(57)【要約】  本発明は、フッ素化炭化水素流体を溶媒として使用して亜臨界条件で調製された、Piper nigrum、Zingiber officinale、Boswellia serrata及びアジュバントとして使用される他の植物の親油性抽出物を含有する新規組成物に関する。適切に処方された前記組成物は、疼痛及び炎症の局所処置及び全身処置に有用である。製剤はまた、筋痙縮及び神経障害性疼痛においても活性を有する。強力な相乗効果を発揮する本発明の製剤は、単独又は特定の薬物との組み合わせで、骨関節症、変形性関節症及び乾癬性関節炎を処置するのに特に有用である。クリーム、ローション又はマッサージオイルの形態の製剤は、局所投与によってあらゆる起源の表在性の疼痛、深部の疼痛、浮腫及び刺激を減少させることが示される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
Piper nigrumの親油性抽出物、Zingiber officinaleの親油性抽出物及びBoswellia serrataの親油性抽出物からなる組み合わせ。
【請求項２】
前記Zingiber officinale抽出物がギンゲロールを少なくとも１０重量％含有し、前記Piper nigrum抽出物がペリトリンを少なくとも１重量％含有し、前記Boswellia serrata抽出物がセラトールを少なくとも２重量％含有する、請求項１に記載の組み合わせ。
【請求項３】
前記Zingiber officinale抽出物がギンゲロールを少なくとも１０重量％含有し、前記Piper nigrum抽出物がペリトリンを少なくとも１０重量％含有し、前記Boswellia serrata抽出物がセラトールを少なくとも２０重量％含有する、請求項１に記載の組み合わせ。
【請求項４】
前記Piper nigrum抽出物がピペリンを少なくとも１０重量％及びペリトリンを少なくとも１重量％含有する、及び／又は
前記Boswellia serrata抽出物がボスウェリン酸を少なくとも０．１重量％、アセチルボスウェリン酸を少なくとも０．１重量％及びセラトールを少なくとも２重量％含有する、及び／又は
前記Boswellia serrata抽出物がセラトールを少なくとも２０重量％含有する、請求項１に記載の組み合わせ。
【請求項５】
前記抽出物のうち１つ、２つ又は全てが、対応する植物又はそれらの混合物を亜臨界条件下でフッ素化炭化水素流体を用いて、任意に極性有機溶媒の存在下で、抽出することによって得られる、請求項１〜請求項４に記載の組み合わせ。
【請求項６】
前記フッ素化炭化水素流体がフレオンであり、前記極性有機溶媒がメタノール、エタノール、プロパノール、ｉ−プロパノール、ブタノール、アセトン、酢酸エチル、アセトニトリル、ジメチルスルホキシド、ジメチルホルムアミド及びそれらの混合物から選択される、請求項１〜請求項５に記載の組み合わせ。
【請求項７】
前記Piper nigrum親油性抽出物、前記Zingiber officinale親油性抽出物及び前記Boswellia serrata親油性抽出物がそれぞれ約１：１：２．５の重量比で存在する、請求項１〜請求項６に記載の組み合わせ。
【請求項８】
前記Piper nigrum抽出物、前記Zingiber officinale抽出物及び前記Boswellia serrata抽出物を提供すること、及びそれらを一緒に配合して前記組み合わせを形成することを含む、請求項１〜請求項７に記載の組み合わせを調製する方法。
【請求項９】
請求項１〜請求項８に記載の親油性抽出物の前記組み合わせを含む医薬組成物。
【請求項１０】
Celastrus paniculatus、Anacyclus pyrethrum及びEchinacea属植物のうちの１つ以上の抽出物をさらに含む、請求項９に記載の組成物。
【請求項１１】
前記Piper nigrum抽出物、前記Zingiber officinale抽出物及び前記Boswellia serrata抽出物が、全体として、前記組成物中に存在する活性成分の７５重量％以上を占める、請求項９〜請求項１０に記載の組成物。
【請求項１２】
治療に使用するための、請求項１〜請求項７に記載の組み合わせ又は請求項９〜請求項１１に記載の組成物。
【請求項１３】
炎症性障害の処置及び／又は予防において使用するための、請求項１２に記載の組み合わせ又は組成物。
【請求項１４】
末梢性疼痛、種々の起源の炎症状態（inflammatory status of different origin）、こわばりのような筋痙攣に関連する疼痛、肩こり、有痛性腰痛、関節痛、筋肉痛、骨関節症（osteoarthrosis）、変形性関節症（osteoarthritis）、乾癬性関節炎、頭痛、糖尿病性疼痛（diabetic pain）及び痛風から選択される炎症性疾患の処置及び／又は予防に使用するための、請求項１３に記載の組み合わせ又は組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、フッ素化炭化水素流体を溶媒として使用して亜臨界条件で調製された、Piper nigrum、Zingiber officinale、Boswellia serrata及びアジュバントとして使用される他の植物の親油性抽出物を含有する新規組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
本発明で使用される植物は、食品として世界中で使用されている食用植物であり、医薬のアーユルベーダシステムにおける医薬品として非常に頻繁に使用されている。伝統的医薬には多くの場合非常に多様に混合された植物の無数の例の組み合わせがあり、広範囲の異なる医学適応に使用されるが、各植物についての潜在能力の知見が完全であることは稀であり、植物源の不均一性、抽出方法の変動性、異なる処置方法などに起因して、製品による結果には変動が伴う。伝統的医薬製品は、一見自然な、患者に優しい性質を有するにもかかわらず、忍容性、副作用、毒性に関して十分に探求されていない活性分子の複雑な相互作用をしばしば引き起こす。それらはまた世界中で人体を大量の活性成分に曝露させているが、かかる活性成分の幾らかは治療される特定の状態に不必要でありうる。理想的でない組み合わせを用いると治療効力が低くなるため、投薬量を増加させる必要、及び／又は時間をかけて処置を延長する必要があり、そのため生体を標的外の処置及び潜在的に毒性となる量の薬物にさらに曝露することとなる。したがって、現代医学は、処置の量及び期間の両方の点で患者の外来分子への曝露を制限することを目指して、患者の医学的状態に密接に適合された天然薬物の最も活性な組み合わせを患者に提供する努力において、これらの薬剤及びその成分の使用を合理化し、新しい医学的適応、望ましい又は望ましくない相互作用を研究し、可能な相乗効果を同定することにおいて、長い間積極的である。
【０００３】
特許出願であるＩＮ２０１１ＤＥ００２２８には、Curcuma longa、Boswellia serrata、Zingiber officinale、Ocimum sanctum抽出物、ブロメライン、硫酸グルコサミン、メチルスルホニルメタン及びコショウ属植物（Piper sp.）を含む、骨及び関節の健康を維持するための組成物が記載されている。ウェブサイトｗｗｗ．ｈｕｍｂｏｌｄｔｈｅｒｂａｌｓ ．ｃｏｍには、２０種類の植物又は植物抽出物を含む、心を落ち着かせるために使用されるアンバーオイルブレンドを記載されている。ウェブサイトｗｗｗ．ａｕｓｔｒａｌｉａｎｖｉｔａｍｉｎｓ．ｃｏｍには、クルクミンの吸着が黒コショウ由来のピペリン及びショウガ由来のギンゲロールによって改善されている融合クルクミンの先進的製品が記載されており、該組成物はさらに、Boswellia serrata抽出物を含むものである。ウェブサイトｗｗｗ．ｂｏｓｍｅｒｉｓ−ＳＭ．ｃｏｍ、ｗｗｗ．ｎａｔｕｒａｌｐｒａｃｔｉｔｉｏｎｅｒｍａｇ．ｃｏｍ、及び出版物であるHolistic Primary Care News for Health and Healing、Ascending Media、Ｖｏｌ．１３、ｎｏ．２、２０１２、ｐｐ．１−４には、使用しうる最高用量のｃｕｒｃｕｍｉｎ−Ｃ３ ＣｏｍｐｌｅｘをベースとしてＢｏｓｗｅｌｌｉｎ（登録商標）ＰＳ、ショウガ抽出物及びＢｉｏｐｅｒｉｎｅ（登録商標）が組み合わされた組成物が記載されている。組み合わされた材料の詳細は記載されていない。特許出願であるＣＮ１０６２６７０６９には、例えば少量のショウガ精油、黒コショウ精油及びオリバナム精油などの１４種類の精油を含有する、卵巣−子宮マッサージオイルが開示されている。特許出願であるＣＮ１０３７５１７３４には、例えば少量のショウガ根茎（Rhizoma Zingiberis）、乳香及び黒コショウなどの２７種の植物を含有する、血液循環を改善し、疼痛を軽減するためのペーストが開示されている。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明の基礎となる植物は基本的に３種類、すなわち、Zingiber officinale、Piper nigrum及びBoswellia serrataであり、これらは全ての組み合わせ及び製剤において常に存在する。
【０００５】
Zingiber officinaleは極東及びインドで香辛料として主に使用されているが、この数十年間、西洋諸国でも同様の使用のために使用され、また、いくつかの栄養補助食品中の抽出物の形態で、悪心、妊娠性嘔吐の処置のため使用され、また、他の植物と組み合わせて腸障害に対して使用されている。ショウガ根は世界で最も消費されている食用物質の１つである。ショウガは、西洋諸国に万能薬として入る前に何千年も薬用植物として使用されていたアジアで最初に栽培された。活性成分は、ギンゲロール類、ショウガオール類及びジンゲロン類であると考えられる。ショウガ根は、抗悪心効果、抗炎症効果及び鎮痛効果の原因である刺激性化合物であるギンゲロールを約１．０〜２．５％含有する。ショウガ油において、全ての刺激性化合物は、それらの構造中にバニリル（４−ヒドロキシ−３−メトキシフェニル）部分及びケトン官能基を含有する。ギンゲロールは新鮮根において最も豊富な化合物であり、種々の鎖長（ｎ６〜ｎ１０）のギンゲロールがいくつか存在し、最も豊富であるのは６−ギンゲロールである。ギンゲロール及びショウガオールの作用機序はＮＦｋＢ、カンナビノイド受容体ＣＢ２などの炎症メディエーターの阻害に関係しており、それらは疼痛に関与するバニロイド受容体ＲＴＰＶ１のアゴニストである。文献では、いくつかのin vitro試験及びわずかなin vivo試験でこの作用が支持されている。In vivo試験では、主にバイオアベイラビリティの低さ、肝臓における急速な分解及び抱合のため、結果は不安定である。これらの分子のバイオアベイラビリティは主な問題であり、これらの理由のために、バイオアベイラビリティの改善及び最適化における相乗効果を与え得る他の化合物との適切な組み合わせが所望される。いくつかの問題は科学的な正当性及び再現性なしに、いくつかの伝統的な組み合わせで既に部分的に対処されている。抽出物が依然として伝統的に使用されている国では、それらは他の成分と組み合わされる。西洋諸国では、上記の理由で結果が矛盾する場合であっても、予期される悪心及び炎症性疾患の処置のために腫瘍学においてZingiber officinaleの親油性抽出物が予備的に使用される。対照臨床試験においては、抽出物の特性を確認するために新しい製剤が必要である。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者らによって実施された対照研究において、本発明の範囲内で、Piper nigrum親油性抽出物及びBoswellia serrata親油性抽出物、好ましくは本実施例に記載された方法によるフレオン抽出によって得られたPiper nigrum親油性抽出物及びBoswellia serrata親油性抽出物について、ショウガ油との驚くべき相乗効果が見出された。抽出は、単一の植物単独で、又は好ましくは出発植物材料のプレフィクスの組み合わせで実施することができる。
【０００７】
Piper nigrum又は黒コショウは、香味料として世界の多くの地域で一般的に使用されている香辛料である。黒コショウの抽出物は広く使用されており、その活性成分であるピペリンを介して、輸送ポンプを阻害してヒトにおける代謝を改変し、チトクロームと相互作用することが知られている。肝臓における過程、すなわちグルクロン酸抱合は、薬物動態を変化させるいくつかの分子を抱合するものであるが、ピペリンによって阻害される。
【０００８】
ピペリンのこの明らかに負の挙動にもかかわらず、Piper Nigrumは、本開示中で、特許請求される組み合わせによれば他の分子の効力を改善することが見出された。黒コショウ抽出物では、ピペリン内容物とは別に、他の分子、イソブチルアミドがあり、最も重要なのはペリトリン、これはコショウ親油性抽出物の最も強い刺激性分子である。ペリトリンはバニロイド受容体ＲＴＰＶ１と相互作用し、これらの受容体を飽和させることにより、疼痛及び炎症を特異的に軽減する。本発明では、とりわけ、本組み合わせの他の分子、例えば、グルクロン酸抱合されるかさもなければ部分的に除去されるギンゲロール、の吸収を増加させるのに有用である。同じ作用は、本発明において組み合わせて使用される植物油の活性分子中に存在する他のフェノール基のグルクロン酸抱合を減少させるのに有用である。これは、Boswellia serrata油中に存在するいくつかの分子、すなわち、バニロイド受容体ＲＴＶ３並びに他のモノテルペン及びセスキテルペンのアゴニストであるセラトールの場合である。バニロイド受容体ＲＴＶ３は炎症に関与する。特に、セラトールは非常に活性な抗炎症物質であり、この特定の剤を大量に含有するBoswellia Serrataの抽出物を得ることが望ましい。添付の実施例によって実験的に支持されるように、本発明の実施形態において、多量のセラトールを有するBoswellia serrata親油性抽出物が予想外に得られ、本組み合わせにおいて最も有利に使用された。異なる濃度で多くの植物に存在する他のモノテルペンは、活性成分の天然ビヒクルである。
【０００９】
本発明で使用される抽出物は、実施例で報告されるように、フレオン単独又は適切な溶媒の存在下における抽出によって初めて調製された、新規な親油性抽出物である。
【００１０】
アーユルヴェーダ医学の体系及びユナニ医学の体系で使用される特定の植物の抽出物の組み合わせ（好ましくは本開示中に記載される新たな技術的アプローチで抽出される）がヒトの炎症及び関連する疼痛の処置において、予測不可能で強力な効果を与えうることが、今や発見されている。特に局所投与のための、Piper nigrum、Zingiber officinale、Boswellia serrataの親油性抽出物の組み合わせは、組み合わされていない抽出物や、さらにいくつかの合成薬物で得ることができるよりも、大幅に優れた強力な相乗的鎮痛及び抗炎症の効果を生じることが、今や発見されている。特に、本発明において、上記の３つの植物は存在する活性剤のみ（sole）であるか又はその大部分（すなわち、それらは、組成物中に存在する全活性成分の７５重量％以上（より好ましくは９０重量％以上、又は９５重量％以上、さらに又は１００重量％）を表す）である。本開示において互換的に使用される用語「活性成分」又は「活性剤」は、組成物中に存在する任意の植物産物（全植物、植物部分、植物抽出物など）、並びに既知の医薬的有用性を有する任意の起源の物質を意味する。さらなる活性成分が非常に少量又は無いことは、本発明の３つの植物は（、特に、大量の (Zingiber officinaleからの）ギンゲロール、 (Piper nigrumからの）ペリトリン及び (Boswellia serrataからの）セラトールを含有する選択された抽出物の形態で使用される場合）、強力な抗炎症効果を得、これはゴールドスタンダード合成ＮＳＡＩＤ(ケトプロフェン）によって得られるものと同程度である、という本発明者の発見を具体化する。これは、多数の異なる植物及び／又は補充医薬物質の複合混合物を繰り返す必要なしに、前記３員の植物の組み合わせ「それ自体（as such）」で強力な抗炎症効果を得ることを可能にする。上記３つの植物の組み合わせは、天然ベースの抗炎症性組成物における主な活性成分として広く使用される植物であるCurcuma longaの非存在下で強力な抗炎症効果を得ることも見出された。Curcuma longaをベースとする天然補助食品に関しては、プレスで近年、肝炎のいくつかの症例が報告された(https://www.nutraingredients.com/Article/2019/05/20/UPDATE-Hepatitis-cases-linked-to-turmeric-supplements-rumble-on-as-incidences-rise-to-ten）。したがって、本発明が抗炎症性組成物中でCurcuma longaを使用しないことは、かなりの有利性を表す。したがって、ある好ましい実施形態によれば、全ての本発明の組成物は、Curcuma longaを含まない、すなわち、Curcuma longa自体を含まず、Curcuma longaから得られるか又はCurcuma longaを含有する任意の物質又は製品も含まない。
【００１１】
本発明の組み合わせは、あらゆる種類の痛み、特に関節及び筋肉の疼痛、関節症及び関節炎、頭痛及び糖尿病疼痛の処置に使用することができる。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
発明の詳細な説明
「親油性抽出物」という用語は、本開示では、親油性溶媒を用いて得られる任意の抽出物を広く指す。親油性溶媒は周囲温度及び周囲圧力において液体物質であってよい。あるいは室内常温常圧で非液体物質（典型的には気体）であってもよく、これは抽出目的のために、温度及び圧力の改変された（臨界未満の）条件で液体状態にされる。親油性抽出物は植物の水不溶性又は水にほとんど溶解しない成分を濃縮するが、親油性溶媒へのそれらの溶解度に応じて、より少ない量又はゼロの量の水溶性成分を含有する。本発明において、Piper nigrum、Zingiber officinale、Boswellia serrataの親油性抽出物は好ましくはフッ素化炭化水素（例えば、フレオン）を用いた亜臨界条件（すなわち、液体状態）での抽出によって、さらなる精製なしに、経済的バランス及び溶媒量排除の点で大きな利点を伴って得られる。
【００１３】
本発明による組み合わせにおける３つの主成分間の重量比は約１：１：２．５であり、ここで「約」という用語は、上記比のそれぞれについて２０％以内の変動があることを示す。特に活性のある抽出物は、バイオマスの活性成分（特に、Zingiber officinaleのギンゲロール；Piper nigrumのピペリン、特にペリトリン；Boswellia serrataのボスウェリン酸、アセチルボスウェリン酸及びインセンソール、特にセラトール）の分析含量に応じて調節される様々な比率の粉砕バイオマスの混合物にフレオンを適用して抽出される。
【００１４】
特に好ましい態様において、本発明による単一抽出物は、フレオン単体で、又は好ましくは適切な極性有機溶媒（本開示中では改質剤とも呼ばれる）の存在下にフレオンで、抽出される。適切な改質剤としては例えばメタノール、エタノール、プロパノール、ｉ−プロパノール、ブタノール、アセトン、酢酸エチル、アセトニトリル、ジメチルスルホキシド、ジメチルホルムアミドがある。食品調製における規制の観点から許容されるアセトン又はエタノールのような溶媒が特に好ましい。抽出プロセスは、適当なスチール容器中の個々のケージに粉砕された物質を入れ、２５〜４５℃、好ましくは３５℃の間の温度及び５〜１５／ｋｇ／ｃｍ2、好ましくは８〜９ｋｇ／ｃｍ2の間の圧力で、フレオンを循環させることからなる。循環溶媒の量は、バイオマス／溶媒比として表せば約１／６であり、抽出時間は３〜１０時間、通常は抽出を完了させるのに５〜６時間である。溶媒をエバポレーターで蒸発させ、抽出物を回収する。
【００１５】
改質剤を使用する場合、計算された時間の後に極性有機溶媒を徐々に添加し、抽出が完了するまで混合物を循環させる、という違い以外、前記プロセスは同じである。もちろん、この装置は、溶媒の完全な分離及び抽出物の回収のために研究される。詳細は実施例で報告する。
【００１６】
抽出物は、エバポレーターで回収され、水が存在する場合は機械的分離によって除去した後、界面活性剤の存在下で油中に直接希釈されてもよく、又はヒトへの投与のための適切な外添剤（excipient）中に製剤化されてもよい。
【００１７】
本発明は、上記の組み合わせを調製する方法を含む。その一般的な条件において、前記方法は上記のZingiber officinale親油性抽出物、Piper nigrum親油性抽出物及びBoswellia serrata親油性抽出物を提供すること（providing）及び配合すること（compounding together）を含む。上記３つの抽出物は、複数の単一原料生成物（single raw products）として得てもよく、又は一度に（at once）調製してもよい。一度に調製する場合、３つの抽出物を別々の抽出物として調製し、次いで配合することができる。あるいは、３つの植物の混合物を抽出に供することによって、単一の組み合わせ抽出物を調製してもよい。この場合、上記で言及した提供及び配合工程は、１つの単一工程に組み合わされる。抽出されるべき関連する３つの植物の植物は、単独であっても組み合わせであっても、好ましくは、抽出プロセスを容易にするために、細かく砕かれるか、又は粉砕される。抽出目的に有用な関連植物の部位は、Zingiger officinaleでは根と根茎であり、Piper Nigrumでは種子であり、Bosewellia serrataでは樹脂である。上記のように、親油性抽出物を得る任意の方法が意図される。好ましくは、抽出は、フッ素化炭化水素（例えば、フレオン）を用いて、亜臨界条件下で、任意に上記のような極性溶媒（改質剤）の存在下で、実施される。
【００１８】
本発明のさらなる目的は、上記のZingiber officinale、Piper nigrum及びBoswellia serrataの親油性抽出物の組み合わせを含む医薬組成物である。
【００１９】
本組成物において、上記の組み合わせは、存在する活性剤のみを表してもよく（the above combination can represent the sole active agents present）、又は上記の組み合わせは限定された量の他の活性剤が存在（in presence of a limited amount of other active agents）していてもよく、典型的には抽出物の形態であってもよい。他の活性剤が存在する場合、Zingiber officinale、Piper nigrum及びBoswellia serrataの組み合わせは、組成物中に存在する活性剤の全量に対して、好ましくは７５重量％以上、より好ましくは９０重量％以上、又は９５重量％以上、又はさらには１００重量％を占めうる。
【００２０】
本発明によれば、特に有効かつ好ましいのは、Zingiber officinale抽出物、Piper nigrum抽出物及びBoswellia serrata抽出物の組み合わせであって、前記Zingiber officinale抽出物が少なくとも１０重量％のギンゲロールを含み、前記Piper nigrum抽出物が少なくとも１重量％のペリトリンを含み、前記Boswellia serrata抽出物が少なくとも２重量％のセラトールを含む組み合わせであり、最も有効かつ好ましいのは、前記組み合わせであって、前記Zingiber officinale抽出物が少なくとも１０重量％のギンゲロールを含み、前記Piper nigrum抽出物が少なくとも１０重量％のペリトリンを含み、前記Boswellia serrata抽出物が少なくとも２０重量％のセラトールを含む組み合わせである。本発明によれば、Boswellia抽出物中の多量のセラトールは、この抗炎症性成分が特に短いｔmax（経口投与の約１５分後）を有することから、本開示において特に好ましい。本開示中で使用される高セラトール含量のBoswellia抽出物は、通常のBoswellia抽出物と比較して、強力で迅速に開始する抗炎症活性を有する。本発明によれば、ペリトリンがカンナビノイドＣＢ２受容体ｅを妨害する強力な抗炎症剤である多価不飽和酸イソブチラミドのクラスに属し、末梢痛に直接関与するＲＴＰＶ１受容体のアゴニストであることから、多量のペリトリンも歓迎される。ギンゲロール高含量である抽出物、ペリトリン高含量である抽出物及びセラトール高含量である抽出物は、亜臨界条件下でフッ素化炭化水素を用いたZingiber officinale、Piper nigrum及びBoswellia serrataのそれぞれの抽出によって、本開示において有利に得られる。
【００２１】
他の活性剤が任意に存在する場合、本発明の分子のさらなる供給源として知られる植物の抽出物の中から選択されてもよい。例えば、ペリトリンは、Anacyclus phyrethrum中にさらに存在する。目的の別の分子、セラストロールは、Celastrus paniculatusに存在する。伝統的な漢方薬から単離されたトリテルペノイドであるセラストロールは、様々な炎症性疾患及び自己免疫疾患の処置のための有望な薬剤である。インターロイキン（ＩＬ）１β誘導炎症に対するセラストロールの効果を調べるために、逆転写ポリメラーゼ連鎖反応、ウェスタンブロット法及びＥＬＩＳＡを実施した。その結果、セラストロールはＩＬ−６、ＩＬ−８、シクロオキシゲナーゼ（ＣＯＸ）２及び細胞間接着分子１（ＩＣＡＭ１）の発現を有意に減弱させ、ＩＬ−１βはＩＬ−６、ＩＬ−８、ＩＣＡＭ１及びＣＯＸ２の発現の増加を誘導することが明らかになった。さらなる研究で、セラストロールが核因子（ＮＦ）の活性化を阻害することによりＩＬ−１β誘導炎症反応を抑制することが示された。Anacyclus phyrethrum及びCelastrus paniculatusの両方の抽出物は前記組成物中に、特に末梢疼痛のためのマッサージ油中に、存在することが有利である。
【００２２】
上記の活性剤に加えて、前記医薬組成物は、薬理学的に非活性な慣用成分を含有しうる。これらは、特定の選択された投与形態、及び処方される抽出物の化学的−物理的性質などに依存して、質及び量において選択されうる。非活性成分としては、液体、固体又は半固体の、キャリア、界面活性剤、湿潤剤、緩衝剤、張性調整剤、流動化剤、増粘剤、崩壊剤、保存料、染料、フレーバーなどが挙げられる。
【００２３】
本発明の組み合わせ及び組成物は、所望の投与経路及び患者の状態に応じて、任意の既知の投与形態に製剤化し供給することができる。投与形態のリストには溶液、分散液、エマルション、粉末、クリーム、軟膏、パッチ、プラスター、フィルム、ゲル、錠剤、トローチ、カプセル、シロップ、エアロゾル、座薬、輸液などが含まれるが、これらに限定されない。
【００２４】
本発明の組み合わせ及び組成物は、経口、口腔、局所、経皮、吸入、筋肉内、静脈内などを含む任意の公知の投与経路によって投与することができる。特に好ましいのは、経口投与又は局所投与である。
【００２５】
経口投与のために、製剤は、好ましくはリン脂質及びオメガ３脂肪酸又はそれらを含有する抽出物の存在下で、Zingiber officinale、Piper nigrum及びBoswellia serrataの抽出物を含有する。
【００２６】
本発明の一実施形態による局所投与のために、マッサージ用油性製剤は、典型的には１．５〜４．５重量％、好ましくは３％のショウガ油と、５〜１５重量％、好ましくは９重量％のPiper nigrum抽出物と、２〜７重量％、好ましくは５重量％のBoswellia serrata油性抽出物と、０〜３重量％、好ましくは１重量％のCelastrus paniculatusと、を含有する。前記組み合わせの快さ及び効力を向上させるためにラベンダー油を任意に添加することができる。マッサージ油中の抽出物は、２重量％のリン脂質の存在下でアンズ油中に組み込む。
【００２７】
ローション、クリーム及び軟膏に組み込まれる同抽出物の濃度は、処置される症状又は不快感に応じて異なっていてもよい。例えば、高活性の局所抗炎症クリームは、０．２〜０．８重量％、好ましくは約０．５重量％のZingiber officinalis抽出物と、０．１〜０．７重量％、好ましくは約０．４重量％のPiper nigrum抽出物と、０．７〜１．３重量％、好ましくは約１．１重量％のBoswellia serrata抽出物と、を含有しうる。
【００２８】
本発明のさらなる目的は、治療における使用のための、上記の組み合わせ及び医薬組成物によって表される。特に、これらは炎症性疾患の処置又は予防に使用される。炎症性疾患の例は、末梢性疼痛、種々の起源の炎症状態（inflammatory status of different origin）、こわばりのような筋痙攣に関連する疼痛、肩こり、有痛性腰痛、骨関節症（osteoarthrosis）、変形性関節症（osteoarthritis）、乾癬性関節炎及び痛風である。本発明による組成物はまた、化粧料分野で炎症状態、刺激状態及びかゆみを減少させるために使用することができる。この処置は、痛みを伴う症状の影響を受ける身体の部分に製剤を１日に１〜４回塗布することで行うことができる。経口投与により、抽出物は例えば、油に適した錠剤又は硬カプセルに、又は好ましくは軟ゼラチンカプセルに、組み込むことができる。
【００２９】
本発明の組み合わせのための有用な経口投与用の用量単位（dosage units）は、上記の相互重量比を条件として、２０〜６０ｍｇのZingiber officinale、２０〜６０ｍｇのPiper nigrum、８０〜１２０ｍｇのBoswellia serrataを含み、好ましい経口組成物は４０ｍｇのZingiber officinale、４０ｍｇのPiper nigrum、１００ｍｇのBoswellia serrataを含む。
【００３０】
以下の非限定的な実施例で、本発明を詳細に説明する。
【実施例】
【００３１】
実施例１  抽出溶媒（フレオンハイドロフルオロカーボンＲ１３４Ａ）及び改質溶媒（アセトン）を用いての、Zingiber officinale抽出物の調製
【００３２】
ショウガオール及びショウガオール中の含量が１．２％である、粉砕されたZingiber officinaleの根及び根茎５０ｋｇを、スチール抽出器中に配置する。前記器、エバポレーター及び接続ライン中に真空状態を作りだし、空気を除去した後にフレオン（ＨＦＣハイドロフルオロカーボンＲ１３４Ａ）を導入し（２５０ｋｇ）、次いで、８〜９ｋｇ／ｃｍ2 （３５℃）の圧力条件で溶剤循環を開始して３５分間行い、一方、アセトン（２００Ｌ）を１〜１．５リットル／分で投入しながらフレオンの循環を３時間続ける。
【００３３】
その後、フレオンをエバポレーターで回収し、次いで貯蔵容器に移す。抽出した物質をエバポレーターから取り出し、布でろ過して微量の植物物質を除去した後、アセトンを４０℃の真空下で完全に留去し、油状の塊を単離する。以下の特徴を有するZingiber officinale油が２．２ｋｇ得られる：淡褐色の可動性液体、香辛性；２０℃における密度０．９７、ギンゲロール類及びショウガオール類が２５％以上。
【００３４】
実施例２ 抽出溶媒（フレオン）及び改質溶媒（エタノール）を用いての、Piper nigrum種子抽出物の調製
粉砕されたPiper nigrumの種子５０ｋｇをスチール抽出器中に配置し、Ｒｒｅｏｎと共に加圧してバイオマスを処理する。前記器、エバポレーター及び接続ライン中に真空状態を作りだし、空気を除去した後にフレオンを導入し（２５０ｋｇ）、次いで、８〜９ｋｇ／ｃｍ2 （３５℃）の圧力条件で溶剤循環を開始して３５分間行い、一方、エタノール（２００Ｌ）を１〜１．５リットル／分で投入しながらフレオンの循環を３時間続ける。
【００３５】
その後、フレオンをエバポレーターで回収し、次いで貯蔵容器に移す。抽出した物質をエバポレーターから取り出し、布でろ過して微量の植物物質を除去した後、アセトンを４０℃の真空下で完全に留去し、油状の塊を単離する。以下の特徴を有するPiper nigrum油が１．４３ｋｇ得られる：強い香辛性を有する褐色の可動性油；２０℃における密度０．９０。ＨＰＬＣによるピペリン含量３８．６％、ペリトリン含量１６％；フィンガープリントにおけるようないくつかの追加のピックが報告された（several additional picks as in fingerprint reported）。
【００３６】
実施例３ 抽出溶媒（フレオン）を用いたBoswellia serrata樹脂抽出物の調製
ボスウェリン酸含有量が計２６％である、粉砕されたBoswellia serrataの樹脂５０ｋｇを、スチール抽出器中に配置し、フレオンと共に加圧してバイオマスを処理する。前記器、エバポレーター及び接続ライン中に真空状態を作りだし、空気を除去した後にフレオンを導入し（２５０ｋｇ）、次いで、８〜９ｋｇ／ｃｍ2 （３５℃）の圧力条件で溶剤循環を開始し、５時間続けて、抽出を完了させる。
【００３７】
その後、フレオンをエバポレーターで回収し、次いで貯蔵容器に移す。抽出した物質をエバポレーターから取り出し、布でろ過して微量の植物物質を除去すると、以下の特徴を有するBoswellia serrata油が８．９ｋｇ得られる: 淡黄色の可動性液体、特徴的な木質性（woody）、香辛性のカンファー臭；２０℃における密度０．８５０; ＧＣ−ＭＳ(ボスウェリン酸の含量０．２３％、３−アセチルボスウェリン酸の含量０．２％、セラトールの含量３％）。
【００３８】
実施例３の２  抽出溶媒（フレオン）及び改質溶媒（アセトン）を用いての、Boswellia serrata樹脂抽出物の調製
ボスウェリン酸含有量が計２６％である、粉砕されたBoswellia serrataの樹脂５０ｋｇを、スチール抽出器中に配置する。前記器、エバポレーター及び接続ライン中に真空状態を作りだし、空気を除去した後にフレオン（ＨＦＣハイドロフルオロカーボンＲ１３４Ａ）を導入し（２５０ｋｇ）、次いで、８〜９ｋｇ／ｃｍ2 （３５℃）の圧力条件で溶剤循環を開始して３５分間行い、一方、アセトン（２００Ｌ）を１〜１．５リットル／分で投入しながらフレオンの循環を３時間続ける。
【００３９】
その後、フレオンをエバポレーターで回収し、次いで貯蔵容器に移す。抽出した物質をエバポレーターから取り出し、布でろ過して微量の植物物質を除去した後、アセトンを４０℃の真空下で完全に留去し、油状の塊を単離する。以下の特徴を有するBoswellia serrata油が１２．５ｋｇ得られる：ボスウェリン酸の含量１．５％、３−アセチルボスウェリン酸の含量１．７％、及びセラトールの含量２５％。重要なことに、改質溶媒の使用で、回収されるセラトールの量及び濃度は著しく増加する。
【００４０】
実施例４  抽出溶媒（フレオン）を用いての、Celastrus paniculatus抽出物の調製
粉砕されたCelastrus paniculatusの種子５０ｋｇを、スチール抽出器中に配置し、フレオンと共に加圧してバイオマスを処理する。前記器、エバポレーター及び接続ライン中に真空状態を作りだし、空気を除去した後にフレオンを導入し（２５０ｋｇ）、次いで、８〜９ｋｇ／ｃｍ2 （３５℃）の圧力条件で溶剤循環を開始し、５時間続けて、抽出を完了させる。
【００４１】
その後、フレオンをエバポレーターで回収し、次いで貯蔵容器に移す。抽出した物質をエバポレーターから取り出し、布で濾過して微量の植物物質を除去する。
【００４２】
実施例５  異なる植物バイオマスを抽出プロセスにおいて組み合わせる、新規な油性抽出物の調製
Boswellia serrataの粉砕樹脂と、Piper migrumの未熟種子と、Zingiber officinaleの根及び根茎とをそれぞれ１０：４：４の比率で含む混合物５０ｋｇを、正確な均質化後、スチール抽出器中に配置し、フレオンと共に加圧してバイオマスを処理する。前記器、エバポレーター及び接続ライン中に真空状態を作りだし、空気を除去した後にフレオン（ＨＦＣハイドロフルオロカーボンＲ１３４Ａ）を導入し（２５０ｋｇ）、次いで、８〜９ｋｇ／ｃｍ2 （３５℃）の圧力条件で溶剤循環を開始して１時間行い、一方、エタノール（２００Ｌ）を１〜１．５リットル／分で投入しながらフレオンの循環を３時間続ける。その後、フレオンをエバポレーターで回収し、次いで貯蔵容器に移す。抽出した物質をエバポレーターから取り出し、布でろ過して微量の植物物質を除去した後、エタノールを４０℃の真空下で完全に留去し、油状の塊を単離する。
【００４３】
実施例６  実施例１、２、３に従って調製されたBoswellia serrata油、Piper nigrum油及びZingiber officinale油を含有する軟ゼラチンカプセルの調製
各ソフトゼラチンカプセルは以下を含有する。
Boswellia serrata油・・・・・４０ ｍｇ
Piper nigrum油・・・・・・・・２０ ｍｇ
Zingiber officinale油・・・・４０ ｍｇ
レシチン液．．．．．．．．．．５０ ｍｇ
亜麻仁油．．．．．．．．．．１２０ ｍｇ
【００４４】
実施例７  マッサージオイルの調製
Boswellia serrata油、Zingiber officinale油、Piper nigrum油、Celastrus paniculatus油及びLavandula officinalis油である標準化植物抽出物の調製のためのブレンド手順
【００４５】
ステップ１：ヒマワリレシチン（１．５ｇ）をアンズ油（１７．５ｍｌ）に添加し、混合物を撹拌しながら５５〜６０℃で加熱して、均一な混合物を形成する。次いで、混合物を２５℃に冷却し、そのまま使用する。
【００４６】
ステップ２：室温（２５℃）で、アンズ油（１１．５ｍｌ）の入った別の容器に、ショウガ油（実施例１）１ｍｌ、Celastrus油（実施例４）０．４ｍｌ及びPiper nigrum油（実施例２）３ｍｌを攪拌下で添加し、得られた溶液を、均質な混合物が形成されるまで攪拌する。
【００４７】
ステップ３：ステップ１の混合物を、攪拌下で、Boswellia serrata油２ｍｌ及びLavandula officinalis油０．３ｍｌと共に、ステップ２からの混合物に添加する。
【００４８】
混合物を、ブレンドの均一な混合物が形成されるまで室温で撹拌する
【００４９】
実施例８  実施例６による単一抽出物及び組み合わせの、ラットにおける鎮痛活性の評価−相乗作用の評価
組成物の鎮痛活性を、ラットにおけるテールフリック試験で評価した。実験の妥当性を保証するために、文献にしたがって、処置前に測定を３回行った。テールフリック評価に伴い使用したパラメータは、１５Ｖの放射熱と１５秒のカットオフであった。動物を、尾の始めから４ｃｍの位置で、０．２ｍｌの実施例６の組成物又はヒマワリ油で処置した。鎮痛効果は、局所適用の１５分後及び３０分後に測定した。単一抽出物は、実施例６の製剤中に存在する濃度でヒマワリ油中に希釈する。結果を表１に報告する。
【００５０】
【表１】
2021535085.tif 000002
【００５１】
実施例６の製剤は明らかに、単一の抽出物によって得られる効果の合計よりも明らかに優れた効果を提供する。これは、本発明の組成物について相乗効果が存在することを示す。
【００５２】
実施例９  実施例６による抽出物組み合わせ（カプセル）の、患者における鎮痛活性の評価
実施例１のショウガ油４０ｍｇ、実施例２のPiper nigrum抽出物４０ｍｇ、及び実施例３のBoswellia serrata油１００ｍｇを含有する、実施例６に従って調製された軟ゼラチンカプセル（ＡＢ）を、激しい関節痛、運動性の低下及び生活の質の低下に苦しんでいる２５人の患者に与えた。新規製剤の有効性は、その薬力学的作用を確かめるため、プラセボに対して試験された。４週後と８週後に患者対照を行った。臨床成績を表２に報告する。
【００５３】
【表２】
2021535085.tif 000003
【００５４】
この表から、前記組み合わせの鎮痛活性は明らかである。忍容性には問題が認められなかった。
【００５５】
実施例１０ 実施例７の抽出物組み合わせ（マッサージオイル）の、（末梢性疼痛）患者における鎮痛活性の評価
疼痛処置に関係する他の製剤としては、マッサージオイルが、頸部痛又は関節の処置において特に関心が持たれている。該オイルはまた、イオン導入によって投与されても、又はプラスターに組み込まれてもよい。
【００５６】
実施例７で報告されているような局所マッサージのための製剤が、末梢疼痛に苦しむ様々な患者群で試験されている。頚部痛に苦しむ２２人の被験者群を理学療法士が１週間、１日３回処置し、疼痛軽減と許容可能時間の短縮に要する時間とを評価した。
【００５７】
その結果を表３に、標準療法（対照）との比較とともに報告する。
【００５８】
【表３】
2021535085.tif 000004
【００５９】
全ての測定値は統計的有意性に達した（ｐ＜０．０５）。表３のデータは本発明の組成物について、疼痛／こわばりの低減及び可動性の回復に関して一貫して高い性能を示す。さらに、対症的薬物治療への依存が低減し、そして組織微小循環（レーザードップラーで試験された）が増加する。実施例７の組成物を用いたイオン導入では、４．９分で油成分が皮膚に浸透した。
【００６０】
実施例１１  実施例６（カプセル）の抽出物組み合わせの、（変形性関節症）患者における鎮痛活性の評価；ケトプロフェンとの比較
対照比較臨床試験では、実施例６の組み合わせ又は比較原薬としてのケトプロフェンを用いた二重盲検試験において、変形性関節症の患者群が処置された。表４に報告されているように、２つの均質なグループに分けられた６４人の患者を１日２回、６ヵ月間、併実施例６の組み合わせ又はケトプロフェンで処置し、相対的な有効性及び忍容性を評価した。
【００６１】
【表４】
2021535085.tif 000005
【００６２】
この新規な天然産物組み合わせの有効性が臨床結果で証明されている。
【００６３】
実施例１２  局所抗炎症クリーム
【００６４】
【表５】
2021535085.tif 000006
【手続補正書】
【提出日】令和2年5月22日(2020.5.22)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
Piper nigrumの親油性抽出物、Zingiber officinaleの親油性抽出物及びBoswellia serrataの親油性抽出物からなる組み合わせ、ここで前記Zingiber officinale抽出物はギンゲロールを少なくとも１０重量％含有し、前記Piper nigrum抽出物はペリトリンを少なくとも１重量％含有し、前記Boswellia serrata抽出物はセラトールを少なくとも２重量％含有する。
【請求項２】
前記Zingiber officinale抽出物がギンゲロールを少なくとも１０重量％含有し、前記Piper nigrum抽出物がペリトリンを少なくとも１０重量％含有し、前記Boswellia serrata抽出物がセラトールを少なくとも２０重量％含有する、請求項１に記載の組み合わせ。
【請求項３】
前記Piper nigrum抽出物がピペリンを少なくとも１０重量％及びペリトリンを少なくとも１重量％含有する、及び／又は
前記Boswellia serrata抽出物がボスウェリン酸を少なくとも０．１重量％、アセチルボスウェリン酸を少なくとも０．１重量％及びセラトールを少なくとも２重量％含有する、及び／又は
前記Boswellia serrata抽出物がセラトールを少なくとも２０重量％含有する、請求項１に記載の組み合わせ。
【請求項４】
前記抽出物のうち１つ、２つ又は全てが、対応する植物又はそれらの混合物を亜臨界条件下でフッ素化炭化水素流体を用いて、任意に極性有機溶媒の存在下で、抽出することによって得られる、請求項１〜請求項３に記載の組み合わせ。
【請求項５】
前記フッ素化炭化水素流体がフレオンであり、前記極性有機溶媒がメタノール、エタノール、プロパノール、ｉ−プロパノール、ブタノール、アセトン、酢酸エチル、アセトニトリル、ジメチルスルホキシド、ジメチルホルムアミド及びそれらの混合物から選択される、請求項１〜請求項４に記載の組み合わせ。
【請求項６】
前記Piper nigrum親油性抽出物、前記Zingiber officinale親油性抽出物及び前記Boswellia serrata親油性抽出物がそれぞれ約１：１：２．５の重量比で存在する、請求項１〜請求項５に記載の組み合わせ。
【請求項７】
前記Piper nigrum抽出物、前記Zingiber officinale抽出物及び前記Boswellia serrata抽出物を提供すること、及びそれらを一緒に配合して前記組み合わせを形成することを含む、請求項１〜請求項６に記載の組み合わせを調製する方法。
【請求項８】
請求項１〜請求項６に記載の親油性抽出物の前記組み合わせを含む医薬組成物、ここで前記親油性抽出物は、全体として、前記組成物中に存在する活性成分の７５重量％以上を占める。
【請求項９】
Celastrus paniculatus、Anacyclus pyrethrum及びEchinacea属植物のうちの１つ以上の抽出物をさらに含む、請求項８に記載の組成物。
【請求項１０】
治療に使用するための、請求項１〜請求項６に記載の組み合わせ又は請求項８〜請求項９に記載の組成物。
【請求項１１】
炎症性障害の処置及び／又は予防において使用するための、請求項１０に記載の組み合わせ又は組成物。
【請求項１２】
末梢性疼痛、種々の起源の炎症状態（inflammatory status of different origin）、こわばりのような筋痙攣に関連する疼痛、肩こり、有痛性腰痛、関節痛、筋肉痛、骨関節症（osteoarthrosis）、変形性関節症（osteoarthritis）、乾癬性関節炎、頭痛、糖尿病性疼痛（diabetic pain）及び痛風から選択される炎症性疾患の処置及び／又は予防に使用するための、請求項１１に記載の組み合わせ又は組成物。
【国際調査報告】
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