(57)【要約】【課題】ＧＡＢＡＡ受容体アロステリックエンハンサーの医薬への使用【解決手段】本発明は、ＧＡＢＡＡ受容体アロステリックエンハンサーの医薬への応用を提供する。具体的には、本発明は、鎮静薬、催眠薬、不安、うつ、不眠、悪心、嘔吐、片頭痛、統合失調、驚厥及びてんかんの治療又は予防のための薬の製造における、式（Ｉ）で示されるＧＡＢＡＡ受容体アロステリックエンハンサーの使用を提供する。［化１］2021535217.tif 000009【選択図】図１
2021535217.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＧＡＢＡＡ受容体に関連する疾患に対する医薬の製造における、式（Ｉ）で示されるＧＡＢＡＡ受容体アロステリックエンハンサーの使用。
【化１】
2021535217.tif 000008
【請求項２】
前記ＧＡＢＡＡ受容体に関連する疾患は、鎮静、催眠や不安、うつ、不眠、悪心、嘔吐、片頭痛、統合失調、驚厥及びてんかんの治療又は予防を含む、請求項１に記載の使用。
【請求項３】
前記てんかんが、海馬ニューロン欠損を引き起こすてんかんである、請求項２に記載の使用。
【請求項４】
前記てんかんが側頭葉てんかんである、請求項２に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、医薬分野に関し、具体的に、ＧＡＢＡＡ受容体アロステリックエンハンサーの医薬への応用に関する。
【背景技術】
【０００２】
てんかんは、大脳ニューロンが突発的に異常放電して一過性脳機能障害を引き起こす慢性疾患である。てんかん発作とは、脳ニューロンの異常や過剰な超同期性放電による臨床現象である。現在、中国の国内外にてんかん患者は益々高罹患率となってきているため、社会的に益々注目されている健康的な問題となっている。てんかん患者数が世界人口の０．５％〜１％を占めることを統計的に示している。てんかんについての鋭意研究を続けているが、てんかん病の発症原理については依然として知られておらず、現在使用されている薬物はてんかん患者の病態を一部緩和することしかできず、発展性大発作患者に対する有効率は６０％〜７０％に過ぎない。
【０００３】
近年、てんかんに関する研究が進み、ＧＡＢＡＡ受容体がてんかん発作に密に関与していることが明らかとなった。ＧＡＢＡＡ受容体は、ヒトの中枢組織に最も重要な中枢抑制性受容体であり、脳内ＧＡＢＡＡ受容体の活性化がニューロンを過分極させ、神経細胞の興奮性を低下させることができる。従来の抗てんかん薬であるベンゾジアゼピン系、バルビタール系、並びに新規に開発・市販されているバルプロ酸ナトリウム、レベチラセタム等の薬物は、いずれもＧＡＢＡＡ受容体作用の増強又は組織におけるＧＡＢＡＡ濃度の向上に関連している。
【０００４】
特許文献１に開示されたビフェノール（３，３’，５，５’−テトライソプロピル−４，４’−ビフェノール、結果は図２に示す通り）は、てんかん重積状態を含む様々なてんかん発作の治療のための新規なGABAＡ受容体アロステリック制御エンハンサーであって、西安力邦製薬有限会社によって開発された抗てんかん新規薬である。この化合物は、前臨床試験において良好なてんかん抵抗活性及び小さい副作用を発現しており、現在臨床研究段階に移行している。しかし、前臨床試験から明らかのように、この化合物は、静脈注射後に脳への導入速度が遅く、薬物が脳内で治療閾値濃度に達するまでに時間を要し、発症中のてんかんに対して即座に効かないので、本発明は、効き速度が速く、薬効がより高い抗てんかん薬を開発することを目的とする。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】中国特許出願公開第２０１０１０１６００３４．９号明細書
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明は、ＧＡＢＡＡ受容体アロステリックエンハンサーの医薬への応用を提供することを目的とする。
【０００７】
上記目的を達成するために、一つの形態では、本発明は、ＧＡＢＡＡ受容体に関連する疾患に対する医薬の製造における、式（Ｉ）で示されるＧＡＢＡＡ受容体アロステリックエンハンサーの使用を提供する。
【０００８】
【化１】
2021535217.tif 000003
【０００９】
本発明のいくつかの具体的な実施形態によれば、前記ＧＡＢＡＡ受容体に関連する疾患が、鎮静、催眠や不安、うつ、不眠、悪心、嘔吐、片頭痛、統合失調、驚厥及びてんかんの治療又は予防を含む。
【００１０】
本発明のいくつかの具体的な実施形態によれば、前記てんかんが、海馬ニューロン欠損を引き起こすてんかんである。
【００１１】
本発明のいくつかの具体的な実施形態によれば、てんかんが、側頭葉てんかんである。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】ラット投与後の異なる時点での脳組織における化合物１とビフェノールの濃度変化図である。
【図２】実験例１のＫＡ誘導の慢性てんかんモデルの自発性てんかん発作回数である。
【図３】実験例１のＫＡ誘導の慢性てんかんモデルのニューロン細胞生存率である。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
以下、図面を参照しつつ、本発明の実施形態を詳細に説明するが、本発明の保護範囲はこれに限定されない。
【００１４】
実施例１
４，４’−ジヒドロキシ−３，３’−ジイソプロピル−５，５’−ジプロピルビフェニル（化合物１）の製造
【００１５】
【化２】
2021535217.tif 000004
【００１６】
（１）Ｏ−イソプロピルフェノール（１．０g、７．３ｍｍｏｌ）とアリルブロモ（１４．６ｍｍｏｌ）を２５ｍＬの丸底フラスコに逐次加え、塩化メチレンで溶解した。
【００１７】
（２）他の５０ｍＬのフラスコにベンジルトリブチルアンモニウムブロミド（０．２６ｇ、０．７３ｍｍｏｌ）を加え、１ＭのＮａＯＨ溶液で溶解した。
【００１８】
（３）常温で、（１）で得られた溶液を（２）で得られた溶液にゆっくり添加し、室温にて２時間撹拌し、有機相を分離し、水相を塩化メチレンで抽出し、有機相を合わせ、水、飽和塩化ナトリウムで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮によって無色液体が得られた。窒素保護の下、この液体を２５０℃で２時間加熱し、冷却後にカラムクロマトグラフィーによって無色液体を得た。この無色液体を無水エタノールに溶解し、Ｐｄ／Ｃを加えて還元し、還元後に濾過し、得られた母液を濃縮して、２−イソプロピル−６−プロピルフェノールを得た。
１Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）  δ  ７．０６  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ７．６，  １．６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．９７  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ７．５，  １．６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．８５  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．７５  （ｓ，  １Ｈ），  ３．２２  −  ３．１３  （ｍ，  １Ｈ），  ２．５９  −  ２．５４  （ｍ，  ２Ｈ），  １．７２  −  １．５９  （ｍ，  ２Ｈ），  １．２６  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．９  Ｈｚ，  ６Ｈ），  ０．９９  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．３  Ｈｚ，  ３Ｈ）。
【００１９】
（４）２−イソプロピル−６−プロピルフェノール（１．０ｇ、５．６ｍｍｏｌ）をジクロロメタン２０ｍＬに溶解し、触媒としてのＣｕ（ＯＨ）Ｃｌ．ＴＭＥＤＡ（Ｎ，Ｎ，Ｎ，Ｎ−テトラメチルエチレンジアミン塩基性塩化銅）（５０ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）を加えて、室温にて撹拌して、赤色固体キノンを得た後、ハイドロサルファイドで還元して４，４’−ジヒドロキシ−３，３’−ジイソプロピル−５，５’−ジプロピルビフェニル（１．１ｇ、５５．５％）を得た。
４，４’−ジヒドロキシ−３，３’−ジイソプロピル−５，５’−ジプロピルビフェニル：１Ｈ  ＮＭＲ  （３００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）  δ  ７．２９  （ｓ，  ４Ｈ），  ６．５２  （ｓ，  ２Ｈ），  ３．１３−３．０８  （ｍ，  ２Ｈ），  ２．４３−２．４０  （ｍ，  ４Ｈ），  １．５１−１．４３  （ｍ，  ４Ｈ），  １．０３  （ｄ，  １２Ｈ），  ０．８４−０．８１  （ｍ，  ６Ｈ）。
【００２０】
実験例１
１、化合物１とビフェノール（３，３’，５，５’−テトライソプロピル−４，４’−ビフェノール）の、静脈投与後のラットの脳組織における薬物分布の比較試験
体重２００〜２２０ｇのＳＤラット７２匹をランダムに１２群（各時間群６匹）に分け、投与前に１２時間絶食させた。化合物１又はビフェノールをそれぞれ４５ｍｇ／ｋｇの用量で静脈投与し、投与後５分、１５分、３０分、１時間、２時間及び４時間でそれぞれ犠牲死させ、すぐに脳組織を採取し、氷冷蒸留水で洗い流し、拭い取り、−４０℃で凍結保存した。ラット投与後の異なる時点における脳組織中の化合物１又はビフェノールの濃度をＬＣ−ＭＳ／ＭＳ法により測定して、その結果を表１及び図１に示す。
【００２１】
【表１】
2021535217.tif 000005
【００２２】
静脈注射後５分、脳組織における化合物１の濃度はビフェノールの２．７５倍であり、脳組織における化合物１が濃度ピークとなる時間は１５分であるが、ビフェノールが濃度ピークとなる時間は投与後３０分である。化合物１の脳組織ＡＵＣ０−４ｈはおよそビフェノールの１．３１倍である。
【００２３】
上記結果は、同じ投与量で静脈投与すると、化合物１の脳への導入速度及び導入量はビフェノールよりも顕著に高いことが示された。
【００２４】
２、体外ＧＡＢＡＡ受容体標的親和力実験
放射性リガンド（［３５Ｓ］  ＴＢＰＳ）受容体の競争的結合による実験にて、試験化合物（１０ｕＭ）とＧＡＢＡＡ受容体との親和力を評価して、その結果を以下の表２に示す。
【００２５】
【表２】
2021535217.tif 000006
【００２６】
その結果から、化合物１とＧＡＢＡＡ受容体は、いずれも高い親和力を有し、かつ親和力がビフェノールに相当することが示された。
【００２７】
３、化合物１及びビフェノール（３，３’，５，５’−テトライソプロピル−４，４’−ビフェノール）の、ＰＴＺによるラットのてんかん発作への抵抗実験
実験では、体重２００〜２５０ｇの雄性ＳＤラット（西安交通大学から）に、ビフェノール注射液、化合物１注射液及び等体積のブランクをそれぞれ４５ｍｇ／ｋｇで静脈投与した。静脈投与後１分、３分、５分、１０分、１５分、３０分、６０分、９０分、１２０分で、７０ｍｇ／ｋｇのＰＴＺを腹腔内注射してラットの強直間代性てんかんの発作が誘発された。各薬物群については、各時点ごとに７匹のラットとし、ラットの発作強度は、Ｒａｃｉｎｅ分類基準に準拠してＩＩＩ級〜Ｖ級の発作状態を記録した。また、発作強度に従って点数を記録した。具体的に、発作強度Ｖ級を５点として、ＩＶ級を４点として、ＩＩＩ級を３点として、ＩＩＩ級以下を０点として記録した。各群の動物の発作強度は７匹の動物の合計点数であり、その結果を下記の表３に示す。
【００２８】
【表３】
2021535217.tif 000007
【００２９】
その実験結果から分かるように、化合物１は、静脈注射後３〜５分でＰＴＺ誘導によるてんかん大発作を完全に抑制でき、薬効を投与後１２０分以上持続できた。一方、ビフェノールは、静脈注射後１５分でＰＴＺ誘導によるてんかん大発作を完全に抑制し、薬効が投与後９０分で減衰した。上記結果から分かるように、本発明の化合物は、投与後の効き速度がビフェノールよりも顕著に優れており、薬効ピーク維持時間も後者より大きい。
【００３０】
４、ＫＡ誘導による慢性てんかんのモデル
ラットの海馬をカイニン酸微量注射する方法（ＫＡ）によって慢性てんかんの動物モデルを作製した。マウス海馬内に０．２ｕｇ（２ｕｌ）のＫＡを脳定位固定装置により注入し、モデル作成後６時間内でマウスがてんかん発作を起こした。モデル作成後３週間では、マウスが次々と自発性てんかん発作を起こした。モデル作成後に自発性てんかん発作を起こしたマウスを２群（ｎ＝１０）、即ち化合物１投与群および生理食塩水投与群に分けた。モデル作成後２日目に化合物１（１００ｍｇ／ｋｇ）及び等体積の生理食塩水を１日ずつ静脈投与した。モデル作成３週間後から、マウスの自発性てんかんの発作回数を２週間かけて観察した（図２）。観察終了後マウスを犠牲死させ、海馬組織切片を採取し、ＮｅｕＮ染色によりＣＡ１領域のニューロン細胞生存率を統計した（図３）。
【００３１】
その結果から、本発明の化合物Ａを投与したＫＡ誘導慢性てんかんモデル動物が、自発性てんかんの発作のみならず、てんかんモデルによって誘発される海馬ニューロンの死亡を大幅に抑制することができることが示された。
【図１】
2021535217.tif 000010
【図２】
2021535217.tif 000011
【図３】
2021535217.tif 000012
【手続補正書】
【提出日】令和3年3月19日(2021.3.19)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＧＡＢＡＡ受容体に関連する疾患の治療に用いられる、式（Ｉ）で示されるＧＡＢＡＡ受容体アロステリックエンハンサー。
【化１】
2021535217.tif 000013
【請求項２】
前記ＧＡＢＡＡ受容体に関連する疾患の治療は、鎮静、催眠や不安、うつ、不眠、悪心、嘔吐、片頭痛、統合失調、驚厥及びてんかんの治療又は予防を含む、請求項１に記載のＧＡＢＡＡ受容体アロステリックエンハンサー。
【請求項３】
前記てんかんが、海馬ニューロン欠損を引き起こすてんかんである、請求項２に記載のＧＡＢＡＡ受容体アロステリックエンハンサー。
【請求項４】
前記てんかんが側頭葉てんかんである、請求項２に記載のＧＡＢＡＡ受容体アロステリックエンハンサー。
【国際調査報告】
2021535217.tif 000014
2021535217.tif 000015
2021535217.tif 000016
2021535217.tif 000017
2021535217.tif 000018
2021535217.tif 000019