(57)【要約】  本開示は、オキソピコリンアミド誘導体の結晶形及びその製造方法を提供する。具体的には、本開示は、式(I)に示される化合物のＡ型、Ｂ型、Ｃ型、Ｄ型、Ｅ型及びＦ型結晶、ならびにこれらの製造方法を提供する。本開示で得られる式(I)の化合物のＡ型、Ｂ型、Ｃ型、Ｄ型、Ｅ型及びＦ型結晶は、良好な結晶的及び化学的安定性を有し、よりよく臨床治療に利用される。
2021514944.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
5.9、8.8、9.6、13.8、15.7及び16.8に特徴的なピークを含み、回折角2θ角度で表されるＸ線粉末回折スペクトルを有することを特徴とする、式(I)の化合物のＡ型結晶。
【化１】
2021514944.tif 000014
【請求項２】
前記Ａ型結晶が、4.50、5.86、8.78、9.60、11.89、12.57、13.21、13.76、14.35、15.68、16.78、18.01、19.42、19.95、22.57、23.76、25.14、27.03、27.42及び27.92に特徴的なピークを含み、回折角2θ角度で表されるＸ線粉末回折スペクトルを有することを特徴とする、請求項１に記載のＡ型結晶。
【請求項３】
方法Ｉ：式(I)の化合物を溶媒(I)に加え、該混合物をパルプ化し、Ａ型結晶を得る；該溶媒(I)は、エステル溶媒、好ましくは酢酸エチルから選択される；及び
方法II：式(I)の化合物を溶媒(II)に溶解し、Ａ型結晶を結晶化する；該溶媒(II)は、エステル溶媒、好ましくは酢酸エチルから選択される；該結晶化の方法は、室温結晶化、冷却結晶化、溶媒揮発結晶化及び結晶種による誘発結晶化からなる群から選択される。
からなる群から選択されることを特徴とする、請求項１または２に記載のＡ型結晶を製造する方法。
【請求項４】
7.0、7.5、12.4、13.1、13.6、16.0、16.8、17.2、18.1、19.1、19.9、21.7、22.7、23.7、23.9、25.6、26.0、27.9、28.5及び29.0に特徴的なピークを含み、回折角2θ角度で表されるＸ線粉末回折スペクトルを有することを特徴とする、式(I)の化合物のＢ型結晶。
【化２】
2021514944.tif 000015
【請求項５】
前記Ｂ型結晶が、6.98、7.53、11.24、12.36、13.13、13.59、16.02、16.79、17.21、18.12、19.06、19.87、20.56、21.65、22.70、23.73、23.94、24.50、25.58、25.98、26.33、27.87、28.48、28.96、30.19、30.77、33.01、34.13、35.13、37.83、38.74、41.03、41.74、42.91、44.03及び45.46に特徴的なピークを含み、回折角2θ角度で表されるＸ線粉末回折スペクトルを有することを特徴とする、請求項４に記載のＢ型結晶。
【請求項６】
方法Ｉ：式(Ｉ)の化合物を溶媒(III)に加え、該混合物をパルプ化し、Ｂ型結晶を得る；該溶媒(III)は、水、アルコール溶媒、アルコール溶媒と水の混合溶媒、エーテル溶媒とアルコール溶媒の混合溶媒及びエーテル溶媒と水の混合溶媒からなる群から選択される；該アルコール溶媒は、好ましくはメタノールであり；該エーテル溶媒は、好ましくはテトラヒドロフランであり；該エーテル溶媒とアルコール溶媒の混合溶媒は、好ましくはテトラヒドロフランとメタノールの混合溶媒であり；該アルコール溶媒と水の混合溶媒は、好ましくはメタノールと水の混合溶媒である；及び
方法II：式(Ｉ)の化合物を溶媒(IV)に溶解し、溶媒(V)を添加することにより結晶形Ｂを結晶化する；該溶媒(IV)は、テトラヒドロフランから選択されるエーテル溶媒であり；該溶媒(V)は、水、アルコール溶媒及びアルコール溶媒と水の混合溶媒からなる群から選択され；該アルコール溶媒は好ましくはメタノールであり；該アルコール溶媒と水の混合溶媒は、好ましくはメタノールと水の混合溶媒である。
からなる群から選択されることを特徴とする、請求項４または５に記載のＢ型結晶を製造する方法。
【請求項７】
7.4、9.2、13.3、15.6、15.9、19.2、21.7、24.1、24.9及び27.3に特徴的なピークを含み、回折角2θ角度で表されるＸ線粉末回折スペクトルを有することを特徴とする、式(I)の化合物のＣ型結晶。
【化３】
2021514944.tif 000016
【請求項８】
前記Ｃ型結晶が、7.38、9.15、11.60、12.82、13.27、14.36、15.60、15.91、16.67、17.21、18.54、19.18、20.15、21.65、22.27、24.06、24.92、26.82、27.34、28.96、29.96、32.24及び33.08に特徴的なピークを含み、回折角2θ角度で表されるＸ線粉末回折スペクトルを有することを特徴とする、請求項７に記載のＣ型結晶。
【請求項９】
方法I：式(Ｉ)の化合物を溶媒(VI)に溶解し、Ｃ型結晶を結晶化する；該溶媒(VI)は、ハロ炭化水素溶媒及びケトン溶媒からなる群から選択され；該ハロ炭化水素溶媒は、好ましくはジクロロメタンであり；該ケトン溶媒は好ましくはアセトンであり；該結晶化の方法は、室温結晶化、冷却結晶化、溶媒揮発結晶化及び結晶種による誘発結晶化からなる群から選択される；及び
方法II：式(I)の化合物を溶媒(VII)に加え、混合物をパルプ化し、Ｃ型結晶を得る；該溶媒(VII)は、ハロ炭化水素溶媒、ケトン溶媒及びニトリル溶媒からなる群から選択され；該ハロ炭化水素溶媒は、好ましくはジクロロメタンであり；該ケトン溶媒は、好ましくはアセトンであり；該ニトリル溶媒は好ましくはアセトニトリルである。
からなる群から選択されることを特徴とする、請求項７または８に記載のＣ型結晶を製造する方法。
【請求項１０】
5.3、6.4、8.7、11.5、15.9、16.3、20.0及び24.7に特徴的なピークを含み、回折角2θ角度で表されるＸ線粉末回折スペクトルを有することを特徴とする、式(I)の化合物のＤ型結晶。
【化４】
2021514944.tif 000017
【請求項１１】
前記Ｄ型結晶が、5.34、6.44、8.71、10.85、11.48、12.02、13.24、15.91、16.28、18.08、20.04、23.22、24.69、25.95及び27.30に特徴的なピークを含み、回折角2θ角度で表されるＸ線粉末回折スペクトルを有することを特徴とする、請求項１０に記載のＤ型結晶。
【請求項１２】
式(Ｉ)の化合物を溶媒(VIII)に溶解し、Ｄ型結晶を結晶化する；該溶媒(VIII)は、エーテル溶媒、好ましくはテトラヒドロフランから選択され；該結晶化の方法は、室温結晶化、冷却結晶化、溶媒揮発結晶化及び結晶種による誘発結晶化からなる群から選択される、工程を含むことを特徴とする、請求項１０または１１に記載のＤ型結晶を製造する方法。
【請求項１３】
6.6、7.0、8.9、11.9、15.1、15.4、16.3、19.1、19.9、20.9、23.5、23.8、24.3、25.4、26.6、28.9及び30.1に特徴的なピークを含み、回折角2θ角度で表されるＸ線粉末回折スペクトルを有することを特徴とする、式(I)の化合物のＥ型結晶。
【請求項１４】
前記Ｅ型結晶が、3.60、3.79、4.76、6.55、6.98、8.92、11.86、13.18、14.33、15.14、15.37、16.32、17.19、19.05、19.86、20.88、22.75、23.50、23.77、24.26、25.38、26.56、28.88、30.05及び32.19に特徴的なピークを含み、回折角2θ角度で表されるＸ線粉末回折スペクトルを有することを特徴とする、請求項１３に記載のＥ型結晶。
【請求項１５】
式(Ｉ)の化合物を溶媒(IX)に溶解し、Ｅ型結晶を結晶化する；該溶媒(IX)は、ハロ炭化水素溶媒、ハロ炭化水素溶媒とエステル溶媒の混合溶媒及びハロ炭化水素溶媒とエーテル溶媒の混合溶媒からなる群から選択され、好ましくは、ジクロロエタン、ジクロロエタンと酢酸エチルの混合溶媒、ジクロロエタンとジイソプロピルエーテルの混合溶媒であり；該結晶化の方法は、室温結晶化、冷却結晶化、溶媒揮発結晶化及び結晶種による誘発結晶化からなる群から選択される、工程を含むことを特徴とする、請求項１３または１４に記載のＥ型結晶を製造する方法。
【請求項１６】
6.5、9.9、11.3、13.2、13.6、15.2、16.5、17.4、17.9、19.0、20.1、21.1、23.7、24.1及び26.6に特徴的なピークを含み、回折角2θ角度で表されるＸ線粉末回折スペクトルを有することを特徴とする、式(I)の化合物のＦ型結晶。
【化５】
2021514944.tif 000018
【請求項１７】
前記Ｆ型結晶が、6.46、7.51、9.92、11.26、13.15、13.58、15.20、16.46、17.38、17.88、19.02、20.10、21.10、23.70、24.10、26.61、28.78及び29.80に特徴的なピークを含み、回折角2θ角度で表されるＸ線粉末回折スペクトルを有することを特徴とする、請求項１６に記載のＦ型結晶。
【請求項１８】
方法Ｉ：式(Ｉ)の化合物を溶媒(X)に加え、該混合物をパルプ化し、Ｆ型結晶を得る；該溶媒(X)は、アルコール溶媒から選択され、好ましくはエタノールまたはイソプロパノールである；及び
方法II：式(Ｉ)の化合物を溶媒(XI)に溶解し、Ｆ型結晶を結晶化する；該溶媒(XI)は、アルコール溶媒から選択され、好ましくはエタノールまたはイソプロパノールである；該結晶化の方法は、室温結晶化、冷却結晶化、溶媒揮発結晶化及び結晶種による誘発結晶化からなる群から選択される。
からなる群から選択されることを特徴とする、請求項１６または１７に記載のＦ型結晶を製造する方法。
【請求項１９】
2θの誤差範囲は±0.2である、請求項１、２、４、５、７、８、１０、１１、１３、１４、１６及び１７のいずれか１項に記載の結晶形。
【請求項２０】
請求項１、２、４、５、７、８、１０、１１、１３、１４、１６、１７及び１９のいずれか１項に記載の結晶形及び場合により薬剤的に許容される担体、希釈剤及び賦形剤を含む、医薬組成物。
【請求項２１】
請求項１、２、４、５、７、８、１０、１１、１３、１４、１６、１７及び１９のいずれか１項に記載の結晶形及び場合により薬剤的に許容される担体、希釈剤及び賦形剤から製造された、医薬組成物。
【請求項２２】
請求項１、２、４、５、７、８、１０、１１、１３、１４、１６、１７及び１９のいずれか１項に記載の結晶形を薬剤的に許容される担体、希釈剤または賦形剤と混合する工程を含むことを特徴とする、請求項２０または２１に記載の医薬組成物を製造する方法。
【請求項２３】
請求項１、２、４、５、７、８、１０、１１、１３、１４、１６、１７及び１９のいずれか１項に記載の結晶形の、XIa因子の阻害に関連する疾患または状態を治療及び/または予防するための薬物の製造における使用であって、ここで、該疾患または状態は、心血管疾患、好ましくは血栓塞栓性疾患、より好ましくは血管形成術または大動脈冠状動脈シャント後の心筋梗塞、狭心症、再閉塞及び再狭窄、播種性血管内凝固、脳卒中、一過性虚血発作、末梢動脈閉塞症、肺塞栓症及び深部静脈血栓症からなる群から選択される、該結晶形の使用。
【発明の詳細な説明】
【本発明の分野】
【０００１】
本開示は、(S)-4-(2-(4-(2-アセチル-5-クロロフェニル)-5-メトキシ-2-オキソピリジン-1(2H)-イル)-3-フェニルプロパンアミド)安息香酸のＡ型、Ｂ型、Ｃ型、Ｄ型、Ｅ型及びＦ型結晶ならびにそれらの製造方法に関する。
【本発明の背景】
【０００２】
ヒトFXI欠乏症(FXI活性<15 U/dL)は、Ｃ型血友病としても知られている。血栓モデルにおいてFXIa因子の阻害は血栓の形成を効果的に阻害できることが見出された。
【０００３】
血液凝固因子XIa(FXIaと称する)は新たな標的である。Bayer社のアンチセンスオリゴヌクレオチド(ASO)BAY-2306001は臨床第II相試験に入り、良い結果が得られた。該薬物の臨床第I相試験では、被験者におけるFXI活性は、aPTTの延長を伴う持続的な用量依存的な減少を示している。体内のFXIが検出できない程度まで減少しても、薬物関連の出血症状はなく、FXIaが新たな標的になる可能性を示している。しかし、FXI ASOは注射により投与され、薬効の開始が遅く、抗血栓効果が現れるまで数週間かかるので、予防薬として限られる可能性がある。低分子阻害剤に関しては、BMS社で開発されたFXIa阻害剤のみが2014年に臨床第I相試験に入った。これまでには臨床試験の結果は報告されていない。従って、新規なFXIa阻害剤の研究は非常に重要である。
【０００４】
PCT/CN2017/099579(2017年8月30日に出願)は、化学名(S)-4-(2-(4-(2-アセチル-5-クロロフェニル)-5-メトキシ-2-オキソピリジン-1(2H)-イル)-3-フェニルプロパンアミド)安息香酸の低分子FXIa拮抗薬を開示している。該薬物分子は、より高い活性を有し、ヒト血液に対して優れた抗凝固作用を示し、また、良好な薬物動態的活性を有していることから、心血管や脳血管の疾患及び血栓症を有効に治療及び/または予防するために使用できる。その構造を式(I)として示す：
【化１】
2021514944.tif 000003
【０００５】
医薬品有効成分の結晶構造は、しばしば薬物の化学的及び物理的安定性に影響する。異なる結晶化条件、製造方法及び保存条件は、化合物の結晶構造の変化につながり、時には他の結晶形の生成を伴う場合がある。一般に、無晶形の薬物は規則的な結晶構造をもたず、しばしば製品の安定性が悪く、濾過が困難、凝集し易い、また流動性が悪い等のような他の欠陥がある。従って、化合物の様々な性質を改良し、また、高純度で良好な化学的安定性をもつ結晶形を見出す必要がある。
【本発明の概要】
【０００６】
本開示は、式(I)の化合物のＡ型結晶を提供する。該Ａ型結晶が、5.9、8.8、9.6、13.8、15.7及び16.8の2θ角度に特徴的なピークを含み、回折角2θ角度で表されるＸ線粉末回折スペクトルを有することを特徴とする。
【化２】
2021514944.tif 000004
【０００７】
好ましくは、回折角2θ角度で表される該Ｘ線粉末回折スペクトルは、4.50、5.86、8.78、9.60、11.89、12.57、13.21、13.76、14.35、15.68、16.78、18.01、19.42、19.95、22.57、23.76、25.14、27.03、27.42及び27.92の2θ角度に特徴的なピークを含む。
【０００８】
より好ましくは、回折角2θ角度で表される該Ｘ線粉末回折スペクトルは、4.502、5.859、8.776、9.596、11.890、12.565、13.206、13.758、14.351、15.678、16.777、18.008、19.422、19.948、22.567、23.761、25.141、27.031、27.417及び27.919の2θ角度に特徴的なピークを含む。
【０００９】
さらに、該Ａ型結晶は、図１に示すような回折角2θ角度で表されるＸ線粉末回折スペクトルを有する。
【００１０】
本開示は、
方法Ｉ：式(I)の化合物を溶媒(I)に加え、該混合物をパルプ化し、Ａ型結晶を得る；該溶媒(I)は、エステル溶媒、好ましくは酢酸エチルから選択される；及び
方法II：式(I)の化合物を溶媒(II)に溶解し、Ａ型結晶を結晶化する；該溶媒(II)は、エステル溶媒、好ましくは酢酸エチルから選択される；該結晶化の方法は、室温結晶化、冷却結晶化、溶媒揮発結晶化及び結晶種による誘発結晶化からなる群から選択される。
からなる群から選択される、式(I)の化合物のＡ型結晶の製造方法を提供する。
【００１１】
本開示は、式(I)の化合物のＢ型結晶も提供する。該Ｂ型結晶が、7.0、7.5、12.4、13.1、13.6、16.0、16.8、17.2、18.1、19.1、19.9、21.7、22.7、23.7、23.9、25.6、26.0、27.9、28.5及び29.0の2θ角度に特徴的なピークを含み、回折角2θ角度で表されるＸ線粉末回折スペクトルを有することを特徴とする。
【００１２】
好ましくは、該Ｂ型結晶は、6.98、7.53、11.24、12.36、13.13、13.59、16.02、16.79、17.21、18.12、19.06、19.87、20.56、21.65、22.70、23.73、23.94、24.50、25.58、25.98、26.33、27.87、28.48、28.96、30.19、30.77、33.01、34.13、35.13、37.83、38.74、41.03、41.74、42.91、44.03及び45.46の2θ角度に特徴的なピークを含み、回折角2θ角度で表されるＸ線粉末回折スペクトルを有する。
【００１３】
より好ましくは、該Ｂ型結晶は、6.983、7.527、11.239、12.362、13.132、13.586、16.019、16.793、17.206、18.119、19.060、19.872、20.556、21.647、22.699、23.733、23.944、24.498、25.581、25.983、26.334、27.869、28.478、28.964、30.193、30.769、33.013、34.128、35.126、37.827、38.742、41.026、41.743、42.908、44.027及び45.461の2θ角度に特徴的なピークを含み、回折角2θ角度で表されるＸ線粉末回折スペクトルを有する。
【００１４】
さらに、該Ｂ型結晶は、図２に示すような回折角2θ角度で表されるＸ線粉末回折スペクトルを有する。
【００１５】
本開示は、
方法Ｉ：式(Ｉ)の化合物を溶媒(III)に加え、該混合物をパルプ化し、Ｂ型結晶を得る；該溶媒(III)は、水、アルコール溶媒、アルコール溶媒と水の混合溶媒、エーテル溶媒とアルコール溶媒の混合溶媒及びエーテル溶媒と水の混合溶媒からなる群から選択される；該アルコール溶媒は、好ましくはメタノールであり、該エーテル溶媒は、好ましくはテトラヒドロフランであり、該エーテル溶媒とアルコール溶媒の混合溶媒は、好ましくはテトラヒドロフランとメタノールの混合溶媒であり、該アルコール溶媒と水の混合溶媒は、好ましくはメタノールと水の混合溶媒である；及び
方法II：式(Ｉ)の化合物を溶媒(IV)に溶解し、溶媒(V)を添加することにより結晶形Ｂを結晶化する；該溶媒(IV)は、テトラヒドロフランから選択されるエーテル溶媒であり；該溶媒(V)は、水、アルコール溶媒及びアルコール溶媒と水の混合溶媒からなる群から選択され；該アルコール溶媒は好ましくはメタノールであり、該アルコール溶媒と水の混合溶媒は、好ましくはメタノールと水の混合溶媒である。
からなる群から選択される、式(I)の化合物のＢ型結晶の製造方法も提供する。
【００１６】
本開示は、式(I)の化合物のＣ型結晶も提供する。該Ｃ型結晶が、7.4、9.2、13.3、15.6、15.9、19.2、21.7、24.1、24.9及び27.3の2θ角度に特徴的なピークを含み、回折角2θ角度で表されるＸ線粉末回折スペクトルを有することを特徴とする。
【００１７】
好ましくは、該Ｃ型結晶は、7.38、9.15、11.60、12.82、13.27、14.36、15.60、15.91、16.67、17.21、18.54、19.18、20.15、21.65、22.27、24.06、24.92、26.82、27.34、28.96、29.96、32.24及び33.08の2θ角度に特徴的なピークを含み、回折角2θ角度で表されるＸ線粉末回折スペクトルを有する。
【００１８】
より好ましくは、該Ｃ型結晶は、7.375、9.154、11.597、12.818、13.268、14.356、15.604、15.907、16.670、17.205、18.536、19.180、20.154、21.646、22.267、24.064、24.917、26.817、27.340、28.956、29.962、32.244及び33.075の2θ角度に特徴的なピークを含み、回折角2θ角度で表されるＸ線粉末回折スペクトルを有する。
【００１９】
さらに、該Ｃ型結晶は、図３に示すような回折角2θ角度で表されるＸ線粉末回折スペクトルを有する。
【００２０】
本開示は、
方法I：式(Ｉ)の化合物を溶媒(VI)に溶解し、Ｃ型結晶を結晶化する；該溶媒(VI)は、ハロ炭化水素溶媒及びケトン溶媒からなる群から選択され；該ハロ炭化水素溶媒は、好ましくはジクロロメタンであり；該ケトン溶媒は好ましくはアセトンであり；該結晶化の方法は、室温結晶化、冷却結晶化、溶媒揮発結晶化及び結晶種による誘発結晶化からなる群から選択される；及び
方法II：式(I)の化合物を溶媒(VII)に加え、混合物をパルプ化し、Ｃ型結晶を得る；該溶媒(VII)は、ハロ炭化水素溶媒、ケトン溶媒及びニトリル溶媒からなる群から選択され；該ハロ炭化水素溶媒は、好ましくはジクロロメタンであり；該ケトン溶媒は、好ましくはアセトンであり；該ニトリル溶媒は好ましくはアセトニトリルである。
からなる群から選択される、式(I)の化合物のＣ型結晶の製造方法も提供する。
【００２１】
本開示は、式(I)の化合物のＤ型結晶も提供する。該Ｄ型結晶が、5.3、6.4、8.7、11.5、15.9、16.3、20.0及び24.7の2θ角度に特徴的なピークを含み、回折角2θ角度で表されるＸ線粉末回折スペクトルを有することを特徴とする。
【００２２】
好ましくは、該Ｄ型結晶は、5.34、6.44、8.71、10.85、11.48、12.02、13.24、15.91、16.28、18.08、20.04、23.22、24.69、25.95及び27.30の2θ角度に特徴的なピークを含み、回折角2θ角度で表されるＸ線粉末回折スペクトルを有する。
【００２３】
より好ましくは、該Ｄ型結晶は、5.343、6.443、8.714、10.849、11.477、12.017、13.237、15.907、16.280、18.076、20.040、23.221、24.694、25.952及び27.302の2θ角度に特徴的なピークを含み、回折角2θ角度で表されるＸ線粉末回折スペクトルを有する。
【００２４】
さらに、該Ｄ型結晶は、図４に示すような回折角2θ角度で表されるＸ線粉末回折スペクトルを有する。
【００２５】
本開示は、
式(Ｉ)の化合物を溶媒(VIII)に溶解し、Ｄ型結晶を結晶化する；該溶媒(VIII)は、エーテル溶媒、好ましくはテトラヒドロフランから選択され；該結晶化の方法は、室温結晶化、冷却結晶化、溶媒揮発結晶化及び結晶種による誘発結晶化からなる群から選択される、工程を含む式(I)の化合物のＤ型結晶の製造方法も提供する。
【００２６】
本開示は、式(I)の化合物のＥ型結晶も提供する。該Ｅ型結晶が、6.6、7.0、8.9、11.9、15.1、15.4、16.3、19.1、19.9、20.9、23.5、23.8、24.3、25.4、26.6、28.9及び30.1の2θ角度に特徴的なピークを含み、回折角2θ角度で表されるＸ線粉末回折スペクトルを有することを特徴とする。
【００２７】
好ましくは、該Ｅ型結晶は、3.60、3.79、4.76、6.55、6.98、8.92、11.86、13.18、14.33、15.14、15.37、16.32、17.19、19.05、19.86、20.88、22.75、23.50、23.77、24.26、25.38、26.56、28.88、30.05及び32.19の2θ角度に特徴的なピークを含み、回折角2θ角度で表されるＸ線粉末回折スペクトルを有する。
【００２８】
より好ましくは、該Ｅ型結晶は、3.602、3.785、4.756、6.548、6.980、8.919、11.856、13.176、14.326、15.136、15.369、16.316、17.191、19.050、19.855、20.878、22.752、23.502、23.772、24.259、25.376、26.561、28.884、30.046及び32.185の2θ角度に特徴的なピークを含み、回折角2θ角度で表されるＸ線粉末回折スペクトルを有する。
【００２９】
さらに、該Ｅ型結晶は、図５に示すような回折角2θ角度で表されるＸ線粉末回折スペクトルを有する。
【００３０】
本開示は、
式(Ｉ)の化合物を溶媒(IX)に溶解し、Ｅ型結晶を結晶化する；該溶媒(IX)は、ハロ炭化水素溶媒、ハロ炭化水素溶媒とエステル溶媒の混合溶媒及びハロ炭化水素溶媒とエーテル溶媒の混合溶媒からなる群から選択され、好ましくは、ジクロロエタン、ジクロロエタンと酢酸エチルの混合溶媒、ジクロロエタンとジイソプロピルエーテルの混合溶媒である；該結晶化の方法は、室温結晶化、冷却結晶化、溶媒揮発結晶化及び結晶種による誘発結晶化からなる群から選択される、工程を含む式(I)の化合物のＥ型結晶の製造方法も提供する。
【００３１】
本開示は、式(I)の化合物のＦ型結晶も提供する。該Ｆ型結晶が、6.5、9.9、11.3、13.2、13.6、15.2、16.5、17.4、17.9、19.0、20.1、21.1、23.7、24.1及び26.6の2θ角度に特徴的なピークを含み、回折角2θ角度で表されるＸ線粉末回折スペクトルを有することを特徴とする。
【００３２】
好ましくは、該Ｆ型結晶は、6.46、7.51、9.92、11.26、13.15、13.58、15.20、16.46、17.38、17.88、19.02、20.10、21.10、23.70、24.10、26.61、28.78及び29.80の2θ角度に特徴的なピークを含み、回折角2θ角度で表されるＸ線粉末回折スペクトルを有する。
【００３３】
より好ましくは、該Ｆ型結晶は、6.464、7.507、9.923、11.262、13.146、13.578、15.199、16.455、17.383、17.882、19.023、20.096、21.101、23.697、24.098、26.606、28.782及び29.795の2θ角度に特徴的なピークを含み、回折角2θ角度で表されるＸ線粉末回折スペクトルを有する。
【００３４】
さらに、該Ｆ型結晶は、図６に示すような回折角2θ角度で表されるＸ線粉末回折スペクトルを有する。
【００３５】
本開示は、
方法Ｉ：式(Ｉ)の化合物を溶媒(X)に加え、該混合物をパルプ化し、Ｆ型結晶を得る；該溶媒(X)は、アルコール溶媒から選択され、好ましくはエタノールまたはイソプロパノールである；及び
方法II：式(Ｉ)の化合物を溶媒(XI)に溶解し、Ｆ型結晶を結晶化する；該溶媒(XI)は、アルコール溶媒から選択され、好ましくはエタノールまたはイソプロパノールである；該結晶化の方法は、室温結晶化、冷却結晶化、溶媒揮発結晶化及び結晶種による誘発結晶化からなる群から選択される。
からなる群から選択される、式(I)の化合物のＦ型結晶の製造方法も提供する。
【００３６】
いくつかの実施形態では、本開示の結晶形の製造方法は、濾過、洗浄または乾燥等の工程をさらに含む。
【００３７】
本開示はまた、上記実施形態に記載されたＡ型、Ｂ型、Ｃ型、Ｄ型、Ｅ型またはＦ型結晶及び場合により薬剤的に許容される担体、希釈剤及び賦形剤を含む医薬組成物を提供する。
【００３８】
本開示はまた、上記実施形態に記載されたＡ型、Ｂ型、Ｃ型、Ｄ型、Ｅ型またはＦ型結晶及び場合により薬剤的に許容される担体、希釈剤及び賦形剤を含む医薬組成物を提供する。
【００３９】
別の実施形態では、本開示の式(Ｉ)の化合物の結晶形または医薬製剤は、錠剤、カプセル、ピル、顆粒、溶液、懸濁液、シロップ、注射(注射溶液、注射用無菌粉末及び注射用濃縮溶液を含む)、坐剤、吸入剤またはスプレーに製剤化されてもよい。
【００４０】
さらに、本開示の医薬組成物を該治療を必要とする患者または被験者に任意の適切な投与様式、例えば、経口、非経口、直腸、肺内または局所投与により投与してもよい。経口投与のため、該医薬組成物を経口用製剤に製剤化してもよい。例えば、錠剤、カプセル、ピル、顆粒等の経口用の固形製剤、または経口用液剤、経口用懸濁液、シロップ等の経口用の液体製剤。経口用製剤に製剤化する場合、該薬剤はさらに適切な充填剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤等を含んでもよい。非経口投与のため、該薬剤を、注射溶液、注射用無菌粉末及び注射用濃縮溶液を含む注射用製剤に製剤化してもよい。注射用製剤に製剤化する場合、製薬産業に汎用される方法で該医薬組成物を製造してもよい。注射剤に製剤化する場合、該医薬品の性質に応じて、本医薬製剤に追加の薬剤を添加しないか、または適切な他の薬剤を添加してもよい。直腸投与のため、本薬剤を坐剤等に製剤化してもよい。肺内投与のため、本薬剤を吸入剤またはスプレー等に製剤化してもよい。特定の好ましい実施形態では、本開示の式(Ｉ)の化合物の結晶形は、治療的及び／または予防的有効量で医薬組成物または薬物の中に存在する。特定の好ましい実施形態では、本開示の式(Ｉ)の化合物の結晶形は、単位用量で医薬組成物または薬物の中に存在する。
【００４１】
本開示はまた、XIa因子の阻害に関連する疾患または状態を治療及び/または予防するための薬物の製造におけるＡ型、Ｂ型、Ｃ型、Ｄ型、Ｅ型またはＦ型結晶または該医薬組成物の使用に関する。ここで、該疾患または状態は、心血管疾患、好ましくは血栓塞栓性疾患、より好ましくは血管形成術または大動脈冠状動脈シャント後の心筋梗塞、狭心症、再閉塞及び再狭窄、播種性血管内凝固、脳卒中、一過性虚血発作、末梢動脈閉塞症、肺塞栓症及び深部静脈血栓症からなる群から選択される。
【００４２】
さらに、本願はまた、治療的及び／または予防的有効量の本開示の式(Ｉ)の化合物または本開示の医薬組成物をそれを必要とする被験者に投与することを含む、XIa因子の阻害に関連する疾患または状態を阻害する方法を提供する。得られる式(Ｉ)の化合物のＡ型、Ｂ型、Ｃ型、Ｄ型、Ｅ型及びＦ型結晶は、Ｘ線粉末回折スペクトル(XRPD)及び示差走査熱量測定(DSC)により測定する。
【００４３】
本開示の実験に用いられる機器の試験条件：
１．示差走査熱量計、DSC
型式          ：Mettler Toledo DSC 3+STARe System
パージガス    ：窒素
加熱速度      ：10.0℃/min
温度範囲      ：20〜250℃
２．Ｘ線粉末回折計、XRPD
型式          ：Bruker D8 Discover A25 
光線          ：単色光 Cu-Kα(λ=1.5406)
スキャンモード：θ/2θ、スキャン範囲：10〜48°
電圧          ：40 kV、電流：40 mA
【００４４】
該結晶形の再結晶方法は特に限定されず、汎用の再結晶法で行ってもよい。例えば、該原料、即ち式(Ｉ)の化合物を有機溶媒に溶解した後、貧溶媒を加えて結晶化させることができる。結晶化が終了した後、ろ過や乾燥により目的の結晶を得ることができる。
【００４５】
本開示の結晶化の方法には、室温結晶化、冷却結晶化、溶媒揮発結晶化及び結晶種による誘発結晶化等が含まれる。冷却温度は40℃未満であり、好ましくは-10℃〜40℃である。結晶化の過程において撹拌を行ってもよい。
【００４６】
本開示の結晶形の製造方法に用いられる原料は、任意の状態での式(Ｉ)の化合物であってもよい。特定の状態には、無晶形及び任意の結晶形等が含まれるが、これらに限定されない。
【本発明の詳細な説明】
【００４７】
本願の明細書及び特許請求の範囲において、別途に示さない限り、本明細書で使用される科学的及び技術的用語は、当業者によって一般に理解される意味を有する。しかし、本開示をよりよく理解してもらうために、いくつかの関連用語の定義及び説明を提供する。さらに、本願で提供される用語の定義及び説明が当業者によって一般に理解される意味と一致しない場合、本願で提供される用語の定義及び説明が優先されるものとする。
【００４８】
本開示に用いられる用語「パルプ化」とは、ある溶媒に対する物質の溶解度が低い一方、該溶媒に対する不純物の溶解度が良好であるとの性質を利用した精製方法をいう。パルプ化精製により、色を除去したり、結晶形を変化させたり、また少量の不純物を除去したりすることができる。
【００４９】
本開示に用いられる用語「ハロ」とは、「ハロゲン原子」に置換されることをいう。該「ハロゲン原子」とは、フッ素原子、塩素原子、臭素原子及びヨウ素原子等をいう。
【００５０】
本開示に用いられる用語「C1〜6アルキル」とは、１〜６個の炭素原子を含有する直鎖または分岐鎖アルキルをいう。その具体例には、メチル、エチル、n-プロピル、イソプロピル、n-ブチル、イソブチル、sec-ブチル、tert-ブチル、n-ペンチル、イソペンチル、2-メチルブチル、neo-ペンチル、1-エチルプロピル、n-ヘキシル、イソヘキシル、3-メチルペンチル、2-メチルペンチル、1-メチルペンチル、3,3-ジメチルブチル、2,2-ジメチルブチル、1,1-ジメチルブチル、1,2-ジメチルブチル、1,3-ジメチルブチル、2,3-ジメチルブチル、2-エチルブチル及び1,2-ジメチルプロピル等が含まれるが、これらに限定されない。
【００５１】
本開示に用いられる用語「エステル溶媒」とは、有機酸とアルコールまたはフェノール、または官能基-C(O)O-を含む14個以下の炭素原子を有する低級エステル化合物との反応によって形成される、14個以下の炭素原子を有する化合物をいう。その具体例には、酢酸メチル、酢酸エチル、フタル酸ジメチル、酢酸ブチルまたは酢酸プロピルが含まれるが、これらに限定されない。
【００５２】
本開示に用いられる用語「エーテル溶媒」とは、エーテル結合-O-を含む1〜10個の炭素原子を有する鎖状化合物または環状化合物をいう。その具体例には、ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、プロピレングリコールメチルエーテル、テトラヒドロフラン、メチルtert-ブチルエーテルまたは1,4-ジオキサンが含まれるが、これらに限定されない。
【００５３】
本開示に用いられる用語「アルコール溶媒」とは、「C1〜6アルキル」上の1つまたは複数の水素原子を1つまたは複数の「ヒドロキシ」で置換することから誘導される化合物をいい、ここで、該「C1〜6アルキル」は上記で定義したとおりである。その具体例には、メタノール、エタノール、n-プロパノールまたはイソプロパノールが含まれるが、これらに限定されない。
【００５４】
本開示に用いられる用語「ハロ炭化水素溶媒」とは、「C1〜6アルキル」上の1つまたは複数の水素原子を1つまたは複数の「ハロゲン原子」で置換することから誘導される化合物をいい、ここで、該「C1〜6アルキル」は上記で定義したとおりである。その具体的な例には、クロロメタン、ジクロロメタン、ジクロロエタン、クロロホルムまたは四塩化炭素が含まれるが、これらに限定されない。
【００５５】
本開示に用いられる用語「ケトン溶媒」とは、カルボニル基(-C(O)-)が２つの炭化水素基に結合した化合物をいう。ケトンは、分子内の炭化水素基によって、脂肪族ケトン、脂環式ケトン、芳香族ケトン、飽和ケトン及び不飽和ケトンに分類できる。その具体例には、アセトン、アセトフェノン、メチルイソブチルケトンまたはメチルピロリドンが含まれるが、これらに限定されない。
【００５６】
本開示に用いられる用語「ニトリル溶媒」とは、「C1〜6アルキル」上の１つまたは複数の水素原子を１つまたは複数の「シアノ」で置換することから誘導される化合物をいい、ここで、該「シアノ」及び「C1〜6アルキル」は上記で定義したとおりである。その具体例には、アセトニトリルまたはプロピオニトリルが含まれるが、これらに限定されない。
【００５７】
本開示に用いられる用語「混合溶媒」とは、１種または複数の異なる種類の有機溶媒を一定の比率で混合し、または有機溶媒と水を一定の比率で混合することで得られる溶媒をいう。該比率は0.05：1〜1：0.05であり、好ましくは1：1、1：2、1：3、1：4、1：5、1：8及び1：10である。該混合溶媒は、好ましくはハロ炭化水素溶媒とエステル溶媒の混合溶媒、ハロ炭化水素溶媒とエーテル溶媒の混合溶媒、またはアルコール溶媒と水の混合溶媒である。該アルコール溶媒、ハロ炭化水素溶媒、エステル溶媒及びエーテル溶媒は上記で定義したとおりである。
【００５８】
本開示に用いられる用語「Ｘ線粉末回折スペクトル」または「XRPD」とは、Bragg式2d sinθ ＝ nλ(ここで、λがＸ線の波長であり、λ=1.54056Å、回折次数nが任意の正の整数であり、一般に1次回折ピークをとり、n = 1)に従って得られるＸ線粉末回折スペクトルをいい、Ｘ線が結晶サンプルまたは入射角度θ(入射角度の相補角度、Bragg角度とも呼ばれる)でd格子面間隔を持つ部分結晶サンプルの特定の原子面に入射する場合にはBragg方程式を満たすことができる。
【００５９】
本開示で用いられる用語「示差走査熱量測定」または「DSC」は、熱効果に関連するすべての物理的及び化学的変化を特徴付け、またサンプルの相変化に関する情報を得るために、サンプルの加熱または定温のプロセス中に該サンプルと基準物との間の温度差及び熱流差を測定することを意味する。
【００６０】
本開示に用いられる用語「2θ」または「2θ角度」とは、回折角をいい、θはBragg角度であり、その単位は°または度である。2θの誤差範囲は±0.1〜±0.5であり、好ましくは±0.1〜±0.3であり、また、-0.30、-0.29、-0.28、-0.27、-0.26、-0.25、-0.24、-0.23、-0.22、-0.21、-0.20、-0.19、-0.18、-0.17、-0.16、-0.15、-0.14、-0.13、-0.12、-0.11、-0.10、-0.09、-0.08、-0.07、-0.06、-0.05、-0.04、-0.03、-0.02、-0.01、0.00、0.01、0.02、0.03、0.04、0.05、0.06、0.07、0.08、0.09、0.10、0.11、0.12、0.13、0.14、0.15、0.16、0.17、0.18、0.19、0.20、0.21、0.22、0.23、0.24、0.25、0.26、0.27、0.28、0.29、0.30であってもよく、より好ましくは±0.2である。
【００６１】
本開示に用いられる用語「面間間隔」または「面間距離(d値)」は、2つの隣接する格子点を接続し、空間格子から選択された3つの非平行単位ベクトルa、b、cは、格子を並置され、面間間隔と呼ばれる平行六面体単位に分割することを意味する。該空間格子が、決定された平行六面体の単位線に従って分割され、空間格子または格子と呼ばれる線形グリッドのセットを得る。該空間格子は、幾何学的な点と線で結晶構造の周期性を反映する。異なる結晶面は、異なる面間間隔（即ち、２つの隣接する平行な結晶面の間の距離）を有する。その単位はÅまたはオングストロームである。
【本発明の有益な効果】
【００６２】
本開示の技術的解決策は、先行技術と比べて以下の利点がある。
本開示の式(Ｉ)の化合物のＡ型、Ｂ型、Ｃ型、Ｄ型、Ｅ型及びＦ型結晶は、高純度及び良好な安定性を有することが見出されている。それらのHPLC純度の変化が少なく、化学的安定性が高い。本開示の技術的解決法に従って得られた式(Ｉ)の化合物のＡ型、Ｂ型、Ｃ型、Ｄ型、Ｅ型及びＦ型結晶は、医薬品の製造、輸送及び貯蔵の要件を満たすことができる。それらの製造過程は安定性、再現性及び制御性があり、工業生産に適用できる。
【図面の簡単な説明】
【００６３】
【図１】式(I)の化合物のＡ型結晶のＸ線粉末回折スペクトル
【図２】式(I)の化合物のＢ型結晶のＸ線粉末回折スペクトル
【図３】式(I)の化合物のＣ型結晶のＸ線粉末回折スペクトル
【図４】式(I)の化合物のＤ型結晶のＸ線粉末回折スペクトル
【図５】式(I)の化合物のＥ型結晶のＸ線粉末回折スペクトル
【図６】式(I)の化合物のＦ型結晶のＸ線粉末回折スペクトル
【図７】25℃及び相対湿度60％の条件下で7日間後のＡ型結晶のXRPDスペクトル
【図８】40℃及び相対湿度75％の条件下で7日間後のＡ型結晶のXRPDスペクトル
【図９】25℃及び相対湿度60％の条件下で7日間後のＢ型結晶のXRPDスペクトル
【図１０】40℃及び相対湿度75％の条件下で7日間後のＢ型結晶のXRPDスペクトル
【図１１】25℃及び相対湿度60％の条件下で7日間後のＣ型結晶のXRPDスペクトル
【図１２】40℃及び相対湿度75％の条件下で7日間後のＣ型結晶のXRPDスペクトル
【図１３】25℃及び相対湿度60％の条件下で7日間後のＤ型結晶のXRPDスペクトル
【図１４】40℃及び相対湿度75％の条件下で7日間後のＤ型結晶のXRPDスペクトル
【図１５】25℃及び相対湿度60％の条件下で7日間後のＦ型結晶のXRPDスペクトル
【図１６】40℃及び相対湿度75％の条件下で7日間後のＦ型結晶のXRPDスペクトル
【実施例】
【００６４】
以下の実施例により本開示を詳細に説明する。本開示の実施例は、単に本開示の技術的解決策を説明することを意図したものであり、本開示の主旨及び範囲を限定するものとみなされるべきではない。
【００６５】
比較例：式(I)の化合物の製造(PCT/CN2017/099579(2017年8月30日に出願)の方法に従った)
【化３】
2021514944.tif 000005
【００６６】
工程１
1-(4-クロロ-2-(2,5-ジメトキシピリジン-4-イル)フェニル)エタノン1e
2-ブロモ-4-クロロフェニルエタノン1c(1.27 g、5.46 mmol)、(2,5-ジメトキシピリジン-4-イル)ボロン酸1d(1.0 g、5.46 mmol、特許出願「WO2015063093」に開示の方法で製造)、[1,1'-ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン]ジクロロパラジウム(230 mg、0.32 mmol)及び炭酸カリウム(2.2 g、16.38 mmol)を25 mLの1,4-ジオキサンに加えた。添加終了後、該反応溶液を110℃に加熱し、8時間攪拌した後、室温まで自然冷却した。該反応溶液に水50 mLを加え、酢酸エチル(50 mL×3)で抽出した。有機相を合わせ、水(50 mL)及び塩化ナトリウムの飽和溶液(50 mL)で連続して洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した。濾液を減圧下で濃縮し、得られた残渣を溶出系Bのシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、表題化合物1e(1.0 g、収率：63.3％)を得た。
MS m/z (ESI): 292.3 [M+1].
【００６７】
工程２
4-(2-アセチル-5-クロロフェニル)-5-メトキシピリジン-2(1H)-オン1f
化合物1e(1.0 g、3.43 mmol)を10 mLのN,N−ジメチルホルムアミドに加え、次にピリジン臭化水素酸塩(3.30 g、20.6 mmol)を加えた。添加終了後、該反応溶液を105℃に加熱し、3時間攪拌した。該反応溶液に水50 mLを加え、酢酸エチル(50 mL×3)で抽出した。有機相を合わせ、水(50 mL)及び塩化ナトリウムの飽和溶液(50 mL)で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した。濾液を減圧下で濃縮し、表題化合物1f(550 mg、収率：57.8％)を得た。
MS m/z (ESI): 276.3 [M-1].
【００６８】
工程３
2-(4-(2-アセチル-5-クロロフェニル)-5-メトキシ-2-オキソピリジン-1(2H)-イル)-3-フェニルプロパン酸4b
マグネシウムtert-ブトキシド(701.62 mg、7.2 mmol)を250 mLのテトラヒドロフランに溶解し、次に(R)-2-ブロモ-3-フェニルプロピオン酸(1649.77 mg、7.2 mmol、「Chemical Communications(Cambridge、United Kingdom)、2014、50(88)、13489-13491」に開示されている既知の方法で製造)、カリウムtert-ブトキシド(404.07 mg、3.6 mmol)及び化合物1fの粗製品(1000 mg、3.6 mmol)を加えた。該反応溶液を60℃で16時間反応させた後、室温まで冷却し、1 M塩酸を滴下してpHを3〜4に調整し、酢酸エチル(50 mL×3)で抽出した。有機相を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した。濾液を減圧下で濃縮し、得られた残渣を高速液体クロマトグラフィー(Gilson-281、溶出系：アセトニトリル、水)で精製し、表題化合物4b(350 mg、収率：20.5％)を得た。
MS m/z (ESI): 426.4 [M+1].
【００６９】
工程４
4-(2-(4-(2-アセチル-5-クロロフェニル)-5-メトキシ-2-オキソピリジン-1(2H)-イル)-3-フェニルプロパンアミド)安息香酸メチル4d
化合物4b(350 mg、0.82 mmol)、4-アミノ安息香酸メチル4c(39.23 mg、0.26 mmol、「Chemical Communications(Cambridge、United Kingdom)、2015、51(58)、11705-11708」に開示されている既知の方法で製造)及びN,N-ジイソプロピルエチルアミン(0.57 mL、3.29 mmol)を30 mLの酢酸エチルに順次に溶解し、続いて2,4,6-トリプロピル-1,3,5,2,4,6-トリオキサトリホスホリナン-2,4,6-トリオキシドの酢酸エチル溶液(50％、1569 mg、2.47 mmol)を滴下した。添加終了後、該反応を60℃まで加熱し、2時間撹拌した。該反応溶液を室温まで冷却し、減圧下で濃縮した。得られた残留物を、溶出液としてジクロロメタン／メタノールを用いるシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物4d(140 mg、収率：28.9％)を得た。
MS m/z (ESI): 559.5 [M+1].
【００７０】
工程５
4-(2-(4-(2-アセチル-5-クロロフェニル)-5-メトキシ-2-オキソピリジン-1(2H)-イル)-3-フェニルプロパンアミド)安息香酸4
化合物4d(120 mg、0.21 mmol)をテトラヒドロフランとメタノールの混合溶媒(V/V ＝ 3:1)4 mLに溶解し、続いて1.28 mLの1M水酸化リチウム溶液を加えた。添加終了後、該反応溶液を16時間攪拌した。該反応溶液に10％塩酸を滴下してpHを3〜4に調整し、酢酸エチル(50 mL×2)で抽出した。有機相を合わせ、減圧下で濃縮した。得られた残渣を高速液体クロマトグラフィー(Gilson-281、溶出系：アセトニトリル、水)で精製し、表題化合物4(50 mg、収率：42.7％)を得た。
【００７１】
工程６
(S)-4-(2-(4-(2-アセチル-5-クロロフェニル)-5-メトキシ-2-オキソピリジン-1(2H)-イル)-3-フェニルプロパンアミド)安息香酸(I)
化合物4(900 mg、1.65 mmol)をキラル分離した(分離条件：キラル分取カラムSuperchiral S-AD(Chiralway)、2 cm I.D.×25 cm長さ、5μm;移動相：二酸化炭素：エタノール：ジエチルアミン= 60：40：0.05、流量：50 g/分)。対応する画分を収集し、減圧下で濃縮し、表題生成物(Ｉ)(421 mg)を得た。
MS m/z (ESI): 545.4 [M+1].
キラルHPLC分析：保持時間4.138分、キラル純度：98％(クロマトグラフィーカラム：Superchiral S-AD(Chiralway)、2 cm I.D.×25 cm長さ、5μm;移動相：エタノール/n-ヘキサン/トリフルオロ酢酸 = 50/50/0.05(v/v/v));
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.81 (s, 1H), 7.92 (s, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.83-7.81 (d, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.62-7.59 (dd, 1H), 7.43 (s, 1H) 7.38 (s, 1H), 7.30-7.25 (m, 4H), 7.21-7.17 (m, 1H), 8.31 (s, 1H), 6.05-6.01 (m, 1H), 3.54 (s, 3H), 3.49-3.44 (m, 2H), 2.37 (s, 3H).
【００７２】
試験例１：吸収測光法による本発明の化合物の凝固因子XIaに対する生物学的阻害活性の検出
１．実験材料
酵素  ：凝固XIaプロテアーゼ(Abcam、No. ab62411)
基質  ：凝固因子XIaに特異的な基質(HYPHEN1310 med、No. Biophen cs-21(66))
緩衝液：100 mMトリス塩酸、200 mM NaCl、0.02％Tween 20、pH 7.4
２．実験手順
100％DMSOに溶解した20 mMの試験化合物を、100％DMSOで200、20、2、0.2、0.02、0.002μMに希釈した。1μlの該化合物を384ウェルプレートの各ウェルに加えた。ブランクとコントロールのウェルには、その代わりにDMSOを加えた。該プレートを遠心分離し、該化合物を底に移動させた。10μl(2.5μg/ml)のFXIa酵素溶液を各ウェルに加え、10μlの緩衝液をブランクのウェルに加えた。該プレートを遠心分離し、酵素溶液を底に移動させた。
最後に、10μlの2 mM基質を各ウェルに加え、該プレートを遠心分離し、基質溶液を底に移動させた。
該プレートを37℃で10分間インキュベートした後、405 nmにおける吸光度を測定した。吸光度をグラフパッドでカーブフィッティングし、得られたIC50は16であった。
【００７３】
試験例２：本発明の化合物のヒト血液に対するin vitro抗凝固作用の測定
１．実験材料
血漿：抗凝固剤を含まない採血管にヒト血液を採取した後、3.8％クエン酸ナトリウム(容量比1：9)を加えた。室温で該チューブを2500 rpmで10分間遠心分離した後、血漿を収集し、-80℃で保存した。
試薬：APTT試薬(活性化部分トロンボプラスチン時間アッセイキット、SIEMENS、No.B4218-1)、塩化カルシウム溶液
装置：凝固装置(SYSMEX、CA-500)
２．実験手順
分離した血漿を室温で溶かし、よく混合した。100％DMSOに溶解した10000μMの試験化合物を100％DMSOで3000、300、200、150、75、30、10、3、0.3μMに希釈した。ブランクは100％DMSOであった。該試薬、血漿及び化合物を凝固装置のそれぞれの位置に置き、該化合物のAPTT検出を行った。
３．データ分析
プリズムによりカーブフィッティングを行い、CT2(即ち、ブランクコントロールのAPTTの2倍に相当する該化合物の濃度)を算出した結果、CT2 = 2.0となった。
【００７４】
実施例１：Ａ型結晶の製造
(S)-4-(2-(4-(2-アセチル-5-クロロフェニル)-5-メトキシ-2-オキソピリジン-1(2H)-イル)-3-フェニルプロパンアミド)安息香酸(50 mg)とエチル酢酸(5 mL)を反応フラスコに入れ、該混合物を室温で12日間攪拌した。該混合物を濾過し、40℃で3時間真空乾燥し、最終生成物を得た。該サンプルのXRPDスペクトルを図１に示す。DSCの昇温期に2つの連続した吸熱ピークがある。第1吸熱ピークの値は122.16℃であり、また第2吸熱ピークの値は153.50℃である。該結晶形をＡ型結晶と定義し、その特徴的なピーク位置を次の表に示す。
表１.Ａ型結晶の特徴的なピーク
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【００７５】
実施例２：Ｂ型結晶の製造
(S)-4-(2-(4-(2-アセチル-5-クロロフェニル)-5-メトキシ-2-オキソピリジン-1(2H)-イル)-3-フェニルプロパンアミド)安息香酸(50 mg)とメタノール(2.5 mL)を反応フラスコに入れ、該混合物を25℃の定温で5日間攪拌した。該混合物を濾過し、40℃で3時間真空乾燥し、結晶生成物を得た。該結晶サンプルのXRPDスペクトルを図２に示す。DSCの昇温期に複数の吸熱ピークがある。該結晶形をＢ型結晶と定義し、その特徴的なピーク位置を次の表に示す。
表２.Ｂ型結晶の特徴的なピーク
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【００７６】
実施例３：Ｂ型結晶の製造
(S)-4-(2-(4-(2-アセチル-5-クロロフェニル)-5-メトキシ-2-オキソピリジン-1(2H)-イル)-3-フェニルプロパンアミド)安息香酸(5 mg)と精製水(0.5 mL)を反応フラスコに入れ、該混合物を25℃の定温で12日間攪拌した。該混合物を濾過し、40℃で3時間真空乾燥し、最終生成物を得た。Ｘ線粉末回折により該生成物はＢ型結晶と同定された。
【００７７】
実施例４：Ｂ型結晶の製造
(S)-4-(2-(4-(2-アセチル-5-クロロフェニル)-5-メトキシ-2-オキソピリジン-1(2H)-イル)-3-フェニルプロパンアミド)安息香酸(10 mg)及びメタノール-水の混合溶媒(v/v = 1/1、0.5 mL)を反応フラスコに入れ、該混合物を25℃の定温で5日間攪拌した。該混合物を濾過し、40℃で3時間真空乾燥した。Ｘ線粉末回折により該生成物はＢ型結晶と同定された。
【００７８】
実施例５：Ｃ型結晶の製造
(S)-4-(2-(4-(2-アセチル-5-クロロフェニル)-5-メトキシ-2-オキソピリジン-1(2H)-イル)-3-フェニルプロパンアミド)安息香酸(50 mg)とアセトニトリル(5 mL)を反応フラスコに入れ、該混合物を25℃の定温で12日間攪拌した。該混合物を濾過し、40℃で3時間真空乾燥し、結晶生成物を得た。該結晶サンプルのXRPDスペクトルを図３に示す。DSCの昇温期における吸熱ピークの値は146.44℃である。該結晶形をＣ型結晶と定義し、その特徴的なピーク位置を次の表に示す。
表３.Ｃ型結晶の特徴的なピーク
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【００７９】
実施例６：Ｃ型結晶の製造
(S)-4-(2-(4-(2-アセチル-5-クロロフェニル)-5-メトキシ-2-オキソピリジン-1(2H)-イル)-3-フェニルプロパンアミド)安息香酸(100 mg)とアセトン(10 mL)を反応フラスコに入れ、該混合物を25℃の定温で5日間攪拌した。該混合物を濾過し、40℃で3時間真空乾燥した。Ｘ線粉末回折により該生成物はＣ型結晶と同定された。
【００８０】
実施例７：Ｃ型結晶の製造
(S)-4-(2-(4-(2-アセチル-5-クロロフェニル)-5-メトキシ-2-オキソピリジン-1(2H)-イル)-3-フェニルプロパンアミド)安息香酸(5 mg)とジクロロメタン(0.5 mL)を反応フラスコに入れ、該混合物を25℃の定温で12日間攪拌した。該混合物を濾過し、40℃で3時間真空乾燥した。Ｘ線粉末回折により該生成物はＣ型結晶と同定された。
【００８１】
実施例８：Ｄ型結晶の製造
(S)-4-(2-(4-(2-アセチル-5-クロロフェニル)-5-メトキシ-2-オキソピリジン-1(2H)-イル)-3-フェニルプロパンアミド)安息香酸の粗製品(100 mg)とテトラヒドロフラン(1 mL)を反応フラスコに入れた。該溶液を室温で放置し、揮発させ、結晶性固体を得た。該サンプルのXRPDスペクトルを図４に示す。DSCスペクトルにおける吸熱ピークの値は約138.33℃である。該結晶形をＤ型結晶と定義し、その特徴的なピーク位置を次の表に示す。
表４.Ｄ型結晶の特徴的なピーク
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【００８２】
実施例９：Ｅ型結晶の製造
(S)-4-(2-(4-(2-アセチル-5-クロロフェニル)-5-メトキシ-2-オキソピリジン-1(2H)-イル)-3-フェニルプロパンアミド)安息香酸(20 mg)を1,2-ジクロロエタン(5 mL)に溶解した。該溶液を10日間放置し、自然に揮発させ、固体を析出させた。該混合物を濾過し、固体を収集した。該結晶サンプルのXRPDスペクトルを図５に示す。DSCスペクトルにおける吸熱ピークの値は約167.55℃である。該結晶形をＥ型結晶と定義し、その特徴的なピーク位置を次の表に示す。
表５.Ｅ型結晶の特徴的なピーク
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実施例１０：Ｅ型結晶の製造
(S)-4-(2-(4-(2-アセチル-5-クロロフェニル)-5-メトキシ-2-オキソピリジン-1(2H)-イル)-3-フェニルプロパンアミド)安息香酸(20 mg)を1,2-ジクロロエタン(5 mL)に溶解した後、イソプロピルエーテル(1 mL)を加えた。該溶液を10日間放置し、自然に揮発させ、固体を析出させた。該混合物を濾過し、固体を収集した。Ｘ線粉末回折により該生成物はＥ型結晶と同定された。
【００８３】
実施例１１：Ｆ型結晶の製造
(S)-4-(2-(4-(2-アセチル-5-クロロフェニル)-5-メトキシ-2-オキソピリジン-1(2H)-イル)-3-フェニルプロパンアミド)安息香酸の粗製品(100 mg)とエタノール(10 mL)を反応フラスコに入れた。該混合物を50℃の定温で1時間撹拌し、室温で5日間パルプ化した。該混合物を濾過し、40℃で3時間真空乾燥し、結晶生成物を得た。該固体サンプルのXRPDスペクトルを図６に示す。DSCの昇温期に複数の吸熱ピークがあり、それらのピークの値はそれぞれ約147.75℃及び157.25℃である。該結晶形をＦ型結晶と定義し、その特徴的なピーク位置を次の表に示す。
表６.Ｆ型結晶の特徴的なピーク
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【００８４】
実施例１２：Ｆ型結晶の製造
(S)-4-(2-(4-(2-アセチル-5-クロロフェニル)-5-メトキシ-2-オキソピリジン-1(2H)-イル)-3-フェニルプロパンアミド)安息香酸(5 mg)とイソプロパノール(0.5 mL)を反応フラスコに入れ、該混合物を室温で12日間撹拌した。該混合物を濾過し、40℃で3時間真空乾燥し、結晶生成物を得た。Ｘ線粉末回折により該生成物はＦ型結晶と同定された。
【００８５】
実施例１３：結晶形の安定性試験
空気中にＡ型、Ｂ型、Ｃ型、Ｄ型及びＦ型結晶のサンプルを平らに広げ、4℃、25℃-相対湿度(RH)60％及び40℃-相対湿度(RH)75％の条件下でサンプルの安定性について試験した。7日目にサンプリングを行った。該サンプルのHPLC純度及び結晶形の安定性を調べた。
試験の結果：
表７．結晶形の安定性試験の結果
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25℃-60％RH及び40℃-75％RHの条件下でのＡ型、Ｂ型、Ｃ型、Ｄ型及びＦ型結晶サンプルのXRPDスペクトルを図７〜１６に示す。
【００８６】
試験の結論：
表７に示すように、Ａ型、Ｂ型、Ｃ型、Ｄ型及びＦ型結晶の化学的安定性は良好である。図７〜１６の安定性試験結果に示されたように、4℃、25℃-60％RH及び40℃-75％RHの条件下で、式(I)の化合物のＢ型及びＦ型結晶のHPLC純度はわずかに変化したが、XRPDピークは変化せず、これらの結晶形は安定である。25℃-60％RH及び40℃-75％RHの条件下で、Ａ型及びＤ型結晶のXRPDピークは変化し、いくつかのピーク特性が失われ、これらの結晶性が低下した。Ｃ型結晶のXRPDも40℃-75％RHの放置条件下で変化した。Ｂ型及びＦ型結晶の安定性は、Ａ型、Ｃ型及びＤ型結晶の安定性より優れていることが分かる。

【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【国際調査報告】
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