(57)【要約】  本明細書に開示されるのは、リソソーム蓄積症、神経変性疾患、および筋肉疾患などの、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患のバイオマーカーとして機能するＰＢＭＣサンプル中の低下されたＨｓｐ７０レベルの同定に基づく方法である。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）サンプル中のＨｓｐ７０を検出する方法であって、
ａ）ＰＢＭＣサンプルを提供するステップと、
ｂ）前記ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０を検出するステップと、
ｃ）任意により前記ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０のレベルを定量化するかまたは決定するステップ
を含む、方法。
【請求項２】
個体において低下されたレベルのＨｓｐ７０のレベルを呈する疾患を診断するための方法であって、
ａ）前記個体からのＰＢＭＣサンプルを提供するステップと、
ｂ）前記ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０を検出するステップと、
ｃ）前記ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０のレベルを定量化するかまたは決定するステップ
を含む、方法。
【請求項３】
ｉ．前記個体が低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有するか、または有する可能性があるかを分類するかまたは決定するステップ
をさらに含む、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有する患者を選択するための方法であって、
ａ）前記患者からのＰＢＭＣサンプルを提供するステップと、
ｂ）前記ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０を検出するステップと、
ｃ）前記ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０のレベルを定量化するかまたは決定するステップと、
ｄ）個体が低下されたレベルのＨｓｐ７０を有するかを分類するかまたは決定するステップ
を含む、方法。
【請求項５】
Ｉｎ  ｖｉｔｒｏ法である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
ｉ．ＨｓｐＡ１Ａ、
ｉｉ．ＨｓｐＡ１Ｂ、または
ｉｉｉ．ＨｓｐＡ１ＡおよびＨｓｐＡ１Ｂ
から選択されるＨｓｐ７０を検出しかつ任意により定量化するかまたは決定することを含む、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
前記ＰＢＭＣサンプルが、個体から得られるかまたは得ることができる、請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
前記個体が、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有する、有する疑いがある、有するリスクがあるかまたは有する可能性がある、請求項１〜７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
前記個体が、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患と診断された兄弟、親、いとこ、叔父および／または叔母の１名以上などの、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患と診断された１名以上の家族を有する、請求項１〜８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
前記個体が、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患の遺伝的素因を有する１名以上の家族を有する、請求項１〜９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
前記個体が、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患に関連するかまたはそれを示す１つ以上の症状を有する、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
前記ステップｄ）が、健康な対照からのＰＢＭＣサンプル中のレベルと比較される前記ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０のレベルを決定することを含む、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
ｉ．健康な対照中のレベルと比較して前記ＰＢＭＣサンプル中の低下されたまたは検出不能なレベルのＨｓｐ７０が、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有する、有する可能性があるかまたは有するリスクのある個体を示す、かつ／または
ｉｉ．健康な対照中のレベルと比較して前記ＰＢＭＣサンプル中の低下されたまたは検出不能なレベルのＨｓｐＡ１Ａが、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有する、有する可能性があるかまたは有するリスクのある個体を示す、かつ／または
ｉｉｉ．健康な対照中のレベルと比較して前記ＰＢＭＣサンプル中の低下されたまたは検出不能なレベルのＨｓｐＡ１Ｂが、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有する、有する可能性があるかまたは有するリスクのある個体を示す、かつ／または
ｉｖ．健康な対照中のレベルに匹敵する、等しいまたはより高い前記サンプル中のＨｓｐ７０、ＨｓｐＡ１Ａおよび／またはＨｓｐＡ１Ｂのレベルが、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有しない個体を示す、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
請求項１〜１３のいずれか一項に記載の方法であって、前記個体が、
ｉ．前記ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０のレベルが、健康な対照で見られるレベルよりも１〜２倍、２〜３倍、３〜４倍、４〜５倍、５〜６倍、６〜７倍、７〜８倍、８〜９倍、９〜１０倍、１０〜１１倍、１１〜１２倍、１２〜１３倍、１３〜１４倍、１４〜１５倍、１５〜１６倍、１６〜１７倍、１７〜１８倍、１８〜１９倍、１９〜２０倍、２０〜２５倍、２５〜３０倍、３０〜３５倍、３５〜４０倍、４０〜４５倍、４５〜５０倍、５０〜７５倍、７５〜１００倍、１００〜１５０倍、１５０〜２００倍、２００〜２５０倍、２５０〜３００倍、３００〜４００倍、４００〜５００倍、５００〜７５０倍、７５０〜１０００倍低いか、または検出できないなどの、健康な対照で見られるレベルよりも１〜１０００倍低い場合に、かつ／または、
ｉｉ．前記ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐＡ１Ａおよび／またはＨｓｐＡ１Ｂのレベルが、健康な対照で見られるレベルよりも、１〜２倍、２〜３倍、３〜４倍、４〜５倍、５〜６倍、６〜７倍、７〜８倍、８〜９倍、９〜１０倍、１０〜１１倍、１１〜１２倍、１２〜１３倍、１３〜１４倍、１４〜１５倍、１５〜１６倍、１６〜１７倍、１７〜１８倍、１８〜１９倍、１９〜２０倍、２０〜２５倍、２５〜３０倍、３０〜３５倍、３５〜４０倍、４０〜４５倍、４５〜５０倍、５０〜７５倍、７５〜１００倍、１００〜１５０倍、１５０〜２００倍、２００〜２５０倍、２５０〜３００倍、３００〜４００倍、４００〜５００倍、５００〜７５０倍、７５０〜１０００倍低いか、または検出できないなどの、健康な対照で見られるレベルよりも１〜１０００倍低い場合に、
低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有する可能性がある、方法。
【請求項１５】
請求項１〜１４のいずれか一項に記載の方法であって、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有するか、または有する可能性があるとして個体を分類するかまたは決定する前記ステップｄ）が、
ｉ．前記ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０の量が事前定義されたカットオフ値を下回っているか、または検出できないかを決定すること、かつ／または
ｉｉ．前記ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐＡ１Ａおよび／またはＨｓｐＡ１Ｂの量が事前定義されたカットオフ値を下回っているか、または検出できないかを決定すること
を含む、方法。
【請求項１６】
前記個体が、前記ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０の量が７５００ｐｇ／ｍＬ以下、７０００ｐｇ／ｍＬ以下など、６５００ｐｇ／ｍＬ以下など、６０００ｐｇ／ｍＬ以下など、５５００ｐｇ／ｍＬ以下など、５０００ｐｇ／ｍＬ以下など、４５００ｐｇ／ｍＬ以下など、４０００ｐｇ／ｍＬ以下など、３５００ｐｇ／ｍＬ以下など、３０００ｐｇ／ｍＬ以下など、２５００ｐｇ／ｍＬ以下など、２０００ｐｇ／ｍＬ以下など、１５００ｐｇ／ｍＬ以下など、１０００ｐｇ／ｍＬＰＢＭＣ以下などである場合に低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有するかまたは有する可能性がある、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７】
前記患者が低下されたレベルのＨｓｐ７０を有するかを分類するかまたは決定するステップが、低下されたレベルのＨｓｐ７０を有する患者を同定するステップを含む、請求項４〜１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８】
前記患者が低下されたレベルのＨｓｐ７０を有するかを分類するかまたは決定するステップが、同じ基礎疾患を呈するが付随する低下されたレベルのＨｓｐ７０を有しない患者から得られたまたは得ることができるＰＢＭＣサンプル中のレベルと比較して前記ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０のレベルを決定することを含む、請求項４〜１２、または１７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９】
前記患者が低下されたレベルのＨｓｐ７０を有するかを分類するかまたは決定する前記ステップｄ）が、
ｉ．前記ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０の量が事前定義されたカットオフ値を下回っているか、または検出できないかを決定すること、かつ／または
ｉｉ．前記ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐＡ１Ａおよび／またはＨｓｐＡ１Ｂの量が事前定義されたカットオフ値を下回っているか、または検出できないかを決定すること
を含む、請求項４〜１２、または１７〜１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０】
前記患者が、Ｈｓｐ７０の量が前記カットオフ値を下回る場合、Ｈｓｐ７０を含む、熱ショックタンパク質の細胞内濃度および／または活性を増加させる生物活性剤を含むＨｓｐ７０治療法に応答する可能性があるか、または可能性が高い、請求項４〜１２、または１７〜１９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１】
低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する患者が、前記ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０（ＨｓｐＡ１Ａおよび／またはＨｓｐＡ１Ｂなど）の量が７５００ｐｇ／ｍＬ以下、７０００ｐｇ／ｍＬ以下など、６５００ｐｇ／ｍＬ以下など、６０００ｐｇ／ｍＬ以下など、５５００ｐｇ／ｍＬ以下など、５０００ｐｇ／ｍＬ以下など、４５００ｐｇ／ｍＬ以下など、４０００ｐｇ／ｍＬ以下など、３５００ｐｇ／ｍＬ以下など、３０００ｐｇ／ｍＬ以下など、２５００ｐｇ／ｍＬ以下など、２０００ｐｇ／ｍＬ以下など、１５００ｐｇ／ｍＬ以下など、１０００ｐｇ／ｍＬＰＢＭＣ以下などである場合にＨｓｐ７０治療法に応答する可能性があるか、または可能性が高い、請求項４〜１２、または１７〜２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２】
Ｈｓｐ７０を含む、熱ショックタンパク質の細胞内濃度および／または活性を増加させる生物活性剤を含むＨｓｐ７０治療法などの、前記患者に低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する前記疾患の治療のための治療法を施すために前記患者の適格性を決定するステップをさらに含む、請求項４〜１２、または１７〜２１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２３】
ｉ．低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患の治療のための治療法を施すステップ
をさらに含む、請求項１〜２２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２４】
ステップａ）個体からのＰＢＭＣサンプルを提供することが、
ｉ．個体からの全血サンプルを提供するステップと、
ｉｉ．全血をそのサブ区画に分離してＰＢＭＣサンプルを得るステップ
の１つ以上のステップを含む、請求項１〜２３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２５】
低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有する個体において疾患進行を監視するための方法であって、
ｉ．２つ以上のその後の時点で前記個体からの１つ以上のＰＢＭＣサンプルを提供するステップと、
ｉｉ．前記ＰＢＭＣサンプルの各々中でＨｓｐ７０を検出するステップと、
ｉｉｉ．前記ＰＢＭＣサンプルの各々中のＨｓｐ７０のレベルを定量化するかまたは決定するステップ
を含む、方法。
【請求項２６】
第１のＰＢＭＣサンプルが、ｔ＝０で採取されかつ１つ以上のその後のＰＢＭＣサンプルが、ｔ＞０での１つ以上の後の時点で採取される、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
１つ以上のその後のサンプルが、１日、２日、３日、４日、５日、６日、７日、１４日、３週間、４週間、５週間、６週間、７週間、８週間、１ヶ月、２ヶ月、３ヶ月、４ヶ月、５ヶ月、６ヶ月、７ヶ月、８ヶ月、９ヶ月、１０ヶ月、１１ヶ月および／または１２ヶ月の間隔で採取される、請求項２５または２６に記載の方法。
【請求項２８】
ｄ）低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患が進行中であるか寛解中であるかを決定するステップをさらに含む、請求項２５〜２７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２９】
ａ）時間の経過に伴うＨｓｐ７０のレベルの低下が、前記疾患の進行を示す、かつ／または
ｂ）経時的なＨｓｐ７０のレベルの増加が、前記疾患の寛解を示す、
請求項２５〜２８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３０】
低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有する個体において低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を治療するための治療法の有効性を監視するための方法であって、
ａ）治療法が適用される、維持される、減少されるかまたは上昇される前、その間および／またはその後に前記個体からの１つ以上のＰＢＭＣサンプルを提供するステップと、
ｂ）前記１つ以上のＰＢＭＣサンプルの各々中のＨｓｐ７０を検出するステップと、
ｃ）前記１つ以上のＰＢＭＣサンプルの各々中のＨｓｐ７０のレベルを定量化するかまたは決定するステップ
を含む、方法。
【請求項３１】
ｉ．１つ以上のＰＢＭＣサンプルが、治療法が適用される、維持される、減少されるかまたは上昇される前に低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有する個体から得られる；
ｉｉ．１つ以上のＰＢＭＣサンプルが、治療法中に低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有する個体から得られる；かつ／または
ｉｉｉ．１つ以上のＰＢＭＣサンプルが、治療法が適用された、維持された、減少されたかまたは上昇された後に低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有する個体から得られる；かつ／または
ｉｖ．１つ以上のＰＢＭＣサンプルが、治療法が適用される、維持される、減少されるかまたは上昇される前、その間および／またはその後に低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有する個体から得られる、
請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
ｄ）低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患に対する治療法の有効性を監視するステップをさらに含む、請求項３０または３１に記載の方法。
【請求項３３】
ａ）治療法が適用された、維持された、減少されたかまたは上昇された後の、Ｈｓｐ７０のレベルの増加が、前記治療法が有効であることを示す、かつ／または
ｂ）治療法が適用された、維持された、減少されたかまたは上昇された後の、Ｈｓｐ７０のレベルの減少が、前記治療法が有効でないことを示す、
請求項３０〜３２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３４】
前記Ｈｓｐ７０を検出することが、Ｈｓｐ７０タンパク質またはＨｓｐ７０タンパク質などのＲＮＡを検出することを含む、請求項１〜３３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３５】
前記Ｈｓｐ７０が、酵素結合免疫吸着検定法（ＥＬＩＳＡ）によって検出されかつ定量化される、請求項１〜３４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３６】
ステップｃ）サンプル中のＨｓｐ７０のレベルを定量化するかまたは決定するステップが、
ｉ．較正された標準に正規化するステップと、
ｉｉ．前記ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０を定量化するステップ
の１つ以上を含む、請求項１〜３５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３７】
低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を治療するための治療法が、Ｈｓｐ７０を含む、熱ショックタンパク質の細胞内濃度および／または活性を増加させる生物活性剤である、請求項１〜３６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３８】
Ｈｓｐ７０を含む、熱ショックタンパク質の細胞内濃度および／または活性を増加させる前記生物活性剤が、Ｈｓｐ７０タンパク質、またはその機能的断片またはバリアント、熱ショックタンパク質誘導物質およびＨｓｐ７０誘導物質または共誘導物質から選択される、請求項１〜３７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３９】
Ｈｓｐ７０を含む、熱ショックタンパク質の細胞内濃度および／または活性を増加させる前記生物活性剤が、Ｈｓｐ７０遺伝子発現を増幅することによりＨｓｐ７０の細胞内濃度（またはレベル）を増加させることができる小分子ヒドロキシルアミン誘導体である、請求項１〜３８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４０】
Ｈｓｐ７０を含む、熱ショックタンパク質の細胞内濃度および／または活性を増加させる前記生物活性剤が、アリモクロモール、イロキサナジン、ビモクロモール、ＢＧＰ−１５、それらの立体異性体およびそれらの酸付加塩からなる群から選択される、請求項１〜３９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４１】
低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患が、リソソーム蓄積症、神経変性疾患、神経筋障害、筋ジストロフィーおよび炎症性筋障害である、請求項１〜４０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４２】
低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する前記疾患が、リソソーム蓄積症である、請求項１〜４１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４３】
前記リソソーム蓄積症が、スフィンゴリピドース；ムコ多糖症；グリコーゲン貯蔵障害；糖タンパク質代謝障害（糖タンパク代謝異常症）；およびムコリピドースを含む脂質貯蔵障害からなる群から選択される、請求項４２に記載の方法。
【請求項４４】
前記リソソーム蓄積症が、スフィンゴリピドースである、請求項４３に記載の方法。
【請求項４５】
前記リソソーム蓄積症が、ニーマンピック病（Ａ型、Ｂ型、およびＣ型など）、ファーバー病、クラッベ病、ファブリー病、ゴーシェ病、シアリドーシス（ムコリピドーシスＩ型）、異染性白質ジストロフィーなどのスルファチドーシス（後期乳児型、若年型、および成人型）ならびにサポシン欠損症および多発性スルファターゼ欠損症（オースティン病）、ゴーシェ病（Ｉ型、ＩＩ型およびＩＩＩ型を含む）、脳腱コレステリン蓄積症、ウォルマン病（リソソーム酸性リパーゼ欠損症）、コレステリルエステル蓄積症、および神経セロイドリポフスチン症（バッテン病（シュピールマイヤー・フォークト病を含む、ＮＣＬ）、ビールショウスキー−ヤンスキー病、クフス病、サンタヴオリ−ハルティア病）、ムコ多糖症（Ｉ型、ＩＩ型、ＩＩＩ型、ＩＶ型、ＶＩ型、ＶＩＩ型、ＶＩＩＩ型およびＩＸ型）、ムコリピドース（ＩＩ型、ＩＩＩ型およびＩＶ型），心臓糖原病、アンデルセン病、コリ病（フォーブス病）、ハース病、マッカードル病、ポンペ病、タウリ病（タルイ病）、フォン・ギールケ病、ＩＩ型ポンペ病、ＩＩｂ型ダノン病、アスパルチルグルコサミン尿症、フコシドーシス、マンノシドーシス、アルファマンノシドーシス、アルファマンノシドーシスＩ型、アルファマンノシドーシスＩＩ型、ベータマンノシドーシス、シアリドーシスＩＩ型（ムコリピドーシスＩ）およびガラクトシアリドーシスからなる群から選択される、請求項４２に記載の方法。
【請求項４６】
前記リソソーム蓄積症が、ニーマンピック病Ｃ型などの、ニーマンピック病である、請求項４２に記載の方法。
【請求項４７】
低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する前記疾患が、神経変性疾患である、請求項１〜４６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４８】
前記神経変性疾患が、パーキンソン病、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、多発性硬化症、ハンチントン病、ポリグルタミン病、および脊髄小脳失調症（脊髄小脳失調症１型、脊髄小脳失調症２型、脊髄小脳失調症３型（別名、マチャド・ジョセフ病）、脊髄小脳失調症６型、脊髄小脳失調症７型および脊髄小脳失調症１７型）、ＤＲＰＬＡ（歯状核赤核淡蒼球ルイ体萎縮症）およびＳＢＭＡ（球脊髄性筋萎縮症またはケネディ病）からなる群から選択される、請求項４７に記載の方法。
【請求項４９】
低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する前記疾患が、神経筋障害、筋ジストロフィーおよび炎症性筋障害からなる群から選択される、請求項１〜４８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５０】
前記神経筋障害が、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、多発性硬化症、パーキンソン病、ハンチントン病、クロイツフェルト・ヤコブ病、重症筋無力症、脊髄性筋萎縮症（ＳＭＡ）、呼吸困難１型を伴う脊髄性筋萎縮症（ＳＭＡＲＤ１；別名遠位脊髄性筋萎縮症１型（ＤＳＭＡ１））、先天性筋無力症候群（ＣＭＳ）、先天性ミオパチー、痙攣線維束性収縮症候群、筋ジストロフィー、遺伝性痙性対麻痺、封入体筋炎、ニューロミオトニア（ＮＭＴ、別名アイザックス症候群、アイザックス−マートン症候群）、ミトコンドリアミオパチー、ランバート・イートン筋無力症候群（ＬＥＭＳ）、筋緊張性ジストロフィー、末梢神経障害、脊髄性筋萎縮症（ＳＢＭＡ、またはケネディ病）、スティッフパーソン症候群およびギランバレー症候群からなる群から選択される、請求項４９に記載の方法。
【請求項５１】
前記筋ジストロフィーが、デュシェンヌ型筋ジストロフィー（ＤＭＤ）、ベッカー型筋ジストロフィー、先天性筋ジストロフィー、遠位型筋ジストロフィー、エメリー・ドレイフス型筋ジストロフィー、顔面肩甲上腕型筋ジストロフィー、肢帯型筋ジストロフィー、筋緊張性筋ジストロフィーおよび眼咽頭型筋ジストロフィーからなる群から選択される、請求項４９に記載の方法。
【請求項５２】
前記炎症性筋障害が、炎症性ミオパチー（炎症性筋疾患または筋炎）、特発性炎症性ミオパチー、多発性筋炎（ＰＭ）、皮膚筋炎（ＤＭ）、封入体筋炎（ｓＩＢＭおよびｈＩＢＭ）、多発性筋炎（または「筋肉リウマチ」）および横紋筋融解症からなる群から選択される、請求項４９に記載の方法。
【請求項５３】
Ｈｓｐ７０遺伝子発現を増幅することにより個体におけるＨｓｐ７０の細胞内濃度（またはレベル）を増加させることができる小分子ヒドロキシルアミン誘導体の投与量を調整するための方法であって、
ａ）前記個体からのＰＢＭＣサンプルを提供するステップと、
ｂ）前記ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０を検出するステップと、
ｃ）前記ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０の第１のレベルを定量化するかまたは決定するステップと、
ｄ）第１の用量で前記小分子ヒドロキシルアミン誘導体を投与するステップと、
ｅ）ステップａ）〜ｃ）を繰り返して前記ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０の第２のレベルを特定するステップと、
ｆ）前記第１のレベルをＨｓｐ７０の第２のレベルと比較するステップと、
ｇ）任意により前記比較に基づいて前記小分子ヒドロキシルアミン誘導体の投与量を調整するステップ
を含む、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、熱ショックタンパク質７０（Ｈｓｐ７０）がリソソーム蓄積症ＮＰＣの末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）患者サンプルにおいて著しく減少し、したがって、脳および肝臓組織を含む、病理学的に罹患している疾患組織で観察された、これまでに観察されたＨｓｐ７０のレベルの低下がＰＢＭＣサンプル中の低レベルのＨｓｐ７０タンパク質に直接変換され、Ｈｓｐ７０レベルの簡素な検出手段をもたらす、という発見に関する。
【背景技術】
【０００２】
熱ショックタンパク質（ＨＳＰ）の最も広く研究されているファミリーの１つであるＨｓｐ７０タンパク質は、すべての真核細胞で合成される。Ｈｓｐ７０タンパク質は、幅広いシャペロン機能を有し、多くの細胞内プロセスの正常な過程をもたらす。さらに、Ｈｓｐ７０タンパク質は、ストレスに対する細胞の耐性に関与しており、特に、それらはタンパク質の凝集を防ぎ、ストレス条件下で損傷したタンパク質の除去を促進する。
【０００３】
Ｈｓｐ７０タンパク質はストレスおよび熱ショックによって誘発され、複数の報告がＨｓｐ７０の発現と、疾患またはストレスおよび運動の他の状態との相関関係について実証している。例えば、Ｈｓｐ７０（血漿または血清中）の循環レベルの上昇は、心血管疾患（急性心筋梗塞後の心不全、末梢動脈疾患）、癌患者（例えば、小細胞肺癌、胆管癌、頭頸部癌、膵癌）、子癇前症および病理学的妊娠、妊娠性真性糖尿病、多嚢胞性卵巣症候群、炎症状態、喘息および高齢患者における虚弱で確認されている。このような上昇した循環レベルのＨｓｐ７０レベルは、疾患の進行および好ましくない臨床転帰を予測することが見出されている。
【０００４】
特定の病理学的条件下では、タンパク質の品質管理機構は、ミスフォールドタンパク質の蓄積を防ぐのに十分ではない。Ｈｓｐ７０は、シャペロンとして機能し、タンパク質の凝集および毒性からニューロンを保護する。アルツハイマー病（ＡＤ）、パーキンソン病（ＰＤ）、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、および遺伝性ポリグルタミン（ＰｏｌｙＱ）疾患（例えば、ハンチントン病（ＨＤ）；脊髄小脳失調症（ＳＣＡ）１型、２型、３型、６型、７型、および１７型；球脊髄性筋萎縮症（ＳＢＭＡ）；歯状核赤核淡蒼球ルイ体萎縮症（ＤＲＰＬＡ））を含む、様々な神経変性疾患に共通する特徴は、脳（ニューロンの内側と外側）におけるミスフォールドタンパク質の蓄積および沈着、ならびに中枢神経系（ＣＮＳ）での選択的なニューロンの喪失である。これらのコンフォメーション／ミスフォールディング疾患のすべてについて、ミスフォールドタンパク質が一般的な治療標的と見なされており、多くの研究がＨＳＰの神経保護的役割に焦点を合わせている。
【０００５】
神経変性疾患の発生率は、世界的に高い。神経変性疾患は、高齢の個体に不釣り合いな影響を与えるため、一般的に長寿が増長すると共に、疾患に関連する罹患率が上昇している。神経変性につながる根本的なメカニズムの理解は、予防および治療の方法を特定するために重要である。研究者らは、脳疾患の様々なモデルにおいて、プレコンディショニング、過剰発現、または薬物によって誘発されるＨＳＰの保護効果を観察した。実験データは、Ｈｓｐ７０を提供することを含む、細胞ストレス応答の操作が、神経変性疾患の進行中に脳を保護するための戦略を提供し得ることを示唆する。
【０００６】
リソソーム蓄積症（ＬＳＤ）は、まれな疾患群であり、リソソーム区画に物質が蓄積し、その結果それが不安定化することを特徴とし、影響を受けた個体に壊滅的な影響を与える。物質は、それらの異化作用に関与する酵素の欠乏により、リソソーム区画中に蓄積する。
【０００７】
ＬＳＤ患者の大多数は、可能であれば酵素アッセイによって最初にスクリーニングされ、これは、確定診断に到達するための最も効率的な方法である。疾患の原因となる変異（複数可）が知られている一部の家族および特定の遺伝的分離株では、変異分析が行われる場合もある。多数の異なる変異が存在し得るため、診断を確認するために、特定の影響を受けるタンパク質／酵素をコードする遺伝子の配列決定が必要になる場合もある。出生前診断は、既知の遺伝的リスク因子がある場合に有用であり得る。
【０００８】
ＬＳＤとしては、ニーマンピック病（Ａ型、Ｂ型、Ｃ型を含む）が挙げられる。歴史的に、ニーマンピック病Ｃ型（ＮＰＣ）の診断は、エステル化研究および培養皮膚線維芽細胞のフィリピン染色の両方により組織病理学的に行われ、ほとんどの患者は、この信頼できるが費用がかかり困難な、確定的調査前に実行される様々な検査の組み合わせを受ける。これらの検査は、キトトリオシダーゼ測定、他のリソソーム蓄積症を除外するための白血球酵素研究、ならびに骨髄穿刺液および肝生検試験片の両方の蛍光および電子顕微鏡検査を含む場合がある。フィリピン染色検査は困難であるため、現在最も広く実施され、利用可能な確定診断検査は、ＮＰＣ１遺伝子およびＮＰＣ２遺伝子の配列決定である。次世代シーケンサーは、特に関連する遺伝子が、新生児胆汁うっ滞性黄疸などの特定の疾患表現型を示す患者に適した複数遺伝子パネルに含まれる場合、はるかに簡単に実行できるが、このアプローチにも制限がある。患者の１０％では、単一の病原性変異のみが特定され得、一部の患者では、臨床的意義が不確かな新しい変異が特定され得る。
【０００９】
ニーマンピック病Ｃ型（ＮＰＣ）マウスモデル（Ｎｐｃ１−／−）の脳および肝臓でのＨｓｐ７０レベルが、野生型マウスの臓器でのＨｓｐ７０レベルよりも低いことが実証されている（Ｋｉｒｋｅｇａａｒｄ，Ｔ．ら、２０１６）。
【００１０】
したがって、ＣＮＳおよびＰＮＳのニューロン、ならびに罹患した個体の臓器などの罹患組織では、低下したレベルのＨｓｐ７０を有する疾患が多く存在する。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
低下したレベルのＨｓｐ７０を有する多数の疾患が存在し、上記の疾患の特定を支援するため、または代わりに、低下したレベルのＨｓｐ７０が共存している疾患の患者のサブセットを特定するための一般的なバイオマーカーとして、低下されたＨｓｐ７０レベルのこの所見を適用することは非常に有用である。
【００１２】
この発見は、このような低下したＨｓｐ７０の病理学的結果および症状に関係なく、低下したレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有する患者を診断する、あるいは、低下したレベルのＨｓｐ７０が共存する疾患の患者のサブセットを特定するかまたは診断するための方法に適用され得る。また、低下したレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有する個体での疾患進行および治療の有効性を監視するための方法での使用も見出され得る。
【００１３】
したがって、Ｈｓｐ７０レベルの測定に加えて、低下したレベルのＨｓｐ７０を呈する、また共に呈する特定の疾患を決定するために、さらなるレベルの診断が別々に、同時にまたはその後に通常実行される。正確な診断は、承認されかつ特定の病状に固有である治療を含む、正確な治療レジメンを可能にするために極めて重要であり、Ｈｓｐ７０の補充および誘導の治療法との併用治療を試験する可能性を開く。
【００１４】
低下したレベルのＨｓｐ７０は、ニーマンピック病Ｃ型マウスモデルの脳組織サンプルおよび肝臓組織サンプルで実証されている。しかし、脳組織サンプルおよび肝臓組織サンプルなどの組織で見られるバイオマーカーは、低下したレベルのＨｓｐ７０を呈する任意の他の疾患は言うまでもなく、ＮＰＣの診断の観点から適用可能であるとは見なされない。したがって、低下したレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を特定するための他の手段が必要である。
【００１５】
本発明者らは驚くべきことに、ニーマンピック病Ｃ型の患者由来の特に末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）サンプルが、健康な対照と比較して、実質的に低下または減少したレベルの熱ショックタンパク質７０（Ｈｓｐ７０）を含むことを発見した。
【００１６】
ＰＢＭＣサンプルは、血液サンプルを単に採取し、ＰＢＭＣの分離および単離のいくつかの簡素なステップを実行することにより、個体から容易に得ることができる。したがって、脳および肝臓組織を含む、病理学的に罹患している疾患組織で観察された低レベルのＨｓｐ７０が、ＰＢＭＣサンプル中の低レベルのＨｓｐ７０タンパク質に直接変換されるという新たな観察結果は、Ｈｓｐ７０レベルの簡素で容易かつ安易な検出手段を提供する。
【００１７】
末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）サンプル中のＨｓｐ７０を検出する方法を提供することは、本開示の一態様であり、この方法は、
ａ）ＰＢＭＣサンプルを提供するステップと、
ｂ）ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０を検出するステップと、
ｃ）任意により、ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０のレベルを定量化するかまたは決定するステップ、
を含む。
【００１８】
本開示のさらなる態様では、個体において低下したレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を診断するための方法が提供され、本方法は、
ａ）個体からのＰＢＭＣサンプルを提供するステップと、
ｂ）ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０を検出するステップと、
ｃ）ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０のレベルを定量化するかまたは決定するステップと、
ｄ）任意により、個体が低下したレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有しているか、または有する可能性があるかを分類するかまたは決定するステップ、
を含む。
本開示のさらなる態様では、低下したレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有する患者を選択するための方法が提供され、本方法は、
ａ）患者からのＰＢＭＣサンプルを提供するステップと、
ｂ）ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０を検出するステップと、
ｃ）ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０のレベルを定量化するかまたは決定するステップと、
ｄ）個体が低下したレベルのＨｓｐ７０を有しているかを分類するかまたは決定するステップ、
を含む。
【００１９】
本開示のさらなる態様では、低下したレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有する個体の疾患の進行を監視するための方法が提供され、本方法は、
ｉ．２つ以上のその後の時点で、個体からの１つ以上のＰＢＭＣサンプルを提供するステップと、
ｉｉ．上記のＰＢＭＣサンプルの各々中でＨｓｐ７０を検出するステップと、
ｉｉｉ．ＰＢＭＣサンプルの各々中のＨｓｐ７０のレベルを定量化するかまたは決定するステップ、
を含む。
【００２０】
本開示のさらなる態様では、低下したレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有する個体において、低下したレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を治療するための治療法の有効性を監視するための方法を提供し、本方法は、
ａ）治療法が適用されるか、維持されるか、減少されるか、または上昇される前、その間、および／またはその後に、個体からの１つ以上のＰＢＭＣサンプルを提供するステップと、
ｂ）１つ以上のＰＢＭＣサンプルの各々中のＨｓｐ７０を検出するステップと、
ｃ）１つ以上のＰＢＭＣサンプルの各々中のＨｓｐ７０のレベルを定量化するかまたは決定するステップ、
を含む。
【００２１】
一実施形態では、低下したレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患は、リソソーム蓄積障害、神経変性疾患、神経筋障害、筋ジストロフィー、および炎症性筋障害からなる群から選択される。
【図面の簡単な説明】
【００２２】
【図１】１回目および２回目の臨床試験訪問時にニーマンピック病Ｃ型（ＮＰＣ）を有する個体から、または健康な個体（対照）から単離されたＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０タンパク質のレベルの定量化。Ｈｓｐ７０のレベルは、ＥＬＩＳＡによって決定されるとおり、健康な対照から得たＰＢＭＣサンプルと比較して、ＮＰＣ患者から得たＰＢＭＣサンプルにおいて著しく減少した。
【図２】ニーマンピック病Ｃ型を有する個体から得たＰＢＭＣサンプルにおけるＮＰＣ重症度スケールスコア（ＮＰＣＣＳＳ）とＨｓｐ７０レベルとの比較。Ｈｓｐ７０レベルとＮＰＣＣＳＳの間に相関は観察されなかった。
【図３】１回目および２回目の訪問時に、ニーマンピック病Ｃ型を有する個体から得たＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０レベルの比較。２回目の臨床試験訪問は、１回目の臨床試験訪問から６〜１４か月後に実施した。１回目および２回目の臨床試験訪問からの時間の経過によるＨｓｐ７０レベルの変化は観察されなかった。
【図４】アリモクロモールを含む前治療を受けたＮＰＣ患者でのＨＳＰ７０レベル。
【図５】アリモクロモールによる治療を受けたＮＰＣ患者でのＨＳＰ７０レベル。
【発明を実施するための形態】
【００２３】
本発明は、対照と比較して、脳および肝臓組織を含む、病理学的に罹患している疾患組織における、低下したレベルのＨｓｐ７０を呈するリソソーム蓄積症である、ニーマンピック病Ｃ型の患者末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）サンプル中の低下したレベルのＨｓｐ７０の発見に基づく。
【００２４】
Ｈｓｐ７０タンパク質は、タンパク質の折り畳みおよび不安定な細胞タンパク質の分解を含む様々な細胞プロセスに関与し、また、他の細胞保護の役割も果たしている。したがって、Ｈｓｐ７０は、細胞の恒常性、およびリソソーム蓄積症、神経変性疾患、ならびにいくつかの神経筋および筋肉疾患を含む、Ｈｓｐ７０レベルの低下を呈する複数の疾患においていくつかの重要な役割を果たす。
【００２５】
ＬＳＤは、脂質、糖脂質、糖タンパク質、またはムコ多糖の代謝または輸送に必要な単一のリソソームタンパク質または酵素の欠乏の結果としてのリソソーム機能の欠陥に起因するまれな遺伝性代謝障害の群である。各障害は、タンパク質活性の欠乏につながる様々な遺伝子の変異に起因するが、それらはすべて共通の生化学的特性を共有し、すべてのリソソーム障害は、リソソーム内の物質の異常な蓄積から生じる。リソソーム蓄積症は主に小児に影響を及ぼし、多くの場合小児は、生後数ヶ月または数年以内に、若く予測できない年齢で死亡する。他の多くの小児が、特定の障害の様々な症状に何年も苦しんだ後、この疾患で死亡する。
【００２６】
ニーマンピック病Ｃ型（ＮＰＣ）は、ＮＰＣ１遺伝子またはＮＰＣ２遺伝子のいずれかにおける変異によって引き起こされる、スフィンゴリピドース型の壊滅的なリソソーム蓄積症であり、リソソーム区画の機能不全、複数の組織におけるコレステロール、スフィンゴシン、およびスフィンゴ糖脂質の異常な蓄積をもたらす。血液サンプル中の疾患進行を追跡するためのバイオマーカーの同定は、主にコレステロールおよびその誘導体に焦点が当てられてきた。
【００２７】
ＮＰＣはまた、脳および肝臓組織において低下したレベルのＨｓｐ７０を呈し、ここで本発明者らは、この発見が、ＮＰＣ患者の末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）サンプルにおける低下したレベルのＨｓｐ７０に結びつくことを確認した。
【００２８】
低下したレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有する患者は、Ｈｓｐ７０のレベルを増加させることから恩恵を受ける可能性がある。したがって、一実施形態における本発明は、低下したレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有する患者を特定するための手段を提供し、これは、個体がＨｓｐ７０のレベルを増加させることから恩恵を受ける可能性がある。
【００２９】
一実施形態では、Ｈｓｐ７０のレベルを増加させることは、Ｈｓｐ７０遺伝子の発現を増幅することによってＨｓｐ７０の細胞内濃度を増加させることを含む。
【００３０】
一実施形態では、Ｈｓｐ７０のレベルを増加させることは、Ｈｓｐ７０、またはその機能的断片またはそのバリアントを投与することによってＨｓｐ７０の細胞内濃度を上昇させることを含む。
熱ショックタンパク質７０ファミリー
【００３１】
Ｈｓｐ７０タンパク質は、タンパク質の折り畳みおよび不安定な細胞タンパク質の分解を含む様々な細胞プロセスに関与し、また、他の細胞保護の役割も果たしている。これらのプロセスにおけるＨｓｐ７０の一般的な機能は、部分的に折り畳まれたポリペプチドの短い疎水性セグメントの結合であると考えられ、それにより適切な折り畳みを容易にし、凝集を防ぐ。真核生物では、Ｈｓｐ７０シャペロンは、機能サイクルの重要なステップを調節するのに役立つ様々なクラスのタンパク質（これらの中では、Ｊドメインファミリータンパク質Ｈｓｐ４０）とｉｎ  ｖｉｖｏで相互作用する。さらに、追加のパートナータンパク質が同定されており、そのうちのいくつかは、Ｈｓｐ７０をＨｓｐ９０系などの他のシャペロン系に連結する。
ヒトＨｓｐ７０ファミリーのメンバー
【００３２】
分子シャペロンに寄与する重要な機能の一部としては、細胞区画へのタンパク質のインポート、細胞質ゾル、小胞体およびミトコンドリアでのタンパク質のフォールディング、タンパク質凝集の防止、およびミスフォールドされたタンパク質のリフォールディングが挙げられる。現在、ヒトＨｓｐ７０ファミリーは、異なる遺伝子によってコードされる１５のメンバーを含む。Ｈｓｐ７０遺伝子およびタンパク質は、本明細書ではそれらの遺伝子座名によって参照され得る。Ｈｓｐ７０への言及は通常、遺伝子座名ＨＳＰＡ１ＡおよびＨＳＰＡ１Ｂを有する２つの主要な誘導性Ｈｓｐ７０ファミリーメンバーを指すが、テキストのコンセンサスから明らかなように、一般にＨｓｐ７０ファミリー全体を指す場合もある。
ＨｓｐＡ１ＡおよびＨｓｐＡ１Ｂ
【００３３】
遺伝子座ＨＳＰＡ１ＡおよびＨＳＰＡ１Ｂから転写される遺伝子は、２つの熱／ストレス誘導性Ｈｓｐ７０遺伝子であり、ヒトＨｓｐ７０に関する文献の大部分は、これらの２つの遺伝子によってコードされるタンパク質を指す。これらの遺伝子は、６４１個のアミノ酸からなるタンパク質を生成し、互いに９９％の相同性を有し、クローン化および特性評価された最初のヒトＨｓｐ７０ファミリーメンバーであった。遺伝子は、６ｐ２１．３においてＭＨＣクラスＩＩＩ複合体中で連結され、イントロンがなく、ＨＳＥを含むプロモーター領域を有し、それらがＨＳＦに結合し様々な細胞の攻撃に応答して転写を誘導することを可能にする。
ＨｓｐＡ１ＬおよびＨｓｐＡ２
【００３４】
２つのＨｓｐ７０ファミリーメンバーは、雄生殖細胞が強い偏向でそれらの発現を優先するため、「優越主義遺伝子（ｃｈａｕｖｉｎｉｓｔ  ｇｅｎｅ）」と呼ばれている。ｈｓｐＡ１Ｌ遺伝子は、染色体６上の同じＭＨＣクラスＩＩＩ複合体中のＨＳＰＡ１Ａ遺伝子座に対し４ｋｂテロメア側に位置する、構成的に発現されるイントロンのないＨｓｐ７０ファミリーメンバーである。これは、熱ショックの前後の両方で少量発現されるが、６４１個のアミノ酸（ａａ）タンパク質がＨｓｐＡ１Ａと９０％相同であるマウス、ラット、およびヒトの精巣で有利な発現パターンを有する。ＨｓｐＡ２遺伝子は、マウスゲノムライブラリーから最初に単離され、後に、骨格筋、卵巣、小腸、結腸、脳、胎盤、および腎臓を含むヒトの身体の様々な組織において低レベルではあるが、構成的に発現され、精巣では高発現されることが示された。その発現、またはむしろその欠如は、異常なヒト精子形成と関連しており、雄のｈｓｐＡ２（−／−）マウスは無精子である。この遺伝子は、染色体１４に位置し、ＨｓｐＡ１Ａに対し８４％の相同性を有する６３９アミノ酸のタンパク質を生じるが、２つの論文が異なる遺伝子座位置（１４ｑ２４．１および１４ｑ２２）を示しているため、正確な位置について議論がなされている。
ＨｓｐＡ６およびＨｓｐＡ７
【００３５】
ＨｓｐＡ６およびｈｓｐＡ７遺伝子は、Ｈｓｐ７０ファミリーの熱誘導性メンバーであり、マウスには明らかな対応物はない。それらはプロモーター部位にＨＳＥを含み、遺伝子にはイントロンがない。それらは染色体１で共局在し、ヌクレオチド配列において互いに９４％相同である。しかし、ｈｓｐＡ７遺伝子には単一ヌクレオチドの挿入があり＋１３２４で未成熟な終止コドンを生成するため、ＨｓｐＡ６のみが機能的である。ＨｓｐＡ６タンパク質は、６４３アミノ酸長であり、ＨｓｐＡ１ＡおよびＨｓｐＡ１Ｂと７７％の相同性を示す。
ＨｓｐＡ５およびＨｓｐＡ９
【００３６】
ＨｓｐＡ５およびｈｓｐＡ９遺伝子は、Ｈｓｐ７０ファミリーの２つの区画固有のメンバーである。６５５アミノ酸のＨｓｐＡ５タンパク質は、小胞体（ＥＲ）に位置し、この区画中で新たに合成されたタンパク質の折り畳みおよび輸送を容易にする。このタンパク質は、ＨｓｐＡ１Ａと６４％相同であり、遺伝子は９ｑ３４に位置している。６７９アミノ酸のＨｓｐＡ９タンパク質は、ミトコンドリアに位置し、タンパク質がミトコンドリア膜を通過した後、それらの折り畳みを支援する。ＨｓｐＡ９は、５ｑ３１．１に位置し、タンパク質は、ＨｓｐＡ１Ａと５２％相同である。
ＨｓｐＡ８
【００３７】
Ｈｓｃ７０として公知である同族のＨｓｐ７０メンバーは、１１ｑ２４においてｈｓｐＡ８という名前の遺伝子によってコードされ、ＨｓｐＡ１Ａと８６％の相同性を有する６４６アミノ酸のタンパク質を生じ、すべての組織および細胞株で構成的に発現  される。このタンパク質は、細胞機能においてＨｓｐ７０に類似しており、通常の状況下で必要なシャペロニングを提供するが、クラスリンがコーティングされた小胞のコーティングの除去、およびシャペロン媒介オートファジーにおける役割もある。ＨｓｐＡ３およびＨｓｐＡ４、ＨｓｐＡ４Ｌ、ＨｓｐＡ１２ＡおよびＨｓｐＡ１４については、本明細書では、さらに論じない。
【表１】
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【００３８】
本発明者らは、健康な対照と比較して、脳および肝臓組織を含む、病理学的に罹患した疾患組織において低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈することが知られている疾患を有する患者から得た特にＰＢＭＣサンプル中で、Ｈｓｐ７０レベルが有意に低いことを見出した。低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患は、Ｈｓｐ７０治療法によって軽減される可能性があり、本開示はしたがって、Ｈｓｐ７０治療法による治療から恩恵を得る可能性のある患者を選択するための手段を提供する。
【００３９】
「低下された」レベルは、本明細書の減少したレベルまたはより低いレベルと同義に使用され得る。Ｈｓｐ７０レベルは、健康な個体などの対照と比較して、または異なる時点と比較して（例えば、第１回目の訪問／サンプルとその後の訪問／サンプルと比較して）低下しているか、またはより低い可能性がある。
【００４０】
本発明の方法は、ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０レベルの容易かつ安易な検出を可能にし、かつバイオマーカーとしてのＰＢＭＣ中のＨｓｐ７０の使用を可能にして、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を特定するための信頼できる簡単なツールを提供する。
【００４１】
本発明の方法は、個体から得たＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０を検出することおよび定量化することを含む。
【００４２】
ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０の検出および定量化はしたがって、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患の患者を診断するまたは特定する方法において使用できる。
【００４３】
したがって、健康な対照で検出される量と比較して、個体のＰＢＭＣサンプル中の低下された量のＨｓｐ７０は、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を示すか、または患者がＨｓｐ７０治療法の対象となることを示す。
【００４４】
本発明の方法はまた、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有する個体または患者における疾患進行を監視する方法において使用できる。
【００４５】
本発明の方法はまた、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有する個体または患者における治療の有効性を監視する方法において使用きる。
Ｈｓｐ７０の検出方法
【００４６】
ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０を検出する方法を提供することは、本開示の一態様であり、この方法は、
ａ）ＰＢＭＣサンプルを提供するステップと、
ｂ）ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０を検出するステップと、
ｃ）任意により、ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０のレベルを定量化するかまたは決定するステップ、
を含む。
【００４７】
一実施形態では、Ｈｓｐ７０を検出することおよび／または定量化することは、Ｈｓｐ７０タンパク質の検出および定量化を指す。
【００４８】
一実施形態では、Ｈｓｐ７０を検出することおよび／または定量化することは、ＨｓｐＡ１ＡおよびＨｓｐＡ１Ｂの一方または両方の検出および定量化を指す。
【００４９】
一実施形態では、Ｈｓｐ７０を検出することおよび／または定量化することは、ＨｓｐＡ１ＡおよびＨｓｐＡ１Ｂの一方または両方の検出および定量化を指し、ＨｓｐＡ５および／またはＨｓｐＡ８はまったくまたはほとんど検出されない。
【００５０】
一実施形態では、Ｈｓｐ７０を検出することおよび／または定量化することは、天然に存在するＨｓｐＡ１Ａおよび／またはＨｓｐＡ１Ｂならびに天然に存在するＨｓｐＡ１Ａおよび／またはＨｓｐＡ１Ｂバリアントなどの、天然に存在するＨｓｐ７０および天然に存在するＨｓｐ７０バリアントの検出を含む。天然に存在するＨｓｐＡ１Ａおよび／またはＨｓｐＡ１Ｂバリアントは、当業者に公知である。
【００５１】
一実施形態では、Ｈｓｐ７０は、ＨｓｐＡ１Ａ（配列番号１および２）およびＨｓｐＡ１Ｂ（配列番号４および５）、またはそれらの機能的断片もしくはバリアントから選択される。配列番号２では、配列番号１の開始メチオニン（１位のＭ）が除去されている。配列番号５では、配列番号４の開始メチオニン（１位のＭ）が除去されている。Ｉｎ  ｖｉｖｏでは、これは翻訳後処理によって生じる。
【００５２】
一実施形態では、ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０を検出する方法は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ法である。
【００５３】
一実施形態では、定量化は、ＰＢＭＣサンプル中に存在するＨｓｐ７０タンパク質のレベルを決定することを意味する。
【００５４】
一実施形態では、Ｈｓｐ７０のレベルは、ＰＢＭＣサンプル中において検出される、かつ／または定量化される。一実施形態では、ＰＢＭＣサンプルは、個体から得られるか、または個体から得ることができる。一実施形態では、個体は、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有するか、有する疑いがあるか、有するリスクがあるか、または有する可能性がある。一実施形態では、個体は、スフィンゴリピドース；ムコ多糖症；グリコーゲン貯蔵障害；糖タンパク質代謝障害（糖タンパク代謝異常症）；およびムコリピドース、および本明細書の他の場所で指定されるその任意のサブタイプ（例えば、ニーマンピック病）を含む脂質貯蔵障害からなる群から選択されるリソソーム蓄積症を有するか、有する疑いがあるか、有するリスクがあるか、または有する可能性がある。一実施形態では、個体は、本明細書の他の場所で指定されるとおり、神経変性疾患、神経筋障害、筋ジストロフィー、または炎症性筋障害を有するか、有する疑いがあるか、または有する可能性がある。ＰＢＭＣサンプルは、本明細書の他の場所でさらに詳細に開示される。
【００５５】
したがって、一実施形態では、本開示は、
ａ）ＰＢＭＣサンプルを提供するステップと、
ｂ）ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０を検出するステップと、
ｃ）ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０のレベルを定量化するかまたは決定するステップ、
を含む、ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０を検出する方法を提供する。
【００５６】
ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐＡ１Ａおよび／またはＨｓｐＡ１Ｂを検出する方法も開示され、本方法は、
ａ）ＰＢＭＣサンプルを提供するステップと、
ｂ）ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐＡ１Ａおよび／またはＨｓｐＡ１Ｂを検出するステップと、
ｃ）任意により、ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐＡ１Ａおよび／またはＨｓｐＡ１Ｂのレベルを定量化するかまたは決定するステップ、
を含む。
【００５７】
一実施形態では、ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０を検出し、任意により定量化するための方法は、
ｉ）ＨｓｐＡ１Ａ、
ｉｉ）ＨｓｐＡ１Ｂ、または
ｉｉｉ）ＨｓｐＡ１ＡおよびＨｓｐＡ１Ｂ
を検出し、任意により定量化することを含む。
【００５８】
一実施形態におけるＨｓｐＡ１Ａおよび／またはＨｓｐＡ１Ｂを検出し、任意により定量化する本発明の方法は、他のＨｓｐ７０タンパク質の検出を排除しない。
【００５９】
したがって、一実施形態では、本開示は、
ａ）ＰＢＭＣサンプルを提供するステップと、
ｂ）ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０を検出するステップと、
ｃ）ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０のレベルを定量化するかまたは決定するステップ、
を含むＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０を検出する方法を提供し、
ＰＢＭＣサンプルは、本明細書の他の場所で指定されるとおり、リソソーム蓄積症、神経変性疾患、神経筋障害、筋ジストロフィー、または炎症性筋障害を含む、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有するか、有する疑いがあるか、有するリスクがあるか、または有する可能性がある個体から得られる。
【００６０】
治療法が適用されるか、維持されるか、減少されるか、または上昇される前、その間、および／またはその後に、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有する個体または患者からのＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０を検出し、任意により定量化する方法も本明細書に開示される。
【００６１】
一実施形態では、個体は、スフィンゴリピドース；ムコ多糖症；グリコーゲン貯蔵障害；糖タンパク質代謝障害（糖タンパク代謝異常症）；およびムコリピドース、および本明細書の他の場所で指定されるその任意のサブタイプ（例えば、ニーマンピック病）を含む脂質貯蔵障害からなる群から選択されるリソソーム蓄積症を有する。一実施形態では、個体は、本明細書の他の場所で指定されるとおり、神経変性疾患、神経筋障害、筋ジストロフィーまたは炎症性筋障害を有する。
【００６２】
一実施形態では、本治療法は、Ｈｓｐ７０の発現および／またはＨｓｐ７０の活性を誘導できる生物活性剤などの、Ｈｓｐ７０レベルおよび／または活性を誘導するための治療法を含む。一実施形態では、治療法は、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患の治療において有効な生物活性剤などの、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を治療するための治療法を含む。治療法および生物活性剤は、本明細書の他の場所に開示される。
【００６３】
一実施形態では、個体からのＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０を検出し、任意により定量化する方法は、
ｉ）治療法が適用されるか、維持されるか、減少されるか、または上昇される前に、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有する個体から得た１つ以上のＰＢＭＣサンプル；
ｉｉ）治療法中に低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有する個体から得た１つ以上のＰＢＭＣサンプル；および／または
ｉｉｉ）治療法が適用されたか、維持されたか、減少されたか、または上昇された後に、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有する個体から得た１つ以上のＰＢＭＣサンプル；
ｉｖ）治療法が適用されるか、維持されるか、減少されるか、または上昇される前および後に、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有する個体から得た１つ以上のＰＢＭＣサンプル
を含む。
【００６４】
疾患の進行を監視するために、その後の時点で低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有する個体のＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０を検出し、任意により定量化する方法も本明細書で開示される。
【００６５】
また、本明細書に開示されるのは、上記障害を診断するために、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有することが疑われる個体のＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０を検出し、任意により定量化する方法である。
【００６６】
ＰＢＭＣサンプルを提供するための手段、ＰＢＭＣサンプルの性質、およびＨｓｐ７０の検出のための手段、ならびにＨｓｐ７０を定量化するための手段は、本明細書の他の場所に開示される。
Ｈｓｐ７０の検出および定量
【００６７】
本明細書に開示される方法は、ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０を検出する１つ以上のステップを含み、
ａ）個体からの１つ以上のＰＢＭＣサンプルを提供するステップと、
ｂ）ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０を検出するステップと、
ｃ）任意により、ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０のレベルを定量化するかまたは決定するステップ、
を含む。
【００６８】
本開示によるＰＢＭＣ中のＨｓｐ７０は、ＤＮＡレベル、ＲＮＡ／ｍＲＮＡレベルおよび／またはタンパク質レベルで検出され得る。好ましい実施形態では、Ｈｓｐ７０はタンパク質レベルで検出される。
【００６９】
Ｈｓｐ７０の検出および定量化は、当技術分野で公知であるいくつかの方法によって実施でき、１つ以上のステップを含み得る。Ｈｓｐ７０の検出および定量化は、当業者に公知である任意の方法によって実施できる。
【００７０】
一実施形態では、ｂ）ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０を検出するステップは、ＰＢＭＣサンプルを１つ以上の検出および／または定量化のステップに供することによって実行される。
【００７１】
一実施形態では、Ｈｓｐ７０タンパク質の検出および定量化は、分光分析法または抗体依存性法によって実施される。
【００７２】
一実施形態では、Ｈｓｐ７０タンパク質の検出および定量化は、酵素結合免疫吸着検定法（ＥＬＩＳＡ）、ウエスタンブロッティング、タンパク質免疫沈降、免疫電気泳動、タンパク質免疫染色、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）および液体クロマトグラフィー−質量分析（ＬＣ／ＭＳ）からなる群から選択される方法によって実施される。
【００７３】
一実施形態では、Ｈｓｐ７０タンパク質の検出および定量化は、質量分析を使用して実行される。一実施形態では、乾燥血液スポット（ＤＢＳ）サンプル中のＨｓｐ７０タンパク質の検出および定量化は、質量分析を使用して実行される。
【００７４】
乾燥血液スポット検査（ＤＢＳ）は、当業者に周知であるバイオサンプリングの形態であり、スポットあたり７０μＬの全血などの血液サンプルを濾紙にブロットし、乾燥させる。乾燥されたサンプルは、分析実験室に容易に出荷でき、本明細書に記載の方法など、例えば質量分析などの様々な方法を使用して分析できる。一実施形態では、総タンパク質は、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）に浸された血液スポットから抽出される。一実施形態では、タンパク質はさらにトリプシン消化に供され、精製され、質量分析によって分析される。
【００７５】
一実施形態では、Ｈｓｐ７０タンパク質の検出および定量化は、酵素結合免疫吸着検定法（ＥＬＩＳＡ）によって実施される。
【００７６】
一実施形態では、ｂ）ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０を検出するステップおよび／またはｃ）任意により、ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０のレベルを定量化するかまたは決定するステップは、
ｉ）ＰＢＭＣサンプルの溶解、および／または
ｉｉ）溶解したＰＢＭＣサンプル中に存在するＨｓｐ７０タンパク質の固定化、および／または
ｉｉｉ）固定化されたＨｓｐ７０タンパク質への一次抗体の結合、および／または
ｉｖ）ｉｉｉ）の一次抗体への二次抗体の結合、および／または
ｖ）ストレプトアビジンコンジュゲートをもたらすためのストレプトアビジンコンジュゲートの二次抗体への結合、および／または
ｖｉ）Ｈｓｐ７０タンパク質に結合した一次抗体の可視化、および／または
ｖｉｉ）二次抗体の可視化
の１つ以上のステップを含む。
【００７７】
一実施形態では、ｉｉｉ）の一次抗体は、ビオチン分子と共有結合されて、二次抗体のストレプトアビジンコンジュゲートの結合を可能にする。
【００７８】
一実施形態では、一次抗体、二次抗体、またはｖ）のストレプトアビジンコンジュゲートは、酵素または蛍光プローブと共有結合される。
【００７９】
ステップｖｉ）およびｖｉｉ）Ｈｓｐ７０に結合した一次抗体または一次抗体に結合した二次抗体の可視化は、比色検出、化学発光検出、放射性検出、電気化学的検出または蛍光検出によって実施できる。一実施形態では、視覚化は、Ｈｓｐ７０に結合した一次抗体、一次抗体に結合した二次抗体、または一次抗体に結合したストレプトアビジンコンジュゲートに共有結合した酵素による１つ以上の基質の変換を含む。
【００８０】
一実施形態では、Ｈｓｐ７０に結合した一次抗体、一次抗体に結合した二次抗体、またはストレプトアビジンコンジュゲートに共有結合した酵素は、西洋ワサビペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）である。一実施形態では、基質は、過酸化水素、ルミノール、テトラメチルベンジジンからなる群から選択される。
【００８１】
一実施形態では、ｂ）ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０を検出するステップおよび／またはｃ）任意によりＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０のレベルを定量化するかまたは決定するステップは、溶解、固定化、結合、および視覚化のステップの間に洗浄ステップをさらに含む。
【００８２】
ＥＬＩＳＡは典型的には、サンプル中の特定のタンパク質の存在および／または量を測定するのに好適である。したがってＥＬＩＳＡは、ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０の存在および／または量を測定するのに好適である。
【００８３】
一実施形態では、ｂ）ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０を検出するステップおよび／またはｃ）任意により、ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０のレベルを定量化するかまたは決定するステップは、直接Ｈｓｐ７０を検出する１つ以上のステップを含む（例えば、ＥＬＩＳＡによる）。
【００８４】
一実施形態では、較正された標準が、ＰＢＭＣサンプル中に存在するＨｓｐ７０の定量化のために使用される。
【００８５】
一実施形態では、定量化のための較正された標準は、異なる濃度で使用される。
【００８６】
一実施形態では、Ｈｓｐ７０  ｍＲＮＡの検出および定量化は、ノーザンブロット、リボヌクレアーゼ保護アッセイ（ＲＰＡ）、およびリアルタイムポリメラーゼ連鎖反応（ＲＴ−ＰＣＲ）からなる群から選択される方法によって実施される。
診断の方法
【００８７】
個体において低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を診断するための方法を提供することは、本開示の一態様であり、本方法は、個体から得られた、または個体から得ることができるＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０を検出するステップを含む。
【００８８】
一実施形態では、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を診断するための方法は、ＰＢＭＣサンプル中に存在するＨｓｐ７０のレベルを定量化するかまたは決定するステップをさらに含む。
【００８９】
一実施形態では、ＰＢＭＣサンプル中に存在するＨｓｐ７０のレベルは、個体が低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有する（もしくは罹患している）かどうかを示すか、または個体が低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有する可能性があるか、疾患を有する（もしくは罹患する）リスクがあるかを示す。
【００９０】
この方法は、例えば家族歴、またはＬＳＤを示す症状の存在に基づいて、例えば個体が低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有する、または罹患している疑いがある場合に、疑わしい診断を確認するために使用され得る。これらの方法は、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を診断する既知の方法に加えて使用できる。
【００９１】
個体において低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を診断するための方法を提供することはしたがって、本開示の一態様であり、本方法は、
ａ）個体からのＰＢＭＣサンプルを提供するステップと、
ｂ）ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０を検出するステップと、
ｃ）ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０のレベルを定量化するかまたは決定するステップ、
を含む。
【００９２】
一実施形態では、ＰＢＭＣサンプル中に存在するＨｓｐ７０のレベルは、個体が低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有する（もしくは罹患している）かどうかを示すか、または個体が低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有する可能性があるか、疾患を有する（もしくは罹患する）リスクがあるかを示す。
【００９３】
個体において低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を診断するための方法も開示され、この方法は、
ａ）個体からのＰＢＭＣサンプルを提供するステップと、
ｂ）ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０を検出するステップと、
ｃ）ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０のレベルを定量化するかまたは決定するステップと、
ｄ）個体が低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有しているか、または有する可能性があるかを分類するかまたは決定するステップ、
を含む。
【００９４】
一実施形態では、ＰＢＭＣサンプルは、個体から得られるか、または個体から得ることができる。
【００９５】
一実施形態では、個体において低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を診断するための方法も開示され、この方法は、
ａ）個体からのＰＢＭＣサンプルを提供するステップと、
ｂ）ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０を検出するステップと、
ｃ）ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０のレベルを定量化するかまたは決定するステップと、
ｄ）個体が低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有しているか、または有する可能性があるかを分類するかまたは決定するステップ、
を含み、
疾患は、本明細書の他の場所で指定されるとおり、リソソーム蓄積症、神経変性疾患、神経筋障害、筋ジストロフィー、または炎症性筋障害である。
【００９６】
一実施形態では、リソソーム蓄積症は、スフィンゴリピドース；ムコ多糖症；グリコーゲン貯蔵障害；糖タンパク質代謝障害（糖タンパク代謝異常症）；およびムコリピドースなどの脂質貯蔵障害、ならびに本明細書の他の場所で指定されるその任意のサブタイプからなる群から選択される。一実施形態では、リソソーム蓄積症は、ＮＰＣなどのニーマンピック病である。
【００９７】
一実施形態では、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を診断するための方法は、
ｉ）ＨｓｐＡ１Ａ、
ｉｉ）ＨｓｐＡ１Ｂ、または
ｉｉｉ）ＨｓｐＡ１ＡおよびＨｓｐＡ１Ｂ
のレベルを検出し、定量化するかまたは決定することを含む。
【００９８】
一実施形態では、ｄ）個体が低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有するか、または有する可能性があるかを分類するかまたは決定するステップは、個体が低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有しているか、または有する可能性があるかを分類するかまたは決定するステップである。
【００９９】
本明細書における「このサンプル（ｔｈｅ  ｓａｍｐｌｅ）」または「サンプル（ａ  ｓａｍｐｌｅ）」への言及は、特に明記しない限り、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有するか、または有することが疑われる個体由来のＰＢＭＣサンプルを指す。対照的に、健康な対照由来のサンプルは、健康な対照または対照サンプル由来のＰＢＭＣサンプルと呼ばれる。
【０１００】
一実施形態では、ｄ）低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有するか、または有する可能性があるとして個体を分類するかまたは決定するステップは、健康な対照から得られた、または得ることができるＰＢＭＣサンプル中のレベルと比較して、ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０のレベルを決定することを含む。本明細書の文脈における健康な対照は、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有していないか、または有している疑いがない個体である。好ましくは、健康な対照はまた、任意の他の明らかな疾患を示さない。一実施形態では、健康な対照は、任意の年齢であり得る。一実施形態では、健康な対照は、年齢一致対照である。一実施形態では、健康な対照は、２９歳未満など、２８歳未満など、２７歳未満など、２６歳未満など、２５歳未満など、２４歳未満など、２３歳未満など、２２歳未満など、２１歳未満など、２０歳未満など、１９歳未満など、１８歳未満などの、３０歳未満である。一実施形態では、健康な対照は、２０歳未満である。一実施形態では、健康な対照は、約４歳〜約１８歳である。一実施形態では、健康な対照は、約２歳〜約４歳である。
【０１０１】
一実施形態では、健康な対照のレベルと比較してＰＢＭＣサンプル中の低下されたレベルのＨｓｐ７０は、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有するか、または有する可能性があるか、または有するリスクのある個体を示す。
【０１０２】
一実施形態では、健康な対照のレベルに匹敵するかまたは等しいＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０のレベルは、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患のない個体を示す。
【０１０３】
一実施形態では、健康な対照のレベルより高いＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０のレベルは、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患のない個体を示す。
【０１０４】
一実施形態では、個体は、以下の場合、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有する可能性がある。
ｉ）ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０のレベルが、健康な対照で見られるレベルよりも低いか、または検出できない、
ｉｉ）ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐＡ１Ａのレベルが、健康な対照で見られるレベルよりも低いか、または検出できない、
ｉｉｉ）ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐＡ１Ｂのレベルが、健康な対照で見られるレベルよりも低いか、または検出できない、および／または
ｉｖ）ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐＡ１ＡおよびＨｓｐＡ１Ｂのレベルが、健康な対照で見られるレベルよりも低いか、または検出できない。
【０１０５】
一実施形態では、個体は、ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０のレベルが健康対照で見られるレベルよりも１〜１０００倍低い場合、例えば、健康な対照で見られるレベルより、１〜２倍、２〜３倍、３〜４倍、４〜５倍、５〜６倍、６〜７倍、７〜８倍、８〜９倍、９〜１０倍、１０〜１１倍、１１〜１２倍、１２〜１３倍、１３〜１４倍、１４〜１５倍、１５〜１６倍、１６〜１７倍、１７〜１８倍、１８〜１９倍、１９〜２０倍、２０〜２５倍、２５〜３０倍、３０〜３５倍、３５〜４０倍、４０〜４５倍、４５〜５０倍、５０〜７５倍、７５〜１００倍、１００〜１５０倍、１５０〜２００倍、２００〜２５０倍、２５０〜３００倍、３００〜４００倍、４００〜５００倍、５００〜７５０倍、７５０〜１０００倍低いか、または検出できない場合、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有する可能性がある。
【０１０６】
一実施形態では、個体は、ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐＡ１Ａおよび／またはＨｓｐＡ１Ｂのレベルが健康対照で見られるレベルよりも１〜１０００倍低い場合、例えば、健康な対照で見られるレベルより、１〜２倍、２〜３倍、３〜４倍、４〜５倍、５〜６倍、６〜７倍、７〜８倍、８〜９倍、９〜１０倍、１０〜１１倍、１１〜１２倍、１２〜１３倍、１３〜１４倍、１４〜１５倍、１５〜１６倍、１６〜１７倍、１７〜１８倍、１８〜１９倍、１９〜２０倍、２０〜２５倍、２５〜３０倍、３０〜３５倍、３５〜４０倍、４０〜４５倍、４５〜５０倍、５０〜７５倍、７５〜１００倍、１００〜１５０倍、１５０〜２００倍、２００〜２５０倍、２５０〜３００倍、３００〜４００倍、４００〜５００倍、５００〜７５０倍、７５０〜１０００倍低いか、または検出できない場合、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有する可能性がある。
【０１０７】
一実施形態では、「検出できない」は、ベースラインノイズを超える信号がないなど、信号が観察されないことを意味する。一実施形態では、「検出できない」は、Ｈｓｐ７０のレベルがＰＢＭＣサンプル中で検出できないことを意味する。
【０１０８】
一実施形態では、ｄ）低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有するか、または有する可能性があるとして個体を分類するかまたは決定するステップは、ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０の量が所定のカットオフ値を下回るかまたは検出できないかを決定することを含む。
【０１０９】
Ｈｓｐ７０の量が上記のカットオフ値未満である場合、その個体は、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有するか、または有する可能性がある。Ｈｓｐ７０の量が上記のカットオフ値以上である場合、その個体は、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有しない、または有する可能性がない。
【０１１０】
一実施形態では、ｄ）低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有しないか、または有する可能性がないとして個体を分類するかまたは決定するステップは、ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０の量が所定のカットオフ値以上であるかを決定することを含む。
【０１１１】
上記のカットオフ値は、健康な対照での値に基づいて決定され、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有する個体での値と比較される。
【０１１２】
一実施形態では、カットオフ値は、ニーマンピック病Ｃ型などのニーマンピック病などの、ＬＳＤを有する患者での値と比較した健康な対照での値に基づいて決定される。
【０１１３】
５０００ｐｇ／ｍＬ ＰＢＭＣのＨｓｐ７０のカットオフ値は、５０００ｐｇ／ｍＬ  Ｈｓｐ７０以下の値が、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有するか、または有する可能性がある個体を示す。
【０１１４】
一実施形態では、個体は、ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０の量が、７５００ｐｇ／ｍＬ以下、７０００ｐｇ／ｍＬ以下など、６５００ｐｇ／ｍＬ以下など、６０００ｐｇ／ｍＬ以下など、５５００ｐｇ／ｍＬ以下など、５０００ｐｇ／ｍＬ以下など、４５００ｐｇ／ｍＬ以下など、４０００ｐｇ／ｍＬ以下など、３５００ｐｇ／ｍＬ以下など、３０００ｐｇ／ｍＬ以下など、２５００ｐｇ／ｍＬ以下など、２０００ｐｇ／ｍＬ以下など、１５００ｐｇ／ｍＬ以下など、１０００ｐｇ／ｍＬ ＰＢＭＣ以下などである場合、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有するか、または有する可能性がある。
【０１１５】
一実施形態では、個体は、ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐＡ１Ａおよび／またはＨｓｐＡ１Ｂの量が、７５００ｐｇ／ｍＬ以下、７０００ｐｇ／ｍＬ以下など、６５００ｐｇ／ｍＬ以下など、６０００ｐｇ／ｍＬ以下など、５５００ｐｇ／ｍＬ以下など、５０００ｐｇ／ｍＬ以下など、４５００ｐｇ／ｍＬ以下など、４０００ｐｇ／ｍＬ以下など、３５００ｐｇ／ｍＬ以下など、３０００ｐｇ／ｍＬ以下など、２５００ｐｇ／ｍＬ以下など、２０００ｐｇ／ｍＬ以下など、１５００ｐｇ／ｍＬ以下など、１０００ｐｇ／ｍＬ ＰＢＭＣ以下などである場合、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有するか、または有する可能性がある。
【０１１６】
逆に、個体は、ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０の量が、５０００ｐｇ／ｍＬ超、５５００ｐｇ／ｍＬ超など、６０００ｐｇ／ｍＬ超など、６５００ｐｇ／ｍＬ超など、７０００ｐｇ／ｍＬ超など、７５００ｐｇ／ｍＬ超など、８０００ｐｇ／ｍＬ超など、８５００ｐｇ／ｍＬ超など、９０００ｐｇ／ｍＬ超など、９５００ｐｇ／ｍＬ超など、１００００ｐｇ／ｍＬ超など、１０５００ｐｇ／ｍＬ超など、１１０００ｐｇ／ｍＬ超など、１１５００ｐｇ／ｍＬ超など、１２０００ｐｇ／ｍＬ超など、１２５００ｐｇ／ｍＬ超のＰＢＭＣなどである場合、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有しない、または有する可能性がないものと分類される。
【０１１７】
一実施形態では、個体は、ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐＡ１Ａおよび／またはＨｓｐＡ１Ｂの量が、５０００ｐｇ／ｍＬ超、５５００ｐｇ／ｍＬ超など、６０００ｐｇ／ｍＬ超など、６５００ｐｇ／ｍＬ超など、７０００ｐｇ／ｍＬ超など、７５００ｐｇ／ｍＬ超など、８０００ｐｇ／ｍＬ超など、８５００ｐｇ／ｍＬ超など、９０００ｐｇ／ｍＬ超など、９５００ｐｇ／ｍＬ超など、１００００ｐｇ／ｍＬ超など、１０５００ｐｇ／ｍＬ超など、１１０００ｐｇ／ｍＬ超など、１１５００ｐｇ／ｍＬ超など、１２０００ｐｇ／ｍＬ超など、１２５００ｐｇ／ｍＬ超のＰＢＭＣなどである場合、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有しない、または有する可能性がないものと分類される。
【０１１８】
さらに、個体は、ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０の量が検出できない場合、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有するか、または有する可能性があると分類される。
【０１１９】
診断は、当技術分野において公知である方法を使用して、または本明細書に開示される診断方法を繰り返すことによって確認できる。
【０１２０】
一実施形態では、本方法は、対象が低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有するか、または有するリスクがあるかどうかに基づいて、治療法を適用すること、維持すること、低減させること、上昇させること、または適用しないことをさらに含む。
【０１２１】
一実施形態では、個体において低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を診断するための方法は、ｅ）低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を治療するための治療法を、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有すると診断された患者に施すステップを含む。
診断および治療方法
【０１２２】
個体において低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を診断し、治療するための方法を提供することもまた本開示の一態様であり、本方法は、
ａ）個体からのＰＢＭＣサンプルを提供するステップと、
ｂ）ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０を検出するステップと、
ｃ）ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０のレベルを定量化するかまたは決定するステップと、
ｄ）個体が低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有しているか、または有する可能性があるかを分類するかまたは決定するステップと、
ｅ）個体へ低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を治療するための治療法を施すステップ、
を含む。
【０１２３】
一実施形態では、ｅ）個体へ低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を治療するための治療法を施すステップは、その個体に有効量の生物活性剤を投与することを含み、生物活性剤は、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患に対し有効である。
【０１２４】
低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有する個体を治療する方法を提供することも本開示の一態様であり、本方法は、その個体に低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を治療するための治療法を施すことを含み、個体は、
ａ）個体からのＰＢＭＣサンプルを提供するステップと、
ｂ）ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０を検出するステップと、
ｃ）ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０のレベルを定量化するかまたは決定するステップと、
ｄ）個体が低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有しているか、または有する可能性があるかを分類するかまたは決定するステップ、
を含む方法により低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患と診断される。
【０１２５】
低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を治療するための治療法および同じ目的のための生物活性剤は、本明細書の他の場所に開示され、低下されたレベルのＨｓｐ７０に関連する障害のための治療の上記方法および治療法に含まれる。
【０１２６】
一実施形態では、個体において低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を診断し、治療するための方法は、本明細書の他の場所で指定されるとおり、リソソーム蓄積症、神経変性疾患、神経筋障害、筋ジストロフィー、または炎症性筋障害からなる群から選択される疾患を診断し、治療することを含む。
【０１２７】
一実施形態では、リソソーム蓄積症は、スフィンゴリピドース；ムコ多糖症；グリコーゲン貯蔵障害；糖タンパク質代謝障害（糖タンパク代謝異常症）；およびムコリピドースなどの脂質貯蔵障害、ならびに本明細書の他の場所で指定されるその任意のサブタイプからなる群から選択される。一実施形態では、リソソーム蓄積症は、ＮＰＣなどのニーマンピック病である。
患者を選択する方法
【０１２８】
本発明の方法は、ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０の検出、および低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有する個体の診断または同定を可能にする。
【０１２９】
多数の疾患は、多数の生物学的、分子的、病理学的変化の１つとして、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する。低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有する患者、または有意にもしくは著しく低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈するまたは共に呈するなどの、低下されたレベルのＨｓｐ７０を共に呈する疾患を有する患者のサブセットを容易に特定できることは、非常に有用であろう。
【０１３０】
低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有する患者、または低下されたレベルのＨｓｐ７０を共に呈する疾患を有する患者のサブセットの同定は、Ｈｓｐ７０を含む、熱ショックタンパク質の細胞内濃度および／または活性を増加させる生物活性剤に応答する、または応答する可能性のある患者を選択するために適用できる。
【０１３１】
したがって、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有する患者を選択するための方法を提供することは一態様であり、この方法は、
ａ）患者からのＰＢＭＣサンプルを提供するステップと、
ｂ）ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０を検出するステップと、
ｃ）ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０のレベルを定量化するかまたは決定するステップと、
ｄ）患者が低下されたレベルのＨｓｐ７０を有するかを分類するかまたは決定するステップ、
を含む。
【０１３２】
一実施形態では、Ｈｓｐ７０のレベルを検出し、定量化すること、または決定することは、
ｉ）ＨｓｐＡ１Ａ、
ｉｉ）ＨｓｐＡ１Ｂ、または
ｉｉｉ）ＨｓｐＡ１ＡおよびＨｓｐＡ１Ｂ
のレベルを検出し、定量化すること、または決定することを含む。
【０１３３】
一実施形態では、患者が低下されたレベルのＨｓｐ７０を有するかを分類するかまたは決定するステップは、本明細書の他の場所で指定されるとおり、対照と比較して、患者が低下されたレベルのＨｓｐ７０を有するかを分類するかまたは決定するステップを含む。
【０１３４】
一実施形態では、患者は、健康な対照でのレベルと比較して、ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐＡ１Ａおよび／またはＨｓｐＡ１Ａなどの、減少されたまたは検出できないレベルのＨｓｐ７０が決定される場合、低下されたレベルのＨｓｐ７０を有する。
【０１３５】
一実施形態では、患者が低下されたレベルのＨｓｐ７０を有するかを分類するかまたは決定するステップは、低下されたレベルのＨｓｐ７０を有する患者を特定するステップを含む。
【０１３６】
一実施形態では、ステップｄ）患者が低下されたレベルのＨｓｐ７０を有するかを分類するかまたは決定するステップは、健康な対照から得られた、または得ることができるＰＢＭＣサンプル中のレベルと比較して、ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０のレベルを決定することを含む。本明細書の文脈における健康な対照は、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有しないか、または有する疑いがない個体である。好ましくは、健康な対照はまた、任意の他の明らかな疾患を呈さない。
【０１３７】
一実施形態では、ｄ）患者が低下されたレベルのＨｓｐ７０を有するかを分類するかまたは決定するステップは、同じ基礎疾患を呈するが、付随する低下されたレベルのＨｓｐ７０を有しない患者から得られた、または得ることができるＰＢＭＣサンプル中のレベルと比較して、ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０のレベルを決定することを含む。
【０１３８】
一実施形態では、低下されたレベルのＨｓｐ７０を有する患者を選択するための方法が提供され、本患者は基礎疾患を有し、本方法は、
ａ）患者からのＰＢＭＣサンプルを提供するステップと、
ｂ）ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０を検出するステップと、
ｃ）ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０のレベルを定量化するかまたは決定するステップと、
ｄ）同じ基礎疾患を呈する他の患者と比較して、患者が、低下されたレベルのＨｓｐ７０を有するかを分類するかまたは決定するステップ、
を含む。
【０１３９】
一実施形態では、低下されたレベルのＨｓｐ７０を有するとして、リソソーム蓄積障害、神経変性障害、神経筋障害、筋ジストロフィー、および炎症性筋障害からなる群から選択される疾患を有する患者を選択するかまたは特定するための方法が提供され、本方法は、
ａ）患者からのＰＢＭＣサンプルを提供するステップと、
ｂ）ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０を検出するステップと、
ｃ）ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０のレベルを定量化するかまたは決定するステップと、
ｄ）患者が低下されたレベルのＨｓｐ７０を有するかを分類するかまたは決定するステップ、
を含む。
【０１４０】
一実施形態では、低下されたレベルのＨｓｐ７０を有するとしてニーマンピック病（ＮＰＣなど）を有する患者を選択するかまたは特定するための方法が提供され、本方法は、
ａ）患者からのＰＢＭＣサンプルを提供するステップと、
ｂ）ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０を検出するステップと、
ｃ）ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０のレベルを定量化するかまたは決定するステップと、
ｄ）患者が低下されたレベルのＨｓｐ７０を有するかを分類するかまたは決定するステップ、
を含む。
【０１４１】
一実施形態では、患者は、ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０（一実施形態ではＨｓｐＡ１Ａおよび／またはＨｓｐＡ１Ｂ）のレベルが健康な対照で見られるレベルよりも１〜１０００倍低い場合、例えば、健康な対照で見られるレベルより、１〜２倍、２〜３倍、３〜４倍、４〜５倍、５〜６倍、６〜７倍、７〜８倍、８〜９倍、９〜１０倍、１０〜１１倍、１１〜１２倍、１２〜１３倍、１３〜１４倍、１４〜１５倍、１５〜１６倍、１６〜１７倍、１７〜１８倍、１８〜１９倍、１９〜２０倍、２０〜２５倍、２５〜３０倍、３０〜３５倍、３５〜４０倍、４０〜４５倍、４５〜５０倍、５０〜７５倍、７５〜１００倍、１００〜１５０倍、１５０〜２００倍、２００〜２５０倍、２５０〜３００倍、３００〜４００倍、４００〜５００倍、５００〜７５０倍、７５０〜１０００倍低いか、または検出できない場合、低下されたレベルのＨｓｐ７０を有する。
【０１４２】
一実施形態では、ｄ）患者が低下されたレベルのＨｓｐ７０を有するかを分類するかまたは決定するステップは、ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０（一実施形態ではＨｓｐＡ１Ａおよび／またはＨｓｐＡ１Ｂ）の量が、所定のカットオフ値未満であるか、または検出できないかを決定することを含む。
【０１４３】
Ｈｓｐ７０の量が上記のカットオフ値未満である場合、患者は、低下されたレベルのＨｓｐ７０を有し、Ｈｓｐ７０を含む、熱ショックタンパク質の細胞内濃度および／または活性を増加させる生物活性剤を含むＨｓｐ７０治療法に応答する可能性があるか、または可能性が高い。Ｈｓｐ７０の量が上記のカットオフ値以上である場合、患者は、低下されたレベルのＨｓｐ７０を有さず、Ｈｓｐ７０を含む、熱ショックタンパク質の細胞内濃度および／または活性を増加させる生物活性剤を含むＨｓｐ７０治療法に応答する可能性が低いか、または可能性がない。
【０１４４】
一実施形態では、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する患者は、ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０（一実施形態ではＨｓｐＡ１Ａおよび／またはＨｓｐＡ１Ｂ）の量が、７５００ｐｇ／ｍＬ以下、７０００ｐｇ／ｍＬ以下など、６５００ｐｇ／ｍＬ以下など、６０００ｐｇ／ｍＬ以下など、５５００ｐｇ／ｍＬ以下など、５０００ｐｇ／ｍＬ以下など、４５００ｐｇ／ｍＬ以下など、４０００ｐｇ／ｍＬ以下など、３５００ｐｇ／ｍＬ以下など、３０００ｐｇ／ｍＬ以下など、２５００ｐｇ／ｍＬ以下など、２０００ｐｇ／ｍＬ以下など、１５００ｐｇ／ｍＬ以下など、１０００ｐｇ／ｍＬ ＰＢＭＣ以下などである場合、Ｈｓｐ７０治療法に応答する可能性があるか、またはその可能性が高い。
【０１４５】
逆に、一実施形態では、患者は、ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０（一実施形態ではＨｓｐＡ１Ａおよび／またはＨｓｐＡ１Ｂ）の量が、５０００ｐｇ／ｍＬ超、５５００ｐｇ／ｍＬ超など、６０００ｐｇ／ｍＬ超など、６５００ｐｇ／ｍＬ超など、７０００ｐｇ／ｍＬ超など、７５００ｐｇ／ｍＬ超など、８０００ｐｇ／ｍＬ超など、８５００ｐｇ／ｍＬ超など、９０００ｐｇ／ｍＬ超など、９５００ｐｇ／ｍＬ超など、１００００ｐｇ／ｍＬ超など、１０５００ｐｇ／ｍＬ超など、１１０００ｐｇ／ｍＬ超など、１１５００ｐｇ／ｍＬ超など、１２０００ｐｇ／ｍＬ超など、１２５００ｐｇ／ｍＬ超のＰＢＭＣなどである場合、Ｈｓｐ７０の治療法に対して応答する可能性が低いか、または可能性がない。
【０１４６】
一実施形態では、低下されたレベルのＨｓｐ７０を有する患者を特定するステップは、Ｈｓｐ７０を含む、熱ショックタンパク質の細胞内濃度および／または活性を増加させる生物活性剤を含むＨｓｐ７０治療法などの、患者に低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を治療するための治療法を施すために、患者の適格性を決定するステップを含む。
【０１４７】
一実施形態では、患者を選択するための方法は、ｅ）個体に低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を治療するための治療法を施すステップをさらに含む。
【０１４８】
一実施形態では、個体に低下されたレベルのＨｓｐ７を呈する疾患を治療するための治療法を施すことは、本明細書の他の場所で指定されるとおり、Ｈｓｐ７０誘導物質またはＨｓｐ７０タンパク質などの、Ｈｓｐ７０を含む熱ショックタンパク質の細胞内濃度および／または活性を増加させる生物活性剤を投与することを含む。
疾患の進行の監視
【０１４９】
本明細書に開示の方法はまた、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患の疾患進行を監視するために有用である。
【０１５０】
したがって、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有する個体において、疾患進行を監視するための方法を提供することは一態様であり、この方法は、
ａ）２つ以上のその後の時点で、個体からの１つ以上のＰＢＭＣサンプルを提供するステップと、
ｂ）上記のＰＢＭＣサンプルの各々中でＨｓｐ７０を検出するステップと、
ｃ）ＰＢＭＣサンプルの各々中のＨｓｐ７０のレベルを定量化するかまたは決定するステップ、
を含む。
【０１５１】
一実施形態では、Ｈｓｐ７０を検出することは、ＨｓｐＡ１Ａおよび／またはＨｓｐＡ１Ｂを検出することを含む。
【０１５２】
一実施形態では、ＰＢＭＣサンプルの各々中に存在するＨｓｐ７０のレベルは、疾患の進行または疾患の寛解を示す。
【０１５３】
ａ）個体から１つ以上のＰＢＭＣサンプルを提供するステップ、ｂ）ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０を検出するステップ、およびｃ）ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０のレベルを定量化するかまたは決定するステップはそれぞれ、本開示に従って実施され、本明細書の他の場所で指定され得ることが理解される。
【０１５４】
一実施形態では、疾患の進行を監視するための方法は、ｄ）低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患が進行中であるか寛解中であるかを決定するさらなるステップを含む。
【０１５５】
一実施形態では、ステップｄ）は、ｔ＝０などの、より早い時間にＰＢＭＣサンプル中に存在するＨｓｐ７０のレベルを決定すること、およびｔ＞０などの、より遅い時間にＰＢＭＣサンプル中に存在するＨｓｐ７０のレベルを決定することを含む。
【０１５６】
一実施形態では、第１のサンプルは、ｔ＝０（より早い時間）で採取され、１つ以上のその後のサンプルは、ｔ＞０での１つ以上のその後の時点（その後のサンプル）で採取される。一実施形態では、ＰＢＭＣサンプルは、特定の間隔で連続的に採取される。
【０１５７】
一実施形態では、１つ以上のその後のサンプルは、ｔ＝０およびｔ＝０後の１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０またはそれより多い時点で採取されたＰＢＭＣサンプルを含む。
【０１５８】
一実施形態では、１つ以上のその後のサンプルは、ｔ＝１日、ｔ＝２日、ｔ＝３日、ｔ＝４日、ｔ＝５日、ｔ＝６日、ｔ＝７日、ｔ＝１４日、ｔ＝３週間、ｔ＝４週間、ｔ＝５週間、ｔ＝６週間、ｔ＝７週間、ｔ＝８週間、ｔ＝１ヶ月、ｔ＝２ヶ月、ｔ＝３ヶ月、ｔ＝４ヶ月、ｔ＝５ヶ月、ｔ＝６ヶ月、ｔ＝７ヶ月、ｔ＝８ヶ月、ｔ＝９ヶ月、ｔ＝１０ヶ月、ｔ＝１１ヶ月、ｔ＝１２ヶ月、ｔ＝１３ヶ月、ｔ＝１４ヶ月、ｔ＝１５ヶ月、ｔ＝１６ヶ月、ｔ＝１７ヶ月、ｔ＝１８ヶ月、ｔ＝２０ヶ月、ｔ＝２２ヶ月および／またはｔ＝２４ヶ月の１つ以上で採取される。
【０１５９】
一実施形態では、１つ以上のその後のサンプルは、１日、２日、３日、４日、５日、６日、７日、１４日、３週間、４週間、５週間、６週間、７週間、８週間、１ヶ月、２ヶ月、３ヶ月、４ヶ月、５ヶ月、６ヶ月、７ヶ月、８ヶ月、９ヶ月、１０ヶ月、１１ヶ月、および／または１２ヶ月の間隔で採取される。１ヶ月の間隔は、その後のサンプルが１ヶ月ごとに採取されることを意味する。
【０１６０】
一実施形態では、経時的なＨｓｐ７０のレベルの減少は、疾患の進行を示す。
【０１６１】
一実施形態では、経時的なＨｓｐ７０のレベルの増加は、疾患の寛解を示す。
【０１６２】
一実施形態では、本方法は、疾患の進行を示す、Ｈｓｐ７０のレベルがその後のサンプル（複数可）においてより低いかを決定すること、かつ／または疾患の寛解を示す、Ｈｓｐ７０のレベルがその後のサンプル（複数可）でより高いかを決定することを含む。
【０１６３】
一実施形態では、ｔ＝０において、および１〜１０００倍のｔ＞０での１つ以上の時点において測定される経時的なＨｓｐ７０のレベルの減少は、Ｈｓｐ７０のレベルが１〜２倍、２〜３倍、３〜４倍、４〜５倍、５〜６倍、６〜７倍、７〜８倍、８〜９倍、９〜１０倍、１０〜１１倍、１１〜１２倍、１２〜１３倍、１３〜１４倍、１４〜１５倍、１５〜１６倍、１６〜１７倍、１７〜１８倍、１８〜１９倍、１９〜２０倍、２０〜２５倍、２５〜３０倍、３０〜３５倍、３５〜４０倍、４０〜４５倍、４５〜５０倍、５０〜６０倍、６０〜７０倍、７０〜８０倍、８０〜９０倍、９０〜１００倍、１００〜１５０倍、１５０〜２００倍、２００〜２５０倍、２５０〜３００倍、３００〜４００倍、４００〜５００倍、５００〜６００倍、６００〜７００倍、７００〜８００倍減少するなど、Ｈｓｐ７０のレベルが９００〜１０００倍減少するなど、疾患の進行を示す。
【０１６４】
一実施形態では、ｔ＝０において、および１〜１０００倍のｔ＞０での１つ以上の時点において測定される経時的なＨｓｐ７０のレベルの減少は、Ｈｓｐ７０のレベルが１〜２倍、２〜３倍、３〜４倍、４〜５倍、５〜６倍、６〜７倍、７〜８倍、８〜９倍、９〜１０倍、１０〜１１倍、１１〜１２倍、１２〜１３倍、１３〜１４倍、１４〜１５倍、１５〜１６倍、１６〜１７倍、１７〜１８倍、１８〜１９倍、１９〜２０倍、２０〜２５倍、２５〜３０倍、３０〜３５倍、３５〜４０倍、４０〜４５倍、４５〜５０倍、５０〜６０倍、６０〜７０倍、７０〜８０倍、８０〜９０倍、９０〜１００倍、１００〜１５０倍、１５０〜２００倍、２００〜２５０倍、２５０〜３００倍、３００〜４００倍、４００〜５００倍、５００〜６００倍、６００〜７００倍、７００〜８００倍増加するなど、Ｈｓｐ７０のレベルが９００〜１０００倍増加するなど、疾患の寛解を示す。
【０１６５】
一実施形態では、５００〜７５０ｐｇ／ｍＬなど、７５０〜１０００ｐｇ／ｍＬなど、１０００〜１５００ｐｇ／ｍＬなど、１５００〜２０００ｐｇ／ｍＬなど、２０００〜３０００ｐｇ／ｍＬなど、３０００〜４０００ｐｇ／ｍＬなど、４０００〜５０００ｐｇ／ｍＬなど、５０００〜７５００ｐｇ／ｍＬなど、７５００〜１００００ｐｇ／ｍＬなど、１００００〜１２５００ｐｇ／ｍＬなど、１２５００〜１５０００ｐｇ／ｍＬなど、１５０００〜２００００ｐｇ／ｍＬ ＰＢＭＣなどの、５００〜２００００ｐｇ／ｍＬのＰＢＭＣのｔ＝０およびｔ＝６ヶ月（約）で測定される経時的なＨｓｐ７０のレベルの減少は、疾患の進行を示す。
【０１６６】
一実施形態では、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有する個体における疾患進行を監視するための方法は、本明細書の他の場所で指定されるとおり、リソソーム蓄積症、神経変性疾患、神経筋障害、筋ジストロフィーまたは炎症性筋障害からなる群から選択される疾患を有する個体における疾患進行を監視することを含む。
【０１６７】
一実施形態では、リソソーム蓄積症は、スフィンゴリピドース；ムコ多糖症；グリコーゲン貯蔵障害；糖タンパク質代謝障害（糖タンパク代謝異常症）；およびムコリピドースなどの脂質貯蔵障害、ならびに本明細書の他の場所で指定されるその任意のサブタイプからなる群から選択される。一実施形態では、リソソーム蓄積症は、ＮＰＣなどのニーマンピック病である。
治療法の有効性の監視
【０１６８】
本明細書に開示される方法はまた、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患の治療または潜在的な治療の有効性を監視するために有用である。
【０１６９】
低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有する個体において低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を治療するための治療法の有効性を監視するための方法を提供することはしたがって、本開示の一態様であり、本方法は、
ａ）治療法が適用されるか、維持されるか、減少されるか、または上昇される前、その間、および／またはその後に、個体からの１つ以上のＰＢＭＣサンプルを提供するステップと、
ｂ）１つ以上のＰＢＭＣサンプルの各々中のＨｓｐ７０を検出するステップと、
ｃ）１つ以上のＰＢＭＣサンプルの各々中のＨｓｐ７０のレベルを定量化するかまたは決定するステップ、
を含む。
【０１７０】
一実施形態では、Ｈｓｐ７０を検出することは、ＨｓｐＡ１Ａおよび／またはＨｓｐＡ１Ｂを検出することを含む。
【０１７１】
一実施形態では、ＰＢＭＣサンプルの各々中に存在するＨｓｐ７０のレベルは、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患に対する治療法の有効性を示す。
【０１７２】
ａ）個体から１つ以上のＰＢＭＣサンプルを提供するステップ、ｂ）ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０を検出するステップ、およびｃ）ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０のレベルを定量化するかまたは決定するステップは、それぞれ、本開示に従って実施され、本明細書の他の場所で指定され得ることが理解される。
【０１７３】
一実施形態では、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を治療するための治療法の有効性を監視するための方法は、ｄ）低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患の治療法の有効性を監視するさらなるステップを含む。
【０１７４】
一実施形態では、ステップｄ）は、治療法が適用されるか、維持されるか、減少されるか、または上昇される前に、ＰＢＭＣサンプル中に存在するＨｓｐ７０のレベルを決定することを含む。
【０１７５】
一実施形態では、ステップｄ）は、治療法中にＰＢＭＣサンプル中に存在するＨｓｐ７０のレベルを決定することを含む。
【０１７６】
一実施形態では、ステップｄ）は、治療法が適用されたか、維持されたか、減少されたか、または上昇された後に、ＰＢＭＣサンプル中に存在するＨｓｐ７０のレベルを決定することを含む。
【０１７７】
一実施形態では、ステップｄ）は、ｉ）治療法が適用されるか、維持されるか、減少されるか、または上昇される前に、ＰＢＭＣサンプル中に存在するＨｓｐ７０のレベルを決定することと；ｉｉ）治療法中にＰＢＭＣサンプル中に存在するＨｓｐ７０のレベルを決定することと、ｉｉｉ）治療法が適用されたか、維持されたか、減少されたか、または上昇された後に、ＰＢＭＣサンプル中に存在するＨｓｐ７０のレベルを決定することの１つ以上を含む。
【０１７８】
一実施形態では、治療法が適用されたか、維持されたか、減少されたか、または上昇された後のＨｓｐ７０のレベルの増加は、治療法が有効であることを示す。
【０１７９】
一実施形態では、治療法が適用されたか、維持されたか、減少されたか、または上昇された後のＨｓｐ７０のレベルの減少は、治療法が有効でないことを示す。
【０１８０】
一実施形態では、本方法は、治療法が有効であることを示す、治療法が適用されたか、維持されたか、減少されたか、または上昇された後にＨｓｐ７０のレベルがより高いかを決定する１つ以上のステップ、および／または治療が有効でないことを示す、治療法が適用されたか、維持されたか、減少されたか、または上昇された後にＨｓｐ７０のレベルが低いかを決定する１つ以上のステップを含む。
【０１８１】
治療法が適用されたか、維持されたか、減少されたか、または上昇された後のＨｓｐ７０のレベルの１〜１０００倍の増加、例えば、１〜２倍、２〜３倍、３〜４倍、４〜５倍、５〜６倍、６〜７倍、７〜８倍、８〜９倍、９〜１０倍、１０〜１１倍、１１〜１２倍、１２〜１３倍、１３〜１４倍、１４〜１５倍、１５〜１６倍、１６〜１７倍、１７〜１８倍、１８〜１９倍、１９〜２０倍、２０〜２５倍、２５〜３０倍、３０〜３５倍、３５〜４０倍、４０〜４５倍、４５〜５０倍、５０〜６０倍、６０〜７０倍、７０〜８０倍、８０〜９０倍、９０〜１００倍、１００〜１５０倍、１５０〜２００倍、２００〜２５０倍、２５０〜３００倍、３００〜４００倍、４００〜５００倍、５００〜６００倍、６００〜７００倍、７００〜８００倍、９００〜１０００倍の増加などは、治療が有効であることを示す。
【０１８２】
治療法が適用されたか、維持されたか、減少されたか、または上昇された後のＨｓｐ７０のレベルの１〜１０００倍の減少、例えば、１〜２倍、２〜３倍、３〜４倍、４〜５倍、５〜６倍、６〜７倍、７〜８倍、８〜９倍、９〜１０倍、１０〜１１倍、１１〜１２倍、１２〜１３倍、１３〜１４倍、１４〜１５倍、１５〜１６倍、１６〜１７倍、１７〜１８倍、１８〜１９倍、１９〜２０倍、２０〜２５倍、２５〜３０倍、３０〜３５倍、３５〜４０倍、４０〜４５倍、４５〜５０倍、５０〜６０倍、６０〜７０倍、７０〜８０倍、８０〜９０倍、９０〜１００倍、１００〜１５０倍、１５０〜２００倍、２００〜２５０倍、２５０〜３００倍、３００〜４００倍、４００〜５００倍、５００〜６００倍、６００〜７００倍、７００〜８００倍、９００〜１０００倍の減少などは、治療が有効でないことを示す。
【０１８３】
一実施形態では、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有する個体において低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を治療するための治療法の有効性を監視するための方法は、本明細書の他の場所で指定されるとおり、リソソーム蓄積症、神経変性疾患、神経筋障害、筋ジストロフィーまたは炎症性筋障害からなる群から選択される疾患を有する個体において治療のための治療法の有効性を監視することを含む。
【０１８４】
一実施形態では、リソソーム蓄積症は、スフィンゴリピドース；ムコ多糖症；グリコーゲン貯蔵障害；糖タンパク質代謝障害（糖タンパク代謝異常症）；およびムコリピドースなどの脂質貯蔵障害、ならびに本明細書の他の場所で指定されているその任意のサブタイプからなる群から選択される。一実施形態では、リソソーム蓄積症は、ＮＰＣなどのニーマンピック病である。
【０１８５】
低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を治療するための治療法および同じ目的のための生物活性剤は、本明細書の他の場所に開示され、治療法の有効性を監視する上記の方法に含まれる。
サンプル
【０１８６】
本明細書に開示の方法は、個体由来の末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）サンプルの提供を含む。
【０１８７】
本開示のサンプルは、個体、好ましくはヒトから得られるかまたは得ることができることが理解される。一実施形態では、ＰＢＭＣサンプルは、個体から得られるか、または個体から得ることができる。
【０１８８】
末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）は、丸核を有する任意の末梢血細胞であり、これらの細胞は、リンパ球（Ｔ細胞、Ｂ細胞、ＮＫ細胞）、単球および樹状細胞から構成される。対照的に、赤血球および血小板は、核がなく、顆粒球（好中球、好塩基球、および好酸球）は、多葉性核を有する。
【０１８９】
したがって、一実施形態では、ＰＢＭＣサンプルは、丸核を有する末梢血単核細胞を含むサンプルである。一実施形態では、ＰＢＭＣサンプルは、リンパ球（Ｔ細胞、Ｂ細胞、ＮＫ細胞）、単球および／または樹状細胞を含むサンプルである。
【０１９０】
本明細書で定義される個体由来のＰＢＭＣサンプルは、一実施形態では、主にＰＢＭＣを含むサンプルである。一実施形態では、ＰＢＭＣサンプルは、全血から抽出されたＰＢＭＣを含むサンプルである。一実施形態では、ＰＢＭＣサンプルは、全血のＰＢＭＣ成分を含むか、または本質的にそれからなるサンプルである。
【０１９１】
ＰＢＭＣは、フィコール（血液の層を分離する親水性多糖類）、および勾配遠心分離を用いて全血から抽出でき、勾配遠心分離は血液を、血漿の最上層に、次いでＰＢＭＣの層および多形核細胞（好中球および好酸球など）ならびに赤血球の最下分画に分離する。多形核細胞は、赤血球を溶解することによってさらに単離できる。好塩基球は、密度の高い画分およびＰＢＭＣ画分の両方で見られることがある。
【０１９２】
ヒトの免疫系研究のために末梢全血を採取する場合、それは多くの場合、密度勾配遠心分離により赤血球を除去するために処理される。最も一般的には、この方法は、高分子量のショ糖ポリマー溶液であるＦｉｃｏｌｌ  Ｐａｑｕｅを使用する。フィコールは、全血を１．０７７ｇ／ｍｌの密度の上と下の２つの画分に分離する。
【０１９３】
末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）は、フィコール層の密度の低い上部界面にとどまる免疫細胞の集団であり、バフィーコートと呼ばれることが多く、フィコール分画法を使用する場合に収集される細胞である。赤血球（ｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅ）（赤血球（ｒｅｄ  ｂｌｏｏｄ  ｃｅｌｌ））および好中球と好酸球を含む多形核細胞（ＰＭＮ）は、１．０７７ｇ／ｍｌよりも密度が高いため、通常、この分画中に除去される。しかし、好塩基球は１．０７７ｇ／ｍｌよりも密度が高い場合も低い場合もあり、したがって密度の低いＰＢＭＣ画分にわずかに存在する可能性がある。
【０１９４】
ＰＢＭＣの典型的な組成は、ＰＢＭＣの７０〜９０％の範囲のリンパ球（Ｔ細胞、Ｂ細胞、およびＮＫ細胞）、ＰＢＭＣの１０〜３０％の範囲の単球を含み、樹状細胞は、まれであり、わずかにＰＢＭＣの１〜２％である。いくつかの実施形態におけるリンパ球集団内の細胞型の頻度は、７０〜８５％のＣＤ３＋Ｔ細胞（ＰＢＭＣの４５〜７０％）、５〜２０％のＢ細胞（ＰＢＭＣの最大１５％）、および５〜２０％のＮＫ細胞（ＰＢＭＣの最大１５％）を含み得る。
【０１９５】
ＣＤ３＋区画は、ほぼ２：１の比で、ＣＤ４（ＰＢＭＣの２５〜６０％）およびＣＤ８  Ｔ細胞（ＰＢＭＣの５〜３０％）から構成される。ＣＤ４およびＣＤ８  Ｔ細胞の両方は、ナイーブな、および休止状態または活性化状態で存在する、抗原経験のあるセントラルメモリー、エフェクターメモリー、およびエフェクターサブタイプにさらにサブセット化できる。複数のマーカーを使用して、これらの区画を様々な類似性に同定でき、したがって様々なマーカーを使用して報告される頻度は異なる場合がある。
【０１９６】
ＣＤ４  Ｔ細胞は、ヘルパーＴ細胞として公知であり、さらに、特定のサイトカイン、表面マーカー、または転写因子の発現プロファイルに基づいて、様々な機能サブタイプに分類できる。これらは、制御性Ｔ細胞、ＴＨ１、ＴＨ２、およびＴＨ１７細胞、ならびにＴＨ９、濾胞ヘルパー、およびＴＲ１タイプなどの他の記載された亜集団を含む。細胞傷害性ＣＤ８Ｔ細胞区画は、マーカーの発現および機能において非常に不均一であることが示されており、約２００の機能的表現型で構成され得る。
【０１９７】
循環するＢ細胞は、移行型、ナイーブ型、記憶型のサブタイプ、および形質細胞を含み、これらはすべて、末梢血中の様々な集団で見ることができる。循環樹状細胞は、形質細胞様樹状細胞および骨髄由来樹状細胞を含む。循環単球は、古典的単球または非古典的ＣＤ１６＋炎症誘発性単球のいずれかであると説明され、これは末梢血中において単球の最大１０％を構成し、古典的単球と比較して独特の機能を有する。
【０１９８】
一実施形態では、個体から１つ以上のＰＢＭＣサンプルを提供する本明細書に開示の方法のステップａ）は、
ｉ）全血サンプルを提供するステップと、
ｉｉ）全血をそのサブ区画に分離して、ＰＢＭＣサンプルを得るステップ
の１つ以上のステップを含む。
【０１９９】
一実施形態では、全血サンプルは、ＰＢＭＣサンプルを得るために遠心分離および／またはフィコール分離に供される。
個体からのサンプル
【０２００】
一実施形態において、本明細書に提供されるＰＢＭＣサンプルは、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有するか、有する疑いがあるか、または有するリスクがあるか、または有する可能性がある個体に由来する。
【０２０１】
一実施形態では、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有するか、有するリスクがあるか、有する疑いがあるか、または有する可能性がある個体は、本明細書の他の場所で指定されるとおり、リソソーム蓄積症、神経変性疾患、神経筋障害、筋ジストロフィーまたは炎症性筋障害からなる群から選択される疾患を有するか、有するリスクがあるか、有する疑いがあるか、または有する可能性がある。一実施形態では、リソソーム蓄積症は、スフィンゴリピドース；ムコ多糖症；グリコーゲン貯蔵障害；糖タンパク質代謝障害（糖タンパク代謝異常症）；およびムコリピドースなどの脂質貯蔵障害、ならびに本明細書の他の場所で指定されるその任意のサブタイプからなる群から選択される。一実施形態では、リソソーム蓄積症は、ＮＰＣなどのニーマンピック病である。
【０２０２】
一実施形態では、ＰＢＭＣサンプルは、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有するか、有する疑いがあるか、または有するリスクがあるか、または有する可能性がある個体から得られるか、または得ることができる。
【０２０３】
一実施形態では、サンプルは、一般集団と比較して、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有するか、または有する疑いがあるか、または有するリスクがあるか、または有する可能性がある個体から得られる。低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有するかまたは発症するリスクの増加は、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患の家族歴の評価、症状の評価、および／または他の診断検査の結果に基づく場合がある。
【０２０４】
一実施形態では、サンプルは、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患と診断された１名以上の家族を有する個体から得られる。
【０２０５】
一実施形態では、サンプルは、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有する兄弟、親、いとこ、叔父、および／または叔母を有する個体から得られる。
【０２０６】
一実施形態では、サンプルは、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有する兄弟を有する個体から得られる。
【０２０７】
一実施形態では、サンプルは、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を発症する素因がある個体から得られる。
【０２０８】
一実施形態では、サンプルは、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患の遺伝的素因を有する１名以上の家族を有する個体から得られる。
【０２０９】
本明細書の他の場所で指定されるとおり、「低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患」は、リソソーム蓄積症、神経変性疾患、神経筋障害、筋ジストロフィー、および炎症性筋障害を含む。
【０２１０】
一実施形態では、サンプルは、ＮＰＣ１遺伝子および／またはＮＰＣ２遺伝子に変異を有する１名以上の家族を有する個体から得られる。
【０２１１】
一実施形態では、サンプルは、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を示す１つ以上の症状などの、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患に関連する１つ以上の症状を有する個体から得られる。
【０２１２】
一実施形態では、サンプルは、ＬＳＤを示す１つ以上の症状などの、ＬＳＤに関連する１つ以上の症状を有する個体から得られる。
【０２１３】
兆候および症状は疾患ごとに異なるが、ＬＳＤの症状は、身体の細胞の各々に存在するリソソームがそれらの正常な機能を実行する能力を阻害するタンパク質の欠乏のため、それぞれの症例において発生する。
【０２１４】
一実施形態では、サンプルは、ニーマンピック病Ｃ型などのニーマンピック病に関連する１つ以上の症状を有する個体から得られる。一実施形態では、症状は、垂直注視麻痺、肝腫大、脾腫大および／または黄疸、運動能力の進行性喪失、摂食困難、進行性学習障害、および発作からなる群から選択される。
【０２１５】
ＬＳＤおよびＮＰＣの他の症状としては、知性および神経機能の両方の悪化、進行性視覚障害（視覚萎縮）、精神障害者、精神退化、肝腫大／脾腫（肝脾腫）、物理的劣化、進行性の筋低下、筋緊張低下（筋緊張低下症）、運動遅滞、摂食障害、呼吸困難および全身脱力感（嗜眠）が挙げられる。
Ｈｓｐ７０のレベルの低下を呈する疾患
【０２１６】
Ｈｓｐ７０は、細胞の恒常性ならびに、リソソーム蓄積症、神経変性疾患、および一部の神経筋疾患および筋肉疾患を含む、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する多数の疾患においていくつかの重要な役割を果たす。
【０２１７】
一実施形態では、全体を通して本明細書で言及されるとおり、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患は、リソソーム蓄積症、神経変性疾患、神経筋障害、筋ジストロフィー、および炎症性筋障害からなる群から選択される。
リソソーム蓄積症
【０２１８】
本開示の一態様は、リソソーム蓄積症を有するか、有している疑いがあるか、有するリスクがあるか、または有する可能性がある個体から得られた、または得ることができるＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０を検出する方法；個体におけるリソソーム蓄積症を診断する方法；リソソーム蓄積症を有している個体における疾患進行を監視するための方法；リソソーム蓄積症を有している個体におけるリソソーム蓄積症を治療するための治療法の有効性を監視するための方法；および低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を有する個体を選択するための方法に関する。
【０２１９】
本文脈におけるリソソーム蓄積症への言及は、当業者に公知であるあらゆるリソソーム蓄積症を包含することを意味する。
【０２２０】
一実施形態では、本明細書に開示されるリソソーム蓄積症は、脂質貯蔵障害（またはリピドーシス）、例えば、スフィンゴリピドース；ムコ多糖症；グリコーゲン貯蔵障害；糖タンパク質代謝障害（糖タンパク代謝異常症）；およびムコリピドースからなる群から選択される。
【０２２１】
本開示の一実施形態では、上記で詳細に概説されるように、個体でのリソソーム蓄積症を診断する方法が提供され、ＬＳＤは、脂質貯蔵障害（またはリピドーシス）、例えば、スフィンゴリピドース；ムコ多糖症；グリコーゲン貯蔵障害；糖タンパク質代謝障害（糖タンパク代謝異常症）；およびムコリピドース；および本明細書で指定されたＬＳＤの任意のサブタイプからなる群から選択される。
【０２２２】
本開示の一実施形態では、上記で詳細に概説されるように、リソソーム蓄積症を有する個体での疾患進行を監視するための方法が提供され、ＬＳＤは、脂質貯蔵障害（またはリピドーシス）、例えば、スフィンゴリピドース；ムコ多糖症；グリコーゲン貯蔵障害；糖タンパク質代謝障害（糖タンパク代謝異常症）；およびムコリピドース；および本明細書で指定されたＬＳＤの任意のサブタイプからなる群から選択される。
【０２２３】
本開示の一実施形態では、上記で詳細に概説されるように、リソソーム蓄積症を有する個体でのリソソーム蓄積症を治療するための治療法の有効性を監視するための方法が提供され、ＬＳＤは、脂質貯蔵障害（またはリピドーシス）、例えば、スフィンゴリピドース；ムコ多糖症；グリコーゲン貯蔵障害；糖タンパク質代謝障害（糖タンパク代謝異常症）；およびムコリピドース；および本明細書で指定されたＬＳＤの任意のサブタイプからなる群から選択される。
【０２２４】
本開示の一実施形態では、上記で詳細に概説されるように、リソソーム蓄積症を有する個体を選択するための方法が提供され、ＬＳＤは、脂質貯蔵障害（またはリピドーシス）、例えば、スフィンゴリピドース；ムコ多糖症；グリコーゲン貯蔵障害；糖タンパク質代謝障害（糖タンパク代謝異常症）；およびムコリピドース；および本明細書で指定されたＬＳＤの任意のサブタイプからなる群から選択される。
【０２２５】
スフィンゴリピドースは、主に中枢神経系に影響を与えるスフィンゴ脂質代謝の遺伝性疾患の異種群である。これらの障害は主に小児集団において発生し、疾患プロセスの変性性は一般に、精神運動遅滞およびミオクローヌスを伴うニューロン（灰白質）または衰弱および痙攣を伴う線維路（白質）のびまん性かつ進行性の関与を特徴とする。蓄積されるスフィンゴ脂質は、ガングリオシド（ガングリオシドース）、糖脂質／セラミド（ファブリー病、クラッベ病）、グルコセレブロシド（ゴーシェ病）、スフィンゴミエリン（ニーマンピック病）、およびスルファチド（白質ジストロフィー（ｌｅｕｋｏｄｙｓｔｒｏｈｉｅｓ）；ＭＬＤ）を含む。
【０２２６】
一実施形態では、本明細書で開示のリソソーム蓄積症は、スフィンゴリピドースである。一実施形態では、本明細書で開示のリソソーム蓄積症は、ガングリオシドーシスおよび白質ジストロフィーから選択されるスフィンゴリピドースである。
【０２２７】
一実施形態では、本明細書に開示のリソソーム蓄積症は、サンドホフ病（またはＧＭ２ガングリオシドーシスＩＩ型）、古典的幼児サンドホフ病、若年性サンドホフ病、成人／遅発性サンドホフ病、テイサックス病（またはＧＭ２ガングリオシドーシスＩ型）、乳児テイサックス病、若年性テイサックス病、成人／遅発性テイ・サックス病、ＧＭ２−ガングリオシドーシスＡＢバリアント、ＧＭ１ガングリオシドーシス、初期の乳児ＧＭ１ガングリオシドーシス、後期乳児ＧＭ１ガングリオシドーシス、成人ＧＭ１ガングリオシドーシス、ＧＭ３ガングリオシドーシス、およびムコリピドーシスＩＶからなる群から選択されるガングリオシドーシスである。
【０２２８】
一実施形態では、本明細書に開示のリソソーム蓄積症は、ニーマンピック病、ファーバー病、クラッベ病、ファブリー病、ゴーシェ病、シアリドーシス（ムコリピドーシスＩ型）、異染性白質ジストロフィーなどのスルファチドーシス（後期乳児型、若年型、および成人型）ならびにサポシン欠損症および多発性スルファターゼ欠損症（オースティン病）からなる群から選択される。
【０２２９】
一実施形態では、本明細書に開示のリソソーム蓄積症は、ゴーシェ病、例えば、ゴーシェ病Ｉ型（非神経障害型）、ＩＩ型（急性乳児神経障害性ゴーシェ病）およびＩＩＩ型（慢性神経障害性形態）である。
【０２３０】
一実施形態では、本明細書に開示されるリソソーム蓄積症は、ニーマンピック病Ａ型、ニーマンピック病Ｂ型およびニーマンピック病Ｃ型などのニーマンピック病である。
【０２３１】
一実施形態では、本明細書に開示されるリソソーム蓄積症は、ニーマンピック病Ｃ型である。
【０２３２】
一実施形態では、本明細書に開示されるリソソーム蓄積症は、脳腱コレステリン蓄積症、ウォルマン病（リソソーム酸性リパーゼ欠損症）、コレステリルエステル蓄積症、および神経セロイドリポフスチン症（ＮＣＬ）からなる群から選択されるリピドーシスである。一実施形態では、神経セロイドリポフスチン症は、バッテン病（シュピールマイヤー・フォークト病）、ビールショウスキー−ヤンスキー病、クフス病、およびサンタヴオリ−ハルティア病からなる群から選択される。
【０２３３】
一実施形態では、本明細書に開示されるリソソーム蓄積症は、ムコ多糖症Ｉ型、ムコ多糖症ＩＩ型、ムコ多糖症ＩＩＩ型、ムコ多糖症ＩＶ型、ムコ多糖症ＶＩ型、ムコ多糖症ＶＩＩ型、ムコ多糖症ＶＩＩＩ型、およびムコ多糖症ＩＸ型からなる群から選択されるムコ多糖症である。
【０２３４】
一実施形態では、本明細書に開示されるリソソーム蓄積症は、ハーラー症候群、ハーラー・シャイエ症候群およびシャイエ症候群（Ｉ型）；ハンター症候群（ＩＩ型）；サンフィリッポ症候群Ａ型、Ｂ型、Ｃ型、またはＤ型（ＩＩＩ型）；モルキオ症候群、古典的またはモルキオ様（ＩＶ型）；マロトー−ラミー症候群、軽度または重度（ＶＩ型）；ＤｉＦｅｒｒａｎｔｅ症候群またはスライ症候群（ＶＩＩ型）；およびヒアルロニダーゼ欠損症（ＩＸ型）からなる群から選択される、ムコ多糖症である。
【０２３５】
一実施形態では、本明細書に開示されるリソソーム蓄積症は、ムコリピドーシスＩＩ型（Ｉ−ｃｅｌｌ病）、ムコリピドーシスＩＩＩ型（偽ハーラー多発性ジストロフィー）およびムコリピドーシスＩＶ型（ムコリピドーシス１欠損症）からなる群から選択されるムコリピドーシスである。
【０２３６】
一実施形態では、本明細書に開示されるリソソーム蓄積症は、心臓糖原病、アンデルセン病、コリ病（フォーブス病）、ハース病、マッカードル病、ポンペ病、タウリ病（タルイ病）、フォン・ギールケ病、ＩＩ型ポンペ病およびＩＩｂ型ダノン病からなる群から選択される糖原病である。
【０２３７】
一実施形態では、本明細書に開示されるリソソーム蓄積症は、アスパルチルグルコサミン尿症、フコシドーシス、マンノシドーシス、アルファマンノシドーシス、アルファマンノシドーシスＩ型、アルファマンノシドーシスＩＩ型、ベータマンノシドーシス、シアリドーシスＩＩ型（ムコリピドーシスＩ）およびガラクトシアリドーシスからなる群から選択される糖タンパク質代謝の障害である。
神経変性疾患
【０２３８】
本開示の一態様は、神経変性疾患を有するか、有することが疑われるか、有するリスクがあるか、または有する可能性がある個体から得られる、または得ることができるＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０を検出する方法に関する。
【０２３９】
神経変性疾患は、高齢化コミュニティにおける障害の増大する原因である。中枢神経系（ＣＮＳ）のニューロンおよび軸索接続の喪失に関連する機能障害のゆっくりとした進行である神経変性は、アルツハイマー病、パーキンソン病（ＰＤ）、およびハンチントン病（ＨＤ）などの神経障害の主な病理学的特徴である。この喪失は、側頭葉および頭頂葉、ならびに前頭皮質および帯状回の一部の変性を含む、疾患の肉眼的萎縮をもたらす。
【０２４０】
多くの神経変性疾患は、遺伝的変異によって引き起こされ、そのほとんどは、完全に無関係な遺伝子に位置している。様々な疾患の多くにおいて、変異した遺伝子は、共通の特徴：ＣＡＧヌクレオチドトリプレット（グルタミンをコードする）の繰り返しを有する。ＣＡＧの繰り返しは、ポリグルタミン（ｐｏｌｙＱ）の区画を生じ、これを示す疾患は、ポリグルタミン疾患（ｐｏｌｙＱ疾患）として公知である。これらは、ハンチントン病、脊髄小脳失調症、ＤＲＰＬＡ（歯状核赤核淡蒼球ルイ体萎縮症）およびＳＢＭＡ（球脊髄性筋萎縮症またはケネディ病）を含む。
【０２４１】
一実施形態では、本明細書に開示される神経変性障害は、アルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン病、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ；ルーゲーリック病）、多発性硬化症、およびポリグルタミン病、例えば、脊髄小脳失調症（脊髄小脳失調症１型、脊髄小脳失調症２型、脊髄小脳失調症３型（別名、マチャド・ジョセフ病）、脊髄小脳失調症６型、脊髄小脳失調症７型および脊髄小脳失調症１７型）、ＤＲＰＬＡ（歯状核赤核淡蒼球ルイ体萎縮症）およびＳＢＭＡ（球脊髄性筋萎縮症またはケネディ病）からなる群から選択される。
筋肉疾患
【０２４２】
本開示の一態様は、神経筋障害、筋ジストロフィー、および炎症性筋障害からなる群から選択される筋肉疾患などの、筋肉疾患を有するか、有する疑いがあるか、有するリスクがあるか、または有する可能性がある個体から得られた、または得ることができるＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０を検出する方法に関する。
神経筋障害
【０２４３】
神経筋障害は、随意筋肉を制御する神経に影響を及ぼす。随意筋肉は、腕および脚でのような、制御できる筋肉である。ニューロンとも呼ばれる神経細胞は、これらの筋肉を制御するメッセージを送信する。ニューロンが不健康になる、または死滅すると、神経系と筋肉の間の通信が破断する。その結果、筋肉が無力になり衰弱する。脱力感は、痙攣、激痛を伴う痙攣、鈍痛および疼痛、ならびに関節および動きの問題をもたらし得る。脱力感は、心臓機能および呼吸能力に影響を及ぼすこともある。中枢神経筋障害のいくつかの例としては、脳血管障害、パーキンソン病、多発性硬化症、ハンチントン病、およびクロイツフェルト・ヤコブ病などが挙げられる。脊髄性筋萎縮症は、下位運動ニューロンの障害であり、筋萎縮性側索硬化症は、上位運動ニューロンと下位運動ニューロンの混合状態である。
【０２４４】
一実施形態では、神経筋障害は、中枢神経筋障害である。
【０２４５】
一実施形態では、神経筋障害は、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、多発性硬化症、パーキンソン病、ハンチントン病、クロイツフェルト・ヤコブ病、重症筋無力症、脊髄性筋萎縮症（ＳＭＡ）、呼吸困難１型を伴う脊髄性筋萎縮症（ＳＭＡＲＤ１；別名遠位脊髄性筋萎縮症１型（ＤＳＭＡ１））、先天性筋無力症候群（ＣＭＳ）、先天性ミオパチー、痙攣線維束性収縮症候群、筋ジストロフィー、遺伝性痙性対麻痺、封入体筋炎、ニューロミオトニア（ＮＭＴ、別名アイザックス症候群、アイザックス−マートン症候群）、ミトコンドリアミオパチー、ランバート・イートン筋無力症候群（ＬＥＭＳ）、筋緊張性ジストロフィー、末梢神経障害、脊髄性筋萎縮症（ＳＢＭＡ、またはケネディ病）、スティッフパーソン症候群およびギランバレー症候群からなる群から選択される。
【０２４６】
一実施形態では、脊髄性筋萎縮症（ＳＭＡ）は、ＳＭＡ１（乳児、ウェルドニッヒホフマン病）、ＳＭＡ０型（、または重度の乳児ＳＭＡ）、ＳＭＡ２（中等度、デュボウィッツ病）、ＳＭＡ３（若年性、クーゲルベルグ・ウェランダ病）およびＳＭＡ４（成人発症）からなる群から選択される。
【０２４７】
一実施形態では、先天性筋無力症候群（ＣＭＳ）は、シナプス前ＣＭＳ、シナプスＣＭＳ、およびシナプス後ＣＭＳからなる群から選択される。
【０２４８】
一実施形態では、先天性ミオパチーは、ネマリンミオパチー、筋管ミオパチー、中心核病または中心核ミオパチー、先天性線維タイプ不均衡ミオパチー、および円柱性螺旋ミオパチーからなる群から選択される。
【０２４９】
一実施形態では、ポンペ病は、乳児型および遅発型からなる群から選択される。
【０２５０】
一実施形態では、遺伝性痙性対麻痺は、ＭＡＳＡ症候群、ペリザエウス−メルツバッハー病、ストランペル病、運動神経障害を伴う白内障、低身長および骨格異常、トロイヤー症候群、ＭＡＳＴ症候群、アラン−ハーンドン−ダドリー症候群、Ｌｉｓｏｎ症候群、痙性運動失調２、ＳＰＯＡＮ症候群、マートソルフ症候群またはワールブルグ・ミクロ症候群、Ｋｕｆｏｒ−Ｒａｋｅｂ症候群、ＭＥＧＤＥＬ症候群およびＨａｒｅｌ−Ｙｏｏｎ症候群からなる群から選択される。
【０２５１】
一実施形態では、封入体筋炎は、散発性封入体筋炎（ｓＩＢＭ）および遺伝性封入体筋炎（ｈＩＢＭ）からなる群から選択され、ｈＩＢＭとしては、ＩＢＭ２、ＩＢＭ３および早期発症型パジェット病および前頭側頭型認知症（ＩＢＭＰＦＤ）を伴う封入体ミオパチーが挙げられる。
【０２５２】
一実施形態では、神経筋緊張症（ＮＭＴ）は、慢性、単相性および再発寛解型からなる群から選択される。
【０２５３】
一実施形態では、ミトコンドリアミオパチーは、カーンズ・セイヤー症候群（ＫＳＳ）、ミオクローヌスてんかんおよび赤色ぼろ線維（ＭＥＲＲＦ）、ミトコンドリア脳筋症、乳酸アシドーシス、脳卒中様症候群（ＭＥＬＡＳ）、および慢性進行性外眼筋麻痺（ＣＰＥＯ）からなる群から選択される。
【０２５４】
一実施形態では、筋緊張性ジストロフィーは、筋緊張性ジストロフィー１型（ＤＭ１）または筋緊張性ジストロフィー２型（ＤＭ２）である。
【０２５５】
一実施形態では、末梢神経障害は、単神経障害、多発神経障害、多発性単神経炎（または多発性神経炎）、自律神経障害、および神経炎からなる群から選択される。
【０２５６】
一実施形態では、ギランバレー症候群は、急性炎症性脱髄性多発神経炎（ＡＩＤＰ）、急性運動軸索ニューロパチー（ＡＭＡＮ）、急性運動感覚性軸索型ニューロパチー（ＡＭＳＡＮ）、咽頭頸部腕神経叢バリアントおよびミラーフィッシャー症候群からなる群から選択される。
筋ジストロフィー
【０２５７】
筋ジストロフィー（ＭＤ）は、時間の経過とともに骨格筋の衰弱および破壊を増加させる筋肉疾患のグループである。この障害は、主に影響を受ける筋肉、衰弱の程度、筋肉が悪化する速さ、および症状が始まる時期が異なる。多くのヒトは、最終的に歩くことができなくなる。いくつかのタイプは、他の臓器での問題にも関連している。３０を超える特定のタイプを含む筋ジストロフィーの９つの主要なカテゴリーがある。
【０２５８】
一実施形態では、筋ジストロフィーは、デュシェンヌ型筋ジストロフィー（ＤＭＤ）、ベッカー型筋ジストロフィー、先天性筋ジストロフィー、遠位型筋ジストロフィー、エメリー・ドレイフス型筋ジストロフィー、顔面肩甲上腕型筋ジストロフィー、肢帯型筋ジストロフィー、筋緊張性筋ジストロフィー、および眼咽頭型筋ジストロフィーからなる群から選択される。
炎症性筋障害
【０２５９】
一実施形態では、炎症性筋障害は、炎症性ミオパチー（炎症性筋疾患または筋炎）、特発性炎症性ミオパチー、多発性筋炎（ＰＭ）、皮膚筋炎（ＤＭ）、封入体筋炎（ｓＩＢＭおよびｈＩＢＭ）、多発性筋炎（または「筋肉リウマチ」）および横紋筋融解症からなる群から選択される。
治療のための治療法
【０２６０】
本開示によれば、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患と診断された患者に、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を治療するための治療法を施す方法が提供される。
【０２６１】
一実施形態では、ｅ）低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患と診断された患者に低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を治療するための治療法を施すステップは、有効量の生物活性剤を個体に投与することを含む。
【０２６２】
低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を治療するための治療法および同じ目的のための生物活性剤は、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患のための既知の治療法を含む。
【０２６３】
「生物活性剤」（すなわち、生物学的活性物質／剤）は、ｉｎ  ｖｉｖｏまたはｉｎ  ｖｉｔｒｏで実証できるいくつかの薬理学的、多くの場合有益な効果を提供する任意の剤、薬物、物質、化合物、物質の組成物または混合物である。本明細書で使用される場合、この用語は、個体において任意の局所的効果または全身的効果をもたらす任意の生理学的または薬理学的に活性な物質をさらに含む。
Ｈｓｐ７０およびＨｓｐ誘導物質
【０２６４】
一実施形態では、ｅ）低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患と診断された患者に、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を治療するための治療法を施すステップは、細胞内濃度かつ／またはＨｓｐ７０などの熱ショックタンパク質の活性を増加させる有効量の生物活性剤を投与することを含む。
【０２６５】
一実施形態では、低下されたレベルのＨｓｐ７０を呈する疾患を治療するための治療法は、Ｈｓｐ７０およびコシャペロンを含む、１つ以上の熱ショックタンパク質の細胞内濃度（もしくはレベル）および／または活性を増加させる生物活性剤であり、Ｈｓｐ７０自体、またはその機能的断片またはバリアント、任意の熱ショックタンパク質誘導物質、および当業者に公知である任意のＨｓｐ７０誘導物質を含む。
【０２６６】
Ｈｓｐ７０を含む、１つ以上の熱ショックタンパク質の細胞内濃度および／または活性を増加させる生物活性剤、およびＨｓｐ７０の細胞内濃度および／または活性を増加させる生物活性剤は、本明細書の「Ｈｓｐ７０誘導物質」と交換可能に使用できる。
【０２６７】
Ｈｓｐ７０誘導物質は、付随するストレスの有無にかかわらず、Ｈｓｐ７０遺伝子の発現およびタンパク質の発現を増幅できる。直接的Ｈｓｐ７０誘導物質は、付随するストレスなしに、Ｈｓｐ７０遺伝子の発現およびタンパク質の発現をそれ自体で増幅できる化合物である。間接的Ｈｓｐ７０誘導物質、またはＨｓｐ７０共誘導物質は、付随する（軽度の）ストレスなしにＨｓｐ７０遺伝子の発現およびタンパク質の発現を増幅できない化合物であるが、ストレスによって誘発されるＨｓｐ７０レベルの増加は、それらの存在によってさらに上昇されるかまたは増強される。
【０２６８】
したがって、生物活性剤は、Ｈｓｐ７０などの熱ショックタンパク質の細胞内濃度および／または活性を直接的または間接的に増加させ得る。
【０２６９】
一実施形態では、生物活性剤は、Ｈｓｐ７０タンパク質、またはその機能的断片またはバリアントである。一実施形態では、Ｈｓｐ７０タンパク質は、ＨＳＰＡ１ＡおよびＨＳＰＡ１Ｂ、またはそれらの機能的断片またはバリアントから選択される。一実施形態では、Ｈｓｐ７０の機能的断片またはバリアントは、Ｈｓｐ７０に対して、例えば、ＨＳＰＡ１ＡおよびＨＳＰＡ１Ｂのいずれか１つに対して、少なくとも７５％の配列同一性、例えば、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも９９％の配列同一性などを有する。
【０２７０】
別の実施形態では、生物活性剤は、Ｈｓｐ７０を含む、熱ショックタンパク質の誘導物質である。
【０２７１】
一実施形態では、Ｈｓｐ７０を含む、熱ショックタンパク質の誘導物質は、Ｈｓｐ７０、Ｈｓｐ４０、Ｈｓｐ７２およびＨｓｐ９０、ならびにコシャペロンの１つ以上の誘導物質である。
【０２７２】
一実施形態では、熱ショックタンパク質の誘導物質は、少なくともＨｓｐ７０の誘導物質である。一実施形態では、熱ショックタンパク質の誘導物質は、Ｈｓｐ７０の誘導物質である。
【０２７３】
Ｈｓｐ７０の誘導物質、またはＨｓｐ７０の誘導への言及は、少なくともＨｓｐ７０が誘導されることを意味し、他のタンパク質および他の熱ショックタンパク質などのエフェクターの同時誘導を排除しない。Ｈｓｐ７０の誘導物質は、Ｈｓｐ７０誘導物質および共誘導物質、ならびに直接的および間接的Ｈｓｐ７０誘導物質を等しく指す。
【０２７４】
一実施形態では、生物活性剤は、Ｈｓｐ７０、またはその機能的断片またはバリアントと、Ｈｓｐ７０などの熱ショックタンパク質の誘導物質との組み合わせを含む。
【０２７５】
一実施形態では、生物活性剤は、熱ショック応答を活性化する。一実施形態では、生物活性剤は、Ｈｓｐ７０を含む、１つ以上の熱ショックタンパク質の細胞内濃度および／または活性を増加させる。一実施形態では、生物活性剤は、Ｈｓｐ７０の細胞内濃度（もしくはレベル）および／または活性を増加させる。一実施形態では、生物活性剤は、Ｈｓｐ７０の細胞内濃度（またはレベル）を増加させる。一実施形態では、生物活性剤は、Ｈｓｐ７０を含む、１つ以上の熱ショックタンパク質の誘導物質である。一実施形態では、生物活性剤は、Ｈｓｐ７０の誘導物質である。
熱ショックタンパク質の小分子誘導物質
【０２７６】
一実施形態では、生物活性剤は、Ｈｓｐ７０の小分子誘導物質などの、Ｈｓｐ７０を含む熱ショックタンパク質の小分子誘導物質である。
【０２７７】
一実施形態では、Ｈｓｐ７０を含む、１つ以上の熱ショックタンパク質の小分子誘導物質は、Ｈｓｐ７０遺伝子発現を増幅することなどにより、とりわけＨｓｐ７０の細胞内濃度（またはレベル）を増加させることができる化合物である。
【０２７８】
一実施形態では、生物活性剤は、Ｈｓｐ７０遺伝子発現を増幅することによりＨｓｐ７０の細胞内濃度（またはレベル）を増加させることができる。一実施形態では、生物活性剤は、Ｈｓｐ７０遺伝子発現を増幅することによりＨｓｐ７０の細胞内濃度（またはレベル）を増加させることができ、生物活性剤は、ヒドロキシルアミン誘導体小分子などのヒドロキシルアミン誘導体である。
【０２７９】
こうしたヒドロキシルアミン誘導体の例は、アリモクロモール、イロキサナジン、ビモクロモール、ＢＧＰ−１５、それらの立体異性体およびそれらの酸付加塩を含む。
アリモクロモール：
【０２８０】
一実施形態では、Ｈｓｐ７０の小分子誘導物質は、Ｎ−［２−ヒドロキシ−３−（１−ピペリジニル）−プロポキシ］−ピリジン−１−オキシド−３−カルボキシイミドイルクロリド（アリモクロモール）、その立体異性体およびその酸付加塩から選択される。アリモクロモールは、例えば、国際公開第００／５０４０３号に記載されている。
【０２８１】
一実施形態では、Ｈｓｐ７０の小分子誘導物質は、Ｎ−［２−ヒドロキシ−３−（１−ピペリジニル）−プロポキシ］−ピリジン−１−オキシド−３−カルボキシイミドイルクロリド（アリモクロモール）、その光学活性（＋）または（−）エナンチオマー、任意の比率のエナンチオマーの混合物、およびラセミ化合物から選択され、さらに、上記の化合物のいずれかと無機酸または有機酸とから形成される酸付加塩は、本開示の対象を構成する。Ｎ−［２−ヒドロキシ−３−（１−ピペリジニル）−プロポキシ］−ピリジン−１−オキシド−３−カルボキシイミドイルクロリドのすべての可能な幾何異性体形態は、本開示の範囲に属する。「Ｎ−［２−ヒドロキシ−３−（１−ピペリジニル）−プロポキシ］−ピリジン−１−オキシド−３−カルボキシイミドイルクロリドの立体異性体」という用語は、その化合物のすべての可能な光学的および幾何学的異性体を指す。
【０２８２】
所望により、Ｎ−［２−ヒドロキシ−３−（１−ピペリジニル）−プロポキシ］−ピリジン−１−オキシド−３−カルボキシイミドイルクロリドまたはその光学活性エナンチオマーのうちの１つを、既知の方法により、無機酸または有機酸を含む酸付加塩に変換できる。
【０２８３】
一実施形態では、Ｈｓｐ７０の小分子誘導物質は、Ｎ−［２−ヒドロキシ−３−（１−ピペリジニル）−プロポキシ］−ピリジン−１−オキシド−３−カルボキシイミドイルクロリドのラセミ体である。
【０２８４】
一実施形態では、Ｈｓｐ７０の小分子誘導物質は、Ｎ−［２−ヒドロキシ−３−（１−ピペリジニル）−プロポキシ］−ピリジン−１−オキシド−３−カルボキシイミドイルクロリドの光学活性立体異性体である。
【０２８５】
一実施形態では、Ｈｓｐ７０の小分子誘導物質は、Ｎ−［２−ヒドロキシ−３−（１−ピペリジニル）−プロポキシ］−ピリジン−１−オキシド−３−カルボキシイミドイルクロリドのエナンチオマーである。
【０２８６】
一実施形態では、Ｈｓｐ７０の小分子誘導物質は、（＋）−Ｒ−Ｎ−［２−ヒドロキシ−３−（１−ピペリジニル）−プロポキシ］−ピリジン−１−オキシド−３−カルボキシイミドイルクロリドおよび（−）−（Ｓ）−Ｎ−［２−ヒドロキシ−３−（１−ピペリジニル）−プロポキシ］−ピリジン−１−オキシド−３−カルボキシイミドイルクロリドからなる群から選択される。
【０２８７】
一実施形態では、Ｈｓｐ７０の小分子誘導物質は、Ｎ−［２−ヒドロキシ−３−（１−ピペリジニル）−プロポキシ］−ピリジン−１−オキシド−３−カルボキシイミドイルクロリドの酸付加塩である。
【０２８８】
一実施形態では、Ｈｓｐ７０の小分子誘導物質は、（Ｎ−［２−ヒドロキシ−３−（１−ピペリジニル）−プロポキシ］−ピリジン−１−オキシド−３−カルボキシイミドイルクロリドクエン酸塩（ＢＲＸ−３４５）、およびＮ−［２−ヒドロキシ−３−（１−ピペリジニル）−プロポキシ−ピリジン−１−オキシド−３−カルボキシイミドイルクロリドマレイン酸塩（ＢＲＸ−２２０）からなる群から選択される。
【０２８９】
一実施形態では、Ｈｓｐ７０少分子誘導物質は、（＋）−Ｒ−Ｎ−［２−ヒドロキシ−３−（１−ピペリジニル）−プロポキシ］−ピリジン−１−オキシド−３−カルボキシイミドイルクロリドクエン酸塩；（−）−Ｓ−Ｎ−［２−ヒドロキシ−３−（１−ピペリジニル）−プロポキシ］−ピリジン−１−オキシド−３−カルボキシイミドイルクロリドクエン酸塩；（＋）−Ｒ−Ｎ−［２−ヒドロキシ−３−（１−ピペリジニル）−プロポキシ］−ピリジン−１−オキシド−３−カルボキシイミドイルクロリドマレイン酸塩；および（−）−Ｓ−Ｎ−［２−ヒドロキシ−３−（１−ピペリジニル）−プロポキシ］−ピリジン−１−オキシド−３−カルボキシイミドイルクロリドマレイン酸塩からなる群から選択される。
ＢＧＰ−１５：
【０２９０】
一実施形態では、Ｈｓｐ７０の小分子誘導物質は、Ｎ−［２−ヒドロキシ−３−（１−ピペリジニル）プロポキシ］−３−ピリジンカルボキシイミドアミド、二塩酸塩（ＢＧＰ−１５）、その立体異性体およびそれらの酸付加塩である。
【０２９１】
一実施形態では、Ｈｓｐ７０の小分子誘導物質は、Ｎ−［２−ヒドロキシ−３−（１−ピペリジニル）プロポキシ］−３−ピリジンカルボキシイミドアミド、二塩酸塩（ＢＧＰ−１５）、その光学活性（＋）または（−）エナンチオマー、任意の比率のエナンチオマーの混合物、およびラセミ化合物から選択され、さらに、上記の化合物のいずれかと無機酸または有機酸から形成される酸付加塩は、本開示の対象を構成する。Ｎ−［２−ヒドロキシ−３−（１−ピペリジニル）プロポキシ］−３−ピリジンカルボキシイミドアミド、二塩酸塩のすべての可能な幾何異性体形態は、本開示の範囲に属する。「Ｎ−［２−ヒドロキシ−３−（１−ピペリジニル）プロポキシ］−３−ピリジンカルボキシイミドアミド、二塩酸塩の立体異性体」という用語は、化合物のすべての可能な光学的および幾何学的異性体を指す。
イロキサナジン：
【０２９２】
一実施形態では、Ｈｓｐ７０の少分子誘導物質は、５，６−ジヒドロ−５−（１−ピペリジニル）メチル−３−（３−ピリジル）−４Ｈ−１，２，４−オキサジアジン（イロキサナジン）、その立体異性体およびその酸付加塩から選択される。イロキサナジンは、例えば、国際公開第９７／１６４３９号および国際公開第００／３５９１４号に記載されている。
【０２９３】
一実施形態では、Ｈｓｐ７０の小分子誘導物質は、５，６−ジヒドロ−５−（１−ピペリジニル）メチル−３−（３−ピリジル）−４Ｈ−１，２，４−オキサジアジン（イロキサナジン）、その光学活性（＋）または（−）エナンチオマー、任意の比率のエナンチオマーの混合物、およびラセミ化合物から選択され、さらに、上記の化合物のいずれかと無機酸または有機酸から形成される酸付加塩は、本開示の対象を構成する。５，６−ジヒドロ−５−（１−ピペリジニル）メチル−３−（３−ピリジル）−４Ｈ−１，２，４−オキサジアジンのすべての可能な幾何異性体形態は、本開示の範囲に属する。用語「５，６−ジヒドロ−５−（１−ピペリジニル）メチル−３−（３−ピリジル）−４Ｈ−１，２，４−オキサジアジンの立体異性体」は、本化合物のすべての可能な光学的および幾何学的異性体を指す。
【０２９４】
所望の場合、５，６−ジヒドロ−５−（１−ピペリジニル）メチル−３−（３−ピリジル）−４Ｈ−１，２，４−オキサジアジンまた、その光学活性エナンチオマーの１つを、既知の方法により、無機酸または有機酸を用いて酸付加塩に変換できる。
【０２９５】
一実施形態では、Ｈｓｐ７０の少分子誘導物質は、５，６−ジヒドロ−５−（１−ピペリジニル）メチル−３−（３−ピリジル）−４Ｈ−１，２，４−オキサジアジンのラセミ体である。
【０２９６】
一実施形態では、Ｈｓｐ７０の少分子誘導物質は、５，６−ジヒドロ−５−（１−ピペリジニル）メチル−３−（３−ピリジル）−４Ｈ−１，２，４−オキサジアジンの光学活性立体異性体である。
【０２９７】
一実施形態では、Ｈｓｐ７０の小分子誘導物質は、５，６−ジヒドロ−５−（１−ピペリジニル）メチル−３−（３−ピリジル）−４Ｈ−１，２，４−オキサジアジンのエナンチオマーである。
【０２９８】
一実施形態では、Ｈｓｐ７０の小分子誘導物質は、（＋）−５，６−ジヒドロ−５−（１−ピペリジニル）メチル−３−（３−ピリジル）−４Ｈ−１，２，４−オキサジアジンおよび（−）−５，６−ジヒドロ−５−（１−ピペリジニル）メチル−３−（３−ピリジル）−４Ｈ−１，２，４−オキサジアジンからなる群から選択される。
【０２９９】
一実施形態では、Ｈｓｐ７０の小分子誘導物質は、５，６−ジヒドロ−５−（１−ピペリジニル）メチル−３−（３−ピリジル）−４Ｈ−１，２，４−オキサジアジンの酸付加塩である。
【０３００】
一実施形態では、Ｈｓｐ７０の小分子誘導物質は、５，６−ジヒドロ−５−（１−ピペリジニル）メチル−３−（３−ピリジル）−４Ｈ−１，２，４−オキサジアジンクエン酸塩および５，６−ジヒドロ−５−（１−ピペリジニル）メチル−３−（３−ピリジル）−４Ｈ−１，２，４−オキサジアジンマレイン酸塩からなる群から選択される。
【０３０１】
一実施形態では、Ｈｓｐ７０の小分子誘導物質は、（＋）−５，６−ジヒドロ−５−（１−ピペリジニル）メチル−３−（３−ピリジル）−４Ｈ−１，２，４−オキサジアジンクエン酸塩；（−）−５，６−ジヒドロ−５−（１−ピペリジニル）メチル−３−（３−ピリジル）−４Ｈ−１，２，４−オキサジアジンクエン酸塩；（＋）−５，６−ジヒドロ−５−（１−ピペリジニル）メチル−３−（３−ピリジル）−４Ｈ−１，２，４−オキサジアジンマレイン酸塩、および（−）−５，６−ジヒドロ−５−（１−ピペリジニル）メチル−３−（３−ピリジル）−４Ｈ−１，２，４−オキサジアジンマレイン酸塩からなる群から選択される。
ビモクロモール：
【０３０２】
一実施形態では、Ｈｓｐ７０の小分子誘導物質は、Ｎ−［２−ヒドロキシ−３−（１−ピペリジニル）−プロポキシ］−３−ピリジンカルボキシイミドイルクロリド（ビモクロモール）、その立体異性体およびその酸付加塩から選択される。ビモクロモールは、例えば、国際公開第１９９７／１６４３９にさらに記載されている。
【０３０３】
一実施形態では、Ｈｓｐ７０の小分子誘導物質は、Ｎ−［２−ヒドロキシ−３−（１−ピペリジニル）−プロポキシ］−３−ピリジンカルボキシイミドイルクロリド（ビモクロモール）、その光学活性（＋）または（−）エナンチオマー、任意の比率のエナンチオマーの混合物、およびラセミ化合物から選択され、さらに、上記の化合物のいずれかと無機酸または有機酸から形成される酸付加塩は、本開示の対象を構成する。Ｎ−［２−ヒドロキシ−３−（１−ピペリジニル）−プロポキシ］−３−ピリジンカルボキシイミドイルクロリドのすべての可能な幾何異性体形態は、本開示の範囲に属する。「Ｎ−［２−ヒドロキシ−３−（１−ピペリジニル）−プロポキシ］−３−ピリジンカルボキシイミドイルクロリドの立体異性体」という用語は、化合物のすべての可能な光学的および幾何学的異性体を指す。
【０３０４】
所望により、Ｎ−［２−ヒドロキシ−３−（１−ピペリジニル）−プロポキシ］−３−ピリジンカルボキシイミドイルクロリドまたはその光学活性エナンチオマーの１つを、既知の方法により、無機酸または有機酸を用いて酸付加塩に変換できる。
【０３０５】
一実施形態では、Ｈｓｐ７０の小分子誘導物質は、Ｎ−［２−ヒドロキシ−３−（１−ピペリジニル）−プロポキシ］−３−ピリジンカルボキシイミドイルクロリドのラセミ体である。
【０３０６】
一実施形態では、Ｈｓｐ７０の小分子誘導物質は、Ｎ−［２−ヒドロキシ−３−（１−ピペリジニル）−プロポキシ］−３−ピリジンカルボキシイミドイルクロリドの光学活性立体異性体である。
【０３０７】
一実施形態では、Ｈｓｐ７０の小分子誘導物質は、Ｎ−［２−ヒドロキシ−３−（１−ピペリジニル）−プロポキシ］−３−ピリジンカルボキシイミドイルクロリドのエナンチオマーである。
【０３０８】
一実施形態では、Ｈｓｐ７０の小分子誘導物質は、（＋）−Ｒ−Ｎ−［２−ヒドロキシ−３−（１−ピペリジニル）−プロポキシ］−３−ピリジンカルボキシイミドイルクロリドおよび（−）−（Ｓ）−Ｎ−［２−ヒドロキシ−３−（１−ピペリジニル）−プロポキシ］−３−ピリジンカルボキシイミドイルクロリドからなる群から選択される。
【０３０９】
一実施形態では、Ｈｓｐ７０の小分子誘導物質は、Ｎ−［２−ヒドロキシ−３−（１−ピペリジニル）−プロポキシ］−３−ピリジンカルボキシイミドイルクロリドの酸付加塩である。
【０３１０】
一実施形態では、Ｈｓｐ７０の小分子誘導物質は、Ｎ−［２−ヒドロキシ−３−（１−ピペリジニル）−プロポキシ］−３−ピリジンカルボキシイミドイルクロリドクエン酸塩、およびＮ−［２−ヒドロキシ−３−（１−ピペリジニル）−プロポキシ］−３−ピリジンカルボキシイミドイルクロリドマレイン酸塩からなる群から選択される。
【０３１１】
一実施形態では、Ｈｓｐ７０の小分子誘導物質は、（＋）−Ｒ−Ｎ−［２−ヒドロキシ−３−（１−ピペリジニル）−プロポキシ］−３−ピリジンカルボキシイミドイルクロリドクエン酸塩；（−）−Ｓ−Ｎ−［２−ヒドロキシ−３−（１−ピペリジニル）−プロポキシ］−３−ピリジンカルボキシイミドイルクロリドクエン酸塩；（＋）−Ｒ−Ｎ−［２−ヒドロキシ−３−（１−ピペリジニル）−プロポキシ］−３−ピリジンカルボキシイミドイルクロリドマレイン酸塩；および（−）−Ｓ−Ｎ−［２−ヒドロキシ−３−（１−ピペリジニル）−プロポキシ］−３−ピリジンカルボキシイミドイルクロリドマレイン酸塩からなる群から選択される。
【０３１２】
多数の化合物が、Ｈｓｐ７０を含む、ＨＳＰを誘導（または共誘導）することが示されている。一実施形態では、Ｈｓｐ７０の誘導物質は、以下からなる群から選択される：アルキルリゾリン脂質エデルホシン（ＥＴ−１８−ＯＣＨ３または１−オクタデシル−２−メチル−ｒａｃ−グリセロ−３−ホスホコリン）などの膜相互作用化合物；セレコキシブおよびコキシブなどのシクロオキシゲナーゼ１／２阻害剤を含む抗炎症薬；ＮＳＡＩＤ、例えば、アセチルサリチル酸、サリチル酸ナトリウムおよびインドメタシンなど；デキサメタゾン；プロスタグランジンＰＧＡ１、ＰＧｊ２および２−シクロペンテン−１−オン；ペルオキシダーゼ増殖因子活性化受容体−ガンマアゴニスト；ビンクリスチンおよびパクリタキセルなどのチューブリン相互作用抗癌剤；インスリン感作物質ピオグリタゾン；抗背品生物剤、例えばカルボプラチン、ドキソルビシン、フルダラビン、イホスファミドおよびシタラビンなど；ゲルダナマイシン、１７−ＡＡＧ、１７−ＤＭＡＧ、ラジシコール、ハービマイシン−Ａおよびアラキドン酸などのＨｓｐ９０阻害剤；プロテアソーム阻害剤、例えば、ＭＧ１３２、ラクタシスチン、ボルテゾミブ、カルフィルゾミブおよびオプロゾミブ；セリンプロテアーゼ阻害剤、例えば、ＤＣＩＣ、ＴＬＣＫおよびＴＰＣＫ；ヒストンデアセチラーゼ阻害剤（ＨＤＡＣｉ）、例えば、ＳＡＨＡ／ボリノスタット、ベリノスタット／ＰＸＤ１０１、ＬＢ−２０５、ＬＢＨ５８９（パノビノスタット）、ＦＫ−２２８、ＣＩ−９９４、トリコスタチンＡ（ＴＳＡ）およびＰＣＩ−３４０５１；抗潰瘍薬、例えば、ゲラニルゲラニルアセトン（ＧＧＡ）、レバミピド、カルベノキソロン、およびポラプレジンク（亜鉛Ｌ−カルノシン）など；重金属（亜鉛およびスズ）；コカイン；ニコチン；アルコール；アルファアドレナリンアゴニスト；シクロペンテノンプロスタノイド；Ｌ型Ｃａ＋＋チャネル遮断薬、例えば、Ｌ型Ｃａ＋＋チャネル遮断薬（リアノジン受容体も阻害する）、例えば、ラシジピン；リアノジン受容体アンタゴニスト、例えば、ＤＨＢＰ（１，１’−ジヘプチル−４，４’−ビピリジウム；ならびに漢方薬、例えば、ペオニフロリン、グリチルリチン、セラストロール、ジヒドロセラストロール、ジヒドロセラストロールジアセテートおよびクルクミン。
【０３１３】
一実施形態では、Ｈｓｐ７０の誘導物質は、プロテアソーム阻害剤である。一実施形態では、プロテアソーム阻害剤は、ボルテゾミブ、カルフィルゾミブ、オプロゾミブ、ＭＧ１３２およびラクタシスチンからなる群から選択される。
【０３１４】
一実施形態では、Ｈｓｐ７０の誘導物質は、ＨＤＡＣ阻害剤である。一実施形態では、ＨＤＡＣｉは、ＳＡＨＡ／ボリノスタット、ベリノスタット／ＰＸＤ１０１、ＬＢ−２０５、ＬＢＨ５８９（パノビノスタット）、ＦＫ−２２８、ＣＩ−９９４、トリコスタチンＡ（ＴＳＡ）およびＰＣＩ−３４０５１からなる群から選択される。
【０３１５】
一実施形態では、Ｈｓｐ７０の誘導物質は、膜流動化剤である。膜流動化剤による治療は、脂質療法と呼ばれることもある。一実施形態では、Ｈｓｐ７０の誘導物質は、ベンジルアルコール、ヘプタノール、ＡＬ７２１、ドコサヘキサエン酸、脂肪族アルコール、オレイルアルコール、ジメチルアミノエタノール、Ａ２Ｃ、ファルネソールのほか、リドカイン、ロピバカイン、ブピバカイン、およびメピバカインなどの麻酔剤、ならびに同業者に公知である他のものからなる群から選択される膜流動化剤である。
ＬＳＤの他の治療
【０３１６】
ＨｓｐまたはＨｓｐ誘導剤による上記の治療に加えて、ＬＳＤは、以下に記載の他の手段によって治療され得る。このような治療を、Ｈｓｐおよび／またはＨｓｐ誘導剤による治療と組み合わせてもよい。
【０３１７】
ＬＳＤの根本的な原因は、特定のリソソーム酵素が、脂質などの特定のリソソーム物質を効率的に異化できないことである。したがって、組換え酵素を患者に提供することによる酵素補充療法（ＥＲＴ）の使用は、ゴーシェ病およびファブリー病を含む、これらの疾患のサブセットに用いられている。ＥＲＴは、組換え酵素が産生されている特定の種類の疾患に対してのみ有効である。
【０３１８】
一実施形態では、ｅ）リソソーム蓄積症を治療するための治療法をリソソーム蓄積症と診断された患者に施すステップは、有効量の酵素補充療法（ＥＲＴ）を施すことを含む。
【０３１９】
一実施形態では、ｅ）リソソーム蓄積症を治療するための治療法をリソソーム蓄積症と診断された患者に施すステップは、基質減少療法（ＳＲＴ）を施すことを含む。
【０３２０】
一実施形態では、ｅ）リソソーム蓄積症を治療するための治療法をリソソーム蓄積症と診断された患者に施すステップは、鎮痛剤；コルチコステロイド；移植、例えば、骨髄移植、臍帯血移植または幹細胞移植など；ならびに対症療法および支持療法、例えば理学療法などからなる群から選択される治療法を施すことを含む。
【０３２１】
一実施形態では、本方法でのＬＳＤは、ニーマンピック病であり、ニーマンピック病を治療するための治療法は、アリモクロモールなどのＨｓｐ７０など、熱ショックタンパク質の小分子誘導物質、アンブロキソールおよびミグルスタットからなる群から選択される。
【０３２２】
一実施形態では、本方法でのＬＳＤはゴーシェ病であり、ゴーシェ病を治療するための治療法は、酵素補充療法、例えば、静脈内組換えグルコシルセラミダーゼおよびＣｅｒｅｚｙｍｅ（登録商標）（注射用イミグルセラーゼ）；ミグルスタット；アンブロキソール；骨髄移植；手術；輸血；関節置換術；抗生物質；抗てんかん薬；ビスフォスフォネートおよび肝移植からなる群から選択される。
【０３２３】
別の実施形態では、本方法でのＬＳＤは、ファブリー病であり、ファブリー病を治療するための治療法は、ファブラザイム（登録商標）（アガルシダーゼベータ）およびリプレガル（アガルシダーゼアルファ）を含む、酵素補充療法からなる群から選択される。
配列
配列番号１：ホモサピエンス熱ショック７０ｋＤａタンパク質１Ａ（ＨＳＰＡ１Ａ＿ＨＵＭＡＮ）のタンパク質配列（ＮＭ＿００５３４５．５／ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ  −Ｐ０ＤＭＶ８）：
ＭＡＫＡＡＡＩＧＩＤＬＧＴＴＹＳＣＶＧＶＦＱＨＧＫＶＥＩＩＡＮＤＱＧＮＲＴＴＰＳＹＶＡＦＴＤＴＥＲＬＩＧＤＡＡＫＮＱＶＡＬＮＰＱＮＴＶＦＤＡＫＲＬＩＧＲＫＦＧＤＰＶＶＱＳＤＭＫＨＷＰＦＱＶＩＮＤＧＤＫＰＫＶＱＶＳＹＫＧＥＴＫＡＦＹＰＥＥＩＳＳＭＶＬＴＫＭＫＥＩＡＥＡＹＬＧＹＰＶＴＮＡＶＩＴＶＰＡＹＦＮＤＳＱＲＱＡＴＫＤＡＧＶＩＡＧＬＮＶＬＲＩＩＮＥＰＴＡＡＡＩＡＹＧＬＤＲＴＧＫＧＥＲＮＶＬＩＦＤＬＧＧＧＴＦＤＶＳＩＬＴＩＤＤＧＩＦＥＶＫＡＴＡＧＤＴＨＬＧＧＥＤＦＤＮＲＬＶＮＨＦＶＥＥＦＫＲＫＨＫＫＤＩＳＱＮＫＲＡＶＲＲＬＲＴＡＣＥＲＡＫＲＴＬＳＳＳＴＱＡＳＬＥＩＤＳＬＦＥＧＩＤＦＹＴＳＩＴＲＡＲＦＥＥＬＣＳＤＬＦＲＳＴＬＥＰＶＥＫＡＬＲＤＡＫＬＤＫＡＱＩＨＤＬＶＬＶＧＧＳＴＲＩＰＫＶＱＫＬＬＱＤＦＦＮＧＲＤＬＮＫＳＩＮＰＤＥＡＶＡＹＧＡＡＶＱＡＡＩＬＭＧＤＫＳＥＮＶＱＤＬＬＬＬＤＶＡＰＬＳＬＧＬＥＴＡＧＧＶＭＴＡＬＩＫＲＮＳＴＩＰＴＫＱＴＱＩＦＴＴＹＳＤＮＱＰＧＶＬＩＱＶＹＥＧＥＲＡＭＴＫＤＮＮＬＬＧＲＦＥＬＳＧＩＰＰＡＰＲＧＶＰＱＩＥＶＴＦＤＩＤＡＮＧＩＬＮＶＴＡＴＤＫＳＴＧＫＡＮＫＩＴＩＴＮＤＫＧＲＬＳＫＥＥＩＥＲＭＶＱＥＡＥＫＹＫＡＥＤＥＶＱＲＥＲＶＳＡＫＮＡＬＥＳＹＡＦＮＭＫＳＡＶＥＤＥＧＬＫＧＫＩＳＥＡＤＫＫＫＶＬＤＫＣＱＥＶＩＳＷＬＤＡＮＴＬＡＥＫＤＥＦＥＨＫＲＫＥＬＥＱＶＣＮＰＩＩＳＧＬＹＱＧＡＧＧＰＧＰＧＧＦＧＡＱＧＰＫＧＧＳＧＳＧＰＴＩＥＥＶＤ
配列番号２：配列番号１の開始剤メチオニン（１位のＭ）を除去して、６４０アミノ酸長の配列を得る（２〜６４１位）：
ＡＫＡＡＡＩＧＩＤＬＧＴＴＹＳＣＶＧＶＦＱＨＧＫＶＥＩＩＡＮＤＱＧＮＲＴＴＰＳＹＶＡＦＴＤＴＥＲＬＩＧＤＡＡＫＮＱＶＡＬＮＰＱＮＴＶＦＤＡＫＲＬＩＧＲＫＦＧＤＰＶＶＱＳＤＭＫＨＷＰＦＱＶＩＮＤＧＤＫＰＫＶＱＶＳＹＫＧＥＴＫＡＦＹＰＥＥＩＳＳＭＶＬＴＫＭＫＥＩＡＥＡＹＬＧＹＰＶＴＮＡＶＩＴＶＰＡＹＦＮＤＳＱＲＱＡＴＫＤＡＧＶＩＡＧＬＮＶＬＲＩＩＮＥＰＴＡＡＡＩＡＹＧＬＤＲＴＧＫＧＥＲＮＶＬＩＦＤＬＧＧＧＴＦＤＶＳＩＬＴＩＤＤＧＩＦＥＶＫＡＴＡＧＤＴＨＬＧＧＥＤＦＤＮＲＬＶＮＨＦＶＥＥＦＫＲＫＨＫＫＤＩＳＱＮＫＲＡＶＲＲＬＲＴＡＣＥＲＡＫＲＴＬＳＳＳＴＱＡＳＬＥＩＤＳＬＦＥＧＩＤＦＹＴＳＩＴＲＡＲＦＥＥＬＣＳＤＬＦＲＳＴＬＥＰＶＥＫＡＬＲＤＡＫＬＤＫＡＱＩＨＤＬＶＬＶＧＧＳＴＲＩＰＫＶＱＫＬＬＱＤＦＦＮＧＲＤＬＮＫＳＩＮＰＤＥＡＶＡＹＧＡＡＶＱＡＡＩＬＭＧＤＫＳＥＮＶＱＤＬＬＬＬＤＶＡＰＬＳＬＧＬＥＴＡＧＧＶＭＴＡＬＩＫＲＮＳＴＩＰＴＫＱＴＱＩＦＴＴＹＳＤＮＱＰＧＶＬＩＱＶＹＥＧＥＲＡＭＴＫＤＮＮＬＬＧＲＦＥＬＳＧＩＰＰＡＰＲＧＶＰＱＩＥＶＴＦＤＩＤＡＮＧＩＬＮＶＴＡＴＤＫＳＴＧＫＡＮＫＩＴＩＴＮＤＫＧＲＬＳＫＥＥＩＥＲＭＶＱＥＡＥＫＹＫＡＥＤＥＶＱＲＥＲＶＳＡＫＮＡＬＥＳＹＡＦＮＭＫＳＡＶＥＤＥＧＬＫＧＫＩＳＥＡＤＫＫＫＶＬＤＫＣＱＥＶＩＳＷＬＤＡＮＴＬＡＥＫＤＥＦＥＨＫＲＫＥＬＥＱＶＣＮＰＩＩＳＧＬＹＱＧＡＧＧＰＧＰＧＧＦＧＡＱＧＰＫＧＧＳＧＳＧＰＴＩＥＥＶＤ
配列番号３：ホモサピエンス熱ショック７０ｋＤａタンパク質１Ａ（ＨＳＰＡ１Ａ）の核酸（ＤＮＡ）配列（ＮＭ＿００５３４５．５）：
１  ａｔａａａａｇｃｃｃ  ａｇｇｇｇｃａａｇｃ  ｇｇｔｃｃｇｇａｔａ  ａｃｇｇｃｔａｇｃｃ  ｔｇａｇｇａｇｃｔｇ  ｃｔｇｃｇａｃａｇｔ
６１  ｃｃａｃｔａｃｃｔｔ  ｔｔｔｃｇａｇａｇｔ  ｇａｃｔｃｃｃｇｔｔ  ｇｔｃｃｃａａｇｇｃ  ｔｔｃｃｃａｇａｇｃ  ｇａａｃｃｔｇｔｇｃ
１２１  ｇｇｃｔｇｃａｇｇｃ  ａｃｃｇｇｃｇｃｇｔ  ｃｇａｇｔｔｔｃｃｇ  ｇｃｇｔｃｃｇｇａａ  ｇｇａｃｃｇａｇｃｔ  ｃｔｔｃｔｃｇｃｇｇ
１８１  ａｔｃｃａｇｔｇｔｔ  ｃｃｇｔｔｔｃｃａｇ  ｃｃｃｃｃａａｔｃｔ  ｃａｇａｇｃｇｇａｇ  ｃｃｇａｃａｇａｇａ  ｇｃａｇｇｇａａｃｃ
２４１  ｇｇｃａｔｇｇｃｃａ  ａａｇｃｃｇｃｇｇｃ  ｇａｔｃｇｇｃａｔｃ  ｇａｃｃｔｇｇｇｃａ  ｃｃａｃｃｔａｃｔｃ  ｃｔｇｃｇｔｇｇｇｇ
３０１  ｇｔｇｔｔｃｃａａｃ  ａｃｇｇｃａａｇｇｔ  ｇｇａｇａｔｃａｔｃ  ｇｃｃａａｃｇａｃｃ  ａｇｇｇｃａａｃｃｇ  ｃａｃｃａｃｃｃｃｃ
３６１  ａｇｃｔａｃｇｔｇｇ  ｃｃｔｔｃａｃｇｇａ  ｃａｃｃｇａｇｃｇｇ  ｃｔｃａｔｃｇｇｇｇ  ａｔｇｃｇｇｃｃａａ  ｇａａｃｃａｇｇｔｇ
４２１  ｇｃｇｃｔｇａａｃｃ  ｃｇｃａｇａａｃａｃ  ｃｇｔｇｔｔｔｇａｃ  ｇｃｇａａｇｃｇｇｃ  ｔｇａｔｔｇｇｃｃｇ  ｃａａｇｔｔｃｇｇｃ
４８１  ｇａｃｃｃｇｇｔｇｇ  ｔｇｃａｇｔｃｇｇａ  ｃａｔｇａａｇｃａｃ  ｔｇｇｃｃｔｔｔｃｃ  ａｇｇｔｇａｔｃａａ  ｃｇａｃｇｇａｇａｃ
５４１  ａａｇｃｃｃａａｇｇ  ｔｇｃａｇｇｔｇａｇ  ｃｔａｃａａｇｇｇｇ  ｇａｇａｃｃａａｇｇ  ｃａｔｔｃｔａｃｃｃ  ｃｇａｇｇａｇａｔｃ
６０１  ｔｃｇｔｃｃａｔｇｇ  ｔｇｃｔｇａｃｃａａ  ｇａｔｇａａｇｇａｇ  ａｔｃｇｃｃｇａｇｇ  ｃｇｔａｃｃｔｇｇｇ  ｃｔａｃｃｃｇｇｔｇ
６６１  ａｃｃａａｃｇｃｇｇ  ｔｇａｔｃａｃｃｇｔ  ｇｃｃｇｇｃｃｔａｃ  ｔｔｃａａｃｇａｃｔ  ｃｇｃａｇｃｇｃｃａ  ｇｇｃｃａｃｃａａｇ
７２１  ｇａｔｇｃｇｇｇｔｇ  ｔｇａｔｃｇｃｇｇｇ  ｇｃｔｃａａｃｇｔｇ  ｃｔｇｃｇｇａｔｃａ  ｔｃａａｃｇａｇｃｃ  ｃａｃｇｇｃｃｇｃｃ
７８１  ｇｃｃａｔｃｇｃｃｔ  ａｃｇｇｃｃｔｇｇａ  ｃａｇａａｃｇｇｇｃ  ａａｇｇｇｇｇａｇｃ  ｇｃａａｃｇｔｇｃｔ  ｃａｔｃｔｔｔｇａｃ
８４１  ｃｔｇｇｇｃｇｇｇｇ  ｇｃａｃｃｔｔｃｇａ  ｃｇｔｇｔｃｃａｔｃ  ｃｔｇａｃｇａｔｃｇ  ａｃｇａｃｇｇｃａｔ  ｃｔｔｃｇａｇｇｔｇ
９０１  ａａｇｇｃｃａｃｇｇ  ｃｃｇｇｇｇａｃａｃ  ｃｃａｃｃｔｇｇｇｔ  ｇｇｇｇａｇｇａｃｔ  ｔｔｇａｃａａｃａｇ  ｇｃｔｇｇｔｇａａｃ
９６１  ｃａｃｔｔｃｇｔｇｇ  ａｇｇａｇｔｔｃａａ  ｇａｇａａａａｃａｃ  ａａｇａａｇｇａｃａ  ｔｃａｇｃｃａｇａａ  ｃａａｇｃｇａｇｃｃ
１０２１  ｇｔｇａｇｇｃｇｇｃ  ｔｇｃｇｃａｃｃｇｃ  ｃｔｇｃｇａｇａｇｇ  ｇｃｃａａｇａｇｇａ  ｃｃｃｔｇｔｃｇｔｃ  ｃａｇｃａｃｃｃａｇ
１０８１  ｇｃｃａｇｃｃｔｇｇ  ａｇａｔｃｇａｃｔｃ  ｃｃｔｇｔｔｔｇａｇ  ｇｇｃａｔｃｇａｃｔ  ｔｃｔａｃａｃｇｔｃ  ｃａｔｃａｃｃａｇｇ
１１４１  ｇｃｇａｇｇｔｔｃｇ  ａｇｇａｇｃｔｇｔｇ  ｃｔｃｃｇａｃｃｔｇ  ｔｔｃｃｇａａｇｃａ  ｃｃｃｔｇｇａｇｃｃ  ｃｇｔｇｇａｇａａｇ
１２０１  ｇｃｔｃｔｇｃｇｃｇ  ａｃｇｃｃａａｇｃｔ  ｇｇａｃａａｇｇｃｃ  ｃａｇａｔｔｃａｃｇ  ａｃｃｔｇｇｔｃｃｔ  ｇｇｔｃｇｇｇｇｇｃ
１２６１  ｔｃｃａｃｃｃｇｃａ  ｔｃｃｃｃａａｇｇｔ  ｇｃａｇａａｇｃｔｇ  ｃｔｇｃａｇｇａｃｔ  ｔｃｔｔｃａａｃｇｇ  ｇｃｇｃｇａｃｃｔｇ
１３２１  ａａｃａａｇａｇｃａ  ｔｃａａｃｃｃｃｇａ  ｃｇａｇｇｃｔｇｔｇ  ｇｃｃｔａｃｇｇｇｇ  ｃｇｇｃｇｇｔｇｃａ  ｇｇｃｇｇｃｃａｔｃ
１３８１  ｃｔｇａｔｇｇｇｇｇ  ａｃａａｇｔｃｃｇａ  ｇａａｃｇｔｇｃａｇ  ｇａｃｃｔｇｃｔｇｃ  ｔｇｃｔｇｇａｃｇｔ  ｇｇｃｔｃｃｃｃｔｇ
１４４１  ｔｃｇｃｔｇｇｇｇｃ  ｔｇｇａｇａｃｇｇｃ  ｃｇｇａｇｇｃｇｔｇ  ａｔｇａｃｔｇｃｃｃ  ｔｇａｔｃａａｇｃｇ  ｃａａｃｔｃｃａｃｃ
１５０１  ａｔｃｃｃｃａｃｃａ  ａｇｃａｇａｃｇｃａ  ｇａｔｃｔｔｃａｃｃ  ａｃｃｔａｃｔｃｃｇ  ａｃａａｃｃａａｃｃ  ｃｇｇｇｇｔｇｃｔｇ
１５６１  ａｔｃｃａｇｇｔｇｔ  ａｃｇａｇｇｇｃｇａ  ｇａｇｇｇｃｃａｔｇ  ａｃｇａａａｇａｃａ  ａｃａａｔｃｔｇｔｔ  ｇｇｇｇｃｇｃｔｔｃ
１６２１  ｇａｇｃｔｇａｇｃｇ  ｇｃａｔｃｃｃｔｃｃ  ｇｇｃｃｃｃｃａｇｇ  ｇｇｃｇｔｇｃｃｃｃ  ａｇａｔｃｇａｇｇｔ  ｇａｃｃｔｔｃｇａｃ
１６８１  ａｔｃｇａｔｇｃｃａ  ａｃｇｇｃａｔｃｃｔ  ｇａａｃｇｔｃａｃｇ  ｇｃｃａｃｇｇａｃａ  ａｇａｇｃａｃｃｇｇ  ｃａａｇｇｃｃａａｃ
１７４１  ａａｇａｔｃａｃｃａ  ｔｃａｃｃａａｃｇａ  ｃａａｇｇｇｃｃｇｃ  ｃｔｇａｇｃａａｇｇ  ａｇｇａｇａｔｃｇａ  ｇｃｇｃａｔｇｇｔｇ
１８０１  ｃａｇｇａｇｇｃｇｇ  ａｇａａｇｔａｃａａ  ａｇｃｇｇａｇｇａｃ  ｇａｇｇｔｇｃａｇｃ  ｇｃｇａｇａｇｇｇｔ  ｇｔｃａｇｃｃａａｇ
１８６１  ａａｃｇｃｃｃｔｇｇ  ａｇｔｃｃｔａｃｇｃ  ｃｔｔｃａａｃａｔｇ  ａａｇａｇｃｇｃｃｇ  ｔｇｇａｇｇａｔｇａ  ｇｇｇｇｃｔｃａａｇ
１９２１  ｇｇｃａａｇａｔｃａ  ｇｃｇａｇｇｃｇｇａ  ｃａａｇａａｇａａｇ  ｇｔｇｃｔｇｇａｃａ  ａｇｔｇｔｃａａｇａ  ｇｇｔｃａｔｃｔｃｇ
１９８１  ｔｇｇｃｔｇｇａｃｇ  ｃｃａａｃａｃｃｔｔ  ｇｇｃｃｇａｇａａｇ  ｇａｃｇａｇｔｔｔｇ  ａｇｃａｃａａｇａｇ  ｇａａｇｇａｇｃｔｇ
２０４１  ｇａｇｃａｇｇｔｇｔ  ｇｔａａｃｃｃｃａｔ  ｃａｔｃａｇｃｇｇａ  ｃｔｇｔａｃｃａｇｇ  ｇｔｇｃｃｇｇｔｇｇ  ｔｃｃｃｇｇｇｃｃｔ
２１０１  ｇｇｇｇｇｃｔｔｃｇ  ｇｇｇｃｔｃａｇｇｇ  ｔｃｃｃａａｇｇｇａ  ｇｇｇｔｃｔｇｇｇｔ  ｃａｇｇｃｃｃｃａｃ  ｃａｔｔｇａｇｇａｇ
２１６１  ｇｔａｇａｔｔａｇｇ  ｇｇｃｃｔｔｔｃｃａ  ａｇａｔｔｇｃｔｇｔ  ｔｔｔｔｇｔｔｔｔｇ  ｇａｇｃｔｔｃａａｇ  ａｃｔｔｔｇｃａｔｔ
２２２１  ｔｃｃｔａｇｔａｔｔ  ｔｃｔｇｔｔｔｇｔｃ  ａｇｔｔｃｔｃａａｔ  ｔｔｃｃｔｇｔｇｔｔ  ｔｇｃａａｔｇｔｔｇ  ａａａｔｔｔｔｔｔｇ
２２８１  ｇｔｇａａｇｔａｃｔ  ｇａａｃｔｔｇｃｔｔ  ｔｔｔｔｔｃｃｇｇｔ  ｔｔｃｔａｃａｔｇｃ  ａｇａｇａｔｇａａｔ  ｔｔａｔａｃｔｇｃｃ
２３４１  ａｔｃｔｔａｃｇａｃ  ｔａｔｔｔｃｔｔｃｔ  ｔｔｔｔａａｔａｃａ  ｃｔｔａａｃｔｃａｇ  ｇｃｃａｔｔｔｔｔｔ  ａａｇｔｔｇｇｔｔａ
２４０１  ｃｔｔｃａａａｇｔａ  ａａｔａａａｃｔｔｔ  ａａａａｔｔｃａａａ  ａａａａａａａａａａ  ａａａａａ
配列番号４：ホモサピエンス熱ショック７０ｋＤａタンパク質１Ｂ（ＨＳＰＡ１Ｂ＿ＨＵＭＡＮ）のタンパク質配列（ＮＭ＿００５３４６．４／ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ−Ｐ０ＤＭＶ９）：
ＭＡＫＡＡＡＩＧＩＤＬＧＴＴＹＳＣＶＧＶＦＱＨＧＫＶＥＩＩＡＮＤＱＧＮＲＴＴＰＳＹＶＡＦＴＤＴＥＲＬＩＧＤＡＡＫＮＱＶＡＬＮＰＱＮＴＶＦＤＡＫＲＬＩＧＲＫＦＧＤＰＶＶＱＳＤＭＫＨＷＰＦＱＶＩＮＤＧＤＫＰＫＶＱＶＳＹＫＧＥＴＫＡＦＹＰＥＥＩＳＳＭＶＬＴＫＭＫＥＩＡＥＡＹＬＧＹＰＶＴＮＡＶＩＴＶＰＡＹＦＮＤＳＱＲＱＡＴＫＤＡＧＶＩＡＧＬＮＶＬＲＩＩＮＥＰＴＡＡＡＩＡＹＧＬＤＲＴＧＫＧＥＲＮＶＬＩＦＤＬＧＧＧＴＦＤＶＳＩＬＴＩＤＤＧＩＦＥＶＫＡＴＡＧＤＴＨＬＧＧＥＤＦＤＮＲＬＶＮＨＦＶＥＥＦＫＲＫＨＫＫＤＩＳＱＮＫＲＡＶＲＲＬＲＴＡＣＥＲＡＫＲＴＬＳＳＳＴＱＡＳＬＥＩＤＳＬＦＥＧＩＤＦＹＴＳＩＴＲＡＲＦＥＥＬＣＳＤＬＦＲＳＴＬＥＰＶＥＫＡＬＲＤＡＫＬＤＫＡＱＩＨＤＬＶＬＶＧＧＳＴＲＩＰＫＶＱＫＬＬＱＤＦＦＮＧＲＤＬＮＫＳＩＮＰＤＥＡＶＡＹＧＡＡＶＱＡＡＩＬＭＧＤＫＳＥＮＶＱＤＬＬＬＬＤＶＡＰＬＳＬＧＬＥＴＡＧＧＶＭＴＡＬＩＫＲＮＳＴＩＰＴＫＱＴＱＩＦＴＴＹＳＤＮＱＰＧＶＬＩＱＶＹＥＧＥＲＡＭＴＫＤＮＮＬＬＧＲＦＥＬＳＧＩＰＰＡＰＲＧＶＰＱＩＥＶＴＦＤＩＤＡＮＧＩＬＮＶＴＡＴＤＫＳＴＧＫＡＮＫＩＴＩＴＮＤＫＧＲＬＳＫＥＥＩＥＲＭＶＱＥＡＥＫＹＫＡＥＤＥＶＱＲＥＲＶＳＡＫＮＡＬＥＳＹＡＦＮＭＫＳＡＶＥＤＥＧＬＫＧＫＩＳＥＡＤＫＫＫＶＬＤＫＣＱＥＶＩＳＷＬＤＡＮＴＬＡＥＫＤＥＦＥＨＫＲＫＥＬＥＱＶＣＮＰＩＩＳＧＬＹＱＧＡＧＧＰＧＰＧＧＦＧＡＱＧＰＫＧＧＳＧＳＧＰＴＩＥＥＶＤ
配列番号５：配列番号４の開始メチオニン（１位のＭ）を除去して、６４０アミノ酸長の配列（２〜６４１位）を得る：
ＡＫＡＡＡＩＧＩＤＬＧＴＴＹＳＣＶＧＶＦＱＨＧＫＶＥＩＩＡＮＤＱＧＮＲＴＴＰＳＹＶＡＦＴＤＴＥＲＬＩＧＤＡＡＫＮＱＶＡＬＮＰＱＮＴＶＦＤＡＫＲＬＩＧＲＫＦＧＤＰＶＶＱＳＤＭＫＨＷＰＦＱＶＩＮＤＧＤＫＰＫＶＱＶＳＹＫＧＥＴＫＡＦＹＰＥＥＩＳＳＭＶＬＴＫＭＫＥＩＡＥＡＹＬＧＹＰＶＴＮＡＶＩＴＶＰＡＹＦＮＤＳＱＲＱＡＴＫＤＡＧＶＩＡＧＬＮＶＬＲＩＩＮＥＰＴＡＡＡＩＡＹＧＬＤＲＴＧＫＧＥＲＮＶＬＩＦＤＬＧＧＧＴＦＤＶＳＩＬＴＩＤＤＧＩＦＥＶＫＡＴＡＧＤＴＨＬＧＧＥＤＦＤＮＲＬＶＮＨＦＶＥＥＦＫＲＫＨＫＫＤＩＳＱＮＫＲＡＶＲＲＬＲＴＡＣＥＲＡＫＲＴＬＳＳＳＴＱＡＳＬＥＩＤＳＬＦＥＧＩＤＦＹＴＳＩＴＲＡＲＦＥＥＬＣＳＤＬＦＲＳＴＬＥＰＶＥＫＡＬＲＤＡＫＬＤＫＡＱＩＨＤＬＶＬＶＧＧＳＴＲＩＰＫＶＱＫＬＬＱＤＦＦＮＧＲＤＬＮＫＳＩＮＰＤＥＡＶＡＹＧＡＡＶＱＡＡＩＬＭＧＤＫＳＥＮＶＱＤＬＬＬＬＤＶＡＰＬＳＬＧＬＥＴＡＧＧＶＭＴＡＬＩＫＲＮＳＴＩＰＴＫＱＴＱＩＦＴＴＹＳＤＮＱＰＧＶＬＩＱＶＹＥＧＥＲＡＭＴＫＤＮＮＬＬＧＲＦＥＬＳＧＩＰＰＡＰＲＧＶＰＱＩＥＶＴＦＤＩＤＡＮＧＩＬＮＶＴＡＴＤＫＳＴＧＫＡＮＫＩＴＩＴＮＤＫＧＲＬＳＫＥＥＩＥＲＭＶＱＥＡＥＫＹＫＡＥＤＥＶＱＲＥＲＶＳＡＫＮＡＬＥＳＹＡＦＮＭＫＳＡＶＥＤＥＧＬＫＧＫＩＳＥＡＤＫＫＫＶＬＤＫＣＱＥＶＩＳＷＬＤＡＮＴＬＡＥＫＤＥＦＥＨＫＲＫＥＬＥＱＶＣＮＰＩＩＳＧＬＹＱＧＡＧＧＰＧＰＧＧＦＧＡＱＧＰＫＧＧＳＧＳＧＰＴＩＥＥＶＤ
配列番号６：ホモサピエンス熱ショック７０ｋＤａタンパク質１Ｂ（ＨＳＰＡ１Ｂ）（ＮＭ＿００５３４６．４）の核酸（ＤＮＡ）配列：
１  ｇｇａａａａｃｇｇｃ  ｃａｇｃｃｔｇａｇｇ  ａｇｃｔｇｃｔｇｃｇ  ａｇｇｇｔｃｃｇｃｔ  ｔｃｇｔｃｔｔｔｃｇ  ａｇａｇｔｇａｃｔｃ
６１  ｃｃｇｃｇｇｔｃｃｃ  ａａｇｇｃｔｔｔｃｃ  ａｇａｇｃｇａａｃｃ  ｔｇｔｇｃｇｇｃｔｇ  ｃａｇｇｃａｃｃｇｇ  ｃｇｔｇｔｔｇａｇｔ
１２１  ｔｔｃｃｇｇｃｇｔｔ  ｃｃｇａａｇｇａｃｔ  ｇａｇｃｔｃｔｔｇｔ  ｃｇｃｇｇａｔｃｃｃ  ｇｔｃｃｇｃｃｇｔｔ  ｔｃｃａｇｃｃｃｃｃ
１８１  ａｇｔｃｔｃａｇａｇ  ｃｇｇａｇｃｃｃａｃ  ａｇａｇｃａｇｇｇｃ  ａｃｃｇｇｃａｔｇｇ  ｃｃａａａｇｃｃｇｃ  ｇｇｃｇａｔｃｇｇｃ
２４１  ａｔｃｇａｃｃｔｇｇ  ｇｃａｃｃａｃｃｔａ  ｃｔｃｃｔｇｃｇｔｇ  ｇｇｇｇｔｇｔｔｃｃ  ａａｃａｃｇｇｃａａ  ｇｇｔｇｇａｇａｔｃ
３０１  ａｔｃｇｃｃａａｃｇ  ａｃｃａｇｇｇｃａａ  ｃｃｇｃａｃｃａｃｃ  ｃｃｃａｇｃｔａｃｇ  ｔｇｇｃｃｔｔｃａｃ  ｇｇａｃａｃｃｇａｇ
３６１  ｃｇｇｃｔｃａｔｃｇ  ｇｇｇａｔｇｃｇｇｃ  ｃａａｇａａｃｃａｇ  ｇｔｇｇｃｇｃｔｇａ  ａｃｃｃｇｃａｇａａ  ｃａｃｃｇｔｇｔｔｔ
４２１  ｇａｃｇｃｇａａｇｃ  ｇｇｃｔｇａｔｃｇｇ  ｃｃｇｃａａｇｔｔｃ  ｇｇｃｇａｃｃｃｇｇ  ｔｇｇｔｇｃａｇｔｃ  ｇｇａｃａｔｇａａｇ
４８１  ｃａｃｔｇｇｃｃｔｔ  ｔｃｃａｇｇｔｇａｔ  ｃａａｃｇａｃｇｇａ  ｇａｃａａｇｃｃｃａ  ａｇｇｔｇｃａｇｇｔ  ｇａｇｃｔａｃａａｇ
５４１  ｇｇｇｇａｇａｃｃａ  ａｇｇｃａｔｔｃｔａ  ｃｃｃｃｇａｇｇａｇ  ａｔｃｔｃｇｔｃｃａ  ｔｇｇｔｇｃｔｇａｃ  ｃａａｇａｔｇａａｇ
６０１  ｇａｇａｔｃｇｃｃｇ  ａｇｇｃｇｔａｃｃｔ  ｇｇｇｃｔａｃｃｃｇ  ｇｔｇａｃｃａａｃｇ  ｃｇｇｔｇａｔｃａｃ  ｃｇｔｇｃｃｇｇｃｃ
６６１  ｔａｃｔｔｃａａｃｇ  ａｃｔｃｇｃａｇｃｇ  ｃｃａｇｇｃｃａｃｃ  ａａｇｇａｔｇｃｇｇ  ｇｔｇｔｇａｔｃｇｃ  ｇｇｇｇｃｔｃａａｃ
７２１  ｇｔｇｃｔｇｃｇｇａ  ｔｃａｔｃａａｃｇａ  ｇｃｃｃａｃｇｇｃｃ  ｇｃｃｇｃｃａｔｃｇ  ｃｃｔａｃｇｇｃｃｔ  ｇｇａｃａｇａａｃｇ
７８１  ｇｇｃａａｇｇｇｇｇ  ａｇｃｇｃａａｃｇｔ  ｇｃｔｃａｔｃｔｔｔ  ｇａｃｃｔｇｇｇｃｇ  ｇｇｇｇｃａｃｃｔｔ  ｃｇａｃｇｔｇｔｃｃ
８４１  ａｔｃｃｔｇａｃｇａ  ｔｃｇａｃｇａｃｇｇ  ｃａｔｃｔｔｃｇａｇ  ｇｔｇａａｇｇｃｃａ  ｃｇｇｃｃｇｇｇｇａ  ｃａｃｃｃａｃｃｔｇ
９０１  ｇｇｔｇｇｇｇａｇｇ  ａｃｔｔｔｇａｃａａ  ｃａｇｇｃｔｇｇｔｇ  ａａｃｃａｃｔｔｃｇ  ｔｇｇａｇｇａｇｔｔ  ｃａａｇａｇａａａａ
９６１  ｃａｃａａｇａａｇｇ  ａｃａｔｃａｇｃｃａ  ｇａａｃａａｇｃｇａ  ｇｃｃｇｔｇａｇｇｃ  ｇｇｃｔｇｃｇｃａｃ  ｃｇｃｃｔｇｃｇａｇ
１０２１  ａｇｇｇｃｃａａｇａ  ｇｇａｃｃｃｔｇｔｃ  ｇｔｃｃａｇｃａｃｃ  ｃａｇｇｃｃａｇｃｃ  ｔｇｇａｇａｔｃｇａ  ｃｔｃｃｃｔｇｔｔｔ
１０８１  ｇａｇｇｇｃａｔｃｇ  ａｃｔｔｃｔａｃａｃ  ｇｔｃｃａｔｃａｃｃ  ａｇｇｇｃｇａｇｇｔ  ｔｃｇａｇｇａｇｃｔ  ｇｔｇｃｔｃｃｇａｃ
１１４１  ｃｔｇｔｔｃｃｇａａ  ｇｃａｃｃｃｔｇｇａ  ｇｃｃｃｇｔｇｇａｇ  ａａｇｇｃｔｃｔｇｃ  ｇｃｇａｃｇｃｃａａ  ｇｃｔｇｇａｃａａｇ
１２０１  ｇｃｃｃａｇａｔｔｃ  ａｃｇａｃｃｔｇｇｔ  ｃｃｔｇｇｔｃｇｇｇ  ｇｇｃｔｃｃａｃｃｃ  ｇｃａｔｃｃｃｃａａ  ｇｇｔｇｃａｇａａｇ
１２６１  ｃｔｇｃｔｇｃａｇｇ  ａｃｔｔｃｔｔｃａａ  ｃｇｇｇｃｇｃｇａｃ  ｃｔｇａａｃａａｇａ  ｇｃａｔｃａａｃｃｃ  ｃｇａｃｇａｇｇｃｔ
１３２１  ｇｔｇｇｃｃｔａｃｇ  ｇｇｇｃｇｇｃｇｇｔ  ｇｃａｇｇｃｇｇｃｃ  ａｔｃｃｔｇａｔｇｇ  ｇｇｇａｃａａｇｔｃ  ｃｇａｇａａｃｇｔｇ
１３８１  ｃａｇｇａｃｃｔｇｃ  ｔｇｃｔｇｃｔｇｇａ  ｃｇｔｇｇｃｔｃｃｃ  ｃｔｇｔｃｇｃｔｇｇ  ｇｇｃｔｇｇａｇａｃ  ｇｇｃｃｇｇａｇｇｃ
１４４１  ｇｔｇａｔｇａｃｔｇ  ｃｃｃｔｇａｔｃａａ  ｇｃｇｃａａｃｔｃｃ  ａｃｃａｔｃｃｃｃａ  ｃｃａａｇｃａｇａｃ  ｇｃａｇａｔｃｔｔｃ
１５０１  ａｃｃａｃｃｔａｃｔ  ｃｃｇａｃａａｃｃａ  ａｃｃｃｇｇｇｇｔｇ  ｃｔｇａｔｃｃａｇｇ  ｔｇｔａｃｇａｇｇｇ  ｃｇａｇａｇｇｇｃｃ
１５６１  ａｔｇａｃｇａａａｇ  ａｃａａｃａａｔｃｔ  ｇｔｔｇｇｇｇｃｇｃ  ｔｔｃｇａｇｃｔｇａ  ｇｃｇｇｃａｔｃｃｃ  ｔｃｃｇｇｃｃｃｃｃ
１６２１  ａｇｇｇｇｃｇｔｇｃ  ｃｃｃａｇａｔｃｇａ  ｇｇｔｇａｃｃｔｔｃ  ｇａｃａｔｃｇａｔｇ  ｃｃａａｃｇｇｃａｔ  ｃｃｔｇａａｃｇｔｃ
１６８１  ａｃｇｇｃｃａｃｇｇ  ａｃａａｇａｇｃａｃ  ｃｇｇｃａａｇｇｃｃ  ａａｃａａｇａｔｃａ  ｃｃａｔｃａｃｃａａ  ｃｇａｃａａｇｇｇｃ
１７４１  ｃｇｃｃｔｇａｇｃａ  ａｇｇａｇｇａｇａｔ  ｃｇａｇｃｇｃａｔｇ  ｇｔｇｃａｇｇａｇｇ  ｃｇｇａｇａａｇｔａ  ｃａａａｇｃｇｇａｇ
１８０１  ｇａｃｇａｇｇｔｇｃ  ａｇｃｇｃｇａｇａｇ  ｇｇｔｇｔｃａｇｃｃ  ａａｇａａｃｇｃｃｃ  ｔｇｇａｇｔｃｃｔａ  ｃｇｃｃｔｔｃａａｃ
１８６１  ａｔｇａａｇａｇｃｇ  ｃｃｇｔｇｇａｇｇａ  ｔｇａｇｇｇｇｃｔｃ  ａａｇｇｇｃａａｇａ  ｔｃａｇｃｇａｇｇｃ  ｇｇａｃａａｇａａｇ
１９２１  ａａｇｇｔｔｃｔｇｇ  ａｃａａｇｔｇｔｃａ  ａｇａｇｇｔｃａｔｃ  ｔｃｇｔｇｇｃｔｇｇ  ａｃｇｃｃａａｃａｃ  ｃｔｔｇｇｃｃｇａｇ
１９８１  ａａｇｇａｃｇａｇｔ  ｔｔｇａｇｃａｃａａ  ｇａｇｇａａｇｇａｇ  ｃｔｇｇａｇｃａｇｇ  ｔｇｔｇｔａａｃｃｃ  ｃａｔｃａｔｃａｇｃ
２０４１  ｇｇａｃｔｇｔａｃｃ  ａｇｇｇｔｇｃｃｇｇ  ｔｇｇｔｃｃｃｇｇｇ  ｃｃｔｇｇｃｇｇｃｔ  ｔｃｇｇｇｇｃｔｃａ  ｇｇｇｔｃｃｃａａｇ
２１０１  ｇｇａｇｇｇｔｃｔｇ  ｇｇｔｃａｇｇｃｃｃ  ｔａｃｃａｔｔｇａｇ  ｇａｇｇｔｇｇａｔｔ  ａｇｇｇｇｃｃｔｔｔ  ｇｔｔｃｔｔｔａｇｔ
２１６１  ａｔｇｔｔｔｇｔｃｔ  ｔｔｇａｇｇｔｇｇａ  ｃｔｇｔｔｇｇｇａｃ  ｔｃａａｇｇａｃｔｔ  ｔｇｃｔｇｃｔｇｔｔ  ｔｔｃｃｔａｔｇｔｃ
２２２１  ａｔｔｔｃｔｇｃｔｔ  ｃａｇｃｔｃｔｔｔｇ  ｃｔｇｃｔｔｃａｃｔ  ｔｃｔｔｔｇｔａａａ  ｇｔｔｇｔａａｃｃｔ  ｇａｔｇｇｔａａｔｔ
２２８１  ａｇｃｔｇｇｃｔｔｃ  ａｔｔａｔｔｔｔｔｇ  ｔａｇｔａｃａａｃｃ  ｇａｔａｔｇｔｔｃａ  ｔｔａｇａａｔｔｃｔ  ｔｔｇｃａｔｔｔａａ
２３４１  ｔｇｔｔｇａｔａｃｔ  ｇｔａａｇｇｇｔｇｔ  ｔｔｃｇｔｔｃｃｃｔ  ｔｔａａａｔｇａａｔ  ｃａａｃａｃｔｇｃｃ  ａｃｃｔｔｃｔｇｔａ
２４０１  ｃｇａｇｔｔｔｇｔｔ  ｔｇｔｔｔｔｔｔｔｔ  ｔｔｔｔｔｔｔｔｔｔ  ｔｔｔｔｔｔｇｃｔｔ  ｇｇｃｇａａａａｃａ  ｃｔａｃａａａｇｇｃ
２４６１  ｔｇｇｇａａｔｇｔａ  ｔｇｔｔｔｔｔａｔａ  ａｔｔｔｇｔｔｔａｔ  ｔｔａａａｔａｔｇａ  ａａａａｔａａａａｔ  ｇｔｔａａａｃｔｔｔ
２５２１  ａａａａａａａａａａ  ａａａａａａａａａａ  ａａａａａａａａａａ  ａ
実施例
実施例１：ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０レベルの決定
【０３２４】
健康な個体から単離されたＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０タンパク質のレベルを、ニーマンピック病Ｃ型の個体のＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０レベルと比較した。
緒言
【０３２５】
ニーマンピック病Ｃ型（ＮＰＣ）は、ＮＰＣ１（症例の９５％）またはＮＰＣ２遺伝子のいずれかでの変異によって引き起こされる、まれな壊滅的な神経変性疾患である。ＮＰＣ１はリソソーム／エンドソーム膜タンパク質であるが、ＮＰＣ２は可溶性コレステロール結合リソソームタンパク質であり、一緒にそれらはリソソーム生合成において不可欠な役割を果たす。ＮＰＣ病は、この疾患の病状を引き起こすリソソーム区画の拡大および機能不全、ならびに複数の組織の細胞内でのコレステロールおよびスフィンゴ糖脂質（ＧＳＬ）の異常な蓄積を特徴とする（Ｐｌａｔｔ，２０１４）。
【０３２６】
進化的に保存されたタンパク質であるＨｓｐ７０は、リソソームタンパク質との直接的な相互作用によりリソソームを安定化する（Ｔ  Ｋｉｒｋｅｇａａｒｄら、２０１０）。したがって、Ｈｓｐ７０治療法は、ＮＰＣに対する見込みのある治療法と考えられた。これに対応して、Ｈｓｐ７０または熱ショック応答の周知の誘導物質であるアリモクロモールの投与は、リソソーム区画のサイズを縮小し、変異型ＮＰＣ１マウスの神経および内臓の病理を逆転させた（Ｔｈｏｍａｓ  Ｋｉｒｋｅｇａａｒｄら、２０１６）。さらに、Ｈｓｐ７０の内因性レベルは、ＮＰＣ１マウスの脳および肝臓で減少されることがわかった。
【０３２７】
ＮＰＣ患者における前向き非介入臨床試験を、アリモクロモールを用いたプラセボ対照試験の開始前に開始した。少なくとも１つの神経学的症状を有し、補助を用いて歩く能力を保持した、ＮＰＣと診断された、２〜１８歳の患者を適格とした。患者は、標準治療法を維持した。すべてのデータを、包含時（訪問１）および前向き観察の６〜１４ヶ月後（訪問２）に評価した。疾患の重症度を、ＮＰＣ−重症度スケールスコアを使用して決定し（Ｙａｎｊａｎｉｎら、２０１０）、より高いスコアは、より重症の病気と関連する。
【０３２８】
疾患の病理をよりよく理解するために、未治療の患者でＨｓｐ７０を測定することを開始した。しかし、脳および肝臓はいずれもＮＰＣ患者にとって適切なマトリックスではない。本臨床研究の計画時に、ＰＢＭＣでの古典的なＮＰＣ病理を説明する論文が発表されたところであった（Ｔｅ  Ｖｒｕｃｈｔｅら、２０１４）。したがって、本発明者らは、ＮＰＣ患者においてＨｓｐ７０を測定するための関連マトリックスとしてＰＢＭＣを見出した。
方法
サンプルの収集：
【０３２９】
全血サンプルを、臨床研究の場で、６ｍＬ  ＥＤＴＡチューブに収集し、サンプルの調製のために周囲状態から中央研究所に出荷した。
【０３３０】
臨床試験サンプル（ｎ＝２６）を、２〜１８歳であり、ＮＰＣと診断され、少なくとも１つの神経症状を有し、補助を用いて歩く能力が維持したニーマンピック病Ｃ型（ＮＰＣ患者）の個体から得た。患者は、研究中、標準治療法を維持した。サンプルを、１回目の臨床試験訪問（包含）および１回目の訪問から６〜１４ヶ月後の２回目の臨床試験訪問で収集した。
【０３３１】
対照サンプル（ｎ＝１９）を、２０〜３０歳の健康な対象から得た。これらのサンプルを、臨床試験サンプルと同じ収集方法および分離方法を使用して処理した。
ＮＰＣ−重大度スケールスコア：
【０３３２】
１回目および２回目の臨床試験訪問時に、ＮＰＣ患者の疾患重症度を、ＮＰＣ重症度スケールスコア（ＮＰＣＣＳＳ）を使用して決定し（Ｙａｎｊａｎｉｎら、２０１０）、ここでより高いスコアは、より重症の病気と関連する。
ＰＢＭＣの分離：
【０３３３】
血漿を、室温での遠心分離によって全血から分離した。血液量を、ＰＢＳで回復し、ＰＢＭＣを、Ｈｉｓｔｏｐａｑｕｅ（商標）を使用する密度勾配遠心分離によって単離した。生存可能ＰＢＭＣ細胞数を、フローサイトメトリーによって決定した。１ｍｉｏ．のアリコートのＰＢＭＣを生成し、−７０℃で冷凍保存した。
ヒトＰＢＭＣ中のＨｓｐ７０の測定：
【０３３４】
Ｈｓｐ７０を、Ｈｕｍａｎ／Ｍｏｕｓｅ／Ｒａｔ  ｔｏｔａｌ  ＨＳＰ７０  ＤｕｏＳｅｔ（登録商標）ＩＣ  ＥＬＩＳＡキット（Ｒ＆ＤＳｙｓｔｅｍｓ）を使用して定量化した。臨床試験サンプルを分析する前に、分析方法は、ヒトＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０の測定について認可された。Ｈｕｍａｎ／Ｍｏｕｓｅ／Ｒａｔ  ｔｏｔａｌ  ＨＳＰ７０  ＤｕｏＳｅｔ（登録商標）ＩＣ  ＥＬＩＳＡキットは、ＨｓｐＡ５およびＨｓｐＡ８の交差反応なしに、ＨｓｐＡ１ＡおよびＨｓｐＡ１Ｂのレベルを検出する。
結果
【０３３５】
ＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０の定量化は、健康な対照由来のＰＢＭＣサンプルと比較して、ＮＰＣ患者由来のＰＢＭＣサンプル中でのＨｓｐ７０の発現が著しく減少していることを示した。健康な対照サンプルは、平均１２０００ｐｇ／ｍＬのＨｓｐ７０を示したが、ＮＰＣ患者から単離したＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０の平均濃度は、１８００ｐｇ／ｍＬであった（図１）。ＮＰＣ患者から単離したＰＢＭＣサンプル中のＨｓｐ７０の発現は、ＮＰＣ−重症度スケールスコア（ＮＰＣＣＳＳ）との相関を示さなかった（図２）。さらに、臨床試験の１回目の訪問〜２回目の訪問の時間の経過に伴うＨｓｐ７０レベルの変化は観察されなかった（図３）。
結論
【０３３６】
この実施例は、健康な対照と比較して、ニーマンピック病Ｃ型に罹患している患者の末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）中でＨｓｐ７０タンパク質の発現が著しく低下していることを示す。さらに、低レベルのＨｓｐ７０は、ＮＰＣ患者の疾患の重症度とは関係がない。
実施例２：アリモクロモールはＮＰＣ患者においてＨｓｐ７０を増加させる
材料および方法
【０３３７】
材料および方法を、実施例１に記載されているとおりに実施した。
結果
【０３３８】
Ｈｓｐ７０濃度を、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）のホモジネートで測定した。Ｈｓｐ７０を、観察研究（図４および図５）、スクリーニング（前処理）、および６〜１４か月後（ベースライン）で決定した。患者を、アリモクロモール（Ｃｌｉｎｉｃａｌｔｒｉａｌｓ．ｇｏｖ  ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｒＮＣＴ０２６１２１２９）で１２ヶ月間治療した。Ｈｓｐ７０レベルを、１２ヶ月の治療前後のＨｓｐ７０レベルを比較するベースラインおよび１２ヶ月のデータポイントを使用して、アリモクロモールでの１２名の患者のウィルコクソン符号順位検定により分析した。
【表２】
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結論
【０３３９】
Ｈｓｐ７０の血中レベルは、健康な対照と比較してＮＰＣの患者において低下し、疾患進行（前治療からベースラインまで）に伴い安定なままである。この例は、アリモクロモールによる１２ヶ月間の治療は、ベースラインと比較してＨｓｐ７０のＰＢＭＣレベルを大幅に増加させたことを示す。これは、Ｈｓｐ７０のＰＢＭＣレベルがアリモクロモール治療法の薬力学的マーカーであることを示す。
引用文献
Ｋｉｒｋｅｇａａｒｄ，  Ｔ．，  Ｇｒａｙ，  Ｊ．，  Ｐｒｉｅｓｔｍａｎ，  Ｄ．  Ａ．，  Ｗａｌｌｏｍ，  Ｋ．，  Ａｔｋｉｎｓ，  Ｊ．，  Ｏｌｓｅｎ，  Ｏ．  Ｄ．，  …  Ｐｌａｔｔ，  Ｆ．  Ｍ．  （２０１６）．  Ｈｅａｔ  ｓｈｏｃｋ  ｐｒｏｔｅｉｎ−ｂａｓｅｄ  ｔｈｅｒａｐｙ  ａｓ  ａ  ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  ｃａｎｄｉｄａｔｅ  ｆｏｒ  ｔｒｅａｔｉｎｇ  ｔｈｅ  ｓｐｈｉｎｇｏｌｉｐｉｄｏｓｅｓ．  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，  ８（３５５），  ３５５ｒａ１１８．  ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１１２６／ｓｃｉｔｒａｎｓｌｍｅｄ．ａａｄ９８２３
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Ｔｅ  Ｖｒｕｃｈｔｅ，  Ｄ．，  Ｓｐｅａｋ，  Ａ．  Ｏ．，  Ｗａｌｌｏｍ，  Ｋ．  Ｌ．，  Ａｌ  Ｅｉｓａ，  Ｎ．，  Ｓｍｉｔｈ，  Ｄ．  Ａ．，  Ｈｅｎｄｒｉｋｓｚ，  Ｃ．  Ｊ．，  …  Ｐｌａｔｔ，  Ｆ．  Ｍ．  （２０１４）．  Ｒｅｌａｔｉｖｅ  ａｃｉｄｉｃ  ｃｏｍｐａｒｔｍｅｎｔ  ｖｏｌｕｍｅ  ａｓ  ａ  ｌｙｓｏｓｏｍａｌ  ｓｔｏｒａｇｅ  ｄｉｓｏｒｄｅｒ−ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｂｉｏｍａｒｋｅｒ．  Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ，  １−９．  ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１１７２／ＪＣＩ７２８３５
Ｙａｎｊａｎｉｎ，  Ｎ．  Ｍ．，  Ｖｅｌｅｚ，  Ｊ．  Ｉ．，  Ｓｃ，  Ｍ．，  Ｇｒｏｐｍａｎ，  Ａ．，  Ｋｉｎｇ，  Ｋ．，  Ａｕ，  Ｄ．，  …  Ｐｏｒｔｅｒ，  Ｆ．  Ｄ．  （２０１０）．  Ｌｉｎｅａｒ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ，  Ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  ｏｆ  Ａｇｅ  ｏｆ  Ｏｎｓｅｔ，  ｉｎ  Ｎｉｅｍａｎｎ−Ｐｉｃｋ  Ｄｉｓｅａｓｅ，  ｔｙｐｅ  Ｃ．  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  Ｏｆ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  Ｐａｒｔ  Ｂ  Ｎｅｕｒｏｐｓｙｃｈｉａｔｒｉｃ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ，  （１），  １３２−１４０．  ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１００２／ａｊｍｇ．ｂ．３０９６９．Ｌｉｎｅａｒ
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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