(57)【要約】  本開示は、ヒトＢＣＭＡに特異的に結合するＢＣＭＡ結合分子、ＢＣＭＡ結合分子を含むコンジュゲート並びにＢＣＭＡ結合分子及びコンジュゲートを含む医薬組成物を提供する。本開示は、細胞表面ＢＣＭＡを発現する癌を治療するためにＢＣＭＡ結合分子を使用する方法をさらに提供する。本開示は、ＢＣＭＡ結合分子を発現するように操作された組み換え宿主細胞及びＢＣＭＡ結合分子が発現される条件下で宿主細胞を培養することにより、ＢＣＭＡ結合分子を産生する方法をさらにまた提供する。
2021525715.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒトＢＣＭＡに特異的に結合し、且つ表１Ａ−１、表１Ｂ−１、表１Ｃ−１、表１Ｄ−１、表１Ｅ−１、表１Ｆ−１、表１Ｇ−１、表１Ｈ−１、表１Ｉ−１、表１Ｊ−１、表１Ｋ−１（ａ）、表１Ｋ−１（ｂ）、表１Ｌ−１、表１Ｍ−１、表１Ｎ−１（ａ）又は表１Ｎ−１（ｂ）に記載されるＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２及びＣＤＲ−Ｌ３配列並びに表１Ａ−２、表１Ｂ−２、表１Ｃ−２、表１Ｄ−２、表１Ｅ−２、表１Ｆ−２、表１Ｇ−２、表１Ｈ−２、表１Ｉ−２、表１Ｊ−２、表１Ｋ−２、表１Ｋ−２、表１Ｌ−２、表１Ｍ−２、表１Ｎ−２又は表１Ｎ−２にそれぞれ記載される対応するＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含むＢＣＭＡ結合分子。
【請求項２】
表１Ａ−１に記載されるＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２及びＣＤＲ−Ｌ３配列並びに表１Ａ−２に記載される対応するＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む、請求項１に記載のＢＣＭＡ結合分子。
【請求項３】
表１Ｂ−１に記載されるＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２及びＣＤＲ−Ｌ３配列並びに表１Ｂ−２に記載される対応するＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む、請求項１に記載のＢＣＭＡ結合分子。
【請求項４】
表１Ｃ−１に記載されるＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２及びＣＤＲ−Ｌ３配列並びに表１Ｃ−２に記載される対応するＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む、請求項１に記載のＢＣＭＡ結合分子。
【請求項５】
表１Ｄ−１に記載されるＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２及びＣＤＲ−Ｌ３配列並びに表１Ｄ−２に記載される対応するＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む、請求項１に記載のＢＣＭＡ結合分子。
【請求項６】
表１Ｅ−１に記載されるＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２及びＣＤＲ−Ｌ３配列並びに表１Ｅ−２に記載される対応するＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む、請求項１に記載のＢＣＭＡ結合分子。
【請求項７】
表１Ｆ−１に記載されるＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２及びＣＤＲ−Ｌ３配列並びに表１Ｆ−２に記載される対応するＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む、請求項１に記載のＢＣＭＡ結合分子。
【請求項８】
表１Ｇ−１に記載されるＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２及びＣＤＲ−Ｌ３配列並びに表１Ｇ−２に記載される対応するＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む、請求項１に記載のＢＣＭＡ結合分子。
【請求項９】
表１Ｈ−１に記載されるＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２及びＣＤＲ−Ｌ３配列並びに表１Ｈ−２に記載される対応するＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む、請求項１に記載のＢＣＭＡ結合分子。
【請求項１０】
表１Ｉ−１に記載されるＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２及びＣＤＲ−Ｌ３配列並びに表１Ｉ−２に記載される対応するＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む、請求項１に記載のＢＣＭＡ結合分子。
【請求項１１】
表１Ｊ−１に記載されるＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２及びＣＤＲ−Ｌ３配列並びに表１Ｊ−２に記載される対応するＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む、請求項１に記載のＢＣＭＡ結合分子。
【請求項１２】
表１Ｋ−１（ａ）又は表１Ｋ−１（ｂ）に記載されるＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２及びＣＤＲ−Ｌ３配列並びに表１Ｋ−２に記載される対応するＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む、請求項１に記載のＢＣＭＡ結合分子。
【請求項１３】
表１Ｌ−１に記載されるＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２及びＣＤＲ−Ｌ３配列並びに表１Ｌ−２に記載される対応するＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む、請求項１に記載のＢＣＭＡ結合分子。
【請求項１４】
表１Ｍ−１に記載されるＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２及びＣＤＲ−Ｌ３配列並びに表１Ｍ−２に記載される対応するＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む、請求項１に記載のＢＣＭＡ結合分子。
【請求項１５】
表１Ｎ−１（ａ）又は表１Ｎ−１（ｂ）に記載されるＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２及びＣＤＲ−Ｌ３配列並びに表１Ｎ−２に記載される対応するＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む、請求項１に記載のＢＣＭＡ結合分子。
【請求項１６】
前記ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、ＡＢ１のものである、請求項４〜９のいずれか一項に記載のＢＣＭＡ結合分子。
【請求項１７】
前記ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、ＡＢ２のものである、請求項４〜９のいずれか一項に記載のＢＣＭＡ結合分子。
【請求項１８】
前記ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、ＡＢ３のものである、請求項１０〜１５のいずれか一項に記載のＢＣＭＡ結合分子。
【請求項１９】
表１Ｏ−１に記載される軽鎖可変配列及び表１Ｏ−２に記載される対応する重鎖可変配列を含む、請求項１に記載のＢＣＭＡ結合分子。
【請求項２０】
前記軽鎖可変配列及び前記対応する重鎖可変配列は、ＡＢ１のものである、請求項１９に記載のＢＣＭＡ結合分子。
【請求項２１】
前記軽鎖可変配列及び前記対応する重鎖可変配列は、ＡＢ２のものである、請求項１９に記載のＢＣＭＡ結合分子。
【請求項２２】
前記軽鎖可変配列及び前記対応する重鎖可変配列は、ＡＢ３のものである、請求項１９に記載のＢＣＭＡ結合分子。
【請求項２３】
抗体、抗体フラグメント、ｓｃＦｖ、ｄｓＦｖ、Ｆｖ、Ｆａｂ、ｓｃＦａｂ、（Ｆａｂ’）２又は単一ドメイン抗体（ＳＤＡＢ）を含む、請求項１〜２２のいずれか一項に記載のＢＣＭＡ結合分子。
【請求項２４】
抗体又は抗体フラグメントを含む、請求項２３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
【請求項２５】
ｓｃＦｖを含む、請求項２３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
【請求項２６】
多重特異性結合分子である、請求項１〜２５のいずれか一項に記載のＢＣＭＡ結合分子。
【請求項２７】
二重特異性結合分子（ＢＢＭ）である、請求項２６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
【請求項２８】
前記ＢＢＭは、
（ａ）ＢＣＭＡに特異的に結合する抗原結合ドメイン１（ＡＢＤ１）；及び
（ｂ）ヒトＴ細胞受容体（ＴＣＲ）複合体の構成要素に特異的に結合する抗原結合ドメイン２（ＡＢＤ２）
を含む、請求項２７に記載のＢＣＭＡ結合分子。
【請求項２９】
ＡＢＤ１は、ＡＢＤ２がヒトＴＣＲ複合体の構成要素に結合されるのと同時にＢＣＭＡに結合することが可能である、請求項２８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
【請求項３０】
ＡＢＤ１は、抗体、抗体フラグメント、ｓｃＦｖ、ｄｓＦｖ、Ｆｖ、Ｆａｂ、ｓｃＦａｂ、（Ｆａｂ’）２、単一ドメイン抗体（ＳＤＡＢ）、ＶＨ若しくはＶＬドメイン又はラクダ科ＶＨＨドメインである、請求項２８又は２９に記載のＢＣＭＡ結合分子。
【請求項３１】
ＡＢＤ１は、ｓｃＦｖである、請求項３０に記載のＢＣＭＡ結合分子。
【請求項３２】
ＡＢＤ１は、Ｆａｂである、請求項３０に記載のＢＣＭＡ結合分子。
【請求項３３】
ＡＢＤ１は、抗ＢＣＭＡ抗体又はその抗原結合ドメインである、請求項３０に記載のＢＣＭＡ結合分子。
【請求項３４】
ＡＢＤ２は、抗体、抗体フラグメント、ｓｃＦｖ、ｄｓＦｖ、Ｆｖ、Ｆａｂ、ｓｃＦａｂ、（Ｆａｂ’）２、単一ドメイン抗体（ＳＤＡＢ）、ＶＨ若しくはＶＬドメイン又はラクダ科ＶＨＨドメインである、請求項２８〜３３のいずれか一項に記載のＢＣＭＡ結合分子。
【請求項３５】
ＡＢＤ２は、ｓｃＦｖである、請求項３４に記載のＢＣＭＡ結合分子。
【請求項３６】
ＡＢＤ２は、Ｆａｂである、請求項３４に記載のＢＣＭＡ結合分子。
【請求項３７】
前記ＴＣＲ複合体の前記構成要素は、ＣＤ３である、請求項２８〜３６のいずれか一項に記載のＢＣＭＡ結合分子。
【請求項３８】
ＡＢＤ２は、抗ＣＤ３抗体又はその抗原結合ドメインである、請求項３７に記載のＢＣＭＡ結合分子。
【請求項３９】
ＡＢＤ２は、ＣＤ３−１〜ＣＤ３−１２７のいずれか１つのＣＤＲ配列を含む、請求項３８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
【請求項４０】
２価である、請求項２７〜３９のいずれか一項に記載のＢＣＭＡ結合分子。
【請求項４１】
３価である、請求項２７〜３９のいずれか一項に記載のＢＣＭＡ結合分子。
【請求項４２】
４価である、請求項２７〜３９のいずれか一項に記載のＢＣＭＡ結合分子。
【請求項４３】
（ａ）第１のポリペプチドであって、
（ｉ）第１のＦｃ領域を含む第１の重鎖定常ドメイン；
（ｉｉ）表３Ａ中のＣＤ３−２３として示されるｓｃＦｖのアミノ酸配列を含むｓｃＦｖであって、ヒンジによって前記第１のＦｃ領域のＮ末端に共有結合されるｓｃＦｖ
を含む第１のポリペプチド；
（ｂ）第２のポリペプチドであって、
（ｉ）重鎖可変ドメイン；
（ｉｉ）第２のＦｃ領域を含む第２の重鎖定常ドメイン
を含む第２のポリペプチド；及び
（ｃ）軽鎖定常ドメイン及び軽鎖可変ドメインを含む第３のポリペプチド
を含むＢＣＭＡ結合分子であって、
Ａ．前記第１及び第２のＦｃ領域は、Ｆｃドメインを形成し；
Ｂ．前記第１及び第２のＦｃ領域は、Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ：Ｌ３６８Ｄ／３７０Ｓを含むアミノ酸置換の組を有し；
Ｃ．前記第１及び／又は第２のＦｃ領域は、アミノ酸修飾Ｅ２２３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３６ｄｅｌ及びＳ２６７Ｋを含み；
Ｄ．前記第１及び／又は第２のＦｃ領域は、アミノ酸置換Ｎ２０８Ｄ、Ｑ２９５Ｅ、Ｎ３８４Ｄ、Ｑ４１８Ｅ及びＮ４２１Ｄを含み；及び
Ｅ．前記軽鎖可変ドメイン及び前記重鎖可変ドメインは、表１Ｏ−１及び表１Ｏ−２に記載されるＡＢ１、ＡＢ２又はＡＢ３の軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメイン配列を含む、ＢＣＭＡ結合分子。
【請求項４４】
（ａ）第１のポリペプチドであって、そのアミノ酸配列は、配列番号５０９のアミノ酸配列を含む、第１のポリペプチド；
（ｂ）第２のポリペプチドであって、そのアミノ酸配列は、配列番号５１０のアミノ酸配列を含む、第２のポリペプチド；及び
（ｃ）第３のポリペプチドであって、そのアミノ酸配列は、配列番号５０４のアミノ酸配列を含む、第３のポリペプチド
を含むＢＣＭＡ結合分子。
【請求項４５】
薬剤として使用するための、請求項１〜４４のいずれか一項に記載のＢＣＭＡ結合分子。
【請求項４６】
ＢＣＭＡの発現に関連する疾患又は障害を治療するのに使用するための、請求項１〜４４のいずれか一項に記載のＢＣＭＡ結合分子。
【請求項４７】
請求項１〜４４のいずれか一項に記載のＢＣＭＡ結合分子及び薬剤を含むコンジュゲート。
【請求項４８】
請求項１〜４４のいずれか一項に記載のＢＣＭＡ結合分子又は請求項４７に記載のコンジュゲート及び薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物。
【請求項４９】
ＢＣＭＡの発現に関連する疾患又は障害に罹患した対象を治療する方法であって、有効量の、請求項１〜４４のいずれか一項に記載のＢＣＭＡ結合分子、請求項４７に記載のコンジュゲート又は請求項４８に記載の医薬組成物を前記対象に投与することを含む方法。
【請求項５０】
前記疾患又は障害は、形質細胞腫を含む、請求項４９に記載の方法。
【請求項５１】
前記疾患又は障害は、細胞表面ＢＣＭＡを発現するＢ細胞悪性腫瘍を含む、請求項４９に記載の方法。
【請求項５２】
少なくとも１つの追加的な薬剤を前記対象に投与することをさらに含む、請求項４９〜５１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５３】
前記疾患又は障害は、自己免疫疾患を含む、請求項４９に記載の方法。
【請求項５４】
請求項１〜４４のいずれか一項に記載のＢＣＭ結合分子をコードする１つ又は複数の核酸。
【請求項５５】
請求項１〜４４のいずれか一項に記載のＢＣＭＡ結合分子を発現するように操作された細胞。
【請求項５６】
１つ以上のプロモーターの制御下において、請求項１〜４４のいずれか一項に記載のＢＣＭＡ結合分子又は請求項４７に記載のコンジュゲートをコードする１つ以上の核酸配列を含む１つ以上の発現ベクターでトランスフェクトされた細胞。
【請求項５７】
ＢＣＭＡ結合分子を産生する方法であって、
（ａ）前記ＢＣＭＡ結合分子が発現される条件において、請求項５５又は５６に記載の細胞を培養することと；
（ｂ）細胞培養物から前記ＢＣＭＡ結合分子を回収することと
を含む方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
１．関連出願の相互参照
本出願は、２０１８年６月１日に出願された米国仮特許出願第６２／６７９，６１１号明細書及び２０１８年６月１２日に出願された米国仮特許出願第６２／６８４，０４６号明細書の優先権の利益を主張するものであり、この両方の仮特許出願の内容全体は、参照により本明細書に援用される。
【０００２】
２．配列表
本出願は、ＡＳＣＩＩ形式で電子的に提出された配列表を含み、この配列表は、全体が参照により本明細書に援用される。このＡＳＣＩＩコピーは、２０１９年５月１０日に作成され、ＮＯＶ−００３ＷＯ＿ＳＬと命名され、４００，３７５バイトのサイズである。
【０００３】
３．参照による援用
本出願において引用される全ての刊行物、特許、特許出願及び他の文献は、それぞれの個々の刊行物、特許、特許出願又は他の文献があらゆる目的のために参照により援用されることが個別に示されているのと同程度に、あらゆる目的のためにその全体が参照により本明細書に援用される。本明細書に援用される参照文献の１つ以上と本開示の教示との間に矛盾がある場合、本明細書の教示が意図される。
【背景技術】
【０００４】
ＢＣＭＡは、Ｂ細胞系統の細胞において発現される腫瘍壊死ファミリー受容体（ＴＮＦＲ）メンバーである。ＢＣＭＡ発現は、形質細胞、形質芽球及び活性化Ｂ細胞及びメモリーＢ細胞の亜集団を含む、長寿命形質細胞の運命を仮定する最終分化したＢ細胞において最も高い。ＢＣＭＡは、長期体液性免疫を維持するために形質細胞の生存を仲介することに関与する。ＢＣＭＡの発現は、多くの癌、自己免疫疾患及び感染症と関連付けられている。ＢＣＭＡの増加した発現を有する癌としては、いくつかの血液癌、例えば多発性骨髄腫、ホジキンリンパ腫及び非ホジキンリンパ腫、様々な白血病及び膠芽細胞腫が挙げられる。
【０００５】
ＢＣＭＡ抗体−薬物コンジュゲート、例えばＧＳＫ２８５７９１６（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈｋｌｉｎｅ）並びにＢＭＣＡ及びＣＤ３を標的とする二重特異性ＢＣＭＡ結合分子、例えばＰＦ０６８６３１３５（Ｐｆｉｚｅｒ）、ＥＭ  ９０１（ＥｎｇＭａｂ）、ＪＮＪ−６４００７９５７（Ｊａｎｓｓｅｎ）及びＡＭＧ  ４２０（Ａｍｇｅｎ）を含む様々なＢＣＭＡ結合分子が臨床開発中である。Ｃｈｏ  ｅｔ  ａｌ．，２０１８，Ｆｒｏｎｔ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．９：１８２１；国際公開第２０１６／０１６６６２９号パンフレットを参照されたい。
【０００６】
ＣＤ３二重特異性分子を含む任意の抗体ベースの薬物の主な安全性への懸念の１つは、サイトカイン放出症候群（「ＣＲＳ」）などの生命に関わる副作用を誘発するその可能性である。Ｓｈｉｍａｂｕｋｕｒｏ−Ｖｏｒｎｈａｇｅｎ，Ａ．ｅｔ  ａｌ．，２０１８，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ  Ｃａｎｃｅｒ．６：５６を参照されたい。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
したがって、ＢＣＭＡに結合し、且つ高い有効性を保持しながら、向上した安全性プロファイルを有する（例えば、サイトカイン放出を減少させる）ポリペプチド、例えば抗体及び多重特異性結合分子に対する満たされていない医学的ニーズがある。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本開示は、ヒトＢＣＭＡ、例えば抗体、その抗原結合フラグメントに特異的に結合するＢＣＭＡ結合分子及びヒトＢＣＭＡに特異的に結合する多重特異性分子を提供する。
【０００９】
一態様において、本開示は、ＢＣＭＡ抗原結合ドメイン（「ＡＢＤ」）を含む単一特異性ＢＣＭＡ結合分子（例えば、抗体及びその抗原結合フラグメント）を提供する。単一特異性であり得る例示的なＢＣＭＡ結合分子は、以下の第７．２節及び特定の実施形態１〜１４２に記載されている。
【００１０】
別の態様において、本開示は、ヒトＢＣＭＡに特異的に結合する第１のＡＢＤ（「ＡＢＤ１」又は「ＢＣＭＡ  ＡＢＤ」）及び第２の抗原に特異的に結合する第２のＡＢＤ（「ＡＢＤ２」）、例えばヒトＣＤ３又はＴＣＲ複合体の他の構成要素（本明細書において「ＴＣＲ  ＡＢＤ」と呼ばれることがある）を含む多重特異性結合分子（「ＭＢＭ」）（例えば、二重特異性結合分子（「ＢＢＭ」））を提供する。ＡＢＤ１、ＡＢＤ２、ＢＣＭＡ  ＡＢＤ及びＴＣＲ  ＡＢＤという用語は、便宜上使用されるに過ぎず、ＢＢＭの任意の特定の形態を示すことを意図されていない。ある実施形態において、ＴＣＲ  ＡＢＤは、ＣＤ３に結合する（本明細書において「ＣＤ３  ＡＢＤ」などと呼ばれる）。したがって、ＡＢＤ２及びＴＣＲ  ＡＢＤに関連する開示は、ＣＤ３  ＡＢＤにも適用可能である。このような多重特異性分子は、ＣＤ３＋エフェクターＴ細胞をＢＣＭＡ＋部位に指向させ、それにより、ＣＤ３＋エフェクターＴ細胞がＢＣＭＡ＋細胞及び腫瘍を攻撃し、溶解させることを可能にするのに使用され得る。例示的なＭＢＭの特徴は、以下の第７．２〜７．６節及び特定の実施形態１４３〜７１６に記載されている。
【００１１】
ＡＢＤは、免疫グロブリンベース又は非免疫グロブリンベースであり得、ＭＢＭは、免疫グロブリンベースのＡＢＤ又は免疫グロブリンベースのＡＢＤ及び非免疫グロブリンベースのＡＢＤの任意の組合せを含み得る。ＢＣＭＡ結合分子において使用され得る免疫グロブリンベースのＡＢＤは、以下の第７．２及び７．３．１節並びに特定の実施形態１４７〜３２９に記載されている。ＭＢＭにおいて使用され得る非免疫グロブリンベースのＡＢＤは、以下の第７．３．２節及び特定の実施形態３３０〜３３１に記載されている。ＢＣＭＡに結合する例示的なＡＢＤのさらなる特徴は、以下の第７．２節及び特定の実施形態１４７〜１５５に記載されている。ＴＣＲ複合体の構成要素に結合する例示的なＡＢＤのさらなる特徴は、以下の第７．３．３節及び特定の実施形態１５６〜３３１に記載されている。
【００１２】
ＢＣＭＡ結合分子（又はその部分）のＡＢＤは、例えば、短鎖ペプチドリンカー又はＦｃドメインによって互いに連結され得る。ＡＢＤ及びその部分を連結して、ＢＣＭＡ結合分子を形成するための方法及び構成要素は、以下の第７．４節及び特定の実施形態３３２〜６２０に記載されている。
【００１３】
ある実施形態において、本開示のＭＢＭは、ＢＢＭである。ＢＢＭは、少なくとも２つのＡＢＤを有する（すなわち、ＢＢＭは、少なくとも２価である）が、３つ以上のＡＢＤを有することもある。例えば、ＢＢＭは、３つのＡＢＤ（すなわち３価である）又は４つのＡＢＤ（すなわち４価である）を有し得、ただし、ＢＢＭは、ＢＣＭＡに結合し得る少なくとも１つのＡＢＤ及びＢＣＭＡ以外の標的抗原に結合し得る少なくとも１つのＡＢＤを有する。例示的な２価、３価及び４価ＢＢＭ形態は、図１に示され、以下の第７．５節及び特定の実施形態６２１〜６８１に記載されている。
【００１４】
本開示は、ＢＣＭＡ結合分子（単一の核酸又は複数の核酸のいずれかにおける）をコードする核酸並びにこの核酸及びＢＣＭＡ結合分子を発現するように操作された組み換え宿主細胞及び細胞株をさらに提供する。例示的な核酸、宿主細胞及び細胞株は、以下の第７．７節及び特定の実施形態１０５１〜１０５７に記載されている。
【００１５】
本開示は、延長された生体内半減期を有するＢＣＭＡ結合分子をさらに提供する。このようなＢＣＭＡ結合分子の例は、以下の第７．８節及び特定の実施形態８３６〜８４５に記載されている。
【００１６】
本開示は、ＢＣＭＡ結合分子を含む薬物コンジュゲートをさらに提供する。このようなコンジュゲートは、ＡＢＤの一部が非免疫グロブリンドメインであり得るにもかかわらず、便宜上、本明細書において「抗体−薬物コンジュゲート」又は「ＡＤＣ」と呼ばれる。ＡＤＣの例は、以下の第７．９節及び特定の実施形態８５１〜８８９に記載されている。
【００１７】
本開示は、ＢＣＭＡ結合分子及びポリペプチド、マーカー、診断剤若しくは検出可能剤又は固体担体を含むコンジュゲートをさらに提供する。このようなコンジュゲートの例は、以下の第７．１０及び７．１１節並びに特定の実施形態８４６〜８５０及び８９０〜８９１に記載されている。
【００１８】
ＢＣＭＡ結合分子及びＡＤＣを含む医薬組成物も提供される。医薬組成物の例は、以下の第７．１２節及び特定の実施形態８９２に記載されている。
【００１９】
例えば、ＢＣＭＡが発現される増殖性疾患（例えば、癌）を治療するために、自己免疫疾患を治療するために、且つＢＣＭＡの発現に関連する他の疾患及び病態を治療するために、ＢＣＭＡ結合分子、ＡＤＣ及び医薬組成物を使用する方法が本明細書においてさらに提供される。例示的な方法は、以下の第７．１３節並びに特定の実施形態８９３〜９７１及び１０１２〜１０５０に記載されている。
【００２０】
本開示は、ＢＣＭＡ結合分子、ＡＤＣ及び医薬組成物を他の薬剤及び治療法と組み合わせて使用する方法をさらに提供する。例示的な薬剤、治療法及び併用治療の方法は、以下の第７．１４節及び特定の実施形態９７２〜１０１１に記載されている。
【図面の簡単な説明】
【００２１】
【図１−１】例示的なＢＢＭ形態である。図１Ａは、図１Ｂ〜１ＡＧに示される例示的なＢＢＭ形態の構成要素を示す。各鎖の異なるドメインを連結する全ての領域が示されているわけではない（例えば、ｓｃＦｖのＶＨ及びＶＬドメインを連結するリンカー、ＦｃドメインのＣＨ２及びＣＨ３ドメインを連結するヒンジなどが省略されている）。図１Ｂ〜１Ｆは、２価ＢＢＭを示し；図１Ｇ〜１Ｚは、３価ＢＢＭを示し；図１ＡＡ〜１ＡＧは、４価ＢＢＭを示す。
【図１−２】（上記の通り。）
【図１−３】（上記の通り。）
【図１−４】（上記の通り。）
【図１−５】（上記の通り。）
【図１−６】（上記の通り。）
【図１−７】（上記の通り。）
【図１−８】（上記の通り。）
【図１−９】（上記の通り。）
【図１−１０】（上記の通り。）
【図１−１１】（上記の通り。）
【図１−１２】（上記の通り。）
【図１−１３】（上記の通り。）
【図１−１４】（上記の通り。）
【図１−１５】（上記の通り。）
【図１−１６】（上記の通り。）
【図１−１７】（上記の通り。）
【図１−１８】（上記の通り。）
【図１−１９】（上記の通り。）
【図１−２０】（上記の通り。）
【図１−２１】（上記の通り。）
【図１−２２】（上記の通り。）
【図１−２３】（上記の通り。）
【図１−２４】（上記の通り。）
【図１−２５】（上記の通り。）
【図１−２６】（上記の通り。）
【図１−２７】（上記の通り。）
【図１−２８】（上記の通り。）
【図１−２９】（上記の通り。）
【図１−３０】（上記の通り。）
【図１−３１】（上記の通り。）
【図１−３２】（上記の通り。）
【図１−３３】（上記の通り。）
【図２−１】ＢＣＭＡ反応性クローンを用いたモノクローナルファージＥＬＩＳＡ（実施例１）。図２Ａ：ＰＩ−２６；図２Ｂ：ＰＩ−２８；図２Ｃ：ＰＩ−６１；図２Ｄ：ＰＩＩＩ−７９；図２Ｅ：ＰＩＩＩ−７８；図２Ｆ：ＰＩＶ−２４；図２Ｇ：ＰＩＩ−５５；図２Ｈ：ＰＩＩ−４５；図２Ｉ：ＰＩ−４５。
【図２−２】（上記の通り。）
【図２−３】（上記の通り。）
【図２−４】（上記の通り。）
【図２−５】（上記の通り。）
【図２−６】（上記の通り。）
【図２−７】（上記の通り。）
【図２−８】（上記の通り。）
【図２−９】（上記の通り。）
【図３−１】個々の酵母クローンの表面への可溶性ＢＣＭＡの力価測定（実施例２）。図３Ａ：クローンＨ２／Ｌ２−１８；図３Ｂ：クローンＨ２／Ｌ２−２；図３Ｃ：クローンＨ２／Ｌ２−６８；図３Ｄ：クローンＨ２／Ｌ２−８０；図３Ｅ：クローンＨ２／Ｌ２−８３；図３Ｆ：クローンＨ２／Ｌ２−８８；図３Ｇ：クローンＨ２／Ｌ２−４７；図３Ｈ：クローンＨ２／Ｌ２−３６；図３Ｉ：クローンＨ２／Ｌ２−３４。
【図３−２】（上記の通り。）
【図３−３】（上記の通り。）
【図３−４】（上記の通り。）
【図３−５】（上記の通り。）
【図３−６】（上記の通り。）
【図３−７】（上記の通り。）
【図３−８】（上記の通り。）
【図３−９】（上記の通り。）
【図４】親ＰＩ−６１（配列番号１１３）並びに選択されたクローンＨ２／Ｌ２−２２（配列番号１１４）、Ｈ２／Ｌ２−８８（配列番号１１５）、Ｈ２／Ｌ２−３６（配列番号１１５）、Ｈ２／Ｌ２−３４（配列番号１１６）、Ｈ２／Ｌ２−６８（配列番号１１７）、Ｈ２／Ｌ２−１８（配列番号１１８）、Ｈ２／Ｌ２−４７（配列番号１１５）、Ｈ２／Ｌ２−２０（配列番号１１２）、Ｈ２／Ｌ２−８０（配列番号１１２）及びＨ２／Ｌ２−８３（配列番号１１５）のＣＤＲ−Ｈ２配列。
【図５】親ＰＩ−６１（配列番号１０３）並びに選択されたクローンＨ２／Ｌ２−２２（配列番号１０４）、Ｈ２／Ｌ２−８８（配列番号１０５）、Ｈ２／Ｌ２−３６（配列番号１０５）、Ｈ２／Ｌ２−３４（配列番号１０６）、Ｈ２／Ｌ２−６８（配列番号１０７）、Ｈ２／Ｌ２−１８（配列番号１０６）、Ｈ２／Ｌ２−４７（配列番号１０６）、Ｈ２／Ｌ２−２０（配列番号１０２）、Ｈ２／Ｌ２−８０（配列番号１０８）及びＨ２／Ｌ２−８３（配列番号１０５）のＣＤＲ−Ｌ２配列。
【図６】実施例３の二重特異性抗体のヘテロ二量体二重特異性抗体形式。
【図７】親ＰＩ−６１（配列番号１１３）並びに選択されたクローンＨ３−１（配列番号１１９）、Ｈ３−２（配列番号１２０）、Ｈ３−３（配列番号１２１）、Ｈ３−４（配列番号１１９）、Ｈ３−５（配列番号１２２）、Ｈ３−６（配列番号１１９）、Ｈ３−７（配列番号１１２）、Ｈ３−８（配列番号１１９）、Ｈ３−９（配列番号１１９）、Ｈ３−１０（配列番号１２０）、Ｈ３−１１（配列番号１２３）、Ｈ３−１２（配列番号１２４）、Ｈ３−１３（配列番号１１９）、Ｈ３−１４（配列番号１１９）及びＨ３−１５（配列番号１２５）のＣＤＲ−Ｈ２配列。
【図８】親ＰＩ−６１（配列番号１５５）並びに選択されたクローンＨ３−１（配列番号１５７）、Ｈ３−２（配列番号１５７）、Ｈ３−３（配列番号１５７）、Ｈ３−４（配列番号１５６）、Ｈ３−５（配列番号１５７）、Ｈ３−６（配列番号１５７）、Ｈ３−７（配列番号１５７）、Ｈ３−８（配列番号１５７）、Ｈ３−９（配列番号１５７）、Ｈ３−１０（配列番号１５７）、Ｈ３−１１（配列番号１５７）、Ｈ３−１２（配列番号１５７）、Ｈ３−１３（配列番号１５６）、Ｈ３−１４（配列番号１６１）及びＨ３−１５（配列番号１５６）のＣＤＲ−Ｌ２配列。
【図９】親ＰＩ−６１（配列番号４９）並びに選択されたクローンＨ３−１（配列番号１２７）、Ｈ３−２（配列番号１２８）、Ｈ３−３（配列番号１２７）、Ｈ３−４（配列番号１２７）、Ｈ３−５（配列番号１２９）、Ｈ３−６（配列番号１２７）、Ｈ３−７（配列番号１３０）、Ｈ３−８（配列番号１２７）、Ｈ３−９（配列番号１２７）、Ｈ３−１０（配列番号１３１）、Ｈ３−１１（配列番号１３２）、Ｈ３−１２（配列番号１３３）、Ｈ３−１３（配列番号１２７）、Ｈ３−１４（配列番号１２７）及びＨ３−１５（配列番号１３４）のＣＤＲ−Ｈ３配列。
【図１０】組み換え完全長ｈＢＣＭＡ及びｃｙｎｏＢＣＭＡへの結合を試験するために、実施例４において生成されるクローンのＥＬＩＳＡスクリーニング。
【図１１−１】ｈＢＣＭＡへの選択されたヒト抗ＢＣＭＡ抗体の結合を示すバイオレイヤー干渉法（ＢＬＩ）プロット（実施例４）。図１１Ａ：Ｒ１Ｆ２；図１１Ｂ：ＰＡＬＦ０１；図１１Ｃ：ＰＡＬＦ０３；図１１Ｄ：ＰＡＬＦ０４；図１１Ｅ：ＰＡＬＦ０５；図１１Ｆ：ＰＡＬＦ０６；図１１Ｇ：ＰＡＬＦ０７；図１１Ｈ：ＰＡＬＦ０８；図１１Ｉ：ＰＡＬＦ０９；図１１Ｊ：ＰＡＬＦ１１；図１１Ｋ：ＰＡＬＦ１２；図１１Ｌ：ＰＡＬＦ１３；図１１Ｍ：ＰＡＬＦ１４；図１１Ｎ：ＰＡＬＦ１５；図１１Ｏ：ＰＡＬＦ１６；図１１Ｐ：ＰＡＬＦ１７；図１１Ｑ：ＰＡＬＦ１８；図１１Ｒ：ＰＡＬＦ１９；図１１Ｓ：ＰＡＬＦ２０。
【図１１−２】（上記の通り。）
【図１１−３】（上記の通り。）
【図１１−４】（上記の通り。）
【図１１−５】（上記の通り。）
【図１１−６】（上記の通り。）
【図１１−７】（上記の通り。）
【図１１−８】（上記の通り。）
【図１１−９】（上記の通り。）
【図１１−１０】（上記の通り。）
【図１１−１１】（上記の通り。）
【図１１−１２】（上記の通り。）
【図１１−１３】（上記の通り。）
【図１１−１４】（上記の通り。）
【図１１−１５】（上記の通り。）
【図１１−１６】（上記の通り。）
【図１１−１７】（上記の通り。）
【図１１−１８】（上記の通り。）
【図１１−１９】（上記の通り。）
【図１２−１】ｃｙｎｏＢＣＭＡへの選択されたヒト抗ＢＣＭＡ抗体の結合を示すバイオレイヤー干渉法（ＢＬＩ）プロット（実施例４）。図１２Ａ：Ｒ１Ｆ２；図１２Ｂ：ＰＡＬＦ０１；図１２Ｃ：ＰＡＬＦ０３；図１２Ｄ：ＰＡＬＦ０４；図１２Ｅ：ＰＡＬＦ０５；図１２Ｆ：ＰＡＬＦ０６；図１２Ｇ：ＰＡＬＦ０７；図１２Ｈ：ＰＡＬＦ０８；図１２Ｉ：ＰＡＬＦ０９；図１２Ｊ：ＰＡＬＦ１１；図１２Ｋ：ＰＡＬＦ１２；図１２Ｌ：ＰＡＬＦ１３；図１２Ｍ：ＰＡＬＦ１４；図１２Ｎ：ＰＡＬＦ１５；図１２Ｏ：ＰＡＬＦ１６；図１２Ｐ：ＰＡＬＦ１７；図１２Ｑ：ＰＡＬＦ１８；図１２Ｒ：ＰＡＬＦ１９；図１２Ｓ：ＰＡＬＦ２０。
【図１２−２】（上記の通り。）
【図１２−３】（上記の通り。）
【図１２−４】（上記の通り。）
【図１２−５】（上記の通り。）
【図１２−６】（上記の通り。）
【図１２−７】（上記の通り。）
【図１２−８】（上記の通り。）
【図１２−９】（上記の通り。）
【図１２−１０】（上記の通り。）
【図１２−１１】（上記の通り。）
【図１２−１２】（上記の通り。）
【図１２−１３】（上記の通り。）
【図１２−１４】（上記の通り。）
【図１２−１５】（上記の通り。）
【図１２−１６】（上記の通り。）
【図１２−１７】（上記の通り。）
【図１２−１８】（上記の通り。）
【図１２−１９】（上記の通り。）
【図１３−１】ＫＭＳ１１Ｌｕｃ同所性腫瘍モデルのヒトＰＢＭＣ養子免疫伝達適応における２価又は３価ＢＣＭＡ−ＣＤ３  ＡＢ１（図１３Ａ及び図１３Ｂ）及びＡＢ２（図１３Ｃ及び図１３Ｄ）の抗腫瘍活性（実施例６）。灰色の丸：０．０３ｍｇ／ｋｇの用量；灰色の三角：０．３ｍｇ／ｋｇの用量；灰色の菱形：３．０ｍｇ／ｋｇの用量；黒色の丸：腫瘍のみ；黒色の四角：非処理対照。＊ｐ＜０．０５、ダネットの多重比較検定。
【図１３−２】（上記の通り。）
【図１３−３】（上記の通り。）
【図１３−４】（上記の通り。）
【図１４−１】ＫＭＳ１１Ｌｕｃ同所性腫瘍モデルのヒトＰＢＭＣ養子免疫伝達適応における２価又は３価ＢＣＭＡ−ＣＤ３  ＡＢ１（図１４Ａ及び図１４Ｂ）又はＡＢ２（図１４Ｃ及び図１４Ｄ）による処理後の体重変化（実施例６）。灰色の丸：０．０３ｍｇ／ｋｇの用量；灰色の三角：０．３ｍｇ／ｋｇの用量；灰色の菱形：３．０ｍｇ／ｋｇの用量；黒色の丸：腫瘍のみ；黒色の四角：非処理対照。
【図１４−２】（上記の通り。）
【図１４−３】（上記の通り。）
【図１４−４】（上記の通り。）
【図１５−１】ＫＭＳ１１Ｌｕｃ同所性腫瘍モデルのヒトＰＢＭＣ養子免疫伝達適応における２価又は３価ＢＣＭＡ−ＣＤ３  ＡＢ１（図１５Ａ及び図１５Ｂ）、ＡＢ２（図１５Ｃ及び図１５Ｄ）及びＡＢ３（図１５Ｅ及び図１５Ｆ）の抗腫瘍活性（実施例７）。灰色の丸：０．０３ｍｇ／ｋｇの用量；灰色の三角：０．３ｍｇ／ｋｇの用量；灰色の菱形：３．０ｍｇ／ｋｇの用量；黒色の丸：腫瘍のみ；黒色の四角：非処理対照。＊ｐ＜０．０５、ダネットの多重比較検定。
【図１５−２】（上記の通り。）
【図１５−３】（上記の通り。）
【図１５−４】（上記の通り。）
【図１５−５】（上記の通り。）
【図１５−６】（上記の通り。）
【図１６−１】ＫＭＳ１１Ｌｕｃ同所性腫瘍モデルのヒトＰＢＭＣ養子免疫伝達適応における２価又は３価ＢＣＭＡ−ＣＤ３  ＡＢ１（図１６Ａ及び図１６Ｂ）、ＡＢ２（図１６Ｃ及び図１６Ｄ）及びＡＢ３（図１６Ｅ及び図１６Ｆ）による処理後の体重変化（実施例７）。灰色の丸：０．０３ｍｇ／ｋｇの用量；灰色の三角：０．３ｍｇ／ｋｇの用量；灰色の菱形：３．０ｍｇ／ｋｇの用量；黒色の丸：腫瘍のみ；黒色の四角：非処理対照。
【図１６−２】（上記の通り。）
【図１６−３】（上記の通り。）
【図１６−４】（上記の通り。）
【図１６−５】（上記の通り。）
【図１６−６】（上記の通り。）
【図１７】フローサイトメトリーによって評価される多発性骨髄腫細胞株におけるＢＣＭＡの細胞表面発現（実施例８）。デルタ平均蛍光強度（ＭＦＩ）を、抗ＢＣＭＡ−ＢＶ４２１染色細胞のＭＦＩに対して非染色細胞のＭＦＩを減算することによって決定した。
【図１８】増殖したＴ細胞を用いたＢＣＭＡ＋  ＭＭ細胞株におけるＢＣＭＡ−ＣＤ３二重特異性抗体誘導性ＲＴＣＣについてのＥＣ５０結果（実施例８）。
【図１９−１】新鮮に単離したＴ細胞を用いたＢＣＭＡ＋  ＭＭ細胞株ＭＭ１Ｓ（図１９Ａ）及びＭＣ１１６（図１９Ｂ）におけるＢＣＭＡ−ＣＤ３抗体媒介性ＲＴＣＣ（実施例８）。
【図１９−２】（上記の通り。）
【図２０−１】ＢＣＭＡ−ＣＤ３二重特異性抗体によって誘導されるサイトカイン分泌（実施例９）。図２０Ａ：ＩＦＮ−γ；図２０Ｂ：ＴＮＦ−α。
【図２０−２】（上記の通り。）
【図２１−１】ＢＣＭＡ＋  ＭＭ細胞株ＭＭ１Ｓ（図２１Ａ）及びＭＣ１１６（図２１Ｂ）の存在下におけるＢＣＭＡ−ＣＤ３二重特異性抗体媒介性Ｔ細胞増殖（実施例９）。
【図２１−２】（上記の通り。）
【図２２−１】γセクレターゼ阻害剤ＬＹ４１１５７５及びＰＦ０３０８４０１４で処理されたＫＭＳ１１細胞からの可溶性ＢＣＭＡ（ｓＢＣＭＡ）濃度（図２２Ａ）及び膜結合（ｍＢＣＭＡ）発現（図２２Ｂ）の時間経過（実施例１０）。非処理細胞についてのデータが白色の丸で示され、ＬＹ４１５５７５で処理された細胞についてのデータが黒色の四角で示され、ＰＦ０３０８４０１４で処理された細胞についてのデータが黒色の菱形で示される。
【図２２−２】（上記の通り。）
【図２３−１】時間経過前の２２時間にわたってγセクレターゼ阻害剤ＬＹ４１１５７５で前処理されたＫＭＳ１１細胞からのｓＢＣＭＡ濃度（図２３Ａ）及びｍＢＣＭＡ発現（図２３Ｂ）の時間経過（実施例１０）。非処理細胞についてのデータが白色の丸で示され、ＬＹ４１５５７５で処理された細胞についてのデータが黒色の四角で示される。
【図２３−２】（上記の通り。）
【図２４−１】２価ＡＢ３及びγセクレターゼ阻害剤ＬＹ４１１５７５（図２４Ａ）、ＰＲ０３０８４０１４（図２４Ｂ）及びＢＭＳ０７０８１６３（図２４Ｃ）の組合せのＲＴＣＣアッセイ結果（実施例１１）。２価ＡＢ３（ｎＭ）の濃度がＸ軸上に示される。
【図２４−２】（上記の通り。）
【図２４−３】（上記の通り。）
【図２５−１】ＢＣＭＡ局在化（図２５Ａ）、ＮＯＴＣＨシグナル伝達（図２５Ｂ）及び２価ＡＢ３の効力（図２５Ｃ）に対するＧＳＩの効果を示すアッセイの結果（実施例１２）。
【図２５−２】（上記の通り。）
【図２５−３】（上記の通り。）
【図２６】フローサイトメトリーによって評価される、ＰＦＺ０３０８４０１４による処理後のＫＭＳ１１異種移植片モデルにおけるｍＢＣＭＡレベル（実施例１３）。
【図２７】ＥＬＩＳＡによって評価される、ＰＦＺ０３０８４０１４による処理後のＫＭＳ１１異種移植片モデルにおけるｓＢＣＭＡレベル（実施例１３）。
【図２８−１】ｇＨ（対照）、２価ＡＢ３及びｈ２Ｂ４＿Ｃ２９の存在下における、ＫＭＳ１１細胞及びＴ細胞（１：３の比率）の４８時間の共培養後の細胞培養上清におけるサイトカインレベル（実施例１４）。図２８Ａ：ＩＦＮ−γレベル；図２８Ｂ：ＩＬ−２レベル；図２８Ｃ：ＴＮＦ−αレベル。
【図２８−２】（上記の通り。）
【図２８−３】（上記の通り。）
【発明を実施するための形態】
【００２２】
７．１．定義
本明細書において使用される際、以下の用語は、以下の意味を有することが意図される。
【００２３】
ＡＤＣＣ：本明細書において使用される際の「ＡＤＣＣ」又は「抗体依存性細胞媒介細胞傷害性」とは、ＦｃγＲｓを発現する非特異的な細胞傷害性細胞が標的細胞上の結合抗体を認識し、その後、標的細胞の溶解を引き起こす細胞媒介反応を意味する。ＡＤＣＣは、ＦｃγＲＩＩＩａへの結合に相関しており；ＦｃγＲＩＩＩａへの増加した結合は、ＡＤＣＣ活性の増加をもたらす。
【００２４】
ＡＤＣＰ：本明細書において使用される際の「ＡＤＣＰ」又は抗体依存性細胞媒介食作用とは、ＦｃγＲｓを発現する非特異的な食細胞が標的細胞上の結合抗体を認識し、その後、標的細胞の食作用を引き起こす細胞媒介反応を意味する。
【００２５】
追加的な薬剤：便宜上、本開示の抗原結合分子と組み合わせて使用される薬剤は、本明細書において「追加的な」薬剤と呼ばれる。
【００２６】
抗体：本明細書において使用される際の「抗体」という用語は、非共有結合的に、可逆的に及び特異的に抗原に結合することが可能な免疫グロブリンファミリーのポリペプチド（又はポリペプチドのセット）を指す。例えば、ＩｇＧ型の天然「抗体」は、ジスルフィド結合によって相互接続される少なくとも２つの重（Ｈ）鎖及び２つの軽（Ｌ）鎖を含む四量体である。各重鎖は、重鎖可変領域（本明細書においてＶＨと略記される）及び重鎖定常領域から構成される。重鎖定常領域は、３つのドメイン、ＣＨ１、ＣＨ２及びＣＨ３から構成される。各軽鎖は、軽鎖可変領域（本明細書においてＶＬと略記される）及び軽鎖定常領域から構成される。軽鎖定常領域は、１つのドメイン（本明細書においてＣＬと略記される）から構成される。ＶＨ及びＶＬ領域は、フレームワーク領域（ＦＲ）と呼ばれるより保存的な領域がその間に散在する、相補性決定領域（ＣＤＲ）と呼ばれる超可変領域にさらに細分され得る。各ＶＨ及びＶＬは、以下の順序：ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４でアミノ末端からカルボキシ末端まで配置された３つのＣＤＲ及び４つのＦＲから構成される。重鎖及び軽鎖の可変領域は、抗原と相互作用する結合ドメインを含有する。抗体の定常領域は、免疫系の様々な細胞（例えば、エフェクター細胞）及び古典補体系の第１の構成要素（Ｃｌｑ）を含む、宿主組織又は因子への免疫グロブリンの結合を媒介し得る。「抗体」という用語は、限定はされないが、モノクローナル抗体、ヒト抗体、ヒト化抗体、ラクダ化抗体、キメラ抗体、二重特異性又は多重特異性抗体及び抗イディオタイプ（抗Ｉｄ）抗体（例えば、本開示の抗体に対する抗Ｉｄ抗体を含む）を含む。抗体は、任意のアイソタイプ／クラス（例えば、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＡ及びＩｇＹ）又はサブクラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１及びＩｇＡ２）のものであり得る。
【００２７】
軽鎖及び重鎖は、両方とも構造的及び機能的相同性の領域に分けられる。「定常」及び「可変」という用語は、機能的に使用される。これに関して、軽（ＶＬ）及び重（ＶＨ）鎖部分の両方の可変ドメインが抗原認識及び特異性を決定することが理解されるであろう。逆に、軽鎖（ＣＬ）及び重鎖（ＣＨ１、ＣＨ２又はＣＨ３）の定常ドメインは、分泌、経胎盤移動性、Ｆｃ受容体結合、補体結合などの重要な生物学的特性を付与する。慣例により、定常領域ドメインの番号付けは、抗体の抗原結合部位又はアミノ末端からより遠位になるにつれて数が増加する。野生型抗体において、Ｎ末端では可変領域であり、Ｃ末端では定常領域であり；ＣＨ３及びＣＬドメインは、実際にそれぞれ重鎖及び軽鎖のカルボキシ末端を含む。
【００２８】
抗体フラグメント：本明細書において使用される際の抗体の「抗体フラグメント」という用語は、抗体の１つ以上の部分を指す。ある実施形態において、これらの部分は、抗体の接触ドメインの一部である。ある他の実施形態において、これらの部分は、本明細書において「抗原結合フラグメント」、「その抗原結合フラグメント」、「抗原結合部分」などと呼ばれることもある、非共有結合的に、可逆的に及び特異的に抗原に結合する能力を保持する抗原結合フラグメントである。結合フラグメントの例としては、限定はされないが、一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）、Ｆａｂフラグメント、ＶＬ、ＶＨ、ＣＬ及びＣＨ１ドメインからなる１価フラグメント；Ｆ（ａｂ）２フラグメント、ヒンジ領域においてジスルフィド架橋によって連結される２つのＦａｂフラグメントを含む２価フラグメント；ＶＨ及びＣＨ１ドメインからなるＦｄフラグメント；抗体の単一アームのＶＬ及びＶＨドメインからなるＦｖフラグメント；ＶＨドメインからなるｄＡｂフラグメント（Ｗａｒｄ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８９）Ｎａｔｕｒｅ  ３４１：５４４−５４６）；及び単離された相補性決定領域（ＣＤＲ）が挙げられる。したがって、「抗体フラグメント」という用語は、抗体のタンパク質分解フラグメント（例えば、Ｆａｂ及びＦ（ａｂ）２フラグメント）並びに抗体の１つ以上の部分（例えば、ｓｃＦｖ）を含む改変タンパク質を包含する。
【００２９】
抗体フラグメントは、単一ドメイン抗体、マキシボディ、ミニボディ、細胞内抗体、二重特異性抗体、三重特異性抗体、四重特異性抗体、ｖ−ＮＡＲ及びビス−ｓｃＦｖ中にも組み込まれ得る（例えば、Ｈｏｌｌｉｎｇｅｒ  ａｎｄ  Ｈｕｄｓｏｎ，２００５，Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ２３：１１２６−１１３６を参照されたい）。抗体フラグメントは、フィブロネクチンＩＩＩ型（Ｆｎ３）などのポリペプチドに基づいて足場中にグラフトされ得る（フィブロネクチンポリペプチドモノボディを説明する米国特許第６，７０３，１９９号明細書を参照されたい）。
【００３０】
抗体フラグメントは、相補的軽鎖ポリペプチド（例えば、ＶＬ−ＶＣ−ＶＬ−ＶＣ）と一緒になって抗原結合領域の対を形成する、タンデムＦｖセグメントの対（例えば、ＶＨ−ＣＨ１−ＶＨ−ＣＨ１）を含む一本鎖分子中に組み込まれ得る（Ｚａｐａｔａ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５，Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇ．８：１０５７−１０６２；及び米国特許第５，６４１，８７０号明細書）。
【００３１】
抗体番号付け方式：本明細書において、抗体ドメイン中の番号付けされたアミノ酸残基への言及は、特に規定されない限り、ＥＵ番号付け方式に基づいている（例えば、表１Ｃ〜１Ｎ中）。この方式は、Ｅｄｅｌｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９６９，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ  Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ６３：７８−８５によって最初に考案され、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，１９９１，ｉｎ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，ＵＳ  Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ  ａｎｄ  Ｈｕｍａｎ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，ＮＩＨ，ＵＳＡに詳細に記載されている。
【００３２】
抗原結合ドメイン：「抗原結合ドメイン」又は「ＡＢＤ」という用語は、非共有結合的に、可逆的に及び特異的に抗原に結合する能力を有する抗原結合分子の部分を指す。例示的なＡＢＤは、非共有結合的に、可逆的に及び特異的に抗原に結合する能力を保持する、抗原結合フラグメント並びに免疫グロブリン及び非免疫グロブリンの両方に基づく足場の部分を含む。本明細書において使用される際、「抗原結合ドメイン」という用語は、非共有結合的に、可逆的に及び特異的に抗原に結合する能力を保持する抗体フラグメントを包含する。
【００３３】
抗原結合ドメイン鎖又はＡＢＤ鎖：個々のＡＢＤが１つの（例えば、ｓｃＦｖの場合）ポリペプチド鎖として存在し得るか、又は２つ以上のポリペプチド鎖（例えば、Ｆａｂの場合）の会合によって形成され得る。本明細書において使用される際、「ＡＢＤ鎖」という用語は、単一のポリペプチド鎖上に存在するＡＢＤの全て又は一部を指す。「ＡＢＤ鎖」という用語の使用は、便宜上及び説明の目的のために意図されるに過ぎず、特定の形態又は製造の方法を暗示していない。
【００３４】
抗原結合フラグメント：抗体の「抗原結合フラグメント」という用語は、非共有結合的に、可逆的に及び特異的に抗原に結合する能力を保持する抗体の部分を指す。
【００３５】
抗原結合分子：「抗原結合分子」という用語は、１つ以上の抗原結合ドメインを含む分子、例えば抗体を指す。抗原結合分子は、１つ以上のポリペプチド鎖、例えば１つ、２つ、３つ、４つ又はそれを超えるポリペプチド鎖を含み得る。抗原結合分子中のポリペプチド鎖は、互いに直接又は間接的に会合され得る（例えば、第１のポリペプチド鎖が第２のポリペプチド鎖と会合され得、それが次に第３のポリペプチド鎖と会合されて、第１及び第２のポリペプチド鎖が互いに直接会合される抗原結合分子を形成し得るか、第２及び第３のポリペプチド鎖が互いに直接会合され、第１及び第３のポリペプチド鎖が第２のポリペプチド鎖を介して間接的に互いに会合される）。
【００３６】
会合された：抗原結合分子内のドメイン又は領域に関連して、「会合された」という用語は、２つ以上のポリペプチド鎖及び／又は単一のポリペプチド鎖の２つ以上の位置間の機能的関係を指す。特に、「会合された」という用語は、２つ以上のポリペプチド（又は単一のポリペプチドの複数の部分）が、機能的抗原結合ドメインを生成するように、例えば分子相互作用によって非共有結合的に及び／又は１つ以上のスルフィド架橋若しくは化学的架橋によって共有結合的に互いに会合されることを意味する。抗原結合分子中に存在し得る会合の例としては、（限定はされないが）Ｆｃドメイン中のＦｃ領域間の会合、Ｆａｂ又はＦｖ中のＶＨ及びＶＬ領域間の会合並びにＦａｂ中のＣＨ１及びＣＬ間の会合が挙げられる。
【００３７】
Ｂ細胞：本明細書において使用される際、「Ｂ細胞」という用語は、リンパ球サブタイプの白血球のタイプであるＢ細胞系統の細胞を指す。Ｂ細胞の例としては、形質芽球、形質細胞、リンパ形質細胞様細胞、メモリーＢ細胞、濾胞Ｂ細胞、辺縁帯Ｂ細胞、Ｂ−１細胞、Ｂ−２細胞及び制御性Ｂ細胞が挙げられる。
【００３８】
Ｂ細胞悪性腫瘍：本明細書において使用される際、Ｂ細胞悪性腫瘍は、Ｂ細胞の無制御の増殖を指す。Ｂ細胞悪性腫瘍の例としては、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、ホジキンリンパ腫、白血病及び骨髄腫が挙げられる。例えば、Ｂ細胞悪性腫瘍は、限定はされないが、多発性骨髄腫、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）／小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）、濾胞性リンパ腫、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、辺縁帯リンパ腫、バーキットリンパ腫、リンパ形質細胞性リンパ腫（ワルデンシュトレームマクログロブリン血症）、有毛細胞白血病、原発性中枢神経系（ＣＮＳ）リンパ腫、原発性縦隔大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、縦隔灰色帯リンパ腫（ＭＧＺＬ）、脾性辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、ＭＡＬＴ型節外性辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、節性辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、及び原発性滲出液リンパ腫、及び形質細胞様樹状細胞腫瘍であり得る。
【００３９】
ＢＣＭＡ：本明細書において使用される際、「ＢＣＭＡ」という用語は、Ｂ細胞成熟抗原を指す。ＢＣＭＡ（ＴＮＦＲＳＦ１７、ＢＣＭ又はＣＤ２６９としても知られている）は、腫瘍壊死受容体（ＴＮＦＲ）ファミリーのメンバーであり、主に最終分化したＢ細胞、例えばメモリーＢ細胞及び形質細胞において発現される。そのリガンドは、Ｂ細胞活性化因子（ＢＡＦＦ）及び増殖誘導リガンド（ＡＰＲＩＬ）を含む。タンパク質ＢＣＭＡは、遺伝子ＴＮＦＲＳＦ１７によってコードされる。例示的なＢＣＭＡ配列は、受託番号Ｑ０２２２３で、Ｕｎｉｐｒｏｔデータベースで入手可能である。
【００４０】
結合配列：表１（その下位部分を含む）を参照して、「結合配列」という用語は、該当する表に記載されるＣＤＲ一式、ＶＨ−ＶＬ対又はｓｃＦｖを有するＡＢＤを意味する。
【００４１】
二重特異性結合分子：「二重特異性結合分子」又は「ＢＢＭ」という用語は、２つの抗原に特異的に結合し、２つ以上のＡＢＤを含む分子を指す。本開示のＢＢＭは、ＢＣＭＡに対して特異的な少なくとも１つの抗原結合ドメイン及び異なる抗原に対して特異的な少なくとも１つの抗原結合ドメイン、例えばＴＣＲ複合体の構成要素を含む。代表的なＢＢＭが図１Ｂ〜１ＡＧに示される。ＢＢＭは、１つ、２つ、３つ、４つ又はさらにそれを超えるポリペプチド鎖を含み得る。
【００４２】
２価：抗原結合分子に関連して本明細書において使用される際の「２価」という用語は、２つのＡＢＤを有する抗原結合分子を指す。ドメインは、同じであるか又は異なり得る。したがって、２価抗原結合分子は、単一特異性又は二重特異性であり得る。２価ＢＢＭは、ＢＣＭＡに特異的に結合するＡＢＤ及び別の抗原に結合する別のＡＢＤ、例えばＴＣＲ複合体の構成要素を含む。
【００４３】
癌：「癌」という用語は、異常細胞の制御されない（多くの場合に急速な）成長によって特徴付けられる疾患を指す。癌細胞は、局所的に又は血流及びリンパ系を介して身体の他の部位に広がり得る。様々な癌の例が本明細書に記載され、限定はされないが、白血病、多発性骨髄腫、無症候性骨髄腫、ホジキンリンパ腫及び非ホジキンリンパ腫、例えば上記のタイプのいずれかの任意のＢＣＭＡ陽性癌が挙げられる。「癌性Ｂ細胞」という用語は、無制御の増殖を起こしているか又は起こしたＢ細胞を指す。
【００４４】
ＣＤ３：「ＣＤ３」又は「分化群３」という用語は、Ｔ細胞受容体の分化した３つの共受容体の群を指す。ＣＤ３は、細胞傷害性Ｔ細胞（例えば、ＣＤ８＋ナイーブＴ細胞）及びＴヘルパー細胞（例えば、ＣＤ４＋ナイーブＴ細胞）の両方の活性化を促進し、４つの異なる鎖：１つのＣＤ３γ鎖（例えば、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＮＭ＿００００７３及びＭＰ＿００００６４（ヒト））、１つのＣＤ３δ鎖（例えば、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＮＭ＿０００７３２、ＮＭ＿００１０４０６５１、ＮＰ＿００７３２及びＮＰ＿００１０３５７４１（ヒト））及び２つのＣＤ３ε鎖（例えば、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＮＭ＿０００７３３及びＮＰ＿００７２４（ヒト））から構成される。ＣＤ３の鎖は、単一の細胞外免疫グロブリンドメインを含む免疫グロブリンスーパーファミリーの非常に関連する細胞表面タンパク質である。ＣＤ３分子は、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）及びζ−鎖と会合して、Ｔリンパ球における活性化シグナルを生成する際に機能するＴ細胞受容体（ＴＣＲ）複合体を形成する。
【００４５】
明示的に示されない限り、本出願におけるＣＤ３への言及は、ＣＤ３共受容体、ＣＤ３共受容体複合体又はＣＤ３共受容体複合体の任意のポリペプチド鎖を指し得る。
【００４６】
キメラ抗体：「キメラ抗体」（又はその抗原結合フラグメント）という用語は、（ａ）定常領域又はその部分が、抗原結合部位（可変領域）が、異なる若しくは改変されたクラス、エフェクター機能及び／若しくは種の定常領域又はキメラ抗体に新しい特性を付与する全く異なる分子、例えば酵素、毒素、ホルモン、成長因子、薬物などに連結されるように改変、置換又は交換されたか；又は（ｂ）可変領域又はその部分が、異なる又は改変された抗原特異性を有する可変領域により改変、置換又は交換された抗体分子（又はその抗原結合フラグメント）である。例えば、マウス抗体は、その定常領域をヒト免疫グロブリンからの定常領域で置換することによって修飾され得る。ヒト定常領域による置換により、キメラ抗体は、元のマウス抗体と比較して、ヒトにおいて低下した抗原性を有しながら、抗原を認識する際にその特異性を保持することができる。
【００４７】
相補性決定領域：本明細書において使用される際の「相補性決定領域」又は「ＣＤＲ」という用語は、抗原特異性及び結合親和性を付与する、抗体可変領域内のアミノ酸の配列を指す。例えば、一般に、各重鎖可変領域中の３つのＣＤＲ（例えば、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３）並びに各軽鎖可変領域中の３つのＣＤＲ（ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２及びＣＤＲ−Ｌ３）がある。所与のＣＤＲの正確なアミノ酸配列境界は、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．（１９９１），“Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ”，５ｔｈ  Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ（「Ｋａｂａｔ」番号付けスキーム），Ａｌ−Ｌａｚｉｋａｎｉ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９７）ＪＭＢ  ２７３，９２７−９４８（「Ｃｈｏｔｈｉａ」番号付けスキーム）又はそれらの組合せ及びＩｍＭｕｎｏＧｅｎＴｉｃｓ（ＩＭＧＴ）番号付け（Ｌｅｆｒａｎｃ，Ｍ．−Ｐ．，ｔｈｅ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｓｔ，７，１３２−１３６（１９９９）；Ｌｅｆｒａｎｃ，Ｍ．−Ｐ．ｅｔ  ａｌ．，Ｄｅｖ．Ｃｏｍｐ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，２７，５５−７７（２００３）（「ＩＭＧＴ」番号付けスキーム）によって記載されるものを含む、いくつかの周知のスキームのいずれか１つを用いて決定され得る。所与のＣＤＲ領域（例えば、ＨＣ  ＣＤＲ１、ＨＣ  ＣＤＲ２、ＨＣ  ＣＤＲ３、ＬＣ  ＣＤＲ１、ＬＣ  ＣＤＲ２又はＬＣ  ＣＤＲ３）のための組み合わされたＫａｂａｔ及びＣｈｏｔｈｉａ番号付けスキームでは、ある実施形態において、ＣＤＲは、Ｃｈｏｔｈｉａ  ＣＤＲの一部として定義されるアミノ酸残基と一緒に、Ｋａｂａｔ  ＣＤＲの一部として定義されるアミノ酸残基に対応する。本明細書において使用される際、「Ｃｈｏｔｈｉａ」番号付けスキームに従って定義されるＣＤＲは、「超可変ループ」と呼ばれることもある。
【００４８】
例えば、Ｋａｂａｔにより、重鎖可変ドメイン（ＶＨ）中のＣＤＲアミノ酸残基は、３１〜３５（ＣＤＲ−Ｈ１）（例えば、３５位の後の挿入）、５０〜６５（ＣＤＲ−Ｈ２）及び９５〜１０２（ＣＤＲ−Ｈ３）と番号付けされ；軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）中のＣＤＲアミノ酸残基は、２４−３４（ＣＤＲ−Ｌ１）（例えば、２７位の後の挿入）、５０〜５６（ＣＤＲ−Ｌ２）及び８９〜９７（ＣＤＲ−Ｌ３）と番号付けされる。別の例として、Ｃｈｏｔｈｉａにより、ＶＨ中のＣＤＲアミノ酸は、２６〜３２（ＣＤＲ−Ｈ１）（例えば、３１位の後の挿入）、５２〜５６（ＣＤＲ−Ｈ２）及び９５〜１０２（ＣＤＲ−Ｈ３）と番号付けされ；ＶＬ中のアミノ酸残基は、２６〜３２（ＣＤＲ−Ｌ１）（例えば、３０位の後の挿入）、５０〜５２（ＣＤＲ−Ｌ２）及び９１〜９６（ＣＤＲ−Ｌ３）と番号付けされる。Ｋａｂａｔ及びＣｈｏｔｈｉａの両方のＣＤＲの定義を組み合わせることにより、ＣＤＲは、例えば、ヒトＶＨ中のアミノ酸残基２６〜３５（ＣＤＲ−Ｈ１）、５０〜６５（ＣＤＲ−Ｈ２）及び９５〜１０２（ＣＤＲ−Ｈ３）並びにヒトＶＬ中のアミノ酸残基２４〜３４（ＣＤＲ−Ｌ１）、５０〜５６（ＣＤＲ−Ｌ２）及び８９〜９７（ＣＤＲ−Ｌ３）を含むか又はそれらからなる。ＩＭＧＴにより、ＶＨ中のＣＤＲアミノ酸残基は、約２６〜３５（ＣＤＲ１）、５１〜５７（ＣＤＲ２）及び９３〜１０２（ＣＤＲ３）と番号付けされ、ＶＬ中のＣＤＲアミノ酸残基は、約２７〜３２（ＣＤＲ１）、５０〜５２（ＣＤＲ２）及び８９〜９７（ＣＤＲ３）（「Ｋａｂａｔ」による番号付け）と番号付けされる。ＩＭＧＴにより、抗体のＣＤＲ領域は、プログラムＩＭＧＴ／ドメインＧａｐ  Ａｌｉｇｎを用いて決定され得る。一般に、特に示されない限り、抗体分子は、１つ以上のＫａｂａｔ  ＣＤＲ及び／又はＣｈｏｔｈｉａ  ＣＤＲの任意の組合せを含み得る。
【００４９】
同時に：「同時に」という用語は、ちょうど同時の治療薬（例えば、予防剤又は治療剤）の投与に限定されず、抗原結合分子を含む医薬組成物が、さらなる治療薬と一緒に作用して、それらが他の方法で投与される場合より増加した利益を提供し得るような順序及び時間間隔内で対象に投与されることを意味する。
【００５０】
保存的配列修飾：「保存的配列修飾」という用語は、ＢＣＭＡ結合分子又はその構成要素（（例えば、ＡＢＤ又はＦｃ領域）の結合特性に実質的に影響を与えないか又は変化させないアミノ酸修飾を指す。このような保存的修飾は、アミノ酸置換、付加及び欠失を含む。修飾は、部位特異的突然変異誘発及びＰＣＲ媒介突然変異誘発などの標準的な技術によってＢＢＭに導入され得る。保存的アミノ酸置換は、アミノ酸残基が同様の側鎖を有するアミノ酸残基で置換されるものである。同様の側鎖を有するアミノ酸残基のファミリーは、当技術分野において規定されている。これらのファミリーとしては、塩基性側鎖を有するアミノ酸（例えば、リジン、アルギニン、ヒスチジン）、酸性側鎖を有するアミノ酸（例えば、アスパラギン酸、グルタミン酸）、非荷電極性側鎖を有するアミノ酸（例えば、グリシン、アスパラギン、グルタミン、セリン、トレオニン、チロシン、システイン、トリプトファン）、非極性側鎖を有するアミノ酸（例えば、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン）、β−分岐側鎖を有するアミノ酸（例えば、トレオニン、バリン、イソロイシン）及び芳香族側鎖を有するアミノ酸（例えば、チロシン、フェニルアラニン、トリプトファン、ヒスチジン）が挙げられる。したがって、ＢＢＭ内の１つ以上のアミノ酸残基は、同じ側鎖ファミリーからの他のアミノ酸残基で置換され得、改変されたＢＢＭは、例えば、標的分子への結合及び／又は有効なヘテロ二量体化及び／又はエフェクター機能について試験され得る。
【００５１】
二重特異性抗体：本明細書において使用される際の「二重特異性抗体」という用語は、典型的に、ｓｃＦｖ鎖の対合によって形成される、２つの抗原結合部位を有する小型の抗体フラグメントを指す。各ｓｃＦｖは、同じポリペプチド鎖中に軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）に連結された重鎖可変ドメイン（ＶＨ）を含む（ＶＨ−ＶＬ、ここで、ＶＨは、ＶＬに対してＮ末端又はＣ末端のいずれかである）。ＶＨ及びＶＬが同じポリペプチド鎖上のＶＨ及びＶＬが対合して抗原結合ドメインを形成することを可能にするリンカーによって隔てられる典型的なｓｃＦｖと異なり、二重特異性抗体は、典型的に、同じ鎖上のＶＨ及びＶＬドメイン間の対合を可能にするには短過ぎるリンカーを含み、それにより、ＶＨ及びＶＬドメインが別の鎖の相補的ドメインと対合され、２つの抗原結合部位が形成される。二重特異性抗体は、例えば、欧州特許第４０４，０９７号明細書；国際公開第９３／１１１６１号パンフレット；及びＨｏｌｌｉｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９９３，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９０：６４４４−６４４８にさらに十分に記載されている。
【００５２】
ｄｓＦｖ：「ｄｓＦｖ」という用語は、ジスルフィド安定化Ｆｖフラグメントを指す。ｄｓＦｖにおいて、ＶＨ及びＶＬがドメイン間ジスルフィド結合によって連結される。このような分子を生成するために、ＶＨ及びＶＬのフレームワーク領域中の１つのアミノ酸がそれぞれシステインに突然変異され、それが次に安定した鎖間ジスルフィド結合を形成する。典型的に、ＶＨ中の４４位及びＶＬ中の１００位がシステインに突然変異される。Ｂｒｉｎｋｍａｎｎ，２０１０，Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  １８１−１８９，ＤＯＩ：１０．１００７／９７８−３−６４２−０１１４７−４＿１４を参照されたい。ｄｓＦｖという用語は、ｄｓＦｖとして公知のもの（ＶＨ及びＶＬが、リンカーペプチドではなく鎖間ジスルフィド結合によって連結された分子）又はｓｃｄｓＦｖ（ＶＨ及びＶＬが、リンカー並びに鎖間ジスルフィド結合によって連結された分子）の両方を包含する。
【００５３】
エピトープ：エピトープ又は抗原決定基は、抗体又は本明細書に記載される他の抗原結合部分によって認識される抗原の部分である。エピトープは、線形又は立体構造であり得る。
【００５４】
エフェクター機能：「エフェクター機能」という用語は、通常、エフェクター分子の結合によって媒介される、抗原結合ドメイン以外の抗体のドメインを介した結合によって媒介される抗体分子の活性を指す。エフェクター機能は、例えば、抗体への補体のＣ１構成要素の結合によって媒介される補体媒介性エフェクター機能を含む。補体の活性化は、細胞病原体のオプソニン化及び溶解において重要である。補体の活性化は、炎症反応も刺激し、自己免疫過敏性にも関与し得る。エフェクター機能は、Ｆｃ受容体（ＦｃＲ）媒介性エフェクター機能も含み、これは、Ｆｃ受容体（ＦｃＲ）への抗体の定常ドメインの結合時に引き起こされ得る。細胞表面におけるＦｃ受容体への抗体の結合は、抗体で被覆された粒子の貪食及び破壊、免疫複合体のクリアランス、ＡＤＣＣ、ＡＤＣＰ、炎症性メディエータの放出、胎盤通過及び免疫グロブリン産生の制御を含む、多くの重要及び多様な生物学的応答を引き起こす。抗体のエフェクター機能は、Ｆｃ受容体又は補体成分などのエフェクター分子に対する抗体の親和性を改変、例えば増強又は低減することによって改変され得る。結合親和性は、一般に、エフェクター分子結合部位を修飾することによって変化され、この場合、対象とする部位を位置特定し、この部位の少なくとも一部を好適な方法で修飾することが適切である。エフェクター分子のための抗体における結合部位の改変が全体的な結合親和性を実質的に改変する必要はないが、エフェクター機構を非生産的結合におけるように無効にするように、相互作用の幾何学的性質を改変し得ることも考えられる。エフェクター機能は、エフェクター分子結合に直接関与しないが、エフェクター機能の性能に他の方法で関与する部位を修飾することによって改変され得ることもさらに考えられる。
【００５５】
Ｆａｂ：本明細書において使用される際の「Ｆａｂ」又は「Ｆａｂ領域」とは、ＶＨ、ＣＨ１、ＶＬ及びＣＬ免疫グロブリンドメインを含むポリペプチド領域を意味する。これらの用語は、単独でのこの領域又は抗原結合分子に関連したこの領域を指し得る。
【００５６】
Ｆａｂドメインは、ＶＬドメインに結合されたＣＬドメインとの、ＶＨドメインに結合されたＣＨ１ドメインの会合によって形成される。ＶＨドメインは、ＶＬドメインと対合されてＦｖ領域を構成し、ＣＨ１ドメインは、ＣＬドメインと対合されて結合モジュールをさらに安定させる。２つの定常ドメイン間のジスルフィド結合は、Ｆａｂドメインをさらに安定させ得る。
【００５７】
Ｆａｂ領域は、（例えば、パパインなどの酵素を用いた）免疫グロブリン分子のタンパク質分解的切断又は組み換え発現によって生成され得る。天然免疫グロブリン分子において、Ｆａｂは、２つの異なるポリペプチド鎖の会合（例えば、一方の鎖上のＶＨ−ＣＨ１が他方の鎖上のＶＬ−ＣＬと会合する）によって形成される。Ｆａｂ領域は、典型的に２つのポリペプチド鎖上で、典型的に組み換え技術によって発現されるが、一本鎖Ｆａｂも本明細書において考えられる。
【００５８】
Ｆｃ領域：本明細書において使用される際の「Ｆｃ領域」又は「Ｆｃ鎖」という用語は、ＩｇＧ分子のＣＨ２−ＣＨ３ドメインを含み、ある場合には、ヒンジを含むポリペプチドを意味する。ヒトＩｇＧ１のためのＥＵ番号付けにおいて、ＣＨ２−ＣＨ３ドメインは、アミノ酸２３１〜４４７を含み、ヒンジは２１６〜２３０である。したがって、「Ｆｃ領域」の定義は、アミノ酸２３１〜４４７（ＣＨ２−ＣＨ３）若しくは２１６〜４４７（ヒンジ−ＣＨ２−ＣＨ３）の両方又はそのフラグメントを含む。これに関連する「Ｆｃフラグメント」は、Ｎ末端及びＣ末端のいずれか又は両方からのより少ないアミノ酸を含有し得るが、一般にサイズに基づく標準的な方法（例えば、非変性クロマトグラフィー、サイズ排除クロマトグラフィー）を用いて検出され得るように、別のＦｃ領域とともに二量体を形成する能力を依然として保持する。ヒトＩｇＧ  Ｆｃ領域は、本開示において特に有用であり、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２又はＩｇＧ４からのＦｃ領域であり得る。
【００５９】
Ｆｃドメイン：「Ｆｃドメイン」という用語は、関連するＦｃ領域の対を指す。２つのＦｃ領域が二量体化して、Ｆｃドメインを生成する。Ｆｃドメイン内の２つのＦｃ領域は、互いに同じか（本明細書において「Ｆｃホモ二量体」と呼ばれるＦｃドメインなど）又は異なり得る（本明細書において「Ｆｃヘテロ二量体」と呼ばれるＦｃドメインなど）。
【００６０】
Ｆｖ：「Ｆｖ」、「Ｆｖフラグメント」又は「Ｆｖ領域」という用語は、強固に非共有結合された抗体フラグメントのＶＬ及びＶＨドメイン（ＶＨ−ＶＬ二量体）を含む領域を指す。この形態において、各可変ドメインの３つのＣＤＲが相互作用して、標的結合部位が規定される。多くの場合、６つのＣＤＲが抗原結合分子に標的結合特異性を付与する。しかしながら、ある場合には、単一の可変ドメイン（又は標的に特異的な３つのみのＣＤＲを含むＦｖの半分）でも、標的を認識し、標的に結合する能力を有し得る。天然免疫グロブリン分子において、ＦｖのＶＨ及びＶＬは、別個のポリペプチド鎖上にあるが、一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）として操作され得る。この用語は、さらなる安定性のためにジスルフィド結合の導入によって操作されるＦｖも含む。
【００６１】
本明細書におけるＶＨ−ＶＬ二量体への言及は、任意の特定の形態を示すことを意図されていない。例えば、ｓｃＦｖにおいて、ＶＨは、ＶＬに対してＮ末端又はＣ末端にあり得る（ＶＨ及びＶＬが、典型的に本明細書に記載されるリンカーによって連結された状態で）。
【００６２】
半抗体：「半抗体」という用語は、少なくとも１つのＡＢＤ又はＡＢＤ鎖を含み、例えばジスルフィド架橋又は分子相互作用（例えば、Ｆｃヘテロ二量体間のノブ・イン・ホール相互作用）により、ＡＢＤ又はＡＢＤ鎖を含む別の分子と会合し得る分子を指す。半抗体は、１つのポリペプチド鎖又は２つ以上のポリペプチド鎖（例えば、Ｆａｂの２つのポリペプチド鎖）から構成され得る。一実施形態において、半抗体は、Ｆｃ領域を含む。
【００６３】
半抗体の例は、抗体（例えば、ＩｇＧ抗体）の重鎖及び軽鎖を含む分子である。半抗体の別の例は、ＶＬドメイン及びＣＬドメインを含む第１のポリペプチドと、ＶＨドメイン、ＣＨ１ドメイン、ヒンジ領域、ＣＨ２ドメイン及びＣＨ３ドメインを含む第２のポリペプチドとを含む分子であり、ここで、ＶＬ及びＶＨドメインは、ＡＢＤを形成する。半抗体のさらに別の例は、ｓｃＦｖドメイン、ＣＨ２ドメイン及びＣＨ３ドメインを含むポリペプチドである。
【００６４】
半抗体は、２つ以上のＡＢＤを含み得、例えば、半抗体は、（Ｎ末端からＣ末端への順に）ｓｃＦｖドメイン、ＣＨ２ドメイン、ＣＨ３ドメイン及び別のｓｃＦｖドメインを含む。
【００６５】
半抗体は、別の半抗体中の別のＡＢＤ鎖と会合されたときに完全なＡＢＤを形成するＡＢＤ鎖も含み得る。
【００６６】
したがって、ＢＢＭは、１つ、より典型的に２つ又はさらに３つ以上の半抗体を含み得、半抗体は、１つ以上のＡＢＤ又はＡＢＤ鎖を含み得る。
【００６７】
一部のＢＢＭにおいて、第１の半抗体は、第２の半抗体と会合し、例えばそれとともにヘテロ二量体化する。他のＢＢＭにおいて、第１の半抗体は、例えば、ジスルフィド架橋又は化学的架橋によって第２の半抗体に共有結合される。さらに他のＢＢＭにおいて、第１の半抗体は、共有結合及び非共有相互作用の両方、例えばジスルフィド架橋及びノブ・イン・ホール相互作用によって第２の半抗体と会合する。
【００６８】
「半抗体」という用語は、説明の目的のために意図されるに過ぎず、特定の形態又は製造の方法を暗示していない。「第１の」半抗体、「第２の」半抗体、「左側」半抗体、「右側」半抗体などの半抗体の説明は、便宜上及び説明の目的のために過ぎない。
【００６９】
ホール：ノブ・イントゥ・ホールに関連して、「ホール」は、第１のＦｃ鎖の境界から陥凹しており、したがってＦｃヘテロ二量体を安定させ、それにより例えば、Ｆｃホモ二量体形成よりＦｃヘテロ二量体形成に有利に作用するように、第２のＦｃ鎖の隣接する境界における相補的な「ノブ」に位置決め可能である少なくとも１つのアミノ酸側鎖を指す。
【００７０】
宿主細胞又は組み換え宿主細胞：「宿主細胞」又は「組み換え宿主細胞」という用語は、例えば、異種核酸の導入によって遺伝子組み換えされた細胞を指す。このような用語は、特定の対象の細胞だけでなく、このような細胞の子孫を指すことが意図されることが理解されるべきである。突然変異又は環境の影響のいずれかのため、ある修飾が後の世代において存在し得るため、このような子孫は、実際には親細胞と同一でないことがあり得るが、本明細書において使用される際の「宿主細胞」という用語の範囲内に依然として含まれる。宿主細胞は、例えば、染色体外異種発現ベクター上で一時的に又は例えば宿主細胞ゲノムへの異種核酸の統合によって安定的に異種核酸を保有し得る。抗原結合分子を発現する目的のために、宿主細胞は、サル腎臓細胞（ＣＯＳ、例えばＣＯＳ−１、ＣＯＳ−７）、ＨＥＫ２９３、ベビーハムスター腎臓（ＢＨＫ、例えばＢＨＫ２１）、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）、ＮＳＯ、ＰｅｒＣ６、ＢＳＣ−１、ヒト肝細胞癌細胞（例えば、Ｈｅｐ  Ｇ２）、ＳＰ２／０、ＨｅＬａ、メイディン・ダービー・ウシ腎臓（ＭＤＢＫ）、骨髄腫及びリンパ腫細胞又はそれらの誘導体及び／若しくは改変変異体などの、哺乳動物由来又は哺乳動物様特性の細胞株であり得る。改変変異体としては、例えば、グリカンプロファイル修飾された及び／又は部位特異的統合部位誘導体が挙げられる。
【００７１】
ヒト化：非ヒト（例えば、マウス）抗体の「ヒト化」形態という用語は、非ヒト免疫グロブリンに由来する最小配列を含むキメラ抗体である。ほとんどの場合、ヒト化抗体は、レシピエントの超可変領域に由来する残基が、所望の特異性、親和性及び能力を有するマウス、ラット、ウサギ又は非ヒト霊長類などの非ヒト種（ドナー抗体）の超可変領域に由来する残基で置換されたヒト免疫グロブリン（レシピエント抗体）である。ある場合には、ヒト免疫グロブリンのフレームワーク領域（ＦＲ）残基は、対応する非ヒト残基で置換される。さらに、ヒト化抗体は、レシピエント抗体又はドナー抗体に見られない残基を含み得る。これらの修飾は、抗体の性能をさらに改善するために行われる。一般に、ヒト化抗体は、少なくとも１つ、典型的に２つの可変ドメインの実質的に全てを含み、ここで、超可変ループの全て又は実質的に全ては、非ヒト免疫グロブリンのものに対応し、ＦＲの全て又は実質的に全ては、ヒト免疫グロブリンｌｏ配列のものである。ヒト化抗体は、任意選択的に、免疫グロブリン定常領域（Ｆｃ）の少なくとも一部、典型的にヒト免疫グロブリンのものも含む。ヒト化抗体は、典型的に、非ヒト化抗体と比べて、ヒトに対する免疫原性が低く、したがって、特定の状況において治療効果を提供する。ヒト化抗体は、公知の方法を用いて生成され得る。例えば、Ｈｗａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，２００５，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ３６：３５；Ｑｕｅｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８９，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．８６：１００２９−１００３３；Ｊｏｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９８６，Ｎａｔｕｒｅ  ３２１：５２２−２５，１９８６；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８８，Ｎａｔｕｒｅ  ３３２：３２３−２７；Ｖｅｒｈｏｅｙｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８８，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２３９：１５３４−３６；Ｏｒｌａｎｄｉ  ｅｔ  ａｌ．，１９８９，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．８６：３８３３−３８３７；米国特許第５，２２５，５３９号明細書；同第５，５３０，１０１号明細書；同第５，５８５，０８９号明細書；同第５，６９３，７６１号明細書；同第５，６９３，７６２号明細書；及び同第６，１８０，３７０号明細書；及び国際公開第９０／０７８６１号パンフレットを参照されたい。以下の総説及びその中で引用される参考文献：Ｐｒｅｓｔａ，１９９２，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．２：５９３−５９６；Ｖａｓｗａｎｉ  ａｎｄ  Ｈａｍｉｌｔｏｎ，１９９８，Ａｎｎ．Ａｌｌｅｒｇｙ，Ａｓｔｈｍａ＆Ｉｍｍｕｎｏｌ．１：１０５−１１５；Ｈａｒｒｉｓ，１９９５，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｔｒａｎｓａｃｔｉｏｎｓ  ２３：１０３５−１０３８；Ｈｕｒｌｅ  ａｎｄ  Ｇｒｏｓｓ，１９９４，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．５：４２８−４３３も参照されたい。
【００７２】
ヒト抗体：本明細書において使用される際の「ヒト抗体」という用語は、フレームワーク及びＣＤＲ領域の両方が、ヒト由来の配列に由来する可変領域を有する抗体を含む。さらに、抗体が定常領域を含む場合、定常領域は、このようなヒト配列、例えばヒト生殖系列配列若しくは突然変異体のヒト生殖系列配列又は例えばＫｎａｐｐｉｋ  ｅｔ  ａｌ．，２０００，Ｊ  Ｍｏｌ  Ｂｉｏｌ  ２９６，５７−８６に記載されているように、ヒトフレームワーク配列分析に由来する抗体含有コンセンサスフレームワーク配列にも由来する。免疫グロブリン可変ドメイン、例えばＣＤＲの構造及び位置は、周知の番号付けスキーム、例えばＫａｂａｔ番号付けスキーム、Ｃｈｏｔｈｉａ番号付けスキーム又はＫａｂａｔ及びＣｈｏｔｈｉａの任意の組合せを用いて定義され得る（例えば、Ｌａｚｉｋａｎｉ  ｅｔ  ａｌ．，１９９７，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏ．２７３：９２７  ９４８；Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，１９９１，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ  ｅｄｉｔ．，ＮＩＨ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ  ｎｏ．９１−３２４２  Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ  ａｎｄ  Ｈｕｍａｎ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ；Ｃｈｏｔｈｉａ  ｅｔ  ａｌ．，１９８７，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１−９１７；Ｃｈｏｔｈｉａ  ｅｔ  ａｌ．，１９８９，Ｎａｔｕｒｅ  ３４２：８７７−８８３を参照されたい）。
【００７３】
ヒト抗体は、ヒト配列によってコードされないアミノ酸残基（例えば、インビトロでのランダム若しくは部位特異的突然変異又はインビボでの体細胞突然変異によって導入される突然変異又は安定性若しくは製造を促進するための保存的置換）を含み得る。しかしながら、本明細書において使用される際の「ヒト抗体」という用語は、マウスなどの別の哺乳動物種の生殖系列に由来するＣＤＲ配列が、ヒトフレームワーク配列上にグラフトされた抗体を含むことを意図されていない。
【００７４】
組み合わせて：本明細書において使用される際の「組み合わせて」投与されるとは、２つ（以上）の異なる治療薬が、対象が疾患に罹患する過程において対象に送達されること、例えば２つ以上の治療薬が、対象が疾患と診断された後及び疾患が治癒若しくは取り除かれる前又は治療が他の理由で停止される前に送達されることを意味する。
【００７５】
ノブ：ノブ・イントゥ・ホールに関連して、「ノブ」は、第１のＦｃ鎖の境界から突出し、したがってＦｃヘテロ二量体を安定させ、それにより例えばＦｃホモ二量体形成よりＦｃヘテロ二量体形成に有利に作用するように、第２のＦｃ鎖との境界における相補的な「ホール」に位置決め可能である少なくとも１つのアミノ酸側鎖を指す。
【００７６】
ノブ及びホール（又はノブ・イントゥ・ホール）：Ｆｃヘテロ二量体化の１つの機構は、当技術分野において「ノブ及びホール」、又は「ノブ・イン・ホール」、又は「ノブ・イントゥ・ホール」と一般に呼ばれる。これらの用語は、例えば、Ｒｉｄｇｗａｙ  ｅｔ  ａｌ．，１９９６，Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  ９（７）：６１７；Ａｔｗｅｌｌ  ｅｔ  ａｌ．，１９９７，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２７０：２６；及び米国特許第８，２１６，８０５号明細書に記載されるように、Ｆｃホモ二量体よりＦｃヘテロ二量体の形成に有利に作用するように立体的影響を生じるアミノ酸突然変異を指す。ノブ・イン・ホール突然変異は、例えば、第７．４．１．６節に記載されるように、ヘテロ二量体化を改善する他の手法と組み合わされ得る。
【００７７】
モノクローナル抗体：本明細書において使用される際の「モノクローナル抗体」という用語は、同じ遺伝源に由来する、抗体、抗体フラグメント、分子（ＢＢＭを含む）などを含むポリペプチドを指す。
【００７８】
１価：抗原結合分子に関連して本明細書において使用される際の「１価」という用語は、単一の抗原結合ドメインを有する抗原結合分子を指す。
【００７９】
多重特異性結合分子：「多重特異性結合分子」又は「ＭＢＭ」という用語は、少なくとも２つの抗原に特異的に結合し、２つ以上のＡＢＤを含む抗原結合分子を指す。ＡＢＤは、それぞれ独立して、抗体フラグメント（例えば、ｓｃＦｖ、Ｆａｂ、ナノボディ）、リガンド又は非抗体由来の結合剤（例えば、フィブロネクチン、フィノマー、ＤＡＲＰｉｎ）であり得る。
【００８０】
突然変異又は修飾：ポリペプチドの一次アミノ酸配列に関連して、「修飾」及び「突然変異」という用語は、参照ポリペプチドと比べた、ポリペプチド配列におけるアミノ酸置換、挿入及び／又は欠失を指す。さらに、「修飾」という用語は、例えば、化学的コンジュゲーション（例えば、薬物又はポリエチレングリコール部分の）又は翻訳後修飾（例えば、グリコシル化）による、アミノ酸残基への改変をさらに包含する。
【００８１】
核酸：「核酸」という用語は、「ポリヌクレオチド」という用語と同義的に本明細書において使用され、一本鎖又は二本鎖形態のいずれかのデオキシリボヌクレオチド又はリボヌクレオチド及びそれらのポリマーを指す。この用語は、合成、天然及び非天然であり、参照核酸と同様の結合特性を有し、参照ヌクレオチドと同様に代謝される、公知のヌクレオチド類似体又は修飾された骨格残基又は連結を含む核酸を包含する。このような類似体の例としては、限定はされないが、ホスホロチオエート、ホスホロアミダート、メチルホスホネート、キラル−メチルホスホネート、２−Ｏ−メチルリボヌクレオチド及びペプチド−核酸（ＰＮＡ）が挙げられる。
【００８２】
特に示されない限り、特定の核酸配列は、明示的に示された配列だけでなく、その核酸配列の保存的に修飾された変異体（例えば、縮重コドン置換）及び相補配列も暗に包含する。具体的には、以下に詳述されるように、縮重コドン置換は、１つ以上の選択された（又は全ての）コドンの第３位が、混合塩基及び／又はデオキシイノシン残基で置換された配列を生成することによって達成され得る（Ｂａｔｚｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９１）Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄ  Ｒｅｓ．１９：５０８１；Ｏｈｔｓｕｋａ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８５）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６０：２６０５−２６０８；及びＲｏｓｓｏｌｉｎｉ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９４）Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｐｒｏｂｅｓ  ８：９１−９８）。
【００８３】
作動可能に連結された：「作動可能に連結された」という用語は、２つ以上のペプチド又はポリペプチドドメイン又は核酸（例えば、ＤＮＡ）セグメント間の機能的関係を指す。融合タンパク質又は他のポリペプチドに関連して、「作動可能に連結された」という用語は、２つ以上のアミノ酸セグメントが機能的ポリペプチドを生成するように連結されることを意味する。例えば、抗原結合分子に関連して、別個のＡＢＭ（又はＡＢＭの鎖）がペプチドリンカー配列を介して作動可能に連結され得る。抗原結合分子のポリペプチド鎖などの、融合タンパク質をコードする核酸に関連して、「作動可能に連結された」は、２つの核酸が、２つの核酸によってコードされたアミノ酸配列がインフレームのままであるように結合されることを意味する。転写調節に関連して、この用語は、転写配列に対する転写調節配列の機能的関係を指す。例えば、プロモーター又はエンハンサー配列は、それが適切な宿主細胞又は他の発現系におけるコード配列の転写を刺激又は調節する場合、コード配列に作動可能に連結される。
【００８４】
ポリペプチド及びタンパク質：「ポリペプチド」及び「タンパク質」という用語は、アミノ酸残基のポリマーを指すように本明細書において同義的に使用される。この用語は、１つ以上のアミノ酸残基が、対応する天然アミノ酸の人工的な化学的模倣体であるアミノ酸ポリマー並びに天然アミノ酸ポリマー及び非天然アミノ酸ポリマーを包含する。さらに、この用語は、例えば、１つ以上の側鎖若しくは末端の合成誘導体化、グリコシル化、ＰＥＧ化、循環置換（ｃｉｒｃｕｌａｒ  ｐｅｒｍｕｔａｔｉｏｎ）、環化、他の分子へのリンカー、タンパク質若しくはタンパク質ドメインへの融合及びペプチドタグ若しくは標識の付加によって誘導体化されるアミノ酸ポリマーを包含する。
【００８５】
認識する：本明細書において使用される際の「認識する」という用語は、そのエピトープを見つけ、それと相互作用する（例えば、結合する）ＡＢＤを指す。
【００８６】
配列同一性：２つの類似の配列（例えば、抗体可変ドメイン）間の配列同一性は、Ｓｍｉｔｈ、Ｔ．Ｆ．＆Ｗａｔｅｒｍａｎ，Ｍ．Ｓ．（１９８１）“Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ  Ｏｆ  Ｂｉｏｓｅｑｕｅｎｃｅｓ”，Ａｄｖ．Ａｐｐｌ．Ｍａｔｈ．２：４８２［局地的相同性アルゴリズム］；Ｎｅｅｄｌｅｍａｎ，Ｓ．Ｂ．＆Ｗｕｎｓｃｈ，ＣＤ．（１９７０）“Ａ  Ｇｅｎｅｒａｌ  Ｍｅｔｈｏｄ  Ａｐｐｌｉｃａｂｌｅ  Ｔｏ  ｔｈｅ  Ｓｅａｒｃｈ  Ｆｏｒ  Ｓｉｍｉｌａｒｉｔｉｅｓ  Ｉｎ  Ａｍｉｎｏ  Ａｃｉｄ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  Ｏｆ  Ｔｗｏ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ”，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．４８：４４３［相同性アライメントアルゴリズム］、Ｐｅａｒｓｏｎ，Ｗ．Ｒ．＆Ｌｉｐｍａｎ，Ｄ．Ｊ．（１９８８）“Ｉｍｐｒｏｖｅｄ  Ｔｏｏｌｓ  Ｆｏｒ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ”，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．（Ｕ．Ｓ．Ａ．）８５：２４４４［類似性の探索方法］；又はＡｌｔｓｃｈｕｌ，Ｓ．Ｆ．ｅｔ  ａｌ，（１９９０）“Ｂａｓｉｃ  Ｌｏｃａｌ  Ａｌｉｇｎｍｅｎｔ  Ｓｅａｒｃｈ  Ｔｏｏｌ“，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２１５：４０３−１０，“ＢＬＡＳＴ”  ａｌｇｏｒｉｔｈｍ（ｂｌａｓｔ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／Ｂｌａｓｔ．ｃｇｉを参照されたい）のものなどのアルゴリズムによって測定され得る。上記のアルゴリズムのいずれかを使用する場合、デフォルトパラメータ（ウィンドウ長さ、ギャップペナルティなどの）が使用される。一実施形態において、配列同一性は、デフォルトパラメータを使用するＢＬＡＳＴアルゴリズムを使用して行われる。
【００８７】
任意選択的に、同一性は、少なくとも約５０ヌクレオチド（又はペプチド若しくはポリペプチドの場合、少なくとも約１０アミノ酸）の長さの領域にわたり、又はある場合には１００〜５００若しくは１０００又はそれを超えるヌクレオチド（又は２０、５０、２００若しくはそれを超えるアミノ酸）の長さの領域にわたって決定される。ある実施形態において、同一性は、規定されたドメイン、例えば抗体のＶＨ又はＶＬにわたって決定される。特に規定されない限り、２つの配列間の配列同一性は、２つの配列の短い方の全長にわたって決定される。
【００８８】
一本鎖Ｆａｂ又はｓｃＦａｂ：「一本鎖Ｆａｂ」及び「ｓｃＦａｂ」という用語は、ＶＨ及びＶＬが互いに会合され、ＣＨ１及びＣＬが互いに会合されるように、抗体重鎖可変ドメイン（ＶＨ）、抗体定常ドメイン１（ＣＨ１）、抗体軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）、抗体軽鎖定常ドメイン（ＣＬ）及びリンカーを含むポリペプチドを意味する。ある実施形態において、抗体ドメイン及びリンカーは、Ｎ末端からＣ末端方向への以下の順序の１つ：ａ）ＶＨ−ＣＨ１−リンカー−ＶＬ−ＣＬ、ｂ）ＶＬ−ＣＬ−リンカー−ＶＨ−ＣＨ１、ｃ）ＶＨ−ＣＬ−リンカー−ＶＬ−ＣＨ１又はｄ）ＶＬ−ＣＨ１−リンカー−ＶＨ−ＣＬを有する。リンカーは、少なくとも３０個のアミノ酸、例えば３２〜５０個のアミノ酸のポリペプチドであり得る。一本鎖Ｆａｂは、ＣＬドメインとＣＨ１ドメインとの間の天然ジスルフィド結合によって安定化される。
【００８９】
同時（ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ）又は同時（ｃｏｎｃｕｒｒｅｎｔ）送達：ある実施形態において、投与に関して重複があるように、１つの治療薬の送達は、第２の治療薬の送達が開始したときに依然として行われている。これは、本明細書において「同時の」又は「同時の送達」と呼ばれることがある。いずれの場合でもある実施形態において、治療薬は、併用投与のためより有効である。例えば、第２の治療薬が、より有効であり、例えば同等の効果がより少ない第２の治療薬で見られるか、又は第２の治療薬が、第２の治療薬が第１の治療薬なしで投与された場合に見られるより大きく症状を軽減するか、又は同様の状況が、第１の治療薬で見られる。ある実施形態において、送達は、症状の軽減又は疾患に関連する他のパラメータが、他方の治療薬なしで送達された一方の治療薬で観察され得るより大きくなるようなものである。２つの治療薬の効果は、部分的に相加的であるか、完全に相加的であるか、又は相加作用以上であり得る。送達は、送達される第１の治療薬の効果が、第２の治療薬が送達されるときに依然として検出可能であるようなものであり得る。
【００９０】
一本鎖Ｆｖ又はｓｃＦｖ：本明細書における「一本鎖Ｆｖ」又は「ｓｃＦｖ」とは、一般に本明細書に記載されるＡＢＤリンカーを用いて可変軽鎖ドメインに共有結合されて、ｓｃＦｖ又はｓｃＦｖドメインを形成する可変重鎖ドメインを意味する。ｓｃＦｖドメインは、Ｎ末端からＣ末端への配向（ＶＨ−リンカー−ＶＬ又はＶＬ−リンカー−ＶＨ）のいずれかであり得る。ｓｃＦｖの概要については、Ｐｌｕｅｃｋｔｈｕｎ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ｏｆ  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，ｖｏｌ．１１３，Ｒｏｓｅｎｂｕｒｇ  ａｎｄ  Ｍｏｏｒｅ  ｅｄｓ．，（１９９４）Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ｐｐ．２６９−３１５を参照されたい。
【００９１】
特異的に（又は選択的に）結合する：抗原又はエピトープに「特異的に（又は選択的に）結合する」という用語は、タンパク質及び他の生体物質の異種集団中の同種抗原又はエピトープの存在を決定する結合反応を指す。本開示の抗原結合分子又はＡＢＤは、典型的に、５×１０−２Ｍ未満、１０−２Ｍ未満、５×１０−３Ｍ未満、１０−３Ｍ未満、５×１０−４Ｍ未満、１０−４Ｍ未満、５×１０−５Ｍ未満、１０−５Ｍ未満、５×１０−６Ｍ未満、１０−６Ｍ未満、５×１０−７Ｍ未満、１０−７Ｍ未満、５×１０−８Ｍ未満、１０−８Ｍ未満、５×１０−９Ｍ未満又は１０−９Ｍ未満の解離速度定数（ＫＤ）（ｋｏｆｆ／ｋｏｎ）を有し、非特異的抗原（例えば、ＨＳＡ）に結合するためのその親和性より少なくとも２倍高い（より典型的に、少なくとも２０倍、少なくとも５０倍又は少なくとも１００倍）親和性で標的抗原に結合する。結合親和性は、Ｂｉａｃｏｒｅ、ＳＰＲ又はＢＬＩアッセイを用いて測定され得る。
【００９２】
「特異的に結合する」という用語は、異種間交差性を排除しない。例えば、１つの種からの抗原に「特異的に結合する」抗原結合モジュール（例えば、抗体の抗原結合フラグメント）は、１つ以上の他の種における該当する抗原にも「特異的に結合」し得る。したがって、このような異種間交差性自体は、「特異的な」結合剤として抗原結合モジュールの分類を変化させない。特定の実施形態において、ヒト抗原に特異的に結合する抗原結合ドメインは、１つ以上の非ヒト哺乳動物種、例えば霊長類種（カニクイザル（Ｍａｃａｃａ  ｆａｓｃｉｃｕｌａｒｉｓ）、アカゲザル（Ｍａｃａｃａ  ｍｕｌａｔｔａ）及びブタオザル（Ｍａｃａｃａ  ｎｅｍｅｓｔｒｉｎａ）の１つ以上を含むが、これらに限定されない）又はげっ歯類種、例えばハツカネズミ（Ｍｕｓ  ｍｕｓｃｕｌｕｓ）との異種間交差性を有する。他の実施形態において、抗原結合ドメインは、異種間交差性を有さない。
【００９３】
対象：「対象」という用語は、ヒト及び非ヒト動物を含む。非ヒト動物は、全ての脊椎動物、例えば非ヒト霊長類、ヒツジ、イヌ、ウシ、ニワトリ、両生類及びは虫類などの哺乳動物及び非哺乳動物を含む。特記されない限り、「患者」又は「対象」という用語は、本明細書において同義的に使用される。
【００９４】
ＶＨドメインのタンデム：本明細書において使用される際の「ＶＨドメイン（又はＶＨ）のタンデム」という用語は、抗体の倍数の同一のＶＨドメインからなる一連のＶＨドメインを指す。ＶＨドメインのそれぞれは、タンデムの末端の最後の１つを除いて、リンカーあり又はなしで別のＶＨドメインのＮ末端に連結されたそのＣ末端を有する。タンデムは、少なくとも２つのＶＨドメインを有し、ＢＢＭのある実施形態において３、４、５、６、７、８、９又は１０個のＶＨドメインを有する。ＶＨのタンデムは、それらが単一のポリペプチド鎖として作製されることを可能にするリンカーあり又はなしの組み換え方法（例えば、第７．４．３節に記載されるように）を用いて、所望の順序で各ＶＨドメインのコード核酸を結合することによって生成され得る。タンデムの最初のＶＨドメインのＮ末端は、タンデムのＮ末端として定義される一方、タンデムの最後のＶＨドメインのＣ末端は、タンデムのＣ末端として定義される。
【００９５】
ＶＬドメインのタンデム：本明細書において使用される際の「ＶＬドメイン（又はＶＬ）のタンデム」という用語は、抗体の倍数の同一のＶＬドメインからなる一連のＶＬドメインを指す。ＶＬドメインのそれぞれは、タンデムの末端の最後の１つを除いて、リンカーあり又はなしで別のＶＬのＮ末端に連結されたそのＣ末端を有する。タンデムは、少なくとも２つのＶＬドメインを有し、ＢＢＭのある実施形態において３、４、５、６、７、８、９又は１０個のＶＬドメインを有する。ＶＬのタンデムは、それらが単一のポリペプチド鎖として作製されることを可能にするリンカーあり又はなしの組み換え方法（例えば、第７．４．３節に記載されるように）を用いて、所望の順序で各ＶＬドメインのコード核酸を結合することによって生成され得る。タンデムの最初のＶＬドメインのＮ末端は、タンデムのＮ末端として定義される一方、タンデムの最後のＶＬドメインのＣ末端は、タンデムのＣ末端として定義される。
【００９６】
標的抗原：本明細書において使用される際の「標的抗原」とは、抗原結合ドメインによって非共有結合的に、可逆的に及び特異的に結合される分子を意味する。
【００９７】
４価：抗原結合分子（例えば、ＢＢＭ）に関連して本明細書において使用される際の「４価」という用語は、４つのＡＢＤを有する抗原結合分子を指す。ＢＢＭである本開示の抗原結合分子は、二重特異性であり、ＢＣＭＡ及び第２の抗原、例えばＴＣＲ複合体の構成要素に特異的に結合する。特定の実施形態において、４価ＢＢＭは、一般に、それぞれＢＣＭＡに特異的に結合する２つのＡＢＤ及びそれぞれ第２の抗原、例えばＴＣＲ複合体の構成要素に特異的に結合する２つのＡＢＤを有するが、他の形態が考えられ、それにより、３つのＡＢＤが１つの抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に特異的に結合し、１つのＡＢＤが、異なる抗原（例えば、ＴＣＲ複合体の構成要素）に特異的に結合する。４価形態の例は、図１ＡＡ〜１ＡＧに概略的に示される。
【００９８】
治療有効量：「治療有効量」は、所望の治療結果を達成するのに必要な投与量及び期間での有効な量を指す。
【００９９】
治療する、治療、治療すること：本明細書において使用される際、「治療する」、「治療」及び「治療すること」という用語は、１つ以上の抗原結合分子の投与から得られる、増殖性疾患の進行、重症度及び／又は若しくは期間の減少若しくは改善又は増殖性疾患の１つ以上の症状（例えば、１つ以上の識別可能な症状）の改善を指す。ある実施形態において、「治療する」、「治療」及び「治療すること」という用語は、必ずしも患者によって識別されない、腫瘍の成長などの増殖性疾患の少なくとも１つの測定可能な物理的パラメータの改善を指す。他の実施形態において、「治療する」、「治療」及び「治療すること」という用語は、例えば、識別可能な症状の安定化によって物理的に、例えば物理的パラメータの安定化によって生理学的に又はその両方のいずれかの増殖性疾患の進行の阻害を指す。他の実施形態において、「治療する」、「治療」及び「治療すること」という用語は、腫瘍サイズ又は癌性細胞数の減少又は安定化を指す。
【０１００】
腫瘍：「腫瘍」という用語は、本明細書において「癌」という用語と同義的に使用され、例えば、両方の用語は、固体及び液体、例えばびまん性又は循環腫瘍を包含する。本明細書において使用される際、「癌」又は「腫瘍」という用語は、前悪性並びに悪性の癌及び腫瘍を含む。
【０１０１】
３価：抗原結合分子（例えば、ＢＢＭ）に関連して本明細書において使用される際の「３価」という用語は、３つのＡＢＤを有する抗原結合分子を指す。ＢＢＭである本開示の抗原結合分子は、二重特異性であり、ＢＣＭＡ及び第２の抗原、例えばＴＣＲ複合体の構成要素に特異的に結合する。したがって、３価ＢＢＭは、１つの抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に結合する２つのＡＢＤ及び異なる抗原（例えば、ＴＣＲ複合体の構成要素）に結合する１つのＡＢＤを有する。３価形態の例は、図１Ｇ〜１Ｚに概略的に示される。
【０１０２】
可変領域：本明細書において使用される際の「可変領域」又は「可変ドメイン」とは、それぞれκ、λ及び重鎖免疫グロブリン遺伝子座を構成するＶκ、Ｖλ及び／又はＶＨ遺伝子のいずれかによって実質的にコードされる１つ以上のＩｇドメインを含み、抗原特異性を付与するＣＤＲを含有する、免疫グロブリンの領域を意味する。「可変重鎖ドメイン」は、「可変軽鎖ドメイン」と対合して、抗原結合ドメイン（「ＡＢＤ」）を形成し得る。さらに、各可変ドメインは、以下の順序：ＦＲ１−ＣＤＲ１−ＦＲ２−ＣＤＲ２−ＦＲ３−ＣＤＲ３−ＦＲ４でアミノ末端からカルボキシ末端まで配置された、３つの超可変領域（「相補性決定領域」、「ＣＤＲ」）（可変重鎖ドメインについてはＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２、ＣＤＲ−Ｈ３及び可変軽鎖ドメインについてはＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３）及び４つのフレームワーク（ＦＲ）領域を含む。
【０１０３】
ベクター：「ベクター」という用語は、それに連結された別のポリヌクレオチドを輸送することが可能なポリヌクレオチド分子を指すことが意図される。１つのタイプのベクターは、「プラスミド」であり、これは、さらなるＤＮＡセグメントがその中にライゲートされ得る環状二本鎖ＤＮＡループを指す。別のタイプのベクターは、ウイルスベクターであり、ここで、さらなるＤＮＡセグメントがウイルスゲノム中にライゲートされ得る。特定のベクターは、それらが導入される宿主細胞内で自己複製が可能である（例えば、細菌複製起点及びエピソーム哺乳動物ベクターを有する細菌ベクター）。他のベクター（例えば、非エピソーム哺乳動物ベクター）は、宿主細胞中への導入時、宿主細胞のゲノムに組み込まれ得、それにより宿主ゲノムに沿って複製される。さらに、特定のベクターは、それらが作動可能に連結される遺伝子の発現を誘導することが可能である。このようなベクターは、本明細書において「組み換え発現ベクター」（又は単に「発現ベクター」）と呼ばれる。一般に、組み換えＤＮＡ技術において有用な発現ベクターは、プラスミドの形態であることが多い。プラスミドがベクターの最も一般的に使用される形態であるため、本明細書において、「プラスミド」及び「ベクター」は、同義的に使用され得る。しかしながら、本開示は、同等の機能を果たすウイルスベクター（例えば、複製欠損レトロウイルス、アデノウイルス及びアデノ随伴ウイルス）などのこのような他の形態の発現ベクターを含むことが意図される。
【０１０４】
ＶＨ：「ＶＨ」という用語は、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、ｄｓＦｖ又はＦａｂの重鎖を含む、抗体の免疫グロブリン重鎖の可変領域を指す。
【０１０５】
ＶＬ：「ＶＬ」という用語は、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、ｄｓＦｖ又はＦａｂの軽鎖を含む、免疫グロブリン軽鎖の可変領域を指す。
【０１０６】
ＶＨ−ＶＬ又はＶＨ−ＶＬ対：ＶＨ−ＶＬ対を参照して、同じポリペプチド鎖上又は異なるポリペプチド鎖上にかかわらず、「ＶＨ−ＶＬ」及び「ＶＨ−ＶＬ対」という用語は、便宜上、使用され、文脈上他の意味に解すべき場合を除き、任意の特定の配向を示すことを意図されていない。したがって、「ＶＨ−ＶＬ」又は「ＶＨ−ＶＬ対」を含むｓｃＦｖは、例えば、ＶＨ  Ｎ末端からＶＬ又はＶＬ  Ｎ末端からＶＨへの任意の配向でＶＨ及びＶＬドメインを有し得る。
【０１０７】
７．２．ＢＣＭＡ結合分子
一態様において、本開示は、ヒトＢＣＭＡに結合する単一特異性及び多重特異性分子を含むＢＣＭＡ結合分子を提供する。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、単一特異性結合分子である。例えば、単一特異性結合分子は、抗体又はその抗原結合フラグメント（例えば、抗体フラグメント、ｓｃＦｖ、ｄｓＦｖ、Ｆｖ、Ｆａｂ、ｓｃＦａｂ、（Ｆａｂ’）２又は単一ドメイン抗体（ＳＤＡＢ）であり得る。他の実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、多重特異性（例えば、二重特異性）ＢＣＭＡ結合分子（例えば、二重特異性抗体）である。
【０１０８】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、キメラ又はヒト化モノクローナル抗体である。キメラ及び／又はヒト化抗体は、非ヒト対象において産生されるか又は非ヒト抗体遺伝子の発現から得られる抗体に対するヒト患者による免疫応答を最小限に抑えるように操作され得る。キメラ抗体は、非ヒト動物抗体可変領域及びヒト抗体定常領域を含む。このような抗体は、元のモノクローナル抗体のエピトープ結合特異性を保持するが、ヒトに投与される場合、免疫抗原性が低くなり得るため、患者に忍容される可能性がより高い。例えば、マウス抗体（例えば、マウスモノクローナル抗体）の軽鎖の可変領域の１つ又は全て（例えば、１つ、２つ又は３つ）及び／又は重鎖の可変領域の１つ又は全て（例えば、１つ、２つ又は３つ）は、限定はされないが、それぞれＩｇＧ１ヒト定常領域などのヒト定常領域に結合され得る。キメラモノクローナル抗体は、公知の組み換えＤＮＡ技術によって産生され得る。例えば、非ヒト抗体分子の定常領域をコードする遺伝子が、ヒト定常領域をコードする遺伝子で置換され得る（ＲｏｂｉｎｓｏｎらのＰＣＴ特許公報ＰＣＴ／ＵＳ８６／０２２６９号明細書；Ａｋｉｒａらの欧州特許出願第１８４，１８７号明細書；又はＴａｎｉｇｕｃｈｉ，Ｍ．の欧州特許出願第１７１，４９６号明細書を参照されたい）。さらに、キメラ抗体を生成するのに使用され得る他の好適な技術は、例えば、米国特許第４，８１６，５６７号明細書；同第４，９７８，７７５号明細書；同第４，９７５，３６９号明細書；及び同第４，８１６，３９７号明細書に記載されている。
【０１０９】
本開示のキメラ又はヒト化抗体及びその抗原結合フラグメントが、マウスモノクローナル抗体の配列に基づいて調製され得る。重鎖及び軽鎖免疫グロブリンをコードするＤＮＡは、対象とするマウスハイブリドーマから得られ、標準的な分子生物学技術を用いて非マウス（例えば、ヒト）免疫グロブリン配列を含むように操作され得る。例えば、キメラ抗体を生成するために、マウス可変領域は、公知の方法を用いてヒト定常領域に連結され得る（例えば、Ｃａｂｉｌｌｙらに付与された米国特許第４，８１６，５６７号明細書を参照されたい）。ヒト化抗体を生成するために、マウスＣＤＲ領域は、公知の方法を用いてヒトフレームワークに挿入され得る。例えば、Ｗｉｎｔｅｒに付与された米国特許第５，２２５，５３９号明細書並びにＱｕｅｅｎらに付与された米国特許第５，５３０，１０１号明細書；同第５，５８５，０８９号明細書；同第５，６９３，７６２号明細書及び同第６１８０３７０号明細書を参照されたい。
【０１１０】
ヒト化抗体は、ＣＤＲグラフティング（例えば、欧州特許第２３９，４００号明細書；国際公開番号国際公開第９１／０９９６７号パンフレット；及び米国特許第５，２２５，５３９号明細書、同第５，５３０，１０１号明細書及び同第５，５８５，０８９号明細書を参照されたい）、ベニヤリング（ｖｅｎｅｅｒｉｎｇ）又はリサーフェイシング（ｒｅｓｕｒｆａｃｉｎｇ）（例えば、欧州特許第５９２，１０６号明細書及び欧州特許第５１９，５９６号明細書；Ｐａｄｌａｎ，１９９１，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，２８（４／５）：４８９−４９８；Ｓｔｕｄｎｉｃｋａ  ｅｔ  ａｌ．，１９９４，Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，７（６）：８０５−８１４；及びＲｏｇｕｓｋａ  ｅｔ  ａｌ．，１９９４，ＰＮＡＳ，９１：９６９−９７３を参照されたい）、チェーンシャッフリング（ｃｈａｉｎ  ｓｈｕｆｆｌｉｎｇ）（例えば、米国特許第５，５６５，３３２号明細書を参照されたい）並びに例えば米国特許出願公開第２００５／００４２６６４号明細書、米国特許出願公開第２００５／００４８６１７号明細書、米国特許第６，４０７，２１３号明細書、米国特許第５，７６６，８８６号明細書、国際公開番号国際公開第９３１７１０５号パンフレット、Ｔａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１６９：１１１９−２５（２００２）、Ｃａｌｄａｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇ．，１３（５）：３５３−６０（２０００）、Ｍｏｒｅａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ，２０（３）：２６７−７９（２０００）、Ｂａｃａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２７２（１６）：１０６７８−８４（１９９７）、Ｒｏｇｕｓｋａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇ．，９（１０）：８９５−９０４（１９９６）、Ｃｏｕｔｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．，５５（２３  Ｓｕｐｐ）：５９７３ｓ−５９７７ｓ（１９９５）、Ｃｏｕｔｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．，５５（８）：１７１７−２２（１９９５）、Ｓａｎｄｈｕ  Ｊ  Ｓ，Ｇｅｎｅ，１５０（２）：４０９−１０（１９９４）及びＰｅｄｅｒｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２３５（３）：９５９−７３（１９９４）に開示される技術を含むがこれらに限定されない様々な公知の技術を用いて産生され得る。多くの場合、フレームワーク領域中のフレームワーク残基は、抗原結合を改変する、例えば改善するために、ＣＤＲドナー抗体に由来する対応する残基で置換される。これらのフレームワーク置換、例えば保存的置換が、周知の方法により、例えば抗原結合に重要なフレームワーク残基を同定するためのＣＤＲとフレームワーク残基との相互作用のモデリング及び特定の位置における異常なフレームワークを同定するための配列比較によって同定される。（例えば、Ｑｕｅｅｎらの米国特許第５，５８５，０８９号明細書；及びＲｉｅｃｈｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８８，Ｎａｔｕｒｅ，３３２：３２３を参照されたい）。
【０１１１】
本明細書において提供されるように、ヒト化抗体又は抗体フラグメントは、非ヒト免疫グロブリン分子からの１つ以上のＣＤＲ及びフレームワーク領域を含み得、ここで、フレームワークを含むアミノ酸残基は、生殖系列に完全に又は大部分が由来する。抗体又は抗体フラグメントのヒト化のための複数の技術が周知であり、Ｗｉｎｔｅｒ及び協同研究者の方法（Ｊｏｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３２１：５２２−５２５（１９８６）；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３３２：３２３−３２７（１９８８）；Ｖｅｒｈｏｅｙｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２３９：１５３４−１５３６（１９８８））に従って、げっ歯類ＣＤＲ又はヒト抗体の対応する配列についてのＣＤＲ配列を置換すること、すなわちＣＤＲグラフティング（欧州特許第２３９，４００号明細書；ＰＣＴ公開番号国際公開第９１／０９９６７号パンフレット；及び米国特許第４，８１６，５６７号明細書；同第６，３３１，４１５号明細書；同第５，２２５，５３９号明細書；同第５，５３０，１０１号明細書；同第５，５８５，０８９号明細書；同第６，５４８，６４０号明細書）によって実質的に行われ得る。このようなヒト化抗体及び抗体フラグメントにおいて、無傷のヒト可変ドメインより実質的に少ない部分が、非ヒト種からの対応する配列で置換されている。ヒト化抗体は、いくつかのＣＤＲ残基及び場合によりいくつかのフレームワーク（ＦＲ）残基がげっ歯類抗体の類似の部位からの残基で置換されたヒト抗体であることが多い。抗体及び抗体フラグメントのヒト化は、ベニヤリング又はリサーフェイシング（欧州特許第５９２，１０６号明細書；欧州特許第５１９，５９６号明細書；Ｐａｄｌａｎ，１９９１，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，２８（４／５）：４８９−４９８；Ｓｔｕｄｎｉｃｋａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，７（６）：８０５−８１４（１９９４）；及びＲｏｇｕｓｋａ  ｅｔ  ａｌ．，ＰＮＡＳ，９１：９６９−９７３（１９９４））又はチェーンシャッフリング（米国特許第５，５６５，３３２号明細書）によっても達成され得る。
【０１１２】
ヒト化抗体を作製するのに使用される、軽鎖及び重鎖の両方のヒト可変ドメインの選択は、抗原性を低下させることになる。いわゆる「最良適合（ｂｅｓｔ−ｆｉｔ）」法に従って、げっ歯類抗体の可変ドメインの配列は、公知のヒト可変ドメイン配列のライブラリー全体に対してスクリーニングされる。次に、げっ歯類の配列に最も近いヒト配列が、ヒト化抗体のためのヒトフレームワーク（ＦＲ）として容認される（Ｓｉｍｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１５１：２２９６（１９９３）；Ｃｈｏｔｈｉａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，１９６：９０１（１９８７））。別の方法は、軽鎖又は重鎖の特定のサブグループの全てのヒト抗体のコンセンサス配列に由来する特定のフレームワークを使用する。同じフレームワークが、いくつかの異なるヒト化抗体に使用され得る（例えば、Ｎｉｃｈｏｌｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎ．３４（１６−１７）：１１５７−１１６５（１９９７）；Ｃａｒｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８９：４２８５（１９９２）；Ｐｒｅｓｔａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１５１：２６２３（１９９３）を参照されたい。ある実施形態において、フレームワーク領域、例えば重鎖可変領域の全ての４つのフレームワーク領域は、ＶＨ４＿４−５９生殖系列配列に由来する。一実施形態において、フレームワーク領域は、例えば、対応するマウス配列におけるアミノ酸からの１、２、３、４又は５つの修飾、例えば置換、例えば保存的置換を含み得る。一実施形態において、フレームワーク領域、例えば軽鎖可変領域の全ての４つのフレームワーク領域は、ＶＫ３＿１．２５生殖系列配列に由来する。一実施形態において、フレームワーク領域は、例えば、対応するマウス配列におけるアミノ酸からの１、２、３、４又は５つの修飾、例えば置換、例えば保存的置換を含み得る。
【０１１３】
特定の実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、特定の生殖系列重鎖免疫グロブリン遺伝子からの重鎖可変領域及び／又は特定の生殖系列軽鎖免疫グロブリン遺伝子からの軽鎖可変領域を含む。例えば、このような抗体は、特定の生殖系列配列「の産物」であるか又は「に由来する」重鎖又は軽鎖可変領域を含むヒト抗体を含むか又はそれからなり得る。生殖系列免疫グロブリン配列「の産物」であるか又は「に由来する」ヒト抗体は、ヒト抗体のアミノ酸配列を、生殖系列免疫グロブリンのアミノ酸配列と比較し、（本明細書に概説される方法を用いて）ヒト抗体の配列と配列が最も近い（すなわち最も高い同一性％）生殖系列免疫グロブリン配列を選択することなどによって同定され得る。特定の生殖系列免疫グロブリン配列「の産物」であるか又は「に由来する」ヒト抗体は、例えば、天然の体細胞突然変異又は部位特異的突然変異の意図的な導入のため、生殖系列配列と比較してアミノ酸差を含み得る。しかしながら、ヒト化抗体は、典型的に、アミノ酸配列が、生殖系列免疫グロブリン遺伝子によってコードされるアミノ酸配列と少なくとも９０％同一であり、他の種の生殖系列免疫グロブリンアミノ酸配列（例えば、マウス生殖系列配列）と比較した際に、ヒト配列に由来するものとして抗体を同定するアミノ酸残基を含む。ある場合には、ヒト化抗体は、アミノ酸配列が、生殖系列免疫グロブリン遺伝子によってコードされるアミノ酸配列と少なくとも９５、９６、９７、９８若しくは９９％又は少なくとも９６％、９７％、９８％若しくは９９％同一であり得る。典型的に、特定の生殖系列配列に由来するヒト化抗体は、生殖系列免疫グロブリン遺伝子によってコードされるアミノ酸配列との１０〜２０以下のアミノ酸差を示す（本明細書における任意の歪曲（ｓｋｅｗ）、ｐＩ及び除去（ａｂｌａｔｉｏｎ）変異の導入の前；すなわち、変異の数は、本開示の変異の導入の前、一般に少ない）。ある場合には、ヒト化抗体は、生殖系列免疫グロブリン遺伝子によってコードされるアミノ酸配列と５以下又は４、３、２若しくは１以下のアミノ酸差を示し得る（やはり、本明細書における任意の歪曲、ｐＩ及び除去変異の導入の前；すなわち、変異の数は、本開示の変異の導入の前、一般に少ない）。
【０１１４】
一実施形態において、親抗体は、親和性成熟されている。例えば、米国特許出願第１１／００４，５９０号明細書に記載されるように、構造に基づく方法が、ヒト化及び親和性成熟に用いられ得る。Ｗｕ  ｅｔ  ａｌ．，１９９９，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２９４：１５１−１６２；Ｂａｃａ  ｅｔ  ａｌ．，１９９７，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２（１６）：１０６７８−１０６８４；Ｒｏｓｏｋ  ｅｔ  ａｌ．，１９９６，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７１（３７）：２２６１１−２２６１８；Ｒａｄｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９９８，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９５：８９１０−８９１５；Ｋｒａｕｓｓ  ｅｔ  ａｌ．，２００３，Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  １６（１０）：７５３−７５９に記載される方法を含むがこれらに限定されない選択に基づく方法が、抗体可変領域をヒト化し、且つ／又は親和性成熟させるのに用いられ得る。米国特許第０９／８１０，５１０号明細書；Ｔａｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００２，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６９：１１１９−１１２５；Ｄｅ  Ｐａｓｃａｌｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，２００２，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６９：３０７６−３０８４に記載される方法を含むがこれらに限定されない他のヒト化方法は、ＣＤＲの一部のみをグラフトすることを含み得る。
【０１１５】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、ＦａｂであるＡＢＤを含む。Ｆａｂドメインは、パパインなどの酵素を用いた免疫グロブリン分子のタンパク質分解的切断又は組み換え発現によって産生され得る。Ｆａｂドメインは、典型的に、ＶＬドメインに結合されたＣＬドメインと対合するＶＨドメインに結合されたＣＨ１ドメインを含む。野生型免疫グロブリンにおいて、ＶＨドメインは、ＶＬドメインと対合して、Ｆｖ領域を構成し、ＣＨ１ドメインは、ＣＬドメインと対合して、結合モジュールをさらに安定させる。２つの定常ドメイン間のジスルフィド結合は、Ｆａｂドメインをさらに安定させ得る。
【０１１６】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、ｓｃＦａｂであるＡＢＤを含む。一実施形態において、ｓｃＦａｂフラグメント中の抗体ドメイン及びリンカーは、Ｎ末端からＣ末端方向への以下の順序の１つ：ａ）ＶＨ−ＣＨ１−リンカー−ＶＬ−ＣＬ、又はｂ）ＶＬ−ＣＬ−リンカー−ＶＨ−ＣＨ１を有する。ある場合には、ＶＬ−ＣＬ−リンカー−ＶＨ−ＣＨ１が使用される。
【０１１７】
別の実施形態において、ｓｃＦａｂフラグメント中の抗体ドメイン及びリンカーは、Ｎ末端からＣ末端方向への以下の順序の１つ：ａ）ＶＨ−ＣＬ−リンカー−ＶＬ−ＣＨ１又はｂ）ＶＬ−ＣＨ１−リンカー−ＶＨ−ＣＬを有する。
【０１１８】
任意選択的に、ｓｃＦａｂフラグメントにおいて、ＣＬ−ドメインとＣＨ１ドメインとの間の天然ジスルフィド結合に加えて、抗体重鎖可変ドメイン（ＶＨ）及び抗体軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）は、以下の位置：ｉ）重鎖可変ドメイン４４位と軽鎖可変ドメイン１００位、ｉｉ）重鎖可変ドメイン１０５位と軽鎖可変ドメイン４３位、又はｉｉｉ）重鎖可変ドメイン１０１位と軽鎖可変ドメイン１００位（ＫａｂａｔのＥＵインデックスによる番号付け）との間のジスルフィド結合の導入によってもジスルフィド安定化される。
【０１１９】
ｓｃＦａｂフラグメントのこのようなさらなるジスルフィド安定化は、一本鎖Ｆａｂフラグメントの可変ドメインＶＨ及びＶＬ間のジスルフィド結合の導入によって達成される。一本鎖Ｆｖの安定化のための非天然ジスルフィド架橋を導入するための技術は、例えば、国際公開第９４／０２９３５０号パンフレット、Ｒａｊａｇｏｐａｌ  ｅｔ  ａｌ．，１９９７，Ｐｒｏｔ．Ｅｎｇｉｎ．１０：１４５３−５９；Ｋｏｂａｙａｓｈｉ  ｅｔ  ａｌ．，１９９８，Ｎｕｃｌｅａｒ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ＆Ｂｉｏｌｏｇｙ，２５：３８７−３９３；及びＳｃｈｍｉｄｔ，ｅｔ  ａｌ．，１９９９，Ｏｎｃｏｇｅｎｅ  １８：１７１１−１７２１に記載されている。一実施形態において、ｓｃＦａｂフラグメントの可変ドメイン間の任意選択のジスルフィド結合は、重鎖可変ドメイン４４位と軽鎖可変ドメイン１００位との間にある。一実施形態において、ｓｃＦａｂフラグメントの可変ドメイン間の任意選択のジスルフィド結合は、重鎖可変ドメイン１０５位と軽鎖可変ドメイン４３位との間にある（ＫａｂａｔのＥＵインデックスによる番号付け）。
【０１２０】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、ｓｃＦｖであるＡＢＤを含む。一本鎖Ｆｖ抗体フラグメントは、単一のポリペプチド鎖中の抗体のＶＨ及びＶＬドメインを含み、一本鎖ポリペプチドとして発現されることが可能であり、それが由来する無傷の抗体の特異性を保持する。一般に、ｓｃＦｖポリペプチドは、ｓｃＦｖが標的結合のための所望の構造を形成することを可能にするＶＨ及びＶＬドメイン間のポリペプチドリンカーをさらに含む。ｓｃＦＶのＶＨ及びＶＬ鎖を連結するのに好適なリンカーの例は、第７．４．３節において特定されるＡＢＤリンカー、例えばＬ１〜Ｌ５８として示されるリンカーのいずれかである。
【０１２１】
規定されない限り、本明細書において使用される際、ｓｃＦｖは、例えば、ポリペプチドのＮ末端及びＣ末端に関して、いずれかの順序でＶＬ及びＶＨ可変領域を有し得、ｓｃＦｖは、ＶＬ−リンカー−ＶＨを含み得るか又はＶＨ−リンカー−ＶＬを含み得る。
【０１２２】
ｓｃＦｖコード核酸を生成するために、ＶＨ及びＶＬコードＤＮＡフラグメントは、リンカーをコードする、例えば第７．４．３節に記載されるリンカーのいずれか（アミノ酸配列（Ｇｌｙ４〜Ｓｅｒ）３（配列番号１）など）をコードする別のフラグメントに作動可能に連結され、ＶＬ及びＶＨ領域が可撓性リンカーによって結合された状態で、ＶＨ及びＶＬ配列が、連続した一本鎖タンパク質として発現され得るようになっている（例えば、Ｂｉｒｄ  ｅｔ  ａｌ．，１９８８，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４２：４２３−４２６；Ｈｕｓｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８８，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８５：５８７９−５８８３；ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙ  ｅｔ  ａｌ．，１９９０，Ｎａｔｕｒｅ  ３４８：５５２−５５４を参照されたい）。
【０１２３】
ＢＣＭＡ結合分子は、Ｆｖ、ｄｓＦｖ、（Ｆａｂ’）２、単一ドメイン抗体（ＳＤＡＢ）、ＶＨ若しくはＶＬドメイン又はラクダ科（ｃａｍｅｌｉｄ）ＶＨＨドメイン（ナノボディとも呼ばれる）であるＡＢＤも含み得る。
【０１２４】
ＢＣＭＡ結合分子は、ＢＣＭＡに対する十分な親和性を示す単一のＶＨ又はＶＬドメインから構成される単一ドメイン抗体を含み得る。一実施形態において、単一ドメイン抗体は、ラクダ科ＶＨＨドメインである（例えば、Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ，１９９９，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ２３１：２５−３８；国際公開第９４／０４６７８号パンフレットを参照されたい）。
【０１２５】
表１Ａ−１〜１Ｐ（まとめて「表１」）には、ＢＣＭＡ結合分子に含まれ得る例示的なＢＣＭＡ結合配列の配列が列挙されている。
【０１２６】
【表１】
2021525715.tif 000003
【０１２７】
【表２】
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【０１２８】
【表３】
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【０１２９】
【表４】
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【０１３０】
【表５】
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【０１３１】
【表６】
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【０１３２】
【表７】
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【０１３３】
【表８】
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【０１３４】
【表９】
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【０１３５】
【表１０】
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【０１３６】
【表１１】
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【０１３７】
【表１２】
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【０１３８】
【表１３】
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【０１３９】
【表１４】
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【０１４０】
【表１５】
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【０１４１】
【表１６】
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【０１４２】
【表１７】
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【０１４３】
【表１８】
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【０１４４】
【表１９】
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【０１４５】
【表２０】
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【０１４６】
【表２１】
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【０１４７】
【表２２】
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【０１４８】
【表２３】
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【０１４９】
【表２４】
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【０１５０】
【表２５】
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【０１５１】
【表２６】
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【０１５２】
【表２７】
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【０１５３】
【表２８】
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【０１５４】
【表２９】
2021525715.tif 000031
【０１５５】
【表３０】
2021525715.tif 000032
【０１５６】
【表３１】
2021525715.tif 000033
【０１５７】
【表３２】
2021525715.tif 000034
【０１５８】
【表３３】
2021525715.tif 000035
【０１５９】
【表３４】
2021525715.tif 000036
【０１６０】
【表３５】
2021525715.tif 000037
【０１６１】
【表３６】
2021525715.tif 000038
【０１６２】
【表３７】
2021525715.tif 000039
【０１６３】
【表３８】
2021525715.tif 000040
【０１６４】
【表３９】
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【０１６５】
【表４０】
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【０１６６】
【表４１】
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【０１６７】
【表４２】
2021525715.tif 000044
【０１６８】
【表４３】
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【０１６９】
【表４４】
2021525715.tif 000046
【０１７０】
表１Ａ−１〜１Ｂ−２には、実施例に記載される例示的なＢＣＭＡ結合分子のＣＤＲ配列に由来するＣＤＲコンセンサス配列が列挙されている。ＣＤＲコンセンサス配列は、例示的なＢＣＭＡ結合分子のＫａｂａｔ  ＣＤＲ配列、例示的なＢＣＭＡ結合分子のＣｈｏｔｈｉａ  ＣＤＲ配列、例示的なＢＣＭＡ結合分子のＩＭＧＴ  ＣＤＲ配列、例示的なＢＣＭＡ結合分子のＫａｂａｔ及びＣｈｏｔｈｉａ  ＣＤＲ配列の組合せ、例示的なＢＣＭＡ結合分子のＫａｂａｔ及びＩＭＧＴ  ＣＤＲ配列の組合せ及び例示的なＢＣＭＡ結合分子のＣｈｏｔｈｉａ及びＩＭＧＴ  ＣＤＲ配列の組合せに基づく配列を含む。実施例に記載される例示的なＢＣＭＡ結合分子の特定のＣＤＲ配列が表１Ｃ１−１Ｎ−２に列挙されている。例示的なＶＬ及びＶＨ配列がそれぞれ表１Ｏ−１及び１Ｏ−２に列挙されている。例示的なｓｃＦｖ配列が、表１Ｐに列挙されている。
【０１７１】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ａ−１又は表１Ｂ−１に列挙されるＣＤＲコンセンサス配列のいずれか１つのアミノ酸配列を有する軽鎖ＣＤＲを含む。特定の実施形態において、本開示は、表１Ａ−１又は表１Ｂ−１に記載される軽鎖ＣＤＲから選択される１つ、２つ、３つ又はそれを超える軽鎖ＣＤＲを含む（又は代わりにそれからなる）ＢＣＭＡ結合分子を提供する。
【０１７２】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ａ−２又は表１Ｂ−２に列挙される重鎖ＣＤＲのいずれか１つのアミノ酸配列を有する重鎖ＣＤＲを含む。特定の実施形態において、本開示は、表１Ａ−２又は表１Ｂ−２に記載される重鎖ＣＤＲから選択される１つ、２つ、３つ又はそれを超える重鎖ＣＤＲを含む（又は代わりにそれからなる）ＢＣＭＡ結合分子を提供する。
【０１７３】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ａ−１及び１Ａ−２に記載されるＣ１のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ａ−１及び１Ａ−２に記載されるＣ２のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ａ−１及び１Ａ−２に記載されるＣ３のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ａ−１及び１Ａ−２に記載されるＣ４のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ａ−１及び１Ａ−２に記載されるＣ５のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ａ−１及び１Ａ−２に記載されるＣ６のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ａ−１及び１Ａ−２に記載されるＣ７のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ａ−１及び１Ａ−２に記載されるＣ８のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ａ−１及び１Ａ−２に記載されるＣ９のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ａ−１及び１Ａ−２に記載されるＣ１０のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ａ−１及び１Ａ−２に記載されるＣ１１のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ａ−１及び１Ａ−２に記載されるＣ１２のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。
【０１７４】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｂ−１及び１Ｂ−２に記載されるＣ１３のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｂ−１及び１Ｂ−２に記載されるＣ１４のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｂ−１及び１Ｂ−２に記載されるＣ１５のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｂ−１及び１Ｂ−２に記載されるＣ１６のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｂ−１及び１Ｂ−２に記載されるＣ１７のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｂ−１及び１Ｂ−２に記載されるＣ１８のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｂ−１及び１Ｂ−２に記載されるＣ１９のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｂ−１及び１Ｂ−２に記載されるＣ２０のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｂ−１及び１Ｂ−２に記載されるＣ２１のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｂ−１及び１Ｂ−２に記載されるＣ２２のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｂ−１及び１Ｂ−２に記載されるＣ２３のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｂ−１及び１Ｂ−２に記載されるＣ２４のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｂ−１及び１Ｂ−２に記載されるＣ２５のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｂ−１及び１Ｂ−２に記載されるＣ２６のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｂ−１及び１Ｂ−２に記載されるＣ２７のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｂ−１及び１Ｂ−２に記載されるＣ２８のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。
【０１７５】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｃ−１、表１Ｄ−１、表１Ｅ−１、表１Ｆ−１、表１Ｇ−１、表１Ｈ−１、表１Ｉ−１、表１Ｊ−１、表１Ｋ−１（ａ）、表１Ｋ−１（ｂ）、表１Ｌ−１、表１Ｍ−１、表１Ｎ−１（ａ）又は表１Ｎ−１（ｂ）に列挙されるＣＤＲのいずれか１つのアミノ酸配列を有する軽鎖ＣＤＲを含む。特定の実施形態において、本開示は、表１Ｃ−１、表１Ｄ−１、表１Ｅ−１、表１Ｆ−１、表１Ｇ−１、表１Ｈ−１、表１Ｉ−１、表１Ｊ−１、表１Ｋ−１（ａ）、表１Ｋ−１（ｂ）、表１Ｌ−１、表１Ｍ−１、表１Ｎ−１（ａ）及び表１Ｎ−１（ｂ）に記載される軽鎖ＣＤＲから選択される１つ、２つ、３つ又はそれを超える軽鎖ＣＤＲを含む（又は代わりにそれからなる）ＢＣＭＡ結合分子を提供する。
【０１７６】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｃ−２、表１Ｄ−２、表１Ｅ−２、表１Ｆ−２、表１Ｇ−２、表１Ｈ−２、表１Ｉ−２、表１Ｊ−２、表１Ｋ−２、表１Ｌ−２、表１Ｍ−２又は表１Ｎ−２に列挙される重鎖ＣＤＲのいずれか１つのアミノ酸配列を有する重鎖ＣＤＲを含む。特定の実施形態において、本開示は、表１Ｃ−２、表１Ｄ−２、表１Ｅ−２、表１Ｆ−２、表１Ｇ−２、表１Ｈ−２、表１Ｉ−２、表１Ｊ−２、表１Ｋ−２、表１Ｌ−２、表１Ｍ−２及び表１Ｎ−２に記載される重鎖ＣＤＲから選択される１つ、２つ、３つ又はそれを超える重鎖ＣＤＲを含む（又は代わりにそれからなる）ＢＣＭＡ結合分子を提供する。
【０１７７】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｏ−１に記載される任意のＶＬドメインのアミノ酸配列を有するＶＬドメインを含む。他のＢＣＭＡ結合分子は、突然変異しているが、ＶＬドメインにおいて、表１Ｏ−１に記載される配列に示されるＶＬドメインと少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８又は９９パーセントの同一性を有するアミノ酸を含み得る。
【０１７８】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｏ−２に記載される任意のＶＨドメインのアミノ酸配列を有するＶＨドメインを含む。他のＢＣＭＡ結合分子は、突然変異しているが、ＶＨドメインにおいて、表１Ｏ−２に記載される配列に示されるＶＨドメインと少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８又は９９パーセントの同一性を有するアミノ酸を含み得る。
【０１７９】
他のＢＣＭＡ結合分子は、突然変異しているが、ＣＤＲ領域において、表１に記載されるＣＤＲ配列と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８又は９９パーセントの同一性を有するアミノ酸を含む。ある実施形態において、このようなＢＣＭＡ結合分子は、１、２、３、４又は５つ以下のアミノ酸が、表１に記載されるＣＤＲ配列と比較した際に、ＣＤＲ領域において突然変異されている、突然変異アミノ酸配列を含む。
【０１８０】
他のＢＣＭＡ結合分子は、表１に記載されるＶＨ及び／又はＶＬ配列と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８又は９９パーセントの同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ及び／又はＶＬドメインを含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、１、２、３、４又は５つ以下のアミノ酸が、実質的に同じ治療活性を保持しながら、表１に記載される配列に示されるＶＨ及び／又はＶＬドメインと比較した際に突然変異されている、ＶＨ及び／又はＶＬドメインを含む。
【０１８１】
ＶＨ及びＶＬ配列（アミノ酸配列及びアミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列）は、他のＢＣＭＡ結合分子を作製するために「混合及びマッチ」され得る。このような「混合及びマッチされた」ＢＣＭＡ結合分子は、公知の結合アッセイ（例えば、ＥＬＩＳＡ、実施例に記載されるアッセイ）を用いて試験され得る。鎖が、混合及びマッチされる場合、特定のＶＨ／ＶＬ対合からのＶＨ配列は、実質的に同様のＶＨ配列で置換されるべきである。特定のＶＨ／ＶＬ対合からのＶＬ配列は、実質的に同様のＶＬ配列で置換されるべきである。
【０１８２】
したがって、一実施形態において、本開示は、表１−Ｏ２に記載されるＶＨ配列のいずれか１つから選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；及び表１−Ｏ１に記載されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を有するＢＣＭＡ結合分子を提供する。
【０１８３】
別の実施形態において、本開示は、表１に記載されるＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２、ＣＤＲ−Ｈ３、ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２及びＣＤＲ−Ｌ３又はそれらの任意の組合せを含むＢＣＭＡ結合分子を提供する。
【０１８４】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｃ−１及び１Ｃ−２に示されるＡＢ１のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｄ−１及び１Ｄ−２に示されるＡＢ１のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｅ−１及び１Ｅ−２に示されるＡＢ１のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｆ−１及び１Ｆ−２に示されるＡＢ１のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｇ−１及び１Ｇ−２に示されるＡＢ１のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｈ−１及び１Ｈ−２に示されるＡＢ１のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。
【０１８５】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｃ−１及び１Ｃ−２に示されるＡＢ２のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｄ−１及び１Ｄ−２に示されるＡＢ２のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｅ−１及び１Ｅ−２に示されるＡＢ２のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｆ−１及び１Ｆ−２に示されるＡＢ２のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｇ−１及び１Ｇ−２に示されるＡＢ２のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｈ−１及び１Ｈ−２に示されるＡＢ２のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。
【０１８６】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｃ−１及び１Ｃ−２に示されるＲ１Ｆ２のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｄ−１及び１Ｄ−２に示されるＲ１Ｆ２のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｅ−１及び１Ｅ−２に示されるＲ１Ｆ２のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｆ−１及び１Ｆ−２に示されるＲ１Ｆ２のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｇ−１及び１Ｇ−２に示されるＲ１Ｆ２のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｈ−１及び１Ｈ−２に示されるＲ１Ｆ２のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。
【０１８７】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｃ−１及び１Ｃ−２に示されるＰＡＬＦ０３のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｄ−１及び１Ｄ−２に示されるＰＡＬＦ０３のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｅ−１及び１Ｅ−２に示されるＰＡＬＦ０３のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｆ−１及び１Ｆ−２に示されるＰＡＬＦ０３のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｇ−１及び１Ｇ−２に示されるＰＡＬＦ０３のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｈ−１及び１Ｈ−２に示されるＰＡＬＦ０３のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。
【０１８８】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｃ−１及び１Ｃ−２に示されるＰＡＬＦ０４のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｄ−１及び１Ｄ−２に示されるＰＡＬＦ０４のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｅ−１及び１Ｅ−２に示されるＰＡＬＦ０４のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｆ−１及び１Ｆ−２に示されるＰＡＬＦ０４のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｇ−１及び１Ｇ−２に示されるＰＡＬＦ０４のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｈ−１及び１Ｈ−２に示されるＰＡＬＦ０４のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。
【０１８９】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｃ−１及び１Ｃ−２に示されるＰＡＬＦ０５のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｄ−１及び１Ｄ−２に示されるＰＡＬＦ０５のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｅ−１及び１Ｅ−２に示されるＰＡＬＦ０５のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｆ−１及び１Ｆ−２に示されるＰＡＬＦ０５のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｇ−１及び１Ｇ−２に示されるＰＡＬＦ０５のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｈ−１及び１Ｈ−２に示されるＰＡＬＦ０５のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。
【０１９０】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｃ−１及び１Ｃ−２に示されるＰＡＬＦ０６のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｄ−１及び１Ｄ−２に示されるＰＡＬＦ０６のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｅ−１及び１Ｅ−２に示されるＰＡＬＦ０６のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｆ−１及び１Ｆ−２に示されるＰＡＬＦ０６のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｇ−１及び１Ｇ−２に示されるＰＡＬＦ０６のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｈ−１及び１Ｈ−２に示されるＰＡＬＦ０６のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。
【０１９１】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｃ−１及び１Ｃ−２に示されるＰＡＬＦ０７のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｄ−１及び１Ｄ−２に示されるＰＡＬＦ０７のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｅ−１及び１Ｅ−２に示されるＰＡＬＦ０７のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｆ−１及び１Ｆ−２に示されるＰＡＬＦ０７のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｇ−１及び１Ｇ−２に示されるＰＡＬＦ０７のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｈ−１及び１Ｈ−２に示されるＰＡＬＦ０７のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。
【０１９２】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｃ−１及び１Ｃ−２に示されるＰＡＬＦ０８のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｄ−１及び１Ｄ−２に示されるＰＡＬＦ０８のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｅ−１及び１Ｅ−２に示されるＰＡＬＦ０８のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｆ−１及び１Ｆ−２に示されるＰＡＬＦ０８のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｇ−１及び１Ｇ−２に示されるＰＡＬＦ０８のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｈ−１及び１Ｈ−２に示されるＰＡＬＦ０８のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。
【０１９３】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｃ−１及び１Ｃ−２に示されるＰＡＬＦ０９のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｄ−１及び１Ｄ−２に示されるＰＡＬＦ０９のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｅ−１及び１Ｅ−２に示されるＰＡＬＦ０９のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｆ−１及び１Ｆ−２に示されるＰＡＬＦ０９のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｇ−１及び１Ｇ−２に示されるＰＡＬＦ０９のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｈ−１及び１Ｈ−２に示されるＰＡＬＦ０９のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。
【０１９４】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｃ−１及び１Ｃ−２に示されるＰＡＬＦ１２のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｄ−１及び１Ｄ−２に示されるＰＡＬＦ１２のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｅ−１及び１Ｅ−２に示されるＰＡＬＦ１２のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｆ−１及び１Ｆ−２に示されるＰＡＬＦ１２のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｇ−１及び１Ｇ−２に示されるＰＡＬＦ１２のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｈ−１及び１Ｈ−２に示されるＰＡＬＦ１２のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。
【０１９５】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｃ−１及び１Ｃ−２に示されるＰＡＬＦ１３のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｄ−１及び１Ｄ−２に示されるＰＡＬＦ１３のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｅ−１及び１Ｅ−２に示されるＰＡＬＦ１３のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｆ−１及び１Ｆ−２に示されるＰＡＬＦ１３のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｇ−１及び１Ｇ−２に示されるＰＡＬＦ１３のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｈ−１及び１Ｈ−２に示されるＰＡＬＦ１３のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。
【０１９６】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｃ−１及び１Ｃ−２に示されるＰＡＬＦ１４のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｄ−１及び１Ｄ−２に示されるＰＡＬＦ１４のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｅ−１及び１Ｅ−２に示されるＰＡＬＦ１４のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｆ−１及び１Ｆ−２に示されるＰＡＬＦ１４のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｇ−１及び１Ｇ−２に示されるＰＡＬＦ１４のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｈ−１及び１Ｈ−２に示されるＰＡＬＦ１４のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。
【０１９７】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｃ−１及び１Ｃ−２に示されるＰＡＬＦ１５のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｄ−１及び１Ｄ−２に示されるＰＡＬＦ１５のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｅ−１及び１Ｅ−２に示されるＰＡＬＦ１５のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｆ−１及び１Ｆ−２に示されるＰＡＬＦ１５のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｇ−１及び１Ｇ−２に示されるＰＡＬＦ１５のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｈ−１及び１Ｈ−２に示されるＰＡＬＦ１５のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。
【０１９８】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｃ−１及び１Ｃ−２に示されるＰＡＬＦ１６のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｄ−１及び１Ｄ−２に示されるＰＡＬＦ１６のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｅ−１及び１Ｅ−２に示されるＰＡＬＦ１６のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｆ−１及び１Ｆ−２に示されるＰＡＬＦ１６のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｇ−１及び１Ｇ−２に示されるＰＡＬＦ１６のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｈ−１及び１Ｈ−２に示されるＰＡＬＦ１６のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。
【０１９９】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｃ−１及び１Ｃ−２に示されるＰＡＬＦ１７のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｄ−１及び１Ｄ−２に示されるＰＡＬＦ１７のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｅ−１及び１Ｅ−２に示されるＰＡＬＦ１７のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｆ−１及び１Ｆ−２に示されるＰＡＬＦ１７のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｇ−１及び１Ｇ−２に示されるＰＡＬＦ１７のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｈ−１及び１Ｈ−２に示されるＰＡＬＦ１７のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。
【０２００】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｃ−１及び１Ｃ−２に示されるＰＡＬＦ１８のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｄ−１及び１Ｄ−２に示されるＰＡＬＦ１８のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｅ−１及び１Ｅ−２に示されるＰＡＬＦ１８のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｆ−１及び１Ｆ−２に示されるＰＡＬＦ１８のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｇ−１及び１Ｇ−２に示されるＰＡＬＦ１８のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｈ−１及び１Ｈ−２に示されるＰＡＬＦ１８のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。
【０２０１】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｃ−１及び１Ｃ−２に示されるＰＡＬＦ１９のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｄ−１及び１Ｄ−２に示されるＰＡＬＦ１９のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｅ−１及び１Ｅ−２に示されるＰＡＬＦ１９のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｆ−１及び１Ｆ−２に示されるＰＡＬＦ１９のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｇ−１及び１Ｇ−２に示されるＰＡＬＦ１９のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｈ−１及び１Ｈ−２に示されるＰＡＬＦ１９のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。
【０２０２】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｃ−１及び１Ｃ−２に示されるＰＡＬＦ２０のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｄ−１及び１Ｄ−２に示されるＰＡＬＦ２０のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｅ−１及び１Ｅ−２に示されるＰＡＬＦ２０のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｆ−１及び１Ｆ−２に示されるＰＡＬＦ２０のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｇ−１及び１Ｇ−２に示されるＰＡＬＦ２０のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｈ−１及び１Ｈ−２に示されるＰＡＬＦ２０のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。
【０２０３】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｉ−１及び１Ｉ−２に示されるＡＢ３のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｊ−１及び１Ｊ−２に示されるＡＢ３のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｋ−１及び１Ｋ−２に示されるＡＢ３のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｌ−１及び１Ｌ−２に示されるＡＢ３のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｍ−１及び１Ｍ−２に示されるＡＢ３のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｎ−１及び１Ｎ−２に示されるＡＢ３のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。
【０２０４】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｉ−１及び１Ｉ−２に示されるＰＩ−６１のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｊ−１及び１Ｊ−２に示されるＰＩ−６１のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｋ−１及び１Ｋ−２に示されるＰＩ−６１のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｌ−１及び１Ｌ−２に示されるＰＩ−６１のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｍ−１及び１Ｍ−２に示されるＰＩ−６１のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｎ−１及び１Ｎ−２に示されるＰＩ−６１のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。
【０２０５】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｉ−１及び１Ｉ−２に示されるＨ２／Ｌ２−２２のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｊ−１及び１Ｊ−２に示されるＨ２／Ｌ２−２２のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｋ−１及び１Ｋ−２に示されるＨ２／Ｌ２−２２のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｌ−１及び１Ｌ−２に示されるＨ２／Ｌ２−２２のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｍ−１及び１Ｍ−２に示されるＨ２／Ｌ２−２２のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｎ−１及び１Ｎ−２に示されるＨ２／Ｌ２−２２のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。
【０２０６】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｉ−１及び１Ｉ−２に示されるＨ２／Ｌ２−８８のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｊ−１及び１Ｊ−２に示されるＨ２／Ｌ２−８８のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｋ−１及び１Ｋ−２に示されるＨ２／Ｌ２−８８のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｌ−１及び１Ｌ−２に示されるＨ２／Ｌ２−８８のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｍ−１及び１Ｍ−２に示されるＨ２／Ｌ２−８８のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｎ−１及び１Ｎ−２に示されるＨ２／Ｌ２−８８のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。
【０２０７】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｉ−１及び１Ｉ−２に示されるＨ２／Ｌ２−３６のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｊ−１及び１Ｊ−２に示されるＨ２／Ｌ２−３６のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｋ−１及び１Ｋ−２に示されるＨ２／Ｌ２−３６のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｌ−１及び１Ｌ−２に示されるＨ２／Ｌ２−３６のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｍ−１及び１Ｍ−２に示されるＨ２／Ｌ２−３６のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｎ−１及び１Ｎ−２に示されるＨ２／Ｌ２−３６のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。
【０２０８】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｉ−１及び１Ｉ−２に示されるＨ２／Ｌ２−３４のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｊ−１及び１Ｊ−２に示されるＨ２／Ｌ２−３４のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｋ−１及び１Ｋ−２に示されるＨ２／Ｌ２−３４のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｌ−１及び１Ｌ−２に示されるＨ２／Ｌ２−３４のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｍ−１及び１Ｍ−２に示されるＨ２／Ｌ２−３４のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｎ−１及び１Ｎ−２に示されるＨ２／Ｌ２−３４のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。
【０２０９】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｉ−１及び１Ｉ−２に示されるＨ２／Ｌ２−６８のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｊ−１及び１Ｊ−２に示されるＨ２／Ｌ２−６８のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｋ−１及び１Ｋ−２に示されるＨ２／Ｌ２−６８のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｌ−１及び１Ｌ−２に示されるＨ２／Ｌ２−６８のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｍ−１及び１Ｍ−２に示されるＨ２／Ｌ２−６８のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｎ−１及び１Ｎ−２に示されるＨ２／Ｌ２−６８のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。
【０２１０】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｉ−１及び１Ｉ−２に示されるＨ２／Ｌ２−１８のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｊ−１及び１Ｊ−２に示されるＨ２／Ｌ２−１８のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｋ−１及び１Ｋ−２に示されるＨ２／Ｌ２−１８のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｌ−１及び１Ｌ−２に示されるＨ２／Ｌ２−１８のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｍ−１及び１Ｍ−２に示されるＨ２／Ｌ２−１８のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｎ−１及び１Ｎ−２に示されるＨ２／Ｌ２−１８のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。
【０２１１】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｉ−１及び１Ｉ−２に示されるＨ２／Ｌ２−４７のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｊ−１及び１Ｊ−２に示されるＨ２／Ｌ２−４７のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｋ−１及び１Ｋ−２に示されるＨ２／Ｌ２−４７のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｌ−１及び１Ｌ−２に示されるＨ２／Ｌ２−４７のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｍ−１及び１Ｍ−２に示されるＨ２／Ｌ２−４７のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｎ−１及び１Ｎ−２に示されるＨ２／Ｌ２−４７のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。
【０２１２】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｉ−１及び１Ｉ−２に示されるＨ２／Ｌ２−２０のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｊ−１及び１Ｊ−２に示されるＨ２／Ｌ２−２０のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｋ−１及び１Ｋ−２に示されるＨ２／Ｌ２−２０のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｌ−１及び１Ｌ−２に示されるＨ２／Ｌ２−２０のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｍ−１及び１Ｍ−２に示されるＨ２／Ｌ２−２０のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｎ−１及び１Ｎ−２に示されるＨ２／Ｌ２−２０のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。
【０２１３】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｉ−１及び１Ｉ−２に示されるＨ２／Ｌ２−８０のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｊ−１及び１Ｊ−２に示されるＨ２／Ｌ２−８０のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｋ−１及び１Ｋ−２に示されるＨ２／Ｌ２−８０のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｌ−１及び１Ｌ−２に示されるＨ２／Ｌ２−８０のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｍ−１及び１Ｍ−２に示されるＨ２／Ｌ２−８０のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｎ−１及び１Ｎ−２に示されるＨ２／Ｌ２−８０のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。
【０２１４】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｉ−１及び１Ｉ−２に示されるＨ２／Ｌ２−８３のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｊ−１及び１Ｊ−２に示されるＨ２／Ｌ２−８３のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｋ−１及び１Ｋ−２に示されるＨ２／Ｌ２−８３のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｌ−１及び１Ｌ−２に示されるＨ２／Ｌ２−８３のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｍ−１及び１Ｍ−２に示されるＨ２／Ｌ２−８３のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｎ−１及び１Ｎ−２に示されるＨ２／Ｌ２−８３のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。
【０２１５】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｉ−１及び１Ｉ−２に示されるＨ３−１のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｊ−１及び１Ｊ−２に示されるＨ３−１のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｋ−１及び１Ｋ−２に示されるＨ３−１のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｌ−１及び１Ｌ−２に示されるＨ３−１のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｍ−１及び１Ｍ−２に示されるＨ３−１のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｎ−１及び１Ｎ−２に示されるＨ３−１のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。
【０２１６】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｉ−１及び１Ｉ−２に示されるＨ３−２のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｊ−１及び１Ｊ−２に示されるＨ３−２のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｋ−１及び１Ｋ−２に示されるＨ３−２のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｌ−１及び１Ｌ−２に示されるＨ３−２のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｍ−１及び１Ｍ−２に示されるＨ３−２のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｎ−１及び１Ｎ−２に示されるＨ３−２のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。
【０２１７】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｉ−１及び１Ｉ−２に示されるＨ３−３のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｊ−１及び１Ｊ−２に示されるＨ３−３のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｋ−１及び１Ｋ−２に示されるＨ３−３のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｌ−１及び１Ｌ−２に示されるＨ３−３のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｍ−１及び１Ｍ−２に示されるＨ３−３のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｎ−１及び１Ｎ−２に示されるＨ３−３のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。
【０２１８】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｉ−１及び１Ｉ−２に示されるＨ３−４のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｊ−１及び１Ｊ−２に示されるＨ３−４のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｋ−１及び１Ｋ−２に示されるＨ３−４のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｌ−１及び１Ｌ−２に示されるＨ３−４のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｍ−１及び１Ｍ−２に示されるＨ３−４のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｎ−１及び１Ｎ−２に示されるＨ３−４のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。
【０２１９】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｉ−１及び１Ｉ−２に示されるＨ３−５のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｊ−１及び１Ｊ−２に示されるＨ３−５のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｋ−１及び１Ｋ−２に示されるＨ３−５のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｌ−１及び１Ｌ−２に示されるＨ３−５のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｍ−１及び１Ｍ−２に示されるＨ３−５のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｎ−１及び１Ｎ−２に示されるＨ３−５のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。
【０２２０】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｉ−１及び１Ｉ−２に示されるＨ３−６のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｊ−１及び１Ｊ−２に示されるＨ３−６のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｋ−１及び１Ｋ−２に示されるＨ３−６のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｌ−１及び１Ｌ−２に示されるＨ３−６のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｍ−１及び１Ｍ−２に示されるＨ３−６のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｎ−１及び１Ｎ−２に示されるＨ３−６のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。
【０２２１】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｉ−１及び１Ｉ−２に示されるＨ３−７のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｊ−１及び１Ｊ−２に示されるＨ３−７のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｋ−１及び１Ｋ−２に示されるＨ３−７のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｌ−１及び１Ｌ−２に示されるＨ３−７のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｍ−１及び１Ｍ−２に示されるＨ３−７のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｎ−１及び１Ｎ−２に示されるＨ３−７のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。
【０２２２】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｉ−１及び１Ｉ−２に示されるＨ３−８のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｊ−１及び１Ｊ−２に示されるＨ３−８のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｋ−１及び１Ｋ−２に示されるＨ３−８のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｌ−１及び１Ｌ−２に示されるＨ３−８のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｍ−１及び１Ｍ−２に示されるＨ３−８のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｎ−１及び１Ｎ−２に示されるＨ３−８のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。
【０２２３】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｉ−１及び１Ｉ−２に示されるＨ３−９のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｊ−１及び１Ｊ−２に示されるＨ３−９のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｋ−１及び１Ｋ−２に示されるＨ３−９のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｌ−１及び１Ｌ−２に示されるＨ３−９のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｍ−１及び１Ｍ−２に示されるＨ３−９のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｎ−１及び１Ｎ−２に示されるＨ３−９のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。
【０２２４】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｉ−１及び１Ｉ−２に示されるＨ３−１０のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｊ−１及び１Ｊ−２に示されるＨ３−１０のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｋ−１及び１Ｋ−２に示されるＨ３−１０のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｌ−１及び１Ｌ−２に示されるＨ３−１０のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｍ−１及び１Ｍ−２に示されるＨ３−１０のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｎ−１及び１Ｎ−２に示されるＨ３−１０のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。
【０２２５】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｉ−１及び１Ｉ−２に示されるＨ３−１１のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｊ−１及び１Ｊ−２に示されるＨ３−１１のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｋ−１及び１Ｋ−２に示されるＨ３−１１のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｌ−１及び１Ｌ−２に示されるＨ３−１１のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｍ−１及び１Ｍ−２に示されるＨ３−１１のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｎ−１及び１Ｎ−２に示されるＨ３−１１のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。
【０２２６】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｉ−１及び１Ｉ−２に示されるＨ３−１２のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｊ−１及び１Ｊ−２に示されるＨ３−１２のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｋ−１及び１Ｋ−２に示されるＨ３−１２のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｌ−１及び１Ｌ−２に示されるＨ３−１２のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｍ−１及び１Ｍ−２に示されるＨ３−１２のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｎ−１及び１Ｎ−２に示されるＨ３−１２のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。
【０２２７】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｉ−１及び１Ｉ−２に示されるＨ３−１３のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｊ−１及び１Ｊ−２に示されるＨ３−１３のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｋ−１及び１Ｋ−２に示されるＨ３−１３のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｌ−１及び１Ｌ−２に示されるＨ３−１３のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｍ−１及び１Ｍ−２に示されるＨ３−１３のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｎ−１及び１Ｎ−２に示されるＨ３−１３のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。
【０２２８】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｉ−１及び１Ｉ−２に示されるＨ３−１４のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｊ−１及び１Ｊ−２に示されるＨ３−１４のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｋ−１及び１Ｋ−２に示されるＨ３−１４のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｌ−１及び１Ｌ−２に示されるＨ３−１４のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｍ−１及び１Ｍ−２に示されるＨ３−１４のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｎ−１及び１Ｎ−２に示されるＨ３−１４のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。
【０２２９】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｉ−１及び１Ｉ−２に示されるＨ３−１５のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｊ−１及び１Ｊ−２に示されるＨ３−１５のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｋ−１及び１Ｋ−２に示されるＨ３−１５のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｌ−１及び１Ｌ−２に示されるＨ３−１５のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｍ−１及び１Ｍ−２に示されるＨ３−１５のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｎ−１及び１Ｎ−２に示されるＨ３−１５のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む。
【０２３０】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｏ−１及び表１Ｏ−２に記載されるＡＢ１の軽鎖可変配列及び／又は重鎖可変配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｏ−１及び表１Ｏ−２に記載されるＡＢ２の軽鎖可変配列及び／又は重鎖可変配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｏ−１及び表１Ｏ−２に記載されるＲ１Ｆ２の軽鎖可変配列及び／又は重鎖可変配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｏ−１及び表１Ｏ−２に記載されるＰＡＬＦ０３の軽鎖可変配列及び／又は重鎖可変配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｏ−１及び表１Ｏ−２に記載されるＰＡＬＦ０４の軽鎖可変配列及び／又は重鎖可変配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｏ−１及び表１Ｏ−２に記載されるＰＡＬＦ０５の軽鎖可変配列及び／又は重鎖可変配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｏ−１及び表１Ｏ−２に記載されるＰＡＬＦ０６の軽鎖可変配列及び／又は重鎖可変配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｏ−１及び表１Ｏ−２に記載されるＰＡＬＦ０７の軽鎖可変配列及び／又は重鎖可変配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｏ−１及び表１Ｏ−２に記載されるＰＡＬＦ０８の軽鎖可変配列及び／又は重鎖可変配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｏ−１及び表１Ｏ−２に記載されるＰＡＬＦ０９の軽鎖可変配列及び／又は重鎖可変配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｏ−１及び表１Ｏ−２に記載されるＰＡＬＦ１２の軽鎖可変配列及び／又は重鎖可変配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｏ−１及び表１Ｏ−２に記載されるＰＡＬＦ１３の軽鎖可変配列及び／又は重鎖可変配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｏ−１及び表１Ｏ−２に記載されるＰＡＬＦ１４の軽鎖可変配列及び／又は重鎖可変配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｏ−１及び表１Ｏ−２に記載されるＰＡＬＦ１５の軽鎖可変配列及び／又は重鎖可変配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｏ−１及び表１Ｏ−２に記載されるＰＡＬＦ１６の軽鎖可変配列及び／又は重鎖可変配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｏ−１及び表１Ｏ−２に記載されるＰＡＬＦ１７の軽鎖可変配列及び／又は重鎖可変配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｏ−１及び表１Ｏ−２に記載されるＰＡＬＦ１８の軽鎖可変配列及び／又は重鎖可変配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｏ−１及び表１Ｏ−２に記載されるＰＡＬＦ１９の軽鎖可変配列及び／又は重鎖可変配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｏ−１及び表１Ｏ−２に記載されるＰＡＬＦ２０の軽鎖可変配列及び／又は重鎖可変配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｏ−１及び表１Ｏ−２に記載されるＡＢ３の軽鎖可変配列及び／又は重鎖可変配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｏ−１及び表１Ｏ−２に記載されるＰＩ−６１の軽鎖可変配列及び／又は重鎖可変配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｏ−１及び表１Ｏ−２に記載されるＨ３−１の軽鎖可変配列及び／又は重鎖可変配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｏ−１及び表１Ｏ−２に記載されるＨ３−２の軽鎖可変配列及び／又は重鎖可変配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｏ−１及び表１Ｏ−２に記載されるＨ３−３の軽鎖可変配列及び／又は重鎖可変配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｏ−１及び表１Ｏ−２に記載されるＨ３−４の軽鎖可変配列及び／又は重鎖可変配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｏ−１及び表１Ｏ−２に記載されるＨ３−５の軽鎖可変配列及び／又は重鎖可変配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｏ−１及び表１Ｏ−２に記載されるＨ３−６の軽鎖可変配列及び／又は重鎖可変配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｏ−１及び表１Ｏ−２に記載されるＨ３−７の軽鎖可変配列及び／又は重鎖可変配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｏ−１及び表１Ｏ−２に記載されるＨ３−８の軽鎖可変配列及び／又は重鎖可変配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｏ−１及び表１Ｏ−２に記載されるＨ３−９の軽鎖可変配列及び／又は重鎖可変配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｏ−１及び表１Ｏ−２に記載されるＨ３−１０の軽鎖可変配列及び／又は重鎖可変配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｏ−１及び表１Ｏ−２に記載されるＨ３−１１の軽鎖可変配列及び／又は重鎖可変配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｏ−１及び表１Ｏ−２に記載されるＨ３−１２の軽鎖可変配列及び／又は重鎖可変配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｏ−１及び表１Ｏ−２に記載されるＨ３−１３の軽鎖可変配列及び／又は重鎖可変配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｏ−１及び表１Ｏ−２に記載されるＨ３−１４の軽鎖可変配列及び／又は重鎖可変配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｏ−１及び表１Ｏ−２に記載されるＨ３−１５の軽鎖可変配列及び／又は重鎖可変配列を含む。
【０２３１】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｐに記載されるＨ２／Ｌ２−８８のｓｃＦｖ配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｐに記載されるＨ２／Ｌ２−３６のｓｃＦｖ配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｐに記載されるＨ２／Ｌ２−３４のｓｃＦｖ配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｐに記載されるＨ２／Ｌ２−６８のｓｃＦｖ配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｐに記載されるＨ２／Ｌ２−１８のｓｃＦｖ配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｐに記載されるＨ２／Ｌ２−４７のｓｃＦｖ配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｐに記載されるＨ２／Ｌ２−２０のｓｃＦｖ配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｐに記載されるＨ２／Ｌ２−８０のｓｃＦｖ配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｐに記載されるＨ２／Ｌ２−８３のｓｃＦｖ配列を含む。
【０２３２】
各ＢＣＭＡ結合分子がＢＣＭＡに結合すること及び抗原結合特異性が主にＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２、ＣＤＲ−Ｈ３、ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２及びＣＤＲ−Ｌ３領域によって提供されることを考慮すると、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２、ＣＤＲ−Ｈ３、ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２及びＣＤＲ−Ｌ３配列が、「混合及びマッチ」され得る。このような「混合及びマッチされた」ＢＣＭＡ結合分子は、公知の結合アッセイ及び実施例に記載されるもの（例えば、ＥＬＩＳＡ）を用いて試験され得る。ＶＨ  ＣＤＲ配列が、混合及びマッチされる場合、特定のＶＨ配列からのＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及び／又はＣＤＲ−Ｈ３配列は、構造的に類似したＣＤＲ配列で置換されるべきである。同様に、ＶＬ  ＣＤＲ配列が、混合及びマッチされる場合、特定のＶＬ配列からのＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２及び／又はＣＤＲ−Ｌ３配列は、構造的に類似したＣＤＲ配列で置換されるべきである。新規なＶＨ及びＶＬ配列が、１つ以上のＶＨ及び／又はＶＬ  ＣＤＲ領域配列を、本開示のモノクローナル抗体又は他のＢＣＭＡ結合分子について本明細書に示されるＣＤＲ配列からの構造的に類似した配列で置換することによって作製され得ることが当業者に容易に明らかになるであろう。
【０２３３】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ｏ−１に記載されるＶＬ配列から選択されるＶＬ配列及び表１Ｏ−２に記載されるＶＨ配列から選択されるＶＨ配列を含む。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表１Ａ−２、表１Ｂ−２、表１Ｃ−２、表１Ｄ−２、表１Ｅ−２、表１Ｆ−２、表１Ｇ−２、表１Ｈ−２、表１Ｉ−２、表１Ｊ−２、表１Ｋ−２、表１Ｌ−２、表１Ｍ−２及び表１Ｎ−２に記載されるＣＤＲ−Ｈ１配列から選択されるＣＤＲ−Ｈ１配列；表１Ａ−２、表１Ｂ−２、表１Ｃ−２、表１Ｄ−２、表１Ｅ−２、表１Ｆ−２、表１Ｇ−２、表１Ｈ−２、表１Ｉ−２、表１Ｊ−２、表１Ｋ−２、表１Ｌ−２、表１Ｍ−２及び表１Ｎ−２に記載されるＣＤＲ−Ｈ２配列から選択されるＣＤＲ−Ｈ２配列；表１Ａ−２、表１Ｂ−２、表１Ｃ−２、表１Ｄ−２、表１Ｅ−２、表１Ｆ−２、表１Ｇ−２、表１Ｈ−２、表１Ｉ−２、表１Ｊ−２、表１Ｋ−２、表１Ｌ−２、表１Ｍ−２及び表１Ｎ−２に記載されるＣＤＲ−Ｈ３配列から選択されるＣＤＲ−Ｈ３配列；表１Ａ−１、表１Ｂ−１、表１Ｃ−１、表１Ｄ−１、表１Ｅ−１、表１Ｆ−１、表１Ｇ−１、表１Ｈ−１、表１Ｉ−１、表１Ｊ−１、表１Ｋ−１（ａ）、表１Ｋ−１（ｂ）、表１Ｌ−１、表１Ｍ−１、表１Ｎ−１（ａ）及び表１Ｎ−１（ｂ）に記載されるＣＤＲ−Ｌ１配列から選択されるＣＤＲ−Ｌ１配列；表１Ａ−１、表１Ｂ−１、表１Ｃ−１、表１Ｄ−１、表１Ｅ−１、表１Ｆ−１、表１Ｇ−１、表１Ｈ−１、表１Ｉ−１、表１Ｊ−１、表１Ｋ−１（ａ）、表１Ｋ−１（ｂ）、表１Ｌ−１、表１Ｍ−１、表１Ｎ−１（ａ）及び表１Ｎ−１（ｂ）に記載されるＣＤＲ−Ｌ２配列から選択されるＣＤＲ−Ｌ２配列；並びに表１Ａ−１、表１Ｂ−１、表１Ｃ−１、表１Ｄ−１、表１Ｅ−１、表１Ｆ−１、表１Ｇ−１、表１Ｈ−１、表１Ｉ−１、表１Ｊ−１、表１Ｋ−１（ａ）、表１Ｋ−１（ｂ）、表１Ｌ−１、表１Ｍ−１、表１Ｎ−１（ａ）及び表１Ｎ−１（ｂ）に記載されるＣＤＲ−Ｌ３配列から選択されるＣＤＲ−Ｌ３配列を含む。
【０２３４】
ＢＣＭＡ結合分子は、異種タンパク質又はポリペプチド（又はそのフラグメント、例えば少なくとも１０、少なくとも２０、少なくとも３０、少なくとも４０、少なくとも５０、少なくとも６０、少なくとも７０、少なくとも８０、少なくとも９０又は少なくとも１００アミノ酸のポリペプチド）に融合又は化学的にコンジュゲートされ得る（共有結合的及び非共有結合的コンジュゲーションの両方を含む）。例えば、ＢＣＭＡ結合分子は、検出可能なタンパク質、例えば第７．１０節に記載されるものなどの酵素又は蛍光タンパク質に直接又は間接的に融合され得る。タンパク質、ポリペプチド又はペプチドを、抗体又は抗体フラグメントに融合又はコンジュゲートするための方法は公知であり、タンパク質又はポリペプチドを、本開示のＢＣＭＡ結合分子に融合又はコンジュゲートするのに使用され得る。例えば、米国特許第５，３３６，６０３号明細書、同第５，６２２，９２９号明細書、同第５，３５９，０４６号明細書、同第５，３４９，０５３号明細書、同第５，４４７，８５１号明細書及び同第５，１１２，９４６号明細書；欧州特許第３０７，４３４号明細書及び欧州特許第３６７，１６６号明細書；国際公開番号国際公開第９６／０４３８８号パンフレット及び国際公開第９１／０６５７０号パンフレット；Ａｓｈｋｅｎａｚｉ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９１）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８８：１０５３５−１０５３９；Ｚｈｅｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９５）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５４：５５９０−５６００；及びＶｉｌ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９２）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８９：１１３３７−１１３４１を参照されたい。
【０２３５】
さらなるＢＣＭＡ結合分子は、遺伝子−シャッフリング、モチーフ−シャッフリング、エクソン−シャッフリング及び／又はコドン−シャッフリング（まとめて「ＤＮＡシャッフリング」と呼ばれる）の技術によって生成され得る。ＤＮＡシャッフリングは、本開示の分子又はそのフラグメント（例えば、より高い親和性及びより低い解離速度を有する分子又はそのフラグメント）の活性を改変するのに用いられ得る。一般に、米国特許第５，６０５，７９３号明細書、同第５，８１１，２３８号明細書、同第５，８３０，７２１号明細書、同第５，８３４，２５２号明細書及び同第５，８３７，４５８号明細書；Ｐａｔｔｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９７）Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎｉｏｎ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．８：７２４−３３；Ｈａｒａｙａｍａ，（１９９８）Ｔｒｅｎｄｓ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１６（２）：７６−８２；Ｈａｎｓｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９９）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２８７：２６５−７６；及びＬｏｒｅｎｚｏ  ａｎｄ  Ｂｌａｓｃｏ，（１９９８）Ｂｉｏｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  ２４（２）：３０８−３１３を参照されたい。本明細書に記載されるＢＣＭＡ結合分子又はそのフラグメントは、組み換えの前に、エラープローンＰＣＲ、ランダムヌクレオチド挿入又は他の方法によるランダム突然変異誘発にかけられることによって改変され得る。本明細書に記載されるＢＣＭＡ結合分子のフラグメントをコードするポリヌクレオチドが、１つ以上の異種分子の１つ以上の構成要素、モチーフ、セクション、部分、ドメイン、フラグメントなどと組み換えられ得る。
【０２３６】
さらに、ＢＣＭＡ結合分子は、精製を容易にするために、ペプチドなどのマーカー配列に融合され得る。ある実施形態において、マーカーアミノ酸配列は、中でも特に、ｐＱＥベクターにおいて提供されるタグ（ＱＩＡＧＥＮ，Ｉｎｃ．，９２５９  Ｅｔｏｎ  Ａｖｅｎｕｅ，Ｃｈａｔｓｗｏｒｔｈ，ＣＡ，９１３１１）などのヘキサヒスチジンペプチド（配列番号６０３）であり、それらの多くは市販されている。Ｇｅｎｔｚ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８９）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８６：８２１−８２４に記載されるように、例えば、ヘキサヒスチジン（配列番号６０３）は、融合タンパク質の好都合な精製を提供する。精製に有用な他のペプチドタグとしては、限定はされないが、インフルエンザ赤血球凝集素タンパク質に由来するエピトープに相当する赤血球凝集素（「ＨＡ」）タグ（Ｗｉｌｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８４）Ｃｅｌｌ  ３７：７６７）及び「フラッグ（ｆｌａｇ）」タグが挙げられる。
【０２３７】
７．３．多重特異性結合分子の抗原結合メイン
典型的に、ＭＢＭの１つ以上のＡＢＤは、免疫グロブリンベースの抗原結合ドメイン、例えば第７．２節に記載されるように、抗体フラグメントの配列又は誘導体を含む。これらの抗体フラグメント及び誘導体は、典型的に、抗体のＣＤＲを含み、より大きいフラグメント及びその誘導体、例えばＦａｂ、ｓｃＦａｂ、Ｆｖ及びｓｃＦｖを含み得る。
【０２３８】
７．３．１．免疫グロブリンベースのＡＢＤ
７．３．１．１．Ｆａｂ
特定の態様において、ＭＢＭは、例えば、第７．２節に記載されるように、Ｆａｂドメインである１つ以上のＡＢＤを含む。
【０２３９】
本開示のＭＢＭでは、Ｆａｂヘテロ二量体化手法を用いて、同じＡＢＤに属するＦａｂドメインの適切な会合を可能にし、異なるＡＢＤに属するＦａｂドメインの異常な対合を最小限に抑えることが有利である。例えば、以下の表２に示されるＦａｂヘテロ二量体化手法が使用され得る。
【０２４０】
【表４５】
2021525715.tif 000047
【０２４１】
したがって、特定の実施形態において、Ｆａｂの２つのポリペプチド間の適切な会合は、例えば、国際公開第２００９／０８０２５１号パンフレットに記載されるようにＦａｂのＶＬ及びＶＨドメインを互いに交換することにより、又はＣＨ１及びＣＬドメインを互いに交換することにより促進される。
【０２４２】
適切なＦａｂ対合は、１つ以上のアミノ酸修飾をＣＨ１ドメイン中に及び１つ以上のアミノ酸修飾をＦａｂのＣＬドメイン中に導入し、且つ／又は１つ以上のアミノ酸修飾をＶＨドメイン中に及び１つ以上のアミノ酸修飾をＶＬドメイン中に導入することによっても促進され得る。Ｆａｂ構成要素が他のＦａｂの構成要素とよりも互いと優先的に対合するように、修飾されるアミノ酸は、典型的に、ＶＨ：ＶＬ及びＣＨ１：ＣＬ境界の一部である。
【０２４３】
一実施形態において、１つ又はアミノ酸修飾は、残基のＫａｂａｔ番号付けによって示されるように、可変（ＶＨ、ＶＬ）及び定常（ＣＨ１、ＣＬ）ドメインの保存されたフレームワーク残基に限定される。Ａｌｍａｇｒｏ，２００８，Ｆｒｏｎｔｉｅｒｓ  Ｉｎ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ  １３：１６１９−１６３３には、Ｋａｂａｔ、Ｃｈｏｔｈｉａ及びＩＭＧＴ番号付けスキームに基づいたフレームワーク残基の定義が提供される。
【０２４４】
一実施形態において、ＶＨ及びＣＨ１及び／又はＶＬ及びＣＬドメイン中に導入される修飾は、互いに相補的である。重鎖及び軽鎖境界における相補性は、立体及び疎水性接触、静電／電荷相互作用又は様々な相互作用の任意の組合せに基づいて達成され得る。タンパク質表面間の相補性は、ロック・アンド・キー嵌合、ノブ・イントゥ・ホール、突起及び空洞、ドナー及びアクセプターなどに関して文献に広く記載されており、これらは、全て２つの相互作用する表面間の構造的及び化学的マッチの性質を示唆している。
【０２４５】
一実施形態において、１つ以上の導入される修飾は、Ｆａｂ構成要素の境界にわたる新たな水素結合を導入する。一実施形態において、１つ以上の導入される修飾は、Ｆａｂ構成要素の境界にわたる新たな塩架橋を導入する。例示的な置換は、国際公開第２０１４／１５０９７３号パンフレット及び国際公開第２０１４／０８２１７９号パンフレットに記載されている。
【０２４６】
ある実施形態において、Ｆａｂドメインは、ＣＨ１ドメイン中の１９２Ｅ置換並びにＣＬドメイン中の１１４Ａ及び１３７Ｋ置換を含み、これは、ＣＨ１及びＣＬドメイン間に塩架橋を導入する（Ｇｏｌａｙ  ｅｔ  ａｌ．，２０１６，Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １９６：３１９９−２１１を参照されたい）。
【０２４７】
ある実施形態において、Ｆａｂドメインは、ＣＨ１ドメイン中の１４３Ｑ及び１８８Ｖ置換並びにＣＬドメイン中の１１３Ｔ及び１７６Ｖ置換を含み、これは、ＣＨ１及びＣＬドメイン間の疎水性及び極性接触領域を入れ替える役割を果たす（Ｇｏｌａｙ  ｅｔ  ａｌ．，２０１６，Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １９６：３１９９−２１１を参照されたい）。
【０２４８】
ある実施形態において、Ｆａｂドメインは、Ｆａｂドメインの適切な集合を促進する直交Ｆａｂ境界を導入するためにＶＨ、ＣＨ１、ＶＬ、ＣＬドメインのいくつか又は全てにおける修飾を含み得る（Ｌｅｗｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，２０１４  Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ３２：１９１−１９８）。一実施形態において、３９Ｋ、６２Ｅ修飾がＶＨドメイン中に導入され、Ｈ１７２Ａ、Ｆ１７４Ｇ修飾がＣＨ１ドメイン中に導入され、１Ｒ、３８Ｄ、（３６Ｆ）修飾がＶＬドメイン中に導入され、Ｌ１３５Ｙ、Ｓ１７６Ｗ修飾がＣＬドメイン中に導入される。別の実施形態において、３９Ｙ修飾がＶＨドメイン中に導入され、３８Ｒ修飾がＶＬドメイン中に導入される。
【０２４９】
Ｆａｂドメインは、天然ＣＨ１：ＣＬジスルフィド結合を改変ジスルフィド結合で置換するようにも修飾されて、それによりＦａｂ構成要素対合の効率を高め得る。例えば、改変ジスルフィド結合は、１２６ＣをＣＨ１ドメイン中に且つ１２１ＣをＣＬドメイン中に導入することによって導入され得る（Ｍａｚｏｒ  ｅｔ  ａｌ．，２０１５，ＭＡｂｓ  ７：３７７−８９を参照されたい）。
【０２５０】
Ｆａｂドメインは、ＣＨ１ドメイン及びＣＬドメインを、適切な集合を促進する別のドメインで置換することによっても修飾され得る。例えば、Ｗｕ  ｅｔ  ａｌ．，２０１５，ＭＡｂｓ  ７：３６４−７６には、α  Ｔ細胞受容体のＣＨ１ドメインを定常ドメインで置換すること及びＴ細胞受容体のＣＬドメインをβドメインで置換すること並びに３８Ｄ修飾をＶＬドメイン中に及び３９Ｋ修飾をＶＨドメイン中に導入することにより、ＶＬ及びＶＨドメイン間のさらなる電荷間相互作用とこれらのドメイン置換とを組み合わせることが記載されている。
【０２５１】
ＭＢＭは、例えば、第７．２節に記載されるように、一本鎖Ｆａｂフラグメントである１つ以上のＡＢＤを含み得る。
【０２５２】
７．３．１．２．ｓｃＦｖ
特定の態様において、ＭＢＭは、例えば、第７．２節に記載されるように、ｓｃＦｖである１つ以上のＡＢＤを含む。
【０２５３】
７．３．１．３．他の免疫グロブリンベースのＡＢＤ
ＭＢＭは、Ｆａｂ又はｓｃＦｖ、例えばＦｖ、ｄｓＦｖ、（Ｆａｂ’）２、単一ドメイン抗体（ＳＤＡＢ）、ＶＨ若しくはＶＬドメイン又はラクダ科（ｃａｍｅｌｉｄ）ＶＨＨドメイン（ナノボディとも呼ばれる）以外の免疫グロブリン形式を有するＡＢＤも含み得る。
【０２５４】
ＡＢＤは、標的に対する十分な親和性を示す単一のＶＨ又はＶＬドメインから構成される単一ドメイン抗体であり得る。実施形態において、単一ドメイン抗体は、ラクダ科ＶＨＨドメインである（例えば、Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ，１９９９，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ２３１：２５−３８；国際公開第９４／０４６７８号パンフレットを参照されたい）。
【０２５５】
７．３．２．非免疫グロブリンベースのＡＢＤ
特定の実施形態において、ＭＢＭは、非抗体足場タンパク質（設計されたアンキリンリピートタンパク質（ＤＡＲＰｉｎ）、アビマー（アビディティ多量体の省略形）、アンチカリン／リポカリン、センチリン、クニッツドメイン、アドネキシン、アフィリン、アフィチン（ナノフィチンとしても知られている）、ノッチン、プロネクチン、バーサボディ、デュオカリン及びフィノマーを含むが、これらに限定されない）、リガンド、受容体、サイトカイン又はケモカインに由来する１つ以上のＡＢＤを含む。
【０２５６】
ＭＢＭにおいて使用され得る非免疫グロブリン足場としては、Ｍｉｎｔｚ  ａｎｄ  Ｃｒｅａ，２０１３，Ｂｉｏｐｒｏｃｅｓｓ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  １１（２）：４０−４８の表３及び４；Ｖａｚｑｕｅｚ−Ｌｏｍｂａｒｄｉ  ｅｔ  ａｌ．，２０１５，Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  Ｔｏｄａｙ  ２０（１０）：１２７１−８３の図１、表１及び図Ｉ；Ｓｋｒｌｅｃ  ｅｔ  ａｌ．，２０１５，Ｔｒｅｎｄｓ  ｉｎ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ３３（７）：４０８−１８の表１及びＢｏｘ  ２に列挙されるものが挙げられる。Ｍｉｎｔｚ  ａｎｄ  Ｃｒｅａ，２０１３，Ｂｉｏｐｒｏｃｅｓｓ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  １１（２）：４０−４８の表３及び４；Ｖａｚｑｕｅｚ−Ｌｏｍｂａｒｄｉ  ｅｔ  ａｌ．，２０１５，Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  Ｔｏｄａｙ  ２０（１０）：１２７１−８３の図１、表１及び図Ｉ；Ｓｋｒｌｅｃ  ｅｔ  ａｌ．，２０１５，Ｔｒｅｎｄｓ  ｉｎ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ３３（７）：４０８−１８の表１及びＢｏｘ  ２の内容（まとめて「足場の開示」）は、参照により本明細書に援用される。特定の実施形態において、足場の開示は、それらがアドネキシンに関して開示するものについて参照により援用される。別の実施形態において、足場の開示は、それらがアビマーに関して開示するものについて参照により援用される。別の実施形態において、足場の開示は、それらがアフィボディに関して開示するものについて参照により援用される。さらに別の実施形態において、足場の開示は、それらがアンチカリンに関して開示するものについて参照により援用される。さらに別の実施形態において、足場の開示は、それらがＤＡＲＰｉｎに関して開示するものについて参照により援用される。さらに別の実施形態において、足場の開示は、それらがクニッツドメインに関して開示するものについて参照により援用される。さらに別の実施形態において、足場の開示は、それらがノッチンに関して開示するものについて参照により援用される。さらに別の実施形態において、足場の開示は、それらがプロネクチンに関して開示するものについて参照により援用される。さらに別の実施形態において、足場の開示は、それらがナノフィチンに関して開示するものについて参照により援用される。さらに別の実施形態において、足場の開示は、それらがアフィリンに関して開示するものについて参照により援用される。さらに別の実施形態において、足場の開示は、それらがアドネクチンに関して開示するものについて参照により援用される。さらに別の実施形態において、足場の開示は、それらがＡＢＤに関して開示するものについて参照により援用される。さらに別の実施形態において、足場の開示は、それらがアドヒロンに関して開示するものについて参照により援用される。さらに別の実施形態において、足場の開示は、それらがアフィマーに関して開示するものについて参照により援用される。さらに別の実施形態において、足場の開示は、それらがアルファボディに関して開示するものについて参照により援用される。さらに別の実施形態において、足場の開示は、それらがアルマジロリピートタンパク質に関して開示するものについて参照により援用される。さらに別の実施形態において、足場の開示は、それらがアトリマー／テトラネクチンに関して開示するものについて参照により援用される。さらに別の実施形態において、足場の開示は、それらがオーボディ／ＯＢ−フォールドに関して開示するものについて参照により援用される。さらに別の実施形態において、足場の開示は、それらがセンチリンに関して開示するものについて参照により援用される。さらに別の実施形態において、足場の開示は、それらがレペボディに関して開示するものについて参照により援用される。さらに別の実施形態において、足場の開示は、それらがアンチカリンに関して開示するものについて参照により援用される。さらに別の実施形態において、足場の開示は、それらがアトリマーに関して開示するものについて参照により援用される。さらに別の実施形態において、足場の開示は、それらが二環式ペプチドに関して開示するものについて参照により援用される。さらに別の実施形態において、足場の開示は、それらがｃｙｓ−ノットに関して開示するものについて参照により援用される。さらに別の実施形態において、足場の開示は、それらがＦｎ３足場（アドネクチン、センチリン、プロネクチン及びＴｎ３を含む）に関して開示するものについて参照により援用される。
【０２５７】
一実施形態において、ＡＢＤは、設計されたアンキリンリピートタンパク質（「ＤＡＲＰｉｎ」）であり得る。ＤＡＲＰｉｎは、高度に特異的及び高親和性標的タンパク質結合を典型的に示す抗体ミメティックタンパク質である。それらは、典型的に、遺伝子組み換えされ、天然アンキリンタンパク質に由来し、これらのタンパク質の少なくとも３つ、通常、４つ又は５つの反復モチーフからなる。それらの分子量は、４つ又は５つの反復ＤＡＲＰｉｎでそれぞれ約１４又は１８ｋＤａ（キロダルトン）である。ＤＡＲＰｉｎの例は、例えば、米国特許第７，４１７，１３０号明細書に見られる。ＤＡＲＰｉｎ結合モジュール及び免疫グロブリンベースの結合モジュールを含む多重特異性結合分子は、例えば、米国特許出願公開第２０１５／００３０５９６  Ａ１号明細書に開示されている。
【０２５８】
別の実施形態において、ＡＢＤは、アフィボディであり得る。アフィボディは、周知であり、ブドウ球菌（ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃａｌ）プロテインＡのＩｇＧ結合ドメインの１つに由来する、５８アミノ酸残基タンパク質ドメインをベースとする親和性タンパク質を指す。
【０２５９】
別の実施形態において、ＡＢＤは、アンチカリンであり得る。アンチカリンは、周知であり、別の抗体ミメティック技術を指し、ここで、結合特異性は、リポカリンに由来する。アンチカリンは、デュオカリンと呼ばれる二重標的化タンパク質としてもフォーマットされ得る。
【０２６０】
別の実施形態において、ＡＢＤは、バーサボディであり得る。バーサボディは、周知であり、別の抗体ミメティック技術を指す。それらは、典型的なタンパク質の疎水性コアを置き換える、高ジスルフィド密度足場を形成する、１５％を超えるシステインを有する３〜５ｋＤａの低分子タンパク質である。
【０２６１】
他の非免疫グロブリンＡＢＤとしては、「Ａ」ドメインオリゴマー（アビマーとしても知られている）（例えば、米国特許出願公開第２００５／０１６４３０１号明細書、同第２００５／００４８５１２号明細書及び同第２００４／０１７５７６号明細書を参照されたい）、Ｆｎ３ベースのタンパク質足場（例えば、米国特許出願公開第２００３／０１７０７５３号明細書を参照されたい）、ＶＡＳＰポリペプチド、トリ膵臓ポリペプチド（ａＰＰ）、テトラネクチン（ＣＴＬＤ３をベースとする）、アフィリン（γＢ−クリスタリン／ユビキチンをベースとする）、ノッチン、ＳＨ３ドメイン、ＰＤＺドメイン、テンダミスタット、ネオカルジノスタチン、プロテインＡドメイン、リポカリン、トランスフェリン及びクニッツドメインが挙げられる。一態様において、ＭＢＭの構築に有用なＡＢＤは、国際公開第２０１１／１３０３２４号パンフレットに例示されるフィブロネクチンベースの足場を含む。
【０２６２】
さらに、特定の態様において、ＡＢＤは、受容体のリガンド結合ドメイン又はリガンドの受容体結合ドメインを含む。
【０２６３】
７．３．３．ＴＣＲ  ＡＢＤ
ＭＢＭは、ＢＣＭＡに特異的に結合するＡＢＤ及び異なる抗原、例えばＴＣＲ複合体の構成要素に特異的な少なくとも１つのＡＢＤを含有する。ＴＣＲは、通常、非変異ＣＤ３鎖分子との複合体の一部として発現される高度に可変のアルファ（α）及びベータ（β）鎖からなる、ジスルフィド連結された膜に固定されたヘテロ二量体タンパク質である。この受容体を発現するＴ細胞は、α：β（又はαβ）Ｔ細胞と呼ばれるが、少数のＴ細胞は、別の受容体を発現し、可変ガンマ（γ）及びデルタ（δ）鎖によって形成され、γδ  Ｔ細胞と呼ばれる。
【０２６４】
一実施形態において、ＭＢＭは、ＣＤ３に特異的に結合するＡＢＤを含有する。
【０２６５】
７．３．３．１．ＣＤ３  ＡＢＤ
ＭＢＭは、ＣＤ３に特異的に結合するＡＢＤを含有し得る。「ＣＤ３」という用語は、Ｔ細胞受容体の分化した３つの共受容体の群（又は共受容体複合体又は共受容体複合体のポリペプチド鎖）を指す。ヒトＣＤ３のポリペプチド鎖のアミノ酸配列が、ＮＣＢＩ  Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  Ｐ０４２３４、Ｐ０７７６６及びＰ０９６９３において示される。ＣＤ３タンパク質は、変異体も含み得る。ＣＤ３タンパク質は、フラグメントも含み得る。ＣＤ３タンパク質は、ＣＤ３アミノ酸配列の翻訳後修飾も含む。翻訳後修飾としては、限定はされないが、Ｎ−結合型及びＯ−結合型グリコシル化が挙げられる。
【０２６６】
ある実施形態において、ＭＢＭは、抗ＣＤ３抗体であるＡＢＤ（例えば、米国特許出願公開第２０１６／０３５５６００号明細書、国際公開第２０１４／１１０６０１号パンフレット及び国際公開第２０１４／１４５８０６号パンフレットに記載されるように）又はその抗原結合ドメインを含み得る。ＭＢＭにおいて使用され得る例示的な抗ＣＤ３  ＶＨ、ＶＬ及びｓｃＦＶ配列が、表３Ａに示される。
【０２６７】
【表４６】
2021525715.tif 000048
【０２６８】
【表４７】
2021525715.tif 000049
【０２６９】
【表４８】
2021525715.tif 000050
【０２７０】
【表４９】
2021525715.tif 000051
【０２７１】
【表５０】
2021525715.tif 000052
【０２７２】
【表５１】
2021525715.tif 000053
【０２７３】
Ｋａｂａｔ番号付けスキーム（Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ，１９９１，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ  Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．）、Ｃｈｏｔｈｉａ番号付けスキーム（Ａｌ−Ｌａｚｉｋａｎｉ  ｅｔ  ａｌ．，１９９７，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ  ２７３：９２７−９４８）及びＫａｂａｔ及びＣｈｏｔｈｉａ番号付けの組合せによって規定されるいくつかのＣＤ３結合剤のＣＤＲ配列がそれぞれ表３Ｂ〜３Ｄに示される。
【０２７４】
【表５２】
2021525715.tif 000054
【０２７５】
【表５３】
2021525715.tif 000055
【０２７６】
【表５４】
2021525715.tif 000056
【０２７７】
【表５５】
2021525715.tif 000057
【０２７８】
【表５６】
2021525715.tif 000058
【０２７９】
【表５７】
2021525715.tif 000059
【０２８０】
【表５８】
2021525715.tif 000060
【０２８１】
【表５９】
2021525715.tif 000061
【０２８２】
【表６０】
2021525715.tif 000062
【０２８３】
【表６１】
2021525715.tif 000063
【０２８４】
【表６２】
2021525715.tif 000064
【０２８５】
【表６３】
2021525715.tif 000065
【０２８６】
【表６４】
2021525715.tif 000066
【０２８７】
【表６５】
2021525715.tif 000067
【０２８８】
【表６６】
2021525715.tif 000068
【０２８９】
【表６７】
2021525715.tif 000069
【０２９０】
【表６８】
2021525715.tif 000070
【０２９１】
【表６９】
2021525715.tif 000071
【０２９２】
【表７０】
2021525715.tif 000072
【０２９３】
【表７１】
2021525715.tif 000073
【０２９４】
【表７２】
2021525715.tif 000074
【０２９５】
ある実施形態において、ＭＢＭは、Ｋａｂａｔ番号付け（例えば、表３Ｂに記載されるように）によって規定されるＣＤ３−１〜ＣＤ３−１２７のいずれかのＣＤＲを含むＣＤ３  ＡＢＤを含み得る。他の実施形態において、ＭＢＭは、Ｃｈｏｔｈｉａ番号付け（例えば、表３Ｃに記載されるように）によって規定されるＣＤ３−１〜ＣＤ３−１２７のいずれかのＣＤＲを含むＣＤ３  ＡＢＤを含み得る。さらに他の実施形態において、ＭＢＭは、Ｋａｂａｔ及びＣｈｏｔｈｉａ番号付けの組合せ（例えば、表３Ｄに記載されるように）によって規定されるＣＤ３−１〜ＣＤ３−１２７のいずれかのＣＤＲを含むＣＤ３  ＡＢＤを含み得る。
【０２９６】
ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−１のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−２のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−３のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−４のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−５のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−６のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−７のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−８のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−９のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−１０のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−１１のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−１２のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−１３のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−１４のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−１５のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−１６のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−１７のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−１８のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−１９のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−２０のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−２１のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−２２のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−２３のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−２４のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−２５のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−２６のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−２７のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−２８のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−２９のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−３０のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−３１のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−３２のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−３３のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−３４のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−３５のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−３６のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−３７のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−３８のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−３９のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−４０のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−４１のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−４２のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−４３のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−４４のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−４５のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−４６のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−４７のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−４８のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−４９のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−５０のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−５１のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−５２のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−５３のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−５４のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−５５のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−５６のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−５７のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−５８のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−５９のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−６０のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−６１のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−６２のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−６３のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−６４のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−６５のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−６６のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−６７のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−６８のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−６９のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−７０のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−７１のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−７２のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−７３のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−７４のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−７５のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−７６のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−７７のＣ��Ｒ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−７８のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−７９のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−８０のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−８１のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−８２のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−８３のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−８４のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−８５のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−８６のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−８７のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−８８のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−８９のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−９０のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−９１のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−９２のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−９３のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−９４のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−９５のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−９６のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−９７のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−９８のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−９９のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−１００のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−１０１のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−１０２のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−１０３のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−１０４のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−１０５のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−１０６のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−１０７のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−１０８のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−１０９のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−１１０のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−１１１のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−１１２のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−１１３のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−１１４のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３���１１５のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−１１６のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−１１７のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−１１８のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−１１９のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−１２０のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−１２１のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−１２２のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−１２３のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−１２４のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−１２５のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−１２６のＣＤＲ配列を含む。ある実施形態において、ＣＤ３  ＡＢＤは、ＣＤ３−１２７のＣＤＲ配列を含む。
【０２９７】
ＭＢＭは、ＣＤ３−１〜ＣＤ３−１２７のいずれか１つの完全な重鎖及び軽鎖可変配列を含み得る。ある実施形態において、ＭＢＭは、ＣＤ３−１のＶＨ及びＶＬ配列を含むＣＤ３  ＡＢＤを含む。ある実施形態において、ＭＢＭは、ＣＤ３−１のＶＨ及びＶＬ配列を含むＣＤ３  ＡＢＤを含む。ある実施形態において、ＭＢＭは、ＣＤ３−２のＶＨ及びＶＬ配列を含むＣＤ３  ＡＢＤを含む。ある実施形態において、ＭＢＭは、ＣＤ３−３のＶＨ及びＶＬ配列を含むＣＤ３  ＡＢＤを含む。ある実施形態において、ＭＢＭは、ＣＤ３−４のＶＨ及びＶＬ配列を含むＣＤ３  ＡＢＤを含む。ある実施形態において、ＭＢＭは、ＣＤ３−５のＶＨ及びＶＬ配列を含むＣＤ３  ＡＢＤを含む。ある実施形態において、ＭＢＭは、ＣＤ３−６のＶＨ及びＶＬ配列を含むＣＤ３  ＡＢＤを含む。ある実施形態において、ＭＢＭは、ＣＤ３−７のＶＨ及びＶＬ配列を含むＣＤ３  ＡＢＤを含む。ある実施形態において、ＭＢＭは、ＣＤ３−８のＶＨ及びＶＬ配列を含むＣＤ３  ＡＢＤを含む。ある実施形態において、ＭＢＭは、ＣＤ３−９のＶＨ及びＶＬ配列を含むＣＤ３  ＡＢＤを含む。ある実施形態において、ＭＢＭは、ＣＤ３−１０のＶＨ及びＶＬ配列を含むＣＤ３  ＡＢＤを含む。ある実施形態において、ＭＢＭは、ＣＤ３−１１のＶＨ及びＶＬ配列を含むＣＤ３  ＡＢＤを含む。ある実施形態において、ＭＢＭは、ＣＤ３−１２のＶＨ及びＶＬ配列を含むＣＤ３  ＡＢＤを含む。ある実施形態において、ＭＢＭは、ＣＤ３−１３のＶＨ及びＶＬ配列を含むＣＤ３  ＡＢＤを含む。ある実施形態において、ＭＢＭは、ＣＤ３−１４のＶＨ及びＶＬ配列を含むＣＤ３  ＡＢＤを含む。ある実施形態において、ＭＢＭは、ＣＤ３−１５のＶＨ及びＶＬ配列を含むＣＤ３  ＡＢＤを含む。ある実施形態において、ＭＢＭは、ＣＤ３−１６のＶＨ及びＶＬ配列を含むＣＤ３  ＡＢＤを含む。ある実施形態において、ＭＢＭは、ＣＤ３−１７のＶＨ及びＶＬ配列を含むＣＤ３  ＡＢＤを含む。ある実施形態において、ＭＢＭは、ＣＤ３−１８のＶＨ及びＶＬ配列を含むＣＤ３  ＡＢＤを含む。ある実施形態において、ＭＢＭは、ＣＤ３−１９のＶＨ及びＶＬ配列を含むＣＤ３  ＡＢＤを含む。ある実施形態において、ＭＢＭは、ＣＤ３−２０のＶＨ及びＶＬ配列を含むＣＤ３  ＡＢＤを含む。ある実施形態において、ＭＢＭは、ＣＤ３−２１のＶＨ及びＶＬ配列を含むＣＤ３  ＡＢＤを含む。ある実施形態において、ＭＢＭは、ＣＤ３−２２のＶＨ及びＶＬ配列を含むＣＤ３  ＡＢＤを含む。ある実施形態において、ＭＢＭは、ＣＤ３−２３のＶＨ及びＶＬ配列を含むＣＤ３  ＡＢＤを含む。ある実施形態において、ＭＢＭは、ＣＤ３−２４のＶＨ及びＶＬ配列を含むＣＤ３  ＡＢＤを含む。ある実施形態において、ＭＢＭは、ＣＤ３−２５のＶＨ及びＶＬ配列を含むＣＤ３  ＡＢＤを含む。ある実施形態において、ＭＢＭは、ＣＤ３−２６のＶＨ及びＶＬ配列を含むＣＤ３  ＡＢＤを含む。ある実施形態において、ＭＢＭは、ＣＤ３−２７のＶＨ及びＶＬ配列を含むＣＤ３  ＡＢＤを含む。
【０２９８】
表３Ｂ〜３Ｄに記載されるＣＤＲ組（すなわちＣＤ３−１〜ＣＤ３−１２７のそれぞれの６つのＣＤＲの組）に加えて、本開示は、変異型ＣＤＲ組を提供する。一実施形態において、６つのＣＤＲの組は、Ｂｉａｃｏｒｅ、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）及び／又はＢＬＩ（バイオレイヤー干渉法、例えばＯｃｔｅｔアッセイ）アッセイの少なくとも１つによって測定される際、ＣＤ３  ＡＢＤが、標的抗原に結合することが依然として可能である限り、表３Ｂ〜３Ｄに記載されるＣＤＲ組から１、２、３、４又は５つのアミノ酸変化を有し得る。
【０２９９】
ＣＤ３へのＡＢＤを形成する表３Ａに開示される可変重鎖及び可変軽鎖ドメインに加えて、本開示は、変異型ＶＨ及びＶＬドメインを提供する。一実施形態において、変異型ＶＨ及びＶＬドメインは、Ｂｉａｃｏｒｅ、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）及び／又はＢＬＩ（バイオレイヤー干渉法、例えばＯｃｔｅｔアッセイ）アッセイの少なくとも１つによって測定される際、ＡＢＤが標的抗原に結合することが依然として可能である限り、表３Ａに記載されるＶＨ及びＶＬドメイン組からの１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０のアミノ酸変化をそれぞれ有し得る。別の実施形態において、Ｂｉａｃｏｒｅ、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）及び／又はＢＬＩ（バイオレイヤー干渉法、例えばＯｃｔｅｔアッセイ）アッセイの少なくとも１つによって測定される際、ＡＢＤが、標的抗原に結合することが依然として可能である限り、変異型ＶＨ及びＶＬは、表３Ａに開示されるそれぞれのＶＨ又はＶＬと少なくとも９０、９５、９７、９８又は９９％同一である。
【０３００】
ある実施形態において、ヒトＣＤ３に特異的に結合する抗原結合ドメインは、非免疫グロブリンベースであり、その代わりに、非抗体足場タンパク質、例えば第７．３．２節に記載される非抗体足場タンパク質の１つに由来する。一実施形態において、ヒトＣＤ３に特異的に結合する抗原結合ドメインは、国際公開第２０１７／０１３１３６号パンフレットに記載されるＡｆｆｉｌｉｎ−１４４１６０を含む。Ａｆｆｉｌｉｎ−１４４１６０は、以下のアミノ酸配列を有する。
ＭＱＩＦＶＫＴＬＴＧＫＴＩＴＬＥＶＥＰＳＤＴＩＥＮＶＫＡＫＩＱＤＫＥＧＩＰＰＤＱＱＷＬＷＦＡＧＫＱＬＥＤＧＲＴＬＳＤＹＮＩＱＫＥＳＴＬＫＬＷＬＶＤＫＡＡＭＱＩＦＶＹＴＲＴＧＫＴＩＴＬＥＶＥＰＳＤＴＩＥＮＶＫＡＫＩＱＤＫＥＧＩＰＰＤＱＱＲＬＩＷＡＧＫＱＬＥＤＧＲＴＬＳＤＹＮＩＡＬＥＳＧＬＨＬＶＬＲＬＲＡＡ（配列番号４１５）
【０３０１】
７．３．３．２．ＴＣＲ−α／β  ＡＢＤ
ＭＢＭは、ＴＣＲ−α鎖、ＴＣＲ−β鎖又はＴＣＲ−αβ二量体に特異的に結合するＡＢＤを含有し得る。例示的な抗ＴＣＲ−α／β抗体が公知である（例えば、米国特許出願公開第２０１２／００３４２２１号明細書；Ｂｏｒｓｔ  ｅｔ  ａｌ．，１９９０，Ｈｕｍ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．２９（３）：１７５−８８（抗体ＢＭＡ０３１を記載している）を参照されたい）。抗体ＢＭＡ０３１のＶＨ、ＶＬ及びＫａｂａｔ  ＣＤＲ配列が、表４に示される。
【０３０２】
【表７３】
2021525715.tif 000075
【０３０３】
一実施形態において、ＴＣＲ  ＡＢＤは、抗体ＢＭＡ０３１のＣＤＲ配列を含み得る。他の実施形態において、ＴＣＲ  ＡＢＤは、抗体ＢＭＡ０３１のＶＨ及びＶＬ配列を含み得る。
【０３０４】
７．３．３．３．ＴＣＲ−γ／δ  ＡＢＤ
ＭＢＭは、ＴＣＲ−γ鎖、ＴＣＲ−δ鎖又はＴＣＲ−γδ二量体に特異的に結合するＡＢＤを含有し得る。例示的な抗ＴＣＲ−γ／δ抗体が公知である（例えば、米国特許第５，９８０，８９２号明細書（受託番号ＨＢ  ９５７８としてＡＴＣＣにより寄託されたハイブリドーマによって産生されるδＴＣＳ１を記載している）を参照されたい）。
【０３０５】
７．４．コネクタ
ＢＣＭＡ結合分子は、ある場合には、例えばリンカーなしで融合タンパク質として、互いに直接連結されたＡＢＤ又はＡＢＤ鎖の対（例えば、ＦａｂのＶＨ−ＣＨ１又はＶＬ−ＣＬ構成要素）を含み得ることが考えられる。例えば、ＢＣＭＡ結合分子は、個々のＡＢＤ又はＡＢＤ鎖を連結するコネクタ部分を含む。コネクタ部分の使用は、例えば、ＢＣＭＡ結合分子内のＡＢＤの柔軟性を高め、それにより立体障害を低減することによって標的結合を改善し得る。ＡＢＤ又はＡＢＤ鎖は、例えば、Ｆｃドメイン（各Ｆｃドメインは、会合されたＦｃ領域の対を表す）及び／又はＡＢＤリンカーを介して互いに連結され得る。Ｆｃドメインの使用は、典型的に、最適な抗原結合のために、ＡＢＤ又はＡＢＤ鎖のコネクタとしてのヒンジ領域の使用を必要とする。したがって、「コネクタ」という用語は、限定はされないが、Ｆｃ領域、Ｆｃドメイン及びヒンジ領域を包含する。
【０３０６】
コネクタは、例えば、ＢＣＭＡ結合分子の生物学的半減期を増加又は減少させるように選択又は修飾され得る。例えば、生物学的半減期を減少させるために、フラグメントを含むＢＣＭＡ結合分子が、天然のＦｃ−ヒンジ領域ＳｐＡ結合と比べて低下したブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｙｌ）プロテインＡ（ＳｐＡ）結合を有するように、１つ以上のアミノ酸突然変異が、Ｆｃ−ヒンジフラグメントのＣＨ２−ＣＨ３ドメイン境界領域に導入され得る。この手法は、Ｗａｒｄらによる米国特許第６，１６５，７４５号明細書にさらに詳細に記載されている。代わりに、ＢＣＭＡ結合分子が、その生物学的半減期を増加させるように修飾され得る。例えば、Ｗａｒｄに付与された米国特許第６，２７７，３７５号明細書に記載されるように、以下の突然変異：Ｔ２５２Ｌ、Ｔ２５４Ｓ、Ｔ２５６Ｆの１つ以上が導入され得る。代わりに、生物学的半減期を増加させるために、Ｐｒｅｓｔａらによる米国特許第５，８６９，０４６号明細書及び同第６，１２１，０２２号明細書に記載されるように、ＢＣＭＡ結合分子が、ＩｇＧのＦｃ領域のＣＨ２ドメインの２つのループから取られたサルベージ受容体結合エピトープを含むようにＣＨ１又はＣＬ領域内で改変され得る。
【０３０７】
Ｆｃドメイン（２つのＦｃ領域の対合によって形成される）、ヒンジ領域及びＡＢＤリンカーの例がそれぞれ第７．４．１、７．４．２及び７．４．３節に記載されている。
【０３０８】
７．４．１．Ｆｃドメイン
ＢＣＭＡ結合分子は、任意の好適な種に由来するＦｃドメインを含み得る。一実施形態において、Ｆｃドメインは、ヒトＦｃドメインに由来する。
【０３０９】
Ｆｃドメインは、ＩｇＡ（サブクラスＩｇＡ１及びＩｇＡ２を含む）、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ（サブクラスＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３及びＩｇＧ４を含む）及びＩｇＭを含む、任意の好適なクラスの抗体に由来し得る。一実施形態において、Ｆｃドメインは、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３又はＩｇＧ４に由来する。一実施形態において、Ｆｃドメインは、ＩｇＧ１に由来する。一実施形態において、Ｆｃドメインは、ＩｇＧ４に由来する。
【０３１０】
天然抗体において、Ｆｃ領域は、典型的に同一であるが、多重特異性結合分子、例えば本開示のＭＢＭを生成する目的のために、Ｆｃ領域は、以下の第７．４．１．５節に記載されるように、ヘテロ二量体化を可能にするために有利には異なり得る。
【０３１１】
典型的に、各Ｆｃ領域は、２つ又は３つの重鎖定常ドメインを含むか又はそれからなる。
【０３１２】
天然抗体において、ＩｇＡ、ＩｇＤ及びＩｇＧのＦｃ領域は、２つの重鎖定常ドメイン（ＣＨ２及びＣＨ３）から構成され、ＩｇＥ及びＩｇＭの重鎖Ｆｃ領域は、３つの重鎖定常ドメイン（ＣＨ２、ＣＨ３及びＣＨ４）から構成される。これらは、Ｆｃドメインを生成するように二量体化する。
【０３１３】
本開示において、Ｆｃ領域は、１つ以上の異なるクラスの抗体、例えば１つ、２つ又は３つの異なるクラスに由来する重鎖定常ドメインを含み得る。
【０３１４】
一実施形態において、Ｆｃ領域は、ＩｇＧ１に由来するＣＨ２及びＣＨ３ドメインを含む。
【０３１５】
一実施形態において、Ｆｃ領域は、ＩｇＧ２に由来するＣＨ２及びＣＨ３ドメインを含む。
【０３１６】
一実施形態において、Ｆｃ領域は、ＩｇＧ３に由来するＣＨ２及びＣＨ３ドメインを含む。
【０３１７】
一実施形態において、Ｆｃ領域は、ＩｇＧ４に由来するＣＨ２及びＣＨ３ドメインを含む。
【０３１８】
一実施形態において、Ｆｃ領域は、ＩｇＭに由来するＣＨ４ドメインを含む。ＩｇＭ  ＣＨ４ドメインは、典型的に、ＣＨ３ドメインのＣ末端に位置する。
【０３１９】
一実施形態において、Ｆｃ領域は、ＩｇＧに由来するＣＨ２及びＣＨ３ドメイン及びＩｇＭに由来するＣＨ４ドメインを含む。
【０３２０】
本開示のＢＣＭＡ結合分子のためのＦｃ領域を生成するのに使用するための重鎖定常ドメインは、上述される天然定常ドメインの変異型を含み得ることが理解されるであろう。このような変異型は、野生型定常ドメインと比較して１つ以上のアミノ酸変化を含み得る。一例において、本開示のＦｃ領域は、野生型定常ドメインと配列が異なる少なくとも１つの定常ドメインを含む。変異型定常ドメインは、野生型定常ドメインより長いか又は短いことがあることが理解されるであろう。例えば、変異型定常ドメインは、野生型定常ドメインと少なくとも６０％同一であるか又は類似している。別の例において、変異型定常ドメインは、少なくとも７０％同一であるか又は類似している。別の例において、変異型定常ドメインは、少なくとも７５％同一であるか又は類似している。別の例において、変異型定常ドメインは、少なくとも８０％同一であるか又は類似している。別の例において、変異型定常ドメインは、少なくとも８５％同一であるか又は類似している。別の例において、変異型定常ドメインは、少なくとも９０％同一であるか又は類似している。別の例において、変異型定常ドメインは、少なくとも９５％同一であるか又は類似している。別の例において、変異型定常ドメインは、少なくとも９９％同一であるか又は類似している。例示的なＦｃ変異型は、以下の第７．４．１．１〜７．４．１．５節に記載されている。
【０３２１】
ＩｇＭ及びＩｇＡは、共通のＨ２Ｌ２抗体単位の共有結合多量体としてヒトにおいて天然に存在する。ＩｇＭは、Ｊ鎖を組み込んだ場合に五量体として存在するか、又はＪ鎖を欠いている場合に六量体として存在する。ＩｇＡは、モノマー及び二量体形態として存在する。ＩｇＭ及びＩｇＡの重鎖は、尾部として知られている、Ｃ末端定常ドメインへの１８アミノ酸伸長を有する。尾部は、ポリマーにおいて重鎖間にジスルフィド結合を形成するシステイン残基を含み、重合において重要な役割を果たすものと考えられる。尾部は、グリコシル化部位も含有する。特定の実施形態において、本開示のＢＣＭＡ結合分子は、尾部を含まない。
【０３２２】
本開示のＢＣＭＡ結合分子に組み込まれるＦｃドメインは、血清半減期、補体結合、Ｆｃ受容体結合及び／又は抗原依存性細胞傷害性などの、タンパク質の１つ以上の機能的特性を変化させる１つ以上の修飾を含み得る。さらに、ＢＣＭＡ結合分子は、化学修飾され得るか（例えば、１つ以上の化学部分が、ＢＣＭＡ結合分子に結合され得る）又はそのグリコシル化を改変するように、同様に、ＢＣＭＡ結合分子の１つ以上の機能的特性を改変するように修飾され得る。
【０３２３】
抗体分子のエフェクター機能は、例えば、抗体への補体のＣ１構成要素の結合によって媒介される補体媒介性エフェクター機能を含む。補体の活性化は、病原体のオプソニン化及び直接溶解において重要である。さらに、それは、補体の活性化の部位に食細胞を動員及び活性化することによって炎症反応を刺激する。エフェクター機能は、Ｆｃ受容体（ＦｃＲ）媒介性エフェクター機能を含み、これは、Ｆｃ受容体（ＦｃＲ）への抗体の定常ドメインの結合時に引き起こされ得る。エフェクター細胞表面におけるＦｃ受容体の抗原抗体複合体に媒介される架橋は、抗体で被覆された粒子の貪食及び破壊、免疫複合体のクリアランス、キラー細胞による抗体で被覆された標的細胞の溶解（抗体依存性細胞媒介細胞傷害性又はＡＤＣＣと呼ばれる）、炎症性メディエータの放出、胎盤通過及び免疫グロブリン産生の制御を含む、多くの重要及び多様な生物学的応答を引き起こす。
【０３２４】
Ｆｃ領域は、エフェクター機能を改変するために、少なくとも１つのアミノ酸残基を異なるアミノ酸残基で置換することによって改変され得る。例えば、Ｆｃ領域が、エフェクターリガンドに対する改変された親和性を有するように、１つ以上のアミノ酸が、異なるアミノ酸残基で置換され得る。それに対する親和性が改変されるエフェクターリガンドは、例えば、Ｆｃ受容体又は補体のＣ１構成要素であり得る。この手法は、例えば、両方ともＷｉｎｔｅｒらによる米国特許第５，６２４，８２１号明細書及び同第５，６４８，２６０号明細書に記載されている。修飾Ｆｃ領域は、Ｃ１ｑ結合も改変し、且つ／又は補体依存性細胞傷害性（ＣＤＣ）を低減するか又はなくし得る。この手法は、例えば、Ｉｄｕｓｏｇｉｅらによる米国特許第６，１９４，５５１号明細書に記載されている。修飾Ｆｃ領域は、補体を結合するＦｃ領域の能力も改変し得る。この手法は、例えば、ＢｏｄｍｅｒらによるＰＣＴ公報国際公開第９４／２９３５１号パンフレットに記載されている。アロタイプアミノ酸残基としては、限定はされないが、Ｊｅｆｆｅｒｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，２００９，ＭＡｂｓ，１：３３２−３３８によって記載されるように、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２及びＩｇＧ３サブクラスの重鎖の定常領域並びにκアイソタイプの軽鎖の定常領域が挙げられる。
【０３２５】
Ｆｃ領域は、例えば、抗体依存性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）及び／又は抗体依存性細胞食作用（ＡＤＣＰ）を媒介するＢＣＭＡ結合分子の能力を低減するか又はなくすために、エフェクター機能を「サイレンシング」するようにも修飾され得る。これは、例えば、Ｆｃ領域における突然変異を導入することによって達成され得る。このような突然変異は、当技術分野において記載されている：ＬＡＬＡ及びＮ２９７Ａ（Ｓｔｒｏｈｌ，２００９，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．２０（６）：６８５−６９１）；及びＤ２６５Ａ（Ｂａｕｄｉｎｏ  ｅｔ  ａｌ．，２００８，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１８１：６６６４−６９；Ｓｔｒｏｈｌ、上記）。サイレントＦｃ  ＩｇＧ１抗体の例は、ＩｇＧ１  Ｆｃアミノ酸配列におけるＬ２３４Ａ及びＬ２３５Ａ突然変異を含むいわゆるＬＡＬＡ突然変異体を含む。サイレントＩｇＧ１抗体の別の例は、Ｄ２６５Ａ突然変異を含む。別のサイレントＩｇＧ１抗体は、ＩｇＧ１  Ｆｃアミノ酸配列におけるＤ２６５Ａ及びＰ３２９Ａ突然変異を含むいわゆるＤＡＰＡ突然変異体を含む。別のサイレントＩｇＧ１抗体は、Ｎ２９７Ａ突然変異を含み、これは、脱グリコシル化／非グリコシル化抗体をもたらす。
【０３２６】
Ｆｃ領域は、例えば、活性Ｆｃγ受容体に対するＢＣＭＡ結合分子の親和性を増大するように又は阻害性Ｆｃγ受容体に対するＢＣＭＡ結合分子の親和性を低下させるように、１つ以上のアミノ酸残基を修飾することにより、抗体依存性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）及び／又は抗体依存性細胞食作用（ＡＤＣＰ）を媒介する、Ｆｃ領域を含有するＢＣＭＡ結合分子の能力を向上させるように修飾され得る。ヒト活性化Ｆｃγ受容体は、ＦｃγＲＩａ、ＦｃγＲＩＩａ、ＦｃγＲＩＩＩａ及びＦｃγＲＩＩＩｂを含み、ヒト阻害性Ｆｃγ受容体は、ＦｃγＲＩＩｂを含む。この手法は、例えば、ＰｒｅｓｔａによるＰＣＴ公報国際公開第００／４２０７２号パンフレットに記載されている。さらに、ＦｃγＲｌ、ＦｃγＲＩＩ、ＦｃγＲＩＩＩ及びＦｃＲｎのためのヒトＩｇＧ１における結合部位が、マッピングされており、向上した結合を有する変異型が、記載されている（Ｓｈｉｅｌｄｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７６：６５９１−６６０４，２００１を参照されたい）。ＡＤＣＣ／ＡＤＣＰ機能の向上などの、モノクローナル抗体のＦｃ媒介性エフェクター機能の最適化が、記載されている（Ｓｔｒｏｈｌ，２００９，Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎｉｏｎ  ｉｎ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ２０：６８５−６９１を参照されたい）。ＡＤＣＣ／ＡＤＣＰ機能を向上させ得る突然変異としては、Ｇ２３６Ａ、Ｓ２３９Ｄ、Ｆ２４３Ｌ、Ｐ２４７Ｉ、Ｄ２８０Ｈ、Ｋ２９０Ｓ、Ｒ２９２Ｐ、Ｓ２９８Ａ、Ｓ２９８Ｄ、Ｓ２９８Ｖ、Ｙ３００Ｌ、Ｖ３０５Ｉ、Ａ３３０Ｌ、Ｉ３３２Ｅ、Ｅ３３３Ａ、Ｋ３３４Ａ、Ａ３３９Ｄ、Ａ３３９Ｑ、Ａ３３９Ｔ及びＰ３９６Ｌ（全ての位置はＥＵ番号付けによる）から選択される１つ以上の突然変異が挙げられる。
【０３２７】
Ｆｃ領域は、例えば、典型的に、ＦｃαＲＩなどの親ＢＣＭＡ結合分子を認識しない活性化受容体に対するＢＣＭＡ結合分子の親和性を増大するように１つ以上のアミノ酸を修飾することにより、ＡＤＣＣ及び／又はＡＤＣＰを媒介するＢＣＭＡ結合分子の能力を向上させるようにも修飾され得る。この手法は、例えば、Ｂｏｒｒｏｋ  ｅｔ  ａｌ．，２０１５，ｍＡｂｓ．７（４）：７４３−７５１に記載されている。
【０３２８】
したがって、特定の態様において、本開示のＢＣＭＡ結合分子は、限定はされないが、ＦｃＲｎ若しくは白血球受容体などのＦｃ−受容体への結合（例えば、上記又は第７．４．１．１節に記載されるように）、補体への結合（例えば、上記又は第７．４．１．２節に記載されるように）、修飾ジスルフィド結合構造（例えば、上記又は第７．４．１．３節に記載されるように）又は改変グリコシル化パターン（例えば、上記又は第７．４．１．４節に記載されるように）などの改変されたエフェクター機能を有するＦｃドメインを含み得る。Ｆｃドメインは、例えば、同一のＦｃ領域より非同一のＦｃ領域の優先的な対合であるヘテロ二量体化を可能にすることにより、非対称ＢＣＭＡ結合分子の製造可能性を向上させる修飾を含むようにも改変され得る。ヘテロ二量体化は、異なるＡＢＤが、配列が異なるＦｃ領域を含有するＦｃドメインによって互いに連結されたＢＣＭＡ結合分子の生成を可能にする。ヘテロ二量体化手法の例が第７．４．１．５節（及びそのサブセクション）に例示されている。
【０３２９】
第７．４．１．１〜７．４．１．５節に記載される修飾のいずれかは、任意の好適な方法で組み合わされて、所望の機能的特性を達成し得、且つ／又は他の修飾と組み合わされて、ＢＣＭＡ結合分子の特性を改変し得ることが理解されるであろう。
【０３３０】
７．４．１．１．改変されたＦｃＲ結合を有するＦｃドメイン
ＢＣＭＡ結合分子のＦｃドメインは、対応する天然免疫グロブリンと比較して、１つ以上のＦｃ−受容体（ＦｃＲｓ）への改変された結合を示し得る。任意の特定のＦｃ−受容体への結合は、増加又は減少され得る。一実施形態において、Ｆｃドメインは、そのＦｃ−受容体結合プロファイルを改変する１つ以上の修飾を含む。
【０３３１】
ヒト細胞は、ＦｃαＲ、ＦｃεＲ、ＦｃγＲ、ＦｃＲｎ及びグリカン受容体から選択されるいくつかの膜結合性ＦｃＲを発現し得る。一部の細胞は、可溶性（細胞外ドメイン）ＦｃＲを発現することも可能である（Ｆｒｉｄｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９３，Ｊ  Ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ５４：５０４−５１２）。ＦｃγＲは、ＩｇＧ結合の親和性（高／低）及び生物学的影響（活性化／阻害）によってさらに分けられ得る。ヒトＦｃγＲＩは、唯一の「高親和性」受容体であると広く考えられている一方、他の全ては、中程度〜低親和性であると考えられる。ＦｃγＲＩＩｂは、その細胞内ＩＴＩＭモチーフにより「阻害」機能性を有する唯一の受容体である一方、他の全ては、ＩＴＡＭモチーフにより「活性化」するか、又は共通のＦｃγＲ−−γ鎖と対合すると考えられる。ＦｃγＲＩＩＩｂは、活性であるが、それがＧＰＩアンカーを介して細胞と会合する点でも独特である。全体的に、ヒトは、６つの「標準的な」ＦｃγＲｓ：ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩａ、ＦｃγＲＩＩｂ、ＦｃγＲＩＩｃ、ＦｃγＲＩＩＩａ及びＦｃγＲＩＩＩｂを発現する。これらの配列に加えて、これらのファミリーにわたって広がる多数の配列又はアロタイプ変異体が存在する。これらのいくつかは、重要な機能的結果を有することが分かっており、したがってそれ自体の受容体サブタイプであると考えられることがある。例としては、ＦｃγＲＩＩａＨ１３４Ｒ、ＦｃγＲＩＩｂＩ１９０Ｔ、ＦｃγＲＩＩＩａＦ１５８Ｖ、ＦｃγＲＩＩＩｂＮＡ１、ＦｃγＲＩＩＩｂＮＡ２及びＦｃγＲＩＩＩＳＨが挙げられる。各受容体配列は、ＩｇＧ：ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３及びＩｇＧ４の４つのサブクラスに対する異なる親和性を有することが示された（Ｂｒｕｈｎｓ，１９９３，Ｂｌｏｏｄ  １１３：３７１６−３７２５）。他の種は、ＦｃγＲのいくらか異なる数及び機能性を有し、マウス系がこれまで最も良く試験され、４つのＦｃγＲ、ＦｃγＲＩ  ＦｃγＲＩＩｂ  ＦｃγＲＩＩＩ  ＦｃγＲＩＶを含む（Ｂｒｕｈｎｓ，２０１２，Ｂｌｏｏｄ  １１９：５６４０−５６４９）。細胞上のヒトＦｃγＲＩは、通常、ＩｇＧ１／ＩｇＧ３／ＩｇＧ４に対するその親和性（約１０−８Ｍ）及び血清中のこれらのＩｇＧの濃度（約１０ｍｇ／ｍｌ）のため、正常な血清条件でモノマーＩｇＧによって「占有される」ものと考えられる。したがって、それらの表面上にＦｃγＲＩを保有する細胞は、結合された多重特異性ＩｇＧによって代理的にそれらの抗原環境の「スクリーニング」又は「サンプリング」が可能であると考えられる。ＩｇＧサブクラスに対するより低い親和性（約１０−５〜１０−７Ｍの範囲内）を有する他の受容体は、通常、「占有されない」ものと考えられる。したがって、低親和性受容体は、抗体が関与する免疫複合体の検出及びそれによる活性化に対して本質的に感受性である。抗体免疫複合体中の増加したＦｃ密度は、低親和性ＦｃγＲへの結合アビディティの増加した機能的親和力をもたらす。これは、いくつかの方法を用いてインビトロで実証された（Ｓｈｉｅｌｄｓ  ｅｔ  ａｌ．，２００１，Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  ２７６（９）：６５９１−６６０４；Ｌｕｘ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １９０��４３１５−４３２３）。それは、ヒトにおけるＩＴＰを治療するための抗ＲｈＤの使用における主要な作用モードの１つであることも示唆された（Ｃｒｏｗ，２００８，Ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  ２２：１０３−１１６）。
【０３３２】
多くの細胞型が複数のタイプのＦｃγＲを発現し、したがって、ＦｃγＲを保有する細胞へのＩｇＧ又は抗体免疫複合体の結合は、生物学的状況に応じて複数の及び複雑な結果を有し得る。最も簡潔には、細胞は、活性、阻害又は混合シグナルのいずれかを受け取り得る。これは、食作用（例えば、マクロファージ及び好中球）、抗原プロセシング（例えば、樹枝状細胞）、減少したＩｇＧ産生（例えば、Ｂ細胞）又は脱顆粒（例えば、好中球、肥満細胞）などの事象をもたらし得る。ＦｃγＲＩＩｂからの阻害シグナルが活性シグナルのものより優位であり得ることを裏付けるデータがある（Ｐｒｏｕｌｘ，２０１０，Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  １３５：４２２−４２９）。
【０３３３】
ＦｃγＲ受容体の１つ以上への結合を改変するために行われ得るいくつかの有用なＦｃ置換がある。増加した結合並びに減少した結合をもたらす置換が、有用であり得る。例えば、ＦｃγＲＩＩＩａへの増加した結合が、一般に、増加したＡＤＣＣ（抗体依存性細胞媒介細胞傷害性；ＦｃγＲを発現する非特異的な細胞傷害性細胞が、標的細胞上の結合抗体を認識し、その後、標的細胞の溶解を引き起こす細胞媒介反応）をもたらすことは公知である。同様に、ＦｃγＲＩＩｂ（阻害性受容体）への減少した結合は、ある状況において同様に有益であり得る。本開示において利用されるアミノ酸置換としては、米国特許出願公開第２００６／００２４２９８号明細書（特に図４１）、米国特許出願公開第２００６／０１２１０３２号明細書、米国特許出願公開第２００６／０２３５２０８号明細書及び米国特許出願公開第２００７／０１４８１７０号明細書に列挙されるものが挙げられる。利用される特定の変異型としては、限定はされないが、２３６Ａ、２３９Ｄ、２３９Ｅ、３３２Ｅ、３３２Ｄ、２３９Ｄ／３３２Ｅ、２６７Ｄ、２６７Ｅ、３２８Ｆ、２６７Ｅ／３２８Ｆ、２３６Ａ／３３２Ｅ、２３９Ｄ／３３２Ｅ／３３０Ｙ、２３９Ｄ、３３２Ｅ／３３０Ｌ、２４３Ａ、２４３Ｌ、２６４Ａ、２６４Ｖ及び２９９Ｔが挙げられる。
【０３３４】
ＦｃＲｎは、成人及び小児の血清中のＩｇＧの長い半減期を維持するのに重要な役割を果たす。受容体は、酸性化された小胞（ｐＨ＜６．５）中のＩｇＧに結合して、ＩｇＧ分子を分解から保護し、次に血液中７．４のより高いｐＨでそれを放出する。
【０３３５】
ＦｃＲｎは、白血球Ｆｃ受容体と異なり、代わりにＭＨＣクラスＩ分子との構造的類似性を有する。それは、３つの細胞外ドメインを含む膜結合性鎖に非共有結合されたβ２−ミクログロブリン鎖から構成されるヘテロ二量体である。炭水化物鎖を含む、これらのドメインの１つは、β２−ミクログロブリンと一緒に、ＦｃのＣＨ２及びＣＨ３ドメイン間の部位と相互作用する。相互作用は、ｐＨ＜６．５で正に荷電したＩｇＧ上のヒスチジン残基になされた塩架橋を含む。より高いｐＨにおいて、Ｈｉｓ残基は、それらの正電荷を喪失し、ＦｃＲｎ−ＩｇＧ相互作用が弱められ、ＩｇＧが解離する。
【０３３６】
一実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、ヒトＦｃＲｎに結合するＦｃドメインを含む。
【０３３７】
一実施形態において、Ｆｃドメインは、３１０位、ある場合には４３５位にもヒスチジン残基を含むＦｃ領域（例えば、１つ又は２つ）を有する。これらのヒスチジン残基は、ヒトＦｃＲｎ結合のために重要である。一実施形態において、３１０及び４３５位におけるヒスチジン残基は、天然残基であり、すなわち３１０及び４３５位が修飾されていない。代わりに、これらのヒスチジン残基の１つ又は両方が修飾の結果として存在し得る。
【０３３８】
ＢＣＭＡ結合分子は、ＦｃＲｎへのＦｃ結合を改変する１つ以上のＦｃ領域を含み得る。改変された結合は、増加した結合又は減少した結合であり得る。
【０３３９】
一実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、少なくとも１つ（任意選択的に両方）のＦｃ領域が、それが対応する天然免疫グロブリンより高い親和性及びアビディティでＦｃＲｎに結合するように１つ以上の修飾を含むＦｃドメインを含む。
【０３４０】
ＦｃＲｎ受容体への結合を増加させ、血清半減期を増加させるＦｃ置換が、米国特許出願公開第２００９／０１６３６９９号明細書に記載され、４３４Ｓ、４３４Ａ、４２８Ｌ、３０８Ｆ、２５９Ｉ、４２８Ｌ／４３４Ｓ、２５９Ｉ／３０８Ｆ、４３６Ｉ／４２８Ｌ、４３６Ｉ又はＶ／４３４Ｓ、４３６Ｖ／４２８Ｌ及び２５９Ｉ／３０８Ｆ／４２８Ｌを含むがこれらに限定されない。
【０３４１】
一実施形態において、Ｆｃ領域は、２５０位におけるトレオニン残基をグルタミン残基（Ｔ２５０Ｑ）で置換することによって修飾される。
【０３４２】
一実施形態において、Ｆｃ領域は、２５２位におけるメチオニン残基をチロシン残基（Ｍ２５２Ｙ）で置換することによって修飾される。
【０３４３】
一実施形態において、Ｆｃ領域は、２５４位におけるセリン残基をトレオニン残基（Ｓ２５４Ｔ）で置換することによって修飾される。
【０３４４】
一実施形態において、Ｆｃ領域は、２５６位におけるトレオニン残基をグルタミン酸残基（Ｔ２５６Ｅ）で置換することによって修飾される。
【０３４５】
一実施形態において、Ｆｃ領域は、３０７位におけるトレオニン残基をアラニン残基（Ｔ３０７Ａ）で置換することによって修飾される。
【０３４６】
一実施形態において、Ｆｃ領域は、３０７位におけるトレオニン残基をプロリン残基（Ｔ３０７Ｐ）で置換することによって修飾される。
【０３４７】
一実施形態において、Ｆｃ領域は、３０８位におけるバリン残基をシステイン残基（Ｖ３０８Ｃ）で置換することによって修飾される。
【０３４８】
一実施形態において、Ｆｃ領域は、３０８位におけるバリン残基をフェニルアラニン残基（Ｖ３０８Ｆ）で置換することによって修飾される。
【０３４９】
一実施形態において、Ｆｃ領域は、３０８位におけるバリン残基をプロリン残基（Ｖ３０８Ｐ）で置換することによって修飾される。
【０３５０】
一実施形態において、Ｆｃ領域は、３１１位におけるグルタミン残基をアラニン残基（Ｑ３１１Ａ）で置換することによって修飾される。
【０３５１】
一実施形態において、Ｆｃ領域は、３１１位におけるグルタミン残基をアルギニン残基（Ｑ３１１Ｒ）で置換することによって修飾される。
【０３５２】
一実施形態において、Ｆｃ領域は、４２８位におけるメチオニン残基をロイシン残基（Ｍ４２８Ｌ）で置換することによって修飾される。
【０３５３】
一実施形態において、Ｆｃ領域は、４３３位におけるヒスチジン残基をリジン残基（Ｈ４３３Ｋ）で置換することによって修飾される。
【０３５４】
一実施形態において、Ｆｃ領域は、４３４位におけるアスパラギン残基をフェニルアラニン残基（Ｎ４３４Ｆ）で置換することによって修飾される。
【０３５５】
一実施形態において、Ｆｃ領域は、４３４位におけるアスパラギン残基をチロシン残基（Ｎ４３４Ｙ）で置換することによって修飾される。
【０３５６】
一実施形態において、Ｆｃ領域は、２５２位におけるメチオニン残基をチロシン残基で、２５４位におけるセリン残基をトレオニン残基で、且つ２５６位におけるトレオニン残基をグルタミン酸残基（Ｍ２５２Ｙ／Ｓ２５４Ｔ／Ｔ２５６Ｅ）で置換することによって修飾される。
【０３５７】
一実施形態において、Ｆｃ領域は、３０８位におけるバリン残基をプロリン残基で、且つ４３４位におけるアスパラギン残基をチロシン残基（Ｖ３０８Ｐ／Ｎ４３４Ｙ）で置換することによって修飾される。
【０３５８】
一実施形態において、Ｆｃ領域は、２５２位におけるメチオニン残基をチロシン残基で、２５４位におけるセリン残基をトレオニン残基で、２５６位におけるトレオニン残基をグルタミン酸残基で、４３３位におけるヒスチジン残基をリジン残基で、且つ４３４位におけるアスパラギン残基をフェニルアラニン残基（Ｍ２５２Ｙ／Ｓ２５４Ｔ／Ｔ２５６Ｅ／Ｈ４３３Ｋ／Ｎ４３４Ｆ）で置換することによって修飾される。
【０３５９】
上に列挙される修飾のいずれかが組み合わされて、ＦｃＲｎ結合を改変し得ることが理解されるであろう。
【０３６０】
一実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、１つ又は両方のＦｃ領域が、Ｆｃドメインが対応する天然免疫グロブリンより低い親和性及びアビディティでＦｃＲｎに結合するように１つ以上の修飾を含むＦｃドメインを含む。
【０３６１】
一実施形態において、Ｆｃ領域は、３１０位及び／又は４３５位において、ヒスチジン以外の任意のアミノ酸残基を含む。
【０３６２】
ＢＣＭＡ結合分子は、１つ又は両方のＦｃ領域が、ＦｃγＲＩＩｂへのその結合を増加させる１つ以上の修飾を含むＦｃドメインを含み得る。ＦｃγＲＩＩｂは、ヒトにおける唯一の阻害性受容体及びＢ細胞に見られる唯一のＦｃ受容体である。
【０３６３】
一実施形態において、Ｆｃ領域は、２３８位におけるプロリン残基をアスパラギン酸残基（Ｐ２３８Ｄ）で置換することによって修飾される。
【０３６４】
一実施形態において、Ｆｃ領域は、２５８位におけるグルタミン酸残基をアラニン残基（Ｅ２５８Ａ）で置換することによって修飾される。
【０３６５】
一実施形態において、Ｆｃ領域は、２６７位におけるセリン残基をアラニン残基（Ｓ２６７Ａ）で置換することによって修飾される。
【０３６６】
一実施形態において、Ｆｃ領域は、２６７位におけるセリン残基をグルタミン酸残基（Ｓ２６７Ｅ）で置換することによって修飾される。
【０３６７】
一実施形態において、Ｆｃ領域は、３２８位におけるロイシン残基をフェニルアラニン残基（Ｌ３２８Ｆ）で置換することによって修飾される。
【０３６８】
一実施形態において、Ｆｃ領域は、２５８位におけるグルタミン酸残基をアラニン残基で、且つ２６７位におけるセリン残基をアラニン残基（Ｅ２５８Ａ／Ｓ２６７Ａ）で置換することによって修飾される。
【０３６９】
一実施形態において、Ｆｃ領域は、２６７位におけるセリン残基をグルタミン酸残基で、且つ３２８位におけるロイシン残基をフェニルアラニン残基（Ｓ２６７Ｅ／Ｌ３２８Ｆ）で置換することによって修飾される。
【０３７０】
上に列挙される修飾のいずれかが組み合わされて、ＦｃγＲＩＩｂ結合を増加させ得ることが理解されるであろう。
【０３７１】
一実施形態において、ＦｃγＲへの減少した結合を示すＦｃドメインを含むＢＣＭＡ結合分子が提供される。
【０３７２】
一実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、１つ又は両方のＦｃ領域が、ＦｃγＲへのＦｃ結合を減少させる１つ以上の修飾を含むＦｃドメインを含む。
【０３７３】
Ｆｃドメインは、ＩｇＧ１に由来し得る。
【０３７４】
一実施形態において、Ｆｃ領域は、２３４位におけるロイシン残基をアラニン残基（Ｌ２３４Ａ）で置換することによって修飾される。
【０３７５】
一実施形態において、Ｆｃ領域は、２３５位におけるロイシン残基をアラニン残基（Ｌ２３５Ａ）で置換することによって修飾される。
【０３７６】
一実施形態において、Ｆｃ領域は、２３６位におけるグリシン残基をアルギニン残基（Ｇ２３６Ｒ）で置換することによって修飾される。
【０３７７】
一実施形態において、Ｆｃ領域は、２９７位におけるアスパラギン残基をアラニン残基（Ｎ２９７Ａ）又はグルタミン残基（Ｎ２９７Ｑ）で置換することによって修飾される。
【０３７８】
一実施形態において、Ｆｃ領域は、２９８位におけるセリン残基をアラニン残基（Ｓ２９８Ａ）で置換することによって修飾される。
【０３７９】
一実施形態において、Ｆｃ領域は、３２８位におけるロイシン残基をアルギニン残基（Ｌ３２８Ｒ）で置換することによって修飾される。
【０３８０】
一実施形態において、Ｆｃ領域は、２３４位におけるロイシン残基をアラニン残基で、且つ２３５位におけるロイシン残基をアラニン残基（Ｌ２３４Ａ／Ｌ２３５Ａ）で置換することによって修飾される。
【０３８１】
実施形態において、Ｆｃ領域は、２３４位におけるフェニルアラニン残基をアラニン残基で、且つ２３５位におけるロイシン残基をアラニン残基（Ｆ２３４Ａ／Ｌ２３５Ａ）で置換することによって修飾される。
【０３８２】
一実施形態において、Ｆｃ領域は、２３６位におけるグリシン残基をアルギニン残基で、且つ３２８位におけるロイシン残基をアルギニン残基（Ｇ２３６Ｒ／Ｌ３２８Ｒ）で置換することによって修飾される。
【０３８３】
上に列挙される修飾のいずれかが組み合わされて、ＦｃγＲ結合を減少させ得ることが理解されるであろう。
【０３８４】
一実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、１つ又は両方のＦｃ領域が、ＦｃγＲＩＩへのＦｃの結合に影響を与えずにＦｃγＲＩＩＩａへのＦｃ結合を減少させる１つ以上の修飾を含むＦｃドメインを含む。
【０３８５】
一実施形態において、Ｆｃ領域は、２３９位におけるセリン残基をアラニン残基（Ｓ２３９Ａ）で置換することによって修飾される。
【０３８６】
一実施形態において、Ｆｃ領域は、２６９位におけるグルタミン酸残基をアラニン残基（Ｅ２６９Ａ）で置換することによって修飾される。
【０３８７】
一実施形態において、Ｆｃ領域は、２９３位におけるグルタミン酸残基をアラニン残基（Ｅ２９３Ａ）で置換することによって修飾される。
【０３８８】
一実施形態において、Ｆｃ領域は、２９６位におけるチロシン残基をフェニルアラニン残基（Ｙ２９６Ｆ）で置換することによって修飾される。
【０３８９】
一実施形態において、Ｆｃ領域は、３０３位におけるバリン残基をアラニン残基（Ｖ３０３Ａ）で置換することによって修飾される。
【０３９０】
一実施形態において、Ｆｃ領域は、３２７位におけるアラニン残基をグリシン残基（Ａ３２７Ｇ）で置換することによって修飾される。
【０３９１】
一実施形態において、Ｆｃ領域は、３３８位におけるリジン残基をアラニン残基（Ｋ３３８Ａ）で置換することによって修飾される。
【０３９２】
一実施形態において、Ｆｃ領域は、３７６位におけるアスパラギン酸残基をアラニン残基（Ｄ３７６Ａ）で置換することによって修飾される。
【０３９３】
上に列挙される修飾のいずれかが組み合わされて、ＦｃγＲＩＩＩａ結合を減少させ得ることが理解されるであろう。
【０３９４】
減少したＦｃＲ結合を有するＦｃ領域変異は、「ＦｃγＲ除去変異」、「ＦｃγＲサイレンシング変異」又は「Ｆｃノックアウト（ＦｃＫＯ又はＫＯ）」変異と呼ばれ得る。ある治療用途では、さらなる作用機序を避けるために、Ｆｃγ受容体（例えば、ＦｃγＲ１、ＦｃγＲＩＩａ、ＦｃγＲＩＩｂ、ＦｃγＲＩＩＩａ）の１つ以上又は全てへのＦｃドメインの通常の結合を減少させるか又は除去することが望ましい。すなわち、例えば多くの実施形態において、特にＣＤ３に１価的に結合するＢＢＭの使用において、ＦｃγＲＩＩＩａ結合を除去して、ＡＤＣＣ活性をなくすか又は実質的に低下させることが一般に望ましい。ある実施形態において、本明細書に記載されるＢＣＭＡ結合分子Ｆｃ領域の少なくとも１つは、１つ以上のＦｃγ受容体除去変異を含む。ある実施形態において、Ｆｃ領域は、両方とも１つ以上のＦｃγ受容体除去変異を含む。これらの除去変異は、表５に示され、それぞれが、独立して及び任意選択的に、含まれるか又は除外され得、ある態様は、Ｇ２３６Ｒ／Ｌ３２８Ｒ、Ｅ２３３Ｐ／Ｌ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２３９Ｋ、Ｅ２３３Ｐ／Ｌ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２６７Ｋ、Ｅ２３３Ｐ／Ｌ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２３９Ｋ／Ａ３２７Ｇ、Ｅ２３３Ｐ／Ｌ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２６７Ｋ／Ａ３２７Ｇ及びＥ２３３Ｐ／Ｌ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ（「ｄｅｌ」は、欠失を示し、例えば、Ｇ２３６ｄｅｌは、２３６位におけるグリシンの欠失を指す）からなる群から選択される除去変異を用いる。本明細書において言及される除去変異が、ＦｃγＲ結合を除去するが、一般にＦｃＲｎ結合を除去しないことが留意されるべきである。
【０３９５】
【表７４】
2021525715.tif 000076
【０３９６】
ある実施形態において、本開示の多重特異性ＢＣＭＡ結合分子は、第１のＦｃ領域及び第２のＦｃ領域を含む。ある実施形態において、第１のＦｃ領域及び／又は第２のＦｃ領域は、以下の突然変異：Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３６ｄｅｌ及びＳ２６７Ｋを含み得る。
【０３９７】
ヒトＩｇＧ１のＦｃドメインは、Ｆｃγ受容体への最も高い結合を有し、したがってヘテロ二量体抗体の骨格中の定常ドメイン（又はＦｃドメイン）がＩｇＧ１である場合、除去変異が使用され得る。
【０３９８】
代わりに又はＩｇＧ１バックグラウンドにおける除去変異に加えて、グリコシル化２９７位における突然変異、例えば２９７位のアスパラギン残基を、アラニン残基（Ｎ２９７Ａ）又はグルタミン残基（Ｎ２９７Ｑ）で置換することにより、例えばＦｃγＲＩＩＩａへの結合を有意に除去することができる。ヒトＩｇＧ２及びＩｇＧ４は、Ｆｃγ受容体への自然に減少した結合を有し、したがって、それらの骨格が、除去変異を伴うか又は伴わずに使用され得る。
【０３９９】
７．４．１．２．改変された補体結合を有するＦｃドメイン
ＢＣＭＡ結合分子は、１つ又は両方のＦｃ領域が、補体へのＦｃ結合を改変する１つ以上の修飾を含むＦｃドメインを含み得る。改変された補体結合は、増加した結合又は減少した結合であり得る。
【０４００】
一実施形態において、Ｆｃ領域は、Ｃ１ｑへのその結合を減少させる１つ以上の修飾を含む。古典的補体経路の開始は、抗原結合ＩｇＧ及びＩｇＭのＣＨ２ドメインへの六量体Ｃ１ｑタンパク質の結合から開始する。
【０４０１】
一実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、１つ又は両方のＦｃ領域が、Ｃ１ｑへのＦｃ結合を減少させる１つ以上の修飾を含むＦｃドメインを含む。
【０４０２】
一実施形態において、Ｆｃ領域は、２３４位におけるロイシン残基をアラニン残基（Ｌ２３４Ａ）で置換することによって修飾される。
【０４０３】
一実施形態において、Ｆｃ領域は、２３５位におけるロイシン残基をアラニン残基（Ｌ２３５Ａ）で置換することによって修飾される。
【０４０４】
一実施形態において、Ｆｃ領域は、２３５位におけるロイシン残基をグルタミン酸残基（Ｌ２３５Ｅ）で置換することによって修飾される。
【０４０５】
一実施形態において、Ｆｃ領域は、２３７位におけるグリシン残基をアラニン残基（Ｇ２３７Ａ）で置換することによって修飾される。
【０４０６】
一実施形態において、Ｆｃ領域は、３２２位におけるリジン残基をアラニン残基（Ｋ３２２Ａ）で置換することによって修飾される。
【０４０７】
一実施形態において、Ｆｃ領域は、３３１位におけるプロリン残基をアラニン残基（Ｐ３３１Ａ）で置換することによって修飾される。
【０４０８】
一実施形態において、Ｆｃ領域は、３３１位におけるプロリン残基をセリン残基（Ｐ３３１Ｓ）で置換することによって修飾される。
【０４０９】
一実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、ＩｇＧ４に由来するＦｃドメインを含む。ＩｇＧ４は、元々、ＩｇＧ１より低い補体活性化プロファイルを有するだけでなく、ＦｃγＲのより弱い結合も有する。したがって、一実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、ＩｇＧ４  Ｆｃドメインを含み、ＦｃγＲ結合を増加させる１つ以上の修飾も含む。
【０４１０】
上に列挙される修飾のいずれかが組み合わされて、Ｃ１ｑ結合を減少させ得ることが理解されるであろう。
【０４１１】
７．４．１．３．改変されたジスルフィド構造を有するＦｃドメイン
ＢＣＭＡ結合分子は、システイン残基を生成及び／又は除去するための１つ以上の修飾を含むＦｃドメインを含み得る。システイン残基は、ポリペプチドモノマーの個々の対間にジスルフィド架橋を形成することにより、Ｆｃベースの多重特異性結合分子の自発的集合において重要な役割を果たす。したがって、システイン残基の数及び／又は位置を改変することにより、ＢＣＭＡ結合分子の構造を修飾して、向上した治療特性を有するタンパク質を産生することが可能である。
【０４１２】
本開示のＢＣＭＡ結合分子は、１つ又は両方のＦｃ領域、例えば両方のＦｃ領域が、３０９位にシステイン残基を含むＦｃドメインを含み得る。一実施形態において、３０９位におけるシステイン残基は、修飾によって生成され、例えばＩｇＧ１に由来するＦｃドメインの場合、３０９位におけるロイシン残基がシステイン残基（Ｌ３０９Ｃ）で置換され、ＩｇＧ２に由来するＦｃドメインの場合、３０９位におけるバリン残基がシステイン残基（Ｖ３０９Ｃ）で置換される。
【０４１３】
一実施形態において、Ｆｃ領域は、３０８位におけるバリン残基をシステイン残基（Ｖ３０８Ｃ）で置換することによって修飾される。
【０４１４】
一実施形態において、ヒンジ領域における２つのジスルフィド結合が、コアヒンジ配列ＣＰＰＣ（配列番号４２２）をＳＰＰＳ（配列番号４２３）に突然変異させることによって除去される。
【０４１５】
７．４．１．４．改変されたグリコシル化を有するＦｃドメイン
特定の態様において、対応する免疫グロブリンより少ないグリコシル化部位を含む、向上した製造可能性を有するＢＣＭＡ結合分子が提供される。これらのタンパク質は、より単純な翻訳後グリコシル化パターンを有し、したがってより単純であり、製造するのにより安価である。
【０４１６】
一実施形態において、ＣＨ２ドメインにおけるグリコシル化部位は、２９７位におけるアスパラギン残基をアラニン残基（Ｎ２９７Ａ）又はグルタミン残基（Ｎ２９７Ｑ）で置換することによって除去される。向上した製造可能性に加えて、これらのグリコシル突然変異体は、本明細書において上述されるＦｃγＲ結合も減少させる。
【０４１７】
ある実施形態において、減少した量のフコシル残基を有する低フコシル化された（ｈｙｐｏｆｕｃｏｓｙｌａｔｅｄ）抗体又は増加した二分ＧｌｃＮａｃ構造を有する抗体などの、改変されたタイプのグリコシル化を有するＢＣＭＡ結合分子が作製され得る。このような改変されたグリコシル化パターンは、抗体のＡＤＣＣ能力を向上させることが実証されている。このような炭水化物修飾は、例えば、改変されたグリコシル化機構を有する宿主細胞内でＢＣＭＡ結合分子を発現することによって達成され得る。改変されたグリコシル化機構を有する細胞は、当技術分野において記載されており、ＢＣＭＡ結合分子を内部で発現して、それによって改変されたグリコシル化を有するＢＣＭＡ結合分子を産生する宿主細胞として使用され得る。例えば、Ｈａｎｇらによる欧州特許第１，１７６，１９５号明細書には、フコシルトランスフェラーゼをコードする機能的に破壊されたＦＵＴ８遺伝子を有する細胞株が記載されており、このような細胞株において発現される抗体は、低フコシル化（ｈｙｐｏｆｕｃｏｓｙｌａｔｉｏｎ）を示すようになっている。ＰｒｅｓｔａによるＰＣＴ公報国際公開第０３／０３５８３５号パンフレットには、フコースをＡｓｎ（２９７）連結炭水化物に結合する低下した能力を有し、該当する宿主細胞において発現される抗体の低フコシル化ももたらす、変異型ＣＨＯ細胞株、Ｌｅｃｌ３細胞が記載されている（Ｓｈｉｅｌｄｓ  ｅｔ  ａｌ．，２００２，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７７：２６７３３−２６７４０も参照）。ＵｍａｎａらによるＰＣＴ公報国際公開第９９／５４３４２号パンフレットには、糖タンパク質修飾グリコシルトランスフェラーゼ（例えば、β（１，４）−ＮアセチルグルコサミニルトランスフェラーゼＩＩＩ（ＧｎＴＩＩＩ））を発現するように操作された細胞株が記載されており、操作された細胞株において発現される抗体は、抗体の増大したＡＤＣＣ活性をもたらす増加した二分ＧｌｃＮａｃ構造を示すようになっている（Ｕｍａｎａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．１７：１７６−１８０，１９９９も参照）。
【０４１８】
７．４．１．５．Ｆｃヘテロ二量体化
多くの多重特異性分子形式は、天然免疫グロブリンと異なり、非同一抗原結合ドメイン（又はその部分、例えばＦａｂのＶＨ又はＶＨ−ＣＨ１）に作動可能に連結される、２つのＦｃ領域間の二量体化を伴う。Ｆｃドメインを形成するための２つのＦｃ領域の不十分なヘテロ二量体化は、常に所望の多重特異性分子の収率を増加させることの障害になっており、精製にとって難しい問題である。当技術分野において利用可能な様々な手法は、例えば、欧州特許出願公開第１８７０４５９Ａ１号明細書；米国特許第５，５８２，９９６号明細書；米国特許第５，７３１，１６８号明細書；米国特許第５，９１０，５７３号明細書；米国特許第５，９３２，４４８号明細書；米国特許第６，８３３，４４１号明細書；米国特許第７，１８３，０７６号明細書；米国特許出願公開第２００６２０４４９３Ａ１号明細書；及びＰＣＴ公開番号国際公開第２００９／０８９００４Ａ１号パンフレットに開示されるように、ＢＣＭＡ結合分子（及び特に本開示のＭＢＭ）中に存在し得るＦｃ領域の二量体化を促進するのに使用され得る。
【０４１９】
本開示は、Ｆｃヘテロ二量体を含むＦｃドメインを含むＢＣＭＡ結合分子を提供する。ヘテロ二量体化手法を用いて、異なるＡＢＤ（又はその部分、例えばＦａｂのＶＨ又はＶＨ−ＣＨ１）に作動可能に連結されるＦｃ領域の二量体化を促進し、同じＡＢＤ又はその部分に作動可能に連結されるＦｃ領域の二量体化を低減する。典型的に、Ｆｃヘテロ二量体中の各Ｆｃ領域は、抗体のＣＨ３ドメインを含む。ＣＨ３ドメインは、前の節に記載されるように、任意のアイソタイプ、クラス又はサブクラス、ある場合にはＩｇＧ（ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３及びＩｇＧ４）クラスの抗体の定常領域に由来する。
【０４２０】
典型的に、ＢＣＭＡ結合分子は、ＣＨ３ドメインに加えて、ＣＨ１ドメイン、ＣＨ２ドメイン、ヒンジ領域、ＶＨドメイン、ＶＬドメイン、ＣＤＲ及び／又は本明細書に記載される抗原結合フラグメントなどの他の抗体フラグメントを含む。ある実施形態において、２つのヘテロポリペプチドは、二重特異性又は多重特異性分子を形成する２つの重鎖である。ＣＨ３ドメインにおける２つの異なる重鎖のヘテロ二量体化は、所望の抗体又は抗体様分子を生じさせる一方、同一の重鎖のホモ二量体化は、所望の抗体又は分子の収率を低下させる。例示的な実施形態において、２つ以上のヘテロポリペプチド鎖は、ＣＨ３ドメインを含み、且つ本開示の上述される多重特異性分子形式のいずれかの分子を形成する２つの鎖を含む。一実施形態において、ＣＨ３ドメインを含む２つのヘテロポリペプチド鎖は、非修飾鎖と比べて、ポリペプチドのヘテロ二量体会合に有利に作用する修飾を含む。修飾手法の様々な例が以下の表６及び第７．４．１．５．１〜７．４．１．５．７節に示されている。
【０４２１】
【表７５】
2021525715.tif 000077
【０４２２】
【表７６】
2021525715.tif 000078
【０４２３】
【表７７】
2021525715.tif 000079
【０４２４】
【表７８】
2021525715.tif 000080
【０４２５】
【表７９】
2021525715.tif 000081
【０４２６】
【表８０】
2021525715.tif 000082
【０４２７】
【表８１】
2021525715.tif 000083
【０４２８】
【表８２】
2021525715.tif 000084
【０４２９】
７．４．１．５．１．立体変異
ＢＣＭＡ結合分子は、Ｆｃドメインの定常ドメインの１つ以上に対する、例えばＣＨ３ドメインに対する１つ以上、例えば複数の修飾を含み得る。一例において、本開示のＢＣＭＡ結合分子は、抗体の重鎖定常ドメイン、例えばＣＨ２又はＣＨ３ドメインをそれぞれ含む２つのポリペプチドを含む。一例において、ＢＣＭＡ結合分子の２つの重鎖定常ドメイン、例えばＣＨ２又はＣＨ３ドメインは、２つの鎖間のヘテロ二量体会合を可能にする１つ以上の修飾を含む。一態様において、１つ以上の修飾は、２つの重鎖のＣＨ２ドメイン上に配置される。一態様において、１つ以上の修飾は、ＢＣＭＡ結合分子の少なくとも２つのポリペプチドのＣＨ３ドメイン上に配置される。
【０４３０】
Ｆｃヘテロ二量体化のための１つの機構は、一般に、当技術分野において「ノブ及びホール」、又は「ノブ・イン・ホール」、又は「ノブ・イントゥ・ホール」と呼ばれる。これらの用語は、例えば、Ｒｉｄｇｗａｙ  ｅｔ  ａｌ．，１９９６，Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  ９（７）：６１７；Ａｔｗｅｌｌ  ｅｔ  ａｌ．，１９９７，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２７０：２６；米国特許第８，２１６，８０５号明細書に記載されるように、Ｆｃホモ二量体よりＦｃヘテロ二量体の形成に有利に作用するように立体的影響を生じるアミノ酸突然変異を指す。ノブ・イン・ホール突然変異は、ヘテロ二量体化を改善する他の手法と組み合わされ得る。
【０４３１】
一態様において、重鎖定常ドメインを含むＢＣＭＡ結合分子の第１のポリペプチドに対する１つ以上の修飾は、「ノブ」を生成することができ、ＢＣＭＡ結合分子の第２のポリペプチドに対する１つ以上の修飾は、「ホール」を生成し、重鎖定常ドメインを含むＢＣＭＡ結合分子のポリペプチドのヘテロ二量体化が「ノブ」を「ホール」と結び付けさせる（例えば、相互作用させる、例えば第１のポリペプチドのＣＨ２ドメインが第２のポリペプチドのＣＨ２ドメインと相互作用するか、又は第１のポリペプチドのＣＨ３ドメインが第２のポリペプチドのＣＨ３ドメインと相互作用する）ようになっている。ノブは、重鎖定常ドメインを含むＢＣＭＡ結合分子の第１のポリペプチドの境界から突出し、したがってヘテロ多量体を安定させ、それにより例えばホモ多量体形成よりヘテロ多量体形成に有利に作用するように、重鎖定常ドメインを含むＢＣＭＡ結合分子の第２のポリペプチドとの境界における相補的な「ホール」に位置決め可能である。ノブは、元の境界に存在し得るか、又は（例えば、境界をコードする核酸を改変することによって）合成的に導入され得る。ノブの形成のためのインポート残基は、一般に、天然アミノ酸残基であり、アルギニン（Ｒ）、フェニルアラニン（Ｆ）、チロシン（Ｙ）及びトリプトファン（Ｗ）から選択され得る。ある場合には、トリプトファン及びチロシンが選択される。実施形態において、突起の形成のための元の残基は、小さい側鎖容量を有し、例えばアラニン、アスパラギン、アスパラギン酸、グリシン、セリン、トレオニン又はバリンである。
【０４３２】
「ホール」は、重鎖定常ドメインを含むＢＣＭＡ結合分子の第２のポリペプチドの境界から陥凹しており、したがって重鎖定常ドメインを含むＢＣＭＡ結合分子の第１のポリペプチドの隣接する相互作用表面上の対応するノブに適合する少なくとも１つのアミノ酸側鎖を含む。ホールは、元の境界に存在し得るか、又は（例えば、境界をコードする核酸を改変することによって）合成的に導入され得る。ホールの形成のためのインポート残基は、通常、天然アミノ酸残基であり、ある場合にはアラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）及びバリン（Ｖ）から選択される。一実施形態において、アミノ酸残基は、セリン、アラニン又はトレオニンである。別の実施形態において、ホールの形成のための元の残基は、大きい側鎖容量を有し、例えばチロシン、アルギニン、フェニルアラニン又はトリプトファンである。
【０４３３】
実施形態において、第１のＣＨ３ドメインは、残基３６６、４０５又は４０７において修飾されて、「ノブ」又はホール」（上述されるような）のいずれかを生成し、第１のＣＨ３ドメインとともにヘテロ二量体する第２のＣＨ３ドメインは、残基３６６が第１のＣＨ３ドメインにおいて修飾される場合、残基４０７、残基４０５が第１のＣＨ３ドメインにおいて修飾される場合、残基３９４又は残基４０７が第１のＣＨ３ドメインにおいて修飾されて、第１のＣＨ３ドメインの「ノブ」又は「ホール」に相補的な「ホール」又は「ノブ」を生成する場合、残基３６６において修飾される。
【０４３４】
別の実施形態において、第１のＣＨ３ドメインは、残基３６６において修飾され、第１のＣＨ３ドメインとともにヘテロ二量体化する第２のＣＨ３ドメインは、残基３６６、３６８及び／又は４０７において修飾されて、第１のＣＨ３ドメインの「ノブ」又は「ホール」に相補的な「ホール」又は「ノブ」を生成する。一実施形態において、第１のＣＨ３ドメインに対する修飾は、３６６位におけるチロシン（Ｙ）残基を導入する。一実施形態において、第１のＣＨ３に対する修飾は、Ｔ３６６Ｙである。一実施形態において、第１のＣＨ３ドメインに対する修飾は、３６６位におけるトリプトファン（Ｗ）残基を導入する。一実施形態において、第１のＣＨ３に対する修飾は、Ｔ３６６Ｗである。ある実施形態において、３６６位において修飾された第１のＣＨ３ドメインとともにヘテロ二量体化する、第２のＣＨ３ドメインに対する修飾（例えば、３６６位において導入されたチロシン（Ｙ）又はトリプトファン（Ｗ）を有する、例えば修飾Ｔ３６６Ｙ又はＴ３６６Ｗを含む）は、３６６位における修飾、３６８位における修飾及び４０７位における修飾を含む。ある実施形態において、３６６位における修飾は、セリン（Ｓ）残基を導入し、３６８位における修飾は、アラニン（Ａ）を導入し、４０７位における修飾は、バリン（Ｖ）を導入する。ある実施形態において、修飾は、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ及びＹ４０７Ｖを含む。一実施形態において、多重特異性分子の第１のＣＨ３ドメインは、修飾Ｔ３６６Ｙを含み、第１のＣＨ３ドメインとともにヘテロ二量体化する第２のＣＨ３ドメインは、修飾Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ及びＹ４０７Ｖを含むか又は逆も同様である。一実施形態において、多重特異性分子の第１のＣＨ３ドメインは、修飾Ｔ３６６Ｗを含み、第１のＣＨ３ドメインとともにヘテロ二量体化する第２のＣＨ３ドメインは、修飾Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ及びＹ４０７Ｖを含むか又は逆も同様である。
【０４３５】
さらなる立体又は「歪曲」（例えば、ノブ・イン・ホール）修飾は、ＰＣＴ公開番号国際公開第２０１４／１４５８０６号パンフレット（例えば、国際公開第２０１４／１４５８０６号パンフレットの図３、図４及び図１２）、ＰＣＴ公開番号国際公開第２０１４／１１０６０１号パンフレット及びＰＣＴ公開番号国際公開第２０１６／０８６１８６号パンフレット、国際公開第２０１６／０８６１８９号パンフレット、国際公開第２０１６／０８６１９６号パンフレット及び国際公開第２０１６／１８２７５１号パンフレットに記載されている。ＫＩＨ変異体の例は、Ｓ３６４Ｋ及びＥ３５７Ｑ修飾を含む第２の定常鎖と対合された、Ｌ３６８Ｄ及びＫ３７０Ｓ修飾を含む第１の定常鎖を含む。
【０４３６】
本開示のＢＣＭＡ結合分子のいずれかにおいて使用するのに好適なさらなるノブ・イン・ホール修飾対は、例えば、国際公開第１９９６／０２７０１１号パンフレット及びＭｅｒｃｈａｎｔ  ｅｔ  ａｌ．，１９９８，Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．，１６：６７７−６８１にさらに記載されている。
【０４３７】
さらなる実施形態において、ＣＨ３ドメインは、システイン残基の対を導入するようにさらに修飾され得る。理論によって拘束されるものではないが、ジスルフィド結合を形成することが可能なシステイン残基の対の導入は、対合したＣＨ３ドメインを含むヘテロ二量体化ＢＣＭＡ結合分子に安定性を与えるものと考えられる。ある実施形態において、第１のＣＨ３ドメインは、３５４位におけるシステインを含み、第１のＣＨ３ドメインとともにヘテロ二量体化する第２のＣＨ３ドメインは、３４９位におけるシステインを含む。ある実施形態において、第１のＣＨ３ドメインは、３５４位におけるシステイン（例えば、修飾Ｓ３５４Ｃを含む）及び３６６位におけるチロシン（Ｙ）（例えば、修飾Ｔ３６６Ｙを含む）を含み、第１のＣＨ３ドメインとともにヘテロ二量体化する第２のＣＨ３ドメインは、３４９位におけるシステイン（例えば、修飾Ｙ３４９Ｃを含む）、３６６位におけるセリン（例えば、修飾Ｔ３６６Ｓを含む）、３６８位におけるアラニン（例えば、修飾Ｌ３６８Ａを含む）及び４０７位におけるバリン（例えば、修飾Ｙ４０７Ｖを含む）を含む。ある実施形態において、第１のＣＨ３ドメインは、３５４位におけるシステイン（例えば、修飾Ｓ３５４Ｃを含む）及び３６６位におけるトリプトファン（Ｗ）（例えば、修飾Ｔ３６６Ｗを含む）を含み、第１のＣＨ３ドメインとともにヘテロ二量体化する第２のＣＨ３ドメインは、３４９位におけるシステイン（例えば、修飾Ｙ３４９Ｃを含む）、３６６位におけるセリン（例えば、修飾Ｔ３６６Ｓを含む）、３６８位におけるアラニン（例えば、修飾Ｌ３６８Ａを含む）及び４０７位におけるバリン（例えば、修飾Ｙ４０７Ｖを含む）を含む。
【０４３８】
ヘテロ二量体の生成に利用されるさらなる機構は、Ｇｕｎａｓｅｋａｒａｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１０，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２８５（２５）：１９６３７に記載されるように「静電ステアリング（ｅｌｅｃｔｒｏｓｔａｔｉｃ  ｓｔｅｅｒｉｎｇ）」と呼ばれることがある。これは、本明細書において「電荷対」と呼ばれることがある。この実施形態において、静電学を用いて、ヘテロ二量体化に向けて形成を歪曲させる。当業者が理解するように、これは、ｐＩ、したがって精製に影響を与えることもあり、したがってある場合にはｐＩ変異と見なされ得る。しかしながら、これらがヘテロ二量体化を促すために生成され、精製手段として使用されなかったため、それらは、「立体変異」として分類される。これらとしては、限定はされないが、Ｄ２２１Ｒ／Ｐ２２８Ｒ／Ｋ４０９Ｒと対合されたＤ２２１Ｅ／Ｐ２２８Ｅ／Ｌ３６８Ｅ及びＣ２２０Ｒ／Ｅ２２４Ｒ／Ｐ２２８Ｒ／Ｋ４０９Ｒと対合されたＣ２２０Ｅ／Ｐ２２８Ｅ／３６８Ｅが挙げられる。
【０４３９】
さらなる変異が、本明細書に概説されるｐＩ変異又は米国特許出願公開第２０１２／０１４９８７６号明細書の図３７に示される他の立体変異などの他の変異と、任意の量で任意選択的に及び独立して組み合わされ得る。
【０４４０】
ある実施形態において、本明細書に概説される立体変異は、任意選択的に及び独立して、いずれかのｐＩ変異（又はＦｃ変異、ＦｃＲｎ変異などの他の変異）を一方又は両方のＦｃ領域に組み込むことができ、独立して及び任意選択的に、本開示のＢＣＭＡ結合分子に含めるか又は除外することができる。
【０４４１】
好適な歪曲変異のリストが、多くの実施形態において特に有用ないくつかの対を示す表７に見出される。多くの実施形態において特に有用なのは、Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ：Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ；Ｌ３６８Ｅ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ；Ｔ４１１Ｔ／Ｅ３６０Ｅ／Ｑ３６２Ｅ：Ｄ４０１Ｋ；Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｌ；及びＫ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑを含むがこれらに限定されないセットの対である。命名法に関して、対「Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ：Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ」は、Ｆｃ領域の一方が、二重変異セットＳ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑを有し、他方が、二重変異セットＬ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓを有することを意味する。
【０４４２】
【表８３】
2021525715.tif 000085
【０４４３】
【表８４】
2021525715.tif 000086
【０４４４】
【表８５】
2021525715.tif 000087
【０４４５】
【表８６】
2021525715.tif 000088
【０４４６】
【表８７】
2021525715.tif 000089
【０４４７】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、第１のＦｃ領域及び第２のＦｃ領域を含む。ある実施形態において、第１のＦｃ領域は、以下の突然変異：Ｌ３６８Ｄ及びＫ３７０Ｓを含み、第２のＦｃ領域は、以下の突然変異：Ｓ３６４Ｋ及びＥ３５７Ｑを含む。ある実施形態において、第１のＦｃ領域は、以下の突然変異：Ｓ３６４Ｋ及びＥ３５７Ｑを含み、第２のＦｃ領域は、以下の突然変異：Ｌ３６８Ｄ及びＫ３７０Ｓを含む。
【０４４８】
７．４．１．５．２．代替的なノブ及びホール：ＩｇＧヘテロ二量体化
対合したＣＨ３ドメインを含むＢＣＭＡ結合分子のポリペプチド鎖のヘテロ二量体化は、ＩｇＧ１抗体クラスに由来するＣＨ３ドメイン中に１つ以上の修飾を導入することによって増加され得る。一実施形態において、修飾は、第２のＣＨ３ドメイン中のＦ４０５Ｌ修飾と対合された１つのＣＨ３ドメインに対するＫ４０９Ｒ修飾を含む。さらなる修飾は、さらに又は代わりに、３６６、３６８、３７０、３９９、４０５、４０７及び４０９位にあり得る。ある場合には、このような修飾を含むポリペプチドのヘテロ二量体化は、還元条件下、例えば２５〜３７Ｃ、例えば２５Ｃ又は３７Ｃで１〜１０時間、例えば１．５〜５時間、例えば５時間にわたって１０〜１００ｍＭの２−ＭＥＡ（例えば、２５、５０又は１００ｍＭの２−ＭＥＡ）で行われる。
【０４４９】
本明細書に記載されるアミノ酸置換は、周知の技術を用いてＣＨ３ドメイン中に導入され得る（例えば、ＭｃＰｈｅｒｓｏｎ，ｅｄ．，１９９１、Ｄｉｒｅｃｔｅｄ  Ｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓ：ａ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ；Ａｄｅｌｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８３，ＤＮＡ，２：１８３を参照されたい）。
【０４５０】
ＩｇＧヘテロ二量体化手法は、例えば、国際公開第２００８／１１９３５３号パンフレット、国際公開第２０１１／１３１７４６号パンフレット及び国際公開第２０１３／０６０８６７号パンフレットにさらに記載されている。
【０４５１】
この節に記載される実施形態のいずれかにおいて、ＣＨ３ドメインは、第７．４．１．３節に記載されるように、システイン残基の対を導入するようにさらに修飾され得る。
【０４５２】
７．４．１．５．３．ｐＩ（等電点）変異
一般に、当業者によって理解されるように、ｐＩ変異の２つの一般的なカテゴリーがある：タンパク質のｐＩを増加させるもの（塩基性変化）及びタンパク質のｐＩを減少させるもの（酸性変化）。本明細書に記載されるように、これらの変異の全ての組合せが行われ得る：一方のＦｃ領域が、野生型又は野生型と顕著に異なるｐＩを示さない変異型であり得、他方が、より塩基性又はより酸性のいずれかであり得る。代わりに、各Ｆｃ領域が、１つがより塩基性に、１つがより酸性に変化され得る。
【０４５３】
ｐＩ変異の例示的な組合せが、表８に示される。本明細書に概説され、表８に示されるように、これらの変化が、ＩｇＧ１と比べて示されるが、全てのアイソタイプが、このように改変され得、アイソタイプハイブリッドも同様である。重鎖定常ドメインがＩｇＧ２−４に由来する場合、Ｒ１３３Ｅ及びＲ１３３Ｑも使用され得る。
【０４５４】
【表８８】
2021525715.tif 000090
【０４５５】
一実施形態において、例えば図１Ｃ、Ｇ、Ｈ、Ｏ、Ｐ及びＱの形式において、ｐＩ変異の組合せは、２０８Ｄ／２９５Ｅ／３８４Ｄ／４１８Ｅ／４２１Ｄ変異を含む１つのＦｃ領域（負のＦａｂ側）（ヒトＩｇＧ１と比べたとき、Ｎ２０８Ｄ／Ｑ２９５Ｅ／Ｎ３８４Ｄ／Ｑ４１８Ｅ／Ｎ４２１Ｄ）及び正に荷電したｓｃＦｖリンカー、例えばＬ３６を含む第２のＦｃ領域（正のｓｃＦｖ側）を有する（第７．４．３に記載されるように）。しかしながら、当業者によって理解されるように、第１のＦｃ領域は、２０８位を含むＣＨ１ドメインを含む。したがって、ＣＨ１ドメインを含まない構築物において（例えば、ドメインの１つとしてＣＨ１ドメインを利用しない抗体について、例えば図１Ｄ、Ｅ又はＦに示されるものなどの二重ｓｃＦｖ形式又は「ワンアーム（ｏｎｅ  ａｒｍｅｄ）」形式において）、例示的な負のｐＩ変異Ｆｃセットは、２９５Ｅ／３８４Ｄ／４１８Ｅ／４２１Ｄ変異（ヒトＩｇＧ１と比べたとき、Ｑ２９５Ｅ／Ｎ３８４Ｄ／Ｑ４１８Ｅ／Ｎ４２１Ｄ）を含む。
【０４５６】
ある実施形態において、第１のＦｃ領域は、表Ｂからの置換のセットを有し、第２のＦｃ領域は、荷電リンカーに連結される（例えば、第７．４．３節に記載されるものから選択される）。
【０４５７】
ある実施形態において、本開示のＢＣＭＡ結合分子は、第１のＦｃ領域及び第２のＦｃ領域を含む。ある実施形態において、第１のＦｃ領域は、以下の突然変異：Ｎ２０８Ｄ、Ｑ２９５Ｅ、Ｎ３８４Ｄ、Ｑ４１８Ｅ及びＮ４２１Ｄを含む。ある実施形態において、第２のＦｃ領域は、以下の突然変異：Ｎ２０８Ｄ、Ｑ２９５Ｅ、Ｎ３８４Ｄ、Ｑ４１８Ｅ及びＮ４２１Ｄを含む。
【０４５８】
７．４．１．５．４．アイソタイプ変異
さらに、本開示の多くの実施形態は、１つのＩｇＧアイソタイプから別のものへの特定の位置におけるｐＩアミノ酸の「取り込み」に依存し、したがって、望ましくない免疫原性が変異体に導入される可能性を低減するか又はなくす。これらのいくつかが、米国特許出願公開第２０１４／０３７００１３号明細書の図２１に示される。すなわち、ＩｇＧ１は、高いエフェクター機能を含む様々な理由から治療用抗体の一般的なアイソタイプである。しかしながら、ＩｇＧ１の重鎖定常領域は、ＩｇＧ２のものより高いｐＩを有する（８．１０対７．３１）。特定の位置でＩｇＧ２残基をＩｇＧ１骨格に導入することにより、得られるＦｃ領域のｐＩは低下（又は増加）され、さらに、より長い血清半減期を示す。例えば、ＩｇＧ１は、１３７位にグリシン（ｐＩ  ５．９７）を有し、ＩｇＧ２は、グルタミン酸（ｐＩ  ３．２２）を有し；グルタミン酸を取り込むと、得られるタンパク質のｐＩに影響を与える。以下に記載されるように、変異型抗体のｐＩに顕著な影響を与えるために、いくつかのアミノ酸置換が、一般に必要とされる。しかしながら、後述されるように、ＩｇＧ２分子の変化でさえ、血清半減期の増加を可能にすることが留意されるべきである。
【０４５９】
他の実施形態において、得られるタンパク質の全体的な荷電状態を低下させるため（例えば、より高いｐＩアミノ酸からより低いｐＩアミノ酸に変化させることによって）又はさらに後述されるように、安定性のために構造の調整を可能にするために、非アイソタイプのアミノ酸変化が行われる。
【０４６０】
さらに、２つの半抗体を含むＢＣＭＡ結合分子の重鎖及び軽鎖定常ドメインの両方をｐＩ操作することにより、各半抗体の有意な変化がみられる。２つの半抗体ｐＩが少なくとも０．５だけ異なることは、イオン交換クロマトグラフィー若しくは等電点電気泳動又は等電点に感受性の他の方法による分離を可能にし得る。
【０４６１】
７．４．１．５．５．ｐＩの計算
Ｆｃ領域及びＡＢＤ又はＡＢＤ鎖を含む半抗体のｐＩは、変異型重鎖定常ドメインのｐＩ並びに変異型重鎖定常ドメイン及びＡＢＤ又はＡＢＤ鎖を含む半抗体全体のｐＩに依存し得る。したがって、ある実施形態において、ｐＩの変化は、米国特許出願公開第２０１４／０３７００１３号明細書の図１９のチャートを用いて、変異型重鎖定常ドメインに基づいて計算される。本明細書に記載されるように、どの半抗体を操作するかは、一般に、半抗体の固有のｐＩによって決定される。代わりに、各半抗体のｐＩが比較され得る。
【０４６２】
７．４．１．５．６．インビボ結合に良好なＦｃＲｎも付与するｐＩ変異
ｐＩ変異がＦｃ領域のｐＩを減少させる場合、それは、インビボでの血清保持を改善するという追加の利点を有し得る。
【０４６３】
エンドソームにおけるｐＨ６でのＦｃＲｎへの結合により、Ｆｃが隔離されるため、ｐＩ変異Ｆｃ領域は、インビボでの抗原結合分子により長い半減期を与えると考えられる（Ｇｈｅｔｉｅ  ａｎｄ  Ｗａｒｄ，１９９７，Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｔｏｄａｙ．１８（１２）：５９２−５９８）。次に、エンドソーム区画は、Ｆｃを細胞表面にリサイクルする。区画が細胞外空間に開くと、約７．４のより高いｐＨが、血液中へのＦｃの放出を誘導する。マウスにおいて、Ｄａｌｌ’  Ａｃｑｕａらは、ｐＨ６及びｐＨ７．４での増加したＦｃＲｎ結合を有するＦｃ突然変異体が、実際に低下した血清濃度及び野生型Ｆｃと同じ半減期を有することを示した（Ｄａｌｌ’  Ａｃｑｕａ  ｅｔ  ａｌ．２００２，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６９：５１７１−５１８０）。ｐＨ７．４でのＦｃＲｎに対するＦｃの親和性の増加は、血液中へのＦｃの放出を妨げると考えられる。したがって、インビボでのＦｃの半減期を増加させるＦｃ突然変異は、理想的には、より高いｐＨでのＦｃの放出をなお可能にしながら、より低いｐＨでのＦｃＲｎ結合を増加させる。アミノ酸ヒスチジンは、６．０〜７．４のｐＨ範囲でその荷電状態を変化させる。したがって、Ｆｃ／ＦｃＲｎ複合体中の重要な位置にＨｉｓ残基を見出すことは驚くべきことではない。
【０４６４】
より低い等電点を有する可変領域を有する抗体が、より長い血清半減期も有し得ることが示唆されている（Ｉｇａｗａ  ｅｔ  ａｌ．，２０１０，ＰＥＤＳ．２３（５）：３８５−３９２）。しかしながら、この機構の理解は、依然として不十分である。さらに、可変領域は、抗体毎に異なる。低下されたｐＩ及び延長された半減期を有する定常領域変異体は、本明細書に記載されるように、ＢＣＭＡ結合分子の薬物速度論的特性を改善するよりモジュール型の手法を提供するであろう。
【０４６５】
７．４．１．５．７．極性架橋
Ｆｃドメインを含むＢＣＭＡ結合分子のポリペプチド鎖のヘテロ二量体化は、「極性架橋」の原理に基づいて修飾を導入することによって増加され得、「極性架橋」の原理は、２つのポリペプチド鎖の結合境界における残基をヘテロ二量体形態において同様の（又は補完的な）物理的特性の残基と相互作用させる一方、ホモ二量体形態において異なる物理的特性の残基と相互作用させる。特に、これらの修飾は、ヘテロ二量体形成において、極性残基が極性残基と相互作用する一方、疎水性残基が疎水性残基と相互作用するように設計される。対照的に、ホモ二量体形成において、残基は、極性残基が疎水性残基と相互作用するように修飾される。ヘテロ二量体形態における好ましい相互作用及びホモ二量体形態における好ましくない相互作用は、連携して、Ｆｃ領域が、ホモ二量体を形成するよりもヘテロ二量体を形成する傾向が高くなるようにする。
【０４６６】
例示的な実施形態において、上記の修飾は、ＣＨ３ドメインの残基３６４、３６８、３９９、４０５、４０９及び４１１の１つ以上の位置において生成される。
【０４６７】
ある実施形態において、Ｓ３６４Ｌ、Ｔ３６６Ｖ、Ｌ３６８Ｑ、Ｎ３９９Ｋ、Ｆ４０５Ｓ、Ｋ４０９Ｆ及びＲ４１１Ｋからなる群から選択される１つ以上の修飾が２つのＣＨ３ドメインの１つに導入される。Ｙ４０７Ｆ、Ｋ４０９Ｑ及びＴ４１１Ｎからなる群から選択される１つ以上の修飾が第２のＣＨ３ドメイン中に導入され得る。
【０４６８】
別の実施形態において、Ｓ３６４Ｌ、Ｔ３６６Ｖ、Ｌ３６８Ｑ、Ｄ３９９Ｋ、Ｆ４０５Ｓ、Ｋ４０９Ｆ及びＴ４１１Ｋからなる群から選択される１つ以上の修飾が１つのＣＨ３ドメイン中に導入される一方、Ｙ４０７Ｆ、Ｋ４０９Ｑ及びＴ４１１Ｄからなる群から選択される１つ以上の修飾が第２のＣＨ３ドメイン中に導入される。
【０４６９】
例示的な一実施形態において、１つのＣＨ３ドメインの３６６位におけるトレオニンの元の残基がバリンで置換される一方、他方のＣＨ３ドメインの４０７位におけるチロシンの元の残基がフェニルアラニンで置換される。
【０４７０】
別の例示的な実施形態において、１つのＣＨ３ドメインの３６４位におけるセリンの元の残基がロイシンで置換される一方、同じＣＨ３ドメインの３６８位におけるロイシンの元の残基がグルタミンで置換される。
【０４７１】
さらに別の例示的な実施形態において、１つのＣＨ３ドメインの４０５位におけるフェニルアラニンの元の残基がセリンで置換され、このＣＨ３ドメインの４０９位におけるリジンの元の残基がフェニルアラニンで置換される一方、他方のＣＨ３ドメインの４０９位におけるリジンの元の残基がグルタミンで置換される。
【０４７２】
さらに別の例示的な実施形態において、１つのＣＨ３ドメインの３９９位におけるアスパラギン酸の元の残基がリジンで置換され、同じＣＨ３ドメインの４１１位におけるトレオニンの元の残基がリジンで置換される一方、他方のＣＨ３ドメインの４１１位におけるトレオニンの元の残基がアスパラギン酸で置換される。
【０４７３】
本明細書に記載されるアミノ酸置換は、周知の技術を用いてＣＨ３ドメイン中に導入され得る（例えば、ＭｃＰｈｅｒｓｏｎ，ｅｄ．，１９９１、Ｄｉｒｅｃｔｅｄ  Ｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓ：ａ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ；Ａｄｅｌｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８３，ＤＮＡ，２：１８３を参照されたい）。極性架橋手法は、例えば、国際公開第２００６／１０６９０５号パンフレット、国際公開第２００９／０８９００４号パンフレット及びＫ．Ｇｕｎａｓｅｋａｒａｎ，ｅｔ  ａｌ．（２０１０）ＪＢＣ，２８５：１９６３７−１９６４６に記載されている。
【０４７４】
さらなる極性架橋修飾は、例えば、ＰＣＴ公開番号国際公開第２０１４／１４５８０６号パンフレット（例えば、国際公開第２０１４／１４５８０６号パンフレットの図６）、ＰＣＴ公開番号国際公開第２０１４／１１０６０１号パンフレット及びＰＣＴ公開番号国際公開第２０１６／０８６１８６号パンフレット、国際公開第２０１６／０８６１８９号パンフレット、国際公開第２０１６／０８６１９６号パンフレット及び国際公開第２０１６／１８２７５１号パンフレットに記載されている。極性架橋変異体の例は、Ｎ２０８Ｄ、Ｑ２９５Ｅ、Ｎ３８４Ｄ、Ｑ４１８Ｅ及びＮ４２１Ｄ修飾を含む定常鎖を含む。
【０４７５】
本明細書に記載される実施形態のいずれかにおいて、ＣＨ３ドメインは、第７．４．１．３節に記載されるように、システイン残基の対を導入するようにさらに修飾され得る。
【０４７６】
ヘテロ二量体化を促進するためのさらなる手法は、例えば、国際公開第２０１６／１０５４５０号パンフレット、国際公開第２０１６／０８６１８６号パンフレット、国際公開第２０１６／０８６１８９号パンフレット、国際公開第２０１６／０８６１９６号パンフレット、国際公開第２０１６／１４１３７８号パンフレット、及び国際公開第２０１４／１４５８０６号パンフレット、及び国際公開第２０１４／１１０６０１号パンフレットに記載されている。これらの手法のいずれかは、本明細書に記載されるＢＣＭＡ結合分子に用いられ得る。
【０４７７】
７．４．１．６．ヘテロ二量体化変異及び他のＦｃ変異の組合せ
当業者によって理解されるように、列挙されたヘテロ二量体化変異（歪曲及び／又はｐＩ変異を含む）は全て、ＦｃドメインのＦｃ領域が二量体化するそれらの能力を保持する限り、任意選択的に及び独立して、任意の方法で組み合わされ得る。さらに、これらの変異は全て、ヘテロ二量体化形式のいずれかに組み合わされ得る。
【０４７８】
ｐＩ変異の場合、特に使用される実施形態が表８に示されるが、精製を容易にするためにＦｃヘテロ二量体中の２つのＦｃ領域間のｐＩの差異を変化させるという基本的な規則に従って、他の組合せが生成され得る。
【０４７９】
さらに、ヘテロ二量体化変異、歪曲及びｐＩのいずれも、本明細書に一般に概説されるように、独立して及び任意選択的に、Ｆｃ除去変異、Ｆｃ変異、ＦｃＲｎ変異と組み合わされる。
【０４８０】
ある実施形態において、本開示において利用される歪曲及びｐＩ変異の特定の組合せは、Ｔ３６６Ｓ／Ｌ３６８Ａ／Ｙ４０７Ｖ：Ｔ３６６Ｗ（任意選択的に、架橋ジスルフィドを含む、Ｔ３６６Ｓ／Ｌ３６８Ａ／Ｙ４０７Ｖ／Ｙ３４９Ｃ：Ｔ３６６Ｗ／Ｓ３５４Ｃ）であり、一方のＦｃ領域は、Ｑ２９５Ｅ／Ｎ３８４Ｄ／Ｑ４１８Ｅ／Ｎ４８１Ｄを含み、他方は、正に荷電したｓｃＦｖリンカーを含む（形式がｓｃＦｖドメインを含む場合）。当業者によって理解されるように、「ノブ・イン・ホール」変異は、ｐＩを変化させず、したがって、Ｆｃヘテロ二量体中のＦｃ領域のいずれか一方に使用され得る。
【０４８１】
ある実施形態において、本開示において利用される第１及び第２のＦｃ領域は、アミノ酸置換Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ：Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓを含み、ここで、第１及び／又は第２のＦｃ領域は、除去変異体置換２３３Ｐ／Ｌ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２６７Ｋを含み、第１及び／又は第２のＦｃ領域は、ｐＩ変異体置換Ｎ２０８Ｄ／Ｑ２９５Ｅ／Ｎ３８４Ｄ／Ｑ４１８Ｅ／Ｎ４２１Ｄ（ｐｌ＿（−）＿ｉｓｏｓｔｅｒｉｃ＿Ａ）を含む。
【０４８２】
７．４．２．ヒンジ領域
ＢＣＭＡ結合分子は、例えば、抗原結合ドメインをＦｃ領域に連結するヒンジ領域も含み得る。ヒンジ領域は、天然又は修飾ヒンジ領域であり得る。ヒンジ領域は、典型的に、Ｆｃ領域のＮ末端において見られる。
【０４８３】
天然ヒンジ領域は、天然抗体中のＦａｂ及びＦｃドメイン間に通常見られ得るヒンジ領域である。修飾ヒンジ領域は、天然ヒンジ領域と長さ及び／又は組成が異なる任意のヒンジである。このようなヒンジは、ヒト、マウス、ラット、ウサギ、サメ、ブタ、ハムスター、ラクダ、ラマ又はヤギヒンジ領域など、他の種に由来するヒンジ領域を含み得る。他の修飾ヒンジ領域は、Ｆｃ領域のものと異なるクラス又はサブクラスの抗体に由来する完全なヒンジ領域を含み得る。代わりに、修飾ヒンジ領域は、天然ヒンジの部分又は繰返し中の各単位が天然ヒンジ領域に由来する繰返し単位を含み得る。さらなる代替例において、天然ヒンジ領域は、１つ以上のシステイン又は他の残基をセリン又はアラニンなどの中性残基に転化することにより、又は好適に配置された残基をシステイン残基に転化することにより改変され得る。このような手段により、ヒンジ領域中のシステイン残基の数が増加又は減少され得る。この手法は、Ｂｏｄｍｅｒらによる米国特許第５，６７７，４２５号明細書にさらに記載されている。ヒンジ領域中のシステイン残基の数を改変することにより、例えば軽鎖及び重鎖の集合を促進するか、又はＢＣＭＡ結合分子の安定性を増加若しくは低下させることができる。他の修飾ヒンジ領域は、全体的に合成であり得、長さ、システイン組成物及び柔軟性など、所望の特性を有するように設計され得る。
【０４８４】
いくつかの修飾ヒンジ領域は、例えば、米国特許第５，６７７，４２５号明細書、国際公開第９９１５５４９号パンフレット、国際公開第２００５００３１７０号パンフレット、国際公開第２００５００３１６９号パンフレット、国際公開第２００５００３１７０号パンフレット、国際公開第９８２５９７１及び国際公開第２００５００３１７１号パンフレットに記載されている。
【０４８５】
好適なヒンジ配列の例が表９に示される。
【０４８６】
【表８９】
2021525715.tif 000091
【０４８７】
一実施形態において、Ｆｃ領域は、そのＮ末端において無傷のヒンジ領域を有する。
【０４８８】
一実施形態において、Ｆｃ領域及びヒンジ領域は、ＩｇＧ４に由来し、ヒンジ領域は、修飾配列ＣＰＰＣ（配列番号４２２）を含む。ヒトＩｇＧ４のコアヒンジ領域は、配列ＣＰＰＣ（配列番号４２２）を含有するＩｇＧ１と比較して配列ＣＰＳＣ（配列番号４３２）を含有する。ＩｇＧ４配列中に存在するセリン残基は、この領域における増加した柔軟性をもたらし、したがって、分子の一部は、鎖間ジスルフィドを形成するためのＩｇＧ分子における他の重鎖への架橋ではなく、同じタンパク質鎖内のジスルフィド結合（鎖内ジスルフィド）を形成する。（Ａｎｇｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，１９９３，Ｍｏｌ  ｌｍｍｕｎｏｌ  ３０（１）：１０５−１０８）。セリン残基をプロリンに変化させて、ＩｇＧ１と同じコア配列を得ることは、ＩｇＧ４ヒンジ領域における鎖間ジスルフィドの完全な形成を可能にし、したがって精製された産物の異質性を低減する。この改変されたアイソタイプは、ＩｇＧ４Ｐと呼ばれる。
【０４８９】
７．４．３．ＡＢＤリンカー
特定の態様において、本開示は、ＢＣＭＡ結合分子を提供し、ここで、ＡＢＤの２つ以上の構成要素（例えば、ｓｃＦｖのＶＨ及びＶＬ）、２つ以上のＡＢＤ又はＡＢＤ及び非ＡＢＤドメイン（例えば、Ｆｃ領域などの二量体化ドメイン）がペプチドリンカーによって互いに連結される。このようなリンカーは、例えば、第７．９．２節に記載されるように、薬物をＢＣＭＡ結合分子に結合するのに使用されるＡＤＣリンカーと対照的に、本明細書において「ＡＢＤリンカー」と呼ばれる。
【０４９０】
ペプチドリンカーは、２個のアミノ酸〜６０個以上のアミノ酸の範囲であり得、特定の態様において、ペプチドリンカーは、３個のアミノ酸〜５０個のアミノ酸、４〜３０個のアミノ酸、５〜２５個のアミノ酸、１０〜２５個のアミノ酸又は１２〜２０個のアミノ酸の範囲である。特定の実施形態において、ペプチドリンカーは、２個のアミノ酸、３個のアミノ酸、４個のアミノ酸、５個のアミノ酸、６個のアミノ酸、７個のアミノ酸、８個のアミノ酸、９個のアミノ酸、１０個のアミノ酸、１１個のアミノ酸、１２個のアミノ酸、１３個のアミノ酸、１４個のアミノ酸、１５個のアミノ酸、１６個のアミノ酸、１７個のアミノ酸、１８個のアミノ酸、１９個のアミノ酸、２０個のアミノ酸、２１個のアミノ酸、２２個のアミノ酸、２３個のアミノ酸、２４個のアミノ酸、２５個のアミノ酸、２６個のアミノ酸、２７個のアミノ酸、２８個のアミノ酸、２９個のアミノ酸、３０個のアミノ酸、３１個のアミノ酸、３２個のアミノ酸、３３個のアミノ酸、３４個のアミノ酸、３５個のアミノ酸、３６個のアミノ酸、３７個のアミノ酸、３８個のアミノ酸、３９個のアミノ酸、４０個のアミノ酸、４１個のアミノ酸、４２個のアミノ酸、４３個のアミノ酸、４４個のアミノ酸、４５個のアミノ酸、４６個のアミノ酸、４７個のアミノ酸、４８個のアミノ酸、４９個のアミノ酸又は５０個のアミノ酸長である。
【０４９１】
荷電及び／又は可撓性リンカーが使用され得る。
【０４９２】
ＢＣＭＡ結合分子に使用され得る可撓性ＡＢＤリンカーの例としては、Ｃｈｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，Ａｄｖ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖ  Ｒｅｖ．６５（１０）：１３５７−１３６９及びＫｌｅｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１４，Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｄｅｓｉｇｎ＆Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ  ２７（１０）：３２５−３３０によって開示されるものが挙げられる。特に有用な可撓性リンカーは、（ＧＧＧＧＳ）ｎ（（Ｇ４Ｓ）ｎとも呼ばれる）（配列番号４４５）である。ある実施形態において、ｎは、１〜１０の任意の数、すなわち１、２、３、４、５、６、７、８、９及び１０又は上記の数のいずれか２つによって境界付けられる任意の範囲、例えば１〜５、２〜５、３〜６、２〜４、１〜４など及びその他である。
【０４９３】
本開示のＢＣＭＡ結合分子に使用するのに好適なＡＢＤリンカーの他の例が以下の表１０に示される。
【０４９４】
【表９０】
2021525715.tif 000092
【０４９５】
【表９１】
2021525715.tif 000093
【０４９６】
様々な態様において、本開示は、１つ以上のＡＢＤリンカーを含むＢＣＭＡ結合分子を提供する。ＡＢＤリンカーのそれぞれは、任意選択的に上の表１０から選択される２個のアミノ酸〜６０個のアミノ酸長、例えば４〜３０個のアミノ酸、５〜２５個のアミノ酸、１０〜２５個のアミノ酸又は１２〜２０個のアミノ酸長の範囲であり得る。特定の実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、２つ、３つ、４つ、５つ又は６つのＡＢＤリンカーを含む。ＡＢＤリンカーは、ＢＣＭＡ結合分子の１つ、２つ、３つ、４つ又はさらにそれを超えるポリペプチド鎖上にあり得る。
【０４９７】
７．５．二重特異性結合分子形態
例示的なＢＢＭ形態が図１に示される。図１Ａは、図１Ｂ〜１ＡＧに示されるＢＢＭ形態の構成要素を示す。ｓｃＦｖ、Ｆａｂ、ｓｃＦａｂ、非免疫グロブリンベースのＡＢＤ及びＦｃドメインは、それぞれ第７．２及び７．３節においてこれらの構成要素について記載される特性を有し得る。図１に示されるＢＢＭ形態の構成要素は、第７．４節に記載される手段のいずれかによって（例えば、直接結合、ＡＢＤリンカー、ジスルフィド結合、ノブ・イン・ホール相互作用で修飾されたＦｃドメインなどによって）互いに会合され得る。図１に示される様々な構成要素の配向及び会合は、例示的なものであるに過ぎず；当業者によって理解されるように、他の配向及び会合が好適であり得る（例えば、第７．２及び７．３節に記載されるように）。
【０４９８】
ＢＢＭは、図１に示される形態に限定されない。使用され得る他の形態が当業者に公知である。例えば、国際公開第２０１４／１４５８０６号パンフレット；国際公開第２０１７／１２４００２号パンフレット；Ｌｉｕ  ｅｔ  ａｌ．，２０１７，Ｆｒｏｎｔ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．８：３８；Ｂｒｉｎｋｍａｎｎ＆Ｋｏｎｔｅｒｍａｎｎ，２０１７，ｍＡｂｓ  ９：２，１８２−２１２；米国特許出願公開第２０１６／０３５５６００号明細書；Ｋｌｅｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１６，ＭＡｂｓ  ８（６）：１０１０−２０；及び米国特許出願公開第２０１７／０１４５１１６号明細書を参照されたい。
【０４９９】
７．５．１．例示的な２価ＢＢＭ
ＢＢＭは、２価であり得、すなわち、それらは、２つの抗原結合ドメインを有し、その１つ又は２つは、ＢＣＭＡ（ＡＢＤ１）に結合し、１つは、第２の標的抗原（ＡＢＤ２）、例えばＴＣＲ複合体の構成要素に結合する。
【０５００】
例示的な２価ＢＢＭ形態が図１Ｂ〜１Ｆに示される。
【０５０１】
図１Ｂ〜１Ｄに示されるように、ＢＢＭは、２つの半抗体を含み得、一方が１つのＡＢＤを含み、他方が１つのＡＢＤを含み、２つの半抗体は、Ｆｃドメインを介して対合されている。
【０５０２】
図１Ｂの実施形態において、第１の（又は左側）半抗体は、Ｆａｂ及びＦｃ領域を含み、第２の（又は右側）半抗体は、Ｆａｂ及びＦｃ領域を含む。第１及び第２の半抗体は、Ｆｃ領域を介して会合されてＦｃドメインを形成する。
【０５０３】
図１Ｃの実施形態において、第１の（又は左側）半抗体は、Ｆａｂ及びＦｃ領域を含み、第２の（又は右側）半抗体は、ｓｃＦｖ及びＦｃ領域を含む。第１及び第２の半抗体は、Ｆｃ領域を介して会合されてＦｃドメインを形成する。
【０５０４】
図１Ｄの実施形態において、第１の（又は左側）半抗体は、ｓｃＦｖ及びＦｃ領域を含み、第２の（又は右側）半抗体は、ｓｃＦｖ及びＦｃ領域を含む。第１及び第２の半抗体は、Ｆｃ領域を介して会合されてＦｃドメインを形成する。
【０５０５】
図１Ｅ〜１Ｆに示されるように、２価ＢＢＭは、Ｆｃドメインの１つのＦｃ領域に結合された２つのＡＢＤを含み得る。
【０５０６】
図１Ｅの実施形態において、ＢＢＭは、Ｆａｂ、ｓｃＦｖ及びＦｃドメインを含み、ここで、ｓｃＦｖは、Ｆａｂ及びＦｃドメイン間に位置する。
【０５０７】
図１Ｆの実施形態において、（「ワンアームｓｃＦｖ−ｍＡｂ」形態）ＢＢＭは、Ｆａｂ、ｓｃＦｖ及びＦｃドメインを含み、ここで、Ｆａｂは、ｓｃＦｖ及びＦｃドメイン間に位置する。
【０５０８】
図１Ｂ〜１Ｆに示される形態において、Ｘ及びＹのそれぞれは、ＡＢＤ１又はＡＢＤ２のいずれかを表し、ただし、ＢＢＭは、１つのＡＢＤ１及び１つのＡＢＤ２を含む。したがって、本開示は、図１Ｂ〜１Ｆのいずれか１つに示されるような２価ＢＢＭを提供し、ここで、ＸがＡＢＤ１であり、ＹがＡＢＤ２である（ＡＢＤのこの形態は、便宜上、「Ｂ１」として示される）。本開示は、図１Ｂ〜１Ｆのいずれか１つに示されるような２価ＢＢＭも提供し、ここで、ＸがＡＢＤ２であり、ＹがＡＢＤ１である（ＡＢＤのこの形態は、便宜上、「Ｂ２」として示される）。
【０５０９】
７．５．２．例示的な３価ＢＢＭ
ＢＢＭは、３価であり得、すなわち、それらは、３つの抗原結合ドメインを有し、その１つ又は２つは、ＢＣＭＡ（ＡＢＤ１）に結合し、その１つ又は２つは、第２の標的抗原（ＡＢＤ２）、例えばＴＣＲ複合体の構成要素に結合する。
【０５１０】
例示的な３価ＢＢＭ形態が図１Ｇ〜１Ｚに示される。
【０５１１】
図１Ｇ〜１Ｎ、１Ｑ〜１Ｗ、１Ｙ〜１Ｚに示されるように、ＢＢＭは、２つの半抗体を含み得、一方が２つのＡＢＤを含み、他方が１つのＡＢＤを含み、２つの半抗体は、Ｆｃドメインを介して対合される。
【０５１２】
図１Ｇの実施形態において、第１の（又は左側）半抗体は、Ｆａｂ及びＦｃ領域を含み、第２の（又は右側）半抗体は、ｓｃＦｖ及びＦｃ領域を含む。第１及び第２の半抗体は、Ｆｃ領域を介して会合されてＦｃドメインを形成する。
【０５１３】
図１Ｈの実施形態において、第１の（又は左側）半抗体は、Ｆａｂ及びＦｃ領域を含み、第２の（又は右側）半抗体は、Ｆａｂ、ｓｃＦｖ及びＦｃ領域を含む。第１及び第２の半抗体は、Ｆｃ領域を介して会合されてＦｃドメインを形成する。
【０５１４】
図１Ｉの実施形態において、第１の（又は左側）半抗体は、ｓｃＦｖ及びＦｃ領域を含み、第２の（又は右側）半抗体は、２つのＦａｂ及びＦｃ領域を含む。第１及び第２の半抗体は、Ｆｃ領域を介して会合されてＦｃドメインを形成する。
【０５１５】
図１Ｊの実施形態において、第１の（又は左側）半抗体は、２つのＦａｖ及びＦｃ領域を含み、第２の（又は右側）半抗体は、Ｆａｂ及びＦｃ領域を含む。第１及び第２の半抗体は、Ｆｃ領域を介して会合されてＦｃドメインを形成する。
【０５１６】
図１Ｋの実施形態において、第１の（又は左側）半抗体は、ｓｃＦｖ及びＦｃ領域を含み、第２の（又は右側）半抗体は、２つのｓｃＦｖｓ及びＦｃ領域を含む。第１及び第２の半抗体は、Ｆｃ領域を介して会合されてＦｃドメインを形成する。
【０５１７】
図１Ｌの実施形態において、第１の（又は左側）半抗体は、ｓｃＦｖ及びＦｃ領域を含み、第２の（又は右側）半抗体は、ｓｃＦｖ、Ｆａｂ及びＦｃ領域を含む。第１及び第２の半抗体は、Ｆｃ領域を介して会合されてＦｃドメインを形成する。
【０５１８】
図１Ｍの実施形態において、第１の（又は左側）半抗体は、ｓｃＦｖ及びＦｃ領域を含み、第２の（又は右側）半抗体は、Ｆａｂ、ｓｃＦｖ及びＦｃ領域を含む。第１及び第２の半抗体は、Ｆｃ領域を介して会合されてＦｃドメインを形成する。
【０５１９】
図１Ｎの実施形態において、第１の（又は左側）半抗体は、二重特異性抗体型結合ドメイン及びＦｃ領域を含み、第２の（又は右側）半抗体は、Ｆａｂ及びＦｃ領域を含む。第１及び第２の半抗体は、Ｆｃ領域を介して会合されてＦｃドメインを形成する。
【０５２０】
図１Ｑの実施形態において、第１の（又は左側）半抗体は、Ｆａｂ及びＦｃ領域を含み、第２の（又は右側）半抗体は、Ｆａｂ、Ｆｃ領域及びｓｃＦｖを含む。第１及び第２の半抗体は、Ｆｃ領域を介して会合されてＦｃドメインを形成する。
【０５２１】
図１Ｒの実施形態において、第１の（又は左側）半抗体は、ｓｃＦｖ及びＦｃ領域を含み、第２の（又は右側）半抗体は、Ｆａｂ、Ｆｃ領域及びｓｃＦｖを含む。第１及び第２の半抗体は、Ｆｃ領域を介して会合されてＦｃドメインを形成する。
【０５２２】
図１Ｓの実施形態において、第１の（又は左側）半抗体は、ｓｃＦｖ及びＦｃ領域を含み、第２の（又は右側）半抗体は、ｓｃＦｖ、Ｆｃ領域及び第２のｓｃＦＶを含む。第１及び第２の半抗体は、Ｆｃ領域を介して会合されてＦｃドメインを形成する。
【０５２３】
図１Ｔの実施形態において、第１の（又は左側）半抗体は、ｓｃＦｖ、Ｆｃ領域及びＦａｂを含み、第２の（又は右側）半抗体は、Ｆａｂ及びＦｃ領域を含む。第１及び第２の半抗体は、Ｆｃ領域を介して会合されてＦｃドメインを形成する。
【０５２４】
図１Ｕの実施形態において、第１の（又は左側）半抗体は、２つのＦａｂ及びＦｃ領域を含み、第２の（又は右側）半抗体は、非免疫グロブリンベースのＡＢＤ及びＦｃ領域を含む。第１及び第２の半抗体は、Ｆｃ領域を介して会合されてＦｃドメインを形成する。
【０５２５】
図１Ｖの実施形態において、第１の（又は左側）半抗体は、Ｆａｂ、ｓｃＦｖ及びＦｃ領域を含み、第２の（又は右側）半抗体は、非免疫グロブリンベースのＡＢＤ及びＦｃ領域を含む。第１及び第２の半抗体は、Ｆｃ領域を介して会合されてＦｃドメインを形成する。
【０５２６】
図１Ｗの実施形態において、第１の（又は左側）半抗体は、Ｆａｂ及びＦｃ領域を含み、第２の（又は右側）半抗体は、ｓｃＦｖ、非免疫グロブリンベースのＡＢＤ及びＦｃ領域を含む。第１及び第２の半抗体は、Ｆｃ領域を介して会合されてＦｃドメインを形成する。
【０５２７】
図１Ｙの実施形態において、第１の（又は左側）半抗体は、ｓｃＦｖ及びＦｃ領域を含み、第２の（又は右側）半抗体は、Ｆａｂ、ｓｃＦｖ及びＦｃ領域を含む。第１及び第２の半抗体は、Ｆｃ領域を介して会合されてＦｃドメインを形成する。
【０５２８】
図１Ｚの実施形態において、第１の（又は左側）半抗体は、Ｆａｂ、Ｆｃ領域及びｓｃＦａｂを含み、第２の（又は右側）半抗体は、Ｆａｂ及びＦｃ領域を含む。第１及び第２の半抗体は、Ｆｃ領域を介して会合されてＦｃドメインを形成する。
【０５２９】
代わりに、図１Ｏ及び１Ｐに示されるように、３価ＢＢＭは、２つの半抗体を含み得、それぞれが１つの完全なＡＢＤ（図１Ｏ及び１ＰのＦａｂ）及び別のＡＢＤの一部を含む（一方がＶＨである、他方がＶＬである）。２つの半抗体がＦｃドメインを介して対合されると直ちに、ＶＨ及びＶＬが会合して、完全な抗原結合Ｆｖドメインを形成する。
【０５３０】
図１Ｘに示されるように、ＢＢＭは、一本鎖であり得る。図１ＸのＢＢＭは、リンカーを介して連結された３つのｓｃＦｖドメインを含む。
【０５３１】
図１Ｇ〜１Ｚに示される形態において、Ｘ、Ｙ及びＡのそれぞれは、ＡＢＤ１又はＡＢＤ２のいずれかを示し、ただし、ＢＢＭは、少なくともＡＢＤ１及び少なくとも１つのＡＢＤ２を含む。したがって、３価ＭＢＭは、１つ又は２つのＡＢＤ１及び１つ又は２つのＡＢＤ２を含む。ある実施形態において、３価ＢＢＭは、２つのＡＢＤ１及び１つのＡＢＤ２を含む。他の実施形態において、本開示の３価ＢＢＭは、１つのＡＢＤ１及び２つのＡＢＤ２を含む。
【０５３２】
したがって、本開示において、図１Ｇ〜１Ｚのいずれか１つに示されるような３価ＢＢＭを提供し、ここで、ＸがＡＢＤ１であり、ＹがＡＢＤ１であり、ＡがＡＢＤ２である（ＡＢＤのこの形態は、便宜上、「Ｔ１」として示される）。
【０５３３】
本開示は、図１Ｇ〜１Ｚのいずれか１つに示されるような３価ＢＢＭをさらに提供し、ここで、ＸがＡＢＤ１であり、ＹがＡＢＤ２であり、ＡがＡＢＤ１である（ＡＢＤのこの形態は、便宜上、「Ｔ２」として示される）。
【０５３４】
本開示は、図１Ｇ〜１Ｚのいずれか１つに示されるような３価ＢＢＭをさらに提供し、ここで、ＸがＡＢＤ２であり、ＹがＡＢＤ１であり、ＡがＡＢＤ１である（ＡＢＤのこの形態は、便宜上、「Ｔ３」として示される）。
【０５３５】
本開示は、図１Ｇ〜１Ｚのいずれか１つに示されるような３価ＢＢＭをさらに提供し、ここで、ＸがＡＢＤ１であり、ＹがＡＢＤ２であり、ＡがＡＢＤ２である（ＡＢＤのこの形態は、便宜上、「Ｔ４」として示される）。
【０５３６】
本開示は、図１Ｇ〜１Ｚのいずれか１つに示されるような３価ＢＢＭをさらに提供し、ここで、ＸがＡＢＤ２であり、ＹがＡＢＤ１であり、ＡがＡＢＤ２である（ＡＢＤのこの形態は、便宜上、「Ｔ５」として示される）。
【０５３７】
本開示は、図１Ｇ〜１Ｚのいずれか１つに示されるような３価ＢＢＭをさらに提供し、ここで、ＸがＡＢＤ２であり、ＹがＡＢＤ２であり、ＡがＡＢＤ１である（ＡＢＤのこの形態は、便宜上、「Ｔ６」として示される）。
【０５３８】
７．５．３．例示的な４価ＢＢＭ
ＢＢＭは、４価であり得、すなわち、それらは、４つの抗原結合ドメインを有し、その１つ、２つ又は３つは、ＢＣＭＡ（ＡＢＤ１）に結合し、その１つ、２つ又は３つは、第２の標的抗原（ＡＢＤ２）、例えばＴＣＲ複合体の構成要素に結合する。
【０５３９】
例示的な４価ＢＢＭ形態が図１ＡＡ〜１ＡＧに示される。
【０５４０】
図１ＡＡ〜１ＡＧに示されるように、４価ＢＢＭは、２つの半抗体を含み得、それぞれが２つの完全なＡＢＤを含み、２つの半抗体は、Ｆｃドメインを介して対合される。
【０５４１】
図１ＡＡの実施形態において、第１の（又は左側）半抗体は、Ｆａｂ、Ｆｃ領域及びｓｃＦｖを含み、第２の（又は右側）半抗体は、Ｆａｂ、Ｆｃ領域及びｓｃＦｖを含む。第１及び第２の半抗体は、Ｆｃ領域を介して会合されてＦｃドメインを形成する。
【０５４２】
図１ＡＢの実施形態において、第１の（又は左側）半抗体は、Ｆａｂ、ｓｃＦｖ及びＦｃ領域を含み、第２の（又は右側）半抗体は、Ｆａｂ、ｓｃＦｖ及びＦｃ領域を含む。第１及び第２の半抗体は、Ｆｃ領域を介して会合されてＦｃドメインを形成する。
【０５４３】
図１ＡＣの実施形態において、第１の（又は左側）半抗体は、ｓｃＦｖ、Ｆａｂ及びＦｃ領域を含み、第２の（又は右側）半抗体は、ｓｃＦｖ、Ｆａｂ及びＦｃ領域を含む。第１及び第２の半抗体は、Ｆｃ領域を介して会合されてＦｃドメインを形成する。
【０５４４】
図１ＡＤの実施形態において、第１の（又は左側）半抗体は、Ｆａｂ、Ｆｃ領域及び第２のＦａｂを含み、第２の（又は右側）半抗体は、Ｆａｂ、Ｆｃ領域及び第２のＦａｂを含む。第１及び第２の半抗体は、Ｆｃ領域を介して会合されてＦｃドメインを形成する。
【０５４５】
図１ＡＥの実施形態において、第１の（又は左側）半抗体は、ｓｃＦｖ、第２のｓｃＦｖ及びＦｃ領域を含み、第２の（又は右側）半抗体は、ｓｃＦｖ、第２のｓｃＦｖ及びＦｃ領域を含む。第１及び第２の半抗体は、Ｆｃ領域を介して会合されてＦｃドメインを形成する。
【０５４６】
図１ＡＦの実施形態において、第１の（又は左側）半抗体は、Ｆａｂ、ｓｃＦｖ及びＦｃ領域を含み、第２の（又は右側）半抗体は、Ｆａｂ、ｓｃＦｖ及びＦｃ領域を含む。第１及び第２の半抗体は、Ｆｃ領域を介して会合されてＦｃドメインを形成する。
【０５４７】
図１ＡＧの実施形態において、第１の（又は左側）半抗体は、Ｆａｂ、Ｆｃ領域及びｓｃＦｖを含み、第２の（又は右側）半抗体は、ｓｃＦｖ、Ｆｃ領域及びＦａｂを含む。第１及び第２の半抗体は、Ｆｃ領域を介して会合されてＦｃドメインを形成する。
【０５４８】
図１ＡＡ〜１ＡＧに示される形態において、Ｘ、Ｙ、Ａ及びＢのそれぞれは、必ずしもその順序であるとは限らないが、ＡＢＤ１又はＡＢＤ２を表し、ただし、ＢＢＭは、少なくとも１つのＡＢＤ１及び少なくとも１つのＡＢＤ２を含む。したがって、４価ＡＢＤは、１つ、２つ又は３つのＡＢＤ１及び１つ、２つ又はＡＢＤ２を含む。ある実施形態において、４価ＢＢＭは、３つのＡＢＤ１及び１つのＡＢＤ２を含む。他の実施形態において、４価ＢＢＭは、２つのＡＢＤ１、２つのＡＢＤ２を含む。さらに他の実施形態において、４価ＢＢＭは、１つのＡＢＤ１及び３つのＡＢＤ２を含む。
【０５４９】
したがって、本開示において、図１ＡＡ〜１ＡＧのいずれか１つに示されるような４価ＢＢＭを提供し、ここで、ＸがＡＢＤ１であり、Ｙ、Ａ及びＢのそれぞれがＡＢＤ２である（ＡＢＤのこの形態は、便宜上、「Ｔｖ  １」として示される）。
【０５５０】
本開示は、図１ＡＡ〜１ＡＧのいずれか１つに示されるような４価ＢＢＭをさらに提供し、ここで、ＹがＡＢＤ１であり、Ｘ、Ａ及びＢのそれぞれがＡＢＤ２である（ＡＢＤのこの形態は、便宜上、「Ｔｖ  ２」として示される）。
【０５５１】
本開示は、図１ＡＡ〜１ＡＧのいずれか１つに示されるような４価ＢＢＭをさらに提供し、ここで、ＡがＡＢＤ１であり、Ｘ、Ｙ及びＢのそれぞれがＡＢＤ２である（ＡＢＤのこの形態は、便宜上、「Ｔｖ  ３」として示される）。
【０５５２】
本開示は、図１ＡＡ〜１ＡＧのいずれか１つに示されるような４価ＢＢＭをさらに提供し、ここで、ＢがＡＢＤ１であり、Ｘ、Ｙ及びＡのそれぞれがＡＢＤ２である（ＡＢＤのこの形態は、便宜上、「Ｔｖ  ４」として示される）。
【０５５３】
本開示は、図１ＡＡ〜１ＡＧのいずれか１つに示されるような４価ＢＢＭをさらに提供し、ここで、Ｘ及びＹが両方ともＡＢＤ１であり、Ａ及びＢが両方ともＡＢＤ２である（ＡＢＤのこの形態は、便宜上、「Ｔｖ  ５」として示される）。
【０５５４】
本開示は、図１ＡＡ〜１ＡＧのいずれか１つに示されるような４価ＢＢＭをさらに提供し、ここで、Ｘ及びＡが両方ともＡＢＤ１であり、Ｙ及びＢが両方ともＡＢＤ２である（ＡＢＤのこの形態は、便宜上、「Ｔｖ  ６」として示される）。
【０５５５】
本開示は、図１ＡＡ〜１ＡＧのいずれか１つに示されるような４価ＢＢＭをさらに提供し、ここで、Ｘ及びＢが両方ともＡＢＤ１であり、Ｙ及びＡが両方ともＡＢＤ２である（ＡＢＤのこの形態は、便宜上、「Ｔｖ  ７」として示される）。
【０５５６】
本開示は、図１ＡＡ〜１ＡＧのいずれか１つに示されるような４価ＢＢＭをさらに提供し、ここで、Ｙ及びＡが両方ともＡＢＤ１であり、Ｘ及びＢが両方ともＡＢＤ２である（ＡＢＤのこの形態は、便宜上、「Ｔｖ  ８」として示される）。
【０５５７】
本開示は、図１ＡＡ〜１ＡＧのいずれか１つに示されるような４価ＢＢＭをさらに提供し、ここで、Ｙ及びＢが両方ともＡＢＤ１であり、Ｘ及びＡが両方ともＡＢＤ２である（ＡＢＤのこの形態は、便宜上、「Ｔｖ  ９」として示される）。
【０５５８】
本開示は、図１ＡＡ〜１ＡＧのいずれか１つに示されるような４価ＢＢＭをさらに提供し、ここで、Ａ及びＢが両方ともＡＢＤ１であり、Ｘ及びＹが両方ともＡＢＤ２である（ＡＢＤのこの形態は、便宜上、「Ｔｖ  １０」として示される）。
【０５５９】
本開示は、図１ＡＡ〜１ＡＧのいずれか１つに示されるような４価ＢＢＭをさらに提供し、ここで、Ｘ、Ｙ及びＡのそれぞれがＡＢＤ１であり、ＢがＡＢＤ２である（ＡＢＤのこの形態は、便宜上、「Ｔｖ  １１」として示される）。
【０５６０】
本開示は、図１ＡＡ〜１ＡＧのいずれか１つに示されるような４価ＢＢＭをさらに提供し、ここで、Ｘ、Ｙ及びＢのそれぞれがＡＢＤ１であり、ＡがＡＢＤ２である（ＡＢＤのこの形態は、便宜上、「Ｔｖ  １２」として示される）。
【０５６１】
本開示は、図１ＡＡ〜１ＡＧのいずれか１つに示されるような４価ＢＢＭをさらに提供し、ここで、Ｘ、Ａ及びＢのそれぞれがＡＢＤ１であり、ＹがＡＢＤ２である（ＡＢＤのこの形態は、便宜上、「Ｔｖ  １３」として示される）。
【０５６２】
本開示は、図１ＡＡ〜１ＡＧのいずれか１つに示されるような４価ＢＢＭをさらに提供し、ここで、Ｙ、Ａ及びＢのそれぞれがＡＢＤ１であり、ＸがＡＢＤ２である（ＡＢＤのこの形態は、便宜上、「Ｔｖ  １４」として示される）。
【０５６３】
７．６．例示的なＢＢＭ
本開示のＢＢＭは、ＢＣＭＡに特異的に結合する少なくとも１つのＡＢＤ及びＣＤ３などの第２の標的抗原に結合する少なくとも１つのＡＢＤを含む。例示的な抗ＢＣＭＡ×抗ＣＤ３  ＢＢＭが表１１Ａ〜１１Ｆに記載される。
【０５６４】
ＢＢＭは、例えば、表１１Ａ〜１１Ｆに記載される例示的なＢＢＭのＣＤＲ配列を含み得る。ある実施形態において、ＢＢＭは、表１１Ａ〜Ｆに記載される例示的なＢＢＭの重鎖及び軽鎖可変領域配列を含む。
【０５６５】
【表９２】
2021525715.tif 000094
【０５６６】
【表９３】
2021525715.tif 000095
【０５６７】
【表９４】
2021525715.tif 000096
【０５６８】
【表９５】
2021525715.tif 000097
【０５６９】
【表９６】
2021525715.tif 000098
【０５７０】
【表９７】
2021525715.tif 000099
【０５７１】
７．７．核酸及び宿主細胞
別の態様において、本開示は、本開示のＢＣＭＡ結合分子をコードする核酸（すなわちポリヌクレオチド）を提供する。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、単一の核酸によってコードされる。他の実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、複数（例えば、２つ、３つ、４つ又はそれを超える）の核酸によってコードされる。
【０５７２】
単一の核酸は、単一のポリペプチド鎖を含むＢＣＭＡ結合分子、２つ以上のポリペプチド鎖を含むＢＣＭＡ結合分子又は３つ以上のポリペプチド鎖を含むＢＣＭＡ結合分子の部分をコードし得る（例えば、単一の核酸は、３つ、４つ若しくはそれを超えるポリペプチド鎖を含むＢＣＭＡ結合分子の２つのポリペプチド鎖又は４つ以上のポリペプチド鎖を含むＢＣＭＡ結合分子の３つのポリペプチド鎖をコードし得る）。発現の別個の制御のために、２つ以上のポリペプチド鎖をコードするオープンリーディングフレームは、別個の転写調節要素（例えば、プロモーター及び／又はエンハンサー）の制御下にあり得る。２つ以上のポリペプチドをコードするオープンリーディングフレームはまた、同じ転写調節要素によって制御され、内部リボソーム侵入部位（ＩＲＥＳ）配列によって分離されて、別個のポリペプチドへの翻訳を可能にし得る。
【０５７３】
ある実施形態において、２つ以上のポリペプチド鎖を含むＢＣＭＡ結合分子は、２つ以上の核酸によってコードされる。ＢＣＭＡ結合分子をコードする核酸の数は、ＢＣＭＡ結合分子中のポリペプチド鎖の数以下であり得る（例えば、２つ以上のポリペプチド鎖が単一の核酸によってコードされる場合）。
【０５７４】
核酸は、ＤＮＡ又はＲＮＡ（例えば、ｍＲＮＡ）であり得る。
【０５７５】
別の態様において、本開示は、本開示の核酸を含有する宿主細胞及びベクターを提供する。核酸は、本明細書において以下により詳細に記載されるように、同じ宿主細胞又は別個の宿主細胞中に存在する単一のベクター又は別個のベクター中に存在し得る。
【０５７６】
７．７．１．ベクター
本開示は、本明細書に記載されるＢＣＭＡ結合分子又はＢＣＭＡ結合分子構成要素をコードするヌクレオチド配列を含むベクターを提供する。一実施形態において、ベクターは、本明細書に記載される免疫グロブリンベースのＡＢＤをコードするヌクレオチドを含む。一実施形態において、ベクターは、本明細書に記載されるＦｃドメインをコードするヌクレオチドを含む。一実施形態において、ベクターは、本明細書に記載される組み換え非免疫グロブリンベースのＡＢＤをコードするヌクレオチドを含む。ベクターは、１つ以上のＡＢＤ、１つ以上のＦｃドメイン、１つ以上の非免疫グロブリンベースのＡＢＤ又はそれらの任意の組合せをコードし得る（例えば、複数の構成要素又は部分構成要素が単一のポリペプチド鎖としてコードされる場合）。一実施形態において、ベクターは、本明細書に記載されるヌクレオチド配列を含む。ベクターとしては、限定はされないが、ウイルス、プラスミド、コスミド、ラムダファージ又は酵母人工染色体（ＹＡＣ）が挙げられる。
【０５７７】
多くのベクター系が用いられ得る。例えば、ある種類のベクターは、例えば、ウシパピローマウイルス、ポリオーマウイルス、アデノウイルス、ワクシニアウイルス、バキュロウイルス、レトロウイルス（ラウス肉腫ウイルス、ＭＭＴＶ又はＭＯＭＬＶ）又はＳＶ４０ウイルスなどの動物ウイルスに由来するＤＮＡ要素を用いる。別の種類のベクターは、セムリキフォレストウイルス、東部ウマ脳炎ウイルス及びフラビウイルスなどのＲＮＡウイルスに由来するＲＮＡ要素を用いる。
【０５７８】
さらに、ＤＮＡを染色体中に安定的に取り込んだ細胞は、トランスフェクトされた宿主細胞の選択を可能にする１つ以上のマーカーを導入することによって選択され得る。マーカーは、例えば、栄養要求性宿主に対する原栄養性、殺生物剤耐性（例えば、抗生物質）又は銅などの重金属に対する耐性を提供し得る。選択可能なマーカー遺伝子は、発現されるべきＤＮＡ配列に直接連結されるか、又は同時形質転換によって同じ細胞中に導入され得る。さらなる要素は、ｍＲＮＡの最適な合成にも必要とされ得る。これらの要素は、スプライスシグナル並びに転写プロモーター、エンハンサー及び終結シグナルを含み得る。
【０５７９】
構築物を含有する発現ベクター又はＤＮＡ配列が発現のために調製されると、発現ベクターは、適切な宿主細胞中にトランスフェクト又は導入され得る。例えば、原形質融合、リン酸カルシウム沈殿、エレクトロポレーション、レトロウイルス導入、ウイルストランスフェクション、遺伝子銃、脂質に基づくトランスフェクション又は他の従来の技術などの様々な技術がこれを行うのに用いられ得る。得られるトランスフェクトされた細胞を培養し、発現されたポリペプチドを回収するための方法及び条件は、当業者に公知であり、本明細書に基づいて、用いられる特定の発現ベクター及び哺乳動物宿主細胞に応じて変化又は最適化され得る。
【０５８０】
７．７．２．細胞
本開示は、本開示の核酸を含む宿主細胞も提供する。
【０５８１】
一実施形態において、宿主細胞は、本明細書に記載される１つ以上の核酸を含むように遺伝子組み換えされる。
【０５８２】
一実施形態において、宿主細胞は、発現カセットを用いることによって遺伝子組み換えされる。「発現カセット」という語句は、このような配列と適合する宿主における遺伝子の発現に影響を与えることが可能なヌクレオチド配列を指す。このようなカセットは、プロモーター、イントロンを有する又は有さないオープンリーディングフレーム及び終結シグナルを含み得る。例えば、誘導性プロモーターなど、発現を行うのに必要な又は有用なさらなる因子も使用され得る。
【０５８３】
本開示は、本明細書に記載されるベクターを含む宿主細胞も提供する。
【０５８４】
細胞は、限定はされないが、真核細胞、細菌細胞、昆虫細胞又はヒト細胞であり得る。好適な真核細胞としては、限定はされないが、Ｖｅｒｏ細胞、ＨｅＬａ細胞、ＣＯＳ細胞、ＣＨＯ細胞、ＨＥＫ２９３細胞、ＢＨＫ細胞及びＭＤＣＫＩＩ細胞が挙げられる。好適な昆虫細胞としては、限定はされないが、Ｓｆ９細胞が挙げられる。
【０５８５】
７．８．延長された生体内半減期を有するＢＣＭＡ結合分子
本開示のＢＣＭＡ結合分子は、延長された生体内半減期を有するように修飾され得る。
【０５８６】
様々な手法が、本開示のＢＣＭＡ結合分子の半減期を延長するのに使用され得る。例えば、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ｒｅＣＯＤＥ  ＰＥＧ、抗体足場、ポリシアル酸（ＰＳＡ）、ヒドロキシエチルデンプン（ＨＥＳ）、アルブミン結合リガンド及び炭水化物シールドへの化学結合によるか；アルブミン、ＩｇＧ、ＦｃＲｎ及びトランスフェリンなどの血清タンパク質に結合するタンパク質との遺伝子融合によるか；ナノボディ、Ｆａｂ、ＤＡＲＰｉｎ、アビマー、アフィボディ及びアンチカリンなどの血清タンパク質に結合する他の結合部分に（遺伝的に又は化学的に）カップリングすることによるか；ｒＰＥＧ、アルブミン、アルブミンのドメイン、アルブミン結合タンパク質及びＦｃとの遺伝子融合によるか；又はナノ担体、徐放製剤若しくは医療デバイスへの組み込みによる。
【０５８７】
インビボでのＢＣＭＡ結合分子の血清中循環を延長するために、高分子量ＰＥＧなどの不活性ポリマー分子が、ＢＣＭＡ結合分子を含むポリペプチドのＮ末端若しくはＣ末端へのＰＥＧの部位特異的コンジュゲーションによって又はリジン残基上のε−アミノ基を介して多官能性リンカーを伴うか又は伴わずにＢＣＭＡ結合分子に結合され得る。ＢＣＭＡ結合分子をペグ化するために、分子は、１つ以上のＰＥＧ基がＢＣＭＡ結合分子に結合される条件下で、ＰＥＧの反応性エステル又はアルデヒド誘導体などのポリエチレングリコール（ＰＥＧ）と反応され得る。ペグ化は、反応性ＰＥＧ分子（又は類似する反応性の水溶性ポリマー）とのアシル化反応又はアルキル化反応によって行われ得る。本明細書において使用される際、「ポリエチレングリコール」という用語は、モノ（Ｃ１〜Ｃ１０）アルコキシ−又はアリールオキシ−ポリエチレングリコール又はポリエチレングリコール−マレイミドなどの、他のタンパク質を誘導体化するのに使用されているＰＥＧの形態のいずれか１つを包含することが意図される。一実施形態において、ペグ化されるＢＣＭＡ結合分子は、脱グリコシル化抗体である。生物学的活性の最小限の低下をもたらす直鎖状又は分枝鎖状ポリマーの誘導体化が使用される。コンジュゲーションの程度は、抗体へのＰＥＧ分子の適切なコンジュゲーションを確認するためにＳＤＳ−ＰＡＧＥ及び質量分析法によって厳密に監視され得る。未反応のＰＥＧは、サイズ排除又はイオン交換クロマトグラフィーによって抗体−ＰＥＧコンジュゲートから分離され得る。ＰＥＧ誘導体化抗体は、当業者に周知の方法を用いて、例えば本明細書に記載されるイムノアッセイにより、結合活性並びにインビボでの有効性について試験され得る。タンパク質をペグ化するための方法は公知であり、本開示のＢＣＭＡ結合分子に適用され得る。例えば、Ｎｉｓｈｉｍｕｒａらによる欧州特許第０１５４３１６号明細書及びＩｓｈｉｋａｗａらによる欧州特許第０４０１３８４号明細書を参照されたい。
【０５８８】
他の改変されたペグ化技術は、ｔＲＮＡシンテターゼ及びｔＲＮＡを含む再構成系を介して、化学的に特定された側鎖を生合成タンパク質に組み込む、再構成化学的直交性直接操作技術（ＲｅＣＯＤＥ  ＰＥＧ）を含む。この技術は、３０を超える新たなアミノ酸の、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）、酵母及び哺乳類細胞内の生合成タンパク質への組み込みを可能にする。ｔＲＮＡは、標準的なアミノ酸を、アンバーコドンが配置される任意の位置に組み込み、アンバーを、終止コドンから、化学的に特定されたアミノ酸の組み込みをシグナル伝達するコドンに変換する。
【０５８９】
組み換えペグ化技術（ｒＰＥＧ）は、血清半減期の延長にも使用され得る。この技術は、３００〜６００アミノ酸の非構造化タンパク質テールを、既存の医薬用タンパク質に遺伝子融合させることを含む。このような非構造化タンパク質鎖の見掛けの分子量は、その実際の分子量の約１５倍であるため、タンパク質の血清半減期は、大きく増加される。化学的コンジュゲーション及び再精製を必要とする従来のペグ化と対照的に、製造工程は大きく簡略化され、生成物は均質である。
【０５９０】
ポリシアリル化は、活性寿命を延長し、治療用ペプチド及びタンパク質の安定性を改善するために天然ポリマーポリシアル酸（ＰＳＡ）を使用する別の技術である。ＰＳＡは、シアル酸（糖）のポリマーである。タンパク質及び治療用ペプチドの薬物送達に使用される場合、ポリシアル酸は、コンジュゲーション時の保護的微小環境を提供する。これは、循環中の治療用タンパク質の活性寿命を増加させ、それが免疫系によって認識されるのを防ぐ。ＰＳＡポリマーは、天然で、ヒト体内で見出される。ＰＳＡポリマーは、数百万年にわたり、自身の壁をＰＳＡポリマーで被覆するように進化したある種の細菌によって採用された。次に、これらの天然でポリシアリル化された細菌は、分子模倣により、体内の防御系を失効させることが可能となった。自然の究極のステルス技術であるＰＳＡは、大量に且つ所定の物理的特徴を伴って、このような細菌から容易に産生され得る。細菌ＰＳＡは、ヒト体内でＰＳＡと化学的に同一であるため、タンパク質に結合される場合でも、完全に非免疫原性である。
【０５９１】
別の技術は、ＢＣＭＡ結合分子に連結されたヒドロキシエチルデンプン（「ＨＥＳ」）誘導体の使用を含む。ＨＥＳは、ろう状トウモロコシデンプンに由来する修飾された天然ポリマーであり、体内の酵素によって代謝され得る。ＨＥＳ溶液は、通常、不足した血液量を補い、血液のレオロジー特性を改善するために投与される。ＢＣＭＡ結合分子のＨＥＳ化は、分子の安定性を高めること並びに腎クリアランスを低減することにより、循環半減期の延長を可能とし、増加した生物学的活性をもたらす。ＨＥＳの分子量などの異なるパラメータを変更することにより、多様なＨＥＳ  ＢＣＭＡ結合分子コンジュゲートがカスタマイズされ得る。
【０５９２】
増加した生体内半減期を有するＢＣＭＡ結合分子は、１つ以上のアミノ酸修飾（すなわち置換、挿入又は欠失）を、ＩｇＧ定常ドメイン又はそのＦｃＲｎ結合フラグメント（例えば、Ｆｃ又はヒンジＦｃドメインフラグメント）に導入しても生成され得る。例えば、国際公開番号国際公開第９８／２３２８９号パンフレット；国際公開番号国際公開第９７／３４６３１号パンフレット；及び米国特許第６，２７７，３７５号明細書を参照されたい。
【０５９３】
さらに、ＢＣＭＡ結合分子は、分子を、インビボでより安定させるか、又はより長い生体内半減期を有するようにするために、アルブミン、アルブミンのドメイン、アルブミン結合タンパク質又はアルブミン結合抗体若しくはその抗体フラグメントにコンジュゲートされ得る。この技術は周知であり、例えば国際公開番号国際公開第９３／１５１９９号パンフレット、国際公開第９３／１５２００号パンフレット及び国際公開第０１／７７１３７号パンフレット；及び欧州特許第４１３，６２２号明細書を参照されたい。
【０５９４】
本開示のＢＣＭＡ結合分子は、１つ以上のヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）ポリペプチド又はその部分にも融合され得る。様々なタンパク質の担体としてのアルブミン融合タンパク質の構成要素としてのアルブミンの使用が、国際公開第９３／１５１９９号パンフレット、国際公開第９３／１５２００号パンフレット及び欧州特許第４１３  ６２２号明細書において示唆されている。ポリペプチドへの融合のための、ＨＳＡのＮ末端フラグメントの使用も提案されている（欧州特許第３９９  ６６６号明細書）。したがって、分子をアルブミンに遺伝的に又は化学的に融合又はコンジュゲートすることにより、貯蔵寿命を安定させるか若しくは延長し、且つ／又は溶液中で、インビトロで及び／又はインビボで、長期間にわたって分子の活性を保持することができる。ＨＳＡ融合に関するさらなる方法は、例えば、国際公開第２００１０７７１３７号パンフレット及び国際公開第２００３０６００７号パンフレットに見出される。一実施形態において、融合タンパク質の発現は、哺乳動物細胞株、例えばＣＨＯ細胞株において行われる。
【０５９５】
本開示のＢＣＭＡ結合分子は、アルブミン、例えばヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）に結合する抗体又はその抗体フラグメントにも融合され得る。アルブミン結合抗体又はその抗体フラグメントは、Ｆａｂ、ｓｃＦｖ、Ｆｖ、ｓｃＦａｂ、（Ｆａｂ’）２、単一ドメイン抗体、ラクダ科ＶＨＨドメイン、ＶＨ若しくはＶＬドメイン又は完全長モノクローナル抗体（ｍＡｂ）であり得る。
【０５９６】
本開示のＢＣＭＡ結合分子は、それらの半減期を延長するためにも脂肪酸に融合され得る。生体分子に連結するのに好適な脂肪酸が、当技術分野において、例えば国際公開第２０１５／２０００７８号パンフレット、国際公開第２０１５／１９１７８１号パンフレット、米国特許出願公開第２０１３／００４０８８４号明細書に記載されている。好適な半減期を延長する脂肪酸としては、Ｃ６〜７０アルキル、Ｃ６〜７０アルケニル又はＣ６〜７０アルキニル鎖として定義されるものが挙げられ、これらは、それぞれ少なくとも１つのカルボン酸（例えば１、２、３又は４つのＣＯ２Ｈ）で置換され、任意選択的に、ヒドロキシル基でさらに置換される。例えば、本明細書に記載されるＢＣＭＡ結合分子は、以下の式Ａ１、Ａ２又はＡ３：
【化１】
2021525715.tif 000100
（Ｒ１が、ＣＯ２Ｈ又はＨであり；
Ｒ２、Ｒ３及びＲ４が、互いに独立して、Ｈ、ＯＨ、ＣＯ２Ｈ、−ＣＨ＝ＣＨ２又は−Ｃ≡ＣＨであり；
Ａｋが、分枝鎖状Ｃ６〜Ｃ３０アルキレンであり；
ｎ、ｍ及びｐが、互いに独立して、６〜３０の整数である）のいずれかで表される脂肪酸；又はそのアミド、エステル若しくは薬学的に許容される塩に連結され得る。
【０５９７】
ある実施形態において、脂肪酸は、式Ａ１のもの、例えば式Ａ１（式中、ｎ及びｍが、独立して、８〜２０、例えば１０〜１６である）の脂肪酸である。別の実施形態において、脂肪酸部分は、式Ａ１のものであり、式中、Ｒ２及びＲ３の少なくとも１つがＣＯ２Ｈである。
【０５９８】
ある実施形態において、脂肪酸は、以下の式：
【化２】
2021525715.tif 000101
（式中、Ａｋ３、Ａｋ４、Ａｋ５、Ａｋ６及びＡｋ７が、独立して、（Ｃ８〜２０）アルキレンであり、Ｒ５及びＲ６が、独立して、（Ｃ８〜２０）アルキルである）から選択される。
【０５９９】
ある実施形態において、脂肪酸は、以下の式：
【化３】
2021525715.tif 000102
から選択される。
【０６００】
ある実施形態において、脂肪酸は、以下の式：
【化４】
2021525715.tif 000103
から選択される。
【０６０１】
ある実施形態において、脂肪酸は、式Ａ２又はＡ３のものである。特定の実施形態において、コンジュゲートは、式Ａ２（式中、ｐが、８〜２０である）の脂肪酸部分又は式Ａ３（式中、Ａｋが、Ｃ８〜２０アルキレンである）の脂肪酸部分を含む。
【０６０２】
７．９．抗体−薬物コンジュゲート
本開示のＢＣＭＡ結合分子は、例えば、リンカーを介して薬物部分にコンジュゲートされ得る。このようなコンジュゲートは、ＡＢＤの１つ以上が非免疫グロブリン足場に基づき得ることにもかかわらず、便宜上、本明細書において抗体−薬物コンジュゲート（又は「ＡＤＣ」）と呼ばれ、例えばＡｆｆｉｌｉｎ−１４４１６０を含むＴＣＲ  ＡＢＤなどの１つ以上の非免疫グロブリンベースのＡＢＤを含むＭＢＭである）。
【０６０３】
特定の態様において、薬物部分は、細胞傷害性又は細胞増殖抑制作用を発揮する。一実施形態において、薬物部分は、マイタンシノイド、キネシン様タンパク質ＫＩＦ１１阻害剤、Ｖ−ＡＴＰアーゼ（液胞型Ｈ＋  −ＡＴＰアーゼ）阻害剤、アポトーシス促進剤、Ｂｃｌ２（Ｂ細胞リンパ腫２）阻害剤、ＭＣＬ１（骨髄細胞白血病１）阻害剤、ＨＳＰ９０（熱ショックタンパク質９０）阻害剤、ＩＡＰ（アポトーシスの阻害剤）阻害剤、ｍＴＯＲ（ラパマイシンの機構的標的）阻害剤、微小管安定剤、微小管不安定化剤、オーリスタチン、ドラスタチン、ＭｅｔＡＰ（メチオニンアミノペプチダーゼ）、ＣＲＭ１（染色体維持１）阻害剤、ＤＰＰＩＶ（ジペプチジルペプチダーゼＩＶ）阻害剤、プロテアソーム阻害剤、ミトコンドリアにおけるホスホリル移動反応の阻害剤、タンパク質合成阻害剤、キナーゼ阻害剤、ＣＤＫ２（サイクリン依存性キナーゼ２）阻害剤、ＣＤＫ９（サイクリン依存性キナーゼ９）阻害剤、キネシン阻害剤、ＨＤＡＣ（ヒストンデアセチラーゼ）阻害剤、ＤＮＡ損傷剤、ＤＮＡアルキル化剤、ＤＮＡ挿入剤、ＤＮＡ小溝結合剤、ＲＮＡポリメラーゼ阻害剤、トポイソメラーゼ阻害剤又はＤＨＦＲ（ジヒドロ葉酸レダクターゼ）阻害剤から選択される。ある実施形態において、薬物部分は、放射性金属イオン、例えば２１３Ｂｉなどのα放射体又は１３１Ｉｎ、１３１ＬＵ、１３１Ｙ、１３１Ｈｏ、１３１Ｓｍを含むがこれらに限定されない放射性金属イオンをポリペプチドにコンジュゲートするのに有用な大環状キレート剤である。一実施形態において、大環状キレート剤は、１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−Ｎ，Ｎ’，Ｎ’’，Ｎ’’’−四酢酸（ＤＯＴＡ）である。
【０６０４】
一実施形態において、リンカーは、切断性リンカー、非切断性リンカー、親水性リンカー、プロチャージリンカー又はジカルボン酸ベースのリンカーから選択される。
【０６０５】
ある実施形態において、ＡＤＣは、構造式（Ｉ）：
［Ｄ−Ｌ−ＸＹ］ｎ−Ａｂ
で表される化合物又はその塩であり、式中、各「Ｄ」が、互いに独立して、細胞傷害性及び／又は細胞増殖抑制性薬剤（「薬物」）を表し；各「Ｌ」が、互いに独立して、リンカーを表し；「Ａｂ」が、本明細書に記載されるＢＣＭＡ結合分子を表し；各「ＸＹ」が、リンカー上の官能基Ｒｘと抗体上の「相補的な」官能基Ｒｙとの間に形成される連結を表し、ｎが、ＡＤＣに連結される薬物の数又はＡＤＣの薬物対抗体比（ＤＡＲ）を表す。
【０６０６】
ＡＤＣを含み得る様々な抗体（Ａｂ）のある実施形態は、上述されるＢＣＭＡ結合分子の様々な実施形態を含む。
【０６０７】
構造式（Ｉ）のＡＤＣ及び／又は塩のある実施形態において、各Ｄが同じであり、且つ／又は各Ｌが同じである。
【０６０８】
本開示のＡＤＣを含み得る細胞傷害性及び／又は細胞増殖抑制性薬剤（Ｄ）及びリンカー（Ｌ）のある実施形態並びにＡＤＣに連結される細胞傷害性及び／又は細胞増殖抑制性薬剤の数が以下により詳細に記載される。
【０６０９】
７．９．１．細胞傷害性及び／又は細胞増殖抑制性薬剤
細胞傷害性及び／又は細胞増殖抑制性薬剤は、細胞、特に癌細胞及び／又は腫瘍細胞の成長及び／又は複製を阻害し、且つ／又は細胞、特に癌細胞及び／又は腫瘍細胞を死滅させることが知られている任意の薬剤であり得る。細胞傷害特性及び／又は細胞増殖抑制特性を有する多くの薬剤が文献において公知である。細胞傷害性及び／又は細胞増殖抑制性薬剤の種類の非限定的な例としては、例として、限定はされないが、放射性核種、アルキル化剤、トポイソメラーゼＩ阻害剤、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤、ＤＮＡ挿入剤（例えば、小溝結合剤などの溝結合剤）、ＲＮＡ／ＤＮＡ代謝拮抗剤、細胞周期調節剤、キナーゼ阻害剤、タンパク質合成阻害剤、ヒストンデアセチラーゼ阻害剤、ミトコンドリア阻害剤及び抗有糸分裂剤が挙げられる。
【０６１０】
これらの様々な種類のいくつかの中の薬剤の特定の非限定的な例が以下に示される。
【０６１１】
アルキル化剤：アサレイ（ａｓａｌｅｙ）（（Ｌ−ロイシン、Ｎ−［Ｎ−アセチル−４−［ビス−（２−クロロエチル）アミノ］−ＤＬ−フェニルアラニル］−、エチルエステル；ＮＳＣ  １６７７８０；ＣＡＳ登録番号３５７７８９７））；ＡＺＱ（（１，４−シクロヘキサジエン−１，４−ジカルバミン酸、２，５−ビス（１−アジリジニル）−３，６−ジオキソ−、ジエチルエステル；ＮＳＣ  １８２９８６；ＣＡＳ登録番号５７９９８６８２））；ＢＣＮＵ（（Ｎ，Ｎ’−ビス（２−クロロエチル）−Ｎ−ニトロソウレア；ＮＳＣ  ４０９９６２；ＣＡＳ登録番号１５４９３８））；ブスルファン（１，４−ブタンジオールジメタンスルホネート；ＮＳＣ  ７５０；ＣＡＳ登録番号５５９８１）；（カルボキシフタラト）白金（ＮＳＣ  ２７１６４；ＣＡＳ登録番号６５２９６８１３）；ＣＢＤＣＡ（（シス−（１，１−シクロブタンジカルボキシラト）ジアミン白金（ＩＩ））；ＮＳＣ  ２４１２４０；ＣＡＳ登録番号４１５７５９４４））；ＣＣＮＵ（（Ｎ−（２−クロロエチル）−Ｎ’−シクロヘキシル−Ｎ−ニトロソウレア；ＮＳＣ  ７９０３７；ＣＡＳ登録番号１３０１０４７４））；ＣＨＩＰ（イプロプラチン；ＮＳＣ  ２５６９２７）；クロラムブシル（ＮＳＣ  ３０８８；ＣＡＳ登録番号３０５０３３）；クロロゾトシン（（２−［［［（２−クロロエチル）ニトロソアミノ］カルボニル］アミノ］−２−デオキシ−Ｄ−グルコピラノース；ＮＳＣ  １７８２４８；ＣＡＳ登録番号５４７４９９０５））；シス−白金（シスプラチン；ＮＳＣ  １１９８７５；ＣＡＳ登録番号１５６６３２７１）；クロメソン（ＮＳＣ  ３３８９４７；ＣＡＳ登録番号８８３４３７２０）；シアノモルホリノドキソルビシン（ＮＣＳ  ３５７７０４；ＣＡＳ登録番号８８２５４０７３）；シクロジソン（ＮＳＣ  ３４８９４８；ＣＡＳ登録番号９９５９１７３８）；ジアンヒドロガラクチトール（５，６−ジエポキシズルシトール；ＮＳＣ  １３２３１３；ＣＡＳ登録番号２３２６１２０３）；フルオロドーパン（ｆｌｕｏｒｏｄｏｐａｎ）（（５−［（２−クロロエチル）−（２−フルオロエチル）アミノ］−６−メチル−ウラシル；ＮＳＣ  ７３７５４；ＣＡＳ登録番号８３４９１３）；ヘプスルファム（ＮＳＣ  ３２９６８０；ＣＡＳ登録番号９６８９２５７８）；ヒカントン（ＮＳＣ  １４２９８２；ＣＡＳ登録番号２３２５５９３８）；メルファラン（ＮＳＣ  ８８０６；ＣＡＳ登録番号３２２３０７２）；メチルＣＣＮＵ（（１−（２−クロロエチル）−３−（トランス−４−メチルシクロヘキサン）−１−ニトロソウレア；ＮＳＣ  ９５４４１；１３９０９０９６）；マイトマイシンＣ（ＮＳＣ  ２６９８０；ＣＡＳ登録番号５００７７）；ミトゾラミド（ｍｉｔｏｚｏｌａｍｉｄｅ）（ＮＳＣ  ３５３４５１；ＣＡＳ登録番号８５６２２９５３）；ナイトロジェンマスタード（（ビス（２−クロロエチル）メチルアミン塩酸塩；ＮＳＣ  ７６２；ＣＡＳ登録番号５５８６７）；ＰＣＮＵ（（１−（２−クロロエチル）−３−（２，６−ジオキソ−３−ピペリジル）−１−ニトロソウレア；ＮＳＣ  ９５４６６；ＣＡＳ登録番号１３９０９０２９））；ピペラジンアルキル化剤（（１−（２−クロロエチル）−４−（３−クロロプロピル）−ピペラジン二塩酸塩；ＮＳＣ  ３４４００７））；ピペラジンジオン（ＮＳＣ  １３５７５８；ＣＡＳ登録番号４１１０９８０２）；ピポブロマン（（Ｎ，Ｎ−ビス（３−ブロモプロピオニル）ピペラジン；ＮＳＣ  ２５１５４；ＣＡＳ登録番号５４９１１））；ポルフィロマイシン（Ｎ−メチルマイトマイシンＣ；ＮＳＣ  ５６４１０；ＣＡＳ登録番号８０１５２５）；スピロヒダントインマスタード（ＮＳＣ  １７２１１２；ＣＡＳ登録番号５６６０５１６４）；テロキシロン（イソシアヌル酸トリグリシジル；ＮＳＣ  ２９６９３４；ＣＡＳ登録番号２４５１６２９）；テトラプラチン（ＮＳＣ  ３６３８１２；ＣＡＳ登録番号６２８１６９８２）；チオ−テパ（Ｎ，Ｎ’，Ｎ’’−トリ−１，２−エタンジイルチオホスホラミド；ＮＳＣ  ６３９６；ＣＡＳ登録番号５２２４４）；トリエチレンメラミン（ＮＳＣ  ９７０６；ＣＡＳ登録番号５１１８３）；ウラシルナイトロジェンマスタード（デスメチルドーパン（ｄｅｓｍｅｔｈｙｌｄｏｐａｎ）；ＮＳＣ  ３４４６２；ＣＡＳ登録番号６６７５１）；Ｙｏｓｈｉ−８６４（（ビス（３−メシルオキシプロピル）アミン塩酸塩；ＮＳＣ  １０２６２７；ＣＡＳ登録番号３４５８２２８）。
【０６１２】
トポイソメラーゼＩ阻害剤：カンプトテシン（ＮＳＣ  ９４６００；ＣＡＳ登録番号７６８９−０３−４）；様々なカンプトテシン誘導体及び類似体（例えば、ＮＳＣ  １００８８０、ＮＳＣ  ６０３０７１、ＮＳＣ  １０７１２４、ＮＳＣ  ６４３８３３、ＮＳＣ  ６２９９７１、ＮＳＣ  ２９５５００、ＮＳＣ  ２４９９１０、ＮＳＣ  ６０６９８５、ＮＳＣ  ７４０２８、ＮＳＣ  １７６３２３、ＮＳＣ  ２９５５０１、ＮＳＣ  ６０６１７２、ＮＳＣ  ６０６１７３、ＮＳＣ  ６１０４５８、ＮＳＣ  ６１８９３９、ＮＳＣ  ６１０４５７、ＮＳＣ  ６１０４５９、ＮＳＣ  ６０６４９９、ＮＳＣ  ６１０４５６、ＮＳＣ  ３６４８３０及びＮＳＣ  ６０６４９７）；モルホリンイソキソルビシン（ｍｏｒｐｈｏｌｉｎｉｓｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ）（ＮＳＣ  ３５４６４６；ＣＡＳ登録番号８９１９６０４３）；ＳＮ−３８（ＮＳＣ  ６７３５９６；ＣＡＳ登録番号８６６３９−５２−３）。
【０６１３】
トポイソメラーゼＩＩ阻害剤：ドキソルビシン（ＮＳＣ  １２３１２７；ＣＡＳ登録番号２５３１６４０９）；アモナフィド（ベンズイソキノリンジオン；ＮＳＣ  ３０８８４７；ＣＡＳ登録番号６９４０８８１７）；ｍ−ＡＭＳＡ（（４’−（９−アクリジニルアミノ）−３’−メトキシメタンスルホンアニリド；ＮＳＣ  ２４９９９２；ＣＡＳ登録番号５１２６４１４３））；アントラピラゾール誘導体（（ＮＳＣ  ３５５６４４）；エトポシド（ＶＰ−１６；ＮＳＣ  １４１５４０；ＣＡＳ登録番号３３４１９４２０）；ピラゾロアクリジン（（ピラゾロ［３，４，５−ｋｌ］アクリジン−２（６Ｈ）−プロパンアミン、９−メトキシ−Ｎ、Ｎ−ジメチル−５−ニトロ−、モノメタンスルホネート；ＮＳＣ  ３６６１４０；ＣＡＳ登録番号９９００９２１９）；ビサントレン塩酸塩（ＮＳＣ  ３３７７６６；ＣＡＳ登録番号７１４３９６８４）；ダウノルビシン（ＮＳＣ  ８２１１５１；ＣＡＳ登録番号２３５４１５０６）；デオキシドキソルビシン（ＮＳＣ  ２６７４６９；ＣＡＳ登録番号６３９５００６１）；ミトキサントロン（ＮＳＣ  ３０１７３９；ＣＡＳ登録番号７０４７６８２３）；メノガリル（ＮＳＣ  ２６９１４８；ＣＡＳ登録番号７１６２８９６１）；Ｎ，Ｎ−ジベンジルダウノマイシン（ＮＳＣ  ２６８２４２；ＣＡＳ登録番号７０８７８５１２）；オキサントラゾール（ＮＳＣ  ３４９１７４；ＣＡＳ登録番号１０５１１８１２５）；ルビダゾン（ＮＳＣ  １６４０１１；ＣＡＳ登録番号３６５０８７１１）；テニポシド（ＶＭ−２６；ＮＳＣ  １２２８１９；ＣＡＳ登録番号２９７６７２０２）。
【０６１４】
ＤＮＡ挿入剤：アントラマイシン（ＣＡＳ登録番号４８０３２７４）；チカマイシンＡ（ＣＡＳ登録番号８９６７５３７６）；トメイマイシン（ＣＡＳ登録番号３５０５０５５６）；ＤＣ−８１（ＣＡＳ登録番号８１３０７２４６）；シビロマイシン（ＣＡＳ登録番号１２６８４３３２）；ピロロベンゾジアゼピン誘導体（ＣＡＳ登録番号９４５４９００９５）；ＳＧＤ−１８８２（（Ｓ）−２−（４−アミノフェニル）−７−メトキシ−８−（３−４（Ｓ）−７−メトキシ−２−（４−メトキシフェニル）−−５−オキソ−５，１１ａ−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−８−イル）オキシ）プロポキシ）−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−５（１１ａＨ）−オン）；ＳＧ２０００（ＳＪＧ−１３６；（１１ａＳ，１１ａ’Ｓ）−８，８’−（プロパン−１，３−ジイルビス（オキシ））ビス（７−メトキシ−２−メチレン−２，３−−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−５（１１ａＨ）−オン）；ＮＳＣ  ６９４５０１；ＣＡＳ登録番号２３２９３１５７６）。
【０６１５】
ＲＮＡ／ＤＮＡ代謝拮抗剤：Ｌ−アラノシン（ＮＳＣ  １５３３５３；ＣＡＳ登録番号５９１６３４１６）；５−アザシチジン（ＮＳＣ  １０２８１６；ＣＡＳ登録番号３２０６７２）；５−フルオロウラシル（ＮＳＣ  １９８９３；ＣＡＳ登録番号５１２１８）；アシビシン（ＮＳＣ  １６３５０１；ＣＡＳ登録番号４２２２８９２２）；アミノプテリン誘導体Ｎ−［２−クロロ−５−［［（２，４−ジアミノ−５−メチル−６−キナゾリニル）メチル］アミノ］ベンゾイル−］Ｌ−アスパラギン酸（ＮＳＣ  １３２４８３）；アミノプテリン誘導体Ｎ−［４−［［（２，４−ジアミノ−５−エチル−６−キナゾリニル）メチル］アミノ］ベンゾイル］Ｌ−アスパラギン酸（ＮＳＣ  １８４６９２）；アミノプテリン誘導体Ｎ−［２−クロロ−４−［［（２，４−ジアミノ−６−プテリジニル）メチル］アミノ］ベンゾイル］Ｌ−アスパラギン酸一水和物（ＮＳＣ  １３４０３３）；アンチフォ（ａｎｔｉｆｏ）（（Ｎα−（４−アミノ−４−デオキシプテロイル）−Ｎ７−ヘミフタロイル−Ｌ−オルニチン；ＮＳＣ  ６２３０１７））；ベイカーの可溶性アンチフォル（Ｂａｋｅｒ’ｓ  ｓｏｌｕｂｌｅ  ａｎｔｉｆｏｌ）（ＮＳＣ  １３９１０５；ＣＡＳ登録番号４１１９１０４２）；ジクロルアリルローソン（ｌａｗｓｏｎｅ）（（２−（３，３−ジクロロアリル）−３−ヒドロキシ−１，４−ナフトキノン；ＮＳＣ  １２６７７１；ＣＡＳ登録番号３６４１７１６０）；ブレキナル（ＮＳＣ  ３６８３９０；ＣＡＳ登録番号９６２０１８８６）；フトラフル（（プロドラッグ；５−フルオロ−１−（テトラヒドロ−２−フリル）−ウラシル；ＮＳＣ  １４８９５８；ＣＡＳ登録番号３７０７６６８９）；５，６−ジヒドロ−５−アザシチジン（ＮＳＣ  ２６４８８０；ＣＡＳ登録番号６２４０２３１７）；メトトレキサート（ＮＳＣ  ７４０；ＣＡＳ登録番号５９０５２）；メトトレキサート誘導体（Ｎ−［［４−［［（２，４−ジアミノ−６−プテリジニル）メチル］メチルアミノ］−１−ナフタレニル］カルボニル］Ｌ−グルタミン酸；ＮＳＣ  １７４１２１）；ＰＡＬＡ（（Ｎ−（ホスホノアセチル）−Ｌ−アスパルテート；ＮＳＣ  ２２４１３１；ＣＡＳ登録番号６０３４２５５６５）；ピラゾフリン（ＮＳＣ  １４３０９５；ＣＡＳ登録番号３０８６８３０５）；トリメトレキサート（ＮＳＣ  ３５２１２２；ＣＡＳ登録番号８２９５２６４５）。
【０６１６】
ＤＮＡ代謝拮抗剤：３−ＨＰ（ＮＳＣ  ９５６７８；ＣＡＳ登録番号３８１４７９７）；２’−デオキシ−５−フルオロウリジン（ＮＳＣ  ２７６４０；ＣＡＳ登録番号５０９１９）；５−ＨＰ（ＮＳＣ  １０７３９２；ＣＡＳ登録番号１９４９４８９４）；α−ＴＧＤＲ（α−２’−デオキシ−６−チオグアノシン；ＮＳＣ  ７１８５１  ＣＡＳ登録番号２１３３８１５）；アフィディコリングリシネート（ＮＳＣ  ３０３８１２；ＣＡＳ登録番号９２８０２８２２）；ａｒａ  Ｃ（シトシンアラビノシド；ＮＳＣ  ６３８７８；ＣＡＳ登録番号６９７４９）；５−アザ−２’−デオキシシチジン（ＮＳＣ  １２７７１６；ＣＡＳ登録番号２３５３３３５）；β−ＴＧＤＲ（β−２’−デオキシ−６−チオグアノシン；ＮＳＣ  ７１２６１；ＣＡＳ登録番号７８９６１７）；シクロシチジン（ＮＳＣ  １４５６６８；ＣＡＳ登録番号１０２１２２５６）；グアナゾール（ＮＳＣ  １８９５；ＣＡＳ登録番号１４５５７７２）；ヒドロキシウレア（ＮＳＣ  ３２０６５；ＣＡＳ登録番号１２７０７１）；イノシングリコジアルデヒド（ＮＳＣ  １１８９９４；ＣＡＳ登録番号２３５９０９９０）；マクベシンＩＩ（ＮＳＣ  ３３０５００；ＣＡＳ登録番号７３３４１７３８）；ピラゾロイミダゾール（ＮＳＣ  ５１１４３；ＣＡＳ登録番号６７１４２９０）；チオグアニン（ＮＳＣ  ７５２；ＣＡＳ登録番号１５４４２７）；チオプリン（ＮＳＣ  ７５５；ＣＡＳ登録番号５０４４２）。
【０６１７】
細胞周期調節剤：シリビニン（ＣＡＳ登録番号２２８８８−７０−６）；エピガロカテキンガレート（ＥＧＣＧ；ＣＡＳ登録番号９８９５１５）；プロシアニジン誘導体（例えば、プロシアニジンＡ１［ＣＡＳ登録番号１０３８８３０３０］、プロシアニジンＢ１［ＣＡＳ登録番号２０３１５２５７］、プロシアニジンＢ４［ＣＡＳ登録番号２９１０６５１２］、アレカタンニンＢ１［ＣＡＳ登録番号７９７６３２８３］）；イソフラボン（例えば、ゲニステイン［４’，５，７−トリヒドロキシイソフラボン；ＣＡＳ登録番号４４６７２０］、ダイゼイン［４’，７−ジヒドロキシイソフラボン、ＣＡＳ登録番号４８６６６８］；インドール−３−カルビノール（ＣＡＳ登録番号７０００６１）；ケルセチン（ＮＳＣ  ９２１９；ＣＡＳ登録番号１１７３９５）；エストラムスチン（ＮＳＣ  ８９２０１；ＣＡＳ登録番号２９９８５７４）；ノコダゾール（ＣＡＳ登録番号３１４３０１８９）；ポドフィロトキシン（ＣＡＳ登録番号５１８２８５）；ビノレルビンタートレート（ＮＳＣ  ６０８２１０；ＣＡＳ登録番号１２５３１７３９７）；クリプトフィシン（ＮＳＣ  ６６７６４２；ＣＡＳ登録番号１２４６８９６５２）。
【０６１８】
キナーゼ阻害剤：アファチニブ（ＣＡＳ登録番号８５０１４０７２６）；アキシチニブ（ＣＡＳ登録番号３１９４６０８５０）；ＡＲＲＹ−４３８１６２（ビニメチニブ）（ＣＡＳ登録番号６０６１４３８９９）；ボスチニブ（ＣＡＳ登録番号３８０８４３７５４）；カボザンチニブ（ＣＡＳ登録番号１１４０９０９４８３）；セリチニブ（ＣＡＳ登録番号１０３２９００２５６）；クリゾチニブ（ＣＡＳ登録番号８７７３９９５２５）；ダブラフェニブ（ＣＡＳ登録番号１１９５７６５４５７）；ダサチニブ（ＮＳＣ  ７３２５１７；ＣＡＳ登録番号３０２９６２４９８）；エルロチニブ（ＮＳＣ  ７１８７８１；ＣＡＳ登録番号１８３３１９６９９）；エベロリムス（ＮＳＣ  ７３３５０４；ＣＡＳ登録番号１５９３５１６９６）；ホスタマチニブ（ＮＳＣ  ７４５９４２；ＣＡＳ登録番号９０１１１９３５５）；ゲフィチニブ（ＮＳＣ  ７１５０５５；ＣＡＳ登録番号１８４４７５３５２）；イブルチニブ（ＣＡＳ登録番号９３６５６３９６１）；イマチニブ（ＮＳＣ  ７１６０５１；ＣＡＳ登録番号２２０１２７５７１）；ラパチニブ（ＣＡＳ登録番号３８８０８２７８８）；レンバチニブ（ＣＡＳ登録番号８５７８９０３９２）；ムブリチニブ（ＣＡＳ  ３６６０１７０９６）；ニロチニブ（ＣＡＳ登録番号９２３２８８９５３）；ニンテダニブ（ＣＡＳ登録番号６５６２４７１７５）；パルボサイクリブ（ＣＡＳ登録番号５７１１９０３０２）；パゾパニブ（ＮＳＣ  ７３７７５４；ＣＡＳ登録番号６３５７０２６４６）；ペガプタニブ（ＣＡＳ登録番号２２２７１６８６１）；ポナチニブ（ＣＡＳ登録番号１１１４５４４３１８）；ラパマイシン（ＮＳＣ  ２２６０８０；ＣＡＳ登録番号５３１２３８８９）；レゴラフェニブ（ＣＡＳ登録番号７５５０３７０３７）；ＡＰ  ２３５７３（リダフォロリムス）（ＣＡＳ登録番号５７２９２４５４０）；ＩＮＣＢ０１８４２４（ルキソリチニブ）（ＣＡＳ登録番号１０９２９３９１７７）；ＡＲＲＹ−１４２８８６（セルメチニブ）（ＮＳＣ  ７４１０７８；ＣＡＳ登録番号６０６１４３−５２−６）；シロリムス（ＮＳＣ  ２２６０８０；ＣＡＳ登録番号５３１２３８８９）；ソラフェニブ（ＮＳＣ  ７２４７７２；ＣＡＳ登録番号４７５２０７５９１）；スニチニブ（ＮＳＣ  ７３６５１１；ＣＡＳ登録番号３４１０３１５４７）；トファシチニブ（ＣＡＳ登録番号４７７６００７５２）；テムシロリムス（ＮＳＣ  ６８３８６４；ＣＡＳ登録番号１６３６３５０４３）；トラメチニブ（ＣＡＳ登録番号８７１７００１７３）；バンデタニブ（ＣＡＳ登録番号４４３９１３７３３）；ベムラフェニブ（ＣＡＳ登録番号９１８５０４６５１）；ＳＵ６６５６（ＣＡＳ登録番号３３０１６１８７０）；ＣＥＰ−７０１（レスタウルチニブ）（ＣＡＳ登録番号１１１３５８８８４）；ＸＬ０１９（ＣＡＳ登録番号９４５７５５５６６）；ＰＤ−３２５９０１（ＣＡＳ登録番号３９１２１０１０９）；ＰＤ−９８０５９（ＣＡＳ登録番号１６７８６９２１８）；ＰＩ−１０３（ＣＡＳ登録番号３７１９３５７４９）、ＰＰ２４２（ＣＡＳ登録番号１０９２３５１６７１）、ＰＰ３０（ＣＡＳ登録番号１０９２７８８０９４）、トリン１（ＣＡＳ登録番号１２２２９９８３６８）、ＬＹ２９４００２（ＣＡＳ登録番号１５４４４７３６６）、ＸＬ−１４７（ＣＡＳ登録番号９３４５２６８９３）、ＣＡＬ−１２０（ＣＡＳ登録番号８７０２８１３４８）、ＥＴＰ−４５６５８（ＣＡＳ登録番号１１９８３５７７９７）、ＰＸ  ８６６（ＣＡＳ登録番号５０２６３２６６８）、ＧＤＣ−０９４１（ＣＡＳ登録番号９５７０５４３０７）、ＢＧＴ２２６（ＣＡＳ登録番号１２４５５３７６８１）、ＢＥＺ２３５（ＣＡＳ登録番号９１５０１９６５７）、ＸＬ−７６５（ＣＡＳ登録番号９３４４９３７６２）を含むＡＴＰ競合ＴＯＲＣ１／ＴＯＲＣ２阻害剤。
【０６１９】
タンパク質合成阻害剤：アクリフラビン（ＣＡＳ登録番号６５５８９７００）；アミカシン（ＮＳＣ  １７７００１；ＣＡＳ登録番号３９８３１５５５）；アルベカシン（ＣＡＳ登録番号５１０２５８５５）；アストロマイシン（ＣＡＳ登録番号５５７７９０６１）；アジスロマイシン（ＮＳＣ  ６４３７３２；ＣＡＳ登録番号８３９０５０１５）；ベカナマイシン（ＣＡＳ登録番号４６９６７６８）；クロルテトラサイクリン（ＮＳＣ  １３２５２；ＣＡＳ登録番号６４７２２）；クラリスロマイシン（ＮＳＣ  ６４３７３３；ＣＡＳ登録番号８１１０３１１９）；クリンダマイシン（ＣＡＳ登録番号１８３２３４４９）；クロモサイクリン（ＣＡＳ登録番号１１８１５４０）；シクロヘキシミド（ＣＡＳ登録番号６６８１９）；ダクチノマイシン（ＮＳＣ  ３０５３；ＣＡＳ登録番号５０７６０）；ダルホプリスチン（ＣＡＳ登録番号１１２３６２５０２）；デメクロサイクリン（ＣＡＳ登録番号１２７３３３）；ジベカシン（ＣＡＳ登録番号３４４９３９８６）；ジヒドロストレプトマイシン（ＣＡＳ登録番号１２８４６１）；ジリスロマイシン（ＣＡＳ登録番号６２０１３０４１）；ドキシサイクリン（ＣＡＳ登録番号１７０８６２８１）；エメチン（ＮＳＣ  ３３６６９；ＣＡＳ登録番号４８３１８１）；エリスロマイシン（ＮＳＣ  ５５９２９；ＣＡＳ登録番号１１４０７８）；フルリスロマイシン（ＣＡＳ登録番号８３６６４２０８）；フラマイセチン（ネオマイシンＢ；ＣＡＳ登録番号１１９０４０）；ゲンタマイシン（ＮＳＣ  ８２２６１；ＣＡＳ登録番号１４０３６６３）；チゲサイクリン（ＣＡＳ登録番号２２０６２００９７）などのグリシルサイクリン；ハイグロマイシンＢ（ＣＡＳ登録番号３１２８２０４９）；イセパマイシン（ＣＡＳ登録番号６７８１４７６０）；ジョサマイシン（ＮＳＣ  １２２２２３；ＣＡＳ登録番号１６８４６２４５）；カナマイシン（ＣＡＳ登録番号８０６３０７８）；テリスロマイシン（ＣＡＳ登録番号１９１１１４４８４）、セスロマイシン（ＣＡＳ登録番号２０５１１０４８１）及びソリスロマイシン（ＣＡＳ登録番号７６０９８１８３７）などのケトライド；リンコマイシン（ＣＡＳ登録番号１５４２１２）；リメサイクリン（ＣＡＳ登録番号９９２２１２）；メクロサイクリンン（ＮＳＣ  ７８５０２；ＣＡＳ登録番号２０１３５８３）；メタサイクリン（ロンドマイシン；ＮＳＣ  ３５６４６３；ＣＡＳ登録番号９１４００１）；ミデカマイシン（ＣＡＳ登録番号３５４５７８０８）；ミノサイクリン（ＮＳＣ  １４１９９３；ＣＡＳ登録番号１０１１８９０８）；ミオカマイシン（ＣＡＳ登録番号５５８８１０７７）；ネオマイシン（ＣＡＳ登録番号１１９０４０）；ネチルマイシン（ＣＡＳ登録番号５６３９１５６１）；オレアンドマイシン（ＣＡＳ登録番号３９２２９０５）；エペレゾリド（ＣＡＳ登録番号１６５８０００４４）、リネゾリド（ＣＡＳ登録番号１６５８０００３３）、ポシゾリド（ＣＡＳ登録番号２５２２６００２９）、ラデゾリド（ＣＡＳ登録番号８６９８８４７８６）、ランベゾリド（ＣＡＳ登録番号３９２６５９３８０）、ステゾリド（ＣＡＳ登録番号１６８８２８５８８）、テジゾリド（ＣＡＳ登録番号８５６８６７５５５）などのオキサゾリジノン；オキシテトラサイクリン（ＮＳＣ  ９１６９；ＣＡＳ登録番号２０５８４６０）；パロモマイシン（ＣＡＳ登録番号７５４２３７２）；ペニメピサイクリン（ＣＡＳ登録番号４５９９６０４）；ペプチジルトランスフェラーゼ阻害剤、例えばクロラムフェニコール（ＮＳＣ  ３０６９；ＣＡＳ登録番号５６７５７）並びにアジダムフェニコール（ＣＡＳ登録番号１３８３８０８９）、フロルフェニコール（ＣＡＳ登録番号７３２３１３４２）及びチアムフェニコール（ＣＡＳ登録番号１５３１８４５３）などの誘導体並びにレタパムリン（ＣＡＳ登録番号２２４４５２６６８）、チアムリン（ＣＡＳ登録番号５５２９７９５５）、バルネムリン（ＣＡＳ登録番号１０１３１２９２９）などのプロイロムチリン；ピルリマイシン（ＣＡＳ登録番号７９５４８７３５）；ピューロマイシン（ＮＳＣ  ３０５５；ＣＡＳ登録番号５３７９２）；キヌプリスチン（ＣＡＳ登録番号１２０１３８５０３）；リボスタマイシン（ＣＡＳ登録番号５３７９７３５６）；ロキタマイシン（ＣＡＳ登録番号７４０１４５１０）；ロリテトラサイクリン（ＣＡＳ登録番号７５１９７３）；ロキシスロマイシン（ＣＡＳ登録番号８０２１４８３１）；シソマイシン（ＣＡＳ登録番号３２３８５１１８）；スペクチノマイシン（ＣＡＳ登録番号１６９５７７８）；スピラマイシン（ＣＡＳ登録番号８０２５８１８）；プリスチナマイシン（ＣＡＳ登録番号２７００７６６０３）、キヌプリスチン／ダルホプリスチン（ＣＡＳ登録番号１２６６０２８９９）及びヴァージニアマイシン（ＣＡＳ登録番号１１００６７６１）などのストレプトグラミン；ストレプトマイシン（ＣＡＳ登録番号５７９２１）；テトラサイクリン（ＮＳＣ  １０８５７９；ＣＡＳ登録番号６０５４８）；トブラマイシン（ＣＡＳ登録番号３２９８６５６４）；トロレアンドマイシン（ＣＡＳ登録番号２７５１０９９）；タイロシン（ＣＡＳ登録番号１４０１６９０）；ベルダマイシン（ＣＡＳ登録番号４９８６３４８１）。
【０６２０】
ヒストンデアセチラーゼ阻害剤：アベキシノスタット（ＣＡＳ登録番号７８３３５５６０２）；ベリノスタット（ＮＳＣ  ７２６６３０；ＣＡＳ登録番号４１４８６４００９）；チダミド（ＣＡＳ登録番号７４３４２００２２）；エンチノスタット（ＣＡＳ登録番号２０９７８３８０２）；ギビノスタット（ＣＡＳ登録番号７３２３０２９９７）；モセチノスタット（ＣＡＳ登録番号７２６１６９７３９）；パノビノスタット（ＣＡＳ登録番号４０４９５０８０７）；キシノスタット（ＣＡＳ登録番号８７５３２０２９９）；レスミノスタット（ＣＡＳ登録番号８６４８１４８８０）；ロミデプシン（ＣＡＳ登録番号１２８５１７０７７）；スルフォラファン（ＣＡＳ登録番号４４７８９３７）；チオウレイドブチロニトリル（Ｋｅｖｅｔｒｉｎ（商標）；ＣＡＳ登録番号６６５９８９０）；バルプロ酸（ＮＳＣ  ９３８１９；ＣＡＳ登録番号９９６６１）；ボリノスタット（ＮＳＣ  ７０１８５２；ＣＡＳ登録番号１４９６４７７８９）；ＡＣＹ−１２１５（リコリノスタット）；ＣＡＳ登録番号１３１６２１４５２４）；ＣＵＤＣ−１０１（ＣＡＳ登録番号１０１２０５４５９９）；ＣＨＲ−２８４５（テフィノスタット（ｔｅｆｉｎｏｓｔａｔ）；ＣＡＳ登録番号９１４３８２６０８）；ＣＨＲ−３９９６（ＣＡＳ登録番号１２３５８５９１３８）；４ＳＣ−２０２（ＣＡＳ登録番号９１０４６２４３０）；ＣＧ２００７４５（ＣＡＳ登録番号９３６２２１３３９）；ＳＢ９３９（プラシノスタット；ＣＡＳ登録番号９２９０１６９６６）。
【０６２１】
ミトコンドリア阻害剤：パンクラチスタチン（ＮＳＣ  ３４９１５６；ＣＡＳ登録番号９６２８１３１１）；ローダミン−１２３（ＣＡＳ登録番号６３６６９７０９）；エデルフォシン（ＮＳＣ  ３２４３６８；ＣＡＳ登録番号７０６４１５１９）；ｄ−α−トコフェロールスクシネート（ＮＳＣ  １７３８４９；ＣＡＳ登録番号４３４５０３３）；化合物１１β（ＣＡＳ登録番号８６５０７０３７７）；アスピリン（ＮＳＣ  ４０６１８６；ＣＡＳ登録番号５０７８２）；エリプチシン（ＣＡＳ登録番号５１９２３３）；ベルベリン（ＣＡＳ登録番号６３３６５８）；セルレニン（ＣＡＳ登録番号１７３９７８９６）；ＧＸ０１５−０７０（Ｏｂａｔｏｃｌａｘ（登録商標）；１Ｈ−インドール、２−（２−（（３，５−ジメチル−１Ｈ−ピロール−２−イル）メチレン）−３−メトキシ−２Ｈ−ピロール−５−イル）−；ＮＳＣ  ７２９２８０；ＣＡＳ登録番号８０３７１２６７６）；セラストロール（トリプテリン；ＣＡＳ登録番号３４１５７８３０）；メトホルミン（ＮＳＣ  ９１４８５；ＣＡＳ登録番号１１１５７０４）；ブリリアントグリーン（Ｂｒｉｌｌｉａｎｔ  ｇｒｅｅｎ）（ＮＳＣ  ５０１１；ＣＡＳ登録番号６３３０３４）；ＭＥ−３４４（ＣＡＳ登録番号１３７４５２４５５６）。
【０６２２】
抗有糸分裂剤：アロコルヒチン（ＮＳＣ  ４０６０４２）；ＭＭＡＥ（モノメチルオーリスタチンＥ；ＣＡＳ登録番号４７４６４５−２７−７）及びＭＭＡＦ（モノメチルオーリスタチンＦなどのオーリスタチン；ＣＡＳ登録番号７４５０１７−９４−１；ハリコンドリンＢ（ＮＳＣ  ６０９３９５）；コルヒチン（ＮＳＣ  ７５７；ＣＡＳ登録番号６４８６８）；コルヒチン誘導体（Ｎ−ベンゾイル−デアセチルベンズアミド；ＮＳＣ  ３３４１０；ＣＡＳ登録番号６３９８９７５３）；ドラスタチン１０（ＮＳＣ  ３７６１２８；ＣＡＳ登録番号１１０４１７−８８−４）；マイタンシン（ＮＳＣ  １５３８５８；ＣＡＳ登録番号３５８４６−５３−８）；リゾキシン（ＮＳＣ  ３３２５９８；ＣＡＳ登録番号９０９９６５４６）；タキソール（ＮＳＣ  １２５９７３；ＣＡＳ登録番号３３０６９６２４）；タキソール誘導体（（２’−Ｎ−［３−（ジメチルアミノ）プロピル］グルタメートタキソール；ＮＳＣ  ６０８８３２）；チオコルヒチン（３−デメチルチオコルヒチン；ＮＳＣ  ３６１７９２）；トリチルシステイン（ＮＳＣ  ４９８４２；ＣＡＳ登録番号２７９９０７７）；ビンブラスチン硫酸塩（ＮＳＣ  ４９８４２；ＣＡＳ登録番号１４３６７９）；ビンクリスチン硫酸塩（ＮＳＣ  ６７５７４；ＣＡＳ登録番号２０６８７８２）。
【０６２３】
ＢＣＭＡ結合分子への結合部位を含むか又は含むように修飾され得るこれらの薬剤のいずれかは、本明細書に開示されるＡＤＣに含まれ得る。
【０６２４】
実施形態において、細胞傷害性及び／又は細胞増殖抑制性薬剤は、抗有糸分裂剤である。
【０６２５】
別の実施形態において、細胞傷害性及び／又は細胞増殖抑制性薬剤は、オーリスタチン、例えばモノメチルオーリスタチンＥ（「ＭＭＡＥ：）又はモノメチルオーリスタチンＦ（「ＭＭＡＦ」）である。
【０６２６】
７．９．２．ＡＤＣリンカー
本開示のＡＤＣにおいて、細胞傷害性及び／又は細胞増殖抑制性薬剤は、ＡＤＣリンカーによってＢＣＭＡ結合分子に連結される。細胞傷害性及び／又は細胞増殖抑制性薬剤をＡＤＣのＢＣＭＡ結合分子に連結するＡＤＣリンカーは、短い、長い、疎水性、親水性、可撓性若しくは剛性であり得るか、又はリンカーが異なる特性を有するセグメントを含み得るように、それぞれ独立して、上述される特性の１つ以上を有するセグメントから構成され得る。リンカーは、２つ以上の薬剤をＢＣＭＡ結合分子上の単一の部位に共有結合するように多価であり得るか、又は単一の薬剤をＢＣＭＡ結合分子上の単一の部位に共有結合するように１価であり得る。
【０６２７】
当業者によって理解されるように、ＡＤＣリンカーは、１つの位置で細胞傷害性及び／又は細胞増殖抑制性薬剤への共有結合を形成し、別の位置でＢＣＭＡ結合分子への共有結合を形成することにより、細胞傷害性及び／又は細胞増殖抑制性薬剤をＢＣＭＡ結合分子に連結する。共有結合は、ＡＤＣリンカー上の官能基と、薬剤及びＢＣＭＡ結合分子上の官能基との間の反応によって形成される。本明細書において使用される際、「ＡＤＣリンカー」という表現は、（ｉ）ＡＤＣリンカーを細胞傷害性及び／又は細胞増殖抑制性薬剤に共有結合することが可能な官能基及びＡＤＣリンカーをＢＣＭＡ結合分子に共有結合することが可能な官能基を含む非結合型のＡＤＣリンカー；（ｉｉ）ＡＤＣリンカーをＢＣＭＡ結合分子に共有結合することが可能な官能基を含み、細胞傷害性及び／又は細胞増殖抑制性薬剤に共有結合されるか又は逆も同様である部分結合型のＡＤＣリンカー；及び（ｉｉｉ）細胞傷害性及び／又は細胞増殖抑制性薬剤及びＢＣＭＡ結合分子の両方に共有結合される完全結合型のＡＤＣリンカーを含むことが意図される。本開示のＡＤＣリンカー及びＡＤＣ並びにリンカー−薬剤をＢＣＭＡ結合分子に結合するのに使用されるシントンのある実施形態において、ＡＤＣリンカー上の官能基を含む部分及びＡＤＣリンカーとＢＣＭＡ結合分子との間に形成される共有結合は、それぞれＲｘ及びＸＹとして具体的に示される。
【０６２８】
ＡＤＣリンカーは、細胞外の条件に対して化学的に安定であり得るが、そうである必要はなく、細胞内で開裂し、犠牲になり、且つ／又は他の方法で特異的に分解するように設計され得る。代わりに、細胞内で特異的に開裂又は分解するように設計されていないＡＤＣリンカーが使用され得る。安定な又は不安定なＡＤＣリンカーの選択は、細胞傷害性及び／又は細胞増殖抑制性薬剤の毒性に依存し得る。正常細胞に対して毒性の薬剤について、安定なリンカーが使用され得る。細胞外環境に対するＡＤＣリンカーの化学安定性は、あまり重要でないため、選択的な又は標的化された及び正常細胞に対してより低い毒性を有する薬剤が用いられ得る。ＡＤＣに関連して薬物をＢＣＭＡ結合分子に連結するのに有用な多様なＡＤＣリンカーが公知である。これらのＡＤＣリンカー及び他のＡＤＣリンカーのいずれかは、細胞傷害性及び／又は細胞増殖抑制性薬剤を本開示のＡＤＣのＢＣＭＡ結合分子に連結するのに使用され得る。
【０６２９】
多くの細胞傷害性及び／又は細胞増殖抑制性薬剤を単一のＢＣＭＡ結合分子に連結するのに使用され得る例示的な多価ＡＤＣリンカーは、例えば、国際公開第２００９／０７３４４５号パンフレット；国際公開第２０１０／０６８７９５号パンフレット；国際公開第２０１０／１３８７１９号パンフレット；国際公開第２０１１／１２００５３号パンフレット；国際公開第２０１１／１７１０２０号パンフレット；国際公開第２０１３／０９６９０１号パンフレット；国際公開第２０１４／００８３７５号パンフレット；国際公開第２０１４／０９３３７９号パンフレット；国際公開第２０１４／０９３３９４号パンフレット；国際公開第２０１４／０９３６４０号パンフレットに記載されている。例えば、Ｍｅｒｓａｎａらによって開発されたＦｌｅｘｉｍｅｒリンカー技術は、良好な物理化学的特性を有する高ＤＡＲのＡＤＣを可能にする可能性を有する。以下に示されるように、Ｍｅｒｓａｎａの技術は、一連のエステル結合を介して薬物分子を可溶化ポリアセタール骨格に組み込むことに基づいている。この方法は、良好な物理化学的特性を維持しながら高負荷ＡＤＣ（２０までのＤＡＲ）を提供する。
【０６３０】
樹枝状リンカーのさらなる例は、米国特許出願公開第２００６／１１６４２２号明細書；米国特許出願公開第２００５／２７１６１５号明細書；ｄｅ  Ｇｒｏｏｔ  ｅｔ  ａｌ．，２００３，Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．４２：４４９０−４４９４；Ａｍｉｒ  ｅｔ  ａｌ．，２００３，Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．４２：４４９４−４４９９；Ｓｈａｍｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，２００４，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１２６：１７２６−１７３１；Ｓｕｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００２，Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ＆Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｌｅｔｔｅｒｓ  １２：２２１３−２２１５；Ｓｕｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００３，Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ＆Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  １１：１７６１−１７６８；Ｋｉｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，２００２，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔｅｒｓ  ４３：１９８７−１９９０に見られる。
【０６３１】
使用され得る例示的な１価ＡＤＣリンカーは、例えば、Ｎｏｌｔｉｎｇ，２０１３，Ａｎｔｉｂｏｄｙ−Ｄｒｕｇ  Ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  １０４５：７１−１００；Ｋｉｔｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＣＲＯｓ−ＭＯｓ−−Ｃｈｅｍｉｃａ−ｇｇｉ−−Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｔｏｄａｙ  ３１（４）：３０−３８；Ｄｕｃｒｙ  ｅｔ  ａｌ．，２０１０，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ．２１：５−１３；Ｚｈａｏ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．５４：３６０６−３６２３；米国特許第７，２２３，８３７号明細書；米国特許第８，５６８，７２８号明細書；米国特許第８，５３５，６７８号明細書；及び国際公開第２００４０１０９５７号パンフレットに記載されている。
【０６３２】
例として、限定はされないが、ＡＤＣに含まれ得るいくつかの切断性及び非切断性ＡＤＣリンカーが後述される。
【０６３３】
７．９．２．１．切断性ＡＤＣリンカー
特定の実施形態において、選択されるＡＤＣリンカーは、インビボで切断可能である。切断性ＡＤＣリンカーは、化学的に又は酵素的に不安定な又は分解可能な連結を含み得る。切断性ＡＤＣリンカーは、一般に、細胞質における還元、リソソーム中の酸性条件への曝露又は細胞内の特異的プロテアーゼ若しくは他の酵素による切断など、薬物を遊離させるための細胞内部でのプロセスに依存する。切断性ＡＤＣリンカーは、一般に、化学的に又は酵素的に切断可能な１つ以上の化学結合を組み込む一方、ＡＤＣリンカーの残りの部分は、切断不可能である。特定の実施形態において、ＡＤＣリンカーは、ヒドラゾン及び／又はジスルフィド基などの化学的に不安定な基を含む。化学的に不安定な基を含むリンカーは、原形質といくつかの細胞質画分との間の特性の差を利用する。ヒドラゾン含有ＡＤＣリンカーのための、薬物放出を促進する細胞内条件は、エンドソーム及びリソソームの酸性環境である一方、ジスルフィド含有ＡＤＣリンカーは、高いチオール濃度、例えばグルタチオンを含むサイトゾル中で還元される。特定の実施形態において、化学的に不安定な基を含むＡＤＣリンカーの原形質安定性は、化学的に不安定な基の近くの置換基を用いて立体障害を導入することによって増大され得る。
【０６３４】
ヒドラゾンなどの酸に不安定な基は、血中の中性ｐＨ環境（ｐＨ７．３〜７．５）における体循環中に無傷のままであり、ＡＤＣが細胞の弱酸性のエンドソーム（ｐＨ５．０〜６．５）及びリソソーム（ｐＨ４．５〜５．０）画分中に取り込まれると、加水分解を起こして薬物を放出する。このｐＨ依存性放出機構は、薬物の非特異的放出に関連していた。ＡＤＣリンカーのヒドラゾン基の安定性を高めるために、ＡＤＣリンカーは、化学修飾、例えば置換によって変化されて、循環中の損失を最小限にしながら、リソソームにおけるより効率的な放出を達成するための調節を可能にし得る。
【０６３５】
ヒドラゾン含有ＡＤＣリンカーは、さらなる酸に不安定な切断部位及び／又は酵素的に不安定な切断部位などのさらなる切断部位を含有し得る。例示的なヒドラゾン含有ＡＤＣリンカーを含むＡＤＣは、以下の構造：
【化５】
2021525715.tif 000104
を含み、式中、Ｄ及びＡｂがそれぞれ細胞傷害性及び／又は細胞増殖抑制性薬剤（薬物）及びＡｂを表し、ｎが、ＢＣＭＡ結合分子に連結される薬物−ＡＤＣリンカーの数を表す。リンカー（Ｉｇ）などの特定のＡＤＣリンカーにおいて、ＡＤＣリンカーは、２つの切断性基−ジスルフィド及びヒドラゾン部分を含む。このようなＡＤＣリンカーについて、非修飾遊離薬物の有効な放出は、酸性ｐＨ又はジスルフィド還元及び酸性ｐＨを必要とする。（Ｉｈ）及び（Ｉｉ）などのリンカーは、単一のヒドラゾン切断部位で有効であることが示されている。
【０６３６】
体循環中に無傷のままであり、ＡＤＣが酸性細胞区画に取り込まれると、加水分解を起こして薬物を放出するさらなるＡＤＣリンカーとしては、カーボネートが挙げられる。このようなＡＤＣリンカーは、細胞傷害性及び／又は細胞増殖抑制性薬剤が酸素を介して共有結合され得る場合、有用であり得る。
【０６３７】
ＡＤＣリンカーに含まれ得る他の酸に不安定な基としては、シス−アコニチル含有ＡＤＣリンカーが挙げられる。シス−アコニチル化学は、酸性条件下でのアミド加水分解を加速させるために、アミド結合に並置されたカルボン酸を使用する。
【０６３８】
切断性ＡＤＣリンカーは、ジスルフィド基も含み得る。ジスルフィドは、生理的ｐＨにおいて熱力学的に安定しており、サイトゾルが、細胞外環境と比較して著しく還元性の環境を提供する、細胞内部への取り込み時に薬物を放出するように設計される。ジスルフィド結合の切断は、一般に、ジスルフィド含有ＡＤＣリンカーが循環中で適度に安定しており、サイトゾル中で薬物を選択的に放出するように、（還元された）グルタチオン（ＧＳＨ）などの細胞質チオール補因子の存在を必要とする。細胞内酵素タンパク質ジスルフィドイソメラーゼ又はジスルフィド結合を切断することが可能な同様の酵素も細胞内部でのジスルフィド結合の優先的な切断に寄与し得る。ＧＳＨは、循環中のＧＳＨ又は最も豊富な低分子量チオールであるシステインの約５というかなり低い濃度と比較して、０．５〜１０ｍＭの濃度範囲で細胞内に存在すると報告されている。不規則な血流が低酸素状態を引き起こす腫瘍細胞は、還元酵素の活性促進、したがってさらにより高いグルタチオン濃度をもたらす。特定の実施形態において、ジスルフィド含有ＡＤＣリンカーのインビボ安定性は、ＡＤＣリンカーの化学修飾、例えばジスルフィド結合に隣接する立体障害の使用によって促進され得る。
【０６３９】
例示的なジスルフィド含有ＡＤＣリンカーを含むＡＤＣは、以下の構造：
【化６】
2021525715.tif 000105
を含み、式中、Ｄ及びＡｂがそれぞれ薬物及びＢＣＭＡ結合分子を表し、ｎが、ＢＣＭＡ結合分子に連結される薬物−ＡＤＣリンカーの数を表し、Ｒが、独立して、出現するごとに例えば水素又はアルキルから選択される。特定の実施形態において、ジスルフィド結合に隣接する立体障害の増加により、ＡＤＣリンカーの安定性が高まる。（Ｉｊ）及び（Ｉｌ）などの構造は、１つ以上のＲ基がメチルなどの低級アルキルから選択される場合、インビボ安定性の増大を示す。
【０６４０】
使用され得る別のタイプの切断性ＡＤＣリンカーは、酵素によって特異的に切断されるＡＤＣリンカーである。このようなＡＤＣリンカーは、典型的にペプチドベースであるか、又は酵素の基質としての役割を果たすペプチド領域を含む。ペプチドベースのＡＤＣリンカーは、化学的に不安定なＡＤＣリンカーより原形質及び細胞外環境で安定している傾向がある。リソソームタンパク質分解酵素は、内因性阻害剤及びリソソームと比較して血液の不利に高いｐＨ値により、血中で非常に低い活性を有するため、ペプチド結合は、一般に、良好な血清安定性を有する。ＢＣＭＡ結合分子からの薬物の放出は、リソソームプロテアーゼ、例えばカテプシン及びプラスミンの作用により特異的に起こる。これらのプロテアーゼは、特定の腫瘍細胞中に高いレベルで存在し得る。
【０６４１】
例示的な実施形態において、切断性ペプチドは、Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ（配列番号５１２）、Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｌｅｕ（配列番号５１３）などのテトラペプチド又はＶａｌ−Ｃｉｔ、Ｖａｌ−Ａｌａ、Ｍｅｔ−（Ｄ）Ｌｙｓ、Ａｓｎ−（Ｄ）Ｌｙｓ、Ｖａｌ−（Ｄ）Ａｓｐ、Ｐｈｅ−Ｌｙｓ、Ｉｌｅ−Ｖａｌ、Ａｓｐ−Ｖａｌ、Ｈｉｓ−Ｖａｌ、ＮｏｒＶａｌ−（Ｄ）Ａｓｐ、Ａｌａ−（Ｄ）Ａｓｐ  ５、Ｍｅｔ−Ｌｙｓ、Ａｓｎ−Ｌｙｓ、Ｉｌｅ−Ｐｒｏ、Ｍｅ３Ｌｙｓ−Ｐｒｏ、ＰｈｅｎｙｌＧｌｙ−（Ｄ）Ｌｙｓ、Ｍｅｔ−（Ｄ）Ｌｙｓ、Ａｓｎ−（Ｄ）Ｌｙｓ、Ｐｒｏ−（Ｄ）Ｌｙｓ、Ｍｅｔ−（Ｄ）Ｌｙｓ、Ａｓｎ−（Ｄ）Ｌｙｓ、ＡＭ  Ｍｅｔ−（Ｄ）Ｌｙｓ、Ａｓｎ−（Ｄ）Ｌｙｓ、ＡＷ  Ｍｅｔ−（Ｄ）Ｌｙｓ及びＡｓｎ−（Ｄ）Ｌｙｓなどのジペプチドから選択される。特定の実施形態において、より長いペプチドの疎水性により、より長いポリペプチドにわたって選択され得る。
【０６４２】
ドキソルビシン、マイトマイシン、カンプトテシン、ピロロベンゾジアゼピン、タリソマイシン及びオーリスタチン／オーリスタチンファミリーメンバーなどの薬物をＢＣＭＡ結合分子に連結するのに有用な様々なジペプチドベースの切断性ＡＤＣリンカーが記載されている（Ｄｕｂｏｗｃｈｉｋ  ｅｔ  ａｌ．，１９９８，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．６７：１８６６−１８７２；Ｄｕｂｏｗｃｈｉｋ  ｅｔ  ａｌ．，１９９８，Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．８（２１）：３３４１−３３４６；Ｗａｌｋｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２００２，Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．１２：２１７−２１９；Ｗａｌｋｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２００４，Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．１４：４３２３−４３２７；Ｓｕｔｈｅｒｌａｎｄ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，Ｂｌｏｏｄ  １２２：１４５５−１４６３；及びＦｒａｎｃｉｓｃｏ  ｅｔ  ａｌ．，２００３，Ｂｌｏｏｄ  １０２：１４５８−１４６５を参照されたい）。これらのジペプチドＡＤＣリンカー又はこれらのジペプチドＡＤＣリンカーの修飾形態の全ては、本開示のＡＤＣに使用され得る。使用され得る他のジペプチドＡＤＣリンカーとしては、Ｓｅａｔｔｌｅ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ’  Ｂｒｅｎｔｕｘｉｍａｂ  Ｖｅｎｄｏｔｉｎ  ＳＧＮ−３５（Ａｄｃｅｔｒｉｓ（商標））、Ｓｅａｔｔｌｅ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  ＳＧＮ−７５（抗ＣＤ−７０、Ｖａｌ−Ｃｉｔ−モノメチルオーリスタチンＦ（ＭＭＡＦ）、Ｓｅａｔｔｌｅ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  ＳＧＮ−ＣＤ３３Ａ（抗ＣＤ−３３、Ｖａｌ−Ａｌａ−（ＳＧＤ−１８８２））、Ｃｅｌｌｄｅｘ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓグレンバツムマブ（ＣＤＸ−０１１）（抗ＮＭＢ、Ｖａｌ−Ｃｉｔ−モノメチルオーリスタチンＥ（ＭＭＡＥ）及びＣｙｔｏｇｅｎ  ＰＳＭＡ−ＡＤＣ（ＰＳＭＡ−ＡＤＣ−１３０１）（抗ＰＳＭＡ、Ｖａｌ−Ｃｉｔ−ＭＭＡＥ）などのＡＤＣにおいて見られるものが挙げられる。
【０６４３】
酵素的に切断可能なＡＤＣリンカーは、酵素的切断の部位から薬物を空間的に分離するための自己犠牲スペーサーを含み得る。ペプチドＡＤＣリンカーへの薬物の直接結合は、薬物のアミノ酸付加物のタンパク質分解による放出を引き起こし、それによりその活性を損ない得る。自己犠牲スペーサーの使用は、アミド結合の加水分解後、完全に活性な化学的に非修飾の薬物の脱離を可能にする。
【０６４４】
１つの自己犠牲スペーサーは、二官能性パラ−アミノベンジルアルコール基であり、これは、アミノ基を介してペプチドに連結され、アミド結合を形成する一方、アミン含有薬物は、カルバメート官能基を介してＡＤＣリンカー（ＰＡＢＣ）のベンジル性ヒドロキシル基に結合され得る。得られるプロドラッグは、プロテアーゼ媒介切断後に活性化されて１，６−脱離反応を引き起こして、非修飾の薬物、二酸化炭素及びＡＤＣリンカー基の残りを放出する。以下のスキームは、ｐ−アミノベンジルエーテルの切断及び薬物の放出：
【化７】
2021525715.tif 000106
を示し、式中、Ｘ−Ｄが非修飾の薬物を表す。
【０６４５】
この自己犠牲基の複素環式形態も記載されている。例えば、米国特許第７，９８９，４３４号明細書を参照されたい。
【０６４６】
ある実施形態において、酵素的に切断可能なＡＤＣリンカーは、β−グルクロン酸ベースのＡＤＣリンカーである。薬物の容易な放出は、リソソーム酵素β−グルクロニダーゼによってβ−グルクロニドグリコシド結合の切断によって実現され得る。この酵素は、リソソーム内に豊富に存在し、いくつかの腫瘍型において過剰発現されるが、細胞外での酵素活性が低い。β−グルクロン酸ベースのＡＤＣリンカーを用いて、ＡＤＣがβ−グルクロニドの親水性による凝集を起こす傾向を回避し得る。ある実施形態において、β−グルクロン酸ベースのＡＤＣリンカーが、疎水性薬物に連結されるＡＤＣのためのＡＤＣリンカーとして使用され得る。以下のスキームは、β−グルクロン酸ベースのＡＤＣリンカーを含有するＡＤＣからの薬物の放出を示す。
【化８】
2021525715.tif 000107
【０６４７】
オーリスタチン、カンプトテシン及びドキソルビシン類似体、ＣＢＩ小溝結合剤及びプシンベリンなどの薬物をＢＣＭＡ結合分子に連結するのに有用な様々な切断性β−グルクロン酸ベースのＡＤＣリンカーが記載されている（Ｎｏｌｔｉｎｇ，Ｃｈａｐｔｅｒ  ５“Ｌｉｎｋｅｒ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ｉｎ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ−Ｄｒｕｇ  Ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ”，Ｉｎ：Ａｎｔｉｂｏｄｙ−Ｄｒｕｇ  Ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ：Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，ｖｏｌ．１０４５，ｐｐ．７１−１００，Ｌａｕｒｅｎｔ  Ｄｕｃｒｙ（Ｅｄ．），Ｓｐｒｉｎｇｅｒ  Ｓｃｉｅｎｃｅ＆Ｂｕｓｉｎｅｓｓ  Ｍｅｄｉｃａ，ＬＬＣ，２０１３；Ｊｅｆｆｒｅｙ  ｅｔ  ａｌ．，２００６，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇ．Ｃｈｅｍ．１７：８３１−８４０；Ｊｅｆｆｒｅｙ  ｅｔ  ａｌ．，２００７，Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．１７：２２７８−２２８０；及びＪｉａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，２００５，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１２７：１１２５４−１１２５５を参照されたい）。これらのβ−グルクロン酸ベースのＡＤＣリンカーの全てが本開示のＡＤＣに使用され得る。
【０６４８】
さらに、フェノール基を含有する細胞傷害性及び／又は細胞増殖抑制性薬剤は、フェノール性酸素を介してＡＤＣリンカーに共有結合され得る。国際公開第２００７／０８９１４９号パンフレットに記載されている１つのこのようなＡＤＣリンカーは、ジアミノ−エタン「ＳｐａｃｅＬｉｎｋ」を従来の「ＰＡＢＯ」ベースの自己犠牲基とともに用いてフェノールを送達する方法に依存する。ＡＤＣリンカーの切断が以下に概略的に示され、式中、Ｄが、フェノール性ヒドロキシル基を有する細胞傷害性及び／又は細胞増殖抑制性薬剤を表す。
【化９】
2021525715.tif 000108
【０６４９】
切断性ＡＤＣリンカーは、非切断性部分若しくはセグメントを含み得、且つ／又は切断性セグメント若しくは部分は、本来は非切断性のＡＤＣリンカーに含まれて、それを切断可能にし得る。あくまでも例として、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）及び関連ポリマーは、ポリマー主鎖中に切断性基を含み得る。例えば、ポリエチレングリコール又はポリマーＡＤＣリンカーは、ジスルフィド、ヒドラゾン又はジペプチドなどの１つ以上の切断性基を含み得る。
【０６５０】
ＡＤＣリンカーに含まれ得る他の分解可能な連結は、ＰＥＧカルボン酸又は活性化ＰＥＧカルボン酸と、生物活性剤上のアルコール基との反応によって形成されるエステル結合を含み、ここで、このようなエステル基は、一般に、生理的条件下で加水分解して生物活性剤を放出する。加水分解により分解可能な連結としては、限定はされないが、カーボネート結合；アミンとアルデヒドとの反応から得られるイミン結合；アルコールとリン酸基との反応によって形成されるリン酸エステル結合；アルデヒドとアルコールとの反応生成物であるアセタール結合；ホルメートとアルコールとの反応生成物であるオルトエステル結合；及びホスホロアミダイト基と、限定はされないが、ポリマーの末端に、オリゴヌクレオチドの５’ヒドロキシル基とによって形成されるオリゴヌクレオチド結合が挙げられる。
【０６５１】
特定の実施形態において、ＡＤＣリンカーは、酵素的に切断可能なペプチド部分、例えば構造式（ＩＶａ）若しくは（ＩＶｂ）：
【化１０】
2021525715.tif 000109
又はその塩を含むＡＤＣリンカーを含み、式中、ペプチドが、リソソーム酵素によって切断可能なペプチド（Ｃ→Ｎで示され、カルボキシ及びアミノ「末端」を示さない）を表し；Ｔが、１つ以上のエチレングリコール単位又はアルキレン鎖又はそれらの組合せを含むポリマーを表し；Ｒａが水素、アルキル、スルホネート及びメチルスルホネートから選択され；ｐが０〜５の範囲の整数であり；ｑが０又は１であり；ｘが０又は１であり；ｙが０又は１であり；
【化１１】
2021525715.tif 000110
が細胞傷害性及び／又は細胞増殖抑制性薬剤へのＡＤＣリンカーの結合点を表し；＊がＡＤＣリンカーの残りの部分への結合点を表す。
【０６５２】
特定の実施形態において、ペプチドは、トリペプチド又はジペプチドから選択される。特定の実施形態において、ジペプチドは、Ｖａｌ−Ｃｉｔ；Ｃｉｔ−Ｖａｌ；Ａｌａ−Ａｌａ；Ａｌａ−Ｃｉｔ；Ｃｉｔ−Ａｌａ；Ａｓｎ−Ｃｉｔ；Ｃｉｔ−Ａｓｎ；Ｃｉｔ−Ｃｉｔ；Ｖａｌ−Ｇｌｕ；Ｇｌｕ−Ｖａｌ；Ｓｅｒ−Ｃｉｔ；Ｃｉｔ−Ｓｅｒ；Ｌｙｓ−Ｃｉｔ；Ｃｉｔ−Ｌｙｓ；Ａｓｐ−Ｃｉｔ；Ｃｉｔ−Ａｓｐ；Ａｌａ−Ｖａｌ；Ｖａｌ−Ａｌａ；Ｐｈｅ−Ｌｙｓ；Ｖａｌ−Ｌｙｓ；Ａｌａ−Ｌｙｓ；Ｐｈｅ−Ｃｉｔ；Ｌｅｕ−Ｃｉｔ；Ｉｌｅ−Ｃｉｔ；Ｐｈｅ−Ａｒｇ；及びＴｒｐ−Ｃｉｔから選択される。特定の実施形態において、ジペプチドは、Ｃｉｔ−Ｖａｌ；及びＡｌａ−Ｖａｌから選択される。
【０６５３】
ＡＤＣに含まれ得る構造式（ＩＶａ）で表されるＡＤＣリンカーの特定の例示的な実施形態としては、以下に示されるＡＤＣリンカーが挙げられる（示されるように、ＡＤＣリンカーは、ＡＤＣリンカーをＢＣＭＡ結合分子に共有結合するのに好適な基を含む）。
【化１２】
2021525715.tif 000111
【化１３】
2021525715.tif 000112
【０６５４】
ＡＤＣに含まれ得る構造式（ＩＶｂ）で表されるＡＤＣリンカーの特定の例示的な実施形態としては、以下に示されるＡＤＣリンカーが挙げられる（示されるように、ＡＤＣリンカーは、ＡＤＣリンカーをＢＣＭＡ結合分子に共有結合するのに好適な基を含む）。
【化１４】
2021525715.tif 000113
【化１５】
2021525715.tif 000114
【化１６】
2021525715.tif 000115
【化１７】
2021525715.tif 000116
【化１８】
2021525715.tif 000117
【０６５５】
特定の実施形態において、ＡＤＣリンカーは、酵素的に切断可能なペプチド部分、例えば構造式（ＩＶｃ）若しくは（ＩＶｄ）：
【化１９】
2021525715.tif 000118
又はその塩を含むＡＤＣリンカーを含み、式中、ペプチドが、リソソーム酵素によって切断可能なペプチド（Ｃ→Ｎで示され、カルボキシ及びアミノ「末端」を示さない）を表し；Ｔが、１つ以上のエチレングリコール単位又はアルキレン鎖又はそれらの組合せを含むポリマーを表し；Ｒａが水素、アルキル、スルホネート及びメチルスルホネートから選択され；ｐが０〜５の範囲の整数であり；ｑが０又は１であり；ｘが０又は１であり；ｙが０又は１であり；
【化２０】
2021525715.tif 000119
が細胞傷害性及び／又は細胞増殖抑制性薬剤へのＡＤＣリンカーの結合点を表し；＊がＡＤＣリンカーの残りの部分への結合点を表す。
【０６５６】
ＡＤＣに含まれ得る構造式（ＩＶｃ）で表されるＡＤＣリンカーの特定の例示的な実施形態としては、以下に示されるＡＤＣリンカーが挙げられる（示されるように、ＡＤＣリンカーは、ＡＤＣリンカーをＢＣＭＡ結合分子に共有結合するのに好適な基を含む）。
【化２１】
2021525715.tif 000120
【０６５７】
ＡＤＣに含まれ得る構造式（ＩＶｄ）で表されるＡＤＣリンカーの特定の例示的実施形態としては、以下に示されるＡＤＣリンカーが挙げられる（示されるように、ＡＤＣリンカーは、ＡＤＣリンカーをＢＣＭＡ結合分子に共有結合するのに好適な基を含む）。
【化２２】
2021525715.tif 000121
【化２３】
2021525715.tif 000122
【化２４】
2021525715.tif 000123
【０６５８】
特定の実施形態において、構造式（ＩＶａ）、（ＩＶｂ）、（ＩＶｃ）又は（ＩＶｄ）を含むＡＤＣリンカーは、酸性培地への曝露によって切断可能なカーボネート部分をさらに含む。特定の実施形態において、ＡＤＣリンカーは、酸素を介して細胞傷害性及び／又は細胞増殖抑制性薬剤に結合される。
【０６５９】
７．９．２．２．非切断性リンカー
切断性ＡＤＣリンカーは、いくつかの利点を提供し得るが、ＡＤＣを含むＡＤＣリンカーは、切断可能である必要はない。非切断性ＡＤＣリンカーでは、薬物の放出は、原形質といくつかの細胞質画分との間の特性の差に依存しない。薬物の放出は、抗原媒介性エンドサイトーシス及びリソソーム画分への送達によってＡＤＣが取り込まれ、ここで、ＢＣＭＡ結合分子は、細胞内タンパク質分解によってアミノ酸のレベルまで分解された後に起こると仮定される。このプロセスは、薬物、ＡＤＣリンカー及びＡＤＣリンカーが共有結合されたアミノ酸残基によって形成される薬物誘導体を放出する。非切断性ＡＤＣリンカーとのコンジュゲートからのアミノ酸薬物代謝産物は、切断性ＡＤＣリンカーとのコンジュゲートと比較してより親水性であり、一般に、膜透過性がより低く、それによりバイスタンダー効果が低く、非特異的毒性が低くなる。一般に、非切断性ＡＤＣリンカーを有するＡＤＣは、切断性ＡＤＣリンカーを有するＡＤＣより高い、循環中の安定性を有する。非切断性ＡＤＣリンカーは、アルキレン鎖であり得るか、又は例えばポリアルキレングリコールポリマー、アミドポリマーに基づくなど、ポリマーの性質であり得るか、又はアルキレン鎖、ポリアルキレングリコール及び／若しくはアミドポリマーのセグメントを含み得る。
【０６６０】
薬物をＢＣＭＡ結合分子に連結するのに使用される様々な非切断性ＡＤＣリンカーが記載されている。Ｊｅｆｆｒｅｙ  ｅｔ  ａｌ．，２００６，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇ．Ｃｈｅｍ．１７；８３１−８４０；Ｊｅｆｆｒｅｙ  ｅｔ  ａｌ．，２００７，Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．１７：２２７８−２２８０；及びＪｉａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，２００５，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１２７：１１２５４−１１２５５を参照されたい。これらのＡＤＣリンカーの全てが本開示のＡＤＣに含まれ得る。
【０６６１】
特定の実施形態において、ＡＤＣリンカーは、インビボで切断不可能である、例えば構造式（ＶＩａ）、（ＶＩｂ）、（ＶＩｃ）又は（ＶＩｄ）で表されるＡＤＣリンカー（示されるように、ＡＤＣリンカーは、ＡＤＣリンカーをＢＣＭＡ結合分子に共有結合するのに好適な基を含む）
【化２５】
2021525715.tif 000124
又はその塩であり、式中、Ｒａが水素、アルキル、スルホネート及びメチルスルホネートから選択され；Ｒｘが、ＡＤＣリンカーをＢＣＭＡ結合分子に共有結合することが可能な官能基を含む部分であり；
【化２６】
2021525715.tif 000125
が細胞傷害性及び／又は細胞増殖抑制性薬剤へのＡＤＣリンカーの結合点を表す。
【０６６２】
ＡＤＣに含まれ得る構造式（ＶＩａ）〜（ＶＩｄ）で表されるＡＤＣリンカーの特定の例示的な実施形態としては、以下に示されるＡＤＣリンカーが挙げられる（示されるように、ＡＤＣリンカーは、ＡＤＣリンカーをＢＣＭＡ結合分子に共有結合するのに好適な基を含み、
【化２７】
2021525715.tif 000126
が細胞傷害性及び／又は細胞増殖抑制性薬剤への結合点を表す）。
【化２８】
2021525715.tif 000127
【０６６３】
７．９．２．３．リンカーをＢＣＭＡ結合分子に結合するのに使用される基
様々な基を用いて、ＡＤＣリンカー−薬物シントンをＢＣＭＡ結合分子に結合してＡＤＣを得ることができる。結合基は、性質が求電子性であり得、マレイミド基、活性化ジスルフィド、ＮＨＳエステル及びＨＯＢｔエステルなどの活性エステル、ハロホルメート、酸ハロゲン化物、ハロアセトアミドなどのアルキル及びベンジルハロゲン化物が挙げられる。後述されるように、本開示に従って使用され得る「自己安定化」マレイミド及び「架橋ジスルフィド」に関連する新興の技術もある。使用される具体的な基は、部分的にＢＣＭＡ結合分子への結合部位に依存する。
【０６６４】
ＢＣＭＡ結合分子コンジュゲーション条件下で自発的に加水分解して、向上した安定性を有するＡＤＣ種を生じる「自己安定化」マレイミド基の一例が以下の概略図に示される。米国特許出願公開第２０１３０３０９２５６  Ａ１号明細書；Ｌｙｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈ  ｐｕｂｌｉｓｈｅｄ  ｏｎｌｉｎｅ，ｄｏｉ：１０．１０３８／ｎｂｔ．２９６８も参照されたい。
【化２９】
2021525715.tif 000128
【化３０】
2021525715.tif 000129
【０６６５】
Ｐｏｌｙｔｈｅｒｉｃｓは、天然ヒンジジスルフィド結合の還元から誘導される対のスルフヒドリル基を架橋するための方法を開示している。Ｂａｄｅｓｃｕ  ｅｔ  ａｌ．，２０１４，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ．２５：１１２４−１１３６を参照されたい。反応が以下の概略図に示される。この方法の利点は、ＩｇＧの完全な還元（４対のスルフヒドリルを生じる）と、それに続く４当量のアルキル化剤との反応により、富化されたＤＡＲ４  ＡＤＣを合成する能力である。「架橋ジスルフィド」を含むＡＤＣは、増大した安定性を有する。
【化３１】
2021525715.tif 000130
【０６６６】
同様に、以下に示されるように、対のスルフヒドリル基を架橋することが可能なマレイミド誘導体（１、下記）も開発された。国際公開第２０１３／０８５９２５号パンフレットを参照されたい。
【化３２】
2021525715.tif 000131
【０６６７】
７．９．２．４．ＡＤＣリンカー選択の考察
当業者によって公知であるように、特定のＡＤＣのために選択されるＡＤＣリンカーは、ＢＣＭＡ結合分子への結合部位（例えば、ｌｙｓ、ｃｙｓ又は他のアミノ酸残基）、薬物ファーマコフォアの構造的制約及び薬物の親油性を含むが、これらに限定されない様々な要因によって影響され得る。ＡＤＣのために選択される特定のＡＤＣリンカーは、特定のＢＣＭＡ結合分子／薬物の組合せのためにこれらの異なる要因の平衡を保とうとするものであるべきである。ＡＤＣにおけるＡＤＣリンカーの選択によって影響される要因の概説については、Ｎｏｌｔｉｎｇ，Ｃｈａｐｔｅｒ  ５“Ｌｉｎｋｅｒ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ｉｎ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ−Ｄｒｕｇ  Ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ”，Ｉｎ：Ａｎｔｉｂｏｄｙ−Ｄｒｕｇ  Ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ：Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，ｖｏｌ．１０４５，ｐｐ．７１−１００，Ｌａｕｒｅｎｔ  Ｄｕｃｒｙ（Ｅｄ．），Ｓｐｒｉｎｇｅｒ  Ｓｃｉｅｎｃｅ＆Ｂｕｓｉｎｅｓｓ  Ｍｅｄｉｃａ，ＬＬＣ，２０１３を参照されたい。
【０６６８】
例えば、ＡＤＣは、抗原陽性腫瘍細胞の近くに存在するバイスタンダー抗原陰性細胞を死滅させることが観察されている。ＡＤＣによるバイスタンダー細胞死滅の機構は、ＡＤＣの細胞内プロセシング中に形成された代謝産物が役割を果たし得ることを示している。抗原陽性細胞中でのＡＤＣの代謝によって生成された中性の細胞傷害性代謝産物は、バイスタンダー細胞死滅において役割を果たすようである一方、荷電代謝産物は、膜を通して培地中に拡散するのが防止され得るため、バイスタンダー死滅に影響を与えることができない。特定の実施形態において、ＡＤＣリンカーは、ＡＤＣの細胞内代謝産物によって引き起こされるバイスタンダー死滅効果を弱めるように選択される。特定の実施形態において、ＡＤＣリンカーは、バイスタンダー死滅効果を増加させるように選択される。
【０６６９】
ＡＤＣリンカーの特性は、使用及び／又は貯蔵の条件下でのＡＤＣの凝集にも影響を与え得る。典型的に、文献において報告されるＡＤＣは、１抗体分子当たり３〜４つ以下の薬物分子を含有する（例えば、Ｃｈａｒｉ，２００８，Ａｃｃ  Ｃｈｅｍ  Ｒｅｓ  ４１：９８−１０７を参照されたい）。より高い薬物対抗体比（「ＤＡＲ」）を得る試みは、特に薬物及びＡＤＣリンカーの両方が疎水性である場合、ＡＤＣの凝集により失敗することが多かった（Ｋｉｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，２００２，Ｊ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  ４５：４３３６−４３４３；Ｈｏｌｌａｎｄｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２００８，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ  １９：３５８−３６１；Ｂｕｒｋｅ  ｅｔ  ａｌ．，２００９  Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ  ２０：１２４２−１２５０）。多くの場合、３〜４より高いＤＡＲは、効力を高める手段として有益であり得る。細胞傷害性及び／又は細胞増殖抑制性薬剤が疎水性の性質である場合、特に３〜４より大きいＤＡＲＳが所望される場合、ＡＤＣ凝集を低減する手段として比較的親水性のＡＤＣリンカーを選択することが望ましいであろう。したがって、特定の実施形態において、ＡＤＣリンカーは、貯蔵及び／又は使用中にＡＤＣの凝集を低減する化学部分を組み込む。ＡＤＣリンカーは、ＡＤＣの凝集を低減するために、荷電基又は生理的ｐＨで荷電される基などの極性又は親水性基を組み込み得る。例えば、ＡＤＣリンカーは、塩などの荷電基又は生理的ｐＨで例えばカルボキシレートを脱プロトン化するか若しくは例えばアミンをプロトン化する基を組み込み得る。
【０６７０】
多くの細胞傷害性及び／又は細胞増殖抑制性薬剤をＢＣＭＡ結合分子に連結するのに使用され得る、２０もの高いＤＡＲを生じることが報告されている例示的な多価ＡＤＣリンカーが国際公開第２００９／０７３４４５号パンフレット；国際公開第２０１０／０６８７９５号パンフレット；国際公開第２０１０／１３８７１９号パンフレット；国際公開第２０１１／１２００５３号パンフレット；国際公開第２０１１／１７１０２０号パンフレット；国際公開第２０１３／０９６９０１号パンフレット；国際公開第２０１４／００８３７５号パンフレット；国際公開第２０１４／０９３３７９号パンフレット；国際公開第２０１４／０９３３９４号パンフレット；国際公開第２０１４／０９３６４０号パンフレットに記載されている。
【０６７１】
特定の実施形態において、貯蔵又は使用中のＡＤＣの凝集は、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）によって決定した際、約１０％未満である。特定の実施形態において、貯蔵又は使用中のＡＤＣの凝集は、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）によって決定した際、１０％未満、例えば約５％未満、約４％未満、約３％未満、約２％未満、約１％未満、約０．５％未満、約０．１％未満又はさらに低い。
【０６７２】
７．９．３．ＡＤＣを作製する方法
ＡＤＣは、周知の化学を用いて合成され得る。選択される化学は、特に、細胞傷害性及び／又は細胞増殖抑制性薬剤の同一性、ＡＤＣリンカー及びＡＤＣリンカーをＢＣＭＡ結合分子に結合するのに使用される基に依存する。一般に、式（Ｉ）で表されるＡＤＣは、以下のスキーム：
Ｄ−Ｌ−Ｒｘ＋Ａｂ−Ｒｙ→［Ｄ−Ｌ−ＸＹ］ｎ−Ａｂ（Ｉ）
に従って調製され得、式中、Ｄ、Ｌ、Ａｂ、ＸＹ及びｎが前に定義されるとおりであり、Ｒｘ及びＲｙが、上述されるように、互いに共有結合を形成することが可能な相補的な基を表す。
【０６７３】
基Ｒｘ及びＲｙの同一性は、シントンＤ−Ｌ−ＲｘをＢＣＭＡ結合分子に連結するのに使用される化学に依存する。一般に、使用される化学は、ＢＣＭＡ結合分子の完全性、例えばその標的に結合するその能力を変化させてはならない。ある場合には、コンジュゲートされた抗体の結合特性は、非コンジュゲートＢＣＭＡ結合分子のものと酷似することになる。分子を生体分子、特に免疫グロブリン（その構成要素が典型的に本開示のＢＣＭＡ結合分子の構成単位である）にコンジュゲートするための様々な化学及び技術が周知である。例えば、Ａｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  Ｆｏｒ  Ｉｍｍｕｎｏｔａｒｇｅｔｉｎｇ  Ｏｆ  Ｄｒｕｇｓ  Ｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ”，ｉｎ：Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  Ａｎｄ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ，Ｒｅｉｓｆｅｌｄ  ｅｔ  ａｌ．Ｅｄｓ．，Ａｌａｎ  Ｒ．Ｌｉｓｓ，Ｉｎｃ．，１９８５；Ｈｅｌｌｓｔｒｏｍ  ｅｔ  ａｌ．，“Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  Ｆｏｒ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ”，ｉｎ：Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ，Ｒｏｂｉｎｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．Ｅｄｓ．，Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．，２ｎｄ  Ｅｄ．１９８７；Ｔｈｏｒｐｅ，“Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｃａｒｒｉｅｒｓ  Ｏｆ  Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ  Ａｇｅｎｔｓ  Ｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ：Ａ  Ｒｅｖｉｅｗ”，ｉｎ：Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ’８４：Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ａｎｄ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，Ｐｉｎｃｈｅｒａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｄｓ．，１９８５；“Ａｎａｌｙｓｉｓ，Ｒｅｓｕｌｔｓ，ａｎｄ  Ｆｕｔｕｒｅ  Ｐｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  Ｕｓｅ  ｏｆ  Ｒａｄｉｏｌａｂｅｌｅｄ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ”，ｉｎ：Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  Ｆｏｒ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ  Ａｎｄ  Ｔｈｅｒａｐｙ，Ｂａｌｄｗｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｄｓ．，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，１９８５；Ｔｈｏｒｐｅ  ｅｔ  ａｌ．，１９８２，Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｒｅｖ．６２：１１９−５８；ＰＣＴ公報国際公開第８９／１２６２４号パンフレットを参照されたい。これらの化学のいずれかは、シントンをＢＣＭＡ結合分子に連結するのに使用され得る。
【０６７４】
シントンを利用可能なリジン残基に連結するのに有用ないくつかの官能基Ｒｘ及び化学が公知であり、例として、限定はされないが、ＮＨＳ−エステル及びイソチオシアネートが挙げられる。
【０６７５】
シントンをシステイン残基の利用可能な遊離スルフヒドリル基に連結するのに有用ないくつかの官能基Ｒｘ及び化学が公知であり、例として、限定はされないが、ハロアセチル及びマレイミドが挙げられる。
【０６７６】
しかしながら、コンジュゲーション化学は、利用可能な側鎖基に限定されない。アミンなどの側鎖は、適切な小分子をアミンに連結することにより、ヒドロキシルなどの他の有用な基に転化され得る。この手法を用いて、多官能性小分子を、ＢＣＭＡ結合分子の利用可能なアミノ酸残基の側鎖にコンジュゲートすることにより、抗体上の利用可能な連結部位の数を増加させることができる。次に、シントンをこれらの「転化された」官能基に共有結合するのに好適な官能基Ｒｘがシントンに含まれる。
【０６７７】
ＢＣＭＡ結合分子は、コンジュゲーションのためのアミノ酸残基を含むようにも操作され得る。ＡＤＣに関連して薬物をコンジュゲートするのに有用な遺伝的にコードされていないアミノ酸残基を含むようにＢＢＭを操作するための手法は、シントンをコードされていないアミノ酸に連結するのに有用な化学及び官能基と同様に、Ａｘｕｐ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２，Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ．１０９（４０）：１６１０１−１６１０６によって記載されている。
【０６７８】
典型的に、シントンは、例えば、利用可能なリジン残基の第一級アミノ基又は利用可能なシステイン残基のスルフヒドリル基を含む、ＢＣＭＡ結合分子のアミノ酸残基の側鎖に連結される。遊離スルフヒドリル基は、鎖間ジスルフィド結合を還元することによって得ることができる。
【０６７９】
Ｒｙがスルフヒドリル基である連結のために（例えば、Ｒｘがマレイミドである場合）、ＢＣＭＡ結合分子は、一般に、まず完全に又は部分的に還元されて、システイン残基間の鎖間ジスルフィド架橋を切断する。
【０６８０】
ジスルフィド架橋に関与しないシステイン残基は、１つ以上のコドンの修飾によってＢＣＭＡ結合分子中に操作され得る。これらの不対システインを還元することにより、コンジュゲーションに好適なスルフヒドリル基が生じる。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、薬物部分へのコンジュゲーションのための部位として１つ以上のシステイン残基を導入するように操作される（Ｊｕｎｕｔｕｌａ，ｅｔ  ａｌ，２００８，Ｎａｔ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ，２６：９２５−９３２を参照されたい）。
【０６８１】
システイン置換のための部位が、定常領域において選択されて、安定した且つ均一なコンジュゲートを提供し得る。ＢＣＭＡ結合分子は、例えば、２つ以上のシステイン置換を有することができ、これらの置換は、本明細書に記載される他の修飾及びコンジュゲーション方法と組み合わせて使用され得る。抗体の特定の位置にシステインを挿入するための方法が公知であり、例えばＬｙｏｎｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９９０，Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇ．，３：７０３−７０８、国際公開第２０１１／００５４８１号パンフレット、国際公開第２０１４／１２４３１６号パンフレット、国際公開第２０１５／１３８６１５号パンフレットを参照されたい。特定の実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、重鎖の位置１１７、１１９、１２１、１２４、１３９、１５２、１５３、１５５、１５７、１６４、１６９、１７１、１７４、１８９、２０５、２０７、２４６、２５８、２６９、２７４、２８６、２８８、２９０、２９２、２９３、３２０、３２２、３２６、３３３、３３４、３３５、３３７、３４４、３５５、３６０、３７５、３８２、３９０、３９２、３９８、４００及び４２２から選択される定常領域における、システインによる１つ以上のアミノ酸の置換を含み、ここで、位置は、ＥＵ方式に従って番号付けされている。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、軽鎖の位置１０７、１０８、１０９、１１４、１２９、１４２、１４３、１４５、１５２、１５４、１５６、１５９、１６１、１６５、１６８、１６９、１７０、１８２、１８３、１９７、１９９及び２０３から選択される定常領域における、システインによる１つ以上のアミノ酸の置換を含み、ここで、位置は、ＥＵ方式に従って番号付けされており、軽鎖は、ヒトκ軽鎖である。特定の実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、定常領域における、システインによる２つ以上のアミノ酸の置換の組合せを含み、ここで、組合せは、重鎖の位置３７５、重鎖の位置１５２、重鎖の位置３６０又は軽鎖の位置１０７における置換を含み、ここで、位置は、ＥＵ方式に従って番号付けされている。特定の実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、定常領域における、システインによる１つのアミノ酸の置換を含み、ここで、置換は、重鎖の位置３７５、重鎖の位置１５２、重鎖の位置３６０、軽鎖の位置１０７、軽鎖の位置１６５又は軽鎖の位置１５９であり、ここで、位置は、ＥＵ方式に従って番号付けされており、軽鎖は、κ鎖である。
【０６８２】
特定の実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、定常領域における、システインによる２つのアミノ酸の置換の組合せを含み、ここで、ＢＣＭＡ結合分子は、重鎖の位置１５２及び３７５にシステインを含み、ここで、位置は、ＥＵ方式に従って番号付けされている。
【０６８３】
他の特定の実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、重鎖の位置３６０における、システインによる１つのアミノ酸の置換を含み、ここで、位置は、ＥＵ方式に従って番号付けされている。
【０６８４】
他の特定の実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、軽鎖の位置１０７における、システインによる１つのアミノ酸の置換を含み、ここで、位置は、ＥＵ方式に従って番号付けされており、軽鎖は、κ鎖である。
【０６８５】
操作されたシステインを組み込むための他の位置としては、例として、限定はされないが、ヒトＩｇＧ１重鎖上の位置Ｓ１１２Ｃ、Ｓ１１３Ｃ、Ａ１１４Ｃ、Ｓ１１５Ｃ、Ａ１７６Ｃ、５１８０Ｃ、Ｓ２５２Ｃ、Ｖ２８６Ｃ、Ｖ２９２Ｃ、Ｓ３５７Ｃ、Ａ３５９Ｃ、Ｓ３９８Ｃ、Ｓ４２８Ｃ（Ｋａｂａｔ番号付け）及びヒトＩｇ  κ軽鎖上の位置Ｖ１１０Ｃ、Ｓ１１４Ｃ、Ｓ１２１Ｃ、Ｓ１２７Ｃ、Ｓ１６８Ｃ、Ｖ２０５Ｃ（Ｋａｂａｔ番号付け）が挙げられ得る（例えば、米国特許第７，５２１，５４１号明細書、米国特許第７，８５５，２７５号明細書及び米国特許第８，４５５，６２２号明細書を参照されたい）。
【０６８６】
本明細書に開示されるＡＤＣにおいて有用なＢＣＭＡ結合分子は、それに加えて又はその代わりに、天然配列の少なくとも１つのアミノ酸の代わりに、Ｐｃｌ、ピロリシン、ペプチドタグ（Ｓ６、Ａ１及びｙｂｂＲタグなど）及び非天然アミノ酸を含む１つ以上の他の反応性アミノ酸（システイン以外）を導入して、それにより、ＢＣＭＡ結合分子における、薬物部分へのコンジュゲーションのための反応部位を提供するように修飾され得る。例えば、ＢＣＭＡ結合分子は、薬物へのコンジュゲーションのための部位としてＰｃｌ又はピロリシン（Ｗ．Ｏｕ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１，ＰＮＡＳ，１０８（２６）：１０４３７−１０４４２；国際公開第２０１４１２４２５８号パンフレット）又は非天然アミノ酸（Ａｘｕｐ，ｅｔ  ａｌ．，２０１２，ＰＮＡＳ，１０９：１６１０１−１６１０６；概説については、Ｃ．Ｃ．Ｌｉｕ  ａｎｄ  Ｐ．Ｇ．Ｓｃｈｕｌｔｚ，２０１０，Ａｎｎｕ  Ｒｅｖ  Ｂｉｏｃｈｅｍ  ７９：４１３−４４４；Ｋｉｍ，ｅｔ  ａｌ．，２０１３，Ｃｕｒｒ  Ｏｐｉｎ  Ｃｈｅｍ  Ｂｉｏｌ．１７：４１２−４１９を参照されたい）を組み込むように修飾され得る。同様に、酵素的コンジュゲーション方法のためのペプチドタグが、ＢＣＭＡ結合分子中に導入され得る（Ｓｔｒｏｐ  ｅｔ  ａｌ．２０１３，Ｃｈｅｍ  Ｂｉｏｌ．２０（２）：１６１−７；Ｒａｂｕｋａ，２０１０，Ｃｕｒｒ  Ｏｐｉｎ  Ｃｈｅｍ  Ｂｉｏｌ．１４（６）：７９０−６；Ｒａｂｕｋａ，ｅｔ  ａｌ．，２０１２、Ｎａｔ  Ｐｒｏｔｏｃ．７（６）：１０５２−６７を参照されたい）。１つの他の例は、補酵素Ａ類似体のコンジュゲーションのための４’−ホスホパンテテイニル（ｐｈｏｓｐｈｏｐａｎｔｅｔｈｅｉｎｙｌ）トランスフェラーゼ（ＰＰＴａｓｅ）の使用である（国際公開第２０１３１８４５１４号パンフレット）。このような修飾又は操作されたＭＢＭは、公知の方法に従って、ペイロード又はリンカー−ペイロードの組合せとコンジュゲートされ得る。
【０６８７】
当業者によって理解されるように、ＢＣＭＡ結合分子に連結される薬剤（例えば、細胞傷害性及び／又は細胞増殖抑制性薬剤）の数は、ＡＤＣの集合が不均一な性質であり得るように変化し得、ここで、１つの連結された薬剤を含むＢＣＭＡ結合分子もあれば、２つ、３つなどを含むものもある（及び含まないものもある）。不均一度は、特に、細胞傷害性及び／又は細胞増殖抑制性薬剤を連結するのに使用される化学に依存する。例えば、ＢＣＭＡ結合分子が還元されて、結合のためのスルフヒドリル基を生じる場合、１分子当たり０、２、４、６又は８つの連結された薬剤を有するＢＣＭＡ結合分子の不均一な混合物が生成されることが多い。さらに、結合化合物のモル比を限定することにより、１分子当たり０、１、２、３、４、５、６、７又は８つの連結された薬剤を有するＢＣＭＡ結合分子が生成されることが多い。したがって、状況に応じて、規定の薬物ＢＣＭＡ結合分子比（ＤＴＲ）がＢＣＭＡ結合分子の集合の平均であり得ることが理解されるであろう。例えば、「ＤＴＲ４」は、特定のＤＴＲピークを単離するための精製に供されておらず、１つのＢＣＭＡ結合分子当たり異なる数の細胞増殖抑制性薬剤及び／又は細胞傷害性薬剤（例えば、１つのＢＣＭＡ結合分子当たり０、２、４、６、８つの薬剤）が結合されたＡＤＣ分子の不均一な混合物を含み得るが、４の平均薬物対ＢＣＭＡ結合分子比を有するＡＤＣ製剤を指し得る。同様に、ある実施形態において、「ＤＴＲ２」は、平均薬物対ＢＣＭＡ結合分子比が２である不均一なＡＤＣ製剤を指す。
【０６８８】
富化された製剤が所望される場合、規定の数の連結された細胞傷害性及び／又は細胞増殖抑制性薬剤を有するＢＣＭＡ結合分子は、不均一な混合物の精製により、例えばカラムクロマトグラフィー、例えば疎水性相互作用クロマトグラフィーによって得ることができる。
【０６８９】
純度は、様々な方法によって評価され得る。具体例として、ＡＤＣ製剤がＨＰＬＣ又は他のクロマトグラフィーによって分析され得、純度は、得られるピークの曲線下の面積を分析することによって評価され得る。
【０６９０】
７．１０．検出可能剤にコンジュゲートされたＢＣＭＡ結合分子
本開示のＢＣＭＡ結合分子は、診断剤若しくは検出可能剤にコンジュゲートされ得る。このような分子は、特定の治療の有効性を決定することなど、臨床検査手順の一環として、疾患又は障害の発生、発症、進行及び／又は重症度をモニタリング又は予後診断するのに有用であり得る。このような診断及び検出は、限定はされないが、西洋ワサビペルオキシダーゼ、アルカリホスファターゼ、β−ガラクトシダーゼ又はアセチルコリンエステラーゼなどの様々な酵素；限定はされないが、ストレプトアビジン／ビオチン及びアビジン／ビオチンなどの補欠分子族；限定はされないが、ウンベリフェロン、フルオレセイン、イソチオシアン酸フルオレセイン、ローダミン、ジクロロトリアジニルアミンフルオレセイン、ダンシルクロリド又はフィコエリトリンなどの蛍光材料；限定はされないが、ルミノールなどの発光材料；限定はされないが、ルシフェラーゼ、ルシフェリン及びイクオリンなどの生物発光材料；限定はされないが、ヨウ素（１３１Ｉ、１２５Ｉ、１２３Ｉ及び１２１Ｉ）、炭素（１４Ｃ）、硫黄（３５Ｓ）、トリチウム（３Ｈ）、インジウム（１１５Ｉｎ、１１３Ｉｎ、１１２Ｉｎ及び１１１Ｉｎ）、テクネチウム（９９Ｔｃ）、タリウム（２０１Ｔｉ）、ガリウム（６８Ｇａ、６７Ｇａ）、パラジウム（１０３Ｐｄ）、モリブデン（９９Ｍｏ）、キセノン（１３３Ｘｅ）、フッ素（１８Ｆ）、１５３Ｓｍ、１７７Ｌｕ、１５９Ｇｄ、１４９Ｐｍ、１４０Ｌａ、１７５Ｙｂ、１６６Ｈｏ、９０Ｙ、４７Ｓｃ、１８６Ｒｅ、１８８Ｒｅ、１４２Ｐｒ、１０５Ｒｈ、９７Ｒｕ、６８Ｇｅ、５７Ｃｏ、６５Ｚｎ、８５Ｓｒ、３２Ｐ、１５３Ｇｄ、１６９Ｙｂ、５１Ｃｒ、５４Ｍｎ、７５Ｓｅ、１１３Ｓｎ及び１１７Ｔｉｎなどの放射性材料；並びに様々なポジトロン断層法を使用するポジトロン放出金属及び非放射性の常磁性金属イオンを含むがこれらに限定されない検出可能な物質にＢＣＭＡ結合分子をカップリングすることによって達成され得る。
【０６９１】
７．１１．固体担体に結合されたＢＣＭＡ結合分子
ＢＣＭＡ結合分子は、固体担体にも結合され得、これは、イムノアッセイ又は標的抗原の精製に特に有用である。このような固体担体としては、限定はされないが、ガラス、セルロース、ポリアクリルアミド、ナイロン、ポリスチレン、ポリ塩化ビニル又はポリプロピレンが挙げられる。
【０６９２】
７．１２．医薬組成物
本開示のＢＣＭＡ結合分子（並びにそれらのコンジュゲート；本開示におけるＢＣＭＡ結合分子への言及は、文脈上他の意味に解すべき場合を除き、ＡＤＣなどのＢＣＭＡ結合分子を含むコンジュゲートも指す）は、例えば、１つ以上の薬学的に許容される賦形剤又は担体を含有する、ＢＣＭＡ結合分子を含む医薬組成物として製剤化され得る。本開示のＢＣＭＡ結合分子を含む医薬又は滅菌組成物を調製するために、ＢＣＭＡ結合分子製剤は、１つ以上の薬学的に許容される賦形剤又は担体と組み合わされ得る。
【０６９３】
例えば、ＢＣＭＡ結合分子の製剤は、ＢＣＭＡ結合分子を生理学的に許容される担体、賦形剤又は安定剤と、例えば凍結乾燥粉末、スラリー、水溶液、ローション又は懸濁液の形態で混合することによって調製され得る（例えば、Ｈａｒｄｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００１，Ｇｏｏｄｍａｎ  ａｎｄ  Ｇｉｌｍａｎ’ｓ  Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．；Ｇｅｎｎａｒｏ，２０００，Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ，ａｎｄ  Ｗｉｌｋｉｎｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．；Ａｖｉｓ，ｅｔ  ａｌ．（ｅｄｓ．），１９９３，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ：Ｇｅｎｅｒａｌ  Ｍｅｄｉｃａｔｉｏｎｓ，Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，ＮＹ；Ｌｉｅｂｅｒｍａｎ，ｅｔ  ａｌ．（ｅｄｓ．），１９９０，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ：Ｔａｂｌｅｔｓ，Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，ＮＹ；Ｌｉｅｂｅｒｍａｎ，ｅｔ  ａｌ．（ｅｄｓ．），１９９０，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ：Ｄｉｓｐｅｒｓｅ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，ＮＹ；Ｗｅｉｎｅｒ  ａｎｄ  Ｋｏｔｋｏｓｋｉｅ，２０００，Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔ  Ｔｏｘｉｃｉｔｙ  ａｎｄ  Ｓａｆｅｔｙ，Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．を参照されたい）。
【０６９４】
ＢＣＭＡ結合分子のための投与計画の選択は、ＢＣＭＡ結合分子の血清又は組織代謝回転速度、症状のレベル、ＢＣＭＡ結合分子の免疫原性及び標的細胞の接近可能性を含むいくつかの要因に依存する。特定の実施形態において、投与計画は、副作用の許容レベルと合致して、対象に送達されるＢＣＭＡ結合分子の量を最大にする。したがって、送達されるＢＣＭＡ結合分子の量は、部分的に、具体的なＢＣＭＡ結合分子及び治療される病態の重症度に依存する。抗体及び小分子の適切な用量を選択する際の指針が利用可能である（例えば、Ｗａｗｒｚｙｎｃｚａｋ，１９９６，Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｔｈｅｒａｐｙ，Ｂｉｏｓ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｐｕｂ．Ｌｔｄ，Ｏｘｆｏｒｄｓｈｉｒｅ，ＵＫ；Ｋｒｅｓｉｎａ（ｅｄ．），１９９１，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，Ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ  ａｎｄ  Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ，Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．；Ｂａｃｈ（ｅｄ．），１９９３，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ａｎｄ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｔｈｅｒａｐｙ  ｉｎ  Ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ  Ｄｉｓｅａｓｅｓ，Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．；Ｂａｅｒｔ  ｅｔ  ａｌ．，２００３，Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３４８：６０１−６０８；Ｍｉｌｇｒｏｍ  ｅｔ  ａｌ．，１９９９，Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３４１：１９６６−１９７３；Ｓｌａｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００１，Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３４４：７８３−７９２；Ｂｅｎｉａｍｉｎｏｖｉｔｚ  ｅｔ  ａｌ．，２０００，Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３４２：６１３−６１９；Ｇｈｏｓｈ  ｅｔ  ａｌ．，２００３，Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３４８：２４−３２；Ｌｉｐｓｋｙ  ｅｔ  ａｌ．，２０００，Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３４３：１５９４−１６０２を参照されたい）。
【０６９５】
適切な用量の決定は、例えば、治療に影響を与えることが当技術分野において知られている若しくは疑われているか又は治療に影響を与えることが予測されるパラメータ又は要因を用いて、臨床医によってなされる。一般に、投与は、至適用量よりいくらか少ない量から開始し、その後、負の副作用と比べて所望の又は最適な効果が得られるまで少しずつ増加される。重要な診断尺度は、例えば、炎症の症状の尺度又は産生される炎症性サイトカインのレベルを含む。
【０６９６】
本開示の医薬組成物におけるＢＣＭＡ結合分子の実際の投与量レベルは、対象に有害でなく、特定の対象、組成物及び投与方法について所望の治療反応を達成するのに有効なＢＣＭＡ結合分子の量を得るように変化され得る。選択された投与量レベルは、特定のＢＣＭＡ結合分子の活性、投与経路、投与の時期、用いられる特定のＢＣＭＡ結合分子の排せつ速度、治療の期間、用いられる特定のＢＣＭＡ結合分子と併用される他の薬剤（例えば、治療用薬剤若しくは化合物などの活性薬剤及び／又は担体として使用される不活性材料）、治療される対象の年齢、性別、体重、病態、全体的な健康及び過去の病歴及び医療分野において公知の同様の要因を含む様々な薬物動態学的要因に依存する。
【０６９７】
ＢＣＭＡ結合分子を含む組成物は、持続注入により又は例えば１日、１週間若しくは週に１〜７回の間隔での投与により提供され得る。投与は、静脈内、皮下、局所、経口、経鼻、直腸、筋肉内、脳内に又は吸入によって提供され得る。特定の投与プロトコルは、顕著な望ましくない副作用を回避する最大容量又は投与頻度を含むものである。
【０６９８】
特定の対象のための有効量は、治療される病態、対象の健康全般、投与の方法、経路及び用量並びに副作用の重症度などの要因に応じて変化し得る（例えば、Ｍａｙｎａｒｄ，ｅｔ  ａｌ．（１９９６）Ａ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  ＳＯＰｓ  ｆｏｒ  Ｇｏｏｄ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ，Ｉｎｔｅｒｐｈａｒｍ  Ｐｒｅｓｓ，Ｂｏｃａ  Ｒａｔｏｎ，Ｆｌａ．；Ｄｅｎｔ（２００１）Ｇｏｏｄ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  ａｎｄ  Ｇｏｏｄ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ，Ｕｒｃｈ  Ｐｕｂｌ．，Ｌｏｎｄｏｎ，ＵＫを参照されたい）。
【０６９９】
投与経路は、例えば、局所若しくは皮膚適用、静脈内、腹腔内、脳内、筋肉内、眼内、動脈内、脳脊髄内、病巣内への注射若しくは注入により、又は持続放出系若しくはインプラントにより行われ得る（例えば、Ｓｉｄｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８３，Ｂｉｏｐｏｌｙｍｅｒｓ  ２２：５４７−５５６；Ｌａｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９８１，Ｊ．Ｂｉｏｍｅｄ．Ｍａｔｅｒ．Ｒｅｓ．１５：１６７−２７７；Ｌａｎｇｅｒ，１９８２，Ｃｈｅｍ．Ｔｅｃｈ．１２：９８−１０５；Ｅｐｓｔｅｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８５，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８２：３６８８−３６９２；Ｈｗａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，１９８０，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ７７：４０３０−４０３４；米国特許第６，３５０，４６６号明細書及び同第６，３１６，０２４号明細書を参照されたい）。必要に応じて、組成物は、可溶化剤及び注射の部位における疼痛を軽減するためのリドカインなどの局所麻酔薬も含み得る。さらに、経肺投与も、例えば、吸入器又は噴霧器及びエアロゾル化剤を含む製剤の使用によって用いられ得る。例えば、米国特許第６，０１９，９６８号明細書、同第５，９８５，３２０号明細書、同第５，９８５，３０９号明細書、同第５，９３４，２７２号明細書、同第５，８７４，０６４号明細書、同第５，８５５，９１３号明細書、同第５，２９０，５４０号明細書及び同第４，８８０，０７８号明細書；並びにＰＣＴ公開番号国際公開第９２／１９２４４号パンフレット、国際公開第９７／３２５７２号パンフレット、国際公開第９７／４４０１３号パンフレット、国際公開第９８／３１３４６号パンフレット及び国際公開第９９／６６９０３号パンフレットを参照されたい。
【０７００】
本開示の組成物は、様々な公知の方法の１つ以上を用いて、１つ以上の投与経路によっても投与され得る。当業者によって理解されるように、投与の経路及び／又は方法は、所望の結果に応じて変化する。ＢＣＭＡ結合分子の投与の選択された経路としては、例えば、注射又は注入による静脈内、筋肉内、皮内、腹腔内、皮下、脊髄又は他の一般的な投与経路が挙げられる。一般的な投与は、通常、注射による腸内及び局所投与以外の投与方法を表し得、限定はされないが、静脈内、筋肉内、動脈内、髄腔内、嚢内、眼窩内、心臓内、皮内、腹腔内、経気管、皮下、表皮下、関節内、被膜下、くも膜下、髄腔内、硬膜外及び胸骨内注射及び注入が挙げられる。代わりに、本開示の組成物は、局所、表皮又は粘膜投与経路、例えば鼻腔内、経口、経膣的、直腸内、舌下又は局所などの非一般的経路によって投与され得る。一実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、注入によって投与される。別の実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、皮下投与される。
【０７０１】
ＢＣＭＡ結合分子が、制御放出又は持続放出系において投与される場合、ポンプが制御又は持続放出を行うのに使用され得る（Ｌａｎｇｅｒ、上記；Ｓｅｆｔｏｎ，１９８７，ＣＲＣ  Ｃｒｉｔ．Ｒｅｆ  Ｂｉｏｍｅｄ．Ｅｎｇ．１４：２０；Ｂｕｃｈｗａｌｄ  ｅｔ  ａｌ．，１９８０，Ｓｕｒｇｅｒｙ  ８８：５０７；Ｓａｕｄｅｋ  ｅｔ  ａｌ．，１９８９，Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３２１：５７４を参照されたい）。ポリマー材料が本開示の治療法の制御又は持続放出を行うのに使用され得る（例えば、Ｍｅｄｉｃａｌ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ，Ｌａｎｇｅｒ  ａｎｄ  Ｗｉｓｅ（ｅｄｓ．），ＣＲＣ  Ｐｒｅｓ．，Ｂｏｃａ  Ｒａｔｏｎ，Ｆｌａ．（１９７４）；Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｄｒｕｇ  Ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ，Ｄｒｕｇ  Ｐｒｏｄｕｃｔ  Ｄｅｓｉｇｎ  ａｎｄ  Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ，Ｓｍｏｌｅｎ  ａｎｄ  Ｂａｌｌ（ｅｄｓ．），Ｗｉｌｅｙ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（１９８４）；Ｒａｎｇｅｒ  ａｎｄ  Ｐｅｐｐａｓ，１９８３，Ｊ．，Ｍａｃｒｏｍｏｌ．Ｓｃｉ．Ｒｅｖ．Ｍａｃｒｏｍｏｌ．Ｃｈｅｍ．２３：６１を参照されたい；Ｌｅｖｙ  ｅｔ  ａｌ．，１９８５，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２２８：１９０；Ｄｕｒｉｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，１９８９，Ａｎｎ．Ｎｅｕｒｏｌ．２５：３５１；Ｈｏｗａｒｄ  ｅｔ  ａｌ．，１９８９，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇ．７１：１０５も参照されたい）；米国特許第５，６７９，３７７号明細書；米国特許第５，９１６，５９７号明細書；米国特許第５，９１２，０１５号明細書；米国特許第５，９８９，４６３号明細書；米国特許第５，１２８，３２６号明細書；ＰＣＴ公開番号国際公開第９９／１５１５４号パンフレット；及びＰＣＴ公開番号国際公開第９９／２０２５３号パンフレットも参照されたい。持続放出製剤に使用されるポリマーの例としては、限定はされないが、ポリ（２−ヒドロキシエチルメタクリレート）、ポリ（メチルメタクリレート）、ポリ（アクリル酸）、ポリ（エチレン−コ−酢酸ビニル）、ポリ（メタクリル酸）、ポリグリコリド（ＰＬＧ）、ポリ無水物、ポリ（Ｎ−ビニルピロリドン）、ポリ（ビニルアルコール）、ポリアクリルアミド、ポリ（エチレングリコール）、ポリラクチド（ＰＬＡ）、ポリ（ラクチド−コ−グリコリド）（ＰＬＧＡ）及びポリオルトエステルが挙げられる。一実施形態において、持続放出製剤に使用されるポリマーは、不活性であり、浸出可能な不純物を含まず、貯蔵中に安定しており、滅菌され、生分解性である。制御又は持続放出系は、予防又は治療標的の近くに配置され得、したがって全身投与量のごく一部を必要とする（例えば、Ｇｏｏｄｓｏｎ，ｉｎ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ、上記、ｖｏｌ．２，ｐｐ．１１５−１３８（１９８４）を参照されたい）。
【０７０２】
制御放出系は、Ｌａｎｇｅｒによる概説において説明される（１９９０，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４９：１５２７−１５３３）。当業者に公知の任意の技術は、本開示の１つ以上のＢＣＭＡ結合分子を含む持続放出製剤を製造するのに使用され得る。例えば、米国特許第４，５２６，９３８号明細書、ＰＣＴ公報国際公開第９１／０５５４８号パンフレット、ＰＣＴ公報国際公開第９６／２０６９８号パンフレット、Ｎｉｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，１９９６，Ｒａｄｉｏｔｈｅｒａｐｙ＆Ｏｎｃｏｌｏｇｙ  ３９：１７９−１８９、Ｓｏｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５，ＰＤＡ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ＆Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ５０：３７２−３９７、Ｃｌｅｅｋ  ｅｔ  ａｌ．，１９９７，Ｐｒｏ．Ｉｎｔ’ｌ．Ｓｙｍｐ．Ｃｏｎｔｒｏｌ．Ｒｅｌ．Ｂｉｏａｃｔ．Ｍａｔｅｒ．２４：８５３−８５４及びＬａｍ  ｅｔ  ａｌ．，１９９７，Ｐｒｏｃ．Ｉｎｔ’ｌ．Ｓｙｍｐ．Ｃｏｎｔｒｏｌ  Ｒｅｌ．Ｂｉｏａｃｔ．Ｍａｔｅｒ．２４：７５９−７６０を参照されたい。
【０７０３】
ＢＣＭＡ結合分子が局所投与される場合、それらは、軟膏剤、クリーム、経皮パッチ、ローション、ジェル、シャンプー、スプレー、エアゾール、液剤、乳剤の形態又は当業者に周知の他の形態で製剤化され得る。例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  ａｎｄ  Ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  ｔｏ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ，１９ｔｈ  ｅｄ．，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂ．Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐａ．（１９９５）を参照されたい。スプレー不可能な局所剤形では、局所適用と適合し、且つ場合により水よりも高い動的粘度を有する担体又は１つ以上の賦形剤を含む粘性〜半固体又は固体形態が典型的に用いられる。好適な製剤としては、限定はされないが、液剤、懸濁液、乳剤、クリーム、軟膏剤、粉末、塗布薬、軟膏などが挙げられ、これらは、必要に応じて、滅菌されるか、又は例えば浸透圧などの様々な特性に影響を与えるために、補助剤（例えば、保存剤、安定剤、湿潤剤、緩衝液又はその塩）と混合される。他の好適な局所剤形としては、スプレー可能なエアゾール製剤が挙げられ、ここで、場合により、固体又は液体不活性担体と組み合わされた有効成分は、加圧された揮発性物質（例えば、フロンなどのガス状噴射剤）との混合物中において又はスクイーズボトル中に包装される。湿潤剤又は保湿剤も必要に応じて医薬組成物及び剤形に加えられ得る。このようなさらなる成分の例は、周知である。
【０７０４】
ＢＣＭＡ結合分子を含む組成物が鼻腔内投与される場合、ＢＣＭＡ結合分子は、エアゾール形態、スプレー、ミスト又は滴剤の形態で製剤化され得る。特に、本開示に係る使用のための予防又は治療剤は、好適な噴射剤（例えば、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、二酸化炭素又は他の好適なガス）の使用とともに、加圧パック又は噴霧器からのエアゾールスプレー製剤の形態で好都合に送達され得る。加圧されたエアゾールの場合、投与量単位は、計量された量を送達するための弁を提供することによって決定され得る。ＢＣＭＡ結合分子の粉末混合物及びラクトース又はデンプンなど好適な粉末基剤を含有する、吸入器又は注入器中で使用するためのカプセル及びカートリッジ（例えば、ゼラチンから構成される）が製剤化され得る。
【０７０５】
本開示のＢＣＭＡ結合分子は、以下の第７．１４節に記載されるように、併用治療計画において投与され得る。
【０７０６】
特定の実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、インビボでの適切な分配を確実にするように製剤化され得る。例えば、血液脳関門（ＢＢＢ）は、多くの高度に親水性の化合物を除外する。本開示の治療用化合物がＢＢＢを越えることを確実にするために（必要に応じて）、それらは、例えば、リポソーム中で製剤化され得る。リポソームを製造する方法については、例えば、米国特許第４，５２２，８１１号明細書；同第５，３７４，５４８号明細書；及び同第５，３９９，３３１号明細書を参照されたい。リポソームは、特定の細胞又は器官中に選択的に輸送されて、それにより標的化された薬物送達を促進する１つ以上の部分を含み得る（例えば、Ｒａｎａｄｅ，１９８９，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２９：６８５を参照されたい）。例示的な標的化部分としては、フォレート又はビオチン（例えば、Ｌｏｗらに付与された米国特許第５，４１６，０１６号明細書を参照されたい）；マンノシド（Ｕｍｅｚａｗａ  ｅｔ  ａｌ．，１９８８，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．１５３：１０３８）；抗体（Ｂｌｏｅｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５，ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔ．３５７：１４０；Ｏｗａｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５，Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．３９：１８０）；界面活性剤プロテインＡ受容体（Ｂｒｉｓｃｏｅ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５，Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．１２３３：１３４）；ｐ  １２０（Ｓｃｈｒｅｉｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９９４，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６９：９０９０）が挙げられ；Ｋｅｉｎａｎｅｎ  ａｎｄ  Ｌａｕｋｋａｎｅｎ，１９９４，ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔ．３４６：１２３；Ｋｉｌｌｉｏｎ  ａｎｄ  Ｆｉｄｌｅｒ，１９９４，Ｉｍｍｕｎｏｍｅｔｈｏｄｓ  ４：２７３も参照されたい。
【０７０７】
例えば、以下の第７．１４節に記載されるように、併用治療に使用される場合、ＢＣＭＡ結合分子及び１つ以上の追加的な薬剤は、同じ医薬組成物中で対象に投与され得る。代わりに、ＢＣＭＡ結合分子及び併用治療の追加的な薬剤は、別個の医薬組成物中で対象に同時に投与され得る。
【０７０８】
本明細書に記載される治療方法は、「コンパニオン診断」試験を行うことをさらに含み得、それにより、ＢＣＭＡ結合分子による治療のための候補である対象に由来する試料は、ＢＣＭＡの発現について試験される。コンパニオン診断試験は、ＢＣＭＡ結合分子による治療を開始する前及び／又はＢＣＭＡ結合分子治療に対する対象の継続的な適合性を監視するために、ＢＣＭＡ結合分子による治療計画中に行われ得る。コンパニオン診断に使用される薬剤は、ＢＣＭＡ結合分子自体又は別の診断薬、例えばＢＣＭＡ  ＲＮＡを検出するためにＢＣＭＡ又は核酸プローブに対して標識された単一特異性抗体であり得る。コンパニオン診断アッセイにおいて試験され得る試料は、ＢＣＭＡ結合分子によって標的にされる細胞が存在し得る任意の試料、例えば腫瘍（例えば、固形腫瘍）生検からのリンパ液、便、尿、血液又は循環腫瘍細胞を含有し得る任意の他の体液であり得る。
【０７０９】
７．１３．治療適応症
本開示のＢＣＭＡ結合分子は、ＢＣＭＡ発現に関連する任意の疾患の治療に使用され得る。例えば、ＢＣＭＡ結合分子は、ＢＣＭＡの増加した発現に関連する疾患のための治療を受けた対象を治療するのに使用され得、ここで、増加したレベルのＢＣＭＡのための治療を受けた対象は、増加したレベルのＢＣＭＡに関連する疾患を示す。
【０７１０】
一態様において、本開示は、ＢＣＭＡ発現腫瘍細胞の増殖を阻害する方法であって、腫瘍細胞の増殖が阻害されるように、腫瘍細胞をＢＣＭＡ結合分子と接触させることを含む方法を提供する。
【０７１１】
一態様において、本開示は、免疫障害を有する個体において発生する疾患を治療及び／又は予防する方法であって、ＢＣＭＡ結合分子を投与することを含む方法を提供する。特に、ＢＣＭＡの発現に関連する疾患、障害及び病態を治療する方法であって、ＢＣＭＡ結合分子を投与することを含む方法が、本明細書に開示される。
【０７１２】
特定の態様において、ＢＣＭＡの発現に関連する疾患、障害及び病態を発症するリスクのある患者を治療する方法であって、ＢＣＭＡ結合分子を投与することを含む方法が、本明細書に開示される。
【０７１３】
したがって、本開示は、ＢＣＭＡの発現に関連する疾患、障害及び病態の治療又は予防のための方法であって、それを必要とする対象に、治療有効量のＢＣＭＡ結合分子を投与することを含む方法を提供する。
【０７１４】
本開示は、ＢＣＭＡ発現細胞に関連する疾患（例えば、ＢＣＭＡを発現する血液癌又は非定型癌）を予防、治療及び／又は管理するための方法であって、必要とする対象に、ＢＣＭＡ結合分子を投与することを含む方法も提供する。一態様において、対象はヒトである。ＢＣＭＡ発現細胞に関連する障害の非限定的な例としては、ウイルス又は真菌感染症及び粘膜免疫に関連する障害が挙げられる。
【０７１５】
７．１３．１．癌並びに癌に関連する疾患及び障害
一態様において、本開示は、対象における癌を治療する方法を提供する。本方法は、対象において癌が治療されるように、ＢＣＭＡ結合分子を対象に投与することを含む。ＢＣＭＡ標的化薬剤によって治療可能な癌の一例は、ＢＣＭＡの発現に関連する癌である。
【０７１６】
一態様において、本開示は、腫瘍の一部がＢＣＭＡについて陰性であり、且つ腫瘍の一部がＢＣＭＡについて陽性である癌を治療するための方法を提供する。
【０７１７】
一態様において、本開示は、本開示のＢＣＭＡ結合分子を用いて、ＢＣＭＡが正常細胞及び癌細胞の両方において発現されるが、正常細胞においてより低いレベルで発現される癌を治療するための方法を提供する。一実施形態において、本方法は、ＢＣＭＡ結合分子が、ＢＣＭＡを発現する癌細胞に結合し、それを死滅させるが、例えば本明細書に記載されるアッセイによって決定される際、ＢＣＭＡを発現する正常細胞の３０％、２５％、２０％、１５％、１０％、５％未満又はそれ未満を死滅させることを可能にする親和性で結合するＢＣＭＡ結合分子を選択することをさらに含む。例えば、Ｃｒ５１  ＣＴＬに基づくフローサイトメトリーなどの死滅アッセイが使用され得る。一実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、ＢＣＭＡに対する、１０−４Ｍ〜１０−８Ｍ、例えば１０−５Ｍ〜１０−７Ｍ、例えば１０−６Ｍ又は１０−７Ｍの結合親和性ＫＤを有する抗原結合ドメインを有する。
【０７１８】
一態様において、増殖性疾患、例えば癌若しくは悪性腫瘍又は骨髄異形成、骨髄異形成症候群若しくは前白血病などの前癌症状を治療する方法であって、ＢＣＭＡ結合分子を投与することを含む方法が、本明細書に開示される。一態様において、癌は、血液癌である。血液癌状態は、血液、骨髄及びリンパ系を侵す、白血病及び悪性リンパ増殖性疾患などの癌のタイプである。一態様において、血液癌は、白血病である。ＢＣＭＡに関連する疾患又は障害の一例は、多発性骨髄腫（ＭＭとしても知られている）である（Ｃｌａｕｄｉｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ．２００２，１００（６）：２１７５−８６；及びＮｏｖａｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ．２００４，１０３（２）：６８９−９４を参照されたい）。形質細胞性骨髄腫又はカーレル病としても知られている多発性骨髄腫は、骨髄における異常な又は悪性の形質Ｂ細胞の蓄積によって特徴付けられる癌である。癌細胞は、隣接する骨に浸潤し、骨格構造を破壊し、骨痛及び骨折をもたらすことが多い。骨髄腫の大部分の症例は、悪性形質細胞のクローン増殖により過剰に産生される、異常な免疫グロブリンであるパラプロテイン（Ｍタンパク質又は骨髄腫タンパク質としても知られている）の産生も特徴とする。３０ｇ／Ｌを超える血清パラプロテインレベルは、Ｔｈｅ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｍｙｅｌｏｍａ  Ｗｏｒｋｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐ（ＩＭＷＧ）の診断基準（Ｋｙｌｅ  ｅｔ  ａｌ．（２００９），Ｌｅｕｋｅｍｉａ．２３：３−９を参照されたい）に従って、多発性骨髄腫の診断に用いられる。多発性骨髄腫の他の症状又は兆候としては、腎機能の低下若しくは腎不全、骨病変、貧血、高カルシウム血症及び神経症状が挙げられる。
【０７１９】
本明細書に記載される組成物及び方法によって治療され得る他の形質細胞増殖性疾患としては、限定はされないが、無症候性骨髄腫（くすぶり型多発性骨髄腫又は無痛性骨髄腫）、意義不明の単クローン性ガンマグロブリン血症（ＭＧＵＳ）、ワルデンシュトレーム型マクログロブリン血症、形質細胞腫（例えば、形質細胞悪液質、孤立性骨髄腫、孤立性形質細胞腫、髄外性形質細胞腫及び多発性形質細胞腫）、全身性アミロイド軽鎖アミロイド症及びＰＯＥＭＳ症候群（クロウ深瀬症候群、高月病及びＰＥＰ症候群としても知られている）が挙げられる。
【０７２０】
ＢＣＭＡに関連する疾患又は障害の別の例は、ホジキンリンパ腫及び非ホジキンリンパ腫である（Ｃｈｉｕ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ．２００７、１０９（２）：７２９−３９；Ｈｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．２００４，１７２（５）：３２６８−７９を参照されたい）。
【０７２１】
ホジキン病としても知られているホジキンリンパ腫（ＨＬ）は、白血球又はリンパ球に由来するリンパ系の癌である。リンパ腫を含む異常な細胞は、リード−スタンバーグ細胞と呼ばれる。ホジキンリンパ腫において、癌は、あるリンパ節群から別のリンパ節群に広がる。ホジキンリンパ腫は、リード−スタンバーグ細胞の形態及びリード−スタンバーグ細胞の周囲の細胞組成（リンパ節生検によって決定される）に基づいて４つの病理学的亜型：結節硬化型ＨＬ、混合細胞型亜型、リンパ球豊富型又はリンパ球優位型、リンパ球枯渇型に下位分類され得る。一部のホジキンリンパ腫は、結節性リンパ球優位型ホジキンリンパ腫でもあり得るか又は性状不明であり得る。ホジキンリンパ腫の症状及び兆候としては、頸部、腋窩部若しくは鼠径部のリンパ節における無痛の腫脹、発熱、寝汗、体重の減少、疲労、掻痒感又は腹痛が挙げられる。
【０７２２】
非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）は、ホジキンリンパ腫以外の任意の種類のリンパ腫を含む血液癌の多様な群を含む。非ホジキンリンパ腫の亜型は、主に、細胞形態、染色体異常及び表面マーカーによって分類される。ＮＨＬ亜型（又はＮＨＬ関連癌）としては、Ｂ細胞リンパ腫、例えば、限定はされないが、バーキットリンパ腫、Ｂ細胞慢性リンパ性白血病（Ｂ−ＣＬＬ）、Ｂ細胞前リンパ球性白血病（Ｂ−ＰＬＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）（例えば、血管内大細胞型Ｂ細胞リンパ腫及び原発性縦隔Ｂ細胞リンパ腫）、濾胞性リンパ腫（例えば、濾胞中心リンパ腫、濾胞性小切れ込み核細胞型リンパ腫）、有毛細胞白血病、高悪性度Ｂ細胞リンパ腫（バーキットリンパ腫様）、リンパ形質細胞性リンパ腫（ワルデンシュトレーム型マクログロブリン血症）、マントル細胞リンパ腫、辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫（例えば、節外性辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫又は粘膜関連リンパ系組織（ＭＡＬＴ）リンパ腫、節性辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫及び脾性辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫）、形質細胞腫／骨髄腫、前駆Ｂリンパ芽球性白血病／リンパ腫（ＰＢ−ＬＢＬ／Ｌ）、原発性中枢神経系（ＣＮＳ）リンパ腫、原発性眼内リンパ腫、小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）；並びにＴ細胞リンパ腫、例えば、限定はされないが、未分化大細胞リンパ腫（ＡＬＣＬ）、成人Ｔ細胞リンパ腫／白血病（例えば、くすぶり型、慢性型、急性型及びリンパ腫型）、血管中心性リンパ腫、血管免疫芽球性Ｔ細胞リンパ腫、皮膚Ｔ細胞リンパ腫（例えば、菌状息肉腫、セザリー症候群など）、節外性ナチュラルキラー／Ｔ細胞リンパ腫（鼻腔型）、腸症型腸管Ｔ細胞リンパ腫、大型顆粒リンパ球白血病、前駆Ｔリンパ芽球性リンパ腫／白血病（Ｔ−ＬＢＬ／Ｌ）、Ｔ細胞慢性リンパ性白血病／前リンパ球性白血病（Ｔ−ＣＬＬ／ＰＬＬ）及び性状不明の末梢性Ｔ細胞リンパ腫が挙げられる。ホジキンリンパ腫の症状及び兆候としては、頸部、腋窩部若しくは鼠径部のリンパ節における無痛の腫脹、発熱、寝汗、体重の減少、疲労、掻痒感、腹痛、咳又は胸痛が挙げられる。
【０７２３】
ＢＣＭＡ発現は、リンパ形質細胞性リンパ腫（ＬＰＬ）としても知られているワルデンシュトレーム型マクログロブリン血症（ＷＭ）にも関連している（Ｅｌｓａｗａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ．２００６、１０７（７）：２８８２−８を参照されたい）。ワルデンシュトレーム型マクログロブリン血症は、以前は、多発性骨髄腫に関連すると考えられていたが、最近では、非ホジキンリンパ腫の亜種として分類されている。ＷＭは、貧血及び血液を増粘させ、過粘稠度症候群をもたらす、過剰量のパラプロテイン又は免疫グロブリンＭ（ＩｇＭ）の産生をもたらす、無制御のＢ細胞リンパ球増殖によって特徴付けられる。ＷＭの他の症状又は兆候としては、発熱、寝汗、疲労、貧血、体重の減少、リンパ節症又は脾腫、目のかすみ、めまい、鼻血、歯茎の出血、異常なあざ、腎機能障害若しくは腎不全、アミロイド症又は末梢神経障害が挙げられる。
【０７２４】
ＢＣＭＡ発現に関連する疾患又は障害の別の例は、脳腫瘍である。具体的には、ＢＣＭＡの発現は、星細胞腫又は膠芽細胞腫に関連している（Ｄｅｓｈａｙｅｓ  ｅｔ  ａｌ，Ｏｎｃｏｇｅｎｅ．２００４，２３（１７）：３００５−１２，Ｐｅｌｅｋａｎｏｕ  ｅｔ  ａｌ．，ＰＬｏＳ  Ｏｎｅ．２０１３，８（１２）：ｅ８３２５０を参照されたい）。星細胞腫は、脳における神経膠細胞のタイプである、星細胞から生じる腫瘍である。膠芽細胞腫（多形性膠芽腫又はＧＢＭとしても知られている）は、星細胞腫の最も悪性の形態であり、脳腫瘍の最も進行した病期（病期ＩＶ）であると考えられる。膠芽細胞腫には２つの変種：巨細胞性膠芽細胞腫及び神経膠肉腫がある。他の星細胞腫としては、若年性毛様細胞性星細胞腫（ＪＰＡ）、原線維性星細胞腫、多形黄色星細胞腫（ＰＸＡ）、胚芽異形成性神経上皮腫瘍（ＤＮＥＴ）及び未分化星細胞腫（ＡＡ）が挙げられる。
【０７２５】
膠芽細胞腫又は星細胞腫に関連する症状又は兆候としては、脳内圧の増加、頭痛、発作、記憶障害、挙動の変化、体の片側における運動又は感覚の喪失、言語機能障害、認知機能障害、視覚機能障害、悪心、嘔吐及び腕部又は脚部の筋力低下が挙げられる。
【０７２６】
腫瘍の外科的摘出（又は切除）は、正常な周囲の脳に対する損傷を伴わないか又は最小限の損傷で、可能な限り大きく神経膠腫を摘出するための標準的な処置である。任意の残存する癌細胞又は衛星病変からの疾患の再発を抑制し、遅らせるために、手術後、放射線療法及び／又は化学療法が使用されることが多い。放射線療法は、全脳照射療法（従来の外照射）、標的化された三次元原体照射療法及び標的化された放射性核種が挙げられる。膠芽細胞腫を治療するのに一般的に使用される化学療法剤としては、テモゾロミド、ゲフィチニブ又はエルロチニブ及びシスプラチンが挙げられる。ベバシズマブ（Ａｖａｓｔｉｎ（登録商標））などの血管新生阻害剤も、化学療法及び／又は放射線療法と組み合わせて一般的に使用される。
【０７２７】
支持処置も、神経症状を軽減し、神経機能を改善するために使用されることが多く、本明細書に記載される癌治療のいずれかと組み合わせて投与される。主要な支持薬としては、抗けいれん薬及びコルチコステロイドが挙げられる。したがって、本開示の組成物及び方法は、膠芽細胞腫又は星細胞腫を治療するための標準的な処置又は支持処置のいずれかと組み合わせて使用され得る。
【０７２８】
本開示は、癌を治療するための組成物及び方法を提供する。一態様において、癌は、白血病又はリンパ腫を含むがこれらに限定されない血液癌である。一態様において、癌及び悪性腫瘍を治療する方法が、本明細書に開示され、癌及び悪性腫瘍としては、例えば、限定はされないが、例えばＢ細胞急性リンパ性白血病（「ＢＡＬＬ」）、Ｔ細胞急性リンパ性白血病（「ＴＡＬＬ」）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）を含むがこれらに限定されない急性白血病；例えば、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）を含むがこれらに限定されない１つ以上の慢性白血病；例えば、Ｂ細胞前リンパ球性白血病、芽球性形質細胞様樹状細胞腫瘍、バーキットリンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、有毛細胞白血病、小細胞型若しくは大細胞型濾胞性リンパ腫、悪性リンパ増殖性疾患、ＭＡＬＴリンパ腫、マントル細胞リンパ腫、辺縁帯リンパ腫、多発性骨髄腫、骨髄異形成及び骨髄異形成症候群、非ホジキンリンパ腫、形質芽球性リンパ腫、形質細胞様樹状細胞腫瘍、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症及び骨髄の血液細胞の効果のない産生（又は異形成）に共通する様々な血液学的状態の群である「前白血病」を含むがこれらに限定されない、さらなる血液癌又は血液学的状態などが挙げられる。ＢＣＭＡ発現に関連するさらなる疾患としては、限定はされないが、例えば非定型的及び／又は非典型的な、ＢＣＭＡを発現する癌、悪性腫瘍、前癌症状又は増殖性疾患が挙げられる。
【０７２９】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、形質細胞増殖性疾患、例えば無症候性骨髄腫（くすぶり型多発性骨髄腫又は無痛性骨髄腫）、意義不明の単クローン性ガンマグロブリン血症（ＭＧＵＳ）、ワルデンシュトレーム型マクログロブリン血症、形質細胞腫（例えば、形質細胞悪液質、孤立性骨髄腫、孤立性形質細胞腫、髄外性形質細胞腫及び多発性形質細胞腫）、全身性アミロイド軽鎖アミロイド症及びＰＯＥＭＳ症候群（クロウ深瀬症候群、高月病及びＰＥＰ症候群としても知られている）を含むがこれらに限定されない疾患を治療するのに使用され得る。
【０７３０】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、癌、例えば本明細書に記載される癌、例えば前立腺癌（例えば、去勢抵抗性若しくは治療抵抗性前立腺癌又は転移性前立腺癌）、膵臓癌又は肺癌を含むがこれらに限定されない疾患を治療するのに使用され得る。
【０７３１】
本開示は、増殖を阻害するか又はＢＣＭＡ発現細胞集団を減少させるための方法であって、ＢＭＣＡ発現細胞を含む細胞の集団を、ＢＣＭＡ結合分子と接触させることを含む方法も提供する。特定の態様において、本開示は、増殖を阻害するか又はＢＣＭＡを発現する癌細胞の集団を減少させるための方法であって、ＢＣＭＡ発現癌細胞集団を、ＢＣＭＡ結合分子と接触させることを含む方法を提供する。一態様において、本開示は、増殖を阻害するか又はＢＣＭＡを発現する癌細胞の集団を減少させるための方法であって、ＢＭＣＡ発現癌細胞集団を、ＢＣＭＡ結合分子と接触させることを含む方法を提供する。特定の態様において、本方法は、細胞及び／又は癌細胞の量、数、数量又はパーセンテージを、骨髄性白血病又はＢＣＭＡ発現細胞に関連する別の癌を有する対象又はこれらのための動物モデルにおいて、陰性対照と比べて、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６５％、少なくとも７５％、少なくとも８５％、少なくとも９５％又は少なくとも９９％だけ減少させる。一態様において、対象はヒトである。
【０７３２】
本開示は、ＢＣＭＡ発現細胞に関連する癌の再発を予防するための方法であって、それを必要とする対象に、ＢＣＭＡ結合分子を投与することを含む方法を提供する。
【０７３３】
７．１３．２．非癌関連の疾患及び障害
ＢＣＭＡ発現に関連する非癌関連の疾患及び障害は、本明細書に開示される組成物及び方法によっても治療され得る。ＢＣＭＡ発現に関連する非癌関連の疾患及び障害の例としては、限定はされないが：ウイルス感染症；例えば、ＨＩＶ、真菌感染症、例えばＣ．ネオフォルマンス（Ｃ．ｎｅｏｆｏｒｍａｎｓ）；及び自己免疫疾患が挙げられる。
【０７３４】
本開示のＢＣＭＡ結合分子で治療され得る自己免疫疾患としては、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、シェーグレン症候群、強皮症、関節リウマチ（ＲＡ）、若年性特発性関節炎、移植片対宿主病、皮膚筋炎、１型糖尿病、橋本甲状腺炎、グレーブス病、アジソン病、セリアック病、粘膜免疫に関連する障害、過敏性腸症候群（例えば、クローン病、潰瘍性大腸炎）、悪性貧血、尋常性天疱瘡、白斑、自己免疫性溶血性貧血、特発性血小板減少性紫斑病、巨細胞性動脈炎、重症筋無力症、多発性硬化症（ＭＳ）（例えば、再発寛解型ＭＳ（ＲＲＭＳ））、糸球体腎炎、グッドパスチャー症候群、水疱性類天疱瘡、潰瘍性大腸炎、ギラン・バレー症候群、慢性炎症性脱髄性多発神経炎、抗リン脂質抗体症候群、ナルコレプシー、サルコイドーシス及びウェゲナー肉芽腫症が挙げられる。
【０７３５】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）を治療するのに使用される。
【０７３６】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、シェーグレン症候群を治療するのに使用される。
【０７３７】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、強皮症を治療するのに使用される。
【０７３８】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、関節リウマチ（ＲＡ）を治療するのに使用される。
【０７３９】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、若年性特発性関節炎を治療するのに使用される。
【０７４０】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、移植片対宿主病を治療するのに使用される。
【０７４１】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、皮膚筋炎を治療するのに使用される。
【０７４２】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、１型糖尿病を治療するのに使用される。
【０７４３】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、橋本甲状腺炎を治療するのに使用される。
【０７４４】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、グレーブス病を治療するのに使用される。
【０７４５】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、アジソン病を治療するのに使用される。
【０７４６】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、セリアック病を治療するのに使用される。
【０７４７】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、クローン病を治療するのに使用される。
【０７４８】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、悪性貧血を治療するのに使用される。
【０７４９】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、尋常性天疱瘡を治療するのに使用される。
【０７５０】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、白斑を治療するのに使用される。
【０７５１】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、自己免疫性溶血性貧血を治療するのに使用される。
【０７５２】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、特発性血小板減少性紫斑病を治療するのに使用される。
【０７５３】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、巨細胞性動脈炎を治療するのに使用される。
【０７５４】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、重症筋無力症を治療するのに使用される。
【０７５５】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、多発性硬化症（ＭＳ）を治療するのに使用される。ある実施形態において、ＭＳは、再発寛解型ＭＳ（ＲＲＭＳ）である。
【０７５６】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、糸球体腎炎を治療するのに使用される。
【０７５７】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、グッドパスチャー症候群を治療するのに使用される。
【０７５８】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、水疱性類天疱瘡を治療するのに使用される。
【０７５９】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、潰瘍性大腸炎を治療するのに使用される。
【０７６０】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、ギラン・バレー症候群を治療するのに使用される。
【０７６１】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、慢性炎症性脱髄性多発神経炎を治療するのに使用される。
【０７６２】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、抗リン脂質抗体症候群を治療するのに使用される。
【０７６３】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、ナルコレプシーを治療するのに使用される。
【０７６４】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、サルコイドーシスを治療するのに使用される。
【０７６５】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、ウェゲナー肉芽腫症を治療するのに使用される。
【０７６６】
７．１４．併用治療
本開示のＢＣＭＡ結合分子は、他の公知の薬剤及び治療法と組み合わせて使用され得る。例えば、ＢＣＭＡ結合分子は、外科手術、化学療法、抗体、放射線、ペプチドワクチン、ステロイド、細胞毒素、プロテアソーム阻害剤、免疫調節薬（例えば、ＩＭｉＤ）、ＢＨ３模倣体、サイトカイン療法、幹細胞移植又はそれらの任意の組合せと組み合わせて治療計画において使用され得る。
【０７６７】
便宜上、ＢＣＭＡ結合分子と組み合わせて使用される薬剤は、本明細書において「追加的な」薬剤と呼ばれる。
【０７６８】
本明細書において使用される際、「組み合わせて」投与されるとは、２つ（以上）の異なる治療薬が、対象が疾患に罹患する過程において対象に送達されること、例えば２つ以上の治療薬が、対象が疾患と診断された後及び疾患が治癒若しくは取り除かれる前又は治療が他の理由で停止される前に送達されることを意味する。ある実施形態において、投与に関して重複があるように、１つの治療薬の送達は、第２の治療薬の送達が開始したときに依然として行われている。これは、本明細書において「同時の」又は「同時の送達」と呼ばれることがある。「同時に」という用語は、ちょうど同時の治療薬（例えば、ＢＣＭＡ結合分子及び追加的な薬剤）の投与に限定されず、ＢＣＭＡ結合分子を含む医薬組成物が、ＢＣＭＡ結合分子がさらなる治療薬と一緒に作用して、それらが他の方法で投与される場合より増加した利益を提供し得るような順序及び時間間隔内で対象に投与されることを意味する。例えば、各治療薬は、同時に又は異なる時点で任意の順序で連続して対象に投与され得るが；同時に投与されない場合、それらは、所望の治療効果を提供するように十分に近い時間内に投与されるべきである。
【０７６９】
ＢＣＭＡ結合分子及び１つ以上の追加的な薬剤は、同じ若しくは別個の組成物中で同時に又は連続して投与され得る。連続投与の場合、ＢＣＭＡ結合分子がまず投与され得、追加的な薬剤が２番目に投与され得るか、又は投与の順序が逆にされ得る。
【０７７０】
ＢＣＭＡ結合分子及び追加的な薬剤は、任意の適切な形態で及び任意の好適な経路によって対象に投与され得る。ある実施形態において、投与経路は、同じである。他の実施形態において、投与経路は、異なる。
【０７７１】
他の実施形態において、１つの治療薬の送達は、他の治療薬の送達が開始する前に終了する。
【０７７２】
いずれの場合もある実施形態において、治療薬は、併用投与により、より有効である。例えば、第２の治療薬は、より有効であり、例えば同等の効果がより少ない第２の治療薬で見られるか、又は第２の治療薬は、第２の治療薬が第１の治療薬なしで投与される場合に見られるより大きい程度に症状を軽減するか、又は類似の状況が第１の治療薬で見られる。ある実施形態において、送達は、症状の軽減又は疾患に関連する他のパラメータが、他の治療薬なしで送達される１つの治療薬により観察されるより大きくなるようなものである。２つの治療薬の効果は、部分的に相加的であるか、完全に相加的であるか、又は相加的以上であり得る。送達は、送達される第１の治療薬の効果が、第２の治療薬が送達されるときに依然として検出可能であるようなものであり得る。
【０７７３】
ＢＣＭＡ結合分子及び／又は追加的な薬剤は、活性な疾患の期間中又は寛解若しくは活性の低い疾患の期間中に投与され得る。ＢＣＭＡ結合分子は、追加的な薬剤による治療前に、追加的な薬剤による治療と同時に、追加的な薬剤による治療後又は疾患の寛解期に投与され得る。
【０７７４】
組み合わせて投与される場合、ＢＣＭＡ結合分子及び／又は追加的な薬剤は、例えば、単剤療法として個別に使用される各薬剤の量又は投与量より多い、少ない又は同じ量又は用量で投与され得る。
【０７７５】
本開示の併用治療の追加的な薬剤は、対象に同時に投与され得る。「同時に」という用語は、ちょうど同時の治療薬（例えば、予防又は治療剤）の投与に限定されず、ＢＣＭＡ結合分子を含む医薬組成物が、本開示の分子がさらなる治療薬と一緒に作用して、それらが他の方法で投与される場合より増加した利益を提供し得るような順序及び時間間隔内で対象に投与されることを意味する。例えば、各治療薬は、同時に又は異なる時点で任意の順序で連続して対象に投与され得るが；同時に投与されない場合、それらは、所望の治療又は予防効果を提供するように十分に近い時間内に投与されるべきである。各治療薬は、別個に、任意の適切な形態で及び任意の好適な経路によって対象に投与され得る。
【０７７６】
ＢＣＭＡ結合分子及び追加的な薬剤は、同じ又は異なる投与経路によって対象に投与され得る。
【０７７７】
ＢＣＭＡ結合分子及び追加的な薬剤は、周期的に投与され得る。周期的治療は、ある期間にわたる第１の治療薬（例えば、第１の予防又は治療剤）の投与、続いてある期間にわたる第２の治療薬（例えば、第２の予防又は治療剤）の投与、任意選択的に続いてある期間にわたる第３の治療薬（例えば、予防又は治療剤）の投与など、及びこの連続投与を繰り返すことを含み、すなわち治療薬の１つに対する耐性の発生を低減し、治療薬の１つの副作用を回避若しくは低減し、且つ／又は治療薬の有効性を向上させるための周期である。
【０７７８】
場合により、１つ以上の追加的な薬剤は、他の抗癌剤、抗アレルギー剤、制吐剤（又は鎮吐剤）、鎮痛剤、細胞保護剤及びそれらの組合せである。
【０７７９】
一実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、抗癌剤（例えば、化学療法剤）と組み合わせて使用され得る。例示的な化学療法剤としては、アントラサイクリン（例えば、ドキソルビシン（例えば、リポソームドキソルビシン））、ビンカアルカロイド（例えば、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、ビノレルビン）、アルキル化剤（例えば、シクロホスファミド、ダカルバジン、メルファラン、イホスファミド、テモゾロミド）、免疫細胞抗体（例えば、アレムツズマブ、ゲムツズマブ、リツキシマブ、トシツモマブ、オビヌツズマブ、オファツムマブ、ダラツマブ、エロツズマブ）、代謝抵抗物質（例えば、葉酸拮抗薬、ピリミジン類似体、プリン類似体及びアデノシンデアミナーゼ阻害剤（例えば、フルダラビン）を含む）、ｍＴＯＲ阻害剤、ＴＮＦＲグルココルチコイド誘発性ＴＮＦＲ関連タンパク質（ＧＩＴＲ）アゴニスト、プロテアソーム阻害剤（例えば、アクラシノマイシンＡ、グリオトキシン又はボルテゾミブ）、サリドマイド又はサリドマイド誘導体（例えば、レナリドミド）などの免疫調節剤が挙げられる。
【０７８０】
併用治療における使用が考慮される一般的な化学療法剤としては、アナストロゾール（Ａｒｉｍｉｄｅｘ（登録商標））、ビカルタミド（Ｃａｓｏｄｅｘ（登録商標））、ブレオマイシン硫酸塩（Ｂｌｅｎｏｘａｎｅ（登録商標））、ブスルファン（Ｍｙｌｅｒａｎ（登録商標））、ブスルファン注射液（Ｂｕｓｕｌｆｅｘ（登録商標））、カペシタビン（Ｘｅｌｏｄａ（登録商標））、Ｎ４−ペントキシカルボニル−５−デオキシ−５−フルオロシチジン、カルボプラチン（Ｐａｒａｐｌａｔｉｎ（登録商標））、カルムスチン（ＢｉＣＮＵ（登録商標））、クロラムブシル（Ｌｅｕｋｅｒａｎ（登録商標））、シスプラチン（Ｐｌａｔｉｎｏｌ（登録商標））、クラドリビン（Ｌｅｕｓｔａｔｉｎ（登録商標））、シクロホスファミド（Ｃｙｔｏｘａｎ（登録商標）又はＮｅｏｓａｒ（登録商標））、シタラビン、シトシンアラビノシド（Ｃｙｔｏｓａｒ−Ｕ（登録商標））、シタラビンリポソーム注射液（ＤｅｐｏＣｙｔ（登録商標））、ダカルバジン（ＤＴＩＣ−Ｄｏｍｅ（登録商標））、ダクチノマイシン（アクチノマイシンＤ、Ｃｏｓｍｅｇａｎ）、ダウノルビシン塩酸塩（Ｃｅｒｕｂｉｄｉｎｅ（登録商標））、ダウノルビシンクエン酸塩リポソーム注射液（ＤａｕｎｏＸｏｍｅ（登録商標））、デキサメタゾン、ドセタキセル（Ｔａｘｏｔｅｒｅ（登録商標））、ドキソルビシン塩酸塩（Ａｄｒｉａｍｙｃｉｎ（登録商標）、Ｒｕｂｅｘ（登録商標））、エトポシド（Ｖｅｐｅｓｉｄ（登録商標））、フルダラビンリン酸エステル（Ｆｌｕｄａｒａ（登録商標））、５−フルオロウラシル（Ａｄｒｕｃｉｌ（登録商標）、Ｅｆｕｄｅｘ（登録商標））、フルタミド（Ｅｕｌｅｘｉｎ（登録商標））、テザシチビン、ゲムシタビン（ジフルオロデオキシシチジン）、ヒドロキシウレア（Ｈｙｄｒｅａ（登録商標））、イダルビシン（Ｉｄａｍｙｃｉｎ（登録商標））、イホスファミド（ＩＦＥＸ（登録商標））、イリノテカン（Ｃａｍｐｔｏｓａｒ（登録商標））、Ｌ−アスパラギナーゼ（ＥＬＳＰＡＲ（登録商標））、ロイコボリンカルシウム、メルファラン（Ａｌｋｅｒａｎ（登録商標））、６−メルカプトプリン（Ｐｕｒｉｎｅｔｈｏｌ（登録商標））、メトトレキサート（Ｆｏｌｅｘ（登録商標））、ミトキサントロン（Ｎｏｖａｎｔｒｏｎｅ（登録商標））、マイロターグ、パクリタキセル（Ｔａｘｏｌ（登録商標））、フェニックス（イットリウム９０／ＭＸ−ＤＴＰＡ）、ペントスタチン、ポリフェプロサン２０カルムスチンインプラント（Ｇｌｉａｄｅｌ（登録商標））、タモキシフェンクエン酸塩（Ｎｏｌｖａｄｅｘ（登録商標））、テニポシド（Ｖｕｍｏｎ（登録商標））、６−チオグアニン、チオテパ、チラパザミン（Ｔｉｒａｚｏｎｅ（登録商標））、注射用のトポテカン塩酸塩（Ｈｙｃａｍｐｔｉｎ（登録商標））、ビンブラスチン（Ｖｅｌｂａｎ（登録商標））、ビンクリスチン（Ｏｎｃｏｖｉｎ（登録商標））及びビノレルビン（Ｎａｖｅｌｂｉｎｅ（登録商標））が挙げられる。
【０７８１】
本開示のＢＣＭＡ結合分子との組合せのための特に興味深い抗癌剤としては、アントラサイクリン；アルキル化剤；代謝拮抗剤；カルシウム依存性ホスファターゼカルシニューリン若しくはｐ７０Ｓ６キナーゼＦＫ５０６）のいずれかを阻害するか又はｐ７０Ｓ６キナーゼを阻害する薬物；ｍＴＯＲ阻害剤；免疫調節剤；アントラサイクリン；ビンカアルカロイド；プロテアソーム阻害剤；ＧＩＴＲアゴニスト（例えば、ＧＷＮ３２３）；タンパク質チロシンホスファターゼ阻害剤；ＣＤＫ４キナーゼ阻害剤；ＢＴＫ阻害剤；ＭＫＮキナーゼ阻害剤；ＤＧＫキナーゼ阻害剤；腫瘍溶解性ウイルス；ＢＨ３模倣体；及びサイトカイン療法が挙げられる。
【０７８２】
例示的なアルキル化剤としては、限定はされないが、ナイトロジェンマスタード、エチレンイミン誘導体、スルホン酸アルキル、ニトロソウレア及びトリアゼン）：ウラシルマスタード（Ａｍｉｎｏｕｒａｃｉｌ  Ｍｕｓｔａｒｄ（登録商標）、Ｃｈｌｏｒｅｔｈａｍｉｎａｃｉｌ（登録商標）、Ｄｅｍｅｔｈｙｌｄｏｐａｎ（登録商標）、Ｄｅｓｍｅｔｈｙｌｄｏｐａｎ（登録商標）、Ｈａｅｍａｎｔｈａｍｉｎｅ（登録商標）、Ｎｏｒｄｏｐａｎ（登録商標）、Ｕｒａｃｉｌ  ｎｉｔｒｏｇｅｎ  ｍｕｓｔａｒｄ（登録商標）、Ｕｒａｃｉｌｌｏｓｔ（登録商標）、Ｕｒａｃｉｌｍｏｓｔａｚａ（登録商標）、Ｕｒａｍｕｓｔｉｎ（登録商標）、Ｕｒａｍｕｓｔｉｎｅ（登録商標））、クロルメチン（Ｍｕｓｔａｒｇｅｎ（登録商標））、シクロホスファミド（Ｃｙｔｏｘａｎ（登録商標）、Ｎｅｏｓａｒ（登録商標）、Ｃｌａｆｅｎ（登録商標）、Ｅｎｄｏｘａｎ（登録商標）、Ｐｒｏｃｙｔｏｘ（登録商標）、ＲｅｖｉｍｍｕｎｅＴＭ）、イホスファミド（Ｍｉｔｏｘａｎａ（登録商標））、メルファラン（Ａｌｋｅｒａｎ（登録商標））、クロラムブシル（Ｌｅｕｋｅｒａｎ（登録商標））、ピポブロマン（Ａｍｅｄｅｌ（登録商標）、Ｖｅｒｃｙｔｅ（登録商標））、トリエチレンメラミン（Ｈｅｍｅｌ（登録商標）、Ｈｅｘａｌｅｎ（登録商標）、Ｈｅｘａｓｔａｔ（登録商標））、トリエチレンチオホスホラミン（ｔｒｉｅｔｈｙｌｅｎｅｔｈｉｏｐｈｏｓｐｈｏｒａｍｉｎｅ）、テモゾロミド（Ｔｅｍｏｄａｒ（登録商標））、チオテパ（Ｔｈｉｏｐｌｅｘ（登録商標））、ブスルファン（Ｂｕｓｉｌｖｅｘ（登録商標）、Ｍｙｌｅｒａｎ（登録商標））、カルムスチン（ＢｉＣＮＵ（登録商標））、ロムスチン（ＣｅｅＮＵ（登録商標））、ストレプトゾシン（Ｚａｎｏｓａｒ（登録商標））及びダカルバジン（ＤＴＩＣ−Ｄｏｍｅ（登録商標））が挙げられる。さらなる例示的なアルキル化剤としては、限定はされないが、オキサリプラチン（Ｅｌｏｘａｔｉｎ（登録商標））；テモゾロミド（Ｔｅｍｏｄａｒ（登録商標）及びＴｅｍｏｄａｌ（登録商標））；ダクチノマイシン（アクチノマイシン−Ｄとしても知られている、Ｃｏｓｍｅｇｅｎ（登録商標））；メルファラン（Ｌ−ＰＡＭとしても知られている、Ｌ−サルコリシン及びフェニルアラニンマスタード、Ａｌｋｅｒａｎ（登録商標））；アルトレタミン（ヘキサメチルメラミン（ＨＭＭ）としても知られている、Ｈｅｘａｌｅｎ（登録商標））；カルムスチン（ＢｉＣＮＵ（登録商標））；ベンダムスチン（Ｔｒｅａｎｄａ（登録商標））；ブスルファン（Ｂｕｓｕｌｆｅｘ（登録商標）及びＭｙｌｅｒａｎ（登録商標））；カルボプラチン（Ｐａｒａｐｌａｔｉｎ（登録商標））；ロムスチン（ＣＣＮＵとしても知られている、ＣｅｅＮＵ（登録商標））；シスプラチン（ＣＤＤＰとしても知られている、Ｐｌａｔｉｎｏｌ（登録商標）及びＰｌａｔｉｎｏｌ（登録商標）−ＡＱ）；クロラムブシル（Ｌｅｕｋｅｒａｎ（登録商標））；シクロホスファミド（Ｃｙｔｏｘａｎ（登録商標）及びＮｅｏｓａｒ（登録商標））；ダカルバジン（ＤＴＩＣとしても知られている、ＤＩＣ及びイミダゾールカルボキサミド、ＤＴＩＣ−Ｄｏｍｅ（登録商標））；アルトレタミン（ヘキサメチルメラミン（ＨＭＭ）としても知られている、Ｈｅｘａｌｅｎ（登録商標））；イホスファミド（Ｉｆｅｘ（登録商標））；プレドニムスチン；プロカルバジン（Ｍａｔｕｌａｎｅ（登録商標））；メクロレタミン（ナイトロジェンマスタードとしても知られている、ムスチン及びメクロレタミン塩酸塩、Ｍｕｓｔａｒｇｅｎ（登録商標））；ストレプトゾシン（Ｚａｎｏｓａｒ（登録商標））；チオテパ（チオホスホアミド（ｔｈｉｏｐｈｏｓｐｈｏａｍｉｄｅ）としても知られている、ＴＥＳＰＡ及びＴＳＰＡ、Ｔｈｉｏｐｌｅｘ（登録商標））；シクロホスファミド（Ｅｎｄｏｘａｎ（登録商標）、Ｃｙｔｏｘａｎ（登録商標）、Ｎｅｏｓａｒ（登録商標）、Ｐｒｏｃｙｔｏｘ（登録商標）、Ｒｅｖｉｍｍｕｎｅ（登録商標））；及びベンダムスチンＨＣｌ（Ｔｒｅａｎｄａ（登録商標））が挙げられる。
【０７８３】
例示的なｍＴＯＲ阻害剤としては、例えば、テムシロリムス；リダフォロリムス（公式にはデフォロリムスとして知られている、（１Ｒ，２Ｒ，４Ｓ）−４−［（２Ｒ）−２［（１Ｒ，９Ｓ，１２Ｓ，１５Ｒ，１６Ｅ，１８Ｒ，１９Ｒ，２１Ｒ、２３Ｓ，２４Ｅ，２６Ｅ，２８Ｚ，３０Ｓ，３２Ｓ，３５Ｒ）−１，１８−ジヒドロキシ−１９，３０−ジメトキシ−１５，１７，２１，２３、２９，３５−ヘキサメチル−２，３，１０，１４，２０−ペンタオキソ−１１，３６−ジオキサ−４−アザトリシクロ［３０．３．１．０４，９］ヘキサトリアコンタ−１６，２４，２６，２８−テトラエン−１２−イル］プロピル］−２−メトキシシクロヘキシルジメチルホスフィネート、ＡＰ２３５７３及びＭＫ８６６９としても知られており、ＰＣＴ公開番号国際公開第０３／０６４３８３号パンフレットに記載されている）；エベロリムス（Ａｆｉｎｉｔｏｒ（登録商標）又はＲＡＤ００１）；ラパマイシン（ＡＹ２２９８９、Ｓｉｒｏｌｉｍｕｓ（登録商標））；セマピモド（ＣＡＳ  １６４３０１−５１−３）；テムシロリムス、（５−｛２，４−ビス［（３Ｓ）−３−メチルモルホリン−４−イル］ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７−イル｝−２−メトキシフェニル）メタノール（ＡＺＤ８０５５）；２−アミノ−８−［トランス−４−（２−ヒドロキシエトキシ）シクロヘキシル］−６−（６−メトキシ−３−ピリジニル）−４−メチル−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オン（ＰＦ０４６９１５０２、ＣＡＳ  １０１３１０１−３６−４）；及びＮ２−［１，４−ジオキソ−４−［［４−（４−オキソ−８−フェニル−４Ｈ−１−ベンゾピラン−２−イル）モルホリニウム−４−イル］メトキシ］ブチル］−Ｌ−アルギニルグリシル−Ｌ−α−アスパルチルＬ−セリン−（配列番号５１４）、分子内塩（ＳＦ１１２６、ＣＡＳ  ９３６４８７−６７−１）及びＸＬ７６５が挙げられる。
【０７８４】
例示的な免疫調節剤としては、例えば、アフツズマブ（Ｒｏｃｈｅ（登録商標）から入手可能）；ペグフィルグラスチム（Ｎｅｕｌａｓｔａ（登録商標））；レナリドミド（ＣＣ−５０１３、Ｒｅｖｌｉｍｉｄ（登録商標））；ＩＭＩＤ（サリドマイド（Ｔｈａｌｏｍｉｄ（登録商標））、レナリドミド、ポマリドミド及びアプレミラストなど）、アクチミド（ＣＣ４０４７）；及びＩＲＸ−２（インターロイキン１、インターロイキン２及びインターフェロンγを含むヒトサイトカインの混合物、ＣＡＳ  ９５１２０９−７１−５、ＩＲＸ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓから入手可能）が挙げられる。
【０７８５】
例示的なアントラサイクリンとしては、例えば、ドキソルビシン（Ａｄｒｉａｍｙｃｉｎ（登録商標）及びＲｕｂｅｘ（登録商標））；ブレオマイシン（ｌｅｎｏｘａｎｅ（登録商標））；ダウノルビシン（ダウノルビシン塩酸塩、ダウノマイシン及びルビドマイシン塩酸塩、Ｃｅｒｕｂｉｄｉｎｅ（登録商標））；ダウノルビシンリポソーム（ダウノルビシンクエン酸塩リポソーム、ＤａｕｎｏＸｏｍｅ（登録商標））；ミトキサントロン（ＤＨＡＤ、Ｎｏｖａｎｔｒｏｎｅ（登録商標））；エピルビシン（Ｅｌｌｅｎｃｅ（商標））；イダルビシン（Ｉｄａｍｙｃｉｎ（登録商標）、Ｉｄａｍｙｃｉｎ  ＰＦＳ（登録商標））；マイトマイシンＣ（Ｍｕｔａｍｙｃｉｎ（登録商標））；ゲルダナマイシン；ハービマイシン；ラビドマイシン；及びデアセチルラビドマイシンが挙げられる。
【０７８６】
例示的なビンカアルカロイドとしては、例えば、ビノレルビン酒石酸塩（Ｎａｖｅｌｂｉｎｅ（登録商標））、ビンクリスチン（Ｏｎｃｏｖｉｎ（登録商標））及びビンデシン（Ｅｌｄｉｓｉｎｅ（登録商標）））；ビンブラスチン（ビンブラスチン硫酸塩、ビンカレウコブラスチン及びＶＬＢとしても知られている、Ａｌｋａｂａｎ−ＡＱ（登録商標）及びＶｅｌｂａｎ（登録商標））；及びビノレルビン（Ｎａｖｅｌｂｉｎｅ（登録商標））が挙げられる。
【０７８７】
例示的なプロテアソーム阻害剤としては、ボルテゾミブ（Ｖｅｌｃａｄｅ（登録商標））；カーフィルゾミブ（ＰＸ−１７１−００７、（Ｓ）−４−メチル−Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−４−メチル−１−（（Ｒ）−２−メチルオキシラン−２−イル）−１−オキソペンタン−２−イル）アミノ）−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル）−２−（（Ｓ）−２−（２−モルホリノアセトアミド）−４−フェニルブタンアミド）−ペンタンアミド）；マリゾミブ（ＮＰＩ−００５２）；イキサゾミブクエン酸エステル（ＭＬＮ−９７０８）；デランゾミブ（ＣＥＰ−１８７７０）；及びＯ−メチル−Ｎ−［（２−メチル−５−チアゾリル）カルボニル］−Ｌ−セリル−Ｏ−メチル−Ｎ−［（１Ｓ）−２−［（２Ｒ）−２−メチル−２−オキシラニル］−２−オキソ−１−（フェニルメチル）エチル］−Ｌ−セリンアミド（ＯＮＸ−０９１２）が挙げられる。
【０７８８】
例示的なＢＨ３模倣体としては、ベネトクラクス、ＡＢＴ−７３７（４−｛４−［（４’−クロロ−２−ビフェニリル）メチル］−１−ピペラジニル｝−Ｎ−［（４−｛［（２Ｒ）−４−（ジメチルアミノ）−１−（フェニルスルファニル）−２−ブタニル］アミノ｝−３−ニトロフェニル）スルホニル］ベンズアミド及びナビトクラクス（旧ＡＢＴ−２６３）が挙げられる。
【０７８９】
例示的なサイトカイン療法としては、インターロイキン２（ＩＬ−２）及びインターフェロン−α（ＩＦＮ−α）が挙げられる。
【０７９０】
特定の態様において、異なる化学療法剤の「混合物」が、追加的な薬剤として投与される。
【０７９１】
一態様において、本開示は、ＢＣＭＡの発現に関連する疾患に罹患した対象を治療するための方法であって、有効量の：（ｉ）ＢＣＭＡ結合分子、及び（ｉｉ）γセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）を対象に投与することを含む方法を提供する。
【０７９２】
一態様において、本開示は、ＢＣＭＡの発現に関連する疾患のための治療を受けた対象を治療するための方法であって、有効量の：（ｉ）ＢＣＭＡ結合分子、及び（ｉｉ）ＧＳＩを対象に投与することを含む方法を提供する。
【０７９３】
一実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子及びＧＳＩは、同時に又は連続して投与される。一実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、ＧＳＩの投与の前に投与される。一実施形態において、ＧＳＩは、ＢＣＭＡ結合分子の投与の前に投与される。一実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子及びＧＳＩは、同時に投与される。
【０７９４】
一実施形態において、ＧＳＩは、ＢＣＭＡ結合分子の投与の前に投与され（例えば、ＧＳＩは、ＢＣＭＡ結合分子の投与の１、２、３、４又は５日前に投与される）、任意選択的に、ＧＳＩの投与後及びＢＣＭＡ結合分子の投与前に、対象は、細胞表面ＢＣＭＡ発現レベルの増加及び／又は可溶性ＢＣＭＡレベルの低下を示す。
【０７９５】
ある実施形態において、ＧＳＩは、γセクレターゼの発現及び／又は機能を低下させる小分子、例えば本明細書に開示される小分子ＧＳＩである。一実施形態において、ＧＳＩは、ＬＹ−４５０１３９、ＰＦ−５２１２３６２、ＢＭＳ−７０８１６３、ＭＫ−０７５２、ＥＬＮ−３１８４６３、ＢＭＳ−２９９８９７、ＬＹ−４１１５７５、ＤＡＰＴ、ＡＬ−１０１（ＢＭＳ−９０６０２４としても知られている）、ＡＬ−１０２（ＢＭＳ−９８６１１５としても知られている）、ＰＦ−３０８４０１４、ＲＯ４９２９０９７及びＬＹ３０３９４７８から選択される。一実施形態において、ＧＳＩは、ＰＦ−５２１２３６２、ＥＬＮ−３１８４６３、ＢＭＳ−９０６０２４及びＬＹ３０３９４７８から選択される。例示的なＧＳＩは、Ｔａｋｅｂｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｔｈｅｒ．２０１４  Ｆｅｂ；１４１（２）：１４０−９；及びＲａｎ  ｅｔ  ａｌ．，ＥＭＢＯ  Ｍｏｌ  Ｍｅｄ．２０１７  Ｊｕｌ；９（７）：９５０−９６６に開示されている。ある実施形態において、ＧＳＩは、ＡＬ−１０１である。ある実施形態において、ＧＳＩは、ＡＬ−１０２である。
【０７９６】
ある実施形態において、ＭＫ−０７５２は、ドセタキセルと組み合わせて投与される。ある実施形態において、ＭＫ−０７５２は、ゲムシタビンと組み合わせて投与される。ある実施形態において、ＢＭＳ−９０６０２４は、化学療法と組み合わせて投与される。
【０７９７】
ある実施形態において、ＧＳＩは、式（Ｉ）
【化３３】
2021525715.tif 000132
の化合物又はその薬学的に許容される塩であり得；式中、環Ａが、アリール又はヘテロアリールであり；Ｒ１、Ｒ２及びＲ４のそれぞれが、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクリルアルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル又はヘテロアラルキルであり、ここで、各Ｃ１〜Ｃ６アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクリルアルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル又はヘテロアラルキルが、ハロゲン、−ＯＲＡ、−ＳＲＡ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲＡ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＲＡ）（ＲＢ）、−Ｎ（ＲＡ）（ＲＢ）又は−Ｃ（ＮＲＣ）Ｎ（ＲＡ）（ＲＢ）の０〜６の独立した存在で置換され；各Ｒ３ａ、Ｒ３ｂ、Ｒ５ａ及びＲ５ｂが、独立して、水素、ハロゲン、−ＯＨ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、シクロアルキル、ヘテロシクリル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクリルアルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル又はヘテロアラルキルであり、ここで、各Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、シクロアルキル、ヘテロシクリル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクリルアルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル又はヘテロアラルキルが、ハロゲン、−ＯＨ、−ＯＲＡ、−ＳＲＡ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲＡ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＲＡ）（ＲＢ）、−Ｎ（ＲＡ）（ＲＢ）又は−Ｃ（ＮＲＣ）Ｎ（ＲＡ）（ＲＢ）の０〜６の独立した存在で置換され；Ｒ６が、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクリルアルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル又はヘテロアラルキルであり、ここで、各Ｃ１〜Ｃ６アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクリルアルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル又はヘテロアラルキルが、ハロゲン、−ＯＨ又はＣ１〜Ｃ６アルコキシの０〜６の独立した存在で置換され；各ＲＡ、ＲＢ及びＲＣが、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクリルアルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル又はヘテロアラルキルであり、ここで、各Ｃ１〜Ｃ６アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクリルアルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル又はヘテロアラルキルが、ハロゲン、−ＯＨ又はＣ１〜Ｃ６アルコキシの０〜６の独立した存在で置換される。
【０７９８】
ある実施形態において、環Ａが、アリール（例えば、フェニル）である。ある実施形態において、Ｒ１が−ＣＨ３である。ある実施形態において、Ｒ２及びＲ４のそれぞれが、独立して、水素である。ある実施形態において、Ｒ３ａが−ＣＨ３であり、Ｒ３ｂが水素である。ある実施形態において、Ｒ５ａが水素であり、Ｒ５ｂが−ＣＨ（ＣＨ３）２である。ある実施形態において、Ｒ６が水素である。
【０７９９】
さらなる実施形態において、ＧＳＩは、米国特許第７，４６８，３６５号明細書に記載される化合物である。一実施形態において、ＧＳＩは、ＬＹ−４５０１３９、すなわちセマガセスタット、（Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−メチル−Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−３−メチル−２−オキソ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］アゼピン−１−イル）アミノ）−１−オキソプロパン−２−イル）ブタンアミド又はその薬学的に許容される塩である。一実施形態において、ＧＳＩは、
【化３４】
2021525715.tif 000133
又はその薬学的に許容される塩である。
【０８００】
ある実施形態において、ＧＳＩは、式（ＩＩ）
【化３５】
2021525715.tif 000134
の化合物又はその薬学的に許容される塩であり；式中、環Ｂが、アリール又はヘテロアリールであり；Ｌが、結合、Ｃ１〜Ｃ６アルキレン、−Ｓ（Ｏ）２−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｎ（ＲＥ）（Ｏ）Ｃ−又は−ＯＣ（Ｏ）−であり；各Ｒ７が、独立して、ハロゲン、−ＯＨ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、シクロアルキル、ヘテロシクリル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクリルアルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル又はヘテロアラルキルであり、ここで、各Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、シクロアルキル、ヘテロシクリル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクリルアルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル又はヘテロアラルキルが、独立して、ハロゲン、−ＯＲＤ、−ＳＲＤ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲＤ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＲＤ）（ＲＥ）、−Ｎ（ＲＤ）（ＲＥ）又は−Ｃ（ＮＲＦ）Ｎ（ＲＤ）（ＲＥ）の０〜６の存在で置換され；Ｒ８が、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、シクロアルキル、ヘテロシクリル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクリルアルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル又はヘテロアラルキルであり、ここで、各Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、シクロアルキル、ヘテロシクリル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクリルアルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル又はヘテロアラルキルが、ハロゲン、−ＯＲＤ、−ＳＲＤ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲＤ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＲＤ）（ＲＥ）、−Ｎ（ＲＤ）（ＲＥ）又は−Ｃ（ＮＲＦ）Ｎ（ＲＤ）（ＲＥ）の０〜６の独立した存在で置換され；Ｒ９及びＲ１０のそれぞれが、独立して、水素、ハロゲン、−ＯＨ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、シクロアルキル、ヘテロシクリル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクリルアルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル又はヘテロアラルキルであり、ここで、各Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル又はヘテロアラルキルが、ハロゲン，−ＯＲＤ、−ＳＲＤ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲＤ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＲＤ）（ＲＥ）、−Ｎ（ＲＤ）（ＲＥ）又は−Ｃ（ＮＲＩ）Ｎ（ＲＧ）（ＲＨ）の０〜６の独立した存在で置換され；各ＲＤ、ＲＥ及びＲＦが、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクリルアルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル又はヘテロアラルキルであり、ここで、各Ｃ  Ｃ１〜Ｃ６アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクリルアルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル又はヘテロアラルキルが、ハロゲン、−ＯＨ又はＣ１〜Ｃ６アルコキシの０〜６の独立した存在で置換され；ｎが、０、１、２、３、４又は５である。
【０８０１】
ある実施形態において、環Ｂが、ヘテロアリール（例えば、チオフラニル）である。ある実施形態において、Ｌが−Ｓ（Ｏ）２である。ある実施形態において、Ｒ７がクロロであり、ｎが１である。ある実施形態において、Ｒ８が−ＣＨ２ＯＨである。ある実施形態において、Ｒ９及びＲ１０のそれぞれが、独立して、−ＣＦ３である。
【０８０２】
さらなる実施形態において、ＧＳＩは、米国特許第７，６８７，６６６号明細書に記載される化合物である。一実施形態において、ＧＳＩは、ＰＦ−５２１２３６２、すなわちベガセスタット、ＧＳＩ−９５３又は（Ｒ）−５−クロロ−Ｎ−（４，４，４−トリフルオロ−１−ヒドロキシ−３−（トリフルオロメチル）ブタン−２−イル）チオフェン−２−スルホンアミド、その薬学的に許容される塩である。一実施形態において、ＧＳＩは、
【化３６】
2021525715.tif 000135
又はその薬学的に許容される塩である。
【０８０３】
ある実施形態において、ＧＳＩは、式（ＩＩＩ）：
【化３７】
2021525715.tif 000136
の化合物又はその薬学的に許容される塩であり、式中、環Ｃ及びＤのそれぞれが、独立して、アリール又はヘテロアリールであり；
Ｒ１１、Ｒ１２及びＲ１４のそれぞれが、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、シクロアルキル、ヘテロシクリル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクリルアルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル又はヘテロアラルキルであり、ここで、各Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、−Ｓ（Ｏ）ＲＧ−、−Ｓ（Ｏ）２ＲＧ−、シクロアルキル、ヘテロシクリル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクリルアルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル又はヘテロアラルキルが、ハロゲン、−ＯＲＧ、−ＳＲＧ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲＧ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＲＧ）（ＲＨ）、−Ｎ（ＲＧ）（ＲＨ）又は−Ｃ（ＮＲＩ）Ｎ（ＲＧ）（ＲＨ）の０〜６の独立した存在で置換され；Ｒ１３ａ及びＲ１３ｂのそれぞれが、水素、ハロゲン、−ＯＨ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、シクロアルキル、ヘテロシクリル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクリルアルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル又はヘテロアラルキルであり、ここで、各Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、シクロアルキル、ヘテロシクリル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクリルアルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル又はヘテロアラルキルが、ハロゲン、−ＯＲＧ、−ＳＲＧ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲＧ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＲＧ）（ＲＨ）、−Ｎ（ＲＧ）（ＲＨ）又は−Ｃ（ＮＲＩ）Ｎ（ＲＧ）（ＲＨ）の０〜６の独立した存在で置換され；各Ｒ１５及びＲ１６が、独立して、ハロゲン、−ＯＨ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、シクロアルキル、ヘテロシクリル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクリルアルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル又はヘテロアラルキルであり、ここで、各Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、シクロアルキル、ヘテロシクリル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクリルアルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル又はヘテロアラルキルが、ハロゲン、−ＯＲＧ、−ＳＲＧ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲＧ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＲＧ）（ＲＨ）、−Ｎ（ＲＧ）（ＲＨ）又は−Ｃ（ＮＲＩ）Ｎ（ＲＧ）（ＲＨ）の０〜６の独立した存在で置換され；各ＲＧ、ＲＨ及びＲＩが、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクリルアルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル又はヘテロアラルキルであり、ここで、各Ｃ１〜Ｃ６アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクリルアルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル又はヘテロアラルキルが、ハロゲン、−ＯＨ又はＣ１〜Ｃ６アルコキシの０〜６の独立した存在で置換され；ｍ、ｎ及びｐのそれぞれが、独立して、０、１、２、３、４又は５である。
【０８０４】
ある実施形態において、環Ｃが、アリール（例えば、フェニル）である。ある実施形態において、環Ｄが、ヘテロアリール（例えば、１，２，４−オキサジアゾール）である。ある実施形態において、Ｒ１５がフルオロであり、ｎが１である。ある実施形態において、ｐが０である。ある実施形態において、ｍが１である。ある実施形態において、Ｒ１４が−Ｓ（Ｏ）２ＲＧであり、ＲＧがクロロフェニルである。ある実施形態において、Ｒ１３ａが−ＣＨ２ＣＨ２ＣＦ３であり、Ｒ１３ｂが水素である。ある実施形態において、各Ｒ１１及びＲ１２が、独立して、水素である。
【０８０５】
さらなる実施形態において、ＧＳＩは、米国特許第８，０８４，４７７号明細書に記載される化合物である。一実施形態において、ＧＳＩは、ＢＭＳ−７０８１６３、すなわちアバガセスタット又は（Ｒ）−２−（（４−クロロ−Ｎ−（２−フルオロ−４−（１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）ベンジル）フェニル）スルホンアミド）−５，５，５−トリフルオロペンタンアミド又はその薬学的に許容される塩である。一実施形態において、ＧＳＩは、
【化３８】
2021525715.tif 000137
又はその薬学的に許容される塩である。
【０８０６】
ある実施形態において、γセクレターゼ阻害剤は、式（ＩＶ）：
【化３９】
2021525715.tif 000138
の化合物又はその薬学的に許容される塩であり、式中、Ｒ１７が、
【化４０】
2021525715.tif 000139
から選択され、Ｒ１８が、低級アルキル、低級アルキニル、−（ＣＨ２）ｎ−Ｏ−低級アルキル、−（ＣＨ２）ｎ−Ｓ−低級アルキル、−（ＣＨ２）ｎ−ＣＮ、−（ＣＲ’Ｒ”）ｎ−ＣＦ３、−（ＣＲ’Ｒ”）ｎ−ＣＨＦ２、−（ＣＲ’Ｒ”）ｎ−ＣＨ２Ｆ、−（ＣＨ２）ｎ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−低級アルキル、−（ＣＨ２）ｎ−ハロゲンであるか、又はフェニル、ハロゲン及びＣＦ３からなる群から選択される１つ以上の置換基で任意選択的に置換される−（ＣＨ２）ｎ−シクロアルキルであり；Ｒ’、Ｒ”が、それぞれ独立して、水素、低級アルキル、低級アルコキシ、ハロゲン又はヒドロキシであり；Ｒ１９、Ｒ２０が、それぞれ独立して、水素、低級アルキル、低級アルコキシ、フェニル又はハロゲンであり；Ｒ２１が、水素、低級アルキル、−（ＣＨ２）ｎ−ＣＦ３又は−（ＣＨ２）ｎ−シクロアルキルであり；Ｒ２２が、水素又はハロゲンであり；Ｒ２３が、水素又は低級アルキルであり；Ｒ２４が、水素、低級アルキル、低級アルキニル、−（ＣＨ２）ｎ−ＣＦ３、−（ＣＨ２）ｎ−シクロアルキル又はハロゲンで任意選択的に置換される−（ＣＨ２）ｎ−フェニルであり；Ｒ２５が、水素、低級アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｈ、−Ｃ（Ｏ）−低級アルキル、−Ｃ（Ｏ）−ＣＦ３、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２Ｆ、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨＦ２、−Ｃ（Ｏ）−シクロアルキル、−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｎ−Ｏ−低級アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−（ＣＨ２）ｎ−シクロアルキル、ハロゲン及び−Ｃ（Ｏ）Ｏ−低級アルキルからなる群から選択される１つ以上の置換基で任意選択的に置換される−Ｃ（Ｏ）−フェニルであるか、又は−Ｓ（Ｏ）２−低級アルキル、−Ｓ（Ｏ）２−ＣＦ３、−（ＣＨ２）ｎ−シクロアルキルであるか、又はハロゲンで任意選択的に置換される−（ＣＨ２）ｎ−フェニルであり；ｎが、０、１、２、３又は４である。
【０８０７】
ある実施形態において、Ｒ１７が、５，７−ジヒドロ−６Ｈ−ジベンゾ［ｂ，ｄ］アゼピン−６−オニルである。ある実施形態において、各Ｒ１９及びＲ２０が、独立して、−ＣＨ３である。ある実施形態において、Ｒ１８がＣＨ２ＣＦ２ＣＦ３である。
【０８０８】
ある実施形態において、ＧＳＩは、米国特許第７，１６０，８７５号明細書に記載される化合物である。一実施形態において、ＧＳＩは、ＲＯ４９２９０９７、すなわち（Ｓ）−２，２−ジメチル−Ｎ１−（６−オキソ−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−ジベンゾ［ｂ，ｄ］アゼピン−７−イル）−Ｎ３−（２，２，３，３，３−ペンタフルオロプロピル）マロンアミド又はその薬学的に許容される塩である。一実施形態において、ＧＳＩは、
【化４１】
2021525715.tif 000140
又はその薬学的に許容される塩である。
【０８０９】
ある実施形態において、ＧＳＩは、
【化４２】
2021525715.tif 000141
又はその薬学的に許容される塩である。
【０８１０】
ある実施形態において、ＧＳＩは、式（Ｖ）：
【化４３】
2021525715.tif 000142
の化合物又はその薬学的に許容される塩であり、式中、
ｑが、０又は１であり；Ｚが、ハロゲン、−ＣＮ、−ＮＯ２、−Ｎ３、−ＣＦ３、−ＯＲ２ａ、−Ｎ（Ｒ２ａ）２、−ＣＯ２Ｒ２ａ、−ＯＣＯＲ２ａ、−ＣＯＲ２ａ、−ＣＯＮ（Ｒ２ａ）２、−ＯＣＯＮ（Ｒ２ａ）２、−ＣＯＮＲ２ａ（ＯＲ２ａ）、−ＣＯＮ（Ｒ２ａ）Ｎ（Ｒ２ａ）２、−ＣＯＮＨＣ（＝ＮＯＨ）Ｒ２ａ、ヘテロシクリル、フェニル又はヘテロアリールを表し、ヘテロシクリル、フェニル又はヘテロアリールは、ハロゲン、−ＣＮ、−ＮＯ２、−ＣＦ３、−ＯＲ２ａ、−Ｎ（Ｒ２ａ）２、−ＣＯ２Ｒ２ａ、−ＣＯＲ２ａ、−ＣＯＮ（Ｒ２ａ）２及びＣ１〜４アルキルから選択される０〜３つの置換基を有し；Ｒ２７が、Ｈ、Ｃ１〜４アルキル又はＯＨを表し；Ｒ２６が、Ｈ又はＣ１〜４アルキルを表し；ただし、ｍが１である場合、Ｒ２６及びＲ２７が両方ともＣ１〜４アルキルを表すことはなく；Ａｒ１が、Ｃ６〜１０アリール又はヘテロアリールを表し、そのいずれも、ハロゲン、−ＣＮ、−ＮＯ２、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＯＣＦ３、Ｃ１〜４アルコキシ又はハロゲン、ＣＮ、ＮＯ２、ＣＦ３、ＯＨ及びＣ１〜４アルコキシから選択される置換基を任意選択的に有するＣ１〜４アルキルから独立して選択される０〜３つの置換基を有し；Ａｒ２が、Ｃ６〜１０アリール又はヘテロアリールを表し、そのいずれも、ハロゲン、−ＣＮ、−ＮＯ２、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＯＣＦ３、Ｃ１〜４アルコキシ又はハロゲン、−ＣＮ、−ＮＯ２、−ＣＦ３、−ＯＨ及びＣ１〜４アルコキシから選択される置換基を任意選択的に有するＣ１〜４アルキルから独立して選択される０〜３つの置換基を有し；Ｒ２ａが、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、Ｃ３＿６シクロアルキル、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニルを表し、そのいずれも、ハロゲン、−ＣＮ、−ＮＯ２、−ＣＦ３、−ＯＲ２ｂ、−ＣＯ２Ｒ２ｂ、−Ｎ（Ｒ２ｂ）２、−ＣＯＮ（Ｒ２ｂ）２、Ａｒ及びＣＯＡｒから選択される置換基を任意選択的に有し；又はＲ２ａが、Ａｒを表し；又は２つのＲ２ａ基が、それらが互いに結合される窒素原子と一緒に、＝Ｏ、＝Ｓ、ハロゲン、Ｃ１〜４アルキル、−ＣＮ、−ＮＯ２、−ＣＦ３、−ＯＨ、Ｃ１〜４アルコキシ、Ｃ１〜４アルコキシカルボニル、ＣＯ２Ｈ、アミノ、Ｃ１〜４アルキルアミノ、ジ（Ｃ１〜４アルキル）アミノ、カルバモイル、Ａｒ及びＣＯＡｒから独立して選択される０〜４つの置換基を有するＮ−ヘテロシクリル基を完成させることができ；Ｒ２ｂが、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、Ｃ３〜６シクロアルキルＣ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニルを表し、そのいずれも、ハロゲン、−ＣＮ、−ＮＯ２、−ＣＦ３、−ＯＨ、Ｃ１〜４アルコキシ、Ｃ１〜４アルコキシカルボニル、−ＣＯ２Ｈ、アミノ、Ｃ１〜４アルキルアミノ、ジ（Ｃ１〜４アルキル）アミノ、カルバモイル、Ａｒ及びＣＯＡｒから選択される置換基を任意選択的に有し；又はＲ２ｂが、Ａｒを表し；又は２つのＲ２ｂ基が、それらが互いに結合される窒素原子と一緒に、＝Ｏ、＝Ｓ、ハロゲン、Ｃ１〜４アルキル、−ＣＮ、−ＮＯ２、ＣＦ３、−ＯＨ、Ｃ１〜４アルコキシ、Ｃ１〜４アルコキシカルボニル、−ＣＯ２Ｈ、アミノ、Ｃ１〜４アルキルアミノ、ジ（Ｃ１〜４アルキル）アミノ、カルバモイル、Ａｒ及びＣＯＡｒから独立して選択される０〜４つの置換基を有するＮ−ヘテロシクリル基を完成させることができ；Ａｒが、ハロゲン、Ｃ１〜４アルキル、−ＣＮ、−ＮＯ２、−ＣＦ３、−ＯＨ、Ｃ１〜４アルコキシ、Ｃ１〜４アルコキシカルボニル、アミノ、Ｃ１〜４アルキルアミノ、ジ（Ｃ１〜４アルキル）アミノ、カルバモイル、Ｃ１〜４アルキルカルバモイル及びジ（Ｃ１〜４アルキル）カルバモイルから選択される０〜３つの置換基を有するフェニル又はヘテロアリールを表す。
【０８１１】
ある実施形態において、ｑが１である。ある実施形態において、ＺがＣＯ２Ｈである。ある実施形態において、Ｒ２７及びＲ２６のそれぞれが、独立して、水素である。ある実施形態において、Ａｒ１がクロロフェニルである。ある実施形態において、Ａｒ２がジフルオロフェニルである。
【０８１２】
ある実施形態において、ＧＳＩは、米国特許第６，９８４，６６３号明細書に記載される化合物である。一実施形態において、ＧＳＩは、ＭＫ−０７５２、すなわち３−（（１Ｓ，４Ｒ）−４−（（４−クロロフェニル）スルホニル）−４−（２，５−ジフルオロフェニル）シクロヘキシル）プロパン酸又はその薬学的に許容される塩である。ある実施形態において、ＧＳＩは、
【化４４】
2021525715.tif 000143
又はその薬学的に許容される塩である。
【０８１３】
ある実施形態において、ＧＳＩは、式（ＶＩ）の化合物又はその薬学的に許容される塩である。
【化４５】
2021525715.tif 000144
（式中、Ａ’が、存在しないか、又は
【化４６】
2021525715.tif 000145
及び−Ｓ（Ｏ）２−から選択され；
Ｚが、−ＣＨ２、−ＣＨ（ＯＨ）、−ＣＨ（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）、−ＣＨ（Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ）、−ＣＨ（ＮＲ３３Ｒ３４）、−ＣＨ（ＣＨ２（ＯＨ））、−ＣＨ（ＣＨ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）（ＯＨ））及び−ＣＨ（Ｃ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）（ＯＨ））、例えば−ＣＨ（Ｃ（ＣＨ３）（ＣＨ３）（ＯＨ））又は−ＣＨ（Ｃ（ＣＨ３）（ＣＨ２ＣＨ３）（ＯＨ））から選択され；Ｒ２７が、Ｃ１〜Ｃ２０アルキル、Ｃ２〜Ｃ２０アルケニル、Ｃ２〜Ｃ２０アルキニル、Ｃ１〜Ｃ２０アルコキシ、Ｃ２〜Ｃ２０アルケノキシ、Ｃ１〜Ｃ２０ヒドロキシアルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、ベンゾ（Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル）、ベンゾ（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロアルキル）、Ｃ４〜Ｃ８シクロアルケニル、（Ｃ５〜Ｃ１１）ビ−若しくはトリシクロアルキル、ベンゾ（Ｃ５〜Ｃ１１）ビ−若しくはトリシクロアルキル、Ｃ７〜Ｃ１１トリシクロアルケニル、（３〜８員）ヘテロシクロアルキル、Ｃ６〜Ｃ１４アリール及び（５〜１４員）ヘテロアリールから選択され、ここで、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ及びアルケノキシの各水素原子が、ハロで任意選択的に独立して置換され、ここで、シクロアルキル、ベンゾ（Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル）、シクロアルケニル、（３〜８員）ヘテロシクロアルキル、Ｃ６〜Ｃ１４アリール及び（５〜１４員）ヘテロアリールが、１〜３個のハロ原子で任意選択的に置換されるＣ１〜Ｃ１０アルキル、１〜３個のハロ原子で任意選択的に置換されるＣ１〜Ｃ１０アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ１０ヒドロキシアルキル、ハロ、例えばフッ素、−ＯＨ、−ＣＮ、−ＮＲ３３Ｒ３４、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ３３Ｒ３４、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ３５、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル及び（３〜８員）ヘテロシクロアルキルから独立して選択される１〜４つの置換基で任意選択的に独立して置換され；Ｒ２８が、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル及びＣ５〜Ｃ８シクロアルケニルから選択され、ここで、Ｒ２８が、１〜３個のハロ原子で任意選択的に置換されるＣ１〜Ｃ４アルキル、１〜３個のハロ原子で任意選択的に置換されるＣ１〜Ｃ４アルコキシ、ハロ及び−ＯＨから独立して選択される１〜３つの置換基で任意選択的に独立して置換され；又はＲ２７及びＲ２８が、存在する場合Ａ’基及びＲ２８が結合される窒素原子と一緒に、又はＲ２７及びＲ２８が、Ａ’が存在しない場合、Ｒ２７及びＲ２８が結合される窒素原子と一緒に、４〜８員環を任意選択的に形成し得；Ｒ２９が、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル、Ｃ５〜Ｃ６シクロアルケニル及び（３〜８員）ヘテロシクロアルキルから選択され、ここで、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル及びヘテロシクロアルキルが、それぞれＣ１〜Ｃ４アルコキシ、ハロ、−ＯＨ−Ｓ（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル及び（３〜８員）ヘテロシクロアルキルから独立して選択される１〜３つの置換基で任意選択的に独立して置換され；Ｒ３０が、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル又はハロであり；又はＲ２９及びＲ３０が、それらが結合される炭素原子と一緒に、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、モルホリノ、ピペリジノ、ピロリジノ、テトラヒドロフラニル及びペルヒドロ−２Ｈ−ピランから選択される部分を任意選択的に形成し得、ここで、Ｒ２９及びＲ３０によって形成される部分は、１〜３個のハロ原子で任意選択的に置換されるＣ１〜Ｃ６アルキル、１〜３個のハロ原子で任意選択的に置換されるＣ１〜Ｃ６アルコキシ、ハロ、−ＯＨ、−ＣＮ及びアリルから独立して選択される１〜３つの置換基で任意選択的に置換され；Ｒ３１が、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルキレン、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、ハロ、−ＣＮ、Ｃ３〜Ｃ１２シクロアルキル、Ｃ４〜Ｃ１２シクロアルケニル及びＣ６〜Ｃ１０アリール、（５〜１０員）ヘテロアリールから選択され、ここで、Ｒ３１のアルキル、アルキレン及びアルコキシが、それぞれハロ及び−ＣＮから独立して選択される１〜３つの置換基で任意選択的に独立して置換され、ここで、Ｒ３１のシクロアルキル、シクロアルケニル及びアリール及びヘテロアリールが、それぞれ１〜３個のハロ原子で任意選択的に置換されるＣ１〜Ｃ４アルキル、１〜３個のハロ原子で任意選択的に置換されるＣ１〜Ｃ４アルコキシ、ハロ及び−ＣＮから独立して選択される１〜３つの置換基で任意選択的に独立して置換され；Ｒ３２が、水素、Ｃ１〜Ｃ２０アルキル、Ｃ１〜Ｃ２０アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ２０ヒドロキシアルキル、Ｃ３〜Ｃ１２シクロアルキル、Ｃ４〜Ｃ１２シクロアルケニル、（Ｃ５〜Ｃ２０）ビ−若しくはトリシクロアルキル、（Ｃ７〜Ｃ２０）ビ−又はトリシクロアルケニル、（３〜１２員）ヘテロシクロアルキル、（７〜２０員）ヘテロビ−又はヘテロトリシクロアルキル、Ｃ６〜Ｃ１４アリール及び（５〜１５員）ヘテロアリールから選択され、ここで、Ｒ３２が、１〜３個のハロ原子で任意選択的に置換されるＣ１〜Ｃ２０アルキル、Ｃ１〜Ｃ２０アルコキシ、−ＯＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、−ＮＲ３３Ｒ３４、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ３３Ｒ３４、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ３５、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ３５、−Ｓ（Ｏ）ｎＮＲ３３Ｒ３４、−Ｓ（Ｏ）ｎＲ３５、Ｃ３〜Ｃ１２シクロアルキル、１〜３つのＯＨ又はハロ基で任意選択的に置換される（４〜１２員）ヘテロシクロアルキル、（４〜１２員）ヘテロシクロアルコキシ、Ｃ６〜Ｃ１４アリール、（５〜１５員）ヘテロアリール、Ｃ６〜Ｃ１２アリールオキシ及び（５〜１２員）ヘテロアリールオキシから独立して選択される１〜４つの置換基で任意選択的に独立して置換され；又はＲ３３及びＲ３４が、それらがそれぞれ結合される炭素及び窒素原子と一緒に、（５〜８員）ヘテロシクロアルキル環、（５〜８員）ヘテロシクロアルケニル環又は（６〜１０員）ヘテロアリール環を任意選択的に形成し得、ここで、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルケニル及びヘテロアリール環が、それぞれハロ、１〜３個のハロ原子で任意選択的に置換されるＣ１〜Ｃ６アルキル、１〜３個のハロ原子で任意選択的に置換されるＣ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６ヒドロキシアルキル、−ＯＨ、−（ＣＨ２）０〜１０ＮＲ３３Ｒ３４、−（ＣＨ２）０〜１０Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ３３Ｒ３４、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ３３Ｒ３４及びＣ３〜Ｃ１２シクロアルキルから独立して選択される１〜３つの置換基で任意選択的に独立して置換され；Ｒ３３及びＲ３４が、それぞれ水素、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル（ここで、Ｃ１〜Ｃ１０アルキルの各水素原子が、ハロ原子、例えばフッ素原子で任意選択的に独立して置換される）、Ｃ２〜Ｃ１０アルケニル、Ｃ２〜Ｃ１０アルキニル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ（ここで、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシの各水素原子が、ハロ原子で任意選択的に独立して置換される）、Ｃ２〜Ｃ６アルケノキシ、Ｃ２〜Ｃ６アルキノキシ（ａｌｋｙｎｏｘｙ）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ１１、−Ｓ（Ｏ）ｎＲ１１、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ４〜Ｃ８シクロアルケニル、（Ｃ５〜Ｃ１１）ビ−若しくはトリシクロアルキル、（Ｃ７〜Ｃ１１）ビ−又はトリシクロアルケニル、（３〜８員）ヘテロシクロアルキル、Ｃ６〜Ｃ１４アリール及び（５〜１４員）ヘテロアリールから独立して選択され、ここで、アルキル及びアルコキシが、それぞれハロ及び−ＯＨから独立して選択される１〜３つの置換基で任意選択的に独立して置換され、ここで、シクロアルキル、シクロアルケニル、ビ−若しくはトリシクロアルキル、ビ−又はトリシクロアルケニル、ヘテロシクロアルキル、アリール及びヘテロアリールが、それぞれハロ、−ＯＨ、１〜６個のハロ原子で任意選択的に独立して置換されるＣ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ２〜Ｃ６アルケノキシ、Ｃ２〜Ｃ６アルキノキシ及びＣ１〜Ｃ６ヒドロキシアルキルから独立して選択される１〜３つの置換基で任意選択的に独立して置換され；又はＮＲ３３Ｒ３４が、（４〜７員）ヘテロシクロアルキルを形成し得、ここで、ヘテロシクロアルキルが、Ｎ、Ｏ及びＳから独立して選択される１〜２個のさらなるヘテロ原子を任意選択的に含み、ここで、ヘテロシクロアルキルが、１〜３つの二重結合を任意選択的に含有し、ここで、ヘテロシクロアルキルが、１〜６個のハロ原子で任意選択的に置換されるＣ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ２〜Ｃ６アルケノキシ、Ｃ２〜Ｃ６アルキノキシ、Ｃ１〜Ｃ６ヒドロキシアルキル、Ｃ２〜Ｃ６ヒドロキシアルケニル、Ｃ２〜Ｃ６ヒドロキシアルキニル、ハロ、−ＯＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ３５、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ３５
、−Ｓ（Ｏ）ｎＲ３５及び−Ｓ（Ｏ）ｎＮＲ３３Ｒ３４から独立して選択される１〜３つの置換基で任意選択的に独立して置換され；Ｒ３５が、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ４〜Ｃ８シクロアルケニル、（Ｃ５〜Ｃ１１）ビ−若しくはトリシクロアルキル、−（Ｃ７〜Ｃ１１）ビ−又はトリシクロアルケニル、（３〜８員）ヘテロシクロアルキル、Ｃ６〜Ｃ１０アリール及び（５〜１４員）ヘテロアリールから選択され、ここで、Ｒ３５のアルキルが、−ＯＨ、−ＣＮ及びＣ３〜Ｃ８シクロアルキルから独立して選択される１〜３つの置換基で任意選択的に独立して置換され、ここで、アルキルの各水素原子が、ハロ原子、例えばフッ素原子で任意選択的に独立して置換され、ここで、Ｒ３５のシクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロシクロアルキル、アリール及びヘテロアリールが、それぞれハロ、１〜３個のハロ原子で任意選択的に置換されるＣ１〜Ｃ８アルキル、−ＯＨ、−ＣＮ及びＣ３〜Ｃ８シクロアルキルから独立して選択される１〜３つの置換基で任意選択的に独立して置換され；ｎが、いずれの場合も、０、１、２及び３から独立して選択される整数である）；及びこのような化合物の薬学的に許容される塩。
【０８１４】
ある実施形態において、ＧＳＩは、米国特許第７，７９５，４４７号明細書に記載される化合物である。一実施形態において、ＧＳＩは、ＰＦ−３０８４０１４、すなわちニトロガセスタット又は（Ｓ）−２−（（（Ｓ）−６，８−ジフルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イル）アミノ）−Ｎ−（１−（２−メチル−１−（ネオペンチルアミノ）プロパン−２−イル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル）ペンタンアミド又はその薬学的に許容される塩である。
【０８１５】
ある実施形態において、ＧＳＩは、
【化４７】
2021525715.tif 000146
又はその薬学的に許容される塩である。
【０８１６】
ある実施形態において、ＧＳＩは、式（ＶＩＩ）：
【化４８】
2021525715.tif 000147
の化合物又はその薬学的に許容される塩であり、式中、ｋが、１、２又は３であり；Ｒ３６が、アリールＣ１〜Ｃ８アルキル、アリールＣ２〜Ｃ６アルケニル又はアリールアルキニルであり、ここで、アリール基が、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、ハロゲン、ハロアルキル、ハロアルコキシ、ヘテロアリール、ヘテロアリール（Ｃ１〜Ｃ６）アルコキシ、アリールアルコキシ、アリールオキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシカルボニル、−ＯＣＨ２ＣＨ２Ｏ−、−ＯＣＨ２Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ４３Ｒ４４、−ＮＨＲ’、−ＮＲ’Ｒ”、−Ｎ（Ｒ１６）Ｃ（Ｏ）Ｒ１７、ヘテロシクロアルキル、フェニル、アリールＣ１〜Ｃ６アルカノイル、フェニルアルコキシ、フェニルオキシ、ＣＮ、−ＳＯ２−アリール、−Ｓ（Ｏ）ｎＲ２５、−（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）−Ｓ（Ｏ）ｘＲ２５、−（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）−ＳＯ２−アリール、ＯＨ、Ｃ１〜Ｃ６チオアルコキシ、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、−ＯＳＯ２−アリール又はＣＯ２Ｈの０〜５つの存在で置換され、ここで、各ヘテロアリールが、独立して、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ハロゲン、アルキル、アルコキシ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、アルコキシアルキル若しくはＣＮの０〜２つの存在で置換されるヘテロアリール、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ４アルコキシＣ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル、ハロゲン又はハロゲン、ＯＨ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ４アルコキシ、ＣＦ３、ＯＣＦ３、ＣＮ若しくはＣ１〜Ｃ６チオアルコキシの０〜５つの存在で置換されるフェニルの０〜３つの存在で置換され、
ここで、各ヘテロシクロアルキル及びアリールが、独立して、ハロゲン、アルキル、アルコキシ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、アルコキシアルキル又はＣＮ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ４アルコキシＣ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル、ハロゲン又はハロゲン、ＯＨ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ４アルコキシ、ＣＦ３、ＯＣＦ３、ＣＮ若しくはＣ１〜Ｃ６チオアルコキシの０〜５つの存在で置換されるフェニルの０〜２つの存在で置換され；Ｒ１６が、水素又はＣ１〜Ｃ６アルキルであり；Ｒ１７が、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、アリール、ヘテロアリール、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、ＯＨ、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、アリール（Ｃ１〜Ｃ６）アルコキシ、−ＮＲ１８Ｒ１９、シクロアルキル又はアリールアルキルであり、ここで、それぞれの環状部分が、独立して、アルキル、アルコキシ、ハロ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、ＣＮ、ＮＨ２、ＮＨ（アルキル）、Ｎ（アルキル）（アルキル）、ＣＯ２Ｈ又はＣ１〜Ｃ６アルコキシカルボニルの０〜５つの存在で置換され；Ｒ１８及びＲ１９が、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル又はアリール（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルであり、ここで、それぞれの環状部分が、アルキル、アルコキシ、ハロゲン、ヒドロキシル、ＣＦ３又はＯＣＦ３の０〜３つの存在で置換され；各Ｒ’が、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、アリール、アリール（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルカノイル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、アリール（Ｃ１〜Ｃ６）アルカノイル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロアリール（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル、−ＳＯ２−アルキル、−ＳＯ２−アリール、−ＳＯ２−ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル（Ｃ１〜Ｃ６）アルカノイル又はヘテロアリール（Ｃ１〜Ｃ６）アルカノイルであり、ここで、アルキル及びアルカノイル基のアルキル部分が、ハロゲン又はＣ１〜Ｃ６アルコキシで任意選択的に置換され、アリール及びヘテロアリール基が、アルキル、アルコキシ、ハロゲン、ハロアルキル、ハロアルコキシで任意選択的に置換され；各Ｒ”が、独立して、水素又はＣ１〜Ｃ６アルキルであり、ここで、アルキル基が、ハロゲンで任意選択的に置換され；
Ｒ３６は、環状部分が、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ＯＨ、アルコキシカルボニル又はＣ１〜Ｃ６アルコキシの０〜５つの存在で置換されたＣ３〜Ｃ７シクロアルキル（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）であり；又はＲ３６が、Ｃ１〜Ｃ１４アルキル、Ｃ２〜Ｃ１６アルケニル又はＣ２〜Ｃ８アルキニルであり、これらは、それぞれＯＨ、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、アリール、アリールアルコキシ、アリールオキシ、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル、アリール（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、−ＣＯ２（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）、−ＮＲ’Ｒ”、Ｃ１〜Ｃ６チオアルコキシ、−ＮＨＳ（Ｏ）ｘＲ２５、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）−Ｓ（Ｏ）ｎＲ２５、−Ｓ（Ｏ）ｘＲ２５、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ４３Ｒ４４、−Ｎ（Ｒ１６）Ｃ（Ｏ）ＮＲ１６Ｒ１７又は−Ｎ（Ｒ１６）Ｃ（Ｏ）Ｒ１７の０〜５つの存在で置換され；ここで、上記のアリール基が、ＯＨ、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル又はハロゲンの０〜３つの存在で置換され；Ｒ４３及びＲ４４が、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルキルアルキル、アリールアルカノイル、アルケニル、シクロアルキル、アルキニル、シクロアルケニル、ピリジル、イミダゾリル、チアゾリル、オキサゾリル又はインドリルであり、ここで、各アルキルが、ＮＨ２、ＮＨ（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）、Ｎ（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）、ＯＨ、Ｃ１〜Ｃ６チオアルコキシ、ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ＣＮ、ハロゲン又はＯＨ若しくはフェニルで任意選択的に置換されるアルコキシの０〜３つの存在で置換され、ここで、アリール、ヘテロアリール及びヘテロシクロアルキル基が、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ４アルコキシ、ＣＦ３、ＯＣＦ３、ＯＨ、ハロゲン、チオアルコキシ、フェニル又はヘテロアリールの０〜３つの存在で置換され；又はＲ４３、Ｒ４４及びそれらが結合される窒素が、３〜７環員を含有するヘテロシクロアルキル環を形成し、ここで、Ｒ４３及びＲ４４の環状部分又はＲ４３、Ｒ４４及びそれらが結合される窒素から形成される複素環が、アルキル、アルコキシ、ハロ、ＯＨ、チオアルコキシ、ＮＨ２、ＮＨ（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）、Ｎ（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）、ＣＦ３、ＯＣＦ３、ハロゲンで任意選択的に置換されるフェニル、−（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）−Ｎ（Ｈ又はＣ１〜Ｃ４アルキル）−フェニル、Ｃ１〜Ｃ４ヒドロキシアルキル、アリールアルコキシ、アリールアルキル、アリールアルカノイル、Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、Ｃ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）、Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）、ヘテロシクロアルキルアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシカルボニル、Ｃ２〜Ｃ６アルカノイル、ヘテロアリール又は−ＳＯ２（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）の０〜３つの存在で置換され；ｘが、０、１又は２であり；Ｒ２５が、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ＯＨ、ＮＲ２６Ｒ２７であり；Ｒ２６及びＲ２７が、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、フェニル（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）、アリール又はヘテロアリールであり；又はＲ２６、Ｒ２７及びそれらが結合される窒素が、ヘテロシクロアルキル環を形成し；
Ｒ３６は、環状部分が、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ４ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ４ハロアルコキシ、アリール、アリールアルキル、アリールオキシ、ヘテロアリール、−ＳＯ２−アリール、−Ｓ（Ｏ）ｘＲ２５、（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）−Ｓ（Ｏ）ｘＲ２５、ＣＮ、Ｃ１〜Ｃ６チオアルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシカルボニル、−ＮＲ’Ｒ”、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ’Ｒ”、ヘテロシクロアルキルの０〜５つの存在で置換されたヘテロアリール（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルであり、ここで、上記のアリール基が、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ４ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ４ハロアルコキシ又はＣＮの０〜４つの存在で置換され；ここで、上記のヘテロアリール及びヘテロシクロアルキル基が、ハロゲン、ＣＦ３、（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル、Ｃ１〜Ｃ６チオアルコキシ、ＯＨ、Ｃ１〜Ｃ４ヒドロキシアルキル又はＣ１〜Ｃ４アルコキシの０〜３つの存在で置換され；又は
Ｒ３６は、環状部分が、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ４ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ４ハロアルコキシ、アリール、アリールアルキル、アリールオキシ、ヘテロアリール、−ＳＯ２−アリール、−Ｓ（Ｏ）ｘＲ２５、（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）−Ｓ（Ｏ）ｘＲ２５、ＣＮ、Ｃ１〜Ｃ６チオアルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシカルボニル、−ＮＲ’Ｒ”、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ’Ｒ”、ヘテロシクロアルキルの０〜３つの存在で置換されたヘテロシクロアルキル（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）であり；
Ｒ３７が、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル又はフェニル（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルであり；Ｒ３８が、水素、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、ＣＮであり；Ｒ３９が、水素、ハロゲン、−ＣＯ２−（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルコキシ、ＣＮ、アリールオキシ、イソシアナト、−ＳＯ２（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）、−ＮＨＲ’、−ＮＲ’Ｒ”、Ｃ１〜Ｃ６アルカノイル、ヘテロアリール、アリールで任意選択的に置換されるＣ１〜Ｃ６アルキルであり；又は
Ｒ３８及びＲ３９及びそれらが結合される炭素が、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ４アルコキシ、ハロゲン又はＣ１〜Ｃ４アルカノイルの０〜３つの存在で置換されるヘテロシクロアルキル環を形成し、ここで、アルカノイル基が、０〜３個のハロゲン原子で置換され；Ｒ４０が、水素、−ＳＯ２ＮＲ’Ｒ”、ハロゲンであり；又はＲ３９及びＲ４０及びそれらが結合される炭素が、ベンゾ環を形成し；又はＲ３９及びＲ４０及びそれらが結合される炭素が、１−オキサ−２，３−ジアザシクロペンチル環を形成し；
Ｒ４０及びＲ４１が、独立して、水素又はＦであり；又はＲ４０、Ｒ４１及びそれらが結合される炭素が、１，２，５−オキサジアゾリル環を形成し；又はＲ４０、Ｒ４１及びそれらが結合される炭素が、ナフチル環を形成する。
【０８１７】
ある実施形態において、Ｒ３６が４−ブロモベンジルである。ある実施形態において、Ｒ３７が水素である。ある実施形態において、ｋが２である。ある実施形態において、Ｒ３８、Ｒ４０、Ｒ４１及びＲ４２のそれぞれが、独立して、水素である。ある実施形態において、Ｒ３９がクロロである。
【０８１８】
ある実施形態において、ＧＳＩは、米国特許第７，９３９，６５７号明細書に記載される化合物である。一実施形態において、ＧＳＩは、ＥＬＮ−３１８４６３、すなわちＨＹ−５０８８２又は（Ｒ）−Ｎ−（４−ブロモベンジル）−４−クロロ−Ｎ−（２−オキソアゼパン−３−イル）ベンゼンスルホンアミド又はその薬学的に許容される塩である。ある実施形態において、ＧＳＩは、
【化４９】
2021525715.tif 000148
又はその薬学的に許容される塩である。
【０８１９】
ある実施形態において、ＧＳＩは、式（ＶＩＩＩ）：
【化５０】
2021525715.tif 000149
の化合物又はその薬学的に許容される塩であり、式中、Ｒ１が、−ＣＨ２ＣＦ３又は−ＣＨ２ＣＨ２ＣＦ３であり；Ｒ２が、−ＣＨ２ＣＦ３、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＦ３又は−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＦ３であり；Ｒ３が、水素又は−ＣＨ３であり；各Ｒａが、独立して、Ｆ、ＣＩ、−ＣＮ、−ＯＣＨ３及び／又は−ＮＨＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３であり；ｚが、０、１又は２である。
【０８２０】
ある実施形態において、Ｒ１が、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＦ３ＣＨ２ＣＨ２ＣＦ３である。ある実施形態において、Ｒ２が、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＦ３である。ある実施形態において、Ｒ３が−ＣＨ３である。ある実施形態において、ｚが０である。
【０８２１】
ある実施形態において、ＧＳＩは、米国特許第８，６２９，１３６号明細書に記載される化合物である。一実施形態において、ＧＳＩは、ＢＭＳ−９０６０２４、すなわち（２Ｒ，３Ｓ）−Ｎ−［（３Ｓ）−１−メチル−２−オキソ−５−フェニル−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１，４−ベンゾジアゼピン−３−イル］−２，３−ビス（３，３，３−トリフルオロプロピル）スクシンアミド又はその薬学的に許容される塩である。一実施形態において、ＧＳＩは、
【化５１】
2021525715.tif 000150
又はその薬学的に許容される塩である。
【０８２２】
ある実施形態において、ＧＳＩは、米国特許第８，６２９，１３６号明細書に記載される化合物である。一実施形態において、ＧＳＩは、ＬＹ３０３９４７８、すなわちクレニガセスタット又は４，４，４−トリフルオロ−Ｎ−（（Ｒ）−１−（（（Ｓ）−５−（２−ヒドロキシエチル）−６−オキソ−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［ｄ］ピリド［２，３−ｂ］アゼピン−７−イル）アミノ）−１−オキソプロパン−２−イル）ブタンアミド又はその薬学的に許容される塩である。ある実施形態において、ＧＳＩは、
【化５２】
2021525715.tif 000151
又はその薬学的に許容される塩である。
【０８２３】
ある実施形態において、ＧＳＩは、ＢＭＳ−２９９８９７、すなわち２−［（１Ｒ）−１−［［（４−クロロフェニル）スルホニル］（２，５−ジフルオロフェニル）アミノ］エチル−５−フルオロベンゼンブタン酸又はその薬学的に許容される塩である。ある実施形態において、ＧＳＩは、
【化５３】
2021525715.tif 000152
又はその薬学的に許容される塩である。
【０８２４】
ある実施形態において、ＧＳＩは、ＬＹ−４１１５７５、すなわちＬＳＮ−４１１５７５、（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（３，５−ジフルオロフェニル）−２−ヒドロキシアセトアミド）−Ｎ−（（Ｓ）−５−メチル−６−オキソ−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−ジベンゾ［ｂ，ｄ］アゼピン−７−イル）プロパンアミド又はその薬学的に許容される塩である。ある実施形態において、ＧＳＩは、
【化５４】
2021525715.tif 000153
又はその薬学的に許容される塩である。
【０８２５】
ある実施形態において、ＧＳＩは、ＤＡＰＴ、すなわちＮ−［（３，５−ジフルオロフェニル）アセチル］−Ｌ−アラニル−２−フェニル］グリシン−１，１−ジメチルエチルエステル又はその薬学的に許容される塩である。ある実施形態において、ＧＳＩは、
【化５５】
2021525715.tif 000154
又はその薬学的に許容される塩である。
【０８２６】
ある実施形態において、ＧＳＩは、以下の式：
【化５６】
2021525715.tif 000155
の化合物であり、式中、ｚ１が、０、１又は２であり；Ｘ１が、Ｃ（Ｒ３）又はＮであり；Ｒ１が、水素、ハロゲン、−Ｎ３、−ＣＦ３、−ＣＣｌ３、−ＣＢｒ３、−ＣＩ３、−ＣＮ、−ＣＨＯ、−ＯＲ１Ａ、−ＮＲ１ＡＲ１Ｂ、−ＣＯＯＲ１Ａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１ＡＲ１Ｂ、−ＮＯ２、−ＳＲ１Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ１ＯＲ１Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ１ＮＲ１ＡＲ１Ｂ、−ＮＨＮＲ１ＡＲ１Ｂ、−ＯＮＲ１ＡＲ１Ｂ、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＲ１ＡＲ１Ｂ、置換若しくは非置換アルキル、置換若しくは非置換ヘテロアルキル、置換若しくは非置換シクロアルキル、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換アリール又は置換若しくは非置換ヘテロアリールであり；Ｒ２が、水素、ハロゲン、−Ｎ３、−ＣＦ３、−ＣＣｌ３、−ＣＢｒ３、−ＣＩ３、−ＣＮ、−ＣＨＯ、−ＯＲ２Ａ、−ＮＲ２ＡＲ２Ｂ、−ＣＯＯＲ２Ａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２ＡＲ２Ｂ、−ＮＯ２、−ＳＲ２Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ２Ｒ２Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ２ＯＲ２Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ２ＮＲ２ＡＲ２Ｂ、−ＮＨＮＲ２ＡＲ２Ｂ、−ＯＮＲ２ＡＲ２Ｂ、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＲ２ＡＲ２Ｂ、置換若しくは非置換アルキル、置換若しくは非置換ヘテロアルキル、置換若しくは非置換シクロアルキル、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換アリール又は置換若しくは非置換ヘテロアリールであり；Ｒ３が、水素、ハロゲン、−Ｎ３、−ＣＦ３、−ＣＣｌ３、−ＣＢｒ３、−ＣＩ３、−ＣＮ、−ＣＨＯ、−ＯＲ３Ａ、−ＮＲ３ＡＲ３Ｂ、−ＣＯＯＲ３Ａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ３ＡＲ３Ｂ、−ＮＯ２、−ＳＲ３Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ３Ｒ３Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ３ＯＲ３Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ３ＯＮＲ３ＡＲ３Ｂ、−ＮＨＮＲ３ＡＲ３Ｂ、−ＯＮＲ３ＡＲ３Ｂ、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＲ３ＡＲ３Ｂ、置換若しくは非置換アルキル、置換若しくは非置換ヘテロアルキル、置換若しくは非置換シクロアルキル、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換アリール又は置換若しくは非置換ヘテロアリールであり；Ｒ４が、水素、ハロゲン、−Ｎ３、−ＣＦ３、−ＣＣｌ３、−ＣＢｒ３、−ＣＩ３、−ＣＮ、−ＣＨＯ、−ＯＲ４Ａ、−ＮＲ４ＡＲ４Ｂ、−ＣＯＯＲ４Ａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ４ＡＲ４Ｂ、−ＮＯ２、−ＳＲ４Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ４Ｒ４Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ４ＯＲ４Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ４ＮＲ４ＡＲ４Ｂ、−ＮＨＮＲ４ＡＲ４Ｂ、−ＯＮＲ４ＡＲ４Ｂ、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＲ４ＡＲ４Ｂ、置換若しくは非置換アルキル、置換若しくは非置換ヘテロアルキル、置換若しくは非置換シクロアルキル、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換アリール又は置換若しくは非置換ヘテロアリールであり；Ｒ５が、水素、ハロゲン、−Ｎ３、−ＣＦ３、−ＣＣｌ３、−ＣＢｒ３、−ＣＩ３、−ＣＮ、−ＣＨＯ、−ＯＲ５Ａ、−ＮＲ５ＡＲ５Ｂ、−ＣＯＯＲ５Ａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ５ＡＲ５Ｂ、−ＮＯ２、−ＳＲ５Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ５Ｒ５Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ５ＯＲ５Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ５ＮＲ５ＡＲ５Ｂ、−ＮＨＮＲ５ＡＲ５Ｂ、−ＯＮＲ５ＡＲ５Ｂ、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＲ５ＡＲ５Ｂ、置換若しくは非置換アルキル、置換若しくは非置換ヘテロアルキル、置換若しくは非置換シクロアルキル、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換アリール又は置換若しくは非置換ヘテロアリールであり、ここで、Ｒ４及びＲ５が、任意選択的に一緒に結合されて、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル又は置換若しくは非置換ヘテロアリールを形成し；Ｒ６が、−ＣＦ３、置換若しくは非置換シクロプロピル又は置換若しくは非置換シクロブチルであり；Ｒ７が、独立して、水素、ハロゲン、−Ｎ３、−ＣＦ３、−ＣＣｌ３、−ＣＢｒ３、−ＣＩ３、−ＣＮ、−ＣＨＯ、−ＯＲ７Ａ、−ＮＲ７ＡＲ７Ｂ、−ＣＯＯＲ７Ａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ７ＡＲ７Ｂ、−ＮＯ２、−ＳＲ７Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ７Ｒ７Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ７ＯＲ７Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ７ＮＲ７ＡＲ７Ｂ、−ＮＨＮＲ７ＡＲ７Ｂ、−ＯＮＲ７ＡＲ７Ｂ、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＲ７ＡＲ７Ｂ、置換若しくは非置換アルキル、置換若しくは非置換ヘテロアルキル、置換若しくは非置換シクロアルキル、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換アリール又は置換若しくは非置換ヘテロアリールであり；Ｒ１Ａ、Ｒ１Ｂ、Ｒ２Ａ、Ｒ２Ｂ、Ｒ３Ａ、Ｒ３Ｂ、Ｒ４Ａ、Ｒ４Ｂ、Ｒ５Ａ、Ｒ５Ｂ、Ｒ７Ａ及びＲ７Ｂが、独立して、水素、置換若しくは非置換アルキル、置換若しくは非置換ヘテロアルキル、置換若しくは非置換シクロアルキル、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換アリール又は置換若しくは非置換ヘテロアリールであり；ｎ１、ｎ２、ｎ３、ｎ４、ｎ５及びｎ７が、独立して、１又は２である。
【０８２７】
ある実施形態において、式（ＶＩＩＩ−ａ）、（ＶＩＩＩ−ｂ）、（ＶＩＩＩ−ｃ）又は（ＶＩＩＩ−ｄ）のＧＳＩは、国際特許公開番号国際公開第２０１４／１６５２６３号パンフレット（例えば、実施形態Ｐ１〜Ｐ１２中）に記載されている。ある実施形態において、式（ＶＩＩＩ−ａ）、（ＶＩＩＩ−ｂ）、（ＶＩＩＩ−ｃ）又は（ＶＩＩＩ−ｄ）のＧＳＩは、
【化５７】
2021525715.tif 000156
又はその薬学的に許容される塩から選択される。
【０８２８】
ある実施形態において、ＧＳＩは、式（ＩＸ）：
【化５８】
2021525715.tif 000157
の化合物又はその薬学的に許容される塩であり、式中、Ａが、Ｎ、Ｏ、Ｓ、Ｓ（Ｏ）２、Ｐ（Ｏ）Ｒ１及びＮ−Ｓ（Ｏ）２−Ｒ１からなる群から選択される少なくとも１つのヘテロ原子を含む４〜７員スピロ環であり、ここで、スピロ環が、Ｃ１〜３アルキル及び＝Ｏからなる群から選択される１〜３つの置換基で任意選択的に置換され；Ｒ１が、ハロで任意選択的に置換されるＣ１〜６アルキルであり；各Ｌ１が、独立して、１）ハロで任意選択的に置換されるＣ１〜３アルキル及び２）ハロからなる群から選択され；各Ｌ２が、独立して、１）ハロで任意選択的に置換されるＣ１〜３アルキル、及び２）ハロからなる群から選択され；
ｎが、０〜３である。
【０８２９】
ある実施形態において、ＧＳＩは、米国特許出願公開第２０１５−３０７５３３号明細書（例えば、１３〜１６頁の表中）に記載される化合物である。ある実施形態において、式（ＩＸ）のＧＳＩは、
【化５９】
2021525715.tif 000158
又はその薬学的に許容される塩から選択される。
【０８３０】
ある実施形態において、ＧＳＩは、式（Ｘ）：
【化６０】
2021525715.tif 000159
の化合物又はその薬学的に許容される塩であり、式中、Ｒ１が、ヒドロキシ又はフルオロであり；Ｒ２が、Ｃ１〜Ｃ４アルキルであり；Ｒ３が、水素又はフェニルであり；Ｒ４が、水素、フェニル又はＣ１〜Ｃ４アルキルであり；Ｒ５が、水素又はフェニルであり；ただし、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５の１つが、水素以外であり、他の２つが水素である。
【０８３１】
ある実施形態において、ＧＳＩは、米国特許第８，１８８，０６９号明細書中の化合物である。一実施形態において、ＧＳＩは、
【化６１】
2021525715.tif 000160
又はその薬学的に許容される塩である。
【０８３２】
ある実施形態において、ＧＳＩは、式（ＸＩ）：
【化６２】
2021525715.tif 000161
の化合物又はその薬学的に許容される塩であり、式中：Ｒ１が、１）水素、２）１〜５つのハロゲン又はフェニルで任意選択的に置換される（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル（ここで、フェニルが、１〜３つのハロゲンで任意選択的に置換される）、３）１〜３つの（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル又は１〜５つのハロゲンで任意選択的に置換されるフェニル、又は４）１〜３つの（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル又は１〜５つのハロゲンで任意選択的に置換される（Ｃ４〜Ｃ６）シクロアルキルであり；Ｒ２が、１）水素、２）１〜５つのハロゲン又はフェニルで任意選択的に置換される（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル（ここで、フェニルが、１〜３つのハロゲンで任意選択的に置換される）、又は３）１〜３つのハロゲンで任意選択的に置換されるフェニルであり；Ｒ３が、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、−ＯＨ又はハロゲンであり；
Ｘが、−ＮＲ４−、−Ｏ−、−Ｓ−又は−ＳＯ２−であり；Ｒ４が、水素又は（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルであり；
ｐが、１〜３であり；ｍが、０又は１であり；ｎが、０〜３であり；Ａｒ２−Ａｒ１が、
【化６３】
2021525715.tif 000162
又はその薬学的に許容される塩からなる群から選択される。
【０８３３】
ある実施形態において、ＧＳＩは、米国特許第９，０９６，５８２号明細書（例えば、１３〜１７頁の表中）に記載される化合物である。ある実施形態において、ＧＳＩは、
【化６４】
2021525715.tif 000163
又はその薬学的に許容される塩から選択される。
【０８３４】
ある実施形態において、ＧＳＩは、式（ＸＩＩ）：
【化６５】
2021525715.tif 000164
の化合物又はその薬学的に許容される塩、式中、又は薬学的に許容される塩であり、式中：Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０及びＷが、独立して、以下から選択され；Ｗが、−Ｓ（Ｏ）−及び−Ｓ（Ｏ）２−からなる群から選択され；Ｒ１が、Ｈ、アルキル−、アルケニル−、アルキニル−、アリール−、アリールアルキル−、アルキルアリール−、シクロアルキル−、シクロアルケニル、シクロアルキルアルキル−、縮合ベンゾシクロアルキル（すなわちベンゾ縮合シクロアルキル）、縮合ベンゾヘテロシクロアルキル（すなわちベンゾ縮合ヘテロシクロアルキル）、縮合ヘテロアリールシクロアルキル（すなわちヘテロアリール縮合シクロアルキル）、縮合ヘテロアリールヘテロシクロアルキル（すなわちヘテロアリール縮合ヘテロシクロアルキル）、ヘテロアリール−、ヘテロアリールアルキル−、ヘテロシクリル−、ヘテロシクレニル（ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｅｎｙｌ）−及びヘテロシクロアルキル−からなる群から選択され；ここで、アルキル−、アルケニル−及びアルキニル−、アリール−、アリールアルキル−、アルキルアリール−、シクロアルキル−、シクロアルケニル−、シクロアルキルアルキル−、縮合ベンゾシクロアルキル、縮合ベンゾヘテロシクロアルキル、縮合ヘテロアリールシクロアルキル、縮合ヘテロアリールヘテロシクロアルキル、ヘテロアリール−、ヘテロアリールアルキル−、ヘテロシクリル−、ヘテロシクレニル及びヘテロシクロアルキル−Ｒ１基のそれぞれが、１〜５つの独立して選択されるＲ２１基で任意選択的に置換され；Ｒ２及びＲ３が、それぞれ独立して、Ｈ、アルキル−、アルケニル−、アルキニル−、アリール−、アリールアルキル−、アルキルアリール−、シクロアルキル−、シクロアルケニル−、シクロアルキルアルキル−、ヘテロアリール−、ヘテロアリールアルキル−、ヘテロシクリル−、ヘテロシクレニル−及びヘテロシクロアルキル−からなる群から選択され；アルキル−、アルケニル−及びアルキニル−、アリール−、アリールアルキル−、アルキルアリール−、シクロアルキル−、シクロアルケニル、シクロアルキルアルキル−、シクロアルケニル−、ヘテロアリール−、ヘテロアリールアルキル−、ヘテロシクリル−、ヘテロシクレニル−及びヘテロシクロアルキル−Ｒ１基のそれぞれが、１〜５つの独立して選択されるＲ２１基で任意選択的に置換され；又はＲ２及びＲ３が、それらが結合される原子と一緒になって、（ａ）５〜６員ヘテロシクロアルキル環であって、Ｗに加えて及びＷに隣接するＮに加えて、−Ｏ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２及び−Ｃ（Ｏ）−からなる群から独立して選択される少なくとも１つの他のヘテロ原子を任意選択的に含むヘテロシクロアルキル環及び（ｂ）５〜６員ヘテロシクロアルケニル環であって、Ｗに加えて及びＷに隣接するＮに加えて、−Ｏ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２及び−Ｃ（Ｏ）−からなる群から独立して選択される少なくとも１つの他のヘテロ原子を任意選択的に含むヘテロシクロアルケニル環からなる群から選択される環を形成し；ここで、環が、１〜５つの独立して選択されるＲ２１基で任意選択的に置換され；又はＲ２及びＲ３が、それらが結合される原子と一緒になって、且つＲ１及びＲ３が、それらが結合される原子と一緒になって、縮合環部分：
【化６６】
2021525715.tif 000165
を形成し、式中、環Ａが、
（ａ）５〜６員ヘテロシクロアルキル環であって、Ｗに加えて及びＷに隣接するＮに加えて、−Ｏ−、−ＮＲ１４−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２及び−Ｃ（Ｏ）−からなる群から独立して選択される少なくとも１つの他のヘテロ原子を任意選択的に含むヘテロシクロアルキル環、及び（ｂ）５〜６員ヘテロシクロアルケニル環であって、Ｗに加えて及びＷに隣接するＮに加えて、−Ｏ−、−ＮＲ１４−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２及び−Ｃ（Ｏ）−からなる群から独立して選択される少なくとも１つの他のヘテロ原子を任意選択的に含むヘテロシクロアルケニル環からなる群から選択される環であり、ここで、縮合環部分、１〜５つの独立して選択されるＲ２１基で任意選択的に置換され；又はＲ１及びＲ３が、それらが結合される原子と一緒になって、縮合ベンゾヘテロシクロアルキル環を形成し、ここで、縮合環が、１〜５つの独立して選択されるＲ２１基で任意選択的に置換され、Ｒ８が、Ｈ、アルキル−、アルケニル−、アルキニル−、アリール−、アリールアルキル−、アルキルアリール−、シクロアルキル−、シクロアルケニル、シクロアルキルアルキル−、ヘテロアリール−、ヘテロアリールアルキル−、ヘテロシクリル−、ヘテロシクレニル−及びヘテロシクロアルキル−からなる群から選択され；ここで、Ｒ８アルキル−、アルケニル−及びアルキニル−、アリール−、アリールアルキル−、アルキルアリール−、シクロアルキル−、シクロアルケニル、シクロアルキルアルキル−、ヘテロアリール−、ヘテロアリールアルキル−、ヘテロシクリル、ヘテロシクレニル−及びヘテロシクロアルキル−のそれぞれが、１〜３つの独立して選択されるＲ２１基で任意選択的に置換され；Ｒ９が、アルキル−、アルケニル−、アルキニル−、アリール−、アリールアルキル−、アルキルアリール−、シクロアルキル−、シクロアルケニル、シクロアルキルアルキル、ヘテロアリール−、ヘテロアリールアルキル−、ヘテロシクリル−、ヘテロシクレニル−及びヘテロシクロアルキル−からなる群から選択され、ここで、Ｒ９アルキル−、アルケニル−及びアルキニル−、アリール−、アリールアルキル−、アルキルアリール−、シクロアルキル−、シクロアルケニル、シクロアルキルアルキル−、ヘテロアリール−、ヘテロアリールアルキル−、ヘテロシクリル−、ヘテロシクレニル−、ヘテロシクロアルキル−及びヘテロシクロアルキル−のそれぞれが、１〜３つの独立して選択されるＲ２１基で任意選択的に置換され；
Ｒ１０が、結合、アルキル−、アルケニル−、アルキニル−、アリール−、アリールアルキル−、アルキルアリール−、シクロアルキル−、シクロアルケニル、シクロアルキルアルキル−、ヘテロアリール−、ヘテロアリールアルキル−、ヘテロシクリル−、ヘテロシクレニル−、ヘテロシクロアルキル−、ヘテロシクロアルケニル−、
【化６７】
2021525715.tif 000166
からなる群から選択され、式中、Ｘが、Ｏ、−Ｎ（Ｒ１４）−又は−Ｓ−からなる群から選択され；
ここで、Ｒ１０部分のそれぞれが、１〜３つの独立して選択されるＲ２１基で任意選択的に置換され；Ｒ１４が、Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、シクロアルケニル、ヘテロシクリル、ヘテロシクレニル、ヘテロシクリルアルキル、ヘテロシクロアルケニル−、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、−ＯＮ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１５、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１５、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１５）（Ｒ１６）、−Ｓ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１５）（Ｒ１６）、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ１５）（Ｒ１６）、−Ｃ（＝ＮＯＲ１５）Ｒ１６及び−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１５）（ＯＲ１６）からなる群から選択され；Ｒ１５、Ｒ１６及びＲ１７が、独立して、Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、アリールシクロアルキル、アリールヘテロシクリル、（Ｒ１８）ｎ−アルキル、（Ｒ１８）ｎ−シクロアルキル、（Ｒ１８）ｎ−シクロアルキルアルキル、（Ｒ１８）ｎ−ヘテロシクリル、（Ｒ１８）ｎ−ヘテロシクリルアルキル、（Ｒ１８）ｎ−アリール、（Ｒ１８）ｎ−アリールアルキル、（Ｒ１８）ｎ−ヘテロアリール及び（Ｒ１８）ｎ−ヘテロアリールアルキルからなる群から選択され；各Ｒ１８が、独立して、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アリールアルキル、アリールアルケニル、アリールアルキニル、−ＮＯ２、ハロ、ヘテロアリール、ＨＯ−アルキルオキシアルキル、−ＣＦ３、−ＣＮ、アルキル−ＣＮ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１９、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１９、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ２０、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２−Ｃ（Ｏ）Ｎ（アルキル）２、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（アルキル）（アリール）、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（アルキル）（ヘテロアリール）、−ＳＲ１９、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ２０、−Ｓ（Ｏ）ＮＨ２、−Ｓ（Ｏ）ＮＨ（アルキル）、−Ｓ（Ｏ）Ｎ（アルキル）（アルキル）、−Ｓ（Ｏ）ＮＨ（アリール）、−Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、−Ｓ（Ｏ）２ＮＨＲ１９、−Ｓ（Ｏ）２ＮＨ（ヘテロシクリル）、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（アルキル）２、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（アルキル）（アリール）、−ＯＣＦ３、−ＯＨ、−ＯＲ２０、−Ｏ−ヘテロシクリル、−Ｏ−シクロアルキルアルキル、−Ｏ−ヘテロシクリルアルキル、−ＮＨ２、−ＮＨＲ２０、−Ｎ（アルキル）２、−Ｎ（アリールアルキル）２、−Ｎ（アリールアルキル）−（ヘテロアリールアルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ２０、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ（アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｎ（アルキル）（アルキル）、−Ｎ（アルキル）Ｃ（Ｏ）ＮＨ（アルキル）、−Ｎ（アルキル）Ｃ（Ｏ）Ｎ（アルキル）（アルキル）、−ＮＨＳ（Ｏ）２Ｒ２０、−ＮＨＳ（Ｏ）２ＮＨ（アルキル）、−ＮＨＳ（Ｏ）２Ｎ（アルキル）（アルキル）、−Ｎ（アルキル）Ｓ（Ｏ）２ＮＨ（アルキル）及び−Ｎ（アルキル）Ｓ（Ｏ）２Ｎ（アルキル）（アルキル）からなる群から選択され；又は隣接する炭素上の２つのＲ１８部分が、一緒に連結されて、
【化６８】
2021525715.tif 000167
を形成し得；Ｒ１９が、アルキル、シクロアルキル、アリール、アリールアルキル及びヘテロアリールアルキルからなる群から選択され；Ｒ２０が、アルキル、シクロアルキル、アリール、ハロ置換アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール及びヘテロアリールアルキルからなる群から選択され；各Ｒ２１が、独立して、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、シクロアルケニル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルキルアルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、ハロ、−ＯＮ、−ＯＲ１５、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１５、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１５、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１５）（Ｒ１６）、−ＳＲ１５、−Ｓ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１６）（Ｒ１６）、−ＣＨ（Ｒ１５）（Ｒ１６）、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ１６）（Ｒ１６）、−Ｃ（＝ＮＯＲ１６）Ｒ１６、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１５）（ＯＲ１６）、−Ｎ（Ｒ１５）（Ｒ１６）、−アルキル−Ｎ（Ｒ１５）（Ｒ１６）、−Ｎ（Ｒ１５）Ｃ（Ｏ）Ｒ１６、−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ１５）Ｃ（Ｏ）Ｒ１６、−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ１５）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１６）（Ｒ１７）、−ＯＨ２−Ｒ１５；−ＣＨ２Ｎ（Ｒ１５）（Ｒ１６）、−Ｎ（Ｒ１５）Ｓ（Ｏ）Ｒ１６、−Ｎ（Ｒ１５）Ｓ（Ｏ）２Ｒ１６、−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ１５）Ｓ（Ｏ）２Ｒ１６、−Ｎ（Ｒ１５）Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ１６）（Ｒ１７）、−Ｎ（Ｒ１５）Ｓ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１６）（Ｒ１７）、−Ｎ（Ｒ１５）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１６）（Ｒ１７）、−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ１５）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１６）（Ｒ１７）、−Ｎ（Ｒ１５）Ｃ（Ｏ）ＯＲ１６、−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ１５）Ｃ（Ｏ）ＯＲ１６、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１５、＝ＮＯＲ１５、−Ｎ３、−ＮＯ２及び−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１５からなる群から選択され；ここで、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、シクロアルケニル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルキルアルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール及びヘテロアリールアルキルＲ２１基のそれぞれが、１〜５つの独立して選択されるＲ２２基で任意選択的に置換され；各Ｒ２２基が、独立して、アルキル、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ハロ、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＲ１５、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１５、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１５、−アルキル−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１５、Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１５）（Ｒ１６）、−ＳＲ１５、−Ｓ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１５）（Ｒ１６）、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ１５）（Ｒ１６）、−Ｃ（＝ＮＯＲ１５）Ｒ１６、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１５）（ＯＲ１６）、−Ｎ（Ｒ１５）（Ｒ１６）、−アルキル−Ｎ（Ｒ１５）（Ｒ１６）、−Ｎ（Ｒ１５）Ｃ（Ｏ）Ｒ１６、−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ１５）Ｃ（Ｏ）Ｒ１６、−Ｎ（Ｒ１５）Ｓ（Ｏ）Ｒ１６、−Ｎ（Ｒ１５）Ｓ（Ｏ）２Ｒ１６、−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ１５）Ｓ（Ｏ）２Ｒ１６、−Ｎ（Ｒ１５）Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ１６）（Ｒ１７）、−Ｎ（Ｒ１５）Ｓ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１６）（Ｒ１７）、−Ｎ（Ｒ１５）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１６）（Ｒ１７）、−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ１５）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１６）（Ｒ１７）；−Ｎ（Ｒ１５）Ｃ（Ｏ）ＯＲ１６、−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ１５）Ｃ（Ｏ）ＯＲ１６、−Ｎ３、＝ＮＯＲ１５、−ＮＯ２、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１５及び−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１５からなる群から選択される。
【０８３５】
ある実施形態において、ＧＳＩは、米国特許出願公開第２０１１−０２５７１６３号明細書（例えば、段落［０５０６］〜［０５５３］中）に記載される化合物である。ある実施形態において、式（ＸＩＩ）のＧＳＩは、薬学的に許容されるエステルである。ある実施形態において、式（ＸＩＩ）のＧＳＩは、
【化６９】
2021525715.tif 000168
及びその薬学的に許容される塩から選択される。
【０８３６】
ある実施形態において、ＧＳＩは、式（ＸＩＩＩ）：
【化７０】
2021525715.tif 000169
の化合物又はその薬学的に許容される塩であり、式中、Ａ環が、アリール、シクロアルキル、ヘテロアリール又はヘテロシクロアルキルであり、ここで、各環が、置換可能な位置において、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、ヒドロキシル、ヒドロキシアルキル、ＣＮ、フェノキシ、−Ｓ（Ｏ）０〜２−（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）、−ＮＲ１０Ｒ１１、Ｃ１〜Ｃ６アルカノイル、Ｃ０〜Ｃ３アルキルＣＯ２Ｒ’、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル、アリール、アラルキル又は−ＳＯ２ＮＲ１０Ｒ１１で任意選択的に置換され；Ｒ１及びＲ２が組み合わされて、［３．３．１］又は［３．２．１］環系を形成し、ここで、環系中の炭素の０又は１つが、−Ｏ−、−Ｓ（Ｏ）ｘ−又は−ＮＲ１５−基で任意選択的に置換され；ここで、［３．３．１］又は［３．２．１］環系が、独立して、オキソ、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−Ｏ（Ｃ１〜Ｃ２アルキル）Ｏ−、−Ｓ（Ｃ１〜Ｃ２アルキル）Ｓ−、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、ヒドロキシ、ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、ハロアルコキシ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１３、−（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１６、−ＣＯＮＲ１０Ｒ１１、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ１０Ｒ１１、−ＮＲ’Ｃ（Ｏ）ＯＲ”、−ＮＲ’Ｓ（Ｏ）２Ｒ”、−ＯＳ（Ｏ）２Ｒ’、−ＮＲ’ＣＯＲ”、ＣＮ、＝Ｎ−ＮＲ１２又は＝Ｎ−Ｏ−Ｒ１３である１、２、３又は４つの基で任意選択的に置換され；ここで、ｘが、０、１又は２であり；Ｒ１０及びＲ１１が、出現するごとに、独立して、水素又はＣ１〜Ｃ６アルキルであり、ここで、アルキルが、アリールで任意選択的に置換され、ここで、アリールが、独立して、ハロゲン、ヒドロキシル、アルキル、アルコキシ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、ＣＮ又はＮＯ２である１〜５つの基で任意選択的に置換され；又は
Ｒ１０及びＲ１１が、一緒に、Ｎ、Ｏ又はＳなどのさらなるヘテロ原子を任意選択的に含む３〜８員環を形成し得；Ｒ１２が、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル又は−ＳＯ２−アリールであり、ここで、アリールが、独立して、ハロゲン、ヒドロキシル、アルキル、アルコキシ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、ＣＮ又はＮＯ２である１〜５つの基で任意選択的に置換され；Ｒ１３が、水素又はアリール、ヒドロキシル若しくはハロゲンで任意選択的に置換されるＣ１〜Ｃ６アルキルであり、ここで、アリールが、独立して、ハロゲン、ヒドロキシル、アルキル、アルコキシ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、ＣＮ又はＮＯ２である１〜５つの基で任意選択的に置換され；
Ｒ１５が、水素、アリール、ヘテロアリール、−ＳＯ２Ｒ’、−Ｃ（Ｏ）Ｒ’、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ’又はアリール、ヒドロキシル若しくはハロゲンで任意選択的に置換されるＣ１〜Ｃ６アルキルであり、ここで、アリール基が、独立して、ハロゲン、ヒドロキシル、アルキル、アルコキシ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、ＣＮ又はＮＯ２である１〜５つの基で任意選択的に置換され；Ｒ’及びＲ”が、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ハロアルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル又は独立して、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ’、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、ヒドロキシル、ＣＮ、フェノキシ、−ＳＯ２−（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）、−ＮＲ１０Ｒ１１、Ｃ１〜Ｃ６アルカノイル、ピリジル、フェニル、ＮＯ２若しくは−ＳＯ２ＮＲ１０Ｒ１１である１〜５つの基で任意選択的に置換されるフェニルである。
【０８３７】
ある実施形態において、式（ＸＩＩＩ）のＧＳＩは、米国特許出願公開第２０１１−１７８１９９号明細書（例えば、段落［０７９８］〜［０７９９］及び表１〜４中）に記載されている。ある実施形態において、式（ＸＩＩＩ）のＧＳＩは、架橋ｎ−二環式スルホンアミド又はその薬学的に許容される塩を含む。ある実施形態において、式（ＸＩＩＩ）のＧＳＩは、
【化７１】
2021525715.tif 000170
及びその薬学的に許容される塩から選択される。
【０８３８】
ある実施形態において、ＧＳＩは、式（ＸＩＶ）：
【化７２】
2021525715.tif 000171
の化合物又はその薬学的に許容される塩であり、式中、Ｒが、（１）−ピリジニル、（２）−ピラゾリニル、（３）−１，２，４−オキサジアゾリル、（４）−（Ｃ１〜Ｃ２）アルキル−ピリジニル、（５）−（Ｃ１〜Ｃ２）アルキル−ピラゾリニル、及び（６）−（Ｃ１〜Ｃ２）アルキル−１，２，４−オキサジアゾリルからなる群から選択され、ここで、ピリジニル、ピラゾリニル及び−１，２，４−オキサジアゾリルが、非置換であるか又は１つのＬ１基で置換され；Ｒ１が、独立して、ハロゲン、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、−ＣＮ、−ＣＦ３、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、−Ｏ−（ハロ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル）、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ６）−ＯＨ−置換（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル、ハロ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、−（Ｃ１〜Ｃ４）アルコキシ−ＯＨ、−（Ｃ１〜Ｃ４）アルコキシ（Ｃ１〜Ｃ４）アルコキシ及び−Ｓ（Ｏ）２（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルからなる群から選択され；ｎが、０、１、２又は３であり；Ａｒが、１つ又は２つのＬ２基で任意選択的に置換されるフェニル及び１つ又は２つのＬ２基で任意選択的に置換されるピリジルからなる群から選択され；
Ｌ１が、独立して、−ＯＣＨ３、−ＮＨ２、＝Ｏ及び（Ｃ１〜Ｃ５）アルキルからなる群から選択され；Ｌ２が、独立して、ハロゲン、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、−ＣＮ、−ＣＦ３、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、−Ｏ−（ハロ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル）、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、−ＯＨ−置換（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、ハロ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、−ＯＨ−置換（Ｃ１〜Ｃ４）アルコキシ、−（Ｃ１〜Ｃ４）アルコキシ（Ｃ１〜Ｃ４）アルコキシ及び−Ｓ（Ｏ）２（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルからなる群から選択される。
【０８３９】
ある実施形態において、ＧＳＩは、米国特許第９，２２６，９２７号明細書に記載される化合物（例えば、化合物４、８ａ、８ｂ、１１、１４、２５ａ、２５ｂ、２５ｃ、２５ｄ、２５ｅ、２５ｆ、２５ｇ、２５ｈ、２７ａ又は２７ｂ）である。ある実施形態において、式（ＸＩＶ）のＧＳＩは、架橋ｎ−二環式スルホンアミド又はその薬学的に許容される塩を含む。ある実施形態において、式（ＸＩＶ）のＧＳＩは、
【化７３】
2021525715.tif 000172
及びその薬学的に許容される塩から選択される。
【０８４０】
ある実施形態において、ＧＳＩは、γセクレターゼの発現及び／又は機能を低下させる抗体分子である。ある実施形態において、ＧＳＩは、γセクレターゼのサブユニットを標的とする抗体分子である。ある実施形態において、ＧＳＩは、抗プレセニリン抗体分子、抗ニカストリン抗体分子、抗ＡＰＨ−１抗体分子又は抗ＰＥＮ−２抗体分子から選択される。
【０８４１】
γセクレターゼのサブユニットを標的とする例示的な抗体分子（例えば、例えばプレセニリン、ニカストリン、ＡＰＨ−１又はＰＥＮ−２）は、米国特許第８，３９４，３７６号明細書、米国特許第８，６３７，２７４号明細書及び米国特許第５，９４２，４００号明細書に記載されている。
【０８４２】
一態様において、本開示は、Ｂ細胞の病態又は障害を有する対象を治療するための方法であって、有効量の：（ｉ）ＢＣＭＡ結合分子、及び（ｉｉ）γセクレターゼ調節剤（例えば、ＧＳＩ）を対象に投与することを含む方法を提供する。ＢＣＭＡ結合分子及びγセクレターゼ調節剤の組合せで治療され得る例示的なＢ細胞の病態又は障害としては、多発性骨髄腫、ワルデンシュトレーム型マクログロブリン血症、慢性リンパ性白血病、Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫、形質細胞腫、ホジキンリンパ腫、濾胞性リンパ腫、小型非切れ込み核細胞型リンパ腫、風土性バーキットリンパ腫、散発性バーキットリンパ腫、辺縁帯リンパ腫、節外性粘膜関連リンパ系組織リンパ腫、節性単球性Ｂ細胞リンパ腫、脾リンパ腫、マントル細胞リンパ腫、大細胞型リンパ腫、びまん性混合細胞型リンパ腫、免疫芽球性リンパ腫、原発性縦隔Ｂ細胞リンパ腫、肺Ｂ細胞血管中心性リンパ腫、小リンパ球性リンパ腫、悪性度不明のＢ細胞増殖、リンパ腫様肉芽腫症、移植後リンパ増殖性疾患、免疫調節障害、関節リウマチ、重症筋無力症、特発性血小板減少性紫斑病、抗リン脂質抗体症候群、シャーガス病、グレーブス病、ウェゲナー肉芽腫症、結節性多発動脈炎、シェーグレン症候群、尋常性天疱瘡、強皮症、多発性硬化症、抗リン脂質抗体症候群、ＡＮＣＡ関連脈管炎、グッドパスチャー症候群、川崎病、自己免疫性溶血性貧血、急速進行性糸球体腎炎、重鎖病、原発性若しくは免疫細胞関連アミロイド症及び意義不明の単クローン性ガンマグロブリン血症が挙げられる。
【０８４３】
ある実施形態において、γセクレターゼ調節剤は、国際公開第２０１７／０１９４９６号パンフレットに記載されるγセクレターゼ調節剤である。ある実施形態において、γセクレターゼ調節剤は、γ−セクレターゼ阻害剤Ｉ（ＧＳＩ  Ｉ）Ｚ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−ノルロイシン；γ−セクレターゼ阻害剤ＩＩ（ＧＳＩ  ＩＩ）；γ−セクレターゼ阻害剤ＩＩＩ（ＧＳＩ  ＩＩＩ）、Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−Ｌｅｕ−ロイシナール、Ｎ−（２−ナフトイル）−Ｖａｌ−フェニルアラニナール；γ−セクレターゼ阻害剤ＩＶ（ＧＳＩ  ＩＶ）；γ−セクレターゼ阻害剤Ｖ（ＧＳＩ  Ｖ）、Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−Ｌｅｕ−フェニルアラニナール；γ−セクレターゼ阻害剤ＶＩ（ＧＳＩ  ＶＩ）、１−（Ｓ）−ｅｎｄｏ−Ｎ−（１，３，３）−トリメチルビシクロ［２．２．１］ヘプタ−２−イル）−４−フルオロフェニルスルホンアミド；γ−セクレターゼ阻害剤ＶＩＩ（ＧＳＩ  ＶＩＩ）、メンチルオキシカルボニル−ＬＬ−ＣＨＯ；γ−セクレターゼ阻害剤ＩＸ（ＧＳＩ  ＩＸ）、（ＤＡＰＴ）、Ｎ−［Ｎ−（３，５−ジフルオロフェナセチル−Ｌ−アラニル）］−Ｓ−フェニルグリシンｔ−ブチルエステル；γ−セクレターゼ阻害剤Ｘ（ＧＳＩ  Ｘ）、｛１Ｓ−ベンジル−４Ｒ−［１−（１Ｓ−カルバモイル−２−フェネチルカルバモイル）−１Ｓ−３−メチルブチルカルバモイル］−２Ｒ−ヒドロキシ−５−フェニルペンチル｝カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル；γ−セクレターゼ阻害剤ＸＩ（ＧＳＩ  ＸＩ）、７−アミノ−４−クロロ−３−メトキシイソクマリン；γ−セクレターゼ阻害剤ＸＩＩ（ＧＳＩ  ＸＩＩ）、Ｚ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−ＣＨＯ；γ−セクレターゼ阻害剤ＸＩＩＩ（ＧＳＩ  ＸＩＩＩ）、Ｚ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−ＣＨＯ；γ−セクレターゼ阻害剤ＸＩＶ（ＧＳＩ  ＸＩＶ）、Ｚ−Ｃｙｓ（ｔ−Ｂｕ）−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−ＣＨＯ；γ−セクレターゼ阻害剤ＸＶＩ（ＧＳＩ  ＸＶＩ）、Ｎ−［Ｎ−３，５−ジフルオロフェナセチル］−Ｌ−アラニル−Ｓ−フェニルグリシンＭエチルエステル；γ−セクレターゼ阻害剤ＸＶＩＩ（ＧＳＩ  ＸＶＩＩ）；γ−セクレターゼ阻害剤ＸＩＸ（ＧＳＩ  ＸＩＸ）、ベンゾ［ｅ］［ｌ，４］ジアゼピン−３−イル）−ブチルアミド；γ−セクレターゼ阻害剤ＸＸ（ＧＳＩ  ＸＸ）、（Ｓ，Ｓ）−２−［２−（３，５−ジフルオロフェニル）アセチルアミノ］−Ｎ−（５−メチル−６−オキソ−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−ジベンゾ［ｂ，ｄ］アゼピン−７−イル）プロピオンアミド；γ−セクレターゼ阻害剤ＸＸＩ（ＧＳＩ  ＸＸＩ）、（Ｓ，Ｓ）−２−［２−（３，５−ジフルオロフェニル）−アセチルアミノ］−Ｎ−（ｌ−メチル−２−オキソ−５−フェニル−２−，３−ジヒドロ−ｌＨ−ベンゾ［ｅ］［ｌ，４］ジアゼピン−３−イル）−プロピオンアミド；γ４０セクレターゼ阻害剤Ｉ、Ｎ−トランス−３，５−ジメトキシシンナモイル−Ｉｌｅ−ロイシナール；γ４０セクレターゼ阻害剤ＩＩ、Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−バリナール（Ｖａｌｉｎａｌ）；イソバレリル−Ｖ  Ｖ−Ｓｔａ−Ａ−Ｓｔａ−ＯＣＨ３；ＭＫ−０７５２（Ｍｅｒｃｋ）；ＭＲＫ−００３（Ｍｅｒｃｋ）；セマガセスタット／ＬＹ４５０１３９（Ｅｌｉ  Ｌｉ���ｌｙ）；ＲＯ４９２９０９７；ＰＦ−０３０８４０１４；ＢＭＳ−７０８１６３；ＭＰＣ−７８６９（γ−セクレターゼ調節剤）、ＹＯ−０１０２７（ジベンザゼピン）；ＬＹ４１１５７５（Ｅｌｉ  Ｌｉｌｌｙ  ａｎｄ  Ｃｏ．）；Ｌ−６８５４５８（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）；ＢＭＳ−２８９９４８（４−クロロ−Ｎ−（２，５−ジフルオロフェニル）−Ｎ−（（ｌＲ）−｛４−フルオロ−２−［３−（ｌＨ−イミダゾール−ｌ−イル）プロピル］フェニル｝エチル）ベンゼンスルホンアミド塩酸塩）；又はＢＭＳ−２９９８９７（４−［２−（（ｌＲ）−ｌ−｛［（４−クロロフェニル）スルホニル］−２，５−ジフルオロアニリノ｝エチル）−５−フルオロフェニルブタン酸）（Ｂｒｉｓｔｏｌ  Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）である。
【０８４４】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、サリドマイドクラスの化合物のメンバーと組み合わせて使用され得る。サリドマイドクラスの化合物のメンバーとしては、限定はされないが、レナリドミド（ＣＣ−５０１３）、ポマリドミド（ＣＣ−４０４７又はＡＣＴＩＭＩＤ）、サリドマイド並びにそれらの塩及び誘導体が挙げられる。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、サリドマイドクラスの化合物の１つ、２つ、３つ又はそれを超えるメンバーの混合物と組み合わせて使用される。サリドマイド類似体及びサリドマイド類似体の免疫調節特性が、Ｂｏｄｅｒａ  ａｎｄ  Ｓｔａｎｋｉｅｗｉｃｚ，Ｒｅｃｅｎｔ  Ｐａｔ  Ｅｎｄｏｃｒ  Ｍｅｔａｂ  Ｉｍｍｕｎｅ  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖ．２０１１  Ｓｅｐ；５（３）：１９２−６に記載されている。サリドマイド類似体及びＥ３ユビキチンの構造的複合体が、Ｇａｎｄｈｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｒ  Ｊ  Ｈａｅｍａｔｏｌ．２０１４  Ｍａｒ；１６４（６）：８１１−２１に記載されている。サリドマイド類似体によるＥ３ユビキチンリガーゼの調節が、Ｆｉｓｃｈｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ．２０１４  Ａｕｇ  ７；５１２（７５１２）：４９−５３に記載されている。
【０８４５】
ある実施形態において、サリドマイドクラスの化合物のメンバーは、式（Ｉ）：
【化７４】
2021525715.tif 000173
の化合物又はその薬学的に許容される塩、エステル、水和物、溶媒和物若しくは互変異性体を含み、式中：
Ｘが、Ｏ又はＳであり；
Ｒ１が、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、カルボシクリル、ヘテロシクリル、アリール又はヘテロアリールであり、これらは、それぞれ１つ以上のＲ４で任意選択的に置換され；
Ｒ２ａ及びＲ２ｂのそれぞれが、独立して、水素又はＣ１〜Ｃ６アルキルであり；又はＲ２ａ及びＲ２ｂが、それらが結合される炭素原子と一緒に、カルボニル基又はチオカルボニル基を形成し；
Ｒ３のそれぞれが、独立して、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、ハロ、シアノ、−Ｃ（Ｏ）ＲＡ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲＢ、−ＯＲＢ、−Ｎ（ＲＣ）（ＲＤ）、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＲＣ）（ＲＤ）、−Ｎ（ＲＣ）Ｃ（Ｏ）ＲＡ、−Ｓ（Ｏ）ｘＲＥ、−Ｓ（Ｏ）ｘＮ（ＲＣ）（ＲＤ）又は−Ｎ（ＲＣ）Ｓ（Ｏ）ｘＲＥであり、ここで、各アルキル、アルケニル、アルキニル及びヘテロアルキルが、独立して及び任意選択的に、１つ以上のＲ６で置換され；
各Ｒ４が、独立して、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、ハロ、シアノ、オキソ、−Ｃ（Ｏ）ＲＡ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲＢ、−ＯＲＢ、−Ｎ（ＲＣ）（ＲＤ）、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＲＣ）（ＲＤ）、−Ｎ（ＲＣ）Ｃ（Ｏ）ＲＡ、−Ｓ（Ｏ）ｘＲＥ、−Ｓ（Ｏ）ｘＮ（ＲＣ）（ＲＤ）、−Ｎ（ＲＣ）Ｓ（Ｏ）ｘＲＥ、カルボシクリル、ヘテロシクリル、アリール又はヘテロアリールであり、ここで、各アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、カルボシクリル、ヘテロシクリル、アリール及びヘテロアリールが、独立して及び任意選択的に、１つ以上のＲ７で置換され；
ＲＡ、ＲＢ、ＲＣ、ＲＤ及びＲＥのそれぞれが、独立して、水素又はＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
各Ｒ６が、独立して、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、オキソ、シアノ、−ＯＲＢ、−Ｎ（ＲＣ）（ＲＤ）、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＲＣ）（ＲＤ）、−Ｎ（ＲＣ）Ｃ（Ｏ）ＲＡ、アリール又はヘテロアリールであり、ここで、各アリール及びヘテロアリールが、独立して及び任意選択的に、１つ以上のＲ８で置換され；
各Ｒ７が、独立して、ハロ、オキソ、シアノ、−ＯＲＢ、−Ｎ（ＲＣ）（ＲＤ）、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＲＣ）（ＲＤ）又は−Ｎ（ＲＣ）Ｃ（Ｏ）ＲＡであり；
各Ｒ８が、独立して、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、シアノ、−ＯＲＢ、−Ｎ（ＲＣ）（ＲＤ）、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＲＣ）（ＲＤ）又は−Ｎ（ＲＣ）Ｃ（Ｏ）ＲＡであり；
ｎが、０、１、２、３又は４であり；
ｘが、０、１又は２である。
【０８４６】
ある実施形態において、ＸがＯである。
【０８４７】
ある実施形態において、Ｒ１がヘテロシクリルである。ある実施形態において、Ｒ１が、６員ヘテロシクリル又は５員ヘテロシクリルである。ある実施形態において、Ｒ１が、窒素含有ヘテロシクリルである。ある実施形態において、Ｒ１が、ピペリジニル（例えば、ピペリジン−２，６−ジオニル）である。
【０８４８】
ある実施形態において、Ｒ２ａ及びＲ２ｂのそれぞれが、独立して、水素である。ある実施形態において、Ｒ２ａ及びＲ２ｂが、それらが結合される炭素と一緒に、カルボニル基を形成する。
【０８４９】
ある実施形態において、Ｒ３が、Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、−Ｎ（ＲＣ）（ＲＤ）又は−Ｎ（ＲＣ）Ｃ（Ｏ）ＲＡである。ある実施形態において、Ｒ３が、Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル（例えば、ＣＨ２ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２−フェニル−ｔ−ブチル）、−Ｎ（ＲＣ）（ＲＤ）（例えば、ＮＨ２）又は−Ｎ（ＲＣ）Ｃ（Ｏ）ＲＡ（例えば、ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ３）である。
【０８５０】
一実施形態において、ＸがＯである。一実施形態において、Ｒ１が、ヘテロシクリル（例えば、ピペリジン−２，６−ジオニル）である。一実施形態において、Ｒ２ａ及びＲ２ｂのそれぞれが、独立して、水素である。一実施形態において、ｎが１である。一実施形態において、Ｒ３が、−Ｎ（ＲＣ）（ＲＤ）（例えば、−ＮＨ２）である。一実施形態において、化合物は、レナリドミド、例えば３−（４−アミノ−１−オキソイソインドリン−２−イル）ピペリジン−２，６−ジオン又はその薬学的に許容される塩を含む。一実施形態において、化合物は、例えば、以下の式：
【化７５】
2021525715.tif 000174
で表されるレナリドミドである。
【０８５１】
一実施形態において、ＸがＯである。一実施形態において、Ｒ１が、ヘテロシクリル（例えば、ピペリジニル−２，６−ジオニル）である。ある実施形態において、Ｒ２ａ及びＲ２ｂが、それらが結合される炭素と一緒に、カルボニル基を形成する。一実施形態において、ｎが１である。一実施形態において、Ｒ３が、−Ｎ（ＲＣ）（ＲＤ）（例えば、−ＮＨ２）である。一実施形態において、化合物は、ポマリドミド、例えば４−アミノ−２−（２，６−ジオキソピペリジン−３−イル）イソインドリン−１，３−ジオン又はその薬学的に許容される塩を含む。一実施形態において、化合物は、例えば、以下の式：
【化７６】
2021525715.tif 000175
で表されるポマリドミドである。
【０８５２】
一実施形態において、ＸがＯである。一実施形態において、Ｒ１が、ヘテロシクリル（例えば、ピペリジニル−２，６−ジオニル）である。一実施形態において、Ｒ２ａ及びＲ２ｂが、それらが結合される炭素と一緒に、カルボニル基を形成する。一実施形態において、ｎが０である。一実施形態において、化合物は、サリドマイド、例えば２−（２，６−ジオキソピペリジン−３−イル）イソインドリン−１，３−ジオン又はその薬学的に許容される塩を含む。一実施形態において、生成物は、例えば、以下の式：
【化７７】
2021525715.tif 000176
で表されるサリドマイドである。
【０８５３】
一実施形態において、ＸがＯである。一実施形態において、Ｒ１が、ヘテロシクリル（例えば、ピペリジン−２，６−ジオニル）である。一実施形態において、Ｒ２ａ及びＲ２ｂのそれぞれが、独立して、水素である。一実施形態において、ｎが１である。一実施形態において、Ｒ３が、Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル（例えば、ＣＨ２ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２−フェニル−ｔ−ブチル）である。一実施形態において、化合物は、２−（４−（ｔｅｒｔ−ブチル）フェニル）−Ｎ−（（２−（２，６−ジオキソピペリジン−３−イル）−１−オキソイソインドリン−５−イル）メチル）アセトアミド又はその薬学的に許容される塩を含む。一実施形態において、化合物は、以下の式：
【化７８】
2021525715.tif 000177
に示されるような構造を有する。
【０８５４】
ある実施形態において、化合物は、式（Ｉ−ａ）：
【化７９】
2021525715.tif 000178
の化合物又はその薬学的に許容される塩、エステル、水和物若しくは互変異性体であり、式中：
環Ａが、カルボシクリル、ヘテロシクリル、アリール又はヘテロアリールであり、これらは、それぞれ１つ以上のＲ４で任意選択的に置換され；
Ｍが、存在しないか、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル又はＣ１〜Ｃ６ヘテロアルキルであり、ここで、各アルキル、アルケニル、アルキニル及びヘテロアルキルが、１つ以上のＲ４で任意選択的に置換され；
Ｒ２ａ及びＲ２ｂのそれぞれが、独立して、水素又はＣ１〜Ｃ６アルキルであり；又はＲ２ａ及びＲ２ｂが、それらが結合される炭素原子と一緒に、カルボニル基又はチオカルボニル基を形成し；
Ｒ３ａが、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、ハロ、シアノ、−Ｃ（Ｏ）ＲＡ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲＢ、−ＯＲＢ、−Ｎ（ＲＣ）（ＲＤ）、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＲＣ）（ＲＤ）、−Ｎ（ＲＣ）Ｃ（Ｏ）ＲＡ、−Ｓ（Ｏ）ｘＲＥ、−Ｓ（Ｏ）ｘＮ（ＲＣ）（ＲＤ）又は−Ｎ（ＲＣ）Ｓ（Ｏ）ｘＲＥであり、ここで、各アルキル、アルケニル、アルキニル及びヘテロアルキルが、１つ以上のＲ６で任意選択的に置換され；
Ｒ３のそれぞれが、独立して、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、ハロ、シアノ、−Ｃ（Ｏ）ＲＡ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲＢ、−ＯＲＢ、−Ｎ（ＲＣ）（ＲＤ）、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＲＣ）（ＲＤ）、−Ｎ（ＲＣ）Ｃ（Ｏ）ＲＡ、−Ｓ（Ｏ）ｘＲＥ、−Ｓ（Ｏ）ｘＮ（ＲＣ）（ＲＤ）又は−Ｎ（ＲＣ）Ｓ（Ｏ）ｘＲＥであり、ここで、各アルキル、アルケニル、アルキニル及びヘテロアルキルが、独立して及び任意選択的に、１つ以上のＲ６で置換され；
各Ｒ４が、独立して、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、ハロ、シアノ、オキソ、−Ｃ（Ｏ）ＲＡ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲＢ、−ＯＲＢ、−Ｎ（ＲＣ）（ＲＤ）、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＲＣ）（ＲＤ）、−Ｎ（ＲＣ）Ｃ（Ｏ）ＲＡ、Ｓ（Ｏ）ｘＲＥ、−Ｓ（Ｏ）ｘＮ（ＲＣ）（ＲＤ）、−Ｎ（ＲＣ）Ｓ（Ｏ）ｘＲＥ、カルボシクリル、ヘテロシクリル、アリール又はヘテロアリールであり、ここで、各アルキル、アルケニル、アルキニル、カルボシクリル、ヘテロシクリル、アリール又はヘテロアリールが、独立して、独立して及び任意選択的に、１つ以上のＲ７で置換され；
ＲＡ、ＲＢ、ＲＣ、ＲＤ及びＲＥのそれぞれが、独立して、水素又はＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
各Ｒ６が、独立して、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、オキソ、シアノ、−ＯＲＢ、−Ｎ（ＲＣ）（ＲＤ）、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＲＣ）（ＲＤ）、−Ｎ（ＲＣ）Ｃ（Ｏ）ＲＡ、アリール又はヘテロアリールであり、ここで、各アリール又はヘテロアリールが、独立して、独立して及び任意選択的に、１つ以上のＲ８で置換され；
各Ｒ７が、独立して、ハロ、オキソ、シアノ、−ＯＲＢ、−Ｎ（ＲＣ）（ＲＤ）、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＲＣ）（ＲＤ）又は−Ｎ（ＲＣ）Ｃ（Ｏ）ＲＡであり；
各Ｒ８が、独立して、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、シアノ、−ＯＲＢ、−Ｎ（ＲＣ）（ＲＤ）、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＲＣ）（ＲＤ）又は−Ｎ（ＲＣ）Ｃ（Ｏ）ＲＡであり；
ｎが、０、１、２又は３であり；
ｏが、０、１、２、３、４又は５であり；
ｘが、０、１又は２である。
【０８５５】
ある実施形態において、ＸがＯである。
【０８５６】
ある実施形態において、Ｍが存在しない。
【０８５７】
ある実施形態において、環Ａが、ヘテロシクリルである。ある実施形態において、環Ａが、ヘテロシクリル、例えば６員ヘテロシクリル又は５員ヘテロシクリルである。ある実施形態において、環Ａが、窒素含有ヘテロシクリルである。ある実施形態において、環Ａが、ピペリジニル（例えば、ピペリジン−２，６−ジオニル）である。
【０８５８】
ある実施形態において、Ｍが存在せず、環Ａが、ヘテロシクリル（例えば、ピペリジニル、例えばピペリジン−２，６−ジオニル）である。
【０８５９】
ある実施形態において、Ｒ２ａ及びＲ２ｂのそれぞれが、独立して、水素である。ある実施形態において、Ｒ２ａ及びＲ２ｂが、それらが結合される炭素と一緒に、カルボニル基を形成する。
【０８６０】
ある実施形態において、Ｒ３ａが、水素、−Ｎ（ＲＣ）（ＲＤ）又は−Ｎ（ＲＣ）Ｃ（Ｏ）ＲＡである。ある実施形態において、Ｒ３ａが水素である。ある実施形態において、Ｒ３ａが、−Ｎ（ＲＣ）（ＲＤ）（例えば、−ＮＨ２）である。ある実施形態において、Ｒ３ａが、−Ｎ（ＲＣ）Ｃ（Ｏ）ＲＡ（例えば、ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ３）である。
【０８６１】
ある実施形態において、Ｒ３が、Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル（例えば、ＣＨ２ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２−フェニル−ｔ−ブチル）である。ある実施形態において、ｎが、０又は１である。ある実施形態において、ｎが０である。ある実施形態において、ｎが１である。
【０８６２】
化合物は、１つ以上のキラル中心を含むか、又は１つ以上の立体異性体として存在し得る。ある実施形態において、化合物は、単一のキラル中心を含み、立体異性体、例えばＲ立体異性体及びＳ立体異性体の混合物である。ある実施形態において、混合物は、Ｒ立体異性体対Ｓ立体異性体の比率、例えばＲ立体異性体対Ｓ立体異性体（すなわちラセミ混合物）の約１：１の比率を含む。ある実施形態において、混合物は、約５１：４９、約５２：４８、約５３：４７、約５４：４６、約５５：４５、約６０：４０、約６５：３５、約７０：３０、約７５：２５、約８０：２０、約８５：１５、約９０：１０、約９５：５又は約９９：１の、Ｒ立体異性体対Ｓ立体異性体の比率を含む。ある実施形態において、混合物は、約５１：４９、約５２：４８、約５３：４７、約５４：４６、約５５：４５、約６０：４０、約６５：３５、約７０：３０、約７５：２５、約８０：２０、約８５：１５、約９０：１０、約９５：５又は約９９：１の、Ｓ立体異性体対Ｒ立体異性体の比率を含む。ある実施形態において、化合物は、式（Ｉ）又は式（Ｉ−ａ）の単一立体異性体、例えば単一Ｒ立体異性体又は単一Ｓ立体異性体である。
【０８６３】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、キナーゼ阻害剤と組み合わせて投与される。一実施形態において、キナーゼ阻害剤は、ＰＩ３−キナーゼ阻害剤、例えばＣＬＲ４５７、ＢＧＴ２２６又はＢＹＬ７１９である。一実施形態において、キナーゼ阻害剤は、ＣＤＫ４阻害剤、例えば本明細書に記載されるＣＤＫ４阻害剤、例えばＣＤＫ４／６阻害剤、例えば６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−２−（５−ピペラジン−１−イル−ピリジン−２−イルアミノ）−８Ｈ−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７−オン、塩酸塩（パルボサイクリブ又はＰＤ０３３２９９１とも呼ばれる）である。一実施形態において、キナーゼ阻害剤は、ＢＴＫ阻害剤、例えば本明細書に記載されるＢＴＫ阻害剤、例えばイブルチニブである。一実施形態において、キナーゼ阻害剤は、ｍＴＯＲ阻害剤、例えば本明細書に記載されるｍＴＯＲ阻害剤、例えばラパマイシン、ラパマイシン類似体、ＯＳＩ−０２７である。ｍＴＯＲ阻害剤は、例えば、ｍＴＯＲＣ１阻害剤及び／又はｍＴＯＲＣ２阻害剤、例えば本明細書に記載されるｍＴＯＲＣ１阻害剤及び／又はｍＴＯＲＣ２阻害剤であり得る。一実施形態において、キナーゼ阻害剤は、ＭＮＫ阻害剤、例えば本明細書に記載されるＭＮＫ阻害剤、例えば４−アミノ−５−（４−フルオロアニリノ）−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジンである。ＭＮＫ阻害剤は、例えば、ＭＮＫ１ａ、ＭＮＫ１ｂ、ＭＮＫ２ａ及び／又はＭＮＫ２ｂ阻害剤であり得る。一実施形態において、キナーゼ阻害剤は、本明細書に記載される二重ＰＩ３Ｋ／ｍＴＯＲ阻害剤、例えばＰＦ−０４６９５１０２である。一実施形態において、キナーゼ阻害剤は、ＤＧＫ阻害剤、例えば本明細書に記載されるＤＧＫ阻害剤、例えばＤＧＫｉｎｈ１（Ｄ５９１９）又はＤＧＫｉｎｈ２（Ｄ５７９４）である。
【０８６４】
一実施形態において、キナーゼ阻害剤は、イブルチニブ（ＰＣＩ−３２７６５）；ＧＤＣ−０８３４；ＲＮ−４８６；ＣＧＩ−５６０；ＣＧＩ−１７６４；ＨＭ−７１２２４；ＣＣ−２９２；ＯＮＯ−４０５９；ＣＮＸ−７７４；及びＬＦＭ−Ａ１３から選択されるＢＴＫ阻害剤である。一実施形態において、ＢＴＫ阻害剤は、インターロイキン−２誘導性キナーゼ（ＩＴＫ）のキナーゼ活性を低下も阻害もせず、ＧＤＣ−０８３４；ＲＮ−４８６；ＣＧＩ−５６０；ＣＧＩ−１７６４；ＨＭ−７１２２４；ＣＣ−２９２；ＯＮＯ−４０５９；ＣＮＸ−７７４；及びＬＦＭ−Ａ１３から選択される。
【０８６５】
一実施形態において、キナーゼ阻害剤は、ＢＴＫ阻害剤、例えばイブルチニブ（ＰＣＩ−３２７６５）である。ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、ＢＴＫ阻害剤（例えば、イブルチニブ）と組み合わせて対象に投与される。実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、イブルチニブ（ＰＣＩ−３２７６５とも呼ばれる）と組み合わせて対象に（例えば、ＣＬＬ、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）又は小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）に罹患した対象に投与される。例えば、対象は、１７番染色体の短腕に欠失（例えば、白血病細胞中のｄｅｌ（１７ｐ））を有し得る。他の例において、対象は、ｄｅｌ（１７ｐ）を有さない。ある実施形態において、対象は、再発したＣＬＬ又はＳＬＬを有し、例えば、対象は、癌治療を以前に投与されている（例えば、過去の癌治療を１、２、３又は４回、以前に投与されている）。ある実施形態において、対象は、難治性ＣＬＬ又はＳＬＬを有する。他の実施形態において、対象は、濾胞性リンパ腫、例えば再発性又は難治性濾胞性リンパ腫を有する。ある実施形態において、イブルチニブは、約３００〜６００ｍｇ／日（例えば、約３００〜３５０、３５０〜４００、４００〜４５０、４５０〜５００、５００〜５５０又は５５０〜６００ｍｇ／日、例えば約４２０ｍｇ／日又は約５６０ｍｇ／日）の投与量で、例えば経口で投与される。ある実施形態において、イブルチニブは、所定の期間にわたって毎日、例えば２１日間のサイクルで毎日又は２８日間のサイクルで毎日、約２５０ｍｇ、３００ｍｇ、３５０ｍｇ、４００ｍｇ、４２０ｍｇ、４４０ｍｇ、４６０ｍｇ、４８０ｍｇ、５００ｍｇ、５２０ｍｇ、５４０ｍｇ、５６０ｍｇ、５８０ｍｇ、６００ｍｇ（例えば、２５０ｍｇ、４２０ｍｇ又は５６０ｍｇ）の用量で投与される。一実施形態において、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２又はそれを超えるサイクルのイブルチニブが投与される。ある実施形態において、イブルチニブは、リツキシマブと組み合わせて投与される。例えば、Ｂｕｒｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（２０１３）Ｉｂｒｕｔｉｎｉｂ  Ｉｎ  Ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ  Ｗｉｔｈ  Ｒｉｔｕｘｉｍａｂ（ｉＲ）Ｉｓ  Ｗｅｌｌ  Ｔｏｌｅｒａｔｅｄ  ａｎｄ  Ｉｎｄｕｃｅｓ  ａ  Ｈｉｇｈ  Ｒａｔｅ  Ｏｆ  Ｄｕｒａｂｌｅ  Ｒｅｍｉｓｓｉｏｎｓ  Ｉｎ  Ｐａｔｉｅｎｔｓ  Ｗｉｔｈ  Ｈｉｇｈ−Ｒｉｓｋ  Ｃｈｒｏｎｉｃ  Ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｉｃ  Ｌｅｕｋｅｍｉａ（ＣＬＬ）：Ｎｅｗ，Ｕｐｄａｔｅｄ  Ｒｅｓｕｌｔｓ  Ｏｆ  ａ  Ｐｈａｓｅ  ＩＩ  Ｔｒｉａｌ  Ｉｎ  ４０  Ｐａｔｉｅｎｔｓ，Ａｂｓｔｒａｃｔ  ６７５  ｐｒｅｓｅｎｔｅｄ  ａｔ  ５５ｔｈ  ＡＳＨ  Ａｎｎｕａｌ  Ｍｅｅｔｉｎｇ  ａｎｄ  Ｅｘｐｏｓｉｔｉｏｎ，Ｎｅｗ  Ｏｒｌｅａｎｓ，ＬＡ  ７−１０  Ｄｅｃを参照されたい。理論によって拘束されるものではないが、イブルチニブの添加が、Ｔ細胞増殖反応を促進し、Ｔ細胞を、Ｔ−ヘルパー−２（Ｔｈ２）からＴ−ヘルパー−１（Ｔｈ１）表現型に変化させ得るものと考えられる。Ｔｈ１及びＴｈ２は、ヘルパーＴ細胞の表現型であり、Ｔｈ１とＴｈ２とで、異なる免疫応答経路を指向する。Ｔｈ１表現型は、例えば、細胞内病原体／ウイルス又は癌性細胞などの細胞��死滅させるための又は自己免疫反応を持続させるための、炎症誘発性反応に関連する。Ｔｈ２表現型は、好酸球蓄積及び抗炎症反応に関連する。
【０８６６】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）の阻害剤と組み合わせて投与される。
【０８６７】
ある実施形態において、ＥＧＦＲ阻害剤は、（Ｒ，Ｅ）−Ｎ−（７−クロロ−１−（１−（４−（ジメチルアミノ）ブタ−２−エノイル）アゼパン−３−イル）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２−イル）−２−メチルイソニコチンアミド（化合物Ａ４０）又はＰＣＴ公開番号国際公開第２０１３／１８４７５７号パンフレットに開示される化合物である。
【０８６８】
ある実施形態において、ＥＧＦＲ阻害剤、例えば（Ｒ，Ｅ）−Ｎ−（７−クロロ−１−（１−（４−（ジメチルアミノ）ブタ−２−エノイル）アゼパン−３−イル）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２−イル）−２−メチルイソニコチンアミド（化合物Ａ４０）又はＰＣＴ公開番号国際公開第２０１３／１８４７５７号パンフレットに開示される化合物は、例えば、１日当たり１５０〜２５０ｍｇの用量で投与される。ある実施形態において、ＥＧＦＲ阻害剤、例えば（Ｒ，Ｅ）−Ｎ−（７−クロロ−１−（１−（４−（ジメチルアミノ）ブタ−２−エノイル）アゼパン−３−イル）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２−イル）−２−メチルイソニコチンアミド（化合物Ａ４０）又はＰＣＴ公開番号国際公開第２０１３／１８４７５７号パンフレットに開示される化合物は、約１５０、２００若しくは２５０ｍｇ又は約１５０〜２００又は２００〜２５０ｍｇの用量で投与される。
【０８６９】
ある実施形態において、ＥＧＦＲ阻害剤、（Ｒ，Ｅ）−Ｎ−（７−クロロ−１−（１−（４−（ジメチルアミノ）ブタ−２−エノイル）アゼパン−３−イル）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２−イル）−２−メチルイソニコチンアミド（化合物Ａ４０）又はＰＣＴ公開番号国際公開第２０１３／１８４７５７号パンフレットに開示される化合物は、共有結合的な不可逆的チロシンキナーゼ阻害剤である。特定の実施形態において、ＥＧＦＲ阻害剤、（Ｒ，Ｅ）−Ｎ−（７−クロロ−１−（１−（４−（ジメチルアミノ）ブタ−２−エノイル）アゼパン−３−イル）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２−イル）−２−メチルイソニコチンアミド（化合物Ａ４０）又はＰＣＴ公開番号国際公開第２０１３／１８４７５７号パンフレットに開示される化合物は、活性化ＥＧＦＲ突然変異（Ｌ８５８Ｒ、ｅｘ１９ｄｅｌ）を阻害する。他の実施形態において、ＥＧＦＲ阻害剤、（Ｒ，Ｅ）−Ｎ−（７−クロロ−１−（１−（４−（ジメチルアミノ）ブタ−２−エノイル）アゼパン−３−イル）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２−イル）−２−メチルイソニコチンアミド（化合物Ａ４０）又はＰＣＴ公開番号国際公開第２０１３／１８４７５７号パンフレットに開示される化合物は、野生型（ｗｔ）ＥＧＦＲを阻害しないか又は実質的に阻害しない。化合物Ａ４０は、ＥＧＦＲ突然変異ＮＳＣＬＣ患者において有効性を示した。ある実施形態において、ＥＧＦＲ阻害剤、（Ｒ，Ｅ）−Ｎ−（７−クロロ−１−（１−（４−（ジメチルアミノ）ブタ−２−エノイル）アゼパン−３−イル）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２−イル）−２−メチルイソニコチンアミド（化合物Ａ４０）又はＰＣＴ公開番号国際公開第２０１３／１８４７５７号パンフレットに開示される化合物は、キナーゼのＴＥＣファミリーにおいて１つ以上のキナーゼも阻害する。Ｔｅｃファミリーキナーゼは、例えば、ＩＴＫ、ＢＭＸ、ＴＥＣ、ＲＬＫ及びＢＴＫを含み、Ｔ細胞受容体及びケモカイン受容体シグナル伝達の伝播において中心的な役割を果たす（Ｓｃｈｗａｒｔｚｂｅｒｇ  ｅｔ  ａｌ．（２００５）Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．ｐ．２８４−９５）。例えば、化合物Ａ４０は、１．３ｎＭの生化学的ＩＣ５０でＩＴＫを阻害し得る。ＩＴＫは、Ｔｈ２細胞の生存に重要な酵素であり、その阻害は、Ｔｈ２及びＴｈ１細胞間のバランスの変化をもたらす。
【０８７０】
ある実施形態において、ＥＧＦＲ阻害剤は、エルロチニブ、ゲフィチニブ、セツキシマブ、パニツムマブ、ネシツムマブ、ＰＦ−００２９９８０４、ニモツズマブ又はＲＯ５０８３９４５の１つ以上から選択される。
【０８７１】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、アデノシンＡ２Ａ受容体（Ａ２ＡＲ）アンタゴニストと組み合わせて投与される。例示的なＡ２ＡＲアンタゴニストとしては、例えば、ＰＢＦ５０９（Ｐａｌｏｂｉｏｆａｒｍａ／Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＣＰＩ４４４／Ｖ８１４４４（Ｃｏｒｖｕｓ／Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）、ＡＺＤ４６３５／ＨＴＬ−１０７１（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ／Ｈｅｐｔａｒｅｓ）、ビパデナント（Ｒｅｄｏｘ／Ｊｕｎｏ）、ＧＢＶ−２０３４（Ｇｌｏｂａｖｉｒ）、ＡＢ９２８（Ａｒｃｕｓ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）、テオフィリン、イストラデフィリン（協和発酵工業（Ｋｙｏｗａ  Ｈａｋｋｏ  Ｋｏｇｙｏ））、トザデナント／ＳＹＮ−１１５（Ａｃｏｒｄａ）、ＫＷ−６３５６（協和発酵工業（Ｋｙｏｗａ  Ｈａｋｋｏ  Ｋｏｇｙｏ））、ＳＴ−４２０６（Ｌｅａｄｉａｎｔ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）、プレラデナント／ＳＣＨ  ４２０８１４（Ｍｅｒｃｋ／Ｓｃｈｅｒｉｎｇ）及びＮＩＲ１７８（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）が挙げられる。
【０８７２】
特定の実施形態において、Ａ２ＡＲアンタゴニストは、ＰＢＦ５０９である。ＰＢＦ５０９及び他のＡ２ＡＲアンタゴニストは、米国特許第８，７９６，２８４号明細書及び国際公開第２０１７／０２５９１８号パンフレットに開示されている。特定の実施形態において、Ａ２ＡＲアンタゴニストは、５−ブロモ−２，６−ジ−（１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピリミジン−４−アミンである。特定の実施形態において、Ａ２ＡＲアンタゴニストは、以下の構造：
【化８０】
2021525715.tif 000179
を有する。
【０８７３】
特定の実施形態において、Ａ２ＡＲアンタゴニストは、ＣＰＩ４４４／Ｖ８１４４４である。ＣＰＩ−４４４及び他のＡ２ＡＲアンタゴニストは、国際公開第２００９／１５６７３７号パンフレットに開示されている。特定の実施形態において、Ａ２ＡＲアンタゴニストは、（Ｓ）−７−（５−メチルフラン−２−イル）−３−（（６−（（（テトラヒドロフラン−３−イル）オキシ）メチル）ピリジン−２−イル）メチル）−３Ｈ−［１，２，３］トリアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−５−アミンである。特定の実施形態において、Ａ２ＡＲアンタゴニストは、（Ｒ）−７−（５−メチルフラン−２−イル）−３−（（６−（（（テトラヒドロフラン−３−イル）オキシ）メチル）ピリジン−２−イル）メチル）−３Ｈ−［１，２，３］トリアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−５−アミン又はそのラセミ化合物である。特定の実施形態において、Ａ２ＡＲアンタゴニストは、７−（５−メチルフラン−２−イル）−３−（（６−（（（テトラヒドロフラン−３−イル）オキシ）メチル）ピリジン−２−イル）メチル）−３Ｈ−［１，２，３］トリアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−５−アミンである。特定の実施形態において、Ａ２ＡＲアンタゴニストは、以下の構造：
【化８１】
2021525715.tif 000180
を有する。
【０８７４】
特定の実施形態において、Ａ２ＡＲアンタゴニストは、ＡＺＤ４６３５／ＨＴＬ−１０７１である。Ａ２ＡＲアンタゴニストは、国際公開第２０１１／０９５６２５号パンフレットに開示されている。特定の実施形態において、Ａ２ＡＲアンタゴニストは、６−（２−クロロ−６−メチルピリジン−４−イル）−５−（４−フルオロフェニル）−１，２，４−トリアジン−３−アミンである。特定の実施形態において、Ａ２ＡＲアンタゴニストは、以下の構造：
【化８２】
2021525715.tif 000181
を有する。
【０８７５】
特定の実施形態において、Ａ２ＡＲアンタゴニストは、ＳＴ−４２０６（Ｌｅａｄｉａｎｔ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）である。特定の実施形態において、Ａ２ＡＲアンタゴニストは、米国特許第９，１３３，１９７号明細書に記載されるＡ２ＡＲアンタゴニストである。特定の実施形態において、Ａ２ＡＲアンタゴニストは、以下の構造：
【化８３】
2021525715.tif 000182
を有する。
【０８７６】
特定の実施形態において、Ａ２ＡＲアンタゴニストは、米国特許第８１１４８４５号明細書、米国特許第９０２９３９３号明細書、米国特許出願公開第２０１７００１５７５８号明細書又は米国特許出願公開第２０１６０１２９１０８号明細書に記載されるＡ２ＡＲアンタゴニストである。
【０８７７】
特定の実施形態において、Ａ２ＡＲアンタゴニストは、イストラデフィリン（ＣＡＳ登録番号１５５２７０−９９−８）である。イストラデフィリンは、ＫＷ−６００２又は８−［（Ｅ）−２−（３，４−ジメトキシフェニル）ビニル］−１，３−ジエチル−７−メチル−３，７−ジヒドロ−１Ｈ−プリン−２，６−ジオンとしても知られている。イストラデフィリンは、例えば、ＬｅＷｉｔｔ  ｅｔ  ａｌ．（２００８）Ａｎｎａｌｓ  ｏｆ  Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ  ６３（３）：２９５−３０２）に開示されている。
【０８７８】
特定の実施形態において、Ａ２ＡＲアンタゴニストは、トザデナント（Ｂｉｏｔｉｅ）である。トザデナントは、ＳＹＮ１１５又は４−ヒドロキシ−Ｎ−（４−メトキシ−７−モルホリン−４−イル−１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）−４−メチルピペリジン−１−カルボキサミドとしても知られている。トザデナントは、Ａ２ａ受容体において内因性アデノシンの作用をブロックし、Ｄ２受容体においてドーパミンの作用の増強及びｍＧｌｕＲ５受容体においてグルタメートの作用の阻害をもたらす。ある実施形態において、Ａ２ＡＲアンタゴニストは、プレラデナント（ＣＡＳ登録番号３７７７２７−８７−２）である。プレラデナントは、ＳＣＨ  ４２０８１４又は２−（２−フラニル）−７−［２−［４−［４−（２−メトキシエトキシ）フェニル］−１−ピペラジニル］エチル］７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｅ］［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ｃ］ピリミジン−５−アミンとしても知られている。プレラデナントは、アデノシンＡ２Ａ受容体において強力且つ選択的なアンタゴニストとして作用する薬物として開発された。
【０８７９】
特定の実施形態において、Ａ２ＡＲアンタゴニストは、ビパデナンである。ビパデナンは、ＢＩＩＢ０１４、Ｖ２００６又は３−［（４−アミノ−３−メチルフェニル）メチル］−７−（フラン−２−イル）トリアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−５−アミンとしても知られている。
【０８８０】
他の例示的なＡ２ＡＲアンタゴニストとしては、例えば、ＡＴＬ−４４４、ＭＳＸ−３、ＳＣＨ−５８２６１、ＳＣＨ−４１２，３４８、ＳＣＨ−４４２，４１６、ＶＥＲ−６６２３、ＶＥＲ−６９４７、ＶＥＲ−７８３５、ＣＧＳ−１５９４３又はＺＭ−２４１，３８５が挙げられる。
【０８８１】
ある実施形態において、Ａ２ＡＲアンタゴニストは、Ａ２ａＲ経路アンタゴニスト（例えば、ＣＤ−７３阻害剤、例えば抗ＣＤ７３抗体）であり、ＭＥＤＩ９４４７である。ＭＥＤＩ９４４７は、ＣＤ７３に特異的なモノクローナル抗体である。ＣＤ７３によるアデノシンの細胞外産生を標的とすることにより、アデノシンの免疫抑制効果を減少させ得る。ＭＥＤＩ９４４７は、様々な活性、例えばＣＤ７３エクトヌクレオチダーゼ活性の阻害、ＡＭＰ媒介リンパ球抑制の緩和及び同系腫瘍増殖の阻害を有することが報告された。ＭＥＤＩ９４４７は、腫瘍微小環境内の骨髄及びリンパ球浸潤性白血球集団の両方の変化を促し得る。これらの変化は、例えば、ＣＤ８エフェクター細胞及び活性化マクロファージの増加並びに骨髄由来免疫抑制細胞（ＭＤＳＣ）及び制御性Ｔリンパ球の割合の減少を含む。
【０８８２】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、ＣＤ１９  ＣＡＲ発現細胞治療などのＣＡＲ発現細胞治療と組み合わせて投与される。
【０８８３】
一実施形態において、ＣＤ１９  ＣＡＲの抗原結合ドメインは、Ｎｉｃｈｏｌｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎ．３４（１６−１７）：１１５７−１１６５（１９９７）に記載されるＦＭＣ６３  ｓｃＦｖフラグメントと同じか又は同様の結合特異性を有する。一実施形態において、ＣＤ１９  ＣＡＲの抗原結合ドメインとしては、Ｎｉｃｈｏｌｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎ．３４（１６−１７）：１１５７−１１６５（１９９７）に記載されるｓｃＦｖフラグメントが挙げられる。
【０８８４】
ある実施形態において、ＣＤ１９  ＣＡＲとしては、国際公開第２０１４／１５３２７０号パンフレットの表３に記載される抗原結合ドメイン（例えば、ヒト化抗原結合ドメイン）が挙げられる。国際公開第２０１４／１５３２７０号パンフレットには、様々なＣＡＲ構築物の結合及び有効性をアッセイする方法も記載されている。
【０８８５】
一態様において、親マウスｓｃＦｖ配列は、ＰＣＴ公報国際公開第２０１２／０７９０００号パンフレットに示されるＣＡＲ１９構築物である。一実施形態において、抗ＣＤ１９結合ドメインは、国際公開第２０１２／０７９０００号パンフレットに記載されるｓｃＦｖである。
【０８８６】
一実施形態において、ＣＡＲ分子は、ヒトＣＤ１９に特異的に結合するマウス由来のｓｃＦｖフラグメントを提供する、ＰＣＴ公報国際公開第２０１２／０７９０００号パンフレットに配列番号１２として示される融合ポリペプチド配列を含む。
【０８８７】
一実施形態において、ＣＤ１９  ＣＡＲは、ＰＣＴ公報国際公開第２０１２／０７９０００号パンフレットに配列番号１２として示されるアミノ酸配列を含む。
【０８８８】
一実施形態において、ＣＤ１９  ＣＡＲは、ＵＳＡＮ名称ＴＩＳＡＧＥＮＬＥＣＬＥＵＣＥＬ−Ｔを有する。実施形態において、ＣＴＬ０１９は、Ｔ細胞の遺伝子修飾によって作製され、ＥＦ−１αプロモーターの制御下で、ＣＴＬ０１９導入遺伝子を含有する自己不活性化、複製欠損レンチウイルス（ＬＶ）ベクターによる形質導入を介した安定した挿入によって媒介される。ＣＴＬ０１９は、導入遺伝子陽性Ｔ細胞のパーセントに基づいて対象に送達される導入遺伝子陽性及び陰性Ｔ細胞の混合物であり得る。
【０８８９】
他の実施形態において、ＣＤ１９  ＣＡＲは、国際公開第２０１４／１５３２７０号パンフレットの表３に記載される抗原結合ドメイン（例えば、ヒト化抗原結合ドメイン）を含む。
【０８９０】
マウスＣＤ１９抗体のヒト化は、マウス特異的な残基が、ＣＡＲＴ１９処置、すなわちＣＡＲ１９構築物が形質導入されたＴ細胞による処置を受ける患者においてヒト抗マウス抗原（ＨＡＭＡ）応答を誘導し得る臨床環境のために望ましい。ヒト化ＣＤ１９  ＣＡＲ配列の産生、特性評価及び有効性は、実施例１〜５（ｐ．１１５〜１５９）を含む国際出願国際公開第２０１４／１５３２７０号パンフレットに記載されている。
【０８９１】
ある実施形態において、ＣＤ１９  ＣＡＲ構築物は、ＰＣＴ公報国際公開第２０１２／０７９０００号パンフレットに記載されている。
【０８９２】
ヒト化抗ＣＤ１９  ｓｃＦｖドメインを含有するＣＤ１９  ＣＡＲ構築物は、ＰＣＴ公報国際公開第２０１４／１５３２７０号パンフレットに記載されている。
【０８９３】
当技術分野において任意の公知のＣＤ１９  ＣＡＲ、例えば任意の公知のＣＤ１９  ＣＡＲのＣＤ１９抗原結合ドメインが、本開示に従って使用され得る。例えば、ＬＧ−７４０；米国特許第８，３９９，６４５号明細書；米国特許第７，４４６，１９０号明細書；Ｘｕ  ｅｔ  ａｌ．，Ｌｅｕｋ  Ｌｙｍｐｈｏｍａ．２０１３  ５４（２）：２５５−２６０（２０１２）；Ｃｒｕｚ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ  １２２（１７）：２９６５−２９７３（２０１３）；Ｂｒｅｎｔｊｅｎｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ，１１８（１８）：４８１７−４８２８（２０１１）；Ｋｏｃｈｅｎｄｅｒｆｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ  １１６（２０）：４０９９−１０２（２０１０）；Ｋｏｃｈｅｎｄｅｒｆｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ  １２２（２５）：４１２９−３９（２０１３）；及び１６ｔｈ  Ａｎｎｕ  Ｍｅｅｔ  Ａｍ  Ｓｏｃ  Ｇｅｎ  Ｃｅｌｌ  Ｔｈｅｒ（ＡＳＧＣＴ）（Ｍａｙ  １５−１８，Ｓａｌｔ  Ｌａｋｅ  Ｃｉｔｙ）２０１３，Ａｂｓｔ  １０に記載されるＣＤ１９  ＣＡＲ。
【０８９４】
例示的なＣＤ１９  ＣＡＲとしては、本明細書に記載されるＣＤ１９  ＣＡＲ又はＸｕ  ｅｔ  ａｌ．Ｂｌｏｏｄ  １２３．２４（２０１４）：３７５０−９；Ｋｏｃｈｅｎｄｅｒｆｅｒ  ｅｔ  ａｌ．Ｂｌｏｏｄ  １２２．２５（２０１３）：４１２９−３９、Ｃｒｕｚ  ｅｔ  ａｌ．Ｂｌｏｏｄ  １２２．１７（２０１３）：２９６５−７３、ＮＣＴ００５８６３９１、ＮＣＴ０１０８７２９４、ＮＣＴ０２４５６３５０、ＮＣＴ００８４０８５３、ＮＣＴ０２６５９９４３、ＮＣＴ０２６５０９９９、ＮＣＴ０２６４０２０９、ＮＣＴ０１７４７４８６、ＮＣＴ０２５４６７３９、ＮＣＴ０２６５６１４７、ＮＣＴ０２７７２１９８、ＮＣＴ００７０９０３３、ＮＣＴ０２０８１９３７、ＮＣＴ００９２４３２６、ＮＣＴ０２７３５０８３、ＮＣＴ０２７９４２４６、ＮＣＴ０２７４６９５２、ＮＣＴ０１５９３６９６、ＮＣＴ０２１３４２６２、ＮＣＴ０１８５３６３１、ＮＣＴ０２４４３８３１、ＮＣＴ０２２７７５２２、ＮＣＴ０２３４８２１６、ＮＣＴ０２６１４０６６、ＮＣＴ０２０３０８３４、ＮＣＴ０２６２４２５８、ＮＣＴ０２６２５４８０、ＮＣＴ０２０３０８４７、ＮＣＴ０２６４４６５５、ＮＣＴ０２３４９６９８、ＮＣＴ０２８１３８３７、ＮＣＴ０２０５０３４７、ＮＣＴ０１６８３２７９、ＮＣＴ０２５２９８１３、ＮＣＴ０２５３７９７７、ＮＣＴ０２７９９５５０、ＮＣＴ０２６７２５０１、ＮＣＴ０２８１９５８３、ＮＣＴ０２０２８４５５、ＮＣＴ０１８４０５６６、ＮＣＴ０１３１８３１７、ＮＣＴ０１８６４８８９、ＮＣＴ０２７０６４０５、ＮＣＴ０１４７５０５８、ＮＣＴ０１４３０３９０、ＮＣＴ０２１４６９２４、ＮＣＴ０２０５１２５７、ＮＣＴ０２４３１９８８、ＮＣＴ０１８１５７４９、ＮＣＴ０２１５３５８０、ＮＣＴ０１８６５６１７、ＮＣＴ０２２０８３６２、ＮＣＴ０２６８５６７０、ＮＣＴ０２５３５３６４、ＮＣＴ０２６３１０４４、ＮＣＴ０２７２８８８２、ＮＣＴ０２７３５２９１、ＮＣＴ０１８６０９３７、ＮＣＴ０２８２２３２６、ＮＣＴ０２７３７０８５、ＮＣＴ０２４６５９８３、ＮＣＴ０２１３２６２４、ＮＣＴ０２７８２３５１、ＮＣＴ０１４９３４５３、ＮＣＴ０２６５２９１０、ＮＣＴ０２２４７６０９、ＮＣＴ０１０２９３６６、ＮＣＴ０１６２６４９５、ＮＣＴ０２７２１４０７、ＮＣＴ０１０４４０６９、ＮＣＴ００４２２３８３、ＮＣＴ０１６８０９９１、ＮＣＴ０２７９４９６１若しくはＮＣＴ０２４５６２０７に記載される抗ＣＤ１９  ＣＡＲが挙げられる。
【０８９５】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、ＣＤ２０阻害剤と組み合わせて投与される。
【０８９６】
一実施形態において、ＣＤ２０阻害剤は、抗ＣＤ２０抗体又はそのフラグメントである。一実施形態において、抗体は、単一特異性抗体であり、別の実施形態において、抗体は、二重特異性抗体である。一実施形態において、ＣＤ２０阻害剤は、キメラマウス／ヒトモノクローナル抗体、例えばリツキシマブである。一実施形態において、ＣＤ２０阻害剤は、オファツムマブなどのヒトモノクローナル抗体である。一実施形態において、ＣＤ２０阻害剤は、オクレリズマブ、ベルツズマブ、オビヌツズマブ、オカラツズマブ又はＰＲＯ１３１９２１（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）などのヒト化抗体である。一実施形態において、ＣＤ２０阻害剤は、ＴＲＵ−０１５（Ｔｒｕｂｉｏｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）などの抗ＣＤ２０抗体の部分を含む融合タンパク質である。
【０８９７】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、ＣＤ２２  ＣＡＲ発現細胞治療（例えば、ヒトＣＤ２２に結合するＣＡＲを発現する細胞）と組み合わせて投与される。
【０８９８】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、ＣＤ２２阻害剤と組み合わせて投与される。ある実施形態において、ＣＤ２２阻害剤は、小分子又は抗ＣＤ２２抗体分子である。ある実施形態において、抗体は、任意選択的に、化学療法剤などの第２の薬剤にコンジュゲートされる単一特異性抗体である。例えば、一実施形態において、抗体は、抗ＣＤ２２モノクローナル抗体−ＭＭＡＥコンジュゲート（例えば、ＤＣＤＴ２９８０Ｓ）である。一実施形態において、抗体は、抗ＣＤ２２抗体のｓｃＦｖ、例えば抗体ＲＦＢ４のｓｃＦｖである。このｓｃＦｖは、シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）外毒素−Ａ（例えば、ＢＬ２２）の全て又はフラグメントに融合され得る。一実施形態において、抗体は、ヒト化抗ＣＤ２２モノクローナル抗体（例えば、エプラツズマブ）である。一実施形態において、抗体又はそのフラグメントは、任意選択的に、シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）外毒素−Ａ（例えば、モキセツモマブパスドトクス）の全て又はフラグメント又は（例えば、３８ＫＤａフラグメント）に共有結合的に融合される、抗ＣＤ２２抗体のＦｖ部分を含む。一実施形態において、抗ＣＤ２２抗体は、任意選択的に、毒素にコンジュゲートされる抗ＣＤ１９／ＣＤ２２二重特異性抗体である。例えば、一実施形態において、抗ＣＤ２２抗体は、ジフテリア毒素（ＤＴ）、例えばジフテリア毒素（ＤＴ）の最初の３８９アミノ酸、ＤＴ  ３９０、例えばＤＴ２２１９ＡＲＬ）などのリガンド指向性毒素の全て又は部分に任意選択的に連結される、抗ＣＤ１９／ＣＤ２２二重特異性部分、（例えば、ヒトＣＤ１９及びＣＤ２２を認識する２つのｓｃＦｖリガンド）を含む。別の実施形態において、二重特異性部分（例えば、抗ＣＤ１９／抗ＣＤ２２）は、脱グリコシル化リシンＡ鎖（例えば、Ｃｏｍｂｏｔｏｘ）などの毒素に連結される。
【０８９９】
ある実施形態において、ＣＤ２２阻害剤は、多重特異性抗体分子、例えば二重特異性抗体分子、例えばＣＤ２０及びＣＤ３に結合する二重特異性抗体分子である。ＣＤ２０及びＣＤ３に結合する例示的な二重特異性抗体分子は、国際公開第２０１６０８６１８９号パンフレット及び国際公開第２０１６１８２７５１号パンフレットに開示されている。ある実施形態において、ＣＤ２０及びＣＤ３に結合する二重特異性抗体分子は、国際公開第２０１６０８６１８９号パンフレットの図７４、配列番号３２３、３２４及び３２５に開示されるようなＸＥＮＰ１３６７６である。
【０９００】
ある実施形態において、ＣＤ２２  ＣＡＲ発現細胞治療は、国際公開第２０１６／１６４７３１号パンフレットに記載される抗原結合ドメインを含む。
【０９０１】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、ＦＣＲＬ２又はＦＣＲＬ５阻害剤と組み合わせて投与される。ある実施形態において、ＦＣＲＬ２又はＦＣＲＬ５阻害剤は、抗ＦＣＲＬ２抗体分子、例えば二重特異性抗体分子、例えばＦＣＲＬ２及びＣＤ３に結合する二重特異性抗体である。ある実施形態において、ＦＣＲＬ２又はＦＣＲＬ５阻害剤は、抗ＦＣＲＬ５抗体分子、例えば二重特異性抗体分子、例えばＦＣＲＬ５及びＣＤ３に結合する二重特異性抗体である。ある実施形態において、ＦＣＲＬ２又はＦＣＲＬ５阻害剤は、ＦＣＲＬ２  ＣＡＲ発現細胞治療である。ある実施形態において、ＦＣＲＬ２又はＦＣＲＬ５阻害剤は、ＦＣＲＬ５  ＣＡＲ発現細胞治療である。
【０９０２】
例示的な抗ＦＣＲＬ５抗体分子は、米国特許出願公開第２０１５００９８９００号明細書、米国特許出願公開第２０１６０３６８９８５号明細書、国際公開第２０１７０９６１２０号パンフレットに開示されている（例えば、国際公開第２０１７０９６１２０号パンフレットに開示される抗体ＥＴ２００−００１、ＥＴ２００−００２、ＥＴ２００−００３、ＥＴ２００−００６、ＥＴ２００−００７、ＥＴ２００−００８、ＥＴ２００−００９、ＥＴ２００−０１０、ＥＴ２００−０１１、ＥＴ２００−０１２、ＥＴ２００−０１３、ＥＴ２００−０１４、ＥＴ２００−０１５、ＥＴ２００−０１６、ＥＴ２００−０１７、ＥＴ２００−０１８、ＥＴ２００−０１９、ＥＴ２００−０２０、ＥＴ２００−０２１、ＥＴ２００−０２２、ＥＴ２００−０２３、ＥＴ２００−０２４、ＥＴ２００−０２５、ＥＴ２００−０２６、ＥＴ２００−０２７、ＥＴ２００−０２８、ＥＴ２００−０２９、ＥＴ２００−０３０、ＥＴ２００−０３１、ＥＴ２００−０３２、ＥＴ２００−０３３、ＥＴ２００−０３４、ＥＴ２００−０３５、ＥＴ２００−０３７、ＥＴ２００−０３８、ＥＴ２００−０３９、ＥＴ２００−０４０、ＥＴ２００−０４１、ＥＴ２００−０４２、ＥＴ２００−０４３、ＥＴ２００−０４４、ＥＴ２００−０４５、ＥＴ２００−０６９、ＥＴ２００−０７８、ＥＴ２００−０７９、ＥＴ２００−０８１、ＥＴ２００−０９７、ＥＴ２００−０９８、ＥＴ２００−０９９、ＥＴ２００−１００、ＥＴ２００−１０１、ＥＴ２００−１０２、ＥＴ２００−１０３、ＥＴ２００−１０４、ＥＴ２００−１０５、ＥＴ２００−１０６、ＥＴ２００−１０７、ＥＴ２００−１０８、ＥＴ２００−１０９、ＥＴ２００−１１０、ＥＴ２００−１１１、ＥＴ２００−１１２、ＥＴ２００−１１３、ＥＴ２００−１１４、ＥＴ２００−１１５、ＥＴ２００−１１６、ＥＴ２００−１１７、ＥＴ２００−１１８、ＥＴ２００−１１９、ＥＴ２００−１２０、ＥＴ２００−１２１、ＥＴ２００−１２２、ＥＴ２００−１２３、ＥＴ２００−１２５、ＥＴ２００−００５及びＥＴ２００−１２４）。
【０９０３】
例示的なＦＣＲＬ５  ＣＡＲ分子は、国際公開第２０１６０９０３３７号パンフレットに開示されている。
【０９０４】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、ＩＬ１５／ＩＬ−１５Ｒａ複合体と組み合わせて投与される。ある実施形態において、ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒａ複合体は、ＮＩＺ９８５（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＡＴＬ−８０３（Ａｌｔｏｒ）又はＣＹＰ０１５０（Ｃｙｔｕｎｅ）から選択される。
【０９０５】
ある実施形態において、ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒａ複合体は、可溶性形態のヒトＩＬ−１５Ｒａと複合体化されたヒトＩＬ−１５である。複合体は、可溶性形態のＩＬ−１５Ｒａに共有結合的に又は非共有結合的に結合されたＩＬ−１５を含み得る。特定の実施形態において、ヒトＩＬ−１５は、可溶性形態のＩＬ−１５Ｒａに非共有結合的に結合される。特定の実施形態において、組成物のヒトＩＬ−１５は、国際公開第２０１４／０６６５２７号パンフレットに記載されるアミノ酸配列を含み、可溶性形態のヒトＩＬ−１５Ｒａは、国際公開第２０１４／０６６５２７号パンフレットに記載されるアミノ酸配列を含む。本明細書に記載される分子は、国際公開第２００７／０８４３４２号パンフレットに記載されるベクター、宿主細胞及び方法によって作製され得る。
【０９０６】
ある実施形態において、ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒａ複合体は、ＡＬＴ−８０３、ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒａ  Ｆｃ融合タンパク質（ＩＬ−１５Ｎ７２Ｄ：ＩＬ−１５ＲａＳｕ／Ｆｃ可溶性複合体）である。ＡＬＴ−８０３は、国際公開第２００８／１４３７９４号パンフレットに開示されている。
【０９０７】
ある実施形態において、ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒａ複合体は、ＩＬ−１５Ｒａ（ＣＹＰ０１５０、Ｃｙｔｕｎｅ）のｓｕｓｈｉドメインに融合されたＩＬ−１５を含む。ＩＬ−１５Ｒａのｓｕｓｈｉドメインは、ＩＬ−１５Ｒａのシグナルペプチドの後の第１のシステイン残基から開始し、シグナルペプチドの後の第４のシステイン残基で終了するドメインを指す。ＩＬ−１５Ｒａのｓｕｓｈｉドメインに融合されたＩＬ−１５の複合体は、国際公開第２００７／０４６０６号パンフレット及び国際公開第２０１２／１７５２２２号パンフレットに開示されている。
【０９０８】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、ＰＤ−１阻害剤と組み合わせて投与される。ある実施形態において、ＰＤ−１阻害剤は、ＰＤＲ００１（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ニボルマブ（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、ペンブロリズマブ（Ｍｅｒｃｋ＆Ｃｏ）、ピディリズマブ（ＣｕｒｅＴｅｃｈ）、ＭＥＤＩ０６８０（Ｍｅｄｉｍｍｕｎｅ）、ＲＥＧＮ２８１０（Ｒｅｇｅｎｅｒｏｎ）、ＴＳＲ−０４２（Ｔｅｓａｒｏ）、ＰＦ−０６８０１５９１（Ｐｆｉｚｅｒ）、ＢＧＢ−Ａ３１７（Ｂｅｉｇｅｎｅ）、ＢＧＢ−１０８（Ｂｅｉｇｅｎｅ）、ＩＮＣＳＨＲ１２１０（Ｉｎｃｙｔｅ）又はＡＭＰ−２２４（Ａｍｐｌｉｍｍｕｎｅ）から選択される。一実施形態において、ＰＤ−１阻害剤は、抗ＰＤ−１抗体分子である。一実施形態において、ＰＤ−１阻害剤は、米国特許出願公開第２０１５／０２１０７６９号明細書に記載される抗ＰＤ−１抗体分子である。
【０９０９】
一実施形態において、抗ＰＤ−１抗体分子は、ＭＤＸ−１１０６、ＭＤＸ−１１０６−０４、ＯＮＯ−４５３８、ＢＭＳ−９３６５５８又はＯＰＤＩＶＯ（登録商標）としても知られているニボルマブ（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）である。ニボルマブ（クローン５Ｃ４）及び他の抗ＰＤ−１抗体は、米国特許第８，００８，４４９号明細書及び国際公開第２００６／１２１１６８号パンフレットに開示されている。一実施形態において、抗ＰＤ−１抗体分子は、ニボルマブのＣＤＲ配列の１つ以上（又はまとめてＣＤＲ配列の全て）、重鎖若しくは軽鎖可変領域配列又は重鎖若しくは軽鎖配列を含む。
【０９１０】
一実施形態において、抗ＰＤ−１抗体分子は、ランブロリズマブ、ＭＫ−３４７５、ＭＫ０３４７５、ＳＣＨ−９００４７５又はＫＥＹＴＲＵＤＡ（登録商標）としても知られているペンブロリズマブ（Ｍｅｒｃｋ＆Ｃｏ）である。ペンブロリズマブ及び他の抗ＰＤ−１抗体は、Ｈａｍｉｄ，Ｏ．ｅｔ  ａｌ．（２０１３）Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  ３６９（２）：１３４−４４、米国特許第８，３５４，５０９号明細書及び国際公開第２００９／１１４３３５号パンフレットに開示されている。一実施形態において、抗ＰＤ−１抗体分子は、ペンブロリズマブのＣＤＲ配列の１つ以上（又はまとめてＣＤＲ配列の全て）、重鎖若しくは軽鎖可変領域配列又は重鎖若しくは軽鎖配列を含む。
【０９１１】
一実施形態において、抗ＰＤ−１抗体分子は、ＣＴ−０１１としても知られているピディリズマブ（ＣｕｒｅＴｅｃｈ）である。ピディリズマブ及び他の抗ＰＤ−１抗体は、Ｒｏｓｅｎｂｌａｔｔ，Ｊ．ｅｔ  ａｌ．（２０１１）Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ  ３４（５）：４０９−１８、米国特許第７，６９５，７１５号明細書、米国特許第７，３３２，５８２号明細書及び米国特許第８，６８６，１１９号明細書に開示されている。一実施形態において、抗ＰＤ−１抗体分子は、ピディリズマブのＣＤＲ配列の１つ以上（又はまとめてＣＤＲ配列の全て）、重鎖若しくは軽鎖可変領域配列又は重鎖若しくは軽鎖配列を含む。
【０９１２】
一実施形態において、抗ＰＤ−１抗体分子は、ＡＭＰ−５１４としても知られているＭＥＤＩ０６８０（Ｍｅｄｉｍｍｕｎｅ）である。ＭＥＤＩ０６８０及び他の抗ＰＤ−１抗体は、米国特許第９，２０５，１４８号明細書及び国際公開第２０１２／１４５４９３号パンフレットに開示されている。一実施形態において、抗ＰＤ−１抗体分子は、ＭＥＤＩ０６８０のＣＤＲ配列の１つ以上（又はまとめてＣＤＲ配列の全て）、重鎖若しくは軽鎖可変領域配列又は重鎖若しくは軽鎖配列を含む。
【０９１３】
一実施形態において、抗ＰＤ−１抗体分子は、ＲＥＧＮ２８１０（Ｒｅｇｅｎｅｒｏｎ）である。一実施形態において、抗ＰＤ−１抗体分子は、ＲＥＧＮ２８１０のＣＤＲ配列の１つ以上（又はまとめてＣＤＲ配列の全て）、重鎖若しくは軽鎖可変領域配列又は重鎖若しくは軽鎖配列を含む。
【０９１４】
一実施形態において、抗ＰＤ−１抗体分子は、ＰＦ−０６８０１５９１（Ｐｆｉｚｅｒ）である。一実施形態において、抗ＰＤ−１抗体分子は、ＰＦ−０６８０１５９１のＣＤＲ配列の１つ以上（又はまとめてＣＤＲ配列の全て）、重鎖若しくは軽鎖可変領域配列又は重鎖若しくは軽鎖配列を含む。
【０９１５】
一実施形態において、抗ＰＤ−１抗体分子は、ＢＧＢ−Ａ３１７又はＢＧＢ−１０８（Ｂｅｉｇｅｎｅ）である。一実施形態において、抗ＰＤ−１抗体分子は、ＢＧＢ−Ａ３１７又はＢＧＢ−１０８のＣＤＲ配列の１つ以上（又はまとめてＣＤＲ配列の全て）、重鎖若しくは軽鎖可変領域配列又は重鎖若しくは軽鎖配列を含む。
【０９１６】
一実施形態において、抗ＰＤ−１抗体分子は、ＩＮＣＳＨＲ０１２１０又はＳＨＲ−１２１０としても知られているＩＮＣＳＨＲ１２１０（Ｉｎｃｙｔｅ）である。一実施形態において、抗ＰＤ−１抗体分子は、ＩＮＣＳＨＲ１２１０のＣＤＲ配列の１つ以上（又はまとめてＣＤＲ配列の全て）、重鎖若しくは軽鎖可変領域配列又は重鎖若しくは軽鎖配列を含む。
【０９１７】
一実施形態において、抗ＰＤ−１抗体分子は、ＡＮＢ０１１としても知られているＴＳＲ−０４２（Ｔｅｓａｒｏ）である。一実施形態において、抗ＰＤ−１抗体分子は、ＴＳＲ−０４２のＣＤＲ配列の１つ以上（又はまとめてＣＤＲ配列の全て）、重鎖若しくは軽鎖可変領域配列又は重鎖若しくは軽鎖配列を含む。
【０９１８】
さらなる公知の抗ＰＤ−１抗体としては、例えば、国際公開第２０１５／１１２８００号パンフレット、国際公開第２０１６／０９２４１９号パンフレット、国際公開第２０１５／０８５８４７号パンフレット、国際公開第２０１４／１７９６６４号パンフレット、国際公開第２０１４／１９４３０２号パンフレット、国際公開第２０１４／２０９８０４号パンフレット、国際公開第２０１５／２００１１９号パンフレット、米国特許第８，７３５，５５３号明細書、米国特許第７，４８８，８０２号明細書、米国特許第８，９２７，６９７号明細書、米国特許第８，９９３，７３１号明細書及び米国特許第９，１０２，７２７号明細書に記載されるものが挙げられる。
【０９１９】
一実施形態において、抗ＰＤ−１抗体は、ＰＤ−１における、本明細書に記載される抗ＰＤ−１抗体の１つと同じエピトープと結合について競合し且つ／又は結合する抗体である。
【０９２０】
一実施形態において、ＰＤ−１阻害剤は、例えば、米国特許第８，９０７，０５３号明細書に記載されるような、ＰＤ−１シグナル伝達経路を阻害するペプチドである。一実施形態において、ＰＤ−１阻害剤は、イムノアドヘシン（例えば、定常領域（例えば、免疫グロブリン配列のＦｃ領域）に融合されたＰＤ−Ｌ１又はＰＤ−Ｌ２の細胞外又はＰＤ−１結合部分を含むイムノアドヘシンである。一実施形態において、ＰＤ−１阻害剤は、ＡＭＰ−２２４（例えば、国際公開第２０１０／０２７８２７号パンフレット及び国際公開第２０１１／０６６３４２号パンフレットに開示されるＢ７−ＤＣＩｇ（Ａｍｐｌｉｍｍｕｎｅ））である。
【０９２１】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、ＰＤ−Ｌ１阻害剤と組み合わせて投与される。ある実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、ＦＡＺ０５３（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、アテゾリズマブ（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ／Ｒｏｃｈｅ）、アベルマブ（Ｍｅｒｃｋ  Ｓｅｒｏｎｏ及びＰｆｉｚｅｒ）、デュルバルマブ（ＭｅｄＩｍｍｕｎｅ／ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）又はＢＭＳ−９３６５５９（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）から選択される。
【０９２２】
一実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体分子である。一実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、米国特許出願公開第２０１６／０１０８１２３号パンフレットに開示される抗ＰＤ−Ｌ１抗体分子である。
【０９２３】
一実施形態において、抗ＰＤ−Ｌ１抗体分子は、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＲＧ７４４６、ＲＯ５５４１２６７、ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０又はＴＥＣＥＮＴＲＩＱ（商標）としても知られているアテゾリズマブ（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ／Ｒｏｃｈｅ）である。アテゾリズマブ及び他の抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、米国特許第８，２１７，１４９号明細書に開示されている。一実施形態において、抗ＰＤ−Ｌ１抗体分子は、アテゾリズマブのＣＤＲ配列の１つ以上（又はまとめてＣＤＲ配列の全て）、重鎖若しくは軽鎖可変領域配列又は重鎖若しくは軽鎖配列を含む。
【０９２４】
一実施形態において、抗ＰＤ−Ｌ１抗体分子は、ＭＳＢ００１０７１８Ｃとしても知られているアベルマブ（Ｍｅｒｃｋ  Ｓｅｒｏｎｏ及びＰｆｉｚｅｒ）である。アベルマブ及び他の抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、国際公開第２０１３／０７９１７４号パンフレットに開示されている。一実施形態において、抗ＰＤ−Ｌ１抗体分子は、アベルマブのＣＤＲ配列の１つ以上（又はまとめてＣＤＲ配列の全て）、重鎖若しくは軽鎖可変領域配列又は重鎖若しくは軽鎖配列を含む。
【０９２５】
一実施形態において、抗ＰＤ−Ｌ１抗体分子は、ＭＥＤＩ４７３６としても知られているデュルバルマブ（ＭｅｄＩｍｍｕｎｅ／ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）である。デュルバルマブ及び他の抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、米国特許第８，７７９，１０８号明細書に開示されている。一実施形態において、抗ＰＤ−Ｌ１抗体分子は、デュルバルマブのＣＤＲ配列の１つ以上（又はまとめてＣＤＲ配列の全て）、重鎖若しくは軽鎖可変領域配列又は重鎖若しくは軽鎖配列を含む。
【０９２６】
一実施形態において、抗ＰＤ−Ｌ１抗体分子は、ＭＤＸ−１１０５又は１２Ａ４としても知られているＢＭＳ−９３６５５９（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）である。ＢＭＳ−９３６５５９及び他の抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、米国特許第７，９４３，７４３号明細書及び国際公開第２０１５／０８１１５８号パンフレットに開示されている。一実施形態において、抗ＰＤ−Ｌ１抗体分子は、ＢＭＳ−９３６５５９のＣＤＲ配列の１つ以上（又はまとめてＣＤＲ配列の全て）、重鎖若しくは軽鎖可変領域配列又は重鎖若しくは軽鎖配列を含む。
【０９２７】
さらなる公知の抗ＰＤ−Ｌ１抗体としては、例えば、国際公開第２０１５／１８１３４２号パンフレット、国際公開第２０１４／１０００７９号パンフレット、国際公開第２０１６／０００６１９号パンフレット、国際公開第２０１４／０２２７５８号パンフレット、国際公開第２０１４／０５５８９７号パンフレット、国際公開第２０１５／０６１６６８号パンフレット、国際公開第２０１３／０７９１７４号パンフレット、国際公開第２０１２／１４５４９３号パンフレット、国際公開第２０１５／１１２８０５号パンフレット、国際公開第２０１５／１０９１２４号パンフレット、国際公開第２０１５／１９５１６３号パンフレット、米国特許第８，１６８，１７９号明細書、米国特許第８，５５２，１５４号明細書、米国特許第８，４６０，９２７号明細書及び米国特許第９，１７５，０８２号明細書に記載されるものが挙げられる。
【０９２８】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、ＬＡＧ−３阻害剤と組み合わせて投与される。ある実施形態において、ＬＡＧ−３阻害剤は、ＬＡＧ５２５（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＢＭＳ−９８６０１６（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）又はＴＳＲ−０３３（Ｔｅｓａｒｏ）から選択される。
【０９２９】
一実施形態において、ＬＡＧ−３阻害剤は、抗ＬＡＧ−３抗体分子である。一実施形態において、ＬＡＧ−３阻害剤は、米国特許出願公開第２０１５／０２５９４２０号明細書に開示される抗ＬＡＧ−３抗体分子である。
【０９３０】
一実施形態において、抗ＬＡＧ−３抗体分子は、ＢＭＳ９８６０１６としても知られているＢＭＳ−９８６０１６（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）である。ＢＭＳ−９８６０１６及び他の抗ＬＡＧ−３抗体は、国際公開第２０１５／１１６５３９号パンフレット及び米国特許第９，５０５，８３９号明細書に開示されている。一実施形態において、抗ＬＡＧ−３抗体分子は、ＢＭＳ−９８６０１６のＣＤＲ配列の１つ以上（又はまとめてＣＤＲ配列の全て）、重鎖若しくは軽鎖可変領域配列又は重鎖若しくは軽鎖配列を含む。
【０９３１】
一実施形態において、抗ＬＡＧ−３抗体分子は、ＴＳＲ−０３３（Ｔｅｓａｒｏ）である。一実施形態において、抗ＬＡＧ−３抗体分子は、ＴＳＲ−０３３のＣＤＲ配列の１つ以上（又はまとめてＣＤＲ配列の全て）、重鎖若しくは軽鎖可変領域配列又は重鎖若しくは軽鎖配列を含む。
【０９３２】
一実施形態において、抗ＬＡＧ−３抗体分子は、ＩＭＰ７３１又はＧＳＫ２８３１７８１（ＧＳＫ及びＰｒｉｍａ  ＢｉｏＭｅｄ）である。ＩＭＰ７３１及び他の抗ＬＡＧ−３抗体は、国際公開第２００８／１３２６０１号パンフレット及び米国特許第９，２４４，０５９号明細書に開示されている。一実施形態において、抗ＬＡＧ−３抗体分子は、ＩＭＰ７３１のＣＤＲ配列の１つ以上（又はまとめてＣＤＲ配列の全て）、重鎖若しくは軽鎖可変領域配列又は重鎖若しくは軽鎖配列を含む。一実施形態において、抗ＬＡＧ−３抗体分子は、ＧＳＫ２８３１７８１のＣＤＲ配列の１つ以上（又はまとめてＣＤＲ配列の全て）、重鎖若しくは軽鎖可変領域配列又は重鎖若しくは軽鎖配列を含む。
【０９３３】
さらなる公知の抗ＬＡＧ−３抗体としては、例えば、国際公開第２００８／１３２６０１号パンフレット、国際公開第２０１０／０１９５７０号パンフレット、国際公開第２０１４／１４０１８０号パンフレット、国際公開第２０１５／１１６５３９号パンフレット、国際公開第２０１５／２００１１９号パンフレット、国際公開第２０１６／０２８６７２号パンフレット、米国特許第９，２４４，０５９号明細書、米国特許第９，５０５，８３９号明細書に記載されるものが挙げられる。
【０９３４】
一実施形態において、抗ＬＡＧ−３阻害剤は、例えば、国際公開第２００９／０４４２７３号パンフレットに開示されるような、可溶性ＬＡＧ−３タンパク質、例えばＩＭＰ３２１（Ｐｒｉｍａ  ＢｉｏＭｅｄ）である。
【０９３５】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、ＴＩＭ−３阻害剤と組み合わせて投与される。ある実施形態において、ＴＩＭ−３阻害剤は、ＭＧＢ４５３（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）又はＴＳＲ−０２２（Ｔｅｓａｒｏ）である。
【０９３６】
一実施形態において、ＴＩＭ−３阻害剤は、抗ＴＩＭ−３抗体分子である。一実施形態において、ＴＩＭ−３阻害剤は、米国特許出願公開第２０１５／０２１８２７４号明細書に開示されるような抗ＴＩＭ−３抗体分子である。
【０９３７】
一実施形態において、抗ＴＩＭ−３抗体分子は、ＴＳＲ−０２２（ＡｎａｐｔｙｓＢｉｏ／Ｔｅｓａｒｏ）である。一実施形態において、抗ＴＩＭ−３抗体分子は、ＴＳＲ−０２２のＣＤＲ配列の１つ以上（又はまとめてＣＤＲ配列の全て）、重鎖若しくは軽鎖可変領域配列又は重鎖若しくは軽鎖配列を含む。一実施形態において、抗ＴＩＭ−３抗体分子は、ＡＰＥ５１３７又はＡＰＥ５１２１のＣＤＲ配列の１つ以上（又はまとめてＣＤＲ配列の全て）、重鎖若しくは軽鎖可変領域配列又は重鎖若しくは軽鎖配列を含む。ＡＰＥ５１３７、ＡＰＥ５１２１及び他の抗ＴＩＭ−３抗体は、国際公開第２０１６／１６１２７０号パンフレットに開示されている。
【０９３８】
一実施形態において、抗ＴＩＭ−３抗体分子は、抗体クローンＦ３８−２Ｅ２である。一実施形態において、抗ＴＩＭ−３抗体分子は、Ｆ３８−２Ｅ２のＣＤＲ配列の１つ以上（又はまとめてＣＤＲ配列の全て）、重鎖若しくは軽鎖可変領域配列又は重鎖若しくは軽鎖配列を含む。
【０９３９】
さらなる公知の抗ＴＩＭ−３抗体としては、例えば、国際公開第２０１６／１１１９４７号パンフレット、国際公開第２０１６／０７１４４８号パンフレット、国際公開第２０１６／１４４８０３号パンフレット、米国特許第８，５５２，１５６号明細書、米国特許第８，８４１，４１８号明細書及び米国特許第９，１６３，０８７号明細書に記載されるものが挙げられる。
【０９４０】
一実施形態において、抗ＴＩＭ−３抗体は、ＴＩＭ−３における、本明細書に記載される抗ＴＩＭ−３抗体の１つと同じエピトープとの結合について競合し且つ／又は結合する抗体である。
【０９４１】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、形質転換成長因子β（ＴＧＦ−β）阻害剤と組み合わせて投与される。ある実施形態において、ＴＧＦ−β阻害剤は、フレゾリムマブ（ＣＡＳ登録番号９４８５６４−７３−６）である。フレゾリムマブは、ＧＣ１００８としても知られている。フレゾリムマブは、ＴＧＦ−βアイソフォーム１、２及び３に結合し、それを阻害するヒトモノクローナル抗体である。フレゾリムマブは、例えば、国際公開第２００６／０８６４６９号パンフレット、米国特許第８，３８３，７８０号明細書及び米国特許第８，５９１，９０１号明細書に開示されている。
【０９４２】
ある実施形態において、ＴＧＦ−β阻害剤は、ＸＯＭＡ  ０８９である。ＸＯＭＡ  ０８９は、ＸＰＡ．４２．０８９としても知られている。ＸＯＭＡ  ０８９は、ＴＧＦ−β１及び２リガンドに結合し、それを中和する完全ヒトモノクローナル抗体であり、ＰＣＴ公開番号国際公開第２０１２／１６７１４３号パンフレットに開示されている。
【０９４３】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、抗ＣＤ７３抗体分子と組み合わせて投与される。一実施形態において、抗ＣＤ７３抗体分子は、完全抗体分子又はその抗原結合フラグメントである。特定の実施形態において、抗ＣＤ７３抗体分子は、ＣＤ７３タンパク質に結合し、ＣＤ７３、例えばヒトＣＤ７３の活性を低下させ、例えばそれを阻害するか又はそれに拮抗する。
【０９４４】
一実施形態において、抗ＣＤ７３抗体分子は、国際公開第２０１６／０７５０９９号パンフレットに開示される抗ＣＤ７３抗体である。一実施形態において、抗ＣＤ７３抗体分子は、例えば、国際公開第２０１６／０７５０９９号パンフレットに開示されるようなＭＥＤＩ  ９４４７である。ＭＥＤＩ  ９４４７の代替名は、クローン１０．３又は７３ｃｏｍｂｏ３を含む。ＭＥＤＩ  ９４４７は、ＣＤ７３の活性を阻害する、例えばそれに拮抗するＩｇＧ１抗体である。ＭＥＤＩ  ９４４７及び他の抗ＣＤ７３抗体分子は、国際公開第２０１６／０７５１７６号パンフレット及び米国特許出願公開第２０１６／０１２９１０８号明細書にも開示されている。
【０９４５】
一実施形態において、抗ＣＤ７３抗体分子は、ＭＥＤＩ  ９４７７の重鎖可変ドメイン、軽鎖可変ドメイン又は両方を含む。
【０９４６】
一実施形態において、抗ＣＤ７３抗体分子は、国際公開第２０１６／０８１７４８号パンフレットに開示される抗ＣＤ７３抗体である。一実施形態において、抗ＣＤ７３抗体分子は、例えば、国際公開第２０１６／０８１７４８号パンフレットに開示されるような１１Ｆ１１である。１１Ｆ１１は、ＣＤ７３の活性を阻害する、例えばそれに拮抗するＩｇＧ２抗体である。１１Ｆ１１、例えばＣＤ７３．４及びＣＤ７３．１０に由来する抗体；１１Ｆ１１、例えば１１Ｆ１１−１及び１１Ｆ１１−２のクローン；並びに他の抗ＣＤ７３抗体分子が、国際公開第２０１６／０８１７４８号パンフレット及び米国特許第９，６０５，０８０号明細書に開示されている。
【０９４７】
一実施形態において、抗ＣＤ７３抗体分子は、１１Ｆ１１−１又は１１Ｆ１１−２の重鎖可変ドメイン、軽鎖可変ドメイン又は両方を含む。
【０９４８】
一実施形態において、抗ＣＤ７３抗体分子は、例えば、米国特許第９，６０５，０８０号明細書に開示される抗ＣＤ７３抗体である。
【０９４９】
一実施形態において、抗ＣＤ７３抗体分子は、例えば、米国特許第９，６０５，０８０号明細書に開示されるようなＣＤ７３．４である。一実施形態において、抗ＣＤ７３抗体分子は、ＣＤ７３．４の重鎖可変ドメイン、軽鎖可変ドメイン又は両方を含む。
【０９５０】
一実施形態において、抗ＣＤ７３抗体分子は、例えば、米国特許第９，６０５，０８０号明細書に開示されるようなＣＤ７３．１０である。一実施形態において、抗ＣＤ７３抗体分子は、ＣＤ７３．１０の重鎖可変ドメイン、軽鎖可変ドメイン又は両方を含む。
【０９５１】
一実施形態において、抗ＣＤ７３抗体分子は、国際公開第２００９／０２０３５３８号パンフレットに開示される抗ＣＤ７３抗体である。一実施形態において、抗ＣＤ７３抗体分子は、例えば、国際公開第２００９／０２０３５３８号パンフレットに開示されるような０６７−２１３である。
【０９５２】
一実施形態において、抗ＣＤ７３抗体分子は、０６７−２１３の重鎖可変ドメイン、軽鎖可変ドメイン又は両方を含む。
【０９５３】
一実施形態において、抗ＣＤ７３抗体分子は、米国特許第９，０９０，６９７号明細書に開示される抗ＣＤ７３抗体である。一実施形態において、抗ＣＤ７３抗体分子は、例えば、米国特許第９，０９０，６９７号明細書に開示されるようなＴＹ／２３である。一実施形態において、抗ＣＤ７３抗体分子は、ＴＹ／２３の重鎖可変ドメイン、軽鎖可変ドメイン又は両方を含む。
【０９５４】
一実施形態において、抗ＣＤ７３抗体分子は、国際公開第２０１６／０５５６０９号パンフレットに開示される抗ＣＤ７３抗体である。一実施形態において、抗ＣＤ７３抗体分子は、国際公開第２０１６／０５５６０９号パンフレットに開示される抗ＣＤ７３抗体の重鎖可変ドメイン、軽鎖可変ドメイン又は両方を含む。
【０９５５】
一実施形態において、抗ＣＤ７３抗体分子は、国際公開第２０１６／１４６８１８号パンフレットに開示される抗ＣＤ７３抗体である。一実施形態において、抗ＣＤ７３抗体分子は、国際公開第２０１６／１４６８１８号パンフレットに開示される抗ＣＤ７３抗体の重鎖可変ドメイン、軽鎖可変ドメイン又は両方を含む。
【０９５６】
一実施形態において、抗ＣＤ７３抗体分子は、国際公開第２００４／０７９０１３号パンフレットに開示される抗ＣＤ７３抗体である。一実施形態において、抗ＣＤ７３抗体分子は、国際公開第２００４／０７９０１３号パンフレットに開示される抗ＣＤ７３抗体の重鎖可変ドメイン、軽鎖可変ドメイン又は両方を含む。
【０９５７】
一実施形態において、抗ＣＤ７３抗体分子は、国際公開第２０１２／１２５８５０号パンフレットに開示される抗ＣＤ７３抗体である。一実施形態において、抗ＣＤ７３抗体分子は、国際公開第２０１２／１２５８５０号パンフレットに開示される抗ＣＤ７３抗体の重鎖可変ドメイン、軽鎖可変ドメイン又は両方を含む。
【０９５８】
一実施形態において、抗ＣＤ７３抗体分子は、国際公開第２０１５／００４４００号パンフレットに開示される抗ＣＤ７３抗体である。一実施形態において、抗ＣＤ７３抗体分子は、国際公開第２０１５／００４４００号パンフレットに開示される抗ＣＤ７３抗体の重鎖可変ドメイン、軽鎖可変ドメイン又は両方を含む。
【０９５９】
一実施形態において、抗ＣＤ７３抗体分子は、国際公開第２００７／１４６９６８号パンフレットに開示される抗ＣＤ７３抗体である。一実施形態において、抗ＣＤ７３抗体分子は、国際公開第２００７１４６９６８号パンフレットに開示される抗ＣＤ７３抗体の重鎖可変ドメイン、軽鎖可変ドメイン又は両方を含む。
【０９６０】
一実施形態において、抗ＣＤ７３抗体分子は、米国特許出願公開第２００７／００４２３９２号明細書に開示される抗ＣＤ７３抗体である。一実施形態において、抗ＣＤ７３抗体分子は、米国特許出願公開第２００７／００４２３９２号明細書に開示される抗ＣＤ７３抗体の重鎖可変ドメイン、軽鎖可変ドメイン又は両方を含む。
【０９６１】
一実施形態において、抗ＣＤ７３抗体分子は、米国特許出願公開第２００９／０１３８９７７号明細書に開示される抗ＣＤ７３抗体である。一実施形態において、抗ＣＤ７３抗体分子は、米国特許出願公開第２００９／０１３８９７７号明細書に開示される抗ＣＤ７３抗体の重鎖可変ドメイン、軽鎖可変ドメイン又は両方を含む。
【０９６２】
一実施形態において、抗ＣＤ７３抗体分子は、Ｆｌｏｃｋｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｕｒ  Ｊ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．１９９２  Ｊｕｎ；５８（１）：６２−７０に開示される抗ＣＤ７３抗体である。一実施形態において、抗ＣＤ７３抗体分子は、Ｆｌｏｃｋｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｕｒ  Ｊ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．１９９２  Ｊｕｎ；５８（１）：６２−７０に開示される抗ＣＤ７３抗体の重鎖可変ドメイン、軽鎖可変ドメイン又は両方を含む。
【０９６３】
一実施形態において、抗ＣＤ７３抗体分子は、Ｓｔａｇｇ  ｅｔ  ａｌ．，ＰＮＡＳ．２０１０  Ｊａｎ  １０７（４）：１５４７−１５５２に開示される抗ＣＤ７３抗体である。ある実施形態において、抗ＣＤ７３抗体分子は、Ｓｔａｇｇ  ｅｔ  ａｌ．に開示されるようなＴＹ／２３又はＴＹ１１．８である。一実施形態において、抗ＣＤ７３抗体分子は、Ｓｔａｇｇ  ｅｔ  ａｌに開示される抗ＣＤ７３抗体の重鎖可変ドメイン、軽鎖可変ドメイン又は両方を含む。
【０９６４】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、インターロイキン−１７（ＩＬ−１７）阻害剤と組み合わせて投与される。
【０９６５】
ある実施形態において、ＩＬ−１７阻害剤は、セクキヌマブ（ＣＡＳ登録番号８７５３５６−４３−７（重鎖）及び８７５３５６−４４−８（軽鎖））である。セクキヌマブは、ＡＩＮ４５７及びＣＯＳＥＮＴＹＸ（登録商標）としても知られている。セクキヌマブは、ＩＬ−１７Ａに特異的に結合する組み換えヒトモノクローナルＩｇＧ１／κ抗体である。それは、組み換えチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞株において発現される。セクキヌマブは、例えば、国際公開第２００６／０１３１０７号パンフレット、米国特許第７，８０７，１５５号明細書、米国特許第８，１１９，１３１号明細書、米国特許第８，６１７，５５２号明細書及び欧州特許第１７７６１４２号明細書に記載されている。
【０９６６】
ある実施形態において、ＩＬ−１７阻害剤は、ＣＪＭ１１２である。ＣＪＭ１１２は、ＸＡＢ４としても知られている。ＣＪＭ１１２は、ＩＬ−１７Ａを標的とする（例えば、ＩｇＧ１／κアイソタイプの）完全ヒトモノクローナル抗体である。ＣＪＭ１１２は、例えば、国際公開第２０１４／１２２６１３号パンフレットに開示されている。
【０９６７】
ＣＪＭ１１２は、ヒト、カニクイザル、マウス及びラットＩＬ−１７Ａに結合し、インビトロ及びインビボでこれらのサイトカインの生物活性を中和することができる。ＩＬ−１７ファミリーのメンバーであるＩＬ−１７Ａは、乾癬及び癌などの多くの免疫介在疾患において重要な役割を果たすことが示されている主要な炎症性サイトカインである（Ｗｉｔｏｗｓｋｉ  ｅｔ  ａｌ．（２００４）Ｃｅｌｌ  Ｍｏｌ．Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉ．ｐ．５６７−７９；Ｍｉｏｓｓｅｃ  ａｎｄ  Ｋｏｌｌｓ（２０１２）Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖ．ｐ．７６３−７６）。
【０９６８】
ある実施形態において、ＩＬ−１７阻害剤は、イキセキズマブ（ＣＡＳ登録番号１１４３５０３−６９−８）である。イキセキズマブは、ＬＹ２４３９８２１としても知られている。イキセキズマブは、ＩＬ−１７Ａに標的とするヒト化ＩｇＧ４モノクローナル抗体である。イキセキズマブは、例えば、国際公開第２００７／０７０７５０号パンフレット、米国特許第７，８３８，６３８号明細書及び米国特許第８，１１０，１９１号明細書に記載されている。
【０９６９】
ある実施形態において、ＩＬ−１７阻害剤は、ブロダルマブ（ＣＡＳ登録番号１１７４３９５−１９−７）である。プロダルマブは、ＡＭＧ  ８２７又はＡＭ−１４としても知られている。ブロダルマブは、インターロイキン−１７受容体Ａ（ＩＬ−１７ＲＡ）に結合し、ＩＬ−１７が受容体を活性化するのを防ぐ。ブロダルマブは、例えば、国際公開第２００８／０５４６０３号パンフレット、米国特許第７，７６７，２０６号明細書、米国特許第７，７８６，２８４号明細書、米国特許第７，８３３，５２７号明細書、米国特許第７，９３９，０７０号明細書、米国特許第８，４３５，５１８号明細書、米国特許第８，５４５，８４２号明細書、米国特許第８，７９０，６４８号明細書及び米国特許第９，０７３，９９９号明細書に開示されている。
【０９７０】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、インターロイキン−１β（ＩＬ−１β）阻害剤と組み合わせて投与される。
【０９７１】
ある実施形態において、ＩＬ−１β阻害剤は、カナキヌマブである。カナキヌマブは、ＡＣＺ８８５又はＩＬＡＲＩＳ（登録商標）としても知られている。カナキヌマブは、ヒトＩＬ−１βの生物活性を中和するヒトモノクローナルＩｇＧ１／κ抗体である。カナキヌマブは、例えば、国際公開第２００２／１６４３６号パンフレット、米国特許第７，４４６，１７５号明細書及び欧州特許第１３１３７６９号明細書に開示されている。
【０９７２】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、ＣＤ３２Ｂ阻害剤と組み合わせて投与される。ある実施形態において、ＣＤ３２Ｂ阻害剤は、抗ＣＤ３２Ｂ抗体分子である。例示的な抗ＣＤ３２Ｂ抗体分子は、米国特許第８１８７５９３号明細書、米国特許第８７７８３３９号明細書、米国特許第８８０２０８９号明細書、米国特許第２００６００７３１４２号明細書、米国特許第２０１７０１９８０４０号明細書及び米国特許第２０１３０２５１７０６号明細書に開示されている。
【０９７３】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、表Ａに列挙される化合物の１つと組み合わせて投与される。
【０９７４】
【表９８】
2021525715.tif 000183
【０９７５】
【表９９】
2021525715.tif 000184
【０９７６】
【表１００】
2021525715.tif 000185
【０９７７】
【表１０１】
2021525715.tif 000186
【０９７８】
【表１０２】
2021525715.tif 000187
【０９７９】
【表１０３】
2021525715.tif 000188
【０９８０】
【表１０４】
2021525715.tif 000189
【０９８１】
【表１０５】
2021525715.tif 000190
【０９８２】
【表１０６】
2021525715.tif 000191
【０９８３】
【表１０７】
2021525715.tif 000192
【０９８４】
【表１０８】
2021525715.tif 000193
【０９８５】
【表１０９】
2021525715.tif 000194
【０９８６】
【表１１０】
2021525715.tif 000195
【０９８７】
【表１１１】
2021525715.tif 000196
【０９８８】
【表１１２】
2021525715.tif 000197
【０９８９】
【表１１３】
2021525715.tif 000198
【０９９０】
【表１１４】
2021525715.tif 000199
【０９９１】
【表１１５】
2021525715.tif 000200
【０９９２】
【表１１６】
2021525715.tif 000201
【０９９３】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、ＣＡＲ−Ｔ治療、ＮＩＺ９８５、ＧＩＴＲアゴニスト、例えばＧＷＮ３２３、ＰＴＫ７８７、ＭＢＧ４５３、ｍＡｂ１２４２５、ＣＬＲ４５７、ＢＧＴ２２６、ＢＹＬ７１９、ＡＭＮ１０７、ＡＢＬ００１、ＩＤＨ３０５／ＬＱＳ３０５、ＬＪＭ７１６、ＭＣＳ１１０、ＷＮＴ９７４／ＬＧＫ９７４、ＢＬＺ９４５、ＮＩＲ１７８、ＱＢＭ０７６、ＭＢＧ４５３、ＣＧＳ−２０２６７、ＬＨＳ５３４、ＬＫＧ９６０、ＬＤＭ０９９／ＳＨＰ０９９、ＴＮＯ１５５、ＬＣＬ１６１、ＭＡＰ８５５／ＬＱＮ７１６、ＲＡＤ００１、ＬＥＪ５１１、ＬＤＫ３７８、ＬＯＵ０６４、ＬＳＺ１０２、ＬＥＱ５０６、ＲＡＦ２６５／ＣＨＩＲ２６５、カナキヌマブ、ゲボキズマブ、アナキンラ、リロナセプト、ＣＧＳ−２０２６７、ＰＳＣ８３３、ＧＧＰ−５７１４８Ｂ、ＣＧＭ０９７、ＨＤＭ２０１、ＬＢＨ５８９、ＰＫＣ４１２、ＬＨＣ１６５、ＭＡＫ６８３、ＩＮＣ２８０、ＩＮＣ４２４、ＬＪＥ７０４、ＬＡＧ５２５及びＮＩＳ７９３の１つ以上と組み合わせて投与される。
【０９９４】
ある実施形態において、ＢＣＭＡ結合分子は、標準治療と組み合わせて投与される。
【０９９５】
多発性骨髄腫及び関連疾患のための標準治療としては、化学療法、幹細胞移植（自己又は同種）、放射線療法及び他の薬物療法が挙げられる。よく使用される抗骨髄腫薬物としては、アルキル化剤（例えば、ベンダムスチン、シクロホスファミド及びメルファラン）、プロテアソーム阻害剤（例えば、ボルテゾミブ）、コルチコステロイド（例えば、デキサメタゾン及びプレドニゾン）及び免疫調節剤（例えば、サリドマイド及びレナリドミド又はＲｅｖｌｉｍｉｄ（登録商標））又はそれらの任意の組合せが挙げられる。ビスホスホネート系薬剤も、骨量の減少を防ぐために、標準抗ＭＭ治療と組み合わせてよく投与される。６５〜７０歳を超える患者は、幹細胞移植の候補になる可能性が低い。ある場合には、２回の自己幹細胞移植が、１回目の移植に対する準最適な応答を有する６０歳未満の患者のための選択肢である。本開示の組成物及び方法は、多発性骨髄腫のための現在処方される治療薬のいずれか１つと組み合わせて投与され得る。
【０９９６】
ホジキンリンパ腫は、放射線療法、化学療法又は造血幹細胞移植で一般的に治療される。非ホジキンリンパ腫のための最も一般的な治療は、Ｒ−ＣＨＯＰであり、これは、４つの異なる化学療法剤（シクロホスファミド、ドキソルビシン、ビンクリスチン及びプレドニゾロン）及びリツキシマブ（Ｒｉｔｕｘａｎ（登録商標））からなる。ＮＨＬを治療するのに一般的に使用される他の治療としては、他の化学療法剤、放射線療法、幹細胞移植（自己又は同種骨髄移植）又は生物学的療法、例えば免疫療法が挙げられる。生物学的治療剤の他の例としては、限定はされないが、リツキシマブ（Ｒｉｔｕｘａｎ（登録商標））、トシツモマブ（Ｂｅｘｘａｒ（登録商標））、エプラツズマブ（ＬｙｍｐｈｏＣｉｄｅ（登録商標））及びアレムツズマブ（ＭａｂＣａｍｐａｔｈ（登録商標））が挙げられる。本開示の組成物及び方法は、ホジキンリンパ腫又は非ホジキンリンパ腫のための現在処方される治療薬のいずれか１つと組み合わせて投与され得る。
【０９９７】
ＷＭの標準治療は、特に、リツキシマブ（Ｒｉｔｕｘａｎ（登録商標））による化学療法からなる。クロラムブシル（Ｌｅｕｋｅｒａｎ（登録商標））、シクロホスファミド（Ｎｅｏｓａｒ（登録商標））、フルダラビン（Ｆｌｕｄａｒａ（登録商標））、クラドリビン（Ｌｅｕｓｔａｔｉｎ（登録商標））、ビンクリスチン及び／又はサリドマイドなどの他の化学療法剤は、組み合わせて使用され得る。プレドニゾンなどのコルチコステロイドも、化学療法と組み合わせて投与され得る。プラスマフェレーシス又は血漿交換が、血液からパラプロテインを除去することによっていくつかの症状を軽減するために、患者の治療全体を通して一般的に使用される。ある場合には、幹細胞移植は、一部の患者のための選択肢である。
【０９９８】
ＢＣＭＡ及びＣＤ３に対して二重特異性であるＢＣＭＡ結合分子は、ＢＣＭＡ及びＣＤ３に対して二重特異性であるＢＣＭＡ結合分子の投与に関連する副作用を軽減又は改善する薬剤と組み合わせて投与され得る。二重特異性ＢＣＭＡ結合分子の投与に関連する副作用は、限定はされないが、サイトカイン放出症候群（「ＣＲＳ」）及びマクロファージ活性化症候群（ＭＡＳ）とも呼ばれる血球貪食性リンパ組織症（ＨＬＨ）を含み得る。ＣＲＳの症状は、高熱、吐き気、一過性低血圧、低酸素症などを含み得る。ＣＲＳは、発熱、疲労、食欲不振、筋肉痛、関節痛、吐き気、嘔吐及び頭痛などの臨床的全身兆候及び症状を含み得る。ＣＲＳは、発疹などの臨床的皮膚兆候及び症状を含み得る。ＣＲＳは、吐き気、嘔吐及び下痢などの臨床的消化管兆候及び症状を含み得る。ＣＲＳは、頻呼吸及び低酸素症などの臨床的呼吸器兆候及び症状を含み得る。ＣＲＳは、頻拍、脈圧拡大、低血圧、心拍出量増加（早期）及び心拍出量の潜在的な低下（後期）などの臨床的心血管兆候及び症状を含み得る。ＣＲＳは、Ｄ−ダイマーの上昇、出血を伴う又は伴わない低フィブリノゲン血症などの臨床的凝固兆候及び症状を含み得る。ＣＲＳは、高窒素血症などの臨床的腎臓兆候及び症状を含み得る。ＣＲＳは、高トランスアミナーゼ血症及び高ビリルビン血症などの臨床的肝臓兆候及び症状を含み得る。ＣＲＳは、頭痛、精神状態の変化、混乱、せん妄、喚語困難又は明らかな失語症、幻覚、振戦、ディスメトリア、異常歩行及び発作などの臨床的神経兆候及び症状を含み得る。
【０９９９】
したがって、本明細書に記載される方法は、本明細書に記載されるＢＣＭＡ及びＣＤ３に対して二重特異性であるＢＣＭＡ結合分子を、対象に投与し、ＢＣＭＡ及びＣＤ３に対して二重特異性であるＢＣＭＡ結合分子による処置に起因する可溶性因子のレベル増加を管理するための１つ以上の薬剤をさらに投与することを含み得る。一実施形態において、対象において増加する可溶性因子は、ＩＦＮ−γ、ＴＮＦα、ＩＬ−２及びＩＬ−６の１つ以上である。一実施形態において、対象において増加する因子は、ＩＬ−１、ＧＭ−ＣＳＦ、ＩＬ−１０、ＩＬ−８、ＩＬ−５及びフラクタルカインの１つ以上である。したがって、この副作用を治療するために投与される薬剤は、これらの可溶性因子の１つ以上を中和する薬剤であり得る。一実施形態において、これらの可溶性形態の１つ以上を中和する薬剤は、抗体又はその抗原結合フラグメントである。このような薬剤の例としては、限定はされないが、ステロイド（例えば、コルチコステロイド）、ＴＮＦαの阻害剤、及びＩＬ−１Ｒの阻害剤、及びＩＬ−６の阻害剤が挙げられる。ＴＮＦα阻害剤の一例は、インフリキシマブ、アダリムマブ、セルトリズマブペゴール及びゴリムマブなどの抗ＴＮＦα抗体分子である。ＴＮＦα阻害剤の別の例は、エンタネルセプトなどの融合タンパク質である。ＴＮＦαの小分子阻害剤としては、限定はされないが、キサンチン誘導体（例えば、ペントキシフィリン）及びブプロピオンが挙げられる。ＩＬ−６阻害剤の一例は、トシリズマブ（ｔｏｃ）、サリルマブ、エルシリモマブ、ＣＮＴＯ  ３２８、ＡＬＤ５１８／ＢＭＳ−９４５４２９、ＣＮＴＯ  １３６、ＣＰＳＩ−２３６４、ＣＤＰ６０３８、ＶＸ３０、ＡＲＧＸ−１０９、ＦＥ３０１及びＦＭ１０１などの抗ＩＬ−６抗体分子である。一実施形態において、抗ＩＬ−６抗体分子は、トシリズマブである。ＩＬ−１Ｒ系阻害剤の一例は、アナキンラである。
【１０００】
ある実施形態において、対象は、例えば、特にメチルプレドニゾロン、ヒドロコルチゾンなどのコルチコステロイドを投与される。ある実施形態において、対象は、ＣＲＳリスクを軽減するために、ＢＣＭＡ及びＣＤ３に対して二重特異性であるＢＣＭＡ結合分子の投与の前に、Ｂｅｎａｄｒｙｌ及びＴｙｌｅｎｏｌと組み合わせて、コルチコステロイド、例えばメチルプレドニゾロン、ヒドロコルチゾンを投与される。
【１００１】
ある実施形態において、対象は、例えば、ノルエピネフリン、ドーパミン、フェニレフリン、エピネフリン、バソプレシン又はそれらの任意の組合せなどの昇圧剤を投与される。
【１００２】
一実施形態において、対象は、解熱剤を投与され得る。一実施形態において、対象は、鎮痛剤を投与され得る。
【１００３】
しかしながら、ある場合には、二重特異性抗体を含む抗体ベースの治療法が、大量のサイトカイン放出を誘発し、ＣＲＳを管理し得る薬剤による同時投与又は処置を用いてもＣＲＳをもたらし得ることが知られている。ある場合には、ＣＲＳは、生命に関わる及び／又は死を引き起こすほど重度でもあり得る。Ｓｈｉｍａｂｕｋｕｒｏ−Ｖｏｒｎｈａｇｅｎ，Ａ．ｅｔ  ａｌ．，２０１８，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ  Ｃａｎｃｅｒ．６：５６を参照されたい。したがって、より少ないサイトカイン放出を誘発するが、同時にその有効性を保持及び／又は改善する抗体ベースの治療法の開発が必要とされている。
【実施例】
【１００４】
８．１．実施例１：ファージディスプレイを用いた抗ＢＣＭＡ抗体の単離
８．１．１．概説
ＢＣＭＡは、形質細胞並びに他のＢ細胞悪性腫瘍、特に多発性骨髄腫において発現される細胞表面受容体である。有効な医薬品開発のために、非臨床的な薬物動態及び毒性研究のために、ヒト抗原並びにモデル非ヒト霊長類種（カニクイザルなど）における対応する抗原の両方と交差反応性である抗体を有することは非常に望ましい。
【１００５】
８．１．２．材料及び方法
８．１．２．１．パニング
ヒト及びカニクイザルＢＣＭＡの両方と交差反応性である抗体を発見するために、ヒト抗体フラグメントを含むナイーブファージライブラリーを、標準的な手順を用いて、組み換えヒト及びカニクイザルＢＣＭＡ抗原に対してパニングした。簡潔に述べると、Ｆｃ−タグ化ヒトＢＣＭＡ（ｃａｔ＃  ＢＣ７−Ｈ５２５４）及びカニクイザルＢＣＭＡ（ｃａｔ＃  ＢＣＡ−Ｃ５２５３）タンパク質を、ＡＣＲＯ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ（Ｎｅｗａｒｋ，ＤＥ）から購入し、社内でビオチン化した。
【１００６】
第１回のパニングにおいて、ナイーブファージプールを再懸濁させ、ストレプトアビジンＤｙｎａｂｅａｄｓ（ｃａｔ  ＃  Ｍ−２８０、Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ）上に捕捉されたビオチン化ヒトＦｃ（ｃａｔ  ＃００９−０６０−００８，Ｊａｃｋｓｏｎ  ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ，Ｗｅｓｔ  Ｇｒｏｖｅ，ＰＡ）を用いて３回除去した。次に、ファージプールを２つに分割し、５倍過剰の非ビオチン化ヒトＦｃ（ｃａｔ  ＃００９−０００−００８，Ｊａｃｋｓｏｎ  ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ，Ｗｅｓｔ  Ｇｒｏｖｅ，ＰＡ）の存在下で、Ｄｙｎａｂｅａｄｓ上に捕捉された４０μｇのビオチン化ヒト又はｃｙｎｏ  ＢＣＭＡ−Ｆｃのいずれかに対してパニングした。捕捉されたファージを６０分間インキュベートし、洗浄緩衝液（ＰＢＳ＋２％のミルク＋１％のＢＳＡ＋０．０５％のＴｗｅｅｎ  ２０）で１０回洗浄し、２００μＬの溶出緩衝液（Ｐｉｅｒｃｅ  ＩｇＧ  Ｅｌｕｔｉｏｎ  Ｂｕｆｆｅｒ，ｃａｔ＃  ２１００４，Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ）による処理によってビーズから溶出させた。次に、溶出されたファージを、２０μＬの中和緩衝液（１ＭのトリスｐＨ９、ｃａｔ＃  Ｔ１０９０，Ｔｅｋｎｏｖａ，Ｈｏｌｌｉｓｔｅｒ，ＣＡ）による処理によって中和した。溶出及び中和工程を１回繰り返し、溶出液を組み合わせて、それを用いて、２ＹＴ培地（ｃａｔ＃  Ｙ０１６７，Ｔｅｋｎｏｖａ，Ｈｏｌｌｉｓｔｅｒ，ＣＡ）中で培養された１０ｍＬのＥＲ２７３８細胞（ｃａｔ＃  ６０５２２，Ｌｕｃｉｇｅｎ，Ｍｉｄｄｌｅｔｏｎ，ＷＩ）を感染させた。別個の培養物を、ヒト又はｃｙｎｏ  ＢＣＭＡに対してスクリーニングされるファージプールのために維持した。感染させたＥＲ２７３８細胞を、３７℃で３０分間インキュベートし、次に、１００μｇ／ｍＬのカルベニシリン（ｃａｔ  ＃Ｃ２１１２，Ｔｅｋｎｏｖａ，Ｈｏｌｌｉｓｔｅｒ，ＣＡ）を含有する２５ｍＬの２ＹＴ緩衝液に加えた。次に、過剰なＭ１３Ｋ０７ヘルパーファージ（ｃａｔ＃  Ｎ０３１５Ｓ，Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｂｉｏｌａｂｓ，Ｉｐｓｗｉｃｈ，ＭＡ）を培地に加え、得られた培養物を、３７℃で一晩成長させた。培養上清を遠心分離によって採取し、デカントし、増幅したファージを、ＰＥＧ／ＮａＣｌ（ＰＥＧ  ６０００／２．５ＭのＮａＣｌ、ｃａｔ＃  Ｐ４１６８，Ｔｅｋｎｏｖａ，Ｈｏｌｌｉｓｔｅｒ，ＣＡ）による沈殿、遠心分離及びＰＢＳ中での再懸濁によって上清から回収した。
【１００７】
第２回のパニングにおいて、第１回のアウトプットプールのそれぞれからの約１×１０１３個のファージを、より低い濃度の捕捉された抗原（Ｄｙｎａｂｅａｄｓ上に捕捉された１５μｇのビオチン化ヒト又はｃｙｎｏ  ＢＣＭＡ−Ｆｃのいずれか）を用いて、別の抗原に対してパニングした（第１回においてヒトＢＣＭＡに対してパニングされたファージを用いて、第２回においてｃｙｎｏ  ＢＣＭＡに対してパニングし、逆も同様である）。残りのプロトコルは、Ｆｃ除去工程を含め、第１回のパニングでしたがったプロトコルと一致していた。
【１００８】
第３回のパニングにおいて、パニングの両方のプールからのアウトプットファージを組み合わせて、Ｓｅｒａ−Ｍａｇ  ＳｐｅｅｄＢｅａｄ  Ｎｅｕｔｒａｖｉｄｉｎ（ｃａｔ  ＃７８１５−２１０４−０１１１５０，Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ）上に捕捉された１μｇのヒトＢＣＭＡ−Ｈｉｓ−ＡＰＰ−Ａｖｉ（表１２）に対してパニングした。残りのプロトコルは、Ｆｃ除去工程並びに非標識Ｓｅｒａ−Ｍａｇ  ＳｐｅｅｄＢｅａｄ  Ｎｅｕｔｒａｖｉｄｉｎビーズを用いたさらなる除去工程を含め、第１回及び第２回のパニングでしたがったプロトコルと一致していた。
【１００９】
第４回のパニングにおいて、第３回からのアウトプットファージを、Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ａ  Ｄｙｎａｂｅａｄｓ（ｃａｔ  ＃１０００１Ｄ，Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ）上に捕捉された１μｇのｃｙｎｏ  ＢＣＭＡ−Ｆｃ（ｃａｔ  ＃９０１０３−Ｃ０２Ｈ−５０，Ｓｉｎｏ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ，Ｂｅｉｊｉｎｇ，Ｃｈｉｎａ）に対してパニングした。残りのプロトコルは、Ｆｃ除去工程並びに非標識Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ａ  Ｄｙｎａｂｅａｄｓを用いたさらなる除去工程を含め、第１回、第２回及び第３回のパニングでしたがったプロトコルと一致していた。
【１０１０】
８．１．２．２．配列エンリッチメント及びファージＥＬＩＳＡに基づくスクリーニング
約４００の単一ファージコロニーを、第４回のパニングアウトプットから取り、Ｍ１３リバースプライマーを用いてシーケンシングした。上位５つの富化されたクローン及びいくつかのシングレットクローン（ＰＩ−２６、ＰＩ−２８、ＰＩ−６１、ＰＩＩＩ−７８、ＰＩＩＩ−７９、ＰＩＶ−２４、ＰＩ−４５、ＰＩＩ−４５、ＰＩＩ−５５）を、ファージＥＬＩＳＡのためのファージとして増幅及びレスキューするために選択した。シングレットクローンを、第３回のパニング後に富化されたダブレット（最も高度なエンリッチメント）及び第４回のパニング後のシングレットに基づいて選択した。
【１０１１】
３つのストレプトアビジンで被覆されたＮＵＮＣ透明平底９６ウェルプレート（ｃａｔ  ＃４３６０１４，Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ）をそれぞれｄＰＢＳ中１μｇ／ｍＬで、社内でビオチン化したＦｃ−タグ化ヒトＢＣＭＡ（ｃａｔ＃  ＢＣ７−Ｈ５２５４、ＡＣＲＯ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ，Ｎｅｗａｒｋ，ＤＥ）、ヒトＢＣＭＡ−Ｈｉｓ−ＡＰＰ−Ａｖｉ及びビオチン化ヒトＩｇＧ１  Ｆｃ（ｃａｔ  ＃００９−０６０−００８，Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｉｍｍｕｎｏｒｅｓｅａｒｃｈ，Ｗｅｓｔ  Ｇｒｏｖｅ，ＰＡ）で被覆した。ＮＵＮＣ  Ｍａｘｉｓｏｒｐ透明平底９６ウェルプレート（ｃａｔ  ＃４４２４０４，Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ）を、ｄＰＢＳ中１μｇ／ｍＬで、Ｆｃ−タグ化カニクイザルＢＣＭＡ（ｃａｔ＃  ＢＣＡ−Ｃ５２５３，ＡＣＲＯ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ，Ｎｅｗａｒｋ，ＤＥ）で被覆した。プレートを、２〜８℃で一晩インキュベートした。
【１０１２】
抗原で被覆されたプレートを、ＰＢＳ、Ｔｗｅｅｎ２０で、ＢｉｏＴｅｋプレートウォッシャー（ＥＬ４０６，ＢｉｏＴｅｋ，Ｗｉｎｏｏｓｋｉ，ＶＴ）において洗浄し、３００μＬ／ウェルのブロッキングバッファー（ｄＰＢＳ、５％のＢＳＡ、０．０５％のポリソルベート２０、０．０１％のｄ−ビオチン）で２時間にわたってブロックした。プレートを再度洗浄し、１００μＬ／ウェルの滴定されたファージサンプルを加え、室温で２時間インキュベートした。プレートを、ファージサンプルインキュベーション後に洗浄し、５０μＬ／ウェルの１：５０００希釈されたＨＲＰコンジュゲート抗Ｍ１３検出抗体（ｃａｔ  ＃２７−９４２１−０１，ＧＥ，Ｐｉｓｔａｃａｗａｙ，ＮＪ）を、室温で３０分間インキュベートした。プレートを洗浄し、ＥＬＩＳＡを、１００μＬ／ウェルの１成分ペルオキシダーゼ基質（ｃａｔ  ＃５０−７７−０４，ＳｅｒａＣａｒｅ，Ｍｉｌｆｏｒｄ，ＭＡ）を分配し、５０μＬ／ウェルの１ＮのＨＣｌで反応をクエンチすることによって発色させた。４５０ｎｍ吸光度を、ＥｎＶｉｓｉｏｎ  Ｐｌａｔｅ  Ｒｅａｄｅｒ（２１０５−００１０，Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ，Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ）で読み取った。
【１０１３】
８．１．３．結果
各モノクローナルファージ力価測定についてのＥＬＩＳＡデータが、図２に示される。５つ全ての富化されたクローンは、Ｆｃ−タグ化又はＨｉｓ−ＡＰＰ−Ａｖｉ−タグ化形式のいずれかでヒトＢＣＭＡへの強固な結合を示した。クローンＰＩ−２６及びＰＩ−６１は、Ｆｃ−タグ化ｃｙｎｏ  ＢＣＭＡとＦｃ−タグ化ヒトＢＣＭＡとの間で同等レベルの結合を示した。クローンＰＩ−２８及びＰＩＩＩ−７９は、Ｆｃ−タグ化ｃｙｎｏ  ＢＣＭＡ並びにヒトＢＣＭＡへの結合を示したが、ｃｙｎｏ  ＢＣＭＡへの結合についてのシグナルは、ヒトＢＣＭＡの前に力価が低下し、これは、より低い結合親和性を示す。クローンＰＩＩＩ−７８は、Ｆｃ−タグ化ｃｙｎｏ  ＢＣＭＡ並びにＦｃタグ単独への残留レベルの結合を示し、これは、ｃｙｎｏへのある程度の非特異的結合及び最小の交差反応性を示唆している。４つ全てのシングレットクローンは、Ｆｃ−タグ化ヒトＢＣＭＡへの最も強い結合を示したが、クローンＰＩＩ−５５及びＰＩＩ−４５に対する親和性並びにクローンＰＩ−４５及びＰＩＶ−２４についての信号振幅に関してＦｃ−タグ化ｃｙｎｏ  ＢＣＭＡへのより弱い結合を示した。非特異的Ｆｃ結合は、４つ全てで最小であった。ヒト及びｃｙｎｏ  ＢＣＭＡへのそれらの同等の結合のため、クローンＰＩＩＩ−７８のみが、このスクリーンから除外され、残りの８つのクローン、ＰＩ−２６、ＰＩ−６１、ＰＩ−２８、ＰＩＩＩ−７９、ＰＩ−４５、ＰＩＩ−４５、ＰＩＩ−５５、ＰＩＶ−２４を、潜在的な有力候補として特定し、二重特異性抗体に変換した。
【１０１４】
【表１１７】
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【１０１５】
８．２．実施例２：酵母ディスプレイを用いたＰＩ−６１の親和性成熟
８．２．１．概説
実施例１に詳述されるように、ＰＩ−６１抗体は、表面プラズモン共鳴によって決定される際、ヒトＢＣＭＡ（ＫＤ  約３４ｎＭ）と比較してカニクイザルＢＣＭＡに対してより低い親和性（ＫＤ  約２４０ｎＭ）を有していた。医薬品開発のために、ヒト及びカニクイザル抗原の両方に対する同等の親和性並びにより高い全体的な結合親和性を有することが望ましいであろう。親和性を改善するために、４つのＣＤＲ領域における突然変異を特徴付ける３つの変異体ライブラリーを合成し、酵母の表面に提示させ、ヒト及びカニクイザルＢＣＭＡへのより高い結合親和性を有するＰＩ−６１の変異体を単離するようにスクリーニングした。
【１０１６】
８．２．２．ライブラリー１構築及びスクリーニング：ＣＤＲ  Ｈ２／ＣＤＲ  Ｌ２変異体
ＰＩ−６１のＣＤＲ  Ｈ２及びＣＤＲ  Ｌ２領域（表１３に示される）が、医薬品開発に望ましくない、ヒト生殖系列由来の変異の領域及び推定上のアスパラギン酸異性化部位（ＤＧ）を含有するため、突然変異誘発のために選択された。ＣＤＲ  Ｈ２の５７〜６４位（ＳＹＤＧＳＮ、（配列番号１４１））（ＩＭＧＴ番号付け）並びにＣＤＲ  Ｌ２の５６〜５７位（ＤＶ）及び６８〜６９位（ＰＳ）に突然変異を有するＤＮＡライブラリーを設計した。
【１０１７】
作製される第１のライブラリーは、ＣＤＲ  Ｌ２であった。Ｌ２ライブラリーで修飾されたＰＩ−６１  ｓｃＦｖに対応する合成ＤＮＡを、ｐＹＵＮＢＣ４酵母発現ベクターからのベクターＤＮＡと組み合わせて、Ｇａｌ１プロモーターの制御下で、Ａｇａ１タンパク質を過剰発現する酵母株にエレクトロポレートして、相同的組み換え及び最終的なライブラリーの組み立てを可能にした。
【１０１８】
第１回のスクリーニングでは、Ｌ２酵母ライブラリーを、４００ｍＬのＳＤ−ｕｒａブロス（Ｃｌｏｎｔｅｃｈ，Ｍｏｕｎｔａｉｎ  Ｖｉｅｗ，ＣＡ）中で３日間にわたって２０℃で成長させ、次に、５０００×ｇで５分間遠心分離することによってペレット化した。上清を除去し、酵母ペレットを、１％のラフィノース及び２％のガラクトース（Ｃｌｏｎｔｅｃｈ，Ｍｏｕｎｔａｉｎ  Ｖｉｅｗ，ＣＡ）を含む４００ｍＬのＳＤ−ｕｒａブロス中で再懸濁させ、２２時間にわたって２０℃で成長させて、発現を誘導した。培養物をペレット化し、上清を除去し、ペレットを、ＰＢＳＭ（１％のＢＳＡ（ウシ血清アルブミン）及び２ｍＭのＥＤＴＡを含むＰＢＳ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ））で１回洗浄し、次に、１５ｍＬのＰＢＳＭ中で再懸濁させた。Ｌ２ライブラリーを、１０分間にわたって３７℃で熱処理し、４Ｃに冷却し、次に、１５分間にわたってストレプトアビジン及び抗ビオチン電磁ビーズ（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ）を用いて除去し、ビーズを、ＭＡＣＳ  ＬＳカラム（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ）を用いて除去し、洗浄した。次に、酵母ライブラリーを、１０ｎＭのビオチン化ヒトＢＣＭＡ（配列が表１２に示される）を含有する３５ｍＬのＰＢＳＭ中で再懸濁させ、室温で１時間インキュベートした。酵母をペレット化し、ＰＢＳＭで２回洗浄し、１００μＬのストレプトアビジン電磁ビーズを含む１０ｍＬのＰＢＳＭ中で再懸濁させ、４℃で５分間インキュベートし、ペレット化し、１５ｍＬのＰＢＳＭ中で再懸濁させ、ＭＡＣＳ  ＬＳカラム上で分離させた。捕捉された細胞を、ＰＢＳＭで洗浄し、溶出させ、２％のグルコースを含む１０ｍＬのＳＤ−ｕｒａブロスに加え、一晩振とうしながら３０Ｃで成長させた。
【１０１９】
第１回の選択からのＬ２ライブラリーアウトプットを、Ｈ２ライブラリーの構築のための鋳型として使用した。ＶＨドメインにおける増加したＣＤＲ  Ｈ２多様性を有する合成ＤＮＡを、Ｌ２ライブラリーアウトプットからのベクターＤＮＡと組み合わせて、酵母にエレクトロポレートした。ＣＤＲ  Ｌ２及びＣＤＲ  Ｈ２における多様性を組み合わせた、この得られたライブラリーは、以後、ライブラリーＬ２／Ｈ２と呼ばれるものとする。
【１０２０】
第２回のスクリーニングでは、Ｌ２／Ｈ２ライブラリーを培養し、第１回のスクリーニングについて記載されるように発現を誘導し、同様に、ストレプトアビジン及び抗ビオチン電磁ビーズに対して除去した。Ｌ２／Ｈ２ライブラリーを、１０分間にわたって３４℃で熱処理し、４Ｃに冷却し、ＰＢＳＭ中で再懸濁させ、室温で１時間にわたって２５ｎＭのビオチン化ヒトＢＣＭＡとともにインキュベートした。酵母をペレット化し、ＰＢＳＭで２回洗浄し、２００ｕＬのストレプトアビジン電磁ビーズを含む１０ｍＬのＰＢＳＭ中で再懸濁させ、４℃で５分間インキュベートし、ペレット化し、１５ｍＬのＰＢＳＭ中で再懸濁させ、ＭＡＣＳ  ＬＳカラム上で分離させた。捕捉された細胞をＰＢＳＭで洗浄し、溶出させ、１％のラフィノース、２％のガラクトースを含む５０ｍＬのＳＤ−ｕｒａブロスに加え、２３℃で２４時間インキュベートした。
【１０２１】
第３回のスクリーニングでは、第２回のアウトプットからの酵母をペレット化し、洗浄し、ＰＢＳＭ中で再懸濁させ、室温で１時間にわたって１ｎＭのｃｙｎｏ  ＢＣＭＡ−ＡＰＰ−Ａｖｉ（表１３）とともにインキュベートした。酵母をペレット化し、ＰＢＳＭで２回洗浄し、５０ｕＬのストレプトアビジン電磁ビーズを含む５ｍＬのＰＢＳＭ中で再懸濁させ、４℃で５分間インキュベートし、ペレット化し、１５ｍＬのＰＢＳＭ中で再懸濁させ、ＭＡＣＳ  ＬＳカラム上で分離させた。捕捉された細胞をＰＢＳＭで洗浄し、溶出させ、２％のグルコースを含む２００ｍＬのＳＤ−ｕｒａブロスに加え、１８℃で３日間成長させた。
【１０２２】
第４回のスクリーニングでは、第３回のアウトプットからの酵母をペレット化し、洗浄し、１％のラフィノース、２％のガラクトースを含む２００ｍＬのＳＤ−ｕｒａブロス中で再懸濁させ、２０℃で２２時間インキュベートして、発現を誘導した。２つの２．５ｍＬのサンプルを、得られた培養物から取り、ペレット化し、ＰＢＳＭ中で再懸濁させ、それぞれ２５０ｐＭのビオチン化ヒトＢＣＭＡとともにインキュベートした。第１のサンプルを、室温で４５分間にわたってヒトＢＣＭＡとともにインキュベートし、ペレット化し、ＰＢＳＦで２回洗浄し、次に、１ｍＬのＰＢＳＦ（０．１％のＢＳＡを含むＰＢＳ）中で再懸濁させた。第２のサンプルを、室温で４５分間にわたってヒトＢＣＭＡとともにインキュベートした。両方のサンプルをペレット化し、ＰＢＳＦで２回洗浄し、２００ｕＬのＰＢＳＦ＋１：３０希釈のウサギ抗ｃＭｙｃ−ＦＩＴＣ（Ａｂｃａｍ）＋１：１００希釈のニュートラアビジン（ｎｅｕｔｒａｖｉｄｉｎ）−ｄｙｌｉｇｈｔ  ６３３（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）中で再懸濁させた。サンプルを４Ｃで３０分間インキュベートし、ペレット化し、ＰＢＳＦで２回洗浄し、３ｍＬのＰＢＳＦ中で再懸濁させ、４０ｕｍのフィルタに通してろ過し、次に、ＦＡＣＳ  Ａｒｉａセルソーター（Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ，ＣＡ）においてフローサイトメトリーを用いてソートした。約５×１０５個の酵母を単離し、２％のグルコースを含む４ｍＬのＳＤ−ｕｒａブロス中で再懸濁させ、３０℃で一晩成長させた。
【１０２３】
第５回のスクリーニングでは、第４回のアウトプットから得られた一晩培養物を、ＳＤ−ｕｒａブロス中で２０ｍＬに希釈した。１０ｍＬを取り、ペレット化し、１％のラフィノース、２％のガラクトースを含む２０ｍＬのＳＤ−ｕｒａブロス中で再懸濁させ、２０℃で２２時間にわたってインキュベートして、発現を誘導した。翌日、次に、得られたライブラリーを、１０分間にわたって４０℃で熱処理し、４Ｃに冷却し、ＰＢＳＭ中で再懸濁させ、２つのサンプルに分割し、上に示される、第４回のスクリーニングと同様のプロトコルに従って、１００ｐＭのビオチン化ｃｙｎｏ  ＢＣＭＡとともにインキュベートした。しかしながら、ニワトリ抗ｃＭｙｃ−ＦＩＴＣ（Ａｂｃａｍ）及びストレプトアビジン−ｄｙｌｉｇｈｔ  ６３３（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を、セルソーティングの前に酵母を標識するのに使用した。同様に、高い強度の染色を示す酵母をゲートし、ソートした。約１．５×１０５個の酵母を単離し、２％のグルコースを含む４ｍＬのＳＤ−ｕｒａブロス中で再懸濁させ、３０℃で一晩成長させた。
【１０２４】
第６回のスクリーニングでは、第５回のアウトプットから得られた一晩培養物を用いて、２％のグルコースを含む１００ｍＬのＳＤ−ｕｒａブロスを接種し、３０℃で６時間成長させた。次に、培養物をペレット化し、１％のラフィノース、２％のガラクトースを含む５０ｍＬのＳＤ−ｕｒａブロス中で再懸濁させ、２０℃で２０時間にわたってインキュベートして、発現を誘導した。次に、培養物をペレット化し、ＰＢＳＭで２回洗浄し、２．５ｎＭのビオチン化ヒトＢＣＭＡを含む１０ｍＬのＰＢＳＭ中で再懸濁させ、２分間混合し、ペレット化し、ＰＢＳＭで２回洗浄し、次に、１００ｎＭの非標識ヒトＢＣＭＡを含む１ｍＬのＰＢＳＭ中で再懸濁させ、２時間インキュベートした。次に、サンプルをペレット化し、１００ｕＬのＰＢＳＦ＋１：３０希釈のヤギ抗ｃＭｙｃ−ＦＩＴＣ（Ａｂｃａｍ）＋１：１００希釈のニュートラアビジン（ｎｅｕｔｒａｖｉｄｉｎ）−ｄｙｌｉｇｈｔ  ６３３（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）中で再懸濁させ、２５分間インキュベートした。次に、サンプルをペレット化し、ＰＢＳＦで２回洗浄し、１ｍＬのＰＢＳＦ中で再懸濁させ、ＦＡＣＳ  Ａｒｉａセルソーターにおいてソートした。約１．６×１０５個の酵母を単離し、２％のグルコースを含む３ｍＬのＳＤ−ｕｒａブロス中で再懸濁させ、３０℃で一晩成長させた。
【１０２５】
得られたプールを、ＳＤ−ＵＲＡ  ２％のグルコース中で希釈し、十分に間隔を空けたコロニーを得るためにＣＭ−ＵＲＡグルコース寒天プレート（Ｔｅｋｎｏｖａ）上で平板培養した。寒天プレートを、３日間にわたって３０℃で成長させ、次に、３８４のコロニーを、５００μｌ／ウェルのＳＤ−ＵＲＡ  １％のラフィノース、２％のガラクトースを含有する４×９６ウェルディープウェルプレートに取った。これらのプレートを、２日間にわたって振とうしながら２０℃でインキュベートして、発現を誘導した。
【１０２６】
各サンプルプレートを用いて、フローサイトメトリー分析のための３つの試験プレートを作製した。各サンプルウェルからの約１００，０００個の酵母細胞を、２０ｎＭ、９００ｐＭのビオチン化ｃｙｎｏ  ＢＣＭＡを含有するか、又はビオチン化ｃｙｎｏ  ＢＣＭＡを含有しない、３つの９６ウェル試験プレートのそれぞれの対応するウェルに移した。標識は、補助的な試薬としてＰＢＳＦ中の１：２００の各ストレプトアビジン−ｄｙｌｉｇｈｔ  ６３３（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）及びニュートラアビジン（ｎｅｕｔｒａｖｉｄｉｎ）−ｄｙｌｉｇｈｔ  ６３３（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を使用し、任意の抗ｃＭｙｃ抗体を除外したことを除いて、実質的に、ソーティングについて上述されるとおりであった。試験プレートを、Ｃｙｔｏｆｌｅｘフローサイトメーター（Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｃｏｕｌｔｅｒ，Ｂｒｅａ，ＣＡ）において分析した。
【１０２７】
２０ｎＭにおけるバックグラウンドを超える中央蛍光に対する９００ｐＭのＢＣＭＡにおけるバックグラウンドを超える中央蛍光の比率によってランク付けされる上位９４ヒットを、元の寒天プレートから新鮮なＣＭ−ＵＲＡグルコース寒天プレート（Ｔｅｋｎｏｖａ）にパッチし、２日間にわたって３０℃で成長させた。９４ヒットのｓｃＦｖ部分を、コロニーＰＣＲによって増幅し、ＨＴ  ＥｘｏＳａｐ−ＩＴ（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ）を用いて精製し、サンガーシーケンシングのためにＧｅｎｅｗｉｚ（Ｓｏｕｔｈ  Ｐｌａｉｎｆｉｅｌｄ，ＮＪ）に供した。
【１０２８】
何らかの望ましくない突然変異（さらなるシステイン、推定上の翻訳後修飾部位など）を含まなかった上位９つのクローン（配列が表１３に示される）を、ｓｃＦｖからＣＤ３二重特異性形式への変換のために選択した。これらのクローンは、ＢＣＭＡに対する最も高い親和性の結合剤であるべきであり、これは、二重特異性抗体としてフォーマットされるとより強力な分子をもたらすべきである。図３は、個々の酵母クローンの表面上への可溶性ＢＣＭＡの力価測定を示す。各クローンについてのＭＦＩ値が、表１４に示される。
【１０２９】
【表１１８】
2021525715.tif 000203
【１０３０】
【表１１９】
2021525715.tif 000204
【１０３１】
【表１２０】
2021525715.tif 000205
【１０３２】
【表１２１】
2021525715.tif 000206
【１０３３】
【表１２２】
2021525715.tif 000207
【１０３４】
【表１２３】
2021525715.tif 000208
【１０３５】
【表１２４】
2021525715.tif 000209
【１０３６】
図４は、親ＰＩ−６１と選択されたクローンとの間のＣＤＲＨ２の差異を強調している。特に興味深いのは、親配列中のアスパルテートとして、潜在的なアスパルテート異性化部位の部分を形成した５９位（ＩＭＧＴ番号付け）である。これは、同定された配列において主にアルギニン又はトレオニンのいずれかに突然変異されている。
【１０３７】
図５は、親ＰＩ−６１と同定されたクローンとの間のＣＤＲＬ２におけるさらなる突然変異を示す。５６位（ＩＭＧＴ番号付け）が、配列のいくつかにおいてアスパルテートからグルタメートに突然変異されている。配列の大部分は、６１位にプロリンからロイシンへの突然変異を有する。さらに、６２位が、同定された配列の大部分において、セリンからアルギニン又はトリプトファンのいずれかに突然変異されている。
【１０３８】
６つ全ての回のスクリーニング条件が、表１５に要約されている。
【１０３９】
【表１２５】
2021525715.tif 000210
【１０４０】
８．２．３．ライブラリー２構築及びスクリーニング：ＣＤＲ  Ｈ３．１変異体
ＰＩ−６１のＣＤＲ  Ｈ３のＮ末端の半分は、それがヒト生殖系列由来の変異の領域を含有し、ＣＤＲ  Ｈ３領域が、典型的に、抗原との接触のために重要であるため、突然変異誘発のために選択された。ＤＮＡライブラリー（以後、Ｈ３．１と呼ばれる）を、ＣＤＲ−Ｈ３の１０７〜１１２．２位（ＳＧＹＡＬＨＤ（配列番号５３０））（ＩＭＧＴ番号付け）に突然変異を有するように設計した。ライブラリー１からのアウトプットは、全ての同定された配列が、親ＰＩ−６１  ＣＤＲＨ２中に存在する潜在的なアスパルテート異性化部位を除去するために突然変異を有することを確実にするために、このライブラリーの作製のためのインプットとして使用された。
【１０４１】
Ｈ２／Ｌ２アウトプットｓｃＦｖ  ＤＮＡを増幅し、Ｈ３．１ライブラリーで修飾し、ｐＹＵＮＢＣ４酵母発現ベクターからのベクターＤＮＡと組み合わせて、酵母にエレクトロポレートして、相同的組み換え及び最終的なライブラリーの組み立てを可能にした。
【１０４２】
ライブラリー２のスクリーニングを、ライブラリー１のスクリーニング（上記を参照）と実質的に同様に行った。ソーティング手順及び補助的な試薬は、回数及び回の間の抗原改変の順序を除いて、実質的に同じであった。使用される抗原濃度、会合時間及び解離時間も異なり、表１６に列挙される。
【１０４３】
【表１２６】
2021525715.tif 000211
【１０４４】
８．２．４．ライブラリー３構築及びスクリーニング：ＣＤＲ  Ｈ３．２変異体
また、ＰＩ−６１のＣＤＲ  Ｈ３のＣ末端の半分は、それがヒト生殖系列由来の変異の領域を含有し、ＣＤＲ  Ｈ３領域が、典型的に、抗原との接触のために重要であるため、突然変異誘発のために選択された。ＤＮＡライブラリー（以後、Ｈ３．２と呼ばれる）を、ＣＤＲ  Ｈ３の１１２．１〜１１７位（ＤＹＹＧＬＤＶ（配列番号５３１））（ＩＭＧＴ番号付け）に突然変異を有するように設計した。ライブラリー１からのアウトプットは、全ての同定された配列が、親ＰＩ−６１  ＣＤＲＨ２中に存在する潜在的なアスパルテート異性化部位を除去するために突然変異を有することを確実にするために、このライブラリーの作製のためのインプットとして使用された。
【１０４５】
Ｈ２／Ｌ２アウトプットｓｃＦｖ  ＤＮＡを増幅し、Ｈ３．２ライブラリーで修飾し、ｐＹＵＮＢＣ４酵母発現ベクターからのベクターＤＮＡと組み合わせて、酵母にエレクトロポレートして、相同的組み換え及び最終的なライブラリーの組み立てを可能にした。
【１０４６】
ライブラリー３のスクリーニングを、ライブラリー１のスクリーニング（上記を参照）と実質的に同様に行った。ソーティング手順及び補助的な試薬は、回数及び回の間の抗原改変の順序を除いて、実質的に同じであった。使用される抗原濃度、会合時間及び解離時間も異なり、表１７に列挙される。
【１０４７】
【表１２７】
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【１０４８】
８．３．実施例３：活性化アッセイを用いた親和性成熟ライブラリーのスクリーニング
８．３．１．概説
親和性成熟抗ＢＣＭＡプールを、実施例２において同定したが、これらの抗体を、ｓｃＦｖｓとして酵母表面に提示させた。これらの抗体配列の１つの治療的用途は、Ｔ細胞傷害性をＢＣＭＡ発現腫瘍細胞にリダイレクトするための二重特異性抗体としての用途であり得る。二重特異性抗体としてのこれらの抗体配列の有用性を評価するために、可変ドメイン配列を、ヘテロ二量体二重特異性抗体形式（図６）にクローニングし、ＨＥＫ  ２９３細胞において発現させ、Ｊｕｒｋａｔ  ＮＦＡＴルシフェラーゼ（ＪＮＬ）レポーターアッセイを用いて、標的依存的な方法で、腫瘍細胞上でＢＣＭＡに結合する能力及びＴ細胞を活性化する能力について試験した。
【１０４９】
８．３．２．ＣＤ３共トランスフェクション及び発現
実施例２のＨ３．１及びＨ３．２ライブラリープールを、Ｆａｂ形式に変換し、ヘテロ二量体Ｆｃを用いて２シストロン性ＩｇＧベクターにサブクローニングした（図６）。ヘテロ二量体Ｆｃに融合された抗ＣＤ３  ｓｃＦｖを含有する同様のベクターとともに共トランスフェクトさせると、これらのクローンの発現により、第１の重鎖に抗ＢＣＭＡ  Ｆａｂ及び第２の重鎖に抗ＣＤ３  ｓｃＦｖを有するヘテロ二量体二重特異性抗体が得られる（図６）。１μｇ／ｍｌの全ＤＮＡの２つのベクターの１：１混合物を、３μｇ／ｍｌのＰＥＩ（４０Ｋ直鎖状、Ｐｏｌｙｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｗａｒｒｉｎｇｔｏｎ，ＰＡ）と混合し、Ｅｘｐｉ２９３細胞（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）に加え、二重特異性抗体を産生するために、振とうしながら３７℃／８％の二酸化炭素で５日間成長させた。発現後、細胞を遠心分離によってペレット化し、次に、馴化培地を、０．４５μｍのろ過によって清澄化した。この清澄化された馴化培地をＪＮＬ活性化アッセイに直接使用した。
【１０５０】
８．３．３．ＪＮＬ活性化アッセイ
使用される標的細胞は、カニクイザルＢＣＭＡ構築物を過剰発現する改変３００−１９細胞株（Ｔｕｆｔｓ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｂｏｓｔｏｎ，ＭＡ）であった。それらを、ＲＰＭＩ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）＋１０％のウシ胎仔血清（ＶＷＲ  Ｓｅｒａｄｉｇｍ，Ｒａｄｎｏｒ，ＰＡ）＋２ｍＭのＬ−グルタミン中でＪＮＬレポーター細胞と予め混合し、３８４ウェル白色組織培養プレートの全てのウェルに加えた。１つの３８４ウェル試験プレートを、各９６ウェルサンプルプレートのために設置した。試験抗体を含有する馴化培地を、ＲＰＭＩ中で希釈し、各サンプルを、１：１０、１：１００、１：１０００及び１：１００００の最終的な希釈で対応する細胞含有試験プレート中の４つのウェルに加えた。試験プレートを、ＮＦＡＴ駆動ルシフェラーゼ発現を発生させるために、３７℃／５％の二酸化炭素で５時間インキュベートした。試験プレートを室温に平衡化し、次に、Ｏｎｅ−Ｇｌｏ（Ｐｒｏｍｅｇａ，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ）を、１：１の希釈で各ウェルに加えた。プレートを室温で１０分間インキュベートし、次に、Ｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ７００フィルタを用いてＥｎｖｉｓｉｏｎ  Ｐｌａｔｅ  ｒｅａｄｅｒ（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）で読み取った。平均抗体濃度を使用し、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ及び式Ｙ＝ボトム＋（トップ−ボトム）／（１＋１０＾（（ＬｏｇＥＣ５０−Ｘ）））を用いてデータをフィットさせて、各サンプルについてのおよそのＥＣ５０値を得た。およそのＥＣ５０によってランク付けされた上位９４のクローンをシーケンシングし、望ましくないＣＤＲ配列（システイン、推定上の修飾部位など）を廃棄した後、７２クローンを再試験のために選択した。第２のアッセイは、各クローンをヒト及びカニクイザルＢＣＭＡ過剰発現細胞株の両方に対して別々に試験したことを除いて、第１のアッセイと同様であった。さらに、各サンプル抗体について、８点の３倍希釈系列を使用し、最も高いおよその濃度は４０００ｐＭであり、最も低いおよその濃度は１．８３ｐＭであった。これらのデータを、再度同じ式を用いてフィットさせ、ヒト及びカニクイザルＢＣＭＡの両方で高い活性化能を示した上位のクローン（表１８）を、スケールアップ及びさらなる試験のために選択した。クローンのＶＨ及びＶＬヌクレオチド及びアミノ酸配列が、表１９に示される。
【１０５１】
【表１２８】
2021525715.tif 000213
【１０５２】
【表１２９】
2021525715.tif 000214
【１０５３】
【表１３０】
2021525715.tif 000215
【１０５４】
【表１３１】
2021525715.tif 000216
【１０５５】
【表１３２】
2021525715.tif 000217
【１０５６】
【表１３３】
2021525715.tif 000218
【１０５７】
【表１３４】
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【１０５８】
【表１３５】
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【１０５９】
ヒト及びカニクイザルＢＣＭＡの両方に対してＪＮＬ活性化アッセイにおいて５００ｐＭ以下のＥＣ５０値を有するこれらの同定されたクローンは、最初に同定されたクローン、ＰＩ−６１を上回る顕著な改善を表す。この親クローンは、ヒトＢＣＭＡに対して３４ｎＭ及びカニクイザルＢＣＭＡに対して２４０ｎＭのおよその親和性を有していた。
【１０６０】
図７は、同定された及び親クローンのＣＤＲ  Ｈ２領域を示す。特に注目すべきことは、ＣＤＲＨ２の５９及び６２位（ＩＭＧＴ番号付け）におけるアスパルテート−グリシン異性化部位が、高確率で、いくつかのアミノ酸対、最も一般的にはアスパルテート−アスパルテートで置換されていることである。さらに、６３位は、成熟したヒットの大部分においてセリンからアラニンに突然変異されていた。
【１０６１】
図８は、同定された及び親クローンのＣＤＲ  Ｌ２領域を示す。全ての同定されたクローンは、５６位におけるアスパルテートからグルタメートへの突然変異及び６１位におけるプロリンからロイシンへの突然変異を示す。さらに、６２位におけるセリンからアルギニンへの突然変異が、大部分のクローンにおいて存在していた。
【１０６２】
図９は、同定された及び親クローンのＣＤＲ  Ｈ３領域を示す。１１０位にアラニンからグルタメートへの突然変異、１１１ｃ位にアスパルテートからグルタミンへの突然変異及び１１３〜１１５位にリジン−プロリン−バリンに突然変異したチロシン−グリシン−ロイシンを含む、いくつかの突然変異が、改良されたクローンにおいて富化されている。
【１０６３】
８．４．実施例４：ファージディスプレイを用いた抗ＢＣＭＡ抗体の単離
８．４．１．親クローンＲ１Ｆ２の生成
ストレプトアビジンビーズをビオチン化ＢＣＭＡタンパク質（ヒトＢＣＭＡ及びＣｙｎｏ  ＢＣＭＡ（Ａｇ））で被覆することによってパニングを行った。Ａｇ被覆ビーズを、０．０５％のＴｗｅｅｎ  ２０（ＰＢＳＴ）を含むリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で洗浄し、２％のウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）でブロックした。ファージライブラリーを、２％のＢＳＡでブロックし、ブランクストレプトアビジンビーズに予め吸着して、ストレプトアビジンに結合するファージを除去した。ブロックされ、予め吸着されたファージライブラリーを、Ａｇ被覆ビーズに加え、混合しながら室温で１時間インキュベートした。非特異的に結合されたファージを、数回の洗浄工程で洗い落とした。特異的に結合されたファージを、グリシンｐＨ２の添加によってストレプトアビジンビーズから溶出させた。溶出液を、ファージ感染のために大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）ＴＧ１培養物に移した。３７℃で４５分間にわたるインキュベーション後、培養物を遠心分離し；細菌ペレットを、新鮮な培地中で再懸濁させ、アンピシリンを含む寒天プレートで平板培養し、３７℃で一晩インキュベートした。各プールからのコロニーを、プレートから擦り取り、それを用いて、グリセロールストックを作製するか、又はファージレスキュー、ファージのポリクローナル増幅及びファージ沈殿に直接使用した。
【１０６４】
表面にＦａｂフラグメントを提示する新たなファージ粒子を、各選択の回のために産生した。各ファージ調製のために、１２ｍｌの２ｘＹＴ／アンピシリン／グルコース培地に、対応するライブラリー（前の段落に記載される）又はそのグリセロールストックからの細菌を接種したところ、０．１〜０．２のＯＤ６００が得られた。培養物を、０．４５〜０．５５のＯＤ６００に達するまで、３７℃で、１２０ｒｐｍで６０〜９０分間振とうした。次に、ヘルパーファージを、２０の感染の多重度で、細菌培養物に加えた後、振とうせずに３７℃で３０分間、次に、１６０ｒｐｍで振とうしながら３７℃で３０分間インキュベートした。細菌を沈降させ、ヘルパーファージを含有する上清を廃棄した。ファージに感染した細菌を、２０ｍｌの２ｘＹＴ／Ａｍｐ／Ｋａｎ／ＩＰＴＧ培地中で再懸濁させ、１２０ｒｐｍで振とうしながら２５℃で一晩インキュベートした。翌日、一晩培養物からの細菌をペレット化し、Ｆａｂ提示ファージを含有する上清を収集した。１／５の総体積の予め冷却したＰＥＧ／ＮａＣｌを、ファージを含有する上清に加えることにより、ファージ沈殿を行った。サンプルを、沈殿ファージの群が視認可能になるまで、氷上で少なくとも３０分間インキュベートした。沈殿したファージを沈降させ、ＰＢＳ中で再懸濁させた。精製されたファージを、次の回のパニングに使用した。
【１０６５】
最後の回のパニングプールを、細菌発現ベクターにサブクローニングし、生成された培養物を、単一コロニーピッキングのために寒天プレート上で平板培養した。単一クローンを、寒天プレートから、２つのマイクロタイタープレート（デュプリケート）、マスタープレート及び娘プレートのウェル中に取った。マスタープレートウェルに、アンピシリン及び低いグルコースを含有する２ｘＹＴを予め充填した。増殖後、グリセロールをこれらのプレートに加え、それらを−８０℃で貯蔵した。娘プレートに、誘導培地（アンピシリン及びＩＰＴＧを含有する２ｘＹＴ）を予め充填した。プレートを３０℃でインキュベートし、Ｆａｂ発現のために一晩振とうした。翌日、発現培養物を、リゾチーム緩衝液の添加によって溶解させた。
【１０６６】
酵素結合免疫吸着法（ＥＬＩＳＡ）を用いて、組み換え完全長ＢＣＭＡ  ＡｇへのＦａｂｓ（粗製の細菌溶解物中）の結合を試験した。ビオチン化Ａｇを、ニュートラアビジン（ｎｅｕｔｒａｖｉｄｉｎ）被覆プレートによって捕捉した。プレートをＰＢＳＴで洗浄し、２％のＢＳＡでブロックした。細菌溶解物（Ｆａｂを含有する）をプレートに加え、インキュベーション及び非特異的結合を除去するための洗浄後、結合されたＦａｂを、抗Ｆａｂ−ＨＲＰ（西洋ワサビペルオキシダーゼ）を用いて検出した。インキュベーション及び数回の洗浄後、基質を加え、０．５ＮのＨＣｌを加えることによって発色を停止させた。シグナル（吸光度）を、４５０ｎｍで測定した。
【１０６７】
Ｆａｂの、その抗原に対する親和性は、フレームワーク領域が影響を受けないままにしながら、予め構築されたＣＤＲ成熟カセットライブラリーを導入する反復ＣＤＲ最適化手法によって増加され得る。成熟ライブラリーのクローニングを、親Ｆａｂフラグメントをコードするベクターにおいて行った。３つのライブラリー；２つの異なる長さのＣＤＲ−Ｌ３を提示する軽鎖ＣＤＲ３（ＣＤＲ−Ｌ３）のための２つのライブラリー及び１つの重鎖ＣＤＲ−Ｈ２ライブラリーを、クローンＲ１Ｆ２のために作製した。対応するＣＤＲを、制限消化によって親クローンから除去し、無関係の配列とスワップさせて、親クローンのバックグラウンドを減少させた。第２の工程において、無関係の配列を除去し、ライゲーション反応によって所望の多様なＣＤＲを含有するＤＮＡフラグメントのレパートリーで置換した。ライゲーション混合物を、ライブラリー増幅のために細菌細胞（ＴＧ１Ｆ｀）にエレクトロポレートした。
【１０６８】
成熟したライブラリーのパニングを、洗浄工程中のストリンジェンシーを増加させて、上述されるように行った。改善されたクローンのプロファイルを親プロファイルと区別するために低い抗原濃度を用いて、上述されるようにＥＬＩＳＡによってスクリーニングを行った（図１０）。選択されたクローンを、圧縮プレート上に再配置し、独自性を決定するため及び追跡アッセイのために、シーケンシングした。
【１０６９】
８．４．２．成熟したヒト抗ＢＣＭＡ抗体の特性評価
バイオレイヤー干渉法（ＢＬＩ）を用いて、ＢＣＭＡタンパク質へのユニークなクローンの親和性を決定した。ストレプトアビジン先端（ＦｏｒｔｅＢｉｏ）を、ビオチン化抗原で被覆し、細菌溶解物を含有するＦａｂを、結合緩衝液中で希釈し、抗原で被覆された先端を、結合／会合測定（オンレート）のために溶解物に浸漬した。その後、先端を、解離（オフレート）を監視するために緩衝液に浸漬した。見掛けのＫＤの計算を、Ｆｏｒｔｅｂｉｏの専有の分析ソフトウェアを用いて行った。親Ｒ１Ｆ２を上回る改善された親和性を有する多くのクローンを同定し（図１１及び図１２；表２０）、その後、産生及び機能アッセイのために二重特異性形式にサブクローニングした。
【１０７０】
【表１３６】
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【１０７１】
【表１３７】
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【１０７２】
【表１３８】
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【１０７３】
【表１３９】
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【１０７４】
【表１４０】
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【１０７５】
【表１４１】
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【１０７６】
【表１４２】
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【１０７７】
８．５．実施例５：抗ＢＣＭＡ×抗ＣＤ３二重特異性結合分子の産生及び特性評価
抗体ＰＡＬＦ０１及びＰＡＬＦ１１（実施例４）及びＨ２／Ｌ２−２０（実施例２）を、抗ＢＣＭＡ×抗ＣＤ３二重特異性形式に変換し、得られた二重特異性抗体をそれぞれＡＢ１、ＡＢ２及びＡＢ３と命名した。
【１０７８】
８．５．１．材料及び方法
８．５．１．１．ＡＢ３を産生するためのＨ２／Ｌ２−２０候補の生殖系列化（Ｇｅｒｍｌｉｎｉｎｇ）
その後の特性評価のための全ての候補のクローン配列を、それらの最も近い生殖系列にアライメントして、フレームワークがヒト抗体レパートリーにおいて提示される天然フレームワークに確実に近くなるようにした。実施例４からのクローンは、ＣＤＲの外側の生殖系列配列と１００％同一であり、したがって、それらの一次アミノ酸配列へのさらなる変化なしで産生された。クローンＨ２／Ｌ２−２０は、可変軽鎖及び可変重鎖領域の両方においてＣＤＲの外側に突然変異を有し、これらは、最も近い生殖系列への残基に突然変異されて、最終的な構築物の遺伝子合成の一環として最終的なＡＢ３配列を産生した。
【１０７９】
８．５．１．２．ノブ・イントゥ・ホール形式の抗ＢＣＭＡ×抗ＣＤ３  ＩｇＧ１二重特異性抗体の産生
遺伝子合成を、ＡＴＵＭ（Ｎｅｗａｒｋ，ＣＡ，ＵＳＡ）によって行った。抗ＢＣＭＡ重鎖を、ヘテロ二量体化並びにＮ２９７Ａサイレンシング突然変異を促進するためにホールの突然変異を含む定常ｈＩｇＧ１ドメインへの可変ドメインの融合として合成した。軽鎖プラスミドを、上述されるように合成した。抗ＣＤ３アームを、ヘテロ二量体化並びにＮ２９７Ａサイレンシング突然変異を促進するためにノブの突然変異を含む定常ｈＩｇＧ１ドメインに融合された一本鎖可変フラグメントとして産生した。二重特異性抗体を、ＨＥＫ２９３細胞中で一過性に共トランスフェクトさせた。簡潔に述べると、トランスフェクションを、トランスフェクション試薬としてＰＥＩ  Ｍａｘを用いて行った。小規模（＜５Ｌ）のトランスフェクションでは、細胞を、５％のＣＯ２）で加湿インキュベータ（８５％）においてオービタルシェーカー（１１５ｒｐｍ）における振とうフラスコ中で成長させた。抗ＢＣＭＡ軽鎖及び重鎖プラスミドを、１  ＤＮＡ：３  ＰＥＩの最終比でＰＥＩとともに、２：２：３の比率で抗ＣＤ３プラスミドと組み合わせた。培養物の１Ｌ当たり１ｍｇのプラスミドを、５０万個の細胞／ｍＬ血清培地でトランスフェクションに使用した。５日間の発現後、抗体を遠心分離及びろ過による培地の清澄化によって収集した。精製を、抗ＣＨ１アフィニティーバッチクロマトグラフィー（ＣａｐｔｕｒｅＳｅｌｅｃｔ  ＩｇＧ−ＣＨ１  Ａｆｆｉｎｉｔｙ  Ｍａｔｒｉｘ，Ｔｈｅｒｍｏ−Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ，ＵＳＡ）又はプロテインＡアフィニティーバッチクロマトグラフィー（ＭａｂＳｅｌｅｃｔ（登録商標）ＳｕＲｅ，ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｕｐｐｓａｌａ，Ｓｗｅｄｅｎ）のいずれかによって行った。樹脂を、１００ｍＬの上清ごとに１ｍＬの樹脂の比率で加え、バッチを最大で４時間にわたって結合させた。使い捨てカラムに上清を充填して、重力によって排出させ、２０ＣＶのＰＢＳで洗浄した。抗体を、２０ＣＶの２０ｍＭのシトレート、１２５ｍＭのＮａＣｌ、５０ｍＭのスクロースｐＨ３．２で溶離した。溶離されたＩｇＧタンパク質を、１Ｍのクエン酸ナトリウムを用いてｐＨ５．５になるまで調整した。抗体が凝集体を含む場合、分取サイズ排除クロマトグラフィーを、最終的なポリシング（ｐｏｌｉｓｈｉｎｇ）工程としてＨｉ  Ｌｏａｄ  １６／６０  Ｓｕｐｅｒｄｅｘ  ２００グレードカラム（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｕｐｐｓａｌａ，Ｓｗｅｄｅｎ）を用いて行った。
【１０８０】
８．５．１．３．抗ＢＣＭＡ−抗ＣＤ３  ２価及び３価結合分子の産生
図１Ｃに示される形式の２価結合分子及び図１Ｈに示される形式の３価結合分子を作製した。
【１０８１】
遺伝子合成を、上述されるように行った。抗ＢＣＭＡ重鎖を、ヘテロ二量体化並びにＥ２３３Ｐ／Ｌ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２６７Ｋサイレンシング突然変異を促進するために突然変異Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓを含む定常ｈＩｇＧ１ドメインへの可変ドメインの融合として合成した。軽鎖プラスミドを、上述されるように合成した。２価ＢＢＭのための抗ＣＤ３アームを、ヘテロ二量体化並びにＥ２３３Ｐ／Ｌ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２６７Ｋサイレンシング突然変異を促進するために突然変異Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑを含む定常ｈＩｇＧ１ドメインに融合された一本鎖可変フラグメントとして産生した。３価ＢＢＭのための抗ＣＤ３アームを、ヘテロ二量体化並びにＥ２３３Ｐ／Ｌ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２６７Ｋサイレンシング突然変異を促進するために突然変異Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑを含む定常ｈＩｇＧ１ドメインに融合された一本鎖フラグメント可変ＣＤ３への抗ＢＣＭＡ重鎖Ｆａｂ融合として産生した。ＢＢＭを、ＨＥＫ２９３細胞中で一過性に共トランスフェクトさせた。簡潔に述べると、トランスフェクションを、トランスフェクション試薬としてＰＥＩ  Ｍａｘを用いて行った。小規模（＜５Ｌ）のトランスフェクションでは、細胞を、５％のＣＯ２）で加湿インキュベータ（８５％）においてオービタルシェーカー（１１５ｒｐｍ）における振とうフラスコ中で成長させた。抗ＢＣＭＡ軽鎖及び重鎖プラスミドを、１  ＤＮＡ：３  ＰＥＩの最終比でＰＥＩとともに抗ＣＤ３プラスミドと組み合わせた。培養物の１Ｌ当たり１ｍｇのプラスミドを、５０万個の細胞／ｍＬ血清培地でトランスフェクションに使用した。５日間の発現後、ＢＢＭを、遠心分離及びろ過による培地の清澄化によって収集した。精製を、抗ＣＨ１アフィニティーバッチクロマトグラフィー（ＣａｐｔｕｒｅＳｅｌｅｃｔ  ＩｇＧ−ＣＨ１  Ａｆｆｉｎｉｔｙ  Ｍａｔｒｉｘ，Ｔｈｅｒｍｏ−Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ，ＵＳＡ）又はプロテインＡアフィニティーバッチクロマトグラフィー（ＭａｂＳｅｌｅｃｔ（登録商標）ＳｕＲｅ，ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｕｐｐｓａｌａ，Ｓｗｅｄｅｎ）のいずれかによって行った。樹脂を、１００ｍＬの上清ごとに１ｍＬの樹脂の比率で加え、バッチを最大で４時間にわたって結合させた。使い捨てカラムに上清を充填して、重力によって排出させ、２０ＣＶのＰＢＳで洗浄した。ＢＢＭを、２０ＣＶの２０ｍＭのシトレート、１２５ｍＭのＮａＣｌ、５０ｍＭのスクロースｐＨ３．２で溶離した。溶離されたＩｇＧタンパク質を、１Ｍのクエン酸ナトリウムを用いてｐＨ５．５になるまで調整した。ＢＢＭが凝集体を含む場合、分取サイズ排除クロマトグラフィーを、最終的なポリシング工程としてＨｉ  Ｌｏａｄ  １６／６０  Ｓｕｐｅｒｄｅｘ  ２００グレードカラム（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｕｐｐｓａｌａ，Ｓｗｅｄｅｎ）を用いて行った。ホモ二量体を含有するサンプルを、分取カチオン交換クロマトグラフィーによって精製した。
【１０８２】
８．５．１．４．ＢＣＭＡ×ＣＤ３  ＢＢＭ配列
実施例５において作製された構築物のアミノ酸及びＤＮＡ配列が、表２１に示される。
【１０８３】
【表１４３】
2021525715.tif 000228
【１０８４】
【表１４４】
2021525715.tif 000229
【１０８５】
【表１４５】
2021525715.tif 000230
【１０８６】
【表１４６】
2021525715.tif 000231
【１０８７】
【表１４７】
2021525715.tif 000232
【１０８８】
【表１４８】
2021525715.tif 000233
【１０８９】
【表１４９】
2021525715.tif 000234
【１０９０】
【表１５０】
2021525715.tif 000235
【１０９１】
【表１５１】
2021525715.tif 000236
【１０９２】
【表１５２】
2021525715.tif 000237
【１０９３】
【表１５３】
2021525715.tif 000238
【１０９４】
【表１５４】
2021525715.tif 000239
【１０９５】
【表１５５】
2021525715.tif 000240
【１０９６】
【表１５６】
2021525715.tif 000241
【１０９７】
【表１５７】
2021525715.tif 000242
【１０９８】
【表１５８】
2021525715.tif 000243
【１０９９】
【表１５９】
2021525715.tif 000244
【１１００】
【表１６０】
2021525715.tif 000245
【１１０１】
【表１６１】
2021525715.tif 000246
【１１０２】
【表１６２】
2021525715.tif 000247
【１１０３】
【表１６３】
2021525715.tif 000248
【１１０４】
【表１６４】
2021525715.tif 000249
【１１０５】
【表１６５】
2021525715.tif 000250
【１１０６】
【表１６６】
2021525715.tif 000251
【１１０７】
【表１６７】
2021525715.tif 000252
【１１０８】
【表１６８】
2021525715.tif 000253
【１１０９】
【表１６９】
2021525715.tif 000254
【１１１０】
【表１７０】
2021525715.tif 000255
【１１１１】
【表１７１】
2021525715.tif 000256
【１１１２】
【表１７２】
2021525715.tif 000257
【１１１３】
【表１７３】
2021525715.tif 000258
【１１１４】
【表１７４】
2021525715.tif 000259
【１１１５】
【表１７５】
2021525715.tif 000260
【１１１６】
【表１７６】
2021525715.tif 000261
【１１１７】
【表１７７】
2021525715.tif 000262
【１１１８】
【表１７８】
2021525715.tif 000263
【１１１９】
【表１７９】
2021525715.tif 000264
【１１２０】
【表１８０】
2021525715.tif 000265
【１１２１】
【表１８１】
2021525715.tif 000266
【１１２２】
【表１８２】
2021525715.tif 000267
【１１２３】
【表１８３】
2021525715.tif 000268
【１１２４】
【表１８４】
2021525715.tif 000269
【１１２５】
【表１８５】
2021525715.tif 000270
【１１２６】
【表１８６】
2021525715.tif 000271
【１１２７】
【表１８７】
2021525715.tif 000272
【１１２８】
【表１８８】
2021525715.tif 000273
【１１２９】
【表１８９】
2021525715.tif 000274
【１１３０】
【表１９０】
2021525715.tif 000275
【１１３１】
８．５．１．５．溶解平衡滴定による親和性決定
溶解平衡滴定（ＳＥＴ）を、二重特異性ＢＣＭＡ結合分子の見掛けのＫＤを生成するために行った。この形式において、組み換えヒト及び組み換えカニクイザルＢＣＭＡを、複合体の濃度が理想的にはＫＤを下回るように低い濃度でＭＳＤプレートにコーティングした。二重特異性を固定し、いくつかの濃度（１ｎＭ、０．１ｎＭ、０．０１ｎＭ）で試験し、各濃度を、溶液中で滴定されたＢＣＭＡとともにプレインキュベートした。この複合体を、一晩プレインキュベートさせた。次に、この混合物を、遊離二重特異性を捕捉するために短時間のインキュベーションのためにプレートに加えた。より多くの遊離二重特異性が検出されるほど、相互作用は弱くなり、したがって親和性が弱くなる。簡潔に述べると、抗原を、２５μｌのＰＢＳ中０．２〜０．３μｇ／ｍｌで標準的な結合ＭＳＤプレート（Ｍｅｓｏ−Ｓｃａｌｅ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ、３８４−ウェル：ＭＳＤ  ｃａｔ＃Ｌ２１ＸＡ、９６−ウェル：ＭＳＤ  ｃａｔ＃Ｌ１５ＸＡ）にコーティングし、４℃で一晩インキュベートした。
【１１３２】
二重特異性抗体を、インキュベーション緩衝液（２％のＢＳＡ（Ｓｉｇｍａ  ｃａｔ＃Ａ４５０３）及び１％のＴｗｅｅｎ２０及び１％のＴｒｉｔｏｎ−Ｘ（Ｓｉｇｍａ  ｃａｔ＃２３４７２９）を含有するＰＢＳ）中で一定の濃度（例えば、１０ｐＭ）に希釈し、インキュベーション緩衝液中の抗原の連続希釈に加えた。サンプルを、室温で一晩のインキュベーションによって平衡に到達させた。
【１１３３】
プレートを、洗浄緩衝液（０．０５％のＴｗｅｅｎ２０を含むＰＢＳ）中で３回洗浄し、２時間にわたって室温で、１００μｌのインキュベーション緩衝液でブロックした。次に、プレートを洗浄緩衝液中で３回洗浄した。二重特異性抗体（一定の濃度）及び抗原（滴定）を含有するサンプルを、プレート（２５μｌ）に加え、室温で１５分間インキュベートした。次に、プレートを洗浄緩衝液中で３回洗浄した。次に、２５μｌの検出抗体を加え（抗ヒト（ヤギ）スルホ−ＴＡＧ、インキュベーション緩衝液中１：１０００、ＭＳＤ  ｃａｔ＃Ｒ３２ＡＪ−１）、室温で３０分間インキュベートした。次に、プレートを洗浄緩衝液中で３回洗浄し、５０μｌの１×ＭＳＤ  Ｒｅａｄ  ｂｕｆｆｅｒ  Ｔを加えた（界面活性剤を含む、ＭＳＤ  ｃａｔ＃Ｒ９２ＴＣ−１）。次に、プレートを、ＭＳＤ  Ｓｐｅｃｔｏｒ  Ｉｍａｇｅｒ  ６０００において読み取った。
【１１３４】
データを、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ  ｓｏｆｔｗａｒｅ  ｖ４を用いて分析し、バックグラウンド（Ｆａｂを含まないウェルの平均）を各値から差し引いた。Ｘ軸値（溶液中の抗原の濃度）をｌｏｇ１０ｘに変換した。
【１１３５】
ＫＤ値（ＫＤ）を、以下のモデルからフィットさせた：
Ｙ＝（トップ−（（トップ／（２×Ｆａｂ））×（（（（１０＾ｘ）＋Ｆａｂ）＋ＫＤ）−（（（（（（１０＾ｘ）＋Ｆａｂ）＋ＫＤ）×（（（１０＾ｘ）＋Ｆａｂ）＋ＫＤ））−（（４×（１０＾ｘ））×Ｆａｂ））＾０．５））））
トップ＝抗原濃度におけるシグナル＝０
ｘ＝溶液中のＢＣＭＡの濃度
Ｆａｂ＝適用される１価被分析物（Ｆａｂ）の濃度
【１１３６】
８．５．２．結果
試験されるＢＣＭＡ結合アームのそれぞれの見掛けの親和性が、表２２に示される。
【１１３７】
【表１９１】
2021525715.tif 000276
【１１３８】
８．６．実施例６：ＮＳＧマウスにおけるＫＭＳ１１−Ｌｕｃ多発性骨髄腫同所性腫瘍モデルの養子免疫伝達適応における２価及び３価ＢＣＭＡ−ＣＤ３  ＡＢ１及びＡＢ２の抗腫瘍活性
８．６．１．材料及び方法
２価及び３価ＢＣＭＡ−ＣＤ３  ＡＢ１及びＡＢ２の抗腫瘍活性を、ＮＳＧマウスにおけるＫＭＳ１１−Ｌｕｃ多発性骨髄腫同所性腫瘍モデルの養子免疫伝達適応において試験した。
【１１３９】
０日目に、ＫＭＳ１１−Ｌｕｃ細胞を採取し、１０×１０６個の細胞／ｍＬの濃度で、Ｈａｎｋｓ  Ｂａｌａｎｃｅｄ  Ｓａｌｔ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ（ＨＢＳＳ）中で懸濁させた。約６週齢の雌ＮＯＤ．Ｃｇ−Ｐｒｋｄｃｓｃｉｄ  Ｉｌ２ｒｇｔｍ１Ｗｊｌ／ＳｚＪマウス（ＮＳＧマウス）（Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，ＭＥ）に、１×１０６個のＫＭＳ１１−Ｌｕｃ細胞（１００μＬの体積）を側部尾静脈に静脈内（ＩＶ）注入した。
【１１４０】
腫瘍接種の７日後、各マウスに、側部尾静脈への静脈内（ＩＶ）注入により、１０×１０６個の末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）（１００μＬの体積）の養子免疫伝達（ＡｄＴ）を与えた。ＰＢＭＣを、ヒトｌｅｕｋｏｐａｋから予め単離し、凍結させ、使用するまで気相液体窒素タンク中で、Ｃｒｙｏｓｔｏｒ１０培地中で貯蔵した。ＡｄＴの直前に、ＰＢＭＣを解凍し、Ｈａｎｋｓ  Ｂａｌａｎｃｅｄ  Ｓａｌｔ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ（ＨＢＳＳ）中１００×１０６個の細胞／ｍｌの濃度で懸濁させた。
【１１４１】
腫瘍組織量（ＴＢ）が、生物発光によって測定される平均約１．０×１０７個の光子／秒（ｐ／ｓ）に達したとき、マウス（ｎ＝５／群）を、０．０３ｍｇ／ｋｇ、０．３ｍｇ／ｋｇ又は３．０ｍｇ／ｋｇの用量レベルでの２価ＢＣＭＡ−ＣＤ３  ＡＢ１、３価ＢＣＭＡ−ＣＤ３  ＡＢ１、２価ＢＣＭＡ−ＣＤ３  ＡＢ２又は３価ＢＣＭＡ−ＣＤ３  ＡＢ２の単回静脈内（ＩＶ）投与により処理した。各抗体の抗腫瘍活性を、腫瘍移植及びＡｄＴを受けたが、処理を受けていない非処理対照群（腫瘍＋ＡｄＴ）と比較した。腫瘍のみの群が、非処理対照で観察される同種免疫反応を測るために含まれていた。全ての処理を、個々のマウス体重に応じて１０ｍＬ／ｋｇで投与した。抗腫瘍活性を、非処理対照における変化（％ΔＴ／ΔＣ）又は退縮％と比べた、腫瘍組織量の変化パーセントによって決定した。
【１１４２】
腫瘍組織量及び体重を週に２回記録した。腫瘍組織量を、生物発光イメージングシステム（ＩＶＩＳ２００，Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）を用いてｐ／ｓで生物発光シグナル強度によって測定した。抗腫瘍活性を、ΔＴＢ≧０である場合、式：１００×ΔＴＢｔｒｅａｔｍｅｎｔ、ｔｉｍｅ／ΔＴＢｃｏｎｔｒｏｌ  ｇｒｏｕｐ、ｔｉｍｅ；又はΔＴＶ＜０である場合、退縮パーセント：（−１×（１００×（ＴＢｆｉｎａｌ−ＴＢｉｎｉｔｉａｌ／ＴＢｉｎｉｔｉａｌ）を用いて、対照と比べた腫瘍組織量の変化パーセント（％ΔＴ／ΔＣ）によって決定し、ＴＢｉｎｉｔｉａｌは、処理開始日の腫瘍組織量である（％ΔＴ／ΔＣ値＜４２％は、抗腫瘍活性を有すると見なされた）。体重変化パーセントを、式：１００×（（ＢＷｔｉｍｅ−ＢＷｉｎｉｔｉａｌ）／ＢＷｉｎｉｔｉａｌ）を用いて決定した。ダネットの多重比較検定とともに１元配置ＡＮＯＶＡを用いた統計分析を、Ｇｒａｐｈｐａｄ  Ｐｒｉｓｍ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｖｅｒｓｉｏｎ．７．０３を用いて行った。
【１１４３】
ＫＭＳ１１−Ｌｕｃ移植の３６日後に、非処理対照群からの全ての動物を、腫瘍組織量のため安楽死させた。
【１１４４】
８．６．２．結果
８．６．２．１．２価及び３価ＢＣＭＡ−ＣＤ３  ＡＢ１の抗腫瘍活性
０．３ｍｇ／ｋｇ及び３．０ｍｇ／ｋｇの２価ＢＣＭＡ−ＣＤ３  ＡＢ１による抗体処理は、それぞれ５７．８％及び８５．３％の顕著な腫瘍退縮をもたらした。０．０３ｍｇ／ｋｇの２価ＢＣＭＡ−ＣＤ３  ＡＢ１による抗体処理は、顕著な抗腫瘍活性を示さなかった（６７．４％のΔＴ／ΔＣ値）。３価ＢＣＭＡ−ＣＤ３  ＡＢ１による抗体処理は、０．３ｍｇ／ｋｇ（２．４％のΔＴ／ΔＣ）及び３．０ｍｇ／ｋｇ（７３．６％の退縮）で顕著な抗腫瘍反応をもたらした。０．０３ｍｇ／ｋｇの３価ＢＣＭＡ−ＣＤ３  ＡＢ１による抗体処理は、このモデルにおいて有効でなかった（表２３、図１３）。
【１１４５】
【表１９２】
2021525715.tif 000277
【１１４６】
２価又は３価ＢＣＭＡ−ＣＤ３  ＡＢ１では抗体に関連する体重減少はなかった。２価及び３価ＢＣＭＡ−ＣＤ３  ＡＢ１の処理で観察された体重変化は、移植片対宿主病（ＧｖＨＤ）の発症に起因する可能性が最も高かった。体重減少は、ＧｖＨＤの疾病負担及び発症の両方のエンドポイントパラメータである。ＰＢＭＣ注入の３５〜４２日後（腫瘍移植の２８〜３５日後）の時点で、動物は、ＧｖＨＤに起因する体重の減少を示し始めた。高い腫瘍組織量を有する動物は、疾病負担に関連する体重の減少も示した。試験の経過とともに、体重は、腫瘍移植の日に行った最初の測定と比べて増加した（表２３、図１４）。しかしながら、試験の終了時に、ピーク増加と比べて観察された体重減少は、ＧｖＨＤの兆候であり、疾病負担が体重の減少を誘発した。この試験により、最小の同種免疫反応が得られた（図１３）。
【１１４７】
８．６．２．２．２価及び３価ＢＣＭＡ−ＣＤ３  ＡＢ２の抗腫瘍活性
２価ＢＣＭＡ−ＣＤ３  ＡＢ２による抗体処理は、顕著な抗腫瘍活性をもたらした。０．０３ｍｇ／ｋｇの２価ＢＣＭＡ−ＣＤ３  ＡＢ２は、０．９％の％ΔＴ／ΔＣ値をもたらし、０．３ｍｇ／ｋｇ及び３．０ｍｇ／ｋｇは、それぞれ９０．７％及び９１．７％の退縮を達成した。３価ＢＣＭＡ−ＣＤ３  ＡＢ２による処理は、０．０３ｍｇ／ｋｇ及び０．３ｍｇ／ｋｇの用量レベルのそれぞれについて２．４％及び５．７％の％ΔＴ／ΔＣ値で顕著な抗腫瘍反応をもたらした。３．０ｍｇ／ｋｇの３価ＢＣＭＡ−ＣＤ３  ＡＢ２は、９６．８％の退縮を達成した（表２４、図１３）。
【１１４８】
【表１９３】
2021525715.tif 000278
【１１４９】
【表１９４】
2021525715.tif 000279
【１１５０】
２価又は３価ＢＣＭＡ−ＣＤ３  ＡＢ２では抗体に関連する体重減少はなかった。ＧｖＨＤの発症に起因する体重減少は、試験の終了までにこの構築物について観察されなかった（表２４、図１４）。この試験により、最小の同種免疫反応が得られた（図１３）。
【１１５１】
８．７．実施例７：ＮＳＧマウスにおけるＫＭＳ１１−Ｌｕｃ多発性骨髄腫同所性腫瘍モデルの養子免疫伝達適応における２価及び３価ＢＣＭＡ−ＣＤ３  ＡＢ１、ＡＢ２及びＡＢ３の抗腫瘍活性
８．７．１．材料及び方法
実施例７において使用される材料及び方法は、ＫＭＳ１１−Ｌｕｃ移植の３８日後に、非処理対照群からの全ての動物を腫瘍組織量のため安楽死させ、残りの動物を４０日目に安楽死させたことを除いて、実施例６において使用されるものに対応する。
【１１５２】
８．７．２．結果
８．７．２．１．２価及び３価ＢＣＭＡ−ＣＤ３  ＡＢ１の抗腫瘍活性
２価ＢＣＭＡ−ＣＤ３  ＡＢ１による抗体処理は、顕著な抗腫瘍活性をもたらした。０．０３ｍｇ／ｋｇの２価ＢＣＭＡ−ＣＤ３  ＡＢ１は、２４．７％の％ΔＴ／ΔＣをもたらした。０．３ｍｇ／ｋｇ及び３．０ｍｇ／ｋｇの２価ＢＣＭＡ−ＣＤ３  ＡＢ１は、それぞれ５０．７％及び２２．７％の退縮をもたらした。３価ＢＣＭＡ−ＣＤ３  ＡＢ１処理は、０．０３ｍｇ／ｋｇ（２．６％の％ΔＴ／ΔＣ）、０．３ｍｇ／ｋｇ（６４．２％の退縮）及び３．０ｍｇ／ｋｇ（８９．５％の退縮）で顕著な抗腫瘍反応をもたらした（表２５、図１５）。
【１１５３】
【表１９５】
2021525715.tif 000280
【１１５４】
２価又は３価ＢＣＭＡ−ＣＤ３  ＡＢ１では抗体に関連する体重減少はなかった。２価及び３価ＢＣＭＡ−ＣＤ３  ＡＢ１の処理で観察された体重変化は、ＧｖＨＤの発症に起因する可能性が最も高い。体重減少は、ＧｖＨＤの疾病負担及び発症の両方のエンドポイントパラメータである。ＰＢＭＣ注入の３５〜４２日後（腫瘍移植の２８〜３５日後）の時点で、動物は、ＧｖＨＤに起因する体重の減少を示し始めた。高い腫瘍組織量を有する動物は、疾病負担に関連する体重の減少も示した。試験の経過とともに、体重は、腫瘍移植の日に行った最初の測定と比べて増加した（表２５、図１６）。しかしながら、試験の終了時に、ピーク増加と比べて観察された体重減少は、ＧｖＨＤの兆候であり、疾病負担が体重の減少を誘発した（表２５、図１６）。
【１１５５】
８．７．２．２．２価及び３価ＢＣＭＡ−ＣＤ３  ＡＢ２の抗腫瘍活性
０．３ｍｇ／ｋｇ及び３．０ｍｇ／ｋｇの２価ＢＣＭＡ−ＣＤ３  ＡＢ２抗体処理は、顕著な抗腫瘍活性をもたらし、０．０３ｍｇ／ｋｇ及び０．３ｍｇ／ｋｇでそれぞれ３３．３％及び０．４％の％ΔＴ／ΔＣ値を達成した。３．０ｍｇ／ｋｇの２価ＢＣＭＡ−ＣＤ３  ＡＢ２は、９６％の退縮を達成した。３価ＢＣＭＡ−ＣＤ３  ＡＢ２は、全ての処理で顕著な抗腫瘍反応をもたらし、０．０３ｍｇ／ｋｇの用量で６６．１％、０．３ｍｇ／ｋｇの用量で８０．８％及び３．０ｍｇ／ｋｇの用量で６９．３％の退縮をもたらした（表２６、図１５）。
【１１５６】
【表１９６】
2021525715.tif 000281
【１１５７】
２価又は３価ＢＣＭＡ−ＣＤ３  ＡＢ２では抗体に関連する体重減少はなかった。２価及び３価ＢＣＭＡ−ＣＤ３  ＡＢ２の処理で観察された体重変化は、ＧｖＨＤの発症に起因する可能性が最も高い。体重減少は、ＧｖＨＤの疾病負担及び発症の両方のエンドポイントパラメータである。ＰＢＭＣ注入の３５〜４２日後（腫瘍移植の２８〜３５日後）の時点で、動物は、ＧｖＨＤに起因する体重の減少を示し始めた。高い腫瘍組織量を有する動物は、疾病負担に関連する体重の減少も示した。試験の経過とともに、体重は、腫瘍移植の日に行った最初の測定と比べて増加する（表２６、図１６）。しかしながら、試験の終了時に、ピーク増加と比べて観察された体重減少は、ＧｖＨＤの兆候であり、疾病負担が体重の減少を誘発した（表２６、図１６）。
【１１５８】
８．７．２．３．２価及び３価ＢＣＭＡ−ＣＤ３  ＡＢ３の抗腫瘍活性
２価ＢＣＭＡ−ＣＤ３  ＡＢ３は、顕著な抗腫瘍活性をもたらし、０．０３ｍｇ／ｋｇ、０．３ｍｇ／ｋｇ及び３．０ｍｇ／ｋｇでそれぞれ８７．６％、９１．３％及び８５．２％の退縮％をもたらした。３価ＢＣＭＡ−ＣＤ３  ＡＢ３による処理は、顕著な抗腫瘍反応をもたらした。０．０３ｍｇ／ｋｇの３価ＢＣＭＡ−ＣＤ３  ＡＢ３は、２９．０％の％ΔＴ／ΔＣ値をもたらし、０．３ｍｇ／ｋｇ及び３．０ｍｇ／ｋｇは、それぞれ８５．４％及び９０．４％の退縮をもたらした（表２７、図１５）。
【１１５９】
【表１９７】
2021525715.tif 000282
【１１６０】
２価又は３価ＢＣＭＡ−ＣＤ３  ＡＢ３では抗体に関連する体重減少はなかった。２価及び３価ＢＣＭＡ−ＣＤ３  ＡＢ３の処理で観察された体重変化は、ＧｖＨＤの発症に起因する可能性が最も高い。体重減少は、ＧｖＨＤの疾病負担及び発症の両方のエンドポイントパラメータである。ＰＢＭＣ注入の３５〜４２日後（腫瘍移植の２８〜３５日後）の時点で、動物は、ＧｖＨＤに起因する体重の減少を示し始めた。高い腫瘍組織量を有する動物は、疾病負担に関連する体重の減少も示した。試験の経過とともに、体重は、腫瘍移植の日に行った最初の測定と比べて増加する（表２７、図１６）。しかしながら、試験の終了時に、ピーク増加と比べて観察された体重減少は、ＧｖＨＤの兆候であり、疾病負担が体重の減少を誘発した（表２７、図１６）。
【１１６１】
８．８．実施例８：インビトロでのＴ細胞によるＢＣＭＡ×ＣＤ３二重特異性抗体媒介性ＢＣＭＡ＋  ＭＭ細胞溶解
８．８．１．概説
２価及び３価形式におけるＢＣＭＡ×ＣＤ３二重特異性抗体ＡＢ１、ＡＢ２及びＡＢ３が、ヒトＴ細胞による多発性骨髄腫（ＭＭ）細胞株溶解を媒介する効力を、リダイレクトＴ細胞傷害性（ＲＴＣＣ）アッセイにおいて測定した。５つのＭＭ細胞株（（ＮＣＩ−Ｈ９２９、ＭＭ１Ｓ、ＭＯＬＰ８、Ｕ２６６Ｂ１、ＭＣ１１６）及びＢＣＭＡ−陰性対照細胞株（ＮＡＬＭ６）を、標的細胞として使用した。
【１１６２】
８．８．２．材料及び方法
ＢＣＭＡ＋  ＭＭ細胞株（ＮＣＩ−Ｈ９２９、ＭＭ１Ｓ、ＭＯＬＰ８、Ｕ２６６Ｂ１、ＭＣ１１６）並びにＢＣＭＡ−対照細胞株（ＮＡＬＭ６）を、ルシフェラーゼを構成的に発現するようにレンチウイルス粒子（ＧｅｎＴａｒｇｅｔ  Ｉｎｃ，Ｃａｔ  ＃  ＬＶＰ４３５）を用いて形質導入した。ＢＣＭＡの細胞表面発現を、ＢＶ４２１標識抗ＢＣＭＡ  Ａｂ（クローン１９Ｆ２、Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ  ３５７５２０を用いてフローサイトメトリーによって決定し、データを、ＢＤ  ＬＳＲＦｏｒｔｅｓｓａにおいて取得し、ＦｌｏｗＪｏ、ｖ１０）を用いて分析した。
【１１６３】
ヒトＴ細胞を、健康なヒトドナーの末梢血から単離した。まず、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を、Ｆｉｃｏｌｌ−Ｐａｑｕｅ  ＰＬＵＳ（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  ＃１７−１４４０−０２）密度勾配を用いて、ドナー血液から分画した。次に、Ｔ細胞を、製造業者の推奨プロトコル（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ  ＃１３０−０９６−５３５）に従って、負の選択（ｎｅｇａｔｉｖｅ  ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ）によってＰＢＭＣから単離した。一部の試験では、新鮮に単離したＴ細胞を、３：１又は６：１のエフェクター：標的（Ｅ：Ｔ）細胞比で、ＲＴＣＣアッセイにおいてエフェクター細胞として直接使用した。他の試験では、単離されたＴ細胞を、９日間にわたってヒトＴ−Ａｃｔｉｖａｔｏｒ  ＣＤ３／ＣＤ２８  Ｄｙｎａｂｅａｄｓ（Ｇｉｂｃｏ  ＃１１１３２Ｄ）を用いてさらに増殖させ、次に、磁気的にビーズを取り除き、液体窒素中で生存凍結アリコートとして貯蔵した。増殖したＴ細胞を、ＲＴＣＣアッセイにおいてエフェクターＴ細胞として使用し、ここで、それらを凍結アリコートから解凍し、計数し、３：１のエフェクター：標的（Ｅ：Ｔ）細胞比で直ぐに使用した。
【１１６４】
新鮮なＴ細胞を用いたＲＴＣＣアッセイでは、標的細胞を、Ｔ細胞培地（ＴＣＭ）中でＣｏｓｔａｒ  ９６ウェルプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ  ３９０４）において７５，０００個又は１５０，０００個の細胞／ウェルのエフェクター細胞（新鮮に単離したＴ細胞）と一緒に２５，０００個の細胞／ウェルで平板培養した。増殖したＴ細胞を用いたＲＴＣＣアッセイでは、標的細胞を、ＴＣＭ中で３８４ウェルプレート（Ｃｏｓｔａｒ  ３７６５）において２２，５００個の細胞／ウェルのエフェクター細胞（増殖したＴ細胞）と一緒に７，５００個の細胞／ウェルで平板培養した。ＴＣＭは、１０％のＦＢＳ、２ｍＭのＬ−グルタミン、０．１ｍＭの非必須アミノ酸、１ｍＭのピルビン酸ナトリウム１０ｍＭのＨＥＰＥＳ、０．０５５ｍＭの２−メルカプトエタノール（それぞれＧｉｂｃｏ  ２２４０００８９、１６１４０、２５０３０−０８１、１１１４０−０５０、１１３６０−０７０、１５６３０−０８０、２１９８５−０２３）の添加を伴い、ＲＰＭＩ／１６４０ベースである。二重特異性抗体を、連続希釈で個別に希釈し、ウェルに加えた。アッセイを、４８時間（新鮮なＴ細胞）又は２０時間（増殖したＴ細胞）にわたって３７℃／５％のＣＯ２でインキュベートした後、製造業者のプロトコルに従って標的細胞生存（ＢｒｉｇｈｔＧｌｏ，Ｐｒｏｍｅｇａ  ＃  Ｅ２６５０）を示すためにルシフェラーゼ活性を測定した。Ｔ細胞又は抗体を含まない標的細胞のみが、１００％のルシフェラーゼ活性（１００％の生存）のための対照として用いられた。データを、Ｓｐｏｔｆｉｒｅを用いて分析し、ここで、ＥＣ５０値を、ロジスティック回帰カーブフィッティングを用いて計算した。
【１１６５】
８．８．３．結果
ＮＣＩ−Ｈ９２９は、高いレベルのＢＣＭＡ、ＭＭ１Ｓ、ＭＯＬＰ８を発現し、Ｕ２６６Ｂ１は、中レベルのＢＣＭＡ発現を有する一方、ＭＣ１１６は、低いレベルの細胞表面ＢＣＭＡを示した（図１７）。対照細胞株ＮＡＬＭ６は、検出可能なＢＣＭＡ発現を示さなかった。試験される全ての２価及び３価抗体は、ＢＣＭＡ＋多発性骨髄腫（ＭＭ）細胞に対して選択的であり、増殖したＴ細胞によって強力なＲＴＣＣ活性を媒介した（図１８）。全ての２価抗体間で、ＲＴＣＣ活性は、抗ＢＣＭＡ親和性と相関する。中程度の親和性の抗ＢＣＭＡ結合剤では、ＢＣＭＡ−ＣＤ３  ＡＢ２、３価ＡＢ２が、ＢＣＭＡｍｅｄ及びＢＣＭＡｌｏｗ  ＭＭ細胞において２価ＡＢ２より優れた活性を示したが、ＢＣＭＡｈｉｇｈ  ＭＭ細胞では示さなかった。高い又は低い親和性の抗ＢＣＭＡ結合剤では、ＢＣＭＡ−ＣＤ３  ＡＢ３及びＡＢ１、３価形式が、試験される細胞株の大部分にわたって２価形式を上回る明らかな利点を示さなかった。同様に、新鮮に単離したＴ細胞が、エフェクター細胞として使用される場合、ＢＣＭＡ−ＣＤ３抗体は、ＢＣＭＡ＋  ＭＭ細胞株においてＲＴＣＣを媒介し（図１９Ａ及び図１９Ｂ）、これは、Ｔ細胞のインビトロでの予めの活性化が必要とされなかったことを示す。
【１１６６】
８．９．実施例９：ＢＣＭＡ＋  ＭＭ細胞の存在下におけるＢＣＭＡ×ＣＤ３二重特異性抗体誘発性Ｔ細胞活性化
８．９．１．概説
一部のＭＭ患者は、低いＴ細胞数及び高い腫瘍組織量を有し、ＭＭ細胞がＴ細胞傷害性を抑制するチェックポイント分子を発現することが示された。したがって、Ｔ細胞活性化及び増殖は、二重特異性Ａｂ投与の望ましい結果である。標的細胞の存在下で、二重特異性抗体ＡＢ１、ＡＢ２及びＡＢ３によって媒介されるサイトカイン分泌及びＴ細胞増殖を測定することにより、Ｔ細胞活性化の程度を決定した。
【１１６７】
８．９．２．材料及び方法
８．９．２．１．サイトカイン分泌
サイトカインを、４８時間の時点で新鮮なＴ細胞を用いてＲＴＣＣアッセイの上清から測定した。９６ウェルプレートを、５分間にわたって５００×ｇで遠心分離し、上清を採取し、サイトカイン定量を、製造業者のプロトコルに従ってＶ−Ｐｌｅｘ  Ｐｒｏ−ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  Ｐａｎｅｌ  Ｉ（ヒト）Ｋｉｔ（ＭｅｓｏＳｃａｌｅ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ，Ｃａｔ  ＃  Ｋ１５０４９Ｄ−４）を用いて行った。
【１１６８】
８．９．２．２．Ｔ細胞増殖
ＭＭ１Ｓ及びＭＣ１１６標的細胞を、アッセイ当日に照射し、Ｔ細胞培地（ＴＣＭ）中でＣｏｓｔａｒ  ９６ウェルプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ，Ｃａｔ  ＃  ３９０４）においてウェル当たり６０，０００個の細胞の密度で平板培養した。Ｔ細胞を、実施例８に記載されるように健康なドナー血液から新鮮に単離した。単離されたＴ細胞を、製造業者のプロトコルに従って２．５ｕＭのＣｅｌｌ  Ｔｒａｃｅ  Ｖｉｏｌｅｔで標識し、次に、１：１のＥ：Ｔ比で標的細胞と共培養した。０．００５ｐＭ〜１０，０００ｐｍの範囲の希釈系列のＢＣＭＡ−ＣＤ３抗体を、細胞に加え、プレートを、９６時間にわたって５％のＣＯ２、３７℃のインキュベータ中でインキュベートした。その後、細胞を採取し、製造業者の指示に従ってヒトＴｒｕＳｔａｉｎ  ＦｃＸ（Ｆｃ  Ｂｌｏｃｋ）［Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ，Ｃａｔ  ＃  ４２２３０２］で処理し、次に、４Ｃで３０分間にわたるインキュベーションによってＦｉｘａｂｌｅ  Ｖｉａｂｉｌｉｔｙ  Ｄｙｅ  ｅＦｌｏｕｒ  ７８０（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｃａｔ  ＃  ６５−０８６５−１４）で染色した。次に、細胞を洗浄し、４Ｃで３０分間にわたるインキュベーションによってＰｅｒＣＰ−Ｃｙ５．５コンジュゲート抗ヒトＣＤ３  ｍＡｂ（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ，Ｃａｔ  ＃  ３１７３３６）で染色した。次に、サンプルをＢＤ  ＬＳＲ  Ｆｏｒｔｅｓｓａにおいて電気泳動にかけ、ＦｌｏｗＪｏを用いて分析して、ＣＤ３染色及びＣｅｌｌ  Ｔｒａｃｅ  Ｖｉｏｌｅｔ色素の希釈に基づいて増殖したＣＤ３＋Ｔ細胞％を決定した。
【１１６９】
８．９．３．結果
全ての２価及び３価ＢＣＭＡ−ＣＤ３抗体は、ＢＣＭＡ＋  ＭＭ１Ｓ又はＭＣ１１６細胞との共培養後、Ｔ細胞からのＩＦＮγ及びＴＮＦαサイトカイン分泌を誘導することができる（図２０Ａ〜Ｂ）。分泌されるサイトカインのレベルは、二重特異性抗体の親和性に相関していた。３価抗体が、対応する２価抗体より低いＴＮＦα分泌を誘導したことは注目に値する。非標的化ＲＳＶ−ＣＤ３抗体を、陰性対照として使用し、最小のサイトカイン分泌が、試験される最も高い濃度を除いて検出された。データは、ＢＣＭＡ−ＣＤ３抗体によって媒介されるＴ細胞の標的特異的なエンゲージメント（ｅｎｇａｇｅｍｅｎｔ）及び活性化のみが、堅固なサイトカイン分泌を誘導することを示した。
【１１７０】
６つ全てのＢＣＭＡ−ＣＤ３抗体が、ＢＣＭＡ＋  ＭＭ細胞株の存在下で用量依存的にＴ細胞増殖を促進した（図２１）。陰性対照ＲＳＶ−ＣＤ３  Ａｂは、高い濃度（＞１μＭ）でのみＴ細胞増殖を刺激し、これは、ＢＣＭＡ−及びＣＤ３−結合アームの同時のエンゲージメントが、ＲＴＣＣ活性及びサイトカイン分泌と一致して、Ｔ細胞増殖の強力な誘導に必要とされることを示す。２価形式では、Ｔ細胞増殖の効力は、抗体の親和性と相関していた。さらに、ＢＣＭＡｌｏｗ  ＭＣ１１６細胞がＢＣＭＡｍｅｄ  ＭＭ１Ｓ細胞より低い効率のＴ細胞増殖を誘導したため、増殖の程度は、細胞表面ＢＣＭＡの密度に依存し得る。
【１１７１】
８．１０．実施例１０：γセクレターゼ阻害剤による処理に対する多発性骨髄腫細胞株ＫＭＳ１１の応答の時間経過
８．１０．１．概説
ＧＳＩによるＭＭ細胞の処理は、循環可溶性因子としてのＢＣＭＡの流出を阻害して、細胞表面におけるＢＣＭＡの蓄積をもたらす。ＧＳＩ活性の動態を決定するために、ＫＭＳ１１細胞をＧＳＩで処理した。サンプルを４２時間の時間経過にわたって収集して、ｓＢＣＭＡ（流出ＢＣＭＡ）及びｍＢＣＭＡ（膜ＢＣＭＡ）を測定した。細胞がいかに迅速にＧＳＩ処理に応答するかを決定するため及びＧＳＩ処理の効果が前処理及び薬剤の除去後にどの程度長く持続するかを決定するために、試験を行った。
【１１７２】
８．１０．２．材料及び方法
８．１０．２．１．ＫＭＳ１１細胞のＧＳＩ処理
ＫＭＳ１１細胞を、ウェル当たり２０％のＦＢＳ（Ｇｉｂｃｏ  ＃１１８７５−０８５、Ｓｅｒａｄｉｇｍ  ＃１５００−５００）を補充した４ｍＬのＲＰＭＩ１６４０中で、４×１０６個の細胞／ウェルで６ウェルプレートにおいて培養した。ＧＳＩストック溶液を、１０ｍＭのＤＭＳＯ中で調製し、ＬＹ４１１５７５（Ｓｉｇｍａ  ＃ＳＭＬ０５０６）について２ｎＭ又はＰＦ０３０８４０１４（Ｓｅｌｌｅｃｋｃｈｅｍ  ＃Ｓ８０１８）について２００ｎＭのそれぞれの最終濃度で細胞に加えた。細胞を３７℃／５％のＣＯ２でインキュベートし、サンプルを、以下の時点：０、１、２、４、６、８、１２、１８、２４、３０及び４２時間の時点で収集した。収集されたサンプルを、以下に概説されるように、ＥＬＩＳＡ及びフローサイトメトリーによってＢＣＭＡ発現について評価した。
【１１７３】
前処理試験を、ＫＭＳ１１細胞をＬＹ４１１５７５のみで一晩（２２時間）処理したことを除いて上述されるように行った。細胞を、３つの体積の増殖培地で２回洗浄し、元の４ｍＬの体積になるまでＧＳＩを含まない新鮮な増殖培地を用いて再度平板培養した。細胞を３７℃／５％のＣＯ２でインキュベートし、サンプルを、以下の時点：０、１、２、４、６、８、１２、１８、２４、３０及び４２時間の時点で収集した。０時間は、一晩の処理及び洗浄後の開始時点である。
【１１７４】
８．１０．２．２．フローサイトメトリーによるインビトロでのＢＣＭＡ膜発現の分析
各収集されたサンプルについて、細胞を遠心分離によってペレット化した。上清を、新しいプレートに移し、ＥＬＩＳＡによる後の分析のために−２０℃で凍結させた。細胞ペレットを、ＢＳＡ（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ  ＃１３０−０９１−２２２、１３０−０９１−３７６）を含有する５０μＬのＭＡＣＳ緩衝液中で再懸濁させ、４℃で３０分間にわたって抗ＢＣＭＡ−ＰＥ（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ  ＃３５７５０４、３：５０の希釈）で染色した。細胞を洗浄し、１０％の中性緩衝ホルマリン（ＶＷＲ  ＃１６００４−１２６）中で２０分間固定し、全ての時点が収集されるまで４℃で貯蔵した。全ての時点からのサンプルを、ＢＤ  ＬＳＲ  Ｆｏｒｔｅｓｓａ機器におけるフローサイトメトリーによって一緒に分析した。ＦｌｏｗＪｏ  ｖ１０ソフトウェアを分析に使用した。ＧＳＩ処理されたウェルについてのＰＥ（ＢＣＭＡ）の平均蛍光強度（ＭＦＩ）の比率を、非処理のＫＭＳ１１ウェルについてのＭＦＩで除算した。これらの比率を、ＧＳＩの濃度に対してＴｉｂｃｏ  Ｓｐｏｔｆｉｒｅ又はＧｒａｐｈｐａｄ  Ｐｒｉｓｍにおいてプロットした。
【１１７５】
ＢＣＭＡの受容体密度が提供された場合、ＫＭＳ１１細胞における抗ＢＣＭＡ抗体結合能（ＡＢＣ）を、供給業者から供給されたプロトコルに従ってＱｕａｎｔｕｍ  Ｓｉｍｐｌｙ  Ｃｅｌｌｕｌａｒ  ｂｅａｄｓ（Ｂａｎｇｓ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ  ＃８１５）を用いて決定した。ＡＢＣは、細胞当たりの受容体の量の推定値である。
【１１７６】
８．１０．２．３．ＥＬＩＳＡによる流出ＢＣＭＡレベルの測定
様々な時点で収集及び凍結された上清中のｓＢＣＭＡレベルを、供給業者から供給されたプロトコル（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  ＃ＤＹ１９３）に従ってＥＬＩＳＡによって決定した。簡潔に述べると、組み換えヒトＢＣＭＡ−Ｆｃタンパク質が、キットに含まれており、それを用いて、標準曲線を生成した。収集されたサンプルをアッセイし、ｓＢＣＭＡ濃度を、標準曲線から推定した。キットによって決定される定量された値を、５．５で除算して、標準曲線としてキットに使用されるＢＣＭＡ−Ｆｃ融合タンパク質（３２，５５４．６Ｄａ）と内因的に流出されるＢＣＭＡ細胞外ドメインの質量（５，８９９．３Ｄａ）との間の分子量の差を補正した。結果を、ＧＳＩの濃度に対してＴｉｂｃｏ  Ｓｐｏｔｆｉｒｅ又はＧｒａｐｈｐａｄ  Ｐｒｉｓｍにおいてプロットした。
【１１７７】
８．１０．３．結果
ＫＭＳ１１細胞からのｓＢＣＭＡ濃度は、ＬＹ４１１５７５又はＰＦ０３０８４０１４（図２２Ａの黒色の線）で処理される場合、経時的な増加を示さなかったが、ｓＢＣＭＡの着実な増加が、非処理細胞（図２２Ａ、灰色の線）から経時的に観察された。ｍＢＣＭＡレベルが、ＬＹ４１１５７５又はＰＦ０３０８４０１４（図２２Ｂ、黒色の線）で処理されたＫＭＳ１１細胞について経時的に増加したが、非処理のＫＭＳ１１細胞については一定のままであった。
【１１７８】
結果は、ＧＳＩが迅速に作用することを示し、膜ＢＣＭＡの増加が１時間程度で観察され、６時間の時点で効果がほぼ最大であった。ＧＳＩは、細胞培養物中で３０時間超にわたって流出ＢＣＭＡの阻害及び膜ＢＣＭＡレベルの増加を続けた。
【１１７９】
ＧＳＩ前処理及び除去（洗浄）後のＫＭＳ１１細胞からのｓＢＣＭＡ濃度は、時間とともに非常にゆっくりとした増加を伴い、低いままであった一方、非処理細胞は、ｓＢＣＭＡのはるかに速い蓄積を示した（図２３Ａ）。非処理細胞中のｍＢＣＭＡレベルは、経時的に一定のままであった（図２３Ｂ）。対照的に、ＧＳＩ処理されたＫＭＳ１１細胞におけるｍＢＣＭＡ密度は、４時間で最大レベルに達し、３０時間の時点まで非処理細胞より約１２倍高いレベルで持続してから低下した（図２３Ｂ）。
【１１８０】
データは、一晩の処理により、ｓＢＣＭＡ及びｍＢＣＭＡに対するＧＳＩの効果が、薬剤の除去（洗浄）後に最大で３０時間持続し得ることを示した。
【１１８１】
８．１１．実施例１１：ＧＳＩと組み合わせた２価ＡＢ３の活性
８．１１．１．概説
リダイレクトＴ細胞傷害性（ＲＴＣＣ）アッセイを、ＧＳＩと組み合わせて投与されるときの２価ＡＢ３活性の向上を試験するために行った。アッセイを、８×８マトリクス形式で２価ＡＢ３及び３つの異なるＧＳＩの様々な用量範囲の組合せを用いて行った。
【１１８２】
８．１１．２．材料及び方法
８．１１．２．１．健康なヒトＴ細胞の単離及び増殖
ヒトＴ細胞を、健康なヒトドナーの末梢血から単離した。まず、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を、Ｆｉｃｏｌｌ−Ｐａｑｕｅ  ＰＬＵＳ（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  ＃１７−１４４０−０２）密度勾配を用いて、ドナー血液から分画した。次に、Ｔ細胞を、製造業者の推奨プロトコル（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ  ＃１３０−０９６−５３５）に従って、負の選択によってＰＢＭＣから単離した。単離されたＴ細胞を、９日間にわたってヒトＴ−Ａｃｔｉｖａｔｏｒ  ＣＤ３／ＣＤ２８  Ｄｙｎａｂｅａｄｓ（Ｇｉｂｃｏ  ＃１１１３２Ｄ）を用いてさらに増殖させ、次に、磁気的にビーズを取り除き、液体窒素中で生存凍結アリコートとして貯蔵した。増殖したＴ細胞を、ＲＴＣＣアッセイにおいてエフェクターＴ細胞として使用し、ここで、それらを凍結アリコートから解凍し、計数し、３：１のエフェクター：標的（Ｅ：Ｔ）細胞比で直ぐに使用した。
【１１８３】
８．１１．２．２．ＲＴＣＣアッセイ
標的ＭＭ細胞株ＫＭＳ１１を、細胞生存／生存率を測定するのに使用されるルシフェラーゼを構成的に発現するように形質導入した。ＫＭＳ１１細胞をペレット化し、平板培養の直前に新鮮な培地中で再懸濁させて、存在していた可能性のある基礎レベルの流出ＢＣＭＡを除去した。２５μＬのＴＣＭ中の２，５００個のＫＭＳ１１−ｌｕｃ標的細胞を、３８４ウェルプレートのウェルに加えた。５０ｎＬの連続希釈された２価ＡＢ３及びＧＳＩ溶液（ＬＹ４１１５７５、ＰＲ０３０８４０１４及びＢＭＳ０７０８１６３）を、アッセイプレートの対応するウェルに音響的に分配した。上述されるように、７，５００個の増殖したＴ細胞を、２０μＬのＴＣＭ中のアッセイプレートの対応するウェルに加えた。アッセイを、２０時間にわたって３７℃／５％のＣＯ２でインキュベートした後、製造業者のプロトコルに従って標的細胞生存（ＢｒｉｇｈｔＧｌｏ，Ｐｒｏｍｅｇａ  ＃  Ｅ２６５０）を示すためにルシフェラーゼ活性を測定した。Ｔ細胞又は抗体を含まない標的細胞のみ（ＫＭＳ１１）が、対照として働き、１００％のルシフェラーゼ活性（１００％の生存）を表す。データをプロットし、Ｓｐｏｔｆｉｒｅを用いて分析し、ここで、ＥＣ５０値を、シグモイド、４−パラメータ非線形回帰カーブフィッティングを用いて計算した。
【１１８４】
８．１１．３．結果
２価ＡＢ３は、ＲＴＣＣアッセイにおいてＫＭＳ１１細胞死に対する用量依存的効果を示した。ＧＳＩ濃度が、２価ＡＢ３の存在下で増加したため、反応曲線が左にシフトし、３つのＧＳＩ：ＬＹ４１１５７５（図２４Ａ）、ＰＦ０３０８４０１４（図２４Ｂ）及びＢＭＳ０７０８１６３（図２４Ｃ）のそれぞれと組み合わせて起こった。
【１１８５】
７．８ｐＭ以下のＬＹ４１１５７５は、２価ＡＢ３活性に対する効果を与えず、３１．２ｐＭでわずかな効果を与え、１２５ｐＭ以上の濃度で２価ＡＢ３の効力に対する顕著な向上を与えた。同様に、ＰＦ０３０８４０１４は、３ｎＭでわずかな向上及び１２ｎＭ以上で顕著な向上を示した。ＢＭＳ−７０８１６３については、わずかな向上が８ｎＭで観察され、顕著な向上が３１ｎＭ以上で観察された。ＧＳＩの組合せによる２価ＡＢ３の効力の最大の向上は、１０〜１５倍である（図３Ｃ中のＥＣ５０値）。これらの結果は、２価ＡＢ３のＲＴＣＣ効力が、ＧＳＩと組み合わせて投与される場合に相乗的に向上されたことを実証した。
【１１８６】
８．１２．実施例１２：ＢＣＭＡ流出阻害、Ｎｏｔｃｈシグナル伝達阻害のためのＧＳＩ有効用量範囲及び２価ＡＢ３との相乗効果
８．１２．１．概説
ＧＳＩの有効な用量範囲を重ね合わせて、比較するために、同じＧＳＩ濃度を、異なるアッセイにおいて使用した。ＫＭＳ１１細胞のｓＢＣＭＡ及びｍＢＣＭＡに対するＧＳＩの効果を、２価ＡＢ３と組み合わせて使用される同じ濃度と一致させるために再度測定した。ＮＯＴＣＨ阻害のためのＧＳＩの有効な用量範囲を決定するために、ＨＰＢ−ＡＬＬ細胞をＧＳＩで処理し、ＮＯＴＣＨ標的転写産物のｍＲＮＡを評価した。２価ＡＢ３（図２４）のＲＴＣＣ  ＥＣ５０値に対するＧＳＩの効果を、有効な用量範囲を重ね合わせて、比較するために、ＧＳＩの濃度に対してプロットした。
【１１８７】
８．１２．２．材料及び方法
８．１２．２．１．ＫＭＳ１１細胞のＧＳＩ処理
２０％のＦＢＳ（Ｇｉｂｃｏ  ＃１１８７５−０８５，Ｓｅｒａｄｉｇｍ  ＃１５００−５００）を補充されたＲＰＭＩ１６４０中のＧＳＩの１２点、５倍の連続希釈を含む１００μＬの最終体積で、ウェル当たり５０，０００個の細胞で、ＫＭＳ１１細胞を、９６ウェルプレートにおいて培養した。希釈前のＬＹ４１１５７５（Ｓｉｇｍａ  ＃ＳＭＬ０５０６）の開始濃度は、１μＭであった。希釈前のＰＦ０３０８４０１４（Ｓｅｌｌｅｃｋｃｈｅｍ  ＃Ｓ８０１８）及びＢＭＳ−７０８１６３（Ｓｅｌｌｅｃｋｃｈｅｍ  ＃Ｓ１２６２）の開始濃度は、１０μＭであった。細胞を、３７℃／５％のＣＯ２で２０時間にわたってインキュベートした。細胞をペレット化し、上清を、流出ＢＣＭＡレベルのＥＬＩＳＡ測定のために収集し、細胞ペレットを、実施例１０に記載される方法に従って、ＢＣＭＡ膜発現レベルのフローサイトメトリー評価のために染色した。結果を、Ｔｉｂｃｏ  Ｓｐｏｔｆｉｒｅにおいてプロットした。
【１１８８】
８．１２．２．２．ＮＯＴＣＨシグナル伝達阻害アッセイ
Ｔ細胞白血病細胞株ＨＢＰ−ＡＬＬ（ＤＳＭＺ  ＃ＡＣＣ４８３）を培養し、ＫＭＳ１１細胞について上述されるのと同じようにＧＳＩで処理した。細胞を、３７℃／５％のＣＯ２で２９時間にわたってインキュベートし、ペレット化し、緩衝液ＲＬＴ（Ｑｉａｇｅｎ）で溶解させた。ＲＮＡを、供給業者から供給されたプロトコルに従ってＲＮｅａｓｙ  ｍｉｎｉ（Ｑｉａｇｅｎ  ＃７４１０６）を用いて精製した。得られたＲＮＡを用いて、供給業者から供給されたプロトコル（ＡＢＩ  ＃４３２２１７１）に従ってｃＤＮＡを合成した。鋳型の正規化のためにヒトシクロフィリンＡ内在性コントロール（ＡＢＩ  ４３２６３１６ＲＥ）とそれぞれ多重化された、下流のＮｏｔｃｈ標的遺伝子ＨＥＳ１及びＤＴＸ１（ＡＢＩ  ＃  Ｈｓ＿００１７８７８．ｍ１、Ｈｓ＿０１１１４１１３．ｍ１）の転写レベルを、ＴａｑＭａｎ  ｕｎｉｖｅｒｓａｌ  ＰＣＲ  ｍａｓｔｅｒ  ｍｉｘ（ＡＢＩ  ４３０４４３７）を用いて、供給業者から供給されたプロトコルに従って、ＡＢＩ７９００機器におけるｑＰＣＲによって評価した。得られた閾値サイクル（ＣＴ）値を用いて、非処理対照と比較した各遺伝子の相対的な発現を決定した。各ウェルについて、内在性コントロールのＣＴを、標的遺伝子のＣＴから差し引いた（デルタＣＴ、ΔＣＴ）。次に、非処理対照ウェルのデルタＣＴを、処理されたウェルのデルタＣＴから差し引いた（デルタデルタＣＴ、ΔΔＣＴ）。各サイクルで積の２倍である、ＰＣＲの対数増幅を補正するために、相対的な発現レベルが、２−ΔΔＣＴとして表される。非処理のウェルは、１の相対的な発現を有し；処理時の発現の低下は、１未満の相対的な発現レベルを有することになる。相対的な発現レベルを、Ｔｉｂｃｏ  Ｓｐｏｔｆｉｒｅにおいてプロットした。
【１１８９】
８．１２．２．３．ＲＴＣＣ  ＥＣ５０値
実施例１１からの２価ＡＢ３及びＧＳＩの組合せからのデータ（図２４）をプロットし、Ｓｐｏｔｆｉｒｅを用いて分析し、ここで、ＥＣ５０値を、シグモイド、４−パラメータ非線形回帰カーブフィッティングを用いて計算した。
【１１９０】
８．１２．３．結果
同じ用量範囲での、ｓＢＣＭＡ及びｍＢＣＭＡ（ＫＭＳ１１細胞）、Ｎｏｔｃｈシグナル伝達（ＨＢＰ−ＡＬＬ細胞）及び２価ＡＢ３（ＫＭＳ１１細胞）のＲＴＣＣ活性に対するＧＳＩの用量反応曲線をアライメントした。ＧＳＩ処理は、用量依存的に、ＫＭＳ１１細胞におけるｓＢＣＭＡを阻害し、ｍＢＣＭＡ発現を増加させた（図２５Ａ）。２価ＡＢ３のＲＴＣＣ活性を向上させるＧＳＩの最小濃度は、ＢＣＭＡの流出を減少させるのに必要とされる濃度よりわずかに高かった。予想どおり、２価ＡＢ３の最も高い相乗効果が、ｓＢＣＭＡ及びｍＢＣＭＡの最大の効果が観察された場合と同じ濃度で達成された（図２５Ａ；図２５Ｃ）。同じ有効な用量範囲（破線によって描かれている）内で、Ｎｏｔｃｈシグナル伝達阻害が、濃度依存的に観察された（図２５Ｂ）。
【１１９１】
８．１３．実施例１３：ＫＭＳ１１異種移植片モデルにおけるＧＳＩ処理に対するインビボ応答
８．１３．１．概説
理論によって拘束されるものではないが、ＢＣＭＡ結合分子（例えば、ＢＢＭ）と組み合わせて投与されたＧＳＩが、可溶性ＢＣＭＡの量を減少させ、ＢＣＭＡ結合分子の結合に利用可能な膜結合ＢＣＭＡの量を増加させることにより、ＢＣＭＡ発現に関連する疾患及び障害を治療する際のＢＣＭＡ結合分子の有効性を増大するものと考えられる。ＫＭＳ１１異種移植片モデルにおいてインビボでのｓＢＣＭＡ及びｍＢＣＭＡに対するＧＳＩの効果を評価するために、試験を行った。
【１１９２】
８．１３．２．材料及び方法
８．１３．２．１．インビボＧＳＩ処理
０日目に、ＫＭＳ１１−Ｌｕｃ細胞を採取し、２５×１０６個の細胞／ｍＬの濃度で、Ｈａｎｋｓ  Ｂａｌａｎｃｅｄ  Ｓａｌｔ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ（ＨＢＳＳ）及び５０％のマトリゲル溶液中で懸濁させた。約６週齢の雌ＮＯＤ．Ｃｇ−Ｐｒｋｄｃｓｃｉｄ  Ｉｌ２ｒｇｔｍ１Ｗｊｌ／ＳｚＪマウス（ＮＳＧマウス）（Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，ＭＥ，ＵＳＡ）に、右脇腹に５×１０６個のＫＭＳ１１−Ｌｕｃ細胞ＳＱを送達するために２００μＬの細胞懸濁液を皮下（ＳＱ）移植した。腫瘍接種の７日後に、各マウスに、側部尾静脈への静脈内（ＩＶ）注入により、１００μＬ中１０×１０６個の末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）の養子免疫伝達（ＡｄＴ）を与えた。ＰＢＭＣを、ヒトｌｅｕｋｏｐａｋから予め単離し、凍結させ、使用するまで気相液体窒素タンク中で、Ｃｒｙｏｓｔｏｒ１０培地中で貯蔵した。ＡｄＴの直前に、ＰＢＭＣを解凍し、Ｈａｎｋｓ  Ｂａｌａｎｃｅｄ  Ｓａｌｔ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ（ＨＢＳＳ）中１００×１０６個の細胞／ｍｌの濃度で懸濁させた。腫瘍組織量（ＴＢ）が、平均約４００ｍｍ３（１５日）に達したとき、動物を無作為に分け、５日間にわたって１０ｍＬ／ｋｇを１日２回（ＢＩＤ）投与されるビヒクル又は１５０ｍｇ／ｋｇ又はＰＦ０３０８４０１４のいずれかを与えた。最後の投与の１、７、２４及び４８時間後の時点で、動物のコホート（ｎ＝３）を安楽死させ、腫瘍及び血清を取り出して、膜ＢＣＭＡ（腫瘍ＰＤ）及び流出／可溶性ＢＣＭＡ（血清）のレベルを評価した。
【１１９３】
腫瘍組織量及び体重を週に２回記録した。腫瘍組織量を、キャリパー測定によって測定し、ＷｉｎＷｅｄｇｅにおいて記録した。体重を測定し、ＷｉｎＷｅｄｇｅにおいて記録した。
【１１９４】
８．１３．２．２．フローサイトメトリーによる膜ＢＣＭＡの評価
切除した腫瘍からの単一細胞懸濁液を得るために、組織をはさみで細かく切った後、ＧｅｎｔｌｅＭＡＸ（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ）を用いて、Ｌｉｂｅｒａｓｅ（商標）研究グレードコラゲナーゼ（Ｒｏｃｈｅ）及びＤＮａｓｅ  ｌリコンビナーゼ（Ｒｏｃｈｅ）とともにＲＰＭＩ（Ｇｉｂｃｏ，Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を含有する解離緩衝液中で機械的に均質化した。水又はビーズ浴中で、３７℃で５分間のインキュベーション後、ホモジネートを１０％のＦＢＳでクエンチし、７０μＭの篩（３５２３５０、Ｆａｌｃｏｎ）でろ過した。単一細胞懸濁液の濃度を、Ｖｉ−Ｃｅｌｌ（Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｃｏｕｌｔｅｒ）において測定し、細胞を、１２００ｒｐｍで５分間にわたって遠心分離によってペレット化した。上清を廃棄し、細胞ペレットを４００μＬのＲＰＭＩ（Ｇｉｂｃｏ，Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）中で再懸濁させた。腫瘍細胞を、５００，０００〜２００万個／ウェルの細胞密度で、１００μＬ／ウェルの体積で平板培養した。
【１１９５】
細胞表面染色のために、ライブ／デッド（ｌｉｖｅ／ｄｅａｄ）染色を、ＤＰＢＳ中で平板培養したサンプルに加え、３０分間インキュベートした。ライブ／デッド（ｌｉｖｅ／ｄｅａｄ）染色後、細胞を３０分間にわたって飽和濃度のマウスＦｃブロック（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）とともにインキュベートした後、表２８中のフローサイトメトリーパネルを用いてフルオロクロムコンジュゲート抗体とともに３０分間インキュベートした。
【１１９６】
【表１９８】
2021525715.tif 000283
【１１９７】
ブロック及び染色手順中、細胞を氷上に維持し、光から保護した。表面染色後、細胞を４％のＰＦＡ中で固定し、２００μＬの２％のＦＢＳ＋ＰＢＳ中で再懸濁させた。全てのサンプルを、試験の完了時にフローサイトメトリーによって一緒に分析した。データ取得を、ＬＳＲ−ＩＩフローサイトメーター（ＢＤ  ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）において行った。機械の性能を、ＤＩＶＡ中のＣｙｔｏｍｅｔｅｒ  Ｓｅｔｕｐプログラム（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を用いて毎日確認した。
【１１９８】
分析を、Ｔｒｅｅｓｔａｒ製のＦＬＯＷＪＯ  ｖ１０．０．７ソフトウェアを用いて行った。各分析について、対象とする集団を、形態学的パラメータ（全ての細胞：ＳＳＣ−Ａ対ＦＳＣ−Ａ、単一細胞：ＳＳＣ−Ｈ対ＳＳＣ−Ｗ）の組合せを用いて生白血球を同定するようにゲートし、ｅＦｌｕｏｒ７８０（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を用いて死細胞を除外した。マウスＣＤ４５特異的な標識を用いて、マウス血液細胞を除外し、ヒトＨＬＡ特異的な標識を用いて、ヒト細胞を単離及び同定した後、ヒトＢＣＭＡ特異的な標識抗体を用いて、腫瘍細胞におけるＢＣＭＡの膜レベルを同定した。各時点における非処理サンプルに対する処理サンプルにおけるＢＣＭＡ発現を、平均蛍光強度（ＭＦＩ）として報告した。
【１１９９】
８．１３．２．３．ＥＬＩＳＡによる流出ＢＣＭＡレベルの測定
血清中の流出ＢＣＭＡレベルを、実施例１０に記載されるようにＥＬＩＳＡによって測定した。
【１２００】
８．１３．３．結果
平均蛍光強度（ＭＦＩ）として測定される膜ＢＣＭＡレベルが、図２６に示される。ＳＥＭとともに平均データとして表される流出ＢＣＭＡレベルが、図２７に示される。ビヒクル対照と比較してＰＦＺ０３０８４０１４処理後にｍＢＣＭＡの１０倍の増加があった。この増加は、７時間の時点でずっと持続されていた。最後の投与後２４時間以上までには、ｍＢＣＭＡレベルは、ビヒクル対照について観察されたレベルと同様のレベルに低下された。ｓＢＣＭＡのレベルは、ＰＦＺ０３０８４０１４の最後の投与の２４時間後まで低下された。最後の投与後の２４〜４８時間において、ｓＢＣＭＡのレベルは、その後、増加し、ビヒクル処理動物について観察されるレベルと同等のレベルに戻った。ＧＳＩ処理が、ｍＢＣＭＡレベルを増加させ、ｓＢＣＭＡレベルを低下させることが分かったため、このインビボ試験の結果は、ＢＣＭＡの発現に関連する疾患及び障害を治療するためのＢＣＭＡ結合分子と組み合わせたＧＳＩの使用を支持するものである。
【１２０１】
８．１４．実施例１４：他のＢＣＭＡ−ＣＤ３二重特異性分子と比較した２価ＡＢ３
ｈ２Ｂ４＿Ｃ２９は、多発性骨髄腫の治療のために開発中のＢＣＭＡ−ＣＤ３二重特異性抗体である（国際公開第２０１６／０１６６６２９号パンフレットを参照）。ＫＭＳ１１及びＰＢＭＣ／Ｔ細胞共培養試験からの２価ＡＢ３及びｈ２Ｂ４＿Ｃ２９についての予備データは、２価ＡＢ３が、ｈ２Ｂ４＿Ｃ２９より低いレベルのサイトカイン誘導を媒介することを示し（図２８）、これは、ＡＢ３で処置された患者が、ｈ２Ｂ４＿Ｃ２９で処置された患者と比較してサイトカイン放出症候群の低下したリスクを有し得ることを示唆している。予備データは、ＫＭＳ１１細胞の存在下でｈ２Ｂ４＿Ｃ２９によって活性化されたＴ細胞が、２価ＡＢ３によって活性化されたＴ細胞より多くのＴＣＲ下方制御を媒介することも示し（データは示さず）、これは、２価ＡＢ３が、ｈ２Ｂ４＿Ｃ２９より持続された抗癌活性を示し得ることを示唆している。
【１２０２】
ＫＭＳ１１異種移植片モデルにおいて、いくつかの予備データは、２価ＡＢ３及びｈ２Ｂ４＿Ｃ２９が、ＥｎｇＭａｂ及びＪａｎｓｓｅｎ製のＢＣＭＡ−ＣＤ３二重特異性分子と比較してより高い抗腫瘍活性を有することを示唆している（データは示さず）。
【１２０３】
９．特定の実施形態、参考文献の引用
様々な特定の実施形態が示され、記載されているが、様々な変形形態が本開示の趣旨及び範囲から逸脱せずになされ得ることが理解されるであろう。本開示は、以下に記載される番号付けされた実施形態によって例示される。
１．ヒトＢＣＭＡに特異的に結合し、且つ表１Ａ−１、表１Ｂ−１、表１Ｃ−１、表１Ｄ−１、表１Ｅ−１、表１Ｆ−１、表１Ｇ−１、表１Ｈ−１、表１Ｉ−１、表１Ｊ−１、表１Ｋ−１（ａ）、表１Ｋ−１（ｂ）、表１Ｌ−１、表１Ｍ−１、表１Ｎ−１（ａ）又は表１Ｎ−１（ｂ）に記載されるＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２及びＣＤＲ−Ｌ３配列並びに表１Ａ−２、表１Ｂ−２、表１Ｃ−２、表１Ｄ−２、表１Ｅ−２、表１Ｆ−２、表１Ｇ−２、表１Ｈ−２、表１Ｉ−２、表１Ｊ−２、表１Ｋ−２、表１Ｋ−２、表１Ｌ−２、表１Ｍ−２、表１Ｎ−２又は表１Ｎ−２にそれぞれ記載される対応するＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含むＢＣＭＡ結合分子。
２．ヒトＢＣＭＡに特異的に結合し、且つ表１Ａ−１、表１Ｂ−１、表１Ｃ−１、表１Ｄ−１、表１Ｅ−１、表１Ｆ−１、表１Ｇ−１、表１Ｈ−１、表１Ｉ−１、表１Ｊ−１、表１Ｋ−１（ａ）、表１Ｌ−１、表１Ｍ−１又は表１Ｎ−１（ａ）に記載されるＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２及びＣＤＲ−Ｌ３配列並びに表１Ａ−２、表１Ｂ−２、表１Ｃ−２、表１Ｄ−２、表１Ｅ−２、表１Ｆ−２、表１Ｇ−２、表１Ｈ−２、表１Ｉ−２、表１Ｊ−２、表１Ｋ−２、表１Ｌ−２、表１Ｍ−２又は表１Ｎ−２にそれぞれ記載される対応するＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含むＢＣＭＡ結合分子。
３．表１Ａ−１に記載されるＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２及びＣＤＲ−Ｌ３配列並びに表１Ａ−２に記載される対応するＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む、実施形態１又は実施形態２に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４．表１Ｂ−１に記載されるＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２及びＣＤＲ−Ｌ３配列並びに表１Ｂ−２に記載される対応するＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む、実施形態１又は実施形態２に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５．表１Ｃ−１に記載されるＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２及びＣＤＲ−Ｌ３配列並びに表１Ｃ−２に記載される対応するＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む、実施形態１又は実施形態２に記載のＢＣＭＡ結合分子。
６．表１Ｄ−１に記載されるＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２及びＣＤＲ−Ｌ３配列並びに表１Ｄ−２に記載される対応するＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む、実施形態１又は実施形態２に記載のＢＣＭＡ結合分子。
７．表１Ｅ−１に記載されるＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２及びＣＤＲ−Ｌ３配列並びに表１Ｅ−２に記載される対応するＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む、実施形態１又は実施形態２に記載のＢＣＭＡ結合分子。
８．表１Ｆ−１に記載されるＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２及びＣＤＲ−Ｌ３配列並びに表１Ｆ−２に記載される対応するＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む、実施形態１又は実施形態２に記載のＢＣＭＡ結合分子。
９．表１Ｇ−１に記載されるＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２及びＣＤＲ−Ｌ３配列並びに表１Ｇ−２に記載される対応するＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む、実施形態１又は実施形態２に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１０．表１Ｈ−１に記載されるＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２及びＣＤＲ−Ｌ３配列並びに表１Ｈ−２に記載される対応するＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む、実施形態１又は実施形態２に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１１．表１Ｉ−１に記載されるＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２及びＣＤＲ−Ｌ３配列並びに表１Ｉ−２に記載される対応するＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む、実施形態１又は実施形態２に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１２．表１Ｊ−１に記載されるＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２及びＣＤＲ−Ｌ３配列並びに表１Ｊ−２に記載される対応するＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む、実施形態１又は実施形態２に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１３．表１Ｋ−１（ａ）に記載されるＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２及びＣＤＲ−Ｌ３配列並びに表１Ｋ−２に記載される対応するＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む、実施形態１又は実施形態２に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１４．表１Ｋ−１（ｂ）に記載されるＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２及びＣＤＲ−Ｌ３配列並びに表１Ｋ−２に記載される対応するＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む、実施形態１に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１５．表１Ｌ−１に記載されるＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２及びＣＤＲ−Ｌ３配列並びに表１Ｌ−２に記載される対応するＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む、実施形態１又は実施形態２に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１６．表１Ｍ−１に記載されるＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２及びＣＤＲ−Ｌ３配列並びに表１Ｍ−２に記載される対応するＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む、実施形態１又は実施形態２に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１７．表１Ｎ−１（ａ）に記載されるＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２及びＣＤＲ−Ｌ３配列並びに表１Ｎ−２に記載される対応するＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む、実施形態１又は実施形態２に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１８．表１Ｎ−１（ｂ）に記載されるＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２及びＣＤＲ−Ｌ３配列並びに表１Ｎ−２に記載される対応するＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列を含む、実施形態１に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１９．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、Ｃ１のものである、実施形態３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２０．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、Ｃ２のものである、実施形態３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２１．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、Ｃ３のものである、実施形態３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２２．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、Ｃ４のものである、実施形態３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２３．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、Ｃ５のものである、実施形態３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２４．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、Ｃ６のものである、実施形態３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２５．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、Ｃ７のものである、実施形態３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２６．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、Ｃ８のものである、実施形態３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２７．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、Ｃ９のものである、実施形態３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２８．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、Ｃ１０のものである、実施形態３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２９．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、Ｃ１１のものである、実施形態３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３０．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、Ｃ１２のものである、実施形態３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３１．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、Ｃ１３のものである、実施形態４に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３２．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、Ｃ１４のものである、実施形態４に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３３．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、Ｃ１５のものである、実施形態４に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３４．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、Ｃ１６のものである、実施形態４に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３５．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、Ｃ１７のものである、実施形態４に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３６．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、Ｃ１８のものである、実施形態４に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３７．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、Ｃ１９のものである、実施形態４に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３８．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、Ｃ２０のものである、実施形態４に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３９．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、Ｃ２１のものである、実施形態４に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４０．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、Ｃ２２のものである、実施形態４に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４１．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、Ｃ２３のものである、実施形態４に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４２．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、Ｃ２４のものである、実施形態４に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４３．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、Ｃ２５のものである、実施形態４に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４４．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、Ｃ２６のものである、実施形態４に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４５．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、Ｃ２７のものである、実施形態４に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４６．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、Ｃ２８のものである、実施形態４に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４７．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、ＡＢ１のものである、実施形態５〜１０のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
４８．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、ＡＢ２のものである、実施形態５〜１０のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
４９．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、Ｒ１Ｆ２のものである、実施形態５〜１０のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
５０．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、ＰＡＬＦ０３のものである、実施形態５〜１０のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
５１．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、ＰＡＬＦ０４のものである、実施形態５〜１０のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
５２．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、ＰＡＬＦ０５のものである、実施形態５〜１０のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
５３．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、ＰＡＬＦ０６のものである、実施形態５〜１０のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
５４．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、ＰＡＬＦ０７のものである、実施形態５〜１０のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
５５．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、ＰＡＬＦ０８のものである、実施形態５〜１０のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
５６．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、ＰＡＬＦ０９のものである、実施形態５〜１０のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
５７．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、ＰＡＬＦ１２のものである、実施形態５〜１０のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
５８．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、ＰＡＬＦ１３のものである、実施形態５〜１０のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
５９．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、ＰＡＬＦ１４のものである、実施形態５〜１０のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
６０．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、ＰＡＬＦ１５のものである、実施形態５〜１０のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
６１．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、ＰＡＬＦ１６のものである、実施形態５〜１０のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
６２．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、ＰＡＬＦ１７のものである、実施形態５〜１０のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
６３．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、ＰＡＬＦ１８のものである、実施形態５〜１０のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
６４．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、ＰＡＬＦ１９のものである、実施形態５〜１０のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
６５．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、ＰＡＬＦ２０のものである、実施形態５〜１０のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
６６．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、ＡＢ３のものである、実施形態１１〜１８のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
６７．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、ＰＩ−６１のものである、実施形態１１〜１８のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
６８．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、Ｈ２／Ｌ２−２２のものである、実施形態１１〜１８のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
６９．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、Ｈ２／Ｌ２−８８のものである、実施形態１１〜１８のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
７０．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、Ｈ２／Ｌ２−３６のものである、実施形態１１〜１８のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
７１．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、Ｈ２／Ｌ２−３４のものである、実施形態１１〜１８のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
７２．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、Ｈ２／Ｌ２−６８のものである、実施形態１１〜１８のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
７３．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、Ｈ２／Ｌ２−１８のものである、実施形態１１〜１８のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
７４．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、Ｈ２／Ｌ２−４７のものである、実施形態１１〜１８のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
７５．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、Ｈ２／Ｌ２−２０のものである、実施形態１１〜１８のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
７６．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、Ｈ２／Ｌ２−８０のものである、実施形態１１〜１８のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
７７．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、Ｈ２／Ｌ２−８３のものである、実施形態１１〜１８のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
７８．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、Ｈ３−１のものである、実施形態１１〜１８のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
７９．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、Ｈ３−２のものである、実施形態１１〜１８のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
８０．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、Ｈ３−３のものである、実施形態１１〜１８のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
８１．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、Ｈ３−４のものである、実施形態１１〜１８のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
８２．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、Ｈ３−５のものである、実施形態１１〜１８のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
８３．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、Ｈ３−６のものである、実施形態１１〜１８のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
８４．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、Ｈ３−７のものである、実施形態１１〜１８のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
８５．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、Ｈ３−８のものである、実施形態１１〜１８のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
８６．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、Ｈ３−９のものである、実施形態１１〜１８のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
８７．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、Ｈ３−１０のものである、実施形態１１〜１８のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
８８．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、Ｈ３−１１のものである、実施形態１１〜１８のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
８９．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、Ｈ３−１２のものである、実施形態１１〜１８のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
９０．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、Ｈ３−１３のものである、実施形態１１〜１８のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
９１．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、Ｈ３−１４のものである、実施形態１１〜１８のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
９２．ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３配列は、Ｈ３−１５のものである、実施形態１１〜１８のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
９３．表１Ｏ−１に記載される軽鎖可変配列及び表１Ｏ−２に記載される対応する重鎖可変配列を含む、実施形態１又は実施形態２に記載のＢＣＭＡ結合分子。
９４．軽鎖可変配列及び対応する重鎖可変配列は、ＡＢ１のものである、実施形態９３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
９５．軽鎖可変配列及び対応する重鎖可変配列は、ＡＢ２のものである、実施形態９３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
９６．軽鎖可変配列及び対応する重鎖可変配列は、ＡＢ３のものである、実施形態９３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
９７．軽鎖可変配列及び対応する重鎖可変配列は、Ｒ１Ｆ２のものである、実施形態９３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
９８．軽鎖可変配列及び対応する重鎖可変配列は、ＰＡＬＦ０３のものである、実施形態９３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
９９．軽鎖可変配列及び対応する重鎖可変配列は、ＰＡＬＦ０４のものである、実施形態９３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１００．軽鎖可変配列及び対応する重鎖可変配列は、ＰＡＬＦ０５のものである、実施形態９３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１０１．軽鎖可変配列及び対応する重鎖可変配列は、ＰＡＬＦ０６のものである、実施形態９３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１０２．軽鎖可変配列及び対応する重鎖可変配列は、ＰＡＬＦ０７のものである、実施形態９３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１０３．軽鎖可変配列及び対応する重鎖可変配列は、ＰＡＬＦ０８のものである、実施形態９３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１０４．軽鎖可変配列及び対応する重鎖可変配列は、ＰＡＬＦ０９のものである、実施形態９３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１０５．軽鎖可変配列及び対応する重鎖可変配列は、ＰＡＬＦ１２のものである、実施形態９３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１０６．軽鎖可変配列及び対応する重鎖可変配列は、ＰＡＬＦ１３のものである、実施形態９３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１０７．軽鎖可変配列及び対応する重鎖可変配列は、ＰＡＬＦ１４のものである、実施形態９３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１０８．軽鎖可変配列及び対応する重鎖可変配列は、ＰＡＬＦ１５のものである、実施形態９３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１０９．軽鎖可変配列及び対応する重鎖可変配列は、ＰＡＬＦ１６のものである、実施形態９３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１１０．軽鎖可変配列及び対応する重鎖可変配列は、ＰＡＬＦ１７のものである、実施形態９３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１１１．軽鎖可変配列及び対応する重鎖可変配列は、ＰＡＬＦ１８のものである、実施形態９３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１１２．軽鎖可変配列及び対応する重鎖可変配列は、ＰＡＬＦ１９のものである、実施形態９３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１１３．軽鎖可変配列及び対応する重鎖可変配列は、ＰＡＬＦ２０のものである、実施形態９３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１１４．軽鎖可変配列及び対応する重鎖可変配列は、ＰＩ−６１のものである、実施形態９３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１１５．軽鎖可変配列及び対応する重鎖可変配列は、Ｈ２／Ｌ２−８８のものである、実施形態９３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１１６．軽鎖可変配列及び対応する重鎖可変配列は、Ｈ２／Ｌ２−３６のものである、実施形態９３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１１７．軽鎖可変配列及び対応する重鎖可変配列は、Ｈ２／Ｌ２−３４のものである、実施形態９３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１１８．軽鎖可変配列及び対応する重鎖可変配列は、Ｈ２／Ｌ２−６８のものである、実施形態９３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１１９．軽鎖可変配列及び対応する重鎖可変配列は、Ｈ２／Ｌ２−１８のものである、実施形態９３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１２０．軽鎖可変配列及び対応する重鎖可変配列は、Ｈ２／Ｌ２−４７のものである、実施形態９３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１２１．軽鎖可変配列及び対応する重鎖可変配列は、Ｈ２／Ｌ２−２０のものである、実施形態９３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１２２．軽鎖可変配列及び対応する重鎖可変配列は、Ｈ２／Ｌ２−８０のものである、実施形態９３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１２３．軽鎖可変配列及び対応する重鎖可変配列は、Ｈ２／Ｌ２−８３のものである、実施形態９３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１２４．軽鎖可変配列及び対応する重鎖可変配列は、Ｈ３−１のものである、実施形態９３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１２５．軽鎖可変配列及び対応する重鎖可変配列は、Ｈ３−２のものである、実施形態９３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１２６．軽鎖可変配列及び対応する重鎖可変配列は、Ｈ３−３のものである、実施形態９３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１２７．軽鎖可変配列及び対応する重鎖可変配列は、Ｈ３−４のものである、実施形態９３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１２８．軽鎖可変配列及び対応する重鎖可変配列は、Ｈ３−５のものである、実施形態９３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１２９．軽鎖可変配列及び対応する重鎖可変配列は、Ｈ３−６のものである、実施形態９３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１３０．軽鎖可変配列及び対応する重鎖可変配列は、Ｈ３−７のものである、実施形態９３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１３１．軽鎖可変配列及び対応する重鎖可変配列は、Ｈ３−８のものである、実施形態９３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１３２．軽鎖可変配列及び対応する重鎖可変配列は、Ｈ３−９のものである、実施形態９３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１３３．軽鎖可変配列及び対応する重鎖可変配列は、Ｈ３−１０のものである、実施形態９３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１３４．軽鎖可変配列及び対応する重鎖可変配列は、Ｈ３−１１のものである、実施形態９３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１３５．軽鎖可変配列及び対応する重鎖可変配列は、Ｈ３−１２のものである、実施形態９３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１３６．軽鎖可変配列及び対応する重鎖可変配列は、Ｈ３−１３のものである、実施形態９３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１３７．軽鎖可変配列及び対応する重鎖可変配列は、Ｈ３−１４のものである、実施形態９３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１３８．軽鎖可変配列及び対応する重鎖可変配列は、Ｈ３−１５のものである、実施形態９３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１３９．抗体、抗体フラグメント、ｓｃＦｖ、ｄｓＦｖ、Ｆｖ、Ｆａｂ、ｓｃＦａｂ、（Ｆａｂ’）２又は単一ドメイン抗体（ＳＤＡＢ）を含む、実施形態１〜１３８のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
１４０．抗体又は抗体フラグメントを含む、実施形態１３９に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１４１．ｓｃＦｖを含む、実施形態１３９に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１４２．ｓｃＦｖは、表１Ｐに記載される配列を含む、実施形態１４１に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１４３．多重特異性結合分子である、実施形態１〜１４２のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
１４４．二重特異性結合分子（ＢＢＭ）である、実施形態１４３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１４５．ＢＢＭは、
（ａ）ＢＣＭＡに特異的に結合する抗原結合ドメイン１（ＡＢＤ１）；及び
（ｂ）ヒトＴ細胞受容体（ＴＣＲ）複合体の構成要素に特異的に結合する抗原結合ドメイン２（ＡＢＤ２）
を含む、実施形態１４４に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１４６．ＡＢＤ１は、ＡＢＤ２がヒトＴＣＲ複合体の構成要素に結合されるのと同時にＢＣＭＡに結合することが可能である、実施形態１４５に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１４７．ＡＢＤ１は、抗体、抗体フラグメント、ｓｃＦｖ、ｄｓＦｖ、Ｆｖ、Ｆａｂ、ｓｃＦａｂ、（Ｆａｂ’）２、単一ドメイン抗体（ＳＤＡＢ）、ＶＨ若しくはＶＬドメイン又はラクダ科ＶＨＨドメインである、実施形態１４５又は実施形態１４６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１４８．ＡＢＤ１は、ｓｃＦｖである、実施形態１４７に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１４９．ＡＢＤ１は、Ｆａｂである、実施形態１４７に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１５０．Ｆａｂは、Ｆａｂヘテロ二量体である、実施形態１４７に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１５１．ＡＢＤ１は、抗ＢＣＭＡ抗体又はその抗原結合ドメインである、実施形態１４７に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１５２．ＡＢＤ２は、抗体、抗体フラグメント、ｓｃＦｖ、ｄｓＦｖ、Ｆｖ、Ｆａｂ、ｓｃＦａｂ、（Ｆａｂ’）２、単一ドメイン抗体（ＳＤＡＢ）、ＶＨ若しくはＶＬドメイン又はラクダ科ＶＨＨドメインである、実施形態１４５〜１５１のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
１５３．ＡＢＤ２は、ｓｃＦｖである、実施形態１５２に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１５４．ＡＢＤ２は、Ｆａｂである、実施形態１５２に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１５５．Ｆａｂは、Ｆａｂヘテロ二量体である、実施形態１５４に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１５６．ＴＣＲ複合体の構成要素は、ＣＤ３である、実施形態１４５〜１５５のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
１５７．ＡＢＤ２は、抗ＣＤ３抗体又はその抗原結合ドメインである、実施形態１５６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１５８．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−１〜ＣＤ３−１２７のいずれか１つのＣＤＲ配列を含む、実施形態１５７に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１５９．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−１のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１６０．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−２のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１６１．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−３のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１６２．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−４のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１６３．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−５のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１６４．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−６のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１６５．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−７のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１６６．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−８のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１６７．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−９のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１６８．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−１０のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１６９．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−１１のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１７０．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−１２のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１７１．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−１３のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１７２．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−１４のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１７３．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−１５のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１７４．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−１６のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１７５．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−１７のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１７６．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−１８のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１７７．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−１９のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１７８．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−２０のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１７９．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−２１のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１８０．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−２２のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１８１．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−２３のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１８２．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−２４のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１８３．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−２５のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１８４．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−２６のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１８５．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−２７のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１８６．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−２８のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１８７．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−２９のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１８８．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−３０のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１８９．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−３１のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１９０．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−３２のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１９１．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−３３のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１９２．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−３４のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１９３．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−３５のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１９４．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−３６のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１９５．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−３７のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１９６．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−３８のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１９７．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−３９のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１９８．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−４０のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
１９９．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−４１のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２００．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−４２のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２０１．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−４３のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２０２．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−４４のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２０３．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−４５のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２０４．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−４６のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２０５．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−４７のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２０６．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−４８のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２０７．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−４９のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２０８．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−５０のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２０９．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−５１のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２１０．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−５２のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２１１．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−５３のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２１２．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−５４のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２１３．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−５５のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２１４．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−５６のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２１５．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−５７のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２１６．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−５８のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２１７．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−５９のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２１８．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−６０のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２１９．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−６１のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２２０．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−６２のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２２１．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−６３のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２２２．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−６４のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２２３．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−６５のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２２４．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−６６のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２２５．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−６７のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２２６．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−６８のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２２７．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−６９のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２２８．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−７０のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２２９．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−７１のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２３０．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−７２のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２３１．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−７３のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２３２．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−７４のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２３３．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−７５のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２３４．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−７６のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２３５．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−７７のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２３６．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−７８のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２３７．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−７９のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２３８．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−８０のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２３９．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−８１のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２４０．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−８２のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２４１．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−８３のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２４２．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−８４のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２４３．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−８５のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２４４．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−８６のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２４５．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−８７のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２４６．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−８８のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２４７．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−８９のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２４８．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−９０のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２４９．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−９１のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２５０．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−９２のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２５１．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−９３のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２５２．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−９４のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２５３．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−９５のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２５４．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−９６のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２５５．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−９７のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２５６．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−９８のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２５７．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−９９のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２５８．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−１００のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２５９．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−１０１のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２６０．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−１０２のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２６１．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−１０３のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２６２．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−１０４のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２６３．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−１０５のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２６４．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−１０６のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２６５．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−１０７のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２６６．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−１０８のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２６７．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−１０９のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２６８．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−１１０のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２６９．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−１１１のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２７０．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−１１２のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２７１．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−１１３のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２７２．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−１１４のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２７３．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−１１５のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２７４．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−１１６のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２７５．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−１１７のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２７６．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−１１８のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２７７．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−１１９のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２７８．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−１２０のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２７９．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−１２１のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２８０．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−１２２のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２８１．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−１２３のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２８２．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−１２４のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２８３．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−１２５のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２８４．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−１２６のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２８５．ＡＢＤ２は、ＣＤ３−１２７のＣＤＲ配列を含む、実施形態１５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２８６．ＣＤＲは、表３Ｂに記載されるＫａｂａｔ番号付けによって規定される、実施形態１５９〜２８５のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
２８７．ＣＤＲは、表３Ｃに記載されるＣｈｏｔｈｉａ番号付けによって規定される、実施形態１５９〜１７８のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
２８８．ＣＤＲは、表３Ｄに記載されるＫａｂａｔ及びＣｈｏｔｈｉａ番号付けの組合せによって規定される、実施形態１５９〜１７８のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
２８９．ＡＢＤ２は、表３Ａに記載されるＣＤ３−１の重鎖及び軽鎖可変配列を含む、実施形態１５７に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２９０．ＡＢＤ２は、表３Ａに記載されるＣＤ３−２の重鎖及び軽鎖可変配列を含む、実施形態１５７に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２９１．ＡＢＤ２は、表３Ａに記載されるＣＤ３−３の重鎖及び軽鎖可変配列を含む、実施形態１５７に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２９２．ＡＢＤ２は、表３Ａに記載されるＣＤ３−４の重鎖及び軽鎖可変配列を含む、実施形態１５７に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２９３．ＡＢＤ２は、表３Ａに記載されるＣＤ３−５の重鎖及び軽鎖可変配列を含む、実施形態１５７に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２９４．ＡＢＤ２は、表３Ａに記載されるＣＤ３−６の重鎖及び軽鎖可変配列を含む、実施形態１５７に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２９５．ＡＢＤ２は、表３Ａに記載されるＣＤ３−７の重鎖及び軽鎖可変配列を含む、実施形態１５７に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２９６．ＡＢＤ２は、表３Ａに記載されるＣＤ３−８の重鎖及び軽鎖可変配列を含む、実施形態１５７に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２９７．ＡＢＤ２は、表３Ａに記載されるＣＤ３−９の重鎖及び軽鎖可変配列を含む、実施形態１５７に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２９８．ＡＢＤ２は、表３Ａに記載されるＣＤ３−１０の重鎖及び軽鎖可変配列を含む、実施形態１５７に記載のＢＣＭＡ結合分子。
２９９．ＡＢＤ２は、表３Ａに記載されるＣＤ３−１１の重鎖及び軽鎖可変配列を含む、実施形態１５７に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３００．ＡＢＤ２は、表３Ａに記載されるＣＤ３−１２の重鎖及び軽鎖可変配列を含む、実施形態１５７に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３０１．ＡＢＤ２は、表３Ａに記載されるＣＤ３−１３の重鎖及び軽鎖可変配列を含む、実施形態１５７に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３０２．ＡＢＤ２は、表３Ａに記載されるＣＤ３−１４の重鎖及び軽鎖可変配列を含む、実施形態１５７に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３０３．ＡＢＤ２は、表３Ａに記載されるＣＤ３−１５の重鎖及び軽鎖可変配列を含む、実施形態１５７に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３０４．ＡＢＤ２は、表３Ａに記載されるＣＤ３−１６の重鎖及び軽鎖可変配列を含む、実施形態１５７に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３０５．ＡＢＤ２は、表３Ａに記載されるＣＤ３−１７の重鎖及び軽鎖可変配列を含む、実施形態１５７に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３０６．ＡＢＤ２は、表３Ａに記載されるＣＤ３−１８の重鎖及び軽鎖可変配列を含む、実施形態１５７に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３０７．ＡＢＤ２は、表３Ａに記載されるＣＤ３−１９の重鎖及び軽鎖可変配列を含む、実施形態１５７に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３０８．ＡＢＤ２は、表３Ａに記載されるＣＤ３−２０の重鎖及び軽鎖可変配列を含む、実施形態１５７に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３０９．ＡＢＤ２は、表３Ａに記載されるＣＤ３−２１の重鎖及び軽鎖可変配列を含む、実施形態１５７に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３１０．ＡＢＤ２は、表３Ａに記載されるＣＤ３−２２の重鎖及び軽鎖可変配列を含む、実施形態１５７に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３１１．ＡＢＤ２は、表３Ａに記載されるＣＤ３−２３の重鎖及び軽鎖可変配列を含む、実施形態１５７に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３１２．ＡＢＤ２は、表３Ａに記載されるＣＤ３−２４の重鎖及び軽鎖可変配列を含む、実施形態１５７に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３１３．ＡＢＤ２は、表３Ａに記載されるＣＤ３−２５の重鎖及び軽鎖可変配列を含む、実施形態１５７に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３１４．ＡＢＤ２は、表３Ａに記載されるＣＤ３−２６の重鎖及び軽鎖可変配列を含む、実施形態１５７に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３１５．ＡＢＤ２は、表３Ａに記載されるＣＤ３−２７の重鎖及び軽鎖可変配列を含む、実施形態１５７に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３１６．ＴＣＲ複合体の構成要素は、ＴＣＲ−α、ＴＣＲ−β又はＴＣＲ−α／β二量体である、実施形態１４５〜１５５のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
３１７．ＡＢＤ２は、抗体又はその抗原結合ドメインである、実施形態３１６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３１８．ＡＢＤ２は、ＢＭＡ０３１のＣＤＲ配列を含む、実施形態３１７に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３１９．ＣＤＲ配列は、Ｋａｂａｔ番号付けによって規定される、実施形態３１８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３２０．ＣＤＲ配列は、Ｃｈｏｔｈｉａ番号付けによって規定される、実施形態３１８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３２１．ＣＤＲ配列は、Ｋａｂａｔ及びＣｈｏｔｈｉａ番号付けの組合せによって規定される、実施形態３１８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３２２．ＡＢＤ２は、ＢＭＡ０３１の重鎖及び軽鎖可変配列を含む、実施形態３１８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３２３．ＴＣＲ複合体の構成要素は、ＴＣＲ−γ、ＴＣＲ−δ又はＴＣＲ−γ／δ二量体である、実施形態１４５〜１５５のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
３２４．ＡＢＤ２は、抗体又はその抗原結合ドメインである、実施形態３２３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３２５．ＡＢＤ２は、δＴＣＳ１のＣＤＲ配列を含む、実施形態３２４に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３２６．ＣＤＲ配列は、Ｋａｂａｔ番号付けによって規定される、実施形態３２５に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３２７．ＣＤＲ配列は、Ｃｈｏｔｈｉａ番号付けによって規定される、実施形態３２５に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３２８．ＣＤＲ配列は、Ｋａｂａｔ及びＣｈｏｔｈｉａ番号付けの組合せによって規定される、実施形態３２５に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３２９．ＡＢＤ２は、δＴＣＳ１の重鎖及び軽鎖可変配列を含む、実施形態３２５に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３３０．ＡＢＤ２は、非免疫グロブリン足場ベースのＡＢＤである、実施形態１４５〜１５１のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
３３１．ＡＢＤ２は、クニッツドメイン、アドネキシン、アフィボディ、ＤＡＲＰｉｎ、アビマー、アンチカリン、リポカリン、センチリン、バーサボディ、ノッチン、アドネクチン、プロネクチン、アフィチン／ナノフィチン、アフィリン、アトリマー／テトラネクチン、二環式ペプチド、ｃｙｓ−ノット、Ｆｎ３足場、オーボディ、Ｔｎ３、アフィマー、ＢＤ、アドヒロン、デュオカリン、アルファボディ、アルマジロリピートタンパク質、レペボディ又はフィノマーである、実施形態３３０に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３３２．一緒にＦｃヘテロ二量体を形成する第１の変異体Ｆｃ領域及び第２の変異体Ｆｃ領域を含む、実施形態１４５〜３３１のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
３３３．第１及び第２の変異体Ｆｃ領域は、アミノ酸置換Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ：Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓを含む、実施形態３３２に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３３４．第１及び第２の変異体Ｆｃ領域は、アミノ酸置換Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４を含む、実施形態３３２に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３３５．第１及び第２の変異体Ｆｃ領域は、アミノ酸置換Ｌ３６８Ｅ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋを含む、実施形態３３２に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３３６．第１及び第２の変異体Ｆｃ領域は、アミノ酸置換Ｔ４１１Ｔ／Ｅ３６０Ｅ／Ｑ３６２Ｅ：Ｄ４０１Ｋを含む、実施形態３３２に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３３７．第１及び第２の変異体Ｆｃ領域は、アミノ酸置換Ｌ３６８Ｄ  ３７０Ｓ：Ｓ３６４／Ｅ３５７Ｌを含む、実施形態３３２に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３３８．第１及び第２の変異体Ｆｃ領域は、アミノ酸置換３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑを含む、実施形態３３２に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３３９．第１及び第２の変異体Ｆｃ領域は、国際公開第２０１４／１１０６０１号パンフレットの図４（表６中で再現される）に列挙される立体変異体のいずれか１つのアミノ酸置換を含む、実施形態３３２に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３４０．第１及び第２の変異体Ｆｃ領域は、国際公開第２０１４／１１０６０１号パンフレットの図５（表６中で再現される）に列挙される変異体のいずれかのアミノ酸置換を含む、実施形態３３２に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３４１．第１及び第２の変異体Ｆｃ領域は、国際公開第２０１４／１１０６０１号パンフレットの図６（表６中で再現される）に列挙される変異体のいずれかのアミノ酸置換を含む、実施形態３３２に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３４２．第１の変異体Ｆｃ領域は、ＡＢＤ１に作動可能に連結され、第２の変異体Ｆｃ領域は、ＡＢＤ２に作動可能に連結される、実施形態３３２〜３４１のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
３４３．第１の変異体Ｆｃ領域は、ＡＢＤ２に作動可能に連結され、第２の変異体Ｆｃ領域は、ＡＢＤ１に作動可能に連結される、実施形態３３２〜３４１のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
３４４．Ｆｃ領域の少なくとも１つは、除去変異修飾を含む、実施形態３３２〜３４３のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
３４５．除去変異修飾は、表５から選択される、実施形態３４２に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３４６．除去変異修飾は、Ｇ２３６Ｒを含む、実施形態３４５に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３４７．除去変異修飾は、Ｓ２３９Ｇを含む、実施形態３４５に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３４８．除去変異修飾は、Ｓ２３９Ｋを含む、実施形態３４５に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３４９．除去変異修飾は、Ｓ２３９Ｑを含む、実施形態３４５に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３５０．除去変異修飾は、Ｓ２３９Ｒを含む、実施形態３４５に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３５１．除去変異修飾は、Ｖ２６６Ｄを含む、実施形態３４５に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３５２．除去変異修飾は、Ｓ２６７Ｋを含む、実施形態３４５に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３５３．除去変異修飾は、Ｓ２６７Ｒを含む、実施形態３４５に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３５４．除去変異修飾は、Ｈ２６８Ｋを含む、実施形態３４５に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３５５．除去変異修飾は、Ｅ２６９Ｒを含む、実施形態３４５に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３５６．除去変異修飾は、２９９Ｒを含む、実施形態３４５に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３５７．除去変異修飾は、２９９Ｋを含む、実施形態３４５に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３５８．除去変異修飾は、Ｋ３２２Ａを含む、実施形態３４５に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３５９．除去変異修飾は、Ａ３２７Ｇを含む、実施形態３４５に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３６０．除去変異修飾は、Ａ３２７Ｌを含む、実施形態３４５に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３６１．除去変異修飾は、Ａ３２７Ｎを含む、実施形態３４５に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３６２．除去変異修飾は、Ａ３２７Ｑを含む、実施形態３４５に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３６３．除去変異修飾は、Ｌ３２８Ｅを含む、実施形態３４５に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３６４．除去変異修飾は、Ｌ３２８Ｒを含む、実施形態３４５に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３６５．除去変異修飾は、Ｐ３２９Ａを含む、実施形態３４５に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３６６．除去変異修飾は、Ｐ３２９Ｈを含む、実施形態３４５に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３６７．除去変異修飾は、Ｐ３２９Ｋを含む、実施形態３４５に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３６８．除去変異修飾は、Ａ３３０Ｌを含む、実施形態３４５に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３６９．除去変異修飾は、Ａ３３０Ｓ／Ｐ３３１Ｓを含む、実施形態３４５に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３７０．除去変異修飾は、Ｉ３３２Ｋを含む、実施形態３４５に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３７１．除去変異修飾は、Ｉ３３２Ｒを含む、実施形態３４５に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３７２．除去変異修飾は、Ｖ２６６Ｄ／Ａ３２７Ｑを含む、実施形態３４５に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３７３．除去変異修飾は、Ｖ２６６Ｄ／Ｐ３２９Ｋを含む、実施形態３４５に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３７４．除去変異修飾は、Ｇ２３６Ｒ／Ｌ３２８Ｒを含む、実施形態３４５に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３７５．除去変異修飾は、Ｅ２３３Ｐ／Ｌ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２３９Ｋを含む、実施形態３４５に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３７６．除去変異修飾は、Ｅ２３３Ｐ／Ｌ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２６７Ｋを含む、実施形態３４５に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３７７．除去変異修飾は、Ｅ２３３Ｐ／Ｌ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２３９Ｋ／Ａ３２７Ｇを含む、実施形態３４５に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３７８．除去変異修飾は、Ｅ２３３Ｐ／Ｌ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２６７Ｋ／Ａ３２７Ｇを含む、実施形態３４５に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３７９．除去変異修飾は、Ｅ２３３Ｐ／Ｌ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌを含む、実施形態３４５に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３８０．除去変異修飾は、Ｓ２３９Ｋ／Ｓ２６７Ｋを含む、実施形態３４５に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３８１．除去変異修飾は、２６７Ｋ／Ｐ３２９Ｋを含む、実施形態３４５に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３８２．除去変異修飾を含むＦｃ領域は、ＡＢＤ１に作動可能に連結される、実施形態３４４〜３８１のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
３８３．除去変異修飾を含むＦｃ領域は、ＡＢＤ２に作動可能に連結される、実施形態３４４〜３８１のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
３８４．両方のＦｃ領域は、除去変異修飾を含む、実施形態３４４〜３８１のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
３８５．Ｆｃ領域の少なくとも１つは、ｐＩ変異体置換をさらに含む、実施形態３３２〜３８４のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
３８６．ｐＩ変異体置換は、表８から選択される、実施形態３４２に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３８７．ｐＩ変異体置換は、ｐｌ＿ＩＳＯ（−）中に存在する置換を含む、実施形態３８６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３８８．ｐＩ変異体置換は、ｐｌ＿（−）＿ｉｓｏｓｔｅｒｉｃ＿Ａ中に存在する置換を含む、実施形態３８６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３８９．ｐＩ変異体置換は、ｐｌ＿（−）＿ｉｓｏｓｔｅｒｉｃ＿Ｂ中に存在する置換を含む、実施形態３８６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３９０．ｐＩ変異体置換は、Ｐｌ＿ＩＳＯ（＋ＲＲ）中に存在する置換を含む、実施形態３８６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３９１．ｐＩ変異体置換は、ｐｌ＿ＩＳＯ（＋）中に存在する置換を含む、実施形態３８６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３９２．ｐＩ変異体置換は、ｐｌ＿（＋）＿ｉｓｏｓｔｅｒｉｃ＿Ａ中に存在する置換を含む、実施形態３８６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３９３．ｐＩ変異体置換は、ｐｌ＿（＋）＿ｉｓｏｓｔｅｒｉｃ＿Ｂ中に存在する置換を含む、実施形態３８６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３９４．ｐＩ変異体置換は、ｐｌ＿（＋）＿ｉｓｏｓｔｅｒｉｃ＿Ｅ２６９Ｑ／Ｅ２７２Ｑ中に存在する置換を含む、実施形態３８６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３９５．ｐＩ変異体置換は、ｐｌ＿（＋）＿ｉｓｏｓｔｅｒｉｃ＿Ｅ２６９Ｑ／Ｅ２８３Ｑ中に存在する置換を含む、実施形態３８６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３９６．ｐＩ変異体置換は、ｐｌ＿（＋）＿ｉｓｏｓｔｅｒｉｃ＿Ｅ２７２０／Ｅ２８３Ｑ中に存在する置換を含む、実施形態３８６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３９７．ｐＩ変異体置換は、ｐｌ＿（＋）＿ｉｓｏｓｔｅｒｉｃ＿Ｅ２６９Ｑ中に存在する置換を含む、実施形態３８６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
３９８．ＡＢ１に作動可能に連結されるＦｃ領域は、ｐＩ変異体置換を含む、実施形態３８５〜３９７のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
３９９．ＡＢ１に作動可能に連結されるＦｃ領域は、ｐＩ変異体置換を含む、実施形態３８５〜３９８のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
４００．第１及び／又は第２のＦｃ領域は、４３４Ａ、４３４Ｓ、４２８Ｌ、３０８Ｆ、２５９Ｉ、４２８Ｌ／４３４Ｓ、２５９Ｉ／３０８Ｆ、４３６Ｉ／４２８Ｌ、４３６１又はＶ／４３４Ｓ、４３６Ｖ／４２８Ｌ、２５２Ｙ、２５２Ｙ／２５４Ｔ／２５６Ｅ、２５９Ｉ／３０８Ｆ／４２８Ｌ、２３６Ａ、２３９Ｄ、２３９Ｅ、３３２Ｅ、３３２Ｄ、２３９Ｄ／３３２Ｅ、２６７Ｄ、２６７Ｅ、３２８Ｆ、２６７Ｅ／３２８Ｆ、２３６Ａ／３３２Ｅ、２３９Ｄ／３３２Ｅ／３３０Ｙ、２３９Ｄ、３３２Ｅ／３３０Ｌ、２３６Ｒ、３２８Ｒ、２３６Ｒ／３２８Ｒ、２３６Ｎ／２６７Ｅ、２４３Ｌ、２９８Ａ及び２９９Ｔから選択される１つ以上のアミノ酸置換をさらに含む、実施形態３３２〜３９９のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
４０１．第１及び／又は第２のＦｃ領域は、アミノ酸置換４３４Ａ、４３４Ｓ又は４３４Ｖを含む１つ以上のアミノ酸置換をさらに含む、実施形態３３２〜３９９のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
４０２．第１及び／又は第２のＦｃ領域は、アミノ酸置換４２８Ｌを含む１つ以上のアミノ酸置換をさらに含む、実施形態４０１に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４０３．第１及び／又は第２のＦｃ領域は、アミノ酸置換３０８Ｆを含む１つ以上のアミノ酸置換をさらに含む、実施形態４０１〜４０２のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
４０４．第１及び／又は第２のＦｃ領域は、アミノ酸置換２５９Ｉを含む１つ以上のアミノ酸置換をさらに含む、実施形態４０１〜４０３のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
４０５．第１及び／又は第２のＦｃ領域は、アミノ酸置換４３６Ｉを含む１つ以上のアミノ酸置換をさらに含む、実施形態４０１〜４０４のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
４０６．第１及び／又は第２のＦｃ領域は、アミノ酸置換２５２Ｙを含む１つ以上のアミノ酸置換をさらに含む、実施形態４０１〜４０５のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
４０７．第１及び／又は第２のＦｃ領域は、アミノ酸置換２５４Ｔを含む１つ以上のアミノ酸置換をさらに含む、実施形態４０１〜４０６のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
４０８．第１及び／又は第２のＦｃ領域は、アミノ酸置換２５６Ｅを含む１つ以上のアミノ酸置換をさらに含む、実施形態４０１〜４０７のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
４０９．第１及び／又は第２のＦｃ領域は、アミノ酸置換２３９Ｄ又は２３９Ｅを含む１つ以上のアミノ酸置換をさらに含む、実施形態４０１〜４０８のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
４１０．第１及び／又は第２のＦｃ領域は、アミノ酸置換３３２Ｅ又は３３２Ｄを含む１つ以上のアミノ酸置換をさらに含む、実施形態４０１〜４０９のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
４１１．第１及び／又は第２のＦｃ領域は、アミノ酸置換２６７Ｄ又は２６７Ｅを含む１つ以上のアミノ酸置換をさらに含む、実施形態４０１〜４１０のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
４１２．第１及び／又は第２のＦｃ領域は、アミノ酸置換３３０Ｌを含む１つ以上のアミノ酸置換をさらに含む、実施形態４０１〜４１１のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
４１３．第１及び／又は第２のＦｃ領域は、アミノ酸置換２３６Ｒ又は２３６Ｎを含む１つ以上のアミノ酸置換をさらに含む、実施形態４０１〜４１２のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
４１４．第１及び／又は第２のＦｃ領域は、アミノ酸置換３２８Ｒを含む１つ以上のアミノ酸置換をさらに含む、実施形態４０１〜４１３のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
４１５．第１及び／又は第２のＦｃ領域は、アミノ酸置換２４３Ｌを含む１つ以上のアミノ酸置換をさらに含む、実施形態４０１〜４１４のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
４１６．第１及び／又は第２のＦｃ領域は、アミノ酸置換２９８Ａを含む１つ以上のアミノ酸置換をさらに含む、実施形態４０１〜４１５のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
４１７．第１及び／又は第２のＦｃ領域は、アミノ酸置換２９９Ｔを含む１つ以上のアミノ酸置換をさらに含む、実施形態４０１〜４１６のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
４１８．（ａ）第１及び第２の変異体Ｆｃ領域は、アミノ酸置換Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ：Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓを含み；
（ｂ）第１及び／又は第２の変異体Ｆｃ領域は、除去変異修飾Ｅ２３３Ｐ／Ｌ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２６７Ｋを含み、
（ｃ）第１及び／又は第２の変異体Ｆｃ領域は、ｐＩ変異体置換Ｎ２０８Ｄ／Ｑ２９５Ｅ／Ｎ３８４Ｄ／Ｑ４１８Ｅ／Ｎ４２１Ｄ（ｐｌ＿（−）＿ｉｓｏｓｔｅｒｉｃ＿Ａ）を含む、実施形態３３２に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４１９．第１の変異体Ｆｃ領域は、ＡＢＤ１に作動可能に連結され、第２の変異体Ｆｃ領域は、ＡＢＤ２に作動可能に連結される、実施形態４１８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４２０．第１の変異体Ｆｃ領域は、ＡＢＤ２に作動可能に連結され、第２の変異体Ｆｃ領域は、ＡＢＤ１に作動可能に連結される、実施形態４１８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４２１．第１の変異体Ｆｃ領域は、除去変異修飾Ｅ２３３Ｐ／Ｌ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２６７Ｋを含む、実施形態４１８〜４２０のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
４２２．第２の変異体Ｆｃ領域は、除去変異修飾Ｅ２３３Ｐ／Ｌ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２６７Ｋを含む、実施形態４１８〜４２１のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
４２３．第１の変異体Ｆｃ領域は、ｐＩ変異体置換Ｎ２０８Ｄ／Ｑ２９５Ｅ／Ｎ３８４Ｄ／Ｑ４１８Ｅ／Ｎ４２１Ｄ（ｐｌ＿（−）＿ｉｓｏｓｔｅｒｉｃ＿Ａ）を含む、実施形態４１８〜４２２のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
４２４．第２の変異体Ｆｃ領域は、ｐＩ変異体置換Ｎ２０８Ｄ／Ｑ２９５Ｅ／Ｎ３８４Ｄ／Ｑ４１８Ｅ／Ｎ４２１Ｄ（ｐｌ＿（−）＿ｉｓｏｓｔｅｒｉｃ＿Ａ）を含む、実施形態４１８〜４２３のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
４２５．Ｆｃドメインを含む、実施形態１４５〜３３１のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
４２６．Ｆｃドメインは、Ｆｃヘテロ二量体である、実施形態４２５に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４２７．Ｆｃヘテロ二量体は、表６に記載されるＦｃ修飾の少なくとも１つを含む、実施形態４２６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４２８．Ｆｃヘテロ二量体は、ノブ・イン・ホール（「ＫＩＨ」）修飾を含む、実施形態４２６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４２９．ＫＩＨ修飾は、第７．４．１．５．１節又は表６に記載されるＫＩＨ修飾のいずれかである、実施形態４２８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４３０．ＫＩＨ修飾は、第７．４．１．５．２節又は表６に記載される代替的なＫＩＨ修飾のいずれかである、実施形態４２８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４３１．極性架橋修飾を含む、実施形態４２６〜４３０のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
４３２．極性架橋修飾は、第７．４．１．５．７節又は表６に記載される極性架橋修飾のいずれかである、実施形態４３１に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４３３．Ｆｃ  １〜Ｆｃ  １５０として示されるＦｃ修飾の少なくとも１つを含む、実施形態４２６〜４３２のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
４３４．Ｆｃ  １〜Ｆｃ  ５として示されるＦｃ修飾の少なくとも１つを含む、実施形態４３３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４３５．Ｆｃ  ６〜Ｆｃ  １０として示されるＦｃ修飾の少なくとも１つを含む、実施形態４３３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４３６．Ｆｃ  １１〜Ｆｃ  １５として示されるＦｃ修飾の少なくとも１つを含む、実施形態４３３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４３７．Ｆｃ  １６〜Ｆｃ  ２０として示されるＦｃ修飾の少なくとも１つを含む、実施形態４３３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４３８．Ｆｃ  ２１〜Ｆｃ  ２５として示されるＦｃ修飾の少なくとも１つを含む、実施形態４３３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４３９．Ｆｃ  ２６〜Ｆｃ  ３０として示されるＦｃ修飾の少なくとも１つを含む、実施形態４３３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４４０．Ｆｃ  ３１〜Ｆｃ  ３５として示されるＦｃ修飾の少なくとも１つを含む、実施形態４３３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４４１．Ｆｃ  ３６〜Ｆｃ  ４０として示されるＦｃ修飾の少なくとも１つを含む、実施形態４３３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４４２．Ｆｃ  ４１〜Ｆｃ  ４５として示されるＦｃ修飾の少なくとも１つを含む、実施形態４３３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４４３．Ｆｃ  ４６〜Ｆｃ  ５０として示されるＦｃ修飾の少なくとも１つを含む、実施形態４３３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４４４．Ｆｃ  ５１〜Ｆｃ  ５５として示されるＦｃ修飾の少なくとも１つを含む、実施形態４３３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４４５．Ｆｃ  ５６〜Ｆｃ  ６０として示されるＦｃ修飾の少なくとも１つを含む、実施形態４３３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４４６．Ｆｃ  ６１〜Ｆｃ  ６５として示されるＦｃ修飾の少なくとも１つを含む、実施形態４３３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４４７．Ｆｃ  ６６〜Ｆｃ  ７０として示されるＦｃ修飾の少なくとも１つを含む、実施形態４３３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４４８．Ｆｃ  ７１〜Ｆｃ  ７５として示されるＦｃ修飾の少なくとも１つを含む、実施形態４３３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４４９．Ｆｃ  ７６〜Ｆｃ  ８０として示されるＦｃ修飾の少なくとも１つを含む、実施形態４３３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４５０．Ｆｃ  ８１〜Ｆｃ  ８５として示されるＦｃ修飾の少なくとも１つを含む、実施形態４３３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４５１．Ｆｃ  ８６〜Ｆｃ  ９０として示されるＦｃ修飾の少なくとも１つを含む、実施形態４３３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４５２．Ｆｃ  ９１〜Ｆｃ  ９５として示されるＦｃ修飾の少なくとも１つを含む、実施形態４３３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４５３．Ｆｃ  ９６〜Ｆｃ  １００として示されるＦｃ修飾の少なくとも１つを含む、実施形態４３３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４５４．Ｆｃ  １０１〜Ｆｃ  １０５として示されるＦｃ修飾の少なくとも１つを含む、実施形態４３３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４５５．Ｆｃ  １０６〜Ｆｃ  １１０として示されるＦｃ修飾の少なくとも１つを含む、実施形態４３３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４５６．Ｆｃ  １１１〜Ｆｃ  １１５として示されるＦｃ修飾の少なくとも１つを含む、実施形態４３３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４５７．Ｆｃ  １１６〜Ｆｃ  １２０として示されるＦｃ修飾の少なくとも１つを含む、実施形態４３３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４５８．Ｆｃ  １２１〜Ｆｃ  １２５として示されるＦｃ修飾の少なくとも１つを含む、実施形態４３３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４５９．Ｆｃ  １２６〜Ｆｃ  １３０として示されるＦｃ修飾の少なくとも１つを含む、実施形態４３３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４６０．Ｆｃ  １３１〜Ｆｃ  １３５として示されるＦｃ修飾の少なくとも１つを含む、実施形態４３３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４６１．Ｆｃ  １３６〜Ｆｃ  １４０として示されるＦｃ修飾の少なくとも１つを含む、実施形態４３３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４６２．Ｆｃ  １４１〜Ｆｃ  １４５として示されるＦｃ修飾の少なくとも１つを含む、実施形態４３３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４６３．Ｆｃ  １４６〜Ｆｃ  １５０として示されるＦｃ修飾の少なくとも１つを含む、実施形態４３３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４６４．Ｆｃドメインは、改変されたエフェクター機能を有する、実施形態４２５〜４６３のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
４６５．Ｆｃドメインは、１つ以上のＦｃ受容体への改変された結合を有する、実施形態４６４に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４６６．１つ以上のＦｃ受容体は、ＦｃＲＮを含む、実施形態４６５に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４６７．１つ以上のＦｃ受容体は、白血球受容体を含む、実施形態４６５又は実施形態４６６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４６８．Ｆｃは、修飾ジスルフィド結合構造を有する、実施形態４２５〜４６７のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
４６９．Ｆｃは、改変されたグリコシル化パターンを有する、実施形態４２５〜４６８のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
４７０．Ｆｃは、ヒンジ領域を含む、実施形態４２５〜４６９のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
４７１．ヒンジ領域は、第７．４．２節に記載されるヒンジ領域のいずれか１つを含む、実施形態４７０に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４７２．ヒンジ領域は、Ｈ１として示されるヒンジ領域のアミノ酸配列を含む、実施形態４７１に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４７３．ヒンジ領域は、Ｈ２として示されるヒンジ領域のアミノ酸配列を含む、実施形態４７１に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４７４．ヒンジ領域は、Ｈ３として示されるヒンジ領域のアミノ酸配列を含む、実施形態４７１に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４７５．ヒンジ領域は、Ｈ４として示されるヒンジ領域のアミノ酸配列を含む、実施形態４７１に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４７６．ヒンジ領域は、Ｈ５として示されるヒンジ領域のアミノ酸配列を含む、実施形態４７１に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４７７．ヒンジ領域は、Ｈ６として示されるヒンジ領域のアミノ酸配列を含む、実施形態４７１に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４７８．ヒンジ領域は、Ｈ７として示されるヒンジ領域のアミノ酸配列を含む、実施形態４７１に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４７９．ヒンジ領域は、Ｈ８として示されるヒンジ領域のアミノ酸配列を含む、実施形態４７１に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４８０．ヒンジ領域は、Ｈ９として示されるヒンジ領域のアミノ酸配列を含む、実施形態４７１に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４８１．ヒンジ領域は、Ｈ１０として示されるヒンジ領域のアミノ酸配列を含む、実施形態４７１に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４８２．ヒンジ領域は、Ｈ１１として示されるヒンジ領域のアミノ酸配列を含む、実施形態４７１に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４８３．ヒンジ領域は、Ｈ１２として示されるヒンジ領域のアミノ酸配列を含む、実施形態４７１に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４８４．ヒンジ領域は、Ｈ１３として示されるヒンジ領域のアミノ酸配列を含む、実施形態４７１に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４８５．ヒンジ領域は、Ｈ１４として示されるヒンジ領域のアミノ酸配列を含む、実施形態４７１に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４８６．ヒンジ領域は、Ｈ１５として示されるヒンジ領域のアミノ酸配列を含む、実施形態４７１に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４８７．ヒンジ領域は、Ｈ１６として示されるヒンジ領域のアミノ酸配列を含む、実施形態４７１に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４８８．ヒンジ領域は、Ｈ１７として示されるヒンジ領域のアミノ酸配列を含む、実施形態４７１に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４８９．ヒンジ領域は、Ｈ１８として示されるヒンジ領域のアミノ酸配列を含む、実施形態４７１に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４９０．ヒンジ領域は、Ｈ１９として示されるヒンジ領域のアミノ酸配列を含む、実施形態４７１に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４９１．ヒンジ領域は、Ｈ２０として示されるヒンジ領域のアミノ酸配列を含む、実施形態４７１に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４９２．ヒンジ領域は、Ｈ２１として示されるヒンジ領域のアミノ酸配列を含む、実施形態４７１に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４９３．少なくとも１つのｓｃＦｖドメインを含む、実施形態１〜４９２のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
４９４．少なくとも１つのｓｃＦｖは、ＶＨ及びＶＬドメインを連結するリンカーを含む、実施形態４９３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４９５．リンカーは、５〜２５アミノ酸長である、実施形態４９４に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４９６．リンカーは、１２〜２０アミノ酸長である、実施形態４９５に記載のＢＣＭＡ結合分子。
４９７．リンカーは、荷電リンカー及び／又は可撓性リンカーである、実施形態４９４〜４９６のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
４９８．リンカーは、リンカーＬ１〜Ｌ５４のいずれか１つから選択される、実施形態４９４〜４９７のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
４９９．リンカー領域は、Ｌ１として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態４９８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５００．リンカー領域は、Ｌ２として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態４９８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５０１．リンカー領域は、Ｌ３として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態４９８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５０２．リンカー領域は、Ｌ４として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態４９８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５０３．リンカー領域は、Ｌ５として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態４９８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５０４．リンカー領域は、Ｌ６として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態４９８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５０５．リンカー領域は、Ｌ７として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態４９８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５０６．リンカー領域は、Ｌ８として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態４９８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５０７．リンカー領域は、Ｌ９として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態４９８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５０８．リンカー領域は、Ｌ１０として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態４９８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５０９．リンカー領域は、Ｌ１１として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態４９８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５１０．リンカー領域は、Ｌ１２として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態４９８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５１１．リンカー領域は、Ｌ１３として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態４９８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５１２．リンカー領域は、Ｌ１４として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態４９８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５１３．リンカー領域は、Ｌ１５として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態４９８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５１４．リンカー領域は、Ｌ１６として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態４９８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５１５．リンカー領域は、Ｌ１７として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態４９８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５１６．リンカー領域は、Ｌ１８として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態４９８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５１７．リンカー領域は、Ｌ１９として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態４９８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５１８．リンカー領域は、Ｌ２０として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態４９８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５１９．リンカー領域は、Ｌ２１として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態４９８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５２０．リンカー領域は、Ｌ２２として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態４９８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５２１．リンカー領域は、Ｌ２３として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態４９８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５２２．リンカー領域は、Ｌ２４として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態４９８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５２３．リンカー領域は、Ｌ２５として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態４９８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５２４．リンカー領域は、Ｌ２６として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態４９８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５２５．リンカー領域は、Ｌ２７として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態４９８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５２６．リンカー領域は、Ｌ２８として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態４９８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５２７．リンカー領域は、Ｌ２９として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態４９８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５２８．リンカー領域は、Ｌ３０として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態４９８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５２９．リンカー領域は、Ｌ３１として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態４９８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５３０．リンカー領域は、Ｌ３２として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態４９８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５３１．リンカー領域は、Ｌ３３として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態４９８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５３２．リンカー領域は、Ｌ３４として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態４９８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５３３．リンカー領域は、Ｌ３５として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態４９８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５３４．リンカー領域は、Ｌ３６として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態４９８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５３５．リンカー領域は、Ｌ３７として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態４９８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５３６．リンカー領域は、Ｌ３８として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態４９８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５３７．リンカー領域は、Ｌ３９として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態４９８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５３８．リンカー領域は、Ｌ４０として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態４９８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５３９．リンカー領域は、Ｌ４１として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態４９８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５４０．リンカー領域は、Ｌ４２として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態４９８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５４１．リンカー領域は、Ｌ４３として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態４９８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５４２．リンカー領域は、Ｌ４４として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態４９８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５４３．リンカー領域は、Ｌ４５として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態４９８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５４４．リンカー領域は、Ｌ４６として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態４９８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５４５．リンカー領域は、Ｌ４７として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態４９８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５４６．リンカー領域は、Ｌ４８として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態４９８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５４７．リンカー領域は、Ｌ４９として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態４９８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５４８．リンカー領域は、Ｌ５０として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態４９８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５４９．リンカー領域は、Ｌ５１として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態４９８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５５０．リンカー領域は、Ｌ５２として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態４９８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５５１．リンカー領域は、Ｌ５３として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態４９８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５５２．リンカー領域は、Ｌ５４として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態４９８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５５３．少なくとも１つのＦａｂドメインを含む、実施形態１〜５５２のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
５５４．少なくとも１つのＦａｂドメインは、表２に記載されるＦａｂヘテロ二量体化修飾のいずれかを含む、実施形態５５３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５５５．少なくとも１つのＦａｂドメインは、Ｆ１として示されるＦａｂヘテロ二量体化修飾を含む、実施形態５５４に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５５６．少なくとも１つのＦａｂドメインは、Ｆ２として示されるＦａｂヘテロ二量体化修飾を含む、実施形態５５４に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５５７．少なくとも１つのＦａｂドメインは、Ｆ３として示されるＦａｂヘテロ二量体化修飾を含む、実施形態５５４に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５５８．少なくとも１つのＦａｂドメインは、Ｆ４として示されるＦａｂヘテロ二量体化修飾を含む、実施形態５５４に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５５９．少なくとも１つのＦａｂドメインは、Ｆ５として示されるＦａｂヘテロ二量体化修飾を含む、実施形態５５４に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５６０．少なくとも１つのＦａｂドメインは、Ｆ６として示されるＦａｂヘテロ二量体化修飾を含む、実施形態５５４に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５６１．少なくとも１つのＦａｂドメインは、Ｆ７として示されるＦａｂヘテロ二量体化修飾を含む、実施形態５５４に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５６２．リンカーを介して互いに連結される、少なくとも２つのＡＢＤ、ＡＢＤ及びＡＢＤ鎖又は２つのＡＢＤ鎖を含む二重特異性結合分子である、実施形態１４５〜５６１のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
５６３．リンカーは、５〜２５アミノ酸長である、実施形態５６２に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５６４．リンカーは、１２〜２０アミノ酸長である、実施形態５６３に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５６５．リンカーは、荷電リンカー及び／又は可撓性リンカーである、実施形態５６２〜５６４のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
５６６．リンカーは、リンカーＬ１〜Ｌ５４のいずれか１つから選択される、実施形態５６２〜５６５のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
５６７．リンカー領域は、Ｌ１として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態５６６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５６８．リンカー領域は、Ｌ２として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態５６６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５６９．リンカー領域は、Ｌ３として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態５６６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５７０．リンカー領域は、Ｌ４として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態５６６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５７１．リンカー領域は、Ｌ５として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態５６６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５７２．リンカー領域は、Ｌ６として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態５６６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５７３．リンカー領域は、Ｌ７として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態５６６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５７４．リンカー領域は、Ｌ８として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態５６６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５７５．リンカー領域は、Ｌ９として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態５６６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５７６．リンカー領域は、Ｌ１０として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態５６６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５７７．リンカー領域は、Ｌ１１として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態５６６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５７８．リンカー領域は、Ｌ１２として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態５６６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５７９．リンカー領域は、Ｌ１３として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態５６６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５８０．リンカー領域は、Ｌ１４として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態５６６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５８１．リンカー領域は、Ｌ１５として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態５６６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５８２．リンカー領域は、Ｌ１６として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態５６６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５８３．リンカー領域は、Ｌ１７として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態５６６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５８４．リンカー領域は、Ｌ１８として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態５６６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５８５．リンカー領域は、Ｌ１９として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態５６６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５８６．リンカー領域は、Ｌ２０として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態５６６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５８７．リンカー領域は、Ｌ２１として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態５６６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５８８．リンカー領域は、Ｌ２２として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態５６６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５８９．リンカー領域は、Ｌ２３として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態５６６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５９０．リンカー領域は、Ｌ２４として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態５６６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５９１．リンカー領域は、Ｌ２５として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態５６６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５９２．リンカー領域は、Ｌ２６として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態５６６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５９３．リンカー領域は、Ｌ２７として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態５６６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５９４．リンカー領域は、Ｌ２８として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態５６６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５９５．リンカー領域は、Ｌ２９として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態５６６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５９６．リンカー領域は、Ｌ３０として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態５６６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５９７．リンカー領域は、Ｌ３１として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態５６６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５９８．リンカー領域は、Ｌ３２として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態５６６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
５９９．リンカー領域は、Ｌ３３として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態５６６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
６００．リンカー領域は、Ｌ３４として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態５６６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
６０１．リンカー領域は、Ｌ３５として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態５６６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
６０２．リンカー領域は、Ｌ３６として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態５６６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
６０３．リンカー領域は、Ｌ３７として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態５６６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
６０４．リンカー領域は、Ｌ３８として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態５６６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
６０５．リンカー領域は、Ｌ３９として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態５６６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
６０６．リンカー領域は、Ｌ４０として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態５６６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
６０７．リンカー領域は、Ｌ４１として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態５６６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
６０８．リンカー領域は、Ｌ４２として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態５６６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
６０９．リンカー領域は、Ｌ４３として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態５６６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
６１０．リンカー領域は、Ｌ４４として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態５６６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
６１１．リンカー領域は、Ｌ４５として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態５６６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
６１２．リンカー領域は、Ｌ４６として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態５６６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
６１３．リンカー領域は、Ｌ４７として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態５６６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
６１４．リンカー領域は、Ｌ４８として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態５６６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
６１５．リンカー領域は、Ｌ４９として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態５６６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
６１６．リンカー領域は、Ｌ５０として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態４９８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
６１７．リンカー領域は、Ｌ５１として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態４９８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
６１８．リンカー領域は、Ｌ５２として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態４９８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
６１９．リンカー領域は、Ｌ５３として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態４９８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
６２０．リンカー領域は、Ｌ５４として示されるリンカーのアミノ酸配列を含む、実施形態５６６に記載のＢＣＭＡ結合分子。
６２１．２価ＢＣＭＡ結合分子である、実施形態１４５〜６２０のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
６２２．２価ＢＣＭＡ結合分子は、図１Ｂ〜１Ｆに示される形態のいずれか１つを有する、実施形態６２１に記載のＢＣＭＡ結合分子。
６２３．２価ＢＣＭＡ結合分子は、図１Ｂに示される形態を有する、実施形態６２２に記載のＢＣＭＡ結合分子。
６２４．２価ＢＣＭＡ結合分子は、図１Ｃに示される形態を有する、実施形態６２２に記載のＢＣＭＡ結合分子。
６２５．２価ＢＣＭＡ結合分子は、図１Ｄに示される形態を有する、実施形態６２２に記載のＢＣＭＡ結合分子。
６２６．２価ＢＣＭＡ結合分子は、図１Ｅに示される形態を有する、実施形態６２２に記載のＢＣＭＡ結合分子。
６２７．２価ＢＣＭＡ結合分子は、図１Ｆに示される形態を有する、実施形態６２２に記載のＢＣＭＡ結合分子。
６２８．ＡＢＤは、Ｂ１として示される形態を有する、実施形態６２２〜６２７のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
６２９．ＡＢＤは、Ｂ２として示される形態を有する、実施形態６２２〜６２７のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
６３０．３価ＢＣＭＡ結合分子である、実施形態１４５〜６２０のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
６３１．３価ＢＣＭＡ結合分子は、図１Ｇ〜１Ｚに示される形態のいずれか１つを有する、実施形態６３０に記載のＢＣＭＡ結合分子。
６３２．３価ＢＣＭＡ結合分子は、図１Ｇに示される形態を有する、実施形態６３１に記載のＢＣＭＡ結合分子。
６３３．３価ＢＣＭＡ結合分子は、図１Ｈに示される形態を有する、実施形態６３１に記載のＢＣＭＡ結合分子。
６３４．３価ＢＣＭＡ結合分子は、図１Ｉに示される形態を有する、実施形態６３１に記載のＢＣＭＡ結合分子。
６３５．３価ＢＣＭＡ結合分子は、図１Ｊに示される形態を有する、実施形態６３１に記載のＢＣＭＡ結合分子。
６３６．３価ＢＣＭＡ結合分子は、図１Ｋに示される形態を有する、実施形態６３１に記載のＢＣＭＡ結合分子。
６３７．３価ＢＣＭＡ結合分子は、図１Ｌに示される形態を有する、実施形態６３１に記載のＢＣＭＡ結合分子。
６３８．３価ＢＣＭＡ結合分子は、図１Ｍに示される形態を有する、実施形態６３１に記載のＢＣＭＡ結合分子。
６３９．３価ＢＣＭＡ結合分子は、図１Ｎに示される形態を有する、実施形態６３１に記載のＢＣＭＡ結合分子。
６４０．３価ＢＣＭＡ結合分子は、図１Ｏに示される形態を有する、実施形態６３１に記載のＢＣＭＡ結合分子。
６４１．３価ＢＣＭＡ結合分子は、図１Ｐに示される形態を有する、実施形態６３１に記載のＢＣＭＡ結合分子。
６４２．３価ＢＣＭＡ結合分子は、図１Ｑに示される形態を有する、実施形態６３１に記載のＢＣＭＡ結合分子。
６４３．３価ＢＣＭＡ結合分子は、図１Ｒに示される形態を有する、実施形態６３１に記載のＢＣＭＡ結合分子。
６４４．３価ＢＣＭＡ結合分子は、図１Ｓに示される形態を有する、実施形態６３１に記載のＢＣＭＡ結合分子。
６４５．３価ＢＣＭＡ結合分子は、図１Ｔに示される形態を有する、実施形態６３１に記載のＢＣＭＡ結合分子。
６４６．３価ＢＣＭＡ結合分子は、図１Ｕに示される形態を有する、実施形態６３１に記載のＢＣＭＡ結合分子。
６４７．３価ＢＣＭＡ結合分子は、図１Ｖに示される形態を有する、実施形態６３１に記載のＢＣＭＡ結合分子。
６４８．３価ＢＣＭＡ結合分子は、図１Ｗに示される形態を有する、実施形態６３１に記載のＢＣＭＡ結合分子。
６４９．３価ＢＣＭＡ結合分子は、図１Ｘに示される形態を有する、実施形態６３１に記載のＢＣＭＡ結合分子。
６５０．３価ＢＣＭＡ結合分子は、図１Ｙに示される形態を有する、実施形態６３１に記載のＢＣＭＡ結合分子。
６５１．３価ＢＣＭＡ結合分子は、図１Ｚに示される形態を有する、実施形態６３１に記載のＢＣＭＡ結合分子。
６５２．ＡＢＤは、Ｔ１として示される形態を有する、実施形態６３１〜６５１のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
６５３．ＡＢＤは、Ｔ２として示される形態を有する、実施形態６３１〜６５１のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
６５４．ＡＢＤは、Ｔ３として示される形態を有する、実施形態６３１〜６５１のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
６５５．ＡＢＤは、Ｔ４として示される形態を有する、実施形態６３１〜６５１のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
６５６．ＡＢＤは、Ｔ５として示される形態を有する、実施形態６３１〜６５１のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
６５７．ＡＢＤは、Ｔ６として示される形態を有する、実施形態６３１〜６５１のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
６５８．４価ＢＣＭＡ結合分子である、実施形態１４５〜６２０のいずれか１つに記載のＢＣＭＡ結合分子。
６５９．４価ＢＣＭＡ結合分子は、図１ＡＡ〜１ＡＧに示される形態のいずれか１つを有する、実施形態６５８に記載のＢＣＭＡ結合分子。
６６０．４価ＢＣＭＡ結合分子は、図１ＡＡに示さ苣讂뷥讅苣覜臣讂胣龮雦ꊽ藦隼볯馼臣風볨꺁볯ꎼ볯ꆼ뗧袐裥邭胣㲂牢ਾ†볯隼볯躼볯ꆾ볯ꎼ볯ꆼ뗧袐裥邭臣膀鯥醼볯ꊼ臣몤臣貂苣ꊽ藦銂鳦馁苣膀껥붖뷥讅볯閼볯ꮁ꣨覼臣ꊼ볯궼볯邵郥蚈귥芀戼㹲 隼볯銼볯钼뻤ꊼ볯궼볯邵郥蚈귥꾁胣뎛볯ꆼ볯ꮁꓧ閁苣讂뷥讅苣覜臣讂胣龮雦ꊽ藦隼볯馼臣風볨꺁볯ꎼ볯ꆼ뗧袐裥邭胣㲂牢ਾ†볯隼볯躼볯ꆾ볯ꎼ볯ꆼ뗧袐裥邭臣膀鯥醼볯꒼臣몤臣貂苣ꊽ藦銂鳦馁苣膀껥붖뷥讅볯閼볯ꮁ꣨覼臣ꊼ볯궼볯邵郥蚈귥芀戼㹲 隼볯钼볯钼뻤ꊼ볯궼볯邵郥蚈귥꾁胣뎛볯ꆼ볯ꮁꓧ閁苣讂뷥讅苣覜臣讂胣龮雦ꊽ藦隼볯馼臣風볨꺁볯ꎼ볯ꆼ뗧袐裥邭胣㲂牢ਾ†볯隼볯躼볯ꆾ볯ꎼ볯ꆼ뗧袐裥邭臣膀鯥醼볯ꚼ臣몤臣貂苣ꊽ藦銂鳦馁苣膀껥붖뷥讅볯閼볯ꮁ꣨覼臣ꊼ볯궼볯邵郥蚈귥芀戼㹲 隼볯隼볯钼뻤ꊼ볯궼볯邵郥蚈귥꾁胣뎛볯ꆼ볯ꮁꓧ閁苣讂뷥讅苣覜臣讂胣龮雦ꊽ藦隼볯馼臣風볨꺁볯ꎼ볯ꆼ뗧袐裥邭胣㲂牢ਾ†볯隼볯躼볯ꊼ볯꾁胣뒼뷯ₖ醼胣뒼뷯ₖ銼볯ꢁ臣ꚁꓧ閁苣讂뷥讅臣蒁臣貂臣醼臣銂鳦馁苣膀껥붖뷥讅볯閼볯鲀볯隼볯꺁臣骁苣讁볯ꒁ臣風볨꺁볯ꎼ볯ꆼ뗧袐裥邭胣㲂牢ਾ†볯隼볯躼볯ꊼ볯꾁胣뒼뷯ₖ醼臣鞁臣몤臣貂苣ꊽ藦銂鳦馁苣膀껥붖뷥讅볯隼볯ꮁ꣨覼臣ꊼ볯궼볯邵郥蚈귥芀戼㹲 隼볯馼볯ꆼ볯꒼臣膀볯隽†볯ꢁ臣ꚁꓧ閁苣讂뷥讅苣覜臣讂胣龮雦ꊽ藦隼볯鞼臣風볨꺁볯ꎼ볯ꆼ뗧袐裥邭胣㲂牢ਾ†볯鞼볯躼볯ꊼ볯꾁胣뒼뷯ₖ鎼臣鞁臣몤臣貂苣ꊽ藦銂鳦馁苣膀껥붖뷥讅볯隼볯ꮁ꣨覼臣ꊼ볯궼볯邵郥蚈귥芀戼㹲 隼볯醼볯ꆼ볯꒼臣膀볯隽†볯ꢁ臣ꚁꓧ閁苣讂뷥讅苣覜臣讂胣龮雦ꊽ藦隼볯鞼臣風볨꺁볯ꎼ볯ꆼ뗧袐裥邭胣㲂牢ਾ†볯鞼볯躼볯ꊼ볯꾁胣뒼뷯ₖ閼臣鞁臣몤臣貂苣ꊽ藦銂鳦馁苣膀껥붖뷥讅볯隼볯ꮁ꣨覼臣ꊼ볯궼볯邵郥蚈귥芀戼㹲 隼볯鎼볯ꆼ볯꒼臣膀볯隽†볯ꢁ臣ꚁꓧ閁苣讂뷥讅苣覜臣讂胣龮雦ꊽ藦隼볯鞼臣風볨꺁볯ꎼ볯ꆼ뗧袐裥邭胣㲂牢ਾ†볯鞼볯躼볯ꊼ볯꾁胣뒼뷯ₖ鞼臣鞁臣몤臣貂苣ꊽ藦銂鳦馁苣膀껥붖뷥讅볯隼볯ꮁ꣨覼臣ꊼ볯궼볯邵郥蚈귥芀戼㹲 隼볯閼볯ꆼ볯꒼臣膀볯隽†볯ꢁ臣ꚁꓧ閁苣讂뷥讅苣覜臣讂胣龮雦ꊽ藦隼볯鞼臣風볨꺁볯ꎼ볯ꆼ뗧袐裥邭胣㲂牢ਾ†볯鞼볯躼볯ꊼ볯꾁胣뒼뷯ₖ馼臣鞁臣몤臣貂苣ꊽ藦銂鳦馁苣膀껥붖뷥讅볯隼볯ꮁ꣨覼臣ꊼ볯궼볯邵郥蚈귥芀戼㹲 隼볯鞼볯ꆼ볯꒼臣膀볯隽†볯邼臣鞁臣몤臣貂苣ꊽ藦銂鳦馁苣膀껥붖뷥讅볯隼볯ꮁ꣨覼臣ꊼ볯궼볯邵郥蚈귥芀戼㹲 隼볯颼볯ꆼ볯꒼臣膀볯隽†볯醼臣鞁臣몤臣貂苣ꊽ藦銂鳦馁苣膀껥붖뷥讅볯隼볯ꮁ꣨覼臣ꊼ볯궼볯邵郥蚈귥芀戼㹲 隼볯馼볯ꆼ볯꒼臣膀볯隽†볯銼臣鞁臣몤臣貂苣ꊽ藦銂鳦馁苣膀껥붖뷥讅볯隼볯ꮁ꣨覼臣ꊼ볯궼볯邵郥蚈귥芀戼㹲 隼볯邼볯ꆼ볯꒼臣膀볯隽†볯鎼臣鞁臣몤臣貂苣ꊽ藦銂鳦馁苣膀껥붖뷥讅볯隼볯ꮁ꣨覼臣ꊼ볯궼볯邵郥蚈귥芀戼㹲 隼볯醼볯ꆼ볯꒼臣膀볯隽†볯钼臣鞁臣몤臣貂苣ꊽ藦銂鳦馁苣膀껥붖뷥讅볯隼볯ꮁ꣨覼臣ꊼ볯궼볯邵郥蚈귥芀戼㹲 隼볯銼볯낕꣧鎖뫤꺷胦銂鳦馁苣膀껥붖뷥讅볯鲀볯颼볯꺁臣骁苣讁볯ꒁ臣風볨꺁볯ꎼ볯ꆼ뗧袐裥邭胣㲂牢ਾ†볯颼볯躼볯ꎼ볯ꆼ뗧袐裥邭臣膀볯ꒁ믤誸臣麝菣袃鏥뎹该ꦉ꣧ꮁ臣蒁臣ꊼ볯궼볯ꮁ觧낕髧ꮁ臣覂臣邵郥馁苣膀껥붖뷥讅볯颼볯ꮁ꣨覼臣ꊼ볯궼볯邵郥蚈귥芀戼㹲 隼볯钼볯醼臣ꖻ룤꺁鷩銃菣몓매開觧꺨臣膀볯ꒁ믤誸臣麝菣袃鳩랕ꇩ꺨苣ꮐ苣膀껥붖뷥讅볯颼볯ꮁ꣨覼臣ꊼ볯궼볯邵郥蚈귥芀戼㹲 隼볯閼볯醼臣ꖻ룤꺁鷩銃菣誜闩麡꣧꾁胣ꮂ菣꾂苣뚂菣袼볯膽뷯膽뷯膽†뷯膽뷯莽뷯莽뷯貽뷯銽뷯鎽볯銂郥肂胣龮雦ꊽ藦隼볯钼臣風볨꺁볯ꎼ볯ꆼ뗧袐裥邭胣㲂牢ਾ†볯颼볯躼볯ꒁ믤誸臣麝菣袃鳩랕ꇩ꺨臣膀苣ꮂ苣뚂菣袼볯膽뷯膽뷯膽†뷯閽뷯膽뷯钽뷯覼苣ꮐ苣膀껥붖뷥讅볯颼볯袏臣龮雦ꊽ藦隼볯閼臣風볨꺁볯ꎼ볯ꆼ뗧袐裥邭胣㲂牢ਾ†볯颼볯躼볯ꒁ믤誸臣麝菣袃鳩랕ꇩ꺨臣膀菣뾂苣뚂菣袼볯膽뷯膽뷯膽†뷯薽뷯薽뷯钽뷯覽뷯膽볯銂郥肂胣龮雦ꊽ藦隼볯钼胣隼볯隼臣蒁臣貂臣醼臣ꮁ꣨覼臣ꊼ볯궼볯邵郥蚈귥芀戼㹲 隼볯颼볯醼臣ꖻ룤꺁鷩銃菣몓매開觧꺨臣膀菣蒃苣趃苣龃볯궼뷯鎽†뷯閽뷯莽뷯貽뷯鎽볯銂郥肂胣龮雦ꊽ藦隼볯銼胣隼볯鞼臣蒁臣貂臣醼臣ꮁ꣨覼臣ꊼ볯궼볯邵郥蚈귥芀戼㹲 隼볯馼볯ꊼ볯궼볯邵郥蚈귥꾁胣낕꣧鎖뫤꺷胦銂鳦閁臣蒁胣龮雦ꊽ藦醼胣隼볯醼臣蒁臣貂臣醼臣ꮁ꣨覼臣ꊼ볯궼볯邵郥蚈귥芀戼㹲 隼볯邼볯ꊼ볯궼臣芁苣膀볯ꊼ볯醼迥뎁볯袏臣ꆼ볯꒼볯꾁胣낕꣧鎖뫤꺷胦銂鳦馁苣膀껥붖뷥讅볯钼볯鲀볯颼볯꺁臣骁苣讁볯ꒁ臣風볨꺁볯ꎼ볯ꆼ뗧袐裥邭胣㲂牢ਾ†볯馼볯躼볯ꊼ볯醼臣膀볯ꒁ믤誸臣麝菣袃鏥뎹该ꦉ꣧ꮁ臣蒁臣ꊼ볯궼볯ꮁ觧낕髧ꮁ臣覂臣邵郥馁苣膀껥붖뷥讅볯馼볯ꮁ꣨覼臣ꊼ볯궼볯邵郥蚈귥芀戼㹲 隼볯銼볯ꆼ볯꒼볯꾁胣醼臣ꖻ룤꺁鷩銃菣몓매開觧꺨臣誁臣ꚁ볯ꎼ볯螤郥鎽臣讧裦膦듧ꮁ觧낕髧ꮁ臣覂臣邵郥馁苣膀껥붖뷥讅볯馼볯袏臣龮雦ꊽ藦隼볯醼臣風볨꺁볯ꎼ볯ꆼ뗧袐裥邭胣㲂牢ਾ†볯馼볯躼볯ꒁ믤誸臣麝菣袃鏥뎹该ꦉ꣧꾁胣醼臣ꖻ룤꺁鷩銃菣誜闩麡꣧銂郥肂胣龮雦ꊽ藦隼볯邼胣隼볯銼臣蒁臣貂臣醼臣ꮁ꣨覼臣ꊼ볯궼볯邵郥蚈귥芀戼㹲 隼볯钼볯醼臣ꖻ룤꺁鷩銃菣誜闩麡꣧꾁胣ꮂ菣꾂苣뚂菣袼볯膽뷯膽뷯膽†뷯膽뷯莽뷯莽뷯貽뷯銽뷯鎽볯銂郥肂胣龮雦ꊽ藦隼볯鎼臣風볨꺁볯ꎼ볯ꆼ뗧袐裥邭胣㲂牢ਾ†볯馼볯躼볯ꒁ믤誸臣麝菣袃鳩랕ꇩ꺨臣膀苣ꮂ苣뚂菣袼볯膽뷯膽뷯膽†뷯閽뷯膽뷯钽뷯覼苣ꮐ苣膀껥붖뷥讅볯馼볯袏臣龮雦ꊽ藦隼볯钼臣風볨꺁볯ꎼ볯ꆼ뗧袐裥邭胣㲂牢ਾ†볯馼볯躼볯ꒁ믤誸臣麝菣袃鳩랕ꇩ꺨臣膀菣뾂苣뚂菣袼볯膽뷯膽뷯膽†뷯薽뷯薽뷯钽뷯覽뷯膽볯銂郥肂胣龮雦ꊽ藦隼볯鎼胣隼볯閼臣蒁臣貂臣醼臣ꮁ꣨覼臣ꊼ볯궼볯邵郥蚈귥芀戼㹲 隼볯鞼볯醼臣ꖻ룤꺁鷩銃菣몓매開觧꺨臣膀菣蒃苣趃苣龃볯궼뷯鎽†뷯閽뷯莽뷯貽뷯鎽볯銂郥肂胣龮雦ꊽ藦隼볯銼胣隼볯隼臣蒁臣貂臣醼臣ꮁ꣨覼臣ꊼ볯궼볯邵郥蚈귥芀戼㹲 隼볯颼볯ꊼ볯궼臣芁苣膀볯ꊼ볯醼迥뎁볯ꊼ볯銼臣膀闧꺨雩꒺럥Ꞁ苣覜臣ꪁ臣膀껥붖뷥讅볯钼볯鲀볯颼볯꺁臣骁苣讁볯ꒁ臣風볨꺁볯ꎼ볯ꆼ뗧袐裥邭胣㲂牢ਾ†볯馼볯躼볯膽볯견볯꺁菣ꪃ菣鞃菣覃臣芁臣ꚁ胣㲁牢ਾ††볯覽볯견볯꺁볯莽ꃩ龟苣ꮐ苣견볯꺁蟩階껥뢸菣ꆃ苣뎃볯㲛牢ਾ††볯覽뷯覼뷯莽볯隽迥覤믨階菣ꆃ苣뎃胣鎽뷯ꚼ뷯ꪃ菣ꮂ菣誏臣鎽뷯ꚼ뷯꾏ꓥ趇軩覃菣ꒂ菣銂郥肂뷯莽볯隽臣芁臣ꚁ胣銃菣뢂臣袂臣ꚁ곧醼臣ꚼ뷯颠鿥꺁볯ꮜꯧꮁ藥覜뗧袐臣貂苣鎽뷯ꚼ뷯㲖牢ਾ苣ꮐ苣견볯꺁菣ꪃ菣鞃菣覃볯㲛牢ਾ†볯芽볯견볯꺁菣ꪃ菣鞃菣覃臣芁臣ꚁ胣㲁牢ਾ††볯覽볯趇軩꾏ꓥ覃菣ꒂ菣鮼戼㹲 †袼뷯覽볯견볯꺁볯莽ꃩ龟苣ꮐ苣견볯꺁蟩階껥뢸菣ꆃ苣뎃戼㹲銂郥肂곧銼臣鶃菣骃菣膃菣鮼迥뎁戼㹲 袼뷯覼믨階껥뢸菣ꆃ苣뎃迥뎁믨階迥覤菣ꆃ苣뎃苣ꮐ苣견볯꺁菣ꪃ菣鞃菣覃戼㹲銂郥肂볯ꎼ볯ꆼ뗧袐裥邭臣芁臣ꚁ胣㲁牢ਾ†볯躼곧醼迥뎁곧銼臣ꚼ뷯颠鿥꾁胣ꚼ뷯覃菣ꒂ菣銂뷥邈臣鮼戼㹲 ꊼ볯견볯誏臣견볯꺁볯莽ꃩ龟臣膀볯鎼볯钼볯込볯鎼볯鞼볯骼볯鎼볯颼볯込볯鞼볯뎼苣ꮐ苣ꊂ菣躃藩꺽迦꺁뗧銂鳦鞁胣设臣낁胣견볯꺁볯莽ꃩ龟臣膀볯鎼볯钼볯込볯鎼볯鞼볯꺽迦銂郥뾁胣견볯꺁볯莽ꃩ龟臣膀볯鎼볯颼볯込볯鞼볯뎼뷧鮏苣ꮐ臣鮼戼㹲 ꎼ볯견볯誏臣込迥꾁곧銼臣ꚼ뷯颠鿥꾁胣ꊂ菣躃藩꺿ꏩꖼ볯銼볯낼胣겼볯鎼볯뚼胣겼볯鎼볯ꆼ胣Ꞽ볯鎼볯蒽뷯貽胣뎼볯隼볯ꮼ苣ꮐ臣膀뻤袁臣膀곧醼迥뎁곧銼臣ꚼ뷯颠鿥꾁胣ꆸ雦ꢁ苣ꊂ菣躃藩꺿ꏩꖼ볯銼볯낼胣겼볯鎼볯뚼胣겼볯鎼볯ꆼ胣Ꞽ볯鎼볯蒽뷯貽胣뎼볯隼볯ꮼ苣ꮐ臣鮼戼㹲 ꒼볯견볯誏臣込迥꾁곧銼臣ꚼ뷯颠鿥꾁胣ꊂ菣躃藩꺽迦꺼볯邼볯꒼胣놼볯馼볯ꖼ胣꺼볯颼볯꒼胣놼볯醼볯ꖼ迥뎁볯钼볯醼볯銂郥뾁胣设臣낁胣견볯꺁볯莽ꃩ龟臣꾁臣辁胣견볯꺁볯莽ꃩ龟臣膀苣龃菣뢅뷧鮏볯銼볯颼볯膀볯銼볯閼볯膀볯鎼볯钼볯膀볯钼볯颼볯誏臣꺼볯銼볯꒼苣ꮐ臣鮼戼㹲 ꖼ볯견볯꺁菣ꪃ菣鞃菣覃臣趇軩꾏ꓥ覃菣ꒂ菣誏臣견볯꺁菣ꪃ菣鞃菣覃臣붻軩꾏ꓥ覃菣ꒂ菣꾁胣ꢡ볯ꎼ裢醼迥뎁ꇨ醼볯銈볯膀ꇨ醼볯銈볯誏臣ꢡ볯꒼裢銼胣ꢡ볯ꖼ裢醼迥뎁ꇨ醼볯銈볯膀ꇨ醼볯銈볯誏臣ꢡ볯ꚼ裢銼胣ꢡ볯Ꞽ裢醼迥뎁ꇨ醼볯銈볯袏臣ꢡ볯ꢼ裢醼迥뎁ꇨ醼볯銈볯ꮁ꣨覼臣貂苣ꆼ볯醼臣ꎼ볯늼藩鞈苣ꮐ臣鮼迥뎁戼㹲 ꚼ볯鎽뷯ꚼ뷯꾁胣銃菣ꎼ볯鎼臣邵郥馁苣膀볯ꎼ볯ꆼ뗧袐裥邭胣㲂牢ਾ†볯邼볯躼곧鎼臣鶃菣骃菣膃菣꺁믨階迥覤菣ꆃ苣뎃迥뎁곧銼臣鶃菣骃菣膃菣꺁蟩階菣ꆃ苣뎃臣膀ꇨ醼볯銈볯誏臣ꢡ볯꾼裢銼臣風볨閁苣讂볯ꊼ볯꺁믨階迥覤菣ꆃ苣뎃迥뎁蟩階迥覤菣ꆃ苣뎃藩鞈苣ꮐ苣膀껥붖뷥讅볯馼볯ꮁ꣨覼臣ꊼ볯궼볯邵郥蚈귥芀戼㹲 鞼볯醼볯袼뷯覼곧醼臣鶃菣骃菣膃菣ꞁ臣ꎁ臣膀戼㹲 †袼뷯覼곧醼臣ꚼ뷯颠鿥銂郥肂곧醼臣趇軩骮룥覃菣ꒂ菣鮼戼㹲 †袼뷯覽볯鎽뷯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