｅｏｕｓ−ｓｏｌｕｂｌｅ）」、「水溶性（ｗａｔｅｒ−ｓｏｌｕｂｌｅ）」などである本明細書の特定のオリゴ糖などのグルカン（例えば、８未満のＤＰを有するα−１，３−グルカン）（又はそのエーテル誘導体若しくはエステル誘導体）は、これらの条件下でかなり溶解する。
【００４３】
本明細書の用語「フィルム」、「シート」及び同様の用語は、薄い視覚的に連続した材料を指す。フィルムは、材料の上に薄層又はコーティングとして構成され得るか又は単独であり得る（例えば、材料表面に付着されない；自立型）。本明細書で使用される「コーティング」は、材料表面を覆う薄層を指す。
【００４４】
本明細書のフィルム又はコーティングを特徴付けるために使用される「一様な厚さ」という用語は、（ｉ）フィルム／コーティングの全領域の少なくとも２０％であり、且つ（ｉｉ）厚さの標準偏差が例えば約５０ｎｍ未満である、連続した領域を指し得る。
【００４５】
本明細書の用語「破断点伸び」、「伸び」、「破断伸度」及び同様の用語は、応力下でのフィルムの長さの変化率を指し、フィルムに応力が加わってからフィルムが壊れるまでが測定される。
【００４６】
本明細書で使用される用語「粘度」は、流動を引き起こす傾向を示す力に（水性又は非水性の）流体が抵抗する程度の尺度を指す。本明細書において使用できる粘度の様々な単位としては、例えば、センチポアズ（ｃＰ、ｃｐｓ）及びパスカル秒（Ｐａ・ｓ）が挙げられる。１センチポアズは、１／１００ポアズであり、１ポアズは、０．１００ｋｇ・ｍ−１・ｓ−１に等しい。
【００４７】
用語「家庭用ケア製品」及び同様の用語は、典型的には、家財の処理、清掃、手入れ及び／又は調整に関連する製品、商品及びサービスを指す。前述のものとしては、例えば、そうしたケアに用途を有する化学薬品、組成物、製品又はそれらの組み合わせが挙げられる。
【００４８】
用語「織物」、「布地」及び「布」などは、天然及び／又は化学繊維の網状組織を有する織布材料を指すために本明細書では同じ意味で用いられる。そのような繊維は、例えば、撚り糸又は編み糸の形態であり得る。
【００４９】
「織物ケア組成物」及び同様の用語は、何らかの方法で織物を処理するために好適な任意の組成物を指す。そのような組成物の例としては、洗濯用洗剤及び織物柔軟剤が挙げられ、これらは、洗濯ケア組成物の例である。
【００５０】
用語「重質洗剤」、「万能洗剤」などは、本明細書では、任意の温度で白物及び／又は色物の布地を普通に洗濯するのに有用な洗剤を指す同義語として使用される。用語「軟質洗剤」、「微細織物洗剤」などは、本明細書では、例えばビスコース、ウール、シルク、マイクロファイバー又は特別なケアを必要とする他の織物などの繊細な織物のケアのために有用を指す同義語として使用される。「特別なケア」には、例えば、過剰の水、軽い撹拌を用い、且つ／又は漂白剤を使用しないという条件が含まれ得る。
【００５１】
本明細書の「洗剤組成物」は、典型的には少なくとも１つの界面活性剤（洗剤化合物）及び／又は１つのビルダーを含む。本明細書の「界面活性剤」は、物質が溶解した液体の表面張力を低下させる傾向を有する物質を指す。界面活性剤は、例えば、洗剤、湿潤剤、乳化剤、起泡剤及び／又は分散剤として機能し得る。
【００５２】
用語「パーソナルケア製品」及び同様の用語は、典型的には、ヒトのトリートメント、浄化、洗浄、ケア又はコンディショニングに関連する製品、商品及びサービスを指す。前述のものとしては、例えば、そうしたケアに用途を有する化学薬品、組成物、製品又はそれらの組み合わせが挙げられる。
【００５３】
本明細書の「口腔ケア組成物」は、歯（ｄｅｎｔａｌ）表面（歯（ｔｅｅｔｈ）表面）及び／又は歯肉表面など、口腔内の軟質又は硬質の表面を処理するのに好適な任意の組成物である。
【００５４】
「エーテル」（例えば、グラフトコポリマーエーテル誘導体）に関して本明細書で使用される用語は、米国特許出願公開第２０１４／１７９９１３号明細書、同第２０１６／０３０４６２９号明細書、同第２０１６／０３１１９３５号明細書、同第２０１５／０２３９９９５号明細書、同第２０１８／０２３０２４１号明細書及び／又は同第２０１８／０２３７８１６号明細書（これらは、参照により本明細書に組み込まれる）のように定義されている。
【００５５】
「エステル」（例えば、グラフトコエステル誘導体）に関して本明細書で使用される用語は、米国特許出願公開第２０１４／０１８７７６７号明細書及び／若しくは同第２０１８／０１５５４５５号明細書並びに／又は国際公開第２０１８／０９８０６５号パンフレット（これらは、参照により本明細書に組み込まれる）のように定義されている。
【００５６】
本明細書で使用する用語「置換度」（ＤｏＳ）は、本明細書のグラフトコポリマーエーテル誘導体又はエステル誘導体の各モノマー単位（グルコース）中の（エーテル結合による有機基又はエステル結合によるアシル基で）置換されるヒドロキシル基の平均数を指す。
【００５７】
ポリペプチドアミノ酸配列に関して本明細書で用いられるような用語「配列同一性」、「同一性」などは、米国特許出願公開第２０１７／０００２３３６号明細書（参照により本明細書に組み込まれる）において定義及び決定されるとおりである。
【００５８】
本明細書には、様々なポリペプチドアミノ酸配列及びポリヌクレオチド配列が特定の実施形態の特徴として開示されている。本明細書に開示した配列と少なくとも約７０〜８５％、８５〜９０％又は９０％〜９５％同一であるこれらの配列のバリアントを使用又は参照することができる。代わりに、バリアントアミノ酸配列又はポリヌクレオチド配列は、本明細書に開示した配列と少なくとも７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の同一性を有し得る。バリアントアミノ酸配列又はポリヌクレオチド配列は、開示した配列と同一の機能／活性又は開示した配列の少なくとも約８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％若しくは９９％の機能／活性を有する。メチオニンで始まらない、本明細書に開示した任意のポリペプチドアミノ酸配列は、典型的には、アミノ酸配列のＮ末端に少なくとも開始メチオニンを更に含み得る。対照的に、メチオニンで始まる、本明細書に開示した任意のポリペプチドアミノ酸配列は、このようなメチオニン残基を任意選択的に欠失し得る。
【００５９】
用語「〜と整列する」、「〜に対応する」などは、本明細書において同じ意味で用いられ得る。本明細書のいくつかの実施形態は、配列番号６２の少なくとも１つの特定のアミノ酸残基に対応する位置で少なくとも１つのアミノ酸置換を含むグルコシルトランスフェラーゼに関する。（１）クエリ配列が対象配列と整列し得る場合（例えば、この場合、アラインメントは、クエリ配列及び対象配列［又は対象配列の部分配列］が少なくとも約３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％又は９０％同一であることを示す）、及び（２）クエリアミノ酸位置が（１）のアラインメントにおいて対象アミノ酸位置と一直線に整列する（一直線に一列に並ぶ）場合、グルコシルトランスフェラーゼのアミノ酸位置又はその部分配列は、（例えば、触媒ドメイン又は触媒ドメインに加えてグルカン結合ドメイン）（このようなアミノ酸位置又は配列を「クエリ」位置又は配列と呼ぶことができる）、配列番号６２の特定のアミノ酸残基（そのようなアミノ酸位置又は配列を「対象」位置又は配列と呼ぶことができる）に対応するように特徴付けることができる。一般に、開示された本明細書に記載される任意のアラインメントアルゴリズム、ツール及び／又はソフトウェア（例えば、ＢＬＡＳＴＰ、ＣｌｕｓｔａｌＷ、ＣｌｕｓｔａｌＶ、Ｃｌｕｓｔａｌ−Ｏｍｅｇａ、ＥＭＢＯＳＳ）を用いて、対象配列（配列番号６２又は配列番号６２の部分配列）とクエリアミノ酸配列とを整列させて同一性パーセントを決定することができる。まさに更なる例として、Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  Ｏｐｅｎ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ  Ｓｕｉｔｅ（ＥＭＢＯＳＳ［例えば、バージョン５．０．０以降］，Ｒｉｃｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｒｅｎｄｓ  Ｇｅｎｅｔ．１６：２７６−２７７，２０００）のＮｅｅｄｌｅプログラムにおいて実行されるようなニードルマン−ヴンシュアルゴリズム（Ｎｅｅｄｌｅｍａｎ  ａｎｄ  Ｗｕｎｓｃｈ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．４８：４４３−４５３，１９７０）を使用して、クエリ配列を本明細書の対象配列と整列させることができる。このようなＥＭＢＯＳＳアラインメントのパラメータは、例えば、ギャップオープンペナルティ１０、ギャップ伸長ペナルティ０．５、ＥＢＬＯＳＵＭ６２（ＢＬＯＳＵＭ６２のＥＭＢＯＳＳバージョン）置換マトリックスを含み得る。
【００６０】
本明細書の配列番号６２の特定のアミノ酸置換残基のナンバリングは、配列番号６２の全長アミノ酸配列に関する。配列番号６２の最初のアミノ酸（すなわち１位、Ｍｅｔ−１）は、シグナルペプチドの開始点である。別段の開示がなされていなければ、本明細書の置換は、配列番号６２の全長アミノ酸配列に関する。
【００６１】
本明細書の「非天然グルコシルトランスフェラーゼ」（「変異体」、「バリアント」、「改変された」及び同様の用語は、このようなグルコシルトランスフェラーゼを記載するために同様に用いられる）は、配列番号６２の特定のアミノ酸残基に対応する位置で少なくとも１つのアミノ酸置換を有する。このような少なくとも１つのアミノ酸置換は、典型的には、非天然グルコシルトランスフェラーゼの天然対応物（親）において同じ位置で一般に（自然に）存在するアミノ酸残基に代わるものである（すなわち配列番号６２が位置についての基準として使用されるが、本明細書のアミノ酸置換は、非天然グルコシルトランスフェラーゼの天然対応物に関する）（別の方法として、非天然グルコシルトランスフェラーゼの配列を配列番号６２と整列させる場合、特定の位置での置換が存在するかどうかを決定することは、それ自体、配列番号６２におけるそれぞれのアミノ酸残基に依存せず、むしろ非天然グルコシルトランスフェラーゼの天然対応物内の対象位置に存在するアミノ酸に依存する）。天然対応物のグルコシルトランスフェラーゼにおいて関連した位置で一般に存在するアミノ酸は、アラインメントがなされる配列番号６２の特定のアミノ酸残基と同じである（又は保存されている）ことが多い（しかし、常にではない）。非天然グルコシルトランスフェラーゼは、任意選択的に、その天然対応物配列に対して他のアミノ酸変化（変異、欠失及び／又は挿入）を有し得る。
【００６２】
本明細書の置換／アラインメントを説明することは、有益であり得る。配列番号１２（ＧＴＦ０５４４）は、ストレプトコッカス・ソブリナス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｓｏｂｒｉｎｕｓ）のグルコシルトランスフェラーゼのトランケート型である。配列番号１２のＬｅｕ−１９３は、配列番号６２のＬｅｕ−３７３に対応することに留意されたい（アラインメントは示さず）。例えば、配列番号１２が１９３位で変異されて、Ｌｅｕ残基を異なる残基（例えば、Ｇｌｎ）で置換する場合、配列番号１２の１９３位で変異したバージョンは、配列番号６２のＬｅｕ−３７３に対応する位置でアミノ酸置換を有する非天然グルコシルトランスフェラーゼに相当すると言うことができる。
【００６３】
用語「単離された」は、天然に存在しない形態又は環境にある物質（又はプロセス）を意味する。単離された物質の非限定的な例としては、本明細書のグラフトコポリマーなどの天然に存在しない任意の物質（並びにこれらの調製に使用される酵素反応及び他のプロセス）が挙げられる。本明細書に開示される実施形態は、合成物／人工物（人間の介入／関与以外には製造できない）であり、且つ／又は天然に存在しない特性を有すると考えられる。
【００６４】
本明細書で使用される「増加した」という用語は、増加した量又は活性が比較される量又は活性より少なくとも約１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１１％、１２％、１３％、１４％、１５％、１６％、１７％、１８％、１９％、２０％、５０％、１００％又は２００％多い量又は活性を指すことができる。用語「増加した」、「上昇した」、「高められた」、「より多い」、「向上した」などは、本明細書では同じ意味で用いられる。
【００６５】
α−１，３−グルカンの新たな形態は、様々な用途でこの材料の経済的価値及び性能特性を向上させるように所望される。グラフトコポリマーの形態でα−１，３−グルカンを含む組成物が、現在、このニーズに対処するために開示されている。
【００６６】
本開示の特定の実施形態は、グラフトコポリマー又はそのエーテル誘導体若しくはエステル誘導体を含む組成物であって、前記グラフトコポリマーは、
（ｉ）約１％〜２５％のα−１，２分枝で変性されたデキストランを含む主鎖と、
（ｉｉ）少なくとも約５０％のα−１，３グリコシド結合を含む１つ以上のα−１，３−グルカン側鎖と
を含む、組成物に関する。
【００６７】
本明細書のグラフトコポリマーの主鎖を形成するデキストランは、約１００％のα−１，６−グリコシド結合（すなわち完全に直鎖のデキストラン主鎖）又は例えば約若しくは少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％若しくは９９．５％のα−１，６−グリコシド結合（すなわち実質的に直鎖のデキストラン主鎖）を含み得る。α−１，６結合プロファイルのそのような割合は、デキストラン（主鎖及び存在する場合には分枝部の組み合わせ）の全ての結合の総計を考慮に入れる。いくつかの態様では、実質的に直鎖のデキストラン主鎖は、（α−１，２分枝で変性する前に存在する場合に）５％、４％、３％、２％、１％、０．５％又はそれより少ない分枝を含み得る。存在する場合、デキストラン主鎖分枝は、典型的には短く、長さにおいて１つ（ペンダント）〜３つのグルコースモノマーであり、デキストラン主鎖のグルコースモノマー全ての約１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％又は１％未満を占める。前述の全てのデキストラン主鎖結合情報は、α−１，２分枝で変性する前のデキストラン主鎖に関する。
【００６８】
特定の実施形態におけるグラフトコポリマーの主鎖は、本開示のデキストランから完全になり得る。しかし、いくつかの態様では、主鎖は、他の要素を含み得る。例えば、グラフトコポリマー主鎖は、デキストラン主鎖の非還元側鎖から生じるα−１，３−グルカンを含むことができ、主鎖（その非還元末端で）により、グラフトコポリマーの合成中にα−１，３−グルカン合成をプライムするのに役立つ。
【００６９】
いくつかの態様では、デキストラン主鎖は、α−１，２分枝変性前に約又は少なくとも約３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３５、４０、４５、５０、８５、９０、９５、１００、１０５、１１０、１５０、２００、２５０、３００、４００又は５００のＤＰ又はＤＰｗを有し得る。このＤＰ又はＤＰｗは、任意選択的に、これらの値の任意の２つの間の範囲として表すことができる。あくまで例として、ＤＰ又はＤＰｗは、約８〜２０、８〜３０、８〜１００又は８〜５００、３〜４、３〜５、３〜６、３〜７、３〜８、４〜５、４〜６、４〜７、４〜８、５〜６、５〜７、５〜８、６〜７、６〜８又は７〜８であり得る。あくまで他の例として、このＤＰ又はＤＰｗは、９０〜１２０、９５〜１２０、１００〜１２０、１０５〜１２０、１１０〜１２０、１１５〜１２０、９０〜１１５、９５〜１１５、１００〜１１５、１０５〜１１５、１１０〜１１５、９０〜１１０、９５〜１１０、１００〜１１０、１０５〜１１０、９０〜１０５、９５〜１０５、１００〜１０５、９０〜１００、９５〜１００、９０〜９５、８５〜９５又は８５〜９０であり得る。なお、いくつかの態様では、デキストラン主鎖は、α−１，２分枝変性前に、例えば米国特許出願公開第２０１６／０１２２４４５号明細書、同第２０１７／０２１８０９３号明細書若しくは同第２０１８／０２８２３８５号明細書又は国際公開第２０１７／０７９５９５号パンフレット、同第２０１５／１８３７１４号パンフレット若しくは同第２０１７／０９１５３３号パンフレット（これらは、全て参照により本明細書に組み込まれる）に開示されるようないずれかであり得る。
【００７０】
本明細書のデキストランは、α−１，２−分枝で変性される前に例えば酵素的に生成され得る。特定の実施形態では、デキストランは、デキストランスクラーゼ及び／又は国際公開第２０１５／１８３７１４号パンフレット若しくは同第２０１７／０９１５３３号パンフレット又は米国特許出願公開第２０１８／０２８２３８５号明細書（これらは、全て参照により本明細書に組み込まれる）に開示されているような方法論を用いて合成され得る。必要に応じて、これらの文献でＧＴＦ８１１７（本明細書の配列番号６６）、ＧＴＦ６８３１（本明細書の配列番号６７又は６８）又はＧＴＦ５６０４（本明細書の配列番号６９）と同定されたデキストランスクラーゼを使用することができる（これらの特定のデキストランスクラーゼのいずれかと少なくとも約９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％同一であるアミノ酸配列を含む任意のデキストランスクラーゼ）。このように酵素的に生成されたデキストランは、直鎖（すなわち１００％のα−１，６結合）であり、水溶性である。
【００７１】
本明細書のグラフトコポリマーの主鎖を形成するデキストランは、約１％〜２５％のα−１，２分枝で変性されている。これらのα−１，２分枝は、α−１，２分枝で変性される前のデキストランに存在し得る任意の分枝と異なる。α−１，２分枝のための基質として直鎖デキストランを用いる実施形態では、グラフトコポリマーの主鎖は、約１％〜２５％のα−１，２分枝（又は本明細書で開示した任意のα−１，２分枝パーセンテージ）を含むように単に特徴付けることができる。したがって、このような主鎖は、α−１，６及び−１，２結合（α−１，２，６）（すなわちα−１，２−結合したペンダントグルコースで装飾されたα−１，６−結合した主鎖）のみを含み、他の結合型ペンダントを含まない。
【００７２】
本明細書のグラフトコポリマーの主鎖のα−１，２分枝の割合は、例えば、約若しくは少なくとも約１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１１％、１２％、１３％、１４％、１５％、１６％、１７％、１８％、１９％、２０％、２１％、２２％、２３％、２４％若しくは２５％又は約それら未満であり得る。このα−１，２−分枝プロファイルは、任意選択的に、これらの値のいずれか２つの間の範囲を有するとして表すことができる。あくまで例として、α−１，２分枝のパーセンテージは、約２〜２５％、２〜２０％、２〜１５％、２〜１０％、５〜２５％、５〜２０％、５〜１５％、５〜１０％、７〜１３％、８〜１２％、９〜１１％、１０〜２５％、１０〜２０％又は１０〜１５％であり得る。
【００７３】
本明細書の主鎖の１つ以上のα−１，２分枝は、典型的には、長さにおいて単一のグルコースモノマーである（すなわち、それらは、ペンダントグルコースである）。α−１，２分枝の全て又は少なくとも８０％若しくは９０％は、例えば、長さにおいて単一のグルコースモノマーである。
【００７４】
特定の態様では、約１％〜２５％のα−１，２分枝で変性されたグラフトコポリマーの主鎖のＤＰ又はＤＰｗは、約１０〜５００である。このＤＰ又はＤＰｗは、例えば、約又は少なくとも約１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、８５、９０、９５、１００、１０５、１１０、１１５、１２０、１２５、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、２００、３００、４００又は５００であり得、任意選択的にこれらの値のいずれか２つの間の範囲として表され得る。あくまで例として、本明細書の主鎖のＤＰｗは、約８５〜１３０、８５〜１２５、８５〜１２０、８５〜１１５、８５〜１１０、８５〜１０５、８５〜１００、８５〜９５、８５〜９０、９０〜１３０、９０〜１２５、９０〜１２０、９０〜１１５、９０〜１１０、９０〜１０５、９０〜１００、９０〜９５、９５〜１３０、９５〜１２５、９５〜１２０、９５〜１１５、９５〜１１０、９５〜１０５、９５〜１００、１００〜１３０、１００〜１２５、１００〜１２０、１００〜１１５、１００〜１１０、１００〜１０５、１０５〜１３０、１０５〜１２５、１０５〜１２０、１０５〜１１５、１０５〜１１０、１１０〜１３０、１１０〜１２５、１１０〜１２０、１１０〜１１５、１１５〜１３０、１１５〜１２５、１１５〜１２０、１２０〜１３０又は１２０〜１２５であり得る。
【００７５】
本明細書のα−１，２分枝のデキストランへの修飾／付加は、典型的には、酵素的になされる。特定の実施形態では、α−１，２分枝は、α−１，２分枝酵素及び／又は国際公開第２０１５／１８３７１４号パンフレット若しくは同第２０１７／０９１５３３号パンフレット又は米国特許出願公開第２０１８／０２８２３８５号明細書（これらは、全て参照により本明細書に組み込まれる）に記載されている方法論を用いて、デキストランから合成することができる。必要に応じて、これらの文献でＧＴＦＪ１８Ｔ１（本明細書の配列番号７０）又はＧＴＦ９９０５（本明細書の配列番号７１）と同定された分枝酵素を使用することができる（又はこれらの特定の分枝酵素のいずれかと少なくとも約９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％同一であるアミノ酸配列を含む任意のα−１，２分枝酵素）。このような酵素的に生成されたα−１，２−分枝状デキストランは、水溶性である。
【００７６】
本開示のグラフトコポリマーは、少なくとも約５０％のα−１，３グリコシド結合を含む１つ以上のα−１，３−グルカン側鎖を含む。これらの側鎖は、典型的には、本明細書のα−１，２−分枝状デキストランを、α−１，３−グルカンを合成できるグルコシルトランスフェラーゼと反応させることにより生じる。明確にする目的上、これらの側鎖は、それ自体、デキストランの分枝と見なされるべきではない。
【００７７】
特定の態様におけるα−１，３−グルカン側鎖は、約又は少なくとも約５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、９９．５％又は１００％のα−１，３グリコシド結合を含み得る。したがって、いくつかの態様では、α−１，３−グルカン側鎖は、約５０％、４０％、３０％、２０％、１５％、１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、１％、０．５％又は０％未満のα−１，３ではないグリコシド結合を有する。典型的には、α−１，３でないグリコシド結合は、ほとんど又は全部がα−１，６である。側鎖内に存在するα−１，３結合のパーセンテージが高くなるほど、側鎖内で分枝点の一部であり得る特定の結合の発生率が低くなるため、側鎖が直鎖状である確率が高くなることが理解されるであろう。特定の実施形態では、α−１，３−グルカン側鎖は、分枝点を有していないか、又は側鎖内のグリコシド結合の割合として約５％、４％、３％、２％若しくは１％未満の分枝点を有する。少なくとも約５０％のα−１，３結合を含むα−１，３−グルカン側鎖を生成するのに有用であると考えられるグルコシルトランスフェラーゼは、米国特許第７００００００号明細書及び同第８８７１４７４号明細書並びに国際公開第２０１７／０７９５９５号パンフレット（これらの全ては、参照により本明細書に組み込まれる）で開示されている。主鎖が５０％のα−１，３グリコシド結合を含む態様では、そのような主鎖は、典型的には、アルテルナン（交互のα−１，３及びα−１，６結合）を含まない。
【００７８】
特定の態様における１つ以上のα−１，３−グルカン側鎖のＤＰは、個別に、約又は少なくとも約１００、２００、３００、４００、５００、６００、７００、８００、９００、１０００、１１００又は１２００であり得る。ＤＰは、任意選択的に、これらの値の任意の２つの間の範囲として表すことができる。あくまで例として、１つ以上のα−１，３−グルカン側鎖のＤＰは、個別に、約４００〜１２００、５００〜１２００、６００〜１２００、７００〜１２００、４００〜１１００、５００〜１１００、６００〜１１００、７００〜１１００、４００〜１０００、５００〜１０００、６００〜１０００、７００〜１０００、４００〜９００、５００〜９００、６００〜９００又は７００〜９００であり得る。更なる例として、１つ以上のα−１，３−グルカン側鎖のＤＰは、個別に、（ｉ）約３００、２９０、２８０、２７０、２６０、２５０、２４０、２３０、２２０、２１０、２００、１９０、１８０、１７０、１６０、１５０、１４０、１３０、１２０、１１０、１００、９５、９０、８５、８０、７５、７０、６５、６０、５５、５０、４５、４０、３５、３０、２９、２８、２７、２６、２５、２４、２３、２２、２１、２０、１９、１８、１７、１６、１５、１４、１３、１２若しくは１１又は約それら未満、或いは（ｉｉ）１１〜２５、１２〜２５、１１〜２２、１２〜２２、１１〜２０、１２〜２０、２０〜３００、２０〜２００、２０〜１５０、２０〜１００、２０〜７５、３０〜３００、３０〜２００、３０〜１５０、３０〜１００、３０〜７５、５０〜３００、５０〜２００、５０〜１５０、５０〜１００、５０〜７５、７５〜３００、７５〜２００、７５〜１５０、７５〜１００、１００〜３００、１００〜２００、１００〜１５０、１５０〜３００、１５０〜２００又は２００〜３００の範囲であり得る。グラフトコポリマーの複数のα−１，３−グルカン側鎖のＤＰｗは、必要に応じて、前述のＤＰ値のいずれかを指し、これは、側鎖を個別基準で特徴付け、任意選択的にコポリマーの全ての側鎖のＤＰｗと見なすことができる。グラフトコポリマーが複数のα−１，３−グルカン側鎖を有するいくつかの態様では、側鎖の個別のＤＰ値は、互いに類似している（例えば、ＤＰ値は、約２．５％、５％、１０％、１５％又は２０％未満で変化する）。
【００７９】
いくつかの実施形態では、α−１，３−グルカン側鎖は、少なくとも約３０％のα−１，３結合並びに側鎖中のα−１，３及びα−１，６結合の両方の合計を１００％にするパーセンテージのα−１，６結合を含む。例えば、α−１，３及びα−１，６結合のパーセンテージは、それぞれ約３０〜４０％及び６０〜７０％であり得る。少なくとも約３０％のα−１，３結合を含むα−１，３−グルカン側鎖を生成するのに有用であると考えられるグルコシルトランスフェラーゼは、米国特許出願公開第２０１５／０２３２８１９号明細書（参照により本明細書に組み込まれる）に開示されている。
【００８０】
いくつかの態様における１つ以上のα−１，３−グルカン側鎖は、（Ａ）α−１，２分枝が、グルコシルトランスフェラーゼ酵素によるα−１，３−グルカン合成を場合によりプライムすることができる非還元末端を提供するため、α−１，２分枝の伸長部であり、及び／又は（Ｂ）α−１，３−グルカン分枝側鎖合成が、グルコシルトランスフェラーゼ酵素が最初にデキストラン主鎖からα−１，３分枝を作り、続いて酵素によるこの分枝の伸長により生じる場合、デキストラン主鎖に直接α−１，３結合を介して結合されると考えられる。いくつかの態様では、α−１，３−グルカン側鎖は、全て（Ａ）若しくは（Ｂ）の結合タイプを介して又は（Ａ）及び（Ｂ）結合タイプの両方の組み合わせを介してデキストラン主鎖に結合している。後者に関して、両方の結合タイプの組み合わせは、約５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％又は９５％の結合タイプ（Ａ）を含み得、残余の他の結合タイプは、タイプ（Ｂ）である。
【００８１】
本明細書のグラフトコポリマーのα−１，３−グルカン側鎖の数は、例えば、約若しくは少なくとも約１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９若しくは２０又はこれらの値のいずれか２つの間の範囲であり得る。あくまで例として、α−１，３−グルカン側鎖の数は、１〜２０、１〜１５、１〜１０、１〜５、１〜６、２〜５、２〜６、３〜５、３〜６、４〜５、４〜６又は５〜６であり得る。いくつかの態様では、α−１，３−グルカン側鎖の数は、グラフトコポリマーのデキストラン部分のグルコースモノマーの数の最大約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％又は９０％であり得る。
【００８２】
本開示のグラフトコポリマーは、典型的には、水不溶性である。そのような不溶性は、本明細書のグルコシルトランスフェラーゼ反応の条件（例えば、ｐＨ４〜８、下記を参照されたい）などの非苛性水性条件であり得る。いくつかの態様では、グラフトコポリマーは、最大約５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０又は１２０℃の温度において水性条件で不溶性である。しかし、グラフトコポリマーは、いくつかの態様では、水溶性であり得る。水溶液などの本明細書の水性組成物は、例えば、約又は少なくとも約１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０又は１００ｗｔ％の水を有する溶媒を含み得る。
【００８３】
本明細書のグラフトコポリマーのＤＰｗは、例えば、本明細書の任意のα−１，２−分枝状デキストラン主鎖のＤＰｗプラス本明細書の任意のα−１，３−グルカン側鎖のＤＰｗの合計であり得る（鎖の数を考慮する）。あくまで例として、本明細書のグラフトコポリマーのＤＰｗは、約１０００〜３０００、１５００〜３０００、２０００〜３０００、２５００〜３０００、１０００〜２５００、１５００〜２５００、２０００〜２５００、１０００〜２０００、１５００〜２０００、１０００〜１５００、２００〜１４００、２００〜１２００、２００〜１０００、２００〜８００、２００〜６００、２００〜４００、４００〜１４００、４００〜１２００、４００〜１０００、４００〜８００、４００〜６００、６００〜１４００、６００〜１２００、６００〜１０００又は６００〜８００であり得る。
【００８４】
本明細書のグラフトコポリマーは、例えば、約又は少なくとも約１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１１％又は１２％（例えば、重量による）（又はこれらの値のいずれか２つの間の範囲）のα−１，２−分枝状デキストラン主鎖を含み得る。あくまで例として、グラフトコポリマーは、例えば、約１〜１２％、１〜１０％、１〜８％、１〜６％、２〜１２％、２〜１０％、２〜８％、２〜６％、４〜１２％、４〜１０％、４〜８％若しくは４〜６％（例えば、重量による）又は以下の実施例で報告されている割合（±０．５％）のα−１，２−分枝状デキストラン主鎖を含み得る（「％プライマー」）。
【００８５】
本開示のグラフトコポリマーは、例えば、以下に開示される酵素反応プロセスのいずれかの生成物であり得る。
【００８６】
本開示の特定の実施形態は、本明細書に記載のグラフトコポリマーを生成（調製）する方法に関する。このようなグラフトポリマー生成方法は、（ａ）少なくとも（ｉ）水、（ｉｉ）スクロース、（ｉｉｉ）約１％〜２５％のα−１，２分枝で変性されたデキストラン、及び（ｉｖ）少なくとも約５０％のα−１，３−グリコシド結合を含むα−１，３−グルカンを合成するグルコシルトランスフェラーゼ酵素を接触させ、それにより本開示のグラフトコポリマーを生成することと、（ｂ）任意選択的に、工程（ａ）で生成されたグラフトコポリマーを単離することとを含み得る。工程（ａ）は、任意選択的に、少なくとも水、スクロース、約１％〜２５％のα−１，２分枝で変性されたデキストラン及び少なくとも約５０％のα−１，３グリコシド結合を有するα−１，３−グルカンを合成するグルコシルトランスフェラーゼ酵素を含む反応を実施する（又は反応組成物を調製／準備する）ことと特徴付けることができる。本明細書のグラフトポリマー生成方法は、任意選択的に、工程（ａ）前にα−１，２分枝でデキストランを変性して（すなわちα−１，２分枝をデキストランに付加して）、（工程［ａ］で使用するための）約１％〜２５％のα−１，２分枝を有するデキストランを提供することを更に含む。本明細書のグラフトポリマー（例えば、α−１，２−分枝状デキストラン、α−１，３−グルカン、グラフトコポリマー）生成方法の前述の特徴のいずれかは、上記又は以下の実施例などの本明細書の他の箇所で記載されるとおりであり得る。例えば、使用されるデキストランは、実質的に直鎖のデキストラン又は完全に直鎖のデキストラン（約１〜２５％のα−１，２分枝で変性する前）であり得る。また、必要に応じて、本明細書のグラフトコポリマー生成方法は、α−１，３−グルカンを生成する方法と特徴付けることができる。
【００８７】
本明細書のグラフトコポリマーのα−１，３−グルカン側鎖を生成するためのグルコシルトランスフェラーゼ酵素は、細菌などの任意の微生物源由来であり得る。細菌グルコシルトランスフェラーゼ酵素の例は、ストレプトコッカス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）種、ロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）種又はラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）種に由来する酵素である。ストレプトコッカス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）種の例としては、Ｓ．サリバリウス（Ｓ．ｓａｌｉｖａｒｉｕｓ）、Ｓ．ソブリナス（Ｓ．ｓｏｂｒｉｎｕｓ）、Ｓ．デンチロウセッティ（Ｓ．ｄｅｎｔｉｒｏｕｓｅｔｔｉ）、Ｓ．ダウネイ（Ｓ．ｄｏｗｎｅｉ）、Ｓ．ミュータンス（Ｓ．ｍｕｔａｎｓ）、Ｓ．オラリス（Ｓ．ｏｒａｌｉｓ）、Ｓ．ガロリティクス（Ｓ．ｇａｌｌｏｌｙｔｉｃｕｓ）及びＳ．サングイニス（Ｓ．ｓａｎｇｕｉｎｉｓ）が挙げられる。ロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）種の例としては、Ｌ．メセンテロイデス（Ｌ．ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ）、Ｌ．アメリビオスム（Ｌ．ａｍｅｌｉｂｉｏｓｕｍ）、Ｌ．アルゲンチナム（Ｌ．ａｒｇｅｎｔｉｎｕｍ）、Ｌ．カルノスム（Ｌ．ｃａｒｎｏｓｕｍ）、Ｌ．シトレウム（Ｌ．ｃｉｔｒｅｕｍ）、Ｌ．クレモリス（Ｌ．ｃｒｅｍｏｒｉｓ）、Ｌ．デキストラニカム（Ｌ．ｄｅｘｔｒａｎｉｃｕｍ）及びＬ．フルクトサム（Ｌ．ｆｒｕｃｔｏｓｕｍ）が挙げられる。ラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）種の例としては、Ｌ．アシドフィルス（Ｌ．ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ）、Ｌ．デルブリュキイ（Ｌ．ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ）、Ｌ．ヘルベチクス（Ｌ．ｈｅｌｖｅｔｉｃｕｓ）、Ｌ．サリバリウス（Ｌ．ｓａｌｉｖａｒｉｕｓ）、Ｌ．カゼイ（Ｌ．ｃａｓｅｉ）、Ｌ．クルバツス（Ｌ．ｃｕｒｖａｔｕｓ）、Ｌ．プランタルム（ｐｌａｎｔａｒｕｍ）、Ｌ．サケイ（ｓａｋｅｉ）、Ｌ．ブレビス（Ｌ．ｂｒｅｖｉｓ）、Ｌ．ブフネリ（Ｌ．ｂｕｃｈｎｅｒｉ）、Ｌ．フェルメンタム（Ｌ．ｆｅｒｍｅｎｔｕｍ）及びＬ．ロイテリ（Ｌ．ｒｅｕｔｅｒｉ）が挙げられる。
【００８８】
本明細書のグラフトコポリマーのα−１，３−グルカン側鎖を生成するためのグルコシルトランスフェラーゼ酵素は、いくつかの態様では、米国特許出願公開第２０１４／００８７４３１号明細書、同第２０１７／０１６６９３８号明細書、同第２０１７／０００２３３５号明細書及び同第２０１８／００７２９９８号明細書（米国特許出願公開第１５／７０２，８９３号明細書に対応）並びに米国特許出願公開第１６／１２７，２８８号明細書（これらの全ては、参照により本明細書に組み込まれる）のいずれかで開示されるようなアミノ酸配列を含み得る。いくつかの態様では、本明細書のグルコシルトランスフェラーゼ酵素は、配列番号２、４、６、８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２６、２８、３０、３４若しくは５９（表１）と１００％同一であるか、又は少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９８．５％、９９％若しくは９９．５％同一であるアミノ酸配列を含み得、グルコシルトランスフェラーゼ活性を有し得る。配列番号２、４、８、１０、１４、２０、２６、２８、３０又は３４を有するグルコシルトランスフェラーゼ酵素は、少なくとも約９０％（約１００％）のα−１，３結合を含むα−１，３−グルカン側鎖を合成し得ることが留意される。
【００８９】
特定の態様におけるグルコシルトランスフェラーゼ酵素のアミノ酸配列は、その酵素が所定量のスクロース基質から、より多くの生成物（α−１，３グルカン及びフルクトース）と、より少ない副生成物（例えば、グルコース、オリゴ糖（ロイクロースなど））とを生成するように改変されている。例えば、本発明のグルコシルトランスフェラーゼの触媒ドメインの１、２、３、４つ又はそれを超えるアミノ酸残基を修飾／置換して、より多くの生成物（不溶性α−グルカン及びフルクトース）を生成する酵素を得ることができる。好適な改変されたグルコシルトランスフェラーゼ酵素の例は、以下の実施例（表Ａ及びＢ）で開示されている。改変されたグルコシルトランスフェラーゼ酵素は、例えば、少なくとも４０％のα−１，３−グルカン収率に付随する、表Ａ及び／又はＢ（又は米国特許出願公開第２０１８／００７２９９８号明細書（参照により本明細書に組み込まれ、米国特許出願公開第１５／７０２，８９３号明細書に対応する）の表３）中のものに対応する１つ以上のアミノ酸置換を含み得る（配列番号６２の位置ナンバリングに対応するこのような少なくとも１つの置換の位置ナンバリング）。例えば、表Ａ又はＢに示したような一連のアミノ酸改変が使用され得る。
【００９０】
特定の態様におけるグルコシルトランスフェラーゼ酵素のアミノ酸配列は、酵素が、その対応する親グルコシルトランスフェラーゼにより生成されるα−１，３−グルカンの分子量よりも小さい分子量（ＤＰｗ）を有するα−１，３−グルカンを生成するように改変されている。好適な改変されたグルコシルトランスフェラーゼ酵素の例は、以下の実施例（表Ｃ及びＤ）で開示されている。改変されたグルコシルトランスフェラーゼ酵素は、例えば、親酵素により生成されるα−１，３−グルカンの分子量より少なくとも５％小さいα−１，３−グルカン生成物分子量に付随する、表Ｃ及び／又はＤ中のものに対応する１つ以上のアミノ酸置換を含み得る（配列番号６２の位置ナンバリングに対応するこのような少なくとも１つの置換の位置ナンバリング）。例えば、表Ｄに示したような一連のアミノ酸改変が使用され得る。
【００９１】
特定の態様におけるグルコシルトランスフェラーゼ酵素のアミノ酸配列は、酵素が、その対応する親グルコシルトランスフェラーゼにより生成されるα−１，３−グルカンの分子量よりも大きい分子量（ＤＰｗ）を有するα−１，３−グルカンを生成するように改変されている。好適な改変されたグルコシルトランスフェラーゼ酵素の例は、以下の実施例（表Ｅ及びＦ）で開示されている。改変されたグルコシルトランスフェラーゼ酵素は、例えば、親酵素により生成されるα−１，３−グルカンの分子量より少なくとも５％大きいα−１，３−グルカン生成物分子量に付随する、表Ｅ及び／又はＦ中のものに対応する１つ以上のアミノ酸置換を含み得る（配列番号６２の位置ナンバリングに対応するこのような少なくとも１つの置換の位置ナンバリング）。例えば、米国特許出願公開第１６／１２７，２８８号明細書の表５に示したような一連のアミノ酸改変が使用され得る。
【００９２】
いくつかの態様では、改変されたグルコシルトランスフェラーゼは、（ｉ）少なくとも１つのアミノ酸置換又は一連のアミノ酸置換（収率又は分子量に関して上記で記載されたように）を含み、且つ（ｉｉ）配列番号４のアミノ酸残基５５〜９６０、配列番号６５の残基５４〜９５７、配列番号３０の残基５５〜９６０、配列番号２８の残基５５〜９６０若しくは配列番号２０の残基５５〜９６０と少なくとも約９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％若しくは９９．５％同一であるグルコシルトランスフェラーゼ触媒ドメインを含むか又はそれからなる。これらの配列の各々は、それぞれの参照配列のおよその触媒ドメインであり、少なくとも約５０％（例えば、＞９０％又は＞９５％）のα−１，３結合を含むα−１，３−グルカンを生成し、任意選択的に少なくとも１００のＤＰｗを更に有することができると考えられている。いくつかの態様では、改変されたグルコシルトランスフェラーゼは、（ｉ）少なくとも１つのアミノ酸置換又は一連のアミノ酸置換（上記のとおり）を含み、且つ（ｉｉ）配列番号６２若しくは配列番号４（その開始メチオニンを有しない）若しくは配列番号４の５５〜９６０位（およその触媒ドメイン）などのその部分配列と少なくとも約４０％、４１％、４２％、４３％、４４％、４５％、４６％、４７％、４８％、４９％、５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、５６％、５７％、５８％、５９％、６０％、６１％、６２％、６３％、６４％、６５％、６６％、６７％、６９％、７０％、７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は９９．５％同一であるアミノ酸配列を含むか又はそれからなる。
【００９３】
本明細書の反応組成物の温度は、必要に応じて制御される場合があり、例えば約５〜５０℃、２０〜４０℃、３０〜４０℃、２０〜３０℃、２０〜２５℃、２０℃、２５℃、３０℃、３５℃又は４０℃であり得る。
【００９４】
本明細書の反応組成物中のスクロースの初期濃度は、約若しくは少なくとも約１０、２０、３０、４０、４５、５０、５５、６０、８０、９０、９５、１００、１０５、１１０、１２５、１５０、２００、３００、４００、５００若しくは６００ｇ／Ｌ又はこれらの値のいずれか２つの間の範囲であり得る。あくまで例として、初期スクロース濃度は、例えば、約１０〜１５０、４０〜６０、４５〜５５、９０〜１１０又は９５〜１０５ｇ／Ｌであり得る。「スクロースの初期濃度」は、全ての反応構成成分（例えば、少なくとも水、スクロース、約１％〜３５％のα−１，２分枝を有するデキストラン、グルコシルトランスフェラーゼ酵素）が添加された／合わせられた直後の反応組成物におけるスクロース濃度を指す。
【００９５】
反応組成物中の本開示のα−１，２−分枝状デキストランの初期濃度は、約若しくは少なくとも約０．１、０．５、１、２、２．５、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９若しくは２０ｇ／Ｌ又はこれらの値のいずれか２つの間の範囲であり得る。あくまで例として、α−１，２−分枝状デキストランの初期濃度は、約０．５〜１２、１〜１２、２〜１２、４〜１２、０．５〜１０、１〜１０、２〜１０、４〜１０、０．５〜８、１〜８、２〜８、４〜８、０．５〜６、１〜６、２〜６又は４〜６ｇ／Ｌであり得る。
【００９６】
いくつかの態様では、α−１，２−分枝状デキストランのスクロースに対する重量による比は、約１：１００〜約１：５又は約１：５０〜約１：５である。このような比は、初期設定時の反応組成物に関するものである。
【００９７】
特定の実施形態における反応組成物のｐＨは、約４．０〜９．０、４．０〜８．５、４．０〜８．０、５．０〜８．０、５．５〜７．５又は５．５〜６．５であり得る。いくつかの態様では、ｐＨは、約４．０、４．５、５．０、５．５、６．０、６．５、７．０、７．５又は８．０であり得る。ｐＨは、リン酸塩、トリス、クエン酸塩又はそれらの組み合わせを含むが、それらに限定されない、好適なバッファの添加又は組み込みによって調整又は制御することができる。本明細書の反応組成物中のバッファ濃度は、例えば、約０．１〜３００ｍＭ、０．１〜１００ｍＭ、１０〜１００ｍＭ、５ｍＭ、１０ｍＭ、２０ｍＭ又は５０ｍＭであり得る。
【００９８】
反応組成物は、本明細書に開示される反応条件の１つ以上を適用するのに好適な任意の容器（例えば、不活性容器／コンテナ）内に入れることができる。いくつかの態様における不活性容器は、ステンレス鋼製、プラスチック製又はガラス製（又はこれらの構成要素の２つ以上を含む）であり得、且つ特定の反応物を入れるのに好適なサイズであり得る。例えば、不活性容器の体積／容量（及び／又は本明細書の反応組成物の体積）は、約又は少なくとも約１、１０、５０、１００、５００、１０００、２５００、５０００、１００００、１２５００、１５０００又は２００００リットルであり得る。不活性容器は、任意選択的に撹拌装置を備えることができる。例えば、前述の特徴のいずれかは、本明細書の単離反応を特徴付けるために使用され得る。
【００９９】
本明細書の反応組成物は、例えば、α−１，３−グルカン側鎖を生成する１つ、２つ又はそれを超える異なるグルコシルトランスフェラーゼ酵素を含有し得る。いくつかの実施形態では、１つ又２つのグルコシルトランスフェラーゼ酵素のみが反応組成物に含まれる。本明細書の反応組成物は、細胞を含まないことができ、典型的には細胞を含まない（例えば、全細胞が存在しない）。
【０１００】
特定の態様における反応の完了は、視覚的に（例えば、不溶性グラフトコポリマー生成物がもはや蓄積しない）、且つ／又は溶液中に残ったスクロース（残留スクロース）の量を測定することによって決定でき、この場合、少なくとも約９０％、９５％又は９９％のスクロース消費率が反応完了を指示し得る。いくつかの態様では、反応は、そのスクロース含量が約２〜５ｇ／Ｌ以下になった場合に完了したと見なし得る。開示したプロセスの反応は、例えば、約１時間〜約又は少なくとも約２、４、６、８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２２、２４、３６、４８、６０、７２、９６、１２０、１４４又は１６８時間実施され得る。反応は、任意選択的に、少なくとも約６５℃で少なくとも約３０〜６０分間加熱することによって終了させ、且つ／又は別の方法でグルコシルトランスフェラーゼ活性を停止させるために処理することができる。
【０１０１】
本明細書のグラフトコポリマー生成におけるα−１，３−グルカン側鎖を合成するのに好適な他の条件及び／又は成分の例は、米国特許出願公開第２０１４／００８７４３１号明細書、同第２０１７／０１６６９３８号明細書及び同第２０１７／０００２３３５号明細書（これらは、参照により本明細書に組み込まれる）に開示されている。
【０１０２】
本明細書の反応組成物中で生成したグラフトコポリマーは、任意選択的に、単離することができる。特定の実施形態では、グラフトコポリマーの単離は、少なくとも遠心分離、濾過、分留、クロマト分離、透析、蒸発又は希釈の工程を実施することを含み得る。不溶性グラフトコポリマーの単離は、少なくともグラフトコポリマーのケーキを調製する工程を実施することを含み得る。ケーキの調製は、少なくとも遠心分離（ケーキは、ペレット状のグラフトコポリマーである）及び／又は濾過（ケーキは、濾過されたグラフトコポリマーである）の工程を実施することを含み得る。単離は、任意選択的に、遠心分離にかけられ且つ／又は濾過されたグラフトコポリマーを、１回、２回又はそれを超えて水又は他の水性液体で洗浄することを更に含み得る。洗浄体積は、任意選択的に、例えばグラフトコポリマーを生成するのに使用される反応組成物の体積の少なくとも約１０〜１００％であり得る。洗浄は、必要に応じて、置換洗浄又はリスラリー洗浄などの様々な方式で行うことができる。いくつかの態様では、得られたケーキの水性部分は、（検出可能な）溶解糖類を有さないか、又は約０．１〜１．５、０．１〜１．２５、０．１〜１．０、０．１〜．７５、０．１〜０．５、０．２〜０．６、０．３〜０．５、０．２、０．３、０．４、０．５若しくは０．６ｗｔ％の溶解糖類を有する。このような溶解糖類は、例えば、スクロース、フルクトース、ロイクロース及び／又は可溶性グルコ−オリゴ糖を含み得る。本明細書の単離は、任意選択的に、グラフトコポリマーを乾燥させること及び／又はグラフトコポリマーの分散液を調製することを更に含み得る。
【０１０３】
いくつかの態様におけるグラフトコポリマーの分散液の調製は、不溶性グラフトコポリマー（上記）のウェットケーキを調製することと、ウェットケーキを水又は水溶液中に分散させることとを含み得る。本明細書のウェットケーキを分散させるのに好適な手段としては、例えば、分散機、ソニケータ（例えば、ウルトラソニケータ）、ホモミキサー、ホモジナイザー（例えば、回転式又はピストン、ロータステータ）、マイクロ流動化装置、遊星型ミキサー、コロイドミル、ジェットミル、ボルテックスなどの好適な分散器具及び／又は国際公開第２０１６／１２６６８５号パンフレット若しくは同第２０１６／０３０２３４号パンフレット、米国特許第５７６７１７６号明細書、同第６１３９８７５号明細書、同第８７２２０９２号明細書若しくは米国特許出願公開第２０１７／００５５５４０号明細書、同第２０１８／００２１２３８号明細書若しくは同第２０１７／０２８１７８０号明細書（これらの全ては、参照により本明細書に組み込まれる）で記載されるような任意の方法論を用いることを含む。
【０１０４】
乾燥形態で提供される、本明細書の単離されたグラフトコポリマー（又はその誘導体）は、例えば、２．０、１．５、１．０、０．５、０．２５、０．１０、０．０５又は０．０１ｗｔ％以下の水を含み得る。いくつかの態様では、グラフトコポリマー生成物（又はその誘導体）は、少なくとも１グラム（例えば、少なくとも約２．５、５、１０、２５、５０、１００、２５０、５００、７５０、１０００、２５００、５０００、７５００、１００００、２５０００、５００００又は１０００００ｇ）の量で提供され、このような量は、例えば、乾燥量であり得る。
【０１０５】
いくつかの態様では、単離された（任意選択的に「精製された」と特徴付けられた）グラフトコポリマー（又はその誘導体）は、少なくとも約５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９８．５％、９９％、９９．５％、９９．８％又は９９．９％のｗｔ％（乾燥重量基準）で組成物中に存在し得る。このような単離されたグラフトコポリマー（又はその誘導体）は、例えば、生成物／用途において成分／構成成分として使用され得る。
【０１０６】
いくつかの態様では、本明細書の反応組成物のグラフトコポリマー生成物中に含まれるようなα−１，３−グルカン（すなわち本明細書のα−１，２−分枝状デキストランでプライムしたα−１，３−グルカン）の収率は、デキストランプライマーがない反応で合成されるα−１，３−グルカンの収率よりも約又は少なくとも約３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、３〜１０％、３〜９％、３〜８％、４〜１０％、４〜９％又は４〜８％高くなり得る。α−１，２分枝がないデキストランプライマーを含む反応組成物におけるα−１，３−グルカンの収率は、以下の実施例において、デキストランプライマーがない反応で合成されるα−１，３−グルカンの収率よりも最大約２．５％高いことが観察された（例えば、表５及び１１を考慮する）ため、これは、注目に値する。典型的には、このような収率の比較は、他の同一又は類似の反応条件（例えば、初期スクロース濃度、温度、ｐＨ及び／又は反応時間）下で任意の好適な測定方法（例えば、ＨＰＬＣ又はＮＩＲ分光法）を使用してなされ得る。いくつかの態様では、このような収率の比較は、約５〜１５％、８〜１２％若しくは９〜１０％のα−１，２分枝を有するデキストランでプライムされたα−１，３−グルカンに関して及び／又は８０〜１２０、９０〜１２０若しくは１００〜１１０ｇ／Ｌの初期スクロース濃度を有する反応に関してなされ得る。いくつかの態様におけるα−１，３−グルカンの収率は、反応のグルコシル構成成分を基準として評価され得る。
【０１０７】
本開示の組成物は、例えば、フィルム又はコーティングであり得る。フィルム又はコーティングは、いくつかの態様では、例えば約３、２、１、０．５又は０．１ｗｔ％未満の水を含む乾燥したフィルム又はコーティングであり得る。本明細書のフィルム又はコーティングに含まれるグラフトコポリマー（又はグラフトコポリマーエステルなどのその誘導体）の量は、例えば、約又は少なくとも約１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、９９．５又は９９．９ｗｔ％であり得る。
【０１０８】
本明細書のフィルム又はコーティングは、例えば、約又は少なくとも約０．５、０．６、０．７、０．８、０．９、１．０、１．１、１．２、１．３、１．４、１．５、０．５〜１．５、０．８〜１．５、１．０〜１．５、０．５〜１．４、０．８〜１．４又は１．０〜１．４ミル（０．００１インチ）の厚みを有し得る。いくつかの態様では、そのような厚みは、一様であり、これは、（ｉ）フィルム／コーティングの全領域の少なくとも２０％、３０％、４０％又は５０％であり、且つ（ｉｉ）約０．０６、０．０５又は０．０４ミル未満の厚みの標準偏差を有する、連続した領域を有することにより特徴付けることができる。本明細書のフィルム又はコーティングは、いくつかの態様では、薄いものとして特徴付けることができる。本明細書のフィルムは、典型的には、キャストフィルムである。
【０１０９】
本明細書のフィルム又はコーティングは、所望の種々の透明度を示し得る。例えば、フィルム／コーティングは、高い透明度（例えば、高い光透過性及び／又は低ヘイズ）であり得る。本発明で使用する場合、光透過性は、少なくとも約１０〜９９％の光透過率又は少なくとも約５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％若しくは９９％の光透過性を与えるフィルム又はコーティングを指し得る。高透過性は、任意選択的に、少なくとも約９０％の光透過率を有するフィルム／コーティングを指し得る。本明細書のフィルム／コーティングの透過性は、例えば、ＡＳＴＭ  Ｄ１７４６試験（２００９，Ｓｔａｎｄａｒｄ  Ｔｅｓｔ  Ｍｅｔｈｏｄ  ｆｏｒ  Ｔｒａｎｓｐａｒｅｎｃｙ  ｏｆ  Ｐｌａｓｔｉｃ  Ｓｈｅｅｔｉｎｇ，ＡＳＴＭ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，Ｗｅｓｔ  Ｃｏｎｓｈｏｈｏｃｋｅｎ，ＰＡ）に従って測定することができ、これは、参照により本明細書に組み込まれる。
【０１１０】
本明細書のフィルム又はコーティングは、任意選択的に、グリセロール、プロピレングリコール、エチレングリコール及び／又はポリエチレングリコールなどの可塑剤を更に含み得る。特定の実施形態では、他のフィルム構成成分（本明細書のグラフトコポリマーに加えて）は、米国特許出願公開第２０１１／０１５１２２４号明細書若しくは同第２０１５／０１９１５５０号明細書又は米国特許第９６８８０３５号明細書若しくは同第３３４５２００号明細書（それらの全ては、参照により本明細書に組み込まれる）で開示されているとおりであり得る。
【０１１１】
特定の態様におけるフィルムは、約又は少なくとも約２０％、２２％、２４％、２６％、２８％、３０％、３２％、３４％、３６％、２０〜３６％、２４〜３６％又は２８〜３６％の破断点伸び率を示し得る。特定の態様におけるフィルムは、約又は少なくとも約２５０、３００、３５０、４００、４５０、５００、５５０、６００、２５０〜６００、３００〜６００、３５０〜６００又は４００〜６００ｉｎ−ｌｂ．／ｉｎ３の強靱性を示し得る。特定の態様におけるフィルムは、約又は少なくとも約０．１５、０．１６、０．１７、０．１８、０．１９、０．２０、０．２２、０．２４、０．２６、０．２８、０．３０又は０．３２ｉｎ−ｌｂ．／ｉｎのＷＴＭ（「最大仕事」、破損する前にフィルムに適用された最大仕事量）を示し得る。いくつかの態様では、本明細書のフィルムは、表１４（以下）で試験されたグラフトコポリマー含有フィルム及び／又は米国特許第９６８８０３５号明細書若しくは同第５７５０２０４号明細書（これらは、参照により本明細書に組み込まれる）で開示されるようなフィルムの１つ以上の特徴（値の±５〜１０％の値）を有し得る。前述のフィルムの特徴のいずれか又は任意の他の適用可能なフィルムの特徴は、任意選択的に、実施例７に開示される方法論に従って及び／又は米国特許第９６８８０３５号明細書若しくは米国特許出願公開第２０１５／０１９１５５０号明細書（これらは、参照により本明細書に組み込まれる）に開示されているように評価され得る。
【０１１２】
本開示は、フィルムを生成する方法であって、（ａ）本明細書の水不溶性グラフトコポリマー又はそのエーテル誘導体若しくはエステル誘導体を溶媒中に溶解させて溶液を提供することと、（ｂ）溶液を表面と接触させることと、（ｃ）溶液を凝固させてフィルムを形成することとを含む方法にも関する。本方法は、例えば、以下の実施例７に記載される方法論に従って及び／又は米国特許出願公開第２０１５／０１９１５５０号明細書（参照により本明細書に組み込まれる）に開示されているように実施され得る。いくつかの態様では、フィルム生成方法は、除去が、例えば、乾燥させること及び／又は凝固させることによりなされ得る、溶媒除去工程（ｃ）を含み得る。
【０１１３】
本明細書のフィルムの調製について、グラフトコポリマーの溶媒中溶液を調製する。溶媒は、例えば、水性ＮａＯＨ（例えば、４〜１５ｗｔ％又は１０ｗｔ％のＮａＯＨ）、水性ＫＯＨ（例えば、４〜１５ｗｔ％のＫＯＨ）、水性水酸化テトラエチルアンモニウム（例えば、２０ｗｔ％）又はＤＭＳＯ（ジメチルスルホキシド）とＬｉＣｌ（３〜５ｗｔ％のＬｉＣｌ）の混合物を含み得る。溶液は、例えば、約又は少なくとも約３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、８〜１３、９〜１３、１０〜１３、８〜１２、９〜１２又は１０〜１２ｗｔ％のグラフトコポリマーを含み得る。いくつかの態様では、溶液は、１５、１４又は１３ｗｔ％未満のグラフトコポリマーを含む。グラフトコポリマーを溶媒中に溶解させるいくつかの態様では、グラフトコポリマーの水中スラリーを最初に作製し、続いて濃縮水性塩基を添加し得る。
【０１１４】
本明細書のグラフトコポリマーを含む溶液（フィルム調製用）は、必要に応じて、溶解性添加剤又はレオロジー変性剤などの添加剤を更に含み得る。添加剤の例としては、尿素及びグリセロールが挙げられる。これらの添加剤のいずれかの量は、例えば、溶液中のグラフトコポリマーのｗｔ％まで可能である。他の添加剤は、任意選択的に、グラフトコポリマー溶液、例えば他のポリマーなどの中に混合され得る（例えば、ポリマーブレンドが所望される場合）。
【０１１５】
グラフトコポリマー溶液を本開示のフィルム生成プロセス中に表面／基材と接触させる。フィルムキャスティング又は押し出しについて、グラフトコポリマー溶液の粘度は、典型的には、流動性があるほど十分に低いが、破れることなく連続したフィルムを形成するのに十分なほど高い。いくつかの態様では、１５ｗｔ％未満（例えば、３〜１５ｗｔ％）のグラフトコポリマーの溶液濃度は、本明細書のフィルムのキャスティングに好適であるが、より高いグラフトコポリマー濃度（例えば、１５〜２３ｗｔ％）は、フィルムの押し出しにより好適であり得る。フィルムは、グラフトコポリマー溶液を、例えばロッドコーター又はドローダウンコーターを使用して表面／基材上にキャストすることにより製造することができる。本明細書の好適な表面／基材は、ガラス（任意選択的に界面活性剤でコーティングされる）又はポリエステルフィルムであり得る。いくつかの態様では、フィルムはスロットダイを通して押し出すことにより製造することができる。
【０１１６】
表面／基材との接触に続いて、グラフトコポリマー溶液から溶媒が除去される（これによりフィルムが形成される）。いくつかの態様では、グラフトコポリマー溶液を乾燥及び／又は凝固させることにより溶媒を除去することができる。フィルムは、グラフトコポリマー溶液を（例えば、表面にキャストされた状態で）凝固媒体に直接浸漬することにより（それによって溶媒を除去する）、又は最初に溶液を乾燥工程にかけて溶媒の一部を除去し、その後、凝固して任意の残りの溶媒を除去することにより形成することができる。溶媒除去は、室温（約２０〜２５℃）又は例えば２０〜８０℃の任意の好適な温度で実施することができる。凝固媒体は、グラフトコポリマーのための非溶媒、例えば水、アルコール（例えば、メタノール）、酸（例えば、硫酸又は酢酸）又はこれらの２つ以上の混合物を含み得る。１つ以上の塩も必要に応じて含まれ得る。いくつかの態様では、凝固媒体は、水並びに約１０〜２０ｗｔ％（例えば、約１４ｗｔ％）の硫酸及び約２０〜３０ｗｔ％（例えば、約２５ｗｔ％）の硫酸ナトリウムを含み得る。
【０１１７】
フィルムは、任意選択的に、凝固に続いて洗浄され得る。水又はアルコール（例えば、メタノール）は、例えば、洗浄のために使用され得る。必要に応じて、洗浄は、中性ｐＨ（例えば、ｐＨ６〜８又は約７）（洗浄の）が達成されるまでなされ得る。洗浄又は後洗浄工程は、任意選択的に、フィルムを１〜１０ｗｔ％（例えば、約５ｗｔ％）の可塑剤（例えば、グリセロール又はエチレングリコール）溶液（例えば、水系又はアルコール系）に好適な期間（例えば、少なくとも２、３又は４分間）で浸すことを更に含み得る。本明細書のフィルムは、典型的には、約７０〜８５℃（例えば、約８０℃）の温度で好適な期間（例えば、１０〜２０分間又は約１５分間）さらすことなどにより乾燥させる。
【０１１８】
本開示のいくつかの態様における組成物は、本明細書のグラフトコポリマーのエーテル誘導体を含み得る（すなわち、グラフトコポリマーは、１つ以上の異なる有機基にエーテル結合するように誘導体化され得る）。１つ以上のエーテル化有機基を有するグラフトコポリマーの置換度（ＤｏＳ）は、例えば、約０．００１〜約３．０であり得る。いくつかの態様におけるＤｏＳは、約又は少なくとも約又は最大約０．００１、０．００２５、０．００５、０．０１、０．０２５、０．０５、０．０７５、０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９、１．０、１．１、１．２、１．３、１．４、１．５、１．６、１．７、１．８、１．９、２．０、２．１、２．２、２．３、２．４、２．５、２．６、２．７、２．８、２．９又は３．０であり得る（ＤｏＳは、任意選択的に、これらの値のいずれか２つの間の範囲として表され得る）。エーテル基は、アニオン性、非荷電又はカチオン性であり得る。エーテル基の電荷は、グラフトコポリマーエーテル誘導体が本明細書の水性組成物中にある場合に存在するままであり得、更に水性組成物のｐＨ及び任意の塩が存在するかどうかを考慮に入れる。
【０１１９】
本明細書のグラフトコポリマーにエーテル化した有機基は、例えば、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニル又はデシル基などのアルキル基を含み得る。いくつかの態様では、グラフトコポリマーにエーテル化した有機基は、アルキル基の１つ以上の炭素上に置換基がある置換アルキル基であり得る。置換であり得るは、１つ以上のヒドロキシル、アルデヒド、ケトン及び／又はカルボキシル基。例えば、置換アルキル基は、ヒドロキシアルキル基、ジヒドロキシアルキル基又はカルボキシアルキル基であり得る。好適なヒドロキシアルキル基の例としては、ヒドロキシメチル、ヒドロキシエチル、ヒドロキシプロピル、ヒドロキシブチル及びヒドロキシペンチル基が挙げられる。他の例としては、ジヒドロキシメチル、ジヒドロキシエチル、ジヒドロキシプロピル、ジヒドロキシブチル及びジヒドロキシペンチル基などのジヒドロキシアルキル基（ジオール）が挙げられる。好適なカルボキシアルキル基の例としては、カルボキシメチル（−ＣＨ２ＣＯＯＨ）、カルボキシエチル、カルボキシプロピル、カルボシブチル及びカルボキシペンチル基が挙げられる。いくつかの態様における有機基は、ベンジル基などのアリール基を含み得る。
【０１２０】
本明細書のグラフトコポリマーにエーテル化した有機基は、いくつかの態様では、正荷電（カチオン性）有機基であり得る。正荷電基は、例えば、米国特許出願公開第２０１６／０３１１９３５号明細書（参照により本明細書に組み込まれる）に開示されるもののいずれかであり得る。正荷電基は、例えば、置換アンモニウム基を含み得る。置換アンモニウム基の例は、第一級、第二級、第三級及び第四級アンモニウム基である。アンモニウム基は、例えば、１つ、２つ又は３つのアルキル基（例えば、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシル）で置換可能である。置換アンモニウム基の１つの基は、グラフトコポリマーにエーテル結合した１つの炭素又は炭素の鎖を含む。そのような炭素又は炭素鎖は、例えば、−ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ−、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−又は−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−であり得る。これに関連して、炭素又は炭素鎖は、任意選択的に、酸素原子を有する少なくとも１つの置換基（例えば、アルコール基）及び／又はアルキル基（例えば、メチル、エチル、プロピル、ブチル）を有し得る。いくつかの態様における１つ以上の正荷電有機基は、トリメチルアンモニウムヒドロキシプロピル基（Ｒ２、Ｒ３及びＲ４がメチル基である場合、構造Ｉ）であり得る。
【化１】
2021507955.tif 000005
【０１２１】
特定の実施形態におけるグラフトコポリマーエーテルは、１種類の有機基を含有し得る。そのような化合物の非限定的な例は、カルボキシメチルグラフトコポリマー又はベンジルグラフトコポリマーである。代わりに、グラフトコポリマーエーテル化合物は、２つ以上の異なる種類の有機基（例えば、カルボキシメチル基及びベンジル基の両方）を含有し得る。いくつかの態様では、グラフトコポリマーエーテルは、少なくとも１つのノニオン性有機基及び少なくとも１つのアニオン基をエーテル基として含み得る。いくつかの態様では、グラフトコポリマーエーテルは、少なくとも１つのノニオン性有機基及び少なくとも１つの正荷電有機基をエーテル基として含み得る。したがって、本明細書のグラフトコポリマーエーテルは、任意選択的に、両親媒性であり得る。
【０１２２】
本開示の任意のグラフトコポリマーは、エーテル化合物を調製するのに好適である。エーテル誘導体化多糖類のための任意の好適なプロセスは、米国特許第２９６１４３９号明細書、同第２３４４１７９号明細書、同第２２０３７０３号明細書、同第２２０３７０４号明細書、同第２３８０８７９号明細書及び同第２９７４１３４、米国特許出願公開第２０１４／１７９９１３号明細書、同第２０１６／０３０４６２９号明細書、同第２０１６／０３１１９３５号明細書、同第２０１５／０２３２７８５号明細書、同第２０１５／０２３９９９５号明細書、同第２０１８／０２３０２４１号明細書及び同第２０１８／０２３７８１６号明細書（これらの全ては、参照により本明細書に組み込まれる）などに開示されるように使用され得る。
【０１２３】
本開示のいくつかの態様における組成物は、本明細書のグラフトコポリマーのエステル誘導体を含み得る（すなわち、グラフトコポリマーは、１つ以上の異なるアシル基にエステル結合するように誘導体化され得る）。１つ以上のアシル基を有するグラフトコポリマーのＤｏＳは、例えば、約０．００１〜約３．０であり得る。いくつかの態様におけるＤｏＳは、約又は少なくとも約又は最大約０．００１、０．００２５、０．００５、０．０１、０．０２５、０．０５、０．０７５、０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９、１．０、１．１、１．２、１．３、１．４、１．５、１．６、１．７、１．８、１．９、２．０、２．１、２．２、２．３、２．４、２．５、２．６、２．７、２．８、２．９又は３．０であり得る（ＤｏＳは、任意選択的に、これらの値のいずれか２つの間の範囲として表され得る）。
【０１２４】
アシル基は、例えば、米国特許出願公開第２０１４／０１８７７６７号明細書及び同第２０１８／０１５５４５５号明細書並びに国際公開第２０１８／０９８０６５号パンフレット（これらは、参照により本明細書に組み込まれる）に開示されるようなもののいずれかであり得る。本明細書のアシル基の例としては、例えば、メタノイル（ホルミル）、エタノイル（アセチル）、プロパノイル（プロピオニル）、ブタノイル（ブチリル）、ペンタノイル（バレリル）、ヘキサノイル（カプロイル）、ヘプタノイル（エナンチル）、オクタノイル（カプリリル）、ノナノイル（ペラルゴニル）、デカノイル（カプリル）、ウンデカノイル、ドデカノイル（ラウロイル）、トリデカノイル、テトラデカノイル（ミリスチル）、ペンタデカノイル、ヘキサデカノイル（パルミチル）、ヘプタデカノイル、オクタデカノイル（ステアリル）、ノナデカノイル、エイコサノイル（アラキジル）、ウンエイコサノイル、ドコサノイル（ベヘニル）、トリコサノイル、テトラコサノイル（リグノセリル）、ペンタコサノイル及びヘキサコサノイル（セロチル）基が挙げられる。本明細書のアシル基の更なる例としては、分枝状アシル基（例えば、２−メチルプロパノイル、２−メチルブタノイル、２，２−ジメチルプロパノイル、３−メチルブタノイル、２−メチルペンタノイル、３−ジメチルペンタノイル基、４−ジメチルペンタノイル、２，２−ジメチルブタノイル、２，３−ジメチルブタノイル、３，３−ジメチルブタノイル基、２−エチルブタノイル基、２−エチルヘキサノイル）、環状アシル基（例えば、シクロプロパノイル、シクロブタノイル、シクロペンタノイル、シクロヘキサノイル、シクロヘプタノイル）及びアリールアシル基（例えば、ベンゾイル）が挙げられる。本明細書のアシル基の更なる例としては、−ＣＯ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＯＯＨ、−ＣＯ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＯＯＨ、−ＣＯ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＯＯＨ、−ＣＯ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＯＯＨ、−ＣＯ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＯＯＨ、−ＣＯ−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＯＯＨ、−ＣＯ−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ２−ＣＯＯＨ、−ＣＯ−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＯＯＨ、−ＣＯ−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＯＯＨ、−ＣＯ−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＯＯＨ、−ＣＯ−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＯＯＨ、−ＣＯ−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ２−ＣＯＯＨ、−ＣＯ−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＯＯＨ、−ＣＯ−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＯＯＨ、−ＣＯ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＯＯＨ、−ＣＯ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ２−ＣＯＯＨ、−ＣＯ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＯＯＨ、−ＣＯ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＯＯＨ、−ＣＯ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ２−ＣＯＯＨ、−ＣＯ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＯＯＨ、
【化２】
2021507955.tif 000006
及びエステル誘導体化剤として環状有機無水物を使用して形成することができる任意の他のアシル基が挙げられる。
【０１２５】
特定の実施形態におけるグラフトコポリマーエステルは、一種類のアシル基（例えば、アセチル基又はベンゾイル基）を含有し得る。代わりに、グラフトコポリマーエステル化合物は、２つ以上の異なる種類のアシル基を含有し得る。
【０１２６】
本開示の任意のグラフトコポリマーは、エステル化合物を調製するのに好適である。エステル誘導体化多糖類のための任意の好適なプロセスは、米国特許出願公開第２０１４／０１８７７６７号明細書及び同第２０１８／０１５５４５５号明細書並びに国際公開第２０１８／０９８０６５号パンフレット（これらは、参照により本明細書に組み込まれる）などに開示されるように使用され得る。
【０１２７】
本明細書のグラフトコポリマー又はそのエーテル誘導体若しくはエステル誘導体（非誘導体化及び誘導体化グラフトコポリマーは、一括して、本明細書では「グラフトコポリマー化合物」と称する）は、水性組成物（例えば、コロイド分散液、溶液）又は乾燥組成物などの組成物において、例えば約若しくは少なくとも約０．０１、０．０５、０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９、１．０、１．２、１．４、１．６、１．８、２．０、２．５、３．０、３．５、４．０、４．５、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８若しくは９９ｗｔ％又は約それら未満で存在し得る。水性組成物の液体成分は、例えば、水又は水溶液であり得る。水溶液の溶媒は、典型的には、水であるか、又は例えば約若しくは少なくとも約１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、９５若しくは９８ｗｔ％の水を含み得る。
【０１２８】
いくつかの態様における水溶液は、（検出可能な）溶解糖類を有さないか、又は約０．１〜１．５、０．１〜１．２５、０．１〜１．０、０．１〜．７５、０．１〜０．５、０．２〜０．６、０．３〜０．５、０．２、０．３、０．４、０．５若しくは０．６ｗｔ％の溶解糖類を有する。このような溶解糖類は、例えば、スクロース、フルクトース、ロイクロース及び／又は可溶性グルコ−オリゴ糖を含み得る。いくつかの態様における水溶液は、１つ以上の塩／バッファ（例えば、Ｎａ＋、Ｃｌ−、ＮａＣｌ、リン酸塩、トリス、クエン酸塩）（例えば、０．１、０．５、１．０、２．０又は３．０ｗｔ％以下）及び／又は例えば約４．０、４．５、５．０、５．５、６．０、６．５、７．０、７．５、８．０、８．５、９．０、４．０〜９．０、４．０〜８．５、４．０〜８．０、５．０〜９．０、５．０〜８．５、５．０〜８．０、６．０〜９．０、６．０〜８．５若しくは６．０〜８．０のｐＨを有し得る。
【０１２９】
本開示のグラフトコポリマー化合物を含む組成物は、いくつかの態様では、約又は少なくとも約１０、２５、５０、１００、２５０、５００、７５０、１０００、２０００、３０００、４０００、５０００、６０００、７０００、８０００、９０００、１００００、１１０００、１２０００、１３０００、１４０００、１５０００、２００００、３００００、４００００、５００００、６００００、７００００、８００００、９００００、１０００００、２５００００、５０００００又は１００００００センチポアズ（ｃＰ）の粘度を有し得る。粘度は、粘度計若しくはレオメータを使用して又は当技術分野において公知の任意の他の手段を使用して測定できる。例えば、約又は少なくとも約１０、６０、１５０、２５０、６００、８００、１０００又は１０〜１０００ｒｐｍ（１分当たりの回転）の回転剪断速度は、本明細書の組成物の粘度を測定する場合に適用され得る。粘度は、任意の好適な温度（例えば、４〜３０、２０〜３０、２０〜２５又は３〜１１０℃）及び／又は任意の好適な圧力（例えば、大気圧、約７６０トル）で測定され得る。
【０１３０】
本開示のグラフトコポリマー化合物を含む組成物は、いくつかの態様では、非水性（例えば、乾燥組成物）であり得る。そのような実施形態の例としては、粉末、顆粒、マイクロカプセル、フレーク又は粒状物質の任意の他の形態が挙げられる。他の例としては、例えば、ペレット、バー、カーネル、ビーズ、タブレット、スティック又は他の凝集体などのより大きい組成物が挙げられる。非水性又は乾燥組成物は、典型的には、その中に含まれた３、２、１、０．５又は０．１ｗｔ％未満の水を有する。
【０１３１】
本開示のグラフトコポリマー化合物を含む組成物は、いくつかの態様では、１つ以上のナトリウム塩（例えば、ＮａＣｌ、Ｎａ２ＳＯ４）などの塩を含み得る。塩の他の非限定的な例としては、（ｉ）アルミニウム、アンモニウム、バリウム、カルシウム、クロム（ＩＩ又はＩＩＩ）、銅（Ｉ又はＩＩ）、鉄（ＩＩ又はＩＩＩ）、水素、鉛（ＩＩ）、リチウム、マグネシウム、マンガン（ＩＩ又はＩＩＩ）、水銀（Ｉ又はＩＩ）、カリウム、銀、ナトリウム、ストロンチウム、スズ（ＩＩ又はＩＶ）又は亜鉛カチオンと、（ｉｉ）酢酸塩、ホウ酸塩、臭素酸塩、臭化物、炭酸塩、塩素酸塩、塩化物、亜塩素酸塩、クロム酸塩、シアナミド、シアン化物、重クロム酸塩、リン酸二水素、フェリシアン化物、フェロシアン化物、フッ化物、炭酸水素、リン酸水素、硫酸水素、硫化水素、亜硫酸水素、水素化物、水酸化物、次亜塩素酸塩、ヨウ素酸塩、ヨウ化物、硝酸塩、窒化物、亜硝酸塩、シュウ酸塩、酸化物、過塩素酸塩、過マンガン酸塩、過酸化物、リン酸塩、リン化物、亜リン酸塩、ケイ酸塩、スズ酸塩、亜スズ酸塩、硫酸塩、硫化物、亜硫酸塩、酒石酸塩又はチオシアン酸塩アニオンとを有するものが挙げられる。したがって、例えば、上記（ｉ）からのカチオン及び上記（ｉｉ）からのアニオンを有する任意の塩が組成物中に含まれ得る。塩は、本明細書の水性組成物中において、例えば約又は少なくとも約．０１、．０２５、．０５、．０７５、．１、．２５、．５、．７５、１．０、１．２５、１．５、１．７５、２．０、２．５、３．０、３．５、．０１〜３．５、．５〜３．５、．５〜２．５又は．５〜１．５ｗｔ％（そのようなｗｔ％値は、典型的には、１つ以上の塩の合計濃度を指す）のｗｔ％で存在し得る。
【０１３２】
グラフトコポリマー化合物を含む本明細書の組成物は、任意選択的に、１つ以上の活性酵素を含有し得る。好適な酵素の非限定的な例としては、プロテアーゼ、セルラーゼ、ヘミセルラーゼ、ペルオキシダーゼ、脂肪分解酵素（例えば、金属脂肪分解酵素）、キシラナーゼ、リパーゼ、ホスホリパーゼ、エステラーゼ（例えば、アリールエステラーゼ、ポリエステラーゼ）、ペルヒドロラーゼ、クチナーゼ、ペクチナーゼ、ペクチン酸リアーゼ、マンナナーゼ、ケラチナーゼ、レダクターゼ、オキシダーゼ（例えば、コリンオキシダーゼ）、フェノールオキシダーゼ、リポキシゲナーゼ、リグニナーゼ、プルラナーゼ、タンナーゼ、ペントサナーゼ、メラナーゼ、β−グルカナーゼ、アラビノシダーゼ、ヒアルロニダーゼ、コンドロイチナーゼ、ラッカーゼ、メタロプロテイナーゼ、アマドリアーゼ、グルコアミラーゼ、アラビノフラノシダーゼ、フィターゼ、イソメラーゼ、トランスフェラーゼ及びアミラーゼが挙げられる。酵素が含まれる場合、酵素は、例えば、（例えば、純粋酵素タンパク質として計算して）約０．０００１〜０．１ｗｔ％（例えば、０．０１〜０．０３ｗｔ％）の活性酵素で本明細書の組成物中に含まれ得る。織物ケア用途では、セルラーゼは、その中で織物が処理される水性組成物（例えば、洗浄液）中において、最少約０．０１〜０．１ｐｐｍの全セルラーゼタンパク質又は約０．１〜１０ｐｐｂ（例えば、１ｐｐｍ未満）の全セルラーゼタンパク質から最大約１００、２００、５００、１，０００、２，０００、３，０００、４，０００又は５，０００ｐｐｍの全セルラーゼタンパク質の濃度で存在し得る。
【０１３３】
水性組成物又は非水性組成物（上記）など、本明細書のグラフトコポリマー化合物を含む組成物は、家庭用ケア製品、パーソナルケア製品、工業製品、医薬製品又は食品、例えば米国特許出願公開第２０１８／００２２８３４号明細書、同第２０１８／０２３７８１６号明細書、同第２０１８／０２３０２４１号明細書、同第２０１８００７９８３２号明細書、同第２０１６／０３１１９３５号明細書、同第２０１６／０３０４６２９号明細書、同第２０１５／０２３２７８５号明細書、同第２０１５／０３６８５９４号明細書、同第２０１５／０３６８５９５号明細書若しくは同第２０１６／０１２２４４５又は国際公開第２０１６／１６０７３７号パンフレット、同第２０１６／１６０７３８号パンフレット、同第２０１６／１３３７３４号パンフレット若しくは同第２０１６／１６０７４０号パンフレット（これらは、参照により全て本明細書に組み込まれる）のいずれかに記載されるようなものの形態であり得る。いくつかの態様では、グラフトコポリマー化合物を含む組成物は、前述の刊行物のいずれかで開示される及び／又は本明細書に開示されるような家庭用ケア製品、パーソナルケア製品、工業製品、医薬製品又は食品の少なくとも１つの構成成分／成分を含み得る。
【０１３４】
本明細書に開示したグラフトコポリマー化合物は、パーソナルケア製品、医薬製品、家庭用品、工業用品又は食品に次の物理的特性：例えば、増粘、凍結融解安定性、潤滑性、水分の保持及び放出、質感、稠度、形状保持性、乳化特性、結合性、懸濁性、分散性、ゲル化性、鉱物硬度の低減などの１つ以上を付与するのに有用であると考えられる。製品中のグラフトコポリマー化合物の濃度又は量の例は、例えば、本明細書で提供した重量％のいずれかであり得る。
【０１３５】
本明細書のパーソナルケア製品としては、特に限定されるものではないが、例えばスキンケア組成物、化粧品組成物、抗真菌性組成物及び抗菌性組成物が挙げられる。本明細書のパーソナルケア製品は、例えば、ローション、クリーム、ペースト、鉱油、軟膏、ポマード、ジェル、リキッド、これらの組み合わせなどの形態であり得る。本明細書に開示したパーソナルケア製品は、必要に応じて、少なくとも１つの活性成分を含むことができる。活性成分は、一般に、意図した薬理学的効果を引き起こす成分であると認識されている。
【０１３６】
特定の実施形態では、スキンケア製品は、水分不足に関連する皮膚のダメージに対処するために皮膚に適用することができる。スキンケア製品は、皮膚の外観に対処するため（例えば、鱗状、ひび割れ及び／又は赤みがかった皮膚の外観を減らすため）及び／又は皮膚の触感に対処するため（例えば、皮膚の滑らかさ及び繊細さを改善しながら、皮膚の粗さ及び／又は乾燥度を減らすため）にも使用され得る。スキンケア製品は、典型的には、化粧効果を提供しながら、皮膚の病気を治療若しくは予防するため又は皮膚に保湿効果を提供するための少なくとも１つの活性成分、例えば酸化亜鉛、ワセリン、白色ワセリン、鉱油、タラ肝油、ラノリン、ジメチコン、硬質脂肪、ビタミンＡ、アラントイン、カラミン、カオリン、グリセリン又はコロイド状オートミール及びこれらの組み合わせを含み得る。スキンケア製品は、１つ以上の天然保湿要素、例えばセラミド、ヒアルロン酸、グリセリン、スクアラン、アミノ酸、コレステロール、脂肪酸、トリグリセリド、リン脂質、グリコスフィンゴ脂質、ウレア、リノール酸、グリコサミノグリカン、ムコ多糖、乳酸ナトリウム又はピロリドンカルボン酸ナトリウムを含み得る。スキンケア製品に含まれ得る他の成分としては、限定されるものではないが、グリセリド、杏仁油、キャノーラ油、スクアラン、スクアレン、ココナツ油、コーン油、ホホバ油、ホホバワックス、レシチン、オリーブ油、ベニバナ油、ゴマ油、シアバター、大豆油、甘扁桃油、ヒマワリ油、ティーツリー油、シアバター、パーム油、コレステロール、コレステロールエステル、ワックスエステル、脂肪酸及びオレンジ油が挙げられる。
【０１３７】
本明細書のパーソナルケア製品は、例えば、メーキャップ、リップスティック、マスカラ、ルージュ、ファンデーション、チーク、アイライナー、リップライナー、リップグロス、他の化粧品、サンスクリーン、サンブロック、マニキュア液、ネイルコンディショナー、バスジェル、シャワージェル、ボディソープ、洗顔料、リップバーム、スキンコンディショナー、コールドクリーム、保湿剤、ボディースプレー、石鹸、ボディスクラブ、落屑剤、収れん剤、スクラッフィングローション、脱毛剤、パーマネント液、ふけ防止製剤、制汗組成物、デオドラント、シェービング製品、プレシェーブ製品、アフターシェーブ製品、クレンジング剤、スキンジェル、リンス、歯磨き組成物、練り歯磨き又はマウスウォッシュの形態でもあり得る。パーソナルケア製品の例（例えば、クレンジング剤、石鹸、スクラブ、化粧品）は、担体又は落屑剤（例えば、ホホバビーズ［ホホバエステルビーズ］）（例えば、約１〜１０、３〜７、４〜６又は５ｗｔ％）を含む。そのような作用物質は、任意選択的に製品内に分散させることができる。
【０１３８】
いくつかの態様におけるパーソナルケア製品は、ヘアケア製品であり得る。本明細書のヘアケア製品の例としては、シャンプー、ヘアコンディショナー（リーブイン又はリンスアウト）、クリームリンス、ヘアダイ、ヘアカラー製品、ヘアシャイン製品、ヘアセラム、毛髪縮れ防止製品、毛髪枝毛修復製品、ムース、ヘアスプレー及びスタイリングジェルが挙げられる。いくつかの実施形態では、ヘアケア製品は、リキッド、ペースト、ジェル、固体又は粉末の形態であり得る。本明細書に開示したヘアケア製品は、典型的には、ヘアケア製品の配合に一般に使用される下記の成分：アニオン性界面活性剤、例えばポリオキシエチレンラウリルエーテル硫酸ナトリウム；カチオン性界面活性剤、例えば塩化ステアリルトリメチルアンモニウム及び／又は塩化ジステアリルトリメチルアンモニウム；ノニオン性界面活性剤、例えばグリセリルモノステレアレート、ソルビタンモノパルミテート及び／又はポリオキシエチレンセチルエーテル；湿潤剤、例えばプロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、グリセリン、ソルビトール、ピログルタミン酸塩、アミノ酸及び／又はトリメチルグリシン；炭化水素、例えば液体パラフィン、ワセリン、固形パラフィン、スクアラン及び／又はオレフィンオリゴマー；高級アルコール、例えばステアリルアルコール及び／又はセチルアルコール；過脂肪剤；ふけ防止剤；消毒剤；抗炎症剤；生薬；水溶性ポリマー、例えばメチルセルロース、ヒドロキシセルロース及び／又は部分脱アセチル化キチン；防腐剤、例えばパラベン；紫外線吸収剤；パール化剤；ｐＨ調整剤；香料；並びに顔料の１つ以上を含む。
【０１３９】
本明細書の医薬製品は、例えば、エマルション、リキッド、エリキシル、ジェル、懸濁剤、液剤、クリーム又は軟膏の形態であり得る。また、本明細書の医薬製品は、本明細書に開示したパーソナルケア製品のいずれかの形態、例えば抗菌又は抗真菌組成物などの形態であり得る。医薬製品は、１つ以上の薬学的に許容される担体、希釈剤及び／又は薬学的に許容される塩を更に含み得る。本明細書に開示したグラフトコポリマー化合物は、医薬及び薬剤用のカプセル、カプセル化材、錠剤コーティング及び賦形剤として使用することもできる。
【０１４０】
本明細書の家庭用及び／又は工業製品は、例えば、ドライウォールテープ接合化合物；モルタル；グラウト；セメントプラスター；スプレープラスター；セメントスタッコ；接着剤；ペースト；壁／天井結着剤；テープキャスティング、押出成形、射出成形及びセラミック用結合剤及び加工助剤；殺虫剤、除草剤及び肥料用スプレー粘着剤及び懸濁化／分散助剤；織物ケア製品、例えば織物用柔軟剤及び洗濯用洗剤；硬質表面洗浄剤；空気清浄剤；ポリマーエマルション；ゲル剤、例えば水性ゲル；界面活性剤溶液；塗料、例えば水性塗料；保護コーティング；接着剤；シーラント及びコーキング剤；インク類、例えば水性インク；金属切削液；フィルム若しくはコーティング；又は電気めっき、リン酸塩処理、亜鉛めっき及び／若しくは一般の金属洗浄作業で使用するエマルション系金属洗浄液の形態であり得る。
【０１４１】
本明細書に開示したグラフトコポリマー化合物は、例えば、パーソナルケア製品、医薬製品、家庭用製品又は工業製品中において、所望の増粘度及び／又は分散度を提供する量で含まれ得る。製品中のグラフトコポリマー化合物の濃度又は量の例は、例えば、上記に提供した重量％のいずれかであり得る。
【０１４２】
本明細書に開示した組成物は、織物ケア組成物の形態であり得る。本明細書の織物ケア組成物は、手洗い、洗濯機洗浄及び／又は他の目的、例えば織物の浸漬及び／又は前処理などの他の目的のために使用することができる。織物ケア組成物は、例えば、洗濯用洗剤；織物コンディショナー、任意の洗濯用製品、リンス用製品又は乾燥機添加製品；単位用量又はスプレーの形態を取り得る。液状の織物ケア組成物は、本明細書に開示した水性組成物の形態であり得る。他の態様では、織物ケア組成物は、乾燥形態、例えば顆粒状洗剤又は乾燥機添加用織物柔軟剤シートなどの乾燥形態であり得る。本明細書の織物ケア組成物の他の非限定的な例としては、顆粒状又は粉末状の万能又は重質洗浄剤；液体、ジェル又はペースト形態の万能又は重質洗浄剤；液体又はドライの細（例えば、繊細）繊維用洗剤；例えば漂白用添加物、「ステイン・スティック」又は前処理剤などのクリーニング補助剤；基質積載製品、例えばドライワイプ又はウェットワイプ、パッド又はスポンジ；スプレー剤及びミスト剤が挙げられる。
【０１４３】
本明細書の洗剤組成物は、例えば、粉末、顆粒、ペースト、バー、単位用量又は液体などの任意の有用な形態であり得る。液体洗剤は、典型的には、最大約７０ｗｔ％の水及び０ｗｔ％〜約３０ｗｔ％の有機溶媒を含有する水性であり得る。液体洗剤は、水を約３０ｗｔ％のみ含有するコンパクトジェルの形態でもあり得る。
【０１４４】
本明細書の洗剤組成物は、典型的には、１つ以上の界面活性剤を含み、界面活性剤は、ノニオン性界面活性剤、アニオン性界面活性剤、カチオン性界面活性剤、両性界面活性剤、双性イオン性界面活性剤、半極性ノニオン性界面活性剤及びこれらの混合物から選択される。いくつかの実施形態では、界面活性剤は、洗剤組成物の約０．１ｗｔ％〜約６０ｗｔ％の濃度で存在し、代替の実施形態では、濃度は、約１ｗｔ％〜約５０ｗｔ％であり、なお更なる実施形態では、濃度は、約５ｗｔ％〜約４０ｗｔ％である。洗剤は、通常、０ｗｔ％〜約５０ｗｔ％のアニオン性界面活性剤、例えば直鎖状アルキルベンゼンスルホン酸塩（ＬＡＳ）、α−オレフィンスルホン酸塩（ＡＯＳ）、アルキル硫酸塩（高級アルコール硫酸エステル塩）（ＡＳ）、アルコールエトキシサルフェート（ＡＥＯＳ又はＡＥＳ）、第２級アルカンスルホネート（ＳＡＳ）、α−スルホ脂肪酸メチルエステル、アルキル−若しくはアルケニルコハク酸又は石鹸を含有するであろう。加えて、洗剤組成物は、任意選択的に、０ｗｔ％〜約４０ｗｔ％のノニオン性界面活性剤、例えば、（例えば、参照により本明細書に組み込まれる国際公開第９２／０６１５４号パンフレットに記載されている）アルコールエトキシレート（ＡＥＯ又はＡＥ）、カルボキシル化アルコールエトキシレート、ノニルフェノールエトキシレート、アルキルポリグリコシド、アルキルジメチルアミンオキシド、エトキシル化脂肪酸モノエタノールアミン、脂肪酸モノエタノールアミド又はポリヒドロキシアルキル脂肪酸アミドを含有し得る。
【０１４５】
本明細書の洗剤組成物は、典型的には、１つ以上の洗剤ビルダー又はビルダー系を含む。いくつかの態様では、例えば本明細書に開示したいずれかなどの１つ以上の更なるビルダーと一緒に使用されるコビルダーとして、酸化ポリα−１，３−グルカンを含むことができる。本明細書で使用するための酸化ポリα−１，３−グルカン化合物は、米国特許出願公開第２０１５／０２５９４３９号明細書において開示されている。少なくとも１つのビルダーを組み込むいくつかの実施形態では、洗浄組成物は、ビルダーを組成物の少なくとも約１重量％、約３重量％〜約６０重量％又は更に約５重量％〜約４０重量％含む。ビルダーとしては、（酸化ポリα−１，３−グルカンに加えて）アルカリ金属、ポリリン酸のアンモニウム塩及びアルカノールアンモニウム塩、アルカリ金属ケイ酸塩、アルカリ土類及びアルカリ金属炭酸塩、アルミノケイ酸塩、ポリカルボン酸塩化合物、エーテルヒドロキシポリカルボキシレート、マレイン酸無水物とエチレン若しくはビニルメチルエーテルとのコポリマー、１，３，５−トリヒドロキシベンゼン−２，４，６−トリスルホン酸及びカルボキシメチルオキシコハク酸、ポリ酢酸の様々なアルカリ金属、アンモニウム及び置換アンモニウム塩、例えばエチレンジアミン四酢酸及びニトリロ三酢酸など、並びにポリカルボン酸塩、例えばメリット酸、コハク酸、クエン酸、オキシジコハク酸、ポリマレイン酸、ベンゼン１，３，５−トリカルボン酸、カルボキシメチルオキシコハク酸及びそれらの可溶塩などが挙げられるが、それらに限定されない。実際に、本開示の様々な実施形態において、任意の好適なビルダーの使用が見られると考えられている。洗剤ビルダー又は錯化剤の更なる例としては、ゼオライト、二リン酸塩、三リン酸塩、ホスホン酸塩、クエン酸塩、ニトリロ三酢酸（ＮＴＡ）、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、ジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＭＰＡ）、アルキルコハク酸及びアルケニルコハク酸、可溶性ケイ酸塩又は層状ケイ酸塩（例えば、Ｈｏｅｃｈｓｔ製のＳＫＳ−６）が挙げられる。
【０１４６】
いくつかの実施形態では、ビルダーは、クエン酸塩及びポリリン酸塩（例えば、トリポリリン酸ナトリウム、トリポリリン酸ナトリウム六水和物、トリポリリン酸カリウム及びミックストリポリリン酸ナトリウム・カリウムなど）などの水溶性の硬質イオン錯体（例えば、金属イオン封鎖ビルダー）を形成する。任意の好適なビルダーは、当技術分野において公知のビルダーも含めて本開示で使用が見られると考えられる（例えば、欧州特許第２１００９４９号明細書を参照されたい）。
【０１４７】
いくつかの実施形態では、好適なビルダーとして、リン酸塩ビルダー及び非リン酸塩ビルダーを挙げることができる。いくつかの実施形態では、ビルダーは、リン酸塩ビルダーである。いくつかの実施形態では、ビルダーは、非リン酸塩ビルダーである。ビルダーは、組成物の０．１重量％〜８０重量％、５重量％〜６０重量％又は１０重量％〜５０重量％の濃度で使用され得る。いくつかの実施形態では、生成物は、リン酸塩ビルダー及び非リン酸塩ビルダーの混合物を含む。好適なリン酸塩ビルダーとしては、一リン酸塩、二リン酸塩、三リン酸塩又はオリゴマーポリリン酸塩、例えばこれらの化合物のアルカリ金属塩、例えばナトリウム塩が挙げられる。いくつかの実施形態では、ビルダーは、トリポリリン酸ナトリウム（ＳＴＰＰ）であり得る。更に、組成物は、炭酸塩及び／又はクエン酸塩、好ましくは中性ｐＨ組成物を達成するのに役立つクエン酸塩を含み得る。他の好適な非リン酸塩ビルダーとしては、ポリカルボン酸及びそれらの部分又は完全中和塩のホモポリマー及びコポリマー、モノマーポリカルボン酸及びヒドロキシカルボン酸並びにそれらの塩が挙げられる。いくつかの実施形態では、上記化合物の塩として、アンモニウム塩及び／又はアルカリ金属塩、すなわちリチウム塩、ナトリウム塩及びカリウム塩、例えばナトリウム塩が挙げられる。好適なポリカルボン酸としては、非環式、脂環式、複素環式及び芳香族カルボン酸が挙げられるが、ここで、いくつかの実施形態では、それらは、それぞれの場合に相互から、一部の例では２つ以下の炭素原子によって相互から分離できる少なくとも２つのカルボキシル基を含有し得る。
【０１４８】
本明細書の洗剤組成物は、少なくとも１つのキレート剤を含み得る。好適なキレート剤としては、銅、鉄及び／又はマンガンキレート剤並びにそれらの混合物が挙げられるが、それらに限定されない。少なくとも１つのキレート剤を使用する実施形態では、組成物は、組成物の約０．１重量％〜約１５重量％又は更に約３．０重量％〜約１０重量％のキレート剤を含む。
【０１４９】
本明細書の洗剤組成物は、少なくとも１つの沈着助剤を含み得る。好適な沈着助剤としては、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、ポリカルボン酸塩、汚れ放出ポリマー、例えばポリテレフタル酸、粘土、例えばカオリナイト、モンモリロナイト、アタパルジャイト、イライト、ベントナイト、ハロイサイト及びそれらの混合物が挙げられるが、それらに限定されない。
【０１５０】
本明細書の洗剤組成物は、１つ以上の染料移動阻害剤を含み得る。好適なポリマー染料移動阻害剤としては、ポリビニルピロリドンポリマー、ポリアミンＮ−オキシドポリマー、Ｎ−ビニルピロリドン及びＮ−ビニルイミダゾールのコポリマー、ポリビニルオキサゾリドン及びポリビニルイミダゾールのコポリマー又はそれらの混合物が挙げられるが、それらに限定されない。更なる染料移動阻害剤としては、マンガンフタロシアニン、ペルオキシダーゼ、ポリビニルピロリドンポリマー、ポリアミンＮ−オキシドポリマー、Ｎ−ビニルピロリドン及びＮ−ビニルイミダゾールのコポリマー、ポリビニルオキサゾリドン及びポリビニルイミダゾールのコポリマー並びに／又はそれらの混合物が挙げられる。そのキレート剤の例としては、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）；ジエチレントリアミンペンタメチレンホスホン酸（ＤＴＰＭＰ）；ヒドロキシ−エタン二リン酸（ＨＥＤＰ）；エチレンジアミンＮ，Ｎ’−ジコハク酸（ＥＤＤＳ）；メチルグリシン二酢酸（ＭＧＤＡ）；ジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）；プロピレンジアミン四酢酸（ＰＤＴＡ）；２−ヒドロキシピリジン−Ｎ−オキシド（ＨＰＮＯ）；又はメチルグリシン二酢酸（ＭＧＤＡ）；グルタミン酸Ｎ，Ｎ−二酢酸（Ｎ，Ｎ−ジカルボキシメチルグルタミン酸四ナトリウム塩）（ＧＬＤＡ）；ニトリロ三酢酸（ＮＴＡ）；４，５−ジヒドロキシ−ｍ−ベンゼンジスルホン酸；クエン酸及びそれらの任意の塩；Ｎ−ヒドロキシエチルエチレンジアミン三酢酸（ＨＥＤＴＡ）、トリエチレンテトラアミン六酢酸（ＴＴＨＡ）、Ｎ−ヒドロキシエチルイミノ二酢酸（ＨＥＩＤＡ）、ジヒドロキシエチルグリシン（ＤＨＥＧ）、エチレンジアミンテトラプロピオン酸（ＥＤＴＰ）並びに単独又は上記のいずれかと組み合わせて使用できるそれらの誘導体が挙げられる。少なくとも１つの染料移動阻害剤を使用する実施形態では、本明細書の組成物は、組成物の約０．０００１重量％〜約１０重量％、約０．０１重量％〜約５重量％又は更に約０．１重量％〜約３重量％を含み得る。
【０１５１】
本明細書の洗剤組成物は、ケイ酸塩を含み得る。これらの実施形態のいくつかでは、ケイ酸ナトリウム（例えば、二ケイ酸ナトリウム、メタケイ酸ナトリウム及び／又はフィロケイ酸塩）の使用が見られる。いくつかの実施形態では、ケイ酸塩は、組成物の約１重量％〜約２０重量％の濃度で存在する。いくつかの実施形態では、ケイ酸塩は、組成物の約５重量％〜約１５重量％の濃度で存在する。
【０１５２】
本明細書の洗剤組成物は、分散剤を含み得る。好適な水溶性有機材料としては、その中でポリカルボン酸が２つ以下の炭素原子で相互から分離された少なくとも２つのカルボキシル基を含むホモポリマー酸若しくはコポリマー酸又はそれらの塩が挙げられるが、それらに限定されない。
【０１５３】
本明細書の洗剤組成物は、１つ以上の酵素を更に含み得る。酵素の例としては、任意の組み合わせのプロテアーゼ、セルラーゼ、ヘミセルラーゼ、ペルオキシダーゼ、脂肪分解酵素（例えば、メタロ脂肪分解酵素）、キシラナーゼ、リパーゼ、ホスホリパーゼ、エステラーゼ（例えば、アリールエステラーゼ、ポリエステラーゼ）、ペルヒドロラーゼ、クチナーゼ、ペクチナーゼ、ペクチン酸リアーゼ、マンナナーゼ、ケラチナーゼ、レダクターゼ、オキシダーゼ（例えば、コリンオキシダーゼ、フェノールオキシダーゼ）、フェノールオキシダーゼ、リポキシゲナーゼ、リグニナーゼ、プルラナーゼ、タンナーゼ、ペントサナーゼ、マラナーゼ、β−グルカナーゼ、アラビノシダーゼ、ヒアルロニダーゼ、コンドロイチナーゼ、ラッカーゼ、メタロプロテイナーゼ、アマドリアーゼ、グルコアミラーゼ、α−アミラーゼ、β−アミラーゼ、ガラクトシダーゼ、ガラクタナーゼ、カタラーゼ、カラギナーゼ（ｃａｒａｇｅｅｎａｓｅ）、ヒアルロニダーゼ、ケラチナーゼ、ラクターゼ、リグニナーゼ、ペルオキシダーゼ、ホスファターゼ、ポリガラクツロナーゼ、プルラナーゼ、ラムノガラクツロナーゼ、タンナーゼ、トランスグルタミナーゼ、キシログルカナーゼ、キシロシダーゼ、メタロプロテアーゼ、アラビノフラノシダーゼ、フィターゼ、イソメラーゼ、トランスフェラーゼ及び／又はアミラーゼが挙げられる。
【０１５４】
いくつかの実施形態では、洗剤組成物は、各々が本組成物の重量で約０．００００１重量％〜約１０重量％の濃度である１つ以上の酵素（例えば、本明細書で開示したいずれか）及び残余のクリーニング補助材料を含み得る。いくつかの他の実施形態では、洗剤組成物は、各酵素を組成物の約０．０００１重量％〜約１０重量％、約０．００１重量％〜約５重量％、約０．００１重量％〜約２重量％又は約０．００５重量％〜約０．５重量％の濃度でも含み得る。
【０１５５】
本明細書の洗剤組成物に含まれ得る酵素は、従来の安定剤、例えばプロピレングリコール又はグリセロールなどのポリオール；糖又は糖アルコール；乳酸；ホウ酸又はホウ酸誘導体（例えば、芳香族ホウ酸エステル）を用いて安定化され得る。
【０１５６】
特定の実施形態における洗剤組成物は、本明細書に開示したグラフトコポリマー化合物に加えて１つ以上の他のタイプのポリマーを含み得る。本明細書で有用なポリマーの他の種類の例としては、カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）、デキストラン、ポリ（ビニルピロリドン）（ＰＶＰ）、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリ（ビニルアルコール）（ＰＶＡ）、ポリカルボキシレート、例えばポリアクリレート、マレイン酸／アクリル酸コポリマー及びラウリルメタクリレート／アクリル酸コポリマーなどが挙げられる。
【０１５７】
本明細書の洗剤組成物は、漂白系を含有し得る。例えば、漂白系は、Ｈ２Ｏ２起源、例えば過酸形成漂白活性化剤、例えばテトラアセチルエチレンジアミン（ＴＡＥＤ）又はノナノイルオキシベンゼンスルホネート（ＮＯＢＳ）と結合することのできる過ホウ酸塩又は過炭酸塩を含み得る。代わりに、漂白系は、ペルオキシ酸（例えば、アミド、イミド又はスルホンタイプのペルオキシ酸）を含み得る。代わりに更に、漂白系は、例えば、国際公開第２００５／０５６７８３号パンフレットに記載された系などのペルヒドロラーゼを含む酵素的漂白系であり得る。
【０１５８】
本明細書の洗剤組成物は、織物コンディショナー、粘度、起泡力増進剤、抑泡剤、防食剤、汚れ懸濁剤、再汚染防止剤、染料、殺菌剤、変色防止剤、蛍光増白剤又は香料などの従来の洗剤成分も含有し得る。本明細書の洗剤組成物の（使用濃度で水溶液中において測定した）ｐＨは、通常、中性又はアルカリ性（例えば、約７．０〜約１１．０のｐＨ）である。
【０１５９】
本明細書のグラフトコポリマーは、必要に応じて、例えば織物ケア組成物などの洗剤組成物中の再付着防止剤及び／又は粘土質汚れ除去剤として含むことができる（そのような作用物質は、任意選択的に所定の態様における白色維持剤であると特徴付けることができる）と考えられる。本明細書の他の好適な再付着防止剤及び／又は粘土質汚れ除去剤の例としては、ポリエトキシ両性イオン性界面活性剤、アクリル酸若しくはメタクリル酸とアクリル酸若しくはメタクリル酸−酸化エチレン凝縮体との水溶性コポリマー（例えば、米国特許第３７１９６４７号明細書）、セルロース誘導体、例えばカルボキシメチルセルロース及びヒドロキシプロピルセルロース（例えば、米国特許第３５９７４１６号明細書及び同第３５２３０８８号明細書）並びにノニオン性アルキルポリエトキシ界面活性剤、ポリエトキシアルキル第四級カチオン性界面活性剤及び脂肪酸アミド界面活性剤を含む混合物（例えば、米国特許第４２２８０４４号明細書）が挙げられる。他の好適な再付着防止剤及び粘土質汚れ除去剤の非限定的な例は、米国特許第４５９７８９８号明細書及び同第４８９１１６０号明細書並びに国際公開公開第９５／３２２７２号パンフレット（これらの全ては、参照により本明細書に組み込まれる）に開示されている。
【０１６０】
本明細書に開示した目的に適合させることのできる洗剤組成物の特定の形態は、例えば、米国特許出願公開第２００９０２０９４４５Ａ１号明細書、同第２０１０００８１５９８Ａ１号明細書、同第７００１８７８Ｂ２号明細書、欧州特許第１５０４９９４Ｂ１号明細書、国際公開第２００１０８５８８８Ａ２号パンフレット、同第２００３０８９５６２Ａ１号パンフレット、同第２００９０９８６５９Ａ１号パンフレット、同第２００９０９８６６０Ａ１号パンフレット、同第２００９１１２９９２Ａ１号パンフレット、同第２００９１２４１６０Ａ１号パンフレット、同第２００９１５２０３１Ａ１号パンフレット、同第２０１００５９４８３Ａ１号パンフレット、同第２０１００８８１１２Ａ１号パンフレット、同第２０１００９０９１５Ａ１号パンフレット、同第２０１０１３５２３８Ａ１号パンフレット、同第２０１１０９４６８７Ａ１号パンフレット、同第２０１１０９４６９０Ａ１号パンフレット、同第２０１１１２７１０２Ａ１号パンフレット、同第２０１１１６３４２８Ａ１号パンフレット、同第２００８０００５６７Ａ１号パンフレット、同第２００６０４５３９１Ａ１号パンフレット、同第２００６００７９１１Ａ１号パンフレット、同第２０１２０２７４０４Ａ１号パンフレット、欧州特許第１７４０６９０Ｂ１号明細書、国際公開第２０１２０５９３３６Ａ１号パンフレット、米国特許第６７３０６４６Ｂ１号明細書、国際公開第２００８０８７４２６Ａ１号パンフレット、同第２０１０１１６１３９Ａ１号パンフレット及び同第２０１２１０４６１３Ａ１号パンフレット（これらの全ては、参照により本明細書に組み込まれる）に開示されている。
【０１６１】
本明細書の洗濯用洗剤組成物は、任意選択的に、重質（万能）洗濯用洗剤組成物であり得る。例示的な重質洗濯用洗剤組成物は、アニオン性洗浄性界面活性剤（直鎖若しくは分枝鎖若しくはランダム鎖の置換若しくは未置換アルキルスルフェート、アルキルスルホネート、アルキルアルコキシル化スルフェート、アルキルホスフェート、アルキルホスホネート、アルキルカルボキシレート及び／又はそれらの混合物の群から選択される）及び任意選択的にノニオン性界面活性剤（直鎖若しくは分枝鎖若しくはランダム鎖の置換若しくは未置換アルキルアルコキシル化アルコール、例えばＣ８〜Ｃ１８アルキルエトキシル化アルコール及び／又はＣ６〜Ｃ１２アルキルフェノールアルコキシレートの群から選択される）を含む洗浄性界面活性剤（１０ｗｔ／ｗｔ％〜４０ｗｔ／ｗｔ％）を含み、ここで、アニオン性洗浄性界面活性剤（６．０〜９の親水性指数（ＨＩｃ）を有する）対ノニオン性洗浄性界面活性剤の重量比は、１：１より大きい。好適な洗浄性界面活性剤としては、カチオン性洗浄性界面活性剤（アルキルピリジニウム化合物、アルキル第四級アンモニウム化合物、アルキル第四級ホスホニウム化合物、アルキル三元スルホニウム化合物及び／又はそれらの混合物の群から選択される）；両性イオン性及び／又は両性洗浄性界面活性剤（アルカノールアミンスルホ−ベタインの群から選択される）；両性界面活性剤；半極性ノニオン性界面活性剤並びにそれらの混合物も挙げられる。
【０１６２】
重質洗濯用洗剤組成物などの本明細書の洗剤には、任意選択的に、両親媒性アルコキシル化グリース洗浄ポリマー（分枝状親水性及び疎水性を有するアルコキシル化ポリマー、例えば０．０５ｗｔ％〜１０ｗｔ％の範囲のアルコキシル化ポリアルキレンイミンなどの群から選択される）及び／又はランダムグラフトポリマー（典型的には、不飽和Ｃ１〜Ｃ６カルボン酸、エーテル、アルコール、アルデヒド、ケトン、エステル、糖単位、アルコキシ単位、無水マレイン酸、グリセロールなどの飽和ポリアルコール及びそれらの混合物からなる群から選択されるモノマーを含む親水性骨格からなる）；並びにＣ４〜Ｃ２５アルキル基、ポリプロピレン、ポリブチレン、飽和Ｃ１〜Ｃ６モノ−カルボン酸のビニルエステル、アクリル酸若しくはメタクリル酸のＣ１〜Ｃ６アルキルエステル及びそれらの混合物からなる群から選択される疎水性側鎖からなる界面活性増強性ポリマーが含まれ得る。
【０１６３】
例えば重質洗濯用洗剤組成物などの本明細書の洗剤には、任意選択的に、追加のポリマー、例えば汚れ放出ポリマー（アニオン性で末端キャップされたポリエステル、例えばＳＲＰ１などのランダム又はブロック構造にある糖、ジカルボン酸、ポリオール及びそれらの組み合わせから選択される少なくとも１つのモノマー単位を含むポリマー、ランダム又はブロック構造にあるエチレンテレフタレートをベースとするポリマー及びそれらのコポリマー、例えばＲＥＰＥＬ−Ｏ−ＴＥＸ  ＳＦ、ＳＦ−２  ＡＮＤ  ＳＲＰ６、ＴＥＸＣＡＲＥ  ＳＲＡ１００、ＳＲＡ３００、ＳＲＮ１００、ＳＲＮ１７０、ＳＲＮ２４０、ＳＲＮ３００  ＡＮＤ  ＳＲＮ３２５、ＭＡＲＬＯＱＵＥＳＴ  ＳＬが含まれる）を含むことができ、本明細書の再付着防止剤（０．１ｗｔ％〜１０ｗｔ％）には、５００〜１００，０００Ｄａの範囲内の分子量のカルボキシレートポリマー、例えばアクリル酸、マレイン酸（又はマレイン酸無水物）、フマル酸、イタコン酸、アコニット酸、メサコン酸、シトラコン酸、メチレンマロン酸及びそれらの任意の混合物、ビニルピロリドン、ビニルピロリドンホモポリマー及び／又はポリエチレングリコールから選択される少なくとも１つのモノマーを含むポリマー；並びにポリマーカルボキシレート（例えば、マレエート／アクリレートランダムコポリマー又はポリアクリレートホモポリマー）が含まれる。
【０１６４】
例えば重質洗濯用洗剤組成物などの本明細書の洗剤には、任意選択的に、更に飽和又は不飽和脂肪酸、好ましくは飽和又は不飽和Ｃ１２〜Ｃ２４脂肪酸（０ｗｔ％〜１０ｗｔ％）；本明細書に開示した沈着助剤（それらの例には、多糖類、セルロースポリマー、ポリジアリルジメチルアンモニウムハロゲン化物（ＤＡＤＭＡＣ）及びランダム又はブロック構造にあるＤＡＤ  ＭＡＣとビニルピロリドン、アクリルアミド、イミダゾール、イミダゾリウムハロゲン化物及びそれらの混合物とのコポリマー、カチオン性グアールガム、カチオン性デンプン、カチオン性ポリアクリルアミド及びそれらの混合物が含まれる）が含まれ得る。
【０１６５】
例えば重質洗濯用洗剤組成物などの本明細書の洗剤は、任意選択的に、その例として、マンガンフタロシアニン、ペルオキシダーゼ、ポリビニルピロリドンポリマー、ポリアミンＮ−オキシドポリマー、Ｎ−ビニルピロリドン及びＮ−ビニルイミダゾールのコポリマー、ポリビニルオキサゾリドン及びポリビニルイミダゾール並びに／又はそれらの混合物が挙げられる染料移動阻害剤、その例にはエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、ジエチレントリアミンペンタメチレンホスホン酸（ＤＴＰＭＰ）、ヒドロキシエタンジホスホン酸（ＨＥＤＰ）、エチレンジアミンＮ，Ｎ’−ジコハク酸（ＥＤＤＳ）、メチルグリシン二酢酸（ＭＧＤＡ）、ジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）、プロピレンジアミン四酢酸（ＰＤＴＡ）、２−ヒドロキシピリジン−Ｎ−オキシド（ＨＰＮＯ）又はメチルグリシン二酢酸（ＭＧＤＡ）、グルタミン酸Ｎ，Ｎ−二酢酸（Ｎ，Ｎ−ジカルボキシメチルグルタミン酸四ナトリウム塩（ＧＬＤＡ）、ニトリロ三酢酸（ＮＴＡ）、４，５−ジヒドロキシ−ｍ−ベンゼンジスルホン酸、クエン酸及びそれらの任意の塩、Ｎ−ヒドロキシエチルエチレンジアミン三酢酸（ＨＥＤＴＡ）、トリエチレンテトラアミン六酢酸（ＴＴＨＡ）、Ｎ−ヒドロキシエチルイミノ二酢酸（ＨＥＩＤＡ）、ジヒドロキシエチルグリシン（ＤＨＥＧ）、エチレンジアミンテトラプロピオン酸（ＥＤＴＰ）及びそれらの誘導体が挙げられるキレート剤を含み得る。
【０１６６】
例えば重質洗濯用洗剤組成物などの本明細書の洗剤は、任意選択的に、シリコン又は脂肪酸をベースとする石鹸泡抑制剤；ぼかし染料（ｈｕｅｉｎｇ  ｄｙｅ）、カルシウムカチオン及びマグネシウムカチオン、視覚的シグナル伝達成分、消泡剤（０．００１ｗｔ％〜約４．０ｗｔ％）及び／又はジグリセリド及びトリグリセリド、エチレングリコールジステアレート、微結晶セルロース、マイクロファイバーセルロース、バイオポリマー、キサンタンガム、ゲランガム並びにそれらの混合物からなる群から選択される構造化剤／増粘剤（０．０１ｗｔ％〜約５ｗｔ％）を含み得る。特定の実施形態では、そのような構造化剤／増粘剤は、洗剤に含まれる１つ以上のグラフトコポリマー化合物に追加されるであろう。構造化剤は、構造剤とも呼ぶことができる。
【０１６７】
本明細書の洗剤は、例えば、重質乾燥／固体洗濯用洗剤組成物の形態であり得る。そのような洗剤は、（ｉ）洗浄性界面活性剤、例えば本明細書に開示した任意のアニオン性洗浄性界面活性剤、本明細書に開示した任意のノニオン性洗浄性界面活性剤、本明細書に開示した任意のカチオン性洗浄性界面活性剤、本明細書に開示した任意の両性イオン性及び／若しくは両性洗浄性界面活性剤並びにそれらの混合物；（ｉｉ）ビルダー、例えば任意の無リンビルダー（例えば、０ｗｔ％〜１０ｗｔ％未満の範囲内のゼオライトビルダー）、任意のリン酸塩ビルダー（例えば、０ｗｔ％〜１０ｗｔ％未満の範囲内のトリポリリン酸ナトリウム）、クエン酸、クエン酸塩及びニトリロ三酢酸、任意のケイ酸塩（例えば、０ｗｔ％〜１０ｗｔ％未満の範囲内のケイ酸ナトリウム若しくはカリウム又はメタケイ酸ナトリウム）；任意の炭酸塩（例えば、０ｗｔ％〜８０ｗｔ％未満の範囲内の炭酸ナトリウム及び／又は重炭酸ナトリウム）及びそれらの混合物；（ｉｉｉ）漂白剤、例えば光漂白剤（例えば、スルホン化亜鉛フタロシアニン、スルホン化アルミニウムフタロシアニン、キサンテン染料及びそれらの混合物）、任意の疎水性若しくは親水性漂白活性化剤（例えば、ドデカノイルオキシベンゼンスルホネート、デカノイルオキシベンゼンスルホネート、デカノイルオキシ安息香酸若しくはそれらの塩、３，５，５−トリメチルヘキサノイルオキシベンゼンスルホネート、テトラアセチルエチレンジアミン−ＴＡＥＤ、ノナノイルオキシベンゼンスルホネート−ＮＯＢＳ、ニトリルクアット及びそれらの混合物）、過酸化水素の任意の起源（例えば、その例には過ホウ酸塩、過炭酸塩、過硫酸塩、過リン酸塩若しくは過ケイ酸塩のモノ若しくはテトラハイドレートナトリウム塩が含まれる無機ペルハイドレート塩）、任意の予備形成親水性及び／若しくは疎水性過酸（例えば、過カルボン酸及び塩、過炭酸及び塩、過イミド酸及び塩、ペルオキソ一硫酸及び塩並びにそれらの混合物）；並びに／又は（ｉｖ）任意の他の成分、例えば漂白触媒（例えば、その例にはイミニウムカチオン及びポリイオン、イミニウム両性イオン、改質アミン、改質アミンオキシド、Ｎ−スルホニルイミン、Ｎ−ホスホニルイミン、Ｎ−アシルイミン、チアジアゾールジオキシド、ペルフルオロイミン、環状糖ケトン及びそれらの混合物が含まれるイミン系漂白増強剤）並びに金属含有漂白触媒（例えば亜鉛又はアルミニウムなどの補助金属カチオン及び例えばＥＤＴＡ、エチレンジアミンテトラ（メチレンホスホン酸）などの金属イオン封鎖剤と一緒に、銅、鉄、チタン、ルテニウム、タングステン、モリブデン又はマンガンカチオン）を含み得る。
【０１６８】
本明細書に開示した組成物は、例えば、食器用洗剤組成物の形態であり得る。食器洗い用洗剤の例としては、自動食器洗い用洗剤（典型的には食器洗い機で使用される）及び手洗い食器用洗剤が挙げられる。食器洗い用洗剤組成物は、例えば、本明細書に開示された任意の乾燥又は液体／水性形態であり得る。食器洗い用洗剤組成物の特定の実施形態に含まれ得る成分としては、例えば、リン酸塩；酸素系若しくは塩素系漂白剤；ノニオン性界面活性剤；アルカリ性塩（例えば、メタケイ酸塩；アルカリ金属水酸化物、炭酸ナトリウム）；本明細書で開示される任意の活性酵素；防錆剤（例えば、ケイ酸ナトリウム）；消泡剤；セラミックスからの艶及び模様の除去を減速するための添加物；香料；固化防止剤（顆粒状洗剤中）；デンプン（錠剤系洗剤中）；ゲル化剤（液体／ジェル系洗剤中）；並びに／又は砂（粉末状洗剤）の１つ以上が挙げられる。
【０１６９】
例えば自動食器洗い機用洗剤又は液体食器洗い用洗剤などの食器洗い用洗剤は、（ｉ）０〜１０ｗｔ％の量で存在する任意のエトキシル化ノニオン性界面活性剤、アルコキシル化アルコール界面活性剤、エポキシキャップされたポリ（オキシアルキル化）アルコール若しくはアミンオキシド界面活性剤を含むノニオン性界面活性剤；（ｉｉ）約５〜６０ｗｔ％の範囲内の、任意のリン酸塩ビルダー（例えば、一リン酸塩、二リン酸塩、トリポリリン酸塩、他のオリゴマーポリリン酸塩、ナトリウムトリポリリン酸塩−ＳＴＰＰ）、任意の無リンビルダー（例えば、メチル−グリシン二酢酸［ＭＧＤＡ］及びそれらの塩又は誘導体、グルタミン−Ｎ，Ｎ−二酢酸［ＧＬＤＡ］及びそれらの塩若しくは誘導体、イミノ二コハク酸（ＩＤＳ）及びそれらの塩又は誘導体、カルボキシメチルイヌリン及びそれらの塩又は誘導体、ニトリロ三酢酸［ＮＴＡ］、ジエチレントリアミン五酢酸［ＤＴＰＡ］、Ｂ−アラニン二酢酸［Ｂ−ＡＤＡ］及びそれらの塩を含むアミノ酸ベースの化合物）、ポリカルボン酸及びそれらの部分若しくは完全中和塩のホモポリマー及びコポリマー、０．５ｗｔ％〜５０ｗｔ％の範囲内のモノマーポリカルボン酸及びヒドロキシカルボン酸及びそれらの塩又は０．１ｗｔ％〜約５０ｗｔ％の範囲内のスルホン化／カルボキシル化ポリマーを含むビルダー；（ｉｉｉ）０．１ｗｔ％〜約１０ｗｔ％の範囲内の乾燥助剤（例えば、任意選択的にまた別の３〜６つの官能基−典型的には重縮合を誘導する酸、アルコール若しくはエステル官能基を備えるモノマーと一緒にポリエステル、特にアニオン性ポリエステル、ポリカーボネート−、ポリウレタン−及び／又はポリウレア−ポリオルガノシロキサン化合物若しくはそれらの、特に反応性環状炭酸塩及びウレアタイプの前駆体化合物）；（ｉｖ）約１ｗｔ％〜約２０ｗｔ％の範囲内のケイ酸塩（例えば、ケイ酸ナトリウム若しくはカリウム、例えば二ケイ酸ナトリウム、メタケイ酸ナトリウム及び結晶性フィロケイ酸塩）；（ｖ）無機漂白剤（例えば、過ホウ酸塩、過炭酸塩、過リン酸塩、過硫酸塩及び過ケイ酸塩などのペルハイドレート塩）及び／又は有機漂白剤（例えば、ジアシル−及びテトラアシルペルオキシド、特にジペルオキシドデカン二酸及びジペルオキシヘキサデカン二酸などの有機ペルオキシ酸）；（ｖｉ）漂白活性化剤（例えば、０．１ｗｔ％〜約１０ｗｔ％の範囲内の有機過酸前駆体）及び／又は漂白触媒（例えば、マンガントリアザシクロノナン及び関連錯体；Ｃｏ、Ｃｕ、Ｍｎ及びＦｅビスピリジルアミン及び関連錯体；及びペンタミンコバルト（ＩＩＩ）酢酸塩及び関連錯体）；（ｖｉｉ）０．１ｗｔ％〜５ｗｔ％の範囲内の金属ケア剤（例えば、ベンザトリアゾール、金属塩及び錯体及び／又はケイ酸塩）；並びに／又は（ｖｉｉｉ）自動食器洗い機用洗剤組成物１グラム当たり約０．０１〜５．０ｍｇの範囲内の活性酵素の本明細書に開示した任意の活性酵素並びに酵素安定化剤（例えば、オリゴ糖、多糖及び無機二価金属塩）を含み得る。
【０１７０】
本明細書に開示した組成物は、例えば、口腔ケア組成物の形態であり得る。口腔ケア組成物の例としては、何らかの形態の口腔ケア（例えば、虫歯［う蝕］、歯肉炎、歯垢、歯石及び／又は歯周疾患の治療又は予防）を提供する歯磨き剤、練り歯磨き、洗口液、口内洗浄剤、チューインガム及び可食ストリップが挙げられる。口腔ケア組成物は、舌の表面、硬い又は柔らかい口蓋、頬粘膜、歯肉及び歯表面など、口腔内の柔らかい又は硬い表面を全て包含する「口腔面」の治療に用いることもできる。本明細書では、「歯表面」は、例えば、天然の歯の表面又はクラウン、キャップ、詰め物、ブリッジ若しくは歯科用インプラントなどの人工歯の硬質の表面である。
【０１７１】
本明細書の口腔ケア組成物は、例えば、本明細書に開示した１つ以上のグラフトコポリマー化合物を約０．０１〜１５．０ｗｔ％（例えば、約０．１〜１０ｗｔ％、約０．１〜５．０ｗｔ％又は約０．１〜２．０ｗｔ％）含み得る。口腔ケア組成物に含まれる１つ以上のグラフトコポリマー化合物は、ときに、組成物に増粘剤及び／又は分散剤として提供することができ、それは、組成物に所望の稠度及び／又は口当たりを付与するのに有用であり得る。本明細書の口腔ケア組成物には、例えば、カルボキシビニルポリマー、カラギーナン（例えば、Ｌ−カラギーナン）、天然ゴム（例えば、カラヤ、キサンタン、アラビアゴム、トラガカント）、コロイド状ケイ酸マグネシウムアルミニウム又はコロイドシリカなどの１つ以上の他の増粘剤又は分散剤も提供することができる。
【０１７２】
本明細書の口腔ケア組成物は、例えば、練り歯磨き又は他の歯磨き剤であり得る。本明細書のそのような組成物及び他の任意の口腔ケア組成物は、限定はされないが、虫歯予防薬、抗微生物剤若しくは抗細菌剤、抗歯石剤若しくは歯石防止剤、界面活性剤、研磨剤、ｐＨ調節剤、起泡調節剤、保湿剤、香料、甘味料、顔料／着色料、増白剤及び／又は他の好適な成分の１つ以上を更に含み得る。１つ以上のグラフトコポリマー化合物を添加することができる口腔ケア組成物の例は、米国特許出願公開第２００６／０１３４０２５号明細書、同第２００２／００２２００６号明細書及び同第２００８／００５７００７号明細書に開示されており、これらは、参照により本明細書に組込まれる。
【０１７３】
本明細書の虫歯予防薬は、経口的に許容されるフッ化物イオン源であり得る。好適なフッ化物イオン源としては、例えば、フッ素化合物、モノフルオロリン酸塩及びフルオロケイ酸塩並びにオラフルル（Ｎ’−オクタデシルトリメチレンジアミン−Ｎ，Ｎ，Ｎ’−トリス（２−エタノール）−ジヒドロフルオリド）を含むアミンフッ化物が挙げられる。虫歯予防薬は、例えば、組成物に全体で約１００〜２００００ｐｐｍ、約２００〜５０００ｐｐｍ又は約５００〜２５００ｐｐｍのフッ化物イオンを与える量で存在し得る。フッ化ナトリウムがフッ化物イオンの単独源である場合の口腔ケア組成物では、例えば、約０．０１〜５．０ｗｔ％、約０．０５〜１．０ｗｔ％又は約０．１〜０．５ｗｔ％の量のフッ化ナトリウムが組成物中に存在し得る。
【０１７４】
本明細書の口腔ケア組成物の使用に好適な抗微生物剤又は抗細菌剤としては、例えば、フェノール化合物（例えば、４−アリルカテコール；ベンジルパラベン、ブチルパラベン、エチルパラベン、メチルパラベン及びプロピルパラベンなどのｐ−ヒドロキシ安息香酸エステル類；２−ベンジルフェノール；ブチル化ヒドロキシアニソール；ブチル化ヒドロキシトルエン；カプサイシンン；カルバクロール；クレオソール；オイゲノール；グアイアコール；ヘキサクロロフェン及びブロモクロロフェンなどのハロゲン化ビスフェノール類；４−ヘキシルレゾルシノール、８−ヒドロキシキノリン及びその塩、サリチル酸メンチル、サリチル酸メチル及びサリチル酸フェニルなどのサリチル酸エステル；フェノール；ピロカテコール；サリチルアニリド；チモール；トリクロサン及びトリクロサン一リン酸などのハロゲン化ジフェニルエーテル化合物）、銅（ＩＩ）化合物（例えば、塩化銅（ＩＩ）、フッ化物、硫酸塩及び水酸化物）、亜鉛イオン源（例えば、亜鉛酢酸塩、クエン酸塩、グリシン酸塩、酸化物及び硫酸塩）、フタル酸及びその塩（例えば、フタル酸マグネシウム一カリウム）、ヘキセチジン、オクテニジン、サンギナリン、塩化ベンザルコニウム、臭化ドミフェン、塩化アルキルピリジニウム（例えば、塩化セチルピリジニウム、塩化テトラデシルピリジニウム、塩化Ｎ−テトラデシル−４−エチルピリジニウム）、ヨウ素、スルホンアミド、ビスビグアニド（例えば、アレキシジン、クロルヘキシジン、グルコン酸クロルヘキシジン）、ピペリジン誘導体（例えば、デルモピノール、オクタピノール）、マグノリア抽出物、グレープシード抽出物、ローズマリー抽出物、メンソール、ゲラニオール、シトラール、オイカリプトール、抗生物質（例えば、オウグメンチン、アモキシリン、テトラサイクリン、ドキシサイクリン、ミノサイクリン、メトロニダゾール、ネオマイシン、カナマイシン、クリンダマイシン）及び／又は米国特許第５７７６４３５号明細書（これは、参照により本明細書に組み込まれる）で開示の抗細菌剤が挙げられる。１つ以上の抗微生物剤は、任意選択的に、開示した口腔ケア組成物中において、例えば約０．０１〜１０ｗｔ％（例えば、０．１〜３ｗｔ％）で存在し得る。
【０１７５】
本明細書の口腔ケア組成物の使用に好適な抗歯石剤又は歯石防止剤としては、例えば、リン酸塩及びポリリン酸塩（例えば、ピロリン酸塩）、ポリアミノプロパンスルホン酸（ＡＭＰＳ）、クエン酸亜鉛三水和物、ポリペプチド（例えば、ポリアスパラギン酸及びポリグルタミン酸）、ポリオレフィンスルホン酸塩、ポリオレフィンリン酸塩、ジホスホネート（例えば、アザシクロヘプタン−２，２−ジホスホン酸などのアザシクロアルカン−２，２−ジホスホネート）、Ｎ−メチルアザシクロペンタン−２，３−ジホスホン酸、エタン−１−ヒドロキシ−１，１−ジホスホン酸（ＥＨＤＰ）、エタン−１−アミノ−１，１−ジホスホネート並びに／又はホスホノアルカンカルボン酸及びその塩（例えば、そのアルカリ金属塩及びアンモニウム塩）が挙げられる。有用な無機リン酸塩及びポリリン酸塩としては、例えば、一塩基性、二塩基性及び三塩基性リン酸ナトリウム、トリポリリン酸ナトリウム、テトラポリリン酸塩、ピロリン酸モノナトリウム、ピロリン酸ジナトリウム、ピロリン酸トリナトリウム及びピロリン酸テトラナトリウム、ピロリン酸二水素二ナトリウム、三メタリン酸ナトリウム、六メタリン酸ナトリウム又はこれらのナトリウムがカリウム又はアンモニウムで置換されたものが挙げられる。特定の実施形態における他の有用な抗歯石剤としては、アニオン性ポリカルボキシレートポリマー（例えば、ポリビニルメチルエーテル／無水マレイン酸コポリマーなどのアクリル酸、メタクリル酸及び無水マレイン酸のポリマー又はコポリマー）が挙げられる。更に他の有用な抗歯石剤としては、ヒドロキシカルボン酸などの金属イオン封鎖剤（例えば、クエン酸、フマル酸、リンゴ酸、酒石酸及びシュウ酸並びにそれらの塩）及びアミノポリカルボン酸（例えば、ＥＤＴＡ）が挙げられる。１つ以上の抗歯石剤又は歯石防止剤は、開示した口腔ケア組成物中において、任意選択的に例えば約０．０１〜５０ｗｔ％（例えば、約０．０５〜２５ｗｔ％又は約０．１〜１５ｗｔ％）で存在し得る。
【０１７６】
本明細書の口腔ケア組成物での使用に好適な界面活性剤は、例えば、アニオン性、ノニオン性又は両性であり得る。好適なアニオン性界面活性剤としては、限定はされないが、水溶性塩のＣ８〜２０アルキル硫酸塩、Ｃ８〜２０脂肪酸のスルホン化モノグリセリド、サルコシン酸塩及びタウリン酸塩が挙げられる。アニオン性界面活性剤の例としては、ラウリル硫酸ナトリウム、ヤシ油モノグリセリドスルホン酸ナトリウム、ラウリルサルコシン酸ナトリウム、ラウリルイセチオン酸ナトリウム、ラウレスカルボン酸ナトリウム及びドデシルベンゼンスルホン酸ナトリウムが挙げられる。好適なノニオン性界面活性剤としては、限定はされないが、ポロキサマー、ポリオキシエチレンソルビタンエステル、脂肪アルコールエトキシレート、第三級アミン酸化物、第三級ホスフィン酸化物及びジアルキルスルホキシドが挙げられる。好適な両性界面活性剤としては、限定はされないが、カルボン酸塩、硫酸塩、スルホン酸塩、リン酸塩又はホスホン酸塩などのアニオン基を有する、Ｃ８〜２０の第二級及び第三級脂肪族アミンの誘導体が挙げられる。好適な両性界面活性剤の一例は、ココアミドプロピルベタインである。１つ以上の界面活性剤は、開示した口腔ケア組成物中において、任意選択的に例えば約０．０１〜１０ｗｔ％（例えば、約０．０５〜５．０ｗｔ％又は約０．１〜２．０ｗｔ％）の総量で存在する。
【０１７７】
本明細書の口腔ケア組成物中で使用するのに好適な研磨剤としては、例えば、シリカ（例えば、シリカゲル、ケイ酸、沈降シリカ）、アルミナ、不溶性リン酸塩、炭酸カルシウム及び樹脂研磨材（例えば、尿素−ホルムアルデヒド縮合生成物）を挙げ得る。本明細書の研磨剤として有用な不溶性リン酸塩の例は、オルトリン酸塩、ポリメタリン酸塩及びピロリン酸塩であり、オルトリン酸二カルシウム二水和物、ピロリン酸カルシウム、ピロリン酸β−カルシウム、リン酸三カルシウム、ポリメタリン酸カルシウム及び不溶性ポリメタリン酸ナトリウムである。１つ以上の研磨剤は、開示した口腔ケア組成物中において、任意選択的に例えば約５〜７０ｗｔ％（例えば、約１０〜５６ｗｔ％又は約１５〜３０ｗｔ％）の総量で存在する。特定の実施形態における研磨剤の平均粒子径は、約０．１〜３０ミクロン（例えば、約１〜２０ミクロン又は約５〜１５ミクロン）である。
【０１７８】
特定の実施形態における口腔ケア組成物は、少なくとも１つのｐＨ調節剤を含み得る。このような薬剤は、約２〜１０のｐＨ範囲（例えば、約２〜８、３〜９、４〜８、５〜７、６〜１０又は７〜９のｐＨ範囲）に組成物のｐＨを酸性化するため、より塩基性にするため又は緩衝するために選択され得る。本明細書で有用なｐＨ調節剤の例としては、限定はされないが、カルボン酸、ホスホン酸及びスルホン酸；酸塩（例えば、クエン酸一ナトリウム、クエン酸二ナトリウム、マレイン酸一ナトリウム）；アルカリ金属水酸化物（例えば、水酸化ナトリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウムなどの炭酸塩、セスキ炭酸塩）；ホウ酸塩；ケイ酸塩；リン酸塩（例えば、リン酸一ナトリウム、リン酸三ナトリウム、ピロリン酸塩）；及びイミダゾールが挙げられる。
【０１７９】
本明細書の口腔ケア組成物で使用するのに好適な起泡調節剤は、例えば、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）であり得る。高分子量ＰＥＧが好ましく、例えば約２０００００〜７００００００（例えば、約５０００００から５００００００又は約１００００００〜２５０００００）の平均分子量を有するものが挙げられる。１つ以上のＰＥＧは、任意選択的に、開示した口腔ケア組成物中において、例えば約０．１〜１０ｗｔ％（例えば、約０．２〜５．０ｗｔ％又は約０．２５〜２．０ｗｔ％）の総量で存在する。
【０１８０】
特定の実施形態における口腔ケア組成物は、少なくとも１つの保湿剤を含み得る。特定の実施形態における保湿剤は、グリセリン、ソルビトール、キシリトール又は低分子量ＰＥＧなどの多価アルコールであり得る。最も好適な保湿剤は、本明細書の甘味料としても機能し得る。１つ以上の保湿剤は、任意選択的に、本明細書に開示した口腔ケア組成物中において、例えば約１．０〜７０ｗｔ％（例えば、約１．０〜５０ｗｔ％、約２〜２５ｗｔ％又は約５〜１５ｗｔ％）の総量で存在する。
【０１８１】
天然又は人工甘味料は、本明細書の口腔ケア組成物中に任意選択的に含まれ得る。好適な甘味料の例としては、デキストロース、スクロース、マルトース、デキストリン、転化糖、マンノース、キシロース、リボース、フルクトース、レブロース、ガラクトース、コーンシロップ（例えば、高フルクトースコーンシロップ又は固形コーンシロップ）、部分加水分解デンプン、水素化デンプン加水分解物、ソルビトール、マンニトール、キシリトール、マルチトール、イソマルト、アスパルテーム、ネオテーム、サッカリン及びその塩、ジペプチドをベースとする強力甘味料並びにシクラミン酸塩が挙げられる。１つ以上の甘味料は、任意選択的に、本明細書に開示した口腔ケア組成物中において、例えば約０．００５〜５．０ｗｔ％の総量で存在する。
【０１８２】
天然又は人工風味剤が本明細書の口腔ケア組成物中に任意選択的に含まれ得る。好適な風味剤の例としては、バニリン；セージ；マジョラム；オランダセリ油；スペアミント油；シナモン油；冬緑油（サリチル酸メチル）；ペパーミント油；チョウジ油；ベイ油；アニス油；ユーカリ油；カンキツ油；果実油；レモン、オレンジ、ライムグレープフルーツ、アンズ、バナナ、ブドウ、リンゴ、イチゴ、サクランボ又はパイナップルなどに由来する精油；コーヒー、ココア、コーラ、ピーナッツ又はアーモンドなどのマメ又はナッツに由来する香味料；並びに吸着及びカプセル封入香料が挙げられる。清涼又は温熱効果など、口中に芳香及び／又は他の感覚効果を与える成分も本明細書の風味剤に包含される。このような成分としては、限定はされないが、メンソール、酢酸メンチル、乳酸メンチル、樟脳、ユーカリ油、オイカリプトール、アネトール、オイゲノール、カッシア、オキサノン、Ｉｒｉｓｏｎｅ（登録商標）、プロペニルグアエトール、チモール、リナロール、ベンズアルデヒド、桂皮アルデヒド、Ｎ−エチル−ｐ−メンタン−３−カルボキサミン、Ｎ，２，３−トリメチル−２−イソプロピルブタンアミド、３−（１−メントキシ）−プロパン−１，２−ジオール、桂皮アルデヒドグリセロールアセタール（ＣＧＡ）及びメントングリセロールアセタール（ＭＧＡ）が挙げられる。１つ以上の風味剤は、任意選択的に、開示した口腔ケア組成物中において、例えば約０．０１〜５．０ｗｔ％（例えば、約０．１〜２．５ｗｔ％）の総量で存在する。
【０１８３】
特定の実施形態における口腔ケア組成物は、少なくとも１つの重炭酸塩を含み得る。例えば、重炭酸ナトリウム又は重炭酸カリウムなどの重炭酸アルカリ金属塩及び重炭酸アンモニウムなど、経口的に許容される任意の重炭酸塩を使用することができる。１つ以上の重炭酸塩は、任意選択的に、本明細書に開示した口腔ケア組成物中において、例えば約０．１〜５０ｗｔ％（例えば、約１〜２０ｗｔ％）の総量で存在する。
【０１８４】
特定の実施形態における口腔ケア組成物は、少なくとも１つの増白剤及び／又は着色料を含み得る。好適な増白剤は、米国特許第８５４０９７１号明細書に開示されているものなどの過酸化物であり、これは、参照により本明細書に組み込まれる。本明細書の好適な着色料としては、例えば、顔料、染料、レーキ及びパール剤などの特定の光沢又は反射率を付与する化学物質が挙げられる。本明細書の有用な着色料の具体例としては、タルク；マイカ；炭酸マグネシウム；炭酸カルシウム；ケイ酸マグネシウム；ケイ酸マグネシウムアルミニウム；シリカ；二酸化チタン；酸化亜鉛；赤色、黄色、褐色及び黒色酸化鉄；第二鉄アンモニウムフェロシアン化合物；マンガンバイオレット；ウルトラマリン；チタン化マイカ；並びにオキシ塩化ビスマスが挙げられる。１つ以上の着色剤は、任意選択的に、開示した口腔ケア組成物中において、例えば約０．００１〜２０ｗｔ％（例えば、約０．０１〜１０ｗｔ％又は約０．１〜５．０ｗｔ％）の総量で存在する。
【０１８５】
本明細書の口腔ケア組成物中に任意選択的に含まれ得る更なる成分には、例えば、１つ以上の（上記の）酵素、ビタミン類及び抗接着剤が挙げられる。本明細書で有用なビタミン類の例としては、ビタミンＣ、ビタミンＥ、ビタミンＢ５及び葉酸が挙げられる。好適な抗接着剤の例としては、ソルブロール、フィシン及びクオラムセンシング阻害剤が挙げられる。
【０１８６】
本開示は、材料を処理する方法にも関する。本方法は、材料を、本明細書に開示した少なくとも１つのグラフトコポリマー化合物を含む水性組成物と接触させることを含む。
【０１８７】
本明細書の接触方法において水性組成物と接触させる材料は、特定の実施形態における織物を含み得る。本明細書の織物は、天然繊維、合成繊維、半合成繊維又はこれらの任意の組み合わせを含み得る。本明細書の半合成繊維は、化学的に誘導体化されている天然由来の材料を使用して製造され、その１つの例は、レーヨンである。本明細書の織物タイプの非限定的な例としては、（ｉ）セルロース繊維、例えば綿（例えば、ブロードクロス、キャンバス、シャンブレー、シェニール、チンツ、コーデュロイ、クレトン、ダマスク、デニム、フランネル、ギンガム、ジャガード、ニット、マテラーゼ、オックスフォード、パーケール、ポプリン、プリッス、サテン、シャーサッカー、シアー、テリークロス、ツイル、ベルベット）、レーヨン（例えば、ビスコース、モーダル、リオセル）、リネン及びＴｅｎｃｅｌ（登録商標）；（ｉｉ）タンパク質性繊維、例えばシルク、ウール及び関連哺乳動物繊維；（ｉｉｉ）合成繊維、例えばポリエステル、アクリル、ナイロンなど；（ｉｖ）ジュート、亜麻、ラミー、コイア、カポック、サイザル、ヘネッケン、アバカ、ヘンプ及びサンヘンプ由来の植物性長繊維；並びに（ｖ）（ｉ）〜（ｉｖ）の織物の任意の組み合わせから製造された織物が挙げられる。織物タイプ（例えば、天然及び合成）の組み合わせを含む織物としては、例えば、綿繊維及びポリエステルの両方を備える織物が挙げられる。本明細書の１つ以上の織物を含有する材料／物品としては、例えば、衣類、カーテン、ドレープ、室内装飾材料、カーペット、ベッド用シーツ類、浴用リネン、テーブルクロス、寝袋、テント、自動車内装などが挙げられる。天然及び／又は合成繊維を含む他の材料としては、例えば、不織布、詰め物、紙及び発泡体が挙げられる。
【０１８８】
織物と接触させる水性組成物は、例えば、織物ケア組成物（例えば、洗濯用洗剤、織物用柔軟剤）であり得る。したがって、特定の実施形態における処理方法は、その中で織物ケア組成物を使用する場合に織物ケア法又は洗濯法であると見なすことができる。本明細書の織物ケア組成物は、下記の織物ケアの利点（すなわち表面直接効果）：しわ除去、しわ取り、防しわ性、織物摩耗減少、織物耐摩耗性、織物のけば立ち減少、織物の寿命延長、織物のカラー維持、織物の退色減少、染料移動の減少、織物の色復元、織物の汚れ減少、織物の汚れ放出、織物の形状保持、織物の平滑性増強、織物上への汚れ再付着防止、洗濯物の灰色化防止、織物の風合／手触りの向上及び／又は縮み減少の１つ以上を達成すると考えられる。
【０１８９】
本明細書の織物ケア法又は洗濯法を実施するための条件（例えば、時間、温度、洗浄／すすぎ量）の例は、国際公開第１９９７／００３１６１号パンフレット並びに米国特許第４７９４６６１号明細書、同第４５８０４２１号明細書及び同第５９４５３９４号明細書（これらは、参照により本明細書に組み込まれる）に開示されている。他の例では、織物を含む材料は、本明細書の水性組成物と、（ｉ）少なくとも約５、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０若しくは１２０分間にわたり；（ｉｉ）少なくとも約１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０若しくは９５℃（例えば、洗濯洗浄又はすすぎのためには；約１５〜３０℃の「低」温、約３０〜５０℃の「中」温、約５０〜９５℃の「高」温）で；（ｉｉｉ）約２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１若しくは１２のｐＨ（例えば、約２〜１２又は約３〜１１のｐＨ範囲）で；（ｉｖ）少なくとも約０．５、１．０、１．５、２．０、２．５、３．０、３．５若しくは４．０ｗｔ％の塩（例えば、ＮａＣｌ）濃度で；又は（ｉ）〜（ｉｖ）の任意の組み合わせで接触させることができる。
【０１９０】
織物ケア法又は洗濯法における接触工程は、例えば、洗浄工程、浸漬工程及び／又はすすぎ工程のいずれかを含み得る。なお更なる実施形態における材料又は織物の接触は、当技術分野で既知の方法、例えば溶解、混合、振盪、噴霧、処理、浸漬、フラッシュ洗浄、上若しくは中への注入、結合、塗装、コーティング、塗布、貼付及び／又は有効量の本明細に記載のグラフトコポリマー化合物の織物若しくは材料への移行によって実施することができる。なお更なる実施形態では、接触は、織物を処理して実質的表面効果を付与するために使用され得る。本明細書で使用する場合、用語「織物の風合」又は「手触り」は、物理的、生理学的、心理学的、社会的又はそれらの任意の組み合わせであり得る織物に対する個人の触覚感覚反応を指す。一実施形態では、織物の風合は、相対風合値を測定するためのＰｈａｂｒＯｍｅｔｅｒ（登録商標）システム（Ｎｕ  Ｃｙｂｅｒｔｅｋ，Ｉｎｃ．Ｄａｖｉｓ，ＣＡから入手できる）を使用して測定できる（米国繊維化学者・色彩技術者協会［ＡＡＴＣＣ  ｔｅｓｔ  ｍｅｔｈｏｄ，“２０２−２０１２，Ｒｅｌａｔｉｖｅ  Ｈａｎｄ  Ｖａｌｕｅ  ｏｆ  Ｔｅｘｔｉｌｅｓ：Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔａｌ  Ｍｅｔｈｏｄ”］）。
【０１９１】
織物を含む材料を処理する特定の実施形態では、水性組成物のグラフトコポリマー化合物構成成分は、織物に吸着する。この特徴は、本明細書のグラフトコポリマー化合物を本明細書に開示した織物ケア組成物中の（それらの粘度修飾効果に加えて）再付着防止剤及び／又は抗灰色化剤として有用にさせると考えられる。本明細書の再付着防止剤又は灰色化防止剤は、汚れが取り除かれた後に洗浄水中の衣類に汚れが再付着しないようにするのに役立つ。更に、本明細書の１つ以上のグラフトコポリマー化合物の織物への吸着は、その織物の機械的特性を強化することも企図されている。
【０１９２】
本明細書のグラフトコポリマー化合物の織物への吸着は、例えば、測色技術（例えば、Ｄｕｂｏｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９５６，Ａｎａｌ．Ｃｈｅｍ．２８：３５０−３５６；ＺｅｍｌｊｉｔＳ  ｅｔ  ａｌ．，２００６，Ｌｅｎｚｉｎｇｅｒ  Ｂｅｒｉｃｈｔｅ  ８５：６８−７６；これらの両方は、参照により本明細書に組み込まれる）又は当技術分野で既知の他の任意の方法を用いて測定することができる。
【０１９３】
上記の処理法において接触させることのできる他の材料としては、食器用洗剤（例えば、自動食器洗い機用洗剤又は食器手洗い用洗剤）を用いて処理できる表面が挙げられる。そのような材料の例としては、セラミック材料、磁器、金属、ガラス、プラスチック（例えば、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリスチレンなど）及び木で作られた皿、グラス、ポット、鍋、グラタン皿、調理器具及び食卓食器（本明細書では集合的に「食器類」と呼ぶ）の表面が挙げられる。したがって、特定の実施形態における処理方法は、例えば、食器洗い法又は食器類洗浄法であると見なすことができる。本明細書の食器洗い法又は食器類洗浄法を実施するための条件（例えば、時間、温度、洗浄量）の例は、米国特許第８５７５０８３号明細書に開示されており、これは、参照により本明細書に組み込まれる。他の例では、食卓用食器製品は、本明細書の水性組成物を、例えば織物を含む材料と接触させることに関して上記に開示した条件のいずれかなどの好適な一連の条件下で接触させることができる。
【０１９４】
上記処理法において接触させることができる他の材料としては、舌、硬口蓋及び軟口蓋、頬粘膜、歯肉及び歯の表面（例えば、天然の歯又は歯冠、キャップ、充填物、ブリッジ、義歯又は歯科用インプラントなどの人工歯の硬質の表面）の表面を含む、口腔内の軟質又は硬質表面などの口腔表面が挙げられる。したがって、特定の実施形態における処理方法は、例えば、口腔ケア法又は歯科治療法であると見なすことができる。口腔表面を本明細書の水性組成物と接触させる条件（例えば、時間、温度）は、そのような接触を行う使用目的に適したものでなければならない。処理法で接触させることのできる他の表面としては、皮膚、毛髪又は爪などの外皮系の表面も挙げられる。
【０１９５】
したがって、本開示の特定の実施形態は、本明細書のグラフトコポリマー化合物を含む材料（例えば、織物）に関する。そのような材料は、例えば、本明細書に開示した材料処理方法に従って生成することができる。材料は、化合物が材料の表面に吸着されるか又は他に接触される場合、特定の実施形態ではグラフトコポリマー化合物を含み得る。
【０１９６】
本明細書の材料を処理する方法の特定の実施形態は、材料を水性組成物と接触させた後、乾燥させる乾燥工程を更に含む。乾燥工程は、接触工程の直後又は接触工程に続き得る１つ以上の追加の工程後に実施することができる（例えば、本明細書の水性組成物中で洗浄した後、例えば水で濯ぎ、その後、布を乾燥させる）。乾燥は、風乾（例えば、約２０〜２５℃）又は例えば少なくとも約３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１２０、１４０、１６０、１７０、１７５、１８０若しくは２００℃の温度でなど、当技術分野で既知のいくつかの任意の手段で実施することができる。本明細書における乾燥した材料は、典型的には、その材料中に３、２、１、０．５又は０．１ｗｔ％未満の水分を含む。織物は、任意選択的に乾燥させる工程を実施するために好ましい材料である。
【０１９７】
本明細書の処理法において使用される水性組成物は、例えば、上記の実施形態又は下記の実施例におけるように、本明細書に開示した任意の水性組成物であり得る。したがって、水性組成物のグラフトコポリマー構成成分は、本明細書に開示したいずれかであり得る。水性組成物の例としては、洗剤（例えば、洗濯用洗剤又は食器用洗剤）及び練り歯磨きなどの水含有歯磨き剤が挙げられる。
【０１９８】
本開示の特定の実施形態は、α−１，３−グルカンを生成する方法であって、（ａ）少なくとも（ｉ）水、（ｉｉ）スクロース、（ｉｉｉ）約１％〜５０％のα−１，２分枝で変性されたデキストラン、及び（ｉｖ）少なくとも約５０％のα−１，３−グリコシド結合を含むα−１，３−グルカンを合成するグルコシルトランスフェラーゼ酵素を接触させ、それにより酵素反応を提供することであって、それにより、少なくとも約５０％のα−１，３グリコシド結合を含むα−１，３−グルカンが生成される、提供することと、（ｂ）任意選択的に、工程（ａ）で生成されたα−１，３−グルカンを単離することとを含む方法に関する。この方法は、本明細書のグラフトコポリマーを生成する方法に加えてなされ、これは、α−１，３−グルカンを生成する方法にも相当する。有意に、この方法の工程（ａ）は、酵素反応のα−１，３−グルカン生成物の分子量を調節するのに使用され得る。特に、α−１，２分枝の割合が低いデキストランを使用すると、α−１，２分枝の割合が高いデキストランを使用する場合（同一又は類似である他の反応条件全て）と比較して分子量の大きい／増加したα−１，３−グルカンが生成される。例えば、約２９．２％、１８．６％、９．２％又は０％のα−１，２分枝を有するデキストランを含む反応（約１００〜１１０ｇ／Ｌのスクロース）は、それぞれ約、平均で１４９９（表１２）、１５７７（表２）、２１１５（表４）又は２７９０（表１０）のＤＰｗを有するα−１，３−グルカングラフトコポリマーを生成したことが以下の実施例から留意される。いくつかの態様では、使用のために選択されたデキストランのα−１，２分枝の割合は、グラフトコポリマー生成物の分子量増加を達成するために、適切な場合、約３０％、２５％、２０％、１５％又は１０％から約２０％、１５％、１０％、５％又は２．５％減少させる。いくつかの態様では、分子量の増加は、約又は少なくとも約５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％又は１００％であり得る。
【０１９９】
いくつかの態様では、α−１，２分枝で変性されたデキストランの濃度を上げると、デキストランをより低濃度で使用した場合（同一又は類似である他の反応条件全て）と比較してより分子量の小さいα−１，３−グルカングラフトコポリマーが生成される。この特徴は、例えば、以下の実施例でも観察され得る（例えば、表２、４、１０、１５及び１６を参照されたい）。いくつかの態様では、分子量の減少は、約又は少なくとも約５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％又は７０％であり得る。
【０２００】
α−１，３−グルカン生成物の分子量を（上方又は下方に）調整するための本明細書における方法の前述の特徴のいずれかは、上記又は以下の実施例など、本明細書の他の箇所に記載されているとおりであり得る。例えば、使用されるデキストランは、実質的に直鎖のデキストラン又は完全に直鎖のデキストラン（約１〜５０％のα−１，２分枝で変性する前）であり得る。いくつかの態様では、約１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１１％、１２％、１３％、１４％、１５％、１６％、１７％、１８％、１９％、２０％、２１％、２２％、２３％、２４％、２５％、２６％、２７％、２８％、２９％、３０％、３１％、３２％、３３％、３４％、３５％、３６％、３７％、３８％、３９％、４０％、４１％、４２％、４３％、４４％、４５％、４６％、４７％、４８％、４９％、５０％、１〜３１％、１〜３０％、９〜３１％、９〜３０％、１０〜３１％又は１０〜３０％のα−１，２分枝を有するデキストランを用いることができる。いくつかの態様（例えば、グラフトコポリマー生成物の分子量を小さくすること）では、本明細書の反応で使用されるデキストランの濃度は、適切な場合、約０．０５、０．１、０．２、０．５、１．０、２．０又は２．５ｇ／Ｌから約０．５、１．０、２．０、２．５、５．０又は１０．０ｇ／Ｌ増加し得る。
【０２０１】
本明細書に開示される組成物及び方法の非限定的な例としては、以下が挙げられる。
１．グラフトコポリマー又はそのエーテル誘導体若しくはエステル誘導体を含む組成物であって、グラフトコポリマーは、（ｉ）約１％〜２５％のα−１，２分枝で変性されたデキストランを含む主鎖と、（ｉｉ）少なくとも約５０％のα−１，３グリコシド結合を含む１つ以上のα−１，３−グルカン側鎖とを含む、組成物。
２．デキストランは、約１％〜２５％のα−１，２分枝で変性された実質的に直鎖のデキストラン（例えば、完全に直鎖のデキストラン）である、実施形態１に記載の組成物。
３．デキストランは、約５％〜２５％のα−１，２分枝で変性されている、実施形態１又は２に記載の組成物。
４．α−１，２分枝の１つ以上は、長さにおいて単一のグルコースモノマーである、実施形態１、２又は３に記載の組成物。
５．主鎖の重量平均重合度（ＤＰｗ）は、約１０〜５００である、実施形態１、２、３又は４に記載の組成物。
６．α−１，３−グルカン側鎖は、少なくとも約９０％のα−１，３グリコシド結合を含む、実施形態１、２、３、４又は５に記載の組成物。
７．１つ以上のα−１，３−グルカン側鎖のＤＰ又はＤＰｗは、少なくとも約１０又は１００である、実施形態１、２、３、４、５又は６に記載の組成物。
８．グラフトコポリマー又はそのエーテル誘導体若しくはエステル誘導体は、水性条件下で不溶性であるか、又はグラフトコポリマー又はそのエーテル誘導体若しくはエステル誘導体は、水性条件下で可溶性である、実施形態１、２、３、４、５、６又は７に記載の組成物。
９．グラフトコポリマーは、少なくとも水、スクロース、デキストラン及び少なくとも約５０％のα−１，３グリコシド結合を有するα−１，３−グルカンを合成するグルコシルトランスフェラーゼ酵素を含む反応組成物中で生成される、実施形態１、２、３、４、５、６、７又は８に記載の組成物。
１０．家庭用ケア製品、パーソナルケア製品、工業製品、医薬製品又は食品である、実施形態１、２、３、４、５、６、７、８又は９に記載の組成物。
１１．（ａ）フィルム若しくはコーティングであって、任意選択的に、フィルムの破断点伸び率は、少なくとも約２０％である、フィルム若しくはコーティング、又は（ｂ）任意選択的に織物ケア組成物である洗剤組成物である、実施形態１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０に記載の組成物。
１２．グラフトコポリマーを生成する方法であって、（ａ）少なくとも（ｉ）水、（ｉｉ）スクロース、（ｉｉｉ）約１％〜２５％のα−１，２分枝で変性されたデキストラン、及び（ｉｖ）少なくとも約５０％のα−１，３−グリコシド結合を含むα−１，３−グルカンを合成するグルコシルトランスフェラーゼ酵素を接触させることであって、それにより、実施形態１〜８のいずれか１つに記載の組成物に従うグラフトコポリマーが生成される、接触させることと、（ｂ）任意選択的に、工程（ａ）で生成されたグラフトコポリマーを単離することとを含む方法。
１３．デキストランは、１％〜２５％のα−１，２分枝で変性された実質的に直鎖のデキストラン（例えば、完全に直鎖のデキストラン）である、実施形態１２に記載の方法。
１４．デキストランは、約５％〜２０％のα−１，２分枝で変性されている、実施形態１２又は１３に記載の方法。
１５．デキストランのスクロースに対する重量比は、約１：１００〜約１：５である、実施形態１２、１３又は１４に記載の方法。
１６．フィルムを生成するための方法であって、（ａ）実施形態１〜８のいずれか１つに記載のグラフトコポリマー又はそのエーテル誘導体若しくはエステル誘導体（又は実施形態９に記載の反応組成物中で生成された不溶性グラフトコポリマー）を溶媒中に溶解させて溶液を提供することと、（ｂ）溶液を表面と接触させることと、（ｃ）溶媒を除去して（例えば、溶液を乾燥及び／又は凝固させることにより）フィルムを形成することとを含む方法。
１７．（ａ）の溶液は、１５ｗｔ％未満のグラフトコポリマー又はそのエーテル誘導体若しくはエステル誘導体を含む、実施形態１６に記載の方法。
１８．α−１，３−グルカンを生成する方法であって、（ａ）少なくとも（ｉ）水、（ｉｉ）スクロース、（ｉｉｉ）約１％〜５０％のα−１，２分枝で変性されたデキストラン（例えば、約１％〜５０％のα−１，２分枝で変性された実質的に直鎖のデキストラン又は完全に直鎖のデキストラン）、及び（ｉｖ）少なくとも約５０％のα−１，３−グリコシド結合を含むα−１，３−グルカンを合成するグルコシルトランスフェラーゼ酵素を接触させ、それにより酵素反応を提供することであって、それにより、少なくとも約５０％のα−１，３グリコシド結合を含むα−１，３−グルカンが生成される、提供することと、（ｂ）任意選択的に、工程（ａ）で生成されたα−１，３−グルカンを単離することとを含む方法。
【実施例】
【０２０２】
以下の実施例において、本開示を更に例示する。これらの実施例は、本発明の特定の態様を示しているが、単に説明の目的でのみ示されていることが理解されるべきである。上述の考察及びこれらの実施例から、当業者であれば、本明細書に開示した実施形態の本質的な特徴を確認することができ、本発明の趣旨及び範囲を逸脱しない範囲で、本明細書に開示した実施形態を様々な使用及び条件に適合させるために様々な変更形態及び修飾形態をなし得る。
【０２０３】
一般的方法
反応プロファイルの分析
屈折率（ＲＩ）検出器を備えたＡｇｉｌｅｎｔ  １２００シリーズ装置を用いて、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）の試料を分析した。分析は、２つの別個のカラム：ＤＰ３未満の糖類分離のためにＢｉｏ−Ｒａｄ  ＡＭＩＮＥＸ  ８７Ｃ（カラム１）及びＤＰ２〜ＤＰ７及びそれを超えるＤＰオリゴ糖（ＤＰ８＋）分離のためにＢｉｏ−Ｒａｄ  ＡＭＩＮＥＸ  ４２Ａ（カラム２）で実施した：カラム１での定量のために、スクロース（０．１〜５０ｇ／Ｌ）、フルクトース（０．１〜１００ｇ／Ｌ）、ロイクロース（０．１〜１００ｇ／Ｌ）及びグルコース（０．１〜１００ｇ／Ｌ）について直線検量線を作成した。カラム２での定量のために、ＤＰ２（０．０４〜１０ｇ／Ｌ）、ＤＰ３（０．０４〜１０ｇ／Ｌ）、ＤＰ４（０．０４〜１０ｇ／Ｌ）、ＤＰ５（０．０４〜１０ｇ／Ｌ）、ＤＰ６（０．０４〜１０ｇ／Ｌ）、ＤＰ７（０．０４〜１０ｇ／Ｌ）及びＤＰ８＋（０．２５〜１０ｇ／Ｌ）のオリゴ糖について直線検量線を作成した。ＤＰ８＋オリゴ糖の検量線作成は、Ｐ１プライマー（以下の実施例１に記載されている）を用いて実施した。プライムされていない又はプライムされた反応で合成されるようなα−１，３−グルカンの収率は、反応物のグルコシル構成成分を基準として測定される。
【０２０４】
グルカン分子量の分析
グルコシルトランスフェラーゼ反応から単離した不溶性グルカンポリマーウェットケーキを、１００℃で１６時間、５％塩化リチウム（ＬｉＣｌ）を含むＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（ＤＭＡｃ）で処理して、グルカンポリマー溶液を形成した。次いで、この溶液（１００μＬ）を、両方とも５０℃で操作する、Ｗｙａｔｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ（Ｓａｎｔａ  Ｂａｒｂａｒａ，ＣＡ）からの示差屈折率検出器及び多角度光散乱検出器を備えたＡｌｌｉａｎｃｅＴＭ２６９５  ＨＰＬＣ（Ｗａｔｅｒｓ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、Ｍｉｌｆｏｒｄ、ＭＡ）に注入した。移動相（０．１１ｗｔ％のＬｉＣｌを含有するＤＭＡｃ）を０．５ｍＬ／分の流量において、直列に連結した４つのスチレン−ジビニルベンゼンカラム、具体的には１つのＫＤ−８０２、１つのＫＤ−８０１及び２つのリニアＫＤ−８０６Ｍカラム（Ｓｈｏｄｅｘ、Ｊａｐａｎ）に通した。グルカンポリマー試料の分子量分布並びにその平均モル質量（Ｍｎ、Ｍｗ及びＭｚ）を、ＷｙａｔｔからのＡｓｔｒａＴＭＳＥＣ−ＬＳデータ整理ソフトウェアパッケージを用いて決定した。平均重合度の値、例えばＤＰｗは、対応する平均モル質量を１６２で除算することにより算出した。
【０２０５】
グリコシド結合の決定
グルコシルトランスフェラーゼによって合成されたグルカン生成物中のグリコシド結合は、１Ｈ  ＮＭＲ（核磁気共鳴）分光法によって決定した。乾燥グルカンポリマー（６〜８ｍｇ）は、室温で一晩撹拌することにより、重水素化ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ−ｄ６）中３ｗｔ％塩化リチウム（ＬｉＣｌ）０．７５ｍＬに溶解させた。次いで、重水素化水（Ｄ２Ｏ）を添加し（０．０５ｍＬ）、試料を８０℃で約１時間加熱して、グルカンポリマー上のプロトン化ヒドロキシルを交換し、完全に溶解させた。得られた６００μＬの透明な均一溶液を５ｍｍのＮＭＲの管に移した。１Ｈ  ＮＭＲスペクトルを使用してグリコシド結合を定量化し、実験の２Ｄ  １Ｈ，１３Ｃホモ／ヘテロ−核スイートを使用してグルカン結合を同定した。データは、８０℃で収集され、５００ＭＨｚ又は６００ＭＨｚのいずれかで稼働しながら、Ｂｒｕｋｅｒ  Ａｖａｎｃｅ  ＩＩＩ  ＮＭＲ分光計で処理された。システムは、プロトン最適化クライオプローブを装備している。
【０２０６】
プライマーの組み込み割合
本明細書のデキストランプライマーの組み込み割合を、以下の式：（消費されたプライマーのｇ／Ｌ）／（出発プライマーのｇ／Ｌ）×１００％を用いて算出した。
【０２０７】
高収率α−１，３−グルカン−生成グルコシルトランスフェラーゼ酵素
アミノ酸置換を調製するために使用されるグルコシルトランスフェラーゼのアミノ酸配列は、配列番号４（ＧＴＦ６８５５）であり、これは、本質的にストレプトコッカス・サリバリウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｓａｌｉｖａｒｉｕｓ）ＳＫ１２６（表１を参照されたい）由来の全長野生型グルコシルトランスフェラーゼ（配列番号６２によって表される）のＮ末端がトランケートされた（シグナルペプチド及び可変領域が除去された）バージョンである。配列番号４においてなされる置換は、配列番号４の各アミノ酸残基／位置（配列番号４のＭｅｔ−１残基を除く）が配列番号６２内のアミノ酸残基／位置と適宜に対応するため、天然のアミノ酸残基に対する置換として特徴付けることができる。少なくともスクロース及び水を含む反応において、配列番号４のグルコシルトランスフェラーゼは、典型的には、約１００％のα−１，３結合及び４００以上のＤＰｗを有するα−グルカンを生成する（例えば、米国特許第８８７１４７４号明細書及び同第９１６９５０６号明細書並びに米国特許出願公開第２０１７／０００２３３６号明細書及び同第２０１７／０００２３３５号明細書（これらは、参照により本明細書に組み込まれる）を参照されたい）。不溶性であるこのα−グルカン生成物は、例えば、濾過を介して酵素的合成後に単離することができる。
【０２０８】
要約すると、配列番号４（ＧＴＦ６８５５）に対して、特定の組み合わせのアミノ酸置換を行った。これらの置換を下の表Ａ及び表Ｂに列記する。表Ａに示した各バリアント酵素を、以下と同じ又は類似のパラメータを用いてグルカン合成反応に投入した：容器、１２０ｒｐｍで撹拌される２５０ｍＬのくぼみ付き振盪フラスコ；初期ｐＨ、５．７；反応体積、５０ｍＬ；スクロース、７５ｇ／Ｌ；ＧＴＦ、酵素を異種性発現する大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）細胞の１．５ｍＬの溶解物；ＫＨ２ＰＯ４、２０ｍＭ；温度、３０℃；時間、約２０〜２４時間。これらの反応のα−１，３−グルカン収率（ＨＰＬＣ分析により測定された）を表Ａに示す。
【０２０９】
【表４】
2021507955.tif 000007
【０２１０】
表Ｂに示した各バリアント酵素を、以下と同じ又は類似のパラメータを用いたグルカン合成反応に投入した：容器、ガラス撹拌棒上にテフロン（Ｔｅｆｌｏｎ）（登録商標）刃傾斜タービン（４５°角）を備え、５０〜２００ｒｐｍで撹拌した５００ｍＬのジャケット付き反応器；初期ｐＨ、５．５；反応体積、５００ｍＬ；スクロース、１０８ｇ／Ｌ；ＫＨ２ＰＯ４、１ｍＭ；温度、３９℃；時間、約１８〜２４時間；前のα−１，３−グルカン合成反応からの濾液、５０体積％。これらの反応のα−１，３−グルカン収率（ＨＰＬＣ分析により測定された）を表Ｂに示す。
【０２１１】
【表５】
2021507955.tif 000008
【０２１２】
より小さい分子量のα−１，３−グルカンを生成するグルコシルトランスフェラーゼ酵素
上述のように、配列番号４（ＧＴＦ６８５５）は、アミノ酸置換を調製するのに使用され得るグルコシルトランスフェラーゼのアミノ酸配列である。要約すると、アミノ酸置換の特定の組み合わせを配列番号４に行うと、より小さい分子量のα−１，３−グルカン（非変性ＧＴＦ６８５５のα−１，３−グルカン生成物と比較して）を生成するグルコシルトランスフェラーゼをもたらし得る。これらの置換を下の表Ｃ及び表Ｄに列記する。これらの表におけるデータを収集するために、各バリアント酵素を、以下と同じ又は類似のパラメータを用いたグルカン合成反応に投入した：容器、７５ｒｐｍで撹拌される５０ｍＬの振盪フラスコ；初期ｐＨ、５．７；反応体積、１０ｍＬ；スクロース、４００ｇ／Ｌ；ＧＴＦ、０．３ｍＬの培養上清（酵素を異種性発現する大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）細胞の溶解物から調製された）；ＫＨ２ＰＯ４、５ｍＭ；温度、３５℃；時間、約２日；不活性化、８０℃で３０分間加熱した。反応で生成された不溶性グルカンポリマーを個別に回収し、水洗浄し、標準的なＳＥＣ手法により分子の大きさ（ＤＰｗ）について分析した（ＤＰｗデータに関する表Ｃ及びＤを参照されたい）。表Ｃ及びＤで列挙されたアミノ酸置換のいずれかを有するグルコシルトランスフェラーゼは、本明細書に開示する主題を実施するに際して有用でなければならない。
【０２１３】
【表６】
2021507955.tif 000009
【０２１４】
【表７】
2021507955.tif 000010
【０２１５】
【表８】
2021507955.tif 000011
【０２１６】
【表９】
2021507955.tif 000012
【０２１７】
【表１０】
2021507955.tif 000013
【０２１８】
【表１１】
2021507955.tif 000014
【０２１９】
より大きい分子量のα−１，３−グルカンを生成するグルコシルトランスフェラーゼ酵素
上述のように、配列番号４（ＧＴＦ６８５５）は、アミノ酸置換を調製するのに使用され得るグルコシルトランスフェラーゼのアミノ酸配列である。要約すると、特定のアミノ酸置換を配列番号４に行うと、より大きい分子量のα−１，３−グルカン（非変性ＧＴＦ６８５５のα−１，３−グルカン生成物と比較して）を生成するグルコシルトランスフェラーゼをもたらし得る。これらの置換のいくつかは、以下の表Ｅ及びＦに、分子量に実質的な影響を与えなかった変異とともに列挙される。これらの表におけるデータを収集するために、各バリアント酵素を、米国特許出願公開第１６／１２７，２８８号明細書（参照により本明細書に組み込まれる）に開示されているパラメータを用いたグルカン合成反応に投入した。表Ｅ及びＦで列挙されたアミノ酸置換のいずれかを有するグルコシルトランスフェラーゼは、本明細書に開示する主題を実施するに際して有用であると考えられる。
【０２２０】
【表１２】
2021507955.tif 000015
【０２２１】
【表１３】
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【０２２２】
実施例１
１８．６％のα−１，２分枝を有するデキストランを含有するグルコシルトランスフェラーゼ反応におけるα−１，３−グルカン生成
本実施例は、１８．６％のα−１，２分枝を有するように予め変性されたデキストランでα−１，３−グルカン合成反応をプライムすることについて記載する。デキストラン主鎖及びα−１，３−グルカンアームを含むグラフトコポリマーを合成した。
【０２２３】
α−１，２−分枝状デキストランを生成し、α−１，３−グルカン合成のためのグルコシルトランスフェラーゼ反応をプライムした。このプライマーの調製は、基本的に、国際公開第２０１７／０９１５３３号パンフレット及び米国特許出願公開第２０１８／０２８２３８５号明細書（これらは、両方とも参照により本明細書に組み込まれる）に記載されているとおりに実施された。要約すると、分子量約１４ｋＤａ（約８９のＤＰｗ）の直鎖デキストラン（すなわち１００％のα−１，６グリコシド結合を有する多糖）を、グルコシルトランスフェラーゼＧＴＦ８１１７（配列番号６６）を用いて生成した。次いで、このデキストランを、α−１，２−分枝酵素ＧＴＦＪ１８Ｔ１（配列番号７０）を使用して、１８．６％のα−１，２−分枝を有するように変性させた。得られたα−１，２−分枝状デキストラン（約１１０（約１７ｋＤａ）のＤＰｗを有した）は、本明細書においてＰ１プライマーと呼ばれる。
【０２２４】
次いで、Ｐ１プライマーを、グルコシルトランスフェラーゼを含むα−１，３−グルカン合成反応に含ませ、デキストラン主鎖及びα−１，３−グルカンアームを含むグラフトコポリマーを生成した。約１００％のα−１，３結合を有するα−１，３−グルカンを生成するこれらの反応で使用されるグルコシルトランスフェラーゼは、この酵素が、酵素の未改変の対応するものと比較してスクロース基質からより多くの生成物（α−１，３−グルカン及びフルクトース）と、より少ない副生成物（例えば、グルコース、オリゴ糖（ロイクロース、ＤＰ２〜７グルコ−オリゴ糖など））とを生成できるように、その触媒ドメインを改変したストレプトコッカス・サリバリウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ．ｓａｌｉｖａｒｉｕｓ）グルコシルトランスフェラーゼであった。一般法のセクションは、この非天然グルコシルトランスフェラーゼ（表Ａ）の調製について記載する。
【０２２５】
８つの別個の１００ｍＬのα−１，３−グルカン合成反応をプラスチックの２５０ｍＬ振盪フラスコで実施した。各反応は、水、スクロース（およそ５０又は１００ｇ／Ｌ）、リン酸バッファ（５ｍＭ）、Ｐ１プライマー（およそ０〜１０ｇ／Ｌ）及びグルコシルトランスフェラーゼ（上記）を含んでいた。反応は、１０又は２０ｍＬの５００ｇ／Ｌのスクロースストック溶液を５ｍＬの１００ｍＭリン酸ナトリウムバッファストック（数滴のＮａＯＨ又はリン酸溶液でｐＨ５．５に調節した）と混合することにより調製した。２５ｇ／ＬのＰ１プライマーストックを使用して、５０又は１００ｇ／Ｌのスクロースを含有する各調製物に０、４、１０又は４０ｍＬを添加することにより、０、１、２．５又は１０ｇ／Ｌの最終濃度を達成し、合計８つの別個の反応調製物を得た。脱イオンしたサブミクロンの濾過水を添加し、最終体積を１００ｍＬとした。各調製物から０．５ｍＬのアリコートを取り出し、その後、０．２２５６ｍＬのグルコシルトランスフェラーゼ酵素ストックを添加し、（１００Ｕ／Ｌの最終酵素濃度の場合に）α−１，３−グルカン合成のための各反応を開始させた。反応を３０℃で実施した。
【０２２６】
反応開始から１、２、３及び２４時間後、１ｍＬの各反応物をマイクロ遠心チューブに取り出した。試料をドライヒートブロック中で８０℃まで約１０分間加熱し、グルコシルトランスフェラーゼを不活性化し、反応を停止させた。次いで、不活性化試料を卓上遠心機で１２，０００ＲＰＭで１０分間回転させ、水不溶性ポリマー生成物をペレット化した。上清を取り出し、ＨＰＬＣ分析のために、０．４５μｍのＷＨＡＴＭＡＮシリンジレスフィルタに通して濾過した。２４時間後、全ての反応物を８０℃の水浴内に約３０分間おいて、グルコシルトランスフェラーゼを不活性化し、反応を停止させた。不活性化した反応物を約１０μｍのＣＨＥＭＲＵＳフリット化フィルタ上に装填し、ほぼ乾燥するまで真空濾過し、約１００ｍＬの冷脱イオン水で２回洗浄して、ポリマーウェットケーキを形成した。約３００〜５００ｍｇの各ウェットケーキをサイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）分析のためにとっておくとともに、各ウェットケーキの残部を真空オーブン内で４０℃、−４０ｃｍＨｇにおいて乾燥させた。
【０２２７】
ＳＥＣ分析を実施して、不溶性ポリマー生成物の分子量及び重合度（ＤＰ）を決定した。ＰＤＩ（多分散指数）値は、これらのデータを用いて算出した。各不溶性ポリマー生成物のグリコシド結合プロファイルは、少量のＤ２Ｏを含有する３％ＬｉＣｌ／ＤＭＳＯ−ｄ６に溶解した乾燥ポリマーを使用して１Ｈ  ＮＭＲにより決定した。表２は、これらの分析の結果を示す。
【０２２８】
【表１４】
2021507955.tif 000017
【０２２９】
ＨＰＬＣデータを使用して、スクロース消費率、グルカンポリマー収率（グルコシルに基づく［実施例全体］）及びプライマー消費率に基づいてグルコシルトランスフェラーゼ反応の速度を推定した。プライマーの消費率を監視することで、グルカンポリマー生成物へのプライマーの組み込みを推定することができる。各反応でプライマー上にグラフトされた個別のα−１，３−グルカンアームのサイズは、追加のプライマーを含まない対照反応で生成されたα−１，３−グルカンのサイズと非常に類似していると予想された。対照反応生成物は、α−１，３−グルカンホモポリマーを含んでいた。この対照ＤＰｗ値（８６０又は７９２）及びＰ１プライマーのＤＰｗ（約１１０）を用いて３時間及び２４時間の反応時間でグルカン対プライマーのモル比（Ｍ比）を算出した。これらの分析からのデータを表３に示す。３時間と２４時間との時点間のグルカン対プライマーモル比における違いは、プライム化反応のコンシステンシーを示した。
【０２３０】
【表１５】
2021507955.tif 000018
【０２３１】
したがって、α−１，２−分枝状デキストランプライマーをα−１，３−グルカン合成反応に提供することにより、デキストラン主鎖及びα−１，３−グルカンアームを含むグラフトコポリマーを合成した。プライマーは、明らかに消費され、グラフトコポリマー生成物に組み込まれた（ＨＰＬＣ及びＮＭＲの結果に基づく）が、反応速度の変化は、最小限に見えた。より高いプライマー濃度がより高いプライマー組み込み及びより高いグルカン収量をもたらしたようであった。プライマーが存在する場合（特に１ｇ／Ｌで）、分子量の増加が観察された。これは、プライム化グルカン生成物を生成する兆候であった。ＤＰｗ及びプライマーの消費率に対するプライム化の影響は、５０ｇ／Ｌのスクロースの反応よりも１００ｇ／Ｌのスクロースの反応の方が少なく、場合により、より多くのスクロースが消費されるにつれてプライム化が減少することを示している。グラフトコポリマー生成物は、デキストランの主鎖１つ当たり平均１〜２つのα−１，３−グルカンアームを有したようであった。
【０２３２】
実施例２
９．２％のα−１，２分枝を有するデキストランを含有するグルコシルトランスフェラーゼ反応におけるα−１，３−グルカン生成
本実施例は、９．２％のα−１，２分枝を有するように予め変性されたデキストランでα−１，３−グルカン合成反応をプライムすることについて記載する。デキストラン主鎖及びα−１，３−グルカンアームを含むグラフトコポリマーを合成した。実施例１で提供された結果を考慮すると、本実施例は、デキストランプライマーのα−１，２分枝頻度を変化させることにより、α−１，３−グルカンプライム化効果を制御できることを示している。
【０２３３】
α−１，２−分枝状デキストランを生成し、α−１，３−グルカン合成のためのグルコシルトランスフェラーゼ反応をプライムした。このプライマーの調製は、（ＧＴＦＪ１８Ｔ１の代わりに）α−１，２−分枝酵素ＧＴＦ９９０５（配列番号７１）を異なる量のスクロースと共に使用し、プライマーのα−１，２分枝のレベルが９．２％（１８．６％の代わりに）であったことを除いて、国際公開第２０１７／０９１５３３号パンフレット及び米国特許出願公開第２０１８／０２８２３８５号明細書に開示されている手順に従い、実施例１に記載されているように実施した。このプライマー（約１５ｋＤａ（ＤＰｗ約９０）の分子量を有した）は、本明細書においてＰ２プライマーと呼ばれる。したがって、Ｐ１及びＰ２プライマー間の唯一の明らかな違いは、α−１，２分枝のそれぞれのレベルである。
【０２３４】
次いで、Ｐ２プライマーを、グルコシルトランスフェラーゼ（実施例１で使用されたものと同じ酵素）を含むα−１，３−グルカン合成反応に含ませ、デキストラン主鎖及びα−１，３−グルカンアームを含むグラフトコポリマーを生成した。要約すると、８つのプラスチック振盪フラスコに１０又は２０ｍＬの５００ｇ／Ｌの滅菌濾過スクロースストック溶液、５ｍＬの１００ｍＭリン酸ナトリウムバッファストック（数滴のＮａＯＨ又はリン酸溶液でｐＨ５．５に調節した）及び０、０．４８、１．２０又は４．８１ｍＬの２０８．１ｇ／ＬのＰ２プライマーストックを充填した。脱イオンしたサブミクロンの濾過水を添加し、最終体積を１００ｍＬとした。したがって、およそ５０又は１００ｇ／Ｌのスクロース、５ｍＭのリン酸バッファ及びおよそ０、１、２．５又は１０ｇ／ＬのＰ２プライマーを含有する８つの調製物を作製した。グルコシルトランスフェラーゼ酵素を添加する前に（ｔ＝０）、ＨＰＬＣ分析のために各調製物から０．５ｍＬのアリコートを取り出した。０．２２６ｍＬのグルコシルトランスフェラーゼ酵素ストックを添加することにより（１００Ｕ／Ｌの最終酵素濃度の場合）、各反応を開始させた。反応を３０℃で実施した。
【０２３５】
反応開始から１、２、３、５及び２４時間後、１ｍＬの各反応物をマイクロ遠心チューブに取り出した。試料をドライヒートブロック中で８０℃まで約１０分間加熱し、グルコシルトランスフェラーゼを不活性化し、反応を停止させた。次いで、不活性化試料を卓上遠心機で１２，０００ＲＰＭで１０分間回転させ、水不溶性ポリマー生成物をペレット化した。上清を取り出し、ＨＰＬＣ分析のために、０．４５μｍのＷＨＡＴＭＡＮシリンジレスフィルタに通して濾過した。２４時間後、全ての反応物を８０℃の水浴内に約３０分間おいて、グルコシルトランスフェラーゼを不活性化し、反応を停止させた。実施例１に記載のように、ポリマーウェットケーキを各終了した反応から調製した。可溶性糖類のＨＰＬＣ分析並びにＮＭＲ及びＳＥＣによる不溶性ポリマー試料の分析を実施例１に記載及び一般法に記載のように実施した。これらの分析結果を表４及び５に示す。
【０２３６】
【表１６】
2021507955.tif 000019
【０２３７】
【表１７】
2021507955.tif 000020
【０２３８】
表４及び５に示されるとおり、実施例１の反応と比較して有意に改善されたプライム化が観察された（表２及び３）。一般的に及び傾向として、Ｐ２プライム化反応は、より高い反応速度、より高い収率及びおそらく最も重要なことにより高い割合のプライマー組み込みを示した。グルカン対プライマー比は、３時間と２４時間との両方の時点でより良好であり、より一貫したプライム化反応があったことも意味する。α−１，３−グルカン分子量の増加は、全てのＰ２プライム化反応（特に１ｇ／Ｌ）についても観察され、値は、Ｐ１プライマーを使用した対応する反応の値よりも高いようであった。プライマーＰ１を使用した反応と同様に、Ｐ２によるプライム化のα−１，３−グルカンＤＰｗ及びプライマー消費率への影響は、１００ｇ／Ｌのスクロースの反応では５０ｇ／Ｌのスクロースの反応よりも少なかった。
【０２３９】
したがって、より低い分枝頻度（Ｐ１プライマーの１８．６％と比較して９．２％のα−１，２分枝）を有するＰ２プライマーは、Ｐ１プライマーと同じデキストラン主鎖により、Ｐ１プライマーと比較してより効率的なα−１，３−グルカン合成が可能になる。この結論は、プライマーのデキストラン主鎖にα−１，２分枝を付加すると、グルコシルトランスフェラーゼ反応でグルカン合成を開始する能力が下方調節されることを示唆している。分枝酵素によるデキストランプライマーへの更なる非還元末端（更なる遊離ヒドロキシル基）の付加により、プライム化活性が向上し、それによりα−１，３−グルカン合成が向上すると予想されたため、この観察は、驚くべきことであった。したがって、α−１，２分枝技術は、プライム化グルコシルトランスフェラーゼ反応におけるグルカン合成を調節／制御するためのインプットとして使用できる。
【０２４０】
実施例３
９．２％のα−１，２分枝を有するデキストランを含有するグルコシルトランスフェラーゼ反応におけるα−１，３−グルカン生成（２リットルスケール）
本実施例では、１００ｍＬスケールの振盪フラスコで行われた、実施例２で記載したＰ２プライム化反応を２Ｌの反応器スケールにスケールアップすることについて記載する。本実施例では、反応体積以外には同様の反応条件（実施例２に記載）を使用して、デキストラン主鎖及びα−１，３−グルカンアームを含むグラフトコポリマーを合成した。したがって、要約すると、本実施例は、９．２％のα−１，２分枝を有するように予め変性されたデキストランでプライムされた更なるα−１，３−グルカン合成反応について記載する。
【０２４１】
２つのグルコシルトランスフェラーゼ反応物を調製した。２００ｇのスクロースを約１Ｌの水に溶解し、１０ｍＬの１Ｍリン酸ナトリウムバッファ（ｐＨ５．５）及び９．６１又は４８．０５ｍＬのいずれかの２０８ｇ／ＬのＰ２プライマーストックを添加して、各々を作製した。両方の調製物の最終体積を、メスフラスコを使用して２Ｌに調整した。最終プライマー濃度は、それぞれ約１及び５ｇ／Ｌであった。各調製物を０．２２ミクロンのフィルタに通して濾過し、次いでオーバーヘッド撹拌機を取り付けた２Ｌのガラスジャケット付き反応器に充填した。グルコシルトランスフェラーゼ酵素を添加する前に（ｔ＝０）、ＨＰＬＣ分析のために各調製物から０．５ｍＬのアリコートを取り出した。４．５３５ｍＬのグルコシルトランスフェラーゼ酵素ストックを添加することにより（１００Ｕ／Ｌの最終酵素濃度の場合）（上記実施例で使用されたものと同じ酵素）、各反応を開始させた。反応を３０℃で実施した。
【０２４２】
反応開始から１、２、３及び２４時間後、１ｍＬの各反応物をマイクロ遠心チューブに取り出した。試料をドライヒートブロック中で８０℃まで約１０分間加熱し、グルコシルトランスフェラーゼを不活性化し、反応を停止させた。次いで、不活性化試料を卓上遠心機で１２，０００ＲＰＭで１０分間回転させ、水不溶性ポリマー生成物をペレット化した。上清を取り出し、ＨＰＬＣ分析のために、０．４５μｍのＷＨＡＴＭＡＮシリンジレスフィルタに通して濾過した。２４時間後、両方の反応物を８０℃の水浴内に約３０分間おいて、グルコシルトランスフェラーゼを不活性化し、反応を停止させた。終了した両方の反応物を約４０μｍのＣＨＥＭＲＵＳ使い捨てフリットフィルタにロードし、完全に吸引濾過した。次いで、残留材料を約３×１Ｌの脱イオン（ＤＩ）水で洗浄して、任意の残存する可溶性構成成分を除去し、クリーンなグルカンポリマーウェットケーキを残した。約３００〜５００ｍｇの各ウェットケーキをＳＥＣ分析のためにとっておいた。各残部を真空オーブン内で４０℃、−４０ｃｍＨｇにおいて乾燥させた。可溶性糖類のＨＰＬＣ分析並びにＮＭＲ及びＳＥＣによる不溶性ポリマー試料の分析を実施例１に記載及び一般法に記載のように実施した。これらの分析結果を表６及び７に示す。
【０２４３】
【表１８】
2021507955.tif 000021
【０２４４】
【表１９】
2021507955.tif 000022
【０２４５】
表６及び７のデータをそれぞれ表４及び５と比較することにより、本実施例のスケールアップした反応（２Ｌ）は、より小さいスケール（１００ｍＬ）の実施例２で実施された反応と同様の結果（例えば、α−１，３−グルカン生成物のＤＰｗ及びプライマーの組み込み）を提供することが観察された。
【０２４６】
実施例４
９．２％のα−１，２分枝を有するデキストランを含有するグルコシルトランスフェラーゼ反応におけるα−１，３−グルカン生成（５０リットルスケール）
本実施例では、２Ｌのスケールで行われた、実施例３で記載したＰ２プライム化反応を５０Ｌのスケールにスケールアップすることについて記載する。本実施例では、反応体積及びプライマー純度（以下で論じる）以外には同様の反応条件（実施例２に記載）を使用して、デキストラン主鎖及びα−１，３−グルカンアームを含むグラフトコポリマーを合成した。したがって、要約すると、本実施例は、９．２％のα−１，２分枝を有するように予め変性されたデキストランでプライムされた更なるα−１，３−グルカン合成反応について記載する。
【０２４７】
実施例１〜３で用いたプライマーを、α−１，３−グルカン合成反応で使用する前に精製した。しかし、本実施例では、Ｐ２プライマーは、デキストランの酵素的１，２−分枝から生じる粗反応混合物の形態においてα−１，３−グルカン合成反応でもたらされた（実施例２に記載のように）。
【０２４８】
以下の条件：およそ１００ｇ／Ｌのスクロース、５ｍＭのリン酸ナトリウム（ｐＨ５．５）、およそ１０ｇ／ＬのＰ２プライマーを有するグルコシルトランスフェラーゼ反応物を調製した。要約すると、オーバーヘッド撹拌機を取り付けた５０Ｌのガラスジャケット付き反応器に約２０ＬのＤＩ水を充填し、その後、５ｋｇのスクロース、２．３Ｌの２１６．１ｇ／Ｌ粗Ｐ２プライマーストック及び２５０ｍＬの１Ｍリン酸ナトリウムバッファ（ｐＨ５．５）を添加した。固形分を撹拌しながら溶解させた後、ＤＩ水を添加することにより反応器を５０Ｌに満たした。１１３．３８ｍＬのグルコシルトランスフェラーゼ酵素ストック（１００Ｕ／Ｌの最終酵素濃度の場合）（上記実施例で使用されたものと同じ酵素）を添加することにより反応を開始させる前（ｔ＝０のＨＰＬＣ分析）に、１ｍＬのアリコートを取り出した。反応を３０℃で実施した。
【０２４９】
反応開始後２．５時間及び２４時間でＨＰＬＣ試料を採取し、実施例１に記載のように処理して分析した。反応開始から２４時間後、反応全体を約８０℃まで約３０分間加熱して、グルコシルトランスフェラーゼを不活性化し、反応を停止させた。終了した反応物を布フィルタ上にロードし、完全に真空濾過した。残留材料を３×約２０ＬのＤＩ水で洗浄し、任意の残存する可溶性構成成分を除去し、次いでラテックスゴムシートで一晩吸引して、コンパクトでクリーンなグルカンポリマーウェットケーキを形成した。ＳＥＣ用試料は、実施例１に記載のとおり採取した。次いで、ウェットケーキを真空オーブン内で６０℃、−４０ｃｍＨｇにおいて約３日間乾燥させた。乾燥ポリマー試料を実施例１に記載のようにＮＭＲ分析に供した。これらの分析結果を表８及び９に示す。
【０２５０】
【表２０】
2021507955.tif 000023
【０２５１】
【表２１】
2021507955.tif 000024
【０２５２】
これらの結果は、更にスケールアップされた反応が、小さいスケールで実行された反応と一貫した方法で実行される可能性が高いことを示す。
【０２５３】
実施例５
α−１，２分枝がないデキストランを含有するグルコシルトランスフェラーゼ反応におけるα−１，３−グルカン生成
本実施例は、α−１，２分枝を有するように予め変性されていないデキストラン（すなわち、デキストランは、非分枝状である）でα−１，３−グルカン合成反応をプライムすることについて記載する。本実施例により、α−１，３−グルカン合成用のプライマーとしてのα−１，２−分枝状デキストランの使用（実施例１〜４及び６の結果を参照されたい）と非分枝状デキストランプライマーの使用とを比較することが可能になる。
【０２５４】
実施例１に記載の手順に従い、非分枝状デキストランをプライマーとして使用して一連の４つのα−１，３−グルカンポリマーを合成した。本実施例で使用されたデキストランは、実施例１〜４で使用されたものと同じであるが、α−１，２分枝化を受けていなかった（すなわち、本実施例におけるデキストランプライマーは、０％のα−１，２分枝を有する）。この直鎖デキストランプライマーは、本明細書においてＰ３プライマーと呼ばれ、約１４ｋＤａ（約８９のＤＰｗ）の分子量を有する。したがって、Ｐ１〜Ｐ３プライマーの各々は、同じデキストラン主鎖を共有するだけでなく、Ｐ１及びＰ２プライマーは、α−１，２分枝を有する。
【０２５５】
全ての反応は、およそ１００ｇ／Ｌのスクロース、５ｍＭのリン酸ナトリウム（ｐＨ５．５）及び約０、１、２．５又は１０ｇ／ＬのＰ３プライマーを有するように調製された。４つのプラスチック２５０ｍＬの振盪フラスコに２０ｍＬの５００ｇ／Ｌの滅菌濾過スクロース溶液、５ｍＬの１００ｍＭの滅菌濾過したリン酸ナトリウムストック（ｐＨ５．５）及び０、１．０４５、２．６１２又は１０．４４８ｍＬの９５．７ｇ／ＬのＰ３プライマーストックを充填した。ＤＩ水を添加し、最終体積を１００ｍＬとした。０．２２５６ｍＬのグルコシルトランスフェラーゼ酵素ストック（１００Ｕ／Ｌの最終酵素濃度の場合）（上記実施例で使用されたものと同じ酵素）を添加して各反応を開始する前に各調製物から０．５ｍＬのｔ＝０時間のＨＰＬＣアリコートを取り出した。反応を３０℃で実施した。
【０２５６】
反応開始から１、２、３、４及び２４時間後、ＨＰＬＣ分析のために１ｍＬの試料を取り出した。ＨＰＬＣ試料を実施例１に記載したように処理して分析した。反応を開始してから２４時間で、全ての反応容器を８０℃の水浴内に約３０分間置いてグルコシルトランスフェラーゼ酵素を不活性化し、それにより反応を停止させた。次いで、終了した反応物を０．４５ミクロンのＮＡＬＧＥＮＥ  ＲＡＰＩＤ  ＦＬＯＷ使い捨てＰＥＳフィルタにロードし、完全に吸引濾過した。次いで、残留材料を３×１００ｍＬのＤＩ水で洗浄して、任意の残存する可溶性構成成分を除去し、クリーンなグルカンポリマーウェットケーキを残した。次いで、各ウェットケーキを真空オーブン内で４０℃、−４０ｃｍＨｇにおいて乾燥させた。可溶性糖類のＨＰＬＣ分析並びにＮＭＲ及びＳＥＣによる不溶性ポリマー試料の分析を実施例１に記載及び一般法に記載のように実施した。これらの分析結果を表１０及び１１に示す。
【０２５７】
【表２２】
2021507955.tif 000025
【０２５８】
【表２３】
2021507955.tif 000026
【０２５９】
表１０〜１１に示すように、一連の４つのα−１，３−グルカンポリマーは、非分枝状デキストランプライマーを含むグルコシルトランスフェラー反応で合成された。本実施例の結果（非分枝状デキストランプライマーＰ３を使用）と実施例２（９．２％のα−１，２−分枝状プライマーＰ２を使用）の結果とを比較することにより、いくつかの興味深い違いが見られた（いずれの実施例もプライマーが異なることを除いて同じ反応条件を利用した）。例えば、約２．５ｇ／Ｌ又は約１０ｇ／ＬのＰ３プライマーを使用する場合（表１１）とは対照的に、約２．５ｇ／Ｌ又は約１０ｇ／ＬのＰ２プライマーを使用する場合（表５）のα−１，３−グルカン収率がより大幅に増加するように見えた。別の実施例として、Ｐ２プライマー（及びＰ１プライマー）を用いて生成されたα−１，３−グルカン生成物の分子量は、一般に、Ｐ３プライマーを用いた場合に観察される分子量よりも小さかった。そのため、α−１，２−分枝状デキストランプライマーは、α−１，３−グルカン生成物の分子量を下方調節するのに有用であり得る。
【０２６０】
実施例６
約２９．２％のα−１，２分枝を有するデキストランを含有するグルコシルトランスフェラーゼ反応におけるα−１，３−グルカン生成
実施例１〜４に加えて、本実施例は、α−１，３−グルカン合成のデキストランプライム化の効果が、デキストランプライマーのα−１，２分枝頻度を変化させることによってどのように制御できるかについて記載する。特に、本実施例は、約２９．２％のα−１，２−分枝を有するデキストランプライマーが、グルコシルトランスフェラーゼ反応でα−１，３−グルカン合成をプライムできなかったことを示す。α−１，３−グルカンホモポリマーは、生成されたが、デキストランプライマーからα−１，３−グルカンは、ほとんど合成されなかったか又は全く合成されなかった。
【０２６１】
実施例１に記載の手順に従い、約２９．２％のα−１，２−分枝を有するデキストランプライマーを使用して一連の４つのα−１，３−グルカングラフトコポリマーを合成した。このデキストランプライマーは、本明細書においてＰ４プライマーと呼ばれ、約２２ｋＤａ（約１３９のＤＰｗ）の分子量を有する。Ｐ４プライマーは、プライマーＰ１〜Ｐ３と同じデキストラン主鎖を共有する。
【０２６２】
全ての反応は、およそ１００ｇ／Ｌのスクロース、５ｍＭのリン酸ナトリウム（ｐＨ５．５）及び約０、１、５又は１０ｇ／ＬのＰ４プライマーを有するように調製された。４つのプラスチック２５０ｍＬの振盪フラスコに２０ｍＬの５００ｇ／Ｌの滅菌濾過スクロース溶液、５ｍＬの１００ｍＭの滅菌濾過したリン酸ナトリウムストック（ｐＨ５．５）及び０、０．５０４、２．５２０又は５．０４０ｍＬの１９８．４ｇ／ＬのＰ４プライマーストックを充填した。ＤＩ水を添加し、最終体積を１００ｍＬとした。０．２２５６ｍＬのグルコシルトランスフェラーゼ酵素ストック（１００Ｕ／Ｌの最終酵素濃度の場合）（上記実施例で使用されたものと同じ酵素）を添加して各反応を開始する前に各調製物から０．５ｍＬのｔ＝０時間のＨＰＬＣアリコートを取り出した。反応を３０℃で実施した。
【０２６３】
反応開始から１、２、３、４及び２４時間後、ＨＰＬＣ分析のために１ｍＬの試料を取り出した。ＨＰＬＣ試料を実施例１に記載したように処理して分析した。反応を開始してから２４時間で、全ての反応容器を８０℃の水浴内に約３０分間置いて、グルコシルトランスフェラーゼ酵素を不活性化し、それにより反応を停止させた。ポリマーウェットケーキを実施例４に記載のように生成した。可溶性糖類のＨＰＬＣ分析並びにＮＭＲ及びＳＥＣによる不溶性ポリマー試料の分析を実施例１に記載及び一般法に記載のように実施した。これらの分析結果を表１２及び１３に示す。
【０２６４】
【表２４】
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【０２６５】
【表２５】
2021507955.tif 000028
【０２６６】
表１２〜１３に示すように、一連の４つのα−１，３−グルカンポリマーは、約２９．２％のα−１，２−分枝状デキストランプライマーを含むグルコシルトランスフェラー反応で合成された。ＳＥＣ、ＮＭＲ及びＨＰＬＣの結果に基づいて、最小限のＰ４プライマーが最終的な不溶性α−１，３−グルカン生成物に組み込まれた。Ｐ４プライマーを含有する反応におけるグルカン生成物の結合プロファイルは、Ｐ４プライマーを含有しない反応生成物の結合プロファイルとほぼ同一であった。Ｐ４を含有する反応のグルカン生成物について、ＮＭＲではわずかな量のα−１，６結合のみが観察されたが、定量可能なレベル未満であった。ＳＥＣにより、グルカン生成物のＤＰｗで有意な変化は観察されず、Ｐ４含有反応では、ＨＰＬＣの結果に基づいてごく微量のプライマーのみが消費された。したがって、Ｐ４含有反応で生成された不溶性グルカンのほぼ全てがα−１，３−グルカンホモポリマーであると思われる。
【０２６７】
実施例５に記載されているように、Ｐ２プライマー（９．２％のα−１，２分枝）又はＰ１プライマー（１８．６％のα−１，２分枝）を用いて生成されたα−１，３−グルカン生成物の分子量は、一般に、Ｐ３プライマー（α−１，２分枝なし）を用いた場合に観察される生成物の分子量よりも小さかった。本実施例では、Ｐ４プライマー（２９．２％のα−１，２分枝）を使用した場合にも同じ現象が起こったことが留意される。更に、表２、４、１０及び１２を比較することにより、プライマーのα−１，２分枝の割合が増加すると、（プライマーを含む反応の）α−１，３−グルカン生成物の分子量は、減少することが明らかである。これは、α−１，２−分枝状デキストランプライマーが、グルコシルトランスフェラーゼ反応におけるα−１，３−グルカン生成物の分子量を下方調節するのに有用であり得るという更なる証拠である。
【０２６８】
実施例７
デキストラン−α−１，３−グルカングラフトコポリマーを含むフィルムの調製及び使用
本実施例は、Ｐ２プライマー（９．２％のα−１，２分枝を有するデキストラン）でプライムしたα−１，３−グルカン合成反応で生成されるようなデキストラン−α−１，３−グルカングラフトコポリマーを含むフィルムを生成することについて記載する。このフィルムを、デキストランプライマーがないグルコシルトランスフェラーゼ反応で生成されたような不溶性α−１，３−グルカンホモポリマーを含むフィルムと比較した。デキストラン−α−１，３−グルカングラフトコポリマーを含むフィルムは、α−１，３−グルカンホモポリマーを含むフィルムと比較して強化された性能特性を示した。
【０２６９】
材料
水酸化ナトリウムは、Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ（Ｆａｉｒ  Ｌａｗｎ，ＮＪ）から入手した。硫酸及び硫酸ナトリウムは、ＥＭＤ  Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ（Ｄａｒｍｓｔａｄｔ，Ｇｅｒｍａｎｙ）から入手した。デキストラン−α−１，３−グルカングラフトコポリマーの調製は、実施例３（表６〜７、５．０ｇ／ＬのＰ２プライマー及び１０４ｇ／Ｌのスクロースを含むα−１，３−グルカン合成反応の生成物、本明細書では「Ｆ−１０４−５」と称される）、実施例３（表６〜７、１．１ｇ／ＬのＰ２プライマー及び１０４ｇ／Ｌのスクロースを含むα−１，３−グルカン合成反応の生成物、本明細書では「Ｆ−１０４−１」と称される）及び実施例４（表８〜９、９．６ｇ／ＬのＰ２プライマー及び１０４ｇ／Ｌのスクロースを含むα−１，３−グルカン合成反応の生成物、本明細書では「Ｆ−１０４−１０」と称される）で記載されたとおりであった。α−１，３−グルカンホモポリマー（ＤＰｗ約８００）は、約１００ｇ／Ｌのスクロース及び上記実施例で使用した非天然グルコシルトランスフェラーゼを含む、プライムされていないグルコシルトランスフェラーゼ反応で調製した。
【０２７０】
溶液及びフィルム調製
各α−１，３−グルカンポリマーの溶液は、ＰＴＦＥ楕円形パドルブレードを有するＩＫＡオーバーヘッド撹拌機を用いて調製した。ポリマーのスラリー及び水（全質量３７．５ｇ）を手で混合し、次いでＮａＯＨの１０ｗｔ％溶液２２．５ｇに撹拌添加し、その後、溶液を３時間撹拌した。適切な量のポリマーを使用して、特定の所望の最終ポリマー濃度（１０〜１２ｗｔ％、表１４を参照されたい）を達成した。各ポリマーの含水量を測定し、溶液の調製中に評価した。各溶液をファルコン（ＦＡＬＣＯＮ）チューブに移し、遠心分離にかけて、溶液を脱気した。
【０２７１】
フィルムの調製について、溶液を側面上に５ミルのテープが付いた（フィルムの厚みを制御するため）個別のガラスプレートに注ぎ、ガラス棒を使用してキャストした。次いで、フィルムを酸浴（１４ｗｔ％の硫酸、２５ｗｔ％の硫酸ナトリウム、６１ｗｔ％のＤＩ水）で３分間凝固させた。次いで、フィルムを中性ｐＨまでＤＩ水中で洗浄して、５ｗｔ％のグリセロール浴に３分間移し、次いで８０℃のオーブンに１５分間入れた。
【０２７２】
フィルム試験法
フィルムの厚みは、ＦＥＤＥＲＡＬ  ２２Ｐ−１０マイクロメータを使用して決定した。引張特性は、ＡＳＴＭ  Ｄ８８２−０９（“Ｓｔａｎｄａｒｄ  Ｔｅｓｔ  Ｍｅｔｈｏｄ  ｆｏｒ  Ｔｅｎｓｉｌｅ  Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ  ｏｆ  Ｔｈｉｎ  Ｐｌａｓｔｉｃ  Ｓｈｅｅｔｉｎｇ”）、（本明細書に組み込まれる）に従い、１インチのグリップ及び２インチのゲージ長を使用してＩＮＳＴＲＯＮ  ５５００Ｒモデル１１２２で測定した。フィルムを引張強度測定のために３インチのドッグボーン型にカットした。これは、下の表１４に平均４〜５回の破壊として表されている。
【０２７３】
【表２６】
2021507955.tif 000029
【０２７４】
表１４に示すように、α−１，２−分枝状（９．２％）デキストランでプライムされたグルコシルトランスフェラーゼ反応で合成されたα−１，３−グルカンを含むフィルムは、α−１，３−グルカンホモポリマーを含むフィルムと比較して例えば伸びの改善（例えば、破断点伸び％）及び強度の維持（最大応力）を示した。強靱性及びＷＴＭも改善された。したがって、デキストラン−α−１，３−グルカングラフトコポリマーを含むフィルムは、α−１，３−グルカンホモポリマーを含むフィルムと比較して強化された性能特性を示し得る。
【０２７５】
実施例８
１８．６％のα−１，２分枝を有するデキストラン及び低分子量のα−１，３−グルカンを生成するグルコシルトランスフェラーゼを含有する反応
本実施例は、１８．６％のα−１，２分枝を有するように予め変性されたデキストランプライマーを含有するグルコシルトランスフェラーゼ反応におけるα−１，３−グルカンの合成について記載する。本反応で使用されたグルコシルトランスフェラーゼ酵素は、酵素の未改変の対応するものによって生成されたグルカン生成物と比較してより小さい分子量のα−１，３−グルカンを生成するように改変された。デキストラン主鎖及びα−１，３−グルカンアームを含むグラフトコポリマーを合成した。
【０２７６】
α−１，２−分枝状デキストランを生成し、α−１，３−グルカン合成のためのグルコシルトランスフェラーゼ反応をプライムした。Ｐ１プライマーについて実施例１（上記）で記載されたように、このプライマーの調製を実施した。得られたデキストラン（これは約１０４（約１７ｋＤａ）のＤＰｗ及び１８．６％のα−１，２−分枝を有していた）は、本明細書においてＰ５プライマーと呼ばれる。
【０２７７】
次いで、Ｐ５プライマーを、グルコシルトランスフェラーゼを含むα−１，３−グルカン合成反応に含ませ、デキストラン主鎖及びα−１，３−グルカンアームを含むグラフトコポリマーを生成した。約１００％のα−１，３結合を有するα−１，３−グルカンを生成するこれらの反応で使用されるグルコシルトランスフェラーゼは、この酵素が、酵素の未改変の対応するものによって生成されたα−グルカンの分子量と比較して低分子量のα−グルカンを生成できるように、その触媒ドメインを改変したストレプトコッカス・サリバリウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ．ｓａｌｉｖａｒｉｕｓ）グルコシルトランスフェラーゼであった。一般法のセクションは、この非天然グルコシルトランスフェラーゼの評価について記載する（表Ｄ）。本実施例の酵素調製は、以下のように実施した。要約すると、グルコシルトランスフェラーゼを異種発現するＫＯＢＷ−３ａ細胞を、１００ｎｇ／ｍＬのアンピシリン及び０．０２５％のＬ−アラビノースを含有するＬＢ培地で３０℃において一晩増殖させた。遠心分離により細胞をペレット化し、次いで１０体積％のＢｕｇＢｕｓｔｅｒ（登録商標）タンパク質抽出試薬（ＥＭＤ  Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）で、室温で少なくとも１時間溶解させた。遠心分離により細胞破砕物を除去した後、透明な細胞溶解物を試験のために収集した。
【０２７８】
１３個の別個の４．０ｍＬのα−１，３−グルカン合成反応をガラスの５０ｍＬくぼみ付きフラスコで実施した。各反応は、水、スクロース（およそ２０、５０又は２００ｇ／Ｌ）、リン酸バッファ（５ｍＭ、ｐＨ５．７）、任意選択的にＰ５プライマー（およそ０．２、１．０又は５．０ｇ／Ｌ）及びグルコシルトランスフェラーゼ（上記）を含んでいた。適切な量のＰ５プライマー（５０ｇ／Ｌのストック溶液使用）、０．２ｍＬの細胞溶解物（グルコシルトランスフェラーゼ含有）及び対応するバッファを混合することにより、反応物を調製した。これらの調製物の各々及びスクロースストック溶液（４００ｇ／Ｌ）を３５℃で少なくとも３０分間温めた。次いで、適切な体積のスクロース溶液を各調製物に添加し、α−１，３−グルカン合成を開始させた。反応は、３５℃で約６０時間振盪（１０ｒｐｍ）しながら実施した。このインキュベーションに続いて、反応内容物全体を１５ｍＬの遠心管に個別に移し、８５℃のオーブンに約３０分間入れて、グルコシルトランスフェラーゼを不活性化し、それによって反応を停止させた。各反応で生成された約３００〜５００ｍｇのウェットケーキをＳＥＣにより分析し、不溶性ポリマー生成物の分子量及びＤＰを決定した。表１５は、これらの分析の結果を示す。
【０２７９】
【表２７】
2021507955.tif 000030
【０２８０】
各プライマー含有反応のグルカン生成物でプライマー上にグラフトされた個別のα−１，３−グルカンアームのサイズは、追加のプライマーを含まない対照反応で生成されたα−１，３−グルカンのサイズと非常に類似していると考えられる。対照反応生成物は、α−１，３−グルカンホモポリマーを含んでいた。とはいえ、プライマーの濃度が反応系列の各セット（２０、５０又は２００ｇ／Ｌのスクロース）で増加すると、グラフトコポリマー生成物ＤＰｗが大幅に減少したことは、注目に値する。
【０２８１】
グルカン対プライマーのモル比（Ｍ比）は、各試験条件及びＰ５プライマーのＤＰｗ（約１０４）下でそれぞれの対照ＤＰｗ値（ホモポリマーＤＰｗ）に基づいて算出した。これらの分析からのデータを表１６に示す。
【０２８２】
【表２８】
2021507955.tif 000031
【０２８３】
したがって、α−１，２−分枝状デキストランプライマーをα−１，３−グルカン合成反応に提供することにより、デキストラン主鎖及びα−１，３−グルカンアームを含むグラフトコポリマーを合成した。プライマーは、明らかに消費され、グラフトコポリマー生成物に組み込まれた。
【０２８４】
実施例９
９．７％のα−１，２分枝を有するデキストラン及び低分子量のα−１，３−グルカンを生成するグルコシルトランスフェラーゼを含有する反応
本実施例は、９．７％のα−１，２分枝を有するように予め変性されたデキストランを含有するグルコシルトランスフェラーゼ反応におけるα−１，３−グルカンの合成について記載する。本反応で使用されたグルコシルトランスフェラーゼ酵素は、酵素の未改変の対応するものによって生成されたグルカン生成物と比較してより小さい分子量のα−１，３−グルカンを生成するように改変された。デキストラン主鎖及びα−１，３−グルカンアームを含むグラフトコポリマーを合成した。
【０２８５】
α−１，２−分枝状デキストランを生成し、α−１，３−グルカン合成のためのグルコシルトランスフェラーゼ反応をプライムした。このプライマーの調製は、基本的に、国際公開第２０１７／０９１５３３号パンフレット（参照により本明細書に組み込まれる）に記載されるように実施された。要約すると、分子量約４０ｋＤａ（約２５０のＤＰｗ）の直鎖デキストラン（すなわち１００％のα−１，６グリコシド結合を有する多糖）を、グルコシルトランスフェラーゼＧＴＦ６８３１（配列番号６８）を用いて生成した。次いで、このデキストランを、α−１，２−分枝酵素ＧＴＦＪ１８Ｔ１（配列番号７０）を使用して、９．７％のα−１，２−分枝を有するように変性させた。結果的なα−１，２−分枝状デキストラン（約２７１（約４４ｋＤａ）のＤＰｗを有した）は、本明細書においてＰ６プライマーと呼ばれる。
【０２８６】
次いで、Ｐ６プライマーを、グルコシルトランスフェラーゼを含むα−１，３−グルカン合成反応に含ませ、デキストラン主鎖及びα−１，３−グルカンアームを含むグラフトコポリマーを生成した。本反応で使用したグルコシルトランスフェラーゼは、実施例８で使用して調製したものと同一であった。
【０２８７】
１３個の別個の４．０ｍＬのα−１，３−グルカン合成反応をガラスの５０ｍＬくぼみ付きフラスコで実施した。各反応は、水、スクロース（およそ２０、５０又は２００ｇ／Ｌ）、リン酸バッファ（５ｍＭ、ｐＨ５．７）、任意選択的にＰ６プライマー（およそ０．２、１．０又は５．０ｇ／Ｌ）及びグルコシルトランスフェラーゼ（上記）を含んでいた。適切な量のＰ６プライマー（５０ｇ／Ｌのストック溶液使用）、０．２ｍＬの細胞溶解物（グルコシルトランスフェラーゼ含有）及び対応するバッファを混合することにより、反応物を調製した。これらの調製物の各々及びスクロースストック溶液（４００ｇ／Ｌ）を３５℃で少なくとも３０分間温めた。次いで、適切な量のスクロース溶液を各調製物に添加し、α−１，３−グルカン合成を開始させた。反応は、３５℃で約６０時間振盪（１０ｒｐｍ）しながら実施した。このインキュベーションに続いて、反応内容物全体を１５ｍＬの遠心管に個別に移し、８５℃のオーブンに約３０分間入れて、グルコシルトランスフェラーゼを不活性化し、それによって反応を停止させた。各反応で生成された約３００〜５００ｍｇのウェットケーキをＳＥＣにより分析し、不溶性ポリマー生成物の分子量及びＤＰを決定した。表１７は、これらの分析の結果を示す。
【０２８８】
【表２９】
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【０２８９】
各プライマー含有反応のグルカン生成物でプライマー上にグラフトされた個別のα−１，３−グルカンアームのサイズは、追加のプライマーを含まない対照反応で生成されたα−１，３−グルカンのサイズと非常に類似していると考えられる。対照反応生成物は、α−１，３−グルカンホモポリマーを含んでいた。とはいえ、一般に、プライマーの濃度が反応系列の各セット（２０、５０又は２００ｇ／Ｌのスクロース）で増加すると、グラフトコポリマー生成物ＤＰｗが大幅に減少したことは、注目に値する。
【０２９０】
グルカン対プライマーのモル比（Ｍ比）は、各試験条件及びＰ６プライマーのＤＰｗ（２７１）下でそれぞれの対照ＤＰｗ値（ホモポリマーＤＰｗ）に基づいて算出した。これらの分析からのデータを表１８に示す。
【０２９１】
【表３０】
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【０２９２】
したがって、α−１，２−分枝状デキストランプライマーをα−１，３−グルカン合成反応に提供することにより、デキストラン主鎖及びα−１，３−グルカンアームを含むグラフトコポリマーを合成した。プライマーは、明らかに消費され、グラフトコポリマー生成物に組み込まれた。
【配列表】
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【国際調査報告】
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