(57)【要約】  本発明は、ヒトＦＡＭ１９Ａ５に特異的に結合する抗体及び当該抗体を含む組成物の投与を含む、対象において中枢神経病性疼痛又は末梢神経病性疼痛を含む神経病性疼痛の治療方法を提供する。本発明はまた、ヒトＦＡＭ１９Ａ５に特異的に結合する抗体を投与することによって神経病性疼痛の症状及び／又は神経病性疼痛の明らかな原因を含む神経病性疼痛を治療する方法を提供する。特定の態様において、本発明の方法は、ヒトＦＡＭ１９Ａ５に特異的に結合する抗体、例えば１０ｎＭ以下のＫＤで可溶性ヒトＦＡＭ１９Ａ５に結合する抗体、又は１０ｎＭ以下のＫＤで膜結合されたヒトＦＡＭ１９Ａ５に結合する抗体、又はこれらの両抗体を投与することを含む。【特許請求の範囲】
【請求項１】
必要とする対象の神経病性疼痛を治療するための配列類似性１９、メンバーＡ５（ＦＡＭ１９Ａ５）タンパク質（“ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤”）を有するファミリーに対する拮抗剤。
【請求項２】
神経病性疼痛が中枢神経病性疼痛又は末梢神経病性疼痛であることを特徴とする、請求項１に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項３】
神経病性疼痛が身体的損傷、感染、糖尿病、癌療法、アルコール中毒、切断、背中、脚、ヒップ又は顔筋肉の弱化、三叉神経痛、多発性硬化症、帯状疱疹、脊椎手術又はこれらの任意の組合せと関連があることを特徴とする、請求項１又は２に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項４】
神経病性疼痛が手根管症候群、中枢疼痛症候群、退行性ディスク疾患、糖尿病性神経病症、幻肢疼痛、帯状疱疹後神経痛（帯状疱疹）、陰部神経痛、坐骨神経痛、腰痛、三叉神経痛、又はこれらの任意の組合せを含むことを特徴とする、請求項１〜３のいずれかに記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項５】
神経病性疼痛が神経の圧迫によって引き起こされることを特徴とする、請求項１〜４のいずれかに記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項６】
糖尿病性神経病症が糖尿病性末梢神経病症であることを特徴とする、請求項４に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項７】
神経病性疼痛が坐骨神経痛であることを特徴とする、請求項４又は５に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項８】
必要としている対象において外部刺激に対する閾値又は遅延時間を増加させるためのＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項９】
外部刺激が機械的刺激であることを特徴とする、請求項８に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項１０】
外部刺激が熱的刺激であることを特徴とする、請求項８に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項１１】
感覚神経伝導速度増加を必要とする対象において感覚神経伝導速度を増加させるためのＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項１２】
ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤がＦＡＭ１９Ａ５を特異的に標的化するアンチセンスオリゴヌクレオチド、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ、ｄｓＲＮＡ、アプタマー、ＦＡＭ１９Ａ５を特異的に標的化するＰＮＡ、又はこれを含むベクターであることを特徴とする、請求項１〜１１のいずれかに記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項１３】
ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤が抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体を暗号化するポリヌクレオチド、そのポリヌクレオチドを含むベクター、そのポリヌクレオチドを含む細胞、又はこれらの任意の組合せであることを特徴とする、請求項１〜１１のいずれかに記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項１４】
ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤が抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体であることを特徴とする、請求項１３に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項１５】
抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体が次から選択された性質を示すことを特徴とする、請求項１４に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤：
（ａ）酵素結合免疫吸着分析法（ＥＬＩＳＡ）によって測定される時、１０ｎＭ以下のＫＤで可溶性ヒトＦＡＭ１９Ａ５に結合；
（ｂ）ＥＬＩＳＡによって測定される時、１０ｎＭ以下のＫＤで膜結合されたヒトＦＡＭ１９Ａ５に結合；又は
（ｃ）（ａ）及び（ｂ）両方。
【請求項１６】
抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体が重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、及び軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含む基準抗体と共にヒトＦＡＭ１９Ａ５エピトープに結合するために交差競合し、ここで、
（ｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１８のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１９のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２９のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３０のアミノ酸配列を含み、及び軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３１のアミノ酸配列を含み；
（ｉｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７のアミノ酸配列を含み、及び軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２８のアミノ酸配列を含み；
（ｉｉｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２４のアミノ酸配列を含み、及び軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２５のアミノ酸配列を含み；又は
（ｉｖ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３２のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３３のアミノ酸配列を含み、及び軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３４のアミノ酸配列を含む
ことを特徴とする、請求項１４又は１５に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項１７】
抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体が重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、及び軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含む基準抗体と同じＦＡＭ１９Ａ５エピトープに結合し、ここで、
（ｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１８のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１９のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２９のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３０のアミノ酸配列を含み、及び軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３１のアミノ酸配列を含み；
（ｉｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７のアミノ酸配列を含み、及び軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２８のアミノ酸配列を含み；
（ｉｉｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２４のアミノ酸配列を含み、及び軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２５のアミノ酸配列を含み；又は
（ｉｖ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３２のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３３のアミノ酸配列を含み、及び軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３４のアミノ酸配列を含む
ことを特徴とする、請求項１４〜１６のいずれかに記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項１８】
抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６又はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９である少なくとも一つのＦＡＭ１９Ａ５エピトープに結合することを特徴とする、請求項１４〜１７のいずれかに記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項１９】
抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６又はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９であるＦＡＭ１９Ａ５エピトープにのみ結合することを特徴とする、請求項１４〜１７のいずれかに記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項２０】
抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体が追加のＦＡＭ１９Ａ５エピトープにさらに結合することを特徴とする、請求項１４〜１８のいずれかに記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項２１】
追加のＦＡＭ１９Ａ５エピトープがＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０及びこれらの任意の組合せからなる群から選ばれることを特徴とする、請求項２０に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項２２】
抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体が重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、及び軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含むことを特徴とする、請求項１４〜２１のいずれかに記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項２３】
重鎖ＣＤＲ３がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１９、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３、又はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２のアミノ酸配列を含むことを特徴とする、請求項２２に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項２４】
重鎖ＣＤＲ１がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１、又はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０のアミノ酸配列を含むことを特徴とする、請求項２２又は２３に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項２５】
重鎖ＣＤＲ２がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１８、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２、又はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２１のアミノ酸配列を含むことを特徴とする、請求項２２〜２４のいずれかに記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項２６】
軽鎖ＣＤＲ１がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２９、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２３、又はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３２のアミノ酸配列を含むことを特徴とする、請求項２２〜２５のいずれかに記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項２７】
軽鎖ＣＤＲ２がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３０、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２４、又はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３３を含むことを特徴とする、請求項２２〜２６のいずれかに記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項２８】
軽鎖ＣＤＲ３がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２８、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２５、又はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３４を含むことを特徴とする、請求項２２〜２７のいずれかに記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項２９】
抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体が重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、及び軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含み、ここで、
（ｉ）重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれ、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７、１８及び１９を含み、及び軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれ、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２９、３０及び３１を含み；
（ｉｉ）重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれ、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４、１５及び１６を含み、及び軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれ配列２６、２７及び２８を含み；
（ｉｉｉ）重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれ、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１、１２及び１３を含み、及び軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれ、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２３、２４及び２５を含み；又は
（ｉｖ）重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれ、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０、２１及び２２を含み、及び軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれ、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３２、３３及び３４を含む
ことを特徴とする、請求項２２〜２８のいずれかに記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項３０】
抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３７、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３６、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３５、又はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３８を含む重鎖可変ドメイン及び／又はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４０、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３９、又はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４２を含む軽鎖可変ドメインを含むことを特徴とする、請求項２２〜２９のいずれかに記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項３１】
抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３７を含む重鎖可変ドメイン及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４１を含む軽鎖可変ドメインを含むことを特徴とする、請求項３０に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項３２】
抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３６を含む重鎖可変ドメイン及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４０を含む軽鎖可変ドメインを含むことを特徴とする、請求項３０に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項３３】
抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３５を含む重鎖可変ドメイン及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３９を含む軽鎖可変ドメインを含むことを特徴とする、請求項３０に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項３４】
抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３８を含む重鎖可変ドメイン及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４２を含む軽鎖可変ドメインを含むことを特徴とする、請求項３０に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項３５】
抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体が重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含み、ここで、重鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３７、３６、３５又は３８に提示されたアミノ酸配列と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％又は約１００％同じアミノ酸配列を含むことを特徴とする、請求項１４〜２２のいずれかに記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項３６】
抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体が重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含み、ここで、軽鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４１、４０、３９、又は４２に提示されたアミノ酸配列と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％又は約１００％同じアミノ酸配列を含むことを特徴とする、請求項１４〜２２のいずれかに記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項３７】
抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体が重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含み、ここで、重鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３７、３６、３５又は３８に提示されたアミノ酸配列と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％又は約１００％同じアミノ酸配列を含み；及び軽鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４１、４０、３９、又は４２に提示されたアミノ酸配列と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％又は約１００％同じアミノ酸配列を含むことを特徴とする、請求項１４〜２２のいずれかに記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項３８】
抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体がＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）を含むことを特徴とする、請求項１４〜３７のいずれかに記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項３９】
抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体がＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、その変異体、及びこれらの任意の組合せからなる群から選ばれることを特徴とする、請求項１４〜３８のいずれかに記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項４０】
抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体がＩｇＧ２抗体、ＩｇＧ４抗体又はこれらの組合せであることを特徴とする、請求項３９に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項４１】
抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体がＩｇＧ２／ＩｇＧ４アイソタイプ抗体を含むことを特徴とする、請求項３９に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項４２】
抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体がＦｃ機能のない定常領域をさらに含むことを特徴とする、請求項１４〜４１のいずれかに記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項４３】
抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体がキメラ抗体、ヒト抗体又はヒト化抗体であることを特徴とする、請求項１４〜４２のいずれかに記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項４４】
ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤が薬剤に連結されて免疫接合体（ｉｍｍｕｎｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ）を形成することを特徴とする、請求項１〜４３のいずれかに記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項４５】
ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤が薬学的に許容される担体で剤形化されることを特徴とする、請求項１〜４４のいずれかに記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項４６】
ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤が静脈内、経口、非経口、脊髄腔内、脳室内、肺、筋肉内、皮下、腹腔内、硝子体内又は心室内投与されることを特徴とする、請求項１〜４５のいずれかに記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項４７】
対象がヒトであることを特徴とする、請求項１〜４６のいずれかに記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願と共に提出されたＡＳＣＩＩテキストファイル（ファイル名：３７６３＿００９ＰＣ０ｌ＿ＳｅｑＬｉｓｔｉｎｇ＿ＳＴ２５．ｔｘｔ；サイズ：２１４，３１３バイト；及び生成日：２０１９年４月２２日）に電子的に提出された配列目録の内容はその全体が本明細書に参考として含まれる。
【０００２】
本発明は、配列類似性１９、メンバーＡ５（ＦＡＭ１９Ａ５）を有するファミリーに特異的に結合する抗体、その抗原結合断片、若しくはこのような抗体又はその抗原結合断片を含む組成物を用いて対象（例えば、ヒト）において神経病性疼痛を治療する方法を提供する。
【背景技術】
【０００３】
神経病性疼痛は、体性感覚系（ｓｏｍａｔｏｓｅｎｓｏｒｙ  ｓｙｓｔｅｍ）の病変又は疾病による慢性疼痛である。Ｃｏｌｌｏｃａ  Ｌ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔ  Ｒｅｖ  Ｄｉｓ  Ｐｒｉｍｅｒｓ  ３：１７００２（２０１７）。体性感覚系は、接触、圧力、疼痛、温度、位置、動き及び振動の認識を許容する。体性感覚神経は皮膚、筋肉、関節及び筋膜で発生し、脊髄に信号を送り、結局として追加処理のために脳に信号を送る熱受容体、機械受容体、化学受容体、かゆみ症及び痛覚受容体を含む。体性感覚神経系の病変又は疾病は、脊髄及び脳へ感覚信号の変更及び無秩序な伝達を招いて慢性疼痛を誘発することがある。
【０００４】
神経病性疼痛は患者、社会及び健康管理システムに相当なる負担を与える。全人口の約７〜１０％が神経病性疼痛に病んでいると推定される。Ｃｒｕｃｃｕ  Ｇ．ａｎｄ  Ｔｒｕｉｎｉ  Ａ．，Ｐａｉｎ  Ｔｈｅｒ  ６：３５−４２（２０１７）。様々な要因（例えば、高齢化、肥満率の増加、神経病性疼痛を誘発し得るインターベンション（ｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎｓ）によって治療を受ける癌患者の生存率増加）により、神経病性疼痛の有病率は将来さらに増加すると見られる。Ｍｏｕｌｉｎ  Ｄ．ｅｔ  ａｌ．，Ｐａｉｎ  Ｒｅｓ  Ｍａｎａｇ  １９：３２８−３３５（２０１４）。
【０００５】
根本原因が常に完全に理解されるわけではないため、神経病性疼痛の管理はしばしば複雑であり、依然として挑戦すべき課題である。Ｆｉｎｎｅｒｕｐ  Ｎ．Ｂ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｌａｎｃｅｔ  Ｎｅｕｒｏｌ  １４：１６２−１７３（２０１５）。現在の接近法は、三環系抗うつ薬（例えば、アミトリプチリン、セロトニン−ノルエピネフリン再吸収抑制剤（ＳＮＲＩ）、カルシウムチャネルアルファ−２−デルタリガンドガバペンチン及びプレガバリン）、及びアヘン類似剤（ｏｐｉｏｉｄ）のような薬理学的薬剤で神経病性疼痛の症状を治療することにフォーカスしているだけである。Ｃｒｕｃｃｕ  Ｇ．ａｎｄ  Ｔｒｕｉｎｉ  Ａ．，Ｐａｉｎ  Ｔｈｅｒ  ６：３５−４２（２０１７）。このような薬物はしばしば多くの人々に深刻な副作用をもたらし及び／又は効能が制限的である。そこで、神経病症性疼痛に対するより効果的な治療オプションが望まれる現状である。
【発明の概要】
【０００６】
本発明は、神経病性疼痛を必要とする対象において中枢神経病性疼痛又は末梢神経病性疼痛を含む神経病性疼痛の治療方法を提供する。一部の実施形態において、本発明の方法は、配列類似性１９、メンバーＡ５（ＦＡＭ１９Ａ５）タンパク質を有するファミリーに対して拮抗剤を対象に投与することを含む。
【０００７】
一部の実施形態において、神経病性疼痛は、身体的損傷、感染、糖尿病、癌治療療法、アルコール中毒、切断、背、脚、ヒップ（ｈｉｐ）又は顔の筋肉の弱化、三叉神経痛（ｔｒｉｇｅｍｉｎａｌ  ｎｅｕｒａｌｇｉａ）、多発性硬化症（ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ）、帯状疱疹（ｓｈｉｎｇｌｅｓ）、脊椎手術、又はこれらの任意の組合せと関連がある。一部の実施形態において、神経病性疼痛は、手根管（ｃａｒｐａｌ  ｔｕｎｎｅｌ）症候群、中枢疼痛（ｃｅｎｔｒａｌ  ｐａｉｎ）症候群、退行性ディスク（ｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｖｅ  ｄｉｓｋ）疾患、糖尿病性神経病症（ｄｉａｂｅｔｉｃ  ｎｅｕｒｏｐａｔｈｙ）、幻肢痛（ｐｈａｎｔｏｍ  ｌｉｍｂ  ｐａｉｎ）、帯状疱疹後神経痛（ｐｏｓｔｈｅｒｐｅｔｉｃ  ｎｅｕｒａｌｇｉａ）（帯状疱疹）、陰部神経痛（ｐｕｄｅｎｄａｌ  ｎｅｕｒａｌｇｉａ）、坐骨神経痛（ｓｃｉａｔｉｃａ）、腰痛（ｌｏｗ  ｂａｃｋ  ｐａｉｎ）、三叉神経痛又はこれらの任意の組合せを含む。
【０００８】
一部の実施形態において、神経病性疼痛は神経の圧迫によって発生する。一部の実施形態において、糖尿病性神経病症は糖尿病性末梢神経病症である。一部の実施形態において、神経病性疼痛は坐骨神経痛である。
【０００９】
本発明はまた、ＦＡＭ１９Ａ５タンパク質に対する拮抗剤を対象に投与することを含む、外部刺激を必要とする対象の外部刺激に対する閾値（ｔｈｒｅｓｈｏｌｄ）又は遅延を増加させる方法を提供する。一部の実施形態において、外部刺激は機械的刺激である。他の実施形態において、外部刺激は熱刺激である。
【００１０】
本発明はまた、ＦＡＭ１９Ａ５タンパク質に対する拮抗剤を対象に投与することを含む、必要とする対象において感覚神経伝導速度を増加させる方法を提供する。
【００１１】
一部の実施形態において、ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤は、アンチセンスオリゴヌクレオチド、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ、ｄｓＲＮＡ、アプタマー、ＦＡＭ１９Ａ５を特異的に標的化するＰＮＡ、又はこれを含むベクターである。他の実施形態において、ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤は、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体を暗号化するポリヌクレオチド、そのポリヌクレオチドを含むベクター、そのポリヌクレオチドを含む細胞、又はこれらの任意の組合せである。
【００１２】
一部の実施形態において、ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤は抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体である。
【００１３】
一部の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は、次から選択された性質を示す：（ａ）酵素結合免疫吸着分析法（ＥＬＩＳＡ）によって測定される時、１０ｎＭ以下のＫＤで可溶性ヒトＦＡＭ１９Ａ５に結合；（ｂ）ＥＬＩＳＡによって測定される時、１０ｎＭ以下のＫＤで膜結合したヒトＦＡＭ１９Ａ５に結合；又は（ｃ）（ａ）及び（ｂ）の両方。
【００１４】
一部の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は、重鎖（ｈｅａｖｙ  ｃｈａｉｎ）ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３及び軽鎖（ｌｉｇｈｔ  ｃｈａｉｎ）ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含む基準抗体と共にヒトＦＡＭ１９Ａ５エピトープに結合するために交差競合（ｃｒｏｓｓ−ｃｏｍｐｅｔｅ）し、ここで、（ｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１８のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１９のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２９のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３０のアミノ酸配列を含み、及び軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３１のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７のアミノ酸配列を含み、及び軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２８のアミノ酸配列を含み；（ｉｉｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２４のアミノ酸配列を含み、及び軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２５のアミノ酸配列を含み；又は（ｉｖ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３２のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３３のアミノ酸配列を含み、及び軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３４のアミノ酸配列を含む。
【００１５】
一部の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３及び軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含む基準抗体と同じＦＡＭ１９Ａ５エピトープに結合し、ここで（ｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１８のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１９のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２９のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３０のアミノ酸配列を含み、及び軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３１のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７のアミノ酸配列を含み、及び軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２８のアミノ酸配列を含み；（ｉｉｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２４のアミノ酸配列を含み、及び軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２５のアミノ酸配列を含み；又は（ｉｖ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３２のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３３のアミノ酸配列を含み、及び軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３４のアミノ酸配列を含む。
【００１６】
一部の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６又はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９である一つ以上のＦＡＭ１９Ａ５エピトープに結合する。他の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６又はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９であるＦＡＭ１９Ａ５エピトープにのみ結合する。特定の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は追加のＦＡＭ１９Ａ５エピトープにさらに結合する。一部の実施形態において、追加のＦＡＭ１９Ａ５エピトープはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０及びこれらの任意の組合せからなる群から選ばれる。
【００１７】
一部の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、及び軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含む。特定の実施形態において、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１９、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３又はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２のアミノ酸配列を含む。他の実施形態において、重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１又はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態において、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１８、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２又はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２１のアミノ酸配列を含む。
【００１８】
一部の実施形態において、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２９、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２３又はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３２のアミノ酸配列を含む。特定の実施形態において、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３０、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２４又はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３３のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態において、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２８、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２５又はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３４のアミノ酸配列を含む。
【００１９】
一部の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、及び軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含み、ここで、（ｉ）重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれ、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７、１８及び１９を含み、及び軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれ、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２９、３０及び３１を含み；（ｉｉ）重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれ、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４、１５及び１６を含み、及び軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれ、配列２６、２７及び２８を含み；（ｉｉｉ）重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれ、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１、１２及び１３を含み、及び軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれ、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２３、２４及び２５を含み；又は（ｉｖ）重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれ、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０、２１及び２２を含み、及び軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれ、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３２、３３及び３４を含む。
【００２０】
一部の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３７、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３６、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３５又はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３８を含む重鎖可変ドメイン及び／又はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４０、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３９又はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４２を含む軽鎖可変ドメインを含む。特定の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３７を含む重鎖可変ドメイン及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４１を含む軽鎖可変ドメインを含む。他の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３６を含む重鎖可変ドメイン及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４０を含む軽鎖可変ドメインを含む。一部の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３５を含む重鎖可変ドメイン及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３９を含む軽鎖可変ドメインを含む。特定の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３８を含む重鎖可変ドメイン及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４２を含む軽鎖可変ドメインを含む。
【００２１】
一部の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含み、ここで、重鎖可変領域は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３７、３６、３５又は３８に提示されたアミノ酸配列と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％又は約１００％同じアミノ酸配列を含む。一部の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含み、ここで、軽鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４１、４０、３９又は４２に提示されたアミノ酸配列と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％又は約１００％同じアミノ酸配列を含む。一部の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含み、ここで、重鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３７、３６、３５又は３８に提示されたアミノ酸配列と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％又は約１００％同じアミノ酸配列を含み；及び、ここで、軽鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４１、４０、３９又は４２に提示されたアミノ酸配列と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％又は約１００％同じアミノ酸配列を含む。
【００２２】
一部の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体はＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）を含む。
【００２３】
一部の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体はＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、これらの変異体及びこれらの任意の組合せからなる群から選ばれる。特定の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体はＩｇＧ２抗体、ＩｇＧ４抗体又はこれらの組合せである。他の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体はＩｇＧ２／ＩｇＧ４アイソタイプ抗体を含む。
【００２４】
一部の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は、Ｆｃ機能がない定常領域をさらに含む。一部の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体はキメラ抗体、ヒト抗体又はヒト化抗体である。
【００２５】
一部の実施形態において、ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤は薬剤に連結されて免疫接合体を形成する。一部の実施形態において、ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤は製薬学的に許容される担体と共に製剤化される。一部の実施形態において、ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤は静脈内、経口、非経口、脊髄腔内、脳室内、肺、筋肉内、皮下、腹腔内、硝子体内又は心室内投与される。
【００２６】
一部の実施形態において、対象はヒトである。
【図面の簡単な説明】
【００２７】
【図１Ａ】図１Ａ〜図１Ｃは、個別ｓｃＦｖクローンのＦＡＭ１９Ａ５タンパク質に対する結合分析を示す。４０５ｎＭで吸光度を測定した。クローン番号はＸ軸に表示された。図１Ａ、図１Ｂ及び図１Ｃはそれぞれ、第１ニワトリ、第２ニワトリ及び第３ニワトリから由来した３次、４次又は５次バイオパンニングから９６個のクローンの分析を示す。
【図１Ｂ】図１Ａ〜図１Ｃは、個別ｓｃＦｖクローンのＦＡＭ１９Ａ５タンパク質に対する結合分析を示す。４０５ｎＭで吸光度を測定した。クローン番号はＸ軸に表示された。図１Ａ、図１Ｂ及び図１Ｃはそれぞれ、第１ニワトリ、第２ニワトリ及び第３ニワトリから由来した３次、４次又は５次バイオパンニングから９６個のクローンの分析を示す。
【図１Ｃ】図１Ａ〜図１Ｃは、個別ｓｃＦｖクローンのＦＡＭ１９Ａ５タンパク質に対する結合分析を示す。４０５ｎＭで吸光度を測定した。クローン番号はＸ軸に表示された。図１Ａ、図１Ｂ及び図１Ｃはそれぞれ、第１ニワトリ、第２ニワトリ及び第３ニワトリから由来した３次、４次又は５次バイオパンニングから９６個のクローンの分析を示す。
【図２】図２は、哺乳動物発現ベクター内にサブクローニングされた抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（ｓｃＦｖ）に対する概略図である。
【図３】図３は、キメラ抗ＦＡＭ１９Ａ５−ＩｇＧ２／４単クローン性抗体（１−６５）のＳＤＳ−ＰＡＧＥ結果を示す。左側パネルには縮小ＳＤＳ−ＰＡＧＥが表示され、右側パネルには縮小されないＳＤＳ−ＰＡＧＥが表示される。
【図４Ａ】図４Ａは、キメラ抗ＦＡＭ１９Ａ５−ＩｇＧ２／４単クローン性抗体（１−６５）がヒトＦＡＭ１９Ａ５に特異的に結合するということを示す。
【図４Ｂ】図４Ｂは、キメラ抗ＦＡＭ１９Ａ５−ＩｇＧ２／４単クローン性抗体（１−６５）がＦＡＭ１９Ａ５タンパク質に特異的であるが、ＦＡＭ１９Ａ５サブファミリーの他のタンパク質に結合しないことを示す。
【図５Ａ】図５Ａ及び図５Ｂは、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の投与が慢性収縮性損傷（ＣＣＩ）誘導ネズミにおいて機械的痛覚過敏を緩和させるということを示す。機械的痛覚過敏に対する効果は、動物が機械的刺激に反応して足を引っ込める（ｗｉｔｈｄｒａｗａｌ）閾値（ｔｈｒｅｓｈｏｌｄ）で示される。閾値測定前に、動物には次のいずれか一つが投与された：（ｉ）対照用抗体（ヒトＩｇＧ）（“Ｇ２”）、（ｉｉ）抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（“Ｇ３”）又は（ｉｉｉ）プレガバリン（“Ｇ４”）。ナイーブ（健康な）動物を“シャム対照群（ｓｈａｍ  ｃｏｎｔｒｏｌ）”（すなわち、ＣＣＩ誘導及び抗体投与無し）（“Ｇ１”）として使用した。図５Ａは、ＣＣＩ誘導後６日目の閾値データを示す。図５Ｂは、ＣＣＩ誘導後２１日目の閾値データを示す。図５Ａ及び図５Ｂの両方において、棒グラフはデータを平均±Ｓ．Ｄとして示す。グラフの下の表は、各グループの個別マウスに対するデータを示す。
【図５Ｂ】図５Ａ及び図５Ｂは、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の投与が慢性収縮性損傷（ＣＣＩ）誘導ネズミにおいて機械的痛覚過敏を緩和させるということを示す。機械的痛覚過敏に対する効果は、動物が機械的刺激に反応して足を引っ込める（ｗｉｔｈｄｒａｗａｌ）閾値（ｔｈｒｅｓｈｏｌｄ）で示される。閾値測定前に、動物には次のいずれか一つが投与された：（ｉ）対照用抗体（ヒトＩｇＧ）（“Ｇ２”）、（ｉｉ）抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（“Ｇ３”）又は（ｉｉｉ）プレガバリン（“Ｇ４”）。ナイーブ（健康な）動物を“シャム対照群（ｓｈａｍ  ｃｏｎｔｒｏｌ）”（すなわち、ＣＣＩ誘導及び抗体投与無し）（“Ｇ１”）として使用した。図５Ａは、ＣＣＩ誘導後６日目の閾値データを示す。図５Ｂは、ＣＣＩ誘導後２１日目の閾値データを示す。図５Ａ及び図５Ｂの両方において、棒グラフはデータを平均±Ｓ．Ｄとして示す。グラフの下の表は、各グループの個別マウスに対するデータを示す。
【図６Ａ】図６Ａ及び図６Ｂは、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の投与がＣＣＩ誘導ネズミにおいて運動機能を改善することを示す。運動機能に対する影響は、実施例に記述するように、ロータロッドトレッドミル（Ｒｏｔａｒｏｄ−ｔｒｅａｄｍｉｌｌ）から落ちる遅延時間（秒）で示す。ＣＣＩ誘導動物は、閾値測定前に次のいずれか一つが投与された：（ｉ）対照用抗体（ヒトＩｇＧ）（“Ｇ２”）、（ｉｉ）抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（“Ｇ３”）又は（ｉｉｉ）プレガバリン（“Ｇ４”）。ナイーブ（健康な）動物を“シャム対照群”（すなわち、ＣＣＩ誘導及び抗体投与無し）（“Ｇ１”）として使用した。図６Ａは、ＣＣＩ誘導後６日目のデータを示す。図６ＢはＣＣＩ誘導後２１日目のデータを示す。棒グラフは遅延時間データを平均±Ｓ．Ｄとして示す。グラフの下の表は、各グループの個別マウスに対するデータを示す。
【図６Ｂ】図６Ａ及び図６Ｂは、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の投与がＣＣＩ誘導ネズミにおいて運動機能を改善することを示す。運動機能に対する影響は、実施例に記述するように、ロータロッドトレッドミル（Ｒｏｔａｒｏｄ−ｔｒｅａｄｍｉｌｌ）から落ちる遅延時間（秒）で示す。ＣＣＩ誘導動物は、閾値測定前に次のいずれか一つが投与された：（ｉ）対照用抗体（ヒトＩｇＧ）（“Ｇ２”）、（ｉｉ）抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（“Ｇ３”）又は（ｉｉｉ）プレガバリン（“Ｇ４”）。ナイーブ（健康な）動物を“シャム対照群”（すなわち、ＣＣＩ誘導及び抗体投与無し）（“Ｇ１”）として使用した。図６Ａは、ＣＣＩ誘導後６日目のデータを示す。図６ＢはＣＣＩ誘導後２１日目のデータを示す。棒グラフは遅延時間データを平均±Ｓ．Ｄとして示す。グラフの下の表は、各グループの個別マウスに対するデータを示す。
【図７】図７は、各種（すなわち、ヒト、マウス、ネズミ及びニワトリ）のＦＡＭ１９Ａ５アミノ酸配列の整列を示す。エピトープマッピング分析に用いられた断片Ｆ１−Ｆ６が表示される。信号ペプチドは下線が付いている。
【図８】図８は、エピトープＦ１−Ｆ６（ＢＳに共役結合した）のアミノ酸配列及びヒトＦＡＭ１９Ａ５ポリペプチドにおいてそれらの位置を示す。同図上端のアミノ酸配列は、野生型ＦＡＭ１９Ａ５アイソタイプ２（信号ペプチドを除く）である。同図の上端二番目のアミノ酸配列は同一配列であるが、システイン残基をセリンに突然変異させ、ペプチド合成過程において非特異的活性を減少させた。各エピトープ断片のサイズは括弧内に表示されている。
【図９】図９は、単クローン性抗体クローン１−６５のエピトープ断片Ｆ１〜Ｆ６（それぞれレーン３〜８）に対するエピトープマッピングに対するウェスタンブロット結果を示す。ＦＡＭ１９Ａ５−ＣＫ（レーン１）、ＰＳＡ−ＣＫ（レーン２）、ペプチドＮＤＶ−ＢＳＡ（レーン９）及びＢＳＡ（レーン１０）を対照群として使用した。使用された異なる抗原の各サイズは、ブロットの右側に示されている。ウェル当たりに使用された抗原の量は、３００ｎｇである。ウェスタンブロットに使用された１次抗体は、１−６５−ｓｃＦｖ−ウサギ−Ｆｃ−ＳＳＳ（２μｇ／ｍＬ）であり、実験に使用された２次抗体は、抗ウサギＩｇＧ（Ｆｃ特異的）−ＨＲＰ（１：４０００）である。
【図１０】図１０は、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の投与が糖尿病性末梢神経病症（ＤＰＮ）ネズミにおいて機械的異痛を改善したことを示す。機械的異痛に対する影響は、動物が機械的刺激に反応して足を引っ込めた閾値（ｇ）で表示される（“足引っ込め閾値”）。ネズミにおいて糖尿病性末梢神経病症を誘導して約３週目に、動物に対照用抗体（ＮＨＩ、白四角、ｎ＝９）又は抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（３−２）（黒四角、ｎ＝９）を毎週投与した。ナイーブ（すなわち、健康でＤＰＮの誘導がない）動物を対照群（白丸、ｎ＝５）として使用した。データは平均±Ｓ．Ｄと表示される。“＊”は、対照用抗体投与の動物と比較して統計的に大きい差（ｐ＜０．０５）を表す。
【図１１Ａ】図１１Ａ及び図１１Ｂは、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の投与が糖尿病性末梢神経病症（ＤＰＮ）ネズミにおいて熱痛覚過敏を改善したことを示す。熱痛覚過敏に対する効果は、熱刺激に反応して動物が足を引っ込める前の遅延時間（“足引っ込め待ち時間”）と示される。ＤＰＮネズミは、対照用抗体（ＮＨＩ、四角）又は抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（３−２）（三角）が投与された。図１１Ａは、抗体投与４週後の熱痛覚過敏データを示す。図１１Ｂは、抗体投与後８週に熱痛覚過敏データを示す。ナイーブ（すなわち、健康でＤＰＮの誘導がない）動物を対照群として使用した。各記号は個別動物を表す。平均±Ｓ．Ｄ．も表示される。
【図１１Ｂ】図１１Ａ及び図１１Ｂは、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の投与が糖尿病性末梢神経病症（ＤＰＮ）ネズミにおいて熱痛覚過敏を改善したことを示す。熱痛覚過敏に対する効果は、熱刺激に反応して動物が足を引っ込める前の遅延時間（“足引っ込め待ち時間”）と示される。ＤＰＮネズミは、対照用抗体（ＮＨＩ、四角）又は抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（３−２）（三角）が投与された。図１１Ａは、抗体投与４週後の熱痛覚過敏データを示す。図１１Ｂは、抗体投与後８週に熱痛覚過敏データを示す。ナイーブ（すなわち、健康でＤＰＮの誘導がない）動物を対照群として使用した。各記号は個別動物を表す。平均±Ｓ．Ｄ．も表示される。
【図１２】図１２は、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の投与が、抗体投与後８週目に糖尿病性末梢神経病症（ＤＰＮ）ネズミにおいて感覚神経伝導速度（ｍ／ｓ）を改善したことを示す。ＤＰＮネズミは、対照用抗体（ＮＨＩ、四角）又は抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（３−２）（三角）が投与された。ナイーブ（すなわち、健康でＤＰＮの誘導がない）動物を対照群として使用した。各記号は個別動物を表す。平均±Ｓ．Ｄ．も表示される。
【発明を実施するための形態】
【００２８】
本発明は、配列類似性１９、メンバーＡ５（ＦＡＭ１９Ａ５）タンパク質を有するヒトファミリーに特異的に結合する拮抗剤（例えば、単離した単クローン性抗体又はその抗原結合部分）を対象に投与することを含む、必要とする対象において神経病性疼痛を治療する方法を開示する。
【００２９】
本明細書に記述された開示内容の理解を容易にするために、多数の用語及び語句が定義される。追加の定義は詳細な説明全体にわたって提示されている。
【００３０】
Ｉ．定義
本明細書全体において、単数の表現は、一つ以上を意味する。例えば、“抗体”は一つ以上の抗体を表すものと理解される。このように、本明細書において単数の表現は“一つ以上の”及び“少なくとも一つの”と同じ意味で使用可能である。
【００３１】
また、“及び／又は”は、明示された二つの特徴又は成分のそれぞれがもう一つと共に又は単独で具体的に開示されるものと解釈されるべきである。したがって、“Ａ及び／又はＢ”は“Ａ及びＢ”、“Ａ又はＢ”、“Ａ”（単独）、及び“Ｂ”（単独）を含むものと意図される。また、“Ａ、Ｂ及び／又はＣ”は、Ａ、Ｂ及びＣ；Ａ、Ｂ又はＣ；Ａ又はＣ；Ａ又はＢ；Ｂ又はＣ；Ａ及びＣ；Ａ及びＢ；Ｂ及びＣ；Ａ（単独）；Ｂ（単独）；及びＣ（単独）の態様をそれぞれ含むものと意図される。
【００３２】
ある態様が“含む”と述べられた場合、“構成される”及び／又は“本質的に構成される”と説明された他の類似の態様も提供されるものと理解される。
【００３３】
特に言及がない限り、本明細書で用いられた全ての技術及び科学用語は、本発明の当業者に通常理解されるのと同じ意味を有する。例えば、文献（ｔｈｅ  Ｃｏｎｃｉｓｅ  Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ  ｏｆ  Ｂｉｏｍｅｄｉｃｉｎｅ  ａｎｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｊｕｏ，Ｐｅｉ−Ｓｈｏｗ，２ｎｄ  ｅｄ，２００２，ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ；Ｔｈｅ  Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ  ｏｆ  Ｃｅｌｌ  ａｎｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，３ｒｄ  ｅｄ，１９９９，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ；ａｎｄ  ｔｈｅ  Ｏｘｆｏｒｄ  Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ  Ｏｆ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ａｎｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｒｅｖｉｓｅｄ，２０００，Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ）は、本明細書で用いられた大部分の用語に対する一般の辞典的意味を当業者に提供する。
【００３４】
単位、接頭辞及び記号は、Ｓｙｓｔｅｍｅ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ｄｅ  Ｕｎｉｔｅｓ（ＳＩ）で承認された形態で表示される。数値範囲はその範囲を限定する数字を包括的に含む。特に言及がない限り、アミノ酸配列は、アミノからカルボキシ配向に左側から右側へと書かれる。開示された表題は、本発明の様々な態様の制限ではなく、これらは明細書全般を参照したものであり得る。したがって、下記定義された用語はその全体が明細書を参照してより詳細に説明される。
【００３５】
用語“約”は、概略（ａｐｐｒｏｘｉｍａｔｅｌｙ）、おおよそ（ｒｏｕｇｈｌｙ）、近傍（ａｒｏｕｎｄ）、又は近傍の領域内を意味する。用語“約”が数値範囲と共に使われるとき、それは、提示された数値の上と下に境界を拡張させることによって当該範囲を変形する。一般に、用語“約”は、例えば上や下に（より高かく或いは低く）１０パーセントまで、言及された値の上と下に数値を変えることができる。
【００３６】
“神経病性疼痛”という用語は、中枢神経系（ＣＮＳ）及び／又は末梢神経系の任意のレベルに影響を及ぼす損傷、傷害（ｄａｍａｇｅ）及び／又は不適切な機能による疼痛を意味する。“神経病性疼痛”という用語は、神経病性疼痛の原因及び全ての症状に関係なく任意の及び全ての類型の神経病性疼痛を含む。
【００３７】
神経病性疼痛は、中枢神経病性疼痛及び末梢神経病性疼痛を含む。本明細書に使われた用語“中枢神経病性疼痛”は、障害、先天性欠陥又は中枢神経系（すなわち、脳又は脊髄）の損傷による疼痛を意味する。本明細書に使われた用語“末梢神経病性疼痛”は、末梢感覚神経の損傷又は感染による疼痛を意味する。
【００３８】
神経病性疼痛の症状は、持続性／慢性疼痛、自発的疼痛及び異痛（例えば、一般に、痛くない刺激に対する苦しい反応）、痛覚過敏（例えば、一般に、単にピンで刺されたような軽微な不快感）、知覚過敏（例：刺激、特に皮膚刺激に対する過度な身体敏感性）又は異常痛症（例えば、短い不快感が長期間の激しい疼痛となる場合）を含むことができる。一部の実施形態において、症状は長く持続することがあり、一次的原因が存在する場合、その一次的な原因が解決された場合にも持続することがある。Ｍｅｒｃｋ  Ｍａｎｕａｌ，Ｎｅｕｒｏｐａｔｈｉｃ  Ｐａｉｎ，ｍｅｒｃｋｍａｎｕａｌｓ．ｃｏｍ／ｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌ／ｎｅｕｒｏｌｏｇｉｃ−ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ／ｐａｉｎ／ｎｅｕｒｏｐａｔｈｉｃ−ｐａｉｎ；Ｃａｍｐｂｅｌｌ  Ｊ．Ｎ．ａｎｄ  Ｍｅｙｅｒ  Ｒ．Ａ．Ｎｅｕｒｏｎ  ５２（１）：７７−９２（２００６）。
【００３９】
一部の実施形態において、神経病性疼痛の類型は、（１）神経痛、（２）求心路遮断疼痛（ｄｅａｆｆｅｒｅｎｔａｔｉｏｎ  ｐａｉｎ）症候群、（３）複合局所疼痛症候群（ＣＲＰＳ）及び（４）神経病症（中枢又は末梢）を含むことができる。
【００４０】
一部の実施形態において、神経病性疼痛は神経痛であり、これは一般に、神経構造の明白な病理学的変化無しに一つ以上の特定神経（例えば、脳神経）の過程に沿って放射される疼痛のことを指す。神経痛には三叉神経痛（ＴＮ）、非定型三叉神経痛（ＡＴＮ）、喉頭神経痛、舌咽頭神経痛、帯状疱疹後神経痛（帯状疱疹又はヘルペスによる）、末梢神経損傷疼痛、坐骨神経痛、腰痛及び非定型顔疼痛が含まれるが、これに制限されない。化学的刺激、慢性腎臓疾患、糖尿病、炎症、外傷（手術を含む）、近傍構造物（例：腫瘍）による神経圧迫、特定医薬品（例えば、シスプラチン、パクリタクセル又はビンクリスチン）、ポルフィリン症（血液障害）、及び感染（例えば、帯状ヘルペス（ｈｅｒｐｅｓ  ｚｏｓｔｅｒ）（帯状疱疹）、ＨＩＶ／ＡＩＤＳ、ライム病又は梅毒）はいずれも神経痛につながり得る。
【００４１】
一部の実施形態において、神経病性疼痛は求心路遮断疼痛症候群であり、これは、身体の一部から感覚入力損失（例えば、末梢感覚線維又は中枢神経系からの神経中断によって招かれる）に起因し得る。求心路遮断疼痛症候群には脳又は脊髄損傷、脳卒中後疼痛、幻想（ｐｈａｎｔｏｍ）疼痛、下半身麻痺、腕神経叢裂離（ｂｒａｃｈｉａｌ  ｐｌｅｘｕｓ  ａｖｕｌｓｉｏｎ）損傷及び腰髄神経根障害（ｌｕｍｂａｒ  ｒａｄｉｃｕｌｏｐａｔｈｉｅｓ）が含まれるが、これに制限されない。
【００４２】
一部の実施形態において、神経病性疼痛は“複合局所疼痛症候群”（ＣＲＰＳ）であり、これは最も頻繁に腕又は脚に影響を及ぼす慢性疼痛状態である。一部の実施形態において、ＣＲＰＳは損傷、手術、脳卒中又は心臓麻痺後に発生する。特定の実施形態において、ＣＲＰＳはＩ型ＣＲＰＳ（ＣＲＰＳ−Ｉ）（反射性交感ジストロフィー（ｄｙｓｔｒｏｐｈｙ）症候群とも知られている。）である。神経損傷が確認されない個人は、しばしばＣＲＰＳ−Ｉを有するものと分類される。他の実施形態において、ＣＲＰＳは、確認された神経損傷と関連したＩＩ型ＣＲＰＳ（ＣＲＰＳ−ＩＩ）（灼熱痛ともいう。）である。
【００４３】
一部の実施形態において、神経病性疼痛は神経病症であり、これは神経における機能的又は病理学的変化（例えば、病態又は傷害）による疼痛のことを指す。神経病症はしばしば、感覚又は運動ニューロン異常によって臨床的に特性化できる。特定の実施形態において、神経病症は、中枢神経病症（例えば、中枢神経系の機能的又は病理学的変化）である。他の実施形態において、神経病症は、末梢神経病症（例えば、運動神経、感覚神経、自律神経又はこれらの組合せを含む一つ以上の末梢神経における機能的又は病理学的変化）である。一部の実施形態において、末梢神経病症は、単一神経又は神経群（すなわち、単神経病症）への機能的又は病理学的変化を伴う。一部の実施形態において、末梢神経病症は多数の神経（局所的に又は全身的に）（すなわち、多発神経病症）に影響を及ぼす機能的又は病理学的変化を含む。一部の実施形態において、末梢神経病症は身体の両側にほぼ同一に影響を及ぼす（すなわち、対称性多発神経病症）。一部の実施形態において、末梢神経病症は身体の異質的な領域に影響を及ぼす（例えば、多発性単神経炎、多病巣性単神経病症又は多発性単神経病症）。
【００４４】
本明細書に記載された“単神経病症”は、単一末梢神経又は神経群の損傷又は破壊によって引き起こされた領域への動き又は感覚喪失を伴う末梢神経病症である。単神経病症はたいてい局所部位の負傷又は外傷によって発生し、例えば単一神経に対する圧迫／圧力が持続することになる。しかし、特定全身性障害（例えば、多発性単神経炎）も単神経病症を誘発することがある。一部の実施形態において、局所領域に対する損傷又は外傷は、神経又は神経細胞の一部（軸索突起）の髄鞘（ｍｙｅｌｉｎ  ｓｈｅａｔｈ）（被服）の破壊を誘発し、これは、神経を通じた衝撃の伝導を遅延又は防止することができる。一部の実施形態において、単神経病症は身体の任意の部分に影響を与えることができる。単一神経病性疼痛の例には、坐骨神経機能障害、一般的な骨盤神経機能障害、腰骨神経機能障害、尺骨神経機能障害、頭蓋骨単神経病症ＶＩ、頭蓋骨単神経病症ＶＩＩ、頭蓋骨単神経病症ＩＩＩ（圧迫類型）、頭蓋骨神経病症ＩＩＩ（糖尿病類型）、腋窩神経機能障害、手根管症候群、大腿神経機能障害、脛骨神経機能障害、ベル麻痺（Ｂｅｌｌ’ｓ  ｐａｌｓｙ）、胸部出口症候群、手根管症候群、及び第６（外転）神経痲痺がある。Ｆｉｎｎｅｒｕｐ  Ｎ．Ｂ．ｅｌ  ａｌ．，Ｐａｉｎ  １５７（８）：１５９９−１６０６（２０１６）；国立神経障害及び脳卒中研究所、末梢神経病理事実資料（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｏｆ  Ｎｅｕｒｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ  ａｎｄ  Ｓｔｒｏｋｅ，Ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ  Ｎｅｕｒｏｐａｔｈｙ  Ｆａｃｔ  Ｓｈｅｅｔ）、ｎｉｎｄｓ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ／ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌｎｅｕｒｏｐａｔｈｙ／ｄｅｔａｉｌｊ３ｅｒｉｐｈｅｒａｌｎｅｕｒｏｐａｔｈｙ．ｈｔｍから入手可能。一部の実施形態において、単一神経病性疼痛は坐骨神経痛である。
【００４５】
本明細書に使われた“多発神経病症”は、多数の末梢神経に対する損傷又は破壊によって引き起こされた領域への動き又は感覚喪失を伴う末梢神経病症である。多発神経病性疼痛は、小児痲痺後症候群、乳房切除術後症候群、糖尿病性神経病症、アルコール神経病症、アミロイド、毒素、エイズ、甲状腺機能低下症、尿毒症、ビタミン欠乏症、化学療法誘発疼痛、２’，３’−ジデキソイシチジン（ｄｄＣ）治療、ギランバレー（Ｇｕｉｌｌａｉｎ−Ｂａｒｒｅ）症候群又はファブリー病（Ｆａｂｒｙ’  ｄｉｓｅａｓｅ）を含むが、これに制限されない。Ｆｉｎｎｅｒｕｐ  Ｎ．Ｂ．ｅｔ  ａｌ．，Ｐａｉｎ  １５７（８）：１５９９−１６０６（２０１６）；国立神経障害及び脳卒中研究所、末梢神経病理事実資料（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｏｆ  Ｎｅｕｒｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ  ａｎｄ  Ｓｔｒｏｋｅ，Ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ  Ｎｅｕｒｏｐａｔｈｙ  Ｆａｃｔ  Ｓｈｅｅｔ）、ｎｉｎｄｓ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ／ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌｎｅｕｒｏｐａｔｈｙ／ｄｅｔａｉｌ  ３ｅｒｉｐｈｅｒａｌｎｅｕｒｏｐａｔｈｙ．ｈｔｍ。一部の実施形態において、多発神経病症は糖尿病性末梢神経病症である。特定の実施形態において、糖尿病末梢神経病症は糖尿病患者の血液で高い血中グルコースレベル（血糖）及び／又は高いレベルの脂肪（例えば、トリグリセリド）によって誘発され、これは対象の末梢神経に損傷を引き起こす。
【００４６】
一部の実施形態において、本明細書に開示された末梢神経病症は、損傷したり影響を受ける神経細胞の一部（例えば、軸索（ａｘｏｎ）、髄鞘（ｍｙｅｌｉｎ  ｓｈｅａｔｈ）又は細胞体）に基づいて分類できる。一部の実施形態において、末梢神経病症は遠位軸索病症（ｄｉｓｔａｌ  ａｘｏｎｏｐａｔｈｙ）であり、これは軸索の代謝又は毒性変形によるものである。一部の実施形態において、代謝障害は、糖尿病、腎不全、栄養不足及びアルコール中毒のような欠乏症候群を含む。一部の実施形態において、代謝障害は糖尿病であり、遠位軸索病症は糖尿病性神経病症である。
【００４７】
一部の実施形態において、末梢神経病症は髄鞘病（ｍｙｅｌｉｎｏｐａｔｈｙ）であり、これは髄鞘又は髄鞘性シュワン（Ｓｃｈｗａｎｎ）細胞に対する１次攻撃から発生してインパルス伝導の急性失敗を引き起こす。最も通常の原因は急性炎症性脱髄鞘性多発神経病症（ＡＩＤＰ；ａｋａ  Ｇｕｉｌｌａｉｎ−Ｂａｒｒｅ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ）であるが、他の原因としては慢性炎症性脱髄鞘性症候群（ＣＩＤＰ）、遺伝子代謝障害（例えば、白質変性症）又は毒素がある。
【００４８】
一部の実施形態において、末梢神経病症は神経病症であり、これは末梢神経系（ＰＮＳ）ニューロンの破壊に起因する。一部の実施形態において、神経病症は、運動ニューロン疾患、感覚神経病症（例えば、帯状疱疹）、毒素又は自律機能障害によって引き起こされる。一部の実施形態において、神経病症は化学療法剤ビンクリスチン（ｖｉｎｃｒｉｓｔｉｎ）のような神経毒によって引き起こされる。
【００４９】
神経病性疼痛は、様々な病因（例えば、身体的損傷（例えば、外傷又は反復ストレス）、疾病又は障害、毒性物質に対する露出、又はこれらの組合せ）に起因するか或いはこれに関連し得る。一部の実施形態において、神経病性疼痛は、外傷性損傷又は傷害、例えば、神経圧迫損傷（例えば、神経クラッシュ、神経伸張、神経絞扼又は不完全な神経横切断）；脊髄損傷（例えば、脊髄の片側切断）；末梢神経（例えば、運動神経、感覚神経又は自律神経又はこれらの組合せ）の損傷又は傷害、四肢切断；打撲傷；炎症（例えば、脊髄の炎症）；又は手術手順に起因するか或いはそれらと関連する。一部の実施形態において、神経病性疼痛は、例えば長期間の任意の関節グループの動きを必要とする反復的、鈍い及び／又は強力な活動を含む反復的ストレスから発生するか或いはこれと関連する。これらに制限されないものとして、結果的に刺激は靭帯、腱及び筋肉に炎症ができて腫れ上がるようにし、神経が通過する狭い通路を収縮させることがある（例えば、肘又は手首に閉じ込められたり圧迫された神経の神経病症である尺骨神経病症及び手根管症候群）。一部の実施形態において、神経病性疼痛は、例えば次を含む疾患又は障害によって発生するか或いはこれと関連する：虚血性事例（例：脳卒中又は心臓麻痺）、多発性硬化症、代謝及び／又は内分泌疾患又は障害（例えば、糖尿病、代謝性疾患及び肥大症、成長ホルモンの過剰生成によって発生し、関節を含む骨格部分の異常拡大によって特性化されて神経絞扼及び疼痛を誘発する病態）、末梢神経への酸素供給を減少させて神経組織損傷を誘発する小さな血管疾患（例えば、血管炎、すなわち血管炎症）、自己免疫疾患（例えば、シェーグレン（Ｓｊｏｇｒｅｎ’ｓ）症候群、ループス、リウマチ関節炎及びギランバレー症候群とも知られた急性炎症性脱髄鞘性神経病症）、腎臓疾患、癌又は腫瘍（例えば、新生物腫瘍、神経腫、副腎生物症候群及び化学療法剤からの毒性及び癌治療の放射線）、感染（例えば、ヘルペス水痘帯状疱疹（帯状疱疹）、エプスタインバーウイルス、ウェストナイルウイルス、サイトメガロウイルス及び単純疱疹ウイルス、後天性免疫欠乏症候群（ＡＩＤＳ）又はライム病、ジフテリアのようなバクテリア及びハンセン病による感染）、炎症性障害、末梢神経障害（例えば、神経腫）、遺伝的又は新生の遺伝因子障害（例えば、Ｃｈａｒｃｏｔ−Ｍａｒｉｅ−Ｔｏｏｔｈ障害は、脚と足の筋肉弱化及び衰弱、歩行以上、腱反射の喪失、下肢麻痺など）、単神経病症又は多発神経病症。一部の実施形態において、神経病性疼痛は、感染源（例えば、ダニ媒介感染、ヘルペス水痘帯状疱疹（ｈｅｒｐｅｓ  ｖａｒｉｃｅｌｌａｚｏｓｔｅｒ）、エプスタインバーウイルス、ウェストナイルウイルス、サイトメガロウイルス、単純ヘルペスウイルス、ＡＩＤＳ）から発生するか或いはこれと関連する。一部の実施形態において、神経病性疼痛は、例えば薬物、アルコール、重金属（例えば、鉛、ヒ素、水銀）、工業用製剤（例えば、溶剤、接着剤から発生する煙）又は亜酸化窒素を含む毒性製剤への露出から発生するか或いはそれと関連する。
【００５０】
疾患又は障害と“関連した神経病性疼痛”という用語は、疾患又は障害（例えば、本明細書に開示されたもの）に同伴したり、疾患又は障害（例えば、本明細書に開示されたもの）によって引き起こされたり或いはそれによる神経病性疼痛をいう。
【００５１】
本明細書において、用語“治療する（ｔｒｅａｔ）”、“治療する（ｔｒｅａｔｉｎｇ）”及び“治療（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）”は、疾患と関連した症状、合併症、病態又は生化学的指標の進行、発生、深刻性又は再発を反転、改善、緩和、抑制又は遅延させる目的で対象に対して行われた任意の種類の介入又は過程、又は対象に活性剤を投与することを意味する。治療は、疾患を持つ対象又は疾患を持たない対象に対してなされ得る（例えば、予防のために）。
【００５２】
本明細書において、用語“投与”は、当業者に公知の様々な方法及び伝達システム（ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｓｙｓｔｅｍｓ）のいずれかを用いて、対象に治療剤又は治療剤を含む組成物を物理的に注入することを指す。本明細書に開示された抗体の好ましい投与経路は、静脈内、腹腔内、筋肉内、皮下、脊椎又は他の非経口投与経路、例えは注射又は注入によるものを含む。本明細書において、用語“非経口投与”は一般に注射による、腸内（ｅｎｔｅｒａｌ）及び局部的（ｔｏｐｉｃａｌ）投与以外の投与方式を意味し、制限されないが、静脈内、腹腔内、筋肉内、動脈内、脊椎腔内、リンパ内、病巣内、嚢内（ｉｎｔｒａｃａｐｓｕｌａｒ）、眼窩内（ｉｎｔｒａｏｒｂｉｔａｌ）、心臓内、血内（ｉｎｔｒａｄｅｒｍａｌ）、気管支経（ｔｒａｎｓｔｒａｃｈｅａｌ）、皮下（ｓｕｂｃｕｔａｎｅｏｕｓ）、表皮下、硝子体内、関節内、嚢下、蜘蛛膜下、髄腔内、硬膜外、及び胸骨下注射及び注入の他、生体内電気穿孔も含む。代案として、本明細書に開示された抗体は、非−非経口経路を通じて、例えば局部的、上皮又は粘膜投与経路を通じて、例えば鼻内、経口、膣、直腸、舌下又は局部的経路を通じて投与され得る。また、投与は、例えば、１回、複数回、及び／又は１回以上の延長された期間にわたって行われ得る。
【００５３】
本明細書において、用語“治療的有効量”は、単独で又は他の治療剤と組み合わせて、対象の疾患又は障害を“治療することに”有効な又は疾患又は障害（例えば、神経病性疼痛）の危険、潜在性、可能性又は発生を減少させることに有効な薬物の量を指す。“治療的有効量”は疾患又は障害（例えば、本明細書に記載された神経病性疼痛）を有するか或いは有する危険のある対象に一部の改善や利益を提供する薬物又は治療剤の量を含む。したがって、“治療的有効量”は、疾患又は障害の危険、潜在性、可能性又は発生を減少させたり又は一部緩和、軽減させる、及び／又は少なくとも一つの指標（例えば、神経病性疼痛）を減少させる、及び／又は疾患又は障害の少なくとも一つの臨床症状を減少させる量である。
【００５４】
本明細書において、用語“対象”は、任意のヒト又は非ヒト動物を含む。用語“非ヒト動物”は、全ての脊椎動物、例えば哺乳類及び非哺乳類、例えば非ヒト霊長類、ヤギ、イヌ、ウシ、ニワトリ、両棲類、爬虫類などを含む。
【００５５】
用語“配列類似性１９、メンバーＡ５を有するファミリー”又は“ＦＡＭ１９Ａ５”は、５個の高度に相同性であるタンパク質のＴＡＦＡファミリー（ＦＡＭ１９ファミリーとも知られている）に属し、脳と脊髄で優勢に発現するタンパク質のことを指す。ＦＡＭ１９Ａ５はまた、ＴＡＦＡ５又はケモカイン様タンパク質ＴＡＦＡ−５（Ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ−ｌｉｋｅ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ＴＡＦＡ−５）とも知られている。
【００５６】
ヒトにおいて、ＦＡＭ１９Ａ５を暗号化する遺伝子は染色体２２に位置する。次のような多数のヒトＦＡＭ１９Ａ５（ＵｎｉＰｒｏｔ：Ｑ７Ｚ５Ａ７）アイソタイプがあり、それらは選択的スプライシング（ｓｐｌｉｃｉｎｇ）によって生成されると推定される：１３２個のアミノ酸で構成されたアイソタイプ１（ＵｎｉＰｒｏｔ：Ｑ７Ｚ５Ａ７−１）；１２５個のアミノ酸で構成されたアイソタイプ２（ＵｎｉＰｒｏｔ：Ｑ７Ｚ５Ａ７−２）；及び５３個のアミノ酸で構成されたアイソタイプ３（ＵｎｉＰｒｏｔ：Ｑ７Ｚ５Ａ７−３）。ヒトＦＡＭ１９Ａ５タンパク質は膜結合形態及び可溶性（分泌された）形態で存在すると推定される。アイソタイプ１は一つの硬膜領域を有する膜タンパク質であると推定される。アイソタイプ２は、分泌されたタンパク質（可溶性）としてＴａｎｇ  Ｔ  Ｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｇｅｎｏｍｉｃｓ  ８３（４）：７２７−３４（２００４）に報告されており、アミノ酸位置１−２５に信号ペプチドを含有する。アイソタイプ１は膜タンパク質であると推定される。次は３つの公知されたヒトＦＡＭ１９Ａ５アイソタイプのアミノ酸配列である。
【００５７】
（Ｉ）アイソタイプ１（ＵｎｉＰｒｏｔ：Ｑ７Ｚ５Ａ７−１、硬膜タンパク質）：このアイソタイプは標準配列として選択された。
【００５８】
ＭＡＰＳＰＲＴＧＳＲ  ＱＤＡＴＡＬＰＳＭＳ  ＳＴＦＷＡＦＭＩＬＡ  ＳＬＬＩＡＹＣＳＱＬ  ＡＡＧＴＣＥＩＶＴＬ  ＤＲＤＳＳＱＰＲＲＴ  ＩＡＲＱＴＡＲＣＡＣ  ＲＫＧＱＩＡＧＴＴＲ  ＡＲＰＡＣＶＤＡＲＩ  ＩＫＴＫＱＷＣＤＭＬ  ＰＣＬＥＧＥＧＣＤＬ  ＬＩＮＲＳＧＷＴＣＴ  ＱＰＧＧＲＩＫＴＴＴ  ＶＳ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）
（ＩＩ）アイソタイプ２（ＵｎｉＰｒｏｔ：Ｑ７Ｚ５Ａ７−２、可溶性タンパク質）：
ＭＱＬＬＫＡＬＷＡＬ  ＡＧＡＡＬＣＣＦＬＶ  ＬＶＩＨＡＱＦＬＫＥ  ＧＱＬＡＡＧＴＣＥＩ  ＶＴＬＤＲＤＳＳＱＰ  ＲＲＴＩＡＲＱＴＡＲ  ＣＡＣＲＫＧＱＩＡＧ  ＴＴＲＡＲＰＡＣＶＤ  ＡＲＩＩＫＴＫＱＷＣ  ＤＭＬＰＣＬＥＧＥＧ  ＣＤＬＬＩＮＲＳＧＷ  ＴＣＴＱＰＧＧＲＩＫ  ＴＴＴＶＳ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２）
（ＩＩＩ）アイソタイプ３（ＵｎｉＰｒｏｔ：Ｑ７Ｚ５Ａ７−３）：
ＭＹＨＨＲＥＷＰＡＲ  ＩＩＫＴＫＱＷＣＤＭ  ＬＰＣＬＥＧＥＧＣＤ  ＬＬＩＮＲＳＧＷＴＣ  ＴＱＰＧＧＲＩＫＴＴ  ＴＶＳ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３）
用語“ＦＡＭ１９Ａ５”は、細胞によって自然的に発現するＦＡＭ１９Ａ５の任意の変異体又はアイソタイプを含む。したがって、本明細書に開示された抗体は同種の異なるアイソタイプ（例えば、ヒトＦＡＭ１９Ａ５の各アイソタイプ）と交差反応できるか、又はヒト以外の種のＦＡＭ１９Ａ５（例えば、マウスＦＡＭ１９Ａ５）と交差反応することができる。代案として、抗体はヒトＦＡＭ１９Ａ５に特異的であり得、他の種とは交差反応性を示さないことがある。ＦＡＭ１９Ａ５又はその任意の変異体及びアイソタイプは、それらを自然的に発現する細胞又は組織から単離されたり又は組換え的に生成され得る。ヒトＦＡＭ１９Ａ５を暗号化するポリヌクレオチドはＧｅｎＢａｎｋ受託番号ＢＣ０３９３９６を有し、次の配列を有する：
【００５９】
【表１】
2021514363.tif 000002
【００６０】
用語“ＦＡＭ１９Ａ５タンパク質に対する拮抗剤”は、ＦＡＭ１９Ａ５タンパク質の発現を抑制する全ての拮抗剤のことを指す。このような拮抗剤は、ペプチド、核酸、又は化合物であり得る。より具体的に、拮抗剤は、アンチセンス−オリゴヌクレオチド、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ、ｄｓＲＮＡ、アプタマー、ＦＡＭ１９Ａ５標的化ＰＮＡ（ペプチド核酸）、又はこれらを含むベクターであり得る。一部の実施形態において、拮抗剤は、ＦＡＭ１９Ａ５タンパク質に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合部分であり得る。
【００６１】
用語“抗体（ａｎｔｉｂｏｄｙ）”及び“抗体（ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ）”は当業界の用語であり、本明細書で同じ意味で使用可能であり、抗原に特異的に結合する抗原結合部位を有する分子を指す。本明細書で使われた用語は全抗体及び任意の抗原結合断片（すなわち“抗原結合部分”）又はこれらの単鎖を含む。一部の実施形態において、“抗体”は二硫化物結合によって相互連結された少なくとも２本の重鎖（Ｈ）と２本の軽鎖（Ｌ）を含む糖タンパク質、又はその抗原結合部分を指す。他の実施形態において、“抗体”は単一可変ドメイン、例えばＶＨＨドメインを含む単鎖抗体を指す。各重鎖は重鎖可変領域（ＶＨと略称）と重鎖定常領域とからなる。特定自然発生抗体において、重鎖定常領域は３個のドメインＣＨ１、ＣＨ２及びＣＨ３からなる。特定自然発生抗体において、各軽鎖は軽鎖可変領域（ＶＬと略称）と軽鎖定常領域とからなる。軽鎖定常領域は一つのドメインＣＬからなる。
【００６２】
ＶＨ及びＶＬ領域は、フレームワーク領域（ＦＲ）と称する、より保存される領域が散在している、相補性決定領域（ＣＤＲ）と称する、超可変性の領域にさらに細分化できる。それぞれのＶＨ及びＶＬは３個のＣＤＲ及び４個のＦＲからなり、これらはＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、及びＦＲ４の順にアミノ末端からカルボキシ末端に向かって配列される。重鎖及び軽鎖の可変領域は抗原と相互作用する結合ドメインを含有する。抗体の定常領域は、免疫システムの様々な細胞（例えば、エフェクター細胞）及び伝統補体システムの第１成分（Ｃ１ｑ）を含む宿主組織又は因子と免疫グロブリンの結合を媒介し得る。
【００６３】
用語“Ｋａｂａｔナンバリング”は当業界で認定され、抗体、又はその抗原結合部分の重鎖及び軽鎖可変領域においてアミノ酸残基をナンバリングするシステムを指す。特定態様において、抗体のＣＤＲは、Ｋａｂａｔナンバリングシステムによって決定され得る（例えば、Ｋａｂａｔ  ＥＡ  ＆  Ｗｕ  ＴＴ（１９７１）Ａｎｎ  ＮＹ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  １９０：３８２−３９１  ａｎｄ  Ｋａｂａｔ  ＥＡ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９１）Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ、Ｆｉｆｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，ＵＳ  Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ  ａｎｄ  Ｈｕｍａｎ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，ＮＩＨ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ  Ｎｏ  ９１−３２４２参考）。Ｋａｂａｔナンバリングシステムを用いると、抗体重鎖分子内におけるＣＤＲは典型的にアミノ酸位置３１〜３５（これは、選択的に３５以降に１個又は２個の追加のアミノ酸を含み得る；Ｋａｂａｔナンバリング方式において３５Ａ及び３５Ｂと言及される。）（ＣＤＲ１）、アミノ酸位置５０〜６５（ＣＤＲ２）、及びアミノ酸位置９５〜１０２（ＣＤＲ３）に存在する。Ｋａｂａｔナンバリングシステムを用いると、抗体軽鎖分子内からＣＤＲは典型的にアミノ酸位置２４〜３４（ＣＤＲ１）、アミノ酸位置５０〜５６（ＣＤＲ２）、及びアミノ酸位置８９〜９７（ＣＤＲ３）に存在する。特定の実施形態において、本明細書に開示された抗体のＣＤＲはＫａｂａｔナンバリング方式によって決定されている。
【００６４】
用語“Ｋａｂａｔでのアミノ酸位置ナンバリング”及び“Ｋａｂａｔ位置”又は関連する変形用語は文献（Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ  Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ（１９９１））で抗体編集の重鎖可変ドメイン又は軽鎖可変ドメインに対して使われたナンバリングシステムをいう。このナンバリングシステムを用いると、実際線形アミノ酸配列はより少ない又は追加のアミノ酸を含有することができるが、これは、可変ドメインのＦＷ又はＣＤＲの短縮、又は可変ドメインのＦＷ又はＣＤＲへの挿入に該当する。例えば、重鎖可変ドメインは、Ｈ２の残基５２以降の単一アミノ酸挿入（Ｋａｂａｔによれば残基５２ａ）及び重鎖ＦＷ残基８２以降に挿入された残基（Ｋａｂａｔによれば残基８２ａ、８２ｂ、及び８２ｃなど）を含むことができる（表１Ｂ参照）。
【００６５】
【表２】
2021514363.tif 000003
【００６６】
残基のＫａｂａｔナンバリングは、“標準”Ｋａｂａｔナンバリングされた配列と抗体の配列の相同性の領域で整列によって与えられた抗体に対して決定され得る。Ｃｈｏｔｈｉａは、構造ループの位置を代わりに参照する（Ｃｈｏｔｈｉａ  ａｎｄ  Ｌｅｓｋ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１−９１７（１９８７））。Ｃｈｏｔｈｉａ  ＣＤＲ−Ｈ１ループの端部は、Ｋａｂａｔナンバリング慣例を用いてナンバリングされたとき、ループの長さによってＨ３２〜Ｈ３４の間で変わる（これは、Ｋａｂａｔナンバリング方式がＨ３５ＡとＨ３５Ｂに挿入を位置させるためである；３５Ａも３５Ｂも存在しなければ、ループは３２で終わる；３５Ａだけ存在すれば、ループは３３で終わる；３５Ａと３５Ｂがともに存在すればループは３４で終わる）。ＡｂＭ超可変領域はＫａｂａｔ  ＣＤＲとＣｈｏｔｈｉａ構造ループ間の折衝点を表示し、Ｏｘｆｏｒｄ  ＭｏｌｅｃｕｌａｒのＡｂＭ抗体モデリングソフトウェアによって用いられる。
【００６７】
ＩＭＧＴ（ＩｍＭｕｎｏＧｅｎｅＴｉｃｓ）もＣＤＲを含む免疫グロブリン可変領域に対するナンバリングシステムを提供する。例えば、Ｌｅｆｒａｎｃ，ＭＰ  ｅｔ  ａｌ．，Ｄｅｖ  Ｃｏｍｐ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．２７：５５−７７（２００３）を参照し、これは本明細書に参照として含まれる。ＩＭＧＴナンバリングシステムは５，０００個を越える配列の整列、構造データ、及び超可変ループの特性化に基づており、全種に対して可変領域とＣＤＲ領域を容易に比較する。ＩＭＧＴナンバリングスキマーによれば、ＶＨ−ＣＤＲ１は位置２６〜３５にあり、ＶＨ−ＣＤＲ２は位置５１〜５７にあり、ＶＨ−ＣＤＲ３は位置９３〜１０２にあり、ＶＬ−ＣＤＲ１は位置２７〜３２にあり、ＶＬ−ＣＤＲ２は位置５０〜５２にあり、そしてＶＬ−ＣＤＲ３は位置８９〜９７にある。
【００６８】
本明細書に開示された全ての重鎖定常領域アミノ酸位置に対して、ナンバリングは、配列化された最初のヒトＩｇＧ１である骨髄腫タンパク質ＥＵのアミノ酸配列を説明した文献（Ｅｄｅｌｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９６９，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ６３（１）：７８−８５）に最初に提示されたＥＵインデックスに従う。ＥｄｅｌｍａｎなどのＥＵインデックスはまた、文献（Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，１９９１，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ  Ｅｄ，Ｕｎｉｔｅｄ  Ｓｔａｔｅｓ  Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ）にも提示される。したがって、用語“Ｋａｂａｔに提示されたＥＵインデックス”又は“ＫａｂａｔのＥＵインデックス”及び“Ｋａｂａｔに提示されたＥＵインデックスによる位置”及び関連する変形用語は、Ｋａｂａｔ  １９９１に提示のＥｄｅｌｍａｎなどのヒトＩｇＧ１ＥＵ抗体に基づく残基ナンバリングシステムのことをいう。
【００６９】
可変ドメイン（重鎖及び軽鎖の両方）及び軽鎖定常領域アミノ酸配列に用いられたナンバリングシステムは、Ｋａｂａｔ  １９９１に提示されたものである。
【００７０】
抗体は、免疫グロブリン分子の任意のタイプ（例えば、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＡ又はＩｇＹ）、任意の類型（例えば、ＩｇＤ、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１又はＩｇＡ２）、又は任意の亜型（例えば、ヒトにおいてＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３及びＩｇＧ４；及びマウスにおいてＩｇＧ１、ＩｇＧ２ａ、ＩｇＧ２ｂ及びＩｇＧ３）を有することができる。免疫グロブリン、例えばＩｇＧ１はいくつかのアロタイプで存在し、これらは最大でいくつかのアミノ酸が互いに異なる。本明細書に開示された抗体は、通常知られたアイソタイプ、類型、亜型、又はアロタイプのいずれかから由来し得る。特定の実施形態において、本明細書に開示された抗体はＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、又はＩｇＧ４亜型又はこれらの任意のハイブリッドである。特定の実施形態において、抗体はヒトＩｇＧ１亜型又はヒトＩｇＧ２又はヒトＩｇＧ４亜型のものである。
【００７１】
“抗体”は、例えば、自然発生及び非自然発生抗体；単クローン性及び多クローン性抗体；キメラ及びヒト化された抗体；ヒト及び非ヒト抗体、全体合成抗体；単鎖抗体；単一特異的抗体；多重特異的抗体（二重特異的抗体を含む）；２本の重鎖と２本の軽鎖分子を含むテトラマー抗体；抗体軽鎖モノマー；抗体重鎖モノマー；抗体軽鎖ダイマ−；抗体重鎖ダイマ−；抗体軽鎖−抗体重鎖対；イントラボディー；ヘテロコンジュゲート抗体；１価抗体；単鎖抗体；ラクダ化（ｃａｍｅｌｉｚｅｄ）抗体；アフィボディー（ａｆｆｙｂｏｄｉｅｓ）；抗イディオタイプ（抗Ｉｄ）抗体（例えば、抗抗Ｉｄ抗体を含む）、及び十分に抗原結合可能な単一モノマー可変抗体ドメイン（例えば、ＶＨドメイン又はＶＬドメイン）で構成された結合分子を含む単一−ドメイン抗体（ｓｄＡｂ）を含む（Ｈａｒｍｅｎ  Ｍ．Ｍ．ａｎｄ  Ｈａａｒｄ  Ｈ．Ｊ．Ａｐｐｌ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．７７（１）：１３−２２（２００７））。
【００７２】
本明細書において用語“抗体の抗原結合部分”又は“抗体の抗原結合断片”とは、抗原（例えば、ヒトＦＡＭ１９Ａ５）に特異的に結合する能力を保有した抗体の一つ以上の断片を指す。このような“断片”は、例えば、約８個〜約１，５００個のアミノ酸長、好適には約８個〜約７４５個のアミノ酸長、より好適には約８個〜約３００個、約８個〜約２００個のアミノ酸長、又は約１０個〜約５０個、又は１００個のアミノ酸長である。抗体の抗原結合機能は全長抗体の断片によって行われ得るということが明らかにされた。抗体、例えば本明細書に開示の抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の“抗原結合部分”に含まれる結合断片の例は、（ｉ）ＶＬ、ＶＨ、ＣＬ、及びＣＨ１ドメインで構成された１価断片であるＦａｂ断片；（ｉｉ）ヒンジ領域において二硫化物ブリッジによって連結された２個のＦａｂ断片を含む２価断片であるＦ（ａｂ’）２断片；（ｉｉｉ）ＶＨ及びＣＨ１ドメインで構成されたＦｄ断片；（ｉｖ）抗体の単一腕のＶＬ及びＶＨドメインで構成されたＦｖ断片、及び二硫化物−連結されたＦｖｓ（ｓｄＦｖ）；（ｖ）ＶＨドメインで構成されたｄＡｂ断片（Ｗａｒｄ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８９）Ｎａｔｕｒｅ  ３４１：５４４−５４６）；及び（ｖｉ）単離した相補性決定領域（ＣＤＲ）又は（ｖｉｉ）合成リンカーによって選択的につながり得る２以上の単離したＣＤＲの組合せを含む。また、Ｆｖ断片の２ドメインであるＶＬとＶＨは別個の遺伝子によってコードされるが、これらは合成リンカーによって、組換え方法を用いて、つながり得、これによってＶＬとＶＨ領域が対をなして１価分子を形成した単一タンパク質鎖（単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）という。）になり得る；（例えば、Ｂｉｒｄ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８８）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４２：４２３−４２６；及びＨｕｓｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８８）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８５：５８７９−５８８３参考）。このような単鎖抗体もまた、抗体の“抗原結合部分”に含まれる。これらの抗体断片は当業者に公知の従来の技術によって得られ、断片は無損傷抗体と同じ方式で有用性に対してスクリーニングされる。抗原結合部分は組換えＤＮＡ技術によって、又は無損傷免疫グロブリンの酵素又は化学切断によって生成され得る。
【００７３】
本明細書において用語“可変領域”又は“可変ドメイン”は当業界で通常同じ意味で使用される。可変領域は典型的に抗体の一部分、一般的に軽鎖又は重鎖の一部分、典型的に成熟した重鎖において約アミノ末端１１０〜１２０個アミノ酸及び成熟した軽鎖において約９０〜１１５個アミノ酸を指し、抗体のうち、配列が広範囲に互いに異なり、特定抗原に対する特定抗体の結合及び特異性と関連して用いられる。配列変動性は相補性決定領域（ＣＤＲ）と呼ばれる領域に集中し、可変ドメインにおいてより高度に保存された領域はフレームワーク領域（ＦＲ）と呼ばれる。
【００７４】
特定メカニズムや理論に拘わらず、軽鎖及び重鎖のＣＤＲは抗原と抗体の相互作用及び特異性を主に担当するものと推定される。特定の実施形態において、可変領域はヒト可変領域である。特定の実施形態において、可変領域は、齧歯類又はミューリンＣＤＲとヒトフレームワーク領域（ＦＲ）を含む。特定の実施形態において、可変領域は霊長類（例えば、非ヒト霊長類）可変領域である。特定の実施形態において、可変領域は齧歯類又はミューリンＣＤＲと霊長類（例えば、非ヒト霊長類）フレームワーク領域（ＦＲ）を含む。
【００７５】
本明細書において、用語“重鎖”（ＨＣ）は、抗体と関連して用いられた場合、定常ドメインのアミノ酸配列に基づいて、任意の異なるタイプ、例えば、アルファ（α）、デルタ（δ）、エプシロン（ε）、ガンマ（γ）及びミュー（μ）を指すことができ、これらはそれぞれＩｇＧの亜型、例えばＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３及びＩｇＧ４を含み、抗体のＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ及びＩｇＭ類型を発生させる。
【００７６】
本明細書において、用語“軽鎖”（ＬＣ）は、抗体と関連して用いられた場合、定常ドメインのアミノ酸配列に基づいて任意の互いに異なるタイプ、例えばカッパ（κ）及びラムダ（λ）を指すことができる。軽鎖アミノ酸配列は当業界に公知されている。特定の実施形態において、軽鎖はヒト軽鎖である。
【００７７】
用語“ＶＬ”及び“ＶＬドメイン”は同じ意味で使用され、抗体の軽鎖可変領域のことを指す。
【００７８】
用語“ＶＨ”及び“ＶＨドメイン”は同じ意味で使用され、抗体の重鎖可変領域のことを指す。
【００７９】
本明細書において、用語“定常領域”又は“定常ドメイン”は同じ意味で使用可能であり、当業界における通常の意味を有する。定常ドメインは抗体部分であり、例えば抗体と抗原の結合には直接関係しないが、Ｆｃ受容体との相互作用のような様々なエフェクター機能を示し得る軽鎖及び／又は重鎖のカルボキシ末端部分である。免疫グロブリン分子の定常領域は一般に、免疫グロブリン可変ドメインに比べてより保存されたアミノ酸配列を有する。
【００８０】
“Ｆｃ領域”（断片決定化可能な領域）又は“Ｆｃドメイン”又は“Ｆｃ”は、免疫システムの様々な細胞（例えば、エフェクター細胞）上に位置したＦｃ受容体又は伝統補体システムの第１成分（Ｃ１ｑ）との結合を含み、宿主組織又は因子と免疫グロブリンの結合を媒介する抗体の重鎖のＣ末端領域をいう。したがって、Ｆｃ領域は、第１定常領域免疫グロブリンドメイン（例えばＣＨ１又はＣＬ）以外の抗体の定常領域を含む。ＩｇＧ、ＩｇＡ及びＩｇＤ抗体イソタイプにおいて、Ｆｃ領域は、抗体の両重鎖の第２（ＣＨ２）及び第３（ＣＨ３）定常ドメインから由来した２個の同じタンパク質断片を含む；ＩｇＭ及びＩｇＥ  Ｆｃ領域は、各ポリペプチド鎖に３個の重鎖定常ドメイン（ＣＨドメイン２〜４）を含む。ＩｇＧの場合、Ｆｃ領域は、免疫グロブリンドメインＣγ２及びＣγ３、並びにＣγ１とＣγ２との間のヒンジを含む。免疫グロブリン重鎖のＦｃ領域の境界は様々であるが、ヒトＩｇＧ重鎖Ｆｃ領域は一般に、位置Ｃ２２６又はＰ２３０にあるアミノ酸残基（又は、これら両アミノ酸間のアミノ酸）から重鎖のカルボキシ末端まで伸びたものに限定され、ここで、ナンバリングはＫａｂａｔにおけるようなＥＵインデックスに従う。ヒトＩｇＧ  Ｆｃ領域のＣＨ２ドメインは、約アミノ酸２３１から約アミノ酸３４０まで延長され、ＣＨ３ドメインはＦｃ領域においてＣｍドメインのＣ末端側に位置するが、これはＩｇＧの約アミノ酸３４１から約アミノ酸４４７まで延長される。Ｆｃ領域は、任意のアロタイプ変異体を含む自生配列Ｆｃ、又は変異体Ｆｃ（例えば、非自然発生Ｆｃ）であり得る。また、Ｆｃは単離した状態の領域を指すか、或いは“Ｆｃ融合タンパク質”（例えば、抗体又は免疫癒着（ｉｍｍｕｎｏａｄｈｅｓｉｏｎ））とも呼ばれる、“Ｆｃ領域を含む結合タンパク質”のような含Ｆｃタンパク質ポリペプチドと関係している領域のことを指す。
【００８１】
“自生配列Ｆｃ領域”又は“自生配列Ｆｃ”は自然で発見されたＦｃ領域のアミノ酸配列と同じアミノ酸配列を含む。自生配列ヒトＦｃ領域は、自生配列ヒトＩｇＧ１Ｆｃ領域；自生配列ヒトＩｇＧ２Ｆｃ領域；自生配列ヒトＩｇＧ３Ｆｃ領域；及び自生配列ヒトＩｇＧ４Ｆｃ領域だけでなく、これらの自然発生変異体を含む。自生配列ＦｃはＦｅの様々なアロタイプを含む（例えば、Ｊｅｆｆｅｒｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，（２００９）ｍＡｂｓ  １：１；Ｖｉｄａｒｓｓｏｎ  Ｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｆｒｏｎｔ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．５：５２０（２０１４年１０月２０日オンライン公開）参照）
“Ｆｃ受容体”又は“ＦｃＲ”は、免疫グロブリンのＦｃ領域に結合する受容体である。ＩｇＧ抗体に結合するＦｃＲはＦｃγファミリーの受容体を含み、これらの受容体の対立形質変異体及び他の方式でスプライシングされた形態を含む。Ｆｃγファミリーは、３個の活性化受容体（マウスにおいてＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩＩ、及びＦｃγＲＩＶ；ヒトにおいてＦｃγＲＩＡ、ＦｃγＲＩＩＡ、及びＦｃγＲＩＩＩＡ）と一つの抑制受容体（ＦｃγＲＩＩＢ）で構成される。ヒトＩｇＧ１は大部分のヒトＦｃ受容体と結合し、最も強いＦｃエフェクター機能を導出する。ヒトＩｇＧ１が結合する活性化Ｆｃ受容体の種類に対してはミューリンＩｇＧ２ａと同等であると見なされる。一方、ヒトＩｇＧ４は最小限のＦｃエフェクター機能を導出する（Ｖｉｄａｒｓｓｏｎ  Ｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｆｒｏｎｔ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．５：５２０（２０１４年１０月２０日オンライン公開）参照）。
【００８２】
定常領域は一つ以上のエフェクター機能を除去するために、例えば組換え技術によって操作され得る。“エフェクター機能”は、抗体Ｆｃ領域とＦｃ受容体又はリガンドの相互作用、又はこれに起因する生化学的事例（ｅｖｅｎｔ）のことを指す。例示的な“エフェクター機能”は、Ｃ１ｑ結合、補体依存性細胞毒性（ＣＤＣ）、Ｆｃ受容体結合、ＦｃγＲ媒介エフェクター機能、例えばＡＤＣＣ及び抗体依存性細胞媒介飽食作用（ＡＤＣＰ）、及び細胞表面受容体（例えば、Ｂ細胞受容体；ＢＣＲ）の下向き調節を含む。このようなエフェクター機能は一般に、Ｆｃ領域が結合ドメイン（例えば、抗体可変ドメイン）と組み合わせられることを必要とする。したがって、用語“Ｆｃ機能のない定常領域”は、Ｆｃ領域によって媒介された一つ以上のエフェクター機能が減少した或いはない定常領域を含む。
【００８３】
抗体のエフェクター機能は個別の接近法によって減少又は回避され得る。抗体のエフェクター機能は、Ｆｃ領域を欠如した抗体断片（例えば、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）、又はモノマーＶＨ又はＶＬドメインで構成されたｓｄＡｂ）を用いて減少又は回避し得る。あるいは、Ｆｃ領域の他の価値ある属性（例えば、延長された半減期及びヘテロダイマ−化）は保有しながら抗体のエフェクター機能を減少させるために、いわゆる無グリコシル化（ａｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｅｄ）抗体がＦｃ領域で特定残基に連結された糖を除去することによって生成され得る。無グリコシル化抗体は、例えば、糖の付着した残基を欠失又は変更することによって、糖を酵素的に除去することによって、グリコシル化抑制剤の存在の下に培養された細胞で抗体を生成することによって、又はタンパク質をグリコシル化できない細胞（例えば、バクテリア宿主細胞）で抗体を発現することによって生成され得る（例えば、米国特許公開第２０１２０１００１４０号参考）。他の接近法は、エフェクター機能の減少したＩｇＧ亜型からのＦｃ領域を利用することであるが、例えば、ＩｇＧ２及びＩｇＧ４抗体はＩｇＧ１及びＩｇＧ３に比べてより低いレベルのＦｃエフェクター機能を有することを特徴とする。Ｆｃ部分のＣＨ２ドメインにおいてヒンジ領域に最も近接している残基が抗体のエフェクター機能を担当し、それは先天免疫システムのエフェクター細胞上でＣ１ｑ（補体）及びＩｇＧ−Ｆｃ受容体（ＦｃγＲ）に対して相当重なった結合部位を含有する（Ｖｉｄａｒｓｓｏｎ  Ｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｆｒｏｎｔ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．５：５２０（２０１４年１０月２０日オンライン公開））。したがって、Ｆｃエフェクター機能が減少した又はない抗体は、例えば、ＩｇＧ４イソタイプのＩｇＧ抗体からのＣＨ２ドメインとＩｇＧ１イソタイプのＩｇＧ抗体からのＣＨ３ドメインを含むキメラＦｃ領域、又はＩｇＧ２からのヒンジ領域とＩｇＧ４からのＣＨ２領域を含むキメラＦｃ領域（例えば、Ｌａｕ  Ｃ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９１：４７６９−４７７７（２０１３）参考）、又は変更されたＦｃエフェクター機能、例えばＦｃ機能が減少した又はない突然変異を有するＦｃ領域を生成することによって製造され得る。突然変異を有するかかるＦｃ領域は、当業界に公知されている。例えば、米国特許公開第２０１２０１００１４０号とそこに引用された米国出願及びＰＣＴ出願、及びＡｎ  ｅｔ  ａｌ．，ｍＡｂｓ  １：６，５７２−５７９（２００９）を参照し、これらの開示はその全体が本明細書に参照として含まれる。
【００８４】
“ヒンジ”、“ヒンジドメイン”又は“ヒンジ領域”又は“抗体ヒンジ領域”は、ＣＨ１ドメインをＣＨ２ドメインと結合し、ヒンジの上部、中央、及び下部部分を含む重鎖定常領域のドメインのことを指す（Ｒｏｕｘ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ  １９９８  １６１：４０８３）。ヒンジは、抗体の結合領域とエフェクター領域間に可撓性のレベルを変化させ、また２本の重鎖定常領域間に分子間二硫化物結合のための部位を提供する。本明細書に開示されたヒンジは、全てのＩｇＧイソタイプに対してＧｌｕ２１６から始まってＧｌｙ２３７で終わる（Ｒｏｕｘ  ｅｔ  ａｌ．，１９９８  Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １６１：４０８３）。野生型ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３及びＩｇＧ４ヒンジの配列が当業界に公知されている（例えば、Ｋａｂａｔ  ＥＡ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９１）Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ、Ｆｉｆｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，ＵＳ  Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ  ａｎｄ  Ｈｕｍａｎ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，ＮＩＨ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ  Ｎｏ  ９１−３２４２；Ｖｉｄａｒｓｓｏｎ  Ｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｆｒｏｎｔ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．５：５２０（２０１４年１０月２０日オンライン公開）参照）。
【００８５】
用語“ＣＨ１ドメイン”は、重鎖定常ドメインにおいて可変ドメインとヒンジを連結する重鎖定常領域のことを指す。本明細書に開示されたＣＨ１ドメインはＡ１１８から始まってＶ２１５で終わる。用語“ＣＨ１ドメイン”は、野生型ＣＨ１ドメインの他に、その自然的に存在する変異体（例えば、アロタイプ）も含む。（野生型及びアロタイプを含む）ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、及びＩｇＧ４のＣＨ１ドメイン配列は当業界に公知されている（例えば、Ｋａｂａｔ  ＥＡ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９１）（同上）及びＶｉｄａｒｓｓｏｎ  Ｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｆｒｏｎｔ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．５：５２０（２０１４年１０月２０日オンライン公開）参照）。例示的なＣＨ１ドメインは、抗体の生物学的活性、例えば半減期を変形する突然変異を有するＣＨ１ドメインを含み、これらは、例えば米国特許公開第２０１２０１００１４０号及びそこに引用された米国特許及び公報とＰＣＴ公報に開示される。
【００８６】
用語“ＣＨ２ドメイン”は、重鎖定常ドメインにおいてヒンジとＣＨ３ドメインを連結する重鎖定常領域のことを指す。本明細書に開示されたＣＨ２ドメインはＰ２３８から始まってＫ３４０で終わる。用語“ＣＨ２ドメイン”は、野生型ＣＨ２ドメインの他に、その自然的に存在する変異体（例えば、アロタイプ）も含む。（野生型及びアロタイプを含む）ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、及びＩｇＧ４のＣＨ２ドメイン配列は当業界に公知されている（例えば、Ｋａｂａｔ  ＥＡ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９１）（同上）及びＶｉｄａｒｓｓｏｎ  Ｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｆｒｏｎｔ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．５：５２０（２０１４年１０月２０日オンライン公開）参照）。例示的なＣＨ２ドメインは、抗体の生物学的活性、例えば半減期及び／又は減少したＦｃエフェクター機能を変形する突然変異を有するＣＨ２ドメインを含み、これらは、例えば米国特許公開第２０１２０１００１４０号及びそこに引用された米国特許及び公報とＰＣＴ公報に開示される。
【００８７】
用語“ＣＨ３ドメイン”は、重鎖定常ドメインにおいてＣＨ２ドメインに対してＣ末端である重鎖定常領域のことを指す。本明細書に開示されたＣＨ３ドメインはＧ３４１から始まってＫ４４７で終わる。用語“ＣＨ３ドメイン”は野生型ＣＨ３ドメインの他に、その自然的に存在する変異体（例えば、アロタイプ）も含む。（野生型及びアロタイプを含む）ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、及びＩｇＧ４のＣＨ３ドメイン配列は当業界に公知されている（例えば、Ｋａｂａｔ  ＥＡ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９１）（同上）及びＶｉｄａｒｓｓｏｎ  Ｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｆｒｏｎｔ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．５：５２０（２０１４年１０月２０日オンライン公開）参照）。例示的なＣＨ３ドメインは、抗体の生物学的活性、例えば半減期を変形する突然変異を有するＣＨ３ドメインを含み、これらは、例えば米国特許公開第２０１２０１００１４０号及びそこに引用された米国特許及び公報とＰＣＴ公報に開示される。
【００８８】
本明細書において用語“アイソタイプ”は、重鎖定常領域遺伝子によって暗号化される抗体類型（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＭ、ＩｇＡ１、ＩｇＡ２、ＩｇＤ、及びＩｇＥ抗体）を指す。
【００８９】
用語“アロタイプ”は、いくつかのアミノ酸が異なる特定のアイソタイプグループ内で自然発生した変異体のことを指す（例えば、Ｊｅｆｆｅｒｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，（２００９）ｍＡｂｓ  １：１参照）。本明細書に開示された抗体は任意のアロタイプを有することができる。ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、及びＩｇＧ４のアロタイプは当業界に公知されている（例えば、Ｋａｂａｔ  ＥＡ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９１）（同上）；Ｖｉｄａｒｓｓｏｎ  Ｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｆｒｏｎｔ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．５：５２０（２０１４年１０月２０日オンライン公開）；及びＬｅｆｒａｎｃ  ＭＰ，ｍＡｂｓ  １：４，１−７（２００９）参照）。
【００９０】
用語“抗原を認識する抗体”及び“抗原に特異的な抗体”は、用語“抗原に特異的に結合する抗体”と共に本明細書において同じ意味で使われる。
【００９１】
本明細書において、用語“単離した抗体”は、異なる抗原特異性を有する他の抗体が実質的にない抗体を指す。例えば、ＦＡＭ１９Ａ５に特異的に結合する単離した抗体は、ＦＡＭ１９Ａ５以外の抗原に特異的に結合する抗体が実質的に存在しない。しかし、ＦＡＭ１９Ａ５のエピトープに特異的に結合する単離した抗体は、異なる種からの他のＦＡＭ１９Ａ５タンパク質に対して交差反応性を有することができる。
【００９２】
“結合親和性”は一般に、分子（例えば、抗体）の単一結合部位とその結合パートナー（例えば、抗原）間の非共有相互作用の全体の合計強度を指す。特に言及がない限り、用語“結合親和性”は、結合対のメンバー（例えば、抗体と抗原）間の１：１相互作用を反映する固有の結合親和性のことを指す。パートナーＹに対する分子Ｘの親和性は一般に解離定数（ＫＤ）によって表示され得る。親和性は、制限されないが、平衡解離定数（ＫＤ）、及び平衡結合定数（ＫＡ）を含む、当業界に公知の多数の方式で測定及び／又は表示され得る。ＫＤは、ｋｏｆｆ／ｋｏｎの商から計算され、モル濃度（Ｍ）で表示され、ＫＡはｋｏｎ／ｋｏｆｆの商から計算される。ｋｏｎは、例えば抗原に対する抗体の結合速度定数を指し、ｋｏｆｆは、例えば、抗原に対する抗体の解離速度定数を指す。ｋｏｎ及びｋｏｆｆは免疫分析（例えば、酵素結合免疫吸着分析（ＥＬＩＳＡ））、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）又は力学的排除分析（ＫｉｎＥｘＡ）のような、当業者に公知の技術によって決定され得る。
【００９３】
本明細書において、用語“特異的に結合する”、“特異的に認識する”、“特異的結合”、“選択的結合”及び“選択的に結合する”とは、抗体と関連して類似の用語であり、抗原（例えば、エピトープ又は免疫複合体）に結合する分子（例えば、抗体）をいい、このような結合は当業者にとって理解される通りである。抗原に特異的に結合する分子は、例えば、免疫分析、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）  ＫｉｎＥｘＡ  ３０００機器（Ｓａｐｉｄｙｎｅ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ，Ｂｏｉｓｅ，ＩＤ）、又は当業界に公知の他の分析によって決定されたとき、通常、より低い親和性で他のペプチド又はポリペプチドに結合し得る。特定の実施形態において、抗原に特異的に結合する分子は、この分子が他の抗原に結合する時のＫＡに比べて少なくとも２ｌｏｇｓ、２．５ｌｏｇｓ、３ｌｏｇｓ、４ｌｏｇｓ又はそれ以上のＫＡでその抗原に結合する。
【００９４】
抗体は典型的に１０−５〜１０−１１Ｍ以下の解離定数（ＫＤ）によって反映される、高い親和性で同族抗原に特異的に結合する。約１０−４Ｍを超えるＫＤは、通常、非特異的結合を示すと見なされる。抗原と“特異的に結合する”抗体は、高い親和性で抗原及び実質的に同じ抗原に結合する抗体のことを指し、これは、例えば定められた抗原を用いて免疫分析（例えば、ＥＬＩＳＡ）又はＢＩＡＣＯＲＥ  ２０００機器で表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）技術によって決定された時、１０−７Ｍ以下、好ましくは１０−８Ｍ以下、より好ましくは１０−９Ｍ以下、及び最も好ましくは１０−８Ｍ〜１０−１０Ｍ以下のＫＤを有するものを意味し、これは、関連していない抗原には高い親和性で結合しない。
【００９５】
本明細書において、用語“抗原”は、任意の天然又は合成免疫原性物質、例えばタンパク質、ペプチド又はハプテンのことを指す。抗原はＦＡＭ１９Ａ５又はその断片であり得る。
【００９６】
本明細書において、“エピトープ”は当業界の用語であり、抗体が特異的に結合し得る抗原の局所化された領域のことを指す。エピトープは、例えばポリペプチドの連続（ｃｏｎｔｉｇｕｏｕｓ）アミノ酸（線形又は連続エピトープ）であり得るか、又はエピトープは、例えばポリペプチド又はポリペプチドの２以上の非連続領域が合わせられたもの（立体形態的、非線形、不連続、又は非連続エピトープ）であり得る。連続アミノ酸から形成されたエピトープは、いつもそうであるわけではないが、典型的に変性溶媒に露出時に保有され、３次フォルディングによって形成されたエピトープは典型的に変性溶媒で処理時に喪失される。エピトープは典型的に独特の空間的立体形態において少なくとも３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、又は２０個のアミノ酸を含む。エピトープが与えられた抗体によって結合したものを決定する方法（すなわち、エピトープマッピング）が当業界に公知されており、これは、例えば免疫ブロット及び免疫沈殿分析を含み、例えばＦＡＭ１９Ａ５からの重複又は連続ペプチドが与えられた抗体（例えば、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体）との反応性に対して試験される。エピトープの空間的立体形態を決定する方法は、当業界の技術及び本明細書に開示されたものを含み、例えば、Ｘ線結晶学、２次元核磁気共鳴及びＨＤＸ−ＭＳを含む（例えば、Ｅｐｉｔｏｐｅ  Ｍａｐｐｉｎｇ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ  ６６，Ｇ．Ｅ．Ｍｏｒｒｉｓ，Ｅｄ．（１９９６）参照）。
【００９７】
特定の実施形態において、抗体が結合したエピトープは、例えばＮＭＲ分光法、Ｘ線回折結晶学研究、ＥＬＩＳＡ分析、質量分光法と結合した水素／重水素交換（例えば、液体クロマトグラフィー電子噴霧質量分光法）、アレイ基盤オリゴ−ペプチドスキャニング分析、及び／又は突然変異誘発マッピング（例えば、部位指定突然変異誘発マッピング）によって決定され得る。Ｘ線結晶学の場合、結晶化は当業界に公知の方法のいずれかを用いて達成され得る（例えば、Ｇｉｅｇｅ  Ｒ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９４）Ａｃｔａ  Ｃｒｙｓｔａｌｌｏｇｒ  Ｄ  Ｂｉｏｌ  Ｃｒｙｓｔａｌｌｏｇｒ  ５０（Ｐｔ４）：３３９−３５０；ＭｃＰｈｅｒｓｏｎ  Ａ（１９９０）Ｅｕｒ  Ｊ  Ｂｉｏｃｈｅｍ  １８９：１−２３；Ｃｈａｙｅｎ  ＮＥ（１９９７）Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ５：１２６９−１２７４；ＭｃＰｈｅｒｓｏｎ  Ａ（１９７６）Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  ２５１：６３００−６３０３）。抗体：抗原結晶は、公知のＸ線回折技術を用いて研究でき、Ｘ−ＰＬＯＲ（Ｙａｌｅ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，１９９２，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｓｉｍｕｌａｔｉｏｎｓ，Ｉｎｃ．によって配布；例えば、Ｍｅｔｈ  Ｅｎｚｙｍｏｌ（１９８５）ｖｏｌｕｍｅｓ  １１４  ＆  １１５，ｅｄｓ  Ｗｙｃｋｏｆｆ  ＨＷ  ｅｔ  ａｌ．，；米国特許公開第２００４／００１４１９４号参照）、及びＢＵＳＴＥＲ（Ｂｒｉｃｏｇｎｅ  Ｇ（１９９３）Ａｃｔａ  Ｃｒｙｓｔａｌｌｏｇｒ  Ｄ  Ｂｉｏｌ  Ｃｒｙｓｔａｌｌｏｇｒ  ４９（Ｐｔ１）：３７−６０；Ｂｒｉｃｏｇｎｅ  Ｇ（１９９７）Ｍｅｔｈ  Ｅｎｚｙｍｏｌ  ２７６Ａ：３６１−４２３，ｅｄ  Ｃａｒｔｅｒ  ＣＷ；Ｒｏｖｅｒｓｉ  Ｐ  ｅｔ  ａｌ．，（２０００）Ａｃｔａ  Ｃｒｙｓｔａｌｌｏｇｒ  Ｄ  Ｂｉｏｌ  Ｃｒｙｓｔａｌｌｏｇｒ  ５６（Ｐｔ  １０）：１３１６−１３２３）のようなコンピュータソフトウェアを用いて研究できる。突然変異誘発マッピング研究は、当業者に公知の任意の方法で行うことができる。アラニンスキャニング突然変異誘発技術を含む突然変異誘発技術に関する説明は、例えばＣｈａｍｐｅ  Ｍ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９５）Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  ２７０：１３８８−１３９４及びＣｕｎｎｉｎｇｈａｍ  ＢＣ  ＆  Ｗｅｌｌｓ  ＪＡ（１９８９）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４４：１０８１−１０８５を参照する。
【００９８】
用語“エピトープマッピング”は、抗体−抗原認識に対する分子決定の確認過程を指す。
【００９９】
２つ以上の抗体と関連して用語“同じエピトープに結合する”とは、与えられた方法によって決定された時、抗体がアミノ酸残基の同じセグメントに結合するということを意味する。抗体が本明細書に開示の抗体と“ＦＡＭ１９Ａ５上の同じエピトープ”に結合するか否かを決定する技術は、エピトープマッピング方法、例えば、エピトープの原子分解能を提供する抗原：抗体複合体の結晶のＸ線分析及び水素／重水素交換質量分光法（ＨＤＸ−ＭＳ）を含む。他の方法は、抗体と抗原断片又は抗原の突然変異された変異体の結合をモニタリングし、ここで、抗原配列内でアミノ酸残基の変形による結合の損失が主にエピトープ成分の表示として見なされる。これに加えて、エピトープマッピング用コンピュータ組合せ方法が用いられてもよい。これらの方法は組合せファージディスプレイペプチドライブラリーから特定の短いペプチドを親和性単離できる関心抗体の能力に依存する。同じＶＨ及びＶＬ又は同じＣＤＲ１、２及び３配列を有する抗体は同じエピトープに結合すると予想される。
【０１００】
“標的との結合に対して他の抗体と競合する”抗体は、残り抗体と標的の結合を（部分的に又は完全に）抑制する抗体を指す。２つの抗体が標的との結合に対して互いに競合するか否か、すなわち、一つの抗体がもう一つの抗体と標的の結合を抑制するか否かと抑制する程度は、公知の競合実験によって決定され得る。特定の実施形態において、抗体は他の抗体と標的の結合に対して競合し、この結合を少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％又は１００％まで抑制する。抑制又は競合のレベルは、抗体が“遮断抗体”（すなわち、標的とまずインキュベーションされた低温抗体）であるか否かによって異なり得る。競合分析は、例えば、Ｅｄ  Ｈａｒｌｏｗ  ａｎｄ  Ｄａｖｉｄ  Ｌａｎｅ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂ  Ｐｒｏｔｏｃ；２００６；ｄｏｉ：１０．１１０１／ｐｄｂｐｒｏｔ  ４２７７又はＥｄ  Ｈａｒｌｏｗ  ａｎｄ  Ｄａｖｉｄ  Ｌａｎｅによる“Ｕｓｉｎｇ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ”（Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，ＮＹ，ＵＳＡ１９９９）の第１１章に説明された通りに行われ得る。競合抗体は、同じエピトープ、重複エピトープ又は隣接エピトープ（例えば、立体障害によって証明されたとおり）に結合する。
【０１０１】
他の競合結合分析は、固体相直接又は間接放射性免疫分析（ＲＩＡ）、固体相直接又は間接酵素免疫分析（ＥＩＡ）、サンドウィッチ競合分析（Ｓｔａｈｌｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ  ９：２４２（１９８３）参照）；固体相直接ビオチン−アビジンＥＩＡ（Ｋｉｒｋｌａｎｄ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３７：３６１４（１９８６）参照）；固体相直接標識化分析、固体相直接標識化サンドウィッチ分析（Ｈａｒｌｏｗ  ａｎｄ  Ｌａｎｅ，Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｐｒｅｓｓ（１９８８）参照）；１−１２５標識を使用した固体相直接標識ＲＩＡ（Ｍｏｒｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．２５（１）：７（１９８８）参照）；固体相直接ビオチン−アビジンＥＩＡ（Ｃｈｅｕｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｖｉｒｏｌｏｇｙ  １７６：５４６（１９９０））；及び直接標識化ＲＩＡ（Ｍｏｌｄｅｎｈａｕｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃａｎｄ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３２：７７（１９９０））を含む。
【０１０２】
“二重特異的”又は“二重機能性抗体”は、２つの異なる重鎖／軽鎖対と２つの異なる結合部位を有する人工ハイブリッド抗体である。二重特異的抗体はハイブリドーマの融合又はＦａｂ’断片の連結を含む様々な方法によって生成され得る（例えば、Ｓｏｎｇｓｉｖｉｌａｉ  ＆  Ｌａｃｈｍａｎｎ，Ｃｌｉｎ．Ｅｘｐ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．７９：３１５−３２１（１９９０）；Ｋｏｓｔｅｌｎｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４８，１５４７−１５５３（１９９２）参照）。
【０１０３】
本明細書において、用語“単クローン性抗体”は、特定エピトープに対して単一結合特異性及び親和性を示す抗体又は全ての抗体が特定エピトープに対して単一結合特異性及び親和性を示す抗体の組成物を指す。したがって、用語“ヒト単クローン性抗体”は、単一結合特異性を示し、ヒトジャームライン（ｇｅｒｍｌｉｎｅ）免疫グロブリン配列から由来した可変及び選択的定常領域を有する抗体又は抗体組成物をいう。一部の実施形態において、ヒト単クローン性抗体は、遺伝子導入非ヒト動物、例えば不滅化細胞に融合されたヒト重鎖導入遺伝子と軽鎖導入遺伝子を含むゲノムを有する、遺伝子導入マウスから得られたＢ細胞を含むハイブリドーマによって生成される。
【０１０４】
本明細書において、用語“組換えヒト抗体”は、（ａ）ヒト免疫グロブリン遺伝子に対して遺伝子導入或いは染色体導入（ｔｒａｎｓｃｈｒｏｍｏｓｏｍａｌ）した動物（例えば、マウス）から単離した抗体又はこれによって製造されたハイブリドーマ、（ｂ）抗体を発現するように形質転換された宿主細胞から、例えばトランスフェクトーマ（ｔｒａｎｓｆｅｃｔｏｍａ）から単離した抗体、（ｃ）組換え、組合せヒト抗体ライブラリーから単離した抗体、及び（ｄ）他のＤＮＡ配列に対するヒト免疫グロブリン遺伝子配列をスプライシングを伴う任意の他の手段によって製造、発現、生成又は単離した抗体のような、組換え手段によって製造、発現、生成又は単離した全てのヒト抗体を含む。このような組換えヒト抗体はジャームライン遺伝子によって暗号化されるが、例えば抗体成熟化の間に発生する後続再配列及び突然変異を含む特定のヒトジャームライン免疫グロブリン配列を利用する可変及び定常領域を含む。当業界に公知のとおり（例えば、Ｌｏｎｂｅｒｇ（２００５）Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈ．２３（９）：１１１７−１１２５参照）、可変領域は、外来抗原に対して特異的な抗体を形成するように再配列した様々な遺伝子によって暗号化された、抗原結合ドメインを含有する。再配列に加えて、可変領域は、外来抗原に対する抗体の親和性を増加させるために多数の単一アミノ酸変化（体細胞突然変異又は超突然変異という。）によってさらに変形され得る。定常領域は抗原に対する追加の反応（すなわちアイソタイプスイッチ）で変わるだろう。したがって、抗原に反応して軽鎖及び重鎖免疫グロブリンポリペプチドを暗号化する再配列され体細胞突然変異された核酸分子は元来の核酸分子と配列同一性を有することができないが、実質的に同一又は類似であろう（すなわち、少なくとも８０％同一の性を有する）。
【０１０５】
用語“ヒト抗体（ＨｕＭＡｂ）”は、フレームワークとＣＤＲ領域が両方も、ヒトジャームライン免疫グロブリン配列から由来した可変領域を有する抗体を指す。また、この抗体が定常領域を含有すると、定常領域もヒトジャームライン免疫グロブリン配列から由来する。本明細書に開示された抗体はヒトジャームライン免疫グロブリン配列（例えば、試験管内無作為又は部位特定突然変異誘発によって又は生体内体細胞突然変異によって導入された突然変異）によって暗号化されないアミノ酸残基を含むことができる。しかし、本明細書に開示された“ヒト抗体”は、マウスのような他の哺乳類種のジャームラインから由来したＣＤＲ配列がヒトフレームワーク配列に結び付けられた抗体は含まない。用語“ヒト抗体”と“完全なヒト抗体”は同じ意味で使われる。
【０１０６】
用語“ヒト化された抗体”は、非ヒト抗体のＣＤＲドメイン外のアミノ酸の一部、大部分又は全部がヒト免疫グロブリンから由来した相応するアミノ酸に置換された抗体を指す。抗体のヒト化された形態の一部の実施形態において、ＣＤＲドメイン外のアミノ酸の一部、大部分又は全部がヒト免疫グロブリンからのアミノ酸に置換され、１以上のＣＤＲ領域内のアミノ酸の一部、大部分又は全部はそのまま残る。アミノ酸の小さな添加、欠失、挿入、置換又は変形は、抗体が特定抗原に結合する能力をなくさない限り許容される。“ヒト化された抗体”は元来の抗体と類似の抗原特異性を保有する。
【０１０７】
“キメラ抗体”は、一つの種から可変領域が由来し、他の種から定常領域が由来した抗体、例えば、マウス抗体から可変領域が由来し、ヒト抗体から定常領域が由来した抗体のことを指す。
【０１０８】
本明細書で用語“交差反応する”とは、異なる種からのＦＡＭ１９Ａ５に結合する本明細書に開示された抗体の能力をいう。例えば、ヒトＦＡＭ１９Ａ５に結合する本明細書に開示された抗体はまた、他の種のＦＡＭ１９Ａ５（例えば、マウスＦＡＭ１９Ａ５）にも結合可能である。交差反応性は結合分析（例えば、ＳＰＲ、ＥＬＩＳＡ）で精製された抗原との特異的反応性を検出することによって又はＦＡＭ１９Ａ５を生理学的に発現する細胞との結合、又は機能的相互作用を検出することによって測定され得る。交差反応性を決定する方法は、本明細書に開示の標準結合分析、例えば、ＢＩＡＣＯＲＥＴＭ２０００  ＳＰＲ機器（Ｂｉａｃｏｒｅ  ＡＢ，Ｕｐｐｓａｌａ，Ｓｗｅｄｅｎ）を使用したＢＩＡＣＯＲＥＴＭ表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）分析、又は流細胞計数（ｆｌｏｗ  ｃｙｔｏｍｅｔｒｉｃ）技術を含む。
【０１０９】
用語“自然発生”は、自然で発見可能であることを指す。例えば、自然の出処から単離可能であり、実験室で人間によって意図的に変形されない有機体に存在するポリペプチド又はポリヌクレオチド配列は自然発生的である。
【０１１０】
用語“ポリペプチド”は、少なくとも２つの連続連結されたアミノ酸残基を含む鎖のことを指し、鎖の長さに上限はない。タンパク質における一つ以上のアミノ酸残基は、制限されないが、グリコシル化、リン酸化又は二硫化物結合形成のような変形を含有し得る。“タンパク質”は、一つ以上のポリペプチドを含むことができる。
【０１１１】
本明細書において“核酸分子”は、ＤＮＡ分子及びＲＮＡ分子を含む。核酸分子は一本鎖又は二本鎖であり得、ｃＤＮＡであり得る。
【０１１２】
本明細書において用語“ベクター”は、それが連結された他の核酸を輸送できる核酸分子のことを指す。ベクターの一種類は“プラスミド”であり、これは、追加のＤＮＡセグメントがライゲーションされ得る円形の二本鎖ＤＮＡループのことを指す。ベクターの他の種類は、追加のＤＮＡセグメントがウイルスゲノムにライゲーションされ得るウイルスベクターである。特定のベクター（例えば、バクテリア複製起源を有するバクテリアベクター及びエピゾーム哺乳類ベクター）は、それらが導入された宿主細胞で自己複製可能である。他のベクター（例えば、非エピゾーム哺乳類ベクター）は、宿主細胞に導入時に宿主細胞のゲノムに統合可能であり、これによって宿主ゲノムと共に複製される。また、特定のベクターは、それらが作動可能に連結された遺伝子の発現を指示することができる。このようなベクターは本明細書において“組換え発現ベクター”（又は、簡単に“発現ベクター”）と言及される。一般に、組換えＤＮＡ技術において有用性を有する発現ベクターは主にプラスミドの形態である。本明細書において、“プラスミド”と“ベクター”は、プラスミドがベクターの最も多く用いられる形態であることから、同じ意味で使用可能である。しかし、ウイルス（例えば、複製結合レトロウイルス、アデノウイルス及びアデノ関連ウイルス）ベクターのような他の形態の発現ベクターも含まれ、これらは同等の機能を果たす。
【０１１３】
本明細書において、用語“組換え宿主細胞”（又は、簡単に“宿主細胞”）は、細胞に自然的に存在しない核酸を含む細胞のことを指し、組換え発現ベクターが導入された細胞であり得る。かかる用語は、特定の該当細胞の他にそれら細胞の子孫も言及するものとして理解されるべきである。突然変異や環境的影響によってつながった世代では特定の変形が起こり得るので、このような子孫は実際に母細胞と同一であるとは言えなくとも、相変らず用語“宿主細胞”の範囲内に含まれる。
【０１１４】
本明細書において、用語“連結された”とは、２つ以上の分子のアソシエーションをいう。連結は、共有連結又は非共有連結であり得る。連結はまた、遺伝子連結（すなわち、組換え的に融合される。）であり得る。このような連結は化学的共役結合（ｃｏｎｊｕｇａｔｉｏｎ）及び組換えタンパク質生成のような当業界に公知の様々な技術を用いて達成され得る。
【０１１５】
ＩＩ．神経病性疼痛の治療方法
本発明ではＦＡＭ１９Ａ５に特異的に結合する拮抗剤（例えば、単離した単クローン性抗体又はその抗原結合断片）を対象に投与することを含む、必要とする対象において神経病症性疼痛を治療する方法を提供する。一部の実施形態において、神経病性疼痛は、中枢神経病性疼痛、すなわち中枢的体性感覚神経系を含めてＣＮＳの全部位に影響を及ぼす負傷又は損傷（例えば、脳損傷及び脊髄損傷）による疼痛、又は発作、多発性硬化症、又は延髄外側梗塞（ｌａｔｅｒａｌ  ｍｅｄｕｌｌａｒｙ  ｉｎｆａｒｃｔｉｏｎ）のような疾患又は障害から発生するか或いはそれと関連した疼痛である。一部の実施形態において、中枢神経病性疼痛は自発的であるか或いは刺激を誘発し得る。一部の実施形態において、中枢神経病性疼痛は力学的機械的異痛及び冷感異痛を含むことができる。中枢神経病性疼痛の症状には、例えば、灼熱痛、刺痛、電撃痛、圧迫痛、苦しい低温症、感覚異常及び不快感覚が一般的である（例：チクチク感、ピン及び針感、冷症及び圧迫感）。中枢神経病性疼痛の分布は、例えば、末梢領域において小さい領域から広い領域に達する領域、又は脊髄損傷において脳卒中又は身体の半分を覆ったり顔の片方を含んだり或いは身体又は四肢の反対側を含む領域を含む。脊髄損傷による中枢神経病性疼痛は、損傷部位において分節パターンで知覚される“損傷部位（ａｔ−ｌｅｖｅｌ）”疼痛、及び損傷レベルの下方で感じられる“損傷部位下部（ｂｅｌｏｗ−ｌｅｖｅｌ  ｐａｉｎ）”疼痛を含む。一部の実施形態において、前記方法は、中枢神経病性疼痛、疼痛と関連した症状、疼痛の根本原因又はこれらの組合せを減少、逆転、緩和、改善、抑制又は鈍化又は予防する。
【０１１６】
一部の実施形態において、神経病性疼痛は、末梢神経病性疼痛、末梢神経系の任意の部位に影響を及ぼす損傷（例えば、運動神経、感覚神経、自律神経又はこれらの組合せの損傷）又は傷害による痛み、或いは疾病又は障害によるか又はそれに関連する痛みである。運動神経の損傷又は傷害は、筋肉弱化（例えば、背中、脚、ヒップ又は顔筋肉の弱化）、苦しい痙攣及び線維束性筋収縮（皮膚の下で統制されない筋肉痙攣）、筋肉萎縮（筋肉サイズの深刻な収縮）及び反射作用減少のような症状と関連がある。感覚神経の損傷又は傷害は皮膚において疼痛及び疼痛受容体の過敏性を含めて様々な症状を誘発し、異痛（例えば、一般に疼痛のない刺激による激しい疼痛）をもたらす。
【０１１７】
一部の実施形態において、本発明の方法は、ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤（例えば、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合断片）をそれを必要とする対象に投与することを含む、一つ以上の類型の神経病性疼痛を治療する。一部の実施形態において、本発明の方法で治療可能な神経病性疼痛は神経痛であり、これは非制限的に次を含む：三叉神経痛（ＴＮ）（例：顔面又は口腔三叉神経領域内疼痛）、非定型三叉神経痛（ＡＴＮ）、喉頭神経痛、帯状疱疹後神経痛（例えば、一つ以上の脊椎皮膚又は三叉眼神経分枝（ｔｒｉｇｅｍｉｎａｌ  ｏｐｈｔｈａｌｍｉｃ  ｄｉｖｉｓｉｏｎ）に分布した片側疼痛）、末梢神経損傷疼痛（例えば、病変神経の神経分布領域の疼痛、典型的に外傷、手術又は圧迫に対する遠位の損傷神経の神経分布領域の疼痛）、舌咽頭神経痛（例えば、首、舌及び耳の裏側に深刻な疼痛を誘発する第９脳神経の刺激）、坐骨神経痛、腰痛及び非定型顔面疼痛。一部の実施形態において、神経痛は、化学的刺激、炎症、外傷（手術を含む）、例えば近傍の構造物（例えば、腫瘍）による神経の圧迫又は感染に起因するか或いはこれと関連がある。一部の実施形態において、神経病性疼痛は求心路疼痛症候群であり、これは、制限されないが次を含む：脳又は脊髄損傷、脳卒中後疼痛、幻想疼痛、下半身麻痺、腕神経叢裂離損傷、腰髄神経根障害。一部の実施形態において、神経病性疼痛は、ＣＲＰＳ１及びＣＲＰＳ２を含む複合局所疼痛症候群（ＣＲＰＳ）である。ＣＲＰＳは制限なく含む。一部の実施形態において、ＣＲＰＳと関連した症状は激しい疼痛、爪、骨及び皮膚の変化；及び影響を受けた四肢に触れる感覚の増加を含むことができる。一部の実施形態において、神経病性疼痛は神経病症（例えば、中枢又は末梢）である。神経病性疼痛の非制限的な例は、例えば、単一神経病性疼痛（単神経病症）及び多発神経病性疼痛（多発神経病症）を含む。
【０１１８】
一部の実施形態において、神経病性疼痛は、例えば、次のようなものを含む身体的損傷から発生するか或いはそれと関連がある：（１）神経圧迫（例えば、神経クラッシュ、神経伸張、神経絞扼又は不完全な神経切開）を含む外傷性損傷又は傷害；（２）脊髄損傷（例えば、脊髄の半分切開）；（３）末梢神経の損傷又は傷害（例えば、運動神経、感覚神経又は自律神経又はこれらの組合せ）、（４）四肢切断；打撲傷；炎症（例えば、脊髄の炎症）；又は手術手順；及び（５）反復的なストレス、例えば、長期間の関節グループの動きを必要とする反復的、鈍い及び／又は強力な活動（例えば、尺骨神経病症及び手根管症候群）。一部の実施形態において、前記方法は毒性製剤の露出に起因するか或いはこれと関連した神経病性疼痛を治療する。
【０１１９】
一部の実施形態において、神経病性疼痛は、例えば次のような一つ以上の疾病又は障害から発生するか或いはこれと関連する：（１）虚血性事例（例：脳卒中又は心臓麻痺）、（２）多発性硬化症、（３）代謝及び／又は内分泌疾患又は障害（例えば、糖尿病、代謝疾患、及び肥大症、成長ホルモンの過剰生成によって引き起こされ、関節を含む骨格部分の異常拡大によって特性化されて神経捕獲及び疼痛をもたらす病態）、（４）末梢神経への酸素供給を減少させて神経組織損傷を誘発する小さな血管疾患（例：血管炎、すなわち血管炎症）、（５）自己免疫疾患（例えば、シェーグレン症候群、ループス、リウマチ関節炎及びギランバレー症候群とも知られた急性炎症性脱髄鞘性神経病症）、（６）腎臓障害、（７）癌又は腫瘍（例えば、新生物腫瘍、神経腫、副腎生物症候群及び化学療法剤及び癌治療放射線からの毒性）、（８）感染（例えば、ヘルペス水痘帯状疱疹（帯状疱疹）、エプスタインバーウイルス、ウェストナイルウイルス、サイトメガロウイルス及び単純ヘルペスウイルス、ＡＩＤＳのようなウイルスによる感染、又はライム病、ジフテリアのようなバクテリア及びハンセン病による感染）、（９）炎症性障害、（１０）末梢神経障害（例：神経腫）、（１１）遺伝的又は新生の遺伝因子障害（例えば、Ｃｈａｒｃｏｔ−Ｍａｒｉｅ−Ｔｏｏｔｈ障害）、（１２）単神経病症、（１３）多発神経病症又はこれらの組合せ。一部の実施形態において、神経病性疼痛は、糖尿病（類型Ｉ又は類型ＩＩ）に起因するか或いはこれと関連する。一部の実施形態において、神経病性疼痛は糖尿病末梢神経病症である。
【０１２０】
一部の実施形態において、神経病性疼痛は、例えば、ダニ感染、ヘルペス水痘帯状疱疹、エプスタインバーウイルス、ウェストナイルウイルス、サイトメガロウイルス、単純ヘルペスウイルス、ＡＩＤＳを含む感染源、又は毒性物質（例えば、薬物、アルコール、重金属（例えば、鉛、ヒ素、水銀）、又は産業物質（例えば、溶媒、接着剤からのヒューム）及び亜酸化窒素）を含む感染源への露出から発生するか或いはこれと関連する。
【０１２１】
一部の実施形態において、神経病性疼痛は、身体的損傷、感染、糖尿病、癌療法、アルコール中毒、切断、多発性硬化症、帯状疱疹、脊椎手術、坐骨神経痛（坐骨神経を通じた疼痛）、腰痛、三叉神経痛（例えば、顔面又は口腔三叉神経領域内の疼痛）のような神経痛、疼痛性多発神経病症（例えば、足の疼痛は下肢、大腿部及び手を含むように延長されることがある。）のような神経病性疼痛、又はこれらの組合せによって発生するか或いはこれと関連がある。一部の実施形態において、神経病性疼痛は三叉神経痛である。一部の実施形態において、神経病性疼痛は背中、脚、ヒップ又は顔の筋肉弱化と関連がある。一部の実施形態において、神経病性疼痛は神経、例えば脚、足、ヒップの神経又は顔面筋肉神経の圧迫によって引き起こされる。一部の実施形態において、神経病性疼痛は坐骨神経損傷を含む。一部の実施形態において、神経病性疼痛は坐骨神経痛である。
【０１２２】
一部の実施形態において、本発明の方法は、神経病性疼痛と関連した一つ以上の症状を逆転、緩和、改善、抑制、鈍化又は予防することができる。したがって、一態様において、本発明は、必要とする対象にＦＡＭ１９Ａ５に対する拮抗剤を投与することを含む、痛覚過敏症を改善させる方法を提供する。本明細書において用語“痛覚過敏症”は、苦しい刺激（例えば、針刺し又はホットプレート）に対する増加又は強調された反応のことを指す。一部の実施形態において、痛覚過敏は針刺し（機械的痛覚過敏）に関する。他の実施形態において、痛覚過敏はホットプレート（熱痛覚過敏）のような熱刺激に関する。一部の実施形態において、これを必要とする対象は慢性収縮性損傷（例えば、坐骨神経痛）を有する。一部の実施形態において、これを必要とする対象は糖尿病性末梢神経病症を有する。
【０１２３】
一部の実施形態において、ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤をそれを必要とする対象（例えば、ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤を投与していない神経病性疼痛対象）に投与すれば、対象が、基準対照群と比較して、機械的刺激に対してより高い閾値を有することができる。本明細書において用語“機械的刺激に対する閾値”とは、対象が刺激（例えば、引っ張ることによる刺激）に反応する前に（機械的刺激からの）圧迫の量を指す。したがって、相対的に高い閾値を有する対象は、相対的に低い閾値を有する対象と比較して遥かに多い量の機械的刺激に耐えるか或いは抵抗することができる。一部の実施形態において、本発明の方法は、基準対照群（例えば、ＦＡＭ１９Ａ５投与前対象の閾値）と比較して対象の閾値を機械的刺激によって少なくとも５％、少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも１００％、少なくとも１５０％又は少なくとも２００％増加させることができる。
【０１２４】
一部の実施形態において、ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤をそれを必要とする対象に投与すれば、基準対照群（ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤を投与しない神経病症性疼痛対象）と比較して対象の熱刺激（例えば、ホットプレート）に対する遅延時間（すなわち、刺激と反応間の時間間隔）を増加させる。一部の実施形態において、本発明の方法は、基準対照群（例えば、ＦＡＭ１９Ａ５投与前対象の閾値）と比較して熱刺激に対する対象の遅延時間を少なくとも５％、少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも１００％、少なくとも１５０％又は少なくとも２００％増加させることができる。
【０１２５】
他の態様において、本発明は、感覚神経伝導速度増加を必要とする対象において感覚神経伝導速度を改善させる方法を提供する。本明細書において用語“感覚神経伝導速度”（ＳＮＣＶ）は、電気信号が末梢神経を通じて移動する速度のことを指す。健康な神経は損傷した神経に比べてより速くて強力な電気信号を送る。Ｃｈｏｕｈａｎ  Ｓ．，Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｄｉａｇｎ  Ｒｅｓ  ｌ０（ｌ）：ＣＣ０ｌ−３（２０１６）参照。したがって、ＳＮＣＶ（例えば、感覚神経伝導速度試験）を測定することに役立つ試験は、対象の潜在的な神経損傷及び／又は機能障害を識別することに有用であり得る。一部の実施形態において、本発明の方法は、基準対照群（例えば、ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤投与前対象の閾値）と比較して神経病性疼痛対象のＳＮＣＶを少なくとも５％、少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも１００％、少なくとも１５０％又は少なくとも２００％増加させることができる。
【０１２６】
神経病性疼痛を研究するための動物モデルが存在する。このような動物モデルの非制限的な例としては次を含む：（１）足に行く一つ以上の脊髄神経が結紮され切断される脊髄神経結紮（ＳＮＬ）モデル（Ｋｉｍ  ＳＨ及びＣｈｕｎｇ  ＪＭ．，Ｐａｉｎ  ５０：３５５−３６３（１９９２）参照）；（２）坐骨神経の一部が堅く結紮された部分坐骨結紮（ＰＳＬ）モデル（Ｓｅｌｔｚｅｒ  ｅｌ．，Ｐａｉｎ  ４３：２０５−２１８（１９９０）参照）；（３）坐骨神経に４個の緩い縫合糸（ｃｈｒｏｍｉｃ−ｇｕｔ）による結紮を配置し、縫合に対する免疫反応が神経膨脹及び神経収縮を誘発する慢性収縮損傷（ＣＣＩ）モデル（例：実施例６参照）；（４）腓腹神経（ｓｕｒａｌ  ｎｅｒｖｅ）を残して共通神経網及び脛骨神経が切断される余分の神経損傷（ＳＮＩ）モデル（Ｄｅｏｓｔｅｒｄ  Ｉ．ａｎｄ  Ｗｏｏｌｆ  Ｃ．Ｊ．，Ｐａｉｎ  ８７：１４９−１５８（２０００）参照）；及び（５）ＳＴＺ注射がランゲルハンス島β細胞で膵臓浮腫及び退行を誘発してネズミで実験的な糖尿病を誘発するＳＴＺ注射によって誘発された糖尿病性ネズミ（例えば、実施例８；Ａｋｂａｒｚａｄｅｈ  Ａ．ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｄｉａｎ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．２２（２）：６０−６４（２００７）参照）。これらのモデルは動物において痛覚過敏を誘発し、これは、機械的及び／又は熱的刺激に対して強化された反応によって現れる。
【０１２７】
動物の機械的痛覚過敏検査にはフォンフレイ（Ｖｏｎ  Ｆｒｅｙ）試験を含み、ここで、曲げ力が互いに異なるフォンフレイモノフィラメントが足裏の表面に適用される。足引っ込め閾値は神経損傷後に急激に減少する。Ｌｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐａｉｎ  ８５：４９３−５０２（２０００）；実施例６参照。したがって、一部の実施形態において、本発明の方法は神経病性疼痛動物モデル（例えば、慢性収縮損傷モデル）で足引っ込めに対する閾値を増加させることができる。
【０１２８】
熱的痛覚過敏に対する試験は、足の裏の表面に焦点をおいた輻射熱源（例：ホットプレート）を使用することを含むことができ、足引っ込めに対する反応時間が測定される。神経損傷後、足引っ込めは損傷前よりも早い。Ｋｉｍ  ＳＨ  ａｎｄ  Ｃｈｕｎｇ  ＪＭ．Ｐａｉｎ  ５０：３５５−３６３（１９９２）；実施例８参照。一部の実施形態において、本発明の方法は、神経病性疼痛動物モデル（例えば、糖尿病性末梢神経病症モデル）で足引っ込め遅延を増加させることができる。
【０１２９】
一部の実施形態において、本発明の方法で治療する対象は、非ヒト動物、例えばネズミ又はマウスである。一部の実施形態において、この方法で治療する対象はヒトである。
【０１３０】
一部の実施形態において、ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤（例えば、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分）、二重特異的分子、又は免疫接合体（ｉｍｍｕｎｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ）、又は本発明の組成物は静脈内、経口、非経口、脊髄腔内、脳室内、肺、筋肉内、皮下、腹腔内、硝子体内又は脳室内に投与される。
【０１３１】
一部の実施形態において、ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤又はその組成物は、神経病症性疼痛を治療するために一つ以上の追加薬剤と組み合わせて投与され得る。例えば、神経病性疼痛を治療するための非制限的な例示的な薬剤としては次を含む：ベンラファキシン（ＥＦＦＥＸＯＲ（登録商標））、カルバマゼピン（ＣＡＲＢＡＴＲＯＬ（登録商標）、ＴＥＧＲＥＴＯＬ（登録商標）、三叉神経痛の疼痛緩和のためにＦＤＡ承認）のような抗てんかん剤、ガバペンチン（ＮＥＵＲＯＮＴＩＮ（登録商標）、ＧＲＡＬＩＳＥ（登録商標）、帯状疱疹後神経痛（ＰＨＮ）管理承認：帯状疱疹が治療された後１〜３ヶ月間持続する疼痛）、プレガバリン（ＬＹＲＩＣＡ（登録商標）、ＰＨＮ、苦しい糖尿病性神経病性疼痛及び線維筋肉痛に対して承認）、リカドインのようなナトリウムチャネル遮断剤、クロニジン、フェントラミン、フェノキシベンザミン、レセルピン、デクスメデトミジンのようなアドレナリン薬物、モルヒネのようなオピオイド、及びアミトリプチリン、イミプラミン及びデュロキセチンのような抗うつ剤。
【０１３２】
一つ以上の追加治療薬物の容量及び投与は当業界に公知であり、例えば、それぞれの薬物の製品ラベルによって指示される。
【０１３３】
ＩＩＩ．ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤
一つ以上のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤は、神経病性疼痛を治療するために用いることができる。一部の実施形態において、ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤は、アンチセンスオリゴヌクレオチド、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ、ｄｓＲＮＡ、アプタマー、ＦＡＭ１９Ａ５を特異的に標的化するＰＮＡ（ペプチド核酸）、又はこれらを含むベクターである。他の実施形態において、ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤はＦＡＭ１９Ａ５タンパク質に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合部分、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分を暗号化するポリヌクレオチド、又はこれらのポリヌクレオチドを含むベクターである。
【０１３４】
本明細書に開示された方法に有用な抗体は、特定の機能的特性を特徴とする単クローン性抗体を含む。例えば、抗体は、可溶性ＦＡＭ１９Ａ５及び膜結合ＦＡＭ１９Ａ５を含むヒトＦＡＭ１９Ａ５に特異的に結合する。可溶性及び／又は膜結合ヒトＦＡＭ１９Ａ５に特異的に結合することに加えて、本明細書に開示された抗体はまた、（ａ）１０ｎＭ以下のＫＤで可溶性ヒトＦＡＭ１９Ａ５に結合したり；（ｂ）１０ｎＭ以下のＫＤで膜結合ヒトＦＡＭ１９Ａ５に結合したり；或いは（ａ）及び（ｂ）の両方である。
【０１３５】
一部の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、例えば、１０−７Ｍ以下、１０−８Ｍ以下、１０−９Ｍ（１ｎＭ）以下、１０−１０Ｍ（０．１ｎＭ）以下、１０−１１Ｍ以下、又は１０−１２Ｍ以下、例えば１０−１２Ｍ〜１０−７Ｍ、１０−１１Ｍ〜１０−７Ｍ、１０−１０Ｍ〜１０−７Ｍ、又は１０−９Ｍ〜１０−７Ｍ、例えば１０−１２Ｍ、５×１０−１２Ｍ、１０−１１Ｍ、５×１０−１１Ｍ、１０−１０Ｍ、５×１０−１０Ｍ、１０−９Ｍ、５×１０−９Ｍ、１０−８Ｍ、５×１０−８Ｍ、１０−７Ｍ、又は５×１０−７ＭのＫＤの高い親和性で可溶性ヒトＦＡＭ１９Ａ５又は膜結合ヒトＦＡＭ１９Ａ５に特異的に結合する。様々な種のヒトＦＡＭ１９Ａ５に対する抗体の結合能力を評価する標準分析は当業界に公知されており、例えばＥＬＩＳＡ、ウェスタンブロット、及びＲＩＡを含む。好適な分析が実施例に詳細に説明される。抗体の結合動力学（例えば、結合親和性）がまた、ＥＬＩＳＡ、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析又はＫＩＮＥＸＡ（登録商標）のような当業界に公知の標準分析によって評価され得る。ＦＡＭ１９Ａ５の機能的特性（例えば、リガンド結合）に対する抗体の効果を評価する分析が下記及び実施例においてより詳細に説明される。
【０１３６】
一部の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、例えばＥＬＩＳＡによって決定された時、１０−７Ｍ以下、１０−８Ｍ（１０ｎＭ）以下、１０−９Ｍ（１ｎＭ）以下、１０−１０Ｍ以下、１０−１２Ｍ〜１０−７Ｍ、１０−１１Ｍ〜１０−７Ｍ、１０−１０Ｍ〜１０−７Ｍ、１０−９Ｍ〜１０−７Ｍ、又は１０−８Ｍ〜１０−７ＭのＫＤで可溶性ヒトＦＡＭ１９Ａ５と結合する。一部の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、１０ｎＭ以下、例えば０．１〜１０ｎＭ、０．１〜５ｎＭ、０．１〜１ｎＭ、０．５〜１０ｎＭ、０．５〜５ｎＭ、０．５〜１ｎＭ、１〜１０ｎＭ、１〜５ｎＭ、又は５〜１０ｎＭのＫＤで可溶性ＦＡＭ１９Ａ５と結合する。一部の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、ＥＬＩＳＡによって決定された時、約１ｐＭ、２ｐＭ、３ｐＭ、４ｐＭ、５ｐＭ、６ｐＭ、７ｐＭ、８ｐＭ、９ｐＭ、１０ｐＭ、２０ｐＭ、３０ｐＭ、４０ｐＭ、５０ｐＭ、６０ｐＭ、７０ｐＭ、８０ｐＭ、９０ｐＭ、１００ｐＭ、２００ｐＭ、３００ｐＭ、４００ｐＭ、５００ｐＭ、６００ｐＭ、７００ｐＭ、８００ｐＭ、又は９００ｐＭ、又は約１ｎＭ、２ｎＭ、３ｎＭ、４ｎＭ、５ｎＭ、６ｎＭ、７ｎＭ、８ｎＭ、又は９ｎＭ、又は約１０ｎＭ、２０ｎＭ、３０ｎＭ、４０ｎＭ、５０ｎＭ、６０ｎＭ、７０ｎＭ、８０ｎＭ、又は９０ｎＭのＫＤで可溶性ヒトＦＡＭ１９Ａ５と特異的に結合する。
【０１３７】
一部の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、例えばＥＬＩＳＡによって決定された時、１０−７Ｍ以下、１０−８Ｍ（１０ｎＭ）以下、１０−９Ｍ（１ｎＭ）以下、１０−１０Ｍ以下、１０−１２Ｍ〜１０−７Ｍ、１０−１１Ｍ〜１０−７Ｍ、１０−１０Ｍ〜１０−７Ｍ、１０−９Ｍ〜１０−７Ｍ、又は１０−８Ｍ〜１０−７ＭのＫＤで膜結合ヒトＦＡＭ１９Ａ５と結合する。特定の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、ＥＬＩＳＡによって決定された時、１０ｎＭ以下、例えば０．１〜１０ｎＭ、０．１〜５ｎＭ、０．１〜１ｎＭ、０．５〜１０ｎＭ、０．５〜５ｎＭ、０．５〜１ｎＭ、１〜１０ｎＭ、１〜５ｎＭ、又は５〜１０ｎＭのＫＤで膜結合ヒトＦＡＭ１９Ａ５と特異的に結合する。一部の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、ＥＬＩＳＡによって決定された時、約１ｐＭ、２ｐＭ、３ｐＭ、４ｐＭ、５ｐＭ、６ｐＭ、７ｐＭ、８ｐＭ、９ｐＭ、１０ｐＭ、２０ｐＭ、３０ｐＭ、４０ｐＭ、５０ｐＭ、６０ｐＭ、７０ｐＭ、８０ｐＭ、９０ｐＭ、１００ｐＭ、２００ｐＭ、３００ｐＭ、４００ｐＭ、５００ｐＭ、６００ｐＭ、７００ｐＭ、８００ｐＭ、又は９００ｐＭ、又は約１ｎＭ、２ｎＭ、３ｎＭ、４ｎＭ、５ｎＭ、６ｎＭ、７ｎＭ、８ｎＭ、又は９ｎＭ、又は約１０ｎＭ、２０ｎＭ、３０ｎＭ、４０ｎＭ、５０ｎＭ、６０ｎＭ、７０ｎＭ、８０ｎＭ、又は９０ｎＭのＫＤで膜結合ヒトＦＡＭ１９Ａ５と結合する。
【０１３８】
一部の実施形態において、本明細書に開示された方法に適した抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、ヒトＦＡＭ１９Ａ５エピトープとの結合に対して本明細書に開示されたＣＤＲ又は可変領域を含む抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体と交差競合する（又は、結合を抑制する）。
一部の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３と軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含む基準抗体の結合を抑制し、ここで（ｉ）基準抗体の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれ、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３のアミノ酸配列を含み、基準抗体の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれ、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２４及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２５のアミノ酸配列を含んだり；（ｉｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７のアミノ酸配列を含み、及び軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２８のアミノ酸配列を含んだり；（ｉｉｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１８のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１９のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２９のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３０のアミノ酸配列を含み、及び軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３１のアミノ酸配列を含んだり；（ｉｖ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３２のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３３のアミノ酸配列を含み、及び軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３４のアミノ酸配列を含んだり；（ｖ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８９のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９０のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９２のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９３のアミノ酸配列を含み、及び軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９４のアミノ酸配列を含んだり；（ｖｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９５のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９６のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９７のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９８のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９９のアミノ酸配列を含み、及び軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１００のアミノ酸配列を含んだり；（ｖｉｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０４のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０５のアミノ酸配列を含み、及び軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０６のアミノ酸配列を含んだり；（ｖｉｉｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０７のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０８のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０９のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１０のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１１のアミノ酸配列を含み、及び軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１２のアミノ酸配列を含んだり；（ｉｘ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１３のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１４のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１５のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１６のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１７のアミノ酸配列を含み、及び軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１８のアミノ酸配列を含んだり；（ｘ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１９のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２０のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２２のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２３のアミノ酸配列を含み、及び軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２４のアミノ酸配列を含んだり；（ｘｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２５のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２６のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２７のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２８のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２９のアミノ酸配列を含み、及び軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３０のアミノ酸配列を含んだり；（ｘｉｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３４のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３５のアミノ酸配列を含み、及び軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３６のアミノ酸配列を含んだり；（ｘｉｉｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３７のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３８のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３９のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４０のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４１のアミノ酸配列を含み、及び軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４２のアミノ酸配列を含んだり；（ｘｉｖ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４３のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４４のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４５のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４６のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４７のアミノ酸配列を含み、及び軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４８のアミノ酸配列を含んだり；又は（ｘｖ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４９のアミノ酸配列を含み、重鎖��ＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５０のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５２のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５３のアミノ酸配列を含み、及び軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５４のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態において、基準抗体の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれ、表２に提示されたＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列を含み、そして基準抗体の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれ、表３に提示されたＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列を含む。
【０１３９】
一部の実施形態において、基準抗体は（ａ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３５及び３９をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｂ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３６及び４０をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｃ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３７及び４１をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｄ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３８及び４２をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｅ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５５及び１６６をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｆ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５６及び１６７をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｇ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５７及び１６８をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｈ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５８及び１６９をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｉ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５９及び１７０をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｊ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６０及び１７１をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｋ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６１及び１７２をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｌ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６２及び１７３をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｍ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６３及び１７４をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｎ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６４及び１７５をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；又は（ｏ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６５及び１７６をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列を含む。一部の実施形態において、基準抗体は重鎖可変領域（ＶＨ）及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含み、ここで、ＶＨは表４に提示されたようなアミノ酸配列を含み、ＶＬは表５に提示されたアミノ酸配列を含む。
【０１４０】
一部の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分はこのような基準抗体とヒトＦＡＭ１９Ａ５の結合を少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、又は９０％又は１００％まで抑制する。競合抗体は同一のエピトープ、重複エピトープ又は隣接エピトープ（例えば、立体障害によって証明される）と結合する。両抗体が標的との結合に対して互いに競合するか否かは、ＲＩＡ及びＥＩＡのような当業界に公知の競合実験によって決定され得る。
【０１４１】
一部の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３と軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含む本明細書に開示された基準抗体と同じＦＡＭ１９Ａ５エピトープに結合し、ここで、（ｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２４のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２５のアミノ酸配列を含んだり；（ｉｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２８のアミノ酸配列を含んだり；（ｉｉｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１８のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１９のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２９のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３０のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３１のアミノ酸配列を含んだり；（ｉｖ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３２のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３４のアミノ酸配列を含んだり；（ｖ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８９のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９０のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９２のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９４のアミノ酸配列を含んだり；（ｖｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９５のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９６のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９７のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９８のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９９のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１００のアミノ酸配列を含んだり；（ｖｉｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０４のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０５のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３���ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０６のアミノ酸配列を含んだり；（ｖｉｉｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０７のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０８のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０９のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１０のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１２のアミノ酸配列を含んだり；（ｉｘ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１３のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１４のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１５のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１６のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１７のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１８のアミノ酸配列を含んだり；（ｘ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１９のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２０のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２２のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２４のアミノ酸配列を含んだり；（ｘｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２５のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２６のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２７のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２８のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２９のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３０のアミノ酸配列を含んだり；（ｘｉｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３４のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３５のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３６のアミノ酸配列を含んだり；（ｘｉｉｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３７のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３８のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３９のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４０のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４２のアミノ酸配列を含んだり；（ｘｉｖ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４３のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４４のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４５のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４６のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４７のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４８のアミノ酸配列を含んだり；又は（ｘｖ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  Ｉ���  ＮＯ：１４９のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５０のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５２のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５４のアミノ酸配列を含む。
【０１４２】
一部の実施形態において、基準抗体は（ａ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３５及び３９をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｂ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３６及び４０をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｃ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３７及び４１をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｄ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３８及び４２をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｅ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５５及び１６６をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｆ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５６及び１６７をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｇ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５７及び１６８をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｈ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５８及び１６９をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｉ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５９及び１７０をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｊ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６０及び１７１をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｋ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６１及び１７２をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｌ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６２及び１７３をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｍ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６３及び１７４をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｎ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６４及び１７５をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；又は（ｏ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６５及び１７６をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列を含む。
【０１４３】
両抗体が同じエピトープに結合するか否かを決定する技術は、例えばエピトープマッピング方法、例えばエピトープの原子分解能を提供する抗原：抗体複合体結晶のｘ−線分析及び水素／重水素交換質量分光法（ＨＤＸ−ＭＳ）、抗体と抗原断片又は抗原の突然変異された変異体の結合をモニタリングする方法（ここで、抗原配列内でアミノ酸残基の変形による結合は、損失が主にエピトープ成分の表示として見なされる）、エピトープマッピングのためのコンピュータ組合せ方法を含む。
【０１４４】
本明細書に開示された方法に有用な抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、例えば抗体とヒトＦＡＭ１９Ａ５の断片との結合によって決定された時、成熟したヒトＦＡＭ１９Ａ５の少なくとも一つのエピトープと結合し得る。一部の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、ＴＬＤＲＤＳＳＱＰＲＲＴＩＡＲＱＴＡＲＣ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６又はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２のアミノ酸残基４２〜６１）のアミノ酸配列内に位置した断片、例えばＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６の少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、又は２０個アミノ酸を有するエピトープと結合する。一部の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２のアミノ酸残基４６〜５１（すなわち、ＤＳＳＱＰＲ）、例えばアミノ酸残基４６、５０、及び５２（すなわち、Ｄ−−−Ｐ−Ｒ）、例えばアミノ酸残基４６、４７、４８、及び５０（すなわち、ＤＳＳ−Ｐ）に該当する一つ以上のアミノ酸でＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６に結合する。一部の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分はＣＤＭＬＰＣＬＥＧＥＧＣＤＬＬＩＮＲＳＧ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９又はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２のアミノ酸残基９０〜１０９）のアミノ酸配列内に位置した断片、例えばＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９の少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、又は２０個アミノ酸を有するエピトープと結合する。特定の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４の一つ以上のアミノ酸残基９９〜１０７（すなわち、ＥＧＣＤＬＬＩＮＲ）、例えばアミノ酸残基１０２、１０３、１０５、及び１０７（すなわち、ＤＬ−Ｉ−Ｒ）、例えばアミノ酸残基９９、１００、１０２、１０３、１０５、及び１０７（すなわち、ＥＧ−ＤＬ−Ｉ−Ｒ）、例えばアミノ酸残基９９、１００、及び１０７（すなわち、ＥＧ−−−−−−Ｒ）でＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９に結合する。
【０１４５】
一部の実施形態において、少なくとも一つのエピトープは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６と少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、又は約１００％同じアミノ酸配列を有する。一部の実施形態において、少なくとも一つのエピトープは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９と少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、又は約１００％同じアミノ酸配列を有する。
【０１４６】
一部の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５、６、７、８、９、又は１０、又はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５、６、７、８、９、又は１０のアミノ酸配列内に位置した断片、例えばＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５、６、７、８、９、又は１０の３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、又は２０個アミノ酸を有するエピトープである、ヒトＦＡＭ１９Ａ５にのみ結合する。
【０１４７】
一部の実施形態において、本発明の抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６又はその断片と自生立体形態（すなわち不変性）状態で結合する。一部の実施形態において、本発明の抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９又はその断片と自生立体形態（すなわち不変性）状態で結合する。一部の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、グリコシル化及び非グリコシル化ヒトＦＡＭ１９Ａ５の両方に結合する。
【０１４８】
一部の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、１以上の追加のＦＡＭ１９Ａ５エピトープによって結合する。したがって、特定の抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、（ｉ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６のエピトープ及び追加のエピトープ、又は（ｉｉ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９のエピトープ及び追加のエピトープに結合する。他の抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合断片は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５のエピトープ、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９のエピトープ、及び追加のエピトープに結合し得る。一部の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６のエピトープ、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０のエピトープ、及び追加のエピトープに結合する。
【０１４９】
一部の実施形態において、一つ以上の追加のＦＡＭ１９Ａ５エピトープは、ＱＬＡＡＧＴＣＥＩＶＴＬＤＲ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５、エピトープＦ１）、ＴＬＤＲＤＳＳＱＰＲＲＴＩＡＲＱＴＡＲＣ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６、エピトープＦ２）、ＴＡＲＣＡＣＲＫＧＱＩＡＧＴＴＲＡＲＰＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７、エピトープＦ３）、ＡＲＰＡＣＶＤＡＲＩＩＫＴＫＱＷＣＤＭＬ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８、エピトープＦ４）、ＣＤＭＬＰＣＬＥＧＥＧＣＤＬＬＩＮＲＳＧ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９、エピトープＦ５）、又はＮＲＳＧＷＴＣＴＱＰＧＧＲＩＫＴＴＴＶＳ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０、エピトープＦ６）、又はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０、又はこれらの任意の組合せのアミノ酸配列内に位置した断片から選択される。ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９、又はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０のアミノ酸配列内に位置した断片は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９、又はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０のいずれかの１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、又は２０個アミノ酸を有する断片を含む。一部の実施形態において、一つ以上の追加のＦＡＭ１９Ａ５エピトープは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５、６、７、８、９、又は１０、又はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５、６、７、８、９、又は１０のアミノ酸配列内に位置した断片、例えばＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５、６、７、８、９、又は１０の１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、又は２０個のアミノ酸を有する断片、又はこれらの任意の組合せから選択される。一部の実施形態において、本開示内容の抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、その固有形態（すなわち、変性されない）において一つ以上の追加エピトープのいずれか一つに結合する。一部の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、一つ以上の追加のＦＡＭ１９Ａ５エピトープのグリコシル化及び非グリコシル化形態にともに結合する。
【０１５０】
一部の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、ＥＰ２、ＥＰ４、及び／又はＥＰ８として確認された少なくとも一つのＦＡＭ１９Ａ５エピトープに結合し、ここで、ＥＰ２はアミノ酸ＤＳＳＱＰ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６６）を含み、ＥＰ４はアミノ酸ＡＲＣＡＣＲＫ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６８）を含み、ＥＰ８はアミノ酸ＴＣＴＱＰＧＧＲ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７２）を含む。一部の実施形態において、少なくとも一つのエピトープは、ＥＰ２、ＥＰ４、又はＥＰ８と少なくとも９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、又は約１００％同じアミノ酸配列を有する。一部の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分はＥＰ２にのみ結合する。一部の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分はＥＰ４及びＥＰ８に結合する。
【０１５１】
一部の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、ＥＰ６、ＥＰ７、又はＥＰ８として確認された少なくとも一つのＦＡＭ１９Ａ５エピトープに結合し、ここで、ＥＰ６はアミノ酸ＫＴＫＱＷＣＤＭＬ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７０）を含み、ＥＰ７はアミノ酸ＧＣＤＬＬＩＮＲ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７１）を含み、ＥＰ８はアミノ酸ＴＣＴＱＰＧＧＲ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７２）を含む。一部の実施形態において、少なくとも一つのエピトープはＥＰ６、ＥＰ７、又はＥＰ８と少なくとも９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、又は約１００％同じアミノ酸配列を有する。一部の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分はＥＰ６、ＥＰ７、又はＥＰ８にのみ結合する。一部の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分はＥＰ６、ＥＰ７、及びＥＰ８に結合する。一部の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分はＥＰ７及びＥＰ８に結合する。一部の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分はＥＰ７に結合する。
【０１５２】
一部の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６５、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６６、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６７、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６８、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６９、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７０、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７２、及びこれらの任意の組合せで構成される群から選ばれる一つ以上のＦＡＭ１９Ａ５エピトープに結合する。
【０１５３】
一部の実施形態において、例えば、免疫分析（例えば、ＥＬＩＳＡ）、表面プラズモン共鳴、又は力学的排除分析によって測定された時、ＦＡＭ１９Ａ５ファミリーの他のタンパク質に比べて２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％又はさらに高い親和性でＦＡＭ１９Ａ５（例えば、ヒトＦＡＭ１９Ａ５）と結合する抗体又はその抗原結合部分が提供される。特定の実施形態において、例えば免疫分析によって測定された時、ＦＡＭ１９Ａ５ファミリーの他のタンパク質と交差反応性無しでＦＡＭ１９Ａ５（例えば、ヒトＦＡＭ１９Ａ５）に結合する抗体又はその抗原結合部分が開示される。
【０１５４】
一部の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は自生抗体でないか或いは自然発生抗体ではない。例えば、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は、例えば、より多いか少ない、又は互いに異なる類型の翻訳後修飾（ｐｏｓｔ−ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌ  ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ）を有することによって、自然発生の抗体のそれとは異なる翻訳後修飾を有する。
【０１５５】
ＩＶ．例示的な抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体
本発明の方法に使用可能な特定の抗体は、実施例１で単離した抗体１−６５のＣＤＲ及び／又は可変領域配列を有する抗体、例えば単クローン性抗体の他にも、それらの可変領域又はＣＤＲ配列に対して少なくとも８０％の同一性（例えば、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、又は少なくとも９９％の同一性）を有する抗体である。異なる抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体に対するＶＨ及びＶＬ  ＣＤＲのアミノ酸配列はそれぞれ表２及び３に提供される。Ｋａｂａｔナンバリングスキーム（上記を参照）を用いて下記抗体に対するＣＤＲを確認した：１−６５、３−２、２−１３、１−２８、Ｐ２−Ｃ１２、１３Ｂ４、１３Ｆ７、１５Ａ９、Ｐ１−Ａ０３、Ｐ１−Ａ０８、Ｐ１−Ｆ０２、Ｐ２−Ａ０１、Ｐ２−Ａ０３、Ｐ２−Ｆ０７、Ｐ２−Ｆ１１、ＳＳ０１−１３、ＳＳ０１−１３−ｓ５及びＳ５−２．ＧＫＮＧ．ＩＭＧＴナンバリングシステム（上記を参照）を用いて下記抗体に対するＣＤＲを確認した：１−７Ａ−ＩＴ、Ｌｏｗ−ＰＩ、１−３０、１−１７、１−３２、４−１１、６−１０、２−１３Ｄ、２−１３Ｄ−３７、２−１３Ｄ−３７−１．５Ｗ−４１及び２−１３Ｄ−３７−３Ｗ−１６。本発明の異なる抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列はそれぞれ表４及び５に提供される。
【０１５６】
【表３】
2021514363.tif 000004
【０１５７】
2021514363.tif 000005
【０１５８】
2021514363.tif 000006
【０１５９】
【表４】
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【０１６０】
2021514363.tif 000008
【０１６１】
2021514363.tif 000009
【０１６２】
【表５】
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【０１６３】
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【０１６４】
【表６】
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【０１６５】
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【０１６６】
2021514363.tif 000014
【０１６７】
一部の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合断片は重鎖及び軽鎖可変領域を含み、ここで、重鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３５−３８、１５５−１６５、２０３、２２３−２２６、２５４、２５７、２７１又は２７５のアミノ酸配列を含む。他の実施形態において、単離した抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３５−３８、１５５−１６５、２０３、２２３−２２６、２５４、２５７、２７１又は２７５からなる群から選ばれる重鎖可変領域のＣＤＲを含む。
【０１６８】
一部の実施形態において、単離した抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合断片は重鎖及び軽鎖可変領域を含み、ここで、軽鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３９−４２、１６６−１７６、２０４、２２７−２３４又は２７２のアミノ酸配列を含む。他の実施形態において、単離した抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３９−４２、１６６−１７６、２２７−２３４又は２７２からなる群から選ばれる軽鎖可変領域のＣＤＲを含む。
【０１６９】
一部の実施形態において、単離した抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３５−３８、１５５−１６５、２０３、２２３−２２６、２５４、２５７、２７１又は２７５からなる群から選ばれる重鎖可変領域のＣＤＲ及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３９−４２、１６６−１７６、２２７−２３４又は２７２からなる群から選ばれる軽鎖可変領域のＣＤＲを含む。
【０１７０】
一部の実施形態において、単離した抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合断片は重鎖及び軽鎖可変領域を含み、ここで、（ｉ）重鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３７のアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４１のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）重鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３６のアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４０のアミノ酸配列を含み；（ｉｉｉ）重鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３５のアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３９のアミノ酸配列を含み；（ｉｖ）重鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３８のアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４２のアミノ酸配列を含み；（ｖ）重鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５５のアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６６のアミノ酸配列を含み；（ｖｉ）重鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５６のアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６７のアミノ酸配列を含み；（ｖｉｉ）重鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５７のアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６８のアミノ酸配列を含み；（ｖｉｉｉ）重鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５８のアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６９のアミノ酸配列を含み；（ｉｘ）重鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５９のアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７０のアミノ酸配列を含み；（ｘ）重鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６０のアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７１のアミノ酸配列を含み；（ｘｉ）重鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６１のアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７２のアミノ酸配列を含み；（ｘｉｉ）重鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６２のアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７３のアミノ酸配列を含み；（ｘｉｉｉ）重鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６３のアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７４のアミノ酸配列を含み；（ｘｉｖ）重鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６４のアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７５のアミノ酸配列を含み；及び（ｘｖ）重鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６５のアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７６のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態において、単離した抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合断片は重鎖可変領域（ＶＨ）及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含み、ここで、ＶＨは表４に提示されたようなＶＨ配列を含み、そしてＶＬは表５に提示されたＶＬ配列を含む。
【０１７１】
一部の実施形態において、単離した抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含み、ここで、重鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３５−３８、１５５−１６５、２０３、２２３−２２６、２５４、２５７、２７１又は２７５に提示されたアミノ酸配列と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも９８％、少なくとも約９９％又は約１００％同じアミノ酸配列を含む。
【０１７２】
一部の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含み、ここで、軽鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３９−４２、１６６−１７６、２２７−２３４、又は２７２に提示されたアミノ酸配列と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％又は約１００％同じアミノ酸配列を含む。
【０１７３】
一部の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は重鎖及び軽鎖可変領域を含み、ここで、重鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３５−３８、１５５−１６５、２０３、２２３−２２６、２５４、２５７、２７１又は２７５に提示されたアミノ酸配列と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％又は約１００％同じアミノ酸配列を含み；及び軽鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３９−４２、１６６−１７６、２２７−２３４又は２７２に提示されたアミノ酸配列と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％又は少なくとも約１００％同じアミノ酸配列を含む。
【０１７４】
一部の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体、又はその抗原結合部分は次を含む：
（ａ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３５及び３９をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｂ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３６及び４０をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｃ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３７及び４１をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｄ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３８及び４２をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｅ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５５及び１６６をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｆ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５６及び１６７をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｇ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５７及び１６８をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｈ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５８及び１６９をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｉ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５９及び１７０をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｊ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６０及び１７１をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｋ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６１及び１７２をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｌ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６２及び１７３をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｍ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６３及び１７４をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｎ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６４及び１７５をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列、又は
（ｏ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６５及び１７６をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列
を含む。
【０１７５】
特定の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、（ｉ）１−６５の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの組合せ、及び／又は１−６５の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの組合せ；（ｉｉ）３−２の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの組合せ、及び／又は３−２の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの任意の組合せ；（ｉｉｉ）２−１３の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの組合せ、及び／又は２−１３の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの任意の組合せ；（ｉｖ）１−２８の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの組合せ、及び／又は１−２８の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの任意の組合せ；（ｖ）Ｐ２−Ｃ１２の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの組合せ、及び／又はＰ２−Ｃ１２の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの任意の組合せ；（ｖｉ）１３Ｂ４の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの組合せ、及び／又は１３Ｂ４の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの任意の組合せ；（ｖｉｉ）１３Ｆ７の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの組合せ、及び／又は１３Ｆ７の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの任意の組合せ；（ｖｉｉｉ）１５Ａ９の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの組合せ、及び／又は１５Ａ９の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの任意の組合せ；（ｉｘ）Ｐ１−Ａ０３の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの組合せ、及び／又はＰ１−Ａ０３の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの任意の組合せ；（ｘ）Ｐ１−Ａ０８の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの組合せ、及び／又はＰ１−Ａ０８の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの任意の組合せ；（ｘｉ）Ｐ１−Ｆ０２の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの組合せ、及び／又はＰ１−Ｆ０２の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの任意の組合せ；（ｘｉｉ）Ｐ２−Ａ０１の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの組合せ、及び／又はＰ２−Ａ０１の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの任意の組合せ；（ｘｉｉｉ）Ｐ２−Ａ０３の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの組合せ、及び／又はＰ２−Ａ０３の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの任意の組合せ；（ｘｉｖ）Ｐ２−Ｆ０７の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの組合せ、及び／又はＰ２−Ｆ０７の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの任意の組合せ；又は（ｘｖ）Ｐ２−Ｆ１１の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの組合せ、及び／又はＰ２−Ｆ１１の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの任意の組合せを含む。本明細書に開示された各抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体に対するＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列が表２に提供される。本明細書に開示された各抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体に対するＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列は表３に提供される。
【０１７６】
一部の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、
（ａ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ１；
（ｂ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１８のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ２；及び／又は
（ｃ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１９のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ３
を含む。
【０１７７】
一部の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、前記ＶＨ  ＣＤＲのうち１個、２個、又は３個全部を含む。
【０１７８】
一部の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、
（ａ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２９のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ１；
（ｂ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３０のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ２；及び／又は
（ｃ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３１のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ３
を含む。
【０１７９】
一部の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、前記ＶＬ  ＣＤＲのうち１個、２個、又は３個全部を含む。
【０１８０】
一部の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、
（ａ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ１；
（ｂ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１８のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ２；
（ｃ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１９のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ３；
（ｄ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２９のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ１；
（ｅ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３０のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ２；及び／又は
（ｆ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３１のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ３
を含む。
【０１８１】
一部の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合断片は、
（ａ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ１；
（ｂ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ２；及び／又は
（ｃ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ３
を含む。
【０１８２】
一部の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合断片は、前記ＶＨ  ＣＤＲのうち１個、２個、又は３個全部を含む。
【０１８３】
一部の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合断片は、
（ａ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ１；
（ｂ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ２；及び／又は
（ｃ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２８のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ３
を含む。
【０１８４】
一部の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合断片は、前記ＶＬ  ＣＤＲのうち１個、２個、又は３個全部を含む。
【０１８５】
一部の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合断片は、
（ａ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ１；
（ｂ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ２；
（ｃ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ３
（ｄ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ１；
（ｅ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ２；及び／又は
（ｆ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２８のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ３
を含む。
【０１８６】
一部の実施形態において、ヒトＦＡＭ１９Ａ５に特異的に結合する抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合断片は、
（ａ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ１；
（ｂ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ２；及び／又は
（ｃ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ３
を含む。
【０１８７】
一部の実施形態において、抗体又はその抗原結合断片は、前記ＶＨ  ＣＤＲのうち１個、２個、又は３個全部を含む。
【０１８８】
一部の実施形態において、ヒトＦＡＭ１９Ａ５に特異的に結合する抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合断片は、
（ａ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２３のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ１；
（ｂ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２４のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ２；及び／又は
（ｃ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２５のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ３
を含む。
【０１８９】
一部の実施形態において、抗体又はその抗原結合断片は、前記ＶＬ  ＣＤＲのうち１個、２個、又は３個全部を含む。
【０１９０】
一部の実施形態において、ヒトＦＡＭ１９Ａ５に特異的に結合する抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合断片は、
（ａ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ１；
（ｂ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ２；
（ｃ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ３
（ｄ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２３のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ１；
（ｅ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２４のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ２；及び／又は
（ｆ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２５のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ３
を含む。
【０１９１】
一部の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合断片は、
（ａ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ１；
（ｂ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２１のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ２；及び／又は
（ｃ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ３
を含む。
【０１９２】
一部の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合断片は、前記ＶＨ  ＣＤＲのうち１個、２個、又は３個全部を含む。
【０１９３】
一部の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合断片は、
（ａ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３２のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ１；
（ｂ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３３のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ２；及び／又は
（ｃ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３４のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ３
を含む。
【０１９４】
一部の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合断片は、前記ＶＬ  ＣＤＲのうち１個、２個、又は３個全部を含む。
【０１９５】
一部の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合断片は、
（ａ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ１；
（ｂ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２１のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ２；
（ｃ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ３
（ｄ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３２のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ１；
（ｅ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３３のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ２；及び／又は
（ｆ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３４のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ３
を含む。
【０１９６】
一部の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、前記ＣＤＲのうち１個、２個、３個、４個、５個、又は６個を含む。
【０１９７】
本明細書に開示されたＶＨドメイン、又はその一つ以上のＣＤＲは、重鎖、例えば全長重鎖を形成するために定常ドメインに連結され得る。類似に、本明細書に開示されたＶＬドメイン、又はその一つ以上のＣＤＲは、軽鎖、例えば全長軽鎖を形成するために定常ドメインに連結され得る。全長重鎖と全長軽鎖は組み合わせられて全長抗体を形成することができる。
【０１９８】
したがって、特定の実施形態において、抗体軽鎖及び重鎖、例えば本発明の方法において有用な別途の軽鎖及び重鎖を含む抗体が開示される。軽鎖と関連して、特定の実施形態において、本明細書に開示された抗体の軽鎖はカッパ軽鎖である。他の特定の実施形態において、本明細書に開示された抗体の軽鎖はラムダ軽鎖である。さらに他の特定の実施形態において、本明細書に開示された抗体の軽鎖はヒトカッパ軽鎖又はヒトラムダ軽鎖である。特定の実施形態において、ＦＡＭ１９Ａ５（例えば、ヒトＦＡＭ１９Ａ５）ポリペプチドに特異的に結合する、本発明の方法において有用な抗体は、本明細書で開示された任意のＶＬ又はＶＬ  ＣＤＲアミノ酸配列を含む軽鎖を含み、ここで、軽鎖の定常領域はヒトカッパ軽鎖定常領域のアミノ酸配列を含む。特定の実施形態、ＦＡＭ１９Ａ５（例えば、ヒトＦＡＭ１９Ａ５）ポリペプチドに特異的に結合する、本発明の方法において有用なものと開示された抗体は、ＶＬ又はＶＬ  ＣＤＲアミノ酸配列を含む軽鎖を含み、ここで、軽鎖の定常領域はヒトラムダ軽鎖定常領域のアミノ酸配列を含む。ヒト定常領域配列の非制限的な例は当業界に公知であり、例えば、米国特許第５，６９３，７８０号及びＫａｂａｔ  ＥＡ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９１）（同上）を参照する。
【０１９９】
重鎖と関連して、一部の実施形態において、本明細書に開示された抗体の重鎖は、アルファ（α）、デルタ（δ）、エプシロン（ε）、ガンマ（γ）又はミュー（μ）重鎖であり得る。他の特定の実施形態において、本明細書に開示された抗体の重鎖は、ヒトアルファ（α）、デルタ（δ）、エプシロン（ε）、ガンマ（γ）又はミュー（μ）重鎖を含むことができる。一部の実施形態において、ＦＡＭ１９Ａ５（例えば、ヒトＦＡＭ１９Ａ５）に特異的に結合する、本明細書に有用なものと開示された抗体は、ＶＨ又はＶＨ  ＣＤＲアミノ酸配列を含む重鎖を含み、ここで、重鎖の定常領域はヒトガンマ（γ）重鎖定常領域のアミノ酸配列を含む。他の実施形態において、ＦＡＭ１９Ａ５（例えば、ヒトＦＡＭ１９Ａ５）に特異的に結合する、本明細書に開示された抗体は、ＶＨ又はＶＨ  ＣＤＲアミノ酸配列を含む重鎖を含み、ここで、重鎖の定常領域は、本明細書に開示又は当業界に公知のヒト重鎖のアミノ酸配列を含む。ヒト定常領域配列の非制限的な例は当業界に公知であり、例えば、米国特許第５，６９３，７８０号及びＫａｂａｔ  ＥＡ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９１）（同上）を参照する。
【０２００】
一部の実施形態において、ＦＡＭ１９Ａ５（例えば、ヒトＦＡＭ１９Ａ５）に特異的に結合する、本明細書に開示された抗体は、ＶＨ又はＶＨ  ＣＤＲ及びＶＬ又はＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬドメイン及びＶＨドメインを含み、ここで、定常領域はＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＡ又はＩｇＹ免疫グロブリン分子、又はヒトＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＡ又はＩｇＹ免疫グロブリン分子の定常領域のアミノ酸配列を含む。他の特定の実施形態において、ＦＡＭ１９Ａ５（例えば、ヒトＦＡＭ１９Ａ５）に特異的に結合する、本明細書に開示された抗体は、任意のアミノ酸配列を含むＶＬドメイン及びＶＨドメインを含み、ここで、定常領域はＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＡ又はＩｇＹ免疫グロブリン分子、免疫グロブリン分子の任意の亜型（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１及びＩｇＡ２）の定常領域のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態において、定常領域は亜型（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３又はＩｇＧ４）及びアロタイプ（例えば、Ｇ１ｍ、Ｇ２ｍ、Ｇ３ｍ及びｎＧ４ｍ）及びこれらの変異体を含む、自然発生である、ヒトＩｇＧの定常領域のアミノ酸配列を含む（例えば、Ｖｉｄａｒｓｓｏｎ  Ｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｆｒｏｎｔ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．５：５２０（２０１４年１０月２０日オンライン公開）及びＪｅｆｆｅｒｉｓ  Ｒ  ａｎｄ  Ｌｅｆｒａｎｃ  ＭＰ，ｍＡｂｓ  １：４，１−７（２００９）参照）一部の実施形態において、定常領域はヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、又はＩｇＧ４、又はこれらの変異体の定常領域のアミノ酸配列を含む。
【０２０１】
特定の実施形態において、本発明の方法において有用であると開示された抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、Ｆｃエフェクター機能、例えば補体依存性細胞毒性（ＣＤＣ）及び／又は抗体依存性細胞飽食作用（ＡＤＣＰ）を有しない。エフェクター機能はＦｃ領域によって媒介され、先天免疫システムのエフェクター細胞上でＣ１ｑ（補体）及びＩｇＧ−Ｆｃ受容体（ＦｃγＲ）に対して非常に重なった結合部位を含有するので、Ｆｃ領域のＣＨ２ドメインにおいてヒンジ領域と最も近くにある残基が抗体のエフェクター機能を担当する。また、ＩｇＧ２及びＩｇＧ４抗体は、ＩｇＧ１及びＩｇＧ３抗体に比べてより低いレベルのＦｃエフェクター機能を有する。抗体のエフェクター機能は、次のような当業界に公知の異なる接近法によって減少又は回避され得る：（１）Ｆｃ領域を欠如した抗体断片（例えば、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）、又はモノマーＶＨ又はＶＬドメインで構成されたｓｄＡｂ）の使用；（２）糖が付着した残基の欠失又は変更、酵素的に糖の除去、グリコシル化抑制剤の存在の下に培養された細胞において抗体の生成、又はタンパク質をグリコシル化できない細胞（例えば、バクテリア宿主細胞）における抗体の発現（米国特許公開第２０１２０１００１４０号参照）によって生成され得る、無グリコシル化抗体の生成；（３）エフェクター機能が減少したＩｇＧ亜型からのＦｃ領域（例えば、ＩｇＧ２又はＩｇＧ４抗体からのＦｃ領域又はＩｇＧ２又はＩｇＧ４抗体からのＣＨ２ドメインを含むキメラＦｃ領域）の利用（米国特許公開第２０１２０１００１４０号及びＬａｕ  Ｃ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９１：４７６９−４７７７（２０１３）参照）；及び（４）Ｆｃ機能が減少した又はない突然変異を有するＦｃ領域の生成（米国特許公開第２０１２０１００１４０号及びそこに引用された米国出願及びＰＣＴ出願とＡｎ  ｅｔ  ａｌ．，ｍＡｂｓ  １：６，５７２−５７９（２００９）参照）。
【０２０２】
したがって、一部の実施形態において、本発明の方法において有用なものと開示された抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）、又はモノマーＶＨ又はＶＬドメインで構成されたｓｄＡｂである。このような抗体断片は当業界に公知であり、上述されている。
【０２０３】
一部の実施形態において、本明細書に開示された抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、Ｆｃエフェクター機能が減少した又はないＦｃ領域を含む。一部の実施形態において、定常領域はヒトＩｇＧ２又はＩｇＧ４のＦｃ領域のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体はＩｇＧ２／ＩｇＧ４アイソタイプのものである。一部の実施形態において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は、ＩｇＧ４アイソタイプのＩｇＧ抗体からのＣＨ２ドメインとＩｇＧ１アイソタイプのＩｇＧ抗体からのＣＨ３ドメインを含むキメラＦｃ領域、又はＩｇＧ２からのヒンジ領域とＩｇＧ４からのＣＨ２領域を含むキメラＦｃ領域、又は減少する又はないＦｃ機能をもたらす突然変異を有するＦｃ領域を含む。Ｆｃエフェクター機能が減少した又はないＦｃ領域は当業界に公知のものを含む（例えば、Ｌａｕ  Ｃ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９１：４７６９−４７７７（２０１３）；Ａｎ  ｅｔ  ａｌ．，ｍＡｂｓ  １：６，５７２−５７９（２００９）；及び米国特許公開第２０１２０１００１４０号及びそこに引用された米国特許と特許公開及びＰＣＴ公開を参照）。また、Ｆｃエフェクター機能が減少した又はないＦｃ領域は当業者によって容易に製造可能である。
【０２０４】
Ｖ．核酸分子
本発明の他の態様は、本発明の方法において有用な抗体又はその抗原結合部分のいずれか一つを暗号化する一つ以上の核酸分子に関する。核酸は全体細胞に、細胞溶解物に、又は部分的に精製された形態や実質的に純粋な形態で存在し得る。核酸は、アルカリ性／ＳＤＳ処理、ＣｓＣｌバンディング、カラムクロマトグラフィー、制限酵素、アガロースゲル電気泳動及び当業界に公知の他の技術を含む標準技術によって、他の細胞成分又は他の汚染物、例えば他の細胞核酸（例えば、他の染色体ＤＮＡ、例えば自然で単離したＤＮＡに連結された染色体ＤＮＡ）又はタンパク質から精製された時、“単離されたり”又は“実質的に純粋である”（Ｆ  Ａｕｓｕｂｅｌ，ｅｔ  ａｌ．，ｅｄ．（１９８７）Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｇｒｅｅｎｅ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  ａｎｄ  Ｗｉｌｅｙ  Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ参照）。本明細書に開示された核酸は、例えばＤＮＡ又はＲＮＡであり得、イントロン配列を含有してもよく、含有しなくてもよい。特定の実施形態において、核酸はｃＤＮＡ分子である。
【０２０５】
本明細書に開示された核酸は、標準分子生物学技術を用いて得ることができる。ハイブリドーマ（例えば、下記詳述されるヒト免疫グロブリン遺伝子を有する遺伝子導入マウスから製造されたハイブリドーマ）によって発現した抗体の場合、このハイブリドーマによって製造された抗体の軽鎖及び重鎖を暗号化するｃＤＮＡは、標準ＰＣＲ増幅又はｃＤＮＡクローニング技術によって得ることができる。免疫グロブリン遺伝子ライブラリー（例えば、ファージディスプレイ技術を利用）から得られた抗体の場合、この抗体を暗号化する核酸がライブラリーから回収され得る。
【０２０６】
本明細書に開示された特定核酸分子は、本発明の抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体のＶＨ及びＶＬ配列を暗号化するものである。このような抗体のＶＨ配列を暗号化する例示的なＤＮＡ配列がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４３−４６、１７７、２０５、２３５−２４３、２５５、２５８、２７３、及び２７６（表６参照）に提示される。このような抗体のＶＬ配列を暗号化する例示的なＤＮＡ配列は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４７−５０、１７８、２０６、２４４−２５２、２５６、２５９、２７４、及び２７７（表７参照）に提示される。
【０２０７】
【表７】
2021514363.tif 000015
【０２０８】
2021514363.tif 000016
【０２０９】
2021514363.tif 000017
【０２１０】
【表８】
2021514363.tif 000018
【０２１１】
2021514363.tif 000019
【０２１２】
明細書に開示された抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体及びその抗原結合断片の製造方法は、信号ペプチドと共に重鎖及び軽鎖を暗号化するヌクレオチド配列、例えば、それぞれＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４３及び４７、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４４及び４８、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４５及び４９、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４６及び５０、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７７及び１７８を含む細胞株で抗体の関連した重鎖及び軽鎖を発現することを含むことができる。これらのヌクレオチド配列を含む宿主細胞は本発明に含まれる。
【０２１３】
ＶＨ及びＶＬセグメントを暗号化するＤＮＡ断片が得られた後、これらのＤＮＡ断片は、例えば可変領域遺伝子を全長抗体鎖遺伝子、Ｆａｂ断片遺伝子又はｓｃＦｖ遺伝子に転換するために、標準組換えＤＮＡ技術によってさらに操作され得る。それらの操作において、ＶＬ−又はＶＨ−暗号化ＤＮＡ断片は、抗体定常領域又は可撓性リンカーのような他のタンパク質を暗号化する他のＤＮＡ断片に作動可能に連結される。用語“作動可能に連結された”とは、２個のＤＮＡ断片によって暗号化されたアミノ酸配列がイン−フレーム（ｉｎ−ｆｒａｍｅ）を維持するように２個のＤＮＡ断片がつながることを意味する。
【０２１４】
ＶＨ領域を暗号化する単離したＤＮＡは、ＶＨ−暗号化ＤＮＡを重鎖定常領域（ヒンジ、ＣＨ１、ＣＨ２及び／又はＣＨ３）を暗号化する他のＤＮＡ分子に作動可能に連結することによって全長重鎖遺伝子に転換され得る。ヒト重鎖定常領域遺伝子の配列は当業界に公知であり（例えば、Ｋａｂａｔ，Ｅ．Ａ．，ｅｔ  ａｌ．，（１９９１）Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ、Ｆｉｆｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，ＵＳ  Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ  ａｎｄ  Ｈｕｍａｎ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，ＮＩＨ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ  Ｎｏ  ９１−３２４２参照）、これらの領域を含むＤＮＡ断片を標準ＰＣＲ増幅によって得ることができる。重鎖定常領域はＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ、ＩｇＥ、ＩｇＭ又はＩｇＤ定常領域、例えばＩｇＧ２及び／又はＩｇＧ４定常領域であり得る。Ｆａｂ断片重鎖遺伝子の場合、ＶＨ−暗号化ＤＮＡは単に重鎖ＣＨ１定常領域のみを暗号化する他のＤＮＡ分子に作動可能に連結され得る。
【０２１５】
ＶＬ領域を暗号化する単離したＤＮＡは、ＶＬ−暗号化ＤＮＡを軽鎖定常領域ＣＬを暗号化する他のＤＮＡ分子に作動可能に連結することによって全長軽鎖遺伝子に転換され得る。ヒト軽鎖定常領域遺伝子の配列は当業界に公知であり（例えば、Ｋａｂａｔ，Ｅ．Ａ．，ｅｔ  ａｌ．，（１９９１）Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ、Ｆｉｆｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，ＵＳ  Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ  ａｎｄ  Ｈｕｍａｎ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，ＮＩＨ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ  Ｎｏ  ９１−３２４２参照）、これらの領域を含むＤＮＡ断片を標準ＰＣＲ増幅によって得ることができる。軽鎖定常領域はカッパ又はラムダ定常領域であり得る。
【０２１６】
ｓｃＦｖ遺伝子を生成するために、ＶＨ−及びＶＬ−暗号化ＤＮＡ断片が可撓性リンカーを暗号化する、例えば、アミノ酸配列（Ｇｌｙ４−Ｓｅｒ）３を暗号化する他の断片に作動可能に連結され、これによってＶＬとＶＨ領域が可撓性リンカーによって結合された状態でＶＨ及びＶＬ配列が連続単鎖タンパク質として発現し得る（例えば、Ｂｉｒｄ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８８）Ｓｃｉｅｎｃｅ２４２：４２３−４２６；Ｈｕｓｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８８）Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ  ８５：５８７９−５８８３；ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９０）Ｎａｔｕｒｅ  ３４８：５５２−５５４参照）。
【０２１７】
一部の実施形態において、本発明は抗体又はその抗原結合部分を暗号化するヌクレオチド配列を含む単離した核酸分子を含むベクターを提供する。他の実施形態において、ベクターは遺伝子療法に用いられ得る。
【０２１８】
本発明に好適なベクターは、発現ベクター、ウイルスベクター、及びプラスミドベクターを含む。一部の実施形態において、ベクターはウイルスベクターである。
【０２１９】
本発明で用いられたように、発現ベクターが適切な宿主細胞に導入された時、挿入されたコーディング配列の転写及び翻訳のための必須要素、又はＲＮＡウイルスベクターの場合、複製及び翻訳のための必須要素を含有する任意の核酸構成物である。発現ベクターはプラスミド、ファージミド、ウイルス、及びこれらの誘導体を含むことができる。
【０２２０】
ＶＩ．抗体生成
本明細書に開示された抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合断片は、抗体の合成のための当業界に公知の任意の方法によって、例えば化学的合成又は組換え発現技術によって生成され得る。本明細書に開示された方法は、特に言及がない限り、分子生物学、微生物学、遺伝子分析、組換えＤＮＡ、有機化学、生化学、ＰＣＲ、オリゴヌクレオチド合成及び変形、核酸混成化、及び当業界技術範囲内の関連分野の従来の技術を利用する。これらの技術は本明細書で引用された参考資料に詳細に記述されている（例えば、Ｍａｎｉａｔｉｓ  Ｔ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８２）Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ；Ｓａｍｂｒｏｏｋ  Ｊ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８９），Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，Ｓｅｃｏｎｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ；Ｓａｍｂｒｏｏｋ  Ｊ  ｅｔ  ａｌ．，（２００１）Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，ＮＹ；Ａｕｓｕｂｅｌ  ＦＭ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ（１９８７  ａｎｄ  ａｎｎｕａｌ  ｕｐｄａｔｅｓ）；Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ（１９８７  ａｎｄ  ａｎｎｕａｌ  ｕｐｄａｔｅｓ）Ｇａｉｔ（ｅｄ）（１９８４）Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ：Ａ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ，ＩＲＬ  Ｐｒｅｓｓ；Ｅｃｋｓｔｅｉｎ（ｅｄ）（１９９１）Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ  ａｎｄ  Ａｎａｌｏｇｕｅｓ：Ａ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ，ＩＲＬ  Ｐｒｅｓｓ；Ｂｉｒｒｅｎ  Ｂ  ｅｔ  ａｌ．，（ｅｄｓ）（１９９９）Ｇｅｎｏｍｅ  Ａｎａｌｙｓｉｓ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ参照）。
【０２２１】
一部の実施形態において、本明細書に開示された方法において有用な抗体は、例えば、合成、ＤＮＡ配列の遺伝子操作を用いた生成を伴う任意の手段によって製造、発現、生成又は単離した抗体（例えば、組換え抗体）である。特定の実施形態において、このような抗体は生体内動物又は哺乳類（例えば、ヒト）の抗体ジャームライン（ｇｅｒｍｌｉｎｅ）レパートリー内に自然的に存在しない配列（例えば、ＤＮＡ配列又はアミノ酸配列）を含む。
【０２２２】
ＶＩＩ．製薬学的組成物
生理学的に許容される担体、賦形剤又は安定剤（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（１９９０）Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ）のうち、所望する程度の純度を有する本明細書に開示された方法に有用な抗体又はその抗原結合部分を含む組成物が開示される。許容される担体、賦形剤又は安定剤は、用いられた投薬量及び濃度において受領者に非毒性であり、緩衝剤、例えばホスフェート、シトレート及び他の有機酸；アスコルビン酸及びメチオニンを含む抗酸化剤；保存剤（例えば、オクタデシルジメチルベンジルアンモニウムクロリド；ヘキサメトニウムクロリド；ベンザルコニウムクロリド；ベンゼトニウムクロリド、フェノール、ブチル又はベンジルアルコール；アルキルパラベン、例えばメチル又はプロピルパラベン；カテコール；レゾルシノール；シクロヘキサノール；３−ペンタノール；及びｍ−クレゾール）；低分子量（約１０個未満の残基）ポリペプチド；タンパク質、例えば血清アルブミン、ゼラチン、又は免疫グロブリン；親水性重合体、例えばポリビニルピロリドン；アミノ酸、例えばグリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニン、又はリシン；単糖類、二糖類、及びグルコース、マンノース、又はデキストリンを含む他の炭水化物；キレート化剤、例えばＥＤＴＡ；糖、例えばスクロース、マンニトール、トレハロース又はソルビトール；塩形成対イオン（ｓａｌｔ−ｆｏｒｍｉｎｇ  ｃｏｕｎｔｅｒ−ｉｏｎｓ）、例えばナトリウム；金属複合体（例えば、Ｚｎ−タンパク質複合体）；及び／又は非イオン界面活性剤、例えばＴＷＥＥＮ（商標）、ＰＬＵＲＯＮＩＣＳ（商標）又はポリエチレングリコール（ＰＥＧ）を含む。
【０２２３】
特定の実施形態において、製薬学的組成物は、本明細書に開示された抗体又はその抗原結合部分、二重特異的分子、又は免疫コンジュゲート、及び選択的に一つ以上の追加の予防又は治療剤を、製薬学的に許容される担体中に含む。特定の実施形態において、製薬学的組成物は、本明細書に開示された抗体又はその抗原結合部分の有効量、及び選択的に一つ以上の追加の予防又は治療剤を、製薬学的に許容される担体中に含む。一部の実施形態において、抗体は製薬学的組成物に含まれた唯一の活性成分である。本明細書に開示された製薬学的組成物はＦＡＭ１９Ａ５活性を増進、誘発又は活性化し、且つ中枢神経系損傷、退行性脳障害又は神経病性疼痛のような病態を治療するのに有用である。
【０２２４】
非経口製剤に用いられた製薬学的に許容される担体は、水性ビークル、非水性ビークル、抗菌剤、等張剤、緩衝剤、抗酸化剤、局所痲酔剤、懸濁及び分散剤、乳化剤、金属イオン封鎖剤又はキレート化剤及び他の製薬学的に許容される物質を含む。水性ビークルの例は、塩化ナトリウム注射液、リンゲル液、等張デキストロース注射液、滅菌水注射液、デキストロース及び乳酸加リンゲル液を含む。非水性非経口ビークルは、植物起源の固定油、綿実油、トウモロコシ油、胡麻油及ラッカセイ油を含む。静菌又は静真菌濃度の抗菌剤が多回投与容器に包装された非経口製剤に添加されてもよく、これらはフェノール又はクレゾール、水銀含有物質、ベンジルアルコール、クロロブタノール、メチル及びプロピルｐ−ヒドロキシベンゾ酸エステル、チメロサール、ベンザルコニウムクロリド及びベンゼトニウムクロリドを含む。等張剤は塩化ナトリウム及びデキストロースを含む。緩衝剤は、ホスフェート及びシトレートを含む。抗酸化剤は重硫酸ナトリウムを含む。局所痲酔剤はプロカイン塩酸塩を含む。懸濁剤及び分散剤は、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース及びポリビニルピロリドンを含む。乳化剤はポリソルベート８０（ＴＷＥＥＮ（登録商標）８０）を含む。金属イオンの封鎖剤又はキレート化剤はＥＤＴＡを含む。製薬学的担体はまた、水混和性ビークル用エチルアルコール、ポリエチレングリコール及びプロピレングリコールを含み、ｐＨ調整用水酸化ナトリウム、塩酸、クエン酸又は乳酸を含む。
【０２２５】
製薬学的組成物は対象に対する任意の投与経路に合うように製剤化され得る。投与経路の具体的な例は、鼻内、経口、非経口、脊椎腔内、脳室内、肺、皮下、又は心室内経路を含む。皮下、筋肉内又は静脈内注射を特徴とする非経口投与がまた考慮される。注射可能物質が従来の形態で、液体溶液又は懸濁液、注射前に液体中で溶液又は懸濁液になるに適した固体形態、又はエマルジョンとして製造され得る。注射可能物質、溶液及びエマルジョンはまた、一つ以上の賦形剤を含有する。好適な賦形剤は、例えば水、食塩水、デキストロース、グリセロール又はエタノールである。また、所望時には、投与される製薬学的組成物は少量の非毒性補助物質、例えば湿潤又は乳化剤、ｐＨ緩衝剤、安定剤、溶解性増進剤、及び他のそのような製剤、例えば酢酸ナトリウム、モノラウリン酸ソルビタン、オレイン酸トリエタノールアミン及びシクロデキストリンを含有し得る。
【０２２６】
抗体の非経口投与用製剤は、直に注射可能な滅菌溶液、使用直前に溶媒と直に調合可能な凍結乾燥した粉末のような滅菌乾燥可溶性製品、皮下注射用錠剤、直に注射可能な滅菌懸濁液、使用直前にビークルと直に調合可能な滅菌乾燥不溶性製品及び滅菌エマルジョンを含む。溶液は水性又は非水性であり得る。
【０２２７】
静脈内投与される場合、好適な担体は、生理学的食塩水又はリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）、及び増粘及び溶解剤を含有する溶液、例えばグルコース、ポリエチレングリコール、及びポリプロピレングリコール及びこれらの混合物を含む。
【０２２８】
抗体を含む局部用混合物は、局所及び全身投与について説明されたとおりに製造される。得られた混合物は、溶液、懸濁液、エマルジョンなどであり得、クリーム、ゲル、軟膏、エマルジョン、溶液、エリキシル、ローション、懸濁液、チンキ剤、ペースト、フォーム、エアゾール、灌注剤、スプレー、坐薬、包帯、皮膚パッチ又は局部的投与に適した任意の他の製剤として製剤化できる。
【０２２９】
本明細書に開示された抗体又はその抗原結合部分は、例えば吸入による、局部的投与用エアゾールとして製剤化できる（例えば、米国特許第４，０４４，１２６号、第４，４１４，２０９号、及び第４，３６４，９２３号を参考、これらの特許は炎症性疾患、特に喘息の治療に有用なステロイドの分配のためのエアゾールを開示する。）。経気道投与用のこれらの製剤は、噴霧器用のエアゾール又は溶液の形態であるか、又は吸込剤用の超微細粉末であり得、単独で用いられたり又はラクトースのような非活性担体と組み合わせて使用される。この場合、製剤の粒子は、一部の実施形態において、５０ミクロン未満、一部の実施形態において、１０ミクロン未満の直径を有する。
【０２３０】
本明細書に開示された抗体又はその抗原結合部分は、局所又は局部的適用、例えば皮膚及び粘膜に局部的適用、例えば目に局所適用のために、ゲル、クリーム及びローションとして製剤化でき、目に適用又は胸骨内又は髄腔内適用のために製剤化できる。局部的投与は経皮伝達のために考慮され、また目や粘膜投与、又は吸入療法用に考慮される。他の製薬学的に許容される賦形剤と組み合わせて又は単独で抗体の鼻液も投与され得る。
【０２３１】
イオン泳動及び電気泳動装置を含む経皮パッチが当業者にとって公知であり、抗体投与用に使用され得る。例えば、このようなパッチは、米国特許第６，２６７，９８３号、第６，２６１，５９５号、第６，２５６，５３３号、第６，１６７，３０１号、第６，０２４，９７５号、第６，０．１０７１５号、第５，９８５，３１７号、第５，９８３，１３４号、第５，９４８，４３３号、及び第５，８６０，９５７号に開示されている。
【０２３２】
特定の実施形態において、本明細書に開示された抗体又はその抗原結合部分を含む製薬学的組成物は凍結乾燥した粉末であり、これは、溶液、エマルジョン及び他の混合物として投与用に再構成され得る。凍結乾燥した粉末はまた、固形物又はゲルとして再構成及び製剤化されてもよい。凍結乾燥した粉末は、本明細書に開示された抗体又はその抗原結合部分、又はその製薬学的に許容される誘導体を適切な溶媒に溶解することによって製造される。一部の実施形態において、凍結乾燥した粉末は滅菌状態である。溶媒は粉末又は粉末から製造された再構成溶液の安定性又は他の薬物学的成分を改善する賦形剤を含有できる。使用可能な賦形剤は、制限ではないが、デキストロース、ソルビトール、フルクトース、コーンシロップ、キシリトール、グリセリン、グルコース、スクロース又は他の好適な製剤を含む。また、溶媒は、一部の実施形態において、ｐＨが弱中性である緩衝剤、例えばシトレート、ナトリウム又はカリウムホスフェート又は当業者に公知の他の緩衝剤を含有し得る。溶液を後続滅菌濾過した後、当業者に公知の標準条件下で凍結乾燥することによって所望の製剤を提供する。一部の実施形態において、得られた溶液は凍結乾燥用バイアルに配分される。各バイアルは、化合物の単一投薬量又は多回投薬量を含有し得る。凍結乾燥した粉末は適切な条件の下に、例えば約４℃〜室温で保管され得る。
【０２３３】
注射用水によるこの凍結乾燥した粉末の再構成は、非経口投与に使用するための製剤を提供する。再構成のために凍結乾燥した粉末が滅菌水又は他の適切な担体に添加される。正確な量は選択された化合物に依存する。このような量は経験的に決定され得る。
【０２３４】
本明細書に開示された抗体又はその抗原結合部分、二重特異的分子、又は免疫コンジュゲート及び本明細書に開示された他の組成物はまた、治療対象の特定組織、受容体、又は他の身体領域に標的化するように製剤化され得る。多くの標的化方法が当業者に公知されている。全てのこのような標的化方法を本組成物に使用することが考慮される。標的化方法の非制限的な例は、例えば、米国特許第６，３１６，６５２号、第６，２７４，５５２号、第６，２７１，３５９号、第６，２５３，８７２号、第６，１３９，８６５号、第６，１３１，５７０号、第６，１２０，７５１号、第６，０７１，４９５号、第６，０６０，０８２号、第６，０４８，７３６号、第６，０３９，９７５号、第６，００４，５３４号、第５，９８５，３０７号、第５，９７２，３６６号、第５，９００，２５２号、第５，８４０，６７４号、第５，７５９，５４２号及び第５，７０９，８７４号を参照する。特定の実施形態において、本明細書に記載された抗体又はその抗原結合部分は、中枢神経系損傷、退行性脳障害又は神経病性疼痛を治療するために標的化される。
【０２３５】
生体内投与に用いられる組成物は滅菌され得る。例えば、滅菌濾過膜を通した濾過によって容易に滅菌され得る。
【０２３６】
ＶＩＩＩ．キット
本発明の方法に有用な一つ以上の抗体、又はその抗原結合部分、二重特異的分子、又はその免疫コンジュゲートを含むキットが提供される。特定の実施形態において、本明細書に開示された一つ以上の抗体又はその抗原結合部分のような、製薬学的組成物の成分のうち一つ以上で満たされた一つ以上の容器、選択的な使用説明書を含む製薬学的パック又はキットが提供される。一部の実施形態において、キットは、本明細書に開示された製薬学的組成物及び任意の予防又は治療剤を含有する。
【０２３７】
実施例
次の実施例は例示的に提供され、制限的なものではない。
【０２３８】
実施例１：ヒトＦＡＭ１９Ａ５タンパク質の発現及び精製
組換えヒトＦＡＭ１９Ａ５タンパク質を下に説明されたとおりに生成して精製し、この精製されたタンパク質を結合親和性分析に基づく抗体スクリーニング分析に使用した。まず、ＦＡＭ１９Ａ５遺伝子を発現するＬＰＳ−ｈＴプラスミドをバクテリアに形質転換し、タンパク質過発現を誘導した。生成されたＦＡＭ１９Ａ５タンパク質をＮｉ−ＮＴＡ親和性クロマトグラフィー（Ｑｉａｇｅｎ，Ｖａｌｅｎｃｉａ，ＣＡ，ＵＳＡ）を用いて精製した。イミダゾールを漸次高い濃度で使用してＮｉ−カラムからＨｉｓ−タグされたＦＡＭ１９Ａ５タンパク質を除去した。溶液中タンパク質発現をクマシーブリリアントブルー（Ｃｏｏｍａｓｓｉｅ  Ｂｒｉｌｌｉａｎｔ  Ｂｌｕｅ）Ｒ−２５０染料を用いて測定した。ＦＡＭ１９Ａ５イミダゾール含有溶液だけを取り、ＰＢＳを用いてＦＡＭ１９Ａ５タンパク質を濃縮した。濃縮が完了した時、ＦＡＭ１９Ａ５タンパク質の純度と濃度をウェスタンブロット分析を用いて測定した。次いで、濃縮されたタンパク質を用いてＦＡＭ１９Ａ５−特異的抗体に対してスクリーニングした。
【０２３９】
実施例２：抗体ライブラリーＦＡＭ１９Ａ５の生成
１．免疫化
ＦＡＭ１９Ａ５ペプチドを合成し、Ｃ末端端部でＫＬＨ（Ａｎｙｇｅｎ）に共役結合してニワトリの免疫化のための抗原として使用した。合成ペプチドＫＬＨコンジュゲート（ＫＬＨ−ＶＴＬＤＲＤＳＳＱＰＲＲＴＩＡＲＱＴ）（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６２）５０μｇを７５０μＬリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）に混合し、３７℃で３０分間インキュベーションした。その後、２％スクアレン内毒素ＭＰＬ（モノホスホリレート脂質Ａ種）から毒素を除去し、油中水（ｗａｔｅｒ  ｉｎ  ｏｉｌ）エマルジョン補助剤（ＲＩＢＩ＋ＭＰＬ＋ＴＤＭ＋ＣＷＳ補助剤、Ｓｉｇｍａ，Ｓｔ  Ｌｏｕｉｓ，Ｍｏ，ＵＳＡ）を含有するＴＤＷ及びＣＷＳの細胞壁成分のミコバクテリアをエマルジョン化し、その後、これを３匹のニワトリに皮下注射した。ニワトリは免疫化中に略２〜３週間隔で総３回免疫化した。ＦＡＭ１９Ａ５タンパク質を過発現させたＨＥＫ２９３Ｔ細胞の細胞溶解物を用いて、免疫化されたニワトリから得られた抗体の力価を免疫ブロッティングを用いて測定した。３回免疫化させたニワトリの血清を１次抗体として使用した。使用された２次抗体はＨＲＰ（ホースラディッシュペルオキシダーゼ）（ウサギ抗ニワトリＩｇＧ（Ｙ）−ＨＲＰ，Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ  ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｂｉｌｌｅｒｉａ，ＭＡ，ＵＳＡ）に共役結合した抗ニワトリＩｇＧ（Ｙ）多クローン性抗体だった。
【０２４０】
２．免疫化されたニワトリからの単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）ライブラリーの製造
ＴＲＩ試薬（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，Ｃａｒｌｓｂａｄ，ＣＡ，ＵＳＡ）を用いて、前記説明された免疫化されたニワトリの脾臓、骨髄及び滑液嚢（ｓｙｎｏｖｉａｌ  ｓａｃ）からＲＮＡを抽出した。Ｏｌｉｇｏ−ｄＴプライマーとＳｕｐｅｒｓｃｒｉｐｔ（商標）ＩＩＩ第１鎖合成システム（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を用いて第１鎖ｃＤＮＡを合成した。ニワトリの免疫システムから得られたｃＤＮＡに対して、拡張型高忠実度ＰＣＲシステム（Ｒｏｃｈｅ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，ＩＮ，ＵＳＡ）を用いて単鎖可変領域ライブラリーを生成した。各反応においてｃＤＮＡ  １μＬ、各プライマー６０ｐｍｏｌ、１０倍反応緩衝溶液１０μＬ、８μＬの２．５ｍＭ  ｄＮＴＰ（Ｐｒｏｍｅｇａ，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ，ＵＳＡ）、及びＴａｑ  ＤＮＡ重合酵素０．５μＬを水と混合した。最終体積は１００μＬであった。ＰＣＲ反応を次の条件を用いて行った：３０サイクル（ｉ）９４℃で１５秒、（ｉｉ）５６℃で３０秒、及び（ｉｉｉ）７２℃で９０秒、その後７２℃で１０分間最終拡張。約３５０ｂｐの長さを有する断片を含むＰＣＲ生成物を１．５％アガロースゲル上にローディングし、電気泳動後にＱＩＡＧＥＮ  Ｇｅｌ  ＩＩ抽出キット（ＱＩＡＧＥＮ，Ｖａｌｅｎｃｉａ，ＣＡ，ＵＳＡ）を用いてヌクレオチド断片を精製した。精製されたＰＣＲ生成物をＯＤ  ２６０ｎｍで読み取って定量した（１ユニットＯＤ＝５０μＬ／ｍＬ）。
【０２４１】
２次ＰＣＲからの２個のＶＨ及びＶＬ第１生成物を重複拡張ＰＣＲ（オーバーラップエクステンションＰＣＲ）によって無作為に連結した。各ＰＣＲ反応物を１００ｎｇの精製されたＶＬ及びＶＨ生成物、各プライマー６０ｐｍｏｌ、１０倍反応緩衝剤１０μＬ、８μＬの２．５ｍＭ  ｄＮＴＰ、Ｔａｑ  ＤＮＡ重合酵素０．５μＬ及び水と１００μＬの最終体積として混合した。ＰＣＲを次の条件下で行った：２５サイクル（ｉ）９４℃で１５秒、（ｉｉ）５６℃で３０秒、及び（ｉｉｉ）７２℃で２分、その後７２℃で１０分間最終拡張。約７００ｂｐの長さを有する単鎖可変領域断片を含むＰＣＲ生成物を１．５％アガロースゲル上にローディングし、電気泳動後にＱＩＡＧＥＮ  Ｇｅｌ  ＩＩ抽出キット（ＱＩＡＧＥＮ）を用いてヌクレオチド断片を精製した。精製されたＰＣＲ生成物をＯＤ  ２６０ｎｍで読み取って定量した（１ユニットＯＤ＝５０μＬ／ｍＬ）。
【０２４２】
３．ライブラリー、ライゲーション（ｌｉｇａｔｉｏｎ）及び形質転換
ＰＣＲ生成物のｓｃＦｖ断片とベクターｐＣｏｍｂ３Ｘ−ＳＳ（Ｔｈｅ  Ｓｃｒｉｐｐｓ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ＣＡ，ＵＳＡ）をＳｆｉＩ制限酵素で切断（ｄｉｇｅｓｔ）した。精製された重複ＰＣＴ生成物１０μｇをＳｆｉＩ  ３６０ユニット（１６ユニット当たりμｇ  ＤＮＡ，Ｒｏｃｈｅ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｐｌｅａｓａｎｔｏｎ，ＣＡ，ＵＳＡ）、１０倍反応緩衝剤２０μＬ及び水と混合して最終体積２００μＬにした。ｐＣｏｍｂ３Ｘ−ＳＳ緩衝液２０μｇをＳｆｉＩ  １２０ユニット（６ユニット当たりμｇ  ＤＮＡ）、１０倍反応緩衝剤２０μＬ及び水と混合して最終体積２００μＬにした。混合物を５０℃で８時間切断した。その後、ｓｃＦｖ断片（約７００ｂｐ）及びベクター（約３４００ｂｐ）を含む切断された生成物を１％アガロースゲル上にローディングし、ゲル抽出キットＩＩ  ＱＩＡＧＥＮ（ＱＩＡＧＥＮ，Ｖａｌｅｎｃｉａ，ＣＡ，ＵＳＡ）を用いて精製した。ＳｆｉＩ−制限されたｐＣｏｍｂ３Ｘベクター１４００ｎｇと切断されたｓｃＦｖ断片７００ｎｇを５倍リガーゼ緩衝液、１０μＬのＴ４ＤＮＡリガーゼ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，Ｃａｒｌｓｂａｄ，ＣＡ，ＵＳＡ）及び水と混合して最終体積２００μＬにした。混合物を１６℃で１６時間インキュベーションしてライゲーションを行った。
【０２４３】
エタノールで沈殿後、ＤＮＡペレットを水１５μＬに溶解した。ライブラリーを生成するために、ライゲーションサンプルを大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）菌株ＥＲ２７３８（Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｂｉｏｌａｂｓ  Ｉｎｃ，Ｈｉｔｃｈｉｎ，Ｈｅｒｔｆｏｒｄｓｈｉｎｅ，ＳＧ４  ＯＴＹ，Ｅｎｇｌａｎｄ，ＵＫ）にバイブレーター遺伝子（遺伝子パルサー：Ｂｉｏ−Ｒａｄ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｈｅｒｃｕｌｅｓ，ＣＡ，ＵＳＡ）を用いて電気穿孔によって形質転換した。細胞をスーパーブロス（ＳＢ）培地５ｍＬと混合し、３７℃で１時間２５０ｒｐｍで撹拌しながらインキュベーションした。その後、１００ｍｇ／ｍＬカナマイシン３μＬをＳＢ培地１０ｍＬに添加した。ライブラリーサイズを決定するために、培養物サンプル０．１μＬ、１μＬ及び１０μＬを５０μｇ／ｍＬカナマイシンを含有するルリアブロス（ＬＢ）寒天板上に擦り塗った。１時間撹拌後、１００ｍｇ／ｍＬカナマイシン４．５μＬをＬＢ培養物に添加し、さらに１時間追加撹拌した。その後、水中のＶＣＭ１３ヘルパーファージ２ｍＬ（＞１０１１ｃｆｕ／ｍＬ）を１００ｍｇ／ｍＬカナマイシン９２．５μＬを含有する予熱されたＬＢ（１８３ｍＬ）と共にＬＢ培地に添加した。この混合物を２時間３７℃で２５０ｒｐｍでさらに撹拌した。その後、カナマイシン２８０μＬ（５０ｍｇ／ｍＬ）を培養物に添加し、３７℃で一晩撹拌した。翌日、バクテリアペレットを高速遠心分離機（Ｂｅｃｋｍａｎ，ＪＡ−１０ローター）を用いて４℃、３，０００ｇで遠心分離した。その後、バクテリアペレットを用いてファージミドＤＮＡを抽出し、上澄液は滅菌遠心分離瓶に移した。その後、ポリエチレングリコール−８０００（ＰＥＧ−８０００，Ｓｉｇｍａ）８ｇと塩化ナトリウム（ＮａＣｌ，Ｍｅｒｃｋ）６ｇを上澄液に添加した後、氷で３０分間維持した。その後、上澄液を４℃、１５，０００ｇで１５分間遠心分離した。その後、上澄液を捨て、１％  ＢＳＡ−再生を含有するファージペレットＴｒｉｓを緩衝食塩水（ＴＢＳ）に懸濁した。
【０２４４】
実施例３：免疫化された抗原に対するライブラリーパンニング（バイオパンニング）（ｂｉｏ−ｐａｎｎｉｎｇ）
磁気ビーズ（Ｄｙｎａｂｅａｄｓ  Ｍ−２７０Ｅｐｏｘｙ，Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を用いてバイオパンニングを行った。室温で約１×１０７ビーズを組換えＦＡＭ１９Ａ５タンパク質５μｇで室温で２０時間ビーズとタンパク質を共に回転撹拌してコーティングした。コーティングが完了するとビーズをリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）で４回洗浄し、室温で３％  ＢＳＡを含有するＰＢＳ中で１時間遮断した。その後、コーティングされたビーズを前記説明されたファージディスプレイされたｓｃＦｖと共に室温で２時間培養した。抗原コーティングされたビーズに結合しないファージを除去するために、ビーズを０．０５％  Ｔｗｅｅｎ  ２０／ＰＢＳで洗浄した。その後、結合したファージを５０μＬの０．１Ｍグリシン／塩化水素（０．１Ｍグリシン−ＨＣｌ、ｐＨ２．２）で溶出し、塩化水素と共に２Ｍ  Ｔｒｉｓ（Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ９．１）３μＬで中和した。このファージ含有上澄液を用いて大腸菌ＥＲ２７３８細胞を感染させ、ＶＣＳＭ１３ヘルパーファージを用いて一晩増幅し救済した。また、５０μｇ／ｍＬカナマイシンを含有するＬＢ寒天板上にファージ−感染された培養物をブロットすることによって、ファージ−感染された培養物からのファージ力価によって投入（インプット）及び生成（アウトプット）を決定した。翌日、ＰＥＧ−８０００及びＮａＣｌを用いてファージを沈殿させ、次いでこれをバイオパンニングに使用した。バイオパンニングは、前記過程を反復することによって最大で総５回行った。各増幅においてファージをスクリーニングし、ＦＡＭ１９Ａ５タンパク質に対する高い親和性に対して選択した。
【０２４５】
実施例４：ファージＥＬＩＳＡによるクローンの選択
バイオパンニングから選択されたクローンを分析するために、ファージディスプレイされたｓｃＦｖから個別クローンを無作為に選択し、ＥＬＩＳＡを用いてクローンがＦＡＭ１９Ａ５組換えタンパク質に結合することを確認した。ＦＡＭ１９Ａ５組換えタンパク質を０．１Ｍ  ＮａＨＣＯ３緩衝剤に希釈し、タンパク質をウェル当たり１００ｎｇを用いて１６時間４℃で９６ウェルマイクロタイタープレートをコーティングした。翌日、プレートを１時間３７℃で３％  ＢＳＡ／ＰＢＳで遮断した。その後、ファージ上澄液を６％  ＢＳＡ／ＰＢＳと混合し、３７℃で２時間培養した。その後、上澄液を含有するプレートを０．０５％  Ｔｗｅｅｎ  ２０／ＰＢＳで洗浄した。ＨＲＰ−共役結合したＭ１３抗体（ａ−Ｍ１３−ＨＲＰ，Ｐｉｅｒｃｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ，Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，ＩＬ，ＵＳＡ）を１／５，０００に希釈した。希釈された抗体５０μＬをプレートに添加し、３７℃で１時間インキュベーションした。インキュベーション及び洗浄後、色展開のためにプレートに０．０５Ｍクエン酸緩衝溶液、１μｇ／ｍＬの２，２’−アジノ−ビス（３−エチルベンゾチアゾリン−６−スルホン酸）（ＡＢＴＳ，Ａｍｒｅｓｃｏ，Ｓｏｌｏｎ，ＯＨ，ＵＳＡ）、及び０．１％  Ｈ２Ｏ２を添加した。各ウェルに対する吸光度を４０５ｎｍで測定した。図１Ａ、図１Ｂ及び図１Ｃは、第１ニワトリ、第２ニワトリ及び第３ニワトリから由来した３次、４次又は５次バイオパンニングから９６個クローンの分析を示す。
【０２４６】
図１Ａ〜図１Ｃに示すように、ＦＡＭ１９Ａ５組換えタンパク質に結合するとともに高い吸光度を示した２４個クローンを分析し、２４個クローンから独特の配列を有する１３個のｓｃＦｖクローンを得た。クローンの追加選択後、最高の親和性を有するクローン１−６５を得た。
【０２４７】
実施例５：抗ＦＡＭ１９Ａ５−ＩｇＧ２／４抗体の生成
１．哺乳類発現ベクターに抗ＦＡＭ１９Ａ５  ｓｃＦｖのサブクローニング
ＦＡＭ１９Ａ５  ｓｃＦｖ遺伝子配列において、ヒトＣκ遺伝子を軽鎖可変ドメインに連結し、ＣＨ１、ＣＨ２、及びＣＨ３遺伝子のヒト免疫グロブリンアイソタイプＩｇＧ２／４を重鎖可変領域に連結した。制限部位（Ｇｅｎｓｃｒｉｐｔ，ＵＳＡ）を添加することによって各軽鎖と各重鎖を有する抗体を合成した。クローニングを容易にするために、合成された遺伝子を変形された制限部位を有する哺乳類細胞発現ベクターに挿入した。まず、軽鎖遺伝子をＨｉｎｄ  ＩＩＩ及びＸｂａ  Ｉ（Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｂｉｏｌａｂｓ，ＵＫ）制限酵素を用いてベクターに挿入した後、ＮｈｅＩ及びＢａｍＨＩ（Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｂｉｏｌａｂｓ，ＵＫ）制限酵素を用いてベクターに重鎖遺伝子を添加した（図２）。
【０２４８】
２．抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の精製
抗ＦＡＭ１９Ａ５−ＩｇＧ２／４抗体を発現及び精製するために、哺乳類細胞トランスフェクション及び過発現注射システムを用いた。細胞培養体積の１／１０に相応する１５０ｍＭ塩化ナトリウム（ＮａＣｌ，Ｍｅｒｃｋ）中で２μｇ／ｍＬの哺乳類発現ベクターと４μｇのポリエチレンイミン（ＰＥＩ，Ｐｏｌｙｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｗａｒｒｉｎｇｔｏｎ，ＰＡ，ＵＳＡ）を混合した。混合物を室温で１５分間放置した。混合物をＨＥＫ２９３Ｆ細胞（２×１０６細胞／ｍＬ，Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）に加えた後、これを７％  ＣＯ２及び３７℃で６日間１３５ｒｐｍの撹拌条件で１００Ｕ／ｍＬペニシリン及びストレプトマイシン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を含有するＦｒｅｅｓｔｙｌｅ（商標）２９３発現培養培地でインキュベーションした。細胞培養上澄液から発現した抗ＦＡＭ１９Ａ５  ＩｇＧ２／４抗体を精製するために、タンパク質Ａビーズ（ＲｅｐｌｉＧｅｎ，Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ，ＵＳＡ）親和性ゲルクロマトグラフィーを用いた。タンパク質Ａクロマトグラフィー精製された抗体は４〜１２％  Ｂｉｓ−Ｔｒｉｓ勾配ゲル電気泳動上で展開した。タンパク質のサイズ及び収率をクマシーブリリアントブルー染色によって確認した（図３）。
【０２４９】
実施例６：慢性構造的損傷のネズミモデルにおいて抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の生体内投与後機械的高血圧の評価
生体内ＦＡＭ１９Ａ５活性の中和が神経病性疼痛を緩和させ得るかどうかを研究するために、慢性収縮性損傷（ＣＣＩ）のネズミモデルが、Ｂｅｎｎｅｔｔ  ａｎｄ  Ｘｉｅ，Ｐａｉｎ  ３３（１）：８７−１０７（１９８８）、Ａｕｓｔｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｖｉｓ  Ｅｘｐ  ６１：３３９３（２０１２）によって以前に記述された通りに用いられた。坐骨神経の実験的ＣＣＩは神経病性疼痛の研究に最も広く用いられるモデルの一つであり、胴側後足で炎症反応を誘導することが報告された。したがって、例えば、フォンフレイ（Ｖｏｎ  Ｆｒｅｙ）試験で測定された後足引っ込め閾値（ｈｉｎｄ  ｐａｗ  ｗｉｔｈｄｒａｗａｌ  ｔｈｒｅｓｈｏｌｄ）は神経病性疼痛の良い指標として役立つ。
【０２５０】
１．慢性収縮損傷による神経病性疼痛の誘導
簡略に述べると、６週齢雄スプラーグドーリー（Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ）ネズミをＺｏｌｅｔｉｌ  ５０（ＶＩＲＢＡＣ、フランス）及びキシラジン（ＲＯＭＰＵＮ（登録商標），Ｂａｙｅｒ  ＡＧ、ドイツ）ＩＰ（腹腔内注射）で深く麻酔させた。その後、ネズミの腰と大腿部の毛を剃り、ポビドンヨードで皮膚を殺菌した。その後、大腿部側面の皮膚を切開し、大腿2頭筋を通じた鈍的剥離で大腿部中間程度の共通坐骨神経を露出させた。坐骨神経の３分岐（ｔｒｉｆｕｒｃａｔｉｏｎ）近位部に約７ｍｍの神経に付着した組織が存在しないようにし、４個の結紮糸（４．０黒色シルク）で約１ｍｍ間隔で緩く神経を縛った。これによって影響を受ける神経の長さは４〜５ｍｍであった。神経結紮を行った後、筋肉層及び皮膚層を糸のある層に直ちに縫合し、局所抗生剤を適用した。
【０２５１】
２．抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体投与
雄スプラーグドーリー（Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ）ネズミにＺｏｌｅｔｉｌ  ５０（ＶＩＲＢＡＣ、フランス）及びキシラジン（ＲＯＭＰＵＮ（登録商標），Ｂａｙｅｒ  ＡＧ、ドイツ）を用いて麻酔させ、表８に示す通り、４個のグループに分けた。慢性収縮損傷（“ＣＣＩ誘導ネズミ”）（Ｇ３、ｎ＝１０）を有する限り、グループのネズミには脊髄腔内注射によって抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（０．１ｍｌ体積の１０μｇ／ネズミ）が投与された。抗体は１週に１回ずつ総２週間（すなわち、ＣＣＩ誘導７日目及び１４日目）投与された。他のグループのＣＣＩ誘導ネズミ（Ｇ２、ｎ＝１０）は“陰性対照群”として用いられ、単にヒトＩｇＧのみが投与された。他のグループのＣＣＩ誘導ネズミ（Ｇ４、ｎ＝１０）は、神経病性疼痛の治療に用いられる薬物であるプレガバリン（Ｐｒｅｇａｂａｌｉｎ）で治療された。残り群のネズミ（Ｇ１、ｎ＝１０）を“シャム対照群”（すなわち、ＣＣＩ誘導及び投与無し）とした。
【０２５２】
【表９】
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【０２５３】
３．フォンフレイ試験
坐骨神経の慢性収縮後６日及び２１日目に、フォンフレイ試験を用いて足引っ込め閾値を評価した。ネズミをワイヤーメッシュ底を有する装置に入れて約２０分間環境に安定化させた。その後、足引っ込め閾値は、１０秒間隔でメッシュ底を通じてフォンフレイフィラメント（０．５ｍｍ直径）を３回、後足の足裏の表面に適用することによって測定された。
【０２５４】
結果
図５Ａ及び図５Ｂに示すように、ＣＣＩ誘導後、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の生体内投与は足引っ込め閾値を非常に増加させた。投与して初期に（例えば、６日目）、グループ間に大差はなかった。しかし、坐骨神経の慢性収縮後２１日頃まで、治療群（すなわち、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（Ｇ３）又はプレガバリン（Ｇ４））と陰性対照群（Ｇ２）には顕著な差があった。例えば、６日目に、陰性対照群（Ｇ２）及び抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体処理されたネズミ（Ｇ３）に対する平均足引っ込め閾値はそれぞれ、５．１±１．０及び６．６±２．０であった（図５Ａ）。しかし、坐骨神経の慢性収縮後２１日目に、陰性対照群（Ｇ２）の平均閾値は５．５±ｌ．３であるのに対し、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体処理群（Ｇ３）の場合、平均閾値は８．５±１．７であった（ｐ＜０．０１）が、これは神経病性疼痛の治療に用いられる薬物であるプレガバリンのそれと類似である（Ｇ４：８．５±１．７）（図５Ｂ）。このような結果は、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の生体内投与によってＦＡＭ１９Ａ５作用を中和する場合、神経病性疼痛を改善できるということを示す。
【０２５５】
実施例７：抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の生体内投与後の運動機能の評価
抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体処理が運動機能を変化させ得るかどうかを研究するために、ロタロッド（Ｒｏｔａｒｏｄ）試験を用いてＣＣＩ誘導ネズミの運動機能を評価した。この試験はＣＣＩ誘導（Ｃｈｅｎ  Ｌ  ｅｔ  ａｌ．，２０１４，Ｖａｄａｋｋａｎ  ＫＩ  ｅｔ  ａｌ．，２００５）による下肢の疼痛や筋肉弱化に対する良い指標として用いられる。ＣＣＩ誘導及び抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体投与は、実施例１に記載された通りに行われた。
【０２５６】
１．ロタロッド試験
各スプラーグドーリーネズミ（シャム対照群及びＣＣＩ誘導）をロータロッドトレッドミル（Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ａｐｐａｒａｔｕｓ  ７７５０，ＥＴＧＯ  ＢＡＳＩＬＥ  Ｉｎｃ．，Ｉｔａｌｙ）に慎重に配置し、ロタロッドの回転速度を４ｒｐｍから２０ｒｐｍに一定の間隔で増加させた。抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体投与後６日（基準線）及び２１日目に、落ちるまでの遅延時間を記録した。運動機能は、各時間ごとにそれぞれのネズミに対して３回の試験において平均時間から決定された、ロタロッド装置から落ちる遅延時間と見なされた。
【０２５７】
２．結果
図６Ａ及び図６Ｂに示すように、ＣＣＩ誘導後、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の生体内投与は遅延時間を改善した（すなわち、ロタロッド装置にネズミがより長く残った）。坐骨神経の慢性収縮後６日目にグループ間に目立つ差はなかったが（図６Ａ）、２１日目に抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体処理されたネズミは陰性対照群に比べて遥かに大きい遅延時間を示した（Ｇ２：６４．３±１４．１対Ｇ３：９２．８±１１．５）が、これはプレガバリン（Ｇ４：９ｌ．１±ｌ７．８）のそれと類似である（図６Ｂ）。このような結果は、ＣＣＩ誘導後、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の生体内投与が神経病性疼痛を減少させるだけでなく、運動機能を改善できるということを示す。
【０２５８】
実施例８：糖尿病性末梢神経病症のネズミモデルにおいて抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の生体内投与後の機械式痛覚過敏症の評価
神経病性疼痛に対するＦＡＭ１９Ａ５活性を中和する利点をさらに評価するために、糖尿病性末梢神経病症のネズミモデルを使用した。ストレプトゾトシン（ＳＴＺ）を動物（５０ｍｇ／ｋｇ、腹腔内）に投与することによってスプラーグドーリーネズミにおいて糖尿病性末梢神経病症（ＤＰＮ）を誘導した。ＳＴＺ投与後約１週目に血糖レベルを測定し、空腹血糖レベルが３００ｍｇ／ｄＬ以上である動物だけを抗体投与のために選択した。ＳＴＺ投与後約３週目に、選択されたＤＰＮネズミに対照用抗体（正常ヒトＩｇＧ、“ＮＨＩ”）又は抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（３−２）を毎週投与した（総８回投与、すなわちＳＴＺ投与後４週〜１１週目）。抗体は、２５μｇ／ネズミの容量で動物に脊髄腔内に投与された。ナイーブ（健康な）動物を“シャム対照群”（すなわち、ＤＰＮ誘導及び抗体投与無し）として使用した。ＳＴＺ投与後７週目及び１１週目に（すなわち、抗体投与を始めてそれぞれ４週及び８週目に）、実施例６に記述されたようなフォンフレイ試験を用いて動物において足引っ込め閾値を測定した。
【０２５９】
図１０に示すように、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体投与のＤＰＮ動物は、対照用抗体投与のＤＰＮ動物に比べて足引っ込め閾値が著しく高かった。このような閾値の増加は、ＳＴＺ投与後７週目及び１１週目（すなわち、それぞれ、抗体投与後４週目及び８週目）に観察された。
【０２６０】
実施例９：糖尿病性末梢神経病症のネズミモデルにおいて抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の生体内投与後の熱痛覚過敏の評価
その後、熱痛覚過敏に関連した神経病性疼痛に対する抗ＦＡＭ１９Ａ５投与の効果を評価するために、糖尿病性末梢神経病症（ＤＰＮ）がスプラーグドーリーネズミで誘導され、対照群（ＮＨＩ）又は抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（３−２）を、実施例８で記載された通りに動物に投与した。次に、抗体投与を始めて４週目及び８週目に（すなわち、ＳＴＺ投与後７週目及び１１週目に）、動物をホットプレートに置いて温度を直ちに５５℃に上げた。続いて、動物が上昇した温度に反応する（例えば、走ったり足をなめる）のにかかった時間を測定した。
【０２６１】
図１１Ａ及び図１１Ｂに示すように、対照用抗体投与のＤＰＮ動物は、足引っ込め遅延時間が約６秒であって、熱刺激に遥かに敏感であった。対照的に、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体投与のＤＰＮネズミは、４週目及び８週目の両方において顕著に高い足引っ込め遅延時間を有した。このデータは、ＦＡＭ１９Ａ５活性を中和すと、機械的及び熱痛覚過敏に関連した神経病性疼痛が改善され得るということをさらに確認する。
【０２６２】
実施例１０：糖尿病性末梢神経病症のネズミモデルにおいて抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の生体内投与後の感覚神経伝導速度の分析
末梢感覚神経損傷及び／又は機能障害に対する抗ＦＡＭ１９Ａ５投与の効果を決定するために、感覚神経伝導速度（ＳＮＣＶ）試験を行った。この試験は、電気信号が下降する感覚神経から上昇する感覚神経へどれくらい速く移動するかを測定することによって潜在的な神経損傷及び／又は機能障害を確認することに役立ち得る。実施例８に記述された通り、ＳＴＺ投与とともにスプラーグドーリーネズミで糖尿病性末梢神経病症を誘導し、対照群又は抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（３−２）を動物に投与した。次いで、抗体投与を始めて８週目に腓腹神経内の神経伝導速度を測定した。１０ｍＡ及び１０μＶでバイキングクエスト（Ｖｉｋｉｎｇ  Ｑｕｅｓｔ）（Ｎａｔｕｓ  Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ  Ｉｎｃｏｒｐｏｒａｔｅｄ，Ｕ．Ｓ．Ａ．）装備を用いて電気刺激を誘導した。
【０２６３】
図１２に示すように、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体投与のＤＰＮネズミは対照用抗体投与のＤＰＮ動物に比べて改善された伝導速度を有した。この結果は、ＦＡＭ１９Ａ５活性が末梢神経損傷／機能障害を改善及び／又は減少させることができ、これは、以前の実施例で観察された通り、神経病性疼痛を緩和させることに役立ち得ることを示唆する。結論的に、前記結果は、本発明で開示された抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体のようなＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤が神経病性疼痛に適する治療オプションであり得ることを示唆する。
【０２６４】
実施例１１：エピトープマッピング
ヒトＦＡＭ１９Ａ５タンパク質の重複ペプチド断片（Ｆ１−Ｆ５、図９参照）を合成してＢＳＡに共役結合（ｃｏｎｊｕｇａｔｅｄ）させた。ＢＳＡ共役結合したペプチド断片Ｆ１−Ｆ６に対する単クローン性抗体Ｆ１−Ｆ６の結合を、ウェスタンブロット分析によって決定した。ウェスタンブロット分析のために、ＢＳＡ共役結合したＦＡＭ１９Ａ５断片Ｆ１−Ｆ６を、ＳＤＳポリアクリルアミドゲル電気泳動によって分離し、標準手順にしたがってニトロセルロース膜に移した。膜を抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体１−６５（２μｇ／ｍｌ、１−６５−ｓｃＦｖ−ウサギＦｃ−ＳＳＳ）と共に培養し、抗原−抗体複合体をホースラディッシュペルオキシダーゼ（抗ウサギＩｇＧ（Ｆｃ特異的）−ＨＲＰ、１：４，０００希釈）と共役結合した適切な２次抗体で検出した（図９）。図９に示すように、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体１−６５は断片Ｆ５に強く結合する。Ｆ５の他に、断片Ｆ２及びＦ３にも結合する。
【０２６５】
概要及び要約部分を含む詳細な説明部分は、請求項の解釈に用いられるように意図されるということが認められるべきである。概要及び要約部分は、本発明者らによって考察された通り、本発明の全部ではないが、一つ以上の例示的な実施形態を提示でき、したがって、本発明と添付の請求項をいかなる方法でも制限しようと意図しない。
【０２６６】
本発明は、明示された機能とこれらの関係の実施形態を例示する機能的構成要素の補助下に以上開示された。それらの機能的構成要素の境界は、説明の便宜のために本明細書で恣意的に限定された。明示された機能とそれらの関係が適切に行われる限り、代案の境界も限定され得る。
【０２６７】
特定の実施形態に関する前述した説明は、本発明の通常の性質を十分に表すことができ、第三者は当業界の知識を適用することによって本発明の一般概念から逸脱することなく過度な実験無しでこのような特定の実施形態を様々な用途に合わせて容易に変形及び／又は改造することができる。したがって、このような改造及び変形は、本明細書に提示された教示及び指針に基づいて開示された実施形態の等価物の意味と範囲内にあるように意図される。本明細書で用いられた語句又は用語は制限ではなく説明のためのものであることが理解されるべきであり、本明細書の用語又は語句は教示及び指針に照らして当業者によって解釈されるべきである。
【０２６８】
本発明の範囲及び領域は、前記説明された例示の実施形態のいずれによっても制限されず、請求項及びその等価物によってのみ限定されるべきである。
【０２６９】
本明細書で引用された全ての刊行物、特許、特許出願、インターネットサイト及び受託番号／データベース配列（ポリヌクレオチド及びポリペプチド配列の両方を含む）は、各個別刊行物、特許、特許出願、インターネットサイト又は受託番号／データベース配列が参考として含まれるように具体的にそして個別的に簡潔に適示されたのと同じ範囲で全ての目的のためにその全体が参考として本明細書に含まれる。
【０２７０】
本ＰＣＴ出願は２０１８年４月２４日付に提出された米国仮出願第６２／６６１，９２３号の優先権を主張し、それはその全体が本明細書に参考として含まれる。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図１Ｃ】
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【図２】
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【図３】
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【図４Ａ】
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【図４Ｂ】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【図６Ａ】
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【図６Ｂ】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
2021514363.tif 000034
【図１０】
2021514363.tif 000035
【図１１Ａ】
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【図１１Ｂ】
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【図１２】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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