(57)【要約】  本発明は、金属インプラントに対する不耐性の傾向の増加のリスクの増大を予測するための方法に関する。本発明の課題は、金属インプラント使用時に起こり得る合併症の予測を改善することである。前記課題を解決するために、本発明は、被験者の金属インプラントに対する不耐性の傾向の増加のリスクの増大を予測するための方法であって、被験者の遺伝物質を含む単離されたサンプルにおいて、ａ）インターロイキン−１βをコードする遺伝子において、一塩基変異ｒｓ１１４３６２７  ＡＧＣＣＴＣＣＴＡＣＴＴＣＴＧＣＴＴＴＴＧＡＡＡＧＣ［Ｃ／Ｔ］ＡＴＡＡＡＡＡＣＡＧＣＧＡＧＧＧＡＧＡＡＣＴＧＧ、配列番号１を調べ、一塩基変異の位置にＣが存在するか否かを確認し、かつ／またはｂ）ＩＬ１受容体アンタゴニストであるＩＬ１−ＡＮをコードする遺伝子において、反復単位ＡＴＣＣＴＧＧＧＧＡＡＡＧＴＧＡＧＧＧＡＡＡＴＡＴＧＧＡＣＡＴＣＡＣＡＴＧＧＡＡＣＡＡＣＡＴＣＣＡＧＧＡＧＡＣＴＣＡＧＧＣＣＴＣＴＡＧＧＡＧＴＡＡＣＴＧＧＧＴＡＧＴＧＴＧＣ、配列番号２を有するＶＮＴＲ多型ｒｓ２２３４６６３を調べ、反復単位が５回存在するか否かを確認する方法を提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
被験者の金属インプラントに対する不耐性の傾向の増加のリスクの増大を予測するための方法であって、前記被験者の遺伝物質を含む単離されたサンプルにおいて、
ａ）インターロイキン−１βをコードする遺伝子において、一塩基変異ｒｓ１１４３６２７
ＡＧＣＣＴＣＣＴＡＣＴＴＣＴＧＣＴＴＴＴＧＡＡＡＧＣ［Ｃ／Ｔ］ＡＴＡＡＡＡＡＣＡＧＣＧＡＧＧＧＡＧＡＡＣＴＧＧ、配列番号１
を調べ、前記一塩基変異の位置にＣが存在するか否かを確認し、かつ／または
ｂ）ＩＬ１受容体アンタゴニストであるＩＬ１−ＲＮをコードする遺伝子において、反復単位
ＡＴＣＣＴＧＧＧＧＡＡＡＧＴＧＡＧＧＧＡＡＡＴＡＴＧＧＡＣＡＴＣＡＣＡＴＧＧＡＡＣＡＡＣＡＴＣＣＡＧＧＡＧＡＣＴＣＡＧＧＣＣＴＣＴＡＧＧＡＧＴＡＡＣＴＧＧＧＴＡＧＴＧＴＧＣ、配列番号２
を有するＶＮＴＲ多型ｒｓ２２３４６６３を調べ、前記反復単位が５回存在するか否かを確認する、方法。
【請求項２】
前記不耐性の傾向の増加が、炎症の傾向の増加である、請求項１記載の方法。
【請求項３】
さらに、起こりうるアトピー性疾患の存在を調べる、請求項１または２記載の方法。
【請求項４】
アレルギー性気管支喘息、アレルギー性鼻炎およびアトピー性皮膚炎から選択される、起こりうるアトピー性疾患の存在を調べる、請求項３記載の方法。
【請求項５】
以下のＰＣＲプライマー：
ａ）ＴＣＴＴＴＴＣＣＣＣＴＴＴＣＣＴＴＴＡＡＣＴおよびＧＡＧＡＧＡＣＴＣＣＣＴＴＡＧＣＡＣＣＴＡＧＴ、ならびに／または
ｂ）ＣＣＣＣＴＣＡＧＣＡＡＣＡＣＴＣＣおよびＧＧＴＣＡＧＡＡＧＧＧＣＡＧＡＧＡ
を含む、請求項１から４までのいずれか１項記載の方法を実施するためのキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、金属インプラントに対する不耐性の傾向の増加のリスクの増大を予測するための方法およびキットに関する。
【０００２】
インプラントは、例えば整形外科および歯科分野においてますます重要な役割を果たしている。そのようなインプラントは、多くの場合、金属、例えば純チタンまたは金属合金でできている。しかしそれに伴って、インプラント不適合反応の数は増加している［１〜４］。例えばニッケルなどの金属に極少量の不純物や異物があっても、炎症反応やアレルギー反応につながり得る。マクロファージや単球に取り込まれる摩耗粒子や腐食プロセスも、炎症反応を引き起こす場合がある。しかし内部人工器官の場合には、腐食や摩耗による生成物や感染症などの既知の原因には帰し得ない合併症も確認されている。例えばこれまでに不可解な過度の炎症反応が確認されており、これは、例えば腫れ、反復性関節水腫、疼痛、可動性の制限、インプラントの緩みまたは機能不全を伴う場合がある。
【０００３】
JACOBI-GRESSER, Eら（Genetic andimmunological markers predicttitanium implant failure: aretrospective study. Int. J. OralMaxillofac. Surg. (2013) 42 (4) 537-543）において、チタンインプラントの機能不全の予測に診断マーカーが利用されている。チタンインプラント手術、ＩＬ１Ａ−８８９Ｃ／Ｔ（ｒｓ１８００５８７）、ＩＬ１Ｂ＋３９５４Ｃ／Ｔ（ｒｓ１１４３６３４）、ＩＬ１ＲＮ＋２０１８Ｔ／Ｃ（ｒｓ４１９５９８）およびＴＮＦＡ−３０８Ｇ／Ａ（ｒｓ１８００６２９）ジェノタイピング、イン・ビトロＩＬ−１β／ＴＮＦ−ａ放出試験、ならびにリンパ球幼若化試験を治療中に行った１０９名の被験者において、インプラントの結果が評価された。
【０００４】
RAMIREZ-PEREZ, Sら（Association of 86 bp variable number of tandem repeat (VNTR) polymorphism of interleukin-1 receptor antagonist (IL1RN) with susceptibility and clinical activity in rheumatoid arthritis. Clin. Rheumatol. (2017) 36 (6) 1247-1252）において、いくつかの研究により、関節リウマチ（ＲＡ）リスクのあるＩＬ１ＲＮ遺伝子のイントロン２に可変数のタンデムリピート（ＶＮＴＲ）８６ｂｐ（ｒｓ２２３４６６３）を有することが報告されている。本研究では、ＲＡを有する患者および対照被験者（ＣＳ）におけるこの多型の頻度、ならびにＲＡとのその関連性をメキシコ西部の住民において調べることが目的であった。ＲＡを有する３５０名の患者および３０７名のＣＳを対象とした解析的横断研究が行われた。ＩＬ１ＲＮ  ＶＮＴＲ多型の同定は、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）によって行われ、遺伝子型が臨床変数（ＤＡＳ２８およびＣＲＰ）と関連づけられた。
【０００５】
JACOBI-GRESSER, E（Prognose der Einheilquote von Titanimplantaten anhand von Laborparametern - eine retrospektive Studie. umweltmedizin-gesellschaft 26 (2/2013) 98-103）において、著者らは、自身の研究でチタンインプラントの機能不全を予測するための診断マーカーを評価している。チタンインプラント手術を受けた１０９名の被験者において、ＩＬ１Ａ−８８９Ｃ／Ｔ（ｒｓ１８００５８７）、ＩＬ１Ｂ＋３９５４Ｃ／Ｔ（ｒｓ１１４３６３４）、ＩＬ１ＲＮＮ＋２０１８Ｔ／Ｃ（ｒｓ４ｌ９５９８）およびＴＮＦＡ−３０８Ｇ／Ａ（ｒｓ１８００６２９）ジェノタイピング、イン・ビトロＩＬ−１β／ＴＮＦ−ａ放出試験、ならびにリンパ球幼若化試験を治療中に行って、インプラントの結果が遡及的に評価された。チタン刺激時のＴＮＦ−ａおよびＩＬ−１βの放出は、インプラント欠損患者において著しく高かった（ＴＮＦ−ａ：２５６．８９ｐｇ／ｍｌ対８ｌ．４ｐｇ／ｍｌ）；ｐ＜０．０００ｌ；ＩＬ−１β：ｌ５９．９６ｐｇ／ｍｌ対５４．０１ｐｇ／ｍｌ；ｐ＜０．０００ｌ）。
【０００６】
LIU, Y.H.ら（Association of interleukin-1beta (IL1B) polymorphisms with Graves’ophthalmopathy in Taiwan Chinese patients. Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. (2010) 51 (12) 6238-46）において、ＩＬ１Ｂ遺伝子における変異がバセドー病（ＧＤ）患者のグレーブス眼症（ＧＯ）に関連し得るか否かが調べられている。調べたＩＬ１Ｂ−ＳＮＰでは、ｒｓ１１４３６３４のＣ対立遺伝子がＧＤと関連していたが、ＳＮＰのｒｓ１１４３６３４およびｒｓ１６９４４のＴ／Ｔ遺伝子型は、疾患との関連性が低かった。最も強い相互作用があったＳＮＰのｒｓ３９１７３６８およびｒｓ１１４３６４３のＡ／Ａ遺伝子型は、ＧＯのリスクを増加させる可能性がある（Ｐ＝０．０２４、ないしＰ＝０．０１７）。いくつかのＧＤ感受性および非感受性ハプロタイプＩＬ１Ｂが同定されており、また、８つのＳＮＰから構成され、低い循環ＩＬ１β値と関連しているＨｔ４−ＧＣＧＣＣＴＣＣハプロタイプは、ＧＯの発症を防ぐ可能性がある（Ｐ＝０．０２５）。ＩＬ１β多型のデータ、ならびにＧＤおよびＧＯと血漿ＩＬ１βとの関連性は、ＩＬ１β多型がＧＤおよびＧＯの発症と関連する可能性があることを示している。
【０００７】
本発明の課題は、金属インプラント使用時に起こり得る合併症の予想を改善することである。
【０００８】
上記課題を解決するために、本発明は、被験者の金属インプラントに対する不耐性の傾向の増加のリスクの増大を予測するための方法であって、前記被験者の遺伝物質を含む単離されたサンプルにおいて、
ａ）インターロイキン−１βをコードする遺伝子において、一塩基変異ｒｓ１１４３６２７
ＡＧＣＣＴＣＣＴＡＣＴＴＣＴＧＣＴＴＴＴＧＡＡＡＧＣ［Ｃ／Ｔ］ＡＴＡＡＡＡＡＣＡＧＣＧＡＧＧＧＡＧＡＡＣＴＧＧ、配列番号１
を調べ、前記一塩基変異の位置にＣが存在するか否かを確認し、かつ／または
ｂ）ＩＬ１受容体アンタゴニストであるＩＬ１−ＲＮをコードする遺伝子において、反復単位
ＡＴＣＣＴＧＧＧＧＡＡＡＧＴＧＡＧＧＧＡＡＡＴＡＴＧＧＡＣＡＴＣＡＣＡＴＧＧＡＡＣＡＡＣＡＴＣＣＡＧＧＡＧＡＣＴＣＡＧＧＣＣＴＣＴＡＧＧＡＧＴＡＡＣＴＧＧＧＴＡＧＴＧＴＧＣ、配列番号２
を有するＶＮＴＲ多型ｒｓ２２３４６６３を調べ、前記反復単位が５回存在するか否かを確認する、方法を提供する。
【０００９】
驚くべきことに、多型ｒｓ１１４３６２７およびｒｓ２２３４６６３は、金属インプラントを得る人または既に得た人がインプラントに対する不耐性を発症する起こり得るリスクの増大を調べるためのバイオマーカーとして適していることが判明した。ここで、一塩基変異ｒｓ１１４３６２７の場合には、該一塩基変異の位置にＴではなくＣが存在し、かつ／またはＶＮＴＲ多型ｒｓ２２３４６６３の場合には、反復単位（「リピート」）がタンデム状に前後して５回存在する場合に、リスクが増大すると仮定することができる。不耐性は、特に炎症の傾向の増加に現れることがあり、これは、インプラントの緩み（骨溶解を伴う）、疼痛、内出血、機能低下（例えば関節人工器官の可動性の低下）を招く。
【００１０】
特定の理論にとらわれることを望むものではないが、バイオマーカーは、遺伝子に起因する炎症調節の不均衡を示すものと考えられる。これは、「異物」であるインプラントに応答して不耐性を招く。人間の免疫系は、同じ炎症刺激（例えば細菌、インプラント材料）に個々に異なる強度で反応し、その際、免疫応答の経過は、防御機序において重要な役割を果たす炎症誘発性および抗炎症性の伝達物質（例えばサイトカイン）の互いの比率によって決まる。サイトカインＩＬ−１は、最も重要な炎症促進性の伝達物質に属する。例えば遺伝子多型に起因するこの伝達物質の過剰な高放出は、免疫系の過剰反応を引き起こし得る。ＩＬ−１の炎症促進作用は、通常はアンタゴニストＩＬ−ＲＮによってダウンレギュレートされる。しかし、ここで作用を低下させる多型も存在する場合には、炎症伝達物質ＩＬ−１に対抗する炎症阻害性が欠乏し、それにより結果として過剰な炎症反応が生じる可能性がある。このことは、認識可能な要因なしにインプラントに対する強度の炎症反応が起こるという事例を少なくとも部分的に説明し得る。
【００１１】
本発明による方法は、例えばインプラントを必要とする人において、ここでは金属インプラントの使用時に合併症、特に過度の炎症反応が発生する可能性が比較的高いことが予想されるべきか否かを移植前に確認することに寄与し得る。そのような場合には、例えば別のインプラント材料、例えばセラミックに切り替えることができる。本発明は、例えば整形外科または内部人工器官の分野のみならず歯科用インプラントにも有利であり得る。
【００１２】
「金属インプラントに対する不耐性の傾向の増加」という概念は、平均的な一般集団と比較して、金属インプラントに対する不耐性反応、特に炎症反応の可能性が高いことと理解される。
【００１３】
「インプラント」または「内部人工器官」とは、体内に埋め込まれる人工材料であって、永久的または少なくとも長期間にわたってそこに留まるものと理解される。インプラントの例は、股関節、膝関節、肩関節または歯科用インプラントである。しかしこの概念には、体内に埋め込まれる例えばプレート、釘またはネジなどの骨接合物も含まれる。
【００１４】
「金属インプラント」とは、ここでは、特に腰／膝人工器官または歯科用インプラントとしての、コバルト−クロム−モリブデン系、ステンレス鋼系またはチタンのインプラントと理解される。
【００１５】
「関節形成術」（「異種関節形成術」とも称される）という概念は、ここでは、特に関節内部人工器官の使用、すなわち、同種異系の、つまり外来の非生物学的材料による１つ以上の関節面の置き換えに関して用いられる。
【００１６】
「多型」という概念は、集団の遺伝子における配列変異を指す。１集団の異なる複数の個体、または１個体の異なる複数の細胞も、そのような配列変異に起因して、同じ遺伝子座（因子座）に、特定の遺伝子の「対立遺伝子」とも称される異なる変異体を有し得る。この概念には、例えば一塩基（ＳＮＶまたはＳＮＰ）の変異、または異なる数の配列反復（例えばミニサテライト配列、ＶＮＴＲ）の発生が包含される。
【００１７】
「一塩基変異ｒｓ１１４３６２７」（場合によりＩＬ−１Ｂ−３１とも称される）という概念は、ここでは、インターロイキン−１β（ＩＬ−１Ｂ、ＩＬ−１β）をコードする遺伝子のプロモーター領域内の（開始コドンに対して）３１位に存在する一塩基に該当する変異を表し、その際、この位置にはＣまたはＴが存在し得る（例えば、ＨＧＶＳ命名法の推奨事項によればＮＧ＿００８８５１．１：ｇ．４９７０Ｃ＞Ｔ、［１１］参照）。一塩基変異（ＳＮＶ, single nucleotide variation）を有する該当する領域の配列を以下に示す。
ＡＧＣＣＴＣＣＴＡＣＴＴＣＴＧＣＴＴＴＴＧＡＡＡＧＣ［Ｃ／Ｔ］ＡＴＡＡＡＡＡＣＡＧＣＧＡＧＧＧＡＧＡＡＣＴＧＧ（配列番号１）
【００１８】
当該塩基変異体（ここではＣまたはＴ）を、角括弧で囲んで示す。「一塩基変異」またはＳＮＶという表記に代えて、場合により「一塩基多型」またはＳＮＰ（single nucleotide polymorphism）という概念も同義で用いられる。
【００１９】
「ＶＮＴＲ多型ｒｓ２２３４６６３」（場合により「イントロン２  ＶＮＴＲ  ｒｓ２２３４６６３」または「イントロン２  ＶＮＴＲ」とも呼ばれる）という概念は、ＩＬ１受容体アンタゴニスト（ＩＬ１−ＡＮまたはＩＬ１−ＲＮ）をコードする遺伝子において、配列
ＡＴＣＣＴＧＧＧＧＡＡＡＧＴＧＡＧＧＧＡＡＡＴＡＴＧＧＡＣＡＴＣＡＣＡＴＧＧＡＡＣＡＡＣＡＴＣＣＡＧＧＡＧＡＣＴＣＡＧＧＣＣＴＣＴＡＧＧＡＧＴＡＡＣＴＧＧＧＴＡＧＴＧＴＧＣ（配列番号２）
を有する可変数（２〜６）のタンデム状に前後した反復単位（ＶＮＴＲ, variable number tandem repeat, 縦列反復配列多型）が存在する多型と理解される。４つの反復単位を有する配列は、例えばＬＲＧ配列（ＬＲＧ＝Locus Reference Genomic配列）においてＬＲＧ＿１８８が複製されている（http://ftp.ebi.ac.uk/pub/databases/lrgex/LRG_188.xml参照；アクセッション番号ＮＧ＿０２１２４０．１のＮＣＢＩ参照配列も参照のこと）。ＨＧＶＳ命名法の推奨事項（［１１］参照）によれば、５つの反復単位を有するＶＮＴＲ多型は、ｇ．１７６３７＿１７７２２［５］と称される。
【００２０】
「アトピー性疾患」という概念は、気道、胃腸または皮膚と自然または人工的な環境物質との接触に際して、即時型アレルギー反応（Ｉ型アレルギー）、すなわちＩｇＥ形成の増大を伴って反応する、遺伝的に特定の準備に基づく疾患と解釈される。アトピー性疾患では、呼吸器および胃腸粘膜の界面ならびに皮膚がしばしば障害を受ける。アトピー性疾患の例は、アレルギー性気管支喘息、アレルギー性鼻炎（アレルギー性鼻結膜炎）およびアトピー性皮膚炎（アトピー性湿疹、神経性皮膚炎）である。
【００２１】
好ましくは、本発明による方法では、ＩＬ１受容体アンタゴニストであるＩＬ１−ＲＮをコードする遺伝子において、反復単位
ＡＴＣＣＴＧＧＧＧＡＡＡＧＴＧＡＧＧＧＡＡＡＴＡＴＧＧＡＣＡＴＣＡＣＡＴＧＧＡＡＣＡＡＣＡＴＣＣＡＧＧＡＧＡＣＴＣＡＧＧＣＣＴＣＴＡＧＧＡＧＴＡＡＣＴＧＧＧＴＡＧＴＧＴＧＣ、配列番号２
を有するＶＮＴＲ多型ｒｓ２２３４６６３を調べ、この反復単位が５回存在するか否かを確認する。
【００２２】
特に好ましくは、本発明による方法ではさらに、被験者がアトピー性疾患を有するか否かを確認する。アトピー性疾患の例は、気管支喘息、アレルギー性鼻結膜炎およびアトピー性皮膚炎である。特に、５つの反復単位を有するＶＮＴＲ多型ｒｓ２２３４６６３の存在とアトピー性疾患の存在とが組み合わさると、該当する人において、金属インプラントの移植時に合併症、特に炎症反応の増加が生じるリスクが増大すると推論することができる。
【００２３】
さらなる態様において、本発明は、本発明による方法を実施するためのキットにも関する。本発明によるキットは、表１に示すプライマー配列を含む。
【００２４】
【表１】
2021514627.tif 000002
【００２５】
以下、本発明につき、説明のみを目的として実施例により詳説する。
【００２６】
全内部人工器官を有する１９５名の患者がインフォームドコンセントを経て参加した実験を行った。この実験は、地方倫理委員会により認可され、ClinicalTrials.govにて実験ＩＤ２３０−１２で登録されている。
【００２７】
１０２名の患者（女性７２名、男性３０名、４１〜８１歳）は、関節形成術を受けており、合併症を併発していた。対照群は、正常に機能している関節形成術を受けた９３名の患者（女性７０名、男性２３名、１８〜９６歳）から構成されていた。
【００２８】
アンケート調査
喫煙、医薬品の服用、インプラントの種類、金属アレルギーの既往およびアトピー性疾患の既往、例えばアレルギー性鼻炎、アトピー性湿疹または喘息の既往に関する情報を含む、アンケート調査による病歴を収集した。さらに、整形外科のＷＯＭＡＣアンケート調査（Western Ontario and McMaster Universities Osteoarthritis Index, WOMAC）を使用して、疼痛、こわばりおよび機能制限に関する人工関節の挙動について患者の自己評価を定量化した［５］。
【００２９】
アレルゲンおよびパッチテスト
全患者について、パッチテストでアレルギー学的試験を行った。これには、Almirall-Hermalパッチテスト調合剤およびFinn-Kammern auf Scanpor（Finn Chambers on Scanpor）（Almirall Hermal、ラインベーク、ドイツ）を使用した。これらの物質を、０日目に背中上部に施与した。２９のアレルゲンを含む標準シリーズ、通常のサプリメントシリーズおよびドイツ接触皮膚炎学会（ＤＫＧ）のガイドラインに準拠した骨セメントシリーズ（それぞれの患者がセメント固定式内部人工器官を有していた場合）を試験した［６］。測定を、２日目、３日目および６日目にアレルギー科の医師が行った。ここで陽性と記載されている反応は、＋、＋＋および＋＋＋に分類された反応であった。
【００３０】
リンパ球幼若化試験（ＬＴＴ）
Summerら［７］に従って、リンパ球幼若化試験（ＬＴＴ）を実施した。要するに、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を密度勾配遠心分離により単離し、ＮｉＳＯ４、ＣｏＣｌ２またはＣｒＣｌ３の濃度を変えた４つの並行バッチで４日間刺激した。対照刺激は、Ｔ細胞マイトジェンであるフィトヘマグルチニン（ＰＨＡ、Biochrom、ベルリン、ドイツ）２．４μｇ／ｍｌ、対照リコール抗原としての破傷風トキソイド（ＴＴ、Chiron Behring、ベルリン、ドイツ）５μｇ／ｍｌであった。５日後、ＰＢＭＣを3Ｈ−チミジンによりパルスし、一晩インキュベーションした後に吸収された放射活性を測定することにより増殖を調べた。結果を、刺激指数（ＳＩ）として示す。これは、非刺激の対照培養物に対する刺激された対照培養物における吸収された放射活性の比率を表す。ＳＩ≧３を、陽性反応と見なした。
【００３１】
多型解析
「peqGOLD Blood DNA Mini Kit」（Peqlab、エアランゲン、ドイツ）を製造元のプロトコルに従って使用して、患者の末梢血からＤＮＡを単離した。得られたＤＮＡを蒸留Ｈ２Ｏで希釈し、最終濃度を４０ｎｇ／μｌとした。３つの多型ＩＬ−１Ｂ−３９５４（ｒｓ１１４３６３４）、ＩＬ−１Ｂ−３１（ｒｓ１１４３６２７）、ＩＬ１−Ｂ−５１１（ｒｓ１６９４４）およびミニサテライト配列ＩＬ−１  ＲＮ  イントロン２  ＶＮＴＲ（ｒｓ２２３４６６３）を、ＰＣＲ、制限酵素ＴａｑＩ、ＡｌｕＩまたはＡｖａＩによる消化、それに続くゲル電気泳動により解析した。多型のＤＮＡ配列を、表１に示す。
【００３２】
【表２】
2021514627.tif 000003
【００３３】
表２に、多型をそのそれぞれの制限酵素とともに示し、さらに、得られる断片も示す。
【００３４】
【表３】
2021514627.tif 000004
【００３５】
統計
数名の著者により、ミュンヘンのルートヴィヒマクシミリアン大学の統計研究所と協力して、対立遺伝子モデルおよびリスク分析（オッズ比）によるフィッシャーの正確確率検定のクロス集計表を使用して、統計的評価が行われた［８〜１０］。
【００３６】
結果
関節形成術の合併症のある患者は、例えば疼痛（８４．１％）、次いで可動性の自由度の低下（７８．４％）、腫れ（７１．６％）などのさまざまな症状を示していた。これはＷＯＭＡＣ値にも反映され、その際、１００ポイントは完全な機能を意味する。ここで、関節形成術の対照患者では、８２．１３±１８．１１という高い平均値を示す内部人工器官の良好な性能が実証された。一方で、関節形成術の合併症のある患者は、４２．０６±１０．１２という低い平均ＷＯＭＡＣ値を示していた。関節形成術の合併症のある群では、アトピー性疾患の割合がより高く（２４．５％対１６．１％）、花粉症が最も多くの割合を占めていた（１８．７％対１１．８％）。関節形成術の合併症のある群では、既往の金属過敏症の患者の数も、より多かった（２４．０５％対９．７％）。金属パッチテスト陽性の結果は次のとおりであった：ニッケル１９．６％対９．７％、コバルト６．９％対３．２％、クロム２．０％対１．１％。ＬＴＴでは、より多数の患者が陽性であった。ここで、関節形成術の合併症のある患者の２８．４％がニッケルに対して、２．９％がコバルトに対して、そして２．９％がクロムに対してＬＴＴ陽性であった。対照群では、ＬＴＴ陽性であった患者がより少なく、ニッケルに対して１９．４％、コバルトに対して１．１％、そしてクロムに対しては０であった。アンケート、パッチテストおよびＬＴＴの結果を、表３に示す。
【００３７】
【表４−１】
2021514627.tif 000005
【００３８】
【表４−２】
2021514627.tif 000006
【００３９】
ＩＬ−１Ｂ多型３９５４の２つの異なる対立遺伝子であるＣまたはＴの対立遺伝子頻度には、相違がなかった。アトピーを伴うかまたは伴わない、パッチテストまたはＬＴＴの陽性または陰性の患者でのサブグループ解析でも、重大な相違は示されなかった。対照群において、特にアトピーがなく、パッチテストでもＬＴＴ反応でも陽性でない患者では、Ｃ対立遺伝子の頻度がより高いというわずかな傾向があった。ＩＬ１Ｂ多型３９５４の結果を、表４に示す。
【００４０】
【表５−１】
2021514627.tif 000007
【００４１】
【表５−２】
2021514627.tif 000008
【００４２】
対立遺伝子Ｔを伴うＩＬ−１Ｂ−３１多型は、対照群においてより高い頻度を示していた（８４．３％対４８％）。これは、インプラントに対する免疫応答を低減させ得る「保護」遺伝子型を反映している可能性がある。このＴ対立遺伝子頻度の相違は、サブグループ解析でも存在していた。ＩＬ−１Ｂ−３１対立遺伝子頻度の結果を、表５に示す。
【００４３】
【表６−１】
2021514627.tif 000009
【００４４】
【表６−２】
2021514627.tif 000010
【００４５】
ＩＬ−１Ｂ−５１１多型の対立遺伝子頻度に重大な相違はなかった。対照群ではこの多型のＣ対立遺伝子の頻度がより高くなる傾向があったが、これは統計的に有意であるほど十分に高いものではなかった。ＩＬ−１Ｂ−５１１多型の結果を、表６に示す。
【００４６】
【表７−１】
2021514627.tif 000011
【００４７】
【表７−２】
2021514627.tif 000012
【００４８】
ＩＬ−１Ｂ−ＲＮ−イントロン−２−ＶＮＴＲでは、関節形成術の疾患のはるかにより高いリスクがあり、これは対立遺伝子３（４９８ｂｐ、５反復単位）と相関していた。興味深いことに、患者がさらにアトピー性疾患を患っていた場合にこのリスクが増大した。このリスクは、パッチテスト反応ともＬＴＴ反応性とも相関していなかった。ＩＬ−１Ｂ−ＲＮ  イントロン２  ＶＮＴＲの結果を、表７に示す。
【００４９】
【表８−１】
2021514627.tif 000013
【００５０】
【表８−２】
2021514627.tif 000014
【００５１】
【表８−３】
2021514627.tif 000015
【００５２】
【表９】
2021514627.tif 000016
【配列表】
2021514627000001.app
【国際調査報告】
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2021514627.tif 000019
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