(57)【要約】  本発明は、ＡＭＰＫの活性化に使用するための一般式Ｉを有する化合物に関する。ＡＭＰＫの活性化に使用するための化合物を含む組成物も提供される。化合物は、９，１０ジヒドロフェナントレンであり、特に、（ｉ）ルシアントリジンすなわち７−メトキシ−９，１０−ジヒドロフェナントレン−２，５−ジオール、（ｉｉ）７−メトキシ−９，１０−ジヒドロフェナントレン−２，３，５−トリオール、（ｉｉｉ）９，１０−ジヒドロフェナントレン−２，５−ジオール、（ｉｖ）９，１０−ジヒドロフェナントレン−２，４，７ートリオール（ｖ）９，１０−ジヒドロ−７−メトキシ−３，５−フェナントレンジオールからなる群から選択され、ＡＭＰＫの活性化は、心血管代謝の健康、肥満、２型糖尿病、非アルコール性脂肪性肝疾患、心血管疾患、及び癌に関連する状態、障害、又は疾患を改善する。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式Ｉ
【化１】
2021525268.tif 000017
［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は、各々独立してＨ；ＯＨ；ＯＭｅ；Ｏ−グリコシド；Ｃ−グリコシド；アシル化Ｏ−グリコシド；アシル化Ｃ−グリコシド；硫酸化Ｏ−グリコシド；硫酸化Ｃ−グリコシド；ハロゲン；一級、二級、又は三級アルコール；ケトン；アルデヒド；カルボン酸；エステル；一級、二級、又は三級アミン；一級又は二級アミド；シアノ；ニトロ；スルホネート；スルフェート；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ１〜Ｃ２０アルキル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ２０アルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ２０ポリアルケニル；任意選択的に置換された及び／又は任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ２０アルキニル、又は任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ２０ポリアルキニルであり、かつ／又は任意選択的に、ＯＣＨ３基は、隣接するＯＨ基と環化してメチレンジオキシ架橋を形成し得る］を有する、ＡＭＰＫの活性化に使用するための化合物。
【請求項２】
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は、各々独立してＨ；ＯＨ；ＯＭｅ；Ｏ−グリコシド；Ｃ−グリコシド；アシル化Ｏ−グリコシド；アシル化Ｃ−グリコシド；硫酸化Ｏ−グリコシド；硫酸化Ｃ−グリコシド；ハロゲン；一級、二級、又は三級アルコール；ケトン；アルデヒド；カルボン酸；エステル；一級、二級、又は三級アミン；一級又は二級アミド；シアノ；ニトロ；スルホネート；スルフェート；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ１〜Ｃ２０アルキル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ２０アルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ２０ポリアルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ２０アルキニル、又は任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ２０ポリアルキニルであり；Ｒ４及びＲ５は、各々独立してＨ；ＯＨ；Ｏ−グリコシド；Ｃ−グリコシド；アシル化Ｏ−グリコシド；アシル化Ｃ−グリコシド；硫酸化Ｏ−グリコシド；硫酸化Ｃ−グリコシド；ハロゲン；一級、二級、又は三級アルコール；ケトン；アルデヒド；カルボン酸；エステル；一級、二級、又は三級アミン；一級又は二級アミド；シアノ；ニトロ；スルホネート；スルフェート；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ１〜Ｃ２０アルキル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ２０アルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ２０ポリアルケニル；任意選択的に置換された及び／又は任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ２０アルキニル、又は任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ２０ポリアルキニルであり、かつ／又は任意選択的に、ＯＣＨ３基は、隣接するＯＨ基と環化してメチレンジオキシ架橋を形成し得る、ＡＭＰＫの活性化に使用するための、請求項１に記載の一般式Ｉを有する化合物。
【請求項３】
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は、各々独立してＨ；ＯＨ；ＯＭｅ；Ｏ−グリコシド；ハロゲン；アルデヒド；カルボン酸；一級、二級、又は三級アミン；一級又は二級アミド；シアノ；ニトロ；スルホネート；スルフェート；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ１〜Ｃ２０アルキル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ２０アルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ２０ポリアルケニル；任意選択的に置換された及び／又は任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ２０アルキニル、又は任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ２０ポリアルキニルであり、かつ／又は任意選択的に、ＯＣＨ３基は、隣接するＯＨ基と環化してメチレンジオキシ架橋を形成し得る、ＡＭＰＫの活性化に使用するための、請求項１又は２に記載の一般式Ｉを有する化合物。
【請求項４】
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は、各々独立してＨ；Ｍｅ；ＯＨ；ＯＭｅ；ＯＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２；Ｏ−グリコシド；スルフェート；ハロゲン；ＣＨＯ；ＣＨ２ＯＨ；ＣＯＯＨ、ＣＯＮＨ２、ＣＯＣＨ３；ＣＨ＝ＣＨ２；ＣＨ２−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ３）２；ＣＨ（ＣＨ３）２；ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨＯ；ＣＨ（ＣＨ３）−ＯＨ；ＣＨ（ＣＨ３）−ＯＭｅ；ＣＨ（ＣＨ３）−ＯＣ２Ｈ５；ＣＨ（ＣＨ３）−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ３）−（ＣＨ２）３−ＣＨ（ＣＨ３）−（ＣＨ２）３−ＣＨ（ＣＨ３）−（ＣＨ２）３−ＣＨ（ＣＨ３）２；４−ヒドロキシベンジル；４−ヒドロキシ−３−メトキシベンジル；４−ヒドロキシベンゾイル；４−ヒドロキシベンゾイルグリコシドであり、かつ／又は任意選択的に、ＯＣＨ３基は、隣接するＯＨ基と環化してメチレンジオキシ架橋を形成し得る、ＡＭＰＫの活性化に使用するための、請求項１〜３のいずれか一項に記載の一般式Ｉを有する化合物。
【請求項５】
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は、各々独立してＨ；ＯＨ；ＯＭｅ；Ｏ−グリコシド；ハロゲン；アルデヒド；カルボン酸；一級、二級、又は三級アミン；一級又は二級アミド；シアノ；ニトロ；スルホネート；スルフェート；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ１〜Ｃ２０アルキル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ２０アルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ２０ポリアルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ２０アルキニル、又は任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ２０ポリアルキニルであり；Ｒ４及びＲ５は、各々独立してＨ；ＯＨ；Ｏ−グリコシド；ハロゲン；アルデヒド；カルボン酸；一級、二級、又は三級アミン；一級又は二級アミド；シアノ；ニトロ；スルホネート；スルフェート；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ１〜Ｃ２０アルキル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ２０アルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ２０ポリアルケニル；任意選択的に置換された及び／又は任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ２０アルキニル、又は任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ２０ポリアルキニルであり、かつ／又は任意選択的に、ＯＣＨ３基は、隣接するＯＨ基と環化してメチレンジオキシ架橋を形成し得る、ＡＭＰＫの活性化に使用するための、請求項１〜４のいずれか一項に記載の一般式Ｉを有する化合物。
【請求項６】
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は、各々独立してＨ；Ｍｅ；ＯＨ；ＯＭｅ；ＯＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２；Ｏ−グリコシド；スルフェート；ハロゲン；ＣＨＯ；ＣＨ２ＯＨ；ＣＯＯＨ、ＣＯＮＨ２、ＣＯＣＨ３；ＣＨ＝ＣＨ２；ＣＨ２−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ３）２；ＣＨ（ＣＨ３）２；ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨＯ；ＣＨ（ＣＨ３）−ＯＨ；ＣＨ（ＣＨ３）−ＯＭｅ；ＣＨ（ＣＨ３）−ＯＣ２Ｈ５；ＣＨ（ＣＨ３）−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ３）−（ＣＨ２）３−ＣＨ（ＣＨ３）−（ＣＨ２）３−ＣＨ（ＣＨ３）−（ＣＨ２）３−ＣＨ（ＣＨ３）２；４−ヒドロキシベンジル；４−ヒドロキシ−３−メトキシベンジル；４−ヒドロキシベンゾイル；４−ヒドロキシベンゾイルグリコシドであり；Ｒ４及びＲ５は、各々独立してＨ；Ｍｅ；ＯＨ；ＯＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２；Ｏ−グリコシド；スルフェート；ハロゲン；ＣＨＯ；ＣＨ２ＯＨ；ＣＯＯＨ、ＣＯＮＨ２、ＣＯＣＨ３；ＣＨ＝ＣＨ２；ＣＨ２−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ３）２；ＣＨ（ＣＨ３）２；ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨＯ；ＣＨ（ＣＨ３）−ＯＨ；ＣＨ（ＣＨ３）−ＯＭｅ；ＣＨ（ＣＨ３）−ＯＣ２Ｈ５；ＣＨ（ＣＨ３）−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ３）−（ＣＨ２）３−ＣＨ（ＣＨ３）−（ＣＨ２）３−ＣＨ（ＣＨ３）−（ＣＨ２）３−ＣＨ（ＣＨ３）２；４−ヒドロキシベンジル；４−ヒドロキシ−３−メトキシベンジル；４−ヒドロキシベンゾイル；４−ヒドロキシベンゾイルグリコシドであり、かつ／又は任意選択的に、ＯＣＨ３基は、隣接するＯＨ基と環化してメチレンジオキシ架橋を形成し得る、ＡＭＰＫの活性化に使用するための、請求項１〜５のいずれか一項に記載の一般式Ｉを有する化合物。
【請求項７】
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は、各々独立してＨ；Ｍｅ；ＯＨ；ＯＭｅ；ＯＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２；Ｏ−グリコシド；スルフェート；Ｂｒ；ＣＨＯ；ＣＨ２ＯＨ；ＣＯＯＨ、ＣＯＮＨ２、ＣＯＣＨ３；ＣＨ＝ＣＨ２；ＣＨ２−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ３）２；ＣＨ（ＣＨ３）２；ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨＯ；ＣＨ（ＣＨ３）−ＯＨ；ＣＨ（ＣＨ３）−ＯＣＨ３；ＣＨ（ＣＨ３）−ＯＣ２Ｈ５；ＣＨ（ＣＨ３）−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ３）−（ＣＨ２）３−ＣＨ（ＣＨ３）−（ＣＨ２）３−ＣＨ（ＣＨ３）−（ＣＨ２）３−ＣＨ（ＣＨ３）２；４−ヒドロキシベンジル；４−ヒドロキシ−３−メトキシベンジル；４−ヒドロキシベンゾイル；４−ヒドロキシベンゾイルグリコシドであり；Ｒ４及びＲ５は、各々独立してＨ；Ｍｅ；ＯＨ；ＯＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２；Ｏ−グリコシド；スルフェート；Ｂｒ；ＣＨＯ；ＣＨ２ＯＨ；ＣＯＯＨ、ＣＯＮＨ２、ＣＯＣＨ３；ＣＨ＝ＣＨ２；ＣＨ２−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ３）２；ＣＨ（ＣＨ３）２；ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨＯ；ＣＨ（ＣＨ３）−ＯＨ；ＣＨ（ＣＨ３）−ＯＣＨ３；ＣＨ（ＣＨ３）−ＯＣ２Ｈ５；ＣＨ（ＣＨ３）−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ３）−（ＣＨ２）３−ＣＨ（ＣＨ３）−（ＣＨ２）３−ＣＨ（ＣＨ３）−（ＣＨ２）３−ＣＨ（ＣＨ３）２；４−ヒドロキシベンジル；４−ヒドロキシ−３−メトキシベンジル；４−ヒドロキシベンゾイル；４−ヒドロキシベンゾイルグリコシドであり、かつ／又は任意選択的に、ＯＣＨ３基は、隣接するＯＨ基と環化してメチレンジオキシ架橋を形成し得る、ＡＭＰＫの活性化に使用するための、請求項１〜６のいずれか一項に記載の一般式Ｉを有する化合物。
【請求項８】
前記化合物が、
（ｉ）７−メトキシ−９，１０−ジヒドロフェナントレン−２，５−ジオールとして知られるルシアントリジン；
（ｉｉ）７−メトキシ−９，１０−ジヒドロフェナントレン−２，３，５−トリオール；
（ｉｉｉ）２，５−フェナントレンジオール，９，１０−ジヒドロ、９，１０−ジヒドロフェナントレン−２，５−ジオール；
（ｉｖ）９，１０−ジヒドロフェナントレン−２，４，７−トリオール、９，１０−ジヒドロ−２，４，７−フェナントレントリオール、２，４，７−トリヒドロキシ−９，１０−ジヒドロフェナントレン、２，４，７−フェナントレントリオール，９，１０−ジヒドロ；
（ｖ）カンニトレン１、カンナビジヒドロフェナントレン、９，１０−ジヒドロ−７−メトキシ−３，５−フェナントレンジオール、３，５−フェナントレンジオール，９，１０−ジヒドロ−７−メトキシ、７−メトキシ−９，１０−ジヒドロフェナントレン−３，５−ジオール
からなる群から選択される、請求項１〜７のいずれか一項に記載のＡＭＰＫの活性化に使用するための化合物。
【請求項９】
前記ＡＭＰＫの活性化が、対象における状態、障害、又は疾患を治療又は予防する、請求項１〜８のいずれか一項に記載のＡＭＰＫの活性化に使用するための化合物。
【請求項１０】
前記対象がヒトである、請求項９に記載のＡＭＰＫの活性化に使用するための化合物。
【請求項１１】
前記ＡＭＰＫの活性化が、心血管代謝の健康、肥満、２型糖尿病、非アルコール性脂肪性肝疾患、心血管疾患、及び／又は癌に関連する状態、障害、又は疾患を改善する、請求項９又は１０に記載のＡＭＰＫの活性化に使用するための化合物。
【請求項１２】
前記ＡＭＰＫの活性化が直接活性化機序のものである、請求項１〜１１のいずれか一項に記載のＡＭＰＫの活性化に使用するための化合物。
【請求項１３】
前記ＡＭＰＫの活性化が、筋肉組織及び／又は肝組織において生じる、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【請求項１４】
前記ＡＭＰＫが、α２サブユニットと、β１サブユニットと、γ１サブユニットと、を含む、請求項１〜１３のいずれか一項に記載のＡＭＰＫの活性化に使用するための化合物。
【請求項１５】
前記化合物が、植物又は植物抽出物から得られる、請求項１〜１４のいずれか一項に記載のＡＭＰＫの活性化に使用するための化合物。
【請求項１６】
ＡＭＰＫ活性化に対して応答性の状態、障害、又は疾患を治療又は予防するための薬剤の調製に使用するための、請求項１〜８のいずれか一項に記載の一般式Ｉの化合物。
【請求項１７】
前記ＡＭＰＫの活性化に使用するための、請求項１〜８のいずれか一項に記載の一般式Ｉの化合物を含む組成物。
【請求項１８】
前記組成物が、食品、飲料、又は食餌補給剤である、請求項１７に記載の使用のための組成物。
【請求項１９】
前記一般式Ｉの化合物が、
（ｉ）７−メトキシ−９，１０−ジヒドロフェナントレン−２，５−ジオールとして知られるルシアントリジン；
（ｉｉ）７−メトキシ−９，１０−ジヒドロフェナントレン−２，３，５−トリオール；
（ｉｉｉ）２，５−フェナントレンジオール，９，１０−ジヒドロ、９，１０−ジヒドロフェナントレン−２，５−ジオール；
（ｉｖ）９，１０−ジヒドロフェナントレン−２，４，７−トリオール、９，１０−ジヒドロ−２，４，７−フェナントレントリオール、２，４，７−トリヒドロキシ−９，１０−ジヒドロフェナントレン、２，４，７−フェナントレントリオール，９，１０−ジヒドロ；
（ｖ）カンニトレン１、カンナビジヒドロフェナントレン、９，１０−ジヒドロ−７−メトキシ−３，５−フェナントレンジオール、３，５−フェナントレンジオール，９，１０−ジヒドロ−７−メトキシ、７−メトキシ−９，１０−ジヒドロフェナントレン−３，５−ジオール
からなる群から選択される、請求項１６〜１８のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
【請求項２０】
治療有効量の、活性成分としての請求項１〜８のいずれか一項に記載の一般式Ｉの化合物、又はその薬学的に許容可能な塩若しくは溶媒和物と、薬学的に許容可能な担体と、を含む、ＡＭＰＫの活性化に使用するための医薬組成物。
【請求項２１】
請求項１〜８のいずれか一項に記載の一般式Ｉの化合物又はその誘導体若しくは類似体を接触させてＡＭＰＫを活性化する工程を含む、ＡＭＰＫを活性化するインビトロ法。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
序論
ＡＭＰ活性化プロテインキナーゼ（ＡＭＰＫ）は、エネルギーホメオスタシスの進化的に保存されている主調節因子であり、栄養供給とエネルギー需要とのバランスをとることを目的として代謝経路を調整する。ＡＭＰＫは、肥満、２型糖尿病、心血管疾患などの代謝異常の蔓延に対抗するための重要な創薬標的であると考えられる。
【０００２】
ＡＭＰＫ活性は、肝臓、腎臓、筋肉、肺、及び脳を含む全ての組織において見られる（ＰＭＩＤ：１０６９８６９２）。構造に関しては、ＡＭＰＫは、触媒サブユニット（α）と２つの調節サブユニット（β及びγ）とからなるヘテロ三量体複合体である。ＡＭＰＫ複合体は、進化的に保存されており、酵母及び植物にも見ることができる。哺乳動物ＡＭＰＫは、サブユニットの異なるアイソフォーム：α１、α２、β１、β２、γ１、γ２、及びγ３から構成され（ＰＭＩＤ：１１７４６２３０）、可能なヘテロ三量体の組み合わせは１２種となる。α２アイソフォームは、主に骨格筋及び心筋ＡＭＰＫにおいて見られ；α１アイソフォーム及びα２アイソフォームは両方とも、肝臓ＡＭＰＫにおいて見られる；一方で、例えば脂肪及びＴ細胞では、α１アイソフォームのＡＭＰＫが優勢である（ＰＭＩＤ：１６８１８６７０、ＰＭＩＤ１５８７８８５６）。
【０００３】
２型糖尿病は、複雑でありかつ性質の多様な疾患である。疾患を治療するための普遍的に適用可能な単一の解決策は存在せず、医薬と生活習慣介入との組み合わせが推奨される。特に筋肉及び肝臓において、規定された作用機序でＡＭＰＫを中程度に活性化する天然分子を見出すことは、運動模倣効果を提供し、代謝面での健康状態を維持／改善するのに役立つ可能性が高い。
【０００４】
医薬品業界で継続的に集中して取り組まれているにもかかわらず、代謝異常を治療するために利用可能な直接ＡＭＰＫ活性化剤は存在しない。ＡＭＰＫ活性化剤の効果を試験するために登録された臨床試験であろうと考えられるものは存在しない。いくつかの合成ＡＭＰＫ活性化剤が同定／開発されている。しかしながら、上記活性化剤は、経口利用性がないか、低いかのいずれかであり（ＰＭＩＤ：１６７５３５７６、ＰＭＩＤ：２４９００２３４）、又は慢性的かつ強力なＡＭＰＫ活性化は心臓におけるグリコーゲン含量の増加及び肥大を引き起こし得ることから副作用が懸念される（ＰＭＩＤ：１１８２７９９５）。
【０００５】
ＡＭＰＫを間接的に刺激する（ミトコンドリア呼吸の阻害による刺激である可能性が最も高い）ことが示されており、代謝面である程度の健康効果をもたらすことが知られている、天然化合物／抽出物が数多く存在する。しかしながら、これらの代謝効果がＡＭＰＫにより介在されるものなのかを解明することは難しく、更には副作用／有毒作用（細胞／ミトコンドリア中毒）に関する懸念がある。
【０００６】
ＡＭＰＫを直接活性化する新たな天然化合物に対するニーズが満たされていないことは明らかである。
【発明の概要】
【０００７】
本発明は、ＡＭＰＫの活性化に使用するための、一般式Ｉ
【化１】
2021525268.tif 000002
［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は、各々独立してＨ；ＯＨ；ＯＭｅ；Ｏ−グリコシド；Ｃ−グリコシド；アシル化Ｏ−グリコシド；アシル化Ｃ−グリコシド；硫酸化Ｏ−グリコシド；硫酸化Ｃ−グリコシド；ハロゲン；一級、二級、又は三級アルコール；ケトン；アルデヒド；カルボン酸；エステル；一級、二級、又は三級アミン；一級又は二級アミド；シアノ；ニトロ；スルホネート；スルフェート；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ１〜Ｃ２０アルキル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ２０アルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ２０ポリアルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ２０アルキニル、又は任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ２０ポリアルキニルである］を有する化合物、又はこれらの誘導体若しくは類似体を提供する。
【０００８】
いくつかの実施形態では、ＯＣＨ３基は、隣接するＯＨ基と環化してメチレンジオキシ架橋を形成し得る。
【０００９】
一実施形態では、ＡＭＰＫの活性化に使用するため、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は、各々独立してＨ；ＯＨ；ＯＭｅ；Ｏ−グリコシド；Ｃ−グリコシド；アシル化Ｏ−グリコシド；アシル化Ｃ−グリコシド；硫酸化Ｏ−グリコシド；硫酸化Ｃ−グリコシド；ハロゲン；一級、二級、又は三級アルコール；ケトン；アルデヒド；カルボン酸；エステル；一級、二級、又は三級アミン；一級又は二級アミド；シアノ；ニトロ；スルホネート；スルフェート；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ１〜Ｃ２０アルキル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ２０アルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ２０ポリアルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ２０アルキニル、又は任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ２０ポリアルキニルであり；Ｒ４及びＲ５は、各々独立してＨ；ＯＨ；Ｏ−グリコシド；Ｃ−グリコシド；アシル化Ｏ−グリコシド；アシル化Ｃ−グリコシド；硫酸化Ｏ−グリコシド；硫酸化Ｃ−グリコシド；ハロゲン；一級、二級、又は三級アルコール；ケトン；アルデヒド；カルボン酸；エステル；一級、二級、又は三級アミン；一級又は二級アミド；シアノ；ニトロ；スルホネート；スルフェート；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ１〜Ｃ２０アルキル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ２０アルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ２０ポリアルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ２０アルキニル、又は任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ２０ポリアルキニルである、又はこれらの誘導体若しくは類似体である。
【００１０】
いくつかの実施形態では、ＯＣＨ３基は、隣接するＯＨ基と環化してメチレンジオキシ架橋を形成し得る。
【００１１】
一実施形態では、ＡＭＰＫの活性化に使用するため、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は、各々独立してＨ；ＯＨ；ＯＭｅ；Ｏ−グリコシド；ハロゲン；アルデヒド；カルボン酸；一級、二級、又は三級アミン；一級又は二級アミド；シアノ；ニトロ；スルホネート；スルフェート；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ１〜Ｃ２０アルキル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ２０アルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ２０ポリアルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ２０アルキニル、又は任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ２０ポリアルキニルである、又はこれらの誘導体若しくは類似体である。
【００１２】
一実施形態では、ＡＭＰＫの活性化に使用するため、Ｒ２は、Ｈ；ＯＨ；ＯＭｅ；Ｏ−グリコシド；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ１〜Ｃ１０アルキル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ１０アルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ１０ポリアルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ１０アルキニル、又は任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ１０ポリアルキニルである、又はこれらの誘導体若しくは類似体である。
【００１３】
一実施形態では、ＡＭＰＫの活性化に使用するため、Ｒ４は、Ｈ；ＯＨ；Ｏ−グリコシド；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ１〜Ｃ１０アルキル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ１０アルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ１０ポリアルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ１０アルキニル、又は任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ１０ポリアルキニルである、又はこれらの誘導体若しくは類似体である。
【００１４】
一実施形態では、ＡＭＰＫの活性化に使用するため、Ｒ５は、Ｈ；ＯＭｅ；Ｏ−グリコシド；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ１〜Ｃ１０アルキル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ１０アルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ１０ポリアルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ１０アルキニル、又は任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ１０ポリアルキニルである、又はこれらの誘導体若しくは類似体である。
【００１５】
一実施形態では、ＡＭＰＫの活性化に使用するため、Ｒ５は、Ｈ；Ｏ−グリコシド；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ１〜Ｃ１０アルキル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ１０アルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ１０ポリアルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ１０アルキニル、又は任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ１０ポリアルキニルである、又はこれらの誘導体若しくは類似体である。
【００１６】
一実施形態では、ＡＭＰＫの活性化に使用するため、Ｒ６は、Ｈ；ＯＨ；Ｏ−グリコシド；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ１〜Ｃ１０アルキル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ１０アルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ１０ポリアルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ１０アルキニル、又は任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ１０ポリアルキニルである、又はこれらの誘導体若しくは類似体である。
【００１７】
一実施形態では、ＡＭＰＫの活性化に使用するため、Ｒ７は、Ｈ；ＯＨ；Ｏ−グリコシド；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ１〜Ｃ１０アルキル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ１０アルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ１０ポリアルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ１０アルキニル、又は任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ１０ポリアルキニルである、又はこれらの誘導体若しくは類似体である。
【００１８】
一実施形態では、ＡＭＰＫの活性化に使用するため、Ｒ２は、Ｈ；ＯＨ；ＯＭｅ；Ｏ−グリコシド；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ１〜Ｃ１０アルキル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ１０アルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ１０ポリアルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ１０アルキニル、又は任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ１０ポリアルキニルであり；Ｒ４は、Ｈ；ＯＨ；Ｏ−グリコシド；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ１〜Ｃ１０アルキル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ１０アルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ１０ポリアルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ１０アルキニル、又は任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ１０ポリアルキニルであり；かつ、Ｒ７は、Ｈ；ＯＨ；Ｏ−グリコシド；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ１〜Ｃ１０アルキル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ１０アルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ１０ポリアルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ１０アルキニル、又は任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ１０ポリアルキニルである、又はこれらの誘導体若しくは類似体である。
【００１９】
一実施形態では、ＡＭＰＫの活性化に使用するため、Ｒ２は、Ｈ；ＯＨ；ＯＭｅ；Ｏ−グリコシド；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ１〜Ｃ５アルキル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ５アルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ１０ポリアルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ５アルキニル、又は任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ５ポリアルキニルであり；Ｒ４は、Ｈ；ＯＨ；Ｏ−グリコシド；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ１〜Ｃ５アルキル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ５アルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ１０ポリアルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ５アルキニル、又は任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ５ポリアルキニルであり；かつ、Ｒ７は、Ｈ；ＯＨ；Ｏ−グリコシド；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝したＣ１〜Ｃ５アルキル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ５アルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝したＣ４〜Ｃ５ポリアルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ５アルキニル、又は任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ５ポリアルキニルである、又はこれらの誘導体若しくは類似体である。
【００２０】
一実施形態では、ＡＭＰＫの活性化に使用するため、Ｒ２は、Ｈ；ＯＨ；ＯＭｅ；Ｏ−グリコシド；Ｃ１〜Ｃ５アルキル；Ｃ２〜Ｃ５アルケニル；Ｃ４〜Ｃ５ポリアルケニル；Ｃ２〜Ｃ５アルキニル、又はＣ４〜Ｃ５ポリアルキニルであり；Ｒ４は、Ｈ；ＯＨ；Ｏ−グリコシド；Ｃ１〜Ｃ５アルキル；Ｃ２〜Ｃ５アルケニル；Ｃ４〜Ｃ５ポリアルケニル；Ｃ２〜Ｃ５アルキニル、又はＣ４〜Ｃ５ポリアルキニルであり；かつ、Ｒ７は、Ｈ；ＯＨ；Ｏ−グリコシド；Ｃ１〜Ｃ５アルキル；Ｃ２〜Ｃ５アルケニル；Ｃ４〜Ｃ５ポリアルケニル；Ｃ２〜Ｃ５アルキニル；又はＣ４〜Ｃ５ポリアルキニル、又はその誘導体若しくは類似体である。
【００２１】
一実施形態では、アルキル、アルケニル、及びアルキニルは、非分枝状である。
【００２２】
一実施形態では、アルキル、アルケニル、及びアルキニルは、非置換である。
【００２３】
いくつかの実施形態では、ＯＣＨ３基は、隣接するＯＨ基と環化してメチレンジオキシ架橋を形成し得る。
【００２４】
一実施形態では、ＡＭＰＫの活性化に使用するため、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は、各々独立してＨ；ＯＨ；ＯＭｅ；Ｏ−グリコシド；ハロゲン；アルデヒド；カルボン酸；一級、二級、又は三級アミン；一級又は二級アミド；シアノ；ニトロ；スルホネート；スルフェート；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ１〜Ｃ２０アルキル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ２０アルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ２０ポリアルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ２０アルキニル、又は任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ２０ポリアルキニルであり；Ｒ４及びＲ５は、各々独立してＨ；ＯＨ；Ｏ−グリコシド；ハロゲン；アルデヒド；カルボン酸；一級、二級、又は三級アミン；一級又は二級アミド；シアノ；ニトロ；スルホネート；スルフェート；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ１〜Ｃ２０アルキル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ２０アルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ２０ポリアルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ２０アルキニル、又は任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ２０ポリアルキニルである、又はこれらの誘導体若しくは類似体である。
【００２５】
いくつかの実施形態では、ＯＣＨ３基は、隣接するＯＨ基と環化してメチレンジオキシ架橋を形成し得る。
【００２６】
一実施形態では、ＡＭＰＫの活性化に使用するため、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は、各々独立してＨ；Ｍｅ；ＯＨ；ＯＭｅ；ＯＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２；Ｏ−グリコシド；スルフェート；ハロゲン；ＣＨＯ；ＣＨ２ＯＨ；ＣＯＯＨ、ＣＯＮＨ２、ＣＯＣＨ３；ＣＨ＝ＣＨ２；ＣＨ２−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ３）２；ＣＨ（ＣＨ３）２；ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨＯ；ＣＨ（ＣＨ３）−ＯＨ；ＣＨ（ＣＨ３）−ＯＭｅ；ＣＨ（ＣＨ３）−ＯＣ２Ｈ５；ＣＨ（ＣＨ３）−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ３）−（ＣＨ２）３−ＣＨ（ＣＨ３）−（ＣＨ２）３−ＣＨ（ＣＨ３）−（ＣＨ２）３−ＣＨ（ＣＨ３）２；４−ヒドロキシベンジル；４−ヒドロキシ−３−メトキシベンジル；４−ヒドロキシベンゾイル；４−ヒドロキシベンゾイルグリコシドである、又はその誘導体若しくは類似体である。
【００２７】
いくつかの実施形態では、ＯＣＨ３基は、隣接するＯＨ基と環化してメチレンジオキシ架橋を形成し得る。
【００２８】
一実施形態では、ＡＭＰＫの活性化に使用するため、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は、各々独立してＨ；Ｍｅ；ＯＨ；ＯＭｅ；ＯＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２；Ｏ−グリコシド；スルフェート；ハロゲン；ＣＨＯ；ＣＨ２ＯＨ；ＣＯＯＨ、ＣＯＮＨ２、ＣＯＣＨ３；ＣＨ＝ＣＨ２；ＣＨ２−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ３）２；ＣＨ（ＣＨ３）２；ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨＯ；ＣＨ（ＣＨ３）−ＯＨ；ＣＨ（ＣＨ３）−ＯＭｅ；ＣＨ（ＣＨ３）−ＯＣ２Ｈ５；ＣＨ（ＣＨ３）−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ３）−（ＣＨ２）３−ＣＨ（ＣＨ３）−（ＣＨ２）３−ＣＨ（ＣＨ３）−（ＣＨ２）３−ＣＨ（ＣＨ３）２；４−ヒドロキシベンジル；４−ヒドロキシ−３−メトキシベンジル；４−ヒドロキシベンゾイル；４−ヒドロキシベンゾイルグリコシドであり；Ｒ４及びＲ５は、各々独立してＨ；Ｍｅ；ＯＨ；ＯＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２；Ｏ−グリコシド；スルフェート；ハロゲン；ＣＨＯ；ＣＨ２ＯＨ；ＣＯＯＨ、ＣＯＮＨ２、ＣＯＣＨ３；ＣＨ＝ＣＨ２；ＣＨ２−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ３）２；ＣＨ（ＣＨ３）２；ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨＯ；ＣＨ（ＣＨ３）−ＯＨ；ＣＨ（ＣＨ３）−ＯＭｅ；ＣＨ（ＣＨ３）−ＯＣ２Ｈ５；ＣＨ（ＣＨ３）−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ３）−（ＣＨ２）３−ＣＨ（ＣＨ３）−（ＣＨ２）３−ＣＨ（ＣＨ３）−（ＣＨ２）３−ＣＨ（ＣＨ３）２；４−ヒドロキシベンジル；４−ヒドロキシ−３−メトキシベンジル；４−ヒドロキシベンゾイル；４−ヒドロキシベンゾイルグリコシドである、又はその誘導体若しくは類似体である。
【００２９】
いくつかの実施形態では、ＯＣＨ３基は、隣接するＯＨ基と環化してメチレンジオキシ架橋を形成し得る。
【００３０】
一実施形態では、ＡＭＰＫの活性化に使用するため、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は、各々独立してＨ；Ｍｅ；ＯＨ；ＯＭｅ；ＯＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２；Ｏ−グリコシド；スルフェート；Ｂｒ；ＣＨＯ；ＣＨ２ＯＨ；ＣＯＯＨ、ＣＯＮＨ２、ＣＯＣＨ３；ＣＨ＝ＣＨ２；ＣＨ２−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ３）２；ＣＨ（ＣＨ３）２；ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨＯ；ＣＨ（ＣＨ３）−ＯＨ；ＣＨ（ＣＨ３）−ＯＣＨ３；ＣＨ（ＣＨ３）−ＯＣ２Ｈ５；ＣＨ（ＣＨ３）−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ３）−（ＣＨ２）３−ＣＨ（ＣＨ３）−（ＣＨ２）３−ＣＨ（ＣＨ３）−（ＣＨ２）３−ＣＨ（ＣＨ３）２；４−ヒドロキシベンジル；４−ヒドロキシ−３−メトキシベンジル；４−ヒドロキシベンゾイル；４−ヒドロキシベンゾイルグリコシドである、又はその誘導体若しくは類似体である。
【００３１】
いくつかの実施形態では、ＯＣＨ３基は、隣接するＯＨ基と環化してメチレンジオキシ架橋を形成し得る。
【００３２】
一実施形態では、ＡＭＰＫの活性化に使用するため、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は、各々独立してＨ；Ｍｅ；ＯＨ；ＯＭｅ；ＯＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２；Ｏ−グリコシド；スルフェート；Ｂｒ；ＣＨＯ；ＣＨ２ＯＨ；ＣＯＯＨ、ＣＯＮＨ２、ＣＯＣＨ３；ＣＨ＝ＣＨ２；ＣＨ２−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ３）２；ＣＨ（ＣＨ３）２；ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨＯ；ＣＨ（ＣＨ３）−ＯＨ；ＣＨ（ＣＨ３）−ＯＣＨ３；ＣＨ（ＣＨ３）−ＯＣ２Ｈ５；ＣＨ（ＣＨ３）−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ３）−（ＣＨ２）３−ＣＨ（ＣＨ３）−（ＣＨ２）３−ＣＨ（ＣＨ３）−（ＣＨ２）３−ＣＨ（ＣＨ３）２；４−ヒドロキシベンジル；４−ヒドロキシ−３−メトキシベンジル；４−ヒドロキシベンゾイル；４−ヒドロキシベンゾイルグリコシドであり；Ｒ４及びＲ５は、各々独立してＨ；Ｍｅ；ＯＨ；ＯＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２；Ｏ−グリコシド；スルフェート；Ｂｒ；ＣＨＯ；ＣＨ２ＯＨ；ＣＯＯＨ、ＣＯＮＨ２、ＣＯＣＨ３；ＣＨ＝ＣＨ２；ＣＨ２−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ３）２；ＣＨ（ＣＨ３）２；ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨＯ；ＣＨ（ＣＨ３）−ＯＨ；ＣＨ（ＣＨ３）−ＯＣＨ３；ＣＨ（ＣＨ３）−ＯＣ２Ｈ５；ＣＨ（ＣＨ３）−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ３）−（ＣＨ２）３−ＣＨ（ＣＨ３）−（ＣＨ２）３−ＣＨ（ＣＨ３）−（ＣＨ２）３−ＣＨ（ＣＨ３）２；４−ヒドロキシベンジル；４−ヒドロキシ−３−メトキシベンジル；４−ヒドロキシベンゾイル；４−ヒドロキシベンゾイルグリコシドである、又はその誘導体若しくは類似体である。
【００３３】
いくつかの実施形態では、ＯＣＨ３基は、隣接するＯＨ基と環化してメチレンジオキシ架橋を形成し得る。
【００３４】
一実施形態では、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は、各々独立してＨ；Ｍｅ；ＯＨ；ＯＭｅ；Ｏ−グリコシド；スルフェート；ＣＨ２−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ３）２である。
【００３５】
いくつかの実施形態では、ＯＣＨ３基は、隣接するＯＨ基と環化してメチレンジオキシ架橋を形成し得る。
【００３６】
一実施形態では、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は、各々独立してＨ；Ｍｅ；ＯＨ；ＯＭｅ；Ｏ−グリコシド；スルフェート；ＣＨ２−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ３）２であり；Ｒ４及びＲ５は、各々独立してＨ；Ｍｅ；ＯＨ；Ｏ−グリコシド；スルフェート；ＣＨ２−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ３）２である。
【００３７】
いくつかの実施形態では、ＯＣＨ３基は、隣接するＯＨ基と環化してメチレンジオキシ架橋を形成し得る。
【００３８】
一実施形態では、Ｒ１は、Ｈ；ＣＨ３；ＯＨ；ＯＣＨ３；Ｏ−グリコシド；スルフェート；ＣＨ２−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ３）２；４−ヒドロキシベンジル；４−ヒドロキシ−３−メトキシベンジル；４−ヒドロキシベンゾイル；又は４−ヒドロキシベンゾイルグリコシドであり；Ｒ２及びＲ７は、各々独立してＯＨ；ＯＣＨ３；Ｏ−ＣＨ＝ＣＨ２；Ｏ−グリコシド；又はスルフェートであり；Ｒ３は、Ｈ；ＣＨ３；ＯＨ；ＯＣＨ３；Ｏ−グリコシド；スルフェート；ＣＨ２−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ３）２；又は４−ヒドロキシベンジルであり；Ｒ４及びＲ５は、各々独立してＯＨ、ＯＣＨ３；Ｏ−グリコシド；又はスルフェートであり；Ｒ６は、ＣＨ３；ＯＨ；ＯＣＨ３；Ｏ−グリコシド；ＣＨ２−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ３）２；４−ヒドロキシベンジル；又はＡｒであり；Ｒ８は、ＯＨ：ＯＣＨ３；Ｏ−グリコシド；スルフェート；ＣＨ２−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ３）２；又は４−ヒドロキシベンジルである。
【００３９】
一実施形態では、Ｒ１は、Ｈ；ＣＨ３；ＯＨ；ＯＣＨ３；Ｏ−グリコシド；スルフェート；ＣＨ２−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ３）２；４−ヒドロキシベンジル；４−ヒドロキシ−３−メトキシベンジル；４−ヒドロキシベンゾイル；又は４−ヒドロキシベンゾイルグリコシドであり；Ｒ２及びＲ７は、各々独立してＯＨ；ＯＣＨ３；Ｏ−ＣＨ＝ＣＨ２；Ｏ−グリコシド；又はスルフェートであり；Ｒ３は、Ｈ；ＣＨ３；ＯＨ；ＯＣＨ３；Ｏ−グリコシド；スルフェート；ＣＨ２−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ３）２；又は４−ヒドロキシベンジルであり；Ｒ４及びＲ５は、各々独立してＯＨ、Ｏ−グリコシド；又はスルフェートであり；Ｒ６は、ＣＨ３；ＯＨ；ＯＣＨ３；Ｏ−グリコシド；ＣＨ２−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ３）２；４−ヒドロキシベンジル；又はＡｒであり；Ｒ８は、ＯＨ：ＯＣＨ３；Ｏ−グリコシド；スルフェート；ＣＨ２−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ３）２；又は４−ヒドロキシベンジルである。
【００４０】
一実施形態では、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ５、Ｒ６、及びＲ８は、Ｈであり；Ｒ２は、ＯＨ；ＯＭｅ又はＯ−グリコシドであり；Ｒ４は、ＯＨ、又はＯ−グリコシドであり；かつ、Ｒ７は、ＯＨ、又はＯ−グリコシドである。
【００４１】
一実施形態では、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ５、Ｒ６、及びＲ８は、Ｈであり；Ｒ２は、ＯＨ又はＯＭｅであり；Ｒ４はＯＨであり；かつ、Ｒ７はＯＨである。
【００４２】
一実施形態では、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ５、Ｒ６、及びＲ８は、Ｈであり；Ｒ２はＯＭｅであり；Ｒ４はＯＨであり；かつ、Ｒ７はＯＨである。
【００４３】
一実施形態では、上記化合物は、７−メトキシ−９，１０−ジヒドロフェナントレン−２，５−ジオールとして知られる、ＣＡＳ番号８７５３０−３０−１のルシアントリジンである。
【化２】
2021525268.tif 000003
【００４４】
別の実施形態では、上記化合物は、７ーメトキシ−９，１０−ジヒドロフェナントレン−２，３，５−トリオールとして知られる化合物２である。
【化３】
2021525268.tif 000004
【００４５】
別の実施形態では、上記化合物は、２，５−フェナントレンジオール，９，１０−ジヒドロ、９，１０−ジヒドロフェナントレン−２，５−ジオールとして知られる、ＣＡＳ番号１０７１０５５−４２−９の化合物３である。
【化４】
2021525268.tif 000005
【００４６】
別の実施形態では、上記化合物は、９，１０−ジヒドロフェナントレン−２，４，７−トリオール、９，１０−ジヒドロ−２，４，７−フェナントレントリオール、２，４，７−トリヒドロキシ−９，１０−ジヒドロフェナントレン、２，４，７−フェナントレントリオール，９，１０−ジヒドロとして知られる、ＣＡＳ番号７０２０５−５２−６の化合物４である。
【化５】
2021525268.tif 000006
【００４７】
別の実施形態では、上記化合物は、カンニトレン１、カンナビジヒドロフェナントレン、９，１０−ジヒドロ−７−メトキシ−３，５−フェナントレンジオール、３，５−フェナントレンジオール，９，１０−ジヒドロ−７−メトキシ、７−メトキシ−９，１０−ジヒドロフェナントレン−３，５−ジオールとして知られる、ＣＡＳ番号７１１３５−８０−３の化合物５である。
【化６】
2021525268.tif 000007
【００４８】
一実施形態では、ＡＭＰＫの活性化は、対象における状態、障害、又は疾患を治療又は予防する。
【００４９】
一実施形態では、対象はヒト又はコンパニオンアニマルである。
【００５０】
一実施形態では、対象はヒトである。
【００５１】
一実施形態では、対象は高齢のヒトである。
【００５２】
一実施形態では、対象は老齢のヒトである。
【００５３】
一実施形態では、対象はコンパニオンアニマルである。
【００５４】
一実施形態では、状態、障害、又は疾患は、心血管代謝の健康、肥満、２型糖尿病、非アルコール性脂肪性肝疾患、心血管疾患、及び／又は癌に関連する。
【００５５】
一実施形態では、状態、障害、又は疾患は、２型糖尿病及び／又は非アルコール性脂肪性肝疾患に関連する。
【００５６】
一実施形態では、ＡＭＰＫの活性化は、直接活性化機序のものである。
【００５７】
一実施形態では、ＡＭＰＫの活性化は、筋肉及び肝組織におけるものである。
【００５８】
一実施形態では、ＡＭＰＫは、α２サブユニットと、β１サブユニットと、γ１サブユニットとを含む。
【００５９】
一実施形態では、ＡＭＰＫは、α１サブユニットと、β１サブユニットと、γ１サブユニットとを含む。
【００６０】
一実施形態では、化合物は、植物又は植物抽出物から得られる。
【００６１】
一実施形態では、化合物は、化学合成によって得られる。
【００６２】
本発明はまた、ＡＭＰＫ活性化に対して応答性の状態、障害、又は疾患を治療又は予防するための薬剤の調製に使用するための、本明細書に記載される一般式Ｉの化合物も提供する。
【００６３】
一実施形態では、一般式Ｉの化合物は、２型糖尿病を治療又は予防するための薬剤の調製に使用するためのものである。
【００６４】
一実施形態では、一般式Ｉの化合物は、非アルコール性脂肪性肝疾患を治療又は予防するための薬剤の調製に使用するためのものである。
【００６５】
本発明はまた、本明細書に記載される一般式Ｉの化合物、又はその誘導体若しくは類似体を含む、ＡＭＰＫの活性化に使用するための組成物も提供する。
【００６６】
一実施形態では、組成物は、食品、飲料、又は食餌補給剤である。
【００６７】
一実施形態において、組成物は、栄養補助食品である。
【００６８】
１つの好ましい実施形態では、一般式Ｉの化合物は、７−メトキシ−９，１０−ジヒドロフェナントレン−２，５−ジオールとして知られる、ＣＡＳ番号８７５３０−３０−１のルシアントリジンである。
【００６９】
１つの好ましい実施形態では、一般式Ｉの化合物は、７ーメトキシ−９，１０−ジヒドロフェナントレン−２，３，５−トリオールとして知られる化合物２である。
【００７０】
１つの好ましい実施形態では、一般式Ｉの化合物は、２，５−フェナントレンジオール，９，１０−ジヒドロ、９，１０−ジヒドロフェナントレン−２，５−ジオールとして知られる、ＣＡＳ番号１０７１０５５−４２−９の化合物３である。
【００７１】
１つの好ましい実施形態では、一般式Ｉの化合物は、９，１０−ジヒドロフェナントレン−２，４，７−トリオール、９，１０−ジヒドロ−２，４，７−フェナントレントリオール、２，４，７−トリヒドロキシ−９，１０−ジヒドロフェナントレン、２，４，７−フェナントレントリオール，９，１０−ジヒドロとして知られる、ＣＡＳ番号７０２０５−５２−６の化合物４である。
【００７２】
１つの好ましい実施形態では、一般式Ｉの化合物は、カンニトレン１、カンナビジヒドロフェナントレン、９，１０−ジヒドロ−７−メトキシ−３，５−フェナントレンジオール、３，５−フェナントレンジオール，９，１０−ジヒドロ−７−メトキシ、７−メトキシ−９，１０−ジヒドロフェナントレン−３，５−ジオールとして知られる、ＣＡＳ番号７１１３５−８０−３の化合物５である。
【００７３】
一実施形態では、組成物は、薬学的に許容可能な担体を更に含む。
【００７４】
本発明はまた、治療有効量の、活性成分としての本明細書に記載される一般式Ｉの化合物、又はその薬学的に許容可能な塩若しくは溶媒和物と、薬学的に許容可能な担体と、を含む、ＡＭＰＫの活性化に使用するための医薬組成物を提供する。
【００７５】
１つの好ましい実施形態では、一般式Ｉの化合物を含む医薬組成物は、７−メトキシ−９，１０−ジヒドロフェナントレン−２，５−ジオールとして知られる、ＣＡＳ番号８７５３０−３０−１のルシアントリジンである。
【００７６】
１つの好ましい実施形態では、一般式Ｉの化合物を含む医薬組成物は、７ーメトキシ−９，１０−ジヒドロフェナントレン−２，３，５−トリオールとして知られる化合物２である。
【００７７】
１つの好ましい実施形態では、一般式Ｉの化合物を含む医薬組成物は、２，５−フェナントレンジオール，９，１０−ジヒドロ、９，１０−ジヒドロフェナントレン−２，５−ジオールとして知られる、ＣＡＳ番号１０７１０５５−４２−９の化合物３である。
【００７８】
１つの好ましい実施形態では、一般式Ｉの化合物を含む医薬組成物は、９，１０−ジヒドロフェナントレン−２，４，７−トリオール、９，１０−ジヒドロ−２，４，７−フェナントレントリオール、２，４，７−トリヒドロキシ−９，１０−ジヒドロフェナントレン、２，４，７−フェナントレントリオール，９，１０−ジヒドロとして知られる、ＣＡＳ番号７０２０５−５２−６の化合物４である。
【００７９】
１つの好ましい実施形態では、一般式Ｉの化合物を含む医薬組成物は、カンニトレン１、カンナビジヒドロフェナントレン、９，１０−ジヒドロ−７−メトキシ−３，５−フェナントレンジオール、３，５−フェナントレンジオール，９，１０−ジヒドロ−７−メトキシ、７−メトキシ−９，１０−ジヒドロフェナントレン−３，５−ジオールとして知られる、ＣＡＳ番号７１１３５−８０−３の化合物５である。
【００８０】
一実施形態では、医薬組成物は経口剤形である。
【００８１】
本発明はまた、ＡＭＰＫ活性化に対して応答性の状態、障害、又は疾患を治療又は予防するための、治療有効量の本明細書に記載される一般式Ｉの化合物を投与する方法も提供する。
【００８２】
１つの好ましい実施形態では、一般式Ｉの化合物は、７−メトキシ−９，１０−ジヒドロフェナントレン−２，５−ジオールとして知られる、ＣＡＳ番号８７５３０−３０−１のルシアントリジンである。
【００８３】
１つの好ましい実施形態では、一般式Ｉの化合物は、７ーメトキシ−９，１０−ジヒドロフェナントレン−２，３，５−トリオールとして知られる化合物２である。
【００８４】
１つの好ましい実施形態では、一般式Ｉの化合物は、２，５−フェナントレンジオール，９，１０−ジヒドロ、９，１０−ジヒドロフェナントレン−２，５−ジオールとして知られる、ＣＡＳ番号１０７１０５５−４２−９の化合物３である。
【００８５】
１つの好ましい実施形態では、一般式Ｉの化合物は、９，１０−ジヒドロフェナントレン−２，４，７−トリオール、９，１０−ジヒドロ−２，４，７−フェナントレントリオール、２，４，７−トリヒドロキシ−９，１０−ジヒドロフェナントレン、２，４，７−フェナントレントリオール，９，１０−ジヒドロとして知られる、ＣＡＳ番号７０２０５−５２−６の化合物４である。
【００８６】
１つの好ましい実施形態では、一般式Ｉの化合物は、カンニトレン１、カンナビジヒドロフェナントレン、９，１０−ジヒドロ−７−メトキシ−３，５−フェナントレンジオール、３，５−フェナントレンジオール，９，１０−ジヒドロ−７−メトキシ、７−メトキシ−９，１０−ジヒドロフェナントレン−３，５−ジオールとして知られる、ＣＡＳ番号７１１３５−８０−３の化合物５である。
【００８７】
一実施形態では、ＡＭＰＫ活性化に対して応答性の障害は、代謝異常である。
【００８８】
一実施形態では、代謝異常は、境界型糖尿病又は糖尿病である。
【００８９】
一実施形態では、糖尿病の代謝異常は、ＡＭＰＫ活性化に対して応答性であり得る状態、例えば糖尿病性腎症又は糖尿病性神経障害を伴う。
【００９０】
一実施形態では、代謝異常は、脂質異常である。
【００９１】
本発明はまた、ＡＭＰＫ活性化を必要とする対象においてＡＭＰＫを活性化するための方法も提供し、該方法は、有効量の本明細書に記載される一般式Ｉの化合物を含む組成物を、当該活性化を必要とする対象に投与することを含む。
【００９２】
１つの好ましい実施形態では、一般式Ｉの化合物は、７−メトキシ−９，１０−ジヒドロフェナントレン−２，５−ジオールとして知られる、ＣＡＳ番号８７５３０−３０−１のルシアントリジンである。
【００９３】
１つの好ましい実施形態では、一般式Ｉの化合物は、７ーメトキシ−９，１０−ジヒドロフェナントレン−２，３，５−トリオールとして知られる化合物２である。
【００９４】
１つの好ましい実施形態では、一般式Ｉの化合物は、２，５−フェナントレンジオール，９，１０−ジヒドロ、９，１０−ジヒドロフェナントレン−２，５−ジオールとして知られる、ＣＡＳ番号１０７１０５５−４２−９の化合物３である。
【００９５】
１つの好ましい実施形態では、一般式Ｉの化合物は、９，１０−ジヒドロフェナントレン−２，４，７−トリオール、９，１０−ジヒドロ−２，４，７−フェナントレントリオール、２，４，７−トリヒドロキシ−９，１０−ジヒドロフェナントレン、２，４，７−フェナントレントリオール，９，１０−ジヒドロとして知られる、ＣＡＳ番号７０２０５−５２−６の化合物４である。
【００９６】
１つの好ましい実施形態では、一般式Ｉの化合物は、カンニトレン１、カンナビジヒドロフェナントレン、９，１０−ジヒドロ−７−メトキシ−３，５−フェナントレンジオール、３，５−フェナントレンジオール，９，１０−ジヒドロ−７−メトキシ、７−メトキシ−９，１０−ジヒドロフェナントレン−３，５−ジオールとして知られる、ＣＡＳ番号７１１３５−８０−３の化合物５である。
【００９７】
本発明はまた、本明細書に記載される一般式Ｉの化合物又はその誘導体若しくは類似体をＡＭＰＫと接触させることを含む、ＡＭＰＫを活性化するインビトロ法も提供する。
【００９８】
一実施形態では、インビトロ法は、細胞を含まない。
【００９９】
一実施形態では、インビトロ法は、細胞をベースとしたものである。
【０１００】
１つの好ましい実施形態では、一般式Ｉの化合物は、７−メトキシ−９，１０−ジヒドロフェナントレン−２，５−ジオールとして知られる、ＣＡＳ番号８７５３０−３０−１のルシアントリジンである。
【０１０１】
１つの好ましい実施形態では、一般式Ｉの化合物は、７ーメトキシ−９，１０−ジヒドロフェナントレン−２，３，５−トリオールとして知られる化合物２である。
【０１０２】
１つの好ましい実施形態では、一般式Ｉの化合物は、２，５−フェナントレンジオール，９，１０−ジヒドロ、９，１０−ジヒドロフェナントレン−２，５−ジオールとして知られる、ＣＡＳ番号１０７１０５５−４２−９の化合物３である。
【０１０３】
１つの好ましい実施形態では、一般式Ｉの化合物は、９，１０−ジヒドロフェナントレン−２，４，７−トリオール、９，１０−ジヒドロ−２，４，７−フェナントレントリオール、２，４，７−トリヒドロキシ−９，１０−ジヒドロフェナントレン、２，４，７−フェナントレントリオール，９，１０−ジヒドロとして知られる、ＣＡＳ番号７０２０５−５２−６の化合物４である。
【０１０４】
１つの好ましい実施形態では、一般式Ｉの化合物は、カンニトレン１、カンナビジヒドロフェナントレン、９，１０−ジヒドロ−７−メトキシ−３，５−フェナントレンジオール、３，５−フェナントレンジオール，９，１０−ジヒドロ−７−メトキシ、７−メトキシ−９，１０−ジヒドロフェナントレン−３，５−ジオールとして知られる、ＣＡＳ番号７１１３５−８０−３の化合物５である。
【図面の簡単な説明】
【０１０５】
【図１】細菌で発現させたＡＭＰＫα２β１γ１（２１１）又はα２β２γ１（２２１）複合体の、ＡＭＰ及びルシアントリジンによる活性化。ルシアントリジン（７−メトキシ−９，１０−ジヒドロフェナントレン−２，５−ジオール、ＣＡＳ番号８７５３０−３０−１）は、β２含有複合体を活性化しない。ＡＭＰＫのアロステリック薬及び代謝物（ＡＤａＭ）結合部位における活性化剤は、β２含有ＡＭＰＫ複合体の活性化が弱いことが以前に報告されている。対照的に、ＡＭＰ結合部位における調節因子は、ＡＭＰＫのβ−アイソフォーム組成物の影響を受けない。
【図２】細菌で発現させたＡＭＰＫα１β１γ１（１１１）又はα２β１γ１（２１１）複合体の、ＡＭＰ及びルシアントリジンによる活性化。ルシアントリジンは、α１含有複合体及びα２含有複合体を活性化する。
【図３】細菌で発現させたＡＭＰＫα２β１γ１（２１１）又はα２β１γ１γ１Ｒ２９８Ｇ（２１１  Ｒ２９８Ｇ）変異体複合体の、ＡＭＰ及びルシアントリジンによる活性化。ルシアントリジンは、γ１  ＡＭＰ結合ポケット内に変異を有するＡＭＰＫ複合体であっても活性化する。対照的に、この変異体のＡＭＰ調節は損なわれている。これは、ルシアントリジンが、ＡＭＰＫγサブユニット内のヌクレオチド結合部位を介してはＡＭＰＫを活性化しないことを示唆している。
【図４】細菌で発現させたＡＭＰＫα２β１γ１（２１１）又は炭水化物結合モジュール（ＣＢＭ）が複合体から欠失している（ΔＣＢＭ）α２β１γ１複合体（２１１ΔＣＢＭ）の、ＡＭＰ及びルシアントリジンによる活性化。ルシアントリジンは、α２β１γ１ΔＣＢＭ変異体を活性化しない。ＣＢＭは、ＡＤａＭ結合部位の一体部分を形成し、この部位における活性化剤の結合を介在する。これらのデータは、ルシアントリジンがこの部位でＡＭＰＫを活性化することを示唆している。
【図５】細菌で発現させたＡＭＰＫα２β１γ１（２１１）又はβ１  Ｓ１０８Ａ変異を有するα２β１γ１複合体（２１１  Ｓ１０８Ａ）の、ＡＭＰ及びルシアントリジンによる活性化。ルシアントリジンは、Ｓ１０８Ａ変異を有するＡＭＰＫ複合体を活性化しない。Ｓ１０８Ａ変異は、ＡＤａＭ結合部位におけるＡＭＰＫの調節に干渉することが以前に示されている。重要なことに、リン酸化Ｓ１０８残基は、β１サブユニットのＣＢＭとαサブユニットのキナーゼドメインとの間に重要な相互作用を形成する。
【図６】ルシアントリジンは、Ｕ２ＯＳ  Ｆｌｐ−Ｉｎ  ＴＲＥｘ哺乳類細胞におけるＡＭＰＫ基質、アセチル−ＣｏＡカルボキシラーゼ（ＡＣＣ）のリン酸化を増加させる。  （ａ）ＨＴＲＦアッセイ  （ｂ）ウエスタンブロット分析
【図７】ルシアントリジンは、マウス初代肝細胞におけるＡＭＰＫ基質ＡＣＣのリン酸化を増加させる。
【図８】ルシアントリジンは、初代肝細胞における脂質生成の用量依存的阻害を示す。
【図９】ルシアントリジンは、分化したＣ２Ｃ１２細胞へのグルコースの取り込みを増加させる。
【図１０】細菌で発現させたＡＭＰＫα２β１γ１複合体の化合物２、化合物３、化合物４、及び化合物５による活性化。  化合物２、化合物３、化合物４、及び化合物５は、ＡＭＰＫα２β１γ１複合体を活性化する。  化合物２は、７−メトキシ−９，１０−ジヒドロフェナントレン−２，３，５−トリオールとして知られる。  化合物３は、２，５−フェナントレンジオール，９，１０−ジヒドロ、９，１０−ジヒドロフェナントレン−２，５−ジオールとして知られ、ＣＡＳ番号１０７１０５５−４２−９である。  化合物４は、９，１０−ジヒドロフェナントレン−２，４，７−トリオール、９，１０−ジヒドロ−２，４，７−フェナントレントリオール、２，４，７−トリヒドロキシ−９，１０−ジヒドロフェナントレン、２，４，７−フェナントレントリオール，９，１０−ジヒドロとして知られ、ＣＡＳ番号７０２０５−５２−６である。  化合物５は、カンニトレン１、カンナビジヒドロフェナントレン、９，１０−ジヒドロ−７−メトキシ−３，５−フェナントレンジオール、３，５−フェナントレンジオール，９，１０−ジヒドロ−７−メトキシ、７−メトキシ−９，１０−ジヒドロフェナントレン−３，５−ジオールとして知られ、ＣＡＳ番号７１１３５−８０−３である。
【図１１】様々な細菌で発現させたＡＭＰＫ複合体及び変異体の、化合物４による活性化。  ２１１は、ＡＭＰＫ  α２β１γ１を表し；２２１は、ＡＭＰＫ  α２β２γ１を表し；１１１は、ＡＭＰＫ  α１β１γ１を表し；  ２１１  Ｓ１０８Ａは、ＡＭＰＫ  α２β１γ１  Ｓ１０８Ａ変異体を表し；  ２１１  ΔＣＢＭは、ＡＭＰＫ  α２β１γ１  ΔＣＢＭ変異体を表す。  化合物４は、９，１０−ジヒドロフェナントレン−２，４，７−トリオール、９，１０−ジヒドロ−２，４，７−フェナントレントリオール、２，４，７−トリヒドロキシ−９，１０−ジヒドロフェナントレン、２，４，７−フェナントレントリオール，９，１０−ジヒドロとして知られ、ＣＡＳ番号７０２０５−５２−６である。  化合物４は、α１含有複合体及びα２含有複合体を活性化するが、β２含有複合体、α２β１γ１  ΔＣＢＭ変異体及びＳ１０８Ａ変異を有するＡＭＰＫ複合体を活性化しない。まとめると、これは、化合物４がＡＭＰＫのＡＤａＭポケットに結合することによってＡＭＰＫを活性化させることを示唆する。
【図１２】化合物２、化合物３、化合物４、及び化合物５は、Ｕ２ＯＳ  Ｆｌｐ−Ｉｎ  ＴＲＥｘ哺乳類細胞におけるＡＭＰＫ基質、アセチル−ＣｏＡカルボキシラーゼ（ＡＣＣ）のリン酸化を増加させる。  化合物２は、７−メトキシ−９，１０−ジヒドロフェナントレン−２，３，５−トリオールとして知られる。  化合物３は、２，５−フェナントレンジオール，９，１０−ジヒドロ、９，１０−ジヒドロフェナントレン−２，５−ジオールとして知られ、ＣＡＳ番号１０７１０５５−４２−９である。  化合物４は、９，１０−ジヒドロフェナントレン−２，４，７−トリオール、９，１０−ジヒドロ−２，４，７−フェナントレントリオール、２，４，７−トリヒドロキシ−９，１０−ジヒドロフェナントレン、２，４，７−フェナントレントリオール，９，１０−ジヒドロとして知られ、ＣＡＳ番号７０２０５−５２−６である。  化合物５は、カンニトレン１、カンナビジヒドロフェナントレン、９，１０−ジヒドロ−７−メトキシ−３，５−フェナントレンジオール、３，５−フェナントレンジオール，９，１０−ジヒドロ−７−メトキシ、７−メトキシ−９，１０−ジヒドロフェナントレン−３，５−ジオールとして知られ、ＣＡＳ番号７１１３５−８０−３である。
【図１３】化合物４は、初代肝細胞における脂質生成の用量依存的阻害を示す。  化合物４は、９，１０−ジヒドロフェナントレン−２，４，７−トリオール、９，１０−ジヒドロ−２，４，７−フェナントレントリオール、２，４，７−トリヒドロキシ−９，１０−ジヒドロフェナントレン、２，４，７−フェナントレントリオール，９，１０−ジヒドロとして知られ、ＣＡＳ番号７０２０５−５２−６である。
【図１４】化合物４は、分化したＣ２Ｃ１２細胞へのグルコースの取り込みを増加させる。  化合物４は、９，１０−ジヒドロフェナントレン−２，４，７−トリオール、９，１０−ジヒドロ−２，４，７−フェナントレントリオール、２，４，７−トリヒドロキシ−９，１０−ジヒドロフェナントレン、２，４，７−フェナントレントリオール，９，１０−ジヒドロとして知られ、ＣＡＳ番号７０２０５−５２−６である。
【図１５】ルシアントリジンは、ＡＭＰＫα１／α２サブユニットを欠くＣ２Ｃ１２におけるグルコースの取り込みを増加しない。
【図１６】インスリンは、ＡＭＰＫα１／α２サブユニットを欠くＣ２Ｃ１２におけるグルコースの取り込みを増加させることができる。
【図１７】ウォルトマンニンは、Ｃ２Ｃ１２におけるルシアントリジンに刺激されるグルコースの取り込みに影響しない。
【図１８】ルシアントリジンは、マウス初代肝細胞に対して細胞毒性効果を示さなかった。  マウス初代肝細胞を、示された濃度のルシアントリジン、オリゴマイシン及びＦＣＣＰで、３７℃で１時間処理した。細胞生存率は、ＭＴＴアッセイを製造元のプロトコルに従って使用することによって求めた。結果は、これらの化合物で処理した後の生存細胞の割合として表示される。
【図１９】ルシアントリジンは、ｐＡＣＣ  ＨＴＲＦアッセイで評価されるように、ＡＤａＭ結合部位ＡＭＰＫ変異体（β１  Ｓ１０８Ａ）を安定的に発現する細胞においてＡＭＰＫを活性化しない。  β１  ＷＴ及びβ１  Ｓ１０８Ａ変異体を、ＡＭＰＫβ１β２ダブルノックアウト細胞で安定的に発現させ、様々な濃度のルシアントリジンで、３７℃で３０分間処理した。ルシアントリジンは、β１  Ｓ１０８Ａ変異体を発現する細胞においてｐＡＣＣを増加しなかった。対照的に、ルシアントリジンは、β１  ＷＴ発現細胞を活性化することができる。
【図２０】ルシアントリジンは、ウエスタンブロット分析で評価されるように、ＡＤａＭ結合部位ＡＭＰＫ変異体（β１  Ｓ１０８Ａ）を安定的に発現する細胞においてＡＭＰＫを活性化しない。  β１  ＷＴ発現細胞とは対照的に、ルシアントリジンは、β１  Ｓ１０８Ａ変異体発現細胞を発現している細胞においてＡＣＣのリン酸化を増加させなかった。まとめると、これらの結果は、ルシアントリジンが細胞においてＡＭＰＫを活性化する能力は、ルシアントリジンがＡＭＰＫのヌクレオチド結合部位ではなく、ＡＤａＭ部位に結合する能力によるものであることを実証する。
【発明を実施するための形態】
【０１０６】
一般式Ｉを有する化合物
本発明は、ＡＭＰＫの活性化に使用するための、以下に示す構造を有する本明細書に記載の一般式Ｉ：
【化７】
2021525268.tif 000008
［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は、各々独立してＨ；ＯＨ；ＯＭｅ；Ｏ−グリコシド；Ｃ−グリコシド；アシル化Ｏ−グリコシド；アシル化Ｃ−グリコシド；硫酸化Ｏ−グリコシド；硫酸化Ｃ−グリコシド；ハロゲン；一級、二級、又は三級アルコール；ケトン；アルデヒド；カルボン酸；エステル；一級、二級、又は三級アミン；一級又は二級アミド；シアノ；ニトロ；スルホネート；スルフェート；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ１〜Ｃ２０アルキル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ２０アルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ２０ポリアルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ２０アルキニル、又は任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ２０ポリアルキニルである］を有する化合物、又はこれらの誘導体若しくは類似体に関する。
【０１０７】
いくつかの実施形態では、ＯＣＨ３基は、隣接するＯＨ基と環化してメチレンジオキシ架橋を形成し得る。
【０１０８】
一実施形態では、本発明は、ＡＭＰＫの活性化に使用するための、一般式Ｉ［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は、各々独立してＨ；ＯＨ；ＯＭｅ；Ｏ−グリコシド；Ｃ−グリコシド；アシル化Ｏ−グリコシド；アシル化Ｃ−グリコシド；硫酸化Ｏ−グリコシド；硫酸化Ｃ−グリコシド；ハロゲン；一級、二級、又は三級アルコール；ケトン；アルデヒド；カルボン酸；エステル；一級、二級、又は三級アミン；一級又は二級アミド；シアノ；ニトロ；スルホネート；スルフェート；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ１〜Ｃ２０アルキル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ２０アルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ２０ポリアルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ２０アルキニル、又は任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ２０ポリアルキニルであり；Ｒ４及びＲ５は、各々独立してＨ；ＯＨ；Ｏ−グリコシド；Ｃ−グリコシド；アシル化Ｏ−グリコシド；アシル化Ｃ−グリコシド；硫酸化Ｏ−グリコシド；硫酸化Ｃ−グリコシド；ハロゲン；一級、二級、又は三級アルコール；ケトン；アルデヒド；カルボン酸；エステル；一級、二級、又は三級アミン；一級又は二級アミド；シアノ；ニトロ；スルホネート；スルフェート；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ１〜Ｃ２０アルキル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ２０アルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ２０ポリアルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ２０アルキニル、又は任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ２０ポリアルキニルである］の化合物、又はこれらの誘導体若しくは類似体を提供する。
【０１０９】
いくつかの実施形態では、ＯＣＨ３基は、隣接するＯＨ基と環化してメチレンジオキシ架橋を形成し得る。
【０１１０】
一実施形態では、本発明は、ＡＭＰＫの活性化に使用するための、一般式Ｉ［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は、各々独立してＨ；ＯＨ；ＯＭｅ；Ｏ−グリコシド；ハロゲン；アルデヒド；カルボン酸；一級、二級、又は三級アミン；一級又は二級アミド；シアノ；ニトロ；スルホネート；スルフェート；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ１〜Ｃ２０アルキル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ２０アルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ２０ポリアルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ２０アルキニル、又は任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ２０ポリアルキニルである］の化合物、又はこれらの誘導体若しくは類似体を提供する。
【０１１１】
一実施形態では、本発明は、ＡＭＰＫの活性化に使用するための、一般式Ｉ［式中、Ｒ２は、Ｈ；ＯＨ；ＯＭｅ；Ｏ−グリコシド；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ１〜Ｃ１０アルキル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ１０アルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ１０ポリアルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ１０アルキニル、又は任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ１０ポリアルキニルである］の化合物、又はこれらの誘導体若しくは類似体を提供する。
【０１１２】
一実施形態では、本発明は、ＡＭＰＫの活性化に使用するための、一般式Ｉ［式中、Ｒ４は、Ｈ；ＯＨ；Ｏ−グリコシド；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ１〜Ｃ１０アルキル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ１０アルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ１０ポリアルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ１０アルキニル、又は任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ１０ポリアルキニルである］の化合物、又はこれらの誘導体若しくは類似体を提供する。
【０１１３】
一実施形態では、本発明は、ＡＭＰＫの活性化に使用するための、一般式Ｉ［式中、Ｒ５は、Ｈ；ＯＭｅ；Ｏ−グリコシド；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ１〜Ｃ１０アルキル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ１０アルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ１０ポリアルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ１０アルキニル、又は任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ１０ポリアルキニルである］の化合物、又はこれらの誘導体若しくは類似体を提供する。
【０１１４】
一実施形態では、本発明は、ＡＭＰＫの活性化に使用するための、一般式Ｉ［式中、Ｒ５は、Ｈ；Ｏ−グリコシド；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ１〜Ｃ１０アルキル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ１０アルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ１０ポリアルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ１０アルキニル、又は任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ１０ポリアルキニルである］の化合物、又はこれらの誘導体若しくは類似体を提供する。
【０１１５】
一実施形態では、本発明は、ＡＭＰＫの活性化に使用するための、一般式Ｉ［式中、Ｒ６は、Ｈ；ＯＨ；Ｏ−グリコシド；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ１〜Ｃ１０アルキル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ１０アルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ１０ポリアルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ１０アルキニル、又は任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ１０ポリアルキニルである］の化合物、又はこれらの誘導体若しくは類似体を提供する。
【０１１６】
一実施形態では、本発明は、ＡＭＰＫの活性化に使用するための、一般式Ｉ［式中、Ｒ７は、Ｈ；ＯＨ；Ｏ−グリコシド；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ１〜Ｃ１０アルキル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ１０アルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ１０ポリアルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ１０アルキニル、又は任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ１０ポリアルキニルである］の化合物、又はこれらの誘導体若しくは類似体を提供する。
【０１１７】
一実施形態では、本発明は、ＡＭＰＫの活性化に使用するための、一般式Ｉ［式中、Ｒ２は、Ｈ；ＯＨ；ＯＭｅ；Ｏ−グリコシド；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ１〜Ｃ１０アルキル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ１０アルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ１０ポリアルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ１０アルキニル、又は任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ１０ポリアルキニルであり；Ｒ４は、Ｈ；ＯＨ；Ｏ−グリコシド；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ１〜Ｃ１０アルキル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ１０アルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ１０ポリアルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ１０アルキニル、又は任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ１０ポリアルキニルであり；かつ、Ｒ７は、Ｈ；ＯＨ；Ｏ−グリコシド；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ１〜Ｃ１０アルキル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ１０アルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ１０ポリアルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ１０アルキニル、又は任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ１０ポリアルキニルである］の化合物、又はこれらの誘導体若しくは類似体を提供する。
【０１１８】
一実施形態では、本発明は、ＡＭＰＫの活性化に使用するための、一般式Ｉ［式中、Ｒ２は、Ｈ；ＯＨ；ＯＭｅ；Ｏ−グリコシド；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝したＣ１〜Ｃ５アルキル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ５アルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ１０ポリアルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ５アルキニル、又は任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ５ポリアルキニルであり；Ｒ４は、Ｈ；ＯＨ；Ｏ−グリコシド；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝したＣ１〜Ｃ５アルキル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ５アルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ１０ポリアルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ５アルキニル、又は任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ５ポリアルキニルであり；かつ、Ｒ７は、Ｈ；ＯＨ；Ｏ−グリコシド；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝したＣ１〜Ｃ５アルキル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ５アルケニル；任意選択的に置換された及び／又は任意選択的に分枝したＣ４〜Ｃ５ポリアルケニル；任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ２〜Ｃ５アルキニル、又は任意選択的に置換された及び／若しくは任意選択的に分枝状のＣ４〜Ｃ５ポリアルキニルである］の化合物、又はこれらの誘導体若しくは類似体を提供する。
【０１１９】
一実施形態では、本発明は、ＡＭＰＫの活性化に使用するための、一般式Ｉ［式中、Ｒ２は、Ｈ；ＯＨ；ＯＭｅ；Ｏ−グリコシド；Ｃ１〜Ｃ５アルキル；Ｃ２〜Ｃ５アルケニル；Ｃ４〜Ｃ５ポリアルケニル；Ｃ２〜Ｃ５アルキニル、又はＣ４〜Ｃ５ポリアルキニルであり；Ｒ４は、Ｈ；ＯＨ；Ｏ−グリコシド；Ｃ１〜Ｃ５アルキル；Ｃ２〜Ｃ５アルケニル；Ｃ４〜Ｃ５ポリアルケニル；Ｃ２〜Ｃ５アルキニル、又はＣ４〜Ｃ５ポリアルキニルであり；かつ、Ｒ７は、Ｈ；ＯＨ；Ｏ−グリコシド；Ｃ１〜Ｃ５アルキル；Ｃ２〜Ｃ５アルケニル；Ｃ４〜Ｃ５ポリアルケニル；Ｃ２〜Ｃ５アルキニル；又はＣ４〜Ｃ５ポリアルキニルである］の化合物、又はこれらの誘導体若しくは類似体を提供する。
【０１２０】
一実施形態では、本発明は、アルキル、アルケニル、及びアルキニルが非分枝状である、一般式Ｉの化合物を提供する。
【０１２１】
一実施形態では、本発明は、アルキル、アルケニル、及びアルキニルが非置換である、一般式Ｉの化合物を提供する。
【０１２２】
いくつかの実施形態では、ＯＣＨ３基は、隣接するＯＨ基と環化してメチレンジオキシ架橋を形成し得る。
【０１２３】
一実施形態では、本発明は、ＡＭＰＫの活性化に使用するための、一般式Ｉ［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は、各々独立してＨ；Ｍｅ；ＯＨ；ＯＭｅ；ＯＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２；Ｏ−グリコシド；スルフェート；ハロゲン；ＣＨＯ；ＣＨ２ＯＨ；ＣＯＯＨ、ＣＯＮＨ２、ＣＯＣＨ３；ＣＨ＝ＣＨ２；ＣＨ２−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ３）２；ＣＨ（ＣＨ３）２；ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨＯ；ＣＨ（ＣＨ３）−ＯＨ；ＣＨ（ＣＨ３）−ＯＭｅ；ＣＨ（ＣＨ３）−ＯＣ２Ｈ５；ＣＨ（ＣＨ３）−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ３）−（ＣＨ２）３−ＣＨ（ＣＨ３）−（ＣＨ２）３−ＣＨ（ＣＨ３）−（ＣＨ２）３−ＣＨ（ＣＨ３）２；４−ヒドロキシベンジル；４−ヒドロキシ−３−メトキシベンジル；４−ヒドロキシベンゾイル；４−ヒドロキシベンゾイルグリコシドである］の化合物、又はこれらの誘導体若しくは類似体を提供する。
【０１２４】
いくつかの実施形態では、ＯＣＨ３基は、隣接するＯＨ基と環化してメチレンジオキシ架橋を形成し得る。
【０１２５】
一実施形態では、本発明は、ＡＭＰＫの活性化に使用するための、一般式Ｉ［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は、各々独立してＨ；Ｍｅ；ＯＨ；ＯＭｅ；ＯＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２；Ｏ−グリコシド；スルフェート；Ｂｒ；ＣＨＯ；ＣＨ２ＯＨ；ＣＯＯＨ、ＣＯＮＨ２、ＣＯＣＨ３；ＣＨ＝ＣＨ２；ＣＨ２−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ３）２；ＣＨ（ＣＨ３）２；ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨＯ；ＣＨ（ＣＨ３）−ＯＨ；ＣＨ（ＣＨ３）−ＯＣＨ３；ＣＨ（ＣＨ３）−ＯＣ２Ｈ５；ＣＨ（ＣＨ３）−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ３）−（ＣＨ２）３−ＣＨ（ＣＨ３）−（ＣＨ２）３−ＣＨ（ＣＨ３）−（ＣＨ２）３−ＣＨ（ＣＨ３）２；４−ヒドロキシベンジル；４−ヒドロキシ−３−メトキシベンジル；４−ヒドロキシベンゾイル；４−ヒドロキシベンゾイルグリコシドである］の化合物、又はこれらの誘導体若しくは類似体を提供する。
【０１２６】
いくつかの実施形態では、ＯＣＨ３基は、隣接するＯＨ基と環化してメチレンジオキシ架橋を形成し得る。
【０１２７】
一実施形態では、本発明は、ＡＭＰＫの活性化に使用するための、一般式Ｉ［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は、各々独立してＨ；Ｍｅ；ＯＨ；ＯＭｅ；Ｏ−グリコシド；スルフェート；ＣＨ２−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ３）２である］の化合物、又はその誘導体若しくは類似体を提供する。
【０１２８】
いくつかの実施形態では、ＯＣＨ３基は、隣接するＯＨ基と環化してメチレンジオキシ架橋を形成し得る。
【０１２９】
一実施形態では、本発明は、ＡＭＰＫの活性化に使用するための、一般式Ｉ［式中、Ｒ１は、Ｈ；ＣＨ３；ＯＨ；ＯＣＨ３；Ｏ−グリコシド；スルフェート；ＣＨ２−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ３）２；４−ヒドロキシベンジル；４−ヒドロキシ−３−メトキシベンジル；４−ヒドロキシベンゾイル；又は４−ヒドロキシベンゾイルグリコシドであり；Ｒ２及びＲ７は、各々独立してＯＨ；ＯＣＨ３；Ｏ−ＣＨ＝ＣＨ２；Ｏ−グリコシド；又はスルフェートであり；Ｒ３は、Ｈ；ＣＨ３；ＯＨ；ＯＣＨ３；Ｏ−グリコシド；スルフェート；ＣＨ２−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ３）２；又は４−ヒドロキシベンジルであり；Ｒ４及びＲ５は、各々独立してＯＨ、ＯＣＨ３；Ｏ−グリコシド；又はスルフェートであり；Ｒ６は、ＣＨ３；ＯＨ；ＯＣＨ３；Ｏ−グリコシド；ＣＨ２−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ３）２；４−ヒドロキシベンジル；又はＡｒであり；Ｒ８は、ＯＨ：ＯＣＨ３；Ｏ−グリコシド；スルフェート；ＣＨ２−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ３）２；又は４−ヒドロキシベンジルである］の化合物、又はその誘導体若しくは類似体を提供する。
【０１３０】
一実施形態では、本発明は、ＡＭＰＫの活性化に使用するための、一般式Ｉ［式中、Ｒ１は、Ｈ；ＣＨ３；ＯＨ；ＯＣＨ３；Ｏ−グリコシド；スルフェート；ＣＨ２−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ３）２；４−ヒドロキシベンジル；４−ヒドロキシ−３−メトキシベンジル；４−ヒドロキシベンゾイル；又は４−ヒドロキシベンゾイルグリコシドであり；Ｒ２及びＲ７は、各々独立してＯＨ；ＯＣＨ３；Ｏ−ＣＨ＝ＣＨ２；Ｏ−グリコシド；又はスルフェートであり；Ｒ３は、Ｈ；ＣＨ３；ＯＨ；ＯＣＨ３；Ｏ−グリコシド；スルフェート；ＣＨ２−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ３）２；又は４−ヒドロキシベンジルであり；Ｒ４及びＲ５は、各々独立してＯＨ、ＯＣＨ３；Ｏ−グリコシド；又はスルフェートであり；Ｒ６は、ＣＨ３；ＯＨ；ＯＣＨ３；Ｏ−グリコシド；ＣＨ２−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ３）２；４−ヒドロキシベンジル；又はＡｒであり；Ｒ８は、ＯＨ：ＯＣＨ３；Ｏ−グリコシド；スルフェート；ＣＨ２−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ３）２；又は４−ヒドロキシベンジルである］の化合物、又はその誘導体若しくは類似体を提供する。
【０１３１】
一実施形態では、本発明は、ＡＭＰＫの活性化に使用するための、一般式Ｉ［式中、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ５、Ｒ６、及びＲ８は、Ｈであり；Ｒ２は、ＯＨ；ＯＭｅ又はＯ−グリコシドであり；Ｒ４は、ＯＨ、又はＯ−グリコシドであり；かつ、Ｒ７は、ＯＨ、又はＯ−グリコシドである］の化合物を提供する。
【０１３２】
一実施形態では、本発明は、ＡＭＰＫの活性化に使用するための、一般式Ｉ［式中、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ５、Ｒ６、及びＲ８は、Ｈであり；Ｒ２は、ＯＨ又はＯＭｅであり；Ｒ４は、ＯＨであり；かつ、Ｒ７は、ＯＨである］の化合物を提供する。
【０１３３】
一実施形態では、本発明は、ＡＭＰＫの活性化に使用するための、一般式Ｉ［式中、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ５、Ｒ６、及びＲ８は、Ｈであり；Ｒ２はＯＭｅであり；Ｒ４は、ＯＨであり；かつ、Ｒ７は、ＯＨである］の化合物を提供する。
【０１３４】
一実施形態では、上記化合物は、７−メトキシ−９，１０−ジヒドロフェナントレン−２，５−ジオールとして知られる、ＣＡＳ番号８７５３０−３０−１のルシアントリジンである。
【化８】
2021525268.tif 000009
【０１３５】
別の実施形態では、上記化合物は、７−メトキシ−９，１０−ジヒドロフェナントレン−２，３，５−トリオールとして知られる化合物２である。
【化９】
2021525268.tif 000010
【０１３６】
別の実施形態では、上記化合物は、２，５−フェナントレンジオール，９，１０−ジヒドロ、９，１０−ジヒドロフェナントレン−２，５−ジオールとして知られる、ＣＡＳ番号１０７１０５５−４２−９の化合物３である。
【化１０】
2021525268.tif 000011
【０１３７】
別の実施形態では、上記化合物は、９，１０−ジヒドロフェナントレン−２，４，７−トリオール、９，１０−ジヒドロ−２，４，７−フェナントレントリオール、２，４，７−トリヒドロキシ−９，１０−ジヒドロフェナントレン、２，４，７−フェナントレントリオール，９，１０−ジヒドロとして知られる、ＣＡＳ番号７０２０５−５２−６の化合物４である。
【化１１】
2021525268.tif 000012
別の実施形態では、上記化合物は、カンニトレン１、カンナビジヒドロフェナントレン、９，１０−ジヒドロ−７−メトキシ−３，５−フェナントレンジオール、３，５−フェナントレンジオール，９，１０−ジヒドロ−７−メトキシ、７−メトキシ−９，１０−ジヒドロフェナントレン−３，５−ジオールとして知られる、ＣＡＳ番号７１１３５−８０−３の化合物５である。
【化１２】
2021525268.tif 000013
【０１３８】
定義
一般的な化学用語
用語「アルキル」は、１〜２０個の炭素原子、又は１〜１５個の炭素原子、又は１〜１０個の炭素原子、又は１〜８個の炭素原子、又は１〜６個の炭素原子、又は１〜４個の炭素原子を有する分枝状又は非分枝状の飽和炭化水素鎖を指す。この用語は、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソ−プロピル、ｎ−ブチル、イソ−ブチル、ｔ−ブチル、ｎ−ヘキシル、ｎ−デシル、テトラデシルなどの基によって例示される。
【０１３９】
用語「置換アルキル」は、以下を指す：
１）アルケニル、アルキニル、アルコキシ、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルコキシ、シクロアルケニルオキシ、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノ、置換アミノ、アミノカルボニル、アルコキシカルボニルアミノ、アジド、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシ、ケト、チオカルボニル、カルボキシ、カルボキシアルキル、アリールチオ、ヘテロアリールチオ、ヘテロシクリルチオ、チオール、アルキルチオ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール、アミノスルホニル、アミノカルボニルアミノ、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリル、ヘテロシクロオキシ、ヒドロキシアミノ、アルコキシアミノ、ニトロ、−Ｓ（Ｏ）−アルキル、−Ｓ（Ｏ）−シクロアルキル、−Ｓ（Ｏ）−ヘテロシクリル、−Ｓ（Ｏ）−アリール、−Ｓ（Ｏ）−ヘテロアリール、−Ｓ（Ｏ）２−アルキル、−Ｓ（Ｏ）２−シクロアルキル、−Ｓ（Ｏ）２−ヘテロシクリル、−Ｓ（Ｏ）２−アリール及び−Ｓ（Ｏ）２−ヘテロアリールからなる群から選択される１、２、３、４又は５個の置換基（いくつかの実施形態では、１、２又は３個の置換基）を有する、上記定義によるアルキル鎖。定義によって特に制約されない限り、全ての置換基は、任意選択的に、アルキル、アルケニル、アルキニル、カルボキシ、カルボキシアルキル、アミノカルボニル、ヒドロキシ、アルコキシ、ハロゲン、ＣＦ３、アミノ、置換アミノ、シアノ、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、ヘテロアリール、及び−Ｓ（Ｏ）ｎＲ＜ａ＞［式中、Ｒ＜ａ＞はアルキル、アリール又はヘテロアリールであり、ｎは０、１、又は２である］から選択される１、２、又は３個の置換基によって更に置換され得る；又は
２）酸素、硫黄、及びＮＲ＜ａ＞［式中、Ｒ＜ａ＞は、水素、アルキル、シクロアルキル、アルケニル、シクロアルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、及びヘテロシクリルから選択される］から独立して選択される１〜１０個の原子（例えば、１、２、３、４又は５個の原子）が介在する、上記定義によるアルキル鎖。全ての置換基は、任意選択的に、アルキル、アルケニル、アルキニル、カルボキシ、カルボキシアルキル、アミノカルボニル、ヒドロキシ、アルコキシ、ハロゲン、ＣＦ３、アミノ、置換アミノ、シアノ、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、ヘテロアリール、及び−Ｓ（Ｏ）ｎＲ＜ａ＞［式中、Ｒ＜ａ＞はアルキル、アリール又はヘテロアリールであり、ｎは０、１、又は２である］によって更に置換され得る；又は
３）１、２、３、４、又は５個の上記定義による置換基を有し、かつ上記定義による１〜１０個の原子（例えば、１、２、３、４又は５個の原子）が介在する、上記定義によるアルキル基。
【０１４０】
用語「アルケニル」は、アルキル基の２個の原子が、芳香族基の一部ではない二重結合を形成するアルキル鎖の種類を指す。すなわち、アルケニル鎖は、Ｒ−Ｃ（Ｒ）＝Ｃ（Ｒ）−Ｒのパターンを含有し、式中、Ｒは、アルケニル基の残りの部分を指し、同じであっても異なっていてもよい。アルケニル鎖の非限定的な例としては、−ＣＨ＝ＣＨ２、−Ｃ（ＣＨ３）＝ＣＨ２、−ＣＨ＝ＣＨＣＨ３、−Ｃ（ＣＨ３）＝ＣＨＣＨ３、−ＣＨ２−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ３）２、及び−Ｃ（ＣＨ３）２−ＣＨ＝ＣＨ２が挙げられる。アルケニル部分は、分枝状、直鎖状、又は環状（この場合、該部分は「シクロアルケニル」基としても知られる）であってもよい。アルケニル基は、任意選択的に置換され得る。
【０１４１】
用語「アルキニル」は、アルキル基の２個の原子が三重結合を形成するアルキル鎖の種類を指す。すなわち、アルキニル基は、Ｒ−Ｃ≡Ｃ−Ｒのパターンを含み、式中、Ｒは、アルキニル基の残りの部分を指し、同じであっても異なっていてもよい。アルキニル基の非限定的な例としては、−Ｃ≡ＣＨ、−Ｃ≡ＣＣＨ３、及び−Ｃ≡ＣＣＨ２ＣＨ３が挙げられる。アルキニル部分の「Ｒ」部分は、分枝状、直鎖状、又は環状であってもよい。アルキニル基は、任意選択的に置換され得る。
【０１４２】
用語「多価不飽和」は、以下を指す。
【０１４３】
１）アルキル基の１対を超える原子が、芳香族基の一部ではない二重結合を形成する、ポリアルケニルとして知られる鎖。すなわち、ポリアルケニル鎖は、Ｒ−Ｃ（Ｒ）＝Ｃ（Ｒ）−Ｒのパターンを数個含有し、式中、Ｒは、アルケニル基の残りの部分を指し、同じであっても異なっていてもよい。ポリアルケニル鎖の非限定的な例としては、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＣＨ３−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ３）２、及び−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＣＨ３−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＣＨ３−−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ３）２が挙げられる。ポリアルケニル部分は、分枝鎖でも直鎖でもよい。２つの二重結合を含有するポリアルケニル部分は、環状（この場合、該部分は「シクロジアルケニル」基としても知られる）であってもよい。シクロジアルケニル基の非限定的な例としては、シクロペンタジエン基及びシクロヘキサジエン基が挙げられる。ポリアルケニル基は、任意選択的に置換され得る。
【０１４４】
２）アルキル基の１対を超える原子が三重結合を形成する、ポリアルキニルとして知られる鎖。すなわち、ポリアルキニル基は、Ｒ−Ｃ≡Ｃ−Ｒのパターンを数個含み、式中、Ｒは、アルキニル基の残りの部分を指し、同じであっても異なっていてもよい。ポリアルキニル基の非限定的な例としては、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ≡Ｃ−Ｃ≡ＣＨが挙げられる。ポリアルキニル部分の「Ｒ」部分は、分枝状、直鎖状、又は環状であってもよい。アルキニル基は、任意選択的に置換され得る。
【０１４５】
３）アルキル基の少なくとも１対の原子が二重結合を形成し、アルキル基の１対の原子が三重結合を形成するアルキル鎖の種類。すなわち、多価不飽和鎖は、Ｒ−Ｃ（Ｒ）＝Ｃ（Ｒ）−Ｒ及びＲ−Ｃ≡Ｃ−Ｒの両方のパターンを含有し、式中、Ｒは、多価不飽和鎖の残りの部分を指し、同じであっても異なっていてもよい。この種の多価不飽和鎖の非限定的な例としては、−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ≡ＣＨが挙げられる。多価不飽和部分の「Ｒ」部分は、分枝状、直鎖状、又は環状であってもよい。多価不飽和鎖は、任意選択的に置換され得る。
【０１４６】
４）酸素、硫黄、及びＮＲ＜ａ＞［式中、Ｒ＜ａ＞は、水素、アルキル、シクロアルキル、アルケニル、シクロアルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、及びヘテロシクリルから選択される］から独立して選択される１〜１０個の原子（例えば、１、２、３、４又は５個の原子）が介在する、上記段落１〜３の定義による多価不飽和鎖。
【０１４７】
本明細書で使用するとき、用語「環」は、共有結合により閉鎖されている任意の構造を指す。環には、例えば、炭素環（例えば、アリール及びシクロアルキル）、複素環（例えば、ヘテロアリール及び非芳香族複素環）、芳香族（例えば、アリール及びヘテロアリール）、並びに非芳香族（例えば、シクロアルキル及び非芳香族複素環）が含まれる。環は、任意選択的に置換されていてもよい。環は、環系の一部を形成し得る。本明細書で使用するとき、用語「環系」は、環のうちの２つ以上が縮合している、２つ以上の環を指す。用語「縮合」は、２つ以上の環が１つ以上の結合を共有する構造を指す。
【０１４８】
用語「ハロゲン原子」は、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、又はヨウ素原子を指し得る。
【０１４９】
用語「グリコシド」は、少なくとも１つの糖がグリコシド結合を介して別の官能基に結合している化合物を指す。典型的には、グリコシド鎖は、１〜４個の糖単位を含むことができる。
【０１５０】
用語「グリコシド結合」は、糖のヘミアセタール基又はヘミケタール基と化合物の化学基との間に形成される結合を指す。化学基は、−ＯＨ（Ｏ−グリコシド）、又は−ＣＲ１Ｒ２Ｒ３（Ｃ−グリコシド）であり得る。
【０１５１】
用語「アシル化Ｏ−グリコシド」及び「アシル化Ｃ−グリコシド」は、グリコシド鎖の少なくとも１つのヒドロキシルが有機酸によってエステル化された化合物を指す。有機酸の典型的な例は、酢酸、置換安息香酸、ケイ皮酸（カフェー酸、フェルラ酸、ｐ−クマル酸）、及び／又はフェニルプロパン酸（ジヒドロカフェー酸）を含み得る。
【０１５２】
用語「硫酸化Ｏ−グリコシド」及び「硫酸化Ｃ−グリコシド」は、グリコシド鎖の少なくとも１つのヒドロキシルが硫酸によってエステル化された化合物を指す。
【０１５３】
用語「メチレンジオキシ」は、構造式Ｒ−Ｏ−ＣＨ２−Ｏ−Ｒ’を有し、２つの化学結合によって分子の残りの部分に連結された官能基を指し得る。
【０１５４】
本明細書で使用するとき、用語「類似体」は、別のものと類似の構造を有するが、特定の構成成分に関して当該別のものとは異なる化合物を指すものと理解される。「誘導体」は、１つ以上の原子を別の原子又は原子の群と置換することによって、親化合物から生じる又は実際に合成される化合物である。
【０１５５】
本明細書に記載される化学構造の構成要素は、以下のように更に定義できる：用語「不飽和」は、炭素原子間に少なくとも１つ、最大８つの二重結合を含有することを意味する。「脱水」は、１つはヒドロキシルを有し、他方は少なくとも１つの水素を有する２つの隣接する炭素間で水が失われることを意味し、これにより二重結合の形成がもたらされる。「還元」は、二重結合に水素が付加されることで、単結合の形成が生じることを意味し、典型的には、カルボニルのアルコールへの還元、又は不飽和鎖の飽和鎖への還元を意味する。炭素酸化は、例えば、メチルからアルコールへ、アルデヒドへ、そして最終的にカルボン酸へといった段階的なものであってもよい。
【０１５６】
本明細書で使用するとき、用語「アルデヒド」は、一般構造−Ｃ−［Ｃ（＝Ｏ）］ｎ−Ｈ又はＨ−［Ｃ（＝Ｏ）］ｎ−Ｈ（ｎは１以上であり、−［Ｃ（＝Ｏ）］−ｎ基に結合した炭素原子は、酸素、硫黄、セレン、若しくはテルルに二重結合してない、又は窒素に三重結合していない）を有する、有機化合物を意味する。
【０１５７】
本明細書で使用するとき、用語「アミン」は、炭素原子に単結合又は二重結合した窒素原子を有する有機化合物を意味し、上記窒素原子に結合した炭素原子は、酸素、硫黄、セレン、若しくはテルルへの二重結合又は窒素への三重結合を有していない。更に、同じ窒素原子が、−Ｃ（＝Ｘ）−基（ＸはＯ、Ｓ、Ｓｅ、又はＴｅである）に結合し、かつ酸素、硫黄、セレン、又はテルルに二重結合していない炭素原子に結合している化合物は、アミンとはみなされない（例えば、−Ｃ−ＮＨ−Ｃ（Ｘ＝）−）。
【０１５８】
本明細書で使用するとき、用語「シアノ」は、隣接する炭素原子と窒素原子との間の三重結合を意味する。
【０１５９】
本明細書で使用するとき、用語「カルボン酸」は、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＨ基の存在を意味する。
【０１６０】
化合物又はその組成物
特定の実施形態によると、本発明の化合物又はその組成物は、栄養補助組成物、医薬組成物、機能性食品、機能性栄養製品、医療用食品、医療用栄養製品、又は食餌補給剤であってもよいことが理解される。
【０１６１】
用語「栄養補助食品／栄養補助製品」（nutraceutical）は、単語「栄養」（nutrition）と「医薬」（pharmaceutical）を組み合わせたものである。これらは、状態、障害、又は疾患の予防及び治療を含む、健康及び医学的利益を提供する食品又は食料製品である。栄養補助食品は、通常は食品と関連しない医薬品の形態で一般に販売されており、食品から分離された又は精製された製品である。栄養補助食品は、生理学的利益を有すること、又は状態、障害、若しくは疾患に対する保護を提供することが実証されている。このような製品は、分離された栄養素、食餌補給剤、及び特別食から、遺伝子操作された食品、ハーブ製品、並びにシリアル、スープ、及び飲料などの加工食品までの範囲にわたり得る。
【０１６２】
本明細書で使用するとき、用語「栄養補助食品」は、栄養分野及び医薬品分野の両方において有用であることを意味する。したがって、新規な栄養補助食品組成物は、食品及び飲料への栄養補給剤として、並びにカプセル若しくは錠剤などの固体製剤、又は溶液若しくは懸濁液などの液体製剤であり得る経腸若しくは非経口投与用の医薬製剤として、使用することができる。
【０１６３】
本発明による栄養補助組成物は、保護親水コロイド（ガム、タンパク質、改質デンプンなど）、結合剤、被膜形成剤、封入剤／封入材、壁／シェル材料、マトリックス化合物、コーティング、乳化剤、表面活性剤、可溶化剤（油、脂肪、ワックス、レシチンなど）、吸着剤、担体、充填剤、共化合物、分散剤、湿潤剤、加工助剤（溶媒）、流動剤、味マスキング剤、増量剤、ゼリー化剤、ゲル形成剤、酸化防止剤及び抗菌剤を更に含有してもよい。
【０１６４】
更に、マルチビタミン及びミネラルサプリメントを、本発明の栄養補助組成物に添加して、一部の食事において欠けている適切な量の必須栄養素を得ることができる。マルチビタミン及びミネラルサプリメントはまた、疾患予防、並びに生活習慣のパターンによる栄養不足及び栄養失調の防止に有用であり得る。
【０１６５】
本発明の栄養組成物は、身体への投与に適した任意のガレヌス形態であってもよく、特に経口投与に従来用いられている任意の形態、例えば、食品又は飼料、食品又は飼料プレミックス、強化食品又は飼料、錠剤、丸剤、顆粒剤、糖衣錠、カプセル剤、及び発泡性製剤（粉末及び錠剤など）などの固体形態、又は溶液、エマルション、若しくは懸濁液（例えば、飲料、ペースト、及び油性懸濁液として）などの液体形態であってもよい。ペーストは、ハード又はソフトシェルカプセルに組み込まれてもよく、ここで、カプセルは、例えば、（魚、ブタ、家禽、ウシ）ゼラチン、植物タンパク質、又はリグニンスルホネートからなるマトリックスを特徴とするものである。他の適用形態の例は、経皮、非経口、又は注射可能な投与のための形態である。栄養組成物及び医薬組成物は、制御された（遅延された）放出製剤の形態であり得る。
【０１６６】
飲料は、非アルコール飲料及びアルコール飲料、並びに飲用水及び液体食品に添加される液体調製物を包含する。非アルコール飲料は、例えば、ソフトドリンク、スポーツドリンク、果汁、茶、及び乳ベースのドリンクである。液体食品は、例えば、スープ及び乳製品である。本発明の化合物を含む栄養補助組成物は、ソフトドリンク、エネルギーバー、又はキャンディに添加されてもよい。
【０１６７】
栄養補助組成物が医薬製剤であり、組成物が薬学的に許容可能な賦形剤、希釈剤又は補助剤を更に含有する場合、その製剤化には、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，２０ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ，ＰＡ，ＵＳＡに開示されているような、標準的技法を使用してもよい。経口投与の場合、好適な結合剤（例えばゼラチン又はポリビニルピロリドン）、好適な充填剤（例えばラクトース又はデンプン）、好適な潤滑剤（例えばステアリン酸マグネシウム）、及び任意選択的に追加の添加剤を含有する、錠剤及びカプセルが好ましくは使用される。
【０１６８】
「機能性食品」、「機能性栄養製品」、「医療用食品」、及び「医療用栄養製品」は、栄養素を供給するという基本機能を超える健康増進又は疾患予防特性を有すると主張する任意の健康食品に関連する。機能性食品の一般的なカテゴリーには、「ビタミン強化」製品のような、健康増進添加剤で強化された加工食品又は食品類が含まれる。
【０１６９】
用語「食品」、「食品製品」、及び「食品組成物」又は「ダイエット食品」は、ヒトなどの個体による摂取が意図され、かかる個体に対して少なくとも１種の栄養分を提供する、製品又は組成物を意味する。本開示の組成物には、本願明細書に記載されている多くの実施形態が含まれ、本願明細書に開示される要素、並びに本願明細書に記載される又はその他の食餌療法において有用である何らかの追加の若しくは任意的な成分、構成成分又は要素を含む、それらからなる、又はそれらから本質的になることができる。
【０１７０】
食餌補給剤は、食品補助剤又は栄養補助食品としても知られ、食事を補い、かつ個人の食事で欠く場合がある、又は十分量を摂取しない場合があるビタミン類、ミネラル類、繊維、脂肪酸、又はアミノ酸等の栄養素を供給することを目的とした配合物である。食餌補給剤を食品として定義している国もあれば、薬物又は天然健康製品として定義している国もある。ビタミン又は栄養素のミネラルを含有する栄養補助食品は、食品、食品生産、及び食品安全性に関する国際的に認識された規格、実施規準、ガイドライン、及びその他の勧告を集めたものであるコーデックス規格（Codex Alimentarius）に、食品の１カテゴリーとして含まれている。コーデックス規格は、国際連合食糧農業機関（ＦＡＯ）と世界保健機関（ＷＨＯ）が後援する組織であるコーデックス委員会（Codex Alimentarius Commission）によって作成されている。
【０１７１】
動物用組成物としては、動物に必要な食餌所要量を供給するための食品組成物、動物用トリート（例えば、ビスケット）、及び／又は食餌補給剤が挙げられる。組成物は、乾燥組成物（例えば、キブル）、半湿潤組成物、湿潤組成物、又はそれらの任意の混合物であってよい。一実施形態では、組成物は、グレイビー、飲料水、飲料、ヨーグルト、粉末、顆粒、ペースト、懸濁液、噛むもの（chew）、一口で食べるもの（morsel）、トリート、スナック、ペレット、丸薬、カプセル、錠剤、又は他の適切な送達形態のものなどの食餌補給剤である。食餌補給剤は、高濃度のＵＦＡ及びＮＯＲＣと、ビタミンＢ類及び抗酸化物質とを含み得る。これにより、かかる栄養補助食品を動物に少量投与することが可能になり、あるいは動物に投与する前に希釈することができる。食餌補給剤は、動物に投与する前に、水又は他の希釈剤と混合する必要がある場合があり、又は混合することができる。
【０１７２】
「ペットフード」又は「ペットフード組成物」は、約１５％〜約５０％の粗タンパク質を含む。粗タンパク質材料は、大豆ミール、ダイズタンパク質濃縮物、トウモロコシグルテンミール、小麦グルテン、綿実、及びピーナッツミールなどの植物性タンパク質、又はカゼイン、アルブミン、及び肉タンパク質などの動物性タンパク質を含み得る。本明細書で有用な肉タンパク質の例としては、豚肉、子羊、ウマ、家禽、魚、及びこれらの混合物が挙げられる。組成物は、約５％〜約４０％の脂肪を更に含むことができる。組成物は、炭水化物供給源を更に含み得る。組成物は、約１５％〜約６０％の炭水化物を含み得る。そのような炭水化物の例としては、米、トウモロコシ、ミロ、ソルガム、アルファルファ、オオムギ、大豆、キャノーラ、オート麦、コムギ、及びこれらの混合物などの穀物又は穀草類が挙げられる。組成物はまた、任意選択的に、乾燥乳清及び他の乳製品副産物などの他の材料を含んでもよい。いくつかの実施形態では、組成物の灰分は、１％未満〜約１５％の範囲であり、一態様では、約５％〜約１０％の範囲である。
【０１７３】
水分含有量は、組成物の性質に応じて変わり得る。一実施形態では、組成物は、完全なものでありかつ栄養的にバランスのとれたペットフードであり得る。この実施形態では、ペットフードは、「湿潤食品」、「乾燥食品」、又は中間的な水分含有量の食品であり得る。「湿潤食品」は、典型的には缶又はホイル袋で販売されるペットフードを表し、典型的には約７０％〜約９０％の範囲の水分含有量を有する。「乾燥食品」は、湿潤食品と同様の組成のものであるが、典型的には約５％〜約１５％又は２０％の範囲の限定された水分含有量を含むペットフードを表し、そのため、例えば、小さいビスケット状のキブルとして提供される。一実施形態において、組成物の含水率は約５％〜約２０％である。乾燥食品製品は、比較的常温保存可能であり、微生物又は真菌による劣化又は汚染に対して耐性を有するような様々な水分含有量の様々な食品を含む。コンパニオンアニマル向けのペットフード又はスナックフードなどの、押し出し成形された食料製品であるドライフード製品組成物も含まれる。
【０１７４】
化合物又はその組成物の投与方法
本発明の化合物又はその組成物は、好ましくは経口投与により投与される。いくつかの実施形態では、本発明の化合物又はその組成物は、静脈内投与、局所投与、非経口投与、腹腔内投与、筋肉内投与、髄腔内投与、病巣内投与、頭蓋内投与、鼻腔内投与、眼内投与、心臓内投与、硝子体内投与、骨内投与、脳内投与、動脈内投与、関節内投与、皮内投与、経皮投与、経粘膜投与、舌下投与、経腸投与、唇下投与、吹送投与、坐薬投与、吸入投与、及び皮下投与によって投与されてもよい。
【０１７５】
本発明の組成物は、１ヶ月未満で認められる急性の効果（acute effect）を有し得る。追加的に又は代替的に、組成物は、長期間の効果を有することができ、したがって、様々な実施形態は、少なくとも１ヶ月；好ましくは少なくとも２カ月、より好ましくは少なくとも３、４、５又は６カ月、最も好ましくは少なくとも１年の期間にわたる、個体への組成物の投与（例えば、経口的に）を含む。この期間中に、組成物は、少なくとも１週間に１日、好ましくは１週間に少なくとも２日、より好ましくは１週間に少なくとも３、４、５又は６日、最も好ましくは、１週間に７日、個体に投与できる。組成物は、１日に単回用量で投与することも、１日に複数の個別用量で投与することもできる。一実施形態では、単回用量は、約１００ｍｇ以上である。一実施形態では、単回用量は、約１０００ｍｇ以下である。一実施形態では、単回用量は、約１００ｍｇ〜約１０００ｍｇである。
【０１７６】
ＡＭＰＫ活性化用語
本明細書で使用するとき、「ＡＭＰＫ活性化剤」は、（リン酸化されている又はされていない）ＡＭＰＫの下流の基質のリン酸化を増加させる化合物、及び／又はＡＭＰＫのリン酸化を増加させる化合物を指す。
【０１７７】
本明細書で使用するとき、「直接ＡＭＰＫ活性化剤」は、ＡＭＰＫのサブユニットのうちの少なくとも１つとの直接相互作用を介してＡＭＰＫを活性化する化合物を指す。
【０１７８】
本明細書で使用するとき、「ＡＭＰＫ活性化に対して応答性の」状態、障害、又は疾患とは、ＡＭＰＫの活性化によって症状が緩和される状態、障害、若しくは疾患、又はその経過が有益に変更される状態、障害、若しくは疾患を指し、限定するものではないが、代謝異常、糖尿病、脂質異常症、高血圧症、過体重、及び肥満などが挙げられる。例えば、糖尿病の代謝異常は、ＡＭＰＫ活性化に対して応答性であり得る糖尿病性腎症又は糖尿病性神経障害などの状態を伴う。
【０１７９】
医学用語
本明細書で使用するとき、用語「糖尿病」は、インスリン依存性真性糖尿病（すなわち、１型糖尿病としても知られるＩＤＤＭ）、非インスリン依存性真性糖尿病（すなわち、２型糖尿病としても知られるＮＩＤＤＭ）、及び境界型糖尿病を含む。１型糖尿病は、グルコース利用を調節するホルモンであるインスリンの絶対的欠乏の結果である。２型糖尿病は、多くの場合は正常なインスリンレベルで、又は高インスリンレベルでも発生し、組織のインスリンに対する適切な応答が喪失している結果であると考えられる。これは、「インスリン抵抗性」と呼ばれる。ほとんどの２型糖尿病患者は、体重過多又は肥満でもある。糖尿病を診断するための基準の１つは、空腹時血漿グルコース濃度である。糖尿病の対象は、１２６ｍｇ／ｄｌ以上の空腹時血漿グルコース濃度を有する。境界型糖尿病の対象は、境界型糖尿病に罹患している者である。境界型糖尿病の対象は、空腹時血糖障害（空腹時血漿グルコース濃度が１００ｍｇ／ｄｌ以上かつ１２６ｍｇ／ｄｌ未満）；又は耐糖能障害（２時間血漿グルコース濃度が１４０ｍｇ／ｄｌ以上かつ２００ｍｇ／ｄｌ未満）；又はインスリン抵抗性を有し、その結果糖尿病を発症するリスクが増加している対象である。２型糖尿病の予防は、境界型糖尿病の治療を含む。
【０１８０】
本明細書で使用するとき、用語「脂質異常症」は、任意の脂質画分の異常レベル及び特定のリポタンパク質異常を包含する。例えば、脂質異常症は、血漿コレステロールの上昇及び／又はトリグリセリドの上昇及び／又は遊離脂肪酸の上昇及び／又は低い高密度リポタンパク質（ＨＤＬ）レベル及び／又は高い低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）レベル及び／又は高い超低密度リポタンパク質（ＶＬＤＬ）レベルを指す。脂質異常症は、例えば、アテローム性動脈硬化症、及び最終的には冠動脈心疾患を含む症候性血管疾患の発症に寄与し得る。脂質異常症は、糖尿病と関連付けられている場合も関連付けられていない場合もある。
【０１８１】
本明細書で使用するとき、用語「代謝異常」は、環境因子及び遺伝因子（環境因子には、身体活動度、栄養を含む）が原因で、正常な代謝を妨害し、特定物質の過剰レベル又は欠乏を招き、及びエネルギー恒常性の機能不全をもたらす、任意の異常な化学反応及び酵素反応を包含する。代謝異常の非限定的な例としては、糖尿病、脂質異常症、高血圧症、過体重、肥満、及びこれらの任意の組み合わせが挙げられる。
【０１８２】
本明細書で使用するとき、「ＡＭＰＫ関連疾患」は、ＡＭＰＫの活性化が健康に良い効果をもたらす病理学的状態又はゲノム病理学的状態を含む。かかる疾患又は状態の例としては、肥満、糖尿病、メタボリックシンドローム、急性炎症性肺損傷、心臓疾患、再潅流虚血、癌、老化、網膜変性、心肥大、非アルコール性脂肪性肝疾患、高血圧、アルブミン尿症、散発性アルツハイマー病、筋ジストロフィー、及び変形性関節症が挙げられる。加えて、「ＡＭＰＫに関連する状態」は、ＡＭＰＫの活性化が、原発性の「ＡＭＰＫ関連疾患」と関連付けられている状態を改善する状態を含む。例えば、糖尿病性腎症（Ｓａｌｏｔｔｏ  ｅｔ  ａｌ．（２０１７）  Ｊ．Ｐｈａｒｍａ  ａｎｄ  Ｅｘｐｔ  Ｔｈｅｒａ．３６１：３０３−３１１）又は糖尿病性神経障害は、糖尿病の「ＡＭＰＫ関連疾患」と関連付けられ得る「ＡＭＰＫに関連する状態」である。
【０１８３】
「予防」又は「予防すること」は、状態、障害、又は疾患のリスク及び／又は重症度の低減を含む。
【０１８４】
用語「治療」、「治療すること」、「治療する」、「軽減する」及び「緩和する」は、抑止的又は予防的治療（標的とする病的状態又は障害を予防する及び／又は発症を遅らせる治療）と、治癒的、治療的、又は疾患改質的治療との両方が含まれ、例えば、診断された病的状態又は障害の治癒、遅延、症状の軽減、及び／又は進行の停止のための治療的手段、並びに、疾患に感染する危険性がある患者、又は疾患に感染した疑いのある患者、及び体調不良の患者、又は疾患若しくは医学的状態に罹患していると診断された患者の治療が含まれる。この用語は、必ずしも完治するまで対象が治療されることを意味するものではない。これらの用語はまた、疾患を患ってはいないが、不健康な状態を起こしやすい対象の健康維持及び／又は促進も意味する。これらの用語はまた、１つ以上の主たる予防的又は治療的手段の相乗作用あるいは増進を含むことを意図するものである。用語「治療」、「治療する」、「軽減する」及び「緩和する」は更に、疾患若しくは症状に対する食事療法、又は疾患若しくは症状の予防（prophylaxis）若しくは予防（prevention）のための食事療法を含むことを意図するものである。治療は患者に関連するものであってもよく、又は医師に関連するものであってもよい。
【０１８５】
肥満は、除脂肪体重に対して体脂肪が過剰であり、現代社会において非常に一般的な慢性疾患である。これは、社会的不名誉だけでなく、寿命の短縮、並びに有害な精神発達、冠状動脈疾患、高血圧、脳卒中、糖尿病、高脂血症、及び一部の癌を含む多数の医学的問題も伴う（例えば、Ｎｉｓｈｉｎａ，ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｔａｂ．４３：５５４−５５８，１９９４；Ｇｒｕｎｄｙ  ａｎｄ  Ｂａｒｎｅｔｔ，Ｄｉｓ．Ｍｏｎ．３６：６４１−７３１，１９９０；Ｒｉｓｓａｎｅｎ，ｅｔ  ａｌ．，Ｂｒｉｔｉｓｈ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｊｏｕｒｎａｌ，３０１：８３５−８３７，１９９０を参照されたい）。
【０１８６】
「肥満関連疾患」は、過剰体重又は高い「体格指数（ＢＭＩ）」が疾患又は状態の進行又は抑制に関与している疾病又は状態を指す。肥満関連疾患の代表例としては、限定するものではないが、糖尿病、糖尿病合併症、インスリン感受性、多嚢胞性卵巣疾患、高血糖症、脂質異常症、インスリン抵抗性、メタボリックシンドローム、肥満、体重増加、炎症性疾患、消化器官の疾患、狭心症、心筋梗塞、狭心症又は心筋梗塞の後遺症、老年性認知症、及び脳血管性認知症が挙げられる。Ｈａｒｒｉｓｏｎ’ｓ  Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｏｆ  Ｉｎｔｅｒｎａｌ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，１３ｔｈ  Ｅｄ．，ＭｃＧｒａｗ  Ｈｉｌｌ  Ｃｏｍｐａｎｉｅｓ  Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（１９９４）を参照されたい。限定するものではないが、炎症状態の例としては、消化器官の疾患（潰瘍性大腸炎、クローン病、膵炎、胃炎、消化器の良性腫瘍、消化性ポリープ、遺伝性ポリポーシス症候群、大腸癌、直腸癌、胃癌、及び消化器の潰瘍性疾患）、狭心症、心筋梗塞、狭心症又は心筋梗塞の後遺症、老年性認知症、脳血管性認知症、免疫疾患、及び癌全般が挙げられる。
【０１８７】
用語「対象」又は「個体」は、本明細書に開示される化合物、組成物、又は方法のうちの１つ以上から利益を得ることができる、ヒトを含む任意の動物を意味する。概して、対象は、ヒト、又は鳥類、ウシ、イヌ、ウマ、ネコ、ヤギ、オオカミ、ネズミ、ヒツジ、若しくはブタの動物である。「コンパニオンアニマル」は、任意の飼養されている動物であり、限定されないが、ネコ、イヌ、ウサギ、モルモット、フェレット、ハムスター、マウス、アレチネズミ、ウマ、ウシ、ヤギ、ヒツジ、ロバ、ブタなどが挙げられる。好ましくは、対象は、ヒトである、又はイヌ若しくはネコなどのコンパニオンアニマルである。ヒトの文脈における用語「老齢」（elderly）は、少なくとも６０歳、好ましくは６３歳以上、より好ましくは６５歳以上、最も好ましくは７０歳以上の年齢を意味する。用語「高齢者」は、ヒトに関連して、少なくとも４５歳、好ましくは５０歳超、より好ましくは５５歳超の年齢を意味し、老齢の対象を含む。他の動物の場合、「高齢個体」とは、その個々の種及び／又は種内の系統において、平均寿命の５０％を超えた動物をいう。動物は、平均期待寿命の６６％を超えた場合、好ましくは平均期待寿命の７５％を超えた場合、より好ましくは平均期待寿命の８０％を超えた場合に、「老齢」であるとみなされる。老齢のネコ又はイヌは、少なくとも約７歳齢である。
【０１８８】
本明細書で使用する場合、「有効量」とは、対象において、欠乏を防ぐ、障害、状態、若しくは疾患を治療する量、又は更に一般的には、症状を軽減する、疾患の進行を管理する、又は栄養学的、生理学的、若しくは医学的利益を対象に提供する量である。本願明細書に開示される組成物の効果に関連する「改善された」、「増加した」、「増進された」などの相対的用語は、１つ以上の成分を含まない、及び／又は１つ以上の成分の量が異なるが、その他の成分については同一である組成物と比較した場合に用いられる。
【０１８９】
１．５  一般用語
本明細書で使用するとき、単数形「１つの」（「ａ」、「ａｎ」及び「ｔｈｅ」）には、別段の指示がない限り、複数の参照物も含まれる。したがって、例えば、「１つの構成成分（a component）」又は「その構成成分（the component）」についての言及は、２つ以上の構成成分を含む。
【０１９０】
別段の定義がされていない限り、本明細書で使用される技術用語及び科学用語は、本発明が関係する技術分野の当業者によって通常理解されているものと同じ意味を持つ。本明細書では、当業者に既知の様々な方法論及び材料を参照する。組み換えＤＮＡ技術の一般原理を示す標準的な参照文献としては、Ｓａｍｂｒｏｏｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，２ｎｄ  Ｅｄ．，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（１９８９）；Ｋａｕｆｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｄｓ．，Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ａｎｄ  Ｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ｉｎ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ，Ｂｏｃａ  Ｒａｔｏｎ（１９９５）；ＭｃＰｈｅｒｓｏｎ，Ｅｄ．，Ｄｉｒｅｃｔｅｄ  Ｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓ：Ａ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ，ＩＲＬ  Ｐｒｅｓｓ，Ｏｘｆｏｒｄ（１９９１）が挙げられる。薬理学の一般原理を示す標準的な参照文献としては、ＧｏｏｄｍａｎとＧｉｌｍａｎのＴｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，１０ｔｈ  Ｅｄ．，ＭｃＧｒａｗ  Ｈｉｌｌ  Ｃｏｍｐａｎｉｅｓ  Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（２００１）が挙げられる。本明細書で使用される標準的な医療用語は、Ｓｔｅｄｍａｎ’ｓ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ，２７ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，ｗｉｔｈ  ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ  ｍｅｄｉｃｉｎｅ  ｉｎｓｅｒｔに定義された意味を有する。
【０１９１】
本明細書に記載する全ての百分率は、別途記載のない限り、組成物の総重量によるものである。本明細書で使用するとき、「約」、「およそ」、及び「実質的に」は、数値範囲内、例えば、参照数字の−１０％から＋１０％の範囲内、好ましくは−５％から＋５％の範囲内、より好ましくは、参照数字の−１％から＋１％の範囲内、最も好ましくは参照数字の−０．１％から＋０．１％の範囲内の数を指すものと理解される。本明細書における全ての数値範囲は、その範囲内の全ての整数又は分数を含むと理解されるべきである。更に、これらの数値範囲は、この範囲内の任意の数又は数の部分集合を対象とする請求項を支持するために与えられていると解釈されたい。例えば、１〜１０という開示は、１〜８、３〜７、１〜９、３．６〜４．６、３．５〜９．９などの範囲を支持するものと解釈されたい。
【０１９２】
本明細書で使用するとき、移行句又は請求項の本文において、用語「含む」（ｃｏｍｐｒｉｓｅ（ｓ）及びｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」は、オープンエンドの意味を有するものとして解釈されるべきである。すなわち、上記の用語は、「少なくとも有する」又は「少なくとも含む」という語句と同義であると解釈されるべきである。方法の文脈において使用される場合、用語「含む（comprising）」は、当該方法が少なくとも列挙された工程を含むが、追加の工程を含み得ることを意味する。化合物又は組成物の文脈で使用される場合、用語「含む（comprising）」は、当該化合物又は組成物が、少なくとも列挙された特徴又は化合物を含むが、追加の特徴又は化合物も含み得ることを意味する。「Ｘ及び／又はＹ」の文脈にて使用される用語「及び／又は」は、「Ｘ」又は「Ｙ」又は「Ｘ及びＹ」と解釈されるべきである。本明細書において使用する場合、用語「例（example）」及び「などの（such as）」は、特に後に用語の掲載が続く場合は、単に例示的なものであり、かつ説明のためのものであり、排他的又は包括的なものであると判断すべきではない。
【０１９３】
以下に、本発明の特定の実施形態を詳細に参照する。本発明をこれらの特定の実施形態と併せて説明するが、本発明をそのような特定の実施形態に限定することを意図するものではないことは理解されるであろう。対照的に、特許請求の範囲によって定義される本発明の趣旨及び範囲に含まれ得る代替物、修正物、及び等価物を網羅することが意図される。本発明の完全な理解を提供するために、多くの具体的な詳細が以下の説明において記載される。本発明は、これらの具体的な詳細の一部又は全てを伴わずに実施されてもよい。その他の場合には、本発明を不必要に不明瞭にしないために、周知の方法及びプロトコルを詳細には記載していない。
【実施例】
【０１９４】
実施例１
（３−（ベンジルオキシ）−５−メトキシベンジル）トリフェニルホスホニウムブロミドと５−（ベンジルオキシ）−２−ヨードベンズアルデヒドとの間のウィッティヒ反応によるルシアントリジンの化学合成
パート１：（３−（ベンジルオキシ）−５−メトキシベンジル）トリフェニルホスホニウムブロミドの合成
適切に保護した後、３，５−ジヒドロキシ安息香酸のメチルエステルを一級アルコールに還元し、対応するアルキルハライドに変換した後、トリフェニルホスフィンと反応させて、所望のトリフェニルホスホニウムイリド試薬を得た（スキーム１）。
【化１３】
2021525268.tif 000014
【０１９５】
工程ａ．３，５−ジヒドロキシ安息香酸メチル１（３００ｇ、１７８４．１２ｍｍｏｌ）のアセトン（７２００ｍＬ）溶液に、炭酸カリウム（２７１．２２ｇ、１９６２．５３ｍｍｏｌ）を添加した。懸濁液を室温で１０分間撹拌した。臭化ベンジル（２２２．５０ｍＬ、１８７３．３２ｍｍｏｌ）を加え、得られた懸濁液を６０℃で１２時間加熱した。室温まで冷却した後、懸濁液を濾過し、濾過ケークをアセトンで洗浄し、濾液を濃縮して残渣を得た。残渣を自動順相クロマトグラフィーにより精製し、酢酸エチル／ヘキサンで溶離して、３−（ベンジルオキシ）−５−ヒドロキシ安息香酸メチル２を灰白色固体として得た。（１４４ｇ、収率３１％）。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ：９．８９（ｓ，１Ｈ），７．３３−７．４６（ｍ，５Ｈ），７．０１（ｄｄ，Ｊ＝６．３０，０．９０Ｈｚ，２Ｈ），６．６７（ｔ，Ｊ＝２．４０Ｈｚ，１Ｈ），５．１１（ｓ，２Ｈ），３．８２（ｓ，３Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ  ２５７．１［Ｍ−Ｈ］＋；ＨＰＬＣ−ＵＶ分析：保持時間＝１３．３５分；検出：１９０〜４００ｎｍ：ピーク面積、９９．８１％；溶離液Ａ、０．１％ＴＦＡ水溶液；溶離剤Ｂ、アセトニトリル；イソクラティック／１．０ｍＬ毎分の流速で３０分間にわたる勾配。
【０１９６】
工程ｂ．３−（ベンジルオキシ）−５−ヒドロキシ安息香酸メチル２（１４０ｇ、５４２．０６ｍｍｏｌ）のアセトン（７０００ｍＬ）溶液に、炭酸カリウム（２２４．７４ｇ、１６２６．２０ｍｍｏｌ）を添加した。懸濁液を室温で１０分間撹拌した。ヨードメタン（１６８．７３ｍＬ、２７１０．３４ｍｍｏｌ）を添加し、得られた懸濁液を室温で１６時間撹拌した。懸濁液を濾過し、濾過ケークをアセトンで洗浄し、濾液を濃縮して残渣を得た。残渣を自動順相クロマトグラフィーにより精製し、酢酸エチル／ヘキサンで溶離して、３−（ベンジルオキシ）−５−メトキシ安息香酸メチル３を液体として得た。（１２５ｇ、収率９４％）。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ：７．３３−７．４８（ｍ，６Ｈ），７．１６（ｔ，Ｊ＝２．１０Ｈｚ，１Ｈ），７．０８（ｄ，Ｊ＝１．２０Ｈｚ，１Ｈ），６．８７（ｔ，Ｊ＝２．４０Ｈｚ，１Ｈ），５．１５（ｓ，２Ｈ），３．８４（ｓ，３Ｈ），３．７９（ｓ，３Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ  ２７３．１［Ｍ＋Ｈ］＋；ＨＰＬＣ−ＵＶ分析：保持時間＝１５．３１分；検出：１９０〜４００ｎｍ：ピーク面積、９９．７８％；溶離液Ａ、０．１％ＴＦＡ水溶液；溶離剤Ｂ、アセトニトリル；イソクラティック／１．０ｍＬ毎分の流速で３０分間にわたる勾配。
【０１９７】
工程ｃ．水素化アルミニウムリチウム（１６．８６ｇ、４４４．３６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（６０５ｍＬ）溶液を、３−（ベンジルオキシ）−５−メトキシ安息香酸メチル３（１２１ｇ、４４４．３６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１６００ｍＬ）溶液に添加した。懸濁液を０℃で２０分間、室温で１時間撹拌した。反応混合物をＴＨＦで希釈し、水を添加してクエンチした。得られた混合物をセライトパッドを通して濾過し、酢酸エチルで洗浄した。濾液を真空下で濃縮して、（３−（ベンジルオキシ）−５−メトキシフェニル）メタノール４を液体として得た。（１００ｇ、収率９２％）。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ：７．３０−７．４６（ｍ，５Ｈ），６．５９（ｄ，Ｊ＝０．６０Ｈｚ，１Ｈ），６．５１（ｓ，１Ｈ），６．４５（ｄ，Ｊ＝２．４０Ｈｚ，１Ｈ），５．１９（ｔ，Ｊ＝５．７０Ｈｚ，１Ｈ），５．０７（ｓ，２Ｈ），４．４４（ｄ，Ｊ＝５．７０Ｈｚ，２Ｈ），３．７２（ｓ，３Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ  ２４５．１［Ｍ＋Ｈ］＋；ＨＰＬＣ−ＵＶ分析：保持時間＝１２．８６分；検出：１９０〜４００ｎｍ：ピーク面積、９９．６４％；溶離液Ａ、０．１％ＴＦＡ水溶液；溶離剤Ｂ、アセトニトリル；イソクラティック／１．０ｍＬ毎分の流速で３０分間にわたる勾配。
【０１９８】
工程ｄ．（３−（ベンジルオキシ）−５−メトキシフェニル）メタノール４（１００ｇ、４０９．３４ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（１０００ｍＬ）溶液に、三臭化リン（５０．５４ｍＬ、５３２．１５ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を４０℃で１時間撹拌し、水の添加によってクエンチした。水相を酢酸エチルで抽出し、合わせた有機抽出物を水、ブラインで洗浄し、濃縮して、１−（ベンジルオキシ）−３−（ブロモメチル）−５−メトキシベンゼン５を淡黄色固体として得た。（１００ｇ、収率８０％）。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ：７．３３−７．４６（ｍ，５Ｈ），６．７２（ｓ，１Ｈ），６．６３（ｓ，１Ｈ），６．５４（ｄ，Ｊ＝１．８０Ｈｚ，１Ｈ），５．０９（ｄ，Ｊ＝５．４０Ｈｚ，２Ｈ），４．６２（ｄ，Ｊ＝５．７０Ｈｚ，２Ｈ），３．７４（ｓ，３Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ  ３０９［Ｍ＋２Ｈ］＋；ＨＰＬＣ−ＵＶ分析：保持時間＝１５．７７分；検出：１９０〜４００ｎｍ：ピーク面積、９９．７１％；溶離液Ａ、０．１％ＴＦＡ水溶液；溶離剤Ｂ、アセトニトリル；イソクラティック／１．０ｍＬ毎分の流速で３０分間にわたる勾配。
【０１９９】
工程ｅ．１−（ベンジルオキシ）−３−（ブロモメチル）−５−メトキシベンゼン５（１００ｇ、３２５．５３ｍｍｏｌ）のトルエン（２４８８ｍＬ）溶液に、トリフェニルホスフィン（８５．３８ｇ、３２５．５３ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を１００℃で６時間撹拌した後、室温まで冷却させた。固体を濾過により回収し、エーテルで洗浄し、真空下で乾燥して、（３−（ベンジルオキシ）−５−メトキシベンジル）トリフェニルホスホニウムブロミド６をオフホワイト色の固体として得た。（１５０ｇ、収率８２％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ：７．８９−７．９１（ｍ，３Ｈ），７．６５−７．７５（ｍ，１２Ｈ），７．２８−７．３７（ｍ，５Ｈ），６．５１（ｓ，１Ｈ），６．２３（ｓ，１Ｈ），６．１２（ｓ，１Ｈ）５．０７（ｄ，Ｊ＝１５．６０Ｈｚ，２Ｈ），４．８２（ｓ，２Ｈ），３．４８（ｓ，３Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ  ４８９．２［Ｍ−ＨＢｒ］＋；ＨＰＬＣ−ＵＶ分析：保持時間＝１４．１９分；検出：１９０〜４００ｎｍ：ピーク面積、９５．５１％；溶離液Ａ、０．１％ＴＦＡ水溶液；溶離剤Ｂ、アセトニトリル；イソクラティック／１．０ｍＬ毎分の流速で３０分間にわたる勾配。
【０２００】
パート２：５−（ベンジルオキシ）−２−ヨードベンズアルデヒドの合成
３−ヒドロキシベンズアルデヒドを、スキーム２に示すように、オルトヨウ素化前に保護した。
【化１４】
2021525268.tif 000015
【０２０１】
工程ａ．３−ヒドロキシベンズアルデヒド７（２５ｇ、２０４．８５ｍｍｏｌ）のアセトン（２５０ｍＬ）溶液に、炭酸カリウム（４２．４６ｇ、３０７．２７ｍｍｏｌ）を添加した。懸濁液を室温で１０分間撹拌した。臭化ベンジル（３１．３８ｍＬ、２６４．２５ｍｍｏｌ）を加え、得られた懸濁液を６０℃で１２時間加熱した。室温まで冷却した後、懸濁液を濾過し、濾過ケークをアセトンで洗浄し、濾液を濃縮して残渣を得た。残渣を自動順相クロマトグラフィーにより精製し、酢酸エチル／ヘキサンで溶離して、３−（ベンジルオキシ）ベンズアルデヒド８をオフホワイト色の固体として得た。（４２ｇ、収率９６％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ：９．９８（ｓ，１Ｈ），７．２７−７．５０（ｍ，５Ｈ），７．２５−７．２６（ｍ，２Ｈ），５．１４（ｓ，２Ｈ）；ＧＣＭＳ：ｍ／ｚ  ２１２．１：（ＧＣＭＳ条件：カラム：ＨＰ−５（３０ｍ×３２０μｍ×０．２５μｍ）；勾配：１２０℃〜３００℃、４０℃毎分；ＨＰＬＣ−ＵＶ分析：保持時間＝１４．３７分；検出：１９０〜４００ｎｍ：ピーク面積、９９．５８％；溶離液Ａ、０．１％ＴＦＡ水溶液；溶離剤Ｂ、アセトニトリル；イソクラティック／１．０ｍＬ毎分の流速で３０分間にわたる勾配。
【０２０２】
工程ｂ．３−（ベンジルオキシ）ベンズアルデヒド８（４２ｇ、１９７．８７ｍｍｏｌ）のクロロホルム（１０５０ｍＬ）溶液に、トリフルオロ酢酸銀（６５．５６ｇ、２９６．８１ｍｍｏｌ）を添加した。懸濁液を０℃で１０分間撹拌した。ヨウ素（３２．４３ｇ、１２６．９０ｍｍｏｌ）を０℃で添加し、得られた懸濁液を室温で１２時間撹拌し、水の添加によってクエンチした。得られた混合物をセライトパッドを通して濾過し、ジクロロメタンで洗浄した。水相をジクロロメタンで抽出し、合わせた有機抽出物を水、ブラインで洗浄し、濃縮して残渣を得た。残渣を自動順相クロマトグラフィーにより精製し、酢酸エチル／ヘキサンで溶離して、５−（ベンジルオキシ）−２−ヨードベンズアルデヒド９をオフホワイト色の固体として得た。（４０ｇ、収率５９％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δｐｐｍ：１０．０４（ｓ，１Ｈ），７．８３（ｄ，Ｊ＝８．４０Ｈｚ，１Ｈ），７．５４（ｓ，１Ｈ），７．３７−７．５３（ｍ，５Ｈ），７．０１（ｄｄ，Ｊ＝８．８０，３．２０Ｈｚ，１Ｈ），５．１２（ｓ，２Ｈ）；ＧＣＭＳ  ｍ／ｚ  ３３８：（ＧＣＭＳ条件：カラム：ＺＢ１ＭＳ（１０ｍ×１００μｍ×０．１μｍ）；勾配：１２０℃〜３００℃、４０℃毎分；ＨＰＬＣ−ＵＶ分析：保持時間＝１６．０４分；検出：１９０〜４００ｎｍ：ピーク面積、９９．８４％；溶離液Ａ、０．１％ＴＦＡ水溶液；溶離剤Ｂ、アセトニトリル；イソクラティック／１．０ｍＬ毎分の流速で３０分間にわたる勾配。
【０２０３】
パート３：ルシアントリジンの合成
ルシアントリジンは、スキーム３に示されるように、（３−（ベンジルオキシ）−５−メトキシベンジル）トリフェニルホスホニウムブロミドと５−（ベンジルオキシ）−２−ヨードベンズアルデヒドとの間のウィッティヒ反応と、それに続く環化、脱保護、及び還元により調製した。
【化１５】
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【０２０４】
工程ａ．５−（ベンジルオキシ）−２−ヨードベンズアルデヒド９（３６ｇ、１０６．４６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３６００ｍＬ）溶液に、（３−（ベンジルオキシ）−５−メトキシベンジル）トリフェニルホスホニウムブロミド６（１２７．３２ｇ、２２３．５７ｍｍｏｌ）を添加した。懸濁液を０℃で撹拌した。カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（２６．２８ｇ、２３４．０８ｍｍｏｌ）を０℃で添加し、得られた懸濁液を室温で１２時間撹拌した。反応混合物を残渣になるまで濃縮し、残渣を、酢酸エチル／ヘキサンで溶離して、（Ｚ）−４−（ベンジルオキシ）−２−（３−（ベンジルオキシ）−５−メトキシスチリル）−１−ヨードベンゼン１０をオフホワイト色固体として得た。（５０ｇ、収率８６％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δｐｐｍ：７．７４（ｄ，Ｊ＝８．８０Ｈｚ，１Ｈ），７．２６−７．４２（ｍ，８Ｈ），６．８９（ｄ，Ｊ＝３．２０Ｈｚ，１Ｈ），６．４９−６．６５（ｍ，４Ｈ），６．４０（ｓ，３Ｈ），６．３３（ｔ，Ｊ＝１．６０Ｈｚ，１Ｈ），４．８５（ｓ，４Ｈ），３．６２（ｓ，３Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ  ５４９．１［Ｍ＋Ｈ］＋；ＨＰＬＣ−ＵＶ分析：保持時間＝１８．７４分；検出：１９０〜４００ｎｍ：ピーク面積、８９．９８％；溶離液Ａ、０．１％ＴＦＡ水溶液；溶離剤Ｂ、アセトニトリル；イソクラティック／１．０ｍＬ毎分の流速で３０分間にわたる勾配。
【０２０５】
工程ｂ．（Ｚ）−４−（ベンジルオキシ）−２−（３−（ベンジルオキシ）−５−メトキシスチリル）−１−ヨードベンゼン１０（５０ｇ、９１．１７ｍｍｏｌ）のトルエン（１２５０ｍＬ）溶液に、トリブチルスズヒドリド（４９．１４ｍＬ、１８２．３４ｍｍｏｌ）及びアゾビスイソブチロニトリル（７．４８ｇ、４５．５８ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物に窒素を５分間スパージし、１００℃で１６時間加熱した。反応混合物を残渣になるまで濃縮し、残渣を自動順相クロマトグラフィーにより精製し、酢酸エチル／ヘキサンで溶離して、４，７−ビス（ベンジルオキシ）−２−メトキシフェナントレン１１ａと２，７−ビス（ベンジルオキシ）−４−メトキシフェナントレン１１ｂとの１：１混合物をオフホワイト色の固体として得た。（２５ｇ、収率６５％）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ  ４２１．３［Ｍ＋Ｈ］＋；ＨＰＬＣ−ＵＶ分析：保持時間＝（６．５９＆６．７０）分；検出：１９０〜４００ｎｍ：ピーク面積、９９．２８％；溶離液Ａ、０．１％ＴＦＡ水溶液；溶離液Ｂ、０．１％ＴＦＡアセトン溶液；イソクラティック／２．０ｍＬ毎分の流速で１０分間にわたる勾配。
【０２０６】
工程ｃ．４，７−ビス（ベンジルオキシ）−２−メトキシフェナントレン１１ａ及び２，７−ビス（ベンジルオキシ）−４−メトキシフェナントレン１１ｂ（２５ｇ、５９．４５ｍｍｏｌ）の酢酸（２０００ｍＬ）及びＴＨＦ（２５０ｍＬ）溶液に、１０％  Ｐｄ／Ｃ（２５ｇ）を添加した。反応混合物を、水素バルーン下、室温で２日間撹拌した。得られた混合物をセライトパッドを通して濾過し、酢酸エチルで洗浄し、濾液を濃縮して、位置異性体の１：１混合物を得た。（１１．５０ｇ、収率７９％）。この粗生成物（１１．５０ｇ、１：１混合物）をＳＦＣ（ＳＦＣ条件：カラム：ＹＭＣアミロース−Ｃ；検出：２１０ｎｍ：共溶媒：０．５％イソプロピルアミンのメタノール溶液；流速４．０ｍＬ毎分）で精製して、７−メトキシ−９，１０−ジヒドロフェナントレン−２，５−ジオール、ルシアントリジンをオフホワイト色の固体として得た（１．１ｇ）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ：９．６０（ｓ，１Ｈ），９．１８（ｓ，１Ｈ），８．０８（ｄ，Ｊ＝８．８０Ｈｚ，１Ｈ），６．６０（ｓ，１Ｈ），６．５９（ｄ，Ｊ＝７．２０Ｈｚ，１Ｈ），６．３７（ｓ，１Ｈ），６．３２（ｓ，１Ｈ），３．７０（ｓ，３Ｈ），２．６０（ｓ，４Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ：１５８．１３，１５５．５２，１５５．４５，１４０．３２，１３８．８６，１２９．０５，１２４．６７，１１４．８６，１１４．６２，１１３．０９，１０５．１５，１００．９７，５５．２５，３０．７０，２９．９５；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ  ２４３．１［Ｍ＋Ｈ］＋；元素分析（％）Ｃ１５Ｈ１４Ｏ３＋０．２ＣＨ３ＯＨ：Ｃ  ７３．４１，Ｈ  ６．００．実測値：Ｃ  ７３．４３、Ｈ  ５．８４；ＨＰＬＣ−ＵＶ分析：保持時間＝１１．８４分；検出：１９０〜４００ｎｍ：ピーク面積、９８．６２％；溶離液Ａ、０．１％ＴＦＡ水溶液；溶離剤Ｂ、アセトニトリル；イソクラティック／１．０ｍＬ毎分の流速で３０分間にわたる勾配。
【０２０７】
実施例２
ルシアントリジンは、細菌に発現させたＡＭＰＫα２β１γ１及びα１β１γ１複合体を用量依存的に活性化させる。
【０２０８】
ルシアントリジン（ＣＡＳ８７５３０−３０−１）は、ツニアアルバの果実から単離した。ツニアアルバの果実はＡｎａｌｙｔｉｃｏｎ（ＮＰ−０１２３６２）から供給を得た。この植物は、２００３年にＡｎａｌｙｔｉｃｏｎのバイオマテリアル供給業者から購入した。原産国はネパールである。ＡＭＰＫヘテロ三量体を細菌に発現させて、ニッケル精製によってＨｉｓ−αサブユニットを介して精製した。ＡＭＰＫ複合体をゲル濾過により精製し、ＣａＭＫＫβとのインキュベートによってリン酸化し、最終的なゲル濾過精製工程で更に精製した。リン酸化し精製したＡＭＰＫを、ＨＴＲＦ−ＫｉｎＥＡＳＥ  Ｃｉｓｂｉｏアッセイキット（ＳＴＫ  Ｓ１キット）の基質及び試薬を使用して、様々な濃度のリガンドと共に３０分間インキュベートした。基質のリン酸化は、製造業者のプロトコル（及びＣｏｕｌｅｒｉｅ  ｅｔ  ａｌ．，（２０１６）ＰＭＩＤ：２７７９２３２７）に従ってドナー及びアクセプター抗体を室温で２時間インキュベートし、ＨＴＲＦを実施することにより検出されたリン酸化ペプチドによって測定した。６６５ｎｍ／６２０ｎｍ比を求め、その結果を、任意の化合物を含まないそれぞれのＡＭＰＫ複合体と比較して、活性化倍率としてプロットした。
【０２０９】
図１〜５は、ルシアントリジン（７ーメトキシ−９，１０−ジヒドロフェナントレン−２，５−ジオール、ＣＡＳ番号８７５３０−３０−１）がβ２−サブユニットを含有するＡＭＰＫ複合体を活性化しないことを示す。更に、ルシアントリジンは、β１サブユニット内の変異（Ｓ１０８Ａ）又は炭水化物結合モジュールの欠失（ΔＣＢＭ）を有するＡＭＰＫ複合体を活性化しない。この活性化プロファイルは、ＡＤａＭ（アロステリック薬及び代謝）部位を介してそれらの効果を介在する活性化剤の特徴である。ＡＭＰ調節障害を示すＡＭＰＫ  γ１  Ｒ２９８Ｇ変異体では、ルシアントリジンによる活性化に影響がない。これらのデータは、αサブユニットのキナーゼドメインとβサブユニットのＣＢＭとの間に形成された、ＡＭＰＫのＡＤａＭ結合ポケットにおける、ルシアントリジンによる活性化と一致する。
【０２１０】
実施例３
ルシアントリジンは、Ｕ２ＯＳ  Ｆｌｐ−Ｉｎ  Ｔ−ＲＥｘ哺乳類細胞におけるＡＭＰＫ基質、アセチル−ＣｏＡカルボキシラーゼ（ＡＣＣ）のリン酸化を増加させる。
【０２１１】
Ｕ２ＯＳ  Ｆｌｐ−Ｉｎ  ＴＲＥｘ細胞を、９６ウェルプレート中に１００Ｋで播種し、１０％（体積／体積）ＦＢＳと、１００Ｕ／ｍＬペニシリンＧ及び１００μｇ／ｍＬのストレプトマイシンとを添加したＤＭＥＭ  ＧｌｕｔａＭＡＸ（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）中、３７℃で終夜放置した。細胞を、ＦＢＳを含まない培地中で様々な濃度のルシアントリジンで１時間処理し、次いで、細胞を、製造業者のプロトコル（Ｃｉｓｂｉｏ）に従ってブロッキング溶液を添加した５０μＬのＣｉｓｂｉｏ溶解緩衝液＃１に溶解した。細胞を室温で３０分間溶解させた後、１６μＬの溶解物を、４μＬのＨＴＲＦ抗体（製造業者のプロトコルに従った、アクセプター及びドナー（ｐ）ＡＣＣ抗体の１：４０希釈物）と共にインキュベートした。溶解物を抗体と共に終夜インキュベートした後、ＭｏｌｅｃｕｌａｒＤｅｖｉｃｅｓ  ｉ３プレートリーダー（及びＨＴＲＦカートリッジアドオン）を使用して６６５ｎｍ／６２０ｎｍ比を求めた。ウエスタンブロット分析のために、ＳＤＳサンプル緩衝液を溶解物の残りの部分に添加し、９５℃で変性し、次いで、リン酸特異的抗体及びトータルＡＣＣ抗体（Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｌｉｎｇ）を用いてウエスタンブロット分析を行った。Ｌｉ−Ｃｏｒ二次抗体と共にインキュベートすることによってバンドを可視化し、Ｌｉ−Ｃｏｒ  Ｏｄｙｓｓｅｙ装置でスキャンした。
【０２１２】
図６（ａ）は、ｐＡＣＣ  ＨＴＲＦアッセイキット（Ｃｉｓｂｉｏ）を使用して、ルシアントリジンが、Ｕ２ＯＳ  Ｆｌｐ−Ｉｎ  ＴＲＥｘ哺乳類細胞においてＡＭＰＫ基質、ＡＣＣのリン酸化を用量依存的に増加させることを示す。ＡＣＣのリン酸化は、細胞のＡＭＰＫ活性の指標として広く使用されている。
【０２１３】
図６（ｂ）は、様々な濃度のルシアントリジンで処理したＵ２ＯＳ  Ｆｌｐ−Ｉｎ  Ｔ−ＲＥｘ溶解物のウエスタンブロット分析を示す。溶解物は、リン酸特異的ＡＣＣ抗体及びトータルＡＣＣ抗体（Ｃｅｌｌ  ｓｉｇｎａｌｌｉｎｇ）を使用してプローブした。これらのデータは、細胞においてルシアントリジンがＡＭＰＫを活性化し、この活性化が下流の基質のリン酸化をもたらすことを示す。
【０２１４】
実施例４
ルシアントリジンは、マウス初代肝細胞におけるＡＭＰＫ基質ＡＣＣのリン酸化を増加させる。
【０２１５】
肝細胞の単離：最初に５０ｍＬの灌流用緩衝液（０．５μＭ  ＥＤＴＡを含むＫｒｅｂｓ−Ｈｅｐｅｓ緩衝液）、続いて５０ｍＬのコラゲナーゼＡ緩衝液（５ｍＭのＣａＣｌ２及び０．５ｍｇ／ｍＬコラゲナーゼを含むＫｒｅｂｓ−Ｈｅｐｅｓ緩衝液）を肝臓に灌流させた。細胞溶液を、１００μｍメッシュに通した後、冷培地で数回洗浄し、最後に、細胞培養ペレットを培養培地（培地１９９（Ｍ１９９）＋ＧｌｕｔａＭＡＸ、１００Ｕ／ｍＬペニシリンＧ、及び１００μｇ／ｍＬストレプトマイシン、０．１％（重量／体積）ＢＳＡ、１０％ＦＣＳ、１０ｎＭインスリン、２００ｎＭトリヨードサイロニン及び５００ｎＭデキサメタゾン）に再懸濁した。肝細胞を付着させたまま（３〜４時間）、抗生物質及び１００ｎＭのデキサメタゾンを添加したＭ１９９で終夜培養した。翌朝、細胞を実験に使用した。
【０２１６】
初代肝細胞を９６ウェルプレートに１５×１０３個で終夜播種した。細胞を、培地中で様々な濃度のルシアントリジンで１時間処理し、次いで、細胞を、製造業者のプロトコル（Ｃｉｓｂｉｏ）に従ってブロッキング溶液を添加した５０μＬのＣｉｓｂｉｏ溶解緩衝液＃１に溶解した。細胞を室温で３０分間溶解させた後、１６μＬの溶解物を、４μＬのＨＴＲＦ抗体と共にインキュベートした。溶解物を抗体と共に終夜インキュベートした後、ＭｏｌｅｃｕｌａｒＤｅｖｉｃｅｓ  ｉ３プレートリーダー（及びＨＴＲＦカートリッジアドオン）を使用して６６５ｎｍ／６２０ｎｍ比を求めた。
【０２１７】
図７は、ｐＡＣＣ  ＨＴＲＦアッセイキット（Ｃｉｓｂｉｏ）を使用して、ルシアントリジンが、初代肝細胞においてＡＭＰＫ基質、ＡＣＣのリン酸化を用量依存的に増加させる（３７℃で１時間インキュベーション）ことを示す。
【０２１８】
実施例５
ルシアントリジンは、初代肝細胞における脂質生成の用量依存的阻害を示す。
【０２１９】
初代肝細胞の単離については、実施例４を参照されたい。初代肝細胞における脂質生成測定のために、細胞を、６ウェルプレートにウェル当たり６００×１０３個で終夜播種した。培地を新鮮なＭ１９９培地のみに交換した２時間後、［１−１４Ｃ］−酢酸の存在下で、様々な濃度のルシアントリジンと共に３７℃で１時間インキュベートした。水相からの分離後の下層の有機層において、脂肪酸への［１４Ｃ］の取り込みを求めた。この結果は、タンパク質μｇ当たりの毎分壊変数（ＤＰＭ）として表示される。
【０２２０】
脂質生成は、ＡＭＰＫ基質ＡＣＣによって制御され、ＡＭＰＫによるＡＣＣのリン酸化及び阻害は、脂質生成の減少をもたらす。１４Ｃ標識した酢酸の脂肪酸への取り込みを求めることによって、初代肝細胞における脂質生成を測定した。様々な濃度のルシアントリジンの存在下又は不在下で、３７℃で１時間、脂質生成をモニタリングした。図８に示す結果は、ルシアントリジンが脂質生成を用量依存的に阻害できることを、総タンパク質のμｇ当たりのＤＰＭとして示す。この観察結果は、ルシアントリジンが肝細胞においてＡＭＰＫを活性化する能力と一致し、この能力は、ＡＣＣのリン酸化及び阻害をもたらす。これらのデータは、前もってＨＴＲＦアッセイ及びウエスタンブロット分析によって決定されたように、ルシアントリジンの、細胞株及び初代肝細胞の両方においてＡＭＰＫを活性化するという能力と一致する（上記実施例を参照されたい）。
【０２２１】
実施例６
ルシアントリジンは、分化したＣ２Ｃ１２細胞へのグルコースの取り込みを増加させる。
【０２２２】
Ｃ２Ｃ１２細胞を、１０％（体積／体積）ＦＢＳと、１００Ｕ／ｍＬペニシリンＧ及び１００μｇ／ｍＬストレプトマイシンとを添加したＤＭＥＭ  ＧｌｕｔａＭＡＸに維持した。Ｃ２Ｃ１２筋芽細胞を、２％（体積／体積）ウマ血清及び抗生物質を添加したＤＭＥＭ  ＧｌｕｔａＭＡＸでの７日間の培養によって筋管に分化させた。細胞を無血清培地に２４時間移した後、処理前に、重炭酸塩を含まない培地で平衡化した。細胞を、３Ｈ−２−デオキシグルコース（ピルビン酸ナトリウムを含有するＫｒｅｂｓ−Ｈｅｐｅｓ緩衝液）の存在下で、対照（最終濃度１％のＤＭＳＯ）又は１００μＭのルシアントリジンで処理した。細胞を溶解させ、シンチレーションカウンターを使用してこれらの試料中の３Ｈの量を測定した。
【０２２３】
筋細胞におけるＡＭＰＫの活性化は、グルコースの取り込みを増加させることが以前に示されている。したがって、分化した筋細胞株、Ｃ２Ｃ１２細胞におけるＡＭＰＫの活性化が、グルコースの取り込みの増加につながるかどうかを試験した。分化したＣ２Ｃ１２細胞を、対照又は１００μＭルシアントリジンのいずれかで、３７℃で４時間処理した。グルコースの取り込みは、３Ｈ−２−デオキシグルコースの細胞への取り込みをモニターすることによって測定した。図９の結果は、対照ウェルと比較した増加倍率として表示されている。これらの結果は、ルシアントリジンが、Ｃ２Ｃ１２細胞へのグルコースの取り込みの２倍の増加を引き起こすことを示す。これらのデータは、ルシアントリジンが筋肉においてＡＭＰＫを活性化するの能力が、下流の基質のリン酸化をもたらし、最終的にはこの筋細胞系統へのグルコースの取り込みの増加をもたらすことが示唆される。これは、筋肉におけるグルコースの取り込みを介在するというＡＭＰＫの重要な役割と一致する。
【０２２４】
実施例７
更なるジヒドロフェナントレン類似体は、アロステリックにＡＭＰＫを直接活性化し、細胞における基質リン酸化を増加させる。
【０２２５】
ＡＭＰＫのインビトロ活性アッセイについては、実施例２を参照されたい。図１０は、化合物２、化合物３、化合物４、及び化合物５が、細菌で発現させたＡＭＰＫα２β１γ１複合体を活性化することを示す。ルシアントリジンと同様に、化合物４は、β２含有複合体、α２β１γ１ΔＣＢＭ変異体及びＳ１０８Ａ変異を有するＡＭＰＫ複合体を活性化しなかった（図１１）。まとめると、これは、ルシアントリジン及び化合物４が共通の活性化機序を共有しており、この活性プロファイルが、ＡＤａＭポケットに結合することによってＡＭＰＫを調節するリガンドに特徴的なものであることを示唆する。
【０２２６】
Ｕ２ＯＳ  Ｆｌｐ−Ｉｎ  Ｔ−ＲＥｘ細胞の処理については、実施例３を参照されたい。図１２は、ｐＡＣＣ  ＨＴＲＦアッセイキット（Ｃｉｓｂｉｏ）を使用して、化合物２、化合物３、化合物４及び化合物５が、Ｕ２ＯＳ  Ｆｌｐ−Ｉｎ  ＴＲＥｘ哺乳類細胞においてＡＭＰＫ基質、ＡＣＣのリン酸化を用量依存的に増加させることを示す。
【０２２７】
実施例８
化合物４は、マウス初代肝細胞においてＡＭＰＫを活性化させ、肝脂質の生成を減少させ、かつＣ２Ｃ１２細胞へのグルコースの取り込みを増加させる。
【０２２８】
マウス初代肝細胞を単離し（実施例４を参照されたい）、様々な濃度の化合物４で３７℃で１時間処理した（実施例５を参照されたい）後、脂質生成速度を求めた（実施例５を参照されたい）。図１３に示すように、化合物４は、脂質生成速度の用量依存的な低下を引き起こし、これはルシアントリジンで見られる効果と同程度であった。
【０２２９】
化合物４で処理する前に、Ｃ２Ｃ１２細胞を培養し、筋管に分化させた（実施例６を参照されたい）。図１４は、化合物４が、グルコースの取り込みの約２倍の増加を引き起こしたことを示し、これはルシアントリジンで見られる効果と同程度である。
【０２３０】
実施例９
Ｃ２Ｃ１２筋管におけるグルコースの取り込みを増加させるルシアントリジンの能力は、ＡＭＰＫに依存する。
【０２３１】
Ｃ２Ｃ１２筋管におけるグルコースの取り込みを増加させるルシアントリジンの能力がＡＭＰＫに依存するものであるのかを試験するために、我々は、触媒ＡＭＰＫαサブユニット、ＡＭＰＫα１α２−／−の両方のアイソフォームを欠いているＣ２Ｃ１２細胞を生成した。緑色蛍光タンパク質の発現と連結させたＣａｓ９酵素と、マウスＡＭＰＫ  α１サブユニット（ｓｃ−４３０６１８，ＳａｎｔａＣｒｕｚ）を標的とするＣａｓ９ガイドＲＮＡ配列及びマウスＡＭＰＫ  α２サブユニット（ｓｃ−４３０８０３，ＳａｎｔａＣｒｕｚ）を標的とするＣａｓ９ガイドＲＮＡ配列とを含有するプラスミドによる、野生型細胞の一過性トランスフェクションにより、Ｃ２Ｃ１２のＡＭＰＫ  α１α２ダブルノックアウト細胞株を作製した。緑色蛍光タンパク質発現について陽性の細胞は、フローサイトメトリーによって、増殖培地を含有する９６ウェルプレートへと単一細胞として選別し、クローンの増殖後にＡＭＰＫシグナル伝達の低下について分析した。
【０２３２】
ＡＭＰＫα１α２＋／＋及びＡＭＰＫα１α２−／−の分化したＣ２Ｃ１２細胞を、ビヒクル（０．２％ＤＭＳＯ）、３０μＭ又は１００μＭのルシアントリジンのいずれかで、３７℃で１時間処理した。加えて、Ｃ２Ｃ１２細胞を、インスリンシグナル伝達の阻害剤である１５ｎＭのウォルトマンニンの存在下又は非存在下、３００ｎＭインスリンで１時間処理することによって、インスリン依存性／ＡＭＰＫ非依存性のグルコースの取り込みも評価した。最後に、ＡＭＰＫα１α２＋／＋及びＡＭＰＫα１α２−／−の分化したＣ２Ｃ１２細胞を、１５ｎＭのウォルトマンニンの存在下又は非存在下で、ビヒクル（０．２％ＤＭＳＯ）又は１００μＭのルシアントリジンのいずれかで、３７℃で１時間処理した。ウォルトマンニン実験では、分化したＣ２Ｃ１２細胞を、処理前に、ＤＭＳＯ又はウォルトマニンと共に１時間プレインキュベートした。
【０２３３】
グルコースの取り込みは、３Ｈ−２−デオキシグルコースの細胞への取り込みをモニターすることによって測定した。ＡＭＰＫα１α２＋／＋及びＡＭＰＫα１α２−／−のＣ２Ｃ１２細胞を、２０％（体積／体積）ＦＢＳと、１００Ｕ／ｍＬペニシリンＧ及び１００μｇ／ｍＬストレプトマイシンとを添加したＤＭＥＭ  ＧｌｕｔａＭＡＸで維持した。Ｃ２Ｃ１２筋芽細胞を、１％（体積／体積）ウマ血清及び抗生物質を添加したＤＭＥＭ  ＧｌｕｔａＭＡＸで、５〜７日間の培養によって筋管に分化させた。細胞を無血清培地に２４時間移した後、処理前に、重炭酸塩を含まない培地で平衡化した。細胞を、３Ｈ−２−デオキシグルコース（ピルビン酸ナトリウムを含有するＫｒｅｂｓ−Ｈｅｐｅｓ緩衝液）の存在下で処理した。細胞を溶解させ、シンチレーションカウンターを使用してこれらの試料中の３Ｈの量を測定した。グルコースの取り込みにおける倍率変化は、各処理条件で得られたカウント数毎分を、ビヒクル対照条件で得られたカウント数毎分で除算することによって求めた。
【０２３４】
図１５〜１７には、対照ウェルと比較した倍率変化として結果を表示する。図１５及び図１６の結果は、Ｃ２Ｃ１２  ＡＭＰＫα１α２＋／＋細胞をルシアントリジン及びインスリンで処理することが、グルコースの取り込みの増加につながることを示す。インスリンに刺激されるグルコースの取り込みは、ＡＭＰＫα１α２−／−細胞において影響を受けなかったが、予想されるように、その効果は、ウォルトマンニンによる処理によって消失される（図１６）。
【０２３５】
対照的に、ウォルトマンニンが、ＡＭＰＫα１α２＋／＋細胞におけるグルコース取り込みを増加させるルシアントリジンの能力に影響を与えなかったことは、この化合物がインスリンシグナル伝達経路を通じたグルコースの取り込みを増加させないことを示唆している（図１７）。対照的に、ルシアントリジンに刺激されるグルコースの取り込みは、ＡＭＰＫα１α２−／−細胞において消失した（図１５）。まとめると、これらのデータは、Ｃ２Ｃ１２細胞へのグルコースの取り込みを増加させるルシアントリジンの能力が、ＡＭＰＫを活性化する能力に依存することを示唆している。
【０２３６】
実施例１０
ルシアントリジンは、マウス初代肝細胞において細胞毒性を引き起こさない。
【０２３７】
初代肝細胞における細胞毒性実験のために、細胞を、９６ウェルプレートにウェル当たり２０×１０３個で、Ｍ１９９培地に終夜播種した。肝細胞を、様々な濃度のルシアントリジン、オリゴマイシン又はＦＣＣＰを用いて、３７℃で１時間インキュベートした。培地を、フェノールレッドを含まない培地に変更した後、製造業者の指示（Ｔｈｅｒｍｏｆｉｓｈｅｒ，Ｖ１３１１５４）に従ってＭＴＴアッセイを実施した。ＭＴＴアッセイは、細胞における化合物の細胞毒性を測定するために日常的に使用される熱量測定アッセイである。図１８に示される結果は、試験したルシアントリジンの全ての濃度において、細胞生存率の変化がなかったことを示す。対照的に、２つの既知の毒性化合物、オリゴマイシン及びＦＣＣＰ（カルボニルシアニドＰ−（トリフルオロメトキシ）フェニルヒドラゾン）は、細胞生存率の着実な低下を引き起こした。まとめると、これは、ルシアントリジンがマウス初代肝細胞に対して最大１００μＭの最終濃度まで細胞毒性効果を有さないことを示唆する。
【０２３８】
実施例１１
ルシアントリジンは、細胞内のアロステリックに機能する（allosteric drug）部位及び代謝産物（ＡＤａＭ）部位に変異を含有する複合体（Ｓ１０８Ａ）を活性化しない。
【０２３９】
ＡＭＰＫβ１／β２ダブルノックアウトＵ２−ＯＳ  Ｆｌｐ−Ｉｎ（商標）Ｔ−Ｒｅｘ（商標）細胞株は、Ｈｏｒｉｚｏｎ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ（Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，ＵＫ）によって生成された。細胞を遺伝子型解析し、ウエスタンブロットにより分析して、ＡＭＰＫβ１／β２の完全ノックアウトが存在することを確認した。本発明者らは、これらのＡＭＰＫβ１／β２ダブルノックアウト細胞を用い、ヒトβ１野生型（ＷＴ）又はβ１セリン１０８のアラニン変異（Ｓ１０８Ａ）の発現を再誘導した。この再誘導は、この細胞株に存在するＦｌｐ−Ｉｎ（商標）系（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）、及びβ１  ＷＴ又はβ１  Ｓ１０８Ａ変異体を発現している安定細胞を使用して、製造業者のプロトコルに従って達成した。β１サブユニットの再発現は、ウエスタンブロット分析によって確認された。
【０２４０】
β１  ＷＴ又はβ１  Ｓ１０８Ａ変異体を安定的に発現する細胞を、様々な濃度のルシアントリジンで処理し、ｐＡＣＣ  ＨＴＲＦ（Ｃｉｓｂｉｏ）アッセイ又はウエスタンブロット分析に供して、細胞溶解物中のＡＭＰＫ基質、ＡＣＣのリン酸化を求めた。ＬＩ−ＣＯＲ  ｏｄｙｏｓｅｙ系を使用してウエスタンブロットを定量し、ｐＡＣＣからの抗体シグナルをトータルＡＣＣで除算した比として示した。
【０２４１】
図１９及び図２０に示すように、ルシアントリジンは、β１  ＷＴを安定的に発現する細胞において、ｐＡＣＣを用量依存的に増加させることができた。対照的に、ルシアントリジンは、β１  Ｓ１０８Ａ変異体を発現する細胞においてｐＡＣＣを増加させることができなかった。この細胞データは、ルシアントリジンが組み換え型のα２β１γ１  Ｓ１０８Ａ複合体をアロステリックに活性化することができないことを示す、我々のインビトロデータと一致する。まとめると、我々は、インビトロ及び細胞において、ルシアントリジンが、ＡＭＰＫγサブユニット内のヌクレオチド結合部位とは別個のＡＭＰＫのＡＤａＭポケットに結合することにより、ＡＭＰＫを活性化することを示している。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【国際調査報告】
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