(57)【要約】  本発明は、１−イミダゾチアジアゾロ−２Ｈ−ピロール−５−オン誘導体、それらを調製するためのプロセス、それらを含有する医薬組成物、および医薬品としてのそれらの使用に関する。（ｌ）【化１】2021522290.tif 000101
2021522290.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）による化合物、またはその薬学的に許容される塩：
【化１】
2021522290.tif 000100
式中、
Ｒ１が、Ｃ１−４アルキルまたはＣ３−５シクロアルキルであり、これらの基のいずれかが、１つ以上のハロゲン置換基によって場合により置換されており、
Ｒ２が、１つのヒドロキシ置換基またはアルコキシ置換基によって置換されたＣ１−４アルキルであり、
Ｒ３が、ハロゲンであるか；Ｃ１−４アルキルまたはＣ３−４シクロアルキルであり、これらの基のいずれかが、１つ以上のハロゲン原子によって場合により置換されている、式（Ｉ）による化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項２】
Ｒ２が、アルコキシ置換基によって置換されたＣ１−４アルキルである、請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項３】
Ｒ３が、１つ以上のハロゲン原子によって置換されたＣ１−４アルキルである、請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項４】
Ｒ１が、ｎ−プロピル、２，２−ジフルオロプロピル、３，３，３−トリフルオロプロピル、２−クロロ−２，２−ジフルオロエチル、２，２，２−トリフルオロエチルまたは２，２−ジフルオロシクロプロピルである、請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項５】
Ｒ１が、３，３，３−トリフルオロプロピルまたは２，２−ジフルオロシクロプロピルである、請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項６】
Ｒ２が、ヒドロキシメチルまたはメトキシメチルである、請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項７】
Ｒ２がメトキシメチルである、請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項８】
Ｒ３が、メチル基、ジフルオロメチル基、塩素基またはトリフルオロメチル基である、請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項９】
Ｒ３が、メチルまたはジフルオロメチルである、請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１０】
１−［［２−（メトキシメチル）−６−（トリフルオロメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−プロピル−２Ｈ−ピロール−５−オン；
１−［［２−（メトキシメチル）−６−（トリフルオロメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−（２，２，２−トリフルオロエチル）−２Ｈ−ピロール−５−オン；
１−［［２−（メトキシメチル）−６−（トリフルオロメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−（３，３，３−トリフルオロプロピル）−２Ｈ−ピロール−５−オン；
１−［［２−（メトキシメチル）−６−メチル−イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−プロピル−２Ｈ−ピロール−５−オン；
１−［［６−クロロ−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−（２，２，２−トリフルオロエチル）−２Ｈ−ピロール−５−オン；
１−［［６−クロロ−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−プロピル−２Ｈ−ピロール−５−オン；
１−［［６−クロロ−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−（３，３，３−トリフルオロプロピル）−２Ｈ−ピロール−５−オン；
１−［［６−（ジフルオロメチル）−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−プロピル−２Ｈ−ピロール−５−オン；
１−［［６−（ジフルオロメチル）−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−（２，２，２−トリフルオロエチル）−２Ｈ−ピロール−５−オン；
１−［［６−（ジフルオロメチル）−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−（２，２，２−トリフルオロエチル）−２Ｈ−ピロール−５−オン；
１−［［２−（メトキシメチル）−６−メチル−イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−（２，２，２−トリフルオロエチル）−２Ｈ−ピロール−５−オン；
１−［［６−（ジフルオロメチル）−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−（２，２，２−トリフルオロエチル）−２Ｈ−ピロール−５−オン；
１−［［６−（１−フルオロシクロプロピル）−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−（２，２，２−トリフルオロエチル）−２Ｈ−ピロール−５−オン；
３−（２−クロロ−２，２−ジフルオロ−エチル）−１−［［２−（メトキシメチル）−６−（トリフルオロメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−２Ｈ−ピロール−５−オン；
１−［［２−（メトキシメチル）−６−メチル−イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−（３，３，３−トリフルオロプロピル）−２Ｈ−ピロール−５−オン；
１−［［６−（ジフルオロメチル）−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−（３，３，３−トリフルオロプロピル）−２Ｈ−ピロール−５−オン；
３−（２，２−ジフルオロプロピル）−１−［［２−（メトキシメチル）−６−（トリフルオロメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−２Ｈ−ピロール−５−オン；
１−［［６−（ジフルオロメチル）−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−（２，２−ジフルオロプロピル）−２Ｈ−ピロール−５−オン；
３Ｒ−（２，２−ジフルオロシクロプロピル）−１−［［２−（メトキシメチル）−６−（トリフルオロメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−２Ｈ−ピロール−５−オン；
３Ｓ−（２，２−ジフルオロシクロプロピル）−１−［［２−（メトキシメチル）−６−（トリフルオロメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−２Ｈ−ピロール−５−オン；
１−［［２−（メトキシメチル）−６−メチル−イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３Ｒ−［２，２−ジフルオロシクロプロピル］−２Ｈ−ピロール−５−オン；
１−［［２−（メトキシメチル）−６−メチル−イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３Ｓ−［２，２−ジフルオロシクロプロピル］−２Ｈ−ピロール−５−オン；
１−［［６−（ジフルオロメチル）−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３Ｒ−［２，２−ジフルオロシクロプロピル］−２Ｈ−ピロール−５−オン；
１−［［６−（ジフルオロメチル）−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３Ｓ−［２，２−ジフルオロシクロプロピル］−２Ｈ−ピロール−５−オン；
３−（２，２−ジフルオロプロピル）−１−［［２−（メトキシメチル）−６−メチル−イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−２Ｈ−ピロール−５−オン；
１−［［２−（ヒドロキシメチル）−６−メチル−イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−（３，３，３−トリフルオロプロピル）−２Ｈ−ピロール−５−オン；
１−［［６−（ジフルオロメチル）−２−（ヒドロキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−（３，３，３−トリフルオロプロピル）−２Ｈ−ピロール−５−オン；および
１−［［６−（ジフルオロメチル）−２−（ヒドロキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−（２，２，２−トリフルオロエチル）−２Ｈ−ピロール−５−オン
からなる群から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項１１】
薬剤として使用するための、請求項１から１０のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１２】
薬学的に許容される希釈剤または担体と組み合わせて、請求項１から１０に記載の化合物の有効量を含む医薬組成物。
【請求項１３】
てんかん、てんかん発作、発作性疾患、痙攣、特に難治性発作の治療に使用するための、請求項１から１０のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１４】
てんかん、てんかん発作、発作性疾患、痙攣の治療および／または予防のための、特に難治性発作の治療のための薬剤を製造するための、請求項１から１０のいずれか一項に記載の式（Ｉ）の化合物の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、１−イミダゾチアジアゾロ−２Ｈ−ピロール−５−オン誘導体、それらを調製するためのプロセス、それらを含有する医薬組成物、および医薬品としてのそれらの使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
ＳＶ２Ａ結合親和性と抗痙攣効力との間に機能的相関が存在し、ＳＶ２Ａタンパク質がてんかんの病態生理で役割を発揮していると思われることが、文献（Ｋａｍｉｎｓｋｉ  ｅｔ  ａｌ．ｉｎ  Ｎｅｕｒｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，５４，（２００８）７１５）から知られている（Ｌｏｓｃｈｅｒ  ｅｔ  ａｌ．ｉｎ  ＣＮＳ  ｄｒｕｇｓ，Ｏｃｔｏｂｅｒ  ２０１６）。
【０００３】
いくつかのＳＶ２Ａリガンドは、本発明者らの同時係属特許出願における以下に記載さするものを含め、先行技術に記載されている。
【０００４】
国際公開第２０１１／０４７８６０号パンフレットは、以下の式Ａの２−オキソ−１−ピロリジニルイミダゾチアジアゾール誘導体化合物を開示している：
【化１】
2021522290.tif 000003
式中、
Ｒ１は、少なくとも１つのハロゲン置換基を含むＣ１−４アルキルであり、
Ｒ２は、ハロゲン、または少なくとも１つのハロゲン置換基を含むＣ１−４アルキルのいずれかであり、
Ｒ３は、少なくとも１つのヒドロキシ置換基またはアルコキシ置換基を含むＣ１−４アルキルである。
【０００５】
国際公開第２００８／１３２１３９号パンフレットでは、式（Ｂ）の抗てんかん化合物が開示されている：
【化２】
2021522290.tif 000004
式中、
Ｙは、ＯまたはＳであり、
Ｒ１は、水素またはＣ１−６アルキルであり、
Ｒ２は、水素であり、
Ｒ３は、−ＣＯＮＲ５Ｒ６、−ＣＯＲ７、イミダゾリル、イミダゾピリジニル、イミダゾピリダジニルであり、
Ｒ５、Ｒ６は、同じであるか異なり、水素およびＣ１−６アルキルから独立して選択され、
Ｒ７は、Ｃ１−６アルキルであり、
Ｚは、イミダゾリジン−１−イル、１，３−オキサゾリジン−３−イル、２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル、１，３−チアゾール−３（２Ｈ）−イル、１，３−チアゾリジン−３−イル、ピペリジン−１−イル、アゼパン−１−イル、５，６−ジヒドロ−４Ｈ−チエノ［３，２−ｂ］ピロール−４−イル、ヘキサヒドロ−４Ｈ−チエノ［３，２−ｂ］ピロール−４−イル、２，３−ジヒドロ−１Ｈ−チエノ［３，４−ｂ］ピロール−１−イル、１，３−ベンゾチアゾール−３（２Ｈ）−イル、１，３−ベンゾオキサゾール−３（２Ｈ）−イル、ピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−１（２Ｈ）−イル、３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル、３，４−ジヒドロキノリン−１（２Ｈ）−イル、１，３，４，５−テトラヒドロ−２Ｈ−２−ベンズアゼピン−２−イル、１，２，４，５−テトラヒドロ−３Ｈ−３−ベンズアゼピン−３−イルからなる群から選択される単環式または二環式複素環部分である。
【０００６】
国際公開第２００８／１３２１３９号パンフレットの特定の実施形態では、式（Ｂ）のＺ＝Ｙ部分は、以下であり得る：
【化３】
2021522290.tif 000005
【０００７】
上記の化合物は、てんかん、てんかん発作、発作性疾患、痙攣、特に難治性発作の治療に対する薬剤としての使用について記載されている。
【０００８】
発作制御では、抗てんかん薬が利用可能であるにもかかわらず、現在利用可能な治療にまったく反応しないか、不十分にしか反応しない患者に生じる持続的な問題が依然として存在する。
【０００９】
これらの患者は治療に抵抗性であると考えられており、医学界にとって大きな課題となっている。てんかん患者の約３０％が難治性として分類されると推定される。したがって、この患者集団を特に対象とする新たな薬剤を開発する必要がある。
【００１０】
さらに、治療に使用するための化合物を開発する際に直面する可能性のある問題が、特定の化合物がＣＹＰ４５０酵素を誘導する能力である。そのような酵素の誘導は、そのような化合物、またはそれとともに同時投与され得る他の化合物の患者への曝露に影響を及ぼし、それによって、それらのそれぞれの安全性または有効性を潜在的に変化させる可能性がある。したがって、そのような誘導の可能性も最小限に抑える化合物を開発することが望ましい。
【発明の概要】
【００１１】
本発明は、式（Ｉ）を有する１−イミダゾチアジアゾロ−２Ｈ−ピロール−５−オン誘導体、それらの幾何異性体、鏡像異性体、ジアステレオ異性体、同位体および混合物、またはそれらの薬学的に許容される塩を提供する：
【化４】
2021522290.tif 000006
【００１２】
本発明のさらなる態様は、詳細な説明から明らかになるであろう。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
本発明は、式（Ｉ）による１−イミダゾチアジアゾロ−２Ｈ−ピロール−５−オン誘導体に関する：
【化５】
2021522290.tif 000007
式中、
Ｒ１は、Ｃ１−４アルキルまたはＣ３−５シクロアルキルであり、これらの基のいずれかは、１つ以上のハロゲン置換基によって場合により置換されており、
Ｒ２は、１つのヒドロキシ置換基またはアルコキシ置換基によって置換されたＣ１−４アルキルであり、
Ｒ３は、ハロゲンであるか；Ｃ１−４アルキルまたはＣ３−４シクロアルキルであり、これらの基のいずれかは、１つ以上のハロゲン原子によって場合により置換されている。
【００１４】
式（Ｉ）の化合物の互変異性体、幾何異性体、鏡像異性体、ジアステレオマー、同位体および混合物または薬学的に許容される塩、ならびに任意の重水素化変異体もまた、本発明の範囲内に含まれる。
【００１５】
したがって、式（Ｉ）による化合物は、先行技術に開示されている化合物とは異なる。
【００１６】
一実施形態では、Ｒ１は、１つ以上のハロゲン置換基によって場合により置換されたＣ１−４アルキルである。この実施形態の第１の態様では、Ｒ１は、非置換のＣ１−４アルキルである。この実施形態の第２の態様では、Ｒ１は、１つ以上のハロゲンによって置換されたＣ１−４アルキルである。好適には、この特定の態様では、ハロゲン置換基は、クロロ置換基またはフルオロ置換基である。
【００１７】
別の実施形態では、Ｒ１は、１つ以上のハロゲン置換基によって場合により置換されたＣ３−５シクロアルキルである。この実施形態の第１の態様では、Ｒ１は、非置換のＣ３−５シクロアルキルである。この実施形態の第２の態様では、Ｒ１は、１つ以上のハロゲンによって置換されたＣ３−５シクロアルキルである。好適には、この特定の態様では、ハロゲン置換基はフルオロ置換基である。
【００１８】
特定の実施形態では、Ｒ１は、１つ以上のハロゲン置換基によって置換されたＣ１−４アルキルである。この特定の実施形態の特定の態様では、Ｒ１は、１つ以上のフルオロ置換基によって置換されたＣ１−４アルキルである。
【００１９】
Ｒ１基の好適な例には、ｎ−プロピル、２，２−ジフルオロプロピル、２−クロロ−２，２−ジフルオロエチル、２，２−ジフルオロエチル、２，２，２−トリフルオロエチル、３，３，３−トリフルオロプロピル２−フルオロエチルおよび２，２−ジフルオロシクロプロピルが挙げられる。
【００２０】
Ｒ１基の特定の例には、ｎ−プロピル、２−クロロ−２，２−ジフルオロエチル、２，２−ジフルオロプロピル、３，３，３−トリフルオロプロピル、２，２，２−トリフルオロエチルおよび２，２−ジフルオロシクロプロピルが挙げられる。好ましい実施形態では、Ｒ１は、３，３，３−トリフルオロプロピルまたは２，２−ジフルオロシクロプロピルである。
【００２１】
一実施形態では、Ｒ２は、１つのヒドロキシによって置換されたＣ１−４アルキルである。別の実施形態では、Ｒ２は、１つのアルコキシ置換基によって置換されたＣ１−４アルキルである。この実施形態の特定の態様では、Ｒ２は、メトキシ置換基によって置換されたＣ１−４アルキルである。
【００２２】
特定の実施形態では、Ｒ２は、ヒドロキシメチルまたはメトキシメチルである。
【００２３】
好ましい実施形態では、Ｒ２はメトキシメチルである。
【００２４】
第１の実施形態では、Ｒ３は、１つ以上のハロゲン原子によって場合により置換されたＣ１−４アルキルである。この実施形態の第１の態様では、Ｒ３は、非置換のＣ１−４アルキルである。この実施形態の第２の態様では、Ｒ３は、１つ以上のハロゲン原子によって置換されたＣ１−４アルキルである。好適には、この特定の態様では、Ｒ３は、１つ以上のフルオロ原子によって置換されたＣ１−４アルキルである。
【００２５】
第２の実施形態では、Ｒ３は、１つ以上のハロゲン原子によって場合により置換されたＣ３−４シクロアルキルである。この実施形態の第１の態様では、Ｒ３は、非置換のＣ３−４シクロアルキルである。この実施形態の第２の態様では、Ｒ３は、１つ以上のハロゲン原子によって置換されたＣ３−４シクロアルキルである。好適には、この特定の態様では、Ｒ３は、１つ以上のフルオロ原子によって置換されたＣ３−４シクロアルキルである。
【００２６】
第３の実施形態では、Ｒ３はハロゲンである。この実施形態の特定の態様では、Ｒ３はクロロである。
【００２７】
Ｒ３の好適な例には、メチル、ジフルオロメチル、クロロ、トリフルオロメチルおよび１−フルオロシクロプロピルが挙げられる。
【００２８】
好ましい実施形態では、Ｒ３は、メチルまたはジフルオロメチルである。
【００２９】
Ｒ１基、Ｒ２基およびＲ３基の上記の実施形態および例のあらゆる組合せが、本発明の範囲内に包含される。
【００３０】
さらに特定の実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、以下のものである：
・Ｒ１は、Ｃ１−４アルキルまたはＣ３−５シクロアルキルであり、これらの基のいずれかは、１つ以上のハロゲン置換基によって場合により置換されており、
・Ｒ２は、アルコキシ置換基によって置換されたＣ１−４アルキルであり、
・Ｒ３は、１つ以上のハロゲン原子によって置換されたＣ１−４アルキルである。
【００３１】
本発明による特定の化合物は、以下からなる群から選択されるものである：
１−［［２−（メトキシメチル）−６−（トリフルオロメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−プロピル−２Ｈ−ピロール−５−オン；
１−［［２−（メトキシメチル）−６−（トリフルオロメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−（２，２，２−トリフルオロエチル）−２Ｈ−ピロール−５−オン；
１−［［２−（メトキシメチル）−６−（トリフルオロメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−（３，３，３−トリフルオロプロピル）−２Ｈ−ピロール−５−オン；
１−［［２−（メトキシメチル）−６−メチル−イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−プロピル−２Ｈ−ピロール−５−オン；
１−［［６−クロロ−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−（２，２，２−トリフルオロエチル）−２Ｈ−ピロール−５−オン；
１−［［６−クロロ−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−プロピル−２Ｈ−ピロール−５−オン；
１−［［６−クロロ−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−（３，３，３−トリフルオロプロピル）−２Ｈ−ピロール−５−オン；
１−［［６−（ジフルオロメチル）−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−プロピル−２Ｈ−ピロール−５−オン；
１−［［６−（ジフルオロメチル）−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−（２，２，２−トリフルオロエチル）−２Ｈ−ピロール−５−オン；
１−［［２−（メトキシメチル）−６−メチル−イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−（２，２，２−トリフルオロエチル）−２Ｈ−ピロール−；
１−［［６−（ジフルオロメチル）−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−（２，２，２−トリフルオロエチル）−２Ｈ−ピロール−５−オン；
１−［［６−（１−フルオロシクロプロピル）−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−（２，２，２−トリフルオロエチル）−２Ｈ−ピロール−５−オン；
３−（２−クロロ−２，２−ジフルオロ−エチル）−１−［［２−（メトキシメチル）−６−（トリフルオロメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−２Ｈ−ピロール−５−オン；
１−［［２−（メトキシメチル）−６−メチル−イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−（３，３，３−トリフルオロプロピル）−２Ｈ−ピロール−５−オン；
１−［［６−（ジフルオロメチル）−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−（３，３，３−トリフルオロプロピル）−２Ｈ−ピロール−５−オン；
３−（２，２−ジフルオロプロピル）−１−［［２−（メトキシメチル）−６−（トリフルオロメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−２Ｈ−ピロール−５−オン；
１−［［６−（ジフルオロメチル）−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−（２，２−ジフルオロプロピル）−２Ｈ−ピロール−５−オン；
３Ｒ−（２，２−ジフルオロシクロプロピル）−１−［［２−（メトキシメチル）−６−（トリフルオロメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−２Ｈ−ピロール−５−オン；
３Ｓ−（２，２−ジフルオロシクロプロピル）−１−［［２−（メトキシメチル）−６−（トリフルオロメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−２Ｈ−ピロール−５−オン；
１−［［２−（メトキシメチル）−６−メチル−イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３Ｒ−［２，２−ジフルオロシクロプロピル］−２Ｈ−ピロール−５−オン；
１−［［２−（メトキシメチル）−６−メチル−イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３Ｓ−［２，２−ジフルオロシクロプロピル］−２Ｈ−ピロール−５−オン；
１−［［６−（ジフルオロメチル）−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３Ｒ−［２，２−ジフルオロシクロプロピル］−２Ｈ−ピロール−５−オン；
１−［［６−（ジフルオロメチル）−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３Ｓ−［２，２−ジフルオロシクロプロピル］−２Ｈ−ピロール−５−オン；
３−（２，２−ジフルオロプロピル）−１−［［２−（メトキシメチル）−６−メチル−イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−２Ｈ−ピロール−５−オン；
１−［［２−（ヒドロキシメチル）−６−メチル−イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−（３，３，３−トリフルオロプロピル）−２Ｈ−ピロール−５−オン；
１−［［６−（ジフルオロメチル）−２−（ヒドロキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−（３，３，３−トリフルオロプロピル）−２Ｈ−ピロール−５−オン；および
１−［［６−（ジフルオロメチル）−２−（ヒドロキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−（２，２，２−トリフルオロエチル）−２Ｈ−ピロール−５−オン。
【００３２】
以下の段落は、本発明による化合物を構成する様々な化学部分の定義を提供し、他に明確に示された定義がさらに広範囲な定義を提供しない限り、明細書および請求項全体を通して均一に適用されることを意図している。
【００３３】
「Ｃ１−４アルキル」とは、１〜４個の炭素原子を有するアルキル基を指す。この用語は、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチルなどの基によって例示される。「Ｃ１−４アルキル」基は、ハロゲン、ヒドロキシまたはアルコキシから選択される１つ以上の置換基によって置換されていてもよい。
【００３４】
本明細書で使用される用語「Ｃ３−５シクロアルキル」は、飽和単環式炭化水素に由来する、３〜５個の炭素原子の一価基を指す。例示的なＣ３−５シクロアルキル基には、シクロプロピル、シクロブチルおよびシクロペンチルが含まれる。Ｃ３−５シクロアルキル基の例には、Ｃ３−４シクロアルキルがあり、Ｃ３−４シクロアルキルとは、３〜４個の炭素原子を有する基を指す。例示的なＣ３−４シクロアルキル基は、シクロプロピルおよびシクロブチルである。
【００３５】
式（Ｉ）の任意の部分「Ｈ」は、同位体水素、重水素またはトリチウムであり得る。
【００３６】
「ヒドロキシ」は、式−ＯＨの基を表す。
【００３７】
「アルコキシ」は、Ｒが「Ｃ１−４アルキル」を含む基−Ｏ−Ｒを指す。
【００３８】
「ハロゲン」は、フルオロ原子、クロロ原子、ブロモ原子およびヨード原子、好ましくはフルオロおよびクロロを指す。
【００３９】
本発明による「薬学的に許容される塩」には、式（Ｉ）の化合物が形成することができる治療的に活性な非毒性の酸性塩または塩基塩の形態が含まれる。
【００４０】
塩基としてその遊離形態で生じる式（Ｉ）の化合物の酸付加塩形態は、適切な酸、例えば、無機酸、例えば、ハロゲン化水素、例えば、塩酸もしくは臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸など；または、例えば、酢酸、トリフルオロ酢酸、ヒドロキシ酢酸、プロパン酸、乳酸、ピルビン酸、マロン酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、シクラミン酸、サリチル酸、ｐ−アミノサリチル酸、パモ酸などのような有機酸によって遊離塩基を処理することにより得ることができる。
【００４１】
酸性プロトンを含む式（Ｉ）の化合物は、適切な有機塩基および無機塩基を用いた処理により、それらの治療的に活性な非毒性の塩基付加塩形態、例えば金属塩またはアミン塩に変換され得る。適切な塩基塩形態には、例えば、アンモニウム塩、アルカリ塩およびアルカリ土類金属塩、例えば、リチウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩、マグネシウム塩、カルシウム塩など、有機塩基との塩、例えば、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン、ヒドラバミン塩、ならびにアミノ酸との塩、例えば、アルギニン、リジンなどとの塩が含まれる。
【００４２】
逆に、上記塩形態は、適切な塩基または酸を用いて処理することにより遊離形態に変換することができる。
【００４３】
式（Ｉ）の化合物およびそれらの塩は、本発明の範囲内に含まれる溶媒和物の形態であり得る。そのような溶媒和物には、例えば、水和物、アルコラートなどが含まれる。
【００４４】
式（Ｉ）の化合物および／またはそれらの中間体は、それらの構造中に少なくとも１つの不斉中心を有し得る。この不斉中心は、ＲまたはＳ配置で存在してもよく、上記ＲおよびＳ表記は、Ｐｕｒｅ  Ａｐｐｌ．Ｃｈｅｍ．，４５（１９７６）１１−３０に記載の規則に対応して使用される。したがって、本発明はまた、式（Ｉ）の化合物またはそれらの混合物（立体異性体のあらゆる可能な混合物を含む）の鏡像異性体形態およびジアステレオ異性体形態などのあらゆる立体異性体形態に関する。本発明に関して、単数または複数の化合物への言及は、特定の異性体形態が具体的に言及されない限り、その可能な異性体形態およびそれらの混合物のそれぞれにおけるその化合物を包含することが意図される。本明細書で使用される「鏡像異性的に純粋な」という表現は、９５％を超える鏡像異性体過剰率（ｅｅ）を有する化合物を指す。
【００４５】
本発明による化合物は、様々な多形形態で存在し得る。上記の式では明確に示されていないが、そのような形態は本発明の範囲内に含まれることが意図されている。
【００４６】
本発明による式（Ｉ）の化合物は、合成有機化学の当業者によって理解されるように、従来の方法と同様に調製することができる。
【００４７】
一実施形態によれば、Ｒ２が１つのアルコキシ置換基によって置換されたＣ１−４アルキルである一般式（Ｉ）を有する化合物は、以下の式に従って、式（ＩＩ）のアミンを用いて、式（ＩＩＩ）のヒドロキシラクトンを還元的アミノ化することによって調製され得る：
【化６】
2021522290.tif 000008
式中、Ｒ１およびＲ３は、式（Ｉ）の化合物について上で定義されたものと同じ定義を有する。
【００４８】
この反応は、国際公開第０１／６２７２６号パンフレット、国際公開第２００６／１２８７９２号パンフレットおよび国際公開第２００８／１３２１３９号パンフレットの特許出願に記載されている手順に従って行われてもよい。
【００４９】
式（ＩＩＩ）の化合物は、国際公開第０１／６２７２６号パンフレットもしくは国際公開第２００６／１２８７９２号パンフレットの特許出願に記載されている方法に従って、または当業者に公知の任意の方法に従って調製され得る。
【００５０】
Ｒ２が１つのアルコキシ置換基によって置換されたＣ１−４アルキルである式（ＩＩ）の化合物は、以下の式に従って、式（ＩＶ）の化合物を還元することによって調製され得る：
【化７】
2021522290.tif 000009
式中、Ｒ３は、式（Ｉ）の化合物について上で定義されたものと同じ定義を有する。
【００５１】
この反応は、室温でＴＨＦ／水混合物中のトリフェニルホスフィンなどの還元剤を使用して、または当業者に公知の任意の方法に従って行われてもよい。
【００５２】
Ｒ２が１つのアルコキシ置換基によって置換されたＣ１−４アルキルである式（ＩＶ）の化合物は、以下の式に従って、式（Ｖ）の化合物を変換することによって調製され得る：
【化８】
2021522290.tif 000010
式中、Ｒ３は、式Ｉの化合物について上で定義されたものと同じ定義を有する。
【００５３】
この反応は、ジクロロメタン中のＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンなどの塩基の存在下、０℃で、メタンスルホニルクロリドなどの塩化スルホニルを用いて、または当業者に公知の任意の他の方法に従って化合物（Ｖ）を処理し、続いて、０℃でＤＭＦ中のアジ化ナトリウムなどのアジド誘導体を用いて中間体を処理することにより、２段階系列で行われてもよい。
【００５４】
あるいは、化合物（ＩＩ）は、ジクロロメタン中のＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンなどの塩基または塩化チオニルなどの塩素化剤の存在下、０℃で、メタンスルホニルクロリドなどの塩化スルホニルを用いて、または当業者に公知の任意の他の方法に従って化合物（Ｖ）を処理し、続いてヘキサメチレンテトラミンを用いて中間体を処理し、続いて中間体の第四級アンモニウム塩を酸加水分解することにより、３段階系列で調製されてもよい。
【００５５】
Ｒ２が１つのアルコキシ置換基によって置換されたＣ１−４アルキルである式（Ｖ）の化合物は、以下の式に従って、式（ＶＩ）の化合物のヒドロキシメチル化によって調製され得る：
【化９】
2021522290.tif 000011
式中、Ｒ３は、式（Ｉ）の化合物について上で定義されたものと同じ定義を有する。
【００５６】
この反応は、１００℃のジオキサンなどの極性溶媒中、酸性条件下でパラホルムアルデヒドなどのホルミル化剤を使用して、または当業者に公知の任意の他の方法に従って行われてもよい。
【００５７】
Ｒ２が１つのアルコキシ置換基によって置換されたＣ１−４アルキルである式（ＶＩ）の化合物は、以下の式に従って、式（ＶＩＩ）の化合物と式（ＶＩＩＩ）のブロモ誘導体とを反応させることにより合成され得る：
【化１０】
2021522290.tif 000012
式中、Ｒ３は、式（Ｉ）の化合物について上記されたものと同じ定義を有する。
【００５８】
この反応は、文献に記載されているか当業者に公知の手順を使用して行われてもよい。
【００５９】
式（ＶＩＩ）および式（ＶＩＩＩ）の化合物は、市販されているか、当業者に公知の任意の方法に従って合成され得る。
【００６０】
別の実施形態によれば、Ｒ２が１つのアルコキシ置換基によって置換されたＣ１−４アルキルである式（Ｉ）の化合物は、以下の式に従って、式（Ｖ）の化合物と式（ＩＸ）のピロロンとを反応させることにより合成され得る：
【化１１】
2021522290.tif 000013
式中、Ｒ１およびＲ３は、式（Ｉ）の化合物について上で定義されたものと同じ定義を有する。
【００６１】
この反応は、高温でスルホランなどの非プロトン性溶媒中、ｐ−トルエンスルホン酸などの酸を使用して行われてもよい。
【００６２】
式（ＩＸ）の化合物は、以下の式に従って、式（Ｘ）の化合物を脱保護することにより調製され得る：
【化１２】
2021522290.tif 000014
式中、Ｒ１は、式（Ｉ）の化合物について上で定義されたものと同じ定義を有し、Ｐは、場合により置換されたベンジル基などの保護基である。
【００６３】
この反応は、当業者に公知の任意の標準的な脱保護方法に従って行われてもよい。
【００６４】
式（Ｘ）の化合物は、式（ＸＩ）のアミンを用いて、式（ＩＩＩ）のヒドロキシラクトンを還元的アミノ化することによって調製され得
【化１３】
2021522290.tif 000015
式中、Ｒ１は、式（Ｉ）の化合物について上で定義されたものと同じ定義を有し、Ｐは、場合により置換されたベンジル基などの保護基である。
【００６５】
この反応は、国際公開第０１／６２７２６号パンフレット、国際公開第２００６／１２８７９２号パンフレットおよび国際公開第２００８／１３２１３９号パンフレットの特許出願に記載されている手順に従って行われてもよい。
【００６６】
別の実施形態によれば、Ｒ２が１つのアルコキシ置換基によって置換されたＣ１−４アルキルである式（Ｉ）の化合物は、以下の式に従って、式（ＶＩ）の化合物と式（ＸＩＩ）のピロロンとのＦｒｉｅｄｅｌ−Ｃｒａｆｔｓ型反応によって合成され得：
【化１４】
2021522290.tif 000016
式中、Ｒ１およびＲ３は、式（Ｉ）の化合物について上で定義されたものと同じ定義を有する。
【００６７】
この反応は、１００〜１２０℃の範囲の温度でスルホランまたはジオキサンなどの極性溶媒中の塩化亜鉛または塩化第二鉄などのルイス酸の存在下で、塩素原子またはｐ−トルエンスルホニル基などの脱離基（Ｙ）を有する式（ＸＩＩ）のピロロンを用いて、または文献に記載されているか当業者に公知の任意の手順に従って行われてもよい。
【００６８】
式（ＸＩＩ）の化合物は、ＰＣＴ特許出願国際公開第２００６／１２８６９３号パンフレットに記載されている方法に従って、または当業者に公知の任意の他の方法に従って、式（ＩＸ）の対応するピロロンから調製され得る。
【００６９】
あるいは、Ｒ２が１つのアルコキシ置換基によって置換されたＣ１−４アルキルである式（Ｉ）の化合物は、以下の式に従って、式（ＸＩＩＩ）の化合物を酸化することにより合成され得る：
【化１５】
2021522290.tif 000017
式中、Ｒ１およびＲ３は、式（Ｉ）の化合物について上で定義されたものと同じ定義を有する。この反応は、室温で、メタノールなどの極性溶媒中の過ヨウ素酸ナトリウムなどの酸化剤を使用して、または当業者に公知の任意の方法によって行うことができる。
【００７０】
Ｒ２が１つのアルコキシ置換基によって置換されたＣ１−４アルキルである式（ＸＩＩＩ）の化合物は、以下の式に従って、式（Ｖ）の化合物と式（ＸＩＶ）のピロリドンとを反応させることにより調製され得る：
【化１６】
2021522290.tif 000018
【００７１】
この反応は、高温でスルホランなどの非プロトン性溶媒中、ｐ−トルエンスルホン酸などの酸を使用して行われてもよい。
【００７２】
Ｒ１が式（Ｉ）の化合物について上で定義されたものと同じ定義を有する式（ＸＩＶ）のピロリドンは、以下の式に従って、保護されたピロリドン（ＸＶＩ）のセレニル化によって得られた式（ＸＶ）のピロリドンの脱保護によって、３段階系列で合成され得る：
【化１７】
2021522290.tif 000019
【００７３】
保護−脱保護工程は、当業者に公知の任意の方法によって行われてもよい。セレニル化反応は、−７８℃などの低温で、テトラヒドロフランなどの極性溶媒中でリチウムビス（トリメチルシリル）アミドまたはリチウムジイソプロピルアミドなどの強塩基を使用して脱プロトン化し、続いてフェニルセレネニルクロリドまたはブロミドなどのセレニル化剤によってエノラートを捕捉することによって行われてもよい。
【００７４】
ピロリドン（ＸＶＩＩ）または（ＸＶＩ）は、国際公開第２００６／１２８７９２号パンフレットもしくは国際公開第２０１１／０４７８６０号パンフレットの特許出願に記載されている方法に従って、または当業者に公知の任意の方法に従って調製され得る。
【００７５】
Ｒ２が１つのヒドロキシ置換基によって置換されたＣ１−４アルキルである式（Ｉ）の化合物は、Ｒ２が１つのアルコキシ置換基によって置換されたＣ１−４アルキルである式（Ｉ）の化合物の脱アルキル化によって調製され得る。この反応は、室温でジクロロメタンなどの無極性溶媒中で三臭化ホウ素もしくは三塩化物などの脱アルキル化試薬を使用して、または当業者に公知の任意の方法に従って行われてもよい。
【００７６】
本発明の化合物は、てんかん、てんかん発作、発作性疾患、痙攣、特に難治性発作の治療に有益である。
【００７７】
したがって、別の実施形態では、本発明は、薬剤として使用するための、上で定義された式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩を提供する。
【００７８】
その実施形態の一態様では、本発明はまた、てんかん、てんかん発作、発作性疾患、痙攣、特に難治性発作の治療および／または予防に使用するための、上で定義された式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩を提供する。
【００７９】
さらなる実施形態では、本発明は、てんかん、てんかん発作、発作性疾患、痙攣の治療および／または予防のための、特に難治性発作の治療のための薬剤を製造するための、上記で定義された式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩の使用を提供する。患者が最大耐量で２つ以上の抗てんかん薬を用いた先行技術治療で１２カ月以上にわたる無発作期間を達成できない場合、発作は難治性として分類され得る。国際抗てんかん連盟（ＩＬＡＥ）は、薬剤耐性てんかんを「持続的な無発作期間を達成するための、耐容性があり、適切に選択および使用された２つのＡＥＤスケジュール（単剤療法または併用）の十分な試験の失敗」と定義している。
【００８０】
本発明の方法は、上記の状態または障害に罹患している哺乳動物（好ましくはヒト）に対して、障害または状態を緩和または予防するのに十分な量の本発明による化合物を投与することを含む。
【００８１】
化合物は、限定するものではないが、１単位剤形当たり１〜２０００ｍｇ、好ましくは１〜１０００ｍｇ、さらに好ましくは１〜５００ｍｇの活性成分を含有する単位剤形を含む、任意の好適な単位剤形で適宜投与される。
【００８２】
本明細書で使用される用語「治療」は、治癒的治療および予防的治療を含む。
【００８３】
「治癒的」とは、障害または状態の現在の症候性エピソードの治療における効能を意味する。
【００８４】
「予防的」とは、障害または状態の発生または再発の予防を意味する。
【００８５】
本明細書で使用される用語「てんかん」は、非誘発性再発性てんかん発作を特徴とする慢性神経学的状態を指す。てんかん発作は、一連の脳ニューロンの異常かつ過剰な同期化放電の発現であり、その臨床症状は突然で一過性である。本明細書で使用される用語「てんかん」はまた、発作の周期的な発生を特徴とする脳機能の障害を指し得る。発作は、高熱または毒素への曝露などの条件によって正常な脳で引き起こされると「非てんかん性」になり得るか、明らかな誘発無しに誘発されると「てんかん性」になり得る。
【００８６】
本明細書で使用される用語「発作」は、脳ニューロンの集団の無秩序で同期的かつ律動的な発火による挙動の一過的変化を指す。
【００８７】
本発明のさらなる態様は、薬学的に許容される希釈剤または担体と組み合わせて式（Ｉ）の化合物の有効量を含む医薬組成物に関する。
【００８８】
上記の適応症のいずれかにおける活性は、言うまでもなく、特定の適応症について、および／または一般的な臨床試験のデザインにおいて、当業者に公知の方法で好適な臨床試験を実施することによって決定することができる。
【００８９】
疾患を治療するために、式（Ｉ）の化合物またはそれらの薬学的に許容される塩は、有効な一日投与量で使用され、医薬組成物の形態で投与され得る。
【００９０】
したがって、本発明の別の実施形態は、薬学的に許容される希釈剤または担体と組み合わせて式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩の有効量を含む医薬組成物に関する。
【００９１】
本発明による医薬組成物を調製するために、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩のうちの１つ以上が、当業者に公知の従来の医薬配合技術に従って医薬希釈剤または担体と密接に混合される。
【００９２】
好適な希釈剤および担体は、所望の投与経路、例えば、経口、直腸、非経口または鼻腔内に応じて、多種多様な形態を取り得る。
【００９３】
本発明による化合物を含む医薬組成物は、例えば、経口、非経口、すなわち、静脈内、筋肉内もしくは皮下、髄腔内、経皮（パッチ）、吸入または鼻腔内投与することができる。
【００９４】
経口投与に適した医薬組成物は、固体または液体であり得、例えば、錠剤、丸剤、糖衣錠、ゼラチンカプセル、溶液、シロップ、チューインガムなどの形態であり得る。
【００９５】
この目的のために、活性成分は、不活性希釈剤またはデンプンもしくはラクトースなどの非毒性の薬学的に許容される担体と混合されてもよい。場合により、これらの医薬組成物はまた、微結晶セルロース、トラガカントゴムもしくはゼラチンなどの結合剤、アルギン酸などの崩壊剤、ステアリン酸マグネシウムなどの潤滑剤、コロイド状二酸化ケイ素などの滑剤、スクロースもしくはサッカリンなどの甘味剤、または着色剤、もしくはペパーミントもしくはサリチル酸メチルなどの香味剤を含有することができる。
【００９６】
本発明は、制御された方法で活性物質を放出することができる組成物も企図する。
【００９７】
非経口投与に使用することができる医薬組成物は、アンプル、使い捨て注射器、ガラスもしくはプラスチックのバイアルまたは注入容器に一般的に含まれる水性または油性の溶液または懸濁液などの従来の形態である。
【００９８】
活性成分に加えて、これらの溶液または懸濁液はまた、注射用水、生理食塩水、油、ポリエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコールまたは他の合成溶媒などの滅菌希釈剤、ベンジルアルコールなどの抗菌剤、アスコルビン酸または重亜硫酸ナトリウムなどの抗酸化剤、エチレンジアミン四酢酸などのキレート剤、アセタート、シトラートまたはホスファートなどの緩衝剤、および塩化ナトリウムまたはデキストロースなどの浸透圧調整剤を場合により含有することができる。
【００９９】
これらの医薬形態は、薬剤師が常用的に使用している方法を使用して調製される。
【０１００】
医薬組成物中の活性成分の量は、幅広い濃度の範囲内になり得、患者の性別、年齢、体重および病状、ならびに投与方法などの様々な因子に応じて決まる。したがって、経口投与用の組成物中の式（Ｉ）の化合物の量は、少なくとも０．５重量％であり、組成物の総重量に対して最大８０重量％であり得る。
【０１０１】
本発明によれば、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩は、単独で、または他の薬学的に活性な成分と組み合わせて投与することができることも見出された。本発明による化合物と組み合わせて使用するために挙げることができるそのような追加の化合物の非限定的な例には、抗ウイルス薬、鎮痙薬（例えば、バクロフェン）、制吐薬、抗躁気分安定剤、鎮痛薬（例えば、アスピリン、イブプロフェン、パラセタモール）、麻薬性鎮痛薬、局所麻酔薬、オピオイド鎮痛薬、リチウム塩、抗うつ薬（例えば、ミアンセリン、フルオキセチン、トラゾドン）、三環系抗うつ薬（例えば、イミプラミン、デシプラミン）、抗痙攣薬（例えば、バルプロ酸、カルバマゼピン、フェニトイン）、統合失調症治療薬（例えば、リスペリドン、ハロペリドール）、神経遮断薬、ベンゾジアゼピン（例えば、ジアゼパム、クロナゼパム）、フェノチアジン（例えば、クロルプロマジン）、カルシウムチャネル遮断薬、アンフェタミン、クロニジン、リドカイン、メキシレチン、カプサイシン、カフェイン、クエチアピン、セロトニン拮抗薬、β遮断薬、抗不整脈薬、トリプタン、麦角誘導体およびアマンタジンがある。
【０１０２】
経口組成物の場合、一日投与量は、式（Ｉ）の化合物の１ｍｇ〜２０００ｍｇの範囲である。好ましくは、式（Ｉ）の化合物の１ｍｇ〜１０００ｍｇ、最も好ましくは、１ｍｇ〜５００ｍｇの範囲である。
【０１０３】
非経口投与用の組成物では、存在する式（Ｉ）の化合物の量は、少なくとも０．５重量％であり、組成物の総重量に対して最大３３重量％であり得る。好ましい非経口組成物の場合、投与単位は、式（Ｉ）の化合物の１ｍｇ〜２０００ｍｇの範囲である。
【０１０４】
一日用量は、式（Ｉ）の化合物の幅広い投与単位の範囲内に収まり得、一般に１〜２０００ｍｇ、好ましくは１〜１０００ｍｇの範囲である。ただし、具体的な用量は、医師の裁量で、個々の要件に応じて特定の症例に適合させることができることを理解すべきである。
【０１０５】
本発明によって提供されるＳＶ２タンパク質結合化合物およびその標識化誘導体は、ＳＶ２タンパク質に結合する試験化合物（例えば、潜在的な医薬品）の能力を決定する際の標準物質および試薬として有用であり得る。
【０１０６】
本発明によって提供される、ＳＶ２タンパク質のリガンドの標識化誘導体はまた、陽電子放出断層撮影（ＰＥＴ）イメージングまたは単一光子放射型コンピュータ断層撮影（ＳＰＥＣＴ）のための放射性トレーサーとしても有用であり得る。
【０１０７】
したがって、本発明は、ＳＶ２タンパク質に対するさらに強力な結合に基づいて、潜在的な医薬品を発見するため、特に本明細書に記載される状態を治療および予防するため、組織内でＳＶ２タンパク質を局在化するため、ならびに精製ＳＶ２タンパク質を特性評価するための化学ライブラリーをスクリーニングするためのツールとしての標識化リガンドをさらに提供する。ＳＶ２タンパク質にはＳＶ２Ａ、ＳＶ２ＢおよびＳＶ２Ｃが含まれ、ＳＶ２Ａは抗発作薬レベチラセタムおよびその類似体の結合部位である。ＳＶ２アイソフォームＳＶ２Ａ、ＳＶ２ＢまたはＳＶ２Ｃは、ヒト、ラットまたはマウスを含む任意の哺乳動物種の組織、特に、脳に由来し得る。あるいは、アイソフォームは、異種発現され、アッセイに使用される、ヒト、ラットおよびマウスを含む任意の哺乳動物種のクローン化されたバージョンであり得る。スクリーニング方法は、哺乳動物もしくはヒトの脳膜などの脳膜、またはＳＶ２タンパク質もしくはその断片、特にＳＶ２ＡおよびＳＶ２Ｃを発現するがＳＶ２Ｂを含む細胞株を推定薬剤に曝露し、膜またはタンパク質もしくは断片および薬剤を式（Ｉ）の標識化合物とインキュベートすることを含む。この方法は、タンパク質に対する式（Ｉ）の化合物の結合が推定薬剤によって阻害されるかどうかを決定し、それによって、タンパク質の結合パートナーを特定することをさらに含む。したがって、スクリーニングアッセイにより、ＳＶ２タンパク質と相互作用する新たな薬物または化合物の特定が可能になる。本発明はまた、ＳＶ２タンパク質の光活性化可能なリガンドを提供する。
【０１０８】
標識化リガンドはまた、可溶化、精製およびクロマトグラフィー後のＳＶ２タンパク質の立体構造状態を評価するためのツールとして使用することができる。標識化リガンドは、直接的または間接的に標識され得る。好適な標識の例には、３Ｈなどの放射性標識、蛍光標識、酵素、ユーロピウム、ビオチン、およびこの種のアッセイのための他の従来の標識が挙げられる。
【０１０９】
式（Ｉ）の標識化合物は、この方法では、ＳＶ２タンパク質（ＳＶ２Ａ、ＳＶ２ＢおよびＳＶ２Ｃ）に結合する新たな化合物または薬剤をスクリーニングするためのアッセイのプローブとして有用である。そのようなアッセイの実施形態では、リガンドは、修飾することなく使用することができるか、様々な方法で、例えば、検出可能なシグナルを直接的または間接的に提供する部分を共有結合的または非共有結合的に結合するなどの標識によって修飾することができる。これらのアッセイのいずれでも、材料は直接的または間接的に標識することができる。直接標識の可能性には、限定するものではないが、［３Ｈ］、［１４Ｃ］、［３２Ｐ］、［３５Ｓ］または［１２５Ｉ］を含む放射性標識、ペルオキシダーゼおよびアルカリホスファターゼなどの酵素、ならびに限定するものではないが、フルオレセインまたはローダミンを含む、蛍光強度、波長シフトまたは蛍光偏光の変化をモニタリングすることができる蛍光標識などの標識群が含まれる。間接標識の可能性には、１つの成分をビオチン化した後、上記の標識群のうちの１つに結合したアビジンに結合させること、または抗リガンド抗体を使用することが含まれる。化合物が固体支持体に結合される場合、化合物はまた、スペーサーまたはリンカーを含み得る。ＳＶ２タンパク質（特にＳＶ２ＡおよびＳＶ２Ｃ）に対する結合について、本発明による標識化リガンドと競合または相互作用する薬剤または化合物を特定するために、ＳＶ２ＡもしくはＳＶ２ＣまたはＳＶ２タンパク質全体もしくはその断片を含有するインタクトな細胞、細胞断片または膜断片を使用することができる。薬剤または化合物は、標識化レベチラセタムまたはその類似体もしくは誘導体とのインキュベーションの前、それと同時、またはその後に、細胞、膜、ＳＶ２タンパク質または断片とインキュベートされてもよい。アッセイは、ＳＶ２タンパク質またはその断片に対するレベチラセタムの結合またはその誘導体もしくは類似体の結合をモニタリングするハイスループットスクリーニング（ＨＴＳ）アッセイを含め、任意の利用可能な形式で修飾または調製され得る。化合物のライブラリーを試験する多くの薬物スクリーニングプログラムでは、所定の期間に調査する化合物の数を最大化するために、ハイスループットアッセイが望ましい。そのようなスクリーニングアッセイは、ＳＶ２を含有するインタクトな細胞、細胞断片または膜断片、および精製または半精製タンパク質によって誘導され得るような無細胞系または無膜系を使用してもよい。ＳＶ２タンパク質およびペプチドまたは精製ＳＶ２タンパク質およびペプチドを含有する膜断片を用いたアッセイの利点は、試験化合物の細胞毒性および／または生物学的利用能の作用を一般に無視することができ、代わりに、アッセイでは、例えば、２つの分子間の結合の阻害に現れ得るような分子標的に対する薬物の効果に主に重点を置かれることである。アッセイは、ＳＶ２もしくはＳＶ２断片に対する本発明による標識化リガンドの結合、またはＳＶ２もしくはＳＶ２タンパク質断片に対する標識化レベチラセタムもしくはそれらの誘導体もしくは類似体の結合を阻害する試験薬剤または化合物の能力を検出するように組み立てることができる。複合体形成の阻害は、濾過アッセイ、Ｆｌａｓｈｐｌａｔｅｓ（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）、シンチレーション近接アッセイ（ＳＰＡ、ＧＥ）などの様々な技術によって検出され得る。ハイスループットスクリーニング（ＨＴＳ）の場合、生体膜によってコーティングされたマイクロスフェアまたは生体膜によってコーティングされたフラッシュプレートを使用するシンチレーション近接アッセイが、分離工程または洗浄工程を必要としない強力な方法である。
【０１１０】
治療に使用するための化合物を開発する際に直面する可能性のある課題が、本発明の化合物（犠牲薬物（ｖｉｃｔｉｍ  ｄｒｕｇ））とともに同時投与され得る特定の化合物（加害薬物（ｐｅｒｐｅｔｒａｔｏｒ  ｄｒｕｇ））が、ＣＹＰ４５０酵素、特にＣＹＰ３Ａ４／５を誘導する能力である。加害薬物によるそのような酵素の誘導は、ＣＹＰ４５０酵素、特にＣＹＰ３Ａ４／５によって主に代謝される場合、犠牲薬物の曝露に影響を及ぼし、それによって、それらの有効性プロファイルを潜在的に変化させ得る。したがって、ＣＹＰ３Ａ４／５酵素による代謝の可能性が限定された化合物を開発することが望ましい。
【０１１１】
アザムリンなどの選択的ＣＹＰ３Ａ４／５阻害剤の非存在下および存在下でのヒト肝細胞クリアランスの比を計算することによって、本発明による化合物の代謝全体に対するＣＹＰ３Ａ４／５の寄与を評価した。
【０１１２】
本特許出願に記載されたプロトコルに従ってこのアッセイで試験した場合、添付の例による化合物は、典型的には４５％未満の、ＣＹＰ３Ａ４／５によって代謝される画分（Ｆｍ，ＣＹＰ３Ａ４／５）を示し、したがって、ＣＹＰ４５０誘導剤と同時投与した場合の薬物−薬物相互作用のリスクを最小限に抑える。
【０１１３】
さらに、本発明による化合物が低い固有のクリアランスを示すことは有益であり得る。
【０１１４】
実験セクション
略語／再現試薬
Ａｃ：アセチル
ＡＣＮ：アセトニトリル
ブライン：飽和塩化ナトリウム水溶液
ｎＢｕ：ｎ−ブチル
ｔＢｕ：ｔｅｒｔ−ブチル
Ｂｚ：ベンゾイル
ＣＶ：カラム体積
ＤＣＭ：ジクロロメタン
ＤＭＦ：Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシド
Ｅｔ：エチル
ＥｔＯＨ：エタノール
Ｅｔ２Ｏ：ジエチルエーテル
ＥｔＯＡｃ：酢酸エチル
ｈ：時間
ＨＰＬＣ：高圧液体クロマトグラフィー
ＬＣ：液体クロマトグラフィー
ＬＣＭＳ：液体クロマトグラフィー質量分析
ＭｅＯＨ：メタノール
ｍｉｎ．：分
ＭＴＢＥ：メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル
ＮＭＲ：核磁気共鳴
ｉＰｒＯＨ：イソプロパノール
ＰＴＳＡ：ｐ−トルエンスルホン酸
ＲＴ：室温
ＳＦＣ：超臨界流体クロマトグラフィー
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン
ＴＬＣ：薄層クロマトグラフィー
【０１１５】
分析方法
空気または水分に敏感な試薬を含むあらゆる反応は、乾燥溶媒およびガラス器具を使用して、窒素またはアルゴン雰囲気下で行った。マイクロ波照射を必要とする実験は、オペレーティングソフトウェアのバージョン２．０によってアップグレードされたＢｉｏｔａｇｅ  Ｉｎｉｔｉａｔｏｒ  Ｓｉｘｔｙ電子レンジを用いて行う。実験は、可能な限り速く必要な温度に到達するように実行する（最大照射電力：４００Ｗ、外部冷却なし）。市販の溶媒および試薬は、一般に、適切な場合は無水溶媒（一般に、Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏｍｐａｎｙ製のＳｕｒｅ−Ｓｅａｌ（商標）製品またはＡＣＲＯＳ  Ｏｒｇａｎｉｃｓ製のＡｃｒｏＳｅａｌ（商標））を含め、さらに精製することなく使用した。一般に、反応に続いて薄層クロマトグラフィー、ＨＰＬＣまたは質量分析を行った。
【０１１６】
ＨＰＬＣ分析は、Ｗａｔｅｒｓ  ＸＢｒｉｄｇｅ  ＭＳ  Ｃ１８、５ｐｍ、１５０×４．６ｍｍカラムを取り付けたＡｇｉｌｅｎｔ  １１００シリーズＨＰＬＣシステムを使用して行う。勾配は、６分間で１００％溶媒Ａ（水／ＡＣＮ／ギ酸アンモニウム溶液８５／５／１０（ｖ／ｖ／ｖ））から１００％溶媒Ｂ（水／ＡＣＮ／ギ酸アンモニウム溶液５／８５／１０（ｖ／ｖ／ｖ））、１００％Ｂで５分間保持して実行する。流量は６分間８ｍＬ／分に設定し、次いで、２分間３ｍＬ／分に増加させ、３分間３ｍＬ／分で保持する。ＡＰＩ源の直前に１／２５の分割を使用する。クロマトグラフィーは４５℃で行う。ギ酸アンモニウム溶液（ｐＨ約８．５）は、水（１Ｌ）にギ酸アンモニウム（６３０ｍｇ）を溶解し、水酸化アンモニウム３０％（５００μＬ）を加えることにより調製する。
【０１１７】
異なる分析条件が使用される場合、ＬＣデータについて異なる保持時間が得られる可能性があることは、当業者には明らかであろう。
【０１１８】
ＬＣＭＳモードでの質量分析測定は以下の通り行う：
・塩基性溶出の場合、分析は以下を使用して行う：
ＬＣＭＳ分析には、ＱＤＡ  Ｗａｔｅｒｓの単純な四重極質量分析計を使用する。この分光計は、ＥＳＩ源と、ダイオードアレイ検出器（２００〜４００ｎｍ）を備えたＵＰＬＣ  Ａｃｑｕｉｔｙ  Ｈｃｌａｓｓとを装備している。データは、塩基性溶出を用いたポジティブモードでｍ／ｚ  ７０〜８００のフルＭＳスキャンで取得する。逆相分離は、塩基性溶出では、Ｗａｔｅｒｓ  Ａｃｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣ  ＢＥＨＣ１８  １．７μｍ（２．１×５０ｍｍ）カラムを用いて４５℃で行う。勾配溶出は、水／ＡＣＮ／ギ酸アンモニウム（９５／５／６３ｍｇ／Ｌ）（溶媒Ａ）およびＡＣＮ／水／ギ酸アンモニウム（９５／５／６３ｍｇ／Ｌ）（溶媒Ｂ）を用いて行う。注入量：１μＬ。ＭＳの全流量。
【表１】
2021522290.tif 000020
【表２】
2021522290.tif 000021
【０１１９】
・酸性溶出の場合、分析は以下を使用して行う：
ＬＣＭＳ分析には、ＱＤＡ  Ｗａｔｅｒｓの単純な四重極質量分析計を使用する。この分光計は、ＥＳＩ源と、ダイオードアレイ検出器（２００〜４００ｎｍ）を備えたＵＰＬＣ  Ａｃｑｕｉｔｙ  Ｈｃｌａｓｓとを装備している。データは、酸性溶出を用いたポジティブモードでｍ／ｚ  ７０〜８００のフルＭＳスキャンで取得する。逆相分離は、酸性溶出では、Ｗａｔｅｒｓ  Ａｃｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣ  ＨＳＳ  Ｔ３  １．８μｍ（２．１×５０ｍｍ）カラムを用いて４５℃で行う。勾配溶出は、水／ＡＣＮ／ＴＦＡ（９５／５／０．５ｍＬ／Ｌ）（溶媒Ａ）およびＡＣＮ（溶媒Ｂ）を用いて行う。注入量：１μＬ。ＭＳの全流量。
【表３】
2021522290.tif 000022
【表４】
2021522290.tif 000023
【０１２０】
粗物質は、順相クロマトグラフィー、（酸性または塩基性）逆相クロマトグラフィー、キラル分離または再結晶によって精製され得る。
【０１２１】
通常の逆相クロマトグラフィーは、シリカゲルカラム（１００：２００メッシュシリカゲル、またはＩｎｔｅｒｃｈｉｍ製のＰｕｒｉｆｌａｓｈ（登録商標）−５０ＳＩＨＣ−ＪＰカラム）を使用して行う。
【０１２２】
分取逆相クロマトグラフィーは以下の通り行う：
・ＬＣＭＳ精製には、ＳＱＤまたはＱＭ  Ｗａｔｅｒｓトリプル四重極質量分析計を使用したＬＣＭＳ精製（塩基性モード、ＬＣＭＳ  ｐｒｅｐ）を使用する。この分光計は、ＥＳＩ源と、ダイオードアレイ検出器（２１０〜４００ｎｍ）を備えたＰｒｅｐ  ＬＣコントローラーＷａｔｅｒｓクォータナリポンプとを装備している。
【０１２３】
ＭＳパラメーター：ＥＳＩキャピラリー電圧３ｋＶ。コーンおよび抽出器電圧１０。ソースブロック温度１２０℃。脱溶媒温度３００℃。コーンガス流量３０Ｌ／時間（窒素）、脱溶媒ガス流量６５０Ｌ／時間。データは、酸性溶出または塩基性溶出を用いたポジティブモードでｍ／ｚ  １００〜７００のフルＭＳスキャンで取得する。
【０１２４】
ＬＣパラメーター：逆相分離は、ＸＢｒｉｄｇｅ  ｐｒｅｐ  ＯＢＤ  Ｃ１８カラム（５μｍ、３０×５０ｍｍ）を用いて室温で行う（塩基性溶出）。勾配溶出は、水（溶媒Ａ）、ＡＣＮ（溶媒Ｂ）、重炭酸アンモニウム水溶液８ｇ／Ｌ＋５００μＬ／Ｌ  ＮＨ４ＯＨ  ３０％（溶媒Ｃ）（ｐＨ約８．５）を用いて行う。ＨＰＬＣ流量：３５ｍＬ／分〜６０ｍＬ／分、注入量：１ｍＬ。ＭＳに対して分割比を＋／−１／６０００に設定する。
【表５】
2021522290.tif 000024
【０１２５】
生成物は、一般に、最終分析前、および生物学的試験に供する前に真空下で乾燥させた。
【０１２６】
ＮＭＲスペクトルは、Ｂｒｕｋｅｒ  Ｔｏｐｓｐｉｎ  ３．２ソフトウェアを実行するＷｉｎｄｏｗｓ７ワークステーションと、Ｚ勾配プローブヘッドを備えた５ｍｍ  ＢＢＩ  Ｓ１とを搭載したＢＲＵＫＥＲ  ＡＶＡＮＣＥ  ＩＩＩ  Ｕｌｔｒａｓｈｉｅｌｄ  Ｎａｎｏｂａｙ  ４００ＭＨｚ  ＮＭＲ分光計を用いて記録する。一部のＮＭＲスペクトルは、Ｂｒｕｋｅｒ  Ｔｏｐｓｐｉｎ  ３．２  ｐｌ２ソフトウェアを実行するＷｉｎｄｏｗｓ７ワークステーションと、５ｍｍ  Ｐｒｏｄｉｇｙ  ＢＢＯ  ５００  Ｓ１クライオプローブとを搭載したＢＲＵＫＥＲ  ＡＶＡＮＣＥ  ＩＩＩ  ＨＤ  Ａｓｃｅｎｄ  ５００ＭＨｚ  ＮＭＲ分光計を用いて記録する。化合物は、３００Ｋのプローブ温度でｄ３−クロロホルムまたはｄ６−ＤＭＳＯ溶液中で試験する。機器は、使用した溶媒の重水素シグナルでロックする。化学シフトは、内部標準として使用されるＴＭＳ（テトラメチルシラン）からのｐｐｍ低磁場で示す。
【０１２７】
化合物名は、Ａｃｃｅｌｒｙｓ  Ｄｒａｗ  ４．０またはＢｉｏｖｉａ  Ｄｒａｗ  １６．１によって生成する。
【０１２８】
以下の例は、式（Ｉ）により包含される化合物がどのように合成され得るかを例示する。それらは例示目的のみのために提供されており、いかなる方法でも本発明を限定することを意図しておらず、また本発明を限定すると解釈されるべきではない。当業者であれば、本発明の趣旨または範囲を超えることなく、以下の例の常用的な変更および修正を行うことができることを理解するであろう。
【０１２９】
中間体
Ａ．２−ヒドロキシ−３−（２，２，２−トリフルオロエチル）−２Ｈ−フラン−５−オンＩＩの合成
【化１８】
2021522290.tif 000025
Ａ．１．ナトリウム；４，４，４−トリフルオロ−１−ヒドロキシ−ブタン−１−スルホナートＩの合成
４，４，４−トリフルオロブチルアルデヒド（ＣＡＳ：４０６−８７−１、１．０当量、１２．７５ｇ、１０１ｍｍｏｌ）に、亜硫酸水素ナトリウム（１．０当量、１０．５０ｇ、１０１ｍｍｏｌ）の水溶液（２５ｍＬ）を０℃で加え、混合物を０℃で３０分間撹拌した。沈殿物を濾過し、０℃で冷メタノール（５００ｍＬ）で洗浄した。得られた固体を高真空下４０℃で１６時間乾燥させて、ナトリウム；４，４，４−トリフルオロ−１−ヒドロキシ−ブタン−１−スルホナートＩ（１５．４ｇ、６６．９ｍｍｏｌ）を白色固体として得、これをさらに精製することなく次の工程で使用した。
収率：６６％
【数１】
2021522290.tif 000026
【０１３０】
Ａ．２．２−ヒドロキシ−３−（２，２，２−トリフルオロエチル）−２Ｈ−フラン−５−オンＩＩの合成
水（６ｍＬ）と１，４−ジオキサン（６ｍＬ）との混合物中のグリオキシル酸一水和物（１．５当量、１．８ｇ、１９．５ｍｍｏｌ）とモルホリン塩酸塩（１．５当量、２．４ｇ、１９．５ｍｍｏｌ）との混合物に、ナトリウム；４，４，４−トリフルオロ−１−ヒドロキシ−ブタン−１−スルホナートＩ（１．０当量、３．０ｇ、１３．０ｍｍｏｌ）および塩酸（２．０当量、２．２ｍＬ、２６ｍｍｏｌ）を室温で加えた。混合物を１１０℃で２０時間撹拌し、次いで室温に冷却した。混合物に水を加え、ＭＴＢＥを用いて水層を抽出した（３回）。合わせた有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発乾固させて、２−ヒドロキシ−３−（２，２，２−トリフルオロエチル）−２Ｈ−フラン−５−オンＩＩ（９００ｍｇ、４．５ｍｍｏｌ、推定純度９０％）を得、これをさらに精製することなく次の工程で使用した。
収率：３４％
【数２】
2021522290.tif 000027
【０１３１】
４，４−ジフルオロペンタナール（ＣＡＳ：１５４６３３１−９７−８）から出発して同じ２段階の手順に従って、３−（２，２−ジフルオロプロピル）−２−ヒドロキシ−２Ｈ−フラン−５−オンＩＩ−Ａを調製した。
収率：４０％
【０１３２】
５，５，５−トリフルオロペンタナール（ＣＡＳ：２５０２５３−４７−５）から出発して同じ２段階の手順に従って、２−ヒドロキシ−３−（３，３，３−トリフルオロプロピル）−２Ｈ−フラン−５−オンＩＩＩを調製した。
収率：５５％（第１段階）および７３％（第２段階）。
【０１３３】
２−ヒドロキシ−３−プロピル−２Ｈ−フラン−５−オンＩＩＩ−Ａは、市販されているか（ＣＡＳ：７８９２０−１０−２）、ブチルアルデヒドから出発して同じ手順に従って調製され得る。
【０１３４】
わずかに改変された手順に従って、２−（２，２−ジフルオロシクロプロピル）アセトアルデヒドから３−（２，２−ジフルオロシクロプロピル）−２−ヒドロキシ−２Ｈ−フラン−５−オンＩＩＩ−Ｂを調製した：
【化１９】
2021522290.tif 000028
【０１３５】
モルホリンの混合物（１．１当量、１．０７ｇ、６７６．０ｍｍｏｌ）のヘプタン溶液（５５ｍＬ）にグリオキシル酸（０．９５当量、９６５ｍｇ、６１４．５ｍｍｏｌ）を０℃で加え、混合物を４０℃で２時間撹拌した。次いで、混合物を室温に冷却し、２−（２，２−ジフルオロシクロプロピル）アセトアルデヒド（ＣＡＳ：１８２３９６１−５７−４、１．１当量、１．０７ｇ、６７６．０ｍｍｏｌ）を加え、混合物を４０℃で１６時間撹拌した。０℃に冷却した混合物に塩酸（１．７５当量、１０７５．５ｍｍｏｌ、１２．２ｍＬ、３６．５質量％）を加え、混合物を室温で２時間撹拌した。次いで、ジクロロメタンを真空下２５℃で蒸発させ、得られた混合物に水を加えた。水層をヘプタンで洗浄し（３回）、Ｎａ２ＣＯ３の飽和水溶液をｐＨ＝６〜７になるまで加えた。酢酸エチルを用いて水層を抽出し（３回）、合わせた有機層をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発乾固させて、３−（２，２−ジフルオロシクロプロピル）−２−ヒドロキシ−２Ｈ−フラン−５−オンＩＩＩ−Ｂ（１．５ｇ、７．７ｍｍｏｌ、９０質量％、１９Ｆ−ＮＭＲに基づく推定純度）を褐色油として得、これを次の工程でそのまま使用した。
収率：６９％
【数３】
2021522290.tif 000029
【０１３６】
Ｂ．［２−（メトキシメチル）−６−メチル−イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メタノールＶの合成
【化２０】
2021522290.tif 000030
Ｂ．１  ２−（メトキシメチル）−６−メチル−イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾールＩＶの合成
５−（メトキシメチル）−１，３，４−チアジアゾール−２−アミン（ＣＡＳ：１５８８４−８６−３、国際公開第２０１１／０４７８６０号パンフレット、１．０当量、７．０ｇ、４８．２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（９５ｍＬ）溶液に、ブロモアセトン（１．０当量、４．２ｍＬ、４６．２ｍｍｏｌ、純度９７％）のＤＭＦ（５ｍＬ）溶液を１００℃で滴下した。反応混合物を１００℃で３時間撹拌した。反応混合物を室温（ＲＴ）に冷却し、高真空下で溶媒を蒸発乾固させて、褐色油を得た。フラッシュクロマトグラフィーＢｉｏｔａｇｅ  Ｉｓｏｌｅｒａ  Ｆｏｕｒ（１４ＣＶを通じてジクロロメタン中０％〜１０％メタノールの勾配の１００ｇ  ＫＰ−ＳＮＡＰシリカゲルカラム）によって粗生成物を精製し、純粋な画分を蒸発乾固させて、２−（メトキシメチル）−６−メチル−イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾールＩＶ（５．０ｇ、２５．１１ｍｍｏｌ）を黄色／オレンジ色の固体として得た。
収率：５２％
【数４】
2021522290.tif 000031
【０１３７】
Ｂ．２  ［２−（メトキシメチル）−６−メチル−イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メタノールＶの合成
密閉管内で、２−（メトキシメチル）−６−メチル−イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾールＩＶ（１．０当量、５．０ｇ、２５．１ｍｍｏｌ）、パラホルムアルデヒド（６．０当量、４．５０ｇ、１５０ｍｍｏｌ）および塩酸（４Ｎ）水溶液（２当量、１２．５５ｍＬ、５０．２ｍｍｏｌ）を１，４−ジオキサン（１２．５ｍＬ）中で混合した。混合物を１００℃で１８時間撹拌し、次いで粗混合物を室温に温め、ｐＨ＝６〜７になるまでＮａＨＣＯ３の飽和水溶液を加えた。酢酸エチルを用いて水層を抽出し（３回）、合わせた有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発乾固させた。フラッシュクロマトグラフィーＢｉｏｔａｇｅ  Ｉｓｏｌｅｒａ  Ｆｏｕｒ（１２ＣＶを通じてジクロロメタン中０％〜５％メタノールの勾配の１００ｇ  ＫＰ−ＳＮＡＰシリカゲルカラム）によって粗生成物を精製した。最も純粋な画分を蒸発乾固させて、［２−（メトキシメチル）−６−メチル−イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メタノールＶ（４．０ｇ、１８．５７ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。
収率：７４％
【数５】
2021522290.tif 000032
【０１３８】
Ｃ．［６−（ジフルオロメチル）−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メタノールＶＩＩの合成
【化２１】
2021522290.tif 000033
Ｃ．１．６−（ジフルオロメチル）−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾールＶＩの合成
５−（メトキシメチル）−１，３，４−チアジアゾール−２−アミン（ＣＡＳ：１５８８４−８６−３、１．０当量、６．５ｇ、４５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１００ｍＬ）溶液に、３−ブロモ−１，１−ジフルオロ−プロパン−２−オン（ＣＡＳ：８８３２３３−８５−０、１．０５当量、８．１ｇ、４７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）溶液を１００℃で滴下した。反応混合物を１００℃で３時間加熱し、ＬＣ／ＭＳによって完了を確認した。ＮａＨＣＯ３の飽和水溶液を加え、酢酸エチルを用いて有機層を抽出した（３回）。合わせた有機層を水で洗浄し（５回）、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発乾固させて、褐色固体（７．６ｇ）を得た。フラッシュクロマトグラフィーＢｉｏｔａｇｅ  Ｉｓｏｌｅｒａ  Ｆｏｕｒ（１２ＣＶを通じてジクロロメタン中０％〜５％メタノールの勾配の１００ｇ  ＫＰ−ＳＮＡＰシリカゲルカラム）によって粗生成物を精製し、純粋な画分を合わせ、高真空下で蒸発させて、６−（ジフルオロメチル）−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾールＶＩ（３．９５ｇ、１７．８ｍｍｏｌ）をオレンジ色固体として得た。
収率：４０％
【数６】
2021522290.tif 000034
【０１３９】
Ｃ．２．［６−（ジフルオロメチル）−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メタノールＶＩＩの合成
密閉管内で、６−（ジフルオロメチル）−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾールＶＩ（１．０当量、３．９５ｇ、１８．０ｍｍｏｌ）、パラホルムアルデヒド（６．０当量、３．２４ｇ、１０８ｍｍｏｌ）および塩酸（２Ｎ）水溶液（０．９当量、８．１ｍＬ、１６．２ｍｍｏｌ）を１，４−ジオキサン（８ｍＬ）中で混合した。混合物を１００℃で３．５時間撹拌し、ＬＣ／ＭＳによって反応を確認した。粗混合物を室温に温め、ｐＨ＝６〜７になるまでＮａＨＣＯ３の飽和水溶液を加えた。酢酸エチルを用いて水層を抽出し（３回）、合わせた有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発乾固させた。フラッシュクロマトグラフィーＢｉｏｔａｇｅ  Ｉｓｏｌｅｒａ  Ｆｏｕｒ（１５ＣＶを通じてジクロロメタン中０％〜１０％メタノールの勾配の１００ｇ  ＫＰ−ＳＮＡＰシリカゲルカラム）によって粗生成物を精製して、黄色油（３ｇ）を得、これを逆相ＨＰＬＣ（ＫＲＯＭＡＳＩＬ−Ｅｔｅｒｎｉｔｙ  ＸＴ  Ｃ１８  １０μｍ／２０／８０／０．１〜５０／５０／０．１のＡＣＮ／Ｈ２Ｏ／ＮＨ４ＯＨ勾配）によって２回精製した。最も純粋な画分を蒸発乾固させて、［６−（ジフルオロメチル）−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メタノールＶＩＩ（２ｇ、８．０２ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。
収率：４５％
【数７】
2021522290.tif 000035
【０１４０】
Ｄ．［６−（１−フルオロシクロプロピル）−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メタノールＶＩＩ−Ａ
【化２２】
2021522290.tif 000036
Ｄ．１．６−（１−フルオロシクロプロピル）−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾールＶＩ−Ａの合成
５−（メトキシメチル）−１，３，４−チアジアゾール−２−アミン（１当量、２．０ｇ、１３．７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３０ｍＬ）溶液に、２−クロロ−１−（１−フルオロシクロプロピル）エタノン（ＣＡＳ：１５１６９７−２１−１、１．０５当量、１．９７ｇ、１４．４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２ｍＬ）溶液を１０℃で滴下した。反応混合物を１００℃で２時間３０分加熱し、次いでＮａＨＣＯ３の飽和水溶液を加え、酢酸エチルを用いて水層を抽出した（３回）。合わせた有機層を水で洗浄し（５回）、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発乾固させて褐色油を得た。逆相分取ＨＰＬＣ  Ｇｉｌｓｏｎ（ＹＭＣ  Ｔｒｉａｒｔ  Ｃ１８  ８０×２０４−１０μｍ−５００ｇ−勾配ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ  ４０／６０〜９５／０５）によって粗生成物を精製して、６−（１−フルオロシクロプロピル）−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾールＶＩ−Ａ（１．１６ｇ、５．１０ｍｍｏｌ）をベージュ色固体として得た。
収率：３７％
【数８】
2021522290.tif 000037
【０１４１】
Ｄ．２．［６−（１−フルオロシクロプロピル）−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メタノールＶＩＩ−Ａの合成
６−（１−フルオロシクロプロピル）−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール（ＶＩ−Ａ、１当量、３９５ｍｇ、１．７４ｍｍｏｌ）およびパラホルムアルデヒド（６当量、３１２．８ｍｇ、１０．４３ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（１．７ｍＬ）溶液に塩酸（４当量、１．８２ｇ、６．９５ｍｍｏｌ、４ｍｏｌ／Ｌ）を加え、混合物を１００℃で１時間撹拌した。ＮａＨＣＯ３の飽和水溶液を加え、酢酸エチルを用いて水層を抽出した（３回）。合わせた有機層をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発乾固させて褐色油を得、これをＳＦＣ（ＰＲＥＰ  ６００、カラムＰ４ＶＰ  ５０×１７４−５μｍ−２００ｇ、共溶媒ＭｅＯＨ５％）によって精製して、［６−（１−フルオロシクロプロピル）−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メタノールＶＩＩ−Ａ（２５０ｍｇ、０．９２ｍｍｏｌ）をベージュ色固体として得た。
収率：５３％
【数９】
2021522290.tif 000038
【０１４２】
例
１−［［２−（メトキシメチル）−６−（トリフルオロメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−プロピル−２Ｈ−ピロール−５−オン１の合成
【化２３】
2021522290.tif 000039
１．１  ２−（メトキシメチル）−６−（トリフルオロメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾールＶＩＩＩの合成。
１，２−ジメトキシエタン（６Ｌ）中の５−（メトキシメチル）−１，３，４−チアジアゾール−２−アミン（ＣＡＳ：１５８８４−８６−３３、４６ｇ、２．４ｍｏｌ、１当量）の懸濁液に、３−ブロモ−１，１，１−トリフルオロアセトン（ＣＡＳ：４３１−３５−６、４７８ｇ、２．５ｍｏｌ、１．０５当量）を２０℃で加える。反応混合物を最大転化率（＜２４時間）まで８０℃に加熱する。反応混合物に水（４Ｌ）を３２℃で加え、予測される化合物を反応混合物から結晶化させる。結晶性懸濁液を１０℃に冷却して結晶化プロセスを完了し、濾過し、結晶性沈殿物を水（１．５Ｌ）で洗浄して、２６６ｇの純粋な２−（メトキシメチル）−６−（トリフルオロメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾールＶＩＩＩを得る。
収率：４７％
【数１０】
2021522290.tif 000040
【０１４３】
１．２  ［２−（メトキシメチル）−６−（トリフルオロメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メタノールＩＸの合成。
２−（メトキシメチル）−６−（トリフルオロメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾールＶＩＩＩ（１０ｇ、４２．１６ｍｍｏｌ、１当量）、ホルムアルデヒド（１６ｇ、４２１．６ｍｍｏｌ、１０当量）および塩酸（３７％、８．２ｍｌ、２当量）をスルホラン（２５０ｍｌ）中に希釈する。反応混合物を１１０℃で一晩加熱する。水（５００ｍｌ）を加え、混合物を５０℃で２時間加熱する。次いで、溶媒を減圧下で除去する。シリカゲル上でクロマトグラフィー（勾配；溶離液：ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨ  １００／０／０〜９９／１／０．１）によって残留物を精製して、６．５ｇの［２−（メトキシメチル）−６−（トリフルオロメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メタノールＩＸを黄色固体として得る。
収率５８％
【数１１】
2021522290.tif 000041
【０１４４】
１．３  ５−（アジドメチル）−２−（メトキシメチル）−６−（トリフルオロメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾールＸの合成。
［２−（メトキシメチル）−６−（トリフルオロメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メタノールＩＸ（１．３３ｇ、４．９８ｍｍｏｌ、１当量）のジクロロメタン（３０ｍｌ）溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（３．２２ｇ、２４．８８ｍｍｏｌ、５当量）およびメタンスルホニルクロリド（０．８５５ｇ、７．４７ｍｍｏｌ、１．５当量）を０℃で順次ゆっくりと加える。ＤＭＦ（５ｍｌ）に懸濁したアジ化ナトリウム（０．４８５ｇ、７．４７ｍｍｏｌ、１．５当量）を０℃で加え、次いで室温まで温め、反応混合物を一晩撹拌する。加水分解（Ｈ２Ｏ）、およびジエチルエーテルによる抽出後、合わせた有機層をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で蒸発させて、１．４５ｇの５−（アジドメチル）−２−（メトキシメチル）−６−（トリフルオロメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾールＸを得る。
収率：１００％
【数１２】
2021522290.tif 000042
【０１４５】
［２−（メトキシメチル）−６−メチル−イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メタノールＶから出発して同じ手順に従って、５−（アジドメチル）−２−（メトキシメチル）−６−メチル−イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾールＸＩを調製する。
収率：６２％
【数１３】
2021522290.tif 000043
【０１４６】
１．４  １−［２−（メトキシメチル）−６−（トリフルオロメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メタンアミンＸＩＩの合成。
ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（１８ｍｌ／２ｍｌ）中の５−（アジドメチル）−２−（メトキシメチル）−６−（トリフルオロメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾールＸ（１．４５ｇ、４．９８ｍｍｏｌ、１当量）の懸濁液に、トリフェニルホスフィン（１．３１ｇ、４．９８ｍｍｏｌ、１当量）を室温で加える。反応混合物を室温で６０時間撹拌する。溶媒を減圧下で蒸発させ、残留物に水を加え、５Ｎ  ＨＣｌ水溶液を用いて溶液をｐＨ２に酸性化し、次いでＥｔ２Ｏ（１×５０ｍｌ）を用いて抽出する。水層をＮａ２ＣＯ３水溶液を加えて塩基性化し（ｐＨ８）、ジクロロメタン（２×５０ｍｌ）を用いて抽出し、蓄積した有機層をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で蒸発させて、１．１６ｇの１−［２−（メトキシメチル）−６−（トリフルオロメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メタンアミンＸＩＩを得る。
収率：８８％
【数１４】
2021522290.tif 000044
【０１４７】
５−（アジドメチル）−２−（メトキシメチル）−６−メチル−イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾールＸＩから出発して同じ手順に従って、［２−（メトキシメチル）−６−メチル−イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メタンアミンＸＩＩＩを調製する。逆相分取ＨＰＬＣ（ＫＲＯＭＡＳＩＬ−Ｅｔｅｒｎｉｔｙ  ＸＴ  Ｃ１８  １０μｍ／２０／８０／０．１〜９５／５／０．１のＡＣＮ／Ｈ２Ｏ／ＮＨ４ＯＨ勾配）によって粗混合物の精製を行った。
収率：７４％
【数１５】
2021522290.tif 000045
【０１４８】
１．５  １−［［２−（メトキシメチル）−６−（トリフルオロメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−プロピル−２Ｈ−ピロール−５−オン１の合成
２−ヒドロキシ−３−プロピル−２Ｈ−フラン−５−オンＩＩＩ−Ａ（ＣＡＳ：７８９２０−１０−２、１６０．８ｍｇ、１．１２７ｍｍｏｌ、１当量）および１−［２−（メトキシメチル）−６−（トリフルオロメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メタンアミンＸＩＩ（３００ｍｇ、１．１２７ｍｍｏｌ、１当量）を乾燥メタノール（３ｍｌ）に溶解し、混合物を室温で３時間３０分撹拌し、次いで０℃で冷却する。水素化ホウ素ナトリウム（４２．８ｍｇ、１．１２７ｍｍｏｌ、１当量）を加え、反応物を０℃で１時間撹拌する。０．５ｍｌの酢酸を加え、混合物を室温で一晩撹拌する。溶媒を減圧下で蒸発させ、残留物に水およびジクロロメタンを加え、ジクロロメタンを用いて混合物を３回抽出する。合わせた有機層をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で蒸発させる。シリカゲル（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨ  ９９／１／０．１）上でクロマトグラフィーによって残留物（３２７ｍｇ）を精製し、ヘプタン／ジエチルエーテル（８０／２０）からさらに再結晶化させて、１２７．６ｍｇの純粋な１−［［２−（メトキシメチル）−６−（トリフルオロメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−プロピル−２Ｈ−ピロール−５−オン１を得る。
収率：３０％
【数１６】
2021522290.tif 000046
【０１４９】
２−ヒドロキシ−３−（２，２，２−トリフルオロエチル）−２Ｈ−フラン−５−オンＩＩから出発して同じ手順に従って、１−［［２−（メトキシメチル）−６−（トリフルオロメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−（２，２，２−トリフルオロエチル）−２Ｈ−ピロール−５−オン２を調製する。
収率：３０％
【数１７】
2021522290.tif 000047
【０１５０】
２−ヒドロキシ−３−（３，３，３−トリフルオロプロピル）−２Ｈ−フラン−５−オンＩＩＩから出発して同じ手順に従って、１−［［２−（メトキシメチル）−６−（トリフルオロメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−（３，３，３−トリフルオロプロピル）−２Ｈ−ピロール−５−オン３を調製する。
収率：３４％
【数１８】
2021522290.tif 000048
【０１５１】
［２−（メトキシメチル）−６−メチル−イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メタンアミンＸＩＩＩおよび２−ヒドロキシ−３−プロピル−２Ｈ−フラン−５−オンＩＩＩ−Ａ（ＣＡＳ：７８９２０−１０−２）から出発して同じ手順に従って、１−［［２−（メトキシメチル）−６−メチル−イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−プロピル−２Ｈ−ピロール−５−オン４を調製する。
収率：３０％
【数１９】
2021522290.tif 000049
【０１５２】
１−［［２−（メトキシメチル）−６−（トリフルオロメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−プロピル−２Ｈ−ピロール−５−オン５の合成
【化２４】
2021522290.tif 000050
２．１  ｔｅｒｔ−ブチル［５−（メトキシメチル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］カルバマートＸＩＶの合成。
ジクロロメタン（１Ｌ）中の５−（メトキシメチル）−１，３，４−チアジアゾール−２−アミン（ＣＡＳ：１５８８４−８６−３３、１００ｇ、０．６９ｍｏｌ、１当量）の懸濁液に、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルカーボナート（１３２ｇ、０．７６ｍｏｌ、１．１当量）およびＮ，Ｎ−ジメチルアミノ−ピリジン（８．３５ｇ、０．０６９ｍｏｌ、０．１当量）を室温で順次かつそれぞれ一度に加える。室温で一晩撹拌した後、反応混合物を１Ｎ  ＨＣｌ（ｐＨ５）で洗浄して、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジンを除去する。溶媒を減圧下で除去し、ジイソプロピルエーテルから残留物を再結晶化させて、１４８．９ｇの純粋なｔｅｒｔ−ブチル［５−（メトキシメチル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］カルバマートＸＩＶを得る。
収率：８８％
【数２０】
2021522290.tif 000051
【０１５３】
２．２  ｛２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）イミノ］−５−（メトキシメチル）−１，３，４−チアジアゾール−３（２Ｈ）−イル｝酢酸ＸＶの合成。
ｔｅｒｔ−ブチル［５−（メトキシメチル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］カルバマートＸＩＶ（３６０ｇ、１．４７ｍｏｌ、１当量）のテトラヒドロフラン（３Ｌ）溶液に、ヨード酢酸（４０９．３ｇ、２．２ｍｏｌ、１．５当量）を室温で一度に加える。次いで、３０分以内に水素化ナトリウム（５２．８ｇ、２．２ｍｏｌ、１．５当量）を室温で少しずつ加える。反応混合物を６０℃で一晩加熱し、溶媒を減圧下で蒸発させる。残留物に水を加え、６Ｎ  ＨＣｌ水溶液を用いて溶液をｐＨ＝２に酸性化し、次いでＣＨ２Ｃｌ２を用いて抽出する。有機層を１０％チオ硫酸ナトリウム水溶液で洗浄し、蒸発乾固させて、４５５．７ｇの｛２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ−カルボニル）イミノ］−５−（メトキシメチル）−１，３，４−チアジアゾール−３（２Ｈ）−イル｝酢酸ＸＶを得、これをさらに精製することなく次の工程で直接使用する。
収率：９０％
【数２１】
2021522290.tif 000052
【０１５４】
２．３  ６−クロロ−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾールＸＶＩの合成。
｛２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）イミノ］−５−（メトキシメチル）−１，３，４−チアジアゾール−３（２Ｈ）−イル｝酢酸ＸＶ（４１８ｇ、１．３８ｍｏｌ、１当量）のアセトニトリル（２．５Ｌ）溶液に、トリエチルアミン（２７８．９ｇ、２．７６ｍｏｌ、２当量）を室温で順次ゆっくりと加え、次いで、オキシ塩化リン（６３３．９ｇ、４．１３ｍｏｌ、３当量）を加える。反応混合物を８０℃で１時間加熱する。反応完了後、水（２．２Ｌ）を５０℃でゆっくりと注意深く加える。ジクロロメタン（２×１．２Ｌ）を用いて反応混合物を抽出し、合わせた有機層をＮａＯＨ／ＮａＣｌ水溶液（１．４Ｌの飽和ＮａＣｌ溶液＋４００ｍｌの２Ｎ  ＮａＯＨ）により洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で凝縮する。アセトニトリル／水（１／１）から残留物を再結晶化させて、９９．８ｇの純粋な６−クロロ−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾールＸＶＩを得る。
収率：３６％
【数２２】
2021522290.tif 000053
【０１５５】
２．４  ６−クロロ−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−カルバルデヒドＸＶＩＩの合成。
０℃に冷却したジメチルホルムアミド（５ｍｌ）に、オキシ塩化リン（２．７５ｍｌ、３当量）を非常にゆっくりと加える。温度を５０℃に上昇させる。反応混合物を６０℃に加熱し、次いで、６−クロロ−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾールＸＶＩ（２ｇ、９．８２ｍｍｏｌ、１当量）を２．５時間かけて少しずつ加える。氷／水混合物に反応混合物を注ぐ。沈殿物を濾過し、水で洗浄する。残留物を減圧下４０℃で一晩乾燥させて、１．８ｇの６−クロロ−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−カルバルデヒドＸＶＩＩを固体として得る。
収率：７９％
【数２３】
2021522290.tif 000054
【０１５６】
２．５  ［６−クロロ−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］−メタノールＸＶＩＩＩの合成。
６−クロロ−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−カルバルデヒドＸＶＩＩ（２．９７ｇ、１２．９４ｍｍｏｌ、１当量）をエタノール（８０ｍｌ）に溶解し、０℃で冷却し、水素化ホウ素ナトリウム（５７８ｍｇ、１５．５３ｍｍｏｌ、１．２当量）を０℃で少しずつ加える。反応混合物を室温で一晩撹拌し、次いで０℃で冷却し、飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液（１００ｍｌ）を加える。有機溶媒を減圧下で蒸発させ、沈殿物を濾過し、真空下２０℃で乾燥させて、１．９９ｇの［６−クロロ−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メタノールＸＶＩＩＩを得る。
収率：６６％
【数２４】
2021522290.tif 000055
【０１５７】
２．６  ５−（アジドメチル）−６−クロロ−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾールＸＩＸの合成。
［６−クロロ−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メタノールＸＶＩＩＩ（０．５ｇ、２．１４ｍｍｏｌ、１当量）のジクロロメタン（１２．５ｍｌ）溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１０．７ｍｍｏｌ、５当量）およびメタンスルホニルクロリド（０．３６８ｇ、３．２１ｍｍｏｌ、１．５当量）を０℃で順次ゆっくりと加える。ＤＭＦ（５ｍｌ）に懸濁したアジ化ナトリウム（０．２０９ｇ、３．２１ｍｍｏｌ、１．５当量）を０℃で加え、次いで室温まで温め、反応混合物を一晩撹拌する。加水分解（Ｈ２Ｏ）、およびジエチルエーテルによる抽出後、合わせた有機層をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で蒸発させて、４３４ｍｇの５−（アジドメチル）−６−クロロ−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾールＸＩＸを得、これをさらに精製することなく次の工程で使用する。
収率：７８％
【数２５】
2021522290.tif 000056
【０１５８】
２．７  ［６−クロロ−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メタンアミンＸＸの合成
ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（７．５ｍｌ／０．７５ｍｌ）中の５−（アジドメチル）−６−クロロ−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾールＸＩＸ（０．４３４ｇ、１．６８ｍｍｏｌ、１当量）の懸濁液に、トリフェニルホスフィン（０．４３８ｇ、１．６８ｍｍｏｌ、１当量）を室温で加える。反応混合物を室温で１５時間撹拌する。溶媒を減圧下で蒸発させ、残留物に水を加え、５Ｎ  ＨＣｌ水溶液を用いて溶液をｐＨ２に酸性化し、次いでＥｔ２Ｏ（１×５０ｍｌ）を用いて抽出する。水層をＮａ２ＣＯ３水溶液を加えて塩基性化し（ｐＨ８）、ジクロロメタン（２×５０ｍｌ）を用いて抽出し、蓄積した有機層をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で蒸発させて、０．３４ｇの１−［２−（メトキシメチル）−６−（トリフルオロメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メタンアミンＸＸを得る。
収率：８７％
【数２６】
2021522290.tif 000057
【０１５９】
２．８  １−［［６−クロロ−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−（２，２，２−トリフルオロエチル）−２Ｈ−ピロール−５−オン５の合成
２−ヒドロキシ−３−（２，２，２−トリフルオロエチル）−２Ｈ−フラン−５−オン（３４０ｍｇ、１．８７ｍｍｏｌ、１当量）および１−［２−（メトキシメチル）−６−（トリフルオロメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メタンアミンＸＸ（４３４ｍｇ、１．８７ｍｍｏｌ、１当量）を乾燥メタノール（１０ｍｌ）に溶解し、混合物を室温で一晩撹拌し、次いで０℃で冷却する。水素化ホウ素ナトリウム（７７ｍｇ、２．０３ｍｍｏｌ、１．０８当量）を加え、反応物を０℃で１時間撹拌する。１ｍｌの酢酸を加え、混合物を室温で１時間撹拌する。溶媒を減圧下で蒸発させ、残留物に水およびジクロロメタンを加え、ジクロロメタンを用いて混合物を３回抽出する。合わせた有機層をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で蒸発させる。シリカゲル（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ  ９８／２）上でフラッシュクロマトグラフィーによって残留物（８００ｍｇ）を精製し、アセトニトリルからさらに再結晶化させて、１１９ｍｇの純粋な１−［［６−クロロ−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−（２，２，２−トリフルオロエチル）−２Ｈ−ピロール−５−オン５を得る。
収率：１６％
【数２７】
2021522290.tif 000058
【０１６０】
２−ヒドロキシ−３−プロピル−２Ｈ−フラン−５−オンＩＩＩ−Ａ（ＣＡＳ：７８９２０−１０−２）から出発して同じ手順に従って、１−［［６−クロロ−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−プロピル−２Ｈ−ピロール−５−オン６を調製する。
収率：５０％
【数２８】
2021522290.tif 000059
【０１６１】
２−ヒドロキシ−３−（３，３，３−トリフルオロプロピル）−２Ｈ−フラン−５−オンＩＩＩから出発して同じ手順に従って、１−［［６−クロロ−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−（３，３，３−トリフルオロプロピル）−２Ｈ−ピロール−５−オン７を調製する。
収率：２４％
【数２９】
2021522290.tif 000060
【０１６２】
１−［［６−（ジフルオロメチル）−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−プロピル−２Ｈ−ピロール−５−オン８の合成
【化２５】
2021522290.tif 000061
３．１．ヘキサメチレンテトラミン塩ＸＸＩの合成
［６−（ジフルオロメチル）−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メタノールＶＩＩ（１．０当量、５００ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）の混合物のジクロロメタン（１０ｍＬ）溶液に、塩化チオニル（１．２当量、２８７ｍｇ、２．４ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。反応物を０℃で１０分間、次いで室温で１時間撹拌した。粗混合物を蒸発乾固させ、得られた接着剤をジクロロメタン（１０ｍＬ）中で可溶化させた後、ヘキサメチレンテトラミン（３．０当量、８５２ｍｇ、６．０ｍｍｏｌ）を加えた。次いで、反応物を３５℃で２時間撹拌し、０℃に冷却し、濾過し、冷却したジクロロメタンで洗浄して、ＸＸＩ（９００ｍｇ、１．８７ｍｍｏｌ、推定純度８５％）をベージュ色固体として得、これをさらに精製することなく次の工程で使用した。
収率：９３％
【数３０】
2021522290.tif 000062
【０１６３】
［２−（メトキシメチル）−６−メチル−イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メタノールＶから出発して同じ手順に従って、ヘキサメチレンテトラミン塩ＸＸＩＩを調製する。
収率：定量的
【数３１】
2021522290.tif 000063
【０１６４】
３．２．［６−（ジフルオロメチル）−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メタンアミン塩酸塩ＸＸＩＩＩの合成
ヘキサメチレンテトラミン塩ＸＸＩ（１．０当量、８１８ｍｇ、１．７０ｍｍｏｌ、推定純度８５％）の混合物のメタノール（５ｍＬ）溶液に、塩酸（４．５当量、９１４ｍｇ、９．０ｍｍｏｌ）を室温で加えた。反応物を４５℃で１時間撹拌し、混合物を濾過した。次いで、得られた濾液を蒸発乾固させて、［６−（ジフルオロメチル）−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メタンアミン；塩酸塩ＸＸＩＩＩ（９００ｍｇ、１．７４ｍｍｏｌ、推定純度５５％）を不純なベージュ色固体として得、これをさらに精製することなく次の工程で使用した。
収率：定量的
【数３２】
2021522290.tif 000064
【０１６５】
ヘキサメチレンテトラミン塩ＸＸＩＩから出発して同じ手順に従って、［２−（メトキシメチル）−６−メチル−イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メタンアミン塩酸塩ＸＸＩＶを調製する。
収率：５５％
【数３３】
2021522290.tif 000065
【０１６６】
３．３．１−［［６−（ジフルオロメチル）−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−プロピル−２Ｈ−ピロール−５−オン８の合成
［６−（ジフルオロメチル）−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メタンアミン塩酸塩ＸＸＩＩＩ（１当量、２１０ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ、推定純度６５％）と、２−ヒドロキシ−３−プロピル−２Ｈ−フラン−５−オンＩＩＩ−Ａ（３．０当量、２４１ｍｇ、１．４４ｍｍｏｌ、１Ｈ  ＮＭＲ純度８５％）と、水酸化ナトリウム（２．０当量、３９ｍｇ、０．９６ｍｍｏｌ）との混合物のメタノール（２ｍＬ）溶液を室温で２時間撹拌した。０℃に冷却した溶液に水素化ホウ素ナトリウム（２当量、３６ｍｇ、０．９６ｍｍｏｌ）を加え、混合物を０℃で１時間撹拌した。次いで酢酸（５．０当量、１４４ｍｇ、２．４ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で３時間撹拌した。粗混合物を蒸発乾固させてオレンジ色の接着剤を得、これを逆相分取ＨＰＬＣ（ＫＲＯＭＡＳＩＬ−Ｅｔｅｒｎｉｔｙ  ＸＴ  Ｃ１８  １０μｍ／３０／７０／０．１〜６０／４０／０．１のＡＣＮ／Ｈ２Ｏ／ＮＨ４ＯＨ勾配）により精製して、１−［［６−（ジフルオロメチル）−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−プロピル−２Ｈ−ピロール−５−オン８（４２ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）をベージュ色固体として得た。
収率：２４％
【数３４】
2021522290.tif 000066
【０１６７】
１−［［２−（メトキシメチル）−６−メチル−イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−（２，２，２−トリフルオロエチル）−２Ｈ−ピロール−５−オン９の合成
【化２６】
2021522290.tif 000067
４．１．ｔｅｒｔ−ブチル（４Ｓ）−２−オキソ−４−（２，２，２−トリフルオロエチル）ピロリジン−１−カルボキシラートＸＸＶの合成
（４Ｓ）−４−（２，２，２−トリフルオロエチル）ピロリジン−２−オン（国際公開第２０１１／０４７８６０号パンフレット、ＣＡＳ１４４４４６４−１４−５、１当量、３０ｇ、１７９ｍｍｏｌ）と４−ジメチルアミノピリジン（１．５当量、３３ｇ、２６７ｍｍｏｌ）との混合物のアセトニトリル（９００ｍＬ）溶液に、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルカーボナート（１．２当量、４８ｇ、２１３ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。次いで、混合物を室温まで温め、４時間撹拌した。溶媒を真空下で蒸発させ、得られた混合物に水を加えた。酢酸エチルを用いて水層を抽出し（２回）、合わせた有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発乾固させて黄色油を得た。
【０１６８】
順相フラッシュクロマトグラフィーＢｉｏｔａｇｅ  Ｉｓｏｌｅｒａ  Ｆｏｕｒ（１２ＣＶを通じてＤＣＭ中０％〜５％メタノールの勾配のＳＮＡＰ  ＳｉＯ２  １００ｇ）によって粗混合物を精製した。最も純粋な画分を蒸発乾固させて、ｔｅｒｔ−ブチル（４Ｓ）−２−オキソ−４−（２，２，２−トリフルオロエチル）ピロリジン−１−カルボキシラートＸＸＶ（２４．５ｇ、９１．５ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。
収率：５１％
【数３５】
2021522290.tif 000068
【０１６９】
以下の化合物は、同じ手順に従って調製した。
【表６】
2021522290.tif 000069
【０１７０】
４．２．ｔｅｒｔ−ブチル（４Ｓ）−２−オキソ−３−フェニルセラニル−４−（２，２，２−トリフルオロエチル）ピロリジン−１−カルボキシラートＸＸＶＩの合成
ｔｅｒｔ−ブチル（４Ｓ）−２−オキソ−４−（２，２，２−トリフルオロエチル）ピロリジン−１−カルボキシラートＸＸＶ（１当量、１０ｇ、３７．４ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（２５０ｍＬ）溶液に、リチウムビス（トリメチルシリル）アミド（２当量、５２ｍＬ、７５．４ｍｍｏｌ、１．４５ｍｏｌ／Ｌ）を−７８℃で加え、混合物を−７８℃で１時間撹拌した。次いで、フェニルセレネニルクロリド（１．１当量、８．０ｇ、４１．７ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（８５ｍＬ）溶液を−７８℃で加え、混合物を−７８℃で１時間撹拌した。次いで、撹拌溶液に水を加え、酢酸エチルを用いて水層を抽出し（３回）、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発乾固させて褐色油（１５ｇ）を得、これを順相フラッシュクロマトグラフィーＢｉｏｔａｇｅ  Ｉｓｏｌｅｒａ  Ｆｏｕｒ（１２ＣＶを通じてヘプタン中１０％〜２０％酢酸エチルの勾配のＳＮＡＰ  ＳｉＯ２  ３４０ｇ）によって精製した。最も純粋な画分を蒸発乾固させて、ｔｅｒｔ−ブチル（４Ｓ）−２−オキソ−３−フェニルセラニル−４−（２，２，２−トリフルオロエチル）ピロリジン−１−カルボキシラートＸＸＶＩ（６．２ｇ、１４ｍｍｏｌ）を透明な黄色油として得た。
収率：３８％
【数３６】
2021522290.tif 000070
【０１７１】
以下の化合物は、同じ手順に従って調製した。
【表７】
2021522290.tif 000071
【０１７２】
４．３．（４Ｓ）−３−フェニルセラニル−４−（２，２，２−トリフルオロエチル）ピロリジン−２−オンＸＸＶＩＩの合成
ｔｅｒｔ−ブチル（４Ｓ）−２−オキソ−３−フェニルセラニル−４−（２，２，２−トリフルオロエチル）ピロリジン−１−カルボキシラートＸＸＶＩ（１当量、６．２ｇ、１５ｍｍｏｌ）の混合物のジクロロメタン（１５０ｍＬ）溶液に、トリフルオロ酢酸（１４当量、１５ｍＬ、２００ｍｍｏｌ）を０℃で加え、混合物を室温で３０分間撹拌した。混合物を蒸発乾固させ、水で希釈し、ｐＨ＝６〜７になるまでＮａＨＣＯ３固体を用いて中和した。酢酸エチルを用いて有機層を抽出し（３回）、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発乾固させて、（４Ｓ）−３−フェニルセラニル−４−（２，２，２−トリフルオロエチル）ピロリジン−２−オンＸＸＶＩＩ（４．５ｇ、１４ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。生成物は、さらに精製することなく、次の工程でそのまま使用した
収率：９５％
【数３７】
2021522290.tif 000072
【０１７３】
以下の化合物は、同じ手順に従って調製した。
【表８】
2021522290.tif 000073
【０１７４】
４．４．（４Ｓ）−１−［［２−（メトキシメチル）−６−メチル−イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−フェニルセラニル−４−（２，２，２−トリフルオロエチル）ピロリジン−２−オンＸＸＶＩＩＩの合成
ｐ−トルエンスルホン酸一水和物（０．７当量、１．３ｇ、６．８ｍｍｏｌ）と、［２−（メトキシメチル）−６−メチル−イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メタノールＶ（１当量、２ｇ、９．３７ｍｍｏｌ）と、３−フェニルセラニル−４−（２，２，２−トリフルオロエチル）ピロリジン−２−オンＸＸＶＩＩ（１当量、３ｇ、９．３１ｍｍｏｌ）との混合物のスルホラン（９５ｍｌ）溶液を１３０℃で１６時間撹拌した。混合物を水に注ぎ、ｐＨ＝６〜７になるまでＮａＨＣＯ３の飽和水溶液を加えた。ＭＴＢＥを用いて有機層を抽出した（２回）。合わせた有機層を水で洗浄し（３回）、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発乾固させて褐色油を得た。分取ＬＣ  ＹＭＣ  Ｔｒｉａｒｔ  Ｃ１８（８０×２０４−１０μｍ−５００ｇ、水中６０％〜９０％ＡＣＮの勾配）によって褐色油を精製して、（４Ｓ）−１−［［２−（メトキシメチル）−６−メチル−イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−フェニルセラニル−４−（２，２，２−トリフルオロエチル）ピロリジン−２−オンＸＸＶＩＩＩ（４５０ｍｇ、０．８２ｍｍｏｌ）を褐色油として得た。
収率：９％
【数３８】
2021522290.tif 000074
【０１７５】
以下の化合物は、同じ手順に従って調製した。
【表９】
2021522290.tif 000075
【０１７６】
４．５．  １−［［２−（メトキシメチル）−６−メチル−イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−（２，２，２−トリフルオロエチル）−２Ｈ−ピロール−５−オン９の合成
メタノール（５．５ｍｌ）と水（１．１ｍＬ）との混合物中の（４Ｓ）−１−［［２−（メトキシメチル）−６−メチル−イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−フェニルセラニル−４−（２，２，２−トリフルオロエチル）ピロリジン−２−オンＸＸＶＩＩＩ（１当量、４３０ｍｇ、０．８３１１ｍｍｏｌ）の溶液に、過ヨウ素酸ナトリウム（９当量、１．６ｍｇ、７．４８ｍｍｏｌ）を室温で加えた。反応物を室温で３０分間撹拌した。次いで、混合物にＮＨ４Ｃｌの飽和水溶液を加え、ＥｔＯＡｃを用いて水層を抽出した（３回）。合わせた有機層をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発乾固させて黄色油を得、これを中性条件の逆相フラッシュクロマトグラフィーＢｉｏｔａｇｅ  Ｉｓｏｌｅｒａ  Ｆｏｕｒ（１２ＣＶを通じて水中５％〜９５％ＡＣＮの勾配のＣ１８  ＳＮＡＰ  ３０ｇゲルカラム）によって精製した。最も純粋な画分を直接凍結乾燥して、１−［［２−（メトキシメチル）−６−メチル−イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−（２，２，２−トリフルオロエチル）−２Ｈ−ピロール−５−オン９（７１ｍｇ、０．１９７０ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。
収率：２３％
【数３９】
2021522290.tif 000076
【０１７７】
以下の化合物は、同じ手順に従って調製した。
【０１７８】
１−［［６−（ジフルオロメチル）−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−（２，２，２−トリフルオロエチル）−２Ｈ−ピロール−５−オン１０は、ＸＸＶＩＩＩ−Ａから出発して調製した。
収率：４５％
【数４０】
2021522290.tif 000077
【０１７９】
１−［［６−（１−フルオロシクロプロピル）−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−（２，２，２−トリフルオロエチル）−２Ｈ−ピロール−５−オン１１は、ＸＸＶＩＩＩ−Ｂから出発して調製した。
収率：９％
【数４１】
2021522290.tif 000078
【０１８０】
３−（２−クロロ−２，２−ジフルオロ−エチル）−１−［［２−（メトキシメチル）−６−（トリフルオロメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−２Ｈ−ピロール−５−オン１２は、ＸＸＶＩＩＩ−Ｃから出発して調製した。
収率：９％
【数４２】
2021522290.tif 000079
【０１８１】
１−［［２−（メトキシメチル）−６−メチル−イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−（３，３，３−トリフルオロプロピル）−２Ｈ−ピロール−５−オン１３は、ＸＸＶＩＩＩ−Ｄから出発して調製した。
収率：５３％
【数４３】
2021522290.tif 000080
【０１８２】
１−［［６−（ジフルオロメチル）−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−（３，３，３−トリフルオロプロピル）−２Ｈ−ピロール−５−オン１４は、ＸＸＶＩＩＩ−Ｅから出発して調製した。
収率：５２％
【数４４】
2021522290.tif 000081
【０１８３】
３−（２，２−ジフルオロプロピル）−１−［［２−（メトキシメチル）−６−（トリフルオロメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−２Ｈ−ピロール−５−オン１５は、ＸＸＶＩＩＩ−Ｆから出発して調製した。
収率：４１％
【数４５】
2021522290.tif 000082
【０１８４】
１−［［６−（ジフルオロメチル）−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−（２，２−ジフルオロプロピル）−２Ｈ−ピロール−５−オン１６は、ＸＸＶＩＩＩ−Ｇから出発して調製した。
収率：１４％
【数４６】
2021522290.tif 000083
【０１８５】
３−［（１Ｒ）−２，２−ジフルオロシクロプロピル］−１−［［２−（メトキシメチル）−６−（トリフルオロメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−２Ｈ−ピロール−５−オン１７Ａおよび３−［（１Ｓ）−２，２−ジフルオロシクロプロピル］−１−［［２−（メトキシメチル）−６−（トリフルオロメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−２Ｈ−ピロール−５−オン１７Ｂの合成
【化２７】
2021522290.tif 000084
５．１．３−（２，２−ジフルオロシクロプロピル）−１−［［２−（メトキシメチル）−６−（トリフルオロメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−２Ｈ−ピロール−５−オン１７の合成
［２−（メトキシメチル）−６−（トリフルオロメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メタンアミンＸＩＩ（１当量、７００ｍｇ、２．４４ｍｍｏｌ、９３質量％）の２−プロパノール（１２ｍＬ）溶液に、３−（２，２−ジフルオロシクロプロピル）−２−ヒドロキシ−２Ｈ−フラン−５−オンＩＩＩ−Ｂ（１当量、５００ｍｇ、２．４４ｍｍｏｌ、８０質量％）を室温で加え、反応物を室温で１時間撹拌した。次いで、混合物に水素化ホウ素ナトリウム（１当量、９２ｍｇ、２．４４ｍｍｏｌ）の水溶液（３．５ｍＬ）を室温で加え、反応物を室温で２時間撹拌した。次いで、混合物に追加量の水素化ホウ素ナトリウム（１当量、９２ｍｇ、２．４４ｍｍｏｌ）を加え、反応物を室温で１５分間撹拌した。第３の量の水素化ホウ素ナトリウム（１当量、９２ｍｇ、２．４４ｍｍｏｌ）、続いて酢酸（３５当量、５ｍＬ、８７．０８ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で１時間撹拌した。０℃に冷却した混合物にＮａＨＣＯ３の飽和水溶液を加え、ＭＴＢＥを用いて水層を抽出した（２回）。合わせた有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発乾固させて（最大２５℃）、褐色油を得た。中性モードの逆相フラッシュクロマトグラフィーＢｉｏｔａｇｅ  Ｉｓｏｌｅｒａ  Ｆｏｕｒ（１０ＣＶを通じて５％〜９５％ＡＣＮの勾配によるＳＮＡＰ  Ｃ１８  ６０ｇカラム）によって褐色油を精製し、最も純粋な画分を凍結乾燥して、３−（２，２−ジフルオロシクロプロピル）−１−［［２−（メトキシメチル）−６−（トリフルオロメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−２Ｈ−ピロール−５−オン１７（５７０ｍｇ、１．３５ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。
収率：５５％
【数４７】
2021522290.tif 000085
【０１８６】
キラルＳＦＣ（ＡＳ  ５０×２６５−５μｍ−３００ｇ＊ＥｔＯＨ  １０％、３６０ｍＬ／分、３５℃）によって鏡像異性体の混合物（１０５ｍｇ）を分離して、３−［２，２−ジフルオロシクロプロピル］−１−［［２−（メトキシメチル）−６−（トリフルオロメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−２Ｈ−ピロール−５−オン（鏡像異性体１７−Ａ、第１の溶出、２７ｍｇ、０．０６６ｍｍｏｌ）および３−［２，２−ジフルオロシクロプロピル］−１−［［２−（メトキシメチル）−６−（トリフルオロメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−２Ｈ−ピロール−５−オン（鏡像異性体１７−Ｂ、第２の溶出、２７ｍｇ、０．０６６ｍｍｏｌ）を得た。
分析用キラルＳＦＣ（カラムＡＳ、３ｍＬ／分、３０℃、２０％ＭｅＯＨ、１００ｂａｒ）：鏡像異性体１７−Ａ：１．１９分、鏡像異性体１７−Ｂ：１．６３分
【０１８７】
分離後、中性モードの逆相フラッシュクロマトグラフィーＢｉｏｔａｇｅ  Ｉｓｏｌｅｒａ  Ｆｏｕｒ（１０ＣＶを通じて水中５％〜９５％ＡＣＮの勾配によるＳＮＡＰ  Ｃ１８  １２ｇカラム）によって両鏡像異性体を再精製し、直接凍結乾燥した。
【０１８８】
以下の化合物は、同じ手順に従って調製した。
３−（２，２−ジフルオロシクロプロピル）−１−［［２−（メトキシメチル）−６−メチル−イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−２Ｈ−ピロール−５−オン１８は、ＸＩＩＩおよびＩＩＩ−Ｂから出発して調製した。
収率：５０％
【数４８】
2021522290.tif 000086
【０１８９】
キラルＳＦＣ（ＡＳ  ５０×２６５−５μｍ−３００ｇ＊ＭｅＯＨ  １０％、３６０ｍＬ／分、３５℃）によって鏡像異性体の混合物（１１０ｍｇ）を分離して、１−［［２−（メトキシメチル）−６−メチル−イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−［２，２−ジフルオロシクロプロピル］−２Ｈ−ピロール−５−オン（鏡像異性体１８−Ａ、第１の溶出、１５ｍｇ、０．０４２ｍｍｏｌ）および１−［［２−（メトキシメチル）−６−メチル−イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−［２，２−ジフルオロシクロプロピル］−２Ｈ−ピロール−５−オン（鏡像異性体１８−Ｂ、第２の溶出、１９ｍｇ、０．０５３ｍｍｏｌ）を得た。
分析用キラルＳＦＣ（カラムＡＳ、３ｍＬ／分、３０℃、２０％ＭｅＯＨ、１００ｂａｒ）：鏡像異性体１８−Ａ：１．０４分、鏡像異性体１８−Ｂ：１．３１分
【０１９０】
分離後、中性モードの逆相フラッシュクロマトグラフィーＢｉｏｔａｇｅ  Ｉｓｏｌｅｒａ  Ｆｏｕｒ（１０ＣＶを通じて水中５％〜９５％ＡＣＮの勾配によるＳＮＡＰ  Ｃ１８  １２ｇカラム）によって両鏡像異性体を精製し、直接凍結乾燥した。３−（２，２−ジフルオロシクロプロピル）−１−［［６−（ジフルオロメチル）−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−２Ｈ−ピロール−５−オン１９は、ＸＸＩＩＩ（遊離塩基として）およびＩＩＩ−Ｂから出発して調製した。
収率：１１％
【数４９】
2021522290.tif 000087
【０１９１】
キラルＳＦＣ（ＡＳ  ５０×２６５−５μｍ−３００ｇ＊ＥｔＯＨ  １５％、３６０ｍＬ／分、３５℃）によって鏡像異性体の混合物（１３８ｍｇ）を分離して、１−［［６−（ジフルオロメチル）−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−［２，２−ジフルオロシクロプロピル］−２Ｈ−ピロール−５−オン（鏡像異性体１９−Ａ、第１の溶出、１５ｍｇ、０．０３８ｍｍｏｌ）および３−［２，２−ジフルオロシクロプロピル］−１−［［６−（ジフルオロメチル）−２−（メトキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−２Ｈ−ピロール−５−オン（鏡像異性体１９−Ｂ、第２の溶出、１９ｍｇ、０．０４８ｍｍｏｌ）を得た。
分析用キラルＳＦＣ（カラムＡＳ、３ｍＬ／分、３０℃、２０％ＥｔＯＨ、１００ｂａｒ）：鏡像異性体１９−Ａ：１．３９分、鏡像異性体１９−Ｂ：１．８７分
【０１９２】
分離後、中性モードの逆相フラッシュクロマトグラフィーＢｉｏｔａｇｅ  Ｉｓｏｌｅｒａ  Ｆｏｕｒ（１０ＣＶを通じて水中５％〜９５％ＡＣＮの勾配によるＳＮＡＰ  Ｃ１８  １２ｇカラム）によって両鏡像異性体を精製し、直接凍結乾燥した。
【０１９３】
３−（２，２−ジフルオロプロピル）−１−［［２−（メトキシメチル）−６−メチル−イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−２Ｈ−ピロール−５−オン２０は、ＸＩＩＩおよびＩＩ−Ａから出発して同じ方法に従って調製した。
収率：１６％
【数５０】
2021522290.tif 000088
【０１９４】
１−［［２−（ヒドロキシメチル）−６−メチル−イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−（３，３，３−トリフルオロプロピル）−２Ｈ−ピロール−５−オン２１の合成
【化２８】
2021522290.tif 000089
１−［［２−（メトキシメチル）−６−メチル−イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−（３，３，３−トリフルオロプロピル）−２Ｈ−ピロール−５−オン１３（１当量、１００ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ）の混合物のジクロロメタン（１．５ｍＬ）溶液に、三臭化ホウ素（５当量、１．３ｍＬ、１．３ｍｍｏｌ）を室温で加え、次いで混合物を１時間撹拌した。混合物にメタノールをゆっくりと加え（発熱反応）、次いで、溶媒を蒸発乾固させて黄色油を得た。中性条件で逆相フラッシュクロマトグラフィーＢｉｏｔａｇｅ  Ｉｓｏｌｅｒａ  Ｆｏｕｒ（水中１０％〜９５％ＡＣＮの勾配のＳＮＡＰ  ３０ｇ  Ｃ１８）によって黄色油を精製した。最も純粋な画分を合わせ、凍結乾燥して、１−［［２−（ヒドロキシメチル）−６−メチル−イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−（３，３，３−トリフルオロプロピル）−２Ｈ−ピロール−５−オン２１（２６ｍｇ、０．０７ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。
収率：２７％
【数５１】
2021522290.tif 000090
【０１９５】
１−［［６−（ジフルオロメチル）−２−（ヒドロキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−（３，３，３−トリフルオロプロピル）−２Ｈ−ピロール−５−オン２２は、１４から出発して同じ方法に従って調製した。
収率：６％
【数５２】
2021522290.tif 000091
【０１９６】
１−［［６−（ジフルオロメチル）−２−（ヒドロキシメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル］−３−（２，２，２−トリフルオロエチル）−２Ｈ−ピロール−５−オン２３は、１０から出発して同じ方法に従って調製した。
収率：１４％
【数５３】
2021522290.tif 000092
【０１９７】
表（Ｉ）は、化合物のＩＵＰＡＣ名（またはＡｃｃｅｌｅｒｙｓ  Ｄｒａｗ  ４．０もしくはＢｉｏｖｉａ  Ｄｒａｗ  １６．１から生成された名称）、質量分析で観察されたイオンピーク、および１Ｈ  ＮＭＲの説明を示している。
【表１０−１】
2021522290.tif 000093
【表１０−２】
2021522290.tif 000094
【表１０−３】
2021522290.tif 000095
【表１０−４】
2021522290.tif 000096
【表１０−５】
2021522290.tif 000097
【表１０−６】
2021522290.tif 000098
【０１９８】
インビトロおよびインビボアッセイ
１．ＳＶ２ＡおよびＳＶ２Ｃに対する結合アッセイ
ヒト胎児由来腎臓（ＨＥＫ）細胞にヒトＳＶ２ＡおよびＳＶ２Ｃタンパク質を発現させた。Ｇｉｌｌａｒｄら（Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２００６，５３６，１０２−１０８）に記載されているように、ＨＥＫ  ＳＶ２ＡおよびＨＥＫ  ＳＶ２Ｃ膜調製物を調製した。非標識化合物の親和性を測定するために、以下の通り競合実験を行った：２ｍＭ  ＭｇＣｌ２、０．１％ジメチルスルホキシドおよび１０漸増濃度の非標識試験化合物（０．１ｎＭ〜１０μＭ）を含有する０．２ｍｌの５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ緩衝液（ｐＨ７．４）中の［３Ｈ］−２−［４−（３−アジドフェニル）−２−オキソ−１−ピロリジニル］ブタンアミド（５ｎＭ）および／または［３Ｈ］−４Ｒ−（２−クロロ−２，２−ジフルオロエチル）−１−｛［２−（メトキシメチル）−６−（トリフルオロメチル）イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３，４］チアジアゾール−５−イル］メチル｝ピロリジン−２−オン（２５ｎＭ）とともに、ＳＶ２タンパク質を発現する膜（１アッセイ当たり５〜１５μｇのタンパク質）を３７℃で６０分インキュベートした。インキュベーション期間の終了時に、０．１％ポリエチレンイミンに予め浸漬したＧＦ／Ｃガラス繊維フィルターを通した迅速濾過により、膜結合放射性リガンドを回収した。アッセイ容量の少なくとも４倍の氷冷５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ  ＨＣｌ緩衝液（ｐＨ７．４）で膜を洗浄した。フィルターを乾燥させ、液体シンチレーションによって放射能を決定した。濾過工程全体は１０秒を超えなかった。測定された親和性ｐＩＣ５０値は、ＣｈｅｎｇおよびＰｒｕｓｏｆｆ（Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１９７３，２２（２３），３０９９−３１０８）に従ってｐＫｉに補正した。
【０１９９】
本発明による式（Ｉ）の化合物は、典型的には、少なくとも６．５のｐＫｉ  ＳＶ２Ａ値および少なくとも６．０のｐＫｉ  ＳＶ２Ｃ値を示す。
【０２００】
例１８−Ｂ、２１、２２および２３は、６．５超７．５以下のｐｋｉ  ＳＶ２Ａ値を示す。例２、５、１１、１８−Ａおよび２０は、７．５超８．０以下のｐｋｉ  ＳＶ２Ａ値を示す。例１、３、４、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７−Ａ、１７−Ｂ、１９−Ａおよび１９−Ｂは、８．０以上８．５未満のｐｋｉ  ＳＶ２Ａ値を示す
【０２０１】
２．発作モデル
全実験に体重２２〜３２ｇのオスのＮＭＲＩマウス（Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ，Ｇｅｒｍａｎｙ）を使用する。動物は、午前６時にライトを点灯させる１２時間／１２時間の明暗サイクルに置き、２０〜２１℃に維持された温度および約４０％の湿度で収容する。マウスは１ケージ当たり１０匹の群で収容する（タイプＩＩＩ）。全動物に標準的なペレット状の食物および水を自由に摂取させてから、各１０匹のマウスからなる実験群に無作為に割り付ける。動物実験はいずれも、動物実験に関する国内規則に従って行い、欧州共同体理事会指令２０１０／６３／ＥＵのガイドラインに従って実施する。地元の倫理委員会が実験プロトコルを承認した。
【０２０２】
６．１  ６Ｈｚ発作モデル
６Ｈｚモデルは、以前に記載されたプロトコル（Ｋａｍｉｎｓｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｐｉｌｅｐｓｉａ（２００４），４５，８６４−８６７）に従って行う。要約すると、定電流装置（ＥＣＴ  Ｕｎｉｔ  ５７８００；Ｕｇｏ  Ｂａｓｉｌｅ，Ｃｏｍｅｒｉｏ，Ｉｔａｌｙ）によって、角膜刺激（４４ｍＡ、０．２ｍｓ持続時間、６Ｈｚで３秒間の単極矩形波）を供給する。電気刺激の前に０．４％塩酸オキシブプロカイン（Ｕｎｉｃａｉｎｅ，Ｔｈｅａ，Ｆｒａｎｃｅ）を眼に滴下する。刺激中、マウスを手動で拘束し、通電直後に、観察ケージ（３８×２６×１４ｃｍ）に解放する。多くの場合、発作の前に、短期間（約２〜３秒）の激しい自発運動興奮がある（激しい走行および跳躍）。その後、動物は、立ち上がり、前肢の自動運動およびクローヌス、感覚毛の単収縮、ならびに挙尾を伴う「気絶した」姿勢を示す。発作の最後に、動物は正常な探索行動を再開する。実験エンドポイントは、発作からの保護である。刺激から７秒以内に正常な探索行動を再開した場合、動物は保護されていると考えられる。
【０２０３】
試験化合物について決定されたインビボ活性は、典型的には、単回ＩＰ投与後０．０５ｍｇ／ｋｇから１０ｍｇ／ｋｇの間に含まれる。
【０２０４】
６．２  ペンチレンテトラゾール（ＰＴＺ）発作モデル
以前に確立された８９ｍｇ／ｋｇのＣＤ９７用量（マウスの９７％に対して四肢すべての間代性痙攣を誘発する痙攣性用量）でペンチレンテトラゾールを使用する（Ｋｌｉｔｇａａｒｄ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．（１９９８），３５３，１９１−２０６）。ペンチレンテトラゾール注射の直後に、Ｐｅｒｓｐｅｘケージにマウスを個別に入れ、四肢すべての間代性痙攣、および緊張性後肢伸張の存在について６０分間観察する。
【０２０５】
試験した場合、添付の例の化合物について決定されたインビボ活性は、典型的には、単回ＩＰ投与後、０．５ｍｇ／ｋｇから３０ｍｇ／ｋｇの間に含まれる。
【０２０６】
３．アザムリンアッセイ
供給者の情報に従って、凍結保存したヒト肝細胞（ドナー２０例のプール、Ｃｅｌｓｉｓ／ＩＶＴ／Ｂｉｏｒｅｃｌａｍａｔｉｏｎ製のＢＳＵバッチ）を解凍した。生存率（トリパンブルー排除）は７５％超であった。穏やかな撹拌（振動撹拌機、Ｔｉｔｒａｍａｘ  １００、約３００ｒｐｍ）下で３０分間にわたり、インキュベーター（５％ＣＯ２）中、＋３７℃の４８ウェルプレート内で、２ｍＭのグルタミンおよび１５ｍＭのＨｅｐｅｓを含有するウィリアム培地を用いて、プレインキュベーション（２×１０６個の肝細胞／ｍＬの肝細胞懸濁液２５０μＬ）を行った。プレインキュベーション後、アザムリン（６μＭ−特異的ＣＹＰ３Ａ４／５阻害剤）の存在下または非存在下で、ＵＣＢ化合物（１μＭ）またはミダゾラム（陽性対照）を含有する２５０μＬの培養培地（上記組成を参照）を肝細胞に加えることによって、インキュベーションを開始した。培養物中のＵＣＢ化合物およびアザムリンの最終濃度は、それぞれ０．５μＭおよび３μＭである。２回のピペット出し入れ操作によって、細胞懸濁液を急速に再均質化した。インキュベーションの０、３０、６０、１２０、１８０および２４０分後、ケトコナゾール１μＭを内部標準として含む５０μＬの氷冷アセトニトリルを含有する９６ウェルプレートから適切なウェルに５０μｌの培養物を移すことによって、反応を停止した。各サンプリングの前に、２回のピペット出し入れ操作によって細胞培養物を再均質化する。
【０２０７】
インキュベーションの終了後、９６ウェルプレートを約３７００ｒｐｍ、＋４℃で１５分間遠心分離する。１５０μＬのＨ２Ｏ  Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅが加えられた他のディープウェルプレートのウェルに５０μＬの上清を移す。親消失、および代謝産物形成のモニタリングのために、マイクロＵＰＬＣ／ＨＲ−ＭＳによって、これらの試料を分析した。
【０２０８】
以下の式を使用することによって、アザムリンの非存在下および存在下で、ＣＬｉｎｔ（親親薬物消失に基づく）の比から、各化合物について、ＣＹＰ３Ａ４／５によって代謝される画分（ｆｍ，ＣＹＰ３Ａ４／５）として知られるＣＹＰ３Ａ４／５の寄与を計算した：
【数５４】
2021522290.tif 000099
【０２０９】
試験した場合、添付の例の化合物のＣＹＰ３Ａ４／５によって代謝される画分（ｆｍ，ＣＹＰ３Ａ４／５）は、典型的には、０から４５％の間に含まれる。
【０２１０】
例５、９、１３および１６は、０から１０％の間に含まれる、ＣＹＰ３Ａ４／５によって代謝される画分（ｆｍ，ＣＹＰ３Ａ４／５）を示す。例１、３、６、７、８、１０、１５および２０は、１０％超２０％以下の、ＣＹＰ３Ａ４／５によって代謝される画分（ｆｍ，ＣＹＰ３Ａ４／５）を示す。例２、３、１１、１２、１４、１７−Ａおよび１７−Ｂは、２０％超４５％以下の、ＣＹＰ３Ａ４／５によって代謝される画分（ｆｍ，ＣＹＰ３Ａ４／５）を示す。
【国際調査報告】
2021522290.tif 000102
2021522290.tif 000103