(57)【要約】  【解決手段】  本明細書の実施形態は、治療有効量のメチルＮ−［３−（６，７−ジメトキシ−２−メチルアミノキナゾリン−４−イル）フェニル］テレフタルアミド酸、ＰＥＧ４００、ＰＥＧ４０００、白色ワセリン、ビタミンＥ、モノステアリン酸グリセロール／グリセリド、ミリスチン酸イソプロピル、および水を含む局所用組成物に関する。局所用組成物は、アトピー性皮膚炎を含む様々な皮膚状態を治療するために使用することができる。治療される患者には、小児科、青年および成人が含まれる。  【選択図】      図１２
2021505621.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
それを必要とする患者の皮膚状態を治療する方法であって、治療的有効量のメチルＮ−［３−（６，７−ジメトキシ−２−メチルアミノキナゾリン−４−イル）フェニル］テレフタルアミド酸、ＰＥＧ４００、ＰＥＧ４０００、白色ワセリン、ビタミンＥ、グリセロールモノステアレート／グリセリド、ミリスチン酸イソプロピル、および水を含む局所用組成物を局所的に塗布する工程を含む、方法。
【請求項２】
請求項１に記載の方法において、前記メチルＮ−［３−（６，７−ジメトキシ−２−メチルアミノキナゾリン−４−イル）フェニル］テレフタルアミド酸は、前記局所用組成物の約０．０１重量％〜約５重量％の濃度である、方法。
【請求項３】
請求項１に記載の方法において、前記ＰＥＧ４００は、前記局所用組成物の約２５重量％〜約７５重量％の濃度である、方法。
【請求項４】
請求項１に記載の方法において、前記ＰＥＧ４０００は、前記局所用組成物の約１５重量％〜約３５重量％の濃度である、方法。
【請求項５】
請求項１に記載の方法において、前記白色ワセリンは、前記局所用組成物の約１重量％〜約１０重量％の濃度である、方法。
【請求項６】
請求項１に記載の方法において、前記ビタミンＥは、前記局所用組成物の約０．０１重量％〜約５重量％の濃度である、方法。
【請求項７】
請求項１に記載の方法において、前記モノステアリン酸グリセロール／グリセリドは、前記局所用組成物の約２重量％〜約１５重量％の濃度である、方法。
【請求項８】
請求項１に記載の方法において、前記ミリスチン酸イソプロピルは、前記局所用組成物の約２重量％〜約２５重量％の濃度である、方法。
【請求項９】
請求項１に記載の方法において、前記水は、前記局所用組成物の約０．１重量％〜約１０重量％の濃度である、方法。
【請求項１０】
請求項１に記載の方法において、前記メチルＮ−［３−（６，７−ジメトキシ−２−メチルアミノキナゾリン−４−イル）フェニル］テレフタルアミド酸が０．２重量％であり、前記ＰＥＧ４００が５０．５重量％であり、前記ＰＥＧ４０００が２５．０重量％であり、前記白色ワセリンが４．４重量％であり、前記ビタミンＥが０．１重量％であり、前記グリセロールモノステアレート／グリセリドが８．０重量％であり、前記ミリスチン酸イソプロピルが１０．０重量％であり、前記水が２．０重量％である、方法。
【請求項１１】
請求項１に記載の方法において、前記メチルＮ−［３−（６，７−ジメトキシ−２−メチルアミノキナゾリン−４−イル）フェニル］テレフタルアミド酸が０．５重量％であり、前記ＰＥＧ４００が５０．５重量％であり、前記ＰＥＧ４０００が２５．０重量％であり、前記白色ワセリンが４．４重量％であり、前記ビタミンＥが０．１重量％であり、前記グリセロールモノステアレート／グリセリドが８．０重量％であり、前記ミリスチン酸イソプロピルが１０．０重量％であり、前記水が２．０重量％である、方法。
【請求項１２】
請求項１に記載の方法において、前記皮膚の状態は、皮膚炎、乾癬、皮膚のかゆみ、にきび、皮膚の炎症および発赤、皮脂腺に関連する障害、油性肌、乾燥肌、酒さ様皮膚炎、火傷、手のひらや足の裏に影響を与える障害、皮膚の遺伝的障害、いぼ、およびそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、方法。
【請求項１３】
請求項１２に記載の方法において、前記皮膚炎は、アトピー性皮膚炎、接触性皮膚炎、アレルギー性接触性皮膚炎、刺激性接触性皮膚炎、うっ血性皮膚炎、脂漏性皮膚炎、慢性皮膚炎、湿疹、およびそれらの任意の組み合わせからなる群より選択される、方法。
【請求項１４】
請求項１２に記載の方法において、前記乾癬は、プラーク乾癬、滴状乾癬、逆乾癬、膿疱性乾癬、紅皮症乾癬、およびそれらの任意の組み合わせからなる群より選択される、方法。
【請求項１５】
請求項１２に記載の方法において、前記皮膚のかゆみは、掻痒症、痒疹、毛孔性皮疹、尋常性苔癬、扁平苔癬、およびそれらの任意の組み合わせからなる群より選択される、方法。
【請求項１６】
請求項１２に記載の方法において、前記にきびは、尋常性座瘡、嚢胞性座瘡、炎症性座瘡、非炎症性座瘡、およびそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、方法。
【請求項１７】
請求項１２に記載の方法において、前記皮膚の炎症および発赤は、脂漏性皮膚炎、じんま疹湿疹、じんましん、脂漏性湿疹、およびそれらの任意の組み合わせからなる群より選択される、方法。
【請求項１８】
請求項１２に記載の方法において、前記皮脂腺に関連する障害は、にきび、濾胞性過角化、皮脂腺腫、皮脂腺過形成、過剰な皮脂産生、脂漏症、皮脂腫、皮脂腺癌、脂漏性皮膚炎、皮脂嚢胞、およびそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、方法。
【請求項１９】
請求項１２に記載の方法において、前記油性肌は、脂漏症である、方法。
【請求項２０】
請求項１２に記載の方法において、前記乾燥肌は、皮疹、魚鱗癬、乾癬、およびそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、方法。
【請求項２１】
請求項１２に記載の方法において、前記火傷は、日焼けである、方法。
【請求項２２】
請求項１２に記載の方法において、前記手のひらや足の裏に影響を与える障害は、掌蹠膿疱症、剥離性角質溶解、およびそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、方法。
【請求項２３】
請求項１２に記載の方法において、前記皮膚の遺伝的障害は、ダリエ病である、方法。
【請求項２４】
請求項１に記載の方法において、前記患者は、青年である、方法。
【請求項２５】
請求項１に記載の方法において、前記皮膚状態は、アトピー性皮膚炎である、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
この出願は、米国特許法第３５Ｕ．Ｓ．Ｃ．１１９（ｅ）において、２０１７年１２月７日に出願された米国仮出願番号６２／５９５，９４３、２０１８年２月２３日に出願された米国仮出願番号６２／６３４，２４２、および２０１８年７月９日に提出された米国仮出願番号６２／６９５，３８９に基づき、優先的利益を主張し、その全体が参照により組み込まれる。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００２】
本明細書の実施形態は、治療有効量のメチルＮ−［３−（６，７−ジメトキシ−２−メチルアミノキナゾリン−４−イル）フェニル］テレフタルアミド酸、ＰＥＧ４００、ＰＥＧ４０００、白色ワセリン、ビタミンＥ、モノステアリン酸グリセロール／グリセリド、ミリスチン酸イソプロピル、および水を含む局所用組成物に関する。
【０００３】
本明細書のいくつかの実施形態は、治療的有効量のメチルＮ−［３−（６，７−ジメトキシ−２−メチルアミノキナゾリン−４−イル）フェニル］テレフタルアミド酸、ＰＥＧ４００、ＰＥＧ４０００、白色ワセリン、ビタミンＥ、グリセロールモノステアレート／グリセリド、ミリスチン酸イソプロピル、および水を含む局所用組成物を局所適用することを含む、それを必要とする患者の皮膚状態を治療する方法に関する。特定の実施形態では、患者は青年期である。特定の実施形態では、皮膚状態はアトピー性皮膚炎である。
【０００４】
本発明の性質および利点をより完全に理解するために、添付の図面に関連して行われる以下の詳細な説明を参照する必要がある。
【図面の簡単な説明】
【０００５】
【図１】図１は、本明細書の実施形態の局所製剤の適用から２４時間後に各ドナーの角質層から収集された本明細書の実施形態の式（Ｉ）の化合物の平均量（μｇ）を示す。
【図２】図２は、本明細書の実施形態の局所製剤の適用から２４時間後に各ドナーの表皮から収集された本明細書の実施形態の式（Ｉ）の化合物の平均量（μｇ）を示す。
【図３】図３は、本明細書の実施形態の局所製剤の適用から２４時間後に各ドナーの真皮から収集された本明細書の実施形態の式（Ｉ）の化合物の平均量（μｇ）を示す。
【図４】図４は、実施例２で使用したプロトコルのタイムラインを示す。
【図５】図５は、正常皮膚対アトピー性皮膚炎病変を有する皮膚のヘマトキシリンおよびエオシン染色を示す。ＤＮＣＢ誘発皮膚における表皮過形成、角質増殖症、潰瘍、および免疫細胞浸潤に注意してください。
【図６】図６は、４０倍の倍率で、アトピー性皮膚炎皮膚病変に対して予防的に（左）または治療的に（右）治療された皮膚切片のヘマトキシリンおよびエオシン染色を示す。
【図７Ａ】図７は、予防的（上）および治療的（下）研究からの選択されたサイトカインデータを図示する。注目のサイトカインは、ＩＬ−６（左）、ＩＬ−１７（中央）、およびＴＮＦ−α（右）である。各研究の１５日目に皮膚サンプルからデータを収集し、ＬＵＭＩＮＥＸパネルで実行した。
【図７Ｂ】図７は、予防的（上）および治療的（下）研究からの選択されたサイトカインデータを図示する。注目のサイトカインは、ＩＬ−６（左）、ＩＬ−１７（中央）、およびＴＮＦ−α（右）である。各研究の１５日目に皮膚サンプルからデータを収集し、ＬＵＭＩＮＥＸパネルで実行した。
【図７Ｃ】図７は、予防的（上）および治療的（下）研究からの選択されたサイトカインデータを図示する。注目のサイトカインは、ＩＬ−６（左）、ＩＬ−１７（中央）、およびＴＮＦ−α（右）である。各研究の１５日目に皮膚サンプルからデータを収集し、ＬＵＭＩＮＥＸパネルで実行した。
【図８】図８は、予防的（上）および治療的（下）研究におけるスクラッチアッセイ結果を示す。
【図９】図９は、ＩＴＴ母集団の４週目にＩＧＡでの応答（０／１＋２ポイントの改善）を提供する。
【図１０】図１０は、ＰＰＳ母集団の４週目におけるＩＧＡのレスポンス（０／１＋２ポイントの改善）を提供する。
【図１１】１１は、ＩＴＴ母集団の４週目のＩＧＡ（０／１）でのレスポンスを提供する。
【図１２】１２は、ＰＰＳ母集団の４週目のＩＧＡ（０／１）でのレスポンスを提供する。
【図１３】１３は、ＩＴＴ集団におけるＩＧＡレスポンス（０／１＋２ポイントの改善）の動態を示す。
【図１４】１４は、ＰＰＳ集団におけるＩＧＡレスポンス（０／１＋２ポイントの改善）動態を示す。
【図１５Ａ】図１５は、ベースラインからのＥＡＳＩ％の改善と、ＩＴＴ母集団における４週目のＥＡＳＩ％の改善を示す。
【図１５Ｂ】図１５は、ベースラインからのＥＡＳＩ％の改善と、ＩＴＴ母集団における４週目のＥＡＳＩ％の改善を示す。
【図１６】図１６は、ＩＴＴ集団の４週目のＥＡＳＩ５０／７５／９０レスポンダーのデータを提供する。
【図１７】図１７は、ＰＰＳ集団の４週目のＥＡＳＩ５０／７５／９０レスポンダーのデータを提供する。
【図１８】図１８は、ＩＴＴ集団のベースラインからのＮＲＳ（かゆみ）の改善を示す。
【図１９】図１９は、ＩＴＴ集団の４週目のベースラインからのＮＲＳ（かゆみ）の改善を示す。
【図２０】図２０は、ＰＰＳ集団における４週目のベースラインからのＮＲＳ（かゆみ）の改善を示す。
【図２１Ａ】図２１は、ベースラインからのＢＳＡ％の改善と、ＩＴＴ集団における４週間のＢＳＡ％の改善を示す。
【図２１Ｂ】図２１は、ベースラインからのＢＳＡ％の改善と、ＩＴＴ集団における４週間のＢＳＡ％の改善を示す。
【０００６】
本発明は、記載された特定のプロセス、組成物、または方法論に限定されない。説明で使用される用語は、特定のバージョンまたは実施形態を説明することのみを目的としており、本発明の範囲を限定することを意図していない。他に定義されない限り、本明細書で使用されるすべての技術用語および科学用語は、当業者によって一般に理解されているのと同じ意味を有する。本明細書で言及されるすべての出版物は、参照によりその全体が組み込まれる。本明細書中のいかなるものも、本発明が先行発明によりそのような開示に先行する権利を与えられないことの承認として解釈されるべきではない。
【０００７】
本明細書および添付の特許請求の範囲で使用される場合、単数形「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」は、文脈がそうでないことを明確に指示しない限り、複数の参照を含むことに留意しなければならない。
【０００８】
本明細書で使用される場合、「約」という用語は、それが使用されている数の数値のプラスまたはマイナス１０％を意味する。したがって、約５０％は４５％〜５５％の範囲を意味する。
【０００９】
組成物と組み合わせて使用される場合の「投与すること」は、組成物を患者に投与することを意味し、それにより、それが標的とする、例えば皮膚等の組織に積極的に影響を与える。組成物を「投与すること」は、例えば、局所投与によって、または他の既知の技術と組み合わせて達成することができる。投与は自己投与であっても良く、そのような治療を必要とする対象は組成物を投与するか、または投与は、医療または他の医療専門家またはそのような治療を必要とする対象の世話人が行っても良い。
【００１０】
本明細書で使用される「青年期」という用語は、約１２歳〜１７歳未満のヒトである。
【００１１】
用語「患者」および「対象」は交換可能であり、本発明の化合物で治療され得る任意のヒトを意味すると解釈され得る。いくつかの実施形態では、患者または対象は、成人、青年、子供または幼児である。いくつかの実施形態では、患者または対象は、１８歳以上の成人である。いくつかの実施形態では、患者または対象は、１２〜１７歳の青年である。いくつかの実施形態では、患者または対象は、年齢２〜１１歳の小児の個人である。
【００１２】
本明細書で使用する場合、「備える」、「備える」、「備える」、および「備える」という用語は、包括的または制限のないものであり、追加の列挙されていない要素または方法ステップを除外しない。
【００１３】
本明細書で使用する場合、「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｓ  ｏｆ）」または「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｏｆ）」という用語は、組成物または方法が、特定の実施形態または請求項で具体的に列挙された要素、ステップ、または成分のみを含むことを意味する。
【００１４】
本明細書で使用する場合、「から本質的になる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ  ｏｆ）」または「から本質的になる（ｃｏｎｓｉｓｔｓ  ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ  ｏｆ）」という用語は、組成物または方法が特定の材料またはステップのみを含み、請求される発明の基本的かつ新規な特性に実質的に影響しないものを含む。
【００１５】
本明細書に開示される特定の実施形態は、「備える」ではなく、「からなる」または「本質的にからなる」言語を使用して、特許請求の範囲においてさらに限定され得る。言い換えると、本明細書で説明する実施形態は「含む」または「備える」という句を使用するが、本明細書で説明する任意の実施形態は、「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｏｆ）」／「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｓ  ｏｆ）」または「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ  ｏｆ）」／「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｓ  ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ  ｏｆ）」で置き換えることができる。
【００１６】
用語「皮膚炎」は、皮膚の炎症をもたらす一群の皮膚状態を指すために使用され、かゆみ、赤い皮膚および発疹を特徴とする。このグループには、アトピー性皮膚炎、接触性皮膚炎、アレルギー性接触性皮膚炎、刺激性接触性皮膚炎、うっ血性皮膚炎、脂漏性皮膚炎、慢性皮膚炎、および湿疹が含まれる。
【００１７】
用語「治療有効量」は、本明細書に記載の実施形態の、所望の効果を達成するために必要または十分な組成物の量を指す。例えば、いくつかの実施形態では、所望の効果には、医学的治療、美容的治療および／または予防的処置が含まれるが、これらに限定されない。
【００１８】
用語「角質溶解性角質溶解」または「角質溶解性角質溶解」は、乾燥肌および表面に空気が満たされた水疱を特徴とする皮膚の状態を指す。これらの水ぶくれは非常に簡単に剥がすことができ、赤みがかった柔らかい場所を残す。
【００１９】
「卵胞過角化」は、ニキビの病因において重要な役割を果たし、卵胞の細胞は粘着性になり、皮膚の表面に正常に脱落せず、マイクロコメドンを生じる。
【００２０】
用語「Ｇｅｌｅｏｌ（商標登録）」は、モノステアリン酸グリセリルまたはモノステアリン酸グリセロール／グリセリドを指す。
【００２１】
用語「魚鱗癬」は、乾燥した、厚く、鱗状の皮膚を特徴とする遺伝性皮膚障害を指す。
【００２２】
本明細書に開示される実施形態のそれぞれにおいて、組成物および方法は、「それを必要とする」と言及されることもある、そのような治療を必要とする対象と共にまたはその上で利用され得る。本明細書で使用される場合、「それを必要とする」という語句は、対象が特定の方法または治療を必要とすると識別され、その特定の目的のために対象に治療が施されたことを意味する。
【００２３】
「濾胞性角化症」または「ダリエ病」という用語は、時に膿を含む、皮膚上の黒ずんだ皮むきパッチによって特徴付けられる遺伝的障害を指す。
【００２４】
用語「単純性苔癬」は、慢性のかゆみおよび引っ掻きを特徴とする皮膚障害を指す。一定の引っかき傷は、厚く、革のような、暗くなった（苔癬化した）皮膚を引き起こす。
【００２５】
用語「扁平苔癬」は、腰、手首、および足首のかゆみを伴う赤紫色の多角形の皮膚病変を特徴とする疾患を指す。
【００２６】
本明細書中で使用される場合、用語「メチルＮ−［３−（６，７−ジメトキシ−２−メチルアミノキナゾリン−４−イル）フェニル］テレフタルアミド酸」、「Ｅ６００５」、または「ＲＶＴ−５０１」はまた、Ｎ−［３−（６，７−ジメトキシ−２−メチルアミノキナゾリン−４−イル）フェニル］テレフタルアミドメチルエステル、メチル４−［（３−［６，７−ジメトキシ−２−（メチルアミノ）キナゾリン−４−イル］フェニル）カルバモイル］安息香酸塩、およびメチル４−［（｛３−［６，７−ジメトキシ−２−（メチルアミノ）キナゾリン−４−イル］フェニル｝アミノ）カルボニル］安息香酸塩を含む化合物の代替の名前として参照するものとする。ＲＶＴ−５０１またはＥ６００５として表される化合物は、次の構造を有するメチルＮ−［３−（６，７−ジメトキシ−２−メチルアミノキナゾリン−４−イル）フェニル］テレフタルアミド酸である。
【化１】
2021505621.tif 000003
【００２７】
本明細書で使用される場合、用語「薬学的に許容される」およびそれらの文法的変形は、それらが組成物の担体、希釈剤、賦形剤、および試薬または他の成分を指すので、最終組成物で使用される材料が刺激性ではないことを表す。それ以外の場合、一般的に患者に、特に皮膚に有害であり、好ましくは、一般的な外観、ｐＨ、色、臭い、および質感（感触）に関して快適であり、許容範囲内である。粘着性）、油性または乾燥、およびそれらが容易に広がることは、許容可能な吸収速度で皮膚に吸収される。
【００２８】
本明細書で使用する場合、「Ｅ６００５の代謝産物」、「ＥＲ−３９２７１０」、または「Ｍ１１」という用語は、メチルＮ−［３−（６，７−ジメトキシ−２−メチルアミノキナゾリン−４−イル］フェニル］テレフタルアミド酸の代謝産物を指す。Ｍ１１の化合物は、４−（（３−（６，７−ジメトキシ−２−（メチルアミノ）キナゾリン−４−イル）フェニル）カルバモイル）安息香酸であり、
【化２】
2021505621.tif 000004
の構造を有する。
【００２９】
用語「毛様体性紅皮症」は、赤みがかったオレンジ色、鱗屑の斑および角質性濾胞性丘疹によって特徴付けられる一群の慢性障害を指す。症状には、皮膚の赤みがかったオレンジ色の斑点、重度のはがれ、不快なかゆみ、足と手の皮膚の肥厚、毛包周辺の隆起の隆起などがある。
【００３０】
用語「乾癬」は、赤く、かゆみがあり、鱗状である異常な皮膚のパッチによって特徴付けられる自己免疫疾患を指す。乾癬には、主にプラーク、滴状、逆性、膿疱性、および紅皮症の５つのタイプがある。
【００３１】
「掻痒」または「掻痒」という用語は、様々な病気による皮膚の重度のかゆみを指す。
【００３２】
用語「手掌足膿疱症」は、手のひらおよび足底に影響を与える慢性膿疱性状態を指す。
【００３３】
用語「酒さ」は、発赤、ニキビ、腫れ、および小さな表面的な拡張した血管を特徴とする皮膚の状態を指す。
【００３４】
用語「皮脂腺腫」は、皮膚上の小さな隆起を指し、多くの小さな隆起が現れる場合、それは「皮脂腺過形成」と呼ばれる。
【００３５】
「皮脂腺」という用語は、皮脂を分泌する単葉腺または多葉腺を含む。皮脂腺には、毛包脂腺単位、フォーダイススポット、マイボーム腺、ツァイス腺およびモンゴメリー乳輪結節が含まれる。
【００３６】
「皮脂腺に関連する障害」という語句は、皮脂腺に関連する疾患、状態および症状を含む。皮脂腺に関連する疾患には、にきび、脂漏症、皮脂腫、皮脂腺癌、脂漏性皮膚炎、皮脂嚢胞、皮脂腺腫および皮脂腺過形成が含まれる。
【００３７】
用語「脂漏症」は、油性皮膚を含む。
【００３８】
用語「脂漏性皮膚炎」には、鱗状、薄片状、かゆみ、および赤い皮膚を特徴とする炎症性皮膚疾患が含まれ、真菌、遺伝、環境、ホルモン、および免疫機能障害によって引き起こされる脂漏性皮膚炎が含まれる。
【００３９】
「皮脂嚢胞」という用語は、単純性脂肪嚢胞腫（例えば、単純な皮脂腺嚢胞および孤立性脂肪性嚢胞腫）および多発性脂肪性嚢胞腫（例えば、表皮多嚢胞性疾患および皮脂嚢腫症）を含む。
【００４０】
用語「皮脂過形成」は、皮脂腺の拡大を含む。
【００４１】
本明細書で使用される「皮膚」という用語は、対象を環境刺激から保護し、体温を調節し、外部感覚を可能にする体の器官を指す。「皮膚」は３つの層に分かれ、最外層はメラノサイトを含む表皮と呼ばれ、結合組織、毛包、および汗腺を含む真皮、および、脂肪と結合組織で構成される皮下組織と呼ばれる最も深い皮下層である。
【００４２】
本明細書で使用される場合、「局所的」および「局所的」という用語は、皮膚および粘膜の表面への本発明の組成物の適用を指す。
【００４３】
「局所適用」または「局所投与」は、表皮または真皮の状態を治療するための組成物の送達を指し、局所組成物は皮膚に適用され、局所的に作用し、全身効果を有さない。薬物の局所投与は、例えば、様々な皮膚障害の治療において有利に適用されることが多い。
【００４４】
本明細書中で使用される場合、用語「局所処方物」および「局所組成物」は、皮膚または粘膜に適用され得る処方物または組成物を言及する。局所製剤または組成物は、例えば、患者に治療的利益または消費者に美容的利益を与えるために使用され得る。このような局所製剤または組成物は、クリーム、フォーム、ゲル、ローション、または軟膏の形態で提供され得る。
【００４５】
本明細書で使用される「治療する」、「治療された」、または「治療すること」という用語は、目的が予防、低減、排除、または減速することである治療処置、美容処置および／または予防または防止手段を指す（減少する）望ましくない生理学的状態、障害、または疾患、または有益なまたは望ましい臨床結果を得るため（例えば、にきび（ａｃｎｅ）、ニキビ（ｃｏｍｅｄｏｎｅｓ）、ニキビ（ｐｉｍｐｌｅｓ）、または吹き出物（ｂｒｅａｋｏｕｔｓ）の減少）。この開示の目的のために、有益なまたは望ましい臨床結果には、症状の緩和が含まれるが、これに限定されない。状態、障害または疾患の程度の減少；状態、障害または疾患の状態の安定化（すなわち悪化しない）；状態、障害または疾患の発症の遅延または進行の遅延；状態、障害または病状の改善；寛解（部分的であろうと全体的であろうと）、検出可能か検出不可能か、または状態、障害または疾患の増強または改善。治療には、過度のレベルの望ましくない副作用なしに臨床的に有意な反応を引き出すことが含まれる。
【００４６】
用語「いぼ」は、あるタイプのヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）による感染によって引き起こされる皮膚の残りの部分と色が類似する、小さく、粗く、硬い成長を指す。一般的ないぼ、足底いぼ、糸状いぼ、および性器いぼを含む多くのタイプが存在する。
【００４７】
特記しない限り、明細書および特許請求の範囲で使用される成分の量、分子量、反応条件などの特性を表すすべての数字は、すべての場合において「約」という用語によって修飾されると理解されるべきである。したがって、それに反して示されない限り、本明細書および添付の特許請求の範囲に示される数値パラメーターは、本発明によって得られることが求められる所望の特性に応じて変動し得る近似値である。
【００４８】
本明細書における値の範囲の列挙は、単に、範囲内に含まれるそれぞれの個別の値を個々に参照する簡略法として役立つことを意図する。本明細書で別段の指示がない限り、各個別の値は、本明細書で個別に列挙されているかのように、本明細書に組み込まれる。本明細書に記載されているすべての方法は、本明細書で別段の指示がない限り、または文脈によって明らかに矛盾しない限り、任意の適切な順序で実行することができる。本明細書で提供されるありとあらゆる例、または例示的な言語（例えば、「など」）の使用は、単に本発明をよりよく明らかにすることを意図しており、他に請求される本発明の範囲を限定するものではない。本明細書中の言語は、本発明の実施に必須の請求されていない要素を示すと解釈されるべきではない。
【００４９】
本明細書に開示される本発明の代替要素または実施形態のグループ化は、限定として解釈されるべきではない。各グループのメンバーは、個別に、またはグループの他のメンバーまたは本明細書で見られる他の要素との任意の組み合わせで参照および主張され得る。グループの１つ以上のメンバーが、利便性や特許性の理由から、グループに含まれるか、グループから削除されることが予想される。
【００５０】
いくつかの実施形態では、式（Ｉ）で表される化合物は、以下の構造を有するメチルＮ−［３−（６，７−ジメトキシ−２−メチルアミノキナゾリン−４−イル）フェニル］テレフタルアミド酸（ＲＶＴ−５０１）である：
【化３】
2021505621.tif 000005
化合物およびこのような化合物を作製する方法は、米国特許第７，９３９，５４０号および第８，５３０，６５４号にさらに記載されており、これらはそれぞれ、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【００５１】
光学異性体−ジアステレオマー−幾何異性体−互変異性体。本明細書に記載される化合物は、不斉中心を含み得、したがって、鏡像異性体として存在し得る。本発明による化合物が２つ以上の不斉中心を有する場合、それらはさらにジアステレオマーとして存在し得る。本明細書の実施形態は、実質的に純粋な分割された鏡像異性体、それらのラセミ混合物、ならびにジアステレオマーの混合物としてのすべてのそのような可能な立体異性体を含む。化学式は、特定の位置での明確な立体化学なしで示す。本明細書の実施形態は、そのような式のすべての立体異性体およびその薬学的に許容される塩を含む。エナンチオマーのジアステレオ異性体ペアは、例えば、適切な溶媒からの分別結晶によって分離することができ、こうして得られたエナンチオマーのペアは、従来の手段によって、分割剤またはキラルＨＰＬＣカラムとして、例えば光学活性酸または塩基を使用して、個々の立体異性体に分離することができる。さらに、一般式の化合物の任意の鏡像異性体またはジアステレオマーは、既知の立体配置の光学的に純粋な出発物質または試薬を使用する立体特異的合成によって得ることができる。本明細書に記載の実施形態は、幾何異性体、光学異性体、立体異性体、または互変異性体、および異性体混合物など、本明細書に開示の式（Ｉ）の化合物のすべての異性体を含む。本明細書の実施形態は、ラセミ形態および光学活性形態の両方を含む。実施形態は、単結晶形態またはそれらの混合物をさらに含む。さらに、本明細書の実施形態はまた、化合物のアモルファス形態、無水物、および水和物形態を含む。さらに、本明細書の実施形態は、本明細書に開示されている化合物の代謝産物、塩、水和物、およびプロドラッグも含む。
【００５２】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の化合物の塩は、無機酸塩、有機酸塩、無機塩基性塩、有機塩基性塩、酸性または塩基性アミノ酸塩などを含み得る。いくつかの実施形態では、無機酸塩は、塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩などを含み得る。いくつかの実施形態では、塩は、塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、またはリン酸塩から選択されても良い。いくつかの実施形態では、有機酸塩は、酢酸塩、コハク酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、酒石酸塩、クエン酸塩、乳酸塩、ステアリン酸塩、安息香酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、またはベンゼンスルホン酸塩を含み得る。いくつかの実施形態では、塩は、メタンスルホネートまたはｐ−トルエンスルホネートであって良い。
【００５３】
いくつかの実施形態において、無機塩基性塩は、以下を含み得る：ナトリウム塩またはカリウム塩などのアルカリ金属塩。カルシウム塩、マグネシウム塩などのアルカリ土類金属塩。アルミニウム塩；アンモニウム塩などを含み得る。いくつかの実施形態では、有機塩基性塩は、ジエチルアミン塩、ジエタノールアミン塩、メグルミン塩、Ｎ、Ｎ'−ジベンジルエチレンジアミン塩などを含み得る。
【００５４】
いくつかの実施形態では、酸性アミノ酸塩は、アスパラギン酸およびグルタミン酸を含み得る。いくつかの実施形態では、塩基性アミノ酸塩は、アルギニン塩、リジン塩、オルニチン塩などを含み得る。
【００５５】
局所処方
いくつかの実施形態では、活性成分は、メチルＮ−［３−（６，７−ジメトキシ−２−メチルアミノキナゾリン−４−イル）フェニル］テレフタルアミド酸（ＲＶＴ−５０１）である：
【化４】
2021505621.tif 000006
【００５６】
本明細書の実施形態は、治療有効量のメチルＮ−［３−（６，７−ジメトキシ−２−メチルアミノキナゾリン−４−イル）フェニル］テレフタルアミド酸、ＰＥＧ４００、ＰＥＧ４０００、白色ワセリン、ビタミンＥ、モノステアリン酸グリセロール／グリセリド、ミリスチン酸イソプロピル、および水を含む局所用組成物に関する。いくつかの実施形態では、メチルＮ−［３−（６，７−ジメトキシ−２−メチルアミノキナゾリン−４−イル）フェニル］テレフタルアミド酸は、局所用組成物の約０．０１重量％〜約５重量％の濃度である。いくつかの実施形態では、ＰＥＧ４００は、局所用組成物の約２５重量％〜約７５重量％の濃度である。いくつかの実施形態では、ＰＥＧ４０００は、局所用組成物の約１５重量％〜約３５重量％の濃度である。いくつかの実施形態では、白色ワセリンは、局所用組成物の約１重量％〜約１０重量％の濃度である。いくつかの実施形態では、ビタミンＥは、局所組成物の約０．０１重量％〜約５重量％の濃度である。いくつかの実施形態では、グリセロールモノステアレート／グリセリドは、局所用組成物の約２重量％〜約１５重量％の濃度である。いくつかの実施形態では、ミリスチン酸イソプロピルは、局所用組成物の約２重量％〜約２５重量％の濃度である。いくつかの実施形態では、水は、局所用組成物の約０．１重量％〜約１０重量％の濃度である。
【００５７】
特定の実施形態では、局所用組成物は、メチルＮ−［３−（６，７−ジメトキシ−２−メチルアミノキナゾリン−４−イル）フェニル］テレフタルアミド酸を０．２重量％で含み、ＰＥＧ４００を５０．５重量％で含み、２５．０重量％のＰＥＧ４０００、４．４重量％の白色ワセリン、０．１重量％のビタミンＥ、８．０重量％のグリセロールモノステアレート／グリセリド、１０．０重量％のイソプロピルミリステート、および２．０重量％の水を含む。
【００５８】
特定の実施形態では、局所用組成物は、０．５重量％のメチルＮ−［３−（６，７−ジメトキシ−２−メチルアミノキナゾリン−４−イル）フェニル］テレフタルアミド酸、５０．５重量％のＰＥＧ４００、２５．０重量％のＰＥＧ４０００、４．４重量％の白色ワセリン、０．１重量％のビタミンＥ、８．０重量％のグリセロールモノステアレート／グリセリド、１０．０重量％のイソプロピルミリステート、および２．０重量％の水を含む。
【００５９】
本明細書の実施形態は、治療有効量のメチルＮ−［３−（６，７−ジメトキシ−２−メチルアミノキナゾリン−４−イル）フェニル］テレフタルアミド酸および薬学的に許容される局所賦形剤を含む局所組成物を対象とし、局所組成物のＡＵＣの平均（対数変換データに基づく母集団の幾何平均）の比率の％信頼区間は、前述の局所組成物のいずれかのＡＵＣの８０−１２５％以内であり、局所組成物のＣｍａｘの平均比は、前述の同じ局所組成物のＣｍａｘの７０〜１４３％以内である。
【００６０】
本発明の局所用組成物は、液体、トナー、溶液、スプレー、乳濁液、保湿剤、日焼け止め、クリーム、ローション、マスク、懸濁液、粉末、ゲル、ゼリー、ペーストとして当業者により処方され得る。泡、軟膏、シャンプー、接着剤、美容液、処理された衣服またはパッドなど。いくつかの実施形態では、局所用組成物は、点眼剤、点耳剤、または歯の表面に適用できる組成物として処方される。
【００６１】
本明細書に記載される実施形態では、局所組成物は、エアロゾル、スプレー、ポンプパック、ブラシ、綿棒、または他のアプリケーターを含むがこれらに限定されない、当技術分野で公知の任意の手段によって皮膚に適用され得る。アプリケータは、定量エアロゾル、蓄積エネルギー定量ポンプ、または手動定量ポンプなどの固定または可変の定量アプリケーションを提供できる。
【００６２】
本明細書に記載の実施形態では、局所組成物は、１日１回または１日複数回、部位に適用されるように製剤化される。
【００６３】
本明細書に記載の実施形態は、それを必要とする患者における軽度から中等度のアトピー性皮膚炎を治療する方法であって、治療有効量のメチルＮ−［３−（６，７−ジメトキシ−２−メチルアミノキナゾリン−４−イル）フェニル］テレフタルアミド酸、ＰＥＧ４００、ＰＥＧ４０００、白色ワセリン、ビタミンＥ、モノステアリン酸グリセロール／グリセリド、ミリスチン酸イソプロピル、および水を含む局所組成物を局所的に適用する工程を含む。本明細書に記載の実施形態は、患者が異なる患者集団であっても良く、患者は、小児科、青年期、または成人であっても良い。本明細書に記載の実施形態では、メチルＮ−［３−（６，７−ジメトキシ−２−メチルアミノキナゾリン−４−イル）フェニル］テレフタルアミド酸の治療有効量は、０．２％または０．５％である。本明細書に記載の実施形態では、局所組成物は、１日１回または１日２回適用される。本明細書に記載の実施形態は、実施例２：アトピー性皮膚炎の治療、実施例３：アトピー性皮膚炎の成人および青年期の対象におけるＲＶＴ−５０１の第２相試験、実施例６：軽度から中等度のアトピー性皮膚炎の小児患者におけるＲＶＴ−５０１局所軟膏の有効性、安全性、および忍容性を評価する第２相試験、または実施例７：ＲＶＴの安全性、忍容性、および薬物動態を評価する非盲検試験−５０１アトピー性皮膚炎の小児患者における局所軟膏に従って、それを必要とする患者の軽度から中等度のアトピー性皮膚炎を治療する方法に関する。
【００６４】
本明細書の実施形態は、治療的有効量のメチルＮ−［３−（６，７−ジメトキシ−２−メチルアミノキナゾリン−４）−イル）フェニル］テレフタルアミド酸、ＰＥＧ４００、ＰＥＧ４０００、白色ワセリン、ビタミンＥ、グリセロールモノステアレート／グリセリド、ミリスチン酸イソプロピル、および水を含む局所用組成物を局所適用することを含む、それを必要とする患者の皮膚状態を治療する方法に関する。特定の実施形態では、患者は青年期である。
【００６５】
いくつかの実施形態では、メチルＮ−［３−（６，７−ジメトキシ−２−メチルアミノキナゾリン−４−イル）フェニル］テレフタルアミド酸は、局所用組成物の約０．０１重量％〜約５重量％の濃度である。いくつかの実施形態では、ＰＥＧ４００は、局所用組成物の約２５重量％〜約７５重量％の濃度である。いくつかの実施形態では、ＰＥＧ４０００は、局所用組成物の約１５重量％〜約３５重量％の濃度である。いくつかの実施形態では、白色ワセリンは、局所用組成物の約１重量％〜約１０重量％の濃度である。いくつかの実施形態では、ビタミンＥは、局所組成物の約０．０１重量％〜約５重量％の濃度である。いくつかの実施形態では、グリセロールモノステアレート／グリセリドは、局所用組成物の約２重量％〜約１５重量％の濃度である。いくつかの実施形態では、ミリスチン酸イソプロピルは、局所用組成物の約２重量％〜約２５重量％の濃度である。いくつかの実施形態では、水は、局所用組成物の約０．１重量％〜約１０重量％の濃度である。
【００６６】
特定の実施形態では、それを必要とする患者の皮膚状態を治療する方法は、０．２重量％のメチルＮ−［３−（６，７−ジメトキシ−２−メチルアミノキナゾリン−４−イル）フェニル］テレフタルアミド酸、５０．５重量％のＰＥＧ４００、２５．０重量％のＰＥＧ４０００、４．４重量％の白色ワセリン、０．１重量％のビタミンＥ、８．０重量％のグリセロールモノステアレート／グリセリド、１０．０重量％のミリスチン酸イソプロピル、および２．０重量％の水を含む局所用組成物を局所的に塗布することを含む。
【００６７】
特定の実施形態では、それを必要とする患者の皮膚状態を治療する方法は、０．５重量％のメチルＮ−［３−（６，７−ジメトキシ−２−メチルアミノキナゾリン−４−イル）フェニル］テレフタルアミド酸、５０．５重量％のＰＥＧ４００、２５．０重量％のＰＥＧ４０００、４．４重量％の白色ワセリン、０．１重量％のビタミンＥ、８．０重量％のグリセロールモノステアレート／グリセリド、１０．０重量％のミリスチン酸イソプロピル、および２．０重量％の水を含む局所用組成物を局所適用することを含む。
【００６８】
本明細書の実施形態は、治療有効量のメチルＮ−［３−（６，７−ジメトキシ−２−メチルアミノキナゾリン−４−イル）フェニル］テレフタルアミド酸および薬学的に許容される局所賦形剤を含む局所組成物を対象とし、局所組成物のＡＵＣの平均（対数変換データに基づく母集団の幾何平均）の比率の％信頼区間は、前述の局所組成物のいずれかのＡＵＣの８０−１２５％以内であり、局所用組成物のＣｍａｘの平均の比は、前述の同じ局所用組成物のＣｍａｘの７０〜１４３％以内である。
【００６９】
特定の実施形態では、それを必要とする患者で治療される皮膚状態は、皮膚炎、乾癬、皮膚のかゆみ、にきび、皮膚の炎症と発赤、皮脂腺に関連する障害、油性肌、乾燥肌、酒さ様皮膚炎、火傷、手のひらや足底に影響を与える障害、皮膚の遺伝的障害、いぼ、およびそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、皮膚炎は、アトピー性皮膚炎、接触皮膚炎、アレルギー性接触皮膚炎、刺激性接触皮膚炎、うっ血性皮膚炎、脂漏性皮膚炎、慢性皮膚炎、湿疹、およびそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される。いくつかの実施形態において、乾癬は、プラーク乾癬、滴状乾癬、逆乾癬、膿疱性乾癬、紅皮症乾癬、およびそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、かゆみを伴う皮膚は、掻痒症、痒疹、毛孔性紅斑性乾癬、慢性単純性苔癬、扁平苔癬、およびそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、座瘡は、尋常性座瘡、嚢胞性座瘡、炎症性座瘡、非炎症性座瘡、およびそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される。いくつかの実施形態において、皮膚の炎症および発赤は、脂漏性皮膚炎、じんま疹湿疹、じんましん、脂漏性湿疹、およびそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、皮脂腺に関連する障害は、にきび、濾胞性過角化、皮脂沈着、皮脂腺腫、皮脂過形成、過剰な皮脂産生、脂漏症、皮脂腫、皮脂腺癌、脂漏性皮膚炎、皮脂嚢胞、およびそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、油性皮膚は脂漏症である。いくつかの実施形態では、乾燥肌は、皮疹、魚鱗癬、乾癬、およびそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、火傷は日焼けである。いくつかの実施形態では、手のひらまたは足底に影響を与える障害は、掌蹠膿疱症、剥離性角質溶解、およびそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、皮膚の遺伝的障害はダリエ病である。
【００７０】
いくつかの実施形態では、それを必要とする患者のアトピー性皮膚炎を治療する方法は、治療有効量のメチルＮ−［３−（６，７−ジメトキシ−２−メチルアミノキナゾリン−４−イル）フェニル］テレフタルアミド酸、ＰＥＧ４００、ＰＥＧ４０００、白色ワセリン、ビタミンＥ、グリセロールモノステアレート／グリセリド、ミリスチン酸イソプロピル、および水を含む局所用組成物を局所的に塗布することを含む。特定の実施形態では、患者は青年期である。
【００７１】
いくつかの実施形態では、メチルＮ−［３−（６，７−ジメトキシ−２−メチルアミノキナゾリン−４−イル）フェニル］テレフタルアミド酸は、局所組成物の約０．０１重量％〜約５重量％の濃度である。いくつかの実施形態では、ＰＥＧ４００は、局所用組成物の約２５重量％〜約７５重量％の濃度である。いくつかの実施形態では、ＰＥＧ４０００は、局所用組成物の約１５重量％〜約３５重量％の濃度である。いくつかの実施形態では、白色ワセリンは、局所用組成物の約１重量％〜約１０重量％の濃度である。いくつかの実施形態では、ビタミンＥは、局所組成物の約０．０１重量％〜約５重量％の濃度である。いくつかの実施形態では、グリセロールモノステアレート／グリセリドは、局所用組成物の約２重量％〜約１５重量％の濃度である。いくつかの実施形態では、ミリスチン酸イソプロピルは、局所用組成物の約２重量％〜約２５重量％の濃度である。いくつかの実施形態では、水は、局所用組成物の約０．１重量％〜約１０重量％の濃度である。
【００７２】
特定の実施形態では、それを必要とする患者のアトピー性皮膚炎を治療する方法は、０．２重量％のメチルＮ−［３−（６，７−ジメトキシ−２−メチルアミノキナゾリン−４−イル）フェニル］テレフタルアミド酸、５０．５重量％のＰＥＧ４００、２５．０重量％のＰＥＧ４０００、４．４重量％の白色ワセリン、０．１重量％のビタミンＥ、８．０重量％のモノステアリン酸グリセロール／グリセリド、１０．０重量％のイソプロピルミリステート、および２．０重量％の水を含む局所用組成物を局所的に塗布することを含む。
【００７３】
特定の実施形態では、それを必要とする患者のアトピー性皮膚炎を治療する方法は、０．５重量％のメチルＮ−［３−（６，７−ジメトキシ−２−メチルアミノキナゾリン−４−イル）フェニル］テレフタルアミド酸、５０．５重量％のＰＥＧ４００、２５．０重量％のＰＥＧ４０００、４．４重量％の白色ワセリン、０．１重量％のビタミンＥ、８．０重量％のモノステアリン酸グリセロール／グリセリド、１０．０重量％のイソプロピルミリステート、および２．０重量％の水を含む局所用組成物を局所適用することを含む。
【００７４】
本明細書に記載の実施形態では、方法は、局所組成物を１日１回塗布することを対象とする。本明細書に記載の実施形態では、方法は、局所用組成物を１日に複数回塗布することを対象とする。いくつかの実施形態では、局所用組成物は、１日２回、１日３回、１日４回、または１日５回塗布される。いくつかの実施形態では、局所用組成物は、朝に１回、夕方に１回塗布される。いくつかの実施形態では、局所用組成物は、１２時間ごと、１１時間ごと、１０時間ごと、９時間ごと、８時間ごと、７時間ごと、６時間ごと、５時間ごと、４時間ごと、３時間ごと、２時間、または１時間ごとに塗布される。
【００７５】
本明細書に記載の実施形態では、方法は、局所用組成物を身体の皮膚の複数の部位に適用することを対象とする。例えば、局所用組成物は、皮膚の広い領域に予防的に適用されても良く、または局所用組成物は、治療を必要とする特定の部位に適用されても良い。いくつかの実施形態では、局所用組成物は、液体、トナー、溶液、スプレー、乳液、保湿剤、日焼け止め、クリーム、ローション、マスク、懸濁液、粉末、ゲル、ゼリー、ペースト、泡、軟膏、シャンプーとして皮膚に適用され、接着剤、美容液、処理済みの布またはパッド。いくつかの実施形態では、局所用組成物は、点眼剤として眼に適用され、点耳剤として外耳道に配置されるか、または歯の表面に適用される。
【００７６】
メチルＮ−［３−（６，７−ジメトキシ−２−メチルアミノキナゾリン−４−イル）フェニル］テレフタルアミド酸とその代謝産物の血清レベルを検出する方法
本明細書の実施形態は、メチルＮ−［３−（６，７−ジメトキシ−２−メチルアミノキナゾリン−４−イル）フェニル］テレフタルアミド酸を含む局所用組成物を投与する工程と、患者の血液中のメチルＮ−［３−（６，７−ジメトキシ−２−メチルアミノキナゾリン−４−イル）フェニル］テレフタルアミド酸および代謝物のレベルを分析する工程とを含む、患者の状態を治療する方法に関する。実施形態では、代謝産物は、４−（（３−（６，７−ジメトキシ−２−（メチルアミノ）キナゾリン−４−イル）フェニル）カルバモイル）安息香酸である。
【００７７】
本明細書の実施形態は、メチルＮ−［３−（６，７−ジメトキシ−２−メチルアミノキナゾリン−４−イル）フェニル］テレフタルアミド酸を含む局所用組成物を投与する工程と、および子供の血中のメチルＮ−［３−（６，７−ジメトキシ−２−メチルアミノキナゾリン−４−イル）フェニル］テレフタルアミド酸と代謝物のレベルを分析する工程とを含む、子供の状態を治療する方法に関する。実施形態では、代謝産物は、４−（（３−（６，７−ジメトキシ−２−（メチルアミノ）キナゾリン−４−イル）フェニル）カルバモイル）安息香酸である。
【００７８】
実施形態では、子供は、１８歳未満、１５歳未満、１２歳未満、１０歳未満、５歳未満、３歳未満、２歳未満、または１歳未満である。実施形態では、子供は幼児である。実施形態では、子供は、５０パウンド未満、４０パウンド未未満、３０パウンド未未満、２０パウンド未未満、または１０パウンド未未満の体重である。
【００７９】
本明細書の実施形態は、薬物の局所組成物を投与する工程と、患者の血液を収集する工程と、および血液中の薬物および代謝産物のレベルを分析することを含む、治療中に患者の血液中の薬物および代謝産物のレベルを監視する方法に関する。実施形態では、薬物は、メチルＮ−［３−（６，７−ジメトキシ−２−メチルアミノキナゾリン−４−イル）フェニル］テレフタルアミド酸である。実施形態では、代謝産物は、４−（（３−（６，７−ジメトキシ−２−（メチルアミノ）キナゾリン−４−イル）フェニル）カルバモイル）安息香酸である。
【００８０】
実施形態では、子供または患者の血液中の薬物および／または代謝産物のレベルは、治療の推奨を決定することができ、患者の血液中の薬物および／または代謝産物のレベルは、許容限界内であり、許容範囲外の患者の血中の薬物および／または代謝物のレベルが薬物治療の中止または適用される薬物治療の量の変化をもたらす可能性があるのに対し、薬物治療を継続する。
【００８１】
本明細書の実施形態は、ａ）メチルＮ−［３−（６，７−ジメトキシ−２−）メチルアミノキナゾリン−４−イル）フェニル］テレフタルアミド酸の治療有効量を含む局所組成物を局所的に塗布する工程と、ｂ）患者から約１０μＬ〜約１ｍＬの血液サンプルを収集する工程と、ｃ）血液サンプルを乾燥血液スポットカードにスポットする工程と、ｄ）メチルＮ−［３−（６，７−ジメトキシ−２−メチルアミノキナゾリン−４−イル）フェニル］テレフタルアミド酸と４−（（３−（６，７−ジメトキシ−２−（メチルアミノ）キナゾリン−４−イル）フェニル）カルバモイル）安息香酸のレベルのために血液サンプルを分析する工程を含む、それを必要とする患者の皮膚状態を治療する方法を対象とする。
【００８２】
実施形態では、患者は乳児または子供であり、採取される血液の量は、約１ｍＬ、約５００μＬ、約１００μＬ、約５０μＬ、約４０μＬ、約３０μＬ、約２５μＬ、約２０μＬ、約１５μＬ、または約１０μＬ。
【００８３】
本明細書の実施形態は、ａ）患者から約１０μＬから約１ｍＬの血液サンプルを収集し工程と、ｂ）血液サンプルを乾燥血液スポットカードにスポットする工程と、ｃ）乾燥血液スポットカードから約３ｍｍ〜約１０ｍｍのディスクを打ち抜き、血液サンプルを処理する工程と、ｄ）ＵＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ（超高性能液体クロマトグラフィー−タンデム質量分析）を使用して、処理された血液サンプルを分析する工程と、e）血液サンプル中のメチルＮ−［３−（６，７−ジメトキシ−２−メチルアミノキナゾリン−４−イル）フェニル］テレフタルアミド酸と４−（（３−（６，７−ジメトキシ−２−（メチルアミノ）キナゾリン−４−イル）フェニル）カルバモイル）安息香酸の量を定量化する工程と、を含む、メチルＮ−［３−（６，７−ジメトキシ−２−メチルアミノキナゾリン−４−イル）フェニル］テレフタルアミド酸および４−（（３−（６，７−ジメトキシ−２−（メチルアミノ）キナゾリン−４−イル）フェニル）カルバモイル）安息香酸を検出する方法を対象とする。
【００８４】
実施形態では、収集される血液の量は、約１ｍＬ、約５００μＬ、約１００μＬ、約５０μＬ、約４０μＬ、約３０μＬ、約２５μＬ、約２０μＬ、約１５μＬ、または約１０μＬ。
【００８５】
実施形態では、乾燥血液スポットカードから打ち抜かれたディスクは、約３ｍｍ、約４ｍｍ、約５ｍｍ、約６ｍｍ、約７ｍｍ、約８ｍｍ、約９ｍｍ、または約１０ｍｍである。
【００８６】
実施形態では、血液サンプルから定量されるメチルＮ−［３−（６，７−ジメトキシ−２−メチルアミノキナゾリン−４−イル）フェニル］テレフタルアミド酸の量は、約１ｍｇ／ｍＬ〜約２００ｎｇ／ｍＬである。実施形態では、血液サンプルから定量されるメチルＮ−［３−（６，７−ジメトキシ−２−メチルアミノキナゾリン−４−イル）フェニル］テレフタルアミド酸の量は、３ｎｇ／ｍＬである。実施形態では、血液サンプルから定量されたメチルＮ−［３−（６，７−ジメトキシ−２−メチルアミノキナゾリン−４−イル）フェニル］テレフタルアミド酸の量は、１６０ｎｇ／ｍＬである。
【００８７】
実施形態では、血液サンプルから定量される４−（（３−（６，７−ジメトキシ−２−（メチルアミノ）キナゾリン−４−イル）フェニル）カルバモイル）安息香酸の量は、約１ｍｇ／ｍＬ〜約２００ｎｇ／ｍＬである。実施形態では、血液サンプルから定量化された４−（（３−（６，７−ジメトキシ−２−（メチルアミノ）キナゾリン−４−イル）フェニル）カルバモイル）安息香酸の量は、３ｎｇ／ｍＬである。実施形態では、血液サンプルから定量化された４−（（３−（６，７−ジメトキシ−２−（メチルアミノ）キナゾリン−４−イル）フェニル）カルバモイル）安息香酸の量は、１６０ｎｇ／ｍＬである。
【実施例１】
【００８８】
実施例１：皮膚浸透調査
この研究は、有効成分であるメチルＮ−［３−（６，７−ジメトキシ−２−メチルアミノキナゾリン−４−イル）フェニル］テレフタルアミド酸（ＲＶＴ−５０１）のヒト死体皮膚を用いたｉｎ  ｖｉｔｒｏフランツ有限用量モデルを使用した４つの製剤と１つの薬液からのヒト死体皮膚の内部および全体への浸透を評価するように設計された。リン酸緩衝生理食塩水；ｐＨ７．４±０．１を受容培地として使用した。容積式ピペットを使用して、各細胞に１０μＬ／ｃｍ２のそれぞれの製剤を１回投与した。用量適用後の事前に選択した時間に、５００μＬの受容培地をフランツセルのサンプリングアームから取り出し、等量の新鮮な受容培地と交換した。ガラス棒を使用して、皮膚の表面積全体を均一に覆うように製剤を広げた。研究の終わりに、細胞を分解し、皮膚を各細胞から注意深く取り除いた。各皮膚切片を０．５ｍＬの抽出溶液（受容媒体）で２回洗浄して、吸収されなかった製剤を皮膚の表面から収集した。鉗子を用いて皮膚を注意深く表皮と真皮に分離した。各表皮および真皮バイアルに、均質化溶液（リン酸緩衝生理食塩水、ｐＨ７．４）を加えた。組織はビーズホモジナイザー（ＯＭＮＩ  Ｂｅａｄ  Ｒｕｐｔｏｒ  ２４）を使用してホモジナイズした。
【表１】
2021505621.tif 000007
【００８９】
この研究の目的は、メチルＮ−［３−（６，７−ジメトキシ−２−メチルアミノキナゾリン−４−イル）フェニル］テレフタルアミド酸（ＲＶＴ−５０１）の４つの製剤（Ｂ、Ｃ１、Ｃ２、およびＣ３）と１つの薬液（Ｃ４）からヒトの死体皮膚中への浸透を評価することであった。結果は、ＰＥＧ−４００溶液（Ｃ４）からのメチルＮ−［３−（６，７−ジメトキシ−２−メチルアミノキナゾリン−４−イル）フェニル］テレフタルアミド酸（ＲＶＴ−５０１）の最大浸透を示した。これは、Ｃ４が研究の陽性対照として使用されたため、予想されていた。試験したすべての製剤について、薬物レベルは２４時間で受容体培地での定量限界を下回った。ドナー１の結果は、Ｃ１がＢ、Ｃ２、およびＣ３と比較して浸透性が高いことを示唆する。しかし、ドナー２の結果は、３つの製剤がほぼ同等の浸透性を持つことを示唆する。全体として、ドナー１はドナー２と比較して浸透率が高い傾向を示した。ドナー１はドナー２よりも視覚的に薄いように見えた。さらに、２つの強度０．２％と０．５％の間で用量反応は観察されなかった。両方のドナーでより高い浸透を有するＣ１の同様の傾向は観察されなかったので、製剤Ｂ、Ｃ１、Ｃ２、およびＣ３は、角質層（図１）、表皮（図２）、および真皮（図３）へのほぼ同等の浸透を有したと結論付けることができる。
【実施例２】
【００９０】
実施例２：アトピー性皮膚炎の治療
アトピー性皮膚炎（ＡＤ）は、背部皮膚へのジニトロクロロベンゼン（ＤＮＣＢ）の反復経皮適用により、８〜１２週齢の特定の無菌（ＳＰＦ）雌ＮＣ／Ｎｇａマウス（ｎ＝８／群）で誘発された。ＮＣ／Ｎｇａマウスは、アトピー性皮膚炎の確立されたマウスモデルである。Ｓｕｔｏ  ｅｔ  ａｌ．ＮＣ／Ｎｇａ  ｍｉｃｅ：ａ  ｍｏｕｓｅ  ｍｏｄｅｌ  ｆｏｒ  ａｔｏｐｉｃ  ｄｅｒｍａｔｉｔｉｓ；Ｉｎｔ  Ａｒｃｈ  Ａｌｌｅｒｇｙ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９９９；１２０  Ｓｕｐｐｌ  １：７０−５；ａｎｄ  Ｇａｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔ  ｏｆ  ａｌｌｅｒｇｉｃ  ｄｅｒｍａｔｉｔｉｓ  ｉｎ  ＮＣ／Ｎｇａ  ｍｉｃｅ  ａｓ  ａ  ｍｏｄｅｌ  ｆｏｒ  ｓｅｖｅｒｅ  ａｔｏｐｉｃ  ｄｅｒｍａｔｉｔｉｓ，Ｂｉｏｌ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．２００４  Ｓｅｐ；２７（９）：１３７６−８１参照。
【００９１】
予防的研究および治療的研究が行われた：
１．予防的研究：１〜１４日目の０．２％製剤（Ｃ１）、０．５％製剤（Ｃ２）、ＲＶＴ−５０１プラセボ、タクロリムスプラセボ、０．１％タクロリムス、または治療なし（ＡＤコントロール）またはＡＤの偽誘導。
２．治療試験：８〜１４日目の０．２％製剤（Ｃ１）、０．５％製剤（Ｃ２）、有効成分プラセボ、タクロリムスプラセボ、０．１％タクロリムス、または治療なし（ＡＤコントロール）。図４を参照。
【００９２】
両方の研究において、スクラッチングアッセイを２、８、１１、１４日に行った。皮膚サンプルを組織病理学およびサイトカイン分析のために１５日目に採取した。偽誘導対ＤＮＣＢ誘導マウス皮膚の組織病理学は、アトピー性皮膚炎の明らかな存在を示す。図５を参照。
【００９３】
皮膚切片を、ＡＤ関連の病理について１５日目に調べた。０．５％製剤（Ｃ２）または０．１％タクロリムスによる予防的治療は、微視的レベルでＤＮＣＢによって誘発されたＡＤ病変を弱めた。図６の左の列を参照ください。治療的処置として、０．５％の製剤（Ｃ２）と０．１％のタクロリムスは、ＡＤ病変の重症度の低下に向かう傾向があった。図６の右欄を参照。
【００９４】
これらの免疫モジュレーターが異なる治療によってどのように影響を受けたかを調査するために、各研究の終わりにサイトカイン分析のために皮膚切片を採取した。メチルＮ−［３−（６，７−ジメトキシ−２−メチルアミノキナゾリン−４−イル）フェニル］テレフタルアミド酸（ＲＶＴ−５０１）の予防的投与により、Ｇ−ＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、ＫＣ、ＭＩＰ−１α、およびＴＮＦ−αを用量依存的に減少させた。さらに、０．５％製剤（Ｃ２）は、ＩＬ−３、ＩＬ−６、ＩＬ−１７、ＭＣＰ−１、およびＭＩＰ−１βを減少させた。治療的に、Ｉｌ−１βはメチルＮ−［３−（６，７−ジメトキシ−２−メチルアミノキナゾリン−４−イル）フェニル］テレフタルアミド酸（ＲＶＴ−５０１）治療で有意な用量依存的減少を示した。０．５％製剤（Ｃ２）による有意な減少は、ＩＬ−３、エオタキシン、Ｇ−ＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、ＫＣ、ＭＩＰ−１α、ＭＩＰ−１β、およびＴＮＦ−αでも見られた。治療薬として、０．１％タクロリムスはＩＬ−１α、ＩＬ−１β、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−１０、ＩＬ−１２（ｐ４０）、ＩＬ−１３、エオタキシン、ＧＭ−ＣＳＦ、ＫＣ、ＭＣＰ−１、ＭＩＰ−１α、ＭＩＰ−１β、ＲＡＮＴＥＳ、およびＴＮＦ−α。これらの炎症性サイトカインとケモカインの減少は、０．５％製剤（Ｃ２）と０．１％タクロリムスの両方の研究で組織病理学を介して見られるように、免疫細胞浸潤の減少に貢献している可能性がある。図７を参照。
【００９５】
すべての治療群は、予防的研究において、プラセボと比較して引っかき傷の有意な減少を示している。治療薬として、０．１％のタクロリムスは１４日目に引っかき傷の有意な減少を示した。図８を参照。
【００９６】
結論：予防的研究は、ＲＶＴ−５０１  ０．５％製剤（Ｃ２）が、有効成分のプラセボ対照およびＡＤ対照動物と比較した場合、皮膚潰瘍を有意に減少させ、皮膚構造を保存したことを示した。  ＲＶＴ−５０１  ０．５％製剤（Ｃ２）は、ＲＶＴ−５０１プラセボと比較して、Ｄ１４引っかきイベント、耳の厚さ、ＡＤ皮膚病変スコア、および複数のＡＤ関連炎症誘発性サイトカインも大幅に減少させた。これらはすべて、０．２％から０．５％の製剤（それぞれＣ１とＣ２）からの用量依存性の反応を反映するように見えた。治療研究では、ＲＶＴ−５０１  ０．５％製剤（Ｃ２）で潰瘍形成と耳の厚さが減少する傾向と同様に、用量依存性と思われる有効成分プラセボと比較して、後者の変化は統計的有意性に達していなかったが、ＡＤ皮膚病変スコアが大幅に減少したことが示された。確立されたマウスＡＤ病変の治療的治療は、これらの効果は１４日間の予防的治療ほど顕著ではなかったが、ＡＤ関連の炎症性サイトカインの有意な減少も明らかにした。
【００９７】
要約すると、引っかき傷、顕微鏡による皮膚組織病理学、および炎症性サイトカインの有意な減少が、予防的に投与されたＲＶＴ−５０１  ０．５％製剤（Ｃ２）および０．１％タクロリムスで観察された。有意に向かう傾向は、ＲＶＴ−５０１  ０．５％製剤（Ｃ２）を治療的に投与した場合に見られ、より長い治療が可能なモデルで達成された可能性がある。したがって、局所メチルＮ−［３−（６，７−ジメトキシ−２−メチルアミノキナゾリン−４−イル）フェニル］テレフタルアミド酸（ＲＶＴ−５０１）は、アトピー性皮膚炎の効果的な治療法のようである。
【００９８】
本発明は、その特定の好ましい実施形態を参照してかなり詳細に説明されてきたが、他の形態も可能である。したがって、添付の特許請求の範囲の精神および範囲は、本明細書に含まれる説明および好ましい形態に限定されるべきではない。
【実施例３】
【００９９】
実施例３：アトピー性皮膚炎の成人および思春期の被験者におけるＲＶＴ−５０１の第２相試験
アトピー性皮膚炎は、激しいかゆみ（掻痒）および湿疹病変を特徴とする皮膚の慢性炎症性疾患である。これは、最も一般的な皮膚疾患の１つであり、先進国の人口の１０〜２０％が罹患する。それは子供でより一般的に起こり、子供の人口の１５〜３０％に影響を及ぼす、そして最近の推定は大人のおよそ１０％が影響を受けていることを示す。小児集団のうち、患者の約６０％が人生の最初の年に現れ、患者の約８５％が５歳までに現れる。
【０１００】
疾患は、ほとんどの患者において軽度から中程度であり、全患者の７０％、８０％の子供が軽度から中程度の疾患を有し、２０％の患者が中等度から重度の疾患を有し、臨床的特徴はより激しく、再発する。遺伝的および環境的の両方の多くの要因が、皮膚バリアの欠陥および免疫系の調節不全を特徴とする疾患の病因に寄与する。これらの欠陥に起因する皮膚病変はかゆみを伴い、痛みを伴い、その外観のために患者の社会的および心理的危害を引き起こす。ＡＤ病変の即時の身体症状と心理的症状を超えて、この病気は患者の健康に深刻な二次的影響を及ぼす。具体的には、原因に関連する掻痒症は患者にかなりの不快感を引き起こし、しばしば睡眠不足を引き起こし、若い患者の両親の睡眠の質の低下にも現れる。
【０１０１】
高い有病率にもかかわらず、患者が利用できる現在の治療選択肢は限られる。軽度から中等度の疾患を患う患者の第一選択治療オプションは局所コルチコステロイドですが、多くの患者はステロイド不応性であり、その使用に関連する重大な長期安全リスクがある。局所カルシニューリン阻害剤のＥｌｉｄｅｌとＰｒｏｔｏｐｉｃは、セカンドライン治療オプションとして使用されるが、発がん性のリスクに関する箱入りの警告がある。したがって、安全かつ効果的な治療法が、満たされていない大きな医療ニーズがある。
【０１０２】
アトピー性皮膚炎の診断基準は、そう痒、典型的な形態および分布（成人：屈曲性苔癬化または線形性、子供および幼児：顔面および伸筋表面の関与）、慢性または慢性再発性皮膚炎、またはアトピーの個人歴または家族歴（喘息、アレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎）の主要な基準の少なくとも３つを必要とする。それに加えて、次の３つのマイナー基準の少なくとも３つ：乾癬、魚鱗癬／毛孔性角化症、直腸過線形性、即時型（タイプ１）皮膚テスト反応性、血清ＩｇＥの上昇、若年発症、皮膚感染傾向（黄色ブドウ球菌、単純ヘルペス））／細胞性免疫障害、非特異的手／足皮膚炎、乳頭湿疹、口唇炎、再発性結膜炎、デニーモルガン眼窩下襞、円錐角膜、前嚢下白内障、眼窩黒ずみ、顔面蒼白／紅斑、乾癬、白癬発汗時、羊毛および脂質溶媒への不耐性、毛包周囲のアクセント、食物不耐性、環境／感情的要因の影響を受けたコース、または白い人口統計／遅延したブランチを必要とする。
【０１０３】
以前はＥ６００５として知られたＲＶＴ−５０１は、調査中のホスホジエステラーゼ４（ＰＤＥ４）阻害剤である。研究により、ＰＤＥ４活性がアトピー性皮膚炎でアップレギュレートされ、ｃＡＭＰのレベルが低下し、最終的にプロ炎症性サイトカインのプロテインキナーゼＡ（ＰＫＡ）依存性上昇が引き起こされることが示される。前臨床および臨床データは、ＲＶＴ−５０１によるＰＤＥ４阻害が、疾患関連のサイトカインのダウンレギュレーションと、その結果としての疾患重症度の低下をもたらすことをサポートする。
【０１０４】
エーザイ株式会社（Ｅｉｓａｉ  Ｃｏ．，Ｌｔｄ．）は、白色ワセリンベースの組成物であるＲＶＴ−５０１軟膏（製剤Ｂ）のバージョンを開発した。ＲＶＴ−５０１製剤Ｂの４つの濃度（０．０１％、０．０３％、０．１％、０．２％）が開発された。ＲＶＴ−５０１軟膏（製剤Ｂ）は、これまでに完了した非臨床および臨床研究で使用された。最高濃度のＲＶＴ−５０１  ０．２％軟膏を使用した以前の臨床試験で観察された有効性の程度は、最大値に達していないようだった。したがって、ＲＶＴ−５０１の濃度を増加させた製剤は、ポリエチレングリコールベースの組成物を利用するエーザイ（製剤Ｃ）によって開発された。ダーマバントサイエンスによるこの処方Ｃのさらなる改良により、ＲＶＴ−５０１  ０．２％軟膏（処方Ｃ）とＲＶＴ−５０１  ０．５％軟膏（処方Ｃ）の２つの濃度の新しいＲＶＴ−５０１軟膏処方が生まれた。この研究では、製剤Ｃのこれら２つの濃度を使用する。
【０１０５】
ＡＤを有する成人および小児対象で行われた３つの研究は、副次的目的として有効性エンドポイントを含んだ。一般に、これらの研究は、ＲＶＴ−５０１がさまざまな用量で、アトピー性皮膚炎のさまざまなスコアリングシステムに基づいて、用量に関連した有効性を高め、ＲＶＴ−５０１またはＭ１１への全身曝露がほとんどまたはまったくないことを示した。
【０１０６】
研究００１は、健康な日本人男性被験者における複数回の漸増用量試験であり、非盲検の媒体制御皮膚刺激期間（パッチ試験および光パッチ試験）および複数回の漸増投与期間から構成された。この研究のパッチ／フォトパッチコンポーネントは、何も含まれない、白いワセリン、ビークル、０．０１％、０．０３％、０．１％、または０．２％のＲＶＴ−５０１軟膏を含むＦｉｎｎ  ｃｈａｍｂｅｒｓ（商標登録）を使用して実行された。複数の漸増用量成分では、被験者は無作為にビークル軟膏または０．０１％、０．０３％、０．１％または０．２％ＲＶＴ−５０１軟膏を１日１回（ＱＤ）または１日２回（ＢＩＤ）、最大１１日間（約５ｇ約１０％ＢＳＡ）。この研究では、有意な皮膚または全身のＡＥは確認されなかった。
【０１０７】
ＡＤを有する２０〜６４歳の日本人男性被験者を対象としたＲＶＴ−５０１の第１／２相試験は、塗布後最大１０日間のビークルと比較して、主にＲＶＴ−５０１軟膏（０．０１％、０．０３％、０．１％、および０．２％）の局所適用の安全性およびＰＫを評価するために行われた。追加の探索的目的には、同じ集団におけるこれらの濃度のＲＶＴ−５０１軟膏による局所塗布の有効性が含まれた。背面の標的湿疹（ＳＳＴＥ）の重症度スコアは、ベースラインと比較して、研究終了時に０．０３％、０．１％、および０．２％ＲＶＴ−５０１軟膏グループで大幅に減少した（０．１％ＲＶＴ−５０１グループでＰ＝０．０３１、０．０３％および０．２％ＲＶＴ−５０１グループでＰ＜０．００１）。研究終了時の最小二乗平均のビークルとの差は、０．２％ＲＶＴ−５０１軟膏群で統計的に有意だった（Ｐ＝０．００３）。この試験では、用量依存性の有効性反応を含む同様の所見が、湿疹面積および重症度指数（ＥＡＳＩ）やアトピー性皮膚炎（ＳＣＯＲＡＤ）のスコアリングなど、他の有効性指標でも認められた。
【０１０８】
研究２０１では、５〜３０％の体表面積（ＢＳＡ）を含む軽度から中程度のＡＤを伴う２０〜６４歳の７８人の成人を、ＲＶＴ−５０１  ０．２％（ｎ＝５２）または対照（ｎ＝２６）４週間の軟膏ＢＩＤで無作為化された。次に、すべての被験者をＲＶＴ−５０１  ０．２％軟膏ＢＩＤでさらに８週間続けた。研究２０１で合計７２人の被験者が０．２％ＲＶＴ−５０１軟膏に曝された。最初にＲＶＴ−５０１  ０．２％軟膏を受けた被験者は、湿疹面積と重症度指数（ＥＡＳＩ）とスコアリングアトピー性皮膚炎（ＳＣＯＲＡＤ）スコアに比べてより大きな改善があったビークルを受け取ったが、ＲＶＴ−５０１対ビークルの比較のいずれも４週目に統計的有意性に達しなかった。さらに、すべての被験者は一般に、８週間の拡張フェーズ中にＡＤの改善に向けた継続的な傾向を見た。
【０１０９】
研究１０２は、フェーズ１／２の多施設無作為化ビークル制御研究であり、軽度から中等度のＡＤを有する２〜１５歳の６２人の小児対象が、順次減少する年齢のコホートに登録され、対照軟膏または０．０５％または０．２％ＲＶＴ−５０１軟膏ＢＩＤの１４日間で治療された。ＳＳＴＥおよびＩｎｖｅｓｔｉｇａｔｏｒｓ  Ｇｌｏｂａｌ  Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔの改善は、ＲＶＴ−５０１  ０．２％軟膏対ビークルの被験者で一貫して見られたが、ＲＶＴ−５０１  ０．０５％軟膏では同様の改善は見られなかった。抗ヒスタミン薬または抗アレルギー薬を併用していない対象コホートの掻痒症の改善と同様に、ＡＤ重症度の用量依存的な改善が観察された。
【０１１０】
今日まで、ＲＶＴ−５０１に関連する深刻な有害事象の報告はなかった。
【０１１１】
健康な成人男性における研究００１およびアトピー性皮膚炎の男性成人における研究１０１の結果によれば、ＲＶＴ−５０１軟膏は、皮膚刺激（パッチテスト、フォトパッチテスト）、その他の有害事象、検査値、バイタルサイン、１２誘導心電図検査、または眼科所見に関して０．０１％〜０．２％のＲＶＴ−５０１の濃度で臨床的に重要な所見を生じなかった。
【０１１２】
研究２０１では、アトピー性皮膚炎の成人被験者で実施され、注目の有害事象（例えば、投与部位での有害事象および皮膚感染症に関連する有害事象）の割合は、４週間の無作為化段階の間、ビークル軟膏および０．２％ＲＶＴ−５０１軟膏群で類似した。また、０．２％ＲＶＴ−５０１軟膏群では、ビークル軟膏群よりも有害事象が多発したが、いずれも軽度または中等度であり、忍容性は良好であった。１２週間適用された０．２％ＲＶＴ−５０１軟膏の安全性プロファイルは、４週間適用されたものとほとんど同じだった。
【０１１３】
アトピー性皮膚炎の小児対象で行われた１０２試験では、０．０５％および０．２％のＲＶＴ−５０１軟膏を２週間繰り返し塗布しても、治験薬に起因すると考えられる有害事象は生じなかった。さらに、他の臨床検査値、バイタルサインまたは１２誘導心電図に関して、他の臨床的に重要な所見はなかった。
【０１１４】
ＲＶＴ−５０１軟膏の反復投与の安全性は、成人では１２週間を超えて、または小児では２週間を超えてまだ評価されていない。
【０１１５】
研究の目的は、ＲＶＴ−５０１局所軟膏の複数回投与の安全性、薬物動態および有効性を評価することである。以前の臨床試験では、小児患者（１０２試験）で有意な効果があり、陽性であるが、０．２％局所軟膏を有する成人患者（２０１試験）では有意ではない有効性が得られる。前臨床および臨床用量範囲の証拠は、より高濃度の製剤が効果の増強をもたらす可能性があることを示唆する。この試験の主な目的は、ＢＩＤ投与レジメンで成人と青年の両方で、０．５％製剤（以前に使用されていたよりも高濃度の製剤）の安全性と薬物動態を評価することである。以前の用量レベルでの有効性と安全性の所見を管理するために、０．２％ＢＩＤ製剤群が含まれる。
【０１１６】
０．２％ＢＩＤまでの局所軟膏用量を用いた以前の臨床研究は、小児および成人集団におけるＡＤに関連する徴候および症状の用量依存性の改善を示した。さらに、ＲＶＴ−５０１は、皮膚関連または全身のＡＥがほとんどなく、忍容性も良好で、全身吸収は最小限です。前臨床および臨床用量範囲研究は、以前に試験された最高濃度の軟膏である０．２％を超える投薬をサポートする。最近実施された皮膚浸透研究では、以前の０．２％製剤と比較して、０．５％軟膏の局所適用後の皮膚でＲＶＴ−５０１の増加が示された。さらに、１４Ｃ−ＲＶＴ−５０１が非絶食の雄ラットの剥がされた皮膚に経皮的に送達された放射性標識薬物動態研究は、単回塗布後、放射性標識されたＲＶＴ−５０１は、投与後２４時間の皮膚塗布部位に、３０分後に測定されたレベルの７５％（最大放射能）で存在したことを示した。したがって、０．２％と０．５％の局所製剤であるＢＩＤは、成人と青年の両方で有効性を比較するためにテストされる。
【０１１７】
ＲＶＴ−５０１−２００１／アトピー性皮膚炎の成人および思春期の対象におけるＲＶＴ−５０１の第２相試験：
【０１１８】
主な目的：アトピー性皮膚炎の成人および青年期の対象における局所ＲＶＴ−５０１の安全性および薬物動態を評価すること。主なエンドポイント：ＲＶＴ−５０１およびＭ１１代謝物の血漿中濃度、薬物動態パラメーター（データが許可する場合）。有害事象（局所および全身）の頻度と重症度、検査値、バイタルサイン、およびＥＣＧ。副次的目的：アトピー性皮膚炎の成人および思春期の被験者における局所ＲＶＴ−５０１の有効性を評価すること。副次的評価項目：治験責任医師評価（ＩＧＡ）のベースラインからの変化、ＩＧＡが０または１、少なくとも２ポイントの減少を達成した被験者の割合、ＢＳＡのベースラインからの変化、ベースラインからの変化湿疹領域および重症度指数（ＥＡＳＩ）スコア、ＥＡＳＩ−５０分析（ベースラインからのＥＡＳＩスコアの５０％減少）、数値評価スケールで測定した掻痒のベースラインからの変化。予定されている被験者の数：合計約１５０人のうち、約９０人が成人（１８〜７０歳）、６０人が青年（１２〜１７歳）である。研究デザイン：多施設、無作為化、ビークル制御、二重盲検試験。被験者は次のように無作為化（１：１：１）される：ＲＶＴ−５０１  ０．２％軟膏ＢＩＤ×２８日（３０大人、２０代の若者）、ＲＶＴ−５０１  ０．５％軟膏ＢＩＤ×２８日（３０大人、２０代の若者）、ビークル軟膏ＢＩＤ×２８日（大人３０人、青年２０人）。成人の被験者が最初に登録される。６０人の成人被験者のデータの中間レビューの後、思春期の被験者の年齢（１２歳から＜１８歳）が登録される場合がある。治療期間は２８日間となる。
【０１１９】
これは、軽度から中等度のＡＤを有する成人および思春期の対象における、多施設無作為化、ビークル制御、二重盲検第２相試験であった。
【０１２０】
すべての対象は、適格性を確認するために、登録後３０日以内にスクリーニング手順を受けた。０日目（ベースライン）に、適格な被験者を３つの治療群のいずれかに無作為化（１：１：１）した。被験者は、クリニックの現場担当者の監督下で、ＲＶＴ−５０１またはプラセボを適用する方法について指示された。被験者は、すべての患部に指先で試験薬の薄層を塗布した。治験薬は被験者に投与され、診療所訪問の間に現場担当者の指示に従って自宅で適用された。
【０１２１】
治療期間中、対象は、ＲＶＴ−５０１軟膏またはビークルを２８日間、１日２回（ＢＩＤ）患部に塗布した。被験者は、評価のために４日目にクリニックに戻り、安全性と有効性の評価のために１、２、３、４週目に再び戻った。薬物動態サンプルは１週目と４週目に収集された。有効性の評価が完了した後、診療所の訪問日（４日目の訪問を除く）に、被験者は現場担当者の監督下で現場で治験薬を投与した。
【０１２２】
研究治療の終了後７〜１０日、追跡訪問があった。研究への被験者の総参加には、約１０週間の間に８回の診療が含まれた。
【０１２３】
標的集団：軽度または中等度のＡＤを有する約１５０人の対象（９０人の成人および６０人の青年）が登録されるように計画された。
【０１２４】
包含の主な基準：ハニフィンおよびラジカ基準によりＡＤの診断が確認された男性および女性。成人被験者の場合、年齢範囲は１８〜７０歳だった。思春期の被験者の場合、年齢範囲は１２〜１７歳だった。ＡＤが体表面積（ＢＳＡ）の３％以上４０％未満をカバーし、ベースラインで調査者のグローバルアセスメント（ＩＧＡ）が２または３（軽度または中程度）の対象者。頭皮、手のひら、および足の裏は、ベースライン時の適格性を判断するためにＢＳＡの計算から除外された。ベースライン時の最小湿疹面積および重症度指数（ＥＡＳＩ）スコアは７。ＡＤは、患者／介護者によると少なくとも１２ヶ月間存在し、患者／介護者によると少なくとも１ヶ月は安定した疾患である。
【０１２５】
化合物：ＲＶＴ−５０１、０．２％軟膏、２８日間ＢＩＤを適用、製剤Ｃ１（表１参照）。ＲＶＴ−５０１  ０．５％軟膏、２８日間ＢＩＤを適用、製剤Ｃ２（表１を参照）。ビークル軟膏、２８日間ＢＩＤを適用、配合Ｂ（表１を参照）。
【０１２６】
評価基準：一次結果尺度：有害事象（局所および全身）の頻度および重症度、検査値、バイタルサインおよびＥＣＧ、ＲＶＴ−５０１およびＭ１１代謝産物の血漿濃度、ならびに薬物動態パラメータ（データが許す場合）。二次転帰測定：Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｏｒｓ  Ｇｌｏｂａｌ  Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ（ＩＧＡ）のベースラインからの変化、ＥＡＳＩスコアのベースラインからの変化、ＩＧＡが０または１を達成し、ＩＧＡが少なくとも２ポイント減少した被験者の割合によって決定される有効性、０または１のＩＧＡを達成する被験者の割合、影響を受けるＢＳＡのベースラインからの変化、ＥＡＳＩ−５０分析（ベースラインからのＥＡＳＩスコアの少なくとも５０％の減少を達成）、および数値評価で測定されるそう痒のベースラインからの変化ビジュアルアナログスケールを使用したスコア（ＮＲＳ）。探索的：患者指向湿疹測定（ＰＯＥＭ）のベースラインからの変化、患者は結果測定を報告した。
【０１２７】
統計的方法：有効性分析：サンプルサイズおよび電力感度分析が、有効性エンドポイントについて行われた。効果サイズ（プールされた標準偏差に対する治療グループ間のベースラインＥＡＳＩスコアからの平均変化の差として定義）を０．７と仮定すると、アクティブアームの被験者５０人と組み合わせたプラセボの被験者５０人のサンプルサイズは、両面ｔ検定に基づいて、０．０５（両面）のアルファレベル。また、サンプルサイズにより、レスポンダーエンドポイントでのプラセボとアクティブな治療の間に３３％の差が９０％のパワーで検出され、プラセボグループのレスポンダーの割合が２０％以下であると仮定すると、０．０５の有意水準が得られる。有効性エンドポイントは、各年齢グループおよび両方の年齢グループを組み合わせた場合の治療ごとにまとめてリストされる。継続的有効性変数の治療間比較（アクティブｖｓプラセボおよびアクティブ用量グループ間）は、共分散分析（ＡＮＣＯＶＡ）モデルを使用して実行される。応答者の割合に関する治療間の比較は、ＣＭＨまたはカイ２乗検定を使用して比較される。安全性分析：有害事象は規制活動のための医学辞典（ＭｅｄＤＲＡ）にマッピングされる。治療により生じた有害事象は、治療、優先期間、および臓器分類によって要約される。バイタルサイン、ＥＣＧパラメータ、および臨床検査結果の説明的な要約が、研究訪問および治療グループによって提示される。薬物動態分析：ＲＶＴ−５０１およびＭ１１の血漿中濃度は、対象、治療、および時間ごとにリストされる。そして、治療と時間によって要約される。各時点および試験中の任意の時点で、いずれかの分析対象物の測定可能な濃度の被験者の数と割合が提供される。
【０１２８】
データが欠落している場合、最後に繰り越された観測値（ＬＯＣＦ）が実装された。
【０１２９】
総および領域ＥＡＳＩスコアは、訪問によって、およびベースラインからの変化およびベースラインからのパーセント変化について要約された。ＥＡＳＩスコアがベースラインから少なくとも５０％低下した被験者の割合もまとめられた。ベースラインからの変化とパーセント変化の治療間比較は、共分散分析（ＡＮＣＯＶＡ）モデルを使用した訪問により実施された。ベースラインＥＡＳＩスコアは共変量として含まれた。年齢グループは、結合グループに基づく分析の共変量として含まれた。各アクティブグループとビークルグループ間の９５％ＣＩとｐ値の違いが示された。
【０１３０】
ＩＧＡスコアは、治療群および訪問によるベースラインからのシフトについて要約された。ＩＧＡスコアが０（クリア）または１（ほぼクリア）で、４週目にベースラインから少なくとも２ポイント低下した被験者の割合と、４週目にＩＧＡスコアが０または１だった被験者の割合まとめた。
【０１３１】
ＩＧＡスコアについて、治療間の比較は、ＥＡＳＩスコアに使用されたモデルと同様のＡＮＣＯＶＡモデルを使用して行われた。
【０１３２】
ＩＧＡ応答者エンドポイントは、０または１のＩＧＡスコアとして定義され、そして第４週でのベースライン値からの少なくとも２ポイントの減少を伴う。
【０１３３】
治療群のペアワイズ比較（ＲＶＴ−５０１  ０．２％対ビークルおよびＲＶＴ−５０１  ０．５％対ビークル）は、複数の比較のための調整のダネット手順を使用して生成され、治療効果の統計的有意性は、両面５％レベルで評価された。
【０１３４】
掻痒症の影響を受けたＢＳＡおよびＮＲＳの合計は、通院によって、およびベースラインからの変化およびベースラインからのパーセント変化について要約された。
【０１３５】
中間分析：約６０人の成人被験者が研究の第４週を完了した時、思春期被験者の無作為化の前に安全性と有効性のデータが見直されるべきであった。このレビューには被験者レベルのデータは含まれず、ＡＥ、臨床検査結果、ＥＣＧ、およびバイタルサインが含まれた。ＰＫデータとＩＧＡ／ＥＡＳＩの結果も確認された。レビューは、研究の実施に直接関与していない臨床研究担当者によって行われた。
【０１３６】
分析集団：この研究では４つの分析集団を使用した。治験薬を投与された治験に登録されたすべての被験者からなる安全集団を安全性分析に使用した。治療に無作為化されたすべての被験者として定義された治療意図（ＩＴＴ）集団は、有効性分析に使用された主要集団だった。プロトコルごと（ＰＰ）の人口には、用量の少なくとも５０％を投与した被験者が含まれた。ＰＰ母集団は、有効性変数の確認分析に使用された。ＰＫ母集団には、血漿ＰＫサンプリングを受け、少なくとも１つの評価可能なＰＫサンプルがあったすべての被験者が含まれた（アッセイの定量下限（ＬＬＱ）未満として報告された濃度は、評価可能なＰＫサンプルと見なされた）。
【０１３７】
安全性分析：治療によって生じた有害事象（ＴＥＡＥ）は、対象ごとに列挙され、事象を報告した対象の数、ならびにシステム臓器分類、好ましい用語、重症度、重症度、および研究薬物との関係によって要約された。すべてのＴＥＡＥテーブルは、成人、青年、および全体に対して別々に提示された。
【０１３８】
臨床検査室の結果は訪問ごとに個別にリストされ、異常値は臨床的重要性とともに要約された。生の値とベースラインからの変化を訪問ごとにまとめた。バイタルサインがリストされ、訪問ごとに説明的に（ベースラインからの変化とパーセント変化を含む）提示された。単一の１２誘導ＥＣＧの結果がリストされ、訪問ごとに要約された。
【０１３９】
全体的な設計：これは、軽度から中程度のアトピー性皮膚炎を有する成人および青年期の対象における、多施設無作為化、媒体制御、二重盲検第２相試験である。すべての被験者は、適格性を確認するために、登録後３０日以内にスクリーニング手順を受ける。０日目（ベースライン）で、対象となる被験者は３つの治療群のいずれかに無作為化（１：１：１）される。クリニックの現場担当者の監督下で、ＲＶＴ−５０１を適用する方法について被験者に説明する。簡単に言えば、対象者は指先ですべての患部に試験薬の薄層を塗布する必要がある。治験薬は被験者に投与され、診療所訪問の間に現場担当者の指示に従って自宅で適用される。治療期間中、被験者はＲＶＴ−５０１軟膏を患部に１日２回、２８日間塗布する。被験者は、評価のために４日目にクリニックに戻り、時間とイベントの表に示された時点でのＰＫ、安全性と有効性の評価のために１、２、３、４週目に再び戻る。クリニックの訪問日（４日目の訪問を除く）には、有効性評価が完了した後、対象者は現場の担当者の監督の下、現場で治験薬を適用する必要がある。
【０１４０】
研究治療の終了後７〜１０日、追跡訪問がある。研究への被験者の総参加には、約１０週間のコースでの８回の通院が含まれる。
【０１４１】
治療群および期間−治療群Ａ：ＲＶＴ−５０１  ０．２％軟膏１日２回×２８日、治療群Ｂ：ＲＶＴ−５０１  ０．５％軟膏１日２回×２８日、治療群Ｃ：ビークル軟膏１日２回×２８日。
【０１４２】
表２は、治療期間中のイベントのタイムラインを提供する。
【表２】
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【０１４３】
アトピー性皮膚炎の評価：有効性測定結果には以下が含まれる：Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｏｒ  Ｇｌｏｂａｌ  Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ（ＩＧＡ）：疾患重症度のＩｎｖｅｓｔｉｇａｔｏｒ  Ｇｌｏｂａｌ  Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ（ＩＧＡ）は、すべての現場調査訪問で評価される。ＩＧＡは、疾患の現在の状態のグローバルな評価である。これは、全体的な疾患の重症度の５ポイントの形態学的評価であり、以下に説明するカテゴリに従って決定される。対象となるためには、対象はベースライン訪問（０日目）でＩＧＡスコアが２または３である必要がある。表３にＩＧＡスコアを示す。
【表３】
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【０１４４】
湿疹面積および重症度指数（Ｅｃｚｅｍａ  Ａｒｅａ  ａｎｄ  Ｓｅｖｅｒｉｔｙ  Ｉｎｄｅｘ）（ＥＡＳＩ）：湿疹面積および重症度指数（Ｅｃｚｅｍａ  Ａｒｅａ  ａｎｄ  Ｓｅｖｅｒｉｔｙ  Ｉｎｄｅｘ）（ＥＡＳＩ）は、すべての研究訪問で評価される。病変の重症度と影響を受けたＢＳＡの割合の両方に基づいて、対象のアトピー性皮膚炎の重症度を定量化する。ＥＡＳＩは０〜７２の範囲の複合スコアで、４つの身体領域のそれぞれについて、紅斑、硬結／丘疹、擦傷、苔癬化（それぞれ０〜３のスコア）を考慮し、ＢＳＡは、各身体領域と、全身に対する身体領域の割合に関係する。ＥＡＳＩスコア計算の詳細な手順は次のとおりである。４つの解剖学的部位（頭、上肢、体幹、および下肢）は、検査の日に見られるように、紅斑、硬結（丘疹）、擦傷および苔癬化について評価される。各徴候の重症度は、４ポイントスケールを使用して評価される。０＝症状なし、１＝軽度または軽度、２＝中程度、３＝マーク付きまたは重度。特定の解剖学的部位内のアトピー性皮膚炎の影響を受ける面積は、その解剖学的部位の総面積のパーセンテージとして推定され、次のようにアトピー性皮膚炎の関与の程度に応じて数値が割り当てられる：０＝関与なし、１＝＜１０％、２＝１０〜＜３０％、３＝３０〜＜５０％、４＝５０〜＜７０％、５＝７０〜＜９０％、６＝９０〜１００％。ＥＡＳＩスコアは、次の式を使用して取得される：
ＥＡＳＩ＝０．１（Ｅｈ＋Ｉｈ＋Ｅｘｈ＋Ｌｈ）Ａｈ＋０．２（Ｅｕ＋Ｉｕ＋Ｅｘｕ＋Ｌｕ）Ａｕ＋０．３（Ｅｔ＋Ｉｔ＋Ｅｘｔ＋Ｌｔ）Ａｔ＋０．４（Ｅｌ＋Ｉｌ＋Ｅｘｌ＋Ｌｌ）Ａｌ
ここで、Ｅ、Ｉ、Ｅｘ、Ｌ、Ａはそれぞれ紅斑、硬結、擦傷、苔癬化、面積を示し、ｈ、ｕ、ｔ、ｌはそれぞれ頭、上肢、体幹、下肢を示す。
【０１４５】
ＥＡＳＩ−５０は、ベースラインからのＥＡＳＩスコアの５０％の減少を達成する対象を表す。
【０１４６】
体表面積（ＢＳＡ）：アトピー性皮膚炎に罹患したＢＳＡは、毎回の訪問で評価される（０から１００％まで）。被験者の頭皮、手のひら、足の裏は、被験者の適格性を判断するために、スクリーニングとベースラインの計算から除外する必要がある。０日目以降の通院では、アトピー性皮膚炎に罹患した全身のＢＳＡを使用して、試験治療の有効性を評価する。１人の被験者の手のひら（指を除く）は、総ＢＳＡの約１％、頭１０％、上肢２０％、胴体３０％、および下肢４０％を表す。
【０１４７】
掻痒のＮＲＳ（Ｎｕｍｅｒｉｃａｌ  Ｒａｔｉｎｇ  Ｓｃａｌｅ数値評価尺度）は、掻痒の重症度を迅速に評価するために使用される検証された尺度であり、０はかゆみがなく、１０は想像できる最悪の掻痒である。
【０１４８】
臨床写真は、能力を保有する選択された研究センターの被験者のサブグループで実行することができる。これは、研究への参加のための被験者の要件ではない。インフォームドコンセント／同意と写真による公開が必要になる。写真は、グレーディングの目的で、その後の研究訪問で調査官が参照することはできない。対象の疾患領域の代表的な領域の写真が撮られる。写真は、時間とイベントの表で指定された時点で撮影される。選択した皮膚領域の３つの写真が標準化された方法（つまり、同じカメラ、角度、背景、距離）で撮影される。
【０１４９】
患者は症状を報告した：対象は、以下の尺度を使用して、診療所訪問中の適用部位での灼熱感および掻痒を評価する：灼熱感：０なし（灼熱感なし）、１軽度（軽度の灼熱感（実際には気にならない））、２中程度（やや煩わしい中程度の灼熱感）、３重度（明確な不快感を引き起こす激しい灼熱感）、そう痒：０なし（かゆみなし）、１軽度（軽度のかゆみ感（実際には気にならない））、２中程度（中程度）やや煩わしいかゆみ）、３重度（はっきりとした不快感を与える激しいかゆみ）。これは、可能であれば、サイト担当者による他の評価または評価の前に、対象者が完了する必要がある。
【０１５０】
患者報告の結果：患者志向型湿疹測定（ＰＯＥＭ−成人版）は、アトピー性皮膚炎の重症度を監視するために使用されるツールである。患者が経験する病気に焦点を当てる。測定は、表１に示す時点で評価される。ＰＯＥＭの完全版は、ノッティンガム大学（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｎｏｔｔｉｎｇｈａｍ．ａｃ．ｕｋ／ｒｅｓｅａｒｃｈ／ｇｒｏｕｐｓ／ｃｅｂｄ／ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ／ｐｏｅｍ．ａｓｐｘ）から無料でダウンロードできる。
【０１５１】
患者の日記：自己管理の徴候および症状の重症度の日記（これは、ＰＯＥＭの内容に基づく）は、疾患関連の徴候および症状の重症度を評価する。応答オプションは１１ポイントのＮＲＳにあり、範囲は０（存在しない）から１０（想像できる最悪の状態）である。被験者は、可能であれば過去２４時間のリコール期間を使用して、毎日日記に記入するよう求められる。かゆみの評価には日記の質問１が使用される。電子日記を利用しても良い。
【０１５２】
薬物動態：ＲＶＴ−５０１およびＭ１１代謝産物のＰＫ分析のための血液サンプルは、表１に示される時点で収集されるだろう。各血液サンプル収集の実際の日付および時間ならびに研究調停の最後の線量の日付および時間が記録される。完全なＰＫモニタリングを確実にするために、ＰＫサンプルのタイミングを変更したり、追加の時点でＰＫサンプルを取得したりできる。
【０１５３】
表４は、現在の研究の最終的な対象の性質を提供する。表５に、現在の研究の被験者の人口統計を示す。
【０１５４】
結果の要約
研究の性質：５８人の成人被験者が研究の第４週を完了した後、安全性と有効性のデータが検討された。この中間分析は、思春期の被験者を無作為化する前の２０１７年２月に完了した。ＲＶＴ  ５０１の安全性と有効性のプロファイルは、暫定分析憲章で事前定義された基準を満たしていたため、思春期の被験者の登録が許可された。
【０１５５】
研究では合計１５７人の被験者が無作為化された（成人９５人および青年６２人）。すべてがＩＴＴ集団と安全性集団に含まれた（ビークル群５３例［成人３１名と青年２２名］、５５名［成人３４名と青年２１名］のＲＶＴ−５０１  ０．２％グループ、４９名［３０成人および青少年１９人］ＲＶＴ−５０１  ０．５％グループ）。６人の被験者は同意を撤回し、３人の被験者はフォローアップを失い、２人の被験者はＴＥＡＥが原因で試験を完了せず、１人の被験者は家族の緊急事態のために旅行のために中止された（その他）。ＰＰ集団には、１４２人の被験者（ビークルグループ４９人の成人［２９人の成人および２０人の若者］、５０人の被験者［３１人の成人および１９人の若者］、ＲＶＴ−５０１  ０．２％グループ、４３人の被験者［２８人の成人および１５人の青年］が含まれた。ＲＶＴ−５０１  ０．５％グループ）。１３人の被験者は、重大な治療の不遵守のためにＰＰ集団から除外され、２人の被験者は、主要なプロトコルの逸脱のために除外された。ＰＫ母集団には、１５２人の被験者（ビークルグループの５１人の被験者［成人３０人と青年２１人］、５３人の被験者［成人３２人と青年２１人］がＲＶＴ−５０１  ０．２％グループに、４８人の被験者［大人３０人と青年１８人］が含まれた。ＲＶＴ−５０１  ０．５％グループ）。ＰＫサンプルの欠落により、５人の被験者がＰＫ母集団から除外された。
【０１５６】
合計１４５人の対象（８７人の成人および５８人の青年）が計画通りに研究を完了した（ビークル群の５０人［９４．３％］対象、ＲＶＴ−５０１の０．２％群の５２人［９４．５％］対象、および４３人［８７．８％］対象ＲＶＴ−５０１  ０．５％グループ）。
【０１５７】
人口統計学的およびベースライン特性：ＡＤにより影響を受ける平均ベースライン治療可能ＢＳＡは、治療群にわたって同様であった（ビークル群で１５．２％、ＲＶＴ−５０１  ０．２％群で１５．９％、およびＲＶＴ−５０１  ０．５で１３．５％）％グループ）。対象のほとんどは、ベースラインで疾患重症度が３（中程度）のＩＧＡだった。
【表４】
2021505621.tif 000012
【表５】
2021505621.tif 000013
【０１５８】
表６は、有害事象の要約を提供する。表７は、臓器クラスごとの有害事象の概要を示した。
【表６】
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【表７】
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【０１５９】
安全性の結果：ＲＶＴ−５０１  ０．２％およびＲＶＴ−５０１  ０．５％軟膏は一般に安全であり、忍容性が良く、研究中に重篤な有害事象（ｓｅｒｉｏｕｓ  ａｄｖｅｒｓｅ  ｅｖｅｎｔｓ）（ＳＡＥ）も死亡も報告されなかった。全体として、４２人（２６．８％）の被験者が試験中に少なくとも１回のＴＥＡＥを経験し、合計６２回のＴＥＡＥが報告された。１２（２２．６％）の被験者は、ビークルグループでＴＥＡＥ、ＲＶＴ−５０１  ０．２％グループで１４（２５．５％）、ＲＶＴ−５０１  ０．５％グループで１６（３２．７％）を経験した。ほとんどのＴＥＡＥの強度は軽度（報告されたＴＥＡＥの５８．１％）、ＴＥＡＥの４１．９％は中程度の強度であり、重度または生命を脅かすものはなかった。グレード３以上のＴＥＡＥを経験した被験者はいなかった。ＴＥＡＥの同様の頻度と重症度が治療群間で観察された。ＴＥＡＥの大部分は治験薬とは無関係であると見なされた。研究中に合計１４の薬物関連ＴＥＡＥが報告された。
【０１６０】
ビークル群の１人（１．９％）の成人対象（適用部位の疼痛）およびＲＶＴ−５０１の０．２％群の１人（１．８％）の成人対象（適用部位の掻痒および適用部位の疼痛）は、試験中止につながるＴＥＡＥを報告した。
【０１６１】
治療群全体で最も一般的なＴＥＡＥは、感染症および寄生虫症障害に分類されたものであった。複数の被験者から報告されたＴＥＡＥは、鼻咽頭炎（１３［８．３％］被験者）、上気道感染症（８［５．１％］被験者）、適用部位掻痒（７［４．５％］被験者）、適用部位疼痛（５［３．２％］対象）、悪心（３［１．９％］対象）、アトピー性皮膚炎（ＡＤフレアまたは湿疹の悪化）（３［１．９％］対象）、頭痛（３［１．９％］対象）、および嘔吐（２［１．３％］対象）であった。同様の数の被験者が、治療群全体で適用部位の痛みと掻痒を経験した。アトピー性皮膚炎（ＡＤフレアまたは湿疹の悪化）を報告した３例（１．９％）がＲＶＴ−５０１  ０．５％グループに属していたことを除いて、治療グループ間に傾向は検出されなかった。
【０１６２】
比例して、思春期の人口よりもＴＥＡＥ（思春期の１４．５％と比較して成人の３４．７％）と薬物関連のＴＥＡＥ（思春期の３．２％と比較して１１．６％）を報告する成人集団の患者の割合が高かった。同様に、思春期の人口では、成人の人口よりもＴＥＡＥが軽度だった。
【０１６３】
３人（１．９１％）の対象（ビークル群の成人１人およびＲＴＶ−５０１の０．５％群の成人２人）は、臨床生化学、血液学、または尿検査の結果に臨床的に有意な所見があり、ＴＥＡＥをもたらした。いずれも治験薬とは無関係と見なされた。研究中、研究者はバイタルサインやＥＣＧ所見を臨床的に重要であると見なさなかった。全体として、安全性試験結果、バイタルサイン、およびＥＣＧについて、治療グループ間に傾向は検出されなかった。
【０１６４】
薬物動態の要約：ＰＫサンプルを投与前の第１週および第４週、ならびに投与後第２週から第４週に収集した。１人の対象（青年）のみが、投与前１．２３ｎｇ／ｍＬ、投与後２時間で４週目にＬＬＱ（下限の下限、１ｎｇ／ｍＬ）を超える検出可能なＲＶＴ−５０１を有した。３人の患者が検出可能なＭ１１曝露を示し、最高値は１．６０ｎｇ／ｍＬだった。
【０１６５】
薬物動態学的結果：１週目（投与前）のＲＶＴ−５０１について測定可能な濃度は報告されなかった。値は、すべての処理グループでＬＬＱ（１．００ｎｇ／ｍＬ）未満だった。ＲＶＴ−５０１  ０．２％グループの１人の思春期の被験者は、４週目に測定可能な濃度を示した。投与前と投与後の両方の値がＬＬＱに近かった（最高値は１．２３ｎｇ／ｍＬだった）。
【０１６６】
Ｍ１１代謝産物の血漿濃度は、第１週（投与前）で２人の被験者（ＲＶＴ−５０１  ０．２％で１人の青年被験者およびＲＶＴ−５０１  ０．５％で１人の成人被験者）および（投与前）ＲＶＴ−５０１  ０．５％グループbにて第４週で１人の成人被験者で測定可能であった。最高濃度は１．６０ｎｇ／ｍＬで、すべての濃度はＬＬＱ（１．００ｎｇ／ｍＬ）近くだった。このデータは、ＲＶＴ−５０１またはその活性代謝物の全身吸収が最小限からまったくないことを示す。
【０１６７】
血漿ＲＶＴ−５０１の測定可能な濃度は、ＲＶＴ−５０１の０．２％群において、投与４週目、投与前および投与２時間後にそれぞれ１人の思春期の被験者（被験者１８０１４）で報告された（それぞれ１．２３および１．２０ｎｇ／ｍＬ）。この被験者のＩＧＡスコアは３（中程度）、ＥＡＳＩの合計スコアは７．８、ベースライン時のＡＤの影響を受けたＢＳＡは９％だった。血漿Ｍ１１の測定可能な濃度は、１週目に１人の青年被験者（被験者１８０１４）のＲＶＴ  ５０１  ０．２％グループ（１．２７ｎｇ／ｍＬ）と２人の成人被験者（被験者０３００５および被験者０９００３）、それぞれ１週目（１．６０ｎｇ／ｍＬ）および４週目（１．０９ｎｇ／ｍＬ）のＲＶＴ−５０１  ０．５％グループに投与前で報告された。これらの被験者のＩＧＡスコアは３（中程度）、ＥＡＳＩスコアの合計は２６．１および２０．０、ベースライン時のＡＤの影響を受けるＢＳＡはそれぞれ３５％および１７％だった。
【０１６８】
有効性の結果、表８を参照。
【表８】
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【０１６９】
時間の経過とともに、各治療群においてＩＧＡスコアの改善を示す被験者の割合が徐々に増加した。ＲＶＴ−５０１が０．２％の場合、４日目から１週目までのビークルと比較して増加が顕著で、２週目から同様の結果が観察された。ＲＶＴ−５０１  ０．５％の場合、４日目および１週目と４週目のビヒクルと比較して、増加はより顕著だった。
【０１７０】
表９に示すように、全体として、第４週で、１５７人のうちの合計１０２人の対象（６５．０％）は、ＩＧＡスコアに改善があった。これには、ビークルグループで５３の３４［６４．１％］、ＲＶＴ−５０１  ０．２％グループで５５の３５［６３．６％］、ＲＶＴ  ５０１  ０．５％グループで４９の３３［６７．３％］が含まれる。３人の被験者（１．９％）のＩＧＡスコアは悪化した（１人の被験者［１．９％］がビークルグループ、２人の被験者［４．１％］がＲＶＴ−５０１  ０．５％グループ）。
【表９】
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【０１７１】
研究者の全体的評価において少なくとも２点の減少で透明またはほぼ透明を達成した被験者の割合：０（透明）または１（ほぼ透明）のＩＧＡを達成し、少なくとも１を有した被験者の割合ＩＴＴ母集団について、ベースラインからの２ポイントの削減（つまり、レスポンダー）を表１４．２．２．２．１に示す。表１０は、ＩＴＴ集団の４週目に少なくとも２ポイントの減少が４週間で明確またはほぼ明確になる各年齢層の被験者の割合をまとめたものである。全体として、レスポンダーの数は、ビークルと比較して、ＲＶＴ−５０１  ０．２％とＲＶＴ−５０１  ０．５％の両方で数値的に高かった。
【０１７２】
表１０に示すように、第４週で、特にＲＶＴ−５０１  ０．５％をビークルと比較した場合（青年期：２人［９．１％］のビークル群のレスポンダー、ＲＶＴ−５０１  ０．２％グループの４［１９．０％］レスポンダー、およびＲＶＴ−５０１  ０．５％グループの６［３１．６％］レスポンダー；９５％ＣＩ：１０．４−３１．４）、青年期のＩＧＡレスポンダーの差はさらに顕著であった。
【表１０】
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【０１７３】
Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｏｒ'ｓ  Ｇｌｏｂａｌ  Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔの明確またはほぼ明確な全体的評価を達成した被験者の割合：表１１は、ＩＴＴ集団について４週目に明確またはほぼ明確に達した各年齢群の被験者の割合を要約する。ＩＧＡで少なくとも２ポイントの減少で０または１のＩＧＡを達成した被験者の割合について観察されたものと同様に、ＩＧＡが０または１を達成した被験者の割合は、４週目まで各治療グループで増加し、ビークルと比較してＲＶＴ−５０１  ０．２％とＲＶＴ−５０１  ０．５％の両方で応答者の数が数値的に高かった。表１１に示すように、４週目には、特にＲＶＴ−５０１  ０．５％をビークルと比較した場合（青年期：ビークルグループの３人［１３．６％］のレスポンダー、５［２３．８％］ＲＶＴ−５０１  ０．２％グループのレスポンダー、７［３６．８］ＲＶＴ−５０１  ０．５％グループのレスポンダー；ＣＩ：１４．２−３６．７）、レスポンダーの違いは青年期にさらに顕著だった。
【表１１】
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【０１７４】
影響を受ける体表面積のベースラインからの変化：表１２は、ＩＴＴ集団の４週目におけるベースラインからの変化率を要約する。全体として、ＲＶＴ−５０１  ０．２％とＲＶＴ−５０１  ０．５％の両方の結果は、ビークルと比較して数値的に高かった。表１２に示すように、４週目では、ＲＶＴ−５０１  ０．２％をビークルと比較すると、ベースラインからの変化率の差が青年でより顕著だった（青年期グループのベースラインからの平均変化率［ＳＤ］：−３１．４％）。ビークルでは［３９．１１％］、ＲＶＴ−５０１  ０．２％グループでは−４９．５％［３３．０５％］、ＲＶＴ−５０１  ０．５％グループでは−４０．９％［３８．６７％］）。
【表１２】
2021505621.tif 000021
【０１７５】
湿疹領域のベースラインからの変化および重症度指数スコア：表１３は、ＩＴＴ集団についての４週目におけるベースラインからの変化パーセントを要約する。全体として、結果はビークルと比較してＲＶＴ−５０１  ０．２％とＲＶＴ−５０１  ０．５％の両方で数値的に高かったが、治療グループ間で統計的有意差は認められなかった（ｐ値：＞０．０５）。ＲＶＴ−５０１  ０．２％およびＲＶＴ−５０１  ０．５％、ならびにビークルは、ＥＡＳＩの改善において、時間の経過とともに高い応答を示した。
【０１７６】
表１３に示すように、第４週で、ベースラインからのパーセント変化の差は、特にＲＶＴ−５０１  ０．２％をビークル（思春期グループの平均［ＳＤ］：ビークルグループでは−４９．１％［３５．１８％］、ＲＶＴ  ５０１  ０．２％グループでは−６１．８％［２３．５５％］、ＲＶＴ  ５０１  ０．５％グループでは−５６．０％［３９．７５％］）と比較した場合、思春期の方がより顕著であった。
【表１３】
2021505621.tif 000022
【０１７７】
ＥＡＳＩ−５０分析：表１４は、ＩＴＴ集団について第４週でＥＡＳＩの少なくとも５０％の減少を達成する対象の割合を要約する。時間の経過とともに、各治療グループで、４日目から４週目までＥＡＳＩ−５０が増加した。全体として、結果は、ビークルと比較して、ＲＶＴ−５０１  ０．２％とＲＶＴ−５０１  ０．５％の両方で数値的に高かった。ベースラインからの変化と同様に、ＲＶＴ  ５０１  ０．２％およびＲＶＴ−５０１  ０．５％、ならびにビークルは、時間の経過とともに高い応答を示したことが観察された。
【０１７８】
表１４に示されるように、４週目に、同様の結果が年齢群の間で観察された。それにもかかわらず、ＥＡＳＩ  ５０は、ＲＶＴ−５０１  ０．２％グループとＲＶＴ  ５０１  ０．５％グループの方がビークルグループよりもわずかに高かった（全体：ビークルグループで３０［５６．６％］被験者、被験者で３６［６５．５％］被験者ＲＶＴ  ５０１  ０．２％グループ、およびＲＶＴ−５０１  ０．５％グループの３３［６７．３％］被験者）。
【表１４】
2021505621.tif 000023
【０１７９】
数値評価スケールで測定した掻痒のベースラインからの変化：掻痒ＮＲＳは、被験者に、彼／彼女の現在のかゆみの重症度を「かゆみなし（０）」から「最悪のかゆみ（１０）」まで評価するように求める。表１５は、ＩＴＴ集団の４週目のＮＲＳ掻痒症のベースラインからの変化率をまとめたものである。全体として、結果はＲＶＴ−５０１の０．５％がビークルと比較して数値的に優れる（掻痒が少ない）。
【０１８０】
表１５に示されるように、第４週で、ベースラインからのパーセント変化は、ＲＶＴ−５０１  ０．２％およびＲＶＴ−５０１  ０．５％の両方について、成人群のビークルと比較して数値的に高かった（より低い掻痒）（平均［ＳＤ］成人年齢グループの場合：ビークルグループで−２７．５％［５３．９２％］、ＲＶＴ  ５０１  ０．２％グループで−３９．２％［４６．８３％］、ＲＶＴ−５０１  ０．５％グループで−３８．６％［４５．０９％］）。青年期のグループでは、掻痒性ＮＲＳの減少はなかった。
【表１５】
2021505621.tif 000024
【０１８１】
患者が報告した症状：表１６は、ＩＴＴ集団について、全年齢群についての４週目の患者が報告した症状のベースラインからのシフトを示す。４週目に、合計５８人（３６．９％）の被験者が灼熱感の改善を報告した。これには、ビークルグループで５３のうち１８［３４．０％］、ＲＶＴ−５０１  ０．２％グループで５５のうち２２［４０．０％］、ＲＶＴ−５０１  ０．５％グループで４９のうち１８  ［３６．７％］が含まれる）。７７人（７７）（４９．０％）の被験者がそう痒症の改善を報告した（ビークルグループで５３人中２３人［４３．４％］、ＲＶＴ−５０１  ０．２％グループで５５人中２７人［４９．１％］、４９人中２７人［５５．１％］ＲＶＴ−５０１  ０．５％グループで）ベースラインと比較。以前に観察されたように、成人は、ビークルと比較してＲＶＴ−５０１  ０．２％とＲＶＴ−５０１  ０．５％の両方の適用後に症状の改善を報告したが、これは思春期のグループでは観察されなかった。
【表１６】
2021505621.tif 000025
2021505621.tif 000026
【０１８２】
患者志向型湿疹測定値のベースラインからの変化：表１７は、ＩＴＴ集団の４週目におけるＰＯＥＭのベースラインからのパーセント変化を示す。４週目に、被験者は３つの治療群で症状の重症度の改善を報告した。全体として、結果はビークルと比較してＲＶＴ−５０１  ０．２％とＲＶＴ  ５０１  ０．５％の両方で数値的に高く、ＲＶＴ  ５０１  ０．５％（ベースラインからの平均変化率［ＳＤ］全体：ビークルで３２．９％［３３．８７％］、ＲＶＴ−５０１  ０．２％グループで−３６．４％［４４．３０％］、ＲＶＴ−５０１  ０．５％グループで−４０．８％［３９．０９％］）の違いはより顕著だった。
【表１７】
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【０１８３】
患者の日記：以下の徴候および症状は、成人および青年の年齢群で経時的に自己評価された：皮膚のかゆみ、皮膚の赤または変色、皮膚の出血、皮膚のひび割れ、鱗状、薄片状皮膚。乾燥または荒れた皮膚、痛みを伴う、やけどまたは刺すような皮膚。成人のグループでは、４週目に、これらの兆候と症状の改善がすべての治療グループの被験者から報告された。ＲＶＴ−５０１  ０．２％とＲＶＴ  ５０１  ０．５％の両方で、これらの兆候と症状の数値的により高い改善がビークルと比較して報告され、アクティブな治療グループ間で明確な違いは観察されなかった。被験者がＲＶＴ−５０１  ０．５％グループよりもＲＶＴ−５０１  ０．２％グループの方が高い改善を報告したことを除いて、同様の結果が青年期の集団で観察された。
【０１８４】
第二の目的として、有効性評価は、ＩＴＴおよびＰＰ集団の両方において同様の結果を示した：
【０１８５】
ＲＶＴ−５０１治療群におけるより高いパーセンテージの対象は、ベースラインからの２ポイントの改善で０または１のＩＧＡスコアを達成した。全体として、ＩＧＡを含むエンドポイントは、ビークルと比較して、ＲＶＴ−５０１  ０．２％とＲＶＴ−５０１  ０．５％の両方で数値的に高いレスポンダー数を示した。ＲＶＴ−５０１は一般的に、治療の最初の２週間に、ビークルと比較して、迅速で用量依存的な反応を示した。治療群間の差次的応答は、ビークル群での応答の増加により、第３週から減少した。ＲＶＴ−５０１で治療された青年期の被験者は、成人よりも大きな治療効果を示した。
【０１８６】
同様の結果が、ＢＳＡおよびＥＡＳＩを含むエンドポイントについて観察された。影響を受けたＢＳＡの割合が減少し、治療グループ全体でＥＡＳＩスコアが向上した。これらは、通常、ビークルと比較して両方のアクティブな治療で数値的に高かった。これらのパラメーターは、第４週に群と年齢グループの離散的な分離を示した。ＢＳＡおよびＥＡＳＩの結果も、ＲＶＴ−５０１治療グループで第０週から第２週に急速な応答を示し、第３週からビークル応答が増加した。特にＲＶＴ−５０１  ０．２％をビークルと比較すると、より顕著な結果が得られる。ただし、ＥＡＳＩ−５０の結果では、ＲＶＴ−５０１  ０．５％の方が高い応答を示した。
【０１８７】
かゆみＮＲＳ、患者が報告した灼熱感およびかゆみの症状、およびＰＯＥＭの結果は、試験した両方の濃度で成人群の改善を示すが、ビークル群でも高い反応が起こった。結果は思春期のグループではあまり明確ではなかった。掻痒性ＮＲＳは、ＲＶＴ−５０１  ０．５％グループで１週目から数値の減少を示した。ビークル応答の増加も２週目で見られた。
【０１８８】
図９は、ＩＴＴ母集団の４週目にＩＧＡでの応答（０／１＋２ポイントの改善）を提供する。図１０は、ＰＰＳ母集団の４週目におけるＩＧＡの応答（０／１＋２ポイントの改善）を提供する。青年は両方の集団で成人よりもよく反応した。
【０１８９】
図１１は、ＩＴＴ母集団の４週目のＩＧＡ（０／１）での応答を提供する。図１２は、ＰＰＳ母集団の４週目のＩＧＡ（０／１）での応答を提供する。青年は両方の集団で成人よりもよく反応した。
【０１９０】
図１３は、ＩＴＴ集団におけるＩＧＡ応答（０／１＋２ポイントの改善）の動態を示す。図１４は、ＰＰＳ集団におけるＩＧＡ応答（０／１＋２ポイントの改善）動態を示す。治療の２週間後に急速なビークル応答が観察された。ＩＴＴとＰＰＳの両方の母集団は、同様の時間経過曲線を示す。
【０１９１】
図１５は、ベースラインからのＥＡＳＩ％改善と、ＩＴＴ母集団における４週目のＥＡＳＩ％改善を示す。ＲＶＴ−５０１は、ＥＡＳＩの改善において高いビークル応答を示した。４週目での腕と年齢グループ間の分離は最小限に抑えられる。
【０１９２】
図１６は、ＩＴＴ集団の４週目のＥＡＳＩ５０／７５／９０レスポンダーのデータを提供します。図１７は、ＰＰＳ集団の４週目のＥＡＳＩ５０／７５／９０レスポンダーのデータを提供する。ＥＡＳＩ５０とＥＡＳＩ９０では、アクティブアームとビークルの分離が観察された。ＩＴＴとＰＰＳの集団では、非常に高いビークル応答が観察された。
【０１９３】
図１８は、ＩＴＴ集団のベースラインからのＮＲＳ（かゆみ）の改善を示す。かゆみの迅速な反応は、０．５％グループの１週目までに観察された。高いビークル応答は、早くも第２週に観察された。図１９は、ＩＴＴ集団の４週目のベースラインからのＮＲＳ（かゆみ）の改善を示す。図２０は、ＰＰＳ集団における４週目のベースラインからのＮＲＳ（かゆみ）の改善を示す。武器や年齢層の間で明確な違いはなかった。ただし、ビークルの反応率は驚くほど高かった。
【０１９４】
図２１は、ベースラインからのＢＳＡ％の改善と、ＩＴＴ集団における４週間のＢＳＡ％の改善を示す。第４週に、年齢グループ全体で観察されたビークルとアクティブアームの比較から中程度の分離。アクティブアームで観察されたより速い反応。
【０１９５】
結論：ＲＶＴ−５０１  ０．２％および０．５％軟膏は十分に許容された。ＲＶＴ−５０１治療グループの被験者のパーセンテージが高いほど、少なくとも２ポイントのグレードの改善により、０．１のＩＧＡスコアが達成された（ビークル＝１５．１％、０．２％ＲＶＴ−５０１＝２１．８％、０．５％ＲＶＴ−５０１＝２４．５％）。ＲＶＴ−５０１で治療された青年期の被験者は、より大きな治療効果を示した。成人の被験者では、治療効果の違いは観察されなかった。治療の最初の２週間で、ＲＶＴ−５０１治療を受けた被験者で、かゆみとＥＡＳＩスコアの大幅な改善が観察された。治療群間のこの差のある反応は、２週間目以降は減少した。
【０１９６】
この研究では、ＲＶＴ−５０１  ０．２％およびＲＶＴ−５０１  ０．５％軟膏の両方が一般に安全であり、軽度から中等度のＡＤを有する成人および青年期の対象において十分に許容された。死亡またはＳＡＥは報告されなかった。
【０１９７】
２週間の治療後、検出可能なレベルのＲＶＴ−５０１またはその活性Ｍ１１代謝物を３人の被験者のみが有し、これらはすべてＬＬＱの近くであり、全身吸収が最小から全くないことを示した。
【０１９８】
数値的に高い割合の被験者は、ＩＧＡに改善があり、ビークルと比較して両方のＲＶＴ−５０１治療群で少なくとも２ポイントの改善で０または１のＩＧＡスコアを達成し、用量依存的応答観察された（第４週の結果全体：ビークルグループで１５．１％、ＲＶＴ−５０１  ０．２％グループで２１．８％、ＲＶＴ−５０１  ０．５％グループで２４．５％）。
【０１９９】
ＲＶＴ−５０１で治療された青年期の対象は、特にＲＶＴ−５０１を０．５％適用した後、成人の対象よりも高いＩＧＡ応答を達成した（ＲＶＴ−５０１  ０．５％４週の結果：青年期のグループでは３１．６％、対大人のグループでは２０.０％）。
【０２００】
特に青年期のビークルと比較した場合、ＲＶＴ−５０１で治療された対象において、およびすべての対象について治療の最初の２週間で、影響を受けたＢＳＡおよびＥＡＳＩスコアの数値的に高い改善が観察された。治療群間のこの差次的応答は、ビークルグループでの応答の増加により、研究の最初の２週間で減少した。
【０２０１】
試験された両方の濃度について、掻痒の改善が成人被験者により報告された。改善は思春期のグループではそれほど顕著ではなかった。
【０２０２】
考察
この研究の主な目的は、アトピー性皮膚炎の成人および青年における、局所ＲＶＴ  ５０１適用ＢＩＤの安全性および薬物動態を評価することであった。ＲＶＴ−５０１の有効性も副次的目的として評価された。異なる製剤で実施された以前の研究では、ＲＶＴ−５０１  ０．２％は忍容性が良好であり、この濃度はＡＤの治療においてある程度の有効性があることを示唆した。現在の研究では、０．５％の濃度で新規製剤を評価し、以前の用量レベルでの有効性と安全性の調査結果を管理するために、同じ新規製剤に０．２％ＢＩＤアームを含めた。
【０２０３】
研究（９５人の成人および６２人の青年））では、軽度から中等度のアトピー性皮膚炎を有する合計１５７人の対象が、３つの治療群、ＲＶＴ−５０１  ０．２％、ＲＶＴ−５０１  ０．５％、およびビークルのいずれかに無作為化された（１：１：１）。影響を受けたＢＳＡの平均値は、ベースライン時の治療グループ間で類似した（媒体で１５．２％、ＲＶＴ−５０１  ０．２％グループで１５．９％、ＲＶＴ−５０１  ０．５％グループで１３．５％）。対象のほとんど（８９．２％）は、ベースラインで疾患重症度が３（中程度）のＩＧＡでした。平均年齢、身長、体重、ＢＭＩはすべての治療グループで類似しており、各グループの女性被験者の割合が高かった。注目すべきことに、黒人またはアフリカ系アメリカ人の被験者の割合は、ＲＶＴ−５０１  ０．５％グループでわずかに高かった。
【０２０４】
ＲＶＴ−５０１  ０．２％およびＲＶＴ−５０１  ０．５％軟膏は一般に安全であり、忍容性がよく、研究中にＳＡＥも死亡も報告されなかった。  ＴＥＡＥのほとんどは強度が軽度であり（報告されたＴＥＡＥの５８．１％）、ＴＥＡＥの４１．９％は中程度の強度であり、生命を脅かすほど深刻なものはなかった。グレード３以上のＴＥＡＥを経験した被験者はいない。ＴＥＡＥの頻度と重症度は治療群間で同様だった。ＴＥＡＥの大部分は治験薬とは無関係であると見なされた。研究中に合計１４の薬物関連ＴＥＡＥが報告された。ビークルグループの１人（１．９％）の成人被験者（適用部位の痛み）およびＲＶＴ−５０１  ０．２％（適用部位の掻痒と適用部位の痛み）の１人（１．８％）の成人被験者は、試験の中止につながるＴＥＡＥを報告した。ＴＥＡＥと薬物関連のＴＥＡＥを報告する成人集団では、青年の集団よりも被験者の割合が高かった。同様に、青年の人口では、成人の人口よりもＴＥＡＥが軽度だった。
【０２０５】
複数の被験者によって報告されたＴＥＡＥは、鼻咽頭炎（１３［８．３％］被験者）、上気道感染症（８［５．１％］被験者）、適用部位掻痒症（７［４．５％］被験者）、部位の痛み（５［３．２％］被験者）、吐き気（３［１．９％］被験者）、アトピー性皮膚炎（３［１．９％］被験者）、頭痛（３［１．９％］被験者）、嘔吐（２［１．３％］科目）であった。同様の数の被験者が、治療群全体で適用部位の痛みと掻痒を経験した。アトピー性皮膚炎（ＡＤフレアまたは湿疹の悪化）を報告した３例（１．９％）がＲＶＴ−５０１  ０．５％グループに属していたことを除いて、治療グループ間に傾向は検出されなかった。全体として、安全性試験結果、バイタルサイン、およびＥＣＧについて、治療グループ間に傾向は検出されなかった。
【０２０６】
影響を受けたすべての病変へのＲＶＴ−５０１の０．２％および０．５％の局所投与後に、全身吸収が最小限またはまったく観察されなかった。ＲＶＴ−５０１と代謝物Ｍ１１の測定可能な血漿濃度があったのは、被験者のごく一部のサブセットのみだった。１名の被験者は４週目に測定可能なＲＴＶ−５０１濃度を有し、３名の被験者は１週または４週目に測定可能なＭ１１濃度を示した。
【０２０７】
本研究は、ＲＶＴ−５０１対ビークルの有効性の統計的に有意な比較のために設計されたものではない。この研究の主な目的は、成人および青年におけるＲＶＴ−５０１の安全性と薬物動態を評価し、小児被験者を対象とした将来の研究設計の有効性に関する洞察を得ることだった。
【０２０８】
しかしながら、結果は、ＲＶＴ−５０１治療群におけるより高いパーセンテージの被験者が、ベースラインからの２ポイントの改善で０または１のＩＧＡスコアを達成したことを示した。全体として、ＩＧＡを含むエンドポイントは、ビークルと比較して、ＲＶＴ−５０１  ０．２％とＲＶＴ  ５０１  ０．５％の両方で数値的に高いレスポンダー数を示した。ＲＶＴ−５０１は一般的に、治療の最初の２週間に、ビークルと比較して、迅速で用量依存的な反応を示した。治療群間の差次的応答は、ビークルグループでの応答の増加により、第３週から減少した。ＲＶＴ−５０１で治療された青年期の被験者は、成人よりも大きな治療効果を示した。
【０２０９】
同様の結果が、ＢＳＡおよびＥＡＳＩを含むエンドポイントについて観察された。これらのパラメーターは、第４週に治療群と年齢グループの分離を示した。ＢＳＡとＥＡＳＩの結果も、ＲＶＴ−５０１治療グループで第０週から第２週に急速な反応を示し、３週目からビークルの反応が増加した。特にＲＶＴ５０１  ０．２％をビークルと比較すると、より顕著な結果が表示された。ただし、ＥＡＳＩ５０の結果では、ＲＶＴ５０１  ０．５％の方が高い応答を示した。
【０２１０】
さらに、有効性は青年でより高く、第４週で２段階の低下を伴うＩＧＡ  ０／１の割合は、ビークルで９．１％、ＲＶＴ−５０１  ０．２％で１９．０％、ＲＶＴ−５０１  ０．５％で３１．６％であった。これは、ＲＶＴ−５０１がアトピー性皮膚炎の青年の潜在的な治療オプションとしてさらに検討される可能性があることを示唆する。この患者集団の有効性と安全性を評価するには、幼児のさらなる研究が必要である。
【０２１１】
被験体が報告した掻痒ＮＲＳ、患者が症状を報告した結果、およびＰＯＥＭは、成人群では大部分が陽性の結果を示したが、青年ではそうではなかった。掻痒性ＮＲＳは、ＲＶＴ−５０１  ０．５％グループの数値の減少を１週目から示し、高いビークル反応も２週目から見られた。これは、１１歳から１７歳までの患者を含む、異種の青年集団における被験者の自己申告による結果の使用の難しさを示す可能性がある。
【０２１２】
結論
この研究では、ＲＶＴ−５０１  ０．２％およびＲＶＴ−５０１  ０．５％軟膏の両方が一般に安全であり、軽度から中等度のＡＤを有する成人および青年期の対象において十分に許容された。死亡またはＳＡＥは報告されなかった。
【０２１３】
２週間の治療後、検出可能なレベルのＲＶＴ−５０１またはその活性Ｍ１１代謝物を３人の被験者のみが有し、これらはすべてＬＬＱの近くであり、最小から全身吸収がないことを示した。
【０２１４】
数値的に高い割合の被験者は、ＩＧＡに改善があり、ビークルと比較して両方のＲＶＴ−５０１治療群で少なくとも２ポイントの改善で０または１のＩＧＡスコアを達成し、用量依存的応答観察された（第４週の結果全体：ビークルグループで１５．１％、ＲＶＴ−５０１  ０．２％グループで２１．８％、ＲＶＴ−５０１  ０．５％グループで２４．５％）。
【０２１５】
ＲＶＴ−５０１で治療された青年の対象は、特にＲＶＴ  ５０１  ０．５％の適用後に、成人の対象よりも高いＩＧＡ応答を達成した（ＲＶＴ−５０１  ０．５％第４週の結果：青年のグループでは３１．６％、成人のグループでは２０．０％）。
【０２１６】
特に青年期および治療の最初の２週間で、ビークルと比較した場合、影響を受けたＢＳＡおよびＥＡＳＩスコアの数値的により高い改善がＲＶＴ  ５０１治療対象で観察された。治療群間のこの差次的応答は、ビークル群での応答の増加により、研究の最初の２週間で減少した。
【０２１７】
試験された両方の濃度について、掻痒の改善が成人被験者により報告された。結果は思春期のグループではあまり明確ではなかった。
【実施例４】
【０２１８】
実施例４：局所バイオアベイラビリティの評価
皮膚薬物動態（ＤＰＫ）研究
皮膚薬物動態学（ＤＰＫ）アプローチは、角質層に適用される血液、血漿、尿のＰＫアプローチに匹敵する。ＤＰＫは、時間に関する薬物濃度測定を包含し、薬物摂取、見かけの定常状態レベル、および角質層の濃度−時間曲線に基づく角質層からの薬物除去に関する情報を提供する。
【０２１９】
抗ニキビ薬物製品の場合、標的部位は、毛包および皮脂腺である。この設定では、薬物は角質層、表皮、真皮を通って拡散し、作用部位に到達する。薬物はまた、卵胞経路をたどって作用部位に到達する場合がある。濾胞浸透の程度は、それが懸濁液の形態である場合、有効成分の粒子サイズに依存する。これらの状況下では、角質層と卵胞濃度の間に正の相関があることが研究により示されるため、ＤＰＫアプローチは依然として適用可能であると予想される。
【０２２０】
試験および参照製品の適用および除去：角質層／皮膚を乱したり傷つけたりすることなく、テンプレートを使用して治療領域に印を付ける。治療領域のサイズは、薬物の強度、分析感度、薬物の拡散の程度、曝露時間など、複数の要因による。角質層は特定の環境要因に非常に敏感である。偏見を回避し、実験の利便性と精度の範囲内に留まるには、治療部位と治療群を無作為化する必要がある。以下でより詳細に説明するように、接種、定常状態、および除去フェーズは、被験者の右腕と左腕の間で無作為化することができる。各フェーズの露出時間ポイントは、各腕のさまざまな部位間で無作為化できる。特定の暴露時点のテスト製品と参照製品をサイトに適用して、差異を最小限に抑えることができる。テスト製品と参照製品は、以前に開発および検証されたＳＯＰに従って、同じ対象に同時に適用する必要がある。予めマークされた部位は、所定量の製品（例えば、５ｍｇ／ｓｑｃｍ）で処理され、非閉塞性ガードで覆われる。オクルージョンは、製品ラベルで推奨されている場合にのみ使用される。角質層の損傷を回避するために注意深く複数の綿棒またはＱチップを使用して、指定された時点でＳＯＰに従って製剤の除去を実行する。軟膏などの特定の油性製剤の場合、皮膚を剥がす前に、その領域を中性石鹸で洗う必要がある場合がある。洗浄を行う場合は、ＳＯＰの一部である必要がある。
【０２２１】
適用部位および適用期間：ＢＡ／ＢＥ研究は、角質層への薬物取り込みおよび皮膚からの薬物排除の測定を含むべきである。これらの各要素は、２つの製品のバイオアベイラビリティや生物学的同等性を確立するために重要であり、製品に含まれる賦形剤によって影響を受ける可能性がある。各製品からの摂取／排出を評価するには、最低８つのサイトを使用する必要がある。角質層で定常状態に達するまでの時間を使用して、サンプルのタイミングを決定する必要がある。例えば、薬物が３時間で定常状態に達した場合、０．２５、０．５、１、および３時間後を選択して摂取を決定し、４、６、８、および２４時間を使用して除去を評価できる。各被験者のゼロ時点（テストサイトから離れたコントロールサイト）を選択して、ベースラインデータを提供する必要がある。テスト／参照医薬品が両方の前腕で研究される場合、片方の腕の無作為に選択された部位が、薬物の摂取／定常状態を測定するように指定されることがある。次に、反対側の腕の部位を指定して、薬物除去を測定することができる。薬物の摂取中、過剰な薬物の除去と角質層の剥離時間は同じなので、角質層の剥離は、過剰な薬物の除去の直後に行われる。除去段階では、定常状態の時点で過剰な薬物が部位から除去され、その後２４時間にわたって角質層が採取され、除去段階の推定値が提供される。
【０２２２】
サンプルの収集：皮膚剥離は、最初に、市販の製品（例えば、Ｄ−Ｓｑｕａｍｅ、Ｔｒａｎｓｐｏｒｅ）を使用して、２つの粘着テープのストリップ／ディスクの適用により、角質層の最初の１〜２層の除去で進行する。これらの最初の２つのテープストリップには、浸透または吸収された薬物とは対照的に、一般的に吸収されていない薬物が含まれるため、残りのテープストリップとは別に分析する必要がある。各サイトの残りの角質層は、指定された時間間隔で取り除かれる。これは、追加の１０個の粘着テープストリップで部位を剥がすことによって達成される。所定の時点から得られた１０個のテープストリップすべてを組み合わせて抽出し、有効な分析方法を使用して薬物含有量を決定する。値は一般に、報告された値の均一性を維持するために、量／面積（ｎｇ／ｃｍ２など）として表される。データを計算して、テスト製品と参照製品の完全な薬物濃度時間プロファイル、Ｃｍａｘ−ｓｓ、Ｔｍａｘ−ｓｓ、およびＡＵＣを取得できる。
【０２２３】
皮膚剥離の手順：
薬物摂取を評価するために：複数の部位で同時に試験および／または参照薬物製品を適用する。適切な間隔の後、ティッシュまたは綿棒で３回軽く拭いて、特定の部位から余分な薬剤を取り除く。パイロット研究からの情報を使用して、薬物摂取を評価するためのサンプル収集の適切な時間を決定する。粘着テープの貼り付けを２回繰り返し、均一な圧力でこれらの最初の２つのテープストリップを廃棄する。同じ場所でストリッピングを続け、さらに１０層の角質層サンプルを収集する。他の場所の汚染を避けるように注意する必要がある。他の指定された時点で各部位の手順を繰り返す。組み合わせた１０個の皮膚ストリッピングから薬物を抽出し、検証済みの分析方法を使用して濃度を決定する。結果を粘着テープの治療面積１平方センチあたりの薬物量として表す。
【０２２４】
薬物除去を評価するために：パイロット試験の結果に基づいて選択された複数の部位で試験および参照薬物製品を同時に適用する。見かけの定常状態レベルに達するのに十分な曝露期間を設ける。上述に記載したように、最初の２つの皮膚剥離を含む、過剰な薬物を皮膚表面から取り除く。パイロットスタディに基づいて、時間間隔で連続する１０個のテープストリップを使用して皮膚剥離サンプルを収集し、薬物含有量を分析する。
【０２２５】
指標および統計分析：角質層薬物濃度対時間プロファイルのプロットは、Ｃｍａｘ、ＴｍａｘおよびＡＵＣの角質層指標をもたらすように構築されるべきである。α＝０．０５の有意水準での２つの片側仮説は、検定平均と参照平均の比率の９０％信頼区間（ＣＩ）を作成することにより、ＡＵＣとＣｍａｘについて検定する必要がある。個々の被験者パラメーター、および要約統計（平均、標準偏差、変動係数、９０％ＣＩ）を報告する必要がある。ＢＥになるテスト製品の場合、テストと参照処理の平均（対数変換データに基づく母集団の幾何平均）の比率の９０％ＣＩは、ＡＵＣの場合は８０〜１２５％、Ｃｍａｘの場合は７０〜１４３％の範囲内である必要がある。
【０２２６】
インビボ真皮オープンフロー微小灌流
皮膚オープンフロー微小灌流（ｄＯＦＭ）では、薄い中空管が皮膚表面の真下に挿入され、数インチ幅の皮膚のセクションを通り抜けてから出る。体液に似た液体がチューブに注入される。皮膚の下のチューブの一部は多孔質であるため、皮膚の外層を通して適用および吸収された薬物は、流れる液体に入り、分析のために収集される。ｄＯＦＭは、皮膚科用医薬品の局所適用後の皮膚内の薬物の変化量を確実に測定できる。
【実施例５】
【０２２７】
実施例５：ヒト血液中のＥ６００５、ホスホジエステラーゼ４阻害剤、およびその代謝産物の同時測定のためのＵＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳによる乾燥血液スポットアッセイ
新規ホスホジエステラーゼ４阻害剤であるＥ６００５は、アトピー性皮膚炎の治療のために現在臨床開発中である。小児の臨床試験をサポートするために、Ｅ６００５とその主要代謝産物ＥＲ−３９２７１０（Ｍ１１）を同時に測定するための乾燥血液スポットアッセイは、タンデム質量分析を備えた超高速液体クロマトグラフィーを使用して開発された。ＦＴＡ（商標登録）  ＤＭＰＫ−Ｃカードにスポットされた２５μＬの血液中のＥ６００５とＭ１１は、水／アセトニトリル（１：１、ｖ／ｖ）を用いた単純なタンパク質沈殿によって抽出され、逆相カラムでのグラジエント溶出クロマトグラフィーにかけられた。Ｅ６００５の質量遷移ｍ／ｚ４７３．１→Ｅ６００５のＥ１６３．０およびｍ／ｚ４５９．１→Ｍ１１の１４９．０は、陽イオンエレクトロスプレーイオン化モードでモニターされた。Ｅ６００５とＭ１１は、乾燥血液スポットで１から２００ｎｇ／ｍＬまで定量可能だった。バッチ内およびバッチ間の再現性の精度と精度は、生物分析ガイドラインが推奨する許容基準の範囲内だった。ヘマトクリットと血液スポット量によるアッセイの精度への影響が評価され、ヘマトクリットが分析対象物の精度に影響を与えることが結果で示された。Ｅ６００５からＭ１１への変換を含むさまざまな安定性評価が徹底的に行われた。この方法は、小児臨床試験をサポートするために、血液サンプル中のＥ６００５およびＭ１１レベルを決定するために適用された。
【０２２８】
ホスホジエステラーゼ４（ＰＤＥ４）は、様々な炎症細胞で発現され、アトピー性皮膚炎を含む炎症性障害において重要な役割を果たすと考えられる。Ｅ６００５は２．８ｎＭのＩＣ５０でヒトＰＤＥ４を強力に阻害し、マウスとヒトでも有効性を示したため、アトピー性皮膚炎の治療に有望な薬剤と見なされる。アトピー性皮膚炎は自己免疫疾患の一つであり、多くの子供や幼児が苦しむ。子供と幼児の薬物濃度を監視することは重要であるが、採血の量は限られる。乾燥血液スポット（ＤＢＳ）はマイクロサンプリングの手法であり、全血サンプルの少量を濾紙にスポットして薬物のレベルを分析し、幅広い薬物の分析に適用される。ＤＢＳには、従来の血漿分析に比べて多くの利点がある。採取した血液サンプルを遠心分離してアッセイ用の血漿サンプルを得る血漿ベースのアッセイと比較し、ＤＢＳのサンプル調製に手間がかからない。さらに、ＤＢＳでは、通常の血漿ベースのアッセイで従来の血液サンプリング（通常１ｍＬ以上）よりも少量（１００μＬ未満）の血液を必要とする。
【０２２９】
インビトロ代謝研究は、Ｅ６００５がＭ１１を含む様々な代謝物に代謝されることを示し、臨床研究は、血漿中のＭ１１の全身曝露がＥ６００５のそれと同等かそれ以上であることを示した。したがって、ヒトＤＢＳアッセイでも、Ｅ６００５とＭ１１の同時測定法が開発され、検証される。
【０２３０】
材料および方法
材料：Ｅ６００５およびＭ１１はエーザイ株式会社（Ｅｉｓａｉ  Ｃｏ．，Ｌｔｄ．）（茨城、日本）で合成された。Ｅ６００５およびＭ１１の内部標準（ＩＳ）としてそれぞれ使用されるＥＲ−４９７６５２およびＥＲ−４９７６５３は、積水メディカル（Ｓｅｋｉｓｕｉ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｃｏ．，Ｌｔｄ．）（茨城県）で合成された。抗凝固剤としてＥＤＴＡ−２Ｋを含むブランクのヒト全血は、エーザイ株式会社のボランティアから書面による同意を得て入手した。ブランクのヒト血漿は、得られた全血のアリコートを遠心分離することにより調製したか、または市販されているものは、Ｂｉｏｐｒｅｄｉｃ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ（ＳａｉｎｔＧｒeｇｏｉｒｅ、Ｆｒａｎｃｅ）から購入した。高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）グレードのアセトニトリル、メタノール、蒸留水、ギ酸アンモニウム、および特殊グレードのギ酸は、和光純薬工業株式会社（Ｗａｋｏ  Ｐｕｒｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ，Ｌｔｄ．）（日本、大阪）から購入した。使用した他のすべての化学物質は分析グレードのものだった。ＦＴＡ?ＤＭＰＫ−Ｃ血液スポットカードおよびパンチングデバイスＨａｒｒｉｓ  Ｍｉｃｒｏ  Ｐｕｎｃｈ  ３．０ｍｍ、カッティングマットＨａｒｒｉｓカッティングマットを含むディスクパンチングに使用される機器は、ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ（英国、バッキンガムシャー）から購入しました。シリカゲル乾燥剤、ＤＢＳカード収納用ポリエチレン袋は、それぞれ豊華化工株式会社（Ｔｏｙｏｔａｋａｋｏ  Ｃｏ．，Ｌｔｄ．）（愛知県）、旭化成ホームプロダクツ株式会社（Ａｓａｈｉ  Ｋａｓｅｉ  ｈｏｍｅ  ｐｒｏｄｕｃｔｓ  Ｃｏ．）（東京都）から購入した。
【０２３１】
アッセイ条件：ＤＢＳにおけるＥ６００５およびＭ１１の分析条件は、血漿中の検証されたアッセイに使用されたものと同じだった。簡単に言えば、トリプル四重極質量分析計Ｑｕａｔｔｒｏ  Ｐｒｅｍｉｅｒ（Ｗａｔｅｒｓ）と組み合わせたＡｃｑｕｉｔｙシステム（Ｗａｔｅｒｓ、ＭＡ、ＵＳＡ）を、タンデム質量分析（ＵＬＰＣ−ＭＳ／ＭＳ）を備えた超高速液体クロマトグラフィー（ＵＰＬＣ）として使用した。Ｅ６００５、Ｍ１１、およびＩＳは、（Ａ）水／アセトニトリル／１ｍｏｌ／Ｌギ酸アンモニウム（９５０：５０：５、ｖ／ｖ／ｖ）および（Ｂ）水／アセトニトリル／１ｍｏｌ／Ｌギ酸アンモニウム（１００：９００：５、ｖ／ｖ／ｖ）および４０℃に維持されたＡｃｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣ  ＢＥＨ  Ｃ１８カラム（２．１ｍｍ×１００ｍｍ、１．７μｍ、Ｗａｔｅｒｓ）でのクロマトグラフィーからなる移動相で溶出された。グラジエントプログラムは次のとおりである。移動相（Ｂ）の直線的な増加（４．０％で５％から９５％）、次に０．５％で９５％（Ｂ）のアイソクラティック溶出、続いてシステムを５％（Ｂ）１．５分間。流速は０．２５ｍＬ／ｍｉｎから４．５ｍｉｎであり、平衡状態にするために０．３ｍＬ／ｍｉｎに増加した。
【０２３２】
複数反応モニタリングにおける最適化された質量分析計条件は、脱溶媒和温度について３７０℃、ソース温度について１２５℃、および毛管電圧について１．３ｋＶ、コーン電圧について６５Ｖ、および衝突エネルギーについて−５５ｅＶであった。質量遷移ｍ／ｚ（前駆イオン→プロダクトイオン）４７３．１→１６３．０、ｍ／ｚ４５９．１→１４９．０、ｍ／ｚ４７７．２→１６７．０、およびｍ／ｚ４６３．２→１５３．０は、Ｅ６００５、Ｍ１１、Ｅ６００５、およびＭ１１のＩＳについてそれぞれ監視された。
【０２３３】
較正および品質管理試料の調製：メタノール中のＥ６００５およびＭ１１の原液の混合物（それぞれ遊離塩基として１００μｇ／ｍＬ）を、アセトニトリル／メタノール（１：１、ｖ／ｖ）で希釈して、作業用試料を調製した。標準ソリューション。ブランクのナイーブ全血（ヘマトクリット：約４５％）に作業液を強化することにより、Ｅ６００５とＭ１１の両方について、１、２、１０、２０、８０、１００、１６０、および２００ｎｇ／ｍＬの濃度でキャリブレーションサンプルを調製した。特に明記されていない校正用サンプルの調製には、新鮮なブランク全血を使用した。ＩＳのアセトニトリル／メタノール（１：１、ｖ／ｖ）溶液は、上記と同様の方法（２００ｎｇ／ｍＬ）で調製した。使用液は−２０℃以下で保存し、安定性が確認された１８１日以内に使用した。定量下限（ＬＬＯＱ）、低ＱＣ（ＬＱＣ）、中ＱＣ（ＭＱＣ）、高ＱＣ（ＨＱＣ）を含む品質管理（ＱＣ）サンプルは、１、３、３０、および１６０ｎｇ／ヘマトクリット値が指定されたｍＬの血液。血漿と血球を公称比８０：２０から３０：７０（ｖ／ｖ）で混合することにより、ヘマトクリットが異なる血液サンプルを準備した。血液分析装置（ＡＤＶＩＡ  １２０、シーメンス、ミュンヘン、ドイツ）を使用して決定された正確なヘマトクリット値は、公称ヘマトクリット２０％（８０：２０）、３０に対して１９．３、２６．９、３６．２、４６．７、４９．１、５１．８、５７．５、および６３．６％、７０％（７０：３０）、４０％（６０：４０）、５０％（５０：５０）、５３％（４７：５３）、５６％（４４：５６）、６０％（４０：６０）、７０％（３０：７０）、（血漿／血球、ｖ／ｖ）、それぞれだった。血液サンプル（キャリブレーションサンプルとＱＣサンプル）のアリコート（２５μＬ）を、キャリブレーションされたピペットを使用してＦＴＡＴＭ  ＤＭＰＫ−Ｃカードの円の中心にスポットし、ＤＢＳを準備した。カードを室温で少なくとも２時間乾燥させた。長期安定性評価に使用されるＱＣサンプルは、シリカゲル乾燥剤を含む密封されたポリエチレンバッグに指定された温度で保存された。
【０２３４】
サンプル抽出手順：ＤＢＳディスク（ｉ．ｄ．３ｍｍ）は、抽出用のチューブにパンチングデバイス、ハリスマイクロパンチを使用して、スポットの中心でパンチアウトされた。ＩＳ作業溶液（２００ｎｇ／ｍＬ）の１０μＬアリコートをスパイクしてから、１００μＬのアセトニトリル／水（１：１、ｖ／ｖ）で検体を抽出した。激しくボルテックスした後、サンプルを４℃で遠心分離（１５７００ｘｇ、１分）して、注射用の上清を得た。上清の１０μＬアリコートをＵＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳシステムに注入した。
【０２３５】
メソッドの検証
直線性：較正サンプル（Ｅ６００５およびＭ１１の両方について１〜２００ｎｇ／ｍＬ）でスポットされたパンチされたディスクを抽出し、アッセイして、８回のアッセイ実行にわたる各濃度での不正確さ（相対誤差、ＲＥ）を決定した。各濃度で決定されたＥ６００５とＭ１１の不正確さは±１５％以内である必要がある（ＬＬＯＱでは±２０％が許容されていました）。相対標準偏差（ＲＳＤ）としての不正確さも計算され、％ＲＳＤが１５％以下であるかどうかが確認された（ＬＬＯＱでは２０％以下が許可された）。
【０２３６】
特異性：検体の分析を妨害する内因性ピークが存在するかどうかをチェックするために、６人の個人からのブランクのヒト血液でスポットされたディスクが抽出された。干渉ピーク面積は、Ｅ６００５とＭ１１の場合は２０％未満、ＬＬＯＱサンプルのＩＳの場合は５％である必要がある。
【０２３７】
バッチ内およびバッチ間の再現性：Ｅ６００５およびＭ１１の不正確さと不正確さは、アッセイ内およびアッセイ間バッチでＱＣサンプル（ＬＬＯＱ、ＬＱＣ、ＭＱＣ、およびＨＱＣ）を使用して決定された。濃度ごとに５つの複製をバッチ内再現性について評価し、バッチ内再現性について、バッチ内評価を３つのバッチにわたって繰り返した。不正確さと不正確さの許容基準は、それぞれ±１５％と１５％以内だった（ＬＬＯＱサンプルでは不正確さの±２０％と不正確さの２０％が許可される）。
【０２３８】
抽出回収およびマトリックス効果：ＤＢＳディスクからのＥ６００５およびＭ１１の抽出回収は、３つの濃度（３、３０、および１６０ｎｇ／ｍＬ、３つの複製／濃度）で評価され、システムからのＩＳの回収が決定された。６０ｎｇ／ｍＬで。検体の抽出回収率は、抽出前のブランク血液にスパイクされた検体のピーク面積を、抽出用ディスクと血液スポットの面積の違いを考慮しながら、抽出後のスパイクされたピーク（参照サンプル）で除算することにより決定された。ＩＳは、抽出されたサンプルと参照サンプルのピーク面積を補正せずに比較するだけで決定された。血液スポットの面積はπｒ２で計算され、ｒは定規で決定されたスポットの半径である。
【０２３９】
マトリックス因子は、６人の個人からの参照サンプルのピーク面積を、同じ濃度のニート溶液のピーク面積で割ることによって評価された。対象の分析物（Ｅ６００５およびＭ１１）のマトリックス係数を３ｎｇ／ｍＬで、対応するＩＳを１６０ｎｇ／ｍＬで測定した。Ｅ６００５およびＭ１１のＩＳ補正行列係数は、Ｅ６００５およびＭ１１の行列係数を対応するＩＳの行列係数で除算して計算された。ＩＳ補正されたマトリックス係数の％ＲＳＤは１５％以内である必要がある。
【０２４０】
血液スポット体積、ヘマトクリット、およびパンチング位置の影響：血液スポット体積、ヘマトクリット、およびパンチング位置によるアッセイ精度への潜在的な影響は、ＤＢＳ関連の生物分析法検証研究に特有であるため、これらのパラメーターも評価された。血液スポット量による潜在的な影響を評価するために、低（３ｎｇ／ｍＬ）および高（１６０ｎｇ／ｍＬ）濃度のさまざまな量のＱＣサンプル（１０、２０、２５、３０、および４０μＬ）を、ＤＢＳカード、次にセンターパンチされたディスクを、固定容量（２５μＬ）のキャリブレーションサンプルに対して３回繰り返してアッセイした。許容できる血液スポット量は、±１５％以下の不正確さでなければならない。
【０２４１】
Ｅ６００５およびＭ１１のアッセイに対するヘマトクリットの効果は、他の条件で低（３ｎｇ／ｍＬ）および高（１６０ｎｇ／ｍＬ）濃度で様々なヘマトクリット値（１９．３％から６３．６％）の血液サンプルを使用して評価された。固定（２５μＬスポットボリュームおよびセンターパンチング）。さまざまなヘマトクリットを含む血液でスパイクされたＤＢＳディスクを、ナイーブな血液から調製されたキャリブレーションサンプルに対して３回繰り返し分析した（ヘマトクリット：４５．１％）。スポット面積とＱＣサンプルの不正確さとの潜在的な関係を評価した。不正確さが±１５％以下の場合、ヘマトクリットの影響は無視できると見なされた。
【０２４２】
ディスク内のパンチ位置の潜在的影響を、他の条件を固定して（２５μＬのスポット容量および４５．１％のヘマトクリット）、右上、右下、左上、および左下の次の４つのスポット位置について評価した。低（３ｎｇ／ｍＬ）および高（１６０ｎｇ／ｍＬ）の濃度を評価した。４つの場所から打ち抜かれたディスクを、中央に打ち抜かれた校正サンプルのディスクで分析した。不正確さが±１５％以内の場合、パンチ位置の影響は示唆されなかった。
【０２４３】
キャリーオーバー：２つのタイプのキャリーオーバー評価は、ＤＢＳベースのアッセイを使用する生物分析法で評価する必要がある。１つは、メソッド検証の典型的な検証パラメーターであるＵＰＬＣを介した反復サンプル注入に由来するキャリーオーバーであり、もう１つは、主にディスクの反復パンチングによるパンチングデバイスに由来するＤＢＳ固有のスポットツースポットキャリーオーバーである。ＵＰＬＣのキャリーオーバーは、定量化の上限（ＵＬＯＱ）サンプルの直後にブランクサンプルを注入することで評価した。ＵＬＯＱサンプルの直後にブランクサンプルを使用してディスクをパンチングし、洗浄を行わないパンチングデバイスを使用して、パンチングの繰り返しによって引き起こされる可能性のある他のキャリーオーバーを調査した。ブランクサンプルの干渉のピーク面積は、対象の検体とＩＳのＬＬＯＱサンプルの２０％と５％未満でなければならない。
【０２４４】
安定性：ＤＢＳにおけるＥ６００５およびＭ１１の安定性を、ＬＱＣおよびＨＱＣサンプルを使用して低および高濃度で評価した（３回の複製／濃度）：室温で７日間のベンチトップ安定性、１６０の長期冷凍安定性室温および−１５℃未満で数日間、４℃で８５時間サンプルの安定性を処理した。安定性に対する高湿度の影響を調査するために、ベンチトップの安定性テストが室温にて相対湿度約８０％−８４％で実行された。公称濃度からの％バイアスが±１５％以内の場合、サンプルは安定していると見なされた。
【０２４５】
安定性評価の一部として、Ｅ６００５のみが強化されたＨＱＣサンプルを使用して、Ｅ６００５からＭ１１への可能な変換も調査された。指定された時間の後、形成されたＭ１１濃度が決定され、モル濃度ベースでＭ１１濃度をＥ６００５濃度で割ることによって変換率が計算されました。
【０２４６】
冷蔵血液の貯蔵寿命：新鮮な血液サンプルが較正またはＱＣサンプルを調製するために利用可能であることが時々課題であるので、冷蔵血液が使用できるかどうかを知ることは興味深い。冷蔵血液の保存期間は、新鮮な血液から調製されたキャリブレーションサンプルに対して、冷蔵血液から７日間調製された３つの複製で低（３ｎｇ／ｍＬ）および高（１６０ｎｇ／ｍＬ）濃度のＱＣサンプルをアッセイすることによって評価された。公称濃度からの偏りが±１５％以内の場合、冷蔵血液を使用できる。
【０２４７】
臨床適用：０．０５％または０．２％を含有するＥ６００５軟膏を小児対象に２週間にわたって１日２回局所適用する臨床研究を行った。抗凝固剤としてＫ２−ＥＤＴＡを使用したコレクションチューブで、投与後１週間および２週間のフォローアップ期間とその後の７日間のフォローアップ期間中に血液サンプルを取得し、その後できるだけ早く氷上に置いて、Ｅ６００５からＭ１１への変換の可能性を減らした。クリニックでのサンプル処理の詳細は、ラボのマニュアルで明確にされた。クリニックで、２５μＬの血液サンプルをＤＢＳカードの円の中心に点在させ（サンプルあたり４複製）、室温で少なくとも２時間乾燥させた。乾燥剤が入ったＤＢＳカードをジップ  ロックバッグに入れ、生物分析ラボへの出荷まで−２０℃以下で冷凍保存した。サンプルは、ＤＢＳのＥ６００５およびＭ１１濃度を決定するためのサンプル処理が行われるまで、実験室で−１５℃未満で保管された。
【０２４８】
結果と考察
メソッド開発
血液スポッティングは、正確な決定を確実にするためのＤＢＳ方法における重要なステップの１つであり、したがって、方法開発において、血液スポッティングに関するいくつかの乱用が調査された。通常、目的の薬剤を含む血液サンプルは、ピペットでスポットごとに１滴ずつスポットされた。クリニックでは２滴の乱用が考えられるため、２滴の血液サンプル（各１５μＬアリコート）を含むＤＢＳを処理し、Ｅ６００５およびＭ１１の濃度を１滴の血液サンプル（３０μＬアリコート）のキャリブレーションサンプルに対して決定した。ＲＥ（％）が±１５％以内かどうか。２滴サンプルのＲＥ（％）は、Ｅ６００５とＭ１１でそれぞれ−４．６％と３．７％であり、総量が同等である限り、血液サンプルの２滴の影響は最小限であることを示唆する。実験室のマニュアルによれば、スポッティングの際、ピペットは触れないＤＢＳペーパーの真上に置く必要がある。Ｅ６００５とＭ１１の％ＲＥはそれぞれ４．３％と９．７％で、スポッティング時にピペットがカードに触れることによる影響が最小限であることを示す。
【０２４９】
適切な抽出溶媒の選択に焦点を当てた抽出手順：アセトニトリル、アセトニトリル／水（８：２、ｖ／ｖ）、アセトニトリル／水（１：１、ｖ／ｖ）、メタノール、メタノール／水（８：２、ｖ／ｖ）、およびメタノール／水（１：１、ｖ／ｖ）。最小限の抽出がアセトニトリルで示されたが、他の溶媒は同様の抽出効率を示した。クロマトグラムの内因性ピークが少ないため、純粋な有機溶媒またはより高い有機溶媒を含む溶媒ではなく、５０％のアセトニトリルが選択された。
【０２５０】
方法開発において対処されるべき１つの考えられる問題は、従来の血漿アッセイと比較してマトリックスの容量が少ないために、ＤＢＳ法における感度が低いことである。目標ＬＬＯＱ（１ｎｇ／ｍＬ血液）を考慮して、パンチングスポット領域の増加をテストして、より高い感度を達成できるかどうかを確認した。直径３ｍｍのディスクパンチング以外に、直径６ｍｍのパンチングが評価され、分析物のピーク強度は３〜４倍に増加した。これは、理論的な増加（４倍）に匹敵した。
【０２５１】
メソッドの検証
直線性および選択性：Ｅ６００５およびＭ１１は、１から２００ｎｇ／ｍＬの範囲で定量可能であり、試験されたすべての濃度で許容可能な％の不正確さおよび不正確さであった（表１８）。検量線は、アッセイバッチ間で一貫しており、勾配の変動は最小限だった（Ｅ６００５およびＭ１１でそれぞれ８．２％および８．６％）。
【表１８】
2021505621.tif 000028
相対標準偏差（ＲＳＤ）としての不正確さと不正確さは、８回の分析実行から計算された。
【０２５２】
精度および精度：バッチ内およびバッチ間の精度および精度を４つのレベル（ＬＬＯＱ、ＬＱＣ、ＭＱＣ、およびＨＱＣ）で評価し、結果を表１９に示す。Ｅ６００５とＭ１１は、バッチ内テストで±７．０％と９．６％以内、バッチ間テストでそれぞれ±８．０％と１５．７％（ＬＬＯＱで）以内だった。これらの結果は、米国食品医薬品局および欧州医薬品庁の生物分析ガイドラインが推奨する許容基準の範囲内だった。検体のレベルが臨床試験でＵＬＯＱ（２００ｎｇ／ｍＬ）を超える可能性は非常に低いため、希釈の完全性は評価されなかった。
【表１９】
2021505621.tif 000029
【０２５３】
抽出回収およびマトリックス効果：表２０は、目的の分析物およびＩＳの抽出回収を示す。低、中、高濃度でのＥ６００５とＭ１１の抽出回収率は、抽出とスポットのディスク領域の違いを考慮に入れると、それぞれ７９．２％−８６．７％と７３．３％−８７．５％だった。ＩＳの回復率は、Ｅ６００５で９３．７％、Ｍ１１で９６．９％だった。Ｅ６００５とＭ１１の抽出回収率は、テストした濃度全体で一貫した。分析対象物の抽出がＩＳよりも比較的低いのは、システム内の強化純溶液の違いによるもので、抽出前に分析対象物をカードにスポットし、分析対象物の抽出後にＩＳを強化しただけである。
【表２０】
2021505621.tif 000030
データは、各レベルの分析対象の３つの複製とＩＳの９つの複製の平均±標準偏差を表す。
【０２５４】
分析物およびＩＳのマトリックス効果は、６人の個人からの血液を使用して評価された。９２．５％から１００．３％の範囲のマトリックス係数で、分析対象物質とＩＳの両方で、イオン抑制もイオン増強も観察されなかった。ＩＳで正規化された行列係数は、９３．２％から９９．２％の範囲でほぼ１であり、Ｃ６００はＥ６００５で２．２％、Ｍ１１で２．１％であり、行列の影響がないことを示す（表２１）。
【表２１】
2021505621.tif 000031
Ｅ６００５およびＭ１１のマトリックス効果は５ｎｇ／ｍＬで評価された。
【０２５５】
血斑体積、ヘマトクリット、およびパンチ位置の影響：低および高濃度のＥ６００５およびＭ１１を含む血液サンプル（１０〜４０μＬ）をスポットすることにより、血斑体積の考えられる影響を調査した。Ｅ６００５とＭ１１の両方のＲＥ％は、１０〜３０μＬの血液がスポットされた時、許容基準（?±１５％）内だった。一方、４０μＬスポッティングでのＭ１１の不正確さは、基準（１６．３％）よりわずかに高かった。これらの結果は、血液スポット量が少なくとも３０μＬまで確保されたことを示唆する。
【０２５６】
ヘマトクリットの影響はまた、様々なヘマトクリット（１９．３％〜６３．６％）の血液サンプルを使用して評価された。Ｅ６００５とＭ１１のＲＥ％は、２６．９％から５１．８％の範囲のヘマトクリットで?±１５％以内だった。一方、不正確さはヘマトクリット１９．３％で負にバイアスされ、ヘマトクリット５７．５％と６３．６％で正にバイアスされた。それは血液の粘度を変えることによって説明されるだろう。ＤＢＳカードでの血液の拡散は、ヘマトクリットが小さい血液ほど高くなるため、血液スポット面積が大きくなる。血液スポットの面積に関係なく同じサイズのディスクが打ち抜かれたため、血液スポットの面積が大きくなると、検体の濃度が低くなり、その逆も同様である。Ｅ６００５およびＭ１１のアッセイ精度に対するヘマトクリットの影響は、臨床研究で決定された被験者のヘマトクリットが０．３３〜０．４７の範囲であったことを考えると、臨床的に有意ではなかった。
【０２５７】
スポット内のディスクのパンチング位置がＥ６００５およびＭ１１のアッセイに影響を与える可能性があるため、４つの異なるパンチング位置（スポットの上部、下部、右、および左）の分析物の％ＲＥを、スポットの中心のものと比較した。すべての周辺位置から打ち抜かれたディスクは、ディスクの中央から打ち抜かれた校正サンプルに対して濃度が測定された時に、％ＲＥが±１５％以内であり、ディスクの打ち抜き位置の影響が最小限であることを示した。
【０２５８】
キャリーオーバー：ＵＬＯＱサンプルの直後に注入されたブランクサンプルのクロマトグラムにおいて、反復的なサンプル注入に由来するキャリーオーバーは検出されなかった。ＤＢＳ固有のデバイス指向のキャリーオーバーも記録されていない。
【０２５９】
安定性：ＤＢＳにおけるＥ６００５およびＭ１１の安定性評価の結果を表２２に示す。ベンチトップ安定性試験は、Ｅ６００５およびＭ１１が周囲温度で１６０日間安定であることを実証した。−１５℃以下で長期冷凍安定性が評価され、１６０日まで安定することが確認された。４℃で保存した場合、処理されたサンプルでのＥ６００５およびＭ１１の安定性は８５時間確認された。安定性に対する高湿度の影響は、周囲温度約７℃、周囲温度で７日間も保証されなかった。８０％−８４％。Ｅ６００５からＭ１１への変換の可能性は、血液中のＥ６００５のみを強化することによって評価され、形成されたＭ１１レベルが評価された（表２３）。長期安定性試験でのＥ６００５の変換率は、−１５℃（１．２％）未満で保存した場合と比較して、室温（２．２％）でわずかに高かった。ただし、室温で保存した場合でも、７日間と１６０日間の変換率にはそれほど差はなかった（それぞれ７日間と１．０日間で１．０％と２．２％）。Ｅ６００５のＭ１１への最小限の変換は、皮膚適用後のＥ６００５の最小限の曝露を考慮して臨床的に有意ではなかった（最大で１．６５ｎｇ／ｍＬ）。
【表２２】
2021505621.tif 000032
低（３ｎｇ／ｍＬ）および高（１６０ｎｇ／ｍＬ）レベルの品質管理サンプルを３回測定し、平均値から相対誤差を計算しました。パーセントバイアスは、名目上の濃度に対して計算された。
【表２３】
2021505621.tif 000033
【０２６０】
血液から血漿への分配および冷蔵血液の貯蔵寿命：Ｅ６００５およびＭ１１の血液から血漿への分配（Ｂ／Ｐ）は、遠心分離により血液サンプルから調整された全血試料および血漿試料中のＥ６００５およびＭ１１の濃度をアッセイすることにより決定された。Ｅ６００５のＢ／Ｐはそれぞれ３および１６０ｎｇ／ｍＬで０．６９０および０．６６９だったが、Ｍ１１のＢ／Ｐはそれぞれ３および１６０ｎｇ／ｍＬで０．５９４および０．５７４であり、濃度依存のＢ／Ｐが観察されなかったことを示唆する。２つのレベルの平均Ｂ／Ｐは、Ｅ６００５では０．６７９、Ｍ１１では０．５８４だった。
【０２６１】
冷蔵全血の有効期間は、低レベルおよび高レベルのＥ６００５およびＭ１１で強化された「老化血液」からのＱＣサンプルの不正確さを評価することによって評価された。Ｅ６００５の％ＲＥは、３および１６０ｎｇ／ｍＬでそれぞれ７．７％および−１．９％であり、Ｍ１１のそれは低濃度および高濃度でそれぞれ７．３％および−３．８％だった。これらの結果は、７日間冷蔵保存された古くなった血液が、キャリブレーションサンプルとＱＣサンプルの準備に使用できることを示唆する。
【０２６２】
臨床適用：血中のＥ６００５およびＭ１１の濃度は、Ｅ６００５が局所的に適用された小児臨床試験を支持して決定された。合計１４７のＤＢＳサンプルが上記の方法に従って分析され、１つを除くすべてのサンプルがＬＬＱ未満だった。Ｅ６００５の最大レベルは１．６５ｎｇ／ｍＬだったが、Ｍ１１のレベルはＬＬＯＱを下回った。これらの結果は、Ｅ６００５が子供に局所的に適用された場合、Ｅ６００５とＭ１１の全身曝露は最小限であり、これは成人での所見と同様だった。投与後のサンプルで分析されたすべてのキャリブレーションサンプルとＱＣサンプルのＲＥ％は±１５％以内であり、サンプルアッセイでＥ６００５とＭ１１が正確に測定されたことを示す。
【０２６３】
結論
検証研究の結果は、ヒト全血中のＥ６００５およびＭ１１の同時測定のためのＵＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳを用いた開発されたＤＢＳ法が、単純、選択的、および再現可能であることを示した。検証済みの方法は、小児科の血中Ｅ６００５レベルが２５μＬの血液のみを使用して正確に測定される臨床研究にうまく適用される。
【実施例６】
【０２６４】
実施例６：軽度から中等度のアトピー性皮膚炎の小児患者におけるＲＶＴ−５０１局所軟膏の有効性、安全性および忍容性を評価するための第２相試験
研究設計：多施設、無作為化、ビークル制御、二重盲検有効性、安全性、および忍容性研究。調査は４つのフェーズで構成された：スクリーニング（最大３０日）、二重盲検フェーズ（約２８日）、非盲検延長フェーズ（約２８日）、およびフォローアップ（５〜９日）。
【０２６５】
目的：一次：軽度から中程度のアトピー性皮膚炎を患う小児対象における局所ＲＶＴ−５０１の有効性を評価する。副次的：軽度から中等度のアトピー性皮膚炎の小児被験者における局所ＲＶＴ−５０１の安全性を評価するため、アトピー性皮膚炎の２〜１１歳の被験者における局所ＲＶＴ−５０１の薬物動態（ＰＫ）を評価する。
【０２６６】
研究設計／方法論：これは、軽度から中程度のアトピー性皮膚炎を患う小児対象におけるＲＶＴ−５０１の有効性および安全性を評価するための多施設無作為化ビークル制御二重盲検第２相研究であった。
【０２６７】
被験者がＲＶＴ−５０１  ０．５％軟膏またはビークル軟膏（研究投薬）のいずれかを受けた４週間続く二重盲目相があった。二重盲検フェーズを完了したすべての被験者は、オープンラベル拡張フェーズに入る資格があり、拡張中に４週間アクティブな治療（ＲＶＴ−５０１  ０．５％軟膏）を受けた。
【０２６８】
すべての対象は、適格性を確認するために、無作為化前の３０日以内にスクリーニング手順を受けた。０日目（ベースライン）で、適格な被験者は２つの治療群のいずれかに無作為化（１：１）された。
【０２６９】
二重盲検相の間、対象／介護者は、４週間、１日２回、患部に治験薬を適用した。安全性と有効性の評価のために、被験者は１、２、４週目にクリニックに戻った。被験者の安全性、併用薬、および試験への継続的な参加を評価するために、３週目に電話をかけた。
【０２７０】
被験者／介護者は、薬物の薄層で各病変を完全に覆うのに十分な研究薬物を自由に適用した。新たに出現した病変や研究中に改善した病変を含む、すべての患部に投薬が行った。
【０２７１】
ダブルブラインドフェーズを完了した被験者は、第４週の訪問評価を完了すると、オプションのオープンラベル拡張フェーズに登録することを選択できる。
【０２７２】
参加することを選択した被験者／介護者は、第４週目の来院時にＲＶＴ−５０１  ０．５％軟膏を投薬され、拡張の間、４週間、毎日２回すべての治療領域に軟膏を適用し続けた。
【０２７３】
安全性および有効性の評価のために、被験者／介護者は６および８週目にクリニックに戻った。対象の安全性、併用薬、および研究への継続的な参加を評価するために、５週目に電話をかけた。
【０２７４】
以下のように、オープンラベル拡張フェーズに登録しないことを選択した被験者について、二重盲検フェーズの完了後、またはオープンラベル拡張フェーズの完了後に、該当する場合に、フォローアップ評価が行われた。
【０２７５】
標的集団：２〜１７歳のアトピー性皮膚炎を有する約１００人の小児対象がこの研究に登録された。
【０２７６】
包含の主な基準：ハニフィンおよびラジカ基準によりアトピー性皮膚炎の診断が確認された２〜１７歳の男性および女性の小児対象。体表面積（ＢＳＡ）の５％から４０％をカバーするアトピー性皮膚炎、およびベースラインでの疾患重症度２または３（軽度または中程度のアトピー性皮膚炎）の治験責任医師総合評価（ＩＧＡ）の被験者。被験者または介護者によると、アトピー性皮膚炎および少なくとも１か月間の安定した病歴。
【０２７７】
化合物：ＲＶＴ−５０１  ０．５％軟膏、２８日間にわたって毎日２回塗布され、さらに、非盲検延長期、処方Ｃ２（表１を参照）に入った対象に対して追加の２８日間塗布した。ビークル用軟膏、１日２回、２８日間塗布、配合Ｂ（表１を参照）。
【０２７８】
評価／エンドポイントの基準
一次有効性エンドポイント：０または１のＩＧＡおよび４週目でのＩＧＡの少なくとも２ポイントの改善を達成した被験者の割合。
【０２７９】
二次的有効性エンドポイント：第４週で０または１のＩＧＡを達成した被験者の割合。ＥＡＳＩ−５０（ベースラインの湿疹面積および重症度指数［ＥＡＳＩ］から５０％減少）の合計スコアを達成した被験者の割合。２４時間ピーク掻痒数値評価スケール（ＮＲＳ）で測定したピーク掻痒のベースラインから４週までの変化率。
【０２８０】
探索的有効性エンドポイント：すべての訪問でベースラインから少なくとも２ポイントの改善で明確またはほとんど明確なＩＧＡを達成した被験者の割合。すべての訪問でＩＧＡがクリアまたはほぼクリアになった被験者の割合。すべての訪問でＥＡＳＩ−５０を達成した被験者の割合。ＩＧＡのすべての訪問での合計スコアとベースラインからの変化。ＥＡＳＩのすべての訪問での合計スコア、変化、およびベースラインからの変化率。２４時間ピーク掻痒性ＮＲＳで測定された、ピーク掻痒症のすべての訪問でのベースラインからの合計スコア、変化、およびパーセント変化。影響を受けた全身ＢＳＡのすべての訪問での合計スコア、変化、およびベースラインからの変化率。
【０２８１】
安全性エンドポイント：有害事象の頻度と重症度（ＡＥ、局所および全身）。
【０２８２】
薬物動態エンドポイント：２〜１１歳の対象における１週目の来院時のＲＶＴ−５０１およびＭ１１代謝産物のＰＫ分析。
【０２８３】
統計的方法
分析集団：試験に少なくとも１回適用された研究に登録されたすべての被験者は、安全セット（ＳＳ）に含まれた。これは、安全分析のための人口だった。
【０２８４】
完全分析セット（ＦＡＳ）は、治験薬の少なくとも１つの適用を使用し、ベースライン有効性評価および少なくとも１つのポストベースライン有効性評価を有した、治療に無作為化されたすべての対象からなった。これは、有効性分析に使用された主要な集団だった。
【０２８５】
プロトコルごとのセット（ＰＰＳ）は、重大なプロトコル違反がなく、研究の二重盲検フェーズを完了し、週４訪問を通して予想される用量の少なくとも５０％を適用したＦＡＳのメンバーから構成された。プライマリおよびセカンダリエンドポイントは、感度分析としてＰＰＳを使用して分析された。
【０２８６】
オープンラベル安全セット（ＯＬＳＳ）は、オープンラベル拡張フェーズに入ったすべての対象から構成された。このセットは、人口統計とベースライン特性、有害事象、およびこれらの被験者の併用薬の分析に使用された。
【０２８７】
有効性分析：ベースラインから第４週（主要エンドポイント）まで少なくとも２ポイントの改善で０または１のＩＧＡスコアを達成した対象の割合を、各治療グループのカウントおよび正確な二項９０％ｃｏｎｆｉｄｅｎｃｅ  ｉｎｔｅｒｖａｌ（ＣＩ）で要約した。４週目のＲＶＴ−５０１とプラセボの治療の違いは、その違いに対する９０％のＷａｌｄ  ＣＩ制限と、無作為化因子（ベースラインＩＧＡおよび年齢層）１０％の有意水準で統計的有意性を評価した。
【０２８８】
カテゴリーデータを用いた二次エンドポイントの分析のために、同様のアプローチが行われた。無作為化因子によって層別化されたファンエルテレン検定を使用して、ベースラインからのピーク掻痒症ＮＲＳパーセント変化について治療を比較した。
【０２８９】
仮説試験の場合、連続データには繰り越された最後の観測値（ＬＯＣＦ）が使用され、カテゴリーデータには非応答者補完（ＮＲＩ）が使用されて、欠落データの影響が評価された。
【０２９０】
一次および二次カテゴリカルエンドポイントは、感度分析としてフィッシャーの正確確率検定を使用して分析された。探索的有効性エンドポイントの分析は、このレポートのセクション９．８．５に記載する。
【０２９１】
オープンラベル延長段階からの有効性データは、最初の治療群および全体によって記述的に要約された。
【０２９２】
薬物動態分析：ＲＶＴ−５０１およびＭ１１は、検証されたアッセイにより血漿中で測定された。血漿中濃度を連続変数としてまとめた。
【０２９３】
安全性分析：ＡＥを有する対象の数および割合を、治療、システム臓器分類、およびすべての有害事象の好ましい用語、治験担当医師が治験薬に関連すると見なしたすべての有害事象、すべての重篤な有害事象（ＳＡＥ）、有害事象の一般的な用語基準（ＣＴＣＡＥ）グレード３以上のＡＥ、および試験の中止につながるすべての有害事象によってまとめられた。ＡＥの概要は、二重盲検段階とオープンラベル拡張段階で別々に提示された。
【０２９４】
実験データは、記述的要約統計量およびベースラインからの変化を使用して分析された。カテゴリー安全データは、頻度表と、該当する場合はシフト表を使用して分析された。バイタルサインは被験者ごとにリストされ、治療ごとにまとめられた。
【０２９５】
安全データに関して、正式な統計的比較は行われなかった。
【０２９６】
中間分析：この研究では中間分析は行われなかった。
【０２９７】
結果の要約
研究の性質：合計１１０人の被験者が登録され、９９人の被験者が二重盲検段階を完了した。統計分析のために治療の割り当てが非盲検化された時、ランダム化の不均衡が発見された。被験者の無作為化は、１：１のアクティブＲＶＴ−５０１  ０．５％軟膏対ビークル軟膏になるように計画された。無作為化の不均衡の結果として、７７人の被験者がビークルを受け、３３人の被験者が積極的な治療を受けた。
【０２９８】
１１人の対象が早期に二重盲検段階から撤退した：５人の対象がＡＥのために二重盲検段階を完了しなかった、２人は追跡調査に失敗し、２人は同意を撤回し、１人はプロトコールの逸脱のために撤回し、１人は中止した。研究訪問の出席の非遵守のため。
【０２９９】
ダブルブラインドフェーズを完了した被験者は、オプションのオープンラベル拡張フェーズに登録することを選択できる。合計９３人の被験者がオープンラベルフェーズに入った。二重盲検フェーズを完了した６人の被験者は、有害事象、医師の決定、プロトコルの逸脱、同意の撤回、またはその他の理由のため、オープンラベル拡張フェーズに移行しなかった。合計８４人の被験者がオープンラベル拡張フェーズを完了した。
【０３００】
試験に参加したすべての対象は、ＳＳに含まれた（ｎ＝１１０）。２人の被験者はベースライン後の有効性データがないため、ＦＡＳから除外され、ビークルグループの７７人の被験者とＲＶＴ−５０１  ０．５％グループの３１人の被験者が含まれた。１４人の被験者がＰＰＳから除外された。ＦＡＳに含まれていない２人、禁止薬物を使用したため６人が除外され、研究の二重盲検フェーズを完了しなかったため５人が除外され、予想される線量の５０％が適用された。オープンラベルフェーズに入ったすべての被験者がＯＬＳＳに含まれた。
【０３０１】
人口統計学的およびベースライン特性：２〜１１年のサブグループにおける対象の割合は、ＲＶＴ−５０１  ０．５％グループにおいて、ビークルグループよりも高かった。アトピー性皮膚炎の影響を受けた平均ＢＳＡは、治療群と同様だった（媒体群で１８．１％、ＲＶＴ−５０１  ０．５％群で１７．５％）。対象のほとんどは、ベースラインで疾患重症度が３（中程度）のＩＧＡだった。有効性の結果：ＦＡＳは、有効性分析に使用された主要な集団だった。ＩＧＡの改善は、ＲＶＴ−５０１  ０．５％グループの方がビークルグループよりも一般的に速く、数値的に高かった。ＲＶＴ−５０１  ０．５％グループの被験者の合計１６．１％は、４週間の治療後にビークルグループの被験者の１１．７％と比較して、ベースラインから少なくとも２ポイント改善したＩＧＡスコアをクリアまたはほぼクリアに達成した。グループ間の差は統計的に有意ではなかった。同様の結果が、ＩＧＡスコアがクリアまたはほぼクリアに達した被験者の２次エンドポイントでも観察された。
【０３０２】
ＥＡＳＩ−５０を達成した対象の割合は、治療の開始後１週間という早さで、ＲＶＴ−５０１  ０．５％群においてビークル群よりも高く、これは、二重盲検期の間持続された。４週目では、対象の６１．３％がＲＶＴ−５０１  ０．５％グループでＥＡＳＩ−５０を達成したが、ビークルグループでは４０．３％だった。グループ間の差は統計的に有意だった（Ｐ＝０．０５３）。同様の迅速な反応は、治療開始後それぞれ１週間または２週間の、アトピー性皮膚炎（ＡＤ）に罹患したＥＡＳＩおよびＢＳＡのベースラインからの変化率にも観察された。
【０３０３】
４週目の通院では、ＲＶＴ−５０１が０．５％の場合３５．６３％、そしてビークルがピーク掻痒のビークルの場合は数値による格付けで２６．３４％の掻痒の減少があった。ただし、その差は統計的に有意ではなかった（Ｐ＝０．１４）。
【０３０４】
ベースラインおよび年齢群（２から１１および１２から１７歳）でのＩＧＡ重症度によるサブグループ分析は、特定のサブグループにおけるより高い有効性を示唆しなかった。
【０３０５】
一般に、すでに活性軟膏を受けている被験者におけるＲＶＴ−５０１  ０．５％での追加の４週間の治療は、アトピー性皮膚炎の進行およびそう痒の重症度に有意な影響を及ぼさなかった。ＲＶＴ−５０１  ０．５％による８週間の連続治療後、被験者の１８．５％が少なくとも２ポイントの改善でＩＧＡスコアがクリアまたはほぼクリアになり、ＥＡＳＩ、ＢＳＡ、およびピークの掻痒が減少したＮＲＳはそれぞれ４２．７％、５３．３％、３２．４％である。４週目にＲＶＴ−５０１  ０．５％を開始したビークルグループの被験者は、ベースラインからアクティブな軟膏を塗布した被験者と比較して、４週間の治療後に同様の反応を達成した。表２４を参照。
【表２４】
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【０３０６】
薬物動態学的結果：ＰＫサンプルは、２〜１１歳の合計１６人の対象で収集された。影響を受けたすべての病変へのＲＶＴ−５０１  ０．５％軟膏の局所投与後、ほとんどの被験者で全身吸収は観察されなかったか、最小限に抑えられた。１６人のうち３人の被験者は、ＲＶＴ−５０１の測定可能な血漿濃度を示した。２人の被験者は比較的高濃度のＲＶＴ−５０１を持った（１人は３０６ｎｇ／ｍＬの値で、もう１人は定量の上限を超える値だった）。これらの２人の被験者は３歳で、ベースラインでＩＧＡスコアが３（中程度）であり、ベースラインでＢＳＡおよびＥＡＳＩスコアが全体の研究平均を上回った。１６人のうち合計８人の被験者が測定可能なＭ１１代謝物の濃度を示し、そのすべてが定量下限に近かった。
【０３０７】
安全性の結果：ＲＶＴ−５０１は一般的に安全であり、忍容性も良好だった。この研究中に死亡はなく、４人の被験者（ビークルグループで２人、ＲＶＴ−５０１グループで２人）がＳＡＥを経験したが、すべて治験責任医師による研究治療とは無関係であると見なされた。全体として、２７例（２４．５％）が研究の二重盲検期に少なくとも１件の有害事象を報告し、合計４２件の事象が報告された。４人の被験者が重症度ＣＴＣＡＥグレード３（重度）以上のＡＥを経験したが、１つ（適用部位掻痒）のみが治験薬との関連性があると判断され、ビークルグループの被験者が経験した。ＲＶＴ−５０１  ０．５％グループ（３６．４％）で少なくとも１つのイベントを報告した被験者の数は、ビークルグループ（１９．５％）よりも多かった。
【０３０８】
合計１０人の対象（９．１％）が、適用部位で１１の事象を報告した。５例（４．５％）が適用部位掻痒を報告した（ビークル群で２例［２．６％］、ＲＶＴ−５０１  ０．５％群で３例［９．１％］）。ビークルグループに無作為に割り付けられた１人の被験者（１．３％）は、塗布後に痛みを訴え、塗布部位の痛みの下で記録された。アプリケーションサイトに刺されたイベントは報告されていない。
【０３０９】
治療関連のＡＥは、ＲＶＴ−５０１  ０．５％群の対象における研究の中止につながらなかった。媒体群の４例（５．２％）は、試験中止に至った治療関連のＡＥ（皮膚炎の接触、適用部位の掻痒、適用皮膚炎、および適用部位の痛み）があった。
【０３１０】
最後に、ＡＥをもたらす安全実験結果には臨床的に有意な所見はなく、安全実験結果とバイタルサインについて治療群間で傾向は検出されなかった。
【０３１１】
研究者の、ベースラインから少なくとも２ポイントの改善でクリアまたはほぼクリアのグローバルなアセスメントを達成した被験者の割合：ベースラインから少なくとも２ポイントの改善があり、ＩＧＡがクリアまたはほぼ達成した被験者の割合完全な分析セットについては、４週目でほぼ明確なことが表２５に示す。ＲＶＴ−５０１  ０．５％を投与された被験者の１６．１％の割合は、ビークルを投与された被験者の１１．７％と比較して、ベースラインから少なくとも２ポイントの改善でＩＧＡをクリアまたはほぼクリアに達成した。グループ間の差は統計的に有意ではなかった（Ｐ＝０．６５）。
【表２５】
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【０３１２】
ベースラインから少なくとも２点の改善でＩＧＡが透明またはほぼ透明に達した被験者の割合は、ベースラインと第４週の間に、ＲＶＴ−５０１  ０．５％グループでビークルグループよりわずかに速く増加したが、差は統計的に有意ではなかった（表２６）。ＲＶＴ−５０１  ０．５％グループのベースラインから少なくとも２ポイントの改善でＩＧＡがクリアまたはほぼクリアの被験者の割合は、４週間のオープンラベル拡張フェーズ中に維持された。ビークルグループでは、追加の９人の被験者（１４．２％）がＲＶＴ−５０１  ０．５％軟膏での治療を開始してから４週間後にこのエンドポイントに達し、合計１８人の被験者（２８．６％）がベースラインの訪問からそのような改善を示した。
【表２６】
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【０３１３】
研究者の透明またはほぼ透明の全体的評価を達成した被験者の割合：４週目に透明またはほぼ透明のＩＧＡを達成した被験者の割合を、完全分析セットについて表２７に示す。ＲＶＴ−５０１  ０．５％を受けた被験者の１６．１％の割合は、ビークルを受けた被験者の１８．２％と比較して、透明またはほぼ透明のＩＧＡを達成した。グループ間の差は統計的に有意ではなかった（Ｐ＝０．６３）。
【表２７】
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【０３１４】
経時的に透明またはほぼ透明のＩＧＡを達成した対象の割合は、二重盲検相のグループ間で非常に類似した（表２８）。４週間のオープンラベル拡張フェーズ中に、ＲＶＴ−５０１  ０．５％グループで２人の追加被験者（７．４％）がＩＧＡを達成した。ビークルグループでは、ＲＶＴ−５０１  ０．５％軟膏で治療を開始してから４週間後に、追加の８人の被験者（１２．７％）がこのエンドポイントに到達し、合計２２人の被験者（３４．９％）になった。
【表２８】
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【０３１５】
治験責任医師のグローバル評価スコアにおけるベースラインからの変化：４週目におけるベースラインからのシフトを、完全分析セットについて表２９に提示する。時間の経過とともに、ＩＧＡスコアの改善を示す被験者の割合は、ＲＶＴ−５０１  ０．５％グループの方がすべての訪問でビークルグループよりも顕著だった。４週目に、ＲＶＴ−５０１  ０．５％グループの２３人の被験者（７６．６％）は、媒体グループの３９人の被験者（５２．７％）と比較して、ＩＧＡスコアに改善があった。この訪問では、ＩＧＡスコアが悪化したのは３人の被験者のみだった（ビークルグループで２人の被験者［２．７％］、ＲＶＴ−５０１  ０．５％グループで１人の被験者［３．３％］。
【表２９】
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【０３１６】
完全分析セットについて、ベースラインからの平均変化を含む、経時的な平均ＩＧＡスコアの要約を表３０に提供する。
【０３１７】
二重盲検期の間、ＲＶＴ−５０１  ０．５％群において、経時的にＩＧＡのベースラインからの平均変化に一定の増加があった。ビークルグループの被験者はゆっくりとした速度でＩＧＡを改善したが、グループ間の差は統計的に有意ではなかった。オープンラベル拡張フェーズ中にＲＶＴ−５０１  ０．５％でさらに４週間治療すると、ＲＶＴ−５０１  ０．５％グループの被験者のＩＧＡに有意な影響がなかったことが、週まで維持された平均ＩＧＡによって示された８．オープンラベルフェーズに入ったビークルグループの被験者は、ＲＶＴ−５０１  ０．５％で４週間治療した後、ＩＧＡスコアに有意な改善が見られた（４週目の−０．６と比較した、８週目の−１．１平均変化）。
【表３０】
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【０３１８】
湿疹領域および重症度指数においてベースラインから５０％の減少を達成した被験者の割合：４週目でベースラインから５０％の減少を達成した被験者（ＥＡＳＩ−５０）の割合を、完全な分析のために表３１に示す。セットする。ＲＶＴ−５０１  ０．５％群（６１．３％）とビークル群（４０．３％）でＥＡＳＩ−５０を達成した被験者の割合には統計的有意差があった（Ｐ＝０．０５３）。
【表３１】
2021505621.tif 000041
【０３１９】
ＥＡＳＩ−５０を達成した対象の割合は、ベースラインと第４週の間のすべての訪問で、ビークル群よりもＲＶＴ−５０１  ０．５％群で高かった（表３２）。ＲＶＴ−５０１  ０．５％グループでＥＡＳＩ−５０を達成した被験者の割合は、４週間のオープンラベル拡張フェーズ中に有意に増加しなかった。ビークルグループでは、追加の１２例（１９．０％）がＲＶＴ−５０１  ０．５％軟膏で治療を開始してから４週間後にこのエンドポイントに達し、合計４３例（６８．３％）でベースライン訪問からの改善が見られた。８週目には、両方の治療グループで同様の割合の被験者がＥＡＳＩ−５０に達した。
【表３２】
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【０３２０】
湿疹領域のベースラインからの変化および重症度指数：４週目における全ＥＡＳＩスコアのベースラインからの平均パーセント変化を、完全分析セットについて表３３に示す。４週目で、合計ＥＡＳＩスコアのベースラインからの平均変化率は、ＲＶＴ−５０１  ０．５％グループ（−３９．８５％）で、ビークルグループ（−３４．８２％）よりも統計的に有意に高かった（Ｐ＝０．０２）。
【表３３】
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【０３２１】
ベースラインからの変化およびパーセント変化を含む、経時的なＥＡＳＩスコアの要約が、完全分析セットについて表３４に提供される。ＥＡＳＩの改善は、ビークル群と比較して２週間の治療後のＲＶＴ−５０１  ０．５％群でより大きかったが、違いは４週目に減少した。４週目のベースラインからの平均変化は、ＲＶＴ−  ５０１  ０．５％グループ；ただし、ベースラインからの平均変化率は両グループで同様だった。ＲＶＴ−５０１  ０．５％グループの被験者のＥＡＳＩスコアは、４週間のオープンラベル拡張フェーズ中に有意に改善しなかった。オープンラベルフェーズに入ったビークルグループの被験者は、ＲＶＴ−５０１  ０．５％で４週間治療した後、ＥＡＳＩスコアに有意な改善があった（８週間で−５６％変化、４週間で−３５％変化）。
【表３４】
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【０３２２】
影響を受けた総体表面積のベースラインからの変化：４週目における影響を受けたＢＳＡ全体のベースラインからの平均パーセント変化を、完全分析セットについて表３５に示す。４週目に、影響を受けたＢＳＡ全体のベースラインからの平均変化率は、ＲＶＴ−５０１  ０．５％グループ（−４６．６６％）で、ビークルグループ（−３１．７６％）よりも統計的に有意に高かった（Ｐ＝０．０３）。
【表３５】
2021505621.tif 000045
【０３２３】
完全分析セットについて、ベースラインからの平均変化およびパーセント変化を含む、経時的な総ＢＳＡスコアの要約を表３６に提供する。ＢＳＡの改善は、ビークル群と比較して２週間の治療後のＲＶＴ−５０１  ０．５％群で有意に速かったが、群間の差は４週目ではそれほど顕著ではなかった。ＲＶＴ−５０１  ０．５％の被験者のＢＳＡグループは、オープンラベル拡張フェーズ中に大幅に改善しなかった。オープンラベルフェーズに入ったビークルグループの被験者は、ＲＶＴ−５０１  ０．５％での４週間の治療後に、影響を受けたＢＳＡに有意な改善がありました（８週間で−５６％変化、４週間で−３２％と比較）。８週目に、影響を受けたＢＳＡの平均変化率は、両方の治療グループで同様だった。
【表３６】
2021505621.tif 000046
【０３２４】
ピーク掻痒数値評価スケールスコアのベースラインからの変化：ピーク掻痒ＮＲＳは、被験者に、２４時間の間、彼／彼女のかゆみのピーク重症度を「かゆみなし（０）」から「最悪のかゆみ可能（１０）」まで評価するように依頼する。４週目のピーク掻痒性ＮＲＳスコアのベースラインからの平均変化率は、完全分析セットの表３７に示す。
【０３２５】
４週目に、ピーク掻痒ＮＲＳスコアのベースラインからの平均パーセント変化は、ＲＶＴ−５０１  ０．５％グループ（−３５．６３％）とビークルグループ（−２６．３４％）との間で統計的に異ならなかった（Ｐ＝０．１４）。
【表３７】
2021505621.tif 000047
【０３２６】
平均変化およびベースラインからのパーセント変化を含む、経時的なピーク掻痒性ＮＲＳスコアの要約が、完全分析セットについて表３８に提供される。ピーク掻痒の改善は、ビークル群と比較して、２週間の治療後のＲＶＴ−５０１  ０．５％群の方が速かった。ＲＶＴ−５０１  ０．５％グループのピーク掻痒性ＮＲＳスコアは、４週間のオープンラベル拡張フェーズでは改善しなかった。オープンラベルフェーズに入ったビークルグループの被験者では、ＲＶＴ−５０１による４週間の治療後のピーク掻痒性ＮＲＳスコアが０．５％大幅に改善した（４週目の−２７％と比較して８週目は−４５％変化）。
【表３８】
2021505621.tif 000048
【０３２７】
薬物動態濃度結果：血漿中のＲＶＴ−５０１およびＭ１１代謝産物の濃度を評価するために、第１週に２から１１歳の対象の投薬前に単一の血液サンプルを収集した。
【０３２８】
ＲＶＴ−５０１およびＭ１１代謝産物の血漿濃度の要約は、完全分析セットについて表３９に示される。ＲＶＴ−５０１の測定可能な濃度が３人の被験者で報告された（被験者０３００１［１．０７ｎｇ／ｍＬ］、被験者０５００２［３０６．００ｎｇ／ｍＬ］、および被験者２１００１［定量の上限より上］）（定量の下限＝０．２５ｎｇ／ｍＬ）。
【０３２９】
被験者０３００１は４歳であり、ＩＧＡスコアは３（中程度）、合計ＥＡＳＩは１４．１、ベースライン時のＡＤの影響を受けたＢＳＡは２５．０％であった。試験製品の朝適用は、ＰＫサンプル収集の約９．５時間前に行われた。
【０３３０】
被験者０５００２は３歳であり、ＩＧＡスコアは３（中程度）、合計ＥＡＳＩは１３．２、ベースライン時のＡＤの影響を受けたＢＳＡは２８．４％であった。ＰＫサンプル収集の前の最後のアプリケーションは、第１週の訪問日の前日の夜に実行された。
【０３３１】
被験者２１００１は３歳であり、ＩＧＡスコア３（中程度）、合計ＥＡＳＩ  ２０．０、およびベースラインでＡＤにより影響を受けたＢＳＡ２６．５％を有した。試験製品の朝適用は、ＰＫサンプル収集の約９．５時間前に行われた。
【０３３２】
血漿Ｍ１１の測定可能な濃度が８人の対象で報告された。測定された最高濃度は被験者０５００２で１６．９０ｎｇ／ｍＬでした。これらの被験者のＩＧＡスコアは３（中程度）、ＥＡＳＩの合計は３．４〜２８．５、ＢＳＡの影響を受けたＢＳＡはベースラインで９．０％〜３７．０％だった。
【表３９】
2021505621.tif 000049
【０３３３】
議論
この研究の目的は、アトピー性皮膚炎の小児被験者における研究ＲＶＴ−５０１−２００１で観察された有効性を確認し、成人集団と小児集団の間に反応に差があるかどうかを調査することであった。薬物の安全性と薬物動態も二次的な目的として評価された。
【０３３４】
研究では、軽度から中等度のアトピー性皮膚炎を有する合計１１０人の小児対象が無作為化された。研究の終わりに、統計分析のために治療の割り当てが非盲検化された時、ランダム化の不均衡が発見された。被験者の無作為化は、１：１のアクティブＲＶＴ−５０１  ０．５％軟膏対ビークル軟膏になるように計画された。無作為化の不均衡の結果として、７７人の被験者がビークルを受け、３３人の被験者が積極的な治療を受けた。確認された最も可能性の高い原因は、Ｖｅｒａｃｉｔｙ  ＬｏｇｉｃＶＬＩＲＴ（商標登録）システムの機能に従って提供されるランダム化形式に関して、ＩＲＴベンダーと統計ベンダーの間の明確な理解の欠如だった。その結果、ランダム化コードは、統計ベンダーがランダム化リストを作成した方法ではなく、プロトコル定義の各階層（対象年齢と疾患の重症度）で利用可能な最低のランダム化コードに基づいてＩＲＴベンダーによって割り当てられた。
【０３３５】
影響を受けた平均ＢＳＡは、ベースライン時の治療群と同様であった（ビークルグループで１８．１％、ＲＶＴ−５０１  ０．５％群で１７．５％）。対象のほとんど（８４．３％）は、ベースラインで疾患重症度が３（中程度）のＩＧＡだった。ベースラインＩＧＡ重症度に基づく被験者の割合は、無作為化の不均衡にもかかわらず、両方の治療グループで同様だった。平均年齢は両方の治療群で類似していた。ただし、ＲＶＴ−５０１  ０．５％グループの２〜１１歳のサブグループの被験者の割合が高く（ビークルグループで４６．８％、ＲＶＴ−５０１  ０．５％グループの６０．６％）、ビークルグループの１２〜１７歳のサブグループ（ビークルグループで５３．２％、ＲＶＴ−５０１  ０．５％グループで３９．４％）。この因子による計画された層別化にもかかわらず、年齢グループの比率の違いは、研究が盲検化されなかったときに発見された不均衡ランダム化によるものである可能性が高い。スポンサーが実施した追加の分析では、この不均衡が有効性データに与える影響は最小限である可能性が高いことが示唆された。被験者の大多数は女性であり、黒人またはアフリカ系アメリカ人の割合はビークルグループでより高かった。
【０３３６】
この第２相試験の結果は、ＲＶＴ−５０１  ０．５％がビークル軟膏に対して中程度の利益を提供したことを示唆する。ＩＧＡの改善は、ビークルグループよりもＲＶＴ−５０１  ０．５％グループの方が概して速く、数値的にも高かった。ＲＶＴ−５０１  ０．５％グループの被験者の合計１６．１％は、４週間の治療後のビークルグループの被験者の１１．７％と比較して、少なくとも２ポイントの改善を伴って、クリアまたはほぼクリアのＩＧＡスコアを達成した。グループ間の差は統計的に有意ではなかった。応答は以前の研究（ＲＶＴ−５０１−２００１）で観察された応答よりも低く、ＲＶＴ−５０１での治療の４週間後に３１．６％の青年期の被験者がこのエンドポイントを達成した。同様の結果が、ＩＧＡスコアがクリアまたはほぼクリアに達した被験者の２次エンドポイントでも観察された。
【０３３７】
ＥＡＳＩ−５０、ＥＡＳＩのパーセント変化、およびＢＳＡのパーセント変化を達成する対象の割合の二次エンドポイントについて、統計的有意性が第４週に達した。ＥＡＳＩ−５０を達成した被験者の割合は、治療開始後１週間という早さで、ＲＶＴ−５０１  ０．５％群の方がビークル群よりも高く、これは４週目まで維持され、また、治療開始後１週間または２週間のＥＡＳＩおよびＢＳＡのベースラインからの変化率もそれぞれ観察された。
【０３３８】
４週目の訪問時に、ＲＶＴ−５０１が０．５％の場合は３５．６３％、ピークの掻痒のビークルの場合は数値評価尺度で２６．３４％の減少があった。ただし、これは統計的に有意ではなかった。
【０３３９】
ベースラインおよび年齢群（２〜１１および１２〜１７歳）でのＩＧＡ重症度によるサブグループ分析は、特定のサブグループにおけるより高い有効性を示唆しなかった。１２歳から１７歳のグループの１人の被験者（８．３％）のみが０または１のＩＧＡスコアを達成し、以前の研究の青年期の３１．６％と比較して、ベースラインから少なくとも２ポイント改善した。
【０３４０】
全体として、この研究で得られた有効性の結果は、以前の研究ＲＶＴ−５０１−２００１で青年に観察されたものよりも、媒体と比較して低い有効性を示した。
【０３４１】
研究の二重盲検期を完了した後、被験者は４週間の非盲検延長期に入ることを選択することができた。合計９３人の被験者がオープンラベルフェーズに入った。一般に、既に活性軟膏を受けていた被験者にＲＶＴ−５０１  ０．５％を追加して４週間治療しても、アトピー性皮膚炎の進行とそう痒の重症度には大きな影響はなかった。４週目にＲＶＴ−５０１  ０．５％を開始したビークルグループの被験者は、ベースラインからアクティブな軟膏を塗布した被験者と比較して、４週間後に同様の反応を示した。
【０３４２】
ＲＶＴ−５０１およびＭ１１代謝産物の血漿濃度は、２〜１１歳の１６人の対象で定量化された。他の研究と一致して、影響を受けたすべての病変にＲＶＴ−５０１  ０．５％軟膏を局所投与した後、ほとんどの被験者で全身吸収は見られなかった。３人の被験者（２０％）は、ＲＶＴ−５０１の測定可能な血漿中濃度を持った。２人の被験者は比較的高濃度のＲＶＴ−５０１を持った（１人は３０６ｎｇ／ｍＬの値で、もう１人は定量の上限を超える値だった）。これらの２人の被験者は３歳で、ベースラインでＩＧＡスコアが３（中程度）であり、ベースラインでのＢＳＡおよびＥＡＳＩスコアは全体的な研究平均を上回っていた。合計８人の被験者（５０％）に測定可能なＭ１１代謝産物の濃度があり、そのすべてが定量下限に近かった。この割合は、青年期および成人の被験者のわずか３％が測定可能な濃度の代謝物を有していた以前の研究よりも大幅に高くなった。この研究で使用された生物学的分析法は、以前の研究ＲＶＴ−５０１−２００１よりも感度が高かったが、ＲＶＴ−５０１の吸収が２〜１１歳の被験者の方が青年や成人よりも大きいが、血漿濃度は最小限のままである。
【０３４３】
ＲＶＴ−５０１  ０．５％軟膏は、一般的に安全であり、十分に許容された。４名の被験者がＳＡＥを経験したが、いずれも治験薬とは無関係と見なされた。ＲＶＴ−５０１  ０．５％グループ（３６．４％）で少なくとも１つのイベントを報告した被験者の数はビークルグループ（１９．５％）よりも多かったが、治療関連イベントの頻度は類似した。アプリケーションサイトの反応を含め、各用語について少数のイベントが報告された。
【０３４４】
１０人の対象（９．１％）が適用部位反応を報告した。そのうち５つ（４．５％）が申請サイトのそう痒症を報告した。他の適用部位反応（じんま疹、皮膚炎、痛み）は、適用部位の疼痛優先用語で記録され、適用後の火傷を含む１人の被験者のみによって報告された。アプリケーションサイトに刺されたイベントは報告されていない。
【０３４５】
６人の対象（５．５％）は、二重盲検期の間は治験薬に関連すると考えられたＡＥを有し、非盲検期の間はＡＥを有していなかった。これらの有害事象はすべて皮膚関連だった。ＲＶＴ−５０１グループの２人の被験者（６．１％）は、試験終了前に軽度の適用部位掻痒を治した。ビークル群では、重度の塗布部位掻痒、軽度の塗布部位皮膚炎、中程度の塗布部位の痛み、および中程度の接触皮膚炎がそれぞれ１例（１．３％）によって報告された。治療関連ＡＥのグループ間に傾向は検出されなかった。最後に、安全性試験の結果にＡＥをもたらす臨床的に重要な所見はなく、安全性試験の結果とバイタルサインについて、治療グループ間で傾向は検出されなかった。
【０３４６】
結論：この研究では、ＲＶＴ−５０１  ０．５％は、媒体と比較して軽度から中等度のアトピー性皮膚炎を患う小児対象に中程度の臨床的利益を提供するようである。
【０３４７】
ＩＧＡの改善は、ビークル群よりもＲＶＴ−５０１  ０．５％群の方が一般に速く、数値的に高かった。ＲＶＴ−５０１  ０．５％グループの被験者の合計１６．１％が、４週間の治療後にビークルグループの１１．７％と比較して、ベースラインから少なくとも２ポイント改善したＩＧＡスコアを達成した。グループ間の差は統計的に有意ではなかった。
【０３４８】
ＥＡＳＩ−５０を達成した被験者の割合、ＥＡＳＩのパーセント変化、および４週間の治療後のＢＳＡのパーセント変化において、グループ間に統計的に有意な差があった。
【０３４９】
掻痒の改善が両方のグループで報告されたが（ＲＶＴ−５０１グループの３５．６３％の減少対ビークルグループの２６．３４％の減少）、結果は統計的有意性に達しなかった。
【０３５０】
３人の被験者のみが検出可能なレベルのＲＶＴ−５０１を有し、８人の被験者は、治療の２週間後に測定可能な濃度の活性Ｍ１１代謝産物を有し、最小限の全身吸収を示した。
【０３５１】
さらなる分析は、ＲＶＴ−５０１  ０．５％軟膏で達成された全体的な有効性に対する無作為化不均衡の影響がおそらく最小であることを実証した。
【０３５２】
ＲＶＴ−５０１  ０．５％軟膏は、一般的に安全であり、軽度から中程度のアトピー性皮膚炎を患う小児対象において十分に許容された。治験の治療に関連しないと評価された５つのＳＡＥが観察された。掻痒などの適用部位のＡＥを報告した被験者の数は少なく、両方のグループで同様だった。１人の被験者（ビークル）がアプリケーションサイトの灼熱感を報告し、被験者はアプリケーションサイトの刺痛を報告しなかった。
【実施例７】
【０３５３】
実施例７：アトピー性皮膚炎の小児患者におけるＲＶＴ−５０１局所軟膏の安全性、忍容性、および薬物動態を評価するための非盲検試験
研究設計：多施設、非盲検、安全性、忍容性、および薬物動態研究。研究は３つのフェーズから成った：スクリーニング（最大３０日）、治療フェーズ（２８日）、およびフォローアップ（７−１０日）。
【０３５４】
目的：一次：広範囲のアトピー性皮膚炎を患う小児対象における局所ＲＶＴ−５０１の安全性および薬物動態（ＰＫ）を評価する。
【０３５５】
二次的：広範なアトピー性皮膚炎を患う小児対象における局所ＲＶＴ−５０１の有効性を評価すること。
【０３５６】
研究設計／方法論：これは、アトピー性皮膚炎を患う小児対象におけるＲＶＴ−５０１軟膏の安全性、忍容性、およびＰＫを評価するための多施設非盲検フェーズ１ｂ研究であった。
【０３５７】
対象は、適格性を確認するために、登録後３０日以内にスクリーニング手順を受けた。０日目（ベースライン）に、クリニックの現場担当者の監督下で、適格な被験者とその親または介護者に、ＲＶＴ−５０１の適用方法を指示した。治験薬は被験者に投与され、診療所訪問の間に現場担当者の指示に従って自宅で適用された。
【０３５８】
治療段階の間、対象、その親、または介護者は、ＲＶＴ−５０１  ０．５％軟膏を２８日間、１日２回患部に塗布した。被験者は第１週、第４週、および研究評価のためのフォローアップでクリニックに戻った。１日目と２週目と３週目に、有害事象（ＡＥ）と併用薬の変更を含め、対象者に電話で状況を確認した。
【０３５９】
被験者／介護者は、薬物の薄層で各病変を完全に覆うのに十分な研究薬物を自由に適用した。新たに出現した病変や研究中に改善した病変を含む、すべての患部に投薬が行われた。
【０３６０】
研究治療の終了後７（±２）日で追跡訪問があった。研究への被験者の総参加は最長１０週間続き、５回のクリニックの訪問が含まれた。
【０３６１】
標的集団：２歳〜１１歳の広範囲のアトピー性皮膚炎を有し、両方の年齢グループ（２歳〜６歳および７歳〜１１歳）にわたってほぼ等しい分布を有する約２４人の評価可能な対象をこの研究に登録した。
【０３６２】
包含の主な基準：ハニフィンおよびラジカ基準によりアトピー性皮膚炎の診断が確定している２〜１１歳の男性および女性の小児対象。体表面積（ＢＳＡ）の２５％以上をカバーするアトピー性皮膚炎を持ち、ベースラインで疾患の重症度が２以上のＩｎｖｅｓｔｉｇａｔｏｒ  Ｇｌｏｂａｌ  Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ（ＩＧＡ）の対象。最小体重は１０ｋｇ（２２ポンド）。被験者または介護者によると、アトピー性皮膚炎および少なくとも１か月間の安定した病歴。
【０３６３】
化合物：ＲＶＴ−５０１  ０．５％軟膏、２８日間、１日２回適用、製剤Ｃ２（表１参照）。
【０３６４】
評価／エンドポイントの基準
一次エンドポイント：ＡＥ（局所および全身）の頻度および重症度、臨床検査値、バイタルサイン、ＲＶＴ−５０１およびＭ１１代謝産物の血漿濃度。
【０３６５】
二次エンドポイント：４週目のＩＧＡのベースラインからの変化。ＩＧＡスコアが０（クリア）または１（ほぼクリア）の被験者の割合。４週目のベースラインから少なくとも２ポイント改善。週４での０または１のＩＧＡスコア。４週での湿疹領域および重症度指数（ＥＡＳＩ）のベースラインからの変化率。４週でベースラインＥＡＳＩ（ＥＡＳＩ−５０）から少なくとも５０％減少した被験者の割合。４週目に数値評価スケール（ＮＲＳ）で測定した、掻痒のピーク時のベースラインからの変化率。４週目に、疾患によって影響を受けたＢＳＡのベースラインからの変化率。被験者または介護者のかゆみの重症度評価におけるベースラインからの変化。かゆみの重症度の変化に対する被験者または介護者の全体的な評価のベースラインからの変化。
【０３６６】
統計的方法
分析集団：試験に少なくとも１回適用された試験に登録されたすべての対象が安全セットに含まれた。これは、安全性と有効性の分析の母集団だった。ＰＫセットには、血漿ＰＫサンプリングを受け、評価可能なＰＫアッセイ結果が得られたすべての被験者が含まれた。
【０３６７】
安全性分析：ＡＥを有する対象の数および割合は、システム臓器クラス、およびすべてのＡＥの好ましい用語、治験担当医師によって研究薬物に関連すると考えられるすべてのＡＥ、すべての重篤な有害事象（ＳＡＥ）、および研究中止につながるすべてのＡＥによってまとめられた。
【０３６８】
実験室データは、記述的要約統計およびベースラインからの変化を使用して分析された。臨床的に有意に異常であると見なされた治療に出現する検査値の発生率をまとめた。バイタルサインデータは、被験者ごとにリストされ、治療ごとにまとめられた。心電図データを掲載した。
【０３６９】
安全データに関して、正式な統計的比較は行われなかった。
【０３７０】
薬物動態分析：ＲＶＴ−５０１およびＭ１１は、有効なアッセイにより血漿中で測定された。研究中の各時点および任意の時点で測定可能な濃度の被験者の数と割合を要約した。  ＲＶＴ−５０１とＭ１１の濃度は、各収集時点で説明的に要約された。
【０３７１】
有効性分析：主要な有効性エンドポイントには、連続エンドポイントの１サンプルｔ検定に基づく両側ｐ値が含まれた。観察された症例は一次分析に使用された。感度分析は、連続データの場合は繰り越された最後の観測（ＬＯＣＦ）と、欠落データのバイナリ応答データの場合は非応答補完（ＮＲＩ）に基づいた。
【０３７２】
ＩＧＡスコアは、ベースラインからの実際および変化について要約された。ベースラインからの変化の９０％信頼区間（ＣＩ）が提示された。ＩＧＡもカテゴリ変数として要約され、被験者のｎ（％）がシフトテーブルを介して提示された。ＩＧＡレスポンダーエンドポイントは、４週目にベースラインから少なくとも２ポイント改善した０または１のＩＧＡスコアとして定義された。正確な２項９０％ＣＩが要約された。同様の分析が、第４週で０または１のＩＧＡスコアを達成した被験者に対して提示された。
【０３７３】
総ＥＡＳＩスコアは、実際の、ベースラインからの変化、およびベースラインからのパーセント変化について記述的に要約された。変化の９０％ＣＩとベースラインからの変化率が示された。ベースラインの合計ＥＡＳＩ（すなわち、ＥＡＳＩ  ５０）から少なくとも５０％の削減を達成した被験者の割合には、正確な二項式の９０％ＣＩが示された。
【０３７４】
影響を受けた総ＢＳＡ、オフィス内ピーク掻痒ＮＲＳ、および毎週の平均ピーク掻痒ＮＲＳが、実際のベースラインからの変化、およびベースラインからのパーセント変化について要約された。変化の９０％ＣＩとベースラインからの変化率が示された。かゆみの重症度の評価およびかゆみの重症度の変化のグローバルな評価、ならびに被験者が報告した症状と結果が一覧表示され、要約された。
【０３７５】
中間分析：この研究では中間分析は行われなかった。
結果の要約
研究の性質：合計２６人の被験者が登録され、２５人が研究を完了した。研究に参加したすべての被験者（ｎ＝２６）は、安全セットに含まれた。１人の被験者がＰＫセットから除外された（ｎ＝２５）。被験者は、試験治療に関連しない２つのＳＡＥ（喘息増悪と肺炎）のために第１週の訪問を逃し、試験を完了しなかった。
【０３７６】
人口統計学的およびベースライン特性：アトピー性皮膚炎を有する対象は、平均して、体表面積の４３．５％がアトピー性皮膚炎で覆われた。ほとんどの被験者はベースラインでＩＧＡ２または３（軽度または中等度の重症度）であり、全員が黒人またはアフリカ系アメリカ人または白人だった。
【０３７７】
安全性の結果
全体として、７人の対象（２６．９％）は、試験薬物の最初の適用後に少なくとも１つのＡＥを経験し、合計９つのＡＥが報告された。１例（３．８％）に２つのＳＡＥ（喘息増悪と肺炎）があり、それらはＣＴＣＡＥグレード３（重度）であり、試験治療とは無関係と見なされた。他のすべての有害事象は、軽度または中程度の重症度だった。
【０３７８】
治験責任医師により研究治療（適用部位の痛みにコード化された適用部位での軽度の皮膚の焼け）に関連すると判断されたＡＥを経験した対象は１人（３．８％）のみであった。この治療関連のＡＥは約２日間続き、試験の中止には至らなかった。塗布部位の掻痒または刺痛の事象は報告されていない。安全臨床化学または血液検査の試験でＡＥを引き起こした臨床的に重要な所見はなく、安全検査の結果とバイタルサインの傾向は検出されなかった。試験治療とは無関係と判断された尿路感染症に関連する臨床的に有意な尿検査値を示したのは１例（３．８％）のみだった。
【０３７９】
薬物動態学的結果
１０人の対象（４０％）は、１つ以上の時点で血漿中のＲＶＴ−５０１およびＭ１１代謝産物の測定可能な濃度を有し、１５人の対象（６０％）はすべての時点で測定可能な濃度を有していなかった。研究中にＲＶＴ−５０１の濃度が８０ｎｇ／ｍｌ以上であった被験者は４人（１６％）のみでした（最高値：１  ８６０ｎｇ／ｍＬ）。これらの被験者の１人は、Ｍ１１代謝産物の血漿中濃度も比較的高かった（２３．４ｎｇ／ｍＬ）。これらの被験者のアトピー性皮膚炎の人口統計またはベースライン重症度に傾向はなかった（２〜８歳、２または３のＩＧＡ、３４〜８１％ＢＳＡ、５．８〜３０．５のＥＡＳＩ）。表４０参照。
【表４０】
2021505621.tif 000050
【０３８０】
１０人の対象（４０％）は、１つ以上の時点で血漿中に測定可能な濃度のＲＶＴ−５０１およびＭ１１代謝産物を有し、これらのほとんどは、定量下限（０．２５ｎｇ／ｍＬ）に近い濃度を有した。
【０３８１】
１週目の訪問時、ＲＶＴ−５０１の平均血漿濃度は投与前に６．００ｎｇ／ｍＬであり、投与後３時間で１０２．９２ｎｇ／ｍＬに増加し、投与後７時間で６２．１６ｎｇ／ｍＬに減少した。４週目の訪問での試験製品適用前の平均血漿濃度はｎｇ／ｍＬであった。
【０３８２】
４人の対象（１６％）は、第１週目の来院時に測定されたＲＶＴ−５０１≧８０ｎｇ／ｍｌの濃度を有した。
【０３８３】
対象０３００１は３歳であり、ベースライン来院時のＩＧＡは３、ＥＡＳＩは２４．７、ＢＳＡは７１．９％であった。ＲＶＴ−５０１の血漿中濃度は、投与後７時間で８０．３ｎｇ／ｍＬだった。
【０３８４】
被検者０３００２は８歳であり、ベースライン来院時のＩＧＡは２、ＥＡＳＩは８．７、ＢＳＡは４８．８％であった。ＲＶＴ−５０１の血漿中濃度は、投与３時間後に７１０．０ｎｇ／ｍＬだった。
【０３８５】
被検者０３００５は７歳であり、ベースライン来院時のＩＧＡは２、ＥＡＳＩは５．８、ＢＳＡは３４．０％だった。ＲＶＴ−５０１の血漿中濃度は、投与後３時間で１８６０．０ｎｇ／ｍＬだった。
【０３８６】
被験者０３００７は２歳であり、ベースライン来院時のＩＧＡは３、ＥＡＳＩは３０．５、ＢＳＡは８１．０％だった。ＲＶＴ−５０１の血漿中濃度は、投与前は１４７．０ｎｇ／ｍＬ、投与後は１  ４７０．０ｎｇ／ｍＬ、投与後７時間だった。
【０３８７】
これらの来院時の試験薬物適用、またはこれらの対象について報告されたＰＫサンプリング時間に関連する逸脱はなかった。
【０３８８】
Ｍ１代謝産物の平均血漿濃度は、第１週の訪問での投薬後７時間での１．２４ｎｇ／ｍｌの平均値を除いて、すべての時点で１ｎｇ／ｍｌ未満であった。測定された最高濃度は、投与１週目の訪問で投与後７時間に観察された被験者０３００７で２３．４０ｎｇ／ｍＬだった。
【０３８９】
有効性の結果（表４１を参照）：安全性セットは、有効性分析に使用された主要な集団であった。被験者の合計３０．８％がＩＧＡをクリアまたはほぼクリアに達成し、４週間の治療後にベースラインから少なくとも２ポイント改善した。被験者の合計４６．２％が、４週目の訪問でＩＧＡを達成した。ＥＡＳＩの少なくとも５０％の減少は、４週間の治療後に被験者の６１．５％で観察された。ベースラインからの統計的に有意なパーセント減少は、４週目にＥＡＳＩ、影響を受けたＢＳＡ全体、および掻痒症でも観察された（下の表）。
【０３９０】
７〜１１歳の対象は、評価されたすべてのエンドポイントについて、２〜６歳の対象よりもＲＶＴ−５０１  ０．５％軟膏に対して数値的に良好な応答を示した。この年齢のサブグループの５人の被験者（３８．５％）は、２歳から６歳のサブグループの３人の被験者（２３．１％）と比較して、ＩＧＡで４週目に少なくとも２ポイントの改善を達成した。
【表４１】
2021505621.tif 000051
【０３９１】
ベースラインから少なくとも２点の改善でＩＧＡの透明またはほぼ透明を達成し、透明またはほぼ透明のＩＧＡを達成した被験者の割合を、安全セットについて表４２に示す。被験者の３０．８％の割合がレスポンダーであり、ＲＶＴ−５０１  ０．５％での４週間の治療後にベースラインから少なくとも２ポイントの改善でＩＧＡがクリアまたはほぼクリアになると定義された。１週目に２人の被験者（８．０％）のみがこのエンドポイントを達成した。
【０３９２】
表４２はまた、安全セットにおいて透明またはほぼ透明のＩＧＡを達成した対象の割合を示す。被験者の４６．２％の割合は、ＲＶＴ−５０１  ０．５％による４週間の治療後にＩＧＡを達成した。１週目に２人の被験者（８．０％）のみがこのエンドポイントを達成した。
【表４２】
2021505621.tif 000052
【０３９３】
ベースラインからの変化を含む、経時的なＩＧＡスコアの要約が、安全セットについて表４３に提供される。ＲＶＴ−５０１  ０．５％軟膏による４週間の治療後、ＩＧＡスコアは平均して約１．０ポイント低下し、時間の経過とともにＩＧＡスコアは常に低下した。
【表４３】
2021505621.tif 000053
【０３９４】
湿疹面積および重症度指数：４週目に全ＥＡＳＩスコア（ＥＡＳＩ−５０）においてベースラインから少なくとも５０％の減少を達成した対象の割合を、安全セットについて表４４に示す。被験者の６１．５％の割合は、ＲＶＴ−５０１  ０．５％での治療の４週間後にＥＡＳＩ−５０を達成した。８例（３２．０％）が第１週にこのエンドポイントを達成した。
【表４４】
2021505621.tif 000054
【０３９５】
変化およびベースラインからのパーセント変化を含む、経時的なＥＡＳＩスコアの要約を、安全セットについて表４５に提供する。ＲＶＴ−５０１  ０．５％軟膏による４週間の治療後、ＥＡＳＩスコアは常に低下し、平均は６４．９％減少した。４週目のベースラインからの変化率は統計的に有意だった（Ｐ＜０．００１）。
【表４５】
2021505621.tif 000055
【０３９６】
体表面積：ベースラインからの変化およびパーセント変化を含む、経時的に影響を受けた総ＢＳＡの要約を、安全セットについて表４６に提供する。ＲＶＴ−５０１  ０．５％軟膏による４週間の治療後、影響を受けたＢＳＡは一定の期間で減少し、平均は５４．２％減少した。４週目のベースラインからの変化率は統計的に有意だった（Ｐ＜０．００１）。
【表４６】
2021505621.tif 000056
【０３９７】
毎週の平均ピーク掻痒数値評価尺度：ベースラインからの変化およびパーセント変化を含む、経時的な毎週の平均ピーク掻痒ＮＲＳの要約が、安全セットについて表４７に提供される。ＲＶＴ−５０１  ０．５％軟膏による４週間の治療後、時間の経過に伴う毎週の平均ピーク掻痒の一定した減少があり、平均減少は５６．５％だった。４週目のベースラインからの変化率は統計的に有意だった（Ｐ＜０．００１）。
【表４７】
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【０３９８】
経時的なオフィス内ピーク掻痒数値評価スケール：ベースラインからの変化およびパーセント変化を含む、経時的な社内ピーク掻痒ＮＲＳの要約が、安全セットについて表４８に提供される。ＲＶＴ−５０１  ０．５％軟膏による４週間の治療後、オフィス内のかゆみが時間の経過とともに常に減少し、平均４７．６％減少した。
【表４８】
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【０３９９】
議論
この研究の目的は、最大使用条件下で、アトピー性皮膚炎を患う２〜１１歳の小児対象における局所ＲＶＴ−５０１の安全性およびＰＫを評価することであった。この集団における薬剤の有効性も、二次的な目的として評価された。
【０４００】
この試験は、一般的にはより広範な疾患の形態を有するアトピー性皮膚炎を有する対象を登録した。アトピー性皮膚炎の被験者は、平均して、体表面積の４３．５％がアトピー性皮膚炎で覆われた。ほとんどの被験者は、ベースラインでＩＧＡ２または３（軽度または中程度の重症度）だった。この研究では、両方の年齢グループ（２歳〜６歳および７歳〜１１歳）に均等な分布があった。
【０４０１】
ＲＶＴ−５０１  ０．５％軟膏は、広範囲のアトピー性皮膚炎を有する対象において十分に許容された。１人の被験者が２人のＳＡＥを経験したが、治験責任医師が治験薬に関連しないと見なした。１つを除くすべてのＡＥは、治験薬とは無関係であると見なされた。１例（３．８％）が、試験薬に関連すると判断され、約２日間続いた、適用部位での軽い皮膚の灼熱感を報告した。塗布部位の掻痒または刺痛の事象は報告されていない。臨床化学および血液検査の臨床検査、またはバイタルサインの臨床的に重要な所見はなく、１例（３．８％）に尿路感染症に関連する臨床的に重要な尿検査結果があり、試験治療とは無関係と判断された。
【０４０２】
他の研究と一致して、ＲＶＴ−５０１  ０．５％軟膏の局所適用後、大部分の対象について全身吸収はないか、最小限であった。１０人の被験者（４０％）は、１つ以上の時点で測定可能なＲＶＴ−５０１と血漿中のＭ１１代謝物の濃度を示し、１５人の被験者（６０％）はすべての時点で測定可能な濃度を示さなかった。研究中にＲＶＴ−５０１の濃度が８０ｎｇ／ｍｌ以上であった被験者は４人（１６％）のみでした（最高値：１  ８６０ｎｇ／ｍＬ）。これらの被験者の１人は、Ｍ１１代謝産物の血漿中濃度も比較的高かった（２３．４ｎｇ／ｍＬ）。これらの被験者のアトピー性皮膚炎の人口統計またはベースライン重症度に傾向はなかった（２〜８歳、２または３のＩＧＡ、３４〜８１％ＢＳＡ、５．８〜３０．５のＥＡＳＩ）。１日２回の塗布を４週間行った後、被験者の３０．８％が、ベースラインから少なくとも２ポイントの減少でＩＧＡをクリアまたはほぼクリアに達成した。
【０４０３】
他の有効性エンドポイントの評価は、この小児集団のアトピー性皮膚炎に対するＲＶＴ−５０１の正の効果も示唆する。被験者の合計４６．２％がＩＧＡをクリアまたはほぼクリアに達成し、６１．５％がＥＡＳＩで少なくとも５０％の削減を達成し、ベースラインからの統計的に有意なパーセント削減がＥＡＳＩ、影響を受けたＢＳＡ、および掻痒の合計で観察された。
【０４０４】
しかしながら、有効性の可能性についての結論は、ビークル制御がないために制限される。
【０４０５】
結論：ＲＶＴ−５０１  ０．５％軟膏は一般に安全であり、広範囲のアトピー性皮膚炎を患う小児対象において十分に許容された。２人のＳＡＥは、どちらも試験治療とは無関係であると評価され、同じ被験者で観察された。１名の被験者のみが適用部位の灼熱感を報告し、適用部位の掻痒または刺痛を報告した被験者はいなかった。
【０４０６】
臨床化学および血液学実験室試験、またはバイタルサインにおいて、有意なまたは臨床的に意味のある変化はなかった。
【０４０７】
１０人の対象（４０％）は、１つまたは複数の時点で血漿中に測定可能な濃度のＲＶＴ−５０１およびＭ１１代謝産物を有し、これらのほとんどは、定量下限に近い濃度を有した。４人の被験者（１６％）の１つ以上の時点で、血漿中のＲＶＴ−５０１濃度が８０ｎｇ／ｍｌ以上でした（最高値：１  ８６０ｎｇ／ｍＬ）。
【０４０８】
ＲＶＴ−５０１  ０．５％は、ＩＧＡ、ＥＡＳＩ、ＢＳＡ、および掻痒症評価の減少によって見られるように、アトピー性皮膚炎の改善と関連した。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７Ａ】
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【図７Ｂ】
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【図７Ｃ】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５Ａ】
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【図１５Ｂ】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１Ａ】
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【図２１Ｂ】
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【国際調査報告】
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