(57)【要約】  本発明は、液体領域から発する第１および第２の測定信号を使用して、少なくとも１つの細胞および／または少なくとも１つの粒子を含む液体を検査するための方法に関する。方法には、第１の測定信号を読み取り、第１の測定信号を分析するステップ、およびｂ．分析された第１の測定信号を使用して、第２の測定信号が検出されて完全に読み取られたか、検出された第２の測定信号が完全に読み取られたか、または検出された第２の測定信号（２０）の読み取りが中断されたかを決定するステップがある。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
液体領域（６）から発する第１および第２の測定信号（１５、２０）を使用して、少なくとも１つの細胞（３）および／または少なくとも１つの粒子を含む液体（４）を自動的に検査する方法であって、
ａ．前記第１の測定信号（１５）を読み取り、前記第１の測定信号（１５）を分析するステップと、
ｂ．分析された前記第１の測定信号（１５）を使用して、前記第２の測定信号（２０）が検出されて完全に読み取られたかどうか、検出された前記第２の測定信号が完全に読み取られたかどうか、または検出された前記第２の測定信号（２０）の前記読み取りが完全に読み取られたかどうか、または検出された前記第２の測定信号（２０）の前記読み取りが中断されたかどうかを決定するステップと、を含む、方法。
【請求項２】
ａ．前記第１の測定信号（１５）は、少なくとも１つの細胞（３）および／または少なくとも１つの粒子が前記液体領域（６）に配置されているかに関して分析され、および／または
ｂ．前記第１の測定信号（１５）は、所定の数の細胞および／または粒子が前記液体領域に配置されているかに関して分析されることを特徴とする、
請求項１に記載の方法。
【請求項３】
ａ．少なくとも１つの細胞（３）および／または少なくとも１つの粒子が前記液体領域（６）に配置されているかを決定するために、前記液体領域（６）の光学的特性は、前記第１の測定信号（１５）に基づいて決定され、または
ｂ．前記第１の測定信号（１５）は、明視野画像を生成するために使用され、少なくとも１つの細胞（３）および／または１つの粒子が前記液体領域（６）に配置されているかを決定するために、前記液体領域（６）の光学的特性は前記明視野画像に基づいて決定されることを特徴とする、
請求項２に記載の方法。
【請求項４】
ａ．細胞（３）および／または粒子が前記液体領域（６）に配置されていない場合、および／または前記所定の数の細胞および／または粒子が前記液体領域（６）に配置されていない場合、前記第２の測定信号（２０）は検出および読み取られず、および／または
ｂ．細胞（３）および／または粒子が前記液体領域（６）に配置されていない場合、および／または前記所定の数の細胞および／または粒子が前記液体領域に配置されていない場合、前記第２の測定信号（２０）の読み取りは中断されることを特徴とする、
請求項２または３に記載の方法。
【請求項５】
ａ．前記第２の測定信号（２０）は、少なくとも１つの細胞（３）および／または１つの粒子が前記液体領域（６）に配置されている場合、および／または前記所定の数の細胞（３）および／または粒子が前記液体領域（６）に配置されている場合に検出され、および／または
ｂ．前記第２の測定信号（２０）は、少なくとも１つの細胞（３）および／または１つの粒子が前記液体領域（６）に配置されている場合、および／または前記所定の数の細胞（３）および／または粒子が前記液体領域（６）に配置されている場合に完全に読み取られることを特徴とする、
請求項２から４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
検出された前記第２の測定信号（２０）は、
ａ．前記液体領域（６）が蛍光を発しない、および／または前記液体領域（６）に含まれる細胞（３）が蛍光を発しない、および／または前記液体領域（６）に含まれる粒子が蛍光を発しないかどうか、および／または
ｂ．前記液体領域（６）が蛍光を発する、および／または前記液体領域（６）に含まれる細胞（３）が蛍光を発する、および／または前記液体領域に含まれる粒子が蛍光を発するかどうかを決定するために分析されることを特徴とする、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
ａ．前記液体領域（６）は、第１の照明光（８）で照らされ、次に、前記第１の測定信号（１５）は、前記液体領域（６）から発せられ、および／または
ｂ．前記液体領域（６）は、第２の照明光（１９）で照らされ、次に、前記第２の測定信号（２０）は前記液体領域（６）から発せられることを特徴とする、
請求項１から６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
ａ．細胞（３）および／または粒子が前記液体領域（６）に配置されていない場合、および／または前記所定の数の細胞および／または粒子が前記液体領域（６）に配置されていない場合、前記液体領域（６）は前記第１の照明光（８）で再び照らされ、および／または
ｂ．次に、前記第２の照明光（１９）は、細胞（３）および／または粒子が前記液体領域（６）に配置されている場合、および／または前記所定の数の細胞および／または粒子が前記液体領域（６）に配置されている場合にのみ放出されることを特徴とする、
請求項７に記載の方法。
【請求項９】
ａ．前記液体領域（６）は、前記第１の照明光（８）および前記第２の照明光（１９）によって同時に照らされ、および／または
ｂ．前記液体領域（６）は、細胞（３）および／または粒子が前記液体領域（６）に配置されているか、および／または前記所定の数の細胞および／または粒子が前記液体領域（６）に配置されているかを決定しながら、前記第２の照明光（１９）で照らされ、および／または
ｃ．同時に、前記液体領域（６）は、前記第１の照明光（８）および前記第２の照明光（１９）で照らされ始めることを特徴とする、
請求項７または８に記載の方法。
【請求項１０】
ａ．前記第１の測定信号（１５）を読み取るよりも前記第２の測定信号（２０）を読み取る方がより長い時間がかかり、および／または
ｂ．前記第１の測定信号（１５）を分析するよりも前記第２の測定信号（２０）を分析する方がより長い時間がかかり、および／または
ｃ．細胞（３）および／または粒子が前記液体領域（６）に配置されていない場合、および／または前記所定の数の細胞および／または粒子が前記液体領域に配置されていない場合、さらなる第１の測定信号（１５）が読み取られ、分析されることを特徴とする、
請求項１から９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
液体領域（６）から発する第１および第２の測定信号（１５、２０）を使用して、少なくとも１つの細胞（３）および／または少なくとも１つの粒子を含む液体（４）を自動的に検査する方法であって、
ａ．少なくとも１つの細胞（３）、特に１つの単一細胞、および／または少なくとも１つの粒子、特に１つの単一粒子が前記液体領域（６）に配置されているかを決定するために、前記第２の測定信号（２０）は読み取られ、分析され、および
ｂ．細胞（３）および／または粒子が前記液体領域（６）に配置されている場合、前記細胞（３）および／または前記粒子の特性を決定するために、前記第１の測定信号（１５）は読み取られ、分析され、前記第２の測定信号（２０）の読み取りは、前記第１の測定信号（１５）の読み取りよりも時間がかかり、および／または前記第２の測定信号（２０）の分析は、前記第１の測定信号（１５）の分析よりも時間がかかる、方法。
【請求項１２】
ａ．前記第２の測定信号（２０）は、前記液体領域（６）内の少なくとも１つの細胞（３）および／または少なくとも１つの粒子の位置を決定するために分析され、および／または
ｂ．前記第２の測定信号（２０）は、蛍光細胞（３）および／または蛍光粒子が前記液体領域（６）内に配置されているかに関して分析され、および／または
ｃ．前記第２の測定信号（２０）は、所定の数の蛍光細胞（３）および／または粒子が前記液体領域（６）に配置されているかに関して分析されることを特徴とする、
請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記第２の測定信号（２０）は蛍光画像を生成するために使用され、前記蛍光画像は、蛍光細胞（３）および／または蛍光粒子が前記液体領域（６）に配置されているか、および／または前記所定の数の蛍光細胞（３）および／または粒子が前記液体領域（６）に配置されているかを決定するために使用されることを特徴とする、請求項１１または１２に記載の方法。
【請求項１４】
ａ．前記液体領域（６）は、第１の照明光（８）で照らされ、次に、前記第１の測定信号（１５）は、前記液体領域（６）から発せられ、および／または
ｂ．前記液体領域（６）は、第２の照明光（１９）で照らされ、次に、前記第２の測定信号（２０）は前記液体領域（６）から発せられることを特徴とする、
請求項１１から１３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
ａ．蛍光細胞（３）および／または蛍光粒子が前記液体領域（６）に配置されていない場合、前記液体領域（６）は、前記第２の照明光（１９）で再び照らされ、および／または
ｂ．前記所定の数の蛍光細胞および／または蛍光粒子が前記液体領域に配置されていない場合、前記液体領域（６）は、前記第２の照明光で再び照らされることを特徴とする、
請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
細胞（３）および／または粒子が前記液体領域（６）に配置されていない場合、および／または所定の数の蛍光細胞（３）および／または蛍光粒子が前記液体領域に配置されていない場合、検出されたさらなる第２の測定信号（２０）は読み取られ、分析されることを特徴とする、請求項１１から１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７】
ａ．蛍光細胞（３）および／または蛍光粒子が前記液体領域（６）に配置されている場合、および／または前記所定の数の蛍光細胞（３）および／または蛍光粒子が前記液体領域に配置されている場合、前記第２の照明光（１９）による前記液体領域（６）の照明は終了し、および／または
ｂ．前記第１の照明光（８）は、蛍光細胞（３）および／または蛍光粒子が前記液体領域（６）に配置されていると決定された後、および／または前記所定の数の蛍光細胞（３）および／または蛍光粒子が前記液体領域に配置されていると決定された後に発せられ、および／または
ｃ．前記第１の照明光は、蛍光細胞（３）および／または蛍光粒子が前記液体領域（６）に配置されているかを決定しながら、および／または前記所定の数の蛍光細胞（３）および／または蛍光粒子が前記液体領域に配置されているかを決定しながら発せられることを特徴とする、
請求項１４から１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８】
前記液体（４）、特に前記液体領域（６）はディスペンサ（２）に配置され、および／または前記ディスペンサ（２）によって分注され得ることを特徴とする、請求項１から１７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９】
ａ．分注プロセスは、前記第１および／または第２の測定信号（１５、２０）に基づいて制御され、および／または
ｂ．液体の分注は、ドロップオンデマンド法を使用して実行されることを特徴とする、
請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
ａ．保管場所が決定され、前記保管場所が決定された後、特にキャリア（１０）の容器に分注される前記液体（４）は分注され、および／または
ｂ．分注される前記液体（４）の保管場所は、蛍光に依存し、および／または前記細胞（３）および／または前記粒子が蛍光を発するかどうかに依存し、および／または
ｃ．キャリア（１０）は複数の容器を有し、容器、特に第１の容器群は、蛍光細胞（３）および／または蛍光粒子を含む液体（４）を受け入れることを目的としており、さらなる容器、特に第２群の容器は、蛍光細胞（３）および／または蛍光粒子を含まない液体（４）を受け入れることを目的としており、および少なくとも１つの蛍光細胞（３）および／または少なくとも１つの蛍光粒子を含む前記液体は、前記ディスペンサ（２）から前記容器、特に前記第１群の容器に供給され、および／または蛍光細胞（３）および／または蛍光粒子を含まない前記液体は、前記ディスペンサ（２）から別の容器、特に前記第２群の容器に供給され、および／または
ｄ．前記第１の測定信号および／または前記第２の測定信号に応じて、分注される前記液体は、前記キャリア（１０）の容器またはリジェクト容器に供給されることを特徴とする、
請求項１から１９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１】
前記分注プロセスは
ａ．少なくとも１つの他の細胞および／または少なくとも１つの他の粒子が別の液体領域に配置されているか、および／または所定の数の他の細胞および／または他の粒子が配置されているか、および／または
ｂ．１つの他の蛍光細胞および／または１つの他の蛍光粒子が別の液体領域に配置されているか、および／または所定の数の他の蛍光細胞および／または他の蛍光粒子が配置されているかに依存することを特徴とする、請求項１から２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２】
前記他の液体領域は前記液体領域（６）の上流に配置されることを特徴とする、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
ａ．前記第１の測定信号（１５）は、光信号、特に明視野光であり、および／または
ｂ．前記第２の測定信号（２０）は、光信号、特に蛍光であり、および／または
ｃ．前記第１の測定信号（１５）および前記第２の測定信号（２０）は、異なる測定方法から生じることを特徴とする、
請求項１から２２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２４】
ａ．前記明視野光は明視野画像を生成するために使用され、および／または
ｂ．前記蛍光は、蛍光画像を生成するために使用されることを特徴とする、
請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
ａ．前記明視野画像と前記蛍光画像とは相互に比較され、および／または
ｂ．前記細胞および／または前記粒子の位置を決定するために、前記明視野画像および前記蛍光画像は互いに比較され、および／または
ｃ．前記細胞および／または前記粒子の蛍光物質の位置および／またはサイズを決定するために、前記明視野画像と前記蛍光画像とが互いに比較されることを特徴とする、
請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
請求項１から２５のいずれか一項に記載の方法を実施するための装置（１）。
【請求項２７】
前記装置（１）は、少なくとも１つの細胞（３）および／または１つの粒子を含む液体（４）を分注するためのディスペンサ（２）と、前記ディスペンサ（２）の前記少なくとも１つの液体領域（６）を照らすための前記第１の照明光（８）を放射するための第１の光源（７）を有する光学検出装置（５）と、前記ディスペンサ（２）の前記少なくとも１つの液体領域（６）を照らすための前記第２の照明光（１９）を放射する第２の液体領域（１８）と、少なくとも１つの検出手段と、少なくとも１つの読み出し装置および少なくとも１つの分析装置（１７）とを有することを特徴とする、請求項２６に記載の装置（１）。
【請求項２８】
ａ．前記光学検出装置（５）は複数の検出手段を有し、第１の検出手段（１４）は前記第１の測定信号（１５）を検出し、第２の検出装置（２１）は前記第２の測定信号（２０）を検出し、および／または
ｂ．前記光学検出装置は複数の読み出し装置を有し、第１の読み出し装置は検出された前記第１の測定信号を読み取り、第２の読み出し装置は検出された前記第２の測定信号を読み取ることを特徴とする、
請求項２６または２７に記載の装置（１）。
【請求項２９】
ａ．前記分析装置（１７）は、前記第１の測定信号（１５）に基づいて、少なくとも１つの細胞および／または粒子が前記液体領域（６）に配置されているか、および／または所定の数の細胞および／または粒子が前記液体領域（６）に配置されているかを決定し、および／または
ｂ．前記分析装置（１７）は、前記第２の測定信号（２０）に基づいて、蛍光細胞（３）および／または蛍光粒子が前記液体領域（６）に配置されていないか、または１つの単一の蛍光細胞および／または１つの単一の蛍光粒子が前記液体領域に配置されているか、または複数の蛍光細胞および／または複数の蛍光粒子が前記液体領域に配置されているかを決定することを特徴とする、
請求項２６から２８のいずれか一項に記載の装置。
【請求項３０】
ａ．前記光学検出装置（５）は、少なくとも１つの画像、特に明視野画像および／または蛍光画像を生成するための少なくとも１つの撮像装置を有し、または
ｂ．前記光学検出装置（５）は複数の撮像装置を有し、第１の撮像装置（１６）は少なくとも１つの第１の画像、特に明視野画像を生成し、第２の撮像装置（２２）は少なくとも１つの第２の画像、特に蛍光画像を生成することを特徴とする、
請求項２６から２９のいずれか一項に記載の装置（１）。
【請求項３１】
前記光学検出装置（５）は、その光軸（１３）が、前記液体（４）の分注方向（Ｒ）に横方向、特に垂直方向であるように配置されたレンズ（１２）を有することを特徴とする、請求項２６から３０のいずれか一項に記載の装置（１）。
【請求項３２】
前記装置（１）は、分注された前記液体（４）を受け入れるために、前記ディスペンサ（２）および／またはキャリア（１０）を移動させるための制御装置（２８）および変位装置（２９）を有し、前記制御装置（２８）は、前記第１および／または第２の測定信号（１５、２０）に基づいて前記変位装置（２９）を制御することを特徴とする、請求項２６から３１のいずれか一項に記載の装置（１）。
【請求項３３】
前記ディスペンサから分注された液体を偏向させるための偏向装置および／または前記ディスペンサから分注された液体を吸引除去するための吸引装置を特徴とする、請求項２６から３２のいずれか一項に記載の装置（１）。
【請求項３４】
ａ．前記第１の照明光（８）および前記第１の測定信号（１５）は、少なくとも部分的に共通のビーム経路を有し、および／または
ｂ．前記第２の照明光（１９）および前記第２の測定信号（２０）は、少なくとも部分的に共通のビーム経路を有し、および／または
ｃ．前記第１の照明光（８）および前記第２の照明光（１９）は、少なくとも部分的に共通のビーム経路を有することを特徴とする、
請求項２６から３３のいずれか一項に記載の装置。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、少なくとも１つの細胞および／または少なくとも１つの粒子を含む液体を検査するための方法に関する。本発明はまた、そのような方法を実行するための装置に関する。
【背景技術】
【０００２】
モノクローナル抗体および他のタンパク質などの活性物質は、いわゆるモノクローナル細胞株の助けを借りて産生されることが先行技術から知られている。これらはすべて単一の母細胞に由来する細胞の集団である。モノクローナル細胞株の生産が必要なのは、これが、一定の再現可能な品質で活性物質を産生するために、集団内のすべての細胞がほぼ同一のゲノムを持つことを保証する唯一の方法だからである。
【０００３】
モノクローナル細胞株を作製するために、細胞をマイクロタイタープレートの容器に個別に移す。移入される細胞は、宿主細胞株を遺伝子改変し、これらの改変された細胞を分離することによって産生される。個々の細胞は、例えば、分注装置によってマイクロタイタープレートに堆積する。
【０００４】
分注プロセスを可能な限り迅速に実行するというユーザの要件がある。これは、実験室で毎日多数の細胞が処理されることが理由の要件である。しかし、ユーザには、細胞の迅速な処理を妨げる要件もある。例えば、ユーザは、分注装置において、マイクロタイタープレート内の保管場所が細胞に依存するという要件を有する。特に、例えば、蛍光細胞は、非蛍光細胞とは異なるマイクロタイタープレートの領域に配置されるべきである。
【０００５】
既知のディスペンサはこれらの要件を満たすことができない。たとえば、蛍光細胞を決定する場合、使用可能な蛍光画像を生成できるように、長時間露光を選択する必要がある。しかし、実際には、この時間は利用できないことがよくある。また、露光時間が長いため、多数の細胞を分注することはできない。しかしながら、露光時間を短くすることは、蛍光画像が使用できないこと、または例えば、保管場所が蛍光画像に基づいて正確に決定することができないことを意味する。この点で、自動で迅速な分注は実装できない。さらに、長時間露光または繰り返し露光は、蛍光色素の退色につながる。したがって、可能であれば、各細胞が１回だけ照らされ、その後、必要な期間だけ照らされるようにする必要がある。そうしないと、測定結果が歪んでしまう。
【０００６】
さらに、既知の分注装置では、小さな細胞および／またはほとんど透明な細胞は認識できないか、またはかろうじてのみ認識できる。したがって、そのような細胞の保管場所を自動的に決定することはできない。したがって、これらの細胞が実験室での操作中に失われたり、手動で目的のキャリアに配置しなければならないリスクがある。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明の１つの目的は、上記の不利な点の少なくともいくつかが生じない方法を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
この目的は、液体領域から発する第１および第２の測定信号を使用して、少なくとも１つの細胞および／または少なくとも１つの粒子を含む液体を検査するための方法によって達成され、この方法は、以下のステップ、すなわち、
ａ．第１の測定信号を読み取り、第１の測定信号を分析するステップと、
ｂ．分析された第１の測定信号を使用して、第２の測定信号が検出されて完全に読み取られたかどうか、検出された第２の測定信号が完全に読み取られたかどうか、または検出された第２の測定信号の読み取りが完全に読み取られたかどうか、または検出された第２の測定信号（２０）の読み取りが中断されたかどうかを決定するステップとを含む。
【０００９】
前述の方法ステップａおよびｂは、所与の順序で実行される。
【００１０】
本発明による方法では、２つの異なる測定方法が使用される場合、液体、特に液体領域の検査が非常に迅速に実行され得ることが認識された。特に、第１の測定方法を使用することができ、その結果、第１の測定信号が得られる。第１の測定方法の利点は、第１の測定信号を迅速に読み取ったり分析したりできることである。対照的に、第１の測定信号を読み取るおよび／または分析するよりも、第２の測定方法から生じる第２の測定信号を読み取るおよび／または分析するためにより多くの時間が必要とされる。しかしながら、以下でより詳細に説明されるように、第２の測定信号に基づいて、液体および／または液体領域中の細胞および／または粒子の、ユーザに関連する少なくとも１つの特性、特に物理的または光学的特性を正確に決定できる。
【００１１】
本発明によれば、第２の測定信号の第１の測定信号への依存性は、検査プロセス全体をより迅速に実行できるという利点を提供することが認識された。したがって、第１の測定信号を分析する際に、第２の測定信号の検出および／または読み取りの必要がないことが判明した場合、第２の測定信号は検出されないか、または第２の測定信号のすでに開始された読み取りは取り消される。
【００１２】
第１の測定信号に含まれる情報を読み取り、第１の測定信号を分析した後、液体の検査が中断されない場合、第２の測定信号が検出され、検出された第２の測定信号に含まれる情報の読み取りが完了する。これは、第２の測定信号の読み取りプロセスが完全に実行されることを意味する。
【００１３】
あるいは、すでに開始された第２の測定信号に含まれる情報の読み取りを完了することができる。この場合、第２の測定信号は、第１の測定信号と同時にまたは異なる時間に、特に第１の測定信号の分析プロセスが終了する前に検出されていてもよい。
【００１４】
液体は、液体中に見られる細胞の成長を促進することができる細胞懸濁液、および／または粒子懸濁液であり得る。粒子はガラスまたはポリマービーズであり、および／または細胞のサイズに匹敵するサイズを有する。
【００１５】
第１の測定信号は光信号であり得る。特に、第１の測定信号は、液体領域から発する明視野光であり得る。第２の測定信号は、光信号であり得る。特に、第２の測定信号は、液体領域から発する蛍光であり得る。第１の測定信号は、第２の測定信号が生じる第２の光学的測定方法とは異なる第１の光学的測定方法から生じることができる。それぞれの光学的測定方法は、明視野法、暗視野法、位相差法、共焦点法またはラマン分光法であり得る。
【００１６】
液体領域は、第１および第２の測定信号が発生する液体の領域である。液体領域は、特に光学的に見られる領域に対応する。
【００１７】
液体の自動検査は、メソッドのステップがコンピューターを使用して実行されるため、ユーザが手動で実行する必要がないことを意味する。
【００１８】
特定の実施形態では、第１の測定信号を分析して、少なくとも１つの細胞、特に１つの単一細胞、および／または少なくとも１つの粒子、特に１つの単一粒子が液体領域に配置されているかを決定することができる。特に、第１の測定信号は、所定の数の細胞および／または粒子が液体領域に配置されているかに関して分析することができる。
【００１９】
細胞および／または粒子が液体領域に配置されないように、所定の数は０の値を有することができる。あるいは、所定の数は、０より大きい値、特に正確に１を有することができる。所定の数は、特に方法が実行される前に、ユーザによってまたは自動的に設定することができる。
【００２０】
少なくとも１つの、特に正確に１つの単一細胞および／または少なくとも１つの、特に正確に１つの単一粒子が液体領域に配置されているかを決定する簡単な方法は、検出された第１の測定信号に基づいて液体領域の光学的特性を決定することを含み得る。例えば、液体領域のコントラストを決定することにより、細胞および／または粒子が液体領域に配置されているかを決定することができる。もちろん、少なくとも１つの、特に正確に１つの単一細胞および／または少なくとも１つの、特に正確に１つの単一粒子が液体領域に配置されているかを決定するために、液体領域のさらなる光学的特性を定義することもできる。
【００２１】
検出された第１の測定信号は、明視野画像を生成するために使用できる。さらに、少なくとも１つの、特に正確に１つの単一細胞および／または少なくとも１つの、特に正確に１つの単一粒子が液体領域に配置されているかを決定するために、液体領域の光学的特性は、明視野画像に基づいて決定することができる。
【００２２】
明視野画像は非常に迅速に生成できるため、これは有利である。この点で、１つの、特に正確に１つの単一細胞および／または１つの、特に正確に１つの単一粒子が液体領域に配置されているか、および／または所定の数の細胞および／または粒子が液体領域に配置されているかを非常に迅速に決定することができる。さらに、明視野画像の生成は、細胞および／または粒子を容易に検出できるという利点を提供する。さらに、蛍光物質を含まない細胞および／または粒子の領域も明視野画像で調べることができる。明視野画像では、細胞および／または粒子、特にサイズおよび／または位置および／または形態および／または粒度および／または色などのそれらの特性も正確に決定することができる。
【００２３】
液体領域に細胞および／または粒子が配置されていない場合、第２の測定信号は検出されないため、読み取られない。さらに、液体領域に所定の数の細胞および／または粒子が配置されていない場合、第２の測定信号は検出されないため、読み取られない。
【００２４】
さらに、細胞および／または粒子が液体領域に配置されていない場合、第２の測定信号のすでに開始された読み取りが中断される可能性がある。さらに、液体領域に所定の数の細胞および／または粒子が配置されていない場合、開始された第２の測定信号の読み取りが中断される可能性がある。結果として、細胞および／または粒子が液体領域に配置されているか、および／または所定の数の細胞および／または粒子が液体領域に配置されているかに応じて、第２の測定信号が検出されたか、および／または検出された第２の測定信号のすでに開始された分析が完了したかどうかを決定することができる。これは、液体領域における少なくとも１つの、特に１つの単一細胞および／または特に１つの単一粒子の存在を非常に迅速に決定することができるという点で有利である。
【００２５】
特定の実施形態では、第２の測定信号は、少なくとも１つの細胞、特に正確に１つの単一細胞、および／または少なくとも１つの粒子、特に正確に１つの単一粒子が液体領域に配置されている場合に検出および読み取ることができる。これは、第２の測定信号が検出されて完全に読み取られることを意味する。この目的のために、検出手段の曝露時間は、細胞および／または粒子の特定の特性が検出および／または画像化され得るように、および／または画像が第２の測定信号に基づいて高解像度で生成できるように、検出手段が十分な時間にわたって第２の測定信号に曝露されるように適合され得る。さらに、所定の数の細胞および／または粒子が液体領域に配置されている場合、第２の測定信号を検出および／または読み取ることができる。
【００２６】
少なくとも１つの、特に正確に１つの単一細胞、および／または少なくとも１つの、特に正確に１つの粒子が液体領域に配置されている場合、第２の測定信号のすでに開始された読み取りを完全に実行することができる。さらに、所定の数の細胞および／または粒子が液体領域に配置されている場合、第２の測定信号のすでに開始された読み取りを完全に実行することができる。
【００２７】
検出された第２の測定信号を分析して、特に液体の特性および／または液体領域に配置された細胞および／または粒子の特性を決定し、液体領域が蛍光を発するかどうか、および／または液体領域に含まれる細胞が蛍光を発するかどうか、および／または液体領域に含まれる粒子が蛍光を発するかどうかを決定することができる。さらに、第２の測定信号を分析して、液体領域が蛍光を発するかどうか、および／または蛍光細胞および／または蛍光粒子が液体領域に含まれるかどうかを決定することができる。
【００２８】
結果として、第２の測定信号を分析することにより、細胞および／または粒子および／または液体領域内の液体の特性を簡単な方法で正確に決定することができる。これが可能であるのは、細胞および／または粒子および／または液体が蛍光を発するかどうかを決定するとき、検出手段が、細胞および／または粒子から発する蛍光に十分長い時間さらされるからである。検出手段の曝露時間を長くすることにより、高解像度、高輝度スペクトルの蛍光画像を得ることができる。これにより、蛍光細胞および／または蛍光粒子および／または蛍光液体を正確に決定することができる。
【００２９】
特定の実施形態では、液体領域は、第１の照明光で照らすことができ、その結果、第１の測定信号は、液体領域から発生する。さらに、液体領域は、第２の照明光で照らすことができ、その結果、第２の測定信号は、液体領域から発生する。第１の照明光は、少なくとも１つの、特に光学的特性において第２の照明光とは異なる。特に、第１の照明光は、以下の特性、すなわち波長、強度、偏光、コリメーションおよび／または整列のうちの少なくとも１つにおいて第２の照明光とは異なる。
【００３０】
一実施形態では、第２の照明光は、細胞、特に細胞の蛍光物質、および／または粒子、特に粒子の蛍光物質によって吸収され得、したがって、細胞および／または粒子を励起することができる。この場合、第２の測定信号は、細胞、特に細胞内または細胞上の蛍光物質、および／または粒子、特に粒子内または粒子上の蛍光物質によって放出される蛍光に対応する。蛍光物質は、細胞および／または粒子の特定の領域に存在することができる。
【００３１】
特に、所定の期間の後、細胞および／または粒子が液体領域に配置されていない場合、および／または所定の数の細胞および／または粒子が液体領域に配置されてない場合、液体領域を第１の照明光で再び照らすことができる。液体、特に一滴の液体を分注することができるディスペンサの場合、前の第１の照明ですでに照らされた液体が分注された後に、液体領域を第１の照明光で再び照らすことができる。
【００３２】
さらに、細胞および／または粒子が液体領域に配置されていない場合、および／または所定の数の細胞および／または粒子が液体領域に配置されてない場合、検出されたさらなる第１の測定信号は、特に所定の期間後に読み取られ、分析され得る。さらなる第１の測定信号は、第１の照明光で液体領域を再び照らすことから生じる。
【００３３】
さらに、他の第１の測定信号は、特に急速に連続して、連続して数回読み取られ、分析される可能性がある。これが可能であるのは、第１の測定信号を読み取って分析するためのそれぞれの期間が短いからである。したがって、第１の測定信号の少なくとも２つの読み出しプロセスおよび分析プロセスを実行するための期間は、第２の測定信号を読み取るために必要な期間よりも短くできる可能性がある。
【００３４】
第２の照明光は、少なくとも１つの細胞、特に正確に１つの単一細胞、および／または少なくとも１つの粒子、特に正確に１つの単一粒子が液体領域に配置されている場合、および／または所定の数の液体領域内の細胞および／または粒子が液体領域に配置されている場合、放出することができる。これは、液体領域に細胞および／または粒子が配置されていない限り、および／または液体領域内の細胞および／または粒子の数が所定の数の細胞および／または粒子に対応しない限り、第２の照明光が放出されないことを意味する。これは、蛍光細胞および／または蛍光粒子が液体領域に配置されているかが決定される実施形態の場合、細胞および／または粒子が第２の照明光で恒久的に照らされる実施形態と比較して、細胞および／または粒子の漂白を少なくとも低減できるという利点を提供する。
【００３５】
特定の実施形態では、液体領域は、第１の照明光および第２の照明光によって同時に照らすことができる。これには、第２の照明光が放出されるまで第１の測定信号の分析を待つ必要がないという利点がある。そのような方法は、細胞および／または粒子の特性を迅速に決定できるという利点を提供する。さらに、第１の測定信号が分析されている間、液体領域を第２の照明光で照らすことができる。特に、細胞および／または粒子が液体領域に配置されているか、および／または所定の数の細胞および／または粒子が液体領域に配置されているかを決定しながら、液体領域を第２の照明光で照らすことができる。したがって、同時に、液体領域を、第１の照明光および第２の照明光で照らし始めることができる。
【００３６】
第１の測定信号を読み取るよりも、第２の測定信号を読み取る方が時間がかかる場合がある。これは特に、第１の測定信号が明視野光であり、第２の測定信号が蛍光である場合に当てはまる。同様に、第１の測定信号を分析するよりも、第２の測定信号を分析する方が時間がかかる場合がある。
【００３７】
したがって、液体を調べた後、所定の数の蛍光細胞および／または蛍光粒子が液体領域に配置されているかを知ることができる。単一の蛍光細胞および／または単一の蛍光粒子が液体領域に配置されていることが好ましい。
【００３８】
上記の目的はまた、液体領域から発する第１および第２の測定信号を使用して、少なくとも１つの細胞および／または少なくとも１つの粒子を含む液体を検査するための方法によって達成される。
ａ．第２の測定信号は、少なくとも１つの細胞、特に１つの単一細胞、および／または少なくとも１つの粒子、特に１つの単一粒子が液体領域に配置されているかを決定するために読み取られ、分析される。
ｂ．細胞および／または粒子が液体領域に配置されている場合、細胞および／または粒子の特性を決定するために、第１の測定信号が読み取られて分析され、第２の測定信号の読み取りは、第１の測定信号の読み取りよりも時間がかかり、および／または第２の測定信号の分析は、第１の測定信号の分析よりも時間がかかる。
【００３９】
前述の方法ステップａおよびｂは、所与の順序で実行される。
【００４０】
本発明による方法は、非常に小さいおよび／またはほとんど透明な細胞および／または粒子の存在を簡単な方法で決定できるという利点を有する。特に、この方法は、非常に小さいおよび／またはほとんど透明な細胞および／または粒子が液体領域に存在するかどうかを決定することを可能にする。
【００４１】
本発明による方法は、一方で、２つの異なる光学的測定方法を使用することにより、液体領域における少なくとも１つの細胞および／または粒子の存在を正確に決定することができ、他方で、細胞および／または粒子の特性を簡単な方法で決定することができるという利点を有する。
【００４２】
第１の測定信号は光信号であり得る。特に、第１の測定信号は、液体領域から発する明視野光であり得る。第２の測定信号は、光信号であり得る。特に、第２の測定信号は、液体領域から発する蛍光であり得る。第１の測定信号は、第２の測定信号が生じる第２の光学的測定方法とは異なる第１の光学的測定方法から生じることができる。それぞれの光学的測定方法は、明視野法、暗視野法、位相差法、共焦点法またはラマン分光法であり得る。
【００４３】
本発明による方法によって決定される細胞および／または粒子の特性は、細胞および／または粒子の物理的および／または光学的特性であり得る。例えば、決定される細胞および／または粒子の特性は、細胞および／または粒子の形態および／または粒度および／または透明度および／またはサイズおよび／または色であり得る。
【００４４】
液体領域は、第１および第２の測定信号が発生する液体の領域である。液体領域は、特に光学的に見られる領域に対応する。
【００４５】
液体の自動検査は、メソッドのステップがコンピューターを使用して実行されるため、ユーザが手動で実行する必要がないことを意味する。
【００４６】
所定の数の細胞および／または粒子が液体領域に配置されている場合、細胞および／または粒子の特性を決定するために、第１の測定信号を読み取って分析することができる。細胞および／または粒子が液体領域にないように、数は０の値を有することができる。あるいは、数は０より大きい値、特に正確に１の値を有することができる。
【００４７】
特定の実施形態では、第２の測定信号に含まれる情報が読み取られた後、第２の測定信号を分析して、少なくとも１つの、特に１つの単一細胞、および／または少なくとも１つの、特に１つの単一粒子の位置を決定することができる。これは、後続の第１の測定方法を使用してこの領域をより正確に調べることができるという利点を提供する。特に、第１の測定信号に含まれる情報を読み取ることができ、第１の測定信号、特に第１の測定信号から読み取った情報に基づいて、細胞および／または粒子が配置されているセクションの高解像度を有する画像を生成することができる。さらに、第１の測定信号の分析は、細胞および／または粒子を含む液体領域のセクションのみを検査する必要があるため、より迅速に行うことができる。
【００４８】
第２の測定信号を分析して、細胞、特に単一の蛍光細胞、および／または粒子、特に単一の蛍光粒子が液体領域に配置されているかを決定することができる。さらに、第２の測定信号は、所定の数の蛍光細胞および／または粒子が液体領域に配置されているかに関して分析することができる。
【００４９】
したがって、第２の測定信号を使用して、蛍光画像を生成することができる。蛍光画像を使用して、蛍光細胞、特に単一の蛍光細胞、および／または蛍光粒子、特に単一の蛍光粒子が液体領域に配置されているかを決定することができる。これにより、少なくとも１つ、特に１つの単一の蛍光細胞、および／または１つ、特に１つの単一の蛍光粒子が液体領域に配置されているか、および／または所定の数の蛍光細胞および／または粒子が液体領域に配置されているかを容易に決定できる。
【００５０】
特定の実施形態では、液体領域は、第１の照明光で照らすことができ、その結果、第１の測定信号は、液体領域から発生する。さらに、液体領域は、第２の照明光で照らすことができ、その結果、第２の測定信号は、液体領域から発生する。第１の照明光は、少なくとも１つの、特に光学的特性において第２の照明光とは異なる。特に、第１の照明光は、少なくとも以下の特性、すなわち波長、強度、偏光、コリメーションおよび／または整列において第２の照明光とは異なる。
【００５１】
一実施形態では、第２の照明光は、細胞、特に細胞の蛍光物質、および／または粒子、特に粒子の蛍光物質によって吸収され得、したがって、細胞および／または粒子を励起することができる。この場合、第２の測定信号は、細胞、特に細胞の蛍光物質、および／または粒子、特に粒子の蛍光物質によって放出される蛍光に対応する。
【００５２】
特定の実施形態では、特に、所定の期間の後、細胞および／または粒子が液体領域に配置されていない場合、および／または所定の数の蛍光細胞および／または蛍光粒子が液体領域に配置されてない場合、液体領域を第２の照明光で再び照らすことができる。液体を分注することができるディスペンサの場合、前の第２の照明ですでに照らされた液体が分注された後に、液体領域を第２の照明光で再び照らすことができる。
【００５３】
さらに、細胞および／または粒子が液体領域に配置されていない場合、および／または所定の数の蛍光細胞および／または蛍光粒子が液体領域に配置されてない場合、検出されたさらなる第２の測定信号は、特に所定の期間後に読み取られ、分析され得る。さらなる第２の測定信号は、第２の照明光で液体領域を再び照らすことから生じる。さらに、他の第２の測定信号は、特に急速に連続して、連続して数回読み取られ、分析される可能性がある。
【００５４】
第２の照明光による液体領域の照明は、蛍光細胞、特に単一の蛍光細胞および／または蛍光粒子、特に単一の蛍光粒子が液体領域に配置されている場合、および／または所定の数の蛍光細胞および／または蛍光粒子が液体領域に配置されている場合、終了され得る。結果として、細胞および／または粒子は、必要な限り、第２の照明光にのみ曝露される。これにより、少なくとも細胞の退色が遅くなる可能性がある。
【００５５】
第１の照明光は、蛍光細胞、特に単一の蛍光細胞および／または蛍光粒子、特に単一の蛍光粒子が液体領域に配置されていると決定された後、および／または所定の数の蛍光細胞および／または蛍光粒子が液体領域に配置されていると決定された後、放出され得る。
【００５６】
したがって、第１の測定信号は、蛍光細胞、特に単一の蛍光細胞および／または蛍光粒子、特に蛍光粒子のみが液体領域に配置されていると決定された後、および／または所定の数の蛍光細胞および／または蛍光粒子が液体領域に配置されていると決定された後、放出され得る。これは、細胞および／または粒子の位置がすでにわかっているため、この部分のみを分析する必要があるので、分析プロセスを迅速に実行できるという利点を提供する。さらに、細胞および／または粒子の位置の知識に基づいて、この領域を特定の精度で光学的に検出する可能性がある。
【００５７】
第１の測定信号は、明視野画像を生成するために使用できる。これは、明視野画像を迅速に生成することができ、したがって、ユーザがディスプレイ装置上で液体領域の画像を迅速に表示することができるという利点を提供する。
【００５８】
第１の照明光は、蛍光細胞、特に単一の蛍光細胞および／または蛍光粒子、特に単一の蛍光粒子が液体領域に配置されているかを決定しながら、および／または所定の数の蛍光細胞および／または蛍光粒子が液体領域に配置されているかを決定しながら、放出され得る。
【００５９】
液体を検査するための上記の両方の方法において、以下に記載の方法ステップを実行することができる。
【００６０】
したがって、液体、特に液体領域は、ディスペンサ内に配置することができる。ディスペンサは、液体、特に液体領域を分注することができる。液体領域は、液体分注によってディスペンサによって分注される体積を有する領域に対応し得る。これは、液体領域を見ることによって、ユーザが分注された液体に含まれる細胞および／または粒子の数および／またはタイプを知ることを意味する。液体領域は、ディスペンサのノズル内に少なくとも部分的に配置することができる。分注される液体は、キャリアの容器に分注することができる。キャリアは、１つまたは複数の容器を有することができる。特に、キャリアは、いくつかの容器を備えたマイクロタイタープレートであり得る。
【００６１】
したがって、分注プロセスは、第１および／または第２の測定信号に基づいて制御することができる。特に、分注プロセス中、細胞および／または粒子の保管場所、分注される液滴の数、分注時間、および分注量は、第１および／または第２の測定信号に基づいて制御することができる。
【００６２】
液体分注は、ドロップオンデマンド法で行うことができる。ドロップオンデマンド法では、選択した時間に１滴の液体が分注される。対照的に、連続ジェット法は、出現した後に個々の液滴に崩壊する液体の連続ジェットを放出する。連続ジェット法は、液滴ごとに個別の制御信号が提供されず、選択した時点で個別の液滴を生成することはできない点でドロップオンデマンド法とは異なる。
【００６３】
保管場所を決定した後、第１および／または第２の測定信号に基づいて、分注される液体を分注することができる。液体はキャリアの容器に分注することができる。したがって、保管場所および／または容器内の液体の保管は、自動的に決定することができる。これは、保管場所が、ユーザの影響を受けることなく、以下でより詳細に説明する装置によって決定されることを意味する。
【００６４】
分注される液体の保管場所は、細胞および／または粒子が蛍光を発するかどうかに依存し得る。代替的に、または追加的に、保管場所は、細胞および／または粒子のサイズ、真円度などのような、細胞および／または粒子の特性に依存し得る。さらに、分注される液体の保管場所は、蛍光、特に蛍光の強度に依存し得る。
【００６５】
キャリアは、複数の容器を有することができる。この場合、キャリアの容器は、蛍光細胞、特に単一の蛍光細胞、および／または蛍光粒子、特に単一の蛍光粒子を含む液体を受け入れることを目的とすることができ、キャリアの別の容器は、蛍光細胞および／または蛍光粒子を含まない液体を受け入れることを目的とすることができる。少なくとも１つの、特に１つの単一の蛍光細胞および／または少なくとも１つの、特に１つの単一の蛍光粒子を含む液体は、ディスペンサから容器に供給することができ、および／または蛍光細胞および／または蛍光粒子を含まない液体は、ディスペンサから別の容器に供給される。
【００６６】
特に、キャリアは、第１のグループの容器を有することができ、第１のグループの容器は、蛍光細胞および／または蛍光粒子を含む液体のそれぞれの受け入れを目的としている。さらに、キャリアは、第２のグループの容器を有することができ、第２のグループの容器は、蛍光細胞および／または蛍光粒子を含まない液体のそれぞれの受け入れを目的としている。少なくとも１つの、特に１つの単一の蛍光細胞および／または少なくとも１つの、特に１つの単一の蛍光粒子を含む液体は、ディスペンサから第１のグループの容器に供給することができ、および／または蛍光細胞および／または蛍光粒子を含まない液体は、ディスペンサから第２のグループの容器に供給される。
【００６７】
さらに、第１の測定信号および／または第２の測定信号に応じて、分注される液体は、キャリアの容器またはリジェクト容器に供給され得る。したがって、所定の数の細胞および／または粒子が液体領域に配置されていない場合、液体をリジェクト容器に供給することができる。特に、細胞および／または粒子が液体領域に配置されていない場合、および／または複数の細胞および／または複数の粒子が液体領域に配置されている場合、分注される液体をリジェクト容器に供給することができる。液体領域は、分注プロセス中に分注される液体を含むことができるので、液体領域を見ると、液体を容器に供給するかリジェクト容器に供給するかを容易に決定することができる。
【００６８】
特定の実施形態では、分注プロセス、特に保管場所は、細胞、特に単一の他の細胞および／または粒子、特に単一の他の粒子がディスペンサの別の液体領域に配置されているか、および／または、所定の数の他の細胞および／または他の粒子が他の液体領域に配置されているかにさらに依存し得る。代替的または追加的に、分注プロセス、特に保管場所は、蛍光細胞、特に単一の他の蛍光細胞および／または蛍光粒子、特に単一の他の蛍光粒子がディスペンサの液体領域に配置されているか、および／または、所定の数の他の蛍光細胞および／または他の蛍光粒子が他の液体領域に配置されているかに依存し得る。他の液体領域は、液体領域の上流に配置することができる。
【００６９】
他の液体領域を考慮に入れることは、次のステップで分注される液体の細胞および／または粒子の数および／またはタイプだけでなく、液体分注の後の液体ディスペンサ内の細胞の数および／またはタイプも分かっているという利点を提供する。これは、例えば、液体をキャリア、特にキャリアの容器に効率的に堆積させることができるという利点を提供する。このようにして、ディスペンサおよび／またはキャリアは、次の液体分注に関して最適な位置に移動することができる。
【００７０】
特定の実施形態では、第１の測定信号、特に明視野を使用して、第１の画像、特に明視野画像を生成することができる。第２の測定信号、特に蛍光は、第２の画像、特に蛍光画像を生成するために使用することができる。２つの画像を比較できる。細胞および／または粒子の蛍光物質の位置および／またはサイズは、明視野画像と蛍光画像を比較することによる簡単な方法で決定することができる。代替的にまたは追加的に、細胞および／または粒子の位置は、これらの２つの画像を比較することによる簡単な方法で決定することができる。これは、蛍光細胞および／または蛍光粒子が液体領域に配置されているかが最初に決定される実施形態において特に有利である。
【００７１】
液体を検査した後、少なくとも１つの、特に特定の特性を有する細胞が液体領域に配置されているか、および／または少なくとも１つの、特に特定の特性を有する粒子が液体領域に配置されているかが分かる。さらに、液体を検査した後、少なくとも１つの特定の特性を有する所定の数の細胞および／または少なくとも１つの特性を有する粒子が液体領域に配置されているかが分かる。
【００７２】
本発明の別の目的は、上記の不利な点が発生しない装置を提供することである。
【００７３】
この目的は、本発明による方法、特に本発明による両方の方法を実行するための装置によって達成することができる。装置は両方の方法を自動的に実行できる。
【００７４】
この装置は、少なくとも１つの細胞および／または１つの粒子を含む液体を分注するためのディスペンサ、および光学検出装置を含む。ディスペンサはドロップジェネレータにすることができる。これは、液滴をディスペンサを通して分注できることを意味する。さらに、液体、特に一滴の液体は、１０ｎｌ（ナノリットル）から５０μｌ（マイクロリットル）の間の容量を有するディスペンサによって分注することができる。
【００７５】
光学検出装置は、ディスペンサの少なくとも１つの液体領域を照らすための第１の照明光を放射するための第１の光源と、ディスペンサの少なくとも１つの液体領域を照らすための第２の照明光を放射するための第２の光源と、少なくとも１つの検出手段と、少なくとも１つの読み出し装置と、少なくとも１つの分析装置とを有する。
【００７６】
光学検出装置は、複数の検出手段を有することができ、第１の検出手段は第１の測定信号を検出し、第２の検出装置は第２の測定信号を検出する。あるいは、装置は、第１の測定信号および第２の測定信号の両方を検出する単一の検出手段を有することができる。この実施形態では、特にコンパクトな光学検出装置が実装されている。
【００７７】
光学検出装置はまた、複数の読み出し装置を有することができ、第１の読み出し装置は、検出された第１の測定信号を読み取る。第２の読み出し装置は、検出された第２の測定信号を読み取ることができる。
【００７８】
装置の動作の１つのモードでは、分析装置は、第１の測定信号に基づいて、少なくとも１つ、特に１つの単一の細胞、および／または少なくとも１つ、特に１つの単一の粒子が液体領域に配置されているか、および／または所定の数の細胞および／または粒子が液体領域に配置されているかを容易に決定できる。この目的のために、分析装置は、検出された第１の測定信号に基づいて、細胞および／または粒子および／または液体領域に位置する液体の光学的特性を決定することができる。さらに、分析装置は、第２の測定信号を分析して、液体領域に配置された細胞および／または液体領域に配置された粒子が蛍光を発するかどうかを決定することができる。分注プロセスは、第２の測定信号の分析結果に基づいて制御することができる。
【００７９】
装置の代替的な動作モードでは、分析装置は、第２の測定信号に基づいて、少なくとも１つの細胞および／または少なくとも１つの粒子が液体領域に配置されているかを決定することができる。特に、分析装置は、第２の測定信号を分析して、液体領域に蛍光細胞および／または蛍光粒子が配置されていないか、または単一の蛍光細胞および／または単一の蛍光粒子が液体領域に配置されているか、またはいくつかの蛍光細胞および／またはいくつかの蛍光粒子が液体領域に配置されているかを決定することができる。さらに、分析装置は、少なくとも１つの、特に単一の細胞および／または少なくとも１つの、特に単一の粒子で液体領域に配置されている場合、細胞および／または粒子の特性を決定するために第１の測定信号を分析することができる。分注プロセスは、分析結果、特に細胞および／または粒子の特定の特性に基づいて制御することができる。
【００８０】
装置は、少なくとも１つの画像、特に明視野画像および／または蛍光画像を生成するために、少なくとも１つ、特に正確に１つの単一の撮像装置を有することができる。あるいは、装置は、複数の撮像装置を有することができ、第１の撮像装置は、少なくとも１つの第１の画像、特に明視野画像を生成し、第２の撮像装置は、少なくとも１つの第２の画像、特に蛍光画像を生成する。
【００８１】
特定の実施形態では、装置は、その光軸がディスペンサからの液体の分注方向に対して横方向に、特に垂直に延びるように配置されたレンズを有することができる。これにより、レンズをディスペンサの近くに配置することが可能になり、これは、解像度および液体領域の拡大の点で有利である。
【００８２】
装置はまた、ディスペンサおよび／またはキャリアを移動させるための制御装置および変位装置を有することができる。制御装置は、分析装置に電気的に接続することができる。制御装置は、分析結果に基づいて変位装置を制御することができる。特に、制御装置は、変位装置がディスペンサおよび／またはキャリアを、ディスペンサから分注される液体を、例えば、キャリアの所望の容器に分注することができる位置に移動させるように、変位装置を制御することができる。装置は、分注される液体の保管場所を自動的に決定できる。
【００８３】
分注装置は、偏向および／または吸引装置を有することができる。偏向装置は、分注された液体、特に分注された液滴を偏向させるのに役立つ。吸引装置は、分注された液体を吸引除去するのに役立つ。分注された液体は、リジェクト容器に偏向させ、および／または吸引除去することができる。偏向および／または吸引は、分注された液体が容器、特にマイクロタイタープレートの容器に入る前に起こり得る。液体が細胞および／または粒子を含まない場合、分注された液体は、偏向および／または吸引除去することができる。あるいは、液体に含まれる細胞および／または粒子の数が所定の値よりも多いかまたは少ない場合、特に１より大きい場合、分注された液体は偏向および／または吸引除去することができる。
【００８４】
第１の照明光および第１の測定信号は、少なくとも部分的に共通のビーム経路を有することができる。さらに、第２の照明光および第２の測定信号は、少なくとも部分的に共通のビーム経路を有することができる。さらに、第１の照明光および第２の照明光は、少なくとも部分的に共通のビーム経路を有することができる。これにより、部品点数の少ない簡単な光学検出装置の実装が可能になる。
【図面の簡単な説明】
【００８５】
本発明の主題は図に概略的に示され、同じ要素または同じ効果を有する要素は、大部分は同じ参照記号を備えている。次のことがわかる。
【００８６】
【図１】第１の光源が第１の照明光を放出する、第１の実施形態による本発明による装置の概略図を示す。
【図２】第２の光源が第２の照明光を放出する、第１の実施形態による本発明による装置の概略図を示す。
【図３】第１の光源が第１の照明光を放出する、第２の実施形態による本発明による装置の概略図を示す。
【図４】細胞および／または粒子が液体領域に配置されていない状態の第１の動作モードによる本発明による方法の概略図を示す。
【図５】細胞および／または粒子が液体領域に配置されている状態の第１の動作モードによる本発明による方法の概略図を示す。
【図６】第２の動作モードによる本発明による方法の概略図を示す。
【発明を実施するための形態】
【００８７】
図１は、少なくとも１つの細胞３および／または少なくとも１つの粒子を含む液体４を分注するためのディスペンサ２と、ディスペンサ２に配置された少なくとも１つの液体領域６を光学的に検出するための光学検出装置５とを有する、第１の実施形態による装置１を示している。ディスペンサ２は、液体４を受け入れるための液体リザーバ（図１には詳細には示さず）を有する。光学検出装置５は、第１の照明光８を放出するための、ＬＥＤ光などの第１の光源７を有する。
【００８８】
図１は、第１の光源７のみが第１の照明光８を放出する状態を示している。さらに、図１は、ディスペンサ２が液体４、特に細胞３を含む一滴の液体を分注した状態を示している。液体４は、キャリア１０の容器に供給される。ディスペンサ２は、アクチュエータ（図示せず）、特にピエゾアクチュエータによって液体４を分注するように作動される。
【００８９】
光学検出装置５はまた、レンズ１２を有する。対物レンズ１２は、レンズ１２の光軸１３が、ディスペンサ２から液体４の分注方向Ｒに垂直に延びるように配置されている。さらに、光学検出装置５は、レンズ１２と第１の光源７との間の第１の照明光８のビーム経路に配置された第１のフィルタ９を有する。
【００９０】
第１のフィルタ９は、第１の照明光８をレンズ１２の方向に偏向させるように設計されている。さらに、第１のフィルタ９は、第１の照明光８から生じ、図１に破線で示されている液体領域６から発せられる第１の測定信号１５を通過させるように設計されている。第１の測定信号１５は、明視野光であり得る。第１のフィルタ９を通過した電気測定信号１５は、第２のフィルタ１１により、第１の撮像装置１６の方向に偏向される。第１の撮像装置１６はカメラであり得る。第１の測定信号１５および第１の照明光８は、部分的に共通のビーム経路を有する。
【００９１】
第１の撮像装置１６に配置された第１の検出手段１４は、第１の測定信号１５を検出する。第１の撮像装置１６は、検出された第１の測定信号１５に基づいて、液体領域６の画像を生成することができる。さらに、第１の読み出し装置３０は、第１の撮像装置１６内に配置され、それによって、検出された第１の測定信号１５を読み取ることができる。特に、第１の測定信号１５に含まれる情報を読み取ることができる。
【００９２】
第１の撮像装置１６は、分析装置１７に電気的に接続されている。分析装置１７は、第１の測定信号１５および／または読み取られた情報を分析する。したがって、分析装置１７は、コンピュータ（図示せず）の一部であり得る。
【００９３】
光学検出装置５はまた、第２の照明光１９（図２に示す）を放出するための第２の光源１８、第２の撮像装置２２、および第２の撮像装置２２に配置されている、図２に示される第２の測定信号２０を検出するための第２の検出手段２１を有する。第２の光源１８はレーザーであってもよく、第２の撮像装置２２はカメラであってもよい。
【００９４】
さらに、第２の読み出し装置３１は、第２の撮像装置２２内に配置され、検出された第２の測定信号２０を読み取るために使用される。特に、第２の測定信号２０に含まれる情報は、第２の読み出し装置３１で読み取ることができる。第２の撮像装置２２は、分析装置１７に電気的に接続されている。
【００９５】
さらに、光学検出装置５は、図２に示されるように、液体領域６から発し第２の撮像装置２２の方向への破線で示される第２の測定信号２０を偏向させるビーム偏向器２７を有する。
【００９６】
分析装置１７は、制御装置２８に接続されている。制御装置２８は、分析装置１７の分析結果に基づいて、ディスペンサ２の分注プロセスを制御する。制御装置２８は、変位装置２９に電気的に接続されている。変位装置２９は、液体４が所望の保管場所に分注され得るように、ディスペンサ２および／またはキャリア１０を移動させることができる。
【００９７】
さらに、制御装置２８は、分注装置１の偏向および／または吸引装置３２を制御することができる。したがって、制御装置２８は、細胞３および／または粒子が液体４に配置されていない場合、またはいくつかの細胞３および／またはいくつかの粒子が液体４に配置されている場合に、分注された液体４が偏向および／または吸引除去されるように、偏向および／または吸引装置３２を制御することができる。
【００９８】
図２は、第２の光源１８のみが液体領域６を照らしている、第１の実施形態による図１に示される装置１の状態を示している。第２の光源１８は、ディスペンサ２の液体領域６を照らすための第２の照明光１９を放出し、これは、ビーム偏向器２７、第２のフィルタ１１、および第１のフィルタ９を通過してレンズ１２に到達する。したがって、第２の照明光１９および第１の照明光８は、共通のビーム経路を有する。特に、第１の照明光８および第２の照明光１９の両方は、レンズ１２を通過して液体領域６に到達する。
【００９９】
第２の照明光１９の結果として液体領域６から発せられる第２の測定信号２０は、第２の検出手段２１によって検出される。第２の読み出し装置３１は、検出された第２の測定信号２０を読み取ることができる。第２の測定信号２０は、蛍光特性を有する細胞３および／または粒子がディスペンサ２の液体領域６に配置されているという条件で、細胞３および／または粒子によって放出される蛍光であり得る。第２の照明光１９および第２の測定信号２０は、部分的に共通のビーム経路を有する。
【０１００】
第１の光源７および第２の光源１８が、特に同時にまたは異なる時間に液体領域６を照らすように、装置１を操作することが可能である。
【０１０１】
図３は、第１の光源７が第１の照明光８を放出する、第２の実施形態による本発明による装置の概略図を示している。
【０１０２】
装置は、図１および２に示す装置とは異なり、２つの撮像装置ではなく、１つの撮像装置を有する。さらに、装置１は、第１の測定信号１５および第２の測定信号２０を検出するためのただ単一の検出手段を有する（図３には示さず）。さらに、装置１は、検出された第１の測定信号１５および検出された第２の測定信号２０を読み取るためのただ単一の読み出し装置を有する。撮像装置は、分析装置１７に電気的に接続されている。
【０１０３】
図４は、細胞および／または粒子が液体領域６に配置されていない状態の第１の動作モードによる本発明による方法の概略図を示している。特に、図４は、第１の測定信号１５の読み出し時間、第１の測定信号１５の分析時間、および第２の測定信号２０の読み出し時間を示している。以下に説明する方法は、装置１によって自動的に実行することができる。
【０１０４】
図４に示される動作モードでは、液体領域６は、第１の照明光８および第２の照明光１９の両方で照らされる。第１の検出手段１４は、時間ｔ１の第１の時点で、例えば、明視野光である第１の測定信号１５を最初に検出する。検出された第１の測定信号１５が読み取られ、ここで、読み出しプロセスは、時間ｔ２の第２の時点で終了する。
【０１０５】
分析装置１７は、検出された第１の測定信号１５、特に第１の測定信号１５から読み取られた情報を分析する。特に、第１の測定信号１５は、細胞３および／または粒子が液体領域６に配置されているか、および／または所定数の細胞３および／または粒子が液体領域６に配置されているかに関して分析される。分析プロセス１７は、時点ｔ３の第３の時点で終了する。
【０１０６】
第１の測定信号１５に基づいて、第１の撮像装置１６は、画像、特に明視野画像を生成し、これは、表示装置（図には示さず）によって表示することができる。したがって、装置１のユーザは、細胞３および／または粒子が液体領域６に配置されているかを迅速に見ることができる。
【０１０７】
第２の検出手段２１は、時間ｔ１の第１の時点で、例えば、蛍光である第２の測定信号２０を最初に検出する。検出された第２の測定信号２０が読み取られ、破線で示されるように、読み出しプロセスは、時間ｔ４の第４の時点まで続く。図４から、第２の測定信号２０の分析だけで、第１の測定信号１５の読み取りおよび分析よりも時間がかかることが分かる。
【０１０８】
図４に示されるケースでは、細胞３および／または粒子が液体領域６に配置されていないので、制御装置２８は、第２の測定信号２０の読み取りを第３の時点ｔ３で中断させる。同様に、所定の数の細胞３および／または粒子が液体領域６に配置されていない場合、読み取りプロセスは、時間ｔ３の第３の時点で中断されるであろう。
【０１０９】
第１および第２の測定信号１５、２０の前述の検出、読み取りおよび分析プロセスは、所定の期間の後、および／または液体が分注された後、特に液体領域６がディスペンサ２から分注された後に繰り返すことができ、これは図４には示されていない。
【０１１０】
制御装置２８は、第１および／または第２の測定信号１５、２０に基づいて分注プロセスを制御する。したがって、制御装置２８は、変位装置２９に、分注される液体がリジェクト容器に供給される位置にディスペンサ２および／またはキャリア１０を移動させることができる。代替的または追加的に、制御装置２８は、分注された液体４が偏向され、および／またはリジェクト容器に吸引除去されるように、偏向および／または吸引装置３２を制御することができる。リジェクト容器は、細胞および／または粒子を含まない、および／または所定の数の細胞および／または粒子を含まない液体を保持することを目的としている。ディスペンサおよび／またはキャリア１０を所望の位置に移動させた後、液体４は、ディスペンサ２からキャリア１０の容器に分注される。
【０１１１】
図５は、細胞３および／または粒子が液体領域６に配置されている、および／または所定の数の細胞３および／または粒子が液体領域６に配置されている状態の第１の動作モードによる本発明による方法の概略図を示している。時間ｔ３の第３の時点まで、プロセスシーケンスは図４に示すプロセスシーケンスに対応する。
【０１１２】
図４に示される方法シーケンスとの違いは、時点ｔ４の第３の時点で、分析装置１７は、細胞３および／または粒子が液体領域６に配置されている、および／または液体領域６内の細胞の数および／または粒子の数が細胞および／または粒子の所定の数に対応していると決定することである。したがって、第２の測定信号２０が完全に読み取られ、時間ｔ４の第４の時点で読み取りが完了する。
【０１１３】
分析装置１７は、第２の測定信号２０、特に読み取り情報を分析し、ここで、時間ｔ４の第４の時点から、分析は、時間ｔ５の第５の時点で終了する。特に、分析装置１７は、検出された第２の測定信号２０を分析して、液体領域６に配置されている細胞３および／または粒子が特定の特性を有するかどうか、特に細胞および／または粒子が蛍光を発するかどうかを決定する。第２の測定信号２０に基づいて、第２の撮像装置２２は、画像、特に蛍光画像を生成し、これは、表示装置によって表示することができる。
【０１１４】
制御装置２８は、第１および／または第２の測定信号１５、２０に基づいて分注プロセスを制御する。したがって、ディスペンサ２および／またはキャリア１０は、制御装置２８からの制御コマンドに応じて、変位装置２９によって、１つの蛍光細胞および／または蛍光粒子をキャリア１０の特定の容器に導入することができる位置に移動させることができる。ディスペンサ２および／またはキャリア１０を所望の位置に移動させた後、液体４は、ディスペンサ２からキャリア１０の容器に分注される。
【０１１５】
図６を参照して、第２の動作モードによる方法を以下に説明する。方法は、装置１によって自動的に実行することができる。
【０１１６】
方法では、図２に示すように、液体領域６が最初に第２の照明光１９で照らされ、次に液体領域６から発せられる第２の測定信号２０が時間ｔ１の第１の時点で最初に検出される。検出された第１の測定信号２０の読み取りは、時間ｔ２の第２の時点で終了する。
【０１１７】
次に、分析装置１７は、検出された第２の測定信号２０、特に読み取られた情報を分析する。特に、検出された第２の測定信号２０は、少なくとも１つ、特に１つの単一の蛍光細胞３および／または少なくとも１つ、特に１つの単一の蛍光粒子が液体領域６に配置されているか、および／または所定の数の蛍光細胞および／または蛍光粒子が液体領域６に配置されているかに関して分析される。分析は、時間ｔ３の第３の時点で終了する。第２の測定信号２０に基づいて、第２の撮像装置２２は、表示装置によって表示することができる蛍光画像を生成する。
【０１１８】
液体領域６に蛍光細胞３が配置されていない、および／または蛍光粒子が配置されていない、および／または液体領域６に含まれる細胞および／または粒子の数が所定の数に対応していない場合、液体を検査するプロセスは、時間ｔ３の第３の時点で終了する。第２の測定信号２０の前述の検出、読み取りおよび分析プロセスは、所定の期間の後、および／または液体が分注された後、特に液体領域６が分注された後に繰り返すことができ、これは図６には示されていない。
【０１１９】
図６は、細胞３および／または粒子が液体領域６に配置されているケース、および／または液体領域６に配置されている細胞３および／または粒子の数が細胞／または粒子の所定の数に対応しているケースを示している。したがって、分析装置１７は、時間ｔ３の第３の時点における液体領域６内の細胞３および／または粒子の位置を決定する。
【０１２０】
第１の測定信号１５は、時間ｔ３の第３の時点で初めて検出され、検出された第１の測定信号１５の読み取りは、時間ｔ４の第４の時点で完了する。続いて、検出された第１の測定信号１５、特に読み取られた情報は、分析装置１７によって分析され、これは時間ｔ５の第５の時点で完了する。細胞および／または粒子の位置、したがって分析される領域が既知であるため、分析プロセスは短い。
【０１２１】
分析装置１７は、細胞および／または粒子のサイズ、真円度などの、細胞および／または粒子の特性を決定する。さらに、明視野画像は、検出された第１の測定信号１５に基づいて第１の撮像装置１６によって生成され、表示装置によって表示され得る。
【０１２２】
分注される液体４の保管場所は、細胞３および／または粒子の特性に基づいて決定することができる。変位装置２９は、液体４が特定の保管場所に分注され得るように、ディスペンサ２および／またはキャリア１０を対応する位置に移動させることができる。
【符号の説明】
【０１２３】
１  装置
２  ディスペンサ
３  細胞
４  液体
５  光学検出装置
６  液体領域
７  第１の光源
８  第１の照明光
９  第１のフィルタ
１０  キャリア
１１  第２のフィルタ
１２  レンズ
１３  光軸
１４  第１の検出手段
１５  第１の測定信号
１６  第１の撮像装置
１７  分析装置
１８  第２の光源
１９  第２の照明光
２０  第２の測定信号
２１  第２の検出手段
２２  第２の撮像装置
２７  ビーム偏向器
２８  制御装置
２９  変位装置
３０  第１の読み出し装置
３１  第２の読み出し装置
３２  偏向および／または吸引装置
Ｒ  分注方向
ｔ１−ｔ５  第１から第５の瞬間
【図１】
2021522474.tif 000003
【図２】
2021522474.tif 000004
【図３】
2021522474.tif 000005
【図４】
2021522474.tif 000006
【図５】
2021522474.tif 000007
【図６】
2021522474.tif 000008
【手続補正書】
【提出日】令和3年2月26日(2021.2.26)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
液体領域（６）から発する第１および第２の測定信号（１５、２０）を使用して、少なくとも１つの細胞（３）および／または少なくとも１つの粒子を含む液体（４）を自動的に検査する方法であって、
ａ．前記第１の測定信号（１５）を読み取り、前記第１の測定信号（１５）を分析するステップと、
ｂ．分析された前記第１の測定信号（１５）を使用して、前記第２の測定信号（２０）が検出されて完全に読み取られたかどうか、検出された前記第２の測定信号が完全に読み取られたかどうか、または検出された前記第２の測定信号（２０）の前記読み取りが完全に読み取られたかどうか、または検出された前記第２の測定信号（２０）の前記読み取りが中断されたかどうかを決定するステップと、を含む、方法。
【請求項２】
ａ．前記第１の測定信号（１５）は、少なくとも１つの細胞（３）および／または少なくとも１つの粒子が前記液体領域（６）に配置されているかに関して分析され、および／または
ｂ．前記第１の測定信号（１５）は、所定の数の細胞および／または粒子が前記液体領域に配置されているかに関して分析され、および／または
ｃ．少なくとも１つの細胞（３）および／または少なくとも１つの粒子が前記液体領域（６）に配置されているかを決定するために、前記液体領域（６）の光学的特性は、前記第１の測定信号（１５）に基づいて決定され、または
前記第１の測定信号（１５）は、明視野画像を生成するために使用され、少なくとも１つの細胞（３）および／または１つの粒子が前記液体領域（６）に配置されているかを決定するために、前記液体領域（６）の光学的特性は前記明視野画像に基づいて決定され、および／または
ｄ．細胞（３）および／または粒子が前記液体領域（６）に配置されていない場合、および／または前記所定の数の細胞および／または粒子が前記液体領域（６）に配置されていない場合、前記第２の測定信号（２０）は検出および読み取られず、および／または
ｅ．細胞（３）および／または粒子が前記液体領域（６）に配置されていない場合、および／または前記所定の数の細胞および／または粒子が前記液体領域に配置されていない場合、前記第２の測定信号（２０）の読み取りは中断される
ことを特徴とする、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
ａ．前記第２の測定信号（２０）は、少なくとも１つの細胞（３）および／または１つの粒子が前記液体領域（６）に配置されている場合、および／または前記所定の数の細胞（３）および／または粒子が前記液体領域（６）に配置されている場合に検出され、および／または
ｂ．前記第２の測定信号（２０）は、少なくとも１つの細胞（３）および／または１つの粒子が前記液体領域（６）に配置されている場合、および／または前記所定の数の細胞（３）および／または粒子が前記液体領域（６）に配置されている場合に完全に読み取られることを特徴とする、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
検出された前記第２の測定信号（２０）は、
ａ．前記液体領域（６）が蛍光を発しない、および／または前記液体領域（６）に含まれる細胞（３）が蛍光を発しない、および／または前記液体領域（６）に含まれる粒子が蛍光を発しないかどうか、および／または
ｂ．前記液体領域（６）が蛍光を発する、および／または前記液体領域（６）に含まれる細胞（３）が蛍光を発する、および／または前記液体領域に含まれる粒子が蛍光を発するかどうか
を決定するために分析されることを特徴とする、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
ａ．前記液体領域（６）は、第１の照明光（８）で照らされ、次に、前記第１の測定信号（１５）は、前記液体領域（６）から発せられ、および／または
ｂ．前記液体領域（６）は、第２の照明光（１９）で照らされ、次に、前記第２の測定信号（２０）は前記液体領域（６）から発せられ、および／または
ｃ．前記第１の測定信号（１５）を読み取るよりも前記第２の測定信号（２０）を読み取る方がより長い時間がかかり、および／または
ｄ．前記第１の測定信号（１５）を分析するよりも前記第２の測定信号（２０）を分析する方がより長い時間がかかり、および／または
ｅ．細胞（３）および／または粒子が前記液体領域（６）に配置されていない場合、および／または前記所定の数の細胞および／または粒子が前記液体領域に配置されていない場合、さらなる第１の測定信号（１５）が読み取られ、分析される
ことを特徴とする、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
ａ．細胞（３）および／または粒子が前記液体領域（６）に配置されていない場合、および／または前記所定の数の細胞および／または粒子が前記液体領域（６）に配置されていない場合、前記液体領域（６）は前記第１の照明光（８）で再び照らされ、および／または
ｂ．次に、前記第２の照明光（１９）は、細胞（３）および／または粒子が前記液体領域（６）に配置されている場合、および／または前記所定の数の細胞および／または粒子が前記液体領域（６）に配置されている場合にのみ放出され、および／または
ｃ．前記液体領域（６）は、前記第１の照明光（８）および前記第２の照明光（１９）によって同時に照らされ、および／または
ｄ．前記液体領域（６）は、細胞（３）および／または粒子が前記液体領域（６）に配置されているか、および／または前記所定の数の細胞および／または粒子が前記液体領域（６）に配置されているかを決定しながら、前記第２の照明光（１９）で照らされ、および／または
ｅ．同時に、前記液体領域（６）は、前記第１の照明光（８）および前記第２の照明光（１９）で照らされ始める
ことを特徴とする、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
液体領域（６）から発する第１および第２の測定信号（１５、２０）を使用して、少なくとも１つの細胞（３）および／または少なくとも１つの粒子を含む液体（４）を自動的に検査する方法であって、
ａ．少なくとも１つの細胞（３）、特に１つの単一細胞、および／または少なくとも１つの粒子、特に１つの単一粒子が前記液体領域（６）に配置されているかを決定するために、前記第２の測定信号（２０）は読み取られ、分析され、および
ｂ．細胞（３）および／または粒子が前記液体領域（６）に配置されている場合、前記細胞（３）および／または前記粒子の特性を決定するために、前記第１の測定信号（１５）は読み取られ、分析され、前記第２の測定信号（２０）の読み取りは、前記第１の測定信号（１５）の読み取りよりも時間がかかり、および／または前記第２の測定信号（２０）の分析は、前記第１の測定信号（１５）の分析よりも時間がかかる、方法。
【請求項８】
ａ．前記第２の測定信号（２０）は、前記液体領域（６）内の少なくとも１つの細胞（３）および／または少なくとも１つの粒子の位置を決定するために分析され、および／または
ｂ．前記第２の測定信号（２０）は、蛍光細胞（３）および／または蛍光粒子が前記液体領域（６）内に配置されているかに関して分析され、および／または
ｃ．前記第２の測定信号（２０）は、所定の数の蛍光細胞（３）および／または粒子が前記液体領域（６）に配置されているかに関して分析され、および／または
ｄ．前記第２の測定信号（２０）は蛍光画像を生成するために使用され、前記蛍光画像は、蛍光細胞（３）および／または蛍光粒子が前記液体領域（６）に配置されているか、および／または前記所定の数の蛍光細胞（３）および／または粒子が前記液体領域（６）に配置されているかを決定するために使用される
ことを特徴とする、請求項６に記載の方法。
【請求項９】
ａ．前記液体領域（６）は、第１の照明光（８）で照らされ、次に、前記第１の測定信号（１５）は、前記液体領域（６）から発せられ、および／または
ｂ．前記液体領域（６）は、第２の照明光（１９）で照らされ、次に、前記第２の測定信号（２０）は前記液体領域（６）から発せられる
ことを特徴とする、請求項７または８に記載の方法。
【請求項１０】
ａ．蛍光細胞（３）および／または蛍光粒子が前記液体領域（６）に配置されていない場合、前記液体領域（６）は、前記第２の照明光（１９）で再び照らされ、および／または
ｂ．前記所定の数の蛍光細胞および／または蛍光粒子が前記液体領域に配置されていない場合、前記液体領域（６）は、前記第２の照明光で再び照らされる
ことを特徴とする、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
細胞（３）および／または粒子が前記液体領域（６）に配置されていない場合、および／または所定の数の蛍光細胞（３）および／または蛍光粒子が前記液体領域に配置されていない場合、検出されたさらなる第２の測定信号（２０）は読み取られ、分析されることを特徴とする、請求項７から１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
ａ．蛍光細胞（３）および／または蛍光粒子が前記液体領域（６）に配置されている場合、および／または前記所定の数の蛍光細胞（３）および／または蛍光粒子が前記液体領域に配置されている場合、前記第２の照明光（１９）による前記液体領域（６）の照明は終了し、および／または
ｂ．前記第１の照明光（８）は、蛍光細胞（３）および／または蛍光粒子が前記液体領域（６）に配置されていると決定された後、および／または前記所定の数の蛍光細胞（３）および／または蛍光粒子が前記液体領域に配置されていると決定された後に発せられ、および／または
ｃ．前記第１の照明光は、蛍光細胞（３）および／または蛍光粒子が前記液体領域（６）に配置されているかを決定しながら、および／または前記所定の数の蛍光細胞（３）および／または蛍光粒子が前記液体領域に配置されているかを決定しながら発せられることを特徴とする、
請求項９から１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
ａ．前記液体（４）、特に前記液体領域（６）はディスペンサ（２）に配置され、および／または前記ディスペンサ（２）によって分注され得、特に
分注プロセスは、前記第１および／または第２の測定信号（１５、２０）に基づいて制御され、および／または
液体の分注は、ドロップオンデマンド法を使用して実行され、および／または
ｂ．保管場所が決定され、前記保管場所が決定された後、特にキャリア（１０）の容器に分注される前記液体（４）は分注され、および／または
ｃ．分注される前記液体（４）の保管場所は、蛍光に依存し、および／または前記細胞（３）および／または前記粒子が蛍光を発するかどうかに依存し、および／または
ｄ．キャリア（１０）は複数の容器を有し、容器、特に第１の容器群は、蛍光細胞（３）および／または蛍光粒子を含む液体（４）を受け入れることを目的としており、さらなる容器、特に第２群の容器は、蛍光細胞（３）および／または蛍光粒子を含まない液体（４）を受け入れることを目的としており、および少なくとも１つの蛍光細胞（３）および／または少なくとも１つの蛍光粒子を含む前記液体は、前記ディスペンサ（２）から前記容器、特に前記第１群の容器に供給され、および／または蛍光細胞（３）および／または蛍光粒子を含まない前記液体は、前記ディスペンサ（２）から別の容器、特に前記第２群の容器に供給され、および／または
ｅ．前記第１の測定信号および／または前記第２の測定信号に応じて、分注される前記液体は、前記キャリア（１０）の容器またはリジェクト容器に供給され、および／または
ｆ．前記分注プロセスは、
少なくとも１つの他の細胞および／または少なくとも１つの他の粒子が別の液体領域に配置されているか、および／または所定の数の他の細胞および／または他の粒子が配置されているか、に依存し、特に前記液体領域は前記液体領域（６）の上流に配置され、および／または
ｇ．前記分注プロセスは、１つの他の蛍光細胞および／または１つの他の蛍光粒子が別の液体領域に配置されているか、および／または所定の数の他の蛍光細胞および／または他の蛍光粒子が配置されているかに依存し、特に前記液体領域は前記液体領域（６）の上流に配置される
ことを特徴とする、請求項１から１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
ａ．前記第１の測定信号（１５）は、光信号、特に明視野光であり、および／または
ｂ．前記第２の測定信号（２０）は、光信号、特に蛍光であり、および／または
ｃ．前記第１の測定信号（１５）および前記第２の測定信号（２０）は、異なる測定方法から生じることを特徴とする、
請求項１から１３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
ａ．前記明視野光は明視野画像を生成するために使用され、および／または
ｂ．前記蛍光は、蛍光画像を生成するために使用されることを特徴とする、
請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
ａ．前記明視野画像と前記蛍光画像とは相互に比較され、および／または
ｂ．前記細胞および／または前記粒子の位置を決定するために、前記明視野画像および前記蛍光画像は互いに比較され、および／または
ｃ．前記細胞および／または前記粒子の蛍光物質の位置および／またはサイズを決定するために、前記明視野画像と前記蛍光画像とが互いに比較されることを特徴とする、
請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
請求項１から１６のいずれか一項に記載の方法を実施するための装置（１）。
【請求項１８】
前記装置（１）は、少なくとも１つの細胞（３）および／または１つの粒子を含む液体（４）を分注するためのディスペンサ（２）と、前記ディスペンサ（２）の前記少なくとも１つの液体領域（６）を照らすための前記第１の照明光（８）を放射するための第１の光源（７）を有する光学検出装置（５）と、前記ディスペンサ（２）の前記少なくとも１つの液体領域（６）を照らすための前記第２の照明光（１９）を放射する第２の液体領域（１８）と、少なくとも１つの検出手段と、少なくとも１つの読み出し装置および少なくとも１つの分析装置（１７）とを有することを特徴とする、請求項１７に記載の装置（１）。
【請求項１９】
ａ．前記光学検出装置（５）は複数の検出手段を有し、第１の検出手段（１４）は前記第１の測定信号（１５）を検出し、第２の検出装置（２１）は前記第２の測定信号（２０）を検出し、および／または
ｂ．前記光学検出装置は複数の読み出し装置を有し、第１の読み出し装置は検出された前記第１の測定信号を読み取り、第２の読み出し装置は検出された前記第２の測定信号を読み取り、および／または
ｃ．前記分析装置（１７）は、前記第１の測定信号（１５）に基づいて、少なくとも１つの細胞および／または粒子が前記液体領域（６）に配置されているか、および／または所定の数の細胞および／または粒子が前記液体領域（６）に配置されているかを決定し、および／または
ｄ．前記分析装置（１７）は、前記第２の測定信号（２０）に基づいて、蛍光細胞（３）および／または蛍光粒子が前記液体領域（６）に配置されていないか、または１つの単一の蛍光細胞および／または１つの単一の蛍光粒子が前記液体領域に配置されているか、または複数の蛍光細胞および／または複数の蛍光粒子が前記液体領域に配置されているかを決定し、および／または
ｅ．前記光学検出装置（５）は、少なくとも１つの画像、特に明視野画像および／または蛍光画像を生成するための少なくとも１つの撮像装置を有し、または
ｆ．前記光学検出装置（５）は複数の撮像装置を有し、第１の撮像装置（１６）は少なくとも１つの第１の画像、特に明視野画像を生成し、第２の撮像装置（２２）は少なくとも１つの第２の画像、特に蛍光画像を生成する
ことを特徴とする、請求項１７または１８に記載の装置（１）。
【請求項２０】
ａ．前記光学検出装置（５）は、その光軸（１３）が、前記液体（４）の分注方向（Ｒ）に横方向、特に垂直方向であるように配置されたレンズ（１２）を有し、および／または
ｂ．前記装置（１）は、分注された前記液体（４）を受け入れるために、前記ディスペンサ（２）および／またはキャリア（１０）を移動させるための制御装置（２８）および変位装置（２９）を有し、前記制御装置（２８）は、前記第１および／または第２の測定信号（１５、２０）に基づいて前記変位装置（２９）を制御し、および／または
ｃ．前記装置（１）は、前記ディスペンサから分注された液体を偏向させるための偏向装置および／または前記ディスペンサから分注された液体を吸引除去するための吸引装置を有し、および／または
ｄ．前記第１の照明光（８）および前記第１の測定信号（１５）は、少なくとも部分的に共通のビーム経路を有し、および／または
ｅ．前記第２の照明光（１９）および前記第２の測定信号（２０）は、少なくとも部分的に共通のビーム経路を有し、および／または
ｆ．前記第１の照明光（８）および前記第２の照明光（１９）は、少なくとも部分的に共通のビーム経路を有する
ことを特徴とする、請求項１７から１９のいずれか一項に記載の装置。
【国際調査報告】
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