(57)【要約】  本開示は、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）および／もしくはアルコール性脂肪性肝炎（ＡＳＨ）の治療的ならびに／または予防的処置における使用のための化合物を提供する。本発明による使用のための化合物は、β−位に取り込まれた酸素を有し、α−置換基をさらに含む不飽和脂肪酸である。とりわけ、本発明は、ＮＡＳＨおよび／またはＡＳＨの処置における使用のための化合物、ならびにこれを使用する方法であって、化合物が式（ＩＩ）のものであり、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、ＸおよびＹが、本明細書に定義された通りであり、この化合物を、単独でまたは追加の活性薬剤と組み合わせて投与することができる、方法を提供する。
2021505591.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
非アルコール性脂肪性肝炎の治療的および／または予防的処置における使用のための、式（ＩＩ）
【化１】
2021505591.tif 000115
（式中、Ｒ１は、３〜６個の二重結合を有するＣ１０−Ｃ２２アルケニルから選択され、
Ｒ２およびＲ３は、同じかまたは異なり、水素原子、ヒドロキシ基、アルキル基、ハロゲン原子、アルコキシ基、アシルオキシ基、アシル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基、アルキルチオ基、アルコキシカルボニル基、カルボキシ基、アルキルスルフィニル基、アルキルスルホニル基、アミノ基およびアルキルアミノ基の群から選択され、Ｒ２およびＲ３は、シクロプロパン、シクロブタン、シクロペンタンまたはシクロヘキサンのようなシクロアルカンを形成するために連結することができ、
Ｘは、カルボン酸またはその誘導体であり、前記誘導体は、カルボン酸エステルなどのカルボキシレート；グリセリド；無水物；カルボキサミド；リン脂質；もしくはヒドロキシメチル；またはそれらのプロドラッグである）
の化合物またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、またはそのような塩の溶媒和物。
【請求項２】
式（Ｉ）
【化２】
2021505591.tif 000116
の化合物であり、Ｒ２、Ｒ３およびＸが、式（ＩＩ）のために定義された通りである、請求項１に記載の使用のための請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ２およびＲ３が、水素原子または直鎖、分岐鎖および／もしくは環状Ｃ１−Ｃ６アルキル基から独立して選ばれ、
Ｘが、カルボン酸またはその誘導体であり、前記誘導体が、カルボン酸エステルなどのカルボキシレート；グリセリド；無水物；カルボキサミド；リン脂質；もしくはヒドロキシメチル；またはそれらのプロドラッグである、
非アルコール性脂肪性肝炎の処置における使用のための請求項１に記載の使用のための請求項１もしくは２に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、またはそのような塩の溶媒和物。
【請求項４】
Ｒ２およびＲ３が、水素原子、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基およびイソプロピル基から独立して選択される、請求項１に記載の使用のための請求項１から３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ２およびＲ３がいずれも独立してＣ１−Ｃ６アルキル基である、請求項１に記載の使用のための請求項１から３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ２およびＲ３の一方が水素原子であり、他方がエチル基である、請求項１に記載の使用のための請求項１から４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項７】
Ｘがカルボン酸である、請求項１に記載の使用のための請求項１から６のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項８】
ＸがＣ１−Ｃ６アルキルエステルである、請求項１に記載の使用のための請求項１から６のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項９】
Ｘが、メチルエステル、エチルエステル、イソプロピルエステル、ｎ−ブチルエステルおよびｔｅｒｔ−ブチルエステルから選択される、請求項１に記載の使用のための請求項８に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｘが、メチルエステルおよびエチルエステルの群から選択される、請求項１に記載の使用のための請求項１、８および９のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｘが、トリグリセリド、１，２−ジグリセリド、１，３−ジグリセリド、１−モノグリセリドおよび２−モノグリセリドから選択されるグリセリドである、請求項１に記載の使用のための請求項１から６のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１２】
エナンチオマー、ジアステレオマーまたはそれらの混合物の形態で存在する、請求項１に記載の使用のための請求項１から１１のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１３】
そのＲ体で、そのＳ体でまたはラセミ体で存在する、請求項１に記載の使用のための請求項１２に記載の化合物。
【請求項１４】
２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタン酸（化合物Ａ）またはその薬学的に許容される塩もしくはエステルであり、式が、
【化３】
2021505591.tif 000117
である、請求項１に記載の使用のための請求項１または２に記載の化合物。
【請求項１５】
用量当たり約５ｍｇから約４ｇの間の用量で投与される、請求項１に記載の使用のための請求項１から１４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１６】
毎日１回投与される、請求項１に記載の使用のための請求項１から１５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１７】
前記使用が、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）を処置するまたは好転させる、請求項１から１６のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１８】
前記使用が、肝線維症の発症を軽減するもしくは予防的に処置するまたは既存の肝線維症を軽減するものである、請求項１から１７のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１９】
前記使用が、小葉炎症などの肝炎症の減少；肝細胞の風船様腫大の減少；および脂肪性肝炎の減少のうちのいずれか１つを実現するものである、請求項１から１８のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２０】
非アルコール性脂肪性肝炎および／もしくはアルコール性脂肪性肝炎の治療的ならびに／または予防的処置における使用のための、式（ＩＩ）
【化４】
2021505591.tif 000118
（式中、Ｒ１は、３〜６個の二重結合を有するＣ１０−Ｃ２２アルケニルから選択され、
Ｒ２およびＲ３は、同じかまたは異なり、水素原子、ヒドロキシ基、アルキル基、ハロゲン原子、アルコキシ基、アシルオキシ基、アシル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基、アルキルチオ基、アルコキシカルボニル基、カルボキシ基、アルキルスルフィニル基、アルキルスルホニル基、アミノ基およびアルキルアミノ基からなる置換基の群から選択され、ここでＲ２およびＲ３は、シクロプロパン、シクロブタン、シクロペンタンまたはシクロヘキサンのようなシクロアルカンを形成するために連結することができ、
Ｘは、カルボン酸またはその誘導体であり、前記誘導体は、カルボン酸エステルなどのカルボキシレート；グリセリド；無水物；カルボキサミド；リン脂質；もしくはヒドロキシメチル；またはそれらのプロドラッグである）
の化合物またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、またはそのような塩の溶媒和物を含む薬学的組成物。
【請求項２１】
前記化合物が、式（Ｉ）
【化５】
2021505591.tif 000119
（式中、Ｒ２およびＲ３が、水素原子または直鎖、分岐鎖および／もしくは環状Ｃ１−Ｃ６アルキル基から独立して選ばれ、
Ｘが、カルボン酸またはその誘導体であり、前記誘導体が、カルボン酸エステルなどのカルボキシレート、グリセリドもしくは無水物、カルボキサミド、リン脂質もしくはヒドロキシメチルまたはそれらのプロドラッグである）
の化合物であるか、
またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、またはそのような塩の溶媒和物である、請求項２０に記載の使用のための請求項２０に記載の薬学的組成物。
【請求項２２】
経口投与用に製剤化されている、請求項２０に記載の使用のための請求項２０または２１に記載の組成物。
【請求項２３】
前記薬学的組成物が、少なくとも１種の結合剤、賦形剤、希釈剤もしくは酸化防止剤またはそれらの任意の組合せをさらに含む、請求項２０に記載の使用のための請求項２０から２２のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２４】
前記化合物が２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタン酸である、請求項２０に記載の使用のための請求項２０から２３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２５】
前記使用が、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）および／またはアルコール性脂肪性肝炎の前記予防的処置のためである、請求項１から１６、１８および１９のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２６】
それを必要とする対象における非アルコール性脂肪性肝炎および／またはアルコール性脂肪性肝炎を処置する方法であって、薬学的有効量の式（ＩＩ）：
【化６】
2021505591.tif 000120
（式中、Ｒ１は、３〜６個の二重結合を有するＣ１０−Ｃ２２アルケニルから選択され、
Ｒ２およびＲ３は、同じかまたは異なり、水素原子、ヒドロキシ基、アルキル基、ハロゲン原子、アルコキシ基、アシルオキシ基、アシル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基、アルキルチオ基、アルコキシカルボニル基、カルボキシ基、アルキルスルフィニル基、アルキルスルホニル基、アミノ基およびアルキルアミノ基の群から選択され、Ｒ２およびＲ３は、シクロプロパン、シクロブタン、シクロペンタンまたはシクロヘキサンのようなシクロアルカンを形成するために連結することができ、
Ｘは、カルボン酸またはその誘導体であり、前記誘導体は、カルボン酸エステルなどのカルボキシレート；グリセリド；無水物；カルボキサミド；リン脂質；もしくはヒドロキシメチル；またはそれらのプロドラッグである）
の化合物またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、またはそのような塩の溶媒和物を前記対象に投与することを含む方法。
【請求項２７】
前記化合物が、式（Ｉ）：
【化７】
2021505591.tif 000121
の化合物である、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
Ｒ２およびＲ３が、水素原子または直鎖、分岐鎖および／もしくは環状Ｃ１−Ｃ６アルキル基から独立して選ばれ、
Ｘが、カルボン酸またはその誘導体であり、前記誘導体が、カルボン酸エステルなどのカルボキシレート；グリセリド；無水物；カルボキサミド；リン脂質；もしくはヒドロキシメチル；またはそれらのプロドラッグであり、
あるいはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、またはそのような塩の溶媒和物である、請求項２６または２７に記載の方法。
【請求項２９】
Ｒ２およびＲ３が、水素原子、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基およびイソプロピル基から独立して選択される、請求項２６から２８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３０】
Ｒ２およびＲ３がいずれも独立してＣ１−Ｃ６アルキル基である、請求項２６から２８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３１】
Ｒ２およびＲ３の一方が水素原子であり、他方がエチル基である、請求項２６から２９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３２】
Ｘがカルボン酸である、請求項２６から３１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３３】
ＸがＣ１−Ｃ６アルキルエステルである、請求項２６から３１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３４】
Ｘが、メチルエステル、エチルエステル、イソプロピルエステル、ｎ−ブチルエステルおよびｔｅｒｔ−ブチルエステルから選択される、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
Ｘが、メチルエステルおよびエチルエステルから選択される、請求項２６、３３または３４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３６】
Ｘが、トリグリセリド、１，２−ジグリセリド、１，３−ジグリセリド、１−モノグリセリドおよび２−モノグリセリドから選択されるグリセリドである、請求項２６から３１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３７】
前記化合物が、エナンチオマー、ジアステレオマーまたはそれらの混合物の形態で存在する、請求項２６から３６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３８】
前記化合物が、そのＲ体で、そのＳ体でまたはラセミ体で存在する、請求項３７に記載の方法。
【請求項３９】
前記化合物が、２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタン酸（化合物Ａ）またはその薬学的に許容される塩もしくはエステルであり、式が、
【化８】
2021505591.tif 000122
である、請求項２６に記載の方法。
【請求項４０】
前記化合物が、用量当たり約５ｍｇから約４ｇの間の用量で投与される、請求項２６から３９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４１】
前記化合物が毎日１回投与される、請求項２６から４０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４２】
非アルコール性脂肪性肝炎および／またはアルコール性脂肪性肝炎を処置するまたは好転させる、請求項２６から４１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４３】
非アルコール性脂肪性肝炎および／またはアルコール性脂肪性肝炎を予防的に処置することを含む、請求項２６から４２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４４】
肝線維症の発症を軽減するもしくは予防的に処置するまたは既存の肝線維症を軽減する、請求項２６から４３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４５】
肝炎症の減少、肝細胞の風船様腫大の減少、脂肪性肝炎の減少、線維症の軽減、ならびに／または炎症および／もしくは線維症のバイオマーカー、例えば、ｈｓＣＲＰ、Ｐｒｏ−Ｃ３、ＥＬＦパネルの減少；ならびに／または肝生検からのＮＡＳスコア、肝臓機能検査、ＭＲＩ  ＬｉｖｅｒＭｕｌｔｉＳｃａｎ評価ＰＤＦＦとｃＴ１および／もしくはＨＯＭＡ−ＩＲの改善を実現する、請求項２６から４４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４６】
肝炎症の前記減少が、小葉炎症の減少である、請求項４５に記載の方法。
【請求項４７】
前記化合物が、薬学的組成物として製剤化されている、請求項２６から４６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４８】
前記薬学的組成物が、経口投与用に製剤化されている、請求項４７に記載の方法。
【請求項４９】
前記薬学的組成物が、少なくとも１種の結合剤、賦形剤、希釈剤もしくは酸化防止剤またはそれらの任意の組合せをさらに含む、請求項４７または４８に記載の方法。
【請求項５０】
前記化合物が２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタン酸である、請求項４７から４９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５１】
前記処置の方法が予防的である、請求項２６から５０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５２】
アルコール性脂肪性肝炎の治療的および／または予防的処置における使用のための、式（ＩＩ）
【化９】
2021505591.tif 000123
（式中、Ｒ１は、３〜６個の二重結合を有するＣ１０−Ｃ２２アルケニルから選択され、
Ｒ２およびＲ３は、同じかまたは異なり、水素原子、ヒドロキシ基、アルキル基、ハロゲン原子、アルコキシ基、アシルオキシ基、アシル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基、アルキルチオ基、アルコキシカルボニル基、カルボキシ基、アルキルスルフィニル基、アルキルスルホニル基、アミノ基およびアルキルアミノ基の群から選択され、Ｒ２およびＲ３は、シクロプロパン、シクロブタン、シクロペンタンまたはシクロヘキサンのようなシクロアルカンを形成するために連結することができ、
Ｘは、カルボン酸またはその誘導体であり、前記誘導体は、カルボン酸エステルなどのカルボキシレート；グリセリド；無水物；カルボキサミド；リン脂質；もしくはヒドロキシメチル；またはそれらのプロドラッグである）
の化合物またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、またはそのような塩の溶媒和物。
【請求項５３】
式（Ｉ）
【化１０】
2021505591.tif 000124
の化合物であり、Ｒ２、Ｒ３およびＸが、式（ＩＩ）のために定義された通りである、請求項５２に記載の使用のための請求項５２に記載の化合物。
【請求項５４】
Ｒ２およびＲ３が、水素原子または直鎖、分岐鎖および／もしくは環状Ｃ１−Ｃ６アルキル基から独立して選ばれ、
Ｘが、カルボン酸またはその誘導体であり、前記誘導体が、カルボン酸エステルなどのカルボキシレート；グリセリド；無水物；カルボキサミド；リン脂質；もしくはヒドロキシメチル；またはそれらのプロドラッグである、
アルコール性脂肪性肝炎の予防および／または治療における使用のための、請求項５２に記載の使用のための請求項５２もしくは５３に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、またはそのような塩の溶媒和物。
【請求項５５】
Ｒ２およびＲ３が、水素原子、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基およびイソプロピル基から独立して選択される、請求項５２に記載の使用のための請求項５２から５４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項５６】
Ｒ２およびＲ３がいずれも独立してＣ１−Ｃ６アルキル基である、請求項５２に記載の使用のための請求項５２から５４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項５７】
Ｒ２およびＲ３の一方が水素原子であり、他方がエチル基である、請求項５２に記載の使用のための請求項５２から５５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項５８】
Ｘがカルボン酸である、請求項５２に記載の使用のための請求項５２から５７のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項５９】
ＸがＣ１−Ｃ６アルキルエステルである、請求項５２に記載の使用のための請求項５２から５７のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項６０】
Ｘが、メチルエステル、エチルエステル、イソプロピルエステル、ｎ−ブチルエステルおよびｔｅｒｔ−ブチルエステルから選択される、請求項５２に記載の使用のための請求項５９に記載の化合物。
【請求項６１】
Ｘが、メチルエステルおよびエチルエステルの群から選択される、請求項５２に記載の使用のための請求項５２〜５７、５９および６０のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項６２】
Ｘが、トリグリセリド、１，２−ジグリセリド、１，３−ジグリセリド、１−モノグリセリドおよび２−モノグリセリドから選択されるグリセリドである、請求項５２に記載の使用のための請求項５２から５７のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項６３】
エナンチオマー、ジアステレオマーまたはそれらの混合物の形態で存在する、請求項５２に記載の使用のための請求項５２から６２のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項６４】
そのＲ体で、そのＳ体でまたはラセミ体で存在する、請求項５２に記載の使用のための請求項６３に記載の化合物。
【請求項６５】
２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタン酸（化合物Ａ）またはその薬学的に許容される塩もしくはエステルであり、式が、
【化１１】
2021505591.tif 000125
である、請求項５２に記載の使用のための請求項５２または５３に記載の化合物。
【請求項６６】
用量当たり約５ｍｇから約４ｇの間の用量で投与される、請求項５２に記載の使用のための請求項５２から６５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項６７】
毎日１回投与される、請求項５２に記載の使用のための請求項５２から６６のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項６８】
前記使用が、アルコール性脂肪性肝炎を処置するまたは好転させる、請求項５２から６７のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項６９】
前記使用が、肝線維症の発症を予防するまたは既存の肝線維症を軽減する、請求項５２から６８のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項７０】
前記使用が、小葉炎症などの肝炎症の減少；肝細胞の風船様腫大の減少；および脂肪性肝炎の減少のうちのいずれか１つを実現する、請求項５２から６９のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項７１】
前記化合物が６００ｍｇの投与量で毎日投与される、先行する請求項のいずれか一項に記載の化合物、組成物および方法。
【請求項７２】
前記化合物が３００ｍｇの投与量で毎日投与される、先行する請求項のいずれか一項に記載の化合物、組成物および方法。
【請求項７３】
血漿アラニンアミノトランスフェラーゼレベルが３０〜４０％低減される、先行する請求項のいずれか一項に記載の化合物、組成物および方法。
【請求項７４】
血漿アスパラギン酸トランスアミナーゼレベルが１０〜２０％低減される、先行する請求項のいずれか一項に記載の化合物、組成物および方法。
【請求項７５】
脂肪肝が７０〜９０％軽減される、先行する請求項のいずれか一項に記載の化合物、組成物および方法。
【請求項７６】
前記ＮＡＳスコアが５０〜７０％低減される、先行する請求項のいずれか一項に記載の化合物、組成物および方法。
【請求項７７】
肝線維化面積が４０〜６０％縮小される、先行する請求項のいずれか一項に記載の化合物、組成物および方法。
【請求項７８】
前記化合物が単剤療法として投与される、請求項２６から５１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７９】
少なくとも１種の追加の活性薬剤を共投与することをさらに含む、請求項２６から５１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８０】
前記１種または複数種の追加の活性薬剤が、アロステリックアセチル−ＣｏＡカルボキシラーゼ（ＡＣＣ）阻害剤、アンジオテンシンＩＩ受容体アンタゴニスト、アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤、アポトーシスシグナル制御キナーゼ−１（ＡＳＫ１）阻害剤、カスパーゼ阻害剤、カテプシンＢ阻害剤、ＣＣＲ２ケモカインアンタゴニスト、ＣＣＲ５ケモカインアンタゴニスト、クロライドチャネル刺激剤、コレステロール可溶化剤、ジアシルグリセロールＯ−アシルトランスフェラーゼ１（ＤＧＡＴ１）阻害剤、ジペプチジルペプチダーゼＩＶ（ＤＰＰ  ＩＶ）阻害剤、線維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ）−２１アゴニスト、ファルネソイドＸ受容体（ＦＸＲ）アゴニスト、抗ＣＤ３  ｍＡｂ、ガレクチン−３阻害剤、グルカゴン様ペプチド１（ＧＬＰ１）アゴニスト、グルタチオン前駆体、Ｃ型肝炎ウイルスＮＳ３プロテアーゼ阻害剤、ＨＭＧ  ＣｏＡ還元酵素阻害剤、１  Ｉβ−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ（Ｉ  Ｉβ−ＨＳＤＩ）阻害剤、熱ショックタンパク質（Ｈｓｐ）４７阻害剤、ＩＬ−Ｉβアンタゴニスト、ＩＬ−６アンタゴニスト、ＩＬ−１０アゴニスト、ＩＬ−１７アンタゴニスト、回腸ナトリウム胆汁酸共輸送体阻害剤、レプチンアナログ、５−リポキシゲナーゼ阻害剤、ＬＰＬ遺伝子刺激剤、リシルオキシダーゼホモログ２（ＬＯＸＬ２）阻害剤、リゾホスファチジン酸１（ＬＰＡ１）受容体アンタゴニスト、オメガ−３脂肪酸、ＰＤＥ３阻害剤、ＰＤＥ４阻害剤、ホスホリパーゼＣ（ＰＬＣ）阻害剤、ＰＰＡＲａアゴニスト、ＰＰＡＲｙアゴニスト、ＰＰＡＲ５アゴニスト、組換えヒトペントラキシン−２タンパク質（ＰＲＦ−１）、Ｒｈｏ関連プロテインキナーゼ２（ＲＯＣＫ２）阻害剤、セミカルバジド感受性アミンオキシダーゼ（ＳＳＡＯ）阻害剤、ナトリウムグルコース輸送体−２（ＳＧＬＴ２）阻害剤、ステアロイルＣｏＡデサチュラーゼ−１阻害剤、甲状腺ホルモン受容体βアゴニスト、腫瘍壊死因子ａ（ＴＮＦα）リガンド阻害剤、トランスグルタミナーゼ阻害剤、トランスグルタミナーゼ阻害剤前駆体および低分子活性化ＲＮＡ（ｓａＲＮＡ）から独立して選択される、請求項７９に記載の方法。
【請求項８１】
前記１種または複数種の追加の活性薬剤が、グルカゴン様ペプチド１（ＧＬＰ−１）アゴニスト；ジペプチジルペプチダーゼ（ＤＰＰ  ＩＶ）阻害剤およびオメガ−３脂肪酸（ｎ−３  ＰＵＦＡ）から独立して選択される、請求項７９または８０に記載の方法。
【請求項８２】
前記１種または複数種の追加の活性薬剤が、アセチルサリチル酸、アリポジーンチパルボベック、アラムコール、アトルバスタチン、ＢＩ  １４６７３３５、ＢＬＸ−１００２、ＢＭＳ−９８６０３６、ＢＭＳ−９８６０２０、セニクリビロック、コビプロストン、コレセベラム、エムリカサン、エナラプリル、フォラムラブ、ＧＦＴ−５０５、ＧＲ−ＭＤ−０２、ＧＳ−０９７６、ＧＳ−９６７４、ヒドロクロロチアジド、イコサペントエチルエステル（エイコサペンタエン酸エチル）、ＩＭＭ−１２４Ｅ、ＩＶＡ３３７、Ｋ−８７７、ＫＤ−０２５、リナグリプチン、リラグルチド、メルカプタミン、ＭＧＬ−３１９６、ＮＤ−Ｌ０２−ｓ０２０１、オベチコール酸、オレソキシム、ｐｅｇ−イロデカキン、ピオグリタゾン、ＰＲＭ−１５１、ＰＸ−１０２、レモグリフロジンエタボネート、セロンセルチブ、シムツズマブ、ＳＨＰ−６２６、ソリスロマイシン、チペルカスト、ＴＲＸ−３１８、ウルソデオキシコール酸およびＶＢＹ−３７６から独立して選択される、請求項７９に記載の方法。
【請求項８３】
前記共投与が、同時投与、順次投与、重複投与、間隔投与、継続投与またはそれらの組合せによる、請求項７９から８２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８４】
単剤療法として投与される、請求項１から１９および請求項５２から７７のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項８５】
少なくとも１種の追加の活性薬剤と共投与される、請求項１から１９または請求項５２から７７のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項８６】
前記１種または複数種の追加の活性薬剤が、アロステリックアセチル−ＣｏＡカルボキシラーゼ（ＡＣＣ）阻害剤、アンジオテンシンＩＩ受容体アンタゴニスト、アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤、アポトーシスシグナル制御キナーゼ−１（ＡＳＫ１）阻害剤、カスパーゼ阻害剤、カテプシンＢ阻害剤、ＣＣＲ２ケモカインアンタゴニスト、ＣＣＲ５ケモカインアンタゴニスト、クロライドチャネル刺激剤、コレステロール可溶化剤、ジアシルグリセロールＯ−アシルトランスフェラーゼ１（ＤＧＡＴ１）阻害剤、ジペプチジルペプチダーゼＩＶ（ＤＰＰ  ＩＶ）阻害剤、線維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ）−２１アゴニスト、ファルネソイドＸ受容体（ＦＸＲ）アゴニスト、抗ＣＤ３  ｍＡｂ、ガレクチン−３阻害剤、グルカゴン様ペプチド１（ＧＬＰ１）アゴニスト、グルタチオン前駆体、Ｃ型肝炎ウイルスＮＳ３プロテアーゼ阻害剤、ＨＭＧ  ＣｏＡ還元酵素阻害剤、１  Ｉβ−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ（Ｉ  Ｉβ−ＨＳＤＩ）阻害剤、熱ショックタンパク質（Ｈｓｐ）４７阻害剤、ＩＬ−Ｉβアンタゴニスト、ＩＬ−６アンタゴニスト、ＩＬ−１０アゴニスト、ＩＬ−１７アンタゴニスト、回腸ナトリウム胆汁酸共輸送体阻害剤、レプチンアナログ、５−リポキシゲナーゼ阻害剤、ＬＰＬ遺伝子刺激剤、リシルオキシダーゼホモログ２（ＬＯＸＬ２）阻害剤、リゾホスファチジン酸１（ＬＰＡ１）受容体アンタゴニスト、オメガ−３脂肪酸、ＰＤＥ３阻害剤、ＰＤＥ４阻害剤、ホスホリパーゼＣ（ＰＬＣ）阻害剤、ＰＰＡＲａアゴニスト、ＰＰＡＲｙアゴニスト、ＰＰＡＲ５アゴニスト、組換えヒトペントラキシン−２タンパク質（ＰＲＦ−１）、Ｒｈｏ関連プロテインキナーゼ２（ＲＯＣＫ２）阻害剤、セミカルバジド感受性アミンオキシダーゼ（ＳＳＡＯ）阻害剤、ナトリウムグルコース輸送体−２（ＳＧＬＴ２）阻害剤、ステアロイルＣｏＡデサチュラーゼ−１阻害剤、甲状腺ホルモン受容体βアゴニスト、腫瘍壊死因子ａ（ＴＮＦα）リガンド阻害剤、トランスグルタミナーゼ阻害剤、トランスグルタミナーゼ阻害剤前駆体および低分子活性化ＲＮＡ（ｓａＲＮＡ）から独立して選択される、請求項８５に記載の化合物。
【請求項８７】
前記１種または複数種の追加の活性薬剤が、グルカゴン様ペプチド１（ＧＬＰ−１）アゴニスト；ジペプチジルペプチダーゼ（ＤＰＰ  ＩＶ）阻害剤）およびオメガ−３脂肪酸（ｎ−３  ＰＵＦＡ）から独立して選択される、請求項８５または８６に記載の方法。
【請求項８８】
前記１種または複数種の追加の活性薬剤が、アセチルサリチル酸、アリポジーンチパルボベック、アラムコール、アトルバスタチン、ＢＩ  １４６７３３５、ＢＬＸ−１００２、ＢＭＳ−９８６０３６、ＢＭＳ−９８６０２０、セニクリビロック、コビプロストン、コレセベラム、エムリカサン、エナラプリル、フォラムラブ、ＧＦＴ−５０５、ＧＲ−ＭＤ−０２、ＧＳ−０９７６、ＧＳ−９６７４、ヒドロクロロチアジド、イコサペントエチルエステル（エイコサペンタエン酸エチル）、ＩＭＭ−１２４Ｅ、ＩＶＡ３３７、Ｋ−８７７、ＫＤ−０２５、リナグリプチン、リラグルチド、メルカプタミン、ＭＧＬ−３１９６、ＮＤ−Ｌ０２−ｓ０２０１、オベチコール酸、オレソキシム、ｐｅｇ−イロデカキン、ピオグリタゾン、ＰＲＭ−１５１、ＰＸ−１０２、レモグリフロジンエタボネート、セロンセルチブ、シムツズマブ、ＳＨＰ−６２６、ソリスロマイシン、チペルカスト、ＴＲＸ−３１８、ウルソデオキシコール酸およびＶＢＹ−３７６から独立して選択される、請求項８５に記載の方法。
【請求項８９】
前記共投与が、同時投与、順次投与、重複投与、間隔投与、継続投与またはそれらの組合せによる、請求項８５から８８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９０】
１種または複数種の追加の活性薬剤と共投与される、非アルコール性脂肪性肝炎の治療的および／または予防的処置における使用のための、式（ＩＩ）
【化１２】
2021505591.tif 000126
（式中、Ｒ１は、３〜６個の二重結合を有するＣ１０−Ｃ２２アルケニルから選択され、
Ｒ２およびＲ３は、同じかまたは異なり、水素原子、ヒドロキシ基、アルキル基、ハロゲン原子、アルコキシ基、アシルオキシ基、アシル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基、アルキルチオ基、アルコキシカルボニル基、カルボキシ基、アルキルスルフィニル基、アルキルスルホニル基、アミノ基およびアルキルアミノ基からなる置換基の群から選択され、ここでＲ２およびＲ３は、シクロプロパン、シクロブタン、シクロペンタンまたはシクロヘキサンのようなシクロアルカンを形成するために連結することができ、
Ｘは、カルボン酸またはその誘導体であり、前記誘導体は、カルボン酸エステルなどのカルボキシレート；グリセリド；無水物；カルボキサミド；リン脂質；もしくはヒドロキシメチル；またはそれらのプロドラッグである）
の化合物またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、またはそのような塩の溶媒和物。
【請求項９１】
式（Ｉ）
【化１３】
2021505591.tif 000127
の化合物であり、Ｒ２、Ｒ３およびＸが、式（ＩＩ）のために定義された通りである、請求項９０に記載の使用のための請求項９０に記載の化合物。
【請求項９２】
Ｒ２およびＲ３が、水素原子、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基およびイソプロピル基から独立して選択される、請求項９０に記載の使用のための請求項９０または９１に記載の化合物。
【請求項９３】
２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタン酸（化合物Ａ）またはその薬学的に許容される塩もしくはエステルであり、式が、
【化１４】
2021505591.tif 000128
である、請求項９０に記載の使用のための請求項９０から９２のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項９４】
前記１種または複数種の追加の活性薬剤が、アロステリックアセチル−ＣｏＡカルボキシラーゼ（ＡＣＣ）阻害剤、アンジオテンシンＩＩ受容体アンタゴニスト、アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤、アポトーシスシグナル制御キナーゼ−１（ＡＳＫ１）阻害剤、カスパーゼ阻害剤、カテプシンＢ阻害剤、ＣＣＲ２ケモカインアンタゴニスト、ＣＣＲ５ケモカインアンタゴニスト、クロライドチャネル刺激剤、コレステロール可溶化剤、ジアシルグリセロールＯ−アシルトランスフェラーゼ１（ＤＧＡＴ１）阻害剤、ジペプチジルペプチダーゼＩＶ（ＤＰＰ  ＩＶ）阻害剤、線維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ）−２１アゴニスト、ファルネソイドＸ受容体（ＦＸＲ）アゴニスト、抗ＣＤ３  ｍＡｂ、ガレクチン−３阻害剤、グルカゴン様ペプチド１（ＧＬＰ１）アゴニスト、グルタチオン前駆体、Ｃ型肝炎ウイルスＮＳ３プロテアーゼ阻害剤、ＨＭＧ  ＣｏＡ還元酵素阻害剤、１  Ｉβ−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ（Ｉ  Ｉβ−ＨＳＤＩ）阻害剤、熱ショックタンパク質（Ｈｓｐ）４７阻害剤、ＩＬ−Ｉβアンタゴニスト、ＩＬ−６アンタゴニスト、ＩＬ−１０アゴニスト、ＩＬ−１７アンタゴニスト、回腸ナトリウム胆汁酸共輸送体阻害剤、レプチンアナログ、５−リポキシゲナーゼ阻害剤、ＬＰＬ遺伝子刺激剤、リシルオキシダーゼホモログ２（ＬＯＸＬ２）阻害剤、リゾホスファチジン酸１（ＬＰＡ１）受容体アンタゴニスト、オメガ−３脂肪酸、ＰＤＥ３阻害剤、ＰＤＥ４阻害剤、ホスホリパーゼＣ（ＰＬＣ）阻害剤、ＰＰＡＲａアゴニスト、ＰＰＡＲｙアゴニスト、ＰＰＡＲ５アゴニスト、組換えヒトペントラキシン−２タンパク質（ＰＲＦ−１）、Ｒｈｏ関連プロテインキナーゼ２（ＲＯＣＫ２）阻害剤、セミカルバジド感受性アミンオキシダーゼ（ＳＳＡＯ）阻害剤、ナトリウムグルコース輸送体−２（ＳＧＬＴ２）阻害剤、ステアロイルＣｏＡデサチュラーゼ−１阻害剤、甲状腺ホルモン受容体βアゴニスト、腫瘍壊死因子ａ（ＴＮＦα）リガンド阻害剤、トランスグルタミナーゼ阻害剤、トランスグルタミナーゼ阻害剤前駆体および低分子活性化ＲＮＡ（ｓａＲＮＡ）の群から独立して選択される、請求項９０に記載の使用のための請求項９０から９３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項９５】
前記１種または複数種の追加の活性薬剤が、グルカゴン様ペプチド１（ＧＬＰ−１）アゴニスト；ジペプチジルペプチダーゼ（ＤＰＰ  ＩＶ）阻害剤およびオメガ−３脂肪酸（ｎ−３  ＰＵＦＡ）の群から選択される、請求項９０に記載の使用のための請求項９０から９４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項９６】
１種または複数種の追加の療法剤が、アセチルサリチル酸、アリポジーンチパルボベック、アラムコール、アトルバスタチン、ＢＩ  １４６７３３５、ＢＬＸ−１００２、ＢＭＳ−９８６０３６、ＢＭＳ−９８６０２０、セニクリビロック、コビプロストン、コレセベラム、エムリカサン、エナラプリル、フォラムラブ、ＧＦＴ−５０５、ＧＲ−ＭＤ−０２、ＧＳ−０９７６、ＧＳ−９６７４、ヒドロクロロチアジド、イコサペントエチルエステル（エイコサペンタエン酸エチル）、ＩＭＭ−１２４Ｅ、ＩＶＡ３３７、Ｋ−８７７、ＫＤ−０２５、リナグリプチン、リラグルチド、メルカプタミン、ＭＧＬ−３１９６、ＮＤ−Ｌ０２−ｓ０２０１、オベチコール酸、オレソキシム、ｐｅｇ−イロデカキン、ピオグリタゾン、ＰＲＭ−１５１、ＰＸ−１０２、レモグリフロジンエタボネート、セロンセルチブ、シムツズマブ、ＳＨＰ−６２６、ソリスロマイシン、チペルカスト、ＴＲＸ−３１８、ウルソデオキシコール酸およびＶＢＹ−３７６の群から独立して選択される、請求項９０に記載の使用のための請求項９０から９３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項９７】
前記共投与が、同時投与、順次投与、重複投与、間隔投与、継続投与またはそれらの組合せによる、請求項９０に記載の使用のための請求項９０から９６のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項９８】
前記使用が、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、または線維症、炎症および／もしくは肝細胞の風船様腫大によって特徴付けられる別の肝障害を予防する、処置するまたは好転させる、請求項９０から９７のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項９９】
前記使用が、肝線維症の発症を予防するまたは既存の肝線維症を軽減する、請求項９０から９７のいずれか一項に記載の化合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、２０１７年１２月６日に出願されたノルウェー特許出願第２０１７１９４４号；２０１７年１２月６日に出願されたノルウェー特許出願第２０１７１９４５号；および２０１８年１０月９日に出願された米国仮特許出願第６２／７３４，０１３号の優先権の利益を主張する。前述のすべての出願は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【０００２】
本開示は、それを必要とする対象における非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、アルコール性脂肪性肝炎（ＡＳＨ）、ならびに線維症および／または肝炎症によって特徴付けられる他の肝障害を処置する方法に関する。さらに、本開示は、それを必要とする対象における非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、アルコール性脂肪性肝炎（ＡＳＨ）、ならびに線維症および／または肝炎症によって特徴付けられる他の肝障害の処置における使用のための化合物および化合物を含む組成物に関する。本発明による使用のための化合物は、β−位に取り込まれた酸素を有し、α−置換基をさらに含む不飽和脂肪酸である。
【背景技術】
【０００３】
長鎖オメガ−３脂肪酸、例えば（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン酸（ＥＰＡ）および（４Ｚ，７Ｚ，１０Ｚ，１３Ｚ，１６Ｚ，１９Ｚ）−ドコサ−４，７，１０，１３，１６，１９−ヘキサエン酸（ＤＨＡ）は広範な生物学的影響を与え、血漿脂質レベル、心血管機能および免疫機能、インスリン作用、神経発達ならびに視覚機能に影響する。高用量ＥＰＡ／ＤＨＡは現在、重篤な高トリグリセリド血症（ＨＴＧ）の処置のために処方される。これらの影響は、少なくとも部分的に、肝臓内の脂肪酸代謝に対する影響により媒介される。
【０００４】
非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）を処置するためのＥＰＡおよびＤＨＡなどのオメガ−３化合物の使用が先行技術において提案されている。例として、ＭｏｃｈｉｄａによるＷＯ２０１４／０５７５２２は、ＮＡＳＨの症状の処置または緩和における使用のための、イコサペント酸エチルを含む組成物に関する。
【０００５】
Ｄｉｇｎｉｔｙ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ＬＴＤ（ＷＯ２０１４／１１８０９７）は、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）およびＮＡＳＨなどの脂肪肝障害を処置するための１５−ヒドロキシエイコサペンタエン酸（１５−ＯＨＥＰＡ）などの修飾オメガ−３化合物の使用を提案している。Ｋｒｉｓａｎｉ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ（ＷＯ２０１４／０４５２９３）も、ＮＡＳＨを含む様々な疾患を処置するための修飾オメガ−３化合物の使用を提案している。さらに最近では、Ｐｒｏｎｏｖａ  Ｂｉｏｐｈａｒｍａ  ＡＳ（ＷＯ２０１６１７３９２３Ａ１）が、ＮＡＳＨの処置のための硫黄含有構造修飾脂肪酸の使用を提案した。
【０００６】
単独肝脂肪症（組織学的に５％超の肝細胞）を含むはるかに広範囲の肝臓疾患をＮＡＦＬＤが包含するにも関わらず、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）および非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）はしばしば同義で使用される。肝脂肪症は、炎症反応および細胞傷害を伴わないとき、比較的良性の障害である可能性が最も高い。しかし、ＮＡＦＬＤ患者のサブグループは、肝脂肪症に加えて肝細胞損傷および炎症を有し、これは、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）として既知の状態である。ＮＡＳＨは、組織学的にアルコール性脂肪性肝炎（ＡＳＨ）とほとんど区別できない。ＮＡＦＬＤにおいて見られる単純な脂肪症は短期の罹患率または死亡率の増加と相関しないが、ＮＡＳＨは肝硬変、肝不全および肝細胞癌（ＨＣＣ）のリスクを劇的に高める。ＮＡＳＨに起因する肝硬変は、肝臓移植の理由として頻度がますます高くなっている。肝臓が原因の罹患率および死亡率はＮＡＳＨの患者において大きく増加するが、それらは心血管疾患による罹患率および死亡率とさらにいっそう強く相関する。
【０００７】
ＮＡＳＨの診断およびステージ分類の統一基準はまだ議論されている（詳細は後のセクションで参照されたい）。ＮＡＳＨの鍵となる組織学的要素は脂肪症、肝細胞の風船様腫大および小葉炎症であり、線維症はＮＡＳＨの組織学的定義の一部ではない。しかし、肝生検における線維症の程度（ステージ）は予後の予測に役に立つが、肝生検における炎症および壊死の程度（グレード）は役に立たない。
【０００８】
様々な組織学的要素に関して、疾患の初期のステージで処置が確立された場合、オメガ−３脂肪酸による処置がＮＡＦＬＤの患者において肝脂肪症を効果的に軽減することが明らかになっており（Ｓｃｏｒｌｅｔｔｉ  Ｅ，ら、Ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  ｐｕｒｉｆｉｅｄ  ｅｉｃｏｓａｐｅｎｔａｅｎｏｉｃ  ａｎｄ  ｄｏｃｏｓａｈｅｘａｎｏｉｃ  ａｃｉｄｓ  ｉｎ  ｎｏｎ−ａｌｃｏｈｏｌｉｃ  ｆａｔｔｙ  ｌｉｖｅｒ  ｄｉｓｅａｓｅ：  Ｒｅｓｕｌｔｓ  ｆｒｏｍ  ｔｈｅ  ＊ＷＥＬＣＯＭＥ  ｓｔｕｄｙ、Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ．２０１４  Ｏｃｔ；６０（４）：１２１１−２ｎｄ、これはおそらく、後のより重篤な疾患のステージへの進行を遅らせるであろう。しかし、オメガ−３脂肪酸が、顕著な組織学的変化／炎症性変化が起きたＮＡＳＨを治療するかつ／または好転させるのに十分に強力であるかどうか疑わしい（Ｓａｎｙａｌ  ＡＪ，ら；ＥＰＥ−Ａ  Ｓｔｕｄｙ  Ｇｒｏｕｐ、Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ．２０１４  Ａｕｇ；１４７（２）：３７７−８４．ｅ１）。
【０００９】
ＮＡＳＨの治療におけるオメガ−３脂肪酸の中程度の有効性は、ＮＡＳＨの病因の根底にある他の経路へのその穏やかな作用に二次的である可能性がある。ＮＡＳＨのヒトモデルおよび動物モデルの両方における研究は、単独肝脂肪症とは対照的に、脂肪性肝炎および線維症の発症に関与する複数の因子が存在することを説得力をもって示した。これらの因子には、インスリン抵抗性、酸化ストレス、炎症、腸由来の内毒素ならびに過剰な肝コレステロールおよび胆汁酸が含まれる。これらのすべての因子は、遺伝的に感受性の高い個体において寄与する重要な役割を果たすことが明らかになっており、したがって、これらの経路を標的にする薬物がＮＡＳＨの処置のために開発中である。
【００１０】
ＮＡＳＨと同じく、アルコール性肝臓疾患（ＡＬＤ）は、脂肪肝または単純な脂肪症からアルコール性肝炎（すなわち、ＡＳＨ）への移行、最終的には肝線維症または肝硬変を伴う慢性肝炎への移行を表す組織学的ステージにグループ化することができる。したがって、ＡＳＨおよびＮＡＳＨの起源は異なるかもしれないが、それぞれの慢性損傷に対する肝反応には、マクロファージ活性化およびサイトカイン産生ならびにその結果生じる活性化星細胞、すなわち増殖性の筋線維芽細胞が関与する炎症促進および線維化促進カスケードなどの多くの類似点がある。（例えば、Ｆｒｉｅｄｍａｎ，ＳＬ；Ａｌｃｏｈｏｌｉｓｍ：  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ．１９９９  Ｍａｙ；２３（５）：９０４−９１０を参照されたい。）
【００１１】
ＮＡＳＨおよびＡＳＨを標的にする薬物の開発における課題は、ヒトにおけるこれらの疾患を個別に表す前臨床モデルがないことである。脂質異常症およびインスリン抵抗性など、ＮＡＳＨを典型的に伴う代謝異常をより表し得るげっ歯類モデルは、非常に軽度の肝炎症および線維症により特徴付けられる。その対極には化学誘発性線維症モデル、例えば、四塩化炭素（ＣＣｌ４）またはチオアセトアミド誘発性線維症があり、これらはより重篤な線維症を起こすが、インスリン抵抗性などの代謝要素および肥満の両方に関してヒトへの橋渡しとなることができない。したがって、疾病原因の範囲（代謝撹乱−炎症反応−線維症）の両端を扱う複数の前臨床モデルが潜在的なＮＡＳＨ薬およびＡＳＨ薬の同定に必要である。
【００１２】
げっ歯類肝線維症とヒト肝線維症とを比較するときに考慮することが重要である別の要素は、誘発性線維症の部位および機能的関連性である。例えば、より短い期間の重篤な線維症モデルは、機能的関連性がより高くかつ肝臓コラーゲンの大部分を表すことが多い実質コラーゲン沈着ではなく、コラーゲンが密な大きい門脈路を表すのみである場合がある。したがって、げっ歯類モデルにおける線維症の生化学的（例えばヒドロキシプロリン）および組織学的（例えばＳｉｒｉｕｓ  Ｒｅｄ形態計測）評価の両方を組み合わせて使用することが、肝コラーゲン沈着物の量、部位および機能的関連性に関して最適である。
【００１３】
肝線維症は肝硬変に進行する可能性があり、ひいては罹患率および死亡率の大幅な増加に関連するため、ＮＡＳＨおよびＡＳＨの線維症要素を標的にする薬物を同定することは非常に重要である。それは、慢性肝臓疾患の臨床研究における主要ハードエンドポイントも表す。例えば、明らかになりつつあるデータは、ＮＡＳＨそれ自体ではなく線維症が肝臓関連死および非肝臓関連死の両方の最も重要な組織学的予測因子であることを示唆する。加えて、肝硬変は原発性肝臓がんの有力な補助因子である。したがって、ＮＡＳＨおよびＡＳＨの処置のために開発中の新薬は、確立された線維症の発症を予防するかつ／またはその進行を好転させるのに十分に強力であることが必須である。
【００１４】
Ｐｒｏｎｏｖａ  Ｂｉｏｐｈａｒｍａ  Ｎｏｒｇｅ  ＡＳのＷＯ２０１６１７３９２３Ａ１には、２−エチル−２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエニルチオ）ブタン酸（化合物Ｎ）のような硫黄含有構造修飾脂肪酸がＮＡＳＨの処置において有用であり得ることが開示されている。これは、食餌誘発性肝線維症の予防において、化合物Ｎが、ＰＰＡＲ−ガンマアゴニストであるロシグリタゾンよりも優れているという知見に基づいていた。肝臓への炎症細胞の流入を化合物Ｎが防いだことも示された。ＡＰＯＥ＊３Ｌｅｉｄｅｎ．ＣＥＴＰマウスにおいて線維症を軽減する有効性（ヒドロキシプロリン／プロリン比により測定される）を化合物Ｎが有することが示された。重要なことに、ＡＰＯＥ＊３Ｌｅｉｄｅｎ．ＣＥＴＰマウスは、ヒドロキシプロリン（ＨＹＰ）含量を評価する生化学アッセイにより測定される通り、非常に軽度の肝線維化反応（細胞外基質の２０〜３０％の増加）を起こすだけである。さらに、ＷＯ２０１６１７３９２３Ａ１（その内容は参照により本明細書に組み込まれる）に記載の特定のモデルにおいて、Ｓｉｒｉｕｓ  Ｒｅｄ（ＳＲ）形態計測により測定される肝線維症の量は、同様の実験設定を使用した以前の５件の研究に見られるよりはるかに少なかった。それらの研究では、ＳＲ形態計測により測定される線維症が、ＷＯ２０１６１７３９２３Ａ１に示された研究の１．５％と比べて、２０週間後におよそ４〜５％、２５〜３０週間後に７〜８％見られた。線維症の測定に関して、機能的関連性はより低いが量的に支配的な門脈のコラーゲンに対して、主に実質性である機能的関連性がより高いコラーゲンを過小評価する場合がある生化学的分析（ＨＹＰ）よりもＳＲ形態計測は高感度である。
【００１５】
したがって、肝線維症を予防的に処置するまたは好転させるためなど、ＮＡＳＨおよびＡＳＨを処置するための強力な薬物の必要性に基づいて、肝疾患のこれらの側面の処置において使用することができる化合物を同定するために、かつより高いレベルの線維症に対する新しい評価およびより良いモデルに基づいて影響を確認するために、いくつかの新たな研究が行われた。
【００１６】
肝線維症を予防的に処置するまたは好転させるためなど、ＮＡＳＨおよびＡＳＨを処置するための強力な薬物の必要性に基づいて、肝疾患のこれらの側面の処置において使用することができる化合物を同定するために、かつ新しい評価およびより良いモデルに基づいて影響を確認するために、いくつかの新たな研究が行われた。
【発明の概要】
【００１７】
本開示は、それを必要とする対象における非アルコール性脂肪性肝炎および／またはアルコール性脂肪性肝炎の処置の方法であって、薬学的有効量の式（ＩＩ）：
【００１８】
【化１】
2021505591.tif 000003
（式中、Ｒ１は、３〜６個の二重結合を有するＣ１０−Ｃ２２アルケニルから選択され、
Ｒ２およびＲ３は、同じかまたは異なり、水素原子、ヒドロキシ基、アルキル基、ハロゲン原子、アルコキシ基、アシルオキシ基、アシル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基、アルキルチオ基、アルコキシカルボニル基、カルボキシ基、アルキルスルフィニル基、アルキルスルホニル基、アミノ基およびアルキルアミノ基からなる置換基の群から選択され、ただし、Ｒ２およびＲ３は、シクロプロパン、シクロブタン、シクロペンタンまたはシクロヘキサンのようなシクロアルカンを形成するために連結することができ、
Ｘは、カルボン酸またはその誘導体であり、誘導体は、カルボン酸エステルなどのカルボキシレート；グリセリド；無水物；カルボキサミド；リン脂質；もしくはヒドロキシメチル；またはそれらのプロドラッグである）
の化合物またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、またはそのような塩の溶媒和物を対象に投与することを含む方法を提供する。本開示は、化合物を単剤療法としてまたは１種もしくは複数種の追加の活性薬剤と組み合わせて投与することができると規定している。
【００１９】
本開示の同等の態様は、非アルコール性脂肪性肝炎および／もしくはアルコール性脂肪性肝炎の治療的ならびに／または予防的処置における使用のための、式（ＩＩ）
【００２０】
【化２】
2021505591.tif 000004
（式中、Ｒ１は、３〜６個の二重結合を有するＣ１０−Ｃ２２アルケニルから選択され、
Ｒ２およびＲ３は、同じかまたは異なり、水素原子、ヒドロキシ基、アルキル基、ハロゲン原子、アルコキシ基、アシルオキシ基、アシル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基、アルキルチオ基、アルコキシカルボニル基、カルボキシ基、アルキルスルフィニル基、アルキルスルホニル基、アミノ基およびアルキルアミノ基からなる置換基の群から選択され、ここでＲ２およびＲ３は、シクロプロパン、シクロブタン、シクロペンタンまたはシクロヘキサンのようなシクロアルカンを形成するために連結することができ、
Ｘは、カルボン酸またはその誘導体であり、誘導体は、カルボン酸エステルなどのカルボキシレート；グリセリド；無水物；カルボキサミド；リン脂質；もしくはヒドロキシメチル；またはそれらのプロドラッグである）
の化合物またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、またはそのような塩の溶媒和物を提供する。本開示はまた、使用のための化合物を単剤療法としてまたは１種もしくは複数種の追加の活性薬剤と組み合わせて投与することができると規定している。
【００２１】
少なくとも１つの実施形態において、Ｒ２およびＲ３は、同じかまたは異なり、水素原子、アルキル基、アルコキシ基、アルケニル基からなる置換基の群から選択されてもよく；またはＲ２およびＲ３は、シクロプロパン、シクロブタン、シクロペンタンまたはシクロヘキサンのようなシクロアルカンを形成するために連結することができ、
Ｘは、カルボン酸またはその誘導体を表し、誘導体は、カルボン酸エステル、グリセリドまたはリン脂質であり、
またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、またはそのような塩の溶媒和物である。
【００２２】
とりわけ、本開示は、それを必要とする対象における非アルコール性脂肪性肝炎および／またはアルコール性脂肪性肝炎を処置する方法であって、薬学的有効量の式（Ｉ）：
【００２３】
【化３】
2021505591.tif 000005
（式中、Ｒ２およびＲ３およびＸは、式ＩＩと同様に定義される。とりわけ、
Ｒ２およびＲ３は、水素原子または直鎖、分岐鎖および／もしくは環状Ｃ１−Ｃ６アルキル基から独立して選ばれ、
Ｘは、カルボン酸またはその誘導体であり、誘導体は、カルボン酸エステル、グリセリドまたはリン脂質である）
の化合物またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、またはそのような塩の溶媒和物を対象に投与することを含む方法に関する。
【００２４】
同じく、本開示は、非アルコール性脂肪性肝炎の処置における使用のための、式（Ｉ）：
【００２５】
【化４】
2021505591.tif 000006
（式中、Ｒ２およびＲ３およびＸは、式ＩＩと同様に定義される。とりわけ、
Ｒ２およびＲ３は、水素原子または直鎖、分岐鎖および／もしくは環状Ｃ１−Ｃ６アルキル基から独立して選ばれ、
Ｘは、カルボン酸またはその誘導体であり、誘導体は、カルボン酸エステル、グリセリドまたはリン脂質である）
の化合物またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、またはそのような塩の溶媒和物を提供する。
【００２６】
本開示はまた、それを必要とする対象における非アルコール性脂肪性肝炎および／またはアルコール性脂肪性肝炎を処置する方法であって、薬学的有効量の２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタン酸（化合物Ａ）：
【００２７】
【化５】
2021505591.tif 000007
またはその薬学的に許容される塩もしくはエステルを対象に投与することを含む方法も提供する。
【００２８】
本開示はまた、非アルコール性脂肪性肝炎および／またはアルコール性脂肪性肝炎の処置における使用のための２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタン酸（化合物Ａ）またはその薬学的に許容される塩もしくはエステルも提供する。
【図面の簡単な説明】
【００２９】
【図１】ＣＤＡＡ／高脂肪食マウスモデルにおけるコラーゲン線維数（図１Ａ）、太さ（図１Ｂ）および長さ（図１Ｃ）に対する化合物Ａの影響を示す図である。
【図２】ＣＤＡＡ／高脂肪食マウスモデルにおけるトリグリセリド（ＴＧ、図２Ａ）、ジグリセリド（ＤＧ、図２Ｂ）、遊離脂肪酸（ＦＦＡ、図２Ｃ）およびコレステリルエステル（図２Ｄ）の肝脂質含量に対する化合物Ａの影響を示す図である。
【図３】化合物Ａが、ｏｂ／ｏｂ  ＡＭＬＮ給餌マウスにおいて、４週間の処置後の体重（図３Ａ）もしくは肝重量（図３Ｂ）または８週間の処置後の体重（図３Ｃ）もしくは肝重量（図３Ｄ）に対して有意な影響を与えないことを示す図である。
【図４】ｏｂ／ｏｂ  ＡＭＬＮ給餌マウスにおける肝線維化を制御する古典的遺伝子の発現に対する化合物Ａによる４週間の処置の影響を示す図である。
【図５】ｏｂ／ｏｂ  ＡＭＬＮ給餌マウスにおける細胞外基質（ＥＣＭ）安定性または線維分解を制御する遺伝子の発現に対する化合物Ａによる４週間の処置の影響を示す図である。
【図６】化合物Ａによる８週間の処置が、ｏｂ／ｏｂ  ＡＭＬＮ給餌マウスにおける肝α−ＳＭＡ（図６Ａ〜図６Ｂ）、ｃｏｌ１ａ１（図６Ｃ〜図６Ｄ）およびコラーゲン（図６Ｅ〜図６Ｆ）含量を減少させることを示す図である。
【図７】ｏｂ／ｏｂ  ＡＭＬＮ給餌マウスにおける化合物Ａによる８週間の処置が、処置前レベルとそれぞれ比較した肝α−ＳＭＡ（図７Ａ）およびｃｏｌ１ａ１（図７Ｂ）含量の減少により示される通り、活性化肝星細胞（筋線維芽細胞）の数を減少させ、線維症の縮小を誘発したことを示す図である。
【図８】１１２ｍｇ／ｋｇの化合物Ａによる４週間の処置の結果、ｏｂ／ｏｂ  ＡＭＬＮマウスにおける炎症に関連する肝遺伝子の発現がより低くなったことを示す図である。
【図９】ｏｂ／ｏｂ  ＡＭＬＮマウスにおける肝ガレクチン−３（Ｇａｌ−３）レベルに対する化合物Ａによる８週間の処置の影響を示す図である。
【図１０】肝酵素であるアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ）（図１０Ａ）およびアスパラギン酸トランスアミナーゼ（ＡＳＴ）（図１０Ｂ）のレベルにより決定される、ｏｂ／ｏｂ  ＡＭＬＮマウスにおける肝細胞傷害に対する化合物Ａによる８週間の処置の影響を示す図である。
【図１１】ｏｂ／ｏｂ  ＡＭＬＮマウスにおける面積の割合により決定された脂肪肝（図１１Ａ）、肝総脂質（図１１Ｂ）、コレステロール含量（図１１Ｃ）、血漿トリグリセリド（図１１Ｄ）およびコレステロール（図１１Ｅ）レベルに対する化合物Ａによる８週間の処置の影響を示す図である。
【図１２】ｏｂ／ｏｂ  ＡＭＬＮマウスにおける血糖コントロールに対する化合物Ａによる３週間の処置の影響を示す図である。
【図１３】ヒト肝星細胞（ＬＸ−２）に対するｉｎ  ｖｉｔｒｏでの化合物Ａの影響を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００３０】
本開示の１つの態様の文脈において記載される実施形態および特徴は本発明の他の態様にも適用されることに留意されたい。特に、本開示による非アルコール性脂肪性肝炎またはアルコール脂肪性肝炎を処置する方法に適用される実施形態は、本開示による非アルコール性脂肪性肝炎またはアルコール脂肪性肝炎すべての処置における使用のための化合物または化合物を含む組成物を対象とする側面にも適用される。いくつかの実施形態において、化合物または化合物を含む組成物は、１種または複数種の追加の活性薬剤と組み合わせて投与される。
【００３１】
本開示の特定の態様を以下でより詳しく説明する。本出願において使用され、本明細書において明らかにされる用語および定義は、本開示内における意味を表すことを意図する。
【００３２】
単数形「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」は、文脈により定められていない限り、複数の指示対象を含む。
【００３３】
「およそ」および「約」という用語は、示した数または値とほぼ同じであることを意味する。本明細書において使用されるとき、「およそ」および「約」という用語は、指定の量、頻度または値の±５％を包含すると一般に理解されるべきである。
【００３４】
「処置する」、「処置すること」および「処置」という用語は、ヒトまたは非ヒト哺乳動物に恩恵をもたらし得る任意の治療的または予防的適用を含む。ヒトの処置および獣医学的処置の両方が本開示の範囲内である。処置は既存の状態に対して応答的であり得るかまたは予防的（ｐｒｏｐｈｙｌａｃｔｉｃ）、すなわち予防的（ｐｒｅｖｅｎｔｉｖｅ）であり得る。
【００３５】
本明細書において使用される「投与する」、「投与」および「投与すること」という用語は、（１）医師もしくはその代理人のいずれかによりまたはその指示の下で、本開示による化合物もしくは組成物を提供すること、与えること、投薬することおよび／または処方すること、ならびに（２）ヒト患者もしくはその本人または非ヒト哺乳動物により、本開示による化合物もしくは組成物を投入すること、摂取することまたは消費することを指す。
【００３６】
「を予防することおよび／または治療すること」および「の治療的および／または予防的処置」という用語は同義で使用することができる。典型的には、式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物は、ＮＡＳＨまたはＡＳＨの処置、すなわち治療的処置のために使用される。しかし、あるときには、例えば、患者がＮＡＳＨもしくはＡＳＨに関連する１つまたは複数の危険因子を有する場合、式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物がＮＡＳＨまたはＡＳＨの予防的処置のために使用されることも予見される。
【００３７】
「組み合わせて投与される」および「共投与（ｃｏ−ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）」または「共投与（ｃｏａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）」という用語は同義で使用され、（ａ）式（Ｉ）もしくは（ＩＩ）の化合物またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、またはそのような塩の溶媒和物；および（ｂ）連携して一緒に、少なくとも１種の追加の活性薬剤の投与を指す。例えば、共投与は、同時投与、順次投与、重複投与、間隔投与、継続投与またはそれらの組合せであり得る。投与方法は、化合物および（１種または複数種の）追加の薬剤において異なっていてもよく、共投与は、経口、皮下、舌下、経粘膜、非経口、静脈内、動脈内、腹腔内、頬側、舌下、局所、膣、直腸、眼、耳、経鼻、吸入および経皮、またはそれらの組合せなど、任意の投与方法を含む。非経口投与の例には、静脈内（ＩＶ）投与、動脈内投与、筋肉内投与、皮下投与、骨内投与、髄腔内投与またはそれらの組合せが含まれるが、これらに限定されない。式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物および追加の活性薬剤は独立して投与することができて、例えば経口的または非経口的に投与することができる。１つの実施形態において、式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物は経口的に投与され、追加の活性薬剤は非経口的に投与される。非経口投与は注射または注入により実施することができる。いくつかの実施形態において、本開示の方法および／または使用は、少なくとも２種の異なる活性薬剤、式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物および追加の活性薬剤をそれぞれ使用するＮＡＳＨもしくはＡＳＨの治療的および／または予防的処置を対象とする。少なくとも２種の活性薬剤は、薬剤が例えば別々にパッケージされ、両方の薬剤が最適な所期の効果を実現することが必要とされる「組合せ製品」として見ることができる。
【００３８】
「薬学的有効量」という用語は、所望の薬理効果および／または治療効果を実現するのに十分な量、すなわち、その所期の目的に有効な開示化合物の量を意味する。個々の対象／患者のニーズは様々であり得るが、開示されている化合物の有効量の最適な範囲の決定は当業者の技能の範囲内である。一般に、本発明に開示されている化合物で疾患および／または状態を処置するための投与計画は、対象／患者のタイプ、年齢、重量、性別、食事などの様々な因子および／または病状に従って決定することができる。
【００３９】
「薬学的組成物」という用語は、医学的使用に適した任意の形態の本開示による化合物を意味する。
【００４０】
式（Ｉ）および（ＩＩ）の化合物は、エナンチオマー、ジアステレオマーまたはそれらの混合物を含む様々な立体異性体で存在し得る。本発明は、式（Ｉ）および（ＩＩ）の化合物のすべての光学異性体ならびにそれらの混合物を包含することが理解されるであろう。したがって、ジアステレオマー、ラセミ体および／またはエナンチオマーとして存在する式（Ｉ）および（ＩＩ）の化合物は本開示の範囲内である。
【００４１】
１つの態様において、本発明による使用のための化合物は、式（ＩＩ）
【００４２】
【化６】
2021505591.tif 000008
（式中、Ｒ１は、３〜６個の二重結合を有するＣ１０−Ｃ２２アルケニルから選択され、
Ｒ２およびＲ３は、同じかまたは異なり、水素原子、ヒドロキシ基、アルキル基、ハロゲン原子、アルコキシ基、アシルオキシ基、アシル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基、アルキルチオ基、アルコキシカルボニル基、カルボキシ基、アルキルスルフィニル基、アルキルスルホニル基、アミノ基およびアルキルアミノ基からなる置換基の群から選択されてもよく、ここでＲ２およびＲ３は、シクロプロパン、シクロブタン、シクロペンタンまたはシクロヘキサンのようなシクロアルカンを形成するために連結することができ、
Ｘは、カルボン酸またはその誘導体を表し、誘導体は、カルボン酸エステルなどのカルボキシレート；グリセリド；無水物；カルボキサミド；リン脂質；もしくはヒドロキシメチル；またはそれらのプロドラッグである）
の化合物またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、またはそのような塩の溶媒和物である。
【００４３】
１つの実施形態において、Ｒ１は、５個または６個の二重結合など、３〜６個の二重結合を有するＣ１８−Ｃ２２アルケニルであり、好ましくは、１個の二重結合がオメガ−３位にあるＣ１８−Ｃ２２アルケニルである。
【００４４】
Ｒ２およびＲ３は、より好ましくは水素原子または直鎖、分岐鎖および／もしくは環状Ｃ１−Ｃ６アルキル基から独立して選択される。１つの実施形態において、Ｒ２およびＲ３のうちの少なくとも１つは、水素原子、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、およびイソプロピル基、ブチル基またはペンチル基である。
【００４５】
Ｘは好ましくは、カルボン酸またはカルボン酸エステル；またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、またはそのような塩の溶媒和物を表す。
【００４６】
使用のための式（ＩＩ）の化合物は、単剤療法としてまたは１種もしくは複数種の追加の活性薬剤と組み合わせて投与することができる。
【００４７】
とりわけ、本開示は、それを必要とする対象における非アルコール性脂肪性肝炎またはアルコール性脂肪性肝炎を処置する方法であって、薬学的有効量の式（Ｉ）：
【００４８】
【化７】
2021505591.tif 000009
（式中、Ｒ２、Ｒ３およびＸは、式（ＩＩ）と同様に定義される）
の化合物を対象に投与することを含む方法を提供する。
【００４９】
好ましくは、式（Ｉ）の化合物に関して、Ｒ２およびＲ３は、水素原子または直鎖、分岐鎖および／もしくは環状Ｃ１−Ｃ６アルキル基から独立して選ばれ、
Ｘは、カルボン酸またはカルボン酸エステルであり；またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、またはそのような塩の溶媒和物である。
【００５０】
式（Ｉ）の化合物は、単剤療法としてまたは１種もしくは複数種の追加の活性薬剤と組み合わせて投与することができる。
【００５１】
いくつかの実施形態において、本開示は、非アルコール性脂肪性肝炎またはアルコール性脂肪性肝炎の処置における使用のための、式（Ｉ）：
【００５２】
【化８】
2021505591.tif 000010
（式中、Ｒ２、Ｒ３およびＸは、式（ＩＩ）と同様に定義される）
の化合物を提供する。
【００５３】
好ましくは、式（Ｉ）の化合物に関して、Ｒ２およびＲ３は、水素原子または直鎖、分岐鎖および／もしくは環状Ｃ１−Ｃ６アルキル基から独立して選ばれ、
Ｘは、カルボン酸またはカルボン酸エステルであり；またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、またはそのような塩の溶媒和物である。
【００５４】
Ｒ２およびＲ３が異なる場合、式（Ｉ）および式（ＩＩ）の化合物は立体異性体で存在することができる。本発明は、式（Ｉ）および式（ＩＩ）の化合物のすべての光学異性体ならびにそれらの混合物を包含することが理解されるであろう。
【００５５】
少なくとも１つの実施形態において、Ｒ２およびＲ３は、水素原子、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ブチル基およびペンチル基の群から独立して選択される。
【００５６】
少なくとも１つの実施形態において、Ｒ２およびＲ３は、水素原子、メチル基およびエチル基の群から独立して選択される。
【００５７】
少なくとも１つの実施形態において、Ｒ２およびＲ３のうちの１つは水素原子であり、Ｒ２およびＲ３のうちの他の１つは、Ｃ１−Ｃ３アルキル基から選択される。１つの実施形態において、Ｒ２およびＲ３のうちの１つは水素原子であり、Ｒ２およびＲ３のうちの他の１つは、メチル基およびエチル基の群から選択され、最も好ましくは、Ｒ２およびＲ３のうちの１つは水素原子であり、他の１つはエチル基である。
【００５８】
式Ｉおよび式ＩＩの両方の化合物に関して、Ｒ２およびＲ３は、いくつかの実施形態において、独立してＣ１−Ｃ６アルキル基である。いくつかの実施形態において、Ｒ２およびＲ３の両方がＣ１−Ｃ３アルキル基である。いくつかの実施形態において、Ｒ２およびＲ３は、同じかまたは異なり、それぞれは、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基またはイソプロピル基から独立して選択される。いくつかの実施形態において、Ｒ２およびＲ３は同じであり、一対のメチル基、一対のエチル基、一対のｎ−プロピル基または一対のイソプロピル基から選択される。少なくとも１つの好ましい実施形態において、Ｒ２およびＲ３はエチル基である。いくつかの実施形態において、Ｒ２およびＲ３のうちの１つはメチル基であり、他の１つはエチル基である。いくつかの実施形態において、Ｒ２およびＲ３のうちの１つはエチル基であり、他の１つはｎ−プロピル基である。
【００５９】
少なくとも１つの実施形態において、化合物は、エナンチオマー（ＲまたはＳ）、ジアステレオマーまたはそれらの混合物など、その様々な立体異性体で存在する。少なくとも１つの実施形態において、化合物はラセミ体で存在する。
【００６０】
式（Ｉ）による化合物が、少なくとも１つの立体中心を有する対イオンの塩または少なくとも１つの立体中心を有するアルコールのエステルである場合、化合物は複数の立体中心を有し得る。それらの状況では、本開示の化合物はジアステレオマーとして存在し得る。したがって、少なくとも１つの実施形態において、本開示の化合物は少なくとも１つのジアステレオマーとして存在する。
【００６１】
少なくとも１つの実施形態において、本開示の化合物は、２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタン酸（化合物Ａ）：
【００６２】
【化９】
2021505591.tif 000011
である。
【００６３】
少なくとも１つの実施形態において、本開示の化合物は、式：
【００６４】
【化１０】
2021505591.tif 000012
により表される、そのＳ体および／またはＲ体で存在する２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタン酸（化合物Ａ）である。
【００６５】
いくつかの実施形態において、２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタン酸（化合物Ａ）は、単剤療法として投与される。いくつかの実施形態において、２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタン酸（化合物Ａ）は、１種または複数種の追加の活性薬剤と組み合わせて投与される。
【００６６】
先述の通り、複数の非依存的および相互依存的な代謝要素、炎症性要素、最終的に線維化要素は、ヒトＮＡＳＨの発症に収束する。いかなる処置の成功も、ＮＡＳＨの複数の側面に、好ましくは上流の代謝／炎症標的を介して対処することが必要になる可能性がある。しかし、線維症発症は臨床転帰に関連するため、理想的なＮＡＳＨ治療法は、炎症性要素を標的にすべきであり、さらに理想的には、線維症の発症を軽減するまたは予防的に処置するべきでありかつ既存の線維症を好転させるべきである。含まれる例は、化合物Ａなどの酸素含有構造修飾脂肪酸の驚くべきかつ予想外に強力な抗炎症効果および抗線維化効果を示す。複数の前臨床ＮＡＳＨモデルにおいて示されたこれらの知見は、ヒト対象におけるＮＡＳＨおよびＡＳＨの治療的ならびに予防的処置における本開示の酸素含有化合物の使用を支持する。
【００６７】
例えば、ＣＤＡＡ（定義されたコリン欠乏ｌ−アミノ酸）、食餌誘発性線維症マウスモデル（より穏やかなＡＰＯＥ＊３Ｌｅｉｄｅｎ．ＣＥＴＰマウスモデルにおける細胞外基質（ＥＣＭ）の増加２０〜３０％に対してＥＣＭの増加２〜４００％）においてヒドロキシプロリン含量を評価する生化学アッセイにより測定される通り、線維症の発症を軽減するまたは予防的に処置するかつ肝線維症を好転させる活性が化合物Ａは著しく高いことが判明したのは驚くべきことであった。
【００６８】
ＣＤＡＡ誘発性ＮＡＳＨモデルにおける新規な知見はさらに、Ｓｉｒｉｕｓ  Ｒｅｄ形態計測（ＳＲ形態計測）を使用して組織学的に測定される肝線維症も化合物Ａが減少させたことであった。大血管内のコラーゲンを測定するヒドロキシプロリン（ＨＹＰ）含量の生化学的評価に対して、ＳＲ形態計測は、機能的関連性がより高い類洞コラーゲン沈着を定量化する。
【００６９】
ＮＡＳＨ関連罹患率および死亡率における線維症の中心的重要性を考えると、ＣＤＡＡ誘発性ＮＡＳＨモデルの結果は、化合物Ａなどの酸素含有構造修飾脂肪酸がＮＡＳＨ関連合併症の処置に有効であるという考えを支持する。この知見はまた、線維症関連肝遺伝子発現（Ｃｏｌ１ａ１）および炎症反応（肝ＴＮＦ−ａ遺伝子発現）の変化によって支持された。ＳＲ形態計測により測定される機能的関連性がより高い類洞コラーゲンの有意な減少はまた、ヒトＮＡＳＨにおける化合物Ａの試験および使用を支持する。
【００７０】
臨床転帰における線維症の決定的重要性にも関わらず、ＮＡＳＨの処置のための新規の効果的な薬物の規制認可は、線維症の悪化を伴わないＮＡＳＨの回復に関係する。ＮＡＳスコア要素の改善が新規化合物によって改善されることも重要である。したがって、線維症の所望の改善に加えて脂肪症、小葉炎症および肝細胞の風船様腫大が理想的に改善されるべきである。
【００７１】
別のＮＡＳＨモデルであるＳＴＡＭマウスモデルにおける新規な知見は、脂肪症および炎症の改善に加えて、化合物Ａが肝細胞の風船様腫大を改善したことであった。肝細胞の風船様腫大は通常、細胞質の希薄化を伴う、正常な肝細胞径の１．５〜２倍の細胞拡大と定義され、線維症と相関し、肝臓損傷に関連することが示されている。
【００７２】
（肝細胞肥大と定義される）細胞拡大もＡＰＯＥ＊３Ｌ．ＣＥＴＰダブルトランスジェニックマウスにおいて化合物Ａにより予防された。風船様腫大に対する肥大の定義は、ヒト肝細胞に対するげっ歯類肝細胞に特異的な組織学的差異に関する。
【００７３】
記載された抗炎症効果との組み合わせで、肝細胞の風船様腫大／肥大に関連するこれらの新規な知見は、すべてのＮＡＳスコア要素を改善し、ひいては臨床開発における肯定的な結果とその後の規制認可に寄与する化合物Ａの潜在的有用性を強調する。
【００７４】
上記および実施例に示す通り、様々な重症度の複数のＮＡＳＨげっ歯類モデルにおいて炎症性要素および線維化要素の両方を調節する化合物Ａの有効性が判明したのは驚くべきことであった。
【００７５】
ＮＡＳＨにおける適応および非適応免疫細胞動員、活性化、分化ならびに増殖の相互作用が複雑であることから、いずれか１つの炎症性パラメータへの依存により、そのような読取りの機能的意義を解釈するために、線維症の同時測定が必要になることが推察される。したがって、ＣＤＡＡモデルにおける化合物Ａの抗線維化効果は、酸素置換構造修飾脂肪酸に観察される臨床的に関連する抗炎症効果を強化し得る。
【００７６】
ＮＡＳＨの処置のための新規の効果的な薬物の規制認可は線維症の悪化を伴わないＮＡＳＨの回復に依存するため、２つの別個のＮＡＳＨげっ歯類モデルにおける化合物Ａ処置に観察される肝細胞の風船様腫大／肥大の改善も重要かつ新規な知見である（ＣＤＡＡマウスモデルにおいて測定されない風船様腫大／肥大）。
【００７７】
記載された抗炎症効果との組み合わせで、肝細胞の風船様腫大／肥大に関連するこれらの新規な知見は、すべてのＮＡＳスコア要素を改善し、ひいては臨床開発における肯定的な結果とその後の規制認可に寄与する化合物Ａの潜在的有用性を強調する。
【００７８】
重要なことに、疾病原因が異なる複数の前臨床ＮＡＳＨモデルにおいてすべてのＮＡＳスコア要素ならびに門脈路および実質の両方に関連する線維症を改善する化合物Ａなどの化合物の能力は、ヒトＮＡＳＨ対象におけるその試験を強く支持する。
【００７９】
加えて、かなりの割合のＮＡＳＨ患者が２型糖尿病も有するため、ＮＡＳＨの肥満食誘発性モデルにおける脂肪肝、炎症および線維症に対する化合物Ａなどの薬剤による処置の遅発性の影響ならびに血糖コントロールに対する影響を調査することが重要である。上述の化合物Ａの抗炎症効果、抗線維化効果および脂肪症軽減効果が肥満食誘発性ＮＡＳＨモデル（ｏｂ／ｏｂ  ＡＭＬＮ高脂肪給餌マウス）においてさらに示された。化合物Ａはまた、体重に悪影響を及ぼすチアゾリジンジオン（例えば、ピオグリタゾン）とは異なり、このモデルにおいて体重に影響を与えることなく血糖コントロールに対してプラスの影響を有していた。さらに、化合物Ａは、アラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ）およびアスパラギン酸トランスアミナーゼ（ＡＳＴ）の血漿レベルを低減させた。これは、肝細胞損傷および／または傷害が減少したことを示す。
【００８０】
これらの知見に基づいて、式（ＩＩ）の化合物または好ましくは式（Ｉ）の化合物は、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、または線維症、炎症および／もしくは肝細胞の風船様腫大によって特徴付けられる他の肝障害を処置するかつ／または好転させるために投与することができる。いくつかの実施形態において、ＮＡＳＨの処置は予防的であり得る。さらに、化合物は、ＮＡＳＨに関連する少なくとも１つの疾患、状態または危険因子を処置するために投与することができる。いくつかの実施形態において、ＮＡＳＨに関連する少なくとも１つの疾患、状態または危険因子の処置は予防的であり得る。
【００８１】
ＮＡＳＨとアルコール性脂肪性肝炎（ＡＳＨ）との間の炎症促進および線維化促進機序における類似性を鑑み、ＮＡＳＨモデルおよびｉｎ  ｖｉｔｒｏ実験における本明細書に記載の開示されている化合物の抗炎症効果および抗線維化効果は、すなわち、ＡＳＨの処置および／または好転に関連し、特に、進行の予防ならびに進行したＡＳＨおよび関連線維症の縮小の誘発に関連する。例えば、単離されたＬＸ−２（ヒト星）細胞の増殖に対するｉｎ  ｖｉｔｒｏでの化合物Ａの阻害効果は実質細胞および／またはクッパー細胞からのパラ分泌シグナル伝達に依存しなかった。これは、上流刺激がＮＡＳＨ関連またはＡＳＨ関連肝侵襲に由来するかに関わらず化合物Ａの抗線維化効果を実現することができたことを示唆する。
【００８２】
したがって、式（ＩＩ）の化合物または好ましくは式（Ｉ）の化合物は、ＡＳＨを処置するかつ／または好転させるために投与することができる。いくつかの実施形態において、ＡＳＨの処置は予防的であり得る。さらに、化合物は、ＡＳＨに関連する少なくとも１つの疾患、状態または危険因子を処置するために投与することができる。いくつかの実施形態において、ＡＳＨに関連する少なくとも１つの疾患、状態または危険因子の処置は予防的であり得る。
【００８３】
したがって、本開示は、肝線維症の発症を軽減するまたは予防的に処置するかつ既存の肝線維症を軽減する方法を包含する。本方法により、線維化領域の縮小、線維化量の減少または線維症の重症度の軽減のいずれかにより線維症が処置される。少なくとも１つの実施形態において、本方法は、肝線維症の表面積割合の低下、例えば有意な低下を実現する。少なくとも１つの実施形態において、本方法は、複合ＮＡＳスコアの低減、例えばＮＡＳスコアの有意な低減を実現する。さらに、本方法は、線維化状態の改善に加えて、小葉炎症などの肝炎症の減少；肝細胞の風船様腫大の減少；および脂肪性肝炎の減少を包含する。
【００８４】
いくつかの実施形態において、本開示の化合物は、Ｓｉｒｉｕｓ  Ｒｅｄ形態計測により決定される肝線維化面積を２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％または７０％縮小する。いくつかの実施形態において、本開示の化合物は、肝線維化面積を２０〜３０％、３０〜４０％、１０〜４０％、４０〜５０％、４０〜６０％、５０〜６０％、５０〜７０％または６０〜７０％縮小する。いくつかの実施形態において、本開示の化合物は、肝ヒドロキシプロリン含量により決定される肝線維症量を２０％、２５％、３０％、３５％または４０％減少させる。いくつかの実施形態において、本開示の化合物は、肝線維症量を２０〜３０％、２０〜２５％、２４〜３０％または３０〜４０％、３０〜３５％または３５〜４０％減少させる。いくつかの実施形態において、本開示の化合物は、肝コラーゲン含量を２０％、２５％、３０％、３５％または４０％減少させる。いくつかの実施形態において、本開示の化合物は、肝コラーゲン含量を２０〜３０％、２０〜２５％、２５〜３０％、３０〜４０％、３０〜３５％または３５〜４０％減少させる。いくつかの実施形態において、本開示の化合物は、処置前レベルと比較して肝α−ＳＭＡ含量面積を３％減少させる。
【００８５】
いくつかの実施形態において、本開示の化合物は、脂肪症を４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％または９０％減少させる。いくつかの実施形態において、本開示の化合物は、脂肪症を４０〜５０％、５０〜６０％、６０〜７０％、５０〜７０％、７０〜８０％、６０〜８０％、７０〜９０％または８０〜９０％減少させる。いくつかの実施形態において、本開示の化合物は、肝総脂質含量を２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％または５０％減少させる。いくつかの実施形態において、本開示の化合物は、肝総脂質含量を２０〜３０％、３０〜４０％または４０〜５０％減少させる。
【００８６】
いくつかの実施形態において、本開示の化合物は、肝細胞の風船様腫大を３０％、３５％、４０％、４５％または５０％減少させる。いくつかの実施形態において、本開示の化合物は、肝細胞の風船様腫大を３０〜４０％、３０〜３５％、３５〜４０％、４０〜５０％、４０〜４５％または４５〜５０％減少させる。いくつかの実施形態において、本開示の化合物は、肝細胞肥大を４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％または８０％減少させる。いくつかの実施形態において、本開示の化合物は、肝細胞肥大を４０〜５０％、５０〜６０％、６０〜７０％または７０〜８０％減少させる。いくつかの実施形態において、本開示の化合物は、ＮＡＳスコアを３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％または７０％低減させる。いくつかの実施形態において、本開示の化合物は、ＮＡＳスコアを３０〜４０％、４０〜５０％、３０〜５０％、５０〜６０％、６０〜７０％または５０〜７０％低減させる。
【００８７】
いくつかの実施形態において、本開示の化合物は、ガレクチン（Ｇａｌ−３）レベルにより決定される肝炎症を２０％、３０％または４０％減少させる。いくつかの実施形態において、本開示の化合物は、肝炎症を２０〜３０％、２０〜２５％、２５〜３０％、３０〜４０％、３０〜３５％または３５〜４０％減少させる。いくつかの実施形態において、本開示の化合物は、血漿アラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ）レベルを２０％、３５％、３０％、３５％または４０％低減させる。いくつかの実施形態において、本開示の化合物は、ＡＬＴレベルを２０〜３０％、２０〜２５％、２５〜３０％、３０〜４０％、３０〜３５％または３５〜４０％低減させる。いくつかの実施形態において、本開示の化合物は、血漿アスパラギン酸トランスアミナーゼ（ＡＳＴ）レベルを１０％、１５％または２０％低減させる。いくつかの実施形態において、本開示の化合物は、ＡＳＴレベルを１０〜１５％、１０〜２０％または１５〜２０％低減させる。
【００８８】
いくつかの実施形態において、本開示の化合物および／または本開示の化合物による処置、例えば、化合物Ａは、対照と比べて、肝生検からのＮＡＳスコア、ＭＲＩ  ＬｉｖｅｒＭｕｌｔｉＳｃａｎ評価ＰＤＦＦおよびｃＴ１、（１種または複数種の）肝臓機能検査、ＨＯＭＡ−ＩＲおよび／または炎症および線維症の（１種または複数種の）バイオマーカー（ｈｓＣＲＰ、Ｐｒｏ−Ｃ３、ＥＬＦパネルおよび他の適したバイオマーカーを含む）を改善する。
【００８９】
いくつかの実施形態において、本開示の化合物および／または本開示の化合物による処置、例えば、化合物Ａは、対照と比べて、改善、例えば、風船様腫大の減少（例えば、スコア＝０）、例えば、小葉炎症スコア０または１で線維症の悪化を伴わない改善につながる。いくつかの実施形態において、本開示の化合物および／または本開示の化合物による処置、例えば、化合物Ａは、対照と比べて、変化、例えば、肝生検からのＮＡＳスコアにおける、脂肪症、風船様腫大、炎症および線維症の個々の組織学的スコアにおける、肝臓酵素における、撮像パラメータにおけるかつ／またはバイオマーカー（ｈｓＣＲＰ、Ｐｒｏ−Ｃ３、ＥＬＦパネル、サイトカインおよび他の適したバイオマーカーを含む）におけるベースラインからの改善につながる。
【００９０】
いくつかの実施形態において、患者における本開示の化合物、例えば、化合物Ａの安全性および認容性は、対照と比べて、患者における有害事象、監視臨床検査値（血液学、生化学および検尿）、バイタルサイン（血圧、脈拍数および体温）、ｈｓＣＲＰおよび／または安静時１２誘導ＥＣＧを監視することにより評価することができる。患者における化合物Ａの薬物動態は、例えば、一定の間隔で測定された定常状態での化合物Ａの平均トラフ血漿中濃度を比較することにより調査することができる。例えば、平均トラフ血漿中濃度を８週間間隔で測定して化合物Ａの薬物動態を決定することができる。
【００９１】
以下の基準のうちの１つまたは複数を満たす患者は、同じ１つまたは複数の基準を満たさない患者と比べて、化合物Ａによる処置に対して改善された反応を示し得る：ＮＡＳＨの組織学的診断、線維症スコア１以上３以下（３０％に上限を設けたＦ１）、ＭＲＩによるＰＤＦＦ＞１０％、プロトコールへの組入れに関する以下の血液学的および生化学的基準による代償性肝臓疾患：ＡＬＴ＜５×ＵＬＮ、ＡＳＴ＞３０、ヘモグロビン＞１１ｇ／ｄＬ（女性の場合）および＞１２ｇ／ｄＬ（男性の場合）、白血球（ＷＢＣ）＞２．５Ｋ／μＬ、好中球数＞１．５Ｋ／μＬ、血小板＞１００Ｋ／μＬ、総ビリルビン＜３５μｍｏｌ／Ｌ（ただし、ジルベール症候群の設定内の非抱合型ビリルビンの場合、ビリルビン＞３５μｍｏｌ／Ｌの患者を含めることができる）、アルブミン＞３６ｇ／Ｌ、国際標準比（ＩＮＲ）＜１．４、血清クレアチニン＜１．３ｍｇ／ｄＬ（男性）もしくは＜１．１（女性）または推算糸球体濾過量≧６０ｍＬ／ｍｉｎ／１．７３ｍ２、慢性肝臓疾患（例えば、自己免疫疾患、原発性胆汁性胆管炎、ＨＢＶ、ＨＣＶ、ウィルソン病、α−１−アンチトリプシン欠乏症、ヘモクロマトーシス）の他の原因なし、ならびに／あるいは、該当する場合、安定した２型糖尿病（ＨｇｂＡ１ｃ＜９．５％および空腹時血糖症＜１０ｍｍｏｌ／Ｌ、直近６カ月における投薬の変化なし、ならびに／または直近３カ月における非代償性糖尿病に関連する新たな症状なしと定義）。
【００９２】
逆に、以下の基準のうちの１つまたは複数を満たす患者は、同じ１つまたは複数の基準を欠く患者と比べて、化合物Ａによる処置に対する反応を示さない可能性がある：持続的な過度のアルコール摂取歴、不安定な代謝状態（例えば、スクリーニング前の過去３カ月に５ｋｇを超える体重増減、過去６カ月における血糖コントロール不良の糖尿病（ＨｇｂＡ１ｃ＞９．５％）、または抗糖尿病薬もしくは抗肥満薬の導入／吸収不全性もしくは制限的肥満（減量）外科手術により定義される）、５年未満内の消化管吸収不全性肥満外科手術歴または直近６カ月におけるコルチコステロイド、高用量エストロゲン、メトトレキサート、テトラサイクリンもしくはアミオダロンを含む、脂肪肝を引き起こすことが既知の薬物の摂取歴、ＨＢ抗原＞０、ＨＣＶ  ＰＣＲ＞０（ＨＣＶ感染歴のある患者は、３年間を超えてＨＣＶ  ＰＣＲが陰性である場合、含めることができる）、またはＨＩＶ感染、インスリンで処置された１型糖尿病または２型糖尿病、糖尿病性ケトアシドーシス、空腹時トリグリセリド＞３００ｍｇ／ｄＬ、止血障害または抗凝固薬による現在の処置、不整脈歴もしくは現在の不整脈および／または心筋梗塞を含み、コントロール良好の高血圧の患者におけるものを除く心血管疾患歴、および何らかの臨床的に有意なＥＣＧ異常、ならびに／あるいはＮＡＳＨに対する活性を有することが既知である抗糖尿病薬、例えばピオグリタゾン、およびＧＬＰ−１受容体アゴニストの摂取。
【００９３】
式（Ｉ）および式（ＩＩ）の化合物は、例えば、ＰＣＴ出願ＷＯ２００９／０６１２０８、ＷＯ２０１０／１２８４０１、ＷＯ２０１１／０８９５２９、ＷＯ２０１６／１５６９１２に記載の通り、かつ以下の実施例に従って調製することができる。加えて、化合物Ａは、例えば、ＰＣＴ  ＷＯ２０１０／１２８４０１およびＷＯ２０１４／１３２１３５に記載の通り、かつ以下の実施例２に従って調製することができる。
【００９４】
以下に記載される実施例は例示であり、式（Ｉ）および式（ＩＩ）の範囲内の他の化合物に達するためにこれらの一般的な方法を適用する方法を当業者なら理解するであろう。本開示の化合物は、薬学的に許容される塩またはエステルの形態であり得る。例えば、式（Ｉ）および式（ＩＩ）の化合物は、リン脂質、グリセリドまたはＣ１−Ｃ６−アルキルエステルなどのエステルの形態であり得る。少なくとも１つの実施形態において、エステルは、グリセリドまたはＣ１−Ｃ６−アルキルエステルから選択される。少なくとも１つの実施形態において、エステルは、トリグリセリド、１，２−ジグリセリド、１，３−ジグリセリド、１−モノグリセリド、２−モノグリセリド、メチルエステル、エチルエステル、プロピルエステル、イソプロピルエステル、ｎ−ブチルエステルおよびｔｅｒｔ−ブチルエステルから選択される。少なくとも１つの実施形態において、式（Ｉ）の化合物は、メチルエステル、エチルエステル、イソプロピルエステル、ｎ−ブチルエステルまたはｔｅｒｔ−ブチルエステルとして、例えばメチルエステルまたはエチルエステルとして存在する。典型的には、式（Ｉ）により表されるエステル（例えば、エチルエステル）は消化管内で加水分解される。
【００９５】
本開示に適した塩には、ＮＨ４＋；Ｌｉ＋、Ｎａ＋、Ｋ＋、Ｍｇ２＋またはＣａ２＋などの金属イオン；ｔｅｒｔブチルアンモニウム、（３Ｓ，５Ｓ，７Ｓ）−アダマンタン−１−アンモニウム、１，３−ジヒドロキシ−２−（ヒドロキシメチル）プロパン−２−アンモニウム、プロトン化アミノピリジン（例えば、ピリジン−２−アンモニウム）などのプロトン化一級アミン；ジエチルアンモニウム、２，３，４，５，６−ペンタヒドロキシ−Ｎ−メチルヘキサン−１−アンモニウム、Ｎ−エチルナフタレン−１−アンモニウムなどのプロトン化二級アミン、４−メチルモルホリン−４−イウムなどのプロトン化三級アミン、２−ヒドロキシ−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルエタン−１−アミニウムなどのプロトン化四級アミンおよびアミノ（（４−アミノ−４−カルボキシブチル）アミノ）メタンイミニウムなどのプロトン化グアニジンまたは１Ｈ−イミダゾール−３−イウムなどのプロトン化複素環の塩が含まれるが、これらに限定されない。適した塩の追加の例には、エタン−１，２−ジアンモニウムまたはピペラジン−１，４−ジイウムなどのジプロトン化ジアミンの塩が含まれる。本開示による他の塩には、プロトン化キトサン：
【００９６】
【化１１】
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が含まれ得る。
【００９７】
少なくとも１つの実施形態において、塩は、ナトリウム塩、カルシウム塩およびコリン塩から選択される。１つの実施形態において、塩は、ナトリウム塩またはカルシウム塩である。
【００９８】
本開示は、それを必要とする対象におけるＮＡＳＨまたはＡＳＨを処置する方法であって、薬学的有効量の式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物を対象に投与することを含む方法を提供する。対象はヒトまたは非ヒト哺乳動物であり得る。本発明に開示されている化合物は、薬学的組成物中の医薬など、医薬として投与することができる。１つの態様において、本発明は、非アルコール性脂肪性肝炎の処置における使用のための、化合物Ａなどの、式（Ｉ）の化合物などの、式（ＩＩ）の化合物を含む薬学的組成物を提供する。本発明に開示されている組成物は、開示の少なくとも１つの化合物を含み、および少なくとも１つの非活性薬学的成分、すなわち、賦形剤を含んでいてもよい。非活性成分は、ファッション活性成分が使用に安全であり得、好都合であり得かつ／またはさもなければ許容され得るように、それらを適用可能かつ効果的な製剤に可溶化、懸濁、増粘、希釈、乳化、安定化、保存、保護、着色、着香する、および／または形作ることができる。賦形剤の例には、溶媒、担体、希釈剤、結合剤、充填剤、甘味料、芳香剤、ｐＨ調整剤、粘度調整剤、酸化防止剤、増量剤、保水剤、崩壊剤、溶解遅延剤、吸収促進剤、湿潤剤、吸収剤、滑沢剤、着色剤、分散剤および保存剤が含まれるが、これらに限定されない。賦形剤は、１つを超える役割もしくは機能を有し得、または１つを超える群に分類され得る；分類は、単に説明のためのものであり、限定するためのものではない。いくつかの実施形態において、例えば、少なくとも１種の賦形剤は、コーンスターチ、ラクトース、グルコース、微結晶セルロース、ステアリン酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、クエン酸、酒石酸、水、エタノール、グリセロール、ソルビトール、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、セチルステアリルアルコール、カルボキシメチルセルロースおよびハードファットなどの脂肪性物質またはそれらの適した混合物から選ばれ得る。いくつかの実施形態において、本発明に開示されている組成物は、式（Ｉ）のうちの１つなどの式（ＩＩ）の少なくとも１つの化合物と、少なくとも１種の薬学的に許容される酸化防止剤、例えば、アルファ−トコフェロール、ベータ−トコフェロール、ガンマ−トコフェロールおよびデルタ−トコフェロールなどのトコフェロールまたはそれらの混合物、２−ｔｅｒｔ−ブチル−４−ヒドロキシアニソールおよび３−ｔｅｒｔ−ブチル−４−ヒドロキシアニソールなどのＢＨＡまたはそれらの混合物ならびにＢＨＴ（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−４−ヒドロキシトルエン）またはその混合物とを含む。
【００９９】
本発明に開示されている組成物は、経口投与形態、例えば、錠剤またはゼラチン軟もしくは硬カプセルに製剤化され得る。剤形は、球形、卵形、楕円、立方体形、規則的および／または変則的な形など、経口投与に適した任意の形状のものにすることができる。当技術分野において既知の従来の製剤技術を使用して本開示による化合物を処方することができる。いくつかの実施形態において、組成物は、ゼラチンカプセル剤または錠剤の形態であり得る。
【０１００】
式（Ｉ）の化合物または式（ＩＩ）の化合物など、開示の化合物の適した１日投与量は、約５ｍｇから約２ｇなど、約５ｍｇから約４ｇの範囲であり得る。例えば、いくつかの実施形態において、一日量は、約１０ｍｇから約１．５ｇ、約５０ｍｇから約１ｇ、約１００ｍｇから約１ｇ、約１５０ｍｇから約９００ｍｇ、約５０ｍｇから約８００ｍｇ、約１００ｍｇから約８００ｍｇ、約１００ｍｇから約６００ｍｇ、約１５０から約５５０ｍｇまたは約２００から約５００ｍｇの範囲である。少なくとも１つの実施形態において、一日量は、約２００ｍｇから約６００ｍｇの範囲である。少なくとも１つの実施形態において、一日量は、約５０ｍｇ、約１００ｍｇ、約１５０ｍｇ、約２００ｍｇ、約２５０ｍｇ、約３００ｍｇ、約３５０ｍｇ、約４００ｍｇ、約４５０ｍｇ、約５００ｍｇ、約５５０ｍｇ、約６００ｍｇ、約６５０ｍｇ、約７００ｍｇ、約７５０ｍｇ、約８００ｍｇ、約８５０ｍｇまたは約９００ｍｇである。（１種または複数種の）化合物は、例えば、１日当たり１回、２回または３回投与することができる。
【０１０１】
少なくとも１つの実施形態において、式（Ｉ）の化合物は、用量当たり約２００ｍｇから約８００ｍｇの範囲の量で投与される。少なくとも１つの実施形態において、式（Ｉ）の化合物は、１日当たり１回投与される。少なくとも１つの実施形態において、式（Ｉ）の化合物は、７５０ｍｇの用量で１日当たり１回投与される。いくつかの実施形態において、式（Ｉ）の化合物は、６００ｍｇの用量で１日当たり１回投与される。いくつかの実施形態において、式（Ｉ）の化合物は、５００ｍｇの用量で１日当たり１回投与される。いくつかの実施形態において、式（Ｉ）の化合物は、３００ｍｇの用量で１日当たり１回投与される。いくつかの実施形態において、式（Ｉ）の化合物は、２５０ｍｇの用量で１日当たり１回投与される。好ましくは、式（Ｉ）の化合物は、３００ｍｇまたは６００ｍｇの用量で１日当たり１回投与される。
【０１０２】
少なくとも１つの実施形態において、式（ＩＩ）の化合物は、用量当たり約２００ｍｇから約８００ｍｇの範囲の量で投与される。少なくとも１つの実施形態において、式（ＩＩ）の化合物は、１日当たり１回投与される。少なくとも１つの実施形態において、式（ＩＩ）の化合物は、７５０ｍｇの用量で１日当たり１回投与される。いくつかの実施形態において、式（ＩＩ）の化合物は、６００ｍｇの用量で１日当たり１回投与される。いくつかの実施形態において、式（ＩＩ）の化合物は、５００ｍｇの用量で１日当たり１回投与される。いくつかの実施形態において、式（ＩＩ）の化合物は、３００ｍｇの用量で１日当たり１回投与される。いくつかの実施形態において、式（ＩＩ）の化合物は、２５０ｍｇの用量で１日当たり１回投与される。好ましくは、式（ＩＩ）の化合物は、３００ｍｇまたは６００ｍｇの用量で１日当たり１回投与される。
【０１０３】
本開示によれば、式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物は、単剤療法としてまたは１種もしくは複数種の追加の活性薬剤と組み合わせて投与することができる。共投与に関して、追加の活性薬剤は、好ましくは、薬物などの治療的活性薬剤であり、好ましくは、ＮＡＳＨもしくはＡＳＨの発症および／または悪化に関与する因子のうちの１つまたは複数に対する治療効果など、ＮＡＳＨまたはＡＳＨに対する治療効果を有する。好ましくは、組合せ製品、すなわち、１種または複数種の追加の活性薬剤と組み合わせた式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物の使用は、ＮＡＳＨもしくはＡＳＨの予防および／または治療に対する相乗効果を有する。１つの実施形態において、１種または複数種の追加の療法剤は、アロステリックアセチル−ＣｏＡカルボキシラーゼ（ＡＣＣ）阻害剤、アンジオテンシンＩＩ受容体アンタゴニスト、アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤、アポトーシスシグナル制御キナーゼ−１（ＡＳＫ１）阻害剤、カスパーゼ阻害剤、カテプシンＢ阻害剤、ＣＣＲ２ケモカインアンタゴニスト、ＣＣＲ５ケモカインアンタゴニスト、クロライドチャネル刺激剤、コレステロール可溶化剤、ジアシルグリセロールＯ−アシルトランスフェラーゼ１（ＤＧＡＴ１）阻害剤、ジペプチジルペプチダーゼＩＶ（ＤＰＰ  ＩＶ）阻害剤、線維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ）−２１アゴニスト、ファルネソイドＸ受容体（ＦＸＲ）アゴニスト、抗ＣＤ３  ｍＡｂ、ガレクチン−３阻害剤、グルカゴン様ペプチド１（ＧＬＰ１）アゴニスト、グルタチオン前駆体、Ｃ型肝炎ウイルスＮＳ３プロテアーゼ阻害剤、ＨＭＧ  ＣｏＡ還元酵素阻害剤、１  Ｉβ−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ（Ｉ  Ｉβ−ＨＳＤＩ）阻害剤、熱ショックタンパク質（Ｈｓｐ）４７阻害剤、ＩＬ−Ｉβアンタゴニスト、ＩＬ−６アンタゴニスト、ＩＬ−１０アゴニスト、ＩＬ−１７アンタゴニスト、回腸ナトリウム胆汁酸共輸送体阻害剤、レプチンアナログ、５−リポキシゲナーゼ阻害剤、ＬＰＬ遺伝子刺激剤、リシルオキシダーゼホモログ２（ＬＯＸＬ２）阻害剤、リゾホスファチジン酸１（ＬＰＡ１）受容体アンタゴニスト、オメガ−３脂肪酸、ＰＤＥ３阻害剤、ＰＤＥ４阻害剤、ホスホリパーゼＣ（ＰＬＣ）阻害剤、ＰＰＡＲａアゴニスト、ＰＰＡＲｙアゴニスト、ＰＰＡＲ５アゴニスト、組換えヒトペントラキシン−２タンパク質（ＰＲＦ−１）、Ｒｈｏ関連プロテインキナーゼ２（ＲＯＣＫ２）阻害剤、セミカルバジド感受性アミンオキシダーゼ（ＳＳＡＯ）阻害剤、ナトリウムグルコース輸送体−２（ＳＧＬＴ２）阻害剤、ステアロイルＣｏＡデサチュラーゼ−１阻害剤、甲状腺ホルモン受容体βアゴニスト、腫瘍壊死因子α（ＴＮＦα）リガンド阻害剤、トランスグルタミナーゼ阻害剤、トランスグルタミナーゼ阻害剤前駆体および低分子活性化ＲＮＡ（ｓａＲＮＡ）の群から独立して選択される。
【０１０４】
特に、いくつかの実施形態において、１種または複数種の追加の活性薬剤は、グルカゴン様ペプチド１（ＧＬＰ−１）アゴニスト；ジペプチジルペプチダーゼ阻害剤（ＤＰＰ−４アンタゴニスト）およびオメガ−３（ｎ−３）脂肪酸の群から選択される。
【０１０５】
ＧＬＰ−１受容体アゴニストまたはインクレチンミメティクスとしても既知のグルカゴン様ペプチド−１受容体アゴニストはＧＬＰ−１受容体のアゴニストである。このクラスの薬物は、典型的には２型糖尿病の処置のために使用される。ＧＬＰ−アゴニストの非限定的な例のリストには、エキセナチド、リラグルチド、リキシセナチド、アルビグルチド、デュラグルチド、タスポグルチドおよびセマグルチドが含まれる。
【０１０６】
いくつかの実施形態において、追加の活性薬剤はジペプチジルペプチダーゼ阻害剤（ＤＰＰ−４アンタゴニスト）である。ＤＰＰ−４アンタゴニストは、ＤＰＰ−４（ＤＰＰ−ＩＶ）を遮断する経口血糖降下薬の一クラスである。それらは２型真性糖尿病を処置するために使用することができる。グルカゴンは血糖値を上昇させ、ＤＰＰ−４阻害剤はグルカゴン値および血糖値を低下させる。ＤＰＰ−４阻害剤の機序は、インクレチンレベル（ＧＬＰ−１およびＧＩＰ）を上昇させ、これがグルカゴン放出を阻害し、ひいてはインスリン分泌を増加させ、胃内容排出を減少させ、血糖値を低下させるというものである。ジペプチジルペプチダーゼ阻害剤の非限定的な例のリストには、シタグリプチン、ビルダグリプチン、サキサグリプチン、リナグリプチン、ゲミグリプチン、アナグリプチン、テネリグリプチン、アログリプチン、トレラグリプチン、オマリグリプチン、エボグリプチン、デュトグリプチンが含まれる。
【０１０７】
いくつかの実施形態において、追加の薬剤はオメガ−３脂肪酸である。追加の活性薬剤がオメガ−３脂肪酸であるとき、オメガ−３脂肪酸は、典型的には長鎖多価不飽和オメガ−３脂肪酸（ＬＣ  ｎ−３  ＰＵＦＡ）である。好ましくは、これは、（全Ｚオメガ−３）−５，８，１１，１４，１７−エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）および（全Ｚオメガ−３）−４，７，１０，１３，１６，１９−ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）またはそれらの誘導体のうちの少なくとも１つを含む。ＥＰＡおよびＤＨＡなどのｎ−３  ＰＵＦＡは異なる形態であり得、遊離脂肪酸型；Ｃ１−Ｃ４アルキルエステルなどのエステル化型、好ましくはエチルエステル；リン脂質；モノ／ジ／トリグリセリド；およびそれらの塩のうちの少なくとも１つで提供される。オメガ−３脂肪酸は、経口投与用組成物などの組成物の形態で提供され得る。そのような組成物は、少なくとも５０％、６０％、７０％または８０％など、少なくとも４０％の活性オメガ−３脂肪酸を含み得る。いくつかの実施形態において、追加の活性薬剤は、ＥＰＡおよびＤＨＡのうちの少なくとも１つを、好ましくはエチルエステル型で少なくとも７０％の濃度で含む組成物である。
【０１０８】
いくつかの実施形態において、１種または複数種の追加の活性薬剤は、アセチルサリチル酸、アリポジーンチパルボベック、アラムコール、アトルバスタチン、ＢＩ  １４６７３３５、ＢＬＸ−１００２、ＢＭＳ−９８６０３６、ＢＭＳ−９８６０２０、セニクリビロック、コビプロストン、コレセベラム、エムリカサン、エナラプリル、フォラムラブ（ｆｏｒａｍｕｌａｂ）、ＧＦＴ−５０５、ＧＲ−ＭＤ−０２、ＧＳ−０９７６、ＧＳ−９６７４、ヒドロクロロチアジド、イコサペントエチルエステル（エイコサペンタエン酸エチル、ＥＰＡエチルエステル）、ＩＭＭ−１２４Ｅ、ＩＶＡ３３７、Ｋ−８７７、ＫＤ−０２５、リナグリプチン、リラグルチド、メルカプタミン、ＭＧＬ−３１９６、ＮＤ−Ｌ０２−ｓ０２０１、オベチコール酸、オレソキシム、ｐｅｇ−イロデカキン、ピオグリタゾン、ＰＲＭ−１５１、ＰＸ−１０２、レモグリフロジンエタボネート、セロンセルチブ、シムツズマブ、ＳＨＰ−６２６、ソリスロマイシン、チペルカスト、ＴＲＸ−３１８、ウルソデオキシコール酸およびＶＢＹ−３７６の群から独立して選択される。組合せ製品の第１の要素、すなわち、式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物は、上述のいずれかの方法で投与または製剤化され得る。組合せ製品の第２の要素、追加の活性薬剤は、薬剤のタイプに適するように製剤化され得、薬剤の投与方法を含むいくつかの因子に依存する。追加の活性薬剤の用量は、選択された薬剤のタイプに依存し、特定の薬剤に認可された量に従うべきである。実施例に記載の通り、ＣＤＡＡ（定義されたコリン欠乏ｌ−アミノ酸）食餌誘発性ＮＡＳＨモデルの使用は、肝線維症および炎症の両方のモデルを提供する。例によって支持される通り、ＧＬＰ−１アゴニストと化合物Ａなどの式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物との組合せは、ＧＬＰ−１単独による処置と比較して、ＮＡＳＨ関連線維症および炎症のための優れた効果を有する。肝線維症は大部分が炎症反応に対する応答であるため、これも、ＧＬＰ−１アゴニスト単独に対してＧＬＰ−１アゴニストと組み合わせた酸素含有構造修飾脂肪酸（化合物Ａ）の優位性を示す炎症関連肝遺伝子発現（ＴＮＦ−α）の示された変化によって支持される。全体的に、データは、ＧＬＰ−１アゴニスト（またはあるいはＤＰＰ−４アンタゴニスト）と本開示の化合物との組合せによって肝炎症および線維症の両方の治療のための相乗効果が得られることを示唆する。
【０１０９】
脂肪肝はそれ自体良性の状態である可能性があるが、炎症反応を誘導する他の因子からの「第２の攻撃」に対して肝臓を感受性にさせる可能性がある。したがって、脂肪症の軽減は、他のまたは連続性の肝侵襲の潜在的な「プライミング」因子としてのＮＡＳスコアおよびＮＡＳＨの回復の両方へのその寄与に関して望ましい。高用量オメガ−３エチルエステルと低用量の酸素含有構造修飾脂肪酸（化合物Ａ）との組合せにより達成される肝脂質の新規かつ顕著な改善は相乗効果が得られることを強く示唆し、特にその理由は、どちらの化合物もＡｐｏＥ＊３Ｌ−ＣＥＴＰトランスジェニックマウスにおいて肝トリグリセリド（ＴＧ）の有意な減少を単独では達成しなかったからである。
【０１１０】
著しいことに、化合物Ａは、わずかな用量のオメガ−３エチルエステルで、ＡＰＯＥ＊３．ＣＥＴＰトランスジェニックマウスの肝臓内でオメガ−３エチルエステルの１０個未満に対して１０９４個超の遺伝子発現プローブを有意に上方制御または下方制御した（データは非掲載）。理論によって制限されることなく、肝トランスクリプトームに対するこの多岐にわたる効果は、観察される相乗効果が累積用量効果よりはむしろ様々な経路の標的化に二次的であることを示唆している可能性がある。肝コレステロール含量に対する有意な影響は、ＮＡＳＨおよびＡＳＨの病因に関連する炎症反応に対するプラスの影響も有し得る。全体的に、ＡＰＯＥ＊３．ＣＥＴＰマウスにおけるデータは、脂肪肝を減少させるための、したがってＮＡＳＨおよび／またはＡＳＨの処置のための強力な治療法として、ＥＰＡエチルエステルなどのオメガ−３  ＰＵＦＡ製剤と式（Ｉ）または（ＩＩ）による酸素含有構造修飾脂肪酸との組合せを支持する。
【０１１１】
式（ＩＩ）の化合物または好ましくは式（Ｉ）の化合物は、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）またはアルコール性脂肪性肝炎（ＡＳＨ）を処置するかつ／または好転させるために単剤療法としてまたは少なくとも１種の追加の活性薬剤と組み合わせて投与することができる。いくつかの実施形態において、少なくとも１種の追加の活性薬剤はＧＬＰ−１アゴニストである。加えて、ＡＰＯＥ＊３．ＣＥＴＰトランスジェニックマウスにおける知見に基づいて、式（ＩＩ）の化合物または好ましくは式（Ｉ）の化合物は、脂肪肝（トリグリセリドおよび／またはコレステロール含量）を治療的および／もしくは予防的に処置するかつ／または好転させるために少なくとも１種の追加の活性薬剤と組み合わせて投与することができる。いくつかの実施形態において、少なくとも１種の追加の活性薬剤は、オメガ３  ＰＵＦＡエチルエステルなどのオメガ−３脂肪酸である。
【０１１２】
上述の例は、ＮＡＳＨおよび／またはＡＳＨの処置のための、いくつかの他の活性薬剤と組み合わせられる酸素含有構造修飾脂肪酸の可能性を強調する。これらの組合せは、単剤療法に対して有効性に関連する結果を改善し得るだけでなく、安全性も改善し得る。後者の一例として、化合物Ａは、ＡＰＯＥ＊３．ＣＥＴＰマウスにおいてＣＥＴＰ発現を有意に減少させ、げっ歯類およびヒトの両方において脂質プロファイルを改善することが示された。これは、ＡＰＯＥ＊３．ＣＥＴＰマウスおよびヒトの両方において化合物Ａとは対照的にＣＥＴＰ発現を増加させ、脂質プロファイルを悪化させるオベチコール酸（ＦＸＲアゴニスト）との組合せに有利であり得る。
【０１１３】
本発明者らは、２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタン酸などの式（Ｉ）の化合物が著しく良好な薬学的活性を有することを見出した。驚くべきことに、本発明に開示されている式（Ｉ）の化合物は、グルカゴン様ペプチド１受容体（ＧＬＰ−１Ｒ）アゴニストと比べて、ＮＡＳＨ関連肝線維症および炎症を処置するための改善された生物活性を示す。式（Ｉ）の化合物はまた、追加の活性薬剤と組み合わせて投与されたとき、おそらく相乗効果を示す。
【実施例】
【０１１４】
本開示は、以下の非限定的な例によりさらに説明され、そこでは、適切な場合、当業者に既知の標準的な技術およびこれらの例に記載の技術と類似の技術が使用され得る。本明細書に記載の本開示と一貫した追加の実施形態を当業者なら想定するであろうことが理解される。
【０１１５】
他に記載されていない限り、反応は、室温で、典型的には１８〜２５℃の間の範囲内で無水条件下、ＨＰＬＣグレードの溶媒を用いて行った。蒸発は真空中で回転蒸発により行った。カラムクロマトグラフィーは、シリカゲル４０〜６３μｍ（Ｍｅｒｃｋ）によるフラッシュ法により、またはプレパックシリカゲルカラム「ＭｉｎｉＶａｒｉｏＦｌａｓｈ」、「ＳｕｐｅｒＶａｒｉｏＦｌａｓｈ」、「ＳｕｐｅｒＶａｒｉｏＰｒｅｐ」もしくは「ＥａｓｙＶａｒｉｏＰｒｅｐ」（Ｍｅｒｃｋ）を使用するＡｒｍｅｎ  Ｓｐｏｔｆｌａｓｈにより実施した。核磁気共鳴（ＮＭＲ）シフト値は、Ｂｒｕｋｅｒ  Ａｖａｎｃｅ  ＤＰＸ  ２００または３００装置で以下に記載のピーク多重度を用いて記録した：ｓ、一重線；ｄ、二重線；ｄｄ、二重二重線；ｔ、三重線；ｑ、四重線；ｐ、五重線；ｍ、多重線；ｂｒ、ブロード。質量スペクトルはＬＣ／ＭＳ分光装置を用いて記録した。分離は、Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００シリーズモジュールを使用して、Ｅｃｌｉｐｓｅ  ＸＤＢ−Ｃ１８  ２．１×１５０ｍｍカラムで勾配溶離により実施した。溶離液として０．０１％トリフルオロ酢酸または０．００５％ギ酸ナトリウムを含む緩衝液中の５〜９５％アセトニトリルの勾配を使用した。質量スペクトルは、Ｇ１９５６Ａ質量分析計（エレクトロスプレー、３０００Ｖ）を用いて正および負イオン化モードを切り替えて記録した。報告される収率は例示であり、必ずしも達成可能な最大収率を表さない。
【０１１６】
化合物の調製
【実施例１】
【０１１７】
ｔｅｒｔ−ブチル２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イルオキシ）ブタノエートの調製
【０１１８】
【化１２】
2021505591.tif 000014
テトラブチルアンモニウムクロリド（０．５５ｇ、１．９８ｍｍｏｌ）を、窒素下室温のトルエン（３５ｍＬ）中の（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−オール（３．５０ｇ、１２．１ｍｍｏｌ）の溶液に加えた。水酸化ナトリウムの水性溶液（５０％（ｗ／ｗ）、１１．７ｍＬ）を室温で激しく撹拌しながら加え、続いてｔ−ブチル２−ブロモブチレート（５．４１ｇ、２４．３ｍｍｏｌ）を加えた。生じた混合物を５０℃まで加熱し、追加のｔブチル２−ブロモブチレートを１．５時間後（２．７０ｇ、１２．１ｍｍｏｌ）、３．５時間後（２．７０ｇ、１２．１ｍｍｏｌ）および４．５時間後（２．７０ｇ、１２．１ｍｍｏｌ）に加え、合計１２時間撹拌した。室温まで冷却した後、氷水（２５ｍＬ）を加え、生じた２つの相を分離した。有機相をＮａＯＨ（５％）および塩水の混合物で洗い、乾燥（ＭｇＳＯ４）し、濾過し、濃縮した。ヘプタンおよび酢酸エチルの極性漸増混合物（１００：０→９５：５）を溶離液として使用して、シリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィーにより残留物を精製した。適切な画分を濃縮して、１．８７ｇ（収率３６％）の表題化合物をオイルとして得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 0.85-1.10 (m, 6H), 1.35-1.54 (m, 11H), 1.53-1.87 (m, 4H), 1.96-2.26 (m, 4H), 2.70-3.02 (m, 8H), 3.31 (dt, 1H), 3.51-3.67 (m, 2H), 5.10-5.58 (m, 10H).
【実施例２】
【０１１９】
２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエニルオキシ）ブタン酸（化合物Ａ）の調製
【０１２０】
【化１３】
2021505591.tif 000015
ｔｅｒｔ−ブチル２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イルオキシ）ブタノエート（１９．６ｇ、４５．５ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（２００ｍＬ）に溶解し、窒素下に置いた。トリフルオロ酢酸（５０ｍＬ）を加え、反応混合物を室温で１時間撹拌した。水を加え、水性相をジクロロメタンで２回抽出した。合わせた有機抽出物を塩水で洗い、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、濃縮した。ヘプタン、酢酸エチルおよびギ酸の極性漸増混合物（９０：１０：１→８０：２０：１）を溶離液として使用して、シリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィーに残留物をかけた。適切な画分を濃縮して、１２．１ｇ（収率７１％）の表題化合物をオイルとして得た。1H-NMR (300 MHz, CDCl3): δ 0.90-1.00 (m, 6H), 1.50 (m, 2H), 1.70 (m, 2H), 1.80 (m, 2H), 2.10 (m, 4H), 2.80-2.90 (m, 8H), 3.50 (m, 1H), 3.60 (m, 1H), 3.75 (t, 1H), 5.30-5.50 (m, 10H); MS (エレクトロスプレー): 373.2 [M-H]-.
【実施例３】
【０１２１】
カルシウム２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタノエートの調製
【０１２２】
【化１４】
2021505591.tif 000016
２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタン酸（１．８７ｇ、４．９９ｍｍｏｌ、９３％）をＣａＣＯ３（０．２５ｇ、２．５０ｍｍｏｌ）と混合した。水（１ｍｌ）を加え、混合物を機械的撹拌により室温で１時間撹拌した。ＣＯ２が発生する。密で均質なパスタが生成した。撹拌しながら、アセトン（７ｍｌ）を加えた。固体材料が分離する。固体材料を濾別し、窒素で乾燥し、密封し、４℃の冷蔵庫内で保管した。収量：１．８６グラム（９５％）。固体は分析法または分光法によってさらに特徴付けなかったが、カルシウム塩が生成したことを示す少数の実験を実施した：
・固体材料は、１００℃未満のホットプレート上で溶融する。はっきりした融点は決定されなかった
・材料は、酸を加えてもＣＯ２を放出しないが、「溶解」し、オイルとして析出する
【実施例４】
【０１２３】
ナトリウム２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタノエートの調製
【０１２４】
【化１５】
2021505591.tif 000017
２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタン酸（１．８７ｇ、４．９９ｍｍｏｌ、９３％）をＮａＨＣＯ３（０．４２０ｇ、５．００ｍｍｏｌ）と混合した。水（１ｍｌ）を加え、混合物を機械的撹拌により室温で１時間撹拌した。ＣＯ２が発生し、密で均質なパスタが生成した。撹拌しながら、エタノール（７ｍｌ）を反応フラスコに加えた。２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタン酸から生成されるナトリウム塩は、エタノール（７ｍｌ）を加えると溶液に溶けていく。少量の未反応のＮａＨＣＯ３を濾別し、溶液を蒸発乾固した。わずかに粘性のある粗オイルを９６％エタノールと共に２回蒸発させ、微量の水を除去した。
【実施例５】
【０１２５】
２−ヒドロキシ−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルエタン−１−アミニウム２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタノエートの調製
【０１２６】
【化１６】
2021505591.tif 000018
ＭＴＢＥ約２．５ｍＬおよび７．５ｍＬのｎ−ヘプタンが入ったシンチレーションバイアルに水中のコリンヒドロキシド（３２７．７μＬ）をピペットで入れた。窒素チャンバー内で、２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタン酸（５００ｍｇ、９５．８％）をバイアル内に移した。窒素チャンバー内で約１．０ｍＬの水をバイアルに撹拌下でゆっくりと加えた。次いで、バイアルを密封した。反応混合物を約３０分間撹拌した。生成した２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタン酸コリン塩は硬いゲル状の材料であり、これをブフナー漏斗で濾過した。１ｍＬのＭＴＢＥを使用してフィルター上の湿った材料を３回洗った。洗った材料は硬いゲル状の固体に見えた。
【実施例６】
【０１２７】
（４Ｓ，５Ｒ）−３−（（Ｓ）−２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエニルオキシ）ブタノイル）−４−メチル−５−フェニルオキサゾリジン−２−オンおよび（４Ｓ，５Ｒ）−３−（（Ｒ）−２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエニルオキシ）ブタノイル）−４−メチル−５−フェニルオキサゾリジン−２−オンの調製
【０１２８】
【化１７】
2021505591.tif 000019
ＤＭＡＰ（１．１０ｇ、８．９０ｍｍｏｌ）およびＤＣＣ（１．９０ｇ、９．３０ｍｍｏｌ）を、窒素下０℃に保った乾燥ジクロロメタン（１００ｍＬ）中の２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエニルオキシ）ブタン酸（３．２０ｇ、８．５０ｍｍｏｌ）の混合物に加えた。生じた混合物を０℃で２０分間撹拌した。（４Ｓ，５Ｒ）−４−メチル−５−フェニルオキサゾリジン−２−オン（１．５０ｇ、８．５０ｍｍｏｌ）を加え、生じた濁った混合物を周囲温度で５日間撹拌した。混合物を濾過し、減圧下で濃縮して、所望の生成物を含む粗生成物を２種のジアステレオマーの混合物として得た。ヘプタン中の１５％酢酸エチルを溶離液として使用して、シリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィーにより残留物を精製した。２種のジアステレオマーを分離し、適切な画分を濃縮した。（４Ｓ，５Ｒ）−３−（（Ｓ）−２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエニルオキシ）ブタノイル）−４−メチル−５−フェニルオキサゾリジン−２−オンが最初に溶離し、オイルとして１．１ｇ（収率４０％）得られた。（４Ｓ，５Ｒ）−３−（（Ｒ）−２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエニルオキシ）ブタノイル）−４−メチル−５−フェニルオキサゾリジン−２−オンがオイルとして０．９５ｇ（収率３４％）得られた。
【０１２９】
（４Ｓ，５Ｒ）−３−（（Ｓ）−２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエニルオキシ）ブタノイル）−４−メチル−５−フェニルオキサゾリジン−２−オン（Ｅ１）：1H-NMR (300 MHz, CDCl3): δ 0.90 (d, 3H), 1.00 (t, 3H), 1.07 (t, 3H), 1.45-1.57 (m, 2H), 1.62-1.76 (m, 3H), 1.85-1.95 (m, 1H), 2.05-2.15 (m, 4H), 2.87 (m, 8H), 3.39 (m, 1H), 3.57 (m, 1H), 4.85-4.92 (m, 2H), 5.30-5.45 (m, 10H), 5.75 (d, 1H), 7.32 (m, 2H), 7.43 (m, 3H).
【０１３０】
（４Ｓ，５Ｒ）−３−（（Ｒ）−２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエニルオキシ）ブタノイル）−４−メチル−５−フェニルオキサゾリジン−２−オン（Ｅ２）：1H-NMR (300 MHz, CDCl3): δ 0.98 (d, 3H), 0.99 (t, 3H), 1.08 (t, 3H), 1.40-1.52 (m, 2H), 1.55-1.75 (m, 3H), 1.80-1.90 (m, 1H), 2.05-2.15 (m, 4H), 2.84 (m, 8H), 3.39 (m, 1H), 3.56 (m, 1H), 4.79 (五重線, 1H), 4.97 (dd, 1H), 5.30-5.45 (m, 10H), 5.71 (d, 1H), 7.33 (m, 2H), 7.43 (m, 3H).
【実施例７】
【０１３１】
（Ｓ）−２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエニルオキシ）ブタン酸の調製
【０１３２】
【化１８】
2021505591.tif 000020
過酸化水素（水中３５％、０．７５ｍＬ、８．５４ｍｍｏｌ）および水酸化リチウム一水和物（０．１８ｇ、４．２７ｍｍｏｌ）を、窒素下０℃に保ったテトラヒドロフラン（１２ｍＬ）および水（４ｍＬ）中の（４Ｓ，５Ｒ）−３−（（Ｓ）−２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエニルオキシ）ブタノイル）−４−メチル−５−フェニルオキサゾリジン−２−オン（１．１０ｇ、２．１３ｍｍｏｌ）の溶液に加えた。反応混合物を０℃で３０分間撹拌した。１０％  Ｎａ２ＳＯ３（ａｑ）（３０ｍＬ）を加え、ｐＨを２Ｍ  ＨＣｌで〜２に調整し、混合物をヘプタン（３０ｍＬ）で２回抽出した。合わせた有機抽出物を乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、濃縮した。ヘプタンおよび酢酸エチルの極性漸増混合物（９８：８→１：１）を溶離液として使用して、シリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィーに残留物をかけた。適切な画分を濃縮して、０．４８ｇ（収率６０％）の表題化合物をオイルとして得た。1HNMR (300 MHz, CDCl3): δ 0.90-1.00 (m, 6H), 1.48 (m, 2H), 1.65 (m, 2H), 1.85 (m, 2H), 2.10(m, 4H), 2.80-2.90 (m, 8H), 3.55 (m, 1H), 3.60 (m, 1H), 3.88 (t, 1H), 5.35-5.45 (m, 10H); MS (エレクトロスプレー): 373.3 [M-H]-; [α]D -37° (c=0.104, エタノール).
【実施例８】
【０１３３】
（Ｒ）−２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエニルオキシ）ブタン酸の調製
【０１３４】
【化１９】
2021505591.tif 000021
過酸化水素（水中３５％、０．６５ｍＬ、７．３７ｍｍｏｌ）および水酸化リチウム一水和物（０．１５ｇ、３．６９ｍｍｏｌ）を、窒素下０℃に保ったテトラヒドロフラン（１２ｍＬ）および水（４ｍＬ）中の（４Ｓ，５Ｒ）−３−（（Ｒ）−２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエニルオキシ）ブタノイル）−４−メチル−５−フェニルオキサゾリジン−２−オン（０．９５ｇ、１．８４ｍｍｏｌ）の溶液に加えた。反応混合物を０℃で３０分間撹拌した。１０％  Ｎａ２ＳＯ３（ａｑ）（３０ｍＬ）を加え、ｐＨを２Ｍ  ＨＣｌで２に調整し、混合物をヘプタン（３０ｍＬ）で２回抽出した。合わせた有機抽出物を乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、濃縮した。ヘプタンおよび酢酸エチルの極性漸増混合物（９８：８→５０：５０）を溶離液として使用して、シリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィーに残留物をかけた。適切な画分を濃縮して、０．１９ｇ（収率２９％）の表題化合物をオイルとして得た。1H-NMR (300 MHz, CDCl3): δ 0.90-1.00 (m, 6H), 1.48 (m, 2H), 1.65 (m, 2H), 1.85 (m, 2H), 2.10 (m, 4H), 2.80-2.90 (m, 8H), 3.55 (m, 1H), 3.60 (m, 1H), 3.88 (t, 1H), 5.35-5.45 (m, 10H); MS (エレクトロスプレー): 373.3 [M-H]-; [α]D -31° (c=0.088, エタノール).
【実施例９】
【０１３５】
エチル２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタノエートの調製
【０１３６】
【化２０】
2021505591.tif 000022
ジシクロヘキシルメタンジイミン（ＤＣＣ）（３０４ｍｇ、１．４７ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジメチルピリジン−４−アミン（ＤＭＡＰ）（１０ｍｇ、０．０６７ｍｍｏｌ）を、Ｎ２雰囲気下０℃のジクロロメタン（ＤＣＭ）（４ｍＬ）中の２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタン酸（５０１．３ｍｇ、１．３３５ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に加えた。混合物を５分間撹拌した後、エタノール（ＥｔＯＨ）（０．１６ｍＬ、２．６７ｍｍｏｌ）を加えた。生じた混合物を室温で２０時間撹拌した。次第にヘプタンおよび酢酸エチルの混合物（１００：０→９９：１）を溶離液として使用して、シリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィーにより反応混合物を精製した。適切な画分を濃縮して、４７３ｍｇ（収率８８％）の表題化合物をオイルとして得た。1H NMR (300 MHz, クロロホルム-d) δ 0.95 (2 x t, 6H), 1.37-1.48 (m, 2H), 1.54-1.79 (m, 4H), 2.01-2.10 (m, 4H), 2.77-2.84 (m, 8H), 3.27-3.34 (m, 1H), 3.53-3.60 (m, 1H), 3.69-3.73 (dd, 1H), 4.13-4.24 (m, 2H), 5.25-5.33 (m, 10H), MS (エレクトロスプレー); 425.3 [M+Na]+; HRMS (エレクトロスプレー): 実測値425.3021 [M+Na]+, [C26H42O3+Na]+の計算値425.3031.
【実施例１０】
【０１３７】
イソプロピル２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタノエートの調製
【０１３８】
【化２１】
2021505591.tif 000023
ＤＣＣ（３１０ｍｇ、１．４７ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（９ｍｇ、０．０６７ｍｍｏｌ）を、Ｎ２雰囲気下０℃のＤＣＭ（４ｍＬ）中の２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタン酸（５０１ｍｇ、１．３３５ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に加えた。混合物を５分間撹拌した後、イソプロパノール（ｉＰｒＯＨ）（０．１６ｍＬ、２．６７ｍｍｏｌ）を加えた。生じた混合物を室温で２０時間撹拌した。混合物を濾過し、真空中で濃縮した。残留物にヘプタン（５０ｍＬ）を加え、濾過し、真空中で濃縮した。ヘプタン中の１％酢酸エチルを溶離液として使用して、シリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィーにより残留物を精製した。適切な画分を濃縮して、４９６ｍｇ（収率８９％）の表題化合物をオイルとして得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 0.97 (2 x t, 6H), 1.25 (m, 6H), 1.42-1.50 (m, 2H), 1.61-1.70 (m, 2H), 1.70-1.77 (m, 2H), 2.05-2.12 (m, 4H), 2.79-2.86 (m, 8H), 3.29-3.34 (m, 1H), 3.54-3.59 (m, 1H), 3.67-3.71 (m, 1H), 5.06-5.10 (m, 1H), 5.31-5.42 (m, 10 H); MS (エレクトロスプレー): 439.3 [M+Na]+.
【実施例１１】
【０１３９】
メチル２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタノエートの調製
【０１４０】
【化２２】
2021505591.tif 000024
硫酸（０．０４９ｍｌ、０．９１８ｍｍｏｌ）を、Ｎ２雰囲気下室温のメタノール（２０ｍｌ）中の２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタン酸（（３８５ｍｇ、１，０２８ｍｍｏｌ）の溶液に加え、生じた混合物を室温で一晩撹拌した。MS (エレクトロスプレー): 389.3 [M+1]+.
【実施例１２】
【０１４１】
ブチル２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタノエートの調製
【０１４２】
【化２３】
2021505591.tif 000025
硫酸（０．０４９ｍｌ、０．９１８ｍｍｏｌ）を、Ｎ２雰囲気下室温のブタン−１−オール（４００ｍＬ、４．３７ｍｏｌ）中の２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタン酸（（３３ｇ、８８ｍｍｏｌ）の溶液に加え、反応混合物を１２０時間撹拌した。ヘプタン（４００ｍＬ）および酢酸エチル（４００ｍＬ）を加え、溶液を飽和ａｑ．ＮａＨＣＯ３（３×３００ｍＬ）および水（２×３００ｍＬ）で洗った。合わせた水性相をヘプタン／エーテル（１：１）（２×３００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、真空中で濃縮した。次第にヘプタンおよび酢酸エチルの混合物（９９：１→９６：４）を溶離液として使用して、フラッシュクロマトグラフィーにより残留物を精製した。適切な画分を濃縮して、２６．３ｇ（収率６７％）の表題化合物をオイルとして得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0.93-1.02 (m, 9H), 1.36-1.51 (m, 4H), 1.60-1.70 (m, 4H), 1.72-1.84 (m, 2H), 2.05-2.16 (m,4H), 2.78-2.92 (m, 8H), 3.28-3.39 (m, 1H), 3.54-3.65 (m, 1H), 3.70-3.82 (m, 1H), 4.08-4.24 (m, 2H), 5.27-5.48 (m, 10H), MS (エレクトロスプレー): 453.2 [M+Na]+.
【実施例１３】
【０１４３】
２，３−ジヒドロキシプロピル２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタノエートの調製
ステップａ）（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メチル２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタノエートの調製
【０１４４】
【化２４】
2021505591.tif 000026
２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタン酸（２５ｇ、６６，７ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（８．１５ｇ、６６．７ｍｍｏｌ）を、窒素雰囲気下のクロロホルム（１５０ｍＬ）中の２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−メタノール（７．５４ｍＬ、６０．７ｍｍｏｌ）の溶液に加えた。次いで、クロロホルム（６５ｍＬ）中のＤＣＣ（１３．７７ｇ、６６，７ｍｍｏｌ）の溶液を周囲温度で滴加した。混合物を一晩撹拌し、真空中で濃縮した。ヘプタン中の１０％酢酸エチルの極性漸増混合物を溶離液として使用して、シリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィーにより残留物を精製した。適切な画分を濃縮して、１９．６ｇ（収率６６％）の表題生成物をオイルとして得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 0.99 (t, 6H), 1.37-1.40 (m, 3H), 1.41-1.53 (m, 5H), 1.59-1.71 (m, 2H), 1.72-1.85 (m, 2H), 2.05-2.14 (m, 4H), 2.74-2.95 (m, 8H), 3.31-3.38 (m, 1H), 3.57-3.65 (m, 1H), 3.72-3.86 (m, 2H), 4.07-4.12 (m, 1H), 4.15-4.27 (m, 2H), 4.29-4.40 (m, 1H), 5.23-5.50 (m, 10H). MS (エレクトロスプレー): 511.3 [M+Na]+.
【０１４５】
ステップｂ）２，３−ジヒドロキシプロピル２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタノエートの調製
【０１４６】
【化２５】
2021505591.tif 000027
窒素下室温のジオキサン（２８０ｍＬ）中の（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メチル２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタノエート（２７．５ｇ、５６．３ｍｍｏｌ）の溶液にａｑ．ＨＣｌ（３７％（ｗ／ｗ）、２８ｍＬ、３４１ｍｍｏｌ）を加え、混合物を６０分間撹拌した。次いで、混合物をｓａｔ．ａｑ．ＮａＨＣＯ３（５００ｍＬ）に注意深く注ぎ、ＥｔＯＡｃ（２×３００ｍＬ）で抽出した。有機相を１Ｍ  ＨＣｌ（２００ｍＬ）、塩水（２００ｍＬ）で洗い、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、真空中で濃縮した。ヘプタンおよび酢酸エチル（５０：５０）を溶離液として使用して、シリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィーにより残留物を精製した。適切な画分を濃縮して、〜１０％の異性体１，３−ジヒドロキシプロパン−２−イル２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタノエートが混入したオイルとして１９ｇの表題生成物を得た。材料を１．３５グラムの別のバッチと混合した後、分取ＨＰＬＣによりさらに精製した。水／アセトニトリル（９：１）からアセトニトリル（１００％）のアイソクラティックな１７：８３混合物を溶離液として使用した。適切な画分を濃縮して、１１．３ｇ（収率３８％）の表題生成物をオイルとして得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 0.97-1.03 (m, 6H), 1.41-1.51 (m, 2H), 1.59-1.69 (m, 2H), 1.72-1.87 (m, 2H), 2.05-2.14 (m, 5H), 2.56 (s, 1H), 2.73-2.94 (m, 8H), 3.33-3.40 (m, 1H), 3.55-3.68 (m, 2H), 3.69-3.77 (m, 1H), 3.79-3.85 (m, 1H), 3.93-4.03 (m, 1H), 4.15-4.37 (m, 2H), 5.25-5.51 (m, 10H). MS (エレクトロスプレー): 471.3 [M+Na]+.
【実施例１４】
【０１４７】
１，３−ジヒドロキシプロパン−２−イル２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタノエートの調製
ステップａ）オキシラン−２−イルメチル２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタノエートの調製
【０１４８】
【化２６】
2021505591.tif 000028
乾燥ＤＣＭ（７ｍＬ）中の２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタン酸（８００ｍｇ、２．１４ｍｍｏｌ）、グリシドール（０．１７ｍＬ、２．５６ｍｍｏｌ）、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸（ＥＤＣ＊ＨＣｌ）（４９１ｍｇ、２．５６ｍｍｏｌ）および４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）（３１３ｍｇ、２．５６ｍｍｏｌ）の混合物をＮ２雰囲気下室温で撹拌した。反応混合物を真空中で濃縮した。ヘプタンおよび酢酸エチルの極性漸増混合物（９９：１→９５：５）を溶離液として使用して、シリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィーにより残留物を精製した。適切な画分を濃縮して、５２７ｍｇ（収率５７％）の表題生成物をオイルとして得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0.94-0.98 (m, 6H), 1.40-1.44 (m, 2H), 1.57-1.64 (m, 2H), 1.70-1.82 (m, 2H), 2.02-2.12 (m, 4H), 2.63 (bs, 1H), 2.78-2.84 (m, 9H), 3.20 (bs, 1H), 3.30-3.35 (m, 1H), 3.55-3.61 (m, 1H), 3.77-3.80 (m, 1H), 3.94-4.01 (m, 1H), 4.42-4.48 (m, 1H), 5.36-5.26 (m, 10H). MS (エレクトロスプレー): 453.3 [M+Na]+.
【０１４９】
ステップｂ）２−（（２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタノイル）オキシ）プロパン−１，３−ジイルビス（２，２，２−トリフルオロアセテート）の調製
【０１５０】
【化２７】
2021505591.tif 000029
乾燥ＤＣＭ（３ｍＬ）中のトリフルオロ酢酸無水物（ＴＦＡＡ）（０．５５ｍＬ、３．９６ｍｍｏｌ）を、Ｎ２雰囲気下−２０℃の乾燥ＤＣＭ（３ｍＬ）中のオキシラン−２−イルメチル２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタノエート（２８６ｍｇ、０．６６ｍｍｏｌ）の予冷した溶液に分割して加えた。冷却浴を取り外し、混合物を周囲温度で１９時間撹拌した後、反応混合物を真空圧中で濃縮した。残留物をトルエン（６ｍＬ）に溶解し、トルエン（１５０ｍＬ）で溶離しながらシリカ（６．５ｇ）のパッドに通した。真空中で濃縮して、３５７ｍｇ（収率８４％）の表題化合物をオイルとして得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0.95 (2xt, 6H), 1.38-1.45 (m, 2H), 1.57-1.63 (m, 2H), 1.66-1.78 (m, 2H), 2.09-2.02 (m, 4H), 2.78-2.84 (m, 8H), 3.27-3.33 (m, 1H), 3.51-3.56 (m, 1H), 3.77 (dd, 1H), 4.30-4.53 (m, 2H), 4.60-4.69 (m, 2H), 5.17-5.43 (m, 10H), 5.43-5.55 (m, 1H). MS (エレクトロスプレー): 661.1 [M+Na]+.
【０１５１】
ステップｃ）１，３−ジヒドロキシプロパン−２−イル２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタノエートの調製
【０１５２】
【化２８】
2021505591.tif 000030
Ｎ２雰囲気下−２０℃まで冷却されたペンタン／ＤＣＭ（２：１）（５ｍＬ）中の２−（（２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタノイル）オキシ）プロパン−１，３−ジイルビス（２，２，２−トリフルオロアセテート）（３５４ｍｇ、０．５５２ｍｍｏｌ）の溶液に、ペンタン／ＤＣＭ（２：１）（４．５ｍＬ）中のピリジン（０．４ｍＬ、４．９５ｍｍｏｌ）およびメタノール（０．３ｍＬ、７．４１ｍｍｏｌ）の溶液を滴加した。冷却浴を取り外し、混合物を室温で３時間撹拌した後、真空中で濃縮した。ヘプタンおよび酢酸エチルの極性漸増混合物（９５：５→９０：１０→８０：２０→５０：５０）を溶離液として使用して、シリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィーにより残留物を精製した。適切な画分を濃縮して、２２３ｍｇの表題生成物を粗オイルとして得た。分取ＨＰＬＣにより精製して、５８ｍｇ（収率２２％）の表題化合物をオイルとして得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0.95 (t, 3H), 0.96 (t, 3H), 1.38-1.45 (m, 2H), 1.54-1.64 (m, 2H), 1.67-1.84 (m, 2H), 2.01-2.09 (m, 4H), 2.45 (bs, 2H), 2.83-2.77 (m, 8H), 3.36-3.30 (m, 1H), 3.60-3.55 (m, 1H), 3.84-3.78 (m, 5H), 4.98-4.93 (m, 1H), 5.65-5.09 (m, 10H). MS (エレクトロスプレー): 471.1 [M+Na]+.
【実施例１５】
【０１５３】
３−ヒドロキシプロパン−１，２−ジイルビス（２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタノエート）の調製
ステップａ）ｔｅｒｔ−ブチル（（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メトキシ）ジメチルシランの調製
【０１５４】
【化２９】
2021505591.tif 000031
ｔｅｒｔ−ブチルクロロジメチルシラン（１４．４１ｇ、９１ｍｍｏｌ）を、窒素雰囲気下周囲温度のＴＨＦ（１００ｍＬ）中の（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メタノール（１０ｇ、７６ｍｍｏｌ）およびイミダゾール（７．７３ｇ、１１４ｍｍｏｌ）の溶液に加えた。混合物を１．５時間撹拌し、水（２００ｍＬ）に注ぎ、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル（２×１５０ｍＬ）で抽出した。相を分離し、有機層を水（１００ｍＬ）、塩水（１００ｍＬ）で洗い、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、真空中で濃縮した。ヘプタン中の３％酢酸エチルを溶離液として使用して、シリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィーにより残留物を精製した。適切な画分を濃縮して、１８ｇ（収率９７％）の表題化合物をオイルとして得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 0.02-0.05 (m, 6H), 0.85-0.89 (m, 9H), 1.31-1.35 (m, 3H), 1.35-1.40 (m, 3H), 3.50-3.60 (m, 1H), 3.63-3.72 (m, 1H), 3.75-3.85 (m, 1H), 3.96-4.05 (m, 1H), 4.07-4.18 (m, 1H). MS (エレクトロスプレー): 229.2 [M+Na]+.
【０１５５】
ステップｂ）３−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）プロパン−１，２−ジオールの調製
【０１５６】
【化３０】
2021505591.tif 000032
クロロホルム（６０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル（（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メトキシ）ジメチルシランの溶液に、シリカゲル上に吸収されたＦｅＣｌ３×６Ｈ２０（３０ｇ、１１．９ｍｍｏｌ）を加え、混合物を一晩撹拌した。混合物を濾過し、真空中で濃縮した。ヘプタンおよび酢酸エチルの極性漸増混合物（５０：５０→２５：７５）を溶離液として使用して、シリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィーにより残留物を精製した。適切な画分を濃縮して、７６０ｍｇ（収率９％）の表題化合物をオイルとして得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 0.09-0.12 (m, 6H). 0.91- 0.95 (m, 9H), 2.11-2.17 (m, 1H), 2.60 (d, 1H), 3.57- 3.85 (m, 5H). MS (エレクトロスプレー): 229.2 [M+Na]+.
【０１５７】
ステップｃ）３−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）プロパン−１，２−ジイルビス（２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタノエート）の調製
【０１５８】
【化３１】
2021505591.tif 000033
Ｎ２雰囲気下周囲温度のＤＭＦ（２０ｍｌ）中の３−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）プロパン−１，２−ジオール（０．９１ｇ、４．４１ｍｍｏｌ）の溶液に、２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタン酸（３．４７ｇ、９．３ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（１．１３ｇ、９．３ｍｍｏｌ）、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸（ＤＣＩ）（１．７７６ｇ、９．２６ｍｍｏｌ）および乾燥ＤＣＭ（６０ｍｌ）を加えた。混合物を一晩撹拌した後、反応混合物をジエチルエーテル（２００ｍＬ）で希釈した。混合物を１Ｍ  ＨＣｌ（１００ｍＬ）および塩水（１００ｍＬ）で洗い、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、真空中で濃縮した。ヘプタン中の３％酢酸エチルを溶離液として使用して、シリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィーにより残留物を精製した。適切な画分を濃縮して、２．２６ｇ（収率５６％）の表題化合物をオイルとして得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 0.08 (s, 6H), 0.90 (d, 9H), 0.95-1.03 (m, 12H), 1.40-1.52 (m, 4H), 1.58-1.69 (m, 4H), 1.70-1.83 (m, 4H), 2.04-2.15 (m, 8H), 2.77-2.92 (m, 16H), 3.27-3.37 (m, 2H), 3.57-3.67 (m, 2H), 3.72-3.80 (m, 4H), 4.14-4.32 (m, 1H), 4.41-4.56 (m, 1H), 5.09-5.22 (m, 1H), 5.23-5.49 (m, 20H). MS (エレクトロスプレー): 941.6 [M+Na]+.
【０１５９】
ステップｄ）３−ヒドロキシプロパン−１，２−ジイルビス（２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタノエート）の調製
【０１６０】
【化３２】
2021505591.tif 000034
ジオキサン（１００ｍＬ）中の３−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）プロパン−１，２−ジイルビス（２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタノエート）（２．２６ｇ、２．４６ｍｍｏｌ）の溶液にａｑ．ＨＣｌ（３７％（ｗ／ｗ、２ｍＬ）を加え、混合物を窒素雰囲気下周囲温度で３時間撹拌した後、真空中で濃縮した。ヘプタン中の１５％酢酸エチルを溶離液として使用して、シリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィーにより残留物を精製した。適切な画分を濃縮して、０．８３ｇ（収率４２％）の表題化合物をオイルとして得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 0.96-1.03 (m, 12H), 1.40-1.53 (m, 4H), 1.58-1.68 (m, 4H), 1.70-1.85 (m, 4H), 1.87-2.01 (m, 1H), 2.05-2.15 (m, 8H), 2.75-2.95 (m, 16H), 3.28-3.41 (m, 2H), 3.56-3.65 (m, 2H), 3.73-3.85 (m, 4H), 4.24-4.37 (m, 1H), 4.42-4.53 (m, 1H), 5.14-5.23 (m, 1H), 5.26-5.51 (m, 20H). MS (エレクトロスプレー): 827.5 [M+Na]+.
【実施例１６】
【０１６１】
２−ヒドロキシプロパン−１，３−ジイルビス（２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタノエート）の調製
ステップａ）２−オキソプロパン−１，３−ジイルビス（２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタノエート）
【０１６２】
【化３３】
2021505591.tif 000035
２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタン酸（５．０ｇ、１３．４ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（１．６３ｇ、１３．４ｍｍｏｌ）を、窒素雰囲気下のクロロホルム（２５ｍＬ）中の１，３−ジヒドロキシアセトン二量体（１．１４５ｇ、６．３６ｍｍｏｌ）の溶液に加えた。次いで、クロロホルム（１０ｍＬ）中のＤＣＣ（２．７５ｇ、１３．３５ｍｍｏｌ）の溶液を周囲温度で滴加した。混合物を室温で一晩撹拌した後、真空中で濃縮した。ヘプタンおよび酢酸エチルの極性漸増混合物（９０：１０→８８：１２）を溶離液として使用して、シリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィーにより残留物を精製した。適切な画分を濃縮して、２．４ｇ（収率４７％）の表題化合物をオイルとして得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 0.97-1.06 (m, 12H). 1.38-1.53 (m, 4H), 1.57-1.73 (m, 4H), 1.73-1.96 (m, 4H), 2.03-2.17 (m, 8H), 2.76-2.92 (m, 16H), 3.35-3.42 (m, 2H), 3.63-3.70 (m, 2H), 3.89 (dd, 2H), 4.75-4.93 (m, 4H), 5.27-5.49 (m, 20H). MS (エレクトロスプレー): 827.5 [M+Na]+.
【０１６３】
ステップｂ）２−ヒドロキシプロパン−１，３−ジイルビス（２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタノエート）
【０１６４】
【化３４】
2021505591.tif 000036
ＮａＢＨ４（０．３３６ｇ、８．８７ｍｍｏｌ）を、０℃のＴＨＦ（５５ｍＬ）および水（４ｍＬ）中の２−オキソプロパン−１，３−ジイルビス（２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタノエート）（３．２４ｇ、４．０３ｍｍｏｌ）の溶液に注意深く加えた。混合物を０℃で１５分間撹拌した。次いで、酢酸（１ｍＬ）、続いて酢酸エチル（１００ｍＬ）を注意深く加えた。混合物を水（１００ｍＬ）、飽和ａｑ．ＮａＨＣＯ３（１００ｍＬ）および塩水で洗った後、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、真空中で濃縮した。残留物を材料の別のバッチと合わせた後、ヘプタン中の１５％酢酸エチルを溶離液として使用して、シリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。適切な画分を濃縮して、１．６２ｇ（収率５０％）の表題化合物をオイルとして得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 0.97-1.03 (m, 12H), 1.41-1.52 (m, 4H), 1.58-1.69 (m, 6H), 1.71-1.87 (m, 4H), 2.05-2.14 (m, 8H), 2.38-2.42 (m, 1H), 2.78-2.92 (m, 16H), 3.32-3.39 (m, 2H), 3.57-3.64 (m, 2H), 3.80-3.84 (m, 2H), 4.05-4.34 (m, 5H), 5.26-5.49 (m, 20H). MS (エレクトロスプレー): 827.5 [M+Na]+.
【実施例１７】
【０１６５】
プロパン−１，２，３−トリイルトリス（２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタノエート）の調製
【０１６６】
【化３５】
2021505591.tif 000037
２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタン酸（４．０ｇ、１０．７ｍｍｏｌ）、４−ジメチルアミノピリジン（１．３０５ｇ、１０．７ｍｍｏｌ）、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸（２．０４７ｇ、１０．７ｍｍｏｌ）および乾燥ＤＣＭ（３０ｍｌ）を、Ｎ２雰囲気下室温のＤＭＦ（１０ｍｌ）中のグリセロール（０，１７３ｍｌ、２，３７３ｍｍｏｌ）の溶液に加えた。混合物を一晩撹拌した後、反応混合物をジエチルエーテル（２５０ｍＬ）で希釈した。混合物をａｑ．１Ｍ  ＨＣｌ（１００ｍＬ）および塩水（１００ｍＬ）で洗った後、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、真空中で蒸発させた。ヘプタン中の５％酢酸エチルを溶離液として使用して、シリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィーにより残留物を精製した。適切な画分を濃縮して、２．１ｇ（収率７３％）の表題化合物をオイルとして得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 0.91-1.05 (m, 18H), 1.40-1.52 (m, 6H), 1.57-1.69 (m, 6H), 1.69-1.86 (m, 6H), 2.01-2.17 (m, 12H), 2.69-2.96 (m, 24H), 3.27-3.38 (m, 3H), 3.53-3.67 (m, 3H), 3.73-3.81 (m, 3H), 4.17-4.27 (m, 2H), 4.37-4.54 (m, 2H), 5.28-5.47 (m, 30H). MS (エレクトロスプレー): 1183.8 [M+Na]+.
【実施例１８】
【０１６７】
ｔｅｒｔ−ブチル２−（（２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イルオキシ）ブタノイル）オキシ）ベンゾエートの調製
【０１６８】
【化３６】
2021505591.tif 000038
１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（ＥＤＣ）（３１６ｍｇ、１．６５ｍｍｏｌ）および４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）（２０ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）を、ＤＣＭ（１０ｍＬ）中の２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イルオキシ）ブタン酸（５６１ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）の溶液に加え、反応混合物を１０分間撹拌した。ｔｅｒｔ−ブチル２−ヒドロキシベンゾエート（２９１ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）を加え、混合物を３時間撹拌した。塩水を加え、生じた２つの相を分離した。水性相をＤＣＭで抽出し、合わせた有機相を乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、真空中で濃縮した。ヘプタン中の５％  ＥｔＯＡｃの混合物を溶離液として使用して、フラッシュクロマトグラフィーにより残留物を精製した。適切な画分を濃縮して、５００ｍｇ（収率６１％）の表題化合物を得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 0.98 (t, 3H), 1.11 (t, 3H), 1.13 (t, 3H), 1.45-1.75 (m, 4H), 1.56 (s, 9H), 1.90-2.20 (m, 6H), 2.80-2.90 (m, 8H), 3.45-3.60 (m, 1H), 3.80-3.90 (m, 1H), 4.05-4.15 (m, 1H), 5.25-5.50 (m, 10H), 7.06 (m, 1H), 7.28 (m, 1H), 7.52 (m, 1H), 7.89 (m, 1H). MS (ESI): 573 [M+Na]+.
【実施例１９】
【０１６９】
２−（（２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イルオキシ）ブタノイル）オキシ）安息香酸の調製
【０１７０】
【化３７】
2021505591.tif 000039
ＦＡ（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル２−（（２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イルオキシ）ブタノイル）オキシ）ベンゾエート（５００ｍｇ、０．９ｍｍｏｌ）の溶液を２日間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、ヘプタン（５％  ＦＡを含む）中の１〜５％  ＥｔＯＡｃ（やはり５％  ＦＡを含む）の勾配を溶離液として使用して、フラッシュクロマトグラフィーに残留物をかけた。適切な画分をプールして濃縮し、ヘプタン中の１〜１０％  ＥｔＯＡｃの勾配を溶離液として使用して、第２のフラッシュクロマトグラフィーにより残留物をさらに精製した。適切な画分を濃縮して、７５ｍｇ（収率１７％）の表題化合物を得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 0.99 (t, 3H), 1.13 (t, 3H), 1.45-1.60 (m, 2H), 1.65-1.70 (m, 2H), 1.90-2.15 (m, 6H), 2.80-2.90 (m, 8H), 3.45-3.55 (m, 1H), 3.80-3.90 (m, 1H), 4.05-4.15 (m, 1H), 5.30-5.45 (m, 10H), 7.14 (d, 1H), 7.35-7.45 (m, 1H), 7.60-7.70 (m, 1H), 8.10-8.15 (m, 1H). MS (ESI): 517 [M+Na]+.
【実施例２０】
【０１７１】
２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）エチル２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イルオキシ）ブタノエートの調製
【０１７２】
【化３８】
2021505591.tif 000040
Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ）（８００ｍｇ、２．１ｍｍｏｌ）およびＴＥＡ（０．５６ｍＬ、４ｍｍｏｌ）を、ＤＣＭ（１０ｍＬ）中の２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イルオキシ）ブタン酸（７４８ｍｇ、２ｍｍｏｌ）の溶液に加え、反応混合物を２０分間撹拌した。ＤＣＭ（１ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチルＮ−（２−ヒドロキシエチル）カルバメート（３４０ｍｇ、２．１ｍｍｏｌ）の溶液を加え、生じた混合物を室温で一晩撹拌した。Ｅｔ２Ｏ（１００ｍＬ）を加え、混合物を水、１Ｍ  ＨＣｌ（ａｑ）、飽和ＮａＨＣＯ３（ａｑ）および塩水で洗い、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、真空中で濃縮した。ヘプタン中の１０〜２０％  ＥｔＯＡｃの勾配を溶離液として使用して、フラッシュクロマトグラフィーにより残留物を精製した。適切な画分を濃縮して、７８０ｍｇ（収率７６％）の表題化合物を得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 0.98 (t, 6H), 1.40-1.55 (m, 2H), 1.45 (s, 9H), 1.60-1.85 (m, 4H), 2.05-2.20 (m, 4H), 2.75-2.90 (m, 8H), 3.30-3.45 (m, 3H), 3.55-3.65 (m, 1H), 3.75-3.80 (m, 1H), 4.20-4.25 (m, 2H), 4.76 (br s, 1H), 5.30-5.45 (m, 10H). MS (ESI): 540 [M+Na]+.
【実施例２１】
【０１７３】
２−（２−アセトキシベンズアミド）エチル２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イルオキシ）ブタノエートの調製
【０１７４】
【化３９】
2021505591.tif 000041
塩化アセチル（１ｍＬ）を、０℃のＭｅＯＨ（５ｍＬ）中の２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）エチル２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イルオキシ）ブタノエート（３００ｍｇ、０．５８ｍｍｏｌ）の溶液に加え、反応混合物を室温で１時間撹拌した。混合物を真空中で濃縮し、２−アミノエチル２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イルオキシ）ブタノエートのＨＣｌ塩（２８６ｍｇ）を粗生成物として得た。ＴＥＡ（１０９μＬ、０．７８ｍｍｏｌ）を、ＤＣＭ（１０ｍＬ）中のアセチルサリチル酸（１３７ｍｇ、０．７６ｍｍｏｌ）の溶液に加え、混合物を０℃まで冷却した。クロロギ酸エチル（７５μＬ、０．７８ｍｍｏｌ）を滴加し、反応混合物を２時間撹拌した。次いで、この溶液を、ＤＣＭ（１０ｍＬ）およびＴＥＡ（２ｍＬ）の混合物中の２−アミノエチル２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イルオキシ）ブタノエートのＨＣｌ塩の粗生成物の溶液に加えた。生じた混合物を室温で３．５時間撹拌し、次いで、水を加えた。生じた２つの相を分離し、水性相をＤＣＭで２回抽出した。合わせた有機相を１Ｍ  ＨＣｌ（ａｑ）、飽和ＮａＨＣＯ３（ａｑ）および水で洗い、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、真空中で濃縮した。ヘプタン中の２０％  ＥｔＯＡｃを溶離液として使用して、フラッシュクロマトグラフィーにより残留物を精製した。適切な画分を濃縮して、９０ｍｇ（収率２３％）の表題化合物を得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 0.95-1.05 (m, 6H), 1.35-1.45 (m, 2H), 1.55-1.70 (m, 2H), 1.70-1.85 (m, 2H), 2.05-2.15 (m, 4H), 2.35 (s, 3H), 2.80-2.90 (m, 8H), 3.30-3.40 (m, 1H), 3.55-3.65 (m, 1H), 3.70-3.85 (m, 3H), 4.33 (t, 2H), 5.30-5.45 (m, 10H), 6.61 (br s, 1H), 7.10-7.15 (m, 1H), 7.25-7.35 (m, 1H), 7.45-7.50 (m, 1H), 7.70-7.75 (m, 1H). MS (ESI); 602 [M+Na]+.
【実施例２２】
【０１７５】
２−（２−ヒドロキシベンズアミド）エチル２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イルオキシ）ブタノエートの調製
【０１７６】
【化４０】
2021505591.tif 000042
アンモニア（ａｑ、２８％、２０滴）を、２−プロパノール（９ｍＬ）および水（３ｍＬ）中の２−（２−アセトキシベンズアミド）エチル２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イルオキシ）ブタノエート（９９ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）の溶液に滴加し、反応混合物を１０分間撹拌した。水を加え、生じた混合物をＥｔ２Ｏで２回抽出した。合わせた有機相を塩水で洗い、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、真空中で濃縮した。ヘプタン中の０〜４０％  ＥｔＯＡｃの勾配を溶離液として使用して、フラッシュクロマトグラフィーにより残留物を精製した。適切な画分を濃縮して、３３ｍｇ（収率３６％）の表題化合物を得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 0.95-1.05 (m, 6H), 1.35-1.45 (m, 2H), 1.60-1.70 (m, 2H), 1.70-1.85 (m, 2H), 2.05-2.20 (m, 4H), 2.80-2.90 (m, 8H), 3.35-3.45 (m, 1H), 3.50-3.60 (m, 1H), 3.75-3.85 (m, 3H), 4.40-4.50 (m, 2H), 5.30-5.45 (m, 10H), 6.80-6.90 (m, 2H), 6.95-7.05 (m, 1H), 7.35-7.45 (m, 1H), 12.22 (s, 1H). MS (ESI): 560 [M+Na]+.
【実施例２３】
【０１７７】
Ｎ−ベンジル−２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタンアミドの調製
【０１７８】
【化４１】
2021505591.tif 000043
Ｎ２雰囲気下室温のＤＣＭ（１０ｍＬ）中の２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタン酸（３０２．１ｍｇ、０．８０７ｍｍｏｌ）およびｏ−ベンゾトリアゾール−１−イル−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート（ＴＢＴＵ）（２８５ｍｇ、０．８８８ｍｍｏｌ）の溶液に、トリエチルアミン（１２３μＬ、０．８８７ｍｍｏｌ）を加えた。１５分間撹拌後、混合物にベンジルアミン（９７μＬ、０．８８７ｍｍｏｌを加え、反応混合物を室温で一晩撹拌した。飽和ＮａＨＣＯ３（２５ｍＬ）を加え、混合物をｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル（２×５０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせ、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、真空中で蒸発させた。ヘプタンおよび酢酸エチルの極性漸増混合物（９５：５→５０：５０）を溶離液として使用して、シリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィーにより残留物を精製した。適切な画分を濃縮して、０．２５３ｇ（収率６６％）の表題化合物をオイルとして得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) d 0.97 - 0.90 (m, 6H), 1.41 - 1.35 (m, 2H), 1.59 - 1.52 (m, 2H), 1.75 - 1.68 (m, 1H), 1.86 - 1.80 (m, 1H), 2.09 - 2.03 (m, 4H), 2.82 - 2.77 (m, 8H), 3.44 (t, J = 6.4, 2H), 3.72 - 3.71 (m, 1H), 4.46 (d, J = 5.8, 2H), 5.36 - 5.28 (m, 10H), 6.83 (s, 1H), 7.26 - 7.24 (m, 3H), 7.33 - 7.30 (m, 2H).
【実施例２４】
【０１７９】
２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）−Ｎ，Ｎ−ジメチルブタンアミドの調製
【０１８０】
【化４２】
2021505591.tif 000044
Ｎ２雰囲気下室温のＤＣＭ（１０ｍＬ）中の２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタン酸（３００．２ｍｇ、０．８０１ｍｍｏｌ）およびｏ−ベンゾトリアゾール−１−イル−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート（ＴＢＴＵ）（２８６．４ｍｇ、０．８９２ｍｍｏｌ）の溶液に、トリエチルアミン（１２３μＬ、０．８８４ｍｍｏｌ）を加えた。１５分間撹拌後、混合物にジメチルアミン（ＴＨＦ中２．０Ｍ）（０．８０ｍＬ、１．６０ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で一晩撹拌した。飽和ＮａＨＣＯ３（２５ｍＬ）を加え、混合物をｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル（２×５０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせ、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、真空中で蒸発させた。ヘプタンおよび酢酸エチルの極性漸増混合物（９５：５→５０：５０）を溶離液として使用して、シリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィーにより残留物を精製した。適切な画分を濃縮して、０．２６８ｇ（収率８１％）の表題化合物をオイルとして得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3) d 0.95 (t, 3 H), 0.96 (t, 3 H), 1.35 - 1.46 (m, 2H), 1.53 - 1.63 (m, 2H), 1.66 - 1.79 (m, 2H), 2.01 - 2.10 (m, 4H), 2.77 - 2.87 (m, 8H), 2.93 (s, 3H), 3.10 (s, 3H), 3.28 (dt, J = 9.1, 6.5, 1H), 3.46 (dt, J = 9.1, 6.3, 1H), 3.96 (dd, J = 7.7, 6.1, 1H), 4.97 - 5.70 (m, 10H).
【実施例２５】
【０１８１】
Ｎ−エチル−２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタンアミドの調製
【０１８２】
【化４３】
2021505591.tif 000045
Ｎ２雰囲気下室温のＤＣＭ（１０ｍＬ）中の２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタン酸（３０４．６ｍｇ、０．８１３ｍｍｏｌ）およびｏ−ベンゾトリアゾール−１−イル−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート（ＴＢＴＵ）（２８６．９ｍｇ、０．８９４ｍｍｏｌ）の溶液に、トリエチルアミン（１２３μＬ、０．８８４ｍｍｏｌ）を加えた。１５分間撹拌後、混合物にエチルアミン（ＴＨＦ中２．０Ｍ）（０．８０ｍＬ、１．６０ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で一晩撹拌した。飽和ＮａＨＣＯ３（２５ｍＬ）を加え、混合物をｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル（２×５０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせ、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、真空中で蒸発させた。ヘプタンおよび酢酸エチルの極性漸増混合物（９５：５→５０：５０）を溶離液として使用して、シリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィーにより残留物を精製した。適切な画分を濃縮して、０．１８６ｇ（収率５６％）の表題化合物をオイルとして得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3) d 0.90 (t, 3H), 0.95 (t, 3H), 1.13 (t, 3H), 1.55 - 1.62 (m, 2H), 1.64 - 1.66 (m, 2H), 1.69 - 1.69 (m, 1H), 1.74 - 1.83 (m, 1H), 2.01 - 2.12 (m, 4H), 2.78 - 2.84 (m, 8H), 3.25 - 3.34 (m, 2H), 3.44 (t, 2H), 3.64 (dd, 1H), 5.50 - 5.13 (m, 10H), 6.50 (s, 1H).
【実施例２６】
【０１８３】
ｔｅｒｔ−ブチル（２−（２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタンアミド）エチル）カルバメートの調製
【０１８４】
【化４４】
2021505591.tif 000046
ジシクロヘキシルメタンジイミン（ＤＣＣ）（１．７３ｇ、８．４ｍｍｏｌ）および１Ｈ−ベンゾ［ｄ］［１，２，３］トリアゾール−１−オール（ＨＯＢｔ）（１．１４ｇ、８．４ｍｍｏｌ）を、Ｎ２雰囲気下０℃のＴＨＦ（２５ｍＬ）中の２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタン酸（３．１４ｇ、８．４ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に加えた。混合物を２０分間撹拌した後、ＴＨＦ（１ｍＬ）中のＮ−Ｂｏｃ−エチレンジアミン（１．１２グラム）の溶液を滴加した。生じた混合物を室温で１．５時間撹拌した。ジエチルエーテル（２００ｍＬ）を加え、混合物を水、１Ｍ  ＨＣｌ、飽和ＮａＨＣＯ３および塩水で洗った。有機相を乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、真空中で濃縮した。ヘプタン中の２５％酢酸エチル（０．５％  ＨＣＯＯＨを加えた）を溶離液として使用して、シリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィーにより残留物を精製した。適切な画分を濃縮して、３．０ｇ（収率８３％）の表題化合物を得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3): d 0.90 (t, 3H), 0.96 (t, 3H), 1.43 (s, 9H), 1.40 - 1.80 (m, 6H), 2.05 - 2.20 (m, 4H), 2.75 - 2.90 (m, 8H), 3.20 - 3.60 (m, 6H), 3.65 - 3.75 (m, 1H), 5.02 (br s, 1H), 5.30 - 5.45 (m, 10H), 7.01 (br s, 1H). MS (エレクトロスプレー); 539 [M+Na]+
【実施例２７】
【０１８５】
Ｎ−（２−アミノエチル）−２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタンアミドの調製
【０１８６】
【化４５】
2021505591.tif 000047
Ｎ２雰囲気下周囲温度のＤＣＭ（８ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル（２−（２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタンアミド）エチル）カルバメート（７７４ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）の溶液にＴＦＡ（２ｍＬ）を加え、反応物を室温で３０分間撹拌し、次いで、真空中で濃縮した。ジエチルエーテル（５０ｍＬ）およびＮａＯＨ（ａｑ、１Ｍ、５０ｍＬ）を残留物に加え、混合物を３０分間激しく撹拌した。相を分離し、有機相を塩水で洗い、乾燥（ＮａＳＯ４）し、濾過し、真空中で濃縮して、５６０ｍｇ（９０％）の表題化合物を得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3): d 0.85 - 1.05 (2xt, 6H), 1.35 - 1.50 (m, 2H), 1.55 - 1.85 (m, 4H), 2.05 - 2.20 (m, 4H), 2.75 - 2.95 (m, 8H), 3.10 - 3.20 (m, 1H), 3.30 - 3.80 (m, 6H), 4.05 - 4.20 (br m, 1H), 4.25 - 4.75 (br s, 2H), 5.30 - 5.50 (m, 10H). MS (エレクトロスプレー); 417 [M+H]+, 439 [M+Na]+
【実施例２８】
【０１８７】
Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）−２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタンアミドの調製
【０１８８】
【化４６】
2021505591.tif 000048
Ｎ２雰囲気下室温のＤＣＭ（１００ｍＬ）中の２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタン酸（４．５ｇ、１２ｍｍｏｌ）の溶液に塩化オキサリル（８．４ｍＬ、１００ｍｍｏｌ）を加え、続いてＤＭＦを２滴加えた。混合物を室温で３０分間撹拌し、真空中で濃縮した。残留物をＮ２雰囲気下のＤＣＭ（１００ｍＬ）に溶解した。トリエチルアミン（３．３４ｍＬ、２４ｍｍｏｌ）、続いてエタノールアミン（１．０８ｍＬ、１８ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で２時間撹拌した。水（３００ｍＬ）を加え、混合物をジクロロメタンで２回抽出した。有機相を合わせ、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、真空中で濃縮した。ヘプタンおよび酢酸エチルの極性漸増混合物（５０：５０→２０：８０）を溶離液として使用して、シリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィーにより残留物を精製した。適切な画分を濃縮して、４．６ｇ（収率９２％）の表題化合物を得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3): d 0.90 - 1.05 (m, 6H), 1.40 - 1.55 (m, 2H), 1.60 - 1.90 (m, 4H), 2.05 - 2.20 (m, 4H), 2.75 - 2.90 (m, 8H), 3.05 (br s, 1H), 3.40 - 3.55 (m, 4H), 3.70 - 3.80 (m, 3H), 5.30 - 5.45 (m, 10H), 7.04 (br s, 1H). MS (エレクトロスプレー); 440 [M+Na]+
【実施例２９】
【０１８９】
２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）−Ｎ−イソプロピルブタンアミドの調製
【０１９０】
【化４７】
2021505591.tif 000049
Ｎ２雰囲気下室温のＤＣＭ（１０ｍＬ）中の２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタン酸（３００ｍｇ、０．８０１ｍｍｏｌ）およびｏ−ベンゾトリアゾール−１−イル−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート（ＴＢＴＵ）（２８４ｍｇ、０．８８４ｍｍｏｌ）の溶液に、トリエチルアミン（１２３μＬ、０．８８４ｍｍｏｌ）を加えた。Ｎ２雰囲気下室温で１５分間撹拌後、イソプロピルアミン（７６μＬ、０，８８４ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で一晩撹拌した。飽和ＮａＨＣＯ３（２５ｍＬ）を加え、混合物をｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル（２×５０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせ、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、真空中で蒸発させた。ヘプタンおよび酢酸エチルの極性漸増混合物（９５：５→５０：５０）を溶離液として使用して、シリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィーにより残留物を精製した。適切な画分を濃縮して、０．２０７ｇ（収率５９％）の表題化合物をオイルとして得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) d 0.83 - 0.93 (m, 3H), 0.95 (t, J = 7.5, 3H), 1.14 (t, J = 6.1, 6H), 1.39 -  1.47 (m, 2H), 1.56 - 1.73 (m, 3H), 1.73 - 1.83 (m, 1H), 2.02 - 2.11 (m, 4H), 2.80 - 2.84 (m, 8H), 3.43 (t, J = 6.4, 2H), 3.60 (dd, J = 6.6, 4.4, 1H), 4.02 - 4.11 (m, 1H), 5.66 - 5.01 (m, 10H), 6.33 (d, J = 5.9, 1H).
【実施例３０】
【０１９１】
２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）−Ｎ−メチルブタンアミドの調製
【０１９２】
【化４８】
2021505591.tif 000050
Ｎ２雰囲気下室温のＤＣＭ（１０ｍＬ）中の２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタン酸（３０３．６ｍｇ、０．８１１ｍｍｏｌ）およびｏ−ベンゾトリアゾール−１−イル−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート（ＴＢＴＵ）（２８５．３ｍｇ、０．８８９ｍｍｏｌ）の溶液に、トリエチルアミン（１２３μＬ、０．８８４ｍｍｏｌ）を加えた。Ｎ２雰囲気下室温で１５分間撹拌後、ＴＨＦ中のメチルアミン２．０Ｍ（０，８ｍｌ、１，６００ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で一晩撹拌した。飽和ＮａＨＣＯ３（２５ｍＬ）を加え、混合物をｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル（２×５０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせ、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、真空中で蒸発させた。ヘプタンおよび酢酸エチルの極性漸増混合物（９５：５→５０：５０）を溶離液として使用して、シリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィーにより残留物を精製した。適切な画分を濃縮して、０．２３５ｇ（収率７２％）の表題化合物をオイルとして得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3) d 0.89 (t, J = 7.4, 3H), 0.95 (t, J = 7.5, 3H), 1.37 - 1.47 (m, 2H), 1.56 - 1.72 (m, 3H), 1.74 - 1.84 (m, 1H), 2.01 - 2.15 (m, 4H), 2.78 - 2.84 (m, 11H), 3.44 (t, J = 6.4, 2H), 3.66 (dd, J = 6.4, 4.4, 1H), 5.18 - 5.52 (m, 10H), 6.51 (s, 1H).
【実施例３１】
【０１９３】
２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）−１−（ピペリジン−１−イル）ブタン−１−オンの調製
【０１９４】
【化４９】
2021505591.tif 000051
Ｎ２雰囲気下室温のＤＣＭ（８ｍＬ）中の２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタン酸（３０２．２ｍｇ、０．８０７ｍｍｏｌ）およびｏ−ベンゾトリアゾール−１−イル−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート（ＴＢＴＵ）（２８４ｍｇ、０．８８４ｍｍｏｌ）の溶液に、トリエチルアミン（１２３μＬ、０．８８４ｍｍｏｌ）を加えた。Ｎ２雰囲気下室温で１５分間撹拌後、ピペリジン（８７μＬ、０，８８４ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で一晩撹拌した。飽和ＮａＨＣＯ３（２５ｍＬ）を加え、混合物をｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル（２×５０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせ、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、真空中で蒸発させた。ヘプタンおよび酢酸エチルの極性漸増混合物（９５：５→５０：５０）を溶離液として使用して、シリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィーにより残留物を精製した。適切な画分を濃縮して、０．２７０ｇ（収率７３％）の表題化合物をオイルとして得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) d 0.93 - 0.98 (m, 6H) 1.37 - 1.46 (m, 2H), 1.51 -  1.62 (m, 8H), 1.66 -  1.77 (m, 2H), 2.02 - 2.09 (m, 4H), 2.77 - 2.83 (m, 8H), 3.30 (dt, J = 9.1, 6.6, 1H), 3.47 - 3.52 (m, 2H), 3.54 - 3.62 (m, 3H), 3.95 (dd, J = 7.9, 6.1, 1H), 5.02 -  5.65 (m, 10H).
【実施例３２】
【０１９５】
２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタンアミドの調製
【０１９６】
【化５０】
2021505591.tif 000052
トルエン（２５００ｍＬ）中の２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタン酸（３２０ｇ、８５４ｍｍｏｌ）の溶液に、塩化オキサリル（２７６ｍＬ、３．１５ｍｏｌ）を加えた。次いで、ＤＭＦ（１０ｍＬ）を注意深く滴加した後、混合物を周囲温度で１時間撹拌し、真空中で濃縮した。残留物をＤＣＭ（７５０ｍＬ）に溶解し、冷却（０℃）された撹拌アンモニア溶液（２８％、ａｑ．）（５２８ｍＬ、６．８４ｍｏｌ）にゆっくりと加えた。混合物を周囲温度で３０分間撹拌した。相を分離し、水性相をメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（７００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を３Ｍ  ＨＣｌ（２×３００ｍＬ）、ｓａｔ．ａｑ．ＮａＨＣＯ３（５００ｍＬ）、塩水（２×３００ｍＬ）で洗い、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、真空中で濃縮した。ヘプタンおよび酢酸エチルの極性漸増混合物（７０：３０→６０：４０）を溶離液として使用して、シリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィーにより残留物を精製した。適切な画分を濃縮して、２４９．８グラム（収率７６％）の表題化合物をオイルとして得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) d 0.87 - 0.92 (m, 6H), 1.32 - 1.46 (m, 2H), 1.52 - 1.59 (m, 2H), 1.62 - 1.79 (m, 2H), 1.97 - 2.06 (m, 4H), 2.68 - 2.85 (m, 8H), 3.34 -  3.51 (m, 2H), 3.60 (dd, J = 6.5, 4.5, 1H), 5.18 -  5.42 (m, 10H), 5.61 (s, 1H), 6.42 (s, 1H).
【実施例３３】
【０１９７】
Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブチル）−２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタンアミドの調製
【０１９８】
【化５１】
2021505591.tif 000053
Ｎ２雰囲気下室温のＤＣＭ（１０ｍＬ）中の２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタン酸（３０１．３ｍｇ、０．８０４ｍｍｏｌ）の溶液に、ｏ−ベンゾトリアゾール−１−イル−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート（ＴＢＴＵ）（２８５．６ｍｇ、０．８８９ｍｍｏｌ）、続いてトリエチルアミン（０．１２３ｍｌ、０．８８５ｍｍｏｌ）を加えた。混合物をＮ２雰囲気下室温で１５分間撹拌した後、２−アミノ−２−メチルプロパン（０．１０ｍＬ、０．９５２ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で一晩撹拌した。飽和ＮａＨＣＯ３（２５ｍＬ）を加え、混合物をｔ−ブチルメチルエーテル（２×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、真空中で蒸発させた。ヘプタンおよび酢酸エチルの極性漸増混合物（９５：５→５０：５０）を溶離液として使用して、シリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィーにより残留物を精製した。適切な画分を濃縮して、２４４．１ｍｇ（収率７０％）の表題化合物をオイルとして得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) d 0.89 (t, J = 7.4, 3H), 0.96 (t, J = 7.5, 3H), 1.34 (s, 9H), 1.41 - 1.46 (m, 2H), 1.57 - 1.70 (m, 3H), 1.74 - 1.81 (m, 1H), 2.02 - 2.11 (m, 4H), 2.80 -  2.83 (m, 8H), 3.27 - 3.48 (m, 2H), 3.48 - 3.56 (m, 1H), 4.93 - 5.55 (m, 10H), 6.38 (s, 1H).
【実施例３４】
【０１９９】
（Ｒ）−２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）−Ｎ−（（Ｒ）−１−フェニルエチル）ブタンアミドの調製
【０２００】
【化５２】
2021505591.tif 000054
窒素下０℃の乾燥ＤＭＦ（３ｍＬ）中の（Ｒ）−２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタン酸（４０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）および（Ｒ）−１−フェニルエタン−１−アミン（１４μＬ、０．１１ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ−メチルモルホリン（１４μＬ、０．１３ｍｍｏｌ）、続いてｏ−（ベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＢＴＵ）（４５ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物をＮ２雰囲気下室温で３０分間撹拌した。水（１０ｍＬ）を加え、混合物をヘプタン（１０ｍＬ）で抽出した。相を分離し、水相をヘプタン（１０ｍＬ）、続いてジエチルエーテル（１０ｍＬ）で抽出した。有機物を合わせ、ｓａｔ．ａｑ．ＮＨ４Ｃｌ（１０ｍｌ）および塩水（１０ｍｌ）で洗った。有機相を乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、真空中で蒸発させ、表題化合物（２０ｍｇ  ０．０４２ｍｍｏｌ、収率３８％）をオイルとして得た。
【実施例３５】
【０２０１】
（２Ｓ）−エチル２−（２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イルオキシ）ブタンアミド）−４−メチルペンタノエートの調製
【０２０２】
【化５３】
2021505591.tif 000055
Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）（１．１３ｇ、５．５ｍｍｏｌ）、ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）（０．７４ｇ、５．５ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（ＴＥＡ）（１．５８ｍＬ、１１．４ｍｍｏｌ）を、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）（２０ｍＬ）中の２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イルオキシ）ブタン酸（１．８７ｇ、５．０ｍｍｏｌ）の溶液に加え、混合物を１０分間撹拌した。Ｌ−ロイシンエチルエステル塩酸塩（０．８９ｇ、４．６ｍｍｏｌ）を加え、生じた混合物を２時間撹拌した。混合物を真空中で濃縮し、Ｅｔ２Ｏ（１００ｍｌ）に溶解し、１Ｍ  ＨＣｌ（ａｑ）、飽和ＮａＨＣＯ３（ａｑ）および塩水で洗った。有機相を乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、真空中で濃縮した。ヘプタン中の１０〜１５％  ＥｔＯＡｃの勾配を溶離液として使用して、フラッシュクロマトグラフィーにより残留物を精製した。適切な画分を濃縮して、１．８８ｇ（収率８０％）の表題化合物を得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 0.90-1.05 (m, 12H), 1.25-1.35 (m, 3H), 1.45-1.85 (m, 9H), 2.05-2.20 (m, 4H), 2.80-2.90 (m, 8H), 3.40-3.70 (m, 3H), 4.18 (q, 2H), 4.55-4.70 (m, 1H), 5.30-5.45 (m, 10H), 6.80-6.95 (m, 1H). MS (ESI): 538 [M+Na]+.
【実施例３６】
【０２０３】
（２Ｓ）−２−（２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イルオキシ）ブタンアミド）−４−メチルペンタン酸の調製
【０２０４】
【化５４】
2021505591.tif 000056
水（１０ｍＬ）中のＬｉＯＨ（７００ｍｇ、２９ｍｍｏｌ）の溶液を、ＥｔＯＨ（２０ｍＬ）中の（２Ｓ）−エチル２−（２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イルオキシ）ブタンアミド）−４−メチルペンタノエート（１．８８ｇ、３．６５ｍｍｏｌ）の溶液に加え、反応混合物を４０℃で１時間撹拌した。混合物を周囲温度まで冷却し、ｐＨ〜２まで３Ｍ  ＨＣｌ（ａｑ）を加えた。生じた混合物をＥｔ２Ｏで２回抽出し、合わせた有機相を乾燥（ＮａＳＯ４）し、濾過し、減圧下で濃縮して、１．５５ｇ（収率８７％）の表題化合物を得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 0.90-1.05 (m, 12H), 1.45-1.55 (m, 2H), 1.65-1.85 (m, 7H), 2.05-2.20 (m, 4H), 2.80-2.90 (m, 8H), 3.45-3.65 (m, 2H), 3.70-3.80 (m, 1H), 4.55-4.70 (m, 1H), 5.30-5.45 (m, 10H), 6.85-7.00 (m, 1H), 10.30 (br s, 1H). MS (ESI); 510 [M+Na]+.
【実施例３７】
【０２０５】
ｔｅｒｔ−ブチル２−（（（２Ｓ）−２−（２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イルオキシ）ブタンアミド）−４−メチルペンタノイル）オキシ）ベンゾエートの調製
【０２０６】
【化５５】
2021505591.tif 000057
２−ヒドロキシ安息香酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２９１ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）、ＴＥＡ（０．４６ｍＬ、３．３ｍｍｏｌ）およびＯ−（ベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＴＢＴＵ）（５００ｍｇ、１．６５ｍｍｏｌ）を、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）（１０ｍＬ）中の（２Ｓ）−２−（２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イルオキシ）ブタンアミド）−４−メチルペンタン酸（７３０ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）の溶液に加えた。反応混合物を６５℃で２時間加熱し、室温まで冷却し、Ｅｔ２Ｏ（１００ｍＬ）を加えた。生じた２つの相を分離し、有機相を１０％  ＮＨ４Ｃｌ（ａｑ）および塩水で洗い、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、真空中で濃縮した。ヘプタン中の１０％  ＥｔＯＡｃを溶離液として使用して、フラッシュクロマトグラフィーにより残留物を精製した。適切な画分を濃縮して、４０４ｍｇ（収率４１％）の表題化合物を得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 0.90-1.05 (m, 12H), 1.40-1.55 (m, 2H), 1.57 (s, 9H), 1.60-1.85 (m, 6H), 2.00-2.20 (m, 5H), 2.80-2.90 (m, 8H), 3.40-3.60 (m, 2H), 3.70-3.80 (m, 1H), 4.90-5.05 (m, 1H), 5.30-5.45 (m, 10H), 7.10 (d, 2H), 7.25-7.35 (m, 1H), 7.50-7.55 (m, 1H), 7.85-7.95 (m, 1H). MS (ESI): 686 [M+Na]+.
【実施例３８】
【０２０７】
２−（（（２Ｓ）−２−（２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イルオキシ）ブタンアミド）−４−メチルペンタノイル）オキシ）安息香酸の調製
【０２０８】
【化５６】
2021505591.tif 000058
ＴＦＡ（１ｍＬ）を、０℃のＤＣＭ（４ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル２−（（（２Ｓ）−２−（２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イルオキシ）ブタンアミド）−４−メチルペンタノイル）オキシ）ベンゾエート（１５０ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ）の溶液に加え、反応混合物を４０分間撹拌した。トルエン（１０ｍＬ）を加え、混合物を真空中で濃縮した。ヘプタン（０．１％  ＦＡを含む）中の１３％  ＥｔＯＡｃ（やはり０．１％  ＦＡを含む）を溶離液として使用して、フラッシュクロマトグラフィーにより残留物を精製した。適切な画分を濃縮し、残留物（１００ｍｇ）をＥｔ２Ｏ（５０ｍＬ）に溶解した。溶液を飽和ＮａＨＣＯ３（ａｑ）で洗い、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、真空中で濃縮して、６０ｍｇの所望の生成物を得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 0.85-1.05 (m, 12H), 1.35-2.15 (m, 13H), 2.75-2.90 (m, 8H), 3.40-3.60 (m, 2H), 3.70-3.80 (m, 1H), 4.85-5.05 (m, 1H), 5.30-5.45 (m, 10H), 7.0-7.20 (m, 2H), 7.25-7.40 (m, 1H), 7.50-7.65 (m, 1H), 8.00-8.15 (m, 1H). MS (ESI); 630 [M+Na]+. HR-MS(ESI): C37H53NO6+Naの計算値: 630.3770, 実測値: 630.3786.
【実施例３９】
【０２０９】
ｔｅｒｔ−ブチル（２−（２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イルオキシ）ブタンアミド）エチル）カルバメートの調製
【０２１０】
【化５７】
2021505591.tif 000059
ＤＣＣ（１．７３ｇ、８．４ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（１．１４ｇ、８．４ｍｍｏｌ）を、０℃のＴＨＦ（２５ｍＬ）中の２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イルオキシ）ブタン酸（３．１４ｇ、８．４ｍｍｏｌ）の溶液に加え、混合物を２０分間撹拌した。ＴＨＦ（１ｍＬ）中のＮ−Ｂｏｃ−エチレンジアミンの溶液を滴加し、生じた混合物を室温で１．５時間撹拌した。Ｅｔ２Ｏ（２００ｍＬ）を加え、混合物を水、１Ｍ  ＨＣｌ（ａｑ）、飽和ＮａＨＣＯ３（ａｑ）および塩水で洗った。有機相を乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、真空中で濃縮した。ヘプタン（０．５％  ＦＡを含む）中の２５％  ＥｔＯＡｃ（やはり０．５％  ＦＡを含む）を溶離液として使用して、フラッシュクロマトグラフィーにより残留物を精製した。適切な画分を濃縮して、３．０ｇ（収率８３％）の表題化合物を得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 0.90 (t, 3H), 0.96 (t, 3H), 1.43 (s, 9H), 1.40-1.80 (m, 6H), 2.05-2.20 (m, 4H), 2.75-2.90 (m, 8H), 3.20-3.60 (m, 6H), 3.65-3.75 (m, 1H), 5.02 (br s, 1H), 5.30-5.45 (m, 10H), 7.01 (br s, 1H). MS (ESI): 539 [M+Na]+.
【実施例４０】
【０２１１】
２−ヒドロキシ−Ｎ−（２−（２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イルオキシ）ブタンアミド）エチル）ベンズアミドの調製
【０２１２】
【化５８】
2021505591.tif 000060
ＴＦＡ（２ｍＬ）を、ＤＣＭ（８ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル（２−（２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イルオキシ）ブタンアミド）エチル）カルバメート（６６８ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ）の溶液に加え、生じた混合物を１．５時間撹拌した。混合物を真空中で濃縮して、Ｎ−（２−アミノエチル）−２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イルオキシ）ブタンアミドのＴＦＡ塩を粗生成物として得た（８００ｍｇ、ＭＳ（ＥＳＩ）：４１７［Ｍ＋Ｈ］＋、４３９［Ｍ＋Ｎａ］＋）。残留物をＤＣＭ（１０ｍＬ）に溶解し、ＤＣＣ（３２０ｍｇ、１．５５ｍｍｏｌ）、ＴＥＡ（０．３６ｍＬ、２．６ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（２１０ｍｇ、１．５５ｍｍｏｌ）を加えた。１５分後、ＤＣＭ（１ｍＬ）中のサリチル酸（２１４ｍｇ、１．５５ｍｍｏｌ）の溶液を滴加し、生じた混合物を一晩撹拌した。混合物を濃縮し、残留物をＥｔ２Ｏ（１００ｍＬ）に溶解し、水、１Ｍ  ＨＣｌ（ａｑ）、飽和ＮａＨＣＯ３（ａｑ）および塩水で洗った。有機相を乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、真空中で濃縮した。ヘプタン（５％  ＦＡを含む）中の４〜１５％  ＥｔＯＡｃ（やはり５％  ＦＡを含む）の勾配を溶離液として使用して、フラッシュクロマトグラフィーにより粗オイルを精製した。適切な画分を濃縮して、１１０ｍｇ（２ステップで収率１６％）の表題化合物を得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 0.89 (t, 3H), 0.99 (t, 3H), 1.35-1.50 (m, 2H), 1.60-1.90 (m, 4H), 2.05-2.20 (m, 4H), 2.8-2.9 (m, 8H), 3.47 (t, 2H), 3.50-3.70 (m, 4H), 3.70-3.80 (m, 1H), 5.30-5.45 (m, 10H), 6.85-6.95 (m, 1H), 6.97 (dd, 1H), 7.14 (br s, 1H), 7.35-7.45 (m, 1H), 7.48 (dd, 1H), 7.95 (br s, 1H), 12.51 (br s, 1H). MS (ESI): 537 [M+H]+, 559 [M+Na]+.
【実施例４１】
【０２１３】
２−（２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イルオキシ）ブタンアミド）エチル２−アセトキシベンゾエートの調製
【０２１４】
【化５９】
2021505591.tif 000061
ＴＢＴＵ（０．８５ｇ、２．６４ｍｍｏｌ）およびＴＥＡ（０．８ｍＬ、５．３ｍｍｏｌ）を、ＤＣＭ（２０ｍＬ）中のアセチルサリチル酸（０．４ｇ、２．４ｍｍｏｌ）の溶液に加え、混合物を１０分間撹拌した。ＤＣＭ（１０ｍＬ）中のＮ−（２−ヒドロキシエチル）−２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イルオキシ）ブタンアミド（１．０ｇ、１．４ｍｍｏｌ）の溶液を加え、反応混合物を室温で１時間撹拌し、次いで、一晩還流させた。水を加え、生じた混合物をＤＣＭで２回抽出した。合わせた有機相を乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、真空中で濃縮した。ヘプタン中の０〜２０％  ＥｔＯＡｃの勾配を溶離液として使用して、フラッシュクロマトグラフィーにより残留物を精製した。適切な画分を濃縮して、９００ｍｇ（収率６５％）の表題化合物を得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 0.85-1.00 (m, 6H), 1.35-1.50 (m, 2H), 1.50-1.85 (m, 4H), 2.00-2.20 (m, 4H), 2.37 (s, 3H), 2.75-2.90 (m, 8H), 3.40-3.55 (m, 2H), 3.55-3.75 (m, 3H), 4.15-4.45 (m, 2H), 5.30-5.50 (m, 10H), 6.80-95 (m, 1H), 7.10-7.15 (m, 1H), 7.30-7.40 (m, 1H), 7.55-7.65 (m, 1H), 8.00-8.05 (m, 1H). MS (ESI): 602 [M+Na]+.
【実施例４２】
【０２１５】
２−（２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イルオキシ）ブタンアミド）エチル２−ヒドロキシベンゾエートの調製
【０２１６】
【化６０】
2021505591.tif 000062
アンモニア（ａｑ、２８％、３ｍＬ）を、２−プロパノール（２７ｍＬ）および水（９ｍＬ）中の２−（２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イルオキシ）ブタンアミド）エチル２−アセトキシベンゾエート（３９０ｍｇ、０．６７ｍｍｏｌ）の溶液に滴加し、混合物を１０分間撹拌した。水を加え、生じた混合物をＥｔ２Ｏで２回抽出した。合わせた有機相を塩水で洗い、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、真空中で濃縮した。ヘプタン中の０〜２０％  ＥｔＯＡｃの勾配を溶離液として使用して、フラッシュクロマトグラフィーにより残留物を精製した。適切な画分を濃縮して、６３ｍｇ（収率１８％）の表題化合物を得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 0.91 (t, 3H), 0.97 (t, 3H), 1.35-1.45 (m, 2H), 1.55-1.90 (m, 4H), 2.00-2.15 (m, 4H), 2.80-2.90 (m, 8H), 3.44 (t, 2H), 3.65-3.80 (m, 3H), 4.40-4.50 (m, 2H), 5.30-5.45 (m, 10H), 6.85-6.95 (m, 2H), 6.95-7.05 (m, 1H), 7.40-7.50 (m, 1H), 7.80-7.85 (m, 1H), 10.63 (s, 1H). MS (ESI): 560 [M+Na]+.
【実施例４３】
【０２１７】
メチル２−ヒドロキシ−５−（２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イルオキシ）ブタンアミド）ベンゾエートの調製
【０２１８】
【化６１】
2021505591.tif 000063
２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イルオキシ）ブタン酸（３００ｍｇ、０．８０ｍｍｏｌ）、メチル５−アミノサリシレート（１４０ｍｇ、０．８３ｍｍｏｌ）およびＴＥＡ（０．２２ｍＬ、１．６０ｍｍｏｌ）をＭｅＣＮ（３ｍＬ）に溶解した。ＨＡＴＵ（３２０ｍｇ、０．８３ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を一晩撹拌した。次いで、混合物を減圧下で濃縮し、残留物をＥｔ２Ｏ（３０ｍＬ）と塩水（２０ｍＬ）の間で分配させた。水性相をＥｔ２Ｏ（２０ｍＬ）で抽出し、合わせた有機相を２Ｍ  ＨＣｌ（ａｑ、１５ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ３（ａｑ、１５ｍＬ）および塩水（１５ｍＬ）で洗い、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、真空中で濃縮した。ヘプタン中の５％  ＥｔＯＡｃを溶離液として使用して、フラッシュクロマトグラフィーにより残留物を精製した。適切な画分を濃縮して、３２０ｍｇ（収率７７％）の表題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）：５４６［Ｍ＋Ｎａ］＋。
【実施例４４】
【０２１９】
２−ヒドロキシ−５−（２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イルオキシ）ブタンアミド）安息香酸の調製
【０２２０】
【化６２】
2021505591.tif 000064
２Ｍ  ＮａＯＨ（ａｑ、６ｍＬ）を、ＭｅＯＨ（３ｍＬ）中のメチル２−ヒドロキシ−５−（２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イルオキシ）ブタンアミド）ベンゾエート（３２０ｍｇ、０．６１ｍｍｏｌ）の溶液に加え、反応混合物を５０℃で一晩加熱した。混合物を周囲温度まで冷却し、５Ｍ  ＨＣｌ（ａｑ）でｐＨ〜２の酸性にした。生じた混合物をＥｔＯＡｃで抽出し、有機相を乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、真空中で濃縮した。ＥｔＯＡｃ中の１〜２％  ＭｅＯＨの勾配を溶離液として使用して、フラッシュクロマトグラフィーにより残留物を精製した。適切な画分を濃縮して、８５ｍｇ（収率２７％）の表題化合物を得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 0.90-1.05 (t, 3H), 1.20-1.30 (m, 1H), 1.45-1.60 (m, 2H), 1.65-1.75 (m, 2H), 1.80-1.95 (m, 2H), 2.05-2.20 (m, 4H), 2.80-2.90 (m, 8H), 3.50-3.65 (m, 2H), 3.85-3.95 (m, 1H), 5.30-5.45 (m, 10H), 6.90-7.00 (m, 1H), 7.58 (br s, 1H), 8.11 (br s, 1H), 8.40 (s, 1H). MS (ESI): 508 [M-H]-.
【実施例４５】
【０２２１】
（２Ｓ）−エチル２−（２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イルオキシ）ブタンアミド）−４−メチルペンタノエートの調製
【０２２２】
【化６３】
2021505591.tif 000065
ＤＣＣ（１．１３ｇ、５．５ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（０．７４ｇ、５．５ｍｍｏｌ）、続いてＴＥＡ（１．５８ｍＬ、１１．４ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ（２０ｍＬ）中の２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イルオキシ）ブタン酸（１．８７ｇ、５．０ｍｍｏｌ）の溶液に加え、混合物を１０分間撹拌した。Ｌ−ロイシンエチルエステル塩酸塩（０．８９ｇ、４．６ｍｍｏｌ）を加え、生じた混合物を２時間撹拌した。ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）を加え、混合物を水、１Ｍ  ＨＣｌ（ａｑ）、飽和ＮａＨＣＯ３（ａｑ）および塩水で洗った。有機相を乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、真空中で濃縮した。ヘプタン中の１０〜１５％  ＥｔＯＡｃの勾配を溶離液として使用して、フラッシュクロマトグラフィーにより残留物を精製した。適切な画分を濃縮して、１．８４ｇ（収率７９％）の表題化合物を得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 0.85-1.05 (m, 12H), 1.25-1.35 (m, 3H), 1.40-1.85 (m, 9H), 2.05-2.20 (m, 4H), 2.80-2.90 (m, 8H), 3.45-3.75 (m, 3H), 4.15-4.25 (m, 2H), 4.55-4.75 (m, 1H), 5.30-5.45 (m, 10H), 6.80-6.95 (m, 1H). MS (ESI): 538 [M+Na]+.
【実施例４６】
【０２２３】
（２Ｓ）−２−（２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イルオキシ）ブタンアミド）−４−メチルペンタン酸の調製
【０２２４】
【化６４】
2021505591.tif 000066
１Ｍ  ＬｉＯＨ（ａｑ、２８ｍＬ）を、ＥｔＯＨ（５０ｍＬ）中の（２Ｓ）−エチル２−（２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イルオキシ）ブタンアミド）−４−メチルペンタノエート（１．７９ｇ、３．５ｍｍｏｌ）の溶液に加え、反応混合物を５０℃まで２時間加熱した。混合物を周囲温度まで冷却し、ｐＨ〜２まで６Ｍ  ＨＣｌ（ａｑ）を加えた。生じた混合物をＥｔ２Ｏで２回抽出し、合わせた有機相を乾燥（ＮａＳＯ４）し、濾過し、減圧下で濃縮して、１．６１ｇ（収率９５％）の表題化合物を得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 0.85-1.05 (m, 12H), 1.45-1.55 (m, 2H), 1.60-1.85 (m, 7H), 2.05-2.20 (m, 4H), 2.80-2.90 (m, 8H), 3.45-3.65 (m, 2H), 3.70-3.80 (m, 1H), 4.60-4.75 (m, 1H), 5.30-5.45 (m, 10H), 6.90-7.05 (m, 1H), 10.15 (br s, 1H). MS (ESI): 486 [M-H]-.
【実施例４７】
【０２２５】
メチル２−ヒドロキシ−５−（（２Ｓ）−２−（２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イルオキシ）ブタンアミド）−４−メチルペンタンアミド）ベンゾエートの調製
【０２２６】
【化６５】
2021505591.tif 000067
ＤＣＣ（２４８ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（１６３ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）を、０℃のＴＨＦ（８ｍＬ）中の（２Ｓ）−２−（２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イルオキシ）ブタンアミド）−４−メチルペンタン酸（４８７ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）の溶液に加えた。ＴＨＦ（１ｍＬ）中のメチル５−アミノサリシレート（２０１ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）の溶液を滴加し、反応混合物を室温で３時間撹拌した。Ｅｔ２Ｏ（１００ｍＬ）を加え、混合物を水、１Ｍ  ＨＣｌ（ａｑ）、飽和ＮａＨＣＯ３（ａｑ）および塩水で洗った。有機相を乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、真空中で濃縮した。ヘプタン（５％  ＦＡを含む）中の３〜１５％  ＥｔＯＡｃ（やはり５％  ＦＡを含む）の勾配を溶離液として使用して、フラッシュクロマトグラフィーにより残留物を精製した。適切な画分を濃縮して、１９７ｍｇ（収率３１％）の表題化合物を得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 0.85-1.05 (m, 12H), 1.40-1.50 (m, 2H), 1.60-1.90 (m, 7H), 2.05-2.20 (m, 4H), 2.80-2.90 (m, 8H), 3.45-3.55 (m, 2H), 3.75-3.80 (m, 1H), 3.94 (s, 1H), 4.55-4.65 (m, 1H), 5.30-5.45 (m, 10H), 6.90-7.00 (m, 2H), 7.45-7.50 (m, 1H), 8.00-8.10 (m, 1H), 8.66 (s, 1H), 10.59 (s, 1H). MS (ESI): 659 [M+Na]+.
【実施例４８】
【０２２７】
２−ヒドロキシ−５−（（２Ｓ）−２−（２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イルオキシ）ブタンアミド）−４−メチルペンタンアミド）安息香酸の調製
【０２２８】
【化６６】
2021505591.tif 000068
１Ｍ  ＬｉＯＨ（ａｑ、２．５ｍＬ）を、ＭｅＯＨ（５ｍＬ）中のメチル２−ヒドロキシ−５−（（２Ｓ）−２−（２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イルオキシ）ブタンアミド）−４−メチルペンタンアミド）ベンゾエート（１９０ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）の溶液に加えた。反応混合物を５０℃で５時間加熱し、次いで、室温で３日間撹拌した。混合物を６Ｍ  ＨＣｌ（ａｑ）でｐＨ〜２の酸性にし、溶媒の大部分を真空中で除去した。残留物をＥｔ２Ｏで２回抽出し、合わせた有機相を乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、真空中で濃縮した。ヘプタン（５％  ＦＡを含む）中の５〜２５％  ＥｔＯＡｃ（やはり５％  ＦＡを含む）の勾配を溶離液として使用して、フラッシュクロマトグラフィーにより残留物を精製した。適切な画分を濃縮して、１００ｍｇ（収率５４％）の表題化合物を得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 0.90-1.05 (m, 12H), 1.40-1.50 (m, 2H), 1.60-1.90 (m, 7H), 2.05-2.20 (m, 4H), 2.80-2.90 (m, 8H), 3.45-3.60 (m, 2H), 3.80-3.90 (m, 1H), 4.60-4.75 (m, 1H), 5.30-5.45 (m, 10H), 6.89 (d, 1H), 7.24 (d, 1H), 7.70-7.90 (m, 2H), 9.02 (d, 1H), 10.37 (d, 1H). MS (ESI): 623 [M+H]+.
【実施例４９】
【０２２９】
メチル２−ヒドロキシ−５−（（（２−（２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イルオキシ）ブタンアミド）エトキシ）カルボニル）アミノ）ベンゾエートの調製
【０２３０】
【化６７】
2021505591.tif 000069
ジホスゲン（０．１６ｍＬ、１．３ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルアミン（０．１６ｍＬ、０．９６ｍｍｏｌ）を、０℃のＤＣＭ（１５ｍＬ）中のＮ−（２−ヒドロキシエチル）−２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イルオキシ）ブタンアミド（０．４ｇ、０．９６ｍｍｏｌ）の溶液に加えた。反応混合物を０℃で１時間、次いで室温で２時間撹拌した。混合物を減圧下で濃縮し、残留物をＴＨＦ（２０ｍＬ）に懸濁させた。懸濁液を濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。次いで、残留物をＥｔ２Ｏに懸濁させ、シリカのパッドに通して濾過し、真空中で濃縮し、０．６６ｇの２−（２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イルオキシ）ブタンアミド）エチルカルボノクロリダートを粗生成物として得た。残留物をＤＣＭ（１５ｍＬ）に溶解し、メチル５−アミノサリシレート（０．１３ｇ、０．７７ｍｍｏｌ）およびＴＥＡ（０．２ｍＬ、１．５４ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を２時間撹拌し、次いで、水を加えた。生じた混合物をＤＣＭで２回抽出し、合わせた有機相を乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、真空中で濃縮した。ヘプタン中の３０〜５０％  ＥｔＯＡｃの勾配を溶離液として使用して、フラッシュクロマトグラフィーにより残留物を精製した。適切な画分を濃縮して、１４５ｍｇ（収率３０％）の表題化合物を得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 0.85-1.00 (m, 6H), 1.35-1.50 (m, 2H), 1.50-1.85 (m, 4H), 2.00-2.20 (m, 4H), 2.75-2.90 (m, 8H), 3.40-3.55 (m, 2H), 3.55-3.75 (m, 3H), 3.95 (s, 3H), 4.25-4.35 (m, 2H), 5.25-5.45 (m, 10H), 6.68 (br s, 1H), 6.85-7.00 (m, 2H), 7.35-7.45 (m, 1H), 7.91 (br s, 1H), 10.57 (s, 1H). MS (ESI): 633 [M+Na]+.
【実施例５０】
【０２３１】
２−ヒドロキシ−５−（（（２−（２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イルオキシ）ブタンアミド）エトキシ）カルボニル）アミノ）安息香酸の調製
【０２３２】
【化６８】
2021505591.tif 000070
１Ｍ  ＬｉＯＨ（ａｑ、１．９ｍＬ）を、ＭｅＯＨ（２０ｍＬ）中のメチル２−ヒドロキシ−５−（（（２−（２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イルオキシ）ブタンアミド）エトキシ）カルボニル）アミノ）ベンゾエート（１４５ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）の溶液に加え、混合物を５０℃で一晩加熱した。反応混合物を１Ｍ  ＨＣｌ（ａｑ）でｐＨ〜２の酸性にし、次いで、Ｅｔ２Ｏで２回抽出した。合わせた有機相を乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、真空中で濃縮した。ヘプタン（５％  ＦＡを含む）中の２０％  ＥｔＯＡｃ（やはり５％  ＦＡを含む）を溶離液として使用して、フラッシュクロマトグラフィーにより残留物を精製した。適切な画分をプールして濃縮した。水（５％  ＭｅＣＮおよび０．０１％  ＴＦＡを含む）中の３０〜９５％  ＭｅＣＮの勾配を溶離液として使用して、分取ＨＰＬＣにより残留物（４６ｍｇ）をさらに精製した。適切な画分をプールして濃縮し、残留物をトルエンに溶解した。溶液を濃縮して、２４ｍｇ（収率１７％）の表題化合物を得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 0.91-1.01 (m, 6H), 1.35-1.50 (m, 2H), 1.55-1.90 (m, 4H), 2.05-2.15 (m, 4H), 2.80-2.90 (m, 8H), 3.45-3.55 (m, 2H), 3.65-3.75 (m, 2H), 3.75-3.85 (m, 1H), 4.25-4.35 (m, 2H), 5.30-5.45 (m, 10H), 6.90-7.00 (m, 2H), 7.00-7.10 (m, 1H), 7.63 (br s, 1H), 7.83 (s, 1H), 10.43 (br s, 1H). MS (ESI): 597 [M+H]+.
【実施例５１】
【０２３３】
２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イルオキシ）−Ｎ−（２−イソシアナトエチル）ブタンアミドの調製
【０２３４】
【化６９】
2021505591.tif 000071
１，８−ビス（ジメチルアミノ）ナフタレン（５７７ｍｇ、２．７ｍｍｏｌ）を、ＤＣＭ（１０ｍｌ）中のＮ−（２−アミノエチル）−２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イルオキシ）ブタンアミド（５６０ｍｇ、１．３５ｍｍｏｌ）の溶液に加え、混合物を０℃まで冷却した。クロロギ酸トリクロロメチル（９８μｌ、０．８１ｍｍｏｌ）を滴加した後、冷却浴を取り外し、混合物を１５分間撹拌した。１Ｍ  ＨＣｌ（ａｑ、３０ｍｌ）およびＤＣＭ（３０ｍｌ）を加えた。生じた２つの相を分離し、有機相を１Ｍ  ＨＣｌ（ａｑ）で４回、１Ｍ  ＮａＯＨ（ａｑ）で１回洗い、乾燥（ＮａＳＯ４）し、濾過し、減圧下で濃縮し、５００ｍｇ（収率８４％）の表題化合物を粗生成物として得た。MS (ESI): 465 [M+Na]+.
【実施例５２】
【０２３５】
メチル２−ヒドロキシ−５−（３−（２−（２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イルオキシ）ブタンアミド）エチル）ウレイド）ベンゾエートの調製
【０２３６】
【化７０】
2021505591.tif 000072
メチル５−アミノサリシエート（１８９ｍｇ、１．１３ｍｍｏｌ）を、ＤＣＭ（５ｍｌ）中の２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イルオキシ）−Ｎ−（２−イソシアナトエチル）ブタンアミド（５００ｍｇ、１．１３ｍｍｏｌ）の溶液に加えた。反応混合物を２時間撹拌し、次いで、真空中で濃縮した。ＥｔＯＡｃ中の４０〜０％ヘプタンの勾配を溶離液として使用して、フラッシュクロマトグラフィーにより残留物を精製した。適切な画分を濃縮して、２３０ｍｇ（収率３３％）の表題化合物を得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 0.85-1.05 (2xt, 6H), 1.35-1.50 (m, 2H), 1.55-1.85 (m, 4H), 2.05-2.20 (m, 4H), 2.75-2.95 (m, 8H), 3.35-3.50 (m, 6H), 3.65-3.75 (m, 1H), 3.94 (s, 3H), 5.30-5.50 (m, 10H), 6.95 (d, 1H), 7.10 (br s, 1H), 7.40 (dd, 1H), 7.88 (d, 1H), 10.62 (s, 1H). MS (ESI); 632 [M+Na]+.
【実施例５３】
【０２３７】
２−ヒドロキシ−５−（３−（２−（２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イルオキシ）ブタンアミド）エチル）ウレイド）安息香酸の調製
【０２３８】
【化７１】
2021505591.tif 000073
１Ｍ  ＬｉＯＨ（ａｑ、２．９ｍＬ）を、ＭｅＯＨ（１０ｍＬ）中のメチル２−ヒドロキシ−５−（３−（２−（２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イルオキシ）ブタンアミド）エチル）ウレイド）ベンゾエート（２２０ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）の溶液に滴加し、混合物を５０℃で一晩加熱した。混合物を周囲温度まで冷却し、次いで、６Ｍ  ＨＣｌ（ａｑ）でｐＨ〜２の酸性にした。生じた混合物をＥｔＯＡｃで２回抽出し、合わせた有機相を塩水で洗い、乾燥（ＮａＳＯ４）し、濾過し、減圧下で濃縮した。ヘプタン（５％  ＦＡを含む）中の５〜４０％  ＥｔＯＡｃ（やはり５％  ＦＡを含む）の勾配を溶離液として使用して、フラッシュクロマトグラフィーにより残留物を精製した。適切な画分を濃縮して、９２ｍｇ（収率４３％）の表題化合物を得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 0.91 (t, 3H), 0.98 (t, 3H), 1.40-1.50 (m, 2H), 1.60-1.90 (m, 4H), 2.05-2.20 (m, 4H), 2.80-2.90 (m, 8H), 3.40-3.60 (m, 6H), 3.75-3.80 (m, 1H), 5.30-5.45 (m, 10H), 6.90 (d, 1H), 7.25-7.35 (m, 1H), 7.45-7.55 (m, 1H), 7.80-7.95 (m, 2H), 10.56 (br s, 1H). MS (ESI): 596 [M+H]+, 618 [M+Na]+.
【実施例５４】
【０２３９】
ｔｅｒｔ−ブチル２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエニルオキシ）プロパノエートの調製
【０２４０】
【化７２】
2021505591.tif 000074
（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−オール、（１．００ｇ、３．４７ｍｍｏｌ）、テトラブチルアンモニウムクロリド（０．２４ｇ、０．８７ｍｍｏｌ）およびｔ−ブチル２−ブロモプロピオネート（３．６２ｇ、１７．３ｍｍｏｌ）の混合物をトルエン（３６ｍＬ）に溶解し、窒素下に置いた。水酸化ナトリウムの水性溶液（５０％、８ｍＬ）を激しく撹拌しながらゆっくりと加え、生じた混合物を周囲温度で２０時間撹拌した。水を加え、混合物をエーテルで３回抽出した。合わせた有機抽出物を塩水で洗い、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、濃縮した。ヘプタン中の２％酢酸エチルを溶離液として使用して、シリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィーにより残留物を精製した。適切な画分を濃縮して、１．４０ｇ（収率９０％）の表題化合物をオイルとして得た。1H-NMR (300 MHz, CDCl3): δ 0.95 (t, 3H), 1.41 (d, 3H), 1.48 (s, 9H), 1.48-1.66 (m, 4H), 2.05 (m, 4H), 2.83 (m, 8H), 3.35 (m, 1H), 3.55 (m, 1H), 3.79 (q, 1H), 5.32-5.44 (m, 10H).
【実施例５５】
【０２４１】
２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエニルオキシ）プロパン酸の調製
【０２４２】
【化７３】
2021505591.tif 000075
トリフルオロ酢酸（２ｍＬ）を、窒素下に保ったジクロロメタン（１０ｍＬ）中の２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエニルオキシ）プロパノエート（１．４０ｇ、３．３６ｍｍｏｌ）の溶液に加え、反応混合物を室温で３時間撹拌した。ジエチルエーテル（５０ｍＬ）を加え、有機相を水（３０ｍＬ）で洗い、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濃縮した。ヘプタン、酢酸エチルおよびギ酸の極性漸増混合物（９５：５：０．２５→８０：２０：１）を溶離液として使用して、シリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィーに残留物をかけた。適切な画分を濃縮して、０．６７ｇのわずかに不純な生成物を得た。この材料をヘプタン（１５ｍＬ）に溶解し、水（５ｍＬ）で３回洗い、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、濃縮して、０．５０ｇ（収率４１％）の表題化合物をオイルとして得た。1H-NMR (300 MHz, CDCl3): δ 0.99 (t, 3H), 1.40-1.48 (m, 5H), 1.67 (m, 2H), 2.09 (m, 4H), 2.80-2.60 (m, 8H), 3.53 (m, 2H), 4.01 (q, 1H), 5.31-5.47 (m, 10H); MS (エレクトロスプレー): 359.2 [M-H]-.
【実施例５６】
【０２４３】
ｔｅｒｔ−ブチル２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエニルオキシ）−２−メチルプロパノエートの調製
【０２４４】
【化７４】
2021505591.tif 000076
（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−オール（０．８３ｇ、３．１４ｍｍｏｌ）、テトラブチルアンモニウムクロリド（０．２４ｇ、０．８５ｍｍｏｌ）およびｔ−ブチル２−ブロモイソブチレート（３．５０ｇ、１５．７ｍｍｏｌ）の混合物をトルエン（１５ｍＬ）に溶解し、窒素下に置いた。水酸化ナトリウムの水性溶液（５０％、５ｍＬ）を室温で激しく撹拌しながらゆっくりと加えた。生じた混合物を６０℃まで加熱し、６時間撹拌した。混合物を冷却し、水を加え、エーテルで３回抽出した。合わせた有機抽出物を塩水で洗い、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、濃縮した。ヘプタン中の５〜１０％酢酸エチルの勾配を溶離液として使用して、シリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィーにより残留物を精製した。適切な画分を濃縮して、０．６０ｇ（収率４４％）の表題化合物をオイルとして得た。MS (エレクトロスプレー): 453.3 [M+Na]+.
【実施例５７】
【０２４５】
２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエニルオキシ）−２−メチルプロパン酸の調製
【０２４６】
【化７５】
2021505591.tif 000077
トリフルオロ酢酸（５ｍＬ）を、窒素下のジクロロメタン（２０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエニルオキシ）−２−メチルプロパノエート（６００ｍｇ、１．３９ｍｍｏｌ）の溶液に加え、反応混合物を室温で２時間撹拌した。水を加え、水性相をジクロロメタンで２回抽出した。合わせた有機抽出物を塩水で洗い、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、濃縮した。ヘプタン、酢酸エチルおよびギ酸の混合物（８０：２０：１）を溶離液として使用して、シリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィーにより残留物を精製した。適切な画分を濃縮し、ヘプタン中の５〜１０％の酢酸エチルおよびギ酸の混合物（９５：５）の勾配を溶離液として使用して、シリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィーにより残留物（１３５ｍｇ）をさらに精製した。適切な画分を濃縮して、わずかに不純な生成物８０ｍｇを得た。この材料をヘプタン（５ｍＬ）に溶解し、水（５ｍＬ）で２回洗い、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、濃縮して、４０ｍｇ（収率８％）の表題化合物をオイルとして得た。1H-NMR (300 MHz, CDCl3): δ 0.99 (t, 3H), 1.47 (s, 6H), 1.64 (m, 2H), 2.07 (m, 4H), 2.81-2.88 (m, 8H), 3.46 (t, 2H), 5.29-5.44 (m, 10H); MS (エレクトロスプレー): 373.3 [M-H]-.
【実施例５８】
【０２４７】
ｔｅｒｔ−ブチル２−エチル−２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イルオキシ）ブタノエートの調製
【０２４８】
【化７６】
2021505591.tif 000078
窒素下−７０℃に保った乾燥テトラヒドロフラン（１０ｍＬ）中のリチウムジイソプロピルアミン（ＬＤＡ）（２．０Ｍ、７５０μＬ、１．５０ｍｍｏｌ）の溶液に、ｔｅｒｔ−ブチル２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イルオキシ）ブタノエート（４８０ｍｇ、１．１１ｍｍｏｌ）を３０分にわたって滴加した。反応混合物を３０分間撹拌した。ヨウ化エチル（３１２ｍｇ、２．００ｍｍｏｌ）を１回で加え、生じた混合物を１時間で周囲温度まで加温した。反応混合物を周囲温度で１７時間撹拌した。混合物を飽和ＮＨ４Ｃｌ（ａｑ．）（５０ｍＬ）に注ぎ、ヘプタン（２×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を塩水（５０ｍＬ）、０．２５Ｍ  ＨＣｌ（５０ｍＬ）および塩水（５０ｍＬ）で順次洗い、乾燥（ＭｇＳＯ４）し、濾過し、濃縮した。ヘプタンおよび酢酸エチルの極性漸増混合物（１００：０→９５：５）を溶離液として使用して、シリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィーにより残留物を精製した。適切な画分を濃縮して、３４３ｍｇ（収率６７％）の表題化合物をオイルとして得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 0.84 (t, 6H), 0.99 (td, 3H), 1.35-1.55 (m, 11 H), 1.54-1.69 (m, 2H), 1.68-1.87 (m, 4H), 1.99-2.24 (m, 4H), 2.74-2.99 (m, 8H), 3.31 (t, 2H), 5.23-5.52 (m, 10H); MS (エレクトロスプレー): 401.3 [M-1]-.
【実施例５９】
【０２４９】
２−エチル−２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イルオキシ）ブタン酸の調製
【０２５０】
【化７７】
2021505591.tif 000079
ギ酸（５ｍｌ）およびｔｅｒｔ−ブチル２−エチル−２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イルオキシ）ブタノエート（２５０ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ）の混合物を窒素下室温で４．５時間激しく撹拌した。ギ酸を真空中で除去した。ヘプタンおよび酢酸エチルの極性漸増混合物（１００：０→８０：２０）を溶離液として使用して、シリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィーにより残留物を精製した。適切な画分を濃縮して、１６３ｍｇ（収率７４％）の表題化合物をオイルとして得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 0.86 (t, 6H), 0.99 (t, 3H), 1.36-1.57 (m, 2H), 1.68 (dd, 2H), 1.73-1.98 (m, 4H), 2.11 (tt, 4H), 2.70-3.01 (m, 8H), 3.39 (t, 2H), 5.20-5.56 (m, 10H). MS (エレクトロスプレー): 481.4 [M+Na]+.
【実施例６０】
【０２５１】
ｔｅｒｔ−ブチル２−（（（３Ｚ，６Ｚ，９Ｚ，１２Ｚ）−ペンタデカ−３，６，９，１２−テトラエン−１−イル）オキシ）ブタノエートの調製
ステップａ）（８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−５，６−ジヒドロキシイコサ−８，１１，１４，１７−テトラエン酸
【０２５２】
【化７８】
2021505591.tif 000080
ＭｅＯＨ（１５０ｍＬ）および水（７．５ｍＬ）の混合物中の６−（（３Ｚ，６Ｚ，９Ｚ，１２Ｚ）−１−ヨードペンタデカ−３，６，９，１２−テトラエン−１−イル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−オン（１２．５ｇ、２９，２ｍｍｏｌ）およびＫＯＨ（５．７３ｇ、１０２ｍｍｏｌ）の溶液を窒素下６０℃で４時間撹拌した。反応混合物を室温まで冷却し、２Ｍ  ＨＣｌ（ａｑ．）で酸性にし、ＥｔＯＡｃ（３００ｍＬ）で抽出した。有機層を水（３００ｍＬ、塩水を幾分含む）で洗い、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、真空中で濃縮して、９．８グラム（収率１００％）をオイルとして得た。
【０２５３】
ステップｂ）（３Ｚ，６Ｚ，９Ｚ，１２Ｚ）−ペンタデカ−３，６，９，１２−テトラエン−１−オール
【０２５４】
【化７９】
2021505591.tif 000081
過ヨウ素酸ナトリウム（９，３４ｇ、４３，７ｍｍｏｌ）を、窒素下０℃のＴＨＦ：水（１５０ｍＬ）中の（８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−５，６−ジヒドロキシイコサ−８，１１，１４，１７−テトラエン酸（９．８ｇ、２９．１ｍｍｏｌ）の溶液に加え、１時間撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（３００ｍＬ）で抽出した。有機層を分離し、希塩水（２００ｍＬ）で洗い、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、真空中で濃縮した。残留物をＭｅＯＨ（１００ｍｌ）に溶解し、０℃まで冷却した。ＮａＢＨ４（３．３１ｇ、８７ｍｍｏｌ）を分割して注意深く加え、混合物を０℃で３０分間撹拌した。水（３００ｍＬ）を注意深く加え、混合物をＥｔＯＡｃ（２’２００ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせ、水（２００ｍＬ）で洗い、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、真空中で濃縮した。ヘプタン中の２０％酢酸エチルを溶離液として使用して、シリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィーにより残留物を精製した。適切な画分を濃縮して、４．０６ｇ（収率６３％）の表題化合物をオイルとして得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) d 0.91 (t, 3H), 1.97 - 2.05 (m, 2H), 2.27 - 2.32 (m, 2H), 2.73 - 2.81 (m, 6H), 3.57 - 3.62 (m, 2H), 5.17 - 5.41 (m, 7H), 5.42 - 5.56 (m, 1H).
【０２５５】
ステップｃ）ｔｅｒｔ−ブチル２−（（（３Ｚ，６Ｚ，９Ｚ，１２Ｚ）−ペンタデカ−３，６，９，１２−テトラエン−１−イル）オキシ）ブタノエート
【０２５６】
【化８０】
2021505591.tif 000082
テトラブチルアンモニウムクロリド（０．１０ｇ、０．３３ｍｍｏｌ）を、窒素下周囲温度のトルエン（１０ｍｌ）中の（（３Ｚ，６Ｚ，９Ｚ，１２Ｚ）−ペンタデカ−３，６，９，１２−テトラエン−１−オール（０．２２ｇ、１．００ｍｍｏｌ）の溶液に加え、続いてさらにｔ−ブチル２−ブロモブチレート（１．１１ｇ、５．００ｍｍｏｌ）を加えた。水酸化ナトリウム（５０％（ｗ／ｗ）、４ｍＬ）の水性溶液を室温で激しく撹拌しながら加えた。生じた混合物を５０℃まで加熱し、２時間撹拌し、続いて、周囲温度で一晩撹拌した。室温まで冷却した後、水を加え、水性相をジエチルエーテルで抽出した。相を分離し、水相をジエチルエーテルでさらに２回抽出した。有機相を合わせ、水、続いて塩水で洗った後、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、真空中で濃縮した。ヘプタン中の５％酢酸エチルを溶離液として使用して、シリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィーにより残留物を精製した。適切な画分を濃縮して、０．３０ｇ（８３％）の表題化合物をオイルとして得た。
【実施例６１】
【０２５７】
２−（（（３Ｚ，６Ｚ，９Ｚ，１２Ｚ）−ペンタデカ−３，６，９，１２−テトラエン−１−イル）オキシ）ブタン酸の調製
【０２５８】
【化８１】
2021505591.tif 000083
トリフルオロ酢酸（２ｍｌ）を、窒素下のジクロロメタン（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル２−（（（３Ｚ，６Ｚ，９Ｚ，１２Ｚ）−ペンタデカ−３，６，９，１２−テトラエン−１−イル）オキシ）ブタノエートの溶液に加えた。反応混合物を室温で１時間撹拌した後、水を加え、水性相をジクロロメタンで２回抽出した。有機相を合わせ、塩水で洗い、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、真空中で濃縮した。ヘプタン中の５％酢酸エチル（１％  ＨＣＯＯＨを加えた）を溶離液として使用して、シリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィーにより残留物を精製した。適切な画分を濃縮して、０．１８ｇ（収率７１％）の表題化合物をオイルとして得た。1H-NMR (300 MHz, CDCl3): δ 0.90 - 1.05 (2xt, 6H), 1.75 - 1.90 (m, 2H), 2.05 - 2.15 (m, 2H), 2.30 - 2.50 (m, 2H), 2.85 (m, 6H), 3.60 (m, 2H), 3.85 (t, 1H), 5.25 - 5.60 (m, 8H).
【実施例６２】
【０２５９】
２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−ノナデカ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタン酸の調製
【０２６０】
【化８２】
2021505591.tif 000084
ステップ１：
窒素下０℃まで冷却されたＴＨＦ（１００ｍｌ）中のデカ−２，５，８−トリイン−１−オール（０．９４ｇ、６．４３ｍｍｏｌ）の溶液を、メタンスルホニルクロリド（７２０μＬ、９．２４ｍｍｏｌ）に加え、続いてＴＥＡ（１．９７ｍＬ、１４．１３ｍｍｏｌ）を１５分にわたって滴加した。混合物を０℃で２時間撹拌した。次いで、混合物を水：氷  １：１（２００グラム）に注ぎ、ジエチルエーテル（２×１００）で抽出した。合わせた有機層をｓａｔ．（ａｑ．）ＮａＨＣＯ３（２００ｍＬ）、水（２００ｍＬ）および塩水（２００ｍＬ）で洗い、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、真空中で蒸発させて、粗生成物を得、これをシリカゲルによるドライフラッシュによりさらに精製した。ヘプタンを使用して画分１〜３を、ＥｔＯＡｃ：ヘプタン  ２．５：１００を使用して画分４〜６を、ＥｔＯＡｃ：ヘプタン  ５：１００を使用して画分７〜１０を、ＥｔＯＡｃを使用して画分１１を回収した。適切な画分をプールして濃縮して、１．０７ｇ（４．７７ｍｍｏｌ、収率７４．１％）のノナ−２，５，７−トリイン−１−イルメタンスルホネートを得た。
【０２６１】
ステップ２：
乾燥ＴＨＦ（２５ｍＬ）で希釈されたエチルマグネシウムブロミド（４．００ｍＬ、１２．００ｍｍｏｌ）の周囲溶液に、プロパルギルアルコール（０．３５ｍＬ、５．９９ｍｍｏｌ）の溶液を分割して２０分間で加えた。反応混合物を９０分間還流させた後、０℃まで３０分間で冷却した。触媒量のブロモ（ジメチルスルフィド）銅（Ｉ）（３３０ｍｇ、１．６０５ｍｍｏｌ）を加え、冷却浴を取り外した。１５分撹拌した後、加熱することによりＴＨＦ（５ｍｌ）に溶解したノナ−２，５，７−トリイン−１−イルメタンスルホネート（１．０５ｇ、４．６８ｍｍｏｌ）を５分にわたって滴加した。反応混合物を加熱還流し、還流させながら一晩撹拌した。反応物を周囲温度まで冷却し、ｓａｔ．ａｑ．ＮＨ４Ｃｌ  ５０ｍＬを注意深く加えることにより停止した。生じた混合物をジエチルエーテル（１００ｍＬ）が入った分液漏斗に移した。有機相を分離し、水相をジエチルエーテル（２×１００ｍＬ）で２回抽出した。合わせた有機相を塩水（５０ｍＬ）で洗い、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）した。残留物を真空中で濃縮した後、シリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。適切な画分をプールして濃縮して、０．４９ｇ（２．６５ｍｍｏｌ、収率５６．６％）のドデカ−２，５，８，１０−テトライン−１−オールを得た。
【０２６２】
ステップ３：
窒素下０℃まで冷却されたＴＨＦ（３０ｍｌ）中のドデカ−２，５，８，１０−テトライン−１−オール（４６５ｍｇ、２，５２ｍｍｏｌ）の溶液に、メタンスルホニルクロリド（０．２５６ｍｌ、３．２８ｍｍｏｌ）を加え、続いてＴＥＡ（０．７０４ｍｌ、５．０５ｍｍｏｌ）を１５分にわたって滴加した。混合物を０℃で１時間撹拌した。次いで、混合物を水：氷  １：１（１００グラム）に注ぎ、ジエチルエーテル（２×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をｓａｔ．（ａｑ．）ＮａＨＣＯ３（２００ｍＬ）、水（２００ｍＬ）および塩水（２００ｍＬ）で洗い、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、真空中で蒸発させ、６２２ｍｇの粗生成物を得、これをドライフラッシュによりさらに精製した。ヘプタンを使用して画分１〜３を、ＥｔＯＡｃ：ヘプタン  ２．５：１００を使用して画分４〜６を、ＥｔＯＡｃ：ヘプタン  ５：１００を使用して画分７〜１０を、ＥｔＯＡｃを使用して画分１１を回収した。適切な画分をプールして濃縮して、４６６ｍｇ（１．７８ｍｍｏｌ、収率７０．４％）のトリデカ−２，５，８，１１−テトライン−１−イルメタンスルホネートを得た。
【０２６３】
ステップ４：
ＤＭＦ（乾燥）（１５ｍｌ）中の炭酸セシウム（５５３ｍｇ、１．６９６ｍｍｏｌ）、ヨウ化ナトリウム（２８０ｍｇ、１．８６６ｍｍｏｌ）およびヨウ化銅（Ｉ）（３２３ｍｇ、１．６９６ｍｍｏｌ）の溶液／懸濁液に、ＤＭＦ（乾燥）（５ｍｌ）中のエチルヘキサ−５−イノエート（２６２ｍｇ、１．８６６ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を窒素雰囲気下室温で４０分間撹拌した。ＤＭＦ（乾燥）（５ｍｌ）中のトリデカ−２，５，８，１１−テトライン−１−イルメタンスルホネート（４４５ｍｇ、１．６９６ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で一晩撹拌した。飽和ＮＨ４Ｃｌ（２００ｍｌ）を加え、混合物をＥｔＯＡｃ：ヘプタン（１：１、３×１５０ｍｌ）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２００ｍｌ）で洗い、乾燥（ＭｇＳＯ４）し、濾過し、真空中で濃縮した。ヘプタン中の２％  ＥｔＯＡｃの溶液で出発し、ヘプタンおよび酢酸エチルの極性漸増混合物を溶離液として使用して、シリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィーにより残留物を精製した。適切な画分をプールして濃縮して、５１ｍｇ（０．１６６ｍｍｏｌ、収率９．８％）のエチルノナデカ−５，８，１１，１４，１７−ペンタイノエートを得た。
【０２６４】
ステップ５：
ヘプタン（１０ｍｌ）およびトルエン（１５ｍＬ）中のエチルノナデカ−５，８，１１，１４，１７−ペンタイノエート（６０ｍｇ、０．１９６ｍｍｏｌ）の溶液にＮ２ガスを通気した後、キノリン（１０μＬ、０．０８４ｍｍｏｌ）およびリンドラー触媒（５０ｍｇ、０．０２３ｍｍｏｌ）をＮ２雰囲気下で加えた。懸濁液をＨ２雰囲気（１ａｔｍ）下１５時間撹拌した。反応混合物をＣｅｌｉｔｅに通して濾過し、真空中で蒸発させた。ヘプタン中の２％  ＥｔＯＡｃの混合物を溶離液として使用して、シリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィーにより粗材料を精製した。適切な画分をプールして濃縮して、（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−エチルノナデカ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエノエート（２４．６ｍｇ、０．０７８ｍｍｏｌ、収率３９．７％）をオイルとして得た。1H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δ 1.27 (t, 2H), 1.59 - 1.70 (m, 2H), 1.72 (s, 0H), 2.31 (d, 1H), 2.72 - 2.95 (m, 3H), 4.15 (d, 1H), 5.40 (dq, 4H).
【０２６５】
ステップ６：
０℃に冷却されたテトラヒドロフラン（５ｍｌ）中の（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−エチルノナデカ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエノエート（２２ｍｇ、０．０７０ｍｍｏｌ）の溶液に、ＬＡＨ（８ｍｇ、０．２１１ｍｍｏｌ）を１回で加えた。反応混合物を０℃で３０分撹拌した後、周囲温度で９０分撹拌した。反応混合物を飽和ＮＨ４Ｃｌ（ａｑ．）（１０ｍＬ）および氷（１０ｇ）に注ぎ、１０％  ＨＣｌ（ａｑ．）を使用して混合物をｐＨ〜１〜２の酸性にした。混合物をＥｔ２Ｏ（２５ｍｌ）で２回抽出し、合わせた有機層を水（２５ｍＬ）および塩水（２５ｍＬ）で洗った後、乾燥（ＭｇＳＯ４）し、濾過し、真空中で濃縮して、（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−ノナデカ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−オール（１５．５ｍｇ、０．０５６ｍｍｏｌ、収率８１％）をオイルとして得た。
【０２６６】
ステップ７：
２−ブロモ酪酸（１００ｍｇ、０．５９９ｍｍｏｌ）を、テトラヒドロフラン（１０ｍｌ）中の（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−ノナデカ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−オール（８ｍｇ、０．０２９ｍｍｏｌ）の溶液に加えた。混合物を５℃まで冷却した後、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル（３０ｍｌ）中のナトリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（５００μｌ、０．６７８ｍｍｏｌ）の１７％（ｗ／ｗ）溶液を５分にわたって滴加した。３時間後、追加のナトリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（１００μＬ  ０，１３６ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物をさらに３時間撹拌した。ギ酸（０．１００ｍｌ、２．６１ｍｍｏｌ）および水（１０ｍｌ）を加えることにより反応物を停止し、生じた混合物をｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル（３０ｍｌ）で抽出した。有機相を水（４×１０ｍｌ）で４回洗い、乾燥（ＭｇＳＯ４）し、濾過し、真空中で蒸発させた。濃縮物をＭｅ−ＴＨＦ（５０ｍｌ）に溶解し、飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液（２０ｍｌ）で４回洗った。有機相を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、濾過し、真空中で蒸発させて、２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−ノナデカ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタン酸（６ｍｇ、０．０１７ｍｍｏｌ、５７．１％）をオイルとして得た。HRMS (エレクトロスプレー), [M-H] -: 計算値: 359.2586, 実測値: 359.2578.
【実施例６３】
【０２６７】
２−（（（６Ｚ，９Ｚ，１２Ｚ，１５Ｚ）−オクタデカ−６，９，１２，１５−テトラエン−１−イル）オキシ）ブタン酸の調製
【０２６８】
【化８３】
2021505591.tif 000085
トルエン（３ｍＬ）中の（６Ｚ，９Ｚ，１２Ｚ，１５Ｚ）−オクタデカ−６，９，１２，１５−テトラエン−１−オール（９０ｍｇ、０．３４３ｍｍｏｌ）の溶液に、テトラブチルアンモニウムヒドロキシド（ＴＢＡＯＨ）（２ｍｇ、０．００８ｍｍｏｌ）、ｔｅｒｔ−ブチル２−ブロモブタノエート（１９０ｍｇ、０．８１９ｍｍｏｌ）およびＮａＯＨ（５０ｗ／ｗ％、１ｍＬ）を加え、混合物を４５℃で３時間撹拌した。反応混合物にｔｅｒｔ−ブチル２−ブロモブタノエート（１９０ｍｇ、０．８１９ｍｍｏｌ）をさらに加え、反応混合物を４５℃で２４時間撹拌した。混合物を室温まで冷却し、Ｅｔ２Ｏ（２×３０ｍＬ）で２回抽出した。合わせた有機抽出物を水（３×２５ｍＬ）および塩水（２５ｍＬ）で洗い、濾過し、真空中で蒸発させて、ｔｅｒｔ−ブチル２−（（（６Ｚ，９Ｚ，１２Ｚ，１５Ｚ）−オクタデカ−６，９，１２，１５−テトラエン−１−イル）オキシ）ブタノエートの粗生成物を得た。ｔｅｒｔ−ブチル２−（（（６Ｚ，９Ｚ，１２Ｚ，１５Ｚ）−オクタデカ−６，９，１２，１５−テトラエン−１−イル）オキシ）ブタノエートの粗生成物をギ酸（ＦＡ）（５ｍＬ）に溶解し、生じた溶液を室温で３時間撹拌した。混合物を真空下２５℃で濃縮し、残留物をＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ）に溶解した。溶液を水（４×２５ｍＬ）で洗い、ＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）で希釈し、乾燥（ＭｇＳＯ４）した。溶媒を真空下で除去し、ヘプタンおよびアセトンの極性漸増混合物（１：０→５：１）を溶離液として使用して、シリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィーにより粗生成物を精製した。画分をプールし、真空下で蒸発させた。残留物をＦＡ（５ｍＬ）に溶解し、室温で３時間撹拌した後、溶媒を真空下で蒸発させた。残留物にＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ）を加え、水（４×２５ｍＬ）、塩水（２５ｍＬ）で洗い、乾燥（ＭｇＳＯ４）し、真空下で蒸発させた。水中の８５％  ＭｅＣＮを溶離液として使用して、分取ＨＰＬＣにより残留物を精製した。適切な画分をプールして濃縮した。残留物をＥｔＯＡｃに溶解し、乾燥（ＭｇＳＯ４）し、濾過し、真空下で濃縮した。生成物をＥｔ２Ｏに溶解し、真空下で濃縮して、１０ｍｇ（収率８％）の表題化合物を得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1.09 - 0.81 (m, 6H), 1.41 (dt, 4H), 1.67 (d, 2H), 1.97 - 1.74 (m, 2H), 2.10 (t, 4H), 2.84 (q, 6H), 3.55 - 3.42 (m, 1H), 3.65 - 3.54 (m, 1H), 3.88 (dd, 4.8 Hz, 1H), 5.53 - 5.25 (m, 8H). HRMS (エレクトロスプレー), [M-H]-: 計算値: 347.2592, 実測値: 347.2576.
【実施例６４】
【０２６９】
２−（（（４Ｚ，７Ｚ，１０Ｚ，１３Ｚ，１６Ｚ）−ノナデカ−４，７，１０，１３，１６−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタン酸の調製
【０２７０】
【化８４】
2021505591.tif 000086
ステップ１：
トルエン（５ｍｌ）中の（４Ｚ，７Ｚ，１０Ｚ，１３Ｚ，１６Ｚ）−ノナデカ−４，７，１０，１３，１６−ペンタエン−１−オール（４４６ｍｇ、１．６２５ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ−ブチル２−ブロモブチレート（５０１ｍｇ、２．２４６ｍｍｏｌ）の溶液に、硫酸水素テトラブチルアンモニウム（１０２ｍｇ、０．３００ｍｍｏｌ）を加えた。水酸化ナトリウム（２，５ｍＬ、４６．９ｍｍｏｌ）を撹拌下で加え、反応物を５０℃まで直接加温した。１時間後、追加のｔｅｒｔ−ブチル２−ブロモブチレート（５３３ｍｇ、２．３８９ｍｍｏｌ）を加え、反応物をさらに３時間放置した後、撹拌下で一晩冷却した。Ｅｔ２Ｏ（５０ｍＬ）を加え、エマルションが生成した。飽和ＮＨ４Ｃｌ（ａｑ．）（５０ｍＬ）を加え、混合物を振盪した。相を分離し、水相をＥｔ２Ｏ（５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を５％  ｗ／ｗのＮａＯＨ（ａｑ．）（２×５０ｍＬ）で洗い、乾燥（ＭｇＳＯ４）し、濾過し、蒸発させた。残留物を真空ラインで５日間乾燥した後、ヘプタン（１ｍＬ）で希釈し、ヘプタン２×５０ｍＬ、続いて６×５０ｍＬのヘプタン：ＥｔＯＡｃ（９５：５）の混合物の合計８画分で溶離しながら、シリカゲル（５グラム）を使用してドライフラッシュにより精製した。画分３〜４を回収して、蒸発後にｔｅｒｔ−ブチル２−（（４Ｚ，７Ｚ，１０Ｚ，１３Ｚ，１６Ｚ）−ノナデカ−４，７，１０，１３，１６−ペンタエニルオキシ）ブタノエート（４５５ｍｇ、１．０９２ｍｍｏｌ、収率６７．２％）を得た。1H NMR (300 MHz, クロロホルム-d) δ 0.98 (td, 6H), 1.49 (s, 9H), 1.57 - 1.84 (m, 4H), 2.00 - 2.28 (m, 4H), 2.74 - 2.94 (m, 8H), 3.33 (dt, 1H), 3.50 - 3.70 (m, 2H), 5.24 - 5.50 (m, 10H).
【０２７１】
ステップ２：
ＨＣＯＯＨ（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル２−（（４Ｚ，７Ｚ，１０Ｚ，１３Ｚ，１６Ｚ）−ノナデカ−４，７，１０，１３，１６−ペンタエニルオキシ）ブタノエート（３７３ｍｇ、０．８９５ｍｍｏｌ）の混合物を２．５時間激しく撹拌した。混合物を濃縮し、合計３時間の反応時間の後、酢酸エチル（５０ｍＬ）で希釈し、水（３×５０ｍＬ）で洗い、水相のｐＨを中性にした。有機相を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、濾過し、真空中で濃縮した。シリカゲル（８ｇ）を使用し、ヘプタン：ＥｔｏＡｃ  ９０：１０（３×３０ｍＬ）、続いて８０：２０（７×５０ｍＬ）で溶離するドライフラッシュによる精製。画分４〜６を回収し、真空中で濃縮して、２−（（４Ｚ，７Ｚ，１０Ｚ，１３Ｚ，１６Ｚ）−ノナデカ−４，７，１０，１３，１６−ペンタエニルオキシ）ブタン酸（１２２ｍｇ、０．３３８ｍｍｏｌ、収率３７．８％）を得た。1H NMR (300 MHz, クロロホルム-d) δ 1.00 (td, 2.6 Hz, 6H), 1.62 - 1.79 (m, 2H), 1.79 - 1.92 (m, 2H), 1.99 - 2.13 (m, 2H), 2.19 (dd, 2H), 2.85 (dtd, 8H), 3.47 - 3.67 (m, 2H), 3.88 (dd, 1H), 5.31 - 5.47 (m, 10H). HRMS (エレクトロスプレー), [M-H]-: 計算値: 359.2586, 実測値: 359.2590.
【実施例６５】
【０２７２】
２−（（（８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ）−オクタデカ−８，１１，１４，１７−テトラエン−１−イル）オキシ）ブタン酸の調製
【０２７３】
【化８５】
2021505591.tif 000087
ステップ１：
ＤＭＦ（２０ｍｌ）中の炭酸セシウム（２．６７ｇ、８．２０ｍｍｏｌ）、ＮａＩ（１．２３ｇ、８．２０ｍｍｏｌ）およびヨウ化銅（Ｉ）（１．５６ｇ、８．２０ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＭＦ（５ｍｌ）中のメチルノナ−８−イノエート（１．３８ｇ、８．２０ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を窒素雰囲気下室温で４０分間撹拌した。ＤＭＦ（５ｍｌ）中のノナ−８−エン−２，５−ジイン−１−イルメタンスルホネート（１．７４ｇ、８．２０ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で一晩撹拌した。飽和ＮＨ４Ｃｌ（２００ｍｌ）を加え、混合物をＥｔＯＡｃ：ヘプタン（１：１、３×１５０ｍｌ）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１００ｍｌ）で洗い、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、真空中で濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（ヘプタン／ＥｔＯＡｃ  ９２／８）により、メチルオクタデカ−１７−エン−８，１１，１４−トリイノエート（１．４３ｇ、５．０３ｍｍｏｌ、収率６１．３％）をオイルとして得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 5.80 - 5.67 (m, 1H), 5.29 - 5.18 (m, 1H), 5.08 - 4.99 (m, 1H), 3.60 (s, 3H), 3.15 - 3.09 (m, 2H), 3.09 - 3.05 (m, 2H), 2.93 - 2.85 (m, 2H), 2.24 (t, 2H), 2.11 - 2.05 (m, 2H), 1.60 - 1.52 (m, 2H), 1.46 - 1.38 (m, 2H), 1.35 - 1.23 (m, 4H). MS (エレクトロスプレー): 307.1 [M+Na]+.
【０２７４】
ステップ２：
Ｎ２雰囲気下のヘプタン（１５ｍｌ）中のリンドラー触媒（１．０６３ｇ、０．４９９ｍｍｏｌ）の懸濁液を、キノリン（０．１７７ｍｌ、１．４９８ｍｍｏｌ）およびヘプタン（５ｍｌ）中のメチルオクタデカ−１７−エン−８，１１，１４−トリイノエート（１．４２ｇ、４．９９ｍｍｏｌ）の溶液に加えた。混合物をＨ２雰囲気（１ａｔｍ）下一晩撹拌した。混合物を濾過し、真空中で濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（ヘプタン／ＥｔＯＡｃ  ９８．５／１．５）により、（８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ）−メチルオクタデカ−８，１１，１４，１７−テトラエノエート（０．８３０ｇ、２．８６ｍｍｏｌ、収率５７．２％）をオイルとして得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 5.84 - 5.65 (m, 1H), 5.43 - 5.19 (m, 6H), 5.05 - 4.85 (m, 2H), 3.60 (s, 3H), 2.81 - 2.68 (m, 6H), 2.23 (t, 2H), 2.02 - 1.92 (m, 2H), 1.59 - 1.52 (m, 2H), 1.34 - 1.18 (m, 6H). MS (エレクトロスプレー): 313.2 [M+Na]+.
【０２７５】
ステップ３：
ＴＨＦ（２ｍｌ）中の（８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ）−メチルオクタデカ−８，１１，１４，１７−テトラエノエート（８３０ｍｇ、２．８６ｍｍｏｌ）の溶液を、Ｎ２雰囲気下のＴＨＦ（１０ｍｌ）中のＬＡＨ（１１４ｍｇ、３．００ｍｍｏｌ）の冷却（０℃）懸濁液に滴加した。混合物を０℃で４０分間撹拌し、冷飽和ＮＨ４Ｃｌ（２０ｍＬ）に注意深く注いだ。水性層をＨＣｌ（２Ｍ）でｐＨ〜２の酸性にした。相を分離し、水性相をヘプタン（３×２０ｍｌ）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ）で洗い、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、真空中で濃縮して、（８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ）−オクタデカ−８，１１，１４，１７−テトラエン−１−オール（７３０ｍｇ、２．７８ｍｍｏｌ、収率９７％）をオイルとして得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 5.84 - 5.66 (m, 1H), 5.43 - 5.20 (m, 6H), 5.03 - 4.82 (m, 2H), 3.57 (t, 2H), 2.84 - 2.62 (m, 6H), 2.06 - 1.90 (m, 4H), 1.58 - 1.42 (m, 3H), 1.33 - 1.20 (m, 6H). MS (エレクトロスプレー): 285.1 [M+Na]+.
【０２７６】
ステップ４：
ＮａＯＨ（２ｍｌ、３７．９ｍｍｏｌ）の溶液を、Ｎ２雰囲気下のトルエン（８ｍｌ）中の（８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ）−オクタデカ−８，１１，１４，１７−テトラエン−１−オール（７２０ｍｇ、２．７４ｍｍｏｌ）、ｔｅｒｔ−ブチル２−ブロモブタノエート（９１８ｍｇ、４．１２ｍｍｏｌ）および硫酸水素テトラブチルアンモニウム（２７９ｍｇ、０．８２３ｍｍｏｌ）の激しく撹拌した溶液にゆっくりと加えた。混合物を４０℃で一晩加熱した。追加のｔｅｒｔ−ブチル２−ブロモブタノエート（３０６ｍｇ、１．３７２ｍｍｏｌ）を５時間後および２４時間後の２回加えた。４８時間後、混合物を５〜１０℃まで冷却し、飽和ＮＨ４Ｃｌ（２０ｍｌ）を加えた。相を分離し、水性相をＥｔＯＡｃ（５０ｍｌ）で抽出した。合わせた有機相を乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、真空中で濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（ヘプタン／ＥｔＯＡｃ  ９９／１）により、ｔｅｒｔ−ブチル２−（（（８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ）−オクタデカ−８，１１，１４，１７−テトラエン−１−イル）オキシ）ブタノエート（６７５ｍｇ、１．６６８ｍｍｏｌ、収率６０．８％）をオイルとして得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 5.86 - 5.65 (m, 1H), 5.41 - 5.21 (m, 6H), 5.04 - 4.83 (m, 2H), 3.57 - 3.46 (m, 2H), 3.30 - 3.19 (m, 1H), 2.81 - 2.68 (m, 6H), 2.02 - 1.89 (m, 4H), 1.71 - 1.60 (m, 2H), 1.54 - 1.50 (m, 2H), 1.41 (s, 12H), 1.32 - 1.20 (m, 8H), 0.89 (t, 3H).
【０２７７】
ステップ５：
ＨＣＯＯＨ（６．７５ｍｌ、１７９ｍｍｏｌ）中のｔｅｒｔ−ブチル２−（（（８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ）−オクタデカ−８，１１，１４，１７−テトラエン−１−イル）オキシ）ブタノエート（６７５ｍｇ、１．６６８ｍｍｏｌ）の溶液をＮ２雰囲気下４０℃で２１時間撹拌した。反応混合物を減圧下で蒸発させ、０．０２％  ＨＣＯＯＨを含むＣＨ３ＣＮ：Ｈ２０−９０：１０で溶離しながら分取ＨＰＬＣにより精製した。純粋な生成物を含む分取画分を減圧下で蒸発させて、ＣＨ３ＣＮを除去した。残留物にｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテルおよび塩水を加え、相を分離した。有機相を乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、減圧下で蒸発させて、２−（（８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ）−オクタデカ−８，１１，１４，１７−テトラエン−１−イルオキシ）ブタン酸（１６３ｍｇ、０．４６４ｍｍｏｌ、収率２７．８％）をオイルとして得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 5.89 - 5.70 (m, 1H), 5.51 - 5.22 (m, 6H), 5.00 (dd, 2H), 3.84 (t, 1H), 3.62 - 3.38 (m, 2H), 2.79 (m, 6H), 2.12 - 1.95 (m, 2H), 1.88 - 1.75 (m, 2H), 1.64 - 1.58 (m, 2H), 1.31 (s, 8H), 0.96 (t, 3H). HRMS (エレクトロスプレー) [M-H]-: 計算値: 347.2586, 実測値: 347.2589.
【実施例６６】
【０２７８】
２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ）−ノナデカ−５，８，１１，１４−テトラエン−１−イル）オキシ）ブタン酸の調製
【０２７９】
【化８６】
2021505591.tif 000088
ステップ１：
ＴＨＦ（５０ｍｌ）中の（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ）−エチルノナデカ−５，８，１１，１４−テトラエノエート（２１ｇ、６５．９ｍｍｏｌ）の溶液を、窒素雰囲気下の乾燥ＴＨＦ（３００ｍｌ）中のＬＡＨ（２．５０３ｇ、６５．９ｍｍｏｌ）の冷却（０℃）懸濁液に１５分にわたって滴加した。混合物を０℃で１時間撹拌し、冷飽和ＮＨ４Ｃｌ（３００ｍＬ）に注意深く注いだ。水性層をＨＣｌ（２Ｍ）でｐＨ〜２の酸性にした。相を分離し、水性相をヘプタン（２×２５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を塩水（３００ｍＬ）で洗い、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、真空中で濃縮して、（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ）−ノナデカ−５，８，１１，１４−テトラエン−１−オール（１７．９ｇ、６４．７ｍｍｏｌ、収率９８％）をオイルとして得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 5.46 - 5.11 (m, 8H), 3.68 - 3.57 (m, 2H), 2.89 - 2.69 (m, 6H), 2.12 - 1.98 (m, 4H), 1.62 - 1.51 (m, 2H), 1.47 - 1.23 (m, 6H), 0.91 - 0.85 (m, 3H).
【０２８０】
ステップ２：
ＴＨＦ（３５０ｍｌ）中の（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ）−ノナデカ−５，８，１１，１４−テトラエン−１−オール（１７．９ｇ、６４．７ｍｍｏｌ）の溶液に、２−ブロモブタン酸（１０．３５ｍｌ、９７ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を８〜１０℃まで冷却した。温度を８〜１０℃の間に維持しながら、ナトリウム−ｔ−ブトキシド（１７．４２ｇ、１８１ｍｍｏｌ）（ＭＴＢＥ（１２０ｍＬ）中１７％）の溶液を２５分にわたって加えた。反応物を８〜１０℃で３０分間撹拌した。追加のナトリウム−ｔ−ブトキシド（２．４８９ｇ、２５．９ｍｍｏｌ）（ＭＴＢＥ（２５ｍＬ）中１７％）を５分にわたって加えた。混合物を８〜１０℃で３０分間撹拌し、続いて、２−ブロモ酪酸（６．９０ｍｌ、６４．７ｍｍｏｌ）を５分にわたって加えた。次いで、混合物を８〜１０℃で３０分間撹拌した。追加のナトリウム−ｔ−ブトキシド（４．９８ｇ、５１．８ｍｍｏｌ）（ＭＴＢＥ（４０ｍＬ）中１７％）を５分にわたって加えた。混合物を８〜１０℃で３０分間撹拌した。追加のナトリウム−ｔ−ブトキシド（２．４８９ｇ、２５．９ｍｍｏｌ）（ＭＴＢＥ（２５ｍＬ）中１７％）を５分にわたって加えた。混合物を８〜１０℃で３０分間撹拌した。ＨＣＯＯＨ（３ｍＬ）、続いて２Ｍ  ＨＣｌ（ａｑ）を加えてｐＨ〜２にした。相を分離し、水性相をＭＴＢＥ（２×３００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を水（３００ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ３（４×２００ｍｌ）および塩水（３００ｍｌ）で洗い、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、真空中で濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘプタン／ＥｔＯＡｃ／ＨＣＯＯＨ  ９０／１０／０，５）により精製し、適切な画分をプールし、真空下で濃縮した。次いで、水（１０％  ＭｅＣＮおよび０．０２％  ＨＣＯＯＨを含む）中の８８％  ＭｅＣＮ（０．０２％  ＨＣＯＯＨを含む）を溶離液として使用して、分取ＨＰＬＣにより残留物をさらに精製した。溶媒を除去して、１０．１６ｇの２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ）−ノナデカ−５，８，１１，１４−テトラエン−１−イル）オキシ）ブタン酸（２６．８ｍｍｏｌ、収率４１．５％）をオイルとして生成した。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 9.93 (s, 1H), 5.51 - 5.21 (m, 8H), 3.84 - 3.80 (m, 1H), 3.62 - 3.54 (m, 1H), 3.50 - 3.39 (m, 1H), 2.96 - 2.61 (m, 6H), 2.12 - 2.01 (m, 4H), 1.90 - 1.71 (m, 2H), 1.69 - 1.57 (m, 2H), 1.49 - 1.37 (m, 2H), 1.36 - 1.23 (m, 4H), 0.97 (t, 3H), 0.91 - 0.84 (m, 3H). MS (エレクトロスプレー): 361.2 [M-H]-.
【実施例６７】
【０２８１】
２−（（（８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ）−オクタデカ−８，１１，１４−トリエン−１−イル）オキシ）ブタン酸の調製
【０２８２】
【化８７】
2021505591.tif 000089
ステップ１
窒素雰囲気下周囲温度のＤＭＦ（７５０ｍｌ）中のＣｓ２ＣＯ３（１０６ｇ、３２６ｍｍｏｌ）、ヨウ化ナトリウム（４４．８ｇ、２９９ｍｍｏｌ）およびヨウ化銅（Ｉ）（５６．９ｇ、２９９ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、エチルノナ−８−イノエート（４９．５ｇ、２７２ｍｍｏｌ）、続いて１−ブロモノナ−２，５−ジイン（５４．１ｇ、２７２ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を周囲温度で一晩撹拌し、飽和ＮＨ４Ｃｌ（６００ｍＬ）に注いだ。混合物をＭＴＢＥ（３×３００ｍＬ）で抽出し、合わせた有機相を塩水（４００ｍＬ）で洗い、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、真空中で濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（ヘプタン／ＥｔＯＡｃ  ９５／５−９２／８−９０／１０）により、エチルオクタデカ−８，１１，１４−トリイノエート（５２．８ｇ、１７６ｍｍｏｌ、収率６４．７％）をオイルとして得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.09 (q, 2H), 3.15 - 3.06 (m, 4H), 2.26 (t, 2H), 2.15 - 2.06 (m, 4H), 1.63 - 1.56 (m, 2H), 1.53 - 1.42 (m, 4H), 1.40 - 1.26 (m, 4H), 1.22 (t, 3H), 0.93 (t, 3H). MS (エレクトロスプレー): 323.2 [M+Na]+.
【０２８３】
ステップ２：
室温の無水ＥｔＯＨ（１５０ｍｌ）中の酢酸ニッケル四水和物（７．６７ｍｌ、５５．４ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、Ｈ２雰囲気（１ａｔｍ）下、固体ＮａＢＨ４（２．０９７ｇ、５５．４ｍｍｏｌ）を加えた。生じた懸濁液を３０分間撹拌した後、エチレンジアミン（１２．３８ｍｌ、１８５ｍｍｏｌ）を加えた。完全に加えた後、懸濁液をさらに１５分間撹拌した後、無水ＥｔＯＨ（５０ｍｌ）中のエチルオクタデカ−８，１１，１４−トリイノエート（１１．１ｇ、３６．９ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物をＨ２（１ａｔｍ）下室温で三晩撹拌した。ジエチルエーテル（５００ｍＬ）を加えて反応混合物を希釈し、次いで、生じた混合物を短いシリカゲルカラムに通した。濾液を真空中で濃縮した。フラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘプタン／ＥｔＯＡｃ  ９８／２）により残留物を精製し、エチル（８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ）−オクタデカ−８，１１，１４−トリエノエート（１０ｇ、３２．６ｍｍｏｌ、収率８８％）をオイルとして得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 5.46 - 5.23 (m, 6H), 4.10 (q, 2H), 2.87 - 2.67 (m, 3H), 2.26 (t, 2H), 2.07 - 1.97 (m, 4H), 1.66 - 1.55 (m, 2H), 1.41 - 1.18 (m, 11H), 0.91 - 0.84 (m, 3H).
【０２８４】
ステップ３：
ＴＨＦ（５０ｍｌ）中のエチル（８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ）−オクタデカ−８，１１，１４−トリエノエート（２４．６ｇ、８０ｍｍｏｌ）の溶液を、窒素下の乾燥ＴＨＦ（３００ｍｌ）中のＬＡＨ（３．０５ｇ、８０ｍｍｏｌ）の冷却（０℃）懸濁液に１５分にわたって滴加した。混合物を０℃で１時間撹拌した。混合物を冷飽和ＮＨ４Ｃｌ（３００ｍＬ）に注意深く注いだ。水性層をＨＣｌ（２Ｍ）でｐＨ〜２の酸性にした。相を分離し、水性相をヘプタン（２×２５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を塩水（３００ｍＬ）で洗い、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、真空中で濃縮して、（８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ）−オクタデカ−８，１１，１４−トリエン−１−オール（２０．７ｇ、７８ｍｍｏｌ、収率９８％）をオイルとして得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 5.49 - 5.23 (m, 6H), 3.61 (t, 2H), 2.86 - 2.67 (m, 4H), 2.11 - 1.92 (m, 4H), 1.59 - 1.49 (m, 2H), 1.43 - 1.21 (m, 10H), 0.94 - 0.83 (m, 3H).
【０２８５】
ステップ４：
ＴＨＦ（３５０ｍｌ）中の（８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ）−オクタデカ−８，１１，１４−トリエン−１−オール（２０．７ｇ、７８ｍｍｏｌ）の溶液に、２−ブロモブタン酸（１２．５１ｍｌ、１１７ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を８〜１０℃まで冷却した。温度を８〜１０℃の間に維持しながら、ナトリウム−ｔ−ブトキシド（２１．０６ｇ、２１９ｍｍｏｌ）（ＭＴＢＥ（１３０ｍＬ）中１７％）の溶液を１５分にわたって加えた。反応物を８〜１０℃で３０分間撹拌した。追加のナトリウム−ｔ−ブトキシド（３．０１ｇ、３１，３ｍｍｏｌ）（ＭＴＢＥ（２５ｍＬ）中１７％）を５分にわたって加えた。混合物を８〜１０℃で３０分間撹拌し、続いて、２−ブロモ酪酸（８．３４ｍｌ、７８ｍｍｏｌ）を５分にわたって加えた。次いで、混合物を８〜１０℃で３０分撹拌した。追加のナトリウム−ｔ−ブトキシド（６．０２ｇ、６２．６ｍｍｏｌ）（ＭＴＢＥ（４０ｍＬ）中１７％）を５分にわたって加えた。混合物を８〜１０℃で３０分間撹拌した。追加のナトリウム−ｔ−ブトキシド（３．０１ｇ、３１．３ｍｍｏｌ）（ＭＴＢＥ（２５ｍＬ）中１７％）を５分にわたって加えた。混合物を８〜１０℃で３０分間撹拌した。
【０２８６】
ＨＣＯＯＨ（３ｍＬ）、続いて２Ｍ  ＨＣｌ（ａｑ）を加えてｐＨ〜２にした。相を分離し、水性相をＭＴＢＥ（２×３００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を水（３００ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ３（４×２００ｍｌ）および塩水（３００ｍｌ）で洗い、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、真空中で濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘプタン／ＥｔＯＡｃ／ＨＣＯＯＨ  ９０／１０／０，５）により精製し、適切な画分をプールし、真空下で濃縮した。次いで、水（１０％  ＭｅＣＮおよび０．０２％  ＨＣＯＯＨを含む）中の８８％  ＭｅＣＮ（０．０２％  ＨＣＯＯＨを含む）を溶離液として使用して、分取ＨＰＬＣにより残留物をさらに精製した。溶媒を除去して、１０．５５ｇの２−（（（８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ）−オクタデカ−８，１１，１４−トリエン−１−イル）オキシ）ブタン酸（２８．８ｍｍｏｌ、収率３６．８％）をオイルとして生成した。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 9.70 (s, 1H), 5.47 - 5.25 (m, 6H), 3.85 - 3.81 (m, 1H), 3.60 - 3.52 (m, 1H), 3.49 - 3.42 (m, 1H), 2.87 - 2.68 (m, 4H), 2.10 - 1.94 (m, 4H), 1.89 - 1.69 (m, 2H), 1.66 - 1.54 (m, 2H), 1.43 - 1.24 (m, 10H), 0.96 (t, 3H), 0.89 (t, 3H). MS (エレクトロスプレー): 349.2 [M-H]-.
【実施例６８】
【０２８７】
２−（（（９Ｚ，１２Ｚ，１５Ｚ）−オクタデカ−９，１２，１５−トリエン−１−イル）オキシ）ブタン酸の調製
【０２８８】
【化８８】
2021505591.tif 000090
ＴＨＦ（４００ｍｌ）中の（９Ｚ，１２Ｚ，１５Ｚ）−オクタデカ−９，１２，１５−トリエン−１−オール（２９．６ｇ、１１２ｍｍｏｌ）の溶液に、２−ブロモブタン酸（１７．８９ｍｌ、１６８ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を８〜１０℃まで冷却した。温度を８〜１０℃の間に維持しながら、ナトリウム−ｔ−ブトキシド（３０．１ｇ、３１３ｍｍｏｌ）（ＭＴＢＥ（１８０ｍＬ）中１７％）の溶液を５分にわたって加えた。反応物を８〜１０℃で３０分間撹拌した。追加のナトリウム−ｔ−ブトキシド（４．３０ｇ、４４．８ｍｍｏｌ）（ＭＴＢＥ（３０ｍＬ）中１７％）を５分にわたって加えた。混合物を８〜１０℃で３０分間撹拌し、続いて、２−ブロモ酪酸（１１．９３ｍｌ、１１２ｍｍｏｌ）を５分にわたって加えた。次いで、混合物を８〜１０℃で３０分間撹拌した。追加のナトリウム−ｔ−ブトキシド（８．６１ｇ、９０ｍｍｏｌ）（ＭＴＢＥ（５５ｍＬ）中１７％）を５分にわたって加えた。混合物を８〜１０℃で３０分間撹拌した。追加のナトリウム−ｔ−ブトキシド（４．３０ｇ、４４．８ｍｍｏｌ）（ＭＴＢＥ（３０ｍＬ）中１７％）を５分にわたって加えた。混合物を８〜１０℃で３０分間撹拌した。
【０２８９】
ＨＣＯＯＨ（３ｍＬ）、続いて２Ｍ  ＨＣｌ（ａｑ）を加えてｐＨ〜２にした。相を分離し、水性相をＭＴＢＥ（２×３００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を水（３００ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ３（４×２００ｍｌ）および塩水（３００ｍｌ）で洗い、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、真空中で濃縮した。残留物をシリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィー（ヘプタン／ＥｔＯＡｃ／ＨＣＯＯＨ  ９０／１０／０，５）により精製した。適切な画分をプールし、真空下で濃縮して、２−（（（９Ｚ，１２Ｚ，１５Ｚ）−オクタデカ−９，１２，１５−トリエン−１−イル）オキシ）ブタン酸（２８ｇ、７８ｍｍｏｌ、収率６９．９％）をオイルとして生成した。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 10.07 (s, 1H), 5.48 - 5.16 (m, 6H), 3.84 - 3.80 (m, 1H), 3.60 - 3.53 (m, 1H), 3.48 - 3.40 (m, 1H), 2.87 - 2.70 (m, 4H), 2.12 - 1.97 (m, 4H), 1.91 - 1.70 (m, 2H), 1.66 - 1.53 (m, 2H), 1.38 - 1.27 (m, 10H), 0.99 - 0.93 (m, 6H). MS (エレクトロスプレー): 373.3 [M+Na]+.
【実施例６９】
【０２９０】
２−（（（６Ｚ，９Ｚ，１２Ｚ）−オクタデカ−６，９，１２−トリエン−１−イル）オキシ）ブタン酸の調製
【０２９１】
【化８９】
2021505591.tif 000091
ＴＨＦ（４００ｍｌ）中の（６Ｚ，９Ｚ，１２Ｚ）−オクタデカ−６，９，１２−トリエン−１−オール（２９．６ｇ、１１２ｍｍｏｌ）の溶液に、２−ブロモブタン酸（１７．８９ｍｌ、１６８ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を８〜１０℃まで冷却した。温度を８〜１０℃の間に維持しながら、ナトリウム−ｔ−ブトキシド（３０．１ｇ、３１３ｍｍｏｌ）（ＭＴＢＥ（１８０ｍＬ）中１７％）の溶液を２５分にわたって加えた。反応物を８〜１０℃で３０分間撹拌した。追加のナトリウム−ｔ−ブトキシド（４．３０ｇ、４４．８ｍｍｏｌ）（ＭＴＢＥ（３０ｍＬ）中１７％）を５分にわたって加えた。混合物を８〜１０℃で３０分間撹拌し、続いて、２−ブロモ酪酸（１１．９３ｍｌ、１１２ｍｍｏｌ）を５分にわたって加えた。次いで、混合物を８〜１０℃で３０分間撹拌した。追加のナトリウム−ｔ−ブトキシド（８．６１ｇ、９０ｍｍｏｌ）（ＭＴＢＥ（５５ｍＬ）中１７％）を５分にわたって加えた。混合物を８〜１０℃で３０分間撹拌した。追加のナトリウム−ｔ−ブトキシド（４．３０ｇ、４４．８ｍｍｏｌ）（ＭＴＢＥ（３０ｍＬ）中１７％）を５分にわたって加えた。混合物を８〜１０℃で３０分間撹拌した。
【０２９２】
ＨＣＯＯＨ（３ｍＬ）、続いて２Ｍ  ＨＣｌ（ａｑ）を加えてｐＨ〜２にした。相を分離し、水性相をＭＴＢＥ（２×３００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を水（３００ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ３（４×２００ｍｌ）および塩水（３００ｍｌ）で洗い、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、真空中で濃縮した。残留物をシリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィー（ヘプタン／ＥｔＯＡｃ／ＨＣＯＯＨ  ９０／１０／０，５）により精製した。適切な画分をプールし、真空下で濃縮して、２−（（６Ｚ，９Ｚ，１２Ｚ）−オクタデカ−６，９，１２−トリエン−１−イルオキシ）ブタン酸（３０，２ｇ、８３ｍｍｏｌ、収率７４，１％）をオイルとして生成した。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 9.56 (s, 1H), 5.46 - 5.22 (m, 6H), 3.84 - 3.80 (m, 1H), 3.61 - 3.54 (m, 1H), 3.47 - 3.40 (m, 1H), 2.86 - 2.71 (m, 4H), 2.10 - 1.99 (m, 4H), 1.91 - 1.70 (m, 2H), 1.65 - 1.56 (m, 2H), 1.45 - 1.18 (m, 10H), 0.97 (t, 3H), 0.87 (t, 3H). MS (エレクトロスプレー): 373.2 [M+Na]+.
【実施例７０】
【０２９３】
２−（（（６Ｚ，９Ｚ，１２Ｚ，１５Ｚ，１８Ｚ）−ヘンイコサ−６，９，１２，１５，１８−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタン酸の調製
【０２９４】
【化９０】
2021505591.tif 000092
ＴＨＦ（３５０ｍｌ）中の（６Ｚ，９Ｚ，１２Ｚ，１５Ｚ，１８Ｚ）−ヘンイコサ−６，９，１２，１５，１８−ペンタエン−１−オール（２３ｇ、７６ｍｍｏｌ）の溶液に、２−ブロモブタン酸（１２．１５ｍｌ、１１４ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を８〜１０℃まで冷却した。温度を８〜１０℃の間に維持しながら、ナトリウム−ｔ−ブトキシド（２０．４６ｇ、２１３ｍｍｏｌ）（ＭＴＢＥ（１４０ｍＬ）中１７％）の溶液を２５分にわたって加えた。反応物を８〜１０℃で３０分間撹拌した。追加のナトリウム−ｔ−ブトキシド（２．９２ｇ、３０．４ｍｍｏｌ）（ＭＴＢＥ（２５ｍＬ）中１７％）を５分にわたって加えた。混合物を８〜１０℃で３０分間撹拌し、続いて、２−ブロモ酪酸（８．１０ｍｌ、７６ｍｍｏｌ）を５分にわたって加えた。次いで、混合物を８〜１０℃で３０分間撹拌した。追加のナトリウム−ｔ−ブトキシド（５．８５ｇ、６０．８ｍｍｏｌ）（ＭＴＢＥ（４５ｍＬ）中１７％）を５分にわたって加えた。混合物を８〜１０℃で３０分間撹拌した。追加のナトリウム−ｔ−ブトキシド（２．９２ｇ、３０．４ｍｍｏｌ）（ＭＴＢＥ（２５ｍＬ）中１７％）を５分にわたって加えた。混合物を８〜１０℃で３０分間撹拌した。ＨＣＯＯＨ（３ｍＬ）、続いて２Ｍ  ＨＣｌ（ａｑ）を加えてｐＨ〜２にした。相を分離し、水性相をＭＴＢＥ（２×３００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を水（３００ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ３（４×２００ｍｌ）および塩水（３００ｍｌ）で洗い、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、真空中で濃縮した。残留物をシリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィー（ヘプタン／ＥｔＯＡｃ／ＨＣＯＯＨ  ９０／１０／０，５）により精製した。適切な画分をプールし、真空下で濃縮して、２−（（（６Ｚ，９Ｚ，１２Ｚ，１５Ｚ，１８Ｚ）−ヘンイコサ−６，９，１２，１５，１８−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタン酸（１８．９ｇ、４７．３ｍｍｏｌ、収率６２．２％）をオイルとして生成した。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 9.85 (s, 1H), 5.48 - 5.21 (m, 10H), 3.84 - 3.81 (m, 1H), 3.61 - 3.53 (m, 1H), 3.48 - 3.41 (m, 1H), 2.93 - 2.71 (m, 8H), 2.18 - 1.96 (m, 4H), 1.91 - 1.70 (m, 2H), 1.66 - 1.57 (m, 2H), 1.45 - 1.30 (m, 4H), 0.99 - 0.93 (m, 6H). MS (エレクトロスプレー): 411.4 [M+Na]+.
【実施例７１】
【０２９５】
２−（（（４Ｚ，７Ｚ，１０Ｚ，１３Ｚ，１６Ｚ，１９Ｚ）−ドコサ−４，７，１０，１３，１６，１９−ヘキサエン−１−イル）オキシ）ブタン酸の調製
【０２９６】
【化９１】
2021505591.tif 000093
トルエン（１１ｍｌ）およびＴＨＦ（４００ｍｌ）中の（４Ｚ，７Ｚ，１０Ｚ，１３Ｚ，１６Ｚ，１９Ｚ）−ドコサ−４，７，１０，１３，１６，１９−ヘキサエン−１−オール（３０ｇ、９５ｍｍｏｌ）の溶液に２−ブロモ酪酸（１７．２８ｍｌ、１６２ｍｍｏｌ）を加え、続いて温度を８〜１０℃の間に維持しながら、ＴＨＦ（１６０ｍｌ）中のナトリウム−ｔ−ブトキシド（２５，７ｇ、２６７ｍｍｏｌ）の溶液を３５分間で加えた。反応物を８〜１０℃で４０分間撹拌した。ＴＨＦ（６０ｍｌ）中のナトリウム−ｔ−ブトキシド（４，１７ｇ、４３，４ｍｍｏｌ）を１０分間で加えた。生じた混合物を８〜１０℃で４０分間撹拌した後、２−ブロモ酪酸（１０，１７ｍｌ、９５ｍｍｏｌ）をさらに１回で加えた。混合物を８〜１０℃で１時間撹拌した後、温度を１２℃未満に保ちながら、ＴＨＦ（１００ｍｌ）中のナトリウム−ｔ−ブトキシド（７．３３ｇ、７６ｍｍｏｌ）をさらに１０分間で加えた。反応物を１０℃で６０分間撹拌した。ナトリウム−ｔ−ブトキシド（４．１７ｇ、４３．４ｍｍｏｌ）を１回で加え、次いで、さらに１時間撹拌した。２−ブロモ酪酸（８．５ｍｌ、５０ｍｍｏｌ）およびナトリウム−ｔ−ブトキシド（４．８ｇ、５０ｍｍｏｌ）をさらに加え、混合物を８〜１０℃で１時間撹拌した。２−ブロモ酪酸（８．５ｍｌ、５０ｍｍｏｌ）およびナトリウム−ｔ−ブトキシド（４．８ｇ、５０ｍｍｏｌ）をさらに加え、混合物を８〜１０℃で１時間撹拌した。ＴＨＦ（２００ｍｌ）をさらに加え、反応混合物を室温で一晩撹拌した。２−ブロモ酪酸（１７ｍｌ、１００ｍｍｏｌ）およびナトリウム−ｔ−ブトキシド（９．６ｇ、１００ｍｍｏｌ）をさらに加え、反応混合物を８〜１０℃で１時間撹拌した。次いで、反応物に（１ｍｌ）ギ酸を加え、生じた混合物を８〜１０℃で１０分間撹拌した後、６Ｍ  ＨＣｌを加えてｐＨ〜２にした。水（１００ｍＬ）を加え、水性相と有機相とを分離した。水性相をジエチルエーテル（２×５００ｍＬ）で２回抽出した。合わせた有機相を水（３×１０００ｍｌ）、ｓａｔ．ＮａＨＣＯ３（３×５００ｍｌ）および塩水（１×１００ｍｌ）で洗い、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空中で濃縮した。残留物をシリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘプタン／５％  ＨＣＯＯＨ）（９０／１０）により精製し、２−（（（４Ｚ，７Ｚ，１０Ｚ，１３Ｚ，１６Ｚ，１９Ｚ）−ドコサ−４，７，１０，１３，１６，１９−ヘキサエン−１−イル）オキシ）ブタン酸（１０．３ｇ、２５．０７ｍｍｏｌ、収率２６．３％）をオイルとして得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 5.49 - 5.20 (m, 12H), 3.90 - 3.75 (m, 1H), 3.65 - 3.52 (m, 1H), 3.51 - 3.35 (m, 1H), 2.91 - 2.69 (m, 10H), 2.21 - 1.98 (m, 4H), 1.91 - 1.59 (m, 4H), 1.05 - 0.88 (m, 6H). MS (エレクトロスプレー): 423.3 [M+Na]+.
【実施例７２】
【０２９７】
２−（（（８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−８，１１，１４，１７−テトラエン−１−イル）オキシ）ブタン酸の調製
【０２９８】
【化９２】
2021505591.tif 000094
ステップ１：
ＴＨＦ（３ｍｌ）中のマグネシウム（０．２１７ｇ、８．９３ｍｍｏｌ）の加熱懸濁液に１，２−ジブロモエタン（２滴）を加え、続いて窒素雰囲気下のＴＨＦ（１５ｍｌ）中の２−（（５−ブロモペンチル）オキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン（２．０７ｇ、８．２４ｍｍｏｌ）の溶液を滴加した。混合物を１時間還流させ、周囲温度まで冷却した。ＴＨＦ（１０ｍｌ）中の（３Ｚ，６Ｚ，９Ｚ，１２Ｚ）−ペンタデカ−３，６，９，１２−テトラエナール（１．５ｇ、６．８７ｍｍｏｌ）の溶液を滴加し、混合物を周囲温度で１時間撹拌した。１Ｍ  ＨＣｌを加え、混合物をＥｔＯＡｃ（２×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を塩水（５０ｍＬ）で洗い、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、真空中で濃縮した。シリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィー（ヘプタン／ＥｔＯＡｃ  ８０／２０−７５／２５）により、（８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−１−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）イコサ−８，１１，１４，１７−テトラエン−６−オール（０．７４ｇ、１．８９５ｍｍｏｌ、収率２７．６％）をオイルとして得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 5.59 - 5.49 (m, 1H), 5.49 - 5.25 (m, 7H), 4.56 - 4.53 (m, 1H), 3.88 - 3.82 (m, 1H), 3.77 - 3.67 (m, 1H), 3.65 - 3.59 (m, 1H), 3.52 - 3.43 (m, 1H), 3.40 - 3.34 (m, 1H), 2.85 - 2.77 (m, 6H), 2.23 (t, 2H), 2.13 - 1.97 (m, 2H), 1.84 - 1.77 (m, 1H), 1.73 - 1.67 (m, 1H), 1.63 - 1.34 (m, 12H), 0.96 (t, 3H). MS (エレクトロスプレー): 413.3 [M+Na]+.
【０２９９】
ステップ２：
ＴＨＦ（２０ｍｌ）中の（８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−１−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）イコサ−８，１１，１４，１７−テトラエン−６−オール（０．７４ｇ、１．８９５ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＥＡ（０．５２８ｍｌ、３．７９ｍｍｏｌ）、続いてメタンスルホニルクロリド（０．１９２ｍｌ、２．４６３ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を窒素雰囲気下周囲温度で３時間撹拌した。クエン酸（５％、ａｑ、５０ｍＬ）を加え、混合物をＥｔＯＡｃ（２×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を飽和ＮａＨＣＯ３（５０ｍＬ）および塩水（５０ｍＬ）で洗い、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、真空中で濃縮して、０．８２ｇの中間体メシレートを得た。中間体メシレートをＥｔ２Ｏ（１０ｍｌ）に溶解し、Ｅｔ２Ｏ（２５ｍｌ）中のＬＡＨ（０．２８８ｇ、７．５８ｍｍｏｌ）の撹拌懸濁液に滴加した。混合物を周囲温度で１時間撹拌した。１Ｍ  ＨＣｌ（５０ｍＬ）を注意深く加えた。混合物をＭＴＢＥ（２×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を飽和ＮａＨＣＯ３（５０ｍＬ）および塩水（５０ｍＬ）で洗い、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、真空中で濃縮した。シリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィー（ヘプタン／ＥｔＯＡｃ  ９７／３）により、２−（（（８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−８，１１，１４，１７−テトラエン−１−イル）オキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン（０．４６ｇ、１．２２８ｍｍｏｌ、収率６４．８％）をオイルとして得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 5.46 - 5.20 (m, 8H), 4.57 - 4.54 (m, 1H), 3.88 - 3.82 (m, 1H), 3.74 - 3.68 (m, 1H), 3.51 - 3.44 (m, 1H), 3.39 - 3.33 (m, 1H), 2.84 - 2.77 (m, 6H), 2.14 - 1.96 (m, 4H), 1.85 - 1.77 (m, 1H), 1.73 - 1.65 (m, 1H), 1.62 - 1.46 (m, 6H), 1.37 - 1.24 (m, 8H), 0.96 (t, 3H). MS (エレクトロスプレー): 397.3 [M+Na]+.
【０３００】
ステップ３：
ＥｔＯＨ（５ｍｌ）中の２−（（（８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−８，１１，１４，１７−テトラエン−１−イル）オキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン（０．４６ｇ、１．２２８ｍｍｏｌ）の溶液に、ピリジニウム−ｐ−トルエンスルホネート（ＰＰＴＳ、０．３０９ｇ、１．２２８ｍｍｏｌ）を加え、混合物を５０℃で２時間加熱した。混合物を周囲温度まで冷却した。飽和ＮａＨＣＯ３（５０ｍＬ）を加え、混合物をＥｔＯＡｃ（２×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を塩水（５０ｍＬ）で洗い、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、真空中で濃縮した。シリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィー（ヘプタン／ＥｔＯＡｃ  ８０／２０）により、（８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−８，１１，１４，１７−テトラエン−１−オール（０．２６ｇ、０．８９５ｍｍｏｌ、収率７２．９％）をオイルとして得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 5.41 - 5.17 (m, 8H), 3.57 (t, 2H), 2.84 - 2.68 (m, 6H), 2.06 - 1.94 (m, 4H), 1.54 - 1.46 (m, 2H), 1.34 - 1.21 (m, 8H), 1.20 - 1.13 (m, 1H), 0.91 (t, 3H).
【０３０１】
ステップ４：
トルエン（３ｍＬ）中の（８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−８，１１，１４，１７−テトラエン−１−オール（９３ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）の溶液に、ｔｅｒｔ−ブチル２−ブロモブタノエート（１４３ｍｇ、０．６４ｍｍｏｌ）、テトラブチルアンモニウムヒドロキシド（ＴＢＡＯＨ）（５ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌ）およびＮａＯＨ（５０ｗ／ｗ％、１ｍＬ）を加え、混合物を４５℃まで加熱した。４５℃で１．５時間撹拌した後、ｔｅｒｔ−ブチル２−ブロモブタノエート７１．４ｍｇ（０．３２ｍｍｏｌ）を反応混合物に加え、３時間後、ｔｅｒｔ−ブチル２−ブロモブタノエート７１．４ｍｇ（０．３２ｍｍｏｌ）を反応混合物に加え、８時間後、ｔｅｒｔ−ブチル２−ブロモブタノエート１４３ｍｇ（０．６４ｍｍｏｌ）を反応混合物に加えた。２４時間後、混合物を室温まで冷却し、水を加えた（４０ｍＬ）。生じた混合物をＥｔ２Ｏ（２５＋４０ｍＬ）で２回抽出し、合わせた有機抽出物を水（４×２５ｍＬ）および塩水（２５ｍＬ）で洗い、乾燥（ＭｇＳＯ４）し、濾過し、真空中で蒸発させた。残留物をシリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィー（ヘプタン→ヘプタン：アセトン−５：１）により精製した。適切な画分をプールして濃縮して、１５ｍｇのｔｅｒｔ−ブチル２−（（（８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−８，１１，１４，１７−テトラエン−１−イル）オキシ）ブタノエートを得た。この中間体をギ酸（５ｍＬ）に溶解し、生じた混合物を室温で１時間４５分撹拌した。溶媒を真空下で除去し、残留物にＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ）を加えた。溶液を水（４×２５ｍＬ）および塩水（２５ｍＬ）で洗い、乾燥（ＭｇＳＯ４）し、濾過し、真空中で濃縮した。水中の８５％  ＭｅＣＮを溶離液として使用して、分取ＨＰＬＣにより残留物を精製した。適切な画分をプールして濃縮して、１５ｍｇ（０．０４ｍｍｏｌ、収率１２％）の２−（（（８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−８，１１，１４，１７−テトラエン−１−イル）オキシ）ブタン酸を得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1.00 (td, 6H), 1.49 - 1.20 (m, 8H), 1.64 (t, 2H), 1.96 - 1.73 (m, 2H), 2.08 (dt, 4H), 2.84 (q, 6H), 3.55 - 3.43 (m, 1H), 3.65 - 3.54 (m, 1H), 3.87 (dd, 1H), 5.49 - 5.24 (m, 8H). HRMS (エレクトロスプレー), [M-H]-: 計算値: 375.2899, 実測値: 375.2892.
【実施例７３】
【０３０２】
２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４−テトラエン−１−イル）オキシ）ブタン酸の調製
【０３０３】
【化９３】
2021505591.tif 000095
ステップ１：
乾燥ＴＨＦ（１ｍｌ）中の（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ）−エチルイコサ−５，８，１１，１４−テトラエノエート（５０１．９ｍｇ、１，５０９ｍｍｏｌ）の溶液を、Ｎ２雰囲気下の乾燥ＴＨＦ（３ｍｌ）中のＬｉＡｌＨ４（６４．８ｍｇ、１．７０７ｍｍｏｌ）の冷却（０℃）懸濁液に滴加した。混合物を０℃で５５分間撹拌した。水（５ｍｌ）を滴加し、次いで、１Ｍ  ＨＣｌ（１０ｍｌ）を加えた。冷却浴を取り外し、反応混合物を５分間撹拌した。反応混合物をｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル（２×５０ｍｌ）で抽出し、有機相を１Ｍ  ＨＣｌ（２０ｍｌ）で洗い、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、減圧下で蒸発させ、（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４−テトラエン−１−オール（３９７．７ｍｇ、１．３６９ｍｍｏｌ、収率９１％）を液体として得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 5.41 - 5.29 (m, 8H), 3.63 (t, 2H), 2.83 - 2.77 (m, 6H), 2.20 - 1.91 (m, 4H), 1.61 - 1.54 (m, 2H), 1.46 - 1.41 (m, 2H), 1.35 - 1.28 (m, 8H), 0.87 (t, 3H).
【０３０４】
ステップ２：
トルエン（５ｍＬ）中の（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４−テトラエン−１−オール（３４９ｍｇ、１．２０ｍｍｏｌ）の溶液に、ｔｅｒｔ−ブチル２−ブロモブタノエート（５３５ｍｇ、２．４０ｍｍｏｌ）、テトラブチルアンモニウムヒドロキシド（ＴＢＡＯＨ）（１５６ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ、４０％ｗ／ｗ）およびＮａＯＨ（５０ｗ／ｗ％、２ｍＬ）を加え、混合物を４５℃まで加熱した。１２時間後、混合物を室温まで冷却し、氷水（２５ｍＬ）およびＥｔ２Ｏ（２０ｍＬ）を加えた。相を分離し、水性相をＥｔ２Ｏ（２０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を水（２５ｍＬ）および塩水（２５ｍＬ）で洗い、乾燥（ＭｇＳＯ４）し、濾過し、真空中で蒸発させた。残留物をＥｔＯＨ（２０ｍＬ）に溶解し、真空中で蒸発させた。残留物をシリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィー（ヘプタン：アセトン−１：２０→ヘプタン：アセトン−１：１０）により精製した。適切な画分をプールして濃縮して、３６０ｍｇ（０．８３ｍｍｏｌ、収率６９％）の中間体ｔｅｒｔ−ブチル２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４−テトラエン−１−イル）オキシ）ブタノエートを得た。この中間体３４２ｍｇ（０．７９ｍｍｏｌ）をギ酸（７ｍＬ）に溶解し、生じた混合物を室温で３時間撹拌した。溶媒を真空下で除去し、残留物を、ＥｔＯＡｃ（７５ｍＬ）に加えた。溶液を水（３×５０ｍＬ）で洗い、乾燥（ＭｇＳＯ４）し、濾過し、真空中で濃縮した。残留物をシリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィー（アセトン：ヘプタン：ＨＯＡｃ−１０：１０：１→アセトン：ヘプタン：ＨＯＡｃ−３０：７０：１）により精製した。適切な画分をプールして濃縮して、１８１ｍｇ（０．４８ｍｍｏｌ、収率５８％）の２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４−テトラエン−１−イル）オキシ）ブタン酸を得た。
【実施例７４】
【０３０５】
２−（（（７Ｚ，１０Ｚ，１３Ｚ，１６Ｚ，１９Ｚ）−ドコサ−７，１０，１３，１６，１９−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタン酸の調製
【０３０６】
【化９４】
2021505591.tif 000096
ステップ１：
ＴＨＦ（４ｍｌ）中の（７Ｚ，１０Ｚ，１３Ｚ，１６Ｚ，１９Ｚ）−エチルドコサ−７，１０，１３，１６，１９−ペンタエノエート（１．５ｇ、４．１８ｍｍｏｌ）の溶液を、窒素下の乾燥ＴＨＦ（２０ｍｌ）中のＬＡＨ（０．１５９ｇ、４．１８ｍｍｏｌ）の冷却（０℃）懸濁液に滴加した。混合物を０℃で１時間撹拌した。混合物を１Ｍ  ＨＣｌ（１００ｍＬ）に注意深く注いだ。相を分離し、水性相をヘプタン（１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を塩水（３０ｍＬ）で洗い、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、真空中で濃縮して、（７Ｚ，１０Ｚ，１３Ｚ，１６Ｚ，１９Ｚ）−ドコサ−７，１０，１３，１６，１９−ペンタエン−１−オール（１．１６ｇ、３．６６ｍｍｏｌ、収率８８％）をオイルとして得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 5.44 - 5.23 (m, 10H), 3.62 (t, 2H), 2.87 - 2.73 (m, 8H), 2.10 - 1.99 (m, 4H), 1.60 - 1.51 (m, 2H), 1.40 - 1.29 (m, 6H), 0.95 (t, 3H).
【０３０７】
ステップ２：
ＴＨＦ（５０ｍｌ）中の（７Ｚ，１０Ｚ，１３Ｚ，１６Ｚ，１９Ｚ）−ドコサ−７，１０，１３，１６，１９−ペンタエン−１−オール（１．１６ｇ、３．６６ｍｍｏｌ）の溶液に、２−ブロモブタン酸（０．９１８ｇ、５．５０ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を８〜１０℃まで冷却した。ＭＴＢＥ（１５ｍＬ）中のナトリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（０．９８６ｇ、１０．２６ｍｍｏｌ）の溶液を５分にわたって加えた。反応物を８〜１０℃で３０分間撹拌した。ＭＴＢＥ（４ｍＬ）中の追加のナトリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（０．１４１ｇ、１．４６６ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を８〜１０℃で３０分間撹拌し、続いて、２−ブロモブタン酸（０．６１２ｇ、３．６６ｍｍｏｌ）を５分にわたって加えた。次いで、混合物を８〜１０℃で３０分間撹拌した。ＭＴＢＥ（８ｍＬ）中の追加のナトリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（０．２８２ｇ、２．９３ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を８〜１０℃で３０分間撹拌した。ＭＴＢＥ（４ｍＬ）中の追加のナトリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（０．１４１ｇ、１．４６６ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を８〜１０℃で３０分間撹拌した。ＨＣＯＯＨ（０．５ｍＬ）、続いて１Ｍ  ＨＣｌ（ａｑ）を加えてｐＨ〜２にした。相を分離し、水性相をＭＴＢＥ（２×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を水（５０ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ３（４×３０ｍｌ）および塩水（３０ｍｌ）で洗い、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、真空中で濃縮した。水（１０％  ＭｅＣＮおよび０．０２％  ＨＣＯＯＨを含む）中の９０％  ＭｅＣＮ（０．０２％  ＨＣＯＯＨを含む）を溶離液として使用する分取ＨＰＬＣにより、２−（（（７Ｚ，１０Ｚ，１３Ｚ，１６Ｚ，１９Ｚ）−ドコサ−７，１０，１３，１６，１９−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタン酸（１ｇ、２．４３９ｍｍｏｌ、収率６６．６％）をオイルとして得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 5.44 - 5.24 (m, 10H), 3.84 - 3.81 (m, 1H), 3.59 - 3.64 (m, 1H), 3.47 - 3.41 (m, 1H), 2.90 - 2.73 (m, 8H), 2.11 - 1.98 (m, 4H), 1.90 - 1.71 (m, 2H), 1.64 - 1.57 (m, 2H), 1.41 - 1.26 (m, 6H), 0.98 - 0.93 (m, 6H). HRMS (エレクトロスプレー), [M]+: 計算値: 402.3134, 実測値: 402.3141.
【実施例７５】
【０３０８】
（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタノエートの調製
【０３０９】
【化９５】
2021505591.tif 000097
２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イルオキシ）ブタン酸（１４．２８ｇ、３８．１ｍｍｏｌ）および（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−オール（１０．００ｇ、３４．７ｍｍｏｌ）を、シクロヘキサン（５０ｍＬ）中のＤ（＋）−１０−カンファースルホン酸（０．５３０ｇ、２．２８２ｍｍｏｌ）の混合物に加え、Ｄｅａｎ−Ｓｔａｒｋ装置により水を除去しながら加熱還流した。反応混合物を室温まで冷却し、シリカゲル（１００ｇ）を使用し、シクロヘキサン（５０ｍＬ）、続いてヘプタン（５０ｍＬ）、ヘプタン中の２％  ＥｔＯＡｃ（２×２００ｍＬ）およびヘプタン中の４％  ＥｔＯＡｃ（２×２００ｍＬ）で溶離しながらドライフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。適切な画分をプールし、真空中で濃縮して、（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イルオキシ）ブタノエート（２０．３ｇ、３０．５ｍｍｏｌ、収率８８％）をオイルとして得た。1H NMR (300 MHz, クロロホルム-d) δ 0.99 (t, 9H), 1.45 (ddd, 4H), 1.56 - 1.93 (m, 6H), 2.09 (p, 8H), 2.85 (dt, 16H), 3.34 (dt, 1H), 3.60 (dt, 1H), 3.76 (dd, 1H), 4.16 (td, 2H), 5.05 - 5.76 (m, 20H). MS (エレクトロスプレー): 645.5 [M+H]+.
【実施例７６】
【０３１０】
（２Ｒ）−２−（（２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタノイル）オキシ）ブタン酸の調製
【０３１１】
【化９６】
2021505591.tif 000098
ステップ１：
ＣＤＭ（１０ｍＬ）中の２−（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イルオキシ）ブタン酸（４００ｍｇ、１．０７ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ−メチルモルホリン（２３５μＬ、２．１５ｍｍｏｌ）およびＴＢＴＵ（２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルアミニウムテトラフルオロボレート）（３４４ｍｇ、１．０７ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を３０分間撹拌した後、ｔｅｒｔ−ブチル（Ｒ）−２−ヒドロキシブタノエート（２５０ｍｇ、２．１４ｍｍｏｌ）を加えた。生じた混合物を室温で２２時間撹拌し、次いで、水（１０ｍＬ）、１Ｍ  ＨＣｌ（１０ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ３（１０ｍＬ）および塩水（１０ｍＬ）で洗った。有機相を乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、真空中で濃縮した。１６１ｍｇ（０．３１２ｍｍｏｌ、収率２９．２％）の中間体（Ｒ）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−１−オキソブタン−２−イル２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタノエートをオイルとして単離した。MS (エレクトロスプレー): 539.4 [M+Na]+.
【０３１２】
ステップ２：
（Ｒ）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−１−オキソブタン−２−イル２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタノエート（１６１ｍｇ、０．３１２ｍｍｏｌ）をギ酸（４ｍＬ）に溶解し、反応混合物を室温で１７時間撹拌した。混合物にＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）を加え、生じた混合物を水（１０ｍＬ）および塩水（１０ｍＬ）で洗った。有機相を乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、真空中で濃縮した。６０ｍｇ（０．１３０ｍｍｏｌ、収率４１．８％）の（２Ｒ）−２−（（２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタノイル）オキシ）ブタン酸をオイルとして単離した。MS (エレクトロスプレー): 459.3 [M-H]-.
【実施例７７】
【０３１３】
（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−３，４，５−トリヒドロキシ−６−（（２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタノイル）オキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−カルボン酸の調製
【０３１４】
【化９７】
2021505591.tif 000099
ステップ１：
アセトニトリル（８５ｍｌ）中の４−メトキシベンジル（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３，４，５，６−テトラヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−カルボキシレート（２．４７ｇ、７．８６ｍｍｏｌ）、２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタン酸（２．９４ｇ、７．８５ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（１−［ビス（ジメチルアミノ）メチレン］−１Ｈ−１，２，３−トリアゾロ［４，５−ｂ］ピリジニウム３−オキシドヘキサフルオロホスフェート）（３．００ｇ、７．９０ｍｍｏｌ）の混合物に４−メチルモルホリン（１．７５ｍｌ、１５．９２ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物をＮ２雰囲気下室温で２３．５時間撹拌した。Ａｍｂｅｒｌｙｓｔ−１５（４．７ｍＥｑ／ｇ）（３．３５ｇ）を加え、混合物をおよそ５分間撹拌した。反応混合物を濾過し、減圧下で濃縮し、ＣＨ２Ｃｌ２−ＣＨ２Ｃｌ２：ＥｔＯＨ（９５：５）で溶離しながらシリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィーにより残留物を精製した。適切な画分をプールし、真空中で濃縮して、２．６４ｇの不純な混合物を得た。ＣＨ２Ｃｌ２−ＣＨ２Ｃｌ２：ＥｔＯＨ（９５：５）、次いで、ＣＨ２Ｃｌ２−ＣＨ２Ｃｌ２：ＥｔＯＨ（９７：３）で溶離しながらシリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィーにより残留物を精製した。適切な画分をプールし、真空中で濃縮して、中間体（４−メトキシシクロヘキシル）メチル（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−３，４，５−トリヒドロキシ−６−（（２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタノイル）オキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−カルボキシレート（１．２７ｇ、１．７８ｍｍｏｌ、収率２２．４％）をオイルとして得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.26-7.22 (m, 2H), 6.83 - 6.81 (m, 2H), 5.60 - 5.57 (m, 1H), 5.40 - 5.26 (m, 10H), 5.12-5.10(m, 2H), 4.60-4.56 (m, 1H), 4.14-4.13 (m, 1H), 3.98 (t, 1H), 3.93 - 3.67 (m, 3H), 3.74 (s, 3H), 3.61-3.56 (m, 3H), 3.31-3.25 (m, 1H), 2.82 - 2.77 (m, 8H), 2.07 - 2.02 (m, 4H), 1.80 - 1.67 (m, 2H), 1.57-1.54 (s, 2H), 1.43 - 1.36 (m, 2H), 1.05 - 0.77 (m, 6H). MS (エレクトロスプレー): 693.4 [M+Na]+.
【０３１５】
ステップ２：
（４−メトキシシクロヘキシル）メチル（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−３，４，５−トリヒドロキシ−６−（（２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタノイル）オキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−カルボキシレート（１．２０ｇ、１．７９ｍｍｏｌ）を、窒素雰囲気下０℃のＤＣＭ（８ｍＬ）中の１０％  ＴＦＡの溶液で処理した。周囲温度で３時間撹拌後、溶媒を真空中で除去した。フラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ／ＨＣＯＯＨ−９５／５／０．２）により、５００ｍｇの不純な生成物を得た。水（１０％  ＭｅＣＮおよび０．０２％  ＨＣＯＯＨを含む）中の８５％  ＭｅＣＮ（０．０２％  ＨＣＯＯＨを含む）を溶離液として使用して、分取ＨＰＬＣにより生成物をさらに精製した。適切な画分をプールして濃縮して、（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−３，４，５−トリヒドロキシ−６−（（２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタノイル）オキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−カルボン酸（８０ｍｇ、０．１３９ｍｍｏｌ、収率７．８％）を固体として得た。1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 5.60 - 5.56 (m, 1H), 5.51 - 5.27 (m, 10H), 3.99 - 3.88 (m, 2H), 3.71 - 3.63 (m, 1H), 3.62 - 3.54 (m, 1H), 3.53 - 3.38 (m, 3H), 2.93 - 2.83 (m, 8H), 2.19 - 2.07 (m, 4H), 1.93 - 1.83 (m, 1H), 1.81 - 1.72 (m, 1H), 1.69 - 1.60 (m, 2H), 1.53 - 1.45 (m, 2H), 1.04 - 0.98 (m, 6H). MS (エレクトロスプレー): 549.3 [M-H]-.
【実施例７８】
【０３１６】
２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタン−１−オールの調製
【０３１７】
【化９８】
2021505591.tif 000100
Ｎ２雰囲気下０℃の乾燥ＴＨＦ（１０ｍｌ）中のＬｉＡｌＨ４（９４．９ｍｇ、２．５０ｍｍｏｌ）の懸濁液に、乾燥ＴＨＦ（３ｍｌ）中のブチル２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタノエート（１．００８ｇ、２．３４ｍｍｏｌ）の溶液を滴加した。反応混合物を０℃で１．５時間撹拌した後、冷却浴を取り外し、反応混合物を室温で２０時間撹拌した。氷水浴中で反応混合物を冷却した後、水（２．５ｍｌ）および１Ｍ  ＨＣｌ（１０ｍｌ）を滴加した。冷却浴を取り外し、混合物を室温で１０分間撹拌した。生じた混合物をヘプタン（２×５０ｍｌ）で抽出し、１Ｍ  ＨＣｌ（１０ｍｌ）で洗い、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、減圧下で濃縮した。シリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィーでヘプタン−ＥｔＯＡｃ（９０：１０）で溶離して、０．７０５ｇ（収率８３％）の表題化合物をオイルとして得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 5.71 - 4.93 (m, 10H), 3.63 (dd, 1H), 3.58 - 3.34 (m, 3H), 3.29-3.23 (m, 1H), 2.95 - 2.65 (m, 8H), 2.18 - 1.98 (m, 4H), 1.88 (bs, 1H), 1.66 - 1.51 (m, 3H), 1.45 (dt, 3H), 0.95 (t, 3H), 0.89 (t, 3H). MS (ESI, 陽イオン) 383 [M+Na]+.
【実施例７９】
【０３１８】
２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）酢酸ブチルの調製
【０３１９】
【化９９】
2021505591.tif 000101
乾燥ＣＨ２Ｃｌ２（５ｍｌ）中の２−（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４，１７−ペンタエン−１−イル）オキシ）ブタン−１−オール（３００．９ｍｇ、０．８３４ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（１４０ｍｌ、１．００ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（４．７ｍｇ、０．０３８ｍｍｏｌ）の混合物を無水酢酸（９５ｍｌ、１．００ｍｍｏｌ）に加えた。反応混合物をＮ２雰囲気下室温で８０分間撹拌した。水（１０ｍｌ）を加え、混合物をヘプタン（２×５０ｍｌ）で抽出し、塩水（２０ｍｌ）で洗い、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、減圧下で濃縮した。シリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィーでヘプタン−ＥｔＯＡｃ（１００：１）で溶離して、０．３１９ｇ（９５％）の表題化合物をオイルとして得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 5.59 - 5.14 (m, 10H), 4.10 (dd, 1H), 4.02 (dd, 1H), 3.54 (dt, 1H), 3.43 (dt, 1H), 3.38 - 3.29 (m, 1H), 2.92 - 2.65 (m, 8H), 2.14 - 1.95 (m, 4H), 2.05 (s, 3H), 1.63 - 1.47 (m, 4H), 1.45-1.38 (m, 2H), 0.96 (t, 3H), 0.92 (t, 3H). MS (ESI, 陽イオン) 425 [M+Na]+.
【０３２０】
生物学的実施例
食餌誘発性ＮＡＳＨマウスモデル（ＣＤＡＡ／高脂肪食）における化合物Ａの評価
前臨床薬物開発においてＮＡＳＨの発症および処置を研究するためのメチオニンおよび／コリンが欠乏しているマウスモデル（それぞれＭＣＤおよびＣＤＡＡ）が十分確立されている。ホスファチジルコリン合成のための前駆体として、食事からのメチオニン／コリンの摂取が不足すると、トリグリセリドを排出するための肝リポタンパク質の合成ができなくなり、その結果、重篤な脂肪肝、炎症および線維症を招く。
【０３２１】
広く使用されるメチオニン−コリン欠乏（ＭＣＤ）食は、マウスにおいて重篤なＮＡＳＨ様肝炎症および線維症を一貫して再現するが、重篤な体重減少（骨格筋および体脂肪量の両方の減少）にも関連する。これは、死亡リスクの増加に関連し、長期的な線維化実験の主要な問題となる。準最適用量のメチオニン（０．１７％）を加えることによって、ＣＤＡＡ食モデルはこれらの問題を克服し、マウスおよびラットの両方において体重減少があまり重篤にならずに脂肪性肝炎、肝線維症および肝臓がんを順次引き起こすことによりヒトＮＡＳＨを模倣することを示した。
【０３２２】
生物学的実施例１〜７では、雄Ｃ５６ＢＬ／６Ｊマウス（９週齢）において調査を実施した。コリン添加（ＣＳ）食またはコリン欠乏高脂肪食（３１％総カロリー；「ＣＤＡＡ／高脂肪」）のいずれかをマウスに与えた。予防法よりはむしろ処置／好転の設定として調査を設計するために、処置開始の６週間前にＮＡＳＨ誘発食を開始した。
【０３２３】
生物学的実施例１〜５では、６つの実験群（群当たりｎ＝９）にマウスを分け、ＣＳ食またはＣＤＡＡ／高脂肪食のいずれかを与えた。ＣＳ食またはＣＤＡＡ食のいずれかの６週間後、化合物Ａまたは比較化合物Ｎを０．１５ｍｍｏｌ／ｋｇ  ｂｗ／日（低用量、ＬＤ）および０．３ｍｍｏｌ／ｋｇ  ｂｗ／日（高用量、ＨＤ）の２種の両方の用量でマウスに経口的に投与した。試験物質は、高脂肪食への混合物として経口的に投与した。ヒドロキシプロリン（ＨＹＰ）含量およびＳｉｒｉｕｓ  Ｒｅｄ（ＳＲ）形態計測の両方を測定することにより肝線維症を評価した。線維症、炎症および代謝に関連する転写物レベルを定量的リアルタイムポリメラーゼ連鎖反応（ｑＰＣＲ）により測定した。
【０３２４】
生物学的実施例６および７では、上述のＣＳ食またはＣＤＡＡ／高脂肪食のいずれかをマウスに与えた。実施例６では、ＣＳまたはＣＤＡＡ／高脂肪食のいずれかの６週間後、経口送達された５６ｍｇ／ｋｇ  ｂｗ／日の化合物Ａをマウスに投与し、または２型糖尿病の処置に認可されている長時間作用型ＧＬＰ−１ＲアゴニストＢｙｄｕｒｅｏｎ（商標）（エキセナチド）を０．４ｍｇ／ｋｇ／週で６週間マウスに皮下注射した。ビヒクル対照（ｎ＝８）、化合物Ａ（ｎ＝９）およびＧＬＰ−１Ｒ（ｎ＝８）を与えた群からの単離肝臓サンプルにおいて、肝コラーゲン線維数、太さおよび長さに対する影響を非線形多光子光学撮像システムにより決定した。
【０３２５】
生物学的実施例７では、ＣＳまたはＣＤＡＡ／高脂肪食のいずれかの６週間後、１１２ｍｇ／ｋｇ  ｂｗ／日の化合物Ａ、または経口送達された等モル用量のエイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）をマウスに投与した。ＣＳ（ｎ＝９）群、化合物Ａ（ｎ＝９）群およびＥＰＡ（ｎ＝８）群からの単離肝臓サンプルにおいて肝リピドミック解析を実施した。
【０３２６】
生物学的実施例２１〜２４では、化合物Ａ単独およびＧＬＰ−１アゴニストであるエキセナチドと組み合わせた化合物Ａの影響を調査した。雄Ｃ５６ＢＬ／６Ｊマウス（９週齢）において調査を実施した。上述の通り、ＣＳ食またはＣＤＡＡ／高脂肪食のいずれかを含む６つの実験群（群当たりｎ＝９）にマウスを分けた。予防法よりはむしろ処置／好転を評価するために、処置開始の６週間前にＮＡＳＨ誘発ＣＤＡＡ／高脂肪食を開始した。したがって、ＣＳまたはＣＤＡＡ／高脂肪食のいずれかの６週間後、（Ａ）０．３ｍｍｏｌ／ｋｇ  ｂｗ／日のみの経口化合物Ａ、（Ｂ）毎週１回０．４ｍｇ／ｋｇのｉ．ｐ．送達されたＧＬＰ−１アゴニスト単独、または（Ｃ）０．３ｍｍｏｌ／ｋｇ  ｂｗ／日の化合物Ａと、毎週１回０．４ｍｇ／ｋｇのｉ．ｐ．送達されたＧＬＰ−１アゴニスト（過度の体重減少のために最後の３週間は０．１ｍｇ／ｋｇに減らした）との組合せでマウスを処置した。化合物Ａは、高脂肪食への混合物として経口的に投与し、一方、ＧＬＰ−１アゴニストは、腹腔内注射（ｉ．ｐ．）により送達した。線維症、炎症および代謝に関連する転写物レベルを単離肝臓組織において定量的リアルタイムポリメラーゼ連鎖反応（ｑＰＣＲ）により測定した。
【０３２７】
ストレプトゾトシン注射／高脂肪食誘発性ＮＡＳＨモデル（ＳＴＡＭモデル）における化合物Ａの評価
生物学的実施例８では、病原体フリーの妊娠１５日のＣ５７ＢＬ／６マウスを日本のＣｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ  Ｉｎｃ．（神奈川、日本）から入手した。雄マウスにおいて出生後にストレプトゾトシン（ＳＴＺ）（Ｓｉｇｍａ、米国）の単回皮下注射によりＮＡＳＨを確立し、４週齢（２８±２日目）後、高脂肪食（ＨＦＤ；ＣＬＥＡ）日本、日本）を自由に与えた。処置：ビヒクル（食塩水）、化合物Ａおよびテルミサルタン（陽性対照）を開始する前日に６週齢のマウスをマウス８匹の３群にランダムに分けた。高脂肪食と併せて経口胃管栄養法により３７ｍｇ／ｋｇ  ｂｗ／日の用量で化合物Ａによる処置を６週間施した後、屠殺した。標準化された基準に従ってＮＡＦＬＤ活動性スコア（ＮＡＳ）を計算し、Ｓｉｒｉｕｓ  Ｒｅｄ染色により線維症面積を評価した。
【０３２８】
食餌誘発性ＮＡＳＨマウスモデル（ＡＰＯＥ＊３Ｌｅｉｄｅｎ．ＣＥＴＰダブルトランスジェニックマウス）における化合物Ａの影響の評価
ＡＰＯＥ＊３Ｌｅｉｄｅｎ．ＣＥＴＰダブルトランスジェニックマウスは、ヒトアポリポタンパク質Ｃ１（ＡＰＯＣ１）およびＣＥＴＰに加えてヒトアポリポタンパク質Ｅ３（ＡＰＯＥ３）の変異体であるＡＰＯＥ＊３Ｌｅｉｄｅｎを発現させる。ＡＰＯＥ＊３Ｌｅｉｄｅｎ．ＣＥＴＰダブルトランスジェニックマウスは、ＶＬＤＬ／ＬＤＬサイズのリポタンパク質分画に主に限られる血漿コレステロールレベルおよびトリグリセリドレベルの上昇を示す。このモデルにおいて食餌のコレステロール含量を増加させることにより、ヒトＮＡＳＨのすべての特徴が現れる。
【０３２９】
生物学的実施例９では、様々なコレステロール含量（０．２５〜１％コレステロールｗ／ｗ）の高脂肪食（２４％脂肪ｗ／ｗ）が与えられたＡＰＯＥ＊３Ｌｅｉｄｅｎ．ＣＥＴＰマウスにおいて調査を実施した。１つの調査（１％コレステロールｗ／ｗを使用）では、３週間の導入期間の後、低応答マウス（全体の２０％）を調査から除き、血漿コレステロール、トリグリセリド、血糖、体重および年齢（ｔ＝０）を一致させたそれぞれマウス１２匹（対照群においては＋５匹）の４群に残りのマウスを細分し、処置を開始した。０．３ｍｍｏｌ／ｋｇ  ｂｗ／日の化合物Ａ、比較化合物である化合物Ｎ（０．３ｍｍｏｌ／ｋｇ  ｂｗ／日）、ロシグリタゾン（１３ｍｇ／ｋｇ  ｂｗ／日）または対照（トウモロコシ油）のいずれかによる０７時００から１０時００の間の胃管栄養法を毎日マウスに施した。２０週間の処置後、ＣＯ２窒息によりマウスを屠殺し、肝臓を採取し、肝細胞肥大のレベルをグレード分けした。
【０３３０】
生物学的実施例２５では、化合物Ａ単独およびオメガ−３脂肪酸と組み合わせた化合物Ａの影響を調査した。ＡＰＯＥ＊３Ｌｅｉｄｅｎ．ＣＥＴＰマウスに０．２５コレステロールｗ／ｗの半合成高脂肪食（２４％脂肪ｗ／ｗ）を与えた。４週間の導入期間の後、低応答マウスを調査から除き、血漿コレステロール、トリグリセリド、血糖、体重および年齢（ｔ＝０）を一致させたそれぞれマウス８匹の群に残りのマウスを細分し、処置を開始した。化合物を容易に混合するためにヒマワリ油を加えて、総油量１０ｍＬ／ｋｇの食餌になった。化合物Ａを０．３ｍｍｏｌ／ｋｇ  ｂｗ／日で投与し、一方、オメガ−３脂肪酸エチルエステル（８５％  ｗ／ｗ  ＥＰＡ／ＤＨＡエチルエステル）を３．０ｍｍｏｌ／ｋｇ  ｂｗ／日で投与した。化合物Ａおよびオメガ−３エチルエステルの両方を高脂肪食への混合物として経口的に投与した。４週間の処置後、ＣＯ２窒息によりマウスを屠殺し、肝臓を採取し、高性能薄層クロマトグラフィーによる抽出および分離の後、遊離コレステロール、コレステロールエステルおよびトリグリセリドの肝含量を測定した。
【０３３１】
肥満食誘発性ＮＡＳＨマウスモデル（ｏｂ／ｏｂ  ＡＭＬＮモデル）における化合物Ａの影響の評価
コレステロール（２％）、４０％脂肪（１８％トランス脂肪酸を含む）および２０％フルクトースを高カロリー食に加える（すなわち、ＡＭＬＮ高脂肪食）と、肥満食誘発性Ｂ６．Ｖ−Ｌｅｐｏｂ／Ｊｒｊマウス（ｏｂ／ｏｂ）は一貫して線維症（肝臓）になりやすい。ＡＭＬＮ食を与えたｏｂ／ｏｂマウス（「ｏｂ／ｏｂ  ＡＭＬＮマウス」と呼ぶ）は、同じ食餌を与えた野生型Ｃ５７ＢＬ／６マウス（ＡＭＬＮマウス）と比較して、より短い時間枠内（１２週間以内）に脂肪性肝炎および線維症を発症する。ｏｂ／ｏｂ  ＡＭＬＮマウスは、ＮＡＳＨの肥満食誘発性モデルを提供し、これは、血糖コントロールに対する影響の調査も可能にする。ｏｂ／ｏｂ  ＡＭＬＮモデルにおけるＮＡＳＨの発症は生検により確認される。
【０３３２】
生物学的実施例１０〜１２、１５および１９では、ＡＭＬＮ高脂肪食を１５週間与え、次いで、３群（群当たりｎ＝１０）にランダムに分け、さらに４週間、食餌を介して１１２ｍｇ／ｋｇ  ｂｗ／日の化合物Ａを与えた、食餌を介して３０ｍｇ／ｋｇ  ｂｗ／日のピオグリタゾンを与えた、または処置なし（ビヒクル）の雄ｏｂ／ｏｂマウス（５週齢）において調査を実施した。３週目に経口ブドウ糖負荷試験（ＯＧＴＴ）を実施した。４週間でＲＮＡ配列決定による肝線維形成／線維分解遺伝子発現の測定により肝線維症を評価した。
【０３３３】
生物学的実施例１０、１３〜１４および１６〜１８では、ＡＭＬＮ高脂肪食を１８週間与え、次いで、６群（群当たりｎ＝１０）にランダムに分け、さらに８週間、食餌を介して化合物Ａ（３種の異なる一日量、４５ｍｇ／ｋｇ、９０ｍｇ／ｋｇまたは１３５ｍｇ／ｋｇ）を与えた、食餌を介して３０ｍｇ／ｋｇ  ｂｗ／日のオベチコール酸（ＯＣＡ）を与えた、または処置なし（ビヒクル）の雄ｏｂ／ｏｂマウス（５週齢）において調査を実施した。調査の最後に定量的免疫組織化学（ＩＨＣ）測定によりＮＡＳＨ関連パラメータおよび線維症の評価を行った。
【０３３４】
臨床橋渡しに関して、ここで使用される化合物Ａの用量（８週間の調査における４５ｍｇ／ｋｇ、９０ｍｇ／ｋｇおよび１３５ｍｇ／ｋｇならびに４週間の調査における１１２ｍｇ／ｋｇ）は、種間差のために補正されるとき、７０ｋｇのヒトに対しておよそ２５０ｍｇ／日、５００ｍｇ／日および７５０ｍｇ／日（ならびに４週間の調査における６００ｍｇ／日）のヒト用量に対応する。種間用量換算のガイドについては、Ｎａｉｒ，Ａ．Ｂ．およびＪａｃｏｂ，Ｓ．、Ｊ  Ｂａｓｉｃ  Ｃｌｉｎ  Ｐｈａｒｍ、２０１６；７（２）：２７〜３１を参照されたい。
【０３３５】
ヒト肝星細胞に対するｉｎ  ｖｉｔｒｏでの化合物Ａの影響の評価
星細胞は常在性肝細胞であり、肝線維症の開始および進行に関与する主要な細胞型である。生物学的実施例２０では、培養ヒト星細胞（ＬＸ−２細胞）に対してｉｎ  ｖｉｔｒｏ調査を実施して、この細胞に対する化合物Ａの直接的影響を評価した。細胞を化合物Ａ（１０μＭ、２５μＭ、５０μＭまたは７５μＭ）またはオレイン酸（ＯＡ；７５μＭ）で２４時間処理し、ブロモデオキシウリジン（ＢｒｄＵ）取込みを評価して、増殖に対する影響を決定した。ＭＴＳ（３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−５−（３−カルボキシメトキシフェニル）−２−（４−スルホフェニル）−２Ｈ−テトラゾリウム）アッセイを使用して細胞生存率を決定した。
【０３３６】
生物学的実施例１．肝臓当たりの総ヒドロキシプロリン（ＨＹＰ）含量により測定される肝線維症量に対する化合物Ａおよび化合物Ｎの影響
ＣＤＡＡ／高脂肪給餌マウスに投与された低用量（ＬＤ）および高用量（ＨＤ）の両方の化合物Ａは、対照に対して肝線維症（肝臓当たりのＨＹＰ含量）の有意な縮小を誘発した（それぞれｐ＜０．０１＊および０．００１＊＊）。比較化合物Ｎについては有意な影響は観察されなかった。肝ＨＹＰ含量に対する化合物Ａの影響を表１に示す。
【０３３７】
【表１】
2021505591.tif 000102
【０３３８】
生物学的実施例２．相対的ヒドロキシプロリン（ＨＹＰ）含量（肝臓１００ｍｇ当たりのｕｇ  ＨＹＰ）により測定される肝線維症量に対する化合物Ａおよび化合物Ｎの影響
ＣＤＡＡ／高脂肪給餌マウスに投与された低用量（ＬＤ）および高用量（ＨＤ）の両方の化合物Ａが肝線維症（肝臓当たりのＨＹＰ含量）を縮小したのに対し、化合物Ｎについては影響は観察されなかった。相対的ＨＹＰ含量に対する化合物Ａの影響を表２に示す。
【０３３９】
【表２】
2021505591.tif 000103
【０３４０】
生物学的実施例３．肝炎症性遺伝子発現（ＴＮＦ−ａ  ｍＲＮＡ発現）に対する化合物Ａおよび化合物Ｎの影響
ＣＤＡＡ／高脂肪給餌マウスに投与された低用量（ＬＤ）および高用量（ＨＤ）の両方の化合物Ａは、対照に対して肝炎症（ＴＮＦ−ａ  ｍＲＮＡ）の有意な減少を誘発した（いずれもｐ＜０．００１＊＊＊）。化合物Ｎについても有意な減少（ｐ＜０００１）が観察されたが、高用量（ＨＤ）については観察されなかった。肝ＴＮＦ−ａに対する化合物Ａの影響を表３に示す。
【０３４１】
【表３】
2021505591.tif 000104
【０３４２】
生物学的実施例４．線維症関連遺伝子発現（Ｃｏｌ１ａ１  ｍＲＮＡ発現）に対する化合物Ａおよび化合物Ｎの影響
ＣＤＡＡ／高脂肪給餌マウスに投与された低用量（ＬＤ）および高用量（ＨＤ）の両方の化合物Ａは、対照に対して肝線維症関連遺伝子発現（Ｃｏｌ１ａ１  ｍＲＮＡ）の有意な縮小を誘発した（いずれもそれぞれｐ＜０．００１＊＊＊）。化合物Ｎについては有意な影響は観察されなかった。肝Ｃｏｌ１ａ１に対する化合物Ａの影響を表４に示す。
【０３４３】
【表４】
2021505591.tif 000105
【０３４４】
生物学的実施例５．Ｓｉｒｉｕｓ  Ｒｅｄ形態計測により測定される肝線維症量に対する化合物Ａの影響
肝線維症の量、部位および機能的関連性をより正確に定量化するために、Ｓｉｒｉｕｓ  Ｒｅｄ（ＳＲ）形態計測を実施した。大血管内のコラーゲンを測定するヒドロキシプロリン（ＨＹＰ）含量の生化学的評価を使用した実施例１および２に対して、ＳＲ形態計測は、機能的関連性がより高い類洞コラーゲン沈着を定量化する。倍率１００倍を使用してスライド当たり１０領域を測定した。ＣＤＡＡ／高脂肪給餌マウスに投与された低用量（ＬＤ）および高用量（ＨＤ）の両方の化合物Ａは、対照に対して肝線維症の表面積割合の有意な低下を誘発した（それぞれｐ＜０．００１＊＊＊および０．０５＊）。ＳＲ形態計測により測定される肝線維症に対する化合物Ａの影響を表５に示す。
【０３４５】
【表５】
2021505591.tif 000106
【０３４６】
生物学的実施例６．コラーゲン線維に対する化合物ＡおよびＢｙｄｕｒｅｏｎ（登録商標）の影響
ＣＤＡＡ／高脂肪給餌マウスに低用量（５６ｍｇ／ｋｇ）で投与されたとき、化合物Ａは、コラーゲン線維数を有意に５１％（ｐ＝０．０１）減少させた（図１Ａ）。この影響は、図１Ｂおよび図１Ｃそれぞれにおいて化合物Ａによる線維の太さおよび長さのわずかな増加に反映されたように、短い（＜８．５μｍ）コラーゲン線維および細い（＜３．５μｍ）コラーゲン線維のほぼ完全な消失に反映された。Ｂｙｄｕｒｅｏｎ（商標）（毎週皮下に０．４ｍｇ／ｋｇ注射した）は、有意な影響を与えなかった。
【０３４７】
生物学的実施例７．肝脂質代謝に対する化合物ＡおよびＥＰＡの影響
肝脂質代謝に対する化合物Ａの影響をさらに理解するために、ＣＳ−およびＣＤＡＡ／高脂肪給餌マウス（「ＣＤ」）のリピドミック解析を単離肝臓組織において実施した。ＣＤＡＡ／高脂肪給餌マウスに高用量（１１２ｍｇ／ｋｇ）で投与されたとき、肝トリグリセリド（ＴＧ）（図２Ａ）、肝ジグリセリド（ＤＧ）（図２Ｂ）、肝遊離脂肪酸（ＦＦＡ）（図２Ｃ）またはコレステリルエステル（図２Ｄ）により測定されるコリン欠乏の影響を化合物Ａは有意に低減した。対照的に、等モル量のＥＰＡによる処置によって、コリン欠乏食に関連する肝ＴＧ、ＤＧ、ＦＦＡまたはコレステリルエステルの増加は減少しなかった。
【０３４８】
生物学的実施例８．肝細胞の風船様腫大、小葉炎症、脂肪症、複合ＮＡＳスコアおよび線維症面積に対する化合物Ａの影響
ＳＴＡＭ（モデル）マウスに投与された化合物Ａは、脂肪症および小葉炎症に加えて肝細胞の風船様腫大を減少させた。複合ＮＡＳスコア（ｐ＜０．００１＊）および線維症面積（Ｓｉｒｉｕｓ  Ｒｅｄ陽性面積）のいずれも化合物Ａにより低減した。
【０３４９】
【表６】
2021505591.tif 000107
【０３５０】
生物学的実施例９．肝細胞肥大に対する化合物Ａおよび化合物Ｎの影響
ＡｐｏＥ＊３Ｌ−ＣＥＴＰマウス（０．２５％コレステロール食ｗ／ｗ）に投与された化合物Ａは、肝細胞肥大の有意な減少を誘発し（ｐ＜０．０１＊）、対照に対して８３％の減少となった（ｐ＜０．０１）。化合物Ｎによる影響は観察されなかった。
【０３５１】
【表７】
2021505591.tif 000108
【０３５２】
生物学的実施例１０．肝重量および体重に対する化合物Ａ、ピオグリタゾンおよびＯＣＡの影響
図３Ａに示す通り、４週間で、化合物Ａ（１１２ｍｇ／ｋｇ）がｏｂ／ｏｂ  ＡＭＬＮマウスの体重に対して影響を与えなかったのに対し、ピオグリタゾンは体重の有意な１５％の増加を誘発した（ｐ＜０．０１）。図３Ｂに示す通り、肝重量は、４週目において全群で変化していなかった。図３Ｃに示す通り、８週間で、化合物Ａ（４５ｍｇ／ｋｇ、９０ｍｇ／ｋｇおよび１３５ｍｇ／ｋｇ）もＯＣＡも体重に有意に影響せず、食物摂取はいずれの群においても影響されなかった。図３Ｄに示す通り、ＯＣＡが８週間で肝重量を有意に（ｐ＜０．０５）減少させたのに対し、化合物Ａはビヒクルと比べて、どの用量においても有意な影響を与えなかった。
【０３５３】
生物学的実施例１１．肝線維形成および線維分解遺伝子発現に対する化合物Ａおよびピオグリタゾンの影響
ｏｂ／ｏｂ  ＡＭＬＮマウス単離肝臓サンプルにおける線維形成および線維分解遺伝子発現に対する化合物Ａ（１１２ｍｇ／ｋｇ）またはピオグリタゾン（３０ｍｇ／ｋｇ）のいずれかによる４週間の処置の影響を図４Ａ〜図４Ｆに示す。化合物Ａは、血小板由来増殖因子−ベータ（ＰＤＧＦ−β）（図４Ａ）、血小板由来増殖因子受容体−β（ＰＤＧＦＲ−β）（図４Ｂ）、１型コラーゲンα１（ｃｏｌ１Ａ１）（図４Ｃ）、ｃｏｌ３Ａ１（図４Ｄ）、ｃｏｌ４Ａ１（図４Ｅ）および熱ショックタンパク質−４７（ＨＳＰ４７）（図４Ｆ）を含む肝線維化を制御する古典的遺伝子の発現を有意に減少させた。ピオグリタゾンは、調査したコラーゲンアイソフォーム（ｃｏｌ１Ａ１、ｃｏｌ３Ａ１、ｃｏｌ４Ａ１）の発現を有意に減少させたが、ＨＳＰ４７は、ＰＤＧＦ−βまたはＰＤＧＦＲ−βの発現に対して影響を与えなかった。
【０３５４】
生物学的実施例１２．肝細胞外基質安定性および線維分解遺伝子発現に対する化合物Ａおよびピオグリタゾンの影響
図５Ａ〜図５Ｄに示す通り、細胞外基質（ＥＣＭ）安定性または線維分解を制御する遺伝子に関して、化合物Ａによる４週間の処置は、ｏｂ／ｏｂ  ＡＭＬＮマウスにおけるリシルオキシダーゼ（ＬＯＸ）（図５Ａ）、ＬＯＸ様２（ＬＯＸＬ２）（図５Ｂ）およびＬＯＸＬ１（図５Ｃ）ならびにメタロプロテイナーゼの組織阻害剤（ＴＩＭＰ１）（図５Ｄ）の肝発現を有意に減少させた。ピオグリタゾンはこれらの転写物の転写物レベルも有意に低減させたが、その影響は、化合物Ａにより得られた影響より軽度であった。
【０３５５】
生物学的実施例１３．肝線維症進行に対する化合物ＡおよびＯＣＡの影響
ｏｂ／ｏｂ  ＡＭＬＮマウスにおける肝線維症進行に対する化合物Ａ（４５ｍｇ／ｋｇ、９０ｍｇ／ｋｇまたは１３５ｍｇ／ｋｇ）またはＯＣＡ（３０ｍｇ／ｋｇ）のいずれかの８週間の投与の影響を評価するために、ｃｏｌ１Ａ１およびα−平滑筋アクチン（ＳＭＡ）含量を測定する定量的免疫組織化学（ＩＨＣ）を実施した。図６Ａおよび図６Ｂに示す通り、用量９０ｍｇ／ｋｇおよび１３５ｍｇ／ｋｇで、化合物Ａが筋線維芽細胞マーカーであるα−ＳＭＡ（総量および面積における含有率％（ｔｏｔａｌ  ａｎｄ  ａ  ％  ｏｆ  ｆｒａｃｔｉｏｎａｌ  ａｒｅａ  ｃｏｎｔｅｎｔ）の両方として表した）を著しく減少させたのに対し、ＯＣＡは有意な影響を何ら示さなかった。
【０３５６】
同様に、９０および１３５ｍｇ／ｋｇで投与された化合物Ａが総ｃｏｌ１Ａ１含量を減少させた（図６Ｃ）のに対し、ＯＣＡは有意な影響を与えなかった。総表面積の割合で表したとき（図６Ｄ）、用量９０ｍｇ／ｋｇがｃｏｌ１Ａ１レベルにおいて有意な低減を誘発したのに対し、用量４５および１３５ｍｇ／ｋｇでの低減は統計的に有意ではなかった。定量的ＩＨＣにより示された抗線維化効果を裏付けるために、図６Ｅおよび図６Ｆに示す通り、ヒドロキシプロリン（ＨＹＰ）の肝濃度を測定した。化合物Ａのみが総含量（用量９０および１３５ｍｇ／ｋｇの両方についてｐ＜０．０１）または相対的含量（用量９０および１３５ｍｇ／ｋｇの両方についてｐ＜０．０５）のいずれかとして表したＨＹＰ含量を減少させた。
【０３５７】
生物学的実施例１４．肝線維症の縮小に対する化合物ＡおよびＯＣＡの影響
肝ｃｏｌ１Ａ１およびα−ＳＭＡの両方のＩＨＣ測定を取り込んだｏｂ／ｏｂ  ＡＭＬＮマウスのベースライン（処置前）生検を実施した際、ｃｏｌ１Ａ１およびα−ＳＭＡの最終値を全群においてベースライン（処置前生検）値と比較して、調査の最後に化合物Ａ処置後に本発明者らが観察したビヒクルに対する有意な減少が線維症の縮小に関連するかどうか確認した。図７Ａに示す通り、化合物Ａ１３５ｍｇ／ｋｇによる処置は、処置前生検におけるα−ＳＭＡ含量と比べて、免疫組織化学染色により評価されるα−ＳＭＡ含量の面積割合を減少させた。用量４５ｍｇ／ｋｇおよび９０ｍｇ／ｋｇの化合物Ａは、有意でない傾向を生じた。ＯＣＡは有意な影響を与えなかった。同様に、すべての化合物Ａの用量が生検前の含量と比較してｃｏｌ１Ａ１含量の減少に向かう傾向を示したが、用量９０ｍｇ／ｋｇのみが統計的に有意であった（ｐ＜０．００５）（図７Ｂ）。８週間の投与期間後、ビヒクル処置およびＯＣＡ処置のいずれも肝ｃｏｌ１Ａ１含量の軽度の増加を示したが、増加はＯＣＡについてのみ有意であった（ｐ＜０．０５）。
【０３５８】
生物学的実施例１５．炎症性遺伝子発現に対する化合物Ａおよびピオグリタゾンの影響
ｏｂ／ｏｂ  ＡＭＬＮマウスにおける線維症進行との特異的関連性のうち、１１２ｍｇ／ｋｇの化合物Ａによる４週間の処置は、ビヒクル投与対照マウスと比較して、炎症性遺伝子の発現を有意に減少させた。具体的には、化合物Ａは、図８Ａおよび図８Ｂにそれぞれ示す通り、トランスフォーミング増殖因子ベータ１（ＴＧＦ−β１）（ｐ＜０．０５）およびＴＧＦ−β１受容体（ＴＧＦＲβ）（ｐ＜０．０１）の両方の転写物レベルを低減させた。ピオグリタゾンはＴＧＦＲβの発現を減少させた（ｐ＜０．０５）が、ＴＧＦ−β１の発現は減少させなかった。図８Ｃ、図８Ｄおよび図８Ｆに示す通り、化合物Ａ処置後、対照と比べてＣＣＲ２、ＭＡＣ−２（データ非掲載）、ＣＤ６８およびＣＤ１４の有意な減少（すべてでｐ＜０．００１）が見られた。化合物Ａ処置は、ビヒクル投与対照と比較してガレクチン−３（Ｇａｌ−３）レベルも有意に低減させた（図８Ｅ）。ピオグリタゾンは、ＣＣＲ２（ｐ＜０．０１）（図８Ｃ）、ＣＤ６８（ｐ＜０．０１）（図８Ｄ）およびＣＤ１４（ｐ＜０．００１）（図８Ｆ）を有意に減少させた。いずれの化合物も、インターロイキン（ＩＬ）−１βまたはＭＣＰ−１転写物レベルを有意に低減させなかった（データ非掲載）。
【０３５９】
生物学的実施例１６．肝Ｇａｌ−３により測定される肝炎症に対する化合物ＡおよびＯＣＡの影響
ｏｂ／ｏｂ  ＡＭＬＮマウスにおける肝炎症に対する化合物Ａ（４５ｍｇ／ｋｇ、９０ｍｇ／ｋｇまたは１３５ｍｇ／ｋｇ）またはＯＣＡ（３０ｍｇ／ｋｇ）のいずれかによる８週間の処置の影響を評価するために、ＩＨＣを実施してガレクチン−３（Ｇａｌ−３）レベルを評価した。図９Ａおよび図９Ｂに示す通り、化合物Ａによる処置が、総含量または面積の割合のいずれかとして測定されたときのＧａｌ−３発現レベルを用量反応的に低減させたのに対し、ＯＣＡは、総含量として測定されたときのＧａｌ−３発現レベルを低減させただけであった。
【０３６０】
生物学的実施例１７．肝細胞傷害に対する化合物ＡおよびＯＣＡの影響
ｏｂ／ｏｂ  ＡＭＬＮマウスにおける肝細胞損傷または傷害に対する化合物Ａおよびピオグリタゾンの影響を評価するために、８週間の投与後に血漿アラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ）およびアスパラギン酸トランスアミナーゼ（ＡＳＴ）を測定した。図１０Ａに示す通り、ＡＬＴの顕著かつ有意な減少が用量９０ｍｇ／ｋｇおよび１３５ｍｇ／ｋｇの化合物Ａにより実現した（それぞれｐ＜０．０１およびｐ＜０．００１）のに対し、ＯＣＡは影響を与えなかった。用量９０ｍｇ／ｋｇおよび１３５ｍｇ／ｋｇで、化合物ＡはＡＳＴも有意に減少させた（それぞれｐ＜０．０５およびｐ＜０．０１）が、ＯＣＡはＡＳＴレベルに対する影響を示さなかった（図１０Ｂ）。
【０３６１】
生物学的実施例１８．脂肪肝、肝脂質レベルおよび血漿脂質レベルに対する化合物ＡおよびＯＣＡの影響
図１１Ａおよび図１１Ｂに示す通り、化合物ＡおよびＯＣＡのいずれも、８週間の投与後のｏｂ／ｏｂ  ＡＭＬＮマウスにおける脂肪症（パーセント面積または総脂質含量のいずれかとして表した）を有意に減少させ、ＯＣＡは、最も高い用量（１３５ｍｇ／ｋｇ）の化合物Ａと同等の有効性を示した（いずれもｐ＜０．００１）。同様に、図１１Ｄおよび図１１Ｅに示す通り、（用量９０ｍｇ／ｋｇおよび１３５ｍｇ／ｋｇの）ＯＣＡおよび化合物Ａのいずれも血漿トリグリセリドレベルおよび総コレステロールレベルの同等の低減を示した。化合物ＡではなくＯＣＡ処置が総肝コレステロール含量の減少を示した（ｐ＜０．０１）（図１１Ｃ）。
【０３６２】
生物学的実施例１９．血糖コントロールに対する化合物Ａおよびピオグリタゾンの影響
化合物Ａ（１１２ｍｇ／ｋｇ）、ピオグリタゾンまたはビヒクル対照の３週間の投与後、経口ブドウ糖負荷試験（ＯＧＴＴ）をｏｂ／ｏｂ  ＡＭＬＮマウスにおいて実施した。図１２Ａに示す通り、化合物Ａおよびピオグリタゾンのいずれも糖負荷後の最初の２４０分にわたって血糖変動を有意に減少させた（ＡＵＣ  ０〜２４０分）が、ピオグリタゾンによる影響がより顕著であった。同様に、空腹時血漿血糖レベルの有意な低減が両方の化合物によって実現したが、化合物Ａと比べて、ピオグリタゾンによる影響がより顕著であった（図１２Ｂ）。化合物Ａではなくピオグリタゾンが空腹時インスリンを減少させた（ｐ＜０．００１）（図１２Ｃ）。
【０３６３】
生物学的実施例２０．星細胞増殖および生存率に対するｉｎ  ｖｉｔｒｏでの化合物Ａおよびオレイン酸の影響
１０〜７５μＭの化合物Ａまたはオレイン酸（ＯＡ）（７５μＭ）で２４時間処理されたＬＸ−２ヒト肝星細胞の細胞増殖をＢｒｄＵ取込みにより評価した。結果は、イコサブテートについては独立した５回の実験およびＯＡについては独立した２回の実験の規格化された平均値±Ｓ．Ｅ．Ｍ．である。図１３Ａに示す通り、２５μＭ（ｐ＜０．００５）、５０μＭ（ｐ＜０．０００１）および７５μＭ（ｐ＜０．００５）の化合物Ａで処理されたＬＸ−２細胞は、ＯＡまたはビヒクルと比べると増殖性が低い。化合物Ａによる増殖の低下が２４時間で２５〜３４％であったのに対し、ＯＡは影響を与えなかった。一元配置ＡＮＯＶＡおよび多重比較のためのダネットの補正により比較を行った。図１３Ｂに示す通り、独立した２回の実験においてＭＴＳアッセイにより測定される細胞生存率に対して、化合物ＡもＯＡも有意な影響を示さなかった。
【０３６４】
生物学的実施例２１．肝線維症関連遺伝子発現（Ｃｏｌ１ａ１  ｍＲＮＡ発現）に対する単独ならびに組合せの化合物ＡおよびＧＬＰ−１アゴニスト（ＧＬＰ−１ａ、エキセナチド）の影響
ＣＤＡＡ／高脂肪給餌マウスに投与された化合物Ａ、ＧＬＰ−１ａおよび化合物Ａ＋ＧＬＰ−１ａ組合せは、ＣＤＡＡ給餌マウスに対してＣｏｌ１ａ１  ｍＲＮＡ発現の有意な減少を誘発した（すべてでｐ＜０．００１＊＊＊）。肝Ｃｏｌ１ａ１  ｍＲＮＡに対する化合物Ａ単独およびＧＬＰ−１ａと組み合わせた化合物Ａの影響を表８に示す。
【０３６５】
【表８】
2021505591.tif 000109
【０３６６】
生物学的実施例２２．肝線維症関連遺伝子発現（ＴＩＭＰ（マトリックスメタロプロテイナーゼの組織阻害剤）−１ａ  ｍＲＮＡ発現）に対する単独ならびに組合せの化合物ＡおよびＧＬＰ−１アゴニスト（ＧＬＰ−１ａ、エキセナチド）の影響
ＣＤＡＡ／高脂肪給餌マウスに投与された化合物Ａ、ＧＬＰ−１ａおよび化合物Ａ＋ＧＬＰ−１ａ組合せは、ＣＤＡＡ給餌マウスに対して肝ＴＩＭＰ−１ａ  ｍＲＮＡ発現の有意な減少を誘発した（すべてでｐ＜０．００１＊＊＊）。肝ＴＩＭＰ−１ａ  ｍＲＮＡに対する化合物Ａ単独およびＧＬＰ−１ａと組み合わせた化合物Ａの影響を表９に示す。
【０３６７】
【表９】
2021505591.tif 000110
【０３６８】
生物学的実施例２３．肝線維症関連遺伝子発現（ＭＭＰ（マトリックスメタロプロテイナーゼ）−１３  ｍＲＮＡ発現）に対する単独ならびに組合せの化合物ＡおよびＧＬＰ−１アゴニスト（ＧＬＰ−１ａ、エキセナチド）の影響
ＣＤＡＡ／高脂肪給餌マウスに投与された化合物Ａ、ＧＬＰ−１ａおよび化合物Ａ＋ＧＬＰ−１ａ組合せは、ＣＤＡＡ給餌マウスに対して肝ＭＭＰ−１３  ｍＲＮＡ発現の有意な減少を誘発した（すべてでｐ＜０．００１＊＊＊）。肝ＭＭＰ−１３  ｍＲＮＡに対する化合物Ａ単独およびＧＬＰ−１ａと組み合わせた化合物Ａの影響を表１０に示す。
【０３６９】
【表１０】
2021505591.tif 000111
【０３７０】
生物学的実施例２４．肝炎症関連遺伝子発現（ＴＮＦ−α  ｍＲＮＡ発現）に対する単独ならびに組合せの化合物ＡおよびＧＬＰ−１アゴニスト（ＧＬＰ−１ａ、エキセナチド）の影響
ＣＤＡＡ／高脂肪給餌マウスに投与された化合物Ａ、ＧＬＰ−１ａおよび化合物Ａ＋ＧＬＰ−１ａ組合せは、ＣＤＡＡ給餌マウスに対して肝ＴＮＦ−α  ｍＲＮＡ発現の有意な減少を誘発した（化合物Ａ単独またはＧＬＰ−１ａと組み合わせた化合物Ａについてはｐ＜０．００１、ＧＬＰ−１ａ単独についてはｐ＜０．０５）。肝ＴＮＦ−ａ  ｍＲＮＡに対する化合物Ａ単独およびＧＬＰ−１ａと組み合わせた化合物Ａの影響を表１１に示す。
【０３７１】
【表１１】
2021505591.tif 000112
【０３７２】
生物学的実施例２５．肝脂質（コレステロールエステル−ＣＥ、遊離コレステロール−ＦＣ、トリグリセリド−ＴＧ）に対する単独および組合せの化合物Ａならびに高濃度オメガ−３エチルエステルの影響
高用量（３ｍｍｏｌ／ｋｇ  ｂｗ／日）８５％  ＥＰＡ／ＤＨＡエチルエステルオメガ−３（ＨＤ）と組み合わせた０．２５％コレステロールを含む西洋食を与えたＡｐｏＥ＊３Ｌ−ＣＥＴＰトランスジェニックマウスに投与された低用量（０．３ｍｍｏｌ／ｋｇ  ｂｗ／日）化合物Ａ（ＬＤ）は、ＦＣ（ｐ＜０．０１）、ＣＥ（ｐ＜０．００１）およびＴＧ（ｐ＜０．０１）の有意な減少を誘発した。このモデルでは、単剤療法として肝ＴＧを有意に減少させた化合物はなかった。
【０３７３】
【表１２】
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【０３７４】
生物学的実施例２６．非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）の患者における化合物Ａの多施設、ランダム化、二重盲検、プラセボ対照、並行群試験
この臨床試験の目標は、線維症の悪化を伴わずに患者においてＮＡＳＨを回復させる異なる用量の化合物Ａの有効性を評価すること、ならびにＮＡＳＨを患う患者において化合物Ａの安全性および認容性を決定することである。
【０３７５】
患者数
ＮＡＳＨを患う６００人の患者を適合性に関しておよそ３０箇所にわたってスクリーニングし、およそ２６４人が以下で概説する選択基準と適合することが判明すると予想され、およそ１９８人が全試験を完了すると予想される（処置アーム当たり６６の対象を与え、２５％の患者のドロップアウトを仮定）。
【０３７６】
処置割当て
調査に適格であることが判明した患者をそれぞれ８８人の患者からなる３つの並行群にランダムに分ける。群１にはプラセボ化合物Ａを投与し、群２には３００ｍｇの化合物Ａを投与し、群３には６００ｍｇの化合物Ａを投与する。化合物Ａまたはプラセボを１個（３００ｍｇ）または２個（６００ｍｇ）のカプセル剤で５２週間毎日１回投与する。Ｆ１対Ｆ２／Ｆ３の層別化。
【０３７７】
化合物Ａによる処置の有効性を、例えば、肝生検からのＮＡＳスコア、ＭＲＩ  ＬｉｖｅｒＭｕｌｔｉＳｃａｎ評価ＰＤＦＦおよびｃＴ１、肝臓機能検査、ＨＯＭＡ−ＩＲならびに炎症および線維症のバイオマーカー（ｈｓＣＲＰ、Ｐｒｏ−Ｃ３、ＥＬＦパネルおよび他の適したバイオマーカーを含む）により評価する。
【０３７８】
安全性および認容性を有害事象報告、バイタルサイン、身体的検査、血液学および生化学（腎臓、肝臓）、検尿ならびに安静時１２誘導ＥＣＧの監視により評価する。
【０３７９】
各訪問時に測定される３つの座位血圧読取値により血圧を監視する。
【０３８０】
調査設計
５８週間および患者当たり１０回の臨床訪問の間に調査を実施し、スクリーニング、二重盲検処置期間および処置後フォローアップが含まれる。各訪問時に実施される手順を以下で説明し、表１３にまとめる。
・訪問１（処置の投与の開始１〜４２日前）：適合性に関して以下で概説する基準に従って患者をスクリーニングし、患者から同意を得る。１回を超える訪問にわたって評価を実施する場合がある。
・訪問２：患者を３つの処置群のうちの１つにランダムに分ける。処置群のそれぞれに、３００もしくは６００ｍｇの化合物Ａまたはプラセボを５２週間毎日投与する。肝撮像（ＭＲＩ−ＰＤＦＦおよびｃＴ１）、バイタルサイン、安全性ラボ（ベースライン血液学、生化学および検尿）、安静時１２誘導ＥＣＧおよびバイオマーカー（ＨＯＭＡ−ＩＲ、ｈｓＣＲＰ、Ｐｒｏ−Ｃ３およびＥＬＦパネル）を含むベースライン評価を実施する。
・訪問３（４週間の処置後）：有害事象、バイタルサイン、安全性ラボ（血液学、生化学および検尿）、安静時１２誘導ＥＣＧおよびトラフＰＫサンプルに関して患者を評価する。
・訪問４（１０週間の処置後）：有害事象、バイタルサイン、安全性ラボ（血液学、生化学および検尿）、安静時１２誘導ＥＣＧおよびトラフＰＫサンプルに関して患者を評価する。
・訪問５（１６週間の処置後）：有害事象、肝撮像（ＭＲＩ−ＰＤＦＦおよびｃＴ１）、バイタルサイン、安全性ラボ（血液学、生化学および検尿）、安静時１２誘導ＥＣＧ、バイオマーカー（ＨＯＭＡ−ＩＲ、ｈｓＣＲＰ、Ｐｒｏ−Ｃ３およびＥＬＦパネル）およびトラフＰＫサンプルに関して患者を評価する。
・訪問６、７および８（２４、３２および４０週間の処置後）：有害事象、バイタルサイン、安全性ラボ（血液学、生化学および検尿）、安静時１２誘導ＥＣＧ、バイオマーカー（ｈｓＣＲＰ）およびトラフＰＫサンプルに関して患者を評価する。
・訪問９（５２週間の処置後）：肝生検、肝撮像（ＭＲＩ−ＰＤＦＦおよびｃＴ１）、バイタルサイン、安全性ラボ（血液学、生化学および検尿）、安静時１２誘導ＥＣＧ、バイオマーカー（ＨＯＭＡ−ＩＲ、ｈｓＣＲＰ、Ｐｒｏ−Ｃ３およびＥＬＦパネル）およびトラフＰＫサンプルにより患者を評価する。
・訪問１０（試験投薬中止の１４〜２１日後）：患者は安全性フォローアップを受け、有害事象、バイタルサイン、安全性ラボ（血液学、生化学および検尿）、安静時１２誘導ＥＣＧおよびトラフＰＫサンプルに関して患者を評価する。
【０３８１】
完了前に調査からドロップアウトした患者を有害事象、バイタルサイン、安全性ラボ（血液学、生化学および検尿）、安静時１２誘導ＥＣＧ、トラフＰＫサンプルおよびバイオマーカー（ＨＯＭＡ−ＩＲ、ｈｓＣＲＰ、Ｐｒｏ−Ｃ３およびＥＬＦパネル）に関して評価する。
【０３８２】
患者組入れ基準：
試験に組み入れられる患者は以下の基準を満たす。
・１８歳から７５歳の間。
・女性は妊娠の可能性がなく、または許容される避妊手段を使用する。
・男性患者の女性パートナーに妊娠の可能性がある場合、男性患者は自発的に避妊法（例えば、コンドーム）を使用する。加えて、その女性パートナーは、避妊法（例えば、ホルモン薬、子宮内避妊具など）を使用する。化合物薬の初回投与から調査薬の最終投与の９０日後まで二重避妊法を使用する。
・書面によるインフォームドコンセント。
・生検前の任意選択のｆｉｂｒｏｓｃａｎ基準。
・スクリーニング時またはスクリーニングの６カ月以内のＮＡＳＨの組織学的診断。
・ＮＡＳスコア≧４。
・線維症スコア１以上３以下（３０％に上限を設けたＦ１）。
・ＭＲＩによる任意選択のＰＤＦＦ＞１０％
・５２週間の処置後に肝生検を受ける準備。
・プロトコールへの組入れに関する以下の血液学的および生化学的基準による代償性肝臓疾患：
・ＡＬＴ＜５×ＵＬＮ
・ＡＳＴ＞３０
・ヘモグロビン＞１１ｇ／ｄＬ（女性の場合）および＞１２ｇ／ｄＬ（男性の場合）
・白血球（ＷＢＣ）＞２．５Ｋ／μＬ
・好中球数＞１．５Ｋ／μＬ
・血小板＞１００Ｋ／μＬ
・総ビリルビン＜３５μｍｏｌ／Ｌ。ジルベール症候群の設定内の非抱合型ビリルビンの場合、ビリルビン＞３５μｍｏｌ／Ｌの患者を含めることができる。
・アルブミン＞３６ｇ／Ｌ
・国際標準比（ＩＮＲ）＜１．４
・血清クレアチニン＜１．３ｍｇ／ｄＬ（男性）もしくは＜１．１（女性）または推算糸球体濾過量≧６０ｍＬ／ｍｉｎ／１．７３ｍ２
・慢性肝臓疾患（自己免疫疾患、原発性胆汁性胆管炎、ＨＢＶ、ＨＣＶ、ウィルソン病、α−１−アンチトリプシン欠乏症、ヘモクロマトーシスなど．．．）の他の原因なし
・該当する場合、安定した２型糖尿病（ＨｇｂＡ１ｃ＜９．５％および空腹時血糖症＜１０ｍｍｏｌ／Ｌ、直近６カ月における投薬の変化なし、ならびに直近３カ月における非代償性糖尿病に関連する新たな症状なしと定義）。
・肝生検を実施してから安定した体重を有し、ここで安定とは、初期体重の５％以下の減少と定義される。
【０３８３】
患者除外基準
患者が以下の除外基準のいずれかを満たさない：
・アルコール摂取質問表により評価される持続的な過度のアルコール摂取歴。
・以下により定義される不安定な代謝状態：スクリーニング前の過去３カ月に５ｋｇを超える体重増減、過去６カ月における血糖コントロール不良の糖尿病（ＨｇｂＡ１ｃ＞９．５％）、または抗糖尿病薬もしくは抗肥満薬の導入／吸収不全性もしくは制限的肥満（減量）外科手術。
・５年未満内の消化管吸収不全性肥満外科手術歴または直近６カ月におけるコルチコステロイド、高用量エストロゲン、メトトレキサート、テトラサイクリンもしくはアミオダロンを含む、脂肪肝を引き起こすことが既知の薬物の摂取歴。
・評価者の意見では化合物Ａによる処置を妨げるであろううっ血性心不全（ＡＨＡのクラスＣおよびＤ）、不安定冠動脈疾患、脳血管疾患、肺疾患、腎不全、臓器移植、重篤な精神疾患または悪性腫瘍を含む、肝臓疾患以外の重大な全身病または重病。
・ＨＢ抗原＞０、ＨＣＶ  ＰＣＲ＞０（ＨＣＶ感染歴のある患者は、３年間を超えてＨＣＶ  ＰＣＲが陰性である場合、含めることができる）、またはＨＩＶ感染。
・評価者の意見ではコンピテンスもしくはコンプライアンスを妨げるであろう、またはおそらく調査の完了を妨げるであろうその他の任意の状態。
・ボディマス指数（ＢＭＩ）＞４５ｋｇ／ｍ２。
・インスリンで処置された１型糖尿病または２型糖尿病。
・糖尿病性ケトアシドーシス。
・空腹時トリグリセリド＞３００ｍｇ／ｄＬ。
・止血障害または抗凝固薬による現在の処置。
・肝生検に対する禁忌。
・不整脈歴もしくは現在の不整脈および／または心筋梗塞を含み、コントロール良好の高血圧の患者におけるものを除く心血管疾患歴、および何らかの臨床的に有意なＥＣＧ異常。
・直近３カ月以内または前記薬物の５半減期以内のその他の任意の治験薬調査への参加。
・ＩＭＰの成分または賦形剤のいずれかに対する既知の過敏性。
・ＮＡＳＨに対する活性を有することが既知である抗糖尿病薬、例えばピオグリタゾン、およびＧＬＰ−１受容体アゴニストの摂取。
【０３８４】
エンドポイント基準
化合物Ａの有効性の主要エンドポイントは、小葉炎症スコア０または１で線維症の悪化を伴わない風船様腫大の消失（スコア＝０）により定義されるようにＮＡＳＨが回復した患者の割合である。
【０３８５】
化合物Ａの有効性の副次的エンドポイントは、ＮＡＳスコアにおけるベースラインからの変化、脂肪症、風船様腫大、炎症および線維症の個々の組織学的スコアの変化、肝臓酵素の変化、撮像パラメータの変化ならびにバイオマーカー（ｈｓＣＲＰ、Ｐｒｏ−Ｃ３、ＥＬＦパネルおよびサイトカインを含む）の変化である。
【０３８６】
安全性／認容性の副次的エンドポイントには、報告された有害事象、臨床検査値（血液学、生化学および検尿）、バイタルサイン（血圧、脈拍数および体温）およびｈｓＣＲＰが含まれる。
【０３８７】
薬物動態の副次的エンドポイントには、訪問４、５、６、７および８において測定される３用量の化合物Ａに対する定常状態での平均トラフ血漿中濃度の比較が含まれる。
【０３８８】
統計手法
群当たり８８人の患者のサンプルサイズは、１８％のプラセボ奏効率および２５％のドロップアウト率を仮定して、活性薬剤対プラセボに対して４０％レスポンダー率を検出する８０％の検出力を与える。１６週間の中間解析後、サンプルサイズの再推定を行う場合がある。修正処置企図集団（ｍｏｄｉｆｉｅｄ  ｉｎｔｅｎｔｉｏｎ  ｔｏ  ｔｒｅａｔ  ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ）に基づいて有効性解析を実施し、これは、ベースラインおよび少なくとも１回のポストベースライン有効性測定を含むものからなる。個々の用量とプラセボとの間で比較を行う。
【０３８９】
【表１３】
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【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【国際調査報告】
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