(57)【要約】  本発明は、Ｏ−ＧｌｃＮＡｃ加水分解酵素（ＯＧＡ）阻害剤に関する。本発明はまた、そのような化合物を含む医薬組成物、そのような化合物及び組成物を調製する方法、並びにＯＧＡの阻害が有益である障害（例えば、タウオパチー、特に、アルツハイマー病又は進行性核上性麻痺；及びタウ病変を伴う神経変性疾患、特に、Ｃ９ＯＲＦ７２変異により引き起こされる筋萎縮性側索硬化症又は前頭側頭葉認知症）の予防及び処置のためのそのような化合物及び組成物の使用も対象とする。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）
【化１】
2021527659.tif 000259
の化合物、又はその互変異性体若しくは立体異性形態、又はこれらの薬学的に許容される付加塩若しくは溶媒和物であって、
式中、
ＲＡは、ピリジン−２−イル、ピリジン−３−イル、ピリジン−４−イル、ピリダジン−３−イル、ピリミジン−４−イル、ピリミジン−５−イル、及びピラジン−２−イルからなる群から選択されるヘテロアリールラジカルであり、これらはそれぞれ、ハロ；シアノ；１個、２個、若しくは３個の独立して選択されるハロ置換基で任意選択的に置換されているＣ１〜４アルキル；
−Ｃ（Ｏ）ＮＲａＲａａ；ＮＲａＲａａ；及び１個、２個、若しくは３個の独立して選択されるハロ置換基で任意選択的に置換されているＣ１〜４アルキルオキシからなる群からそれぞれ独立して選択される１個、２個、又は３個の置換基で任意選択的に置換され得、Ｒａ及びＲａａは、それぞれ独立して、水素、及び１個、２個、又は３個の独立して選択されるハロ置換基で任意選択的に置換されているＣ１〜４アルキルからなる群から選択され；
ＬＡは、共有結合、−ＣＨ２−、−Ｏ−、−ＯＣＨ２−、−ＣＨ２Ｏ−、−ＮＨ−、−Ｎ（ＣＨ３）−、−ＮＨＣＨ２−、及び−ＣＨ２ＮＨ−からなる群から選択され；
ｘは、０を表し；
Ｒは、Ｈ又はＣＨ３であり；
ＲＢは、式（ｂ−１）、（ｂ−２）、又は（ｂ−３）
【化２】
2021527659.tif 000260
の二環式ラジカルであり、
式中、
Ｒ１及びＲ２は、それぞれ、水素、フルオロ、及びメチルからなる群から選択され；
Ｘ１、Ｘ２、及びＸ３は、それぞれ、ＣＨ、ＣＦ、又はＮを表し；
−Ｙ１−Ｙ２−は、
−Ｏ（ＣＨ２）ｍＯ−  （ｃ−１）；
−Ｏ（ＣＨ２）ｎ−  （ｃ−２）；−（ＣＨ２）ｎＯ−  （ｃ−３）；
−Ｏ（ＣＨ２）ｐＮＲ３−  （ｃ−４）；−ＮＲ３（ＣＨ２）ｐＯ−  （ｃ−５）；
−Ｏ（ＣＨ２）（ＣＯ）ＮＲ３−  （ｃ−６）；−ＮＲ３（ＣＯ）（ＣＨ２）Ｏ−  （ｃ−７）；
−（ＣＨ２）ｎＮＲ３（ＣＯ）−  （ｃ−８）；−（ＣＯ）ＮＲ３（ＣＨ２）ｎ−  （ｃ−９）；
及び
−Ｎ＝ＣＨ（ＣＯ）ＮＲ３−  （ｃ−１０）
からなる群から選択される二価ラジカルを形成し、
式中、
ｍは、１又は２であり；
ｎ及びｐは、それぞれ独立して、２又は３を表し；
各Ｒ３は、独立して、Ｈ又はＣ１〜４アルキルであり；
ＲＣは、フルオロ、メチル、ヒドロキシ、メトキシ、トリフルオロメチル、及びジフルオロメチルからなる群から選択され；
ＲＤは、水素、フルオロ、メチル、ヒドロキシ、メトキシ、トリフルオロメチル、及びジフルオロメチルからなる群から選択され；
ｙは、０、１、又は２を表すが；
但し、
ａ）ＲＣは、ピペリジンジイル環又はピロリジンジイル環の窒素原子に隣接する炭素原子に存在する場合には、ヒドロキシ又はメトキシではなく；
ｂ）ＲＣ又はＲＤは、ＲＣが、Ｃ−ＲＤに隣接する炭素原子に存在する場合には、ヒドロキシ又はメトキシから同時に選択され得ず；
ｃ）ＲＤは、ＬＡが、−Ｏ−、−ＯＣＨ２−、−ＣＨ２Ｏ−、−ＮＨ−、−Ｎ（ＣＨ３）−、−ＮＨ（ＣＨ２）−、又は−（ＣＨ２）ＮＨ−である場合には、ヒドロキシ又はメトキシではなく、
化合物、又はその互変異性体若しくは立体異性形態、又はこれらの薬学的に許容される付加塩若しくは溶媒和物。
【請求項２】
ＲＡは、ピリジン−４−イル、ピリミジン−４−イル、及びピラジン−２−イルからなる群から選択されるヘテロアリールラジカルであり、これらはそれぞれ、ハロ；
１個、２個、若しくは３個の独立して選択されるハロ置換基で任意選択的に置換されているＣ１〜４アルキル；及び１個、２個、若しくは３個の独立して選択されるハロ置換基で任意選択的に置換されているＣ１〜４アルキルオキシからなる群からそれぞれ独立して選択される１個、２個、又は３個の置換基で任意選択的に置換され得る、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
ＬＡは、共有結合、−ＣＨ２−、−Ｏ−、−ＯＣＨ２−、−ＣＨ２Ｏ−、及び−ＮＨＣＨ２−からなる群から選択される、請求項１又は２に記載の化合物。
【請求項４】
ＲＢは、式（ｂ−１）又は（ｂ−２）の二環式ラジカルである、請求項１〜３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項５】
ＲＢは、式（ｂ−１）又は（ｂ−２）の二環式ラジカルであり、Ｒ１は、水素、フルオロ、及びメチルからなる群から選択され；Ｒ２は、水素であり；Ｘ１は、Ｎ又はＣＨであり；Ｘ２は、ＣＨである、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項６】
ＲＢは、式（ｂ−１）又は（ｂ−２）の二環式ラジカルであり、Ｒ１は、水素、フルオロ、及びメチルからなる群から選択され；Ｒ２は、水素であり；Ｘ１は、Ｎ又はＣＨであり；Ｘ２は、ＣＨであり；−Ｙ１−Ｙ２−は、（ｃ−１）、（ｃ−２）、（ｃ−４）、（ｃ−６）、及び（ｃ−９）からなる群から選択される二価ラジカルを形成し、ｍは、２であり；ｎは、２又は３であり；ｐは、２である、請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項７】
ＲＢは、
【化３】
2021527659.tif 000261
からなる群から選択される、請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項８】
ＲＤは、水素、フルオロ、及びメチルからなる群から選択され；ｙは、０又は１を表す、請求項１〜７のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項９】
請求項１〜８のいずれか一項に記載の化合物の予防上有効な量又は治療上有効な量と、薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物。
【請求項１０】
医薬組成物を調製する方法であって、薬学的に許容される担体と、請求項１〜８のいずれか一項に記載の化合物の予防上有効な量又は治療上有効な量とを混合することを含む方法。
【請求項１１】
薬剤としての使用のための、請求項１〜８のいずれか一項に記載の化合物又は請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
タウオパチー、特に、アルツハイマー病、進行性核上麻痺、ダウン症候群、前頭側頭葉認知症、パーキンソニズム−１７を伴う前頭側頭型認知症、ピック病、大脳皮質基底核変性症、及び嗜銀顆粒病からなる群から選択されるタウオパチー；又はタウ病態を伴う神経変性疾患、特に、Ｃ９ＯＲＦ７２変異により引き起こされる筋萎縮性側索硬化症若しくは前頭側頭葉認知症から選択される神経変性疾患の処置又は予防での使用のための、請求項１〜８のいずれか一項に記載の化合物又は請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
タウオパチー、特に、アルツハイマー病、進行性核上麻痺、ダウン症候群、前頭側頭葉認知症、パーキンソニズム−１７を伴う前頭側頭型認知症、ピック病、大脳皮質基底核変性症、及び嗜銀顆粒病からなる群から選択されるタウオパチー；又はタウ病態を伴う神経変性疾患、特に、Ｃ９ＯＲＦ７２変異により引き起こされる筋萎縮性側索硬化症若しくは前頭側頭葉認知症から選択される神経変性疾患からなる群から選択される障害を予防するか又は処置する方法であって、請求項１〜８のいずれか一項に記載の化合物又は請求項９に記載の医薬組成物の予防上有効な量又は治療上有効な量を、必要とする対象に投与することを含む方法。
【請求項１４】
Ｏ−ＧｌｃＮＡｃ加水分解酵素を阻害する方法であって、請求項１〜８のいずれか一項に記載の化合物又は請求項９に記載の医薬組成物の予防上有効な量又は治療上有効な量を、必要とする対象に投与することを含む方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、式（Ｉ）
【化１】
2021527659.tif 000002
（式中、ラジカルは、本明細書に定義されているとおりである）で示される構造を有するＯ−ＧｌｃＮＡｃ加水分解酵素（ＯＧＡ）阻害剤に関する。本発明はまた、そのような化合物を含む医薬組成物、そのような化合物及び組成物を調製する方法、並びにＯＧＡの阻害が有益である障害（例えばタウオパチー、特にアルツハイマー病又は進行性核上性麻痺；及びタウ病変を伴う神経変性疾患、特にＣ９ＯＲＦ７２の変異を原因とする筋萎縮性側索硬化症又は前頭側頭葉型認知症）の予防及び処置するためのそのような化合物及び組成物の使用も対象とする。
【背景技術】
【０００２】
Ｏ−ＧｌｃＮＡｃ化とは、Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミン残基がセリン残基及びスレオニン残基のヒドロキシル基に転移してＯ−ＧｌｃＮＡｃ化タンパク質が生じるタンパク質の可逆的改変のことである。１０００種を超えるそのような標的タンパク質が、真核生物の細胞基質及び核の両方で同定されている。この改変は、転写、細胞骨格プロセス、細胞周期、プロテアソーム分解、及び受容体シグナル伝達を含む広範な細胞プロセスを調節すると考えられている。
【０００３】
Ｏ−ＧｌｃＮＡｃ転移酵素（ＯＧＴ）及びＯ−ＧｌｃＮＡｃ加水分解酵素（ＯＧＡ）は、Ｏ−ＧｌｃＮＡｃを標的タンパク質に付加する（ＯＧＴ）か又は標的タンパク質から除去（ＯＧＡ）すると説明されているわずか２種のタンパク質である。ＯＧＡは、１９９４年に初めて脾臓標本から精製されており、１９９８年に髄膜腫により発現される抗原として同定されてＭＧＥＡ５と命名されており、細胞の細胞基質コンパートメントにおいて単量体として９１６個のアミノ（１０２９１５ダルトン）からなる。これは、タンパク質の輸送及び分泌に重要であるＥＲ関連の及びゴルジ体関連のグリコシル化プロセスとは区別されるべきであり、ＯＧＡとは異なり至適ｐＨが酸性であるが、ＯＧＡは中性ｐＨで最高活性を示す。
【０００４】
ＯＧＡの、２個のアスパラギン酸触媒中心を有する触媒ドメインは、２個の柔軟なドメインと隣接している酵素のＮ末端部に存在する。Ｃ−末端部は、ストークドメインが先行する推定上のＨＡＴ（ヒストンアセチル転移酵素ドメイン）からなる。ＨＡＴドメインが触媒的に活性であることは、今のところ証明されていない。
【０００５】
Ｏ−ＧｌｃＮＡｃ化タンパク質並びにＯＧＴ及びＯＧＡ自体は、特に脳及び神経細胞で豊富にあり、このことは、この改変が中枢神経系において重要な役割を果たすことを示唆する。実際、研究により、Ｏ−ＧｌｃＮＡｃ化は、神経細胞伝達、記憶形成、及び神経変性疾患の一因となる重要な調節機序を表すことが確認された。さらに、いくつかの動物モデルにおいて、ＯＧＴは胚発生に必須であり、ｏｇｔ欠損マウスは胚性致死性であることが示されている。ＯＧＡも哺乳動物の発達に不可欠である。２つの独立した研究により、ＯＧＡホモ接合型欠損マウスが生後２４〜４８時間を超えて生存しないことが示されている。Ｏｇａが欠失すると、仔においてグリコーゲン動員が不足し、このため、ホモ接合型ノックアウト胎仔に由来するＭＥＦにおいてゲノム不安定性に関連する細胞周期停止が生じた。ヘテロ接合型動物は、成体になるまで生存したが、転写及び代謝の両方において変化を示した。
【０００６】
Ｏ−ＧｌｃＮＡｃの循環の撹乱は、糖尿病等の慢性の代謝性疾患及び癌に影響を及ぼすことが知られている。Ｏｇａのヘテロ接合性は、Ａｐｃ−／＋マウス癌モデルにおいて腸腫瘍発生を抑制し、Ｏｇａ遺伝子（ＭＧＥＡ５）は、ヒト糖尿病感受性遺伝子座であることが立証されている。
【０００７】
加えて、Ｏ−ＧｌｃＮＡｃ改変は、神経変性疾患の発症及び進行に関与するいくつかのタンパク質で同定されており、アルツハイマー病では、タウによる神経原線維変化（ＮＦＴ）タンパク質の形成についてＯ−ＧｌｃＮＡｃレベルの変化量間の相関性が示唆されている。加えて、パーキンソン病では、アルファ−シヌクレインのＯ−ＧｌｃＮＡｃ化が説明されている。
【０００８】
中枢神経系において、タウの６種のスプライスバリアントが説明されている。タウは、１７番染色体上でコードされており、中枢神経系で発現されるその最長のスプライスバリアント中において４４１個のアミノ酸からなる。これらのアイソフォームは、Ｎ−末端側の２個のインサート（エクソン２及び３）並びに微小管結合ドメイン内にあるエクソン１０が異なる。エクソン１０は、タウオパチーにおいて相当に興味深く、なぜならば、下記で説明するように、エクソン１０は、タウを凝集しやすくする多重変異を有するからである。タウタンパク質は、神経細胞の微小管細胞骨格に結合して安定化させ、これは、軸索コンパートメントに沿った細胞小器官の細胞内輸送の調節に重要である。そのため、タウは、軸索の形成及びその保全性の維持に重要な役割を果たす。加えて、樹状突起スパインの生理学における役割も示唆されている。
【０００９】
タウの凝集は、様々ないわゆるタウオパチー、例えばＰＳＰ（進行性核上性麻痺）、ダウン症候群（ＤＳ）、ＦＴＬＤ（前頭側頭葉型認知症）、ＦＴＤＰ−１７（パーキンソニズム−１７を伴う前頭側頭型認知症）、ピック病（ＰＤ）、ＣＢＤ（大脳皮質基底核変性症）、嗜銀顆粒病（ＡＧＤ）、及びＡＤ（アルツハイマー病）の根底にある原因の１つである。加えて、タウ病変は、Ｃ９ＯＲＦ７２の変異を原因とする筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）又はＦＴＬＤのような更なる神経変性疾患を伴う。これらの疾患では、タウは、過剰なリン酸化によって翻訳後に改変され、これにより、タウは、微小管から引き離されて凝集しやすくなると考えられる。Ｏ−ＧｌｃＮＡｃ残基を担持するセリン残基又はスレオニン残基は、リン酸化しにくいことから、タウのＯ−ＧｌｃＮＡｃ化は、リン酸化の程度を調節する。これは、効果的にタウを微小管から離れにくくし、神経毒性の濃縮体（最終的に神経毒性及び神経細胞の細胞死に至る）への凝集を低減する。この機序は、神経細胞から放出されるタウ凝集体が脳内の相互連結した回路に沿って細胞から細胞へと拡散することも低減し得、この拡散は、最近では、タウが関連する認知症において病状を促進すると言われている。実際、ＡＤ患者の脳から単離された過リン酸化タウは、Ｏ−ＧｌｃＮＡｃ化のレベルの有意な低下を示した。
【００１０】
ＪＮＰＬ３タウトランスジェニックマウスに投与したＯＧＡ阻害剤は、ＮＦＴの形成及び神経細胞脱落を低減することに成功し、明らかな有害作用はなかった。この観察は、ＦＴＤに見られる変異型タウの発現を誘導し得る別のタウオパチーの齧歯類モデル（ｔｇ４５１０）において確認されている。ＯＧＡの低分子阻害剤の投与は、タウ凝集の形成の低減に有効であり、皮質萎縮及び脳室拡大を減弱させた。
【００１１】
さらに、アミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）のＯ−ＧｌｃＮＡｃ化は、非アミロイド形成経路によるプロセシングに有利に作用し、可溶性のＡＰＰ断片を産生し、ＡＤ関連のアミロイド−ベータ（Ａβ）を形成する開裂を回避する。
【００１２】
ＯＧＡの阻害によりタウのＯ−ＧｌｃＮＡｃ化を維持することは、上記の神経変性疾患におけるタウのリン酸化及びタウ凝集を低減し、それにより神経変性タウオパチー疾患の進行を減弱させるか又は停止するための有望なアプローチを示す。
【００１３】
国際公開第２０１２／１１７２１９号パンフレット（Ｓｕｍｍｉｔ  Ｃｏｒｐ．ｐｌｃ．、２０１２年９月７日に公開）は、ＯＧＡ阻害剤としてＮ−［［５−（ヒドロキシメチル）ピロリジン−２−イル］メチル］アルキルアミド及びＮ−アルキル−２−［５−（ヒドロキシメチル）ピロリジン−２−イル］アセトアミド誘導体を説明している。
【００１４】
国際公開第２０１４／１５９２３４号パンフレット（Ｍｅｒｃｋ  Ｐａｔｅｎｔ  ＧＭＢＨ、２０１４年１０月２日公開）は、主に、１位でアセトアミド−チアゾリルメチル置換基又はアセトアミドオキサゾリルメチル置換基で置換された４−フェニル又はベンジル−ピペリジン及びピペラジン化合物、並びに化合物Ｎ−［５−［（３−フェニル−１−ピペリジル）メチル］チアゾール−２−イル］アセトアミドを開示しており；
国際公開第２０１６／０３００４４３号パンフレット（Ａｓｃｅｎｅｕｒｏｎ  Ｓ．Ａ．、２０１６年３月３日に公開）、同第２０１７／１４４６３３号パンフレット、及び同第２０１７／０１１４６３９号パンフレット（Ａｓｃｅｎｅｕｒｏｎ  Ｓ．Ａ．、２０１７年８月３１日に公開）は、ＯＧＡ阻害剤として１，４−二置換ピペリジン又はピペラジンを開示しており；
国際公開第２０１７／１４４６３７号パンフレット（Ａｓｃｅｎｅｕｒｏｎ  Ｓ．Ａ、２０１７年８月３１日に公開）は、ＯＧＡ阻害剤として、より具体的な４−置換１−［１−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）エチル］−ピペラジン；１−［１−（２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イル）エチル］−；１−［１−（２，３−ジヒドロベンゾフラン−６−イル）エチル］−；及び１−［１−（２，３−ジヒドロ−１，４−ベンゾジオキシン−６−イル）エチル］−ピペラジン誘導体を開示しており；
国際公開第２０１７／１０６２５４号パンフレット（Ｍｅｒｃｋ  Ｓｈａｒｐ  ＆  Ｄｏｈｍｅ  Ｃｏｒｐ．）は、ＯＧＡ阻害剤として置換Ｎ−［５−［（４−メチレン−１−ピペリジル）メチル］チアゾール−２−イル］アセトアミド化合物を説明している。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１５】
例えば、改善された効力、良好なバイオアベイラビリティ、薬物動態及び脳浸透性、並びに／又はより良好な毒性プロファイルを有する、特性の有利なバランスを有するＯＧＡ阻害剤化合物が依然として必要とされている。従って、これらの問題の少なくともいくつかを克服する化合物を提供することが本発明の目的である。
【課題を解決するための手段】
【００１６】
本発明は、式（Ｉ）
【化２】
2021527659.tif 000003
の化合物、並びにその互変異性体及び立体異性形態、並びにこれらの薬学的に許容される塩及び溶媒和物であって、
式中、
ＲＡは、ピリジン−２−イル、ピリジン−３−イル、ピリジン−４−イル、ピリダジン−３−イル、ピリミジン−４−イル、ピリミジン−５−イル、及びピラジン−２−イルからなる群から選択されるヘテロアリールラジカルであり、これらはそれぞれ、ハロ；シアノ；１個、２個、若しくは３個の独立して選択されるハロ置換基で任意選択的に置換されているＣ１〜４アルキル；
−Ｃ（Ｏ）ＮＲａＲａａ；ＮＲａＲａａ；及び１個、２個、若しくは３個の独立して選択されるハロ置換基で任意選択的に置換されているＣ１〜４アルキルオキシからなる群からそれぞれ独立して選択される１個、２個、又は３個の置換基で任意選択的に置換され得、Ｒａ及びＲａａは、それぞれ独立して、水素、及び１個、２個、又は３個の独立して選択されるハロ置換基で任意選択的に置換されているＣ１〜４アルキルからなる群から選択され；
ＬＡは、共有結合、−ＣＨ２−、−Ｏ−、−ＯＣＨ２−、−ＣＨ２Ｏ−、−ＮＨ−、−Ｎ（ＣＨ３）−、−ＮＨＣＨ２−、及び−ＣＨ２ＮＨ−からなる群から選択され；
ｘは、０を表し；
Ｒは、Ｈ又はＣＨ３であり；
ＲＢは、式（ｂ−１）、（ｂ−２）、又は（ｂ−３）
【化３】
2021527659.tif 000004
の二環式ラジカルであり、
式中、
Ｒ１及びＲ２は、それぞれ、水素、フルオロ、及びメチルからなる群から選択され；
Ｘ１、Ｘ２、及びＸ３は、それぞれ、ＣＨ、ＣＦ、又はＮを表し；
−Ｙ１−Ｙ２−は、
−Ｏ（ＣＨ２）ｍＯ−  （ｃ−１）；
−Ｏ（ＣＨ２）ｎ−  （ｃ−２）；−（ＣＨ２）ｎＯ−  （ｃ−３）；
−Ｏ（ＣＨ２）ｐＮＲ３−  （ｃ−４）；−ＮＲ３（ＣＨ２）ｐＯ−  （ｃ−５）；
−Ｏ（ＣＨ２）（ＣＯ）ＮＲ３−  （ｃ−６）；−ＮＲ３（ＣＯ）（ＣＨ２）Ｏ−  （ｃ−７）；
−（ＣＨ２）ｎＮＲ３（ＣＯ）−  （ｃ−８）；−（ＣＯ）ＮＲ３（ＣＨ２）ｎ−−  （ｃ−９）；
及び
−Ｎ＝ＣＨ（ＣＯ）ＮＲ３−  （ｃ−１０）
からなる群から選択される二価ラジカルを形成し、式中、
ｍは、１又は２であり；
ｎ及びｐは、それぞれ独立して、２又は３を表し；
各Ｒ３は、独立して、Ｈ又はＣ１〜４アルキルであり；
ＲＣは、フルオロ、メチル、ヒドロキシ、メトキシ、トリフルオロメチル、及びジフルオロメチルからなる群から選択され；
ＲＤは、水素、フルオロ、メチル、ヒドロキシ、メトキシ、トリフルオロメチル、及びジフルオロメチルからなる群から選択され；
ｙは、０、１、又は２を表すが；
但し、
ａ）ＲＣは、ピペリジンジイル環又はピロリジンジイル環の窒素原子に隣接する炭素原子に存在する場合には、ヒドロキシ又はメトキシではなく；
ｂ）ＲＣ又はＲＤは、ＲＣが、Ｃ−ＲＤに隣接する炭素原子に存在する場合には、ヒドロキシ又はメトキシから同時に選択され得ず；
ｃ）ＲＤは、ＬＡが、−Ｏ−、−ＯＣＨ２−、−ＣＨ２Ｏ−、−ＮＨ−、
−Ｎ（ＣＨ３）−、−ＮＨ（ＣＨ２）−、又は−（ＣＨ２）ＮＨ−である場合には、ヒドロキシ又はメトキシではなく、
化合物、並びにその互変異性体及び立体異性形態、並びにこれらの薬学的に許容される塩及び溶媒和物を対象とする。
【００１７】
本発明の実例は、薬学的に許容される担体と、上記化合物の内のいずれかとを含む医薬組成物である。本発明の一例は、上記化合物の内のいずれかと、薬学的に許容される担体とを混合することによって製造される医薬組成物である。本発明を例示するものは、医薬組成物を製造する方法であって、上記化合物の内のいずれかと、薬学的に許容される担体とを混合することを含む方法である。
【００１８】
本発明を例示するものは、Ｏ−ＧｌｃＮＡｃ加水分解酵素（ＯＧＡ）の阻害により媒介される障害を予防するか又は処置する方法であって、必要とする対象に、上記の化合物又は医薬組成物の内のいずれかの治療上有効な量を投与することを含む方法である。
【００１９】
本発明をさらに例示するものは、ＯＧＡを阻害する方法であって、必要とする対象に、上記の化合物又は医薬組成物の内のいずれかの予防上有効な量又は治療上有効な量を投与することを含む方法である。
【００２０】
本発明の一例は、タウオパチー（特に、アルツハイマー病、進行性核上麻痺、ダウン症候群、前頭側頭型認知症、パーキンソニズム−１７を伴う前頭側頭型認知症、ピック病、大脳皮質基底核変性症、及び嗜銀顆粒病からなる群から選択されるタウオパチー）；又はタウ病変を伴う神経変性疾患（特に、Ｃ９ＯＲＦ７２変異により引き起こされる筋萎縮性側索硬化症若しくは前頭側頭型認知症から選択される神経変性疾患）から選択される障害を予防するか又は処置する方法であって、必要とする対象に、上記の化合物又は医薬組成物の内のいずれかの予防上有効な量又は治療上有効な量を投与することを含む方法である。
【００２１】
本発明の別の例は、必要とする対象での、タウオパチー（特に、アルツハイマー病、進行性核上麻痺、ダウン症候群、前頭側頭型認知症、パーキンソニズム−１７を伴う前頭側頭型認知症、ピック病、大脳皮質基底核変性症、及び嗜銀顆粒病からなる群から選択されるタウオパチー）；又はタウ病変を伴う神経変性疾患（特に、Ｃ９ＯＲＦ７２変異により引き起こされる筋萎縮性側索硬化症若しくは前頭側頭型認知症から選択される神経変性疾患）の予防又は処置における使用のための上記化合物の内のいずれかである。
【発明を実施するための形態】
【００２２】
本発明は、本明細書において上記に定義したとおりの式（Ｉ）の化合物、並びにその薬学的に許容される付加塩及び溶媒和物を対象とする。式（Ｉ）の化合物は、Ｏ−ＧｌｃＮＡｃ加水分解酵素（ＯＧＡ）の阻害剤であり、タウオパチー（特に、アルツハイマー病、進行性核上麻痺、ダウン症候群、前頭側頭型認知症、パーキンソニズム−１７を伴う前頭側頭型認知症、ピック病、大脳皮質基底核変性症、及び嗜銀顆粒病からなる群から選択されるタウオパチー）の予防若しくは処置に有用であり得るか；又はタウ病変を伴う神経変性疾患（特に、Ｃ９ＯＲＦ７２変異により引き起こされる筋萎縮性側索硬化症若しくは前頭側頭型認知症から選択される神経変性疾患）の予防若しくは処置に有用であり得る。
【００２３】
特定の実施形態では、本発明は、本明細書で言及されている式（Ｉ）の化合物、並びにその互変異性体及び立体異性形態、並びにこれらの薬学的に許容される塩及び溶媒和物あって、
ＲＡは、３−ピリジニル、ピリジン−４−イル、ピリミジン−４−イル、及びピラジン−２−イルからなる群から選択されるヘテロアリールラジカルであり、これらはそれぞれ、ハロ；１個、２個、若しくは３個の独立して選択されるハロ置換基で任意選択的に置換されているＣ１〜４アルキル；及び１個、２個、若しくは３個の独立して選択されるハロ置換基で任意選択的に置換されているＣ１〜４アルキルオキシからなる群からそれぞれ独立して選択される１個、２個、又は３個の置換基で任意選択的に置換され得る、
化合物、並びにその互変異性体及び立体異性形態、並びにこれらの薬学的に許容される塩及び溶媒和物を対象とする。
【００２４】
更なる実施形態では、本発明は、本明細書で言及されている式（Ｉ）の化合物、並びにその互変異性体及び立体異性形態、並びにこれらの薬学的に許容される塩及び溶媒和物であって、
ＲＡは、ピリジン−４−イル、ピリミジン−４−イル、及びピラジン−２−イルからなる群から選択されるヘテロアリールラジカルであり、これらはそれぞれ、ハロ；１個、２個、若しくは３個の独立して選択されるハロ置換基で任意選択的に置換されているＣ１〜４アルキル；
及び１個、２個、若しくは３個の独立して選択されるハロ置換基で任意選択的に置換されているＣ１〜４アルキルオキシからなる群からそれぞれ独立して選択される１個、２個、又は３個の置換基で任意選択的に置換され得る、
化合物、並びにその互変異性体及び立体異性形態、並びにこれらの薬学的に許容される塩及び溶媒和物を対象とする。
【００２５】
更なる実施形態では、本発明は、本明細書で言及されている式（Ｉ）の化合物、並びにその互変異性体及び立体異性形態、並びにこれらの薬学的に許容される塩及び溶媒和物であって、
ＲＡは、ピリジン−４−イル、ピリミジン−４−イル、及びピラジン−２−イルからなる群から選択されるヘテロアリールラジカルであり、これらはそれぞれ、１個、２個、若しくは３個の独立して選択されるハロ置換基で任意選択的に置換されているＣ１〜４アルキル；
及び１個、２個、若しくは３個の独立して選択されるハロ置換基で任意選択的に置換されているＣ１〜４アルキルオキシからなる群からそれぞれ独立して選択される１個、２個、又は３個の置換基で任意選択的に置換され得る、
化合物、並びにその互変異性体及び立体異性形態、並びにこれらの薬学的に許容される塩及び溶媒和物を対象とする。
【００２６】
追加の実施形態では、本発明は、本明細書で言及されている式（Ｉ）の化合物、並びにその互変異性体及び立体異性形態であって、
ＲＡは、ピリジン−４−イル又はピリミジン−４−イルであり、これらはそれぞれ、１個、２個、若しくは３個の独立して選択されるハロ置換基で任意選択的に置換されているＣ１〜４アルキル；及び１個、２個、若しくは３個の独立して選択されるハロ置換基で任意選択的に置換されているＣ１〜４アルキルオキシからなる群からそれぞれ独立して選択される１個、２個、又は３個の置換基で任意選択的に置換され得る、化合物、並びにその互変異性体及び立体異性形態を対象とする。
【００２７】
追加の実施形態では、本発明は、本明細書で言及されている式（Ｉ）の化合物、並びにその互変異性体及び立体異性形態、並びにこれらの薬学的に許容される塩及び溶媒和物であって、
ＲＡは、３−ピリジニル及びピリジン−４−イルからなる群から選択されるヘテロアリールラジカルであり、これらはそれぞれ、１個又は２個の独立して選択されるＣ１〜４アルキル置換基で置換されている、
化合物、並びにその互変異性体及び立体異性形態、並びにこれらの薬学的に許容される塩及び溶媒和物を対象とする。
【００２８】
更なる実施形態では、本発明は、本明細書で言及されている式（Ｉ）の化合物、並びにその互変異性体及び立体異性形態であって、
ＬＡは、共有結合、−ＣＨ２−、−Ｏ−、−ＯＣＨ２−、−ＣＨ２Ｏ−、及び−ＮＨＣＨ２−からなる群から選択される、
化合物、並びにその互変異性体及び立体異性形態を対象とする。
【００２９】
更なる実施形態では、本発明は、本明細書で言及されている式（Ｉ）の化合物、並びにその互変異性体及び立体異性形態であって、
ＬＡは、共有結合、−ＣＨ２−、−Ｏ−、−ＯＣＨ２−、及び−ＣＨ２Ｏ−からなる群から選択される、化合物、並びにその互変異性体及び立体異性形態を対象とする。
【００３０】
更なる実施形態では、本発明は、本明細書で言及されている式（Ｉ）の化合物、並びにその互変異性体及び立体異性形態であって、
ＬＡは、−ＣＨ２−、−Ｏ−、−ＯＣＨ２−、−ＣＨ２Ｏ−、−ＮＨ−、−Ｎ（ＣＨ３）−、−ＮＨＣＨ２−、及び−ＣＨ２ＮＨ−からなる群から選択される、
化合物、並びにその互変異性体及び立体異性形態を対象とする。
【００３１】
別の実施形態では、本発明は、本明細書で言及されている式（Ｉ）の化合物、並びにその互変異性体及び立体異性形態であって、ＬＡは、−ＣＨ２−、−Ｏ−、−ＯＣＨ２−、−ＣＨ２Ｏ−、及び−ＮＨＣＨ２−からなる群から選択される、化合物、並びにその互変異性体及び立体異性形態を対象とする。
【００３２】
更なる実施形態では、本発明は、本明細書で言及されている式（Ｉ）の化合物、並びにその互変異性体及び立体異性形態であって、
ＬＡは、−Ｏ−又は−ＯＣＨ２−である、化合物、並びにその互変異性体及び立体異性形態を対象とする。
【００３３】
さらに別の実施形態では、本発明は、本明細書で言及されている式（Ｉ）の化合物、並びにその互変異性体及び立体異性形態であって、ＲＢは、式（ｂ−１）又は（ｂ−２）の二環式ラジカルである、化合物、並びにその互変異性体及び立体異性形態を対象とする。
【００３４】
更なる実施形態では、本発明は、本明細書で言及されている式（Ｉ）の化合物、並びにその互変異性体及び立体異性形態であって、ＲＢは、式（ｂ−１）又は（ｂ−２）の二環式ラジカルであり、Ｒ１は、水素、フルオロ、及びメチルからなる群から選択され；Ｒ２は、水素であり；Ｘ１は、Ｎ又はＣＨであり；Ｘ２は、ＣＨである、化合物、並びにその互変異性体及び立体異性形態を対象とする。
【００３５】
別の実施形態では、本発明は、本明細書で言及されている式（Ｉ）の化合物、並びにその互変異性体及び立体異性形態であって、ＲＢは、式（ｂ−１）又は（ｂ−２）の二環式ラジカルであり、Ｒ１は、水素、フルオロ、及びメチルからなる群から選択され；Ｒ２は、水素であり；Ｘ１は、Ｎ又はＣＨであり；Ｘ２は、ＣＨであり；−Ｙ１−Ｙ２−は、（ｃ−１）、（ｃ−２）、（ｃ−４）、（ｃ−５）、（ｃ−６）、及び（ｃ−９）（特に、（ｃ−１）、（ｃ−２）、（ｃ−４）、（ｃ−５）、及び（ｃ−９））からなる群から選択される二価ラジカルを形成する、化合物、並びにその互変異性体及び立体異性形態を対象とする。
【００３６】
別の実施形態では、本発明は、本明細書で言及されている式（Ｉ）の化合物、並びにその互変異性体及び立体異性形態であって、ＲＢは、式（ｂ−１）又は（ｂ−２）の二環式ラジカルであり、Ｒ１は、水素、フルオロ、及びメチルからなる群から選択され；Ｒ２は、水素であり；Ｘ１は、Ｎ又はＣＨであり；Ｘ２は、ＣＨであり；−Ｙ１−Ｙ２−は、（ｃ−１）、（ｃ−２）、（ｃ−４）、及び（ｃ−６）からなる群から選択される二価ラジカルを形成する、化合物、並びにその互変異性体及び立体異性形態を対象とする。
【００３７】
更なる実施形態では、本発明は、式（Ｉ）の化合物、並びにその互変異性体及び立体異性形態であって、ＲＢは、式（ｂ−１）又は（ｂ−２）の二環式ラジカルであり、Ｒ１は、水素、フルオロ、及びメチルからなる群から選択され；Ｒ２は、水素であり；Ｘ１は、Ｎ又はＣＨであり；Ｘ２は、ＣＨであり；−Ｙ１−Ｙ２−は、（ｃ−１）、（ｃ−２）、（ｃ−４）、及び（ｃ−６）からなる群から選択される二価ラジカルを形成し、ｍは、２であり；ｎは、２又は３であり；ｐは、２である、化合物、並びにその互変異性体及び立体異性形態を対象とする。
【００３８】
更なる実施形態では、本発明は、式（Ｉ）の化合物、並びにその互変異性体及び立体異性形態であって、ＲＢは、式（ｂ−１）又は（ｂ−２）の二環式ラジカルであり、Ｒ１は、水素、フルオロ、及びメチルからなる群から選択され；Ｒ２は、水素であり；Ｘ１は、Ｎ又はＣＨであり；Ｘ２は、ＣＨであり；−Ｙ１−Ｙ２−は、（ｃ−１）、（ｃ−２）、（ｃ−４）、（ｃ−５）、及び（ｃ−９）からなる群から選択される二価ラジカルを形成し、ｍは、２であり；ｎは、２又は３であり；ｐは、２である、化合物、並びにその互変異性体及び立体異性形態を対象とする。
【００３９】
更なる実施形態では、本発明は、本明細書で言及されている式（Ｉ）の化合物、並びにその互変異性体及び立体異性形態であって、ＲＤは、水素、フルオロ及びメチルからなる群から選択される、化合物、並びにその互変異性体及び立体異性形態を対象とする。
【００４０】
更なる実施形態では、本発明は、本明細書で言及されている式（Ｉ）の化合物、並びにその互変異性体及び立体異性形態であって、ＲＤは、水素又はメチルである、化合物、並びにその互変異性体及び立体異性形態を対象とする。
【００４１】
更なる実施形態では、本発明は、本明細書で言及されている式（Ｉ）の化合物、並びにその互変異性体及び立体異性形態であって、ｙは、０又は１を表す、化合物、並びにその互変異性体及び立体異性形態を対象とする。
【００４２】
更なる実施形態では、本発明は、本明細書で言及されている式（Ｉ）の化合物、並びにその互変異性体及び立体異性形態であって、ｙは、０を表す、化合物、並びにその互変異性体及び立体異性形態を対象とする。
【００４３】
更なる実施形態では、本発明は、本明細書で言及されている式（Ｉ）の化合物、並びにその互変異性体及び立体異性形態であって、ｙは、１を表す、化合物、並びにその互変異性体及び立体異性形態を対象とする。
【００４４】
別の実施形態では、本発明は、本明細書で言及されている式（Ｉ）の化合物、並びにその互変異性体及び立体異性形態、並びにこれらの薬学的に許容される塩及び溶媒和物であって、ＲＡは、ピリジン−４−イル、
ピリミジン−４−イル、及びピラジン−２−イルからなる群から選択されるヘテロアリールラジカルであり、これらはそれぞれ、ハロ；１個、２個、若しくは３個の独立して選択されるハロ置換基で任意選択的に置換されているＣ１〜４アルキル；及び１個、２個、若しくは３個の独立して選択されるハロ置換基で任意選択的に置換されているＣ１〜４アルキルオキシからなる群からそれぞれ独立して選択される１個、２個、又は３個の置換基で任意選択的に置換され得、ＬＡは、共有結合、−ＣＨ２−、−Ｏ−、−ＯＣＨ２−、−ＣＨ２Ｏ−、及び−ＮＨＣＨ２−からなる群から選択され；
ｘは、０を表し；
Ｒは、Ｈ又はＣＨ３であり；
ＲＢは、式（ｂ−１）又は（ｂ−２）の二環式ラジカルであり、
Ｒ１及びＲ２は、それぞれ、水素、フルオロ、及びメチルからなる群から選択され；
Ｘ１、Ｘ２、及びＸ３は、それぞれ、ＣＨ、ＣＦ、又はＮを表し；
−Ｙ１−Ｙ２−は、（ｃ−１）、（ｃ−２）、（ｃ−４）、及び（ｃ−６）からなる群から選択される二価ラジカルを形成し、
ｍは、１又は２であり；
ｎ及びｐは、それぞれ独立して、２又は３を表し；
各Ｒ３は、独立して、Ｈ又はＣ１〜４アルキルであり；
ＲＣは、フルオロ又はメチルであり；
ＲＤは、水素、フルオロ、及びメチルからなる群から選択され；
ｙは、０又は１を表す、
化合物、並びにその互変異性体及び立体異性形態、並びにこれらの薬学的に許容される塩及び溶媒和物を対象とする。
【００４５】
更なる実施形態では、本発明は、式（Ｉ）の化合物、並びにその互変異性体及び立体異性形態であって、ＲＢは、
【化４】
2021527659.tif 000005
からなる群から選択される、化合物、並びにその互変異性体及び立体異性形態を対象とする。
【００４６】
更なる実施形態では、本発明は、式（Ｉ）の化合物、並びにその互変異性体及び立体異性形態であって、ＲＢは、
【化５】
2021527659.tif 000006
からなる群から選択される、化合物、並びにその互変異性体及び立体異性形態を対象とする。
【００４７】
更なる実施形態では、本発明は、式（Ｉ）の化合物、並びにその互変異性体及び立体異性形態であって、ＲＢは、
【化６】
2021527659.tif 000007
からなる群から選択される、化合物、並びにその互変異性体及び立体異性形態を対象とする。
【００４８】
更なる実施形態では、本発明は、式（Ｉ）の化合物、並びにその互変異性体及び立体異性形態であって、ＲＢは、
【化７】
2021527659.tif 000008
からなる群から選択される、化合物、並びにその互変異性体及び立体異性形態を対象とする。
【００４９】
定義
「ハロ」は、フルオロ、クロロ、及びブロモを示すものとし；「Ｃ１〜４アルキル」は、１個、２個、３個、又は４個の炭素原子をそれぞれ有する直鎖の又は分枝した飽和アルキル基（例えば、メチル、エチル、１−プロピル、２−プロピル、ブチル、１−メチル−プロピル、２−メチル−１−プロピル、１，１−ジメチルエチル、及び同類のもの）を指すものとし；「Ｃ１〜４アルキルオキシ」は、エーテルラジカルを指すものとし、ここで、
Ｃ１〜４アルキルは、上で定義されたとおりである。ＬＡを参照する場合、定義を左から右へと読むものとし、リンカーの左部分はＲＡに結合し、リンカーの右部分はピロリジンジイル環又はピペリジンジイル環と結合する。そのため、ＬＡが例えば−Ｏ−ＣＨ２−である場合には、ＲＡ−ＬＡ−はＲＡ−Ｏ−ＣＨ２−である。ＲＣが２回以上存在する場合には、可能な限り、ピロリジンジイル環又はピペリジンジイル環の同一の炭素原子で結合してもよいし、各事例が異なっていてもよい。
【００５０】
一般に、「置換された」という用語は、本発明で使用される場合は常に、別途示されない限り、又は文脈から明らかでない限り、「置換された」を使用する表現で示される原子又はラジカル上の１個又は複数個の水素（特に、１〜３個の水素、好ましくは１個又は２個の水素、より好ましくは１個の水素）が、示された群からの置換基の選択肢で置き換えられることを示すことを意味するが、但し、通常の原子価を超えず、置換の結果、化学的に安定な化合物（即ち、反応混合物からの有用な程度の純度への単離、及び治療剤への製剤化に十分に耐える堅牢さを有する化合物）が得られるものとする。
【００５１】
「対象」という用語は、本明細書で使用される場合、処置、観察、又は実験の目的物であるか又は目的物となった動物（好ましくは哺乳動物、最も好ましくはヒト）を指す。従って、本明細書で使用される場合、「対象」という用語は、患者、及び本明細書で定義されている疾患又は病態を発症するリスクのある無症候性の又は発症前の個体を包含する。
【００５２】
「治療上有効な量」という用語は、本明細書で使用される場合、研究者、獣医師、医師、又は他の臨床医によって求められている、組織系、動物、又はヒトにおける生物学的な又は医学的な反応（処置される疾患又は障害の症状の軽減を含む）を誘発する活性化合物又は医薬剤の量を意味する。「予防上有効な量」という用語は、本明細書で使用される場合、予防される疾患又は障害の発症の可能性を実質的に低減する活性化合物又は医薬剤の量を意味する。
【００５３】
本明細書で使用される場合、「組成物」という用語は、特定成分を特定量で含む生成物、及び特定成分の特定量での組み合わせから直接的に又は間接的に得られる任意の生成物を包含するように意図されている。
【００５４】
上記及び下記では、「式（Ｉ）の化合物」という用語は、その付加塩、溶媒和物、及び立体異性体を含むように意図されている。
【００５５】
「立体異性体」又は「立体化学的異性形態」という用語は、上記又は下記で互換的に使用される。
【００５６】
本発明は、式（Ｉ）の化合物の全ての立体異性体を、純粋な立体異性体又は２種以上の立体異性体の混合物として含む。
【００５７】
エナンチオマーとは、重ね合わせることができない互いの鏡像となっている立体異性体のことである。エナンチオマーの一対の１：１混合物は、ラセミ体又はラセミ混合物である。ジアステレオマー（又はジアステレオ異性体）は、エナンチオマーではない立体異性体であり、即ち、それらは鏡像の関係にない。化合物が二重結合を含む場合、置換基は、Ｅ配置又はＺ配置となり得る。化合物が二置換シクロアルキル基を含む場合、置換基は、シス配置又はトランス配置となり得る。従って、本発明は、エナンチオマー、ジアステレオマー、ラセミ体、Ｅ異性体、Ｚ異性体、シス異性体、トランス異性体、及びこれらの混合物を含む。
【００５８】
絶対配置は、カーン・インゴルド・プレローグシステム（Ｃａｈｎ−Ｉｎｇｏｌｄ−Ｐｒｅｌｏｇ  ｓｙｓｔｅｍ）に従って特定される。不斉原子における配置は、Ｒ又はＳで指定される。絶対配置が不明である分割化合物を、平面偏光を回転させる方向に応じて（＋）又は（−）で示し得る。
【００５９】
特定の立体異性体が同定される場合、これは、前記立体異性体が他の異性体を実質的に含まないことを意味しており、即ち、他の異性体を５０％未満、好ましくは２０％未満、より好ましくは１０％未満、より一層好ましくは５％未満、特に２％未満、最も好ましくは１％未満で伴うことを意味する。そのため、式（Ｉ）の化合物が例えば（Ｒ）と特定される場合には、これは、この化合物が（Ｓ）異性体を実質的に含まないことを意味しており、式（Ｉ）の化合物が例えばＥと特定される場合には、これは、この化合物がＺ異性体を実質的に含まないことを意味しており、式（Ｉ）の化合物が例えばシスと特定される場合には、これは、この化合物がトランス異性体を実質的に含まないことを意味する。
【００６０】
医薬で使用される場合、本発明の化合物の付加塩は、毒性のない「薬学的に許容される付加塩」を指す。しかしながら、他の塩が本発明に係る化合物又はその薬学的に許容される付加塩の調製で有用である場合がある。本化合物の好適な薬学的に許容される付加塩として、例えば、この化合物の溶液と、薬学的に許容される酸（例えば、塩酸、硫酸、フマル酸、マレイン酸、コハク酸、酢酸、安息香酸、クエン酸、酒石酸、炭酸、又はリン酸）の溶液とを混合することにより形成され得る酸付加塩が挙げられる。さらに、本発明の化合物が酸部分を有する場合には、その薬学的に許容される好適な付加塩として、アルカリ金属塩（例えば、ナトリウム塩又はカリウム塩）、アルカリ土類金属塩（例えば、カルシウム塩又はマグネシウム塩）、及び好適な有機リガンドと形成される塩（例えば第四級アンモニウム塩）が挙げられ得る。
【００６１】
薬学的に許容される付加塩の調製で使用され得る代表的な酸として下記が挙げられるが、これらに限定されない：酢酸、２，２−ジクロロ酢酸、アシル化アミノ酸、アジピン酸、アルギン酸、アスコルビン酸、Ｌ−アスパラギン酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、４−アセトアミド安息香酸、（＋）−樟脳酸、樟脳スルホン酸、カプリン酸、カプロン酸、カプリル酸、ケイ皮酸、クエン酸、シクラミン酸、エタン−１，２−ジスルホン酸、エタンスルホン酸、２−ヒドロキシ−エタンスルホン酸、ギ酸、フマル酸、ガラクタル酸、ゲンチジン酸、グルコヘプトン酸、Ｄ−グルコン酸、Ｄ−グルクロン酸、Ｌ−グルタミン酸、ベータ−オキソ−グルタル酸、グリコール酸、馬尿酸、臭化水素酸、塩酸、（＋）−Ｌ−乳酸、（±）−ＤＬ−乳酸、ラクトビオン酸、マレイン酸、（−）−Ｌ−リンゴ酸、マロン酸、（±）−ＤＬ−マンデル酸、メタンスルホン酸、ナフタレン−２−スルホン酸、ナフタレン−１，５−ジスルホン酸、１−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸、ニコチン酸、硝酸、オレイン酸、オロト酸、シュウ酸、パルミチン酸、パモ酸、リン酸、Ｌ−ピログルタミン酸、サリチル酸、４−アミノ−サリチル酸、セバシン酸、ステアリン酸、コハク酸、硫酸、タンニン酸、（＋）−Ｌ−酒石酸、チオシアン酸、
ｐ−トルエンスルホン酸、トリフルオロメチルスルホン酸、及びウンデシレン酸。薬学的に許容される付加塩の調製で使用され得る代表的な塩基として下記が挙げられるが、これらに限定されない：アンモニア、
Ｌ−アルギニン、ベネタミン、ベンザチン、水酸化カルシウム、コリン、ジメチルエタノール−アミン、ジエタノールアミン、ジエチルアミン、２−（ジエチルアミノ）−エタノール、エタノールアミン、エチレン−ジアミン、Ｎ−メチル−グルカミン、ヒドラバミン、１Ｈ−イミダゾール、Ｌ−リシン、水酸化マグネシウム、４−（２−ヒドロキシエチル）−モルホリン、ピペラジン、水酸化カリウム、１−（２−ヒドロキシエチル）−ピロリジン、第二級アミン、水酸化ナトリウム、トリエタノールアミン、トロメタミン、及び水酸化亜鉛。
【００６２】
化合物の名称は、Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ａｂｓｔｒａｃｔｓ  Ｓｅｒｖｉｃｅ（ＣＡＳ）により承認されている命名規則に従って生成されたか、又はＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｕｎｉｏｎ  ｏｆ  Ｐｕｒｅ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（ＩＵＰＡＣ）により承認されている命名規則に従って生成された。
【００６３】
最終化合物の調製
本発明に係る化合物を、一般に、それぞれが当業者に既知の一連の工程により調製し得る。具体的には、本化合物を、下記の合成方法に従って調製し得る。
【００６４】
式（Ｉ）の化合物を、当該技術分野で既知の分割手順に従って互いに分離され得るエナンチオマーのラセミ混合物の形態で合成し得る。式（Ｉ）のラセミ化合物を、好適なキラル酸との反応により、対応するジアステレオマー塩形態に変換し得る。その後、前記ジアステレオマー塩形態は、例えば選択的結晶化又は分別結晶化により分離され、エナンチオマーは、アルカリによりそれから遊離される。式（Ｉ）の化合物のエナンチオマー形態を分離する代替的な方法として、キラル固定相を使用する液体クロマトグラフィーが挙げられる。前記純粋な立体化学的異性形態を、適切な出発物質の対応する純粋な立体化学的異性形態からも誘導し得るが、但し、この反応は立体特異的に起こるものとする。
【００６５】
実験手順１
式（Ｉ−ａ）の最終化合物を、反応スキーム（１）に従って式（ＩＩ）の中間体化合物と式（ＸＶ）の化合物とを反応させることにより調製し得る。この反応を、例えば１時間又は２４時間にわたり、熱的条件（例えば、０℃、又は室温、又は１４０℃）下にて、好適な反応不活性溶媒（例えば、ジクロロメタン等）、金属水素化物（例えば、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム、シアノ水素化ホウ素ナトリウム、又は水素化ホウ素ナトリウム等）中で実施し、好適な塩基（例えば、トリエチルアミン等）及び／又はルイス酸（例えば、チタンテトライソプロポキシド、若しくは四塩化チタン等）の存在を必要とする場合もある。反応スキーム（１）において、全ての変数は、式（Ｉ）のように定義されている。
【化８】
2021527659.tif 000009
【００６６】
実験手順２
加えて、式（Ｉ−ａ）の最終化合物を、反応スキーム２に従って式（ＩＩ）の中間体化合物と式（ＸＶＩ）の化合物とを反応させることにより調製し得る。この反応を、例えば１時間又は２４時間にわたり、熱的条件（例えば、０℃、又は室温、又は７５℃）下にて、好適な反応不活性溶媒（例えば、アセトニトリル等）、好適な塩基（例えば、トリエチルアミン又はジイソプロピルエチルアミン等）中で実施する。反応スキーム（２）において、全ての変数は、式（Ｉ）のように定義されており、ハロは、クロロ、ブロモ、又はヨードである。
【化９】
2021527659.tif 000010
【００６７】
実験手順３
加えて、式（Ｉ）（式中、Ｒは、ＣＨ３である）の最終化合物を、本明細書では（Ｉ−ｂ）と称し、反応スキーム（３）に従って、式（ＩＩ）の中間化合物と式（ＸＶＩＩ）の化合物とを反応させ、続いて、形成されたイミン誘導体と式（ＸＶＩＩＩ）の中間化合物との反応により調製し得る。この反応を、例えば１時間又は２４時間にわたり、熱的条件（例えば、０℃又は室温）下にて、好適な反応不活性溶媒（例えば、無水ジクロロメタン等）、ルイス酸（例えば、チタンテトライソプロポキシド又は四塩化チタン等）中で実施する。反応スキーム（３）において、全ての変数は、式（Ｉ）のように定義されており、ハロは、クロロ、ブロモ、又はヨードである。
【化１０】
2021527659.tif 000011
【００６８】
実験手順４
加えて、式（Ｉ）（式中、ＬＡは、−ＮＨ−ＣＨ２−である）の最終化合物を、本明細書では（Ｉ−ｃ）と称し、反応スキーム（４）に従って式（ＩＩＩ）の中間化合物と式（Ｖ）の化合物とを反応させることにより調製し得る。この反応を、例えば４時間又は２４時間にわたり、熱的条件（例えば、１００℃）下にて、パラジウム触媒（例えば、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）等）、リガンド（例えば、２−ジシクロヘキシルホスフィノ−２’−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）ビフェニル等）、塩基（例えば、ｔｅｒｔ−ブトキシドナトリウム等）、好適な反応不活性溶媒（例えば、無水１，４−ジオキサン等）の存在下で実施する。反応スキーム（４）において、全ての変数は、式（Ｉ）のように定義されており、ハロは、クロロ、ブロモ、又はヨードである。
【化１１】
2021527659.tif 000012
【００６９】
実験手順５
式（ＩＩ）の中間化合物を、反応スキーム（５）に従って式（ＩＶ）の中間化合物の保護基を切断して調製し得る。反応スキーム（５）において、全ての変数は、式（Ｉ）のように定義されており、ＰＧは、窒素官能基の好適な保護基（例えば、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）、エトキシカルボニル、ベンジル、ベンジルオキシカルボニル（Ｃｂｚ）等）である。そのような保護基の除去に好適な方法は、当業者に広く知られており、下記を含むが、これらに限定されない：Ｂｏｃ脱保護：反応不活性溶媒（例えば、ジクロロメタン等）中におけるプロトン酸（例えば、トリフルオロ酢酸等）による処理；エトキシカルボニル脱保護：反応不活性溶媒（例えば、含水テトラヒドロフラン等）中における強塩基（例えば、水酸化ナトリウム等）による処理；ベンジル脱保護：反応不活性溶媒（例えば、エタノール等）中における好適な触媒（例えば、パラジウム炭素等）の存在下での触媒水素化；ベンジルオキシカルボニル脱保護：反応不活性溶媒（例えば、エタノール等）中における好適な触媒（例えば、パラジウム炭素等）の存在下での触媒水素化。
【化１２】
2021527659.tif 000013
【００７０】
実験手順６
式（ＩＶ−ａ）の中間体化合物を、反応スキーム（６）に従う式（Ｖ）のハロ化合物と式（ＶＩ）の有機亜鉛化合物との「根岸カップリング」反応により調製し得る。この反応を、例えば１時間にわたり、熱的条件（例えば、室温等）下にて、好適な反応不活性溶媒（例えばテトラヒドロフラン等）、及び好適な触媒（例えば、Ｐｄ（ＯＡｃ）２等）、遷移金属に対する好適なリガンド（例えば、２−ジシクロヘキシルホスフィノ−２’，６’−ジイソプロポキシビフェニル［ＣＡＳ：７８７６１８−２２−８］等）中で実施する。反応スキーム（６）において、全ての変数は、式（Ｉ）のように定義されており、ＬＡは、結合又はＣＨ２であり、ハロは、好ましくは、ブロモ又はヨードである。ＰＧは、式（ＩＶ）のように定義されている。
【化１３】
2021527659.tif 000014
【００７１】
実験手順７
式（ＶＩ）の中間体化合物を、反応スキーム（７）に従う式（ＶＩＩ）のハロ化合物と亜鉛との反応により調製し得る。この反応を、例えば連続フロー反応器中で、熱的条件（例えば、４０℃等）下にて、好適な反応不活性溶媒（例えば、テトラヒドロフラン等）及び好適な塩（例えば、塩化リチウム等）中で実施する。反応スキーム（７）において、全ての変数は、式（Ｉ）のように定義されており、ＬＡは、結合又はＣＨ２であり、ハロは、好ましくはヨードである。ＰＧは、式（ＩＶ）のように定義されている。
【化１４】
2021527659.tif 000015
【００７２】
実験手順８
式（ＩＶ）（式中、ＲＤは、Ｈである）の中間体化合物を、本明細書では（ＩＶ−ｂ）と称し、反応スキーム（８）に従う式（ＶＩＩＩ）のアルケン化合物の水素化反応により調製し得る。この反応を、例えば３時間にわたり、熱的条件（例えば、室温等）下にて、好適な反応不活性溶媒（例えば、メタノール等）、並びに好適な触媒（例えば、パラジウム炭素等）及び水素中で実施する。反応スキーム（８）において、全ての変数は、式（Ｉ）のように定義されており、ＰＧは、式（ＩＶ）のように定義されている。
【化１５】
2021527659.tif 000016
【００７３】
実験手順９
式（ＶＩＩＩ）の中間体化合物を、反応スキーム（９）に従う式（ＩＸ）のアルケン化合物と式（Ｖ）のハロ誘導体との「鈴木カップリング」反応により調製し得る。この反応を、マイクロ波照射下で、例えば３０分にわたり、熱的条件（例えば、１３０℃等）下にて、好適な反応不活性溶媒（例えば、１，４−ジオキサン等）及び好適な触媒（例えば、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）等）、好適な塩基（例えば、ＮａＨＣＯ３（飽和水溶液）等）中で実施する。反応スキーム（９）において、全ての変数は、式（Ｉ）のように定義されており、ハロは、好ましくは、ブロモ又はヨードであり、ＬＡは、結合であり、ＰＧは、式（ＩＶ）のように定義されており、ＬＡは、結合であり、ＲＤは、Ｈである。
【化１６】
2021527659.tif 000017
【００７４】
実験手順１０
式（ＩＶ−ｃ）の中間体化合物を、反応スキーム（１０）に従う式（Ｘ）のヒドロキシ化合物と式（Ｖ）のハロ誘導体との反応により調製し得る。この反応を、例えば４８時間にわたり、熱的条件（例えば、５０℃等）下にて、好適な反応不活性溶媒（例えば、ジメチルホルムアミド又はジメチルスルホキシド等）、及び好適な塩基（例えば、水素化ナトリウム又はカリウムｔｅｒｔ−ブトキシド等）中で実施する。反応スキーム（１０）において、全ての変数は、式（Ｉ）のように定義されており、ＬＡ’は、結合又はＣＨ２であり、ハロは、好ましくは、クロロ、ブロモ又はフルオロである。ＰＧは、式（ＩＶ）のように定義されている。
【化１７】
2021527659.tif 000018
【００７５】
実験手順１１
或いは、式（ＩＶ−ｃ）の中間体化合物を、反応スキーム（１１）に従う式（Ｘ）のヒドロキシ化合物と式（ＸＩ）のヒドロキシ誘導体との「光延反応」により調製し得る。この反応を、例えば１７時間にわたり、熱的条件（例えば、７０℃等）下にて、好適な反応不活性溶媒（例えば、トルエン等）、ホスフィン（例えば、トリフェニルホスフィン）、好適なカップリング剤（例えば、ＤＩＡＤ（ＣＡＳ：２４４６−８３−５）等）中で実施する。反応スキーム（１１）において、全ての変数は、式（Ｉ）のように定義されており、ＬＡ’は、結合又はＣＨ２であり、ハロは、好ましくは、クロロ、ブロモ又はフルオロである。ＰＧは、式（ＩＶ）のように定義されている。
【化１８】
2021527659.tif 000019
【００７６】
実験手順１２
式（ＩＩＩ）の中間体化合物を、反応スキーム（１２）に従って式（ＸＩ）の中間体化合物の保護基を切断して調製し得る。この反応を、例えば２時間にわたり、熱的条件（例えば、８０℃等）下にて、好適な反応不活性溶媒（例えば、エタノール等）中においてヒドラジン水和物の存在下で実施する。反応スキーム（１２）において、全ての変数は、式（Ｉ）のように定義されている。
【化１９】
2021527659.tif 000020
【００７７】
実験手順１３
式（ＸＩＩ）の中間化合物を、反応スキーム（１３）に従って式（ＸＩＩＩ）の中間化合物とフタルイミドとを反応させることにより調製し得る。この反応を、例えば２４時間にわたり、熱的条件（例えば、室温等）下にて、好適な反応不活性溶媒（例えば、乾燥テトラヒドロフラン等）中においてホスフィン（例えば、トリフェニルホスフィン等）、好適なカップリング剤（例えば、アゾジカルボン酸ジイソプロピル等）の存在下で実施する。反応スキーム（１３）において、全ての変数は、式（Ｉ）のように定義されている。
【化２０】
2021527659.tif 000021
【００７８】
実験手順１４
式（ＸＩＩＩ）の中間体化合物を、反応スキーム（１４）に従って式（ＸＩＶ）の中間体化合物のアルコール基を脱保護することにより調製し得る。この反応を、例えば１６時間にわたり、熱的条件（例えば、室温等）下にて、好適な反応不活性溶媒（例えば、乾燥テトラヒドロフラン等）中においてフッ化物源（例えば、フッ化テトラブチルアンモニウム等）の存在下で実施する。反応スキーム（１３）において、全ての変数は式（Ｉ）のように定義されており、ＰＧ１は、トリメチルシリル、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル、トリイソプロピルシリル、又はｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリルからなる群から選択される。
【化２１】
2021527659.tif 000022
式（Ｖ）、（ＶＩＩ）、（ＩＸ）、（ＸＶ）、（ＸＶＩ）、（ＸＶＩＩ）、及び（ＸＶＩＩＩ）の中間体は、商業的に入手可能であるか、又は当業者に既知の手順により調製し得る。
【００７９】
薬効薬理
本発明の化合物及びその薬学的に許容される組成物は、Ｏ−ＧｌｃＮＡｃ加水分解酵素（ＯＧＡ）を阻害し、従って、タウ病態を伴う疾患（タウオパチーとしても既知である）及びタウ封入体を有する疾患の処置又は予防において有用であり得る。そのような疾患として下記が挙げられるが、これらに限定されない：アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症及びパーキンソン痴呆症候群、嗜銀顆粒病、慢性外傷性脳障害、大脳皮質基底核変性症、石灰沈着を伴うびまん性神経原線維変化病、ダウン症候群、家族性英国型認知症、家族性デンマーク型認知症、第１７番染色体と関連する前頭側頭型認知症及びパーキンソニズム（ＭＡＰＴ変異に起因する）、前頭側頭葉変性症（一部の症例はＣ９ＯＲＦ７２変異に起因する）、ゲルストマン・シュトロイスラー・シャインカー病、グアドループパーキンソン症候群、筋強直性ジストロフィー、脳の鉄沈着を伴う神経変性、ニーマン・ピック病Ｃ型、神経原線維変化を伴う非グアム型運動ニューロン病、ピック病、脳炎後パーキンソン症候群、プリオンタンパク質脳アミロイド血管症、進行性皮質下グリオーシス、進行性核上麻痺、ＳＬＣ９Ａ６関連精神遅滞、亜急性硬化性全脳炎、神経原線維変化のみの認知症、並びにグリア細胞球状封入体を伴う白質タウオパチー。
【００８０】
本明細書で使用される場合、「処置」という用語は、疾患の進行を遅延し得るか、中断し得るか、阻止し得るか、若しくは停止し得るか、又は症状を軽減し得る全てのプロセスを指すことが意図されているが、必ずしも全ての症状の完全な排除を示すものではない。本明細書で使用される場合、「予防」という用語は、疾患の発症を遅延し得るか、中断し得るか、阻止し得るか又は停止し得る全てのプロセスを指すことが意図されている。
【００８１】
本発明はまた、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症及びパーキンソン痴呆症候群、嗜銀顆粒病、慢性外傷性脳障害、大脳皮質基底核変性症、石灰化を伴うびまん性神経原線維変化病、ダウン症候群、家族性イギリス型認知症、家族性デンマーク型認知症、第１７番染色体と関連する前頭側頭型認知症及びパーキンソニズム（ＭＡＰＴ変異に起因する）、前頭側頭葉変性症（一部の症例はＣ９ＯＲＦ７２変異に起因する）、ゲルストマン・シュトロイスラー・シャインカー病、グアドループ型パーキンソニズム、筋緊張性ジストロフィー、脳内鉄沈着を伴う神経変性症、ニーマン・ピック病Ｃ型、神経原線維変化を伴う非グアム型運動ニューロン病、ピック病、脳炎後パーキンソニズム、プリオンタンパク質脳アミロイド血管症、進行性皮質下グリオーシス、進行性核上性麻痺、ＳＬＣ９Ａ６関連精神遅滞、亜急性硬化性全脳炎、神経原線維変化のみの認知症、並びにグリア細胞球状封入体を伴う白質タウオパチーからなる群から選択される疾患又は病態の処置又は予防での使用のための一般式（Ｉ）に係る化合物、その立体異性形態、又はこれらの薬学的に許容される酸付加塩若しくは塩基付加塩にも関する。
【００８２】
本発明はまた、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症及びパーキンソン痴呆症候群、嗜銀顆粒病、慢性外傷性脳障害、大脳皮質基底核変性症、石灰化を伴うびまん性神経原線維変化病、ダウン症候群、家族性イギリス型認知症、家族性デンマーク型認知症、第１７番染色体と関連する前頭側頭型認知症及びパーキンソニズム（ＭＡＰＴ変異に起因する）、前頭側頭葉変性症（一部の症例はＣ９ＯＲＦ７２変異に起因する）、ゲルストマン・シュトロイスラー・シャインカー病、グアドループ型パーキンソニズム、筋緊張性ジストロフィー、脳内鉄沈着を伴う神経変性症、ニーマン・ピック病Ｃ型、神経原線維変化を伴う非グアム型運動ニューロン病、ピック病、脳炎後パーキンソニズム、プリオンタンパク質脳アミロイド血管症、進行性皮質下グリオーシス、進行性核上性麻痺、ＳＬＣ９Ａ６関連精神遅滞、亜急性硬化性全脳炎、神経原線維変化のみの認知症、並びにグリア細胞球状封入体を伴う白質タウオパチーからなる群から選択される疾患又は病態の処置、予防、改善、制御、又はリスクの低減での使用のための一般式（Ｉ）に係る化合物、その立体異性形態、又はこれらの薬学的に許容される酸付加塩若しくは塩基付加塩にも関する。
【００８３】
具体的には、疾患若しくは病態は、特に、タウオパチーから選択され得、より特定すると、アルツハイマー病、進行性核上麻痺、ダウン症候群、前頭側頭葉認知症、パーキンソニズム−１７を伴う前頭側頭型認知症、ピック病、大脳皮質基底核変性症、及び嗜銀顆粒病からなる群から選択されるタウオパチーから選択され得るか、又は疾患若しくは病態は、特に、タウ病態を伴う神経変性疾患であり得、より特定すると、Ｃ９ＯＲＦ７２変異により引き起こされる筋萎縮性側索硬化症若しくは前頭側頭葉認知症から選択される神経変性疾患であり得る。
【００８４】
アルツハイマー病及びタウオパチー疾患における発症前状態：
近年、米国（ＵＳ）国立老化研究所（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｆｏｒ  Ａｇｉｎｇ）及び国際ワーキンググループ（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｗｏｒｋｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐ）は、発症前（無症候性）段階のＡＤをより明確に定義するためのガイドラインを提案した（Ｄｕｂｏｉｓ  Ｂ，ｅｔ  ａｌ．Ｌａｎｃｅｔ  Ｎｅｕｒｏｌ．２０１４；１３：６１４−６２９；Ｓｐｅｒｌｉｎｇ，ＲＡ，ｅｔ  ａｌ．Ａｌｚｈｅｉｍｅｒｓ  Ｄｅｍｅｎｔ．２０１１；７：２８０−２９２）。仮説モデルは、Ａβの蓄積及びタウ凝集が、明白な臨床的障害が発現する何年も前に始まることを前提とする。アミロイド蓄積の上昇、タウ凝集、及びＡＤの発症の重要な危険因子は、年齢（即ち６５歳以上）、ＡＰＯＥ遺伝子型、及び家族歴である。臨床的に正常な７５歳より高齢の個体のおよそ３分の１は、アミロイド及びタウのＰＥＴ画像診断（タウについては現在のところあまり進んでいない）でＡβ又はタウの蓄積のエビデンスを示す。加えて、ＣＳＦ測定値においてＡベータレベルの減少が観察される一方、改変されていないタウ及びリン酸化されたタウのレベルは、ＣＳＦにおいて上昇している。類似の所見が大規模な剖検調査に見られ、早くも２０歳以下で脳内にタウ凝集体が検出されていることが示されている。アミロイド陽性（Ａβ＋）の臨床的に正常な個体は、一貫して他のバイオマーカーで「ＡＤ様中間形質」のエビデンスを示し、これには、機能的磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）と安静時機能的結合との両方における機能的ネットワーク活動の崩壊、フルオロデオキシグルコース１８Ｆ（ＦＤＧ）の代謝低下、皮質薄化、及び萎縮の加速が含まれる。時系列データを積み上げると、やはり、Ａβ＋の臨床的に正常な個体は、認知機能低下、並びに軽度認知障害（ＭＣＩ）及びＡＤ認知症への進行のリスクが増大していることが強く示唆されている。アルツハイマー病の科学界には、これらのＡβ＋の臨床的に正常な個体がＡＤ病理の連続体の初期段階を呈しているという意見の一致がある。そのため、Ａβの産生又はタウの凝集を減少させる治療剤の介入は、広範な神経変性が起こる前の病期で開始されると、より有効になりそうであると主張されてきた。多くの製薬会社が、現在、前駆性ＡＤにおけるＢＡＣＥの阻害を試験中である。
【００８５】
バイオマーカー研究の発展の結果、現在では、最初の症状が発生する前の前臨床段階でのアルツハイマー病を特定することが可能である。前臨床アルツハイマー病に関する様々な問題（例えば定義及び用語、範囲、自然経過、進行のマーカー、及び無症候段階での疾患の検出の倫理的重大性）は全て、Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ＆Ｄｅｍｅｎｔｉａ  １２（２０１６）２９２−３２３で概説されている。
【００８６】
前臨床アルツハイマー病又はタウオパチーにおいて、個体は、２つのカテゴリーで識別され得る。ＰＥＴスキャンでアミロイドベータ若しくはタウ凝集のエビデンスがあるか、又はＣＳＦ  Ａベータ、タウ、及びリン酸タウに変化のある、認知が正常な個体は、「アルツハイマー病のリスク状態にある無症候性（ＡＲ−ＡＤ）」又は「タウオパチーの無症候状態」であると定義される。家族性アルツハイマー病の完全浸透性優性常染色体の変異を有する個体は、「症状が出る前のアルツハイマー病」を有すると言われる。タウタンパク質内の優性常染色体の変異は、同様に、多様な形態のタウオパチーに関して説明されている。
【００８７】
そのため、ある実施形態では、本発明は、前臨床アルツハイマー病、前駆性アルツハイマー病、又はタウオパチーの様々な形態で観測されるタウ関連の神経変性のリスクの制御又は低減での使用のための一般式（Ｉ）に係る化合物、その立体異性形態、又はこれらの薬学的に許容される酸付加塩若しくは塩基付加塩にも関する。
【００８８】
本明細書において上記で既に述べたように、「処置」という用語は、必ずしも全症状の完全な排除を示すものではないが、上記の障害のいずれかの対症処置を指す場合もある。式（Ｉ）の化合物の有用性に鑑みて、本明細書において上述した疾患のいずれか１つに罹患している温血動物（例えばヒト）等の対象を処置する方法、又は本明細書において上述した疾患のいずれか１つに罹患している温血動物（例えばヒト）等の対象を予防する方法が提供される。
【００８９】
前記方法は、温血動物（例えばヒト）等の対象への、式（Ｉ）の化合物、その立体異性形態、これらの薬学的に許容される付加塩又は溶媒和物の予防上有効な量又は治療上有効な量の投与、即ち全身投与又は局所投与（好ましくは経口投与）を含む。
【００９０】
従って、本発明はまた、本明細書において上述した疾患のいずれかを予防する及び／又は処置する方法であって、必要とする対象に、本発明に係る化合物の予防上有効な量又は治療上有効な量を投与することを含む方法にも関する。
【００９１】
本発明はまた、Ｏ−ＧｌｃＮＡｃ加水分解酵素（ＯＧＡ）の活性を調節する方法であって、本発明に係る及び特許請求の範囲で定義される化合物又は本発明に係る及び特許請求の範囲で定義される医薬組成物の予防上有効な量又は治療上有効な量を、必要とする対象に投与することを含む方法にも関する。
【００９２】
処置方法は、１日当たり１〜４回摂取する投薬計画で活性成分を投与することも含み得る。これらの処置方法では、本発明に係る化合物は、投与前に好ましくは製剤化される。本明細書において下記で説明するように、好適な医薬製剤は、公知であり且つ容易に入手可能な成分を使用して、既知の手順で調製される。
【００９３】
上述した障害のいずれか又はそれらの症状を処置するのに又は予防するのに好適であり得る本発明の化合物を、単独で投与し得るか、又は１種若しくは複数種の追加の治療剤と組み合わせて投与し得る。併用治療には、式（Ｉ）の化合物及び１種又は複数種の追加の治療剤を含む単一医薬投与製剤の投与、並びに式（Ｉ）の化合物及び各追加の治療剤（それ自体個別の医薬投与製剤中）の投与が含まれる。例えば、式（Ｉ）の化合物及び治療剤を錠剤若しくはカプセル剤等の単一経口投与組成物で一緒に患者に投与し得るか、又は各薬剤を個別の経口投与製剤で投与し得る。
【００９４】
当業者は、本明細書で言及されている疾患又は病態の別の命名法、疾病分類、及び分類体系に精通しているであろう。例えば、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｉｃ  ＡｓｓｏｃｉａｔｉｏｎのＤｉａｇｎｏｓｔｉｃ＆Ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ  Ｍａｎｕａｌ  ｏｆ  Ｍｅｎｔａｌ  Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓの第５版（ＤＳＭ−５（商標））は、神経認知障害群（ＮＣＤ）（重度と軽度の両方）、特にアルツハイマー病に起因する神経認知障害等の用語を使用する。そのような用語は、当業者により、本明細書で言及されている疾患又は病態の一部の別の名称として使用され得る。
【００９５】
医薬組成物
本発明はまた、Ｏ−ＧｌｃＮＡｃ加水分解酵素（ＯＧＡ）の阻害が有益である疾患（例えば、アルツハイマー病、進行性核上麻痺、ダウン症候群、前頭側頭型認知症、パーキンソニズム−１７を伴う前頭側頭型認知症、ピック病、大脳皮質基底核変性症、嗜銀顆粒病、Ｃ９ＯＲＦ７２変異により引き起こされる筋萎縮性側索硬化症又は前頭側頭型認知症）を予防するための又は処置するための組成物であって、式（Ｉ）に係る化合物の治療上有効な量と、薬学的に許容される担体又は希釈剤とを含む組成物も提供する。
【００９６】
活性成分を単独で投与することが可能であるが、活性成分を医薬組成物として提供することが好ましい。従って、本発明は、本発明に係る化合物を、薬学的に許容される担体又は希釈剤と共に含む医薬組成物をさらに提供する。担体又は希釈剤は、組成物の他の成分と適合し、そのレシピエントに有害でないという意味で「許容される」ものでなければならない。
【００９７】
本発明の医薬組成物を、薬学の技術分野において公知の任意の方法により調製し得る。治療上有効な量の特定の化合物は、活性成分として、塩基形態又は付加塩形態において、薬学的に許容される担体と組み合わされて密接な混合物にされるが、これは、投与に所望される製剤の形態に応じて多様な形態をとり得る。これらの医薬組成物は、好ましくは、経口投与、経皮投与、若しくは非経口投与等の全身投与；又は吸入、鼻腔スプレー、点眼剤によるか又はクリーム、ゲル、シャンプー等による局所投与に好適な単位剤形であることが望ましい。例えば、経口剤形での組成物の調製では、通常の医薬媒体のいずれかを使用し得、例えば懸濁剤、シロップ剤、エリキシル剤、及び液剤等の経口液体製剤の場合には、水、グリコール、油、アルコール、及び同類のものを使用し得；又は散剤、丸剤、カプセル剤、及び錠剤の場合には、固体担体（例えば、デンプン、糖、カオリン、滑沢剤、結合剤、崩壊剤、及び同類のもの）を使用し得る。錠剤及びカプセル剤は、その投与が容易であるために、最も有利な経口単位剤形であり、その場合には、固体医薬担体が当然使用される。非経口組成物の場合には、担体は、通常、滅菌水を少なくとも大部分含むことになるが、例えば溶解性を促進する他の成分が含まれ得る。例えば、注射用溶液であって、担体が、生理食塩水、グルコース溶液、又は生理食塩水とグルコース溶液との混合物を含む、注射用溶液を調製し得る。注射用懸濁剤も調製し得、その場合には、適切な液体担体、懸濁化剤、及び同類のものが使用され得る。経皮投与に好適な組成物では、担体は、皮膚に重大な有害作用を引き起こさない任意の性質の少量の好適な添加剤と任意選択的に組み合わせて、浸透促進剤及び／又は好適な湿潤剤を任意選択的に含む。前記添加剤は、皮膚への投与を容易にし得、及び／又は所望の組成物の調製に役立ち得る。これらの組成物を、様々な方法で（例えば、経皮貼付剤、スポットオン製剤、又は軟膏剤として）投与し得る。
【００９８】
投与及び投与量の均一を容易にするために、上述の医薬組成物を単位剤形で製剤化することが特に有利である。単位剤形は、本明細書及び特許請求の範囲で使用される場合、単位投与量として好適な、物理的に別々の単位を指し、各単位は、必要な医薬担体と共に、所望の治療効果を生じるように算出された所定量の活性成分を含む。そのような単位剤形の例としては、錠剤（割線入り錠剤又はコーティング錠を含む）、カプセル剤、丸剤、分包散剤、カシェ剤、注射用溶液又は注射用懸濁剤、小さじ量、大さじ量、及び同類のもの、並びにそれらを分割して複合化したものがある。
【００９９】
正確な投与量及び投与頻度は、当業者に公知であるように、使用される式（Ｉ）の特定の化合物、処置される特定の病態、処置される病態の重症度、特定の患者の年齢、体重、性別、障害の程度、及び全身の健康状態、並びにその個体が摂取している可能性がある他の医薬によって異なる。さらに、前記有効１日量が、処置対象の応答に応じて、及び／又は本発明の化合物を処方する医師の評価に応じて、減少され得るか又は増加され得ることは明らかである。
【０１００】
投与方法に応じて、本医薬組成物は、０．０５〜９９重量％の、好ましくは０．１〜７０重量％の、より好ましくは０．１〜５０重量％の活性成分と、１〜９９．９５重量％の、好ましくは３０〜９９．９重量％の、より好ましくは５０〜９９．９重量％の薬学的に許容される担体と含むことになり、パーセンテージは全て、この組成物の全重量に基づく。
【０１０１】
本化合物を、経口投与、経皮投与、若しくは非経口投与等の全身投与；又は吸入、鼻腔スプレー、点眼剤を介したもの、又はクリーム、ゲル、シャンプー、若しくは同類ものを介したもの等の局所投与のために使用し得る。本化合物を、好ましくは経口投与する。正確な投与量及び投与頻度は、当業者に公知であるように、使用される式（Ｉ）に係る特定の化合物、処置される特定の病態、処置される病態の重症度、特定の患者の年齢、体重、性別、障害の程度、及び全身の健康状態、並びにその個体が摂取している可能性がある他の医薬によって異なる。さらに、前記有効１日量が、処置対象の応答に応じて、及び／又は本発明の化合物を処方する医師の評価に応じて、減少され得るか又は増加され得ることは明らかである。
【０１０２】
単回剤形を製造するために担体材料と組み合わされ得る式（Ｉ）の化合物の量は、処置される疾患、哺乳動物種、及び特定の投与方式に応じて変動するであろう。しかし、一般的な指針として、本発明の化合物についての好適な単位用量は、例えば、好ましくは０．１ｍｇ〜約１０００ｍｇの活性化合物を含み得る。好ましい単位用量は、１ｍｇ〜約５００ｍｇである。より好ましい単位用量は、１ｍｇ〜約３００ｍｇである。より一層好ましい単位用量は、１ｍｇ〜約１００ｍｇである。そのような単位用量を、７０ｋｇの成人の総投与量が、１回の投与につき対象の体重１ｋｇ当たり０．００１〜約１５ｍｇの範囲になるように、１日に１回超投与し得、例えば、１日に２回、３回、４回、５回、又は６回投与し得るが、好ましくは１日に１回又は２回投与し得る。好ましい投与量は、１回の投与につき対象の体重１ｋｇ当たり０．０１〜約１．５ｍｇであり、そのような療法は、数週間又は数ヶ月間にわたる可能性があり、場合により数年間にわたる可能性がある。しかし、当業者によく理解されているように、任意の特定の患者に対する特定の用量レベルは、使用する特定の化合物の活性、処置される個体の年齢、体重、全身の健康状態、性別、及び食事、投与時間及び投与経路、排泄率；以前投与された他の薬物、並びに治療を受ける特定の疾患の重症度を含む様々な要因に依存することが理解されるであろう。
【０１０３】
典型的な投与量は、１日１回若しくは１日複数回服用される１つの１ｍｇ〜約１００ｍｇ錠剤若しくは１ｍｇ〜約３００ｍｇであり得るか、又は１日１回服用され且つ比較的高含有量の活性成分を含む１つの徐放性カプセル剤若しくは錠剤であり得る。徐放効果を、異なるｐＨ値で溶解するカプセル材料により、浸透圧で徐々に放出するカプセルにより、又は他の既知の任意の放出制御手段により得ることができる。
【０１０４】
当業者に明らかであるように、これらの範囲外の投与量を使用することが必要となる場合があり得る。さらに、臨床医又は処置医は、個々の患者の応答と共に治療を開始する、中断する、調整する、又は終了する方法及び時点を知っているであろうことにも留意されたい。
【０１０５】
本発明はまた、本発明に係る化合物、「リーフレット」としても既知である処方情報、ブリスターパッケージ又はボトル、及び容器を含むキットも提供する。さらに、本発明は、本発明に係る医薬組成物、「リーフレット」としても既知である処方情報、ブリスターパッケージ又はボトル、及び容器を含むキットを提供する。処方情報には、本発明に係る化合物又は医薬組成物の投与に関する患者への助言又は指示が好ましくは含まれる。特に、処方情報には、必要とする対象におけるタウオパチーの予防及び／又は処置のために本発明に係る化合物又は医薬組成物がどのように使用されるべきかについて、前記本発明に係る化合物又は医薬組成物の投与に関する患者への助言又は指示が含められる。そのため、ある実施形態では、本発明は、式（Ｉ）の化合物若しくはその立体異性体、又はこれらの薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物、又は前記化合物を含む医薬組成物と、タウオパチーを予防するか又は処置するための指示書とを含むキットオブパーツを提供する。本明細書で言及されるキットは、特に、市販に好適な医薬パッケージであり得る。
【０１０６】
上記で提供される組成物、方法、及びキットに関して、当業者は、それぞれでの使用に好ましい化合物が上記で好ましいと記載されている化合物であることを理解するであろう。この組成物、方法、及びキットに関してさらに一層好ましい化合物は、下記の非限定的な実施例で提供される化合物である。
【実施例】
【０１０７】
実験の部
下記において、「ｍ．ｐ．」という用語は融点を意味しており、「ｍｉｎ」は分を意味しており、「ＡＣＮ」又は「ＣＨ３ＣＮ」はアセトニトリルを意味しており、「ａｑ．」は水性を意味しており、「Ｂｏｃ」はｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルを意味しており、「ＤＭＦ」はジメチルホルムアミドを意味しており、「ｒ．ｔ．」又は「ＲＴ」は室温を意味しており、「ｒａｃ」又は「ＲＳ」はラセミを意味しており、「ＳＦＣ」は超臨界流体クロマトグラフィーを意味しており、「ＳＦＣ−ＭＳ」は超臨界流体クロマトグラフィー／質量分析を意味しており、「ＬＣ−ＭＳ」は液体クロマトグラフィー／質量分析を意味しており、「ＨＰＬＣ」は高速液体クロマトグラフィーを意味しており、「ｉＰｒＯＨ」はイソプロピルアルコールを意味しており、「ＲＰ」は逆相を意味しており、「Ｒｔ」は保持時間（分）を意味しており、「［Ｍ＋Ｈ］＋」は化合物の遊離塩基のプロトン化質量を意味しており、「ｗｔ」は重量を意味しており、「ＴＨＦ」はテトラヒドロフランを意味しており、「Ｅｔ２Ｏ」はジエチルエーテルを意味しており、「ＥｔＯＡｃ」は酢酸エチルを意味しており、「ＤＣＭ」はジクロロメタンを意味しており、「ＤＢＡＤ」はジ−ｔｅｒｔ−ブチルアゾジカルボキシレートを意味しており、「ＤＩＰＥＡ」はＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンを意味しており、「ＤＣＥ」は１，２−ジクロロエタンを意味しており、「ＭｅＯＨ」はメタノールを意味しており、「ｓａｔ」は飽和を意味しており、「ｓｏｌｔｎ」又は「ｓｏｌ．」は溶液を意味しており、「ＥｔＯＨ」はエタノールを意味しており、「ＴＦＡ」はトリフルオロ酢酸を意味しており、「２−ｍｅＴＨＦ」又は「Ｍｅ−ＴＨＦ」は２−メチル−テトラヒドロフランを意味しており、「ＮＭＰ」はＮ−メチルピロリドンを意味しており、「Ｐｄ（ＯＡｃ）２」又は「（ＯＡｃ）２Ｐｄ」は酢酸パラジウム（ＩＩ）を意味しており、「Ｐｄ２（ｄｂａ）３」はトリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）を意味しており、「Ｐｄ（ＰＰｈ３）４」はテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）を意味しており、「ＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）」は［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）を意味しており、「ＰｄＣｌ２（ＰＰｈ３）２」はビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）二塩化物を意味しており、「Ｐｄ（ｔ−Ｂｕ３Ｐ）２」はビス（ｔｅｒｔ−ブチルホスフィン）パラジウム（０）を意味しており、「ＰｄＣｌ２（ｄｔｂｐｆ）」は［１，１’−ビス（ジ−ｔｅｒｔ−ブチルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）を意味しており、「ＲｕＰｈｏｓ」は２−ジシクロヘキシルホスフィノ−２’，６’−ジイソプロポキシビフェニルを意味しており、「ＴＭＳＣｌ」はトリメチルシリルクロリドを意味する。
【０１０８】
「ＲＳ」という表記が本明細書で示されている場合には常に、別途指示しない限り、化合物は、示された中心でのラセミ混合物であることを意味している。一部の化合物では、中心の立体化学的配置は、混合物が分離された場合に「Ｒ」又は「Ｓ」と指定されており、一部の化合物では、化合物自体は、単一の立体異性体として単離され且つエナンチオマー的に／ジアステレオマー的に純粋であるが、絶対立体化学が未確定の場合には、示された中心での立体化学的配置は、「Ｒ＊」又は「Ｓ＊」と指定されている。本明細書で報告されている化合物の鏡像体過剰率を、超臨界流体クロマトグラフィー（ＳＦＣ）によるラセミ混合物の分析と、その後の分離されたエナンチオマーのＳＦＣ比較とにより決定した。
【０１０９】
フローケミストリー反応を、Ｖａｐｏｕｒｔｅｃ  Ｒ２＋Ｒ４ユニット中において、ベンダーによって提供される標準的な反応器を使用して実施した。
【０１１０】
マイクロ波補助反応を、シングルモード式反応器：Ｉｎｉｔｉａｔｏｒ（商標）Ｓｉｘｔｙ  ＥＸＰマイクロ波反応器（Ｂｉｏｔａｇｅ  ＡＢ）又はマルチモード式反応器：ＭｉｃｒｏＳＹＮＴＨ  Ｌａｂｓｔａｔｉｏｎ（Ｍｉｌｅｓｔｏｎｅ，Ｉｎｃ．）で実施した。
【０１１１】
薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）を、試薬級溶媒を使用してシリカゲル６０  Ｆ２５４プレート（Ｍｅｒｃｋ）で実行した。オープンカラムクロマトグラフィーを、標準的な技術を使用して、シリカゲル、粒径６０Å、メッシュ＝２３０〜４００（Ｍｅｒｃｋ）で実施した。
【０１１２】
自動フラッシュカラムクロマトグラフィーを、下記の様々なフラッシュシステムで、不規則なシリカゲル、粒径１５〜４０μｍ（順相ディスポーザブルフラッシュカラム）により、接続の準備ができているカートリッジを使用して実施した：Ａｒｍｅｎ  ＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔのＳＰＯＴシステム若しくはＬＡＦＬＡＳＨシステム、又はＩｎｔｅｒｃｈｉｍのＰｕｒｉＦｌａｓｈ（登録商標）４３０ｅｖｏシステム、又はＡｇｉｌｅｎｔの９７１−ＦＰシステム、又はＢｉｏｔａｇｅのＩｓｏｌｅｒａ  １ＳＶシステム。
【０１１３】
中間体の調製
中間体１の調製
【化２２】
2021527659.tif 000023
（Ｒ）−３−ヒドロキシメチル−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（ＣＡＳ：１３８１０８−７２−２；１．００ｇ、４．９７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍＬ）溶液に、Ｎ２雰囲気下で０℃にて、ＮａＨ（鉱物油中の６０％分散液、２３８ｍｇ、５．９６ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を１５分にわたり０℃で撹拌し、４−ブロモ−２−メトキシ−６−メチルピリジン（ＣＡＳ：１０８３１６９−００−９；１．１５ｇ、５．４７ｍｍｏｌ）を滴下した。この反応混合物を１時間にわたり０℃で撹拌し、次いで２０時間にわたり７０℃で撹拌した。この反応をＮＨ４Ｃｌ（ｓａｔ．，ａｑ．）でクエンチし、ヘプタンで抽出した。有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、減圧下で蒸発させた。粗混合物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン、勾配  １００／０から５０／５０へ）で精製して、中間体１（９７０ｍｇ、６１％）を得た。
【０１１４】
中間体２の調製
【化２３】
2021527659.tif 000024
Ａｍｂｅｒｌｙｓｔ（登録商標）１５水素フォーム（ＣＡＳ：３９３８９−２０−３；３．２０ｇ、１５．０ｍｍｏｌ）が入った閉鎖反応器に、中間体１（９７０ｍｇ、３．０１ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（３０ｍＬ）溶液を入れた。この混合物を、１６時間にわたり室温にて、固相反応器中で振盪した。樹脂をＭｅＯＨで洗浄し（この画分を廃棄した）、次いでＮＨ３（ＭｅＯＨ中に７Ｎ）で洗浄した。ろ液を減圧下で濃縮して、中間体２（６００ｍｇ、９０％）を淡褐色の油状物として得た。
【０１１５】
中間体３の調製
【化２４】
2021527659.tif 000025
４−ブロモ−６−メチルピリジン−２−オール（ＣＡＳ：８６５１５６−５９−８；２．００ｇ、９．８９ｍｍｏｌ）が入ったフラスコに、Ｎ２雰囲気下で、ＴＨＦ（３４ｍＬ、１０．９ｍｍｏｌ）中の中間体７２の０．３２Ｍ溶液を入れた。ＴＭＥＤＡ（ＣＡＳ：１１０−１８−９；１．６３ｍＬ、１０．９ｍｍｏｌ）及びＰｄ（ＰＰｈ３）２Ｃｌ２（４１７ｍｇ、０．５９ｍｍｏｌ）を連続的に入れた。この反応混合物を、１時間にわたり６０℃で撹拌した。次いで、この混合物を、ＮＨ４Ｃｌ（ｓａｔ．）とＮＨ３（２６％ａｑ．）との１：１溶液でクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ／ＤＣＭ、勾配  ０／１００から４０／６０へ）で精製した。所望の画分を集め、減圧下で濃縮して、中間体３（２．４９ｇ、８２％）を油状物として得た。
【０１１６】
中間体４の調製
【化２５】
2021527659.tif 000026
Ａｍｂｅｒｌｙｓｔ（登録商標）１５水素フォーム（ＣＡＳ：３９３８９−２０−３；８．６５ｇ、４０．６ｍｍｏｌ）が入った閉鎖反応器に、中間体３（２．４９ｇ、８．１３ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（７０ｍＬ）溶液を入れた。この混合物を、１６時間にわたり室温にて、固相反応器中で振盪した。樹脂をＭＥＯＨで洗浄し（この画分を廃棄した）、次いでＮＨ３（ＭｅＯＨ中に７Ｎ）で洗浄した。ろ液を減圧下で濃縮して、中間体４（１．６２ｇ、９７％）を淡褐色の油状物として得た。
【０１１７】
中間体５の調製
【化２６】
2021527659.tif 000027
ＴＨＦ及び４−ブロモ−２，６−ジメチルピリジン（ＣＡＳ：５０９３−７０−９）中の中間体７２の０．３２Ｍ溶液を使用して、中間体３の合成に関して報告したものと類似の手順に従って、中間体５を調製した。
【０１１８】
粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＥｔＡＯｃ／ヘプタン、勾配  ３０／７０から８０／２０へ）で精製した。所望の画分を集め、減圧下で濃縮して、中間体５（２．５０ｇ、８７％）を油状物として得た。
【０１１９】
中間体６の調製
【化２７】
2021527659.tif 000028
出発物質として中間体５を使用して、中間体４の合成に関して報告したものと類似の手順に従って、中間体６を調製した。
【０１２０】
樹脂をＭｅＯＨで洗浄し（この画分を廃棄した）、次いでＮＨ３（ＭｅＯＨ中に７Ｎ）で洗浄した。ろ液を減圧下で濃縮して、中間体６（１．５３ｇ、９３％）を淡褐色の油状物として得た。
【０１２１】
中間体７の調製
【化２８】
2021527659.tif 000029
（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル  ３−（ヒドロキシメチル）ピロリジン−１−カルボキシレート（ＣＡＳ：１９９１７４−２４−８；１．００ｇ、４．９７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍＬ）溶液に、Ｎ２雰囲気下で０℃にて、ＮａＨ（鉱物油中の６０％分散液、２３８ｍｇ、５．９６ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を３０分にわたり０℃で撹拌し、４−クロロ−２，６−ジメチルピリジン（ＣＡＳ：３５１２−７５−２；６９７Ｌ、５．４７ｍｍｏｌ）を滴下した。この反応混合物を１時間にわたり０℃で撹拌し、次いで２０時間にわたり８０℃で撹拌した。この反応をＮＨ４Ｃｌ（ｓａｔ．）でクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、減圧下で蒸発させた。粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ；ＥｔＯＡｃ／ヘプタン、勾配  ５０／５０から１００／０へ）で精製した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮して、中間体７（１．５０ｇ、９９％）を得た。
【０１２２】
中間体８の調製
【化２９】
2021527659.tif 000030
Ａｍｂｅｒｌｙｓｔ（登録商標）１５水素フォーム（ＣＡＳ：３９３８９−２０−３；５．２１ｇ、２４．５ｍｍｏｌ）が入った閉鎖反応器に、中間体７（１．５０ｇ、４．８９ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（３９．８ｍＬ）溶液を入れた。この混合物を、１６時間にわたり室温にて、固相反応器中で振盪した。樹脂をＭｅＯＨで洗浄し（この画分を廃棄した）、次いでＮＨ３（ＭｅＯＨ中に７Ｎ）で洗浄した。ろ液を減圧下で濃縮して、中間体８（１．００ｇ、９９％）を淡褐色の油状物として得た。
【０１２３】
中間体９の調製
【化３０】
2021527659.tif 000031
２−クロロ−４−ヨード−６−トリフルオロメチルピリジン（ＣＡＳ：２０５４４４−２２−０；４１９ｍｇ、１．３６ｍｍｏｌ）及びＰｄ（ｔ−Ｂｕ３Ｐ）２（３４．８ｍｇ、６８．２μｍｏｌ）の混合物に、Ｎ２雰囲気下で、中間体７３のＴＨＦ溶液（ＴＨＦ中に０．１５Ｍ、１０ｍＬ、１．５０ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を、１時間にわたり室温で撹拌した。この混合物をＮＨ４Ｃｌ（ｓａｔ．）とＮＨ４ＯＨとの１／１混合物で処理し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン、勾配  ０／１００から２０／８０へ）で精製した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮して、中間体９（３５０ｍｇ、７０％）を淡黄色の油状物として得た。
【０１２４】
中間体１０の調製
【化３１】
2021527659.tif 000032
中間体９（３５０ｍｇ、０．９６ｍｍｏｌ）をＮａＯＭｅ（０．２２ｍＬ、０．９６ｍｍｏｌ、純度２５％）の無水溶液に溶解させ、この混合物を１６時間にわたり室温で撹拌した。水を添加し、水相をＤＣＭで抽出した。有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発させて、中間体１０（２５０ｍｇ、収率７２％）を無色の油状物として得た。
【０１２５】
中間体１１の調製
【化３２】
2021527659.tif 000033
中間体１０（２５０ｍｇ、０．６９ｍｍｏｌ）をＨＣｌ（１，４−ジオキサン中に４Ｍ、０．１７ｍＬ、０．７０ｍｍｏｌ）に溶解させ、この反応混合物を１時間にわたり室温で撹拌した。溶媒を減圧下で蒸発させて中間体１１をＨＣｌ塩（１９０ｍｇ、９２％）として得、このＨＣｌ塩を、さらに精製することなく次の工程で使用した。
【０１２６】
中間体１２の調製
【化３３】
2021527659.tif 000034
出発物質として中間体７３のＴＨＲ溶液及び２−クロロ−４−ヨード−６−トリフルオロメチルピリジン（ＣＡＳ：２０５４４４−２２−０）を使用して、中間体９の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、中間体１２を調製した。粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン、勾配  ０／１００から２０／８０へ）で精製した。所望の画分を集め、減圧下で濃縮して、中間体１２（２．５０ｇ、収率４０％、純度７５％）を淡黄色の油状物として得た。
【０１２７】
中間体１３の調製
【化３４】
2021527659.tif 000035
中間体１２（２．５０ｇ、５．１４ｍｍｏｌ、純度７５％）の１，４−ジオキサン（１５ｍＬ）撹拌溶液に、Ｋ２ＣＯ３（１．４２ｇ、１０．３ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を、５分にわたりＮ２流で脱酸素化した。トリメチルボロキシン（ＣＡＳ：８２３−９６−１；１．２９ｍＬ、９．２５ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＯＡｃ）２（５７．７ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ）、及びトリシクロヘキシルホスフィンテトラフルオロボレート（ＣＡＳ：５８６５６−０４−５；１８９ｍｇ、０．５１ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を、Ｎ２下で２時間にわたり１００℃にて撹拌した。この混合物を放冷し、Ｈ２Ｏで洗浄し、ＤＣＭで抽出した。有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン、勾配  ０／１００から１５／８５へ）で精製した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮して、中間体１３（１．９０ｇ、８６％、純度８０％）を灰色の油状物として得た。
【０１２８】
中間体１４の調製
【化３５】
2021527659.tif 000036
中間体１３（１．９０ｇ、４．１４ｍｍｏｌ、純度８０％）のＭｅＯＨ（２２．４ｍＬ）撹拌溶液に、Ａｍｂｅｒｌｙｓｔ（登録商標）１５水素フォーム（ＣＡＳ：３９３８９−２０−３；４．４０ｇ）を添加した。この反応混合物を、１６時間にわたり室温にて、固相反応器中で振盪した。樹脂をＭｅＯＨで洗浄し（この画分を廃棄した）、次いでＮＨ３（ＭｅＯＨ中に７Ｎ）で洗浄した。ろ液を減圧下で濃縮して、中間体１４（９８０ｍｇ、９１％）を褐色の油状物として得た。
【０１２９】
中間体１５の調製
【化３６】
2021527659.tif 000037
４−クロロ−２，６−ジメチルピリジン（ＣＡＳ：３５１２−７５−２；０．２０ｇ、１．４１ｍｍｏｌ）、ｔｅｒｔ−ブチル３−（テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−カルボキシレート（ＣＡＳ：２１２１２７−８３−８；０．４８ｇ、１．６３ｍｍｏｌ）及びＰｄ（ＰＰｈ３）４（１６７ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）の撹拌混合物に、密封管中において及びＮ２雰囲気下で、１，４−ジオキサン（３．５７ｍＬ）及びＮａ２ＣＯ３（ｓａｔ．，ａｑ．、２．５ｍＬ）を添加した。この反応混合物を、３０分にわたり１３０℃で撹拌した。この混合物を水で処理し、ＤＣＭで抽出した。有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ；ＥｔＯＡｃ／ヘプタン、勾配  ０／１００から１００／０へ）で精製した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮して、中間体１５（２０７ｍｇ、５３％）を淡黄色の油状物として得、これは静置すると凝固した。
【０１３０】
中間体１６の調製
【化３７】
2021527659.tif 000038
Ｈ−キューブ（Ｈ−ｃｕｂｅ）中で、ＥｔＯＨ（１４ｍＬ）中の中間体１５（２００ｍｇ、０．７３ｍｍｏｌ）及びＰｄ／Ｃ（１０％）の混合物を水素化した。溶媒を減圧下で蒸発させて、中間体１６（１９０ｍｇ、９４％）を無色の油状物として得た。
【０１３１】
中間体１７の調製
【化３８】
2021527659.tif 000039
中間体１６（１９０ｍｇ、０．６９ｍｍｏｌ）をＨＣｌ（１，４−ジオキサン中に４Ｍ、１．０ｍＬ、４．０ｍｍｏｌ）に溶解させ、この反応混合物を１時間にわたり室温で撹拌した。溶媒を減圧下で蒸発させて中間体１７をＨＣｌ塩（１４５ｍｇ、ｑｕａｎｔ．）とし得、このＨＣｌ塩を、さらに精製することなく次の工程で使用した。
【０１３２】
中間体２０の調製
【化３９】
2021527659.tif 000040
中間体４４（１．６７ｇ、５．７１ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（４４ｍＬ）撹拌溶液に、ｒｔで、Ａｍｂｅｒｌｙｓｔ（登録商標）１５水素フォーム（ＣＡＳ：３９３８９−２０−３、６．０１ｇ、ローディング４．７ｍｅｑ／ｇ）を添加した。この混合物を、１６時間にわたりｒｔにて、固相反応器中で振盪した。樹脂をＭｅＯＨで洗浄した（この画分を廃棄した）。次いで、ＮＨ３（ＭｅＯＨ中の７Ｎ溶液、３１．７ｍＬ）を添加した。この混合物を、２時間にわたり固相反応器中で振盪した。樹脂をろ過し、更なるＮＨ３（ＭｅＯＨ中の７Ｎ溶液、２回×３１ｍＬ；３０分振盪）で２回洗浄した。ろ液を減圧下で濃縮して、中間体２０（９６０ｍｇ、８７％）を褐色の油状物として得た。
【０１３３】
中間体２１の調製
【化４０】
2021527659.tif 000041
出発物質として中間体４５を使用して、中間体２０の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、中間体２１を調製した。
【０１３４】
中間体２２の調製
【化４１】
2021527659.tif 000042
出発物質として中間体４６を使用して、中間体２０の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、中間体２２を調製した。
【０１３５】
中間体２３の調製
【化４２】
2021527659.tif 000043
中間体４７に、ｒｔで、ＨＣｌ（９．５５ｍＬ、３８．２ｍｍｏｌ、１，４−ジオキサン中の４Ｍ溶液）を添加した。この混合物を、９０分にわたりｒｔで更に撹拌した。揮発性物質を減圧下で蒸発させ、そのようにして得られた残留物をＭｅＯＨに溶解させ、Ｉｓｏｌｕｔｅ  ＳＣＸ−２カートリッジに通し、生成物をメタノール中の７Ｎアンモニアで溶出させて、中間体２３（３３６ｍｇ、９５％）を茶色がかった油状物として得た。
【０１３６】
中間体２４の調製
【化４３】
2021527659.tif 000044
出発物質として中間体４８を使用して、中間体２０の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、中間体２４を調製した。
【０１３７】
中間体２５の調製
【化４４】
2021527659.tif 000045
中間体４９（８．３６ｇ、２８．８ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（７０ｍＬ）溶液に、ｒｔで、ＨＣｌ（４７．９８ｍＬ、２８７．９１ｍｍｏｌ、イソプロパノール中に６Ｍ）を添加した。この混合物を、１時間にわたり５０℃で更に撹拌した。揮発性物質を減圧下で蒸発させて、粗中間体２５（７．３５ｇ、９７％、２回×ＨＣｌ塩）を白色の固体として得た。
【０１３８】
中間体２６の調製
【化４５】
2021527659.tif 000046
出発物質として中間体５０を使用して、中間体２０の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、中間体２６を調製した。
【０１３９】
中間体２７の調製
【化４６】
2021527659.tif 000047
出発物質として中間体５１を使用して、中間体２０の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、中間体２７を調製した。
【０１４０】
中間体２８の調製
【化４７】
2021527659.tif 000048
出発物質として中間体５２を使用して、中間体２３の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、中間体２８を調製した。
【０１４１】
中間体２９の調製
【化４８】
2021527659.tif 000049
出発物質として中間体５３を使用して、中間体２０の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、中間体２９を調製した。
【０１４２】
中間体３０の調製
【化４９】
2021527659.tif 000050
４−クロロ−２，６−ジメチルピリミジン（ＣＡＳ：４４７２−４５−１；２．０３ｇ、１４．２ｍｍｏｌ）及びＰｄ（ｔＢｕ３Ｐ）２（０．６０ｇ、０．８５ｍｍｏｌ）の混合物に、Ｎ２雰囲気下で、中間体７３の溶液（ＴＨＦ中に０．３３Ｍ、４７．４ｍＬ、１５．７ｍｍｏｌ）を添加した。ＴＭＥＤＡ（ＣＡＳ：１１０−１８−９；２．３３ｍＬ、１５．７ｍｍｏｌ）を添加し、この反応混合物を１８時間にわたり６０℃で撹拌した。この反応を、ＮＨ４Ｃｌ（ｓａｔ．）とＮＨ３（３２％ａｑ．）との１：１溶液でクエンチした。この混合物を、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン、勾配  ０／１００から８０／２０へ）で精製した。所望の画分を集め、溶媒を減圧下で蒸発させて、中間体３０（７３５ｍｇ、９％、純度５１％）を黄色の油状物として得た。
【０１４３】
中間体３１の調製
【化５０】
2021527659.tif 000051
ａｍｂｅｒｌｙｓｔ（登録商標）１５水素フォーム（ＣＡＳ：３９３８９−２０−３；２．６８ｇ、１２．６ｍｍｏｌ）が入った閉鎖反応器に、中間体３０（７３５ｍｇ、２．５２ｍｍｏｌ、純度５１％）のＭｅＯＨ（１９．４ｍＬ）溶液を入れた。この混合物を、１６時間にわたり室温にて、固相反応器中で振盪した。樹脂をＭｅＯＨで洗浄した（この画分を廃棄した）。ＮＨ３（ＭｅＯＨ中に７Ｎ）（２５ｍＬ）を添加した。この混合物を、２時間にわたり固相反応器中で振盪した。樹脂をろ過し、ＮＨ３（ＭｅＯＨ中に７Ｎ）（２回×２５ｍＬ；３０分振盪）で洗浄した。ろ液を減圧下で濃縮して、中間体３１（４３０ｍｇ、８９％）を薄褐色の油状物として得た。
【０１４４】
中間体３２の調製
【化５１】
2021527659.tif 000052
ＴＨＦ（１０ｍＬ）中の２−メチルピリミジン−５−オール（ＣＡＳ：３５２３１−５６−２；５００ｍｇ、４．５４ｍｍｏｌ）、（Ｒ）−（−）−Ｎ−ｂｏｃ−３−ピロリジノール（ＣＡＳ：１０９４３１−８７−０；１．１１ｇ、５．９０ｍｍｏｌ）、及びトリフェニルホスフィン（１．５５ｇ、５．９０ｍｍｏｌ）の混合物に、ＤＢＡＤ（ＣＡＳ：８７０−５０−８；１．３６ｇ、５．９０ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を１８時間にわたり室温で撹拌し、濃縮乾固した。残留物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン、勾配  ０／１００から１００／０へ）で精製した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮して、中間体３２（１．１ｇ、８７％）を無色の油状物として得た。
【０１４５】
中間体３３の調製
【化５２】
2021527659.tif 000053
中間体３２（１．１０ｇ、３．９４ｍｍｏｌ）にＨＣｌ（１，４−ジオキサン中に４Ｍ、１０ｍＬ、４０ｍｍｏｌ）を添加し、この反応混合物を３時間にわたり室温で撹拌した。この反応混合物を濃縮乾固した。残留物をＥｔＯＡｃに懸濁させ、ＮＨ４ＯＨで塩基性化した。水層をＥｔＯＡｃで抽出した。まとめた有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発させて、中間体３２（５６０ｍｇ、７９％）を白色の固体として得た。
【０１４６】
中間体３４の調製
【化５３】
2021527659.tif 000054
２−ブロモ−３，５−ジフルオロピリジン（ＣＡＳ：６６０４２５−１６−１；７６１ｍｇ、３．９２ｍｍｏｌ）に、密封管中において及びＮ２雰囲気下で、中間体７２（１１ｍＬ、４．１８ｍｍｏｌ）の０．３８Ｍ溶液、ＴＭＥＤＡ（ＣＡＳ：１１０−１８−９；０．６３ｍＬ、４．２０ｍｍｏｌ）、及びＰｄ（ＰＰｈ３）２Ｃｌ２（６８．０ｍｇ、９６．６μｍｏｌ）を連続的に添加した。この反応混合物を、１６時間にわたり６５℃で撹拌した。この反応を、ＮＨ４Ｃｌ（ｓａｔ．）とＮＨ３（２６％、ａｑ．）との１／１溶液でクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン、勾配  ０／１００から３０／７０へ）で精製した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮して、中間体３４（７１５ｍｇ、６１％）を黄色の油状物として得た。
【０１４７】
中間体３５の調製
【化５４】
2021527659.tif 000055
固相反応器中のＡｍｂｅｒｌｙｓｔ（登録商標）１５水素フォーム（ＣＡＳ：３９３８９−２０−３；３．９３ｇ、１８．５ｍｍｏｌ）に、中間体３４（１．１６ｇ、３．９１ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１９．７ｍＬ）溶液を滴下した。ＣＯ２の発生が止まると、この混合物を、２日にわたり室温で振盪した。樹脂をＭｅＯＨで洗浄し（この画分を廃棄した）、次いでＮＨ３（ＭｅＯＨ中に７Ｎ）で洗浄した。ろ液を減圧下で濃縮して、中間体３５（６９８ｍｇ、９０％）を褐色の油状物として得た。
【０１４８】
中間体３６の調製
【化５５】
2021527659.tif 000056
４−ブロモ−２，６−ジメチルピリジン（ＣＡＳ：５０９３−７０−９；４９２ｍｇ、２．６４ｍｍｏｌ）及びＰｄ（ＰＰｈ３）２Ｃｌ２（１１１ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）が入ったフラスコに、Ｎ２雰囲気下で、中間体７４（ＴＨＦ中に０．２４Ｍ、１１．０ｍＬ、２．６４ｍｍｏｌ）を入れた。ＴＭＥＤＡ（ＣＡＳ：１１０−１８−９；０．４３ｍＬ、２．９１ｍｍｏｌ）を添加し、この反応混合物を２．５時間にわたり６０℃で撹拌した。この反応を、ＮＨ４Ｃｌ（ｓａｔ．）とＮＨ３（３２％、ａｑ．）との１／１溶液の添加によりクエンチした。この混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。まとめた有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン、勾配  ０／１００から８０／２０へ）で精製した。所望の画分を集め、溶媒を減圧下で蒸発させて、中間体３６（５７８ｍｇ、７２％）を黄色の油状物として得た。
【０１４９】
中間体３７の調製
【化５６】
2021527659.tif 000057
中間体３６（５７８ｍｇ、１．９０ｍｍｏｌ）に室温でＨＣｌ（１，４−ジオキサン中に４Ｍ、１１．４ｍＬ、４５．４ｍｍｏｌ）を添加し、この反応混合物を１２時間にわたり撹拌した。揮発性物質を、減圧下で蒸発させた。残留物をＭｅＯＨに溶解させ、Ｉｓｏｌｕｔｅ  ＳＣＸ−２カートリッジに通した。ＭｅＯＨアウトプット溶液を廃棄した。生成物をＮＨ３（ＭｅＯＨ中に７Ｎ）で溶出させて、中間体３７（３８４ｍｇ、９９％）を無色の油状物として得た。
【０１５０】
中間体３８の調製
【化５７】
2021527659.tif 000058
出発物質として中間体１３３（ＴＨＦ中に０．２９Ｍ）及び４−ブロモ−２，６−ジメチルピリジン（ＣＡＳ：５０９３−７０−９）を使用して、中間体３６の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、中間体３８を調製した。
粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン、勾配  ０／１００から７０／３０へ）で精製した。所望の画分を集め、溶媒を減圧下で蒸発させて、中間体３８（１．１７ｇ、６５％）を黄色の油状物として得た。
【０１５１】
中間体３９の調製
【化５８】
2021527659.tif 000059
出発物質として中間体３８を使用して、中間体３７の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、中間体３９を調製した。残留物をＭｅＯＨに溶解させ、Ｉｓｏｌｕｔｅ  ＳＣＸ−２カートリッジに通した。ＭｅＯＨアウトプット溶液を廃棄し、生成物をＮＨ３（ＭｅＯＨ中に７Ｎ）で溶出させて、中間体３９（６４５ｍｇ、８２％）を淡黄色の油状物として得た。
【０１５２】
中間体４０の調製
【化５９】
2021527659.tif 000060
トルエン（０．５７ｍＬ）中の（Ｒ）−（−）−Ｎ−Ｂｏｃ−３−ピロリジノール（ＣＡＳ：１０９４３１−８７−０、２０．０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）、５−ヒドロキシ−２−メチルピリジン（ＣＡＳ：１１２１−７８−４；１１．７ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）、及びトリフェニルホスフィン（４２．０ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）の混合物に、この溶液をＮ２でバブリングしつつ、０℃で、ＤＢＡＤ（ＣＡＳ：８７０−５０−８；３７．０ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）を滴下した。この反応混合物を６０℃で一晩撹拌し、減圧下で濃縮した。粗混合物を、そのまま次の工程で使用した。
【０１５３】
中間体４１の調製
【化６０】
2021527659.tif 000061
中間体４０（粗物質、３７２ｍｇ）にＨＣｌ（１，４−ジオキサン中に４Ｍ、３．３４ｍＬ、１３．３ｍｍｏｌ）を添加し、この反応混合物を３時間にわたり室温で撹拌した。残留物を、ＭｅＯＨで溶出させた後にＭｅＯＨ中のＮＨ３の７Ｍ溶液で溶出させるイオン交換クロマトグラフィー（ＩＳＯＬＵＴＥ  ＳＣＸ２カートリッジ）で精製した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮して、中間体４１（６３．９ｍｇ）を無色の固体として得た。
【０１５４】
中間体４２の調製
【化６１】
2021527659.tif 000062
ＤＭＦ（３．３１ｍＬ）中のＮａＨ（鉱物油中の６０％分散液、０．２１ｇ、５．１３ｍｍｏｌ）及び１５−クラウン−５（１．１４ｍＬ、４．２７ｍｍｏｌ）の撹拌混合物に、０℃で、（Ｒ）−（−）−Ｎ−ｂｏｃ−３−ピロリジノール（ＣＡＳ：１０９４３１−８７−０；０．８０ｇ、４．２７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３．３１ｍＬ）溶液を滴下した。この反応混合物を３０分にわたり０℃で撹拌し、０℃で、ＤＭＦ（３．１ｍＬ）に溶解させた６−クロロ−３−ピリダジンカルボニトリル（ＣＡＳ：３５８５７−８９−７；６５６ｍｇ、４．７０ｍｍｏｌ）の溶液を少量ずつ添加した。生じた混合物を、３時間にわたり８０℃で撹拌した。この混合物を減圧下で濃縮し、残留物を水で希釈してＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、減圧下で蒸発させた。粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン、勾配  ０／１００から６０／４０へ）で精製した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮して、中間体４２（８１０ｍｇ、６５％）を白色の固体として得た。
【０１５５】
中間体４３の調製
【化６２】
2021527659.tif 000063
中間体４２（８１０ｍｇ、２．７９ｍｍｏｌ）にＨＣｌ（１，４−ジオキサン中４Ｍ、６．９８ｍＬ、２７．９ｍｍｏｌ）を添加し、この反応混合物を３時間にわたり室温で撹拌した。この反応混合物を濃縮乾固した。残留物をＥｔＯＡｃに懸濁させ、ＮＨ４Ｃｌで塩基性化した。水相を、ＥｔＯＡｃで抽出した。まとめた有機抽出物を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発させて中間体４３得、この中間体４３をそのまま次の工程で使用した。
【０１５６】
中間体４４の調製
【化６３】
2021527659.tif 000064
（３Ｓ）−１−Ｂｏｃ−３−ヒドロキシピロリジン（ＣＡＳ：１０９４３１−８７−０、１６００ｍｇ、８．５５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（４．１２ｍＬ）撹拌溶液に、０℃で、水素化ナトリウム（３４１．８ｍｇ、８．５５ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を３０分にわたり撹拌した。次いで、この混合物をｒｔまで昇温させ、４−クロロ−２，６−ジメチルピリジン（ＣＡＳ：３５１２−７５−２、１．０９ｍＬ、８．５５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２．７８ｍＬ）溶液を滴下した。この混合物を１６時間にわたりｒｔで撹拌し、次いで６時間にわたり６０℃で撹拌した。ｒｔまで冷却した後、水を添加し、この混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮した。残留物を、フラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン：０／１００から３０／７０へ）で精製した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮して、中間体４４（１６７０ｍｇ、６７％）を無色の油状物として得た。
【０１５７】
中間体４５の調製
【化６４】
2021527659.tif 000065
出発物質として（３Ｒ）−１−Ｂｏｃ−３−ヒドロキシピロリジン（ＣＡＳ：１０９４３１−８７−０）及び４−クロロ−２，６−ジメチルピリジン（ＣＡＳ：３５１２−７５−２）を使用して、中間体４４の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、中間体４５を調製した。
【０１５８】
中間体４６の調製
【化６５】
2021527659.tif 000066
出発物質として（３Ｒ）−１−Ｂｏｃ−３−ヒドロキシピロリジン（ＣＡＳ：１０９４３１−８７−０）及び４−ブロモ−２−メトキシ−６−メチルピリジン（ＣＡＳ：１０８３１６９−００−９）を使用して、中間体４４の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、中間体４６を調製した。
【０１５９】
中間体４７の調製
【化６６】
2021527659.tif 000067
出発物質として１−Ｂｏｃ−３−メチルピロリジン−３−メタノール（ＣＡＳ：１２６３５０６−２０−２）及び４−クロロ−２，６−ジメチルピリジン（ＣＡＳ：３５１２−７５−２）を使用して、中間体４４の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、中間体４７を調製した。
【０１６０】
中間体４８の調製
【化６７】
2021527659.tif 000068
４−ブロモ−２，６−ジメチルピリジン（ＣＡＳ：５０９３−７０−９、１．７５ｇ、９．３８ｍｍｏｌ）及びビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）ジクロリド（０．３９５ｇ、０．５６ｍｍｏｌ）が入ったフラスコに、Ｎ２下で、中間体７２の溶液（ＴＨＦ中に０．２４Ｍ、４３ｍＬ、１０．３２ｍｍｏｌ）を入れた。次いで、Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルエチレンジアミン（１．５３８ｍＬ、１０．３２ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を１８時間にわたり６０℃で撹拌した。この混合物を、飽和ＮＨ４Ｃｌ／３２％水性ＮＨ３の１／１溶液の添加によりクエンチし、次いでＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン  ０／１００から８０／２０へ）で精製した。所望の画分を集め、溶媒を減圧下で蒸発させて、中間体４８（２．５９ｇ、９５５）を黄色の油状物として得た。
【０１６１】
中間体４９の調製
【化６８】
2021527659.tif 000069
出発物質として中間体７３及び４−ブロモ−２，６−ジメチルピリジン（ＣＡＳ：５０９３−７０−９）を使用して、中間体４８の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、中間体４９を調製した。
【０１６２】
中間体５０の調製
【化６９】
2021527659.tif 000070
出発物質として中間体７３及び４−ブロモ−２−メトキシ−６−メチルピリジン（ＣＡＳ：１０８３１６９−００−９）を使用して、中間体４８の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、中間体５０を調製した。
【０１６３】
中間体５１の調製
【化７０】
2021527659.tif 000071
出発物質として中間体７２及び４−ブロモ−２−メトキシ−６−メチルピリジン（ＣＡＳ：１０８３１６９−００−９）を使用して、中間体４８の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、中間体５０を調製した。
【０１６４】
中間体５２の調製
【化７１】
2021527659.tif 000072
出発物質として中間体７４及び４−ブロモ−２−メトキシ−６−メチルピリジン（ＣＡＳ：１０８３１６９−００−９）を使用して、中間体４８の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、中間体５２を調製した。
【０１６５】
中間体５３の調製
【化７２】
2021527659.tif 000073
出発物質として中間体７３及び２−クロロ−３，５−ジメチルピラジン（ＣＡＳ：３８５５７−７２−１）を使用して、中間体４８の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、中間体５３を調製した。
【０１６６】
中間体５４の調製
【化７３】
2021527659.tif 000074
７−ブロモ−４−メチル−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−１，４−ベンゾオキサジン（ＣＡＳ：１５４２６４−９５−６；２．００ｇ、８．７７ｍｍｏｌ）のＭｅ−ＴＨＦ（３０ｍＬ）撹拌溶液に、−７８℃でＮ２雰囲気下にて、ｎ−ブチル  リチウム（ヘキサン中に１．６Ｍ、６．８５ｍＬ、１１．０ｍｍｏｌ）を滴下した。この反応混合物を３０分にわたり−７８℃で撹拌し、Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチルアセトアミド（ＣＡＳ：７８１９１−００−１；１．８１ｇ、１７．５ｍｍｏｌ）のＭｅ−ＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液を滴下した。この反応混合物を１時間にわたり−７８℃で撹拌し、次いで１時間にわたり室温で撹拌した。この反応をＮＨ４Ｃｌ（ｓａｔ．）でクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、減圧下で濃縮した。残留物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン、勾配  ０／１００から３０／７０へ）で精製した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮して、中間体５４（８１８ｍｇ、４９％）を黄色の油状物として得た。
【０１６７】
中間体５５の調製
【化７４】
2021527659.tif 000075
６−ブロモ−２，３−ジヒドロベンゾフラン（ＣＡＳ：１８９０３５−２２−１；１．００ｇ、５．０２ｍｍｏｌ）のＭｅ−ＴＨＦ（２４．１ｍＬ）撹拌溶液に、−７８℃でＮ２雰囲気下にて、ｎ−ブチル  リチウム（ヘキサン中に１．６Ｍ、３．８７ｍＬ、６．１８ｍｍｏｌ）を滴下した。この反応混合物を３０分にわたり−７８℃で撹拌し、ＤＭＦ（０．９７ｍＬ、１２．５ｍｍｏｌ）を滴下した。この反応混合物を２時間にわたり−７８℃で撹拌し、ＮＨ４Ｃｌ（ｓａｔ．）でクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、減圧下で濃縮した。粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン、勾配  ０／１００から１００／０へ）で精製した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮して、中間体５５（６３１ｍｇ、８５％）をクリーム状の固体として得た。
【０１６８】
中間体５６の調製
【化７５】
2021527659.tif 000076
ＴＨＦ（２６ｍＬ）中の６−ブロモ−１Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］［１，４］オキサジン−２（３Ｈ）−オン（ＣＡＳ：１２４５７０８−１３−７；１．１３ｇ、４．９５ｍｍｏｌ）の撹拌懸濁液に、Ｎ２雰囲気下で、ボランジメチルスルフィド錯体（ＣＡＳ：１３２９２−８７−０；９５０μＬ、１０．０ｍｍｏｌ）を滴下した。この反応混合物を、２時間にわたり還流下で撹拌した。この混合物を０℃まで冷却し、ＭｅＯＨ（１０ｍＬ）を滴下した。この混合物を、１時間にわたり室温で撹拌した。溶媒を、減圧下で蒸発させた。粗混合物をＴＨＦ（２６ｍＬ）に溶解させ、０℃まで冷却した。Ｂｏｃ無水物（ＣＡＳ：２４４２４−９９−５；１．２ｍＬ、１．１ｅｑ）及びリチウム  ビス（トリメチルシリル）アミド（ＴＨＦ中に１Ｍ、５．７５ｍＬ）を滴下した。この反応混合物を２時間にわたり０℃で撹拌し、次いで１時間にわたり室温で撹拌した。この混合物を０℃まで冷却し、Ｂｏｃ無水物（０．２５ｍＬ、０．２ｅｑ）及びリチウム  ビス（トリメチルシリル）アミド（ＴＨＦ中に１Ｍ、１ｍＬ）を滴下した。この反応混合物を１時間にわたり０℃で撹拌し、ＮＨ４Ｃｌ（ｓａｔ．）で処理した。この混合物を、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン、勾配  ０／１００から７０／３０へ）で精製した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮して、中間体５６（１．２９ｇ、８３％）を淡黄色の油状物として得、これは静置すると凝固した。
【０１６９】
中間体５７の調製
【化７６】
2021527659.tif 000077
中間体５６（１．２８ｇ、４．０６ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（４１ｍＬ）撹拌溶液に、Ｎ２雰囲気化で、Ｋ２ＣＯ３（ｓａｔ．，ａｑ．、２２ｍＬ）、ビニルボロン酸ピナコールエステル（ＣＡＳ：７５９２７−４９−０；０．９５ｍＬ、５．６０ｍＬ）、及びＰｄ（ＰＰｈ３）４を連続的に添加した。この反応混合物を、２０時間にわたり８０℃で撹拌した。この混合物を水で処理し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン、勾配  ０／１００から５０／５０へ）で精製した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮して、中間体５７（９４０ｍｇ、８８％）を黄色の油状物として得た。
【０１７０】
中間体５８の調製
【化７７】
2021527659.tif 000078
１，４−ジオキサン（２７．７ｍＬ）及びＨ２Ｏ（１１．１ｍＬ）中の中間体５７（９４０ｍｇ、３．５８ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、Ｎ２雰囲気下で、過ヨウ素酸ナトリウム（ＣＡＳ：７７９０−２８−５；１．７１ｇ、８．０１ｍｍｏｌ）及び四酸化オスミウム（ｔ−ＢｕＯＨ中に２．５％、０６６ｍＬ、４８．８μｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を、１８時間にわたり室温で撹拌した。この混合物をＮａ２Ｓ２Ｏ３（ｓａｔ．）で処理し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン、勾配  ０／１００から１００／０へ）で精製した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮して、中間体５８（４４０ｍｇ、４６％）を白色の固体として得た。
【０１７１】
中間体５９の調製
【化７８】
2021527659.tif 000079
７−ブロモ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピリド［３，２−ｂ］［１，４］オキサジン（ＣＡＳ：３４９５０−８２−８；３．００ｇ、１４．０ｍｍｏｌ）及びｂｏｃ−無水物（ＣＡＳ：２４４２４−９９−５；１．１ｅｑｕｉｖ．）のＴＨＦ（６７．８ｍＬ）撹拌溶液に、Ｎ２雰囲気下で０℃にて、リチウム  ビス（トリメチルシリル）アミド（ＴＨＦ中に１Ｍ、１．１ｅｑｕｉｖ．）を１０分かけて滴下した。この反応混合物を２時間にわたり０℃で撹拌し、０℃で、ＴＨＦ（１０ｍＬ）中の更なる量のｂｏｓ−無水物（０．５２ｅｑｕｉｖ．）を添加した。この反応混合物を１時間にわたり０℃で撹拌し、ＮＨ４Ｃｌ（ｓａｔ．）で処理し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ／ＤＣＭ、勾配  ０／１００から２／９８へ）で精製した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮して、中間体５９（３．６６ｇ、８３％）をベージュ色の固体として得た。
【０１７２】
中間体６０の調製
【化７９】
2021527659.tif 000080
Ｋ２ＣＯ３（ｓａｔ．ａｑ．、２９ｍＬ）及び１，４−ジオキサン（５７．９ｍＬ）中の中間体５９（３．６６ｇ、１１．６ｍｍｏｌ）の脱酸素化溶液に、Ｎ２雰囲気下で、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（０．６７ｇ、０．５８ｍｍｏｌ）を添加し、続いてビニルボロン酸ピナコールエステル（ＣＡＳ：７５９２７−４９−０；２．４６ｍＬ、１４．５ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を、１８時間にわたり８０℃で撹拌した。この混合物を水で処理、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ／ＤＣＭ、勾配  ０／１００から５／９５へ）で精製した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮して、中間体６０（２．６９ｇ、８８％）を褐色の固体として得た。
【０１７３】
中間体６１の調製
【化８０】
2021527659.tif 000081
１，４−ジオキサン（７９．３ｍＬ）及びＨ２Ｏ（３１．７ｍＬ）中の中間体６０（２．６９ｇ、１０．２ｍｍｏｌ）の撹拌混合物に、Ｎ２雰囲気下で、過ヨウ素酸ナトリウム（ＣＡＳ：７７９０−２８−５；４．９ｇ、２２．９ｍｍｏｌ）を添加し、続いて四酸化オスミウム（ｔ−ＢｕＯＨ中に２．５％、１．８９ｍＬ、０．１４ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を４．５時間にわたり室温で撹拌し、Ｎａ２Ｓ２Ｏ３（ｓａｔ．）で処理し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン、勾配  ０／１００から４０／６０）で精製した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮して、中間体６１（１．９３ｇ、７１％）を白色の固体として得た。
【０１７４】
中間体６２の調製
【化８１】
2021527659.tif 000082
中間体９７（１３３ｍｇ、０．７３ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（３ｍＬ）溶液に、０℃で、ＮａＢＨ４（５５．５ｍｇ、１．４７ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を３０分にわたり室温で撹拌し、この反応をＮＨ４Ｃｌ（ｓａｔ．，ａｑ．）でクエンチした。この混合物を、ＤＣＭで抽出した。まとめた有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、減圧下で濃縮して、中間体６２（１３０ｍｇ、９７％）を油状物として得た。
【０１７５】
中間体６３の調製
【化８２】
2021527659.tif 000083
中間体６２（５００ｍｇ、２．７３ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１２ｍＬ）溶液に、０℃で、塩化チオニル（０．８ｍＬ、１１．０ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を２時間にわたり室温で撹拌し、水で希釈し、ＤＣＭで抽出した。まとめた有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、減圧下で蒸発させて中間体６３（５２０ｍｇ）を得、この中間体６３を、全く精製することなく次の工程で使用した。
【０１７６】
中間体６４の調製
【化８３】
2021527659.tif 000084
１，２−ジメチキシエタン（２４．６ｍＬ）中のメチル２，５−ジクロロニコチネート（ＣＡＳ：６７７５４−０３−４；１．９５ｇ、９．４７ｍｍｏｌ）、ビニルボロン酸ピナコールエステル（ＣＡＳ：７５９２７−４９−０；１．７９ｍＬ、１０．４ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（５４７ｍｇ、０．４７ｍｍｏｌ）、及びＫ２ＣＯ３（２Ｍ、９．４７ｍＬ、１８．９ｍｍｏｌ）の混合物を、１２０℃で３時間にわたり、Ｎ２雰囲気下で撹拌した。この懸濁液をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）に通してろ過し、減圧下で蒸発させた。残留物を水に溶解させ、ＤＣＭで抽出した。有機層を乾燥させ（ＮａＳＯ４）、ろ過し、減圧下で蒸発させた。残留物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＤＣＭ）で精製した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮して、中間体６４（１．４６ｇ、７８％）を褐色の油状物として得た。
【０１７７】
中間体６５の調製
【化８４】
2021527659.tif 000085
ＤＩＰＥＡ（ＮＭＰ中に２Ｍ、５．８５ｍＬ、１１．７ｍｍｏｌ）中の中間体６４（１．４０ｇ、４．６８ｍｍｏｌ）及びメチルアミン塩酸塩（ＣＡＳ：５９３−５１−１；４７３ｍｇ、７．０１ｍｍｏｌ）の混合物を、マイクロ波照射下で１０分にわたり１６０℃にて撹拌した。この混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、ＮａＨＣＯ３（ｓａｔ．）及びブラインで洗浄した。有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＥｔＯＡｃ／ＤＣＭ、勾配  ０／１００から３０／７０へ）で精製した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮して、中間体６５（６３３ｍｇ、６９％）を赤色の油状物として得、これは静置すると凝固した。
【０１７８】
中間体６６の調製
【化８５】
2021527659.tif 000086
１，４−ジオキサン（１１．９ｍＬ）及びＨ２Ｏ（４．１３ｍＬ）中の中間体６５（５００ｍｇ、２．５４ｍｍｏｌ）、カリウム  トリフルオロ（ビニル）ボレート（ＣＡＳ：１３６８２−７７−４；６８１ｍｇ、５．０９ｍｍｏｌ）、及びＫ３ＰＯ４（１．６２ｇ、７．６３ｍｍｏｌ）の混合物に、Ｎ２雰囲気下で、Ｐｄ（ｄｔｂｐｆ）Ｃｌ２（１６７ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を、１６時間にわたり１１０℃で撹拌した。この懸濁液をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）に通してろ過し、水及びＥｔＯＡｃで洗浄した。有機層を分離し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ）、ろ過し、減圧下で蒸発させた。粗混合物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＥｔＯＡｃ／ＤＣＭ、勾配  ０／１００から２０／８０へ）で精製した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮して、中間体６６（５６９ｍｇ、純度８９％）を得、この中間体６６をそのまま次の工程で使用した。
【０１７９】
中間体６７の調製
【化８６】
2021527659.tif 000087
１，４−ジオキサン（２２．１ｍＬ）及びＨ２Ｏ（９．４７ｍＬ）中の中間体６６（５６９ｍｇ、３．０２ｍｍｏｌ、純度８９％）の撹拌溶液に、Ｎ２雰囲気下で、四酸化オスミウム（ｔ−ＢｕＯＨ中に２．５％、０．５３ｍＬ、３８．９μｍｏｌ）を添加し、続いて過ヨウ素酸ナトリウム（１．３９ｇ、６．５２ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を１時間にわたり室温で撹拌し、Ｎａ２Ｓ２Ｏ３（ｓａｔ．）で処理し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ／ＤＣＭ、勾配  ０／１００から５０／５０へ）で精製した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮して、中間体６７（２１７ｍｇ、３８％）を黄色の油状物として得た。
【０１８０】
中間体７２の調製
【化８７】
2021527659.tif 000088
（３Ｒ）−１−Ｂｏｃ−３−ヨードメチルピロリジン（ＣＡＳ：１１８７９３２−６９−９；１０．１ｇ、３２．４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（６５ｍＬ）溶液を、１ｍＬ／分の流速で、４０℃にて活性化Ｚｎ（３０ｇ、４５８．８ｍｍｏｌ）を含むカラムに通して圧送した。得られた溶液をＮ２雰囲気下で集め、中間体７２を透明な溶液として得、この中間体７２をさらに操作することなく使用した。上記反応のために、Ｚｎを下記のように活性化した：ＴＨＦ（２０ｍＬ）中のＴＭＳＣｌ（２ｍＬ）及び１−ブロモ−２−クロロエタン（１．２ｍＬ）の溶液を、１ｍＬ／分の流速で、Ｚｎが入ったカラムに通した。
【０１８１】
中間体７３の調製
【化８８】
2021527659.tif 000089
出発物質として（３Ｓ）−１−Ｂｏｃ−３−ヨードメチルピロリジン（ＣＡＳ：２２４１６８−６８−７）を使用して、中間体７２の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、中間体７３を調製した。
【０１８２】
中間体７４の調製
【化８９】
2021527659.tif 000090
出発物質として中間体８１を使用して、中間体７２の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、中間体７４を調製した。
【０１８３】
中間体７５の調製
【化９０】
2021527659.tif 000091
ＤＭＦ（５．９５ｍＬ）中の２，６−ジクロロ−５−フルオロピリジン−３−オール（ＣＡＳ：２２２８６６０−６６３−５；１．１３ｇ、６．２１ｍｍｏｌ）及びＫ２ＣＯ３（１．２２ｇ、８．８２ｍｍｏｌ）の撹拌懸濁液に、（２−ブロモエトキシ）−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシラン（ＣＡＳ：８６８６４−６０−０；１．５１ｍＬ、７．０６ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を１６時間にわたり９０℃で撹拌し、水で希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出した（２回）。まとめた有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン、勾配  ０／１００から５０／５０へ）で精製した。所望の画分を集め、溶媒を減圧下で蒸発させて、中間体７５（１．０９５ｇ、７８％）を白色の固体として得た。
【０１８４】
中間体７６の調製
【化９１】
2021527659.tif 000092
ｔ−ＢｕＯＨ（３２．６ｍＬ）中の中間体７５（１．３０ｇ、５．７７ｍｍｏｌ）の混合物に、ｔ−ＢｕＯＫ（７７７ｍｇ、６．９２ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を１時間にわたり９０℃で加熱し、冷却し、溶媒を減圧下で除去した。残留物を、水及びＥｔＯＡｃで希釈した。この混合物をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）のパッドに通してろ過し、ＥｔＯＡｃで洗浄した。有機層をブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、減圧下で濃縮した。粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン、勾配  ０／１００から５０／５０へ）で精製した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮して、中間体７６（４７０ｍｇ、４３％）を白色の固体として得た。
【０１８５】
中間体７７の調製
【化９２】
2021527659.tif 000093
トルエン（１６．７ｍＬ）中の中間体７６（９００ｍｇ、４．７５ｍｍｏｌ）の混合物に、Ｐｄ（ＰＰｈ３）２Ｃｌ２（３６６ｍｇ、０．５２ｍｍｏｌ）及びトリヌチル（１−エトキシビニル）スズ（ＣＡＳ：９７６７４−０２−７；２．２５ｍＬ、６．６５ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を、１６時間にわたり９２℃で撹拌した。次いで、ＨＣｌ（２Ｎ、１ｍＬ）を添加し、この混合物を３時間にわたり室温で撹拌した。この混合物をＮａＨＣＯ３（ｓａｔ．）で中和し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、減圧下で濃縮した。粗混合物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン、勾配  ０／１００から１００／０へ）で精製した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮して、中間体７７（５６３ｍｇ、６０％）を褐色の固体として得た。
【０１８６】
中間体７８の調製
【化９３】
2021527659.tif 000094
中間体７７（５６３ｍｇ、２．８６ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（１３．４ｍＬ）溶液に、０℃で、ＮａＢＨ４（４３２ｍｇ、１１．４ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を、１０分にわたり室温で撹拌した。水を添加し、この混合物をＤＣＭで抽出した。まとめた有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、減圧下で濃縮して中間体７８（４６５ｍｇ、８１％）を得、この中間体７８をそのまま次の工程で使用した。
【０１８７】
中間体７９の調製
【化９４】
2021527659.tif 000095
中間体７８（４３５ｍｇ、２．１８ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１４．６ｍＬ）溶液に、０℃で、塩化チオニル（０．６４ｍＬ、８．７４ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を、１２時間にわたり室温で撹拌した。水（２０ｍＬ）を添加し、この混合物をＤＣＭで抽出した（３回×２０ｍＬ）。まとめた有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、減圧下で蒸発させて、中間体７９（４５３ｍｇ、８７％、純度９１％）を褐色の油状物として得た。
【０１８８】
中間体８１の調製
【化９５】
2021527659.tif 000096
トルエン（１６．６ｍＬ）中のＩ２（１．３ｇ、５．１ｍｍｏｌ）、ＰＰｈ３（１．３４ｇ、５．１ｍｍｏｌ）、及びイミダゾール（４７４ｍｇ、６．９６ｍｍｏｌ）の溶液に、ｒｔで、１−Ｂｏｃ−３−メチルピロリジン−３−メタノール（ＣＡＳ：１２６３５０６−２０−２；１ｇ、４．６４ｍｍｏｌ）を少量ずつ添加した。この混合物を、８０℃で１６時間にわたり撹拌した。次いで、この混合物を室温まで冷却し、ＥｔＯＡｃ、水、及びＮａ２Ｓ２Ｏ３（ａｑ．ｓａｔ．ｓｏｌｔｎ．）を添加した。有機層を分離し、揮発性物質を減圧下で蒸発させた。このようにして得られた残留物を、フラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン、０：１００から１０：９０へ）で精製した。生成物含有画分を減圧下で蒸発させて、中間体８１（１．１ｇ、７３％）を無色の油状物として得た。
【０１８９】
中間体８６の調製
【化９６】
2021527659.tif 000097
１−ブチル−３−メチルイミダゾリウムテトラフルオロボレート（ＣＡＳ１７４５０１−６５−６；７ｍＬ）中の１−（２，３−ジヒドロ−１，４−ベンゾジオキシン−６−イル）エテノン（２．１ｇ、１１．７８ｍｍｏｌ）の混合物に、Ｎ−フルオロ−Ｎ’−（クロロメチル）トリエチレンジアミンビス（テトラフルオロボレート）（ＣＡＳ１４０６８１−５５−６；１０．４３ｇ、２９．５ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を、１６時間にわたり７０℃で加熱した。次いで、この反応混合物をｒｔまで冷却し、水で処理し、ＥｔＯＡｃで抽出した（２回×１５ｍＬ）。まとめた有機層を減圧下で蒸発させて油状物を得、この油状物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン、０／１００から１０／９０へ）で精製した。所望の画分を濃縮して、中間体８６（１．１ｇ、４８％）を白色の固体として得た。
【０１９０】
中間体９３の調製
【化９７】
2021527659.tif 000098
１，４−ジオキサン（２５ｍＬ）及び水（７．５ｍＬ）中の中間体９４（５０８ｍｇ、２．６７ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、密封管中において及びＮ２雰囲気下で、過ヨウ素酸ナトリウム（２．９１ｇ、１３．６ｍｍｏｌ）を添加し、続いて四酸化オスミウム（０．４７２ｍＬ、０．０３５ｍｍｏｌ、ｔ−ＢｕＯＨ中に２．５％）及び２，６−ジメチルピリジン（０．７１ｍＬ、６．１１ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を、１６時間にわたり室温で撹拌した。この混合物を水で処理し、ろ過し、ＥｔＯＡｃで抽出した。ろ液を、追加のＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ／ＤＣＭ、０／１００から１００／０へ）で精製した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮して、中間体９３（２３０ｍｇ、４５％）を白色の固体として得た。
【０１９１】
中間体９４の調製
【化９８】
2021527659.tif 000099
７−ブロモ−４−メチル−２，３−ジヒドロ−４Ｈ−ピリド［３，２−ｂ］［１，４］オキサジン−３−オン（ＣＡＳ：１２２４５０−９７−９）の１，４−ジオキサン（７．５ｍＬ）撹拌溶液に、密封管中において及びＮ２雰囲気下で、炭酸カリウム（７．５ｍＬ、１０％水溶液）を添加し、続いて４，４，５，５−テトラメチル−２−ビニル−１，３，２−ジオキサボロラン（ＣＡＳ：７５９２７−４９−０；０．６５ｍＬ、３．８３ｍｍｏｌ）及びＰｄ（ＰＰｈ３）４（３６５ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を、マイクロ波照射下で１５分にわたり１５０℃にて撹拌した。この混合物を水で処理し、ＤＣＭで抽出した。有機層を分離し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン  ０／１００から１００／０へ）で精製した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮して、中間体９４（５１６ｍｇ、８７％）を白色の固体として得た。
【０１９２】
中間体９６の調製
【化９９】
2021527659.tif 000100
中間体２５（１２５ｍｇ、０．６６ｍｍｏｌ）及びｔｅｒｔ−ブチル７−ホルミル−２Ｈ−ピリド［３，２−ｂ］［１，４］オキサジン−４（３Ｈ）−カルボキシレート（ＣＡＳ：１２８７３１２−６２−２、２１６．３６ｍｇ、０．８２ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（３．９８ｍＬ）撹拌溶液に、密封管中において及びＮ２下で、チタン（ＩＶ）イソプロポキシド（５７８．５μＬ、１．９８ｍｍｏｌ）を滴下した。この混合物を、１６時間にわたりｒｔで撹拌した。この混合物を０℃で冷却し、臭化メチルマグネシウム（ＴＨＦ中に１．４Ｍ、２．３１ｍＬ、３．２４ｍｍｏｌ）を１０分かけて滴下した。この混合物を、１９時間にわたりｒｔで撹拌した。この混合物を飽和ＮＨ４Ｃｌ及びＤＣＭで処理し、珪藻土のパッドに通してろ過し、より多くのＤＣＭで洗浄した。ろ液を、追加のＤＣＭで抽出した。有機層を分離し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ；ＭｅＯＨ／ＤＣＭ  ０／１００から１０／９０へ）で精製した。所望の画分を集めて蒸発させて、中間体９６（８０．２ｍｇ、２８％）を、黄色の粘着性のある固体として得た。
【０１９３】
中間体９７の調製
【化１００】
2021527659.tif 000101
乾燥ＴＨＦ（２０ｍＬ）中の中間体９８（３４０ｍｇ、２．０７１ｍｍｏｌ）の混合物に、０℃で、臭化メチルマグネシウム（２．０７１ｍＬ、２．９ｍｍｏｌ、ＴＨＦ中に１．４Ｍ）を添加した。この添加の完了後、この反応物をｒｔで１６時間にわたり撹拌した。この混合物を１ＭａｑＨＣｌでクエンチして３０分にわたり撹拌し、次いで、粗物質をｐＨ８までＮＨ４ＯＨで塩基性化した。この溶液を、ＥｔＯＡｃで抽出した（２回×５ｍＬ）。まとめた有機抽出物を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、蒸発乾固させて残留物を得、この残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン  ０／１００から２０／８０へ）で精製した。所望の画分を集めて濃縮して、中間体９７（１５０ｍｇ、４０％）を無色の油状物として得た。
【０１９４】
中間体９８の調製
【化１０１】
2021527659.tif 000102
アセトニトリル（７ｍＬ）中の中間体９９（４００ｍｇ、２．５７ｍｍｏｌ）の混合物に、トリメチルシリルシアニド（ＣＡＳ：７６７７−２４−９；１．２９ｍＬ、１０．３ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（０．９ｍＬ、６．４７ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を、２４時間にわたり９０℃で撹拌した。この混合物を冷却し、水で処理し、ＥｔＯＡｃで抽出した（２回×１０ｍＬ）。まとめた有機抽出物をＭｇＳＯ４で乾燥させ、溶媒を減圧下で蒸発させて残留物を得、この残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン  ０／１００から３０／６０へ）で精製した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮して、中間体９８（３２０ｍｇ、７６％）を油状物として得た。
【０１９５】
中間体９９の調製
【化１０２】
2021527659.tif 000103
ＤＣＭ（１５ｍＬ）中の５−フルオロ−２，３−ジヒドロフロ［２，３−ｂ］ピリジン（ＣＡＳ：１３５６５４２−４１−０；５００ｍｇ、３．６ｍｍｏｌ）の混合物に、ｒｔで、メタクロロ過安息香酸（８０６ｍｇ、４．７ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を、３６時間にわたり２５℃で撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、そのようにして得られた残留物を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（シリカ；ＥｔＯＡｃ／ヘプタン  ０／１００から３０／７０へ、次いでＤＣＭ／ＭｅＯＨ  ０／１００から６／９４へ）で精製した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮して、中間体９９（４００ｍｇ、７２％）を白色の固体として得た。
【０１９６】
中間体１００の調製
【化１０３】
2021527659.tif 000104
トルエン（１５ｍＬ）中の中間体１０１（１．６ｇ、５．７ｍｍｏｌ）の混合物に、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）ジクロリド（４００ｍｇ、０．５７ｍｍｏｌ）及びトリブチル（１−エトキシビニル）スズ（ＣＡＳ：９７６７４−０２−７；２．５ｍＬ、７．４ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を１６時間にわたり９２℃で加熱し、次いで粗物質を冷却し、水性２Ｎ  ＨＣｌ（５ｍＬ）で処理し、この混合物を２時間にわたり撹拌した。粗物質をＮａＨＣＯ３の水性飽和溶液で中和し、ＥｔＯＡｃで抽出し、まとめた有機層を減圧下で蒸発させた。粗物質を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ、０／１００から５／９５へ）で精製した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮して、中間体１００（８５０ｍｇ、７６％）をオレンジ色の固体として得た。
【０１９７】
中間体１０１の調製
【化１０４】
2021527659.tif 000105
ｔ−ＢｕＯＨ（６．９１ｍＬ）中の中間体１０２（５ｇ、１２．２ｍｍｏｌ）の混合物に、ｒｔで、カリウム  ｔｅｒｔ−ブトキシド（２０６ｍｇ、１．８３ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を、３時間にわたり９０℃で加熱した。冷却後、溶媒を減圧下で除去し、残留物を水で希釈した。水溶液を、ＥｔＯＡｃで抽出した（３回×１２ｍＬ）。まとめた有機層をブラインで洗浄し（２回×１０ｍＬ）、分離し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、次いで濃縮した。粗物質を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ、０／１００から５／９５へ）で精製した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮して、中間体１０１（１．６ｇ、４７％）を白色の固体として得た。
【０１９８】
中間体１０２の調製
【化１０５】
2021527659.tif 000106
ＴＨＦ（１２０ｍＬ）中の中間体１０３（８ｇ、１５．３ｍｍｏｌ）の混合物に、テトラブチルアンモニウムフッ化物（１５．３ｍＬ、１５．ｍｍｏｌ、ＴＨＦ中の１Ｍ溶液）を添加し、この混合物をｒｔで３時間にわたり撹拌した。水を添加し、粗物質をＥｔＯＡｃで抽出した。有機相を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、減圧下で蒸発させてオイル状物を得、このオイル状物をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ、０／１００から５／９５へ）で精製した。所望の画分を濃縮して、中間体１０２（５．８ｇ、９２％）をオイル状物として得た。
【０１９９】
中間体１０３の調製
【化１０６】
2021527659.tif 000107
ＤＭＦ（１５ｍＬ）中の中間体１０４（６．１ｇ、１６．７ｍｍｏｌ）、（２−ブロモエトキシ）ジメチル−ｔｅｒｔ−ブチルシラン（４．４ｇｍ  １８．４ｍｍｏｌ）、及びカリウム  ｔｅｒｔ−ブトキシド（５．０８ｇ、３６．７８ｍｍｏｌ）の混合物を、５時間にわたり９０℃で加熱した。粗物質を冷却し、水で処理し、ＥｔＯＡｃで抽出した（２回×２０ｍＬ）。まとめた有機抽出物を減圧下で蒸発させて残留物を得、この残留物をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン、０／１００から２０／８０へ）で精製した。所望の画分を減圧下で濃縮して、中間体１０３（８．１ｇ、９３％）をオイル状物として得た。
【０２００】
中間体１０４の調製
【化１０７】
2021527659.tif 000108
Ｎａ２ＣＯ３（３０ｍＬ、ａｑ．ｓａｔ．ｓｏｌｔｎ．）及び水（１０ｍＬ）中の３−フルオロ−５−ヒドロキシピリジン（２ｇ、１７．７ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｉ２（９．２ｇ、３６．２５ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物をｒｔで１６時間にわたり撹拌した。この反応混合物を、Ｎａ２Ｓ２Ｏ３の水性飽和溶液でクエンチし、この溶液のｐＨを、水性ＨＣｌの添加によりｐＨ＝５に調整した。この反応混合物をＥｔＯＡｃで抽出し（３回×７０ｍＬ）、まとめた有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、ろ過し、減圧下で蒸発させて、中間体１０４（６．０２ｇ、９３％）を黄色の固体として得た。
【０２０１】
中間体１０７の調製
【化１０８】
2021527659.tif 000109
中間体１０８（４．０４ｇ、２２．３ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１５０ｍＬ）溶液に、０℃で、塩化チオニル（６．５１ｍＬ、８９ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を、１２時間にわたりｒｔで撹拌した。水（８０ｍＬ）を添加し、この混合物をＤＣＭで抽出した（８０ｍＬ×３回）。まとめた有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、減圧下で蒸発させて、粗中間体１０７（３．５３ｇ、７９％）を褐色の油状物とし得、これは静置すると凝固した。
【０２０２】
中間体１０８の調製
【化１０９】
2021527659.tif 000110
１−（２，３−ジヒドロ−［１，４］ジオキシノ［２，３−ｂ］ピリジン−６−イル）エテノン（ＣＡＳ：１２５４０４４−２５−１；４．５ｇ、２３．４ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（１０９ｍＬ）溶液に、０℃で、水素化ホウ素ナトリウム（３．５４ｇ、９４ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を、１０分にわたりｒｔで撹拌した。水を添加し、この混合物をＤＣＭで抽出した（８０ｍＬ×３回）。有機層をまとめ、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、減圧下で濃縮して、中間体１０８（４．０４ｇ、９５％）を淡黄色の油状物として得た。
【０２０３】
中間体１１８の調製
【化１１０】
2021527659.tif 000111
出発物質として中間体１１９を使用して、中間体２０の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、中間体１１８を調製した。
【０２０４】
中間体１１９の調製
【化１１１】
2021527659.tif 000112
出発物質として（Ｒ）−１−Ｂｏｃ−３−ヒドロキシピロリジン（ＣＡＳ：１０９４３１−８７−０）及び４−クロロメチル−２，６−ジメチルピリジン（ＣＡＳ：１２０７３９−８７−９）を使用して、中間体４４の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、中間体１１９を調製した。
【０２０５】
中間体１２０の調製
【化１１２】
2021527659.tif 000113
出発物質として中間体１２１を使用して、中間体１０７の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、中間体１２０を調製した。
【０２０６】
中間体１２１の調製
【化１１３】
2021527659.tif 000114
出発物質として１−（２，３−ジヒドロ−［１，４］ジオキシノ［２，３−ｂ］ピリジン−７−イル）−エタノン（ＣＡＳ：１２５４０４４−１５−９）を使用して、中間体１０８の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、中間体１２１を調製した。
【０２０７】
中間体１２２の調製
【化１１４】
2021527659.tif 000115
出発物質として中間体２７及び中間体１２３を使用して、中間体９６の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、中間体１２２を調製した。
【０２０８】
中間体１２３の調製
【化１１５】
2021527659.tif 000116
出発物質として中間体１２４を使用して、中間体９３の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、中間体１２３を調製した。
【０２０９】
中間体１２４の調製
【化１１６】
2021527659.tif 000117
出発物質として中間体１２５を使用して、中間体９４の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、中間体１２４を調製した。
【０２１０】
中間体１２５の調製
【化１１７】
2021527659.tif 000118
丸底フラスコ中におけるＴＨＦ（４４ｍＬ）中の７−ブロモ−６−フルオロ−２Ｈ−ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン−３（４Ｈ）−オン（ＣＡＳ：１２６０８２９−３５−３；２．１ｇ、８．５３ｍｍｏｌ）の撹拌懸濁液に、冷却器下及びＮ２雰囲気下で、ボランジメチルスルフィド錯体（１．６５ｍＬ、１７．４ｍｍｏｌ）を滴下した。この混合物を、２時間にわたり還流温度で撹拌した。この混合物を０℃で冷却し、ＭｅＯＨ（１２ｍＬ）を滴下した。この混合物を、１時間にわたりｒｔで撹拌した。溶媒を、減圧下で蒸発させた。粗物質をＴＨＦ（４４ｍＬ）に溶解させ、０℃で冷却した。Ｂｏｃ無水物（ＣＡＳ：２４４２４−９９−５；２．６５ｍＬ、１２．４ｍｍｏｌ）を一度に添加し、続いてリチウム  ビス（トリメチルシリル）アミド（１２．１ｍＬ、１２．１ｍｍｏｌ、ＴＨＦ中に１Ｍ溶液）を滴下し、この混合物を１時間にわたり０℃で撹拌し、続いて６０時間にわたりｒｔで撹拌した。この混合物をａｑ  ｓａｔ  ＮＨ４Ｃｌで処理し、ＥｔＯＡＣで抽出した。有機層を分離し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン  ０／１００から７０／３０へ）で精製した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮して、中間体１２５（２．８ｇ、９９％）を黄色の油状物として得た。
【０２１１】
中間体１２６の調製
【化１１８】
2021527659.tif 000119
出発物質として中間体２４及びｔｅｒｔ−ブチル  ７−ホルミル−２Ｈ−ピリド［３，２−ｂ］［１，４］オキサジン−４（３Ｈ）−カルボキシレート（ＣＡＳ：１２８７３１２−６２−２）を使用して、中間体９６の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、中間体１２６を調製した。
【０２１２】
中間体１２７の調製
【化１１９】
2021527659.tif 000120
出発物質として中間体１２８を使用して、中間体２０の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、中間体１２７を調製した。
【０２１３】
中間体１２８の調製
【化１２０】
2021527659.tif 000121
出発物質として（Ｓ）−１−Ｂｏｃ−３−（ヒドロキシメチル）ピロリジン（ＣＡＳ：１０９４３１−８７−０）及び４−クロロメチル−２，６−ジメチルピリジン（ＣＡＳ：１２０７３９−８７−９）を使用して、中間体４４の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、中間体１２８を調製した。
【０２１４】
中間体１２９の調製
【化１２１】
2021527659.tif 000122
出発物質として中間体１３０を使用して、中間体１０７の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、中間体１２９を調製した。
【０２１５】
中間体１３０の調製
【化１２２】
2021527659.tif 000123
出発物質として中間体１００を使用して、中間体１０８の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、中間体１３０を調製した。
【０２１６】
中間体１３１の調製
【化１２３】
2021527659.tif 000124
出発物質として中間体１３２を使用して、中間体２３の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、中間体１３１を調製した。
【０２１７】
中間体１３２の調製
【化１２４】
2021527659.tif 000125
出発物質として中間体１３３及び４−ブロモ−２−メトキシ−６−メチルピリジン（ＣＡＳ：１０８３１６９−００−９）を使用して、中間体４８の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、中間体１３２を調製した。
【０２１８】
中間体１３３の調製
【化１２５】
2021527659.tif 000126
出発物質として中間体１３４を使用して、中間体７２の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、中間体１３３を調製した。
【０２１９】
中間体１３４の調製
【化１２６】
2021527659.tif 000127
出発物質として中間体トランス−ｔｅｒｔ−ブチル−３−（ヒドロキシメチル）−４−ピロリジン−１−カルボキシレートを使用して、中間体８１の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、中間体１３４を調製した。
【０２２０】
中間体１３５の調製
【化１２７】
2021527659.tif 000128
（Ｒ）−（−）−Ｎ−Ｂｏｃ−３−ピロリジノール（ＣＡＳ：１０３０５７−４４−９；１５０ｍｇ、０．８０ｍｍｏｌ）の無水ＤＭＦ（２．０２ｍＬ）溶液に、Ｎ２雰囲気下で０℃にて、ＮａＨ（鉱物油中の６０％分散液、３８．５ｍｇ、０．９６ｍｍｏｌ）及び１５−クラウン−５（０．２ｍＬ、０．９６ｍｍｏｌ）を添加した。４−クロロ−２−メチルピリジン（ＣＡＳ：３６７８−６２−４；９７．８μＬ、０．８８ｍｍｏｌ）を添加し、この反応混合物を１６時間にわたり６０℃で撹拌した。追加の量のＮａＨ（鉱物油中の６０％分散液、１ｅｑ）を添加し、この反応混合物を６０℃で一晩撹拌した。再びＮａＨ（鉱物油中の６０％分散液、１ｅｑ）を添加し、この反応混合物を６０℃で更なる４時間にわたり撹拌した。０℃で水を添加し、この混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。粗混合物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン、勾配  ０／１００から８０／２０へ）で精製した。所望の画分を集め、溶媒を減圧下で蒸発させて、中間体１３５（１７８．９ｍｇ、８０％）を黄色の油状物として得た。
【０２２１】
中間体１３６の調製
【化１２８】
2021527659.tif 000129
中間体１３５（１７９ｍｇ、０．６４ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（５．５ｍＬ）撹拌溶液に、ＨＣｌ（１，４−ジオキサン中に４Ｍ、１．９３ｍＬ、７．７１ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を３時間にわたり室温で撹拌し、溶媒を減圧下で蒸発させて中間体１３６（２ＨＣｌ塩、１９１ｍｇ）を得、この中間体１３６を、全く精製することなく次の工程で使用した。
【０２２２】
中間体１３７の調製
【化１２９】
2021527659.tif 000130
出発物質として（Ｒ）−（−）−Ｎ−ｂｏｃ−３−ピロリジノール（ＣＡＳ：１０３０５７−４４−９）及び５−クロロ−２，３−ジメチルピラジン（ＣＡＳ：１８２５００−２８−３）を使用して、中間体１３５の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、中間体１３７を調製した。粗物質を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン、勾配  ０／１００から８０／２０へ）で精製した。所望の画分を集め、溶媒を減圧下で蒸発させて、中間体１３７（１９８ｍｇ、８４％）を薄黄色の油状物として得た。
【０２２３】
中間体１３８の調製
【化１３０】
2021527659.tif 000131
出発物質として中間体１３７を使用して、中間体１３６の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、中間体１３８を調製した。粗生成物（ＨＣｌ塩、１９０ｍｇ）を、全く精製することなく次の工程で使用した。
【０２２４】
中間体１３９の調製
【化１３１】
2021527659.tif 000132
出発物質として（Ｒ）−（−）−Ｎ−ｂｏｃ−３−ピロリジノール（ＣＡＳ：１０３０５７−４４−９）及び４−クロロ−２，６−ジメチルピリミジン（ＣＡＳ：１８２５００−２８−３）を使用して、中間体１３５の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、中間体１３９を調製した。粗物質を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン、勾配  ０／１００から８０／２０へ）で精製した。所望の画分を集め、溶媒を減圧下で蒸発させて、中間体１３９（１６７ｍｇ、７１％）を薄黄色の油状物として得た。
【０２２５】
中間体１４０の調製
【化１３２】
2021527659.tif 000133
出発物質として中間体１３９を使用して、中間体１３６の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、中間体１４０を調製した。粗生成物（ＨＣｌ塩、１６０ｍｇ）を、全く精製することなく次の工程で使用した。
【０２２６】
中間体１４１の調製
【化１３３】
2021527659.tif 000134
５，６−ジメチルピリジン−３−オール（ＣＡＳ：６１８９３−００−３；１００ｍｇ、０．８１ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ（２．５６ｍＬ）溶液に、Ｎ２雰囲気下で、Ｃｓ２ＣＯ３（３３７ｍｇ、１．０３ｍｍｏｌ）及び（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル  ３−（トシルオキシ）ピロリジン−１−カルボキシレート（ＣＡＳ：１３９９８６−０３−１；２５２ｍｇ、０．７４ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を、４時間にわたり６０℃で撹拌した。水を添加し、この混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、減圧下で濃縮した。粗混合物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ；ＥｔＯＡｃ／ヘプタン、勾配  ０／１００から８０／２０へ）で精製した。所望の画分を集め、溶媒を減圧下で蒸発させて、中間体１４１（１４６ｍｇ、６８％）を薄黄色の固体として得た。
【０２２７】
中間体１４２の調製
【化１３４】
2021527659.tif 000135
出発物質として中間体１４１を使用して、中間体１３６の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、中間体１４２を調製した。粗生成物（ＨＣｌ塩、１５１ｍｇ）を、全く精製することなく次の工程で使用した。
【０２２８】
中間体１４３の調製
【化１３５】
2021527659.tif 000136
出発物質としてＲ）−ｔｅｒｔ−ブチル  ３−（トシルオキシ）ピロリジン−１−カルボキシレート（ＣＡＳ：１３９９８６−０３−１）及び５−ヒドロキシ−２−（トリフルオロメチル）ピリジン（ＣＡＳ：２１６７６６−１２−０）を使用して、中間体１４１の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、中間体１４３を調製した。粗混合物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ；ＥｔＯＡｃ／ヘプタン、勾配  ０／１００から８０／２０へ）で精製した。所望の画分を集め、溶媒を減圧下で蒸発させて、中間体１４３（１７２ｍｇ、７８％）を薄黄色の油状物として得た。
【０２２９】
中間体１４４の調製
【化１３６】
2021527659.tif 000137
出発物質として中間体１４３を使用して、中間体１３６の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、中間体１４４を調製した。粗生成物（ＨＣｌ塩、１４４ｍｇ）を、全く精製することなく次の工程で使用した。
【０２３０】
中間体１４５の調製
【化１３７】
2021527659.tif 000138
ＤＣＭ（３．９８ｍＬ）中の中間体２５（１２５ｍｇ、０．６６ｍｍｏｌ）及び中間体５８（２１６ｍｇ、０．８２ｍｍｏｌ）の撹拌混合物に、密封管中において及びＮ２雰囲気下で、Ｔｉ（Ｏｉ−Ｐｒ）４（ＣＡＳ：５４６−６８−９；０．５８ｍＬ、１．９８ｍｍｏｌ）を滴下した。この反応混合物を１６時間にわたり室温で撹拌し、０℃まで冷却し、臭化メチルマグネシウム（ＴＨＦ中に１．４Ｍ、２．３１ｍＬ、３．２４ｍｍｏｌ）を１０分かけて滴下した。この反応混合物を、１９時間にわたり室温で撹拌した。この混合物を、ＮＨ４Ｃｌ（ｓａｔ．溶液）及びＤＣＭで処理し、Ｃｅｌｉｔｅ（登録商標）のパッドに通してろ過し、ＤＣＭで洗浄した。ろ液を、ＤＣＭで抽出した。有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ、勾配  ０／１００から１０／９０へ）で精製した。所望の画分を集め、減圧下で蒸発させて、中間体１４５（１１８ｍｇ、４０％）を褐色の油状物として得た。
【０２３１】
中間体１４６の調製
【化１３８】
2021527659.tif 000139
（Ｒ）−３−ヒドロキシメチル−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（ＣＡＳ：１３８１０８−７２−２；１．００ｇ、４．９７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍＬ）溶液に、窒素雰囲気下で０℃にて、ＮａＨ（鉱物油中の６０％分散液、２３３８ｍｇ、５．９６ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を３０分にわたり０℃で撹拌し、４−クロロ−２，６−ジメチルピリジン（ＣＡＳ：３５１２−７５−２；６９７ｍｇ、５．４７ｍｍｏｌ）を滴下した。この反応混合物を１時間にわたり０℃で撹拌し、次いで２０時間にわたり８０℃で撹拌した。この反応をＮＨ４Ｃｌ（ｓａｔ．）でクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、減圧下で蒸発させた。粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン、勾配  ５０／５０〜１００／０へ）で精製した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮して、中間体１４６（１．４０ｇ、９２％）を油状物として得た。
【０２３２】
中間体１４７の調製
【化１３９】
2021527659.tif 000140
Ａｍｂｅｒｌｙｓｔ（登録商標）１５水素フォーム（ＣＡＳ：３９３８９−２０−３；４．８６ｇ）が入った反応器に、中間体１４６（１．４０ｇ、４．５７ｍｍｏｌ０のＭｅＯＨ（３０ｍＬ）溶液を入れた。この混合物を、１６時間にわたり室温にて、固相反応器中で振盪した。樹脂をＭｅＯＨで洗浄し（この画分を廃棄した）、次いでＮＨ３（ＭｅＯＨ中に７Ｎ）で洗浄した。ろ液を減圧下で濃縮して、中間体１４７（５００ｍｇ、５３％）を淡褐色の油状物として得た。
【０２３３】
中間体１４８の調製
【化１４０】
2021527659.tif 000141
出発物質として（Ｓ）−（＋）−Ｎ−ｂｏｃ−３−ピロリジノール（ＣＡＳ：１０１４６９−９２−５）及び４−ブロモ−２−メトキシ−６−メチルピリジン（ＣＡＳ：１０８３１６９−００−９）を使用して、中間体１４６の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、中間体１４８を調製した。
【０２３４】
中間体１４９の調製
【化１４１】
2021527659.tif 000142
出発物質として中間体１４８を使用して、中間体１４７の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、中間体１４９を調製した。
【０２３５】
最終化合物の調製
Ｅ１．生成物１の調製
【化１４２】
2021527659.tif 000143
ＤＣＭ（３．１２ｍＬ）中の中間体５４・２ＨＣｌ（２５０ｍｇ、０．９５ｍｍｏｌ）、中間体２５（１８２ｍｇ、０．９５ｍｍｏｌ）、Ｔｉ（Ｏｉ−Ｐｒ）４（ＣＡＳ：５４６−６８−９；０．２８ｍＬ、０．９５ｍｍｏｌ）、及びＥｔ３Ｎ（０．３９ｍＬ、２．８５ｍｍｏｌ）の混合物に、室温で、シアノ水素化ホウ素ナトリウム（ＣＡＳ：２５８９５−６０−７；７１．６ｍｇ、１．１４ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を、１６時間にわたり８０℃で撹拌した。水を添加し、生成物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、減圧下で濃縮した。粗混合物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＮＨ３（ＭｅＯＨ中に７Ｍ）／ＤＣＭ、勾配  ０／１００から５／９５へ）で精製した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮した。２回目の精製を、ＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５μｍ）、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３（０．２５％水溶液）／ＣＨ３ＣＮ、勾配  ６７／３３から５０／５０へ）で実施して、無色の油状物を得た。
【０２３６】
生成物（２２０ｍｇ）をＭｅＯＨに溶解させ、ＨＣｌ（ｉ−ＰｒＯＨ中に６Ｍ、０．４８ｍＬ、２．８５ｍｍｏｌ）で処理した。この混合物を２時間にわたり室温で撹拌し、減圧下で濃縮して、生成物１（２２１ｍｇ、５３％）を白色の固体として得た。
【０２３７】
Ｅ２．生成物２の調製
【化１４３】
2021527659.tif 000144
ＭｅＯＨ（３．０８ｍＬ）中の中間体２５・２ＨＣｌ（（２５０ｍｇ、０．９５ｍｍｏｌ）、４−メチル−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−１，４−ベンゾオキサジン−７−カルボアルデヒド（ＣＡＳ：１４１１０３−９３−７；１６８ｍｇ、０．９５ｍｍｏｌ）、及びＥｔ３Ｎ（０．４０ｍＬ、２．８５ｍｍｏｌ）の混合物に、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（ＣＡＳ：５６５５３−６０−７；３０２ｍｇ、１．４３ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を、１６時間にわたり室温で撹拌した。水を添加し、生成物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、減圧下で濃縮した。粗混合物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＮＨ３（ＭｅＯＨ中に７Ｍ）／ＤＣＭ、勾配  ０／１００から５／９５へ）で精製した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮した。２回目の精製を、ＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５μｍ）、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３（０．２５％水溶液）／ＣＨ３ＣＮ、勾配  ８０／２０から６０／４０へ）で実施した。残留物（１８０ｍｇ）をＭｅＯＨに溶解させ、ＨＣｌ（ｉ−ＰｒＯＨ中に６Ｍ、０．１６ｍＬ、０．９５ｍｍｏｌ）で処理した。この混合物を２時間にわたり室温で撹拌し、減圧下で濃縮して、生成物２（１９８ｍｇ、４９％）を灰色の固体として得た。
【０２３８】
Ｅ３．生成物３の調製
【化１４４】
2021527659.tif 000145
中間体１７・ＨＣｌ（６５．０ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１．２８ｍＬ）撹拌溶液に、室温で及びＮ２雰囲気下で、２，３−ジヒドロ−［１，４］ジオキシノ［２，３−ｂ］ピリジン−６−カルボアルデヒド（ＣＡＳ：６１５５６８−２４−６；８５．９ｍｇ、０．５２ｍｍｏｌ）及びＴｉ（Ｏｉ−Ｐｒ）４（ＣＡＳ：５４６−６８−９；０．３７ｍＬ、１．２３ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を１６時間にわたり撹拌し、０℃まで冷却し、臭化メチルマグネシウム（ＴＨＦ及びトルエン中に１．４Ｍ、１．５３ｍＬ、２．１４ｍｍｏｌ）を少量ずつ添加した。この反応混合物を１５分にわたりこの温度で撹拌し、次いで１６時間にわたり室温で撹拌した。この混合物をＮＨ４Ｃｌ（ｓａｔ．溶液）で処理し、ＤＣＭで希釈し、珪藻土のパッドに通して濾過した。有機層を分離し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃ、勾配  ０／１００から１０／９０へ）で精製した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮した。２回目の精製を、ＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５μｍ）、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３（水中に０．２５％溶液）／ＣＨ３ＣＮ、勾配  ８０／２０から６０／４０へ）で実施して、生成物３（１４ｍｇ、１１％）を淡黄色の油状物として得た。
【０２３９】
Ｅ４．生成物４の調製
【化１４５】
2021527659.tif 000146
２，３−ジヒドロ−［１，４］ジオキシノ［２，３−Ｂ］ピリジン−６−カルボアルデヒド（ＣＡＳ：６１５５６８−２４−６）及び中間体１１・ＨＣｌを使用して、生成物３の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、生成物４を調製した。中間体１１・ＨＣｌをＭｅＯＨに溶解させ、Ｉｓｏｌｕｔｅ  ＳＣＸ−２カートリッジに通し、生成物を、反応で使用する前にＮＨ３（ＭｅＯＨ中に７Ｎ）で溶出させた。
【０２４０】
粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃ、勾配  ０／１００から１０／９０へ）で精製した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮した。２回目の精製を、ＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５μｍ）、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３（０．２５％水溶液）／ＣＨ３ＣＮ、勾配  ５４／４６から３６／６４へ）により実施した。残留物（３６ｍｇ）を、ＥｔＯＡｃ及びＨ２Ｏで処理した。有機層を分離し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発させて、生成物４（３０ｍｇ、２１％）を無色のフィルム状物として得た。
【０２４１】
Ｅ５．生成物５の調製
【化１４６】
2021527659.tif 000147
２，３−ジヒドロ−［１，４］ジオキシノ［２，３−Ｂ］ピリジン−６−カルボアルデヒド（ＣＡＳ：６１５５６８−２４−６）及び中間体１４を使用して、生成物３の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、生成物５を調製した。
【０２４２】
粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃ、勾配  ０／１００から１０／９０へ）で精製した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮した。２回目の精製を、ＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５μｍ）、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３（０．２５％水溶液）／ＣＨ３ＣＮ、勾配  ５４／４６から３６／６４へ）により実施した。残留物（６５ｍｇ）を、ＥｔＯＡｃ及びＨ２Ｏで処理した。有機層を分離し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発させて、生成物５（５０ｍｇ、３０％）を無色のフィルム状物として得た。
【０２４３】
Ｅ６．生成物６の調製
【化１４７】
2021527659.tif 000148
中間体５５及び中間体１４を使用して、生成物３の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、生成物６を調製した。
【０２４４】
粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃ、勾配  ０／１００から１０／９０へ）で精製した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮して、生成物６（１１５ｍｇ、７２％）を無色のオイル状物として得た。
【０２４５】
Ｅ７．生成物７の調製
【化１４８】
2021527659.tif 000149
ＤＣＥ（１．６６ｍＬ）中の中間体１４（１００ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）及び中間体８６（８０．３ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）の混合物に、室温で、Ｔｉ（Ｏｉ−Ｐｒ）４（ＣＡＳ：５４６−６８−９；０．１２ｍＬ、０．４１ｍｍｏｌ）及びシアノ水素化ホウ素ナトリウム（ＣＡＳ：２５８９５−６０−７；３０．９ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ）を順次添加した。この反応混合物を、密封管中において１６時間にわたり８０℃で撹拌した。この混合物をＮａＨＣＯ３（ｓａｔ．溶液）で処理し、ＤＣＭで希釈し、Ｃｅｌｉｔｅ（登録商標）に通してろ過した。有機層を分離し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ；ＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃ、勾配  ０／１００から１０／９０へ）で精製した。所望の画分を集めて減圧下で蒸発させて、生成物７（１３０ｍｇ、７５％）を淡黄色のオイル状物として得た。
【０２４６】
Ｅ８．生成物８の調製
【化１４９】
2021527659.tif 000150
中間体２６（８０．０ｍｇ、０．３９ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１．５８ｍＬ）撹拌溶液に、室温で及びＮ２雰囲気下で、中間体５５（８０．４ｍｇ、０．５４ｍｍｏｌ）及びＴｉ（Ｏｉ−Ｐｒ）４（ＣＡＳ：５４６−６８−９；０．３４ｍＬ、１．１６ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を１６時間にわたり撹拌し、０℃まで冷却し、ＴＨＦ（０．４５ｍＬ）を添加し、続いて臭化メチルマグネシウム（ＴＨＦ及びトルエン中に１．４Ｍ、１．３９ｍＬ、１．９４ｍｍｏｌ）を滴下した。この反応混合物を２５分にわたりこの温度で撹拌し、次いで２時間にわたり室温で撹拌した。この混合物をＮＨ４Ｃｌ（ｓａｔ．溶液）で処理し、ＤＣＭで抽出した。有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。粗混合物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（アミノ官能化されたＳｉＯ２、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ、勾配  ０／１００から４／９６へ）で精製した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮した。２回目の精製を、ＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５μｍ）、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３（０．２５％水溶液）／ＣＨ３ＣＮ、勾配  ５４／４６から３６／６４へ）により実施した。残留物（８０ｇ）を水で洗浄し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発させて、生成物８（７８ｍｇ、５７％）をオイル状物として得た。
【０２４７】
Ｅ９．生成物９の調製
【化１５０】
2021527659.tif 000151
出発物質として中間体２６及び２，３−ジヒドロ［１，４］ジオキシノ［２，３−ｂ］ピリジン−６−カルボアルデヒド（ＣＡＳ：６１５５６８−２４−６）を使用して、生成物８の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、生成物９を調製した。
【０２４８】
粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（アミノ官能化されたＳｉＯ２、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ、勾配  ０／１００から４／９６へ）で精製した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮して、生成物９（９０ｍｇ、６３％）を油状物として得た。
【０２４９】
Ｅ１０．生成物１０及び１１の調製
【化１５１】
2021527659.tif 000152
ＤＣＥ（１．３８ｍＬ）中の中間体２６（７０．０ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）及び中間体８６（６６．６ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）の混合物に、室温で、Ｔｉ（Ｏｉ−Ｐｒ）４（ＣＡＳ：５４６−６８−９；０．１ｍＬ、０．３４ｍｍｏｌ）及びシアノ水素化ホウ素ナトリウム（ＣＡＳ：２５８９５−６０−７；２５．６ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）を順次添加した。この反応混合物を密封管中で５時間にわたり７５℃で撹拌し、次いで１８時間にわたり５５℃で撹拌した。この混合物を水で処理し、ＤＣＭで希釈し、Ｃｅｌｉｔｅ（登録商標）に通してろ過した。有機層を分離し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ、勾配  ０／１００から４／９６へ）で精製した。２回目の精製を、ＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５μｍ）、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３（０．２５％水溶液／ＣＨ３ＣＮ、勾配  ４７／５３から３０／７０へ）により実施して、生成物１０（２５ｍｇ、１９％）及び生成物１１（３０ｍｇ、２３％）をオイル状物として得た。
【０２５０】
Ｅ１１．生成物１２の調製
【化１５２】
2021527659.tif 000153
ＴＨＦ（２．５ｍＬ）中の中間体２５（１００ｍｇ、０．５３ｍｍｏｌ）及び２，３−ジヒドロ−［１，４］ジオキシン［２，３−ｂ］ピリジン−６−カルボアルデヒド（ＣＡＳ：６１５５６８−２４−６；９５．５ｍｇ、０．５８ｍｍｏｌ）の撹拌混合物に、密封管中において及びＮ２雰囲気下で、Ｔｉ（Ｏｉ−Ｐｒ）４（ＣＡＳ：５４６−６８−９；０．４６ｍＬ、１．５８ｍｍｏｌ）を滴下した。この反応混合物を１６時間にわたり撹拌し、０℃まで冷却し、臭化メチルマグネシウム（２．６６ｍｍｏｌ）を滴下した。この反応混合物を５分にわたり０℃で撹拌し、次いで１８時間にわたり室温で撹拌した。この混合物をＮＨ４Ｃｌ（ｓａｔ．溶液）及びＤＣＭで処理し、Ｃｅｌｉｔｅ（登録商標）のパッドに通してろ過した。ろ液をＤＣＭで抽出した。有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＮＨ３（ＭｅＯＨ中に７Ｎ）／ＤＣＭ、勾配  ０／１００から３／９７へ）で精製した。２回目の精製を、ＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５μｍ）、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３（０．２５％水溶液）／ＣＨ３ＣＮ、勾配  ６０／４０から３７／６３へ）により実施した。所望の画分を集めて減圧下で蒸発させて、生成物１２（２３．４ｍｇ、１３％）を黄色がかった油状物として得た。
【０２５１】
Ｅ１２．生成物１３及び１４の調製
【化１５３】
2021527659.tif 000154
出発物質として中間体２５及び中間体５５を使用して、生成物１２の合成に関して記載したもの類似の手順に従って、生成物１３及び１４を調製した。
【０２５２】
粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＮＨ３（ＭｅＯＨ中に７Ｎ）／ＤＣＭ、勾配  ０／１００から３／９７へ）で精製した。２回目の精製を、ＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５μｍ）、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３（０．２５％水溶液）／ＣＨ３ＣＮ、勾配  ６０／４０から３７／６３へ）により実施した。所望の画分を集めて減圧下で蒸発させて、生成物１３（１５ｍｇ、８％）及び生成物１４（２２．１ｍｇ、２２％）を無色の油状物として得た。
【０２５３】
Ｅ１３．生成物１５の調製
【化１５４】
2021527659.tif 000155
中間体１４５（１１８ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ）にＨＣｌ（１，４０−ジオキサン中に４Ｍ、１．８９ｍＬ、７．５７ｍｍｏｌ）を添加し、この反応混合物を２時間にわたり室温で撹拌した。溶媒を減圧下で蒸発させた。残留物を、Ｉｓｏｌｕｔｅ（登録商標）ＳＣＸ−２カートリッジを使用して精製した。残留物をＭｅＯＨで洗浄し、生成物をＮＨ３（ＭｅＯＨ中に７Ｎ）で溶出させた。所望の画分を集め、減圧下で蒸発させた。残留物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＮＨ３（ＭｅＯＨ中に７Ｎ）／ＤＣＭ、勾配  ０／１００から１０／９０へ）で精製した。所望の画分を集め、溶媒を減圧下で蒸発させて、生成物１５（５３．５ｍｇ、５８％）を得た。
【０２５４】
Ｅ１４．生成物１６の調製
【化１５５】
2021527659.tif 000156
無水ＴＨＦ（１．９８ｍＬ）中の中間体２６（３０．０ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）、中間体７７（３４．４ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）、及びＴｉ（Ｏｉ−Ｐｒ）４（ＣＡＳ：５４６−６８−９；８６．１μＬ、０．２９ｍｍｏｌ）の撹拌混合物に、Ｎ２雰囲気下で、シアノ水素化ホウ素ナトリウム（ＣＡＳ：２５８９５−６０−７；１９．２ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を、密封管中において４時間にわたり７０℃で撹拌した。溶媒を減圧下で蒸発させ、粗混合物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ、勾配  ０／１００から５／９５へ）で精製した。２回目の精製を、ＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５ｕｍ）、移動相：［０．１％  ＮＨ４ＣＯ３Ｈ／ＮＨ４ＯＨ  ｐＨ９水溶液］／ＣＨ３ＣＮ、勾配  ５４／４６から６４／３６へ）により実施した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮して、生成物１６（４３ｍｇ、７６％）を油状物として得た。
【０２５５】
Ｅ１５．生成物１７、１８、及び１９の調製
【化１５６】
2021527659.tif 000157
密封管中の中間体２１（１５０ｍｇ、０．７８ｍｍｏｌ）及びＫ２ＣＯ３（３２３ｍｇ、２．３４ｍｍｏｌ）の撹拌混合物に、中間体６３（１７３ｍｇ、０．８６ｍｍｏｌ）の無水ＣＨ３ＣＮ（１０．８ｍＬ）溶液を添加した。この反応混合物を、３６時間にわたり７０℃で撹拌した。この反応混合物を水で希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ、勾配  ０／１００から５／９５へ）で精製した。所望の画分を集め、溶媒を減圧下で蒸発させた。生成物をＤＩＰＥで粉砕し、ろ過して固体（１０２ｍｇ、３７％）を得た。
【０２５６】
この固体（２３ｍｇ）をＥｔ２Ｏ（３ｍＬ）に溶解させ、０℃で、ＨＣｌ（Ｅｔ２Ｏ中に１Ｍ、０．１ｍＬ、０．１ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を、３０分にわたり撹拌した。固体をろ過し、冷Ｅｔ２Ｏで洗浄して、生成物１７（２０ｍｇ）を白色の固体として得た。
【０２５７】
この固体の他の画分（８９ｍｇ）を、キラルＳＦＣ（固定相：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  ＩＧ  ５μｍ  ２５０＊２０ｍｍ、移動相：７５％  ＣＯ２、２５％  ＭｅＯＨ（０．３％  ｉ−ＰｒＮＨ２））で精製して、画分Ａ（２０ｍｇ）及び画分Ｂ（２９ｍｇ）を得た。
【０２５８】
画分Ａ（２０ｍｇ）をＥｔ２Ｏ（２ｍＬ）に溶解させ、０℃で、ＨＣｌ（Ｅｔ２Ｏ中に２Ｍ、０．０６ｍＬ、０．１２ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を、室温で３０分にわたり撹拌した。この固体をろ過して、生成物１８（２２．５ｍｇ）をクリーム状の固体として得た。
【０２５９】
出発物質として画分Ｂ（２９ｍｇ）を使用して、類似の手順に従って生成物１９（３３．５ｍｇ）を得た。
【０２６０】
Ｅ１６．生成物２０の調製
【化１５７】
2021527659.tif 000158
中間体２６（１００ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１．９８ｍＬ）撹拌溶液に、室温で及びＮ２雰囲気下で、中間体６１（１６０ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ）及びＴｉ（Ｏｉ−Ｐｒ）４（ＣＡＳ：５４６−６８−９；０．４３ｍＬ、１．４５ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を、１６時間にわたり撹拌した。この混合物を０℃で冷却し、ＴＨＦ（０．５７ｍＬ）を添加し、続いて臭化メチルマグネシウム（ＴＨＦ及びトルエン中に１．４Ｍ、１．７３ｍＬ、２．４２ｍｍｏｌ）を滴下した。この反応混合物を、２５分にわたりこの温度で撹拌し、次いで１８時間にわたり室温で撹拌した。この混合物をＮＨ４Ｃｌ（ｓａｔ．溶液）及びＤＣＭで処理し、Ｃｅｌｉｔｅ（登録商標）に通してろ過し、ろ液をＤＣＭで抽出した。まとめた有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。粗混合物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃ、勾配  ０／１００から１２／８８へ）で精製した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮して、生成物２０（２８．８ｍｇ、１６％）を褐色の粘着性のある固体として得た。
【０２６１】
Ｅ１７．生成物２１、２２、及び２３の調製
【化１５８】
2021527659.tif 000159
出発物質として中間体３５及び２，３−ジヒドロ−［１，４］ジオキシノ［２，３−ｂ］ピリジン−６−カルボアルデヒド（ＣＡＳ：６１５５６８−２４−６）を使用して、生成物２０の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、生成物２１、２２、及び２３を調製した。
【０２６２】
粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃ、勾配  ０／１００から１０／９０へ）で精製した。所望の画分を集め、減圧下で濃縮した。２回目の精製を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ、勾配  ０／１００から１０／９０へ）により実施した。所望の画分を集めて減圧下で蒸発させて、生成物２１（１１８．９ｍｇ、６５％）を淡黄色の油状物として得た。
【０２６３】
精製を、キラルＳＦＣ（固定相：ＣＨＩＲＡＣＥＬ  ＯＪ−Ｈ  ５μｍ  ２５０＊２０ｍｍ、移動相：７５％  ＣＯ２、２５％  ｉ−ＰｒＯＨ（０．３％  ｉ−ＰｒＮＨ２））により実施して、生成物２２（４５ｍｇ、２５％）及び生成物２３（４２ｍｇ、２３％）を得た。これら２種の生成物を、分取ＬＣ（固定相：不規則な裸のシリカ  ４０ｇ、移動相：０．５％  ＮＨ４ＯＨ、９２％  ＤＣＭ、８％  ＭｅＯＨ）でさらに精製して、生成物２２（４０ｍｇ、２２％）を淡黄色の油状物として得、生成物２３（３８ｍｇ、２１％）を淡黄色の油状物として得た。
【０２６４】
Ｅ１８．生成物２４、２５、及び２６の調製
【化１５９】
2021527659.tif 000160
出発物質として中間体２９及び２，３−ジヒドロ−［１，４］ジオキシノ［２，３−ｂ］ピリジン−６−カルボアルデヒド（ＣＡＳ：６１５５６８−２４−６）を使用して、生成物２０の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、生成物２４、２５、及び２６を調製した。
【０２６５】
粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃ、勾配  ０／１００から１５／８５へ）で精製した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮して、生成物２４（１２８．５ｍｇ、６９％）を薄褐色の油状物として得た。
【０２６６】
精製を、キラルＳＦＣ（固定相：ＣＨＩＲＡＣＥＬ  ＯＪ−Ｈ  ５μｍ  ２５０＊２０ｍｍ、移動相：７０％  ＣＯ２、３０％  ｉ−ＰｒＯＨ（０．３％  ｉ−ＰｒＮＨ２））により実施して、生成物２５（４８ｍｇ、２６％）及び生成物２６（４８ｍｇ、２６％）を薄褐色の油状物として得た。
【０２６７】
Ｅ１９．生成物２７、２８、及び２９の調製
【化１６０】
2021527659.tif 000161
密封管中におけるＤＣＥ（１．６６ｍＬ）中の中間体３５（１００ｍｇ、０．５１ｍｍｏｌ）及び中間体８６（８０．３ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）の混合物に、室温で、Ｔｉ（Ｏｉ−Ｐｒ）４（ＣＡＳ：５４６−６８−９；０．１２ｍＬ、０．４１ｍｍｏｌ）及びシアノ水素化ホウ素ナトリウム（ＣＡＳ：２５８９５−６０−７；３０．９ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ）を順次添加した。この反応混合物を、１６時間にわたり８０℃で撹拌した。この混合物をＮａＨＣＯ３（ｓａｔ．溶液）で処理し、ＤＣＭで希釈し、Ｃｅｌｉｔｅ（登録商標）に通してろ過した。有機層を分離し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＥｔＯＡｃ／ＤＣＭ、勾配  ０／１００から１００／０へ）で精製した。所望の画分を集めて減圧下で蒸発させて、生成物２７（８０．９ｍｇ、５２％）を無色の油状物として得た。
【０２６８】
精製を、キラルＳＦＣ（固定相：ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＡＤ−Ｈ  ５μｍ  ２５０＊３０ｍｍ、移動相：８８％  ＣＯ２、１２％  ＥｔＯＨ（０．３％  ｉ−ＰｒＮＨ２））により実施して、生成物２８（２３ｍｇ、１５％）及び生成物２９（２６ｍｇ、１７％）を無色の油状物として得た。
【０２６９】
Ｅ２０．生成物３０、３１、及び３２の調製
【化１６１】
2021527659.tif 000162
中間体２５（１００ｍｇ、０．５３ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２．０８ｍＬ）溶液に、中間体８６（１２４ｍｇ、０．６３ｍｍｏｌ）及びＴｉ（Ｏｉ−Ｐｒ）４（ＣＡＳ：５４６−６８−９；０．２３ｍＬ、０．７９ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を、２０時間にわたり８０℃で撹拌した。シアノ水素化ホウ素ナトリウム（４６．２ｍｇ、０．７４ｍｍｏｌ）を添加し、この反応混合物を１時間にわたり８０℃で撹拌し、３時間にわたり室温まで冷却した。ＮＨ４Ｃｌ（ｓａｔ．溶液）を添加し、生成物をＤＣＭで抽出した。有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＮＨ３（ＭｅＯＨ中に７Ｍ）／ＤＣＭ、勾配  ０／１００から１０／９０へ）で精製した。２回目の精製を、ＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５μｍ）、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３（０．２５％水溶液）／ＣＨ３ＣＮ、勾配  ６０／４０から４３／５７へ）により実施した。所望の画分を集め、減圧下で濃縮した。この画分をＥｔＯＡｃに溶解させ、ＮａＨＣＯ３（ｓａｔ．溶液）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、減圧下で濃縮して、生成物３０（１０．５ｍｇ、５％）、生成物３１（１３．７ｍｇ、７％）、及び生成物３２（１５．４ｍｇ、８％）をオレンジ色の油状物として得た。
【０２７０】
Ｅ２１．生成物３３及び３４の調製
【化１６２】
2021527659.tif 000163
中間体２６（１００ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ）のＤＣＥ（１．９４ｍＬ）溶液に、中間体６７（９６．８ｍｇ、０．５１ｍｍｏｌ）及びＴｉ（Ｏｉ−Ｐｒ）４（ＣＡＳ：５４６−６８−９；０．２２ｍＬ、０．７３ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を１６時間にわたり８０℃で撹拌し、室温まで冷却し、臭化メチルマグネシウム（１．４Ｍ溶液、１．７３ｍＬ、２．４２ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を一晩撹拌した。ＮａＨＣＯ３（ｓａｔ．溶液）を添加し、この混合物をＤＣＭで抽出した。有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＮＨ３（ＭｅＯＨ中に７Ｍ）／ＤＣＭ、勾配  ０／１００から１０／９０へ）で精製した。２回目の精製を、ＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５μｍ）、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３（０．２５％水溶液）／ＣＨ３ＣＮ、勾配  ７５／２５から５７／４３へ）により実施した。所望の画分を集め、減圧下で濃縮した。残留物をＥｔＯＡｃに溶解させ、ＮａＨＣＯ３（ｓａｔ．溶液）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、減圧下で濃縮して、生成物３３（４０ｍｇ、２１％）及び生成物３４（２３．２ｍｇ、１２％）を無色の油状物として得た。
【０２７１】
Ｅ２２．生成物３５及び３６の調製
【化１６３】
2021527659.tif 000164
中間体１２０（１００ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ）をＣＨ３ＣＮ（４ｍＬ）に溶解させ、中間体２４（１０５ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ）及びＫ２ＣＯ３（２０８ｍｇ、１．５０ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を、８０℃で一晩撹拌した。水を添加し、この混合物をＤＣＭで抽出した。まとめた有機抽出物を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、減圧下で蒸発させた。粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＮＨ３（ＭｅＯＨ中に７Ｎ）／ＤＣＭ、勾配  ０／１００から１０／９０へ）で精製した（２回）。別の精製を、ＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５μｍ）、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３（０．２５％水溶液）／ＣＨ３ＣＮ、勾配  ８０／２０から０／１００へ）により実施した。所望の画分を集め、減圧下で濃縮した。残留物をＥｔＯＡＣに溶解させ、ＮａＨＣＯ３（ｓａｔ．溶液）で洗浄した。有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、減圧下で濃縮して、ラセミ混合物（３２．８ｍｇ、１９％）、生成物３５（３０．３ｍｇ、１７％）、及び生成物３６（２４ｍｇ、１４％）を無色の油状物として得た。
【０２７２】
Ｅ２３．生成物３７の調製
【化１６４】
2021527659.tif 000165
出発物質として中間体１０７及び中間体３１を使用して、生成物３５及び３６の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、生成物３７を調製した。
【０２７３】
粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＮＨ３（ＭｅＯＨ中に７Ｍ）／ＤＣＭ、勾配  ０／１００〜１０／９０へ）で精製した（２回）。所望の画分を集めて減圧下で濃縮して、生成物３７（１３７．２ｍｇ、９７％）を薄褐色の油状物として得た。
【０２７４】
Ｅ２４．生成物３８、３９、４０、及び４１の調製
【化１６５】
2021527659.tif 000166
出発物質として中間体１２９及び中間体２１を使用して、生成物３５及び３６の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、生成物３８、３９、４０、及び４１を調製した。
【０２７５】
粗混合物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＮＨ３（ＭｅＯＨ中に７Ｎ）／ＤＣＭ、勾配  ０／１００から１０／９０へ）で精製した。所望の画分を集め、減圧下で濃縮した。２回目の精製を、ＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５μｍ）、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３（０．２５％水溶液）／ＣＨ３ＣＮ、勾配  ７５／２５から５７／４３へ）により精製した。所望の画分を集め、減圧下で濃縮した。残留物をＥｔＯＡｃに溶解させ、ＮａＨＣＯ３（ｓａｔ．溶液）で洗浄した。有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、減圧下で濃縮して、生成物３８（１７０．９ｍｇ、５５％）を得た。
【０２７６】
生成物３８（２０ｍｇ、５３．６μｍｏｌ）のＥｔ２Ｏ（０．１ｍＬ）撹拌溶液に、ＨＣｌ（ｉ−ＰｒＯＨ中に６Ｍ、４４．６μＬ、０．２７  ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を４時間にわたり室温で撹拌し、溶媒を減圧下で濃縮した。ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテルを添加し、この混合物を５分にわたり超音波処理した。溶媒を、減圧下で濃縮した。固体が得られるまでこのプロセスを繰り返し、この固体を減圧下で乾燥させて、生成物１３９（１５．２ｍｇ、６４％）を薄褐色の固体として得た。
【０２７７】
生成物１３８に対して、キラルＳＦＣ（固定相：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  ＩＣ  ５μｍ  ２５０＊２１．２ｍｍ、移動相：７８％  ＣＯ２、２２％  ＥｔＯＨ（０．３％  ｉ−ＰｒＮＨ２））による精製を実施して、画分Ａ（７５ｍｇ）及び画分Ｂ（４７ｍｇ）を得た。画分Ｂを、キラルＳＦＣ（固定相：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  ＩＣ  ５μｍ  ２５０＊２１．２ｍｍ、移動相：７８％  ＣＯ２、２２％  ＥｔＯＨ（０．３％  ｉ−ＰｒＮＨ２））により再び精製して、画分Ｂ  ４０ｍｇを得た。
【０２７８】
画分ＡをＥｔ２Ｏ（０．２ｍＬ）に溶解させ、７Ｎ  ＨＣｌ−ＩＰＡ（０．２ｍＬ）を添加した。この混合物を、４時間にわたり室温で撹拌した。溶媒を減圧下で濃縮して、生成物４０（８０ｍｇ）をクリーム状の固体として得た。類似の手順に従って、画分Ｂも生成物４１（８６ｍｇ）へと変換した。
【０２７９】
Ｅ２５．生成物４２及び４３の調製
【化１６６】
2021527659.tif 000167
中間体４（１００ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ）のＤＣＥ（２ｍＬ）溶液に、中間体８６（９９．８ｍｇ、０．５１ｍｍｏｌ）及びＴｉ（Ｏｉ−Ｐｒ）４（ＣＡＳ：５４６−６８−９；０．２２ｍＬ、０．７３ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を４時間にわたり８０℃で撹拌し、室温まで冷却し、シアノ水素化ホウ素ナトリウム（ＣＡＳ：２５８９５−６０−７；３６．６ｍｇ、０．５８ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を、１６時間にわたり撹拌した。この反応をＮａＨＣＯ３（ｓａｔ．溶液）でクエンチし、ＤＣＭで希釈した。このエマルションを、Ｃｅｌｉｔｅ（登録商標）のパッドに通して濾過した。ろ液を、ＤＣＭで抽出した。まとめた有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン、勾配  ３０／７０から７０／３０へ）で精製した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮して、生成物の混合物（８５ｇ）を無色の油状物として得た。この混合物を、ＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５μｍ）、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３（０．２５％水溶液）／ＣＨ３ＣＮ、勾配  ４７／５３から３０／７０へ）で精製した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮して、画分Ａ（３５ｍｇ）及び画分Ｂ（３０ｍｇ）をオイル状物として得た。画分Ａ及びＢを、ＤＣＭ及びＮａＨＣＯ３（溶液）で希釈した。水相を、ＤＣＭで抽出した。有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発させて、生成物４２（３０ｍｇ、１６％）及び生成物４３（３０ｍｇ、１６％）を得た。
【０２８０】
Ｅ２６．生成物４４及び４５の調製
【化１６７】
2021527659.tif 000168
出発物質として中間体６及び中間体８６を使用して、生成物４２及び４３の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、生成物４４及び４５を調製した。
【０２８１】
粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ、勾配  ０／１００から５／９５へ）で精製した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮して、生成物の混合物（１４０ｍｇ）を無色の油状物として得た。この混合物を、ＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５μｍ）、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３（０．２５％水溶液）／ＣＨ３ＣＮ、勾配  ６０／４０から４３／５７へ）で精製して、画分Ａ及び画分Ｂを得た。画分Ａ及びＢを、ＤＣＭ及びＮａＨＣＯ３（溶液）で希釈した。水相を、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発させて、生成物４４（２１ｍｇ、１１％）及び生成物４５（２０ｍｇ、１０％）を油状物として得た。
【０２８２】
Ｅ２７．生成物４６の調製
【化１６８】
2021527659.tif 000169
ＣＨ３ＣＮ（４ｍＬ）中の中間体１０７（１００ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ）及び中間体１１８（１１４ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ）の混合物に、Ｋ２ＣＯ３（２０８ｍｇ、１．５０ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を、６０℃で２０時間にわたり撹拌した。この反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、Ｃｅｌｉｔｅ（登録商標）に通して濾過し、ＥｔＯＡｃで洗浄し、溶媒を減圧下で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＮＨ３（ＭｅＯＨ中に７Ｍ）／ＤＣＭ、勾配０／１００から５／９５へ）で精製した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮して、生成物４６（１３０ｍｇ、７０％）を油状物として得た。
【０２８３】
Ｅ２８．生成物４７の調製
【化１６９】
2021527659.tif 000170
出発物質として中間体１０７及び中間体８を使用して、生成物４６の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、生成物４７を調製した。
【０２８４】
粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＮＨ３（ＭｅＯＨ中に７Ｍ）／ＤＣＭ、勾配  ０／１００から０５／９５へ）で精製した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮して、生成物４７（１７０ｍｇ、９２％）を油状物として得た。
【０２８５】
Ｅ２９．生成物４８の調製
【化１７０】
2021527659.tif 000171
出発物質として中間体１０７及び中間体２を使用して、生成物４６の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、生成物４８を調製した。
【０２８６】
粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＮＨ３（ＭｅＯＨ中に７Ｍ）／ＤＣＭ、勾配  ０／１００から４／９６へ）で精製した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮して、生成物４８（１９０ｍｇ、７３％）を油状物として得た。
【０２８７】
Ｅ３０．生成物４９の調製
【化１７１】
2021527659.tif 000172
出発物質として中間体１０７及び中間体１２７を使用して、生成物４６の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、生成物４９を調製した。
【０２８８】
粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＮＨ３（ＭｅＯＨ中に７Ｍ）／ＤＣＭ、勾配  ０／１００から０４／９６へ）で精製した。２回目の精製を、ＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５μｍ）、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３（０．２５％水溶液）／ＣＨ３ＣＮ、勾配  ８０／２０から６０／４０へ）により実施した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮して、生成物４９（７０ｍｇ、６５％）を油状物として得た。
【０２８９】
Ｅ３１．生成物５０の調製
【化１７２】
2021527659.tif 000173
出発物質として中間体１２９及び中間体１４７を使用して、生成物４６の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、生成物５０を調製した。
【０２９０】
粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＮＨ３（ＭｅＯＨ中に７Ｍ）／ＤＣＭ、勾配  ０／１００から０４／９６へ）で精製した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮して、生成物５０（７０ｍｇ、７５％）を油状物として得た。
【０２９１】
Ｅ３２．生成物５１及び５２の調製
【化１７３】
2021527659.tif 000174
出発物質として中間体７９及び中間体２４を使用して、生成物４６の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、生成物５１及び５２を調製した。
【０２９２】
粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＮＨ３（ＭｅＯＨ中に７Ｍ）／ＤＣＭ、勾配  ０／１００から０７／９３へ）で精製した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮して、生成物の混合物（１６０ｍｇ）を油状物として得た。精製をキラルＳＦＣ（固定相：ＣＨＩＲＡＣＥＬ  ＯＪ−Ｈ  ５μｍ  ２５０＊２０ｍｍ、移動相：８５％  ＣＯ２、１５％  ＥｔＯＨ（０．３％  ｉＰｒＮＨ２））により実施して、画分Ａ（５２ｍｇ）及び画分Ｂ（４６ｍｇ）を得た。
【０２９３】
画分Ａ（３５ｍｇ）を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＮＨ３（ＭｅＯＨ中に７Ｍ）／ＤＣＭ、勾配  ０／１００から０３／９７へ）で精製した。所望の画分を集め、減圧下で濃縮した。得られた生成物をｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル（２ｍＬ）に溶解させ、撹拌しつつ、ＨＣｌ（Ｅｔ２Ｏ中に２Ｍ、２ｍＬ、４ｍｍｏｌ）を添加した。沈殿物をろ過し、減圧下で５０℃にて乾燥させ、生成物５１（３５ｍｇ）を得た。
【０２９４】
出発物質として画分Ｂを使用して、類似の手順に従って、生成物５２を調製した。
【０２９５】
Ｅ３３．生成物５３の調製
【化１７４】
2021527659.tif 000175
出発物質として中間体１２９及び中間体４３を使用して、生成物４６の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、生成物５３を調製した。
【０２９６】
粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ、勾配  ０／１００から１０／９０へ）で精製した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮して、生成物５３（６９．５ｍｇ、７１％）を得た。
【０２９７】
Ｅ３４．生成物５４及び５５の調製
【化１７５】
2021527659.tif 000176
出発物質として中間体１０７及び中間体４３を使用して、生成物４６の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、生成物５４及び５５を調製した。
【０２９８】
粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ、勾配  ０／１００から１０／９０へ）で精製して、生成物の混合物を得た。この混合物をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５μｍ）、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３（０．２５％水溶液）／ＣＨ３ＣＮ、勾配  ９０／１０から６０／４０へ）で精製して、生成物５４（１５．６ｍｇ、１７％）及び生成物５５（１６．４ｍｇ、１８％）を得た。
【０２９９】
Ｅ３５．生成物５６の調製
【化１７６】
2021527659.tif 000177
出発物質として中間体１０７及び中間体４１を使用して、生成物４６の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、生成物５６を調製した。
【０３００】
粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ、勾配  ０／１００から１０／９０へ）で精製した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮して、生成物５６（１７．５ｍｇ、２７％）を得た。
【０３０１】
Ｅ３６．生成物５７の調製
【化１７７】
2021527659.tif 000178
出発物質として中間体１２９及び中間体４１を使用して、生成物４６の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、生成物５７を調製した。
【０３０２】
粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ、勾配  ０／１００から１０／９０へ）で精製した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮して、生成物５７（３１．２ｍｇ、６０％）を無色の油状物として得た。
【０３０３】
Ｅ３７．生成物５８の調製
【化１７８】
2021527659.tif 000179
無水ＣＨ３ＣＮ（１４．８ｍＬ）中の中間体３７（３８４ｍｇ、１．８８ｍｍｏｌ）及び中間体１０７（３３８ｍｇ、１．６９ｍｍｏｌ）の撹拌混合物に、Ｋ２ＣＯ３（７７９ｍｇ、５．６４ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を、１２時間にわたり密封管中において８０℃にて撹拌した。この反応混合物を水で希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。残留物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン、勾配  ０／１００から１００／０へ）で精製した。所望の画分を集めて減圧下で蒸発させて、生成物５８（５０２ｍｇ、７３％）を淡褐色の油状物として得た。
【０３０４】
Ｅ３８．生成物５９の調製
【化１７９】
2021527659.tif 000180
生成物５８（４３５ｍｇ）をＥｔ２Ｏに懸濁させ、室温でＨＣｌ（Ｅｔ２Ｏ中に２Ｎ、４ｅｑ）により処理した。白色の沈殿物をろ過し、乾燥させて、生成物５９（４２８．７ｍｇ）を白色の固体として得た。
【０３０５】
Ｅ３９．生成物６０の調製
【化１８０】
2021527659.tif 000181
出発物質として中間体３９及び中間体１０７を使用して、生成物５８の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、生成物６０を調製した。残留物をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５μｍ）、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３（０．２５％水溶液）／ＣＨ３ＣＮ、勾配  ８０／２０から０／１００へ）で精製した。所望の画分を集め、溶媒を減圧下で蒸発させて、生成物６０（１２５．８ｍｇ、５６％）を無色の油状物として得た。
【０３０６】
Ｅ４０．生成物６１の調製
【化１８１】
2021527659.tif 000182
出発物質として生成物６０を使用して、生成物５９の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、生成物６１を調製した。
【０３０７】
Ｅ４１．生成物６２の調製
【化１８２】
2021527659.tif 000183
出発物質として中間体３３及び中間体１０７を使用して、生成物５８の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、生成物６２を調製した。
【０３０８】
粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ、勾配  ０／１００から１０／９０へ）で精製した。所望の画分を集め、減圧下で濃縮した。２回目の精製を、ＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５ｕｍ）、移動相：［０．１％  ＮＨ４ＣＯ３Ｈ／ＮＨ４ＯＨ  ｐＨ９水溶液］／ＣＨ３ＣＮ、勾配  ６７／３３から５０／５０へ）により実施した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮して、生成物６２（１１５ｍｇ、６０％）を薄黄色の固体として得た。
【０３０９】
Ｅ４２．生成物６３及び６４の調製
【化１８３】
2021527659.tif 000184
中間体１４９（１００ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）の無水ＤＣＭ（１．９２ｍＬ）撹拌溶液に、２，３−ジヒドロ−［１，４］ジオキシノ［２，３−ｂ］ピリジン−６−カルボアルデヒド（ＣＡＳ：６１５５６８−２４−６；９５．２ｍｇ、０．５８ｍｍｏｌ）及びＴｉ（Ｏｉ−Ｐｒ）４（ＣＡＳ：５４６−６８−９；０．２１ｍＬ、０．７２ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を、２０時間にわたり室温で撹拌した。この反応混合物を０℃まで冷却し、臭化メチルマグネシウム（ＴＨＦ中に１．４Ｍ、１．７２ｍＬ、２．４０ｍｍｏｌ）を滴下した。この反応混合物を５分にわたり０℃で撹拌し、次いで２時間にわたり室温で撹拌した。ＮＨ４Ｃｌ（ｓａｔ．溶液）を添加し、生成物をＤＣＭで抽出した。有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＮＨ３（ＭｅＯＨ中に７Ｍ）／ＤＣＭ、勾配  ０／１００から３／９７へ）で精製した。残留物を、ＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５μｍ）、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３（０．２５％水溶液）／ＣＨ３ＣＮ、勾配  ６７／３３から５０／５０へ）で精製した。ＮａＨＣＯ３（ｓａｔ．溶液）を添加し、生成物をＤＣＭで抽出した。有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発させて、生成物６３（１５ｍｇ、８％）及び生成物６４（２０ｍｇ、１１％）を黄色の油状物として得た。
【０３１０】
Ｅ４８．生成物７０、７１、及び７２の調製
【化１８４】
2021527659.tif 000185
出発物質として中間体２０（１００ｍｇ、０．５２ｍｍｏｌ）及び２，３−ジヒドロ［１，４］ジオキシノ［２，３−ｂ］ピリジン−６−カルボアルデヒド（ＣＡＳ：６１５５６８−２４−６）を使用して、生成物１の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、生成物７０を調製した。粗生成物７０を、ＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５μｍ、移動相：勾配  ５４％  ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５水溶液、４６％  ＣＨ３ＣＮから３６％  ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液、６４％  ＣＨ３ＣＮへ）で精製した。所望の画分を集め、減圧下で濃縮した。そのようにして得られた残留物をＥｔＯＡｃに溶解させ、ＮａＨＣＯ３のａｑ  ｓａｔ  ｓｏｌで洗浄した。有機相を分離し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、減圧下で濃縮して、生成物７０（１２１ｍｇ、６５％、ジアステレオ異性体の混合物）を無色の油状物として得た。
【０３１１】
生成物７０（１１０ｍｇ）を、キラルＳＦＣ（固定相：ＣＨＩＲＡＣＥＬ  ＯＪ−Ｈ  ５μｍ  ２５０＊２０ｍｍ、移動相：８０％  ＣＯ２、２０％  ＭｅＯＨ（０．３％ｉＰｒＮＨ２））により精製して、生成物７１（５０ｍｇ、２７％）及び生成物７２（４２ｍｇ、２３％）を両方とも油状物として得た。生成物７１をジエチルエーテルに溶解させ、ＨＣｌ（ｉ−ＰｒＯＨ中の６Ｎ溶液）で処理した。溶媒を減圧下で蒸発させて、生成物７１（６０．３ｍｇ、２７％、２×ＨＣｌ塩）をクリーム状の有色の固体として得た。生成物７２をジエチルエーテルに溶解させ、ＨＣｌ（ｉ−ＰｒＯＨ中の６Ｎ溶液）で処理した。溶媒を減圧下で蒸発させて、生成物７２（４９ｍｇ、２２％、２×ＨＣｌ塩）をクリーム状の有色の固体として得た。
【０３１２】
Ｅ４９．生成物７３、７４、及び７５の調製
【化１８５】
2021527659.tif 000186
出発物質として中間体２１（１００ｍｇ、０．５２ｍｍｏｌ）及び２，３−ジヒドロ［１，４］ジオキシノ［２，３−ｂ］ピリジン−６−カルボアルデヒド（ＣＡＳ：６１５５６８−２４−６）を使用して、生成物１の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、生成物７３を調製した。粗生成物７３を、ＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５μｍ、移動相：勾配  ８０％  １０ｍＭ  ＮＨ４ＨＣＯ３／ＮＨ４ＯＨのｐＨ＝９水溶液、２０％  ＣＨ３ＣＮから６０％  １０ｍＭ  ＮＨ４ＨＣＯ３／ＮＨ４ＯＨのｐＨ＝９水溶液、４０％  ＣＨ３ＣＮへ）で精製した。所望の画分を集め、減圧下で濃縮した。そのようにして得られた残留物をＥｔＯＡｃに溶解させ、ＮａＨＣＯ３のａｑ  ｓａｔ  ｓｏｌで洗浄した。有機相を分離し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、減圧下で濃縮して、生成物７３（７８ｍｇ、４２％、ジアステレオ異性体の混合物）を無色の油状物として得た。
【０３１３】
生成物７３（６５ｍｇ）を、キラルＳＦＣ（固定相：ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＡＤ−Ｈ  ５μｍ  ２５０＊３０ｍｍ、移動相：８０％  ＣＯ２、２０％  ＭｅＯＨ（０．３％ｉＰｒＮＨ２））により精製して、生成物７４（２０ｍｇ、１１％）及び生成物７５（１９ｍｇ、１０％）を両方とも油状物として得た。
【０３１４】
Ｅ５０．生成物７６の調製
【化１８６】
2021527659.tif 000187
出発物質として中間体２２（１００ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）及び２，３−ジヒドロ［１，４］ジオキシノ［２，３−ｂ］ピリジン−６−カルボアルデヒド（ＣＡＳ：６１５５６８−２４−６）を使用して、生成物１の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、生成物７６を調製した。生成物７６を、ＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５μｍ、移動相：勾配  ６７％  ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液、３３％  ＣＨ３ＣＮから、５０％  ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液、５０％  ＣＨ３ＣＮへ）で精製した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮して、生成物７６（６１．１ｍｇ、３４％、ジアステレオ異性体の混合物）を無色の油状物として得た。
【０３１５】
Ｅ５１．生成物７７、１００、１０１、１０２、及び１０３の調製
【化１８７】
2021527659.tif 000188
出発物質として中間体２３（３３６ｍｇ、１．５２ｍｍｏｌ）及び２，３−ジヒドロ［１，４］ジオキシノ［２，３−ｂ］ピリジン−６−カルボアルデヒド（ＣＡＳ：６１５５６８−２４−６）を使用して、生成物１の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、生成物７７を調製した。粗生成物７７を、ＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５μｍ、移動相：勾配  ７５％  ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液、２５％  ＣＨ３ＣＮから５７％  ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液、４３％  ＣＨ３ＣＮへ）で精製した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮して、生成物７７（２３２ｍｇ、４０％、ジアステレオ異性体の混合物）を無色の油状物として得た。
【０３１６】
生成物７７（２２０ｍｇ）を、キラルＳＦＣ（固定相：Ｌｕｘ−Ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ−４  ５μｍ  ２５０＊２１．２ｍｍ、移動相：８０％  ＣＯ２、２０％  ＥｔＯＨ（０．３％  ｉＰｒＮＨ２））により精製して、生成物７７（１０１ｍｇ）、生成物１０２（５５ｍｇ、９％）、及び生成物１０３（４９ｍｇ、８％）を全てオイル状物として得た。
【０３１７】
生成物７７（１０１ｍｇ）を、キラルＳＦＣ（固定相：ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＡＤ−Ｈ  ５μｍ  ２５０＊３０ｍｍ、移動相：９０％  ＣＯ２、１０％  ｉＰｒＯＨ（０．３％  ｉＰｒＮＨ２））により精製して、生成物１００（４４ｍｇ、７％）及び不純生成物１０１（４７ｍｇ、８％）を全てオイル状物として得た。
【０３１８】
不純生成物１０１（４７ｍｇ）を、キラルＳＦＣ（固定相：ＣＨＩＲＡＣＥＬ  ＯＪ−Ｈ  ５μｍ  ２５０＊２０ｍｍ、移動相：７５％  ＣＯ２、２５％  ｉＰｒＯＨ（０．３％  ｉＰｒＮＨ２））により精製して、生成物１０１（３９ｍｇ、７％）をオイル状物として得た。
【０３１９】
生成物１００をＥｔ２Ｏに懸濁させ、室温でＨＣｌ（４ｅｑｕｉｖ、Ｅｔ２Ｏ中の２Ｎ溶液）により処理した。淡褐色の沈殿物をろ別し、オーブン中で乾燥させて、生成物１００（４０ｍｇ、５％、３×ＨＣｌ塩）を白色の固体として得た。
【０３２０】
生成物１０１をＥｔ２Ｏに懸濁させ、室温でＨＣｌ（４ｅｑｕｉｖ、Ｅｔ２Ｏ中の２Ｎ溶液）により処理した。淡褐色の沈殿物をろ別し、オーブン中で乾燥させて、生成物１０１（３６ｍｇ、５％、３×ＨＣｌ塩）を白色の固体として得た。
【０３２１】
生成物１０３をＥｔ２Ｏに懸濁させ、室温でＨＣｌ（４ｅｑｕｉｖ、Ｅｔ２Ｏ中の２Ｎ溶液）により処理した。淡褐色の沈殿物をろ別し、オーブン中で乾燥させて、生成物１０３（４８ｍｇ、６％、３×ＨＣｌ塩）を白色の固体として得た。
【０３２２】
Ｅ５２．生成物７８、１０４、及び１０５の調製
【化１８８】
2021527659.tif 000189
出発物質として中間体２４（１００ｍｇ、０．５３ｍｍｏｌ）及び２，３−ジヒドロ［１，４］ジオキシノ［２，３−ｂ］ピリジン−６−カルボアルデヒド（ＣＡＳ：６１５５６８−２４−６）を使用して、生成物１の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、生成物７８を調製した。生成物７８（１２０ｍｇ、６４％、ジアステレオ異性体の混合物）を、無色のオイル状物として単離した。
【０３２３】
化合物７８（１１０ｍｇ）をキラルＳＦＣ（固定相：ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＡＤ−Ｈ  ５μｍ  ２５０＊３０ｍｍ、移動相：９０％  ＣＯ２、１０％  ＥｔＯＨ（０．３％  ｉＰｒＮＨ２））により精製して、生成物１０４（３７ｍｇ、２０％）及び不純生成物１０５（４１ｍｇ、２２％）を全て油状物として得た。生成物１０４（３７ｍｇ）をＥｔ２Ｏ（１ｍＬ）に溶解させ、次いでＨＣｌ（１ｍＬ、Ｅｔ２Ｏ中に２Ｎ）を添加した。生じた固体をろ別して乾燥させて、生成物１０４（３５ｍｇ、１６％、２×ＨＣｌ塩）を粘着性のある泡状物として得た。不純生成物１０５（４１ｍｇ）をＤＣＭに溶解させて、ＮａＨＣＯ３（ａｑ．ｓａｔ．ｓｏｌｔｎ．）で洗浄した。有機層を分離し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発させて不純生成物１０５（４０ｍｇ）を得、この不純生成物１０５を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ；メタノール中の７Ｍアンモニア溶液／ＤＣＭ  ０／１００から０５／９５へ）でさらに精製した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮して、純粋生成物１０５（３０ｍｇ、１６％）を油状物として得た。生成物１０５（３０ｍｇ）をＥｔ２Ｏ（１ｍＬ）に溶解させ、次いでＨＣｌ（１ｍＬ、Ｅｔ２Ｏ中に２Ｎ）を添加した。生じた固体をろ別して乾燥させて、生成物１０５（３０ｍｇ、１３％、２×ＨＣｌ塩）を粘着性のある泡状物として得た。
【０３２４】
Ｅ５３．生成物７９の調製
【化１８９】
2021527659.tif 000190
出発物質として中間体２４（１０６ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ）及び中間体８６を使用して、生成物２の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、生成物７９を調製した。生成物７９を、ＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５μｍ、移動相：勾配  ７５％  ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液、２５％  ＣＨ３ＣＮから５７％  ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液、４３％  ＣＨ３ＣＮへ）で精製した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮して、不純生成物７９（１２ｍｇ、６％、ジアステレオ異性体の混合物）を無色の油状物として得た。不純生成物７９（１２ｍｇ）を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ；メタノール中の７Ｍアンモニア溶液／ＤＣＭ  ０／１００から２／９８へ）でさらに精製した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮して、生成物７９（８．５ｍｇ、４％、ジアステレオ異性体の混合物）を油状物として得た。
【０３２５】
Ｅ５４．生成物８０の調製
【化１９０】
2021527659.tif 000191
出発物質として中間体９６（８０ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）を使用して、生成物１４の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、生成物８０を調製した。粗生成物８０を、ＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５μｍ、移動相：勾配  ４７％  １０ｍＭ  ＮＨ４ＨＣＯ３／ＮＨ４ＯＨのｐＨ＝９水溶液、５３％  ＭｅＯＨから２４％  １０ｍＭ  ＮＨ４ＨＣＯ３／ＮＨ４ＯＨのｐＨ＝９水溶液、７６％  ＭｅＯＨへ）で精製した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮して、生成物８０（２０ｇ、３１％、ジアステレオ異性体の混合物）を得た。
【０３２６】
Ｅ５５．生成物８１及び８２の調製
【化１９１】
2021527659.tif 000192
出発物質として中間体２６（２００ｍｇ、０．５３ｍｍｏｌ）及び中間体１２３（３００ｍｇ、１．０７ｍｍｏｌ）を使用して、生成物１の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、生成物８１及び８２を調製した。粗生成物８１及び粗生成物８２の混合物（２５８ｍｇ）を、ＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５μｍ、移動相：勾配  ６０％  ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液、４０％  ＣＨ３ＣＮから４３％  ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液、５７％  ＣＨ３ＣＮへ）で精製した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮して、生成物８１及び生成物８２の混合物（２１５ｍｇ）を得、この混合物を、ＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５μｍ、移動相：勾配  ６０％  ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液、４０％  ＣＨ３ＣＮから４３％  ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液、５７％  ＣＨ３ＣＮへ）でさらに精製した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮して、生成物８１（４６ｍｇ、１２％、単一のラセミジアステレオ異性体）及び生成物８２（４０ｍｇ、１１％、単一のラセミジアステレオ異性体）を両方とも黄色の油状物として得た。
【０３２７】
Ｅ５６．生成物８３、８４、及び８５の調製
【化１９２】
2021527659.tif 000193
出発物質として中間体２６（５０ｍｇ、０．２４２ｍｍｏｌ）及び中間体９７を使用して、生成物２の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、生成物８３を調製した。生成物８３をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５μｍ、移動相：勾配  ５４％  ０．１％ＮＨ４ＣＯ３Ｈ／ＮＨ４ＯＨのｐＨ９水溶液、４６％  ＣＨ３ＣＮから６４％  ０．１％ＮＨ４ＣＯ３Ｈ／ＮＨ４ＯＨのｐＨ９水溶液、３６％  ＣＨ３ＣＮ）で精製し、所望の画分を集めて減圧下で濃縮して、生成物８３（３１．２ｍｇ、３３％、ジアステレオ異性体の混合物）を無色の油状物として得た。
【０３２８】
生成物８３（２３ｍｇ）をキラルＳＦＣ（固定相：ＣＨＩＲＡＣＥＬ  ＯＪ−Ｈ  ５μｍ  ２５０＊２０ｍｍ、移動相：９０％  ＣＯ２、１０％  ｉＰｒＯＨ（０．３％  ｉＰｒＮＨ２））で精製して、生成物８４（１０ｍｇ、１１％）及び生成物８５（１１ｍｇ、１２％）を油状物として得た。
【０３２９】
Ｅ５７．生成物８６、８７、及び８８の調製
【化１９３】
2021527659.tif 000194
出発物質として中間体２６（１５０ｍｇ、０．７２７ｍｍｏｌ）及び７−アセチル（３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラノ）［２，３−ｂ］ピリジン（ＣＡＳ：２５３８７４−７７−０）を使用して、生成物２の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、生成物８６を調製した。生成物８６をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５μｍ、移動相：勾配  ５４％  ０．１％ＮＨ４ＣＯ３Ｈ／ＮＨ４ＯＨのｐＨ９水溶液、４６％  ＣＨ３ＣＮから６４％  ０．１％ＮＨ４ＣＯ３Ｈ／ＮＨ４ＯＨのｐＨ９水溶液、３６％  ＣＨ３ＣＮ）で精製し、所望の画分を集めて減圧下で濃縮して、生成物８６（９０ｍｇ、３４％）を異性体の混合物として得た。この化合物をＥｔＯＡｃに溶解させ、ＮａＨＣＯ３の飽和溶液で処理し（３０分間撹拌）、有機層を分離し、減圧下で蒸発させて、生成物８６（８２．６ｍｇ、３１％）を油状物として得た。
【０３３０】
生成物８６（７０ｍｇ）をキラルＳＦＣ（固定相：ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＡＤ−Ｈ  ５μｍ  ２５０＊３０ｍｍ、移動相：７０％  ＣＯ２、３０％  ＭｅＯＨ（０．３％  ｉＰｒＮＨ２））で精製して、不純生成物８７（３９ｍｇ）及び生成物８８（２５ｍｇ、９％）を両方とも油状物として得た。
【０３３１】
不純生成物８７（３９ｍｇ）を分取ＬＣ（固定相：不規則な裸のシリカ  ４０ｇ、移動相：０．５％  ＮＨ４ＯＨ、９４％ＤＣＭ、６％ＭｅＯＨ）により精製して、生成物８７（３２ｍｇ、１２％）を油状物として得た。
【０３３２】
Ｅ５８．生成物８９、１０６、及び１０７の調製
【化１９４】
2021527659.tif 000195
出発物質として中間体２７（１００ｍｇ、０．４８５ｍｍｏｌ）及び２，３−ジヒドロ［１，４］ジオキシノ［２，３−ｂ］ピリジン−６−カルボアルデヒド（ＣＡＳ：６１５５６８−２４−６）を使用して、生成物１の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、生成物８９を調製した。生成物８９（９８ｍｇ、５５％）を、油状物として得た。
【０３３３】
生成物８９（８５ｍｇ）をキラルＳＦＣ（固定相：ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＡＤ−Ｈ  ５μｍ  ２５０＊３０ｍｍ、移動相：９０％  ＣＯ２、１０％  ＥｔＯＨ（０．３％  ｉＰｒＮＨ２））で精製して、生成物１０６（３３ｍｇ、１８％）及び生成物１０７（３５ｍｇ、１９％）を得た。
【０３３４】
Ｅ５９．生成物９０の調製
【化１９５】
2021527659.tif 000196
出発物質として中間体２７（１１５ｍｇ、０．５５８ｍｍｏｌ）及び中間体１００（１００ｍｇ、０．５０７ｍｍｏｌ）を使用して、生成物２の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、生成物９０を調製した。生成物９０を、ＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５μｍ、移動相：勾配  ６７％  ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液、３３％  ＣＨ３ＣＮから、５０％  ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液、５０％  ＣＨ３ＣＮへ）で精製した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮して、不純生成物９０（１５ｍｇ）を得た。不純生成物９０（１５ｍｇ）を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ；メタノール中の７Ｍアンモニア溶液／ＤＣＭ  ０／１００から２／９８へ）で精製した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮して、生成物９０（９．５ｍｇ、５％）を油状物として得た。
【０３３５】
Ｅ６０．生成物９１、９２、９３、９４、及び９５の調製
【化１９６】
2021527659.tif 000197
出発物質として中間体２８（１５４．８ｍｇ、０．７２６ｍｍｏｌ）及び２，３−ジヒドロ［１，４］ジオキシノ［２，３−ｂ］ピリジン−６−カルボアルデヒド（ＣＡＳ：６１５５６８−２４−６）を使用して、生成物１の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、生成物９１を調製した。粗生成物９１を、ＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ５０×１００ｍｍ  ５μｍ、移動相：勾配  ６０％  ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液、４０％  ＣＨ３ＣＮから４３％  ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液、５７％  ＣＨ３ＣＮへ）で精製した。所望の画分を集めて減圧下で濃縮して、生成物９１（１５１ｍｇ、５６％、ジアステレオ異性体の混合物）を黄色の油状物として得た。
【０３３６】
生成物９１（１４０ｍｇ）をキラルＳＦＣ（固定相：ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＡＤ−Ｈ  ５μｍ  ２５０＊３０ｍｍ、移動相：９２％  ＣＯ２、８％  ｉＰｒＯＨ（０．９％  ｉＰｒＮＨ２））により精製して、生成物９１（４５ｍｇ）、生成物９２（２１ｍｇ、８％）、及び生成物９３（２１ｍｇ、８％）を全て油状物として得た。
【０３３７】
生成物９１（４５ｍｇ）をキラルＳＦＣ（固定相：ＣＨＩＲＡＣＥＬ  ＯＪ−Ｈ  ５μｍ  ２５０＊２０ｍｍ、移動相：９２％  ＣＯ２、８％  ＭｅＯＨ（０．３％  ｉＰｒＮＨ２））により精製して、生成物９４（１７ｍｇ、６％）及び不純生成物９５（１９ｍｇ、７％）を全て油状物として得た。
【０３３８】
Ｅ６１．生成物９６、９７、及び９８の調製
【化１９７】
2021527659.tif 000198
出発物質として中間体２９（１００ｍｇ、０．５２３ｍｍｏｌ）及び中間体８６（８０．３ｍｇ、０．４０９ｍｍｏｌ）を使用して、生成物２の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、生成物９６を調製した。生成物９６（１０８．８ｍｇ、７２％、ジアステレオ異性体の混合物）を、無色の油状物として得た。
【０３３９】
生成物９６（１００ｍｇ）を、ＳＦＣ（固定相：ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＡＤ−Ｈ  ５μｍ  ２５０＊３０ｍｍ、移動相：８５％  ＣＯ２、１５％  ＥｔＯＨ（０．３％  ｉＰｒＮＨ２））により精製して、生成物９７（４２ｍｇ、２８％）及び生成物９８（４３ｍｇ、２８％）を黄色の油状物として得た。
【０３４０】
Ｅ６８．生成物１１５の調製
【化１９８】
2021527659.tif 000199
出発物質として中間体１１８（１１０ｍｇ、０．５３ｍｍｏｌ）及び中間体１０７（１０６ｍｇ、０．５３ｍｍｏｌ）を使用して、生成物１１０の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、生成物１１５を調製した。
【０３４１】
Ｅ６９．生成物１１６の調製
【化１９９】
2021527659.tif 000200
出発物質として中間体２４（１０４ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ）及び中間体１２０（１００ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ）を使用して、生成物１１０の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、生成物１１６を調製した。
【０３４２】
Ｅ７０．生成物１１７の調製
【化２００】
2021527659.tif 000201
中間体１２２（１３０ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１．１ｍＬ）溶液に、０℃で、トリフルオロ酢酸（０．３８ｍＬ、４．９８ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を、出発物質として、１８時間にわたりｒｔで撹拌した。次いで、ＮａＨＣＯ３（ａｑ  ｓａｔ  ｓｏｌｔｎ）を添加し、生成物をＤＣＭで抽出した。有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、減圧下で濃縮した。粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＭｅＯＨ中のアンモニアの７Ｍ溶液／ＤＣＭ、０／１００から３０／７０へ）で精製した。所望の画分を集めて減圧下で蒸発させて、不純生成物７０を得た。不純生成物７０を、ＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５μｍ、移動相：勾配  ８０％  ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液、２０％  ＣＨ３ＣＮから６０％  ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液、４０％  ＣＨ３ＣＮへ）により２回精製した。所望の画分を集め、Ｎａ２ＣＯ３の飽和溶液を添加し、生成物をＤＣＭで抽出した。有機相を分離し、溶媒を減圧下で蒸発させて、生成物１１７（３０ｍｇ、２９％）を油状物として得た。
【０３４３】
Ｅ７１．生成物１１８の調製
【化２０１】
2021527659.tif 000202
出発物質として中間体１２６（３０ｍｇ、０．０６８ｍｍｏｌ）を使用して、生成物１４の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、生成物１１８を調製した。粗生成物１１８を、ＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５μｍ、移動相：勾配  ８０％  ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液、２０％  ＣＨ３ＣＮから、６０％  ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液、４０％  ＣＨ３ＣＮへ）で精製した。所望の画分を集め、ＮａＨＣＯ３の飽和溶液を添加し、生成物をＤＣＭで抽出した。有機相を分離し、溶媒を減圧下で蒸発させて、生成物１１８（２２ｍｇ、９１％）を油状物として得た。
【０３４４】
Ｅ７２．生成物１１９の調製
【化２０２】
2021527659.tif 000203
出発物質として中間体１２９（５０ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ）及び中間体１２７（５２ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）を使用して、生成物１１０の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、生成物１１９を調製した。生成物１１９を、ＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５μｍ、移動相：勾配  ７５％  ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液、２５％  ＣＨ３ＣＮから、５７％  ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液、４３％  ＣＨ３ＣＮへ）で精製した。所望の画分を集め、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機相を分離し、溶媒を減圧下で蒸発させて、生成物１１９（３０ｍｇ、３４％）を油状物として得た。
【０３４５】
Ｅ７３．生成物１２０、１２１、１２２、１２３、及び１２４の調製
【化２０３】
2021527659.tif 000204
出発物質として中間体１３１（５００ｍｇ、２．５ｍｍｏｌ）及び２，３−ジヒドロ［１，４］ジオキシノ［２，３−ｂ］ピリジン−６−カルボアルデヒド（ＣＡＳ：６１５５６８−２４−６）を使用して、生成物１の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、生成物１２０を調製した。生成物１２０を、ＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｃ１８  ５０×１００ｍｍ、５μｍ）、移動相：勾配  ６０％  ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液、４０％  ＣＨ３ＣＮから４３％  ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液、５７％  ＣＨ３ＣＮへ）で精製した。所望の画分を減圧下で蒸発させて、生成物１２０（３８８ｍｇ、４４％）を粘着性のある黄色の油状物として得た。
【０３４６】
生成物１２０（３７５ｍｇ）をキラルＳＦＣ（固定相：ＣＨＩＲＡＣＥＬ  ＯＪ−Ｈ  ５μｍ  ２５０＊３０ｍｍ、移動相：７５％  ＣＯ２、２５％  ｉＰｒＯＨ（０．３％  ｉＰｒＮＨ２））で精製して、生成物１２１（８７ｍｇ、１０％）と、生成物１２２及び生成物１２３の混合物（１２７ｍｇ）と、生成物１２４（８８ｍｇ、１０％）とを得た。
【０３４７】
生成物１２２及び生成物１２３の混合物（１２７ｍｇ）を、キラルＳＦＣ（固定相：ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＩＣ  ５μｍ  ２５０＊２１．２ｍｍ、移動相：８２％  ＣＯ２、１８％  ｉＰｒＯＨ（０．６％  ｉＰｒＮＨ２））により精製して、不純生成物１２２（５０ｍｇ）及び生成物１２３（４６ｍｇ、５％）を得た。
【０３４８】
不純生成物１２２（５０ｍｇ）を、分取ＬＣ（固定相：不規則な裸のシリカ  １０ｇ、移動相：０．３％  ＮＨ４ＯＨ、９５％  ＤＣＭ、５％  ＭｅＯＨ）により精製して、生成物１２２（３９ｍｇ、５％）を得た。
【０３４９】
全ての生成物を、粘着性のあるオイル状物として得た。
【０３５０】
Ｅ７４．生成物１２５の調製
【化２０４】
2021527659.tif 000205
無水ＣＨ３ＣＮ（２．９２ｍＬ）中の中間体１３６・２ＨＣｌ（１９１ｍｇ、０．７６ｍｍｏｌ）、中間体１２９（１６５ｍｇ、０．７６ｍｍｏｌ）、及びＤＩＰＥＡ（０．７９ｍＬ、４．５６ｍｍｏｌ）の混合物を、２０時間にわたり７０℃で撹拌した。この反応混合物を水で希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ、勾配  ０／１００から５／９５へ）で精製した。所望の画分を集め、減圧下で蒸発させた。
【０３５１】
残留物（１７７ｍｇ）ＡをＥｔ２Ｏ（１．２５ｍＬ）に溶解させ、撹拌しつつ、ＨＣｌ（Ｅｔ２Ｏ中に２Ｍ、０．７４ｍＬ、１．４８ｍｍｏｌ）を添加した。沈殿物をろ過し、生成物を室温で１６時間にわたり減圧下にて乾燥させて、生成物１２５（１４５．３ｍｇ、４４％）を白色の固体として得た。
【０３５２】
Ｅ７５．生成物１２６の調製
【化２０５】
2021527659.tif 000206
出発物質として中間体１２９及び中間体１３８を使用して、生成物１２５の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、生成物１２６を調製した。
【０３５３】
Ｅ７６．生成物１２７の調製
【化２０６】
2021527659.tif 000207
出発物質として中間体１２９及び中間体１４４を使用して、生成物１２５の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、生成物１２７を調製した。
【０３５４】
Ｅ７７．生成物１２８の調製
【化２０７】
2021527659.tif 000208
出発物質として中間体１２９及び中間体１４０・ＨＣｌを使用して、生成物１２５の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、生成物１２８を調製した。
【０３５５】
Ｅ７８．生成物１２９の調製
【化２０８】
2021527659.tif 000209
出発物質として中間体１２９及び中間体１４２・ＨＣｌを使用して、生成物１２５の合成に関して説明したものと類似の手順に従って、生成物１２９を調製した。
【０３５６】
下記の化合物を、実験の部で例示した方法に従って調製した。塩形態が示されていない場合は、この化合物を遊離塩基として得た。「Ｅｘ．Ｎｏ．」は実施例番号を指し、そのプロトコルに従って化合物を合成した。「Ｃｏ．Ｎｏ．」は、化合物番号を意味する。
【０３５７】
【表１】
2021527659.tif 000210
【０３５８】
【表２】
2021527659.tif 000211
【０３５９】
【表３】
2021527659.tif 000212
【０３６０】
【表４】
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【０３６１】
【表５】
2021527659.tif 000214
【０３６２】
【表６】
2021527659.tif 000215
【０３６３】
【表７】
2021527659.tif 000216
【０３６４】
【表８】
2021527659.tif 000217
【０３６５】
【表９】
2021527659.tif 000218
【０３６６】
【表１０】
2021527659.tif 000219
【０３６７】
【表１１】
2021527659.tif 000220
【０３６８】
【表１２】
2021527659.tif 000221
【０３６９】
【表１３】
2021527659.tif 000222
【０３７０】
【表１４】
2021527659.tif 000223
【０３７１】
【表１５】
2021527659.tif 000224
【０３７２】
【表１６】
2021527659.tif 000225
【０３７３】
【表１７】
2021527659.tif 000226
【０３７４】
【表１８】
2021527659.tif 000227
【０３７５】
【表１９】
2021527659.tif 000228
【０３７６】
【表２０】
2021527659.tif 000229
【０３７７】
【表２１】
2021527659.tif 000230
【０３７８】
【表２２】
2021527659.tif 000231
【０３７９】
【表２３】
2021527659.tif 000232
【０３８０】
【表２４】
2021527659.tif 000233
【０３８１】
【表２５】
2021527659.tif 000234
【０３８２】
【表２６】
2021527659.tif 000235
【０３８３】
【表２７】
2021527659.tif 000236
【０３８４】
本明細書で提供される化合物中の塩の化学量論又は酸含有量の値は、実験により得られる値である。本明細書で報告する塩酸の含有量を、１Ｈ  ＮＭＲ積分及び／又は元素分析により決定した。
【０３８５】
分析の部
融点
値はピーク値であり、且つこの分析方法に一般的に付随する実験上の不確実性を伴って得られる。
【０３８６】
ＤＳＣ８２３ｅ（Ａ）：いくつかの化合物について、融点を、ＤＳＣ８２３ｅ（Ｍｅｔｔｌｅｒ−Ｔｏｌｅｄｏ）装置で決定した。融点を、１０℃／分の温度勾配で測定した。最高温度を３００℃とした。値はピーク値（Ａ）である。
【０３８７】
Ｍｅｔｔｌｅｒ  Ｔｏｌｅｄｏ  ＭＰ５０（Ｂ）：いくつかの化合物について、融点を、Ｍｅｔｔｌｅｒ  ＦＰ  ８１ＨＴ／ＦＰ９０装置上のオープンキャピラリーチューブ内で決定した。融点を、１℃／分、３℃／分、５℃／分、又は１０℃／分の温度勾配で測定した。最高温度を３００℃とした。融点を、デジタル表示装置から読み取った。
【０３８８】
ＬＣＭＳ
一般的手順
高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）測定を、各方法で明記したＬＣポンプ、ダイオードアレイ（ＤＡＤ）検出器又はＵＶ検出器、及びカラムを使用して実施した。必要に応じて、追加の検出器を含めた（下記の方法の表を参照されたい）。
【０３８９】
カラムからの流れを、大気圧イオン源を装備した質量分析計（ＭＳ）に導入した。化合物の公称モノアイソトピック分子量（ＭＷ）及び／又は正確な質量モノアイソトピック分子量の同定を可能にするイオンを得るために調整パラメータ（例えば、走査範囲、ドウェル時間等）を設定することは、当業者の知識の範囲内である。データ収集を、適当なソフトウェアで実施した。
【０３９０】
化合物を、その実測保持時間（Ｒｔ）及びイオンで説明する。データの表に別に明記されていない場合、報告する分子イオンは、［Ｍ＋Ｈ］＋（プロトン化分子）及び／又は［Ｍ−Ｈ］−（脱プロトン化分子）に相当する。化合物が直接イオン化可能でなかった場合には、付加体の種類を特定する（即ち、［Ｍ＋ＮＨ４］＋、［Ｍ＋ＨＣＯＯ］−、［Ｍ＋ＣＨ３ＣＯＯ］−等）。複数の同位体パターンを有する分子（Ｂｒ、Ｃｌ等）の場合には、報告する値は、最低同位体質量に関して得られた値である。全ての結果は、使用される方法に通常付随する実験的不確実性を伴って得られた。
【０３９１】
本明細書では、これ以後、「ＳＱＤ」は、シングル四重極検出器、「ＭＳＤ」は、質量選択検出器、「ＱＴＯＦ」は、四重極−飛行時間、「ｒｔ」は、室温、「ＢＥＨ」は、架橋エチルシロキサン／シリカハイブリッド、ＨＳＳ」は、高強度シリカ、「ＣＳＨ」は、荷電表面ハイブリッド、「ＵＰＬＣ」は、超高速液体クロマトグラフィー、「ＤＡＤ」は、ダイオードアレイ検出器である。
【０３９２】
【表２８】
2021527659.tif 000237
【０３９３】
【表２９】
2021527659.tif 000238
【０３９４】
【表３０】
2021527659.tif 000239
【０３９５】
【表３１】
2021527659.tif 000240
【０３９６】
【表３２】
2021527659.tif 000241
【０３９７】
【表３３】
2021527659.tif 000242
【０３９８】
【表３４】
2021527659.tif 000243
【０３９９】
【表３５】
2021527659.tif 000244
【０４００】
【表３６】
2021527659.tif 000245
【０４０１】
【表３７】
2021527659.tif 000246
【０４０２】
旋光度
旋光度を、ナトリウムランプを備えたＰｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒ  ３４１旋光計で測定して、下記のように報告した：［α］°（λ、ｃ  ｇ／１００ｍｌ、溶媒、Ｔ℃）。
【０４０３】
［α］λＴ＝（１００α）／（ｌ×ｃ）：式中、ｌは、経路長（単位：ｄｍ）であり、ｃは、温度Ｔ（℃）及び波長λ（単位：ｎｍ）における試料の濃度（単位：ｇ／１００ｍｌ）である。使用する光の波長が５８９ｎｍ（ナトリウムＤライン）である場合には、シンボルＤを代わりに使用してよい。旋光度のサイン（＋又は−）は、常に与えられるはずである。この等式を使用する場合には、濃度及び溶媒は、常に旋光度後の括弧内に記載される。旋光度は、度を使用して報告され、濃度の単位は記載されない（ｇ／１００ｍＬであると仮定する）。
【０４０４】
【表３８】
2021527659.tif 000247
【０４０５】
ＳＦＣＭＳ法
ＳＦＣ−ＭＳ法のための一般的手順
ＳＦＣ測定を、二酸化炭素（ＣＯ２）及びモディファイアを送達するバイナリポンプ、オートサンプラー、カラムオーブン、４００バールまで耐える高圧フローセルを備えたダイオードアレイ検出器で構成されている分析超臨界流体クロマトグラフィー（ＳＦＣ）システムを使用して実施した。質量分析計（ＭＳ）が配置されている場合には、カラムからの流れを（ＭＳ）に導入した。化合物の公称モノアイソトピック分子量（ＭＷ）の特定を可能にするイオンを得るために調整パラメータ（例えば、走査範囲、ドウェル時間等）を設定することは、当業者の知識の範囲内である。データ収集を、適当なソフトウェアで実施した。
【０４０６】
【表３９】
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【０４０７】
【表４０】
2021527659.tif 000249
【０４０８】
【表４１】
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【０４０９】
【表４２】
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【０４１０】
【表４３】
2021527659.tif 000252
【０４１１】
【表４４】
2021527659.tif 000253
【０４１２】
ＮＭＲ
複数の化合物について、１Ｈ  ＮＭＲスペクトルを、溶媒としてクロロホルム−ｄ（重水素化クロロホルム、ＣＤＣｌ３）又はＤＭＳＯ−ｄ６（重水素化ＤＭＳＯ、ジメチル−ｄ６スルホキシド）を使用して、３００ＭＨｚ  Ｕｌｔｒａｓｈｉｅｌｄマグネットを備えたＢｒｕｋｅｒ  Ａｖａｎｃｅ  ＩＩＩにより記録したか、４００ＭＨｚで動作するＢｒｕｋｅｒ  ＤＰＸ−４００分光器により記録したか、５００ＭＨｚで動作するＢｒｕｋｅｒ  Ａｖａｎｃｅ  Ｉにより記録したか、３６０ＭＨｚで動作するＢｒｕｋｅｒ  ＤＰＸ−３６０により記録したか、又は６００ＭＨｚで運転するＢｒｕｋｅｒ  Ａｖａｎｃｅ  ６００分光器により記録した。化学シフト（δ）を、内部標準として使用したテトラメチルシラン（ＴＭＳ）に対して百万分率（ｐｐｍ）単位で報告する。
【０４１３】
【表４５】
2021527659.tif 000254
【０４１４】
薬理学的実施例
１）ＯＧＡ−生化学的アッセイ
このアッセイは、組換えヒト髄膜腫発現抗原５（ＭＧＥＡ５）（Ｏ−ＧｌｃＮＡｃアーゼ（ＯＧＡ）とも称される）によるフルオレセインモノ−β−Ｄ−Ｎ−アセチル−グルコサミン（ＦＭ−ＧｌｃＮＡｃ）の加水分解の阻害基づく（Ｍａｒｉａｐｐａ  ｅｔ  ａｌ．２０１５，Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｊ  ４７０：２５５）。加水分解ＦＭ−ＧｌｃＮＡｃ（Ｍａｒｋｅｒ  Ｇｅｎｅ  ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、カタログ番号Ｍ１４８５）は、β−Ｄ−Ｎ−グルコサミン酢酸塩及びフルオレセインの形成をもたらす。後者の蛍光は、励起波長４８５ｎｍ及び発光波長５３８ｎｍで測定され得る。酵素活性の増大は、蛍光シグナルの増大をもたらす。完全長ＯＧＡ酵素を、ＯｒｉＧｅｎｅで購入した（カタログ番号ＴＰ３２２４１１）。この酵素を、２５ｍＭ  Ｔｒｉｓ．ＨＣｌ、ｐＨ７．３、１００ｍＭグリシン、１０％グリセロール中において−２０℃で保存した。Ｔｈｉａｍｅｔ  Ｇ及びＧｌｃＮＡｃＳｔａｔｉｎを基準化合物として試験した（Ｙｕｚｗａ  ｅｔ  ａｌ．２００８  Ｎａｔｕｒｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ４：４８３；Ｙｕｚｗａ  ｅｔ  ａｌ．２０１２  Ｎａｔｕｒｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ８：３９３）。本アッセイを、０．００５％のＴｗｅｅｎ−２０を加えた２００ｍＭのクエン酸／リン酸緩衝液中で実施した。Ｎａ２ＨＰＯ４２Ｈ２Ｏ（Ｓｉｇｍａ、＃Ｃ０７５９）３５．６ｇを水１Ｌに溶解させて、２００ｍＭ溶液を得た。クエン酸（Ｍｅｒｃｋ、＃１．０６５８０）１９．２ｇを水１Ｌに溶解させて、１００ｍＭ溶液を得た。リン酸ナトリウム溶液のｐＨを、クエン酸溶液で７．２に調整した。反応を停止するための緩衝液は、５００ｍＭ炭酸緩衝液ｐＨ１１．０からなる。７３４ｍｇのＦＭ−ＧｌｃＮＡｃをＤＭＳＯ  ５．４８ｍＬに溶解させて２５０ｍＭ溶液を得、−２０℃で保管した。ＯＧＡを２ｎＭ濃度で使用し、ＦＭ−ＧｌｃＮＡｃを１００ｕＭ最終濃度で使用した。希釈物を、アッセイ緩衝液で調製した。
【０４１５】
化合物５０ｎｌをＤＭＳＯに溶解させ、Ｂｌａｃｋ  Ｐｒｏｘｉｐｌａｔｅ（商標）３８４  Ｐｌｕｓアッセイプレート（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ、＃６００８２６９）に分注し、次にｆｌ−ＯＧＡ酵素混合物３μｌを添加した。プレートを室温で６０分にわたりプレインキュベートし、次いでＦＭ−ＧｌｃＮＡｃ基質混合物２μｌを添加した。最終ＤＭＳＯ濃度は、１％を超えなかった。
【０４１６】
プレートを１０００ｒｐｍで１分間手短に遠心分離し、室温で６時間にわたりインキュベートした。反応を停止するために、停止緩衝液５μｌを添加し、プレートを再度１０００ｒｐｍで１分間遠心分離した。Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｆｌｕｏｒｏｓｋａｎ  Ａｓｃｅｎｔ又はＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ  ＥｎＶｉｓｉｏｎ中で、４８５ｎｍの励起波長及び５３８ｎｍの発光波長で蛍光を定量化した。
【０４１７】
分析のために、最良適合曲線を最小平方和法（ｍｉｎｉｍｕｍ  ｓｕｍ  ｏｆ  ｓｑｕａｒｅｓ  ｍｅｔｈｏｄ）により適合させる。これにより、ＩＣ５０値及びヒル係数を得た。高対照（阻害剤なし）及び低対照（標準阻害剤の飽和濃度）を使用して、最小値及び最大値を定義した。
【０４１８】
２）ＯＧＡ−細胞アッセイ
Ｐ３０１Ｌ変異体ヒトタウ（アイソフォーム２Ｎ４Ｒ）を誘導するＨＥＫ２９３細胞は、Ｊａｎｓｓｅｎで確立された。Ｔｈｉａｍｅｔ−Ｇを、プレートバリデーション（高対照）及び参照化合物（参照ＥＣ５０アッセイバリデーション）の両方に使用した。ＯＧＡの阻害を、既に説明されているように（Ｄｏｒｆｍｕｅｌｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．２０１０  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ＆  ｂｉｏｌｏｇｙ，１７：１２５０）、Ｏ−ＧｌｃＮＡｃ化残基を検出するモノクローナル抗体（ＣＴＤ１１０．６；Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ、＃９８７５）を使用して、Ｏ−ＧｌｃＮＡｃ化タンパク質を免疫細胞化学的（ＩＣＣ）に検出することによって評価する。ＯＧＡを阻害すると、Ｏ−ＧｌｃＮＡｃ化タンパク質レベルが増加することになり、その結果、実験ではシグナルが増加する。細胞核をＨｏｅｃｈｓｔで染色して、細胞培養の品質管理を行い、即時の化合物毒性があれば、そのおよその推定を行う。ＩＣＣ写真を、Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ  Ｏｐｅｒａ  Ｐｈｅｎｉｘプレート顕微鏡で撮像し、付属のソフトウェアＰｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ  Ｈａｒｍｏｎｙ  ４．１で定量化する。
【０４１９】
細胞を、標準的な手順に従ってＤＭＥＭ高グルコース（Ｓｉｇｍａ、＃Ｄ５７９６）中で増殖させた。細胞アッセイの２日前に、細胞を分離し、計数し、１００μｌのアッセイ培地（ＧｌｃＮＡｃ化の基底レベルを低減するために低グルコース培地を使用する）中で、細胞密度１２，０００個の細胞／ｃｍ２（４，０００個の細胞／ウェル）で、ポリ−Ｄ−リシン（ＰＤＬ）をコートした９６ウェル（Ｇｒｅｉｎｅｒ、＃６５５９４６）プレートに播種する（Ｐａｒｋ  ｅｔ  ａｌ．２０１４  Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ２８９：１３５１９）。化合物の試験日にアッセイプレートから培地を除去し、９０μｌの新鮮なアッセイ培地を補充した。１０μｌの化合物を最終濃度１０倍でウェルに添加した。プレートを遠心分離し、その直後に細胞インキュベーターに入れて６時間インキュベートした。ＤＭＳＯ濃度を０．２％に設定した。真空を適用することにより培地を廃棄した。細胞を染色するために、培地を除去し、細胞を１００μｌのＤ−ＰＢＳ（Ｓｉｇｍａ、＃Ｄ８５３７）で１回洗浄した。次の工程以降、特に明記しない限り、アッセイ容量は常に５０μｌであり、インキュベーションを、撹拌せずに室温で実施した。細胞を、室温で５０μｌの４％パラホルムアルデヒド（ＰＦＡ、Ａｌｐｈａ  ａｅｓａｒ、＃０４３３６８）ＰＢＳ溶液中に１５分間固定した。次いで、ＰＦＡ  ＰＢＳ溶液を廃棄し、細胞を１０ｍＭ  トリス緩衝液（ＬｉｆｅＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、＃１５５６７−０２７）、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ（ＬｉｆｅＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、＃２４７４０−０１１０、０．１％  Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ（Ａｌｐｈａ  ａｅｓａｒ、＃Ａ１６０４６）、ｐＨ７．５（ＩＣＣ緩衝液）中で１回洗浄した後、同じ緩衝液中で１０分間透過処理した。続いて、試料を、室温で、５％ヤギ血清（Ｓｉｇｍａ、＃Ｇ９０２３）を含有するＩＣＣ中で、４５〜６０分間ブロックする。次いで、試料を一次抗体（市販品供給元からの１／１０００、上記参照）と共に４℃で一晩インキュベートし、次にＩＣＣ緩衝液中で３回５分間の洗浄を行った。試料を二次蛍光抗体（１／５００希釈物、Ｌｉｆｅｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、＃Ａ−２１０４２）と共にインキュベートし、核を、ＩＣＣ中の最終濃度１μｇ／ｍｌのＨｏｅｃｈｓｔ３３３４２（Ｌｉｆｅｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、＃Ｈ３５７０）により１時間染色した。分析前に、試料を、ＩＣＣ系緩衝液中で２回、５分間手作業で洗浄した。
【０４２０】
撮像を、２０×水浸対物レンズを使用し且つ１ウェル当たり９個の視野を記録するＰｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ  Ｐｈｅｎｉｘ  Ｏｐｅｒａを使用して実施する。４８８ｎｍでの強度読み出しを、ウェル中の全タンパク質のＯ−ＧｌｃＮＡｃ化レベルの尺度として使用する。化合物の潜在的毒性を評価するために、Ｈｏｅｃｈｓｔ染色を用いて核を計数した。ＩＣ５０値を、パラメトリック非線形回帰モデルフィッティングを使用して算出する。最大阻害として、２００ｕＭ濃度のＴｈｉａｍｅｔ  Ｇが各プレート上に存在する。さらに、Ｔｈｉａｍｅｔ  Ｇの濃度応答を各プレートで算出する。
【０４２１】
【表４６】
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【０４２２】
【表４７】
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【０４２３】
【表４８】
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【０４２４】
【表４９】
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【国際調査報告】
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