(57)【要約】本発明は、皮膚への局所適用のための化粧品組成物であって、生理学的に許容できる媒体中に、少なくとも一つの有効量の少なくとも一つの、ドッグローズ(すなわち、ロサ・カニーナ)の果実とは異なるエイジツの水性抽出物、特にEvanratまたはJardin de Granville(登録商標)のバラ種のエイジツの水性抽出物を含む化粧品組成物、および特に眼の輪郭部位において、皮膚への栄養素の供給を促進および／または改善、バリアー機能の強化および細胞外マトリックスの密集化させるためのその使用に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
皮膚への局所適用のための化粧品組成物であって、生理学的に許容できる媒体中に、少なくとも一つの有効量の少なくとも一つの、ドッグローズ(すなわち、ロサ・カニーナ)の果実とは異なるエイジツの水性抽出物、特にEvanratまたはJardin de Granville(登録商標)のバラ種のエイジツの水性抽出物を含む化粧品組成物。
【請求項２】
エイジツの水性抽出物が、組成物の総重量を基準に0.1重量%〜95重量%、特に0.1重量%〜20重量%、好ましくは0.5重量%〜10重量%、より好ましくは1重量%〜5重量%の原料物質の含有量で組成物中に存在することを特徴とする、請求項1に記載の化粧品組成物。
【請求項３】
化粧品組成物が、溶液状、エマルジョン状、漿液状またはゲル状、好ましくは眼の輪郭部位のための水性ゲル状であることを特徴とする、請求項1または2に記載の化粧品組成物。
【請求項４】
皮膚への栄養素の供給を促進および／または改善すること、表皮の凝集および／または分化を促進および／または改善すること、バリアー機能を促進および／または改善すること、細胞外マトリックスを密集化させることおよび／またはその分解を減少させること、皮膚、特に眼の輪郭部位の弾性および／または堅さを改善すること、眼の周りのくまおよび／またはたるみを防止および／または減少させること、皮膚、特に眼の輪郭部位の輝きおよび／または均一性を改善すること、水分を促進および／または改善すること、および／またはしわおよび／または細かい線の形成を防止および／または減少させることを目的とする化粧方法であって、請求項1から3のいずれか一項に記載の化粧品組成物を、皮膚、特に顔および／または首、好ましくは眼の輪郭部位に適用する化粧方法。
【請求項５】
眼の周りのくまおよび／またはたるみの防止および／または減少、および／または眼の周りの皮膚の輝きおよび／または均一性の改善のための化粧方法であって、請求項1から3のいずれか一項に定義の化粧品組成物を、眼の輪郭部位に適用することを含む、請求項4に記載の化粧方法。
【請求項６】
少なくとも一つの有効量の少なくとも一つの、ドッグローズの果実とは異なるエイジツの水性抽出物、特にEvanratまたはJardin de Granville(登録商標)のバラ種のエイジツの水性抽出物における非治療的化粧品としての使用であって、皮膚への栄養素の供給を促進および／または改善すること、表皮の凝集および／または分化を促進および／または改善すること、バリアー機能を促進および／または改善すること、細胞外マトリックスを密集化させることおよび／またはその分解を減少させること、皮膚、特に眼の周りの弾性および／または堅さを改善すること、眼の周りのくまおよび／またはたるみを防止および／または減少させること、皮膚、特に眼の周りの輝きおよび／または均一性を改善すること、水分補給を促進および／または改善すること、および／またはしわおよび／または細かい線の形成を防止および／または減少させることを目的とする物質としての使用。
【請求項７】
請求項1から3のいずれか一項に定義の化粧品組成物、および
顔、特に眼の周りの皮膚への局所適用に適した塗布具を含む化粧品セット。
【請求項８】
美容的に許容できる極性溶媒を用いて得られる、EvanratまたはJardin de Granville(登録商標)のバラ種のエイジツの水性抽出物。
【請求項９】
1重量%〜2重量%のエイジツ(活性成分)、97.5%〜98.5%の水、特に1%のエイジツ(活性成分)、97.5%の水、0.5%のクエン酸および適量100%の防腐剤を含むことを特徴とする、請求項8に記載のEvanratまたはJardin de Granville(登録商標)のバラ種のエイジツの水性抽出物。
【請求項１０】
特にフルクトース、グルコースを含み、場合によりスクロースを含む、1〜3%の範囲の総糖含有量の、請求項8に記載のEvanratまたはJardin de Granville(登録商標)のバラ種のエイジツの水性抽出物。
【請求項１１】
以下の工程を含む抽出方法によって得れれる、請求項8に記載のEvanratまたはJardin de Granville(登録商標)のバラ種のエイジツの水性抽出物：
a)新鮮なエイジツを収穫し、場合により-20℃で保存する工程
b)エイジツを粉砕する工程
c)好ましくは酸性水中、5〜30%、特に10%の植物原料を、特に10〜60℃の範囲の温度、具体的には30℃で混合する工程
d)混合物の温度を徐々に上昇させる、具体的には30℃から100℃まで、特に50〜70℃まで、さらには60℃にまで徐々に上昇させる工程
e)場合により撹拌下で抽出する工程
f)液体／固体の分離工程
g)場合により防腐剤を添加する工程
h)特に0.22μmまでに濾過する工程
i)場合により、必要に応じて窒素下で包装する工程
j)場合により+4℃で保管する工程。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、少なくとも一つのエイジツの水性抽出物、特にJardin de Granville(登録商標)を含む化粧品組成物、および特に眼の輪郭部位における皮膚への栄養素の供給の促進および／または改善、バリアー機能の強化および細胞外マトリックスの密集化のためのその使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
栄養素の質が皮膚の健康に反映され、そして特定の皮膚疾患は具体的には特定の微量栄養素の欠乏に関連している事実が認められている(Park K. Role of micronutrients in skin health and function. Biomol.Ther. 2015; 23; 207-217)。
【０００３】
皮膚における微量栄養素のバランスは、実際には、疲労、ストレス、酸化的効果、紫外線曝露および／または細胞の老化などの外部および／または内部要因によって影響を受けることがある。
【０００４】
具体的には、疲労やストレスに敏感な対象の観察事項として：
-より低いレベルの水分(この差は加齢に伴って大きくなる)；
-必須脂肪酸の欠如(オメガ3およびオメガ6);
-セラミドを構成する長鎖脂肪酸の不足(バリアー機能の低下)；および／または
-より低い含有量のスクアレン(皮膚表面の保護性皮脂膜(hydrolipidic film)の改変)、が挙げられる。
【０００５】
特に顔の最も動く部位である眼の輪郭は、細胞から2倍のエネルギーを必要とする。そして、本出願人は、この活動的で脆弱な部位の疲労が、輝きの喪失、および目の下のたるみやくまの存在を導く微量栄養素の不均衡を引き起こすことを確認した。
【０００６】
これらの観察事項は、特に微量栄養素に関する不均衡を強調している。
【０００７】
これらの栄養素または栄養成分は、皮膚レベルで、特にバリアー機能の再構築、皮膚の水分に有利な環境の確立に関与し、これによって、長期的には、栄養豊富で早期老化の影響を受けにくい皮膚を実現することが知られている。
【０００８】
微量栄養素は、皮膚(常に変動する臓器)の発達と形成、表皮の生理学的再生および皮膚のその環境への適応(保護性エンベロープの役割)に必須である。それらはそれぞれ、皮膚代謝の多くの側面をカバーする相補的機能という特定の役割を有し(Park K. 皮膚の健康と機能における微量栄養素の役割(Role of micronutrients in skin health and function). Biomol.Ther. 2015, 23: 207-217; Polefka T. ミネラル塩と皮膚の相互作用：文献調査 (Interaction of mineral salts with the skin: a literature survey). Int J. Cosmetic. Sci. 2012, 34: 416-423; Boelsma E. 栄養スキンケア：微量栄養素と脂肪酸の健康への影響 (Nutritional skin care: health effects of micronutrients and fatty acids). Am. J. Clin. Nutr. 2001, 73: 853-864; Winkler P. ミネラルと栄養と肌の肌-アンチエイジング、美容、健康肌のためのレッスン (Minerals and the skin in Nutrition and the skin-Lessons for anti-aging, beauty and healthy skin). 2011, Apostolos Papas Editor; Chap 7: 91-109)、それらには主として、以下のものがある：
-抗酸化的保護へ関与するもの(ビタミンA、E、ビタミンC、亜鉛、セレン)；
-脂質、炭水化物またはタンパク質の代謝に必須なもの(コラーゲン合成のためのビタミンB3、B5、ビタミンC)、エネルギー生産に必須なもの(ビタミンB2、マグネシウム)；
-酵素の適切な機能に、その活性に必要な金属イオンを提供することによって寄与するもの(銅、マンガン、セレン、亜鉛、鉄)；
-表皮の分化を調節するもの(カルシウム)；
-膜電位の維持、体液のバランスに関与し、皮膚の水分補給に役割を果たすもの(カリウムおよびナトリウム);
-皮膚の弾性および柔軟性の維持に役に立つ皮脂膜の強化を補助するもの(必須脂肪酸)。
【０００９】
ビタミン(A、E、C)および／または必須脂肪酸を使用すると、皮膚を対象とする化粧品組成物、特に保護および／または栄養効果のための組成物が調製できることが知られているが、皮膚の栄養バランスの維持および／または促進を可能にし、その結果、特に眼の輪郭部位の水分、皮膚バリアーおよび／または皮膚再生を刺激することを可能にする新規な化合物が依然として必要とされている。
【００１０】
眼の輪郭は、顔の他の部位と比較して、特別な特徴を有する：
-この部位の可動性を促進する皮膚の薄さ(基底層およびトゲのある層(角質層)が顔の残りの部分の皮膚よりも少ない)；
-古い肌、乾燥肌または光に晒された皮膚よりも大きな弛み(もしくは弛緩)(弾力性、弾性繊維、コラーゲンの低下)；
-くま(下眼瞼の着色);および
-年齢とともに増加するたるみ(眼瞼液、弾性の損失...)。
【００１１】
さらに、この部位は筋肉が合計22個と豊富であり、そのうち14個はほぼ10秒ごとに活性化され、角膜の水分を持続的に確保している。これらの不断の動きは、繊維をより急速に劣化させ、堅さを低下させる。
【００１２】
そのため、特に眼の輪郭部位において水分を維持し、皮膚代謝を刺激できる栄養素を提供することを可能とする新規な化合物の探索が行われている。「ローズヒップ(rose hip)」とも称される、ドッグローズ(dog rose)(すなわち、ロサ・カニーナ(Rosa canina))の果実の抽出物を、顔の保湿または抗老化のための組成に使用することは、従来から知られている。
【００１３】
しかしながら、本出願人は本発明において、皮膚細胞のエネルギーに関与するATPの合成、およびバリアー機能の強化や細胞外マトリックスの密集化に関与するいくつかの遺伝子発現の刺激に対する、ドッグローズ(すなわち、ロサ・カニーナ)のエイジツとは異なるエイジツの(極性溶媒を用いて得られる)水性抽出物のインビトロ効果、特に、ジャルダン・デ・グランヴィル(登録商標)(Jardin de Granville(登録商標))のエイジツの水性抽出物のインビトロ効果を実証している。
【発明の概要】
【００１４】
本発明の第一の対象は、皮膚への局所適用のための化粧品組成物であって、生理学的に許容できる媒体中に少なくとも一つの有効量の少なくとも一つのエイジツの水性抽出物、特にEvanratまたはJardin de Granville(登録商標)のバラ種の水性抽出物を含む化粧品組成物に関する。
【００１５】
本発明の他の対象は、皮膚への栄養素促の供給を促進および／または改善すること、表皮の凝集および／または分化を促進および／または改善すること、バリアー機能を促進および／または改善すること、細胞外マトリックスを密集化させることおよび／またはその分解を減少させること、皮膚、特に眼の輪郭の弾性および／または堅さを改善すること、眼の周りのくまおよび／またはたるみを防止および／または減少させること、皮膚、特に眼の輪郭部位の輝きおよび／または均一性を改善すること、水分補給を促進および／または改善すること、および／またはしわおよび／または細かい線の形成を防止および／または減少させることを目的とする化粧方法であって、本発明によって定義される化粧品組成物を、皮膚、特に顔および／または首、好ましくは眼の輪郭部位に適用することを含む方法に関する。
【００１６】
特定の好ましい実施態様によれば、本発明は、眼の輪郭部位のくまおよび／またはたるみを防止および／または減少させること、および／または皮膚、特に眼の輪郭の輝きおよび／または均一性を改善することを目的とする化粧方法であって、本発明によって定義される化粧品組成物を、皮膚、特に顔および／または首、好ましくは眼の輪郭部位に適用することを含む方法に関する。
【００１７】
また、本発明は、少なくとも一つの有効量の少なくとも一つの本発明によるエイジツの水性抽出物における非治療的化粧品としての使用であって、皮膚への栄養素の供給を促進および／または改善すること、表皮の凝集および／または分化を促進および／または改善すること、バリアー機能を促進および／または改善すること、細胞外マトリックスを密集化させることおよび／またはその分解を減少させること、皮膚、特に眼の周りの弾性および／または堅さを改善すること、眼の周りのくまおよび／またはたるみを防止および／または減少させること、皮膚、特に眼の周りの輝きおよび／または均一性を改善すること、水分補給を促進および／または改善すること、および／またはしわおよび／または細かい線の形成を防止および／または減少させることを目的とする物質としての使用に関する。
【００１８】
特定の好ましい実施態様によれば、本発明は、本発明による少なくとも一つの有効量の少なくとも一つのエイジツの水性抽出物における非治療的化粧品としての使用であって、眼の周りのくまおよび／またはたるみを防止および／または減少させること、および／または皮膚、特に眼の輪郭部位の輝きおよび／または均一性を改善することを目的とする物質としての使用に関する。
【００１９】
「皮膚への栄養素の供給を促進および／または改善する」とは、本発明のエイジツの抽出物に存在する微量栄養素、例えばカリウムおよびカルシウム(微量栄養素)、および植物中の糖質類、例えばフルクトースおよびグルコース(主要栄養素)の供給を促進することを意味する。この皮膚細胞へのエネルギー(ATP合成)の供給は、皮膚細胞の代謝の促進に役に立つ。
【００２０】
「細胞外マトリックスを密集化させ、および／またはその分解を減少させる」とは、組織構造ならびに細胞分化および増殖の調節において必須役割を果たす細胞外マトリックスのタンパク質(例えばIおよびIII型のコラーゲンおよびエラスチンの線維状タンパク質)の発現を促進および／または刺激することを意味する。
【００２１】
「皮膚、特に眼の輪郭の輝きおよび／または均一性を促進する」とは、特に、皮膚の微小循環を改善し、および／または皮膚の血管透過性を減少させることで、皮膚の顔の肌のより良い均一性および皮膚の着色の欠陥(例えば眼の輪郭のリングなど)の減少を実現することを意味する。
【発明を実施するための形態】
【００２２】
本発明の詳細な説明
したがって、本発明は、皮膚への局所適用のための化粧品組成物であって、生理学的に許容できる媒体中に、少なくとも一つの有効量の少なくとも一つのエイジツの水性抽出物、特にEvanratまたはJardin de Granville(登録商標)のバラ種の水性抽出物を含む化粧品組成物に関する。
【００２３】
エイジツの水性抽出物は、所望の効果を得るための有効量で本発明の化粧品組成物中に存在する。
【００２４】
特に、これは、組成物の総重量を基準に0.1重量%〜95重量%、特に0.5重量%〜80重量%の範囲の原料物質の含有量で存在する。第一の実施態様によれば、これは、組成物の総重量を基準に50重量%〜95重量%、特に60重量%〜90重量%の範囲の原料物質の含有量で存在する。他の特定の実施態様によれば、これは、組成物の総重量を基準に0.1重量%〜20重量%、好ましくは0.5重量%〜10重量%、より好ましくは1重量%〜5重量%の範囲の原料物質の含有量で存在する。具体的な例は以下に示す。
【００２５】
植物原料
本発明の抽出物は、エイジツ(バラの果実)の水性抽出物である。本発明によれば、用語「バラの抽出物」、「ローズブッシュの(バラの木)抽出物」または特にエバンラット(Evanrat)もしくはジャルダン・デ・グランヴィル(Jardin de Granville)(登録商標)のバラ種の抽出物」は、互換性をもって使用される。
【００２６】
当業者は、有機環境および農業様式によって特性が保存されている、選別されたバラを選択するのが好ましい。
【００２７】
本発明のバラ属においては、特にロサ・ダマスケナ(Rosa damascena)、ロサ・ムルティフローラ(Rosa multiflora)、ロサ・ ケンティフォリア(Rosa centifolia)、ロサ・ルゴサ(Rosa rugosa)、ロサ・キネンシス(Rosa chinensis)、ロサ・モスカータ(Rosa moschata)、ロサ・アルバ(Rosa alba)、ロサ・アルピナ(Rosa alpina)、ロサ・シナモメア(Rosa cinnamonea)、ロサ・ガリカ(Rosa gallica)、ロサ・レペンス(Rosa repens)、ロサ・ルブリフォリア(Rosa rubrifolia)、ロサ・ルビギノーサ(Rosa rubiginosa)、ロサ・センパヴィエンス(Rosa sempervirens)、ロサ・スピノシシマ(Rosa spinosissima)、ロサ・スティローサ(Rosa stylosa)、ロサ・トメントーサ(Rosa tomentosa)、またはロサ・ビローサ(Rosa villosa)を具体的なものとして挙げることができるが、ただしロサ・カニーナ(ドッグローズ(dog rose))の種は除かれる。
【００２８】
特定の好ましい実施態様によれば、Evanratまたは「Jardin de Granville(登録商標)」のバラ種のエイジツの水性抽出物が使用される。
「Jardin de Granville(登録商標)」のローズブッシュ(バラの木)またはローズ(バラの花)は、「ローズ・アンシエン・アンドレ・イブS.A.S.(Roses anciennes Andre Eve S.A.S.)」により独占的に提供され、種属名「Rosa L.」、品種名「EVANARAT」としてNo.20110345の下、植物育成者権(plant breeder’s rights)によって保護されている交雑種である。このローズブッシュはモダーン・ハイブリッドのグループに属し、5月から10月までバラの花にいつまでも覆われ、優れた開花特性を示す。。
【００２９】
したがって、本発明の特定の好ましい実施態様によれば、本発明の化粧品組成物は、EvanratまたはJardin de Granville(登録商標)のバラ種のエイジツ(バラの果実)の水性抽出物を含む。
【００３０】
本発明によるエイジツは、ローズヒップ(rose hip)と称されるドッグローズ(すなわち、ロサ・カニーナ(Rosa canina))の果実とは異なる。
【００３１】
本発明によるエイジツは、ローズブッシュ上で花を枯れさせることによって得られる。エイジツは、その成熟度によって3種類に区別することができる：
-10月に収穫され、9月の二回目の開花から生じる「緑」の果実；
-10月に収穫され、8月の二回目の開花から生じる「中間」の果実；
-10月に収穫され、6月の最初の開花から生じる「完熟」の果実(赤橙色)。
【００３２】
本発明によれば、エイジツはそれぞれ、「緑」の果実、「中間」の果実、「完熟」の果実、およびこれらの混合物から選択されて使用される。
【００３３】
本発明の特定の実施態様によれば、「緑」の果実が使用される。
【００３４】
本発明の別の特定の実施態様によれば、「中間」の果実が使用される。
【００３５】
本発明のさらに別の特定の実施態様によれば、「完熟」の果実が使用される。
【００３６】
本発明では、別の特定の実施態様によれば、「中間」および「完熟」の果実が使用される。
【００３７】
緑、中間および／または完熟の果実は、以下の説明ではバラの「果実」と称される。
【００３８】
これらのエイジツは通常、10月に収穫され、即座に−20℃で保存する。
【００３９】
キャップ、毛、果肉を含む果物全体を使用してもよく、または果肉のみを使用してもよい。
【００４０】
これらのエイジツは、単糖類(フルクトース、グルコース、スクロース)、有機酸(クエン酸、リンゴ酸)、ポリフェノール(カテキン)、ビタミンC、アミノ酸(主に、アスパラギン酸およびグルタミン酸)、鉱物(灰、カリウム、カルシウム)、およびカロチノイドを含む。
【００４１】
特に、カルシウムは表皮の分化を改善し、皮膚の構造を強化し、カリウムは皮膚の水分を増幅させ、エネルギー同化を促進する。植物の糖類(フルクトース、スクロース、サッカロース)は、皮膚細胞にエネルギーを供給するものである。
【００４２】
本発明のエイジツは、収穫し、直接に冷凍することができ、これらは、「湿った」または「新鮮な」冷凍果実と称される。別の実施態様によれば、本発明のエイジツは、収穫し、冷凍する前に、乾燥(凍結乾燥)することができ、これらは、冷凍された「凍結乾燥」果実と称される。
【００４３】
特定の好ましい実施態様によれば、「湿った」または「新鮮な」冷凍果実が抽出に使用される。
【００４４】
本発明によるエイジツの水性抽出物は、極性天然化合物に濃縮される抽出物である。本発明によるエイジツの水性抽出物はバラ水とは異なる。これは、pH調整剤が添加されるかまたは添加されない水性(極性)溶媒の存在下、天然のエイジツ化合物を抽出し、水溶液または濃縮物の形態で製剤中に使用されるエイジツの抽出物であり、ここで、この濃縮物の溶媒は抽出溶媒および／または追加溶媒であってよい。
【００４５】
特定の実施態様によれば、本発明によるエイジツの水性抽出物はさらに、本発明のバラの水性抽出物の総量の0.01〜1%、好ましくは0.01〜0.1%の少ない割合でバラの花の抽出物を含む。この実施態様において、元の植物原料(植物原料の総荷重の10%)は、9.99％の果実あたり0.01％の花〜9％の果実あたり1％の花の割合で、エイジツおよびバラの花を含む。
【００４６】
本発明者らは、本発明によるエイジツの水性抽出物には、皮膚のために良い微量栄養素および天然化合物が含まれていることを実際に証明した。
【００４７】
本発明によるエイジツの水性抽出物中に存在する目的の天然極性化合物として、以下の物質について特に言及することができる：
-糖類(グルコース、フルクトース、場合により、サッカロース)およびビタミンC、皮膚のエネルギー過程の中心、
-有機酸類(クエン酸、リンゴ酸)、ポリフェノール類(カテキン)、抗ラジカル活性の担体、
-鉱物類、皮膚保護および修復システムと組み合わせて、および
-アミノ酸類、細胞において生命力の源、タンパク質の構成物質。
【００４８】
本発明によるエイジツの水性抽出物は、当業者に知られているさまざまな方法、特に以下に記載の方法によって得ることができる。
【００４９】
特定の好ましい実施態様によれば、Evanratの品種、好ましくはJardin de Granville(登録商標)のエイジツ、好ましくは直接-20℃に冷凍された新鮮な果実が、以下に記載の本発明に適用される抽出方法に植物原料として使用される。
【００５０】
エイジツの水性抽出物
バラの用語「水性抽出物」、「極性抽出物」または「親水性抽出物」は、本明細書では互換的に使用される。エイジツの水性抽出物は、美容的に許容できる極性溶媒を用いて得られる。
【００５１】
本発明による用語「バラの水性抽出物」とは、特に、エイジツの極性(親水性)化合物が極性溶媒中に可溶化および／または抽出されたことを意味する。
【００５２】
有利には、本発明の抽出物は、安全で高品質の製品／抽出物を確保しつつ、エネルギー消費を減少させるだけではなく、代替溶媒および再生可能な植物資源を使用するための抽出方法の発見および設計に基づいた「エコ抽出」によって得られる。エコ抽出は、6つの主要な原則に基づく(Farid Chemat, Dunod, 2010, Eco-Extraction du vegetal):
-品種選択と再生可能な植物資源の利用によってイノベーションを促進する；
-グリーン溶媒として知られている代替溶媒、主に農業資源からのものを選ぶ；
-革新的な技術の支援によってエネルギー消費を減少させ、エネルギー回収を促進する；
-廃棄物の代わりに副産物の作成を奨励し、有機または農業精製経路を統合する；
-技術革新によって単位操作を減少させ、安全・堅牢・管理されたプロセスを促進する；
-未変性、生分解性、汚染物質のない、とりわけ「エコ抽出」値を持つ製品を選ぶ。したがって、極性緑色溶媒として水を使用することが有利である。
【００５３】
抽出工程自体の前に、果実は乾燥および／または粉砕されてもよい。別の実施態様によれば、果実は湿った状態で使用され、次に粉砕される。
【００５４】
特定の実施態様によれば、果実は、抽出に前に、例えば、当業者に知られている方法によって、モルタル、クライオグラインダー(cryo-grinder)、ミキサー、従来のミルまたは遠心分離機を用いて粉砕される。
【００５５】
抽出物は、植物原料を粉砕する工程、粉砕された原料物質を極性溶媒に分散させる工程、濾過によって可溶性相と不溶性相を分離する工程、濃縮、および可能な再溶解の工程を含む、当業者に知られている様々な抽出方法によって調製することができる。
【００５６】
本発明によれば、用語「極性溶媒」とは、10に相当する、またはそれ以上の極性指数値またはヒルデブラント(Hildebrand)合計溶解度パラメータを有する溶媒を意味する。極性指数は、分子の性質を多少強調する(溶解度と状態変化の)熱力学量に基づいて計算される量である。例として、次の溶媒は、以下のヒルデブラント(Hildebrand)合計溶解度パラメータを有する：
-7.3のヘキサン(非極性溶媒)、
-11.6のブチレングリコール、12.7のエタノールおよび16.5のグリセロール(極性溶媒)、
-23.4の水H2O(極性溶媒)。
【００５７】
好ましい極性溶媒は、少なくとも一つのO-H型の極性共有結合を含有する化合物からなるものである。特に好ましい極性溶媒として、水、C1-C4アルコール、例えばエタノール、グリコール、例えばエチレングリコール、グリセロール、ブチレングリコールおよびプロピレングリコール、ならびにそれらの混合物から選択される一つの溶媒または混合物が使用される。有利には、水、エタノールまたはこれらの混合物が使用される。有利には、水が抽出溶媒(エコ-抽出)として使用される。
【００５８】
特に、植物原料は、水を含む溶媒を用いて、pH調整剤(例えば有機酸、クエン酸、塩酸)を使うか、使わず、いずれかの追加の溶媒を使わずに、水100ｇあたり10ｇの植物原料の割合で抽出する(10%の植物原料の荷重と称される)。植物原料の荷重は5〜30%、好ましくは10%であり得る。
【００５９】
抽出は、高温下で還流によって行ってもよく、室温下で浸漬によっておこなってもよい。
【００６０】
抽出は、超音波、マイクロ波、押出、パルス電場および／または凍結抽出などのよく知られている物理化学的技術を用いて行うことができる。
【００６１】
超音波抽出の場合、抽出の持続時間は2〜10分の範囲、特に5分であり得る。
【００６２】
上記の技術のうちの別の技術を用いた抽出の場合、持続時間は、一般に、特に60℃で1時間〜10時間、特に2〜6時間の範囲、または4時間であり得る。
【００６３】
抽出方法は、有利には、枯渇した植物原料から液相を分離するための濾過工程を含む。当業者は、特に0.1μｍ〜0.5μｍ、特に0.2〜0.3μｍの濾過直径の適切な濾過ふるいを選択するであろう。
【００６４】
抽出と濾過の周期を複数回繰り返すことで、抽出溶媒と親和性がある物質を植物原料から枯渇させることができる。
【００６５】
抽出方法では、抽出溶媒を部分的または完全に除去する工程によってさらに完了することができる。
【００６６】
抽出物は、有利には、溶媒または抽出溶媒混合物の一部を除去することによって濃縮することができる。
【００６７】
したがって、かなりの量の有機溶媒を含まない水性濃縮物を得ることができ、あるいは、抽出溶媒を全て除去することにより、乾燥残渣を得ることができる。
【００６８】
あるいは、抽出工程の生成物は、凍結乾燥させるか、または噴霧して粉末を形成することができる。
【００６９】
特に好ましい実施態様によれば、本発明によるエイジツの水性抽出物は、抽出収量を増加させ、通常植物の汁に含有される水溶性生成物、特に皮膚の微量栄養に有益な糖類、鉱物塩類、タンパク質を抽出物に濃縮させる方法によって得る。
【００７０】
したがって、本発明の特定の好ましい実施態様によれば、エイジツの水性抽出物は、以下の工程を含む抽出方法によって得られる：
a)新鮮なエイジツを収穫し、場合により-20℃で保存する工程
b)エイジツを粉砕する工程
c)好ましくは酸性水(例えばクエン酸)中、5〜30％、特に10％の植物原料を、特に10℃〜60℃の範囲の温度、具体的には30℃で混合する工程
d)混合物の温度を徐々に上昇させる、具体的には30℃から100℃まで、特に50〜70℃まで、さらには60℃にまで徐々に上昇させる工程
e)場合により撹拌下で抽出する工程
f)液体／固体の分離工程
g)場合により防腐剤を添加する工程
h)特に0.22μmまでに濾過する工程
i)場合により、必要に応じて窒素下で包装する工程
j)場合により+4℃で保管する工程。
【００７１】
エイジツは、「緑」の果実、「中間」の果実、「完熟」の果実、およびこれらの混合物から選択される。
【００７２】
特定の実施態様によれば、「緑」の果実が使用される。
【００７３】
別の実施態様によれば、「中間」および／または「完熟」の果実が使用される。
【００７４】
工程ｇ)の防腐剤として、安息香酸ナトリウム、ソルビン酸カリウム、フェノキシエタノールおよびこれらの混合物について特に言及することができる。
【００７５】
特定の好ましい実施態様によれば、本発明によるエイジツの水性抽出物は、上記の抽出方法により得られるEvanratまたはJardin de Granville(登録商標)のバラ種の果実の水性抽出物であり、言い換えれば、「エイジツの水性抽出物」として知られており、1重量%〜2重量%のエイジツの抽出物の乾燥物質(活性成分)、97.5%〜98.5%の水を含む。
【００７６】
特定の好ましい実施態様によれば、本発によるエイジツの水性抽出物は、上記の抽出方法により得られるEvanratまたはJardin de Granville(登録商標)のバラ種の果実の水性抽出物であり、言い換えれば、後述する具体例において「エイジツの水性抽出物」と称されており、1重量%〜2重量%のエイジツの抽出物の乾燥物質(活性成分)、97.5%〜98.5%の水、0.5%のクエン酸および適量の防腐剤を含む。
【００７７】
特定の実施態様によれば、1重量%〜2重量%のエイジツおよびバラの花(9.99の果実あたり0.01の花の質量比で)の抽出物の乾燥物質(活性成分)、97.5%〜98.5%の水、0.5%のクエン酸および適量の防腐剤を含む。
【００７８】
本発明の特定の好ましい実施態様によれば、本発明による化粧品組成物は、エイジツの水性抽出物が、特に10:90(植物抽出物:極性溶媒)の重量比で極性溶媒中に抽出物を含むことを特徴とする。特に上記の方法により得られる本発明によるエイジツの水性抽出物は、、有利には、微量栄養素(カルシウム、カリウム)および主要栄養素、例えば植物中の糖質(グルコースおよびフルクトース、および場合によりサッカロース)を含む。
【００７９】
特定の好ましい実施態様によれば、本発明によるエイジツの水性抽出物、特にEvanratまたはJardin de Granville(登録商標)のバラ種は、300〜1000ppm、特に400〜800ppmの範囲の総鉱物含有量を含み、特にカルシウムおよびカリウムを含む。
【００８０】
本出願では、本発明によるエイジツの水性抽出物の鉱物組成物(カルシウム+カリウム)が、後述するバラの花の「凍結抽出物」の水性抽出物よりはるかに高い(610ppmvs220ppm)ことを示した。
【００８１】
特定の好ましい実施態様によれば、本発明のエイジツの水性抽出物、特にEvanratまたはJardin de Granville(登録商標)のバラ種は、特にフルクトースおよびグルコースを含み、場合によりスクロースを含む、1〜3%の総糖含有量を有する。
【００８２】
本出願人はまた、本発明によるエイジツの糖が豊富な植物水性抽出物を、培養されるケラチン生成細胞に0.3％で適用することにより、＋21％のATP合成増加を得ることを可能にすることを示した。
【００８３】
最終化粧品組成物中のエイジツの水性抽出物の含有量は、一般に組成物の総重量を規準に0.1重量%〜95重量%、特に0.5重量%〜80重量%の原料物質である。第一の実施態様によれば、これは、組成物の総重量を基準に、50重量%〜95%、特に60重量%〜90重量%の範囲の原料物質の含有量で存在する。別の特定の実施態様によれば、これは、組成物の総重量を機中に、0.1重量%〜20重量%、好ましくは0.5重量%〜10重量%、より好ましくは1重量%〜5重量%の範囲の原料物質の含有量で存在する。
【００８４】
1重量％のエイジツの乾燥抽出物を含む原料物質の場合、これは、組成物の総重量を基準に、0.001重量％〜0.02重量％、特に0.005重量％〜0.01重量％、特定の実施態様においては、0.01重量％〜0.05重量％の乾燥(活性)物質に相当する。
【００８５】
ガレヌス
本発明の化粧品組成物は、皮膚への局所適用に適当ないずれかのガレヌス状、例えば漿液(セラム)状、水中油型エマルジョン状、油中水型エマルジョン状、複合エマルション状または水性ゲル状である。
【００８６】
本発明の組成物は、優先的に顔に適用することを目的とし、例えば、顔、特に眼の輪郭部位のためのローション状、ケアクリーム状、漿液状、ファシアール・フルイド(facial fluid)状、ケア・ゲル状で提供される。特定の実施態様によれば、組成物は、眼の輪郭に適用することを目的とし、漿液状、クリーム状または眼の輪郭用ゲル状、優先的には眼の輪郭のための水性ゲル状で存在する。
【００８７】
特定の実施態様によれば、本発明による化粧品組成物は眼の輪郭のための水性ゲル状で存在する。このゲル状のガレニック製剤は、本発明の組成物を以下に説明するように塗布具(applicator)を用いて皮膚に適用する場合に塗布具に接触することで増幅されることができ、たるみおよびくまの除去に有利な新鮮な効果をもたらすため、眼の輪郭に特に適する。
【００８８】
水相は、典型的には、上記の組成物の総重量を基準に1重量%〜99重量%で存在する。
【００８９】
水相
本発明による組成物の水相は水を含み、場合により水溶性溶媒を含む。
【００９０】
本発明による「水溶性溶媒」とは、室温で液体であり、水に混合できる化合物(25℃、大気圧で50重量%超の重量の水中の混合性)を意味する。特に言及すべきなのは
-C1-C5低級モノアルコール、例えばエタノール、イソプロパノールおよびこれらの混合物;
-C2-C8グリコール、例えばエチレングリコール、プロピレングリコール、1,3-ブチレングリコール、ジプロピレングリコール、およびこれらの混合物;
-C2-C32ポリオール、例えばポリグリセロール、ポリエチレングリコール、およびこれらの混合物、およびこれらの混合物である。
【００９１】
また、親水性ゲル化剤、抗酸化剤、防腐剤、およびこれらの混合物を含んでもよい。親水性ゲル化剤として、INCI名「カルボマー」または市販用の製品「Carbopol(登録商標)」などのアクリル酸ポリマー、アクリル酸とメタクリル酸のコポリマー、カルボキシビニルポリマー、アクリル系またはポリウレタン系会合性増粘剤、多糖ゲル化剤、例えばアルギン酸塩、天然ガムまたは変性ガム、例えばザンサンガム、カラギーナンガム、寒天ガム、グアーガム、ジェランガム、キトサン、マンナン、プルラン、セルロース誘導体、ゼラチン、ペクチン、鉱物ゲル化剤、例えばベントンまたは変性シリカ、およびこれらの混合物、を言及することができる。
【００９２】
天然ガムまたは変性ガムとは、水性媒体中で水和して粘性のある溶液または分散液を形成する、場合により変性される多糖を意味する。天然ガムには、海藻抽出物、植物滲出物、植物の種子または根から抽出されるガム、微生物発酵によって得られたものなどが含まれる。変性ガムまたは半合成ガムには、セルロースおよびデンプン誘導体、ならびに一般に、すべての天然ガムの誘導体が含まれる。
【００９３】
特定の実施態様によれば、本発明の化粧品組成物は、少なくとも１つのアクリルポリマー、特にアクリル酸ポリマーまたは、アクリル酸とメタクリル酸のコポリマーの存在によってゲル化された水相を含む。
【００９４】
アクリルポリマーの例として、特に以下のものを言及することができる：
-Carbopol 980という名前で市販されているINCI名「カルボキシビニルポリマー」のポリマー；
-「SepinovTM EMT 10」という名前でSEPPICによって市販されているINCI名「アクリル酸ヒドロキシエチル／アクリロイルジメチルタウリンナトリウムコポリマー」のポリマー；
-LecigelTMという名前でLucas Meyer Cosmeticsによって市販されているINCI名「アクリル酸ナトリウムコポリマーおよびレシチン」のポリマー、
およびこれらの混合物。
【００９５】
特定の好ましい実施態様によれば、アクリル酸とメタクリル酸のコポリマー、特にLecigelTMという名前でLucas Meyer Cosmeticsによって市販されているINCI名「アクリル酸ナトリウムコポリマーおよびレシチン」のポリマーが使用される。
【００９６】
別の特定の実施態様によれば、「SepinovTM EMT 10」という名前でSEPPICによって市販されているINCI名「アクリル酸ヒドロキシエチル／アクリロイルジメチルタウリンナトリウムコポリマー」のポリマーが使用される。
【００９７】
本発明の化粧品組成物中の親水性ゲル化剤の含有量は、上記の組成物の総重量を基準に0.5重量%〜5重量%、特に0.7重量%〜4重量%、好ましくは0.9重量%〜3重量%、より好ましくは1重量%〜2重量%である。
【００９８】
脂肪相または油相
本発明の化粧品組成物はまた、脂肪(固形脂肪)または油相を含み得る。
【００９９】
「油相」とは、互いに混合できる油または油の混合物を意味する。「油」とは、本発明の意味で、水に溶解せず、25℃、0.1MPaで液体であり、好ましくは非揮発性であり、25℃、0.1MPaでゼロでない2.6Pa未満の蒸気圧、好ましくは0.13Pa未満の蒸気圧を有する脂肪性物質を意味する。
【０１００】
本発明による油相は、炭化水素、シリコーン、フッ素化または非フッ素化油、およびこれらの混合物を含み得る。
【０１０１】
これらの油は、揮発性油または非揮発性油、植物油、鉱物油または合成油であり得る。
【０１０２】
本発明によれば、「炭化水素油」とは、主に水素原子および炭原子を含有する油を意味する。
【０１０３】
本発明によれば、「シリコーン油」とは、少なくとも一つのケイ素原子、特に少なくとも一つのSi-O基を含有することを意味する。
【０１０４】
本発明によれば、「フッ素化油」とは、少なくとも一つのフッ素原子を含有する油を意味する。
【０１０５】
非揮発性炭化水素油類として、特に炭化水素油、植物由来の炭化水素油、C10-C4合成エーテル、C10-C40合成エステル、C12-C26脂肪アルコール、C12-C22高級脂肪酸、およびこれらの混合物について言及することができる。
【０１０６】
非揮発性シリコーン油として、特にフェニル化シリコーン油、非フェニル化シリコーン油、およびこれらの混合物について言及することができる。
【０１０７】
油類は、組成物の総重量を基準に0.01重量%〜95重量%の範囲の含有量で本発明の組成物中に存在し得る。特定の実施態様によれば、油類は、組成物の総重量を基準に10重量%相当またはそれ未満、特に5重量%相当またはそれ未満、さらには1重量%相当またはそれ未満の含有量で存在する。特定の実施態様によれば、本発明の化粧品組成物は、ゲル化剤であるLecigelTMにより提供されるレシチン(リン脂質)などの成分によって提供される可能性のある親油性化合物の他には、油類を含まない。
【０１０８】
脂肪相または油相はまた、親油性ゲル化剤、膜形成ポリマー、界面活性剤、抗酸化剤およびこれらの混合物を含み得る。
【０１０９】
特定の実施態様によれば、本発明の化粧品組成物は、水相、アクリル酸のポリマー、多糖類およびこれらの混合物から選択される少なくとも一つの親水性ゲル化剤を含む水性ゲル状である。
【０１１０】
特定の実施態様によれば、化粧品組成物は、特に眼の輪郭のための水性ゲル状であり、少なくとも以下の物質を含む：
-特に組成物の総重量を基準に1重量%〜10重量%の範囲の含有量の本発明によるエイジツの水性抽出物、特に上記のEvanratまたはJardin de Granville(登録商標)のバラ種の果実の水性抽出物；
-組成物の80重量%〜99重量%で存在する、特にアクリル酸ポリマー類、多糖類およびこれらの混合物から選択される少なくとも一つの親水性ゲル化剤を含む水相、および
-組成物の2重量%未満で存在する油相。
【０１１１】
特定の実施態様によれば、本発明の化粧品組成物は、EvanratまたはJardin de Granville(登録商標)のバラ種のバラ抽出物以外のバラ抽出物は含まない。
【０１１２】
特定の実施態様によれば、本発明の化粧品組成物は、バラの花の水性抽出物、バラの花の油性抽出物、およびこれらの混合物から選択されるEvanratまたはJardin de Granville(登録商標)のバラ種の少なくとも一つの他のバラ抽出物、好ましくは:
-出願EP0425391に記載の凍結抽出方法によって得られるEvanratまたはJardin de Granville(登録商標)のバラ種のバラの花の水性抽出物；特に99.5%の水／グリセロール混合物(具体的な例において「凍結抽出物」と称される)の中に0.5%の乾燥物質を含む抽出物、および
-出願WO2010／112760に記載の動態的アンフルラージュ方法によって得られるEvanratまたはJardin de Granville(登録商標)のバラ種のバラの花の油性抽出物；特に98.5%〜99.5%の有機脱臭化オレイックヒマワリ油(以下の具体的な例において「サテン油」と称される)中に0.5%〜1.5%の乾燥物質を含む抽出物、を含む。
【０１１３】
特にEvanratまたはJardin de Granville(登録商標)のバラ種のバラの花の、これらのさらなる水性および油性抽出物は、さらなる微量栄養素、特にバラの花の油性抽出物によって提供される必須脂肪酸(オメガ3、6および9)、およびバラの花の水性抽出物によって提供される鉱物(マンガン、マグネシウム、銅、亜鉛、など)を提供する。
【０１１４】
本出願人は、前の研究で、上記のバラの花の水性抽出物およびバラの花の油性抽出物が、表皮の時計遺伝子の発現を刺激し、特に脂質代謝、皮膚バリアー、細胞分化、細胞間情報伝達および／または細胞凝集に関与する表皮の時計標的遺伝子の発現を刺激することをさらに示した。
【０１１５】
特に、バラの花の水性抽出物は、時計遺伝子であるCryptochrome Circadian Clock 2 CRY2、Period 1 PER1およびPeriod 3 PER3の発現を刺激し、バラの花の油性抽出物は、時計遺伝子であるPeriod 2 PER2の発現を刺激する。
【０１１６】
バラの花の水性抽出物は、ケラチン10 KRT10およびデスモグレイン1 DSG1遺伝子の発現を刺激し、バラの花の油性抽出物は、セラミド-シンターゼ3 CERS3、カルモジュリン3 CALM3、ケラチン1 KRT1、ギャップ結合α-1タンパク質GJA1／コネキシン43 Cx43およびデスモコリン3 DSC3遺伝子の発現を刺激する。
【０１１７】
したがって、これらのバラの花の抽出物を使用することにより、本発明によるエイジツの水性抽出物に関連する効果を補完する効果を得ることが可能にする。
【０１１８】
組成物は、さらにバラ香気を含み得る。
【０１１９】
追加の成分
本発明の組成物はまた、化粧品に一般的に使用されるいずれかの添加物、例えばUVフィルター、抗酸化剤、香料、化粧品活性剤、例えば皮膚軟化剤、保湿剤、ビタミン、老化防止剤、美白剤、充填剤、真珠光沢剤およびこれらの混合物を含み得る。
【０１２０】
化粧品活性剤としては、眼の下のたるみを減少させることを目的とした微小循環促進剤、例えばセンテラ・アシアティカの抽出物、ホルス・ケストヌト(horse chestnut)(アエスクルス・ヒッポカスタヌム(Aesculus hippocastanum))の抽出物などを含み得る。
【０１２１】
これはまた、充填剤および／または真珠層、特に着色欠陥(くま)覆い隠し、眼を明るくすることを目的とする白色真珠層を含み得る。
【０１２２】
塗布具(Applicator)
本発明による化粧品組成物は、有利には眼の輪郭部位に適用される。この適用は、指で行うことができ、有利には塗布具を用いて行うことができ、これにより、眼の輪郭へのより正確な適用および／または化粧品活性成分のより良い浸透に関連して改善された効果、および／または塗布具の動きに関連する補完的な機械的作用を可能にすることができる。
【０１２３】
塗布具は、180から360°、好ましくは360°回転する、1つまたはそれ以上の同一のボールからなるマッサージヘッドを含み得る。マッサージ面が指での適用に比べて広くなり、もたるみの水はけがシングルボールロールオンより効率的になる。こめかみから眼の隅への前後の動きにおけるマッサージ技術に関連して、この塗布具は、微小循環および細胞酸素化を再活性化させ、本発明の化粧品組成物の微量栄養素の同化を増強する。
【０１２４】
化粧方法
本発明はまた、皮膚への栄養素の供給を促進および／または改善すること、表皮の凝集および／または分化を促進および／または改善すること、バリアー機能を促進および／または改善すること、細胞外マトリックスを密集化させることおよび／またはその分解を減少させること、皮膚、特に眼の輪郭の弾性および／または堅さを改善すること、眼の周りのくまおよび／またはたるみを防止および／または減少させること、皮膚、特に眼の輪郭部位の輝きおよび／または均一性を改善すること、水分補給を促進および／または改善すること、および／またはしわおよび／または細かい線の形成を防止および／または減少させることを目的とする化粧方法であって、少なくとも一つの本発明によるエイジツの水性抽出物、特にEvanratまたはJardin de Granville(登録商標)のバラ種のエイジツの水性抽出物を含む本発明によって定義される化粧品組成物を、皮膚、特に顔および／または首、好ましくは眼の輪郭部位に適用することを含む化粧方法に関する。
【０１２５】
組成物は、体、顔およびおよび／または首に適用することができる。特定の実施態様によれば、組成物は顔および／または首に適用される。特定の好ましい実施態様によれば、組成物は眼の輪郭に適用される。
【０１２６】
特定の実施態様によれば、本発明は、細胞外マトリックスを密集化させることおよび／またはその分解を減少させることを目的とする化粧方法であって、本発明によってあらかじめ定義された化粧品組成物を眼の輪郭部位に適用することを含む化粧方法に関する。
【０１２７】
特定の実施態様によれば、本発明は、皮膚の弾性および／または堅さを改善することを目的とする化粧方法であって、本発明によってあらかじめ定義された化粧品組成物を眼の輪郭部位に適用することを含む化粧方法に関する。
【０１２８】
特定の好ましい実施態様によれば、本発明は、眼輪郭の輝きおよび／または着色の均一性を改善することを目的とする化粧方法であって、本発明によってあらかじめ定義された化粧品組成物を眼の輪郭部位に適用することを含む化粧方法に関する。
【０１２９】
特定の好ましい実施態様によれば、本発明は、眼の周りのくまおよび／またはたるみを防止および／または減少させることを目的とする化粧方法であって、本発明によってあらかじめ定義された化粧品組成物を眼の輪郭部位に適用することを含む化粧方法に関する。
【０１３０】
好ましくは、本発明によるエイジツの水性抽出物を含む化粧品組成物は、単独で、または上記に記載のEvanratまたはJardin de Granville(登録商標)のバラ種のバラの花の他の抽出物と組み合わせて、これらの化粧方法に使用される。
【０１３１】
化粧品の使用
本発明はまた、少なくとも一つの有効量の少なくとも一つの本発明によるエイジツの水性抽出物、特にEvanratまたはJardin de Granville(登録商標)のバラ種のエイジツの水性抽出物における非治療的化粧品としての使用であって、表皮の凝集および／または分化を促進および／または改善すること、バリアー機能を促進および／または改善すること、細胞外マトリックスを密集化させることおよび／またはその分解を減少させること、皮膚、特に眼の周りの弾性および／または堅さを改善すること、眼の周りのくまおよび／またはたるみを防止および／または減少させること、皮膚、特に眼の周りの輝きおよび／または均一性を改善すること、水分補給を促進および／または改善すること、および／またはしわおよび／または細かい線の形成を防止および／または減少させることを目的とする物質としての使用に関する。
【０１３２】
本発明によって使用されるエイジツの水性抽出物は、上記の通りである。好ましくは、Jardin de Granville(登録商標)のバラの新鮮な果実のクリオグラインディング(cryogrinding)および熱抽出方法によって得られるEvanratまたはJardin de Granville(登録商標)バラ種のエイジツの水性抽出物、特に97.5%の水中の1%の乾燥物質、0.5%のクエン酸および適量の防腐剤(具体的な例において「エイジツの水性抽出物」と称される)を含む抽出物が使用される。
【０１３３】
次に、本発明を以下の非限定的な実施例で説明する。
【実施例】
【０１３４】
原料物質および方法
Evanratの品種のエイジツ、特に苗床から入手可能なJardin de Granville(登録商標)のエイジツを、これらの実施例に示される水性バラ抽出物を得るために使用される植物材料として使用する。
【０１３５】
本発明によるエイジツの水性抽出物
Evanratの品種のエイジツ、特に苗床から入手可能なJardin de Granville(登録商標)のエイジツを、植物原料として使用する。
【０１３６】
上記の水中での低温粉砕および熱抽出方法(60℃)によってエイジツの水性抽出物を得る。2重量％の乾燥物質(活性成分)、97.5重量％の水、0.5％のクエン酸および100％の防腐剤を含むエイジツの水性抽出物を得る。
【０１３７】
他のバラ抽出物、特にEvanratの品種のバラ抽出物、好ましくはJardin de Granville(登録商標)のバラの抽出物を、本発明によるエイジツの水性抽出物と組み合わせて用いて補完的な効果を提供することができる:
【０１３８】
・バラの花の水性抽出物(「凍結抽出物」)
Evanratの品種のバラの花(花びら)、特に苗床で入手可能なJardin de Granville(登録商標)のバラの花を植物原料として使用する。
【０１３９】
上記に記載の凍結抽出方法を用いて、特に特許出願EP0425391に記載の方法によってバラの花の水性抽出物を得る。0.5重量%の乾燥物質(活性成分)、49重量%〜50重量%の水、49重量%のグリセロールおよび適量100%の防腐剤を含む凍結抽出物を得る。このバラの水性抽出物のINCI名は、水、グリセリン、バラ抽出物またはロサハイブリッド花(Rosa Hybrid Flower)抽出物、水、グリセリンである。
【０１４０】
・バラの花の油性抽出物(「サテン油」)
Evanratの品種のバラの花(花びら)、特に苗床で入手可能なJardin de Granville(登録商標)のバラの花を植物原料として使用する。
【０１４１】
上記の動態的アンフルラージュ方法、特に特許出願WO2010／112760に記載の方法によってバラの花の油性抽出物を得る。0.5重量%〜1.5重量%のバラの乾燥物質(活性成分)および98.5重量%〜99.5重量%の脱臭化有機オレイックヒマワリ油を含むサテン油の油性抽出物を得る。
【０１４２】
バラの油性抽出物のINCI名は、バラ抽出物およびヘリアンサス・アナス(ヒマワリ)種子油またはローザハイブリッド花抽出物、ヘリアンサス・アナス(ヒマワリ)種子油である。
【０１４３】
細胞エネルギー(ATP合成)、表皮の凝集と分化(バリアー機能)に関与する遺伝子の発現、細胞外マトリックスの密集化および細胞透過性に対するエイジツの水性抽出物効果を研究した。
【０１４４】
実施例1：ATP合成に対するエイジツの水性抽出物の効果
培養正常ヒトケラチン生成細胞(NHK)におけるATP合成に対する、エイジツの水性抽出物の効果を試験した。
【０１４５】
NHKを以下の物質を用いて24時間処理した：
-エイジツの水性抽出物:0.3%
-陽性対照：抗抑鬱剤(energizer)としてのCODIFのEarly Boost(C)：0.15%。
【０１４６】
2時間処理後、供給者のプロトコルおよび推奨事項によって、ApoSENSORTM ATP Cell Viability Bioluminescence Assay Kitという名前で市販されているBiovision社のキットを用いて検出し、測定する。
【０１４７】
本アッセイでは、ルシフェラーゼを用いて、以下の反応に従ってATPとルシフェリンからの光の生成に触媒作用を及ぼす。
【数１】
2021522199.tif 000002
【０１４８】
生成された光をルミノメーター(オメガ、BMG)で測定し、それは合成されたATPの量に比例する。
【０１４９】
0.001μg／mL〜1000μg／mLの標準曲線を細胞内ATP濃度として定義する。
【０１５０】
2時間処理後、0.3％のエイジツの水性抽出物がATPの合成を有意に増加させることが観察された(+21%)。陽性対照群では、期待される結果(+32%)を与え、実験を検証している。
【０１５１】
実施例2：バリアー機能の強化に対するエイジツの水性抽出物の効果(分化および表皮凝集)
正常なヒトケラチン生成細胞(NHK)を培養し、次いで、原料物質および方法の部分に記載のエイジツの水性抽出物で処理する。
【０１５２】
NHKを処理した後、試験遺伝子について、抽出された全RNAを逆転写して得られるcDNAを用いて、TaqMan低密度アレイ(TLDA)試験を行う。
【０１５３】
バラの水性抽出物を、0.15重量％、0.31重量％の原料物質(賦形剤水)で試験した。
【０１５４】
NHKの培養
正常なヒトケラチン生成細胞は、整形外科から得られた皮膚皮膚標本に由来する。細胞を、12ウェルプレートにおいて、ウェルあたり50,000細胞の播種密度でP5の完全なEpilife培地で培養する。サブコンフルエントでは、上記のバラ抽出物の用量で細胞を24時間処理する。
【０１５５】
TaqMan Low Density Array(TLDA)技術
・全RNAの取得
細胞培養培地を除去し、250μLのRLT溶解緩衝液(Macherey-NagelのNuclelospin RNAトレースキットで提供)を添加する。細胞をセルスクレーパでこすり落とし、その後、細胞溶解物を1.2 mLのディープウェル(Nucleospin RNAキットで提供)に回収する。定義のプロトコルに従って全RNAを抽出する。
【０１５６】
得られた全RNA溶液を、マイクロプレートリーダーであるMicrolabSTARに結合されたspectrostarNANO(BMG Labtech)を用いて測定し、品質をチェックする。この装置は、ロボティクスプラットフォームを制御するコンピュータに接続されており、結果を分析するための特定のソフトウェア(MARSソフトウェア)を備えている。この技術では、384ウェルマイクロプレート(LoBase)、陽性対照群(RNA 250, AM7155, Thermofisher)で、ロボットによって実行されるピペット操作、およびspectrostarNANOリーダーによって生成された値を検証する必要がある。
【０１５７】
・補完的なDNAの合成
使用された逆転写(RT)キットは、高容量逆転写キット(Thermo Fisher)である。こらは、提供されたプロトコルに従って使用した。前RNA500ngを水で希釈し、最終容量25μＬとする。その後、下記の予め調製された25μＬの高容量逆転写キット2X反応混合物存在下、25℃で10分間、次いで37℃で2時間インキュベートする。さまざまなインキュベーションを、TRobot(Biometra)で行う。
【表１】
2021522199.tif 000003
【０１５８】
・PCR-TaqMan Low Density Array
15μLの各RTを60μLの水と混合し、その後、DNAポリメラーゼを含むTaqMan Gene Expresssionマスターミックス(ThermoFisherの商品番号4369510)を75μＬ添加する。均質化した後、テストされた遺伝子に対応するプローブを含むマイクロ流体カードに100μLを沈着させ(以下の表2)、これらを遠心分離して密封する。プレート上に堆積された遺伝子のプロファイルに対応するCD Romを、カード上の各遺伝子の位置を指定するSDS 2.3ソフトウェアにロードする。結果の正規化に使用される対照群(または「内因性」)遺伝子を、PCRを開始する前に示す。後者は、ABI Prism7900HTシーケンス検出システムのAppliedBiosystemsによって提供されるプロトコルに従って実行する。qPCR工程は、50℃で2分、94.5℃で10分、97℃で30分、59.7℃で1分の40サイクルである。
【表２】
2021522199.tif 000004
【０１５９】
統計的分析
リアルタイムの定量PCRは、その効率が90％〜110％であれば、利用することができる。各試料ついて、SDS2.3ソフトウェアによって信号が現れるサイクル数を測定する。同じアッセイについて、得られた関心のある転写産物の発現レベルを、家庭用遺伝子β-２-ミクログロブリンとして得られた値に正規化した。この遺伝子は、発現が構成的で不変であるため、実験中に誘発される変動を回避することを可能にする(全RNAアッセイ、ピペッティング、逆転写工程、装置内PCR)。
【０１６０】
TLDA RT-PCR法では、△△Ctの比較法を用いて定量化する。得られた相対的定量化(RQ)値は、対照群(ここでは非照射)と比較した発現の振幅レベル(大体対照群のx倍)に対応する。対照群が1に等しい次の計算によってRQを得る。
【数２】
2021522199.tif 000005
【０１６１】
転写活性の統計的に有意な変動を評価するために、Studentのt検定を使用する。各条件で3回行う(3つは未処理、3つは同じ条件で処理)。2つのデータ行列を比較することで最初にFischerのF検定を適用する。値がα=0.05より大きい場合、Studentのt検定の分散は2であり、FischerのF検定がα=0.05より小さい場合、分散は3になる。選択された転写変動は、Studentのt検定がα＝0.05よりも低いものである。
【０１６２】
結果は平均でn=3にわたって示す。Studentのt検定を用いて、処理細胞と非処理細胞との効果を比較した。
【０１６３】
結果は、p<0.05(*)またはp<0.01(**)で有意であるとみなされる。
【０１６４】
その結果を以下の表3に示す：
【表３】
2021522199.tif 000006
【０１６５】
これは、0.31％の用量で、各マーカーにのそれぞれの増加に対応する：
【表４】
2021522199.tif 000007
【０１６６】
これらの結果は、本発明によるエイジツの水性抽出物が表皮の凝集および分化に関与する遺伝子の発現を刺激することを示している。
【０１６７】
そして、エイジツの水性抽出物(52.7μg／mL(／DM)に相当する0.31重量％の原料物質)の効果は、デスモグレイン1遺伝子(DSG1)の発現を+214％増加させ、別の実験で得られた若干高い用量(65μg／mL(／DM)に相当する1重量%の原料物質)の花の凍結抽出物を用いて+58%増加させたことに比較してより高く、さらに、この凍結抽出物が他の遺伝子を刺激しなかったことを知られる。
【０１６８】
実施例3:細胞外マトリックスの密集化に対するエイジツの水性抽出物の効果
正常なヒト線維芽細胞(NHF)を、0.15%(25μg／MLの乾燥物質に相当する)の用量の本発明によるエイジツの水性抽出物を用いて24時間処理するか、処理しなかった。NHFを処理した後、NHFから抽出された全RNAの逆転写の後に得られたcDNAを用いて、異なる遺伝子に対するTaqMan Low Density Array(TLDA)試験を行った。
【０１６９】
NHFの培養
この線維芽細胞は，37歳の女性提供者に対して行われた腹部形成術に由来する。細胞を、6ウェルプレートにおいて、ウェルあたり250,000細胞の播種密度で、P5で10％のウシ胎児血清が添加されたDMEM 1g／Lグルコース培地に接種する。
【０１７０】
NHFの処理
コンフルエンスでは、子牛胎児血清なしのDMEM培地(1g／Lグルコース)中での使用の最終濃度で使用直前に調製されたエイジツの水性抽出物で細胞を処理する。24時間処理後、細胞を回収し、全RNAを抽出する。
【０１７１】
TLDA (TaqMan Low Density Array)
実施例１に記載のプロトコルに従ってNHFから抽出された全RNAの逆転写後に得られたcDNAを用いて、遺伝子リストに対するTLDA技術研究を行う。
【表５】
2021522199.tif 000008
【０１７２】
その結果を以下の表6に示す。
【表６】
2021522199.tif 000009
【０１７３】
これは、0.15％の用量で、各マーカーのそれぞれの増加に対応する：
【表７】
2021522199.tif 000010
【０１７４】
これらの結果は、本発明によるエイジツの水性抽出物が、細胞外マトリックスのタンパク質:コラーゲンI、III、V、エラスチン、および繊維の形成に関与する酵素：LOX(リシルオキシダーゼ)、PECOL(プロコラーゲンCエンドペプチダーゼエンハンサー)の遺伝子発現を刺激し、それと並行して細胞外マトリックス(MMP3)を阻害することを示している。
【０１７５】
そして、このエイジツの水性抽出物(25.5μg／mL(／DM)に相当する0.15重量％の原料物質)の効果は、以下の結果に示すように、同様の実験で花の凍結抽出物を2倍超高い用量(65μg／mL(／DM)に相当する1重量％の原料物質)で得られた効果よりもはるかに大きい：
【０１７６】
【表８】
2021522199.tif 000011
【０１７７】
実施例4: 血管透過性(抗くま／微小循環)に対するエイジツの水性抽出物の効果
実施例1に記載のTLDA試験において、また、0.15％の用量のエイジツの抽出物が、血管透過性に関与する血管内皮増殖因子であるVEGFの発現を-74％抑制することを示している。この効果は、本発明による抽出物を眼の輪郭部位に使用する場合に特に有利である。
【０１７８】
これらの全ての結果は、本発明によるエイジツの水性抽出物、特に1重量%の乾燥物質(活性成分)、97.5重量%の水、0.5%のクエン酸および適量100%の防腐剤を含む、0.15%の用量のエイジツの水性抽出物により以下の効果をもたらすことを示している：
-皮膚細胞へのエネルギーの供給を促進するATPの合成を増加させ；
-バリアー機能の強化に役に立つ表皮の凝集および分化のマーカーの遺伝子発現を刺激し；
-細胞外マトリックスのタンパク質の遺伝子発現を刺激し、細胞外マトリックスの密集化に参与する分解酵素を抑制し、
-血管透過性の減少に参与する血管内皮細胞増殖因子VEGFの遺伝子発現を抑制する。
【０１７９】
そして、バリアー機能と細胞外マトリックスに対するこれらの刺激効果は、花の凍結抽出物で得られるものよりも大きい。
【０１８０】
したがって、本発明によるエイジツの抽出物を使用することによる利益は、顔の皮膚、特に細かくて脆弱な、くまおよび／またはたるみが形成する傾向がある眼の輪郭部位において、表皮の凝集および分化、バリアー機能の強化、細胞外マトリックスの緻密化、細胞透過性の低下を促進および／または改善することにあると理解される。
【０１８１】
本発明によるエイジツの抽出物を、異なる濃度で、単独で、または補完的な性質を有する他のバラ抽出物と組み合わせて、異なる化粧品製剤で使用する。パーセント％は、特に断らない限り、原料物質の重量で示す。
【０１８２】
実施例5:化粧品製剤
【表９】
2021522199.tif 000012
【０１８３】
【表１０】
2021522199.tif 000013
【０１８４】
以下の方法によって、組成物を調製する：
-ゲル化剤を、70℃に加熱された水相(エイジツの水性抽出物と水酸化ナトリウムを除く)に分散させ；
-脂肪相(香気濃縮物、抗酸化剤を除く)を70℃に加熱し；
-脂肪相を強い攪拌下で水相に導入することによってエマルジョンを製造し；
-水酸化ナトリウムを添加することによってゲル化剤を中和し、香気濃縮物、抗酸化剤およびエイジツの水性抽出物を低温で導入し、ゲル化剤を適度な攪拌下で冷却させる。
【０１８５】
この組成物を、皮膚、特に顔に適用することによって、皮膚に栄養素、堅さおよび水分補給をもたらす。
【０１８６】
【表１１】
2021522199.tif 000014
【０１８７】
以下の方法によって組成物を調製する：
-ワックス(C10-18トリグリセリド=GatefosseのLipocire)を、抗酸化剤およびバラサテン油の油性抽出物で融点(数度)を超える温度に加熱し；
-溶融された脂肪相を、撹拌下で脂肪相と同じ温度に加熱した水に注ぎ；
-全体を、所望の液滴直径が得られるまで、ロータリーシステムによって攪拌下で数分間維持させ；
-得られた分散液を、予め冷却させたグリコール水(約-4℃)を添加することによって急冷させ、脂質スフェロイドを凝固させ；
-スフェロイドが凝固したら、攪拌を停止し、表面から回収またはろ過し；
-混合水、ザンサンガム、防腐剤およびバラの凍結抽出物、および本発明のエイジツの水性抽出物によって水相を調製し；
-スフェロイドを表面から回収し、バラの凍結抽出物および本発明によるエイジツの水性抽出物を含むキサンタンゲルに組み込む。
【０１８８】
この組成物を皮膚に適用することにより、皮膚に栄養のよく、より滑らかで堅い外観を与える。
【表１２】
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【０１８９】
室温で、本発明によるエイジツの抽出物および防腐剤を撹拌下で混合し、均質化する。撹拌下で糖類を添加し、次いで、撹拌下でカルボマーを添加し、次いで水を添加し、EDTAを添加する。次いで、均質なゲルが得られるまで、水酸化ナトリウムを撹拌下で添加して水性ゲルを中和する。
【０１９０】
水性ゲルを顔面皮膚に適用することにより、皮膚にみずみずしい効果を与え、柔軟性および堅さをもたらす。
【表１３】
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【０１９１】
室温で、本発明によるエイジツの水性抽出物、フェノキシエタノールおよびグリコールを攪拌下で混合し、次いで、ポリオールを攪拌下で添加する。次いで、界面活性剤であるSepinoTM EMT 10を添加し、水相中で、攪拌下で乳化させ、その後、アルコール、BHTおよびバラ香気を添加する。
【０１９２】
この水性ゲルを顔面皮膚に適用することにより、皮膚にみずみずしい効果を与え、柔軟性および堅さをもたらす。
【表１４】
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【０１９３】
水相の成分(水、グリコール、カルボマー)を80℃で、攪拌下で混合する。次いで、防腐剤を添加し、次いで、ゲル化剤を80℃で、撹拌下で添加し、温度を75℃に下げる。次いで、撹拌下で界面活性剤を水相中で乳化させる。40℃で予め糊付けて均質化した充填剤および真珠層を添加する。40℃で、凍結抽出物、本発明によるバラの水性抽出物および他の抽出物を、攪拌下で30℃まで添加する。
【０１９４】
このゲル漿液を眼の輪郭部位に適用した後は、腫れとくまが消えていくように見え、目に見えてリフレッシュされ、照らされ、輝く外観になる。皮膚は、栄養があり、より堅く、より滑らかで(細かい線およびしわの出現が減少)、潤いがあり、より均一に着色されているように見える。
【国際調査報告】
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