(57)【要約】  本開示は、特に筋萎縮の条件下で、筋肉中の脂肪浸潤を低下させるために、アミノ酸実体を含む組成物を使用するための方法を提供する。本開示はまた、筋肉中の脂肪浸潤を低下させることによって筋機能を向上させるための方法であって、その必要のある対象に有効量の組成物を投与することを含む方法をも提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
筋肉中の脂肪浸潤を低下させるための方法であって、筋肉中に脂肪浸潤のリスクのある対象に、
ａ）ロイシンアミノ酸実体、アルギニンアミノ酸実体、及びグルタミンアミノ酸実体；
ｂ）Ｎ−アセチルシステイン（ＮＡＣ）実体；並びに
ｃ）ヒスチジンアミノ酸実体、リシンアミノ酸実体、フェニルアラニンアミノ酸実体、及びトレオニンアミノ酸実体から選ばれる必須アミノ酸（ＥＡＡ）実体又は２、３、若しくは４つのＥＡＡの組み合わせ
を含む組成物を投与することを含む方法。
【請求項２】
筋肉中に脂肪浸潤のリスクのある前記対象は、肩腱板損傷を有する、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記組成物の投与は、肩腱板損傷のための手術の前に行われる、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
手術の前に前記肩腱板損傷によって冒された肩筋肉中の脂肪浸潤のレベルを決定することをさらに含む、請求項２に記載の方法。
【請求項５】
手術の後に前記肩腱板損傷によって冒された肩筋肉中の脂肪浸潤のレベルを決定することをさらに含む、請求項２に記載の方法。
【請求項６】
前記対象は、高齢の対象である、請求項２に記載の方法。
【請求項７】
筋肉中に脂肪浸潤のリスクのある前記対象は、慢性背部痛（傍脊柱筋群中の脂肪浸潤）；ＨＩＶ患者（運動に関係する筋肉中の脂肪浸潤）；脊髄損傷；脳卒中；ＣＯＰＤ；末期肝疾患（ＥＳＬＤ）、たとえば肝性脳症、静脈瘤出血、門脈圧亢進症、腹水症、感染リスク、敗血症、総入院率、並びに総死亡率及び肝臓関連死亡率；並びに老化に関連する筋力低下を有する、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
筋肉中に脂肪浸潤のリスクのある前記対象への組成物の投与は、グルコースを捕捉する筋機能を改善する、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
筋肉中に脂肪浸潤のリスクがある前記対象は、糖尿病又は代謝性疾患を有する、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
筋肉中に脂肪浸潤のリスクのある前記対象は、癌を有する、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
前記癌は、結腸直腸癌又は乳頭部周囲癌である、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
筋肉中に脂肪浸潤のリスクがある前記対象は、ＢＭＩの著しい増加、サルコペニア、又は他の明白な状態を有していない、請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
筋肉中に脂肪浸潤のリスクがある前記対象は、サルコペニアを伴わない肝硬変に罹患している、請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
筋肉中に脂肪浸潤のリスクがある前記対象は、ＥＳＬＤ、たとえば肝性脳症、静脈瘤出血、門脈圧亢進症、腹水症、感染リスク、敗血症、総入院率、並びに総死亡率及び肝臓関連死亡率を有する、請求項１に記載の方法。
【請求項１５】
筋肉中の脂肪浸潤の程度は、磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）によって決定される、請求項１に記載の方法。
【請求項１６】
メチオニン（Ｍ）、トリプトファン（Ｗ）、バリン（Ｖ）、若しくはシステイン（Ｃ）の少なくとも１つは、不在であるか又は存在する場合、１重量（ｗｔ．）％未満で存在する、請求項１に記載の方法。
【請求項１７】
（ａ）〜（ｃ）の総ｗｔ．％は、前記組成物中の任意の他のアミノ酸実体の総ｗｔ．％よりも多い、請求項１に記載の組成物。
【請求項１８】
前記組成物は、イソロイシンアミノ酸実体、バリンアミノ酸実体、又はイソロイシンアミノ酸実体及びバリンアミノ酸実体の両方をさらに含む、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９】
前記ロイシンアミノ酸実体、前記アルギニンアミノ酸実体、前記グルタミンアミノ酸実体、又は１、２、３、若しくはすべての前記ＥＡＡアミノ酸実体の少なくとも１つは、遊離アミノ酸であり、前記組成物の総乾燥ｗｔ．の少なくとも５０ｗｔ．％は、遊離形態をした１つ又はそれ以上のアミノ酸実体である、請求項１〜１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０】
前記ロイシンアミノ酸実体、前記アルギニンアミノ酸実体、前記グルタミンアミノ酸実体、又は１、２、３、若しくはすべての前記ＥＡＡアミノ酸実体の少なくとも１つは、塩形態をしており、前記組成物の総乾燥ｗｔ．の少なくとも５０ｗｔ．％は、塩形態をした１つ又はそれ以上のアミノ酸実体である、請求項１〜１９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１】
前記組成物は、約０．５ｇ〜約１５ｇのロイシンアミノ酸実体、約０．２５ｇ〜約１０ｇのイソロイシンアミノ酸実体、約０．２５ｇ〜約１０ｇのバリンアミノ酸実体、約０．５〜約２５ｇのアルギニンアミノ酸実体、約０．５ｇ〜約２０ｇのグルタミンアミノ酸実体、約０．１〜約５ｇのＮＡＣ又はその塩、約０．０５ｇ〜約３ｇのＬ−ヒスチジン又はその塩、約０．０５〜約６ｇのＬ−リシン又はその塩、約０．０４〜約２ｇのＬ−フェニルアラニン又はその塩、及び約０．０８〜約４ｇのＬ−トレオニン又はその塩の実体；たとえば、約１ｇのロイシンアミノ酸実体、約０．５ｇのイソロイシンアミノ酸実体、約０．５ｇのバリンアミノ酸実体、約１．５ｇ又は約１．８１ｇのアルギニンアミノ酸実体、約１．３３ｇのグルタミンアミノ酸実体、約０．１５ｇ又は約０．３ｇのＮＡＣ又はその塩、約０．０８ｇのＬ−ヒスチジン又はその塩、約０．３５ｇのＬ−リシン又はその塩、約０．０８ｇのＬ−フェニルアラニン又はその塩、及び約０．１７ｇのＬ−トレオニン又はその塩を含む、請求項１〜２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２】
前記組成物は、医薬組成物であり、薬学的に許容され得る賦形剤をさらに含む、請求項１〜２１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２３】
脂肪浸潤を低下させることによって、移動性が低下したか又は固定された筋肉における筋機能を改善するための方法であって、前記方法は、少なくとも４つのアミノ酸を含む組成物の有効量をその必要のある対象に投与することを含み、前記組成物は、筋肉中の脂肪浸潤を低下させる方法。
【請求項２４】
脂肪浸潤は、移動性が低下したか又は固定された筋肉中で低下する、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
筋肉中の脂肪浸潤の程度を決定することをさらに含む、請求項２３に記載の方法。
【請求項２６】
前記組成物は、
ａ）ロイシンアミノ酸実体、アルギニンアミノ酸実体、及びグルタミンアミノ酸実体；
ｂ）Ｎ−アセチルシステイン（ＮＡＣ）実体、たとえばＮＡＣ；並びに
ｃ）ヒスチジンアミノ酸実体、リシンアミノ酸実体、フェニルアラニンアミノ酸実体、及びトレオニンアミノ酸実体から選ばれる必須アミノ酸（ＥＡＡ）実体又は２、３、若しくは４つのＥＡＡの組み合わせ
を含み、ただし
ｄ）少なくとも１つのアミノ酸実体は、長さが２０アミノ酸残基を超えるペプチドとして提供されないことを条件とし、
（ｉ）（ａ）のアミノ酸実体は、表１から選択され；且つ
（ｉｉ）前記アルギニンアミノ酸実体及び前記グルタミンアミノ酸実体の一方又は両方は、前記ロイシンアミノ酸実体よりも多い量（ｗｔ．％）で存在する、請求項２３に記載の方法。
【請求項２７】
前記対象は、まれな筋疾患、筋萎縮、サルコペニア、筋肉の劣化、筋肉の衰弱、悪液質、医薬誘発性のミオパチー、筋ジストロフィー、ミオペニア、筋力低下、知覚された筋力低下、ＩＣＵ関連ミオパチー、熱傷関連ミオパチー、神経筋障害、人工呼吸器誘発性の横隔膜ジストロフィー、低ナトリウム血症、低カリウム血症、カルシウム欠乏症、高カルシウム血症、筋萎縮性側索硬化症、骨低下症からなる群から選択される疾患若しくは障害を有し；又は前記対象は、加齢、損傷、筋萎縮、感染、疾患、脳卒中、又は骨折若しくは他の外傷による筋機能の減少を有し又は有するとして確認され、前記骨折又は他の外傷は、肩腱板の手術、膝の手術、腰の手術、関節置換術、損傷修復手術から選択されるか又はギブスを着用している、請求項２３〜２６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２８】
前記疾患若しくは前記障害、筋機能の減少、又は骨折若しくは他の外傷を治療する際の前記組成物の投与の有効性を判定するために、前記対象において筋肉中の脂肪浸潤を判定することを含む、請求項２３〜２７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２９】
少なくとも４つのアミノ酸を含む組成物が筋機能に関連する疾患又は障害を治療する際に有効であるかどうかを決定するための方法であって、少なくとも４つのアミノ酸を含む組成物を前記対象に投与すること及び前記対象において筋肉中の脂肪浸潤の低下があるかどうかを決定することを含む方法。
【請求項３０】
脂肪浸潤は、筋機能に関連する前記疾患又は障害によって冒された筋組織中のものである、請求項２９に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
［背景技術］
筋肉中の脂肪の浸潤の増加、たとえば筋萎縮に関連する、多くの疾患及び障害がある。筋萎縮は、癌、エイズ、腎不全、肝疾患、脊髄損傷、及びうっ血性心不全に関連する。さらに、固定又は加齢による筋肉の廃用もまた、筋肉中の脂肪流入の増加と共に筋萎縮をもたらす。
【０００２】
筋萎縮状態を治療するためのゴールドスタンダードは、機能の回復である。しかしながら、筋肉の機能的筋肉量を直接評価することは、困難である（Ｅｖａｎｓ  ｅｔ  ａｌ．，２０１９，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃａｃｈｅｘｉａ，Ｓａｒｃｏｐｅｎｉａ  ａｎｄ  Ｍｕｓｃｌｅ，１０：１４−２１）。さらに、筋肉中の脂肪の浸潤を低下させることができることは、重要な治療ターゲットであるが、利用可能な医薬品は、たとえあったとしてもわずかである。
【０００３】
したがって、筋肉中の脂肪浸潤を低下させるための薬理学的方法をつきとめ、特に筋萎縮の条件下で、筋肉中の脂肪浸潤を低下させるためにそのような薬剤を使用する必要性がある。さらに、筋肉中に脂肪浸潤が生じる筋肉関連疾患及び障害を治療するなどのための、筋肉量及び機能を向上させる（いかなる療法も受けないことに比べて）ための補助的な代謝リバランシング組成物を開発するために、機能的筋肉量についてのマーカーをつきとめる必要性がある。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００４】
本発明は、筋肉中の脂肪浸潤を低下させるための方法であって、筋肉中に脂肪浸潤のリスクのある対象に、活性成分を含む組成物を投与することを含む方法を提供する。活性成分は：
ａ）ロイシンアミノ酸実体、アルギニンアミノ酸実体、及びグルタミンアミノ酸実体；
ｂ）Ｎ−アセチルシステイン（ＮＡＣ）実体；並びに
ｃ）ヒスチジンアミノ酸実体、リシンアミノ酸実体、フェニルアラニンアミノ酸実体、及びトレオニンアミノ酸実体から選ばれる必須アミノ酸（ＥＡＡ）実体又は２、３、若しくは４つのＥＡＡの組み合わせを含む。
【０００５】
方法は、肩腱板損傷を有する、筋肉中に脂肪浸潤のリスクのある対象の筋肉中の脂肪浸潤を低下させるために使用することができ、特に、組成物の投与は、肩腱板損傷のための手術の前に行われる。本発明は、たとえば手術の前に又は手術の後に、肩腱板損傷によって冒された肩筋肉中の脂肪浸潤のレベルを決定することを含むことができる。特定の実施形態では、肩腱板損傷を有する対象は、高齢の対象である。
【０００６】
その代わりに、方法は、慢性背部痛（傍脊柱筋群中の脂肪浸潤）；ＨＩＶ患者（運動に関係する筋肉中の脂肪浸潤）；脊髄損傷；脳卒中；ＣＯＰＤ；末期肝疾患（ＥＳＬＤ）、たとえば肝性脳症、静脈瘤出血、門脈圧亢進症、腹水症、感染リスク、敗血症、総入院率、並びに総死亡率及び肝臓関連死亡率；並びに老化に関連する筋力低下を有する、筋肉中に脂肪浸潤のリスクのある対象の筋肉中の脂肪浸潤を低下させるために使用することができる。さらに、筋肉中に脂肪浸潤のリスクのある対象への組成物の投与は、たとえば、筋肉中に脂肪浸潤のリスクがある対象が糖尿病又は代謝性疾患を有する場合、グルコースを捕捉する筋機能を改善することができる。
【０００７】
さらに別の代替手段では、筋肉中に脂肪浸潤のリスクのある対象は、癌、たとえば結腸直腸癌又は乳頭部周囲癌を有する。好ましくは、癌は、本発明の方法と併せて外科的に治療される。
【０００８】
さらに別の代替手段では、筋肉中に脂肪浸潤のリスクがある対象は、ＢＭＩの著しい増加、サルコペニア、若しくは他の明白な状態を有していない又は筋肉中に脂肪浸潤のリスクがある対象は、サルコペニアを伴わない肝硬変に罹患している。
【０００９】
筋肉内脂肪浸潤（ＩＭＦ）を測定するのに利用可能な、信頼性のある方法は非常に少なく、磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）は、それらのうちの１つである。コンピュータートモグラフィー（ＣＴ）もまた使用することができるが、ＭＲＩほど効率的ではない。
【００１０】
本発明の著しい利点は、組成物中の各アミノ酸の量及び相対比を細かく調節することができることであり、これは、タンパク質を含む、長さが２０アミノ酸を超えるペプチドではできない。したがって、本発明の方法では、組成物は、好ましくは、長さが２０アミノ酸残基を超えるペプチドを含まない。別の態様では、メチオニン（Ｍ）、トリプトファン（Ｗ）、バリン（Ｖ）、若しくはシステイン（Ｃ）の少なくとも１つは、不在であるか又は存在する場合、乾燥重量、特に活性成分の乾燥重量の１重量（ｗｔ．）％未満で存在する。さらに、組成物は、イソロイシンアミノ酸実体、バリンアミノ酸実体、又はイソロイシンアミノ酸実体及びバリンアミノ酸実体の両方をさらに含むことができる。
【００１１】
方法がアミノ酸実体の組成物を想定しているが、本出願において例証される特定の実施形態では、ロイシンアミノ酸実体、アルギニンアミノ酸、グルタミンアミノ酸実体、又は１、２、３、若しくはすべてのＥＡＡアミノ酸実体の少なくとも１つは、遊離アミノ酸である；それらはすべて、遊離アミノ酸とすることができる。したがって、組成物の総乾燥ｗｔ．の少なくとも５０ｗｔ．％は、遊離形態をした１つ又はそれ以上のアミノ酸実体とすることができる。その代わりに、ロイシンアミノ酸実体、アルギニンアミノ酸実体、グルタミンアミノ酸実体、又は１、２、３、若しくはすべてのＥＡＡアミノ酸実体の少なくとも１つは、塩形態をしている；それらはすべて、塩形態とすることができる。したがって、組成物の総乾燥ｗｔ．の少なくとも５０ｗｔ．％は、塩形態をした１つ又はそれ以上のアミノ酸実体とすることができる。
【００１２】
実施例において実証されるように、方法は、約０．５ｇ〜約１５ｇのロイシンアミノ酸実体、約０．２５ｇ〜約１０ｇのイソロイシンアミノ酸実体、約０．２５ｇ〜約１０ｇのバリンアミノ酸実体、約０．５〜約２５ｇのアルギニンアミノ酸実体、約０．５ｇ〜約２０ｇのグルタミンアミノ酸実体、約０．１〜約５ｇのＮＡＣ又はその塩、約０．０５ｇ〜約３ｇのＬ−ヒスチジン又はその塩、約０．０５〜約６ｇのＬ−リシン又はその塩、約０．０４〜約２ｇのＬ−フェニルアラニン又はその塩、及び約０．０８〜約４ｇのＬ−トレオニン又はその塩の実体；たとえば、約１ｇのロイシンアミノ酸実体、約０．５ｇのイソロイシンアミノ酸実体、約０．５ｇのバリンアミノ酸実体、約１．５ｇ又は約１．８１のアルギニンアミノ酸実体、約１．３３ｇのグルタミンアミノ酸実体、約０．１５ｇ又は約０．３ｇのＮＡＣ又はその塩、約０．０８ｇのＬ−ヒスチジン又はその塩、約０．３５ｇのＬ−リシン又はその塩、約０．０８ｇのＬ−フェニルアラニン又はその塩、及び約０．１７ｇのＬ−トレオニン又はその塩を含む組成物により実施することができる。
【００１３】
本発明によれば、任意の方法は、医薬組成物である組成物による実施とすることができる。したがって、組成物は、経口投与に適している賦形剤などのような、薬学的に許容され得る賦形剤をさらに含むことができる。
【００１４】
より広範囲には、本発明は、脂肪浸潤を低下させることによって、移動性が低下したか又は固定された筋肉における筋機能を改善するための方法を含み、方法は、少なくとも４つのアミノ酸を含む組成物の有効量をその必要のある対象に投与することを含み、組成物は、筋肉中の、たとえば、移動性が低下したか又は固定された筋肉中の脂肪浸潤を低下させる。この方法は、医薬組成物である組成物により実施することができる。したがって、組成物は、経口投与に適している賦形剤などのような、薬学的に許容され得る賦形剤をさらに含むことができる。そのような組成物が筋肉中の脂肪の浸潤を低下させることができるという発見は、したがって、移動性が低下したか又は固定された筋肉の条件下で筋肉中の脂肪浸潤の程度を決定することを可能にする。筋肉中の脂肪浸潤の程度を決定するか又は判定する任意の方法、たとえばＭＲＩ、ＤＥＸＡ、又はＣＴを使用することができる。
【００１５】
脂肪浸潤を低下させることによって、移動性が低下したか又は固定された筋肉における筋機能を改善するためのこれらの前述の方法では、組成物は、
ａ）ロイシンアミノ酸実体、アルギニンアミノ酸実体、及びグルタミンアミノ酸実体；
ｂ）Ｎ−アセチルシステイン（ＮＡＣ）実体、たとえばＮＡＣ；並びに
ｃ）ヒスチジン（Ｈ）アミノ酸実体、リシン（Ｋ）アミノ酸実体、フェニルアラニン（Ｆ）アミノ酸実体、及びトレオニン（Ｔ）アミノ酸実体から選ばれる必須アミノ酸（ＥＡＡ）実体又は２、３、若しくは４つのＥＡＡの組み合わせを含むことができる。さらに、
ｄ）少なくとも１つのアミノ酸実体は、長さが２０アミノ酸残基を超えるペプチドとして提供されない。さらに別の態様では、
（ｉ）（ａ）のアミノ酸実体は、表１から選択される；且つ
（ｉｉ）アルギニンアミノ酸実体及びグルタミンアミノ酸実体の一方又は両方は、ロイシンアミノ酸実体よりも多い量（ｗｔ．％）で存在する。
【００１６】
脂肪浸潤を低下させることによって、移動性が低下したか又は固定された筋肉における筋機能を改善するためのこれらの前述の方法では、対象は、まれな筋疾患、筋萎縮、サルコペニア、筋肉の劣化、筋肉の衰弱、悪液質、医薬誘発性のミオパチー、筋ジストロフィー、ミオペニア（ｍｙｏｐｅｎｉａ）、筋力低下、知覚された筋力低下、ＩＣＵ関連ミオパチー、熱傷関連ミオパチー、神経筋障害、人工呼吸器誘発性の横隔膜ジストロフィー（ｄｉａｐｈｒａｇｍａｔｉｃ  ｄｙｓｔｒｏｐｈｙ）、低ナトリウム血症、低カリウム血症、カルシウム欠乏症、高カルシウム血症、筋萎縮性側索硬化症、及び骨低下症（ｂｏｎｅ  ｗｅａｋｎｅｓｓ  ｄｉｓｅａｓｅ）からなる群から選択される疾患又は障害を有することができる。その代わりに、対象は、加齢、損傷、筋萎縮、感染、疾患、脳卒中、又は骨折若しくは他の外傷による筋機能の減少を有することができるか、又は有するとして確認することができる。骨折又は他の外傷は、肩腱板の手術、膝の手術、腰の手術、関節置換術、損傷修復手術から選択されてもよい又は対象は、ギブスを着用している。骨折又は外傷の場合、対象は、骨折若しくは他の外傷の後に又は骨折若しくは他の外傷の前に、後者の場合、たとえば計画されている待機的手術と併せて、組成物を受けることができる。たとえば、対象は、肩腱板損傷を有していてもよく、さらに、対象は、肩腱板の手術を受けてもよい。本発明はまた、たとえば待機的手術より前に、疾患若しくは障害、筋機能の減少、又は骨折若しくは他の外傷を治療する際の組成物の投与の有効性を判定するための、対象における筋肉中の脂肪浸潤の決定又は判定をも提供する。下記に例証される本発明によれば、筋肉中の脂肪浸潤の決定又は判定は、筋肉中の脂肪率が、治療の前と変わらない又は改善されさえすることを明らかにする。上記に述べられるように、筋肉中の脂肪浸潤の程度を決定するか又は判定する任意の方法、たとえばＭＲＩ、ＤＥＸＡ、又はＣＴを使用することができる。
【００１７】
さらに別の実施形態では、本発明は、少なくとも４つのアミノ酸を含む組成物が筋機能に関連する疾患又は障害を治療する際に有効であるかどうかを決定するための方法を提供する。この方法は、少なくとも４つのアミノ酸を含む組成物を対象に投与すること及び対象において筋肉中の脂肪浸潤の低下があるかどうかを決定することを含む。したがって、筋肉中の脂肪浸潤は、少なくとも４つのアミノ酸を含む組成物による治療と併せて、試験、たとえば治験、市販後臨床試験、予後アッセイなどにおいて、筋機能に代わるものとして果たすことができる。特に、脂肪浸潤は、筋機能に関連する疾患又は障害によって冒された筋組織中のものとすることができる。
【００１８】
したがって、対象が肩腱板損傷を有する状況において、この方法を使用することができる。たとえば、組成物の投与は、肩腱板損傷のための手術の前に行うことができる。この状況では、本発明は、手術の前の、肩腱板損傷によって冒された肩筋肉中の脂肪浸潤のレベルの決定を提供する。進行及び予後の判定と併せて、手術の後に肩腱板損傷によって冒された肩筋肉中の脂肪浸潤のレベルを決定することもまたできる。
【００１９】
少なくとも４つのアミノ酸を含む組成物が筋機能に関連する疾患又は障害を治療する際に有効であるかどうかを決定するための方法では、筋肉中に脂肪浸潤のリスクのある対象は、慢性背部痛（傍脊柱筋群中の脂肪浸潤）；ＨＩＶ患者（運動に関係する筋肉中の脂肪浸潤）；脊髄損傷；脳卒中；ＣＯＰＤ；ＥＳＬＤ、たとえば肝性脳症、静脈瘤出血、門脈圧亢進症、腹水症、感染リスク、敗血症、総入院率、並びに総死亡率及び肝臓関連死亡率；並びに老化に関連する筋力低下を有する。その代わりに、方法は、たとえば対象が糖尿病又は代謝性疾患を有する場合、筋肉中に脂肪浸潤のリスクのある対象においてグルコースを捕捉する筋機能を改善する。さらに別の代替手段では、筋肉中に脂肪浸潤のリスクのある対象は、結腸直腸癌又は乳頭部周囲癌などのような癌を有する。そのうえ、筋肉中に脂肪浸潤のリスクがある対象は、ＢＭＩの著しい増加、サルコペニア、又は他の明白な状態を有していなくてもよい。したがって、筋肉中に脂肪浸潤のリスクがある対象は、サルコペニアを伴わない肝硬変に罹患していてもよい又はＥＳＬＤ、たとえば肝性脳症、静脈瘤出血、門脈圧亢進症、腹水症、感染リスク、敗血症、総入院率、並びに総死亡率及び肝臓関連死亡率を有していてもよい。上記に述べられるように、筋肉中の脂肪浸潤の程度を決定するか又は判定する任意の方法、たとえばＭＲＩ、ＤＥＸＡ、又はＣＴを使用することができる。
【図面の簡単な説明】
【００２０】
【図１】図１は、肢固定の間の組織学的検査による外側広筋横断面積（ＣＳＡ）及び線維型における変化（１５日目対８日目）を示す図である。
【図２Ａ】図２：固定された脚及び固定されなかった脚の両方における固定の間の大腿四頭筋の脂肪率における変化（１５日目対８日目）を示す図である。図２Ａ．治療を受けた対象及びプラセボを受けた対象の、固定された及び固定されなかった大腿における脂肪率（ＦＦ）の変化を示す代表的な画像。紫は脂肪率に相当し、赤は筋肉率に相当する。図２Ｂ．すべての対象の間で定量された脂肪率の変化のプロット。
【図２Ｂ】（上記のとおり。）
【図３】図３は、固定＆回復の間の外側広筋電気インピーダンス測定（ＥＩＭ）パラメーターにおける変化（位相、最大リアクタンス、及びリアクタンススロープ（ｒｅａｃｔａｎｃｅ  ｓｌｏｐｅ）における変化）を示す図である。データは、ｎ＝９（Ｐｂｏ）及びｎ＝１０（治療薬）の平均±ＳＥＭである。
【発明を実施するための形態】
【００２１】
本発明は、アミノ酸実体を含む組成物が、筋肉中の脂肪浸潤を低下させることができるという前例がない発見に基づく。この発見は、筋肉中の脂肪浸潤を伴う多くの疾患及び障害の治療をもたらす。ある場合には、筋肉中の脂肪浸潤は、罹患率の増加、疾患若しくは障害の悪化をもたらす又は断裂した肩腱板を修復するための手術などのような介入からの転帰がより悪くなることを予測する。
【００２２】
したがって、本発明は、少なくとも部分的に、少なくとも４つの異なるアミノ酸実体を含む組成物である本発明の活性成分組成物を投与することによって筋肉中の脂肪浸潤を低下させるための方法を提供する。ある場合には、本発明は、たとえば、治療を伴う若しくは治療を伴わない疾患若しくは障害の進行を判定するための診断、予後指標として又は筋肉の健康状態に代わるものとして又は前述の任意の組み合わせの、筋肉中の脂肪の浸潤の範囲又は程度の決定又は判定をさらに含む。様々な技術が、筋肉中の脂肪の浸潤の範囲の決定に利用可能である。最も正確な技術は、コンピューター断層撮影（ＣＴ）及び磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）である。
【００２３】
筋肉中の脂肪浸潤を低下させるための方法はまた、対象において、固定、栄養失調、飢餓、加齢、オートファジー、タンパク質合成の低下、同化抵抗性、接合部完全性（たとえば神経筋接合部完全性）、インスリン抵抗性、ミトコンドリア新生の減少、エネルギー欠損、又はアナプレロティック反応のいずれか又はすべてを治療するための方法を提供してもよく、方法は、定められたアミノ酸構成成分を含む、有効量の医薬組成物をその必要のある対象に投与することを含む。いくつかの実施形態では、対象は、まれな筋疾患を有する。いくつかの実施形態では、対象は、サルコペニア、筋肉の劣化、衰弱、萎縮、悪液質、医薬誘発性のミオパチー、筋ジストロフィー、又はミオペニアを有する。いくつかの実施形態では、対象は、骨折又は他の外傷を有する。いくつかの実施形態では、対象は、医薬誘発性のミオパチーを有する。いくつかの実施形態では、対象は、スタチン誘発性のミオパチーを有する。いくつかの実施形態では、対象は、ステロイド誘発性のミオパチーを有する。いくつかの実施形態では、対象は、免疫抑制薬誘発性のミオパチーを有する。いくつかの実施形態では、対象は、化学療法薬誘発性のミオパチーを有する。いくつかの実施形態では、対象は、アルコール誘発性のミオパチーを有する。
【００２４】
筋肉中の脂肪浸潤の範囲の判定又は決定に加えて、筋機能における改善は、最大等尺性膝強度試験（たとえば、筋力における変化を決定するための）、筋生検（たとえば、筋線維の質を決定するための）、並びに電気インピーダンスミオグラフィー（ＥＩＭ）（たとえば、筋組織の抵抗及び静電容量特性並びに廃用に関連する萎縮に対する感受性などのような、筋肉の健康状態を決定するための）又はＳｈｏｒｔ  Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ  Ｐｈｙｓｉｃａｌ  Ｂａｔｔｅｒｙ（ＳＰＰＢ）、Ｈａｒｒｉｓ  Ｈｉｐ  Ｓｃｏｒｅ、及び他などのような他の標準的な臨床的パフォーマンス評価から選択される測定法を実行することによって評価することができる。
【００２５】
いくつかの実施形態では、組成物は、筋肉中の脂肪浸潤のリスクがあるか又はそれを経験している対象において、筋機能を改善する際の薬として使用するためのものである。いくつかの実施形態では、組成物は、対象において、筋肉中の脂肪浸潤を伴う筋疾患又は障害を治療する際に薬として使用するためのものである。
【００２６】
いくつかの実施形態では、組成物は、筋肉中の脂肪浸潤のリスクがあるか又はそれを経験している対象において、筋機能を改善するための薬の製造において使用するためのものである。いくつかの実施形態では、組成物は、対象において、筋肉中の脂肪浸潤を伴う筋疾患又は障害を治療するための薬の製造において使用するためのものである。
【００２７】
そのうえ、組成物は、本明細書において記載される組成物を含む健康補助食品、たとえば栄養補助食品、成分栄養食（ｄｉｅｔａｒｙ  ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ）、機能性食品、病人用特別食、食品、又は飲料として有用であってもよい。別の実施形態は、本明細書において記載される疾患又は障害のいずれかの管理において使用するための、本明細書において記載される組成物を含む栄養補助食品、成分栄養食、機能性食品、病人用特別食、食品、又は飲料を提供する。
【００２８】
一実施形態は、対象において、筋肉中の脂肪浸潤を低下させるために、本明細書において記載される組成物の有効量を対象に投与することを含む、筋肉の健康状態、筋機能、筋肉の機能的なパフォーマンス、又は筋力を維持するか又は改善するための方法を提供する。別の実施形態は、対象において、筋肉中の脂肪浸潤を低下させるために、本明細書において記載される組成物の有効量を対象に投与することを含む、筋萎縮に罹患している対象に、栄養サポート又は補給を提供するための方法を提供する。さらに別の実施形態は、対象において、筋肉中の脂肪浸潤を低下させるために、本明細書において記載される組成物の有効量をその必要のある対象に投与することを含む、対象に、筋萎縮の管理を助ける栄養サポート又は補給を提供するための方法を提供する。
【００２９】
定義
請求項及び明細書において使用される用語は、別段の定めがない限り、下記に記載されるように定義される。
【００３０】
明細書及び添付の請求項において使用されるように、単数形「１つの（ａ）」、「１つの（ａｎ）」、及び「その」は、文脈上、明らかに他の意味を示す場合を除き、複数形の指示対象を含むことに注意しなければならない。
【００３１】
用語「筋肉中の脂肪浸潤」は、皮下脂肪と区別される、筋膜より下の筋肉の脂肪率の増加を意味する。たとえば、大腿の深在筋膜中に見つけられる脂肪は、筋肉中の脂肪浸潤である。様々な刊行物が、筋肉内脂肪率、筋肉間脂肪浸潤、筋肉内脂肪、筋肉間脂肪、筋肉間脂肪組織（ＩＭＡＴ）、及び筋肉脂肪変性（ｍｙｏｓｔｅａｔｏｓｉｓ）又は筋短縮（ｍｙｏｓｔａｓｉｓ）などのような用語を使用している。これらの用語はすべて、筋線維の間に及び筋肉群の間に又は筋細胞自体の内部に位置する脂肪（脂肪細胞中の脂質の目に見える蓄積）を指す。筋肉中に浸潤した脂肪は、異所性又は内臓脂肪、たとえば肝臓若しくは他の臓器中の又は腹部中の脂肪と同じ特徴のうちのいくつかを有するように見える。
【００３２】
「筋肉中の脂肪浸潤の低下」は、たとえば固定された、損傷を与えられた、又はそうでなければ筋肉浸潤を受けやすい筋肉への、対象における脂肪浸潤の程度又は範囲が、介入がない状態、すなわち、対象への活性成分の投与がない状態よりも小さいことを意味する。したがって、筋肉中の脂肪率は、介入がない状態よりも少ない。一実施例では、活性成分の投与は、筋肉中の脂肪浸潤を１００％低下させる、すなわち、投与は脂肪浸潤を予防する。しかしながら、本発明は、活性成分による治療がない状態において生じると思われる脂肪浸潤におけるいかなる低下をも含む。好ましくは、筋肉中の脂肪浸潤の低下は、検出可能である。より好ましくは、低下は有意であり、たとえば、対照試験における対象の集団において統計的有意差に達する。
【００３３】
用語「脂肪率」又は「ＦＦ」は、肢、肢の一部、又は身体における脂肪の率又は脂肪のパーセンテージを指す（肢、肢の一部、又は身体の全容量を全部又は１００％と考える）。同様に、筋肉量は、肢、肢の一部、又は身体における筋肉の率又は筋肉のパーセンテージである。
【００３４】
下記に記載される実施例において、脂肪率（ＦＦ）を示す画像は、プラセボを投与された対象において、対象の固定されていない脚のＦＦの変化はなかったが、対象の固定された脚のＦＦを増加させ、筋肉量を減少させたことを示す。対照的に、活性成分を投与された対象において、固定された脚は、プラセボと比較して、固定後の脂肪率が低く、且つ筋肉含有量が高かった。これらのＦＦの変化は、すべての対象の間で定量された。四頭筋脂肪率における変化率は、活性成分を受けた対象における約０％と比較して、プラセボを受けた対象において１０％超増加した。
【００３５】
用語「対象」は、人間を指し、患者、すなわち、医療提供者（医師、ナースプラクティショナーなど）のケアの下にいる人を含むことができるが、これに限定されない。対象はまた、治験中の人又は自己診断する及び自己治療する人又は健康補助食品（上記に広範囲に定義される）を受ける対象をも意味することができる。
【００３６】
本明細書において使用されるように、用語「活性成分」は、全体として生理学的作用を有する、４つ又はそれ以上のアミノ酸実体の組み合わせを意味する。ある場合には、生理学的作用は、下記に定義されるように、筋肉の中への脂肪浸潤の低下を伴う治療効果とすることができる。たとえば、活性成分は、疾患又は障害に罹患している対象において代謝機能不全をリバランスすることができる。本発明の活性成分は、他の生物学的に活性な成分を含有することができる。いくつかの実施例では、活性成分は、詳細に下記に説明されるように、４つ又はそれ以上のアミノ酸実体の定められた組み合わせを含む。個々のアミノ酸実体は、様々な量又は比で活性成分中に存在し、これは、重量による量（たとえばグラムで）、各アミノ酸成分どうしの重量による比、モルによる量、活性成分の乾燥重量パーセントによる量、活性成分のモルパーセントによる量、カロリー量、活性成分に対するカロリー寄与率などとして示すことができる。概して、本開示は、剤形中のアミノ酸実体のグラム、活性成分の重量、すなわち活性成分中に存在するすべてのアミノ酸成分及び任意の他の生物学的に活性な成分の重量と比べたアミノ酸成分の重量パーセント、又は比で提供するであろう。略語「ｗｔ．」は、重量を意味する。
【００３７】
本明細書において使用されるように、用語「アミノ酸実体」は、遊離形態又は塩形態の一方又は両方のアミノ酸、ペプチドの（たとえばジペプチド、トリペプチド、又は長さが２０アミノ酸若しくはそれ以下のポリペプチドの）アミノ酸残基、アミノ酸の誘導体、アミノ酸の前駆体、又はアミノ酸の代謝産物を指す（たとえば表１を参照）。したがって、用語「ＸＸＸアミノ酸実体」は、遊離アミノ酸であれば遊離ＸＸＸ又は塩形態をしたＸＸＸを含むアミノ酸実体を指し、ペプチドであればＸＸＸ残基を含むペプチドを指し、誘導体であればＸＸＸの誘導体を指し、前駆体であればＸＸＸの前駆体を指し、代謝産物であればＸＸＸ代謝産物を指す。たとえば、ＸＸＸがロイシンである場合、ロイシンアミノ酸実体は、遊離ロイシン若しくは塩形態をしたロイシン、ロイシン残基を含む２０アミノ酸未満のペプチド、ロイシン誘導体、ロイシン前駆体、又はロイシンの代謝産物を指し（そのような誘導体、前駆体、又は代謝産物は、ロイシンと同じ生理学的作用を実現する）、ＸＸＸがアルギニンである場合、アルギニンアミノ酸実体は、遊離アルギニン若しくは塩形態をしたアルギニン、アルギニン残基を含む２０アミノ酸未満のペプチド、アルギニン誘導体、アルギニン前駆体、又はアルギニンの代謝産物を指し（そのような誘導体、前駆体、又は代謝産物は、アルギニンと同じ生理学的作用を実現する）、ＸＸＸがグルタミンである場合、グルタミンアミノ酸実体は、遊離グルタミン若しくは塩形態をしたグルタミン、グルタミン残基を含む２０アミノ酸未満のペプチド、グルタミン誘導体、グルタミン前駆体、又はグルタミンの代謝産物を指し（そのような誘導体、前駆体、又は代謝産物は、グルタミンと同じ生理学的作用を実現する）、ＸＸＸがＮ−アセチルシステイン（ＮＡＣ）である場合、ＮＡＣアミノ酸実体は、遊離ＮＡＣ又は塩形態をしたＮＡＣ、ＮＡＣ残基を含むペプチド、ＮＡＣ誘導体、ＮＡＣ前駆体、又はＮＡＣの代謝産物を指し（そのような誘導体、前駆体、又は代謝産物は、ＮＡＣと同じ生理学的作用を実現する）、ＸＸＸがヒスチジン（Ｈ）である場合、ヒスチジンアミノ酸実体は、遊離ヒスチジン又は塩形態をしたヒスチジン、ヒスチジン残基を含む２０アミノ酸未満のペプチド、ヒスチジン誘導体、ヒスチジン前駆体、又はヒスチジンの代謝産物を指し（そのような誘導体、前駆体、又は代謝産物は、ヒスチジンと同じ生理学的作用を実現する）、ＸＸＸがリシンである場合、リシンアミノ酸実体は、遊離リシン若しくは塩形態をしたリシン、リシン残基を含む２０アミノ酸未満のペプチド、リシン誘導体、リシン前駆体、又はリシンの代謝産物を指し（そのような誘導体、前駆体、又は代謝産物は、リシンと同じ生理学的作用を実現する）、ＸＸＸがフェニルアラニンである場合、フェニルアラニンアミノ酸実体は、遊離フェニルアラニン若しくは塩形態をしたフェニルアラニン、フェニルアラニン残基を含む２０アミノ酸未満のペプチド、フェニルアラニン誘導体、フェニルアラニン前駆体、又はフェニルアラニンの代謝産物を指し（そのような誘導体、前駆体、又は代謝産物は、フェニルアラニンと同じ生理学的作用を実現する）、又はＸＸＸがトレオニンである場合、トレオニンアミノ酸実体は、遊離トレオニン若しくは塩形態をしたトレオニン、トレオニン残基を含む２０アミノ酸未満のペプチド、トレオニン誘導体、トレオニン前駆体、又はトレオニンの代謝産物を指す（そのような誘導体、前駆体、又は代謝産物は、トレオニンと同じ生理学的作用を実現する）。生体系がＤ−アミノ酸のＬ型への異性化をもたらす場合、Ｄ−アミノ酸は、アミノ酸実体とすることができる。
【００３８】
アミノ酸の塩は、任意の生理学的に許容できる、たとえば摂取可能な塩を含む。医薬組成物については、活性成分中に存在するアミノ酸の塩形態は、薬学的に許容され得る塩であるべきである。特定の実施例では、塩形態は、アミノ酸の塩酸塩（ＨＣｌ）の塩形態である。
【００３９】
いくつかの実施形態では、アミノ酸実体の誘導体は、アミノ酸エステル（たとえば、アミノ酸実体のアルキルエステル、たとえばエチルエステル若しくはメチルエステル）又はケト酸を含む。
【００４０】
【表１】
2021527670.tif 000002
【００４１】
「約」及び「およそ」は、概して、測定法の性質又は精度を考慮に入れて、測定される数量について許容され得る程度の誤差を意味するものとする。誤差の例示的な程度は、所定の値又は値の範囲の２０パーセント（％）以内、典型的には１０％以内、より典型的には５％以内である。
【００４２】
「アミノ酸」は、中央にある炭素原子によってつながれたアミノ基（−ＮＨ２）、カルボン酸基（−Ｃ（＝Ｏ）ＯＨ）、及び側鎖を有する有機化合物を指し、必須及び非アミノ酸並びに天然及び非天然アミノ酸を含む。
【００４３】
下記に示される、タンパク質を生成する（ｐｒｏｔｅｏｇｅｎｉｃ）アミノ酸は、それらのフルネームに加えて３文字及び１文字略語によって知られている。ある所定のアミノ酸について、これらの略語は、区別なく本明細書において使用される。たとえば、Ｌｅｕ、Ｌ、又はロイシンはすべて、アミノ酸ロイシンを指し、Ｉｌｅ、Ｉ、又はイソロイシンはすべて、アミノ酸イソロイシンを指し、Ｖａｌ、Ｖ、又はバリンはすべて、アミノ酸バリンを指し、Ａｒｇ、Ｒ、又はアルギニンはすべて、アミノ酸アルギニンを指し、Ｇｌｎ、Ｑ、又はグルタミンはすべて、アミノ酸グルタミンを指す。同様に、非天然アミノ酸誘導体Ｎ−アセチルシステインは、「ＮＡＣ」又は「Ｎ−アセチルシステイン」によって区別なく称されてもよい。アミノ酸は、生理活性を確かなものにするためにアミノ酸のＬ−異性体として存在してもよい。
【００４４】
【表２】
2021527670.tif 000003
【００４５】
「分枝鎖アミノ酸」は、ロイシン、イソロイシン、及びバリンから選択されるアミノ酸である。
【００４６】
本明細書において使用される用語「有効量」は、活性成分又は活性成分を含む医薬組成物の量を意味し、治療されることになる症状及び／又は状態を有意に且つポジティブに修飾するのに十分である（たとえば、ポジティブな臨床反応をもたらす）。医薬組成物において使用するための活性成分の有効量は、主治医の知識及び専門技術と共に、治療されている特定の状態、状態の重症度、治療の期間、併用療法の性質、用いられている特定の活性成分、利用される特定の薬学的に許容され得る賦形剤及び／又はキャリヤ、並びに同様の因子に応じて変動するであろう。
【００４７】
本明細書において記載される「医薬組成物」は、少なくとも１つのアミノ酸及び薬学的に許容され得るキャリヤ又は賦形剤を含む。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、治療薬、栄養補強食品、病人用特別食として、又はサプリメントとして使用される。
【００４８】
本明細書において使用される用語「薬学的に許容され得る」は、正しい医学的判断の範囲内にあり、過度の毒性、刺激作用、アレルギー応答、又は他の問題若しくは合併症を伴うことなく、ヒト及び動物の組織に接する使用に適しており、妥当なベネフィット／リスク比に相応するアミノ酸、物質、賦形剤、組成物、及び／又は剤形を指す。
【００４９】
「治療効果」は、有益な臨床的効果を意味する。有益な臨床的効果は、疾患の進行を和らげる及び／又は疾患の１つ若しくはそれ以上の症状を軽減することによって示すことができる。好ましくは、有益な臨床的効果は、統計的に有意である。
【００５０】
食品サプリメントに関連する「健康上の効果」は、ヒトの正常な構造若しくは機能又はヒトにおける標的臓器にとっていくらかの利益があることを意味する。
【００５１】
本明細書において使用される「単位用量」又は「単位投薬量」は、便宜、安全性、又はモニタリングのために個々の分包又は容器中に調製される薬物の量又は用量を意味する。「単位用量」又は「単位投薬量」は、特定の用量に分配された、特定の形状（たとえばカプセルシェルなど）をした、活性成分及び不活性な構成成分（賦形剤）の特定の混合物を有する、使用するために市販される形態をした医薬製品を含む。
【００５２】
本明細書において使用されるように、用語「治療する」、「治療すること」、又は「治療」は、一実施形態において、筋肉中の脂肪浸潤の疾患又は障害を寛解させること（すなわち、疾患又は障害又はその臨床症状の少なくとも１つの発症を遅らせること又は抑えること又は低下させること）を指す。別の実施形態では、「治療する」、「治療すること」、又は「治療」は、患者によって識別可能でなくてもよいものを含め、筋肉中の脂肪浸潤の少なくとも１つの身体的パラメーターを軽減するか又は寛解させることを指す。さらに別の実施形態では、「治療する」、「治療すること」、又は「治療」は、筋肉中の脂肪浸潤の疾患又は障害の症状を調整することを指す。さらに別の実施形態では、「治療する」、「治療すること」、又は「治療」は、筋肉中の脂肪浸潤の疾患又は障害の発病又は発症又は進行を予防するか又は遅延させることを指す。
【００５３】
活性成分：アミノ酸実体の組成物
ＡＭＩＮＯ  ＡＣＩＤ  ＣＯＭＰＯＳＩＴＩＯＮＳ  ＡＮＤ  ＭＥＴＨＯＤＳ  ＦＯＲ  ＴＨＥ  ＴＲＥＡＴＭＥＮＴ  ＯＦ  ＭＵＳＣＬＥ  ＤＩＳＥＡＳＥＳ  ＡＮＤ  ＤＩＳＯＲＤＥＲＳと題する２０１７年１２月１９日に提出された米国特許出願公開第２０１８／０２０７１１９号明細書及びＡＭＩＮＯ  ＡＣＩＤ  ＣＯＭＰＯＳＩＴＩＯＮＳ  ＡＮＤ  ＭＥＴＨＯＤＳ  ＦＯＲ  ＴＨＥ  ＴＲＥＡＴＭＥＮＴ  ＯＦ  ＬＩＶＥＲ  ＤＩＳＥＡＳＥＳと題する２０１７年１２月１９日に提出された米国特許出願第１５／８４７，２８９号明細書は、これらのそれぞれが、その全体が参照によって本明細書において明確に援用されるが、本明細書において記載される方法によって示すことができるように、筋肉中の脂肪浸潤を低下させてもよいアミノ酸実体、すなわち活性成分の組成物を開示する。
【００５４】
いくつかの実施形態では、組成物は、ロイシンアミノ酸実体、アルギニンアミノ酸実体、グルタミンアミノ酸実体；及び抗酸化物質又は活性酸素種（ＲＯＳ）スカベンジャー（たとえばＮ−アセチルシステイン（ＮＡＣ）実体、たとえばＮＡＣ）を含む。
【００５５】
いくつかの実施形態では、組成物は、１つ又はそれ以上の必須アミノ酸（ＥＡＡ）実体をさらに含む。いくつかの実施形態では、ＥＡＡ実体は、ヒスチジン（Ｈ）アミノ酸実体、リシン（Ｋ）アミノ酸実体、フェニルアラニン（Ｆ）アミノ酸実体、及びトレオニン（Ｔ）アミノ酸実体の１、２、３、又はそれ以上（たとえばすべて）から選ばれる。
【００５６】
いくつかの実施形態では、組成物は、固定、栄養失調、飢餓、加齢、オートファジー、タンパク質合成の低下、同化抵抗性、神経筋接合部完全性、インスリン抵抗性、ミトコンドリア新生の減少、アナプレロティック反応、筋形成、又はエネルギー欠損から選択される１つ又はそれ以上の生理学的症状を改善することができる。
【００５７】
既に述べられるように、本開示は、ロイシンアミノ酸実体、アルギニンアミノ酸実体、グルタミンアミノ酸実体；及び抗酸化物質又は活性酸素種（ＲＯＳ）スカベンジャー、たとえばＮ−アセチルシステイン（ＮＡＣ）実体、たとえばＮＡＣを含むことができる組成物を提供する。いくつかの実施形態では、ロイシンアミノ酸実体、アルギニンアミノ酸実体、グルタミンアミノ酸実体；及びＲＯＳスカベンジャー、たとえばＮ−ＮＡＣ実体、たとえばＮＡＣの総重量は、組成物中の他のアミノ酸実体（たとえば活性成分）の総ｗｔ．よりも多いものとすることができる。
【００５８】
ある実施形態では、メチオニン（Ｍ）、トリプトファン（Ｗ）、バリン（Ｖ）、又はシステイン（Ｃ）のうちの２、３、又はそれ以上（たとえばすべて）が組成物（たとえば活性成分）になくてもよい又は存在する場合、乾燥重量ベースで前述のそれぞれの１重量（ｗｔ．）％未満、０．５ｗｔ．％未満、又は０．１ｗｔ．％未満で存在する。いくつかの実施形態では、メチオニン、トリプトファン、バリン、又はシステインは、存在する場合、オリゴペプチド、ポリペプチド、又はタンパク質で存在してもよい、ただし、タンパク質は、未変化のタンパク質として存在しようと、タンパク質加水分解物として存在しようと、栄養補助食品、病人用特別食、又は同様の製品として使用されるホエー、カゼイン、ラクトアルブミン、又は任意の他のタンパク質ではないことを条件とする。
【００５９】
いくつかの実施形態では、アルギニンアミノ酸実体及びグルタミンアミノ酸実体の一方又は両方は、ロイシンアミノ酸実体よりも多い量（ｗｔ．％）で存在する。アルギニンアミノ酸実体は、たとえば、ロイシンアミノ酸実体よりも、少なくとも２ｗｔ．％、少なくとも３ｗｔ．％、少なくとも４ｗｔ．％、少なくとも５ｗｔ．％、少なくとも６ｗｔ．％、少なくとも７ｗｔ．％、又は少なくとも８ｗｔ．％多い量で存在することができる。グルタミンアミノ酸実体は、たとえば、Ｌ−ロイシンアミノ酸実体よりも、少なくとも２ｗｔ．％、少なくとも３ｗｔ．％、少なくとも４ｗｔ．％、又は少なくとも５ｗｔ．％多い量で存在することができる。
【００６０】
アミノ酸の組成物又は混合物中の、すなわち活性成分中の、特定のアミノ酸の重量比は、組成物又は混合物中に存在するアミノ酸の総重量と比較した、組成物又は混合物中の、特定の１つ又は複数のアミノ酸の重量の比である。この値は、組成物又は混合物中の１つ又は複数の特定のアミノ酸の重量を、組成物又は混合物中に存在するすべてのアミノ酸の重量によって割り、１００をかけることによって算出される。乾燥重量ベースのパーセント重量は、固形物質のパーセント重量を指し、これは、本明細書において例証されるように、活性成分組成物が、最終の液体製剤にかなりの重量を追加する液体、特に水中に溶解されてもよいか又は懸濁されてもよいので、適切である。
【００６１】
活性成分は、追加の分枝鎖アミノ酸（ＢＣＡＡ）実体、たとえばイソロイシンアミノ酸実体及びバリンアミノ酸実体の一方又は両方をさらに含んでいてもよく、その代わりに、イソロイシンアミノ酸実体及びバリンアミノ酸実体の両方が存在する。ロイシンアミノ酸実体は、イソロイシンアミノ酸実体及びバリンアミノ酸実体の一方又は両方よりも多い量（重量％）で存在することができる（たとえば、ロイシン実体は、イソロイシンアミノ酸実体及びバリンアミノ酸実体の一方又は両方よりも、少なくとも１０ｗｔ．％、少なくとも１５ｗｔ．％、少なくとも２０ｗｔ．％、少なくとも２５ｗｔ．％、少なくとも３０ｗｔ．％、少なくとも３５ｗｔ．％、少なくとも４０ｗｔ．％、少なくとも４５ｗｔ．％、又は少なくとも５０ｗｔ．％多い量で存在する）。
【００６２】
組成物は、１つ又はそれ以上の必須アミノ酸（ＥＡＡ）実体をさらに含むことができる。ある実施形態では、ＥＡＡ実体は、ヒスチジンアミノ酸実体、リシンアミノ酸実体、フェニルアラニンアミノ酸実体、及びトレオニンアミノ酸実体のうちの１、２、３、又は４つから選ばれる。
【００６３】
存在する場合、ヒスチジンアミノ酸実体は、乾燥重量ベースで組成物の少なくとも０．５ｗｔ．％、少なくとも０．６ｗｔ．％、少なくとも０．７ｗｔ．％、少なくとも０．８ｗｔ．％、少なくとも０．９ｗｔ．％、少なくとも１．０ｗｔ．％、少なくとも１．１ｗｔ．％、少なくとも１．２ｗｔ．％、少なくとも１．３ｗｔ．％、又は少なくとも１．４ｗｔ．％の量で存在することができる。
【００６４】
存在する場合、リシンアミノ酸実体は、乾燥重量ベースで組成物の少なくとも２ｗｔ．％、少なくとも３ｗｔ．％、少なくとも４ｗｔ．％、少なくとも５ｗｔ．％、又は少なくとも６ｗｔ．％の量で存在することができる。
【００６５】
存在する場合、フェニルアラニンアミノ酸実体は、乾燥重量ベースで組成物の少なくとも０．５ｗｔ．％、少なくとも０．６ｗｔ．％、少なくとも０．７ｗｔ．％、少なくとも０．８ｗｔ．％、少なくとも０．９ｗｔ．％、少なくとも１．０ｗｔ．％、少なくとも１．１ｗｔ．％、少なくとも１．２ｗｔ．％、少なくとも１．３ｗｔ．％、又は少なくとも１．４ｗｔ．％の量で存在することができる。
【００６６】
存在する場合、トレオニンアミノ酸実体は、乾燥重量ベースで組成物の少なくとも０．５ｗｔ．％、少なくとも１ｗｔ．％、少なくとも１．５ｗｔ．％、少なくとも２ｗｔ．％、少なくとも２．５％、又は少なくとも３ｗｔ．％の量で存在することができる。
【００６７】
ヒスチジンアミノ酸実体、リシンアミノ酸実体、フェニルアラニンアミノ酸実体、及びトレオニンアミノ酸実体はすべて、上記の４つの段落中に記載されたｗｔ．％を含め、組成物中に存在することができる。
【００６８】
活性成分中のロイシンアミノ酸実体、アルギニンアミノ酸実体、グルタミンアミノ酸実体、及びＮＡＣ−アミノ酸実体の重量（ｗｔ．）比は、約１〜３：２〜４：２〜４：０．１〜２．５とすることができる。ある実施形態では、ロイシンアミノ酸実体、アルギニンアミノ酸実体、グルタミンアミノ酸実体、及びＮＡＣ−アミノ酸実体のｗｔ．比は、約２：３：２．６６：０．３である。ある実施形態では、ロイシンアミノ酸実体、アルギニンアミノ酸実体、グルタミンアミノ酸実体、及びＮＡＣ−アミノ酸実体のｗｔ．比は、約２：３：２．６６：０．６である。
【００６９】
いくつかの実施形態では、組成物は、約４：７〜約１：２の比の全アミノ酸に対する分枝鎖アミノ酸を含む。
【００７０】
いくつかの実施形態では、ロイシンアミノ酸実体、イソロイシンアミノ酸実体、バリンアミノ酸実体、アルギニンアミノ酸実体、グルタミンアミノ酸実体、ＮＡＣ−アミノ酸実体、ヒスチジンアミノ酸実体、リシンアミノ酸実体、フェニルアラニンアミノ酸実体、及びトレオニンアミノ酸実体のｗｔ．比は、約１〜３：０．５〜１．５：０．５〜１．５：２〜４：２〜４：０．１〜０．５：０．１〜０．５：０．２〜１．０：０．１〜０．５：０．２〜０．７である。ある実施形態では、ロイシンアミノ酸実体、イソロイシンアミノ酸実体、バリンアミノ酸実体、アルギニンアミノ酸実体、グルタミンアミノ酸実体、ＮＡＣ−アミノ酸実体、ヒスチジンアミノ酸実体、リシンアミノ酸実体、フェニルアラニンアミノ酸実体、及びトレオニンアミノ酸実体のｗｔ．比は、約２．０：１．０：１．０：３．０：２．６６：０．３：０．１６：０．７：０．１６：０．３４である。ある実施形態では、ロイシンアミノ酸実体、イソロイシンアミノ酸実体、バリンアミノ酸実体、アルギニンアミノ酸実体、グルタミンアミノ酸実体、ＮＡＣ−アミノ酸実体、ヒスチジンアミノ酸実体、リシンアミノ酸実体、フェニルアラニンアミノ酸実体、及びトレオニンアミノ酸実体のｗｔ．比は、約２．０：１．０：１．０：３．０：２．６６：０．３：０．１６：０．７：０．１６：０．６８である。
【００７１】
いくつかの実施形態では、活性成分の単位用量中に存在するアミノ酸の総ｗｔ．は、約４ｇ〜約８０ｇの間にある。ある実施形態では、存在するアミノ酸の総ｗｔ．は、活性成分の単位用量中約６ｇ、約１８ｇ、約２４ｇ、約４８ｇ、約６８ｇ、又は約７２ｇである。一実施例では、活性成分の単位用量は、少なくとも１ｇのロイシンアミノ酸実体、少なくとも０．５ｇのイソロイシンアミノ酸実体、少なくとも０．５ｇのバリンアミノ酸実体、少なくとも１．５ｇのアルギニンアミノ酸実体、少なくとも１．３３ｇのグルタミンアミノ酸実体、少なくとも０．１５ｇのＮＡＣ−アミノ酸実体、少なくとも０．０８ｇのヒスチジンアミノ酸実体、少なくとも０．３５ｇのリシンアミノ酸実体、少なくとも０．０８ｇのフェニルアラニンアミノ酸実体、及び少なくとも０．１７ｇのトレオニンアミノ酸実体を含む。いくつかの実施形態では、組成物は、少なくとも１ｇのロイシンアミノ酸実体、少なくとも０．５ｇのイソロイシンアミノ酸実体、少なくとも０．５ｇのバリンアミノ酸実体、少なくとも１．５ｇのアルギニンアミノ酸実体、少なくとも１．３３ｇのグルタミンアミノ酸実体、少なくとも０．３ｇのＮＡＣ−アミノ酸実体、少なくとも０．０８ｇのヒスチジンアミノ酸実体、少なくとも０．３５ｇのリシンアミノ酸実体、少なくとも０．０８ｇのフェニルアラニンアミノ酸実体、及び少なくとも０．１７ｇのトレオニンアミノ酸実体を含む。その代わりに、前述の活性成分は、０．１５ｇの代わりに０．３ｇのＮＡＣを含む。活性成分の単位用量中のこれらすべての量の倍数、たとえば２倍、３倍、４倍、５倍、６倍などもまた、想定される。
【００７２】
好ましくは、少なくとも１つのアミノ酸実体は、遊離アミノ酸である、たとえば、１つ又はそれ以上の（たとえばすべての）アミノ酸実体は、遊離アミノ酸である。いくつかの実施形態では、ロイシンアミノ酸実体、アルギニンアミノ酸実体、グルタミンアミノ酸実体、及びＮＡＣ−アミノ酸実体は、遊離アミノ酸実体である。ある実施形態では、ロイシンアミノ酸実体、イソロイシンアミノ酸実体、バリンアミノ酸実体、アルギニンアミノ酸実体、グルタミンアミノ酸実体、及びＮＡＣ−アミノ酸実体は、遊離アミノ酸である。ある実施形態では、ロイシンアミノ酸実体、イソロイシンアミノ酸実体、バリンアミノ酸実体、アルギニンアミノ酸実体、グルタミンアミノ酸実体、ＮＡＣ−アミノ酸実体、ヒスチジンアミノ酸実体、リシンアミノ酸実体、フェニルアラニンアミノ酸実体、及びトレオニンアミノ酸実体は、遊離アミノ酸である。
【００７３】
その代わりに、少なくとも１つのアミノ酸実体は、塩形態をしている、たとえば、１つ又はそれ以上の（たとえばすべての）アミノ酸実体は、塩形態をしている。いくつかの実施形態では、ロイシンアミノ酸実体、アルギニンアミノ酸実体、グルタミンアミノ酸実体、及びＮＡＣ−アミノ酸実体は、塩形態をしている。ある実施形態では、ロイシンアミノ酸実体、イソロイシンアミノ酸実体、バリンアミノ酸実体、アルギニンアミノ酸実体、グルタミンアミノ酸実体、及びＮＡＣ−アミノ酸実体は、塩形態をしている。ある実施形態では、ロイシンアミノ酸実体、イソロイシンアミノ酸実体、バリンアミノ酸実体、アルギニンアミノ酸実体、グルタミンアミノ酸実体、ＮＡＣ−アミノ酸実体、ヒスチジンアミノ酸実体、リシンアミノ酸実体、フェニルアラニンアミノ酸実体、及びトレオニンアミノ酸実体は、塩形態をしている。
【００７４】
いくつかの実施形態では、活性成分は、４〜２０の異なるアミノ酸実体、たとえば５〜１５の異なるアミノ酸実体の組み合わせを含む。他の実施形態では、活性成分は、４〜１６の異なるアミノ酸実体、より詳細には、５〜１５の異なるアミノ酸実体からなる。たとえば、活性成分は、セリン、グリシン、グルタミン、ＨＭＢ、シトルリン、グルタミン、Ｌ−システイン、シスチン、又はグルタチオンの１つ又はそれ以上（たとえばすべて）又はそれ以上をさらに含むことができる。
【００７５】
いくつかの実施形態では、組成物は、アルギニン、グルタミン、Ｎ−アセチルシステイン；ロイシン、イソロイシン、及びバリンの１、２、又はすべてから選ばれるＢＣＡＡ；並びにヒスチジン、リシン、フェニルアラニン、及びトレオニンの１、２、又はすべてから選ばれる必須アミノ酸ＥＡＡを含む。
【００７６】
本開示の一態様は、遊離アミノ酸から構成される活性成分及び１つ又はそれ以上の薬学的に許容され得る賦形剤を含む組成物を提供し、アミノ酸は、ロイシン、イソロイシン、バリン、アルギニン、グルタミン、Ｎ−アセチルシステイン、ヒスチジン、リシン、フェニルアラニン、及びトレオニンを含む。
【００７７】
本開示の一態様は、遊離アミノ酸からなる活性成分及び１つ又はそれ以上の薬学的に許容され得る賦形剤を含む組成物を提供し、アミノ酸は、ロイシン、イソロイシン、バリン、アルギニン、グルタミン、Ｎ−アセチルシステイン、ヒスチジン、リシン、フェニルアラニン、及びトレオニンからなる。
【００７８】
例示的な活性成分は、その定められたアミノ酸構成成分としてロイシン、イソロイシン、バリン、アルギニンＨＣｌ、グルタミン、Ｎ−アセチルシステイン、ヒスチジン、リシン、フェニルアラニン、及びトレオニンを、２．０：１．０：１．０：３．６２：２．６６：０．３：０．１６：０．７：０．１６：０．３４のｗｔ．比で含むことができる（表３）。活性成分は、その定められたアミノ酸構成成分としてロイシン、イソロイシン、バリン、アルギニン、グルタミン、Ｎ−アセチルシステイン、ヒスチジン、リシン、フェニルアラニン、及びトレオニンを、２．０：１．０：１．０：３．０：２．６６：０．３：０．１６：０．７：０．１６：０．３４のｗｔ．比で含むことができる。
【００７９】
【表３】
2021527670.tif 000004
【００８０】
組成物は、分包で投与することができ、たとえば、分包は、例証されるように約６ｇの全アミノ酸を含有する。
【００８１】
組成物は、約６ｇの活性成分、すなわち全アミノ酸の用量で毎日３回投与することができる。いくつかの実施形態では、約１８ｇ、約２２ｇ、約２４ｇ、約６８ｇ、又は約７２ｇの全アミノ酸が、１日当たりに投与される。一実施例では、組成物は、約２４ｇの全アミノ酸の用量で毎日３回投与され、合計約７２ｇの全アミノ酸が、１日当たりに投与される。
【００８２】
筋肉中の脂肪浸潤を低下させるための活性成分による治療の方法
本明細書において記載される活性成分組成物は、筋肉中の脂肪浸潤を低下させるために投与することができる。筋肉中の脂肪浸潤は、筋萎縮の他の疾患及び障害と無関係の及び関連する筋機能及び移動性の重要な予測因子であり（たとえばＡｄｄｉｓｏｎ  ｅｔａ  ｌ．，２０１４，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ，ｈｔｔｐ：／／ｄｘ．ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１１５５／２０１４／３０９５７０を参照）、他の併存症、たとえばサルコペニアと無関係に、肝硬変の合併症として確認された（たとえばＢｈａｎｊｉ  ｅｔ  ａｌ．，２０１８，Ｈｅｐ．Ｉｎｔｌ．，ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１００７／ｓ１２０７２−０１８−９８７５−９を参照）。脂肪浸潤は、筋肉の質に影響を及ぼすので、したがって、筋肉中の脂肪浸潤を低下させることができる治療薬の確認は、重要な進展である。実施例において示されるように、ＬＩＶＲＱＮａｃＨＦＫＴ（上記に記載されるように、一文字アミノ酸コードを使用、ＮａｃはＮＡＣを意味する）を含有する例示的な活性成分は、ちょうど７日間固定された筋肉中の脂肪浸潤の有意な低下又はさらには回避さえも示した。今や活性成分として確認されているアミノ酸実体のこの種の活性な組み合わせについてのこの前例がない観察は、活性成分の投与の効果をモニターするための方法と同様に、療法を必要とする対象にとって、活性成分による療法の重要な新しい道を開く。
【００８３】
したがって、本発明の方法は、これらに限定されないが、慢性背部痛（傍脊柱筋群中の脂肪浸潤）；ＨＩＶ患者（運動に関係する筋肉中の脂肪浸潤）；脊髄損傷；脳卒中；ＣＯＰＤ；肝性脳症；並びに老化に関連する筋力低下を有する対象などのような、筋肉中の脂肪浸潤のリスクがあるか又はそれを有する対象を治療するための活性成分の投与を含む。
【００８４】
それに加えて、筋肉の脂肪を下げることは、グルコース処理を改善する手段である。インスリン抵抗性と筋肉の脂肪との間の強力な関連性を考慮に入れると、筋肉の脂肪を下げることは、グルコース感受性を改善する。グルコース処理は筋肉の機能であるので、筋肉中の脂肪浸潤を下げることは、グルコースを捕捉する筋機能を改善する。
【００８５】
筋肉間及び筋肉内脂肪による浸潤の増加（筋肉脂肪変性）は、筋肉量の低下（ミオペニア）と併せて、癌を有する患者において不良な予後指標として認識されている（Ｍａｌｉｅｔｚｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｎ  Ｓｕｒｇ．２０１６  Ｆｅｂ；２６３（２）：３２０−５）。著しく短い癌特異的な生存期間及び全生存期間が、根治的結腸直腸癌手術を受けた患者の試験において、非筋肉脂肪変性群に対して筋肉脂肪変性群について確認された（Ｓｕｅｄａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｄｉｓ  Ｃｏｌｏｎ  Ｒｅｃｔｕｍ．２０１８  Ｍａｒ；６１（３）：３６４−３７４）。筋細胞間及び筋細胞内脂肪沈着によって特徴付けられる筋肉脂肪変性は、乳頭部周囲癌の手術の後の不良な全生存に強く関係する（ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１０１６／ｊ．ｈｐｂ．２０１８．０２．３７８）。したがって、別の実施形態では、活性成分の投与による筋肉中の脂肪浸潤の低下は、結腸直腸癌及び乳頭部周囲癌の手術などのような癌の治療の転帰を改善する。
【００８６】
筋肉脂肪変性は、肝性脳症を含むが、これに限定されない末期肝疾患（ＥＳＬＤ）、静脈瘤出血、門脈圧亢進症、腹水症、感染リスク、敗血症、総入院率、並びに総死亡率及び肝臓関連死亡率と個別に関連する。
【００８７】
筋肉中の脂肪浸潤のレベルが増加している対象は、ＢＭＩの著しい増加、サルコペニア、又は他の明白な状態を有していなくてもよい。したがって、本発明は、筋肉中の脂肪浸潤を低下させる有効量の活性成分を投与することによって、サルコペニアを伴わない肝硬変に罹患している患者を治療するための方法を提供する。別の態様では、本発明は、筋肉中の脂肪浸潤を低下させる有効量の活性成分を投与することによって、肝性脳症を有する患者を治療することを提供する。
【００８８】
肩腱板損傷を有する患者は、活性成分を投与する本発明の方法から特に利益を得る。肩筋肉中の脂肪浸潤は、肩腱板損傷からの不良な転帰に関連する（Ｍｅｌｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，２００９，Ｏｒｔｈｏｐａｅｄｉｃｓ＆Ｔｒａｍａｔｏｌｏｇｙ：Ｓｕｒｇｅｒｙ＆Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ９５：３１９−３２４）。肩腱板損傷は、棘上筋、棘下筋、及び肩甲下筋の腱損傷を含む。脂肪浸潤は、冒された筋肉のいずれにおいても生じ得る。Ｇｏｕｔａｌｌｉｅｒ分類（Ｍｅｌｉｓ  ｅｔ  ａｌ．を参照）に従うステージ２を上回る脂肪浸潤（中程度）は、不可逆的機能損失のリスクをもたらし、筋肉脂肪浸潤の中程度のステージの間に介入する主要目的は、そのような永久的な損失を予防することである。したがって、本発明は、とりわけ損傷を修復するための手術より前に、Ｇｏｕｔａｌｌｉｅｒステージ２脂肪浸潤の発病を予防するか又は遅延させるために、活性成分により、肩腱板損傷に罹患している対象を治療することを提供する。その代わりに、本発明は、手術より前に、脂肪浸潤の程度、したがってＧｏｕｔａｌｌｉｅｒステージを低下させるために、Ｇｏｕｔａｌｌｉｅｒステージ２又はそれ以上の脂肪浸潤を有する、肩腱板損傷に罹患している対象を治療することを提供する。さらに別の代替手段では、本発明は、内科的治療に加えて、活性成分により、肩腱板損傷に罹患している対象を治療することを提供する；肩腱板損傷の内科的治療は、休息、毎日の及び職業上の運動の適応、リハビリテーション、ＮＳＡＩＤＳ、鎮痛剤、理学療法、浸潤などを含む。一般に、肩腱板損傷の手術は、断裂した腱を修復する手術であり、関節鏡視下手術又は通常の手術とすることができる。
【００８９】
本発明は、より速い脂肪浸潤並びに中程度のＧｏｕｔａｌｌｉｅｒステージ２並びにそれ以上のより重度の脂肪浸潤（ステージ３及び４）への進行のリスクがより高い、肩腱板損傷を有する高齢の対象を治療するのにとりわけ有用である。５０歳以上の高齢の対象は利益を得、５５歳以上の対象は、さらに大きな利益を受けることができ、それぞれの高年齢群で、脂肪流入に対する感受性が増加していくので、６０歳以上の対象は、５５歳以上の対象よりも、さらに大きな利益を受けることができる。
【００９０】
肩腱板損傷のそれぞれの前述の治療は、たとえば、Ｇｏｕｔａｌｌｉｅｒステージを決定するために；本発明の活性成分を投与することによって療法によるＧｏｕｔａｌｌｉｅｒステージの変化を示すために；手術などのような療法の予後を得るために；手術の適切な時期を確定するために；又はその手術が不必要であることを決定するために、筋肉中の脂肪浸潤の程度を決定することを含んでいてもよい。
【００９１】
筋肉中の脂肪浸潤の判定が伴う活性成分による治療
他の状態では、たとえば筋疾患又は障害を有する患者において、筋機能を改善する、たとえば向上させるために活性成分を投与することは、筋肉中の脂肪浸潤を判定することを含む。本開示はまた、固定、栄養失調、飢餓、加齢、オートファジー、タンパク質合成の低下、同化抵抗性、神経筋接合部完全性、インスリン抵抗性、ミトコンドリア新生の減少、アナプレロティック反応、又はエネルギー欠損から選択される１つ又はそれ以上の（たとえばすべての）生理学的症状を、筋肉中の脂肪浸潤を判定すると共に、各症例において治療するための方法を提供する。方法は、上記に記載されるように、有効量の組成物をその必要のある対象に投与することを含む。本発明による治療上の処置は、筋疾患、たとえば筋萎縮、サルコペニア、筋肉の劣化、筋肉の衰弱、悪液質、医薬誘発性のミオパチー、筋ジストロフィー、又はミオペニアを有する対象において実現することができる。筋疾患又は障害は、筋緊張性ジストロフィーなどのようなジストロフィーとすることができる。たとえば、筋疾患又は障害は、ＤＭ１とすることができる。
【００９２】
その代わりに、筋疾患又は障害は、医薬誘発性のミオパチー、たとえばスタチン誘発性のミオパチー；ステロイド誘発性のミオパチー；免疫抑制薬誘発性のミオパチー；化学療法薬誘発性のミオパチー；又はアルコール誘発性のミオパチーとすることができる。各症例において、活性成分の投与には、筋肉中の脂肪浸潤の判定が伴う。
【００９３】
それに加えて、対象は、肩腱板損傷以外の骨折又は他の外傷を有することができる。
【００９４】
いくつかの実施形態では、方法は、食物の不足、たとえば栄養失調又は飢餓；加齢；オートファジー；タンパク質合成の低下；同化抵抗性；接合部完全性（たとえば神経筋接合部完全性）；ミトコンドリア新生の減少；アナプレロティック反応を治療するために、有効量の組成物をその必要のある対象に投与することを含む。各そのような前述の症例において、治療には筋肉中の脂肪浸潤の判定が伴う。
【００９５】
いくつかの実施形態では、対象は、筋肉中の脂肪浸潤の判定が伴う活性成分による治療を以前に受けたことがない（たとえば未処置の対象）。
【００９６】
いくつかの実施形態では、対象は、筋力低下、たとえば、骨格筋、心筋、又は平滑筋の１、２、又はそれ以上（たとえばすべて）の筋力低下を有する。ある実施形態では、対象は、頸筋、胴体筋肉、腕筋肉、肩筋肉、手筋肉、脚筋、又は脚筋肉の１、２、３、４、５、６、又はそれ以上（たとえばすべて）において筋力低下を有する。筋肉中の脂肪浸潤は、筋肉中の脂肪浸潤の程度を決定するか又は判定するために、特に、筋肉中の脂肪浸潤の程度が活性成分による治療によって低下することを決定するために、治療後、毎日、２〜３日毎に、毎週、２週間毎に、３週間毎に、４週間毎に判定することができる。活性成分の投与が整形外科手術などのような待機的手術の前に行われる場合、筋肉中の脂肪浸潤の判定は、筋肉中の脂肪率が手術の前と変わらない又は改善されさえすることを決定するために行うことができる。
【００９７】
整形外科手術、たとえば膝の手術若しくは腰の手術、肘の手術を受けたことがあるか又はギブスを着用している対象は、筋肉中の脂肪浸潤の判定を伴う活性成分の投与から利益を得る。手術、たとえば、膝又は股関節置換術（それぞれ膝関節全置換術及び股関節全置換術とも呼ばれる）が待機的である場合、活性成分の投与、筋肉中の脂肪浸潤の判定、又はその両方は、手術の前に、たとえば手術の１週間前に若しくは手術の２週間前に行うことができるか又は手術の後に行うことができる、好ましくは、手術の前後に行われる。特に、筋肉、詳細には、手術によって最も影響を与えられるか又は手術によって治療される筋肉中の脂肪浸潤の判定は、筋肉中の脂肪浸潤の程度を決定するか又は判定するために、詳細には、筋肉中の脂肪浸潤の程度が活性成分による治療によって低下することを決定するために、及びより詳細には、筋肉中の脂肪率が手術の前と変わらない又は改善されさえすることを決定するために、手術後、毎日、２〜３日毎に、毎週、２週間毎に、３週間毎に、４週間毎に行うことができる。
【００９８】
いくつかの実施形態では、対象は、神経筋障害、たとえば重症筋無力症又はランバート−イートン筋無力症候群を有する。
【００９９】
いくつかの実施形態では、対象は、筋ジストロフィー、たとえばデュシェンヌ型筋ジストロフィー、ベッカー型筋ジストロフィー、顔面肩甲上腕筋ジストロフィー、又は筋緊張性ジストロフィーを有する。いくつかの実施形態では、対象は、炎症性ミオパチー、たとえば多発筋炎又は皮膚筋炎を有する。
【０１００】
いくつかの実施形態では、対象は、低いナトリウムレベル（たとえば低ナトリウム血症）、低いカリウムレベル（たとえば低カリウム血症）、又はカルシウム欠乏症若しくは比較的高いカルシウムレベル（たとえば高カルシウム血症）の１、２、又はそれ以上（たとえばすべて）を有する。
【０１０１】
いくつかの実施形態では、対象は、神経損傷、たとえば神経痛又は末梢性ニューロパチーに関連する筋力低下を有する。いくつかの実施形態では、対象は、骨低下症、たとえば骨軟化症、骨形成不全症、くる病、又は低ホスファターゼ血症を有する。
【０１０２】
いくつかの実施形態では、対象は、脳卒中又は一過性脳虚血発作を経験したことがある。いくつかの実施形態では、対象は、自己免疫疾患、たとえばグレーブス病を有する。
【０１０３】
いくつかの実施形態では、対象は、甲状腺機能低下症を有する。いくつかの実施形態では、対象は、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）を有する。
【０１０４】
いくつかの実施形態では、組成物の投与は、対象において筋タンパク質合成の活性化をもたらす。いくつかの実施形態では、組成物はまた、筋タンパク質消耗をも低下させる。
【０１０５】
いくつかの実施形態では、組成物は、対象において、損傷後に、固定又は筋肉廃用の一方又は両方に関連する筋肉中の脂肪浸潤の程度における改善をもたらす。いくつかの実施形態では、対象は、組成物の投与より前に、手術、たとえば肩腱板の手術、膝の手術、若しくは腰の手術を受けたことがあるか又はギブスを着用している。いくつかの実施形態では、対象は、股関節骨折に関連するミオペニアを有したことがある。いくつかの実施形態では、対象は、関節置換術を受けたことがある。いくつかの実施形態では、対象は、損傷修復手術を受けたことがある。
【０１０６】
いくつかの実施形態では、対象は、人工呼吸器誘発性の横隔膜ジストロフィー又は人工呼吸器誘発性の横隔膜機能不全を有する。いくつかの実施形態では、対象は、ＩＣＵ関連又は熱傷関連ミオパチーの一方又は両方を有したことがある。
【０１０７】
いくつかの実施形態では、対象は、疾患関連性の悪液質、たとえば、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、うっ血性心不全（ＣＨＦ）、慢性腎疾患（ＣＫＤ）、及び癌から選択される疾患関連性の悪液質を有する。
【０１０８】
いくつかの実施形態では、本発明の方法は、第２の薬剤の投与をさらに含む。そのような第２の薬剤は、未変化であろうと加水分解形態をしていようと、ホエー、カゼイン、ラクトアルブミンなどのようなタンパク質を除外してもよい。
【０１０９】
本開示はまた、本明細書において記載される有効量の組成物をその必要のある対象に投与することを含む、筋萎縮を低下させるための方法を提供する。各そのような症例において、療法の有効性は、筋肉中の脂肪浸潤の低下を含み、筋肉中の脂肪浸潤の程度を決定することを含んでいてもよい。
【０１１０】
本開示はまた、筋肉中の脂肪浸潤を低下させるための薬として使用するための本明細書において記載される組成物をも提供する。
【０１１１】
本開示は、筋肉中の脂肪浸潤を低下させるための薬として使用するための本明細書において記載される組成物を提供し、これは、固定、損傷、手術、栄養失調、飢餓、加齢、オートファジー、タンパク質合成の低下、同化抵抗性、神経筋接合部完全性、インスリン抵抗性、ミトコンドリア新生の減少、及びアナプレロティック反応からなる群から選択される１つ又はそれ以上の症状の治療と併せられてもよい。
【０１１２】
用法・用量
組成物は、本明細書において記載される用法・用量に従ってヒト対象に投与することができる。
【０１１３】
用量は、たとえば毎日２回、毎日３回、毎日４回、毎日５回、毎日６回、毎日７回、又はそれ以上、投与することができる。組成物は、少なくとも２日、３日、４日、５日、６日、７日、又は２週間、投与することができる。治療されている状態に依存して、組成物は、少なくとも１０週、１１週、１２週、１３週、１４週、１５週、１６週、１７週、１８週、１９週、２０週間、又はそれ以上、投与することができる。いくつかの実施形態では、組成物は、長期にわたって、たとえば３０日超（たとえば３１日、４０日、５０日、６０日、３か月、６か月、９か月、１年、２年、又は３年）投与することができる。筋肉中の脂肪浸潤の状態が長期にわたり、且つ和らがない場合、本発明は、無期限に、たとえば対象の一生の間、活性成分を投与することを想定する。
【０１１４】
活性成分は、たとえば１日当たり１回、１日当たり２回、１日当たり３回、１日当たり４回、１日当たり５回、又は１日当たり６回（たとえば１日当たり３回）、約４ｇ及び約８０ｇの全アミノ酸の用量で投与することができる。いくつかの実施形態では、組成物は、約５ｇ〜約１５ｇ、約１０ｇ〜約２０ｇ、約２０ｇ〜約４０ｇ、又は約３０ｇ〜約５０ｇの全アミノ酸の用量で、たとえば１日当たり１回、１日当たり２回、１日当たり３回、１日当たり４回、１日当たり５回、又は１日当たり６回（たとえば１日当たり３回）、投与される。
【０１１５】
組成物は、対象において筋機能を向上させるために、２時間毎に、３時間毎に、４時間毎に、５時間毎に、６時間毎に、７時間毎に、８時間毎に、９時間毎に、又は１０時間毎に投与することができる（たとえば、対象は、加齢、損傷、萎縮、感染、又は疾患により筋機能の減少を有するか又は有するとして確認される）。
【０１１６】
いくつかの実施形態では、組成物は、食事（たとえば朝食、昼食、又は夕食の１、２、又はそれ以上（たとえばすべて））より前に投与される。いくつかの実施形態では、組成物は、食事（たとえば朝食、昼食、又は夕食の１、２、又はそれ以上（たとえばすべて））と同時に投与される。いくつかの実施形態では、組成物は、食事（たとえば朝食、昼食、又は夕食の１、２、又はそれ以上（たとえばすべて））の後に投与される。
【０１１７】
活性成分及び医薬組成物の産生
組成物を作製するために使用されるアミノ酸は、分散及び／又は可溶化を助けるために、１つにまとめられてもよい及び／又はインスタント化されてもよい。
【０１１８】
本開示のアミノ酸組成物は、下記の仕入先のアミノ酸及びアミノ酸誘導体を使用して作製されてもよい又は他の仕入先が使用されてもよく：たとえばＦＵＳＩ−ＢＣＡＡ（商標）インスタントブレンド（２：１：１の重量比のＬ−ロイシン、Ｌ−イソロイシン、及びＬ−バリン）、ＦＵＳＩＬ（商標）インスタントＬ−ロイシン、Ｌ−アルギニンＨＣｌ、Ｌ−グルタミン、及び他のアミノ酸が、味の素株式会社から入手されてもよく；Ｎ−アセチルシステインは、Ｓｐｅｃｔｒｕｍ  Ｃｈｅｍｉｃａｌから入手されてもよい。
【０１１９】
本発明の開示のアミノ酸組成物を産生するために、下記の一般的なステップが使用されてもよい：出発物質（個々のアミノ酸及び賦形剤）がブレンド装置でブレンドされ、その後、ブレンド均一性及びアミノ酸含有量の検証並びにスティックパック又は他の単位剤形の中へのブレンドされた粉末の充填が続けられてもよい。スティックパック又は他の単位剤形の内容物は、経口投与に使用する時に水中に分散させてもよい。
【０１２０】
本開示の医薬組成物は、経口での使用に（たとえば水性若しくは油性懸濁剤、エマルジョン、分散性の粉末若しくは顆粒、シロップ剤、又はエリキシル剤）、非経口投与に（たとえば、静脈内、皮下、筋肉内投薬のための滅菌水性若しくは油性水剤として又は直腸投薬のための坐剤として）、又は腸内投与に（たとえば経管栄養法を介しての）適している形態をしていてもよい。しかしながら、概して、本発明の医薬組成物は、経口投与のためのものであろう。
【０１２１】
本発明の食品サプリメント及び病人用栄養組成物は、経口投与に適している形態をしているであろう。
【０１２２】
原材料、たとえば医薬グレードのアミノ酸実体及び／又は賦形剤を組み合わせて組成物にする場合、混入物が、組成物中に存在するかもしれない。組成物が実質的に混入物を含まない（たとえば、１０、５、１、０．１、０．０１、又は０．００１％未満（乾燥重量ベースのｗ／ｗ）を含む）場合、組成物は、混入のレベルの基準を満たす。いくつかの実施形態では、本明細書における方法において記載される組成物は、混入物を含まない。混入物は、組成物中に故意に存在しない任意の物質（たとえば、医薬グレードのアミノ酸実体及び賦形剤、たとえば経口投与構成成分は、故意に存在してもよい）又は組成物の製品の品質パラメーターに対してマイナスの影響（たとえば対象における副作用、効力の減少、安定性／有効期間の減少、変色、匂い、味が悪い、食感／口当たりが悪い、若しくは組成物の構成成分の分離の増加）を有する任意の物質を含む。いくつかの実施形態では、混入物は、微生物、エンドトキシン、金属、又はその組み合わせを含む。いくつかの実施形態では、組成物の各部の、たとえば金属、レシチン、コリン、エンドトキシン、微生物、又は他の混入物（たとえば原材料からの混入物）による混入のレベルは、食品において許可されるレベル未満である。
【０１２３】
賦形剤
本開示のアミノ酸組成物は、１つ又はそれ以上の賦形剤と共に調合されてもよい又は製剤されてもよい。適している賦形剤の非限定的な例は、味物質、香味料、緩衝剤、防腐剤、安定剤、バインダー、コンパクション剤（ｃｏｍｐａｃｔｉｏｎ  ａｇｅｎｔ）、潤滑剤、分散促進剤、崩壊剤、調味料、甘味料、及び着色料を含む。
【０１２４】
いくつかの実施形態では、賦形剤は、緩衝剤を含む。適している緩衝剤の非限定的な例は、クエン酸、クエン酸ナトリウム、炭酸マグネシウム、重炭酸マグネシウム、炭酸カルシウム、及び重炭酸カルシウムを含む。
【０１２５】
いくつかの実施形態では、賦形剤は、防腐剤を含む。適している防腐剤の非限定的な例は、アルファ−トコフェロール及びアスコルビン酸などのような抗酸化物質並びにパラベン、クロロブタノール、及びフェノールなどのような抗菌剤を含む。
【０１２６】
いくつかの実施形態では、組成物は、賦形剤としてバインダーを含む。適しているバインダーの非限定的な例は、デンプン、アルファ化デンプン、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、セルロース、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロース、ポリアクリルアミド、ポリビニルオキソアゾリドン（ｐｏｌｙｖｉｎｙｌｏｘｏａｚｏｌｉｄｏｎｅ）、ポリビニルアルコール、Ｃ１２〜Ｃ１８脂肪酸アルコール、ポリエチレングリコール、ポリオール、サッカリド、オリゴ糖、及びその組み合わせを含む。
【０１２７】
いくつかの実施形態では、組成物は、賦形剤として潤滑剤を含む。適している潤滑剤の非限定的な例は、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸亜鉛、水添植物油、ｓｔｅｒｏｔｅｘ、ポリオキシエチレンモノステアレート、タルク、ポリエチレングリコール、安息香酸ナトリウム、ラウリル硫酸ナトリウム、ラウリル硫酸マグネシウム、及び軽油を含む。
【０１２８】
いくつかの実施形態では、組成物は、賦形剤として分散促進剤を含む。適している分散剤の非限定的な例は、高ＨＬＢ乳化界面活性剤として、デンプン、アルギン酸、ポリビニルピロリドン、グアーガム、カオリン、キサンタンガム、ベントナイト、精製木材セルロース、デンプングリコール酸ナトリウム、イソアモルファスシリケート（ｉｓｏａｍｏｒｐｈｏｕｓ  ｓｉｌｉｃａｔｅ）、及び結晶セルロースを含む。
【０１２９】
いくつかの実施形態では、組成物は、賦形剤として錠剤分解物質を含む。いくつかの実施形態では、錠剤分解物質は、非発泡性錠剤分解物質である。適している非発泡性錠剤分解物質の非限定的な例は、コーンスターチ、ジャガイモデンプン、そのアルファ化でんぷん及び加工デンプンなどのようなデンプン、甘味料、ベントナイトなどのようなクレー、微結晶性セルロース、アルギナート、デンプングリコール酸ナトリウム、寒天、グアー、イナゴマメ、カラヤ、ペクチン、及びトラガントなどのようなガムを含む。いくつかの実施形態では、錠剤分解物質は、発泡性錠剤分解物質である。適している発泡性錠剤分解物質の非限定的な例は、クエン酸と組み合わせた炭酸水素ナトリウム及び酒石酸と組み合わせた炭酸水素ナトリウムを含む。
【０１３０】
いくつかの実施形態では、賦形剤は、調味料を含む。調味料は、合成香味油及び香料；天然油；植物、葉、花、及び果実からの抽出物；並びにその組み合わせから選ぶことができる。いくつかの実施形態では、調味料は、シナモン油；ヒメコウジの油；ハッカ油；クローバ油；干し草油；アニス油；ユーカリ；バニラ；レモン油、オレンジ油、ブドウ、及びグレープフルーツ油などのような柑橘油；並びにリンゴ、モモ、西洋ナシ、イチゴ、ラズベリー、サクランボ、プラム、パイナップル、及びアプリコットを含む果実精から選択される。
【０１３１】
いくつかの実施形態では、賦形剤は、甘味料を含む。適している甘味料の非限定的な例は、グルコース（コーンシロップ）、デキストロース、転化糖、フルクトース、及びその混合物（キャリヤとして使用されない場合）；サッカリン及びナトリウム塩などのようなその様々な塩；アスパルテームなどのようなジペプチド甘味料；ジヒドロカルコン化合物、グリチルリチン；ステビア（Ｓｔｅｖｉａ  Ｒｅｂａｕｄｉａｎａ）（ステビオシド）；スクラロース（ｓｕｃｒａｌｏｓｅ）などのようなスクロースのクロロ誘導体；並びにソルビトール、マンニトール、キシリトールなどのような糖アルコールを含む。硬化デンプン加水分解物並びに合成甘味料３，６−ジヒドロ−６−メチル−１，２，３−オキサチアジン−４−オン−２，２−ジオキシド、特にそのカリウム塩（アセスルファム−Ｋ）並びにナトリウム塩及びカルシウム塩もまた想定される。
【０１３２】
いくつかの実施形態では、組成物は、着色料を含む。適している着色料の非限定的な例は、食品、医薬、及び化粧品顔料（ＦＤ＆Ｃ）、医薬及び化粧品顔料（Ｄ＆Ｃ）、並びに外用薬及び化粧品顔料（Ｅｘｔ．Ｄ＆Ｃ）を含む。着色料は、染料又はそれらの対応するレーキとして使用することができる。
【０１３３】
特定の賦形剤は、次の１つ又はそれ以上を含んでいてもよい：クエン酸、レシチン（たとえばＡｌｃｏｌｅｃ  Ｆ１００）、甘味料（たとえばスクラロース、スクラロース微粉化ＮＦ、アセスルファムカリウム（たとえばＡｃｅ−Ｋ））、分散促進剤（たとえばキサンタンガム（たとえばＴｉｃａｘａｎ  Ｒａｐｉｄ−３））、フレーバリング（たとえばバニラカスタード＃４３０６、ＮａｔオレンジＷＯＮＦ  ＃１３２６、ライム８６５．００３２Ｕ、及びレモン８６２．２１６９Ｕ）、苦味マスキング剤（たとえば９３６．２１６０Ｕ）、並びに天然又は合成色素（たとえばＦＤ＆Ｃ  Ｙｅｌｌｏｗ  ６）。実施例の表５は、そのような賦形剤を有する製剤を例証する。
【０１３４】
食物性組成物
アミノ酸実体を含む活性成分は、たとえば病人用特別食、機能性食品、又はサプリメントから選ばれる食物性組成物として製剤し、使用することができる。そのような実施形態では、原材料及び最終産物は、食料品の基準を満たすべきである。そのような使用は、加齢、損傷、萎縮、感染、又は疾患により筋肉中の脂肪の浸潤を有するか又はそれに罹患しているとして確認された対象の健康状態を改善することを含む。いくつかの実施形態では、対象は、筋肉の劣化、筋肉の衰弱、筋萎縮、悪液質、サルコペニア、ステロイドミオパチー、又は筋ジストロフィーを有するか又はそれを有するとして確認されている。いくつかの実施形態では、対象は、２型糖尿病又は比較的高いＢＭＩの一方又は両方を有する。
【０１３５】
いくつかの実施形態では、食物性組成物の投与は、対象において１つ又はそれ以上の代謝症状における改善をもたらし、たとえば、１つ又はそれ以上の代謝症状は、以下のものから選択される：遊離脂肪酸及び脂質代謝の増加、ミトコンドリア機能の改善、白色脂肪組織（ＷＡＴ）褐変、活性酸素種（ＲＯＳ）の減少、グルタチオン（ＧＳＨ）のレベルの増加、肝臓炎症の減少、肝細胞の風船様拡大の減少、腸バリア機能の改善、インスリン分泌の増加、又は耐糖能。ある実施形態では、組成物の投与は、２４時間の治療期間の後に１つ又はそれ以上の代謝症状における改善をもたらす。
【０１３６】
バイオマーカー
本明細書において開示される方法のいずれも、たとえばＣＴ又はＭＲＩにより対象における筋肉中の脂肪の浸潤の程度を決定することによって、本明細書において記載される組成物の対象への投与の有効性を判定すること又はモニターすることを含むことができる。対象は、筋機能向上を必要としていてもよい（たとえば、対象は、筋肉の劣化、筋肉の衰弱、筋萎縮、悪液質、サルコペニア、医薬誘発性のミオパチー、筋ジストロフィー、又はミオペニアを有する）。対象の治療における組成物に対する有効性は、以下のものの１つ又はそれ以上（たとえばすべて）のレベルの判断基準をさらに含むことができる：
ａ）ミオスタチン；
ｂ）ミオグロビン；
ｃ）コルチゾール−ＡＭ；
ｄ）Ｃ反応性タンパク質；
ｅ）インスリン；
ｆ）サイトカイン（たとえばＩＬ−１Ａ  ＲＢＭ、ＩＬ−１ＲＡ、ＩＬ−１  ＲＩ、ＩＬ−１  ＲＩＩ、ＩＬ−１２、ＩＬ−１８、若しくはＭＣＰ−１の１つ若しくはそれ以上（たとえばすべて））；
ｇ）ＧＤＦ−１１；
ｈ）Ｐ３ＮＰ；
ｉ）ＩＧＦ−１；
ｊ）ＩＧＦＢＰ１；
ｋ）ＩＧＦＢＰ３；
ｌ）ＦＧＦ２１；
ｍ）ＤＨＥＡＳ；
ｎ）ｍＴＯＲＣ１；
ｏ）Ｇｃｎ２；又は
ｐ）ＡＭＰ活性化プロテインキナーゼ（ＡＭＰＫ）。
【０１３７】
本明細書において開示される方法のいずれかのいくつかの実施形態では、ａ）〜ｐ）の１つ又はそれ以上の判断基準は、対象から取得される試料から得られる。
【０１３８】
いくつかの実施形態では、対象は、組成物を受ける前に、受ける間に、又はその後に判定される。
【０１３９】
いくつかの実施形態では、対象への組成物の投与は、対象において、ミオグロビン、ミオスタチン、ＧＤＦ−１１、コルチゾール−ＡＭ、Ｃ反応性タンパク質、インスリン、又はサイトカイン（たとえばＩＬ−１Ａ  ＲＢＭ、ＩＬ−１ＲＡ、ＩＬ−１  ＲＩ、ＩＬ−１  ＲＩＩ、ＩＬ−１２、ＩＬ−１８、若しくはＭＣＰ−１の１つ若しくはそれ以上（たとえばすべて））の１つ又はそれ以上（たとえばすべて）のレベルにおける減少をもたらす（表４）。いくつかの実施形態では、対象への組成物の投与は、対象において、Ｐ３ＮＰ、ＩＧＦ−１、ＩＧＦＢＰ１、ＩＧＦＢＰ３、ＦＧＦ−２１、ＤＨＥＡＳ、又はｍＴＯＲＣ１の１つ又はそれ以上（たとえばすべて）のレベルにおける増加をもたらす（表４）。
【０１４０】
【表４】
2021527670.tif 000005
【実施例】
【０１４１】
下記の実施例は、本発明の理解を助けるために記載されるが、決して、本発明の範囲を限定することを意図するものではなく、そのように解釈されるべきではない。
【０１４２】
実施例１．アミノ酸組成物による対象における固定の治療は筋肉量及び機能の損失を低下させるだけではなく、驚いたことに脂肪浸潤を低下させる
本明細書において記載される試験は、片側の膝が固定されている健康な対象への、アミノ酸を含む組成物の投与を特徴とする。本試験の目標は、７日間の１本の脚の固定及び１４日間の固定後の回復の後に、筋萎縮に対するアミノ酸組成物の影響を決定することとした。組成物は、１日当たり３回の４本のスティックパック中、投与用スティック分包当たり、約１ｇのＬ−ロイシン、約０．５ｇのＬ−イソロイシン、約０．５ｇのＬ−バリン、約１．５ｇのＬ−アルギニン（又は１．８１ｇのＬ−アルギニンＨＣｌ）、約１．３３ｇのＬ−グルタミン、約０．１５ｇのＮ−アセチルシステイン、約０．０８ｇのＬ−ヒスチジン、約０．３５ｇのＬ−リシン、約０．０８ｇのＬ−フェニルアラニン、及び約０．１７ｇのＬ−トレオニンを含んだ（たとえば、１日当たり合計約６８若しくは７２ｇ又は約２３ｇ若しくは２４ｇを１日当たり３回）。組成物はまた、表５に示されるように賦形剤をも含んだ。
【０１４３】
【表５】
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【０１４４】
本試験では、対象は、２８日間、毎日３回、アミノ酸組成物を受けた。アミノ酸は、８ｏｚ．の水中に溶解されることになる粉末形態で提供された。参加者は、２８日間の試験期間の間、７日（８〜１５日）間、１本の脚が固定された。固定具は、利き足の膝（最大等尺性脚強度に基づく）について、７日間、１本の脚を固定するために使用し、１４０°の固定屈曲位でニーブレース（たとえばＢｒｅｇブレース）を着用させた。
【０１４５】
コントロール対象は、２８日間、毎日３回、プラセボを受けた。プラセボは、カロリー量が、投与されるアミノ酸の量と等価な量のマルトデキストリン（ＮＦグレード）からなり、同じ賦形剤を有し、８ｏｚ．の水中に溶解した。
【０１４６】
本試験の主要評価項目は、安全性及び忍容性とした。それに加えて、１本の脚の固定の７日後の筋肉廃用萎縮、特に、筋萎縮に対するアミノ酸製剤の影響について試験した。副次的評価項目は、膝強度、筋肉断面積及び容量、筋線維の質、並びに除脂肪筋肉量に基づく筋機能を含んだ。対象における除脂肪筋肉量の変化率は、二重エネルギーＸ線吸収測定法（ＤＥＸＡ）を使用して決定した。ＢｉｏＤｅｘ機を使用して測定される最大トルク（ニュートンメートルで測定）の変化率及び最大トルクまでの時間（秒で測定）の変化率もまた評価した。筋生検は、筋線維横断面積（ＣＳＡ）を決定するために実行した。筋肉のサイズは、ＭＲＩを介して評価した。筋肉の健康状態は、電気インピーダンスミオグラフィー（ＥＩＭ）測定法によって評価した。評価は、ベースライン時（１日目）、固定前（８日目）、固定後（１５日目）、及び回復時（２８日目）に実行した。
【０１４７】
より詳細には、ＭＲＩは、１、８、１５、及び２８日目に実行した。軸方向（横断）画像を、ＧＥ高忠実度３Ｔ磁石を使用し、大腿骨の遠位端から大転子まで、両方の大腿から得た。高速リカバリー高速スピンエコーパルスシーケンスを、大腿の水のみ、脂肪のみ、同位相、及び逆位相の画像を得るために、ＩＤＥＡＬ（非対称エコー及び最小二乗法による水及び脂肪の反復分解（ｉｔｅｒａｔｉｖｅ  ｄｅｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ｗａｔｅｒ  ａｎｄ  ｆａｔ  ｗｉｔｈ  ｅｃｈｏ  ａｓｙｍｍｅｔｒｙ  ａｎｄ  ｌｅａｓｔ−ｓｑｕａｒｅｓ  ｅｓｔｉｍａｔｉｏｎ））後処理と共に使用した。以下のパラメーターを使用した：ＴＲ＝２０００ｍｓｅｃ、ＴＥ＝３０ｍｓｅｃ、再収束フリップ角＝１１１度、エコートレインレングス＝６、ＡＳＳＥＴ（パラレルイメージングファクター）＝２、視野＝４２×２１ｃｍ、収集マトリックス＝５１２×２５６、３−ｍｍスライス厚、０−ｍｍスライスギャップ。合計およそ１６０枚のスライスを取得したが、大腿の長さに依存して変動した。取得は、２つのセクション、下方のステージ及び上方のステージで行った。両方のステージについてのスキャンタイムの合計は、およそ１１分であった。スキャンは、Ａｎａｌｙｚｅ  Ｐｒｏソフトウェアにアップロードした。腰の大転子及び膝の外側上顆の間の５０％の領域を分析に使用した。ソフトウェアのセグメンテーション機能は、骨、脂肪、右側の筋肉、右側の大腿四頭筋、左側の筋肉、及び左側の大腿四頭筋を区別するために使用した。次いで、５０％の領域中の３枚目毎のスライスを、両方の脚の四頭筋について手作業でトレースした。これらの測定法からの最大の数を最大大腿四頭筋横断面積と見なした。次いで、ソフトウェアにより、手作業で測定した３枚目毎のスライスを取り込み、５０％の領域中のすべてのスライスについてそのデータから推測し、大腿四頭筋容量の推定値を得ることができた。ＣＳＡはｍｍ２で、筋肉の容量はｍｍ３で表わした。プロトコールは、Ｒｅｅｄｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２００５のものを適合させた。
【０１４８】
画像データについて独立した検証を得るために、上腿及び下腿のＤＩＸＯＮシーケンスを、全筋肉の容量の分析及び筋肉内脂肪率を測定するための追加の分析のために、Ｉｍａｇｅ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  Ｇｒｏｕｐ（ＩＡＧ、Ｌｏｎｄｏｎ、ＵＫ）に安全に移した。水及び脂肪の画像を考慮に入れると、次のように脂肪率（ＦＦ）画像を生成することができる：
ＦＦ＝Ｆ／（Ｗ＋Ｆ）、ここでＦ＝脂肪及びＷ＝水。
【０１４９】
ＩＡＧによりこれらの画像を算出し、個々のＤＩＣＯＭ  ｓｔｕｄｉｅｓにそれらを追加した。基本画像がノイズによる高脂肪率の偽領域を示し得るので、しきい値処理フィルターを、脂肪及び水のシグナルの両方が小さい領域において、これらの小さなささいな人為結果を低下させ、ノイズを最小限にするために使用した。セグメンテーションを上腿ＦＦ画像に対して実行した。セグメンテーションは、２０枚のスライスについて骨盤に向かって大腿の真中からとした。セグメンテーションは、各シーケンスから手作業で実行した。一度セグメンテーションしたら、ＲＯＩスライスを集めて、ＲＯＩ容量にし、統計データを自動的に算出した。
【０１５０】
対象を選択するための主な基準は、以下のものを含んだ：１）概ね健康、非喫煙；２）インフォームドコンセントを提供する意思があり、且つ提供することができる；３）２０〜４５歳の男性；及び４）２５〜３５ｋｇ／ｍ２の間のＢＭＩ。除外基準は、以下のものを含んだ：１）喫煙者；２）対象は、治験責任医師の意見において、試験の要求に従う能力を損なっていると思われる任意の内科的、整形外科的、又は精神的状態を同時に有する；３）過去２年にわたって著しい進行のない基底細胞癌、非扁平上皮皮膚癌、前立腺癌、又は上皮内癌以外の、過去５年以内の癌の病歴；４）深刻な整形外科的な、心血管、肺、腎臓、肝、感染性の疾患、免疫障害（継続的な診療を必要とする）、若しくは代謝／内分泌障害（たとえば糖尿病、高コレステロール、空腹時血糖の上昇）又は経口タンパク質サプリメントの摂取並びに／若しくは安全性及び試験の目的についての評価を妨げると思われる他の疾患；５）任意の悪液質に関連する状態（たとえば、癌、結核、又はヒト免疫不全ウイルス感染及び後天性免疫不全症候群に関する）又は任意の遺伝的筋疾患若しくは障害；６）試験に干渉し得る病気にかかっている（たとえば長期の重度の下痢、吐出、又はえん下困難）；７）本試験の登録前６０日又は治験薬の５半減期未満のどちらか長い方で治験薬の試験に参加していた対象；８）試験薬の構成成分のいずれかに対する過敏症；９）過剰なアルコール摂取量（＞２１単位／週）；１０）試験製剤中のアミノ酸又は任意の成分に対する既知の敏感性又はアレルギー；１１）胃腸バイパス手術（たとえばラップバンド手術）、過敏性腸疾患、又は過敏性腸症候群の経歴；１２）出血性素因の病歴、血小板若しくは凝固障害、又は抗血小板／抗凝固療法（予防薬として服用される１日当たり８１ｍｇ以下の低用量アスピリンは許可される）；１３）凝固異常又は深部静脈血栓症の個人的な病歴又は家族歴；１４）スクリーニング前４５日以内のコルチコステロイド、テストステロン補充療法（摂取、注射、若しくは経皮）、任意のアナボリックステロイド、クレアチン、ホエータンパク質サプリメント、カゼイン、又は分枝鎖アミノ酸（ＢＣＡＡ）の併用；１５）ＭＲＩスキャンに対する禁忌（たとえば取外し不可能な強磁性のインプラント、ペースメーカー、動脈瘤クリップ、若しくは他の異物を有する対象又はＭＲＩスキャンに禁忌を示すと思われる閉所恐怖症の症状を有する対象）；１６）スクリーニング時に１１．５ｍｇ／ｄｌ未満のヘモグロビン；或いは１７）スクリーニング時に１５０，０００／ｕＬ（１５０×１０９／Ｌ）未満の血小板。
【０１５１】
本試験の研究結果は、片側の肢の固定の結果としての、脚除脂肪量の下落（すなわち廃用萎縮）は、筋肉の中への脂肪浸潤の低下を含め、プラセボを受けた人たちと比較して、ＬＩＶＲＱＮＡＣＨＫＦＴアミノ酸の組み合わせを受けた人たちにおいて弱められたことを示唆する。片側の肢が固定されている対象におけるこれらの結果は、アミノ酸の組み合わせが、筋力を保持しながら、固定された脚の除脂肪量におけるこういった下落を弱めたことを示唆する。プラセボ投与群における固定された脚は、２週間の回復期間の間に固定後の状態にも固定前の状態にも除脂肪量を回復させなかった。対照的に、アミノ酸の組み合わせの投与は、この２週間の回復期間内で、脚除脂肪量を維持した並びに／又は固定後及び固定前の脚除脂肪量まで改善した。プラセボ群における１週間の片側の肢の固定の後に見られた筋力の下落もまた、アミノ酸の組み合わせによって弱められた。プラセボ又はＬＩＶＲＱＮＡＣＨＫＦＴアミノ酸投与群のいずれかの固定されていない脚は、適切なコントロールについて予想されるように、ニーブレース期間の間、対応する固定された脚と同じ程度まで脚除脂肪量も筋力も減らしているようには見えなかった。
【０１５２】
外側広筋内の特定の線維のＣＳＡは、Ｐｂｏ投与に対して、ＬＩＶＲＱＮＡＣＨＫＦＴにより固定の間、保持された。１週間の固定は、線維ＣＳＡの２．２％（±４．０）の減少に至った（図１）。既存の文献と一致して、Ｐｂｏ群において、筋肉廃用は、Ｉ型の線維に対してＩＩ型の線維の優先的な損失をもたらす傾向があった（ＩＩ型について４．５±４．８％の損失対Ｉ型について変化なし）。対照的に、ＬＩＶＲＱＮＡＣＨＫＦＴの投与は、固定の間に両方の線維型の横断面積を保持した。ＣＳＡの定量を図１に示すが、ＬＩＶＲＱＮＡＣＨＫＦＴとＰｂｏとの間で下記の変化が観察された：全線維について４．１倍；ＩＩ型線維について１．７倍；Ｉ型線維について１２倍の増加（Ｐ＝０．０８）。注意すべきことに、ＬＩＶＲＱＮＡＣＨＫＦＴは、収縮の遅いＩ型線維に対して特に目立った効果を有し、それらを保持するだけではなく、それらの成長を誘発する傾向があった（８日目から１５日目までにＩ型線維ＣＳＡにおいて１３．３±７．４％の増加）。
【０１５３】
酸化系の収縮の遅いＩ型線維に対するＬＩＶＲＱＮＡＣＨＫＦＴの効果についての前例がない観察は、インスリン鋭敏化に対する影響を示唆し得、後者の事柄については、筋肉脂肪浸潤に密接に関連した（Ａｌｂｕ  ｅｔ  ａｌ．２００５）。Ｉ型筋線維に対するこの前例がない効果と一致して、ＬＩＶＲＱＮＡＣＨＫＦＴの投与は、肢固定の間の筋肉脂肪浸潤を有意に弱らせた（図２Ａ及び２Ｂ）。脂肪率（ＦＦ）の変化を示す代表的な画像は、Ｐｂｏを投与した対象において（図２Ａ）、８〜１５日目の間に、固定されていない脚はＦＦの変化がなかったが、固定された脚はＦＦを増加させ、筋肉量を減少させたことを示す。対照的に、ＬＩＶＲＱＮＡＣＨＫＦＴを投与した対象において（図２Ａ）、固定された脚は、固定後に、より低い脂肪率及びより高い筋肉含有量を有し、ＬＩＶＲＱＮＡＣＨＫＦＴの抗萎縮性の効果を示した。これらのＦＦの変化をすべての対象の間で定量し、結果を図２Ｂにプロットする。８日目に対する１５日目の四頭筋脂肪率の変化率は、固定された脚において、ＬＩＶＲＱＮＡＣＨＫＦＴの−０．４１±３．０７％に対してＰｂｏにおいて＋１２．８±６．１％（Ｐ＝０．０１８）であった。予想されるとおり、固定されていない脚は、筋肉脂肪浸潤が有意に少なかったか又はなかった：１．７６±２．６％（Ｐｂｏ）対−２．０５±２．４％（ＬＩＶＲＱＮＡＣＨＫＦＴ）、群の間で統計的な差はなかった（Ｐ＝０．４７９、図２Ｂ）。
【０１５４】
文献（Ｔａｒｕｌｌｉ  ｅｔ  ａｌ．２００９）と一致して、発明者らは、Ｐｂｏ群において、肢固定の間に（すなわち８から１５日目まで）、位相、最大のリアクタンス、及びリアクタンススロープにおける減少を観察した（これらのパラメーターは筋肉の健康状態を反映すると考えられる、Ｒｕｔｋｏｖｅ  ２００９）（図３）。
【０１５５】
対照的に、ＬＩＶＲＱＮＡＣＨＫＦＴの投与は、固定の間にこれらのパラメーターにおける数的な増加がないにしても、減弱をもたらした（Ｐｂｏに対する相対的な差は１１５％から１５５％までの範囲にわたる）。回復期の間に、これらのパラメーターは、両方の群において固定前のレベルに戻ったが（２８日目対８日目）、これらのパラメーターは、Ｐｂｏと比較して、ＬＩＶＲＱＮＡＣＨＫＦＴ群においてより高くなる傾向があり、相対的な差は、それぞれ位相、最大リアクタンス、及びリアクタンススロープについて５６％、６０％、及び７０％であった。
【０１５６】
本発明は、好ましい実施形態及び様々な代替の実施形態に関して詳細に示され、記載されたが、形態及び詳細における様々な変化が、本発明の精神及び範囲から逸脱することなくなされ得ることが当業者によって理解されるであろう。
【０１５７】
本発明の明細書本文において引用された参考文献、発行された特許、及び特許出願はすべて、あらゆる目的においてそれらの全体が参照によって組み込まれる。
【図１】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図３】
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【国際調査報告】
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2021527670.tif 000012
2021527670.tif 000013