(57)【要約】  本発明は、少なくとも１つの特定のカルボン酸エステルと真菌胞子を含む液体調製物および植物内または植物上の植物病原性真菌、昆虫および／または線虫を制御するため、植物の成長を増強するため、または、植物の収穫または根の健康を増進するための方法であって、本発明の液体調製物または液体組成物の有効量を前記植物または植物が生育中または生育予定の場所に適用することを含む方法に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
カルボン酸部分とアルコール部分からなる少なくとも１つのカルボン酸エステルおよび植物に有益な効果を発揮する真菌の真菌胞子を含む液体調製物であって、該カルボン酸エステルは植物油由来のカルボン酸トリグリセリドではなく、該少なくとも１つのカルボン酸エステルが、
a)  モノカルボン酸部分とモノアルコール部分
b)  少なくとも１つのモノカルボン酸部分とポリアルコール部分、または
c)  ポリカルボン酸部分と少なくとも１つのモノアルコール部分
を含み、
該モノアルコール部分は分枝状、線状、環状、非環状もしくは部分的環状、飽和もしくは部分的不飽和のC１−C２４モノアルコール部分であり；
該モノカルボン酸部分は分枝状、線状、環状、非環状もしくは部分的環状、飽和もしくは部分的不飽和のC２−C24モノカルボン酸部分であり、該C２−C24モノカルボン酸部分は少なくとも１つのOH官能基を有していてもよく；
該ポリアルコール部分は分枝状、線状、環状、非環状もしくは部分的環状、飽和もしくは部分的不飽和の２価、３価、４価、５価もしくは６価のC２−C２０ポリアルコール部分であり；かつ
該ポリカルボン酸部分は分枝状、線状、環状、非環状もしくは部分的環状、飽和もしくは部分的不飽和のC２−C２０ポリカルボン酸部分である、前記液体調製物。
【請求項２】
a）、b)および／またはc)のいずれか１つが１つ以上の異なったモノアルコール部分、ポリアルコール部分、モノカルボン酸部分またはポリカルボン酸部分からなるエステルの混合物である、請求項１に記載の液体調製物。
【請求項３】
a)からｃ）のいずれか１つのカルボン酸エステルの混合物を含む、請求項１または２に記載の液体調製物。
【請求項４】
前記モノアルコール部分が、分枝状、線状、飽和もしくは部分的不飽和のC１−C２０モノアルコール由来である、請求項１または３のいずれか一項に記載の液体調製物。
【請求項５】
前記少なくとも１つのモノアルコール部分が、メタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、１−ブタノール、２−ブタノール、イソブタノール、１−ペンタノール、１−ヘキサノール、１−ヘプタノール、２−エチルヘキサン−１−オール、カプリルアルコール、ペラルゴンアルコール、イソノニルアルコール、カプリンアルコール、ウンデカノール、ラウリルアルコール、トリデカノール、イソトリデカノール、ミリスチルアルコール、ペンタデカノール、セチルアルコール、パルミトリルアルコール、ヘプタデカノール、ステアリルアルコール、オレイルアルコール、ノナデカノール、エイコサノールおよびこれらの混合物から成る群から選択されるモノアルコール由来である、請求項１乃至４のいずれか一項に記載の液体調製物。
【請求項６】
前記少なくとも１つのモノアルコール部分が、メタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、１−ブタノール、２−ブタノール、イソブタノール、１−ペンタノール、１−ヘキサノール、１−ヘプタノール、２−エチルヘキサン−１−オール、カプリルアルコール、ペラルゴンアルコール、イソノニルアルコール、カプリンアルコール、ラウリルアルコール、トリデカノール、イソトリデカノール、ミリスチルアルコール、セチルアルコール、パルミトリルアルコール、ステアリルアルコール、オレイルアルコールおよびこれらの混合物から成る群から選択されるモノアルコール由来である、請求項１乃至５のいずれか一項に記載の液体調製物。
【請求項７】
前記少なくとも１つのモノカルボン酸部分が、分枝状、線状、飽和もしくは部分的不飽和のC２−C２０カルボン酸由来である、請求項１乃至６のいずれか一項に記載の液体調製物。
【請求項８】
前記少なくとも１つのモノカルボン酸部分が、酢酸、プロピオン酸、酪酸、吉草酸、カプロン酸、カプリル酸、カプリン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、イソステアリン酸、オレイン酸、リノール酸、α−リノレン酸、リシノール酸およびこれらの混合物から成る群から選択されるモノカルボン酸由来である、請求項１乃至７のいずれか一項に記載の液体調製物。
【請求項９】
前記少なくとの１つのポリアルコール部分が、グリコール、１，３−プロパンジオール、１，４−ブタンジオール、１，５−ペンタンジオール、１，６−ヘキサンジオール、シクロヘキサン−１，２−ジオール、イソソルビド、１，２−プロパンジオール、ネオペンチルグリコール、グリセロール、トリメチロールプロパン、ペンタエリスリトールおよび糖アルコールから成る群から選択されるポリアルコール由来である、請求項１乃至８のいずれか一項に記載の液体調製物。
【請求項１０】
前記少なくとも１つのポリアルコールが、１，２−プロパンジオール、ネオペンチルグリコール、グリセロール、１，３−プロパンジオール、トリメチロールプロパンおよびソルビタンから成る群から選択される、請求項９に記載の液体調製物。
【請求項１１】
前記少なくとも１つのポリカルボン酸部分が、
a)  線状、飽和もしくは部分的不飽和のC２−C２０ジカルボン酸
b)  環状C５−C６ジカルボン酸、および
c)  クエン酸およびそのO−アシル化誘導体、例えばO−アセチルクエン酸
から成る群から選択されるポリカルボン酸由来である、請求項１乃至１０のいずれか一項に記載の液体調製物。
【請求項１２】
前記少なくとも１つのポリカルボン酸部分が、１，２−シクロヘキサンジカルボン酸、シュウ酸、マロン酸、マレイン酸、フマル酸、コハク酸、２−ヒドロキシコハク酸、グルタル酸、アジピン酸、ピメリン酸、Ｏ−アセチルクエン酸およびクエン酸から成る群から選択されるカルボン酸由来である、請求項１乃至１１のいずれか一項に記載の液体調製物。
【請求項１３】
前記少なくとも１つのポリカルボン酸部分が、１，２−シクロヘキサンジカルボン酸、グルタル酸、アジピン酸およびＯ−アセチルクエン酸から成る群から選択されるポリカルボン酸由来である、請求項１２に記載の液体調製物。
【請求項１４】
前記少なくとも１つのモノカルボン酸部分または少なくとも１つのポリカルボン酸部分が、すくなくとも１つのOH官能基を有する、請求項１乃至１３のいずれか一項に記載の液体調製物。
【請求項１５】
ｂ）に記載の少なくとも１つのカルボン酸エステルの少なくとも１つのポリアルコール部分が、部分的にまたは完全にエステル化されている、請求項１乃至１４のいずれか一項に記載の液体調製物。
【請求項１６】
a)に記載の少なくとも１つのカルボン酸エステルが、少なくとも１つの分枝状、線状、飽和もしくは部分的不飽和のC２−２０モノカルボン酸部分および少なくとも１つの分枝状、線状、飽和もしくは不飽和のC１−C２０モノアルコール部分から成る、請求項１乃至１４のいずれか一項に記載の液体調製物。
【請求項１７】
a)に記載の少なくとも１つのカルボン酸エステルが１３から２８個の炭素原子を有する、請求項１乃至１４および１６のいずれか一項に記載の液体調製物。
【請求項１８】
前記モノカルボン酸部分が、酢酸、プロピオン酸、酪酸、吉草酸、カプロン酸、カプリル酸、カプリン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、イソステアリン酸、オレイン酸、リノール酸、α−リノレン酸、リシノール酸およびそれらの混合物から成る群から選択されるモノカルボン酸由来である、請求項１、１６または１７に記載の液体調製物。
【請求項１９】
前記モノアルコール部分が、メタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、１−ブタノール、２−ブタノール、イソブタノール、１−ペンタノール、１−ヘキサノール、１−ヘプタノール、２−エチルヘキサン−１−オール、カプリルアルコール、ペラルゴンアルコール、イソノニルアルコール、カプリンアルコール、ラウリルアルコール、トリデカノール、イソトリデカノール、ミリスチルアルコール、セチルアルコール、パルミトレイルアルコール、ステアリルアルコール、オレイルアルコールおよびそれらの混合物から群から選択されるモノアルコール由来である、請求項１８に記載の液体調製物。
【請求項２０】
前記モノカルボン酸部分が、酢酸、プロピオン酸、酪酸、吉草酸、カプロン酸、カプリル酸およびカプリン酸からなる群より選択されるモノカルボン酸から成る群から選択されるモノカルボン酸由来であり、前記モノアルコール部分が、ラウリルアルコール、トリデカノール、イソトリデカノール、ミリスチルアルコール、セチルアルコール、パルミトレイルアルコール、ステアリルアルコールおよびオレイルアルコールから成る群から選択されるモノアルコール由来である、請求項１８または１９に記載の液体調製物。
【請求項２１】
前記モノカルボン酸部分が、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、オレイン酸、リノール酸、α−リノレン酸およびリシノール酸から成る群から選択されるモノカルボン酸由来であり、前記モノアルコール部分が、メタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、１−ブタノール、２−ブタノール、イソブタノール、１−ペンタノール、１−ヘキサノール、１−ヘプタノール、２−エチルヘキサン−１−オール、カプリルアルコール、ペラルゴンアルコール、イソノニルアルコールおよびカプリンアルコールから成る群から選択されるモノアルコール由来である、請求項１８または１９に記載の液体調製物。
【請求項２２】
前記カルボン酸エステルが、ラウリン酸２−エチルヘキシル、パルミチン酸２−エチルヘキシル、オレイン酸２−エチルヘキシル、リシノール酸メチルエステルおよびプロピオン酸ペンチルエステルから成る群から選択される、請求項１乃至２２のいずれか一項に記載の液体調製物。
【請求項２３】
ｂ）に記載の少なくとも１つのカルボン酸エステル中において、モノカルボン酸部分が、酢酸、プロピオン酸、酪酸、吉草酸、カプロン酸、カプリル酸、カプリン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、イソステアリン酸、オレイン酸、リノール酸、α−リノレン酸及びリシノール酸から成る群から選択されるモノカルボン酸由来であり、ポリアルコール部分が、１，２−エタンジオール、１，３−プロパンジオール、１−４−ブタンジオール、１，５−ペンタンジオール、１，６−ヘキサンジオール、シクロヘキサン−１，２−ジオール、イソソルビド、１，２−プロパンジオール、ネオペンチルグリコール、グリセロール、ペンタエリトリトール、トリメチロールプロパン及び糖アルコールから成る群から選択されるポリアルコール由来である、請求項１乃至１２のいずれか一項に記載の液体調製物。
【請求項２４】
ｂ）に記載の少なくとも１つのカルボン酸エステル中において、モノカルボン酸部分が分枝状、線状、環状、非環状もしくは部分的環状、飽和もしくは部分的不飽和のC２−C６モノカルボン酸部分であり、該C２−C６モノカルボン酸部分は少なくとも１つのOH官能基を有していてもよく、好ましくはC２からC５モノカルボン酸部分である、請求項１乃至１２および２３のいずれか一項に記載の液体調製物。
【請求項２５】
ｂ）に記載の少なくとも１つのカルボン酸エステル中において、ポリアルコール部分が、
環状もしくは部分的環状、飽和もしくは部分的不飽和のC２−C２０−２価、C３−C２０−３価、C４−C２０−４価、C５−C２０−５価またはC６−C２０−６価ポリアルコール部分；または
下記式II
【化１】
2021530529.tif 000012
［式中、ｎは０から４の整数であり、
R1およびR2は相互に独立して水素またはヒドロキシであり、
ｎが１であり、R1がOHである場合には、R2はC１−C９アルキルである。］
のポリアルコールである、請求項１乃至１２、２３および２４のいずれか一項に記載の液体調製物。
【請求項２６】
前記環状もしくは部分的環状、飽和もしくは部分的不飽和のC２−C２０−２価、C３−C２０−３価、C４−C２０−４価、C５−C２０−５価またはC６−C２０−６価ポリアルコール部分が、糖アルコール由来である、請求項２５に記載の液体調製物。
【請求項２７】
前記糖アルコールが、エチレングリコール、プロピレングリコール、グリセロール、エリトロール、トレイトール、アラビトール、キシリトール、リビトール、マンニトール、ソルビトール、ガラクチトール、フシトール、イジトール、イノシトール、ボレミトール、イソマルト、マルチトール、ラクチトール、マルトトリオール、マルトテトライトール、ポリグリシトールおよびソルビタンから成る群より選択される、請求項２６に記載の液体調製物。
【請求項２８】
前記ポリアルコール部分が、１，２−エタンジオール、１，２−プロパンジオール、ネオペンチルグリコール、１，３−プロパンジオール、トリメチロールプロパンおよびソルビタンから成る群から選択されるポリアルコール由来である、請求項２３乃至２７のいずれか一項に記載の液体調製物。
【請求項２９】
前記ポリアルコールがグリセロールであり、前記モノカルボン酸が酢酸、プロピオン酸、酪酸、吉草酸、カプロン酸、カプリル酸および／またはカプリン酸またはそれらの混合物から成る群から選択される、請求項２３に記載の液体調製物。
【請求項３０】
前記カルボン酸エステルが、酢酸、プロピオン酸、酪酸、吉草酸、カプロン酸、カプリル酸、カプリン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、イソステアリン酸、オレイン酸、リノール酸、α−リノレン酸およびリシノール酸でエステル化されたジアセチルグリセロールから構成される、請求項２３、２５または２７に記載の液体調製物。
【請求項３１】
前記カルボン酸エステルが、プロピレングリコールジカプリレート、プロピレングリコールジカプレート、ネオペンチルグリコールジコケート、グリセロールトリアセテート、トリメチロールプロパントリイソステアレート、トリメチロールプロパントリココアレート、グリセロールトリカプリレート、グリセロールトリカプレート、Ｃ１２−Ｃ１８カルボン酸モノグリセリドジアセテート、トリメチロールプロパントリカプレート、トリメチロールプロパントリカプレート、トリメチロールプロパントリオレエートおよびソルビタントリオレエートから成る群から選択される、請求項１乃至３および２３乃至２８のいずれか一項に記載の液体調製物。
【請求項３２】
ｃ）に記載の少なくとも１つのカルボン酸エステル中において、ポリカルボン酸部分が、線状、飽和もしくは部分的不飽和のC２−C１０ジカルボン酸、環状C５−C６ジカルボン酸、クエン酸およびそのO−アセチル化誘導体に由来する、請求項１乃至６、１１乃至１４および１９のいずれか一項に記載の液体調製物。
【請求項３３】
前記モノアルコール部分が、メタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、１−ブタノール、２−ブタノール、イソブタノール、ペンタン−１−オール、ペンタン−２−オール、ペンタン−３−オール、２−メチルブタン−１−オール、２−メチルブタン−２−オール、３−メチルブタン−１−オール、３−メチルブタン−２−オール、２，２−ジメチルプロパン−１−オール、１−ヘキサノール、１−ヘプタノール、２−エチルヘキサン−１−オール、カプリルアルコール、ペラルゴンアルコール、イソノニルアルコール、カプリンアルコール、ラウリルアルコール、トリデカノール、イソトリデカノール、ミリスチルアルコール、セチルアルコール、パルミトレイルアルコール、ステアリルアルコールおよびオレイルアルコールから成る群から選択されるモノアルコール由来である、請求項３２に記載の液体調製物。
【請求項３４】
前記モノアルコール部分が、メタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、１−ブタノール、２−ブタノール、イソブタノール、ペンタン−１−オール、ペンタン−２−オール、ペンタン−３−オール、２−メチルブタン−１−オール、２−メチルブタン−２−オール、３−メチルブタン−１−オール、３−メチルブタン−２−オールおよび２，２−ジメチルプロパン−１−オールから成る群から選択されるモノアルコール由来である、請求項３３に記載の液体調製物。
【請求項３５】
前記ポリカルボン酸部分が、１，２−シクロヘキサンジカルボン酸、グルタル酸、アジピン酸およびＯ−アセチルクエン酸から成る群から選択されるポリカルボン酸由来である、請求項３２乃至３４のいずれか一項に記載の液体調製物。
【請求項３６】
前記カルボン酸エステルが、１，２−シクロヘキサンジカルボン酸ジイソノニルエステル、アジピン酸ジ−ｎ−ブチル、アジピン酸ジイソプロピルおよびＯ−アセチルクエン酸トリブチルエステルから成る群から選択される、請求項３２乃至３５のいずれか一項に記載の液体調製物。
【請求項３７】
前記真菌胞子が、植物保護における生物農薬または植物健康促進剤として有効な真菌種由来である、請求項１乃至３６のいずれか一項に記載の液体調製物。
【請求項３８】
前記真菌種が昆虫病原性真菌である、請求項３７に記載の液体調製物。
【請求項３９】
前記真菌種が殺線虫活性真菌である、請求項３７または３８に記載の液体調製物。
【請求項４０】
前記真菌種が、イサリア・フモソロセア（Isaria fumosorosea）、ペニシリウム・ビライ（Penicillium bilaii）、 メタリジウム・アニソプリエ（Metarhiziu anisopliae）、プルプレオシリウム・リラシヌム（Purpureocillium lilacinum）、コニオチリウム・ミニタンス（Coniothyrium minitans）、ボーベリア・バシアナ（Beauveria bassiana）およびクロノスタキス・ロゼア（Clonostachys rosea）から成る群から選択される、請求項３７乃至３９のいずれか一項に記載の液体調製物。
【請求項４１】
界面活性剤、レオロジー改質剤、消泡剤、酸化防止剤および染料からなる群から選択される少なくとも１つの物質をさらに含む、請求項１乃至４０のいずれか一項に記載の液体調製物。
【請求項４２】
請求項１乃至４１のいずれか一項に記載の液体調製物を含む液体組成物。
【請求項４３】
植物内または植物上の植物病原性真菌、昆虫および／または線虫を制御するため、植物の成長を増強するため、または、植物の収穫または根の健康を増進するための方法であって、有効量の請求項１乃至４１のいずれか一項に記載の液体調製物または請求項４２に記載の液体組成物を前記植物または植物が生育中または生育予定の場所に適用することを含む、前記方法。
【請求項４４】
植物保護剤としての、または、植物の活力および／または植物の健康を促進するための、請求項１乃至４１のいずれか一項に記載の液体調製物または請求項４２に記載の液体組成物の使用。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
生物農薬（ＢＣＡ）は、植物防疫の分野でますます重要となり、様々な菌類や昆虫との闘い、あるいは植物の健康改善のために重要となっている。生物農薬として使用可能なウイルスもあるが、この分野では主に細菌や真菌に基づくＢＣＡが使用されている。真菌に基づく最も顕著な形態の生物農薬は、分生子または芽胞胞子と呼ばれる無性胞子であるが、（微小）菌核、子嚢胞子、担子胞子、クラミド胞子または菌糸断片のような他の真菌繁殖体も有望な薬剤である可能性がある。
【０００２】
桿菌胞子のような細菌に基づく多くの胞子とは異なり、多くの真菌胞子はそれほど頑強ではなく、市販製品のニーズに合う形で真菌胞子を提供すること、特にある温度での許容可能な保存安定性を提供することは困難であることが証明されている。
【０００３】
それにもかかわらず、生物農薬に適切な製剤を提供することは、生物農薬の性質、温度安定性及び有効期間並びに適用における製剤の効果のような、最終製剤の有効性に寄与する多くの要因のため、依然として課題を提起する。
【０００４】
適当な製剤は、均一で安定な活性成分と不活性成分の混合物であり、最終製品をより単純化し、より安全で、標的に適用するのにより効果的である。
【０００５】
生物農薬に通常用いられる製剤としては、ＷＰ（粉末状に微粉化され、典型的には水中に分散した後に懸濁粒子として適用される固体製剤）、ＷＧ（崩壊後に適用される顆粒および水中に分散される製剤）が挙げられる。ＷＧ製品の顆粒は、０．２〜４ｍｍの範囲で明確な粒子を有している。水分散性顆粒は、凝集、噴霧乾燥、または押出技術によって形成することができる。ＷＰ製剤はかなり容易に製造されるが、それらは粉末状である。また、現場での施用は容易ではない。ＷＧ製剤は、使用者にとって取り扱いが容易であり、一般にＷＰ製剤よりも粉末含量が低い。
【０００６】
液体調製物の例は、使用前に水で希釈することを通常意図した流体中の固体活性成分の水ベースの懸濁液であるＳＣである。別の液体調製物タイプは、ＥＣであり、水に添加されるとエマルジョンを形成する水不溶性有機溶媒中の界面活性剤などの界面活性剤と組み合わせた活性成分の溶液である。
【０００７】
膨大な数の処方物が、生物農薬の実験的および商業的処方において利用されている（より詳細な記述および一覧については、Ｓｃｈｉｓｌｅｒら、Ｐｈｙｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｙ、Ｖｏｌ  ９４、Ｎｏ．１１、２００４を参照されたい）。一般的に、処方剤は、処方バイオマスの化学的、物理的、生理学的または栄養学的特性を改善する担体（充填剤、増量剤）または処方剤のいずれかとしてグループ化することができる。
【０００８】
安定性、特に室温またはそれ以上の温度でのより長い時間にわたる真菌活性物質に基づくＢＣＡの保存安定性は、真菌分生子の繊細な性質のために特別な課題である。多くの生きている生物と同様に、休眠状態の菌類の分生子は、たとえば水、空気（酸素）、温度、照射などの環境の影響に敏感である。いくつかの因子は発芽を誘発するかもしれないが、他の因子は胞子の生存性に有害な影響を及ぼすかもしれない。水を排除するために、白色鉱物（パラフィン）油または植物油のような油は、液体の菌類胞子製剤を調製するために典型的に使用される。これらの油の多くは、真菌生物にとってある程度の有効期間を提供する。植物油は天然由来であり、グリセリンおよびＣ１２−Ｃ１８飽和および不飽和脂肪酸から構成される本質的に混合されたカルボン酸トリグリセリドであり、それらはまた、種々の量の天然ワックスを含有する。植物油組成は多様であり、植物品種、環境因子（例えば土壌、栄養素）および天候などの多くの因子に依存しているが、それはほんの少数を指すにすぎない。したがって、一定の品質および組成を、数年間および／または広い地域にわたって達成することは困難である。植物油の工業的使用におけるもう一つの制限因子は、そのような油は全て酸敗しやすくなることである。すなわち、空気、光、湿気に曝露されるか、または細菌の作用によって、不快な臭い、制御不能な高分子残基の形成および自己触媒的に分解をさらに促進する遊離脂肪酸の放出をもたらす。したがって、光、酸素、高温および望ましくない微生物汚染の排除のような予防措置が必要であり、植物油ベース組成物の安定性を保証するために、抗酸化剤、ラジカルスカベンジャーまたは殺生物剤の使用のような対策が適用されなければならない。
【０００９】
生物農薬の処方例は、Ｔｏｒｒｅｓら、２００３，Ｊ  Ａｐｐｌ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ，９４（２），  ｐｐ：  ３３０−９に記載されている。しかし、生物農薬、例えば、真菌胞子の生存率を４℃で４ヶ月間７０％以上保存する製剤は、野外での日常的な使用には適していないことは明らかである。むしろ、生物農薬の製剤は、冷蔵が不可能な条件下でも十分な有効期間を有することが望ましい。
【００１０】
Ｋｉｍら、２０１０（Ｊ．Ｓ．  Ｋｉｍ、Ｙ．Ｈ．  Ｊｅ、Ｊ．  Ｙ．  Ｒｏｈ、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ  ＆  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ２０１０，  ｖｏｌ  ３７（４号）、ｐｐ、４１９ｆｆ）は、真菌イサリア・フモソロセア（Ｉｓａｒｉａ  ｆｕｍｏｓｏｒｏｓｅａ）の分生子が、油（ダイズ、トウモロコシ、コットンシード、パラフィン油、オレイン酸メチル）中に分散させた場合、５０℃での２および８時間の熱処理中に、水中での分散と比較して改善された安定性を示すことを開示している。
【００１１】
Ｍｂａｒｇａ  ｅｔ  ａｌ．、  ２０１４（Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｃｏｎｔｒｏｌ  ２０１４，  ｖｏｌ．  ７７，  ｐｐ．１５ｆｆ）は、異なる乳化剤を含む大豆油に配合されたトリコデルマ  アスペレラム（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ａｓｐｅｒｅｌｌｕｍ）が、水中の分生子の分散と比較して有効期間の改善を示すことを見出した。
【００１２】
例えば、エトキシル化トリシロキサン類（例えば、Ｂｒｅａｋ−Ｔｈｒｕ  Ｓ２４０）のような他の液体は、適切な代替物であり、例えばＰ．  Ｌｉｌａｃｉｎｕｍ  （バイオアクト（登録商標）、ＷＯ２０１６／０５０７２６参照）と共に安定した調製物を提供するが、このようなトリシロキサン類およびそれらを含む製品の製造には高い費用がかかる。
【００１３】
ＥＰ  １  ８８６  ５７０  Ａ２は、あるエステルと界面活性剤を含む微生物芽胞の農薬学的に活性な製剤を記載している。安定性の絶対値は良好な生存率を示唆しているが、相対的な生存率を比較することによって示されるように、全体的な安定性は特に高くはない（４０℃で８週間保存した後の胞子の生存率は、５，８６％程度の低いレベルまで低下する。）（表１、製剤４）。ＷＯ  ２００９／１２６４７３  Ａ１には、細菌及びある種の非水性水混和性及び／又は水不混和性添加物を含む水ベースの製剤が記載されている。ＷＯ  ２０１６／１８９３２９  Ａ１では、脂肪酸および脂肪酸誘導体と特定の菌種との併用について記載されている。Ｂｅｇｏｎｙａ  Ｖｉｃｅｄｏら．  （Ａｒｃｈｉｖｅｓ  ｏｆ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，  ｖｏｌ．  １８４，  Ｎｏ．  ５，  ｐ．  ３１６ｆ）は、Ｂｏｙｔｒｉｔｉｓ  ｓｐによって引き起こされる病気を制御するための、部分エステル化された炭酸ジアシド（すなわち、アジピン酸モノエチレスター、またはＡＡＭＥ）を記述している。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１４】
【特許文献１】ＷＯ２０１６／０５０７２６
【特許文献２】ＥＰ  １  ８８６  ５７０  Ａ２
【特許文献３】ＷＯ  ２００９／１２６４７３  Ａ１
【特許文献４】ＷＯ  ２０１６／１８９３２９  Ａ１
【非特許文献】
【００１５】
【非特許文献１】Ｓｃｈｉｓｌｅｒら、Ｐｈｙｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｙ、Ｖｏｌ  ９４、Ｎｏ．１１、２００４
【非特許文献２】Ｔｏｒｒｅｓら、２００３，Ｊ  Ａｐｐｌ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ，９４（２），  ｐｐ：  ３３０−９
【非特許文献３】Ｋｉｍら、２０１０（Ｊ．Ｓ．  Ｋｉｍ、Ｙ．Ｈ．  Ｊｅ、Ｊ．  Ｙ．  Ｒｏｈ、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ  ＆  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ２０１０，  ｖｏｌ  ３７（４号）、ｐｐ、４１９ｆｆ）
【非特許文献４】Ｍｂａｒｇａ  ｅｔ  ａｌ．、  ２０１４（Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｃｏｎｔｒｏｌ  ２０１４，  ｖｏｌ．  ７７，  ｐｐ．１５ｆｆ）
【非特許文献５】Ｂｅｇｏｎｙａ  Ｖｉｃｅｄｏら．  （Ａｒｃｈｉｖｅｓ  ｏｆ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，  ｖｏｌ．  １８４，  Ｎｏ．  ５，  ｐ．  ３１６ｆ）
【発明の概要】
【００１６】
上述の欠点により、真菌活性物質に基づく生物農薬のための単純で、取り扱いが容易な製剤処方が依然として必要とされている。他の特性の中でも、このような製剤は、理想的には、濃縮製剤中で良好な物理的安定性を提供し、特に高温（２０℃以上）では、経時的に適切な有効期間を示し、良好な水混和性または懸濁性を提供しなければならない。
【課題を解決するための手段】
【００１７】
上述のように、油または有機ケイ素以外の有機流体を使用して、真菌胞子ベースのＢＣＡの安定な農薬調製物を提供することができるという先行例は非常に少ない。驚くべきことに、高温（３０℃以上で５週間）での保存後、多数の液体カルボン酸エステルが良好ないし優れた胞子生存率を提供することがわかった。
【００１８】
したがって、第１の局面において、本発明は、式Ｉ
【化１】
2021530529.tif 000002
【００１９】
［式中、カルボン酸エステルは植物油に含まれるカルボン酸トリグリセリドではない］に示すカルボン酸部分とアルコール部分からなる少なくとも１つのカルボン酸エステル；および菌類の胞子を含む液体調製物に関する。菌類は植物に有益な効果を発揮する菌類である。
【００２０】
本発明に関連して、カルボン酸エステルは、天然源から単離されるか、または、式Ｉのカルボン酸部分およびカルボン酸部分の基礎となるそれぞれのカルボン酸およびアルコールのエステル化に限定されるものではない当該技術分野で公知の方法によって製造されるかのいずれかである。むしろ、用語「カルボン酸部分」および「アルコール部分」の使用は、本発明によるカルボン酸エステルの構造を明らかにし、明確にするのに役立つ。両方の部分を合わせると、Ｈ２Ｏの正式な脱離のもとにエステル基を作り出す。したがって、カルボン酸部分もカルボン酸のＸ−（Ｃ＝Ｏ）−ラジカルと定義することができ、アルコール部分はアルコールのＹ−Ｏ−ラジカルと定義することができる。このような定義は、本発明に関連して「由来」とも呼ばれる。好ましくは、カルボン酸部分の基礎になるカルボン酸は、以下においてさらに定義されるモノカルボン酸またはポリ酸であり、アルコール部分の基礎になるアルコールは、以下においてさらに定義されるモノアルコールまたはポリアルコールである。
【００２１】
本発明で使用されるカルボン酸エステルは、植物油に見られるカルボン酸トリグリセリドではない。このようなカルボン酸トリグリセリドは、脂肪酸に結合したグリセロールを含み、用語「脂肪酸」は、１２〜１８個の炭素原子を有する直鎖カルボン酸に関する。このような植物油は、例えば、トウモロコシ油、ひまわり油、大豆油、菜種油、ピーナッツ油、綿実油、米糠油、ベニバナ油、オリーブ油、アマニシ油およびヒマシ油のような室温で液体であるものからなることが好ましい。当業者はどのカルボン酸トリグリセリドが植物油に含まれているかを知っている。植物油の定義はｈｔｔｐｓ：／／ｅｎ．ｗｉｋｉｐｅｄｉａ．ｏｒｇ／ｗｉｋｉ／Ｖｅｇｅｔａｂｌｅ＿ｏｉｌに記載され（２０１８年７月２０日現在）、また、そのようなカルボン酸トリグリセリドの概要はｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｄｇｆｅｔｔ．ｄｅ／ｍａｔｅｒｉａｌ／ｆｓｚｕｓ．ｐｈｐで確認できる（２０１８年７月２０日現在）。
【００２２】
上記の除外に加えて、１つの実施形態において、本発明において使用されるカルボン酸エステル、特にａ）記載されるカルボン酸エステルは、Ｃ１４−Ｃ１８カルボン酸部分およびメタノールに基づくアルコール部分から構成されるカルボン酸エステルではない。別の実施形態では、ａ）に記載されるカルボン酸エステルは、Ｃ１４−Ｃ１８カルボン酸部分とエタノールに基づくアルコール部分からなるカルボン酸エステルではない。特定の実施態様において、ａ）に記載されるカルボン酸エステルは、Ｃ１４−Ｃ１８カルボン酸部分からなるカルボン酸エステルではなく、メタノールまたはエタノールに基づくアルコール部分である。このようなカルボン酸エステルは、メチル化またはエチル化種子油とも呼ばれ、いくつかの実施形態においては、本発明の範囲内には明確に含まれない。
【００２３】
本発明の範囲内の真菌胞子は、分生子（ｃｏｎｉｄｉａ）あるいは分芽胞子（ｂｌａｓｔｏｓｐｏｒｅｓ）と呼ばれる無性胞子（ａｓｅｘｕａｌ  ｓｐｏｒｅｓ）を含むが、子嚢胞子（ａｓｃｏｓｐｏｒｅｓ）、担子胞子（ｂａｓｉｄｉｏｓｐｏｒｅｓ）、クラミジア胞子（ｃｈｌａｍｙｄｏｓｐｏｒｅｓ）などの他の真菌繁殖体も含む。（微小）菌核は、厳密な意味では胞子ではないが、本発明による液剤に加えてもよい。好ましくは、真菌胞子は、以下に記載されるように植物にとって有益な真菌の胞子である。
【００２４】
真菌胞子は分生子であることが好ましい。
【００２５】
１つの実施形態において、前記少なくとも１つのカルボン酸エステルは、以下のものから構成されているか、またはそれらを含むか、またはそれらから得ることができる。
【００２６】
ａ）  モノカルボン酸部分とモノアルコール部分
ｂ）  少なくとも１つのモノカルボン酸部分およびポリアルコール部分および／または
ｃ）  ポリカルボン酸部分および少なくとも１つのモノアルコール部分。
【００２７】
［ここで、前記モノアルコール部分が分枝状、線状、環状、非環状または部分的環状、飽和または部分的不飽和のＣ１−Ｃ２４モノアルコール部分であり；
前記モノカルボン酸部分が分枝状、線状、環状、非環状または部分的環状、飽和または部分的不飽和のＣ２−Ｃ２４モノカルボン酸部分であり、任意に少なくとも１つのＯＨ官能基を有し；
前記ポリアルコール部分が、分枝状、線状、環状又は部分環状、飽和又は部分不飽和のジ−、トリ−、テトラ−、ペンタ−及び／又は六価のＣ２−Ｃ２０ポリアルコール部分であり；
前記少なくとも１つのカルボン酸部分が、任意に少なくとも１つのＯＨ官能基を有する、分枝状、線状、環状、非環状又は部分環状、飽和又は部分不飽和のＣ２−Ｃ２０カルボン酸部分である。］
本発明に関連して、用語「ポリカルボン酸（ｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ  ｐｏｌｙａｃｉｄ）」は、２つ以上のカルボキシル基を有するカルボン酸を含む。したがって、本発明の範囲内には、ジカルボン酸、トリカルボン酸およびテトラカルボン酸がある。
【００２８】
液体調製物は、ａ）〜ｃ）、例えば、ａ）およびｂ）、ａ）およびｃ）またはｂ）およびｃ）のいずれかによるカルボン酸エステルの混合物を含み得る。また、ａ）、ｂ）およびｃ）の３種類すべての混合物を使用してもよい。
【００２９】
ａ）およびｂ）のいずれか１つの混合物は、１：１００〜１００：１の範囲、好ましくは１：５０〜５０：１の範囲、より好ましくは１：２５〜２５：１の範囲、例えば１：２０、１：１５、１：１０、１：５、１：２、１：１、２：１、５：１、１０：１、１５：１または２０：１の範囲の比率で存在することができる。さらに別の好ましい実施形態は、１：２０〜１：１の範囲の比、または１：１〜２０：１の範囲の比で、ａ）およびｂ）のいずれか１つの混合物を含む。
【００３０】
ａ）およびｃ）のいずれか１つの混合物は、１：１００〜１００：１の範囲、好ましくは１：５０〜５０：１の範囲、より好ましくは１：２５〜２５：１の範囲、例えば１：２０、１：１５、１：１０、１：５、１：２、１：１、２：１、５：１、１０：１、１５：１または２０：１の範囲の比率で存在することができる。さらに別の好ましい実施形態は、１：２０〜１：１の範囲の比で、または１：１〜２０：１の範囲の比で、ａ）およびｃ）のいずれかの混合物を含む。
【００３１】
ｂ）およびｃ）のいずれか１つの混合物は、１：１００〜１００：１の範囲、好ましくは１：５０〜５０：１の範囲、より好ましくは１：２５〜２５：１の範囲、例えば１：２０、１：１５、１：１０、１：５、１：２、１：１、２：１、５：１、１０：１、１５：１または２０：１の範囲の比率で存在することができる。さらに別の好ましい実施形態は、１：２０〜１：１の範囲の比、または１：１〜２０：１の範囲の比で、ｂ）およびｃ）のいずれか１つの混合物を含む。
【００３２】
ａ）およびｂ）およびｃ）のいずれか１つの混合物は、１：１：１００〜１００：１００：１、１：１００：１〜１００：１：１００、１００：１：１〜１：１００：１００のいずれかの範囲、好ましくは１：１：５０〜５０：５０：１、１：１：５０〜５０：１、１：１：５０〜５０：５０：１のいずれかの範囲、より好ましくは１：１：２５〜２５：２５：１、１：２５：１〜２５：１：２５、２５：１：１〜１：２５：１の混合物の範囲、例えば１：２０：１、１：１５：１、１：１０：１、１：５：１、１：１：１、２０：１：１、１５：１：１、１０：１：１、５：１：１、１：１：２０、１：１：１５、１：１：１０、１：１：５、５：２０：１、５：１５：１、５：１０：１、１：２０：５、１：１５：５、１：１０：５、２０：１：５、１５：１：５、１０：１：５、２０：５：１、１５：５：１、１：５：２０、１：５：１５、１：５：１０、５：１：２０、５：１：１５または５：１：１０の範囲の比率で存在することができる。さらに別の好ましい実施形態は、１：２０：１〜１：１：１の範囲の比、または２０：１：１〜１：１：１の範囲の比、または１：１：２０〜１：１：１の範囲の比で、ａ）およびｂ）およびｃ）のいずれかの混合物を含む。
【００３３】
１つの実施形態において、ａ）、ｂ）および／またはｃ）のいずれか１つは、複数の異なるモノアルコール、ポリアルコール、モノカルボン酸またはポリカルボン酸部分からなるエステルの混合物である。例えば、ａ）による混合物は、１つ以上の異なるモノカルボン酸および／またはモノアルコール部分を含み得、ｂ）による混合物は、１つ以上の異なるモノカルボン酸および／またはポリアルコール部分を含み得、および／またはｃ）による混合物は、異なるカルボン酸および／またはモノアルコール部分以上を含むことができる。
【００３４】
特定の実施形態では、液体調製物は、上記のような異なるモノアルコール、ポリアルコール、モノカルボン酸またはポリカルボン酸部分の混合物と、ａ）〜ｃ）の異なるサブグループの混合物の両方を含むことができる。
【００３５】
好ましい実施態様において、前記モノアルコール部分は、分枝状、線状、飽和または部分的不飽和のＣ１−Ｃ２０モノアルコールに由来する。例示的および好ましいモノアルコールは、メタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、１−ブタノール、２−ブタノール、イソブタノール、１−ペンタノール、１−ヘキサノール、１−ヘプタノール、２−エチルヘキサン−１−オール、カプリルアルコール、ペラルゴンアルコール、イソノニルアルコール、カプリンアルコール、ウンデカノール、ラウリルアルコール、トリデカノール、イソトリデカノール、ミリスチルアルコール、ペンタデカノール、セチルアルコール、パルミトレイルアルコール、ヘプタデカノール、ステアリルアルコール、オレイルアルコール、ノナデカノール、エイコサノール、および任意に前述のいずれかの混合物からなる群から選択される。より好ましいモノアルコールは、メタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、１−ブタノール、２−ブタノール、イソブタノール、１−ペンタノール、１−ヘキサノール、１−ヘプタノール、２−エチルヘキサン−１−オール、カプリルアルコール、ペラルゴンアルコール、イソノニルアルコール、カプリルアルコール、ラウリルアルコール、トリデカノール、イソトリデカノール、ミリスチルアルコール、セチルアルコール、パルミトレイルアルコール、ステアリルアルコール、オレイルアルコールおよび任意に上記のいずれかの混合物からなる群から選択される。
【００３６】
別の好ましい実施態様において、前記少なくとも１つのモノカルボン酸部分は、分枝状、線状、飽和または部分的不飽和のＣ２−Ｃ２０カルボン酸に由来する。例示的で好ましいモノカルボン酸は、酢酸、プロピオン酸、酪酸、吉草酸、カプロン酸、カプリル酸、カプリン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、イソステアリン酸、オレイン酸、リノール酸、α−リノレン酸、リシノール酸、および任意に前述のいずれかの混合物を含む。
【００３７】
好ましい実施態様において、少なくとも１つのポリアルコール部分は、ＨＯＣＨＯＢ（ＣＨＯＨ）ｎ  ＣＨ２  ＯＨ  （ｎ＝２、３または４）式によるグリコール、１、３−プロパンジオール、１−４−ブタンジオール、１、５−ペンタンジオール、１、６−ヘキサンジオール、シクロヘキサン−１、２−ジオール、イソソルビド、１、２−プロパンジオール、ネオペンチルグリコール、グリセロール、トリメチロールプロパン、ペンタエリスリトールおよび糖アルコールからなる群より選択されるポリアルコール、ならびに任意にそれらの混合物に由来する。糖アルコールの例はエチレングリコール、グリセロール、グリセロール、エリスロール、スレイトール、アラビトール、キシリトール、リビトール、マンニトール、ソルビトール、ガラクチトール、フシトール、イジトール、イノシトール、ボレミトール、イソマルト、マルトール、ラクチトール、マルトトリオール、マルトテトライトール、ポリグリシトールおよびソルビタンを含む。好ましい糖アルコールはソルビトールおよびソルビタンである。より好ましいポリアルコールは、１，２−プロパンジオール、ネオペンチルグリコール、グリセロール、１，３−プロパンジオール、トリメチロールプロパンおよびソルビタン、ならびに任意にそれらの混合物である。さらに好ましいポリアルコールは、１，２−プロパンジオール、グリセロール、１，３−プロパンジオールおよびソルビタン、ならびに任意にその混合物である。
【００３８】
別の好ましい実施形態では、前記少なくとも１つのカルボン酸部分は、
（ｉ）  線状、飽和または部分的不飽和のＣ２−Ｃ１０ジカルボン酸
（ｉｉ）  環状Ｃ５−Ｃ６ジカルボン酸、および
（ｉｉｉ）  クエン酸とそのＯ−アセチル化誘導体、例えばＯ−アセチルクエン酸
からなる群より選択されるポリカルボン酸に由来する。
【００３９】
前記少なくとも１つのカルボン酸の非限定的な好ましい例は、１，２−シクロヘキサンジカルボン酸、シュウ酸、マロン酸、マレイン酸、フマル酸、コハク酸、２−ヒドロキシコハク酸、グルタル酸、アジピン酸、ピメリン酸、Ｏ−アセチルクエン酸およびクエン酸を含む。実施例から分かるように、１，２−シクロヘキサンジカルボン酸、アジピン酸、Ｏ−アセチルクエン酸およびグルタル酸が最も好ましく、そのうち１，２−シクロヘキサンジカルボン酸、アジピン酸およびＯ−アセチルクエン酸が本発明により成功裏に試験されている。
【００４０】
本発明によるカルボン酸エステルに含まれる少なくとも１種のモノカルボン酸または少なくとも１種のポリカルボン酸は、少なくとも１種のＯＨ官能基を有していてもよい。
【００４１】
ｂ）による少なくとも１つのカルボン酸エステルの特定の実施形態に含まれるポリアルコール部分を生じる少なくとも１つのポリアルコールは、部分的または完全にエステル化されていてもよい。言い換えれば、ポリアルコールは、まで、その官能性ＯＨ基の１つまたは（得られたポリアルコール部分に存在する全ての官能性ＯＨ基に至る）複数においてエステル化され得る。従って、グリセロールのような３つの官能性ＯＨ基を含むポリアルコール部分において、１つまたは２つまたは全ての３つのＯＨ基は、ｂ）によるモノカルボン酸でエステル化されてカルボン酸エステルを形成し得、１，３−プロパンジオールのような２つの官能性ＯＨ基を含むポリアルコール部分において、１つまたは両方のＯＨ基は、モノカルボン酸でエステル化されて、ｂ）によるカルボン酸エステルを形成し得る。
【００４２】
ａ）によるカルボン酸エステルは、少なくとも１つの分枝状、線状、飽和または部分的不飽和のＣ２−Ｃ２０カルボン酸部分と、少なくとも１つの分枝状、線状、飽和または部分的不飽和のＣ１−Ｃ２０モノアルコール部分で構成されることが好ましい。
【００４３】
好ましくは、ａ）によるカルボン酸エステル中の炭素原子の数は、１３〜２８の範囲である。
【００４４】
好ましくは、ａ）に従うアルコール部分を形成するモノアルコールは、メタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、１−ブタノール、２−ブタノール、イソブタノール、１−ペンタノール、１−ヘキサノール、１−ヘプタノール、２−エチルヘキサン−１−オール、カプリルアルコール、ペラルゴンアルコール、イソノニルアルコール、カプリンアルコール、ウンデカノール、ラウリルアルコール、トリデカノール、イソトリデカノール、ミリスチルアルコール、ペンタデカノール、セチルアルコール、パルミトレイルアルコール、ヘプタデカノール、ステアリルアルコール、オレイルアルコール、ノナデカノール、エイコサノール、および任意に前述のいずれかの混合物からなる群から選択される。
【００４５】
ａ）によるカルボン酸エステルにおいて、前記モノカルボン酸部分は、好ましくは、酢酸、プロピオン酸、酪酸、吉草酸、カプロン酸、カプリル酸、カプリン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、イソステアリン酸、オレイン酸、リノール酸、α−リノレン酸、リシノール酸、および任意に前述のいずれかの混合物からなる群から選択されるモノカルボン酸から誘導される。より好ましくは、特に上記のカルボン酸モノアルコールでは、対応するモノアルコール部分は、メタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、１−ブタノール、２−ブタノール、イソブタノール、１−ペンタノール、１−ヘキサノール、１−ヘプタノール、２−エチルヘキサン−１−オール、カプリルアルコール、ペラルゴンアルコール、イソノニルアルコール、カプリンアルコール、ラウリルアルコール、ラウリルアルコール、トリデカノール、イソトリデカノール、ミリスチルアルコール、セチルアルコール、パルミトレイルアルコール、ステアリルアルコール、オレイルアルコールおよび上記のいずれかの任意の混合物からなる群から選択されるモノアルコールから誘導される。１つのより好ましい実施形態において、上記のメチル化および／またはエチル化種子油は、本発明の範囲内に含まれない。
【００４６】
特に好ましいカルボン酸エステルａ）によれば、酢酸、プロピオン酸、酪酸、吉草酸、カプロン酸、カプリル酸およびカプリン酸からなる群より選択されるモノカルボン酸、ならびに任意にラウリルアルコール、トリデカノール、イソトリデカノール、ミリスチルアルコール、セチルアルコール、パルミトレイルアルコール、ステアリルアルコール、オレイルアルコールおよびそれらの任意の混合物からなる群より選択されるモノアルコールに由来するモノアルコール部分を含むモノカルボン酸部分を含む。
【００４７】
ａ）による他の特に好ましいカルボン酸エステルは、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、オレイン酸、リノール酸、α−リノレン酸、リシノール酸および任意にその混合物からなる群より選択されるモノカルボン酸、ならびにメタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、１−ブタノール、２−ブタノール、イソブタノール、１−ペンタノール、１−ヘキサノール、１−ヘプタノール、２−エチルヘキサン−１−オール、カプリルアルコール、ペラルゴンアルコール、イソノニルアルコールおよび任意にその混合物からなる群より選択されるモノアルコールに由来するモノアルコール部分を含む。１つのより好ましい実施形態において、上記のメチル化および／またはエチル化種子油は、本発明の範囲内に含まれない。
【００４８】
実施例に示されるように、２−エチルヘキシルラウレート、２−エチルヘキシルパルミテート、２−エチルヘキシルオレエート、リシノール酸メチルエステルおよびプロピオン酸ペンチルエステルであるａ）によるカルボン酸エステルは、本発明による安定化効果を発揮することが示されており、したがって特に好ましい。
【００４９】
ｂ）による好ましいカルボン酸エステルは、酢酸、プロピオン酸、酪酸、吉草酸、カプリン酸、カプリル酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、イソステアリン酸、イソステアリン酸、オレイン酸、リノール酸、α−リノレン酸、リシノール酸、および任意にその混合物からなる群から選択されるモノカルボン酸、ならびに１，２−エタンジオール、１，３−プロパンジオール、１−４−ブタンジオール、１，５−ペンタンジオール、１，６−ヘキサンジオール、シクロヘキサン−１，２−ジオール、イソソルビド、１，２−プロパンジオール、ネオペンチルグリコール、グリセロール、ペンタエリトリトール、トリメチロールプロパン、糖アルコールおよび任意にその混合物から選択される群から誘導されるポリアルコール部分を含む。
【００５０】
より好ましい実施形態では、ｂ）による前記少なくとも１つのカルボン酸エステルにおいて、前記モノカルボン酸部分は、分岐状、線状、環状、非環状または部分環状、飽和または部分不飽和のＣ２〜Ｃ６モノカルボン酸から誘導され、任意に少なくとも１つのＯＨ官能基、好ましくはＣ２〜Ｃ５モノカルボン酸部分を担持する。この好ましい実施形態では、対応するポリアルコール部分は、１，２−プロパンジオール、ネオペンチルグリコール、グリセロール、１，３−プロパンジオール、トリメチロールプロパンおよびソルビタンならびに任意にそれらの混合物から誘導されることがさらにより好ましい。さらに好ましいポリアルコールは、１，２−プロパンジオール、グリセロール、１，３−プロパンジオールおよびソルビタン、ならびに任意にその混合物である。
【００５１】
代替のより好ましい実施形態では、ｂ）による前記少なくとも１つのカルボン酸エステルにおいて、前記モノカルボン酸部分は、酢酸、プロピオン酸、酪酸、吉草酸、カプロン酸および任意にそれらの混合物からなる群から選択されるモノカルボン酸から誘導され、前記ポリアルコール部分は、ネオペンチルグリコール、ペンタエリスリトール、トリメチロールプロパンおよび任意にそれらの混合物からなる群から選択されるポリアルコールから誘導される。
【００５２】
上記実施態様に組み合わせてよい別のより好ましい実施態様において、ｂ）による前記少なくとも１つのカルボン酸エステルにおいて、前記ポリアルコール部分は、
環状または部分環状、飽和または部分不飽和のＣ２−Ｃ２０−２価、Ｃ３−Ｃ２０−３価、Ｃ４−Ｃ２０−４価、Ｃ−５−Ｃ２０−５価またはＣ６−Ｃ２０−６価ポリアルコール部分；または次式ＩＩ
【化２】
2021530529.tif 000003
【００５３】
［ここで、ｎは０と４の間の整数であり、
Ｒ１とＲ２は互いに独立して水素またはヒドロキシであり、
ｎ＝１およびＲ１＝ＯＨであればＲ２はＣ−Ｃ９アルキルである。］のポリアルコールである。
【００５４】
あるいは、ｂ）によるより好ましいカルボン酸エステルは、酢酸、プロピオン酸、酪酸、吉草酸、カプロン酸、カプリル酸、カプリル酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、イソステアリン酸、オレイン酸、リノール酸、α−リノレン酸、リシノール酸および任意に混合物からなる群より選択されるモノカルボン酸、ならびに１，２−エタンジオール、１，３−プロパンジオール、１−４−ブタンジオール、１，５−ペンタンジオール、１，６−ヘキサンジオール、シクロヘキサン−１，２−ジオール、イソソルビド、１，２−プロパンジオール、グリセロール、リシコールおよび任意にその混合物からなる群より選択されるポリアルコール部分を含む。
【００５５】
好ましくは、ｂ）によるカルボン酸エステル中の炭素原子の数は９〜６０個の範囲であり、より好ましくは９〜４０の範囲である。
【００５６】
ｂ）によるカルボン酸エステルの１つの特に好ましい実施態様において、前記ポリアルコール部分は、環状または部分的環状の、飽和または部分的不飽和のＣ２−Ｃ２０−２価、Ｃ３−Ｃ２０−３価、Ｃ４−Ｃ２０−４価、Ｃ−５−Ｃ２０−５価またはＣ６−Ｃ２０−６価ポリアルコールに由来する。ここで、前記環状または部分的環状アルコール部分は、エチレングリコール、グリセロール、エリトロール、スレイトール、アラビトール、キシリトール、リビトール、マンニトール、ソルビトール、ガラクチトール、フシトール、イノシトール、イノシトール、ボレミトール、イソマルト、ラクチトール、マルトトリトール、マルトテトライトール、ポリグリシトールおよびソルビタンを含む、上述のような糖アルコールに由来することがさらに好ましい。
【００５７】
ｂ）によるカルボン酸エステルに含まれる特に好ましいポリアルコール部分は、１，２−エタンジオール、１，２−プロパンジオール、ネオペンチルグリコール、１，３−プロパンジオランドソルビタンおよび任意にその混合物に由来する。例えば、ポリアルコールとしてのグリセロール、酢酸、プロピオン酸、酪酸、吉草酸、カプロン酸、カプリル酸およびカプリン酸、ならびに任意にそれらの混合物が、カルボン酸部分を形成するモノカルボン酸として特に好ましい。ポリアルコールとしてのジアセチルグリセロールについては、カルボン酸部分を形成するカルボン酸として、酢酸、プロピオン酸、酪酸、吉草酸、カプロン酸、カプリル酸、カプリン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、イソステアリン酸、オレイン酸、リノール酸、α−リノレン酸およびリシノール酸ならびに任意にそれらの混合物が特に好ましい。ｂ）による特に好ましいカルボン酸エステルの別のセットは、ネオペンチルグリコール、トリメチロールプロパンおよびペンタエリスリトールポリアルコール部分、ならびにモノカルボン酸部分としての酢酸から誘導される。
【００５８】
ｂ）によるカルボン酸エステルに関する全ての実施形態に関連して、ポリアルコール部分がネオペンチルグリコールに由来する場合、モノカルボン酸部分はカプリル酸に由来せず、および／またはポリアルコール部分がペンタエリスロールに由来する場合、モノカルボン酸部分は２−エチルヘキサン酸に由来せず、および／またはポリアルコール部分がトリメチルプロパンに由来する場合、モノカルボン酸部分はｎ−オクタデカン酸に由来しないことが一般に好ましい。
【００５９】
より好ましくは、ｂ）によるカルボン酸エステルに関連して、ポリアルコール部分がネオペンチルグリコール、トリメチルプロパンまたはペンタエリスロールから誘導されることを条件として、カルボン酸部分は７〜１８個の炭素原子を有するモノカルボン酸から誘導されない。
【００６０】
実施例に示すように、プロピレングリコールジカプリレート、プロピレングリコールジコールプラレート、ネオペンチルグリコールジコールジコート、グリセロールトリアセテート、トリメチロールプロパントリイソステアレート、トリメチロールプロパントリオコート、グリセロールトリカプレート、グリセロールトリカプレート、Ｃ１２−Ｃ１８カルボン酸モノグリセリドジアセテート（脂肪酸群を形成するＣ１２−Ｃ１８カルボン酸）、トリメチロールプロパントリカプリレート、トリメチロールプロパントリカプレート、トリメチロールプロパントリオレートおよびソルビタントリオレートのカルボン酸エステルは、本発明に従って安定化効果を発揮することが示されており、したがって特に好ましい。
【００６１】
ｃ）のカルボン酸エステルに関して、前記カルボン酸部分は、好ましくは、線状、飽和または部分的不飽和のＣ２−Ｃ１０ジカルボン酸、環状Ｃ５−Ｃ６ジカルボン酸およびO−アセチルクエン酸、ならびに任意にそれらの混合物に由来する。より好ましくは、前記カルボン酸部分は、線状で飽和したＣ３−Ｃ８ジカルボン酸、１，２−シクロヘキサンジカルボン酸およびO−アセチルクエン酸、ならびに任意にそれらの混合物からなる群より選択されるポリカルボン酸に由来する。さらに好ましくは、前記カルボン酸部分は、１，２−シクロヘキサンジカルボン酸、グルタル酸、アジピン酸およびＯ−アセチルクエン酸、ならびに任意にそれらの混合物からなる群から選択されるポリカルボン酸に由来する。別のより好ましい実施形態では、前記カルボン酸部分は、１，２−シクロヘキサンジカルボン酸、グルタル酸およびＯ−アセチルクエン酸、ならびに任意にそれらの混合物からなる群から選択されるポリカルボン酸に由来する。
【００６２】
好ましくは、ｃ）によるカルボン酸エステル中の炭素原子の数は、１０〜４０の範囲であり、１０〜３０の間でより好まれ、１０〜２０の間でさらに好ましい。
【００６３】
ｃ）によるカルボン酸エステル中のカルボン酸部分を特徴付ける上記実施形態の代わりに、またはそれに加えて、ｃ）によるカルボン酸エステル中のモノアルコール部分は、メタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、１−ブタノール、２−ブタノール、イソブタノール、ペンタン−１−オール、ペンタン−２−オール、ペンタン−３−オール、２−メチルブタン−１−オール、２−メチルブタン−２−オール、３−メチルブタン−１−オール、３−メチルブタン−２−オール、２，２−ジメチルプロパン−１−オール、１−ヘキサノール、１−ヘプタノール、２−エチルヘキサン−１−オール、カプリルアルコール、ペラルゴンアルコール、イソノニルアルコール、カプリルアルコール、ラウリルアルコール、トリデカノール、イソトリデカノール、ミリスチルアルコール、セチルアルコール、パルミトレイルアルコール、ステアリルアルコール、オレイルアルコールおよび任意にその混合物からなる群より選択されるモノアルコールに由来する。
【００６４】
ｃ）によるカルボン酸エステルの好ましい一実施形態において、前記カルボン酸部分は線状Ｃ３−Ｃ８ジカルボン酸に由来し、モノアルコール部分はＣ１−Ｃ５モノアルコールに由来する。
【００６５】
ｃ）によるカルボン酸エステルの別の好ましい実施態様において、前記カルボン酸部分は環状ジカルボン酸およびトリカルボン酸に由来し、モノアルコール部分はＣ１−Ｃ２４モノアルコールに由来する。
【００６６】
ｃ）によるカルボン酸エステルに係る全ての実施形態において、当該ポリカルボン酸部分がアジピン酸に由来する場合、当該モノアルコール部分は、イソデシルアルコールまたは２−ヘプチルンシルアルコールに由来しないことが特に好ましい。他の特に好ましい実施形態では、ｃ）によるカルボン酸エステルは、６〜１８個の炭素原子を有するアジピン酸およびモノアルコール部分に由来しない。
【００６７】
ｃ）によるカルボン酸エステルを特徴付ける上記実施形態の代わりに、または加えて、線状カルボン酸部分と組み合わせたモノアルコール部分は、メタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、１−ブタノール、２−ブタノールおよびイソブタノールからなる群から選択される。
【００６８】
ｃ）によるカルボン酸エステルを特徴付ける別の代替として、または上記実施形態に加えて、環状Ｃ５−Ｃ６ジカルボン酸およびO−アセチルクエン酸と組み合わせたモノアルコール部分、またはそれらの混合物は、メタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、１−ブタノール、２−ブタノール、イソブタノール、１−ヘキサノール、１−ヘプタノール、２−エチルヘキサン−１−オール、カプリルアルコール、ペラルゴンアルコール、イソノニルアルコール、カプリンアルコール、ラウリルアルコール、トリデカノール、イソトリデカノール、ミリスチルアルコール、セチルアルコール、パルミトレイルアルコール、ステアリルアルコール、オレイルアルコール、および任意にこれらの混合物からなる群から選択される。
【００６９】
実施例に示すように、１、２−シクロヘキサンジカルボン酸ジイソノニルエステル、アジピン酸ジ−ｎ−ブチル、アジピン酸ジイソプロピルおよびＯ−アセチルクエン酸トリブチルエステルであるカルボン酸エステルが、本発明に従って安定化効果を発揮することが示されており、したがって特に好ましい。
【００７０】
本出願の実施例に示されるように、本明細書に記載されるようなカルボン酸エステルを含む流体は、本発明による安定化効果を有するが、他の構造的に類似する流体は、この効果を示さないことが見出された。出願人は、いかなる科学理論によっても束縛されることを望まないが、低分子量のカルボン酸エステルおよび高溶媒力を提供するカルボン酸エステルのような流体の特定の構造モチーフは、安定化効果を提供するのに適さないと考えられる。したがって、炭素原子数１２未満、特に炭素原子数９未満、さらに炭素原子数６未満のａ）によるカルボン酸エステル、例えば、酢酸、プロピオン酸、酪酸、ペンタン酸またはヘキサン酸からなる群から選択されるカルボン酸と、メタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、１−ブタノール、２−ブタノール、イソブタノール、１−ペンタノール、および１−ヘキサノールからなる群から選択されるモノアルコールとの組合せから誘導されるカルボン酸エステルは、本発明によるものとはみなされない。本発明に従わない低分子量のカルボン酸エステルの非限定的な例は、酢酸メチル、酢酸エチル、酢酸１−プロピル、酢酸２−プロピル、酢酸ブチル、プロピオン酸メチル、プロピオン酸エチル、プロピオン酸プロピル、酪酸メチル、酪酸エチルおよびペンタン酸メチルである。対照的に、クレームで定義されているカルボン酸エステルは、真菌胞子に対して安定化効果を有する。
【００７１】
本発明の過程において、驚くべきことに、本明細書中に定義されるような特定の液体が、真菌胞子の貯蔵安定性を増加させるのに適していることが見出された。言い換えれば、本発明による液剤中に存在する真菌胞子は、異なる製剤中または純粋な形態で存在する真菌胞子と比較して、所定時間後の発芽率が改善された。
【００７２】
本発明に関連して、「改良された発芽率」とは、休眠真菌構造または器官、好ましくは真菌胞子の発芽率を指し、該発芽率は、本発明の手順に従って処理されないが、その他については等しく処理された休眠真菌構造または器官、例えば、胞子（「対照胞子」）の発芽率よりも少なくとも１０％高く、好ましくは、前記胞子の生産後少なくとも２週間までに少なくとも２０％、より好ましくは少なくとも３０％または少なくとも４０％、最も好ましくは少なくとも５０％高い。言い換えれば、「改良された発芽率」とは、前記胞子の生産後少なくとも２週間までに、対照胞子の発芽率の少なくとも１１０％、好ましくは少なくとも１２０％、より好ましくは少なくとも１３０％または少なくとも１４０％、最も好ましくは少なくとも１５０％またはそれ以上の発芽率を意味する。好ましくは、前記改良された発芽率は、製造後少なくとも３か月、より好ましくは少なくとも４か月、最も好ましくは少なくとも６か月、例えば少なくとも８か月、少なくとも１０か月または１２か月以上までは依然として明らかであるか、または増加する場合さえある。したがって、本発明に従って処理された胞子の発芽率は、前記胞子の製造後３か月に、対照胞子の発芽率の少なくとも２００％であることが好ましい。別の好ましい実施形態では、前記胞子の製造から６ヵ月後に、発芽率は少なくとも３００％または少なくとも４００％であり、対照胞子の発芽率の少なくとも５００％が好ましい。この関係における発芽率は、ある時間を経ても胞子がまだ発芽できることを意味する。％発芽率とは、一定の時間を経て発芽できる胞子の割合を意味する。発芽率を測定する方法は、当該技術分野において周知である。例えば、胞子を寒天培地の表面に広げ、適当な生育温度でインキュベートした後、発芽管を発達させる胞子の割合を顕微鏡で測定する（Ｏｌｉｖｅｉｒａ  ｅｔ  ａｌ．，  ２０１５．  Ａ  ｐｒｏｔｏｃｏｌ  ｆｏｒ  ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｃｏｎｉｄｉａｌ  ｖｉａｂｉｌｉｔｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｆｕｎｇａｌ  ｅｎｔｏｍｏｐａｔｈｏｇｅｎｓ  Ｂｅａｕｖｅｒｉａ  ｂａｓｓｉａｎａ  ａｎｄ  Ｍｅｔａｒｈｉｚｉｕｍ  ａｎｉｓｏｐｌｉａｅ  ｆｒｏｍ  ｃｏｍｍｅｒｃｉａｌ  ｐｒｏｄｕｃｔ．  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  １１９；  ｐｐ：  ４４−５２、およびその中の参考文献）。
【００７３】
特定の実施態様において、本発明は、以下を含む液体調製物を提供する：
０．１〜４０％、好ましくは２．５〜３０％、最も好ましくは５〜２５％、例えば１０〜２０％の真菌胞子、
９９．９％まで、好ましくは７０〜９７．５％、最も好ましくは７５〜９５％、例えば８０〜９０％の上で定義した少なくとも１つのカルボン酸エステル、
０〜２０％、好ましくは０〜１５％、最も好ましくは０．１〜１０％の界面活性剤（例えば、分散剤乳化剤）、
０〜１０％、好ましくは０〜７％、より好ましくは０．５〜５％のレオロジー改質剤、例えば、ヒュームドシリカ、アタプルギト、
それぞれ０〜５％、好ましくは０〜３％、最も好ましくは０．１〜０．５％の消泡剤、抗酸化剤、色素。
【００７４】
特に、適切な量の水で希釈した後に野外に適用することができる水混和性製剤をもたらすために、液体調製物は界面活性剤をさらに含むことが好ましい。
【００７５】
ＢＣＡは休眠状態で生きている生物である。したがって、低濃度の水を含む、または本質的に水を含まない製剤は、ＢＣＡのための好ましい製剤種類である。一方、ある種のＢＣＡは、より高い水分含量で配合されることもある。水が存在する場合、そのような水は主に乾燥した胞子粉末中の残留遊離水または他の調合剤中の微量の水から生じる。したがって、これらの事実により０〜８％の水分濃度が可能であり、その範囲は「基本的に水がない」という定義の範囲内にあると考えられる。好ましくは、水濃度は０〜６％の範囲であり、より好ましくは２〜４％の間など０〜４％の間である。したがって、例示的な水濃度は、２％、３％、４％、５％および６％を含む。
【００７６】
本発明による液体調製物において、前記少なくとも１つのカルボン酸エステルは、より少ない量で存在し得ると考えられるが、少なくとも５０ｗｔ％の量で存在することが好ましい。一般に、前記少なくとも１つのカルボン酸エステルは、最大９９．９％の濃度で存在してもよく、好ましくは７０〜９７．５ｗｔ％の範囲で存在し、より好ましくは７５〜９５％の間で存在し、最も好ましくは８０〜９０ｗｔ％の間で存在する。
【００７７】
本発明による液剤は、水混和性が好ましい。用語「水混和性」は、前記液体が、１：２００の比、好ましくは１：１００の比、より好ましくは１：５０の比で組み合わせれば、均一な混合物を生じることを示す。水混和性を達成するために、液体調製物は、好ましくは、上記の界面活性剤をさらに含む。
【００７８】
いずれの真菌種も、本発明に適用することができる。しかしながら、前記真菌胞子は、植物保護における生物農薬として、または植物健康増進剤として有効な真菌種のように、植物に有益な効果を有する真菌種由来であることが好ましい。より好ましくは、前記真菌は糸状菌である。
【００７９】
当業者がよく知っているように、糸状菌は、主として卵形または楕円形の酵母細胞の単細胞増殖とは対照的に、ほとんどの条件下で多細胞性、糸状型で増殖する傾向があるため、酵母と区別される。
【００８０】
前記少なくとも１つの糸状菌は、植物保護または植物成長促進効果のような植物にプラスの効果を発揮する任意の真菌であり得る。したがって、前記真菌は、昆虫病原性真菌、線虫捕食性真菌、植物成長促進真菌、細菌または真菌植物病原体などの植物病原体に対して活性な真菌、または除草作用を有する真菌であってよい。
【００８１】
ＮＲＲＬは、特許手続きの目的での微生物の寄託の国際的承認にブダペスト条約に基づく微生物株の寄託を目的とした国際寄託機関であるＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎの略称であり、住所はＮａｔｉｏｎａｌ  Ｃｅｎｔｅｒ  ｆｏｒ  Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ  Ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，  Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ｓｅｒｖｉｃｅ，  Ｕ．Ｓ．  Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ，  １８１５  Ｎｏｒｔｈ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｓｔｒｅｅｔ，  Ｐｅｒｏｉｒａ，  Ｉｌｌｉｎｏｉｓ  ６１６０４  ＵＳＡである。
【００８２】
ＡＴＣＣは、特許手続きを目的とした微生物の寄託の国際的承認にブダペスト条約に基づく微生物株の寄託を目的とした国際寄託機関であるＡｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎの略称であり、住所は、ＡＴＣＣ  Ｐａｔｅｎｔ  Ｄｅｐｏｓｉｔｏｒｙ，  １０８０１  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｂｌｖｄ．，  Ｍａｎａｓｓａｓ，  ＶＡ  １０１１０  ＵＳＡである。
【００８３】
選択的除草活性を有する菌類はわずかしか知られておらず、例えば、Ｆ２．１  ホマ・マクロストマ（Ｐｈｏｍａ  ｍａｃｒｏｓｔｒｏｍａ）、特に菌株９４−４４Ｂ；  Ｆ２．２  スクレロチニア・ミノル（Ｓｃｌｅｒｏｔｉｎｉａ  ｍｉｎｏｒ）、特に菌株ＩＭＩ  ３４４１４１、（例： Agrium Advanced TechnologiesのSarritor）；Ｆ２．３  コレトトリクム・グロエオスポリオイデス（Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ  ｇｌｏｅｏｓｐｏｒｉｏｉｄｅｓ）、特にＡＴＣＣ  ２０３５８株（例： Agricultural Research InitiativesのＣｏｌｌｅｇｏ （ＬｏｃｋＤｏｗｎとしても知られる））；  Ｆ２．４  スタグノスポラ・アトリプリシス（Ｓｔａｇｏｎｏｓｐｏｒａ  ａｔｒｉｐｌｉｃｉｓ）；またはＦ２．５  フザリウム・オキシスポラム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ） (このものの異なった種は異なった植物種に対して活性を有する、例：雑草ストライガ・ヘルモンシカ（Ｓｔｒｉｇａ  ｈｅｒｍｏｎｔｈｉｃａ）  （Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｏｘｙｓｐｒｏｕｍ  ｆｏｒｍａｅ  ｓｐｅｃｉａｌｉｓ  ｓｔｒｉｇａｅ）である。
【００８４】
植物成長／植物健康支持、促進又は刺激菌類の例示的種は、Ｅ２．１  タラロマイセス・フラバス（Ｔａｌａｒｏｍｙｃｅｓ  ｆｌａｖｕｓ）、特にＶ１１７ｂ株；  Ｅ２．２  トリコデルマ・アトロビリデ(Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ａｔｒｏｖｉｒｉｄｅ)、特にＣＮＣＭ  Ｉ−１２３７株（例：Ａｇｒａｕｘｉｎｅ（仏）のＥｓｑｕｉｖｅ（登録商標）ＷＰ）、国際出願ＰＣＴ／ＩＴ２００８／０００１９６に記載されているＳＣ１株、菌株番号Ｖ０８／００２３８７、菌株番号ＮＭＩ  Ｎｏ．Ｖ０８／００２３８８、菌株番号  ＮＭＩ  Ｎｏ．Ｖ０８／００２３８９、菌株番号  Ｎｏ．ＮＭＩ  Ｎｏ．  Ｖ０８／００２３９０株、ＬＣ５２株（例：Ａｇｒｉｍｍ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  Ｌｉｍｉｔｅｄ社のSentinel）、ｋｄ株（例：Ａｇｒｉｍｍ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  Ｌｉｍｉｔｅｄ社のＴ−Ｇｒｏ）、および／またはＬＵＩ３２株（例：Ａｇｒｉｍｍ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  Ｌｉｍｉｔｅｄ社のTenet）；  Ｅ２．３  トリコデルマ・ハルジアナム（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｈａｒｚｉａｎｕｍ）、特にITEM 908株またはＴ−２２株（例：Ｋｏｐｐｅｒｔ社のTrianum-P）、Ｅ２．４  ミロテシウム・ベルカリア（Ｍｙｒｏｔｈｅｃｉｕｍ  ｖｅｒｒｕｃａｒｉａ）、特にAARC-0255株（例：Ｖａｌｅｎｔ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ社のＤｉＴｅｒａ（商標））：Ｅ２．５  ペニシリウム・ビライ（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｂｉｌａｉ）、特にＡＴＣＣ  ２２３４８株（例：Ａｃｃｅｌｅｒｏｎ  ＢｉｏＡｇ社のＪｕｍｐＳｔａｒｔ（登録商標））、および／またはＡＴＣＣ２０８５１株；Ｅ２．６  ピシウム・オリガンドラム（Ｐｙｔｈｉｕｍ  ｏｌｉｇａｎｄｒｕｍ）、特にＤＶ７４株またはＭ１株（ＡＴＣＣ  ３８４７２；例  Ｂｉｏｐｒｅｐｒａｔｙ社、CZのPolyversum)；Ｅ２．７  リゾポゴン・アミロポゴン（Ｒｈｉｚｏｐｏｇｏｎ  ａｍｙｌｏｐｏｇｏｎ）  （例：Ｈｅｌｅｎａ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ社のＭｙｃｏ−Ｓｏｌに含まれる）；Ｅ２．８  リゾポゴン・フルビグレバ（Ｒｈｉｚｏｐｏｇｏｎ  ｆｕｌｖｉｇｌｅｂａ）  （例：Ｈｅｌｅｎａ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ社のＭｙｃｏ−Ｓｏｌに含まれる）；  Ｅ２．９  トリコデルマ・ハルジアナム（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｈａｒｚｉａｎｕｍ）、特にＴＳＴｈ２０株、KD株、Plant Health Productsの製品Ｅｃｏ−Ｔ、ＺＡ株または１２９５−２２株；Ｅ２．１０  トリコデルマ・コニンギイ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｋｏｎｉｎｇｉｉ）；Ｅ２．１１  グロムス・アグレカツム（Ｇｌｏｍｕｓ  ａｇｇｒｅｇａｔｕｍ）；Ｅ２．１２  グロムス・クラルム（Ｇｌｏｍｕｓ  ｃｌａｒｕｍ）；Ｅ２．１３  グロムス・デセルチコラ（Ｇｌｏｍｕｓ  ｄｅｓｅｒｔｉｃｏｌａ）；Ｅ２．１４  グロムス  エツニカツム（Ｇｌｏｍｕｓ  ｅｔｕｎｉｃａｔｕｍ）；Ｅ２．１５  グロムス・イントララディセス（Ｇｌｏｍｕｓ  ｉｎｔｒａｒａｄｉｃｅｓ）；Ｅ２．１６  グロムス・モノスポルム（Ｇｌｏｍｕｓ  ｍｏｎｏｓｐｏｒｕｍ）；Ｅ２．１７  グルムス・モセアエ（Ｇｌｏｍｕｓ  ｍｏｓｓｅａｅ）；Ｅ２．１８  ラカリア・ビコロル（Ｌａｃｃａｒｉａ  ｂｉｃｏｌｏｒ）；Ｅ２．１９  リゾポゴン・ルテオルス（Ｒｈｉｚｏｐｏｇｏｎ  ｌｕｔｅｏｌｕｓ）；  ；Ｅ２．２０  リゾポゴン・チンクト���ウス（Ｒｈｉｚｏｐｏｇｏｎ  ｔｉｎｃｔｏｒｕｓ）；Ｅ２．２１  リゾポゴン・ビロスルス（Ｒｈｉｚｏｐｏｇｏｎ  ｖｉｌｌｏｓｕｌｕｓ）、Ｅ２．２２  タマネギモドキ（Scleroderma cepa）、Ｅ２．２３  チチアワタケ（Ｓｕｉｌｌｕｓ  ｇｒａｎｕｌａｔｕｓ）；Ｅ２．２４  アシグロニオイイグチ（Ｓｕｉｌｌｕｓ  ｐｕｎｃｔａｔａｐｉｅｓ）；Ｅ２．２５  トリコデルマ・ビレンス（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ virens）、特にＧＬ−２１株；Ｅ２．２６  バーティシリウム・アルボ・アトラム（Ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ  ａｌｂｏ−ａｔｒｕｍ）  （以前のＶ．  ｄａｈｌｉａｅ）、特にＷＣＳ８５０株（ＣＢＳ  ２７６．９２；  例えば、Ｔｒｅｅ  Ｃａｒｅ  ＩｎｎｏｖａｔｉｏｎｓのＤｕｔｃｈ  Ｔｒｉｇ）；Ｅ２．２７  トリコデルマ・ビリデ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｖｉｒｉｄｅ）、例えばＢ３５株（Ｐｉｅｔｒ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９３，  Ｚｅｓｚ．  Ｎａｕｋ．  Ａ  Ｒ  ｗ  Ｓｚｃｚｅｃｉｎｉｅ  １６１：  １２５―１３７）およびＥ２．２８  プルプレオシリウム・リラシナム（Ｐｕｒｐｕｒｅｏｃｉｌｌｉｕｍ  ｌｉｌａｃｉｎｕｍ）  （以前はＰａｅｃｉｌｏｍｙｃｅｓ  ｌｉｌａｃｉｎｕｓとして知られていた）２５１株（ＡＧＡＬ  ８９／０３０５５０；例えば、Ｂａｙｅｒ  ＣｒｏｐＳｃｉｅｎｃｅ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃｓ  ＧｍｂＨのＢｉｏＡｃｔ）である。
【００８５】
より好ましい態様において、植物の健康および／または成長に有益な効果を有する真菌株は、タラロマウセス・フラバス（Ｔａｌａｒｏｍｙｃｅｓ  ｆｌａｖｕｓ）、ＶＩＩ７ｂ株；  トリコデルマ・ハルジアナム（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｈａｒｚｉａｎｕｍ）ＫＤ株またはPlant Health Productsの製品Ｅｃｏ−Ｔ；  ミロテシウム・ベルカリア（Ｍｙｒｏｔｈｅｃｉｕｍ  ｖｅｒｒｕｃａｒｉａ）ＡＡＲＣ−２５５株；  ペニシリウム・ビライ（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｂｉｌａｉｉ）ＡＴＣＣ  ２２３４８株；  ピシウム・オリガンドラム（Ｐｙｔｈｉｕｍ  ｏｌｉｇａｎｄｒｕｍ）ＤＶ７４株またはＭ１（ＡＴＣＣ  ３８４７２）；  トリコデルマ・ビリデ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｖｉｒｉｄｅ）Ｂ３５株；  トリコデルマ・アトロビリデ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ａｔｒｏｖｉｒｉｄｅ）ＣＮＣＭ  Ｉ−１２３７株、およびプルプレオシルリウム・リラシヌム（Ｐｕｒｐｕｒｅｏｃｉｌｌｉｕｍ  ｌｉｌａｃｉｎｕｍ）  （以前はＰａｅｃｉｌｏｍｙｃｅｓ  ｌｉｌａｃｉｎｕｓとして知られていた）２５１株（ＡＧＡＬ  ８９／０３０５５０）から選択される。
【００８６】
さらに好ましい実施形態では、植物の健康および／または成長に有益な効果を有する真菌株は、ペニシリウム・ビライ（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｂｉｌａｉｉ）ＡＴＣＣ  ２２３４８株、トリコデルマ・ビリデ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｖｉｒｉｄｅ）、例えばＢ３５株、トリコデルマ・アトロビリデ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ａｔｒｏｖｉｒｉｄｅ）ＣＮＣＭ  Ｉ−１２３７株およびプルプレオシリウム・リラシナム（Ｐｕｒｐｕｒｅｏｃｉｌｌｉｕｍ  ｌｉｌａｃｉｎｕｍ）  （以前はＰａｅｃｉｌｏｍｙｃｅｓ  ｌｉｌａｃｉｎｕｓとして知られていた）２５１（ＡＧＡＬ  ８９／０３０５５０）株から選択される。
【００８７】
殺菌的に活性な真菌は、例えば、Ａ２．２  Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍ  ｐｕｌｌｕｌａｎｓ、特にＤＳＭ１４９４０株の胞胚胞子；  Ａ２．３  オーレオバシヂウム・プルランス（Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍ  ｐｕｌｌｕｌａｎｓ）、特にＤＳＭ  １４９４１株の胞胚胞子またはＤＳＭ１４９４０株およびＤＳＭ  １４９４１株の胞胚胞子の混合物；  Ａ２．９  スクレロデルマ・シトリナム（Ｓｃｌｅｒｏｄｅｒｍａ  ｃｉｔｒｉｎｕｍ）である。
【００８８】
真菌病原体に対して活性な真菌は、例えば、Ｂ２．１  コニオチリウム・ミニタンス（Ｃｏｎｉｏｔｈｙｒｉｕｍ  ｍｉｎｉｔａｎｓ）、特にＣＯＮ／Ｍ／９１−８株（受託番号ＤＳＭ−９６６０；例えば、Ｂａｙｅｒ  ＣｒｏｐＳｃｉｅｎｃｅ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃｓ  ＧｍｂＨからのＣｏｎｔａｎｓ（登録商標））；  Ｂ２．２  メチニコビア・フルクチコラ（Ｍｅｔｓｃｈｎｉｋｏｗｉａ  ｆｒｕｃｔｉｃｏｌａ）、特にＮＲＬ  Ｙ−３０７５２株；  Ｂ２．３  ミクロスファエロプシス・オクラセア（Ｍｉｃｒｏｓｐｈａｅｒｏｐｓｉｓ  ｏｃｈｒａｃｅ）、特に株Ｐ１３０Ａ  （ＡＴＣＣ寄託物７４４１２）；  Ｂ２．４  ムスコドールアルブス（Ｍｕｓｃｏｄｏｒ  ａｌｂｕｓ）、特に株ＱＳＴ  ２０７９９（受託番号ＮＲＬ３０５４７）；  Ｂ２．５  リコデルマ・ハルジアナム・リファイ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｈａｒｚｉａｎｕｍ  ｒｉｆａｉ）、特にＫＲＬ−ＡＧ２株（Ｔ−２２株、／ＡＴＣＣ  ２０８４７９、例えば、ＰＬＡＮＴＳＨＩＥＬＤ  Ｔ−２２Ｇ、Ｒｏｏｔｓｈｉｅｌｄ（登録商標）、およびＢｉｏＷｏｒｋｓ，  ＵＳからのＴｒｉｃｈｏｄｅｘ（登録商標）としても知られる）；  Ｂ２．６  アルスロボトリス・ダクチロイド（Ａｒｔｈｒｏｂｏｔｒｙｓ  ｄａｃｔｙｌｏｉｄｅｓ）；Ｂ２．７  アルスロボトリス・オリゴスポラ（Ａｒｔｈｒｏｂｏｔｒｙｓ  ｏｌｉｇｏｓｐｏｒａ）；  Ｂ２．８  アルスロボトリス・ スペルバ（Ａｒｔｈｒｏｂｏｔｒｙｓ  ｓｕｐｅｒｂａ）；  Ｂ２．９  アスペルギルス・フラバス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｆｌａｖｕｓ）、特にＮＲＬ  ２１８８２株（例えば、ＳｙｎｇｅｎｔａからのＡｆｌａ−Ｇｕａｒｄ（登録商標））またはＡＦ３６株（例えば、Ａｒｉｚｏｎａ  Ｃｏｔｔｏｎ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ａｎｄ  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ  Ｃｏｕｎｃｉｌ，  ＵＳからのＡＦ３６）；  Ｂ２．１０  グリオクラディウム・ロゼウム（Ｇｌｉｏｃｌａｄｉｕｍ  ｒｏｓｅａ）（Ｃｌｏｎｏｓｔａｃｈｙｓ  ｒｏｓｅａ  Ｐｌｕｓとしても知られている）、特にＸｕｅ  （Ｅｆｆｉｃａｃｙ  ｏｆ  Ｃｌｏｎｏｓｔａｃｈｙｓ  ｒｏｓｅａ  ｓｔｒａｉｎ  ＡＣＭ９４１  ａｎｄ  ｆｕｎｇｉｃｉｄｅ  ｓｅｅｄ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｒｏｏｔ  ｔｏｔ  ｃｏｍｐｌｅｘ  ｏｆ  ｆｉｅｌｄ  ｐｅａ，  Ｃａｎ  Ｊｏｕｒ  Ｐｌａｎｔ  Ｓｃｉ  ８３（３）：  ５１９−５２４）に開示されているＡｄｊｕｖａｎｔｓ  Ｐｌｕｓからの３２１Ｕ株、ＩＫ７２６株(Jensen DF, et al. Development of a biocontrol agent for plant disease control with special emphasis on the near ｃｏｍｍｅｒｃｉａｌ  ｆｕｎｇａｌ  ａｎｔａｇｏｎｉｓｔ  Ｃｌｏｎｏｓｔａｃｈｙｓ  ｒｏｓｅａ  ｓｔｒａｉｎ  ‘ＩＫ７２６’；  Ａｕｓｔｒａｌａｓ  Ｐｌａｎｔ  Ｐａｔｈｏｌ．  ２００７；３６：９５−１０１）、８８−７１０株（ＷＯ２００７／１０７００００）、ＣＲ７株（ＷＯ２０１５／０３５５０４）またはＷＯ２０１７１０９８０２に開示されているＣＲｒＯ株、ＣＲＭ株およびＣＲｒ２株；  Ｂ２．１１  フレビオプシス・ギガンテア（Ｐｈｌｅｂｉｏｐｓｉｓ  （またはＰｈｌｅｂｉａまたはＰｅｎｉｏｐｈｏｒａ）  ｇｉｇａｎｔｅａ）、特にＶＲＡ  １８３５株（ＡＴＣＣ  ９０３０４）、ＶＲＡ  １９８４株（Ｄ��Ｍ１６２０１）、ＶＲＡ  １９８５株（ＤＳＭ１６２０２）、ＶＲＡ  １９８６株（ＤＳＭ１６２０３）、ＦＯＣ  ＰＧ  Ｂ２０／５株（ＩＭＩ３９００９６）、ＦＯＣ  ＰＧ  ＳＰ  ｌｏｇ６株（ＩＭＩ３９００９７）、ＦＯＣ  ＰＧ  ＳＰ  ＰＧ  ｌｏｇ５株（ＩＭＩ３９００９８）、ＦＯＣ  ＰＧ  ＢＵ３（ＩＭＩ３９００９９）株、ＦＯＣ  ＰＧ  ＢＵ４（ＩＭＩ３９０１００）株、ＦＯＣ  ＰＧ  ４１０．３（ＩＭＩ３９０１０１）株、ＦＯＣ  ＰＧ  ９７／１０６２／１１６／１．１（ＩＭＩ３９０１０２）株、ＦＯＣ  ＰＧ  Ｂ２２／ＳＰ１２８７／３．１（ＩＭＩ３９０１０３）株、ＦＯＣ  ＰＧ  ＳＨ１（ＩＭＩ３９０１０４）株および／またはＦＯＣ  ＰＧ  Ｂ２２／ＳＰ１１９０／３．２（ＩＭＩ３９０１０５）株  （Ｐｈｌｅｂｉｏｐｓｉｓ製品は、例えば、Verdera and FINのRotstop（登録商標）、ｅ−ｎｅｍａ、ＤＥのＰＧ−Ａｇｒｏｍａｓｔｅｒ（登録商標）、ＰＧ−Fungler (登録商標)、PG-ＩＢＬ（登録商標）、ＰＧ−Ｐｏｓｚｗａｌｄ（登録商標）およびＲｏｔｅｘ（登録商標））；  Ｂ２．１２  ｏｌｉｇａｎｄｒｕｍ、特にＤＶ７４またはＭ１株（ＡＴＣＣ  ３８４７２；例えば、Biopre
praty, CZのPolyversum）；Ｂ２．１３  Ｓｃｌｅｒｏｄｅｒｍａ  ｃｉｔｒｉｎｕｍ；  Ｂ２．１４  タラロマイセス・フラバス（Ｔａｌａｒｏｍｙｃｅｓ  ｆｌａｖｕｓ）、特にＶ１１７ｂ株；  Ｂ２．１５  トリコデルマ・アスペレラム（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ａｓｐｅｒｅｌｌｕｍ）、特に、Ｉｓａｇｒｏ由来のＩＣＣ  ０１２株、または、SKT-1株（例えばKumiai Chemical IndustryのＥＣＯ−ＨＯＰＥ（登録商標）など）、Ｔ３４株（例えば、Ｂｉｏｂｅｓｔ  Ｇｒｏｕｐ  ＮＶ由来のＡＳＰＥＲＥＬＬＯ（登録商標）およびＢｉｏｃｏｎｔｒｏｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  Ｓ．Ｌ．，  ＥＳのT34  BIOCONTROL（登録商標））；  Ｂ２．１６  トリコデルマ・アトロビリデ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ａｔｒｏｖｉｒｉｄｅ）、特にＣＮＣＭ  Ｉ−１２３７株（例えば、Ａｇｒａｕｘｉｎｅ  FR由来のＥｓｑｕｉｖｅ（登録商標））、国際公開  ＰＣＴ／ＩＴ２００８／０００１９６に記載されているＳＣ１株、７７B株（Ａｎｄｅｒｍａｔｔ  Ｂｉｏｃｏｎｔｒｏｌ由来のＴ７７株）、菌株番号ＮＭＩ  Ｎｏ．  Ｖ０８／００２３８７株、ＮＭＩ  Ｎｏ．  Ｖ０８／００２３８８株、ＮＭＩ  Ｎｏ．  Ｖ０８／００２３８９株、ＮＭＩ  Ｎｏ．  Ｖ０８／００２３９０株、LC52株（例えば、Agrimm Technologies Limited のSentine）、ＬＵＩ３２株（Ａｇｒｉｍｍ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  ＬｉｍｉｔｅｄのTenet）、ＡＴＣＣ  ２０４７６株（ＩＭＩ  ２０６０４０）、Ｔ１１株（ＩＭＩ３５２９４１／  ＣＥＣＴ２０４９８）、ＳＫＴ−１株（ＦＥＲＭ  Ｐ−１６５１０株）、ＳＫＴ−２株（ＦＥＲＭ  Ｐ−１６５１１株）、ＳＫＴ−３株（ＦＥＲＭ  Ｐ−１７０２１株）；Ｂ２．１７  トリコデルマ・ハルマツム（Trichoderma harmatum）；Ｂ２．１８  トリコデルマ・ハルジアナム（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｈａｒｚｉａｎｕｍ）、特にＫＤ株、Ｔ−２２株（例えば、ＫｏｐｐｅｒｔのTrianum-P株）、ＴＨ３５株（例えば、MycontrolのＲｏｏｔ−Ｐｒｏ）、ＤＢ１０３株（例えば、Ｄａｇｕｔａ  Ｂｉｏｌａｂ社によるＴ−Ｇｒｏ  ７４５６）；Ｂ２．１９  Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｖｉｒｅｎｓ  （Ｇｌｉｏｃｌａｄ
ｉｕｍ  ｖｉｒｅｎｓとしても知られる）、特にＧＬ−２１株（例えば、米国サーティス社によるＳｏｉｌＧａｒｄ）；  Ｂ２．２０  Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｖｉｒｉｄｅ、  特にＴＶ１株（例えば、ＫｏｐｐｅｒｔによるＴｒｉａｎｕｍ−Ｐ）、Ｂ３５株（Ｐｉｅｔｒら、Ｚｅｓｚ．  Ｎａｕｋ．  Ｓｚｃｚｅｃｉｎｉｅ  １６１：  １２５−１３７）；  Ｂ２．１９  トリコデルマ・ビレンス（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｖｉｒｅｎｓ）  （Ｇｌｉｏｃｌａｄｉｕｍ  ｖｉｒｅｎｓとしても知られる），特にｓｔｒａｉｎ  ＧＬ−２１株  （例えばＣｅｒｔｉｓ，  ＵＳのＳｏｉｌＧｒａｎｄ）；  Ｂ２．２０  トリコデルマ・ビリデ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｖｉｒｉｄｅ）、特にＴＶ１株（例えば、ＫｏｐｐｅｒｔのＴｒｉａｎｕｍ−Ｐ）、Ｂ３５株  （Ｐｉｅｔｒ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９３，  Ｚｅｓｚ．  Ｎａｕｋ．  Ａ  Ｒ  ｗ  Ｓｚｃｚｅｃｉｎｉｅ  １６１：  １２５−１３７）；  Ｂ２．２１  アンペロミセス・キスカリス（Ａｍｐｅｌｏｍｙｃｅｓ  ｑｕｉｓｑｕａｌｉｓ）、特にＡＱ  １０株（例えば、ＣＢＣ Europe、イタリアのAQ１０（登録商標））；  Ｂ２．２２  Ａｒｋａｎｓａｓ真菌１８、ＡＲＦ；  Ｂ２．２３  オーレオバシヂウム・プルランス（Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍ  ｐｕｌｌｕｌａｎｓ）、特にＤＳＭ  １４９４１株の胞胚胞子、ＤＳＭ  １４９４１株の胞胚胞子またはＤＳＭ  １４９４１株とＤＳＭ  １４９４１株の胞胚胞子の混合物（例えば、ｂｉｏ−ｆｅｒｍ、ＣＨによるＢｏｔｅｃｔｏｒ（登録商標））；Ｂ２．２４  ケトミウム・クプラム（Ｃｈａｅｔｏｍｉｕｍ  ｃｕｐｒｅｕｍ）（例えば、ＡｇｒｉＬｉｆｅによるＢＩＯＫＵＰＲＵＭ  ＴＭ）；  Ｂ２．２５  ケトミウム  グロボスム（Ｃｈａｅｔｏｍｉｕｍ  ｇｌｏｂｏｓｕｍ）  （例えばＲｉｖａｌｅによるＲｉｖａｄｉｏｍ）；Ｂ２．２６  クラドスポリウム・クラドスポリオイデス（Ｃｌａｄｏｓｐｏｒｉｕｍ  ｃｌａｄｏｓｐｏｒｉｏｉｄｅｓ）、特にＨ３９株（Ｓｔｉｃｈｔｉｎｇ  Ｄｉｅｎｓｔ  Ｌａｎｄｂｏｕｗｋｕｎｄｉｇ  Ｏｎｄｅｒｚｏｅｋによる）；  Ｂ２．２７  ダクチラリア・カンジダ（Ｄａｃｔｙｌａｒｉａ  ｃａｎｄｉｄａ）；  Ｂ２．２８  ジロホスホラ・アロペクリ（Ｄｉｌｏｐｈｏｓｐｈｏｒａ  ａｌｏｐｅｃｕｒｉ）  （例えば、Ｔｗｉｓｔ菌）；  Ｂ２．２９  フザリウム・オキシスポラム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ）、特にＦｏ４７株（例えば、  Ｎａｔｕｒａｌ  Ｐｌａｎｔ  ＰｒｏｔｅｃｔｉｏｎのＦｕｓａｃｌｅａｎ)；  Ｂ２．３０  グリオクラジウム・カテヌラタム（Ｇｌｉｏｃｌａｄｉｕｍ  ｃａｔｅｎｕｌａｔｕｍ）  （同義語：  Ｃｌｏｎｏｓｔａｃｈｙｓ  ｒｏｓｅａ  ｆ．  ｃａｔｅｎｕｌａｔｅ）、特にＪ１４４６株（ＬａｌｌｅｍａｎｄのＰｒｅｓｔｏｐ  （登録商標））；  Ｂ２．３１  レカニシリウム・レカニ（Ｌｅｃａｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｌｅｃａｎｉｉ）（以前はＶｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｌｅｃａｎｉｉとして知られていた）、特にＫＶ０１株（例えば、Ｋｏｐｐｅｒｔ／ＡｒｙｓｔａのVertalec(登録商標)）；  Ｂ２．３２  ペニシリン・バーミクラツム（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｖｅｒｍｉｃｕｌａｔｕｍ）；Ｂ２．３３  トリコデルマ・ガムシイ（Ｔｒｉｃｈｏｄ��ｒｍａ  ｇａｍｓｉｉ）  （以前はＴ．  ｖｉｒｉｄｅ）、特にＩＣＣ０８０株（ＩＭＩ  ＣＣ  ３９２１５１  ＣＡＢＩ、例えばＡＧＲＯＢＩＯＳＯL  ＤＥ  ＭＥＸＩＣＯ，  Ｓ．Ａ．  ＤＥ  Ｃ．Ｖ．のBioDerma）；Ｂ２．３４  トリコデルマ・ポリスポラム（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｐｏｌｙｓｐｏｒｕｍ）、特に、IMI２０６０３９株（例えば、ＢＩＮＡＢ  Ｂｉｏ−Ｉｎｎｏｖａｔｉｏｎ  ＡＢ社（スウェーデン）によるＢｉｎａｂ  ＴＦ  ＷＰ）；Ｂ２．３５  トリコデルマ・ストロマチクム（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｓｔｒｏｍａｔｉｃｕｍ）  （Ceplat、ブラジルのTricovab）；  Ｂ２．３６  ツカムレラ・パウロメタボラ（Ｔｓｕｋａｍｕｒｅｌｌａ  ｐａｕｒｏｍｅｔａｂｏｌａ）、特にＣ−９２４株（例：ＨｅｂｅｒＮｅｍ（登録商標））；  Ｂ２．３７  ウロクラジウム・オウデマンシイ（Ｕｌｏｃｌａｄｉｕｍ  ｏｕｄｅｍａｎｓｉ）、特にＨＲＵ３株（例えば、Botry-Zen社、NZのBotry-Zen（登録商標））  ．  Ｂ２．３８  バーティシリウム・アルボ・アトラム（Ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ  ａｌｂｏ−ａｔｒｕｍ）  （以前のＶ．  ｄａｈｌｉａｅ）、特にＷＣＳ８５０株（ＣＢＳ  ２７６．９２；例えば、Ｔｒｅｅ  Ｃａｒｅ  ＩｎｎｏｖａｔｉｏｎｓによるＤｕｔｃｈ  Ｔｒｅｅ）；  Ｂ２．３９  ムスコドル・  ロセウス（Ｍｕｓｃｏｄｏｒ  ｒｏｓｅｕｓ）、特にＡ３−５株（受託番号：ＮＲＲＬ  ３０５４８）；  Ｂ２．４０  バーティシリウム・クラミドスポリウム（Ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｃｈｌａｍｙｄｏｓｐｏｒｉｕｍ）；Ｂ２．４１  トリコデルマ・アスペレラム（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ａｓｐｅｒｅｌｌｕｍ）株ＩＣＣ  ０１２とトリコデルマ・ガムシイ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｇａｍｓｉｉ）株ＩＣＣ  ０８０の混合物（例えば、バイエル・クロプサイエンスＬＰからのＢＩＯ−ＴＡＭ（商標）として知られる製品）、Ｂ２．４２  シンプリシリウム・ラノソニベウム（Ｓｉｍｐｌｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｌａｎｏｓｏｎｉｖｅｕｍ）およびＢ２．４３  トリコデルマ・フェルティレ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｆｅｒｔｉｌｅ）（例えば、ＢＡＳＦからの製品ＴｒｉｃｈｏＰｌｕｓ）である。
【００８９】
好ましい実施態様において、殺菌活性を有する生物農薬は、コニオチリウム・ミニタンス、特に株ＣＯＮ／Ｍ／９１−８（寄託番号  ＤＳＭ−９６６０）、アスペルギルス・フラバスＮＲＲＬ  ２１８８２株（Ｓｙｎｇｅｎｔａ社からＡＦ３６として入手可能）およびＡＦ３６株（Ａｒｉｚｏｎａ  Ｃｏｔｔｏｎ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ａｎｄ  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ  Ｃｏｕｎｃｉｌ，  ＵＳからＡＦ３６として市販）；グリオクラディウム・ロゼウム  ３２１Ｕ株、ＡＣＭ９４１株、ＩＫ７２６株、８８−７１０株（ＷＯ２００７／１０７０００）、ＣＲ７株（ＷＯ２０１５／０３５５０４）；グリオクラジウム・カテヌラタム  Ｊ１４４６株；フレビオプシス（またはＰｈｌｅｂｉａ  ｏｒ  Ｐｅｎｉｏｐｈｏｒａ）・ギガンテア  特にＶＲＡ  １８３５株（ＡＴＣＣ  ９０３０４）、ＶＲＡ  １９８４株（ＤＳＭ１６２０１）、ＶＲＡ  １９８５（ＤＳＭ１６２０２）、ＶＲＡ  １９８６株（ＤＳＭ１６２０３）、ＦＯＣ  ＰＧ  Ｂ２０／５（ＩＭＩ３９００９６）、ＦＯＣ  ＰＧ  ＳＰ  ｌｏｇ  ６（ＩＭＩ３９００９７）、ＦＯＣ  ＰＧ  ＳＰ  ｌｏｇ  ５（ＩＭＩ３９００９８）、ＦＯＣ  ＰＧ  ＢＵ３（ＩＭＩ３９００９９）、ＦＯＣ  ＰＧ  ＢＵ４（ＩＭＩ３９０１００）、ＦＯＣ  ＰＧ  ４１０．３（ＩＭＩ３９０１０）、ＦＯＣ  ＰＧ  ９７／１０６２／１１６／１．１（ＩＭＩ３９０１０２）、  ＦＯＣ  ＰＧ  Ｂ２２／ＳＰ１２８７／３．１（ＩＭＩ３９０１０３）、ＦＯＣ  ＰＧ  ＳＨ１（ＩＭＩ３９０１０４）、ＦＯＣ  ＰＧ  Ｂ２２／ＳＰ１１９０／３．２（ＩＭＩ３９０１０５）（Ｒｏｔｓｔｏｐ（登録商標）としてＶｅｒｄｅｒａ  ａｎｄ  ＦＩＮから市販、ＰＧ−Ａｇｒｏｍａｓｔｅｒ（登録商標）、ＰＧ−Ｆｕｎｇｌｅｒ（登録商標）、ＰＧ−ＩＢＬ（登録商標）、ＰＧ−Ｐｏｓｚｗａｌｄ（登録商標）、Ｒｏｔｅｘ（登録商標）としてｅ−ｎｅｍａ社、ＤＥから市販）；ピシウム・オリガンドラム、ＤＶ７４またはＭ１種（ＡＴＣＣ  ３８４７２）（ＰｏｌｙｖｅｒｓｕｍとしてＢｉｏｐｒｅｐｒａｔｚｙ、ＣＺから市販）；タラロマイセス・フラバス、ＶＩＩ７ｂ株；アンペロミセス・キスカリス、特にＡＱ  １０（登録商標）としてＣＢＣ  Ｅｕｒｏｐｅ、イタリアから市販）、グリオクラジウム・カテヌラタム  （同義語：  Ｃｌｏｎｏｓｔａｃｈｙｓ  ｒｏｓｅａ  ｆ．  ｃａｔｅｎｕｌａｔｅ）Ｊ１４４６株；クラドスポリウム・クラドスポリオイデス、例えば、Ｈ３９株（Ｓｔｉｃｈｔｉｎｇ  Ｄｉｅｎｓｔ  Ｌａｎｄｂｏｕｗｋｕｎｄｉｇ  Ｏｎｄｅｒｚｏｅｋ）、Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｖｉｒｅｎｓ  （Ｇｌｉｏｃｌａｄｉｕｍ  ｖｉｒｅｎｓとしても知られる）、特にＧＬ−２１株（例えば、Ｃｅｒｔｉｓ社製、米国）、トリコデルマ・アトロビリデＣＮＣＭ  Ｉ−１２３７株、７７Ｂ株、ＬＵ１３２株または受入番号  ＣＢＳ  １２２０８９を有するＳＣ１株；トリコデルマ・ハルジアナムＴ−２２株（例えば、Ａｎｄｅｒｍａｔｔ  ＢｉｏｃｏｎｔｒｏｌまたはＫｏｐｐｅｒｔからのＴｒｉａｎｕｍ−Ｐ）、トリコデルマ・アスペレラム（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ａｓｐｅｒｅｌｌｕｍ）の受託番号ＦＥＲＭ  Ｐ−１６５１０を有するＳＫＴ−１株、またはＴ３４株；トリコデルマ・ビリデＢ３５株および��リコデルマ・アスペレロイデス（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ａｓｐｅｒｅｌｌｏｉｄｅｓ）  ＪＭ４１Ｒ株（受託番号ＮＲＲＬ  Ｂ−５０７５９）から選択される。
【００９０】
より好ましい実施形態では、殺真菌活性を有する真菌種は、特にコニオチリウム・ミニタンス株、特にＣＯＮ／Ｍ／９１−８（Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  Ｎｏ．  ＤＳＭ−９６６０）（Ｄｅ：ＰｒｏｐｈｙｔａからのＣｏｎｔａｎｓ（登録商標）として市販）、グリオクラディウム・ロゼウム３２１Ｕ株、ＡＣＭ９４１株、ＩＫ７２６株；グリオクラジウム・カテヌラタム、特にＪ１４４６株；およびトリコデルマ・ビレンス（Ｇｌｉｏｃｌａｄｉｕｍ  ｖｉｒｅｎｓとしても知られている）、特にＧＬ−２１株から選択される。前記真菌種は、コニオチリウム・ミニタンス、特に、ＣＯＮ／Ｍ／９１−８株（寄託番号ＤＳＭ−９６６０）（Ｐｒｏｐｈｙｔａ、ＤＥのＣｏｎｔａｎｓ（登録商標）として市販）、グリオクラディウム・ロゼウム３２１Ｕ株、ＡＣＭ９４１株、ＩＫ７２６株；グリオクラジウム・カテヌラタム、特にＪ１４４６株およびトリコデルマ・ビレンス（Ｇｌｉｏｃｌａｄｉｕｍ  ｖｉｒｅｎｓとしても知られている）、特にＧＬ−２１株である。真菌種は、好ましくは、コニオチリウム・ミニタンスＣＯＮ／Ｍ／９１−８株（受託番号ＤＳＭ−９６６０）、グリオクラジウム・カテヌラタムＪ１４４８株、トリコデルマ・アトロビリデＣＮＣＭ  Ｉ−１２３７株またはトリコデルマ・アトロビリデＢ３５株であってもよい。
【００９１】
殺真菌活性のある真菌の中では、トリコデルマ属、特にトリコデルマ・ビリデおよびトリコデルマ・アトロビリデが特に好ましい。それらは、トリコデルマ・アトロビリデＣＮＣＭ  Ｉ−１２３７株；受託番号ＣＢＳ  １２２０８９、ＷＯ  ２００９／１１６１０６およびＵ．Ｓ．  Ｐａｔｅｎｔ  Ｎｏ．  ８，４３１，１２０（Ｂｉ−ＰＡ由来）を有するトリコデルマ・アトロビリデSC1株；  トリコデルマ・アトロビリデ７７Ｂ株；  トリコデルマ・アトロビリデＬＵ１３２株；  トリコデルマ・ビリデＢ３５株を含む。特に好ましいのは、トリコデルマ・アトロビリデＣＮＣＭ  Ｉ−１２３７株およびトリコデルマ・ビリデＢ３５株である。
【００９２】
前記真菌種は昆虫病原性真菌でありえる。
【００９３】
昆虫に対して活性な真菌（昆虫病原性真菌）には、Ｃ２．１ムスコドル・アルブス(Muscodor albus)、特にＱＳＴ  ２０７９９株（寄託番号ＮＲＲＬ  ３０５４７）；  Ｃ２．２ムスコドル・ ロセウス（Muscodor roseus）、特にＡ３−５株（寄託番号ＮＲＲＬ  ３０５４８）；C2.3ボーベリア・バシアナ（Beauveria bassiana） 特にＡＴＣＣ  ７４０４０株（例えば、Intrachem Bio ItaliaのNaturalis(登録商標)；GHA株（寄託番号ATCC74250；例えばLaverlam International CorporationのBotaniGuard Es and Mycotrol-O（登録商標））；ＡＴＰ０２株（寄託番号ＤＳＭ  ２４６６５）；ＰＰＲＩ  ５３３９株（例えばＢＡＳＦのBroadBand(登録商標)）；ＰＰＲＩ  ７３１５株、Ｒ４４４株（例えば、Ａｎｄｅｒｍａｔｔ  ＢｉｏｃｏｎｔｒｏｌのＢｂ−Ｐｒｏｔｅｃ）、ＩＬ１９７、ＩＬ１２、ＩＬ２３６、ＩＬ１０、ＩＬ１３１、ＩＬ１１６株（Ｊａｒｏｎｓｋｉ，  ２００７．  Ｕｓｅ  ｏｆ  Ｅｎｔｏｍｏｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ  Ｆｕｎｇｉ  ｉｎ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｐｅｓｔ  Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ，  ２００７：  ＩＳＢＮ：  ９７８−８１−１９２−６を参照）、Ｂｖ０２５株（Ｇａｒｃｉａ  ｅｔ  ａｌ．  ２００６．  Ｍａｎｅｊｏ  Ｉｎｔｅｇｒａｄｏ  ｄｅ  Ｐｌａｇａｓ  ｙ  Ａｇｒｏｅｃｏｌｏｇiａ（Ｃｏｓｔａ  Ｒｉｃａ）  Ｎｏ．７７を参照））；ＢａＧＰＫ株；ＩＣＰＥ  ２７９株；CG716株（例えば、ＮｏｖｏｚｙｍｅｓのＢｏｖｅＭａｘ（登録商標））；  Ｃ２．４  ヒルステラ・トンプソニ（Ｈｉｒｓｕｔｅｌｌａ  ｔｈｏｍｐｓｏｎｉｉ）（例えば、Ａｇｒｏ  Ｂｉｏ−ｔｅｃｈ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｃｅｎｔｒｅ，  ＩＮのＭｙｃｏｈｉｔおよびABTEC）；  Ｃ２．６  レカニシリウム・レカニイ（Ｌｅｃａｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｌｅｃａｎｉｉ）（以前はＶｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｌｅｃａｎｉｉとして知られていた）、特にＫＶ０１株の分生子（例えば、Ｋｏｐｐｅｒｔ／ＡｒｙｓｔａのＭｙｃｏｔａｌ（登録商標）およびＶｅｒｔａｌｅｃ（登録商標））、ＤＡＯＭ１９８４９９株またはＤＡＯＭ２１６５９６株；  Ｃ２．９  レカニシリウム・ムスカ
リウム（Ｌｅｃａｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｍｕｓｃａｒｉｕｍ）（以前はＶｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｌｅｃａｎｉｉ株）、特にＶＥ  ６／  ＣＡＢＩ（＝ＩＭＩ）  ２６８３１７／  ＣＢＳ１０２０７１／  ＡＲＳＥＦ５１２８株（例えば、KopperのMycotal）；C2.10  メタリジウム・アニソプリアエ・アクリダム変種(Metarhizium anisopliae var acridum)、例えば、  Ｂｅｃｋｅｒ  ｕｎｄｅｒｗｏｏｄ，  ＵＳのＧｒｅｅｎＧｕａｒｄ  またはＩＭＩ  ３３０１８９単離体（ＡＲＳＥＦ７４８６；  例えば、Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｃｏｎｔｒｏｌ  ＰｒｏｄｕｃｔｓによるＧｒｅｅｎ  Ｍｕｓｃｌｅ）；  Ｃ２．１１  メタリジウム・ブルンネウム（Metarhizium brunneum）、例えば、Ｃｂ  １５株（例えばBIO CAREのＡＴＴＲＡＣＡＰ（登録商標））  Ｃ２．１２  メタリジウム・アニソプリエ（Ｍｅｔａｒｈｉｚｉｕｍ  ａｎｉｓｏｐｌｉａｅ）、例えば、ＥＳＡＬＱ  １０３７株（例えば、Ｍｅｔａｒｒｉｌ（登録商標）  ＳＰ  Ｏｒｇａｎｉｃ由来）、Ｅ−９株（例えば、Ｍｅｔａｒｒｉｌ（登録商標）  ＳＰ  Ｏｒｇａｎｉｃ由来）、Ｍ２０６０７７株、Ｃ４−Ｂ株（ＮＲＲＬ  ３０９０５）、ＥＳＣ１株、１５０１３−１株（ＮＲＲＬ  ６７０７３）、３２１３−１株（ＮＲＲＬ  ６７０７４）、Ｃ２００９１株、Ｃ２００９２株、Ｆ５２株（ＤＳＭ３８８４／  ＡＴＣＣ  ９０４４８；例えば、Ｂａｙｅｒ  ＣｒｏｐＳｃｉｅｎｃｅ社によるＢＩＯ  １０２０およびNovozymesのMet52）またはICIPE78株；メタリジウム・ロベルトシ(Metarhizium robertsii)  ２３０１３−３（ＮＲＲ  ６７０７５）；  C2.13  ノムラエ・リレイ(Nomuraea rileyi)；ペキロマイセス・フモソロセウス（Paecilomyces fumosoroseus）（新Isaria fumosorosea）、特にApopka 97株（Certis, USA からPreFeRalとして市販）、Fe9901（Natural industries, USAからNoFlyとして市販）、ARSEF 3581、ARSEF 3302、ARSEF 2679（ARS Collection of Entomopathogenic Fungal Cultures, Ithaca, USA）、IfB01 (China Center for Type Culture Collection CCTCC M2012400)、ESALQ1296、ESALQ1364、ESALQ1409 (ESALQ: サンパウロ大学 (Piracicaba, SP, ブラジル))、CG1228 (EMBRAPA Genetic Resources and Biotechnology (Brasilia, DF、ブラジル))、KCH J2 (Dymarska et al., 2017; PLoS one 12(10)): e0184885)、HIB-19、HIB-23、HIB-29、HIB-30 (Gandarilla-Pacheco et al., 2018; Rev Argent Microbiol 50: 81-89)、CHE-CNRCB 304, EH-511/3 (Flores-Villegas et al., 2016; Parasites & Vectors 2016 9:176 doi: 10.1186/s13071-016-1453-1)、CHE-CNRCB 303、CHE-CNRCB 305、CHE-CNRCB 307 (Gallou et al., 2016; fungal biology 120 (2016) 414-423)、EH-506/3、EH-503/3、EH-520/3、PFCAM、MBP、PSMB1 (National Center for Biololgical Control, Mexico; Castellanos-Moguel et al., 2013; Revista Mexicana De Micologia 38: 23-33, 2013)、RCEF3304 (Meng et al., 2015; Genet Mol Biol. 2015 Jul-Sep; 38(3): 381-389)、PF01-N10 (CCTCC No. M207088)、CCM 8367 (Czech Collection of Microorganisms, Brno)、SFP-198 (Kim et al., 2010; Wiley Online: DOI 10.1002/ps.2020)、K3 (Yanagawa et al., 2015; J Chem Ecol. 2015; 41(12): 118-1126), CLO 55 (Ansari Ali et al., 2011; PLoS One. 2011; 6(1): e16108. DOI: 10.1371/journal.pone.0016108), IfTS01, IfTS02, IfTS07 (Dong et al. 2016 / PLoS ONE 11(5): e0156087. doi:10.1371/journal.pone.0156087)、P1 (Sun Agro Biotech Research Centre, India)、If-02、If-2.3、If-03 (Farooq and Freed, 2016; DOI: 10.1016/j.bjm.2016.06.002)、Ifr AsC (Meyer et al., 2008; J. Invertebr. Pathol. 99:96-102. 10.1016/j.jip.2008.03.007)、PC-013 (DSMZ 26931)、P43A、PCC (Carrillo-Perez et al.,  2012; DOI 10.1007/s11274-012-1184-1), Pf04, Pf59, Pf109 (KimJun et al., 2013; Mycobiology 2013 Dec; 41(4): 221-224)、FG340 (Han et al., 2014; DOI: 10.5941/MYCO.2014.42.4.385)、Pfr1、Pfr8、Pfr9、Pfr10、Pfr11、Pfr12 (Angel-Sahagun et al., 2005; Journal of Insect Science)、Ifr531 (Daniel and Wyss, 2009; DOI 10.1111/j.1439-0418.2009.01410.x)、IF-1106 (Insect Ecology and Biocontrol Laboratory, Shanxi Agricultural University), I9602, I7284  (Hussain et al. 2016, DOI:10.3390/ijms17091518), I03011 (Patent US 4618578), CNRCB1 (Centro Nacional de Referencia de Control Biologico (CNRCB), Colima, Mexico)、SCAU-IFCF01 (Nian et al., 2015; DOI: 10.1002/ps.3977), PF01-N4 (Engineering Research Center of Biological Control, SCAU, Guangzhou, P. R. China) Pfr-612 (Institute of Biotechnology (IB-FCB-UANL), Mexico)、Pf-Tim、Pf-Tiz、Pf-Hal、Pf-Tic (Chan-Cupul et al. 2013, DOI: 10.5897/AJMR12.493)、C2.15 Aschersonia aleyrodis; C2.16 ベアウベリア ブロングニアルチイ(Beauveria brongniartii)、(例えば、Andermatt Biocontrol AGのBeaupro); C2.17 コニジオボラス・オブスクルス（Conidiobolus obscurus）; C2.18 エントモフトラ・ビルレンタ(Entomophthora virulenta)(例えば、EcomicのVektor); C2.19 ラゲニジウム・ギガンテウム(Lagenidium giganteum)； C2.20 メタリジウム・フラボビリデ（Metarhizium flavoviride）; C2.21 ムコル・ハエメリス(Mucor haemelis)(例えば、Indore Biotech Inputs & ResearchのBioAvard(登録商標)); C2.22 パンドラ・デルファシス（Pandora delphacis）; C2.23スポロトリクス・インセクトルム(Sporothrix insectorum (例えば、Biocerto, BRのSporothrix Es)および C2.24 ゾーフトラ・ラジカンス（Zoophtora radicans）が含まれる。
【００９４】
好ましい態様において、殺虫効果を有する真菌株は、Ｃ２．３  ボーベリア・バシアナＡＴＣＣ７４０株；ＧＨＡ株（寄託番号：ＡＴＣＣ７４２５０）；ＡＴＰ０２株（寄託番号：ＤＳＭ２４６６５）；ＰＰＲ５３３９株；ＰＰＲＩ７３１５株、株Ｒ４４４、ＩＬ１９７、ＩＬ１２、ＩＬ２３６、ＩＬ１０、ＩＬ１３１、ＩＬ１１６株；ＢａＧＰＫ株；ＩＣＰＥ２７９株、ＣＧ７１６株；Ｃ２．６  レカニシリウム・レカニ（以前はＶｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｌｅｃａｎｉｉとして知られていた）、ＫＶ０１株、ＤＡＯＭ２１６５９６株、Ｃ２．９  レカニシリウム・マスカリウム (Lecanicillium muscarium)  （以前はＶｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｌｅｃａｎｉｉ）ＶＥ株／  ＣＡＢＩ（＝ＩＭＩ）２６８３１７／  ＣＢＳ１０２０７１／  ＡＲＳＥＦ５１２８株、Ｃ２．１０  メタリジウム・アニソプリアエ・アクリダム変種  ＡＲＳＥＦ３２４株または分離株ＩＭＩ  ３３０１８９（ＡＲＳＥＦ７４８６）、Ｃ２．１１  メタリジウム・ブルンネウム  Ｃｂ株、Ｃ２．１２  メタリジウム・アニソプリエ  ＥＳＡＬＱ  １０３７株  Ｅ−９株、Ｃ４−Ｂ株（ＮＲＲＬ  ３０９０５）、ＥＳＣ１株、１５０１３−１株（ＮＲＲＬ  ６７０７３）、３２１３−１株（ＮＲＲＬ  ６７０７４），  Ｃ２００９１株、Ｃ２００９２株、ＩＣＩＰＥ  ７８株、Ａｐｏｐｋａ  ９７株、ＡＲＳＥＦ  ３３０２株、ＡＲＳＥＦ  ２６７９株、ＩｆＢ０１株（Ｃｈｉｎａ  Ｃｅｎｔｅｒ  ｆｏｒ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ  ＣＣＴＣＭ２０１２４００）、ＥＳＡＬＱ１２９６株、ＥＳＡＬＱ１４０９株、ＣＧＪ２株、ＫＣＨ−１９株、ＨＩＢ−２３株、ＨＩＢ−２９株、ＣＨＥ−ＣＮＲＣＢ  ３０４株、ＥＨ−ＣＮＲＣＢ  ３０３株、ＣＨＥ−ＣＮＢ  ３０７株、ＥＨ−５０６／３株、ＥＨ−５２０／３株、ＰＦＣＡＭ株、ＭＢＰ株、ＲＣＥＦ３３０４株  ＰＦ０１−Ｎ１０（ＣＣＴＣＣ  Ｎｏ．  Ｍ２０７０８８）、ＣＣＭ  ８３６７、ＩｆＴＳ０２、ＩｆＴＳ０２、Ｐ１、Ｉｆ−０２、Ｉｆ−２．３、Ｉｆｒ  ＡｓＣ、ＰＣ−０１３（ＤＳＭＺ  ２６９３１）、Ｐ４３Ａ、ＰＣＣ、Ｐｆ０４、Ｐｆ５９、  Ｐｆ１０９，  ＦＧ３４０，  Ｐｆｒ１，  Ｐｆｒ８，  Ｐｆｒ９，  Ｐｆｒ１０，  Ｐｆｒ１１，  Ｐｆｒ１２，  Ｉｆｒ５３１，  ＩＦ−１１０６，  Ｉ９６０２，  Ｉ７２８４，  Ｉ０３０１１（特許ＵＳ  ４６１８５７８）、ＣＮＲＣＢ１、ＳＣＡＵ−ＩＦＣＦ０１、ＰＦ０１−Ｎ４、Ｐｆｒ−６１２、Ｐｆ−Ｔｉｍ、Ｐｆ−Ｔｉｚ、Ｐｆ−ＨａｌおよびＰｆ−Ｔｉｃ．；およびＣ２．１６  ベアウベリア ブロングニアルチイ、  （例えば、Ａｎｄｅｒｍａｔｔ  Ｂｉｏｃｏｎｔrol AG）から選択される。
【００９５】
より好ましい実施態様において、殺虫効果を有する真菌株は、Ｃ２．３  ボーベリア・バシアナＡＴＣＣ７４０４０株；ＧＨＡ株  （寄託番号：ＡＴＣＣ７４２５０）；ＡＴＰ０２株（寄託番号：ＤＳＭ  ２４６６５）；ＰＰＲＩ  ７３１５株および／またはＲ４４４株；  Ｃ２．６  レカニシリウム・レカニ（以前はＶｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｌｅｃａｎｉｉとして知られていた）、ＫＶ０１株の分生子  Ｃ２．９  レカニシリウム・マスカリウム（以前はＶｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｌｅｃａｎｉｉ）、Ｃ２．ＶＥ／ＣＡＢＩ（＝ＩＭＩ）２６８３１７／  ＡＲＳＥＦ５１２８、Ｃ２．１０  メタリジウム・アニソプリアエ・アクリダム変種ＡＲＳＥＦ３２４または分離株ＩＭＩ  ３３０１８９（ＡＲＳＥＦ７４８６）、Ｃ２．１１  メタリジウム・ブルンネウム  Ｃｂ１５株、Ｃ２．１２  メタリジウム・アニソプリエＦ５２株（ＤＳＭ３８８４／  ＡＴＣＣ  ９０４４８）、Ｃ２．１４  ペキロマイセス・フモソロセウス（新：  Ｉｓａｒｉａ  ｆｕｍｏｓｏｒｏｓｅａ）Ａｐｏｐｋａ  ９７株およびＦｅ９９０１株、Ｃ２．１６  ベアウベリア ブロングニアルチイ（例えばＡｎｄｅｒｍａｔｔ  Ｂｉｏｃｏｎｔｒｏｌ  ＡＧ製のBeaupro）から選択される。
【００９６】
前記真菌微生物はＩｓａｒｉａ  ｆｕｍｏｓｏｒｏｓｅａ種の菌株であることがさらに好ましい。イサリア・フモソロセアの好ましい株は、Ａｐｏｐｋａ  ９７、Ｆｅ９９０１、ＡＲＳＥＦ  ３３０２、ＩｆＢ０１（Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ  ＣＣＴＣＭ２０１２４００）、ＥＳＡＬＱ１２９６、ＥＳＡＬＱ１３９、ＣＧ１２２８、ＫＣＨ  Ｊ２、ＨＩＢ−１９、ＨＩＢ−２９、ＨＩＢ−３０、ＣＨＥ−ＣＮＲＣＢ  ３０４、ＣＨＥ−ＣＮＲＣＢ  ３０５、ＣＨＥ−ＣＮＲＣＢ  ３０７、ＥＨ−５０６／３、ＥＨ−５２０／３、ＰＦＣＡＭ、ＭＢＰ、ＲＣＥＦ３３０４、ＰＦ０１−Ｎ１０（ＣＣＴＣＣ  Ｎｏ．Ｉｆ０２、Ｐ０７、ＩｆＴＳ０２、ＩｆＴＳ５５、Ｋ３、ＳＦＰ−１９８、ＳＦ８３６７）、ＣＣＭ−０３、Ｉｆｒ  ＡｓＣ、ＰＣ−０１３（ＤＳＭＺ  ２６９３１）、Ｐ４３Ａ、ＰＣＣ、Ｐｆ０４、Ｐｆ１０９、ＦＧ３４０、Ｐｆｒ１、Ｐｆｒ８、Ｐｆｒ９、Ｐｆｒ１１、Ｐｆｒ１２、Ｉｆｒ５３１、ＩＦ−  １１０６、Ｉ９６０２、Ｉ７２８４、Ｉ０３０１１（米国特許第  ４６１８５７８）、ＣＮＲＣＢ１、ＳＣＡＵ−ＩＦＣＦ０１、ＰＦ０１−Ｎ４、Ｐｆｒ−６１２、Ｐｆ−Ｔｉｍ、Ｐｆ−Ｔｉｚ、Ｐｆ−Ｈａｌ、Ｐｆ−Ｔｉｃからなる群から選択される。
【００９７】
イサリア・フモソロセア株はＡｐｏｐｋａ  ９７とＦｅ９９０１から選択されることが最も好ましい。特に好ましい株はＡＰＯＰＫＡ９７である。
【００９８】
また、特に好ましいのはメタリジウム属の昆虫病原性真菌である。メタリジウム属はいくつかの種からなり、そのいくつかは最近再分類されている（概要については、Ｂｉｓｃｈｏｆｆら、２００９；  Ｍｙｃｏｌｏｇｉａ  １０１（４）：５１２−５３０を参照）。メタリジウム属のメンバーは、Ｍ．  ｐｉｎｇｓｈａｅｎｓｅ、Ｍ．  ａｎｉｓｏｐｌｉａｅ、Ｍ．  ｒｏｂｅｒｔｓｉｉ、Ｍ．  ｂｒｕｎｎｅｕｍ  （これら４種はＭｅｔａｒｈｉｚｉｕｍ  ａｎｉｓｏｐｌｉａｅ複合体とも呼ばれる）、Ｍ．  ａｃｒｉｄｕｍ、Ｍ．  ｍａｊｕｓ、Ｍ．  ｇｕｉｚｏｕｅｎｓｅ、Ｍ．  Ｌｅｐｉｄｉｏｔａｅ、Ｍ．  ＧｌｏｂｏｓｕｍおよびＭ．  ｒｉｌｅｙｉ  （このうち、Ｍ．  ａｎｉｓｏｐｌｉａｅ、Ｍ．  ｒｏｂｅｒｔｓｉｉ、Ｍ．  ｂｒｕｎｎｅｕｍ、Ｍ．  ａｃｒｉｄｕｍおよびＭ．  ｒｉｌｅｙｉはさらに好ましいが、Ｍ．  ｂｒｕｎｎｅｕｍのものが最も好ましい。
【００９９】
特に好ましいのは、メタリジウム・アクリダム  ＡＲＳＥＦ３２４（ＢＡＳＦの製品ＧｒｅｅｎＧｕａｒｄ）または分離株ＩＭＩ  ３３０１８９（ＡＲＳＥＦ７４８６；Biological Control ProductsによるＧｒｅｅｎ  Ｍｕｓｃｌｅなど）；  メタリジウム・ブルンネウム  Ｃｂ  １５株（ＢＩＯＣＡＲＥ由来のＡＴＴＲＡＣＡＰ（登録商標）など）、またはＦ５２株（ＤＳＭ３８８４／  ＡＴＣＣ  ９０４４８；Ｂａｙｅｒ  ＣｒｏｐＳｃｉｅｎｃｅによるＢＩＯ  １０２０など）である。ＮｏｖｏｚｙｍｅｓによるＭｅｔ５２；  メタリジウム・アニソプリエ複合株ＥＳＡＬＱ  １０３７またはＥＳＡＬＱ  Ｅ−９株（いずれもＭｅｔａｒｒｉｌ（登録商標）  ＷＰ  Ｏｒｇａｎｉｃ由来）、Ｍ２０６０７７株、Ｃ４−Ｂ株（ＮＲＲＬ  ３０９０５）、ＥＳＣ１株、１５０１３−１株（ＮＲＲＬ  ６７０７３）、３２１３−１株（ＮＲＲＬ  ６７０７４）、Ｃ２００９１株、Ｃ２００９２株、またはＩＣＩＰＥ  ７８株である。最も好ましいのは、Ｆ５２（ａ．ｋ．ａ．  Ｍｅｔ５２）分離株（これは主に甲虫の幼虫に感染し、当初はキンケクチブトゾウムシの制御のために開発されたものである）およびイナゴの防除に商業的に使用されているＡＲＳＥＦ３２４である。Ｆ５２分離株に基づく市販製品は個々の分離株Ｆ５２の継代培養であり、以下を含むいくつかの培養コレクションに代表される：Julis  Kuｈｎ−Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｆｏｒ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｃｏｎｔｒｏｌ（以前はＢＢＡ）、Darmstadt、ドイツ：［Ｍ．ａ．４３として］；  ＨＲＩ、英国：［２７５−８６（略称Ｖ２７５またはＫＶＬ  ２７５）］；  ＫＶＬデンマーク［ＫＶＬ  ９９−１１２（Ｍａ  ２７５またはＶ  ２７５）］；バイエル、ドイツ［ＤＳＭ  ３８８４］；  ＡＴＣＣ、米国［ＡＴＣＣ  ９０４４８］；  ＵＳＤＡ、イタカ、米国［ＡＲＳＥＦ  １０９５］。この分離株に基づく顆粒状および乳化可能な濃縮製剤がいくつかの企業によって開発され、ＥＵおよび北米（米国およびカナダ）で登録されており、種苗観賞植物および柔らかい果物のキンケクチブトウゾウムシ、他の甲虫類、温室観葉植物のミカンキイロアザミおよび芝のアメリカコバネナガカメに対する使用が行われている。
【０１００】
ボーベリア・バシアーナは大量生産され、コナジラミ、アザミウマ、アブラムシおよびゾウムシを含む多種多様な昆虫害虫の管理に用いられる。Ｂｅａｕｖｅｒｉａ  ｂａｓｓｉａｎａの好ましい株としては、ＡＴＣＣ  ７４０４０株；ＧＨＡ株（寄託番号：ＡＴＣＣ７４２５０）；ＡＴＰ０２株（寄託番号：ＤＳＭ  ２４６６５）；ＰＰＲＩ  ５３３９株；ＰＰＲＩ  ７３１５株、ＩＬ１９７、ＩＬ１２、ＩＬ２３６、ＩＬ１０、ＩＬ１３１、ＩＬ１１６、Ｂｖ０２５株；ＢａＧＰＫ株；ＩＣＰＥ  ２７９株、ＣＧ  ７１６株；  ＥＳＡＬＱＰＬ６３株、ＥＳＡＬＱ４４７株およびＥＳＡＬＱ１４３２株、ＣＧ１２２９株、ＩＭＩ３８９５２１株、ＮＰＰ１１１Ｂ００５株、Ｂｂ−１４７株が挙げられる。ボーベリア・バシアーナ株には、ＡＴＣＣ  ７４０４０株およびＧＨＡ株（寄託番号：ＡＴＣＣ７４２５０）が含まれることが最も好ましい。請求項１〜１７のいずれか一項記載の液体調製物では、前記真菌種が、殺線虫活性真菌である。
【０１０１】
殺線虫活性真菌種には、Ｄ２．１  ムスコドール・アルブス、特に株ＱＳＴ  ２０７９９（寄託番号：ＮＲＲＬ  ３０５４７）；  Ｄ２．２  ムスコドル・ロセウス、特に株Ａ３−５（寄託番号：ＮＲＲＬ  ３０５４８）；  Ｄ２．３  プルプレオシリウム・リラシナム（以前はＰａｅｃｉｌｏｍｙｃｅｓ  ｌｉｌａｃｉｎｕｓとして知られていた）、特にプルプレオシリウム・リラシナム２５１株（ＡＧＡＬ  ８９／０３０５５０；例えば、Ｂａｙｅｒ  ＣｒｏｐＳｃｉｅｎｃｅ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃｓ  ＧｍｂＨ）、５８０株（Laverlam社のＢＩＯＳＴＡＴＯＢ（登録商標）  ＷＰ  （ＡＴＣＣ番号38740）、BIO-NEMATON(登録商標) （Ｔ．Ｓｔａｎｅｓ  ａｎｄ  Ｃｏｍｐａｎｙ  Ｌｔｄ．）、製品MYSIS(登録商標)（Varsha Bioscience and Technology India Pvt Ltd）中の株、製品BIOCONEMA(登録商標)（Nico Orgo Maures, India）中の株、製品ＮＥＭＡＴ（登録商標）（Ｂａｌｌａｇｒｏ  Ａｇｒｏ  Ｔｅｃｎｏｌｏｇｉａ  Ｌｔｄａ，  Ｂｒａｚｉｌ）中の株、製品ＳＰＥＣＴＲＵＭ  ＰＡＥ  Ｌ（登録商標）（Ｐｒｏｍｏｔｏｒａ  Ｔｅｃｎｉｃａ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ，  Ｓ．Ａ．  ＤＥ  Ｃ．Ｖ．，  Ｍｅｘｉｃｏ）中の株；Ｄ２．４  トリコデルマ・コニンギイ；Ｄ２．５  ハルポスポリウム・アングイルラエ（Harposporium anguillullae）；Ｄ２．６  ヒルステラ・ミネソテンシス（Hirsutella minnesotensis）；D2.7  モナクロスポリウム・シオノパグム（Monacrosporium cionopagum）；  Ｄ２．８  モナクロスポリウム・シクロフィルム（Monacrosporium psychrophilum)；  Ｄ２．９  ミロセシウム・ヴェルカリア（Myrothecium verrucaria）、特にＡＡＲＣ−２５５株（Ｖａｌｅｎｔ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ社のＤｉＴｅｒａＴＭなど）；  Ｄ２．１０  ペシロミセス・バリオッティ（Ｐａｅｃｉｌｏｍｙｃｅｓ  ｖａｒｉｏｔｉｉ）、Ｑ−０９株（Ｑｕｉｍｉａ社のＮｅｍａｑｕｉｍ（登録商標）など）；  Ｄ２．１１  スタゴノスポラ・ファセオリ(Stagonospora phaseoli)（Ｓｙｎｇｅｎｔａ社製など）；  Ｄ２．１２  トリコデルマ・リグノラム（trichoderma lignorum）、特にＴＬ−６０１株（Fｕｔｕｒｅｃｏ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ，  ＥＳのMycotricなど）；  Ｄ２．１４  ヒルステラ・トムプソニ（Hirsutella thompsonii）；  Ｄ２．１５  モナクロスポリウム・ドレクスレリ（Monacrosporium drechsleri）；  Ｄ２．１６  モナクロスポリウム・ゲフィロパグム（Monacrosporium gephyropagum）；  Ｄ２．１７  モナクロスポリウム・ゲフィロパグム（Monacrosporium gephyropagum）；  Ｄ２．１８  Nematoctonus leiosporus；  Ｄ２．１９  ネマトクトヌス・レイオスポルス（Nematoctonus leiosporus）；  Ｄ２．２０  Paraglomus sp, 特にＰａｒａｇｌｏｍｕｓ  ｂｒａｓｉｌｉａｎｕｍ；  Ｄ２．２１  ポコニア・クラミドスポリア（Ｐｏｃｈｏｎｉａ  Ｃｈｌａｍｙｄｏｓｐｏｒｉａ）（Ｖｅｒｃｉｌｌｉｕｍ  ｃｈｌａｍｙｄｏｓｐｏｒｉｕｍとしても知られる）、特に変種カテヌラタ（ｖａｒ．Catenulata） （ＩＭＩ  ＳＤ  １８７；例えば、Ｔｈｅ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｅｎｔｅｒ  ｏｆ  Ａｎｉｍａｌ  ａｎｄ  Ｐｌａｎｔ  Ｈｅａｌｔｈ  （ＣＥＮＳＡ）、ＣＵのKlamiC）；  Ｄ２．２２  スタゴノスポラ・ヘテロデラエ（Ｓｔａｇｏｎｏｓｐｏｒａ  ｈｅｔｅｒｏｄｅｒａｅ）；  Ｄ２．２３  メリスタクルム・アステロスペルマム（Meristacrum asterospermum）、およびＤ２．２４  ダ��ディングトニア・フラグランス(Duddingtonia flagrans)が含まれる。
【０１０２】
より好ましい実施態様において、殺線虫効果を有する真菌株は、プルプレオシリウム・リラシナム、特にＰ．  ｌｉｌａｃｉｎｕｍ株２５１（ＡＧＡＬ  ８９／０３０５５０）；  ハルポスポリウム・アングイルラエ；  ヒルステラ・ミネソテンシス；  モナクロスポリウム・シオノパグム；  モナクロスポリウム・シクロフィルム；  ミロセシウム・ヴェルカリア、ＡＡＲＣ−２５５株；  ペシロミセス・バリオッティ；  スタゴノスポラ・ファセオリ（Ｓｙｎｇｅｎｔａから市販）；およびダッディングトニア・フラグランスから選択される。
【０１０３】
さらに好ましい実施態様において、殺線虫効果を有する真菌株は、プルプレオシリウム・リラシナム、特にＰ．  Ｌｉｌａｃｉｎｕｍ株２５１（ＡＧＡＬ  ８９／０３０５５０）；およびダッディングトニア・フラグランスの胞子から選択される。最も好ましくは、殺線虫効果を有する前記真菌株は、プルプレオシリウム・リラシナム種、特にＰ．  ｌｉｌａｃｉｎｕｍ株２５１由来である。
【０１０４】
芽胞を産生し、生物農薬および／または植物成長促進剤として作用する菌類微生物は、例えばＷＯ２００５／０１２４７８またはＷＯ１９９９／０５７２３９に開示されているような装置および方法を用いる、水中発酵または固体発酵により、適当な基質上で、当技術分野で知られている方法に従って培養または発酵される。
【０１０５】
微小菌核のような特殊な菌類の繁殖体（例えば、ＪａｃｋｓｏｎとＪａｒｏｎｓｋｉ  （２００９）．Production of microsclerotia of the fungal entomopathogen Metarhizium anisopliae and their potential for use as a biocontrol agent for soil-inhabiting insects; Mycological Research 113, pp.842-850）は液体発酵技術によって生産され得るが、本発明による休眠構造体または器官は固体発酵によって生産されることが好ましい。固体状態の発酵技術は、当技術分野でよく知られている（概観については、Ｇｏｗｔｈａｍａｎら、２００１．  Ａｐｐｌ  Ｍｙｃｏｌ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ  （１）、３０５−３５２頁を参照のこと）。
【０１０６】
発酵後、真菌胞子を基質から分離することができる。真菌胞子が入った基質は、いずれかの分離段階の前に、好ましくは乾燥させる。微生物または真菌胞子は、例えば凍結乾燥、減圧乾燥又は分離後の噴霧乾燥乾で乾燥させてもよい。燥胞子を調製する方法は、当技術分野で周知であり、流動床乾燥、噴霧乾燥、真空乾燥および凍結乾燥を含む。分生子は、２段階で乾燥され得る：固相発酵によって産生された分生子については、まず、分生子で覆われた培養基質を乾燥させてから、乾燥された培養基質から分生子を収穫し、それによって純粋な分生子粉末を得る。次に、分生子粉末を減圧乾燥または凍結乾燥を用いてさらに乾燥した後、保存または調合する。
【０１０７】
本発明による液体調製物は、界面活性剤、レオロジー改質剤、消泡剤、酸化防止剤および染料の群から選択される少なくとも１つの物質をさらに含み得る。
【０１０８】
非イオン性および／または陰イオン性界面活性剤は、農薬において慣習的に使用され得るこのタイプの全ての物質である。可能な非イオン性界面活性剤は、ポリエチレンオキシド−ポリプロピレンオキシドブロックコポリマー、エトキシル化モノ−、ジアンド／またはトリグリセリド（エトキシル化ヒマシ油またはエトキシル化植物油を、例として挙げることができる）のグループから選択される。分岐または直鎖アルコールのポリエチレングリコールエーテル、脂肪酸または脂肪酸アルコールとエチレンオキシドおよび／またはプロピレンオキシドとの反応生成物、さらに分岐または直鎖アルキルアリールエトキシレート（ポリエチレンオキシド−ソルビタン脂肪酸エステルが例として挙げられる）。上記の例のうち、選択されたクラスは、任意にリン酸化され、塩基で中和され得る。アニオン系界面活性剤とは、農薬に慣例的に使用できるこのタイプの物質のことである。アルキルスルホン酸またはアルキルリン酸ならびにアルキルアリルスルホン酸またはアルキルアリルリン酸のアルカリ金属、アルカリ土類金属およびアンモニウム塩が好ましい。さらに好ましいアニオン性界面活性剤または分散助剤の群は、アルカリ金属、アルカリ土類金属およびポリスチレンスルホン酸のアンモニウム塩、ポリビニルスルホン酸の塩、アルキルナフタレンスルホン酸の塩、ナフタレンスルホン酸−ホルムアルデヒド縮合生成物の塩、ナフタレンスルホン酸、フェノールスルホン酸およびホルムアルデヒドの縮合生成物の塩、およびリグノスルホン酸の塩である。アニオン性界面活性剤または分散助剤のさらに好ましいグループは、サルコシン酸塩またはタウレートのアルカリ金属、アルカリ土類金属およびアンモニウム塩である。本発明による液体調製物中の界面活性剤の適当な範囲は、０〜２０％、好ましくは０〜１５％、より好ましくは０．５〜１０％を含む。
【０１０９】
濃縮剤、凝結防止剤、粘度調整剤または構造化剤としても知られるレオロジー改質剤を、例えば（不可逆的な）沈降を防止するために、本製剤に添加することができる。レオロジー改質剤はミネラルに由来することが望ましい。これらのレオロジー改質剤は、製剤が安静時または保存時に長期安定性をもたらす。適当な化合物は、疎水性および親水性のヒュームドおよび沈殿シリカ粒子、ベントナイト、ヘクトライト、ラポナイト、アタパルガイト、セピオライト、スメクタイト、または疎水性／有機親水性の改質ベントナイトを含むゲル化粘土からなる群から選択されるレオロジー改質剤である。本発明による液体調製物中のレオロジー改質剤の適当な範囲は、０〜１０％、好ましくは０〜７％、より好ましくは０．５〜５％を含む。
【０１１０】
他に規定されていない限り、本願の％はｗｔ．−％を意味する。
【０１１１】
シリカまたは粘土増粘剤を与えられた流体中に分散させるためには、当技術分野で知られているようにゲルを形成するために、高いせん断混合が望ましい。
【０１１２】
ヒュームド（発熱性）の親水性シリカまたは疎水性シリカの主要な世界的製造業者は、Evonic（商標名Ａｅｒｏｓｉｌ（登録商標））、Cabot社（商標名Ｃａｂ−Ｏ−Ｓｉｌ（登録商標））、Wacker Chemie（ＨＤＫ製品群）、Dow Corning、およびＯＣＩ  （Ｋｏｎａｓｉｌ（登録商標））である。別のクラスの適切なレオロジー改質剤は沈降シリカであり、主要な世界的生産者はEvonik（商標名Ｓｉｐｅｒｎａｔ（登録商標）またはＷｅｓｓａｌｏｎ（登録商標））、Rhodia（Ｔｉｘｏｓｉｌ）およびＰＰＧインダストリーズ（Ｈｉ−Ｓｉｌ）である。
【０１１３】
レオロジー改質剤に適した別のクラスの例は粘土増粘剤である。粘土増粘剤は、一般的に、広範囲の適用のための有効な増粘剤となり得る微粉化層ケイ酸塩である。それらは、典型的には、それらの非疎水性または疎水性形態のいずれかで使用される。非水溶媒中で分散性にするために、粘土表面は通常、第四アンモニウム塩で処理される。これらの修飾粘土は有機修飾粘土増粘剤として知られている。任意に、少量の低分子量アルコールまたは水を活性化剤として使用してもよい。このような粘土ベースのレオロジー改質剤のための例としては、スメクタイト、ベントナイト、ヘクトライト、アタパルガイト、セイピオライトまたはモンモリロナイト粘土が挙げられる。
【０１１４】
好ましいレオロジー改質剤（ｂ）は、例えば、Ｂｅｎｔｏｎｅ（登録商標）３８およびＳＤ３のような有機変性ヘクタイトクレイである。Ｂｅｎｔｏｎｅ（登録商標）３４、ＳＤ１およびＳＤ２のような有機変性ベントナイトクレイ、Ｐａｎｇｅｌ（登録商標）Ｂ２０のような有機変性セピオライト、Ａｅｒｏｓｉｌｉｃ（登録商標）２００のような有機変性シリカ、Ａｅｒｏｓｉｌ（登録商標）  Ｒ９７２、Ｒ９７４およびＲ８１２Ｓのようなハイドロフィリックシリカ、Ａｔｔａｇｅｌ（登録商標）５０のようなアタパルガイト、レオロジー改質剤に適した別のクラスは、変性ハイドロジンキャストオイル（トリオキシステアリン）またはＴｈｉｘｃｉｎ（登録商標）  ＲおよびＴｈｉｘａｔｒｏｌ（登録商標）  ＳＴのようなキャスターオイル有機誘導体に基づく有機レオロジー改質剤である。
【０１１５】
選択されたレオロジー改質剤の物理的特性
【表１】
2021530529.tif 000004
2021530529.tif 000005
【０１１６】
好ましい実施態様において、レオロジー改質剤の濃度は０〜１０％重量の範囲にあり、例えば１〜７または３〜６％重量である。特に、レオロジー改質剤の濃度は、０、０．５、１、１．５、２、２．５、３、４、５、６、７、８または９％重量とすることができ、本質的には、担体液の物理的特性と生物学的制御剤の物理的特性に依存する。一般に、本発明による製剤中のレオロジー改質剤の濃度はまた、生物学的制御剤に依存し得る。
【０１１７】
消泡剤は、水で希釈する際の泡立ちを防止するために、本製剤に添加してもよい。適切な消泡剤は、例えば、パラフィン油、植物油、シリコーン油（例えば、Ｓｉｌｃｏｌａｐｓｅ  ４１１、Ｓｉｌｃｏｌａｐｓｅ  ４５４、ＳｏｌｖａｙからのＳｉｌｃｏｌａｐｓｅ  ４８２；ＷａｃｋｅｒからのＳｉｌｆｏｏｍ  ＳＣ１１３２、Ｓｉｌｆｏａｍ  ＳＣ１３２；ＤｏｗからのＸｉａｍｅｔｅｒ  ＡＣＰ−１００）、または水性シリコーン油エマルジョン（例えば、ＳＡＧ３０、ＳＡＧ  １５７２／  Ｍｏｍｅｎｔｉｖｅ、Ｓｉｌｃｏｌａｐｓｅ  ４２６Ｒ、Ｓｉｌｃｏｌａｐｓｅ  ４３２／  Ｓｏｌｖａｙ；  Ｓｉｌｆａｒ  ＳＥ４／  Ｗａｃｋｅｒ；消泡剤８８３０／  Ｈａｒｃｒｏｓ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ）である。好ましい実施態様において、消泡剤の濃度は、０〜０，５％重量、例えば０．１〜０．３％重量の範囲にある。特に、消泡剤の濃度は、０、０．１、０．２、０．３、０．４もしくは０．５％重量、またはその間のいずれかの値であってもよい。
【０１１８】
酸化分解プロセスを防止または減速するために、本製剤に抗酸化剤を添加してもよい。適切な抗酸化剤は、例えば、ｔｅｒｔ．−ブチルヒドロキシキノン（ＴＢＨＱ）、ブチルヒドロキシトルオール（ＢＨＴ）、ブチルヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、パルミチン酸アスコルビル、酢酸トコフェリル、ステアリン酸アスコルビルまたはカロチノイドの群（例えば、β−カロチン）またはガラート（例えば、没食子酸エチル、没食子酸プロピル、没食子酸オクチル、没食子酸ドデシル）である。好ましい実施態様において、抗酸化剤の濃度は０〜０，５％重量の範囲、例えば０．１〜０．３％重量である。特に、抗酸化剤の濃度は、０、０．１、０．２、０．３、０．４もしくは０．５％重量、またはその間のいずれかの値であってもよい。
【０１１９】
使用され得る染料としては、無機顔料、例えば、酸化鉄、酸化チタンおよびプルシアンブルー、ならびに有機染料、例えば、アリザリン染料、アゾ染料および金属フタロシアニン染料が挙げられる。
【０１２０】
異なる態様では、本発明は、本発明による液体調製物を含む液体組成物に関する。
【０１２１】
本発明はまた、植物体内または植物上の植物病原性真菌、昆虫および／または線虫を制御するための方法、植物の成長を増強するための方法、または植物の収量または根の成長を含む植物の健康を改善するための方法に関するものであって、当該方法は、植物または植物が成長中もしくは成長予定の場所に上記の本発明による液剤または液剤組成物の有効量を施用することを含む。
【０１２２】
用語「植物の健康」は、一般に、害虫または植物病原体の制御に結びつかない植物の様々な種類の改良を含む。挙げられる有利な特性は、改善された収穫特性、例えば、出芽、作物の収量、タンパク質含量、油含量、澱粉含量、より発達した根系、根の成長、改良された根系、根のサイズ維持、改善された根の有効性、ストレス耐性（例えば、干ばつ、熱、塩、ＵＶ、水、寒さに対する）の改善、エチレンの減少（生産および／または受容の阻害）、分げつ増加、草丈の増加、より大きな葉身、より弱い枯死基部の葉、より強い分げつ枝、緑色、色素含有量、光合成活性、必要とされる投入量の減少（肥料または水など）、より少ない種子、より少ない生産性の分げつ枝、より早い開花、より早い穀粒成熟、より少ない植物対（倒伏）である。
【０１２３】
植物の健康改善とは、好ましくは、作物の収量、根系の発達（根の成長の改善）、根の大きさの維持、根の有効性の改善、分げつの増加、草丈の増加、葉身が大きい、枯死基葉が少ない、分げつ枝が強い、葉の色が緑色である、光合成活性が高い、分げつ枝が多い、植物の活力が高い、植物林分が多いといった植物特性の改善を指す。
【０１２４】
本発明に関して、改良植物健康とは、特に好ましくは、作物収量、より発達した根系、改良された根成長、改良された根サイズ維持、改良された根有効性、分げつ増加、および草丈の増加から選択された改良された植物特性を指す。
【０１２５】
本明細書で定義されるような植物の健康に対する本発明による組成物の効果は、同じ環境条件下で生育される植物を比較することによって決定することができ、ここでは、前記植物の一部は本発明による液体調製物で処理され、前記植物の他の一部は本発明による液体調製物で処理されない。あるいは、前記他の一部は、全く処理されないか、またはプラセボ（すなわち、本発明に従った液体調製物を含まない施用、例えばあらゆる有効成分を含まない施用（すなわち、本明細書に記載される生物学的制御剤を含まない）で処理される。
【０１２６】
本発明による液体調製物は、種皮、土壌ドレンチ、および／または直接溝内および／または葉面スプレーの形態などの任意の所望の方法で適用し、出芽前、出芽後、またはその両方のいずれかに適用することができる。言い換えれば、液体調製物は、種子、植物、または収穫された果物および野菜、または植物が成長している土壌、または植物が成長したい土壌（植物の成長場所）に適用され得る。特別な適用方法には、例えば、浸漬、噴霧、噴霧、潅注、蒸発、粉塵化、霧状化、散布、発泡、発泡、塗装、散布、散水（包帯）および点滴潅注が含まれる。
【０１２７】
すべての植物および植物部分は、本発明に従って処理することができる。
【０１２８】
ここで、植物は、望ましくない野生植物又は作物植物（天然作物植物を含む）のような全ての植物及び植物部分を意味するものと理解されるべきであり、本発明に従って処理することができる植物は、以下の主な作物植物を含む：トウモロコシ、大豆、アルファルファ、ヒマワリ、アブラナ属（例えば、カノーラ、ナタネ）、アブラナ科（例えば、野外）及びアブラナ科（Ａｒｅｃａｃｅａｅ  ｓｐ．）オイルパーム、ココナッツ、コメ、サトウキビ、オート麦、オオムギ、ミレット、ソルガム、トリティカル、アマ、ナッツ、ブドウ、および様々な植物分類群からの野菜。バラ科の種（例：リンゴや洋ナシなどのポメ果実、サクランボ、アーモンド、プラズやモモなどの石果物、イチゴ科の種、アブラナ科の種子、アブラナ科の種子、トウガラシ科の種子、アブラナ科の種子、ベラ科の種子（例：バナナ、植林地）、トウガラシ科の種子（例：コーヒー）レモン、オレンジ、グレープフルーツ、トマト、トウガラシ、トウガラシ、オーベルギン、タバコなどのヒルギ科、レタス、アーティチョークス、チコリー  ニンジン、オウム、セロリー、セレリアックなどのクンバー、カボチャ、スイカ、カラベア、タマネギなどのカンバー、アブラナ科（白キャベツ、赤キャベツ、カリフラワー、ブルッセルスプラウト、パクチー、ダイコン、ワサビ、クレス、チャイニーズキャベツなど）、マメ科（ピーナッツ、ピーナッツ、レンズマメ、ソラマメなど）、センチュウ属（ソラマメなど）スイスチャード、飼料ビート、ホウレンソウ、トウヒ科（大麻など）、カンナバ科（オクラ、ココアなど）、ハナバチ科（ケシ科）、アスパラギス科（アスパラガスなど）、有用植物  芝、芝、草、Ｓｔｅｖｉａ  ｒｅｂａｕｄｉａｎａなどの庭や木材の観賞植物；そして、それぞれの場合、これらの植物の遺伝子組み換え型。
【０１２９】
作物植物は、従来の育種及び最適化方法、あるいはバイオテクノロジー及び遺伝子工学の方法又はこれらの方法の組合せによって得ることができる植物であって、トランスジェニック植物、及び品種財産権によって保護することができる又はできない植物品種を含む。植物は、種子、実生、若い（未熟な）植物から成熟植物までのすべての発育段階を意味するものと理解されるべきである。植物の部分は、地上及び地下の植物のすべての部分及び器官を意味するものと理解すべきである。例えば、シュート、葉、花及び根、葉、針葉、茎、花、子実体、果実及び種子、並びに塊茎、根及び根茎で与えられた例である。植物の一部には、収穫された植物または収穫された植物部分、および、例えば、実生、塊茎、根茎、挿し木および種子などの栄養および生殖の増殖材料も含まれる。
【０１３０】
液体調製物または液体調製物を含む組成物による植物および植物部分の処置は、化合物が直接的に、または、例えば浸漬、噴霧、蒸発、霧状、散布、塗装、注射、および増殖物質の場合、特に種子の場合には、１つまたは複数の被膜を塗布することによって、通常の処理方法によって、周囲、環境または貯蔵空間に作用することを可能にすることによって行われる。
【０１３１】
すでに述べたように、すべての植物とその部分を本発明に従って処理することが可能である。好ましい実施形態では、野生植物種および植物栽培品種、または交雑またはプロトプラスト融合などの従来の生物学的育種法によって得られたもの、およびその一部も処理される。さらに好ましい実施形態では、遺伝子工学的方法、必要に応じて従来の方法（遺伝子組換え生物）と組み合わせた方法、によって得られたトランスジェニック植物および植物栽培品種およびその一部を処理する。「部分」または「植物の部分」または「植物の部分」という用語は、上記で説明されたとおりである。本発明は、それぞれの商業的に慣用されている品種または使用されている品種の植物を処理するために特に好んで使用される。植物品種は、新しい特性（「形質」）を有し、従来の育種、突然変異誘発または組換えＤＮＡ技術によって得られた植物を意味すると理解されるべきである。それらは品種、品種、生物型または遺伝子型であり得る。
【０１３２】
本発明に従って優先的に取り扱われるべきトランスジェニック植物又は植物栽培品種（遺伝子工学によって得られるもの）は、これらの植物に特定の有利な有用特性（「形質」）を付与する遺伝物質を受け取った全ての植物を含む。そのような特性の例は、良好な植物成長、高温または低温に対する耐性の増加、渇水または水または土壌塩分レベルに対する耐性の増加、開花成績の向上、より容易な収穫、加速された成熟、より高い収量、より高い品質および／または収穫された製品のより高い栄養価、より良い貯蔵寿命および／または収穫された製品の処理可能性である。このような建物のさらなる、および特に強調された例は、例えば、植物において形成された毒素、特に、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ  （例えば、ＣｒｙＩＡ（ａ）、ＣｒｙＩＡ（ｃ）、ＣｒｙＩＩＡ、ＣｒｙＩＩＩＢ２、Ｃｒｙ９ｃ  Ｃｒｙ２Ａｂ、Ｃｒｙ３ＢｂおよびＣｒｙＩＦならびにそれらの組み合わせによって）に対する植物の耐性を増加させ、さらに、植物病原性真菌、細菌および／またはウイルスに対する植物の耐性を、例えば、全身獲得耐性（ＳＡＲ）、システミン、エリシターならびに耐性遺伝子ならびに対応して発現されたタンパク質および毒素によって増加させ、さらに、ある種の除草活性化合物、例えば、イミダゾリノンに対する植物の耐性を増加させた  スルホニル尿素、グリホサート、ホスフィノトリシン（例えば「ＰＡＴ」）遺伝子問題の所望の形質を付与する遺伝子は、トランスジェニック植物中に互いに組合せて存在してもよい。言及され得るトランスジェニック植物の例は、重要な作物植物、例えば穀類（小麦、米、トリティケール、大麦、オート麦）、トウモロコシ、ダイズ、ダイズ、ジャガイモ、サトウキビ、トマト、トマトおよびその他のタイプの植物、ワタ、タバコ、タバコ、オイルシードレープおよび果実植物（果実リンゴ、洋ナシ、柑橘類、果実およびブドウを含む）であり、特にトウモロコシ、大豆、小麦、コムギ、イネ、ジャガイモ、ワタ、サトウキビ、タバコおよび油料ナタネに重点を置いている。特に強調されている形質は、昆虫、クモ類、線虫類、ナメクジウオおよびカタツムリに対する植物の抵抗性の増大である。
【０１３３】
さらに、本発明は、植物保護剤として、または植物の活力および／または植物の健康を促進するための、本発明による液体調製物または液体組成物の使用に関する。
【０１３４】
以下の実施例は、本発明を非限定的な様式で例示する。
【表２】
2021530529.tif 000006
2021530529.tif 000007
【０１３５】
実施例Ｉ  （プルプレオシリウム・リラシナム）
プルプレオシリウム・リラシナム純芽胞粉末３ｇを滅菌スプーンを用いて製剤容器（Ｕｌｔｒａ  Ｔｕｒｒａｘ用分散ツール付きＩＫＡ  Ｔｙｐｅ  ＤＴ−２０混合容器）に移した。１２ｍＬの液体をそれぞれの製剤容器に加え、３０００ｒｐｍで１分間、ウルトラターラックス管駆動制御を用いて分散させた；３０秒後に方向を変更させた。この２．８ｍＬを４本のサンプル瓶Wheatonガラスバイアル、Ｉ型）に入れ、ヘッドスペースをほとんど残さず移し、クリンプネックキャップ（Ｍａｃｈｅｒｅｙ  −  Ｎａｇｅｌ  Ｎ  １３型）を用いて、密閉した状態を保った。その後、すべての検体ボトルを３０℃に設定したインキュベーターに移し、所定の時間保存した。
【０１３６】
一定の間隔で、保存場所から試料を回収し、胞子の生存性を分析した。このために、元の試料を完全に均質化した。各サンプルの０，２５ｇまたは２５０μＬのアリコットを５０ｍＬファルコンチューブに移した。２％  Ｔｗｅｅｎ  ８０を含む滅菌水溶液を用いて試験管を最大２５ｇ充填し、第１希釈段階（１：１００希釈）を達成するためにボルテックスで均質化した。この希釈をさらに希釈し、寒天上にスポットするために用いた。
【０１３７】
２％  Ｔｗｅｅｎ  ８０では、すべてのサンプルが十分に混合したわけではなく、全く混合したわけでもない。これらの試料について、別の分散／希釈法を適用し、最初に胞子から油相を剥がした：試料０．２５ｇまたは２５０μＬを２ｍＬのＥｐｐｅｎｄｏｒｆチューブに秤量し、２％  Ｔｗｅｅｎ  ８０を０，５ｍＬ加え、この混合物をＥｐｐｅｎｄｏｒｆ遠心機に移し、そこで１０．０００ｒｐｍで１分間遠心分離した。上澄み（＝上部油性相）はピペットを用いて廃棄した。その後、２５０μＬのＢｒｅａｋｔｈｒｕ  Ｓ  ２４０を添加し、胞子を十分に分散させた。各検体の２５０μＬまたは０．２５ｇを滅菌済みのファルコン５０ｍＬチューブに移した。２％  Ｔｗｅｅｎ  ８０を含む滅菌水溶液を用いて試験管を最大２５ｇ充填し、第１希釈段階（１：１００希釈）を達成するためにボルテックスで均質化した。この希釈をさらに希釈し、寒天上にスポットするために用いた。
【０１３８】
胞子発芽率の評価には、多重自動希釈法（ピペットロボット、９６ウェルプレート）を用いて、１：１００希釈に基づき１：３００００希釈液を調製する。その後、１２×１２ｃｍの寒天プレートを採取し、自動１２チャンネルピペットを用いて各試料５μＬを１０回スポットした。液体が寒天に浸るまで待って、寒天プレートをインキュベーターに移し、２５℃で１７時間インキュベートする。プレートを開き、顕微鏡の下に置く。スポットごとに無作為に１つの領域を選び、指定された圃場内にある発芽した胞子と発芽しなかった胞子の数を記録する。サンプルあたり少なくとも２００個の胞子を評価する必要がある。必要であれば、１スポットあたり複数の照射野を計測する。
【０１３９】
胞子の生存率の結果を表Ｉに示した。
【表３】
2021530529.tif 000008
【０１４０】
考察：試料の製造（１日目）直後の胞子生存率は、一般に、試験したすべての流体の大部分について９０％以上である。本発明による流体は、３０℃での２か月または３か月間の保存後、それぞれ約７０％またはそれ以上の胞子生存率を示す。選択された流体は３０℃で７ヶ月間保存されており、保存後に約４０％以上の芽胞生存率を示す（表Ｉ、エントリー３，１１，１４，１８，１９）。ＢｒｅａｋＴｈｒｕ  Ｓ２４０は、宿主真菌胞子に対する優れた流体として以前に記載されている。比較のために、ＢｒｅａｋＴｈｒｕ  Ｓ２４０（表Ｉ、エントリー１９）は、所定の試験条件下で、保存２ケ月後に約７７％、保存７ケ月後に約７％の胞子生存率を提供する。自己乳化メチル化種子油の比較例となるタンクミックス添加剤であるＭｅｒｏ  ＥＣ（登録商標）（表Ｉ、エントリー２０）は、貯蔵３ケ月後に、約５％の限界胞子生存率しか示さなかった。
【０１４１】
実施例ＩＩ  （イサリア・フモソロセア）
イサリア・フモソロセア純胞子粉末１，５  ｇを滅菌スプーンを用いて製剤容器（Ｕｌｔｒａ  Ｔｕｒｒａｘ用分散ツール付きＩＫＡ  Ｔｙｐｅ  ＤＴ−２０混合容器）に移した。それぞれの製剤容器に１３，５  ｍＬの液体を加え、３０００ｒｐｍで１分間、ウルトラターラックス管駆動制御を用いて分散させた；３０秒後に方向を変化させた。この２．８ｍＬを４本の検体瓶（Wheatガラスバイアル、Ｉ型）に入れ、ヘッドスペースをほとんど残さず移し、クリンプネックキャップ（Ｍａｃｈｅｒｅｙ  −  Ｎａｇｅｌ型Ｎ  １３）を用いて密閉した後、すべての検体瓶を３０℃に設定した保育器に移し、一定時間保存した。
【０１４２】
一定の間隔で、保存場所から試料を回収し、胞子の生存性を分析した。そのため、元のサンプルを完全に均質化した。各サンプルの０，２５ｇまたは２５０μＬのアリコットを５０ｍＬファルコンチューブに移した。２％  Ｔｗｅｅｎ  ８０を含む滅菌水溶液を用いて試験管を最大２５ｇ充填し、第１希釈段階（１：１００希釈）を達成するためにボルテックスで均質化した。この希釈をさらに希釈し、寒天上にスポットするために用いた。
【０１４３】
２％  Ｔｗｅｅｎ  ８０では、すべてのサンプルが十分に混合したわけではなく、全く混合したわけでもない。これらの試料については、別の分散／希釈法を適用し、最初に胞子から油相を剥がした：試料０．２５ｇまたは２５０μＬを２ｍＬのＥｐｐｅｎｄｏｒｆチューブに秤量し、２％  Ｔｗｅｅｎ  ８０を０，５ｍＬ加え、この混合物をＥｐｐｅｎｄｏｒｆ遠心機に移し、そこで１０．０００ｒｐｍで１分間遠心分離した。上清（＝上部油性相）はピペットを用いて廃棄した。その後、２５０μＬのＢｒｅａｋｔｈｒｕ  Ｓ  ２４０を添加し、胞子を十分に分散させた。各検体２５０  μＬまたは０．２５ｇを滅菌済みのファルコン５０ｍＬチューブに移した。２％  Ｔｗｅｅｎ  ８０を含む滅菌水溶液を用いて試験管を最大２５ｇ充填し、第１希釈段階（１：１００希釈）を達成するためにボルテックスで均質化した。この希釈をさらに希釈し、寒天上にスポットするために用いた。
【０１４４】
胞子発芽率の評価には、多重自動希釈法（ピペットロボット、９６ウェルプレート）を用いて、１：１００希釈に基づき１：１５０００希釈液を調製する。その後、１２×１２ｃｍの寒天プレートを採取し、自動１２チャンネルピペットを用いて各試料５μＬを１０回スポットする。液体が寒天に浸るまで待って、寒天プレートをインキュベーターに移し、２３℃で１６時間インキュベートする。プレートを開き、顕微鏡の下に置く。スポットごとに無作為に１つの領域を選び、指定された圃場内にある発芽した胞子と発芽しなかった胞子の数を記録する。サンプルあたり少なくとも２００個の胞子を評価する必要がある。必要であれば、１スポットあたり複数の照射野を計測する。胞子の生存率の結果を表IIに示す。
【表４】
2021530529.tif 000009
【０１４５】
考察：
芽胞の製造（１日目）直後の芽胞の生存率は、一般に、試験したすべての流体に対して９０％前後である。本発明による流体は、３０℃で７ケ月保存後、約６０％以上の胞子生存率を示し（表ＩＩ、エントリー２、３）、したがって比較例、即ちＢｒｅａｋＴｈｒｕ  Ｓ２４０およびＣａｔｅｎｅｘ  Ｔ  １２１（表２のエントリー１、４）の性能レベルと等しい。
【０１４６】
例ＩＩＩ  （ボーベリア・バシアーナ）
ボーベリア・バシアーナ純胞子粉末の１，５  ｇを滅菌スプーンを用いて製剤容器（Ｕｌｔｒａ  Ｔｕｒｒａｘ用分散ツール付きＩＫＡ  Ｔｙｐｅ  ＤＴ−２０混合容器）に移した。それぞれの製剤容器に１３，５  ｍＬの液体を加え、３０００ｒｐｍで１分間、ウルトラターラックス管駆動制御を用いて分散させた；３０秒後に方向を変化させた。この２．８ｍＬを４本の検体瓶（Wheatガラスバイアル、Ｉ型）に入れ、ヘッドスペースをほとんど残さず、クリンプネックキャップ（Ｍａｃｈｅｒｅｙ  −  Ｎａｇｅｌ型Ｎ  １３）を用いて密閉した後、すべての検体瓶を３０℃に設定した保育器に移し、一定時間保存した。
【０１４７】
一定の間隔で、保存場所から試料を回収し、胞子の生存性を分析した。そのため、元のサンプルを完全に均質化した。各サンプルの０，２５ｇまたは２５０μＬのアリコットを５０ｍＬファルコンチューブに移す。２％  Ｔｗｅｅｎ  ８０を含む滅菌水溶液を用いて試験管を最大２５ｇ充填し、第１希釈段階（１：１００希釈）を達成するためにボルテックスで均質化した。この希釈をさらに希釈し、寒天上にスポットするために用いた。
【０１４８】
２％  Ｔｗｅｅｎ  ８０では、すべてのサンプルが十分に混合したわけではなく、全く混合したわけでもない。これらの試料について、別の分散／希釈法を適用し、最初に油相を胞子から剥がした：０．２５ｇまたは２５０μＬの試料を２ｍＬのエッペンドルフ管に秤量し、２％ツイーン８０の０，５ｍＬを加え、この混合物をエッペンドルフ遠心機に移し、そこで１０．０００ｒｐｍで１分間遠心分離する。上澄み（＝上部油性相）はピペットを用いて廃棄する。その後、２５０μＬのＢｒｅａｋｔｈｒｕ  Ｓ  ２４０を加え、胞子を十分に分散させた。各検体２５０  μＬ又は０．２５ｇを滅菌済みのファルコン５０ｍＬ試験管に移した。２％  Ｔｗｅｅｎ  ８０を含む滅菌水溶液を用いて試験管を最大２５ｇ充填し、第１希釈段階（１：１００希釈）を達成するためにボルテックスで均質化した。この希釈液をさらに希釈し、寒天上にスポットする。
【０１４９】
胞子発芽率の評価には、多重自動希釈法（ピペットロボット、９６ウェルプレート）を用いて、１：１００希釈に基づき１：１５０００希釈液を調製する。その後、１２×１２ｃｍの寒天プレートを採取し、自動１２チャンネルピペットを用いて各試料５μＬを１０回スポットする。液体が寒天に浸るまで待って、寒天プレートをインキュベーターに移し、２０℃で１７時間インキュベートする。プレートを開き、顕微鏡の下に置く。スポットごとに無作為に１つの領域を選び、指定された圃場内にある発芽した胞子と発芽しなかった胞子の数を記録する。サンプルあたり少なくとも２００個の胞子を評価する必要がある。必要であれば、１スポットあたり複数の照射野を計測」する。胞子の生存率の結果を表ＩＩＩに示す。
【表５】
2021530529.tif 000010
【０１５０】
考察：サンプル（１日目）の製造直後の胞子の生存率は一般に高く、ほとんどの場合７５％以上であり、多くの場合、所定の試験条件下で９０％以上に近いかまたはそれ以上であった。本発明による実施例の中には、３０℃で５週間以上保存した後、約３０％以上の胞子の生存率を示す、選択された流体がある。多くの流体は５０％以上の芽胞生存率を提供し、場合によっては６０％以上の芽胞生存率さえ提供する（表ＩＩＩ、エントリー１、２、４、６、１１）。比較して、ＢｒｅａｋＴｈｒｕ  Ｓ２４０は、保存１日目で約５３％、５週間後で約２０％の芽胞生存率しか提供しない（表ＩＩＩ、エントリー１３）。
【０１５１】
例ＩＶ：  ペニシリウム・ビライ
ペニシリウム・ビライ純胞子粉末１，５  ｇを滅菌スプーンを用いて製剤容器（Ｕｌｔｒａ  Ｔｕｒｒａｘ用分散ツール付きＩＫＡ  Ｔｙｐｅ  ＤＴ−２０混合容器）に移した。それぞれの製剤容器に１３，５  ｍＬの液体を加え、３０００ｒｐｍで１分間、ウルトラターラックス管駆動制御を用いて分散させた；３０秒後に方向を変化させた。この２．８ｍＬを４本の検体瓶（Wheatガラスバイアル、Ｉ型）に入れ、ヘッドスペースをほとんど残さず移し、クリンプネックキャップ（Ｍａｃｈｅｒｅｙ  −  Ｎａｇｅｌ型Ｎ  １３）を用いて密閉した後、すべての検体瓶を３０℃に設定した保育器に移し、一定時間保存した。
【０１５２】
一定の間隔で、保存場所から試料を回収し、胞子の生存性を分析した。そのため、元のサンプルを完全に均質化した。各サンプルの０，２５ｇまたは２５０μＬのアリコットを５０ｍＬファルコンチューブに移す。２％  Ｔｗｅｅｎ  ８０を含む滅菌水溶液を用いて試験管を最大２５ｇ充填し、第１希釈段階（１：１００希釈）を達成するためにボルテックスで均質化した。この希釈をさらに希釈し、寒天上にスポットするために用いた。
【０１５３】
２％  Ｔｗｅｅｎ  ８０では、すべてのサンプルが十分に混合したわけではなく、全く混合したわけでもない。これらの試料について、別の分散／希釈法を適用し、油相を最初に胞子から剥がす：０．２５ｇまたは２５０μＬの試料を２ｍＬのエッペンドルフ管に重量を測定し、そして２％ツイーン８０の０，５ｍＬを加え、この混合物をエッペンドルフ遠心機に移し、そこで１０．０００ｒｐｍで１分間遠心分離する。上澄み（＝上部油性相）はピペットを用いて廃棄する。その後、２５０μＬのＢｒｅａｋｔｈｒｕ  Ｓ  ２４０を加え、胞子を十分に分散させる。各検体２５０  μＬ又は０．２５ｇを滅菌済みのファルコン５０ｍＬ試験管に移す。２％  Ｔｗｅｅｎ  ８０を含む滅菌水溶液を用いて試験管を最大２５ｇ充填し、第１希釈段階（１：１００希釈）を達成するためにボルテックスで均質化した。この希釈液をさらに希釈し、寒天上にスポットする。
【０１５４】
胞子発芽率の評価には、多重自動希釈法（ピペットロボット、９６ウェルプレート）を用いて、１：１００希釈に基づき、１：１５０００希釈液を調製する。その後、１２×１２ｃｍの寒天プレートを採取し、自動１２チャンネルピペットを用いて各試料５μＬを１０回スポットする。液体が寒天に浸るまで待って、寒天プレートをインキュベーターに移し、２０℃で１７時間インキュベートする。プレートを開き、顕微鏡の下に置く。スポットごとに無作為に１つの領域を選び、指定された圃場内にある発芽した胞子と発芽しなかった胞子の数を記録する。サンプルあたり少なくとも２００個の胞子を評価する必要がある。必要であれば、１スポットあたり複数の照射野を計測する。胞子の生存率の結果を表ＩＶに示す。
【表６】
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【０１５５】
考察：試料の製造（１日目）直後の胞子生存率は一般に高く、９０％以上である。本発明による実施例は、３０℃で約３ヶ月間保存後、約４２％以上の胞子生存率を示す。多くの場合、流体は約７０％以上の胞子生存率を示している（表ＩＶ、エントリー２、４−８、１０）。比較して、Ｂｒｅａｋ−Ｔｈｒｕ  Ｓ２４０は、ここに与えられた条件下での保存後の胞子の生存率のわずか２０％を提供するにすぎない（表ＩＶエントリー３）。
【国際調査報告】
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