(57)【要約】  本開示は、ＴＣＲ  Ｖβ領域に結合する抗体分子および前記抗体分子を含む多特異性分子を提供する。さらに、それをコードする核酸、前述の分子を産生する方法、前述の分子を含む医薬組成物、および前述の分子を使用してがんを処置する方法が開示される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｔ細胞受容体ベータ可変領域（ＴＣＲβＶ）に結合する（例えば、特異的に結合する）抗体分子（「抗ＴＣＲβＶ抗体分子」）を含む第１の部分（例えば、第１の免疫細胞エンゲージャー）を含む、多特異性分子（例えば、二特異性分子）。
【請求項２】
腫瘍標的化部分、サイトカイン分子、間質改変部分、または第１の部分以外の抗ＴＣＲβＶ抗体分子のうちの１つまたは複数を含む第２の部分を含む、請求項１に記載の多特異性分子。
【請求項３】
第１の部分のＴＣＲβＶ領域への結合が、ＴＣＲβＶ領域以外の受容体または分子に結合するＴ細胞エンゲージャー（「非ＴＣＲβＶ結合性Ｔ細胞エンゲージャー」）のサイトカインプロファイルとは異なるサイトカインプロファイルをもたらす、請求項１または２に記載の多特異性分子。
【請求項４】
非ＴＣＲβＶ結合性Ｔ細胞エンゲージャーが、ＣＤ３分子（例えば、ＣＤ３イプシロン（ＣＤ３ｅ）分子）、またはＴＣＲアルファ（ＴＣＲα）分子に結合する抗体を含む、請求項３に記載の多特異性分子。
【請求項５】
第１の部分のサイトカインプロファイルが、以下：
（ｉ）ＩＬ−２のレベル、例えば、発現レベル、および／もしくは活性の増加、
（ｉｉ）ＩＬ−１βのレベル、例えば、発現レベル、および／もしくは活性の低減、
（ｉｉｉ）ＩＬ−６のレベル、例えば、発現レベル、および／もしくは活性の低減、
（ｉｖ）ＴＮＦαのレベル、例えば、発現レベル、および／もしくは活性の低減、
（ｖ）ＩＬ−１０のレベル、例えば、発現レベル、および／もしくは活性の低減、
（ｖｉ）ＩＬ−２のレベル、例えば、発現レベル、および／もしくは活性の増加における遅延、例えば、少なくとも１時間、２時間、３時間、４時間、５時間、６時間、７時間、８時間、９時間、１０時間、もしくはそれ以上の遅延、
（ｖｉｉ）ＩＦＮｇのレベル、例えば、発現レベル、および／もしくは活性の増加における遅延、例えば、少なくとも１時間、２時間、３時間、４時間、５時間、６時間、７時間、８時間、９時間、１０時間の遅延、または
（ｖｉｉｉ）ＩＬ−１５のレベル、例えば、発現レベル、および／もしくは活性の増加
のうちの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、またはすべてを含み、
例えば、（ｉ）〜（ｖｉｉｉ）が、非ＴＣＲβＶ結合性Ｔ細胞エンゲージャーのサイトカインプロファイルと比較したものである、請求項３または４に記載の多特異性分子。
【請求項６】
第１の部分のＴＣＲβＶ領域への結合が、実施例３のアッセイによって測定したときに、例えば、非ＴＣＲβＶ結合性Ｔ細胞エンゲージャーによって誘導されるサイトカインストームと比較して、サイトカインストームの低減、例えば、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）の低減をもたらす、先行する請求項のいずれか１項に記載の多特異性分子。
【請求項７】
第１の部分のＴＣＲβＶ領域への結合が、
（ｉｘ）Ｔ細胞増殖動態の低減、
（ｘ）例えば、実施例４のアッセイによって測定したときに、細胞殺滅、例えば、標的細胞殺滅、例えば、がん細胞殺滅、
（ｘｉ）ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞増殖、例えば、拡大の増加、または
（ｘｉｉ）メモリーＴ細胞集団の拡大、例えば、少なくとも約１．１〜１０倍の拡大（例えば、少なくとも約１．１倍、１．２倍、１．３倍、１．４倍、１．５倍、２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、もしくは１０倍の拡大）
のうちの１つ、２つ、３つ、またはすべてをもたらし、
例えば、（ｉｘ）〜（ｘｉｉ）が、非ＴＣＲβＶ結合性Ｔ細胞エンゲージャーと比較したものである、先行する請求項のいずれか１項に記載の多特異性分子。
【請求項８】
メモリーＴ細胞集団が、エフェクターメモリーＴ（ＴＥＭ）細胞、例えば、ＣＤ４５ＲＡを発現するＴＥＭ細胞（ＴＥＭＲＡ）細胞を含む、請求項７に記載の多特異性分子。
【請求項９】
第１の部分が、
（ｉ）例えば、ＴＣＲβ  Ｖ６−４＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−４＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ６−９＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−８＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−６＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ６−６＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−２＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−３＊０１、もしくはＴＣＲβ  Ｖ６−１＊０１のうちの１つもしくは複数を含む、ＴＣＲβ  Ｖ６サブファミリー、
（ｉｉ）例えば、ＴＣＲβ  Ｖ１０−１＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ１０−１＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ１０−３＊０１、もしくはＴＣＲβ  Ｖ１０−２＊０１のうちの１つもしくは複数を含む、ＴＣＲβ  Ｖ１０サブファミリー、
（ｉｉｉ）例えば、ＴＣＲβ  Ｖ５−６＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ５−４＊０１、もしくはＴＣＲβ  Ｖ５−８＊０１のうちの１つもしくは複数を含む、ＴＣＲβ  Ｖ５サブファミリー、または
（ｉｖ）例えば、ＴＣＲβ  Ｖ１２−４＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ１２−３＊０１、もしくはＴＣＲβ  Ｖ１２−５＊０１のうちの１つもしくは複数を含む、ＴＣＲβ  Ｖ１２サブファミリー
から選択されるＴＣＲβＶサブファミリーのうちの１つまたは複数に結合する、先行する請求項のいずれか１項に記載の多特異性分子。
【請求項１０】
抗ＴＣＲβＶ抗体分子が、
（ｉ）ＴＣＲβＶ上のエピトープ、例えば、本明細書に記載される抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、第２の抗ＴＣＲβＶ抗体分子によって認識されるエピトープと同じかもしくは類似のエピトープに特異的に結合するか、
（ｉｉ）本明細書に記載される抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、第２の抗ＴＣＲβＶ抗体分子と同じかもしくは類似の結合親和性もしくは特異性またはその両方を示すか、
（ｉｉｉ）本明細書に記載される抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、第２の抗ＴＣＲβＶ抗体分子の結合を阻害する、例えば、競合的に阻害するか、
（ｉｖ）本明細書に記載される抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、第２の抗ＴＣＲβＶ抗体分子と同じかもしくはオーバーラップするエピトープに結合するか、または
（ｖ）本明細書に記載される抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、第２の抗ＴＣＲβＶ抗体分子と、結合について競合する、かつ／もしくは同じエピトープに結合し、
第２の抗ＴＣＲβＶ抗体分子が、配列番号１もしくは配列番号９の重鎖相補性決定領域１（ＨＣ  ＣＤＲ１）、重鎖相補性決定領域２（ＨＣ  ＣＤＲ２）、および／もしくは重鎖相補性決定領域３（ＨＣ  ＣＤＲ３）、ならびに／または配列番号２、配列番号１０、もしくは配列番号１１の軽鎖相補性決定領域１（ＬＣ  ＣＤＲ１）、軽鎖相補性決定領域２（ＬＣ  ＣＤＲ２）、および／もしくは軽鎖相補性決定領域３（ＬＣ  ＣＤＲ３）を含む抗原結合性ドメインを含む、先行する請求項のいずれか１項に記載の多特異性分子。
【請求項１１】
抗ＴＣＲβＶ抗体分子が、
（ｉ）（ａ）配列番号１５、配列番号２３、配列番号２４、もしくは配列番号２５のＨＣ  ＣＤＲ１、ＨＣ  ＣＤＲ２、および／もしくはＨＣ  ＣＤＲ３、ならびに／または（ｂ）配列番号１６、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、もしくは配列番号３０のＬＣ  ＣＤＲ１、ＬＣ  ＣＤＲ２、および／もしくはＬＣ  ＣＤＲ３、または
（ｉｉ）（ａ）配列番号２、配列番号１０、もしくは配列番号１１のＬＣ  ＣＤＲ１、ＬＣ  ＣＤＲ２、および／もしくはＬＣ  ＣＤＲ３、ならびに／または（ｂ）配列番号１または配列番号９のＨＣ  ＣＤＲ１、ＨＣ  ＣＤＲ２、および／もしくはＨＣ  ＣＤＲ２
を含む抗原結合性ドメインを含む、先行する請求項のいずれか１項に記載の多特異性分子。
【請求項１２】
抗ＴＣＲβＶ抗体分子が、同じかまたは異なるＴＣＲβＶサブファミリーメンバーに結合する、先行する請求項のいずれか１項に記載の多特異性分子。
【請求項１３】
二特異性抗体分子、二価抗体分子、または二重パラトープ性抗体分子から選択される抗体分子を含む、先行する請求項のいずれか１項に記載の多特異性分子。
【請求項１４】
２つの異なるＴＣＲβＶサブファミリーメンバーに結合する二特異性抗体分子を含む、先行する請求項のいずれか１項に記載の多特異性分子。
【請求項１５】
抗ＴＣＲβＶ抗体分子が、
（ｉ）ＴＣＲβ  Ｖ６サブファミリーメンバーのうちの１つもしくは複数およびＴＣＲβ  Ｖ１０サブファミリーメンバーのうちの１つもしくは複数、
（ｉｉ）ＴＣＲβ  Ｖ６サブファミリーメンバーのうちの１つもしくは複数およびＴＣＲβ  Ｖ５サブファミリーメンバーのうちの１つもしくは複数、
（ｉｉｉ）ＴＣＲβ  Ｖ６サブファミリーメンバーのうちの１つもしくは複数およびＴＣＲβ  Ｖ１２サブファミリーメンバーのうちの１つもしくは複数、
（ｉｖ）ＴＣＲβ  Ｖ１０サブファミリーメンバーのうちの１つもしくは複数およびＴＣＲβ  Ｖ５サブファミリーメンバーのうちの１つもしくは複数、
（ｖ）ＴＣＲβ  Ｖ１０サブファミリーメンバーのうちの１つもしくは複数およびＴＣＲβ  Ｖ１２サブファミリーメンバーのうちの１つもしくは複数、または
（ｖｉ）ＴＣＲβ  Ｖ５サブファミリーメンバーのうちの１つもしくは複数およびＴＣＲβ  Ｖ１２サブファミリーメンバーのうちの１つもしくは複数
に結合する、先行する請求項のいずれか１項に記載の多特異性分子。
【請求項１６】
請求項１７から５２のいずれかに記載の抗ＴＣＲβＶ抗体分子を含む、多特異性分子、例えば、二特異性分子。
【請求項１７】
Ｔ細胞受容体ベータ可変鎖（ＴＣＲβＶ）領域に結合する、例えば、特異的に結合する抗体分子であって、抗ＴＣＲβＶ抗体分子が、
（ａ）軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
（ｉ）配列番号１０もしくは配列番号１１の（例えば、３つの）軽鎖相補性決定領域１（ＬＣ  ＣＤＲ１）、軽鎖相補性決定領域２（ＬＣ  ＣＤＲ２）、および軽鎖相補性決定領域３（ＬＣ  ＣＤＲ３）のうちの１つ、２つ、もしくはすべて、ならびに
（ｉｉ）（例えば、４つの）非マウス生殖系列フレームワーク１（ＦＲ１）、非マウス生殖系列フレームワーク領域２（ＦＲ２）、非マウス生殖系列フレームワーク領域３（ＦＲ３）、および非マウス生殖系列フレームワーク領域４（ＦＲ４）のうちの１つ、２つ、３つ、もしくはすべてと少なくとも９５％の同一性を有するフレームワーク領域（ＦＲ）を含む、軽鎖可変領域（ＶＬ）、ならびに／または
（ｂ）重鎖可変領域（ＶＨ）であって、
（ｉ）配列番号９の（例えば、３つの）重鎖相補性決定領域１（ＨＣ  ＣＤＲ１）、重鎖相補性決定領域２（ＨＣ  ＣＤＲ２）、および重鎖相補性決定領域３（ＨＣ  ＣＤＲ３）のうちの１つ、２つ、もしくはすべて、ならびに
（ｉｉ）（例えば、４つの）非マウス生殖系列フレームワーク１（ＦＲ１）、非マウス生殖系列フレームワーク領域２（ＦＲ２）、非マウス生殖系列フレームワーク領域３（ＦＲ３）、および非マウス生殖系列フレームワーク領域４（ＦＲ４）のうちの１つ、２つ、３つ、もしくはすべてと少なくとも９５％の同一性を有するフレームワーク領域（ＦＲ）を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）
を含む抗原結合性ドメインを含む、抗体分子。
【請求項１８】
ＶＬが、配列番号２３０のコンセンサス配列を有するアミノ酸配列を含む、請求項１７に記載の抗ＴＣＲβＶ抗体分子。
【請求項１９】
ＶＨが、配列番号２３１のコンセンサス配列を有するアミノ酸配列を含む、請求項１７または１８に記載の抗ＴＣＲβＶ抗体分子。
【請求項２０】
ＴＣＲβ  Ｖ６、例えば、ＴＣＲβ  Ｖ６−４＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−４＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ６−９＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−８＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−６＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ６−６＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−２＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−３＊０１、もしくはＴＣＲβ  Ｖ６−１＊０１のうちの１つもしくは複数、またはそのバリアントに結合する、請求項１７から１９のいずれかに記載の抗ＴＣＲβＶ抗体分子。
【請求項２１】
（ｉ）配列番号１もしくは配列番号９、または表１に列挙されるアミノ酸配列のＨＣ  ＣＤＲ１、ＨＣ  ＣＤＲ２、およびＨＣ  ＣＤＲ３、または
（ｉｉ）配列番号２、配列番号１０、もしくは配列番号１１、または表１に列挙されるアミノ酸配列のＬＣ  ＣＤＲ１、ＬＣ  ＣＤＲ２、およびＬＣ  ＣＤＲ３
を含む抗原結合性ドメインを含む、請求項１７から２０のいずれかに記載の抗ＴＣＲβＶ抗体分子。
【請求項２２】
配列番号２、配列番号１０、もしくは配列番号１１、または表１に列挙されるアミノ酸配列のＬＣ  ＣＤＲ１、ＬＣ  ＣＤＲ２、およびＬＣ  ＣＤＲ３のうちの１つ、２つ、またはすべて（例えば、３つ）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む抗原結合性ドメインを含む、請求項１７から２１のいずれかに記載の抗ＴＣＲβＶ抗体分子。
【請求項２３】
配列番号１もしくは配列番号９、または表１に列挙されるアミノ酸配列のＨＣ  ＣＤＲ１、ＨＣ  ＣＤＲ２、およびＨＣ  ＣＤＲ３のうちの１つ、２つ、もしくはすべて（例えば、３つ）を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む抗原結合性ドメインを含む、請求項１７から２２のいずれかに記載の抗ＴＣＲβＶ抗体分子。
【請求項２４】
（ｉ）配列番号６のＬＣ  ＣＤＲ１アミノ酸配列（またはその１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の改変、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有するアミノ酸配列）、配列番号７のＬＣ  ＣＤＲ２アミノ酸配列（またはその１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の改変、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有するアミノ酸配列）、および／または配列番号８のＬＣ  ＣＤＲ３アミノ酸配列（またはその１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の改変、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有するアミノ酸配列）を含むＶＬ、ならびに／または
（ｉｉ）配列番号３のＨＣ  ＣＤＲ１アミノ酸配列（またはその１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の改変、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有するアミノ酸配列）、配列番号４のＨＣ  ＣＤＲ２アミノ酸配列（またはその１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の改変、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有するアミノ酸配列）、および／または配列番号５のＨＣ  ＣＤＲ３アミノ酸配列（またはその１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の改変、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有するアミノ酸配列）を含むＶＨ
を含む抗原結合性ドメインを含む、請求項１７から２３のいずれかに記載の抗ＴＣＲβＶ抗体分子。
【請求項２５】
表１に列挙されるアミノ酸配列、例えば、配列番号９、または表１に列挙されるアミノ酸配列、例えば、配列番号９に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列の可変重鎖（ＶＨ）、および／または
表１に列挙されるアミノ酸配列、例えば、配列番号１０もしくは配列番号１１、または表１に列挙されるアミノ酸配列、例えば、配列番号１０もしくは配列番号１１に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列の可変軽鎖（ＶＬ）
を含む抗原結合性ドメインを含む、請求項１７から２４のいずれかに記載の抗ＴＣＲβＶ抗体分子。
【請求項２６】
（ｉ）配列番号９のＶＨアミノ酸配列、
（ｉｉ）配列番号９のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列、
（ｉｉｉ）配列番号１０のＶＬアミノ酸配列、および／または
（ｉｖ）配列番号１０のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列
を含む抗原結合性ドメインを含む、請求項１７から２５のいずれかに記載の抗ＴＣＲβＶ抗体分子。
【請求項２７】
（ｉ）配列番号９のＶＨアミノ酸配列、
（ｉｉ）配列番号９のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列、
（ｉｉｉ）配列番号１１のＶＬアミノ酸配列、および／または
（ｉｖ）配列番号１１のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列
を含む抗原結合性ドメインを含む、請求項１７から２６のいずれかに記載の抗ＴＣＲβＶ抗体分子。
【請求項２８】
（ｉ）７３位におけるスレオニン、例えば、Ｋａｂａｔの番号付けによる７３位における置換、例えば、グルタミン酸からスレオニンへの置換、または
（ｉｉ）９４位におけるグリシン、例えば、Ｋａｂａｔの番号付けによる９４位における置換、例えば、アルギニンからグリシンへの置換
のうちの一方または両方を含む、フレームワーク領域、例えば、フレームワーク領域３（ＦＲ３）を含む重鎖を含み、
置換が、ヒト生殖系列重鎖フレームワーク領域配列に対するものである、請求項１７から２７のいずれかに記載の抗ＴＣＲβＶ抗体分子。
【請求項２９】
１０位におけるフェニルアラニン（Ｐｈｅｎｙａｌａｎｉｎｅ）、例えば、Ｋａｂａｔの番号付けによる１０位における置換、例えば、セリンからフェニルアラニンへの置換を含む、フレームワーク領域、例えば、フレームワーク領域１（ＦＲ１）を含む軽鎖を含み、置換が、ヒト生殖系列軽鎖フレームワーク領域配列に対するものである、請求項１７から２８のいずれかに記載の抗ＴＣＲβＶ抗体分子。
【請求項３０】
（ｉ）３６位におけるヒスチジン、例えば、Ｋａｂａｔの番号付けによる３６位における置換、例えば、チロシンからヒスチジンへの置換、または
（ｉｉ）４６位におけるアラニン、例えば、Ｋａｂａｔの番号付けによる４６位における置換、例えば、アルギニンからアラニンへの置換
のうちの一方または両方を含む、フレームワーク領域、例えば、フレームワーク領域２（ＦＲ２）を含む軽鎖を含み、
置換が、ヒト生殖系列軽鎖フレームワーク領域配列に対するものである、
請求項１７から２９のいずれかに記載の抗ＴＣＲβＶ抗体分子。
【請求項３１】
８７位におけるフェニルアラニン、例えば、Ｋａｂａｔの番号付けによる８７位における置換、例えば、チロシンからフェニルアラニンへの置換を含む、フレームワーク領域、例えば、フレームワーク領域３（ＦＲ３）を含む軽鎖を含み、置換が、ヒト生殖系列軽鎖フレームワーク領域配列に対するものである、請求項１７から３０のいずれかに記載の抗ＴＣＲβＶ抗体分子。
【請求項３２】
Ｔ細胞受容体ベータ可変鎖（ＴＣＲβＶ）領域に結合する、例えば、特異的に結合する抗体分子であって、抗ＴＣＲβＶ抗体分子が、
（ａ）軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
（ｉ）表２のヒト化Ｂ−Ｈ軽鎖（ＬＣ）の（例えば、３つの）軽鎖相補性決定領域１（ＬＣ  ＣＤＲ１）、軽鎖相補性決定領域２（ＬＣ  ＣＤＲ２）、および軽鎖相補性決定領域３（ＬＣ  ＣＤＲ３）のうちの１つ、２つ、もしくはすべて、ならびに
（ｉｉ）表２のヒト化Ｂ−Ｈ  ＬＣのフレームワーク領域１（ＦＲ１）、フレームワーク領域２（ＦＲ２）、フレームワーク領域３（ＦＲ３）、およびフレームワーク領域４（ＦＲ４）のうちの１つ、２つ、３つ、もしくはすべて（例えば、４つ）と少なくとも９５％の同一性を有するフレームワーク領域（ＦＲ）を含む、軽鎖可変領域（ＶＬ）、ならびに／または
（ｂ）重鎖可変領域（ＶＨ）であって、
（ｉ）表２のヒト化Ｂ−Ｈ重鎖（ＨＣ）の（例えば、３つの）重鎖相補性決定領域１（ＨＣ  ＣＤＲ１）、重鎖相補性決定領域２（ＨＣ  ＣＤＲ２）、および重鎖相補性決定領域３（ＨＣ  ＣＤＲ３）のうちの１つ、２つ、もしくはすべて、ならびに
（ｉｉ）表２のヒト化Ｂ−Ｈ  ＨＣのフレームワーク領域１（ＦＲ１）、フレームワーク領域２（ＦＲ２）、フレームワーク領域３（ＦＲ３）、およびフレームワーク領域４（ＦＲ４）のうちの１つ、２つ、３つ、もしくはすべて（例えば、４つ）と少なくとも９５％の同一性を有するフレームワーク領域（ＦＲ）を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）
を含む抗原結合性ドメインを含む、抗体分子。
【請求項３３】
ＴＣＲβ  Ｖ１２、例えば、ＴＣＲβ  Ｖ１２−４＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ１２−３＊０１、もしくはＴＣＲβ  Ｖ１２−５＊０１、またはそのバリアントに結合する、請求項３２に記載の抗ＴＣＲβＶ抗体分子。
【請求項３４】
（ｉ）表２に列挙される抗体Ｂ−ＨのＨＣ  ＣＤＲ１、ＨＣ  ＣＤＲ２、およびＨＣ  ＣＤＲ３、または
（ｉｉ）表２に列挙される抗体Ｂ−ＨのＬＣ  ＣＤＲ１、ＬＣ  ＣＤＲ２、およびＬＣ  ＣＤＲ３
を含む抗原結合性ドメインを含む、請求項３２または３３に記載の抗ＴＣＲβＶ抗体分子。
【請求項３５】
前配列番号２、配列番号１０、もしくは配列番号１１、または表１に列挙されるアミノ酸配列のＬＣ  ＣＤＲ１、ＬＣ  ＣＤＲ２、およびＬＣ  ＣＤＲ３のうちの１つ、２つ、またはすべて（例えば、３つ）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む抗原結合性ドメインを含む、請求項３２から３４のいずれかに記載の抗ＴＣＲβＶ抗体分子。
【請求項３６】
表２に列挙されるヒト化抗体Ｂ−ＨのＨＣ  ＣＤＲ１、ＨＣ  ＣＤＲ２、およびＨＣ  ＣＤＲ３のうちの１つ、２つ、もしくはすべて（例えば、３つ）を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む抗原結合性ドメインを含む、請求項３２から３５のいずれかに記載の抗ＴＣＲβＶ抗体分子。
【請求項３７】
表２に列挙されるヒト化抗体Ｂ−ＨのＬＣ  ＣＤＲ１、ＬＣ  ＣＤＲ２、およびＬＣ  ＣＤＲ３のうちの１つ、２つ、またはすべて（例えば、３つ）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む抗原結合性ドメインを含む、請求項３２から３６のいずれかに記載の抗ＴＣＲβＶ抗体分子。
【請求項３８】
表２に列挙されるヒト化抗体Ｂ−ＨのＶＨ配列、または表２に列挙されるヒト化抗体Ｂ−ＨのＶＨに対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列、および／または
表２に列挙されるヒト化抗体Ｂ−ＨのＶＬ配列、もしくは表２に列挙されるヒト化抗体Ｂ−ＨのＶＬに対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列
を含む、請求項３２から３７のいずれかに記載の抗ＴＣＲβＶ抗体分子。
【請求項３９】
表２のヒト化Ｂ−Ｈ  ＬＣのＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、およびＦＲ４のうちの１つと少なくとも９５％の同一性を有するフレームワーク領域（ＦＲ）を含む、請求項３２から３８のいずれかに記載の抗ＴＣＲβＶ抗体分子。
【請求項４０】
表２のヒト化Ｂ−Ｈ  ＬＣのＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、およびＦＲ４のうちのいずれか２つと少なくとも９５％の同一性を有するフレームワーク領域（ＦＲ）を含む、請求項３２から３９のいずれかに記載の抗ＴＣＲβＶ抗体分子。
【請求項４１】
表２のヒト化Ｂ−Ｈ  ＬＣのＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、およびＦＲ４のうちのいずれか３つと少なくとも９５％の同一性を有するフレームワーク領域（ＦＲ）を含む、請求項３２から４０のいずれかに記載の抗ＴＣＲβＶ抗体分子。
【請求項４２】
表２のヒト化Ｂ−Ｈ  ＬＣのＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、およびＦＲ４のうちのすべてと少なくとも９５％の同一性を有するフレームワーク領域（ＦＲ）を含む、請求項３２から４１のいずれかに記載の抗ＴＣＲβＶ抗体分子。
【請求項４３】
表２のヒト化Ｂ−Ｈ  ＨＣのＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、およびＦＲ４のうちの１つと少なくとも９５％の同一性を有するフレームワーク領域（ＦＲ）を含む、請求項３２から４２のいずれかに記載の抗ＴＣＲβＶ抗体分子。
【請求項４４】
表２のヒト化Ｂ−Ｈ  ＨＣのＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、およびＦＲ４のうちのいずれか２つと少なくとも９５％の同一性を有するフレームワーク領域（ＦＲ）を含む、請求項３２から４２のいずれかに記載の抗ＴＣＲβＶ抗体分子。
【請求項４５】
表２のヒト化Ｂ−Ｈ  ＨＣのＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、およびＦＲ４のうちのいずれか３つと少なくとも９５％の同一性を有するフレームワーク領域（ＦＲ）を含む、請求項３２から４２のいずれかに記載の抗ＴＣＲβＶ抗体分子。
【請求項４６】
表２のヒト化Ｂ−Ｈ  ＨＣのＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、およびＦＲ４のうちのすべてと少なくとも９５％の同一性を有するフレームワーク領域（ＦＲ）を含む、請求項３２から４２のいずれかに記載の抗ＴＣＲβＶ抗体分子。
【請求項４７】
抗ＴＣＲβＶ抗体分子のＴＣＲβＶ領域への結合が、ＴＣＲβＶ領域以外の受容体または分子に結合するＴ細胞エンゲージャー（「非ＴＣＲβＶ結合性Ｔ細胞エンゲージャー」）のサイトカインプロファイルとは異なるサイトカインプロファイルをもたらす、請求項１７から４６のいずれかに記載の抗ＴＣＲβＶ抗体分子。
【請求項４８】
非ＴＣＲβＶ結合性Ｔ細胞エンゲージャーが、ＣＤ３分子（例えば、ＣＤ３イプシロン（ＣＤ３ｅ）分子）、またはＴＣＲアルファ（ＴＣＲα）分子に結合する抗体を含む、請求項４７に記載の抗ＴＣＲβＶ抗体分子。
【請求項４９】
第１の部分のサイトカインプロファイルが、以下：
（ｉ）ＩＬ−２のレベル、例えば、発現レベル、および／もしくは活性の増加、
（ｉｉ）ＩＬ−１βのレベル、例えば、発現レベル、および／もしくは活性の低減、
（ｉｉｉ）ＩＬ−６のレベル、例えば、発現レベル、および／もしくは活性の低減、
（ｉｖ）ＴＮＦαのレベル、例えば、発現レベル、および／もしくは活性の低減、
（ｖ）ＩＬ−１０のレベル、例えば、発現レベル、および／もしくは活性の低減、
（ｖｉ）ＩＬ−２のレベル、例えば、発現レベル、および／もしくは活性の増加における遅延、例えば、少なくとも１時間、２時間、３時間、４時間、５時間、６時間、７時間、８時間、９時間、１０時間、もしくはそれ以上の遅延、
（ｖｉｉ）ＩＦＮｇのレベル、例えば、発現レベル、および／もしくは活性の増加における遅延、例えば、少なくとも１時間、２時間、３時間、４時間、５時間、６時間、７時間、８時間、９時間、１０時間の遅延、または
（ｖｉｉｉ）ＩＬ−１５のレベル、例えば、発現レベル、および／もしくは活性の増加
のうちの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、またはすべてを含み、
例えば、（ｉ）〜（ｖｉｉ）が、非ＴＣＲβＶ結合性Ｔ細胞エンゲージャーのサイトカインプロファイルと比較したものである、請求項４７または４８に記載の抗ＴＣＲβＶ抗体分子。
【請求項５０】
抗ＴＣＲβＶ抗体分子のＴＣＲβＶ領域への結合が、実施例３のアッセイによって測定したときに、例えば、非ＴＣＲβＶ結合性Ｔ細胞エンゲージャーによって誘導されるサイトカインストームと比較して、サイトカインストームの低減、例えば、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）の低減をもたらす、請求項１７から４９のいずれかに記載の抗ＴＣＲβＶ抗体分子。
【請求項５１】
抗ＴＣＲβＶ抗体分子のＴＣＲβＶ領域への結合が、
例えば、非ＴＣＲβＶ結合性Ｔ細胞エンゲージャーと比較して、
（ｉｘ）Ｔ細胞増殖動態の低減、
（ｘ）例えば、実施例４のアッセイによって測定したときに、細胞殺滅、例えば、標的細胞殺滅、例えば、がん細胞殺滅、
（ｘｉ）ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞増殖、例えば、拡大の増加、または
（ｘｉｉ）メモリーＴ細胞集団の拡大、例えば、少なくとも約１．１〜１０倍の拡大（例えば、少なくとも約１．１倍、１．２倍、１．３倍、１．４倍、１．５倍、２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、もしくは１０倍の拡大）
のうちの１つ、２つ、３つ、またはすべてをもたらす、請求項１７から５０のいずれかに記載の抗ＴＣＲβＶ抗体分子。
【請求項５２】
メモリーＴ細胞集団が、エフェクターメモリーＴ（ＴＥＭ）細胞、例えば、ＣＤ４５ＲＡを発現するＴＥＭ細胞（ＴＥＭＲＡ）細胞を含む、請求項５１に記載の抗ＴＣＲβＶ抗体分子。
【請求項５３】
抗ＴＣＲβＶ抗体分子のＴＣＲβＶ領域への結合が、実施例３のアッセイによって測定したときに、ＩＬ−１βの発現レベルおよび／または活性の、２分の１以下、５分の１以下、１０分の１以下、２０分の１以下、５０分の１以下、１００分の１以下、もしくは２００分の１以下、または２〜２００分の１以下（例えば、５〜１５０分の１以下、１０〜１００分の１以下、２０〜５０分の１以下）への低減をもたらす、先行する請求項のいずれか１項に記載の多特異性分子または抗ＴＣＲβＶ抗体分子。
【請求項５４】
抗ＴＣＲβＶ抗体分子のＴＣＲβＶ領域への結合が、実施例３のアッセイによって測定したときに、ＩＬ−６の発現レベルおよび／または活性の、２分の１以下、５分の１以下、１０分の１以下、２０分の１以下、５０分の１以下、１００分の１以下、２００分の１以下、３００分の１以下、４００分の１以下、５００分の１以下、６００分の１以下、７００分の１以下、８００分の１以下、９００分の１以下、もしくは１０００分の１以下、または２〜１０００分の１以下（例えば、５〜９００分の１以下、１０〜８００分の１以下、２０〜７００分の１以下、５０〜６００分の１以下、１００〜５００分の１以下、もしくは２００〜４００分の１以下）への低減をもたらす、先行する請求項のいずれか１項に記載の多特異性分子または抗ＴＣＲβＶ抗体分子。
【請求項５５】
抗ＴＣＲβＶ抗体分子のＴＣＲβＶ領域への結合が、実施例３のアッセイによって測定したときに、ＴＮＦαの発現レベルおよび／または活性の、２分の１以下、５分の１以下、１０分の１以下、２０分の１以下、５０分の１以下、１００分の１以下、２００分の１以下、３００分の１以下、４００分の１以下、５００分の１以下、６００分の１以下、７００分の１以下、８００分の１以下、９００分の１以下、１０００分の１以下、もしくは２０００分の１以下、または２〜２０００分の１以下（例えば、５〜１０００分の１以下、１０〜９００分の１以下、２０〜８００分の１以下、５０〜７００分の１以下、１００〜６００分の１以下、２００〜５００分の１以下、もしくは３００〜４００分の１以下）への低減をもたらす、先行する請求項のいずれか１項に記載の多特異性分子または抗ＴＣＲβＶ抗体分子。
【請求項５６】
抗ＴＣＲβＶ抗体分子のＴＣＲβＶ領域への結合が、実施例３のアッセイによって測定したときに、ＩＬ−２の発現レベルおよび／または活性の、少なくとも２倍、５倍、１０倍、２０倍、５０倍、１００倍、２００倍、３００倍、４００倍、５００倍、６００倍、７００倍、８００倍、９００倍、１０００倍、もしくは２０００倍、または少なくとも２〜２０００倍（例えば、５〜１０００倍、１０〜９００倍、２０〜８００倍、５０〜７００倍、１００〜６００倍、２００〜５００倍、もしくは３００〜４００倍）の増加をもたらす、先行する請求項のいずれか１項に記載の多特異性分子または抗ＴＣＲβＶ抗体分子。
【請求項５７】
抗ＴＣＲβＶ抗体分子が、一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）またはＦａｂを含む抗原結合性ドメインを含む、先行する請求項のいずれか１項に記載の多特異性分子または抗ＴＣＲβＶ抗体分子。
【請求項５８】
抗ＴＣＲβＶ抗体分子が、Ｔ細胞上の立体構造エピトープまたは線形エピトープに結合する、先行する請求項のいずれか１項に記載の多特異性分子または抗ＴＣＲβＶ抗体分子。
【請求項５９】
抗ＴＣＲβＶ抗体分子が、全長抗体（例えば、少なくとも１つ、好ましくは２つの完全重鎖と、少なくとも１つ、好ましくは２つの完全軽鎖とを含む抗体）、または抗原結合性断片（例えば、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、一本鎖Ｆｖ断片、単一ドメイン抗体、ダイアボディ（ｄＡｂ）、二価抗体、または二特異性抗体もしくはその断片、その単一ドメインバリアント、またはラクダ抗体）である、先行する請求項のいずれか１項に記載の多特異性分子または抗ＴＣＲβＶ抗体分子。
【請求項６０】
抗ＴＣＲβＶ抗体分子が、例えば、表３に記載される、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧＡ１、ＩｇＧＡ２、ＩｇＧ４、ＩｇＪ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、もしくはＩｇＥから選択される１つもしくは複数の重鎖定常領域、またはその断片を含む、先行する請求項のいずれか１項に記載の多特異性分子または抗ＴＣＲβＶ抗体分子。
【請求項６１】
抗ＴＣＲβＶ抗体分子が、ＩｇＭの重鎖定常領域またはその断片を含み、必要に応じて、ＩｇＭ重鎖定常領域が、配列番号７３の配列、またはそれに対して少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列を含む、先行する請求項のいずれか１項に記載の多特異性分子または抗ＴＣＲβＶ抗体分子。
【請求項６２】
抗ＴＣＲβＶ抗体分子が、ＩｇＪの重鎖定常領域またはその断片を含み、必要に応じて、ＩｇＪ重鎖定常領域が、配列番号７６の配列、またはそれに対して少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列を含む、先行する請求項のいずれか１項に記載の多特異性分子または抗ＴＣＲβＶ抗体分子。
【請求項６３】
抗ＴＣＲβＶ抗体分子が、ＩｇＧＡ１の重鎖定常領域またはその断片を含み、必要に応じて、ＩｇＧＡ１重鎖定常領域が、配列番号７４の配列、またはそれに対して少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列を含む、先行する請求項のいずれか１項に記載の多特異性分子または抗ＴＣＲβＶ抗体分子。
【請求項６４】
抗ＴＣＲβＶ抗体分子が、ＩｇＧＡ２の重鎖定常領域またはその断片を含み、必要に応じて、ＩｇＧＡ２重鎖定常領域が、表３に列挙される配列、例えば、配列番号７５の配列、またはそれに対して少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列を含む、先行する請求項のいずれか１項に記載の多特異性分子または抗ＴＣＲβＶ抗体分子。
【請求項６５】
抗ＴＣＲβＶ抗体分子が、例えば、表３に記載される、カッパもしくはラムダの軽鎖定常領域から選択される軽鎖定常領域、またはその断片を含む、先行する請求項のいずれか１項に記載の多特異性分子または抗ＴＣＲβＶ抗体分子。
【請求項６６】
抗ＴＣＲβＶ抗体分子が、カッパ鎖の軽鎖定常領域またはその断片を含み、必要に応じて、カッパ鎖定常領域が、配列番号３９の配列、またはそれに対して少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列を含む、先行する請求項のいずれか１項に記載の多特異性分子または抗ＴＣＲβＶ抗体分子。
【請求項６７】
抗ＴＣＲβＶ抗体分子が、
（ｉ）例えば、表３に記載される、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧＡ１、ＩｇＧＡ２、ＩｇＧ４、ＩｇＪ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、もしくはＩｇＥから選択される重鎖定常領域、またはその断片を含む、１つまたは複数の重鎖定常領域、および
（ｉｉ）例えば、表３に記載される、カッパまたはラムダの軽鎖定常領域から選択される軽鎖定常領域、またはその断片を含む、軽鎖定常領域
を含む、先行する請求項のいずれか１項に記載の多特異性分子または抗ＴＣＲβＶ抗体分子。
【請求項６８】
抗ＴＣＲβＶ抗体分子が、
（ｉ）重鎖定常領域であって、
（ａ）配列番号７３の配列、またはそれに対して少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列を含む、ＩｇＭ重鎖定常領域またはその断片、
（ｂ）配列番号７４の配列、またはそれに対して少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列を含む、ＩｇＧＡ１重鎖定常領域またはその断片、または
（ｃ）配列番号７５の配列、またはそれに対して少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列を含む、ＩｇＧＡ２重鎖定常領域またはその断片を含む、重鎖定常領域、および
（ｉｉ）配列番号３９の配列、またはそれに対して少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列を含む、カッパ鎖定常領域を含む、軽鎖定常領域
を含み、
必要に応じて、抗ＴＣＲβＶ抗体分子が、ＩｇＪ重鎖定常領域またはその断片をさらに含み、ＩｇＪ重鎖定常領域が、配列番号７６の配列、またはそれに対して少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列を含む、先行する請求項のいずれか１項に記載の多特異性分子または抗ＴＣＲβＶ抗体分子。
【請求項６９】
第２の部分が、腫瘍標的化部分である、請求項１から１６または５３から６８のいずれか１項に記載の多特異性分子。
【請求項７０】
第２の部分が、サイトカイン分子である、請求項１から１６または５３から６８のいずれか１項に記載の多特異性分子。
【請求項７１】
第２の部分が、間質改変部分である、請求項１から１６または５３から６８のいずれか１項に記載の多特異性分子。
【請求項７２】
第２の部分が、第１の部分以外の抗ＴＣＲβＶ抗体分子である、請求項１から１６または５３から６８のいずれか１項に記載の多特異性分子。
【請求項７３】
第１および／または第２の部分が、免疫細胞、例えば、エフェクター細胞に結合し、それを活性化する、請求項１から１６または５３から７２のいずれか１項に記載の多特異性分子。
【請求項７４】
第１および／または第２の部分が、免疫細胞、例えば、エフェクター細胞に結合するが、それを活性化しない、請求項１から１６または５３から７２のいずれか１項に記載の多特異性分子。
【請求項７５】
第２の部分が、ＮＫ細胞エンゲージャー、抗ＴＣＲβＶ抗体分子以外のＴ細胞エンゲージャー、Ｂ細胞エンゲージャー、樹状細胞エンゲージャー、もしくはマクロファージ細胞エンゲージャー、またはこれらの組合せから選択される、請求項１から１６または５３から７４のいずれか１項に記載の多特異性分子。
【請求項７６】
腫瘍標的化部分が、がん抗原に結合する抗体分子（例えば、ＦａｂもしくはｓｃＦｖ）、受容体分子（例えば、受容体、受容体断片、もしくはその機能性バリアント）、もしくはリガンド分子（例えば、リガンド、リガンド断片、もしくはその機能性バリアント）、またはこれらの組合せを含む、請求項１から１６または５３から６９のいずれか１項に記載の多特異性分子。
【請求項７７】
腫瘍標的化部分が、がん、例えば、血液がん、固形腫瘍、転移がん、軟部組織腫瘍、転移病変、またはこれらの組合せに存在するがん抗原に結合する、請求項１から１６、５３から６９、または７６のいずれか１項に記載の多特異性分子。
【請求項７８】
がん抗原が、腫瘍抗原もしくは間質抗原、または血液抗原である、請求項７７に記載の多特異性分子。
【請求項７９】
がん抗原が、ＢＣＭＡ、ＦｃＲＨ５、ＰＤＬ１、ＣＤ４７、ガングロシド（ｇａｎｇｌｏｓｉｄｅ）２（ＧＤ２）、前立腺幹細胞抗原（ＰＳＣＡ）、前立腺特異的膜抗原（ＰＭＳＡ）、前立腺特異的抗原（ＰＳＡ）、癌胎児性抗原（ＣＥＡ）、Ｒｏｎキナーゼ、ｃ−Ｍｅｔ、未成熟ラミニン受容体、ＴＡＧ−７２、ＢＩＮＧ−４、カルシウム活性化塩素チャネル２、サイクリン−Ｂ１、９Ｄ７、Ｅｐ−ＣＡＭ、ＥｐｈＡ３、Ｈｅｒ２／ｎｅｕ、テロメラーゼ、ＳＡＰ−１、サバイビン、ＮＹ−ＥＳＯ−１／ＬＡＧＥ−１、ＰＲＡＭＥ、ＳＳＸ−２、メラン−Ａ／ＭＡＲＴ−１、Ｇｐ１００／ｐｍｅｌ１７、チロシナーゼ、ＴＲＰ−１／−２、ＭＣ１Ｒ、β−カテニン、ＢＲＣＡ１／２、ＣＤＫ４、ＣＭＬ６６、フィブロネクチン、ｐ５３、Ｒａｓ、ＴＧＦ−Β受容体、ＡＦＰ、ＥＴＡ、ＭＡＧＥ、ＭＵＣ−１、ＣＡ−１２５、ＢＡＧＥ、ＧＡＧＥ、ＮＹ−ＥＳＯ−１、β−カテニン、ＣＤＫ４、ＣＤＣ２７、αアクチニン−４、ＴＲＰ１／ｇｐ７５、ＴＲＰ２、ｇｐ１００、メラン−Ａ／ＭＡＲＴ１、ガングリオシド、ＷＴ１、ＥｐｈＡ３、上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）、ＭＡＲＴ−２、ＭＡＲＴ−１、ＭＵＣ１、ＭＵＣ２、ＭＵＭ１、ＭＵＭ２、ＭＵＭ３、ＮＡ８８−１、ＮＰＭ、ＯＡ１、ＯＧＴ、ＲＣＣ、ＲＵＩ１、ＲＵＩ２、ＳＡＧＥ、ＴＲＧ、ＴＲＰ１、ＴＳＴＡ、葉酸受容体アルファ、Ｌ１−ＣＡＭ、ＣＡＩＸ、ｇｐＡ３３、ＧＤ３、ＧＭ２、ＶＥＧＦＲ、インテグリン（インテグリンアルファＶベータ３、インテグリンアルファ５ベータ１）、炭水化物（Ｌｅ）、ＩＧＦ１Ｒ、ＥＰＨＡ３、ＴＲＡＩＬＲ１、ＴＲＡＩＬＲ２、ＲＡＮＫＬ、（ＦＡＰ）、ＴＧＦ−ベータ、ヒアルロン酸、コラーゲン、例えば、ＩＶ型コラーゲン、テネイシンＣ、またはテネイシンＷから選択される、請求項７７または７８に記載の多特異性分子。
【請求項８０】
腫瘍標的化部分が、ＢＣＭＡ標的化部分またはＦｃＲＨ５標的化部分である、請求項１から１６、５３から６９、または７６から７９のいずれか１項に記載の多特異性分子。
【請求項８１】
がんが、膵臓がん（例えば、膵臓腺癌）、乳がん、結腸直腸がん、肺がん（例えば、小細胞もしくは非小細胞肺がん）、皮膚がん、卵巣がん、または肝臓がんを含むがこれらに限定されない固形腫瘍である、請求項７７から８０のいずれか１項に記載の多特異性分子。
【請求項８２】
がんが、Ｂ細胞もしくはＴ細胞悪性腫瘍、例えば、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫（例えば、Ｂ細胞リンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、慢性リンパ球性白血病、マントル細胞リンパ腫、辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫、リンパ形質細胞性リンパ腫、有毛細胞性白血病）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群、多発性骨髄腫、および急性リンパ球性白血病を含むがこれらに限定されない血液がんである、請求項７７から８０のいずれか１項に記載の多特異性分子。
【請求項８３】
サイトカイン分子が、インターロイキン−２（ＩＬ−２）、インターロイキン−７（ＩＬ−７）、インターロイキン−１２（ＩＬ−１２）、インターロイキン−１５（ＩＬ−１５）、インターロイキン−１８（ＩＬ−１８）、インターロイキン−２１（ＩＬ−２１）、もしくはインターフェロンガンマ、またはこれらの断片、バリアント、もしくは組合せから選択される、請求項１から１６、５３から６８、または７０のいずれか１項に記載の多特異性分子。
【請求項８４】
サイトカイン分子が、単量体または二量体である、請求項１から１６、５３から６８、７０、または８３のいずれか１項に記載の多特異性分子。
【請求項８５】
サイトカイン分子が、受容体二量体化ドメイン、例えば、ＩＬ１５Ｒアルファ二量体化ドメインをさらに含む、請求項１から１６、５３から６８、７０、または８３から８４のいずれか１項に記載の多特異性分子。
【請求項８６】
サイトカイン分子（例えば、ＩＬ−１５）および受容体二量体化ドメイン（例えば、ＩＬ１５Ｒアルファ二量体化ドメイン）が、共有結合的に連結されていない、例えば、非共有結合的に会合している、請求項１から１６、５３から６８、７０、または８３から８５のいずれか１項に記載の多特異性分子。
【請求項８７】
ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧＡ１、ＩｇＧＡ２、ＩｇＧ４、ＩｇＪ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、もしくはＩｇＥの重鎖定常領域、またはその断片から選択される免疫グロブリン定常領域（例えば、Ｆｃ領域）をさらに含み、必要に応じて、重鎖定常領域が、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、またはＩｇＧ４の重鎖定常領域を含む、請求項１から１６または５３から８６のいずれか１項に記載の多特異性分子。
【請求項８８】
免疫グロブリン定常領域（例えば、Ｆｃ領域）が、腫瘍標的化部分、サイトカイン分子、または間質改変部分のうちの１つまたは複数に連結されている、例えば、共有結合的に連結されている、請求項８７に記載の多特異性分子。
【請求項８９】
第１および第２の免疫グロブリン鎖定常領域（例えば、Ｆｃ領域）の境界部が、例えば、操作されていない境界部と比較して、二量体化を増加または減少させるように変更、例えば、突然変異されている、請求項８７または８８に記載の多特異性分子。
【請求項９０】
免疫グロブリン鎖定常領域（例えば、Ｆｃ領域）の二量体化が、第１および第２のＦｃ領域のＦｃ境界部に、対になった孔と突起（「ノブ・イン・ホール」）、静電相互作用、または鎖交換のうちの１つまたは複数を提供し、それによって、例えば、操作されていない境界部と比較して、より高い比のヘテロ多量体：ホモ多量体が形成される、請求項８９に記載の多特異性分子。
【請求項９１】
リンカー、例えば、本明細書に記載されるリンカーをさらに含み、必要に応じて、リンカーが、切断性リンカー、非切断性リンカー、ペプチドリンカー、可撓性リンカー、剛性リンカー、ヘリックスリンカー、または非ヘリックスリンカーから選択される、請求項１から１６または５３から９０のいずれかに記載の多特異性分子。
【請求項９２】
請求項１７から５３のいずれかに記載の抗ＴＣＲβＶ抗体分子をコードするヌクレオチド配列、またはそれに対して少なくとも７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の同一性を有するヌクレオチド配列を含む、単離された核酸分子。
【請求項９３】
請求項１から１６もしくは５３から９１のいずれかに記載の多特異性分子をコードするヌクレオチド配列、またはそれに対して少なくとも７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の同一性を有するヌクレオチド配列を含む、単離された核酸分子。
【請求項９４】
請求項９２または９３のいずれかに記載の核酸分子のうちの１つまたは複数を含むベクター、例えば、発現ベクター。
【請求項９５】
請求項９２もしくは９３のいずれかに記載の核酸分子、または請求項９４に記載のベクターを含む細胞、例えば、宿主細胞。
【請求項９６】
請求項１７から５３のいずれかに記載の抗ＴＣＲβＶ抗体分子、または請求項１から１６もしくは５３から９１のいずれかに記載の多特異性分子を作製する、例えば、産生もしくは製造する方法であって、請求項９５に記載の宿主細胞を、好適な条件、例えば、抗ＴＣＲβＶ抗体分子または多特異性分子の発現に好適な条件下において培養するステップを含む、方法。
【請求項９７】
請求項１７から５３のいずれかに記載の抗ＴＣＲβＶ抗体分子または請求項１から１６もしくは５３から９１のいずれかに記載の多特異性分子と、薬学的に許容される担体、賦形剤、または安定化剤とを含む、医薬組成物。
【請求項９８】
対象において免疫応答をモジュレートする、例えば、増強させる方法であって、対象に、有効量の、Ｔ細胞受容体ベータ可変領域（ＴＣＲβＶ）に結合する（例えば、特異的に結合する）抗体分子（「抗ＴＣＲβＶ抗体分子」）を投与するステップを含む、方法。
【請求項９９】
対象において免疫応答をモジュレートする、例えば、増強させる方法であって、対象に、有効量の請求項１から１６または５３から９１のいずれかに記載の多特異性分子を投与するステップを含む、方法。
【請求項１００】
対象において免疫細胞集団を拡大させる、例えば、その数を増加させるステップを含む、請求項９８または９９に記載の方法。
【請求項１０１】
免疫細胞集団を拡大させる、例えば、その数を増加させる方法であって、免疫細胞集団を、有効量の、Ｔ細胞受容体ベータ可変領域（ＴＣＲβＶ）に結合する（例えば、特異的に結合する）抗体分子（「抗ＴＣＲβＶ抗体分子」）と接触させるステップを含む、方法。
【請求項１０２】
免疫細胞集団を拡大させる、例えば、その数を増加させる方法であって、免疫細胞集団を、有効量の請求項１から１６または５３から９１のいずれかに記載の多特異性分子と接触させるステップを含む、方法。
【請求項１０３】
拡大が、ｉｎ  ｖｉｖｏまたはｅｘ  ｖｉｖｏ（例えば、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ）で生じる、請求項１００から１０２のいずれかに記載の方法。
【請求項１０４】
免疫細胞集団が、ＴＣＲβＶを発現する細胞、例えば、ＴＣＲβＶ＋細胞を含む、請求項１００から１０３のいずれかに記載の方法。
【請求項１０５】
ＴＣＲβＶを発現する細胞が、Ｔ細胞、例えば、ＣＤ８＋  Ｔ細胞、ＣＤ３＋  Ｔ細胞、またはＣＤ４＋  Ｔ細胞である、請求項１０４に記載の方法。
【請求項１０６】
免疫細胞集団が、Ｔ細胞（例えば、ＣＤ４  Ｔ細胞、ＣＤ８  Ｔ細胞（例えば、エフェクターＴ細胞もしくはメモリーＴ細胞（例えば、メモリーエフェクターＴ細胞（例えば、ＴＥＭ細胞、例えば、ＴＥＭＲＡ細胞）、または腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）を含む、請求項１００から１０５のいずれかに記載の方法。
【請求項１０７】
免疫細胞集団が、Ｔ細胞、ナチュラルキラー細胞、Ｂ細胞、または骨髄性細胞を含む、請求項１００から１０６のいずれかに記載の方法。
【請求項１０８】
免疫細胞集団が、健常な対象から得られる、請求項１００から１０７のいずれかに記載の方法。
【請求項１０９】
免疫細胞集団が、例えば、本明細書に記載される疾患、例えば、がんを有する対象から（例えば、対象由来のアフェレーシス試料から）得られ、必要に応じて、免疫細胞集団が、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）を含む、請求項１００から１０８のいずれかに記載の方法。
【請求項１１０】
少なくとも１．１〜１０倍の拡大（例えば、少なくとも１．１倍、１．２倍、１．３倍、１．４倍、１．５倍、２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、または１０倍の拡大）をもたらす、請求項１００から１０９のいずれかに記載の方法。
【請求項１１１】
細胞集団を、免疫細胞の拡大を促進する、例えば、増加させる薬剤と接触させるステップをさらに含む、請求項１００から１１０のいずれかに記載の方法。
【請求項１１２】
細胞集団を、免疫チェックポイント阻害剤、例えば、ＰＤ−１阻害剤と接触させるステップをさらに含む、請求項１００から１１１のいずれかに記載の方法。
【請求項１１３】
細胞集団を、４−１ＢＢ（ＣＤ１２７）アゴニスト、例えば、抗４−１ＢＢ抗体と接触させるステップをさらに含む、請求項１００から１１２のいずれかに記載の方法。
【請求項１１４】
細胞集団を、非分裂細胞、例えば、フィーダー細胞、例えば、照射した同種ヒトＰＢＭＣの集団と接触させるステップをさらに含む、請求項１００から１１３のいずれかに記載の方法。
【請求項１１５】
細胞集団を、１つまたは複数のサイトカイン、例えば、ＩＬ−２、ＩＬ−７、ＩＬ−１５、またはこれらの組合せを含む適切な培地（例えば、本明細書に記載される培地）において拡大させる、請求項１００から１１４のいずれかに記載の方法。
【請求項１１６】
細胞集団を、少なくとも約４時間、６時間、１０時間、１２時間、１５時間、１８時間、２０時間、もしくは２２時間、または少なくとも１日間、２日間、３日間、４日間、５日間、６日間、７日間、８日間、９日間、１０日間、１１日間、１２日間、１３日間、１４日間、１５日間、１，６日間、１７日間、１８日間、１９日間、２０日間、もしくは２１日間、または少なくとも約１週間、２週間、３週間、４週間、５週間、６週間、７週間、もしくは８週間の期間、拡大させる、請求項１００から１１５のいずれかに記載の方法。
【請求項１１７】
免疫細胞集団の拡大が、ＣＤ３分子、例えば、ＣＤ３イプシロン（ＣＤ３ｅ）分子、またはＴＣＲアルファ（ＴＣＲα）分子に結合する抗体を用いた類似の細胞集団の拡大と比較される、請求項１００から１１６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１８】
免疫細胞集団の拡大が、抗ＴＣＲβＶ抗体分子または抗ＴＣＲβＶ抗体分子を含む多特異性分子と接触していない類似の細胞集団の拡大と比較される、請求項１００から１１７のいずれかに記載の方法。
【請求項１１９】
メモリーエフェクターＴ細胞、例えば、ＴＥＭ細胞、例えば、ＴＥＭＲＡ細胞集団の拡大が、ＣＤ３分子、例えば、ＣＤ３イプシロン（ＣＤ３ｅ）分子、またはＴＣＲアルファ（ＴＣＲα）分子に結合する抗体を用いた類似の細胞集団の拡大と比較される、請求項１００から１１８のいずれかに記載の方法。
【請求項１２０】
拡大させたエフェクターメモリーＴ細胞集団が、
（ｉ）検出可能なレベルのＣＤ４５ＲＡを有する、例えば、ＣＤ４５ＲＡを発現もしくは再発現する細胞、
（ｉｉ）ＣＣＲ７の低い発現を有するかもしくはその発現を有さない細胞、および／または
（ｉｉｉ）検出可能なレベルのＣＤ９５を有する、例えば、ＣＤ９５を発現する細胞、
例えば、ＣＤ４５ＲＡ＋、ＣＣＲ７−、ＣＤ９５＋  Ｔ細胞集団を含み、必要に応じて、Ｔ細胞が、ＣＤ３＋、ＣＤ４＋、またはＣＤ８＋  Ｔ細胞を含む、請求項１１９に記載の方法。
【請求項１２１】
Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）アルファおよび／またはＴＣＲベータ分子を含むＴＣＲを発現するＴ細胞、例えば、ＴＣＲアルファ−ベータＴ細胞（αβ  Ｔ細胞）の拡大、例えば、選択的または優先的な拡大をもたらす、請求項１００から１２０のいずれかに記載の方法。
【請求項１２２】
ＴＣＲガンマおよび／またはＴＣＲデルタ分子を含むＴＣＲを発現するＴ細胞、例えば、ＴＣＲガンマ−デルタＴ細胞（γδ  Ｔ細胞）の拡大を上回るαβＴ細胞の拡大をもたらす、請求項１２１に記載の方法。
【請求項１２３】
対象における疾患、例えば、がんを処置する方法であって、対象に、有効量の、Ｔ細胞受容体ベータ可変領域（ＴＣＲβＶ）に結合する（例えば、特異的に結合する）抗体分子（「抗ＴＣＲβＶ抗体分子」）を投与するステップを含み、それによって、がんを処置する、方法。
【請求項１２４】
対象における疾患、例えば、がんを処置する際における使用のための、Ｔ細胞受容体ベータ可変領域（ＴＣＲβＶ）に結合する（例えば、特異的に結合する）抗体分子（「抗ＴＣＲβＶ抗体分子」）を含む組成物。
【請求項１２５】
対象における疾患、例えば、がんを処置するための医薬の製造における使用のための、Ｔ細胞受容体ベータ可変領域（ＴＣＲβＶ）に結合する（例えば、特異的に結合する）抗体分子（「抗ＴＣＲβＶ抗体分子」）を含む組成物。
【請求項１２６】
対象における疾患、例えば、がんを処置する方法であって、対象に、有効量の請求項１から１６または５３から９１のいずれかに記載の多特異性分子を投与するステップを含み、それによってがんを処置する、方法。
【請求項１２７】
対象における疾患、例えば、がんを処置する際における使用のための、請求項１から１６または５３から９１のいずれかに記載の多特異性分子を含む組成物。
【請求項１２８】
対象における疾患、例えば、がんを処置するための医薬の製造における使用のための、請求項１から１６または５３から９１のいずれかに記載の多特異性分子を含む組成物。
【請求項１２９】
対象におけるサイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）および／または神経毒性（ＮＴ）、例えば、処置、例えば以前に投与された処置と関連するＣＲＳおよび／またはＮＴを処置する、例えば、予防または低減する方法であって、対象に、有効量の、Ｔ細胞受容体ベータ可変領域（ＴＣＲβＶ）に結合する（例えば、特異的に結合する）抗体分子（「抗ＴＣＲβＶ抗体分子」）を投与するステップを含み、それによって、対象におけるＣＲＳおよび／またはＮＴを予防する、方法。
【請求項１３０】
対象におけるサイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）および／または神経毒性（ＮＴ）、例えば、処置、例えば以前に投与された処置と関連するＣＲＳおよび／またはＮＴを処置する、例えば、予防または低減する方法であって、対象に、有効量の、請求項１から１６または５３から９１のいずれかに記載の多特異性分子を投与するステップを含み、それによって、対象におけるＣＲＳおよび／またはＮＴを予防する、方法。
【請求項１３１】
疾患、例えば、がんを有する対象において、療法、例えば、処置を、Ｔ細胞へと標的化する方法であって、有効量の、
（ｉ）Ｔ細胞受容体ベータ可変領域（ＴＣＲβＶ）に結合する（例えば、特異的に結合する）抗体分子（「抗ＴＣＲβＶ抗体分子」）、および
（ｉｉ）例えば、本明細書に記載される、療法、例えば、腫瘍標的化療法（例えば、がん抗原に結合する抗体）
を投与するステップを含み、それによって、対象において療法をＴ細胞へと標的化する、方法。
【請求項１３２】
疾患、例えば、がんを有する対象において、療法、例えば、処置を、Ｔ細胞へと標的化する方法であって、有効量の、
（ｉ）請求項１から１６または５３から９１のいずれかに記載の多特異性分子、および
（ｉｉ）例えば、本明細書に記載される、療法、例えば、腫瘍標的化療法（例えば、がん抗原に結合する抗体）
を投与するステップを含み、それによって、対象において療法をＴ細胞へと標的化する、方法。
【請求項１３３】
（ｉｉ）単独の投与と比較して、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）の低減（例えば、ＣＲＳの持続期間がより短いこともしくはＣＲＳがないこと）、またはＣＲＳの重症度の低減（例えば、重度のＣＲＳ、例えば、ＣＲＳグレード４もしくは５の不在）をもたらす、請求項１３１または１３２に記載の方法。
【請求項１３４】
抗ＴＣＲβＶ抗体または多特異性分子が、ＣＲＳと関連する処置の投与と並行してまたはその後に投与される、請求項１３１から１３３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３５】
がんを有する対象を処置する方法であって、
対象について、ＴＣＲβＶサブファミリーのステータスの値を取得するステップであって、前記値が、対象由来の試料におけるＴＣＲβＶ分子の存在、例えば、レベルまたは活性の尺度を含む、ステップと、
対象に、有効量の、Ｔ細胞受容体ベータ可変領域（ＴＣＲβＶ）に結合する（例えば、特異的に結合する）抗体分子（「抗ＴＣＲβＶ抗体分子」）を投与するステップと
を含み、それによって、対象を処置する、方法。
【請求項１３６】
がんを有する対象を処置する方法であって、
対象について、ＴＣＲβＶサブファミリーのステータスの値を取得するステップであって、前記値が、対象由来の試料におけるＴＣＲβＶ分子の存在、例えば、レベルまたは活性の尺度を含む、ステップと、
対象に、有効量の、請求項１から１６または５３から９１のいずれかに記載の多特異性分子を投与するステップと
を含み、それによって、対象を処置する、方法。
【請求項１３７】
がんを有する対象を処置する方法であって、対象に、有効量の、Ｔ細胞受容体ベータ可変領域（ＴＣＲβＶ）に結合する（例えば、特異的に結合する）抗体分子（「抗ＴＣＲβＶ抗体分子」）を投与するステップを含み、対象は、例えば、本明細書に記載される１つまたは複数のＴＣＲβＶサブファミリーのレベルまたは活性が、例えば、健常対象、例えば、がんを有さない対象における１つまたは複数のＴＣＲβＶサブファミリーの参照レベルまたは活性と比較して、高い、例えば、増加している、方法。
【請求項１３８】
がんを有する対象を処置する方法であって、対象に、有効量の、請求項１から１６または５３から９１のいずれかに記載の多特異性分子を投与するステップを含み、対象は、例えば、本明細書に記載される１つまたは複数のＴＣＲβＶサブファミリーのレベルまたは活性が、例えば、健常対象、例えば、がんを有さない対象における１つまたは複数のＴＣＲβＶサブファミリーの参照レベルまたは活性と比較して、高い、例えば、増加している、方法。
【請求項１３９】
がんを有する対象由来の免疫エフェクター細胞集団を拡大させる方法であって、
（ｉ）対象から、免疫エフェクター細胞集団を含む生体試料、例えば、末梢血試料、生検試料、または骨髄試料を単離するステップと、
（ｉｉ）対象について、例えば、対象由来の生体試料において、１つまたは複数のＴＣＲβＶサブファミリーのステータスの値を取得するステップであって、前記値が、参照値、例えば、健常対象由来の試料と比較した、対象由来の試料におけるＴＣＲβＶサブファミリーの存在、例えば、レベルまたは活性の尺度を含み、対象における参照物、例えば、健常対象と比較して高い、例えば、増加した値が、対象におけるがんの存在を示す、ステップと、
（ｉｉｉ）免疫エフェクター細胞集団を含む生体試料を、例えば、本明細書に記載される抗ＴＣＲβＶ抗体分子と接触させるステップと
を含む、方法。
【請求項１４０】
対象に、抗ＴＣＲβＶ抗体分子と接触させた免疫エフェクター細胞集団を投与するステップをさらに含む、請求項１３９に記載の方法。
【請求項１４１】
がんを有する対象由来の免疫エフェクター細胞集団を拡大させる方法であって、
（ｉ）対象から、免疫エフェクター細胞集団を含む生体試料、例えば、末梢血試料、生検試料、または骨髄試料を単離するステップと、
（ｉｉ）対象について、例えば、対象由来の生体試料において、１つまたは複数のＴＣＲβＶサブファミリーのステータスの値を取得するステップであって、前記値が、参照値、例えば、健常対象由来の試料と比較した、対象由来の試料におけるＴＣＲβＶサブファミリーの存在、例えば、レベルまたは活性の尺度を含み、対象における参照物、例えば、健常対象と比較して高い、例えば、増加した値が、対象におけるがんの存在を示す、ステップと、
（ｉｉｉ）免疫エフェクター細胞集団を含む生体試料を、請求項１から１６または５３から９１のいずれかに記載の多特異性分子と接触させるステップと
を含む、方法。
【請求項１４２】
対象に、多特異性分子と接触させた免疫エフェクター細胞集団を投与するステップをさらに含む、請求項１４１に記載の方法。
【請求項１４３】
免疫エフェクター細胞集団におけるＴ細胞機能（例えば、細胞傷害活性、サイトカイン分泌、または脱顆粒化）を、例えば、参照集団、例えば、抗ＴＣＲβＶ抗体分子と接触していないその他は類似の集団または健常対象（例えば、がんを有さない対象）から得られた免疫エフェクター細胞集団と比較して測定するステップを含む、請求項１３９から１４２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４４】
免疫エフェクター細胞集団を含む生体試料を、生体試料において高い、例えば、増加しているとして特定された１つまたは複数のＴＣＲβＶサブファミリー（例えば、同じＴＣＲβＶサブファミリー）に結合する抗ＴＣＲβＶ抗体分子または多特異性分子と接触させる、請求項１３９から１４３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４５】
免疫エフェクター細胞集団を含む生体試料を、生体試料において高い、例えば、増加しているとして特定された１つまたは複数のＴＣＲβＶサブファミリー（例えば、異なるＴＣＲβＶサブファミリー）に結合しない抗ＴＣＲβＶ抗体分子または多特異性分子と接触させる、請求項１３９から１４４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４６】
がんが、黒色腫、膵臓がん（例えば、膵臓腺癌）、乳がん、結腸直腸がん（ＣＲＣ）、肺がん（例えば、小細胞もしくは非小細胞肺がん）、皮膚がん、卵巣がん、または肝臓がんを含むがこれらに限定されない固形腫瘍である、請求項１３９から１４５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４７】
がんが、Ｂ細胞もしくはＴ細胞悪性腫瘍、例えば、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫（例えば、Ｂ細胞リンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、濾胞性リンパ腫、慢性リンパ球性白血病（Ｂ−ＣＬＬ）、マントル細胞リンパ腫、辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫、リンパ形質細胞性リンパ腫、有毛細胞性白血病）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群、多発性骨髄腫、および急性リンパ球性白血病を含むがこれらに限定されない血液がんである、請求項１３９から１４５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４８】
がんが、Ｂ−ＣＬＬであり、ＴＣＲβＶ分子が、
（ｉ）例えば、ＴＣＲβ  Ｖ６−４＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−４＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ６−９＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−８＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−６＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ６−６＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−２＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−３＊０１、もしくはＴＣＲβ  Ｖ６−１＊０１を含む、ＴＣＲβ  Ｖ６サブファミリー、
（ｉｉ）ＴＣＲβ  Ｖ５−６＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ５−４＊０１、もしくはＴＣＲβ  Ｖ５−８＊０１を含む、ＴＣＲβ  Ｖ５サブファミリー、
（ｉｉｉ）ＴＣＲβ  Ｖ３−１＊０１を含む、ＴＣＲβ  Ｖ３サブファミリー、
（ｉｖ）ＴＣＲβ  Ｖ２＊０１を含む、ＴＣＲβ  Ｖ２サブファミリー、または
（ｖ）ＴＣＲβ  Ｖ１９＊０１もしくはＴＣＲβ  Ｖ１９＊０２を含む、ＴＣＲβ  Ｖ１９サブファミリー
を含む、請求項１３９から１４７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４９】
がんが、黒色腫であり、ＴＣＲβＶ分子が、例えば、ＴＣＲβ  Ｖ６−４＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−４＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ６−９＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−８＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−６＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ６−６＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−２＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−３＊０１、またはＴＣＲβ  Ｖ６−１＊０１を含む、ＴＣＲβ  Ｖ６サブファミリーを含む、請求項１３９から１４７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５０】
がんが、ＤＬＢＣＬであり、ＴＣＲβＶ分子が、
（ｉ）ＴＣＲβ  Ｖ１３＊０１を含む、ＴＣＲβ  Ｖ１３サブファミリー、
（ｉｉ）ＴＣＲβ  Ｖ３−１＊０１を含む、ＴＣＲβ  Ｖ３サブファミリー、または
（ｉｉｉ）ＴＣＲβ  Ｖ２３サブファミリー
を含む、請求項１３９から１４７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５１】
がんが、ＣＲＣであり、ＴＣＲβＶ分子が、
（ｉ）ＴＣＲβ  Ｖ１９＊０１もしくはＴＣＲβ  Ｖ１９＊０２を含む、ＴＣＲβ  Ｖ１９サブファミリー、
（ｉｉ）ＴＣＲβ  Ｖ１２−４＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ１２−３＊０１、もしくはＴＣＲβ  Ｖ１２−５＊０１を含む、ＴＣＲβ  Ｖ１２サブファミリー、
（ｉｉｉ）ＴＣＲβ  Ｖ１６＊０１を含む、ＴＣＲβ  Ｖ１６サブファミリー、または
（ｉｖ）ＴＣＲβ  Ｖ２１サブファミリー
を含む、請求項１３９から１４７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５２】
腫瘍が、抗原、例えば、腫瘍抗原、例えば、腫瘍関連抗原もしくはネオ抗原を含み、かつ／または
１つもしくは複数のＴＣＲβＶサブファミリーが、腫瘍抗原を認識する、例えば、それに結合する、
請求項１３９から１５１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５３】
試料が、血液試料、例えば、末梢血試料、生検、例えば、腫瘍生検、または骨髄試料を含む、請求項１３９から１５２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５４】
試料が、免疫細胞、例えば、ＴＣＲＢＶを発現する細胞（例えば、ＴＣＲＢＶ＋細胞）、Ｔ細胞、またはＮＫ細胞を含む生体試料を含む、請求項１３９から１５２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５５】
Ｔ細胞が、ＣＤ４  Ｔ細胞、ＣＤ８  Ｔ細胞（例えば、エフェクターＴ細胞もしくはメモリーＴ細胞（例えば、メモリーエフェクターＴ細胞（例えば、ＴＥＭ細胞、例えば、ＴＥＭＲＡ細胞）、または腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）を含む、請求項１５４に記載の方法。
【請求項１５６】
ＴＣＲＶＢ発現免疫エフェクター細胞、例えば、Ｔ細胞を含む免疫エフェクター細胞集団の拡大、例えば、ｉｎ  ｖｉｖｏまたはｅｘ  ｖｉｖｏでの拡大、少なくとも１．１〜１０００倍、例えば、１．１〜１０倍、１０〜１００倍、１００〜２００倍、２００〜３００倍、３００〜４００倍、４００〜５００倍、５００〜６００倍、６００〜７００倍、７００〜８００倍、８００〜９００倍、または９００〜１０００倍の拡大をもたらす、請求項１３９から１５５のいずれかに記載の方法。
【請求項１５７】
細胞集団を、１つまたは複数のサイトカイン、例えば、ＩＬ−２、ＩＬ−７、ＩＬ−１５、またはこれらの組合せを含む適切な培地（例えば、本明細書に記載される培地）において拡大させる、請求項１３９から１５６のいずれかに記載の方法。
【請求項１５８】
細胞集団を、少なくとも約４時間、６時間、１０時間、１２時間、１５時間、１８時間、２０時間、もしくは２２時間、または少なくとも１日間、２日間、３日間、４日間、５日間、６日間、７日間、８日間、９日間、１０日間、１１日間、１２日間、１３日間、１４日間、１５日間、１，６日間、１７日間、１８日間、１９日間、２０日間、もしくは２１日間、または少なくとも約１週間、２週間、３週間、４週間、５週間、６週間、７週間、もしくは８週間の期間、拡大させる、請求項１３９から１５７のいずれかに記載の方法。
【請求項１５９】
免疫細胞集団の拡大が、ＣＤ３分子、例えば、ＣＤ３イプシロン（ＣＤ３ｅ）分子、またはＴＣＲアルファ（ＴＣＲα）分子に結合する抗体を用いた類似の細胞集団の拡大と比較される、請求項１３９から１５８のいずれかに記載の方法。
【請求項１６０】
免疫細胞集団の拡大が、抗ＴＣＲβＶ抗体分子と接触していない類似の細胞集団の拡大と比較される、請求項１３９から１５９のいずれかに記載の方法。
【請求項１６１】
メモリーエフェクターＴ細胞、例えば、ＴＥＭ細胞、例えば、ＴＥＭＲＡ細胞集団の拡大が、ＣＤ３分子、例えば、ＣＤ３イプシロン（ＣＤ３ｅ）分子、またはＴＣＲアルファ（ＴＣＲα）分子に結合する抗体を用いた類似の細胞集団の拡大と比較される、請求項１３９から１６０のいずれかに記載の方法。
【請求項１６２】
拡大させたエフェクターメモリーＴ細胞集団が、
（ｉ）検出可能なレベルのＣＤ４５ＲＡを有する、例えば、ＣＤ４５ＲＡを発現もしくは再発現する細胞、
（ｉｉ）ＣＣＲ７の低い発現を有するかもしくはその発現を有さない細胞、および／または
（ｉｉｉ）検出可能なレベルのＣＤ９５を有する、例えば、ＣＤ９５を発現する細胞、
例えば、ＣＤ４５ＲＡ＋、ＣＣＲ７−、ＣＤ９５＋  Ｔ細胞集団を含み、必要に応じて、Ｔ細胞が、ＣＤ３＋、ＣＤ４＋、またはＣＤ８＋  Ｔ細胞を含む、請求項１３３から１６１のいずれかに記載の方法。
【請求項１６３】
Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）アルファおよび／またはＴＣＲベータ分子を含むＴＣＲを発現するＴ細胞、例えば、ＴＣＲアルファ−ベータＴ細胞（αβ  Ｔ細胞）の拡大、例えば、選択的または優先的な拡大をもたらす、請求項１３９から１６２のいずれかに記載の方法。
【請求項１６４】
ＴＣＲガンマおよび／またはＴＣＲデルタ分子を含むＴＣＲを発現するＴ細胞、例えば、ＴＣＲガンマ−デルタＴ細胞（γδ  Ｔ細胞）の拡大を上回るαβＴ細胞の拡大をもたらす、請求項１６３に記載の方法。
【請求項１６５】
抗ＴＣＲβＶ抗体分子が、表１、２、１０、１１、または１２に開示される軽鎖可変領域（ＶＬ）のＬＣ  ＣＤＲ１、ＬＣ  ＣＤＲ２、およびＬＣ  ＣＤＲ３のうちの１つ、２つ、またはすべてを含むＶＬ、例えば、配列番号２、配列番号１０、配列番号１１、配列番号１６、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、または配列番号３０を含む抗原結合性ドメインを含む、請求項９８から１６４のいずれか１項に記載の方法または使用のための組成物。
【請求項１６６】
抗ＴＣＲβＶ抗体分子が、表１、２、１０、１１、または１２に開示される重鎖可変領域（ＶＨ）のＨＣ  ＣＤＲ１、ＨＣ  ＣＤＲ２、およびＨＣ  ＣＤＲ３のうちの１つ、２つ、またはすべてを含むＶＨ、例えば、配列番号１、配列番号９、配列番号１５、配列番号２３、配列番号２４、または配列番号２５を含む抗原結合性ドメインを含む、請求項９８から１６５のいずれか１項に記載の方法または使用のための組成物。
【請求項１６７】
抗ＴＣＲβＶ抗体分子が、
（ｉ）配列番号２０のＬＣ  ＣＤＲ１アミノ酸配列（またはその１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の改変、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有するアミノ酸配列）、配列番号２１のＬＣ  ＣＤＲ２アミノ酸配列（またはその１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の改変、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有するアミノ酸配列）、および／または配列番号２２のＬＣ  ＣＤＲ３アミノ酸配列（またはその１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の改変、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有するアミノ酸配列）を含むＶＬ、ならびに／または
（ｉｉ）配列番号１７のＨＣ  ＣＤＲ１アミノ酸配列（またはその１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の改変、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有するアミノ酸配列）、配列番号１８のＨＣ  ＣＤＲ２アミノ酸配列（またはその１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の改変、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有するアミノ酸配列）、および／または配列番号１９のＨＣ  ＣＤＲ３アミノ酸配列（またはその１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の改変、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有するアミノ酸配列）を含むＶＨ
を含む抗原結合性ドメインを含む、請求項９８から１６６のいずれか１項に記載の方法または使用のための組成物。
【請求項１６８】
抗ＴＣＲβＶ抗体分子が、
配列番号２３、配列番号２４、もしくは配列番号２５の可変重鎖（ＶＨ）、またはそれに対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列、および／または
配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、もしくは配列番号３０の可変軽鎖（ＶＬ）、またはそれに対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列
を含む抗原結合性ドメインを含む、請求項９８から１６７のいずれか１項に記載の方法または使用のための組成物。
【請求項１６９】
抗ＴＣＲβＶ抗体分子が、
（ｉ）配列番号６のＬＣ  ＣＤＲ１アミノ酸配列（またはその１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の改変、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有するアミノ酸配列）、配列番号７のＬＣ  ＣＤＲ２アミノ酸配列（またはその１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の改変、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有するアミノ酸配列）、および／または配列番号８のＬＣ  ＣＤＲ３アミノ酸配列（またはその１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の改変、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有するアミノ酸配列）を含むＶＬ、ならびに／または
（ｉｉ）配列番号３のＨＣ  ＣＤＲ１アミノ酸配列（またはその１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の改変、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有するアミノ酸配列）、配列番号４のＨＣ  ＣＤＲ２アミノ酸配列（またはその１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の改変、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有するアミノ酸配列）、および／または配列番号５のＨＣ  ＣＤＲ３アミノ酸配列（またはその１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の改変、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有するアミノ酸配列）を含むＶＨ
を含む抗原結合性ドメインを含む、請求項９８から１６８のいずれか１項に記載の方法または使用のための組成物。
【請求項１７０】
抗ＴＣＲβＶ抗体分子が、
配列番号１もしくは配列番号９の可変重鎖（ＶＨ）、またはそれに対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列、および／または
配列番号２、配列番号１０、もしくは配列番号１１の可変軽鎖（ＶＬ）、またはそれに対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列
を含む抗原結合性ドメインを含む、請求項９８から１６９のいずれか１項に記載の方法または使用のための組成物。
【請求項１７１】
抗ＴＣＲβＶ抗体分子が、
（ｉ）１位におけるアスパラギン酸、例えば、Ｋａｂａｔの番号付けによる１位における置換、例えば、アラニンからアスパラギン酸への置換、または
（ｉｉ）２位におけるアスパラギン、例えば、Ｋａｂａｔの番号付けによる２位における置換、例えば、イソロイシンからアスパラギン、セリンからアスパラギン、もしくはチロシンからアスパラギン（Ａｓｐａｒａｇｅｉｎ）への置換、または
（ｉｉｉ）４位におけるロイシン、例えば、Ｋａｂａｔの番号付けによる４位における置換、例えば、メチオニンからロイシンへの置換
のうちの１つ、２つ、またはすべて（例えば、３つ）を含むフレームワーク領域、例えば、フレームワーク領域１（ＦＲ１）を含む軽鎖を含み、
置換が、ヒト生殖系列軽鎖フレームワーク領域配列に対するものである、
請求項９８から１７０のいずれか１項に記載の方法または使用のための組成物。
【請求項１７２】
抗ＴＣＲβＶ抗体分子が、
（ｉ）６６位におけるグリシン、例えば、Ｋａｂａｔの番号付けによる６６位における置換、例えば、リシンからグリシン、もしくはセリンからグリシンへの置換、または
（ｉｉ）６９位におけるアスパラギン、例えば、Ｋａｂａｔの番号付けによる６９位における置換、例えば、スレオニンからアスパラギンへの置換、または
（ｉｉｉ）７１位におけるチロシン、例えば、Ｋａｂａｔの番号付けによる７１位における置換、例えば、フェニルアラニンからチロシン、もしくはアラニンからチロシンへの置換
のうちの１つ、２つ、またはすべて（例えば、３つ）を含むフレームワーク領域、例えば、フレームワーク領域３（ＦＲ３）を含む軽鎖を含み、
置換が、ヒト生殖系列軽鎖フレームワーク領域配列に対するものである、
請求項９８から１７１のいずれか１項に記載の方法または使用のための組成物。
【請求項１７３】
抗ＴＣＲβＶ抗体分子のＴＣＲβＶ領域への結合が、ＴＣＲβＶ領域以外の受容体または分子に結合するＴ細胞エンゲージャー（「非ＴＣＲβＶ結合性Ｔ細胞エンゲージャー」）のサイトカインプロファイルとは異なるサイトカインプロファイルをもたらす、請求項９８から１７１のいずれか１項に記載の方法または使用のための組成物。
【請求項１７４】
非ＴＣＲβＶ結合性Ｔ細胞エンゲージャーが、ＣＤ３分子（例えば、ＣＤ３イプシロン（ＣＤ３ｅ）分子）、またはＴＣＲアルファ（ＴＣＲα）分子に結合する抗体を含む、請求項１７３に記載の方法または使用のための組成物。
【請求項１７５】
第１の部分のサイトカインプロファイルが、以下：
（ｉ）ＩＬ−２のレベル、例えば、発現レベル、および／もしくは活性の増加、
（ｉｉ）ＩＬ−１βのレベル、例えば、発現レベル、および／もしくは活性の低減、
（ｉｉｉ）ＩＬ−６のレベル、例えば、発現レベル、および／もしくは活性の低減、
（ｉｖ）ＴＮＦαのレベル、例えば、発現レベル、および／もしくは活性の低減、
（ｖ）ＩＬ−１０のレベル、例えば、発現レベル、および／もしくは活性の低減、
（ｖｉ）ＩＬ−２のレベル、例えば、発現レベル、および／もしくは活性の増加における遅延、例えば、少なくとも１時間、２時間、３時間、４時間、５時間、６時間、７時間、８時間、９時間、１０時間、もしくはそれ以上の遅延、
（ｖｉｉ）ＩＦＮｇのレベル、例えば、発現レベル、および／もしくは活性の増加における遅延、例えば、少なくとも１時間、２時間、３時間、４時間、５時間、６時間、７時間、８時間、９時間、１０時間の遅延、または
（ｖｉｉｉ）ＩＬ−１５のレベル、例えば、発現レベル、および／もしくは活性の増加
のうちの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、またはすべてを含み、
例えば、（ｉ）〜（ｖｉｉ）が、非ＴＣＲβＶ結合性Ｔ細胞エンゲージャーのサイトカインプロファイルと比較したものである、請求項１７３または１７４に記載の方法または使用のための組成物。
【請求項１７６】
抗ＴＣＲβＶ抗体分子のＴＣＲβＶ領域への結合が、実施例３のアッセイによって測定したときに、例えば、非ＴＣＲβＶ結合性Ｔ細胞エンゲージャーによって誘導されるサイトカインストームと比較して、サイトカインストームの低減、例えば、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）の低減をもたらす、請求項１７３から１７５のいずれか１項に記載の方法または使用のための組成物。
【請求項１７７】
抗ＴＣＲβＶ抗体分子のＴＣＲβＶ領域への結合が、
例えば、非ＴＣＲβＶ結合性Ｔ細胞エンゲージャーと比較して、
（ｉｘ）Ｔ細胞増殖動態の低減、
（ｘ）例えば、実施例４のアッセイによって測定したときに、細胞殺滅、例えば、標的細胞殺滅、例えば、がん細胞殺滅、
（ｘｉ）ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞増殖、例えば、拡大の増加、または
（ｘｉｉ）メモリーＴ細胞集団の拡大、例えば、少なくとも約１．１〜１０倍の拡大（例えば、少なくとも約１．１、１．２、１．３、１．４、１．５、２、３、４、５、６、７、８、９、もしくは１０倍の拡大）
のうちの１つ、２つ、３つ、またはすべてをもたらす、請求項１７３から１７６のいずれか１項に記載の方法または使用のための組成物。
【請求項１７８】
抗ＴＣＲβＶ抗体分子が、例えば、図２４Ａにおいて丸で囲んだ領域によって示される、ＴＣＲβＶタンパク質上の外向きの領域（例えば、エピトープ）に結合する、請求項９８から１７８のいずれか１項に記載の方法または使用のための組成物。
【請求項１７９】
ＴＣＲβＶタンパク質上の外部に面した領域が、ＴＣＲβＶの構造的に保存される領域、例えば、１つまたは複数のＴＣＲβＶサブファミリーにわたって類似の構造を有するＴＣＲβＶの領域を含む、請求項１７８に記載の方法または使用のための組成物。
【請求項１８０】
方法が、例えば、本明細書に記載される、第２の薬剤、例えば、治療剤を（例えば、逐次的に、同時に、または並行して）投与するステップをさらに含む、請求項９８から１７９のいずれか１項に記載の方法または使用のための組成物。
【請求項１８１】
第２の薬剤、例えば、治療剤が、化学療法剤、生物剤、ホルモン療法）、放射線、または外科手術を含む、請求項１８０に記載の方法または使用のための組成物。
【請求項１８２】
疾患が、がん、例えば、固形腫瘍もしくは血液がん、または転移病変である、請求項９８から１３４のいずれか１項に記載の方法または使用のための組成物。
【請求項１８３】
がん抗原が、ＢＣＭＡまたはＦｃＲＨ５である、請求項１７５に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１８年７月３日に出願された米国仮出願第６２／６９３，６５３号、２０１８年９月２７日に出願された米国仮出願第６２／７３７，８２９号、２０１９年１月４日に出願された米国仮出願第６２／７８８，６７４号、および２０１９年２月２１日に出願された米国仮出願第６２／８０８，７００号の利益を主張し、これらのそれぞれのすべての内容は、参照により本明細書に組み込まれる。
【背景技術】
【０００２】
がん免疫療法のために腫瘍細胞溶解を促進するためにＴ細胞を再指向させるように設計された現在の分子は、典型的に、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）のＣＤ３イプシロン（ＣＤ３ｅ）サブユニットを標的とする。しかしながら、このアプローチには制限がある。以前の研究では、例えば、低用量の抗ＣＤ３ｅモノクローナル抗体（ｍＡｂ）が、Ｔ細胞機能不全を引き起こし、免疫抑制作用を生じ得ることが示されている。加えて、抗ＣＤ３ｅ  ｍＡｂは、すべてのＴ細胞に結合し、したがって、多数のＴ細胞を活性化する。これらの抗ＣＤ３ｅ  ｍＡｂによるＴ細胞のそのような非生理学的な大規模な活性化は、炎症促進性サイトカイン、例えば、ＩＦＮ−ガンマ、ＩＬ−１−ベータ、ＩＬ−６、ＩＬ−１０、およびＴＮＦ−アルファの産生をもたらし、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）としても知られ神経毒性（ＮＴ）とも関係している「サイトカインストーム」を引き起こし得る。したがって、ＣＲＳおよび／またはＮＴを回避するかまたは低減させる抗体を開発することが有利であり得る。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００３】
Ｔ細胞、例えば、Ｔ細胞のサブセットに結合し、例えば、それを活性化するかまたは拡大させる、ＴＣＲのベータサブユニットの可変鎖（ＴＣＲβＶ）に指向される抗体分子（「抗ＴＣＲβＶ抗体分子」）が、とりわけ、本明細書に開示される。一部の実施形態では、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβＶ領域以外の受容体または分子に結合するＴ細胞エンゲージャー（「非ＴＣＲβＶ結合性Ｔ細胞エンゲージャー」）のものとは異なるサイトカインプロファイル、例えば、サイトカイン分泌プロファイルをもたらす。一部の実施形態では、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）と関連するサイトカイン、例えば、ＩＬ−６、ＩＬ−１ベータ、ＩＬ−１０、およびＴＮＦアルファのより少ない産生をもたらすか、最小限の産生をもたらすか、もしくは産生をもたらさず、ＩＬ−２およびＩＦＮ−ガンマの増強および／もしくは遅延された産生をもたらす。一部の実施形態では、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体は、免疫細胞、例えば、Ｔ細胞、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）、ＮＫ細胞、または他の免疫細胞（例えば、本明細書に記載される）の拡大をもたらす。また、前記抗ＴＣＲβＶ抗体分子を作製する方法、ならびに免疫細胞または免疫細胞集団を拡大させるために抗ＴＣＲβＶ抗体分子を使用する方法を含む前記抗ＴＣＲβＶ抗体分子を使用する方法、ならびにＴＩＬおよび免疫チェックポイント治療薬との組合せ治療としての使用を含むがんを処置するために抗ＴＣＲβＶ抗体分子を使用する方法も、本明細書に開示される。本開示は、前記抗ＴＣＲβＶ抗体分子を含む多特異性分子、例えば、二特異性分子をさらに提供する。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＣＲβＶ抗体分子を含む組成物は、例えば、がん免疫療法のために腫瘍細胞溶解を促進させるために、Ｔ細胞を活性化し、かつ／またはそれを再指向させるために使用することができる。一部の実施形態では、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子を含む組成物は、ＣＲＳおよび／またはＮＴ、例えば、抗ＣＤ３ｅ標的化と関連するＣＲＳおよび／またはＮＴの望ましくない副作用を制限する。
【０００４】
一部の実施形態では、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、抗ＣＤ３抗体分子（例えば、低親和性抗ＣＤ３抗体分子）と比較して、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）と関連するサイトカイン、例えば、ＩＬ−６、ＩＬ−１ベータ、ＩＬ−１０、およびＴＮＦアルファのより少ない産生をもたらすか、最小限の産生をもたらすか、もしくは産生をもたらさず、ＩＬ−２およびＩＦＮ−ガンマの増強および／もしくは遅延された産生をもたらす。一部の実施形態では、対象における本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子の投与は、抗ＣＤ３抗体分子（例えば、低親和性抗ＣＤ３抗体分子）の同様の投与と比較して、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）の低減（例えば、ＣＲＳの持続期間がより短いこともしくはＣＲＳがないこと）、ＣＲＳの重症度の低減（例えば、重度のＣＲＳ、例えば、ＣＲＳグレード４もしくは５の不在）、神経毒性（ＮＴ）の低減、またはＮＴの重症度の低減をもたらす。
【０００５】
したがって、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、抗ＴＣＲβＶ抗体分子を含む多特異性または多機能性分子（例えば、多特異性もしくは多機能性抗体分子）（本明細書において「組成物」とも称される）、それをコードする核酸、前述の分子を産生する方法、前述の分子を含む医薬組成物、および前述の分子を使用して疾患または障害、例えば、がんを処置する方法が本明細書で提供される。本明細書に開示される抗体分子および医薬組成物は、例えば、本明細書に記載される障害および状態、例えば、がんを処置、予防、および／または診断するために（単独で、または他の薬剤もしくは治療モダリティと組み合わせて）使用することができる。
【０００６】
一態様では、本開示は、Ｔ細胞受容体ベータ可変（ＴＣＲβＶ）領域に結合する、例えば、特異的に結合する、例えば、非マウスの、例えば、ヒト様の抗体分子（例えば、ヒトまたはヒト化抗体分子）を提供する。
【０００７】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲＢＶ抗体分子は、表１〜２もしくは１０〜１２のうちのいずれかに開示される抗体の抗原結合性ドメイン、またはそれに対して少なくとも８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を有する配列を含む。一部の実施形態では、抗ＴＣＲＢＶ抗体分子は、配列番号３２８８のアミノ酸配列を含むリーダー配列を含む。一部の実施形態では、抗ＴＣＲＢＶ抗体分子は、配列番号３２８８のアミノ酸配列を含むリーダー配列を含まない。
【０００８】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子のＴＣＲβＶ領域への結合は、ＴＣＲβＶ領域以外の受容体または分子に結合するＴ細胞エンゲージャー（「非ＴＣＲβＶ結合性Ｔ細胞エンゲージャー」）のものとは異なるサイトカインプロファイル、例えば、サイトカイン分泌プロファイル（例えば、１つもしくは複数のサイトカインおよび／または１つもしくは複数のケモカインを含む）をもたらす。
【０００９】
一部の実施形態では、サイトカインプロファイル、例えば、サイトカイン分泌プロファイルは、以下：
（ｉ）ＩＬ−２のレベル、例えば、発現レベル、および／もしくは活性の増加、
（ｉｉ）ＩＬ−１βのレベル、例えば、発現レベル、および／もしくは活性の低減、
（ｉｉｉ）ＩＬ−６のレベル、例えば、発現レベル、および／もしくは活性の低減、
（ｉｖ）ＴＮＦαのレベル、例えば、発現レベル、および／もしくは活性の低減、
（ｖ）ＩＬ−１０のレベル、例えば、発現レベル、および／もしくは活性の低減、
（ｖｉ）ＩＬ−２のレベル、例えば、発現レベル、および／もしくは活性の増加における遅延、例えば、少なくとも１時間、２時間、３時間、４時間、５時間、６時間、７時間、８時間、９時間、１０時間、もしくはそれ以上の遅延、
（ｖｉｉ）ＩＦＮ−ガンマのレベル、例えば、発現レベル、および／もしくは活性の増加における遅延、例えば、少なくとも１時間、２時間、３時間、４時間、５時間、６時間、７時間、８時間、９時間、１０時間の遅延、または
（ｖｉｉｉ）ＩＬ−１５のレベル、例えば、発現レベル、および／もしくは活性の増加、
のうちの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、またはすべてを含み、
例えば、（ｉ）〜（ｖｉｉｉ）は、非ＴＣＲβＶ結合性Ｔ細胞エンゲージャーのサイトカインプロファイル、例えば、サイトカイン分泌プロファイルと比較したものである。
【００１０】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲＢＶ抗体のＴＣＲβＶ領域への結合は、実施例３のアッセイによって測定したときに、非ＴＣＲβＶ結合性Ｔ細胞エンゲージャーによって誘導されるサイトカインストームと比較して、サイトカインストームの低減、例えば、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）および／または神経毒性（ＮＴ）の低減をもたらす。
【００１１】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲＢＶ抗体のＴＣＲβＶ領域への結合は、以下：
（ｉｘ）Ｔ細胞増殖動態の低減、
（ｘ）例えば、実施例４のアッセイによって測定したときに、細胞殺滅、例えば、標的細胞殺滅、例えば、がん細胞殺滅、
（ｘｉ）ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞増殖、例えば、拡大の増加、または
（ｘｉｉ）メモリーＴ細胞集団の拡大、例えば、少なくとも約１．１〜１０倍の拡大（例えば、少なくとも約１．１倍、１．２倍、１．３倍、１．４倍、１．５倍、２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、もしくは１０倍の拡大）
のうちの１つ、２つ、３つ、またはすべてをもたらし、
例えば、（ｉｘ）〜（ｘｉｉ）は、非ＴＣＲβＶ結合性Ｔ細胞エンゲージャーと比較したものである。
【００１２】
一部の実施形態では、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβＶタンパク質上の構造的に保存されたドメイン（例えば、図２４Ａにおいて丸で囲んだ領域によって示される）を認識する（例えば、それに結合する）。
【００１３】
一部の実施形態では、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβＶ：ＴＣＲアルファ複合体の境界部を認識しない、例えば、それに結合しない。
一部の実施形態では、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβＶタンパク質の定常領域を認識しない、例えば、それに結合しない。ＴＣＲＢＶ領域の定常領域に結合する例示的な抗体は、Ｖｉｎｅｙ  ｅｔ  ａｌ．，  （Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ．  １９９２  Ｄｅｃ；１１（６）：７０１−１３）に記載されるＪＯＶＩ．１である。
【００１４】
一部の実施形態では、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβＶタンパク質の相補性決定領域（例えば、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、および／またはＣＤＲ３）のうちの１つまたは複数（例えば、すべて）を認識しない、例えば、それに結合しない。
【００１５】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子のＴＣＲβＶ領域への結合は、以下：
（ｉ）ＩＬ−１βのレベル、例えば、発現レベル、および／もしくは活性の低減、
（ｉｉ）ＩＬ−６のレベル、例えば、発現レベル、および／もしくは活性の低減、
（ｉｉｉ）ＴＮＦαのレベル、例えば、発現レベル、および／もしくは活性の低減、
（ｉｖ）ＩＬ−２のレベル、例えば、発現レベル、および／もしくは活性の増加、
（ｖ）ＩＬ−２のレベル、例えば、発現レベル、および／もしくは活性の増加における遅延、例えば、少なくとも１時間、２時間、３時間、４時間、５時間、６時間、７時間、８時間、９時間、１０時間、もしくはそれ以上の遅延、
（ｖｉ）ＩＦＮ−ガンマのレベル、例えば、発現レベル、および／もしくは活性の増加における遅延、例えば、少なくとも１時間、２時間、３時間、４時間、５時間、６時間、７時間、８時間、９時間、１０時間の遅延、
（ｖｉｉ）Ｔ細胞増殖動態の低減、
（ｖｉｉｉ）例えば、実施例３のアッセイによって測定したときに、サイトカインストーム、例えば、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）および／もしくは神経毒性（ＮＴ）の低減、
（ｉｘ）例えば、実施例４のアッセイによって測定したときに、細胞殺滅、例えば、標的細胞殺滅、例えば、がん細胞殺滅、
（ｘ）ＩＬ−１５のレベル、例えば、発現レベル、および／もしくは活性の増加、または
（ｘｉ）ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞増殖、例えば、拡大の増加
のうちの１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、またはそれ以上（例えば、すべて）をもたらす。
【００１６】
一部の実施形態では、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子により生じる（ｉ）〜（ｘｉ）のうちのいずれか１つもしくはすべてまたはそれらの任意の組合せは、ＣＤ３分子、例えば、ＣＤ３イプシロン（ＣＤ３ｅ）分子、またはＴＣＲアルファ（ＴＣＲα）分子に結合する抗体と比較される。
【００１７】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子のＴＣＲβＶ領域への結合は、パーフォリンおよび／またはグランザイムＢの分泌、例えば、産生をもたらす。
ある態様では、本開示は、Ｔ細胞受容体ベータ可変鎖（ＴＣＲβＶ）領域に結合する、例えば、特異的に結合する抗体分子であって、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、
（ａ）軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
（ｉ）配列番号１０もしくは配列番号１１の（例えば、３つの）軽鎖相補性決定領域１（ＬＣ  ＣＤＲ１）、軽鎖相補性決定領域２（ＬＣ  ＣＤＲ２）、および軽鎖相補性決定領域３（ＬＣ  ＣＤＲ３）のうちの１つ、２つ、もしくはすべて、ならびに
（ｉｉ）（例えば、４つの）非マウス生殖系列フレームワーク１（ＦＲ１）、非マウス生殖系列フレームワーク領域２（ＦＲ２）、非マウス生殖系列フレームワーク領域３（ＦＲ３）、および非マウス生殖系列フレームワーク領域４（ＦＲ４）のうちの１つ、２つ、３つ、もしくはすべてと少なくとも９５％の同一性を有するフレームワーク領域（ＦＲ）を含む、軽鎖可変領域（ＶＬ）、ならびに／または
（ｂ）重鎖可変領域（ＶＨ）であって、
（ｉ）配列番号９の（例えば、３つの）重鎖相補性決定領域１（ＨＣ  ＣＤＲ１）、重鎖相補性決定領域２（ＨＣ  ＣＤＲ２）、および重鎖相補性決定領域３（ＨＣ  ＣＤＲ３）のうちの１つ、２つ、もしくはすべて、ならびに
（ｉｉ）（例えば、４つの）非マウス生殖系列フレームワーク１（ＦＲ１）、非マウス生殖系列フレームワーク領域２（ＦＲ２）、非マウス生殖系列フレームワーク領域３（ＦＲ３）、および非マウス生殖系列フレームワーク領域４（ＦＲ４）のうちの１つ、２つ、３つ、もしくはすべてと少なくとも９５％の同一性を有するフレームワーク領域（ＦＲ）を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）
を含む抗原結合性ドメインを含む、抗体分子を提供する。
【００１８】
一部の実施形態では、ＶＬは、配列番号２３０または３２８９のコンセンサス配列を有する配列を含む。
一部の実施形態では、ＶＨは、配列番号２３１または３２９０のコンセンサス配列を有する配列を含む。
【００１９】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβ  Ｖ６、例えば、ＴＣＲβ  Ｖ６−４＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−４＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ６−９＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−８＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−６＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ６−６＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−２＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−３＊０１、もしくはＴＣＲβ  Ｖ６−１＊０１のうちの１つもしくは複数、またはそのバリアントに結合する。
【００２０】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、
（ｉ）配列番号１もしくは配列番号９、または表１に列挙されるアミノ酸配列のＨＣ  ＣＤＲ１、ＨＣ  ＣＤＲ２、およびＨＣ  ＣＤＲ３、または
（ｉｉ）配列番号２、配列番号１０、もしくは配列番号１１、または表１に列挙されるアミノ酸配列のＬＣ  ＣＤＲ１、ＬＣ  ＣＤＲ２、およびＬＣ  ＣＤＲ３
を含む抗原結合性ドメインを含む。
【００２１】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、配列番号２、配列番号１０、もしくは配列番号１１、または表１に列挙されるアミノ酸配列のＬＣ  ＣＤＲ１、ＬＣ  ＣＤＲ２、およびＬＣ  ＣＤＲ３のうちの１つ、２つ、またはすべて（例えば、３つ）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む抗原結合性ドメインを含む。
【００２２】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、配列番号１もしくは配列番号９、または表１に列挙されるアミノ酸配列のＨＣ  ＣＤＲ１、ＨＣ  ＣＤＲ２、およびＨＣ  ＣＤＲ３のうちの１つ、２つ、もしくはすべて（例えば、３つ）を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む抗原結合性ドメインを含む。
【００２３】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、
（ｉ）配列番号６のＬＣ  ＣＤＲ１アミノ酸配列（またはその１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の改変、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有するアミノ酸配列）、配列番号７のＬＣ  ＣＤＲ２アミノ酸配列（またはその１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の改変、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有するアミノ酸配列）、および／または配列番号８のＬＣ  ＣＤＲ３アミノ酸配列（またはその１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の改変、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有するアミノ酸配列）を含むＶＬ、ならびに／または
（ｉｉ）配列番号３のＨＣ  ＣＤＲ１アミノ酸配列（またはその１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の改変、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有するアミノ酸配列）、配列番号４のＨＣ  ＣＤＲ２アミノ酸配列（またはその１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の改変、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有するアミノ酸配列）、および／または配列番号５のＨＣ  ＣＤＲ３アミノ酸配列（またはその１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の改変、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有するアミノ酸配列）を含むＶＨ
を含む抗原結合性ドメインを含む。
【００２４】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、
表１に列挙されるアミノ酸配列、例えば、配列番号９、または表１に列挙されるアミノ酸配列、例えば、配列番号９に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列の可変重鎖（ＶＨ）、および／または
表１に列挙されるアミノ酸配列、例えば、配列番号１０もしくは配列番号１１、または表１に列挙されるアミノ酸配列、例えば、配列番号１０もしくは配列番号１１に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列の可変軽鎖（ＶＬ）
を含む抗原結合性ドメインを含む。
【００２５】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、
（ｉ）配列番号９のＶＨアミノ酸配列、
（ｉｉ）配列番号９のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列、
（ｉｉｉ）配列番号１０のＶＬアミノ酸配列、および／または
（ｉｖ）配列番号１０のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列
を含む抗原結合性ドメインを含む。
【００２６】
ある態様では、Ｔ細胞受容体ベータ可変鎖（ＴＣＲβＶ）領域に結合する、例えば、特異的に結合する抗体分子であって、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、
（ａ）軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
（ｉ）表２のヒト化Ｂ−Ｈ軽鎖（ＬＣ）の（例えば、３つの）軽鎖相補性決定領域１（ＬＣ  ＣＤＲ１）、軽鎖相補性決定領域２（ＬＣ  ＣＤＲ２）、および軽鎖相補性決定領域３（ＬＣ  ＣＤＲ３）のうちの１つ、２つ、もしくはすべて、ならびに
（ｉｉ）表２のヒト化Ｂ−Ｈ  ＬＣのフレームワーク領域１（ＦＲ１）、フレームワーク領域２（ＦＲ２）、フレームワーク領域３（ＦＲ３）、およびフレームワーク領域４（ＦＲ４）のうちの１つ、２つ、３つ、もしくはすべて（例えば、４つ）と少なくとも９５％の同一性を有するフレームワーク領域（ＦＲ）を含む、軽鎖可変領域（ＶＬ）、ならびに／または
（ｂ）重鎖可変領域（ＶＨ）であって、
（ｉ）表２のヒト化Ｂ−Ｈ重鎖（ＨＣ）の（例えば、３つの）重鎖相補性決定領域１（ＨＣ  ＣＤＲ１）、重鎖相補性決定領域２（ＨＣ  ＣＤＲ２）、および重鎖相補性決定領域３（ＨＣ  ＣＤＲ３）のうちの１つ、２つ、もしくはすべて、ならびに
（ｉｉ）表２のヒト化Ｂ−Ｈ  ＨＣのフレームワーク領域１（ＦＲ１）、フレームワーク領域２（ＦＲ２）、フレームワーク領域３（ＦＲ３）、およびフレームワーク領域４（ＦＲ４）のうちの１つ、２つ、３つ、もしくはすべて（例えば、４つ）と少なくとも９５％の同一性を有するフレームワーク領域（ＦＲ）を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）
を含む抗原結合性ドメインを含む、抗体分子が本明細書で提供される。
【００２７】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲＢＶは、ＴＣＲβ  Ｖ１２、例えば、ＴＣＲβ  Ｖ１２−４＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ１２−３＊０１、もしくはＴＣＲβ  Ｖ１２−５＊０１、またはそのバリアントに結合する。
【００２８】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、
（ｉ）表２に列挙される抗体ＢのＨＣ  ＣＤＲ１、ＨＣ  ＣＤＲ２、およびＨＣ  ＣＤＲ３、または
（ｉｉ）表２に列挙される抗体ＢのＬＣ  ＣＤＲ１、ＬＣ  ＣＤＲ２、およびＬＣ  ＣＤＲ３
を含む抗原結合性ドメインを含む。
【００２９】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、配列番号２、配列番号１０、もしくは配列番号１１、または表１に列挙されるアミノ酸配列のＬＣ  ＣＤＲ１、ＬＣ  ＣＤＲ２、およびＬＣ  ＣＤＲ３のうちの１つ、２つ、またはすべて（例えば、３つ）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む抗原結合性ドメインを含む。
【００３０】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、表２に列挙されるヒト化Ｂ−Ｈ抗体のＨＣ  ＣＤＲ１、ＨＣ  ＣＤＲ２、およびＨＣ  ＣＤＲ３のうちの１つ、２つ、もしくはすべて（例えば、３つ）を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む抗原結合性ドメインを含む。
【００３１】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、表２に列挙されるヒト化Ｂ−Ｈ抗体のＬＣ  ＣＤＲ１、ＬＣ  ＣＤＲ２、およびＬＣ  ＣＤＲ３のうちの１つ、２つ、またはすべて（例えば、３つ）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む抗原結合性ドメインを含む。
【００３２】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、
表２に列挙されるヒト化Ｂ−Ｈ抗体のＶＨ配列、または表２に列挙されるヒト化Ｂ−Ｈ抗体のＶＨに対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列、および／または
表２に列挙されるヒト化Ｂ−Ｈ抗体のＶＬ配列、もしくは表２に列挙されるヒト化Ｂ−Ｈ抗体のＶＬに対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列
を含む。
【００３３】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、表２のヒト化Ｂ−Ｈ  ＬＣのＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、およびＦＲ４のうちの１つと少なくとも９５％の同一性を有するフレームワーク領域（ＦＲ）を含む。
【００３４】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、表２のヒト化Ｂ−Ｈ  ＬＣのＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、およびＦＲ４のうちのいずれか２つと少なくとも９５％の同一性を有するフレームワーク領域（ＦＲ）を含む。
【００３５】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、表２のヒト化Ｂ−Ｈ  ＬＣのＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、およびＦＲ４のうちのいずれか３つと少なくとも９５％の同一性を有するフレームワーク領域（ＦＲ）を含む。
【００３６】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、表２のヒト化Ｂ−Ｈ  ＬＣのＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、およびＦＲ４のうちのすべてと少なくとも９５％の同一性を有するフレームワーク領域（ＦＲ）を含む。
【００３７】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、表２のヒト化Ｂ−Ｈ  ＨＣのＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、およびＦＲ４のうちの１つと少なくとも９５％の同一性を有するフレームワーク領域（ＦＲ）を含む。
【００３８】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、表２のヒト化Ｂ−Ｈ  ＨＣのＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、およびＦＲ４のうちのいずれか２つと少なくとも９５％の同一性を有するフレームワーク領域（ＦＲ）を含む。
【００３９】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、表２のヒト化Ｂ−Ｈ  ＨＣのＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、およびＦＲ４のうちのいずれか３つと少なくとも９５％の同一性を有するフレームワーク領域（ＦＲ）を含む。
【００４０】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、表２のヒト化Ｂ−Ｈ  ＨＣのＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、およびＦＲ４のうちのすべてと少なくとも９５％の同一性を有するフレームワーク領域（ＦＲ）を含む。
【００４１】
別の態様では、本開示は、Ｔ細胞受容体ベータ可変（ＴＣＲβＶ）領域に結合する、例えば、特異的に結合する、非マウスの、例えば、ヒト様の抗体分子（例えば、ヒトまたはヒト化抗体分子）を提供する。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子の結合は、メモリーＴ細胞、例えば、エフェクターメモリーＴ（ＴＥＭ）細胞、例えば、ＣＤ４５ＲＡを発現するＴＥＭ細胞（ＴＥＭＲＡ）細胞、例えば、ＣＤ４＋またはＣＤ８＋  ＴＥＭＲＡ細胞の集団の拡大、例えば、少なくとも約１．１〜５０倍の拡大（例えば、少なくとも約１．５〜４０倍、２〜３５倍、３〜３０倍、５〜２５倍、８〜２０倍、または１０〜１５倍の拡大）をもたらす。一部の実施形態では、拡大は、少なくとも約１．１〜１０倍の拡大（例えば、少なくとも約１．１倍、１．２倍、１．３倍、１．４倍、１．５倍、２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、または１０倍の拡大）である。
【００４２】
一部の実施形態では、メモリーエフェクターＴ細胞、例えば、ＴＥＭ細胞、例えば、ＴＥＭＲＡ細胞、例えば、ＣＤ４＋またはＣＤ８＋  ＴＥＭＲＡ細胞集団の拡大は、ＣＤ３分子、例えば、ＣＤ３イプシロン（ＣＤ３ｅ）分子、またはＴＣＲアルファ（ＴＣＲα）分子に結合する抗体を用いた類似の細胞集団の拡大と比較される。
【００４３】
一部の実施形態では、拡大させたエフェクターメモリーＴ細胞集団は、Ｔ細胞、例えば、ＣＤ３＋、ＣＤ８＋、またはＣＤ４＋  Ｔ細胞を含む。一部の実施形態では、拡大させたエフェクターメモリーＴ細胞集団は、ＣＤ３＋およびＣＤ８＋  Ｔ細胞を含む。一部の実施形態では、拡大させたエフェクターメモリーＴ細胞集団は、ＣＤ３＋およびＣＤ４＋  Ｔ細胞を含む。
【００４４】
一部の実施形態では、拡大させたエフェクターメモリーＴ（ＴＥＭ）細胞集団は、ＣＤ４５ＲＡを発現または再発現する、例えば、ＣＤ４５ＲＡ＋である、Ｔ細胞、例えば、ＣＤ３＋、ＣＤ８＋、またはＣＤ４＋  Ｔ細胞を含む。一部の実施形態では、集団は、ＣＤ４５ＲＡを発現するＴＥＭ細胞、例えば、ＴＥＭＲＡ細胞を含む。一部の実施形態では、ＴＥＭＲＡ細胞、例えば、ＣＤ４＋またはＣＤ８＋  ＴＥＭＲＡ細胞上のＣＤ４５ＲＡの発現は、本明細書に開示される方法、例えば、フローサイトメトリーによって検出することができる。
【００４５】
一部の実施形態では、ＴＥＭＲＡ細胞は、ＣＣＲ７の低い発現を有するかまたはその発現を有さない、例えば、ＣＣＲ７−またはＣＣＲ７  ｌｏｗである。一部の実施形態では、ＴＥＭＲＡ細胞上のＣＣＲ７の発現は、本明細書に開示される方法、例えば、フローサイトメトリーによって検出することができない。
【００４６】
一部の実施形態では、ＴＥＭＲＡ細胞は、ＣＤ９５を発現し、例えば、ＣＤ９５＋である。一部の実施形態では、ＴＥＭＲＡ細胞上のＣＤ９５の発現は、本明細書に開示される方法、例えば、フローサイトメトリーによって検出することができる。
【００４７】
一部の実施形態では、ＴＥＭＲＡ細胞は、ＣＤ４５ＲＡを発現し、例えば、ＣＤ４５ＲＡ＋であり、ＣＣＲ７の低い発現を有するかまたはその発現を有さず、例えば、ＣＣＲ７−またはＣＣＲ７  ｌｏｗであり、ＣＤ９５を発現し、例えば、ＣＤ９５＋である。一部の実施形態では、ＴＥＭＲＡ細胞は、ＣＤ４５ＲＡ＋、ＣＣＲ７−、およびＣＤ９５＋細胞として特定することができる。一部の実施形態では、ＴＥＭＲＡ細胞は、ＣＤ３＋、ＣＤ４＋、またはＣＤ８＋  Ｔ細胞（例えば、ＣＤ３＋  Ｔ細胞、ＣＤ３＋  ＣＤ８＋  Ｔ細胞、またはＣＤ３＋  ＣＤ４＋  Ｔ細胞）を含む。
【００４８】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子の結合は、Ｔ細胞の部分集団の拡大、例えば、少なくとも約１．１〜５０倍の拡大（例えば、少なくとも約１．５〜４０倍、２〜３５倍、３〜３０倍、５〜２５倍、８〜２０倍、または１０〜１５倍の拡大）をもたらす。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子により活性化された（例えば、拡大された）Ｔ細胞の部分集団は、ＣＤ４５ＲＡの高い発現および／またはＣＣＲ７の低い発現という点で、ＴＥＭＲＡ細胞に近似している。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子により活性化された（例えば、拡大された）Ｔ細胞の部分集団は、老化マーカーＣＤ５７および／またはＫＬＲＧ１の上方制御を示さない。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子により活性化された（例えば、拡大された）Ｔ細胞の部分集団は、共刺激分子ＣＤ２７および／またはＣＤ２８の上方制御を示さない。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子により活性化された（例えば、拡大された）Ｔ細胞の部分集団は、高度に増殖性である。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子により活性化された（例えば、拡大された）Ｔ細胞の部分集団は、ＩＬ−２を分泌する。一部の実施形態では、Ｔ細胞上の表面マーカーの発現は、本明細書に開示される方法、例えば、フローサイトメトリーによって検出することができる。一部の実施形態では、Ｔ細胞の増殖能力は、本明細書に開示される方法、例えば、実施例４に記載される方法によって検出することができる。一部の実施形態では、Ｔ細胞のサイトカイン発現は、本明細書に開示される方法、例えば、実施例１０および２１に記載される方法によって検出することができる。一部の実施形態では、拡大は、少なくとも約１．１〜１０倍の拡大（例えば、少なくとも約１．１倍、１．２倍、１．３倍、１．４倍、１．５倍、２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、または１０倍の拡大）である。一部の実施形態では、拡大は、ＣＤ３分子、例えば、ＣＤ３イプシロン（ＣＤ３ｅ）分子、またはＴＣＲアルファ（ＴＣＲα）分子に結合する抗体を用いた類似の細胞集団の拡大と比較される。
【００４９】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子のＴＣＲβＶ領域への結合は、ＣＤ３分子、例えば、ＣＤ３イプシロン（ＣＤ３ｅ）分子、またはＴＣＲアルファ（ＴＣＲα）分子に結合する抗体と比較して、以下：
（ｉ）ＩＬ−１βのレベル、例えば、発現レベル、および／もしくは活性の低減、
（ｉｉ）ＩＬ−６のレベル、例えば、発現レベル、および／もしくは活性の低減、
（ｉｉｉ）ＴＮＦαのレベル、例えば、発現レベル、および／もしくは活性の低減、
（ｉｖ）ＩＬ−２のレベル、例えば、発現レベル、および／もしくは活性の増加、
（ｖ）ＩＬ−２のレベル、例えば、発現レベル、および／もしくは活性の増加における遅延、例えば、少なくとも１時間、２時間、３時間、４時間、５時間、６時間、７時間、８時間、９時間、１０時間、もしくはそれ以上の遅延、
（ｖｉ）ＩＦＮｇのレベル、例えば、発現レベル、および／もしくは活性の増加における遅延、例えば、少なくとも１時間、２時間、３時間、４時間、５時間、６時間、７時間、８時間、９時間、１０時間の遅延、
（ｖｉｉ）Ｔ細胞増殖動態の低減、
（ｖｉｉｉ）例えば、実施例３のアッセイによって測定したときに、サイトカインストーム、例えば、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）および／もしくは神経毒性（ＮＴ）の低減、
（ｉｘ）例えば、実施例４のアッセイによって測定したときに、細胞殺滅、例えば、標的細胞殺滅、例えば、がん細胞殺滅、
（ｘ）ＩＬ−１５のレベル、例えば、発現レベル、および／もしくは活性の増加、または
（ｘｉ）ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞増殖、例えば、拡大の増加
のうちの１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、またはそれ以上（例えば、すべて）をもたらす。
【００５０】
本明細書に開示される組成物のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子のＴＣＲβＶ領域への結合は、実施例３のアッセイによって測定したときに、ＩＬ−１βの発現レベルおよび／または活性の、２分の１以下、５分の１以下、１０分の１以下、２０分の１以下、５０分の１以下、１００分の１以下、もしくは２００分の１以下、または少なくとも２〜２００分の１以下（例えば、５〜１５０分の１以下、１０〜１００分の１以下、２０〜５０分の１以下）への低減をもたらす。
【００５１】
本明細書に開示される組成物のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子のＴＣＲβＶ領域への結合は、実施例３のアッセイによって測定したときに、ＩＬ−６の発現レベルおよび／または活性の、２分の１以下、５分の１以下、１０分の１以下、２０分の１以下、５０分の１以下、１００分の１以下、２００分の１以下、３００分の１以下、４００分の１以下、５００分の１以下、６００分の１以下、７００分の１以下、８００分の１以下、９００分の１以下、もしくは１０００分の１以下、または少なくとも２〜１０００分の１以下（例えば、５〜９００分の１以下、１０〜８００分の１以下、２０〜７００分の１以下、５０〜６００分の１以下、１００〜５００分の１以下、もしくは２００〜４００分の１以下）への低減をもたらす。
【００５２】
本明細書に開示される組成物のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子のＴＣＲβＶ領域への結合は、実施例３のアッセイによって測定したときに、ＴＮＦαの発現レベルおよび／または活性の、２分の１以下、５分の１以下、１０分の１以下、２０分の１以下、５０分の１以下、１００分の１以下、２００分の１以下、３００分の１以下、４００分の１以下、５００分の１以下、６００分の１以下、７００分の１以下、８００分の１以下、９００分の１以下、１０００分の１以下、もしくは２０００分の１以下、または少なくとも２〜２０００分の１以下（例えば、５〜１０００分の１以下、１０〜９００分の１以下、２０〜８００分の１以下、５０〜７００分の１以下、１００〜６００分の１以下、２００〜５００分の１以下、もしくは３００〜４００分の１以下）への低減をもたらす。
【００５３】
本明細書に開示される組成物のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子のＴＣＲβＶ領域への結合は、実施例３のアッセイによって測定したときに、ＩＬ−２の発現レベルおよび／または活性の、少なくとも２倍、５倍、１０倍、２０倍、５０倍、１００倍、２００倍、３００倍、４００倍、５００倍、６００倍、７００倍、８００倍、９００倍、１０００倍、もしくは２０００倍、または少なくとも２〜２０００倍（例えば、５〜１０００倍、１０〜９００倍、２０〜８００倍、５０〜７００倍、１００〜６００倍、２００〜５００倍、もしくは３００〜４００倍）の増加をもたらす。
【００５４】
本明細書に開示される組成物のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子のＴＣＲβＶ領域への結合は、実施例４のアッセイによって測定したときに、ＩＬ−１５の発現レベルおよび／または活性の、少なくとも２倍、５倍、１０倍、２０倍、５０倍、１００倍、２００倍、３００倍、４００倍、５００倍、６００倍、７００倍、８００倍、９００倍、１０００倍、もしくは２０００倍、または少なくとも２〜２０００倍（例えば、５〜１０００倍、１０〜９００倍、２０〜８００倍、５０〜７００倍、１００〜６００倍、２００〜５００倍、もしくは３００〜４００倍）の増加をもたらす。
【００５５】
本明細書に開示される組成物のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子の結合は、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞集団の増殖、例えば、拡大、例えば、少なくとも約１．１〜５０倍の拡大（例えば、少なくとも約１．５〜４０倍、２〜３５倍、３〜３０倍、５〜２５倍、８〜２０倍、または１０〜１５倍の拡大）をもたらす。一部の実施形態では、ＮＫ細胞の拡大は、少なくとも約１．１〜３０倍の拡大（例えば、少なくとも約１．１倍、１．２倍、１．３倍、１．４倍、１．５倍、２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、１０倍、１５倍、２０倍、２５倍、または少なくとも約１．１〜５倍、５〜１０倍、１０〜１５倍、１５〜２０倍、２０〜２５倍、もしくは２５〜３０倍の拡大）である。一部の実施形態では、ＮＫ細胞の拡大は、実施例４のアッセイによって測定される。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子による、例えば、その結合による、ＮＫ細胞の拡大は、抗ＴＣＲβＶ抗体分子と接触していないそれ以外は類似の集団の拡大と比較される。
【００５６】
本明細書に開示される組成物のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子の結合は、細胞殺滅、例えば、標的細胞殺滅、例えば、がん細胞殺滅をもたらす。一部の実施形態では、がん細胞は、血液がん細胞または固形腫瘍細胞である。一部の実施形態では、がん細胞は、多発性骨髄腫細胞である。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子の結合は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏまたはｉｎ  ｖｉｖｏにおいて細胞殺滅をもたらす。一部の実施形態では、細胞殺滅は、実施例４のアッセイによって測定される。
【００５７】
本明細書に開示される組成物のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子のＴＣＲβＶ領域への結合は、米国特許第５，８６１，１５５号に記載される、１６Ｇ８もしくはＴＭ２３マウス抗体またはそのヒト化バージョンの活性と比較して、本明細書に記載される活性のうちのいずれかの、少なくとも２倍、５倍、１０倍、２０倍、５０倍、１００倍、２００倍、３００倍、４００倍、５００倍、６００倍、７００倍、８００倍、９００倍、１０００倍、もしくは２０００倍、または少なくとも２〜２０００倍（例えば、５〜１０００倍、１０〜９００倍、２０〜８００倍、５０〜７００倍、１００〜６００倍、２００〜５００倍、もしくは３００〜４００倍）の増加、あるいは２分の１以下、５分の１以下、１０分の１以下、２０分の１以下、５０分の１以下、１００分の１以下、２００分の１以下、３００分の１以下、４００分の１以下、５００分の１以下、６００分の１以下、７００分の１以下、８００分の１以下、９００分の１以下、１０００分の１以下、もしくは２０００分の１以下、または２〜２０００分の１以下（例えば、５〜１０００分の１以下、１０〜９００分の１以下、２０〜８００分の１以下、５０〜７００分の１以下、１００〜６００分の１以下、２００〜５００分の１以下、もしくは３００〜４００分の１以下）への減少をもたらす。
【００５８】
ある態様では、Ｔ細胞受容体ベータ可変鎖（ＴＣＲβＶ）領域に結合する、例えば、特異的に結合する、抗体分子（抗ＴＣＲβＶ抗体分子）であって、
（ｉ）ＴＣＲβＶ上のエピトープ、例えば、本明細書に記載される抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、第２の抗ＴＣＲβＶ抗体分子によって認識されるエピトープと同じかもしくは類似のエピトープに特異的に結合するか、
（ｉｉ）本明細書に記載される抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、第２の抗ＴＣＲβＶ抗体分子と同じかもしくは類似の結合親和性もしくは特異性またはその両方を示すか、
（ｉｉｉ）本明細書に記載される抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、第２の抗ＴＣＲβＶ抗体分子の結合を阻害する、例えば、競合的に阻害するか、
（ｉｖ）本明細書に記載される抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、第２の抗ＴＣＲβＶ抗体分子と同じかもしくはオーバーラップするエピトープに結合するか、または
（ｖ）本明細書に記載される抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、第２の抗ＴＣＲβＶ抗体分子と、結合について競合し、かつ／もしくは同じエピトープに結合する、
抗体分子が本明細書で提供される。
【００５９】
一部の実施形態では、第２の抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、表１もしくは表２から選択される抗原結合性ドメイン、またはそれに対して実質的に同一の配列を含む。一部の実施形態では、第２の抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、
配列番号１もしくは配列番号９の重鎖相補性決定領域１（ＨＣ  ＣＤＲ１）、重鎖相補性決定領域２（ＨＣ  ＣＤＲ２）、および／もしくは重鎖相補性決定領域３（ＨＣ  ＣＤＲ３）、ならびに／または配列番号２、配列番号１０、もしくは配列番号１１の軽鎖相補性決定領域１（ＬＣ  ＣＤＲ１）、軽鎖相補性決定領域２（ＬＣ  ＣＤＲ２）、および／もしくは軽鎖相補性決定領域３（ＬＣ  ＣＤＲ３）
を含む抗原結合性ドメインを含む。
【００６０】
本明細書に開示される組成物のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子のＴＣＲβＶ領域への結合は、米国特許第５，８６１，１５５号に記載される１６Ｇ８もしくはＴＭ２３マウス抗体またはそのヒト化バージョンの活性と比較して、（ｉ）〜（ｖ）のうちのいずれか（例えば、１つ、２つ、３つ、４つ、またはすべて）の、異なる変化、例えば、少なくとも２倍、５倍、１０倍、２０倍、５０倍、１００倍の増加、または２分の１以下、５分の１以下、１０分の１以下、２０分の１以下、１００分の１以下への減少をもたらす。
【００６１】
本明細書に開示される組成物のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲＢＶファミリー（例えば、遺伝子ファミリー）、例えば、例として本明細書に記載されるサブファミリーを含むＴＣＲＢＶ遺伝子ファミリーに結合する。一部の実施形態では、ＴＣＲＢＶファミリー、例えば、遺伝子ファミリーは、ＴＣＲβ  Ｖ６サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ１０サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ１２サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ５サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ７サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ１１サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ１４サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ１６サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ１８サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ９サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ１３サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ４サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ３サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ２サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ１５  ｖ、ＴＣＲβ  Ｖ３０サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ１９サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ２７サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ２８サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ２４サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ２０サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ２５サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ２９サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ２３サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ２１サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ１サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ１７サブファミリー、またはＴＣＲβ  Ｖ２６サブファミリーを含む。
【００６２】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体は、ＴＣＲβ  Ｖ６−４＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−４＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ６−９＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−８＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−６＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ６−６＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−２＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−３＊０１、またはＴＣＲβ  Ｖ６−１＊０１から選択されるＴＣＲβ  Ｖ６サブファミリーに結合する。一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ６サブファミリーは、ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１を含む。
【００６３】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体は、ＴＣＲβ  Ｖ１０−１＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ１０−１＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ１０−３＊０１、またはＴＣＲβ  Ｖ１０−２＊０１から選択されるＴＣＲβ  Ｖ１０サブファミリーに結合する。
【００６４】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体は、ＴＣＲβ  Ｖ１２−４＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ１２−３＊０１、またはＴＣＲβ  Ｖ１２−５＊０１から選択されるＴＣＲβ  Ｖ１２サブファミリーに結合する。
【００６５】
本明細書に開示される組成物のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβ  Ｖ１２に結合しないか、あるいは米国特許第５，８６１，１５５号に記載される１６Ｇ８マウス抗体またはそのヒト化バージョンの親和性および／または結合特異性よりも低い（例えば、約１０％未満、２０％未満、３０％未満、４０％未満、５０％未満、６０％未満、７０％未満、８０％未満、９０％未満、または約２分の１未満、５分の１未満、もしくは１０分の１未満）の親和性および／または結合特異性で、ＴＣＲβ  Ｖ１２に結合する。
【００６６】
本明細書に開示される組成物のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、米国特許第５，８６１，１５５号に記載される１６Ｇ８マウス抗体またはそのヒト化バージョンの親和性および／または結合特異性を上回る（例えば、約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または約２倍、５倍、もしくは１０倍上回る）親和性および／または結合特異性で、ＴＣＲβ  Ｖ１２に結合する。
【００６７】
本明細書に開示される組成物のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、米国特許第５，８６１，１５５号に記載される１６Ｇ８マウス抗体またはそのヒト化バージョンの親和性および／または結合特異性を上回る（例えば、約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または約２倍、５倍、もしくは１０倍上回る）親和性および／または結合特異性で、ＴＣＲβ  Ｖ１２以外のＴＣＲβＶ領域（例えば、本明細書に記載されるＴＣＲβＶ領域、例えば、ＴＣＲβ  Ｖ６サブファミリー（例えば、ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）に結合する。
【００６８】
本明細書に開示される組成物のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、抗体Ｂの少なくとも１つのＣＤＲを含まない。本明細書に開示される組成物のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、抗体ＢのＣＤＲを含まない。
【００６９】
本明細書に開示される組成物のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体は、ＴＣＲβ  Ｖ５−５＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ５−６＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ５−４＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ５−８＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ５−１＊０１から選択されるＴＣＲβ  Ｖ５サブファミリーに結合する。
【００７０】
本明細書に開示される組成物のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体は、ＴＣＲβ  Ｖ５−５＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ５−６＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ５−４＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ５−８＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ５−１＊０１から選択されるＴＣＲβ  Ｖ５サブファミリーに結合する。
【００７１】
本明細書に開示される組成物のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβ  Ｖ５−５＊０１にもＴＣＲβ  Ｖ５−１＊０１にも結合しないか、あるいは米国特許第５，８６１，１５５号に記載されるＴＭ２３マウス抗体またはそのヒト化バージョンの親和性および／または結合特異性よりも低い（例えば、約１０％未満、２０％未満、３０％未満、４０％未満、５０％未満、６０％未満、７０％未満、８０％未満、９０％未満、または約２分の１未満、５分の１未満、もしくは１０分の１未満の）親和性および／または結合特異性で、ＴＣＲβ  Ｖ５−５＊０１またはＴＣＲβ  Ｖ５−１＊０１に結合する。
【００７２】
本明細書に開示される組成物のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、米国特許第５，８６１，１５５号に記載されるＴＭ２３マウス抗体またはそのヒト化バージョンの親和性および／または結合特異性を上回る（例えば、約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または約２倍、５倍、もしくは１０倍上回る）親和性および／または結合特異性で、ＴＣＲβ  Ｖ５−５＊０１またはＴＣＲβ  Ｖ５−１＊０１に結合する。
【００７３】
本明細書に開示される組成物のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、米国特許第５，８６１，１５５号に記載されるＴＭ２３マウス抗体またはそのヒト化バージョンの親和性および／または結合特異性を上回る（例えば、約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または約２倍、５倍、もしくは１０倍上回る）親和性および／または結合特異性で、ＴＣＲβ  Ｖ５−５＊０１またはＴＣＲβ  Ｖ５−１＊０１以外のＴＣＲβＶ領域（例えば、本明細書に記載されるＴＣＲβＶ領域、例えば、ＴＣＲβ  Ｖ６サブファミリー（例えば、ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）に結合する。
【００７４】
本明細書に開示される組成物のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＭ２３マウス抗体の少なくとも１つのＣＤＲを含まない。本明細書に開示される組成物のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＭ２３マウス抗体のＣＤＲを含まない。
【００７５】
本明細書に開示される組成物のうちのいずれかの一部の実施形態では、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、例えば、Ｊ  Ｅｘｐ  Ｍｅｄ．  １９８９  Ｊａｎ  １；  １６９（１）：  ７３−８６に開示される、マウス抗ラットＴＣＲ抗体Ｒ７３の配列を含まず、これは、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。本明細書に開示される組成物のうちのいずれかの一部の実施形態では、本明細書に開示される多特異性抗体分子は、例えば、Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  １９９３  Ｍａｒ  １５；１５０（６）：２３０５−１５に開示される、マウス抗ラットＴＣＲ抗体Ｒ７３の配列を含まず、これは、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【００７６】
本明細書に開示される組成物のうちのいずれかの一部の実施形態では、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、例えば、Ｏｎｃｏｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ．  ２０１６；  ５（１）：  ｅ１０５２９３０に開示される、ウイルスペプチド−ＭＨＣ複合体を含まず、これは、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。本明細書に開示される組成物のうちのいずれかの一部の実施形態では、本明細書に開示される多特異性抗体分子は、例えば、Ｏｎｃｏｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ．  ２０１６；  ５（１）：  ｅ１０５２９３０に開示される、ウイルスペプチド−ＭＨＣ複合体を含まず、これは、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【００７７】
本明細書に開示される組成物のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、以下のＴＣＲβＶサブファミリー：
（ｉ）例えば、ＴＣＲβ  Ｖ６−４＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−４＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ６−９＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−８＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−６＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ６−６＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−２＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−３＊０１、もしくはＴＣＲβ  Ｖ６−１＊０１のうちの１つもしくは複数を含む、ＴＣＲβ  Ｖ６サブファミリー、
（ｉｉ）例えば、ＴＣＲβ  Ｖ１０−１＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ１０−１＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ１０−３＊０１、もしくはＴＣＲβ  Ｖ１０−２＊０１のうちの１つもしくは複数を含む、ＴＣＲβ  Ｖ１０サブファミリー、
（ｉｉｉ）例えば、ＴＣＲβ  Ｖ５−６＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ５−４＊０１、もしくはＴＣＲβ  Ｖ５−８＊０１のうちの１つもしくは複数を含む、ＴＣＲβ  Ｖ５サブファミリー、
（ｉｖ）例えば、ＴＣＲβ  Ｖ１２−４＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ１２−３＊０１、もしくはＴＣＲβ  Ｖ１２−５＊０１のうちの１つもしくは複数を含む、ＴＣＲβ  Ｖ１２サブファミリー、
（ｖ）例えば、ＴＣＲβ  Ｖ７−７＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ７−６＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ７  −８＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ７  −４＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ７−２＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ７−２＊０３、ＴＣＲβ  Ｖ７−２＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ７−３＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ７−９＊０３、もしくはＴＣＲβ  Ｖ７−９＊０１のうちの１つもしくは複数を含む、ＴＣＲβ  Ｖ７サブファミリー、
（ｖｉ）例えば、ＴＣＲβ  Ｖ１１−１＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ１１−２＊０１、もしくはＴＣＲβ  Ｖ１１−３＊０１のうちの１つもしくは複数を含む、ＴＣＲβ  Ｖ１１サブファミリー、
（ｖｉｉ）ＴＣＲβ  Ｖ１４＊０１を含む、ＴＣＲβ  Ｖ１４サブファミリー、
（ｖｉｉｉ）ＴＣＲβ  Ｖ１６＊０１を含む、ＴＣＲβ  Ｖ１６サブファミリー、
（ｉｘ）ＴＣＲβ  Ｖ１８＊０１を含む、ＴＣＲβ  Ｖ１８サブファミリー、
（ｘ）例えば、ＴＣＲβ  Ｖ９＊０１もしくはＴＣＲβ  Ｖ９＊０２のうちの１つもしくは複数を含む、ＴＣＲβ  Ｖ９サブファミリー、
（ｘｉ）ＴＣＲβ  Ｖ１３＊０１を含む、ＴＣＲβ  Ｖ１３サブファミリー、
（ｘｉｉ）例えば、ＴＣＲβ  Ｖ４−２＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ４−３＊０１、もしくはＴＣＲβ  Ｖ４−１＊０１のうちの１つもしくは複数を含む、ＴＣＲβ  Ｖ４サブファミリー、
（ｘｉｉｉ）ＴＣＲβ  Ｖ３−１＊０１を含む、ＴＣＲβ  Ｖ３サブファミリー、
（ｘｉｖ）ＴＣＲβ  Ｖ２＊０１を含む、ＴＣＲβ  Ｖ２サブファミリー、
（ｘｖ）ＴＣＲβ  Ｖ１５＊０１を含む、ＴＣＲβ  Ｖ１５サブファミリー、
（ｘｖｉ）例えば、ＴＣＲβ  Ｖ３０＊０１もしくはＴＣＲβ  Ｖ３０＊０２のうちの１つもしくは複数を含む、ＴＣＲβ  Ｖ３０サブファミリー、
（ｘｖｉｉ）例えば、ＴＣＲβ  Ｖ１９＊０１もしくはＴＣＲβ  Ｖ１９＊０２のうちの１つもしくは複数を含む、ＴＣＲβ  Ｖ１９サブファミリー、
（ｘｖｉｉｉ）ＴＣＲβ  Ｖ２７＊０１を含む、ＴＣＲβ  Ｖ２７サブファミリー、
（ｘｉｘ）ＴＣＲβ  Ｖ２８＊０１を含む、ＴＣＲβ  Ｖ２８サブファミリー、
（ｘｘ）ＴＣＲβ  Ｖ２４−１＊０１を含む、ＴＣＲβ  Ｖ２４サブファミリー、
（ｘｘｉ）例えば、ＴＣＲβ  Ｖ２０−１＊０１もしくはＴＣＲβ  Ｖ２０−１＊０２のうちの１つもしくは複数を含む、ＴＣＲβ  Ｖ２０サブファミリー、
（ｘｘｉｉ）ＴＣＲβ  Ｖ２５−１＊０１を含む、ＴＣＲβ  Ｖ２５サブファミリー、または
（ｘｘｉｉｉ）ＴＣＲβ  Ｖ２９−１＊０１を含む、ＴＣＲβ  Ｖ２９サブファミリー、
（ｘｘｉｖ）ＴＣＲβ  Ｖ２１サブファミリー、
（ｘｘｖ）ＴＣＲβ  Ｖ１サブファミリー、
（ｘｘｖｉ）ＴＣＲβ  Ｖ１７サブファミリー、
（ｘｖｉｉ）ＴＣＲβ  Ｖ２３サブファミリー、または
（ｘｖｉｉｉ）ＴＣＲβ  Ｖ２６サブファミリー
のうちの１つまたは複数（例えば、すべて）に結合する。
【００７８】
本明細書に開示される組成物のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、以下のＴＣＲβＶサブファミリー：
（ｉ）ＴＣＲβ  Ｖ６、例えば、ＴＣＲβ  Ｖ６−４＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−４＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ６−９＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−８＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−６＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ６−６＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−２＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−３＊０１、もしくはＴＣＲβ  Ｖ６−１＊０１のうちの１つもしくは複数、
（ｉｉ）ＴＣＲβ  Ｖ１０、例えば、ＴＣＲβ  Ｖ１０−１＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ１０−１＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ１０−３＊０１、もしくはＴＣＲβ  Ｖ１０−２＊０１のうちの１つもしくは複数、
（ｉｉｉ）ＴＣＲβ  Ｖ１２、例えば、ＴＣＲβ  Ｖ１２−４＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ１２−３＊０１、もしくはＴＣＲβ  Ｖ１２−５＊０１のうちの１つもしくは複数、または
（ｉｖ）ＴＣＲβ  Ｖ５、例えば、ＴＣＲβ  Ｖ５−５＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ５−６＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ５−４＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ５−８＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ５−１＊０１のうちの１つもしくは複数
のうちの１つまたは複数（例えば、すべて）に結合する。
【００７９】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβ  Ｖ６、例えば、ＴＣＲβ  Ｖ６−４＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−４＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ６−９＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−８＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−６＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ６−６＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−２＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−３＊０１、またはＴＣＲβ  Ｖ６−１＊０１のうちの１つもしくは複数に結合する。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１に結合する。
【００８０】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβ  Ｖ１２に結合しない。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβ  Ｖ５−５＊０１にもＴＣＲβ  Ｖ５−１＊０１にも結合しない。
【００８１】
ある態様では、Ｔ細胞受容体ベータ可変領域（ＴＣＲβＶ）に結合する（例えば、特異的に結合する）抗体分子（「抗ＴＣＲβＶ抗体分子」）を含む第１の部分（例えば、第１の免疫細胞エンゲージャー）を含む、多特異性分子（例えば、二特異性分子）が本明細書で提供される。
【００８２】
一部の実施形態では、多特異性分子は、腫瘍標的化部分、サイトカイン分子、間質改変部分、または第１の部分以外の抗ＴＣＲβＶ抗体分子のうちの１つまたは複数を含む、第２の部分を含む。
【００８３】
一部の実施形態では、第１の部分のＴＣＲβＶ領域への結合は、ＴＣＲβＶ領域以外の受容体または分子に結合するＴ細胞エンゲージャー（「非ＴＣＲβＶ結合性Ｔ細胞エンゲージャー」）のものとは異なるサイトカインプロファイル、例えば、サイトカイン分泌プロファイルをもたらす。
【００８４】
別の態様では、本開示は、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子を含む、多特異性分子、例えば、二特異性分子を提供する。
一部の実施形態では、多特異性分子は、腫瘍標的化部分、サイトカイン分子、免疫細胞エンゲージャー、例えば、第２の免疫細胞エンゲージャー、および／または間質改変部分をさらに含む。
【００８５】
なおも別の態様では、
（ｉ）本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子を含む、第１の免疫細胞エンゲージャーを含む、第１の部分、ならびに
（ｉｉ）腫瘍標的化部分、第２の免疫細胞エンゲージャー、サイトカイン分子、または間質改変部分のうちの１つまたは複数を含む、第２の部分
を含む、多特異性分子、例えば、二特異性分子が、本明細書に開示される。
【００８６】
別の態様では、本開示は、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子をコードするヌクレオチド配列、またはそれに対して少なくとも７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の同一性を有するヌクレオチド配列を含む、単離された核酸分子を提供する。
【００８７】
別の態様では、本開示は、本明細書に開示される多特異性分子をコードするヌクレオチド配列、またはそれに対して少なくとも７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の同一性を有するヌクレオチド配列を含む、単離された核酸分子を提供する。
【００８８】
なおも別の態様では、本開示は、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子をコードするヌクレオチド配列、またはそれに対して少なくとも７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の同一性を有するヌクレオチド配列を含む、ベクター、例えば、発現ベクターを提供する。
【００８９】
別の態様では、本開示は、本明細書に開示される多特異性分子をコードするヌクレオチド配列、またはそれに対して少なくとも７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の同一性を有するヌクレオチド配列を含む、ベクター、例えば、発現ベクターを提供する。
【００９０】
一態様では、本開示は、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子をコードする核酸分子、またはそれに対して少なくとも７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の同一性を有するヌクレオチド配列を含む、細胞、例えば、宿主細胞、例えば、細胞集団を提供する。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子をコードする核酸分子を含む細胞または細胞集団は、（ｉ）可変領域（ＶＨ）、例えば、表１もしくは２に列挙されるＶＨ、またはそれに対して少なくとも７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の同一性を有する配列、および例えば、本明細書に記載される１つもしくは複数の重鎖定常領域を含む、重鎖、ならびに／または（ｉｉ）可変領域（ＶＬ）、例えば、表１もしくは２に列挙されるＶＬ、またはそれに対して少なくとも７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の同一性を有する配列、および例えば、本明細書に記載される軽鎖定常領域、例えば、配列番号３９の配列、またはそれに対して少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列を含む、カッパ鎖定常領域を含む、軽鎖を含む。一部の実施形態では、細胞または細胞集団は、ＩｇＪ重鎖定常領域、またはその断片をさらに含む。一部の実施形態では、ＩｇＪ重鎖定常領域は、配列番号７６の配列、またはそれに対して少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列を含む。一部の実施形態では、ＩｇＪは、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβＶ抗体分子の重鎖および／または軽鎖を含む、例えば、それを発現する、同じ細胞または細胞集団に含まれる、例えば、それにおいて発現される。一部の実施形態では、ＩｇＪは、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβＶ抗体分子の重鎖および／または軽鎖を含む、例えば、それを発現する、細胞または細胞集団とは異なる細胞または細胞集団において発現される。
【００９１】
一態様では、本開示は、本明細書に開示される多特異性分子をコードする核酸分子、またはそれに対して少なくとも７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の同一性を有するヌクレオチド配列を含む、細胞、例えば、宿主細胞、例えば、細胞集団を提供する。
【００９２】
一態様では、対象における疾患、例えば、がんを処置するための医薬の製造における使用のための、抗ＴＣＲβＶ抗体分子が、本明細書に開示される。
一態様では、対象における疾患、例えば、がんを処置するための医薬の製造における使用のための、抗ＴＣＲβＶ抗体分子を含む多特異性分子が、本明細書に開示される。
【００９３】
別の態様では、本開示は、本明細書に記載される抗ＴＣＲβＶ抗体分子、多特異性分子を作製する、例えば産生する方法であって、本明細書に記載される宿主細胞を、好適な条件下において培養するステップを含む、方法を提供する。多特異性分子を作製する方法の一部の実施形態では、条件は、例えば、遺伝子発現および／またはホモもしくはヘテロ二量体化に好適な条件を含む。
【００９４】
別の態様では、本開示は、本明細書に記載される抗ＴＣＲβＶ抗体分子、または多特異性分子と、薬学的に許容される担体、賦形剤、または安定化剤とを含む、医薬組成物を提供する。
【００９５】
ある態様では、本開示は、対象において免疫応答をモジュレート、例えば、増強させる方法であって、対象に、有効量の、Ｔ細胞受容体ベータ可変領域（ＴＣＲβＶ）に結合する（例えば、特異的に結合する）抗体分子（「抗ＴＣＲβＶ抗体分子」）を投与するステップを含む、方法を提供する。
【００９６】
ある態様では、本開示は、対象において免疫応答をモジュレート、例えば、増強させる方法であって、対象に、有効量の本明細書に開示される多特異性分子を投与するステップを含む、方法を提供する。
【００９７】
一部の実施形態では、本方法は、対象において免疫細胞集団を拡大させる、例えば、その数を増加させるステップを含む。
ある態様では、本開示は、免疫細胞集団を拡大させる、例えば、その数を増加させる方法であって、免疫細胞集団を、有効量の、Ｔ細胞受容体ベータ可変領域（ＴＣＲβＶ）に結合する（例えば、特異的に結合する）抗体分子（「抗ＴＣＲβＶ抗体分子」）と接触させるステップを含む、方法を提供する。
【００９８】
ある態様では、本開示は、免疫細胞集団を拡大させる、例えば、その数を増加させる方法であって、免疫細胞集団を、有効量の本明細書に開示される多特異性分子と接触させるステップを含む、方法を提供する。
【００９９】
一部の実施形態では、拡大は、ｉｎ  ｖｉｖｏまたはｅｘ  ｖｉｖｏ（例えば、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ）で生じる。
一部の実施形態では、免疫細胞集団は、ＴＣＲβＶを発現する細胞、例えば、ＴＣＲβＶ＋細胞を含む。
【０１００】
一部の実施形態では、ＴＣＲβＶを発現する細胞は、Ｔ細胞、例えば、ＣＤ８＋  Ｔ細胞、ＣＤ３＋  Ｔ細胞、またはＣＤ４＋  Ｔ細胞である。
一部の実施形態では、免疫細胞集団は、Ｔ細胞（例えば、ＣＤ４  Ｔ細胞、ＣＤ８  Ｔ細胞（例えば、エフェクターＴ細胞もしくはメモリーＴ細胞（例えば、メモリーエフェクターＴ細胞（例えば、ＴＥＭ細胞、例えば、ＴＥＭＲＡ細胞）、または腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）を含む。
【０１０１】
一部の実施形態では、免疫細胞集団は、Ｔ細胞、ナチュラルキラー細胞、Ｂ細胞、または骨髄性細胞を含む。
一部の実施形態では、免疫細胞集団は、健常対象から得られる。
【０１０２】
ある態様では、対象における疾患、例えば、がんを処置する方法であって、対象に、有効量の、例えば、治療有効量の、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子または抗ＴＣＲβＶ抗体分子を含む多特異性分子を投与するステップを含み、それによって疾患を処置する、方法が本明細書で提供される。
【０１０３】
関連する態様では、対象における疾患、例えば、がんの処置における使用のための、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子または抗ＴＣＲβＶ抗体分子を含む多特異性分子を含む、組成物が本明細書で提供される。
【０１０４】
一部の実施形態では、疾患は、がん、例えば、固形腫瘍、または血液がん、または転移病変である。
一部の実施形態では、本方法は、例えば、本明細書に記載される第２の薬剤、例えば、治療剤を投与するステップをさらに含む。一部の実施形態では、第２の薬剤は、治療剤（例えば、化学療法剤、生物剤、ホルモン療法）、放射線、または外科手術を含む。一部の実施形態では、治療剤は、化学療法剤または生物剤から選択される。
【０１０５】
別の態様では、例えば、例として、疾患、例えば、がんを有する対象において、療法、例えば、処置を、Ｔ細胞へと標的化する、例えば、指向または再指向させる方法であって、有効量の、（ｉ）本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体、および（ｉｉ）例えば、本明細書に記載される療法、例えば、腫瘍標的化療法（例えば、がん抗原に結合する抗体）を投与するステップを含み、それによって、Ｔ細胞を標的化する方法が本明細書で提供される。
【０１０６】
一部の実施形態では、（ｉ）および（ｉｉ）は、コンジュゲートされている、例えば、連結されている。
一部の実施形態では、（ｉ）および（ｉｉ）は、同時にまたは並行して投与される。
【０１０７】
一部の実施形態では、本方法は、（ｉｉ）単独の投与と比較して、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）の低減（例えば、ＣＲＳの持続期間がより短いこともしくはＣＲＳがないこと）、またはＣＲＳの重症度の低減（例えば、重度のＣＲＳ、例えば、ＣＲＳグレード４もしくは５の不在）をもたらす。一部の実施形態では、ＣＲＳは、実施例３のアッセイによって評価される。一部の実施形態では、本方法は、（ｉｉ）単独の投与と比較して、神経毒性（ＮＴ）の低減（例えば、ＮＴの持続期間がより短いこともしくはＮＴがないこと）、またはＮＴの重症度の低減（例えば、重度のＮＴの不在）をもたらす。
【０１０８】
なおも別の態様では、本開示は、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体または本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体を含む多特異性分子を用いて、例えば、疾患、例えば、がんを有する対象において、Ｔ細胞を標的化する方法を提供する。
【０１０９】
別の態様では、本開示は、対象におけるサイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）および／または神経毒性（ＮＴ）、例えば、処置、例えば以前に投与された処置と関連するＣＲＳおよび／またはＮＴを処置する、例えば、予防または低減する方法であって、対象に、有効量の、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体または本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体を含む多特異性分子を投与するステップであって、対象が、疾患、例えば、がんを有する、ステップを含み、それによって、対象におけるＣＲＳおよび／またはＮＴを処置、例えば、予防または低減する、方法を提供する。
【０１１０】
関連する態様では、本開示は、対象に、有効量の抗ＴＣＲβＶ抗体を投与するステップを含む、対象におけるサイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）および／または神経毒性（ＮＴ）、例えば、処置、例えば以前に投与された処置と関連するＣＲＳおよび／またはＮＴの処置、例えば、予防または低減における使用のための、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体または本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体を含む多特異性分子を含む、組成物であって、対象が、疾患、例えば、がんを有する、組成物を提供する。
【０１１１】
本明細書に開示される方法または使用のための組成物の一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体は、ＣＲＳおよび／またはＮＴと関連する処置の投与と並行してまたはその後に、投与される。
【０１１２】
別の態様では、免疫細胞集団を拡大させる、例えば、その数を増加させる方法であって、免疫細胞集団を、Ｔ細胞受容体ベータ可変鎖（ＴＣＲβＶ）領域に結合する、例えば、特異的に結合する、抗体分子、例えば、ヒト化抗体分子（例えば、本明細書に記載される抗ＴＣＲβＶ抗体分子または本明細書に記載される抗ＴＣＲβＶ抗体分子を含む多特異性分子）と接触させるステップを含み、それによって免疫細胞集団を拡大させる、方法が本明細書で提供される。
【０１１３】
一部の実施形態では、拡大は、ｉｎ  ｖｉｖｏまたはｅｘ  ｖｉｖｏ（例えば、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ）で生じる。
ある態様では、がんを有する対象を評価する方法であって、対象について、ＴＣＲβＶ分子のステータスの値を取得するステップを含み、前記値が、対象から得られた試料におけるＴＣＲβＶ分子の存在、例えば、レベルまたは活性の尺度を含み、ＴＣＲβＶ分子のステータスの値が、対象から得られた試料において、参照値、例えば、健常対象、例えば、がんを有さない対象から得られた値と比較して、高い、例えば、増加している、方法が本明細書で提供される。
【０１１４】
別の態様では、本開示は、がんを有する対象を処置する方法であって、（ｉ）対象について、ＴＣＲβＶ分子のステータスの値を取得するステップであって、前記値が、対象から得られた試料におけるＴＣＲβＶ分子の存在、例えば、レベルまたは活性の尺度を含む、ステップと、（ｉｉ）前記値に応じて、対象に、有効量の本明細書に記載される抗ＴＣＲβＶ抗体分子（例えば、ＴＣＲβＶアゴニスト）を投与するステップとを含み、それによってがんを処置する、方法を提供する。
【０１１５】
一部の実施形態では、値は、対象由来の試料において、参照値、例えば、健常対象、例えば、がんを有さない対象から得られた値と比較して、高い、例えば、増加している。
関連する態様では、本開示は、（ｉ）対象について、ＴＣＲβＶ分子のステータスの値を取得するステップであって、前記値が、対象由来の試料におけるＴＣＲβＶ分子の存在、例えば、レベルまたは活性の尺度を含む、ステップと、（ｉｉ）前記値に応じて、対象に、有効量の本明細書に記載される抗ＴＣＲβＶ抗体分子（例えば、ＴＣＲβＶアゴニスト）を投与するステップとを含む、がんを有する対象の処置における使用のための、抗ＴＣＲβＶ抗体分子を含む組成物を提供する。
【０１１６】
ある態様では、がんの存在に関して、対象を評価する方法であって、
（ｉ）対象について、例えば、対象由来の生体試料において、１つまたは複数のＴＣＲβＶ分子のステータスの値を取得するステップであって、前記値が、対象から得られた試料におけるＴＣＲβＶ分子の存在、例えば、レベルまたは活性の尺度を含む、ステップと、
（ｉｉ）１つまたは複数のＴＣＲβＶ分子の値が、対象由来の試料において、参照値、例えば、健常対象、例えば、がんを有さない対象から得られた値と比較して、高い、例えば、増加しているかどうかを判定するステップと
を含み、対象において、参照物、例えば、健常対象と比較して高い、例えば、増加している値は、対象におけるがんの存在を示す、方法が本明細書で提供される。
【０１１７】
別の態様では、本開示は、がんを有する対象を処置する方法であって、
（ｉ）対象について、例えば、対象由来の生体試料において、１つまたは複数のＴＣＲβＶ分子のステータスの値を取得するステップであって、前記値が、対象から得られた試料におけるＴＣＲβＶ分子の存在、例えば、レベルまたは活性の尺度を含む、ステップと、
（ｉｉ）１つまたは複数のＴＣＲβＶ分子の値が、対象由来の試料において、参照値、例えば、健常対象、例えば、がんを有さない対象から得られた値と比較して、高い、例えば、増加しているかどうかを判定するステップと、
（ｉｉｉ）対象において、参照値と比較して高い、例えば、増加している値が判定された場合、対象に、有効量の、例えば、本明細書に記載される抗ＴＣＲβＶ抗体分子（例えば、ＴＣＲβＶアゴニスト）を投与するステップと
を含み、それによって、がんを処置する、方法を提供する。
【０１１８】
関連する態様では、
（ｉ）対象について、例えば、対象由来の生体試料において、１つまたは複数のＴＣＲβＶ分子のステータスの値を取得するステップであって、前記値が、対象から得られた試料におけるＴＣＲβＶ分子の存在、例えば、レベルまたは活性の尺度を含む、ステップと、
（ｉｉ）１つまたは複数のＴＣＲβＶ分子の値が、対象由来の試料において、参照値、例えば、健常対象、例えば、がんを有さない対象から得られた値と比較して、高い、例えば、増加しているかどうかを判定するステップと、
（ｉｉｉ）対象において、参照値と比較して高い、例えば、増加している値が判定された場合、対象に、有効量の、例えば、本明細書に記載される抗ＴＣＲβＶ抗体分子（例えば、ＴＣＲβＶアゴニスト）を投与するステップと
を含む、がんを有する対象を処置する方法における使用のための、抗ＴＣＲβＶ抗体分子を含む組成物が本明細書で提供される。
【０１１９】
本明細書に開示される処置の方法または使用のための組成物のうちのいずれかの一部の実施形態では、ステータスは、対象ががんまたはその症状を有することを示す。
本明細書に開示される処置の方法または使用のための組成物のうちのいずれかの一部の実施形態では、ステータスは、療法、例えば、例として本明細書に記載される抗ＴＣＲβＶ抗体分子を含む療法に対する応答性を示す。
【０１２０】
本明細書に開示される処置の方法または使用のための組成物のうちのいずれかの一部の実施形態では、ステータスの値は、本明細書に記載されるアッセイによって判定、例えば、測定される。
【０１２１】
なおも別の態様では、がんを有する対象を処置する方法であって、対象に有効量の本明細書に記載される抗ＴＣＲＢＶ抗体分子を投与するステップを含み、対象は、例えば、本明細書に記載される１つまたは複数のＴＣＲＢＶ分子のレベルまたは活性が、例えば、健常対象、例えば、がんを有さない対象における１つまたは複数のＴＣＲＢＶ分子の参照レベルまたは活性と比較して、高い、例えば、増加している、方法が本明細書で提供される。
【０１２２】
ある態様では、本開示は、がんを有する対象を処置する方法であって、
（ｉ）対象から生体試料、例えば、末梢血試料、生検試料、または骨髄試料を単離するステップと、
（ｉｉ）対象について、例えば、対象由来の生体試料において、１つまたは複数のＴＣＲβＶ分子のステータスの値を取得するステップであって、前記値が、参照値、例えば、健常対象由来の試料と比較した、対象から得られた試料におけるＴＣＲβＶ分子の存在、例えば、レベルまたは活性の尺度を含み、
対象において、参照物、例えば、健常対象と比較して高い、例えば、増加している値は、対象におけるがんの存在を示す、ステップと、
（ｉｉｉ）生体試料を、例えば、ｉｎ  ｖｉｔｒｏにおいて、抗ＴＣＲβＶ抗体分子と接触させるステップと、
（ｉｖ）ステップ（ｉｉｉ）から得られた生体試料またはその一部分を、対象に投与するステップと
を含む、方法を提供する。
【０１２３】
別の態様では、がんを有する対象由来の免疫エフェクター細胞集団を拡大させる方法であって、
（ｉ）対象から、免疫エフェクター細胞集団を含む生体試料、例えば、末梢血試料、生検試料、または骨髄試料を単離するステップと、
（ｉｉ）対象について、例えば、対象由来の生体試料において、１つまたは複数のＴＣＲβＶ分子のステータスの値を取得するステップであって、前記値が、参照値、例えば、健常対象由来の試料と比較した、対象由来の試料におけるＴＣＲβＶ分子の存在、例えば、レベルまたは活性の尺度を含み、
対象において、参照物、例えば、健常対象と比較して高い、例えば、増加している値は、対象におけるがんの存在を示す、ステップと、
（ｉｉｉ）免疫エフェクター細胞集団を含む生体試料を、抗ＴＣＲβＶ抗体分子と接触させるステップと
を含む、方法が本明細書で提供される。
【０１２４】
一部の実施形態では、本方法は、対象に、抗ＴＣＲβＶ抗体分子と接触させた免疫エフェクター細胞集団を投与するステップをさらに含む。
一部の実施形態では、本明細書に開示される拡大の方法、または処置の方法、または使用のための組成物は、免疫エフェクター細胞集団におけるＴ細胞機能（例えば、細胞傷害活性、サイトカイン分泌、もしくは脱顆粒化）を、例えば、参照集団、例えば、抗ＴＣＲβＶ抗体分子と接触していないその他は類似の集団または健常対象（例えば、がんを有さない対象）から得られた免疫エフェクター細胞集団と比較して測定するステップを含む。
【０１２５】
本明細書に開示される方法または使用のための組成物のうちのいずれかの一部の実施形態では、免疫エフェクター細胞集団を含む生体試料を、その生体試料において高い、例えば、増加しているとして特定された１つまたは複数のＴＣＲβＶ分子（例えば、同じＴＣＲβＶ分子）に結合する抗ＴＣＲβＶ抗体分子と接触させる。
【０１２６】
本明細書に開示される方法または使用のための組成物のうちのいずれかの一部の実施形態では、免疫エフェクター細胞集団を含む生体試料を、その生体試料において高い、例えば、増加しているとして特定された１つまたは複数のＴＣＲβＶ分子（例えば、異なるＴＣＲβＶ分子）に結合しない抗ＴＣＲβＶ抗体分子と接触させる。
【０１２７】
別の態様では、がんと関連する１つまたは複数のＴＣＲβＶ分子を特定する方法であって、
（ｉ）疾患を有する第１の対象由来の生体試料および疾患を有さない第２の対象由来の生体試料において、複数のＴＣＲβＶ分子のステータスを取得するステップと、
（ｉｉ）ＴＣＲβＶ分子のうちの１つまたは複数のレベルまたは活性が、第１の対象において、第２の対象と比較して高い、例えば、増加しているかどうかを判定するステップと
を含み、それによって、がんと関連する１つまたは複数のＴＣＲβＶ分子を特定する、方法が本明細書で提供される。
【０１２８】
本明細書に開示される方法または使用のための組成物のうちのいずれかの一部の実施形態では、ＴＣＲβＶ分子のうちの１つまたは複数は、以下のＴＣＲβＶサブファミリー：
（ｉ）例えば、ＴＣＲβ  Ｖ６−４＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−４＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ６−９＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−８＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−６＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ６−６＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−２＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−３＊０１、もしくはＴＣＲβ  Ｖ６−１＊０１のうちの１つもしくは複数を含む、ＴＣＲβ  Ｖ６サブファミリー、
（ｉｉ）例えば、ＴＣＲβ  Ｖ１０−１＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ１０−１＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ１０−３＊０１、もしくはＴＣＲβ  Ｖ１０−２＊０１のうちの１つもしくは複数を含む、ＴＣＲβ  Ｖ１０サブファミリー、
（ｉｉｉ）例えば、ＴＣＲβ  Ｖ５−６＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ５−４＊０１、もしくはＴＣＲβ  Ｖ５−８＊０１のうちの１つもしくは複数を含む、ＴＣＲβ  Ｖ５サブファミリー、
（ｉｖ）例えば、ＴＣＲβ  Ｖ１２−４＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ１２−３＊０１、もしくはＴＣＲβ  Ｖ１２−５＊０１のうちの１つもしくは複数を含む、ＴＣＲβ  Ｖ１２サブファミリー、
（ｖ）例えば、ＴＣＲβ  Ｖ７−７＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ７−６＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ７  −８＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ７  −４＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ７−２＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ７−２＊０３、ＴＣＲβ  Ｖ７−２＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ７−３＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ７−９＊０３、もしくはＴＣＲβ  Ｖ７−９＊０１のうちの１つもしくは複数を含む、ＴＣＲβ  Ｖ７サブファミリー、
（ｖｉ）例えば、ＴＣＲβ  Ｖ１１−１＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ１１−２＊０１、もしくはＴＣＲβ  Ｖ１１−３＊０１のうちの１つもしくは複数を含む、ＴＣＲβ  Ｖ１１サブファミリー、
（ｖｉｉ）ＴＣＲβ  Ｖ１４＊０１を含む、ＴＣＲβ  Ｖ１４サブファミリー、
（ｖｉｉｉ）ＴＣＲβ  Ｖ１６＊０１を含む、ＴＣＲβ  Ｖ１６サブファミリー、
（ｉｘ）ＴＣＲβ  Ｖ１８＊０１を含む、ＴＣＲβ  Ｖ１８サブファミリー、
（ｘ）例えば、ＴＣＲβ  Ｖ９＊０１もしくはＴＣＲβ  Ｖ９＊０２のうちの１つもしくは複数を含む、ＴＣＲβ  Ｖ９サブファミリー、
（ｘｉ）ＴＣＲβ  Ｖ１３＊０１を含む、ＴＣＲβ  Ｖ１３サブファミリー、
（ｘｉｉ）例えば、ＴＣＲβ  Ｖ４−２＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ４−３＊０１、もしくはＴＣＲβ  Ｖ４−１＊０１のうちの１つもしくは複数を含む、ＴＣＲβ  Ｖ４サブファミリー、
（ｘｉｉｉ）ＴＣＲβ  Ｖ３−１＊０１を含む、ＴＣＲβ  Ｖ３サブファミリー、
（ｘｉｖ）ＴＣＲβ  Ｖ２＊０１を含む、ＴＣＲβ  Ｖ２サブファミリー、
（ｘｖ）ＴＣＲβ  Ｖ１５＊０１を含む、ＴＣＲβ  Ｖ１５サブファミリー、
（ｘｖｉ）例えば、ＴＣＲβ  Ｖ３０＊０１もしくはＴＣＲβ  Ｖ３０＊０２のうちの１つもしくは複数を含む、ＴＣＲβ  Ｖ３０サブファミリー、
（ｘｖｉｉ）例えば、ＴＣＲβ  Ｖ１９＊０１もしくはＴＣＲβ  Ｖ１９＊０２のうちの１つもしくは複数を含む、ＴＣＲβ  Ｖ１９サブファミリー、
（ｘｖｉｉｉ）ＴＣＲβ  Ｖ２７＊０１を含む、ＴＣＲβ  Ｖ２７サブファミリー、
（ｘｉｘ）ＴＣＲβ  Ｖ２８＊０１を含む、ＴＣＲβ  Ｖ２８サブファミリー、
（ｘｘ）ＴＣＲβ  Ｖ２４−１＊０１を含む、ＴＣＲβ  Ｖ２４サブファミリー、
（ｘｘｉ）例えば、ＴＣＲβ  Ｖ２０−１＊０１もしくはＴＣＲβ  Ｖ２０−１＊０２のうちの１つもしくは複数を含む、ＴＣＲβ  Ｖ２０サブファミリー、
（ｘｘｉｉ）ＴＣＲβ  Ｖ２５−１＊０１を含む、ＴＣＲβ  Ｖ２５サブファミリー、または
（ｘｘｉｉｉ）ＴＣＲβ  Ｖ２９−１＊０１を含む、ＴＣＲβ  Ｖ２９サブファミリー、
（ｘｘｉｖ）ＴＣＲβ  Ｖ２１サブファミリー、
（ｘｘｖ）ＴＣＲβ  Ｖ１サブファミリー、
（ｘｘｖｉ）ＴＣＲβ  Ｖ１７サブファミリー、
（ｘｖｉｉ）ＴＣＲβ  Ｖ２３サブファミリー、または
（ｘｖｉｉｉ）ＴＣＲβ  Ｖ２６サブファミリー
のうちの１つまたは複数（例えば、すべて）を含む。
【０１２９】
本明細書に開示される方法または使用のための組成物のうちのいずれかの一部の実施形態では、がんは、黒色腫、膵臓がん（例えば、膵臓腺癌）、乳がん、結腸直腸がん（ＣＲＣ）、肺がん（例えば、小細胞もしくは非小細胞肺がん）、皮膚がん、卵巣がん、または肝臓がんを含むがこれらに限定されない、固形腫瘍である。
【０１３０】
本明細書に開示される方法または使用のための組成物のうちのいずれかの一部の実施形態では、がんは、Ｂ細胞もしくはＴ細胞悪性腫瘍、例えば、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫（例えば、Ｂ細胞リンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、濾胞性リンパ腫、慢性リンパ球性白血病（Ｂ−ＣＬＬ）、マントル細胞リンパ腫、辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫、リンパ形質細胞性リンパ腫、有毛細胞性白血病）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群、多発性骨髄腫、および急性リンパ球性白血病を含むがこれらに限定されない、血液がんである。
【０１３１】
本明細書に開示される拡大の方法、または処置の方法、または使用のための組成物の一部の実施形態では、対象、例えば、対象由来の試料における高い、例えば、増加した、１つまたは複数のＴＣＲβＶ分子のレベルまたは活性は、対象における前記１つまたは複数のＴＣＲβＶ分子を発現するＴ細胞のバイアス、例えば、優先的な拡大、例えば、クローン拡大を示す。
【０１３２】
一部の実施形態では、例えば、本明細書に開示されるがんを有する対象は、がんと関連する１つまたは複数のＴＣＲβＶ分子のレベルまたは活性が、高い、例えば、増加している。一部の実施形態では、ＴＣＲβＶ分子は、がん抗原、例えば、がん関連抗原またはネオ抗原と会合する、例えば、それを認識する。
【０１３３】
本明細書に開示される方法または使用のための組成物のうちのいずれかの一部の実施形態では、対象は、Ｂ−ＣＬＬを有する。一部の実施形態では、Ｂ−ＣＬＬを有する対象は、１つまたは複数のＴＣＲβＶ分子、例えば、（ｉ）例えば、ＴＣＲβ  Ｖ６−４＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−４＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ６−９＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−８＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−６＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ６−６＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−２＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−３＊０１、もしくはＴＣＲβ  Ｖ６−１＊０１を含む、ＴＣＲβ  Ｖ６サブファミリー、（ｉｉ）ＴＣＲβ  Ｖ５−６＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ５−４＊０１、もしくはＴＣＲβ  Ｖ５−８＊０１を含む、ＴＣＲβ  Ｖ５サブファミリー、（ｉｉｉ）ＴＣＲβ  Ｖ３−１＊０１を含む、ＴＣＲβ  Ｖ３サブファミリー、（ｉｖ）ＴＣＲβ  Ｖ２＊０１を含む、ＴＣＲβ  Ｖ２サブファミリー、または（ｖ）ＴＣＲβ  Ｖ１９＊０１もしくはＴＣＲβ  Ｖ１９＊０２を含む、ＴＣＲβ  Ｖ１９サブファミリーを含む、１つまたは複数のＴＣＲβＶ分子のレベルまたは活性が、高い、例えば、増加している。
【０１３４】
一部の実施形態では、Ｂ−ＣＬＬを有する対象は、例えば、ＴＣＲβ  Ｖ６−４＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−４＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ６−９＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−８＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−６＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ６−６＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−２＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−３＊０１、またはＴＣＲβ  Ｖ６−１＊０１を含むＴＣＲβ  Ｖ６サブファミリーのレベルまたは活性が、高い、例えば、増加している。一部の実施形態では、対象に、ＴＣＲβ  Ｖ６サブファミリーの１つまたは複数のメンバーに結合する抗ＴＣＲβＶ分子（例えば、本明細書に記載されるアゴニスト抗ＴＣＲβＶ分子）が投与される。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ分子の投与は、ＴＣＲβ  Ｖ６サブファミリーの１つまたは複数のメンバーを発現する免疫細胞の拡大をもたらす。
【０１３５】
一部の実施形態では、Ｂ−ＣＬＬを有する対象は、ＴＣＲβ  Ｖ５−６＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ５−４＊０１、またはＴＣＲβ  Ｖ５−８＊０１を含むＴＣＲβ  Ｖ５サブファミリーのレベルまたは活性が、高い、例えば、増加している。一部の実施形態では、対象に、ＴＣＲβ  Ｖ５サブファミリーの１つまたは複数のメンバーに結合する抗ＴＣＲβＶ分子（例えば、本明細書に記載されるアゴニスト抗ＴＣＲβＶ分子）が投与される。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ分子の投与は、ＴＣＲβ  Ｖ５サブファミリーの１つまたは複数のメンバーを発現する免疫細胞の拡大をもたらす。
【０１３６】
一部の実施形態では、Ｂ−ＣＬＬを有する対象は、ＴＣＲβ  Ｖ３−１＊０１を含むＴＣＲβ  Ｖ３サブファミリーのレベルまたは活性が、高い、例えば、増加している。一部の実施形態では、対象に、ＴＣＲβ  Ｖ３サブファミリーの１つまたは複数のメンバーに結合する抗ＴＣＲβＶ分子（例えば、本明細書に記載されるアゴニスト抗ＴＣＲβＶ分子）が投与される。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ分子の投与は、ＴＣＲβ  Ｖ３サブファミリーの１つまたは複数のメンバーを発現する免疫細胞の拡大をもたらす。
【０１３７】
一部の実施形態では、Ｂ−ＣＬＬを有する対象は、ＴＣＲβ  Ｖ２＊０１を含むＴＣＲβ  Ｖ２サブファミリーのレベルまたは活性が、高い、例えば、増加している。一部の実施形態では、対象に、ＴＣＲβ  Ｖ２サブファミリーの１つまたは複数のメンバーに結合する抗ＴＣＲβＶ分子（例えば、本明細書に記載されるアゴニスト抗ＴＣＲβＶ分子）が投与される。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ分子の投与は、ＴＣＲβ  Ｖ２サブファミリーの１つまたは複数のメンバーを発現する免疫細胞の拡大をもたらす。
【０１３８】
一部の実施形態では、Ｂ−ＣＬＬを有する対象は、ＴＣＲβ  Ｖ１９＊０１またはＴＣＲβ  Ｖ１９＊０２を含むＴＣＲβ  Ｖ１９サブファミリーのレベルまたは活性が、高い、例えば、増加している。一部の実施形態では、対象に、ＴＣＲβ  Ｖ１９サブファミリーの１つまたは複数のメンバーに結合する抗ＴＣＲβＶ分子（例えば、本明細書に記載されるアゴニスト抗ＴＣＲＢＶ分子）が投与される。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ分子の投与は、ＴＣＲβ  Ｖ１９サブファミリーの１つまたは複数のメンバーを発現する免疫細胞の拡大をもたらす。
【０１３９】
本明細書に開示される方法または使用のための組成物のうちのいずれかの一部の実施形態では、対象は、黒色腫を有する。一部の実施形態では、黒色腫を有する対象は、１つまたは複数のＴＣＲβＶ分子、例えば、ＴＣＲβ  Ｖ６−４＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−４＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ６−９＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−８＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−６＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ６−６＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−２＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−３＊０１、またはＴＣＲβ  Ｖ６−１＊０１を含む、ＴＣＲβ  Ｖ６サブファミリーを含む、１つまたは複数のＴＣＲβＶ分子のレベルまたは活性が、高い、例えば、増加している。一部の実施形態では、対象に、ＴＣＲβ  Ｖ６サブファミリーの１つまたは複数のメンバーに結合する抗ＴＣＲβＶ分子（例えば、本明細書に記載されるアゴニスト抗ＴＣＲβＶ分子）が投与される。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ分子の投与は、ＴＣＲβ  Ｖ６サブファミリーの１つまたは複数のメンバーを発現する免疫細胞の拡大をもたらす。
【０１４０】
本明細書に開示される方法または使用のための組成物のうちのいずれかの一部の実施形態では、対象は、ＤＬＢＣＬを有する。一部の実施形態では、黒色腫を有する対象は、１つまたは複数のＴＣＲβＶ分子、例えば、（ｉ）ＴＣＲβ  Ｖ１３＊０１を含む、ＴＣＲβ  Ｖ１３サブファミリー、（ｉｉ）ＴＣＲβ  Ｖ３−１＊０１を含む、ＴＣＲβ  Ｖ３サブファミリー、または（ｉｉｉ）ＴＣＲβ  Ｖ２３サブファミリーを含む、１つまたは複数のＴＣＲβＶ分子のレベルまたは活性が、高い、例えば、増加している。
【０１４１】
一部の実施形態では、ＤＬＢＣＬを有する対象は、高い、例えば、増加した、ＴＣＲβ  Ｖ１３＊０１を含むＴＣＲβ  Ｖ１３サブファミリーのレベルまたは活性を有する。一部の実施形態では、対象に、ＴＣＲβ  Ｖ１３サブファミリーの１つまたは複数のメンバーに結合する抗ＴＣＲβＶ分子（例えば、本明細書に記載されるアゴニスト抗ＴＣＲβＶ分子）が投与される。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ分子の投与は、ＴＣＲβ  Ｖ１３サブファミリーの１つまたは複数のメンバーを発現する免疫細胞の拡大をもたらす。
【０１４２】
一部の実施形態では、ＤＬＢＣＬを有する対象は、ＴＣＲβ  Ｖ３−１＊０１を含むＴＣＲβ  Ｖ３サブファミリーのレベルまたは活性が、高い、例えば、増加している。一部の実施形態では、対象に、ＴＣＲβ  Ｖ３サブファミリーの１つまたは複数のメンバーに結合する抗ＴＣＲβＶ分子（例えば、本明細書に記載されるアゴニスト抗ＴＣＲβＶ分子）が投与される。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ分子の投与は、ＴＣＲβ  Ｖ３サブファミリーの１つまたは複数のメンバーを発現する免疫細胞の拡大をもたらす。
【０１４３】
一部の実施形態では、ＤＬＢＣＬを有する対象は、ＴＣＲβ  Ｖ２３サブファミリーのレベルまたは活性が、高い、例えば、増加している。一部の実施形態では、対象に、ＴＣＲβ  Ｖ２３サブファミリーの１つまたは複数のメンバーに結合する抗ＴＣＲβＶ分子（例えば、本明細書に記載されるアゴニスト抗ＴＣＲβＶ分子）が投与される。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ分子の投与は、ＴＣＲβ  Ｖ２３サブファミリーの１つまたは複数のメンバーを発現する免疫細胞の拡大をもたらす。
【０１４４】
本明細書に開示される方法または使用のための組成物のうちのいずれかの一部の実施形態では、対象は、ＣＲＣを有する。一部の実施形態では、黒色腫を有する対象は、１つまたは複数のＴＣＲβＶ分子、例えば、（ｉ）ＴＣＲβ  Ｖ１９＊０１もしくはＴＣＲβ  Ｖ１９＊０２を含む、ＴＣＲβ  Ｖ１９サブファミリー、（ｉｉ）ＴＣＲβ  Ｖ１２−４＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ１２−３＊０１、もしくはＴＣＲβ  Ｖ１２−５＊０１を含む、ＴＣＲβ  Ｖ１２サブファミリー、（ｉｉｉ）ＴＣＲβ  Ｖ１６＊０１を含む、ＴＣＲβ  Ｖ１６サブファミリー、または（ｉｖ）ＴＣＲβ  Ｖ２１サブファミリーを含む、１つまたは複数のＴＣＲβＶ分子のレベルまたは活性が、高い、例えば、増加している。
【０１４５】
一部の実施形態では、ＣＲＣを有する対象は、ＴＣＲβ  Ｖ１９＊０１またはＴＣＲβ  Ｖ１９＊０２を含むＴＣＲβ  Ｖ１９サブファミリーのレベルまたは活性が、高い、例えば、増加している。一部の実施形態では、対象に、ＴＣＲβ  Ｖ１９サブファミリーの１つまたは複数のメンバーに結合する抗ＴＣＲβＶ分子（例えば、本明細書に記載されるアゴニスト抗ＴＣＲβＶ分子）が投与される。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ分子の投与は、ＴＣＲβ  Ｖ１９サブファミリーの１つまたは複数のメンバーを発現する免疫細胞の拡大をもたらす。
【０１４６】
一部の実施形態では、ＣＲＣを有する対象は、ＴＣＲβ  Ｖ１２−４＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ１２−３＊０１、またはＴＣＲβ  Ｖ１２−５＊０１を含むＴＣＲβ  Ｖ１２サブファミリーのレベルまたは活性が、高い、例えば、増加している。一部の実施形態では、対象に、ＴＣＲβ  Ｖ１２サブファミリーの１つまたは複数のメンバーに結合する抗ＴＣＲβＶ分子（例えば、本明細書に記載されるアゴニスト抗ＴＣＲβＶ分子）が投与される。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ分子の投与は、ＴＣＲβ  Ｖ１２サブファミリーの１つまたは複数のメンバーを発現する免疫細胞の拡大をもたらす。
【０１４７】
一部の実施形態では、ＣＲＣを有する対象は、ＴＣＲβ  Ｖ１６＊０１を含むＴＣＲβ  Ｖ１６サブファミリーのレベルまたは活性が、高い、例えば、増加している。一部の実施形態では、対象に、ＴＣＲβ  Ｖ１６サブファミリーの１つまたは複数のメンバーに結合する抗ＴＣＲβＶ分子（例えば、本明細書に記載されるアゴニスト抗ＴＣＲβＶ分子）が投与される。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ分子の投与は、ＴＣＲβ  Ｖ１６サブファミリーの１つまたは複数のメンバーを発現する免疫細胞の拡大をもたらす。
【０１４８】
一部の実施形態では、ＣＲＣを有する対象は、ＴＣＲβ  Ｖ２１サブファミリーのレベルまたは活性が、高い、例えば、増加している。一部の実施形態では、対象に、ＴＣＲβ  Ｖ２１サブファミリーの１つまたは複数のメンバーに結合する抗ＴＣＲβＶ分子（例えば、本明細書に記載されるアゴニスト抗ＴＣＲβＶ分子）が投与される。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ分子の投与は、ＴＣＲβ  Ｖ２１サブファミリーの１つまたは複数のメンバーを発現する免疫細胞の拡大をもたらす。
【０１４９】
代替的に、または本明細書に開示される実施形態のうちのいずれかとの組合せで、
（ｉ）ＴＣＲβＶ上のエピトープ、例えば、本明細書に記載される抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、第２の抗ＴＣＲβＶ抗体分子によって認識されるエピトープと同じかもしくは類似のエピトープに特異的に結合するか、
（ｉｉ）本明細書に記載される抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、第２の抗ＴＣＲβＶ抗体分子と同じかもしくは類似の結合親和性もしくは特異性またはその両方を示すか、
（ｉｉｉ）本明細書に記載される抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、第２の抗ＴＣＲβＶ抗体分子の結合を阻害する、例えば、競合的に阻害するか、
（ｉｖ）本明細書に記載される抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、第２の抗ＴＣＲβＶ抗体分子と同じかもしくはオーバーラップするエピトープに結合するか、または
（ｖ）本明細書に記載される抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、第２の抗ＴＣＲβＶ抗体分子と、結合について競合し、かつ／もしくは同じエピトープに結合する、
抗ＴＣＲβＶ抗体分子が本明細書で提供される。
【０１５０】
一部の実施形態では、第２の抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、表１もしくは表２から選択される抗原結合性ドメイン、またはそれに対して実質的に同一の配列を含む。一部の実施形態では、第２の抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、
配列番号１もしくは配列番号９の重鎖相補性決定領域１（ＨＣ  ＣＤＲ１）、重鎖相補性決定領域２（ＨＣ  ＣＤＲ２）、および／もしくは重鎖相補性決定領域３（ＨＣ  ＣＤＲ３）、ならびに／または配列番号２、配列番号１０、もしくは配列番号１１の軽鎖相補性決定領域１（ＬＣ  ＣＤＲ１）、軽鎖相補性決定領域２（ＬＣ  ＣＤＲ２）、および／もしくは軽鎖相補性決定領域３（ＬＣ  ＣＤＲ３）
を含む抗原結合性ドメインを含む。
【０１５１】
本明細書に開示される組成物または方法のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、
（ｉ）配列番号１もしくは配列番号９、または表１に開示される配列の重鎖相補性決定領域１（ＨＣ  ＣＤＲ１）、重鎖相補性決定領域２（ＨＣ  ＣＤＲ２）、および／または重鎖相補性決定領域３（ＨＣ  ＣＤＲ３）、または
（ｉｉ）配列番号２、配列番号１０、もしくは配列番号１１、または表１に開示される配列の軽鎖相補性決定領域１（ＬＣ  ＣＤＲ１）、軽鎖相補性決定領域２（ＬＣ  ＣＤＲ２）、および／または軽鎖相補性決定領域３（ＬＣ  ＣＤＲ３）
を含む抗原結合性ドメインを含む。
【０１５２】
本明細書に開示される組成物または方法のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、配列番号２、配列番号１０、または配列番号１１のＬＣ  ＣＤＲ１、ＬＣ  ＣＤＲ２、およびＬＣ  ＣＤＲ３のうちの１つ、２つ、またはすべて（例えば、３つ）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む、抗原結合性ドメインを含む。
【０１５３】
本明細書に開示される組成物または方法のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、配列番号１または配列番号９のＨＣ  ＣＤＲ１、ＨＣ  ＣＤＲ２、およびＨＣ  ＣＤＲ３のうちの１つ、２つ、またはすべて（例えば、３つ）を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む、抗原結合性ドメインを含む。
【０１５４】
本明細書に開示される組成物または方法のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、
（ｉ）配列番号６のＬＣ  ＣＤＲ１アミノ酸配列（またはその１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の改変、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有するアミノ酸配列）、配列番号７のＬＣ  ＣＤＲ２アミノ酸配列（またはその１つ、２、３つ、もしくは４つ以下の改変、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有するアミノ酸配列）、および／または配列番号８のＬＣ  ＣＤＲ３アミノ酸配列（またはその１つ、２、３つ、もしくは４つ以下の改変、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有するアミノ酸配列）を含む、ＶＬ、ならびに／または
（ｉｉ）配列番号３のＨＣ  ＣＤＲ１アミノ酸配列（またはその１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の改変、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有するアミノ酸配列）、配列番号４のＨＣ  ＣＤＲ２アミノ酸配列（またはその１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の改変、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有するアミノ酸配列）、および／または配列番号５のＨＣ  ＣＤＲ３アミノ酸配列（またはその１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の改変、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有するアミノ酸配列）を含む、ＶＨ
を含む抗原結合性ドメインを含む。
【０１５５】
本明細書に開示される組成物または方法のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、
配列番号９の可変重鎖（ＶＨ）、またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列、および／または
配列番号１０もしくは配列番号１１の可変軽鎖（ＶＬ）、またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列
を含む抗原結合性ドメインを含む。
【０１５６】
本明細書に開示される組成物または方法のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、配列番号９のＶＨアミノ酸配列および配列番号１０のＶＬアミノ酸配列を含む、抗原結合性ドメインを含む。
【０１５７】
本明細書に開示される組成物または方法のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、配列番号９のＶＨアミノ酸配列および配列番号１１のＶＬアミノ酸配列を含む、抗原結合性ドメインを含む。
【０１５８】
本明細書に開示される組成物または方法のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、（ｉ）７３位におけるスレオニン、例えば、Ｋａｂａｔの番号付けによる７３位における置換、例えば、グルタミン酸からスレオニンへの置換、または（ｉｉ）位におけるグリシン、例えば、Ｋａｂａｔの番号付けによる９４位における置換、例えば、アルギニンからグリシンへの置換のうちの一方または両方を含む、フレームワーク領域、例えば、フレームワーク領域３（ＦＲ３）を含む、重鎖を含む。一部の実施形態では、置換は、ヒト生殖系列重鎖フレームワーク領域配列に対するものである。
【０１５９】
本明細書に開示される組成物または方法のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、１０位におけるフェニルアラニン、例えば、Ｋａｂａｔの番号付けによる１０位における置換、例えば、セリンからフェニルアラニン（Ｐｈｅｎｙａｌａｎｉｎｅ）への置換を含む、フレームワーク領域、例えば、フレームワーク領域１（ＦＲ１）を含む、軽鎖を含む。一部の実施形態では、置換は、ヒト生殖系列軽鎖フレームワーク領域配列に対するものである。
【０１６０】
本明細書に開示される組成物または方法のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、（ｉ）３６位におけるヒスチジン、例えば、Ｋａｂａｔの番号付けによる３６位における置換、例えば、チロシンからヒスチジンへの置換、または（ｉｉ）４６位におけるアラニン、例えば、Ｋａｂａｔの番号付けによる４６位における置換、例えば、アルギニンからアラニンへの置換のうちの一方または両方を含む、フレームワーク領域、例えば、フレームワーク領域２（ＦＲ２）を含む、軽鎖を含む。一部の実施形態では、置換は、ヒト生殖系列軽鎖フレームワーク領域配列に対するものである。
【０１６１】
本明細書に開示される組成物または方法のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、８７位におけるフェニルアラニン、例えば、Ｋａｂａｔの番号付けによる８７位における置換、例えば、チロシンからフェニルアラニンへの置換を含む、フレームワーク領域、例えば、フレームワーク領域３（ＦＲ３）を含む、軽鎖を含む。一部の実施形態では、置換は、ヒト生殖系列軽鎖フレームワーク領域配列に対するものである。
【０１６２】
本明細書に開示される組成物または方法のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβ  Ｖ６、例えば、ＴＣＲβ  Ｖ６−４＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−４＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ６−９＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−８＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−６＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ６−６＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−２＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−３＊０１、またはＴＣＲβ  Ｖ６−１＊０１に結合する。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１に結合する。
【０１６３】
一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ６、例えば、ＴＣＲβ  Ｖ６−４＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−４＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ６−９＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−８＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−６＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ６−６＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−２＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−３＊０１、またはＴＣＲβ  Ｖ６−１＊０１は、配列番号１および／または配列番号２によって認識され、例えば結合される。一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ６、例えば、ＴＣＲβ  Ｖ６−４＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−４＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ６−９＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−８＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−６＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ６−６＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−２＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−３＊０１、またはＴＣＲβ  Ｖ６−１＊０１は、配列番号９および／または配列番号１０によって認識され、例えば結合される。一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ６、例えば、ＴＣＲβ  Ｖ６−４＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−４＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ６−９＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−８＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−６＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ６−６＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−２＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−３＊０１、またはＴＣＲβ  Ｖ６−１＊０１は、配列番号９および／または配列番号１１によって認識され、例えば結合される。一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１は、配列番号９および／もしくは配列番号１０、またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列によって認識され、例えば結合される。一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１は、配列番号９および／もしくは配列番号１１、またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列によって認識され、例えば結合される。
【０１６４】
本明細書に開示される組成物または方法のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、
（ｉ）配列番号１５、配列番号２３、配列番号２４、もしくは配列番号２５、または表２に開示される配列の重鎖相補性決定領域（ＨＣ  ＣＤＲ１）、ＨＣ  ＣＤＲ２、および／またはＨＣ  ＣＤＲ３、ならびに／または
（ｉｉ）配列番号１６、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、もしくは配列番号３０、または表２に開示される配列の軽鎖相補性決定領域１（ＬＣ  ＣＤＲ１）、ＬＣ  ＣＤＲ２、および／またはＬＣ  ＣＤＲ３
を含む抗原結合性ドメインを含む。
【０１６５】
本明細書に開示される組成物または方法のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、配列番号１６、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、または配列番号３０のＬＣ  ＣＤＲ１、ＬＣ  ＣＤＲ２、およびＬＣ  ＣＤＲ３のうちの１つ、２つ、またはすべてを含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む、抗原結合性ドメインを含む。
【０１６６】
本明細書に開示される組成物または方法のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、配列番号１５、配列番号２３、配列番号２４、または配列番号２５のＨＣ  ＣＤＲ１、ＨＣ  ＣＤＲ２、およびＨＣ  ＣＤＲ３のうちの１つ、２つ、またはすべてを含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む、抗原結合性ドメインを含む。
【０１６７】
本明細書に開示される組成物または方法のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、
（ｉ）配列番号２０のＬＣ  ＣＤＲ１アミノ酸配列（またはその１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の改変、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有するアミノ酸配列）、配列番号２１のＬＣ  ＣＤＲ２アミノ酸配列（またはその１つ、２、３つ、もしくは４つ以下の改変、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有するアミノ酸配列）、および／または配列番号２２のＬＣ  ＣＤＲ３アミノ酸配列（またはその１つ、２、３つ、もしくは４つ以下の改変、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有するアミノ酸配列）を含む、ＶＬ、ならびに／または
（ｉｉ）配列番号１７のＨＣ  ＣＤＲ１アミノ酸配列（またはその１つ、２、３、もしくは４つ以下の改変、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有するアミノ酸配列）、配列番号１８のＨＣ  ＣＤＲ２アミノ酸配列（またはその１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の改変、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有するアミノ酸配列）、および／または配列番号１９のＨＣ  ＣＤＲ３アミノ酸配列（またはその１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の改変、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有するアミノ酸配列）を含む、ＶＨ
を含む抗原結合性ドメインを含む。
【０１６８】
本明細書に開示される組成物または方法のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、
配列番号２３、配列番号２４、もしくは配列番号２５の可変重鎖（ＶＨ）、またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列、および／または
配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、もしくは配列番号３０の可変軽鎖（ＶＬ）、またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列
を含む抗原結合性ドメインを含む。
【０１６９】
本明細書に開示される組成物または方法のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、（ｉ）１位におけるアスパラギン酸、例えば、Ｋａｂａｔの番号付けによる１位における置換、例えば、アラニンからアスパラギン酸への置換、または（ｉｉ）２位におけるアスパラギン、例えば、Ｋａｂａｔの番号付けによる２位における置換、例えば、イソロイシンからアスパラギンへの置換、セリンからアスパラギンへの置換、もしくはチロシンからアスパラギンへの置換、または（ｉｉｉ）４位におけるロイシン、例えば、Ｋａｂａｔの番号付けによる４位における置換、例えば、メチオニンからロイシンへの置換のうちの１つ、２つ、またはすべて（例えば、３つ）を含む、フレームワーク領域、例えばフレームワーク領域１（ＦＲ１）を含む、軽鎖を含む。一部の実施形態では、置換は、ヒト生殖系列軽鎖フレームワーク領域配列に対するものである。
【０１７０】
本明細書に開示される組成物または方法のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、（ｉ）６６位におけるグリシン、例えば、Ｋａｂａｔの番号付けによる６６位における置換、例えば、リシンからグリシンへの置換、もしくはセリンからグリシンへの置換、（ｉｉ）６９位におけるアスパラギン、例えば、Ｋａｂａｔの番号付けによる６９位における置換、例えば、スレオニンからアスパラギンへの置換、または（ｉｉｉ）７１位におけるチロシン、例えば、Ｋａｂａｔの番号付けによる７１位における置換、例えば、フェニルアラニンからチロシンへの置換、もしくはアラニンからチロシンへの置換のうちの１つ、２つ、またはすべて（例えば、３つ）を含む、フレームワーク領域、例えば、フレームワーク領域３（ＦＲ３）を含む、軽鎖を含む。一部の実施形態では、置換は、ヒト生殖系列軽鎖フレームワーク領域配列に対するものである。
【０１７１】
本明細書に開示される組成物または方法のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβ  Ｖ１２、例えば、ＴＣＲβ  Ｖ１２−４＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ１２−３＊０１、またはＴＣＲβ  Ｖ１２−５＊０１に結合する。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβ  Ｖ１２−４＊０１またはＴＣＲβ  Ｖ１２−３＊０１に結合する。
【０１７２】
一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ１２、例えば、ＴＣＲβ  Ｖ１２−４＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ１２−３＊０１、またはＴＣＲβ  Ｖ１２−５＊０１は、配列番号１５および／または配列番号１６によって認識され、例えば結合される。一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ１２、例えば、ＴＣＲβ  Ｖ１２−４＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ１２−３＊０１、またはＴＣＲβ  Ｖ１２−５＊０１は、配列番号２３〜２５のうちのいずれか１つ、および／または配列番号２６〜３０のうちのいずれか１つ、またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列によって認識され、例えば結合される。一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ１２−４＊０１は、配列番号２３〜２５のうちのいずれか１つ、および／または配列番号２６〜３０のうちのいずれか１つ、またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列によって認識され、例えば結合される。一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ１２−３＊０１は、配列番号２３〜２５のうちのいずれか１つ、および／または配列番号２６〜３０のうちのいずれか１つ、またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列によって認識され、例えば結合される。
【０１７３】
本明細書に開示される組成物または方法のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）またはＦａｂを含む抗原結合性ドメインを含む。
【０１７４】
本明細書に開示される組成物または方法のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、Ｔ細胞上の立体構造エピトープまたは線形エピトープに結合する。
本明細書に開示される組成物または方法のうちのいずれかの一部の実施形態では、腫瘍は、抗原、例えば、腫瘍抗原、例えば、腫瘍関連抗原またはネオ抗原を含む。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、腫瘍抗原を認識し、例えば、それに結合する。
【０１７５】
本明細書に開示される組成物または方法のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、全長抗体（例えば、少なくとも１つ、好ましくは２つの完全重鎖と、少なくとも１つ、好ましくは２つの完全軽鎖とを含む抗体）、または抗原結合性断片（例えば、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、一本鎖  Ｆｖ断片、単一ドメイン抗体、ダイアボディ（ｄＡｂ）、二価抗体、または二特異性抗体もしくはその断片、その単一ドメインバリアント、ラクダ抗体、またはラット由来ＶＨである。
【０１７６】
本明細書に開示される組成物または方法のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、例えば、表３に開示される、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧＡ１、ＩｇＧＡ２、ＩｇＭ、ＩｇＪ、もしくはＩｇＧ４から選択される１つもしくは複数の重鎖定常領域、またはその断片を含む。
【０１７７】
本明細書に開示される組成物または方法のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＩｇＭの重鎖定常領域またはその断片を含み、必要に応じて、ＩｇＭ重鎖定常領域は、配列番号７３の配列、またはそれに対して少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列を含む。本明細書に開示される組成物または方法のうちのいずれかの一部の実施形態では、ＩｇＭ定常領域を含む抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＩｇＪの重鎖定常領域またはその断片をさらに含み、必要に応じて、ＩｇＪ重鎖定常領域は、配列番号７６の配列、またはそれに対して少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列を含む。
【０１７８】
本明細書に開示される組成物または方法のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＩｇＪの重鎖定常領域またはその断片を含み、必要に応じて、ＩｇＪ重鎖定常領域は、配列番号７６の配列、またはそれに対して少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列を含む。
【０１７９】
本明細書に開示される組成物または方法のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＩｇＧＡ１の重鎖定常領域またはその断片を含み、必要に応じて、ＩｇＧＡ１重鎖定常領域は、配列番号７４の配列、またはそれに対して少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列を含む。
【０１８０】
本明細書に開示される組成物または方法のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＩｇＧＡ２の重鎖定常領域またはその断片を含み、必要に応じて、ＩｇＧＡ２重鎖定常領域は、表３に列挙される配列、例えば、配列番号７５の配列、またはそれに対して少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列を含む。
【０１８１】
本明細書に開示される組成物または方法のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子のＴＣＲβＶ領域への結合は、ＴＣＲβＶ領域以外の受容体または分子に結合するＴ細胞エンゲージャー（「非ＴＣＲβＶ結合性Ｔ細胞エンゲージャー」）のものとは異なるサイトカインプロファイル、例えば、サイトカイン分泌プロファイル（例えば、１つもしくは複数のサイトカインおよび／または１つもしくは複数のケモカインを含む）をもたらす。
【０１８２】
一部の実施形態では、サイトカインプロファイル、例えば、サイトカイン分泌プロファイルは、１つもしくは複数のサイトカインおよび／または１つもしくは複数のケモカイン（例えば、本明細書に記載される）のレベルおよび／または活性を含む。ある実施形態では、サイトカインプロファイル、例えば、サイトカイン分泌プロファイルは、ＩＬ−２（例えば、全長、そのバリアント、もしくは断片）、ＩＬ−１ベータ（例えば、全長、そのバリアント、もしくは断片）、ＩＬ−６（例えば、全長、そのバリアント、もしくは断片）、ＴＮＦα（例えば、全長、そのバリアント、もしくは断片）、ＩＦＮｇ（例えば、全長、そのバリアント、もしくは断片）、ＩＬ−１０（例えば、全長、そのバリアント、もしくは断片）、ＩＬ−４（例えば、全長、そのバリアント、もしくは断片）、ＴＮＦアルファ（例えば、全長、そのバリアント、もしくは断片）、ＩＬ−１２ｐ７０（例えば、全長、そのバリアント、もしくは断片）、ＩＬ−１３（例えば、全長、そのバリアント、もしくは断片）、ＩＬ−８（例えば、全長、そのバリアント、もしくは断片）、エオタキシン（例えば、全長、そのバリアント、もしくは断片）、エオタキシン−３（例えば、全長、そのバリアント、もしくは断片）、ＩＬ−８（ＨＡ）（例えば、全長、そのバリアント、もしくは断片）、ＩＰ−１０（例えば、全長、そのバリアント、もしくは断片）、ＭＣＰ−１（例えば、全長、そのバリアント、もしくは断片）、ＭＣＰ−４（例えば、全長、そのバリアント、もしくは断片）、ＭＤＣ（例えば、全長、そのバリアント、もしくは断片）、ＭＩＰ−１ａ（例えば、全長、そのバリアント、もしくは断片）、ＭＩＰ−１ｂ（例えば、全長、そのバリアント、もしくは断片）、ＴＡＲＣ（例えば、全長、そのバリアント、もしくは断片）、ＧＭ−ＣＳＦ（例えば、全長、そのバリアント、もしくは断片）、ＩＬ−１２  ２３ｐ４０（例えば、全長、そのバリアント、もしくは断片）、ＩＬ−１５（例えば、全長、そのバリアント、もしくは断片）、ＩＬ−１６（例えば、全長、そのバリアント、もしくは断片）、ＩＬ−１７ａ（例えば、全長、そのバリアント、もしくは断片）、ＩＬ−１ａ（例えば、全長、そのバリアント、もしくは断片）、ＩＬ−５（例えば、全長、そのバリアント、もしくは断片）、ＩＬ−７（例えば、全長、そのバリアント、もしくは断片）、ＴＮＦ−ベータ（例えば、全長、そのバリアント、もしくは断片）、またはＶＥＧＦ（例えば、全長、そのバリアント、もしくは断片）のうちの１つまたは複数のレベルおよび／または活性を含む。
【０１８３】
一部の実施形態では、サイトカインプロファイル、例えば、サイトカイン分泌プロファイルは、以下：
（ｉ）ＩＬ−２のレベル、例えば、発現レベル、および／もしくは活性の増加、
（ｉｉ）ＩＬ−１βのレベル、例えば、発現レベル、および／もしくは活性の低減、
（ｉｉｉ）ＩＬ−６のレベル、例えば、発現レベル、および／もしくは活性の低減、
（ｉｖ）ＴＮＦαのレベル、例えば、発現レベル、および／もしくは活性の低減、
（ｖ）ＩＬ−１０のレベル、例えば、発現レベル、および／もしくは活性の低減、
（ｖｉ）ＩＬ−２のレベル、例えば、発現レベル、および／もしくは活性の増加における遅延、例えば、少なくとも１時間、２時間、３時間、４時間、５時間、６時間、７時間、８時間、９時間、１０時間、もしくはそれ以上の遅延、
（ｖｉｉ）ＩＦＮｇのレベル、例えば、発現レベル、および／もしくは活性の増加における遅延、例えば、少なくとも１時間、２時間、３時間、４時間、５時間、６時間、７時間、８時間、９時間、１０時間の遅延、または
（ｖｉｉｉ）ＩＬ−１５のレベル、例えば、発現レベル、および／もしくは活性の増加、
のうちの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、またはすべてを含み、
例えば、（ｉ）〜（ｖｉｉｉ）は、非ＴＣＲβＶ結合性Ｔ細胞エンゲージャーのサイトカインプロファイル、例えば、サイトカイン分泌プロファイルと比較したものである。
【０１８４】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲＢＶ抗体のＴＣＲβＶ領域への結合は、実施例３のアッセイによって測定したときに、非ＴＣＲβＶ結合性Ｔ細胞エンゲージャーによって誘導されるサイトカインストームと比較して、サイトカインストームの低減、例えば、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）および／または神経毒性（ＮＴ）の低減をもたらす。
【０１８５】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲＢＶ抗体のＴＣＲβＶ領域への結合は、以下：
（ｉｘ）Ｔ細胞増殖動態の低減、
（ｘ）例えば、実施例４のアッセイによって測定したときに、細胞殺滅、例えば、標的細胞殺滅、例えば、がん細胞殺滅、
（ｘｉ）ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞増殖、例えば、拡大の増加、または
（ｘｉｉ）メモリーＴ細胞集団の拡大、例えば、少なくとも約１．１〜１０倍の拡大（例えば、少なくとも約１．１倍、１．２倍、１．３倍、１．４倍、１．５倍、２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、もしくは１０倍の拡大）
のうちの１つ、２つ、３つ、またはすべてをもたらし、
例えば、（ｉｘ）〜（ｘｉｉ）は、非ＴＣＲβＶ結合性Ｔ細胞エンゲージャーと比較したものである。
【０１８６】
一部の実施形態では、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβＶタンパク質上の構造的に保存されたドメイン（例えば、図２４Ａにおいて丸で囲んだ領域によって示される）を認識する（例えば、それに結合する）。
【０１８７】
一部の実施形態では、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβＶ：ＴＣＲアルファ複合体の境界部を認識しない、例えば、それに結合しない。
一部の実施形態では、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβＶタンパク質の定常領域を認識しない、例えば、それに結合しない。ＴＣＲＢＶ領域の定常領域に結合する例示的な抗体は、Ｖｉｎｅｙ  ｅｔ  ａｌ．，  （Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ．  １９９２  Ｄｅｃ；１１（６）：７０１−１３）に記載されるＪＯＶＩ．１である。
【０１８８】
一部の実施形態では、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβＶタンパク質の相補性決定領域（例えば、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、および／またはＣＤＲ３）のうちの１つまたは複数（例えば、すべて）を認識しない、例えば、それに結合しない。
【０１８９】
本明細書に開示される組成物または方法のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、例えば、表３に開示される、カッパもしくはラムダの軽鎖定常領域、またはその断片から選択される軽鎖定常領域を含む。
【０１９０】
本明細書に開示される組成物または方法のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、カッパ鎖の軽鎖定常領域またはその断片を含み、必要に応じて、カッパ鎖定常領域は、配列番号３９の配列、またはそれに対して少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列を含む。
【０１９１】
本明細書に開示される組成物または方法のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、
（ｉ）例えば、表３に記載される、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧＡ１、ＩｇＧＡ２、ＩｇＧ４、ＩｇＪ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、もしくはＩｇＥから選択される重鎖定常領域、またはその断片を含む、１つまたは複数の重鎖定常領域、および
（ｉｉ）例えば、表３に記載される、カッパまたはラムダの軽鎖定常領域から選択される軽鎖定常領域、またはその断片を含む、軽鎖定常領域
を含む。
【０１９２】
本明細書に開示される組成物または方法のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、または抗ＴＣＲβＶ抗体分子を含む細胞は、
（ｉ）可変領域（ＶＨ）、例えば、本明細書に開示される抗体のＶＨ、および／または例えば、本明細書に開示される１つもしくは複数の重鎖定常領域を含む、重鎖、ならびに／または
（ｉｉ）可変軽鎖（ＶＬ）、例えば、本明細書に開示される抗体のＶＬ、および／または例えば、本明細書に開示される１つもしくは複数の軽鎖定常領域を含む、軽鎖
を含む。
【０１９３】
本明細書に開示される組成物または方法のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、または抗ＴＣＲβＶ抗体分子を含む細胞は、
（ｉ）（ａ）配列番号７３の配列、またはそれに対して少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列を含む、ＩｇＭ重鎖定常領域またはその断片、
（ｂ）配列番号７４の配列、またはそれに対して少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列を含む、ＩｇＧＡ１重鎖定常領域またはその断片、または
（ｃ）配列番号７５の配列、またはそれに対して少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列を含む、ＩｇＧＡ２重鎖定常領域またはその断片
を含む、重鎖定常領域を含む、重鎖、および
（ｉｉ）配列番号３９の配列、またはそれに対して少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列を含む、カッパ鎖定常領域を含む、軽鎖定常領域を含む、軽鎖
を含み、
必要に応じて、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＩｇＪ重鎖定常領域またはその断片をさらに含み、ＩｇＪ重鎖定常領域は、配列番号７６の配列、またはそれに対して少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列を含む。
【０１９４】
本明細書に開示される組成物または方法のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、または抗ＴＣＲβＶ抗体分子を含む細胞は、
（ｉ）表１もしくは２のＶＨから選択されるＶＨ、またはそれに対して少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列、および重鎖定常領域であって、
（ａ）配列番号７３の配列、またはそれに対して少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列を含む、ＩｇＭ重鎖定常領域またはその断片、
（ｂ）配列番号７４の配列、またはそれに対して少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列を含む、ＩｇＧＡ１重鎖定常領域またはその断片、または
（ｃ）配列番号７５の配列、またはそれに対して少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列を含む、ＩｇＧＡ２重鎖定常領域またはその断片
を含む、重鎖定常領域を含む、重鎖、ならびに
（ｉｉ）表１もしくは２のＶＬから選択されるＶＬ、またはそれに対して少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列、および配列番号３９の配列、またはそれに対して少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列を含むカッパ鎖定常領域を含む、軽鎖定常領域を含む、軽鎖
を含み、
必要に応じて、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＩｇＪ重鎖定常領域またはその断片をさらに含み、ＩｇＪ重鎖定常領域は、配列番号７６の配列、またはそれに対して少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列を含む。
【０１９５】
本明細書に開示される方法のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、以下のＴＣＲβＶサブファミリー：
（ｉ）例えば、ＴＣＲβ  Ｖ６−４＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−４＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ６−９＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−８＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−６＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ６−６＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−２＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−３＊０１、もしくはＴＣＲβ  Ｖ６−１＊０１のうちの１つもしくは複数を含む、ＴＣＲβ  Ｖ６サブファミリー、
（ｉｉ）例えば、ＴＣＲβ  Ｖ１０−１＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ１０−１＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ１０−３＊０１、もしくはＴＣＲβ  Ｖ１０−２＊０１のうちの１つもしくは複数を含む、ＴＣＲβ  Ｖ１０サブファミリー、
（ｉｉｉ）例えば、ＴＣＲβ  Ｖ５−６＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ５−４＊０１、もしくはＴＣＲβ  Ｖ５−８＊０１のうちの１つもしくは複数を含む、ＴＣＲβ  Ｖ５サブファミリー、
（ｉｖ）例えば、ＴＣＲβ  Ｖ１２−４＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ１２−３＊０１、もしくはＴＣＲβ  Ｖ１２−５＊０１のうちの１つもしくは複数を含む、ＴＣＲβ  Ｖ１２サブファミリー、
（ｖ）例えば、ＴＣＲβ  Ｖ７−７＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ７−６＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ７  −８＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ７  −４＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ７−２＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ７−２＊０３、ＴＣＲβ  Ｖ７−２＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ７−３＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ７−９＊０３、もしくはＴＣＲβ  Ｖ７−９＊０１のうちの１つもしくは複数を含む、ＴＣＲβ  Ｖ７サブファミリー、
（ｖｉ）例えば、ＴＣＲβ  Ｖ１１−１＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ１１−２＊０１、もしくはＴＣＲβ  Ｖ１１−３＊０１のうちの１つもしくは複数を含む、ＴＣＲβ  Ｖ１１サブファミリー、
（ｖｉｉ）ＴＣＲβ  Ｖ１４＊０１を含む、ＴＣＲβ  Ｖ１４サブファミリー、
（ｖｉｉｉ）ＴＣＲβ  Ｖ１６＊０１を含む、ＴＣＲβ  Ｖ１６サブファミリー、
（ｉｘ）ＴＣＲβ  Ｖ１８＊０１を含む、ＴＣＲβ  Ｖ１８サブファミリー、
（ｘ）例えば、ＴＣＲβ  Ｖ９＊０１もしくはＴＣＲβ  Ｖ９＊０２のうちの１つもしくは複数を含む、ＴＣＲβ  Ｖ９サブファミリー、
（ｘｉ）ＴＣＲβ  Ｖ１３＊０１を含む、ＴＣＲβ  Ｖ１３サブファミリー、
（ｘｉｉ）例えば、ＴＣＲβ  Ｖ４−２＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ４−３＊０１、もしくはＴＣＲβ  Ｖ４−１＊０１のうちの１つもしくは複数を含む、ＴＣＲβ  Ｖ４サブファミリー、
（ｘｉｉｉ）ＴＣＲβ  Ｖ３−１＊０１を含む、ＴＣＲβ  Ｖ３サブファミリー、
（ｘｉｖ）ＴＣＲβ  Ｖ２＊０１を含む、ＴＣＲβ  Ｖ２サブファミリー、
（ｘｖ）ＴＣＲβ  Ｖ１５＊０１を含む、ＴＣＲβ  Ｖ１５サブファミリー、
（ｘｖｉ）例えば、ＴＣＲβ  Ｖ３０＊０１もしくはＴＣＲβ  Ｖ３０＊０２のうちの１つもしくは複数を含む、ＴＣＲβ  Ｖ３０サブファミリー、
（ｘｖｉｉ）例えば、ＴＣＲβ  Ｖ１９＊０１もしくはＴＣＲβ  Ｖ１９＊０２のうちの１つもしくは複数を含む、ＴＣＲβ  Ｖ１９サブファミリー、
（ｘｖｉｉｉ）ＴＣＲβ  Ｖ２７＊０１を含む、ＴＣＲβ  Ｖ２７サブファミリー、
（ｘｉｘ）ＴＣＲβ  Ｖ２８＊０１を含む、ＴＣＲβ  Ｖ２８サブファミリー、
（ｘｘ）ＴＣＲβ  Ｖ２４−１＊０１を含む、ＴＣＲβ  Ｖ２４サブファミリー、
（ｘｘｉ）例えば、ＴＣＲβ  Ｖ２０−１＊０１もしくはＴＣＲβ  Ｖ２０−１＊０２のうちの１つもしくは複数を含む、ＴＣＲβ  Ｖ２０サブファミリー、
（ｘｘｉｉ）ＴＣＲβ  Ｖ２５−１＊０１を含む、ＴＣＲβ  Ｖ２５サブファミリー、または
（ｘｘｉｉｉ）ＴＣＲβ  Ｖ２９−１＊０１を含む、ＴＣＲβ  Ｖ２９サブファミリー、
（ｘｘｉｖ）ＴＣＲβ  Ｖ２１サブファミリー、
（ｘｘｖ）ＴＣＲβ  Ｖ１サブファミリー、
（ｘｘｖｉ）ＴＣＲβ  Ｖ１７サブファミリー、
（ｘｖｉｉ）ＴＣＲβ  Ｖ２３サブファミリー、または
（ｘｖｉｉｉ）ＴＣＲβ  Ｖ２６サブファミリー
のうちの１つまたは複数（例えば、すべて）に結合する。
【０１９６】
本明細書に開示される方法のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、以下のＴＣＲβＶサブファミリー：
（ｉ）ＴＣＲβ  Ｖ６、例えば、ＴＣＲβ  Ｖ６−４＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−４＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ６−９＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−８＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−６＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ６−６＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−２＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−３＊０１、もしくはＴＣＲβ  Ｖ６−１＊０１、
（ｉｉ）ＴＣＲβ  Ｖ１０、例えば、ＴＣＲβ  Ｖ１０−１＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ１０−１＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ１０−３＊０１、もしくはＴＣＲβ  Ｖ１０−２＊０１、
（ｉｉｉ）ＴＣＲβ  Ｖ１２、例えば、ＴＣＲβ  Ｖ１２−４＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ１２−３＊０１、もしくはＴＣＲβ  Ｖ１２−５＊０１、または
（ｉｖ）ＴＣＲβ  Ｖ５、例えば、ＴＣＲβ  Ｖ５−５＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ５−６＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ５−４＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ５−８＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ５−１＊０１
のうちの１つまたは複数（例えば、すべて）に結合する。
【０１９７】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβ  Ｖ６、例えば、ＴＣＲβ  Ｖ６−４＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−４＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ６−９＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−８＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−６＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ６−６＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−２＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−３＊０１、またはＴＣＲβ  Ｖ６−１＊０１に結合する。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１に結合する。
【０１９８】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβ  Ｖ１２に結合しない。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβ  Ｖ５−５＊０１にもＴＣＲβ  Ｖ５−１＊０１にも結合しない。
【０１９９】
本明細書に開示される方法のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβ  Ｖ１２に結合しないか、あるいは米国特許第５，８６１，１５５号に記載される１６Ｇ８マウス抗体またはそのヒト化バージョンの親和性および／または結合特異性よりも低い（例えば、約１０％未満、２０％未満、３０％未満、４０％未満、５０％未満、６０％未満、７０％未満、８０％未満、９０％未満、または約２分の１未満、５分の１未満、もしくは１０分の１未満の）親和性および／または結合特異性で、ＴＣＲβ  Ｖ１２に結合する。
【０２００】
本明細書に開示される方法のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、米国特許第５，８６１，１５５号に記載される１６Ｇ８マウス抗体またはそのヒト化バージョンの親和性および／または結合特異性を上回る（例えば、約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または約２倍、５倍、もしくは１０倍上回る）親和性および／または結合特異性で、ＴＣＲβ  Ｖ１２に結合する。
【０２０１】
本明細書に開示される方法のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、米国特許第５，８６１，１５５号に記載される１６Ｇ８マウス抗体またはそのヒト化バージョンの親和性および／または結合特異性を上回る（例えば、約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または約２倍、５倍、もしくは１０倍上回る）親和性および／または結合特異性で、ＴＣＲβ  Ｖ１２以外のＴＣＲβＶ領域（例えば、本明細書に記載されるＴＣＲβＶ領域、例えば、ＴＣＲβ  Ｖ６サブファミリー（例えば、ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）に結合する。
【０２０２】
本明細書に開示される方法のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、抗体Ｂの少なくとも１つのＣＤＲを含まない。本明細書に開示される方法のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、抗体ＢのＣＤＲを含まない。
【０２０３】
本明細書に開示される方法のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβ  Ｖ５−５＊０１にもＴＣＲβ  Ｖ５−１＊０１にも結合しないか、あるいは米国特許第５，８６１，１５５号に記載されるＴＭ２３マウス抗体またはそのヒト化バージョンの親和性および／または結合特異性よりも低い（例えば、約１０％未満、２０％未満、３０％未満、４０％未満、５０％未満、６０％未満、７０％未満、８０％未満、９０％未満、または約２分の１未満、５分の１未満、もしくは１０分の１未満の）親和性および／または結合特異性で、ＴＣＲβ  Ｖ５−５＊０１またはＴＣＲβ  Ｖ５−１＊０１に結合する。
【０２０４】
本明細書に開示される方法のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、米国特許第５，８６１，１５５号に記載されるＴＭ２３マウス抗体またはそのヒト化バージョンの親和性および／または結合特異性を上回る（例えば、約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または約２倍、５倍、もしくは１０倍上回る）親和性および／または結合特異性で、ＴＣＲβ  Ｖ５−５＊０１またはＴＣＲβ  Ｖ５−１＊０１に結合する。
【０２０５】
本明細書に開示される方法のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、米国特許第５，８６１，１５５号に記載されるＴＭ２３マウス抗体またはそのヒト化バージョンの親和性および／または結合特異性を上回る（例えば、約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または約２倍、５倍、もしくは１０倍上回る）親和性および／または結合特異性で、ＴＣＲβ  Ｖ５−５＊０１またはＴＣＲβ  Ｖ５−１＊０１以外のＴＣＲβＶ領域（例えば、本明細書に記載されるＴＣＲβＶ領域、例えば、ＴＣＲβ  Ｖ６サブファミリー（例えば、ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）に結合する。
【０２０６】
本明細書に開示される方法のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＭ２３マウス抗体の少なくとも１つのＣＤＲを含まない。本明細書に開示される方法のうちのいずれかの一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＭ２３マウス抗体のＣＤＲを含まない。
【０２０７】
本明細書に開示される方法のうちのいずれかの一部の実施形態では、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、例えば、Ｊ  Ｅｘｐ  Ｍｅｄ．  １９８９  Ｊａｎ  １；  １６９（１）：  ７３−８６に開示される、マウス抗ラットＴＣＲ抗体Ｒ７３の配列を含まず、これは、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。本明細書に開示される方法のうちのいずれかの一部の実施形態では、本明細書に開示される多特異性抗体分子は、例えば、Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  １９９３  Ｍａｒ  １５；１５０（６）：２３０５−１５に開示される、マウス抗ラットＴＣＲ抗体Ｒ７３の配列を含まず、これは、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０２０８】
本明細書に開示される方法のうちのいずれかの一部の実施形態では、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、例えば、Ｏｎｃｏｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ．  ２０１６；  ５（１）：  ｅ１０５２９３０に開示される、ウイルスペプチド−ＭＨＣ複合体を含まず、これは、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。本明細書に開示される方法のうちのいずれかの一部の実施形態では、本明細書に開示される多特異性抗体分子は、例えば、Ｏｎｃｏｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ．  ２０１６；  ５（１）：  ｅ１０５２９３０に開示される、ウイルスペプチド−ＭＨＣ複合体を含まず、これは、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０２０９】
本明細書に開示される方法の一部の実施形態では、免疫細胞集団は、Ｔ細胞、ナチュラルキラー細胞、Ｂ細胞、抗原提示細胞、または骨髄性細胞（例えば、単球、マクロファージ、好中球、もしくは顆粒球）を含む。
【０２１０】
本明細書に開示される方法の一部の実施形態では、免疫細胞集団は、Ｔ細胞、例えば、ＣＤ４＋  Ｔ細胞、ＣＤ８＋  Ｔ細胞、ＴＣＲアルファ−ベータＴ細胞、またはＴＣＲガンマ−デルタＴ細胞を含む。一部の実施形態では、Ｔ細胞は、メモリーＴ細胞（例えば、セントラルメモリーＴ細胞、またはエフェクターメモリーＴ細胞（例えば、ＴＥＭＲＡ）、またはエフェクターＴ細胞を含む。一部の実施形態では、Ｔ細胞は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）を含む。
【０２１１】
本明細書に開示される方法の一部の実施形態では、免疫細胞集団は、健常対象から得られる。
本明細書に開示される方法の一部の実施形態では、免疫細胞集団は、例えば、本明細書に記載される疾患、例えば、がん有する対象から（例えば、対象由来のアフェレーシス試料から）得られる。一部の実施形態では、疾患、例えば、がんを有する対象から得られた免疫細胞集団は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）を含む。
【０２１２】
本明細書に開示される方法の一部の実施形態では、本方法は、少なくとも１．１〜１０倍の拡大（例えば、少なくとも１．１倍、１．２倍、１．３倍、１．４倍、１．５倍、２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、もしくは１０倍の拡大）をもたらす。
【０２１３】
本明細書に開示される方法の一部の実施形態では、本方法は、細胞集団を、免疫細胞の拡大を促進する、例えば、増加させる薬剤と接触させるステップをさらに含む。一部の実施形態では、薬剤には、例えば、本明細書に記載される免疫チェックポイント阻害剤が含まれる。一部の実施形態では、薬剤には、４−１ＢＢ（ＣＤ１２７）アゴニスト、例えば、抗４−１ＢＢ抗体が含まれる。
【０２１４】
本明細書に開示される方法の一部の実施形態では、本方法は、細胞集団を、非分裂細胞、例えば、フィーダー細胞、例えば、照射した同種ヒトＰＢＭＣの集団と接触させるステップをさらに含む。
【０２１５】
本明細書に開示される方法の一部の実施形態では、本明細書に記載される拡大方法は、細胞を、少なくとも約４時間、６時間、１０時間、１２時間、１５時間、１８時間、２０時間、もしくは２２時間、または少なくとも１日間、２日間、３日間、４日間、５日間、６日間、７日間、８日間、９日間、１０日間、１１日間、１２日間、１３日間、１４日間、１５日間、１６日間、１７日間、１８日間、１９日間、２０日間、もしくは２１  日間、または少なくとも約１週間、２週間、３週間、４週間、５週間、６週間、７週間、もしくは８週間の期間、拡大させるステップを含む。
【０２１６】
本明細書に開示される方法の一部の実施形態では、免疫細胞集団の拡大は、ＣＤ３分子、例えば、ＣＤ３イプシロン（ＣＤ３ｅ）分子、またはＴＣＲアルファ（ＴＣＲα）分子に結合する抗体を用いた類似の細胞集団の拡大と比較される。
【０２１７】
本明細書に開示される方法の一部の実施形態では、免疫細胞集団の拡大は、抗ＴＣＲβＶ抗体分子と接触していない類似の細胞集団の拡大と比較される。
本明細書に開示される方法の一部の実施形態では、メモリーエフェクターＴ細胞、例えば、ＴＥＭ細胞、例えば、ＴＥＭＲＡ細胞の集団の拡大は、ＣＤ３分子、例えば、ＣＤ３イプシロン（ＣＤ３ｅ）分子、またはＴＣＲアルファ（ＴＣＲα）分子に結合する抗体を用いた類似の細胞集団の拡大と比較される。
【０２１８】
本明細書に開示される方法の一部の実施形態では、本方法は、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）アルファおよび／またはＴＣＲベータ分子を含むＴＣＲを発現するＴ細胞、例えば、ＴＣＲアルファ−ベータＴ細胞（αβ  Ｔ細胞）の拡大、例えば、選択的または優先的な拡大をもたらす。
【０２１９】
本明細書に開示される方法の一部の実施形態では、本方法は、ＴＣＲガンマおよび／またはＴＣＲデルタ分子を含むＴＣＲを発現するＴ細胞、例えば、ＴＣＲガンマ−デルタＴ細胞（γδ  Ｔ細胞）の拡大を上回るαβＴ細胞の拡大をもたらす。一部の実施形態では、γδ  Ｔ細胞を上回るαβＴ細胞の拡大は、ＣＲＳと関連するサイトカインの産生の低減をもたらす。一部の実施形態では、γδ  Ｔ細胞を上回るαβＴ細胞の拡大は、対象に投与したときに、ＣＲＳを誘導する能力が低減された、例えば、そうなる可能性が低い、免疫細胞をもたらす。
【０２２０】
本明細書に開示される方法の一部の実施形態では、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体の存在下において培養された、例えば、それを用いて拡大させた、免疫細胞集団（例えば、Ｔ細胞（例えば、ＴＥＭＲＡ細胞もしくはＴＩＬ）またはＮＫ細胞）は、対象、例えば、本明細書に記載される疾患または状態を有する対象に投与された場合に、ＣＲＳおよび／またはＮＴを誘導しない。
【０２２１】
一部の実施形態では、本明細書に開示される多特異性分子中の抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、第１の免疫細胞エンゲージャー部分である。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβ  Ｖ１２に結合しないか、あるいは米国特許第５，８６１，１５５号に記載される１６Ｇ８マウス抗体またはそのヒト化バージョンの親和性および／または結合特異性よりも低い（例えば、約１０％未満、２０％未満、３０％未満、４０％未満、５０％未満、６０％未満、７０％未満、８０％未満、９０％未満、または約２分の１未満、５分の１未満、もしくは１０分の１未満の）親和性および／または結合特異性で、ＴＣＲβ  Ｖ１２に結合する。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、米国特許第５，８６１，１５５号に記載される１６Ｇ８マウス抗体またはそのヒト化バージョンの親和性および／または結合特異性を上回る（例えば、約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または約２倍、５倍、もしくは１０倍上回る）親和性および／または結合特異性で、ＴＣＲβ  Ｖ１２に結合する。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、米国特許第５，８６１，１５５号に記載される１６Ｇ８マウス抗体またはそのヒト化バージョンの親和性および／または結合特異性を上回る（例えば、約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または約２倍、５倍、もしくは１０倍上回る）親和性および／または結合特異性で、ＴＣＲβ  Ｖ１２以外のＴＣＲβＶ領域（例えば、本明細書に記載されるＴＣＲβＶ領域、例えば、ＴＣＲβ  Ｖ６サブファミリー（例えば、ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）に結合する。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、抗体Ｂマウス抗体のＣＤＲを含まない。
【０２２２】
一部の実施形態では、本明細書に開示される多特異性分子中の抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、第１の免疫細胞エンゲージャー部分である。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβ  Ｖ５−５＊０１にもＴＣＲβ  Ｖ５−１＊０１にも結合しないか、あるいは米国特許第５，８６１，１５５号に記載されるＴＭ２３マウス抗体またはそのヒト化バージョンの親和性および／または結合特異性よりも低い（例えば、約１０％未満、２０％未満、３０％未満、４０％未満、５０％未満、６０％未満、７０％未満、８０％未満、９０％未満、または約２分の１未満、５分の１未満、もしくは１０分の１未満の）親和性および／または結合特異性で、ＴＣＲβ  Ｖ５−５＊０１またはＴＣＲβ  Ｖ５−１＊０１に結合する。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、米国特許第５，８６１，１５５号に記載されるＴＭ２３マウス抗体またはそのヒト化バージョンの親和性および／または結合特異性を上回る（例えば、約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または約２倍、５倍、もしくは１０倍上回る）親和性および／または結合特異性で、ＴＣＲβ  Ｖ５−５＊０１またはＴＣＲβ  Ｖ５−１＊０１に結合する。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、米国特許第５，８６１，１５５号に記載されるＴＭ２３マウス抗体またはそのヒト化バージョンの親和性および／または結合特異性を上回る（例えば、約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または約２倍、５倍、もしくは１０倍上回る）親和性および／または結合特異性で、ＴＣＲβ  Ｖ５−５＊０１またはＴＣＲβ  Ｖ５−１＊０１以外のＴＣＲβＶ領域（例えば、本明細書に記載されるＴＣＲβＶ領域、例えば、ＴＣＲβ  Ｖ６サブファミリー（例えば、ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）に結合する。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＭ２３マウス抗体のＣＤＲを含まない。
【０２２３】
一部の実施形態では、多特異性分子は、第２の免疫細胞エンゲージャー部分をさらに含む。一部の実施形態では、第１および／または第２の免疫細胞エンゲージャーは、免疫細胞、例えば、エフェクター細胞に結合し、それを活性化する。一部の実施形態では、第１および／または第２の免疫細胞エンゲージャーは、免疫細胞、例えば、エフェクター細胞に結合するが、それを活性化しない。一部の実施形態では、第２の免疫細胞エンゲージャーは、ＮＫ細胞エンゲージャー、Ｔ細胞エンゲージャー、Ｂ細胞エンゲージャー、樹状細胞エンゲージャー、もしくはマクロファージ細胞エンゲージャー、またはこれらの組合せから選択される。一部の実施形態では、第２の免疫細胞エンゲージャーは、ＣＤ３、ＴＣＲα、ＴＣＲγ、ＴＣＲζ、ＩＣＯＳ、ＣＤ２８、ＣＤ２７、ＨＶＥＭ、ＬＩＧＨＴ、ＣＤ４０、４−１ＢＢ、ＯＸ４０、ＤＲ３、ＧＩＴＲ、ＣＤ３０、ＴＩＭ１、ＳＬＡＭ、ＣＤ２、またはＣＤ２２６に結合するＴ細胞エンゲージャーを含む。
【０２２４】
一部の実施形態では、本明細書に開示される多特異性分子は、腫瘍標的化部分を含む。一部の実施形態では、腫瘍標的化部分は、がん抗原に結合する抗体分子（例えば、ＦａｂもしくはｓｃＦｖ）、受容体分子（例えば、受容体、受容体断片、もしくはその機能性バリアント）、もしくはリガンド分子（例えば、リガンド、リガンド断片、もしくはその機能性バリアント）、またはこれらの組合せを含む。一部の実施形態では、腫瘍標的化部分は、がん、例えば、血液がん、固形腫瘍、転移がん、軟部組織腫瘍、転移病変、またはこれらの組合せに存在するがん抗原に結合する。一部の実施形態では、腫瘍標的化部分は、がん抗原、例えば、ＢＣＭＡまたはＦｃＲＨ５に結合する。
【０２２５】
一部の実施形態では、腫瘍標的化抗体分子は、腫瘍抗原上の立体構造エピトープまたは線形エピトープに結合する。
本明細書に開示される組成物または方法のうちのいずれかの一部の実施形態では、腫瘍標的化部分は、抗原、例えば、がん抗原である。一部の実施形態では、がん抗原は、腫瘍抗原もしくは間質抗原、または血液抗原である。
【０２２６】
本明細書に開示される組成物または方法のうちのいずれかの一部の実施形態では、腫瘍標的化部分は、ＢＣＭＡ、ＦｃＲＨ５、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ３８、ＣＤ４７、ＣＤ９９、ＣＤ１２３、ＦｃＲＨ５、ＣＬＥＣ１２、ＣＤ１７９Ａ、ＳＬＡＭＦ７、もしくはＮＹ−ＥＳＯ１、ＰＤＬ１、ＣＤ４７、ガングロシド２（ＧＤ２）、前立腺幹細胞抗原（ＰＳＣＡ）、前立腺特異的膜抗原（ＰＭＳＡ）、前立腺特異的抗原（ＰＳＡ）、癌胎児性抗原（ＣＥＡ）、Ｒｏｎキナーゼ、ｃ−Ｍｅｔ、未成熟ラミニン受容体、ＴＡＧ−７２、ＢＩＮＧ−４、カルシウム活性化塩素チャネル２、サイクリン−Ｂ１、９Ｄ７、Ｅｐ−ＣＡＭ、ＥｐｈＡ３、Ｈｅｒ２／ｎｅｕ、テロメラーゼ、ＳＡＰ−１、サバイビン、ＮＹ−ＥＳＯ−１／ＬＡＧＥ−１、ＰＲＡＭＥ、ＳＳＸ−２、メラン−Ａ／ＭＡＲＴ−１、Ｇｐ１００／ｐｍｅｌ１７、チロシナーゼ、ＴＲＰ−１／−２、ＭＣ１Ｒ、β−カテニン、ＢＲＣＡ１／２、ＣＤＫ４、ＣＭＬ６６、フィブロネクチン、ｐ５３、Ｒａｓ、ＴＧＦ−Β受容体、ＡＦＰ、ＥＴＡ、ＭＡＧＥ、ＭＵＣ−１、ＣＡ−１２５、ＢＡＧＥ、ＧＡＧＥ、ＮＹ−ＥＳＯ−１、β−カテニン、ＣＤＫ４、ＣＤＣ２７、αアクチニン−４、ＴＲＰ１／ｇｐ７５、ＴＲＰ２、ｇｐ１００、メラン−Ａ／ＭＡＲＴ１、ガングリオシド、ＷＴ１、ＥｐｈＡ３、上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）、ＭＡＲＴ−２、ＭＡＲＴ−１、ＭＵＣ１、ＭＵＣ２、ＭＵＭ１、ＭＵＭ２、ＭＵＭ３、ＮＡ８８−１、ＮＰＭ、ＯＡ１、ＯＧＴ、ＲＣＣ、ＲＵＩ１、ＲＵＩ２、ＳＡＧＥ、ＴＲＧ、ＴＲＰ１、ＴＳＴＡ、葉酸受容体アルファ、Ｌ１−ＣＡＭ、ＣＡＩＸ、ｇｐＡ３３、ＧＤ３、ＧＭ２、ＶＥＧＦＲ、インテグリン（インテグリンアルファＶベータ３、インテグリンアルファ５ベータ１）、炭水化物（Ｌｅ）、ＩＧＦ１Ｒ、ＥＰＨＡ３、ＴＲＡＩＬＲ１、ＴＲＡＩＬＲ２、ＲＡＮＫＬ、（ＦＡＰ）、ＴＧＦ−ベータ、ヒアルロン酸、コラーゲン、例えば、ＩＶ型コラーゲン、テネイシンＣ、またはテネイシンＷから選択されるがん抗原に結合する。
【０２２７】
本明細書に開示される組成物または方法のうちのいずれかの一部の実施形態では、がんは、膵臓がん（例えば、膵臓腺癌）、乳がん、結腸直腸がん、肺がん（小細胞もしくは非小細胞肺がん）、皮膚がん、卵巣がん、または肝臓がんを含むがこれらに限定されない、固形腫瘍である。
【０２２８】
本明細書に開示される組成物または方法のうちのいずれかの一部の実施形態では、がん抗原または腫瘍抗原は、血液抗原である。一部の実施形態では、がんまたは腫瘍抗原は、ＢＣＭＡ、ＦｃＲＨ５、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ３８、ＣＤ４７、ＣＤ９９、ＣＤ１２３、ＦｃＲＨ５、ＣＬＥＣ１２、ＣＤ１７９Ａ、ＳＬＡＭＦ７、またはＮＹ−ＥＳＯ１のうちの１つまたは複数から選択される。一部の実施形態では、腫瘍標的化部分は、ＢＣＭＡまたはＦｃＲＨ５のうちの一方または両方に結合する。
【０２２９】
一部の実施形態では、腫瘍標的化部分は、ＢＣＭＡに結合する。実施形態では、腫瘍標的化部分は、ＢＣＭＡ標的化部分を含む。一部の実施形態では、ＢＣＭＡ標的化部分を含む腫瘍標的化部分は、細胞、例えば、がん細胞または造血細胞の表面上のＢＣＭＡ抗原に結合する。ＢＣＭＡ抗原は、原発性腫瘍細胞またはその転移病変に存在し得る。一部の実施形態では、がんは、血液がん、例えば、多発性骨髄腫である。例えば、ＢＣＭＡ抗原は、腫瘍に、例えば、限定的な腫瘍灌流、血管の圧縮、または線維性腫瘍間質のうちの１つまたは複数を有することが典型的なクラスの腫瘍に、存在し得る。一部の実施形態では、ＢＣＭＡ標的化部分を含む腫瘍標的化部分は、米国特許第８９２０７７６号、同第９２４３０５８号、同第９３４０６２１号、同第８８４６０４２号、同第７０８３７８５号、同第９５４５０８６号、同第７２７６２４１号、同第９０３４３２４号、同第７７９９９０２号、同第９３８７２３７号、同第８８２１８８３号、同第８６１７４５号、米国特許出願公開第２０１３０２７３０５５号、同第２０１６０１７６９７３号、同第２０１５０３６８３５１号、同第２０１５０３７６２８７号、同第２０１７００２２２８４号、同第２０１６００１５７４９号、同第２０１４０２４２０７７号、同第２０１７００３７１２８号、同第２０１７００５１０６８号、同第２０１６０３６８９８８号、同第２０１６０３１１９１５号、同第２０１６０１３１６５４号、同第２０１２０２１３７６８号、同第２０１１０１７７０９３号、同第２０１６０２９７８８５号、欧州特許第３１３７５００号、同第２６９９２５９号、同第２９８２６９４号、同第３０２９０６８号、同第３０２３４３７号、国際公開第２０１６０９０３２７号、同第２０１７０２１４５０号、同第２０１６１１０５８４号、同第２０１６１１８６４１号、同第２０１６１６８１４９号に記載される抗ＢＣＭＡ抗体またはその抗原結合性断片を含み、これらのすべての内容は、参照により本明細書に組み込まれる。
【０２３０】
一部の実施形態では、ＢＣＭＡ標的化部分は、ＢＣＭＡに結合する抗体分子（例えば、ＦａｂまたはｓｃＦｖ）を含む。一部の実施形態では、ＢＣＭＡに対する抗体分子は、表９の重鎖可変ドメイン配列のうちのいずれかに由来する１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲ、または緊密に関連するＣＤＲ、例えば、表９のＣＤＲ配列のうちのいずれかから少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、２つ、３つ、もしくは４つ以下である変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する、ＣＤＲを含む。一部の実施形態では、ＢＣＭＡに対する抗体分子は、表９のアミノ酸配列のうちのいずれか、またはそれに対して実質的に同一の（例えば、それに対して９５％〜９９．９％同一であるか、もしくは少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個、もしくは１５個以下である変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する）アミノ酸配列から選択される、重鎖可変ドメイン配列を含む。
【０２３１】
一部の実施形態では、腫瘍標的化部分は、ＦｃＲＨ５に結合する。実施形態では、腫瘍標的化部分は、ＦｃＲＨ５標的化部分を含む。一部の実施形態では、ＦｃＲＨ５標的化部分を含む腫瘍標的化部分は、細胞、例えば、がん細胞または造血細胞の表面上のＦｃＲＨ５抗原に結合する。ＦｃＲＨ５抗原は、原発性腫瘍細胞またはその転移病変に存在し得る。一部の実施形態では、がんは、血液がん、例えば、多発性骨髄腫である。例えば、ＦｃＲＨ５抗原は、腫瘍に、例えば、限定的な腫瘍灌流、血管の圧縮、または線維性腫瘍間質のうちの１つまたは複数を有することが典型的なクラスの腫瘍に、存在し得る。一部の実施形態では、ＦｃＲＨ５標的化部分を含む腫瘍標的化部分は、米国特許第７，９９９，０７７号に記載される抗ＦｃＲＨ５抗体またはその抗原結合性断片を含み、このすべての内容は、参照により本明細書に組み込まれる。
【０２３２】
本明細書に開示される組成物または方法のうちのいずれかの一部の実施形態では、がんは、Ｂ細胞もしくはＴ細胞悪性腫瘍、例えば、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫（例えば、Ｂ細胞リンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、慢性リンパ球性白血病、マントル細胞リンパ腫、辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫、リンパ形質細胞性リンパ腫、有毛細胞性白血病）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群、多発性骨髄腫、および急性リンパ球性白血病を含むがこれらに限定されない、血液がんである。一部の実施形態では、血液がんは、多発性骨髄腫である。
【０２３３】
一部の実施形態では、本明細書に開示される多特異性分子は、サイトカイン分子、例えば、１つまたは２つのサイトカイン分子をさらに含む。一部の実施形態では、サイトカイン分子は、インターロイキン−２（ＩＬ−２）、インターロイキン−７（ＩＬ−７）、インターロイキン−１２（ＩＬ−１２）、インターロイキン−１５（ＩＬ−１５）、インターロイキン−１８（ＩＬ−１８）、インターロイキン−２１（ＩＬ−２１）、もしくはインターフェロンガンマ、またはこれらの断片、バリアント、もしくは組合せから選択される。一部の実施形態では、単量体または二量体である。一部の実施形態では、サイトカイン分子は、受容体二量体化ドメイン、例えば、ＩＬ１５Ｒアルファ二量体化ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、サイトカイン分子（例えば、ＩＬ−１５）および受容体二量体化ドメイン（例えば、ＩＬ１５Ｒアルファ二量体化ドメイン）は、共有結合的に連結されず、例えば、非共有結合的に会合される。
【０２３４】
一部の実施形態では、本明細書に開示される多特異性分子は、
（ｉ）抗ＴＣＲβＶ抗体分子（例えば、本明細書に記載される抗ＴＣＲβＶ抗体分子）、および
（ｉｉ）腫瘍標的化抗体分子（例えば、本明細書に記載される、例えば、ＢＣＭＡ、ＦｃＲＨ５、ＣＤ１９、ＣＤ２２、ＣＤ３３、ＣＤ１２３、ＦｃＲＨ５、ＣＤ１７９ａ、もしくはＣＬＥＣ１２のうちの１つまたは複数から選択される血液抗原に結合する抗体分子）
を含む。
【０２３５】
一部の実施形態では、本明細書に開示される多特異性分子は、（ｉ）の抗ＴＣＲβＶ抗体分子、（ｉｉ）の腫瘍標的化抗体分子、および本明細書に記載されるサイトカイン分子、例えば、ＩＬ−１２サイトカイン分子を含む。
【０２３６】
一部の実施形態では、多特異性分子は、本明細書に記載される抗ＴＣＲβＶ抗体分子、およびＢＣＭＡまたはＦｃＲＨ５のうちの一方または両方に結合する腫瘍標的化抗体分子を含む。一部の実施形態では、多特異性分子は、ＩＬ−１２サイトカイン分子をさらに含む。多特異性分子は、ＢＣＭＡまたはＦｃＲＨ５を発現する血液がん、例えば、多発性骨髄腫を処置するために使用することができる。
【０２３７】
一部の実施形態では、多特異性分子は、本明細書に記載される抗ＴＣＲβＶ抗体分子、およびＣＤ１９、ＣＤ２２、またはＣＤ１２３のうちの１つまたは複数に結合する腫瘍標的化抗体分子を含む。一部の実施形態では、多特異性分子は、ＩＬ−１２サイトカイン分子をさらに含む。多特異性分子は、ＣＤ１９、ＣＤ２２、またはＣＤ１２３を発現する血液がん、例えば、白血病またはリンパ腫を処置するために使用することができる。一部の実施形態では、ＣＤ１９、ＣＤ２２、またはＣＤ１２３を発現する血液がんは、Ｂ細胞またはＴ細胞悪性腫瘍、例えば、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫（例えば、Ｂ細胞リンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、慢性リンパ球性白血病、マントル細胞リンパ腫、辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫、リンパ形質細胞性リンパ腫、有毛細胞性リンパ腫）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群、多発性骨髄腫、および急性リンパ球性白血病から選択される。一部の実施形態では、血液がんは、多発性骨髄腫である。
【０２３８】
一部の実施形態では、本明細書に開示される多特異性分子は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、およびＩｇＧ４の重鎖定常領域、より具体的には、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、またはＩｇＧ４の重鎖定常領域から選択される、免疫グロブリン定常領域（例えば、Ｆｃ領域）をさらに含む。一部の実施形態では、免疫グロブリン定常領域（例えば、Ｆｃ領域）は、腫瘍標的化部分、免疫細胞エンゲージャー、サイトカイン分子、または間質改変部分のうちの１つまたは複数に連結されている、例えば、共有結合的に連結されている。一部の実施形態では、第１および第２の免疫グロブリン鎖定常領域（例えば、Ｆｃ領域）の境界部は、例えば、操作されていない境界部と比較して、二量体化を増加または減少させるように、変更、例えば、突然変異されている。一部の実施形態では、免疫グロブリン鎖定常領域（例えば、Ｆｃ領域）の二量体化は、第１および第２のＦｃ領域のＦｃ境界部に、対になった孔と突起（「ノブ・イン・ホール」）、静電相互作用、または鎖交換のうちの１つまたは複数を提供し、それによって、例えば、操作されていない境界部と比較して、より高い比のヘテロ多量体：ホモ多量体が形成される。一部の実施形態では、
一部の実施形態では、本明細書に開示される多特異性分子は、リンカー、例えば、本明細書に記載されるリンカーをさらに含み、必要に応じて、リンカーは、切断性リンカー、非切断性リンカー、ペプチドリンカー、可撓性リンカー、剛性リンカー、ヘリックスリンカー、または非ヘリックスリンカーから選択される。
【０２３９】
一部の実施形態では、多特異性分子は、少なくとも２つの非連続的ポリペプチド鎖を含む。
一部の実施形態では、多特異性分子は、以下の構成：
Ａ，Ｂ−［二量体化モジュール］−Ｃ，−Ｄ
を含み、ここで、
（１）二量体化モジュールは、免疫グロブリン定常ドメイン、例えば、重鎖定常ドメイン（例えば、ホモ二量体もしくはヘテロ二量体重鎖定常領域、例えば、Ｆｃ領域）、または免疫グロブリン可変領域（例えば、Ｆａｂ領域）の定常ドメインを含み、
（２）Ａ、Ｂ、Ｃ、およびＤは、独立して、不在であるか、（ｉ）本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子を含む第１の免疫細胞エンゲージャーに優先的に結合する抗原結合性ドメイン、（ｉｉ）腫瘍標的化部分（例えば、本明細書に記載される腫瘍標的化抗体分子）、（ｉｉｉ）Ｔ細胞エンゲージャー、ＮＫ細胞エンゲージャー、Ｂ細胞エンゲージャー、樹状細胞エンゲージャー、もしくはマクロファージ細胞エンゲージャーから選択される第２の免疫細胞エンゲージャー、（ｉｖ）サイトカイン分子、または（ｖ）間質改変部分であるが、ただし、
Ａ、Ｂ、Ｃ、およびＤのうちの少なくとも１つ、２つ、または３つが、本明細書に開示されるＴＣＲβＶ領域に優先的に結合する抗原結合性ドメインを含むこと、ならびに
残りのＡ、Ｂ、Ｃ、およびＤのうちのいずれかは、不在であるか、または腫瘍標的化部分、第２の免疫細胞エンゲージャー、サイトカイン分子、もしくは間質改変部分のうちの１つを含むこと
を条件とする。
【０２４０】
一部の実施形態では、二量体化モジュールは、対になった孔と突起（「ノブ・イン・ホール」）、静電相互作用、または鎖交換のうちの１つまたは複数を含む、１つまたは複数の免疫グロブリン鎖定常領域（例えば、Ｆｃ領域）を含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫グロブリン鎖定常領域（例えば、Ｆｃ領域）は、例えば、ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域の、３４７位、３４９位、３５０位、３５１位、３６６位、３６８位、３７０位、３９２位、３９４位、３９５位、３９７位、３９８位、３９９位、４０５位、４０７位、または４０９位のうちの１つまたは複数から選択される位置に、アミノ酸置換を含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫グロブリン定常領域（例えば、Ｆｃ領域）は、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、もしくはＹ４０７Ｖ（例えば、孔もしくはホールに対応する）、またはＴ３６６Ｗ（例えば、突起もしくはノブに対応する）、またはこれらの組合せから選択されるアミノ酸置換を含む。
【０２４１】
一部の実施形態では、多特異性分子は、リンカー、例えば、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子の抗原結合性ドメインと腫瘍標的化部分との間、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子の抗原結合性ドメインと第２の免疫細胞エンゲージャーとの間、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子の抗原結合性ドメインとサイトカイン分子との間、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子の抗原結合性ドメインと間質改変部分との間、第２の免疫細胞エンゲージャーとサイトカイン分子との間、第２の免疫細胞エンゲージャーと間質改変部分との間、サイトカイン分子と間質改変部分との間、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子の抗原結合性ドメインと二量体化モジュールとの間、第２の免疫細胞エンゲージャーと二量体化モジュールとの間、サイトカイン分子と二量体化モジュールとの間、間質改変部分と二量体化モジュールとの間、腫瘍標的化部分と二量体化モジュールとの間、腫瘍標的化部分とサイトカイン分子との間、腫瘍標的化部分と第２の免疫細胞エンゲージャーとの間、または腫瘍標的化部分と本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子の抗原結合性ドメインとの間のうちの１つまたは複数におけるリンカーをさらに含む。一部の実施形態では、リンカーは、切断性リンカー、非切断性リンカー、ペプチドリンカー、可撓性リンカー、剛性リンカー、ヘリックスリンカー、または非ヘリックスリンカーから選択される。一部の実施形態では、リンカーは、ペプチドリンカーである。一部の実施形態では、ペプチドリンカーは、ＧｌｙおよびＳｅｒを含む。一部の実施形態では、ペプチドリンカーは、配列番号１４２〜１４５または１７５〜１７８から選択されるアミノ酸配列を含む。
【０２４２】
本明細書に開示される方法または使用のための組成物の一部の実施形態では、疾患は、血液がん、固形腫瘍、転移がん、軟部組織腫瘍、転移病変、またはこれらの組合せから選択されるがんである。
【０２４３】
本明細書に開示される方法または使用のための組成物の一部の実施形態では、がんは、黒色腫、膵臓がん（例えば、膵臓腺癌）、乳がん、結腸直腸がん（ＣＲＣ）、肺がん（例えば、小細胞もしくは非小細胞肺がん）、皮膚がん、卵巣がん、または肝臓がんから選択される固形腫瘍である。一部の実施形態では、がんは、黒色腫またはＣＲＣである。
【０２４４】
本明細書に開示される方法または使用のための組成物の一部の実施形態では、がんは、Ｂ細胞もしくはＴ細胞悪性腫瘍、例えば、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫（例えば、Ｂ細胞リンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、慢性リンパ球性白血病、マントル細胞リンパ腫、辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫、リンパ形質細胞性リンパ腫、有毛細胞性白血病）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群、多発性骨髄腫、または急性リンパ球性白血病から選択される血液がんである。一部の実施形態では、血液がんは、多発性骨髄腫である。一部の実施形態では、血液がんは、ＣＬＬまたはＤＬＢＣＬである。
【０２４５】
本明細書に開示される方法または使用のための組成物の一部の実施形態では、対象由来の試料は、血液試料、例えば、末梢血試料、生検、例えば、腫瘍生検、または骨髄試料を含む。一部の実施形態では、試料は、免疫エフェクター細胞、例えば、Ｔ細胞またはＮＫ細胞を含む、生体試料を含む。一部の実施形態では、Ｔ細胞は、ＣＤ４  Ｔ細胞、ＣＤ８  Ｔ細胞（例えば、エフェクターＴ細胞もしくはメモリーＴ細胞（例えば、メモリーエフェクターＴ細胞（例えば、ＴＥＭ細胞、例えば、ＴＥＭＲＡ細胞）、または腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）を含む。
【０２４６】
別途定義されない限り、本明細書において使用されるすべての技術用語および科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者によって広く理解されているものと同じ意味を有する。本明細書に記載されるものに類似またはそれと同等の方法および材料を、本発明の実施または試験において使用することができるが、好適な方法および材料が、以下に記載されている。本明細書に記載されるすべての刊行物、特許出願、特許、および他の参考文献は、参照によりその全体が組み込まれる。矛盾が生じた場合には、定義を含め、本明細書が優先される。加えて、材料、方法、および実施例は、例示に過ぎず、限定することを意図するものではない。
【０２４７】
本発明の他の特性および利点は、以下の詳細な説明および特許請求の範囲から明らかであろう。
特許または出願ファイルは、カラーを付して作成された少なくとも１つの図面を含む。カラー図面（複数可）を含むこの特許または特許出願公開の写しは、請求および必要な手数料の納付があった場合に特許庁によって提供される。
【図面の簡単な説明】
【０２４８】
【図１Ａ】図１Ａ〜１Ｂは、抗体Ａ供給源のマウスＶＨおよびＶＬフレームワーク１、ＣＤＲ１、フレームワーク２、ＣＤＲ２、フレームワーク３、ＣＤＲ３、およびフレームワーク４領域の、それらのそれぞれのヒト化配列とのアラインメントを示す図である。Ｋａｂａｔ  ＣＤＲを太字で、Ｃｈｏｔｈｉａ  ＣＤＲを斜体で、組合せＣＤＲをボックスで示す。復帰突然変異したフレームワークの位置には、二重下線が施される。図１Ａは、マウス抗体Ａ（配列番号１）およびヒト化抗体Ａ−Ｈ（配列番号９）のＶＨ配列を示す。図１Ｂは、マウス抗体Ａ（配列番号２）およびヒト化抗体Ａ−Ｈ（配列番号１０および配列番号１１）のＶＬ配列を示す。
【図１Ｂ】図１Ｂは、マウス抗体Ａ（配列番号２）およびヒト化抗体Ａ−Ｈ（配列番号１０および配列番号１１）のＶＬ配列を示す。
【図２Ａ】図２Ａ〜２Ｂは、抗体Ｂ供給源のマウスＶＨおよびＶＬフレームワーク１、ＣＤＲ１、フレームワーク２、ＣＤＲ２、フレームワーク３、ＣＤＲ３、およびフレームワーク４領域の、それらのそれぞれのヒト化配列とのアラインメントを示す図である。Ｋａｂａｔ  ＣＤＲを太字で、Ｃｈｏｔｈｉａ  ＣＤＲを斜体で、組合せＣＤＲをボックスで示す。復帰突然変異したフレームワークの位置には、二重下線が施される。図２Ａは、マウス抗体Ｂ（配列番号１５）およびヒト化ＶＨ配列Ｂ−Ｈ．１Ａ〜Ｂ−Ｈ．１Ｃ（配列番号２３〜２５）のＶＨ配列を示す。図２Ｂは、マウス抗体Ｂ（配列番号１６）およびヒト化ＶＬ配列Ｂ−Ｈ．１Ｄ〜Ｂ−Ｈ．１Ｈ（配列番号２６〜３０）のＶＬ配列を示す。
【図２Ｂ−１】図２Ｂは、マウス抗体Ｂ（配列番号１６）およびヒト化ＶＬ配列Ｂ−Ｈ．１Ｄ〜Ｂ−Ｈ．１Ｈ（配列番号２６〜３０）のＶＬ配列を示す。
【図２Ｂ−２】図２Ｂは、マウス抗体Ｂ（配列番号１６）およびヒト化ＶＬ配列Ｂ−Ｈ．１Ｄ〜Ｂ−Ｈ．１Ｈ（配列番号２６〜３０）のＶＬ配列を示す。
【図３】対応する抗体がマップされたＴＣＲＢＶ遺伝子ファミリーおよびサブファミリーの系統樹を示す図である。サブファミリーの同一性は以下の通りである：サブファミリーＡ：ＴＣＲβ  Ｖ６；サブファミリーＢ：ＴＣＲβ  Ｖ１０；サブファミリーＣ：ＴＣＲβ  Ｖ１２；サブファミリーＤ：ＴＣＲβ  Ｖ５；サブファミリーＥ：ＴＣＲβ  Ｖ７；サブファミリーＦ：ＴＣＲβ  Ｖ１１；サブファミリーＧ：ＴＣＲβ  Ｖ１４；サブファミリーＨ：ＴＣＲβ  Ｖ１６；サブファミリーＩ：ＴＣＲβ  Ｖ１８；サブファミリーＪ：ＴＣＲβ  Ｖ９；サブファミリーＫ：ＴＣＲβ  Ｖ１３；サブファミリーＬ：ＴＣＲβ  Ｖ４；サブファミリーＭ：ＴＣＲβ  Ｖ３；サブファミリーＮ：ＴＣＲβ  Ｖ２；サブファミリーＯ：ＴＣＲβ  Ｖ１５；サブファミリーＰ：ＴＣＲβ  Ｖ３０；サブファミリーＱ：ＴＣＲβ  Ｖ１９；サブファミリーＲ：ＴＣＲβ  Ｖ２７；サブファミリーＳ：ＴＣＲβ  Ｖ２８；サブファミリーＴ：ＴＣＲβ  Ｖ２４；サブファミリーＵ：ＴＣＲβ  Ｖ２０；サブファミリーＶ：ＴＣＲβ  Ｖ２５；およびサブファミリーＷ：ＴＣＲβ  Ｖ２９サブファミリー。サブファミリーメンバーは、本明細書では「ＴＣＲベータＶ（ＴＣＲβＶ）」というセクションに詳細に記載されている。
【図４Ａ−１】図４Ａ〜４Ｃは、抗ＴＣＲ  Ｖβ１３．１抗体（Ａ−Ｈ．１）によって６日間、活性化されたヒトＣＤ３＋  Ｔ細胞を示す図である。ヒトＣＤ３＋  Ｔ細胞を磁気ビーズ分離（負の選択）を用いて単離し、１００ｎＭで、固定化（プレート被覆した）抗ＴＣＲ  Ｖβ１３．１（Ａ−Ｈ．１）または抗ＣＤ３ε（ＯＫＴ３）抗体で６日間、活性化した。図４Ａは、抗ＴＣＲ  Ｖβ１３．１（Ａ−Ｈ．１）、続く、フローサイトメトリー分析のための二次蛍光色素結合した抗体を用いて、ＴＣＲ  Ｖβ１３．１表面発現について評価した、拡大されたＴ細胞の２つの散布図（左：ＯＫＴ３で活性化；右：Ａ−Ｈ．１で活性化）を示す。図４Ｂは、抗ＴＣＲ  Ｖβ１３．１（Ａ−Ｈ．１）または抗ＣＤ３ｅ（ＯＫＴ３）によって活性化されたＴＣＲ  Ｖβ１３．１陽性Ｔ細胞のパーセンテージ（％）を、総Ｔ細胞（ＣＤ３＋）に対してプロットした図である。図４Ｃは、６０μｌ／分の一定速度で２０秒間、各Ｔ細胞サブセットゲート（ＣＤ３またはＴＣＲ  Ｖβ１３．１）における事象の数をカウントすることによって獲得された相対細胞計数を示す。データは、３人のドナーからの平均値として示される。
【図４Ａ−２】図４Ａは、抗ＴＣＲ  Ｖβ１３．１（Ａ−Ｈ．１）、続く、フローサイトメトリー分析のための二次蛍光色素結合した抗体を用いて、ＴＣＲ  Ｖβ１３．１表面発現について評価した、拡大されたＴ細胞の２つの散布図（左：ＯＫＴ３で活性化；右：Ａ−Ｈ．１で活性化）を示す。
【図４Ｂ】図４Ｂは、抗ＴＣＲ  Ｖβ１３．１（Ａ−Ｈ．１）または抗ＣＤ３ｅ（ＯＫＴ３）によって活性化されたＴＣＲ  Ｖβ１３．１陽性Ｔ細胞のパーセンテージ（％）を、総Ｔ細胞（ＣＤ３＋）に対してプロットした図である。
【図４Ｃ】図４Ｃは、６０μｌ／分の一定速度で２０秒間、各Ｔ細胞サブセットゲート（ＣＤ３またはＴＣＲ  Ｖβ１３．１）における事象の数をカウントすることによって獲得された相対細胞計数を示す。データは、３人のドナーからの平均値として示される。
【図５Ａ】図５Ａ〜５Ｂは、形質転換された細胞系ＲＰＭＩ８２２６に対する抗ＴＣＲ  Ｖβ１３．１抗体（Ａ−Ｈ．１）によって活性化されたヒトＣＤ３＋  Ｔ細胞の細胞溶解活性を示す図である。図５Ａは、Ａ−Ｈ．１またはＯＫＴ３で活性化されたヒトＣＤ３＋  Ｔ細胞の標的細胞溶解を示す。ヒトＣＤ３＋  Ｔ細胞を磁気ビーズ分離（負の選択）を用いて単離し、ＲＰＭＩ８２２６細胞と、５：１の（Ｅ：Ｔ）比で２日間の共培養前に、示された濃度で固定化（プレート被覆した）Ａ−Ｈ．１またはＯＫＴ３で４日間、活性化した。次に、フローサイトメトリー分析を用いて、ＣＦＳＥ／ＣＤ１３８標識したおよび膜不透過性ＤＮＡ色素（ＤＲＡＱ７）についてのＦＡＣＳ染色によって、試料をＲＰＭＩ８２２６細胞の細胞溶解について分析した。図５Ｂは、ＲＰＭＩ−８２２６と、５：１の（Ｅ：Ｔ）比で６日間インキュベートしたＡ−Ｈ．１またはＯＫＴ３で活性化されたヒトＣＤ３＋  Ｔ細胞の標的細胞溶解、続く、上記されるように、ＲＰＭＩ８２２６細胞の細胞溶解分析を示す。標的細胞溶解のパーセンテージ（％）は、以下の式：［（ｘ−基底）／（１００％−基底）、式中、ｘは試料の細胞溶解である］を用いて、基底標的細胞溶解（すなわち、抗体処置なし）に対して標準化することによって決定された。示されたデータは、ｎ＝１のドナーの代表的なものである。
【図５Ｂ】図５Ｂは、ＲＰＭＩ−８２２６と、５：１の（Ｅ：Ｔ）比で６日間インキュベートしたＡ−Ｈ．１またはＯＫＴ３で活性化されたヒトＣＤ３＋  Ｔ細胞の標的細胞溶解、続く、上記されるように、ＲＰＭＩ８２２６細胞の細胞溶解分析を示す。標的細胞溶解のパーセンテージ（％）は、以下の式：［（ｘ−基底）／（１００％−基底）、式中、ｘは試料の細胞溶解である］を用いて、基底標的細胞溶解（すなわち、抗体処置なし）に対して標準化することによって決定された。示されたデータは、ｎ＝１のドナーの代表的なものである。
【図６Ａ】図６Ａ〜６Ｂは、示された抗体で活性化されたヒトＰＢＭＣによるＩＦＮｇ産生を示す図である。示された数のドナーからの全血からヒトＰＢＭＣを単離し、続いて、１００Ｎｍで、示された抗体で固相（プレート被覆）刺激を行った。１日目、２日目、３日目、５日目、または６日目に上清を回収した。図６Ａは、活性化後の１日目、２日目、３日目、５日目、または６日目に、抗ＴＣＲ  Ｖβ１３．１抗体（Ａ−Ｈ．１またはＡ−Ｈ．２）または抗ＣＤ３ｅ抗体（ＯＫＴ３またはＳＰ３４−２）で活性化された、示された抗体で活性化されたヒトＰＢＭＣにおけるＩＦＮｇの産生を比較するグラフである。図６Ｂは、活性化後の１日目、２日目、３日目、５日目、または６日目に、示された抗ＴＣＲ  Ｖβ１３．１抗体または抗ＣＤ３ｅ抗体（ＯＫＴ３）で活性化された、示された抗体で活性化されたヒトＰＢＭＣにおけるＩＦＮｇの産生を示す。
【図６Ｂ】図６Ｂは、活性化後の１日目、２日目、３日目、５日目、または６日目に、示された抗ＴＣＲ  Ｖβ１３．１抗体または抗ＣＤ３ｅ抗体（ＯＫＴ３）で活性化された、示された抗体で活性化されたヒトＰＢＭＣにおけるＩＦＮｇの産生を示す。
【図７Ａ】図７Ａ〜７Ｂは、示された抗体で活性化されたヒトＰＢＭＣによるＩＬ−２産生を示す図である。図６Ａ〜６Ｂに記載されるのと類似の実験設定を使用した。
【図７Ｂ】図７Ａ〜７Ｂは、示された抗体で活性化されたヒトＰＢＭＣによるＩＬ−２産生を示す図である。図６Ａ〜６Ｂに記載されるのと類似の実験設定を使用した。
【図８Ａ】図８Ａ〜８Ｂは、示された抗体で活性化されたヒトＰＢＭＣによるＩＬ−６産生を示す図である。図６Ａ〜６Ｂに記載されるのと類似の実験設定を使用した。
【図８Ｂ】図８Ａ〜８Ｂは、示された抗体で活性化されたヒトＰＢＭＣによるＩＬ−６産生を示す図である。図６Ａ〜６Ｂに記載されるのと類似の実験設定を使用した。
【図９Ａ】図９Ａ〜９Ｂは、示された抗体で活性化されたヒトＰＢＭＣによるＴＮＦ−α産生を示す図である。図６Ａ〜６Ｂに記載されるのと類似の実験設定を使用した。
【図９Ｂ】図９Ａ〜９Ｂは、示された抗体で活性化されたヒトＰＢＭＣによるＴＮＦ−α産生を示す図である。図６Ａ〜６Ｂに記載されるのと類似の実験設定を使用した。
【図１０Ａ】図１０Ａ〜１０Ｂは、示された抗体で活性化されたヒトＰＢＭＣによるＩＬ−１β産生を示す図である。図６Ａ〜６Ｂに記載されるのと類似の実験設定を使用した。
【図１０Ｂ】図１０Ａ〜１０Ｂは、示された抗体で活性化されたヒトＰＢＭＣによるＩＬ−１β産生を示す図である。図６Ａ〜６Ｂに記載されるのと類似の実験設定を使用した。
【図１１Ａ】図１１Ａ〜１１Ｂは、抗ＣＤ３ｅ抗体ＯＫＴ３によって活性化されたＰＢＭＣと比較した場合、抗ＴＣＲ  Ｖβ１３．１抗体Ａ−Ｈ．１によって活性化されたヒトＰＭＢＣにおけるＩＦＮｇ分泌の遅延動態を示すグラフである。図１１Ａは、４人のドナーからのＩＦＮｇ分泌データを示す。図１１Ｂは、追加の４人のドナーからのＩＦＮｇ分泌データを示す。示されたデータは、ｎ＝８のドナーの代表的なものである。
【図１１Ｂ】図１１Ｂは、追加の４人のドナーからのＩＦＮｇ分泌データを示す。示されたデータは、ｎ＝８のドナーの代表的なものである。
【図１２】抗ＣＤ３ｅ抗体（ＯＫＴ３またはＳＰ３４−２）によって活性化されたＰＢＭＣと比較して、抗ＴＣＲ  Ｖβ１３．１抗体（Ａ−Ｈ．１またはＡ−Ｈ．２）によって活性化されたヒトＰＢＭＣにおけるＣＤ８＋  ＴＳＣＭおよびＴｅｍｒａ  Ｔ細胞サブセットの増加を示す図である。
【図１３Ａ】図１３Ａ〜１３Ｆは、抗ＴＣＲＶｂ抗体の特徴を示す図である。図１３Ａは、抗ＣＤ３（ＯＫＴ３）抗体または抗ＴＣＲＶｂ抗体で活性化されたＴ細胞の増殖を示すグラフである。図１３Ｂは、抗ＴＣＲＶｂ抗体を用いたＣＤ４５ＲＡ＋エフェクターメモリーＣＤ８＋およびＣＤ４＋Ｔ細胞（ＴＥＭＲＡ）細胞の選択的拡大を示す。Ｔｎ＝ナイーブＴ細胞；Ｔｓｃｍ＝幹細胞メモリーＴ細胞；Ｔｃｍ＝中央メモリーＴ細胞；Ｔｅｍ＝エフェクターメモリーＴ細胞；Ｔｅｍｒａ＝エフェクターメモリーＣＤ４５ＲＡ＋Ｔ細胞。図１３Ｃは、抗ＴＣＲＶｂ抗体、または抗ＣＤ３抗体で刺激されたＰＢＭＣによるＩＦＮ−ｇ分泌を示すグラフである。図１３Ｄは、抗ＴＣＲＶｂ抗体、または抗ＣＤ３抗体で刺激されたＴ細胞による標的細胞溶解を示す。細胞を４日間刺激し、続いて、多発性骨髄腫標的細胞と２日間インキュベートして、細胞殺滅の評価を行った。図１３Ｅは、抗ＴＣＲＶｂ抗体、または抗ＣＤ３抗体で刺激されたＴ細胞によるパーフォリン分泌を示すグラフである。パーフォリンは、１００ｎｇ／ｍｌプレート結合した抗体で５日間刺激した後、ＰＢＭＣにおけるＴＣＲＶＢ陽性およびＴＣＲＶＢ陰性Ｔ細胞において、ＦＡＣＳ染色により分析された。図１３Ｆは、抗ＴＣＲＶｂ抗体、または抗ＣＤ３抗体で刺激されたＴ細胞によるグランザイムＢを示すグラフである。グランザイムＢは、１００ｎｇ／ｍｌプレート結合した抗体で５日間刺激した後、ＰＢＭＣにおけるＴＣＲＶＢ陽性およびＴＣＲＶＢ陰性Ｔ細胞において、ＦＡＣＳ染色により分析された。
【図１３Ｂ】図１３Ｂは、抗ＴＣＲＶｂ抗体を用いたＣＤ４５ＲＡ＋エフェクターメモリーＣＤ８＋およびＣＤ４＋Ｔ細胞（ＴＥＭＲＡ）細胞の選択的拡大を示す。Ｔｎ＝ナイーブＴ細胞；Ｔｓｃｍ＝幹細胞メモリーＴ細胞；Ｔｃｍ＝中央メモリーＴ細胞；Ｔｅｍ＝エフェクターメモリーＴ細胞；Ｔｅｍｒａ＝エフェクターメモリーＣＤ４５ＲＡ＋Ｔ細胞。
【図１３Ｃ】図１３Ｃは、抗ＴＣＲＶｂ抗体、または抗ＣＤ３抗体で刺激されたＰＢＭＣによるＩＦＮ−ｇ分泌を示すグラフである。
【図１３Ｄ】図１３Ｄは、抗ＴＣＲＶｂ抗体、または抗ＣＤ３抗体で刺激されたＴ細胞による標的細胞溶解を示す。細胞を４日間刺激し、続いて、多発性骨髄腫標的細胞と２日間インキュベートして、細胞殺滅の評価を行った。
【図１３Ｅ】図１３Ｅは、抗ＴＣＲＶｂ抗体、または抗ＣＤ３抗体で刺激されたＴ細胞によるパーフォリン分泌を示すグラフである。パーフォリンは、１００ｎｇ／ｍｌプレート結合した抗体で５日間刺激した後、ＰＢＭＣにおけるＴＣＲＶＢ陽性およびＴＣＲＶＢ陰性Ｔ細胞において、ＦＡＣＳ染色により分析された。
【図１３Ｆ】図１３Ｆは、抗ＴＣＲＶｂ抗体、または抗ＣＤ３抗体で刺激されたＴ細胞によるグランザイムＢを示すグラフである。グランザイムＢは、１００ｎｇ／ｍｌプレート結合した抗体で５日間刺激した後、ＰＢＭＣにおけるＴＣＲＶＢ陽性およびＴＣＲＶＢ陰性Ｔ細胞において、ＦＡＣＳ染色により分析された。
【図１４Ａ】図１４Ａ〜１４Ｂは、１００ｎＭの用量で６日間、抗ＴＣＲＶｂ抗体を用いたＰＢＭＣの刺激による、ＩＬ−２およびＩＬ−１５の産生、ならびにヒトＮＫ細胞の拡大を示す図である。図１４Ａは、抗ＴＣＲＶｂ抗体、または抗ＣＤ３抗体で刺激されたＴ細胞におけるＩＬ−２またはＩＬ−１５の分泌を示す。図１４Ｂは、抗ＴＣＲＶｂ抗体もしくは抗ＣＤ３抗体、または対照試料で刺激された細胞におけるＮＫｐ４６染色対ＣＤ５６抗体染色を示すフローサイトメトリードットプロットを示す。
【図１４Ｂ−１】図１４Ｂは、抗ＴＣＲＶｂ抗体もしくは抗ＣＤ３抗体、または対照試料で刺激された細胞におけるＮＫｐ４６染色対ＣＤ５６抗体染色を示すフローサイトメトリードットプロットを示す。
【図１４Ｂ−２】図１４Ｂは、抗ＴＣＲＶｂ抗体もしくは抗ＣＤ３抗体、または対照試料で刺激された細胞におけるＮＫｐ４６染色対ＣＤ５６抗体染色を示すフローサイトメトリードットプロットを示す。
【図１５Ａ】図１５Ａ〜１５Ｃは、抗ＴＣＲＶｂ抗体、または抗ＣＤ３抗体で刺激されたＰＢＭＣにおけるサイトカインの分泌を示す図である。
【図１５Ｂ】図１５Ａ〜１５Ｃは、抗ＴＣＲＶｂ抗体、または抗ＣＤ３抗体で刺激されたＰＢＭＣにおけるサイトカインの分泌を示す図である。
【図１５Ｃ】図１５Ａ〜１５Ｃは、抗ＴＣＲＶｂ抗体、または抗ＣＤ３抗体で刺激されたＰＢＭＣにおけるサイトカインの分泌を示す図である。
【図１６Ａ】図１６Ａ〜１６Ｂは、二重標的化ＢＣＭＡ−ＴＣＲｖｂ抗体分子によるＭＭ細胞の殺滅を示す図である。図１６Ａは、以下の二重標的抗体分子：ＢＣＭＡ−ＴＣＲＶｂ（分子Ｉ）、ＢＣＭＡ−ＣＤ３、または対照−ＴＣＲＶｂ；またはアイソタイプ対照のうちの１つによるｉｎ  ｖｉｔｒｏ殺滅を示す。図１６Ｂは、二重標的ＢＣＭ−ＴＣＲＶｂ抗体（分子Ｉ）によるＭＭ細胞のｉｎ  ｖｉｖｏ殺滅を示す。
【図１６Ｂ】図１６Ｂは、二重標的ＢＣＭ−ＴＣＲＶｂ抗体（分子Ｉ）によるＭＭ細胞のｉｎ  ｖｉｖｏ殺滅を示す。
【図１７】一方のアーム上でＦｃＲＨ５を認識し、他方のアーム上でＴＣＲＶｂを認識する二重標的抗体（分子Ｅ）を用いたＭＭ標的細胞の溶解を示す図である。
【図１８Ａ】図１８Ａ〜１８Ｂは、抗ＣＤ３ε抗体（ＯＫＴ３またはＳＰ３４−２）によって活性化されたものと比較した場合、抗ＴＣＲ  Ｖβ８ａ抗体（Ｂ−Ｈ．１）によって活性化されたヒトＰＢＭＣからのサイトカイン産生を示す図である。図１８Ａは、抗ＴＣＲ  Ｖβ８ａ抗体（Ｂ−Ｈ．１）によって活性化されたヒトＰＢＭＣが、類似のまたは低減したレベルのＩＦＮγを産生することを示す。図１８Ｂは、抗ＴＣＲ  Ｖβ８ａ抗体（Ｂ−Ｈ．１）によって活性化されたヒトＰＢＭＣが、抗ＣＤ３ε抗体（ＯＫＴ３またはＳＰ３４−２）によって活性化されたものと比較した場合、より高いレベルのＩＬ−２を産生することを示す。示されたデータは、ｎ＝６のドナーの代表的なものである。
【図１８Ｂ】図１８Ｂは、抗ＴＣＲ  Ｖβ８ａ抗体（Ｂ−Ｈ．１）によって活性化されたヒトＰＢＭＣが、抗ＣＤ３ε抗体（ＯＫＴ３またはＳＰ３４−２）によって活性化されたものと比較した場合、より高いレベルのＩＬ−２を産生することを示す。示されたデータは、ｎ＝６のドナーの代表的なものである。
【図１９Ａ】図１９Ａ〜１９Ｃは、抗ＴＣＲ  Ｖβ８ａ抗体（Ｂ−Ｈ．１）によって活性化されたヒトＰＢＭＣからのサイトカイン産生を示す図である。抗ＴＣＲ  Ｖβ８ａ抗体（Ｂ−Ｈ．１）によって活性化されたヒトＰＢＭＣは、抗ＣＤ３ε抗体（ＯＫＴ３またはＳＰ３４−２）によって活性化されたＰＢＭＣと比較した場合、ＩＬ−６（図１９Ａ）、ＩＬ１ｂ（図１９Ｂ）を有意に産生せず、ＴＮＦａ（図１９Ｃ）はより少ない。示されたデータは、ｎ＝６のドナーの代表的なものである。
【図１９Ｂ】図１９Ａ〜１９Ｃは、抗ＴＣＲ  Ｖβ８ａ抗体（Ｂ−Ｈ．１）によって活性化されたヒトＰＢＭＣからのサイトカイン産生を示す図である。抗ＴＣＲ  Ｖβ８ａ抗体（Ｂ−Ｈ．１）によって活性化されたヒトＰＢＭＣは、抗ＣＤ３ε抗体（ＯＫＴ３またはＳＰ３４−２）によって活性化されたＰＢＭＣと比較した場合、ＩＬ−６（図１９Ａ）、ＩＬ１ｂ（図１９Ｂ）を有意に産生せず、ＴＮＦａ（図１９Ｃ）はより少ない。示されたデータは、ｎ＝６のドナーの代表的なものである。
【図１９Ｃ】図１９Ａ〜１９Ｃは、抗ＴＣＲ  Ｖβ８ａ抗体（Ｂ−Ｈ．１）によって活性化されたヒトＰＢＭＣからのサイトカイン産生を示す図である。抗ＴＣＲ  Ｖβ８ａ抗体（Ｂ−Ｈ．１）によって活性化されたヒトＰＢＭＣは、抗ＣＤ３ε抗体（ＯＫＴ３またはＳＰ３４−２）によって活性化されたＰＢＭＣと比較した場合、ＩＬ−６（図１９Ａ）、ＩＬ１ｂ（図１９Ｂ）を有意に産生せず、ＴＮＦａ（図１９Ｃ）はより少ない。示されたデータは、ｎ＝６のドナーの代表的なものである。
【図２０Ａ】図２０Ａ〜２０Ｅは、対照抗ＣＤ３ｅ抗体（ＯＫＴ３）と比較して、抗ＴＣＲβＶ抗体Ｄ抗体によって活性化されたヒトＰＢＭＣからのサイトカイン産生を示す図である。図２０Ａは、抗ＴＣＲβＶ抗体Ｄ抗体によって活性化されたヒトＰＢＭＣが、類似のまたは低減したレベルのＩＦＮγを産生することを示す。図２０Ｂは、抗ＴＣＲβＶ抗体Ｄ抗体によって活性化されたヒトＰＢＭＣが、抗ＣＤ３ε抗体（ＯＫＴ３）によって活性化されたものと比較した場合、より高いレベルのＩＬ−２を産生することを示す。抗ＴＣＲβＶ抗体Ｄ抗体によって活性化されたヒトＰＢＭＣは、ＩＬ−１β（図２０Ｃ）、ＩＬ−６（図２０Ｄ）、またはＴＮＦアルファ（図２０Ｅ）を有意に産生しない。示されたデータは、ｎ＝４のドナーの代表的なものである。
【図２０Ｂ】図２０Ａ〜２０Ｅは、対照抗ＣＤ３ｅ抗体（ＯＫＴ３）と比較して、抗ＴＣＲβＶ抗体Ｄ抗体によって活性化されたヒトＰＢＭＣからのサイトカイン産生を示す図である。図２０Ａは、抗ＴＣＲβＶ抗体Ｄ抗体によって活性化されたヒトＰＢＭＣが、類似のまたは低減したレベルのＩＦＮγを産生することを示す。図２０Ｂは、抗ＴＣＲβＶ抗体Ｄ抗体によって活性化されたヒトＰＢＭＣが、抗ＣＤ３ε抗体（ＯＫＴ３）によって活性化されたものと比較した場合、より高いレベルのＩＬ−２を産生することを示す。抗ＴＣＲβＶ抗体Ｄ抗体によって活性化されたヒトＰＢＭＣは、ＩＬ−１β（図２０Ｃ）、ＩＬ−６（図２０Ｄ）、またはＴＮＦアルファ（図２０Ｅ）を有意に産生しない。示されたデータは、ｎ＝４のドナーの代表的なものである。
【図２０Ｃ】図２０Ａ〜２０Ｅは、対照抗ＣＤ３ｅ抗体（ＯＫＴ３）と比較して、抗ＴＣＲβＶ抗体Ｄ抗体によって活性化されたヒトＰＢＭＣからのサイトカイン産生を示す図である。図２０Ａは、抗ＴＣＲβＶ抗体Ｄ抗体によって活性化されたヒトＰＢＭＣが、類似のまたは低減したレベルのＩＦＮγを産生することを示す。図２０Ｂは、抗ＴＣＲβＶ抗体Ｄ抗体によって活性化されたヒトＰＢＭＣが、抗ＣＤ３ε抗体（ＯＫＴ３）によって活性化されたものと比較した場合、より高いレベルのＩＬ−２を産生することを示す。抗ＴＣＲβＶ抗体Ｄ抗体によって活性化されたヒトＰＢＭＣは、ＩＬ−１β（図２０Ｃ）、ＩＬ−６（図２０Ｄ）、またはＴＮＦアルファ（図２０Ｅ）を有意に産生しない。示されたデータは、ｎ＝４のドナーの代表的なものである。
【図２０Ｄ】図２０Ａ〜２０Ｅは、対照抗ＣＤ３ｅ抗体（ＯＫＴ３）と比較して、抗ＴＣＲβＶ抗体Ｄ抗体によって活性化されたヒトＰＢＭＣからのサイトカイン産生を示す図である。図２０Ａは、抗ＴＣＲβＶ抗体Ｄ抗体によって活性化されたヒトＰＢＭＣが、類似のまたは低減したレベルのＩＦＮγを産生することを示す。図２０Ｂは、抗ＴＣＲβＶ抗体Ｄ抗体によって活性化されたヒトＰＢＭＣが、抗ＣＤ３ε抗体（ＯＫＴ３）によって活性化されたものと比較した場合、より高いレベルのＩＬ−２を産生することを示す。抗ＴＣＲβＶ抗体Ｄ抗体によって活性化されたヒトＰＢＭＣは、ＩＬ−１β（図２０Ｃ）、ＩＬ−６（図２０Ｄ）、またはＴＮＦアルファ（図２０Ｅ）を有意に産生しない。示されたデータは、ｎ＝４のドナーの代表的なものである。
【図２０Ｅ】図２０Ａ〜２０Ｅは、対照抗ＣＤ３ｅ抗体（ＯＫＴ３）と比較して、抗ＴＣＲβＶ抗体Ｄ抗体によって活性化されたヒトＰＢＭＣからのサイトカイン産生を示す図である。図２０Ａは、抗ＴＣＲβＶ抗体Ｄ抗体によって活性化されたヒトＰＢＭＣが、類似のまたは低減したレベルのＩＦＮγを産生することを示す。図２０Ｂは、抗ＴＣＲβＶ抗体Ｄ抗体によって活性化されたヒトＰＢＭＣが、抗ＣＤ３ε抗体（ＯＫＴ３）によって活性化されたものと比較した場合、より高いレベルのＩＬ−２を産生することを示す。抗ＴＣＲβＶ抗体Ｄ抗体によって活性化されたヒトＰＢＭＣは、ＩＬ−１β（図２０Ｃ）、ＩＬ−６（図２０Ｄ）、またはＴＮＦアルファ（図２０Ｅ）を有意に産生しない。示されたデータは、ｎ＝４のドナーの代表的なものである。
【図２１Ａ】図２１Ａ〜２１Ｂは、抗ＴＣＲ  Ｖβ５抗体（抗体Ｅ）によって活性化されたヒトＰＢＭＣからのサイトカイン産生を示す図である。図２１Ａは、抗ＴＣＲ  Ｖβ５抗体によって活性化されたヒトＰＢＭＣが、抗ＣＤ３ε抗体（ＯＫＴ３またはＳＰ３４−２）によって活性化されたＰＢＭＣＳと比較して類似のまたは低減したレベルのＩＦＮγを産生することを示す。図２１Ｂは、抗ＴＣＲ  Ｖβ５  １抗体によって活性化されたヒトＰＢＭＣが、抗ＣＤ３ε抗体（ＯＫＴ３またはＳＰ３４−２）によって活性化されたものと比較した場合、より高いレベルのＩＬ−２を産生することを示す。示されたデータは、ｎ＝４のドナーの代表的なものである。
【図２１Ｂ】図２１Ｂは、抗ＴＣＲ  Ｖβ５  １抗体によって活性化されたヒトＰＢＭＣが、抗ＣＤ３ε抗体（ＯＫＴ３またはＳＰ３４−２）によって活性化されたものと比較した場合、より高いレベルのＩＬ−２を産生することを示す。示されたデータは、ｎ＝４のドナーの代表的なものである。
【図２２Ａ】図２２Ａ〜２２Ｄは、抗ＴＣＲ  Ｖβ５抗体（抗体Ｅ）によって活性化されたヒトＰＢＭＣからのサイトカイン産生を示す図である。抗ＴＣＲ  Ｖβ５抗体によって活性化されたヒトＰＢＭＣは、抗ＣＤ３ε抗体（ＯＫＴ３またはＳＰ３４−２）によって活性化されたＰＢＭＣと比較して、ＩＬ−１β（図２２Ａ）、ＩＬ−６（図２２Ｂ）、ＴＮＦアルファ（図２２Ｃ）、またはＩＬ−１０（図２２Ｄ）を有意に産生しない。示されたデータは、ｎ＝４のドナーの代表的なものである。
【図２２Ｂ】図２２Ａ〜２Ｄは、抗ＴＣＲ  Ｖβ５抗体（抗体Ｅ）によって活性化されたヒトＰＢＭＣからのサイトカイン産生を示す図である。抗ＴＣＲ  Ｖβ５抗体によって活性化されたヒトＰＢＭＣは、抗ＣＤ３ε抗体（ＯＫＴ３またはＳＰ３４−２）によって活性化されたＰＢＭＣと比較して、ＩＬ−１β（図２２Ａ）、ＩＬ−６（図２２Ｂ）、ＴＮＦアルファ（図２２Ｃ）、またはＩＬ−１０（図２２Ｄ）を有意に産生しない。示されたデータは、ｎ＝４のドナーの代表的なものである。
【図２２Ｃ】図２２Ａ〜２２Ｄは、抗ＴＣＲ  Ｖβ５抗体（抗体Ｅ）によって活性化されたヒトＰＢＭＣからのサイトカイン産生を示す図である。抗ＴＣＲ  Ｖβ５抗体によって活性化されたヒトＰＢＭＣは、抗ＣＤ３ε抗体（ＯＫＴ３またはＳＰ３４−２）によって活性化されたＰＢＭＣと比較して、ＩＬ−１β（図２２Ａ）、ＩＬ−６（図２２Ｂ）、ＴＮＦアルファ（図２２Ｃ）、またはＩＬ−１０（図２２Ｄ）を有意に産生しない。示されたデータは、ｎ＝４のドナーの代表的なものである。
【図２２Ｄ】図２２Ａ〜２２Ｄは、抗ＴＣＲ  Ｖβ５抗体（抗体Ｅ）によって活性化されたヒトＰＢＭＣからのサイトカイン産生を示す図である。抗ＴＣＲ  Ｖβ５抗体によって活性化されたヒトＰＢＭＣは、抗ＣＤ３ε抗体（ＯＫＴ３またはＳＰ３４−２）によって活性化されたＰＢＭＣと比較して、ＩＬ−１β（図２２Ａ）、ＩＬ−６（図２２Ｂ）、ＴＮＦアルファ（図２２Ｃ）、またはＩＬ−１０（図２２Ｄ）を有意に産生しない。示されたデータは、ｎ＝４のドナーの代表的なものである。
【図２３Ａ】図２３Ａ〜２３Ｅは、抗ＴＣＲβＶ結合部分およびＢＣＭＡ結合部分を含む二重標的化（二特異性分子）によって活性化されたヒトＰＢＭＣからのサイトカイン産生を示す図である。図２３Ａは、二特異性分子によって活性化されたヒトＰＢＭＣが、抗ＣＤ３ε抗体（ＯＫＴ３）によって活性化されたＰＢＭＣＳと類似のまたは低減したレベルのＩＦＮγを産生することを示す。図２３Ｂは、二特異性分子によって活性化されたヒトＰＢＭＣが、抗ＣＤ３ε抗体（ＯＫＴ３）によって活性化されたＰＢＭＣと比較した場合、より高いレベルのＩＬ−２を産生することを示す。二特異性分子によって活性化されたヒトＰＢＭＣは、ＩＬ−１ベータ（図２３Ｃ）、ＩＬ−６（図２３Ｃ）、ＴＮＦアルファ（図２３Ｅ）、またはＩＬ−１０（図２３Ｆ）を有意に産生しない。示されたデータは、ｎ＝３のドナーの代表的なものである。
【図２３Ｂ】図２３Ｂは、二特異性分子によって活性化されたヒトＰＢＭＣが、抗ＣＤ３ε抗体（ＯＫＴ３）によって活性化されたＰＢＭＣと比較した場合、より高いレベルのＩＬ−２を産生することを示す。二特異性分子によって活性化されたヒトＰＢＭＣは、ＩＬ−１ベータ（図２３Ｃ）、ＩＬ−６（図２３Ｃ）、ＴＮＦアルファ（図２３Ｅ）、またはＩＬ−１０（図２３Ｆ）を有意に産生しない。示されたデータは、ｎ＝３のドナーの代表的なものである。
【図２３Ｃ】図２３Ｂは、二特異性分子によって活性化されたヒトＰＢＭＣが、抗ＣＤ３ε抗体（ＯＫＴ３）によって活性化されたＰＢＭＣと比較した場合、より高いレベルのＩＬ−２を産生することを示す。二特異性分子によって活性化されたヒトＰＢＭＣは、ＩＬ−１ベータ（図２３Ｃ）、ＩＬ−６（図２３Ｃ）、ＴＮＦアルファ（図２３Ｅ）、またはＩＬ−１０（図２３Ｆ）を有意に産生しない。示されたデータは、ｎ＝３のドナーの代表的なものである。
【図２３Ｄ】図２３Ｂは、二特異性分子によって活性化されたヒトＰＢＭＣが、抗ＣＤ３ε抗体（ＯＫＴ３）によって活性化されたＰＢＭＣと比較した場合、より高いレベルのＩＬ−２を産生することを示す。二特異性分子によって活性化されたヒトＰＢＭＣは、ＩＬ−１ベータ（図２３Ｃ）、ＩＬ−６（図２３Ｃ）、ＴＮＦアルファ（図２３Ｅ）、またはＩＬ−１０（図２３Ｆ）を有意に産生しない。示されたデータは、ｎ＝３のドナーの代表的なものである。
【図２３Ｅ】図２３Ｂは、二特異性分子によって活性化されたヒトＰＢＭＣが、抗ＣＤ３ε抗体（ＯＫＴ３）によって活性化されたＰＢＭＣと比較した場合、より高いレベルのＩＬ−２を産生することを示す。二特異性分子によって活性化されたヒトＰＢＭＣは、ＩＬ−１ベータ（図２３Ｃ）、ＩＬ−６（図２３Ｃ）、ＴＮＦアルファ（図２３Ｅ）、またはＩＬ−１０（図２３Ｆ）を有意に産生しない。示されたデータは、ｎ＝３のドナーの代表的なものである。
【図２３Ｆ】図２３Ｂは、二特異性分子によって活性化されたヒトＰＢＭＣが、抗ＣＤ３ε抗体（ＯＫＴ３）によって活性化されたＰＢＭＣと比較した場合、より高いレベルのＩＬ−２を産生することを示す。二特異性分子によって活性化されたヒトＰＢＭＣは、ＩＬ−１β（図２３Ｃ）、ＩＬ−６（図２３Ｃ）、ＴＮＦアルファ（図２３Ｅ）、またはＩＬ−１０（図２３Ｆ）を有意に産生しない。示されたデータは、ｎ＝３のドナーの代表的なものである。
【図２４Ａ】図２４Ａ〜２４Ｂは、７つの異なるサブファミリー：ＴＣＲβＶ６サブファミリー（ＴＣＲβＶ６−５およびＴＣＲβＶ６−４を示す）、ＴＣＲβＶ２８サブファミリー、ＴＣＲβＶ１９サブファミリー、ＴＣＲβＶ９サブファミリー、ＴＣＲβＶ５サブファミリー、ＴＣＲβＶ２０サブファミリーおよびＴＣＲβＶ１２サブファミリーからの８つのＴＣＲβＶタンパク質の構造および配列を示す図である。図２４Ａは、異なるＴＣＲβＶタンパク質の構造アラインメントを示す。丸で囲んだ領域は、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体のための提案された結合部位を含む外向きの領域を表す。図２４Ｂは、図２４Ａに示されるタンパク質のアミノ酸配列アラインメントを示す。種々のＴＣＲβＶタンパク質（７つの異なるＴＣＲβＶサブファミリーに由来する）は、多様な配列を有するが、保存された（類似の）構造および機能を共有する。
【図２４Ｂ】図２４Ｂは、図２４Ａに示されるタンパク質のアミノ酸配列アラインメントを示す。種々のＴＣＲβＶタンパク質（７つの異なるＴＣＲβＶサブファミリーに由来する）は、多様な配列を有するが、保存された（類似の）構造および機能を共有する。
【図２５Ａ】図２５Ａ〜２５Ｊは、抗ＴＣＲＶｂ抗体（分子Ｈ）、対照アイソタイプ（１２２）または抗ＣＤ３ｅ抗体（ＯＫＴ３）を含む二特異性分子である抗ＴＣＲＶｂ抗体（Ａ−Ｈ．１、Ｂ−Ｈ．１）で活性化されたＰＢＭＣのサイトカインまたはケモカイン分泌を示す図である。示されたデータは、ｎ＝２のドナーの代表的なものであり、２つの独立した実験の代表的なものである。
【図２５Ｂ】図２５Ａ〜２５Ｊは、抗ＴＣＲＶｂ抗体（分子Ｈ）、対照アイソタイプ（１２２）または抗ＣＤ３ｅ抗体（ＯＫＴ３）を含む二特異性分子である抗ＴＣＲＶｂ抗体（Ａ−Ｈ．１、Ｂ−Ｈ．１）で活性化されたＰＢＭＣのサイトカインまたはケモカイン分泌を示す図である。示されたデータは、ｎ＝２のドナーの代表的なものであり、２つの独立した実験の代表的なものである。
【図２５Ｃ】図２５Ａ〜２５Ｊは、抗ＴＣＲＶｂ抗体（分子Ｈ）、対照アイソタイプ（１２２）または抗ＣＤ３ｅ抗体（ＯＫＴ３）を含む二特異性分子である抗ＴＣＲＶｂ抗体（Ａ−Ｈ．１、Ｂ−Ｈ．１）で活性化されたＰＢＭＣのサイトカインまたはケモカイン分泌を示す図である。示されたデータは、ｎ＝２のドナーの代表的なものであり、２つの独立した実験の代表的なものである。
【図２５Ｄ】図２５Ａ〜２５Ｊは、抗ＴＣＲＶｂ抗体（分子Ｈ）、対照アイソタイプ（１２２）または抗ＣＤ３ｅ抗体（ＯＫＴ３）を含む二特異性分子である抗ＴＣＲＶｂ抗体（Ａ−Ｈ．１、Ｂ−Ｈ．１）で活性化されたＰＢＭＣのサイトカインまたはケモカイン分泌を示す図である。示されたデータは、ｎ＝２のドナーの代表的なものであり、２つの独立した実験の代表的なものである。
【図２５Ｅ】図２５Ａ〜２５Ｊは、抗ＴＣＲＶｂ抗体（分子Ｈ）、対照アイソタイプ（１２２）または抗ＣＤ３ｅ抗体（ＯＫＴ３）を含む二特異性分子である抗ＴＣＲＶｂ抗体（Ａ−Ｈ．１、Ｂ−Ｈ．１）で活性化されたＰＢＭＣのサイトカインまたはケモカイン分泌を示す図である。示されたデータは、ｎ＝２のドナーの代表的なものであり、２つの独立した実験の代表的なものである。
【図２５Ｆ】図２５Ａ〜２５Ｊは、抗ＴＣＲＶｂ抗体（分子Ｈ）、対照アイソタイプ（１２２）または抗ＣＤ３ｅ抗体（ＯＫＴ３）を含む二特異性分子である抗ＴＣＲＶｂ抗体（Ａ−Ｈ．１、Ｂ−Ｈ．１）で活性化されたＰＢＭＣのサイトカインまたはケモカイン分泌を示す図である。示されたデータは、ｎ＝２のドナーの代表的なものであり、２つの独立した実験の代表的なものである。
【図２５Ｇ】図２５Ａ〜２５Ｊは、抗ＴＣＲＶｂ抗体（分子Ｈ）、対照アイソタイプ（１２２）または抗ＣＤ３ｅ抗体（ＯＫＴ３）を含む二特異性分子である抗ＴＣＲＶｂ抗体（Ａ−Ｈ．１、Ｂ−Ｈ．１）で活性化されたＰＢＭＣのサイトカインまたはケモカイン分泌を示す図である。示されたデータは、ｎ＝２のドナーの代表的なものであり、２つの独立した実験の代表的なものである。
【図２５Ｈ】図２５Ａ〜２５Ｊは、抗ＴＣＲＶｂ抗体（分子Ｈ）、対照アイソタイプ（１２２）または抗ＣＤ３ｅ抗体（ＯＫＴ３）を含む二特異性分子である抗ＴＣＲＶｂ抗体（Ａ−Ｈ．１、Ｂ−Ｈ．１）で活性化されたＰＢＭＣのサイトカインまたはケモカイン分泌を示す図である。示されたデータは、ｎ＝２のドナーの代表的なものであり、２つの独立した実験の代表的なものである。
【図２５Ｉ】図２５Ａ〜２５Ｊは、抗ＴＣＲＶｂ抗体（分子Ｈ）、対照アイソタイプ（１２２）または抗ＣＤ３ｅ抗体（ＯＫＴ３）を含む二特異性分子である抗ＴＣＲＶｂ抗体（Ａ−Ｈ．１、Ｂ−Ｈ．１）で活性化されたＰＢＭＣのサイトカインまたはケモカイン分泌を示す図である。示されたデータは、ｎ＝２のドナーの代表的なものであり、２つの独立した実験の代表的なものである。
【図２５Ｊ】図２５Ａ〜２５Ｊは、抗ＴＣＲＶｂ抗体（分子Ｈ）、対照アイソタイプ（１２２）または抗ＣＤ３ｅ抗体（ＯＫＴ３）を含む二特異性分子である抗ＴＣＲＶｂ抗体（Ａ−Ｈ．１、Ｂ−Ｈ．１）で活性化されたＰＢＭＣのサイトカインまたはケモカイン分泌を示す図である。示されたデータは、ｎ＝２のドナーの代表的なものであり、２つの独立した実験の代表的なものである。
【図２６Ａ】図２６Ａ〜２６Ｈは、抗ＴＣＲＶｂ抗体（分子Ｈ）、対照アイソタイプ（１２２）または抗ＣＤ３ｅ抗体（ＯＫＴ３）を含む二特異性分子である抗ＴＣＲＶｂ抗体（Ａ−Ｈ．１、Ｂ−Ｈ．１）で活性化されたＰＢＭＣのサイトカインまたはケモカイン分泌を示す図である。示されたデータは、ｎ＝２のドナーの代表的なものであり、２つの独立した実験の代表的なものである。
【図２６Ｂ】図２６Ａ〜２６Ｈは、抗ＴＣＲＶｂ抗体（分子Ｈ）、対照アイソタイプ（１２２）または抗ＣＤ３ｅ抗体（ＯＫＴ３）を含む二特異性分子である抗ＴＣＲＶｂ抗体（Ａ−Ｈ．１、Ｂ−Ｈ．１）で活性化されたＰＢＭＣのサイトカインまたはケモカイン分泌を示す図である。示されたデータは、ｎ＝２のドナーの代表的なものであり、２つの独立した実験の代表的なものである。
【図２６Ｃ】図２６Ａ〜２６Ｈは、抗ＴＣＲＶｂ抗体（分子Ｈ）、対照アイソタイプ（１２２）または抗ＣＤ３ｅ抗体（ＯＫＴ３）を含む二特異性分子である抗ＴＣＲＶｂ抗体（Ａ−Ｈ．１、Ｂ−Ｈ．１）で活性化されたＰＢＭＣのサイトカインまたはケモカイン分泌を示す図である。示されたデータは、ｎ＝２のドナーの代表的なものであり、２つの独立した実験の代表的なものである。
【図２６Ｄ】図２６Ａ〜２６Ｈは、抗ＴＣＲＶｂ抗体（分子Ｈ）、対照アイソタイプ（１２２）または抗ＣＤ３ｅ抗体（ＯＫＴ３）を含む二特異性分子である抗ＴＣＲＶｂ抗体（Ａ−Ｈ．１、Ｂ−Ｈ．１）で活性化されたＰＢＭＣのサイトカインまたはケモカイン分泌を示す図である。示されたデータは、ｎ＝２のドナーの代表的なものであり、２つの独立した実験の代表的なものである。
【図２６Ｅ】図２６Ａ〜２６Ｈは、抗ＴＣＲＶｂ抗体（分子Ｈ）、対照アイソタイプ（１２２）または抗ＣＤ３ｅ抗体（ＯＫＴ３）を含む二特異性分子である抗ＴＣＲＶｂ抗体（Ａ−Ｈ．１、Ｂ−Ｈ．１）で活性化されたＰＢＭＣのサイトカインまたはケモカイン分泌を示す図である。示されたデータは、ｎ＝２のドナーの代表的なものであり、２つの独立した実験の代表的なものである。
【図２６Ｆ】図２６Ａ〜２６Ｈは、抗ＴＣＲＶｂ抗体（分子Ｈ）、対照アイソタイプ（１２２）または抗ＣＤ３ｅ抗体（ＯＫＴ３）を含む二特異性分子である抗ＴＣＲＶｂ抗体（Ａ−Ｈ．１、Ｂ−Ｈ．１）で活性化されたＰＢＭＣのサイトカインまたはケモカイン分泌を示す図である。示されたデータは、ｎ＝２のドナーの代表的なものであり、２つの独立した実験の代表的なものである。
【図２６Ｇ】図２６Ａ〜２６Ｈは、抗ＴＣＲＶｂ抗体（分子Ｈ）、対照アイソタイプ（１２２）または抗ＣＤ３ｅ抗体（ＯＫＴ３）を含む二特異性分子である抗ＴＣＲＶｂ抗体（Ａ−Ｈ．１、Ｂ−Ｈ．１）で活性化されたＰＢＭＣのサイトカインまたはケモカイン分泌を示す図である。示されたデータは、ｎ＝２のドナーの代表的なものであり、２つの独立した実験の代表的なものである。
【図２６Ｈ】図２６Ａ〜２６Ｈは、抗ＴＣＲＶｂ抗体（分子Ｈ）、対照アイソタイプ（１２２）または抗ＣＤ３ｅ抗体（ＯＫＴ３）を含む二特異性分子である抗ＴＣＲＶｂ抗体（Ａ−Ｈ．１、Ｂ−Ｈ．１）で活性化されたＰＢＭＣのサイトカインまたはケモカイン分泌を示す図である。示されたデータは、ｎ＝２のドナーの代表的なものであり、２つの独立した実験の代表的なものである。
【図２７Ａ】図２７Ａ〜２７Ｌは、抗ＴＣＲＶｂ抗体（分子Ｈ）、対照アイソタイプ（１２２）または抗ＣＤ３ｅ抗体（ＯＫＴ３）を含む二特異性分子である抗ＴＣＲＶｂ抗体（Ａ−Ｈ．１、Ｂ−Ｈ．１）で活性化されたＰＢＭＣのサイトカインまたはケモカイン分泌を示す図である。示されたデータは、ｎ＝２のドナーの代表的なものであり、２つの独立した実験の代表的なものである。
【図２７Ｂ】図２７Ａ〜２７Ｌは、抗ＴＣＲＶｂ抗体（分子Ｈ）、対照アイソタイプ（１２２）または抗ＣＤ３ｅ抗体（ＯＫＴ３）を含む二特異性分子である抗ＴＣＲＶｂ抗体（Ａ−Ｈ．１、Ｂ−Ｈ．１）で活性化されたＰＢＭＣのサイトカインまたはケモカイン分泌を示す図である。示されたデータは、ｎ＝２のドナーの代表的なものであり、２つの独立した実験の代表的なものである。
【図２７Ｃ】図２７Ａ〜２７Ｌは、抗ＴＣＲＶｂ抗体（分子Ｈ）、対照アイソタイプ（１２２）または抗ＣＤ３ｅ抗体（ＯＫＴ３）を含む二特異性分子である抗ＴＣＲＶｂ抗体（Ａ−Ｈ．１、Ｂ−Ｈ．１）で活性化されたＰＢＭＣのサイトカインまたはケモカイン分泌を示す図である。示されたデータは、ｎ＝２のドナーの代表的なものであり、２つの独立した実験の代表的なものである。
【図２７Ｄ】図２７Ａ〜２７Ｌは、抗ＴＣＲＶｂ抗体（分子Ｈ）、対照アイソタイプ（１２２）または抗ＣＤ３ｅ抗体（ＯＫＴ３）を含む二特異性分子である抗ＴＣＲＶｂ抗体（Ａ−Ｈ．１、Ｂ−Ｈ．１）で活性化されたＰＢＭＣのサイトカインまたはケモカイン分泌を示す図である。示されたデータは、ｎ＝２のドナーの代表的なものであり、２つの独立した実験の代表的なものである。
【図２７Ｅ】図２７Ａ〜２７Ｌは、抗ＴＣＲＶｂ抗体（分子Ｈ）、対照アイソタイプ（１２２）または抗ＣＤ３ｅ抗体（ＯＫＴ３）を含む二特異性分子である抗ＴＣＲＶｂ抗体（Ａ−Ｈ．１、Ｂ−Ｈ．１）で活性化されたＰＢＭＣのサイトカインまたはケモカイン分泌を示す図である。示されたデータは、ｎ＝２のドナーの代表的なものであり、２つの独立した実験の代表的なものである。
【図２７Ｆ】図２７Ａ〜２７Ｌは、抗ＴＣＲＶｂ抗体（分子Ｈ）、対照アイソタイプ（１２２）または抗ＣＤ３ｅ抗体（ＯＫＴ３）を含む二特異性分子である抗ＴＣＲＶｂ抗体（Ａ−Ｈ．１、Ｂ−Ｈ．１）で活性化されたＰＢＭＣのサイトカインまたはケモカイン分泌を示す図である。示されたデータは、ｎ＝２のドナーの代表的なものであり、２つの独立した実験の代表的なものである。
【図２７Ｇ】図２７Ａ〜２７Ｌは、抗ＴＣＲＶｂ抗体（分子Ｈ）、対照アイソタイプ（１２２）または抗ＣＤ３ｅ抗体（ＯＫＴ３）を含む二特異性分子である抗ＴＣＲＶｂ抗体（Ａ−Ｈ．１、Ｂ−Ｈ．１）で活性化されたＰＢＭＣのサイトカインまたはケモカイン分泌を示す図である。示されたデータは、ｎ＝２のドナーの代表的なものであり、２つの独立した実験の代表的なものである。
【図２７Ｈ】図２７Ａ〜２７Ｌは、抗ＴＣＲＶｂ抗体（分子Ｈ）、対照アイソタイプ（１２２）または抗ＣＤ３ｅ抗体（ＯＫＴ３）を含む二特異性分子である抗ＴＣＲＶｂ抗体（Ａ−Ｈ．１、Ｂ−Ｈ．１）で活性化されたＰＢＭＣのサイトカインまたはケモカイン分泌を示す図である。示されたデータは、ｎ＝２のドナーの代表的なものであり、２つの独立した実験の代表的なものである。
【図２７Ｉ】図２７Ａ〜２７Ｌは、抗ＴＣＲＶｂ抗体（分子Ｈ）、対照アイソタイプ（１２２）または抗ＣＤ３ｅ抗体（ＯＫＴ３）を含む二特異性分子である抗ＴＣＲＶｂ抗体（Ａ−Ｈ．１、Ｂ−Ｈ．１）で活性化されたＰＢＭＣのサイトカインまたはケモカイン分泌を示す図である。示されたデータは、ｎ＝２のドナーの代表的なものであり、２つの独立した実験の代表的なものである。
【図２７Ｊ】図２７Ａ〜２７Ｌは、抗ＴＣＲＶｂ抗体（分子Ｈ）、対照アイソタイプ（１２２）または抗ＣＤ３ｅ抗体（ＯＫＴ３）を含む二特異性分子である抗ＴＣＲＶｂ抗体（Ａ−Ｈ．１、Ｂ−Ｈ．１）で活性化されたＰＢＭＣのサイトカインまたはケモカイン分泌を示す図である。示されたデータは、ｎ＝２のドナーの代表的なものであり、２つの独立した実験の代表的なものである。
【図２７Ｋ】図２７Ａ〜２７Ｌは、抗ＴＣＲＶｂ抗体（分子Ｈ）、対照アイソタイプ（１２２）または抗ＣＤ３ｅ抗体（ＯＫＴ３）を含む二特異性分子である抗ＴＣＲＶｂ抗体（Ａ−Ｈ．１、Ｂ−Ｈ．１）で活性化されたＰＢＭＣのサイトカインまたはケモカイン分泌を示す図である。示されたデータは、ｎ＝２のドナーの代表的なものであり、２つの独立した実験の代表的なものである。
【図２７Ｌ】図２７Ａ〜２７Ｌは、抗ＴＣＲＶｂ抗体（分子Ｈ）、対照アイソタイプ（１２２）または抗ＣＤ３ｅ抗体（ＯＫＴ３）を含む二特異性分子である抗ＴＣＲＶｂ抗体（Ａ−Ｈ．１、Ｂ−Ｈ．１）で活性化されたＰＢＭＣのサイトカインまたはケモカイン分泌を示す図である。示されたデータは、ｎ＝２のドナーの代表的なものであり、２つの独立した実験の代表的なものである。
【図２８】１０〜２８日目にＲａｊｉ−ｌｕｃ細胞を移植したＮＯＤ／ＳＣＩＤ／ＩＬ−２Ｒγヌル（ＮＳＧ）マウスにおける平均腫瘍体積を示すグラフである。スターは、ＰＢＭＣ移植を示す。白三角形は、示された抗体による抗体処置を示す。
【図２９】図２９Ａ〜Ｂは、がん細胞を移植し、示された抗体で処置されたＮＯＤ／ＳＣＩＤ／ＩＬ−２Ｒγヌル（ＮＳＧ）マウスにおける平均腫瘍負荷（総フラックス）を示す図である。ＮＳＧマウスに１日目にＰＢＭＣを移植し、続いて、７日目にがん細胞を注入した（図２９Ａ中のＲａｊｉ−ｌｕｃ；図２９Ｂ中のＫ５６２−Ｌｕｃ対照）。１６日目に、示された抗体による抗体処置が開始された。図２９Ａは、Ｒａｊｉ−ｌｕｃ細胞を移植したＮＯＤ／ＳＣＩＤ／ＩＬ−２Ｒγヌル（ＮＳＧ）マウスにおける、１６〜３７日目の平均腫瘍負荷を示す。図２９Ｂは、Ｋ５６２−ｌｕｃ細胞を移植した動物における、１６〜３０日目の平均腫瘍負荷（総フラックス）を示す。
【図３０】ＲＰＭＩ−８２２６細胞を移植したＮＯＤ／ＳＣＩＤ／ＩＬ−２Ｒγヌル（ＮＳＧ）マウスにおける平均腫瘍負荷（総フラックス）の平均腫瘍体積を示すグラフである。ＲＰＭＩ−８２２６細胞を１日目に移植した。１１日目に、ＰＢＭＣをマウスに移植し、１７日目に抗体処置を開始した。
【図３１Ａ】図３１Ａ〜３１Ｂは、異なる抗体濃度における標的細胞溶解％を示すグラフである。図３１Ａは、抗ＴＣＲ  Ｖβ１３．１／抗ＣＤ１９（分子Ｆ）、抗ＣＤ３／抗ＣＤ１９、および抗ＴＣＲ  Ｖβ１３．１（Ａ−Ｈ．１）を用いて生成されたデータを示す。図３１Ｂは、抗ＴＣＲ  Ｖβ１３．１／抗ＢＣＭＡ（分子Ｇ）、抗ＣＤ３／抗ＢＣＭＡ、および抗ＴＣＲ  Ｖβ１３．１（Ａ−Ｈ．１）を用いて生成されたデータを示す。
【図３１Ｂ】図３１Ｂは、抗ＴＣＲ  Ｖβ１３．１／抗ＢＣＭＡ（分子Ｇ）、抗ＣＤ３／抗ＢＣＭＡ、および抗ＴＣＲ  Ｖβ１３．１（Ａ−Ｈ．１）を用いて生成されたデータを示す。
【図３２Ａ】図３２Ａ〜３２Ｆは、１日目、２日目、３日目、および５日目に、抗ＴＣＲ  Ｖβ／抗ＢＣＭＡ（分子Ｈ）または抗ＣＤ３（ＯＫＴ３）によって刺激されたサイトカイン分泌を示すグラフである。調べられたサイトカインには、ＩＦＮγ、ＩＬ−２、ＩＬ−１β、ＩＬ−６、ＩＬ−１０、およびＴＮＦα（それぞれ図３２Ａ〜３２Ｆ）が含まれる。
【図３２Ｂ】図３２Ａ〜３２Ｆは、１日目、２日目、３日目、および５日目に、抗ＴＣＲ  Ｖβ／抗ＢＣＭＡ（分子Ｈ）または抗ＣＤ３（ＯＫＴ３）によって刺激されたサイトカイン分泌を示すグラフである。調べられたサイトカインには、ＩＦＮγ、ＩＬ−２、ＩＬ−１β、ＩＬ−６、ＩＬ−１０、およびＴＮＦα（それぞれ図３２Ａ〜３２Ｆ）が含まれる。
【図３２Ｃ】図３２Ａ〜３２Ｆは、１日目、２日目、３日目、および５日目に、抗ＴＣＲ  Ｖβ／抗ＢＣＭＡ（分子Ｈ）または抗ＣＤ３（ＯＫＴ３）によって刺激されたサイトカイン分泌を示すグラフである。調べられたサイトカインには、ＩＦＮγ、ＩＬ−２、ＩＬ−１β、ＩＬ−６、ＩＬ−１０、およびＴＮＦα（それぞれ図３２Ａ〜３２Ｆ）が含まれる。
【図３２Ｄ】図３２Ａ〜３２Ｆは、１日目、２日目、３日目、および５日目に、抗ＴＣＲ  Ｖβ／抗ＢＣＭＡ（分子Ｈ）または抗ＣＤ３（ＯＫＴ３）によって刺激されたサイトカイン分泌を示すグラフである。調べられたサイトカインには、ＩＦＮγ、ＩＬ−２、ＩＬ−１β、ＩＬ−６、ＩＬ−１０、およびＴＮＦα（それぞれ図３２Ａ〜３２Ｆ）が含まれる。
【図３２Ｅ】図３２Ａ〜３２Ｆは、１日目、２日目、３日目、および５日目に、抗ＴＣＲ  Ｖβ／抗ＢＣＭＡ（分子Ｈ）または抗ＣＤ３（ＯＫＴ３）によって刺激されたサイトカイン分泌を示すグラフである。調べられたサイトカインには、ＩＦＮγ、ＩＬ−２、ＩＬ−１β、ＩＬ−６、ＩＬ−１０、およびＴＮＦα（それぞれ図３２Ａ〜３２Ｆ）が含まれる。
【図３２Ｆ】図３２Ａ〜３２Ｆは、１日目、２日目、３日目、および５日目に、抗ＴＣＲ  Ｖβ／抗ＢＣＭＡ（分子Ｈ）または抗ＣＤ３（ＯＫＴ３）によって刺激されたサイトカイン分泌を示すグラフである。調べられたサイトカインには、ＩＦＮγ、ＩＬ−２、ＩＬ−１β、ＩＬ−６、ＩＬ−１０、およびＴＮＦα（それぞれ図３２Ａ〜３２Ｆ）が含まれる。
【図３３Ａ】図３３Ａ〜３３Ｆは、２日目および５日目に、抗ＴＲＢＣ１（抗体Ｆ）または抗ＣＤ３（ＯＫＴ３）によって刺激されたサイトカイン分泌を示すグラフである。調べられたサイトカインには、ＩＦＮγ、ＩＬ−２、ＩＬ−１β、ＩＬ−６、ＩＬ−１０、およびＴＮＦα（それぞれ図３３Ａ〜３３Ｆ）が含まれる。
【図３３Ｂ】図３３Ａ〜３３Ｆは、２日目および５日目に、抗ＴＲＢＣ１（抗体Ｆ）または抗ＣＤ３（ＯＫＴ３）によって刺激されたサイトカイン分泌を示すグラフである。調べられたサイトカインには、ＩＦＮγ、ＩＬ−２、ＩＬ−１β、ＩＬ−６、ＩＬ−１０、およびＴＮＦα（それぞれ図３３Ａ〜３３Ｆ）が含まれる。
【図３３Ｃ】図３３Ａ〜３３Ｆは、２日目および５日目に、抗ＴＲＢＣ１（抗体Ｆ）または抗ＣＤ３（ＯＫＴ３）によって刺激されたサイトカイン分泌を示すグラフである。調べられたサイトカインには、ＩＦＮγ、ＩＬ−２、ＩＬ−１β、ＩＬ−６、ＩＬ−１０、およびＴＮＦα（それぞれ図３３Ａ〜３３Ｆ）が含まれる。
【図３３Ｄ】図３３Ａ〜３３Ｆは、２日目および５日目に、抗ＴＲＢＣ１（抗体Ｆ）または抗ＣＤ３（ＯＫＴ３）によって刺激されたサイトカイン分泌を示すグラフである。調べられたサイトカインには、ＩＦＮγ、ＩＬ−２、ＩＬ−１β、ＩＬ−６、ＩＬ−１０、およびＴＮＦα（それぞれ図３３Ａ〜３３Ｆ）が含まれる。
【図３３Ｅ】図３３Ａ〜３３Ｆは、２日目および５日目に、抗ＴＲＢＣ１（抗体Ｆ）または抗ＣＤ３（ＯＫＴ３）によって刺激されたサイトカイン分泌を示すグラフである。調べられたサイトカインには、ＩＦＮγ、ＩＬ−２、ＩＬ−１β、ＩＬ−６、ＩＬ−１０、およびＴＮＦα（それぞれ図３３Ａ〜３３Ｆ）が含まれる。
【図３３Ｆ】図３３Ａ〜３３Ｆは、２日目および５日目に、抗ＴＲＢＣ１（抗体Ｆ）または抗ＣＤ３（ＯＫＴ３）によって刺激されたサイトカイン分泌を示すグラフである。調べられたサイトカインには、ＩＦＮγ、ＩＬ−２、ＩＬ−１β、ＩＬ−６、ＩＬ−１０、およびＴＮＦα（それぞれ図３３Ａ〜３３Ｆ）が含まれる。
【発明を実施するための形態】
【０２４９】
がん免疫療法のために腫瘍細胞溶解を促進するためにＴ細胞を再指向させるように設計された現在の二特異性構築物は、典型的には、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）のＣＤ３ｅサブユニットに対して指向されるモノクローナル抗体（ｍＡｂ）に由来する抗体断片（Ｆａｂ、ｓｃＦｖ、ＶＨなど）を利用する。しかしながら、このアプローチには限界があり、このような二特異性構築物の治療可能性の完全な実現を妨げる可能性がある。これまでの研究では、低い「活性化」用量の抗ＣＤ３ｅ  ｍＡｂでさえも長期のＴ細胞機能不全を引き起こし、免疫抑制作用を発揮することが示されている。さらに、抗ＣＤ３ｅ  ｍＡｂは、大量のＴ細胞活性化に起因する副作用と関連している。多数の活性化Ｔ細胞は相当量のサイトカインを分泌し、そのうち最も重要なものはインターフェロンガンマ（ＩＦＮｇ）である。この過剰量のＩＦＮｇは、次にマクロファージを活性化し、その後、それがＩＬ−１ベータ、ＩＬ−６、ＩＬ−１０およびＴＮＦ−αなどの炎症性サイトカインを過剰に産生し、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）として公知である「サイトカインストーム」を引き起こす（参照により全体が本明細書に組み込まれるＳｈｉｍａｂｕｋｕｒｏ−Ｖｏｒｎｈａｇｅｎら、Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ  Ｃａｎｃｅｒ．２０１８年６月１５日；６巻（１号）：５６ページ）。したがって、例えば、ＣＲＳおよび／または神経毒性（ＮＴ）を低減させるために、エフェクターＴ細胞のサブセットのみに結合および活性化することができる抗体を開発する必要性が存在する。
【０２５０】
本発明は、ＴＣＲのＴＣＲβＶ鎖を標的とする分子およびその方法を特徴とする。理論に拘泥するものではないが、このような分子は、Ｔ細胞のサブセットのみを結合、活性化、および／または拡大することができ、ＣＲＳおよび／またはＮＴを回避または低下させ、抗ＣＤ３  ｍＡｂの潜在的な免疫抑制効果を最小限に抑えることができる。
【０２５１】
ＴＣＲは、不変のＣＤ３鎖分子との複合体の一部として発現される、通常、高度に可変なアルファ（α）およびベータ（β）鎖からなるジスルフィド連結した膜アンカー型ヘテロ二量体タンパク質である。αβＴ細胞上のＴＣＲは、１つのアルファ鎖と１つのベータ鎖とのヘテロ二量体によって形成される。各アルファ鎖またはベータ鎖は、定常ドメインと、免疫グロブリンスーパーファミリー（ＩｇＳＦ）フォールドとして分類される高度に可変なドメインとからなる。ＴＣＲβＶ鎖は、さらに３０のサブファミリー（ＴＲＢＶ１−３０）に分類され得る。それらの高い構造的および機能的な相同性にもかかわらず、ＴＲＢＶ遺伝子におけるアミノ酸配列相同性は非常に低い。約９５個のアミノ酸のうち４個だけが同一であり、一方、１０個のさらなるアミノ酸が、すべてのサブファミリーで保存されている（表９のＴＣＲＢＶアミノ酸配列のアラインメントを参照）。それにもかかわらず、非常に多様な配列のアルファ鎖とベータ鎖の間に形成されたＴＣＲは、顕著な構造的相同性を示し（図２４Ａおよび２４Ｂ）、ならびに類似の機能、例えば、Ｔ細胞の活性化を誘発する。
【０２５２】
本明細書には、新規なクラスの抗体、すなわち、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子の発見が開示され、これは、低い配列類似性（例えば、異なるＴＣＲβＶサブファミリーを認識する異なる抗体分子間の低い配列同一性）を有するにもかかわらず、ＴＣＲβＶタンパク質上の構造的に保存されているが、配列的に可変な領域、例えば、ドメインを認識し（図２４Ａの円で囲まれた領域で示される）、類似の機能（例えば、Ｔ細胞の活性化および本明細書に記載される類似のサイトカインプロファイル）を有する。したがって、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、構造−機能関係を共有する。
【０２５３】
理論に拘泥するものではないが、一部の実施形態では、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲαタンパク質と複合体を形成している場合、例えば、図２４Ａの円で囲まれた領域で示されるように、ＴＣＲβＶタンパク質の外向きのエピトープに結合すると考えられる。一部の実施形態では、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、（１）異なるＴＣＲβＶサブファミリー間で構造的に保存され；（２）異なるＴＣＲβＶサブファミリー間で最小の配列同一性を有する、ＴＣＲβＶタンパク質上のドメイン（例えば、エピトープ）を認識する（例えば、結合する）。表９に示されるように、異なるＴＣＲＢＶサブファミリー由来のＴＣＲβＶタンパク質は、最小配列類似性を共有する。しかしながら、図２４Ａ〜Ｂに示されるように、最小配列類似性を有するＴＣＲβＶタンパク質は、類似の３Ｄ立体構造および構造を共有する。
【０２５４】
一部の実施形態では、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβＶ：ＴＣＲα複合体の界面を認識しない、例えば、それに結合しない。
一部の実施形態では、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβＶタンパク質の定常領域を認識しない、例えば、それに結合しない。
【０２５５】
一部の実施形態では、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβＶタンパク質の相補性決定領域（例えば、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２および／またはＣＤＲ３）のうちの１つまたは複数（例えば、すべて）を認識しない、例えば、それに結合しない。
【０２５６】
本開示は、特に、Ｔ細胞のサブセットに結合し、例えば、それを活性化するＴＣＲ（ＴＣＲβＶ）のベータサブユニットの可変鎖に指向された抗体分子を提供する。本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＣＲＳに関連するサイトカイン、例えば、ＩＬ−６、ＩＬ−１β、ＩＬ−１０およびＴＮＦαの産生をより減少させるかまたは全く産生させず；ならびにＩＬ−２およびＩＦＮｇの産生の増強および／または遅延をもたらす。一部の実施形態では、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体は、例えば、本明細書に記載されるサイトカインプロファイルを有し、これは、ＴＣＲβＶ領域以外の受容体または分子に結合するＴ細胞エンゲージャー（「非ＴＣＲβＶ結合Ｔ細胞エンゲージャー」）のサイトカインプロファイルとは異なる。一部の実施形態では、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体は、ＴＣＲβＶ＋Ｔ細胞、例えば、ＴＥＭＲＡとして公知であるメモリーエフェクターＴ細胞のサブセットの拡大をもたらす。理論に拘泥するものではないが、一部の実施形態では、ＴＥＭＲＡ細胞は、腫瘍細胞溶解を促進することができるが、ＣＲＳを促進することはできないと考えられる。したがって、本明細書には、前記抗ＴＣＲβＶ抗体分子を作製する方法、およびその使用が提供される。また、本明細書には、前記抗ＴＣＲβＶ抗体分子を含む多特異性分子、例えば、二特異性分子が開示される。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＣＲβＶ抗体分子を含む組成物は、例えば、（１）がん免疫療法のための腫瘍細胞溶解を促進するためにＴ細胞を活性化および再指向させ；および／または（２）ＴＣＲβＶ＋Ｔ細胞を拡大するために使用することができる。一部の実施形態では、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子を含む組成物は、ＣＲＳおよび／またはＮＴ、例えば、抗ＣＤ３ｅ標的化に関連するＣＲＳおよび／またはＮＴの有害な副作用を制限する。
【０２５７】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβＶ１２に結合せず、または米国特許第５，８６１，１５５号に記載されているように、１６Ｇ８マウス抗体またはそのヒト化バージョンの親和性および／もしくは結合特異性よりも低い（例えば、約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％または約２、５、もしくは１０倍未満）親和性および／または結合特異性でＴＣＲβＶ１２に結合する。
【０２５８】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、米国特許第５，８６１，１５５号に記載されているように、１６Ｇ８マウス抗体またはそのヒト化バージョンの親和性および／もしくは結合特異性よりも大きい（例えば、約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％または約２、５、もしくは１０倍を超える）親和性および／または結合特異性でＴＣＲβＶ１２に結合する。
【０２５９】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、本明細書中に記載されるＴＣＲβ  Ｖ１２以外のＴＣＲβＶ領域（例えば、ＴＣＲβ  Ｖ６サブファミリー（例えば、ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）に、米国特許第５，８６１，１５５号に記載されるように、１６Ｇ８マウス抗体またはそのヒト化バージョンの親和性および／または結合特異性より大きい（例えば、約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％または約２、５、もしくは１０倍を超える）親和性および／または結合特異性で結合する。
【０２６０】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、抗体Ｂマウス抗体のＣＤＲを含まない。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβ抗体分子は、ＴＣＲβ  Ｖ５−５＊０１もしくはＴＣＲβ  Ｖ５−１＊０１に結合しないか、またはＴＣＲβ  Ｖ５−５＊０１もしくはＴＣＲβ  Ｖ５−１＊０１に、米国特許第５，８６１，１５５号に記載されるように、ＴＭ２３マウス抗体またはそのヒト化バージョンの親和性および／もしくは結合特異性よりも低い（例えば、約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％または約２、５、もしくは１０倍未満）親和性および／または結合特異性で結合しない。
【０２６１】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβ  Ｖ５−５＊０１またはＴＣＲβ  Ｖ５−１＊０１に、米国特許第５，８６１，１５５号に記載されるように、ＴＭ２３マウス抗体またはそのヒト化バージョンの親和性および／もしくは結合特異性より大きい（例えば、約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％または約２、５、もしくは１０倍を超える）親和性および／または結合特異性で結合する。
【０２６２】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβ  Ｖ５−５＊０１またはＴＣＲβ  Ｖ５−１＊０１以外のＴＣＲβＶ領域（例えば、本明細書に記載されるＴＣＲβＶ領域、例えば、ＴＣＲβＶ６サブファミリー（例えば、ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１））に、米国特許第５，８６１，１５５号に記載されるように、ＴＭ２３マウス抗体またはそのヒト化バージョンの親和性および／もしくは結合特異性より大きい（例えば、約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％または約２、５、もしくは１０倍を超える）親和性および／または結合特異性で結合する。
【０２６３】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＭ２３マウス抗体のＣＤＲを含まない。
したがって、本明細書には、特に、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、抗ＴＣＲβＶ抗体分子を含む多特異性または多機能性分子（例えば、多特異性分子または多機能性抗体分子）、それをコードする核酸、前述の分子を産生する方法、前述の分子を含む医薬組成物、および前述の分子を用いて、疾患または障害、例えば、がんを処置する方法が提供される。本明細書に開示される抗体分子および医薬組成物は、本明細書に記載される疾患および状態、例えば、がんを処置、予防および／または診断するために（単独でまたは他の薬剤もしくは治療モダリティと組み合わせて）使用することができる。
定義
別段の定義がない限り、本明細書で使用されるすべての技術用語および科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者によって一般的に理解されるものと同じ意味を有する。
【０２６４】
用語「ある（ａ）」および「ある（ａｎ）」は、物品の文法的対象物の１つまたは１を超えること（すなわち、少なくとも１つ）を指す。例として、「あるエレメント」は、１つのエレメントまたは１を超えるエレメントを意味する。
【０２６５】
量、持続時間などの測定可能な値を参照する場合、用語「約」は、特定の値から±２０％の変動、またはいくつかの例では±１０％、またはいくつかの例では±５％、またはいくつかの例では±１％、またはいくつかの例では±０．１％の変動を包含することを意味し、このような変動は開示された方法を実施するために適切である。
【０２６６】
用語「獲得する」または「獲得すること」とは、本明細書で使用される場合、物理的実体（例えば、試料、ポリペプチド、核酸、または配列）、または値、例えば、数値の所有を、物理的実体もしくは値を「直接的に獲得すること」または「間接的に獲得すること」によって得ることを指す。「直接的に取得すること」とは、物理的実体または値を得るためのプロセス（例えば、合成方法または分析方法を実施すること）を実施することを意味する。「間接的に取得すること」とは、別の者もしくは情報源（例えば、物理的実体または値を直接的に取得した第三者機関）から物理的実体または値を受け取ることを指す。物理的実体を直接的に取得することは、物理的物質、例えば出発材料の物理的変化を含むプロセスを実行することを含む。値を直接的に取得することは、試料または別の物質の物理的変化を含むプロセスを実施すること、例えば、物質、例えば、試料の物理的変化を含む分析プロセスを実施することを含む。
【０２６７】
本明細書で使用される場合、用語「Ｔ細胞受容体ベータ可変鎖」または「ＴＣＲβＶ」は、Ｔ細胞受容体の抗原認識ドメインを含むＴ細胞受容体ベータ鎖の細胞外領域を指す。用語ＴＣＲβＶは、ＴＣＲβＶと少なくとも１つの共通エピトープを含む、アイソフォーム、哺乳動物の、例えば、ヒトＴＣＲβＶ、ヒトの種相同体およびアナログを含む。ヒトＴＣＲβＶには、限定されないが、ＴＣＲβ  Ｖ６サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ１０サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ１２サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ５サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ７サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ１１サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ１４サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ１６サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ１８サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ９サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ１３サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ４サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ３サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ２サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ１５サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ３０サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ１９サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ２７サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ２８サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ２４サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ２０サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ２５サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ２９サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ１サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ１７サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ２１サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ２３サブファミリー、またはＴＣＲβ  Ｖ２６サブファミリー、ならびに前記サブファミリーのメンバー、およびそれらのバリアント（例えば、その構造的または機能的バリアント）を含むサブファミリーを含む遺伝子ファミリーが含まれる。一部の実施形態では、ＴＣＲβＶ６サブファミリーは、ＴＣＲβ  Ｖ６−４＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−４＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ６−９＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−８＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−６＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ６−６＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−２＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−３＊０１またはＴＣＲβ  Ｖ６−１＊０１を含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβＶは、ＴＣＲβＶ６−５＊０１、またはそのバリアント、例えば、天然に存在する配列と８５％、９０％、９５％、９９％またはそれ以上の同一性を有するバリアントを含む。ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１は、ＴＲＢＶ６５；ＴＣＲＢＶ６Ｓ５；ＴＣＲＢＶ１３Ｓ１、またはＴＣＲβ  Ｖ１３．１としても公知である。ＴＣＲβＶ６−５＊０１、例えば、ヒトＴＣＲβＶ６−５＊０１のアミノ酸配列は、当該技術分野において公知であり、例えば、ＩＭＧＴ  ＩＤ  Ｌ３６０９２によって提供される。一部の実施形態では、ＴＣＲβＶ６−５＊０１は、配列番号４３の核酸配列、またはその８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上の同一性を有する配列によってコードされる。一部の実施形態では、ＴＣＲβＶ６−５＊０１は、配列番号４４のアミノ酸配列、またはその８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上の同一性を有する配列を含む。
【０２６８】
用語「ヒト様抗体分子」は、本明細書で使用される場合、ヒト化抗体分子、ヒト抗体分子、または非マウス生殖系列フレームワーク領域、例えば、ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３および／またはＦＲ４と少なくとも９５％の同一性を有する抗体分子を指す。一部の実施形態では、ヒト様抗体分子は、ヒト生殖系列フレームワーク領域、例えば、ヒト生殖系列フレームワーク領域のＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３および／またはＦＲ４と少なくとも９５％の同一性を有するフレームワーク領域を含む。一部の実施形態では、ヒト様抗体分子は、組換え抗体である。一部の実施形態では、ヒト様抗体分子は、ヒト化抗体分子である。一部の実施形態では、ヒト様抗体分子は、ヒト抗体分子である。一部の実施形態、ヒト様抗体分子は、ファージディスプレイまたは酵母ディスプレイ抗体分子である。一部の実施形態では、ヒト様抗体分子は、キメラ抗体分子である。一部の実施形態では、ヒト様抗体分子は、ＣＤＲグラフト化抗体分子である。
【０２６９】
用語「サイトカインプロファイル」は、本明細書で使用される場合、１つまたは複数のサイトカインまたはケモカイン上のレベルおよび／または活性化、例えば、本明細書中に記載されるものを指す。一部の実施形態では、サイトカインプロファイルは、天然に存在するサイトカイン、その断片またはバリアントのレベルおよび／または活性化を含む。ある実施形態では、サイトカインプロファイルは、１つまたは複数のサイトカインおよび／または１つまたは複数のケモカイン（例えば、本明細書に記載される）のレベルおよび／または活性化を含む。一部の実施形態では、サイトカインプロファイルは、天然に存在するサイトカイン、その断片またはバリアントのレベルおよび／または活性化を含む。一部の実施形態では、サイトカインプロファイルは、天然に存在するケモカイン、その断片またはバリアントのレベルおよび／または活性化を含む。ある実施形態では、サイトカインプロファイルは、ＩＬ−２（例えば、全長、そのバリアント、もしくは断片）；ＩＬ−１β（例えば、全長、そのバリアント、もしくは断片）；ＩＬ−６（例えば、全長、そのバリアント、もしくは断片）；ＴＮＦα（例えば、全長、そのバリアント、もしくは断片）；ＩＦＮｇ（例えば、全長、そのバリアント、もしくは断片）；ＩＬ−１０（例えば、全長、そのバリアント、もしくは断片）；ＩＬ−４（例えば、全長、そのバリアント、もしくは断片）；ＴＮＦα（例えば、全長、そのバリアント、もしくは断片）；ＩＬ−１２ｐ７０（例えば、全長、そのバリアント、もしくは断片）；ＩＬ−１３（例えば、全長、そのバリアント、もしくは断片）；ＩＬ−８（例えば、全長、そのバリアント、もしくは断片）；エオタキシン（例えば、全長、そのバリアント、もしくは断片）；エオタキシン−３（例えば、全長、そのバリアント、もしくは断片）；ＩＬ−８（ＨＡ）（例えば、全長、そのバリアント、もしくは断片）；ＩＰ−１０（例えば、全長、そのバリアント、もしくは断片）；ＭＣＰ−１（例えば、全長、そのバリアント、もしくは断片）；ＭＣＰ−４（例えば、全長、そのバリアント、もしくは断片）；ＭＤＣ（例えば、全長、そのバリアント、もしくは断片）；ＭＩＰ−１ａ（例えば、全長、そのバリアント、もしくは断片）；ＭＩＰ−１ｂ（例えば、全長、そのバリアント、もしくは断片）；ＴＡＲＣ（例えば、全長、そのバリアント、もしくは断片）；ＧＭ−ＣＳＦ（例えば、全長、そのバリアント、もしくは断片）；ＩＬ−１２  ２３ｐ４０（例えば、全長、そのバリアント、もしくは断片）；ＩＬ−１５（例えば、全長、そのバリアント、もしくは断片）；ＩＬ−１６（例えば、全長、そのバリアント、もしくは断片）；ＩＬ−１７ａ（例えば、全長、そのバリアント、もしくは断片）；ＩＬ−１ａ（例えば、全長、そのバリアント、もしくは断片）；ＩＬ−５（例えば、全長、そのバリアント、もしくは断片）；ＩＬ−７（例えば、全長、そのバリアント、もしくは断片）；ＴＮＦ−β（例えば、全長、そのバリアント、もしくは断片）；またはＶＥＧＦ（例えば、全長、そのバリアント、もしくは断片）のうちの１つまたは複数のレベルおよび／または活性化を含む。一部の実施形態では、サイトカインプロファイル��、１つまたは複数のサイトカインまたはケモカインの分泌を含む。
【０２７０】
ある実施形態では、サイトカインプロファイル中のサイトカインは、本明細書に記載される抗ＴＣＲＢＶ抗体分子によって、モジュレート、例えば、増加または減少させることができる。一実施形態では、サイトカインプロファイルは、サイトカインストームまたはサイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）に関連するサイトカイン、例えば、ＩＬ−６、ＩＬ−１β、ＴＮＦαおよびＩＬ−１０を含む。
【０２７１】
用語「バリアント」は、天然に存在する配列と実質的に同一のアミノ酸配列を有するか、または実質的に同一のヌクレオチド配列によりコードされるポリペプチドを指す。一部の実施形態では、バリアントは、機能的バリアントである。一部の実施形態では、ＴＣＲβＶバリアントは、ＴＣＲαに結合し、ＴＣＲα：β複合体を形成し得る。
【０２７２】
用語「機能的バリアント」は、天然に存在する配列と実質的に同一のアミノ酸配列を有するか、または実質的に同一のヌクレオチド配列によりコードされ、天然に存在する配列の１つまたは複数の活性化を有し得るポリペプチドを指す。
【０２７３】
本明細書で使用される場合、「多機能性」分子または「多特異性」分子は、２つ以上の機能性、例えば、２つ以上の結合特異性を有する分子、例えば、ポリペプチドを指す。一部の実施形態では、機能性は、１つまたは複数の免疫細胞エンゲージャー、１つまたは複数の腫瘍結合分子、１つまたは複数のサイトカイン分子、１つまたは複数の間質改変剤、および本明細書に記載される他の部分を含むことができる。一部の実施形態では、多特異性分子は、多特異性抗体分子、例えば、二特異性抗体分子である。一部の実施形態では、多特異性分子は、本明細書に記載される抗ＴＣＲＶｂ抗体分子を含む。
【０２７４】
一部の実施形態では、多機能性分子は、免疫細胞エンゲージャーを含む。「免疫細胞係合体」とは、免疫細胞、例えば、免疫応答に関与する細胞に結合および／または活性化する１つまたは複数の結合特異性を指す。実施形態では、免疫細胞は、Ｔ細胞、ＮＫ細胞、Ｂ細胞、樹状細胞、および／またはマクロファージ細胞から選択される。免疫細胞エンゲージャーは、抗体分子、受容体分子（例えば、全長受容体、受容体断片、またはそれらの融合体（例えば、受容体−Ｆｃ融合体））、または免疫細胞抗原（例えば、Ｔ細胞、ＮＫ細胞抗原、Ｂ細胞抗原、樹状細胞抗原、および／またはマクロファージ細胞抗原）に結合するリガンド分子（例えば、全長リガンド、リガンド断片、またはそれらの融合体（例えば、リガンド−Ｆｃ融合体））であり得る。実施形態では、免疫細胞エンゲージャーは、標的免疫細胞に特異的に結合し、例えば、標的免疫細胞に優先的に結合する。例えば、免疫細胞エンゲージャーが抗体分子である場合、それは、約１０ｎＭ未満の解離定数で、免疫細胞抗原（例えば、Ｔ細胞抗原、ＮＫ細胞抗原、Ｂ細胞抗原、樹状細胞抗原、および／またはマクロファージ細胞抗原）に結合する。
【０２７５】
一部の実施形態では、多機能性分子は、サイトカイン分子を含む。本明細書で使用される場合、「サイトカイン分子」とは、サイトカインの全長、断片またはバリアント；さらに、受容体ドメイン、例えば、サイトカイン受容体二量化ドメインを含むサイトカイン；または、天然に存在するサイトカインの少なくとも１つの活性化を誘発する、サイトカイン受容体のアゴニスト、例えば、サイトカイン受容体に対する抗体分子（例えば、アゴニスト抗体）を指す。一部の実施形態では、サイトカイン分子は、インターロイキン−２（ＩＬ−２）、インターロイキン−７（ＩＬ−７）、インターロイキン−１２（ＩＬ−１２）、インターロイキン−１０（ＩＬ−１０）、インターロイキン−１５（ＩＬ−１５）、インターロイキン−１８（ＩＬ−１８）、インターロイキン−２１（ＩＬ−２１）、もしくはインターフェロンγ、またはこれらの断片もしくはバリアント、または前述のサイトカインのいずれかの組合せから選択される。サイトカイン分子は、モノマーまたは二量体であり得る。実施形態では、サイトカイン分子は、サイトカイン受容体二量体化ドメインをさらに含むことができる。他の実施形態では、サイトカイン分子は、サイトカイン受容体のアゴニスト、例えば、ＩＬ−１５ＲａまたはＩＬ−２１Ｒから選択されるサイトカイン受容体に対する抗体分子（例えば、アゴニスト抗体）である。
【０２７６】
本明細書で使用される場合、例えば、抗体分子、サイトカイン分子、受容体分子において使用される用語「分子」は、改変されていない（例えば、天然に存在する）分子の少なくとも１つの機能および／または活性化が残る限り、全長の天然に存在する分子、ならびにバリアント、例えば、機能性バリアント（例えば、切断、断片、突然変異（例えば、実質的に類似の配列）またはその誘導体化された形態）を含む。
【０２７７】
一部の実施形態では、多機能性分子は、間質改変部分を含む。本明細書で使用される「間質改変部分」とは、間質の成分を改変、例えば、分解することができる薬剤、例えば、タンパク質（例えば、酵素）を指す。実施形態では、間質の成分は、例えば、ＥＣＭ成分、例えば、グリコサミノグリカン、例えば、ヒアルロン酸（ヒアルロン酸またはＨＡとしても公知である）、コンドロイチン硫酸、コンドロイチン、デルマタン硫酸、ヘパリン硫酸、ヘパリン、エンタクチン、テネイシン、アグリカンおよびケラチン硫酸；または細胞外タンパク質、例えば、コラーゲン、ラミニン、エラスチン、フィブリノーゲン、フィブロネクチン、およびビトロネクチンから選択される。
特定の用語を以下に定義する。
【０２７８】
本明細書で使用される場合、冠詞「ある（ａ）」および「ある（ａｎ）」は、冠詞の文法的対象物の１つまたは複数、例えば、少なくとも１つを指す。用語「ある（ａ）」または「ある（ａｎ）」の使用は、本明細書における用語「含んでいる」とともに使用される場合、「１つ」を意味し得るが、「１つまたは複数」、「少なくとも１つ」および「１または１を超える」の意味とも一致する。
【０２７９】
本明細書で使用される場合、「約」および「ほぼ」は、一般に、測定の性質または精度を与えられて測定された量についての許容可能な誤差の程度を意味する。誤差の例示的な程度は、所定の範囲の値の２０パーセント（％）以内であり、典型的には１０％以内であり、より典型的には５％以内である。
【０２８０】
本明細書で使用される「抗体分子」とは、少なくとも１つの免疫グロブリン可変ドメイン構造および／または配列を含む、タンパク質、例えば、免疫グロブリン鎖またはその断片を指す。抗体分子は、抗体（例えば、全長抗体）および抗体断片を包含する。ある実施形態では、抗体分子は、全長抗体の抗原結合もしくは機能的断片、または全長免疫グロブリン鎖を含む。例えば、全長抗体は、天然に存在するか、または正常な免疫グロブリン遺伝子断片の組換えプロセスによって形成される免疫グロブリン（Ｉｇ）分子（例えば、ＩｇＧ抗体）である。実施形態では、抗体分子は、免疫グロブリン分子の免疫学的に活性な抗原結合部分、例えば、抗体断片を指す。抗体断片、例えば、機能性断片は、抗体の一部、例えば、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆ（ａｂ）２、可変断片（Ｆｖ）、ドメイン抗体（ｄＡｂ）、または一本鎖可変断片（ｓｃＦｖ）である。機能性抗体断片は、インタクトな（例えば、全長）抗体によって認識されるものと同じ抗原に結合する。用語「抗体断片」または「機能性断片」はまた、重鎖および軽鎖の可変領域からなる「Ｆｖ」断片、または軽鎖および重鎖の可変領域がペプチドリンカーによって連結されている組換え一本鎖ポリペプチド分子（「ｓｃＦｖタンパク質」）などの可変領域からなる単離された断片を含む。一部の実施形態では、抗体断片は、抗原結合活性を有さない抗体の部分、例えば、Ｆｃ断片または単一アミノ酸残基を含まない。例示的な抗体分子は、全長抗体および抗体断片、例えば、ｄＡｂ（ドメイン抗体）、一本鎖、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、およびＦ（ａｂ’）２断片、ならびに一本鎖可変断片（ｓｃＦｖ）を含む。一部の実施形態では、抗体分子は、抗体模倣体である。一部の実施形態では、抗体分子は、フィブロネクチン、アンキリンリピート（例えば、設計されたアンキリンリピートタンパク質（ＤＡＲＰｉｎｓ））、アビマー、アフィボディ親和性リガンド、アンチカリン、またはアフィリン分子などの抗体様フレームワークまたは足場であるか、またはそれを含む。
【０２８１】
本明細書で使用される場合、「免疫グロブリン可変ドメイン配列」とは、免疫グロブリン可変ドメインの構造を形成することができるアミノ酸配列を指す。例えば、配列は、天然に存在する可変ドメインのアミノ酸配列の全部または一部を含み得る。例えば、配列は、１個、２個、もしくはそれ以上のＮ末端またはＣ末端アミノ酸を含むかまたは含まない場合があり、あるいはタンパク質構造の形成に適合する他の改変を含む場合がある。
【０２８２】
実施形態では、抗体分子は、単一特異性であり、例えば、単一のエピトープに対する結合特異性を含む。一部の実施形態では、抗体分子は、多特異性であり、例えば、それは、複数の免疫グロブリン可変ドメイン配列を含み、第１の免疫グロブリン可変ドメイン配列は、第１のエピトープに対して結合特異性を有し、第２の免疫グロブリン可変ドメイン配列は、第２のエピトープに対して結合特異性を有する。一部の実施形態では、抗体分子は、二特異性抗体分子である。「二特異性抗体分子」とは、本明細書で使用される場合、１を超える（例えば、２、３、４、またはそれを超える）エピトープおよび／または抗原に対する特異性を有する抗体分子を指す。
【０２８３】
本明細書で使用される「抗原」（Ａｇ）とは、例えば、ある種の免疫細胞の活性化および／または抗体生成を伴う、免疫応答を引き起こすことができる分子を指す。ほとんどすべてのタンパク質またはペプチドを含む任意の高分子は、抗原であり得る。抗原はまた、ゲノム組換え体またはＤＮＡから誘導され得る。例えば、免疫応答を誘導することができるタンパク質をコードするヌクレオチド配列または部分的ヌクレオチド配列を含む任意のＤＮＡは、「抗原」をコードする。実施形態では、抗原は、遺伝子の全長ヌクレオチド配列によってのみコードされる必要はなく、また、抗原は、遺伝子によって全くコードされる必要もない。実施形態では、抗原は、生体試料、例えば、組織試料、腫瘍試料、細胞、または他の生体成分を有する流体から合成することができ、または誘導することができる。本明細書で使用される場合、「腫瘍抗原」または同義的に、「がん抗原」は、がん、例えば、がん細胞、または免疫応答を引き起こすことができる腫瘍微小環境上に存在するか、またはそれと関連する任意の分子を含む。本明細書で使用される場合、「免疫細胞抗原」とは、免疫応答を引き起こすことができる免疫細胞上に存在するか、またはそれと関連する任意の分子を含む。
【０２８４】
抗体分子の「抗原結合部位」または「結合部位」とは、抗原結合に関与する抗体分子、例えば、免疫グロブリン（Ｉｇ）分子の一部を指す。実施形態では、抗原結合部位は、重鎖（Ｈ）および軽鎖（Ｌ）の可変領域（Ｖ）のアミノ酸残基によって形成される。超可変領域と呼ばれる、重鎖および軽鎖の可変領域内の３つの高度に分岐ストレッチは、「フレームワーク領域」（ＦＲ）と呼ばれる、より保存された隣接領域間に配置される。ＦＲは、免疫グロブリン中の超可変領域の間で、およびそれに隣接して天然に見出されるアミノ酸配列である。実施形態では、抗体分子において、軽鎖の３つの超可変領域および重鎖の３つの超可変領域は、三次元空間において互いに対して配置されて、結合抗原の三次元表面に相補的な抗原結合表面を形成する。重鎖および軽鎖のそれぞれの３つの超可変領域は、「相補性決定領域」または「ＣＤＲ」と呼ばれる。フレームワーク領域およびＣＤＲは、例えば、Ｋａｂａｔ，Ｅ．Ａ．ら（１９９１年）Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ、第５版、Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ  ａｎｄ  Ｈｕｍａｎ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ、ＮＩＨ公開番号９１−３２４２、およびＣｈｏｔｈｉａ，Ｃ．ら（１９８７年）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６巻：９０１〜９１７ページにおいて定義され、記載されている。各可変鎖（例えば、可変重鎖および可変軽鎖）は、典型的には、３つのＣＤＲおよび４つのＦＲから構成され、アミノ酸の順序：ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、およびＦＲ４でアミノ末端からカルボキシ末端に配列される。
【０２８５】
本明細書で使用される「がん」は、すべてのタイプの発がんプロセスおよび／またはがん性増殖を包含することができる。実施形態では、がんは、原発性腫瘍、ならびに転移性組織、または悪性に形質転換された細胞、組織、もしくは臓器を含む。実施形態では、がんは、がんのすべての組織病理学および病期、例えば、浸潤性／重症度の病期を包含する。実施形態では、がんは、再発がんおよび／または抵抗性がんを含む。用語「がん」および「腫瘍」は、互換的に使用することができる。例えば、両方の用語は、固形腫瘍および液体腫瘍を包含する。本明細書で使用される場合、用語「がん」または「腫瘍」は、前がん、ならびに悪性がんおよび腫瘍を含む。
【０２８６】
本明細書で使用される場合、「免疫細胞」とは、免疫系において機能する、例えば、感染および異物の作用物質に対して防御する、種々の細胞のいずれかを指す。実施形態では、この用語は、白血球、例えば、好中球、好酸球、好塩基球、リンパ球、および単球を含む。先天性白血球には、食細胞（例えば、マクロファージ、好中球、および樹状細胞）、肥満細胞、好酸球、好塩基球、およびナチュラルキラー細胞が含まれる。先天性白血球は、接触を通じてより大きな病原体を攻撃するか、微生物を飲み込んで殺滅させることによって病原体を特定し、排除し、適応免疫応答の活性化のメディエーターである。適応免疫系の細胞は、リンパ球と呼ばれる特殊なタイプの白血球である。Ｂ細胞およびＴ細胞は、重要なタイプのリンパ球であり、骨髄の造血幹細胞に由来する。Ｂ細胞は、体液性免疫応答に関与し、Ｔ細胞は、細胞性免疫応答に関与する。用語「免疫細胞」は、免疫エフェクター細胞を含む。
【０２８７】
「免疫エフェクター細胞」という用語は、本明細書で使用される場合、免疫応答、例えば、免疫エフェクター応答の促進に関与する細胞を指す。免疫エフェクター細胞の例は、限定されないが、Ｔ細胞、例えば、アルファ／ベータＴ細胞およびガンマ／デルタＴ細胞、Ｂ細胞、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、ナチュラルキラーＴ細胞、および肥満細胞を含む。
【０２８８】
用語「エフェクター機能」または「エフェクター応答」は、細胞の特殊化された機能を指す。Ｔ細胞のエフェクター機能は、例えば、細胞溶解活性、またはサイトカインの分泌を含むヘルパー活性であり得る。
【０２８９】
本発明の組成物および方法は、特定の配列、またはそれに対して実質的に同一もしくは類似の配列、例えば、特定の配列に対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％同一である、またはそれ以上同一である配列を有するポリペプチドおよび核酸を包含する。アミノ酸配列との関連で、用語「実質的に同一」が本明細書において使用され、第１および第２のアミノ酸配列が共通の構造ドメインおよび／または共通の機能活性を有し得るように、ｉ）第２のアミノ酸配列と同一であるか、あるいはｉｉ）第２アミノ酸配列における整列されたアミノ酸残基の保存的置換である、十分な数または最小限の数のアミノ酸残基を含有する第１アミノ酸を指す。例えば、共通の構造ドメインを含有するアミノ酸配列は、参照配列、例えば、本明細書で提供される配列に対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％の同一性を有する。
【０２９０】
ヌクレオチド配列との関連で、用語「実質的に同一」が本明細書において使用され、第１および第２ヌクレオチド配列が、共通の機能活性を有するポリペプチドをコードする、または共通のポリペプチド構造ドメインまたは共通のポリペプチド機能活性をコードするように、第２核酸配列におけるアラインされたヌクレオチドと同一である、十分な数または最小限の数のヌクレオチドを含有する第１核酸配列を指す。例えば、参照配列、例えば本明細書で提供される配列に対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％の同一性を有するヌクレオチド配列。
【０２９１】
用語「バリアント」とは、参照アミノ酸配列と実質的に同一のアミノ酸配列を有するか、または実質的に同一のヌクレオチド配列によりコードされるポリペプチドを指す。一部の実施形態では、バリアントは、機能的バリアントである。
【０２９２】
用語「機能的バリアント」とは、参照アミノ酸配列と実質的に同一のアミノ酸配列を有するポリペプチド、または実質的に同一のヌクレオチド配列によりコードされ、参照アミノ酸配列の１つまたは複数の活性化を有し得るポリペプチドを指す。
【０２９３】
配列間の相同性または配列同一性（これらの用語は本明細書において互換的に使用される）の計算は以下のように行われる。
２つのアミノ酸配列または２つの核酸配列の同一性パーセントを決定するため、最適な比較目的のために配列がアラインメントされる（例えば、最適アラインメントのために、第１および第２アミノ酸または核酸配列の１つまたは両方にギャップが導入され得、非相同配列は比較目的のために無視され得る）。好ましい実施形態では、比較目的のためにアラインされた参照配列の長さは、参照配列の長さの少なくとも３０％、好ましくは少なくとも４０％、さらに好ましくは少なくとも５０％、６０％、なおさらに好ましくは少なくとも７０％、８０％、９０％、１００％である。次に、対応するアミノ酸位置またはヌクレオチド位置のアミノ酸残基またはヌクレオチドが比較される。第１配列の位置が、第２配列での対応する位置と同じアミノ酸残基またはヌクレオチドによって占められる場合、分子は、その位置にて同一である（本明細書で使用される場合、アミノ酸または核酸「同一性」は、アミノ酸または核酸「相同性」と等しい）。
【０２９４】
２つの配列間の同一性パーセントは、配列によって共有される同一位置の数の関数であり、２つの配列の最適アラインメントのために導入する必要がある、ギャップ数および各ギャップの長さが考慮に入れられる。
【０２９５】
配列の比較および２つの配列間の同一性パーセントの決定は、数学的アルゴリズムを用いて達成することができる。好ましい実施形態では、２つのアミノ酸配列間の同一性パーセントは、Ｂｌｏｓｓｕｍ６２マトリックスまたはＰＡＭ２５０マトリックス、および１６、１４、１２、１０、８、６、または４のギャップの重みおよび１、２、３、４、５、または６の長さの重みのいずれかを用いて、ＧＣＧソフトウェアパッケージ（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｇｃｇ．ｃｏｍにて入手可能である）のＧＡＰプログラムに組み込まれているＮｅｅｄｌｅｍａｎおよびＷｕｎｓｃｈ（（１９７０年）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．４８巻：４４４〜４５３ページ）アルゴリズムを用いて決定される。さらに別の好ましい実施形態では、２つのヌクレオチド配列間の同一性パーセントは、ＧＣＧソフトウェアパッケージ（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｇｃｇ．ｃｏｍにて入手可能である）のＧＡＰプログラムを使用して、ＮＷＳｇａｐｄｎａ．ＣＭＰマトリックスおよび４０、５０、６０、７０、または８０のギャップの重みおよび１、２、３、４、５、または６の長さの重みを用いて決定される。特に好ましいセットのパラメーター（および別段の指定がない限り使用されるべきであるもの）は、ギャップペナルティ１２、ギャップ伸張ペナルティ４、およびフレームシフトギャップペナルティ５を有するＢｌｏｓｓｕｍ６２スコアマトリックスである。
【０２９６】
２つのアミノ酸配列間またはヌクレオチド配列間の同一性パーセントは、ＰＡＭ１２０残基重み付け表、ギャップ長ペナルティ１２およびギャップペナルティ４を用いて、ＡＬＩＧＮプログラム（バージョン２．０）に組み込まれたＥ．ＭｅｙｅｒｓおよびＷ．Ｍｉｌｌｅｒ（（１９８９年）ＣＡＢＩＯＳ、４巻：１１〜１７ページ）のアルゴリズムを使用して決定することができる。
【０２９７】
本明細書に記載される核酸およびタンパク質配列は、例えば、他のファミリーメンバーまたは関連配列を同定するために、公開データベースに対する検索を行うための「クエリー配列」として用いることができる。このような検索は、Ａｌｔｓｃｈｕｌら（１９９０年）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２１５巻：４０３〜１０ページのＮＢＬＡＳＴおよびＸＢＬＡＳＴプログラム（バージョン２．０）を用いて行うことができる。ＢＬＡＳＴヌクレオチド検索は、本発明の核酸分子と相同なヌクレオチド配列を得るために、ＮＢＬＡＳＴプログラム、スコア＝１００、ワードレングス＝１２を用いて行うことができる。ＢＬＡＳＴタンパク質検索は、本発明のタンパク質分子と相同なアミノ酸配列を得るために、ＸＢＬＡＳＴプログラム、スコア＝５０、ワードレングス＝３を用いて行うことができる。比較目的のためのギャップドアラインメントを得るために、ギャップドＢＬＡＳＴは、Ａｌｔｓｃｈｕｌら（１９９７年）Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．２５巻：３３８９〜３４０２ページに記載されているように利用することができる。ＢＬＡＳＴおよびギャップドＢＬＡＳＴプログラムを利用する場合、それぞれのプログラム（例えば、ＸＢＬＡＳＴおよびＮＢＬＡＳＴ）のデフォルトパラメーターを使用することができる。
【０２９８】
本発明の分子は、それらの機能に実質的な影響を及ぼさない、さらなる保存的または非必須アミノ酸置換を有し得ることが理解される。
用語「アミノ酸」は、天然または合成のいずれであっても、アミノ官能性と酸官能性の両方を含み、天然に存在するアミノ酸のポリマーに含まれ得るすべての分子を包含することを意図する。例示的なアミノ酸には、天然に存在するアミノ酸；そのアナログ、誘導体および同族体；バリアント側鎖を有するアミノ酸アナログ；ならびに先述のいずれかのすべての立体異性体が含まれる。本明細書で使用される場合、用語「アミノ酸」は、ＤまたはＬ光学異性体とペプチド模倣体の両方を含む。
【０２９９】
「保存的アミノ酸置換」とは、アミノ酸残基が、類似の側鎖を有するアミノ酸残基で置換されるものである。類似の側鎖を有するアミノ酸残基のファミリーは、当該技術分野において定義されている。これらのファミリーには、塩基性側鎖（例えば、リシン、アルギニン、ヒスチジン）、酸性側鎖（例えば、アスパラギン酸、グルタミン酸）、非荷電極性側鎖（例えば、グリシン、アスパラギン、グルタミン、セリン、スレオニン、チロシン、システイン）、非極性側鎖（例えば、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン、トリプトファン）、ベータ分枝側鎖（例えば、スレオニン、バリン、イソロイシン）および芳香族側鎖（例えば、チロシン、フェニルアラニン、トリプトファン、ヒスチジン）を有するアミノ酸が含まれる。
【０３００】
用語「ポリペプチド」、「ペプチド」および「タンパク質」（一本鎖の場合）は、本明細書において互換的に使用され、任意の長さのアミノ酸のポリマーを指す。ポリマーは、直鎖状または分枝鎖状であり得て、修飾アミノ酸を含み得、非アミノ酸により割り込まれ得る。これらの用語はまた、修飾されているアミノ酸ポリマー；例えば、ジスルフィド結合形成、グリコシル化、脂質化、アセチル化、リン酸化、または標識成分とのコンジュゲーションなどの任意の他の操作を包含する。ポリペプチドは、天然源から単離することができ、真核生物もしくは原核生物宿主からの組換え技術により産生することができ、または合成手法の産生物であり得る。
【０３０１】
用語「核酸」、「核酸配列」、「ヌクレオチド配列」、または「ポリヌクレオチド配列」、および「ポリヌクレオチド」は、互換的に使用される。それらは、デオキシリボヌクレオチドまたはリボヌクレオチド、またはそれらのアナログのいずれかの長さのヌクレオチドのポリマー形態を指す。ポリヌクレオチドは、一本鎖または二本鎖のいずれかであり得、一本鎖である場合、コード鎖または非コード（アンチセンス）鎖であり得る。ポリヌクレオチドは、メチル化ヌクレオチドおよびヌクレオチドアナログなどの修飾ヌクレオチドを含み得る。ヌクレオチドの配列は、非ヌクレオチド成分によって割り込まれ得る。ポリヌクレオチドは、重合後、例えば、標識成分とのコンジュゲーションによってさらに修飾され得る。核酸は、組換えポリヌクレオチド、またはゲノム、ｃＤＮＡ、天然に存在しないかもしくは非天然配列で別のポリヌクレオチドに連結されている半合成、または合成起源のポリヌクレオチドであり得る。
【０３０２】
用語「単離された」とは、本明細書で使用される場合、その元の環境または天然の環境（例えば、天然に存在する場合には自然環境）から取り出される材料を指す。例えば、生きている動物に存在する天然に存在するポリヌクレオチドまたはポリペプチドは単離されないが、天然系の共存物質の一部または全部からヒトの介入によって分離された同一のポリヌクレオチドまたはポリペプチドが単離される。このようなポリヌクレオチドは、ベクターの一部であり得、および／またはこのようなポリヌクレオチドもしくはポリペプチドは、組成物の一部であり得、このようなベクターまたは組成物は、天然に見出される環境の一部ではないという点で依然として単離され得る。
【０３０３】
本発明の種々の態様を以下にさらに詳細に説明する。追加の定義は、明細書全体にわたって記載される。
ヒトＴ細胞受容体（ＴＣＲ）複合体
Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）は、Ｔ細胞の表面に見出すことができる。ＴＣＲは、細胞、例えば、抗原提示細胞の表面上に提示される、例えば、主要組織適合性複合体（ＭＨＣ）分子に結合される、抗原、例えば、ペプチドを認識する。ＴＣＲはヘテロ二量体分子であり、アルファ鎖、ベータ鎖、ガンマ鎖またはデルタ鎖を含むことができる。アルファ鎖およびベータ鎖を含むＴＣＲはまた、ＴＣＲαβと呼ばれる。ＴＣＲβ鎖は、以下の領域（セグメントとしても公知である）：可変（Ｖ）、多様（Ｄ）、結合（Ｊ）および定常（Ｃ）からなる（Ｍａｙｅｒ  Ｇ．およびＮｙｌａｎｄ  Ｊ．（２０１０年）１０章：Ｍａｊｏｒ  Ｈｉｓｔｏｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙ  Ｃｏｍｐｌｅｘ  ａｎｄ  Ｔ−ｃｅｌｌ  Ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ−Ｒｏｌｅ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｅ  Ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ．Ｉｎ：Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  ｏｎ−ｌｉｎｅ、Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｓｏｕｔｈ  Ｃａｒｏｌｉｎａ  Ｓｃｈｏｏｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅを参照）。ＴＣＲα鎖は、Ｖ、ＪおよびＣ領域からなる。Ｖ（可変）、Ｄ（多様）、Ｊ（結合）、およびＣ（定常）領域の体細胞組換えによるＴ細胞受容体（ＴＣＲ）の再編成は、Ｔ細胞の発生および成熟における決定的な事象である。ＴＣＲ遺伝子再編成は、胸腺で起こる。
【０３０４】
ＴＣＲは、アルファ鎖およびベータ鎖を含むＴＣＲヘテロ二量体、ならびに二量体シグナル伝達分子、例えば、ＣＤ３共受容体、例えば、ＣＤ３δ／εおよび／またはＣＤ３γ／εを含むＴＣＲ複合体として公知である受容体複合体を含み得る。
ＴＣＲベータＶ（ＴＣＲβＶ）
免疫系の多様性は、膨大な数の病原体に対する防御を可能にする。生殖系列ゲノムの大きさは限られているため、多様性は、Ｖ（Ｄ）Ｊ組換えの過程だけでなく、ヌクレオチドの接合部（Ｖ−ＤセグメントとＤ−Ｊセグメントの間の接合部）の欠失および偽ランダムで鋳型化されていないヌクレオチドの付加によっても達成される。ＴＣＲベータ遺伝子は、多様性を生み出すために遺伝子配列を受ける。
【０３０５】
ＴＣＲ  Ｖベータレパートリーは、例えば、機能的遺伝子セグメントにおいて７つの頻繁に起こる不活性化多型、および２つのＶベータ遺伝子セグメントを包含する大きな挿入／欠失関連多型のために、個体と集団との間で変化する。本開示は、例えば、本明細書に記載されるように、例えば、ヒトＴＣＲベータＶ鎖（ＴＣＲβＶ）、例えば、ＴＣＲβＶ遺伝子ファミリー（グループとも呼ばれる）、例えば、ＴＣＲβＶサブファミリー（サブグループとも呼ばれる）に結合する、例えば、特異的に結合する、とりわけ、抗体分子およびその断片を提供する。ＴＣＲベータＶファミリーおよびサブファミリーは、当該技術分野において公知であり、例えばＹａｓｓａｉら（２００９年）Ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｅｔｉｃｓ  ６１巻（７号）４９３〜５０２ページ；Ｗｅｉ  Ｓ．およびＣｏｎｃａｎｎｏｎ  Ｐ．（１９９４年）Ｈｕｍａｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  ４１巻（３号）２０１〜２０６ページに記載されている。本明細書に記載される抗体は、組換え抗体、例えば、組換え非マウス抗体、例えば、組換えヒトまたはヒト化抗体であり得る。
【０３０６】
ある態様では、本開示は、ヒトＴＣＲβＶ、例えば、ＴＣＲβＶファミリー、例えば、遺伝子ファミリーまたはそのバリアントに結合する抗ＴＣＲβＶ抗体分子を提供する。一部の実施形態では、ＴＣＲＢＶ遺伝子ファミリーは、例えば、本明細書に記載されるように、例えば、図３、表８Ａまたは８Ｂに記載されるように、１つまたは複数のサブファミリーを含む。一部の実施態様では、ＴＣＲβＶ遺伝子ファミリーは、ＴＣＲβ  Ｖ６サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ１０サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ１２サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ５サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ７サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ１１サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ１４サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ１６サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ１８サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ９サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ１３サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ４サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ３サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ２サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ１５サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ３０サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ１９サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ２７サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ２８サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ２４サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ２０サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ２５サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ２９サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ１サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ１７サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ２１サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ２３サブファミリー、またはＴＣＲβ  Ｖ２６サブファミリーを含む。
【０３０７】
一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ６サブファミリーはまた、ＴＣＲβ  Ｖ１３．１としても公知である。一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ６サブファミリーは、ＴＣＲβ  Ｖ６−４＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−４＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ６−９＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−８＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−６＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ６−６＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−２＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−３＊０１またはＴＣＲβ  Ｖ６−１＊０１、またはそれらのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ６は、ＴＣＲβ  Ｖ６−４＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ６は、ＴＣＲβ  Ｖ６−４＊０２、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβＶ６は、ＴＣＲβ  Ｖ６−９＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ６は、ＴＣＲβ  Ｖ６−８＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ６は、ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ６は、ＴＣＲβ  Ｖ６−６＊０２、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ６は、ＴＣＲβ  Ｖ６−６＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ６は、ＴＣＲ  βＶ６−２＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ６は、ＴＣＲβ  Ｖ６−３＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ６は、ＴＣＲβ  Ｖ６−１＊０１、またはそのバリアントを含む。
【０３０８】
一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ６は、ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ６、例えば、ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１は、配列番号１および／または配列番号２によって認識され、例えば結合される。一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ６、例えば、ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１は、配列番号９および／または配列番号１０によって認識され、例えば結合される。一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ６は、配列番号９および／または配列番号１１によって認識され、例えば結合される。
【０３０９】
一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ１０サブファミリーはまた、ＴＣＲβ  Ｖ１２としても公知である。一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ１０サブファミリーは、ＴＣＲβ  Ｖ１０−１＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ１０−１＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ１０−３＊０１もしくはＴＣＲβ  Ｖ１０−２＊０１、またはそれらのバリアントを含む。
【０３１０】
一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ１２サブファミリーはまた、ＴＣＲβ  Ｖ８．１としても公知である。一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ１２サブファミリーは、ＴＣＲβ  Ｖ１２−４＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ１２−３＊０１、もしくはＴＣＲβ  Ｖ１２−５＊０１、またはそれらのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ１２は、配列番号１５および／または配列番号１６によって認識され、例えば結合される。一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ１２は、配列番号２３〜２５のいずれか１つ、および／または配列番号２６〜３０のいずれか１つによって認識され、例えば結合される。
【０３１１】
一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ５サブファミリーは、ＴＣＲβ  Ｖ５−５＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ５−６＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ５−４＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ５−８＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ５−１＊０１、またはそれらのバリアントから選択される。
【０３１２】
一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ７サブファミリーは、ＴＣＲβ  Ｖ７−７＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ７−６＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ７−８＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ７−４＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ７−２＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ７−２＊０３、ＴＣＲβ  Ｖ７−２＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ７−３＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ７−９＊０３、もしくはＴＣＲβ  Ｖ７−９＊０１、またはそれらのバリアントを含む。
【０３１３】
一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ１１サブファミリーは、ＴＣＲβ  Ｖ１１−１＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ１１−２＊０１もしくはＴＣＲβ  Ｖ１１−３＊０１、またはそれらのバリアントを含む。
【０３１４】
一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ１４サブファミリーは、ＴＣＲβ  Ｖ１４＊０１、またはそのバリアントを含む。
一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ１６サブファミリーは、ＴＣＲβ  Ｖ１６＊０１、またはそのバリアントを含む。
【０３１５】
一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ１８サブファミリーは、ＴＣＲβ  Ｖ１８＊０１、またはそのバリアントを含む。
一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ９サブファミリーは、ＴＣＲβ  Ｖ９＊０１もしくはＴＣＲβ  Ｖ９＊０２、またはそのバリアントを含む。
【０３１６】
一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ１３サブファミリーは、ＴＣＲβＶ１３＊０１、またはそのバリアントを含む。
一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ４サブファミリーは、ＴＣＲβ  Ｖ４−２＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ４−３＊０１、もしくはＴＣＲβ  Ｖ４−１＊０１、またはそれらのバリアントを含む。
【０３１７】
一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ３サブファミリーは、ＴＣＲβ  Ｖ３−１＊０１、またはそのバリアントを含む。
一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ２サブファミリーは、ＴＣＲβ  Ｖ２＊０１、またはそのバリアントを含む。
【０３１８】
一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ１５サブファミリーは、ＴＣＲβ  Ｖ１５＊０１、またはそのバリアントを含む。
一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ３０サブファミリーは、ＴＣＲβ  Ｖ３０＊０１、もしくはＴＣＲβ  Ｖ３０＊０２、またはそのバリアントを含む
一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ１９サブファミリーは、ＴＣＲβ  Ｖ１９＊０１、もしくはＴＣＲβ  Ｖ１９＊０２、またはそのバリアントを含む。
【０３１９】
一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ２７サブファミリーは、ＴＣＲβ  Ｖ２７＊０１、またはそのバリアントを含む。
一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ２８サブファミリーは、ＴＣＲβ  Ｖ２８＊０１、またはそのバリアントを含む。
【０３２０】
一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ２４サブファミリーは、ＴＣＲβ  Ｖ２４−１＊０１、またはそのバリアントを含む。
一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ２０サブファミリーは、ＴＣＲβ  Ｖ２０−１＊０１、もしくはＴＣＲβ  Ｖ２０−１＊０２、またはそのバリアントを含む。
【０３２１】
一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ２５サブファミリーは、ＴＣＲβ  Ｖ２５−１＊０１、またはそのバリアントを含む。
一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ２９サブファミリーは、ＴＣＲβ  Ｖ２９−１＊０１、またはそのバリアントを含む。
【０３２２】
【表１】
2021530246.tif 000002
【０３２３】
【表２】
2021530246.tif 000003
【０３２４】
ＴＣＲβＶサブファミリーメンバーの例示的なアミノ酸配列は、ＩｍＭｕｎｏＧｅｎｅＴｉｃｓ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ  Ｓｙｓｔｅｍのウェブサイト：ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｉｍｇｔ．ｏｒｇ／、または類似の資料に見出すことができる。
【０３２５】
【表３−１】
2021530246.tif 000004
【０３２６】
【表３−２】
2021530246.tif 000005
【０３２７】
【表３−３】
2021530246.tif 000006
【０３２８】
表９のＴＣＲＢＶアミノ酸配列のアラインメントは、ＴＣＲ配列の多様性を強調している。特に、異なるサブファミリーからのＴＲＢＶ配列は、互いにかなり異なる。
抗ＴＣＲβＶ抗体
低い配列類似性（例えば、異なるＴＣＲβＶサブファミリーを認識する異なる抗体分子の中での低い配列同一性）を有するにもかかわらず、（例えば、図２４Ａにおいて丸で囲った区画によって表されるように）ＴＣＲβＶタンパク質上の構造的に保存された領域、例えば、ドメインを認識し、かつ類似の機能（例えば、類似のサイトカインプロファイル）を有する、抗体の新規のクラス、すなわち、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子の発見が本明細書に開示される。そのため、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子は構造−機能関係性を共有する。
【０３２９】
理論に拘泥するものではないが、一部の実施形態では、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、例えば、図２４Ａにおいて丸で囲った区画によって記載されるように、ＴＣＲアルファタンパク質との複合体である場合にＴＣＲβＶタンパク質の外向きのエピトープに結合すると考えられる。一部の実施形態では、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、（例えば、図２４Ａにおいて丸で囲った区画によって表されるように）ＴＣＲβＶタンパク質上の構造的に保存されたドメインを認識する（例えば、それに結合する）。
【０３３０】
一部の実施形態では、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβＶ：ＴＣＲアルファ複合体の境界部を認識しない、例えば、それに結合しない。
一部の実施形態では、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβＶタンパク質の定常領域を認識しない、例えば、それに結合しない。ＴＣＲＢＶ領域の定常領域に結合する例示的な抗体は、Ｖｉｎｅｙら（Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ．  １９９２  Ｄｅｃ；１１（６）：７０１〜１３ページ）に記載されるＪＯＶＩ．１である。
【０３３１】
一部の実施形態では、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβＶタンパク質の相補性決定領域（例えば、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２および／またはＣＤＲ３）のうちの１つまたは複数（例えば、すべて）を認識しない、例えば、それに結合しない。
【０３３２】
一部の実施形態では、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβＶ領域に結合する（例えば、特異的に結合する）。一部の実施形態では、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子の結合は、ＴＣＲβＶ領域以外の受容体または分子に結合するＴ細胞エンゲージャー（「非ＴＣＲβＶ結合性Ｔ細胞エンゲージャー」）のサイトカインプロファイルとは異なるサイトカインプロファイルをもたらす。一部の実施形態では、非ＴＣＲβＶ結合性Ｔ細胞エンゲージャーは、ＣＤ３分子（例えば、ＣＤ３イプシロン（ＣＤ３ｅ）分子）、またはＴＣＲアルファ（ＴＣＲα）分子に結合する抗体を含む。一部の実施形態では、非ＴＣＲβＶ結合性Ｔ細胞エンゲージャーは、ＯＫＴ３抗体またはＳＰ３４−２抗体である。
【０３３３】
一態様では、本開示は、例えば、本明細書に、例えば、図３、表８Ａ、または表８Ｂに記載される、ヒトＴＣＲβＶ、例えば、ＴＣＲβＶ遺伝子ファミリー、例えば、ＴＣＲβＶサブファミリーのうちの１つまたは複数に結合する抗ＴＣＲβＶ抗体分子を提供する。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβ  Ｖ６サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ１０サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ１２サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ５サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ７サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ１１サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ１４サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ１６サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ１８サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ９サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ１３サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ４サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ３サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ２サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ１５サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ３０サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ１９サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ２７サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ２８サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ２４サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ２０サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ２５サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ２９サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ１サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ１７サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ２１サブファミリー、ＴＣＲβ  Ｖ２３サブファミリー、もしくはＴＣＲβ  Ｖ２６サブファミリーから選択される１つもしくは複数のＴＣＲβＶサブファミリー、またはそのバリアントに結合する。
【０３３４】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβ  Ｖ６−４＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−４＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ６−９＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−８＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−６＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ６−６＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−２＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−３＊０１もしくはＴＣＲβ  Ｖ６−１＊０１、またはそのバリアントを含むＴＣＲβ  Ｖ６サブファミリーに結合する。一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ６サブファミリーは、ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ６は、ＴＣＲβ  Ｖ６−４＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ６は、ＴＣＲβ  Ｖ６−４＊０２、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ６は、ＴＣＲβ  Ｖ６−９＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ６は、ＴＣＲβ  Ｖ６−８＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ６は、ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ６は、ＴＣＲβ  Ｖ６−６＊０２、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ６は、ＴＣＲβ  Ｖ６−６＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ６は、ＴＣＲβ  Ｖ６−２＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ６は、ＴＣＲβ  Ｖ６−３＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ６は、ＴＣＲβ  Ｖ６−１＊０１、またはそのバリアントを含む。
【０３３５】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβ  Ｖ１０−１＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ１０−１＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ１０−３＊０１もしくはＴＣＲβ  Ｖ１０−２＊０１、またはそのバリアントを含むＴＣＲβ  Ｖ１０サブファミリーに結合する。
【０３３６】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβ  Ｖ１２−４＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ１２−３＊０１もしくはＴＣＲβ  Ｖ１２−５＊０１、またはそのバリアントを含むＴＣＲβ  Ｖ１２サブファミリーに結合する。
【０３３７】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβ  Ｖ５−５＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ５−６＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ５−４＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ５−８＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ５−１＊０１、またはそのバリアントを含むＴＣＲβ  Ｖ５サブファミリーに結合する。
【０３３８】
前記抗ＴＣＲβＶ抗体分子によって認識される例示的な抗ＴＣＲβＶ抗体分子および対応するＴＣＲβＶサブファミリーは、表１０Ａに開示される。
【０３３９】
【表４−１】
2021530246.tif 000007
【０３４０】
【表４−２】
2021530246.tif 000008
【０３４１】
【表４−３】
2021530246.tif 000009
【０３４２】
【表４−４】
2021530246.tif 000010
【０３４３】
【表４−５】
2021530246.tif 000011
【０３４４】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβ  Ｖ１２に結合しないか、または米国特許第５，８６１，１５５号に記載される１６Ｇ８マウス抗体もしくはそのヒト化バージョンの親和性および／もしくは結合特異性より低い（例えば、約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％または約２、５、もしくは１０倍低い）親和性および／もしくは結合特異性でＴＣＲβ  Ｖ１２に結合する。
【０３４５】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、米国特許第５，８６１，１５５号に記載される１６Ｇ８マウス抗体またはそのヒト化バージョンの親和性および／または結合特異性より高い（例えば、約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％または約２、５、もしくは１０倍高い）親和性および／または結合特異性でＴＣＲβ  Ｖ１２に結合する。
【０３４６】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、米国特許第５，８６１，１５５号に記載される１６Ｇ８マウス抗体またはそのヒト化バージョンの親和性および／または結合特異性より高い（例えば、約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％または約２、５、もしくは１０倍高い）親和性および／または結合特異性でＴＣＲβ  Ｖ１２以外のＴＣＲβＶ領域（例えば、本明細書に記載されるＴＣＲβＶ領域、例えば、ＴＣＲβ  Ｖ６サブファミリー（例えば、ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）に結合する。
【０３４７】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβ  Ｖ５−５＊０１にもＴＣＲβ  Ｖ５−１＊０１にも結合せず、または米国特許第５，８６１，１５５号に記載されるＴＭ２３マウス抗体もしくはそのヒト化バージョンの親和性および／もしくは結合特異性より低い（例えば、約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％もしくは約２、５、もしくは１０倍低い）親和性および／もしくは結合特異性でＴＣＲβ  Ｖ５−５＊０１もしくはＴＣＲβ  Ｖ５−１＊０１に結合する。
【０３４８】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、米国特許第５，８６１，１５５号に記載されるＴＭ２３マウス抗体またはそのヒト化バージョンの親和性および／または結合特異性より高い（例えば、約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％または約２、５、もしくは１０倍高い）親和性および／または結合特異性でＴＣＲβ  Ｖ５−５＊０１またはＴＣＲβ  Ｖ５−１＊０１に結合する。
【０３４９】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、米国特許第５，８６１，１５５号に記載されるＴＭ２３マウス抗体またはそのヒト化バージョンの親和性および／または結合特異性より高い（例えば、約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％または約２、５、もしくは１０倍高い）親和性および／または結合特異性でＴＣＲβ  Ｖ５−５＊０１またはＴＣＲβ  Ｖ５−１＊０１以外のＴＣＲβＶ領域（例えば、本明細書に記載されるＴＣＲβＶ領域、例えば、ＴＣＲβ  Ｖ６サブファミリー（例えば、ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）に結合する。
抗ＴＣＲβ  Ｖ６抗体
よって、一態様では、本開示は、ヒトＴＣＲβ  Ｖ６、例えば、ＴＣＲβ  Ｖ６−４＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−４＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ６−９＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−８＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−６＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ６−６＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−２＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−３＊０１またはＴＣＲβ  Ｖ６−１＊０１を含むＴＣＲβ  Ｖ６サブファミリーに結合する抗ＴＣＲβＶ抗体分子を提供する。一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ６サブファミリーは、ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ６は、ＴＣＲβ  Ｖ６−４＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ６は、ＴＣＲβ  Ｖ６−４＊０２、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ６は、ＴＣＲβ  Ｖ６−９＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ６は、ＴＣＲβ  Ｖ６−８＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ６は、ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ６は、ＴＣＲβ  Ｖ６−６＊０２、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ６は、ＴＣＲβ  Ｖ６−６＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ６は、ＴＣＲβ  Ｖ６−２＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ６は、ＴＣＲβ  Ｖ６−３＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ６は、ＴＣＲβ  Ｖ６−１＊０１、またはそのバリアントを含む。
【０３５０】
一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１は、配列番号４３の核酸配列、またはその８５％、９０％、９５％、９９％もしくはより高い同一性を有する配列によってコードされる。
配列番号４３
ＡＴＧＡＧＣＡＴＣＧＧＣＣＴＣＣＴＧＴＧＣＴＧＴＧＣＡＧＣＣＴＴＧＴＣＴＣＴＣＣＴＧＴＧＧＧＣＡＧＧＴＣＣＡＧＴＧＡＡＴＧＣＴＧＧＴＧＴＣＡＣＴＣＡＧＡＣＣＣＣＡＡＡＡＴＴＣＣＡＧＧＴＣＣＴＧＡＡＧＡＣＡＧＧＡＣＡＧＡＧＣＡＴＧＡＣＡＣＴＧＣＡＧＴＧＴＧＣＣＣＡＧＧＡＴＡＴＧＡＡＣＣＡＴＧＡＡＴＡＣＡＴＧＴＣＣＴＧＧＴＡＴＣＧＡＣＡＡＧＡＣＣＣＡＧＧＣＡＴＧＧＧＧＣＴＧＡＧＧＣＴＧＡＴＴＣＡＴＴＡＣＴＣＡＧＴＴＧＧＴＧＣＴＧＧＴＡＴＣＡＣＴＧＡＣＣＡＡＧＧＡＧＡＡＧＴＣＣＣＣＡＡＴＧＧＣＴＡＣＡＡＴＧＴＣＴＣＣＡＧＡＴＣＡＡＣＣＡＣＡＧＡＧＧＡＴＴＴＣＣＣＧＣＴＣＡＧＧＣＴＧＣＴＧＴＣＧＧＣＴＧＣＴＣＣＣＴＣＣＣＡＧＡＣＡＴＣＴＧＴＧＴＡＣＴＴＣＴＧＴＧＣＣＡＧＣＡＧＴＴＡＣＴＣ
一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１は、配列番号４４のアミノ酸配列、またはその８５％、９０％、９５％、９９％もしくはより高い同一性を有するアミノ酸配列を含む。
配列番号４４
ＭＳＩＧＬＬＣＣＡＡＬＳＬＬＷＡＧＰＶＮＡＧＶＴＱＴＰＫＦＱＶＬＫＴＧＱＳＭＴＬＱＣＡＱＤＭＮＨＥＹＭＳＷＹＲＱＤＰＧＭＧＬＲＬＩＨＹＳＶＧＡＧＩＴＤＱＧＥＶＰＮＧＹＮＶＳＲＳＴＴＥＤＦＰＬＲＬＬＳＡＡＰＳＱＴＳＶＹＦＣＡＳＳＹ
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、非マウス抗体分子、例えば、ヒトまたはヒト化抗体分子である。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、ヒト抗体分子である。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、ヒト化抗体分子である。
【０３５１】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、単離されているか、または組換えである。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、Ａ−Ｈ．１もしくはＡ−Ｈ．２から選択される抗体、または表１に記載されるか、もしくは表１中のヌクレオチド配列、もしくは前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）である配列によってコードされる抗体からの少なくとも１つの抗原結合性領域、例えば、可変領域またはその抗原結合性断片を含む。
【０３５２】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、Ａ−Ｈ．１もしくはＡ−Ｈ．２から選択される抗体、または表１に記載されるか、もしくは表１中のヌクレオチド配列、もしくは前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）である配列によってコードされる抗体からの少なくとも１つ、２つ、３つまたは４つの可変領域を含む。
【０３５３】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、Ａ−Ｈ．１もしくはＡ−Ｈ．２から選択される抗体、または表１に記載されるか、もしくは表１中のヌクレオチド配列、もしくは前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）である配列によってコードされる抗体分子からの少なくとも１つまたは２つの重鎖可変領域を含む。
【０３５４】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、配列番号２３１または３２９０のコンセンサス配列を有する重鎖可変領域（ＶＨ）を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、Ａ−Ｈ．１もしくはＡ−Ｈ．２から選択される抗体、または表１に記載されるか、もしくは表１中のヌクレオチド配列、もしくは前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）である配列によってコードされる抗体からの少なくとも１つまたは２つの軽鎖可変領域を含む。
【０３５５】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、配列番号２３０または３２８９のコンセンサス配列を有する軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、ＩｇＧ４、例えば、ヒトＩｇＧ４の重鎖定常領域を含む。さらに別の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、ＩｇＧ１、例えば、ヒトＩｇＧ１の重鎖定常領域を含む。一実施形態では、重鎖定常領域は、表３に示されるアミノ酸配列、またはそれに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）である配列を含む。
【０３５６】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、カッパ軽鎖定常領域、例えば、ヒトカッパ軽鎖定常領域を含む。一実施形態では、軽鎖定常領域は、表３に示されるアミノ酸配列、またはそれに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）である配列を含む。
【０３５７】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、Ａ−Ｈ．１もしくはＡ−Ｈ．２から選択される抗体、または表１に記載されるか、もしくは表１中のヌクレオチド配列、もしくは前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）である配列によってコードされる抗体の重鎖可変領域（ＶＨ）からの少なくとも１つ、２つ、または３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む。
【０３５８】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、表１に示されるか、または表１に示されるヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域からの少なくとも１つ、２つ、または３つのＣＤＲ（またはＣＤＲのまとめてすべて）を含む。一実施形態では、ＣＤＲのうちの１つまたは複数（またはＣＤＲのまとめてすべて）は、表１に示されるか、または表１に示されるヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列と比較して、１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つまたはより多くの変化、例えば、アミノ酸置換または欠失を有する。
【０３５９】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、Ａ−Ｈ．１もしくはＡ−Ｈ．２から選択される抗体、または表１に記載されるか、もしくは表１中のヌクレオチド配列、もしくは前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）である配列によってコードされる抗体の軽鎖可変領域からの少なくとも１つ、２つ、または３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む。
【０３６０】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、表１に示されるか、または表１に示されるヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域からの少なくとも１つ、２つ、または３つのＣＤＲ（またはＣＤＲのまとめてすべて）を含む。一実施形態では、ＣＤＲのうちの１つまたは複数（またはＣＤＲのまとめてすべて）は、表１に示されるか、または表１に示されるヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列と比較して、１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つまたはより多くの変化、例えば、アミノ酸置換または欠失を有する。
【０３６１】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、表１に示されるか、または表１に示されるヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列を含む重鎖および軽鎖可変領域からの少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つまたは６つのＣＤＲ（またはＣＤＲのまとめてすべて）を含む。一実施形態では、ＣＤＲのうちの１つまたは複数（またはＣＤＲのまとめてすべて）は、表１に示されるか、または表１に示されるヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列と比較して、１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つまたはより多くの変化、例えば、アミノ酸置換または欠失を有する。
【０３６２】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、Ａ−Ｈ．１もしくはＡ−Ｈ．２から選択される抗体、または表１に記載されるか、もしくは表１中のヌクレオチド配列によってコードされる抗体からの６つすべてのＣＤＲ、または密接に関連したＣＤＲ、例えば、同一であるか、もしくは少なくとも１つのアミノ酸変更であるが２つ、３つもしくは４つ以下である変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するＣＤＲを含む。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、本明細書に記載の任意のＣＤＲを含んでもよい。
【０３６３】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、Ａ−Ｈ．１もしくはＡ−Ｈ．２から選択される抗体、もしくは表１に記載の抗体の重鎖可変領域からのＫａｂａｔらによる少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲ（例えば、表１に示されるＫａｂａｔの定義による少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲ）、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）であるか、もしくは表１に示されるＫａｂａｔらによる１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲと比較して、少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、２つ、３つもしくは４つ以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する配列を含む。
【０３６４】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、Ａ−Ｈ．１もしくはＡ−Ｈ．２から選択される抗体、もしくは表１に記載の抗体の軽鎖可変領域からのＫａｂａｔらによる少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲ（例えば、表１に示されるＫａｂａｔの定義による少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲ）、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）であるか、もしくは表１に示されるＫａｂａｔらによる１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲと比較して、少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、２つ、３つもしくは４つ以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する配列を含む。
【０３６５】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、Ａ−Ｈ．１もしくはＡ−Ｈ．２から選択される抗体、もしくは表１に記載されるか、もしくは表１中のヌクレオチド配列によってコードされる抗体の重鎖および軽鎖可変領域からのＫａｂａｔらによる少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つのＣＤＲ（例えば、表１に示されるＫａｂａｔの定義による少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つのＣＤＲ）、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）であるか、もしくは表１に示されるＫａｂａｔらによる１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つのＣＤＲと比較して、少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、２つ、３つもしくは４つ以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する配列を含む。
【０３６６】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、Ａ−Ｈ．１もしくはＡ−Ｈ．２から選択される抗体、もしくは表１に記載されるか、もしくは表１中のヌクレオチド配列によってコードされる抗体の重鎖および軽鎖可変領域からのＫａｂａｔらによる６つすべてのＣＤＲ（例えば、表１に示されるＫａｂａｔの定義による６つすべてのＣＤＲ）、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）であるか、もしくは表１に示されるＫａｂａｔらによる６つすべてのＣＤＲと比較して、少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、２つ、３つもしくは４つ以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する配列を含む。一実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、本明細書に記載の任意のＣＤＲを含んでもよい。
【０３６７】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、Ａ−Ｈ．１またはＡ−Ｈ．２から選択される抗体の対応する超可変ループと同じカノニカルな構造、例えば、本明細書に記載の抗体の重鎖および／または軽鎖可変ドメインの少なくともループ１および／またはループ２と同じカノニカルな構造を有する少なくとも１つ、２つ、または３つの超可変ループを含む。例えば、超可変ループのカノニカルな構造の記載についてＣｈｏｔｈｉａら、（１９９２）  Ｊ．  Ｍｏｌ．  Ｂｉｏｌ．  ２２７：７９９〜８１７ページ；Ｔｏｍｌｉｎｓｏｎら、（１９９２）  Ｊ．  Ｍｏｌ．  Ｂｉｏｌ．  ２２７：７７６〜７９８ページを参照。これらの構造は、これらの参考文献に記載の表の検査によって決定することができる。
【０３６８】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、Ａ−Ｈ．１もしくはＡ−Ｈ．２から選択されるか、もしくは表１に記載される抗体の重鎖可変領域からのＣｈｏｔｈｉａらによる少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲ（例えば、表１に示されるＣｈｏｔｈｉａの定義による少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲ）、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）であるか、もしくは表１に示されるＣｈｏｔｈｉａらによる１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲと比較して、少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、２つ、３つもしくは４つ以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する配列を含む。
【０３６９】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、Ａ−Ｈ．１もしくはＡ−Ｈ．２から選択される抗体、もしくは表１に記載の抗体の軽鎖可変領域からのＣｈｏｔｈｉａらによる少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲ（例えば、表１に示されるＣｈｏｔｈｉａの定義による少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲ）、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）であるか、もしくは表１に示されるＣｈｏｔｈｉａらによる１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲと比較して、少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、２つ、３つもしくは４つ以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する配列を含む。
【０３７０】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、Ａ−Ｈ．１もしくはＡ−Ｈ．２から選択される抗体、もしくは表１に記載されるか、もしくは表１中のヌクレオチド配列によってコードされる抗体の重鎖および軽鎖可変領域からのＣｈｏｔｈｉａらによる少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つのＣＤＲ（例えば、表１に示されるＣｈｏｔｈｉａの定義による少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つのＣＤＲ）、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）であるか、もしくは表１に示されるＣｈｏｔｈｉａらによる１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つのＣＤＲと比較して、少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、２つ、３つもしくは４つ以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する配列を含む。
【０３７１】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、Ａ−Ｈ．１もしくはＡ−Ｈ．２から選択される抗体、もしくは表１に記載されるか、もしくは表１中のヌクレオチド配列によってコードされる抗体の重鎖および軽鎖可変領域からのＣｈｏｔｈｉａらによる６つすべてのＣＤＲ（例えば、表１に示されるＣｈｏｔｈｉａの定義による６つすべてのＣＤＲ）、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）であるか、もしくは表１に示されるＣｈｏｔｈｉａらによる６つすべてのＣＤＲと比較して、少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、２つ、３つもしくは４つ以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する配列を含む。一実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、本明細書に記載の任意のＣＤＲを含んでもよい。
【０３７２】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、Ｋａｂａｔら、Ｃｈｏｔｈｉａらに従って定義されるか、または表１に記載されるＣＤＲまたは超可変ループの組合せを含む。
【０３７３】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、ＫａｂａｔおよびＣｈｏｔｈｉａの定義によるＣＤＲまたは超可変ループの任意の組合せを含有し得る。
【０３７４】
一部の実施形態では、表１に示される組合せＣＤＲは、Ｋａｂａｔ  ＣＤＲおよびＣｈｏｔｈｉａ  ＣＤＲを含むＣＤＲである。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、表１において組合せＣＤＲとして同定されるＣＤＲまたは超可変ループの組合せを含む。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、表１に記載される「組合せ」ＣＤＲによるＣＤＲまたは超可変ループの任意の組合せを含有し得る。
【０３７５】
一実施形態、例えば、可変領域、ＣＤＲ（例えば、組合せＣＤＲ、Ｃｈｏｔｈｉａ  ＣＤＲもしくはＫａｂａｔ  ＣＤＲ）、または本明細書、例えば、表１において言及される他の配列を含む一実施形態では、抗体分子は、単一特異性抗体分子、二特異性抗体分子、二価抗体分子、二重パラトープ性抗体分子、または抗体の抗原結合性断片を含む抗体分子、例えば、半抗体もしくは半抗体の抗原結合性断片である。ある特定の実施形態では、抗体分子は、例えば本明細書に記載される、多特異性分子、例えば、二特異性分子を含む。
【０３７６】
一実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、
（ｉ）配列番号２、配列番号１０もしくは配列番号１１の軽鎖相補性決定領域１（ＬＣ  ＣＤＲ１）、軽鎖相補性決定領域２（ＬＣ  ＣＤＲ２）、および軽鎖相補性決定領域３（ＬＣ  ＣＤＲ３）のうちの１つ、２つもしくはすべて、ならびに／または
（ｉｉ）配列番号１もしくは配列番号９の重鎖相補性決定領域１（ＨＣ  ＣＤＲ１）、重鎖相補性決定領域２（ＨＣ  ＣＤＲ２）、および重鎖相補性決定領域３（ＨＣ  ＣＤＲ３）のうちの１つ、２つもしくはすべて
を含む。
【０３７７】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、配列番号２のＬＣ  ＣＤＲ１、ＬＣ  ＣＤＲ２、およびＬＣ  ＣＤＲ３、ならびに配列番号１のＨＣ  ＣＤＲ１、ＨＣ  ＣＤＲ２、およびＨＣ  ＣＤＲ３を含む。
【０３７８】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、配列番号１０のＬＣ  ＣＤＲ１、ＬＣ  ＣＤＲ２、およびＬＣ  ＣＤＲ３、ならびに配列番号９のＨＣ  ＣＤＲ１、ＨＣ  ＣＤＲ２、およびＨＣ  ＣＤＲ３を含む。
【０３７９】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、配列番号１１のＬＣ  ＣＤＲ１、ＬＣ  ＣＤＲ２、およびＬＣ  ＣＤＲ３、ならびに配列番号９のＨＣ  ＣＤＲ１、ＨＣ  ＣＤＲ２、およびＨＣ  ＣＤＲ３を含む。
【０３８０】
一実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、
（ｉ）配列番号６のＬＣ  ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号７のＬＣ  ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号８のＬＣ  ＣＤＲ３アミノ酸配列、および／または
（ｉｉ）配列番号３のＨＣ  ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号４のＨＣ  ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号５のＨＣ  ＣＤＲ３アミノ酸配列
を含む。
【０３８１】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、
（ｉ）配列番号６のＬＣ  ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号７のＬＣ  ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号８のＬＣ  ＣＤＲ３アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、および／または
（ｉｉ）配列番号３のＨＣ  ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号４のＨＣ  ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号５のＨＣ  ＣＤＲ３アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）
を含む。
【０３８２】
一実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、
（ｉ）配列番号５１のＬＣ  ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号５２のＬＣ  ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号５３のＬＣ  ＣＤＲ３アミノ酸配列、および／または
（ｉｉ）配列番号４５のＨＣ  ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号４６のＨＣ  ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号４７のＨＣ  ＣＤＲ３アミノ酸配列
を含む。
【０３８３】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、
（ｉ）配列番号５１のＬＣ  ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号５２のＬＣ  ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号５３のＬＣ  ＣＤＲ３アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、および／または
（ｉｉ）配列番号４５のＨＣ  ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号４６のＨＣ  ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号４７のＨＣ  ＣＤＲ３アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）
を含む。
【０３８４】
一実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、
（ｉ）配列番号５４のＬＣ  ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号５５のＬＣ  ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号５６のＬＣ  ＣＤＲ３アミノ酸配列、および／または
（ｉｉ）配列番号４８のＨＣ  ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号４９のＨＣ  ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号５０のＨＣ  ＣＤＲ３アミノ酸配列
を含む。
【０３８５】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、
（ｉ）配列番号５４のＬＣ  ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号５５のＬＣ  ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号５６のＬＣ  ＣＤＲ３アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、および／または
（ｉｉ）配列番号４８のＨＣ  ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号４９のＨＣ  ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号５０のＨＣ  ＣＤＲ３アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）
を含む。
【０３８６】
一実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子の軽鎖または重鎖可変フレームワーク（例えば、少なくともＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、および必要に応じてＦＲ４を包含する領域）は、（ａ）ヒト軽鎖もしくは重鎖可変フレームワークからのアミノ酸残基、例えば、ヒト成熟抗体、ヒト生殖系列配列、もしくはヒトコンセンサス配列からの軽鎖もしくは重鎖可変フレームワーク残基のうちの少なくとも８０％、８５％、８７％  ９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％、もしくは１００％を含む軽鎖もしくは重鎖可変フレームワーク、（ｂ）ヒト軽鎖もしくは重鎖可変フレームワークからのアミノ酸残基、例えば、ヒト成熟抗体、ヒト生殖系列配列、もしくはヒトコンセンサス配列からの軽鎖もしくは重鎖可変フレームワーク残基の２０％〜８０％、４０％〜６０％、６０％〜９０％、もしくは７０％〜９５％を含む軽鎖もしくは重鎖可変フレームワーク、（ｃ）非ヒトフレームワーク（例えば、齧歯動物フレームワーク）、または（ｄ）例えば抗原性もしくは細胞傷害性決定因子を除去するように、修飾されている、例えば、脱免疫化（ｄｅｉｍｍｕｎｉｚｅｄ）、もしくは部分的にヒト化されている非ヒトフレームワークから選択することができる。一実施形態では、軽鎖または重鎖可変フレームワーク領域（特に、ＦＲ１、ＦＲ２および／またはＦＲ３）は、ヒト生殖系列遺伝子のＶＬまたはＶＨセグメントのフレームワークに対して少なくとも７０、７５、８０、８５、８７、８８、９０、９２、９４、９５、９６、９７、９８、９９％同一のまたは同一の軽鎖または重鎖可変フレームワーク配列を含む。
【０３８７】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、Ａ−Ｈ．１またはＡ−Ｈ．２のアミノ酸配列からの、例えば、例えば図１Ａ、または配列番号９に示される、可変領域全体中のＦＲ領域のアミノ酸配列からの少なくとも１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、１０個、１５個、２０個またはより多くの変化、例えば、アミノ酸置換または欠失を有する重鎖可変ドメインを含む。
【０３８８】
代替的に、または本明細書に記載の重鎖置換と組み合わせて、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、Ａ−Ｈ．１またはＡ−Ｈ．２のアミノ酸配列からの、例えば、例えば図１Ｂ、または配列番号１０もしくは配列番号１１に示される、可変領域全体中のＦＲ領域のアミノ酸配列からの少なくとも１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、１０個、１５個、２０個またはより多くのアミノ酸変化、例えば、アミノ酸置換または欠失を有する軽鎖可変ドメインを含む。
【０３８９】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、図１Ａに示される１つ、２つ、３つ、もしくは４つの重鎖フレームワーク領域、またはそれに対して実質的に同一の配列を含む。
【０３９０】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、図１Ｂに示される１つ、２つ、３つ、もしくは４つの軽鎖フレームワーク領域、またはそれに対して実質的に同一の配列を含む。
【０３９１】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、例えば図１Ｂに示される、Ａ−Ｈ．１またはＡ−Ｈ．２の軽鎖フレームワーク領域１を含む。
【０３９２】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、例えば図１Ｂに示される、Ａ−Ｈ．１またはＡ−Ｈ．２の軽鎖フレームワーク領域２を含む。
【０３９３】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、例えば図１Ｂに示される、Ａ−Ｈ．１またはＡ−Ｈ．２の軽鎖フレームワーク領域３を含む。
【０３９４】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、例えば図１Ｂに示される、Ａ−Ｈ．１またはＡ−Ｈ．２の軽鎖フレームワーク領域４を含む。
【０３９５】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、例えば、Ｋａｂａｔの番号付けによる１０位における変化、例えば、置換（例えば、保存的置換）を含むフレームワーク領域、例えば、フレームワーク領域１（ＦＲ１）を含む軽鎖可変ドメインを含む。一部の実施形態では、ＦＲ１は、１０位におけるフェニルアラニン、例えば、セリンからフェニルアラニンへの置換を含む。一部の実施形態では、置換は、ヒト生殖系列軽鎖フレームワーク領域配列と比較したものである。
【０３９６】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、Ｋａｂａｔの番号付けによる本明細書に開示される位置における変化、例えば、置換（例えば、保存的置換）を含むフレームワーク領域、例えば、フレームワーク領域２（ＦＲ２）を含む軽鎖可変ドメインを含む。一部の実施形態では、ＦＲ２は、Ｋａｂａｔの番号付けによる３６位におけるヒスチジン、例えば、３６位における置換、例えば、チロシンからヒスチジンへの置換を含む。一部の実施形態では、ＦＲ２は、Ｋａｂａｔの番号付けによる４６位におけるアラニン、例えば、４６位における置換、例えば、アルギニンからアラニンへの置換を含む。一部の実施形態では、置換は、ヒト生殖系列軽鎖フレームワーク領域配列と比較したものである。
【０３９７】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、Ｋａｂａｔの番号付けによる本明細書に開示される位置における変化、例えば、置換（例えば、保存的置換）を含むフレームワーク領域、例えば、フレームワーク領域３（ＦＲ３）を含む軽鎖可変ドメインを含む。一部の実施形態では、ＦＲ３は、Ｋａｂａｔの番号付けによる８７位におけるフェニルアラニン、例えば、８７位における置換、例えば、チロシンからフェニルアラニンへの置換を含む。一部の実施形態では、置換は、ヒト生殖系列軽鎖フレームワーク領域配列と比較したものである。
【０３９８】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、例えば、配列番号１０のアミノ酸配列に示されるように、（ａ）Ｋａｂａｔの番号付けによる１０位におけるフェニルアラニン、例えば、１０位における置換、例えば、セリンからフェニルアラニンへの置換を含むフレームワーク領域１（ＦＲ１）、（ｂ）Ｋａｂａｔの番号付けによる３６位におけるヒスチジン、例えば、３６位における置換、例えば、チロシンからヒスチジンへの置換、およびＫａｂａｔの番号付けによる４６位におけるアラニン、例えば、４６位における置換、例えば、アルギニンからアラニンへの置換を含むフレームワーク領域２（ＦＲ２）、ならびに（ｃ）Ｋａｂａｔの番号付けによる８７位におけるフェニルアラニン、例えば、８７位における置換、例えば、チロシンからフェニルアラニンへの置換を含むフレームワーク領域３（ＦＲ３）を含む軽鎖可変ドメインを含む。一部の実施形態では、置換は、ヒト生殖系列軽鎖フレームワーク領域配列と比較したものである。
【０３９９】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、例えば、配列番号１１のアミノ酸配列に示されるように、（ａ）Ｋａｂａｔの番号付けによる３６位におけるヒスチジン、例えば、３６位における置換、例えば、チロシンからヒスチジンへの置換、およびＫａｂａｔの番号付けによる４６位におけるアラニン、例えば、４６位における置換、例えば、アルギニンからアラニンへの置換を含むフレームワーク領域２（ＦＲ２）、ならびに（ｂ）Ｋａｂａｔの番号付けによる８７位におけるフェニルアラニン、例えば、８７位における置換、例えば、チロシンからフェニルアラニンへの置換を含むフレームワーク領域３（ＦＲ３）を含む軽鎖可変ドメインを含む。一部の実施形態では、置換は、ヒト生殖系列軽鎖フレームワーク領域配列と比較したものである。
【０４００】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、（ａ）Ｋａｂａｔの番号付けによる本明細書に開示される１つまたは複数（例えば、すべて）の位置における変化、例えば、置換（例えば、保存的置換）を含むフレームワーク領域１（ＦＲ１）、（ｂ）Ｋａｂａｔの番号付けによる本明細書に開示される１つまたは複数（例えば、すべて）の位置における変化、例えば、置換（例えば、保存的置換）を含むフレームワーク領域２（ＦＲ２）、および（ｃ）Ｋａｂａｔの番号付けによる本明細書に開示される１つまたは複数（例えば、すべて）の位置における変化、例えば、置換（例えば、保存的置換）を含むフレームワーク領域３（ＦＲ３）を含む軽鎖可変ドメインを含む。一部の実施形態では、置換は、ヒト生殖系列軽鎖フレームワーク領域配列と比較したものである。
【０４０１】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、例えば図１Ａに示されるように、Ａ−Ｈ．１またはＡ−Ｈ．２の重鎖フレームワーク領域１を含む。
【０４０２】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、例えば図１Ａに示されるように、Ａ−Ｈ．１またはＡ−Ｈ．２の重鎖フレームワーク領域２を含む。
【０４０３】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、例えば図１Ａに示されるように、Ａ−Ｈ．１またはＡ−Ｈ．２の重鎖フレームワーク領域３を含む。
【０４０４】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、例えば図１Ａに示されるように、Ａ−Ｈ．１またはＡ−Ｈ．２の重鎖フレームワーク領域４を含む。
【０４０５】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、Ｋａｂａｔの番号付けによる本明細書に開示される位置における変化、例えば、置換（例えば、保存的置換）を含むフレームワーク領域、例えば、フレームワーク領域３（ＦＲ３）を含む重鎖可変ドメインを含む。一部の実施形態では、ＦＲ３は、Ｋａｂａｔの番号付けによる７３位におけるスレオニン、例えば、７３位における置換、例えば、グルタミン酸からスレオニンへの置換を含む。一部の実施形態では、ＦＲ３は、Ｋａｂａｔの番号付けによる９４位におけるグリシン、例えば、９４位における置換、例えば、アルギニンからグリシンへの置換を含む。一部の実施形態では、置換は、ヒト生殖系列重鎖フレームワーク領域配列と比較したものである。
【０４０６】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、例えば、配列番号１０のアミノ酸配列に示されるように、Ｋａｂａｔの番号付けによる７３位におけるスレオニン、例えば、７３位における置換、例えば、グルタミン酸からスレオニンへの置換、およびＫａｂａｔの番号付けによる９４位におけるグリシン、例えば、９４位における置換、例えば、アルギニンからグリシンへの置換を含むフレームワーク領域３（ＦＲ３）を含む重鎖可変ドメインを含む。
【０４０７】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、Ａ−Ｈ．１またはＡ−Ｈ．２の重鎖フレームワーク領域１〜４、例えば、配列番号９、または図１Ａおよび図１Ｂに示されるものを含む。
【０４０８】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、Ａ−Ｈ．１の軽鎖フレームワーク領域１〜４、例えば、配列番号１０のもの、または図１Ａおよび図１Ｂに示されるものを含む。
【０４０９】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、Ａ−Ｈ．２の軽鎖フレームワーク領域１〜４、例えば、配列番号１１、または図１Ａおよび図１Ｂに示されるものを含む。
【０４１０】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、Ａ−Ｈ．１の重鎖フレームワーク領域１〜４、例えば、配列番号９、およびＡ−Ｈ．１の軽鎖フレームワーク領域１〜４、例えば、配列番号１０、または図１Ａおよび図１Ｂに示されるものを含む。
【０４１１】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、Ａ−Ｈ．２の重鎖フレームワーク領域１〜４、例えば、配列番号９、およびＡ−Ｈ．２の軽鎖フレームワーク領域１〜４、例えば、配列番号１１、または図１Ａおよび図１Ｂに示されるものを含む。
【０４１２】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子の重鎖もしくは軽鎖可変ドメイン、または両方は、本明細書に開示されるアミノ酸に対して実質的に同一である、例えば、本明細書に記載の抗体、例えば、Ａ−Ｈ．１もしくはＡ−Ｈ．２から選択されるか、もしくは表１に記載されるか、もしくは表１中のヌクレオチド配列によってコードされる抗体の可変領域に対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一である、または本明細書に記載の抗体の可変領域から少なくとも１個もしくは５個の残基、かつ４０個、３０個、２０個、もしくは１０個未満の残基が異なる、アミノ酸配列を含む。
【０４１３】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、表１に示されるアミノ酸配列、またはそれに対して実質的に同一の配列（例えば、それに対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一である、もしくは表１に示される配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なる配列を有する少なくとも１つ、２つ、３つ、または４つの抗原結合性領域、例えば、可変領域を含む。別の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、表１に示されるヌクレオチド配列、またはそれに対して実質的に同一の配列（例えば、それに対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるか、もしくは表１に示される配列から３個、６個、１５個、３０個、もしくは４５個以下のヌクレオチドが異なる配列を有する核酸によってコードされるＶＨおよび／またはＶＬドメインを含む。
【０４１４】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、
配列番号９のアミノ酸配列、配列番号９のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、もしくは配列番号９のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン、および／または
配列番号１０のアミノ酸配列、配列番号１０のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、もしくは配列番号１０のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む。
【０４１５】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、
配列番号９のアミノ酸配列、配列番号９のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、もしくは配列番号９のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン、および／または
配列番号１１のアミノ酸配列、配列番号１１のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、もしくは配列番号１１のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む。
【０４１６】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、全長抗体またはその断片（例えば、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、もしくは一本鎖Ｆｖ断片（ｓｃＦｖ））である。実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、モノクローナル抗体または単一の特異性を有する抗体である。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子はまた、ヒト化、キメラ、ラクダ、サメ、またはｉｎ  ｖｉｔｒｏで生成された抗体分子であり得る。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、ヒト化抗体分子である。抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子の重鎖および軽鎖は、全長であり得（例えば、抗体は、少なくとも１つ、好ましくは２つの、完全重鎖、および少なくとも１つ、好ましくは２つの、完全軽鎖を含むことができる）、または抗原結合性断片（例えば、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、一本鎖Ｆｖ断片、単一ドメイン抗体、ダイアボディ（ｄＡｂ）、二価抗体、もしくは二特異性抗体もしくはその断片、その単一ドメインバリアント、もしくはラクダ抗体）を含むことができる。
【０４１７】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、例えば本明細書に記載される、多特異性分子、例えば、二特異性分子の形態である。
【０４１８】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＭ、ＩｇＡ１、ＩｇＡ２、ＩｇＤ、およびＩｇＥの重鎖定常領域から選択される重鎖定常領域（Ｆｃ）を有する。一部の実施形態では、Ｆｃ領域は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、およびＩｇＧ４の重鎖定常領域から選択される。一部の実施形態では、Ｆｃ領域は、ＩｇＧ１またはＩｇＧ２（例えば、ヒトＩｇＧ１、またはＩｇＧ２）の重鎖定常領域から選択される。一部の実施形態では、重鎖定常領域はヒトＩｇＧ１である。
【０４１９】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、例えば、カッパまたはラムダ、好ましくはカッパ（例えば、ヒトカッパ）の軽鎖定常領域から選択される軽鎖定常領域を有する。一実施形態では、定常領域は、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子の特性を修飾するため（例えば、Ｆｃ受容体結合、抗体グリコシル化、システイン残基の数、エフェクター細胞機能、または補体機能のうちの１つまたは複数を増加または減少させるため）に変更、例えば、突然変異されている。例えば、定常領域は、例えば、ヒトＩｇＧ１と比較して、Ｆｃ受容体結合を変更するために２９６位（ＭからＹへ）、２９８位（ＳからＴへ）、３００位（ＴからＥへ）、４７７位（ＨからＫへ）および４７８位（ＮからＦへ）において突然変異されている（例えば、突然変異した位置は、配列番号２１２もしくは２１４の１３２位（ＭからＹへ）、１３４位（ＳからＴへ）、１３６位（ＴからＥへ）、３１３位（ＨからＫへ）および３１４位（ＮからＦへ）、または配列番号２１５、２１６、２１７もしくは２１８の１３５位（ＭからＹへ）、１３７位（ＳからＴへ）、１３９位（ＴからＥへ）、３１６位（ＨからＫへ）および３１７位（ＮからＦへ）に対応する）。
【０４２０】
抗体Ａ−Ｈ．１は、配列番号３２７８のアミノ酸配列を含む重鎖および配列番号７２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。抗体Ａ−Ｈ．２は、配列番号３２７８のアミノ酸配列を含む重鎖および配列番号３２７９のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
【０４２１】
【表５−１】
2021530246.tif 000012
【０４２２】
【表５−２】
2021530246.tif 000013
【０４２３】
【表５−３】
2021530246.tif 000014
【０４２４】
【表５−４】
2021530246.tif 000015
【０４２５】
【表５−５】
2021530246.tif 000016
【０４２６】
【表５−６】
2021530246.tif 000017
【０４２７】
【表５−７】
2021530246.tif 000018
【０４２８】
【表５−８】
2021530246.tif 000019
【０４２９】
【表５−９】
2021530246.tif 000020
【０４３０】
【表５−１０】
2021530246.tif 000021
【０４３１】
【表５−１１】
2021530246.tif 000022
【０４３２】
【表５−１２】
2021530246.tif 000023
【０４３３】
【表５−１３】
2021530246.tif 000024
【０４３４】
【表５−１４】
2021530246.tif 000025
【０４３５】
【表５−１５】
2021530246.tif 000026
【０４３６】
【表５−１６】
2021530246.tif 000027
【０４３７】
【表５−１７】
2021530246.tif 000028
【０４３８】
【表５−１８】
2021530246.tif 000029
【０４３９】
【表５−１９】
2021530246.tif 000030
【０４４０】
【表５−２０】
2021530246.tif 000031
【０４４１】
【表５−２１】
2021530246.tif 000032
【０４４２】
【表５−２２】
2021530246.tif 000033
【０４４３】
【表５−２３】
2021530246.tif 000034
【０４４４】
【表５−２４】
2021530246.tif 000035
【０４４５】
【表５−２５】
2021530246.tif 000036
【０４４６】
【表５−２６】
2021530246.tif 000037
【０４４７】
【表５−２７】
2021530246.tif 000038
【０４４８】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、表１に記載の抗体のＶＨおよび／もしくはＶＬ、またはそれに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％もしくはより高い同一性を有する配列を含む。
【０４４９】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、表１に記載の抗体のＶＨおよびＶＬ、またはそれに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％もしくはより高い同一性を有する配列を含む。
親和性成熟したヒト化抗体Ａ−Ｈ  ＶＬ配列のアラインメント
【０４５０】
【化１】
2021530246.tif 000039
【０４５１】
【化２】
2021530246.tif 000040
【０４５２】
コンセンサスＶＬ：配列番号２３０
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＦＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＫＡＳＱＮＶ  Ｇ／Ｅ／Ａ／Ｄ  Ｎ／Ｄ  Ｒ／Ｋ  ＶＡＷ  Ｙ／Ｈ  ＱＱＫＰＧＫＡＰＫＡＬＩＹＳＳＳＨＲＹ  Ｋ／Ｓ  ＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＥＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＦＣＱＱＦＫＳＹＰＬＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ
コンセンサスＶＬ：配列番号３２８９
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＦＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＫＡＳＱＮＶＸ１Ｘ２Ｘ３ＶＡＷＸ４ＱＱＫＰＧＫＡＰＫＡＬＩＹＳＳＳＨＲＹＸ５  ＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＥＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＦＣＱＱＦＫＳＹＰＬＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ（Ｘ１は、Ｇ、Ｅ、ＡまたはＤであり、Ｘ２はＮまたはＤであり、Ｘ３はＲまたはＫであり、Ｘ４はＹまたはＨであり、Ｘ５はＫまたはＳである）
親和性成熟したヒト化抗体Ａ−Ｈ  ＶＨ配列のアラインメント
【０４５３】
【化３−１】
2021530246.tif 000041
【０４５４】
【化３−２】
2021530246.tif 000042
【０４５５】
【化３−３】
2021530246.tif 000043
【０４５６】
コンセンサスＶＨ：配列番号２３１
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧ  Ｈ／Ｔ／Ｇ／Ｙ  Ｄ／Ｔ／Ｓ  Ｆ  Ｈ／Ｒ／Ｄ／Ｋ／Ｔ  Ｌ／Ｄ／Ｋ／Ｔ／Ｎ  Ｗ／Ｆ／Ｔ／Ｉ／Ｙ／Ｇ    ＹＩＨＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧ  Ｒ／Ｗ  Ｖ／Ｉ／Ｆ  Ｆ／Ｓ／Ｙ    Ａ／Ｐ  ＧＳＧ  Ｎ／Ｓ  Ｔ／Ｖ／Ｙ／Ｉ  Ｋ／Ｒ  ＹＮＥＫＦＫＧＲＶＴＩＴＡＤＴＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡ  Ｇ／Ｖ  Ｓ  Ｙ／Ｉ  ＹＳ  Ｙ／Ａ  Ｄ／Ｇ  ＶＬＤＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ
コンセンサスＶＨ：配列番号３２９０
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＸ１Ｘ２ＦＸ３Ｘ４Ｘ５ＹＩＨＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＸ６Ｘ７Ｘ８Ｘ９ＧＳＧＸ１０Ｘ１１Ｘ１２ＹＮＥＫＦＫＧＲＶＴＩＴＡＤＴＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＸ１３ＳＸ１４ＹＳＸ１５Ｘ１６ＶＬＤＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ（Ｘ１はＨまたはＴまたはＧまたはＹであり、Ｘ２はＤまたはＴまたはＳであり、Ｘ３はＨまたはＲまたはＤまたはＫまたはＴであり、Ｘ４はＬまたはＤまたはＫまたはＴまたはＮであり、Ｘ５はＷまたはＦまたはＴまたはＩまたはＹまたはＧであり、Ｘ６はＲまたはＷであり、Ｘ７はＶまたはＩまたはＦであり、Ｘ８はＦまたはＳまたはＹであり、Ｘ９はＡまたはＰであり、Ｘ１０はＮまたはＳであり、Ｘ１１はＴまたはＶまたはＹまたはＩであり、Ｘ１２はＫまたはＲであり、Ｘ１３はＧまたはＶであり、Ｘ１４はＹまたはＩであり、Ｘ１５はＹまたはＡであり、Ｘ１６はＤまたはＧである）
一部の実施形態では、本明細書に開示される抗ＴＣＲＶｂ抗体は、配列番号２３０（３０位はＧ、Ｅ、ＡもしくはＤであり、３１位はＮもしくはＤであり、３２位はＲもしくはＫであり、３６位はＹもしくはＨであり、かつ／または５６位はＫもしくはＳである）のコンセンサス配列を有するＶＬを有する抗原結合性ドメインを有する。
【０４５７】
一部の実施形態では、本明細書に開示される抗ＴＣＲＶｂ抗体は、配列番号２３１（２７位はＨもしくはＴもしくはＧもしくはＹであり、２８位はＤもしくはＴもしくはＳであり、３０位はＨもしくはＲもしくはＤもしくはＫもしくはＴであり、３１位はＬもしくはＤもしくはＫもしくはＴもしくはＮであり、３２位はＷもしくはＦもしくはＴもしくはＩもしくはＹもしくはＧであり、４９位はＲもしくはＷであり、５０位はＶもしくはＩもしくはＦであり、５１位はＦもしくはＳもしくはＹであり、５２位はＡもしくはＰであり、５６位はＮもしくはＳであり、５７位はＴもしくはＶもしくはＹもしくはＩであり、５８位はＫもしくはＲであり、９７位はＧもしくはＶであり、９９位はＹもしくはＩであり、１０２位はＹもしくはＡであり、かつ／または１０３位はＤもしくはＧである）のコンセンサス配列を有するＶＨを有する抗原結合性ドメインを有する。
抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体
よって、一態様では、本開示は、ヒトＴＣＲβ  Ｖ１２、例えば、ＴＣＲβ  Ｖ１２−４＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ１２−３＊０１またはＴＣＲβ  Ｖ１２−５＊０１を含むＴＣＲβ  Ｖ１２サブファミリーに結合する抗ＴＣＲβＶ抗体分子を提供する。一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ１２サブファミリーはＴＣＲβ  Ｖ１２−４＊０１を含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ１２サブファミリーはＴＣＲβ  Ｖ１２−３＊０１を含む。
【０４５８】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は非マウス抗体分子、例えば、ヒトまたはヒト化抗体分子である。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子はヒト抗体分子である。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子はヒト化抗体分子である。
【０４５９】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、単離されているか、または組換えである。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、表２に記載されるか、もしくは表２中のヌクレオチド配列によってコードされる抗体からの少なくとも１つの抗原結合性領域、例えば、可変領域もしくはその抗原結合性断片、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）である配列を含む。
【０４６０】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、表２に記載されるか、もしくは表２中のヌクレオチド配列によってコードされる抗体からの少なくとも１つ、２つ、３つもしくは４つの可変領域、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）である配列を含む。
【０４６１】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、表２に記載されるか、もしくは表２中のヌクレオチド配列によってコードされる抗体からの少なくとも１つもしくは２つの重鎖可変領域、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）である配列を含む。
【０４６２】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、表２に記載されるか、もしくは表２中のヌクレオチド配列によってコードされる抗体からの少なくとも１つもしくは２つの軽鎖可変領域、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）である配列を含む。
【０４６３】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、ＩｇＧ４、例えば、ヒトＩｇＧ４の重鎖定常領域を含む。さらに別の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、ＩｇＧ１、例えば、ヒトＩｇＧ１の重鎖定常領域を含む。一実施形態では、重鎖定常領域は、表３に示されるアミノ酸配列、またはそれに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）である配列を含む。
【０４６４】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、カッパ軽鎖定常領域、例えば、ヒトカッパ軽鎖定常領域を含む。一実施形態では、軽鎖定常領域は、表３に示されるアミノ酸配列、またはそれに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）である配列を含む。
【０４６５】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、表２に記載されるか、もしくは表２中のヌクレオチド配列によってコードされる抗体の重鎖可変領域からの少なくとも１つ、２つ、もしくは３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）である配列を含む。
【０４６６】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、表２に示されるか、または表２に示されるヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域からの少なくとも１つ、２つ、または３つのＣＤＲ（またはＣＤＲのまとめてすべて）を含む。一実施形態では、ＣＤＲのうちの１つまたは複数（またはＣＤＲのまとめてすべて）は、表２に示されるか、または表２に示されるヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列と比較して、１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つまたはより多くの変化、例えば、アミノ酸置換または欠失を有する。
【０４６７】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、表２に記載されるか、もしくは表２中のヌクレオチド配列によってコードされる抗体の軽鎖可変領域からの少なくとも１つ、２つ、もしくは３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）である配列を含む。
【０４６８】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、表２に示されるか、または表２に示されるヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域からの少なくとも１つ、２つ、または３つのＣＤＲ（またはＣＤＲのまとめてすべて）を含む。一実施形態では、ＣＤＲのうちの１つまたは複数（またはＣＤＲのまとめてすべて）は、表２に示されるか、または表２に示されるヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列と比較して、１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つまたはより多くの変化、例えば、アミノ酸置換または欠失を有する。
【０４６９】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、表２に示されるか、または表２に示されるヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列を含む重鎖および軽鎖可変領域からの少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つまたは６つのＣＤＲ（またはＣＤＲのまとめてすべて）を含む。一実施形態では、ＣＤＲのうちの１つまたは複数（またはＣＤＲのまとめてすべて）は、表２に示されるか、または表２に示されるヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列と比較して、１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つまたはより多くの変化、例えば、アミノ酸置換または欠失を有する。
【０４７０】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、表２に記載されるか、もしくは表２中のヌクレオチド配列によってコードされる抗体からの６つすべてのＣＤＲ、または密接に関連したＣＤＲ、例えば、同一であるか、もしくは少なくとも１つのアミノ酸変更であるが２つ、３つもしくは４つ以下である変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するＣＤＲを含む。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の任意のＣＤＲを含んでもよい。
【０４７１】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、表２に記載される選択された抗体の重鎖可変領域からのＫａｂａｔらによる少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲ（例えば、表２に示されるＫａｂａｔの定義による少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲ）、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）であるか、もしくは表２に示されるＫａｂａｔらによる１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲと比較して、少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、２つ、３つもしくは４つ以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する配列を含む。
【０４７２】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、表２に記載される抗体の軽鎖可変領域からのＫａｂａｔらによる少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲ（例えば、表２に示されるＫａｂａｔの定義による少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲ）、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）であるか、もしくは表２に示されるＫａｂａｔらによる１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲと比較して、少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、２つ、３つもしくは４つ以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する配列を含む。
【０４７３】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、表２に記載されるか、もしくは表２中のヌクレオチド配列によってコードされる抗体の重鎖および軽鎖可変領域からのＫａｂａｔらによる少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つのＣＤＲ（例えば、表２に示されるＫａｂａｔの定義による少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つのＣＤＲ）、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）であるか、もしくは表２に示されるＫａｂａｔらによる１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つのＣＤＲと比較して、少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、２つ、３つもしくは４つ以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する配列を含む。
【０４７４】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、表２に記載されるか、もしくは表２中のヌクレオチド配列によってコードされるような抗体の重鎖および軽鎖可変領域からのＫａｂａｔらによる６つすべてのＣＤＲ（例えば、表２に示されるＫａｂａｔの定義による６つすべてのＣＤＲ）、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）であるか、もしくは表２に示されるＫａｂａｔらによる６つすべてのＣＤＲと比較して、少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、２つ、３つもしくは４つ以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する配列を含む。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の任意のＣＤＲを含んでもよい。
【０４７５】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、表２に記載の抗体の対応する超可変ループと同じカノニカルな構造、例えば、本明細書に記載の抗体の重鎖および／または軽鎖可変ドメインの少なくともループ１および／またはループ２と同じカノニカルな構造を有する少なくとも１つ、２つ、または３つの超可変ループを含む。例えば、超可変ループのカノニカルな構造の記載についてＣｈｏｔｈｉａら、（１９９２）  Ｊ．  Ｍｏｌ．  Ｂｉｏｌ．  ２２７：７９９〜８１７ページ；Ｔｏｍｌｉｎｓｏｎら、（１９９２）  Ｊ．  Ｍｏｌ．  Ｂｉｏｌ．  ２２７：７７６−７９８ページを参照。これらの構造は、これらの参考文献に記載の表の検査によって決定することができる。
【０４７６】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、表２に記載される選択された抗体の重鎖可変領域からのＣｈｏｔｈｉａらによる少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲ（例えば、表２に示されるＣｈｏｔｈｉａの定義による少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲ）、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）であるか、もしくは表２に示されるＣｈｏｔｈｉａらによる１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲと比較して、少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、２つ、３つもしくは４つ以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する配列を含む。
【０４７７】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、表２に記載される抗体の軽鎖可変領域からのＣｈｏｔｈｉａらによる少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲ（例えば、表２に示されるＣｈｏｔｈｉａの定義による少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲ）、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）であるか、もしくは表２に示されるＣｈｏｔｈｉａらによる１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲと比較して、少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、２つ、３つもしくは４つ以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する配列を含む。
【０４７８】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、表２に記載されるか、もしくは表２中のヌクレオチド配列によってコードされる抗体の重鎖および軽鎖可変領域からのＣｈｏｔｈｉａらによる少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つのＣＤＲ（例えば、表２に示されるＣｈｏｔｈｉａの定義による少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つのＣＤＲ）、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）であるか、もしくは表２に示されるＣｈｏｔｈｉａらによる１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つのＣＤＲと比較して、少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、２つ、３つもしくは４つ以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する配列を含む。
【０４７９】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、表２に記載されるか、もしくは表２中のヌクレオチド配列によってコードされるような抗体の重鎖および軽鎖可変領域からのＣｈｏｔｈｉａらによる６つすべてのＣＤＲ（例えば、表２に示されるＣｈｏｔｈｉａの定義による６つすべてのＣＤＲ）、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）であるか、もしくは表２に示されるＣｈｏｔｈｉａらによる６つすべてのＣＤＲと比較して、少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、２つ、３つもしくは４つ以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する配列を含む。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の任意のＣＤＲを含んでもよい。
【０４８０】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、表２に記載される選択された抗体の重鎖可変領域からの組合せＣＤＲによる少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲ（例えば、表２に示される組合せＣＤＲの定義による少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲ）、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）であるか、もしくは表２に示される組合せＣＤＲによる１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲと比較して、少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、２つ、３つもしくは４つ以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する配列を含む。
【０４８１】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、表２に記載される抗体の軽鎖可変領域からの組合せＣＤＲによる少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲ（例えば、表２に示される組合せＣＤＲの定義による少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲ）、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）であるか、もしくは表２に示される組合せＣＤＲによる１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲと比較して、少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、２つ、３つもしくは４つ以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する配列を含む。
【０４８２】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、表２に記載されるか、もしくは表２中のヌクレオチド配列によってコードされる抗体の重鎖および軽鎖可変領域からの組合せＣＤＲによる少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つのＣＤＲ（例えば、表２に示される組合せＣＤＲの定義による少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つのＣＤＲ）、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）であるか、もしくは表２に示される組合せＣＤＲによる１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つのＣＤＲと比較して、少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、２つ、３つもしくは４つ以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する配列を含む。
【０４８３】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、表２に記載されるか、もしくは表２中のヌクレオチド配列によってコードされるような抗体の重鎖および軽鎖可変領域からの組合せＣＤＲによる６つすべてのＣＤＲ（例えば、表２に示される組合せＣＤＲの定義による６つすべてのＣＤＲ）、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）であるか、もしくは表２に示される組合せＣＤＲによる６つすべてのＣＤＲと比較して、少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、２つ、３つもしくは４つ以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する配列を含む。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の任意のＣＤＲを含んでもよい。
【０４８４】
一部の実施形態では、表１に示される組合せＣＤＲは、Ｋａｂａｔ  ＣＤＲおよびＣｈｏｔｈｉａ  ＣＤＲを含むＣＤＲである。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、表１において組合せＣＤＲとして同定されるＣＤＲまたは超可変ループの組合せを含む。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、表１に記載される「組合せ」ＣＤＲによるＣＤＲまたは超可変ループの任意の組合せを含有し得る。
【０４８５】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、ＫａｂａｔらおよびＣｈｏｔｈｉａらに従って定義されるか、または表１に記載されるＣＤＲまたは超可変ループの組合せを含む。
【０４８６】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、ＫａｂａｔおよびＣｈｏｔｈｉａの定義によるＣＤＲまたは超可変ループの任意の組合せを含有し得る。
【０４８７】
一実施形態では、例えば、本明細書、例えば、表２において言及される可変領域、ＣＤＲ（例えば、組合せＣＤＲ、Ｃｈｏｔｈｉａ  ＣＤＲもしくはＫａｂａｔ  ＣＤＲ）、または他の配列を含む一実施形態では、抗体分子は、単一特異性抗体分子、二特異性抗体分子、二価抗体分子、二重パラトープ性抗体分子、または抗体の抗原結合性断片を含む抗体分子、例えば、半抗体もしくは半抗体の抗原結合性断片である。ある特定の実施形態では、抗体分子は、例えば本明細書に記載される、多特異性分子、例えば、二特異性分子を含む。
【０４８８】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、
（ｉ）配列番号１６、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９もしくは配列番号３０の軽鎖相補性決定領域１（ＬＣ  ＣＤＲ１）、軽鎖相補性決定領域２（ＬＣ  ＣＤＲ２）、および軽鎖相補性決定領域３（ＬＣ  ＣＤＲ３）のうちの１つ、２つもしくはすべて、ならびに／または
（ｉｉ）配列番号１５、配列番号２３、配列番号２４もしくは配列番号２５の重鎖相補性決定領域１（ＨＣ  ＣＤＲ１）、重鎖相補性決定領域２（ＨＣ  ＣＤＲ２）、および重鎖相補性決定領域３（ＨＣ  ＣＤＲ３）のうちの１つ、２つもしくはすべてを含む。
【０４８９】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、
（ｉ）配列番号２０のＬＣ  ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号２１のＬＣ  ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号２２のＬＣ  ＣＤＲ３アミノ酸配列、および／または
（ｉｉ）配列番号１７のＨＣ  ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号１８のＨＣ  ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号１９のＨＣ  ＣＤＲ３アミノ酸配列
を含む。
【０４９０】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、
（ｉ）配列番号２０のＬＣ  ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号２１のＬＣ  ＣＤＲ２アミノ酸配列、および配列番号２のＬＣ  ＣＤＲ３アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、ならびに／または
（ｉｉ）配列番号１７のＨＣ  ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号１８のＨＣ  ＣＤＲ２アミノ酸配列、および配列番号１９のＨＣ  ＣＤＲ３アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）
を含む。
【０４９１】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、
（ｉ）配列番号６３のＬＣ  ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号６４のＬＣ  ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号６５のＬＣ  ＣＤＲ３アミノ酸配列、および／または
（ｉｉ）配列番号５７のＨＣ  ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号５８のＨＣ  ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号５９のＨＣ  ＣＤＲ３アミノ酸配列
を含む。
【０４９２】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、
（ｉ）配列番号６３のＬＣ  ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号６４のＬＣ  ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号６５のＬＣ  ＣＤＲ３アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、および／または
（ｉｉ）配列番号５７のＨＣ  ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号５８のＨＣ  ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号５９のＨＣ  ＣＤＲ３アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）
を含む。
【０４９３】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、
（ｉ）配列番号６６のＬＣ  ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号６７のＬＣ  ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号６８のＬＣ  ＣＤＲ３アミノ酸配列、および／または
（ｉｉ）配列番号６０のＨＣ  ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号６１のＨＣ  ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号６２のＨＣ  ＣＤＲ３アミノ酸配列
を含む。
【０４９４】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、
（ｉ）配列番号６３のＬＣ  ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号６４のＬＣ  ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号６５のＬＣ  ＣＤＲ３アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、および／または
（ｉｉ）配列番号５７のＨＣ  ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号５８のＨＣ  ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号５９のＨＣ  ＣＤＲ３アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）
を含む。
【０４９５】
一実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子の軽鎖または重鎖可変フレームワーク（例えば、少なくともＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、および必要に応じてＦＲ４を包含する領域）は、（ａ）ヒト軽鎖もしくは重鎖可変フレームワークからのアミノ酸残基、例えば、ヒト成熟抗体、ヒト生殖系列配列、もしくはヒトコンセンサス配列からの軽鎖もしくは重鎖可変フレームワーク残基のうちの少なくとも８０％、８５％、８７％  ９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％、もしくは１００％を含む軽鎖もしくは重鎖可変フレームワーク、（ｂ）ヒト軽鎖もしくは重鎖可変フレームワークからのアミノ酸残基、例えば、ヒト成熟抗体、ヒト生殖系列配列、もしくはヒトコンセンサス配列からの軽鎖もしくは重鎖可変フレームワーク残基の２０％〜８０％、４０％〜６０％、６０％〜９０％、もしくは７０％〜９５％を含む軽鎖もしくは重鎖可変フレームワーク、（ｃ）非ヒトフレームワーク（例えば、齧歯動物フレームワーク）、または（ｄ）例えば抗原性もしくは細胞傷害性決定因子を除去するように、修飾されている、例えば、脱免疫化、もしくは部分的にヒト化されている非ヒトフレームワークから選択することができる。一実施形態では、軽鎖または重鎖可変フレームワーク領域（特に、ＦＲ１、ＦＲ２および／またはＦＲ３）は、ヒト生殖系列遺伝子のＶＬまたはＶＨセグメントのフレームワークに対して少なくとも７０、７５、８０、８５、８７、８８、９０、９２、９４、９５、９６、９７、９８、９９％同一のまたは同一の軽鎖または重鎖可変フレームワーク配列を含む。
【０４９６】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、表２に記載のアミノ酸配列からの、例えば、例えば図２Ａおよび図２Ｂに示されるか、または配列番号２３〜２５における、可変領域全体中のＦＲ領域のアミノ酸配列からの少なくとも１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、１０個、１５個、２０個またはより多くの変化、例えば、アミノ酸置換または欠失を有する重鎖可変ドメインを含む。
【０４９７】
代替的に、または本明細書に記載の重鎖置換と組み合わせて、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の抗体のアミノ酸配列からの、例えば、例えば図２Ａおよび図２Ｂに示されるか、または配列番号２６〜３０における、可変領域全体中のＦＲ領域のアミノ酸配列からの少なくとも１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、１０個、１５個、２０個またはより多くのアミノ酸変化、例えば、アミノ酸置換または欠失を有する軽鎖可変ドメインを含む。
【０４９８】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、図２Ａに示される１つ、２つ、３つ、もしくは４つの重鎖フレームワーク領域、またはそれに対して実質的に同一の配列を含む。
【０４９９】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、図２Ｂに示される１つ、２つ、３つ、もしくは４つの軽鎖フレームワーク領域、またはそれに対して実質的に同一の配列を含む。
【０５００】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、例えば図２Ｂに示される、軽鎖フレームワーク領域１を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、例えば図２Ｂに示される、軽鎖フレームワーク領域２を含む。
【０５０１】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、例えば図２Ｂに示される、軽鎖フレームワーク領域３を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、例えば図２Ｂに示される、軽鎖フレームワーク領域４を含む。
【０５０２】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、Ｋａｂａｔの番号付けによる本明細書に開示される１つまたは複数の、例えば、すべての、位置における変化、例えば、置換（例えば、保存的置換）を含むフレームワーク領域、例えば、フレームワーク領域１（ＦＲ１）を含む軽鎖を含む。一部の実施形態では、ＦＲ１は、Ｋａｂａｔの番号付けによる１位におけるアスパラギン酸、例えば、１位における置換、例えば、アラニンからアスパラギン酸への置換を含む。一部の実施形態では、ＦＲ１は、Ｋａｂａｔの番号付けによる２位におけるアスパラギン、例えば、２位における置換、例えば、イソロイシンからアスパラギンへの置換、セリンからアスパラギンへの置換またはチロシンからアスパラギンへの置換を含む。一部の実施形態では、ＦＲ１は、Ｋａｂａｔの番号付けによる４位におけるロイシン、例えば、４位における置換、例えば、メチオニンからロイシンへの置換を含む。
【０５０３】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、Ｋａｂａｔの番号付けによる１位における置換、例えば、アラニンからアスパラギン酸への置換、Ｋａｂａｔの番号付けによる２位における置換、例えば、イソロイシンからアスパラギンへの置換、セリンからアスパラギンへの置換またはチロシンからアスパラギンへの置換、およびＫａｂａｔの番号付けによる４位における置換、例えば、メチオニンからロイシンへの置換を含むフレームワーク領域、例えば、フレームワーク領域１（ＦＲ１）を含む軽鎖を含む。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、Ｋａｂａｔの番号付けによる１位における置換、例えば、アラニンからアスパラギン酸への置換、およびＫａｂａｔの番号付けによる２位における置換、例えば、イソロイシンからアスパラギンへの置換、セリンからアスパラギンへの置換またはチロシンからアスパラギンへの置換を含むフレームワーク領域、例えば、フレームワーク領域１（ＦＲ１）を含む軽鎖を含む。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、Ｋａｂａｔの番号付けによる１位における置換、例えば、アラニンからアスパラギン酸への置換、およびＫａｂａｔの番号付けによる４位における置換、例えば、メチオニンからロイシンへの置換を含むフレームワーク領域、例えば、フレームワーク領域１（ＦＲ１）を含む軽鎖を含む。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、Ｋａｂａｔの番号付けによる２位における置換、例えば、イソロイシンからアスパラギンへの置換、セリンからアスパラギンへの置換またはチロシンからアスパラギンへの置換、およびＫａｂａｔの番号付けによる４位における置換、例えば、メチオニンからロイシンへの置換を含むフレームワーク領域、例えば、フレームワーク領域１（ＦＲ１）を含む軽鎖を含む。一部の実施形態では、置換は、ヒト生殖系列軽鎖フレームワーク領域配列と比較したものである。
【０５０４】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、Ｋａｂａｔの番号付けによる本明細書に開示される１つまたは複数の、例えば、すべての、位置における変化、例えば、置換（例えば、保存的置換）を含むフレームワーク領域、例えば、フレームワーク領域３（ＦＲ３）を含む軽鎖を含む。一部の実施形態では、ＦＲ３は、Ｋａｂａｔの番号付けによる６６位におけるグリシン、例えば、６６位における置換、例えば、リシンからグリシンへの置換、またはセリンからグリシンへの置換を含む。一部の実施形態では、ＦＲ３は、Ｋａｂａｔの番号付けによる６９位におけるアスパラギン、例えば、６９位における置換、例えば、チロシンからアスパラギンへの置換を含む。一部の実施形態では、ＦＲ３は、Ｋａｂａｔの番号付けによる７１位におけるチロシン、例えば、７１位における置換、例えば、フェニルアラニンからチロシンへの置換、またはアラニンからチロシンへの置換を含む。
【０５０５】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、Ｋａｂａｔの番号付けによる６６位における置換、例えば、リシンからグリシンへの置換、またはセリンからグリシンへの置換、およびＫａｂａｔの番号付けによる６９位における置換、例えば、チロシンからアスパラギンへの置換を含むフレームワーク領域、例えば、フレームワーク領域３（ＦＲ３）を含む軽鎖を含む。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、Ｋａｂａｔの番号付けによる６６位における置換、例えば、リシンからグリシンへの置換、またはセリンからグリシンへの置換、およびＫａｂａｔの番号付けによる７１位における置換、例えば、フェニルアラニンからチロシンへの置換、またはアラニンからチロシンへの置換を含むフレームワーク領域、例えば、フレームワーク領域３（ＦＲ３）を含む軽鎖を含む。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、Ｋａｂａｔの番号付けによる６９位における置換、例えば、チロシンからアスパラギンへの置換およびＫａｂａｔの番号付けによる７１位における置換、例えば、フェニルアラニンからチロシンへの置換、またはアラニンからチロシンへの置換を含むフレームワーク領域、例えば、フレームワーク領域３（ＦＲ３）を含む軽鎖を含む。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、Ｋａｂａｔの番号付けによる６６位における置換、例えば、リシンからグリシンへの置換、またはセリンからグリシンへの置換、Ｋａｂａｔの番号付けによる６９位における置換、例えば、チロシンからアスパラギンへの置換およびＫａｂａｔの番号付けによる７１位における置換、例えば、フェニルアラニンからチロシンへの置換、またはアラニンからチロシンへの置換を含むフレームワーク領域、例えば、フレームワーク領域３（ＦＲ３）を含む軽鎖を含む。一部の実施形態では、置換は、ヒト生殖系列軽鎖フレームワーク領域配列と比較したものである。
【０５０６】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、例えば、配列番号２６のアミノ酸配列に示されるように、Ｋａｂａｔの番号付けによる２位における置換、例えば、イソロイシンからアスパラギンへの置換を含むフレームワーク領域１（ＦＲ１）、ならびにＫａｂａｔの番号付けによる６９位における置換、例えば、スレオニンからアスパラギンへの置換およびＫａｂａｔの番号付けによる７１位における置換、例えば、フェニルアラニンからチロシンへの置換を含むフレームワーク領域３（ＦＲ３）を含む軽鎖を含む。一部の実施形態では、置換は、ヒト生殖系列軽鎖フレームワーク領域配列と比較したものである。
【０５０７】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、例えば、配列番号２７のアミノ酸配列に示されるように、（ａ）Ｋａｂａｔの番号付けによる１位における置換、例えば、アラニンからアスパラギン酸への置換、およびＫａｂａｔの番号付けによる２位における置換、例えば、イソロイシンからアスパラギンへの置換を含むフレームワーク領域１（ＦＲ１）、ならびに（ｂ）Ｋａｂａｔの番号付けによる６９位における置換、例えば、スレオニンからアスパラギンへの置換およびＫａｂａｔの番号付けによる７１位における置換、例えば、フェニルアラニンからチロシンへの置換を含むフレームワーク領域３（ＦＲ３）を含む軽鎖を含む。一部の実施形態では、置換は、ヒト生殖系列軽鎖フレームワーク領域配列と比較したものである。
【０５０８】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、例えば、配列番号２８のアミノ酸配列に示されるように、（ａ）Ｋａｂａｔの番号付けによる２位における置換、例えば、セリンからアスパラギンへの置換、およびＫａｂａｔの番号付けによる４位における置換、例えば、メチオニンからロイシンへの置換を含むフレームワーク領域１（ＦＲ１）、ならびに（ｂ）Ｋａｂａｔの番号付けによる６９位における置換、例えば、スレオニンからアスパラギンへの置換およびＫａｂａｔの番号付けによる７１位における置換、例えば、フェニルアラニンからチロシンへの置換を含むフレームワーク領域３（ＦＲ３）を含む軽鎖を含む。一部の実施形態では、置換は、ヒト生殖系列軽鎖フレームワーク領域配列と比較したものである。
【０５０９】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、例えば、配列番号２９のアミノ酸配列に示されるように、（ａ）Ｋａｂａｔの番号付けによる２位における置換、例えば、セリンからアスパラギンへの置換を含むフレームワーク領域１（ＦＲ１）、ならびに（ｂ）Ｋａｂａｔの番号付けによる６６位における置換、例えば、リシンからグリシンへの置換、Ｋａｂａｔの番号付けによる６９位における置換、例えば、スレオニンからアスパラギンへの置換、およびＫａｂａｔの番号付けによる７１位における置換、例えば、アラニンからチロシンへの置換を含むフレームワーク領域３（ＦＲ３）を含む軽鎖を含む。一部の実施形態では、置換は、ヒト生殖系列軽鎖フレームワーク領域配列と比較したものである。
【０５１０】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、例えば、配列番号２９のアミノ酸配列に示されるように、（ａ）Ｋａｂａｔの番号付けによる２位における置換、例えば、チロシンからアスパラギンへの置換を含むフレームワーク領域１（ＦＲ１）、ならびに（ｂ）Ｋａｂａｔの番号付けによる６６位における置換、例えば、セリンからグリシンへの置換、Ｋａｂａｔの番号付けによる６９位における置換、例えば、スレオニンからアスパラギンへの置換、およびＫａｂａｔの番号付けによる７１位における置換、例えば、アラニンからチロシンへの置換を含むフレームワーク領域３（ＦＲ３）を含む軽鎖を含む。一部の実施形態では、置換は、ヒト生殖系列軽鎖フレームワーク領域配列と比較したものである。
【０５１１】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、（ａ）Ｋａｂａｔの番号付けによる本明細書に開示される１つまたは複数（例えば、すべて）の位置における変化、例えば、置換（例えば、保存的置換）を含むフレームワーク領域１（ＦＲ１）、および（ｂ）Ｋａｂａｔの番号付けによる本明細書に開示される１つまたは複数（例えば、すべて）の位置における変化、例えば、置換（例えば、保存的置換）を含むフレームワーク領域３（ＦＲ３）を含む軽鎖可変ドメインを含む。一部の実施形態では、置換は、ヒト生殖系列軽鎖フレームワーク領域配列と比較したものである。
【０５１２】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、例えば図２Ａに示される、重鎖フレームワーク領域１を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、例えば図２Ａに示される、重鎖フレームワーク領域２を含む。
【０５１３】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、例えば図２Ａに示される、重鎖フレームワーク領域３を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、例えば図２Ａに示される、重鎖フレームワーク領域４を含む。
【０５１４】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、重鎖フレームワーク領域１〜４、例えば、配列番号２０〜２３、または図２Ａに示されるものを含む。
【０５１５】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、軽鎖フレームワーク領域１〜４、例えば、配列番号２６〜３０、または図２Ｂに示されるものを含む。
【０５１６】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、重鎖フレームワーク領域１〜４、例えば、配列番号２３〜２５、ならびに軽鎖フレームワーク領域１〜４、例えば、配列番号２６〜３０、または図２Ａおよび図２Ｂに示されるものを含む。
【０５１７】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子の重鎖もしくは軽鎖可変ドメイン、または両方は、本明細書に開示されるアミノ酸に対して実質的に同一である、例えば、本明細書に記載の抗体、例えば、表２に記載されるか、もしくは表２中のヌクレオチド配列によってコードされる抗体の可変領域に対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一である、または本明細書に記載の抗体の可変領域から少なくとも１個もしくは５個の残基、かつ４０個、３０個、２０個、もしくは１０個未満の残基が異なるアミノ酸配列を含む。
【０５１８】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、表２に示されるアミノ酸配列、またはそれに対して実質的に同一の配列（例えば、それに対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるか、もしくは表２に示される配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なる配列を有する少なくとも１つ、２つ、３つ、または４つの抗原結合性領域、例えば、可変領域を含む。別の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、表２に示されるヌクレオチド配列、またはそれに対して実質的に同一の配列（例えば、それに対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるか、もしくは表２に示される配列から３個、６個、１５個、３０個、もしくは４５個以下のヌクレオチドが異なる配列を有する核酸によってコードされるＶＨおよび／またはＶＬドメインを含む。
【０５１９】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、
配列番号２３、配列番号２４もしくは配列番号２５のアミノ酸配列、配列番号２３、配列番号２４もしくは配列番号２５のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２３、配列番号２４もしくは配列番号２５のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列から選択されるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン、および／または
配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９もしくは配列番号３０のアミノ酸配列、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９もしくは配列番号３０のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９もしくは配列番号３０のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列から選択されるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む。
【０５２０】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、
配列番号２３のアミノ酸配列、配列番号２３のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２３のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン、および
配列番号２６のアミノ酸配列、配列番号２６のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２６のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む。
【０５２１】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、
配列番号２３のアミノ酸配列、配列番号２３のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２３のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン、および
配列番号２７のアミノ酸配列、配列番号２７のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２７のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む。
【０５２２】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、
配列番号２３のアミノ酸配列、配列番号２３のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２３のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン、および
配列番号２８のアミノ酸配列、配列番号２８のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２８のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む。
【０５２３】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、
配列番号２３のアミノ酸配列、配列番号２３のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２３のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン、および
配列番号２９のアミノ酸配列、配列番号２９のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２９のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む。
【０５２４】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、
配列番号２３のアミノ酸配列、配列番号２３のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２３のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン、および
配列番号３０のアミノ酸配列、配列番号３０のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号３０のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む。
【０５２５】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、
配列番号２４のアミノ酸配列、配列番号２４のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２４のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン、および
配列番号２６のアミノ酸配列、配列番号２６のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２６のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む。
【０５２６】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、
配列番号２４のアミノ酸配列、配列番号２４のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２４のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン、および
配列番号２７のアミノ酸配列、配列番号２７のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２７のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む。
【０５２７】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、
配列番号２４のアミノ酸配列、配列番号２４のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２４のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン、および
配列番号２８のアミノ酸配列、配列番号２８のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２８のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む。
【０５２８】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、
配列番号２４のアミノ酸配列、配列番号２４のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２４のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン、および
配列番号２９のアミノ酸配列、配列番号２９のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２９のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む。
【０５２９】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、
配列番号２４のアミノ酸配列、配列番号２４のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２４のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン、および
配列番号３０のアミノ酸配列、配列番号３０のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号３０のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む。
【０５３０】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、
配列番号２５のアミノ酸配列、配列番号２５のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２５のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン、および
配列番号２６のアミノ酸配列、配列番号２６のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２６のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む。
【０５３１】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、
配列番号２５のアミノ酸配列、配列番号２５のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２５のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン、および
配列番号２７のアミノ酸配列、配列番号２７のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２７のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む。
【０５３２】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、
配列番号２５のアミノ酸配列、配列番号２５のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２５のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン、および
配列番号２８のアミノ酸配列、配列番号２８のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２８のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む。
【０５３３】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、
配列番号２５のアミノ酸配列、配列番号２５のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２５のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン、および
配列番号２９のアミノ酸配列、配列番号２９のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２９のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む。
【０５３４】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、
配列番号２５のアミノ酸配列、配列番号２５のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２５のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン、および
配列番号３０のアミノ酸配列、配列番号３０のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号３０のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む。
【０５３５】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、全長抗体またはその断片（例えば、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、もしくは一本鎖Ｆｖ断片（ｓｃＦｖ））である。実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１）抗体分子は、モノクローナル抗体または単一の特異性を有する抗体である。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子はまた、ヒト化、キメラ、ラクダ、サメ、またはｉｎ  ｖｉｔｒｏで生成された抗体分子であり得る。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子はヒト化抗体分子である。抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子の重鎖および軽鎖は、全長であり得（例えば、抗体は、少なくとも１つ、好ましくは２つの、完全重鎖、および少なくとも１つ、好ましくは２つの、完全軽鎖を含むことができる）、または抗原結合性断片（例えば、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、一本鎖Ｆｖ断片、単一ドメイン抗体、ダイアボディ（ｄＡｂ）、二価抗体、もしくは二特異性抗体もしくはその断片、その単一ドメインバリアント、もしくはラクダ抗体）を含むことができる。
【０５３６】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、例えば本明細書に記載される、多特異性分子、例えば、二特異性分子の形態である。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＭ、ＩｇＡ１、ＩｇＡ２、ＩｇＤ、およびＩｇＥの重鎖定常領域から選択される重鎖定常領域（Ｆｃ）を有する。一部の実施形態では、Ｆｃ領域は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、およびＩｇＧ４の重鎖定常領域から選択される。一部の実施形態では、Ｆｃ領域は、ＩｇＧ１またはＩｇＧ２（例えば、ヒトＩｇＧ１、またはＩｇＧ２）の重鎖定常領域から選択される。一部の実施形態では、重鎖定常領域はヒトＩｇＧ１である。
【０５３７】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子は、例えば、カッパまたはラムダ、好ましくはカッパ（例えば、ヒトカッパ）の軽鎖定常領域から選択される軽鎖定常領域を有する。一実施形態では、定常領域は、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ  Ｖ１２抗体分子の特性を修飾するため（例えば、Ｆｃ受容体結合、抗体グリコシル化、システイン残基の数、エフェクター細胞機能、または補体機能のうちの１つまたは複数を増加または減少させるため）に変更、例えば、突然変異されている。例えば、定常領域は、Ｆｃ受容体結合を変更するために２９６位（ＭからＹへ）、２９８位（ＳからＴへ）、３００位（ＴからＥへ）、４７７位（ＨからＫへ）および４７８位（ＮからＦへ）において突然変異されている（例えば、突然変異した位置は、配列番号２１２もしくは２１４の１３２位（ＭからＹへ）、１３４位（ＳからＴへ）、１３６位（ＴからＥへ）、３１３位（ＨからＫへ）および３１４位（ＮからＦへ）、または配列番号２１５、２１６、２１７もしくは２１８の１３５位（ＭからＹへ）、１３７位（ＳからＴへ）、１３９位（ＴからＥへ）、３１６位（ＨからＫへ）および３１７位（ＮからＦへ）に対応する）。
【０５３８】
抗体Ｂ−Ｈ．１は、配列番号３２８０のアミノ酸配列を含む第１の鎖および配列番号３２８１のアミノ酸配列を含む第２の鎖を含む。
【０５３９】
【表６−１】
2021530246.tif 000044
【０５４０】
【表６−２】
2021530246.tif 000045
【０５４１】
【表６−３】
2021530246.tif 000046
【０５４２】
【表６−４】
2021530246.tif 000047
【０５４３】
【表６−５】
2021530246.tif 000048
【０５４４】
【表７】
2021530246.tif 000049
【０５４５】
抗ＴＣＲβ  Ｖ５抗体
よって、一態様では、本開示は、ヒトＴＣＲβ  Ｖ５に結合する抗ＴＣＲβＶ抗体分子を提供する。一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ５サブファミリーは、ＴＣＲβ  Ｖ５−５＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ５−６＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ５−４＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ５−８＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ５−１＊０１、またはそのバリアントを含む。
【０５４６】
【表８−１】
2021530246.tif 000050
【０５４７】
【表８−２】
2021530246.tif 000051
【０５４８】
【表８−３】
2021530246.tif 000052
【０５４９】
【表８−４】
2021530246.tif 000053
【０５５０】
【表８−５】
2021530246.tif 000054
【０５５１】
【表８−６】
2021530246.tif 000055
【０５５２】
【表８−７】
2021530246.tif 000056
【０５５３】
【表８−８】
2021530246.tif 000057
【０５５４】
抗体Ｅは、配列番号３２８４のアミノ酸配列を含む重鎖および配列番号３２８５のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
【０５５５】
【表９−１】
2021530246.tif 000058
【０５５６】
【表９−２】
2021530246.tif 000059
【０５５７】
【表９−３】
2021530246.tif 000060
【０５５８】
【表９−４】
2021530246.tif 000061
【０５５９】
【表９−５】
2021530246.tif 000062
【０５６０】
【表９−６】
2021530246.tif 000063
【０５６１】
【表９−７】
2021530246.tif 000064
【０５６２】
【表９−８】
2021530246.tif 000065
【０５６３】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβ  Ｖ５抗体分子は、表１０に記載の抗体のＶＨおよび／もしくはＶＬ、またはそれに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％もしくはより高い同一性を有する配列を含む。
【０５６４】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβ  Ｖ５抗体分子は、表１０に記載の抗体のＶＨおよびＶＬ、またはそれに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％もしくはより高い同一性を有する配列を含む。
【０５６５】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβ  Ｖ５抗体分子は、表１１に記載の抗体のＶＨおよび／もしくはＶＬ、またはそれに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％もしくはより高い同一性を有する配列を含む。
【０５６６】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβ  Ｖ５抗体分子は、表１１に記載の抗体のＶＨおよびＶＬ、またはそれに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％もしくはより高い同一性を有する配列を含む。
抗ＴＣＲβ  Ｖ１０抗体
よって、一態様では、本開示は、ヒトＴＣＲβ  Ｖ１０サブファミリーメンバーに結合する抗ＴＣＲβＶ抗体分子を提供する。一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ１０サブファミリーは、ＴＣＲβ  Ｖ１２としても公知である。一部の実施形態では、ＴＣＲβ  Ｖ１０サブファミリーは、ＴＣＲβ  Ｖ１０−１＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ１０−１＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ１０−３＊０１もしくはＴＣＲβ  Ｖ１０−２＊０１、またはそのバリアントを含む。
【０５６７】
【表１０−１】
2021530246.tif 000066
【０５６８】
【表１０−２】
2021530246.tif 000067
【０５６９】
【表１０−３】
2021530246.tif 000068
【０５７０】
【表１０−４】
2021530246.tif 000069
【０５７１】
【表１０−５】
2021530246.tif 000070
【０５７２】
【表１０−６】
2021530246.tif 000071
【０５７３】
【表１０−７】
2021530246.tif 000072
【０５７４】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβ  Ｖ１０抗体分子は、表１２に記載の抗体のＶＨもしくはＶＬ、またはそれに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％もしくはより高い同一性を有する配列を含む。
【０５７５】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβ  Ｖ１０抗体分子は、表１２に記載の抗体のＶＨおよびＶＬ、またはそれに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％もしくはより高い同一性を有する配列を含む。
抗体分子
一実施形態では、抗体分子は、がん抗原、例えば、腫瘍抗原または間質抗原に結合する。一部の実施形態では、がん抗原は、例えば、哺乳動物、例えば、ヒトのがん抗原である。他の実施形態では、抗体分子は、免疫細胞抗原、例えば、哺乳動物、例えば、ヒトの免疫細胞抗原に結合する。例えば、抗体分子は、がん抗原または免疫細胞抗原上のエピトープ、例えば、線形エピトープまたは立体構造エピトープに特異的に結合する。
【０５７６】
一実施形態では、抗体分子は単一特異性抗体分子であり、単一のエピトープに結合する。例えば、単一特異性抗体分子は、それぞれが同じエピトープに結合する複数の免疫グロブリン可変ドメイン配列を有する。
【０５７７】
一実施形態では、抗体分子は、多特異性または多機能性抗体分子であり、例えば、それは複数の免疫グロブリン可変ドメイン配列を含み、複数の免疫グロブリン可変ドメイン配列のうちの第１のものは第１のエピトープに対する結合特異性を有し、複数の免疫グロブリン可変ドメイン配列のうちの第２のものは第２のエピトープに対する結合特異性を有する。一実施形態では、第１および第２のエピトープは、同じ抗原、例えば、同じタンパク質（または多量体タンパク質のサブユニット）上にある。一実施形態では、第１および第２のエピトープはオーバーラップする。一実施形態では、第１および第２のエピトープはオーバーラップしない。一実施形態では、第１および第２のエピトープは、異なる抗原、例えば、異なるタンパク質（または多量体タンパク質の異なるサブユニット）上にある。一実施形態では、多特異性抗体分子は、第３、第４または第５の免疫グロブリン可変ドメインを含む。一実施形態では、多特異性抗体分子は、二特異性抗体分子、三特異性抗体分子、または四特異性抗体分子である。
【０５７８】
一実施形態では、多特異性抗体分子は二特異性抗体分子である。二特異性抗体は、２つ以下の抗原に対して特異性を有する。二特異性抗体分子は、第１のエピトープに対して結合特異性を有する第１の免疫グロブリン可変ドメイン配列および第２のエピトープに対して結合特異性を有する第２の免疫グロブリン可変ドメイン配列によって特徴付けられる。一実施形態では、第１および第２のエピトープは、同じ抗原、例えば、同じタンパク質（または多量体タンパク質のサブユニット）上にある。一実施形態では、第１および第２のエピトープはオーバーラップする。一実施形態では、第１および第２のエピトープはオーバーラップしない。一実施形態では、第１および第２のエピトープは、異なる抗原、例えば、異なるタンパク質（または多量体タンパク質の異なるサブユニット）上にある。一実施形態では、二特異性抗体分子は、第１のエピトープに対して結合特異性を有する重鎖可変ドメイン配列および軽鎖可変ドメイン配列ならびに第２のエピトープに対して結合特異性を有する重鎖可変ドメイン配列および軽鎖可変ドメイン配列を含む。一実施形態では、二特異性抗体分子は、第１のエピトープに対して結合特異性を有する半抗体および第２のエピトープに対して結合特異性を有する半抗体を含む。一実施形態では、二特異性抗体分子は、第１のエピトープに対して結合特異性を有する半抗体、またはその断片、および第２のエピトープに対して結合特異性を有する半抗体、またはその断片を含む。一実施形態では、二特異性抗体分子は、第１のエピトープに対して結合特異性を有するｓｃＦｖもしくはＦａｂ、またはその断片、および第２のエピトープに対して結合特異性を有するｓｃＦｖもしくはＦａｂ、またはその断片を含む。
【０５７９】
一実施形態では、抗体分子は、ダイアボディ、および一本鎖分子の他に、抗体の抗原結合性断片（例えば、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）  ２、およびＦｖ）を含む。例えば、抗体分子は、重（Ｈ）鎖可変ドメイン配列（本明細書でＶＨと略記される）、および軽（Ｌ）鎖可変ドメイン配列（本明細書でＶＬと略記される）を含むことができる。一実施形態では、抗体分子は、重鎖および軽鎖を含むかまたはからなる（本明細書で半抗体と称される。別の例では、抗体分子は、２つの重（Ｈ）鎖可変ドメイン配列および２つの軽（Ｌ）鎖可変ドメイン配列を含み、それによって、２つの抗原結合性部位、例えば、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｃ、Ｆｄ、Ｆｄ’、Ｆｖ、一本鎖抗体（例えばｓｃＦｖ）、単一可変ドメイン抗体、ダイアボディ（Ｄａｂ）（二価および二特異性）、ならびにキメラ（例えば、ヒト化）抗体を形成し、これらは全長抗体の修飾によって産生されるか、または組換えＤＮＡ技術を使用してｄｅ  ｎｏｖｏで合成されるものであってもよい。これらの機能的抗体断片は、それらの各々の抗原または受容体と選択的に結合する能力を保持する。抗体および抗体断片は、ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、およびＩｇＥが挙げられるがそれに限定されない抗体の任意のクラスから、ならびに抗体の任意のサブクラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、およびＩｇＧ４）からのものであり得る。抗体分子の調製物は、モノクローナルまたはポリクローナルであり得る。抗体分子はまた、ヒト、ヒト化、ＣＤＲグラフト化、またはｉｎ  ｖｉｔｒｏで生成された抗体であり得る。抗体は、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４から選択される重鎖定常領域を有し得る。抗体はまた、例えば、カッパまたはラムダから選択される軽鎖を有し得る。「免疫グロブリン」（Ｉｇ）という用語は、本明細書で「抗体」という用語と交換可能に使用される。
【０５８０】
抗体分子の抗原結合性断片の例としては、（ｉ）ＶＬ、ＶＨ、ＣＬおよびＣＨ１ドメインからなる一価断片である、Ｆａｂ断片、（ｉｉ）ヒンジ領域においてジスルフィド架橋によって連結された２つのＦａｂ断片を含む二価断片である、Ｆ（ａｂ’）２断片、（ｉｉｉ）ＶＨおよびＣＨ１ドメインからなる、Ｆｄ断片、（ｉｖ）抗体の単一のアームのＶＬおよびＶＨドメインからなる、Ｆｖ断片、（ｖ）ＶＨドメインからなる、ダイアボディ（ｄＡｂ）断片、（ｖｉ）ラクダまたはラクダ化可変ドメイン、（ｖｉｉ）一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）、例えば、Ｂｉｒｄら、（１９８８）  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４２：４２３〜４２６ページ；およびＨｕｓｔｏｎら、（１９８８）  Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  ＵＳＡ  ８５：５８７９〜５８８３ページを参照）、（ｖｉｉｉ）単一ドメイン抗体が挙げられる。これらの抗体断片は、当業者に公知の従来技術を使用して得られ、断片は、インタクトな抗体と同じ方式で有用性についてスクリーニングされる。
【０５８１】
抗体分子としては、インタクトな分子の他に、その機能的断片が挙げられる。抗体分子の定常領域は、抗体の特性を修飾するため（例えば、Ｆｃ受容体結合、抗体グリコシル化、システイン残基の数、エフェクター細胞機能、または補体機能のうちの１つまたは複数を増加または減少させるため）に変更、例えば、突然変異され得る。
【０５８２】
抗体分子はまた、単一ドメイン抗体であり得る。単一ドメイン抗体は、その相補性（ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔａｒｙ）決定領域が単一ドメインポリペプチドの部分である抗体を含むことができる。例としては、重鎖抗体、軽鎖を天然に欠いている抗体、従来の４鎖抗体に由来する単一ドメイン抗体、操作された抗体および抗体に由来するもの以外の単一ドメインスキャフォールドが挙げられるがそれに限定されない。単一ドメイン抗体は、当該技術分野における任意のもの、または任意の将来的な単一ドメイン抗体であってもよい。単一ドメイン抗体は、マウス、ヒト、ラクダ、ラマ、魚、サメ、ヤギ、ウサギ、およびウシが挙げられるがそれに限定されない任意の種に由来してもよい。本発明の別の態様によれば、単一ドメイン抗体は、軽鎖を欠いている重鎖抗体として公知の天然に存在する単一ドメイン抗体である。そのような単一ドメイン抗体は、例えば、ＷＯ９４０４６７８に開示されている。明確性の理由から、軽鎖を天然に欠いている重鎖抗体に由来するこの可変ドメインは、４鎖免疫グロブリンの従来のＶＨからそれを区別するためにＶＨＨまたはナノボディとして本明細書で知られる。そのようなＶＨＨ分子は、ラクダ科の種、例えば、ラクダ、ラマ、ヒトコブラクダ、アルパカおよびグアナコにおいて産生された抗体に由来することができる。ラクダ科以外の他の種が、軽鎖を天然に欠いている重鎖抗体を産生することがあり、そのようなＶＨＨは本発明の範囲内である。
【０５８３】
ＶＨおよびＶＬ領域は、「フレームワーク領域」（ＦＲまたはＦＷ）と称されるより保存された領域が差し挟まれた、「相補性決定領域」（ＣＤＲ）と称される超可変性の領域にさらに分割することができる。
【０５８４】
フレームワーク領域およびＣＤＲの範囲は、多数の方法によって精密に定義されている（Ｋａｂａｔ，  Ｅ．  Ａ．ら、（１９９１）  Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ、第５版、Ｕ．Ｓ．  Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ  ａｎｄ  Ｈｕｍａｎ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ、ＮＩＨ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ  Ｎｏ．  ９１−３２４２；Ｃｈｏｔｈｉａ，  Ｃ．ら、（１９８７）  Ｊ．  Ｍｏｌ．  Ｂｉｏｌ．  １９６：９０１〜９１７ページ；およびＯｘｆｏｒｄ  ＭｏｌｅｃｕｌａｒのＡｂＭ抗体モデリングソフトウェアによって使用されるＡｂＭの定義を参照。一般に、例えば、「Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  ｏｆ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｖａｒｉａｂｌｅ  Ｄｏｍａｉｎｓ」、Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  Ｌａｂ  Ｍａｎｕａｌ（Ｄｕｅｂｅｌ，  Ｓ．およびＫｏｎｔｅｒｍａｎｎ，  Ｒ．編、Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ、Ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｇ）を参照）。
【０５８５】
「相補性決定領域」、および「ＣＤＲ」という用語は、本明細書で使用される場合、抗原特異性および結合親和性を付与する抗体可変領域内のアミノ酸の配列を指す。一般に、各重鎖可変領域中に３つのＣＤＲ（ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３）および各軽鎖可変領域中に３つのＣＤＲ（ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３）がある。
【０５８６】
所与のＣＤＲの精密なアミノ酸配列の境界は、Ｋａｂａｔら、（１９９１）、「Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ」、第５版、Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ、Ｂｅｔｈｅｓｄａ、ＭＤ（「Ｋａｂａｔ」番号付けスキーム）、Ａｌ−Ｌａｚｉｋａｎｉら、（１９９７）  ＪＭＢ  ２７３、９２７〜９４８ページ（「Ｃｈｏｔｈｉａ」番号付けスキーム）に記載のものを含む、多数の公知のスキームのいずれかを使用して決定することができる。本明細書で使用される場合、「Ｃｈｏｔｈｉａ」番号スキームに従って定義されるＣＤＲは、「超可変ループ」と称されることもある。
【０５８７】
例えば、Ｋａｂａｔの下で、重鎖可変ドメイン（ＶＨ）中のＣＤＲアミノ酸残基は、３１〜３５（ＨＣＤＲ１）、５０〜６５（ＨＣＤＲ２）、および９５〜１０２（ＨＣＤＲ３）と番号付けされ、軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）中のＣＤＲアミノ酸残基は、２４〜３４（ＬＣＤＲ１）、５０〜５６（ＬＣＤＲ２）、および８９〜９７（ＬＣＤＲ３）と番号付けされる。Ｃｈｏｔｈｉａの下で、ＶＨ中のＣＤＲアミノ酸は、２６〜３２（ＨＣＤＲ１）、５２〜５６（ＨＣＤＲ２）、および９５〜１０２（ＨＣＤＲ３）と番号付けされ、ＶＬ中のアミノ酸残基は、２６〜３２（ＬＣＤＲ１）、５０〜５２（ＬＣＤＲ２）、および９１〜９６（ＬＣＤＲ３）と番号付けされる。
【０５８８】
各ＶＨおよびＶＬは、典型的には、以下の順序：ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４でアミノ末端からカルボキシ末端へと並んだ３つのＣＤＲおよび４つのＦＲを含む。
【０５８９】
抗体分子は、ポリクローナルまたはモノクローナル抗体であり得る。
「モノクローナル抗体」または「モノクローナル抗体組成物」という用語は、本明細書で使用される場合、単一の分子組成の抗体分子の調製物を指す。モノクローナル抗体組成物は、特定のエピトープに対して単一の結合特異性および親和性を表し示す。モノクローナル抗体は、ハイブリドーマ技術によって、またはハイブリドーマ技術を使用しない方法（例えば、組換え法）によって作製することができる。
【０５９０】
抗体は、組換えによって産生することができ、例えば、ファージディスプレイまたはコンビナトリアル法、または酵母ディスプレイによって産生することができる。
抗体を生成するためのファージディスプレイおよびコンビナトリアル法は、当該技術分野において公知である（例えば、Ｌａｄｎｅｒら、米国特許第５，２２３，４０９号；Ｋａｎｇら、国際公開ＷＯ９２／１８６１９；Ｄｏｗｅｒら、国際公開ＷＯ９１／１７２７１；Ｗｉｎｔｅｒら、国際公開ＷＯ９２／２０７９１；Ｍａｒｋｌａｎｄら、国際公開ＷＯ９２／１５６７９；Ｂｒｅｉｔｌｉｎｇら、国際公開ＷＯ９３／０１２８８；ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙら、国際公開ＷＯ９２／０１０４７；Ｇａｒｒａｒｄら、国際公開ＷＯ９２／０９６９０；Ｌａｄｎｅｒら、国際公開ＷＯ９０／０２８０９；Ｆｕｃｈｓら、（１９９１）  Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ９：１３７０〜１３７２ページ；Ｈａｙら、（１９９２）  Ｈｕｍ  Ａｎｔｉｂｏｄ  Ｈｙｂｒｉｄｏｍａｓ  ３：８１〜８５ページ；Ｈｕｓｅら、（１９８９）  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４６：１２７５〜１２８１ページ；Ｇｒｉｆｆｔｈｓら、（１９９３）  ＥＭＢＯ  Ｊ  １２：７２５〜７３４ページ；Ｈａｗｋｉｎｓら、（１９９２）  Ｊ  Ｍｏｌ  Ｂｉｏｌ  ２２６：８８９〜８９６ページ；Ｃｌａｃｋｓｏｎら、（１９９１）  Ｎａｔｕｒｅ  ３５２：６２４〜６２８ページ；Ｇｒａｍら、（１９９２）  ＰＮＡＳ  ８９：３５７６〜３５８０ページ；Ｇａｒｒａｄら、（１９９１）  Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ９：１３７３〜１３７７ページ；Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍら、（１９９１）  Ｎｕｃ  Ａｃｉｄ  Ｒｅｓ  １９：４１３３〜４１３７ページ；およびＢａｒｂａｓら、（１９９１）  ＰＮＡＳ  ８８：７９７８〜７９８２ページ（これらのすべての内容はこれにより参照により本明細書に組み込まれる）に記載される通りである）。
【０５９１】
抗体を生成または同定するための酵母ディスプレイ法は当該技術分野において公知であり、例えば、Ｃｈａｏら、（２００６）  Ｎａｔｕｒｅ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  １（２）：７５５〜６８ページ（その内容全体はこれにより参照により本明細書に組み込まれる）に記載される通りである。
【０５９２】
一実施形態では、抗体は、完全ヒト抗体（例えば、ヒト免疫グロブリン配列からの抗体を産生するように遺伝子操作されたマウスにおいて作製される抗体）、または非ヒト抗体、例えば、齧歯動物（マウスもしくはラット）、ヤギ、霊長動物（例えば、サル）、ラクダ抗体である。好ましくは、非ヒト抗体は齧歯動物（マウスまたはラット抗体）である。齧歯動物抗体を産生する方法は当該技術分野において公知である。
【０５９３】
ヒトモノクローナル抗体は、マウス系ではなくヒト免疫グロブリン遺伝子を持つトランスジェニックマウスを使用して生成することができる。目的の抗原を用いて免疫化されたこれらのトランスジェニックマウスからの脾臓細胞を使用して、ヒトタンパク質からのエピトープに対して特異的親和性を有するヒトｍＡｂを分泌するハイブリドーマが産生される（例えば、Ｗｏｏｄら、国際出願ＷＯ９１／００９０６、Ｋｕｃｈｅｒｌａｐａｔｉら、ＰＣＴ国際公開ＷＯ９１／１０７４１；Ｌｏｎｂｅｒｇら、国際出願ＷＯ９２／０３９１８；Ｋａｙら、国際出願９２／０３９１７；Ｌｏｎｂｅｒｇ，  Ｎ．ら、１９９４  Ｎａｔｕｒｅ  ３６８：８５６〜８５９ページ；Ｇｒｅｅｎ，  Ｌ．Ｌ．ら、１９９４  Ｎａｔｕｒｅ  Ｇｅｎｅｔ．  ７：１３〜２１ページ；Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，  Ｓ．Ｌ．ら、１９９４  Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  ＵＳＡ  ８１：６８５１〜６８５５ページ；Ｂｒｕｇｇｅｍａｎら、１９９３  Ｙｅａｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ７：３３〜４０ページ；Ｔｕａｉｌｌｏｎら、１９９３  ＰＮＡＳ  ９０：３７２０〜３７２４ページ；Ｂｒｕｇｇｅｍａｎら、１９９１  Ｅｕｒ  Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ２１：１３２３〜１３２６ページを参照）。
【０５９４】
抗体分子は、可変領域、またはその部分、例えば、ＣＤＲが、非ヒト生物、例えば、ラットまたはマウスにおいて生成されたものであり得る。キメラ、ＣＤＲグラフト化、およびヒト化抗体は、本発明の範囲内である。非ヒト生物、例えば、ラットまたはマウスにおいて生成され、次に、ヒトにおける抗原性を減少させるために、例えば、可変フレームワークまたは定常領域において修飾された抗体分子は、本発明の範囲内である。
【０５９５】
「有効ヒト」タンパク質は、中和抗体応答、例えば、ヒト抗マウス抗体（ＨＡＭＡ）応答を実質的に誘起しないタンパク質である。ＨＡＭＡは、多数の状況において、例えば、例えば慢性または再発性の疾患状態の処置において、抗体分子が繰り返し投与される場合に、問題となり得る。ＨＡＭＡ応答は、血清からの抗体クリアランスの増加（例えば、Ｓａｌｅｈら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．、３２：１８０〜１９０ページ（１９９０）を参照）のため、そしてまた潜在的なアレルギー性反応（例えば、ＬｏＢｕｇｌｉｏら、Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ、５：５１１７〜５１２３ページ（１９８６）を参照）のため、繰返しの抗体投与を潜在的に有効でないものとさせることがある。
【０５９６】
キメラ抗体は、当該技術分野において公知の組換えＤＮＡ技術によって産生することができる（Ｒｏｂｉｎｓｏｎら、国際公開ＰＣＴ／ＵＳ８６／０２２６９；Ａｋｉｒａら、欧州特許出願第１８４，１８７号；Ｔａｎｉｇｕｃｈｉ，  Ｍ．、欧州特許出願第１７１，４９６号；Ｍｏｒｒｉｓｏｎら、欧州特許出願第１７３，４９４号；Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒら、国際出願ＷＯ８６／０１５３３；Ｃａｂｉｌｌｙら、米国特許第４，８１６，５６７号；Ｃａｂｉｌｌｙら、欧州特許出願第１２５，０２３号；Ｂｅｔｔｅｒら、（１９８８  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４０：１０４１〜１０４３ページ）；Ｌｉｕら、（１９８７）  ＰＮＡＳ  ８４：３４３９〜３４４３ページ；Ｌｉｕら、１９８７、Ｊ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  １３９：３５２１〜３５２６ページ；Ｓｕｎら、（１９８７）  ＰＮＡＳ  ８４：２１４〜２１８ページ；Ｎｉｓｈｉｍｕｒａら、１９８７、Ｃａｎｃ．  Ｒｅｓ．  ４７：９９９〜１００５ページ；Ｗｏｏｄら、（１９８５）  Ｎａｔｕｒｅ  ３１４：４４６〜４４９ページ；およびＳｈａｗら、１９８８、Ｊ．  Ｎａｔｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔ．  ８０：１５５３〜１５５９ページを参照）。
【０５９７】
ヒト化またはＣＤＲグラフト化抗体は、ドナーＣＤＲで置き換えられた（重およびまたは軽免疫グロブリン（ｉｍｍｕｏｇｌｏｂｕｌｉｎ）鎖のうちの）少なくとも１つまたは２つであるが一般に３つすべてのレシピエントＣＤＲを有する。抗体は、非ヒトＣＤＲの少なくとも部分で置き換えられていてもよく、またはＣＤＲの一部のみが非ヒトＣＤＲで置き換えられていてもよい。抗原への結合のために要求されるＣＤＲの数を置き換えることのみが必要である。好ましくは、ドナーは、齧歯動物抗体、例えば、ラットまたはマウス抗体であり、レシピエントは、ヒトフレームワークまたはヒトコンセンサスフレームワークである。典型的には、ＣＤＲを提供する免疫グロブリンは「ドナー」と呼ばれ、フレームワークを提供する免疫グロブリンは「アクセプター」と呼ばれる。一実施形態では、ドナー免疫グロブリンは非ヒト（例えば、齧歯動物）である。アクセプターフレームワークは、天然に存在する（例えば、ヒト）フレームワークもしくはコンセンサスフレームワーク、またはそれに対して約８５％もしくはより高い、好ましくは、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一である配列である。
【０５９８】
本明細書で使用される場合、「コンセンサス配列」という用語は、関連配列のファミリーにおいて最も頻繁に生じるアミノ酸（またはヌクレオチド）から形成される配列を指す（例えば、Ｗｉｎｎａｋｅｒ、Ｆｒｏｍ  Ｇｅｎｅｓ  ｔｏ  Ｃｌｏｎｅｓ（Ｖｅｒｌａｇｓｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ、Ｗｅｉｎｈｅｉｍ、Ｇｅｒｍａｎｙ  １９８７）を参照。タンパク質のファミリーにおいて、コンセンサス配列中の各位置は、ファミリーにおいてその位置において最も頻繁に生じるアミノ酸によって占有される。２つのアミノ酸が等しく頻繁に生じる場合、いずれかをコンセンサス配列に含めることができる。「コンセンサスフレームワーク」は、コンセンサス免疫グロブリン配列中のフレームワーク領域を指す。
【０５９９】
抗体分子は、当該技術分野において公知の方法によってヒト化させることができる（例えば、Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，  Ｓ．  Ｌ．、１９８５、Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２２９：１２０２〜１２０７ページ、Ｏｉら、１９８６、ＢｉｏＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  ４：２１４、ならびにＱｕｅｅｎら、米国特許第５，５８５，０８９号、米国特許第５，６９３，７６１号および米国特許第５，６９３，７６２号（これらのすべての内容はこれにより参照により本明細書に組み込まれる）を参照）。
【０６００】
ヒト化またはＣＤＲグラフト化抗体分子は、ＣＤＲグラフト化またはＣＤＲ置換によって産生することができ、それにおいて免疫グロブリン鎖の１つ、２つ、またはすべてのＣＤＲを置き換えることができる。例えば、米国特許第５，２２５，５３９号；Ｊｏｎｅｓら、１９８６  Ｎａｔｕｒｅ  ３２１：５５２〜５２５ページ；Ｖｅｒｈｏｅｙａｎら、１９８８  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２３９：１５３４；Ｂｅｉｄｌｅｒら、１９８８  Ｊ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  １４１：４０５３〜４０６０ページ；Ｗｉｎｔｅｒ、米国特許第５，２２５，５３９号（これらのすべての内容はこれにより明示的に参照により本明細書に組み込まれる）を参照。Ｗｉｎｔｅｒは、本発明のヒト化抗体を調製するために使用され得るＣＤＲグラフト化方法を記載する（１９８７年３月２６日に出願された英国特許出願第２１８８６３８Ａ号；Ｗｉｎｔｅｒ、米国特許第５，２２５，５３９号）（その内容は明示的に参照により本明細書に組み込まれる）。
【０６０１】
具体的なアミノ酸が置換、欠失または付加されたヒト化抗体分子もまた本発明の範囲である。ドナーからのアミノ酸を選択する基準は、米国特許第５，５８５，０８９号、例えば、米国特許第５，５８５，０８９号の第１２〜１６欄、例えば、米国特許第５，５８５，０８９号の第１２〜１６欄に記載されている（その内容はこれにより参照により本明細書に組み込まれる）。抗体をヒト化する他の技術は、１９９２年１２月２３日に公開されたＰａｄｌａｎら、ＥＰ５１９５９６Ａ１に記載されている。
【０６０２】
抗体分子は一本鎖抗体であり得る。一本鎖抗体（ｓｃＦＶ）は操作されていてもよい（例えば、Ｃｏｌｃｈｅｒ，  Ｄ．ら、（１９９９）  Ａｎｎ  Ｎ  Ｙ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ８８０：２６３〜８０ページ；およびＲｅｉｔｅｒ，  Ｙ．、（１９９６）  Ｃｌｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ  ２：２４５〜５２ページを参照）。一本鎖抗体は、二量体化または多量体化して、同じ標的タンパク質の異なるエピトープに対して特異性を有する多価抗体を生成することができる。
【０６０３】
さらに他の実施形態では、抗体分子は、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＭ、ＩｇＡ１、ＩｇＡ２、ＩｇＤ、およびＩｇＥの重鎖定常領域から選択される、特に、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、およびＩｇＧ４の（例えば、ヒト）重鎖定常領域から選択される重鎖定常領域を有する。別の実施形態では、抗体分子は、例えば、カッパまたはラムダの（例えば、ヒト）軽鎖定常領域から選択される軽鎖定常領域を有する。定常領域は、抗体の特性を修飾するため（例えば、Ｆｃ受容体結合、抗体グリコシル化、システイン残基の数、エフェクター細胞機能、および／または補体機能のうちの１つまたは複数を増加または減少させるため）に変更、例えば、突然変異され得る。一実施形態では、抗体は、エフェクター機能を有し、かつ補体を固定することができる。他の実施形態では、抗体は、エフェクター細胞をリクルートせず、かつ補体を固定しない。別の実施形態では、抗体は、Ｆｃ受容体に結合する低減した能力を有し、または該能力を有しない。例えば、それは、Ｆｃ受容体への結合をサポートしないアイソタイプまたはサブタイプ、断片または他の突然変異体であり、例えば、それは、突然変異誘発されたＦｃ受容体結合性領域を有し、またはそれを欠失している。
【０６０４】
抗体定常領域を変更する方法は当該技術分野において公知である。変更された機能、例えば、エフェクターリガンド、例えば、細胞上のＦｃＲ、または補体のＣ１成分に対する変更された親和性を有する抗体は、抗体の定常部分中の少なくとも１つのアミノ酸残基を異なる残基で置き換えることによって産生することができる（例えば、ＥＰ３８８，１５１Ａ１、米国特許第５，６２４，８２１号および米国特許第５，６４８，２６０号（これらのすべての内容はこれにより参照により本明細書に組み込まれる）を参照）。マウス、または他の種の免疫グロブリンに応用された場合にこれらの機能を低減または排除する類似の種類の変更が記載され得る。
【０６０５】
抗体分子は、誘導体化または別の機能分子（例えば、別のペプチドもしくはタンパク質）に連結させることができる。本明細書で使用される場合、「誘導体化」された抗体分子は、修飾された抗体分子である。誘導体化の方法としては、蛍光部分、放射性ヌクレオチド、毒素、酵素または親和性リガンド、例えば、ビオチンの付加が挙げられるがそれに限定されない。よって、本発明の抗体分子は、免疫接着分子を含む、本明細書に記載の抗体の誘導体化および他に修飾された形態を含むことが意図される。例えば、抗体分子は、１つまたは複数の他の分子実体、例えば、別の抗体（例えば、二特異性抗体もしくはダイアボディ）、検出可能な剤、細胞傷害剤、医薬剤、および／または抗体もしくは抗体部分の別の分子（例えば、ストレプトアビジンコア領域もしくはポリヒスチジンタグ）との会合を媒介することができるタンパク質もしくはペプチドに（化学的カップリング、遺伝子融合、非共有結合的会合またはその他によって）機能的に連結させることができる。
【０６０６】
１つの種類の誘導体化された抗体分子は、（例えば、二特異性抗体を作出するために、同じ種類または異なる種類の）２つまたはより多くの抗体を架橋することによって産生される。好適なクロスリンカーとしては、適切なスペーサー（例えば、ｍ−マレイミドベンゾイル−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル）またはホモ二官能性（例えば、スベリン酸ジサクシンイミジル）によって分離された２つの別個に反応性の基を有するヘテロ二官能性のものが挙げられる。そのようなリンカーは、Ｐｉｅｒｃｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏｍｐａｎｙ、Ｒｏｃｋｆｏｒｄ、Ｉｌｌから入手可能である。
多特異性または多機能性抗体分子
本明細書で定義される多特異性および多機能性分子の例示的な構造は、全体を通じて記載されている。例示的な構造は、Ｗｅｉｄｌｅ  Ｕら、（２０１３）  Ｔｈｅ  Ｉｎｔｒｉｇｕｉｎｇ  Ｏｐｔｉｏｎｓ  ｏｆ  Ｍｕｌｔｉｓｐｅｃｉｆｉｃ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｆｏｒｍａｔｓ  ｆｏｒ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｃａｎｃｅｒ．  Ｃａｎｃｅｒ  Ｇｅｎｏｍｉｃｓ  ＆  Ｐｒｏｔｅｏｍｉｃｓ  １０：  １〜１８ページ（２０１３）；およびＳｐｉｅｓｓ  Ｃら、（２０１５）  Ａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅ  ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｆｏｒｍａｔｓ  ａｎｄ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｆｏｒ  ｂｉｓｐｅｃｉｆｉｃ  ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ．  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  ６７：  ９５〜１０６ページ（これらのそれぞれの全内容はこれにより参照により本明細書に組み込まれる）にさらに記載されている。
【０６０７】
実施形態では、多特異性抗体分子は、異なる部位が異なる抗原に特異的である１つより多くの抗原結合性部位を含むことができる。実施形態では、多特異性抗体分子は、同じ抗原上の１つより多く（例えば、２つまたはより多く）のエピトープに結合することができる。実施形態では、多特異性抗体分子は、標的細胞（例えば、がん細胞）に特異的な抗原結合性部位および免疫エフェクター細胞に特異的な異なる抗原結合性部位を含む。一実施形態では、多特異性抗体分子は二特異性抗体分子である。二特異性抗体分子は、５つの異なる構造群：（ｉ）二特異性免疫グロブリンＧ（ＢｓＩｇＧ）、（ｉｉ）追加の抗原結合性部分を付加されたＩｇＧ、（ｉｉｉ）二特異性抗体断片、（ｉｖ）二特異性融合タンパク質、および（ｖ）二特異性抗体コンジュゲートに分類することができる。
【０６０８】
ＢｓＩｇＧは、各抗原について一価のフォーマットである。例示的なＢｓＩｇＧフォーマットとしては、ｃｒｏｓｓＭａｂ、ＤＡＦ（ｔｗｏ−ｉｎ−ｏｎｅ）、ＤＡＦ（ｆｏｕｒ−ｉｎ−ｏｎｅ）、ＤｕｔａＭａｂ、ＤＴ−ＩｇＧ、ノブ・イン・ホール（ｋｎｏｂｓ−ｉｎ−ｈｏｌｅｓ）共通ＬＣ、ノブ・イン・ホールアセンブリー、電荷対、Ｆａｂアーム交換、ＳＥＥＤボディ、ｔｒｉｏｍａｂ、ＬＵＺ−Ｙ、Ｆｃａｂ、κλボディ、直交Ｆａｂが挙げられるがそれに限定されない。Ｓｐｉｅｓｓら、Ｍｏｌ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  ６７（２０１５）：９５〜１０６ページを参照。例示的なＢｓＩｇＧとしては、抗ＣＤ３アームおよび抗ＥｐＣＡＭアームを含有するカツマキソマブ（Ｆｒｅｓｅｎｉｕｓ  Ｂｉｏｔｅｃｈ、Ｔｒｉｏｎ  Ｐｈａｒｍａ、Ｎｅｏｐｈａｒｍ）、ならびにＣＤ３およびＨＥＲ２を標的化するエルツマキソマブ（Ｎｅｏｖｉｉ  Ｂｉｏｔｅｃｈ、Ｆｒｅｓｅｎｉｕｓ  Ｂｉｏｔｅｃｈ）が挙げられる。一部の実施形態では、ＢｓＩｇＧは、ヘテロ二量体化のために操作された重鎖を含む。例えば、重鎖は、「ノブ・イントゥー・ホール」（ｋｎｏｂｓ−ｉｎｔｏ−ｈｏｌｅｓ）戦略、ＳＥＥＤプラットフォーム、（例えば、κλボディ中の）共通重鎖、およびヘテロ二量体Ｆｃ領域の使用を使用してヘテロ二量体化のために操作することができる。Ｓｐｉｅｓｓら、Ｍｏｌ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  ６７（２０１５）：９５〜１０６ページを参照。ＢｓＩｇＧにおけるホモ二量体の重鎖対合を回避するために使用されてきた戦略としては、ノブ・イン・ホール、デュオボディ（ｄｕｏｂｏｄｙ）、アジメトリック（ａｚｙｍｅｔｒｉｃ）、電荷対、ＨＡ−ＴＦ、ＳＥＥＤボディ、および差次的なプロテインＡ親和性が挙げられる。同文献を参照。ＢｓＩｇＧは、異なる宿主細胞中での成分抗体の別々の発現およびその後の精製／ＢｓＩｇＧへのアセンブリーによって産生することができる。ＢｓＩｇＧはまた、単一の宿主細胞中での成分抗体の発現によって産生することができる。ＢｓＩｇＧは、例えば、プロテインＡおよび逐次的ｐＨ溶出を使用する、親和性クロマトグラフィーを使用して精製することができる。
【０６０９】
追加の抗原結合性部分を付加されたＩｇＧは、二特異性抗体分子の別のフォーマットである。例えば、単一特異性ＩｇＧは、例えば、重鎖または軽鎖のいずれかのＮまたはＣ末端において、追加の抗原結合性単位を単一特異性ＩｇＧに付加することによって二特異性を有するように操作することができる。例示的な追加の抗原結合性単位としては、単一ドメイン抗体（例えば、可変重鎖または可変軽鎖）、操作されたタンパク質スキャフォールド、および対合した抗体可変ドメイン（例えば、単鎖可変断片または可変断片）が挙げられる。同文献を参照。付加されたＩｇＧフォーマットの例としては、二重可変ドメインＩｇＧ（ＤＶＤ−Ｉｇ）、ＩｇＧ（Ｈ）−ｓｃＦｖ、ｓｃＦｖ−（Ｈ）ＩｇＧ、ＩｇＧ（Ｌ）−ｓｃＦｖ、ｓｃＦｖ−（Ｌ）ＩｇＧ、ＩｇＧ（Ｌ，Ｈ）−Ｆｖ、ＩｇＧ（Ｈ）−Ｖ、Ｖ（Ｈ）−ＩｇＧ、ＩｇＧ（Ｌ）−Ｖ、Ｖ（Ｌ）−ＩｇＧ、ＫＩＨ  ＩｇＧ−ｓｃＦａｂ、２ｓｃＦｖ−ＩｇＧ、ＩｇＧ−２ｓｃＦｖ、ｓｃＦｖ４−Ｉｇ、ザイボディ（ｚｙｂｏｄｙ）、およびＤＶＩ−ＩｇＧ（４−ｉｎ−１）が挙げられる。Ｓｐｉｅｓｓら、Ｍｏｌ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  ６７（２０１５）：９５〜１０６ページを参照。ＩｇＧ−ｓｃＦｖの例は、ＩＧＦ−１ＲおよびＨＥＲ３に結合するＭＭ−１４１（Ｍｅｒｒｉｍａｃｋ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）である。ＤＶＤ−Ｉｇの例としては、ＩＬ−１αおよびＩＬ−１βに結合するＡＢＴ−９８１（ＡｂｂＶｉｅ）、ならびにＴＮＦおよびＩＬ−１７Ａに結合するＡＢＴ−１２２（ＡｂｂＶｉｅ）が挙げられる。
【０６１０】
二特異性抗体断片（ＢｓＡｂ）は、抗体定常ドメインの一部またはすべてを欠いた二特異性抗体分子のフォーマットである。例えば、一部のＢｓＡｂはＦｃ領域を欠いている。実施形態では、二特異性抗体断片は、単一の宿主細胞中でのＢｓＡｂの効率的な発現を許容するペプチドリンカーによって接続された重鎖および軽鎖領域を含む。例示的な二特異性抗体断片としては、ナノボディ、ナノボディ−ＨＡＳ、ＢｉＴＥ、ダイアボディ、ＤＡＲＴ、ＴａｎｄＡｂ、ｓｃＤｉａｂｏｄｙ、ｓｃＤｉａｂｏｄｙ−ＣＨ３、ダイアボディ−ＣＨ３、トリプルボディ、ミニ抗体、ミニボディ、ＴｒｉＢｉミニボディ、ｓｃＦｖ−ＣＨ３  ＫＩＨ、Ｆａｂ−ｓｃＦｖ、ｓｃＦｖ−ＣＨ−ＣＬ−ｓｃＦｖ、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆ（ａｂ’）２−ｓｃＦｖ２、ｓｃＦｖ−ＫＩＨ、Ｆａｂ−ｓｃＦｖ−Ｆｃ、四価ＨＣＡｂ、ｓｃＤｉａｂｏｄｙ−Ｆｃ、ダイアボディ−Ｆｃ、タンデムｓｃＦｖ−Ｆｃ、およびイントラボディが挙げられるがそれに限定されない。同文献を参照。例えば、ＢｉＴＥフォーマットはタンデムｓｃＦｖを含み、成分ｓｃＦｖは、Ｔ細胞上のＣＤ３およびがん細胞上の表面抗原に結合する。
【０６１１】
二特異性融合タンパク質としては、例えば、追加の特異性および／または機能性を加えるために、他のタンパク質に連結された抗体断片が挙げられる。二特異性融合タンパク質の例は、ＨＬＡ提示ペプチドを認識する親和性成熟したＴ細胞受容体に連結された抗ＣＤ３  ｓｃＦｖを含むｉｍｍＴＡＣである。実施形態では、より高い価数を有する二特異性抗体分子を生成するためにドック−アンド−ロック（ｄｏｃｋ−ａｎｄ−ｌｏｃｋ）（ＤＮＬ）法を使用することができる。また、アルブミン結合性タンパク質またはヒト血清アルブミンへの融合は、抗体断片の血清半減期を延長させることができる。同文献を参照。
【０６１２】
実施形態では、ＢｓＡｂ分子を作出するために化学的コンジュゲーション、例えば、抗体および／または抗体断片の化学的コンジュゲーションを使用することができる。同文献を参照。例示的な二特異性抗体コンジュゲートとしては、ＣｏｖＸボディフォーマットが挙げられ、該フォーマットでは、低分子量薬物が、各Ｆａｂアームまたは抗体もしくはその断片中の単一の反応性リシンに部位特異的にコンジュゲートしている。実施形態では、コンジュゲーションは、低分子量薬物の血清半減期を向上させる。例示的なＣｏｖＸボディは、ＶＥＧＦまたはＡｎｇ２のいずれかを阻害する２つの短いペプチドにコンジュゲートした抗体を含むＣＶＸ−２４１（ＮＣＴ０１００４８２２）である。同文献を参照。
【０６１３】
抗体分子は、例えば、宿主系中での少なくとも１つまたは複数の成分の、組換え発現によって産生することができる。例示的な宿主系としては、真核細胞（例えば、哺乳動物細胞、例えば、ＣＨＯ細胞、または昆虫細胞、例えば、ＳＦ９もしくはＳ２細胞）および原核細胞（例えば、Ｅ．  ｃｏｌｉ）が挙げられる。二特異性抗体分子は、異なる宿主細胞中での成分の別々の発現およびその後の精製／アセンブリーによって産生することができる。代替的に、抗体分子は、単一の宿主細胞中での成分の発現によって産生することができる。二特異性抗体分子の精製は、例えば、プロテインＡおよび逐次的ｐＨ溶出を使用する、親和性クロマトグラフィーなどの、様々な方法によって行うことができる。他の実施形態では、親和性タグ、例えば、ヒスチジン含有タグ、ｍｙｃタグ、またはストレプトアビジンタグを精製のために使用することができる。
例示的な二特異性分子
一態様では、本明細書に開示される多特異性分子は、本明細書に開示される配列、例えば、配列番号１００４〜１００７、３２７５〜３２７７、３２８６、もしくは３２８７から選択される配列、またはそれに対して少なくとも８５％、９０％、９５５、９６％、９７％、９８％、９９％もしくはより高い同一性を有する配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に開示される多特異性分子は、配列番号３２８８のアミノ酸配列を含むリーダー配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に開示される多特異性分子は、配列番号３２８８のアミノ酸配列を含むリーダー配列を含まない。
分子Ｆ：ａＣＤ１９×ａＶｂ６．５
分子Ｆは、配列番号１００４のアミノ酸配列を含む重鎖および配列番号１００５のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
分子Ｆ．１
配列番号１００４（重鎖）（Ｔｃｒｖベータ６＿５  ｓｃＦｖ／抗ＣＤ１９重鎖）
ＭＥＴＤＴＬＬＬＷＶＬＬＬＷＶＰＧＳＴＧＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＳＦＴＴＹＹＩＨＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＷＦＦＰＧＳＧＮＩＫＹＮＥＫＦＫＧＲＶＴＩＴＡＤＴＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＧＳＹＹＳＹＤＶＬＤＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＤＩＱＭＴＱＳＰＳＦＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＫＡＳＱＮＶＧＩＮＶＶＷＨＱＱＫＰＧＫＡＰＫＡＬＩＹＳＳＳＨＲＹＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＥＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＦＣＱＱＦＫＳＹＰＬＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫＧＧＧＧＳＱＶＴＬＲＥＳＧＰＡＬＶＫＰＴＱＴＬＴＬＴＣＴＦＳＧＦＳＬＳＴＳＧＭＧＶＧＷＩＲＱＰＰＧＫＡＬＥＷＬＡＨＩＷＷＤＤＤＫＲＹＮＰＡＬＫＳＲＬＴＩＳＫＤＴＳＫＮＱＶＦＬＴＭＴＮＭＤＰＶＤＴＡＴＹＹＣＡＲＭＥＬＷＳＹＹＦＤＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＡＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ
分子Ｆ．２
配列番号１００５（軽鎖）（抗ＣＤ１９軽鎖）
ＭＥＴＰＡＱＬＬＦＬＬＬＬＷＬＰＤＴＴＧＥＮＶＬＴＱＳＰＡＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＳＡＳＳＳＶＳＹＭＨＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＤＴＳＫＬＡＳＧＩＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＨＴＬＴＩＳＳＬＥＰＥＤＦＡＶＹＹＣＦＱＧＳＶＹＰＦＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ
一態様では、本明細書に開示される多特異性分子は、配列番号１００４および／もしくは配列番号１００５またはそれに対して少なくとも８５％、９０％、９５５、９６％、９７％、９８％、９９％もしくはより高い同一性を有する配列を含む。
分子Ｇ：ａＢＣＭＡ×ａＶｂ６．５
分子Ｇは、配列番号１００６のアミノ酸配列を含む重鎖および配列番号１００７のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
分子Ｇ．１
配列番号１００６（重鎖）
ＭＥＴＤＴＬＬＬＷＶＬＬＬＷＶＰＧＳＴＧＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＳＦＴＴＹＹＩＨＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＷＦＦＰＧＳＧＮＩＫＹＮＥＫＦＫＧＲＶＴＩＴＡＤＴＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＧＳＹＹＳＹＤＶＬＤＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＤＩＱＭＴＱＳＰＳＦＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＫＡＳＱＮＶＧＩＮＶＶＷＨＱＱＫＰＧＫＡＰＫＡＬＩＹＳＳＳＨＲＹＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＥＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＦＣＱＱＦＫＳＹＰＬＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫＧＧＧＧＳＱＶＱＬＶＥＳＧＧＧＶＶＱＰＧＲＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＩＤＦＳＲＹＷＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＧＥＩＮＰＤＳＳＴＩＮＹＡＰＳＬＫＤＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＳＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＳＬＹＹＤＹＧＤＡＭＤＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＡＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＲＦＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ
分子Ｇ．２
配列番号１００７（軽鎖）
ＭＥＴＤＴＬＬＬＷＶＬＬＬＷＶＰＧＳＴＧＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＫＡＳＱＳＶＤＳＮＶＡＷＹＱＱＫＰＥＫＡＰＫＡＬＩＦＳＡＳＬＲＦＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＦＣＱＱＹＮＮＹＰＬＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ
一態様では、本明細書に開示される多特異性分子は、配列番号１００６および／もしくは配列番号１００７またはそれに対して少なくとも８５％、９０％、９５５、９６％、９７％、９８％、９９％もしくはより高い同一性を有する配列を含む。
分子Ｈ：ａＢＣＭＡ  ｘ  ａＴＣＲｖベータ６＿５
分子Ｈは、配列番号３２７５のアミノ酸配列を含む第１の重鎖、配列番号３２７７のアミノ酸配列を含む軽鎖、および配列番号３２７６のアミノ酸配列を含む第２の重鎖を含む。
分子Ｈ．１
配列番号３２７５（抗ＢＣＭＡ重鎖）
ＭＥＴＤＴＬＬＬＷＶＬＬＬＷＶＰＧＳＴＧＱＶＱＬＶＥＳＧＧＧＶＶＱＰＧＲＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＩＤＦＳＲＹＷＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＧＥＩＮＰＤＳＳＴＩＮＹＡＰＳＬＫＤＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＳＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＳＬＹＹＤＹＧＤＡＭＤＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＡＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＣＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＷＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ
分子Ｈ．２
配列番号３２７６（ヒト化ＴＣＲｖベータ＿６＿５  ｓｃＦｖ）
ＭＥＴＤＴＬＬＬＷＶＬＬＬＷＶＰＧＳＴＧＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＳＦＴＴＹＹＩＨＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＷＦＦＰＧＳＧＮＩＫＹＮＥＫＦＫＧＲＶＴＩＴＡＤＴＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＧＳＹＹＳＹＤＶＬＤＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＤＩＱＭＴＱＳＰＳＦＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＫＡＳＱＮＶＧＩＮＶＶＷＨＱＱＫＰＧＫＡＰＫＡＬＩＹＳＳＳＨＲＹＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＥＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＦＣＱＱＦＫＳＹＰＬＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＡＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＣＴＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＳＣＡＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＶＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ
分子Ｈ．３
配列番号３２７７（抗ＢＣＭＡ軽鎖）
ＭＥＴＤＴＬＬＬＷＶＬＬＬＷＶＰＧＳＴＧＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＫＡＳＱＳＶＤＳＮＶＡＷＹＱＱＫＰＥＫＡＰＫＡＬＩＦＳＡＳＬＲＦＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＦＣＱＱＹＮＮＹＰＬＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ
一態様では、本明細書に開示される多特異性分子は、配列番号３２７５、配列番号３２７６、および／もしくは配列番号３２７７またはそれに対して少なくとも８５％、９０％、９５５、９６％、９７％、９８％、９９％もしくはより高い同一性を有する配列を含む。
分子Ｉ：ｃ末端ｓｃＦｖ  ＴＣＲｖベータを有する半アームＢＣＭＡ  Ｆａｂ
分子Ｉは、配列番号３２８６のアミノ酸配列を含む第１の重鎖、配列番号３２７７のアミノ酸配列を含む軽鎖、および配列番号３２８７のアミノ酸配列を含む第２の重鎖を含む。
分子Ｉ．１
配列番号３２８６（重鎖１）
ＭＥＴＤＴＬＬＬＷＶＬＬＬＷＶＰＧＳＴＧＱＶＱＬＶＥＳＧＧＧＶＶＱＰＧＲＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＩＤＦＳＲＹＷＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＧＥＩＮＰＤＳＳＴＩＮＹＡＰＳＬＫＤＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＳＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＳＬＹＹＤＹＧＤＡＭＤＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＣＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＷＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＴＹＡＭＮＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＲＩＲＳＫＹＮＮＹＡＴＹＹＡＤＳＶＫＤＲＦＴＩＳＲＤＤＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＫＴＥＤＴＡＶＹＹＣＶＲＨＧＮＦＧＮＳＹＶＳＷＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＱＡＶＶＴＱＥＰＳＬＴＶＳＰＧＧＴＶＴＬＴＣＲＳＳＴＧＡＶＴＴＳＮＹＡＮＷＶＱＱＫＰＧＱＡＰＲＧＬＩＧＧＴＮＫＲＡＰＷＴＰＡＲＦＳＧＳＬＬＧＧＫＡＡＬＴＬＳＧＡＱＰＥＤＥＡＥＹＹＣＡＬＷＹＳＮＬＷＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬ
分子Ｉ．２
配列番号３２７７（軽鎖）
ＭＥＴＤＴＬＬＬＷＶＬＬＬＷＶＰＧＳＴＧＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＫＡＳＱＳＶＤＳＮＶＡＷＹＱＱＫＰＥＫＡＰＫＡＬＩＦＳＡＳＬＲＦＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＦＣＱＱＹＮＮＹＰＬＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ
分子Ｉ．３
配列番号３２８７（重鎖２）
ＭＥＴＤＴＬＬＬＷＶＬＬＬＷＶＰＧＳＴＧＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＣＴＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＳＣＡＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＶＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ
一態様では、本明細書に開示される多特異性分子は、配列番号３２８６、配列番号３２７７、および／もしくは配列番号３２８７またはそれに対して少なくとも８５％、９０％、９５５、９６％、９７％、９８％、９９％もしくはより高い同一性を有する配列を含む。
抗体様フレームワークまたはスキャフォールド
結果としてもたらされるポリペプチドが、標的抗原、例えば、特に、ＴＣＲｖｂ、腫瘍抗原に特異的に結合する少なくとも１つの結合性領域を含む限り、本明細書に開示される抗ＴＣＲｖｂ抗体分子またはその多機能性フォーマットにおいて多様な抗体／免疫グロブリンフレームワークまたはスキャフォールドを用いることができる。そのようなフレームワークまたはスキャフォールドは、５つの主なイディオタイプのヒト免疫グロブリン、またはその断片を含み、好ましくはヒト化された態様を有する、他の動物種の免疫グロブリンを含む。新規のフレームワーク、スキャフォールドおよび断片が当業者によって発見および開発され続けている。
【０６１４】
一実施形態では、本明細書に開示される抗ＴＣＲｖｂ抗体分子またはその多機能性フォーマットは、ＣＤＲをグラフト化することができる非免疫グロブリンスキャフォールドを使用した非免疫グロブリンベースの抗体を含む。標的抗原（例えば、ＴＣＲｖｂまたは腫瘍抗原）に特異的な結合性領域を含む限り、任意の非免疫グロブリンフレームワークおよびスキャフォールドを用いることができる。例示的な非免疫グロブリンフレームワークまたはスキャフォールドとしては、フィブロネクチン（Ｃｏｍｐｏｕｎｄ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，  Ｉｎｃ．、Ｗａｌｔｈａｍ、ＭＡ）、アンキリン（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐａｒｔｎｅｒｓ  ＡＧ、Ｚｕｒｉｃｈ、Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）、ドメイン抗体（Ｄｏｍａｎｔｉｓ，  Ｌｔｄ．、Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ、ＭＡ、およびＡｂｌｙｎｘ  ｎｖ、Ｚｗｉｊｎａａｒｄｅ、Ｂｅｌｇｉｕｍ）、リポカリン（Ｐｉｅｒｉｓ  Ｐｒｏｔｅｏｌａｂ  ＡＧ、Ｆｒｅｉｓｉｎｇ、Ｇｅｒｍａｎｙ）、小モジュール式免疫医薬品（Ｔｒｕｂｉｏｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ  Ｉｎｃ．、Ｓｅａｔｔｌｅ、ＷＡ）、マキシボディ（ｍａｘｙｂｏｄｉｅｓ）（Ａｖｉｄｉａ，  Ｉｎｃ．、Ｍｏｕｎｔａｉｎ  Ｖｉｅｗ、ＣＡ）、プロテインＡ（Ａｆｆｉｂｏｄｙ  ＡＧ、Ｓｗｅｄｅｎ）、ならびにアフィリン（ガンマ−クリスタリンまたはユビキチン）（Ｓｃｉｌ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ＧｍｂＨ、Ｈａｌｌｅ、Ｇｅｒｍａｎｙ）が挙げられるがそれに限定されない。
【０６１５】
フィブロネクチンスキャフォールドは、典型的には、フィブロネクチンＩＩＩ型ドメイン（例えば、フィブロネクチンＩＩＩ型の第１０モジュール（１０  Ｆｎ３ドメイン））に基づく。フィブロネクチンＩＩＩ型ドメインは、互いに対してパッキングされてタンパク質のコアを形成する２つのベータシートの間に分布した７つまたは８つのベータ鎖を有し、かつベータ鎖を互いに接続し、溶媒曝露される（ＣＤＲに類似した）ループをさらに含有する。ベータシートサンドイッチの各エッジにおいて少なくとも３つのそのようなループがあり、エッジは、ベータ鎖の方向に対して垂直なタンパク質の境界である（米国特許第６，８１８，４１８号を参照）。この構造のため、非免疫グロブリン抗体は、性質および親和性が抗体に類似している抗原結合特性を模倣する。これらのスキャフォールドは、ループ無作為化、およびｉｎ  ｖｉｖｏでの抗体の親和性成熟のプロセスに類似したｉｎ  ｖｉｔｒｏでのシャッフリング戦略において使用することができる。これらのフィブロネクチンベースの分子は、標準的なクローニング技術を使用して分子のループ領域を本発明のＣＤＲで置き換えることができるスキャフォールドとして使用することができる。アンキリン技術は、異なる標的への結合のために使用することができる可変領域を担うためのスキャフォールドとしてアンキリン由来の反復モジュールを有するタンパク質を使用することに基づく。アンキリン反復モジュールは、典型的には、２つの逆平行のα−ヘリックスおよびβターンからなる約３３アミノ酸のポリペプチドである。可変領域の結合は、リボソームディスプレイを使用することによって最適化することができる。
【０６１６】
アビマーは、タンパク質−タンパク質相互作用の性質によって使用され、ヒトにおいて２５０を超えるタンパク質が構造的にＡドメインに基づく。アビマーは、アミノ酸リンカーを介して連結された多数の異なる「Ａドメイン」単量体（２〜１０）からなる。例えば、米国特許出願公開第２００４０１７５７５６号、同第２００５００５３９７３号、同第２００５００４８５１２号、および同第２００６０００８８４４号に記載の方法論を使用して標的抗原に結合できるアビマーを作出することができる。
【０６１７】
アフィボディ親和性リガンドは、プロテインＡのＩｇＧ結合性ドメインのうちの１つのスキャフォールドに基づく３ヘリックスバンドルから構成される小さい単純なタンパク質である。プロテインＡは、細菌Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓからの表面タンパク質である。このスキャフォールドドメインは５８アミノ酸からなり、そのうちの１３個は無作為化されて、多数のリガンドバリアントを有するアフィボディライブラリーを生成する（例えば、米国特許第５，８３１，０１２号を参照）。アフィボディ分子は、抗体を模倣し、１５０ｋＤａである抗体の分子量と比較して、６ｋＤａの分子量を有する。その小さいサイズにもかかわらず、アフィボディ分子の結合性部位は抗体のそれに類似している。
【０６１８】
アンチカリンは、例えば、Ｐｉｅｒｉｓ  ＰｒｏｔｅｏＬａｂ  ＡＧといった、商業的に公知なものである。それらは、通常、化学的に感受性のまたは不溶性の化合物の生理学的輸送または貯蔵に関与する小さい堅牢なタンパク質の広範な群である、リポカリンに由来する。いくつかの天然のリポカリンがヒト組織または体液中に存在する。タンパク質の構成は、免疫グロブリンをしのばせるものであり、剛性のフレームワークの上部に超可変ループを有する。しかしながら、抗体またはそれらの組換え断片とは対照的に、リポカリンは、１６０〜１８０個のアミノ酸残基を有する単一のポリペプチド鎖から構成され、単一の免疫グロブリンドメインよりわずかにのみ大きい。結合性ポケットを作り上げる４つのループのセットは、著しい構造的可塑性を示し、様々な側鎖を許容する。結合性部位は、そのため、高い親和性および特異性で異なる形状の処方された標的分子を認識するために独自のプロセスにおいて再成形され得る。リポカリンファミリーの１つのタンパク質、Ｐｉｅｒｉｓ  Ｂｒａｓｓｉｃａｅのビリン結合性タンパク質（ＢＢＰ）は、４つのループのセットを突然変異誘発することによってアンチカリンを開発するために使用されている。アンチカリンを記載する特許出願の１つの例は、ＰＣＴ国際公開ＷＯ１９９９１６８７３中にある。
【０６１９】
アフィリン分子は、タンパク質および小分子に対する特異的な親和性のために設計される小さい非免疫グロブリンタンパク質である。新たなアフィリン分子は、異なるヒト由来のスキャフォールドタンパク質にそれぞれ基づく２つのライブラリーから非常に迅速に選択することができる。アフィリン分子は、免疫グロブリンタンパク質に対するいかなる構造的相同性も示さない。現在、２つのアフィリンスキャフォールドが用いられており、その１つは、ヒト構造的眼水晶体タンパク質であるガンマクリスタリン（ｇａｍｍａ  ｃｒｙｓｔａｌｌｉｎｅ）であり、他方は「ユビキチン」スーパーファミリータンパク質である。両方のヒトスキャフォールドは、非常に小さく、高い温度安定性を示し、かつｐＨ変化および変性剤に対してほぼ耐性である。この高い安定性は、主に、タンパク質の拡大したベータシート構造に起因する。ガンマクリスタリン由来のタンパク質の例はＷＯ２００１０４１４４に記載されており、「ユビキチン様」タンパク質の例はＷＯ２００４１０６３６８に記載されている。
【０６２０】
タンパク質エピトープ模倣物（ＰＥＭ）は、タンパク質−タンパク質相互作用に関与する主要な二次構造であるタンパク質のベータ−ヘアピン二次構造を模倣する、中間サイズの、環式の、ペプチド様分子（ＭＷ  １〜２ｋＤａ）である。
【０６２１】
ドメイン抗体（ｄＡｂ）は、本明細書に開示される抗ＴＣＲｖｂ抗体分子またはその多機能性フォーマットにおいて使用することができ、抗体の重鎖または軽鎖のいずれかの可変領域に対応する、抗体の小さい機能的な結合性断片である。ドメイン抗体は、細菌、酵母、および哺乳動物細胞系においてよく発現される。ドメイン抗体およびその産生方法のさらなる詳細は当該技術分野において公知である（例えば、米国特許第６，２９１，１５８号、同第６，５８２，９１５号、同第６，５９３，０８１号、同第６，１７２，１９７号、同第６，６９６，２４５号、欧州特許第０３６８６８４号＆０６１６６４０号、ＷＯ０５／０３５５７２、ＷＯ０４／１０１７９０、ＷＯ０４／０８１０２６、ＷＯ０４／０５８８２１、ＷＯ０４／００３０１９およびＷＯ０３／００２６０９を参照。ナノボディは、抗体の重鎖に由来する。
【０６２２】
ナノボディは、典型的には、単一の可変ドメインならびに２つの定常ドメイン（ＣＨ２およびＣＨ３）を含み、元々の抗体の抗原結合能力を保持する。ナノボディは、当該技術分野において公知の方法によって調製することができる（例えば、米国特許第６，７６５，０８７号、米国特許第６，８３８，２５４号、ＷＯ０６／０７９３７２を参照）。ユニボディ（Ｕｎｉｂｏｄｉｅｓ）は、ＩｇＧ４抗体の１つの軽鎖および１つの重鎖からなる。ユニボディは、ＩｇＧ４抗体のヒンジ領域の除去によって作製することができる。ユニボディおよびそれを調製する方法のさらなる詳細は、ＷＯ２００７／０５９７８２に見出すことができる。
腫瘍抗原部分
一態様では、
（ｉ）本明細書に記載の抗ＴＣＲβＶ抗体分子を含む第１の部分（例えば、第１の免疫細胞エンゲージャー）、および
（ｉｉ）腫瘍標的化部分、第２の免疫細胞エンゲージャー、サイトカイン分子または間質改変部分のうちの１つまたは複数を含む第２の部分
を含む多特異性分子、例えば、二特異性分子が本明細書で提供される。
【０６２３】
本明細書に開示される任意の組成物または方法の一部の実施形態では、腫瘍標的化部分は抗原、例えば、がん抗原である。一部の実施形態では、がん抗原は、腫瘍抗原もしくは間質抗原、または血液抗原である。
【０６２４】
本明細書に開示される任意の組成物または方法の一部の実施形態では、腫瘍標的化部分、例えば、がん抗原は、ＢＣＭＡ、ＦｃＲＨ５、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ３８、ＣＤ４７、ＣＤ９９、ＣＤ１２３、ＦｃＲＨ５、ＣＬＥＣ１２、ＣＤ１７９Ａ、ＳＬＡＭＦ７、またはＮＹ−ＥＳＯ１、ＰＤＬ１、ＣＤ４７、ガングロシド（ｇａｎｇｌｏｓｉｄｅ）２（ＧＤ２）、前立腺幹細胞抗原（ＰＳＣＡ）、前立腺特異的膜抗原（ＰＭＳＡ）、前立腺特異的抗原（ＰＳＡ）、癌胎児性抗原（ＣＥＡ）、Ｒｏｎキナーゼ、ｃ−Ｍｅｔ、未成熟ラミニン受容体、ＴＡＧ−７２、ＢＩＮＧ−４、カルシウム活性化塩素チャネル２、サイクリン−Ｂ１、９Ｄ７、Ｅｐ−ＣＡＭ、ＥｐｈＡ３、Ｈｅｒ２／ｎｅｕ、テロメラーゼ、ＳＡＰ−１、サバイビン、ＮＹ−ＥＳＯ−１／ＬＡＧＥ−１、ＰＲＡＭＥ、ＳＳＸ−２、メラン−Ａ／ＭＡＲＴ−１、Ｇｐ１００／ｐｍｅｌ１７、チロシナーゼ、ＴＲＰ−１／−２、ＭＣ１Ｒ、β−カテニン、ＢＲＣＡ１／２、ＣＤＫ４、ＣＭＬ６６、フィブロネクチン、ｐ５３、Ｒａｓ、ＴＧＦ−Ｂ受容体、ＡＦＰ、ＥＴＡ、ＭＡＧＥ、ＭＵＣ−１、ＣＡ−１２５、ＢＡＧＥ、ＧＡＧＥ、ＮＹ−ＥＳＯ−１、β−カテニン、ＣＤＫ４、ＣＤＣ２７、αアクチニン−４、ＴＲＰ１／ｇｐ７５、ＴＲＰ２、ｇｐ１００、メラン−Ａ／ＭＡＲＴ１、ガングリオシド、ＷＴ１、ＥｐｈＡ３、上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）、ＭＡＲＴ−２、ＭＡＲＴ−１、ＭＵＣ１、ＭＵＣ２、ＭＵＭ１、ＭＵＭ２、ＭＵＭ３、ＮＡ８８−１、ＮＰＭ、ＯＡ１、ＯＧＴ、ＲＣＣ、ＲＵＩ１、ＲＵＩ２、ＳＡＧＥ、ＴＲＧ、ＴＲＰ１、ＴＳＴＡ、葉酸受容体アルファ、Ｌ１−ＣＡＭ、ＣＡＩＸ、ｇｐＡ３３、ＧＤ３、ＧＭ２、ＶＥＧＦＲ、インテグリン（Ｉｎｔｅｒｇｒｉｎｓ）（インテグリンアルファＶベータ３、インテグリンアルファ５ベータ１）、炭水化物（Ｌｅ）、ＩＧＦ１Ｒ、ＥＰＨＡ３、ＴＲＡＩＬＲ１、ＴＲＡＩＬＲ２、ＲＡＮＫＬ、（ＦＡＰ）、ＴＧＦ−ベータ、ヒアルロン酸、コラーゲン、例えば、ＩＶ型コラーゲン、テネイシンＣ、またはテネイシンＷから選択される。一部の実施形態では、腫瘍標的化部分、例えば、がん抗原は、ＢＣＭＡである。一部の実施形態では、腫瘍標的化部分、例えば、がん抗原は、ＦｃＲＨ５である。
ＦｃＲＨ５標的化部分
一部の実施形態では、本明細書に開示される多特異性分子は、ＦｃＲＨ５に結合する標的化部分（例えば、ＦｃＲＨ５標的化部分）を含む。ＦｃＲＨ５標的化部分は、抗体分子（例えば、本明細書に記載される抗原結合性ドメイン）、受容体もしくは受容体断片、もしくはリガンドもしくはリガンド断片、またはこれらの組合せから選択することができる。一部の実施形態では、ＦｃＲＨ５標的化部分は、がんまたは造血細胞（例えば、がんまたは造血細胞の表面上に存在する分子、例えば、抗原）と会合する、例えば、それに結合する。ある特定の実施形態では、ＦｃＲＨ５標的化部分は、本明細書に開示される多特異性分子をがんまたは造血細胞に標的化する、例えば、方向付ける。一部の実施形態では、がんは、血液がん、例えば、多発性骨髄腫である。
【０６２５】
一部の実施形態では、多特異性分子、例えば、ＦｃＲＨ５標的化部分は、細胞、例えば、がんまたは造血細胞の表面上のＦｃＲＨ５抗原に結合する。ＦｃＲＨ５抗原は、原発性腫瘍細胞、またはその転移性病変上に存在し得る。一部の実施形態では、がんは、血液がん、例えば、多発性骨髄腫である。例えば、ＦｃＲＨ５抗原は、腫瘍上、例えば、限定された腫瘍灌流、血管の圧迫、または線維性腫瘍間質のうちの１つまたは複数を有することによって型判定されるクラスの腫瘍上に存在し得る。
【０６２６】
本明細書に記載の多特異性分子は、米国特許第７，９９９，０７７号、米国特許出願公開第２０１５００９８９００号、米国特許第８２９９２２０号、米国特許第７１０５１４９号、米国特許第８３６２２１３号、米国特許第８４６６２６０号、米国特許第８６１７５５９号、米国特許出願公開第２０１６０３６８９８５号、米国特許出願公開第２０１５０１６６６６１号、および米国特許出願公開第２００８０２４７９４４号（上記の刊行物のいずれかの全内容はこれにより参照により本明細書に組み込まれる）に記載の抗ＦｃＲＨ５抗体またはその抗原結合性断片を含むＦｃＲＨ５標的化部分を含む。
【０６２７】
一部の実施形態では、本明細書に記載の多特異性分子は、米国特許第７，９９９，０７７号（その全内容はこれにより参照により本明細書に組み込まれる）に記載の抗ＦｃＲＨ５抗体またはその抗原結合性断片を含むＦｃＲＨ５標的化部分を含む。
ＢＣＭＡ標的化部分
ある特定の実施形態では、本明細書に開示される多特異性分子は、ＢＣＭＡに結合する標的化部分（例えば、ＢＣＭＡ標的化部分）を含む。ＢＣＭＡ標的化部分は、抗体分子（例えば、本明細書に記載される抗原結合性ドメイン）、受容体もしくは受容体断片、もしくはリガンドもしくはリガンド断片、またはこれらの組合せから選択することができる。一部の実施形態では、ＢＣＭＡ標的化部分は、がんまたは造血細胞（例えば、がんまたは造血細胞の表面上に存在する分子、例えば、抗原）と会合する、例えば、それに結合する。ある特定の実施形態では、ＢＣＭＡ標的化部分は、本明細書に開示される多特異性分子をがんまたは造血細胞に標的化する、例えば、方向付ける。一部の実施形態では、がんは、血液がん、例えば、多発性骨髄腫である。
【０６２８】
一部の実施形態では、多特異性分子、例えば、ＢＣＭＡ標的化部分は、細胞、例えば、がんまたは造血細胞の表面上のＢＣＭＡ抗原に結合する。ＢＣＭＡ抗原は、原発性腫瘍細胞、またはその転移性病変上に存在し得る。一部の実施形態では、がんは、血液がん、例えば、多発性骨髄腫である。例えば、ＢＣＭＡ抗原は、腫瘍上、例えば、限定された腫瘍灌流、血管の圧迫、または線維性腫瘍間質のうちの１つまたは複数を有することによって型判定されるクラスの腫瘍上に存在し得る。
例示的なＢＣＭＡ標的化部分
本明細書に記載の多特異性分子は、米国特許第８９２０７７６号、米国特許第９２４３０５８号、米国特許第９３４０６２１号、米国特許第８８４６０４２号、米国特許第７０８３７８５号、米国特許第９５４５０８６号、米国特許第７２７６２４１号、米国特許第９０３４３２４号、米国特許第７７９９９０２号、米国特許第９３８７２３７号、米国特許第８８２１８８３号、米国特許第８６１７４５号、米国特許出願公開第２０１３０２７３０５５号、米国特許出願公開第２０１６０１７６９７３号、米国特許出願公開第２０１５０３６８３５１号、米国特許出願公開第２０１５０３７６２８７号、米国特許出願公開第２０１７００２２２８４号、米国特許出願公開第２０１６００１５７４９号、米国特許出願公開第２０１４０２４２０７７号、米国特許出願公開第２０１７００３７１２８号、米国特許出願公開第２０１７００５１０６８号、米国特許出願公開第２０１６０３６８９８８号、米国特許出願公開第２０１６０３１１９１５号、米国特許出願公開第２０１６０１３１６５４号、米国特許出願公開第２０１２０２１３７６８号、米国特許出願公開第２０１１０１７７０９３号、米国特許出願公開第２０１６０２９７８８５号、ＥＰ３１３７５００、ＥＰ２６９９２５９、ＥＰ２９８２６９４、ＥＰ３０２９０６８、ＥＰ３０２３４３７、ＷＯ２０１６０９０３２７、ＷＯ２０１７０２１４５０、ＷＯ２０１６１１０５８４、ＷＯ２０１６１１８６４１、ＷＯ２０１６１６８１４９（これらの全内容はこれにより参照により本明細書に組み込まれる）に記載の抗ＢＣＭＡ抗体またはその抗原結合性断片を含むＢＣＭＡ標的化部分を含むことができる。
【０６２９】
一実施形態では、ＢＣＭＡ標的化部分は、ＢＣＭＡに結合する抗体分子（例えば、ＦａｂまたはｓｃＦｖ）を含む。一部の実施形態では、ＢＣＭＡに対する抗体分子は、表１の重鎖可変ドメイン配列のいずれかからの１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲ、または密接に関連したＣＤＲ、例えば、表９のＣＤＲ配列のいずれかからの少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、２つ、３つもしくは４つ以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するＣＤＲを含む。一部の実施形態では、ＢＣＭＡに対する抗体分子は、表９のアミノ酸配列のいずれかから選択される重鎖可変ドメイン配列、またはそれに対して実質的に同一（例えば、それに対して９５％〜９９．９％同一、もしくは少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個もしくは１５個以下である変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する））のアミノ酸配列を含む。
【０６３０】
代替的に、または本明細書に開示されるＢＣＭＡに対する重鎖と組み合わせて、ＢＣＭＡに対する抗体分子は、表９の軽鎖可変ドメイン配列のいずれかからの１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲ、または密接に関連したＣＤＲ、例えば、表９のＣＤＲ配列のいずれかから少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、２つ、３つもしくは４つ以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するＣＤＲを含む。一部の実施形態では、ＢＣＭＡに対する抗体分子は、表９のアミノ酸配列のいずれかから選択される軽鎖可変ドメイン配列、またはそれに対して実質的に同一（例えば、それに対して９５％〜９９．９％同一、もしくは少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個もしくは１５個以下である変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する））のアミノ酸配列を含む。
【０６３１】
【表１１】
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【０６３２】
ＣＤＲグラフト化スキャフォールド
実施形態では、抗体分子は、ＣＤＲグラフト化スキャフォールドドメインである。実施形態では、スキャフォールドドメインは、フィブロネクチンドメイン、例えば、フィブロネクチンＩＩＩ型ドメインに基づく。フィブロネクチンＩＩＩ型（Ｆｎ３）ドメインの全体的なフォールドは、最小の機能的抗体断片、抗体重鎖の可変ドメインのそれに密接に関係する。Ｆｎ３の末端には３つのループがあり、ＢＣ、ＤＥおよびＦＧループの位置は、抗体のＶＨドメインのＣＤＲ１、２および３のそれにおおよそ対応する。Ｆｎ３はジスルフィド結合を有さず、したがって、Ｆｎ３は、抗体およびそれらの断片とは異なり、還元条件下で安定である（例えば、ＷＯ９８／５６９１５、ＷＯ０１／６４９４２、ＷＯ００／３４７８４を参照）。Ｆｎ３ドメインは、例えば、本明細書に記載の抗原／マーカー／細胞に結合するドメインを選択するために、（例えば、本明細書に記載のＣＤＲまたは超可変ループを使用して）修飾または変更することができる。
【０６３３】
実施形態では、スキャフォールドドメイン、例えば、フォールディングしたドメインは、抗体、例えば、モノクローナル抗体の重鎖可変ドメインから３つのベータ鎖を欠失させることにより作出される「ミニボディ」スキャフォールドに基づく（例えば、Ｔｒａｍｏｎｔａｎｏら、１９９４、Ｊ  Ｍｏｌ．  Ｒｅｃｏｇｎｉｔ．  ７：９、およびＭａｒｔｉｎら、１９９４、ＥＭＢＯ  Ｊ．  １３：５３０３〜５３０９ページを参照）。「ミニボディ」は、２つの超可変ループを提示するために使用することができる。実施形態では、スキャフォールドドメインは、Ｖ様ドメイン（例えば、Ｃｏｉａら、ＷＯ９９／４５１１０を参照）、または２つのジスルフィド結合によって一緒に保持された７４残基の６鎖ベータシートサンドイッチであるテンダミスタチン（ｔｅｎｄａｍｉｓｔａｔｉｎ）に由来するドメインである（例えば、ＭｃＣｏｎｎｅｌｌおよびＨｏｅｓｓ、１９９５、Ｊ  Ｍｏｌ．  Ｂｉｏｌ．  ２５０：４６０を参照）。例えば、テンダミスタチンのループは、例えば、本明細書に記載のマーカー／抗原／細胞に結合するドメインを選択するために、（例えば、ＣＤＲまたは超可変ループを使用して）修飾または変更することができる。別の例示的なスキャフォールドドメインは、ＣＴＬＡ−４の細胞外ドメインに由来するベータ−サンドイッチ構造である（例えば、ＷＯ００／６００７０を参照）。
【０６３４】
他の例示的なスキャフォールドドメインとしては、Ｔ細胞受容体、ＭＨＣタンパク質、細胞外ドメイン（例えば、フィブロネクチンＩＩＩ型リピート、ＥＧＦリピート）、プロテアーゼ阻害剤（例えば、Ｋｕｎｉｔｚドメイン、エコチン、およびＢＰＴＩなど）、ＴＰＲリピート、トリフォイル（ｔｒｉｆｏｉｌ）構造、ジンクフィンガードメイン、ＤＮＡ結合性タンパク質、特に、単量体ＤＮＡ結合性タンパク質、ＲＮＡ結合性タンパク質、酵素、例えば、プロテアーゼ（特に、不活性化プロテアーゼ）、ＲＮａｓｅ、シャペロン、例えば、チオレドキシン、および熱ショックタンパク質、ならびに細胞内シグナル伝達ドメイン（例えば、ＳＨ２およびＳＨ３ドメイン）が挙げられるがそれに限定されない。例えば、米国特許出願公開第２００４０００９５３０号および米国特許第７，５０１，１２１号（参照により本明細書に組み込まれる）を参照。
【０６３５】
実施形態では、スキャフォールドドメインは、例えば、以下の基準：（１）アミノ酸配列、（２）いくつかの相同ドメインの配列、（３）三次元構造、および／または（４）ｐＨ、温度、塩分、有機溶媒、酸化剤濃度の範囲にわたる安定性データのうちの１つまたは複数によって評価および選択される。実施形態では、スキャフォールドドメインは、小さい、安定なタンパク質ドメイン、例えば、１００個、７０個、５０個、４０個または３０個未満のアミノ酸のタンパク質である。ドメインは、１つもしくは複数のジスルフィド結合を含んでもよく、または金属、例えば、亜鉛をキレートしてもよい。
抗体ベースの融合物
抗体のＮまたはＣ末端に取り付けられた追加の結合性実体を含有する様々なフォーマットを生成することができる。単鎖またはジスルフィド安定化ＦｖもしくはＦａｂを有するこれらの融合物は、各抗原に対して二価の結合特異性を有する四価分子の生成をもたらす。ＩｇＧとのｓｃＦｖおよびｓｃＦａｂの組合せは、３つまたはより多くの異なる抗原を認識することができる分子の産生を可能にする。
抗体−Ｆａｂ融合物
抗体−Ｆａｂ融合物は、第１の標的に対する伝統的な抗体および抗体重鎖のＣ末端に融合した第２の標的に対するＦａｂを含む二特異性抗体である。一般的に、抗体およびＦａｂは共通の軽鎖を有する。抗体融合物は、（１）標的融合物のＤＮＡ配列を操作すること、および（２）標的ＤＮＡを好適な宿主細胞にトランスフェクトして融合タンパク質を発現させることにより産生させることができる。Ｃｏｌｏｍａ，  Ｊら、（１９９７）  Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈ  １５：１５９によって記載されるように、抗体−ｓｃＦｖ融合物は、ＣＨ３ドメインのＣ末端とｓｃＦｖのＮ末端との間の（Ｇｌｙ）−Ｓｅｒリンカーによって連結されてもよいようである。
抗体−ｓｃＦｖ融合物
抗体−ｓｃＦｖ融合物は、伝統的な抗体および抗体重鎖のＣ末端に融合した特有の特異性のｓｃＦｖを含む二特異性抗体である。ｓｃＦｖは、直接的にまたはリンカーペプチドを通じてｓｃＦｖの重鎖を通じてＣ末端に融合させることができる。抗体融合物は、（１）標的融合物のＤＮＡ配列を操作すること、および（２）標的ＤＮＡを好適な宿主細胞にトランスフェクトして融合タンパク質を発現させることにより産生させることができる。Ｃｏｌｏｍａ，  Ｊら、（１９９７）  Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈ  １５：１５９によって記載されるように、抗体−ｓｃＦｖ融合物は、ＣＨ３ドメインのＣ末端とｓｃＦｖのＮ末端との間の（Ｇｌｙ）−Ｓｅｒリンカーによって連結されてもよいようである。
可変ドメイン免疫グロブリンＤＶＤ
関連するフォーマットは、より短いリンカー配列によってＶドメインのＮ末端に配置された第２の特異性のＶＨおよびＶＬドメインから構成される二重可変ドメイン免疫グロブリン（ＤＶＤ）である。
【０６３６】
他の例示的な多特異性抗体フォーマットとしては、例えば、以下：米国特許出願公開第２０１６０１１４０５７Ａ１号、米国特許出願公開第２０１３０２４３７７５Ａ１号、米国特許出願公開第２０１４００５１８３３号、米国特許出願公開第２０１３００２２６０１号、米国特許出願公開第２０１５００１７１８７Ａ１号、米国特許出願公開第２０１２０２０１７４６Ａ１号、米国特許出願公開第２０１５０１３３６３８Ａ１号、米国特許出願公開第２０１３０２６６５６８Ａ１号、米国特許出願公開第２０１６０１４５３４０Ａ１号、ＷＯ２０１５１２７１５８Ａ１、米国特許出願公開第２０１５０２０３５９１Ａ１号、米国特許出願公開第２０１４０３２２２２１Ａ１号、米国特許出願公開第２０１３０３０３３９６Ａ１号、米国特許出願公開第２０１１０２９３６１３号、米国特許出願公開第２０１３００１７２００Ａ１号、米国特許出願公開第２０１６０１０２１３５Ａ１号、ＷＯ２０１５１９７５９８Ａ２、ＷＯ２０１５１９７５８２Ａ１、米国特許第９３５９４３７号、米国特許出願公開第２０１５００１８５２９号、ＷＯ２０１６１１５２７４Ａ１、ＷＯ２０１６０８７４１６Ａ１、米国特許出願公開第２００８００６９８２０Ａ１号、米国特許第９１４５５８８Ｂ号、米国特許第７９１９２５７号、および米国特許出願公開第２０１５０２３２５６０Ａ１号に記載のものが挙げられる。全長抗体−Ｆａｂ／ｓｃＦａｂフォーマットを利用する例示的な多特異性分子としては、以下：米国特許第９３８２３２３Ｂ２号、米国特許出願公開第２０１４００７２５８１Ａ１号、米国特許出願公開第２０１４０３０８２８５Ａ１号、米国特許出願公開第２０１３０１６５６３８Ａ１号、米国特許出願公開第２０１３０２６７６８６Ａ１号、米国特許出願公開第２０１４０３７７２６９Ａ１号、米国特許第７７４１４４６Ｂ２号、およびＷＯ１９９５００９９１７Ａ１に記載のものが挙げられる。ドメイン交換フォーマットを利用する例示的な多特異性分子としては、以下：米国特許出願公開第２０１５０３１５２９６Ａ１号、ＷＯ２０１６０８７６５０Ａ１、米国特許出願公開第２０１６００７５７８５Ａ１号、ＷＯ２０１６０１６２９９Ａ１、米国特許出願公開第２０１６０１３０３４７Ａ１号、米国特許出願公開第２０１５０１６６６７０号、米国特許第８７０３１３２Ｂ２号、米国特許出願公開第２０１００３１６６４５号、米国特許第８２２７５７７Ｂ２号、米国特許出願公開第２０１３００７８２４９号に記載のものが挙げられる。
Ｆｃ含有実体（ミニ抗体）
ミニ抗体としても公知のＦｃ含有実体は、ｓｃＦｖを定常重鎖領域ドメイン３のＣ末端（ＣＨ３−ｓｃＦｖ）および／または異なる特異性を有する抗体のヒンジ領域（ｓｃＦｖ−ヒンジ−Ｆｃ）に融合させることにより生成することができる。ＩｇＧのＣＨ３ドメインのＣ末端に融合した（ペプチドリンカーを有さない）ジスルフィド安定化可変ドメインを有する三価の実体もまた作製することができる。
Ｆｃ含有多特異性分子
一部の実施形態では、本明細書に開示される多特異性分子は、免疫グロブリン定常領域（例えば、Ｆｃ領域）を含む。例示的なＦｃ領域は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３またはＩｇＧ４の重鎖定常領域、より特には、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４の重鎖定常領域から選択することができる。
【０６３７】
一部の実施形態では、免疫グロブリン鎖定常領域（例えば、Ｆｃ領域）は、Ｆｃ受容体結合、抗体グリコシル化、システイン残基の数、エフェクター細胞機能、または補体機能のうちの１つまたは複数を増加または減少させるために、変更、例えば、突然変異される。
【０６３８】
他の実施形態では、第１および第２の免疫グロブリン鎖定常領域（例えば、第１および第２のＦｃ領域）の境界部は、例えば、操作されていない境界部、例えば、天然に存在する境界部と比較して、二量体化を増加または減少させるために、変更、例えば、突然変異される。例えば、免疫グロブリン鎖定常領域（例えば、Ｆｃ領域）の二量体化は、第１および第２のＦｃ領域のＦｃ境界部に、対になった孔と突起（「ノブ・イン・ホール」）、静電相互作用、または鎖交換のうちの１つまたは複数を提供し、それによって、例えば、操作されていない境界部と比較して、より高い比のヘテロ多量体：ホモ多量体が形成されることにより、増強させることができる。
【０６３９】
一部の実施形態では、多特異性分子は、例えば、ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域の、３４７、３４９、３５０、３５１、３６６、３６８、３７０、３９２、３９４、３９５、３９７、３９８、３９９、４０５、４０７、または４０９のうちの１つまたは複数から選択される位置において、対になったアミノ酸置換を含む。例えば、免疫グロブリン鎖定常領域（例えば、Ｆｃ領域）は、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、またはＹ４０７Ｖ（例えば、孔またはホールに対応する）、およびＴ３６６Ｗ（例えば、突起またはノブに対応する）から選択される対になったアミノ酸置換を含むことができる。
【０６４０】
他の実施形態では、多機能性分子は、半減期延長剤、例えば、ヒト血清アルブミンまたはヒト血清アルブミンに対する抗体分子を含む。
ヘテロ二量体化抗体分子および作製方法
正しくない重鎖対合の問題に対処するために多特異性抗体を産生する様々な方法が開示されてきた。例示的な方法は以下に記載される。例示的な多特異性抗体フォーマットおよび前記多特異性抗体を作製する方法もまた、例えば、Ｓｐｅｉｓｓら、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  ６７（２０１５）９５〜１０６ページ、およびＫｌｅｉｎら、ｍＡｂ  ４：６、６５３〜６６３ページ、２０１２年１１月／１２月（これらのそれぞれの内容はこれにより参照により本明細書に組み込まれる）に開示されている。
【０６４１】
ヘテロ二量体化二特異性抗体は天然のＩｇＧ構造に基づき、２つの結合性アームが異なる抗原を認識する。定義された一価（および同時の）抗原結合を可能にするＩｇＧ由来のフォーマットは、軽鎖誤対合を最小化する技術（例えば、共通軽鎖）と組み合わせた強制的な重鎖ヘテロ二量体化により生成される。強制的な重鎖ヘテロ二量体化は、例えば、ノブ・イン・ホールまたは鎖交換操作ドメイン（ＳＥＥＤ）を使用して、得ることができる。
ノブ・イン・ホール
米国特許第５，７３１，１１６号、米国特許第７，４７６，７２４号およびＲｉｄｇｗａｙ，  Ｊら、（１９９６）Ｐｒｏｔ．  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  ９（７）：６１７〜６２１ページに記載されるノブ・イン・ホールは、概して、（１）１つまたは両方の抗体のＣＨ３ドメインを突然変異させてヘテロ二量体化を促進すること、および（２）ヘテロ二量体化を促進する条件下で突然変異した抗体を組み合わせることを伴う。「ノブ」または「突起」は、典型的には、親抗体中の小さいアミノ酸をより大きいアミノ酸で置き換えること（例えば、Ｔ３６６ＹまたはＴ３６６Ｗ）により作出され、「ホール」または「孔」は、親抗体中のより大きい残基をより小さいアミノ酸で置き換えること（例えば、Ｙ４０７Ｔ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａおよび／またはＹ４０７Ｖ）により作出される。
【０６４２】
Ｆｃドメインを含む二特異性抗体のために、Ｆｃ部分の正しいヘテロ二量体化を促進するための重鎖の定常領域への特定の突然変異の導入を利用することができる。いくつかのそのような技術は、Ｋｌｅｉｎら（ｍＡｂ（２０１２）４：６、１〜１１ページ）（その内容はこれにより参照により全体が本明細書に組み込まれる）において総説されている。これらの技術としては、抗体重鎖のうちの１つのＣＨ３ドメインのうちの１つへのバルク残基の導入を伴う「ノブ・イントゥー・ホール」（ＫｉＨ）アプローチが挙げられる。このバルク残基は、対になった重鎖の他のＣＨ３ドメイン中の相補的な「ホール」にフィットし、それによって、重鎖の正しい対合が促進される（例えば、米国特許第７６４２２２８号を参照）。
【０６４３】
例示的なＫｉＨ突然変異としては、「ノブ」重鎖中のＳ３５４Ｃ、Ｔ３６６Ｗおよび「ホール」重鎖中のＹ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖが挙げられる。他の例示的なＫｉＨ突然変異は、追加の必要に応じた安定化性Ｆｃシステイン突然変異と共に、表４において提供される。
【０６４４】
【表１２】
2021530246.tif 000074
【０６４５】
他のＦｃ突然変異はＩｇａｗａおよびＴｓｕｎｏｄａにより提供されており、彼らは、他の鎖のＣＨ３ドメイン中の３つの正に荷電した残基と対合する１つの鎖のＣＨ３ドメイン中の３つの負に荷電した残基を同定した。これらの特定の荷電した残基対は、Ｅ３５６−Ｋ４３９、Ｅ３５７−Ｋ３７０、Ｄ３９９−Ｋ４０９およびその逆である。単独でまたは新たに同定されたジスルフィド架橋と組み合わせて、以下の３つの鎖Ａ中の突然変異：Ｅ３５６Ｋ、Ｅ３５７ＫおよびＤ３９９Ｋの他に、鎖Ｂ中のＫ３７０Ｅ、Ｋ４０９Ｄ、Ｋ４３９Ｅのうちの少なくとも２つを導入することにより、それらは、同時にホモ二量体化を抑制しながら非常に効率的なヘテロ二量体化に有利に働くことができた（Ｍａｒｔｅｎｓ  Ｔら、「Ａ  ｎｏｖｅｌ  ｏｎｅ−ａｒｍｅｄ  ａｎｔｉｃ−  Ｍｅｔ  ａｎｔｉｂｏｄｙ  ｉｎｈｉｂｉｔｓ  ｇｌｉｏｂｌａｓｔｏｍａ  ｇｒｏｗｔｈ  ｉｎ  ｖｉｖｏ．」、Ｃｌｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ  ２００６；１２：６１４４〜５２ページ；ＰＭＩＤ：１７０６２６９１）。Ｘｅｎｃｏｒは、構造算出および配列情報の組合せに基づいて４１個のバリアント対を定義し、それをその後に最大のヘテロ二量体化についてスクリーニングして、鎖Ａ上のＳ３６４Ｈ、Ｆ４０５Ａ（ＨＡ）および鎖Ｂ上のＹ３４９Ｔ、Ｔ３９４Ｆ（ＴＦ）の組合せを定義した（Ｍｏｏｒｅ  ＧＬら、「Ａ  ｎｏｖｅｌ  ｂｉｓｐｅｃｉｆｉｃ  ａｎｔｉｂｏｄｙ  ｆｏｒｍａｔ  ｅｎａｂｌｅｓ  ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ  ｂｉｖａｌｅｎｔ  ａｎｄ  ｍｏｎｏｖａｌｅｎｔ  ｃｏ−ｅｎｇａｇｅｍｅｎｔ  ｏｆ  ｄｉｓｔｉｎｃｔ  ｔａｒｇｅｔ  ａｎｔｉｇｅｎｓ．」、ＭＡｂｓ  ２０１１；３：５４６〜５７ページ；ＰＭＩＤ：２２１２３０５５）。
【０６４６】
多特異性抗体のヘテロ二量体化を促進するための他の例示的なＦｃ突然変異としては、以下の参考文献（これらのそれぞれの内容はこれにより参照により本明細書に組み込まれる）：ＷＯ２０１６０７１３７７Ａ１、米国特許出願公開第２０１４００７９６８９Ａ１号、米国特許出願公開第２０１６０１９４３８９Ａ１号、米国特許出願公開第２０１６０２５７７６３号、ＷＯ２０１６０７１３７６Ａ２、ＷＯ２０１５１０７０２６Ａ１、ＷＯ２０１５１０７０２５Ａ１、ＷＯ２０１５１０７０１５Ａ１、米国特許出願公開第２０１５０３５３６３６Ａ１号、米国特許出願公開第２０１４０１９９２９４Ａ１号、米国特許第７７５０１２８Ｂ２号、米国特許出願公開第２０１６０２２９９１５Ａ１号、米国特許出願公開第２０１５０３４４５７０Ａ１号、米国特許第８００３７７４Ａ１号、米国特許出願公開第２０１５０３３７０４９Ａ１号、米国特許出願公開第２０１５０１７５７０７Ａ１号、米国特許出願公開第２０１４０２４２０７５Ａ１号、米国特許出願公開第２０１３０１９５８４９Ａ１号、米国特許出願公開第２０１２０１４９８７６Ａ１号、米国特許出願公開第２０１４０２００３３１Ａ１号、米国特許第９３０９３１１Ｂ２号、米国特許第８５８６７１３号、米国特許出願公開第２０１４００３７６２１Ａ１号、米国特許出願公開第２０１３０１７８６０５Ａ１号、米国特許出願公開第２０１４０３６３４２６Ａ１号、米国特許出願公開第２０１４００５１８３５Ａ１号および米国特許出願公開第２０１１００５４１５１Ａ１号に記載のものが挙げられる。
【０６４７】
安定化性システイン突然変異もまた、ＫｉＨおよび他のＦｃヘテロ二量体化促進性バリアントと組み合わせて使用されている（例えば、米国特許第７１８３０７６号を参照）。他の例示的なシステイン修飾としては、例えば、米国特許出願公開第２０１４０３４８８３９Ａ１号、米国特許第７８５５２７５Ｂ２号、および米国特許第９０００１３０Ｂ２号に開示されるものが挙げられる。
鎖交換操作ドメイン（ＳＥＥＤ）
鎖交換操作ドメイン（ＳＥＥＤ）Ｃ（Ｈ）３ヘテロ二量体を工作することによって二特異性かつ非対称性の融合タンパク質の設計をサポートするヘテロ二量体Ｆｃプラットフォームが公知である。ヒトＩｇＧおよびＩｇＡ  Ｃ（Ｈ）３ドメインのこれらの誘導体は、ヒトＩｇＡおよびＩｇＧ  Ｃ（Ｈ）３配列の交互のセグメントから構成される相補的なヒトＳＥＥＤ  Ｃ（Ｈ）３ヘテロ二量体を作出する。もたらされるＳＥＥＤ  Ｃ（Ｈ）３ドメインの対は、哺乳動物細胞中で発現された場合に優先的に会合してヘテロ二量体を形成する。ＳＥＥＤボディ（Ｓｂ）融合タンパク質は、１つまたは複数の融合パートナーに遺伝子連結されていてもよい［ＩｇＧ１ヒンジ］−Ｃ（Ｈ）２−［ＳＥＥＤ  Ｃ（Ｈ）３］からなる（例えば、Ｄａｖｉｓ  ＪＨら、「ＳＥＥＤｂｏｄｉｅｓ：  ｆｕｓｉｏｎ  ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｂａｓｅｄ  ｏｎ  ｓｔｒａｎｄ  ｅｘｃｈａｎｇｅ  ｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄ  ｄｏｍａｉｎ  （ＳＥＥＤ）  ＣＨ３  ｈｅｔｅｒｏｄｉｍｅｒｓ  ｉｎ  ａｎ  Ｆｃ  ａｎａｌｏｇｕｅ  ｐｌａｔｆｏｒｍ  ｆｏｒ  ａｓｙｍｍｅｔｒｉｃ  ｂｉｎｄｅｒｓ  ｏｒ  ｉｍｍｕｎｏｆｕｓｉｏｎｓ  ａｎｄ  ｂｉｓｐｅｃｉｆｉｃ  ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ．」、Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇ  Ｄｅｓ  Ｓｅｌ  ２０１０；２３：１９５〜２０２ページ；ＰＭＩＤ：２０２９９５４２および米国特許第８８７１９１２号（これらのそれぞれの内容はこれにより参照により本明細書に組み込まれる）を参照）。
デュオボディ
正しい重鎖対合を有する二特異性抗体を産生するための「デュオボディ」技術は公知である。デュオボディ技術は、産生後交換反応において安定な二特異性ヒトＩｇＧ１抗体を生成するための３つの基本的なステップを伴う。第１のステップにおいて、第３の定常（ＣＨ３）ドメイン中に単一のマッチした突然変異をそれぞれ含有する２つのＩｇＧ１が、標準的な哺乳動物組換え細胞系を使用して別々に産生される。その後に、これらのＩｇＧ１抗体は、回収および精製のための標準的な方法に従って精製される。産生および精製後（産生後）、２つの抗体は調整された実験室条件下で組み換えられて、非常に高い収率（典型的には＞９５％）で二特異性抗体産物をもたらす（例えば、Ｌａｂｒｉｊｎら、ＰＮＡＳ  ２０１３；１１０（１３）：５１４５〜５１５０ページおよびＬａｂｒｉｊｎら、Ｎａｔｕｒｅ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ２０１４；９（１０）：２４５０〜６３ページ（これらのそれぞれの内容はこれにより参照により本明細書に組み込まれる）を参照）。
静電相互作用
ホモ二量体形成が静電気的に不都合であるように荷電性アミノ酸を有するＣＨ３アミノ酸変化を使用して多特異性抗体を作製する方法が開示されている。ＥＰ１８７０４５９およびＷＯ２００９０８９００４は、宿主細胞中での異なる抗体ドメインの共発現の際のヘテロ二量体形成に有利に働くための他の戦略を記載する。これらの方法において、重鎖定常ドメイン３（ＣＨ３）、両方のＣＨ３ドメイン中のＣＨ３−ＣＨ３境界部を作り上げる１つまたは複数の残基は、ホモ二量体形成が静電気的に不都合であり、かつヘテロ二量体化が静電気的に好都合であるように荷電性アミノ酸で置き換えられる。静電相互作用を使用して多特異性分子を作製する追加の方法は、米国特許出願公開第２０１０００１５１３３号、米国特許第８５９２５６２Ｂ２号、米国特許第９２０００６０Ｂ２号、米国特許出願公開第２０１４０１５４２５４Ａ１号、および米国特許第９３５８２８６Ａ１号を含む参考文献（これらのそれぞれの内容はこれにより参照により本明細書に組み込まれる）に記載されている。
共通軽鎖
軽鎖誤対合は、二特異性ＩｇＧの均質な調製物を生成するために回避される必要がある。これを達成する１つのやり方は、共通軽鎖の原理、すなわち、１つの軽鎖を共有するが依然として別々の特異性を有する２つのバインダーを組み合わせることの使用を通じたものである。単量体の混合物からの所望の二特異性抗体の形成を増強する例示的な方法は、二特異性抗体のヘテロマー可変重鎖領域のそれぞれと相互作用するための共通の可変軽鎖を提供することによる。共通軽鎖を有する二特異性抗体の組成物およびその産生方法は、例えば、米国特許第７１８３０７６Ｂ２号、米国特許出願公開第２０１１０１７７０７３Ａ１号、ＥＰ２８４７２３１Ａ１、ＷＯ２０１６０７９０８１Ａ１、およびＥＰ３０５５３２９Ａ１（これらのそれぞれの内容はこれにより参照により本明細書に組み込まれる）に開示されている。
ＣｒｏｓｓＭａｂ
軽鎖誤対合を低減するための別のオプションはＣｒｏｓｓＭａｂ技術であり、これは、二特異性抗体の１つの半分のＦａｂ中のＣＨ１およびＣＬドメインを交換することによって非特異的Ｌ鎖誤対合を回避する。そのようなクロスオーバーバリアントは結合特異性および親和性を保持するが、Ｌ鎖誤対合が予防されるように２つのアームを異なるものとさせる。（Ｋｌｅｉｎら、上掲に総説されるように）ＣｒｏｓｓＭａｂ技術は、正しい対合の形成を促進するように重鎖と軽鎖との間のドメインスワッピングを伴う。簡潔に述べれば、２つの別個の軽鎖−重鎖対を使用することによって２つの抗原に結合し得る二特異性ＩｇＧ様ＣｒｏｓｓＭａｂ抗体を構築するために、２ステップ修飾プロセスが応用される。最初に、二量体化境界部は、ヘテロ二量体化アプローチ、例えば、ノブ・イントゥー・ホール（ＫｉＨ）技術を使用して各重鎖のＣ末端中に操作されて、１つの抗体（例えば、抗体Ａ）および第２の抗体（例えば、抗体Ｂ）からの２つの別個の重鎖のヘテロ二量体のみが効率的に形成されることが確実にされる。次に、可変重鎖（ＶＨ）および可変軽鎖（ＶＬ）ドメインを一貫したままに保って、１つの抗体の定常重鎖１（ＣＨ１）および定常軽鎖（ＣＬ）ドメインが交換される（抗体Ａ）。ＣＨ１およびＣＬドメインの交換は、修飾抗体（抗体Ａ）軽鎖は修飾抗体（抗体Ａ）重鎖とのみ効率的に二量体化し、非修飾抗体（抗体Ｂ）軽鎖は非修飾抗体（抗体Ｂ）重鎖とのみ効率的に二量体化するため、所望の二特異性ＣｒｏｓｓＭａｂのみが効率的に形成されることを確実にした（例えば、Ｃａｉｎ，  Ｃ．、ＳｃｉＢＸ  ４（２８）；ｄｏｉ：１０．１０３８／ｓｃｉｂｘ．２０１１．７８３（その内容はこれにより参照により本明細書に組み込まれる）を参照）。
共通重鎖
単量体の混合物からの所望の二特異性抗体の形成を増強する例示的な方法は、二特異性抗体のヘテロマー可変軽鎖領域のそれぞれと相互作用するための共通の可変重鎖を提供することによる。共通重鎖を有する二特異性抗体の組成物およびその産生方法は、例えば、米国特許出願公開第２０１２０１８４７１６号、米国特許出願公開第２０１３０３１７２００号、および米国特許出願公開第２０１６０２６４６８５Ａ１号（これらのそれぞれの内容はこれにより参照により本明細書に組み込まれる）に開示されている。
アミノ酸修飾
正しい軽鎖対合を有する多特異性抗体の代替的な組成物およびその産生方法としては、様々なアミノ酸修飾が挙げられる。例えば、Ｚｙｍｅｗｏｒｋｓは、軽鎖と重鎖との間の境界部の部分であり、各重鎖と所望の軽鎖との優先的な対合を作製する、ＣＨ１および／もしくはＣＬドメイン中の１つもしくは複数のアミノ酸修飾、ＶＨおよび／もしくはＶＬドメイン中の１つもしくは複数のアミノ酸修飾、またはこれらの組合せを有し、それによって、ヘテロ二量体対の２つの重鎖および２つの軽鎖が細胞中で共発現された場合に、第１のヘテロ二量体の重鎖が、他のものよりも軽鎖の１つと優先的に対合する、ヘテロ二量体を記載する（例えば、ＷＯ２０１５１８１８０５を参照）。他の例示的な方法は、ＷＯ２０１６０２６９４３（Ａｒｇｅｎ−Ｘ）、米国特許出願公開第２０１５０２１１００１号、米国特許出願公開第２０１４００７２５８１Ａ１号、米国特許出願公開第２０１６００３９９４７Ａ１号、および米国特許出願公開第２０１５０３６８３５２号に記載されている。
ラムダ／カッパフォーマット
ラムダ軽鎖ポリペプチドおよびカッパ軽鎖ポリペプチドを含む多特異性分子（例えば、多特異性抗体分子）は、ヘテロ二量体化を可能とするために使用することができる。ラムダ軽鎖ポリペプチドおよびカッパ軽鎖ポリペプチドを含む二特異性抗体分子を生成する方法は、２０１７年９月２２日に出願され、公開番号ＷＯ２０１８／０５７９５５を与えられたＰＣＴ／ＵＳ１７／５３０５３（これにより参照により全体が本明細書に組み込まれる）に開示されている。
【０６４８】
実施形態では、多特異性分子は、多特異性抗体分子、例えば、２つの結合特異性を含む抗体分子、例えば、二特異性抗体分子を含む。多特異性抗体分子は、
第１のエピトープに特異的なラムダ軽鎖ポリペプチド１（ＬＬＣＰ１）、
第１のエピトープに特異的な重鎖ポリペプチド１（ＨＣＰ１）、
第２のエピトープに特異的なカッパ軽鎖ポリペプチド２（ＫＬＣＰ２）、および
第２のエピトープに特異的な重鎖ポリペプチド２（ＨＣＰ２）
を含む。
【０６４９】
「ラムダ軽鎖ポリペプチド１（ＬＬＣＰ１）」は、その用語が本明細書で使用される場合、コグネイト重鎖可変領域と組み合わせられた場合に、そのエピトープへの特異的結合を媒介し、ＨＣＰ１と複合体化することができる十分な軽鎖（ＬＣ）配列を含むポリペプチドを指す。一実施形態では、それは、ＣＨ１領域のすべてまたは断片を含む。一実施形態では、ＬＬＣＰ１は、ＬＣ−ＣＤＲ１、ＬＣ−ＣＤＲ２、ＬＣ−ＣＤＲ３、ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、ＦＲ４、およびＣＨ１、またはそのエピトープの特異的結合を媒介し、ＨＣＰ１と複合体化するために十分なこれらからの配列を含む。ＬＬＣＰ１は、そのＨＣＰ１と共に、第１のエピトープに対する特異性を提供する（ＫＬＣＰ２は、そのＨＣＰ２と共に、第２のエピトープに対する特異性を提供する）。本明細書の他の箇所に記載されるように、ＬＬＣＰ１は、ＨＣＰ２に対してよりもＨＣＰ１に対してより高い親和性を有する。
【０６５０】
「カッパ軽鎖ポリペプチド２（ＫＬＣＰ２）」は、その用語が本明細書で使用される場合、コグネイト重鎖可変領域と組み合わせられた場合に、そのエピトープへの特異的結合を媒介し、ＨＣＰ２と複合体化することができる十分な軽鎖（ＬＣ）配列を含むポリペプチドを指す。一部の実施形態では、それは、ＣＨ１領域のすべてまたは断片を含む。一実施形態では、ＫＬＣＰ２は、ＬＣ−ＣＤＲ１、ＬＣ−ＣＤＲ２、ＬＣ−ＣＤＲ３、ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、ＦＲ４、およびＣＨ１、またはそのエピトープの特異的結合を媒介し、ＨＣＰ２と複合体化するために十分なこれらからの配列を含む。ＫＬＣＰ２は、そのＨＣＰ２と共に、第２のエピトープに対する特異性を提供する（ＬＬＣＰ１は、そのＨＣＰ１と共に、第１のエピトープに対する特異性を提供する）。
【０６５１】
「重鎖ポリペプチド１（ＨＣＰ１）」は、その用語が本明細書で使用される場合、コグネイトＬＬＣＰ１と組み合わせられた場合に、そのエピトープへの特異的結合を媒介し、ＨＣＰ１と複合体化することができる十分な重鎖（ＨＣ）配列、例えば、ＨＣ可変領域配列を含むポリペプチドを指す。一部の実施形態では、それは、ＣＨ１領域のすべてまたは断片を含む。一実施形態では、それは、ＣＨ２および／またはＣＨ３領域のすべてまたは断片を含む。一実施形態では、ＨＣＰ１は、ＨＣ−ＣＤＲ１、ＨＣ−ＣＤＲ２、ＨＣ−ＣＤＲ３、ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、ＦＲ４、ＣＨ１、ＣＨ２、およびＣＨ３、または（ｉ）そのエピトープの特異的結合を媒介し、ＬＬＣＰ１と複合体化し、（ｉｉ）本明細書に記載されるように、ＫＬＣＰ２とは対照的にＬＬＣＰ１に対して優先的に複合体化し、かつ（ｉｉｉ）本明細書に記載されるように、ＨＣＰ１の別の分子とは対照的にＨＣＰ２に対して優先的に複合体化するために十分なこれらからの配列を含む。ＨＣＰ１は、そのＬＬＣＰ１と共に、第１のエピトープに対する特異性を提供する（ＫＬＣＰ２は、そのＨＣＰ２と共に、第２のエピトープに対する特異性を提供する）。
【０６５２】
「重鎖ポリペプチド２（ＨＣＰ２）」は、その用語が本明細書で使用される場合、コグネイトＬＬＣＰ１と組み合わせられた場合に、そのエピトープへの特異的結合を媒介し、ＨＣＰ１と複合体化することができる十分な重鎖（ＨＣ）配列、例えば、ＨＣ可変領域配列を含むポリペプチドを指す。一部の実施形態では、それは、ＣＨ１領域のすべてまたは断片を含む。一部の実施形態では、それは、ＣＨ２および／またはＣＨ３領域のすべてまたは断片を含む。一実施形態では、ＨＣＰ１は、ＨＣ−ＣＤＲ１、ＨＣ−ＣＤＲ２、ＨＣ−ＣＤＲ３、ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、ＦＲ４、ＣＨ１、ＣＨ２、およびＣＨ３、または（ｉ）そのエピトープの特異的結合を媒介し、ＫＬＣＰ２と複合体化し、（ｉｉ）本明細書に記載されるように、ＬＬＣＰ１とは対照的にＫＬＣＰ２に対して優先的に複合体化し、かつ（ｉｉｉ）本明細書に記載されるように、ＨＣＰ２の別の分子とは対照的にＨＣＰ１に対して優先的に複合体化するために十分なこれらからの配列を含む。ＨＣＰ２は、そのＫＬＣＰ２と共に、第２のエピトープに対する特異性を提供する（ＬＬＣＰ１は、そのＨＣＰ１と共に、第１のエピトープに対する特異性を提供する）。
【０６５３】
本明細書に開示される多特異性抗体分子の一部の実施形態では、
ＬＬＣＰ１は、ＨＣＰ２に対してよりもＨＣＰ１に対してより高い親和性を有し、かつ／または
ＫＬＣＰ２は、ＨＣＰ１に対してよりもＨＣＰ２に対してより高い親和性を有する。
【０６５４】
実施形態では、ＨＣＰ１に対するＬＬＣＰ１の親和性は、ＨＣＰ２に対するその親和性より十分に高く、それによって、予め選択された条件下、例えば、例えばｐＨ７の水性緩衝液中、例えばｐＨ７の生理食塩水中、または生理的条件下で、多特異性抗体分子の少なくとも７５、８０、９０、９５、９８、９９、９９．５、または９９．９％は、ＨＣＰ１と複合体化した、または結び付けられたＬＬＣＰ１を有する。
【０６５５】
本明細書に開示される多特異性抗体分子の一部の実施形態では、
ＨＣＰ１は、ＨＣＰ１の第２の分子に対してよりもＨＣＰ２に対してより高い親和性を有し、かつ／または
ＨＣＰ２は、ＨＣＰ２の第２の分子に対してよりもＨＣＰ１に対してより高い親和性を有する。
【０６５６】
実施形態では、ＨＣＰ２に対するＨＣＰ１の親和性は、ＨＣＰ１の第２の分子に対するその親和性より十分に高く、それによって、予め選択された条件下、例えば、例えばｐＨ７の水性緩衝液中、例えばｐＨ７の生理食塩水中、または生理的条件下で、多特異性抗体分子の少なくとも７５％、８０、９０、９５、９８、９９  ９９．５または９９．９％は、ＨＣＰ２と複合体化した、または結び付けられたＨＣＰ１を有する。
【０６５７】
別の態様では、多特異性抗体分子を作製、または産生する方法が本明細書に開示される。方法は、（ｉ）〜（ｉｖ）が会合する条件下で、
（ｉ）第１の重鎖ポリペプチド（例えば、第１の重鎖可変領域（第１のＶＨ）、第１のＣＨ１、第１の重鎖定常領域（例えば、第１のＣＨ２、第１のＣＨ３、または両方）のうちの１つ、２つ、３つまたはすべてを含む重鎖ポリペプチド）を提供するステップ、
（ｉｉ）第２の重鎖ポリペプチド（例えば、第２の重鎖可変領域（第２のＶＨ）、第２のＣＨ１、第２の重鎖定常領域（例えば、第２のＣＨ２、第２のＣＨ３、または両方）のうちの１つ、２つ、３つまたはすべてを含む重鎖ポリペプチド）を提供するステップ、
（ｉｉｉ）第１の重鎖ポリペプチド（例えば、第１のＶＨ）と優先的に会合するラムダ鎖ポリペプチド（例えば、ラムダ軽鎖可変領域（ＶＬλ）、ラムダ軽鎖定常鎖（ＶＬλ）、または両方）を提供するステップ、および
（ｉｖ）第２の重鎖ポリペプチド（例えば、第２のＶＨ）と優先的に会合するカッパ鎖ポリペプチド（例えば、ラムダ軽鎖可変領域（ＶＬκ）、ラムダ軽鎖定常鎖（ＶＬκ）、または両方）を提供するステップ
を含む。
【０６５８】
実施形態では、第１および第２の重鎖ポリペプチドは、ヘテロ二量体化を増強するＦｃ境界部を形成する。
実施形態では、（ｉ）〜（ｉｖ）（例えば、（ｉ）〜（ｉｖ）をコードする核酸）は、単一の細胞、例えば、単一の哺乳動物細胞、例えば、ＣＨＯ細胞に導入される。実施形態では、（ｉ）〜（ｉｖ）は、細胞中で発現される。
【０６５９】
実施形態では、（ｉ）〜（ｉｖ）（例えば、（ｉ）〜（ｉｖ）をコードする核酸）は、異なる細胞、例えば、異なる哺乳動物細胞、例えば、２つまたはより多くのＣＨＯ細胞に導入される。実施形態では、（ｉ）〜（ｉｖ）は、細胞中で発現される。
【０６６０】
実施形態では、方法は、例えば、ラムダおよび／またはカッパ特異的精製、例えば、親和性クロマトグラフィーを使用して、細胞発現抗体分子を精製するステップをさらに含む。
【０６６１】
実施形態では、方法は、細胞発現多特異性抗体分子を評価することをさらに含む。例えば、精製された細胞発現多特異性抗体分子は、質量分析を含む、当該技術分野において公知の技術によって分析することができる。一実施形態では、精製された細胞発現抗体分子は、切断、例えば、パパインを用いて消化されて、Ｆａｂ部分をもたらし、質量分析を使用して評価される。
【０６６２】
実施形態では、方法は、高い収率、例えば、少なくとも７５％、８０、９０、９５、９８、９９  ９９．５または９９．９％で、正しく対になったカッパ／ラムダ多特異性の、例えば、二特異性の抗体分子を産生する。
【０６６３】
他の実施形態では、多特異性の、例えば、二特異性の、抗体分子は、
（ｉ）第１の重鎖ポリペプチド（ＨＣＰ１）（例えば、第１の重鎖可変領域（第１のＶＨ）、第１のＣＨ１、第１の重鎖定常領域（例えば、第１のＣＨ２、第１のＣＨ３、または両方）のうちの１つ、２つ、３つまたはすべてを含む重鎖ポリペプチド）であって、例えば、第１のエピトープに結合する、ＨＣＰ１、
（ｉｉ）第２の重鎖ポリペプチド（ＨＣＰ２）（例えば、第２の重鎖可変領域（第２のＶＨ）、第２のＣＨ１、第２の重鎖定常領域（例えば、第２のＣＨ２、第２のＣＨ３、または両方）のうちの１つ、２つ、３つまたはすべてを含む重鎖ポリペプチド）であって、例えば、第２のエピトープに結合する、ＨＣＰ２、
（ｉｉｉ）第１の重鎖ポリペプチド（例えば、第１のＶＨ）と優先的に会合するラムダ軽鎖ポリペプチド（ＬＬＣＰ１）（例えば、ラムダ軽鎖可変領域（ＶＬｌ）、ラムダ軽鎖定常鎖（ＶＬｌ）、または両方）であって、例えば、第１のエピトープに結合する、ＬＬＣＰ１、および
（ｉｖ）第２の重鎖ポリペプチド（例えば、第２のＶＨ）と優先的に会合するカッパ軽鎖ポリペプチド（ＫＬＣＰ２）（例えば、ラムダ軽鎖可変領域（ＶＬｋ）、ラムダ軽鎖定常鎖（ＶＬｋ）、または両方）であって、例えば、第２のエピトープに結合する、ＫＬＣＰ２
を含む。
【０６６４】
実施形態では、第１および第２の重鎖ポリペプチドは、ヘテロ二量体化を増強するＦｃ境界部を形成する。実施形態では、多特異性抗体分子は、Ｆｃ定常、ＣＨ２−ＣＨ３ドメイン（ノブ修飾を有する）に接続された第１の重鎖可変領域にヘテロ二量体化したハイブリッドＶＬｌ−ＣＬｌを含む第１の結合特異性、およびＦｃ定常、ＣＨ２−ＣＨ３ドメイン（ホール修飾を有する）に接続された第２の重鎖可変領域にヘテロ二量体化したハイブリッドＶＬｋ−ＣＬｋを含む第２の結合特異性を有する。
サイトカイン分子
サイトカインは、一般に、例えば、シグナル伝達経路を通じて、細胞活性に影響を及ぼすポリペプチドである。よって、多特異性または多機能性ポリペプチドのサイトカインは有用であり、細胞膜の外側からシグナルを伝達して細胞内の応答をモジュレートする受容体媒介性のシグナル伝達と関連付けられ得る。サイトカインは、免疫応答のメディエーターであるタンパク質性のシグナル伝達化合物である。それらは、増殖、分化および細胞生存／アポトーシスを含む多くの異なる細胞機能を制御し、サイトカインはまた、ウイルス感染症および自己免疫疾患を含むいくつかの病態生理学的プロセスに関与する。サイトカインは、自然免疫系（単球、マクロファージ、樹状細胞）ならびに適応免疫系（ＴおよびＢ細胞）の両方の様々な細胞によって様々な刺激下で合成される。サイトカインは、炎症促進性および抗炎症性の２つの群に分類することができる。ＩＦＮγ、ＩＬ−１、ＩＬ−６およびＴＮＦ−アルファを含む炎症促進性サイトカインは、主に、自然免疫細胞およびＴｈ１細胞に由来する。ＩＬ−１０、ＩＬ−４、ＩＬ−１３およびＩＬ−５を含む抗炎症性サイトカインは、Ｔｈ２免疫細胞から合成される。
【０６６５】
本開示は、とりわけ、１つまたは複数のサイトカイン分子、例えば、免疫調節性（例えば、炎症促進性）サイトカインおよびそのバリアント、例えば、機能的バリアントを含む、例えば、それを含有するように操作された多特異性（例えば、二、三、四特異性）または多機能性分子を提供する。よって、一部の実施形態では、サイトカイン分子は、インターロイキンまたはそのバリアント、例えば、機能的バリアントである。一部の実施形態では、インターロイキンは炎症促進性インターロイキンである。一部の実施形態では、インターロイキンは、インターロイキン−２（ＩＬ−２）、インターロイキン−１２（ＩＬ−１２）、インターロイキン−１５（ＩＬ−１５）、インターロイキン−１８（ＩＬ−１８）、インターロイキン−２１（ＩＬ−２１）、インターロイキン−７（ＩＬ−７）、またはインターフェロンガンマから選択される。一部の実施形態では、サイトカイン分子は炎症促進性サイトカインである。
【０６６６】
ある特定の実施形態では、サイトカインは一本鎖サイトカインである。ある特定の実施形態では、サイトカインは、多鎖サイトカインである（例えば、サイトカインは、２つまたはより多くの（例えば、２つの）ポリペプチド鎖を含む。例示的な多鎖サイトカインはＩＬ−１２である。
【０６６７】
有用なサイトカインの例としては、ＧＭ−ＣＳＦ、ＩＬ−１α、ＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−１０、ＩＬ−１２、ＩＬ−２１、ＩＦＮ−α、ＩＦＮ−β、ＩＦＮ−γ、ＭＩＰ−１α、ＭＩＰ−１β、ＴＧＦ−β、ＴＮＦ−α、およびＴＮＦβが挙げられるがそれに限定されない。一実施形態では、多特異性または多機能性ポリペプチドのサイトカインは、ＧＭ−ＣＳＦ、ＩＬ−２、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−１０、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−２１、ＩＦＮ−α、ＩＦＮ−γ、ＭＩＰ−１α、ＭＩＰ−１βおよびＴＧＦ−βの群から選択されるサイトカインである。一実施形態では、多特異性または多機能性ポリペプチドのサイトカインは、ＩＬ−２、ＩＬ−７、ＩＬ−１０、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＦＮ−α、およびＩＦＮ−γの群から選択されるサイトカインである。ある特定の実施形態では、サイトカインは、Ｎ−および／またはＯ−グリコシル化部位を除去するために突然変異される。グリコシル化の排除は、組換え産生において得られ得る製造物の均質性を増加させる。
【０６６８】
一実施形態では、多特異性または多機能性ポリペプチドのサイトカインはＩＬ−２である。詳細な実施形態では、ＩＬ−２サイトカインは、活性化Ｔリンパ球細胞の増殖、活性化Ｔリンパ球細胞の分化、細胞傷害性Ｔ細胞（ＣＴＬ）活性、活性化Ｂ細胞の増殖、活性化Ｂ細胞の分化、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞の増殖、ＮＫ細胞の分化、活性化Ｔ細胞またはＮＫ細胞によるサイトカイン分泌、およびＮＫ／リンパ球活性化キラー（ＬＡＫ）抗腫瘍細胞傷害性からなる群から選択される細胞応答のうちの１つまたは複数を誘発することができる。別の特定の実施形態では、ＩＬ−２サイトカインは、ＩＬ−２受容体のアルファ−サブユニットに対して低減した結合親和性を有する突然変異体ＩＬ−２サイトカインである。ベータ−およびガンマ−サブユニット（それぞれＣＤ１２２およびＣＤ１３２としても公知）と共に、アルファ−サブユニット（ＣＤ２５としても公知）は、ヘテロ三量体高親和性ＩＬ−２受容体を形成するが、β−およびγ−サブユニットのみからなる二量体受容体は、中親和性ＩＬ−２受容体と称される。ＰＣＴ特許出願番号ＰＣＴ／ＥＰ２０１２／０５１９９１（これにより参照により全体が本明細書に組み込まれる）に記載されるように、ＩＬ−２受容体のアルファ−サブユニットに対して低減した結合を有する突然変異体ＩＬ−２ポリペプチドは、野生型ＩＬ−２ポリペプチドと比較して、制御性Ｔ細胞中でＩＬ−２シグナル伝達を誘導する低減した能力を有し、Ｔ細胞中でより少ない活性化誘導性細胞死（ＡＩＣＤ）を誘導し、かつｉｎ  ｖｉｖｏでの低減した毒性プロファイルを有する。低減した毒性を有するそのようなサイトカインの使用は、Ｆｃドメインの存在に起因して長い血清半減期を有する本発明による多特異性または多機能性ポリペプチドにおいて特に有利である。一実施形態では、本発明による多特異性または多機能性ポリペプチドの突然変異体ＩＬ−２サイトカインは、突然変異されていないＩＬ−２サイトカインと比較して、ＩＬ−２受容体のアルファ−サブユニット（ＣＤ２５）に対する突然変異体ＩＬ−２サイトカインの親和性を低減しまたは消失させるが、中親和性ＩＬ−２受容体（ＩＬ−２受容体のβおよびγサブユニットからなる）に対する突然変異体ＩＬ−２サイトカインの親和性を保存する少なくとも１つのアミノ酸突然変異を含む。一実施形態では、１つまたは複数のアミノ酸突然変異はアミノ酸置換である。詳細な実施形態では、突然変異体ＩＬ−２サイトカインは、ヒトＩＬ−２の残基４２、４５、および７２に対応する位置から選択される１つ、２つまたは３つの位置における１つ、２つまたは３つのアミノ酸置換を含む。より詳細な実施形態では、突然変異体ＩＬ−２サイトカインは、ヒトＩＬ−２の残基４２、４５および７２に対応する位置における３つのアミノ酸置換を含む。よりいっそう詳細な実施形態では、突然変異体ＩＬ−２サイトカインは、アミノ酸置換Ｆ４２Ａ、Ｙ４５ＡおよびＬ７２Ｇを含むヒトＩＬ−２である。一実施形態では、突然変異体ＩＬ−２サイトカインは、ヒトＩＬ−２の３位に対応する位置におけるアミノ酸突然変異を追加的に含み、これはＩＬ−２のＯ−グリコシル化部位を排除する。特に、前記追加のアミノ酸突然��異は、スレオニン残基をアラニン残基によって置き換えるアミノ酸置換である。本発明において有用な特定の突然変異体ＩＬ−２サイトカインは、ヒトＩＬ−２の残基３、４２、４５および７２に対応する位置における４つのアミノ酸置換を含む。特定のアミノ酸置換は、Ｔ３Ａ、Ｆ４２Ａ、Ｙ４５ＡおよびＬ７２Ｇである。ＰＣＴ特許出願番号ＰＣＴ／ＥＰ２０１２／０５１９９１および付加された実施例において実証されるように、前記四重突然変異体ＩＬ−２ポリペプチド（ＩＬ−２  ｑｍ）は、ＣＤ２５への検出可能な結合を呈さず、Ｔ細胞においてアポトーシスを誘導する低減した能力を呈し、制御性Ｔ細胞（Ｔ．ｓｕｂ．ｒｅｇ  ｃｅｌｌｓ）においてＩＬ−２シグナル伝達を誘導する低減した能力を呈し、かつｉｎ  ｖｉｖｏでの低減した毒性プロファイルを呈する。しかしながら、それは、エフェクター細胞においてＩＬ−２シグナル伝達を活性化させ、エフェクター細胞の増殖を誘導し、かつＮＫ細胞により二次的なサイトカインとしてＩＦＮ−γを生成させる能力を保持する。
【０６６９】
上記の実施形態のいずれかによるＩＬ−２または突然変異体ＩＬ−２サイトカインは、発現または安定性の増加などのさらなる利点を提供する追加の突然変異を含んでもよい。例えば、１２５位におけるシステインは、ジスルフィド架橋によるＩＬ−２二量体の形成を回避するために、アラニンなどの中性アミノ酸で置き換えられてもよい。そのため、ある特定の実施形態では、本発明による多特異性または多機能性ポリペプチドのＩＬ−２または突然変異体ＩＬ−２サイトカインは、ヒトＩＬ−２の残基１２５に対応する位置における追加のアミノ酸突然変異を含む。一実施形態では、前記追加のアミノ酸突然変異はアミノ酸置換Ｃ１２５Ａである。
【０６７０】
詳細な実施形態では、多特異性または多機能性ポリペプチドのＩＬ−２サイトカインは、配列番号２２７０
［ＡＰＴＳＳＳＴＫＫＴＱＬＱＬＥＨＬＬＬＤＬＱＭＩＬＮＧＩＮＮ  ＹＫＮＰＫＬＴＲＭＬＴＦＫＦＹＭＰＫＫＡＴＥＬＫＨＬＱＣＬＥＥＥＬＫＰＬＥＥＶＬＮＬＡＱＳＫＮＦＨＬ  ＲＰＲＤＬＩＳＮＩＮＶＩＶＬＥＬＫＧＳＥＴＴＦＭＣＥＹＡＤＥＴＡＴＩＶＥＦＬＮＲＷＩＴＦＡＱＳＩＩＳＴＬＴ］
のポリペプチド配列を含む。
【０６７１】
別の詳細な実施形態では、多特異性または多機能性ポリペプチドのＩＬ−２サイトカインは、配列番号２２８０［ＡＰＡＳＳＳＴＫＫＴＱＬＱＬＥＨＬＬＬＤ  ＬＱＭＩＬＮＧＩＮＮ  ＹＫＮＰＫＬＴＲＭＬＴＡＫＦＡＭＰＫＫＡＴＥＬＫＨＬＱＣＬＥ  ＥＥＬＫＰＬＥＥＶＬＮＧＡＱＳＫＮＦＨＬ  ＲＰＲＤＬＩＳＮＩＮ  ＶＩＶＬＥＬＫＧＳＥＴＴＦＭＣＥＹＡＤＥＴＡＴＩＶＥＦＬＮＲＷＩＴＦＡＱＳＩＩＳＴＬＴ］のポリペプチド配列を含む。
【０６７２】
別の実施形態では、多特異性または多機能性ポリペプチドのサイトカインはＩＬ−１２である。詳細な実施形態では、前記ＩＬ−１２サイトカインは一本鎖ＩＬ−１２サイトカインである。よりいっそう詳細な実施形態では、一本鎖ＩＬ−１２サイトカインは、配列番号２２９０
［ＩＷＥＬＫＫＤＶＹＶＶＥＬＤＷＹＰＤＡＰＧＥＭＶＶＬＴＣＤＴＰＥＥＤＧＩＴＷＴＬＤＱＳＳＥＶＬＧＳＧＫＴＬＴＩＱＶＫＥＦＧＤＡＧＱＹＴＣＨＫＧＧＥＶＬＳＨＳＬＬＬＬＨＫＫＥＤＧＩＷＳＴＤＩＬＫＤＱＫＥＰＫＮＫＴＦＬＲＣＥＡＫＮＹＳＧＲＦＴＣＷＷＬＴＴＩＳＴＤＬＴＦＳＶＫＳＳＲＧＳＳＤＰＱＧＶＴＣＧＡＡＴＬＳＡＥＲＶＲＧＤＮＫＥＹＥＹＳＶＥＣＱＥＤＳＡＣＰＡＡＥＥＳＬＰＩＥＶＭＶＤＡＶＨＫＬＫＹＥＮＹＴＳＳＦＦＩＲＤＩＩＫＰＤＰＰＫＮＬＱＬＫＰＬＫＮＳＲＱＶＥＶＳＷＥＹＰＤＴＷＳＴＰＨＳＹＦＳＬＴＦＣＶＱＶＱＧＫＳＫＲＥＫＫＤＲＶＦＴＤＫＴＳＡＴＶＩＣＲＫＮＡＳＩＳＶＲＡＱＤＲＹＹＳＳＳＷＳＥＷＡＳＶＰＣＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＲＮＬＰＶＡＴＰＤＰＧＭＦＰＣＬＨＨＳＱＮＬＬＲＡＶＳＮＭＬＱＫＡＲＱＴＬＥＦＹＰＣＴＳＥＥＩＤＨＥＤＩＴＫＤＫＴＳＴＶＥＡＣＬＰＬＥＬＴＫＮＥＳＣＬＮＳＲＥＴＳＦＩＴＮＧＳＣＬＡＳＲＫＴＳＦＭＭＡＬＣＬＳＳＩＹＥＤＬＫＭＹＱＶＥＦＫＴＭＮＡＫＬＬＭＤＰＫＲＱＩＦＬＤＱＮＭＬＡＶＩＤＥＬＭＱＡＬＮＦＮＳＥＴＶＰＱＫＳＳＬＥＥＰＤＦＹＫＴＫＩＫＬＣＩＬＬＨＡＦＲＩＲＡＶＴＩＤＲＶＭＳＹＬＮＡＳ］のポリペプチド配列を含む。一実施形態では、ＩＬ−１２サイトカインは、ＮＫ細胞の増殖、ＮＫ細胞の分化、Ｔ細胞の増殖、およびＴ細胞の分化からなる群から選択される細胞応答のうちの１つまたは複数を誘発することができる。
【０６７３】
別の実施形態では、多特異性または多機能性ポリペプチドのサイトカインはＩＬ−１０である。詳細な実施形態では、前記ＩＬ−１０サイトカインは一本鎖ＩＬ−１０サイトカインである。よりいっそう詳細な実施形態では、一本鎖ＩＬ−１０サイトカインは、配列番号２３００
［ＳＰＧＱＧＴＱＳＥＮＳＣＴＨＦＰＧＮＬＰＮＭＬＲＤＬＲＤＡＦＳＲＶＫＴＦＦＱＭＫＤＱＬＤＮＬＬＬＫＥＳＬＬＥＤＦＫＧＹＬＧＣＱＡＬＳＥＭＩＱＦＹＬＥＥＶＭＰＱＡＥＮＱＤＰＤＩＫＡＨＶＮＳＬＧＥＮＬＫＴＬＲＬＲＬＲＲＣＨＲＦＬＰＣＥＮＫＳＫＡＶＥＱＶＫＮＡＦＮＫＬＱＥＫＧＩＹＫＡＭＳＥＦＤＩＦＩＮＹＩＥＡＹＭＴＭＫＩＲＮＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＳＰＧＱＧＴＱＳＥＮＳＣＴＨＦＰＧＮＬＰＮＭＬＲＤＬＲＤＡＦＳＲＶＫＴＦＦＱＭＫＤＱＬＤＮＬＬＬＫＥＳＬＬＥＤＦＫＧＹＬＧＣＱＡＬＳＥＭＩＱＦＹＬＥＥＶＭＰＱＡＥＮＱＤＰＤＩＫＡＨＶＮＳＬＧＥＮＬＫＴＬＲＬＲＬＲＲＣＨＲＦＬＰＣＥＮＫＳＫＡＶＥＱＶＫＮＡＦＮＫＬＱＥＫＧＩＹＫＡＭＳＥＦＤＩＦＩＮＹＩＥＡＹＭＴＭＫＩＲＮ］のポリペプチド配列を含む。
【０６７４】
別の詳細な実施形態では、ＩＬ−１０サイトカインは単量体ＩＬ−１０サイトカインである。より詳細な実施形態では、単量体ＩＬ−１０サイトカインは、配列番号２３１０
［ＳＰＧＱＧＴＱＳＥＮＳＣＴＨＦＰＧＮＬＰＮＭＬＲＤＬＲＤＡＦＳＲＶＫＴＦＦＱＭＫＤＱＬＤＮＬＬＬＫＥＳＬＬＥＤＦＫＧＹＬＧＣＱＡＬＳＥＭＩＱＦＹＬＥＥＶＭＰＱＡＥＮＱＤＰＤＩＫＡＨＶＮＳＬＧＥＮＬＫＴＬＲＬＲＬＲＲＣＨＲＦＬＰＣＥＮＧＧＧＳＧＧＫＳＫＡＶＥＱＶＫＮＡＦＮＫＬＱＥＫＧＩＹＫＡＭＳＥＦＤＩＦＩＮＹＩＥＡＹＭＴＭＫＩＲＮ］のポリペプチド配列を含む。一実施形態では、ＩＬ−１０サイトカインは、サイトカイン分泌の阻害、抗原提示細胞による抗原提示の阻害、酸素ラジカル放出の低減、およびＴ細胞増殖の阻害からなる群から選択される細胞応答のうちの１つまたは複数を誘発することができる。サイトカインがＩＬ−１０である本発明による多特異性または多機能性ポリペプチドは、例えば、炎症性障害の処置における、炎症の下方調節のために特に有用である。
【０６７５】
別の実施形態では、多特異性または多機能性ポリペプチドのサイトカインはＩＬ−１５である。詳細な実施形態では、前記ＩＬ−１５サイトカインは、ＩＬ−１５受容体のα−サブユニットに対して低減した結合親和性を有する突然変異体ＩＬ−１５サイトカインである。理論に拘泥するものではないが、ＩＬ−１５受容体のアルファ−サブユニットへの低減した結合を有する突然変異体ＩＬ−１５ポリペプチドは、野生型ＩＬ−１５ポリペプチドと比較して、身体の全体を通じて線維芽細胞に結合する低減した能力を有し、向上した薬物動態および毒性プロファイルをもたらす。記載される突然変異体ＩＬ−２および突然変異体ＩＬ−１５エフェクター部分などの低減した毒性を有するサイトカインの使用は、Ｆｃドメインの存在に起因して長い血清半減期を有する本発明による多特異性または多機能性ポリペプチドにおいて特に有利である。一実施形態では、本発明による多特異性または多機能性ポリペプチドの突然変異体ＩＬ−１５サイトカインは、突然変異していないＩＬ−１５サイトカインと比較して、ＩＬ−１５受容体のアルファ−サブユニットに対する突然変異体ＩＬ−１５サイトカインの親和性を低減しまたは消失させるが、中親和性ＩＬ−１５／ＩＬ−２受容体（ＩＬ−１５／ＩＬ−２受容体のベータ−およびガンマ−サブユニットからなる）に対する突然変異体ＩＬ−１５サイトカインの親和性を保存する少なくとも１つのアミノ酸突然変異を含む。一実施形態では、アミノ酸突然変異はアミノ酸置換である。詳細な実施形態では、突然変異体ＩＬ−１５サイトカインは、ヒトＩＬ−１５の残基５３に対応する位置においてアミノ酸置換を含む。より詳細な実施形態では、突然変異体ＩＬ−１５サイトカインは、アミノ酸置換Ｅ５３Ａを含むヒトＩＬ−１５である。一実施形態では、突然変異体ＩＬ−１５サイトカインは、ヒトＩＬ−１５の７９位に対応する位置においてアミノ酸突然変異を追加的に含み、これはＩＬ−１５のＮ−グリコシル化部位を排除する。特に、前記追加のアミノ酸突然変異は、アスパラギン残基をアラニン残基によって置き換えるアミノ酸置換である。よりいっそう詳細な実施形態では、ＩＬ−１５サイトカインは、配列番号２３２０［ＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＡＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＡＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ］のポリペプチド配列を含む。一実施形態では、ＩＬ−１５サイトカインは、活性化Ｔリンパ球細胞の増殖、活性化Ｔリンパ球細胞の分化、細胞傷害性Ｔ細胞（ＣＴＬ）活性、活性化Ｂ細胞の増殖、活性化Ｂ細胞の分化、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞の増殖、ＮＫ細胞の分化、活性化Ｔ細胞またはＮＫ細胞によるサイトカイン分泌、およびＮＫ／リンパ球活性化キラー（ＬＡＫ）抗腫瘍細胞傷害性からなる群から選択される細胞応答のうちの１つまたは複数を誘発することができる。
【０６７６】
多特異性または多機能性ポリペプチド中のエフェクター部分として有用な突然変異体サイトカイン分子は、当該技術分野において周知の遺伝学的または化学的方法を使用して欠失、置換、挿入または修飾によって調製することができる。遺伝学的方法は、コーディングＤＮＡ配列の部位特異的突然変異誘発、ＰＣＲ、および遺伝子合成などを含んでもよい。正しいヌクレオチド変化は、例えばシークエンシングによって検証することができる。置換または挿入は、天然アミノ酸残基の他に非天然アミノ酸残基を伴ってもよい。アミノ酸修飾としては、グリコシル化部位の付加もしくは除去または炭水化物の取付けなどの化学修飾の周知の方法が挙げられる。
【０６７７】
一実施形態では、多特異性または多機能性ポリペプチドのサイトカイン、特に一本鎖サイトカインはＧＭ−ＣＳＦである。詳細な実施形態では、ＧＭ−ＣＳＦサイトカインは、顆粒球、単球または樹状細胞において増殖および／または分化を誘発することができる。一実施形態では、多特異性または多機能性ポリペプチドのサイトカイン、特に一本鎖サイトカインはＩＦＮ−αである。詳細な実施形態では、ＩＦＮ−αサイトカインは、ウイルス感染細胞におけるウイルス複製の阻害、および主要組織適合複合体Ｉ（ＭＨＣ  Ｉ）の発現の上方調節からなる群から選択される細胞応答のうちの１つまたは複数を誘発することができる。別の詳細な実施形態では、ＩＦＮ−αサイトカインは、腫瘍細胞において増殖を阻害することができる。一実施形態では、多特異性または多機能性ポリペプチドのサイトカイン、特に一本鎖サイトカインはＩＦＮγである。詳細な実施形態では、ＩＦＮ−γサイトカインは、マクロファージ活性の増加、ＭＨＣ分子の発現の増加、およびＮＫ細胞活性の増加の群から選択される細胞応答のうちの１つまたは複数を誘発することができる。一実施形態では、多特異性または多機能性ポリペプチドのサイトカイン、特に一本鎖サイトカインはＩＬ−７である。詳細な実施形態では、ＩＬ−７サイトカインは、Ｔおよび／またはＢリンパ球の増殖を誘発することができる。一実施形態では、多特異性または多機能性ポリペプチドのサイトカイン、特に一本鎖サイトカインはＩＬ−８である。詳細な実施形態では、ＩＬ−８サイトカインは、好中球において走化性を誘発することができる。一実施形態では、多特異性または多機能性ポリペプチドのサイトカイン、特に一本鎖サイトカインはＭＩＰ−１αである。詳細な実施形態では、ＭＩＰ−１αサイトカインは、単球およびＴリンパ球細胞において走化性を誘発することができる。一実施形態では、多特異性または多機能性ポリペプチドのサイトカイン、特に一本鎖サイトカインはＭＩＰ−１βである。詳細な実施形態では、ＭＩＰ−１βサイトカインは、単球およびＴリンパ球細胞において走化性を誘発することができる。一実施形態では、多特異性または多機能性ポリペプチドのサイトカイン、特に一本鎖サイトカインはＴＧＦ−βである。詳細な実施形態では、ＴＧＦ−βサイトカインは、単球における走化性、マクロファージにおける走化性、活性化マクロファージにおけるＩＬ−１発現の上方調節、および活性化Ｂ細胞におけるＩｇＡ発現の上方調節からなる群から選択される細胞応答のうちの１つまたは複数を誘発することができる。
【０６７８】
一実施形態では、本発明の多特異性または多機能性ポリペプチドは、対照サイトカインについてよりも少なくとも約１、１．５、２、２．５、３、３．５、４、４．５、５、５．５、６、６．５、７、７．５、８、８．５、９、９．５または１０倍高い解離定数（ＫＤ）でサイトカイン受容体に結合する。別の実施形態では、多特異性または多機能性ポリペプチドは、２つまたはより多くのエフェクター部分を含む対応する多特異性または多機能性ポリペプチドについてよりも少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９、または１０倍高いＫＤでサイトカイン受容体に結合する。別の実施形態では、多特異性または多機能性ポリペプチドは、２つまたはより多くのサイトカインを含む対応する多特異性または多機能性ポリペプチドについてよりも約１０倍高い解離定数ＫＤでサイトカイン受容体に結合する。
【０６７９】
一部の実施形態では、本明細書に開示される多特異性分子は、サイトカイン分子を含む。実施形態では、サイトカイン分子は、サイトカインの全長、断片もしくはバリアント；サイトカイン受容体ドメイン、例えば、サイトカイン受容体二量体化ドメイン；またはサイトカイン受容体のアゴニスト、例えば、サイトカイン受容体に対する抗体分子（例えば、アゴニスト抗体）を含む。
【０６８０】
一部の実施形態では、サイトカイン分子は、ＩＬ−２、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−１８、ＩＬ−７、ＩＬ−２１、もしくはインターフェロンガンマ、もしくはその断片もしくはバリアント、または上記のサイトカインの任意の組合せから選択される。サイトカイン分子は、単量体または二量体であり得る。実施形態では、サイトカイン分子は、サイトカイン受容体二量体化ドメインをさらに含むことができる。
【０６８１】
他の実施形態では、サイトカイン分子は、サイトカイン受容体のアゴニスト、例えば、ＩＬ−１５ＲａまたはＩＬ−２１Ｒから選択されるサイトカイン受容体に対する抗体分子（例えば、アゴニスト抗体）である。
【０６８２】
一実施形態では、サイトカイン分子は、ＩＬ−１５、例えば、ヒトＩＬ−１５（例えば、アミノ酸配列：
ＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ（配列番号２１７０）、その断片、またはそれに対して実質的に同一である（例えば、それに対して９５％〜９９．９％同一であるか、もしくは配列番号２１７０のアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個もしくは１５個以下である変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列を含む。
【０６８３】
一部の実施形態では、サイトカイン分子は、受容体二量体化ドメイン、例えば、ＩＬ１５Ｒアルファ二量体化ドメインを含む。一実施形態では、ＩＬ１５Ｒアルファ二量体化ドメインは、アミノ酸配列：
ＭＡＰＲＲＡＲＧＣＲＴＬＧＬＰＡＬＬＬＬＬＬＬＲＰＰＡＴＲＧＩＴＣＰＰＰＭＳＶＥＨＡＤＩＷＶＫＳＹＳＬＹＳＲＥＲＹＩＣＮＳＧＦＫＲＫＡＧＴＳＳＬＴＥＣＶＬ（配列番号２１８０）、その断片、またはそれに対して実質的に同一である（例えば、それに対して９５％〜９９．９％同一であるか、もしくは配列番号２１８０のアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個もしくは１５個以下である変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、多特異性分子のサイトカイン分子（例えば、ＩＬ−１５）および受容体二量体化ドメイン（例えば、ＩＬ１５Ｒアルファ二量体化ドメイン）は、例えば、リンカー（例えば、Ｇｌｙ−Ｓｅｒリンカー、例えば、アミノ酸配列ＳＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＳＧＧＧＧＳＬＱ（配列番号２１９０）を含むリンカーを介して、共有結合的に連結されている。他の実施形態では、多特異性分子のサイトカイン分子（例えば、ＩＬ−１５）および受容体二量体化ドメイン（例えば、ＩＬ１５Ｒアルファ二量体化ドメイン）は、共有結合的に連結されておらず、例えば、非共有結合的に会合している。
【０６８４】
他の実施形態では、サイトカイン分子は、ＩＬ−２、例えば、ヒトＩＬ−２（例えば、アミノ酸配列：
ＡＰＴＳＳＳＴＫＫＴＱＬＱＬＥＨＬＬＬＤＬＱＭＩＬＮＧＩＮＮＹＫＮＰＫＬＴＲＭＬＴＦＫＦＹＭＰＫＫＡＴＥＬＫＨＬＱＣＬＥＥＥＬＫＰＬＥＥＶＬＮＬＡＱＳＫＮＦＨＬＲＰＲＤＬＩＳＮＩＮＶＩＶＬＥＬＫＧＳＥＴＴＦＭＣＥＹＡＤＥＴＡＴＩＶＥＦＬＮＲＷＩＴＦＣＱＳＩＩＳＴＬＴ（配列番号２１９１）その断片、またはそれに対して実質的に同一である（例えば、それに対して９５％〜９９．９％同一であるか、もしくは配列番号２１９１のアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個もしくは１５個以下である変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する）アミノ酸配列を含む。
【０６８５】
他の実施形態では、サイトカイン分子は、ＩＬ−１８、例えば、ヒトＩＬ−１８（例えば、アミノ酸配列：
ＹＦＧＫＬＥＳＫＬＳＶＩＲＮＬＮＤＱＶＬＦＩＤＱＧＮＲＰＬＦＥＤＭＴＤＳＤＣＲＤＮＡＰＲＴＩＦＩＩＳＭＹＫＤＳＱＰＲＧＭ
ＡＶＴＩＳＶＫＣＥＫＩＳＴＬＳＣＥＮＫＩＩＳＦＫＥＭＮＰＰＤＮＩＫＤＴＫＳＤＩＩＦＦＱＲＳＶＰＧＨＤＮＫＭＱＦＥＳＳＳＹ
ＥＧＹＦＬＡＣＥＫＥＲＤＬＦＫＬＩＬＫＫＥＤＥＬＧＤＲＳＩＭＦＴＶＱＮＥＤ（配列番号２１９２）その断片、またはそれに対して実質的に同一である（例えば、それに対して９５％〜９９．９％同一であるか、もしくは配列番号２１９２のアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個もしくは１５個以下である変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する）アミノ酸配列を含む。
【０６８６】
他の実施形態では、サイトカイン分子は、ＩＬ−２１、例えば、ヒトＩＬ−２１（例えば、アミノ酸配列：
ＱＧＱＤＲＨＭＩＲＭＲＱＬＩＤＩＶＤＱＬＫＮＹＶＮＤＬＶＰＥＦＬＰＡＰＥＤＶＥＴＮＣＥＷＳＡＦＳＣＦＱＫＡＱＬＫＳＡＮＴＧＮＮＥＲＩＩＮＶＳＩＫＫＬＫＲＫＰＰＳＴＮＡＧＲＲＱＫＨＲＬＴＣＰＳＣＤＳＹＥＫＫＰＰＫＥＦＬＥＲＦＫＳＬＬＱＫＭＩＨＱＨＬＳＳＲＴＨＧＳＥＤＳ（配列番号２１９３）その断片、またはそれに対して実質的に同一である（例えば、それに対して９５％〜９９．９％同一であるか、もしくは配列番号２１９３のアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個もしくは１５個以下である変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する）アミノ酸配列を含む。
【０６８７】
さらに他の実施形態では、サイトカイン分子は、インターフェロンガンマ、例えば、ヒトインターフェロンガンマ（例えば、アミノ酸配列：
ＱＤＰＹＶＫＥＡＥＮＬＫＫＹＦＮＡＧＨＳＤＶＡＤＮＧＴＬＦＬＧＩＬＫＮＷＫＥＥＳＤＲＫＩＭＱＳＱＩＶＳＦＹＦＫＬＦＫＮＦＫＤＤＱＳＩＱＫＳＶＥＴＩＫＥＤＭＮＶＫＦＦＮＳＮＫＫＫＲＤＤＦＥＫＬＴＮＹＳＶＴＤＬＮＶＱＲＫＡＩＨＥＬＩＱＶＭＡＥＬＳＰＡＡＫＴＧＫＲＫＲＳＱＭＬＦＲＧ（配列番号２１９４）、その断片、またはそれに対して実質的に同一である（例えば、それに対して９５％〜９９．９％同一であるか、もしくは配列番号２１９４のアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個もしくは１５個以下である変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する）アミノ酸配列を含む。
免疫細胞エンゲージャー
本明細書に開示される多特異性または多機能性分子の免疫細胞エンゲージャー、例えば、第１および／または第２の免疫細胞エンゲージャーは、免疫細胞、例えば、免疫エフェクター細胞への結合、および／またはその活性化を媒介することができる。一部の実施形態では、免疫細胞は、Ｔ細胞、ＮＫ細胞、Ｂ細胞、樹状細胞、もしくはマクロファージ細胞エンゲージャー、またはこれらの組合せから選択される。一部の実施形態では、免疫細胞エンゲージャーは、Ｔ細胞エンゲージャー、ＮＫ細胞エンゲージャー、Ｂ細胞エンゲージャー、樹状細胞エンゲージャー、もしくはマクロファージ細胞エンゲージャーのうちの１つ、２つ、３つ、もしくはすべて、またはこれらの組合せから選択される。免疫細胞エンゲージャーは、免疫系のアゴニストであり得る。一部の実施形態では、免疫細胞エンゲージャーは、抗体分子、リガンド分子（例えば、免疫グロブリン定常領域、例えば、Ｆｃ領域をさらに含むリガンド）、小分子、ヌクレオチド分子であり得る。
ナチュラルキラー細胞エンゲージャー
ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞は、抗体非依存性の方式で腫瘍およびウイルス感染細胞を認識および破壊する。ＮＫ細胞の調節は、ＮＫ細胞表面上の受容体を活性化および阻害することによって媒介される。活性化受容体の１つのファミリーは、ＮＫｐ３０、ＮＫｐ４４およびＮＫｐ４６を含む天然細胞傷害性受容体（ＮＣＲ）である。ＮＣＲは、がん細胞上のヘパラン硫酸の認識によって腫瘍標的化を開始させる。ＮＫＧ２Ｄは、活性化キラー（ＮＫ）細胞において刺激性および共刺激性の両方の自然免疫応答を提供する受容体であり、細胞傷害活性に繋がる。ＤＮＡＭ１は、細胞間接着、リンパ球シグナル伝達、細胞傷害性ならびに細胞傷害性Ｔリンパ球（ＣＴＬ）およびＮＫ細胞によって媒介されるリンホカイン分泌に関与する受容体である。ＤＡＰ１０（ＨＣＳＴとしても公知）は、リンパ球様および骨髄性細胞においてＫＬＲＫ１と会合して活性化受容体ＫＬＲＫ１−ＨＣＳＴを形成する膜貫通アダプタータンパク質であり、この受容体は、ＭＨＣクラスＩ鎖関連ＭＩＣＡおよびＭＩＣＢ、ならびにＵ（必要に応じてＬ１）６結合性タンパク質（ＵＬＢＰ）などの細胞表面リガンドを発現する標的細胞に対する細胞傷害性の誘発において大きな役割を果たし、ＫＬＲＫ１−ＨＣＳＴ受容体は、腫瘍に対する免疫サーベイランスにおいて役割を果たし、腫瘍細胞の細胞溶解のために要求され、実際に、ＫＬＲＫ１リガンドを発現しない黒色腫細胞は、ＮＫ細胞によって媒介される免疫サーベイランスを免れる。ＣＤ１６は、ＩｇＧのＦｃ領域に対する受容体であり、複合体化または凝集ＩｇＧ、そして単量体ＩｇＧにも結合し、それによって、抗体依存性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）およびファゴサイトーシスなどの他の抗体依存性応答を媒介する。
【０６８８】
一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーはウイルスヘマグルチニン（ＨＡ）であり、ＨＡは、インフルエンザウイルスの表面上に見出される糖タンパク質である。それは、上気道中の細胞または赤血球などの膜上にシアル酸を有する細胞へのウイルスの結合の原因となる。ＨＡは、少なくとも１８の異なる抗原を有する。これらのサブタイプは、Ｈ１〜Ｈ１８と命名されている。ＮＣＲはウイルスタンパク質を認識することができる。ＮＫｐ４６は、インフルエンザのＨＡならびにセンダイウイルスおよびニューカッスル病ウイルスを含むパラミクソウイルスのＨＡ−ＮＡと相互作用できることが示されている。ＮＫｐ４６の他に、ＮＫｐ４４もまた、異なるインフルエンザサブタイプのＨＡと機能的に相互作用することができる。
【０６８９】
本開示は、とりわけ、ＮＫ細胞への結合および／またはその活性化を媒介する１つまたは複数のＮＫ細胞エンゲージャーを含有するように操作されている多特異性（例えば、二、三、四特異性）または多機能性分子を提供する。よって、一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ＮＫｐ３０、ＮＫｐ４０、ＮＫｐ４４、ＮＫｐ４６、ＮＫＧ２Ｄ、ＤＮＡＭ１、ＤＡＰ１０、ＣＤ１６（例えば、ＣＤ１６ａ、ＣＤ１６ｂ、もしくは両方）、ＣＲＴＡＭ、ＣＤ２７、ＰＳＧＬ１、ＣＤ９６、ＣＤ１００（ＳＥＭＡ４Ｄ）、ＮＫｐ８０、ＣＤ２４４（ＳＬＡＭＦ４もしくは２Ｂ４としても公知）、ＳＬＡＭＦ６、ＳＬＡＭＦ７、ＫＩＲ２ＤＳ２、ＫＩＲ２ＤＳ４、ＫＩＲ３ＤＳ１、ＫＩＲ２ＤＳ３、ＫＩＲ２ＤＳ５、ＫＩＲ２ＤＳ１、ＣＤ９４、ＮＫＧ２Ｃ、ＮＫＧ２Ｅ、またはＣＤ１６０に結合する（例えば、それを活性化させる）抗原結合性ドメインまたはリガンドから選択される。
【０６９０】
一実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ＮＫｐ３０のリガンド、Ｂ７−６であり、例えば、
ＤＬＫＶＥＭＭＡＧＧＴＱＩＴＰＬＮＤＮＶＴＩＦＣＮＩＦＹＳＱＰＬＮＩＴＳＭＧＩＴＷＦＷＫＳＬＴＦＤＫＥＶＫＶＦＥＦＦＧＤＨＱＥＡＦＲＰＧＡＩＶＳＰＷＲＬＫＳＧＤＡＳＬＲＬＰＧＩＱＬＥＥＡＧＥＹＲＣＥＶＶＶＴＰＬＫＡＱＧＴＶＱＬＥＶＶＡＳＰＡＳＲＬＬＬＤＱＶＧＭＫＥＮＥＤＫＹＭＣＥＳＳＧＦＹＰＥＡＩＮＩＴＷＥＫＱＴＱＫＦＰＨＰＩＥＩＳＥＤＶＩＴＧＰＴＩＫＮＭＤＧＴＦＮＶＴＳＣＬＫＬＮＳＳＱＥＤＰＧＴＶＹＱＣＶＶＲＨＡＳＬＨＴＰＬＲＳＮＦＴＬＴＡＡＲＨＳＬＳＥＴＥＫＴＤＮＦＳ（配列番号１２４ａ）のアミノ酸配列、その断片、またはそれに対して実質的に同一である（例えば、それに対して９５％〜９９．９％同一であるか、もしくは配列番号１２４ａａのアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個もしくは１５個以下である変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列を含む。
【０６９１】
他の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ウイルスＨＡである、ＮＫｐ４４またはＮＫｐ４６のリガンドである。ウイルスヘマグルチニン（ＨＡ）は、ウイルスの表面上にある糖タンパク質である。ＨＡタンパク質は、シアル酸糖部分を介してウイルスが細胞の膜に結合することを可能とし、これは細胞膜とのウイルス膜の融合に寄与する（例えば、Ｅｕｒ  Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  ２００１  Ｓｅｐ；３１（９）：２６８０〜９ページ、「Ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ｖｉｒａｌ  ｈｅｍａｇｇｌｕｔｉｎｉｎｓ  ｂｙ  ＮＫｐ４４  ｂｕｔ  ｎｏｔ  ｂｙ  ＮＫｐ３０」；およびＮａｔｕｒｅ  ２００１  Ｆｅｂ  ２２；４０９（６８２３）：１０５５〜６０ページ、「Ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ｈａｅｍａｇｇｌｕｔｉｎｉｎｓ  ｏｎ  ｖｉｒｕｓ−ｉｎｆｅｃｔｅｄ  ｃｅｌｌｓ  ｂｙ  ＮＫｐ４６  ａｃｔｉｖａｔｅｓ  ｌｙｓｉｓ  ｂｙ  ｈｕｍａｎ  ＮＫ  ｃｅｌｌｓ」（これらのそれぞれの内容はこれにより参照により本明細書に組み込まれる）を参照）。
【０６９２】
他の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ＭＩＣＡ、ＭＩＣＢ、またはＵＬＢＰ１から選択されるＮＫＧ２Ｄのリガンドであり、例えば、
（ｉ）ＭＩＣＡは、アミノ酸配列：
ＥＰＨＳＬＲＹＮＬＴＶＬＳＷＤＧＳＶＱＳＧＦＬＴＥＶＨＬＤＧＱＰＦＬＲＣＤＲＱＫＣＲＡＫＰＱＧＱＷＡＥＤＶＬＧＮＫＴＷＤＲＥＴＲＤＬＴＧＮＧＫＤＬＲＭＴＬＡＨＩＫＤＱＫＥＧＬＨＳＬＱＥＩＲＶＣＥＩＨＥＤＮＳＴＲＳＳＱＨＦＹＹＤＧＥＬＦＬＳＱＮＬＥＴＫＥＷＴＭＰＱＳＳＲＡＱＴＬＡＭＮＶＲＮＦＬＫＥＤＡＭＫＴＫＴＨＹＨＡＭＨＡＤＣＬＱＥＬＲＲＹＬＫＳＧＶＶＬＲＲＴＶＰＰＭＶＮＶＴＲＳＥＡＳＥＧＮＩＴＶＴＣＲＡＳＧＦＹＰＷＮＩＴＬＳＷＲＱＤＧＶＳＬＳＨＤＴＱＱＷＧＤＶＬＰＤＧＮＧＴＹＱＴＷＶＡＴＲＩＣＱＧＥＥＱＲＦＴＣＹＭＥＨＳＧＮＨＳＴＨＰＶＰＳＧＫＶＬＶＬＱＳＨＷ（配列番号１２５ａ）その断片、もしくはそれに対して実質的に同一である（例えば、それに対して９５％〜９９．９％同一であるか、もしくは配列番号１２５ａのアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個もしくは１５個以下である変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列を含み、
（ｉｉ）ＭＩＣＢは、アミノ酸配列：
ＡＥＰＨＳＬＲＹＮＬＭＶＬＳＱＤＥＳＶＱＳＧＦＬＡＥＧＨＬＤＧＱＰＦＬＲＹＤＲＱＫＲＲＡＫＰＱＧＱＷＡＥＤＶＬＧＡＫＴＷＤＴＥＴＥＤＬＴＥＮＧＱＤＬＲＲＴＬＴＨＩＫＤＱＫＧＧＬＨＳＬＱＥＩＲＶＣＥＩＨＥＤＳＳＴＲＧＳＲＨＦＹＹＤＧＥＬＦＬＳＱＮＬＥＴＱＥＳＴＶＰＱＳＳＲＡＱＴＬＡＭＮＶＴＮＦＷＫＥＤＡＭＫＴＫＴＨＹＲＡＭＱＡＤＣＬＱＫＬＱＲＹＬＫＳＧＶＡＩＲＲＴＶＰＰＭＶＮＶＴＣＳＥＶＳＥＧＮＩＴＶＴＣＲＡＳＳＦＹＰＲＮＩＴＬＴＷＲＱＤＧＶＳＬＳＨＮＴＱＱＷＧＤＶＬＰＤＧＮＧＴＹＱＴＷＶＡＴＲＩＲＱＧＥＥＱＲＦＴＣＹＭＥＨＳＧＮＨＧＴＨＰＶＰＳＧＫＶＬＶＬＱＳＱＲＴＤ（配列番号１２６ａ）その断片、もしくはそれに対して実質的に同一である（例えば、それに対して９５％〜９９．９％同一であるか、もしくは配列番号１２６ａのアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個もしくは１５個以下である変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列を含み、または
（ｉｉｉ）ＵＬＢＰ１は、アミノ酸配列：
ＧＷＶＤＴＨＣＬＣＹＤＦＩＩＴＰＫＳＲＰＥＰＱＷＣＥＶＱＧＬＶＤＥＲＰＦＬＨＹＤＣＶＮＨＫＡＫＡＦＡＳＬＧＫＫＶＮＶＴＫＴＷＥＥＱＴＥＴＬＲＤＶＶＤＦＬＫＧＱＬＬＤＩＱＶＥＮＬＩＰＩＥＰＬＴＬＱＡＲＭＳＣＥＨＥＡＨＧＨＧＲＧＳＷＱＦＬＦＮＧＱＫＦＬＬＦＤＳＮＮＲＫＷＴＡＬＨＰＧＡＫＫＭＴＥＫＷＥＫＮＲＤＶＴＭＦＦＱＫＩＳＬＧＤＣＫＭＷＬＥＥＦＬＭＹＷＥＱＭＬＤＰＴＫＰＰＳＬＡＰＧ（配列番号１２７ａ）その断片、もしくはそれに対して実質的に同一である（例えば、それに対して９５％〜９９．９％同一であるか、もしくは配列番号１２７ａのアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個もしくは１５個以下である変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列を含む。
【０６９３】
他の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ＮＥＣＴＩＮ２またはＮＥＣＬ５から選択されるＤＮＡＭ１のリガンドであり、例えば、
（ｉ）ＮＥＣＴＩＮ２は、アミノ酸配列：
ＱＤＶＲＶＱＶＬＰＥＶＲＧＱＬＧＧＴＶＥＬＰＣＨＬＬＰＰＶＰＧＬＹＩＳＬＶＴＷＱＲＰＤＡＰＡＮＨＱＮＶＡＡＦＨＰＫＭＧＰＳＦＰＳＰＫＰＧＳＥＲＬＳＦＶＳＡＫＱＳＴＧＱＤＴＥＡＥＬＱＤＡＴＬＡＬＨＧＬＴＶＥＤＥＧＮＹＴＣＥＦＡＴＦＰＫＧＳＶＲＧＭＴＷＬＲＶＩＡＫＰＫＮＱＡＥＡＱＫＶＴＦＳＱＤＰＴＴＶＡＬＣＩＳＫＥＧＲＰＰＡＲＩＳＷＬＳＳＬＤＷＥＡＫＥＴＱＶＳＧＴＬＡＧＴＶＴＶＴＳＲＦＴＬＶＰＳＧＲＡＤＧＶＴＶＴＣＫＶＥＨＥＳＦＥＥＰＡＬＩＰＶＴＬＳＶＲＹＰＰＥＶＳＩＳＧＹＤＤＮＷＹＬＧＲＴＤＡＴＬＳＣＤＶＲＳＮＰＥＰＴＧＹＤＷＳＴＴＳＧＴＦＰＴＳＡＶＡＱＧＳＱＬＶＩＨＡＶＤＳＬＦＮＴＴＦＶＣＴＶＴＮＡＶＧＭＧＲＡＥＱＶＩＦＶＲＥＴＰＮＴＡＧＡＧＡＴＧＧ（配列番号１２８ａ）その断片、もしくはそれに対して実質的に同一である（例えば、それに対して９５％〜９９．９％同一であるか、もしくは配列番号１２８ａのアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個もしくは１５個以下である変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列を含み、または
（ｉｉ）ＮＥＣＬ５は、アミノ酸配列：
ＷＰＰＰＧＴＧＤＶＶＶＱＡＰＴＱＶＰＧＦＬＧＤＳＶＴＬＰＣＹＬＱＶＰＮＭＥＶＴＨＶＳＱＬＴＷＡＲＨＧＥＳＧＳＭＡＶＦＨＱＴＱＧＰＳＹＳＥＳＫＲＬＥＦＶＡＡＲＬＧＡＥＬＲＮＡＳＬＲＭＦＧＬＲＶＥＤＥＧＮＹＴＣＬＦＶＴＦＰＱＧＳＲＳＶＤＩＷＬＲＶＬＡＫＰＱＮＴＡＥＶＱＫＶＱＬＴＧＥＰＶＰＭＡＲＣＶＳＴＧＧＲＰＰＡＱＩＴＷＨＳＤＬＧＧＭＰＮＴＳＱＶＰＧＦＬＳＧＴＶＴＶＴＳＬＷＩＬＶＰＳＳＱＶＤＧＫＮＶＴＣＫＶＥＨＥＳＦＥＫＰＱＬＬＴＶＮＬＴＶＹＹＰＰＥＶＳＩＳＧＹＤＮＮＷＹＬＧＱＮＥＡＴＬＴＣＤＡＲＳＮＰＥＰＴＧＹＮＷＳＴＴＭＧＰＬＰＰＦＡＶＡＱＧＡＱＬＬＩＲＰＶＤＫＰＩＮＴＴＬＩＣＮＶＴＮＡＬＧＡＲＱＡＥＬＴＶＱＶＫＥＧＰＰＳＥＨＳＧＩＳＲＮ（配列番号１２９ａ）その断片、もしくはそれに対して実質的に同一である（例えば、それに対して９５％〜９９．９％同一であるか、もしくは配列番号１２９ａａのアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個もしくは１５個以下である変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列を含む。
【０６９４】
さらに他の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ＮＫＧ２Ｄのアダプターである、ＤＡＰ１０のリガンドである（例えば、Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  Ｕ  Ｓ  Ａ．  ２００５  Ｍａｙ  ２４；１０２（２１）：７６４１〜７６４６ページ；およびＢｌｏｏｄ、１５  Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ  ２０１１  Ｖｏｌｕｍｅ  １１８、Ｎｕｍｂｅｒ  １１（これらのそれぞれの全内容はこれにより参照により本明細書に組み込まれる）を参照）。
【０６９５】
他の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ＣＤ１６ａ／ｂリガンドである、ＣＤ１６のリガンド、例えば、抗体Ｆｃ領域をさらに含むＣＤ１６ａ／ｂリガンドである（例えば、Ｆｒｏｎｔ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  ２０１３；４：７６を参照；これは、ＣＤ１６を通じてＮＫ細胞を誘発するために抗体がＦｃをどのように使用するのかを議論しており、その内容の全体は本明細書に組み込まれる）。
【０６９６】
他の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ＮＥＣＬ２である、ＣＲＴＡＭのリガンドであり、例えば、ＮＥＣＬ２は、アミノ酸配列：
ＱＮＬＦＴＫＤＶＴＶＩＥＧＥＶＡＴＩＳＣＱＶＮＫＳＤＤＳＶＩＱＬＬＮＰＮＲＱＴＩＹＦＲＤＦＲＰＬＫＤＳＲＦＱＬＬＮＦＳＳＳＥＬＫＶＳＬＴＮＶＳＩＳＤＥＧＲＹＦＣＱＬＹＴＤＰＰＱＥＳＹＴＴＩＴＶＬＶＰＰＲＮＬＭＩＤＩＱＫＤＴＡＶＥＧＥＥＩＥＶＮＣＴＡＭＡＳＫＰＡＴＴＩＲＷＦＫＧＮＴＥＬＫＧＫＳＥＶＥＥＷＳＤＭＹＴＶＴＳＱＬＭＬＫＶＨＫＥＤＤＧＶＰＶＩＣＱＶＥＨＰＡＶＴＧＮＬＱＴＱＲＹＬＥＶＱＹＫＰＱＶＨＩＱＭＴＹＰＬＱＧＬＴＲＥＧＤＡＬＥＬＴＣＥＡＩＧＫＰＱＰＶＭＶＴＷＶＲＶＤＤＥＭＰＱＨＡＶＬＳＧＰＮＬＦＩＮＮＬＮＫＴＤＮＧＴＹＲＣＥＡＳＮＩＶＧＫＡＨＳＤＹＭＬＹＶＹＤＰＰＴＴＩＰＰＰＴＴＴＴＴＴＴＴＴＴＴＴＴＩＬＴＩＩＴＤＳＲＡＧＥＥＧＳＩＲＡＶＤＨ（配列番号１３０ａ）その断片、またはそれに対して実質的に同一である（例えば、それに対して９５％〜９９．９％同一であるか、もしくは配列番号１３０ａのアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個もしくは１５個以下である変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列を含む。
【０６９７】
他の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ＣＤ７０である、ＣＤ２７のリガンドであり、例えば、ＣＤ７０は、アミノ酸配列：
ＱＲＦＡＱＡＱＱＱＬＰＬＥＳＬＧＷＤＶＡＥＬＱＬＮＨＴＧＰＱＱＤＰＲＬＹＷＱＧＧＰＡＬＧＲＳＦＬＨＧＰＥＬＤＫＧＱＬＲＩＨＲＤＧＩＹＭＶＨＩＱＶＴＬＡＩＣＳＳＴＴＡＳＲＨＨＰＴＴＬＡＶＧＩＣＳＰＡＳＲＳＩＳＬＬＲＬＳＦＨＱＧＣＴＩＡＳＱＲＬＴＰＬＡＲＧＤＴＬＣＴＮＬＴＧＴＬＬＰＳＲＮＴＤＥＴＦＦＧＶＱＷＶＲＰ（配列番号１３１ａ）その断片、またはそれに対して実質的に同一である（例えば、それに対して９５％〜９９．９％同一であるか、もしくは配列番号１３１ａのアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個もしくは１５個以下である変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列を含む。
【０６９８】
他の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、Ｌ−セレクチン（ＣＤ６２Ｌ）である、ＰＳＧＬ１のリガンドであり、例えば、Ｌ−セレクチンは、アミノ酸配列：
ＷＴＹＨＹＳＥＫＰＭＮＷＱＲＡＲＲＦＣＲＤＮＹＴＤＬＶＡＩＱＮＫＡＥＩＥＹＬＥＫＴＬＰＦＳＲＳＹＹＷＩＧＩＲＫＩＧＧＩＷＴＷＶＧＴＮＫＳＬＴＥＥＡＥＮＷＧＤＧＥＰＮＮＫＫＮＫＥＤＣＶＥＩＹＩＫＲＮＫＤＡＧＫＷＮＤＤＡＣＨＫＬＫＡＡＬＣＹＴＡＳＣＱＰＷＳＣＳＧＨＧＥＣＶＥＩＩＮＮＹＴＣＮＣＤＶＧＹＹＧＰＱＣＱＦＶＩＱＣＥＰＬＥＡＰＥＬＧＴＭＤＣＴＨＰＬＧＮＦＳＦＳＳＱＣＡＦＳＣＳＥＧＴＮＬＴＧＩＥＥＴＴＣＧＰＦＧＮＷＳＳＰＥＰＴＣＱＶＩＱＣＥＰＬＳＡＰＤＬＧＩＭＮＣＳＨＰＬＡＳＦＳＦＴＳＡＣＴＦＩＣＳＥＧＴＥＬＩＧＫＫＫＴＩＣＥＳＳＧＩＷＳＮＰＳＰＩＣＱＫＬＤＫＳＦＳＭＩＫＥＧＤＹＮ（配列番号１３２ａ）その断片、またはそれに対して実質的に同一である（例えば、それに対して９５％〜９９．９％同一であるか、もしくは配列番号１３２ａのアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個もしくは１５個以下である変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列を含む。
【０６９９】
他の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ＮＥＣＬ５である、ＣＤ９６のリガンドであり、例えば、ＮＥＣＬ５は、アミノ酸配列：
ＷＰＰＰＧＴＧＤＶＶＶＱＡＰＴＱＶＰＧＦＬＧＤＳＶＴＬＰＣＹＬＱＶＰＮＭＥＶＴＨＶＳＱＬＴＷＡＲＨＧＥＳＧＳＭＡＶＦＨＱＴＱＧＰＳＹＳＥＳＫＲＬＥＦＶＡＡＲＬＧＡＥＬＲＮＡＳＬＲＭＦＧＬＲＶＥＤＥＧＮＹＴＣＬＦＶＴＦＰＱＧＳＲＳＶＤＩＷＬＲＶＬＡＫＰＱＮＴＡＥＶＱＫＶＱＬＴＧＥＰＶＰＭＡＲＣＶＳＴＧＧＲＰＰＡＱＩＴＷＨＳＤＬＧＧＭＰＮＴＳＱＶＰＧＦＬＳＧＴＶＴＶＴＳＬＷＩＬＶＰＳＳＱＶＤＧＫＮＶＴＣＫＶＥＨＥＳＦＥＫＰＱＬＬＴＶＮＬＴＶＹＹＰＰＥＶＳＩＳＧＹＤＮＮＷＹＬＧＱＮＥＡＴＬＴＣＤＡＲＳＮＰＥＰＴＧＹＮＷＳＴＴＭＧＰＬＰＰＦＡＶＡＱＧＡＱＬＬＩＲＰＶＤＫＰＩＮＴＴＬＩＣＮＶＴＮＡＬＧＡＲＱＡＥＬＴＶＱＶＫＥＧＰＰＳＥＨＳＧＩＳＲＮ（配列番号１２９ａ）その断片、またはそれに対して実質的に同一である（例えば、それに対して９５％〜９９．９％同一であるか、もしくは配列番号１２９ａのアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個もしくは１５個以下である変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列を含む。
【０７００】
他の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ＣＤ７２である、ＣＤ１００（ＳＥＭＡ４Ｄ）のリガンドであり、例えば、ＣＤ７２は、
アミノ酸配列：
ＲＹＬＱＶＳＱＱＬＱＱＴＮＲＶＬＥＶＴＮＳＳＬＲＱＱＬＲＬＫＩＴＱＬＧＱＳＡＥＤＬＱＧＳＲＲＥＬＡＱＳＱＥＡＬＱＶＥＱＲＡＨＱＡＡＥＧＱＬＱＡＣＱＡＤＲＱＫＴＫＥＴＬＱＳＥＥＱＱＲＲＡＬＥＱＫＬＳＮＭＥＮＲＬＫＰＦＦＴＣＧＳＡＤＴＣＣＰＳＧＷＩＭＨＱＫＳＣＦＹＩＳＬＴＳＫＮＷＱＥＳＱＫＱＣＥＴＬＳＳＫＬＡＴＦＳＥＩＹＰＱＳＨＳＹＹＦＬＮＳＬＬＰＮＧＧＳＧＮＳＹＷＴＧＬＳＳＮＫＤＷＫＬＴＤＤＴＱＲＴＲＴＹＡＱＳＳＫＣＮＫＶＨＫＴＷＳＷＷＴＬＥＳＥＳＣＲＳＳＬＰＹＩＣＥＭＴＡＦＲＦＰＤ（配列番号１３３ａ）その断片、またはそれに対して実質的に同一である（例えば、それに対して９５％〜９９．９％同一であるか、もしくは配列番号１３３ａのアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個もしくは１５個以下である変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列を含む。
【０７０１】
他の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ＣＬＥＣ２Ｂ（ＡＩＣＬ）である、ＮＫｐ８０のリガンドであり、例えば、ＣＬＥＣ２Ｂ（ＡＩＣＬ）は、アミノ酸配列：
ＫＬＴＲＤＳＱＳＬＣＰＹＤＷＩＧＦＱＮＫＣＹＹＦＳＫＥＥＧＤＷＮＳＳＫＹＮＣＳＴＱＨＡＤＬＴＩＩＤＮＩＥＥＭＮＦＬＲＲＹＫＣＳＳＤＨＷＩＧＬＫＭＡＫＮＲＴＧＱＷＶＤＧＡＴＦＴＫＳＦＧＭＲＧＳＥＧＣＡＹＬＳＤＤＧＡＡＴＡＲＣＹＴＥＲＫＷＩＣＲＫＲＩＨ（配列番号１３４ａ）その断片、またはそれに対して実質的に同一である（例えば、それに対して９５％〜９９．９％同一であるか、もしくは配列番号１３４ａのアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個もしくは１５個以下である変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列を含む。
【０７０２】
他の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ＣＤ４８である、ＣＤ２４４のリガンドであり、例えば、ＣＤ４８は、アミノ酸配列：
ＱＧＨＬＶＨＭＴＶＶＳＧＳＮＶＴＬＮＩＳＥＳＬＰＥＮＹＫＱＬＴＷＦＹＴＦＤＱＫＩＶＥＷＤＳＲＫＳＫＹＦＥＳＫＦＫＧＲＶＲＬＤＰＱＳＧＡＬＹＩＳＫＶＱＫＥＤＮＳＴＹＩＭＲＶＬＫＫＴＧＮＥＱＥＷＫＩＫＬＱＶＬＤＰＶＰＫＰＶＩＫＩＥＫＩＥＤＭＤＤＮＣＹＬＫＬＳＣＶＩＰＧＥＳＶＮＹＴＷＹＧＤＫＲＰＦＰＫＥＬＱＮＳＶＬＥＴＴＬＭＰＨＮＹＳＲＣＹＴＣＱＶＳＮＳＶＳＳＫＮＧＴＶＣＬＳＰＰＣＴＬＡＲＳ（配列番号１３５ａ）その断片、またはそれに対して実質的に同一である（例えば、それに対して９５％〜９９．９％同一であるか、もしくは配列番号１３５ａのアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個もしくは１５個以下である変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列を含む。
Ｔ細胞エンゲージャー
本開示は、とりわけ、Ｔ細胞への結合および／またはその活性化を媒介する１つまたは複数のＴ細胞エンゲージャーを含有するように操作されている多特異性（例えば、二、三、四特異性）または多機能性分子を提供する。一部の実施形態では、Ｔ細胞エンゲージャーは、本明細書に記載される、ＴＣＲβ、例えば、ＴＣＲβＶ領域に結合する、例えば、それを活性化させる抗原結合性ドメインである。一部の実施形態では、Ｔ細胞エンゲージャーは、ＣＤ３、ＴＣＲα、ＴＣＲγ、ＴＣＲζ、ＩＣＯＳ、ＣＤ２８、ＣＤ２７、ＨＶＥＭ、ＬＩＧＨＴ、ＣＤ４０、４−１ＢＢ、ＯＸ４０、ＤＲ３、ＧＩＴＲ、ＣＤ３０、ＴＩＭ１、ＳＬＡＭ、ＣＤ２、またはＣＤ２２６のうちの１つまたは複数に結合する（例えば、一部の実施形態では、それを活性化させる）抗原結合性ドメインまたはリガンドから選択される。他の実施形態では、Ｔ細胞エンゲージャーは、ＣＤ３、ＴＣＲα、ＴＣＲγ、ＴＣＲζ、ＩＣＯＳ、ＣＤ２８、ＣＤ２７、ＨＶＥＭ、ＬＩＧＨＴ、ＣＤ４０、４−１ＢＢ、ＯＸ４０、ＤＲ３、ＧＩＴＲ、ＣＤ３０、ＴＩＭ１、ＳＬＡＭ、ＣＤ２、またはＣＤ２２６のうちの１つまたは複数に結合し、かつそれを活性化させない抗原結合性ドメインまたはリガンドから選択される。
Ｂ細胞、マクロファージおよび樹状細胞エンゲージャー
概括的に言えば、Ｂリンパ球としても公知のＢ細胞は、リンパ球サブタイプの白血球の一種である。それらは、抗体を分泌することによって適応免疫系の液性免疫成分において機能する。追加的に、Ｂ細胞は、抗原を提示し（それらはまた、プロフェッショナル抗原提示細胞（ＡＰＣ）として分類される）、サイトカインを分泌する。マクロファージは、ファゴサイトーシスを介して細胞残屑、外来物質、微小生物、がん細胞を貪食および消化する白血球の一種である。ファゴサイトーシスの他に、それらは非特異的な防御（自然免疫）において重要な役割を果たし、そしてまた、リンパ球などの他の免疫細胞を動員することによって特異的な防御機構（適応免疫）の開始を助ける。例えば、それらは、Ｔ細胞への抗原提示主体として重要である。炎症の増加および免疫系の刺激の他に、マクロファージはまた、重要な抗炎症性の役割を果たし、サイトカインの放出を通じて免疫反応を減少させることができる。樹状細胞（ＤＣ）は、抗原材料のプロセシングにおいて機能し、それを細胞表面上で免疫系のＴ細胞に対して提示する抗原提示細胞である。
【０７０３】
本開示は、とりわけ、Ｂ細胞、マクロファージ、および／または樹状細胞への結合および／またはその活性化を媒介する１つまたは複数のＢ細胞、マクロファージ、および／または樹状細胞エンゲージャーを含む、例えば、含有するように操作されている、多特異性（例えば、二、三、四特異性）または多機能性分子を提供する。
【０７０４】
よって、一部の実施形態では、免疫細胞エンゲージャーは、ＣＤ４０リガンド（ＣＤ４０Ｌ）もしくはＣＤ７０リガンド；ＣＤ４０もしくはＣＤ７０に結合する抗体分子；ＯＸ４０に対する抗体分子；ＯＸ４０リガンド（ＯＸ４０Ｌ）；Ｔｏｌｌ様受容体のアゴニスト（例えば、本明細書に記載されるもの、例えば、ＴＬＲ４、例えば、構成的活性型ＴＬＲ４（ｃａＴＬＲ４）、もしくはＴＬＲ９アゴニスト）；４１ＢＢ；ＣＤ２；ＣＤ４７；もしくはＳＴＩＮＧアゴニスト、またはこれらの組合せのうちの１つまたは複数から選択されるＢ細胞、マクロファージ、および／または樹状細胞エンゲージャーを含む。
【０７０５】
一部の実施形態では、Ｂ細胞エンゲージャーは、ＣＤ４０Ｌ、ＯＸ４０Ｌ、もしくはＣＤ７０リガンド、またはＯＸ４０、ＣＤ４０もしくはＣＤ７０に結合する抗体分子である。
【０７０６】
一部の実施形態では、マクロファージエンゲージャーはＣＤ２アゴニストである。一部の実施形態では、マクロファージエンゲージャーは、ＣＤ４０ＬもしくはＣＤ４０に結合する抗原結合性ドメインもしくはリガンド、Ｔｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）アゴニスト（例えば、本明細書に記載されるもの）、例えば、ＴＬＲ９もしくはＴＬＲ４（例えば、ｃａＴＬＲ４（構成的活性型ＴＬＲ４）、ＣＤ４７、またはＳＴＩＮＧアゴニストに結合する抗原結合性ドメインである。一部の実施形態では、ＳＴＩＮＧアゴニストは、環状ジヌクレオチド、例えば、サイクリックジＧＭＰ（ｃｄＧＭＰ）またはサイクリックジＡＭＰ（ｃｄＡＭＰ）である。一部の実施形態では、ＳＴＩＮＧアゴニストはビオチン化されている。
【０７０７】
一部の実施形態では、樹状細胞エンゲージャーはＣＤ２アゴニストである。一部の実施形態では、樹状細胞エンゲージャーは、ＯＸ４０Ｌ、４１ＢＢ、ＴＬＲアゴニスト（例えば、本明細書に記載されるもの）（例えば、ＴＬＲ９アゴニスト、ＴＬＲ４（例えば、ｃａＴＬＲ４（構成的活性型ＴＬＲ４））、ＣＤ４７、またはおよびＳＴＩＮＧアゴニストのうちの１つまたは複数に結合するリガンド、受容体アゴニスト、または抗体分子である。一部の実施形態では、ＳＴＩＮＧアゴニストは、環状ジヌクレオチド、例えば、サイクリックジＧＭＰ（ｃｄＧＭＰ）またはサイクリックジＡＭＰ（ｃｄＡＭＰ）である。一部の実施形態では、ＳＴＩＮＧアゴニストはビオチン化されている。
【０７０８】
他の実施形態では、免疫細胞エンゲージャーは、Ｂ細胞、マクロファージ、および／または樹状細胞のうちの１つまたは複数への結合、またはその活性化を媒介する。例示的なＢ細胞、マクロファージ、および／または樹状細胞エンゲージャーは、ＣＤ４０リガンド（ＣＤ４０Ｌ）もしくはＣＤ７０リガンド；ＣＤ４０もしくはＣＤ７０に結合する抗体分子；ＯＸ４０に対する抗体分子；ＯＸ４０リガンド（ＯＸ４０Ｌ）；Ｔｏｌｌ様受容体アゴニスト（例えば、ＴＬＲ４、例えば、構成的活性型ＴＬＲ４（ｃａＴＬＲ４）もしくはＴＬＲ９アゴニスト）；４１ＢＢアゴニスト；ＣＤ２；ＣＤ４７；もしくはＳＴＩＮＧアゴニスト、またはこれらの組合せのうちの１つまたは複数から選択することができる。
【０７０９】
一部の実施形態では、Ｂ細胞エンゲージャーは、ＣＤ４０Ｌ、ＯＸ４０Ｌ、もしくはＣＤ７０リガンド、またはＯＸ４０、ＣＤ４０もしくはＣＤ７０に結合する抗体分子のうちの１つまたは複数から選択される。
【０７１０】
他の実施形態では、マクロファージ細胞エンゲージャーは、ＣＤ２アゴニスト；ＣＤ４０Ｌ；ＯＸ４０Ｌ；ＯＸ４０、ＣＤ４０もしくはＣＤ７０に結合する抗体分子；Ｔｏｌｌ様受容体アゴニストもしくはその断片（例えば、ＴＬＲ４、例えば、構成的活性型ＴＬＲ４（ｃａＴＬＲ４））；ＣＤ４７アゴニスト；またはＳＴＩＮＧアゴニストのうちの１つまたは複数から選択される。
【０７１１】
他の実施形態では、樹状細胞エンゲージャーは、ＣＤ２アゴニスト、ＯＸ４０抗体、ＯＸ４０Ｌ、４１ＢＢアゴニスト、Ｔｏｌｌ様受容体アゴニストもしくはその断片（例えば、ＴＬＲ４、例えば、構成的活性型ＴＬＲ４（ｃａＴＬＲ４））、ＣＤ４７アゴニスト、またはＳＴＩＮＧアゴニストのうちの１つまたは複数から選択される。
【０７１２】
一実施形態では、ＯＸ４０Ｌは、アミノ酸配列：
ＱＶＳＨＲＹＰＲＩＱＳＩＫＶＱＦＴＥＹＫＫＥＫＧＦＩＬＴＳＱＫＥＤＥＩＭＫＶＱＮＮＳＶＩＩＮＣＤＧＦＹＬＩＳＬＫＧＹＦＳＱＥＶＮＩＳＬＨＹＱＫＤＥＥＰＬＦＱＬＫＫＶＲＳＶＮＳＬＭＶＡＳＬＴＹＫＤＫＶＹＬＮＶＴＴＤＮＴＳＬＤＤＦＨＶＮＧＧＥＬＩＬＩＨＱＮＰＧＥＦＣＶＬ（配列番号１３６ａ）その断片、またはそれに対して実質的に同一である（例えば、それに対して９５％〜９９．９％同一であるか、もしくは配列番号１３６ａのアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個もしくは１５個以下である変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列を含む。
【０７１３】
別の実施形態では、ＣＤ４０Ｌは、アミノ酸配列：
ＭＱＫＧＤＱＮＰＱＩＡＡＨＶＩＳＥＡＳＳＫＴＴＳＶＬＱＷＡＥＫＧＹＹＴＭＳＮＮＬＶＴＬＥＮＧＫＱＬＴＶＫＲＱＧＬＹＹＩＹＡＱＶＴＦＣＳＮＲＥＡＳＳＱＡＰＦＩＡＳＬＣＬＫＳＰＧＲＦＥＲＩＬＬＲＡＡＮＴＨＳＳＡＫＰＣＧＱＱＳＩＨＬＧＧＶＦＥＬＱＰＧＡＳＶＦＶＮＶＴＤＰＳＱＶＳＨＧＴＧＦＴＳＦＧＬＬＫＬ（配列番号１３７ａａ）その断片、またはそれに対して実質的に同一である（例えば、それに対して９５％〜９９．９％同一であるか、もしくは配列番号１３７ａのアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個もしくは１５個以下である変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列を含む。
【０７１４】
さらに他の実施形態では、ＳＴＩＮＧアゴニストは、環状ジヌクレオチド、例えば、サイクリックジＧＭＰ（ｃｄＧＭＰ）、サイクリックジＡＭＰ（ｃｄＡＭＰ）、またはこれらの組合せを含み、必要に応じて２’，５’または３’，５’リン酸連結を有する。
【０７１５】
一実施形態では、免疫細胞エンゲージャーは、４１ＢＢリガンド、例えば、アミノ酸配列：
ＡＣＰＷＡＶＳＧＡＲＡＳＰＧＳＡＡＳＰＲＬＲＥＧＰＥＬＳＰＤＤＰＡＧＬＬＤＬＲＱＧＭＦＡＱＬＶＡＱＮＶＬＬＩＤＧＰＬＳＷＹＳＤＰＧＬＡＧＶＳＬＴＧＧＬＳＹＫＥＤＴＫＥＬＶＶＡＫＡＧＶＹＹＶＦＦＱＬＥＬＲＲＶＶＡＧＥＧＳＧＳＶＳＬＡＬＨＬＱＰＬＲＳＡＡＧＡＡＡＬＡＬＴＶＤＬＰＰＡＳＳＥＡＲＮＳＡＦＧＦＱＧＲＬＬＨＬＳＡＧＱＲＬＧＶＨＬＨＴＥＡＲＡＲＨＡＷＱＬＴＱＧＡＴＶＬＧＬＦＲＶＴＰＥＩＰＡＧＬＰＳＰＲＳＥ（配列番号１３８ａ）その断片、またはそれに対して実質的に同一である（例えば、それに対して９５％〜９９．９％同一であるか、もしくは配列番号１３８ａのアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個もしくは１５個以下である変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列を含む４１ＢＢリガンドを含む。
Ｔｏｌｌ様受容体
Ｔｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）は、ショウジョウバエＴｏｌｌタンパク質のホモログである進化的に保存された受容体であり、微生物病原体によって排他的に発現される病原体関連微生物パターン（ＰＡＭＰ）、または壊死したもしくは死にゆく細胞から放出される内因性分子である危険関連分子パターン（ＤＡＭＰ）として公知の高度に保存された構造モチーフを認識する。ＰＡＭＰは、リポ多糖（ＬＰＳ）、ペプチドグリカン（ＰＧＮ）およびリポペプチドなどの様々な細菌細胞壁成分の他に、フラジェリン、細菌ＤＮＡおよびウイルス二本鎖ＲＮＡを含む。ＤＡＭＰは、熱ショックタンパク質などの細胞内タンパク質の他に、細胞外基質からのタンパク質断片を含む。対応するＰＡＭＰまたはＤＡＭＰによるＴＬＲの刺激は、シグナル伝達カスケードを開始させて、ＡＰ−１、ＮＦ−κＢおよびインターフェロン調節因子（ＩＲＦ）などの転写因子の活性化に繋がる。ＴＬＲによるシグナル伝達は、インターフェロン（ＩＦＮ）、炎症促進性サイトカインおよび適応免疫応答を指令するエフェクターサイトカインの産生を含む、様々な細胞応答をもたらす。ＴＬＲは、多数の炎症性および免疫障害に結び付けられており、がんにおいて役割を果たす（Ｒａｋｏｆｆ−Ｎａｈｏｕｍ  Ｓ．およびＭｅｄｚｈｉｔｏｖ  Ｒ．、２００９．  Ｔｏｌｌ−ｌｉｋｅ  ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ  ａｎｄ  ｃａｎｃｅｒ．  Ｎａｔ  Ｒｅｖｓ  Ｃａｎｃｅｒ  ９：５７−６３ページ）。
【０７１６】
ＴＬＲは、ロイシンリッチリピート（ＬＲＲ）およびＴｏｌｌ／ＩＬ−１受容体（ＴＩＲ）ドメインと呼ばれる保存された領域を含有する細胞質テイルを含有する細胞外ドメインによって特徴付けられるＩ型膜貫通タンパク質である。１０個のヒトおよび１２個のマウスＴＬＲが特徴付けられており、それらは、ヒトにおけるＴＬＲ１〜ＴＬＲ１０、ならびにマウスにおけるＴＬＲ１〜ＴＬＲ９、ＴＬＲ１１、ＴＬＲ１２およびＴＬＲ１３であり、ＴＬＲ１０のホモログは偽遺伝子である。ＴＬＲ２は、細菌リポタンパク質、リポマンナンおよびリポタイコ酸を含む、グラム陽性細菌からの様々なＰＡＭＰの認識のために必須である。ＴＬＲ３は、ウイルス由来の二本鎖ＲＮＡに結び付けられている。ＴＬＲ４は、主に、リポ多糖によって活性化される。ＴＬＲ５は細菌フラジェリンを検出し、ＴＬＲ９は、非メチル化ＣｐＧ  ＤＮＡに対する応答のために要求される。最後に、ＴＬＲ７およびＴＬＲ８は、小さい合成の抗ウイルス分子を認識し、一本鎖ＲＮＡはそれらの天然リガンドであることが報告された。ＴＬＲ１１は、尿路病原性Ｅ．  ｃｏｌｉおよびＴｏｘｏｐｌａｓｍａ  ｇｏｎｄｉｉからのプロフィリン様タンパク質を認識することが報告されている。ＴＬＲの特異性のレパートリーは、互いとヘテロ二量体化するＴＬＲの能力によって拡張されるようである。例えば、ＴＬＲ２およびＴＬＲ６の二量体は、ジアシル化リポタンパク質に対する応答のために要求され、ＴＬＲ２およびＴＬＲ１は、相互作用してトリアシル化リポタンパク質を認識する。ＴＬＲの特異性はまた、ＬＰＳに応答してＴＬＲ４と複合体を形成するＭＤ−２およびＣＤ１４などの、様々なアダプターおよびアクセサリー分子によって影響される。
【０７１７】
ＴＬＲシグナル伝達は、炎症性サイトカインの産生に繋がるＭｙＤ８８依存性経路、ならびにＩＦＮ−βの刺激および樹状細胞の成熟と関連付けられるＭｙＤ８８非依存性経路という少なくとも２つの別個の経路からなる。ＭｙＤ８８依存性経路は、ＴＬＲ３を除いてすべてのＴＬＲに共通である（Ａｄａｃｈｉ  Ｏら、１９９８、「Ｔａｒｇｅｔｅｄ  ｄｉｓｒｕｐｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ＭｙＤ８８  ｇｅｎｅ  ｒｅｓｕｌｔｓ  ｉｎ  ｌｏｓｓ  ｏｆ  ＩＬ−１−  ａｎｄ  ＩＬ−１８−ｍｅｄｉａｔｅｄ  ｆｕｎｃｔｉｏｎ．」、Ｉｍｍｕｎｉｔｙ、９（１）：１４３〜５０ページ）。ＰＡＭＰまたはＤＡＭＰによって活性化されると、ＴＬＲは、ヘテロまたはホモ二量体化して、細胞質ＴＩＲドメインを介してアダプタータンパク質の動員を誘導する。個々のＴＬＲは、異なるアダプター分子の使用によって異なるシグナル伝達応答を誘導する。ＴＬＲ４およびＴＬＲ２シグナル伝達は、ＭｙＤ８８依存性経路に関与するアダプターＴＩＲＡＰ／Ｍａｌを要求する。ＴＬＲ３は、アダプターＴＲＩＦ／ＴＩＣＡＭ−１を通じて、ＭｙＤ８８非依存性の方式で、二本鎖ＲＮＡに応答してＩＦＮ−βの産生を誘発する。ＴＲＡＭ／ＴＩＣＡＭ−２は、その機能がＴＬＲ４経路に制限されたＭｙＤ８８非依存性経路に関与する別のアダプター分子である。
【０７１８】
ＴＬＲ３、ＴＬＲ７、ＴＬＲ８およびＴＬＲ９は、ウイルス核酸を認識し、Ｉ型ＩＦＮを誘導する。Ｉ型ＩＦＮの誘導に繋がるシグナル伝達の機序は、活性化されるＴＬＲに依存して異なる。それらは、抗ウイルス防御、細胞成長および免疫調節において不可欠な役割を果たすことが公知の転写因子のファミリー、インターフェロン調節因子、ＩＲＦを伴う。３つのＩＲＦ（ＩＲＦ３、ＩＲＦ５およびＩＲＦ７）は、ウイルス媒介性のＴＬＲシグナル伝達の直接的なトランスデューサーとして機能する。ＴＬＲ３およびＴＬＲ４はＩＲＦ３およびＩＲＦ７を活性化させ、ＴＬＲ７およびＴＬＲ８はＩＲＦ５およびＩＲＦ７を活性化させる（Ｄｏｙｌｅ  Ｓら、２００２、「ＩＲＦ３  ｍｅｄｉａｔｅｓ  ａ  ＴＬＲ３／ＴＬＲ４−ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ａｎｔｉｖｉｒａｌ  ｇｅｎｅ  ｐｒｏｇｒａｍ．」、Ｉｍｍｕｎｉｔｙ、１７（３）：２５１〜６３ページ）。さらには、ＴＬＲ９リガンドＣｐＧ−Ａによって刺激されるＩ型ＩＦＮ産生は、ＰＩ（３）ＫおよびｍＴＯＲによって媒介されることが示されている（Ｃｏｓｔａ−Ｍａｔｔｉｏｌｉ  Ｍ．およびＳｏｎｅｎｂｅｒｇ  Ｎ．  ２００８、「ＲＡＰｐｉｎｇ  ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｙｐｅ  Ｉ  ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  ｉｎ  ｐＤＣｓ  ｔｈｒｏｕｇｈ  ｍＴＯＲ．」、Ｎａｔｕｒｅ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  ９：１０９７〜１０９９ページ）。
ＴＬＲ−９
ＴＬＲ９は、ＤＮＡ分子中の非メチル化ＣｐＧ配列を認識する。ＣｐＧ部位は、細菌ゲノムまたはウイルスＤＮＡと比較して脊椎動物ゲノム上で比較的希少（約１％）である。ＴＬＲ９は、Ｂリンパ球、単球、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、および形質細胞性樹状細胞などの免疫系の多数の細胞によって発現される。ＴＬＲ９は、細胞内、エンドソーム区画内において発現され、ＣｐＧモチーフリッチなＤＮＡへの結合によって免疫系にウイルスおよび細菌感染を警告するように機能する。ＴＬＲ９シグナルは、炎症促進性反応を開始させる細胞の活性化に繋がり、Ｉ型インターフェロンおよびＩＬ−１２などのサイトカインの産生をもたらす。
ＴＬＲアゴニスト
ＴＬＲアゴニストは、１つまたは複数のＴＬＲ、例えば、ヒトＴＬＲ−１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０のうちの１つまたは複数をアゴナイズすることができる。一部の実施形態では、本明細書に記載の付属的剤はＴＬＲアゴニストである。一部の実施形態では、ＴＬＲアゴニストは、ヒトＴＬＲ−９を特異的にアゴナイズする。一部の実施形態では、ＴＬＲ−９アゴニストはＣｐＧ部分である。本明細書で使用される場合、ＣｐＧ部分は、配列：５’−Ｃ−ホスフェート−Ｇ−３’、すなわち、１つのみのホスフェートによって分離されたシトシンおよびグアニンを有する直鎖状ジヌクレオチドである。
【０７１９】
一部の実施形態では、ＣｐＧ部分は、少なくとも１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、１２個、１３個、１４個、１５個、１６個、１７個、１８個、１９個、２０個、２１個、２２個、２３個、２４個、２５個、２６個、２７個、２８個、２９個、３０個、またはより多くのＣｐＧジヌクレオチドを含む。一部の実施形態では、ＣｐＧ部分は、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、１２個、１３個、１４個、１５個、１６個、１７個、１８個、１９個、２０個、２１個、２２個、２３個、２４個、２５個、２６個、２７個、２８個、２９個、または３０個のＣｐＧジヌクレオチドからなる。一部の実施形態では、ＣｐＧ部分は、１〜５個、１〜１０個、１〜２０個、１〜３０個、１〜４０個、１〜５０個、５〜１０個、５〜２０個、５〜３０個、１０〜２０個、１０〜３０個、１０〜４０個、または１０〜５０個のＣｐＧジヌクレオチドを有する。
【０７２０】
一部の実施形態では、ＴＬＲ−９アゴニストは合成ＯＤＮ（オリゴデオキシヌクレオチド）である。ＣｐＧ  ＯＤＮは、特定の配列状況（ＣｐＧモチーフ）において非メチル化ＣｐＧジヌクレオチドを含有する短い合成の一本鎖ＤＮＡ分子である。ＣｐＧ  ＯＤＮは、ゲノム細菌ＤＮＡ中に見出される天然のホスホジエステル（ＰＯ）骨格とは対照的に、部分的または完全にホスホロチオエート化（ＰＳ）した骨格を持つ。クラスＡ、ＢおよびＣというＣｐＧ  ＯＤＮの３つの主要なクラスがあり、これらは免疫賦活活性において異なる。ＣｐＧ−Ａ  ＯＤＮは、ＰＯ中央ＣｐＧ含有パリンドロームモチーフおよびＰＳ修飾３’ポリ−Ｇストリングによって特徴付けられる。それらは、ｐＤＣからの高いＩＦＮ−α産生を誘導するが、ＴＬＲ９依存性ＮＦ−κＢシグナル伝達および炎症促進性サイトカイン（例えば、ＩＬ−６）産生の弱い刺激因子である。ＣｐＧ−Ｂ  ＯＤＮは、１つまたは複数のＣｐＧジヌクレオチドを有する全長ＰＳ骨格を含有する。それらは、Ｂ細胞およびＴＬＲ９依存性ＮＦ−κＢシグナル伝達を強く活性化させるが、ＩＦＮ−α分泌を弱く刺激する。ＣｐＧ−Ｃ  ＯＤＮは、クラスＡおよびＢの両方の特徴を兼ね備える。それらは、完全なＰＳ骨格およびＣｐＧ含有パリンドロームモチーフを含有する。ＣクラスＣｐＧ  ＯＤＮは、ｐＤＣからの強いＩＦＮ−α産生の他に、Ｂ細胞刺激を誘導する。
腫瘍標的化部分
本開示は、とりわけ、分子を腫瘍細胞へと指向させる１つまたは複数の腫瘍特異的標的化部分を含む、例えば、それを含むように操作された、多特異性（例えば、二特異性、三特異性、四特異性）分子を提供する。
【０７２１】
ある特定の実施形態では、本明細書に開示される多特異性分子は、腫瘍標的化部分を含む。腫瘍標的化部分は、抗体分子（例えば、本明細書に記載される抗原結合性ドメイン）、受容体もしくは受容体断片、またはリガンドもしくはリガンド断片、またはこれらの組合せから選択され得る。一部の実施形態では、腫瘍標的化部分は、腫瘍細胞（例えば、腫瘍細胞の表面上に存在する分子、例えば、抗原）と会合する、例えば、それに結合する。ある特定の実施形態では、腫瘍標的化部分は、本明細書に開示される多特異性分子を、がん（例えば、がんまたは腫瘍細胞）へと標的化する、例えば、指向させる。一部の実施形態では、がんは、血液がん、固形がん、転移がん、またはこれらの組合せから選択される。
【０７２２】
一部の実施形態では、多特異性分子、例えば、腫瘍標的化部分は、固形腫瘍抗原または間質抗原に結合する。固形腫瘍抗原または間質抗原は、固形腫瘍またはその転移病変に存在し得る。一部の実施形態では、固形腫瘍は、膵臓がん（例えば、膵臓腺癌）、乳がん、結腸直腸がん、肺がん（例えば、小細胞もしくは非小細胞肺がん）、皮膚がん、卵巣がん、または肝臓がんのうちの１つまたは複数から選択される。一実施形態では、固形腫瘍は、線維性または線維形成性の固形腫瘍である。例えば、固形腫瘍抗原または間質抗原は、腫瘍に、例えば、限定的な腫瘍灌流、血管の圧縮、または線維性腫瘍間質のうちの１つまたは複数を有することが典型的なクラスの腫瘍に、存在し得る。ある特定の実施形態では、固形腫瘍抗原は、ＰＤＬ１、ＣＤ４７、ガングロシド２（ＧＤ２）、前立腺幹細胞抗原（ＰＳＣＡ）、前立腺特異的膜抗原（ＰＭＳＡ）、前立腺特異的抗原（ＰＳＡ）、癌胎児性抗原（ＣＥＡ）、Ｒｏｎキナーゼ、ｃ−Ｍｅｔ、未成熟ラミニン受容体、ＴＡＧ−７２、ＢＩＮＧ−４、カルシウム活性化塩素チャネル２、サイクリン−Ｂ１、９Ｄ７、Ｅｐ−ＣＡＭ、ＥｐｈＡ３、Ｈｅｒ２／ｎｅｕ、テロメラーゼ、ＳＡＰ−１、サバイビン、ＮＹ−ＥＳＯ−１／ＬＡＧＥ−１、ＰＲＡＭＥ、ＳＳＸ−２、メラン−Ａ／ＭＡＲＴ−１、Ｇｐ１００／ｐｍｅｌ１７、チロシナーゼ、ＴＲＰ−１／−２、ＭＣ１Ｒ、β−カテニン、ＢＲＣＡ１／２、ＣＤＫ４、ＣＭＬ６６、フィブロネクチン、ｐ５３、Ｒａｓ、ＴＧＦ−Β受容体、ＡＦＰ、ＥＴＡ、ＭＡＧＥ、ＭＵＣ−１、ＣＡ−１２５、ＢＡＧＥ、ＧＡＧＥ、ＮＹ−ＥＳＯ−１、β−カテニン、ＣＤＫ４、ＣＤＣ２７、ＣＤ４７、αアクチニン−４、ＴＲＰ１／ｇｐ７５、ＴＲＰ２、ｇｐ１００、メラン−Ａ／ＭＡＲＴ１、ガングリオシド、ＷＴ１、ＥｐｈＡ３、上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）、ＭＡＲＴ−２、ＭＡＲＴ−１、ＭＵＣ１、ＭＵＣ２、ＭＵＭ１、ＭＵＭ２、ＭＵＭ３、ＮＡ８８−１、ＮＰＭ、ＯＡ１、ＯＧＴ、ＲＣＣ、ＲＵＩ１、ＲＵＩ２、ＳＡＧＥ、ＴＲＧ、ＴＲＰ１、ＴＳＴＡ、葉酸受容体アルファ、Ｌ１−ＣＡＭ、ＣＡＩＸ、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ｇｐＡ３３、ＧＤ３、ＧＭ２、ＶＥＧＦＲ、インテグリン（インテグリンアルファＶベータ３、インテグリンアルファ５ベータ１）、炭水化物（Ｌｅ）、ＩＧＦ１Ｒ、ＥＰＨＡ３、ＴＲＡＩＬＲ１、ＴＲＡＩＬＲ２、またはＲＡＮＫＬのうちの１つまたは複数から選択される。
【０７２３】
他の実施形態では、多特異性分子、例えば、腫瘍標的化部分は、血液がん、例えば、白血病またはリンパ腫の表面上に存在する分子、例えば、抗原に結合する。一部の実施形態では、血液がんは、Ｂ細胞またはＴ細胞悪性腫瘍である。一部の実施形態では、血液がんは、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫（例えば、Ｂ細胞リンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、慢性リンパ球性白血病、マントル細胞リンパ腫、辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫、リンパ形質細胞性リンパ腫、有毛細胞性リンパ腫）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、多発性骨髄腫、または急性リンパ球性白血病のうちの１つまたは複数から選択される。実施形態では、がんは、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）または骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）以外である。実施形態では、血液抗原は、ＣＤ４７、ＣＤ９９、ＣＤ３０、ＣＤ３８、ＳＬＡＭＦ７、またはＮＹ−ＥＳＯ１から選択される。一部の実施形態では、血液抗原は、ＢＣＭＡ、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ３３、ＣＤ１２３、ＦｃＲＨ５、ＣＬＥＣ１２、またはＣＤ１７９Ａのうちの１つまたは複数から選択される。
間質改変部分
固形腫瘍は、実質（新生細胞）、および新生細胞により誘導され、新生細胞が分散される、間質という、正常組織のものを模倣した、異なっているが相互依存性の２つのコンパートメントを含む構造を有する。すべての腫瘍は、間質を有し、栄養サポートおよび老廃物の除去のために、間質を必要とする。細胞懸濁液として成長する腫瘍（例えば、白血病、腹水腫瘍）の場合、血漿が、間質としての機能を果たす（Ｃｏｎｎｏｌｌｙ  ＪＬ  ｅｔ  ａｌ．  Ｔｕｍｏｒ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ａｎｄ  Ｔｕｍｏｒ  Ｓｔｒｏｍａ  Ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ．  Ｉｎ：  Ｋｕｆｅ  ＤＷ  ｅｔ  ａｌ．，  ｅｄｉｔｏｒｓ．  Ｈｏｌｌａｎｄ−Ｆｒｅｉ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ．  ６ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ．  Ｈａｍｉｌｔｏｎ：  ＢＣ  Ｄｅｃｋｅｒ；  ２００３）。間質には、細胞外マトリックス（ＥＣＭ）および細胞外分子とともに、線維芽細胞／筋線維芽細胞、膠細胞、上皮細胞、脂肪細胞、血管細胞、平滑筋細胞、および免疫細胞を含む様々な細胞型が含まれる（Ｌｉ  Ｈａｎｃｈｅｎ  ｅｔ  ａｌ．  Ｔｕｍｏｒ  Ｍｉｃｒｏｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ：  Ｔｈｅ  Ｒｏｌｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｔｕｍｏｒ  Ｓｔｒｏｍａ  ｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ．  Ｊ  ｏｆ  Ｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  １０１：  ８０５−８１５  （２００７））。
【０７２４】
本明細書に記載される間質改変部分としては、間質の成分、例えば、ＥＣＭ成分、例えば、グリコサミノグリカン、例えば、ヒアルロナン（ヒアルロン酸もしくはＨＡとしても知られる）、コンドロイチン硫酸塩、コンドロイチン、デルマタン硫酸塩、ヘパリン硫酸塩、ヘパリン、エンタクチン、テネイシン、アグリカン、およびケラチン硫酸塩、または細胞外タンパク質、例えば、コラーゲン、ラミニン、エラスチン、フィブリノーゲン、フィブロネクチン、およびビトロネクチンを分解することができる部分（例えば、タンパク質、例えば、酵素）が挙げられる。
間質改変酵素
一部の実施形態では、間質改変部分は、酵素である。例えば、間質改変部分としては、ヒアルロニダーゼ、コラゲナーゼ、コンドロイチナーゼ、マトリックスメタロプロテイナーゼ（例えば、マクロファージメタロエラスターゼ）を挙げることができるが、これらに限定されない。
ヒアルロニダーゼ
ヒアルロニダーゼは、動物界全体に見られる中性および酸性活性酵素の群である。ヒアルロニダーゼは、基質特異性、および作用の機序に関して、多様である。ヒアルロニダーゼには３つの一般的なクラスがある：（１）主要な最終生成物として四糖および六糖を有するエンド−ベータ−Ｎ−アセチルへキソサミニダーゼである、哺乳動物型ヒアルロニダーゼ（ＥＣ  ３．２．１．３５）。これらは、加水分解活性およびトランスグリコシダーゼ活性の両方を有し、ヒアルロナンおよびコンドロイチン硫酸塩を分解することができ、（２）細菌ヒアルロニダーゼ（ＥＣ  ４．２．９９．１）は、ヒアルロナンを分解し、様々な程度で、コンドロイチン硫酸塩およびデルマタン硫酸塩を分解する。これらは、主として二糖の最終生成物をもたらすベータ脱離反応によって作動するエンド−ベータ−Ｎ−アセチルへキソサミニダーゼであり、（３）ヒル、他の寄生虫、および甲殻類に由来するヒアルロニダーゼ（ＥＣ  ３．２．１．３６）は、ベータ１−３連結の加水分解を通じて四糖および六糖の最終生成物をもたらす、エンド−ベータ−グルクロニダーゼである。
【０７２５】
哺乳動物ヒアルロニダーゼは、さらに２つの群に分けることができる：（１）中性活性酵素および（２）酸性活性酵素。ヒトゲノムには、ＨＹＡＬ１、ＨＹＡＬ２、ＨＹＡＬ３、ＨＹＡＬ４、ＨＹＡＬＰ１、およびＰＨ２０／ＳＰＡＭ１の６つのヒアルロニダーゼ様遺伝子がある。ＨＹＡＬＰ１は、偽遺伝子であり、ＨＹＡＬ３は、いずれの公知の基質に対しても酵素活性を有することが示されていない。ＨＹＡＬ４は、コンドロイチナーゼであり、ヒアルロナンに対する活性が欠如している。ＨＹＡＬ１は、原型の酸性活性酵素であり、ＰＨ２０は、原型の中性活性酵素である。酸性活性ヒアルロニダーゼ、例えば、ＨＹＡＬ１およびＨＹＡＬ２は、中性ｐＨでは触媒活性が欠如している。例えば、ＨＹＡＬ１は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏにおいて、ｐＨ４．５を超えると触媒活性を有さない（Ｆｒｏｓｔ  ａｎｄ  Ｓｔｅｒｎ，  “Ａ  Ｍｉｃｒｏｔｉｔｅｒ−Ｂａｓｅｄ  Ａｓｓａｙ  ｆｏｒ  Ｈｙａｌｕｒｏｎｉｄａｓｅ  Ａｃｔｉｖｉｔｙ  Ｎｏｔ  Ｒｅｑｕｉｒｉｎｇ  Ｓｐｅｃｉａｌｉｚｅｄ  Ｒｅａｇｅｎｔｓ”，  Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，  ｖｏｌ．  ２５１，  ｐｐ．  ２６３−２６９  （１９９７）。ＨＹＡＬ２は、酸性活性酵素であり、ｉｎ  ｖｉｔｒｏでの特異性活性は非常に低い。
【０７２６】
一部の実施形態では、ヒアルロニダーゼは、哺乳動物ヒアルロニダーゼである。一部の実施形態では、ヒアルロニダーゼは、組換えヒトヒアルロニダーゼである。一部の実施形態では、ヒアルロニダーゼは、中性活性ヒアルロニダーゼである。一部の実施形態では、ヒアルロニダーゼは、中性活性可溶性ヒアルロニダーゼである。一部の実施形態では、ヒアルロニダーゼは、組換えＰＨ２０中性活性酵素である。一部の実施形態では、ヒアルロニダーゼは、組換えＰＨ２０中性活性可溶性酵素である。一部の実施形態では、ヒアルロニダーゼは、グリコシル化されている。一部の実施形態では、ヒアルロニダーゼは、少なくとも１つのＮ結合型グリカンを有する。組換えヒアルロニダーゼは、当業者に公知の従来的な方法、例えば、米国特許第７７６７４２９号におけるものを使用して、産生することができ、このすべての内容は、参照により本明細書に組み込まれる。
【０７２７】
一部の実施形態では、ヒアルロニダーゼは、ｒＨｕＰＨ２０である（Ｈｙｌｅｎｅｘ（登録商標）とも称され、現在Ｈａｌｏｚｙｍｅによって製造されており、２００５年にＦＤＡにより承認されている（例えば、Ｓｃｏｄｅｌｌｅｒ  Ｐ  （２０１４）  Ｈｙａｌｕｒｏｎｉｄａｓｅ  ａｎｄ  ｏｔｈｅｒ  Ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｍａｔｒｉｘ  Ｄｅｇｒａｄｉｎｇ  Ｅｎｚｙｍｅｓ  ｆｏｒ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ：  Ｎｅｗ  Ｕｓｅｓ  ａｎｄ  Ｎａｎｏ−  Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎｓ．  Ｊ  Ｃａｒｃｉｎｏｇ  Ｍｕｔａｇｅ  ５：１７８、米国特許第７７６７４２９号、同第８２０２５１７号、同第７４３１３８０号、同第８４５０４７０号、同第８７７２２４６号、同第８５８０２５２号を参照されたく、これらのそれぞれのすべての内容は、参照により本明細書に組み込まれる）。ｒＨｕＰＨ２０は、ヒトヒアルロニダーゼＰＨ２０の可溶性断片をコードするＤＮＡプラスミドを含む、遺伝子操作されたＣＨＯ細胞によって産生される。一部の実施形態では、ヒアルロニダーゼは、グリコシル化されている。一部の実施形態では、ヒアルロニダーゼは、少なくとも１つのＮ結合型グリカンを有する。組換えヒアルロニダーゼは、当業者に公知の従来的な方法、例えば、米国特許第７７６７４２９号におけるものを使用して、産生することができ、このすべての内容は、参照により本明細書に組み込まれる。一部の実施形態では、ｒＨｕＰＨ２０は、ＬＮＦＲＡＰＰＶＩＰＮＶＰＦＬＷＡＷＮＡＰＳＥＦＣＬＧＫＦＤＥＰＬＤＭＳＬＦＳＦＩＧＳＰＲＩＮＡＴＧＱＧＶＴＩＦＹＶＤＲＬＧＹＹＰＹＩＤＳＩＴＧＶＴＶＮＧＧＩＰＱＫＩＳＬＱＤＨＬＤＫＡＫＫＤＩＴＦＹＭＰＶＤＮＬＧＭＡＶＩＤＷＥＥＷＲＰＴＷＡＲＮＷＫＰＫＤＶＹＫＮＲＳＩＥＬＶＱＱＱＮＶＱＬＳＬＴＥＡＴＥＫＡＫＱＥＦＥＫＡＧＫＤＦＬＶＥＴＩＫＬＧＫＬＬＲＰＮＨＬＷＧＹＹＬＦＰＤＣＹＮＨＨＹＫＫＰＧＹＮＧＳＣＦＮＶＥＩＫＲＮＤＤＬＳＷＬＷＮＥＳＴＡＬＹＰＳＩＹＬＮＴＱＱＳＰＶＡＡＴＬＹＶＲＮＲＶＲＥＡＩＲＶＳＫＩＰＤＡＫＳＰＬＰＶＦＡＹＴＲＩＶＦＴＤＱＶＬＫＦＬＳＱＤＥＬＶＹＴＦＧＥＴＶＡＬＧＡＳＧＩＶＩＷＧＴＬＳＩＭＲＳＭＫＳＣＬＬＬＤＮＹＭＥＴＩＬＮＰＹＩＩＮＶＴＬＡＡＫＭＣＳＱＶＬＣＱＥＱＧＶＣＩＲＫＮＷＮＳＳＤＹＬＨＬＮＰＤＮＦＡＩＱＬＥＫＧＧＫＦＴＶＲＧＫＰＴＬＥＤＬＥＱＦＳＥＫＦＹＣＳＣＹＳＴＬＳＣＫＥＫＡＤＶＫＤＴＤＡＶＤＶＣＩＡＤＧＶＣＩＤＡＦＬＫＰＰＭＥＴＥＥＰＱＩＦＹＮＡＳＰＳＴＬＳ（配列番号１３９ａ）のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％（例えば、少なくとも９６％、９７％、９８％、９９％、１００％）同一の配列を有する。
【０７２８】
本明細書において提供される方法のうちのいずれかにおいて、抗ヒアルロナン剤は、ヒアルロナンを分解する薬剤であり得るか、またはヒアルロナンの合成を阻害する薬剤であり得る。例えば、抗ヒアルロナン剤は、ヒアルロナン分解酵素であり得る。別の例では、抗ヒアルロナン剤は、ヒアルロナンの合成を阻害する薬剤である。例えば、抗ヒアルロナン剤は、ヒアルロナンの合成を阻害する薬剤、例えば、ＨＡシンターゼに対するセンスもしくはアンチセンス核酸分子であるか、または小分子薬である。例えば、抗ヒアルロナン剤は、４−メチルウンンベリフェロン（ＭＵ）もしくはその誘導体、またはレフルノミドもしくはその誘導体である。そのような誘導体としては、例えば、６，７−ジヒドロキシ−４−メチルクマリンまたは５，７−ジヒドロキシ−４−メチルクマリンである、４−メチルウンベリフェロン（ＭＵ）の誘導体が挙げられる。
【０７２９】
本明細書において提供される方法のさらなる例では、ヒアルロナン分解酵素は、ヒアルロニダーゼである。一部の例では、ヒアルロナン分解酵素は、ＰＨ２０ヒアルロニダーゼ、またはＣ末端グリコシルホスファチジルイノシトール（ＧＰＩ）結合部位もしくはＧＰＩ結合部位の一部分が欠如したその短縮形態である。特定の例では、ヒアルロニダーゼは、ヒト、サル、ウシ、ヒツジ、ラット、マウス、またはモルモットＰＨ２０から選択される、ＰＨ２０である。例えば、ヒアルロナン分解酵素は、中性活性であり、Ｎ−グリコシル化されている、ヒトＰＨ２０ヒアルロニダーゼであり、これは、（ａ）全長ＰＨ２０、またはＰＨ２０のＣ末端短縮形態である、ヒアルロニダーゼポリペプチドであって、短縮形態が、配列番号１３９の少なくともアミノ酸残基３６〜４６４、例えば、３６〜４８１、３６〜４８２、３６〜４８３を含み、全長ＰＨ２０が、配列番号１３９に記載されるアミノ酸配列を有する、ヒアルロニダーゼポリペプチド、または（ｂ）配列番号１３９に記載されるアミノ酸配列のポリペプチドもしくは短縮形態と少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくはそれ以上の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、ヒアルロニダーゼポリペプチド、または（ｃ）アミノ酸置換を含み、それによって、ヒアルロニダーゼポリペプチドが配列番号１３９に記載されるポリペプチドもしくはその対応する短縮形態と少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくはそれ以上の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する、（ａ）もしくは（ｂ）のヒアルロニダーゼポリペプチドから選択される。例示的な例では、ヒアルロナン分解酵素は、ｒＨｕＰＨ２０と表記される組成物を含む、ＰＨ２０である。
【０７３０】
他の例では、抗ヒアルロナン剤は、ポリマーへのコンジュゲーションによって改変されたヒアルロナン分解酵素である。ポリマーは、ＰＥＧであってもよく、抗ヒアルロナン剤は、ＰＥＧ化ヒアルロナン分解酵素である。したがって、本明細書において提供される方法の一部の例では、ヒアルロナン分解酵素は、ポリマーへのコンジュゲーションによって改変されている。例えば、ヒアルロナン分解酵素は、ＰＥＧにコンジュゲートされており、したがって、ヒアルロナン分解酵素は、ＰＥＧ化されている。例示的な例では、ヒアルロナン分解酵素は、ＰＥＧ化ＰＨ２０酵素（ＰＥＧＰＨ２０）である。本明細書において提供される方法では、コルチコステロイドは、コルチゾン、デキサメタゾン、ヒドロコルチゾン、メチルプレドニゾロン、プレドニゾロン、およびプレドニゾンの中から選択されるグルココルチコイドであり得る。
コンドロイチナーゼ
コンドロイチナーゼは、エンドグリコシダーゼ反応を通じてグリコサミノグリカン、特に、コンドロイチンおよびコンドロイチン硫酸塩を分解する、動物界全体に見られる酵素である。一部の実施形態では、コンドロイチナーゼは、哺乳動物コンドロイチナーゼである。一部の実施形態では、コンドロイチナーゼは、組換えヒトコンドロイチナーゼである。一部の実施形態では、コンドロイチナーゼは、ＨＹＡＬ４である。他の例示的なコンドロイチナーゼとしては、コンドロイチナーゼＡＢＣ（プロテウス・ブルガリス由来、日本特許出願公開第６−１５３９４７号、Ｔ．  Ｙａｍａｇａｔａ  ｅｔ  ａｌ．  Ｊ．  Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ．，  ２４３，  １５２３  （１９６８）、Ｓ．  Ｓｕｚｕｋｉ  ｅｔ  ａｌ，  Ｊ．  Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ．，  ２４３，  １５４３  （１９６８））、コンドロイチナーゼＡＣ（フラボバクテリウム・ヘパリヌム由来、Ｔ．  Ｙａｍａｇａｔａ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ．，  ２４３，  １５２３  （１９６８））、コンドロイチナーゼＡＣ  ＩＩ（アルスロバクター・アウレッセンス由来、Ｋ．  Ｈｉｙａｍａ，  ａｎｄ  Ｓ．  Ｏｋａｄａ，  Ｊ．  Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ．，  ２５０，  １８２４  （１９７５）、Ｋ．  Ｈｉｙａｍａ  ａｎｄ  Ｓ．  Ｏｋａｄａ，  Ｊ．  Ｂｉｏｃｈｅｍ．  （Ｔｏｋｙｏ），  ８０，  １２０１  （１９７６））、ヒアルロニダーゼＡＣＩＩＩ（フラボバクテリウム種Ｈｐ１０２由来、Ｈｉｒｏｆｕｍｉ  Ｍｉｙａｚｏｎｏ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｓｅｉｋａｇａｋｕ，  ６１，  １０２３  （１９８９））、コンドロイチナーゼＢ（フラボバクテリウム・ヘパリヌム由来、Ｙ．  Ｍ．  Ｍｉｃｈｅｌａｃｃｉ  ａｎｄ  Ｃ．  Ｐ．  Ｄｉｅｔｒｉｃｈ，  Ｂｉｏｃｈｅｍ．  Ｂｉｏｐｈｙｓ．  Ｒｅｓ．  Ｃｏｍｍｕｎ．，  ５６，  ９７３  （１９７４）、Ｙ．  Ｍ．  Ｍｉｃｈｅｌａｃｃｉ  ａｎｄ  Ｃ．  Ｐ．  Ｄｉｅｔｒｉｃｈ，  Ｂｉｏｃｈｅｍ．  Ｊ．，  １５１，  １２１  （１９７５）、Ｋｅｎｉｃｈｉ  Ｍａｅｙａｍａ  ｅｔ  ａｌ，  Ｓｅｉｋａｇａｋｕ，  ５７，  １１８９  （１９８５））、コンドロイチナーゼＣ（フラボバクテリウム種Ｈｐ１０２由来、Ｈｉｒｏｆｕｍｉ  Ｍｉｙａｚｏｎｏ  ｅｔ  ａｌ，  Ｓｅｉｋａｇａｋｕ，  ６１，  １０２３  （１９３９））などが挙げられる。
マトリックスメタロプロテイナーゼ
マトリックスメタロプロテアーゼ（ＭＭＰ）は、細胞外マトリックス（ＥＣＭ）分解に関与する主要なプロテアーゼである亜鉛依存性エンドペプチダーゼである。ＭＭＰは、広範な細胞外分子およびいくつかの生体活性分子を分解することができる。ヒトにおいて、２４個のＭＭＰ遺伝子が特定されており、これらは、ドメイン構成および基質優先性に基づいて、６つの群に分類される：コラゲナーゼ（ＭＭＰ−１、−８、および−１３）、ゼラチナーゼ（ＭＭＰ−２およびＭＭＰ−９）、ストロメライシン（ＭＭＰ−３、−１０、および−１１）、マトリライシン（ＭＭＰ−７およびＭＭＰ−２６）、膜型（ＭＴ）−ＭＭＰ（ＭＭＰ−１４、−１５、−１６、−１７、−２４、および−２５）、ならびにその他（ＭＭＰ−１２、−１９、−２０、−２１、−２３、−２７、および−２８）。一部の実施形態では、間質改変部分は、ヒト組換えＭＭＰ（例えば、ＭＭＰ−１、−２、−３、−４、−５、−６、−７、−８、−９、１０、−１１、−１２、−１３、−１４、１５、−１５、−１７、−１８、−１９、２０、−２１、−２２、−２３、または−２４）である。
コラゲナーゼ
３つの哺乳動物コラゲナーゼ（ＭＭＰ−１、−８、および−１３）は、コラーゲン性細胞外マトリックスを切断することができる主要な分泌型エンドペプチダーゼである。線維性コラーゲンに加えて、コラゲナーゼは、成長因子を含む複数の他のマトリックスおよび非マトリックスタンパク質を切断することができる。コラゲナーゼは、不活性な代替形態として合成され、一旦活性化されると、それらの活性は、特異的組織メタロプロテイナーゼ阻害剤、ＴＩＭＰによって、ならびに非特異的プロテイナーゼ阻害剤によって阻害される（Ａｌａ−ａｈｏ  Ｒ  ｅｔ  ａｌ．  Ｂｉｏｃｈｉｍｉｅ．  Ｃｏｌｌａｇｅｎａｓｅｓ  ｉｎ  ｃａｎｃｅｒ．  ２００５  Ｍａｒ−Ａｐｒ；８７（３−４）：２７３−８６）。一部の実施形態では、間質改変部分は、コラゲナーゼである。一部の実施形態では、コラゲナーゼは、ヒト組換えコラゲナーゼである。一部の実施形態では、コラゲナーゼは、ＭＭＰ−１である。一部の実施形態では、コラゲナーゼは、ＭＭＰ−８である。一部の実施形態では、コラゲナーゼは、ＭＭＰ−１３である。
マクロファージメタロエラスターゼ
ＭＭＰ−１２としても知られるマクロファージメタロエラスターゼ（ＭＭＥ）は、ＭＭＰのストロメライシンサブグループのメンバーであり、可溶性および不溶性エラスチン、ならびにＩＶ型コラーゲン、フィブロネクチン、ラミニン、ビトロネクチン、エンタクチン、ヘパラン、およびコンドロイチン硫酸塩を含む広範なマトリックスおよび非マトリックス基質の加水分解を触媒する（Ｅｒｊａ  Ｋｅｒｋｅｌa  ｅｔ  ａｌ．  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｖｅ  Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｙ  （２０００）  １１４，  １１１３−１１１９；  ｄｏｉ：１０．１０４６／ｊ．１５２３−１７４７．２０００．００９９３）。一部の実施形態では、間質改変部分は、ＭＭＥである。一部の実施形態では、ＭＭＥは、ヒト組換えＭＭＥである。一部の実施形態では、ＭＭＥは、ＭＭＰ−１２である。
さらなる間質改変部分
一部の実施形態では、間質改変部分は、間質もしくは細胞外マトリックス（ＥＣＭ）成分のレベルもしくは産生の減少、腫瘍線維形成の減少、間質腫瘍輸送の増加、腫瘍灌流の改善、腫瘍微小血管の拡大、腫瘍における間質液圧（ＩＦＰ）の減少、または薬剤、例えば、がん治療薬もしくは細胞療法の、腫瘍もしくは腫瘍血管への浸透もしくは拡散の減少もしくは増強のうちの１つまたは複数を引き起こす。
【０７３１】
一部の実施形態では、減少される間質またはＥＣＭ成分は、グリコサミノグリカンもしくは細胞外タンパク質、またはそれらの組合せから選択される。一部の実施形態では、グリコサミノグリカンは、ヒアルロナン（ヒアルロン酸もしくはＨＡとしても知られる）、コンドロイチン硫酸塩、コンドロイチン、デルマタン硫酸塩、ヘパリン、ヘパリン硫酸塩、エンタクチン、テネイシン、アグリカン、およびケラチン硫酸塩から選択される。一部の実施形態では、細胞外タンパク質は、コラーゲン、ラミニン、エラスチン、フィブリノーゲン、フィブロネクチン、またはビトロネクチンから選択される。一部の実施形態では、間質改変部分は、腫瘍間質または細胞外マトリックス（ＥＣＭ）を分解する酵素分子を含む。一部の実施形態では、酵素分子は、ヒアルロニダーゼ分子、コラゲナーゼ分子、コンドロイチナーゼ分子、マトリックスメタロプロテイナーゼ分子（例えば、マクロファージメタロエラスターゼ）、または前述のもののいずれかのバリアント（例えば、断片）から選択される。「酵素分子」という用語には、酵素の全長、その断片、またはバリアント、例えば、天然に存在する酵素の少なくとも１つの機能的特性を保持する酵素バリアントが含まれる。
【０７３２】
一部の実施形態では、間質改変部分は、ヒアルロン酸のレベルまたは産生を減少させる。他の実施形態では、間質改変部分は、ヒアルロナン分解酵素、ヒアルロナン合成を阻害する薬剤、またはヒアルロン酸に対する抗体分子を含む。
【０７３３】
一部の実施形態では、ヒアルロナン分解酵素は、ヒアルロニダーゼ分子、例えば、全長またはそのバリアント（例えば、その断片）である。一部の実施形態では、ヒアルロナン分解酵素は、中性または酸性のｐＨ、例えば、約４〜５のｐＨにおいて活性である。一部の実施形態では、ヒアルロニダーゼ分子は、哺乳動物ヒアルロニダーゼ分子、例えば、組換えヒトヒアルロニダーゼ分子、例えば、全長またはそのバリアント（例えば、その断片、例えば、短縮形態）である。一部の実施形態では、ヒアルロニダーゼ分子は、ＨＹＡＬ１、ＨＹＡＬ２、もしくはＰＨ−２０／ＳＰＡＭ１、またはそのバリアント（例えば、その短縮形態）から選択される。一部の実施形態では、短縮形態は、Ｃ末端グリコシルホスファチジルイノシトール（ＧＰＩ）結合部位またはＧＰＩ結合部位の一部分が欠如している。一部の実施形態では、ヒアルロニダーゼ分子は、グリコシル化されている、例えば、少なくとも１つのＮ結合型グリカンを含む。
【０７３４】
一部の実施形態では、ヒアルロニダーゼ分子は、ＬＮＦＲＡＰＰＶＩＰＮＶＰＦＬＷＡＷＮＡＰＳＥＦＣＬＧＫＦＤＥＰＬＤＭＳＬＦＳＦＩＧＳＰＲＩＮＡＴＧＱＧＶＴＩＦＹＶＤＲＬＧＹＹＰＹＩＤＳＩＴＧＶＴＶＮＧＧＩＰＱＫＩＳＬＱＤＨＬＤＫＡＫＫＤＩＴＦＹＭＰＶＤＮＬＧＭＡＶＩＤＷＥＥＷＲＰＴＷＡＲＮＷＫＰＫＤＶＹＫＮＲＳＩＥＬＶＱＱＱＮＶＱＬＳＬＴＥＡＴＥＫＡＫＱＥＦＥＫＡＧＫＤＦＬＶＥＴＩＫＬＧＫＬＬＲＰＮＨＬＷＧＹＹＬＦＰＤＣＹＮＨＨＹＫＫＰＧＹＮＧＳＣＦＮＶＥＩＫＲＮＤＤＬＳＷＬＷＮＥＳＴＡＬＹＰＳＩＹＬＮＴＱＱＳＰＶＡＡＴＬＹＶＲＮＲＶＲＥＡＩＲＶＳＫＩＰＤＡＫＳＰＬＰＶＦＡＹＴＲＩＶＦＴＤＱＶＬＫＦＬＳＱＤＥＬＶＹＴＦＧＥＴＶＡＬＧＡＳＧＩＶＩＷＧＴＬＳＩＭＲＳＭＫＳＣＬＬＬＤＮＹＭＥＴＩＬＮＰＹＩＩＮＶＴＬＡＡＫＭＣＳＱＶＬＣＱＥＱＧＶＣＩＲＫＮＷＮＳＳＤＹＬＨＬＮＰＤＮＦＡＩＱＬＥＫＧＧＫＦＴＶＲＧＫＰＴＬＥＤＬＥＱＦＳＥＫＦＹＣＳＣＹＳＴＬＳＣＫＥＫＡＤＶＫＤＴＤＡＶＤＶＣＩＡＤＧＶＣＩＤＡＦＬＫＰＰＭＥＴＥＥＰＱＩＦＹＮＡＳＰＳＴＬＳ（配列番号１６１ａ）のアミノ酸配列、もしくはその断片、またはそれに対して実質的に同一である（例えば、それに対して９５％〜９９．９％同一であるか、または配列番号１６１ａのアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個、もしくは１５個以下である変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列を含む。
【０７３５】
一部の実施形態では、ヒアルロニダーゼ分子は、
（ｉ）配列番号１６１ａの３６〜４６４のアミノ酸配列、
（ｉｉ）ＰＨ２０の３６〜４８１、３６〜４８２、もしくは３６〜４８３のアミノ酸配列、ここで、ＰＨ２０は、配列番号１６１ａに記載されるアミノ酸配列を有する、
（ｉｉｉ）配列番号１６１ａに記載されるアミノ酸配列のポリペプチドもしくはその短縮形態に対して少なくとも９５％〜１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列、または
（ｉｖ）配列番号１６１ａに記載されるアミノ酸配列に対して３０個、２０個、１０個、５つ、もしくはそれよりも少ないアミノ酸置換を有するアミノ酸配列
を含む。一部の実施形態では、ヒアルロニダーゼ分子は、配列番号１６１ａのアミノ酸配列に対して少なくとも９５％（例えば、少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、１００％）同一のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ヒアルロニダーゼ分子は、配列番号１６１ａのヌクレオチド配列に対して少なくとも９５％（例えば、少なくとも９６％、９７％、９８％、９９％、１００％）同一のヌクレオチド配列によってコードされる。
【０７３６】
一部の実施形態では、ヒアルロニダーゼ分子は、ＰＨ２０、例えば、ｒＨｕＰＨ２０である。一部の実施形態では、ヒアルロニダーゼ分子は、ＨＹＡＬ１であり、アミノ酸配列：
ＦＲＧＰＬＬＰＮＲＰＦＴＴＶＷＮＡＮＴＱＷＣＬＥＲＨＧＶＤＶＤＶＳＶＦＤＶＶＡＮＰＧＱＴＦＲＧＰＤＭＴＩＦＹＳＳＱＧＴＹＰＹＹＴＰＴＧＥＰＶＦＧＧＬＰＱＮＡＳＬＩＡＨＬＡＲＴＦＱＤＩＬＡＡＩＰＡＰＤＦＳＧＬＡＶＩＤＷＥＡＷＲＰＲＷＡＦＮＷＤＴＫＤＩＹＲＱＲＳＲＡＬＶＱＡＱＨＰＤＷＰＡＰＱＶＥＡＶＡＱＤＱＦＱＧＡＡＲＡＷＭＡＧＴＬＱＬＧＲＡＬＲＰＲＧＬＷＧＦＹＧＦＰＤＣＹＮＹＤＦＬＳＰＮＹＴＧＱＣＰＳＧＩＲＡＱＮＤＱＬＧＷＬＷＧＱＳＲＡＬＹＰＳＩＹＭＰＡＶＬＥＧＴＧＫＳＱＭＹＶＱＨＲＶＡＥＡＦＲＶＡＶＡＡＧＤＰＮＬＰＶＬＰＹＶＱＩＦＹＤＴＴＮＨＦＬＰＬＤＥＬＥＨＳＬＧＥＳＡＡＱＧＡＡＧＶＶＬＷＶＳＷＥＮＴＲＴＫＥＳＣＱＡＩＫＥＹＭＤＴＴＬＧＰＦＩＬＮＶＴＳＧＡＬＬＣＳＱＡＬＣＳＧＨＧＲＣＶＲＲＴＳＨＰＫＡＬＬＬＬＮＰＡＳＦＳＩＱＬＴＰＧＧＧＰＬＳＬＲＧＡＬＳＬＥＤＱＡＱＭＡＶＥＦＫＣＲＣＹＰＧＷＱＡＰＷＣＥＲＫＳＭＷ（配列番号１６２ａ）もしくはその断片、またはそれに対して実質的に同一である（例えば、それに対して９５％〜９９．９％同一であるか、または配列番号１６２ａのアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個、もしくは１５個以下である変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列を含む。
【０７３７】
一部の実施形態では、ヒアルロナン分解酵素、例えば、ヒアルロニダーゼ分子は、ポリマーをさらに含み、例えば、ポリマー、例えば、ＰＥＧにコンジュゲートされている。一部の実施形態では、ヒアルロナン分解酵素は、ＰＥＧ化ＰＨ２０酵素（ＰＥＧＰＨ２０）である。一部の実施形態では、ヒアルロナン分解酵素、例えば、ヒアルロニダーゼ分子は、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、およびＩｇＧ４の重鎖定常領域、より具体的には、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４の重鎖定常領域から選択される、免疫グロブリン鎖定常領域（例えば、Ｆｃ領域）をさらに含む。一部の実施形態では、免疫グロブリン定常領域（例えば、Ｆｃ領域）は、ヒアルロナン分解酵素、例えば、ヒアルロニダーゼ分子に連結、例えば、共有結合的に連結されている。一部の実施形態では、免疫グロブリン鎖定常領域（例えば、Ｆｃ領域）は、Ｆｃ受容体の結合、抗体のグリコシル化、システイン残基の数、エフェクター細胞の機能、または補体機能のうちの１つまたは複数を増加または減少させるように、変更、例えば、突然変異されている。一部の実施形態では、ヒアルロナン分解酵素、例えば、ヒアルロニダーゼ分子は、二量体を形成する。
【０７３８】
一部の実施形態では、間質改変部分は、ヒアルロナンの合成、例えば、ＨＡシンターゼの阻害剤を含む。一部の実施形態では、阻害剤は、ＨＡシンターゼに対するセンスもしくはアンチセンス核酸分子を含むか、または小分子薬である。一部の実施形態では、阻害剤は、４−メチルウンベリフェロン（ＭＵ）もしくはその誘導体（例えば、６，７−ジヒドロキシ−４−メチルクマリンもしくは５，７−ジヒドロキシ−４−メチルクマリン）、またはレフルノミドもしくはその誘導体である。
【０７３９】
一部の実施形態では、間質改変部分は、ヒアルロン酸に対する抗体分子を含む。
一部の実施形態では、間質改変部分は、コラゲナーゼ分子、例えば、哺乳動物コラゲナーゼ分子、またはそのバリアント（例えば、断片）を含む。一部の実施形態では、コラゲナーゼ分子は、例えば、
ＹＮＦＦＰＲＫＰＫＷＤＫＮＱＩＴＹＲＩＩＧＹＴＰＤＬＤＰＥＴＶＤＤＡＦＡＲＡＦＱＶＷＳＤＶＴＰＬＲＦＳＲＩＨＤＧＥＡＤＩＭＩＮＦＧＲＷＥＨＧＤＧＹＰＦＤＧＫＤＧＬＬＡＨＡＦＡＰＧＴＧＶＧＧＤＳＨＦＤＤＤＥＬＷＴＬＧＥＧＱＶＶＲＶＫＹＧＮＡＤＧＥＹＣＫＦＰＦＬＦＮＧＫＥＹＮＳＣＴＤＴＧＲＳＤＧＦＬＷＣＳＴＴＹＮＦＥＫＤＧＫＹＧＦＣＰＨＥＡＬＦＴＭＧＧＮＡＥＧＱＰＣＫＦＰＦＲＦＱＧＴＳＹＤＳＣＴＴＥＧＲＴＤＧＹＲＷＣＧＴＴＥＤＹＤＲＤＫＫＹＧＦＣＰＥＴＡＭＳＴＶＧＧＮＳＥＧＡＰＣＶＦＰＦＴＦＬＧＮＫＹＥＳＣＴＳＡＧＲＳＤＧＫＭＷＣＡＴＴＡＮＹＤＤＤＲＫＷＧＦＣＰＤＱＧＹＳＬＦＬＶＡＡＨＥＦＧＨＡＭＧＬＥＨＳＱＤＰＧＡＬＭＡＰＩＹＴＹＴＫＮＦＲＬＳＱＤＤＩＫＧＩＱＥＬＹＧＡＳＰＤＩＤＬＧＴＧＰＴＰＴＬＧＰＶＴＰＥＩＣＫＱＤＩＶＦＤＧＩＡＱＩＲＧＥＩＦＦＦＫＤＲＦＩＷＲＴＶＴＰＲＤＫＰＭＧＰＬＬＶＡＴＦＷＰＥＬＰＥＫＩＤＡＶＹＥＡＰＱＥＥＫＡＶＦＦＡＧＮＥＹＷＩＹＳＡＳＴＬＥＲＧＹＰＫＰＬＴＳＬＧＬＰＰＤＶＱＲＶＤＡＡＦＮＷＳＫＮＫＫＴＹＩＦＡＧＤＫＦＷＲＹＮＥＶＫＫＫＭＤＰＧＦＰＫＬＩＡＤＡＷＮＡＩＰＤＮＬＤＡＶＶＤＬＱＧＧＧＨＳＹＦＦＫＧＡＹＹＬＫＬＥＮＱＳＬＫＳＶＫＦＧＳＩＫＳＤＷＬＧＣ（配列番号１６３ａ）のアミノ酸配列、もしくはその断片、またはそれに対して実質的に同一である（例えば、それに対して９５％〜９９．９％同一であるか、または配列番号１６３ａのアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個、もしくは１５個以下である変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列を含む、コラゲナーゼ分子ＩＶである。
リンカー
本明細書に開示される多特異性または多機能性分子は、リンカー、例えば、抗原結合性ドメインとサイトカイン分子との間、抗原結合性ドメインと免疫細胞エンゲージャーとの間、抗原結合性ドメインと間質改変部分との間、サイトカイン分子と免疫細胞エンゲージャーとの間、サイトカイン分子と間質改変部分との間、免疫細胞エンゲージャーと間質改変部分との間、抗原結合性ドメインと免疫グロブリン鎖定常領域との間、サイトカイン分子と免疫グロブリン鎖定常領域との間、免疫細胞エンゲージャーと免疫グロブリン鎖定常領域との間、または間質改変部分と免疫グロブリン鎖定常領域との間のうちの１つまたは複数におけるリンカーをさらに含み得る。実施形態では、リンカーは、切断性リンカー、非切断性リンカー、ペプチドリンカー、可撓性リンカー、剛性リンカー、ヘリックスリンカー、もしくは非ヘリックスリンカー、またはこれらの組合せから選択される。
【０７４０】
一実施形態では、多特異性分子は、１つ、２つ、３つ、または４つのリンカー、例えば、ペプチドリンカーを含み得る。一実施形態では、ペプチドリンカーは、ＧｌｙおよびＳｅｒを含む。一部の実施形態では、ペプチドリンカーは、ＧＧＧＧＳ（配列番号１４２ａ）；ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号１４３ａ）；ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号１４４ａ）；およびＤＶＰＳＧＰＧＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号１４５ａ）から選択される。一部の実施形態では、ペプチドリンカーは、Ａ（ＥＡＡＡＫ）ｎＡファミリーのリンカー（例えば、Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇ．  （２００１）  １４  （８）：  ５２９−５３２に記載される）である。これらは、ｎが２〜５の範囲である剛直なヘリックスリンカーである。一部の実施形態では、ペプチドリンカーは、ＡＥＡＡＡＫＥＡＡＡＫＡＡＡ（配列番号１７５ａ）；ＡＥＡＡＡＫＥＡＡＡＫＥＡＡＡＫＡＡＡ（配列番号１７６ａ）；ＡＥＡＡＡＫＥＡＡＡＫＥＡＡＡＫＥＡＡＡＫＡＡＡ（配列番号１７７ａ）；およびＡＥＡＡＡＫＥＡＡＡＫＥＡＡＡＫＥＡＡＡＫＥＡＡＡＫＡＡＡ（配列番号１７８ａ）から選択される。
核酸
前述の抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、多特異性または多機能性分子をコードする核酸もまた、開示される。
【０７４１】
ある特定の実施形態では、本発明は、本明細書に記載される抗体分子の重鎖および軽鎖可変領域およびＣＤＲまたは超可変ループをコードするヌクレオチド配列を含む核酸を特徴とする。例えば、本発明は、本明細書に開示される抗体分子のうちの１つまたは複数から選択される抗体分子の、重鎖および軽鎖可変領域をそれぞれコードする、第１および第２の核酸を特徴とする。核酸は、本明細書の表に記載されるヌクレオチド配列、またはそれに対して実質的に同一の配列（例えば、それに対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％、もしくはそれ以上同一であるか、または３個、６個、１５個、３０個、もしくは４５個以下のヌクレオチドが、本明細書の表に示される配列と異なる配列を含む。
【０７４２】
ある特定の実施形態では、核酸は、本明細書の表に記載されるアミノ酸配列を有する重鎖可変領域に由来する少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲもしくは超可変ループをコードするヌクレオチド配列、またはそれに対して実質的に相同である配列（例えば、それに対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％、もしくはそれ以上同一である、かつ／または１つもしくは複数の置換、例えば、保存的置換を有する配列）を含み得る。他の実施形態では、核酸は、本明細書の表に記載されるアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域に由来する少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲもしくは超可変ループをコードするヌクレオチド配列、またはそれに対して実質的に相同である配列（例えば、それに対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％、もしくはそれ以上同一である、かつ／または１つもしくは複数の置換、例えば、保存的置換を有する配列）を含み得る。なおも別の実施形態では、核酸は、本明細書の表に記載されるアミノ酸配列を有する重鎖および軽鎖可変領域に由来する少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つのＣＤＲもしくは超可変ループをコードするヌクレオチド配列、またはそれに対して実質的に相同である配列（例えば、それに対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％、もしくはそれ以上同一である、かつ／または１つもしくは複数の置換、例えば、保存的置換を有する配列）を含み得る。
【０７４３】
ある特定の実施形態では、核酸は、本明細書の表に記載されるヌクレオチド配列を有する重鎖可変領域に由来する少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲもしくは超可変ループをコードするヌクレオチド配列、それに対して実質的に相同である配列（例えば、それに対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％、もしくはそれ以上同一である、かつ／または本明細書に記載されるストリンジェンシー条件下においてハイブリダイズすることができる配列）を含み得る。別の実施形態では、核酸は、本明細書の表に記載されるヌクレオチド配列を有する軽鎖可変領域に由来する少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲもしくは超可変ループをコードするヌクレオチド配列、またはそれに対して実質的に相同である配列（例えば、それに対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％、もしくはそれ以上同一である、かつ／または本明細書に記載されるストリンジェンシー条件下においてハイブリダイズすることができる配列）を含み得る。なおも別の実施形態では、核酸は、本明細書の表に記載されるヌクレオチド配列を有する重鎖および軽鎖可変領域に由来する少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つのＣＤＲもしくは超可変ループをコードするヌクレオチド配列、またはそれに対して実質的に相同である配列（例えば、それに対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％、もしくはそれ以上同一である、かつ／または本明細書に記載されるストリンジェンシー条件下においてハイブリダイズすることができる配列）を含み得る。
【０７４４】
ある特定の実施形態では、核酸は、本明細書に開示されるサイトカイン分子、免疫細胞エンゲージャー、または間質改変部分をコードするヌクレオチド配列を含み得る。
別の態様では、本出願は、本明細書に記載される核酸を含む宿主細胞およびベクターを特徴とする。核酸は、本明細書において以下により詳細に記載されるように、同じ宿主細胞または別個の宿主細胞に存在する単一のベクターまたは別個のベクターに存在し得る。
ベクター
さらに、本明細書に記載される抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、または多特異性もしくは多機能性分子をコードするヌクレオチド配列を含むベクターが本明細書で提供される。一実施形態では、ベクターは、本明細書に記載される抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、または多特異性もしくは多機能性分子をコードする核酸配列を含む。一実施形態では、ベクターは、本明細書に記載されるヌクレオチド配列を含む。ベクターとしては、ウイルス、プラスミド、コスミド、ラムダファージ、または酵母人工染色体（ＹＡＣ）が挙げられるが、これらに限定されない。
【０７４５】
多数のベクター系を用いることができる。例えば、１つのクラスのベクターは、動物ウイルス、例えば、ウシパピローマウイルス、ポリオーマウイルス、アデノウイルス、ワクシニアウイルス、バキュロウイルス、レトロウイルス（ラウス肉腫ウイルス、ＭＭＴＶ、もしくはＭＯＭＬＶ）、またはＳＶ４０ウイルスなどに由来するＤＮＡエレメントを利用する。別のクラスのベクターは、ＲＮＡウイルス、例えば、セムリキ森林ウイルス、東部ウマ脳炎ウイルス、およびフラビウイルスに由来するＲＮＡエレメントを利用する。
【０７４６】
加えて、ＤＮＡが染色体に安定に組み込まれた細胞を、トランスフェクトされた宿主細胞の選択を可能にする１つまたは複数のマーカーを導入することによって、選択することができる。マーカーは、例えば、栄養要求性宿主に対するプロトトロピー、殺生物剤耐性（例えば、抗生物質）、または重金属、例えば、銅に対する耐性などを提供し得る。選択可能なマーカー遺伝子は、発現させようとするＤＮＡ配列に直接的に連結させるか、または共形質転換によって同じ細胞に導入するかのいずれかを行うことができる。最適なｍＲＮＡの合成には、追加のエレメントも必要とされ得る。これらのエレメントとしては、スプライスシグナル、ならびに転写プロモーター、エンハンサー、および終結シグナルを挙げることができる。
【０７４７】
構築物を含む発現ベクターまたはＤＮＡ配列を、発現のために調製した後、発現ベクターを、適切な宿主細胞にトランスフェクトまたは導入することができる。例えば、プロトプラスト融合、リン酸カルシウム沈降、エレクトロポレーション、レトロウイルス形質導入、ウイルストランスフェクション、遺伝子銃、脂質に基づくトランスフェクション、または他の従来的な技法など、様々な技法を用いてこれを達成することができる。プロトプラスト融合の場合、細胞を、培地において成長させ、適切な活性に関してスクリーニングする。
【０７４８】
結果として得られたトランスフェクトした細胞の培養、および産生される抗体分子の回収のための方法および条件は、当業者に公知であり、本明細書に基づいて、用いられる具体的な発現ベクターおよび哺乳動物宿主細胞に応じて変更または最適化することができる。
細胞
別の態様では、本出願は、本明細書に記載される核酸を含む宿主細胞およびベクターを特徴とする。核酸は、同じ宿主細胞または別個の宿主細胞に存在する単一のベクターまたは別個のベクターに存在し得る。宿主細胞は、真核生物細胞、例えば、哺乳動物細胞、昆虫細胞、酵母細胞、または原核生物細胞、例えば、大腸菌であってもよい。例えば、哺乳動物細胞は、培養した細胞または細胞系であり得る。例示的な哺乳動物細胞としては、リンパ球細胞系（例えば、ＮＳＯ）、チャイニーズハムスター卵巣細胞（ＣＨＯ）、ＣＯＳ細胞、卵母細胞、およびトランスジェニック動物に由来する細胞、例えば、乳腺上皮細胞が挙げられる。
【０７４９】
本発明はまた、本明細書に記載される抗体分子をコードする核酸を含む宿主細胞も提供する。
一実施形態では、宿主細胞は、抗体分子をコードする核酸を含むように遺伝子操作されている。
【０７５０】
一実施形態では、宿主細胞は、発現カセットを使用することによって遺伝子操作されている。「発現カセット」という語句は、ヌクレオチド配列を指し、そのような配列と適合性のある宿主における遺伝子の発現を達成することができる。そのようなカセットとしては、プロモーター、イントロンありまたはなしのオープンリーディングフレーム、終結シグナルを挙げることができる。例えば、誘導性プロモーターなど、発現を達成するのに必要であるかまたは役に立つ追加の因子もまた、使用することができる。
【０７５１】
本発明はまた、本明細書に記載されるベクターを含む宿主細胞も提供する。
細胞は、真核生物細胞、細菌細胞、昆虫細胞、またはヒト細胞であり得るが、これらに限定されない。好適な真核生物細胞としては、Ｖｅｒｏ細胞、ＨｅＬａ細胞、ＣＯＳ細胞、ＣＨＯ細胞、ＨＥＫ２９３細胞、ＢＨＫ細胞、およびＭＤＣＫＩＩ細胞が挙げられるが、これらに限定されない。好適な昆虫細胞としては、Ｓｆ９細胞が挙げられるが、これに限定されない。
抗ＴＣＲＶＢ抗体を用いて細胞を拡大させる方法
本明細書に記載される組成物および方法のうちのいずれかを使用して、免疫細胞集団を拡大させることができる。本明細書において提供される免疫細胞としては、造血幹細胞に由来する免疫細胞、または非造血幹細胞に由来する、例えば、分化もしくは脱分化による免疫細胞が挙げられる。
【０７５２】
免疫細胞には、造血幹細胞、その子孫、および／または前記ＨＳＣから分化した細胞、例えば、リンパ系細胞もしくは骨髄性細胞が含まれる。免疫細胞は、適応免疫細胞であってもよく、先天免疫細胞であってもよい。免疫細胞の例としては、Ｔ細胞、Ｂ細胞、ナチュラルキラー細胞、ナチュラルキラーＴ細胞、好中球、樹状細胞、単球、マクロファージ、および顆粒球が挙げられる。
【０７５３】
本明細書に開示される方法または組成物のうちのいずれかの一部の実施形態では、免疫細胞は、Ｔ細胞である。一部の実施形態では、Ｔ細胞は、ＣＤ４＋  Ｔ細胞、ＣＤ８＋  Ｔ細胞、ＴＣＲアルファ−ベータＴ細胞、ＴＣＲガンマ−デルタＴ細胞を含む。一部の実施形態では、Ｔ細胞は、メモリーＴ細胞（例えば、セントラルメモリーＴ細胞、もしくはエフェクターメモリーＴ細胞（例えば、ＴＥＭＲＡ）、またはエフェクターＴ細胞を含む。一部の実施形態では、Ｔ細胞は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）を含む。
【０７５４】
本明細書に開示される方法または組成物のうちのいずれかの一部の実施形態では、免疫細胞は、ＮＫ細胞である。
本明細書に開示される方法または組成物のうちのいずれかの一部の実施形態では、免疫細胞は、ＴＩＬである。ＴＩＬは、腫瘍内または腫瘍の周辺（例えば、腫瘍の間質または腫瘍微小環境）、例えば、固形腫瘍、例えば、本明細書に記載されるものにおいて見出すことができる、免疫細胞（例えば、Ｔ細胞、Ｂ細胞、またはＮＫ細胞）である。ＴＩＬは、がんを有する対象由来の試料、例えば、生検または外科手術試料から得ることができる。一部の実施形態では、ＴＩＬは、本明細書に開示される方法を使用して拡大させることができる。一部の実施形態では、拡大させた、例えば、本明細書に開示される方法を使用して拡大させたＴＩＬの集団は、疾患、例えば、がんを処置するために、対象に投与することができる。
【０７５５】
本開示のある特定の態様において、免疫細胞、例えば、Ｔ細胞（例えば、ＴＩＬ）は、Ｆｉｃｏｌｌ（商標）分離など、当業者に公知の任意の多数の技法を使用して、対象から採取された血液単位から得ることができる。一態様では、個体の循環血液由来の細胞は、アフェレーシスによって得られる。アフェレーシス産物は、典型的に、リンパ球、例えば、Ｔ細胞、単球、顆粒球、Ｂ細胞、他の有核白血球、赤血球、および血小板を含有する。一態様では、アフェレーシスによって採取された細胞を洗浄して、血漿画分を除去してもよく、必要に応じて、細胞を、後続の処理ステップに適した緩衝液または培地に入れてもよい。一実施形態では、細胞は、リン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）で洗浄される。代替的な実施形態では、洗浄溶液は、カルシウムを含まず、かつマグネシウム不含であり得るか、またはすべてではないものの多くの二価カチオン不含であり得る。本明細書に記載される方法は、１つを上回る選択ステップ、例えば、１つを上回る枯渇ステップを含み得る。
【０７５６】
一実施形態では、本出願の方法は、ＤＭＥＭ、ＤＭＥＭ  Ｆ１２、ＲＰＭＩ  １６４０、および／またはＡＩＭ  Ｖ培地を含む培養培地条件を利用し得る。培地は、グルタミン、ＨＥＰＥＳ緩衝液（例えば、１０ｍＭ）、血清（例えば、熱不活性化血清、例えば、１０％）、および／またはベータメルカプトエタノール（例えば、５５ｕＭ）が補充されていてもよい。一部の実施形態では、本明細書に開示される培養条件は、１つまたは複数の補充物質、サイトカイン、成長因子、またはホルモンを含む。一部の実施形態では、培養条件は、ＩＬ−２、ＩＬ−１５、もしくはＩＬ−７、またはこれらの組合せのうちの１つまたは複数を含む。
【０７５７】
免疫エフェクター細胞、例えば、Ｔ細胞は、概して、例えば、米国特許第６，３５２，６９４号、同第６，５３４，０５５号、または同第６，９０５，６８０号に記載される方法を使用して、活性化および拡大させることができる。一般に、免疫細胞集団は、ＣＤ３／ＴＣＲ複合体関連シグナルを刺激する薬剤およびＴ細胞の表面上の共刺激分子を刺激するリガンドとの接触によって、ならびに／またはサイトカイン、例えば、ＩＬ−２、ＩＬ−１５、もしくはＩＬ−７との接触によって、拡大させることができる。Ｔ細胞拡大プロトコールには、例えば、表面上に固定化された抗ＣＤ３抗体もしくはその抗原結合性断片、または抗ＣＤ２抗体との接触による、またはカルシウムイオノフォアと併せてタンパク質キナーゼＣ活性化因子（例えば、ブリオスタチン）との接触による、刺激も含まれ得る。例えば、Ｔ細胞の集団を、Ｔ細胞の増殖を刺激するのに適した条件下において、抗ＣＤ３抗体および抗ＣＤ２８抗体と接触させてもよい。ＣＤ４＋  Ｔ細胞またはＣＤ８＋  Ｔ細胞のいずれかの増殖を刺激するために、抗ＣＤ３抗体および抗ＣＤ２８抗体が使用され得る。抗ＣＤ２８抗体の例としては、９．３、Ｂ−Ｔ３、ＸＲ−ＣＤ２８（Ｄｉａｃｌｏｎｅ、Ｂｅｓａｎcｏｎ、Ｆｒａｎｃｅ）が挙げられ、当該技術分野において一般に公知の他の方法と同様に使用することができる（Ｂｅｒｇ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ  Ｐｒｏｃ．  ３０（８）：３９７５−３９７７，  １９９８、Ｈａａｎｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｅｘｐ．  Ｍｅｄ．  １９０（９）：１３１９１３２８，  １９９９、Ｇａｒｌａｎｄ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｍｅｔｈ．  ２２７（１−２）：５３−６３，  １９９９）。
【０７５８】
ＴＩＬ集団はまた、当該技術分野において公知の方法によって拡大させることができる。例えば、ＴＩＬ集団は、Ｈａｌｌ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｆｏｒ  ＩｍｍｕｎｏＴｈｅｒａｐｙ  ｏｆ  Ｃａｎｃｅｒ  （２０１６）  ４：６１に記載されるように拡大させることができ、このすべての内容は、参照により本明細書に組み込まれる。簡単に述べると、ＴＩＬを、機械的および／または物理的消化によって試料から単離することができる。結果として得られたＴＩＬ集団を、非分裂フィーダー細胞の存在下において、抗ＣＤ３抗体で刺激することができる。一部の実施形態では、ＴＩＬ集団は、ＩＬ−２、例えば、ヒトＩＬ−２の存在下において、培養することができる、例えば、拡大させることができる。一部の実施形態では、ＴＩＬ細胞は、少なくとも１〜２１日間、例えば、少なくとも１日間、２日間、３日間、４日間、５日間、６日間、７日間、８日間、９日間、１０日間、１１日間、１２日間、１３日間、１４日間、１５日間、１６日間、１７日間、１８日間、１９日間、２０日間、または２１日間の期間、培養することができる、例えば、拡大させることができる。
【０７５９】
本明細書に開示されるように、一部の実施形態では、免疫細胞集団（例えば、Ｔ細胞（例えば、ＴＥＭＲＡ細胞またはＴＩＬ集団）は、免疫細胞集団を、例えば、本明細書に記載される抗ＴＣＲＶＢ抗体と接触させることによって、拡大させることができる。
【０７６０】
一部の実施形態では、拡大は、ｉｎ  ｖｉｖｏで、例えば、対象において生じる。一部の実施形態では、対象に、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子が投与され、その結果、ｉｎ  ｖｉｖｏで免疫細胞の拡大が生じる。
【０７６１】
一部の実施形態では、拡大は、ｅｘ  ｖｉｖｏ、例えば、ｉｎ  ｖｉｔｒｏで生じる。一部の実施形態では、対象由来の細胞、例えば、Ｔ細胞、例えば、ＴＩＬ細胞を、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子を用いて、ｉｎ  ｖｉｔｒｏで拡大させる。一部の実施形態では、拡大させたＴＩＬは、疾患または疾患の症状を処置するために、対象に投与される。
【０７６２】
一部の実施形態では、本明細書に開示される拡大の方法は、少なくとも１．１〜１０倍の拡大、１０〜２０倍、または２０〜５０倍の拡大をもたらす。一部の実施形態では、拡大は、少なくとも１．１倍、１．２倍、１．３倍、１．４倍、１．５倍、２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、１０倍、１５倍、２０倍、２５倍、３０倍、３５倍、４０倍、４５倍、または５０倍の拡大である。
【０７６３】
一部の実施形態では、本明細書に開示される拡大の方法は、細胞を、少なくとも４時間、６時間、１０時間、１２時間、１５時間、１８時間、２０時間、または２２時間、培養する、例えば、拡大させるステップを含む。一部の実施形態では、本明細書に開示される拡大の方法は、細胞を、少なくとも１日間、２日間、３日間、４日間、５日間、６日間、７日間、８日間、９日間、１０日間、１１日間、１２日間、１３日間、１４日間、１５日間、１，６日間  １７日間、１８日間、１９日間、２０日間、または２１日間、培養する、例えば、拡大させるステップを含む。一部の実施形態では、本明細書に開示される拡大の方法は、細胞を、少なくとも約１週間、２週間、３週間、４週間、５週間、６週間、７週間、または８週間、培養する、例えば、拡大させるステップを含む。
【０７６４】
一部の実施形態では、本明細書に開示される拡大の方法は、健常対象から得られた免疫細胞に行われる。
一部の実施形態では、本明細書に開示される拡大の方法は、疾患、例えば、がん、例えば、本明細書に開示される固形腫瘍を有する対象から得られた免疫細胞（例えば、ＴＩＬ）に行われる。
【０７６５】
一部の実施形態では、本明細書に開示される拡大の方法は、細胞集団を、免疫細胞の拡大を促進する、例えば、増加させる薬剤と接触させるステップをさらに含む。一部の実施形態では、この薬剤は、免疫チェックポイント阻害剤、例えば、ＰＤ−１阻害剤、ＬＡＧ−３阻害剤、ＣＴＬＡ４阻害剤、またはＴＩＭ−３阻害剤を含む。一部の実施形態では、この薬剤は、４−１ＢＢアゴニスト、例えば、抗４−１ＢＢ抗体を含む。
【０７６６】
理論に拘泥するものではないが、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）  アルファおよび／またはＴＣＲベータ分子を含むＴＣＲを発現するＴ細胞、例えば、ＴＣＲアルファ−ベータＴ細胞（αβ  Ｔ細胞）を拡大させる、例えば、選択的または優先的に拡大させることができると考えられる。一部の実施形態では、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲガンマおよび／またはＴＣＲデルタ分子を含むＴＣＲを発現するＴ細胞、例えば、ＴＣＲガンマ−デルタＴ細胞（γδ  Ｔ細胞）を拡大させることも、その増殖を誘導することもない。一部の実施形態では、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、γδ  Ｔ細胞よりも、αβ  Ｔ細胞を選択的または優先的に拡大させる。
【０７６７】
理論に拘泥するものではないが、一部の実施形態では、γδ  Ｔ細胞は、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）および／または神経毒性（ＮＴ）と関係していると考えられる。一部の実施形態では、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、非γδ  Ｔ細胞の選択的な拡大、例えば、αβ  Ｔ細胞の拡大をもたらし、したがって、ＣＲＳおよび／またはＮＴを低減させる。
【０７６８】
一部の実施形態では、本明細書に開示される組成物または方法のうちのいずれかは、γδ  Ｔ細胞の低減、例えば、枯渇を有する免疫細胞集団をもたらす。一部の実施形態では、免疫細胞集団を、γδ  Ｔ細胞を低減させる、例えば、阻害もしくは枯渇させる薬剤、例えば、抗ＩＬ−１７抗体、またはＴＣＲガンマおよび／もしくはＴＣＲデルタ分子に結合する薬剤と接触させる。
使用および組合せ治療
本明細書に記載される方法は、本明細書に記載される抗ＴＣＲβＶ抗体分子、多特異性または多機能性分子を使用して、例えば、本明細書に記載される医薬組成物を使用して、対象におけるがんを処置するステップを含む。また、対象におけるがんの症状を低減または改善する方法、ならびにがんの成長を阻害するおよび／または１つもしくは複数のがん細胞を殺滅させる方法が、提供される。実施形態では、本明細書に記載される方法は、本明細書に記載されるものまたは本明細書に記載される医薬組成物が投与された対象において、腫瘍のサイズを減少させ、かつ／またはがん細胞の数を減少させる。
【０７６９】
実施形態では、がんは、血液がんである。実施形態では、血液がんは、白血病またはリンパ腫である。本明細書で使用される場合、「血液がん」は、造血系またはリンパ系組織の腫瘍、例えば、血液、骨髄、またはリンパ節に罹患する腫瘍を指す。例示的な血液悪性腫瘍としては、白血病（例えば、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、有毛細胞性白血病、急性単球性白血病（ＡＭｏＬ）、慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）、若年性骨髄単球性白血病（ＪＭＭＬ）、もしくは大顆粒リンパ球性白血病）、リンパ腫（例えば、ＡＩＤＳ関連リンパ腫、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、ホジキンリンパ腫（例えば、古典的なホジキンリンパ腫もしくは結節性リンパ球優位型ホジキンリンパ腫）、菌状息肉腫、非ホジキンリンパ腫（例えば、Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫（例えば、バーキットリンパ腫、小リンパ球性リンパ腫（ＣＬＬ／ＳＬＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、免疫芽球性大細胞型リンパ腫、前駆Ｂリンパ芽球性リンパ腫、もしくはマントル細胞リンパ腫）、またはＴ細胞非ホジキンリンパ腫（菌状息肉腫、未分化大細胞リンパ腫、もしくは前駆Ｔリンパ芽球性リンパ腫））、原発性中枢神経系リンパ腫、セザリー症候群、ワルデンシュトレーム型マクログロブリン血症）、慢性骨髄増殖性新生物、ランゲルハンス細胞組織球症、多発性骨髄腫／形質細胞新生物、骨髄異形成症候群、または骨髄異形成性／骨髄増殖性新生物が挙げられるが、これらに限定されない。
【０７７０】
実施形態では、がんは、骨髄増殖性新生物、例えば、原発性もしくは特発性骨髄線維症（ＭＦ）、本態性血小板増加症（ＥＴ）、真性赤血球増加症（ＰＶ）、または慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）である。実施形態では、がんは、骨髄線維症である。実施形態では、対象は、骨髄線維症を有する。実施形態では、対象は、カルレティキュリン突然変異、例えば、本明細書に開示されるカルレティキュリン突然変異を有する。実施形態では、対象は、ＪＡＫ２−Ｖ６１７Ｆ突然変異を有さない。実施形態では、対象は、ＪＡＫ２−Ｖ６１７Ｆ突然変異を有する。実施形態では、対象は、ＭＰＬ突然変異を有する。実施形態では、対象は、ＭＰＬ突然変異を有さない。
【０７７１】
実施形態では、がんは、固形がんである。例示的な固形がんとしては、卵巣がん、直腸がん、胃がん、精巣がん、肛門領域のがん、子宮がん、結腸がん、直腸がん、腎細胞癌、肝臓がん、肺の非小細胞癌、小腸のがん、食道のがん、黒色腫、カポジ肉腫、内分泌系のがん、甲状腺のがん、副甲状腺のがん、副腎のがん、骨がん、膵臓がん、皮膚がん、頭頸部のがん、皮膚もしくは眼球の悪性黒色腫、子宮がん、脳幹神経膠腫、下垂体腺腫、類表皮がん、子宮頸の癌  扁平上皮細胞がん、卵管の癌、子宮内膜の癌、膣の癌、軟部組織の肉腫、尿道のがん、外陰部の癌、陰茎のがん、膀胱のがん、腎臓もしくは尿管のがん、腎盂の癌、脊髄軸腫瘍、中枢神経系（ＣＮＳ）の新生物、原発性ＣＮＳリンパ腫、腫瘍血管新生、前記がんの転移病変、またはこれらの組合せが挙げられるが、これらに限定されない。
【０７７２】
実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、多特異性または多機能性分子（または医薬組成物）は、処置または予防しようとする疾患に適した様式で投与される。投与の回数および頻度は、患者の状態、ならびに患者の疾患の種類および重症度などの因子によって決定される。適切な投薬量は、臨床試験によって決定され得る。例えば、「有効量」または「治療量」が示される場合、投与しようとする医薬組成物（または多特異性もしくは多機能性分子）の厳密な量は、腫瘍サイズ、感染または転移の程度、対象の年齢、体重、および状態における個々の違いを考慮して、医師によって決定され得る。実施形態では、本明細書に記載される医薬組成物は、１０４〜１０９個の細胞／体重ｋｇ、例えば、１０５〜１０６個の細胞／体重ｋｇの投薬量で投与され得、これらの範囲内のすべての整数値が含まれる。実施形態では、本明細書に記載される医薬組成物は、これらの投薬量で複数回投与されてもよい。実施形態では、本明細書に記載される医薬組成物は、免疫療法において説明されている注入技法を使用して投与してもよい（例えば、Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎｅｗ  Ｅｎｇ．  Ｊ．  ｏｆ  Ｍｅｄ．  ３１９：１６７６，  １９８８を参照されたい）。
【０７７３】
実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、多特異性もしくは多機能性分子、または医薬組成物は、対象に非経口（ｐａｒｅｎｔａｌｌｙ）投与される。実施形態では、細胞は、静脈内、皮下、腫瘍内、節内（ｉｎｔｒａｎｏｄａｌｌｙ）、筋肉内、皮内、または腹腔内で、対象に投与される。実施形態では、細胞は、腫瘍またはリンパ節に直接的に、投与される、例えば、注射される。実施形態では、細胞は、注入（例えば、Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎｅｗ  Ｅｎｇ．  Ｊ．  ｏｆ  Ｍｅｄ．  ３１９：１６７６，  １９８８に記載される）または静脈内プッシュ（ｉｎｔｒａｖｅｎｏｕｓ  ｐｕｓｈ）として投与される。実施形態では、細胞は、注射可能なデポー製剤として投与される。
【０７７４】
実施形態では、対象は、哺乳動物である。実施形態では、対象は、ヒト、サル、ブタ、イヌ、ネコ、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ウサギ、ラット、またはマウスである。実施形態では、対象は、ヒトである。実施形態では、対象は、例えば、１８歳未満、例えば、１７歳未満、１６歳未満、１５歳未満、１４歳未満、１３歳未満、１２歳未満、１１歳未満、１０歳未満、９歳未満、８歳未満、７歳未満、６歳未満、５歳未満、４歳未満、３歳未満、２歳未満、１歳未満、またはそれ未満の小児対象である。実施形態では、対象は、成人、例えば、少なくとも１８歳、例えば、少なくとも１９歳、２０歳、２１歳、２２歳、２３歳、２４歳、２５歳、２５〜３０歳、３０〜３５歳、３５〜４０歳、４０〜５０歳、５０〜６０歳、６０〜７０歳、７０〜８０歳、または８０〜９０歳である。
がん処置の方法
本明細書に記載される方法は、抗ＴＣＲβＶ抗体分子を使用して、例えば、本明細書に記載される医薬組成物を使用して、対象におけるがんを処置するステップを含む。また、対象におけるがんの症状を低減または改善する方法、ならびにがんの成長を阻害するおよび／または１つもしくは複数のがん細胞を殺滅させる方法が、提供される。実施形態では、本明細書に記載される方法は、本明細書に記載されるものまたは本明細書に記載される医薬組成物が投与された対象において、腫瘍のサイズを減少させ、かつ／またはがん細胞の数を減少させる。
【０７７５】
がんを有する対象を処置する方法であって、対象における１つまたは複数のＴＣＲＢＶ分子のステータスを取得するステップを含む、方法が、本明細書に開示される。一部の実施形態では、対象、例えば、対象由来の試料における高い、例えば、増加した、１つまたは複数のＴＣＲβＶ分子のレベルまたは活性は、対象における前記１つまたは複数のＴＣＲβＶ分子を発現するＴ細胞のバイアス、例えば、優先的な拡大、例えば、クローン拡大を示す。
【０７７６】
理論に拘泥するものではないが、バイアスされたＴ細胞集団、例えば、ＴＣＲβＶ分子を発現するＴ細胞集団は、疾患抗原、例えば、がん抗原に抗原特異性である（Ｗａｎｇ  ＣＹ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｉｎｔ  Ｊ  Ｏｎｃｏｌ．  （２０１６）  ４８（６）：２２４７−５６）。一部の実施形態では、がん抗原は、がん関連抗原またはネオ抗原を含む。一部の実施形態では、例えば、本明細書に開示されるがんを有する対象は、がんと関連する１つまたは複数のＴＣＲβＶ分子のレベルまたは活性が、高い、例えば、増加している。一部の実施形態では、ＴＣＲβＶ分子は、がん抗原、例えば、がん関連抗原またはネオ抗原と会合する、例えば、それを認識する。
【０７７７】
したがって、対象から得られた免疫エフェクター細胞集団を拡大させる方法であって、対象由来の試料において１つまたは複数のＴＣＲβＶ分子のステータスを取得するステップを含み、前記免疫エフェクター細胞集団を、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、対象由来の試料中の免疫エフェクター細胞集団において高い、例えば、増加しているものと同じＴＣＲβＶ分子に結合する抗ＴＣＲβＶ抗体分子と接触させるステップを含む、方法が、本明細書に開示される。一部の実施形態では、免疫エフェクター細胞（例えば、１つまたは複数のＴＣＲβＶ分子を発現するＴ細胞を含む）集団を、抗ＴＣＲβＶ分子と接触させるステップは、１つまたは複数のＴＣＲβＶ分子を発現する免疫エフェクター細胞集団の拡大をもたらす。一部の実施形態では、拡大させた集団、またはその一部分は、がんを処置するために、対象（例えば、免疫エフェクター細胞集団が得られたのと同じ対象）に投与される。一部の実施形態では、拡大させた集団、またはその一部分は、がんを処置するために、異なる対象（例えば、免疫エフェクター細胞集団が得られたのと同じではない対象）に投与される。
【０７７８】
また、がんを有する対象を処置する方法であって、対象由来の試料において、１つまたは複数のＴＣＲβＶ分子のステータスを取得するステップと、１つまたは複数のＴＣＲβＶ分子が、対象由来の試料において、参照値と比較して高い、例えば、増加しているかどうかを判定するステップと、前記判定に応じて、対象に、有効量の抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、例として本明細書に記載されるアゴニスト抗ＴＣＲβＶ抗体分子を投与するステップとを含む、方法が、本明細書に開示される。
【０７７９】
本明細書に開示される方法または使用のための組成物のうちのいずれかの一部の実施形態では、対象は、Ｂ−ＣＬＬを有する。一部の実施形態では、Ｂ−ＣＬＬを有する対象は、１つまたは複数のＴＣＲβＶ分子、例えば、（ｉ）例えば、ＴＣＲβ  Ｖ６−４＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−４＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ６−９＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−８＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−６＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ６−６＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−２＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−３＊０１、もしくはＴＣＲβ  Ｖ６−１＊０１を含む、ＴＣＲβ  Ｖ６サブファミリー、（ｉｉ）ＴＣＲβ  Ｖ５−６＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ５−４＊０１、もしくはＴＣＲβ  Ｖ５−８＊０１を含む、ＴＣＲβ  Ｖ５サブファミリー、（ｉｉｉ）ＴＣＲβ  Ｖ３−１＊０１を含む、ＴＣＲβ  Ｖ３サブファミリー、（ｉｖ）ＴＣＲβ  Ｖ２＊０１を含む、ＴＣＲβ  Ｖ２サブファミリー、または（ｖ）ＴＣＲβ  Ｖ１９＊０１もしくはＴＣＲβ  Ｖ１９＊０２を含む、ＴＣＲβ  Ｖ１９サブファミリーを含む、１つまたは複数のＴＣＲβＶ分子のレベルまたは活性が、高い、例えば、増加している。
【０７８０】
一部の実施形態では、Ｂ−ＣＬＬを有する対象は、例えば、ＴＣＲβ  Ｖ６−４＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−４＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ６−９＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−８＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−６＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ６−６＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−２＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−３＊０１、またはＴＣＲβ  Ｖ６−１＊０１を含むＴＣＲβ  Ｖ６サブファミリーのレベルまたは活性が、高い、例えば、増加している。一部の実施形態では、対象に、ＴＣＲβ  Ｖ６サブファミリーの１つまたは複数のメンバーに結合する抗ＴＣＲβＶ分子（例えば、本明細書に記載されるアゴニスト抗ＴＣＲβＶ分子）が投与される。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ分子の投与は、ＴＣＲβ  Ｖ６サブファミリーの１つまたは複数のメンバーを発現する免疫細胞の拡大をもたらす。
【０７８１】
一部の実施形態では、Ｂ−ＣＬＬを有する対象は、ＴＣＲβ  Ｖ５−６＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ５−４＊０１、またはＴＣＲβ  Ｖ５−８＊０１を含むＴＣＲβ  Ｖ５サブファミリーのレベルまたは活性が、高い、例えば、増加している。一部の実施形態では、対象に、ＴＣＲβ  Ｖ５サブファミリーの１つまたは複数のメンバーに結合する抗ＴＣＲβＶ分子（例えば、本明細書に記載されるアゴニスト抗ＴＣＲβＶ分子）が投与される。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ分子の投与は、ＴＣＲβ  Ｖ５サブファミリーの１つまたは複数のメンバーを発現する免疫細胞の拡大をもたらす。
【０７８２】
一部の実施形態では、Ｂ−ＣＬＬを有する対象は、ＴＣＲβ  Ｖ３−１＊０１を含むＴＣＲβ  Ｖ３サブファミリーのレベルまたは活性が、高い、例えば、増加している。一部の実施形態では、対象に、ＴＣＲβ  Ｖ３サブファミリーの１つまたは複数のメンバーに結合する抗ＴＣＲβＶ分子（例えば、本明細書に記載されるアゴニスト抗ＴＣＲβＶ分子）が投与される。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ分子の投与は、ＴＣＲβ  Ｖ３サブファミリーの１つまたは複数のメンバーを発現する免疫細胞の拡大をもたらす。
【０７８３】
一部の実施形態では、Ｂ−ＣＬＬを有する対象は、ＴＣＲβ  Ｖ２＊０１を含むＴＣＲβ  Ｖ２サブファミリーのレベルまたは活性が、高い、例えば、増加している。一部の実施形態では、対象に、ＴＣＲβ  Ｖ２サブファミリーの１つまたは複数のメンバーに結合する抗ＴＣＲβＶ分子（例えば、本明細書に記載されるアゴニスト抗ＴＣＲβＶ分子）が投与される。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ分子の投与は、ＴＣＲβ  Ｖ２サブファミリーの１つまたは複数のメンバーを発現する免疫細胞の拡大をもたらす。
【０７８４】
一部の実施形態では、Ｂ−ＣＬＬを有する対象は、ＴＣＲβ  Ｖ１９＊０１またはＴＣＲβ  Ｖ１９＊０２を含むＴＣＲβ  Ｖ１９サブファミリーのレベルまたは活性が、高い、例えば、増加している。一部の実施形態では、対象に、ＴＣＲβ  Ｖ１９サブファミリーの１つまたは複数のメンバーに結合する抗ＴＣＲβＶ分子（例えば、本明細書に記載されるアゴニスト抗ＴＣＲＢＶ分子）が投与される。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ分子の投与は、ＴＣＲβ  Ｖ１９サブファミリーの１つまたは複数のメンバーを発現する免疫細胞の拡大をもたらす。
【０７８５】
本明細書に開示される方法または使用のための組成物のうちのいずれかの一部の実施形態では、対象は、黒色腫を有する。一部の実施形態では、黒色腫を有する対象は、１つまたは複数のＴＣＲβＶ分子、例えば、ＴＣＲβ  Ｖ６−４＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−４＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ６−９＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−８＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−５＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−６＊０２、ＴＣＲβ  Ｖ６−６＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−２＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ６−３＊０１、またはＴＣＲβ  Ｖ６−１＊０１を含む、ＴＣＲβ  Ｖ６サブファミリーを含む、１つまたは複数のＴＣＲβＶ分子のレベルまたは活性が、高い、例えば、増加している。一部の実施形態では、対象に、ＴＣＲβ  Ｖ６サブファミリーの１つまたは複数のメンバーに結合する抗ＴＣＲβＶ分子（例えば、本明細書に記載されるアゴニスト抗ＴＣＲβＶ分子）が投与される。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ分子の投与は、ＴＣＲβ  Ｖ６サブファミリーの１つまたは複数のメンバーを発現する免疫細胞の拡大をもたらす。
【０７８６】
本明細書に開示される方法または使用のための組成物のうちのいずれかの一部の実施形態では、対象は、ＤＬＢＣＬを有する。一部の実施形態では、黒色腫を有する対象は、１つまたは複数のＴＣＲβＶ分子、例えば、（ｉ）ＴＣＲβ  Ｖ１３＊０１を含む、ＴＣＲβ  Ｖ１３サブファミリー、（ｉｉ）ＴＣＲβ  Ｖ３−１＊０１を含む、ＴＣＲβ  Ｖ３サブファミリー、または（ｉｉｉ）ＴＣＲβ  Ｖ２３サブファミリーを含む、１つまたは複数のＴＣＲβＶ分子のレベルまたは活性が、高い、例えば、増加している。
【０７８７】
一部の実施形態では、ＤＬＢＣＬを有する対象は、高い、例えば、増加した、ＴＣＲβ  Ｖ１３＊０１を含むＴＣＲβ  Ｖ１３サブファミリーのレベルまたは活性を有する。一部の実施形態では、対象に、ＴＣＲβ  Ｖ１３サブファミリーの１つまたは複数のメンバーに結合する抗ＴＣＲβＶ分子（例えば、本明細書に記載されるアゴニスト抗ＴＣＲβＶ分子）が投与される。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ分子の投与は、ＴＣＲβ  Ｖ１３サブファミリーの１つまたは複数のメンバーを発現する免疫細胞の拡大をもたらす。
【０７８８】
一部の実施形態では、ＤＬＢＣＬを有する対象は、ＴＣＲβ  Ｖ３−１＊０１を含むＴＣＲβ  Ｖ３サブファミリーのレベルまたは活性が、高い、例えば、増加している。一部の実施形態では、対象に、ＴＣＲβ  Ｖ３サブファミリーの１つまたは複数のメンバーに結合する抗ＴＣＲβＶ分子（例えば、本明細書に記載されるアゴニスト抗ＴＣＲβＶ分子）が投与される。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ分子の投与は、ＴＣＲβ  Ｖ３サブファミリーの１つまたは複数のメンバーを発現する免疫細胞の拡大をもたらす。
【０７８９】
一部の実施形態では、ＤＬＢＣＬを有する対象は、ＴＣＲβ  Ｖ２３サブファミリーのレベルまたは活性が、高い、例えば、増加している。一部の実施形態では、対象に、ＴＣＲβ  Ｖ２３サブファミリーの１つまたは複数のメンバーに結合する抗ＴＣＲβＶ分子（例えば、本明細書に記載されるアゴニスト抗ＴＣＲβＶ分子）が投与される。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ分子の投与は、ＴＣＲβ  Ｖ２３サブファミリーの１つまたは複数のメンバーを発現する免疫細胞の拡大をもたらす。
【０７９０】
本明細書に開示される方法または使用のための組成物のうちのいずれかの一部の実施形態では、対象は、ＣＲＣを有する。一部の実施形態では、黒色腫を有する対象は、１つまたは複数のＴＣＲβＶ分子、例えば、（ｉ）ＴＣＲβ  Ｖ１９＊０１もしくはＴＣＲβ  Ｖ１９＊０２を含む、ＴＣＲβ  Ｖ１９サブファミリー、（ｉｉ）ＴＣＲβ  Ｖ１２−４＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ１２−３＊０１、もしくはＴＣＲβ  Ｖ１２−５＊０１を含む、ＴＣＲβ  Ｖ１２サブファミリー、（ｉｉｉ）ＴＣＲβ  Ｖ１６＊０１を含む、ＴＣＲβ  Ｖ１６サブファミリー、または（ｉｖ）ＴＣＲβ  Ｖ２１サブファミリーを含む、１つまたは複数のＴＣＲβＶ分子のレベルまたは活性が、高い、例えば、増加している。
【０７９１】
一部の実施形態では、ＣＲＣを有する対象は、ＴＣＲβ  Ｖ１９＊０１またはＴＣＲβ  Ｖ１９＊０２を含むＴＣＲβ  Ｖ１９サブファミリーのレベルまたは活性が、高い、例えば、増加している。一部の実施形態では、対象に、ＴＣＲβ  Ｖ１９サブファミリーの１つまたは複数のメンバーに結合する抗ＴＣＲβＶ分子（例えば、本明細書に記載されるアゴニスト抗ＴＣＲβＶ分子）が投与される。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ分子の投与は、ＴＣＲβ  Ｖ１９サブファミリーの１つまたは複数のメンバーを発現する免疫細胞の拡大をもたらす。
【０７９２】
一部の実施形態では、ＣＲＣを有する対象は、ＴＣＲβ  Ｖ１２−４＊０１、ＴＣＲβ  Ｖ１２−３＊０１、またはＴＣＲβ  Ｖ１２−５＊０１を含むＴＣＲβ  Ｖ１２サブファミリーのレベルまたは活性が、高い、例えば、増加している。一部の実施形態では、対象に、ＴＣＲβ  Ｖ１２サブファミリーの１つまたは複数のメンバーに結合する抗ＴＣＲβＶ分子（例えば、本明細書に記載されるアゴニスト抗ＴＣＲβＶ分子）が投与される。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ分子の投与は、ＴＣＲβ  Ｖ１２サブファミリーの１つまたは複数のメンバーを発現する免疫細胞の拡大をもたらす。
【０７９３】
一部の実施形態では、ＣＲＣを有する対象は、ＴＣＲβ  Ｖ１６＊０１を含むＴＣＲβ  Ｖ１６サブファミリーのレベルまたは活性が、高い、例えば、増加している。一部の実施形態では、対象に、ＴＣＲβ  Ｖ１６サブファミリーの１つまたは複数のメンバーに結合する抗ＴＣＲβＶ分子（例えば、本明細書に記載されるアゴニスト抗ＴＣＲβＶ分子）が投与される。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ分子の投与は、ＴＣＲβ  Ｖ１６サブファミリーの１つまたは複数のメンバーを発現する免疫細胞の拡大をもたらす。
【０７９４】
一部の実施形態では、ＣＲＣを有する対象は、ＴＣＲβ  Ｖ２１サブファミリーのレベルまたは活性が、高い、例えば、増加している。一部の実施形態では、対象に、ＴＣＲβ  Ｖ２１サブファミリーの１つまたは複数のメンバーに結合する抗ＴＣＲβＶ分子（例えば、本明細書に記載されるアゴニスト抗ＴＣＲβＶ分子）が投与される。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ分子の投与は、ＴＣＲβ  Ｖ２１サブファミリーの１つまたは複数のメンバーを発現する免疫細胞の拡大をもたらす。
【０７９５】
一部の実施形態では、１つまたは複数のＴＣＲβＶ分子のステータス、例えば、存在、レベル、および／または活性の値を取得するステップは、試料のＴ細胞受容体（ＴＣＲ）レパートリーの尺度を取得することを含む。一部の実施形態では、値は、試料におけるＴ細胞集団のクローン型の尺度を含む。
【０７９６】
一部の実施形態では、１つまたは複数のＴＣＲβＶ分子のステータスの値は、Ｗａｎｇ  ＣＹ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｉｎｔ  Ｊ  Ｏｎｃｏｌ．  （２０１６）  ４８（６）：２２４７−５６に記載されるアッセイを使用して得られ、例えば、測定され、そのすべての内容は、参照により本明細書に組み込まれる。
【０７９７】
一部の実施形態では、１つまたは複数のＴＣＲβＶ分子のステータスの値は、フローサイトメトリーを使用して得られる、例えば、測定される。
併用療法
本明細書に開示されている抗ＴＣＲβＶ抗体分子、多特異性または多機能性分子は、第２の治療剤または手法と併用して使用することができる。
【０７９８】
実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、多特異性または多機能性分子、および第２の治療剤または手法は、対象ががんと診断された後、例えば、がんが対象から除去される前に、投与される／行われる。実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、多特異性または多機能性分子、および第２の治療剤または手法は、同時にまたは並行して投与される／行われる。例えば、１つの処置の送達は、第２の送達を開始する場合、例えば、処置の投与に重複がある場合、なおも生じている。他の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、多特異性または多機能性分子、および第２の治療剤または手法は、連続的に投与される／行われる。例えば、一方の処置の送達は、他方の処置の送達が開始する前に停止する。
【０７９９】
実施形態では、併用療法は、いずれかの薬剤単独による単独療法よりも、より効果的な処置をもたらすことができる。実施形態では、第１および第２の処置の併用は、第１または第２の処置単独よりも有効である（例えば、症状および／またはがん細胞のより大きな減少をもたらす）。実施形態では、併用療法は、単独療法として投与された場合に類似の効果を達成するために通常必要とされる第１または第２の処置の用量と比較して、第１または第２の処置のより低い用量の使用を可能にする。実施形態では、併用療法は、部分的な相加効果、完全な相加効果、または相加効果より大きい効果を有する。
【０８００】
一実施形態では、抗ＴＣＲＢＶ抗体、多特異性または多機能性分子は、療法、例えば、がん療法（例えば、抗がん剤、免疫療法、光線力学的療法（ＰＤＴ）、外科手術および／または放射線の１つまたは複数）と併用して投与される。用語「化学療法薬」、「化学療法剤」、および「抗がん剤」は、本明細書において互換的に使用される。多特異性または多機能性分子の投与および療法、例えば、がん療法は、連続的（重複を伴うまたは伴わない）であるかまたは同時であり得る。抗ＴＣＲＢＶ抗体、多特異性または多機能性分子の投与は、療法（例えば、がん療法）の経過中、連続的または断続的であり得る。本明細書に記載される特定の療法は、がんおよび非がん性疾患を処置するために使用することができる。例えば、ＰＤＴの有効性は、本明細書に記載された方法および組成物を用いて、がん性および非がん性状態（例えば、結核）において増強され得る（例えば、Ａｇｏｓｔｉｎｉｓ，Ｐ．ら（２０１１年）ＣＡ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｊ．Ｃｌｉｎ．６１巻：２５０〜２８１ページに概説される）。
抗がん療法
他の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、多特異性または多機能性分子は、低分子量または小分子量の化学療法剤と併用して投与される。例示的な低分子量または小分子量の化学療法剤には、限定されないが、１３−シス−レチノイン酸（イソトレチノイン、ＡＣＣＵＴＡＮＥ（登録商標））、２−ＣｄＡ（２−クロロデオキシアデノシン、クラドリビン、ＬＥＵＳＴＡＴＩＮ（商標））、５−アザシチジン（アザシチジン、ＶＩＤＡＺＡ（登録商標））、５−フルオロウラシル（５−ＦＵ、フルオロウラシル、ＡＤＲＵＣＩＬ（登録商標））、６−メルカプトプリン（６−ＭＰ、メルカプトプリン、ＰＵＲＩＮＥＴＨＯＬ（登録商標））、６−ＴＧ（６−チオグアニン、チオグアニン、ＴＨＩＯＧＵＡＮＩＮＥ  ＴＡＢＬＯＩＤ（登録商標））、アブラキサン（パクリタキセルタンパク質−結合）、アクチノマイシン−Ｄ（ダクチノマイシン、ＣＯＳＭＥＧＥＮ（登録商標））、アリトレチノイン（ＰＡＮＲＥＴＩＮ（登録商標））、オールトランスレチノイン酸（ＡＴＲＡ、トレチノイン、ＶＥＳＡＮＯＩＤ（登録商標））、アルトレタミン（ヘキサメチルメラミン、ＨＭＭ、ＨＥＸＡＬＥＮ（登録商標））、アメトプテリン（メトトレキサート、メトトレキサートナトリウム、ＭＴＸ、ＴＲＥＸＡＬＬ（商標）、ＲＨＥＵＭＡＴＲＥＸ（登録商標））、アミフォスチン（ＥＴＨＹＯＬ（登録商標））、アラビノシルシトシン（Ａｒａ−Ｃ、シタラビン、ＣＹＴＯＳＡＲ−Ｕ（登録商標））、三酸化ヒ素（ＴＲＩＳＥＮＯＸ（登録商標））、アスパラギナーゼ（エルウィニアＬ−アスパラギナーゼ、Ｌ−アスパラギナーゼ、ＥＬＳＰＡＲ（登録商標）、ＫＩＤＲＯＬＡＳＥ（登録商標））、ＢＣＮＵ（カルムスチン、ＢｉＣＮＵ（登録商標））、ベンダムスチン（ＴＲＥＡＮＤＡ（登録商標））、ベキサロテン（ＴＡＲＧＲＥＴＩＮ（登録商標））、ブレオマイシン（ＢＬＥＮＯＸＡＮＥ（登録商標））、ブスルファン（ＢＵＳＵＬＦＥＸ）（登録商標）、ＭＹＬＥＲＡＮ（登録商標））、カルシウムロイコボリン（シトロボラムファクター、フォリン酸、ロイコボリン）、カンプトテシン−１１（ＣＰＴ−１１、イリノテカン、ＣＡＭＰＴＯＳＡＲ（登録商標））、カペシタビン（ＸＥＬＯＤＡ（登録商標））、カルボプラチン（ＰＡＲＡＰＬＡＴＩＮ（登録商標））、カルムスチンウエハー（カルムスチンインプラントを有するプロリフェプロスパン２０、ＧＬＩＡＤＥＬ（登録商標）ウエハー）、ＣＣＩ−７７９（テムシロリムス、ＴＯＲＩＳＥＬ（登録商標））、ＣＣＮＵ（ロムスチン、ＣｅｅＮＵ）、ＣＤＤＰ（シスプラチン、ＰＬＡＴＩＮＯＬ（登録商標）、ＰＬＡＴＩＮＯＬ−ＡＱ（登録商標））、クロラムブシル（ロイケラン）、シクロホスファミド（ＣＹＴＯＸＡＮ（登録商標）、ＮＥＯＳＡＲ（登録商標））、ダカルバジン（ＤＩＣ、ＤＴＩＣ、イミダゾールカルボキサミド、ＤＴＩＣ−ＤＯＭＥ（登録商標））、ダウノマイシン（ダウノルビシン、ダウノルビシン塩酸塩、ルビドマイシンハイドロクロライド、ＣＥＲＵＢＩＤＩＮＥ（登録商標））、デシタビン（ＤＡＣＯＧＥＮ（登録商標））、デキサゾキサン（ＺＩＮＥＣＡＲＤ（登録商標））、ＤＨＡＤ（ミトキサントロン、ＮＯＶＡＮＴＲＯＮＥ��登録商標））、ドセタキセル（ＴＡＸＯＴＥＲＥ（登録商標））、ドキソルビシン（ＡＤＲＩＡＭＹＣＩＮ（登録商標）、ＲＵＢＥＸ（登録商標））、エピルビシン（ＥＬＬＥＮＣＥ（商標））、エストラムスチン（ＥＭＣＹＴ（登録商標））、エトポシド（ＶＰ−１６、リン酸エトポシド、ＴＯＰＯＳＡＲ（登録商標）、ＶＥＰＥＳＩＤ（登録商標）、ＥＴＯＰＯＰＨＯＳ（登録商標））、フロクスウリジン（ＦＵＤＲ（登録商標））、フルダラビン（ＦＬＵＤＡＲＡ（登録商標））、フルオロウラシル（クリーム）（ＣＡＲＡＣ（商標）、ＥＦＵＤＥＸ（登録商標）、ＦＬＵＯＲＯＰＬＥＸ（登録商標））、ゲムシタビン（ＧＥＭＺＡＲ（登録商標））、ヒドロキシ尿素（ＨＹＤＲＥＡ（登録商標）、ＤＲＯＸＩＡ（商標）、ＭＹＬＯＣＥＬ（商標））、イダルビシン（ＩＤＡＭＹＣＩＮ（登録商標））、イフォスファミド（ＩＦＥＸ（登録商標））、イキサベピロン（ＩＸＥＭＰＲＡ（商標））、ＬＣＲ（ロイロクリスチン、ビンクリスチン、ＶＣＲ、ＯＮＣＯＶＩＮ（登録商標）、ＶＩＮＣＡＳＡＲ  ＰＦＳ（登録商標））、Ｌ−ＰＡＭ（Ｌ−サルコリシン、メルファラン、フェニルアラニンマスタード、ＡＬＫＥＲＡＮ（登録商標））、メクロレタミン（塩酸メクロレタミン、ムスチン、ナイトロジェンマスタード、ＭＵＳＴＡＲＧＥＮ（登録商標））、メスナ（ＭＥＳＮＥＸ（商標））、マイトマイシン（マイトマイシン−Ｃ、ＭＴＣ、ＭＵＴＡＭＹＣＩＮ（登録商標））、ネララビン（ＡＲＲＡＮＯＮ（登録商標））、オキサリプラチン（ＥＬＯＸＡＴＩＮ（商標））、パクリタキセル（ＴＡＸＯＬ（登録商標）、ＯＮＸＡＬ（商標））、ペガスパルガーゼ（ＰＥＧ−Ｌ−アスパラギナーゼ、ＯＮＣＯＳＰＡＲ（登録商標））、ＰＥＭＥＴＲＥＸＥＤ（ＡＬＩＭＴＡ（登録商標））、ペントスタチン（ＮＩＰＥＮＴ（登録商標））、プロカルバジン（ＭＡＴＵＬＡＮＥ（登録商標））、ストレプトゾシン（ＺＡＮＯＳＡＲ（登録商標））、テモゾロミド（ＴＥＭＯＤＡＲ（登録商標））、テニポシド（ＶＭ−２６、ＶＵＭＯＮ（登録商標））、ＴＥＳＰＡ（チオホスホアミド、チオテパ、ＴＳＰＡ、ＴＨＩＯＰＬＥＸ（登録商標））、トポテカン（ＨＹＣＡＭＴＩＮ（登録商標））、ビンブラスチン（硫酸ビンブラスチン、ビンカロイコブラスチン、ＶＬＢ、ＡＬＫＡＢＡＮ−ＡＱ（登録商標）、ＶＥＬＢＡＮ（登録商標））、ビノレルビン（酒石酸ビノレルビン、ＮＡＶＥＬＢＩＮＥ（登録商標））、およびボリノスタット（ＺＯＬＩＮＺＡ（登録商標））が含まれる。
【０８０１】
別の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、多特異性または多機能性分子は、生物製剤と併用して投与される。がんの処置に有用な生物製剤は、当該技術分野において公知であり、本発明の結合分子は、例えば、このような公知の生物製剤と組み合わせて投与することができる。例えば、ＦＤＡは、乳がんの処置のために次の生物製剤を承認している：ＨＥＲＣＥＰＴＩＮ（登録商標）（トラスツズマブ、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ  Ｉｎｃ．、Ｓｏｕｔｈ  Ｓａｎ  Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ、Ｃａｌｉｆ．；ＨＥＲ２陽性乳がんで抗腫瘍活性化を有するヒト化モノクローナル抗体）；ＦＡＳＬＯＤＥＸ（登録商標）（フルベストラント、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ、ＬＰ、Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ、Ｄｅｌ．；乳がんの処置に使用されるエストロゲン受容体拮抗薬）；ＡＲＩＭＩＤＥＸ（登録商標）（アナストロゾール、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ、ＬＰ；エストロゲンの作製に必要な酵素であるアロマターゼを遮断する非ステロイド性アロマターゼ阻害剤）；アロマシン（登録商標）（エキセメスタン、Ｐｆｉｚｅｒ  Ｉｎｃ．、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、Ｎ．Ｙ．；乳がんの処置に使用される不可逆的なステロイド性アロマターゼ不活性化剤）；ＦＥＭＡＲＡ（登録商標）（レトロゾール、Ｎｏｖａｒｔｉｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ、Ｅａｓｔ  Ｈａｎｏｖｅｒ、Ｎ．Ｊ．；ＦＤＡにより乳がんを処置するために承認された非ステロイドアロマターゼ阻害剤）；およびＮＯＬＶＡＤＥＸ（登録商標）（タモキシフェン、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ、ＬＰ；ＦＤＡにより乳がんを処置するために承認された非ステロイド性抗エストロゲン剤）。本発明の結合分子と組み合わせることができる他の生物製剤には、以下が含まれる：アバスチン（登録商標）（ベバシズマブ、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ  Ｉｎｃ．；血管新生を阻害するように設計された最初のＦＤＡ承認療法）；およびＺＥＶＡＬＩＮ（登録商標）（イブリツモマブチウキセタン、Ｂｉｏｇｅｎ  Ｉｄｅｃ、Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ、Ｍａｓｓ；Ｂ細胞リンパ腫の処置のために現在承認されている放射性標識モノクローナル抗体）。
【０８０２】
さらに、ＦＤＡは、結腸直腸がんの処置のために以下の生物製剤を承認した：アバスチン（登録商標）；ＥＲＢＩＴＵＸ（登録商標）（セツキシマブ、ＩｍＣｌｏｎｅ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  Ｉｎｃ．、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、Ｎ．Ｙ．、およびＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、Ｎ．Ｙ．；上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）に対して指向されるモノクローナル抗体）；ＧＬＥＥＶＥＣ（登録商標）（メシル酸イマチニブ；プロテインキナーゼ阻害剤）；ＥＲＧＡＭＩＳＯＬ（登録商標）（レバミゾール塩酸塩、Ｊａｎｓｓｅｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ、ＬＰ、Ｔｉｔｕｓｖｉｌｌｅ、Ｎ．Ｊ．；デュークスのステージＣ結腸がんを有する患者の外科的切除後に５−フルオロウラシルと併用するアジュバント療法として１９９０年にＦＤＡにより承認された免疫調節薬）。
【０８０３】
肺がんの処置のために、例示的な生物製剤には、ＴＡＲＣＥＢＡ（登録商標）（エルロチニブＨＣＬ、ＯＳＩ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ  Ｉｎｃ．、Ｍｅｌｖｉｌｌｅ、Ｎ．Ｙ．；ヒト上皮成長因子受容体１（ＨＥＲ１）経路を標的とするように設計された小分子）が含まれる。
【０８０４】
多発性骨髄腫の処置のために、例示的な生物製剤には、ＶＥＬＣＡＤＥ（登録商標）ベルケイド（ボルテゾミブ、Ｍｉｌｌｅｎｎｉｕｍ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ、Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ  Ｍａｓｓ．、プロテアソーム阻害剤）が含まれる。追加の生物製剤には、ＴＨＡＬＩＤＯＭＩＤ（登録商標）（サリドマイド、Ｃｌｅｇｅｎｅ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、Ｗａｒｒｅｎ、Ｎ．Ｊ．；免疫調節剤であり、骨髄腫細胞の成長と生存を阻害する能力、および抗血管新生を含む複数の作用があるようである）が含まれる。
【０８０５】
追加の例示的ながん療法用抗体には、限定されないが、３Ｆ８、アバゴボマブ、アデカツマブ、アフツズマブ、アラシズマブペゴル、アレムツズマブ（ＣＡＭＰＡＴＨ（登録商標）、ＭＡＢＣＡＭＰＡＴＨ（登録商標））、アルツモマブペンテテート（ＨＹＢＲＩ−ＣＥＡＫＥＲ（登録商標））、アナツモマブマフェナトックス、アンルキンズマブ（ＩＭＡ−６３８）、アポリズマブ、アルシツモマブ（ＣＥＡ−ＳＣＡＮ（登録商標））、バビツキシマブ、ベクツモマブ（ＬＹＭＰＨＯＳＣＡＮ（登録商標））、ベリムマブ（ＢＥＮＬＹＳＴＡ（登録商標）、ＬＹＭＰＨＯＳＴＡＴ−Ｂ（登録商標））、ベシレソマブ（ＳＣＩＮＴＩＭＵＮ（登録商標））、ベバシズマブ（ＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標））、ビバツズマブマータンシン、ブリナツモマブ、ブレンツキシマブベドチン、カンツズマブメルタンシン、カプロマブペンデチド（ＰＲＯＳＴＡＳＣＩＮＴ（登録商標））、カツマキソマブ（ＲＥＭＯＶＡＢ（登録商標））、ＣＣ４９、セツキシマブ（Ｃ２２５、ＥＲＢＩＴＵＸ（登録商標））、シタツズマブボガトックス、シクスツムマブ、クリバツズマブテトラキセタン、コナツムマブ、デセツズマブ、デノスマブ（ＰＲＯＬＩＡ（登録商標））、デツモマブ、エクロメキシマブ、エドレコロマブ（ＰＡＮＯＲＥＸ（登録商標））、エロツズマブ、エピツモマブシツキセタン、エプラツズマブ、エルツマキソマブ（ＲＥＸＯＭＵＮ（登録商標））、エタラシズマブ、ファルレツズマブ、フィギツムマブ、フレソリムマブ、ガリキシマブ、ゲムツズマブオゾガミシン（ＭＹＬＯＴＡＲＧ（登録商標））、ギレンツキシマブ、グレンバツムマブベドチン、イブリツモマブ（イブリツモマブチウキセタン、ＺＥＶＡＬＩＮ（登録商標））、イゴボマブ（ＩＮＤＩＭＡＣＩＳ−１２５（登録商標））、インテツムマブ、イノツズマブオゾガマイシン、イピリムマブ、イラツムマブ、ラベツズマブ（ＣＥＡ−ＣＩＤＥ（登録商標））、レキサツムマブ、リンツズマブ、ルカツムマブ、ルミリキシマブ、マパツムマブ、マツズマブ、ミラツズマブ、ミンレツモマブ、ミツモマブ、ナコロマブタフェナトックス、ナプツモマブエスタフェナトックス、ネシツムマブ、ニモツズマブ（ＴＨＥＲＡＣＩＭ（登録商標）、ＴＨＥＲＡＬＯＣ（登録商標））、ノフェツモマブメルペンタン（ＶＥＲＬＵＭＡ（登録商標））、オファツムマブ（ＡＲＺＥＲＲＡ（登録商標））、オララツマブ、オポルツズマブモナトックス、オレゴボマブ（ＯＶＡＲＥＸ（登録商標））、パニツムマブ（ＶＥＣＴＩＢＩＸ（登録商標））、ペムツモマブ（ＴＨＥＲＡＧＹＮ（登録商標））、パーツズマブ（ＯＭＮＩＴＡＲＧ（登録商標））、ピンツモマブ、プリツムマブ、ラムシルマブ、ラニビズマブ（ＬＵＣＥＮＴＩＳ（登録商標））、リロツムマブ、リツキシマブ（ＭＡＢＴＨＥＲＡ（登録商標）、ＲＩＴＵＸＡＮ（登録商標））、ロバツムマブ、サツモマブペンデチド、シブロツズマブ、シルツキシマブ、ソンツズマブ、タカツズマブテトラキセタン（ＡＦＰ−ＣＩＤＥ（登録商標））、タプリツモマブパプトックス、テナツモマブ、ＴＧＮ１４１２、チシリムマブ（トレメリムマブ）、チガツズマブ、ＴＮＸ−６５０、トシツモマブ（ＢＥＸＸＡＲ（登録商標））、トラスツズマブ（ＨＥＲＣＥＰＴＩＮ（登録商標））、トレメリムマブ、ツコツズマブセルモロイキン、ベルツズマブ、ボロシキシマブ、ボツムマブ（ＨＵＭＡＳＰＥＣＴ（登録商標））、ザルツムマブ（ＨＵＭＡＸ−ＥＧＦＲ（登録商標））、およびザノリムマブ（ＨＵＭＡＸ−ＣＤ４（登録商標））が含まれる。
【０８０６】
他の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、多特異性または多機能性分子は、ウイルスがん治療剤と併用して投与される。例示的なウイルスがん治療剤には、限定されないが、ワクシニアウイルス（ｖｖＤＤ−ＣＤＳＲ）、がん胎児性抗原発現麻疹ウイルス、組換えワクシニアウイルス（ＴＫ−欠失＋ＧＭ−ＣＳＦ）、セネカバレーウイルス−００１、ニューカッスルウイルス、コクサッキーウイルスＡ２１、ＧＬ−ＯＮＣ１、ＥＢＮＡ１  Ｃ末端／ＬＭＰ２キメラタンパク質発現組換え修飾ワクシニアアンカラワクチン、がん胎児性抗原発現麻疹ウイルス、Ｇ２０７腫瘍溶解性ウイルス、ｐ５３を発現する修飾ワクシニアウイルスアンカラワクチン、ＯｎｃｏＶＥＸ  ＧＭ−ＣＳＦ修飾ヘルペスシンプレックス１ウイルス、鶏痘ウイルスワクチンベクター、組換えワクシニア前立腺特異抗原ワクチン、ヒトパピローマウイルス１６／１８  Ｌ１ウイルス様粒子／ＡＳ０４ワクチン、ＭＶＡ−ＥＢＮＡ１／ＬＭＰ２  Ｉｎｊ．ワクチン、４価ＨＰＶワクチン、４価ヒトパピローマウイルス（タイプ６、１１、１６、１８）組換えワクチン（ＧＡＲＤＡＳＩＬ（登録商標））、組換え鶏痘−ＣＥＡ（６Ｄ）／ＴＲＩＣＯＭワクチン；組換えワクシニア−ＣＥＡ（６Ｄ）−ＴＲＩＣＯＭワクチン、組換え修飾ワクシニアＡｎｋａｒａ−５Ｔ４ワクチン、組換え鶏痘−ＴＲＩＣＯＭワクチン、腫瘍崩壊性ヘルペスウイルスＮＶ１０２０、ＨＰＶ  Ｌ１  ＶＬＰワクチンＶ５０４、ヒトパピローマウイルス二価（タイプ１６および１８）ワクチン（ＣＥＲＶＡＲＩＸ（登録商標））、単純ヘルペスウイルスＨＦ１０、Ａｄ５ＣＭＶ−ｐ５３遺伝子、組換えワクシニアＤＦ３／ＭＵＣ１ワクチン、組換えワクシニア−ＭＵＣ−１ワクチン、組換えワクシニア−ＴＲＩＣＯＭワクチン、ＡＬＶＡＣ  ＭＡＲＴ−１ワクチン、ヒトプレプロエンケファリン（ＮＰ２）を発現する複製欠損単純ヘルペスウイルスＩ型（ＨＳＶ−１）ベクター、野生型レオウイルス、レオウイルスタイプ３ディアリング（ＲＥＯＬＹＳＩＮ（登録商標））、腫瘍溶解性ウイルスＨＳＶ１７１６、エプスタイン・バーウイルス標的抗原をコードする組換え改変ワクシニアアンカラ（ＭＶＡ）ベースのワクチン、組換え鶏痘前立腺特異抗原ワクチン、組換えワクシニア前立腺特異抗原ワクチン、組換えワクシニア−Ｂ７．１ワクチン、ｒＡｄ−ｐ５３遺伝子、Ａｄ５−ｄｅｌｔａ２４ＲＧＤ、ＨＰＶワクチン５８０２９９、ＪＸ−５９４（チミジンキナーゼ欠失ワクシニアウイルス＋ＧＭ−ＣＳＦ）、ＨＰＶ−１６／１８  Ｌ１／ＡＳ０４、鶏痘ウイルスワクチンベクター、ワクシニアチロシナーゼワクチン、ＭＥＤＩ−５１７  ＨＰＶ−１６／１８  ＶＬＰ  ＡＳ０４ワクチン、単純ヘルペスウイルスＴＫ９９ＵＮのチミジンキナーゼを含むアデノウイルスベクター、ＨｓｐＥ７、ＦＰ２５３／フルダラビン、ＡＬＶＡＣ（２）黒色腫多抗原治療ワクチン、ＡＬＶＡＣ−ｈＢ７．１、カナリア痘−ｈＩＬ−１２黒色腫ワクチン、Ａｄ−ＲＥＩＣ／Ｄｋｋ−３、ｒＡｄ−ＩＦＮ  ＳＣＨ  ７２１０１５、ＴＩＬ−Ａｄ−ＩＮＦｇ、Ａｄ−ＩＳＦ３５、およびコクサッキーウイルスＡ２１（ＣＶＡ２１、ＣＡＶＡＴＡＫ（登録商標））が含まれる。
【０８０７】
他の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、多特異性または多機能性分子は、ナノ医薬品と併用して投与される。例示的ながんナノ医薬品には、限定されないが、ＡＢＲＡＸＡＮＥ（登録商標）（パクリタキセル結合アルブミンナノ粒子）、ＣＲＬＸ１０１（直鎖シクロデキストリンベースのポリマーにコンジュゲートしたＣＰＴ）、ＣＲＬＸ２８８（ドセタキセルを生分解性ポリマーポリ（乳酸−ｃｏ−グリコール酸）にコンジュゲートしている）、シタラビンリポソーム（リポソームＡｒａ−Ｃ、ＤＥＰＯＣＹＴ（商標））、ダウノルビシンリポソーム（ＤＡＵＮＯＸＯＭＥ（登録商標））、ドキソルビシンリポソーム（ＤＯＸＩＬ（登録商標）、ＣＡＥＬＹＸ（登録商標））、カプセル化ダウノルビシンクエン酸リポソーム（ＤＡＵＮＯＸＯＭＥ（登録商標））、およびＰＥＧ抗ＶＥＧＦアプタマー（ＭＡＣＵＧＥＮ（登録商標））が含まれる。
【０８０８】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、多特異性または多機能性分子は、パクリタキセルまたはパクリタキセル製剤、例えば、ＴＡＸＯＬ（登録商標）、タンパク質結合パクリタキセル（例えば、ＡＢＲＡＸＡＮＥ（登録商標））と併用して投与される。例示的なパクリタキセル製剤には、限定されないが、ナノ粒子アルブミン結合パクリタキセル（ＡＢＲＡＸＡＮＥ（登録商標）、Ａｂｒａｘｉｓ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅにより販売される）、ドコサヘキサエン酸結合パクリタキセル（ＤＨＡ−パクリタキセル、タキソプレキシン、Ｐｒｏｔａｒｇａにより販売される）、ポリグルタミン酸結合パクリタキセル（ＰＧ−パクリタキセル、パクリタキセル・ポリグルメックス、ＣＴ−２１０３、ＸＹＯＴＡＸ、Ｃｅｌｌ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃにより販売される）、腫瘍活性化プロドラッグ（ＴＡＰ）、ＡＮＧ１０５（Ａｎｇｉｏｐｅｐ−２はパクリタキセルの３つの分子に結合し、ＩｍｍｕｎｏＧｅｎにより販売される）、パクリタキセル−ＥＣ−１（パクリタキセルはｅｒｂＢ２認識ペプチドＥＣ−１に結合する；Ｌｉら、Ｂｉｏｐｏｌｙｍｅｒｓ（２００７年）８７巻：２２５〜２３０ページを参照）、およびグルコースをコンジュゲートしたパクリタキセル（例えば、２’−パクリタキセルメチル２−グルコピラノシルスクシナート、Ｌｉｕら、Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ  ＆  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｌｅｔｔｅｒｓ（２００７年）１７巻：６１７〜６２０ページを参照）が含まれる。
【０８０９】
がんを処置するための例示的なＲＮＡｉおよびアンチセンスＲＮＡ剤には、限定されないが、ＣＡＬＡＡ−０１、ｓｉＧ１２Ｄ  ＬＯＤＥＲ（Ｌｏｃａｌ  Ｄｒｕｇ  ＥｌｕｔｅＲ）、およびＡＬＮ−ＶＳＰ０２が含まれる。
【０８１０】
他のがん治療剤には、限定されないが、サイトカイン（例えば、アルデスロイキン（ＩＬ−２、インターロイキン−２、ＰＲＯＬＥＵＫＩＮ（登録商標））、アルファインターフェロン（ＩＦＮ−アルファ、インターフェロンアルファ、ＩＮＴＲＯＮ（登録商標）Ａ（インターフェロンアルファ−２ｂ）、ＲＯＦＥＲＯＮ−Ａ（登録商標）（インターフェロンアルファ−２ａ））、エポエチンアルファ（ＰＲＯＣＲＩＴ（登録商標））、フィルグラスチム（Ｇ−ＣＳＦ、顆粒球−コロニー刺激因子、ＮＥＵＰＯＧＥＮ（登録商標））、ＧＭ−ＣＳＦ（顆粒球マクロファージコロニー刺激因子、サルグラモスチム、ＬＥＵＫＩＮＥ（商標））、ＩＬ−１１（インターロイキン−１１、オプレルベキン、ＮＥＵＭＥＧＡ（登録商標））、インターフェロンアルファ−２ｂ（ＰＥＧコンジュゲート）（ＰＥＧインターフェロン、ＰＥＧ−ＩＮＴＲＯＮ（商標））、およびペグフィルグラスチム（ＮＥＵＬＡＳＴＡ（商標）））、ホルモン療法剤（例えば、アミノグルテチミド（ＣＹＴＡＤＲＥＮ（登録商標））、アナストロゾール（ＡＲＩＭＩＤＥＸ（登録商標））、ビカルタミド（ＣＡＳＯＤＥＸ（登録商標））、エキセメスタン（ＡＲＯＭＡＳＩＮ（登録商標））、フルオキシメステロン（ＨＡＬＯＴＥＳＴＩＮ（登録商標））、フルタミド（ＥＵＬＥＸＩＮ（登録商標））、フルベストラント（ＦＡＳＬＯＤＥＸ（登録商標））、ゴセレリン（ＺＯＬＡＤＥＸ（登録商標））、レトロゾール（ＦＥＭＡＲＡ（登録商標））、リュープロリド（ＥＬＩＧＡＲＤ（商標）、ＬＵＰＲＯＮ（登録商標）、ＬＵＰＲＯＮ  ＤＥＰＯＴ（登録商標）、ＶＩＡＤＵＲ（商標））、メゲストロール（酢酸メゲストロール、ＭＥＧＡＣＥ（登録商標））、ニルタミド（ＡＮＡＮＤＲＯＮ（登録商標）、ＮＩＬＡＮＤＲＯＮ（登録商標））、オクトレオチド（酢酸オクトレオチド、ＳＡＮＤＯＳＴＡＴＩＮ（登録商標）、ＳＡＮＤＯＳＴＡＴＩＮ  ＬＡＲ（登録商標））、ラロキシフェン（ＥＶＩＳＴＡ（登録商標））、ロミプロスチム（ＮＰＬＡＴＥ（登録商標））、タモキシフェン（ＮＯＶＡＬＤＥＸ（登録商標））、およびトレミフェン（ＦＡＲＥＳＴＯＮ（登録商標）））、ホスホリパーゼＡ２阻害剤（例えば、アナグレリド（ＡＧＲＹＬＩＮ（登録商標）））、生物応答改変剤（例えば、ＢＣＧ（ＴＨＥＲＡＣＹＳ（登録商標）、ＴＩＣＥ（登録商標））、およびダルベポエチンアルファ（ＡＲＡＮＥＳＰ（登録商標）））、標的治療薬（例えば、ボルテゾミブ（ＶＥＬＣＡＤＥ（登録商標））、ダサチニブ（ＳＰＲＹＣＥＬ（商標））、デニロイキンジフチトックス（ＯＮＴＡＫ（登録商標））、エルロチニブ（ＴＡＲＣＥＶＡ（登録商標））、エベロリムス（ＡＦＩＮＩＴＯＲ（登録商標））、ゲフィチニブ（ＩＲＥＳＳＡ（登録商標））、メシル酸イマチニブ（ＳＴＩ−５７１、ＧＬＥＥＶＥＣ（商標））、ラパチニブ（ＴＹＫＥＲＢ（登録商標））、ソラフェニブ（ＮＥＸＡＶＡＲ（登録商標））、およびＳＵ１１２４８（スニチニブ、ＳＵＴＥＮＴ（登録商標）））、免疫調節薬および抗血管新生薬（例えば、ＣＣ−５０１３（レナリドマイド、ＲＥＶＬＩＭＩＤ（登録商標））、およびサリドマイド（ＴＨＡＬＯＭＩＤ（登録商標��））、グルココルチコステロイド（例えば、コルチゾン（ヒドロコルチゾン、ヒドロコルチゾンリン酸ナトリウム、ヒドロコルチゾンコハク酸ナトリウム、ＡＬＡ−ＣＯＲＴ（登録商標）、ＨＹＤＲＯＣＯＲＴ  ＡＣＥＴＡＴＥ（登録商標）、リン酸ヒドロコルトン  ＬＡＮＡＣＯＲＴ（登録商標）、ＳＯＬＵ−ＣＯＲＴＥＦ（登録商標））、デカドロン（デキサメタゾン、デキサメタゾン酢酸塩、デキサメタゾンリン酸ナトリウム、ＤＥＸＡＳＯＮＥ（登録商標）、ＤＩＯＤＥＸ（登録商標）、ＨＥＸＡＤＲＯＬ（登録商標）、ＭＡＸＩＤＥＸ（登録商標））、メチルプレドニゾロン（６−メチルプレドニゾロン、酢酸メチルプレドニゾロン、メチルプレドニゾロンコハク酸ナトリウム、ＤＵＲＡＬＯＮＥ（登録商標）、ＭＥＤＲＡＬＯＮＥ（登録商標）、ＭＥＤＲＯＬ（登録商標）、Ｍ−ＰＲＥＤＮＩＳＯＬ（登録商標）、ＳＯＬＵ−ＭＥＤＲＯＬ（登録商標））、プレドニゾロン（ＤＥＬＴＡ−ＣＯＲＴＥＦ（登録商標）、ＯＲＡＰＲＥＤ（登録商標）、ＰＥＤＩＡＰＲＥＤ（登録商標）、ＰＲＥＬＯＮＥ（登録商標））、およびプレドニゾン（ＤＥＬＴＡＳＯＮＥ（登録商標）、ＬＩＱＵＩＤ  ＰＲＥＤ（登録商標）、ＭＥＴＩＣＯＲＴＥＮ（登録商標）、ＯＲＡＳＯＮＥ（登録商標）））、およびビスホスホネート（例えば、パミドロネート（ＡＲＥＤＩＡ（登録商標））、およびゾレドロン酸（ＺＯＭＥＴＡ（登録商標））が含まれる。
【０８１１】
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、多特異性または多機能性分子は、チロシンキナーゼ阻害剤（例えば、受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）阻害剤）と併用して使用される。例示的なチロシンキナーゼ阻害剤には、限定されないが、上皮成長因子（ＥＧＦ）経路阻害剤（例えば、上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）阻害剤）、血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）経路阻害剤（例えば、ＶＥＧＦに対する抗体、ＶＥＧＦトラップ、血管内皮成長因子受容体（ＶＥＧＦＲ）阻害剤（例えば、ＶＥＧＦＲ−１阻害剤、ＶＥＧＦＲ−２阻害剤、ＶＥＧＦＲ−３阻害剤））、血小板由来成長因子（ＰＤＧＦ）経路阻害剤（例えば、血小板由来成長因子受容体（ＰＤＧＦＲ）阻害剤（例えば、ＰＤＧＦＲ−β阻害剤））、ＲＡＦ−１阻害剤、ＫＩＴ阻害剤およびＲＥＴ阻害剤が含まれる。一部の実施形態では、ＡＨＣＭ剤と併用して使用される抗がん剤は、アキシチニブ（ＡＧ０１３７３６）、ボスチニブ（ＳＫＩ−６０６）、セジラニブ（ＲＥＣＥＮＴＩＮ（商標）、ＡＺＤ２１７１）、ダサチニブ（ＳＰＲＹＣＥＬ（登録商標）、ＢＭＳ−３５４８２５）、エルロチニブ（ＴＡＲＣＥＶＡ（登録商標））、ゲフィチニブ（ＩＲＥＳＳＡ（登録商標））、イマチニブ（Ｇｌｅｅｖｅｃ（登録商標）、ＣＧＰ５７１４８Ｂ、ＳＴＩ−５７１）、ラパチニブ（ＴＹＫＥＲＢ（登録商標）、ＴＹＶＥＲＢ（登録商標））、レスタウルチニブ（ＣＥＰ−７０１）、ネラチニブ（ＨＫＩ−２７２）、ニロチニブ（ＴＡＳＩＧＮＡ（登録商標））、セマキサニブ（セマキシニブ、ＳＵ５４１６）、スニチニブ（ＳＵＴＥＮＴ（登録商標）、ＳＵ１１２４８）、トセラニブ（ＰＡＬＬＡＤＩＡ（登録商標））、バンデタニブ（ＺＡＣＴＩＭＡ（登録商標）、ＺＤ６４７４）、バタラニブ（ＰＴＫ７８７、ＰＴＫ／ＺＫ）、トラスツズマブ（ＨＥＲＣＥＰＴＩＮ（登録商標））、ベバシズマブ（ＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標））、リツキシマブ（ＲＩＴＵＸＡＮ（登録商標））、セツキシマブ（ＥＲＢＩＴＵＸ（登録商標））、パニツムマブ（ＶＥＣＴＩＢＩＸ（登録商標））、ラニビズマブ（Ｌｕｃｅｎｔｉｓ（登録商標））、ニロチニブ（ＴＡＳＩＧＮＡ（登録商標））、ソラフェニブ（ＮＥＸＡＶＡＲ（登録商標））、アレムツズマブ（ＣＡＭＰＡＴＨ（登録商標））、ゲムツズマブオゾガマイシン（ＭＹＬＯＴＡＲＧ（登録商標））、ＥＮＭＤ−２０７６、ＰＣＩ−３２７６５、ＡＣ２２０、乳酸ドビチニブ（ＴＫＩ２５８、ＣＨＩＲ−２５８）、ＢＩＢＷ  ２９９２（ＴＯＶＯＫ（商標））、ＳＧＸ５２３、ＰＦ−０４２１７９０３、ＰＦ−０２３４１０６６、ＰＦ−２９９８０４、ＢＭＳ−７７７６０７、ＡＢＴ−８６９、ＭＰ４７０、ＢＩＢＦ  １１２０（ＶＡＲＧＡＴＥＦ（登録商標））、ＡＰ２４５３４、ＪＮＪ−２６４８３３２７、ＭＧＣＤ２６５、ＤＣＣ−２０３６、ＢＭＳ−６９０１５４、ＣＥＰ−１１９８１、チボザニブ（ＡＶ−９５１）、ＯＳＩ−９３０、ＭＭ−１２１、ＸＬ−１８４、ＸＬ−６４７、ＸＬ２２８、ＡＥＥ７８８、ＡＧ−４９０、ＡＳＴ−６、ＢＭＳ−５９９６２６、ＣＵＤＣ−１０１、ＰＤ１５３０３５、ペリチニブ（ＥＫＢ−５６９）、バンデタニブ（ザクティマ）、ＷＺ３１４６、ＷＺ４００２、ＷＺ８０４���、ＡＢＴ−８６９（リニファニブ）、ＡＥＥ７８８、ＡＰ２４５３４（ポナチニブ）、ＡＶ−９５１（チボザニブ）、アキシチニブ、ＢＡＹ  ７３−４５０６（レゴラフェニブ）、ブリバニブアラニネート（ＢＭＳ−５８２６６４）、ブリバニブ（ＢＭＳ−５４０２１５）、セジラニブ（ＡＺＤ２１７１）、ＣＨＩＲ−２５８（ドビチニブ）、ＣＰ  ６７３４５１、ＣＹＣ１１６、Ｅ７０８０、Ｋｉ８７５１、マシチニブ（ＡＢ１０１０）、ＭＧＣＤ−２６５、モテサニブ二リン酸（ＡＭＧ−７０６）、ＭＰ−４７０、ＯＳＩ−９３０、パゾパニブ塩酸塩、ＰＤ１７３０７４、ソラフェニブトシレート（Ｂａｙ  ４３−９００６）、ＳＵ  ５４０２、ＴＳＵ−６８（ＳＵ６６６８）、バタラニブ、ＸＬ８８０（ＧＳＫ１３６３０８９、ＥＸＥＬ−２８８０）からなる群から選択される。選択されたチロシンキナーゼ阻害剤は、スニチニブ、エルロチニブ、ゲフィチニブ、またはソラフェニブから選択される。一実施形態では、チロシンキナーゼ阻害剤は、スニチニブである。
【０８１２】
一実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、多特異性または多機能性分子は、抗血管新生剤、または血管標的剤または血管破壊剤のうちの１つまたは複数と併用して投与される。例示的な抗血管新生剤には、限定されないが、とりわけ、ＶＥＧＦ阻害剤（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体（例えば、ベバシズマブ）；ＶＥＧＦ受容体阻害剤（例えば、イトラコナゾール）；細胞増殖および／または内皮細胞移動の阻害剤（例えば、カルボキシアミドトリアゾール、ＴＮＰ−４７０）；血管新生刺激剤の阻害剤（例えば、スラミン）が含まれる。血管標的剤（ＶＴＡ）または血管破壊剤（ＶＤＡ）は、中枢壊死を引き起こすがん腫瘍の血管系（血管）を損傷するように設計されている（例えば、Ｔｈｏｒｐｅ，Ｐ．Ｅ．（２００４年）Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．Ｖｏｌ．１０巻：４１５〜４２７ページに概説される）。ＶＴＡは、小分子であり得る。例示的な小分子ＶＴＡには、限定されないが、微小管不安定化剤（例えば、コンブレタスタチンＡ−４リン酸二ナトリウム（ＣＡ４Ｐ）、ＺＤ６１２６、ＡＶＥ８０６２、Ｏｘｉ  ４５０３）；およびバジメザン（ＡＳＡ４０４）が含まれる。
免疫チェックポイント阻害剤
他の実施形態では、本明細書に記載される方法は、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、多特異性または多機能性分子と併用した免疫チェックポイント阻害剤の使用を含む。この方法は、ｉｎ  ｖｉｖｏの治療プロトコールにおいて使用することができる。
【０８１３】
実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤は、チェックポイント分子を阻害する。例示的なチェックポイント分子には、限定されないが、ＣＴＬＡ４、ＰＤ１、ＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２、ＴＩＭ３、ＬＡＧ３、ＣＤ１６０、２Ｂ４、ＣＤ８０、ＣＤ８６、Ｂ７−Ｈ３（ＣＤ２７６）、Ｂ７−Ｈ４（ＶＴＣＮ１）、ＨＶＥＭ（ＴＮＦＲＳＦ１４またはＣＤ２７０）、ＢＴＬＡ、ＫＩＲ、ＭＨＣクラスＩ、ＭＨＣクラスＩＩ、ＧＡＬ９、ＶＩＳＴＡ、ＢＴＬＡ、ＴＩＧＩＴ、ＬＡＩＲ１、およびＡ２ａＲが含まれる。例えば、参照により本明細書に組み込まれるＰａｒｄｏｌｌ．Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｃａｎｃｅｒ  １２．４（２０１２年）：２５２〜６４ページを参照されたい。
【０８１４】
実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤は、ＰＤ−１阻害剤、例えば、ニボルマブ、ペンブロリズマブまたはピジリズマブなどの抗ＰＤ−１抗体である。ニボルマブ（ＭＤＸ−１１０６、ＭＤＸ−１１０６−０４、ＯＮＯ−４５３８、またはＢＭＳ−９３６５５８とも呼ばれる）は、ＰＤ１を特異的に阻害する完全ヒトＩｇＧ４モノクローナル抗体である。例えば、米国特許第８，００８，４４９号および国際公開第２００６／１２１１６８号を参照されたい。ペンブロリズマブ（Ｌａｍｂｒｏｌｉｚｕｍａｂ、ＭＫ−３４７５、ＭＫ０３４７５、ＳＣＨ−９００４７５、またはＫＥＹＴＲＵＤＡ（登録商標）とも呼ばれる；Ｍｅｒｃｋ）は、ＰＤ−１に結合するヒト化ＩｇＧ４モノクローナル抗体である。例えば、Ｈａｍｉｄ，Ｏ．ら（２０１３年）Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  ３６９巻（２号）：１３４〜４４ページ、米国特許第８，３５４，５０９号および国際公開第２００９／１１４３３５号を参照されたい。ピジリズマブ（ＣＴ−０１１またはＣｕｒｅ  Ｔｅｃｈとも呼ばれる）は、ＰＤ１に結合するヒト化ＩｇＧ１ｋモノクローナル抗体である。例えば、国際公開第２００９／１０１６１１号を参照されたい。一実施形態では、ＰＤ−１の阻害剤は、実質的に同一または類似の配列、例えば、ニボルマブ、ペンブロリズマブまたはピジリズマブの配列に対して少なくとも８５％、９０％、９５％同一であるまたはそれを超える配列を有する抗体分子である。追加の抗ＰＤ１抗体、例えば、ＡＭＰ  ５１４（Ａｍｐｌｉｍｍｕｎｅ）は、例えば、米国特許第８，６０９，０８９号、米国特許出願公開第２０１０／０２８３３０号、および／または米国特許出願公開第２０１２／０１１４６４９号に記載されている。
【０８１５】
一部の実施形態では、ＰＤ−１阻害剤は、イムノアドヘシン、例えば、定常領域（例えば、免疫グロブリンのＦｃ領域）に融合されたＰＤ−１リガンド（例えば、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２）の細胞外／ＰＤ−１結合部分を含むイムノアドヘシンである。実施形態では、ＰＤ−１阻害剤は、Ｂ７−Ｈ１とＰＤ−１の間の相互作用を遮断するＰＤ−Ｌ２  Ｆｃ融合可溶性受容体であるＡＭＰ−２２４（Ｂ７−ＤＣＩｇ、例えば、国際公開第２０１１／０６６３４２号および国際公開第２０１０／０２７８２７号に記載される）である。
【０８１６】
実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤は、ＰＤ−Ｌ１阻害剤、例えば、抗体分子である。一部の実施形態では、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ−００１０７１８Ｃ、またはＭＤＸ−１１０５である。一部の実施形態では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、ＭＳＢ００１０７１８Ｃ（Ａ０９−２４６−２とも呼ばれる；Ｍｅｒｃｋ  Ｓｅｒｏｎｏ）であり、ＰＤ−Ｌ１に結合するモノクローナル抗体である。例示的なヒト化抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、例えば、国際公開第２０１３／０７９１７４号に記載されている。一実施形態では、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、例えば、ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０である。ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０抗体は、例えば、国際公開第２０１０／０７７６３４号に記載されている。一実施形態では、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、ＭＤＸ−１１０５（ＢＭＳ−９３６５５９とも呼ばれる）であり、例えば、国際公開第２００７／００５８７４号に記載されている。一実施形態では、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、ＭＤＰＬ３２８０Ａ（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ／Ｒｏｃｈｅ）であり、ＰＤ−Ｌ１に対するヒトＦｃ最適化ＩｇＧ１モノクローナル抗体である。例えば、米国特許第７，９４３，７４３号および米国特許出願公開第２０１２／００３９９０６号を参照されたい。一実施形態では、ＰＤ−Ｌ１の阻害剤は、実質的に同一または類似の配列、例えば、ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ−００１０７１８Ｃ、またはＭＤＸ−１１０５の配列に対して少なくとも８５％、９０％、９５％同一であるまたはそれを超える配列を有する抗体分子である。
【０８１７】
実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤は、ＰＤ−Ｌ２阻害剤、例えば、ＡＭＰ−２２４（ＰＤ１とＢ７−Ｈ１の間の相互作用を遮断するＰＤ−Ｌ２  Ｆｃ融合可溶性受容体である）である。例えば、国際公開第２０１０／０２７８２７号および国際公開第２０１１／０６６３４２号を参照されたい。
【０８１８】
一実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤は、ＬＡＧ−３阻害剤、例えば、抗ＬＡＧ−３抗体分子である。実施形態では、抗ＬＡＧ−３抗体は、ＢＭＳ−９８６０１６（ＢＭＳ９８６０１６とも呼ばれる、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）である。ＢＭＳ−９８６０１６および他のヒト化抗ＬＡＧ−３抗体は、例えば、米国特許出願公開第２０１１／０１５０８９２号、国際公開第２０１０／０１９５７０号、および国際公開第２０１４／００８２１８号に記載されている。
【０８１９】
実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤は、例えば、米国特許第８，５５２，１５６号、国際公開第２０１１／１５５６０７号、欧州特許第２５８１１１３号および米国特許出願公開第２０１４／０４４７２８号に記載される、抗ＴＩＭ３抗体分子などのＴＩＭ−３阻害剤である。
【０８２０】
実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤は、ＣＴＬＡ−４阻害剤、例えば、抗ＣＴＬＡ−４抗体分子である。例示的な抗ＣＴＬＡ４抗体には、トレメリムマブ（以前はチシリムマブ、ＣＰ−６７５，２０６として公知であるＰｆｉｚｅｒのＩｇＧ２モノクローナル抗体）、およびイピリムマブ（ＭＤＸ−０１０とも呼ばれる、ＣＡＳ  Ｎｏ．４７７２０２−００−９）が含まれる。他の例示的な抗ＣＴＬＡ−４抗体は、例えば、米国特許第５，８１１，０９７号に記載されている。
ＣＲＳグレード付け
一部の実施形態では、ＣＲＳは、以下のように１〜５の重症度でグレード付けすることができる。グレード１〜３は、重度ＣＲＳよりも軽度である。グレード４〜５は、重度ＣＲＳである。グレード１のＣＲＳでは、対症療法のみが必要であり（例えば、悪心、発熱、疲労、筋肉痛、倦怠感、頭痛）、症状は生命を脅かすものではない。グレード２のＣＲＳでは、症状には、中等度の介入が必要であり、一般に中等度の介入に応答する。グレード２のＣＲＳを有する対象は、輸液もしくは１回の低用量昇圧剤のいずれかに応答する低血圧を発症するか、またはグレード２の臓器毒性もしくは低流量酸素（４０％未満の酸素）に応答する軽度の呼吸器症状を発症する。グレード３のＣＲＳ対象では、低血圧は、一般に、輸液療法または１回の低用量昇圧剤によって回復することができない。これらの対象は、一般に、低流量酸素を超える必要があり、グレード３の臓器毒性（例えば、腎もしくは心機能障害または凝固障害）および／またはグレード４の高トランスアミナーゼ血症を有する。グレード３のＣＲＳ対象は、より積極的な介入（例えば、酸素４０％以上、高用量昇圧剤、および／または複数の昇圧剤）が必要である。グレード４のＣＲＳ対象は、グレード４の臓器毒性または人工呼吸器の必要性など、直ちに生命を脅かす症状に苦しんでいる。グレード４のＣＲＳ対象は、通常、高トランスアミナーゼ血症を有しない。グレード５のＣＲＳ対象では、毒性は、死亡を引き起こす。ＣＲＳをグレード付けるための基準セットは、表５、表６、および表７として本明細書に提供される。別段の規定がない限り、本明細書で使用される場合ＣＲＳは、表６の基準に従ったＣＲＳを指す。
【０８２１】
実施形態では、ＣＲＳは、表５に従ってグレード付けされる：
【０８２２】
【表１３】
2021530246.tif 000075
【０８２３】
【表１４】
2021530246.tif 000076
【０８２４】
【表１５】
2021530246.tif 000077
【実施例】
【０８２５】
実施例１．α−ＴＲＢＶ６−５抗体クローン抗体Ａのヒト化
マウスα−ＴＣＲβ抗体クローン抗体Ａ  ＶＨおよびＶＬの生殖系列は、ＩＭＧＴ命名法を用いて割り当てられ、ＣＤＲ領域はＫａｂａｔおよびＣｈｏｔｈｉａ分類を組み合わせて定義された。配列番号１および配列番号２は、それぞれ、抗体Ａ  ＶＨおよびＶＬ配列であり、ＶＨ生殖系列はマウスＩＧＨＶ１Ｓ１２＊０１であり、ＶＬ生殖系列はマウスＩＧＫＶ６−１５＊０１である。配列番号３〜５は、それぞれ、抗体Ａ  ＶＨ  ＣＤＲ領域１〜３であり、配列番号６〜８は、ＶＬ  ＣＤＲ領域１〜３に対応する（表１に記載される）。
【０８２６】
抗体Ａ  ＶＨおよびＶＬ配列のヒト化は、類似の方法を用いて別々に行われた。ＣＤＲグラフト化の成功に重要であるフレームワーク領域においてアミノ酸位置を同定した。ヒト生殖系列配列は、必要な残基を保存し、全体的に高量の同一性を含むことが同定された。ヒト生殖系列フレームワーク配列が、一致する重要なアミノ酸を含まない場合、マウス配列と一致するように復帰突然変異させた。ＣＤＲ領域を、未変化のヒト生殖系列にグラフト化した。抗体Ａ  ＶＨをヒトＩＧＨＶ１−６９＊０１にヒト化し、抗体Ａ  ＶＬをＩＧＫＶ１−１７＊０１およびＩＧＫＶ１−２７＊０１にヒト化した。３つすべてのヒト化配列は、ヒト化プロセスの結果として、ＮＧ、ＤＧ、ＮＳ、ＮＮ、ＤＳ、ＮＴ、ＮＸＳ、またはＮＸＴなどの、導入された負のポテンシャルの翻訳後修飾部位を含まないことが確認された。配列番号９は、ヒト化抗体Ａ−Ｈ．１  ＶＨであり、配列番号１０および１１は、それぞれ、ヒト化ＶＬ  ＩＧＫＶ１−１７＊０１およびＩＧＫＶ１−２７＊０１生殖系列である（表１に記載される）。図１Ａおよび１Ｂは、ＣＤＲおよびフレームワーク領域（ＦＲ）を示す注釈付きのマウスおよびヒト化配列を示す。
【０８２７】
実施例２：α−ＴＲＢＶ１２−３およびＴＲＢＶ１２−４抗体クローン抗体Ｂのヒト化
マウスα−ＴＣＲβ抗体クローン抗体Ｂ  ＶＨおよびＶＬの生殖系列は、ＩＭＧＴ命名法を用いて割り当てられ、ＣＤＲ領域はＫａｂａｔおよびＣｈｏｔｈｉａ分類を組み合わせて定義された。配列番号１５および配列番号１６は、それぞれ、抗体Ｂ  ＶＨおよびＶＬ配列であり、ＶＨ生殖系列はマウスＩＧＨＶ５−１７＊０２であり、ＶＬ生殖系列はマウスＩＧＫＶ４−５０＊０１である。配列番号１７〜１９は、それぞれ、Ｂ−Ｈ  ＶＨ  ＣＤＲ領域１〜３であり、配列番号２０〜２２は、Ｂ−Ｈ  ＶＬ  ＣＤＲ領域１〜３である（表２に記載される）。
【０８２８】
実施例１に記載されるヒト化抗体Ａに適用された方法を用いて、抗体Ｂをヒト化した。抗体Ｂ  ＶＨをヒトＩＧＨＶ３−３０＊０１、ＩＧＨＶ３−４８＊０１およびＩＧＨＶ３−６６＊０１にヒト化し、抗体Ｂ  ＶＬをヒトＩＧＫＶ１−９＊０１、ＩＧＫＶ１−３９＊０１、ＩＧＫＶ３−１５＊０１、ＩＧＬＶ１−４７＊０１およびＩＧＬＶ３−１０＊０１にヒト化した。配列番号２３〜２５は、Ｂ−Ｈ．１Ａ、Ｂ−Ｈ．１Ｂ、およびＢ−Ｈ．１Ｃヒト化重鎖であり、配列番号２６〜３０は、Ｂ−Ｈ．１Ｄ、Ｂ−Ｈ．１Ｅ、Ｂ−Ｈ．１Ｆ、Ｂ−Ｈ．１Ｇ、およびＢ−Ｈ．１Ｈヒト化軽鎖である（表２に記載される）。図２Ａおよび２Ｂは、ＣＤＲおよびフレームワーク領域（ＦＲ）を示す注釈付きのマウスおよびヒト化配列を示す。
【０８２９】
実施例３：抗ＴＣＲβＶ抗体の特徴
導入
がん免疫療法のための腫瘍細胞溶解を促進するためにＴ細胞を再指向させるように設計された現在の二特異性構築物は、典型的には、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）のＣＤ３ｅサブユニットに対して指向されるモノクローナル抗体（ｍＡｂ）に由来する一本鎖可変断片（ｓｃＦＶ）を利用する。しかしながら、このアプローチには限界があり、このような二特異性構築物の治療可能性の完全な実現を妨げる可能性がある。これまでの研究では、例えば、低い「活性化」用量の抗ＣＤ３ｅ  ｍＡｂが長期のＴ細胞機能不全を引き起こし、免疫抑制作用を発揮することが示されている。さらに、抗ＣＤ３ｅ  ｍＡｂはすべてのＴ細胞に結合し、したがってすべてのＴ細胞を等しく活性化する。これは、Ｔ細胞の大量活性化に起因する抗ＣＤ３ｅ  ｍＡｂの初回投与時の副作用と関連している。これらの多数の活性化Ｔ細胞は相当量のサイトカインを分泌し、そのうち最も重要なものはインターフェロンガンマ（ＩＦＮｇ）である。この過剰量のＩＦＮｇは、次に、例えば、マクロファージを活性化し、その後、ＩＬ−１、ＩＬ−６およびＴＮＦ−αなどの炎症性サイトカインを過剰に産生することができ、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）として公知である「サイトカインストーム」を引き起こす。したがって、ＣＲＳを低減させるために必要なエフェクターＴ細胞のサブセットのみに結合し、活性化することができる抗体を開発することは有利であり得る。
結果
その目的で、ＴＣＲ（ＴＣＲ  Ｖｂ）のベータサブユニットの可変鎖に指向される抗体を同定した。これらの抗ＴＣＲ  Ｖｂ抗体は、Ｔ細胞のサブセットに結合し、活性化するが、例えば、ＣＲＳが全く低減しないかまたは顕著には低減しない。プレート結合した抗ＴＣＲ  Ｖｂ１３．１ｍＡｂ（Ａ−Ｈ．１およびＡ−Ｈ．２）を用いて、Ａ−Ｈ．１での陽性染色によって定義されるＴ細胞の集団が、（０日目のＴ細胞の約５％から６日目の細胞培養での総Ｔ細胞のほぼ６０％まで）拡大され得ることが示された（図４Ａ〜４Ｃ）。この実験のために、ヒトＣＤ３＋Ｔ細胞を磁気ビーズ分離を用いて単離し（負の選択）、１００ｎＭで、固定化（プレート被覆された）Ａ−Ｈ．１またはＯＫＴ３（抗ＣＤ３ｅ）抗体で６日間、活性化した。拡大されたＶｂ１３．１＋Ｔ細胞は、精製ＣＤ３＋Ｔ細胞と共培養した場合、形質転換された細胞系ＲＰＭＩ−８２２６に対して細胞溶解活性化を示す（図５Ａ−５Ｂ）。
【０８３０】
次に、抗ＴＣＲ  ＶＢ抗体によって活性化されたＰＢＭＣがサイトカインを産生する能力を評価した。抗ＴＣＲ  ＶＢ抗体で活性化されたＰＢＭＣのサイトカイン産生を、（ｉ）抗ＣＤ３ｅ抗体（ＯＫＴ３またはＳＰ３４−２）；（ｉｉ）抗ＴＣＲ  ＶＡ  １２．１抗体６Ｄ６．６、抗ＴＣＲ  ＶＡ２４ＪＡ１８抗体６Ｂ１１などの抗ＴＣＲ  Ｖα（ＴＣＲ  ＶＡ）抗体；（ｉｉｉ）抗ＴＣＲαβ抗体Ｔ１０Ｂ９；および／または（ｉｖ）アイソタイプ対照（ＢＧＭ０１０９）で活性化されたＰＢＭＣのサイトカイン産生と比較した。試験した抗ＴＣＲ  ＶＢ抗体には、ヒト化抗ＴＣＲＶＢ  １３．１抗体（Ａ−Ｈ．１またはＡ−Ｈ．２）、マウス抗ＴＣＲ  ＶＢ５抗体Ｅ、マウス抗ＴＣＲ  ＶＢ８．１抗体Ｂ、およびマウス抗ＴＣＲ  ＶＢ１２抗体Ｄが含まれる。ＢＧＭ０１０９は、以下：
ＭＥＴＤＴＬＬＬＷＶＬＬＬＷＶＰＧＳＴＧＧＬＮＤＩＦＥＡＱＫＩＥＷＨＥＧＧＧＧＳＥＰＲＴＤＴＤＴＣＰＮＰＰＤＰＣＰＴＣＰＴＰＤＬＬＧＧＰＳＶＦＩＦＰＰＫＰＫＤＶＬＭＩＳＬＴＰＫＩＴＣＶＶＶＤＶＳＥＥＥＰＤＶＱＦＮＷＹＶＮＮＶＥＤＫＴＡＱＴＥＴＲＱＲＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＰＩＫＨＱＤＷＭＳＧＫＶＦＫＣＫＶＮＮＮＡＬＰＳＰＩＥＫＴＩＳＫＰＲＧＱＶＲＶＰＱＩＹＴＦＰＰＰＩＥＱＴＶＫＫＤＶＳＶＴＣＬＶＴＧＦＬＰＱＤＩＨＶＥＷＥＳＮＧＱＰＱＰＥＱＮＹＫＮＴＱＰＶＬＤＳＤＧＳＹＦＬＹＳＫＬＮＶＰＫＳＲＷＤＱＧＤＳＦＴＣＳＶＩＨＥＡＬＨＮＨＨＭＴＫＴＩＳＲＳＬＧＮＧＧＧＧＳ（配列番号３２８２）のアミノ酸配列を含む。
【０８３１】
図６Ａに示されるように、プレート結合したＡ−Ｈ．１またはＡ−Ｈ．２、または抗ＣＤ３ｅ抗体（ＯＫＴ３またはＳＰ３４−２）を用いて、ヒトＰＢＭＣを活性化した場合、Ｔ細胞サイトカインＩＦＮｇが誘導された（図６Ａ）。試験したすべての抗ＴＣＲ  ＶＢ抗体は、ＩＦＮｇの産生に対して類似の効果を有した（図６Ｂ）。抗ＴＣＲ  ＶＡ抗体は、類似のＩＦＮｇ産生を誘導しなかった。
【０８３２】
ＩＬ−２産生に関して、Ａ−Ｈ．１およびＡ−Ｈ．２で活性化されたＰＢＭＣは、抗ＣＤ３ｅ抗体（ＯＫＴ３またはＳＰ３４−２）で活性化されたＰＢＭＣと比較して、ＩＬ−２産生の増加（図７Ａ）および遅延動態（図７Ｂ）をもたらした。図７Ｂは、抗ＴＣＲ  ＶＢ抗体で活性化されたＰＢＭＣが、活性化（プレート被覆された抗体とのインキュベーション）後の５日目または６日目にＩＬ−２のピーク産生を実証する。対照的に、ＯＫＴ３で活性化されたＰＢＭＣにおけるＩＬ−２産生は、活性化後の２日目でピークに達した。ＩＦＮＧと同様に、ＩＬ−２効果（例えば、ＩＬ−２の産生の増強および遅延動態）は、試験したすべての抗ＴＣＲ  ＶＢ抗体にわたって類似していた（図７Ｂ）。
【０８３３】
また、サイトカインＩＬ−６、ＩＬ−１βおよびＴＮＦ−αの産生は、「サイトカインストーム」（適切にはＣＲＳ）と関連し、類似の条件下で評価された。図８Ａ、９Ａおよび１０Ａは、抗ＣＤ３ｅ抗体で活性化されたＰＢＭＣがＩＬ−６（図８Ａ）、ＴＮＦ−α（図９Ａ）およびＩＬ−１β（図１０Ａ）の産生を実証するが、Ａ−Ｈ．１またはＡ−Ｈ．２で活性化したＰＢＭＣでは、これらのサイトカインの誘導は、全く観察されないかまたはほとんど観察されなかったことを示す。図９Ｂおよび１０Ｂに示されるように、ＴＮＦ−αおよびＩＬ−１βの産生は、抗ＴＣＲ  ＶＢ抗体のいずれかを用いたＰＢＭＣの活性化によって誘導されなかった。
【０８３４】
さらに、Ａ−Ｈ．１活性化されたＣＤ３＋Ｔ細胞によるＩＦＮｇ産生の動態は、抗ＣＤ３ｅ  ｍＡｂ（ＯＫＴ３およびＳＰ３４−２）によって活性化されたＣＤ３＋Ｔ細胞により産生されるものに比べて遅延することが注目された（図１１Ａおよび１１Ｂ）。
【０８３５】
最後に、ＴＥＭＲＡとして公知であるメモリーエフェクターＴ細胞のサブセットは、Ａ−Ｈ．１またはＡ−Ｈ．２によって活性化されたＣＤ８＋Ｔ細胞において優先的に拡大することが観察された（図１２）。単離したヒトＰＢＭＣは、１００ｎＭで、固定化（プレート被覆）された抗ＣＤ３ｅまたは抗ＴＣＲ  Ｖβ１３．１で６日間、活性化された。６日間のインキュベーション後、Ｔ細胞サブセットは、Ｎａｉｖｅ  Ｔ細胞（ＣＤ８＋、ＣＤ９５−、ＣＤ４５ＲＡ＋、ＣＣＲ７＋）、Ｔ幹細胞メモリー（ＴＳＣＭ；ＣＤ８＋、ＣＤ９５＋、ＣＤ４５ＲＡ＋、ＣＣＲ７＋）、Ｔセントラルメモリー（Ｔｃｍ；ＣＤ８＋、ＣＤ９５＋、ＣＤ４５ＲＡ−、ＣＣＲ７＋）、Ｔエフェクターメモリー（Ｔｅｍ；ＣＤ８＋、ＣＤ９５＋、ＣＤ４５ＲＡ−、ＣＣＲ７−）、およびＴエフェクターメモリー再発現ＣＤ４５ＲＡ（Ｔｅｍｒａ；ＣＤ８＋、ＣＤ９５＋、ＣＤ４５ＲＡ＋、ＣＣＲ７−）の表面マーカーに対してＦＡＣＳ染色により同定された。抗ＴＣＲ  Ｖβ１３．１抗体（Ａ−Ｈ．１またはＡ−Ｈ．２）によって活性化されたヒトＰＢＭＣは、抗ＣＤ３ｅ抗体（ＯＫＴ３またはＳＰ３４−２）によって活性化されたＰＢＭＣと比較した場合、ＣＤ８＋ＴＳＣＭおよびＴｅｍｒａ  Ｔ細胞サブセットを増加させた。類似した拡大は、ＣＤ４＋Ｔ細胞を用いて観察された。
結論
この実施例において提供されるデータは、ＴＣＲ  Ｖｂに対して指向される抗体が、例えば、Ｔ細胞のサブセットを優先的に活性化し、例えば、腫瘍細胞溶解を促進し得るが、ＣＲＳを促進し得ないＴＥＭＲＡの拡大を導くことができることを示す。したがって、ＦａｂもしくはｓｃＦＶ、またはＴＣＲ  Ｖｂに指向されるペプチドのいずれかを利用する二特異性構築物は、例えば、抗ＣＤ３ｅ標的化に関連するＣＲＳの有害な副作用なしに、がん免疫療法のための腫瘍細胞溶解を促進するためにＴ細胞を活性化および再指向させるために使用することができる。
【０８３６】
実施例４：ＢＣＭＡおよびＴ細胞エンゲージャーに対する二重標的抗体分子による多発性骨髄腫（ＭＭ）細胞のオンターゲットＴ細胞媒介性の細胞毒性
この実施例は、Ｔ細胞上のＴ細胞エンゲージャー、例えば、ＴＣＲＶｂおよびＭＭ細胞上のＢＣＭＡを認識する二重標的抗体分子による多発性骨髄腫（ＭＭ）細胞のオンターゲットＴ細胞媒介性の細胞毒性を示す。
【０８３７】
図１３Ａに示されるように、プレート結合した抗ＴＣＲＶｂ抗体で５日間、活性化された精製ヒトＴ細胞は、プレート結合した抗ＣＤ３（ＯＫＴ３）抗体で活性化された精製ヒトＴ細胞よりも高速で増殖する。Ｔ細胞の抗ＴＣＲＶｂ抗体刺激は、ＣＤ４５ＲＡ＋エフェクターメモリーＣＤ８＋およびＣＤ４＋Ｔ細胞（ＴＥＭＲＡ）細胞の選択的拡大をもたらした（図１３Ｂ）。ＣＤ８＋およびＣＤ４＋Ｔｅｍｒａ細胞集団の両方は、抗ＴＣＲＶｂ抗体で刺激された場合、非刺激細胞または抗ＣＤ３（ＳＰ３４）抗体で刺激された細胞と比較してより増大した。抗ＴＣＲＶｂ抗体は、抗ＣＤ３抗体で刺激されたＰＢＭＣと比較して、抗ＴＣＲＶｂ抗体で刺激されたＰＢＭＣによるＩＦＮ−ｇの分泌の遅延をもたらした（図１３Ｃ）。さらに、抗ＴＣＲＶｂ抗体または抗ＣＤ３抗体で刺激されたＴ細胞は、図１３Ｄに示されるように、多発性骨髄腫標的細胞の同等の溶解をもたらした。図１３Ｅ〜１３Ｆに示されるように、１００ｎｇ／ｍｌのプレート結合した抗ＴＣＲＶｂ抗体、または抗ＣＤ３抗体で５日間、刺激されたＴ細胞は、パーフォリンおよびグランザイムＢを分泌した。
【０８３８】
抗ＴＣＲＶｂ抗体によるＰＢＭＣの活性化は、抗ＯＫＴ３抗体で活性化されたＰＢＭＣと比較して、ＩＬ−２および／またはＩＬ−１５のより高い産生および／または分泌をもたらした（図１４Ａ）。抗ＴＣＲＶｂ抗体で活性化されたＰＢＭＣは、例えば、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞の拡大および／または生存、例えば、増殖ももたらした（図１４Ｂ）。対照的に、抗ＯＫＴ３抗体で活性化されたＰＢＭＣＳは、ＮＫ細胞拡大をもたらさなかった。さらに、実施例３に記載されるように、抗ＴＣＲＶｂ抗体で活性化されたＰＢＭＣは、ＣＲＳと関連するサイトカインＩＬ−６、ＩＬ−１βおよびＴＮＦ−αの産生をもたらさなかった（図１５）。これらのｉｎ  ｖｉｔｒｏ特徴付け研究は、一部の実施形態では、抗ＴＣＲＶｂ抗体は、例えば、Ｔ細胞を活性化および／または刺激して、標的細胞溶解、パーフォリン分泌およびグランザイムＢ分泌、ならびに、例えば、遅延動態を伴うＩＦＮ−ｇの分泌によって証明されるように、Ｔ細胞殺滅を促進することを示す。
【０８３９】
次に、多発性骨髄腫（ＭＭ）細胞を標的とし、殺滅させる、一方のアームではＢＣＭＡを、他方のアームではＴＣＲＶｂを標的とする二重標的抗体分子（分子Ｉ）の能力を試験した。健康なドナーＰＢＭＣは、ＲＭＰＩ８２２６  ＭＭ細胞系、および以下の二重標的抗体分子：ＢＣＭＡ−ＴＣＲＶｂ（分子Ｉ）、ＢＣＭＡ−ＣＤ３、もしくは対照−ＴＣＲＶｂのうちの１つとともに同時インキュベートし、または、次に、フローサイトメトリーを用いてアイソタイプ対照標的細胞溶解を評価した。図１６Ａに示されるように、二重標的ＢＣＭＡ−ＴＣＲＶｂ抗体分子（分子Ｉ）は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏでＭＭ細胞の殺滅をもたらした。
【０８４０】
二重標的ＢＣＭＡ−ＴＣＲＶｂ抗体分子（分子Ｉ）は、ＭＭマウスモデルにおいてＭＭ腫瘍成長を阻害するその能力についてｉｎ  ｖｉｖｏでさらに試験された。ＮＣＩ−Ｈ９２９細胞系を０日目にＮＯＤ−ｓｃｉｄ  ＩＬ２ｒγヌル（ＮＳＧ）レシピエントマウスに注射し、続いて、９日目にＰＢＭＣを送達した。１２日目、１５日目、１８日目および２１日目に、二重標的ＢＣＭＡ−ＴＣＲＶｂ抗体分子（分子Ｉ）を０．５ｍｇ／ｋｇの用量で腹腔内注射により投与した。図１６Ｂは、二重標的化ＢＣＭＡ−ＴＣＲＶｂ抗体分子（分子Ｉ）によるｉｎ  ｖｉｖｏでのＭＭ腫瘍成長の予防、例えば、阻害を示す。これらの結果は、一部の実施形態では、二重標的ＢＣＭＡ−ＴＣＲＶｂ抗体分子は、例えば、腫瘍細胞、例えば、ＭＭ腫瘍細胞をｉｎ  ｖｉｔｒｏおよびｉｎ  ｖｉｖｏで殺滅させることができることを実証する。したがって、一部の実施形態では、二重標的ＢＣＭＡ−ＴＣＲＶｂ抗体分子を、例えば、がん、例えば、血液がん、例えば、ＭＭに対する療法として使用することができる。
【０８４１】
実施例５：ＦｃＲＨ５およびＴ細胞エンゲージャーに対する二重標的抗体分子のインビトロ細胞毒性
この実施例は、Ｔ細胞上のＴ細胞エンゲージャー、例えば、ＴＣＲＶｂ、およびＭＭ細胞上のＦｃＲＨ５を認識する二重標的抗体分子による、多発性骨髄腫（ＭＭ）細胞におけるｉｎ  ｖｉｔｒｏ細胞毒性を示す。健康なドナーのＰＢＭＣまたは精製Ｔ細胞を、ＭＯＬ８Ｍ  ＭＭ細胞系と一方のアームではＦｃＲＨ５および他方のアームではＴＣＲＶｂ（分子Ｅ）を標的とする二重標的抗体分子とともに、またはアイソタイプ対照抗体とともに同時インキュベートした。次に、フローサイトメトリーを用いて、標的細胞溶解を評価した。図１７に示されるように、二重標的化ＦｃＲＨ５−ＴＣＲＶｂ分子（分子Ｅ）は、精製Ｔ細胞またはＰＢＭＣの両方によるＭＭ細胞の殺滅をもたらした。これは、二重標的化ＦｃＲＨ５−ＴＣＲＶｂ分子が、Ｔ細胞などの免疫細胞、例えば、ＰＢＭＣによって、ＭＭ細胞の殺滅を標的化し、促進することができることを示す。
【０８４２】
実施例６：抗ＴＣＲ  Ｖβ８ａ抗体の特徴
この実施例は、抗ＴＣＲ  Ｖβ８ａ抗体（Ｂ−Ｈ．１）のｉｎ  ｖｉｔｒｏ特徴付けを示す。ＴＣＲ  Ｖβ８は、ＴＣＲ  Ｖβ１２とも呼ばれる（表８に記載される）。単離したヒトＰＢＭＣは、１００ｎＭで、固定化（プレート被覆）されたＣＤ３εまたは抗ＴＣＲ  Ｖβ８ａで活性化され、細胞培養上清を刺激後の１日目、２日目、３日目、５日目、６日目および８日目に回収した。サイトカイン（ＩＦＮγ、ＩＬ−２、ＴＮＦα、ＩＬ−１βまたはＩＬ−６）は、製造業者のプロトコールに記載されているように、ＭＳＤテクノロジープラットフォーム（ＭｅｓｏＳｃａｌｅ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ）を用いて測定された。
【０８４３】
図１８Ａ〜１８Ｂに示されるように、抗ＴＣＲ  Ｖβ８ａ抗体（Ｂ−Ｈ．１）によって活性化されたヒトＰＢＭＣは、抗ＣＤ３ε抗体（ＯＫＴ３またはＳＰ３４−２）によって活性化されたものと比較した場合、類似のまたは低減したレベルのＩＦＮγ（図１８Ｂ）、およびより高レベルのＩＬ−２（図１８Ｂ）を産生する。
【０８４４】
図１９Ａ〜１９Ｂは、抗ＴＣＲ  Ｖβ８ａ抗体（Ｂ−Ｈ．１）によって活性化されたヒトＰＢＭＣが、有意なレベルのＩＬ−６またはＩＬ１ｂを産生しないことを示す。抗ＴＣＲ  Ｖβ８ａ抗体（Ｂ−Ｈ．１）によるヒトＰＢＭＣの活性化はまた、抗ＣＤ３ε抗体（ＯＫＴ３またはＳＰ３４−２）によって活性化されたＰＢＭＣと比較した場合、より少ないＴＮＦａをもたらす（図１９Ｃを参照）。
【０８４５】
要約すると、実施例３に示されるように、この実施例は、抗ＴＣＲ  Ｖβ８ａ抗体が、
例えば、Ｔ細胞サイトカイン、例えば、ＩＬ−２およびＩＦＮｇの発現を優先的に誘導することができるが、「サイトカインストーム」（適切にはＣＲＳ）と関連するサイトカインＩＬ−６、ＩＬ−１βおよびＴＮＦ−αの産生を誘導することができないことを示す。
【０８４６】
実施例７：抗ＴＣＲβＶ抗体Ｄ抗体の特徴
この実施例は、Ｔ細胞のサブセットに結合し、活性化することができるが、例えば、ＣＲＳが全く低減しないかまたは顕著には低減しない、抗ＴＣＲβＶ抗体の特徴付けを記載する。
【０８４７】
ヒトＰＢＭＣを全血から単離し、続いて、１００ｎＭで、抗ＴＣＲ  Ｖβ１２抗体（抗体Ｄ）または抗ＣＤ３ｅ抗体（ＯＫＴ３）で固相（プレート被覆）刺激を行った。１日目、２日目、３日目、５日目、または６日目に上清を回収し、その後、ＩＦＮｇ、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−１β、またはＴＮＦαについてマルチプレックスサイトカイン分析を行った。データは、製造業者のプロトコールに従って、ＭＳＤ（Ｍｅｓｏ  Ｓｃａｌｅ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ）プラットフォームを用いて定量化された。
【０８４８】
図２０Ａに示されるように、プレート結合した抗ＴＣＲ  Ｖβ１２抗体（抗体Ｄ）または抗ＣＤ３ｅ抗体（ＯＫＴ３）を用いて、ヒトＰＢＭＣを活性化した場合、Ｔ細胞サイトカインＩＦＮｇが誘導された。ＩＬ−２産生に関して、抗ＴＣＲ  Ｖβ１２抗体（抗体Ｄ）で活性化されたＰＢＭＣは、抗ＣＤ３ｅ抗体（ＯＫＴ３）で活性化されたＰＢＭＣと比較して、遅延動態を伴うＩＬ−２産生の増加をもたらした（図２０Ｂ）。
【０８４９】
また、サイトカインＩＬ−６、ＩＬ−１βおよびＴＮＦ−αの産生は、「サイトカインストーム」（適切にはＣＲＳ）と関連し、類似の条件下で評価された。図２０Ｃ〜２０Ｅは、抗ＣＤ３ｅ抗体で活性化されたＰＢＭＣがＩＬ−６（図２０Ｄ）、ＴＮＦ−α（図２０Ｃ）およびＩＬ−１β（図２０Ｅ）の産生を実証するが、これらのサイトカインの誘導は、抗ＴＣＲ  Ｖβ１２抗体（抗体Ｄ）で活性化されたＰＢＭＣでは全く観察されないかまたはほとんど観察されなかった。
【０８５０】
この実施例で提供されるデータは、ＴＣＲ  Ｖβに対して指向される抗体が、例えば、Ｔ細胞のサブセットを優先的に活性化することができ、サイトカインストームまたはＣＲＳに関連するサイトカインの誘導をもたらさないことを示す。
【０８５１】
実施例８：抗ＴＣＲβＶ抗体Ｅの特徴
この実施例は、Ｔ細胞のサブセットに結合し、活性化することができるが、例えば、ＣＲＳが全く低減しないかまたは顕著には低減しない、抗ＴＣＲβＶ抗体の特徴付けを記載する。
【０８５２】
全血からヒトＰＢＭＣを単離し、続いて、それぞれ１００ｎＭで、抗ＴＣＲ  Ｖβ５抗体（抗体Ｅ）または抗ＣＤ３ｅ抗体（ＯＫＴ３およびＳＰ３４−２）で固相（プレート被覆）刺激を行った。１日目、３日目、５日目、または７日目に上清を回収し、続いて、ＩＦＮｇ、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−１β、ＩＬ−１０またはＴＮＦαについてマルチプレックスサイトカイン分析を行った。データは、製造業者のプロトコールに従って、ＭＳＤ（Ｍｅｓｏ  Ｓｃａｌｅ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ）プラットフォームを用いて定量化した。
【０８５３】
図２１Ａに示されるように、プレート結合した抗ＴＣＲ  Ｖβ５抗体（抗体Ｅ）または抗ＣＤ３ｅ抗体（ＯＫＴ３およびＳＰ３４−２）を用いて、ヒトＰＢＭＣを活性化した場合、Ｔ細胞サイトカインＩＦＮｇが誘導された。ＩＬ−２産生に関して、抗ＴＣＲ  Ｖβ５抗体（抗体Ｅ）で活性化されたＰＢＭＣは、抗ＣＤ３ｅ抗体（ＯＫＴ３またはＳＰ３４−２）で活性化されたＰＢＭＣと比較して、遅延動態を伴うＩＬ−２産生の増加をもたらした（図２１Ｂ）。
【０８５４】
また、サイトカインＩＬ−６、ＩＬ−１β、ＩＬ−１０およびＴＮＦ−αの産生は、「サイトカインストーム」（適切にはＣＲＳ）と関連し、類似の条件下で評価された。図２２Ａ〜２２Ｄは、抗ＣＤ３ｅ抗体で活性化されたＰＢＭＣがＩＬ−１β（図２２Ａ）、ＩＬ−６（図２２Ｂ）、ＴＮＦ−α（図２２Ｃ）およびＩＬ−１０（図２２Ｄ）の産生を実証することを示すが、これらのサイトカインの誘導は、抗ＴＣＲ  Ｖβ５抗体（抗体Ｅ）で活性化したＰＢＭＣでは全く観察されないかまたはほとんど観察されなかった。
【０８５５】
この実施例で提供されるデータは、ＴＣＲ  Ｖβに対して指向される抗体が、例えば、Ｔ細胞のサブセットを優先的に活性化することができ、サイトカインストームまたはＣＲＳに関連するサイトカインの誘導をもたらさないことを示す。
【０８５６】
実施例９：ＢＣＭＡおよびＴＣＲβＶに対する二重標的抗体分子の特徴
この実施例は、Ｔ細胞のサブセットに結合し、活性化することができるが、例えば、ＣＲＳが全く低減しないかまたは顕著には低減しない、抗ＴＣＲβＶ結合部分およびＢＣＭＡ結合部分（分子Ｈ）を含む二重標的抗体（例えば、二特異性分子）の特徴付けを記載する。
【０８５７】
ヒトＰＢＭＣを全血から単離し、続いて、それぞれ１００ｎＭで、抗ＴＣＲβＶ×ＢＣＭＡ二特異性分子（分子Ｈ）または抗ＣＤ３ｅ抗体（ＯＫＴ３）で固相（プレート被覆）刺激を行った。１日目、２日目、３日目、または５日目に上清を回収し、その後、ＩＦＮｇ、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−１β、ＩＬ−１０またはＴＮＦαについてマルチプレックスサイトカイン分析を行った。データは、製造業者のプロトコールに従って、ＭＳＤ（Ｍｅｓｏ  Ｓｃａｌｅ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ）プラットフォームを用いて定量化された。
【０８５８】
図２３Ａに示されるように、プレート結合した抗ＴＣＲβＶ×ＢＣＭＡ二特異性分子（分子Ｈ）または抗ＣＤ３ｅ抗体（ＯＫＴ３）を用いてヒトＰＢＭＣを活性化した場合、Ｔ細胞サイトカインＩＦＮｇが誘導された。ＩＬ−２産生に関して、抗ＴＣＲβＶ×ＢＣＭＡ二特異性分子（分子Ｈ）で活性化されたＰＢＭＣは、抗ＣＤ３ｅ抗体（ＯＫＴ３）で活性化されたＰＢＭＣと比較して、ＩＬ−２産生の増加をもたらした（図２３Ｂ）。
【０８５９】
また、サイトカインＩＬ−６、ＩＬ−１β、ＩＬ−１０およびＴＮＦ−αの産生は、「サイトカインストーム」（適切にはＣＲＳ）と関連し、類似の条件下で評価された。図２３Ｃ〜Ｅは、抗ＣＤ３ｅ抗体で活性化されたＰＢＭＣがＩＬ−１β（図２３Ｃ）、ＩＬ−６（図２３Ｄ）、ＴＮＦ−α（図２３Ｄ）およびＩＬ−１０（図２３Ｅ）の産生を実証するが、これらのサイトカインの誘導は、抗ＴＣＲβＶ×ＢＣＭＡ二特異性分子（分子Ｈ）で活性化されたＰＢＭＣでは全く観察されないかまたはほとんど観察されなかった。
【０８６０】
この実施例で提供されるデータは、ＴＣＲ  Ｖβに対して指向される抗体が、例えば、Ｔ細胞のサブセットを優先的に活性化することができ、サイトカインストームまたはＣＲＳに関連するサイトカインの誘導をもたらさないことを示す。
【０８６１】
実施例１０：抗ＴＣＲＶｂ抗体のサイトカインおよびケモカインプロファイル
この実施例は、抗ＴＣＲ  Ｖβ抗体による活性化後に、ＰＢＭＣによって分泌されるサイトカインおよびケモカインを記載する。
【０８６２】
全血からヒトＰＢＭＣを単離し、続いて、それぞれ１００ｎＭで、抗ＴＣＲβＶ抗体（Ａ−Ｈ．１、Ｂ−Ｈ．１）、または抗ＴＣＲＶｂ抗体（分子Ｈ）、アイソタイプ対照（ＢＧＭ０１２２）または抗ＣＤ３ｅ抗体（ＳＰ３４）を含む二特異性分子で固相（プレート被覆）刺激を行った。１日目、２日目、３日目、４日目、５日目、６日目、７日目および８日目に上清を回収し、続いて、示されたサイトカインまたはケモカインについて多重分析を行った。データは、製造業者のプロトコールに従って、ＭＳＤ（Ｍｅｓｏ  Ｓｃａｌｅ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ）プラットフォームを用いて定量化された。ＢＧＭ０１２２は、以下：
ＭＥＴＤＴＬＬＬＷＶＬＬＬＷＶＰＧＳＴＧＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＬＮＤＩＦＥＡＱＫＩＥＷＨＥ（配列番号３２８３）のアミノ酸配列を含む。
【０８６３】
図２５Ａ〜２５Ｊ、図２６Ａ〜２６Ｈ、および図２７Ａ〜２７Ｌは、示された抗体で活性化されたＰＢＭＣからのサイトカインおよびケモカインのレベルを示す。
図２５Ａに示されるように、プレート結合した抗ＴＣＲ  Ｖβ抗体または抗ＣＤ３ｅ抗体（ＯＫＴ３）を用いて、ヒトＰＢＭＣを活性化した場合、Ｔ細胞サイトカインＩＦＮｇが誘導された。ＩＬ−２産生に関して、抗ＴＣＲ  Ｖβ抗体で活性化されたＰＢＭＣは、抗ＣＤ３ｅ抗体（ＯＫＴ３）で活性化されたＰＢＭＣと比較して、遅延動態を伴うＩＬ−２産生の増加をもたらした（図２５Ｂ）。
【０８６４】
ＩＬ−１β（図２５Ｃ）、ＩＬ−６（図２５Ｄ）、ＩＬ−１０（図２５Ｅ）、ＩＬ−４（図２５Ｆ）、ＴＮＦα（図２５Ｇ）、ＩＰ−１０（図２６Ｃ）、ＩＬ−１２−２３ｐ４０（図２７Ｄ）、ＩＬ−１７Ａ（図２７Ｇ）およびＩＬ−１ａ（図２７Ｈ）は、抗ＣＤ３ｅ抗体（ＯＫＴ３）によって誘導され、抗ＴＣＲＶｂ抗体で活性化されたＰＢＭＣで、これらのサイトカインまたはケモカインの誘導は全く観察されないかまたはほとんど観察されなかった。
【０８６５】
抗ＴＣＲ  Ｖβ抗体で活性化されたＰＢＭＣは、ＩＬ−１３（図２５Ｉ）、ＩＬ−８（図２５Ｊ）、エオタキシン（図２６Ａ）、エオタキシン３（図２６Ｂ）、ＩＬ−１８（ＨＡ）（図２６Ｃ）、ＭＣＰ−１（図２６Ｅ）、ＭＣＰ−４（図２６Ｆ）、ＭＤＣ（図２６Ｇ）、ＭＩＰ１ａ（図２６Ｈ）、ＭＩＰ１Ｂ（図２７Ａ）、ＴＡＲＣ（図２７Ｂ）、ＧＭ−ＣＳＦ（図２７Ｃ）、ＩＬ−１５（図２７Ｅ）、ＩＬ−１６（図２７Ｆ）、およびＩＬ−１５（図２７Ｉ）、ＩＬ−７（図２７Ｊ）の誘導を実証した。
【０８６６】
実施例１１：ＴＣＲ  Ｖｂ活性化Ｔ細胞のナノストリングに基づく遺伝子発現プロファイリング
この実施例は、ＴＣＲ  Ｖβ活性化Ｔ細胞の遺伝子発現プロファイリングを記載し、例えば、Ｔ細胞のＴＣＲ  Ｖβ活性化の根底にある潜在的なメカニズムまたは経路を明らかにする。
【０８６７】
第１の研究では、抗ＴＣＲ  Ｖβ１３．１抗体Ａ−Ｈ．１を抗ＣＤ３抗体ＯＫＴ３と比較した。簡単に述べると、全血からヒトＰＢＭＣを単離した。単離されたＰＢＭＣから、ヒトＣＤ３＋Ｔ細胞を磁気ビーズ分離（負の選択）（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ  ｂｉｏｔｅｃ）を用いて単離し、１００ｎＭで、固定化（プレート被覆）された抗ＴＣＲ  Ｖβ１３．１抗体（Ａ−Ｈ．１）または抗ＣＤ３抗体（ＯＫＴ３）によって６日間、活性化した。次に、製造業者のプロトコールに従って、遺伝子発現プロファイリング（ＰａｎＣａｎｃｅｒ  ＩＯ  ３６０（商標）パネル、ｎａｎｏＳｔｒｉｎｇ）のために、活性化Ｔ細胞（プレート被覆由来）を調製した。差次的遺伝子発現分析は、ｎＳｏｌｖｅｒ分析ソフトウェア（Ｎａｎｏｓｔｒｉｎｇ）を用いて、抗ＴＣＲ  Ｖβ１３．１（Ａ−Ｈ．１）対抗ＣＤ３（ＯＫＴ３）活性化Ｔ細胞によりグループ化された。表１５Ａに示されるデータは、３人のドナーの平均値である。表１５Ａに示される差次的に制御された遺伝子のｐ値は、０．０５以下である。遺伝子発現の倍の変化を示す表１５Ａの第４列において、正の値は、ＯＫＴ３活性化Ｔ細胞と比較して、ＴＣＲ  Ｖβ活性化Ｔ細胞において転写レベルで上方制御される遺伝子を指し、負の値は、ＯＫＴ３活性化Ｔ細胞と比較して、ＴＣＲ  Ｖβ活性化Ｔ細胞において転写レベルで下方制御される遺伝子を指す。
【０８６８】
【表１６−１】
2021530246.tif 000078
【０８６９】
【表１６−２】
2021530246.tif 000079
【０８７０】
【表１６−３】
2021530246.tif 000080
【０８７１】
【表１６−４】
2021530246.tif 000081
【０８７２】
第２の研究では、多特異性抗ＴＣＲ  Ｖβ１３．１／抗ＢＣＭＡ抗体分子Ｈを抗ＣＤ３抗体ＯＫＴ３と比較した。精製されたＴ細胞は、１００ｎＭで、抗ＴＣＲ  Ｖβ抗体分子Ｈまたは抗ＣＤ３ｅ抗体（ＯＫＴ３）で６日間、固相抗ＴＣＲ  Ｖβ抗体で刺激された。拡大されたＴ細胞を遠心分離により回収し、続いて、ＲＮＡを抽出した。ｎＣｏｕｎｔｅｒ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ（Ｎａｎｏｓｔｒｉｎｇ）を用いて、７７８個の免疫関連遺伝子をカウントし、続いて、ｎＳｏｌｖｅｒ分析ツールを用いて遺伝子発現分析を行った。この実施例に記載されるデータは、３人のドナーの代表的なものである。
【０８７３】
この分析に基づいて、一連の遺伝子が、ＯＫＴ３活性化Ｔ細胞と比較して、ＴＣＲ  Ｖβ活性化Ｔ細胞において差次的に制御されていることが同定された（表１５Ｂ）。表１５Ｂに示される差次的に制御された遺伝子のｐ値は、０．０５以下である。例えば、ＬＩＦ、ＣＤ４０ＬＧ、ＰＤＣＤ１、ＣＸＣＲ５、ＬＴＡ、およびＣＤ８０はすべて、ＯＫＴ３活性化Ｔ細胞と比較して、ＴＣＲ  Ｖβ活性化Ｔ細胞において転写レベルで上方制御される。ＧＺＭＫ、ＥＮＴＰＤ１（ＣＤ３９）、ＴＣＦ７、ＣＤ９６、ＨＬＡ−ＤＲＢ４、ＳＩＧＩＲＲおよびＳＥＬＬは、ＯＫＴ３活性化Ｔ細胞と比較して、ＴＣＲ  Ｖβ活性化Ｔ細胞において転写レベルで下方制御される。ＴＣＲ  Ｖβ活性化Ｔ細胞はまた、高レベルの細胞溶解性エフェクター（例えば、ＩＦＮｇ、グランザイムＢおよびパーフォリン）を発現した。
【０８７４】
【表１７】
2021530246.tif 000082
【０８７５】
実施例１２：親和性成熟ヒト化抗体Ａ−Ｈ抗体の結合親和性
この実施例は、組換えタンパク質ＴＣＲＶＢ  ６−５に対する親和性成熟ヒト化抗体Ａ−Ｈ抗体の結合親和性の評価を記載する。
【０８７６】
抗体Ａ−Ｈヒト化抗体を親和性成熟させた。得られた親和性成熟抗体を、以下に記載されるように、ＴＣＲＶＢ  ６−５に対するそれらの結合親和性について試験した。
５μｇ／ｍＬのＴＣＲＶＢ  ６−５をビオチンＣＡＰシリーズＳセンサーチップ上に６０ＲＵに固定した。ＢＪＭ０２７７を２００ｎＭに希釈し、次に、２倍に連続希釈した。会合は１２０秒、解離は３００秒であった。このアッセイは、１×ＨＢＳ−ＥＰ＋緩衝液ｐＨ７．４および２５℃で行った。データは、１：１結合モデルを用いて適合された。
【０８７７】
５μｇ／ｍＬのＴＣＲＶＢ  ６−５をビオチンＣＡＰシリーズＳセンサーチップ上に６０ＲＵに固定した。Ａ−Ｈ．４５を５０ｎＭに希釈し、次に、２倍連続希釈した。会合は１２０秒、解離は３００秒であった。このアッセイは、１×ＨＢＳ−ＥＰ＋緩衝液ｐＨ７．４および２５℃で行った。データは、１：１結合モデルを用いて適合された。Ａ−Ｈ．４５は、改善された酵母クローン（ＴＣＲｖＢ／ＣＤ１９二特異性）であり、ＨＣＤＲ３の直前のフレームワーク３における最後の残基に突然変異（ＧからＶ）を含む。親和性は、ＢＪＭ０２７７の３５倍である（表１６）。
【０８７８】
５μｇ／ｍＬのＴＣＲＶＢ  ６−５をビオチンＣＡＰシリーズＳセンサーチップ上に６０ＲＵに固定した。Ａ−Ｈ．５２を５０ｎＭに希釈し、次に、２倍に連続希釈した。会合は１２０秒、解離は３００秒であった。このアッセイは、１×ＨＢＳ−ＥＰ＋緩衝液ｐＨ７．４および２５℃で行った。データは、１：１結合モデルを用いて適合された。Ａ−Ｈ．５２はファージクローンであり、一価ｓｃＦｖである。Ａ−Ｈ．５２は、ＣＤＲＨ１に２つの突然変異を有する。Ａ−Ｈ．５２の親和性は、ＢＪＭ０２７７の２０倍である（表１６）。
【０８７９】
５μｇ／ｍＬのＴＣＲＶＢ  ６−５をビオチンＣＡＰシリーズＳセンサーチップ上に６０ＲＵに固定した。Ａ−Ｈ．５３を５０ｎＭに希釈し、次に、２倍連続希釈した。会合は１２０秒、解離は３００秒であった。このアッセイは、１×ＨＢＳ−ＥＰ＋緩衝液ｐＨ７．４および２５℃で行った。データは、１：１結合モデルを用いて適合された。Ａ−Ｈ．５３（ファージクローン）の親和性はｐＭ範囲内にある（表１６）。Ａ−Ｈ．５３の親和性は、ＢＪＭ０２７７の２００倍である（表１６）。
【０８８０】
５μｇ／ｍＬのＴＣＲＶＢ  ６−５をビオチンＣＡＰシリーズＳセンサーチップ上に６０ＲＵに固定した。Ａ−Ｈ．５４を５０ｎＭに希釈し、次に、２倍連続希釈した。会合は１２０秒、解離は３００秒であった。このアッセイは、１×ＨＢＳ−ＥＰ＋緩衝液ｐＨ７．４および２５℃で行った。データは、１：１結合モデルを用いて適合された。Ａ−Ｈ．５４（ファージクローン）の親和性は、ＢＪＭ０２７７の１７倍である（表１６）。
【０８８１】
【表１８】
2021530246.tif 000083
【０８８２】
実施例１３：皮下ヒト腫瘍異種移植モデルにおけるＣＤ１９／ＴＣＲｖＢ二特異性分子の療法有効性
この実施例は、皮下ヒト腫瘍動物モデルにおけるＣＤ１９／ＴＣＲｖＢ二特異性分子のｉｎ  ｖｉｖｏ有効性を実証する。
【０８８３】
研究の１日目に、ホタルルシフェラーゼを安定に発現する、１×１０６細胞のヒトがん細胞系Ｒａｊｉ（Ｒａｊｉ−ｌｕｃ）は、雌ＮＯＤ／ＳＣＩＤ／ＩＬ−２Ｒγヌル（ＮＳＧ）マウスの右背側腹に皮下注射された。３日目に、１０×１０６個のヒトＰＢＭＣを腹腔内に注射によりマウスに移植した。
【０８８４】
抗体処置は、腫瘍が平均腫瘍容積（ＴＶ）が８０ｍｍ３に達した１０日目に開始した。各群の平均ＴＶは、処置の開始時にいずれの他の群と統計学的に差はなかった。マウスは、０．２ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇおよび５ｍｇ／ｋｇのＣＤ１９／ＴＣＲｖＢ二特異性分子を３日ごとに計７回ボーラス静脈内注射で処置された。腫瘍体積（ＴＶ）を３日ごとにキャリパーで測定し、ＴＶの群間比較により進行を評価した。腫瘍増殖阻害Ｔ／Ｃ［％］は、Ｔ／Ｃ［％］＝１００×（分析群の平均ＴＶ）／（ビヒクル群の平均ＴＶ）として算出された。
【０８８５】
結果を表１７および図２８に示す。ＣＤ１９／ＴＣＲｖＢ二特異性分子による処置は、ビヒクル対照処置と比較して、腫瘍増殖を阻害した（図２８）。結果は、ＣＤ１９／ＴＣＲｖＢ二特異性分子が腫瘍成長を阻害し、抗腫瘍活性を有することを実証する。
【０８８６】
【表１９】
2021530246.tif 000084
【０８８７】
実施例１４：ヒト腫瘍異種移植モデルにおけるＣＤ１９／ＴＣＲｖＢ二特異性分子の療法有効性
この実施例は、異種移植動物モデルにおけるＣＤ１９／ＴＣＲｖＢ二特異性分子のｉｎ  ｖｉｖｏ有効性を実証する。
【０８８８】
研究の１日目に、１０×１０６個のヒトＰＢＭＣは、腹腔内への注射によりＮＯＤ／ＳＣＩＤ／ＩＬ−２Ｒγヌル（ＮＳＧ）マウスに移植された。
７日目に、ホタルルシフェラーゼを安定に発現する、１×１０６細胞のヒトがん細胞系Ｒａｊｉ（Ｒａｊｉ−ｌｕｃ）は、ＮＯＤ／ＳＣＩＤ／ＩＬ−２Ｒγヌル（ＮＳＧ）マウスに静脈内注射された。対照動物は、ホタルルシフェラーゼを安定に発現する、１０×１０６細胞のＣＤ１９陰性ヒトがん細胞系Ｋ５６２（Ｋ５６２−ｌｕｃ）を注射された。これらの動物を用いて、ＣＤ１９／ＴＣＲｖＢ分子の特異的殺滅能を評価した。抗体処置は、腫瘍生着が４×１０７光子／秒の平均生物発光フラックスレベルに達した１６日目に開始した。各群の平均フラックスレベルは、処置の開始時にいずれの他の群と統計学的に差はなかった。マウスは、１ｍｇ／ｋｇおよび５ｍｇ／ｋｇのＣＤ１９／ＴＣＲｖＢ二特異性分子を３日ごとに計６回ボーラス静脈内注射で処置された。
【０８８９】
腫瘍負荷は、生物発光イメージングにより毎週測定され、総生物発光フラックス（総フラックス）の群間比較により評価された。腫瘍成長阻害Ｔ／Ｃ［％］は、Ｔ／Ｃ［％］＝１００×（分析群の平均総フラックス）／（ビヒクル群の平均総フラックス）として算出された。
【０８９０】
Ｒａｊｉ−ｌｕｃ移植動物の結果を表１８および図２９Ａに示し、Ｋ５６２−ｌｕｃ移植動物の結果を表１９および図２９Ｂに示す。結果は、ＣＤ１９／ＴＣＲｖＢ二特異性分子が腫瘍成長を阻害し、抗腫瘍活性を有することを実証する（図２９Ａおよび表１８）。
【０８９１】
【表２０】
2021530246.tif 000085
【０８９２】
【表２１】
2021530246.tif 000086
【０８９３】
実施例１５：ヒト腫瘍異種移植モデルにおけるＢＣＭＡ／ＴＣＲｖＢ二特異性分子の療法有効性
この実施例は、異種移植動物モデルにおけるＢＣＭＡ／ＴＣＲｖＢ二特異性分子のｉｎ  ｖｉｖｏ有効性を実証する。
【０８９４】
１日目に、ホタルルシフェラーゼを安定に発現する、２０×１０６細胞のヒトがん細胞系ＲＰＭＩ−８２２６（ＲＰＭＩ−８２２６−ｌｕｃ）をＮＯＤ／ＳＣＩＤ／ＩＬ−２Ｒγヌル（ＮＳＧ）マウスに静脈内注射した。１１日目に、１０×１０６個のヒトＰＢＭＣを腹腔内に注射によりマウスに移植した。抗体処置は、腫瘍生着が４×１０７光子／秒の平均生物発光フラックスレベルに達した１７日目に開始した。マウスは、ＢＣＭＡとＴＣＲｖＢの両方について２価である０．５ｍｇ／ｋｇの分子（２×２分子）、およびＢＣＭＡについて２価であり、ＴＣＲｖＢについて１価である０．５ｍｇ／ｋｇの分子（２×１分子）を週１回、計２用量で静脈内ボーラス注射により処置された。
【０８９５】
腫瘍負荷は、生物発光イメージングにより毎週測定され、総生物発光フラックス（総フラックス）の群間比較により評価された。腫瘍成長阻害Ｔ／Ｃ［％］は、Ｔ／Ｃ［％］＝１００×（分析群の平均総フラックス）／（ビヒクル群の平均総フラックス）として算出された。
【０８９６】
これらの研究の結果を表２０および図３０に示す。ＢＣＭＡ／ＴＣＲｖＢ二特異性分子による処置は、ビヒクル対照処置と比較して、腫瘍成長を阻害した（図２９）。結果は、ＢＣＭＡ／ＴＣＲｖＢ二特異性分子が腫瘍成長を阻害し、抗腫瘍活性を有することを実証する。
【０８９７】
【表２２】
2021530246.tif 000087
【０８９８】
実施例１６：抗体構築物の発現および精製
プラスミドの構築
タンパク質配列をコードするＤＮＡをＣｒｉｃｅｔｕｌｕｓ  ｇｒｉｓｅｕｓにおける発現のために最適化し、合成し、ゲートウェイクローニングを用いてｐｃＤＮＡ３．４−ＴＯＰＯ（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  Ａ１４６９７）にクローニングした。すべての構築物は、Ｉｇカッパリーダー配列ＭＥＴＤＴＬＬＬＷＶＬＬＬＷＶＰＧＳＴＧ（配列番号３２８８）を含有した。
【０８９９】
発現および精製
プラスミドをＥｘｐｉ２９３細胞（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  Ａ１４５２７）またはＥｘｐｉＣＨＯ細胞（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  Ａ２９１２７）のいずれかに同時トランスフェクトした。１：１の重鎖比および３：２の軽鎖／重鎖比を有する多特異性構築物について、該当する場合、１ｍｇの総ＤＮＡを用いてトランスフェクションを行った。Ｅｘｐｉ２９３細胞におけるトランスフェクションは、線状の２５，０００  Ｄａポリエチレンイミン（ＰＥＩ、Ｐｏｌｙｓｃｉｅｎｃｅｓ  Ｉｎｃ  ２３９６６）を用いて、総ＤＮＡと３：１の比で行われた。ＤＮＡおよびＰＥＩは、各々、５０ｍＬのＯｐｔｉＭｅｍ（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  ３１９８５０８８）培地に添加され、滅菌濾過された。ＤＮＡおよびＰＥＩを１０分間合わせ、１．８〜２．８×１０６細胞／ｍＬの細胞密度および少なくとも９５％の生存率でＥｘｐｉ２９３細胞に添加した。ＥｘｐｉＣＨＯトランスフェクションは、製造業者の指示に従って行われた。Ｅｘｐｉ２９３細胞を、トランスフェクション後の５〜７日間、８％ＣＯ２の３７℃で加湿インキュベーター中に増殖させ、ＥｘｐｉＣＨＯ細胞を、５％ＣＯ２に３２℃にて１４日間、増殖させた。４５００×ｇでの遠心分離により細胞をペレット化し、上清を０．２μｍ膜を通して濾過した。プロテインＡレジン（ＧＥ  １７−１２７９−０３）を濾過された上清に添加し、１〜３時間、室温でインキュベートした。レジンをカラムに充填し、３×１０カラム体積のダルベッコのリン酸緩衝生理食塩水（ＤＰＢＳ、Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  １４１９０−１４４）で洗浄した。結合したタンパク質を、２０ｍＭクエン酸塩、１００ｍＭ  ＮａＣｌ、ｐＨ２．９でカラムから溶出させた。必要に応じて、タンパク質は、ＤＰＢＳの泳動緩衝液を用いて、Ｓｕｐｅｒｄｅｘ  ２００カラム上でリガンド親和性および／またはサイズ排除クロマトグラフィーを用いてさらに精製された。
【０９００】
実施例１７：抗ＴＲＢＶ５−５抗体クローン抗体Ｃのヒト化
マウス抗ＴＣＲｖβ抗体クローン抗体Ｃ  ＶＨおよびＶＬの生殖系列は、ＩＭＧＴ命名法を用いて割り当てられ、ＣＤＲ領域はＫａｂａｔおよびＣｈｏｔｈｉａ分類を組み合わせて定義された。配列番号２３２および配列番号２３３は、それぞれ、抗体Ｃ  ＶＨおよびＶＬ配列であり、ＶＨ生殖系列はマウスＩＧＨＶ２−６−７＊０１であり、ＶＬ生殖系列はマウスＩＧＫＶ１０−９４＊０２である。実施例１に記載される抗体Ａをヒト化するために適用された方法は、抗体Ｃをヒト化するために用いられた。抗体Ｃ  ＶＨをヒトＩＧＨＶ２−２６＊０１、ＩＧＨＶ２−７０＊０４、ＩＧＨＶ４−４＊０２、ＩＧＨＶ２−５＊０９、ＩＧＨＶ２−５＊０８、ＩＧＨＶ４−３４＊０９、ＩＧＨＶ４−５９＊０１、ＩＧＨＶ４−５９＊０７、ＩＧＨＶ４−６１＊０２、ＩＧＨＶ４−３８−２＊０１、ＩＧＨＶ４−３１＊０１、ＩＧＨＶ３−４９＊０４、ＩＧＨＶ３−４９＊０２、ＩＧＨＶ４−４＊０７、ＩＧＨＶ３−４９＊０５、ＩＧＨＶ４−３４＊１０、ＩＧＨＶ４−２８＊０４、ＩＧＨＶ３−７２＊０１、ＩＧＨＶ３−１５＊０７、ＩＧＨＶ６−１＊０１、ＩＧＨＶ３−７＊０１、ＩＧＨＶ４−３４＊０１、ＩＧＨＶ３−３３＊０２、ＩＧＨＶ３−４８＊０２、ＩＧＨＶ３−２３＊０３、ＩＧＨＶ３−２１＊０１、ＩＧＨＶ３−７３＊０１、ＩＧＨＶ３−３０＊０２、ＩＧＨＶ３−７＊０１、ＩＧＨＶ３−４３＊０１、およびＩＧＨＶ３−５３＊０３にヒト化し、抗体Ｃ  ＶＬをＩＧＫＶ１Ｄ−４３＊０１、ＩＧＫＶ１−２７＊０１、ＩＧＫＶ１−１７＊０２、ＩＧＫＶ１−１７＊０１、ＩＧＫＶ１−５＊０１、ＩＧＫＶ４−１＊０１、ＩＧＫＶ３−７＊０２、ＩＧＫＶ３−７＊０１、ＩＧＫＶ２−２９＊０２、ＩＧＫＶ６Ｄ−４１＊０１、ＩＧＫＶ２−２８＊０１、ＩＧＫＶ２−４０＊０１、ＩＧＫＶ３−１５＊０１、ＩＧＫＶ２−２４＊０１、ＩＧＫＶ６−２１＊０１、ＩＧＫＶ２Ｄ−２６＊０１、およびＩＧＫＶ２Ｄ−２６＊０３にヒト化した。
【０９０１】
配列番号３０４０〜３０８９は抗体Ｃヒト化重鎖であり、配列番号３０００〜３０３９は抗体Ｃヒト化軽鎖である（表１０に記載される）。
実施例１８：ＴＲＢＶ１０−１、ＴＲＢＶ１０−２、およびＴＲＢＶ１０−３抗体クローン抗体Ｄのヒト化
マウス抗ＴＣＲｖβ抗体クローン抗体Ｄ  ＶＨおよびＶＬの生殖系列は、ＩＭＧＴ命名法を用いて割り当てられ、ＣＤＲ領域はＫａｂａｔおよびＣｈｏｔｈｉａ分類を組み合わせて定義された。配列番号３１８３および配列番号３１８４は、それぞれ、抗体Ｄ  ＶＨおよびＶＬ配列であり、ＶＨ生殖系列はマウスＩＧＨＶ５−６＊０１であり、ＶＬ生殖系列はマウスＩＧＫＶ４−５９＊０１である。
【０９０２】
実施例１に記載される抗体Ａをヒト化するために適用された方法は、抗体Ｄをヒト化するために用いられた。抗体Ｄ  ＶＨをヒトＩＧＨＶ３−３０＊０３、ＩＧＨＶ３−３０＊０２、ＩＧＨＶ３−７＊０１、ＩＧＨＶ３−２１＊０１、ＩＧＨＶ３−２３＊０４、ＩＧＨＶ３−３０＊１５、ＩＧＨＶ３−４８＊０２、ＩＧＨＶ３−５３＊０４、ＩＧＨＶ３−２３＊０３、ＩＧＨＶ３−５３＊０３、ＩＧＨＶ３−５３＊０１、ＩＧＨＶ３−９＊０１、ＩＧＨＶ３−３０＊１３、ＩＧＨＶ３−２０＊０１、ＩＧＨＶ３−４３Ｄ＊０３、ＩＧＨＶ３−４３＊０２、ＩＧＨＶ３−４３＊０１、ＩＧＨＶ３−５３＊０２、ＩＧＨＶ３−１３＊０１、ＩＧＨＶ３−３８−３＊０１、ＩＧＨＶ３−９＊０３、ＩＧＨＶ３−６４Ｄ＊０６、ＩＧＨＶ３−３３＊０２、ＩＧＨＶ３−１１＊０３、ＩＧＨＶ３−６４＊０２、ＩＧＨＶ３−６４＊０１、ＩＧＨＶ３−６４＊０３、ＩＧＨＶ３−７＊０１、ＩＧＨＶ３−３５＊０１、ＩＧＨＶ３−１３＊０２、ＩＧＨＶ３−３８＊０２、およびＩＧＨＶ３−３８＊０１にヒト化し、抗体Ｄ  ＶＬは、ヒトＩＧＫＶ３−１１＊０１、ＩＧＫＶ１−１３＊０２、ＩＧＫＶ１−９＊０１、ＩＧＫＶ６−２１＊０１、ＩＧＫＶ１Ｄ−４３＊０１、ＩＧＫＶ３−１１＊０１、ＩＧＫＶ３Ｄ−１１＊０２、ＩＧＫＶ１−１７＊０３、ＩＧＫＶ３Ｄ−２０＊０１、ＩＧＫＶ３−２０＊０１、ＩＧＫＶ１Ｄ−１６＊０１、ＩＧＫＶ４−１＊０１、ＩＧＫＶ２−２８＊０１、ＩＧＫＶ２−４０＊０１、ＩＧＫＶ２−２９＊０２、ＩＧＫＶ２−２９＊０１、ＩＧＫＶ１Ｄ−４２＊０１、ＩＧＫＶ２−２４＊０１、およびＩＧＫＶ５−２＊０１にヒト化された。配列番号３２２５〜３２７４は、抗体Ｄヒト化重鎖であり、配列番号３１８５〜３２２４は、抗体Ｄヒト化軽鎖である（表１２に記載される）。
【０９０３】
実施例１９：ＴＲＢＶ５−５およびＴＲＢＶ５−６抗体クローン抗体Ｅのヒト化
マウス抗ＴＣＲβ抗体クローン抗体Ｅ  ＶＨおよびＶＬの生殖系列は、ＩＭＧＴ命名法を用いて割り当てられ、ＣＤＲ領域はＫａｂａｔおよびＣｈｏｔｈｉａ分類を組み合わせて定義された。配列番号３０９１および配列番号３０９２は、それぞれ、抗体Ｅ  ＶＨおよびＶＬ配列であり、ＶＨ生殖系列はマウスＩＧＨＶ１−８２＊０１であり、ＶＬ生殖系列はマウスＩＧＫＶ３−５＊０１である。
【０９０４】
実施例１に記載される抗体Ａをヒト化するために適用された方法は、抗体Ｅをヒト化するために用いられた。抗体Ｅ  ＶＨをヒトＩＧＨＶ１−６９＊０８、ＩＧＨＶ１−３＊０２、ＩＧＨＶ１−１８＊０３、ＩＧＨＶ１−３＊０１、ＩＧＨＶ１−１８＊０１、ＩＧＨＶ１−２＊０６、ＩＧＨＶ１−２＊０１、ＩＧＨＶ１−２＊０６、ＩＧＨＶ１−８＊０１、ＩＧＨＶ７−４−１＊０２、ＩＧＨＶ１−５８＊０２、ＩＧＨＶ５−５１＊０１、ＩＧＨＶ７−４−１＊０４、ＩＧＨＶ７−８１＊０１、ＩＧＨＶ５−５１＊０４、ＩＧＨＶ５−５１＊０１、ＩＧＨＶ１−４５＊０３、ＩＧＨＶ３−４９＊０４、ＩＧＨＶ３−４９＊０２、ＩＧＨＶ３−４９＊０５、ＩＧＨＶ４−４＊０２、ＩＧＨＶ３−４９＊０５、ＩＧＨＶ３−７３＊０１、ＩＧＨＶ４−４＊０２、ＩＧＨＶ３−１５＊０７、ＩＧＨＶ３−１５＊０２、ＩＧＨＶ３−７２＊０１、ＩＧＨＶ４−５９＊０７、ＩＧＨＶ４−３１＊０１、ＩＧＨＶ４−３１＊０２、ＩＧＨＶ３−３０＊１５、ＩＧＨＶ３−２１＊０１、ＩＧＨＶ３−７＊０１、ＩＧＨＶ４−２８＊０１、ＩＧＨＶ４−２８＊０２、ＩＧＨＶ３−３０＊０８、ＩＧＨＶ３−３０＊０５、およびＩＧＨＶ３−３０＊０１にヒト化し、抗体Ｅ  ＶＬをヒトＩＧＫＶ４−１＊０１、ＩＧＫＶ３−１１＊０１、ＩＧＫＶ３−２０＊０２、ＩＧＫＶ３−１１＊０１、ＩＧＫＶ１−１３＊０２、ＩＧＫＶ３Ｄ−１１＊０１、ＩＧＫＶ３Ｄ−２０＊０２、ＩＧＫＶ１−１３＊０２、ＩＧＫＶ３Ｄ−２０＊０１、ＩＧＫＶ１−９＊０１、ＩＧＫＶ３Ｄ−１５＊０３、ＩＧＫＶ３−１５＊０１、ＩＧＫＶ１−５＊０１、ＩＧＫＶ２Ｄ−２９＊０１、ＩＧＫＶ３−７＊０２、ＩＧＫＶ１−９＊０１、ＩＧＫＶ２−２８＊０１、ＩＧＫＶ２−４０＊０１、ＩＧＫＶ２Ｄ−２９＊０２、ＩＧＫＶ３−７＊０１、ＩＧＫＶ２−３０＊０１、ＩＧＫＶ２−２４＊０１、ＩＧＫＶ６Ｄ−４１＊０１、ＩＧＫＶ１Ｄ−４２＊０１、ＩＧＫＶ２Ｄ−２６＊０１、ＩＧＫＶ２Ｄ−２６＊０３、およびＩＧＫＶ５−２＊０１にヒト化した。配列番号３１３３〜３１８２は抗体Ｅヒト化重鎖であり、配列番号３０９３〜３１３２は抗体Ｅヒト化軽鎖である（表１１に記載される）。
【０９０５】
実施例２０：抗ＴＣＲＶｂ／ＣＤ１９抗体分子および抗ＴＣＲＶｂ／ＢＣＭＡ抗体分子のｉｎ  ｖｉｔｒｏ細胞毒性
抗ＴＣＲ／抗ＣＤ１９二重標的抗体分子
ヒトＰＢＭＣを全血から単離した。単離されたＰＢＭＣから、ヒトＣＤ３＋Ｔ細胞を磁気ビーズ分離（負の選択）（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ  ｂｉｏｔｅｃ）を用いて単離し、１００ｎＭで、固定化（プレート被覆）された抗ＴＣＲ  Ｖβ１３．１（Ａ−Ｈ．１）によって６日間、活性化した。次に、活性化Ｔ細胞（プレート被覆由来）を移し、５０Ｕ／ｍｌの濃度でヒトＩＬ−２の存在下、組織培養フラスコ中でさらに２日間拡大させた。拡大させたＴＣＲ  Ｖβ１３．１＋細胞を洗浄し、Ｅ：Ｔ比が５：１の、ＣＤ１９を発現するＲａｊｉ細胞（標的細胞）、および連続希釈濃度のＴ細胞エンゲージャー二特異性抗体、例えば、抗ＴＣＲ  Ｖβ１３．１／ＣＤ１９（分子Ｆ）、抗ＣＤ３／ＣＤ１９、および抗ＴＣＲ  Ｖβ１３．１（Ａ−Ｈ．１、対照として供給）の存在下で２４時間、共培養した。２４時間後、細胞の共培養上清を回収し、特異的な標的細胞死について定量化した。標的細胞（Ｒａｊｉ細胞）は、ＫＩＬＲ−レトロ粒子レポーター細胞アッセイ（ＤｉｓｃｏｖｅｒＸ）である。ＫＩＬＲ−Ｒａｊｉ標的細胞は、ＫＩＬＲレトロ粒子を用いて、増強されたＰｒｏＬａｂｅｌ（ｅＰＬ）、β−ｇａｌレポーター断片でタグ化されたタンパク質を安定に発現するように操作され、標的細胞の膜が細胞死により損傷された場合、標的細胞は、タグ化されたタンパク質を培地中に放出する。このＫＩＬＲレポータータンパク質は、β−ｇａｌレポーターの酵素アクセプター（ＥＡ）断片を含有する検出試薬の添加によって、培地／上清中で検出することができる。これにより、基質を加水分解して化学発光出力（ＲＬＵ）を与える活性β−ｇａｌ酵素が形成される。標的細胞死のパーセンテージ（％）は、以下の式：
（ＲＬＵ処置−ＲＬＵ処置なし）／（ＲＬＵ最大溶解−ＲＬＵ処置なし）×１００
を用いて算出される。図３１Ａに示されるデータは、４人のドナーからの平均値である。
【０９０６】
抗ＴＣＲ／抗ＢＣＭＡ二重標的抗体分子
全血からヒトＰＢＭＣを単離した。単離されたＰＢＭＣから、ヒトＣＤ３＋Ｔ細胞を磁気ビーズ分離（負の選択）（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ  ｂｉｏｔｅｃ）を用いて単離し、１００ｎＭで、固定化（プレート被覆）された抗ＴＣＲ  Ｖβ１３．１（Ａ−Ｈ．１）によって６日間、活性化した。次に、活性化Ｔ細胞（プレート被覆由来）を移し、５０Ｕ／ｍｌの濃度でヒトＩＬ−２の存在下、組織培養フラスコ中でさらに２日間、拡大させた。拡大させたＴＣＲ  Ｖβ１３．１＋細胞を洗浄し、Ｅ：Ｔ比が５：１の、ＢＣＭＡを発現するＲＰＭＩ８２２６細胞（標的細胞）、および連続希釈濃度のＴ細胞エンゲージャー二特異性抗体、例えば、抗ＴＣＲ  Ｖβ１３．１／ＢＣＭＡ（分子Ｇ）、抗ＣＤ３／ＢＣＭＡ、および抗ＴＣＲ  Ｖβ１３．１（Ａ−Ｈ．１、対照として供給）の存在下で２４時間、共培養した。２４時間後、細胞の共培養上清を回収し、特異的な標的細胞死について定量化した。標的細胞（ＲＰＭＩ８２２６細胞）は、ＫＩＬＲ−レトロ粒子レポーター細胞アッセイ（ＤｉｓｃｏｖｅｒＸ）である。ＫＩＬＲ−ＲＰＭＩ８２２６標的細胞は、ＫＩＬＲレトロ粒子を用いて、増強されたＰｒｏＬａｂｅｌ（ｅＰＬ）、β−ｇａｌレポーター断片でタグ化されたタンパク質を安定に発現するように操作され、標的細胞の膜が細胞死により損傷された場合、標的細胞は、タグ化されたタンパク質を培地中に放出する。このＫＩＬＲレポータータンパク質を検出し、標的細胞死のパーセンテージ（％）を上記されるように算出した。図３１Ｂに示されるデータは、４人のドナーからの平均値である。
【０９０７】
実施例２１：抗ＴＣＲＶｂ／ＢＣＭＡ抗体分子のサイトカインプロファイル
本実施例は、抗ＴＣＲ  Ｖβ／抗ＢＣＭＡ抗体分子Ｈによる活性化後にＰＢＭＣによって分泌されるサイトカインを記載する。比較のために、抗ＴＣＲβ定常１（ＴＲＢＣ１）抗体の抗体Ｆによる活性化も分析された。
【０９０８】
簡単に説明すると、全血からヒトＰＢＭＣを単離し、続いて、１００ｎＭで、分子Ｈまたは抗体Ｆによる固相（プレート被覆）刺激を行った。上清を、１日目、２日目、３日目、および５日目（分子Ｈについて）、または２日目および５日目（抗体Ｆについて）に回収し、続いて、ＩＦＮγ、ＩＬ−２、ＩＬ−１β、ＩＬ−６、ＩＬ−１０、およびＴＮＦαについてマルチプレックスサイトカイン分析を行い、製造業者のプロトコールに従って、ＭＳＤ（Ｍｅｓｏ  Ｓｃａｌｅ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ）プラットフォームを用いて定量化した。
【０９０９】
図３２Ａ−３２Ｆおよび３３Ａ−３３Ｆに示されるように、抗ＴＣＲ  Ｖβ／抗ＢＣＭＡ抗体分子Ｈのサイトカインプロファイルは、抗ＣＤ３抗体ＯＫＴ３または抗ＴＲＢＣ１抗体Ｆのものとは異なる。
【０９１０】
参考文献による組み込み
本明細書に記載されるすべての刊行物および特許は、個々の刊行物または特許の各々が、参照により組み込まれるように具体的におよび個別に指示されているかのように、それらの全体がこれにより参照により本明細書に組み込まれる。
【０９１１】
均等物
当業者は、本明細書に記載される本発明の具体的な実施形態に対する多くの均等物を、単に日常的な実験を用いて認識するか、または確認することができる。このような均等物は、以下の特許請求の範囲に包含されることが意図される。
【図１Ａ】
2021530246.tif 000088
【図１Ｂ】
2021530246.tif 000089
【図２Ａ】
2021530246.tif 000090
【図２Ｂ−１】
2021530246.tif 000091
【図２Ｂ−２】
2021530246.tif 000092
【図３】
2021530246.tif 000093
【図４Ａ−１】
2021530246.tif 000094
【図４Ａ−２】
2021530246.tif 000095
【図４Ｂ】
2021530246.tif 000096
【図４Ｃ】
2021530246.tif 000097
【図５Ａ】
2021530246.tif 000098
【図５Ｂ】
2021530246.tif 000099
【図６Ａ】
2021530246.tif 000100
【図６Ｂ】
2021530246.tif 000101
【図７Ａ】
2021530246.tif 000102
【図７Ｂ】
2021530246.tif 000103
【図８Ａ】
2021530246.tif 000104
【図８Ｂ】
2021530246.tif 000105
【図９Ａ】
2021530246.tif 000106
【図９Ｂ】
2021530246.tif 000107
【図１０Ａ】
2021530246.tif 000108
【図１０Ｂ】
2021530246.tif 000109
【図１１Ａ】
2021530246.tif 000110
【図１１Ｂ】
2021530246.tif 000111
【図１２】
2021530246.tif 000112
【図１３Ａ】
2021530246.tif 000113
【図１３Ｂ】
2021530246.tif 000114
【図１３Ｃ】
2021530246.tif 000115
【図１３Ｄ】
2021530246.tif 000116
【図１３Ｅ】
2021530246.tif 000117
【図１３Ｆ】
2021530246.tif 000118
【図１４Ａ】
2021530246.tif 000119
【図１４Ｂ−１】
2021530246.tif 000120
【図１４Ｂ−２】
2021530246.tif 000121
【図１５Ａ】
2021530246.tif 000122
【図１５Ｂ】
2021530246.tif 000123
【図１５Ｃ】
2021530246.tif 000124
【図１６Ａ】
2021530246.tif 000125
【図１６Ｂ】
2021530246.tif 000126
【図１７】
2021530246.tif 000127
【図１８Ａ】
2021530246.tif 000128
【図１８Ｂ】
2021530246.tif 000129
【図１９Ａ】
2021530246.tif 000130
【図１９Ｂ】
2021530246.tif 000131
【図１９Ｃ】
2021530246.tif 000132
【図２０Ａ】
2021530246.tif 000133
【図２０Ｂ】
2021530246.tif 000134
【図２０Ｃ】
2021530246.tif 000135
【図２０Ｄ】
2021530246.tif 000136
【図２０Ｅ】
2021530246.tif 000137
【図２１Ａ】
2021530246.tif 000138
【図２１Ｂ】
2021530246.tif 000139
【図２２Ａ】
2021530246.tif 000140
【図２２Ｂ】
2021530246.tif 000141
【図２２Ｃ】
2021530246.tif 000142
【図２２Ｄ】
2021530246.tif 000143
【図２３Ａ】
2021530246.tif 000144
【図２３Ｂ】
2021530246.tif 000145
【図２３Ｃ】
2021530246.tif 000146
【図２３Ｄ】
2021530246.tif 000147
【図２３Ｅ】
2021530246.tif 000148
【図２３Ｆ】
2021530246.tif 000149
【図２４Ａ】
2021530246.tif 000150
【図２４Ｂ】
2021530246.tif 000151
【図２５Ａ】
2021530246.tif 000152
【図２５Ｂ】
2021530246.tif 000153
【図２５Ｃ】
2021530246.tif 000154
【図２５Ｄ】
2021530246.tif 000155
【図２５Ｅ】
2021530246.tif 000156
【図２５Ｆ】
2021530246.tif 000157
【図２５Ｇ】
2021530246.tif 000158
【図２５Ｈ】
2021530246.tif 000159
【図２５Ｉ】
2021530246.tif 000160
【図２５Ｊ】
2021530246.tif 000161
【図２６Ａ】
2021530246.tif 000162
【図２６Ｂ】
2021530246.tif 000163
【図２６Ｃ】
2021530246.tif 000164
【図２６Ｄ】
2021530246.tif 000165
【図２６Ｅ】
2021530246.tif 000166
【図２６Ｆ】
2021530246.tif 000167
【図２６Ｇ】
2021530246.tif 000168
【図２６Ｈ】
2021530246.tif 000169
【図２７Ａ】
2021530246.tif 000170
【図２７Ｂ】
2021530246.tif 000171
【図２７Ｃ】
2021530246.tif 000172
【図２７Ｄ】
2021530246.tif 000173
【図２７Ｅ】
2021530246.tif 000174
【図２７Ｆ】
2021530246.tif 000175
【図２７Ｇ】
2021530246.tif 000176
【図２７Ｈ】
2021530246.tif 000177
【図２７Ｉ】
2021530246.tif 000178
【図２７Ｊ】
2021530246.tif 000179
【図２７Ｋ】
2021530246.tif 000180
【図２７Ｌ】
2021530246.tif 000181
【図２８】
2021530246.tif 000182
【図２９】
2021530246.tif 000183
【図３０】
2021530246.tif 000184
【図３１Ａ】
2021530246.tif 000185
【図３１Ｂ】
2021530246.tif 000186
【図３２Ａ】
2021530246.tif 000187
【図３２Ｂ】
2021530246.tif 000188
【図３２Ｃ】
2021530246.tif 000189
【図３２Ｄ】
2021530246.tif 000190
【図３２Ｅ】
2021530246.tif 000191
【図３２Ｆ】
2021530246.tif 000192
【図３３Ａ】
2021530246.tif 000193
【図３３Ｂ】
2021530246.tif 000194
【図３３Ｃ】
2021530246.tif 000195
【図３３Ｄ】
2021530246.tif 000196
【図３３Ｅ】
2021530246.tif 000197
【図３３Ｆ】
2021530246.tif 000198
【配列表】
2021530246000001.app
【国際調査報告】
2021530246.tif 000199
2021530246.tif 000200
2021530246.tif 000201
2021530246.tif 000202
2021530246.tif 000203
2021530246.tif 000204