(57)【要約】カンプトテシンコンジュゲート、カンプトテシン−リンカー化合物、カンプトテシン化合物、それらの中間体、ならびにこれらを調製する方法が本明細書において提供される。同様に、がんおよび自己免疫疾患を本明細書に記載されているコンジュゲートにより処置する方法が、本明細書において提供される。本発明のカンプトテシンコンジュゲートは、循環中で安定であるが、依然として、遊離薬物が腫瘍細胞近傍またはその内部でコンジュゲートから放出されると、細胞死をもたらすことが可能である。
2021521111.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の式：
Ｌ−（Ｑ−Ｄ）ｐ      （Ｉ）
または薬学的に許容されるその塩［式中、
Ｌは、リガンド単位であり、
Ｑは、以下：
−Ｚ−Ａ−Ｓ＊−ＲＬ−；−Ｚ−Ａ−ＬＰ（Ｓ＊）−ＲＬ−；−Ｚ−Ａ−Ｓ＊−ＲＬ−Ｙ−；または−Ｚ−Ａ−ＬＰ（Ｓ＊）−ＲＬ−Ｙ−
（式中、Ｚは、ストレッチャー単位であり、Ａは、結合またはコネクター単位であり、ＬＰは、並列コネクター単位であり、Ｓ＊は、結合または分断剤であり、
ＲＬは２〜８個のアミノ酸を含むペプチドであり、
Ｙは、スペーサー単位である）
から選択される式を有するリンカー単位であり、
Ｄは、以下：
【化１３８】
2021521111.tif 000192
（式中、
ＲＢは、Ｈ、−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル−ＯＨ、−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル−ＮＨ２、−Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８ハロアルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキルＣ１〜Ｃ４アルキル、フェニルおよびフェニルＣ１〜Ｃ４アルキルからなる群から選択されるメンバーであり、
ＲＦおよびＲＦ’はそれぞれ、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ８アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ４アルキルアミノＣ１〜Ｃ８アルキル、（Ｃ１〜Ｃ４ヒドロキシアルキル）（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）アミノＣ１〜Ｃ８アルキル、ジ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）アミノＣ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ４ヒドロキシアルキルＣ１〜Ｃ８アミノアルキル、Ｃ２〜Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルＣ（Ｏ）−、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキルＣ（Ｏ）−、Ｃ１〜Ｃ８アミノアルキルＣ（Ｏ）−、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキルＣ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキルＣ１〜Ｃ４アルキル、フェニル、フェニルＣ１〜Ｃ４アルキル、ジフェニルＣ１〜Ｃ４アルキル、ヘテロアリールおよびヘテロアリールＣ１〜Ｃ４アルキルからなる群から独立して選択されるメンバーであるか、またはＲＦおよびＲＦ’は、各々が結合している窒素原子と合わさり、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ＯＨ、ＯＣ１〜Ｃ４アルキル、ＮＨ２、ＮＨＣ１〜Ｃ４アルキルおよびＮ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）２から選択される０〜３個の置換基を有する５員、６員または７員環を形成し、
ＲＢ、ＲＦおよびＲＦ’のシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、フェニルおよびヘテロアリール部分は、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ＯＨ、ＯＣ１〜Ｃ４アルキル、ＮＨ２、ＮＨＣ１〜Ｃ４アルキルおよびＮ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）２から選択される０〜３個の置換基により置換されており、
ｐは、約１〜約１６であり、
Ｑは、ＣＰＴ２またはＣＰＴ５に存在するヒドロキシル基またはアミン基のいずれか１つを介して結合している）
から選択される薬物単位である］
を有するカンプトテシンコンジュゲート。
【請求項２】
Ｄが、式ＣＰＴ２を有する、請求項１に記載のカンプトテシンコンジュゲート。
【請求項３】
ＲＢが、−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル−ＯＨまたは−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル−ＮＨ２である、請求項１または２に記載のカンプトテシンコンジュゲート。
【請求項４】
ＲＢが、−ＣＨ２−ＯＨまたは−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−ＮＨ２である、請求項３に記載のカンプトテシンコンジュゲート。
【請求項５】
ＲＢが、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８ハロアルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキルＣ１〜Ｃ４アルキル、フェニルおよびフェニルＣ１〜Ｃ４アルキルからなる群から選択されるメンバーである、請求項１または２に記載のカンプトテシンコンジュゲート。
【請求項６】
ＲＢが、Ｃ１〜Ｃ８アルキルまたはＣ１〜Ｃ８ハロアルキルである、請求項１または２に記載のカンプトテシンコンジュゲート。
【請求項７】
Ｄが、式ＣＰＴ５を有する、請求項１に記載のカンプトテシンコンジュゲート。
【請求項８】
前記コンジュゲートの−Ｑ−Ｄ構成要素が、（ＣＰＴ５ｉＮ）、（ＣＰＴ５ｉｉＮ）、（ＣＰＴ５ｉｉｉＮ）、（ＣＰＴ５ｉｖＮ）、（ＣＰＴ５ｖＮ）、（ＣＰＴ５ｖｉＮ）、（ＣＰＴ５ｉＯ）、（ＣＰＴ５ｉｉＯ）、（ＣＰＴ５ｉｉｉＯ）、（ＣＰＴ５ｉｖＯ）、（ＣＰＴ５ｖＯ）および（ＣＰＴ５ｖｉＯ）：
【化１３９】
2021521111.tif 000193
【化１４０】
2021521111.tif 000194
から選択される式を有する、請求項１または７に記載のカンプトテシンコンジュゲート。
【請求項９】
ＲＦおよびＲＦ’がそれぞれ、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ８アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ４アルキルアミノＣ１〜Ｃ８アルキル、（Ｃ１〜Ｃ４ヒドロキシアルキル）（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）アミノＣ１〜Ｃ８アルキル、ジ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）アミノＣ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ４ヒドロキシアルキルＣ１〜Ｃ８アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルＣ（Ｏ）−、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキルＣ（Ｏ）−およびＣ１〜Ｃ８アミノアルキルＣ（Ｏ）−からなる群から独立して選択され、
ＲＦおよびＲＦ’のシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、フェニルおよびヘテロアリール部分が、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ＯＨ、ＯＣ１〜Ｃ４アルキル、ＮＨ２、ＮＨＣ１〜Ｃ４アルキルおよびＮ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）２から選択される０〜３個の置換基により置換されている、
請求項８に記載のカンプトテシンコンジュゲート。
【請求項１０】
ＲＦおよびＲＦ’がそれぞれ、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキルＣ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキルＣ１〜Ｃ４アルキル、フェニル、フェニルＣ１〜Ｃ４アルキル、ジフェニルＣ１〜Ｃ４アルキル、ヘテロアリールおよびヘテロアリールＣ１〜Ｃ４アルキルからなる群から独立して選択され、
ＲＦおよびＲＦ’のシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、フェニルおよびヘテロアリール部分がそれぞれ、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ＯＨ、ＯＣ１〜Ｃ４アルキル、ＮＨ２、ＮＨＣ１〜Ｃ４アルキルおよびＮ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）２から選択される０〜３個の置換基により独立して置換されている、
請求項８に記載のカンプトテシンコンジュゲート。
【請求項１１】
ＲＦ’がＨである、請求項７または８に記載のカンプトテシンコンジュゲート。
【請求項１２】
前記カンプトテシンコンジュゲートの前記−Ｑ−Ｄ構成要素が、（ＣＰＴ５ｉＮ）、（ＣＰＴ５ｉｉＮ）、（ＣＰＴ５ｉｉｉＮ）、（ＣＰＴ５ｉｖＮ）、（ＣＰＴ５ｖＮ）および（ＣＰＴ５ｖｉＮ）から選択される式を有する、請求項８に記載のカンプトテシンコンジュゲート。
【請求項１３】
前記コンジュゲートの前記−Ｑ−Ｄ構成要素が、（ＣＰＴ５ｉＮ）、（ＣＰＴ５ｉｉＮ）および（ＣＰＴ５ｖｉＮ）から選択される式を有する、請求項１２に記載のカンプトテシンコンジュゲート。
【請求項１４】
ＲＦが、−Ｈ、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ８アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ４アルキルアミノＣ１〜Ｃ８アルキル、（Ｃ１〜Ｃ４ヒドロキシアルキル）（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）アミノＣ１〜Ｃ８アルキル、ジ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）アミノＣ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ４ヒドロキシアルキルＣ１〜Ｃ８アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルＣ（Ｏ）−、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキルＣ（Ｏ）−およびＣ１〜Ｃ８アミノアルキルＣ（Ｏ）−からなる群から選択され、
ＲＦのシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、フェニルおよびヘテロアリール部分が、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ＯＨ、ＯＣ１〜Ｃ４アルキル、ＮＨ２、ＮＨＣ１〜Ｃ４アルキルおよびＮ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）２から選択される０〜３個の置換基により置換されている、
請求項１２または１３に記載のカンプトテシンコンジュゲート。
【請求項１５】
ＲＦが、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキルＣ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキルＣ１〜Ｃ４アルキル、フェニル、フェニルＣ１〜Ｃ４アルキル、ジフェニルＣ１〜Ｃ４アルキル、ヘテロアリールおよびヘテロアリールＣ１〜Ｃ４アルキルからなる群から選択され、
ＲＦおよびＲＦ’のシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、フェニルおよびヘテロアリール部分がそれぞれ、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ＯＨ、ＯＣ１〜Ｃ４アルキル、ＮＨ２、ＮＨＣ１〜Ｃ４アルキルおよびＮ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）２から選択される０〜３個の置換基により独立して置換されている、
請求項１２または１３に記載のカンプトテシンコンジュゲート。
【請求項１６】
Ｓ＊が、結合であり、Ｑが、−Ｚ−Ａ−ＲＬ−または−Ｚ−Ａ−ＲＬ−Ｙ−である、請求項１から１５のいずれか一項に記載のカンプトテシンコンジュゲート。
【請求項１７】
Ｓ＊が、分断剤であり、Ｑが、
−Ｚ−Ａ−Ｓ＊−ＲＬ−；−Ｚ−Ａ−ＬＰ（Ｓ＊）−ＲＬ−；−Ｚ−Ａ−Ｓ＊−ＲＬ−Ｙ−；または−Ｚ−Ａ−ＬＰ（Ｓ＊）−ＲＬ−Ｙ−
である、請求項１から１５のいずれか一項に記載のカンプトテシンコンジュゲート。
【請求項１８】
Ｓ＊が、ＰＥＧ単位である、請求項１７に記載のカンプトテシンコンジュゲート。
【請求項１９】
前記ＰＥＧ単位が、以下の式：
【化１４１】
2021521111.tif 000195
（式中、左側の波線は、Ａへの結合部位を示し、右側の波線は、ＲＬへの結合部位を示し、ｂは２〜２０の整数であるか、または２、４、８もしくは１２である）
を有する、請求項１８に記載のカンプトテシンコンジュゲート。
【請求項２０】
前記ＰＥＧ単位が、以下の式：
【化１４２】
2021521111.tif 000196
（式中、左側の波線は、Ａへの結合部位を示し、右側の波線は、ＲＬへの結合部位を示し、ｂは２〜２０の整数であるか、または２、４、８もしくは１２である）
を有する、請求項１９に記載のカンプトテシンコンジュゲート。
【請求項２１】
Ｑが、式−Ｚ−Ａ−ＬＰ（Ｓ＊）−ＲＬ−または−Ｚ−Ａ−ＬＰ（Ｓ＊）−ＲＬ−Ｙ−であり、Ｓ＊が、２個、４個、８個または１２個の−ＣＨ２ＣＨ２Ｏ−サブ単位、およびＣ１〜４アルキルまたはＣ１〜４アルキル−ＣＯ２ＨであるＰＥＧ単位の末端キャップ基を含む、請求項１７に記載のカンプトテシンコンジュゲート。
【請求項２２】
Ｓ＊が、式：
【化１４３】
2021521111.tif 000197
（式中、波線は、前記並列コネクター単位（ＬＰ）への結合部位を示し、ｂは２〜２０の整数であるか、または２、４、８もしくは１２である）
のものである、請求項２１に記載のカンプトテシンコンジュゲート。
【請求項２３】
Ｓ＊が、式：
【化１４４】
2021521111.tif 000198
（式中、波線は、前記並列コネクター単位（ＬＰ）への結合部位を示し、ｂは２〜２０の整数であるか、または２、４、８もしくは１２である）
のものである、請求項２２に記載のカンプトテシンコンジュゲート。
【請求項２４】
ＬＰがリシンである、請求項２１から２３のいずれか一項に記載のカンプトテシンコンジュゲート。
【請求項２５】
ＬＰが、式：
【化１４５】
2021521111.tif 000199
（式中、波線は、前記分断剤に対する結合位置を示し、アスタリスクは、ＡおよびＲＬへの結合位置を示す）
のものである、請求項２４に記載のカンプトテシンコンジュゲート。
【請求項２６】
Ｚが、式Ｚａ：
【化１４６】
2021521111.tif 000200
［式中、アスタリスクは、前記リガンド単位（Ｌ）への結合位置を示し、
波線は、前記コネクター単位（Ａ）への結合位置を示し、
Ｒ１７は、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−、Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロアルキレン−、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ−、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ８アルキレン）−、−アリーレン−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−アリーレン−、−アリーレン−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−、−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−、−Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−、−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−、Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロアルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ８アルキレン）−Ｃ（＝Ｏ）−、−アリーレン−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−アリーレン−Ｃ（＝Ｏ）−、−アリーレン−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−Ｃ（＝Ｏ）−、−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−Ｃ（＝Ｏ）−、−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−ＮＨ−、Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロアルキレン−ＮＨ−、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ−ＮＨ−、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ８アルキレン）−ＮＨ−、−アリーレン−ＮＨ−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−アリーレン−ＮＨ−、−アリーレン−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−ＮＨ−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−ＮＨ−、−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−ＮＨ−、−Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ−ＮＨ−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−ＮＨ−、−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−ＮＨ−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−Ｓ−、Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロアルキレン−Ｓ−、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ−Ｓ−、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ８アルキレン）−Ｓ−、−アリーレン−Ｓ−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−アリーレン−Ｓ−、−アリーレン−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−Ｓ−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−Ｓ−、−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−Ｓ−、−Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ−Ｓ−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−Ｓ−または−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−Ｓ−であり、
Ｒ１７は、−（ＣＨ２）ｘＮＨ２、−（ＣＨ２）ｘＮＨＲａまたは−（ＣＨ２）ｘＮＲａ２である塩基性単位（ＢＵ）により必要に応じて置換されており、
（式中、ｘは、１〜４の整数であり、
Ｒａはそれぞれ、Ｃ１〜６アルキルおよびＣ１〜６ハロアルキルからなる群から独立して選択されるか、または２つのＲａ基は、それらが結合している窒素と合わさり、４〜６員のヘテロシクロアルキル環またはアゼチジニル、ピロリジニルもしくはピペリジニル基を形成する）］
を有する、請求項１から２５のいずれか一項に記載のカンプトテシンコンジュゲート。
【請求項２７】
Ｒ１７が、−（Ｃ１〜Ｃ５）アルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−であり、Ｒ１７のアルキレン部分が、前記塩基性単位（ＢＵ）により必要に応じて置換されている、請求項２６に記載のカンプトテシンコンジュゲート。
【請求項２８】
Ｚが、以下：
【化１４７】
2021521111.tif 000201
である、請求項２６または２７に記載のカンプトテシンコンジュゲート。
【請求項２９】
Ｚが、以下：
【化１４８】
2021521111.tif 000202
である、請求項２８に記載のカンプトテシンコンジュゲート。
【請求項３０】
Ｚが、以下：
【化１４９】
2021521111.tif 000203
である、請求項２９に記載のカンプトテシンコンジュゲート。
【請求項３１】
Ａが、結合である、請求項１から３０のいずれか一項に記載のカンプトテシンコンジュゲート。
【請求項３２】
ＲＬが、ジペプチド、トリペプチドまたはテトラペプチドである、請求項１から３１のいずれか一項に記載のカンプトテシンコンジュゲート。
【請求項３３】
ＲＬが、ジペプチドである、請求項３２に記載のカンプトテシンコンジュゲート。
【請求項３４】
ＲＬが、トリペプチドである、請求項３２に記載のカンプトテシンコンジュゲート。
【請求項３５】
ＲＬが、ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｃｉｔ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｇｌｎ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｇｌｕ−ｇｌｙ、ｐｈｅ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｌｅｕ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｇｌｙ−ｖａｌ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ａｌａ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ｌｅｕ、ｌｅｕ−ｌｅｕ−ｇｌｙ、ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｐｈｅ−ｇｌｙ、ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｐｈｅ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｇｌｙまたはｖａｌ−ｌｙｓ−β−ａｌａである、請求項３２に記載のカンプトテシンコンジュゲート。
【請求項３６】
ＲＬが、以下の式：ＡＡ１−ＡＡ２−ＡＡ３（式中、ＡＡ１、ＡＡ２およびＡＡ３は、それぞれ独立してアミノ酸であり、ＡＡ１は、−ＮＨ−に結合しており、ＡＡ３は、Ｓ＊に結合している）を有するトリペプチドである、請求項３４に記載のカンプトテシンコンジュゲート。
【請求項３７】
ＡＡ３が、ｇｌｙまたはβ−ａｌａである、請求項３６に記載のカンプトテシンコンジュゲート。
【請求項３８】
ＲＬが、ｖａｌ−ｌｙｓ−ｇｌｙであり、ｖａｌが、−ＮＨ−に結合しており、ｇｌｙが、Ｓ＊に結合している、請求項３７に記載のカンプトテシンコンジュゲート。
【請求項３９】
Ｙが、以下の式：
【化１５０】
2021521111.tif 000204
である、請求項１から３８のいずれか一項に記載のカンプトテシンコンジュゲート。
【請求項４０】
ｐが、１〜１６であるか、または２〜８であるか、または２であるか、または４であるか、または８である、請求項１から３９のいずれか一項に記載のカンプトテシンコンジュゲート。
【請求項４１】
式（ＩＢ）：
【化１５１】
2021521111.tif 000205
または薬学的に許容されるその塩（式中、
Ｓ＊は、ＰＥＧ単位であり、
ＲＬは、２〜８個のアミノ酸を含むペプチドであるペプチド放出可能なリンカーである）
を有する、請求項１に記載のカンプトテシンコンジュゲート。
【請求項４２】
前記ＰＥＧ単位が、以下の式：
【化１５２】
2021521111.tif 000206
（式中、左側の波線は、−Ｃ（Ｏ）−への結合部位を示し、右側の波線は、ＲＬへの結合部位を示し、ｂは２〜２０の整数であるか、または２、４、８もしくは１２である）
を有する、請求項４１に記載のカンプトテシンコンジュゲート。
【請求項４３】
ＲＬが、以下の式：ＡＡ１−ＡＡ２−ＡＡ３（式中、ＡＡ１、ＡＡ２およびＡＡ３は、それぞれ独立してアミノ酸であり、ＡＡ１は、−ＮＨ−に結合しており、ＡＡ３は、Ｓ＊に結合している）を有するトリペプチドである、請求項４１から４２のいずれか一項に記載のカンプトテシンコンジュゲート。
【請求項４４】
ＡＡ３が、ｇｌｙまたはβ−ａｌａである、請求項４３に記載のカンプトテシンコンジュゲート。
【請求項４５】
ＡＡ３が、ｇｌｙである、請求項４４に記載のカンプトテシンコンジュゲート。
【請求項４６】
ＲＬが、ｖａｌ−ｌｙｓ−ｇｌｙであり、ｖａｌが、−ＮＨ−に結合しており、ｇｌｙが、Ｓ＊に結合している、請求項４５に記載のカンプトテシンコンジュゲート。
【請求項４７】
式（ＩＣ）：
【化１５３】
2021521111.tif 000207
または薬学的に許容されるその塩、
（式中、
ｙは、１、２、３もしくは４であるか、または１もしくは４であり、
ｚは、２〜１２の整数であるか、または２、４、８もしくは１２であり、
ｐは、１〜１６である）
を有する、請求項１に記載のカンプトテシンコンジュゲート。
【請求項４８】
ｐが、４、５、６、７、８、９もしくは１０であるか、またはｐが、４もしくは８である、請求項４７に記載のカンプトテシンコンジュゲート。
【請求項４９】
式（ＩＩＡ）：
【化１５４】
2021521111.tif 000208
または薬学的に許容されるその塩（式中、Ｓ＊は、ＰＥＧ単位である）
を有する、請求項１に記載のカンプトテシンコンジュゲート。
【請求項５０】
式（ＩＩＢ）：
【化１５５】
2021521111.tif 000209
または薬学的に許容されるその塩を有する、請求項４９に記載のカンプトテシンコンジュゲート。
【請求項５１】
式（ＩＩＣ）：
【化１５６】
2021521111.tif 000210
または薬学的に許容されるその塩を有する、請求項４９または５０に記載のカンプトテシンコンジュゲート。
【請求項５２】
式（ＩＩＤ）：
【化１５７】
2021521111.tif 000211
または薬学的に許容されるその塩
（式中、
ＲＬは、ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ−β−ａｌａ、ｖａｌ−ｇｌｎ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ａｌａ、ｐｈｅ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｌｅｕ−ｌｅｕ−ｇｌｙ、ｌｅｕ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｇｌｕ−ｇｌｙ、ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ａｓｐ−ｇｌｙ、ｇｌｙ−ｌｙｓ−ｖａｌ、ｖａｌ−ｌｙｓ、ｖａｌ−ｇｌｙおよびｇｌｙ−ｖａｌ−ｌｙｓ−ｇｌｙからなる群から選択されるペプチドであり、
ｘは、２〜２０の整数であるか、または２、４、８もしくは１２である）
を有する、請求項４９または５０に記載のカンプトテシンコンジュゲート。
【請求項５３】
前記リガンド単位が、抗体またはその抗原結合性フラグメントである、請求項１から５２のいずれか一項に記載のカンプトテシンコンジュゲート。
【請求項５４】
前記抗体が、モノクローナル抗体またはその抗原結合性フラグメントである、請求項５３に記載のカンプトテシンコンジュゲート。
【請求項５５】
前記抗体が、ｃＡＣ１０抗ＣＤ３０抗体またはその抗原結合性フラグメントである、請求項５３または５４に記載のカンプトテシンコンジュゲート。
【請求項５６】
以下の式：
Ｑ’−Ｄ
または薬学的に許容されるその塩［式中、
Ｑは、以下：
Ｚ’−Ａ−Ｓ＊−ＲＬ−； Ｚ’−Ａ−ＬＰ（Ｓ＊）−ＲＬ−； Ｚ’−Ａ−Ｓ＊−ＲＬ−Ｙ−；     Ｚ’−Ａ−ＬＰ（Ｓ＊）−ＲＬ−Ｙ−
（式中、Ｚは、ストレッチャー単位前駆体であり、Ａは、結合またはコネクター単位であり、Ｓ＊は、結合または分断剤であり、ＬＰは、並列コネクター単位であり、
ＲＬは２〜８個のアミノ酸を含むペプチドを含むペプチド放出可能なリンカーであり、
Ｙは、スペーサー単位である）
からなる群から選択される式を有するリンカー単位前駆体であり、
Ｄは、以下：
【化１５８】
2021521111.tif 000212
（式中、
ＲＢは、Ｈ、−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル−ＯＨ、−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル−ＮＨ２、−Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８ハロアルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキルＣ１〜Ｃ４アルキル、フェニルおよびフェニルＣ１〜Ｃ４アルキルからなる群から選択されるメンバーであり、
ＲＦおよびＲＦ’はそれぞれ、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ８アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ４アルキルアミノＣ１〜Ｃ８アルキル、（Ｃ１〜Ｃ４ヒドロキシアルキル）（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）アミノＣ１〜Ｃ８アルキル、ジ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）アミノＣ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ４ヒドロキシアルキルＣ１〜Ｃ８アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルＣ（Ｏ）−、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキルＣ（Ｏ）−、Ｃ１〜Ｃ８アミノアルキルＣ（Ｏ）−、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキルＣ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキルＣ１〜Ｃ４アルキル、フェニル、フェニルＣ１〜Ｃ４アルキル、ジフェニルＣ１〜Ｃ４アルキル、ヘテロアリールおよびヘテロアリールＣ１〜Ｃ４アルキルからなる群から独立して選択されるメンバーであるか、またはＲＦおよびＲＦ’は、各々が結合している窒素原子と合わさり、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ＯＨ、ＯＣ１〜Ｃ４アルキル、ＮＨ２、ＮＨＣ１〜Ｃ４アルキルおよびＮ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）２から選択される０〜３個の置換基を有する５員、６員または７員環を形成し、
ＲＢ、ＲＦおよびＲＦ’のシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、フェニルおよびヘテロアリール部分は、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ＯＨ、ＯＣ１〜Ｃ４アルキル、ＮＨ２、ＮＨＣ１〜Ｃ４アルキルおよびＮ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）２から選択される０〜３個の置換基により置換されており、
Ｑは、ＣＰＴ２またはＣＰＴ５に存在するヒドロキシル基またはアミン基のいずれか１つを介して結合している）
から選択される薬物単位である］
を有するカンプトテシン−リンカー化合物。
【請求項５７】
Ｄが、式ＣＰＴ２を有する、請求項５６に記載のカンプトテシン−リンカー化合物。
【請求項５８】
ＲＢが、−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル−ＯＨまたは−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル−ＮＨ２である、請求項５６または５７に記載のカンプトテシン−リンカー化合物。
【請求項５９】
ＲＢが、−ＣＨ２−ＯＨまたは−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−ＮＨ２である、請求項５８に記載のカンプトテシン−リンカー化合物。
【請求項６０】
ＲＢが、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８ハロアルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキルＣ１〜Ｃ４アルキル、フェニルおよびフェニルＣ１〜Ｃ４アルキルからなる群から選択されるメンバーである、請求項５６または５７に記載のカンプトテシン−リンカー化合物。
【請求項６１】
ＲＢが、Ｃ１〜Ｃ８アルキルまたはＣ１〜Ｃ８ハロアルキルである、請求項５６または５７に記載のカンプトテシン−リンカー化合物。
【請求項６２】
Ｄが、式ＣＰＴ５を有する、請求項５６に記載のカンプトテシン−リンカー化合物。
【請求項６３】
Ｑ’−Ｄが、（ＣＰＴ５ｉＮ）、（ＣＰＴ５ｉｉＮ）、（ＣＰＴ５ｉｉｉＮ）、（ＣＰＴ５ｉｖＮ）、（ＣＰＴ５ｖＮ）、（ＣＰＴ５ｖｉＮ）、（ＣＰＴ５ｉＯ）、（ＣＰＴ５ｉｉＯ）、（ＣＰＴ５ｉｉｉＯ）、（ＣＰＴ５ｉｖＯ）、（ＣＰＴ５ｖＯ）および（ＣＰＴ５ｖｉＯ）：
【化１５９−１】
2021521111.tif 000213
【化１５９−２】
2021521111.tif 000214
から選択される式を有する、請求項５６または６２に記載のカンプトテシン−リンカー化合物。
【請求項６４】
ＲＦおよびＲＦ’がそれぞれ、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ８アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ４アルキルアミノＣ１〜Ｃ８アルキル、（Ｃ１〜Ｃ４ヒドロキシアルキル）（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）アミノＣ１〜Ｃ８アルキル、ジ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）アミノＣ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ４ヒドロキシアルキルＣ１〜Ｃ８アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルＣ（Ｏ）−、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキルＣ（Ｏ）−およびＣ１〜Ｃ８アミノアルキルＣ（Ｏ）−からなる群から独立して選択され、
ＲＦおよびＲＦ’のシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、フェニルおよびヘテロアリール部分が、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ＯＨ、ＯＣ１〜Ｃ４アルキル、ＮＨ２、ＮＨＣ１〜Ｃ４アルキルおよびＮ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）２から選択される０〜３個の置換基により置換されている、
請求項６３に記載のカンプトテシン−リンカー化合物。
【請求項６５】
ＲＦおよびＲＦ’がそれぞれ、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキルＣ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキルＣ１〜Ｃ４アルキル、フェニル、フェニルＣ１〜Ｃ４アルキル、ジフェニルＣ１〜Ｃ４アルキル、ヘテロアリールおよびヘテロアリールＣ１〜Ｃ４アルキルからなる群から独立して選択され、
ＲＦおよびＲＦ’のシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、フェニルおよびヘテロアリール部分がそれぞれ、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ＯＨ、ＯＣ１〜Ｃ４アルキル、ＮＨ２、ＮＨＣ１〜Ｃ４アルキルおよびＮ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）２から選択される０〜３個の置換基により独立して置換されている、
請求項６３に記載のカンプトテシン−リンカー化合物。
【請求項６６】
ＲＦ’がＨである、請求項６２または６３に記載のカンプトテシン−リンカー化合物。
【請求項６７】
Ｑ’−Ｄが、（ＣＰＴ５ｉＮ）、（ＣＰＴ５ｉｉＮ）、（ＣＰＴ５ｉｉｉＮ）、（ＣＰＴ５ｉｖＮ）、（ＣＰＴ５ｖＮ）および（ＣＰＴ５ｖｉＮ）から選択される式を有する、請求項６３に記載のカンプトテシン−リンカー化合物。
【請求項６８】
Ｑ’−Ｄが、（ＣＰＴ５ｉＮ）、（ＣＰＴ５ｉｉＮ）および（ＣＰＴ５ｖｉＮ）から選択される式を有する、請求項６７に記載のカンプトテシン−リンカー化合物。
【請求項６９】
ＲＦが、−Ｈ、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ８アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ４アルキルアミノＣ１〜Ｃ８アルキル、（Ｃ１〜Ｃ４ヒドロキシアルキル）（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）アミノＣ１〜Ｃ８アルキル、ジ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）アミノＣ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ４ヒドロキシアルキルＣ１〜Ｃ８アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルＣ（Ｏ）−、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキルＣ（Ｏ）−およびＣ１〜Ｃ８アミノアルキルＣ（Ｏ）−からなる群から選択され、
ＲＦのシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、フェニルおよびヘテロアリール部分が、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ＯＨ、ＯＣ１〜Ｃ４アルキル、ＮＨ２、ＮＨＣ１〜Ｃ４アルキルおよびＮ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）２から選択される０〜３個の置換基により置換されている、
請求項６７または６８に記載のカンプトテシン−リンカー化合物。
【請求項７０】
ＲＦが、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキルＣ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキルＣ１〜Ｃ４アルキル、フェニル、フェニルＣ１〜Ｃ４アルキル、ジフェニルＣ１〜Ｃ４アルキル、ヘテロアリールおよびヘテロアリールＣ１〜Ｃ４アルキルからなる群から選択され、
ＲＦおよびＲＦ’のシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、フェニルおよびヘテロアリール部分がそれぞれ、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ＯＨ、ＯＣ１〜Ｃ４アルキル、ＮＨ２、ＮＨＣ１〜Ｃ４アルキルおよびＮ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）２から選択される０〜３個の置換基により独立して置換されている、
請求項６７または６８に記載のカンプトテシン−リンカー化合物。
【請求項７１】
Ｓ＊が、結合であり、Ｑが、−Ｚ−Ａ−ＲＬ−または−Ｚ−Ａ−ＲＬ−Ｙ−である、請求項５６から７０のいずれか一項に記載のカンプトテシン−リンカー化合物。
【請求項７２】
Ｓ＊が、分断剤であり、Ｑが、
−Ｚ−Ａ−Ｓ＊−ＲＬ−；−Ｚ−Ａ−ＬＰ（Ｓ＊）−ＲＬ−；−Ｚ−Ａ−Ｓ＊−ＲＬ−Ｙ−；または−Ｚ−Ａ−ＬＰ（Ｓ＊）−ＲＬ−Ｙ−
である、請求項５６から７０のいずれか一項に記載のカンプトテシン−リンカー化合物。
【請求項７３】
Ｓ＊が、ＰＥＧ単位である、請求項７２に記載のカンプトテシン−リンカー化合物。
【請求項７４】
前記ＰＥＧ単位が、以下の式：
【化１６０】
2021521111.tif 000215
（式中、左側の波線は、Ａへの結合部位を示し、右側の波線は、ＲＬへの結合部位を示し、ｂは２〜２０の整数であるか、または２、４、８もしくは１２である）
を有する、請求項７３に記載のカンプトテシン−リンカー化合物。
【請求項７５】
前記ＰＥＧ単位が、以下の式：
【化１６１】
2021521111.tif 000216
（式中、左側の波線は、Ａへの結合部位を示し、右側の波線は、ＲＬへの結合部位を示し、ｂは２〜２０の整数であるか、または２、４、８もしくは１２である）
を有する、請求項７４に記載のカンプトテシン−リンカー化合物。
【請求項７６】
Ｑが、式−Ｚ−Ａ−ＬＰ（Ｓ＊）−ＲＬ−または−Ｚ−Ａ−ＬＰ（Ｓ＊）−ＲＬ−Ｙ−であり、Ｓ＊が、２個、４個、８個または１２個の−ＣＨ２ＣＨ２Ｏ−サブ単位、およびＣ１〜４アルキルまたはＣ１〜４アルキル−ＣＯ２ＨであるＰＥＧ単位の末端キャップ基を含む、請求項７２に記載のカンプトテシン−リンカー化合物。
【請求項７７】
Ｓ＊が、式：
【化１６２】
2021521111.tif 000217
（式中、波線は、前記並列コネクター単位（ＬＰ）への結合部位を示し、ｂは２〜２０の整数であるか、または２、４、８もしくは１２である）
のものである、請求項７６に記載のカンプトテシン−リンカー化合物。
【請求項７８】
Ｓ＊が、式：
【化１６３】
2021521111.tif 000218
（式中、波線は、前記並列コネクター単位（ＬＰ）への結合部位を示し、ｂは２〜２０の整数であるか、または２、４、８もしくは１２である）
のものである、請求項７７に記載のカンプトテシン−リンカー化合物。
【請求項７９】
ＬＰがリシンである、請求項７６から７８のいずれか一項に記載のカンプトテシン−リンカー化合物。
【請求項８０】
ＬＰが、式：
【化１６４】
2021521111.tif 000219
（式中、波線は、前記分断剤に対する結合位置を示し、アスタリスクは、ＡおよびＲＬへの結合位置を示す）
のものである、請求項７９に記載のカンプトテシン−リンカー化合物。
【請求項８１】
Ｚが、式Ｚａ：
【化１６５】
2021521111.tif 000220
［式中、波線は、前記コネクター単位（Ａ）への結合位置を示し、
Ｒ１７は、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−、Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロアルキレン−、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ−、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ８アルキレン）−、−アリーレン−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−アリーレン−、−アリーレン−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−、−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−、−Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−、−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−、Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロアルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ８アルキレン）−Ｃ（＝Ｏ）−、−アリーレン−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−アリーレン−Ｃ（＝Ｏ）−、−アリーレン−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−Ｃ（＝Ｏ）−、−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−Ｃ（＝Ｏ）−、−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−ＮＨ−、Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロアルキレン−ＮＨ−、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ−ＮＨ−、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ８アルキレン）−ＮＨ−、−アリーレン−ＮＨ−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−アリーレン−ＮＨ−、−アリーレン−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−ＮＨ−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−ＮＨ−、−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−ＮＨ−、−Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ−ＮＨ−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−ＮＨ−、−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−ＮＨ−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−Ｓ−、Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロアルキレン−Ｓ−、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ−Ｓ−、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ８アルキレン）−Ｓ−、−アリーレン−Ｓ−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−アリーレン−Ｓ−、−アリーレン−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−Ｓ−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−Ｓ−、−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−Ｓ−、−Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ−Ｓ−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−Ｓ−または−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−Ｓ−であり、
Ｒ１７は、−（ＣＨ２）ｘＮＨ２、−（ＣＨ２）ｘＮＨＲａまたは−（ＣＨ２）ｘＮＲａ２である塩基性単位（ＢＵ）により必要に応じて置換されており、
（式中、ｘは、１〜４の整数であり、
Ｒａはそれぞれ、Ｃ１〜６アルキルおよびＣ１〜６ハロアルキルからなる群から独立して選択されるか、または２つのＲａ基は、それらが結合している窒素と合わさり、４〜６員のヘテロシクロアルキル環またはアゼチジニル、ピロリジニルもしくはピペリジニル基を形成する）］
を有する、請求項５６から８０のいずれか一項に記載のカンプトテシン−リンカー化合物。
【請求項８２】
Ｒ１７が、−（Ｃ１〜Ｃ５）アルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−であり、Ｒ１７のアルキレン部分が、前記塩基性単位（ＢＵ）により必要に応じて置換されている、請求項８１に記載のカンプトテシン−リンカー化合物。
【請求項８３】
Ｚ’が、式：
【化１６６】
2021521111.tif 000221
［式中、
カルボニルに隣接する波線は、Ａへの結合点を示しており、
ＢＵは、−（ＣＨ２）ｘＮＨ２、−（ＣＨ２）ｘＮＨＲａまたは−（ＣＨ２）ｘＮ（Ｒａ）２である塩基性単位であり、
（式中、ｘは、１〜４の整数であり、
Ｒａはそれぞれ、独立して、Ｃ１〜６アルキルもしくはＣ１〜６ハロアルキルであるか、または２つのＲａ基は、それらが結合している窒素と合わさり、４〜６員のヘテロシクロアルキル環、またはアゼチジニル、ピロリジニルもしくはピペリジニル基を形成する）］
を有する、請求項８１または８２に記載のカンプトテシン−リンカー化合物。
【請求項８４】
Ｚ’が、以下：
【化１６７】
2021521111.tif 000222
（式中、カルボニルに隣接する波線は、Ａへの結合点を示している）
である、請求項８３に記載のカンプトテシン−リンカー化合物。
【請求項８５】
Ｚ’が、以下：
【化１６８】
2021521111.tif 000223
である、請求項８４に記載のカンプトテシン−リンカー化合物。
【請求項８６】
Ａが、結合である、請求項５６から８５のいずれか一項に記載のカンプトテシン−リンカー化合物。
【請求項８７】
ＲＬが、ジペプチド、トリペプチドまたはテトラペプチドである、請求項５６から８６のいずれか一項に記載のカンプトテシン−リンカー化合物。
【請求項８８】
ＲＬが、ジペプチドである、請求項８７に記載のカンプトテシン−リンカー化合物。
【請求項８９】
ＲＬが、トリペプチドである、請求項８７に記載のカンプトテシン−リンカー化合物。
【請求項９０】
ＲＬが、ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｃｉｔ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｇｌｎ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｇｌｕ−ｇｌｙ、ｐｈｅ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｌｅｕ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｇｌｙ−ｖａｌ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ａｌａ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ｌｅｕ、ｌｅｕ−ｌｅｕ−ｇｌｙ、ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｐｈｅ−ｇｌｙ、ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｐｈｅ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｇｌｙまたはｖａｌ−ｌｙｓ−β−ａｌａである、請求項８７のいずれか一項に記載のカンプトテシン−リンカー化合物。
【請求項９１】
ＲＬが、以下の式：ＡＡ１−ＡＡ２−ＡＡ３（式中、ＡＡ１、ＡＡ２およびＡＡ３は、それぞれ独立してアミノ酸であり、ＡＡ１は、−ＮＨ−に結合しており、ＡＡ３は、Ｓ＊に結合している）を有するトリペプチドである、請求項８９に記載のカンプトテシン−リンカー化合物。
【請求項９２】
ＡＡ３が、ｇｌｙまたはβ−ａｌａである、請求項９１に記載のカンプトテシン−リンカー化合物。
【請求項９３】
ＡＡ３が、ｇｌｙである、請求項９２に記載のカンプトテシン−リンカー化合物。
【請求項９４】
Ｙが、以下の式：
【化１６９】
2021521111.tif 000224
である、請求項５６から９３のいずれか一項に記載のカンプトテシン−リンカー化合物。
【請求項９５】
式：
【化１７０】
2021521111.tif 000225
または薬学的に許容されるその塩（式中、
Ｓ＊は、ＰＥＧ単位であり、
ＲＬは、２〜８個のアミノ酸を含むペプチドであるペプチド放出可能なリンカーである）
を有する、請求項５６に記載のカンプトテシン−リンカー化合物。
【請求項９６】
前記ＰＥＧ単位が、以下の式：
【化１７１】
2021521111.tif 000226
（式中、左側の波線は、−Ｃ（Ｏ）−への結合部位を示し、右側の波線は、ＲＬへの結合部位を示し、ｂは２〜２０の整数であるか、または２、４、８もしくは１２である）
を有する、請求項９５に記載のカンプトテシン−リンカー化合物。
【請求項９７】
ＲＬがトリペプチドである、請求項９５から９６のいずれか一項に記載のカンプトテシン−リンカー化合物。
【請求項９８】
ＲＬが、以下の式：ＡＡ１−ＡＡ２−ＡＡ３（式中、ＡＡ１、ＡＡ２およびＡＡ３は、それぞれ独立してアミノ酸であり、ＡＡ１は、−ＮＨ−に結合しており、ＡＡ３は、Ｓ＊に結合している）を有するトリペプチドである、請求項９５から９７のいずれか一項に記載のカンプトテシン−リンカー化合物。
【請求項９９】
ＡＡ３が、ｇｌｙまたはβ−ａｌａである、請求項９８に記載のカンプトテシン−リンカー化合物。
【請求項１００】
ＲＬが、ｖａｌ−ｌｙｓ−ｇｌｙであり、ｖａｌが、−ＮＨ−に結合しており、ｇｌｙが、Ｓ＊に結合している、請求項９７に記載のカンプトテシン−リンカー化合物。
【請求項１０１】
式（ＩＣ）：
【化１７２】
2021521111.tif 000227
または薬学的に許容されるその塩、
（式中、
ｙは、１、２、３もしくは４であるか、または１もしくは４であり、
ｚは、２〜１２の整数であるか、または２、４、８もしくは１２であり、
ｐは、１〜１６である）
を有する、請求項５６に記載のカンプトテシン−リンカー化合物。
【請求項１０２】
ｐが、４、５、６、７、８、９もしくは１０であるか、またはｐが、４もしくは８である、請求項１０１に記載のカンプトテシン−リンカー化合物。
【請求項１０３】
式：
【化１７３】
2021521111.tif 000228
または薬学的に許容されるその塩を有する、請求項５６に記載のカンプトテシン−リンカー化合物。
【請求項１０４】
式：
【化１７４】
2021521111.tif 000229
または薬学的に許容されるその塩を有する、請求項５６に記載のカンプトテシン−リンカー化合物。
【請求項１０５】
式：
【化１７５】
2021521111.tif 000230
または薬学的に許容されるその塩を有する、請求項５６に記載のカンプトテシン−リンカー化合物。
【請求項１０６】
式：
【化１７６】
2021521111.tif 000231
または薬学的に許容されるその塩
（式中、
ＲＬは、ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ−β−ａｌａ、ｖａｌ−ｇｌｎ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ａｌａ、ｐｈｅ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｌｅｕ−ｌｅｕ−ｇｌｙ、ｌｅｕ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｇｌｕ−ｇｌｙ、ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ａｓｐ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ、ｖａｌ−ｇｌｙおよびｇｌｙ−ｖａｌ−ｌｙｓ−ｇｌｙからなる群から選択されるペプチドであり、
ｘは、２〜２０の整数であるか、または２、４、８もしくは１２である）
を有する、請求項５６に記載のカンプトテシン−リンカー化合物。
【請求項１０７】
以下の式：
【化１７７】
2021521111.tif 000232
（式中、
ｘは、２〜２０の整数であるか、または２、４、８もしくは１２であり、
ＲＬは、ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ−β−ａｌａ、ｖａｌ−ｇｌｎ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ａｌａ、ｐｈｅ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｌｅｕ−ｌｅｕ−ｇｌｙ、ｌｅｕ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｇｌｕ−ｇｌｙ、ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ａｓｐ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ、ｖａｌ−ｇｌｙおよびｇｌｙ−ｖａｌ−ｌｙｓ−ｇｌｙからなる群から選択されるペプチドである）
を有する、請求項５６に記載のカンプトテシン−リンカー化合物。
【請求項１０８】
ｘが、４〜１２の整数である、請求項１０７に記載のカンプトテシン−リンカー化合物。
【請求項１０９】
以下の式：
【化１７８】
2021521111.tif 000233
（式中、
ｘは、２〜２０の整数であるか、または２、４、８もしくは１２であり、
ＲＬは、ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ−β−ａｌａ、ｖａｌ−ｇｌｎ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ａｌａ、ｐｈｅ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｌｅｕ−ｌｅｕ−ｇｌｙ、ｌｅｕ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｇｌｕ−ｇｌｙ、ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ａｓｐ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ、ｖａｌ−ｇｌｙおよびｇｌｙ−ｖａｌ−ｌｙｓ−ｇｌｙからなる群から選択されるペプチドである）
を有する、請求項５６に記載のカンプトテシン−リンカー化合物。
【請求項１１０】
ＲＬがｖａｌ−ｌｙｓ−ｇｌｙである、請求項１０８または１０９に記載のカンプトテシン−リンカー化合物。
【請求項１１１】
以下の式：
【化１７９】
2021521111.tif 000234
（式中、ＲＦおよびＲＦ’はそれぞれ、独立して、Ｈ、グリシル、ヒドロキシアセチル、エチルまたは２−（２−（２−アミノエトキシ）エトキシ）エチルであるか、またはＲＦおよびＲＦ’は、各々が結合している窒素原子と合わさり、５員、６員もしくは７員のヘテロシクロアルキル環を形成する）
であるカンプトテシン化合物。
【請求項１１２】
ＲＦおよびＲＦ’が、各々が結合している窒素原子と合わさり、６員環を形成する、請求項１１１に記載のカンプトテシン化合物。
【請求項１１３】
前記６員環が、モルホリニル基またはピペラジニル基である、請求項１１２に記載のカンプトテシン化合物。
【請求項１１４】
ＲＦ’が、Ｈであり、ＲＦが、グリシル、ヒドロキシアセチル、エチルまたは２−（２−（２−アミノエトキシ）エトキシ）エチルである、請求項１１１に記載のカンプトテシン化合物。
【請求項１１５】
ＲＦ’が、Ｈであり、ＲＦが、脂肪族基を含む、請求項１１１に記載のカンプトテシン化合物。
【請求項１１６】
ＲＦ’が、Ｈであり、ＲＦが、アリール基を含む、請求項１１１に記載のカンプトテシン化合物。
【請求項１１７】
ＲＦ’が、Ｈであり、ＲＦが、アミド基を含む、請求項１１１に記載のカンプトテシン化合物。
【請求項１１８】
ＲＦ’が、Ｈであり、ＲＦが、エチレンオキシド基を含む、請求項１１１に記載のカンプトテシン化合物。
【請求項１１９】
化合物４、化合物５、ならびに表ＩおよびＩＩ中の化合物から選択される群から選択される、請求項１１１から１１８のいずれか一項に記載のカンプトテシン化合物。
【請求項１２０】
以下の式：
【化１８０】
2021521111.tif 000235
または薬学的に許容されるその塩
（式中、ＲＢは、−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル−ＯＨ、−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル−ＮＨ２、−Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８ハロアルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキルＣ１〜Ｃ４アルキル、フェニルまたはフェニルＣ１〜Ｃ４アルキルである）
であるカンプトテシン化合物。
【請求項１２１】
ＲＢが、Ｃ１〜Ｃ８アルキルを含む、請求項１２０に記載のカンプトテシン化合物。
【請求項１２２】
ＲＢが、シクロプロピル、ペンチル、ヘキシル、ｔｅｒｔ−ブチルまたはシクロペンチル基を含む、請求項１２１に記載のカンプトテシン化合物。
【請求項１２３】
化合物６および表ＩＩＩ中の化合物からなる群から選択される、請求項１２０から１２２のいずれか一項に記載のカンプトテシン化合物。
【請求項１２４】
前記抗体またはその抗原結合性フラグメントが、それぞれ、配列番号１、２、３、４、５および６のアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２、ＣＤＲ−Ｈ３、ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２およびＣＤＲ−Ｌ３を含む、請求項５３から５５のいずれか一項に記載のカンプトテシンコンジュゲート。
【請求項１２５】
前記抗体またはその抗原結合性フラグメントが、配列番号７のアミノ酸配列に少なくとも９５％が同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および配列番号８のアミノ酸配列と少なくとも９５％が同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、請求項１２４に記載のカンプトテシンコンジュゲート。
【請求項１２６】
前記抗体またはその抗原結合性フラグメントが、配列番号７のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および配列番号８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、請求項１２４に記載のカンプトテシンコンジュゲート。
【請求項１２７】
前記抗体が、配列番号９または配列番号１０のアミノ酸配列を含む重鎖、および配列番号１１のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、請求項１２４に記載のカンプトテシンコンジュゲート。
【請求項１２８】
式（ＩＣ）：
【化１８１】
2021521111.tif 000236
または薬学的に許容されるその塩、
（式中、
ｙは、１、２、３もしくは４であるか、または１もしくは４であり、
ｚは、２〜１２の整数であるか、または２、４、８もしくは１２であり、
ｐは、１〜１６である）
を有する、請求項１２４から１２７のいずれか一項に記載のカンプトテシンコンジュゲート。
【請求項１２９】
ｐが、２、３、４、５、６、７、８、９もしくは１０であるか、またはｐが、２、４もしくは８である、請求項１２８に記載のカンプトテシンコンジュゲート。
【請求項１３０】
以下の式：
【化１８２】
2021521111.tif 000237
または薬学的に許容されるその塩、
（式中、
ｐは、２、４または８である）
を有する、請求項５３から５５のいずれか一項に記載のカンプトテシンコンジュゲート。
【請求項１３１】
ｐが８である、請求項１３０に記載のカンプトテシンコンジュゲート。
【請求項１３２】
がんの処置を必要とする対象におけるがんを処置する方法であって、前記対象に、有効量の請求項１から５５および１２４から１３１のいずれか一項に記載のカンプトテシンコンジュゲート、または請求項１１１から１２３のいずれか一項に記載のカンプトテシン化合物を投与するステップを含む、方法。
【請求項１３３】
前記がんが、リンパ腫、白血病または固形腫瘍である、請求項１３２に記載の方法。
【請求項１３４】
前記対象に、有効量の追加的な治療剤、１種もしくは複数の化学療法剤、または放射線療法を投与するステップを含む、請求項１３２または１３３に記載の方法。
【請求項１３５】
自己免疫疾患の処置を必要とする対象における自己免疫疾患を処置する方法であって、前記対象に、有効量の請求項１から５５および１２４から１３１のいずれか一項に記載のカンプトテシンコンジュゲート、または請求項１１１から１２３のいずれか一項に記載のカンプトテシン化合物を投与するステップを含む、方法。
【請求項１３６】
前記自己免疫疾患が、Ｔｈ２リンパ球が関連する障害、Ｔｈ１リンパ球が関連する障害または活性化Ｂリンパ球が関連する障害である、請求項１３５に記載の方法。
【請求項１３７】
がんの処置を必要とする対象において、がんを処置する方法であって、がん細胞に請求項１１１から１２３のいずれか一項に記載のカンプトテシン化合物を接触させるステップを含む、方法。
【請求項１３８】
前記がんが、リンパ腫、白血病または固形腫瘍である、請求項１３７に記載の方法。
【請求項１３９】
抗体またはその抗原結合性フラグメントを請求項５６から１１０のいずれか一項に記載のカンプトテシン−リンカー化合物と反応させるステップを含む、請求項１から５５および１２４から１３１のいずれか一項に記載のカンプトテシンコンジュゲートを調製する方法。
【請求項１４０】
請求項１から５５および１２４から１３１のいずれか一項に記載のカンプトテシンコンジュゲートおよび薬学的に許容される担体を含む、医薬組成物。
【請求項１４１】
必要に応じて、追加的な治療剤を含む、請求項１から５５および１２４から１３１のいずれか一項に記載のカンプトテシンコンジュゲートを含む、キット。
【請求項１４２】
疾患または障害を処置するための、請求項１から５５および１２４から１３１のいずれか一項に記載のカンプトテシンコンジュゲート、または請求項１１１から１２３のいずれか一項に記載のカンプトテシン化合物の使用。
【請求項１４３】
疾患または障害を処置するための医薬の調製における、請求項１から５５および１２４から１３１のいずれか一項に記載のカンプトテシンコンジュゲート、または請求項１１１から１２３のいずれか一項に記載のカンプトテシン化合物、および薬学的に許容される添加剤、担体または賦形剤の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願への相互参照
本出願は、その全体が参照により本明細書に援用されている、２０１８年４月６日出願の米国仮特許出願第６２／６５３，９６１号の優先利益を主張する。
配列表への参照
【０００２】
本出願は、参照により本明細書に援用される、２０１９年３月１３日に作成された、１３ＫＢを含む、４５００−００１１１＿Ｓｅｑ＿Ｌｉｓｔ＿ＳＴ２５と名付けたファイル中の電子配列表を含む。
【背景技術】
【０００３】
がん細胞への細胞毒性剤の標的化送達のためのモノクローナル抗体（ｍＡｂ）の使用について多大な関心が寄せられてきた。いくつかの異なる薬物クラスが抗体を介した送達について評価されてきた一方、僅かな薬物クラスのみが、臨床開発を正当化する適切な毒性プロファイルを有する一方で、抗体薬物コンジュゲートとして十分に活性であることが証明されてきた。関心を集めている１つのクラスはカンプトテシンである。
【０００４】
リンカーを介した抗体への細胞毒性剤の結合による抗体薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）の設計は、通常、リンカーに結合するための、薬物上にコンジュゲーションの取掛かり部の存在、および条件として安定的に抗体に薬物を結合するためのリンカー技術を含めた、様々な因子を考慮することが必要である。適切なコンジュゲーションの取掛かり部が欠如していると考えられるある種の薬物のクラスは、ＡＤＣとしての使用に好適ではないと考えられている。コンジュゲーションの取掛かり部を含むようこのような薬物を修飾することは可能なことがあるが、このような修飾は、薬物の活性プロファイルに負に干渉する恐れがある。
【０００５】
エステルおよびカーボネートを含むリンカーはまた、通常、アルコール含有薬物のコンジュゲーションに使用されており、様々な安定性および薬物放出プロファイルを有するＡＤＣをもたらす。非最適プロファイルは、ＡＤＣ効力の低下、コンジュゲートの不十分な免疫学的特異性、およびコンジュゲートからの薬物の非特異的放出による毒性の増大をもたらす恐れがある。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００６】
したがって、標的治療に有用な、新規なリンカー技術およびコンジュゲートが必要である。本発明は、そのような必要性および他の必要性に対処する。
【０００７】
本発明は、とりわけ、カンプトテシンコンジュゲート、カンプトテシン−リンカー化合物およびカンプトテシン化合物、それらを調製および使用する方法、ならびにそれらの調製に有用な中間体を提供する。本発明のカンプトテシンコンジュゲートは、循環中で安定であるが、依然として、遊離薬物が腫瘍細胞近傍またはその内部でコンジュゲートから放出されると、細胞死をもたらすことが可能である。
【０００８】
１つの主要な実施形態では、カンプトテシンコンジュゲートが提供され、これは、以下の式：
Ｌ−（Ｑ−Ｄ）ｐ
または薬学的に許容されるその形態［式中、
Ｌは、リガンド単位であり、
Ｑは、以下：
−Ｚ−Ａ−Ｓ＊−ＲＬ−；−Ｚ−Ａ−ＬＰ（Ｓ＊）−ＲＬ−；−Ｚ−Ａ−Ｓ＊−ＲＬ−Ｙ−；および−Ｚ−Ａ−ＬＰ（Ｓ＊）−ＲＬ−Ｙ−
（式中、Ｚは、ストレッチャー単位であり、Ａは、結合またはコネクター単位であり、ＬＰは、並列コネクター単位であり、Ｓ＊は、結合または分断剤であり、ＲＬは２〜８個のアミノ酸を含むペプチドであり、Ｙは、スペーサー単位である）
からなる群から選択される式を有するリンカー単位であり、
Ｄは、以下：
【化１】
2021521111.tif 000003
（式中、
ＲＢは、Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８ハロアルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキルＣ１〜Ｃ４アルキル、フェニルおよびフェニルＣ１〜Ｃ４アルキルからなる群から選択されるメンバーであり、
ＲＣは、−Ｃ１〜Ｃ６アルキルおよびＣ３〜Ｃ６シクロアルキルからなる群から選択されるメンバーであり、
ＲＦおよびＲＦ’はそれぞれ、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ８アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ４アルキルアミノＣ１〜Ｃ８アルキル、（Ｃ１〜Ｃ４ヒドロキシアルキル）（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）アミノＣ１〜Ｃ８アルキル、ジ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）アミノＣ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ４ヒドロキシアルキルＣ１〜Ｃ８アミノアルキル、Ｃ２〜Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルＣ（Ｏ）−、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキルＣ（Ｏ）−、Ｃ１〜Ｃ８アミノアルキルＣ（Ｏ）−、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキルＣ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキルＣ１〜Ｃ４アルキル、フェニル、フェニルＣ１〜Ｃ４アルキル、ジフェニルＣ１〜Ｃ４アルキル、ヘテロアリールおよびヘテロアリールＣ１〜Ｃ４アルキルからなる群から独立して選択されるメンバーであるか、またはＲＦおよびＲＦ’は、各々が結合している窒素原子と合わさり、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ＯＨ、ＯＣ１〜Ｃ４アルキル、ＮＨ２、ＮＨＣ１〜Ｃ４アルキルおよびＮ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）２から選択される０〜３個の置換基を有する５員、６員または７員環を形成し、
ＲＢ、ＲＣ、ＲＦおよびＲＦ’のシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、フェニルおよびヘテロアリール部分は、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ＯＨ、ＯＣ１〜Ｃ４アルキル、ＮＨ２、ＮＨＣ１〜Ｃ４アルキルおよびＮ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）２から選択される０〜３個の置換基により置換されており、
ｐは、約１〜約１６であり、
Ｑは、ＣＰＴ１、ＣＰＴ２、ＣＰＴ３、ＣＰＴ４またはＣＰＴ５に存在するヒドロキシル基またはアミン基のいずれか１つを介して結合している）
から選択される薬物単位である］
を有する。
【０００９】
別の主要な実施形態では、カンプトテシンコンジュゲートが提供され、これは、以下の式：
Ｌ−（Ｑ−Ｄ）ｐ
または薬学的に許容されるその塩［式中、
Ｌは、リガンド単位であり、
Ｑは、以下：
−Ｚ−Ａ−Ｓ＊−ＲＬ−；−Ｚ−Ａ−ＬＰ（Ｓ＊）−ＲＬ−；−Ｚ−Ａ−Ｓ＊−ＲＬ−Ｙ−；および−Ｚ−Ａ−ＬＰ（Ｓ＊）−ＲＬ−Ｙ−
（式中、Ｚは、ストレッチャー単位であり、Ａは、結合またはコネクター単位であり、ＬＰは、並列コネクター単位であり、Ｓ＊は、結合または分断剤であり、ＲＬは２〜８個のアミノ酸を含むペプチドであり、Ｙは、スペーサー単位である）
からなる群から選択される式を有するリンカー単位であり、
Ｄは、以下：
【化２】
2021521111.tif 000004
（式中、
ＲＢは、Ｈ、−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル−ＯＨ、−Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８ハロアルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキルＣ１〜Ｃ４アルキル、フェニルおよびフェニルＣ１〜Ｃ４アルキルからなる群から選択されるメンバーであり、
ＲＦおよびＲＦ’はそれぞれ、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ８アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ４アルキルアミノＣ１〜Ｃ８アルキル、（Ｃ１〜Ｃ４ヒドロキシアルキル）（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）アミノＣ１〜Ｃ８アルキル、ジ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）アミノＣ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ４ヒドロキシアルキルＣ１〜Ｃ８アミノアルキル、Ｃ２〜Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルＣ（Ｏ）−、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキルＣ（Ｏ）−、Ｃ１〜Ｃ８アミノアルキルＣ（Ｏ）−、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキルＣ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキルＣ１〜Ｃ４アルキル、フェニル、フェニルＣ１〜Ｃ４アルキル、ジフェニルＣ１〜Ｃ４アルキル、ヘテロアリールおよびヘテロアリールＣ１〜Ｃ４アルキルからなる群から独立して選択されるメンバーであるか、またはＲＦおよびＲＦ’は、各々が結合している窒素原子と合わさり、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ＯＨ、ＯＣ１〜Ｃ４アルキル、ＮＨ２、ＮＨＣ１〜Ｃ４アルキルおよびＮ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）２から選択される０〜３個の置換基を有する５員、６員または７員環を形成し、
ＲＢ、ＲＣ、ＲＦおよびＲＦ’のシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、フェニルおよびヘテロアリール部分は、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ＯＨ、ＯＣ１〜Ｃ４アルキル、ＮＨ２、ＮＨＣ１〜Ｃ４アルキルおよびＮ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）２から選択される０〜３個の置換基により置換されており、
ｐは、約１〜約１６であり、
Ｑは、ＣＰＴ２またはＣＰＴ５に存在するヒドロキシル基またはアミン基のいずれか１つを介して結合している）
からなる群から選択される薬物単位である］
を有する。
【００１０】
さらに別の主要な実施形態では、カンプトテシンコンジュゲートが提供され、これは、以下の式：
Ｌ−（Ｑ−Ｄ）ｐ
または薬学的に許容されるその塩［式中、
Ｌは、リガンド単位であり、
Ｑは、以下：
−Ｚ−Ａ−Ｓ＊−ＲＬ−；−Ｚ−Ａ−ＬＰ（Ｓ＊）−ＲＬ−；−Ｚ−Ａ−Ｓ＊−ＲＬ−Ｙ−；および−Ｚ−Ａ−ＬＰ（Ｓ＊）−ＲＬ−Ｙ−
（式中、Ｚは、ストレッチャー単位であり、Ａは、結合またはコネクター単位であり、ＬＰは、並列コネクター単位であり、Ｓ＊は、結合または分断剤であり、ＲＬは２〜８個のアミノ酸を含むペプチドであり、Ｙは、スペーサー単位である）
からなる群から選択される式を有するリンカー単位であり、
Ｄは、以下の構造式：
【化３】
2021521111.tif 000005
（式中、
ＲＦおよびＲＦ’はそれぞれ、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ８アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ４アルキルアミノＣ１〜Ｃ８アルキル、（Ｃ１〜Ｃ４ヒドロキシアルキル）（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）アミノＣ１〜Ｃ８アルキル、ジ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）アミノＣ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ４ヒドロキシアルキルＣ１〜Ｃ８アミノアルキル、Ｃ２〜Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルＣ（Ｏ）−、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキルＣ（Ｏ）−、Ｃ１〜Ｃ８アミノアルキルＣ（Ｏ）−、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキルＣ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキルＣ１〜Ｃ４アルキル、フェニル、フェニルＣ１〜Ｃ４アルキル、ジフェニルＣ１〜Ｃ４アルキル、ヘテロアリールおよびヘテロアリールＣ１〜Ｃ４アルキルからなる群から独立して選択されるメンバーであるか、またはＲＦおよびＲＦ’は、各々が結合している窒素原子と合わさり、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ＯＨ、ＯＣ１〜Ｃ４アルキル、ＮＨ２、ＮＨＣ１〜Ｃ４アルキルおよびＮ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）２から選択される０〜３個の置換基を有する５員、６員または７員環を形成し、
ＲＢ、ＲＣ、ＲＦおよびＲＦ’のシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、フェニルおよびヘテロアリール部分は、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ＯＨ、ＯＣ１〜Ｃ４アルキル、ＮＨ２、ＮＨＣ１〜Ｃ４アルキルおよびＮ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）２から選択される０〜３個の置換基により置換されており、
ｐは、約１〜約１６であり、
Ｑは、ＣＰＴ５に存在するヒドロキシル基またはアミン基のいずれか１つを介して結合している）
を有する薬物単位である］
を有する。
【００１１】
上記の他の主な実施形態は、カンプトテシンコンジュゲートを調製するための中間体として有用なカンプトテシン−リンカー化合物であり、このカンプトテシン−リンカー化合物は、カンプトテシン（Ｄ）およびリンカー単位（Ｑ）からなり、このリンカー単位は、リガンド単位をもたらす標的化リガンドへの共有結合を形成することが可能なストレッチャー単位前駆体（Ｚ’）、および２〜８個のアミノ酸からなるペプチドである放出可能なリンカー（ＲＬ）からなる。
【００１２】
別の態様では、それを必要とする対象に本明細書に記載されているカンプトテシンコンジュゲートを投与するステップを含む、がんを処置する方法が本明細書において提供される。
【００１３】
別の態様では、本明細書に記載されているカンプトテシン−リンカー化合物またはカンプトテシンを使用するがんを処置する方法が本明細書において提供される。
【００１４】
別の態様では、本明細書に記載されているカンプトテシンコンジュゲートを含むキットが本明細書において提供される。
【図面の簡単な説明】
【００１５】
【図１】図１Ａおよび１Ｂは、ホジキンリンパ腫のＬ５４０ｃｙ皮下マウス異種移植片モデルに関して、ペプチドをベースとするカンプトテシンＡＤＣの活性を比較した、平均腫瘍体積のグラフである。
【００１６】
【図２】図２は、７８６−Ｏ腎細胞癌皮下マウス異種移植片モデルの場合の、平均腫瘍体積に及ぼすペプチドをベースとするカンプトテシンＡＤＣの効果を示すグラフである。
【００１７】
【図３−１】図３Ａ〜３Ｃは、Ｋａｒｐａｓ２９９／Ｋａｒｐａｓ２９９−ＢＶＲ未分化大細胞型リンパ腫バイスタンダー皮下異種移植片腫瘍モデルの結果を示すグラフである。
【図３−２】図３Ａ〜３Ｃは、Ｋａｒｐａｓ２９９／Ｋａｒｐａｓ２９９−ＢＶＲ未分化大細胞型リンパ腫バイスタンダー皮下異種移植片腫瘍モデルの結果を示すグラフである。
【００１８】
【図４−１】図４Ａ〜４Ｄは、ＤｅｌＢＶＲモデルにおける、ＣＤ３０特異的カンプトテシンＡＤＣの活性を示すグラフである。
【図４−２】図４Ａ〜４Ｄは、ＤｅｌＢＶＲモデルにおける、ＣＤ３０特異的カンプトテシンＡＤＣの活性を示すグラフである。
【００１９】
【図５】図５Ａおよび５Ｂは、ＤｅｌＢＶＲモデルにおける、ＣＤ３０特異的カンプトテシンＡＤＣの活性、およびブレンツキシマブベドチンとの比較を示すグラフである。
【００２０】
【図６】図６は、単回投与および繰り返し投与を使用する、Ｋａｒｐａｓ２９９モデルにおける、ＣＤ３０特異的カンプトテシンＡＤＣの活性を示すグラフである。
【００２１】
【図７】図７Ａおよび７Ｂは、単回投与および繰り返し投与を使用する、Ｌ４２８モデルにおける、ＣＤ３０特異的カンプトテシンＡＤＣの活性を示すグラフである。
【００２２】
【図８】図８は、様々な用量を使用する、ＤＥＬ−１５モデルにおける、ＣＤ３０特異的カンプトテシンＡＤＣの活性を示すグラフである。
【００２３】
【図９】図９は、Ｌ８２モデルにおける、ＣＤ３０特異的カンプトテシンＡＤＣの活性を示すグラフである。
【００２４】
【図１０】図１０は、マウス血漿におけるＡＤＣ安定性試験の結果を示すグラフである。
【００２５】
【図１１】図１１は、Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットにおける、ＩｇＧ  ｍＡｂおよびＩｇＧ−カンプトテシンＡＤＣの薬物動態プロファイルを示すグラフである。
【００２６】
【図１２】図１２は、クッパー細胞のＡＤＣ取り込みアッセイの結果を示すグラフである。
【００２７】
【図１３】図１３は、非コンジュゲートｃＡＣ１０モノクローナル抗体およびＣＤ３０特異的カンプトテシンＡＤＣを用いる疎水性相互作用クロマトグラフィーの結果を示すグラフである。
【００２８】
【図１４】図１４Ａおよび１４Ｂはそれぞれ、ＡＬＣＬ細胞系であるＫａｒｐａｓｓ２９９およびＨＬ細胞系であるＬ５４０ｃｙにおける、ＣＤ３０特異的カンプトテシンＡＤＣからのｉｎ  ｖｉｔｒｏでの薬物放出結果を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００２９】
定義
特に断りのない限り、下記の用語および語句は、本明細書において使用する場合、下記の意味を有することを意図する。商品名が本明細書において使用されるとき、商品名は、文脈によって他に示さない限り、製品の製剤、ジェネリック薬物、および商品名のある製品の活性医薬成分（複数可）を含む。
【００３０】
用語「抗体」とは、本明細書において使用する場合、最も広範な意味で使用され、インタクトなモノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、単一特異性抗体、多特異性抗体（例えば、二重特異性抗体）、および所望の生物活性を示す抗体フラグメントを特にカバーする。抗体の天然形態は四量体であり、２個の同一の対の免疫グロブリン鎖からなり、それぞれの対は１個の軽鎖および１個の重鎖を有する。それぞれの対において、軽鎖および重鎖可変領域（ＶＬおよびＶＨ）は、一緒になって主に抗原への結合に関与する。軽鎖および重鎖可変ドメインは、「相補性決定領域」または「ＣＤＲ」とまた称される、３個の超可変領域によって中断されるフレームワーク領域からなる。定常領域は、免疫系によって認識され、またはこれと相互作用し得る。（例えば、Ｊａｎｅｗａｙら、２００１年、Ｉｍｍｕｎｏ．  Ｂｉｏｌｏｇｙ、第５版、Ｇａｒｌａｎｄ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋを参照されたい）。抗体は、任意のタイプ（例えば、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、およびＩｇＡ）、クラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１およびＩｇＡ２）またはサブクラスのものでよい。抗体は、任意の適切な種に由来することができる。一部の実施形態では、抗体は、ヒトまたはマウス起源のものである。抗体は、例えば、ヒト抗体、ヒト化抗体またはキメラ抗体でよい。
【００３１】
用語「モノクローナル抗体」とは、本明細書において使用する場合、実質的に均質な抗体の集団から得た抗体を指し、すなわち、集団を構成する個々の抗体は、微量で存在し得る可能な天然に存在する変異を除いて同一である。モノクローナル抗体は高度に特異的であり、単一の抗原部位を指向している。修飾語「モノクローナル」は、抗体の実質的に均質な集団から得られるものとしての抗体の特徴を示し、任意の特定の方法による抗体の産生を必要とするとは解釈されない。
【００３２】
「インタクトな抗体」とは、抗体クラスについて適切な場合の、抗原結合性可変領域、ならびに軽鎖定常ドメイン（ＣＬ）ならびに重鎖定常ドメインＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３およびＣＨ４を含むものである。定常ドメインは、天然配列定常ドメイン（例えば、ヒト天然配列定常ドメイン）またはそのアミノ酸配列バリアントであり得る。
【００３３】
「抗体フラグメント」は、抗原結合領域またはその可変領域を含むインタクトな抗体のポーションを含む。抗体断片の例として、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、およびＦｖ断片、二重特異性抗体、三重特異性抗体、四重特異性抗体、線状抗体、一本鎖抗体分子、ｓｃＦｖ、ｓｃＦｖ−Ｆｃ、抗体断片（複数可）から形成された多特異性抗体断片、Ｆａｂ発現ライブラリーによって産生された断片（複数可）、または標的とされる抗原（例えば、がん細胞抗原、ウイルス抗原または微生物抗原）に免疫特異的に結合する前述のいずれかのエピトープ結合断片が挙げられる。
【００３４】
「抗原」は、そこに抗体が特異的に結合する実体である。
【００３５】
用語「特異的結合」および「特異的に結合する」とは、抗体または抗体誘導体が、多数の他の抗原とではなく、その対応する標的抗原のエピト−プと高度に選択的な様式で結合することを意味する。典型的には、抗体または抗体誘導体は、少なくとも約１×１０−７Ｍ、好ましくは１０−８Ｍから１０−９Ｍ、１０−１０Ｍ、１０−１１Ｍ、または１０−１２Ｍの親和性で結合し、所定の抗原または密接に関連する抗原以外の非特異的抗原（例えば、ＢＳＡ、カゼイン）に結合するその親和性の少なくとも２倍大きい親和性で所定の抗原に結合する。
【００３６】
用語「阻害する」または「の阻害」とは、測定可能な量だけ低減させ、または完全に防止することを意味する。
【００３７】
用語「治療有効量」とは、哺乳動物における疾患または障害を処置するのに有効なコンジュゲートの量を指す。がんの場合、コンジュゲートの治療有効量は、がん細胞の数を低減し得る、腫瘍のサイズを低減し得る、末梢器官中へのがん細胞浸潤を阻害し得る（すなわち、ある程度緩徐化させ、好ましくは停止し得る）、腫瘍転移を阻害し得る（すなわち、ある程度緩徐化させ、好ましくは停止し得る）、ある程度、腫瘍増殖を阻害し得る、かつ／またはがんと関連する症状の１つもしくは複数をある程度軽減し得る。薬物が成長を阻害し、かつ／または存在するがん細胞を死滅させ得る程度にまで、薬物は細胞増殖抑制性および／または細胞毒性でよい。がん療法のために、有効性は、例えば、疾患の進行までの時間（ＴＴＰ）をアセスメントし、かつ／または奏効率（ＲＲ）を決定することによって測定することができる。
【００３８】
用語「実質的な」または「実質的に」とは、集団の、混合物または試料の大部分、すなわち集団の、混合物または試料の＞５０％、好ましくは集団の５０％超、５５％超、６０％超、６５％超、７０％超、７５％超、８０％超、８５％超、９０％超、９１％超、９２％超、９３％超、９４％超、９５％超、９６％超、９７％超、９８％超、または９９％超を指す。
【００３９】
用語「細胞毒性活性」とは、薬物またはカンプトテシンコンジュゲートまたはカンプトテシンコンジュゲートの細胞内代謝物の細胞死滅効果を指す。細胞毒性活性は、細胞の半分が生存する単位体積当たりの濃度（モル濃度（ｍｏｌａｒ）または質量）であるＩＣ５０値として表し得る。
【００４０】
用語「細胞増殖抑制活性」とは、薬物またはカンプトテシンコンジュゲート、またはカンプトテシンコンジュゲートの細胞内代謝物の抗増殖性効果を指す。
【００４１】
用語「細胞毒性剤」とは、本明細書において使用する場合、細胞毒性活性を有し、かつ細胞の破壊をもたらす物質を指す。この用語は、化学療法剤、ならびに毒素、例えば、合成類似体およびその誘導体を含めた、細菌起源、真菌起源、植物起源または動物起源の小分子毒素または酵素的活性毒素を含むことを意図する。
【００４２】
用語「細胞増殖抑制剤」とは、本明細書において使用する場合、細胞成長または増殖を含む細胞の機能を阻害する物質を指す。細胞増殖抑制剤は、阻害剤、例えば、タンパク質阻害剤、例えば、酵素阻害剤を含む。細胞増殖抑制剤は、細胞増殖抑制活性を有する。
【００４３】
用語「がん」および「がんの」とは、レギュレートされない細胞成長によって典型的には特徴付けられる、哺乳動物における生理学的状態または障害を指し、またはそれを記載する。「腫瘍」は、１つまたは複数のがん細胞を含む。
【００４４】
「自己免疫疾患」とは、本明細書において使用する場合、個体自身の組織またはタンパク質から生じ、かつこれらに対する疾患または障害を指す。
【００４５】
「患者」とは、本明細書において使用する場合、本発明のカンプトテシンコンジュゲートを投与する対象を指す。患者には、以下に限定されないが、ヒト、ラット、マウス、モルモット、非ヒト霊長類、ブタ、ヤギ、ウシ、ウマ、イヌ、ネコ、鳥および家禽が含まれる。典型的には、患者は、ラット、マウス、イヌ、ヒトまたは非ヒト霊長類、より典型的には、ヒトである。
【００４６】
用語「処置する」または「処置」とは、文脈によって他に示さない限り、治療的処置、および予防を指し、その目的は、望まれない生理学的変化または障害、例えば、がんの発生または拡散を阻害または緩徐化する（減らす）ことである。本発明の目的のために、有益または所望の臨床結果には、これらに限定されないが、検出可能なものであろうともまたは検出が不可能なものであろうとも、症状の軽減、疾患の程度の減弱、疾患の安定化した（すなわち、悪化しない）状態、疾患の進行の遅延または緩徐化、病態の回復または緩和、および寛解（部分的または全体的であろうと）が含まれる。「処置」はまた、処置を受けない場合の予想される生存と比較した、生存の延長を意味することができる。処置を必要とするものは、上記状態または障害を既に有するもの、および上記状態または障害を有する傾向があるものを含む。
【００４７】
がんとの関連で、用語「処置する」は、腫瘍細胞を殺傷すること、腫瘍細胞、がん細胞、または腫瘍の成長を阻害すること、腫瘍細胞またはがん細胞の複製を阻害すること、全体的な腫瘍量を減らすこと、またはがん性細胞の数を減少させること、およびその疾患と関連する１つまたは複数の症状を回復させることのいずれかまたは全てを含む。
【００４８】
自己免疫疾患との関連で、用語「処置する」は、これらに限定されないが、自己免疫性抗体を産生する細胞を含めた自己免疫疾患の状態と関連する細胞の複製を阻害すること、自己免疫性抗体量を減らすこと、および自己免疫疾患の１つまたは複数の症状を回復させることのいずれかまたは全てを含む。
【００４９】
用語「薬学的に許容される形態」とは、本明細書において使用する場合、以下に限定されないが、薬学的に許容される塩、エステル、水和物、溶媒和物、多形、異性体、プロドラッグおよび同位体標識されているそれらの誘導体を含めた、開示されている化合物の形態を指す。一実施形態では、「薬学的に許容される形態」には、以下に限定されないが、薬学的に許容される塩、エステル、プロドラッグおよび同位体標識されているそれらの誘導体が含まれる。一部の実施形態では、「薬学的に許容される形態」には、以下に限定されないが、薬学的に許容される異性体および立体異性体、プロドラッグおよび同位体標識されているそれらの誘導体が含まれる。
【００５０】
ある種の実施形態では、薬学的に許容される形態は、薬学的に許容される塩である。語句「薬学的に許容される塩」とは、本明細書において使用する場合、化合物（例えば、薬物、薬物−リンカー、またはカンプトテシンコンジュゲート）の薬学的に許容される有機塩または無機塩を指す。一部の態様では、化合物は少なくとも１個のアミノ基を含有することができ、したがって、酸付加塩は、アミノ基と形成することができる。例示的な塩には、これらに限定されないが、硫酸塩、トリフルオロ酢酸塩、クエン酸塩、酢酸塩、シュウ酸塩、クロリド、ブロミド、ヨージド、硝酸塩、硫酸水素塩、リン酸塩、酸性リン酸塩、イソニコチン酸塩、乳酸塩、サリチル酸塩、酸性クエン酸塩、酒石酸塩、オレイン酸塩、タンニン酸塩、パントテン酸塩、酒石酸水素塩、アスコルビン酸塩、コハク酸塩、マレイン酸塩、ゲンチシネート（ｇｅｎｔｉｓｉｎａｔｅ）、フマル酸塩、グルコン酸塩、グルクロン酸塩、糖酸塩、ギ酸塩、安息香酸塩、グルタミン酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、およびパモ酸塩（すなわち、１，１’−メチレン−ビス−（２−ヒドロキシ−３−ナフトエ酸塩））が含まれる。薬学的に許容される塩は、別の分子、例えば、酢酸イオン、コハク酸イオンまたは他の対イオンの含有を伴い得る。対イオンは、親化合物上の電荷を安定化させる任意の有機または無機部分であり得る。さらに、薬学的に許容される塩は、その構造中に複数個の電荷を帯びた原子を有し得る。複数の電荷を帯びた原子が薬学的に許容される塩の部分である場合は、複数の対イオンを有することができる。このように、薬学的に許容される塩は、１個もしくは複数の電荷を帯びた原子および／または１個もしくは複数の対イオンを有することができる。
【００５１】
リンカー単位は、カンプトテシンコンジュゲート中の、カンプトテシンをリガンド単位に結合させる二官能性部分である。本発明のリンカー単位は、いくつかの構成要素（例えば、一部の実施形態では、塩基性単位を有するストレッチャー単位；存在し得るまたは存在し得ないコネクター単位；同様に存在し得るまたは存在し得ない並列コネクター単位；ペプチド放出可能な連結単位；および同様に存在し得るまたは存在し得ないスペーサー単位）を有する。
【００５２】
「ＰＥＧ単位」は、本明細書において使用する場合、反復エチレンオキシサブ単位（ＰＥＧまたはＰＥＧサブ単位）からなる有機部分であり、多分散性、単分散性または個別性（すなわち、個別の数のエチレンオキシサブ単位を有する）とすることができる。多分散性ＰＥＧは、サイズおよび分子量が不均質な混合物である一方、単分散性ＰＥＧは、通常、不均質混合物から精製され、したがって、単一鎖長および分子量をもたらす。好ましいＰＥＧ単位は、重合過程によるのではなくステップ毎の様式で合成された化合物である個別のＰＥＧを含む。個別のＰＥＧは、規定された指定の鎖長を有する単一分子をもたらす。
【００５３】
本明細書において提供されるＰＥＧ単位は、１つまたは複数のポリエチレングリコール鎖を含み、各々が、互いに共有結合した１つまたは複数のエチレンオキシサブ単位からなる。ポリエチレングリコール鎖は、例えば、直鎖状、分岐状または星形状の立体配置で一緒に連結され得る。通常、カンプトテシンコンジュゲートに組み込む前の少なくとも１つのポリエチレングリコール鎖を、一方の末端において、メチレンカルバメート単位のカルバメート窒素に共有結合するための求電子性基で置換されたアルキル部分により誘導体化されている（すなわち、Ｒの例を表す）。通常、リンカー単位の残部への共有結合に含まれない、各ポリエチレングリコール鎖中の末端エチレンオキシサブ単位は、ＰＥＧキャッピング単位、通常、−ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ３またはＣＨ２ＣＨ２ＣＯ２Ｈなどの必要に応じて置換されているアルキルにより修飾されている。好ましいＰＥＧ単位は、直列に共有結合しており、かつＰＥＧキャッピング単位により末端の一方で終端した２〜２４個の−ＣＨ２ＣＨ２Ｏ−サブ単位を有する単一ポリエチレングリコール鎖を有する。
【００５４】
他に示さない限り、用語「アルキル」は、それ自体で、または別の用語の部分として、示した数の炭素原子を有する置換または非置換の直鎖または分岐状の飽和または不飽和の炭化水素を指す（例えば、「−Ｃ１〜Ｃ８アルキル」または「−Ｃ１〜Ｃ１０」アルキルは、それぞれ、１〜８個または１〜１０個の炭素原子を有するアルキル基を指す）。炭素原子の数が示されないとき、アルキル基は、１〜８個の炭素原子を有する。代表的な直鎖「−Ｃ１〜Ｃ８アルキル」基には、これらに限定されないが、−メチル、−エチル、−ｎ−プロピル、−ｎ−ブチル、−ｎ−ペンチル、−ｎ−ヘキシル、−ｎ−ヘプチルおよび−ｎ−オクチルが含まれる。一方では、分岐状−Ｃ３〜Ｃ８アルキルには、これらに限定されないが、−イソプロピル、−ｓｅｃ−ブチル、−イソブチル、−ｔｅｒｔ−ブチル、−イソペンチル、および−２−メチルブチルが含まれる。不飽和−Ｃ２〜Ｃ８アルキルには、これらに限定されないが、−ビニル、−アリル、−１−ブテニル、−２−ブテニル、−イソブチレニル、−１−ペンテニル、−２−ペンテニル、−３−メチル−１−ブテニル、−２−メチル−２−ブテニル、−２，３−ジメチル−２−ブテニル、−１−ヘキシル、２−ヘキシル、−３−ヘキシル、−アセチレニル、−プロピニル、−１−ブチニル、−２−ブチニル、−１−ペンチニル、−２−ペンチニルおよび−３−メチル−１ブチニルが含まれる。場合によって、アルキル基は、置換されていない。アルキル基は、１個または複数の基で置換することができる。他の態様では、アルキル基は飽和している。
【００５５】
他に示さない限り、「アルキレン」は、それ自体で、または別の用語の部分として、記述した数の炭素原子、典型的には１〜１０個の炭素原子の、親アルカンの同じかまたは２個の異なる炭素原子からの２個の水素原子の除去に由来する２個の一価ラジカル中心を有する、置換または非置換の飽和の分岐状または直鎖または環状の炭化水素ラジカルを指す。典型的なアルキレンラジカルには、これらに限定されないが、メチレン（−ＣＨ２−）、１，２−エチレン（−ＣＨ２ＣＨ２−）、１，３−プロピレン（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−）、１，４−ブチレン（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−）などが含まれる。好ましい態様では、アルキレンは、分岐状または直鎖の炭化水素である（すなわち、これは環状炭化水素ではない）。
【００５６】
他に示さない限り、「アリール」は、それ自体で、または別の用語の部分として、親芳香族環系の単一の炭素原子からの１個の水素原子の除去によって得られる、記述されている炭素原子の数、典型的には６〜２０個の炭素原子の置換または非置換の一価炭素環式芳香族炭化水素ラジカルを意味する。いくつかのアリール基は、例示的な構造において、「Ａｒ」と表される。典型的なアリール基には、これらに限定されないが、ベンゼン、置換ベンゼン、ナフタレン、アントラセン、ビフェニルに由来するラジカルなどが含まれる。例示的なアリール基は、フェニル基である。
【００５７】
他に示さない限り、「アリーレン」は、それ自体で、または別の用語の部分として、２つの共有結合を有する（すなわち、これは二価である）、上記に定義されているようなアリール基であり、例示的な基としてフェニルを用いる下記の構造において示すようにオルト、メタ、またはパラ配向でよい。
【化４】
2021521111.tif 000006
【００５８】
他に示さない限り、「Ｃ３〜Ｃ８複素環」は、それ自体で、または別の用語の部分として、３〜８個の炭素原子（環員とまた称される）およびＮ、Ｏ、ＰまたはＳから独立に選択される１〜４個のヘテロ原子環員を有し、かつ親環系の環原子から１個の水素原子を除去することに由来する、一価の置換または非置換の芳香族または非芳香族の単環式または二環式環系を指す。複素環中の１個または複数のＮ、ＣまたはＳ原子は酸化することができる。ヘテロ原子を含む環は、芳香族または非芳香族でよい。環原子がすべて芳香族性に関与している複素環は、ヘテロアリールと称され、そうでないものは、複素炭素環と称される。他に断らない限り、複素環は、任意のヘテロ原子または炭素原子においてそのペンダント基に結合しており、これは安定的な構造をもたらす。したがって、ヘテロアリールは、その芳香族環系の芳香族炭素を介して結合し、Ｃ連結型ヘテロアリールと称され得るか、またはその芳香族環系中の非二重結合性Ｎ原子（すなわち、＝Ｎ−ではない）を介して結合し、Ｎ連結型ヘテロアリールと称され得る。したがって、窒素含有複素環は、Ｃ連結型またはＮ連結型であり得、ピロール−１−イル（Ｎ連結型）およびピロール−３−イル（Ｃ連結型）などのピロール部分、ならびにイミダゾール−１−イルおよびイミダゾール−３−イル（両方がＮ連結型である）、ならびにイミダゾール−２−イル、イミダゾール−４−イルおよびイミダゾール−５−イル部分（それらのすべてが、Ｃ連結型である）などのイミダゾール部分を含む。
【００５９】
特に示さない限り、「Ｃ３〜Ｃ８ヘテロアリール」は、芳香族Ｃ３〜Ｃ８複素環であり、この場合、下付き文字は、複素環の環式環系の炭素の総数、またはヘテロアリールの芳香族環系の芳香族炭素の総数を表し、環系のサイズも、縮合環の存在もしくは非存在も暗示するものではない。Ｃ３〜Ｃ８複素環の代表例には、これらに限定されないが、ピロリジニル、アゼチジニル、ピペリジニル、モルホリニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロピラニル、ベンゾフラニル、ベンゾチオフェン、インドリル、ベンゾピラゾリル、ピロリル、チオフェニル（チオフェン）、フラニル、チアゾリル、イミダゾリル、ピラゾリル、ピリミジニル、ピリジニル、ピラジニル、ピリダジニル、イソチアゾリル、およびイソオキサゾリルが含まれる。複素環またはヘテロアリールの環系のサイズは、明示的に示されている場合、この環中の原子の総数によって表示される。例えば、５員または６員のヘテロアリールとしての表示は、ヘテロアリールのヘテロ芳香族環系中の総数または芳香族原子を示す（すなわち、５個または６個）が、その環系における芳香族ヘテロ原子または芳香族炭素の数を示すものではない。縮合ヘテロアリールは、文脈によってそうであると明示的に明記または暗示され、典型的には、一緒に縮合して縮合複素芳香族環系を構成する各芳香族環中の芳香族原子の数によって表示される。例えば、５，６員のヘテロアリールは、この環の一方または両方が芳香族ヘテロ原子を有するか、または１個のヘテロ原子が２つの環の間で共有されている、芳香族６員環に縮合した芳香族５員環である。
【００６０】
複素環が非芳香族のままで、縮合環系の非芳香族部分との結合を介してより大きな構造の部分となるよう、アリールまたはヘテロアリールに縮合した複素環は、該複素環がアリールまたはヘテロアリールとの環縮合により置換されている、必要に応じて置換されている複素環の一例である。同様に、縮合環系の芳香族部分との結合を介してより大きな構造の部分となる複素環または炭素環に縮合したアリールまたはヘテロアリールは、アリールまたは複素環が複素環または炭素環との環縮合により置換されている、必要に応じて置換されているアリールまたは複素環の一例である。
【００６１】
特に示さない限り、「Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ」は、それ自体で、または別の用語の部分として、複素環の水素原子の１個が結合により置き換えられている、上で定義したＣ３〜Ｃ８複素環式を指す（すなわち、二価である）。特に示さない限り、「Ｃ３〜Ｃ８ヘテロアリーレン」は、それ自体で、または別の用語の部分として、ヘテロアリール基の水素原子の１個が結合により置き換えられている、上で定義したＣ３〜Ｃ８ヘテロアリール基を指す（すなわち、二価である）。
【００６２】
他に示さない限り、「Ｃ３〜Ｃ８炭素環」は、それ自体で、または別の用語の部分として、親環系の環原子からの１個の水素原子の除去に由来する、３員、４員、５員、６員、７員または８員の一価の置換または非置換の飽和または不飽和の非芳香族単環式または二環式炭素環式環である。代表的な−Ｃ３〜Ｃ８炭素環には、これらに限定されないが、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロペンタジエニル、シクロヘキシル、シクロヘキセニル、１，３−シクロヘキサジエニル、１，４−シクロヘキサジエニル、シクロヘプチル、１，３−シクロヘプタジエニル、１，３，５−シクロヘプタトリエニル、シクロオクチル、およびシクロオクタジエニルが含まれる。
【００６３】
他に示さない限り、「Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ」は、それ自体で、または別の用語の部分として、炭素環基の水素原子のもう１個が結合で置き換えられている、上記で定義したＣ３〜Ｃ８炭素環基を指す（すなわち、これは二価である）。
【００６４】
他に示さない限り、用語「ヘテロアルキル」は、それ自体で、または別の用語と組み合わせて、特に明記しない限り、安定的な直鎖または分岐鎖炭化水素、またはこれらの組合せを意味し、これは完全飽和しており、または１〜３の不飽和度を含有し、記述した数の炭素原子、ならびにＯ、Ｎ、ＳｉおよびＳからなる群から選択される１〜１０個、好ましくは１〜３個のヘテロ原子からなり、ここで窒素および硫黄原子は、任意選択で酸化されていてもよく、窒素ヘテロ原子は、任意選択で四級化されていてもよい。ヘテロ原子（複数可）Ｏ、ＮおよびＳは、ヘテロアルキル基の任意の内部の位置において、またはアルキル基が分子の残部に結合している位置において配置し得る。ヘテロ原子Ｓｉは、アルキル基が分子の残部に結合している位置を含めて、ヘテロアルキル基の任意の位置において配置し得る。例には、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ３、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−ＣＨ３、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｎ（ＣＨ３）−ＣＨ３、−ＣＨ２−Ｓ−ＣＨ２−ＣＨ３、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｓ（Ｏ）−ＣＨ３、−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ３、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｓ（Ｏ）２−ＣＨ３、−ＣＨ＝ＣＨ−Ｏ−ＣＨ３、−Ｓｉ（ＣＨ３）３、−ＣＨ２−ＣＨ＝Ｎ−Ｏ−ＣＨ３、および−ＣＨ＝ＣＨ−Ｎ（ＣＨ３）−ＣＨ３が含まれる。２個までのヘテロ原子は、連続的、例えば、−ＣＨ２−ＮＨ−ＯＣＨ３および−ＣＨ２−Ｏ−Ｓｉ（ＣＨ３）３でよい。典型的には、Ｃ１〜Ｃ４ヘテロアルキルまたはヘテロアルキレンは、１〜４個の炭素原子および１個または２個のヘテロ原子を有し、Ｃ１〜Ｃ３ヘテロアルキルまたはヘテロアルキレンは、１〜３個の炭素原子および１個または２個のヘテロ原子を有する。一部の態様では、ヘテロアルキルまたはヘテロアルキレンは飽和している。
【００６５】
他に示さない限り、用語「ヘテロアルキレン」は、それ自体で、または別の用語と組み合わせて、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｓ−ＣＨ２−ＣＨ２−および−ＣＨ２−Ｓ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−ＣＨ２−によって例示されるような（上記で考察するような）ヘテロアルキルに由来する二価基を意味する。ヘテロアルキレン基について、ヘテロ原子はまた、鎖末端の一方または両方を占めることができる。またさらに、アルキレンおよびヘテロアルキレン連結基について、連結基の配向は暗示されない。
【００６６】
特に示さない限り、「アミノアルキル」は、それ自体または別の用語と組み合わされて、ヘテロアルキルであって、本明細書で定義されているアルキル部分が、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノまたはシクロアルキルアミノ基により置換されている、ヘテロアルキルを意味する。例示的な非限定的なアミノアルキルは、−ＣＨ２ＮＨ２、−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２、−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣＨ３および−ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）２であり、（Ｒ）−または（Ｓ）−立体配置にある−ＣＨ（ＣＨ３）ＮＨ２および−Ｃ（ＣＨ３）ＣＨ２ＮＨ２などの分岐種をさらに含む。代替的に、アミノアルキルは、本明細書で定義されているアルキル部分、基または置換基であり、ラジカル炭素以外のｓｐ３炭素が、アミノ部分またはアルキルアミノ部分により置き換えられており、この場合、そのｓｐ３窒素は、アルキルのｓｐ３炭素を置き換えており、ただし、少なくとも１個のｓｐ３炭素がその状態のままであることを条件とする。アミノアルキル部分をより大きな構造または別の部分への置換基として述べる場合、このアミノアルキルは、アミノアルキルのアルキル部分の炭素ラジカルを介して、この構造または部分に共有結合している。
【００６７】
特に示さない限り、「アルキルアミノ」および「シクロアルキルアミノ」は、それ自体または別の用語と組み合わされて、本明細書に記載されているアルキルラジカルまたはシクロアルキルラジカルを意味し、この場合、アルキルラジカルまたはシクロアルキルラジカルのラジカル炭素は、窒素ラジカルと置き換えられており、ただし、少なくとも１個のｓｐ３炭素がその状態のままであることを条件とする。アルキルアミノが、その窒素において、別のアルキル部分により置換されているそのような場合では、生じた置換ラジカルは、時として、ジアルキルアミノ部分、基または置換基と称され、この場合、窒素を置換しているアルキル部分は、独立して選択される。例示的なおよび非限定的なアミノ、アルキルアミノおよびジアルキルアミノ置換基には、−Ｎ（Ｒ’）２の構造を有するものが含まれ、これらの例におけるＲ’は、水素またはＣ１〜６アルキルから、通常、水素またはメチルから独立して選択される一方、ヘテロシクロアルキル中に含まれるシクロアルキルアミンでは、両方のＲ’が、それらが結合している窒素と一緒になって、複素環式環を定義する。両方のＲ’が、水素またはアルキルである場合、この部分は、時として、それぞれ、一級アミノ基および三級アミン基と称される。Ｒ’の一方が水素であり、もう一方がアルキルである場合、この部分は、時として、二級アミノ基と称される。一級および二級アルキルアミノ部分は、カルボニル含有求電子中心への求核剤として一層反応性が高い一方、三級アミンは、塩基性がより高い。
【００６８】
「置換アルキル」および「置換アリール」は、それぞれ、アルキルおよびアリールを意味し、１個または複数の水素原子、通常、１個の水素原子は、それぞれ独立して、置換基により置換されている。典型的な置換基には、以下に限定されないが、−Ｘ、−Ｒ’、−ＯＨ、−ＯＲ’、−ＳＲ’、−Ｎ（Ｒ’）２、−Ｎ（Ｒ’）３、＝ＮＲ’、−ＣＸ３、−ＣＮ、−ＮＯ２、−ＮＲ’Ｃ（＝Ｏ）Ｒ’、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ’、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ’）２、−Ｓ（＝Ｏ）２Ｒ’、−Ｓ（＝Ｏ）２ＮＲ’、−Ｓ（＝Ｏ）Ｒ’、−ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＲ’）２、−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＲ’）２、−ＰＯ３＝、ＰＯ３Ｈ２、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ’、−Ｃ（＝Ｓ）Ｒ’、−ＣＯ２Ｒ’、−ＣＯ２−、−Ｃ（＝Ｓ）ＯＲ’、−Ｃ（＝Ｏ）ＳＲ’、−Ｃ（＝Ｓ）ＳＲ’、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ’）２、−Ｃ（＝Ｓ）Ｎ（Ｒ’）２および−Ｃ（＝ＮＲ）Ｎ（Ｒ’）２が含まれ、各Ｘは、ハロゲン：−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒおよび−Ｉからなる群から独立して選択され、Ｒ’はそれぞれ、−Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ２０アルキル、−Ｃ６〜Ｃ２０アリール、−Ｃ３〜Ｃ１４複素環、保護基およびプロドラッグ部分からなる群から独立して選択される。
【００６９】
さらに一般には、置換基は、−Ｘ、−Ｒ’、−ＯＨ、−ＯＲ’、−ＳＲ’、−Ｎ（Ｒ’）２、−Ｎ（Ｒ’）３、＝ＮＲ’、−ＮＲ’Ｃ（＝Ｏ）Ｒ’、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ’、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ’）２、−Ｓ（＝Ｏ）２Ｒ’、−Ｓ（＝Ｏ）２ＮＲ’、−Ｓ（＝Ｏ）Ｒ’、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ’、−Ｃ（＝Ｓ）Ｒ’、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ’）２、−Ｃ（＝Ｓ）Ｎ（Ｒ’）２および−Ｃ（＝ＮＲ）Ｎ（Ｒ’）２からなる群から選択される（各Ｘは、−Ｆおよび−Ｃｌからなる群から独立して選択される）か、または−Ｘ、−Ｒ’、−ＯＨ、−ＯＲ’、−Ｎ（Ｒ’）２、−Ｎ（Ｒ’）３、−ＮＲ’Ｃ（＝Ｏ）Ｒ’、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ’）２、−Ｓ（＝Ｏ）２Ｒ’、−Ｓ（＝Ｏ）２ＮＲ’、−Ｓ（＝Ｏ）Ｒ’、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ’、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ’）２、−Ｃ（＝ＮＲ）Ｎ（Ｒ’）２、保護基およびプロドラッグ部分からなる群から選択され、各Ｘは、−Ｆであり、Ｒ’はそれぞれ、水素、−Ｃ１〜Ｃ２０アルキル、−Ｃ６〜Ｃ２０アリール、−Ｃ３〜Ｃ１４複素環、保護基およびプロドラッグ部分からなる群から独立して選択される。一部の態様では、アルキル置換基は、−Ｎ（Ｒ’）２、−Ｎ（Ｒ’）３および−Ｃ（＝ＮＲ）Ｎ（Ｒ’）２からなる基から選択され、Ｒ’は、水素および−Ｃ１〜Ｃ２０アルキルからなる群から選択される。他の態様では、アルキルは、ＰＥＧ単位を定義する一連のエチレンオキシ部分により置換されている。上記のアルキレン、炭素環、カルボシクロ、アリーレン、ヘテロアルキル、ヘテロアルキレン、複素環、ヘテロシクロ、ヘテロアリールおよびヘテロアリーレン基も同様に、やはり置換されていてもよい。
【００７０】
「保護基」は、本明細書において使用する場合、連結されている原子または官能基が望ましくない反応に関与する能力を阻止または低減する部分を意味する。原子または官能基に対する典型的な保護基は、Greene  (1999),  “Protective  Groups  In  Organic  Synthesis,  3rd  Ed.”,  Wiley  Interscienceに提示されている。酸素、硫黄および窒素などのヘテロ原子に対する保護基は、一部の例では、求電子性化合物とのその望ましくない反応を最小限にするため、またはこれを回避するために使用される。他の場合では、保護基は、非保護ヘテロ原子の求核性および／もしくは塩基性を低下させるまたはなくすために使用される。保護された酸素の非限定例は、−ＯＲＰＲによって与えられ、ＲＰＲは、ヒドロキシルのための保護基であり、ヒドロキシルは、通常、エステルとして保護される（例えば、酢酸エステル、プロピオン酸エステルまたは安息香酸エステル）。ヒドロキシルのための他の保護基は、有機金属試薬または他の高度に塩基性の試薬の求核性の妨害を回避し、ヒドロキシルは、通常、アルキルエーテルまたはヘテロシクロアルキルエーテル（例えば、メチルエーテルまたはテトラヒドロピラニルエーテル）、アルコキシメチルエーテル（例えば、メトキシメチルエーテルまたはエトキシメチルエーテル）、必要に応じて置換されているアリールエーテル、およびシリルエーテル（例えば、トリメチルシリル（ＴＭＳ）、トリエチルシリル（ＴＥＳ）、ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル（ＴＢＤＰＳ）、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル（ＴＢＳ／ＴＢＤＭＳ）、トリイソプロピルシリル（ＴＩＰＳ）および［２−（トリメチルシリル）エトキシ］−メチルシリル（ＳＥＭ））を含めた、エーテルとして保護される。窒素保護基は、−ＮＨＲＰＲまたは−Ｎ（ＲＰＲ）２−にあるような一級アミンまたは二級アミン向けのものを含み、ＲＰＲの少なくとも１つは、窒素原子保護基であるか、またはＲＰＲの両方が一緒になって、保護基を含む。
【００７１】
保護基は、分子中のどこかの所望の化学変換を行うために必要な反応条件下で、および所望の場合、新規に形成される分子の精製の間の、望ましくない副反応または保護基の早すぎる喪失を阻止または回避することが可能な場合に好適であり、そのような新規に形成された分子の構造または立体化学の完全性に悪影響を及ぼさない条件下で除去することができる。例として、および限定ではなく、好適な保護基は、官能基を保護するため、既に記載したものを含んでもよい。好適な保護基は、時として、ペプチドカップリング反応において使用される保護基である。
【００７２】
「芳香族アルコール」は、それ自体またはより大きな構造の一部として、ヒドロキシル官能基−ＯＨにより置換されている芳香族環系を指す。したがって、芳香族アルコールとは、その芳香族環系の芳香族炭素に結合したヒドロキシル官能基を有する、本明細書に記載されている任意のアリール、ヘテロアリール、アリーレンおよびヘテロアリーレン部分を指す。芳香族アルコールは、その芳香族環系がこの部分の置換基である場合として、より大きな部分の一部であってもよく、または環縮合によって一層大きな部分に組み込まれていてもよく、１つまたは複数の他のヒドロキシル置換基（substitutent）を含めた、本明細書に記載されている部分により必要に応じて置換されていてもよい。フェノール性アルコールは、芳香族環としてフェノール基を有する芳香族アルコールである。
【００７３】
「脂肪族アルコール」は、それ自体またはより大きな構造の一部として、ヒドロキシル官能基−ＯＨに結合している非芳香族炭素を有する部分を指す。ヒドロキシを有する炭素は、無置換であってもよく（すなわち、メチルアルコール）、または１つ、２つもしくは３つの必要に応じて置換されている（substitued）分岐状または非分岐状のアルキル置換基を有して、直鎖状構造または環式構造内に一級アルコール、または二級脂肪族アルコール、または三級脂肪族アルコールを定義することができる。アルコールは、より大きな構造の一部となる場合、ヒドロキシを有する炭素を介する、アルキルもしくはこのヒドロキシを有する炭素への本明細書に記載されている他の部分の炭素を介する、またはこのアルキルもしくは他の部分の置換基を介する結合による、この構造の置換基であってもよい。脂肪族アルコール（ａｌｃｈｏｈｏｌ）は、非芳香族環式構造（すなわち、必要に応じて置換されている、炭素環およびヘテロ炭素環）であって、ヒドロキシ官能基が、その環式環系の非芳香族炭素に結合している、非芳香族環式構造を企図する。
【００７４】
「アリールアルキル」または「ヘテロアリールアルキル」は、本明細書において使用する場合、アリール部分がアルキル部分に結合している置換基、部分または基、すなわちアルキル基およびアリール基が上記の通りであるアリール−アルキル−、例えば、Ｃ６Ｈ５−ＣＨ２−またはＣ６Ｈ５−ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２−を意味する。アリールアルキルまたはヘテロアリールアルキルは、そのアルキル部分のｓｐ３炭素を介して、一層大きな構造または部分に結合している。
【００７５】
「電子求引基（ＥＷＧ）」は、本明細書において使用する場合、どちらか、より主要となる、誘起的におよび／または共鳴のどちらかにより（すなわち、官能基または原子は、誘起的に電子吸引性となり得るが、共鳴により総合的に電子供与性となることがある）、結合している原子から電子密度を引っ張る官能基または電気陰性原子を意味し、陰イオンまたは電子に富む部分を安定化させる傾向がある。電子求引性効果は、通常、弱化した形態であっても、電子求引基（ＥＷＧ）によって電子不足になった結合原子に結合している他の原子に誘起的に伝えられ、こうして、一層遠隔の反応性中心の求電子性に影響を及ぼす。例示的な電子求引基には、以下に限定されないが、−Ｃ（＝Ｏ）、−ＣＮ、−ＮＯ２、−ＣＸ３、−Ｘ、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ’、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ’）２、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ’、−Ｃ（＝Ｏ）Ｘ、−Ｓ（＝Ｏ）２Ｒ’、−Ｓ（＝Ｏ）２ＯＲ’、−Ｓ（＝Ｏ）２ＮＨＲ’、−Ｓ（＝Ｏ）２Ｎ（Ｒ’）２、−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＲ’）２、−Ｐ（＝Ｏ）（ＣＨ３）ＮＨＲ’、−ＮＯ、−Ｎ（Ｒ’）３＋が含まれ、Ｘは、−Ｆ、−Ｂｒ、−Ｃｌまたは−Ｉであり、Ｒ’は、一部の態様では、出現する毎に、水素およびＣ１〜６アルキル、および本明細書に記載されているあるＯ連結部分（アシルオキシなど）からなる群から独立して選択される。
【００７６】
例示的なＥＷＧは、置換およびあるヘテロアリール基（例えば、ピリジン）に応じて、アリール基（例えば、フェニル）をやはり含むことができる。したがって、用語「電子求引基」はまた、電子求引基によりさらに置換されているアリールまたはヘテロアリールを含む。通常、アリールまたはヘテロアリール上の電子求引基は、−Ｃ（＝Ｏ）、−ＣＮ、−ＮＯ２、−ＣＸ３および−Ｘであり、独立して選択されるＸは、ハロゲン、通常、−Ｆまたは−Ｃｌである。それらの置換基に応じて、アルキル部分はまた、電子求引基となることがある。
【００７７】
「脱離基能」とは、カンプトテシンコンジュゲート中のカンプトテシンに対応するアルコール、チオール、アミンまたはアミド含有化合物が、遊離薬物として、コンジュゲート内での自壊的事象の活性化の後にコンジュゲートから放出される能力に関する。その放出は、そのカンプトテシンが結合しているメチレンカルバメート単位の恩恵なしに変化し得る（すなわち、カンプトテシンは、自壊的部分に直接、結合しており、介在性メチレンカルバメート単位を有さない場合）。良好な脱離基は、通常、弱塩基であり、このようなコンジュゲートから放出される官能基の酸性が高いほど、共役塩基の酸性は弱い。したがって、カンプトテシンからのアルコール、チオール、アミンまたはアミド含有遊離薬物の脱離基能は、メチレンカルバメート単位が使用されない場合（すなわち、カンプトテシンが、直接、自壊的部分に結合しているもの）に、コンジュゲートから放出される薬物の官能基のｐＫａに関連するであろう。したがって、その官能基のｐＫａが低いほど、その脱離基能は増大する。他の因子が、メチレンカルバメート単位の恩恵を有していないコンジュゲートからの遊離薬物の放出に寄与し得るが、一般に、より低いｐＫａ値を有する官能基を有する薬物が、より高いｐＫａ値を有する官能基を介して結合している薬物よりも優れた脱離基となろう。別の考慮点は、あまり低いｐＫａ値を有する官能基は、自発的な加水分解により、カンプトテシンの早期喪失による、許容されない活性プロファイルをもたらす恐れがあることである。メチレンカルバメート単位を使用するコンジュゲートの場合、カンプトテシンの許容されない喪失を受けることなく、遊離薬物が効率的に放出することを可能にするｐＫａ値を有する一般的な官能基（すなわち、カルバミン酸）は、自壊時に生成する。
【００７８】
「スクシンイミド部分」とは、本明細書において使用する場合、スクシンイミド環系からなる有機部分を指し、この環系は、通常、その環系のイミド窒素に結合しているアルキレン含有部分からさらになる１つのタイプのストレッチャー単位（Ｚ）中に存在する。スクシンイミド部分は、通常、ストレッチャー単位前駆体（Ｚ’）のマレイミド環系への、リガンド単位のスルフヒドリル基のマイケル付加から生じる。したがって、スクシンイミド部分は、チオ置換スクシンイミド環系からなり、この部分は、カンプトテシンコンジュゲート中に存在する場合、カンプトテシンコンジュゲートのリンカー単位の残部により置換されているそのイミド窒素を有しており、Ｚ’のマレイミド環系上に存在した置換基により必要に応じて置換されている。
【００７９】
「酸−アミド部分」とは、本明細書において使用する場合、加水分解によりそのカルボニル−窒素結合の１つの開裂を受けるスクシンイミド部分のチオ置換スクシンイミド環系から生じるアミド置換基を有するコハク酸を指す。コハク酸−アミド部分をもたらす加水分解により、リンカー単位は、抗体−チオ置換基の脱離により、リンカー単位が結合しているリガンド単位の早すぎる喪失を受ける可能性を低くする。チオ置換スクシンイミド部分のスクシンイミド環系の加水分解は、ストレッチャー単位前駆体のマレイミド環系中に存在する任意の置換基および標的化リガンドにより導入されたチオ置換基に対して少なくとも部分的に寄与し得るスクシンイミド環系の２個のカルボニル炭素の反応性の差異による、酸−アミド部分の位置化学異性体をもたらすことが予想される。
【００８０】
用語「プロドラッグ」とは、本明細書において使用する場合、化学的過程または生物学的過程（すなわち、化学反応または酵素による生物学的変換）により、身体内で一層生物学的に活性な化合物に変換される生物学的にそれほど活性ではない化合物または不活性な化合物を指す。通常、生物学的に活性な化合物は、プロドラッグ部分により化合物を化学的修飾することによって、生物学的にそれほど活性ではない状態（すなわち、プロドラッグに変換される）にされる。一部の態様では、プロドラッグは、タイプＩＩプロドラッグであり、これは、細胞外で、例えば消化性流体中、または身体の循環系中、例えば血液中で生体活性化される。例示的なプロドラッグは、エステルおよびβ−Ｄ−グルコピラノシドである。
【００８１】
多くの場合において、本明細書に記載されているコンジュゲート、リンカーおよび構成要素のアセンブリーは、反応性基を指す。「反応性基」またはＲＧは、リンカー単位（すなわち、Ａ、Ｗ、Ｙ）またはカンプトテシンＤのどちらか一方の構成要素と結合を形成することが可能な、反応性部位（ＲＳ）を含む基である。ＲＳは、反応性基（ＲＧ）内の反応部位である。反応性基には、ジスルフィド結合またはチオエーテル結合を形成するスルフヒドリル基、ヒドラゾン結合を形成するアルデヒド基、ケトン基またはヒドラジン基、ペプチド結合を形成するカルボン酸基またはアミノ基、エステル結合を形成するカルボン酸基またはヒドロキシ基、スルホンアミド結合を形成するスルホン酸、カルバメート結合を形成するアルコール、およびスルホンアミド結合またはカルバメート結合を形成するアミンが含まれる。以下の表は、反応部位の反応後に形成することができる、反応性基、反応部位および例示的な官能基の例示である。この表は限定ではない。当業者は、表中のＲ’およびＲ”部分は、例示的な官能基の１つへのＲＧの変換時に実現する結合形成と適合可能な任意の有機部分（例えば、アルキル基、アリール基、ヘテロアリール基または置換アルキル基、アリール基またはヘテロアリール基）であるのが効果的であることを理解しているであろう。本発明の実施形態に適用される通り、Ｒ’は、場合によって、自己安定性リンカーまたは必要に応じた二次リンカーのうちの１つまたは複数の構成要素となることがあること、および場合によって、Ｒ”は、必要に応じた二次リンカー、カンプトテシン、安定性単位または検出単位のうちの１つまたは複数の構成要素となることがあることがやはり理解されている。
【化５】
2021521111.tif 000007
【００８２】
同位体標識化合物はまた、本開示の範囲内にある。本明細書において使用する場合、「同位体標識化合物」または「同位体誘導体」とは、その各々が本明細書に記載されているその医薬塩およびプロドラッグを含めた、現在開示されている化合物であって、１個または複数の原子が、天然において、通常、見いだされる原子質量または質量数とは異なる原子質量または質量数を有する原子によって置き換えられている、上記の化合物を指す。現在開示されている化合物に組み込まれ得る同位体の例には、それぞれ、２Ｈ、３Ｈ、１３Ｃ、１４Ｃ、１５Ｎ、１８Ｏ、１７Ｏ、３１Ｐ、３２Ｐ、３５Ｓ、１８Ｆおよび３６Ｃｌなどの、水素、炭素、窒素、酸素、リン、フッ素および塩素の同位体が含まれる。
【００８３】
現在開示されている化合物を同位体標識することによって、本化合物は、薬物および／または基質組織分布アッセイに有用となることがある。トリチウム化（３Ｈ）および炭素−１４（１４Ｃ）標識されている化合物は、特に、調製の容易さおよび検出能のために特に好ましい。さらに、重水素（２Ｈ）などのより重い同位体による置換によって、一層大きな代謝安定性に起因するある種の治療的利点、例えば、ｉｎ  ｖｉｖｏ半減期の増大または投与必要量の低減をもたらすことができ、したがって、一部の状況では好ましいことがある。その医薬塩、エステルおよびプロドラッグを含めた、現在開示されている同位体標識化合物は、当分野で公知の任意の手段によって調製することができる。有益性はまた、通常、多量に存在する１２Ｃを１３Ｃで置き換えることから得ることもできる（ＷＯ２００７／００５６４３、ＷＯ２００７／００５６４４、ＷＯ２００７／０１６３６１およびＷＯ２００７／０１６４３１を参照されたい）。
【００８４】
例えば、一次速度論的同位体効果によって、化合物の酸化的代謝を操作する目的のために、重水素（２Ｈ）が、本明細書において開示されている化合物に組み込まれ得る。一次速度論的同位体効果とは、同位体核の交換から生じる化学反応に関する速度変化であり、これは、転じて、この同位体交換後の共有結合性結合形成に必要な基底状態エネルギーの変化によって引き起こされる。より重い同位体に交換すると、化学結合に対する基底状態エネルギーの低下が通常、もたらされ、こうして、律速となる結合開裂の速度の低下が引き起こされる。この結合開裂が、多生成物反応の配位に沿って、鞍点領域でまたはその近傍で起こる場合、生成物分布の速度が実質的に改変され得る。説明すると、重水素が交換不可能な位置にある炭素原子に結合している場合、速度差ｋＭ／ｋＤ＝２〜７が典型である。この速度差が、酸化を受けやすい、本明細書において開示されている化合物に首尾よく適用されると、ｉｎ  ｖｉｖｏでのこの化合物のプロファイルは、顕著に改変されて、薬物動態特性の改善をもたらし得る。
【００８５】
治療剤を発見および開発する場合、当業者は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏでの所望の特性を維持すると同時に、薬物動態パラメータを最適化することが可能である。乏しい薬物動態プロファイルを有する多数の化合物が、酸化的代謝を受けやすいと想定することが妥当である。現在利用可能なｉｎ  ｖｉｔｒｏでの肝臓のミクロソームアッセイは、このタイプの酸化的代謝の過程に関する有用な情報をもたらし、このことは、ひいては、このような酸化的代謝に対する耐性による安定性の改善を伴って、本明細書において開示されているものの重水素化化合物の妥当な設計が可能になる。それによって、本明細書に開示されている化合物の薬物動態プロファイルの顕著な改善が得られ、ｉｎ  ｖｉｖｏでの半減期（ｔ／２）、極大治療作用時濃度（Ｃｍａｘ）、用量応答曲線下面積（ＡＵＣ）およびＦの増大に関して、ならびにクリアランス、用量および物質費用の低減に関して、定量的に表すことができる。
【００８６】
以下のことが上記を例示するために意図されている：酸化的代謝に対する潜在的な攻撃部位、例えば、ベンジル水素原子、および窒素原子に結合している水素原子を複数有する化合物は、水素原子を様々に組み合わせたものが重水素原子により置き換えられ、その結果、これらの水素原子の一部、大部分または全部が重水素原子により置き換えられた一連の類似体として調製される。半減期の決定により、酸化的代謝に対する耐性の改善が改善される程度の範囲の好都合なおよび正確な決定が可能となる。このように、親化合物の半減期は、このタイプの重水素−水素交換の結果として、最大で１００％まで延長され得ると決定される。
【００８７】
本明細書において開示されている化合物における重水素−水素交換を使用して、望ましくない毒性代謝産物を減量またはなくすために、開始化合物の代謝産物スペクトルの好都合な改変を実現することもできる。例えば、毒性代謝産物が、酸化的な炭素−水素（Ｃ−Ｈ）結合切断により生じる場合、重水素化類似体は、特定の酸化が律速工程ではない場合でさえも、望ましくない代謝産物の生成が大幅に低減する、またはなくなるであろうと推定するのが妥当となり得る。重水素−水素交換に関する、当技術の状況に関するさらなる情報は、例えば、Hanzlik  et  al.,  J.  Org.  Chem.  55,  3992-3997,  1990,  Reider  et  al.,  J.  Org.  Chem.  52,  3326-3334,  1987,  Foster,  Adv.  Drug  Res.  14,  1-40,  1985,  Gillette  et  al,  Biochemistry  33(10)  2927-2937,  1994およびJarman  et  al.  Carcinogenesis  16(4),  683-688,  1993に見いだされ得る。
【００８８】
本発明によって想起される置換基および変数の組合せは、安定な化合物の形成をもたらすものだけである。用語「安定な」とは、本明細書において使用する場合、製造を可能にするほど十分な安定性を有しており、かつ本明細書において詳述される目的（例えば、対象への治療的投与または予防的投与）に有用となるほど十分な期間、化合物の完全性を維持する化合物を指す。
【００８９】
本発明の化合物は、その調製に続いて、好ましくは単離および精製されて、９５％またはそれより高い重量基準（「実質的に純粋な」）の量を含有する組成物が得られ、この化合物は、次に、本明細書に記載されている通りに使用または製剤化される。ある種の実施形態では、本発明の化合物は、９９％を超えて純粋である。
実施形態
【００９０】
本発明のいくつかの実施形態が以下に記載されており、これらは、本発明を限定することを決して意図するものではなく、本コンジュゲートを構成する構成要素の一層詳細な議論が続く。当業者は、特定されたコンジュゲートの各々およびその選択された実施形態のいずれかが、各構成要素およびリンカーの範囲全体を含むことが意図されていることを理解しているであろう。
カンプトテシンコンジュゲート
【００９１】
１つの態様では、本明細書には、以下の式：
Ｌ−（Ｑ−Ｄ）ｐ
または薬学的に許容されるその形態［式中、
Ｌは、リガンド単位であり、
Ｑは、以下：
−Ｚ−Ａ−Ｓ＊−ＲＬ−；−Ｚ−Ａ−ＬＰ（Ｓ＊）−ＲＬ−；−Ｚ−Ａ−Ｓ＊−ＲＬ−Ｙ−；および−Ｚ−Ａ−ＬＰ（Ｓ＊）−ＲＬ−Ｙ−
（式中、Ｚは、ストレッチャー単位であり、Ａは、結合またはコネクター単位であり、ＬＰは、並列コネクター単位であり、Ｓ＊は、結合または分断剤であり、ＲＬは２〜８個のアミノ酸を含むペプチドであり、Ｙは、スペーサー単位である）
から選択される式を有するリンカー単位であり、
Ｄは、以下：
【化６】
2021521111.tif 000008
（式中、
ＲＢは、Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８ハロアルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキルＣ１〜Ｃ４アルキル、フェニルおよびフェニルＣ１〜Ｃ４アルキルからなる群から選択されるメンバーであり、
ＲＣは、−Ｃ１〜Ｃ６アルキルおよびＣ３〜Ｃ６シクロアルキルからなる群から選択されるメンバーであり、
ＲＦおよびＲＦ’はそれぞれ、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ８アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ４アルキルアミノＣ１〜Ｃ８アルキル、（Ｃ１〜Ｃ４ヒドロキシアルキル）（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）アミノＣ１〜Ｃ８アルキル、ジ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）アミノＣ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ４ヒドロキシアルキルＣ１〜Ｃ８アミノアルキル、Ｃ２〜Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルＣ（Ｏ）−、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキルＣ（Ｏ）−、Ｃ１〜Ｃ８アミノアルキルＣ（Ｏ）−、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキルＣ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキルＣ１〜Ｃ４アルキル、フェニル、フェニルＣ１〜Ｃ４アルキル、ジフェニルＣ１〜Ｃ４アルキル、ヘテロアリールおよびヘテロアリールＣ１〜Ｃ４アルキルからなる群から独立して選択されるメンバーであるか、またはＲＦおよびＲＦ’は、各々が結合している窒素原子と合わさり、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ＯＨ、ＯＣ１〜Ｃ４アルキル、ＮＨ２、ＮＨＣ１〜Ｃ４アルキルおよびＮ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）２から選択される０〜３個の置換基を有する５員、６員または７員環を形成し、
ＲＢ、ＲＣ、ＲＦおよびＲＦ’のシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、フェニルおよびヘテロアリール部分は、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ＯＨ、ＯＣ１〜Ｃ４アルキル、ＮＨ２、ＮＨＣ１〜Ｃ４アルキルおよびＮ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）２から選択される０〜３個の置換基により置換されており、
ｐは、約１〜約１６であり、
Ｑは、ＣＰＴ１、ＣＰＴ２、ＣＰＴ３、ＣＰＴ４またはＣＰＴ５に存在するヒドロキシル基またはアミン基のいずれか１つを介して結合している）
からなる群から選択される薬物単位である］
を有するカンプトテシンコンジュゲートが提供される。
【００９２】
１つの態様では、本明細書には、以下の式：
Ｌ−（Ｑ−Ｄ）ｐ
または薬学的に許容されるその形態［式中、
Ｌは、リガンド単位であり、
Ｑは、以下：
−Ｚ−Ａ−Ｓ＊−ＲＬ−；−Ｚ−Ａ−ＬＰ（Ｓ＊）−ＲＬ−；−Ｚ−Ａ−Ｓ＊−ＲＬ−Ｙ−；および−Ｚ−Ａ−ＬＰ（Ｓ＊）−ＲＬ−Ｙ−
（式中、Ｚは、ストレッチャー単位であり、Ａは、結合またはコネクター単位であり、ＬＰは、並列コネクター単位であり、Ｓ＊は、結合または分断剤であり、ＲＬは２〜８個のアミノ酸を含むペプチドであり、Ｙは、スペーサー単位である）
から選択される式を有するリンカー単位であり、
Ｄは、以下：
【化７】
2021521111.tif 000009
（式中、
ＲＢは、Ｈ、−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル−ＯＨ、−Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８ハロアルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキルＣ１〜Ｃ４アルキル、フェニルおよびフェニルＣ１〜Ｃ４アルキルからなる群から選択されるメンバーであり、
ＲＦおよびＲＦ’はそれぞれ、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ８アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ４アルキルアミノＣ１〜Ｃ８アルキル、（Ｃ１〜Ｃ４ヒドロキシアルキル）（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）アミノＣ１〜Ｃ８アルキル、ジ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）アミノＣ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ４ヒドロキシアルキルＣ１〜Ｃ８アミノアルキル、Ｃ２〜Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルＣ（Ｏ）−、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキルＣ（Ｏ）−、Ｃ１〜Ｃ８アミノアルキルＣ（Ｏ）−、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキルＣ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキルＣ１〜Ｃ４アルキル、フェニル、フェニルＣ１〜Ｃ４アルキル、ジフェニルＣ１〜Ｃ４アルキル、ヘテロアリールおよびヘテロアリールＣ１〜Ｃ４アルキルからなる群から独立して選択されるメンバーであるか、またはＲＦおよびＲＦ’は、各々が結合している窒素原子と合わさり、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ＯＨ、ＯＣ１〜Ｃ４アルキル、ＮＨ２、ＮＨＣ１〜Ｃ４アルキルおよびＮ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）２から選択される０〜３個の置換基を有する５員、６員または７員環を形成し、
ＲＢ、ＲＦおよびＲＦ’のシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、フェニルおよびヘテロアリール部分は、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ＯＨ、ＯＣ１〜Ｃ４アルキル、ＮＨ２、ＮＨＣ１〜Ｃ４アルキルおよびＮ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）２から選択される０〜３個の置換基により置換されており、
ｐは、約１〜約１６であり、
Ｑは、ＣＰＴ２またはＣＰＴ５に存在するヒドロキシル基またはアミン基のいずれか１つを介して結合している）
からなる群から選択される薬物単位である］
を有するカンプトテシンコンジュゲートが提供される。
【００９３】
さらに別の態様では、本明細書には、以下の式：
Ｌ−（Ｑ−Ｄ）ｐ
または薬学的に許容されるその形態［式中、
Ｌは、リガンド単位であり、
Ｑは、以下：
−Ｚ−Ａ−Ｓ＊−ＲＬ−；−Ｚ−Ａ−ＬＰ（Ｓ＊）−ＲＬ−；−Ｚ−Ａ−Ｓ＊−ＲＬ−Ｙ−；および−Ｚ−Ａ−ＬＰ（Ｓ＊）−ＲＬ−Ｙ−
（式中、Ｚは、ストレッチャー単位であり、Ａは、結合またはコネクター単位であり、ＬＰは、並列コネクター単位であり、Ｓ＊は、結合または分断剤であり、ＲＬは２〜８個のアミノ酸を含むペプチドであり、Ｙは、スペーサー単位である）
からなる群から選択される式を有するリンカー単位であり、
Ｄは、以下の構造式：
【化８】
2021521111.tif 000010
（式中、
ＲＦおよびＲＦ’はそれぞれ、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ８アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ４アルキルアミノＣ１〜Ｃ８アルキル、（Ｃ１〜Ｃ４ヒドロキシアルキル）（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）アミノＣ１〜Ｃ８アルキル、ジ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）アミノＣ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ４ヒドロキシアルキルＣ１〜Ｃ８アミノアルキル、Ｃ２〜Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルＣ（Ｏ）−、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキルＣ（Ｏ）−、Ｃ１〜Ｃ８アミノアルキルＣ（Ｏ）−、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキルＣ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキルＣ１〜Ｃ４アルキル、フェニル、フェニルＣ１〜Ｃ４アルキル、ジフェニルＣ１〜Ｃ４アルキル、ヘテロアリールおよびヘテロアリールＣ１〜Ｃ４アルキルからなる群から独立して選択されるメンバーであるか、またはＲＦおよびＲＦ’は、各々が結合している窒素原子と合わさり、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ＯＨ、ＯＣ１〜Ｃ４アルキル、ＮＨ２、ＮＨＣ１〜Ｃ４アルキルおよびＮ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）２から選択される０〜３個の置換基を有する５員、６員または７員環を形成し、
ＲＦおよびＲＦ’のシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、フェニルおよびヘテロアリール部分は、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ＯＨ、ＯＣ１〜Ｃ４アルキル、ＮＨ２、ＮＨＣ１〜Ｃ４アルキルおよびＮ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）２から選択される０〜３個の置換基により置換されており、
ｐは、約１〜約１６であり、
Ｑは、ＣＰＴ５に存在するヒドロキシル基またはアミン基のいずれか１つを介して結合している）
を有する薬物単位である］
を有するカンプトテシンコンジュゲートが提供される。
【００９４】
実施形態の１つの群では、Ｄは、式ＣＰＴ５を有する。
【００９５】
実施形態の１つの群では、Ｄは、式ＣＰＴ２を有する。
【００９６】
実施形態の１つの群では、Ｄは、式ＣＰＴ３を有する。
【００９７】
実施形態の１つの群では、Ｄは、式ＣＰＴ４を有する。
【００９８】
実施形態の１つの群では、Ｄは、式ＣＰＴ１を有する。
【００９９】
一部の実施形態では、薬学的に許容される形態は、薬学的に許容される塩である。
【０１００】
実施形態の１つの群では、Ｑは、以下：
−Ｚ−Ａ−Ｓ＊−ＲＬ−および−Ｚ−Ａ−Ｓ＊−ＲＬ−Ｙ−
からなる群から選択される式を有する。
【０１０１】
実施形態の別の群では、Ｑは、以下：
−Ｚ−Ａ−ＬＰ（Ｓ＊）−ＲＬ−および−Ｚ−Ａ−ＬＰ（Ｓ＊）−ＲＬ−Ｙ−
からなる群から選択される式を有する。
【０１０２】
実施形態の１つの群では、カンプトテシンコンジュゲートは、式ＣＰＴ１を有する薬物単位を含み、以下：
【化９】
2021521111.tif 000011
【化１０】
2021521111.tif 000012
（式中、基Ｌ、Ｚ、Ａ、Ｓ＊、ＬＰ、ＲＬおよびＹは、上、および本明細書において具体的に列挙されている実施形態のいずれかにおいて提示されている意味を有する）
から選択される式によって表される。
【０１０３】
実施形態の別の群では、カンプトテシンコンジュゲートは、式ＣＰＴ２を有する薬物単位を含み、以下：
【化１１】
2021521111.tif 000013
（式中、基Ｌ、Ｚ、Ａ、Ｓ＊、ＬＰ、ＲＬおよびＹは、上、および本明細書において具体的に列挙されている実施形態のいずれかにおいて提示されている意味を有する）
から選択される式によって表される。
【０１０４】
実施形態の１つの群では、ＲＢは、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ８アルキルおよびＣ１〜Ｃ８ハロアルキルからなる群から選択されるメンバーである。
【０１０５】
実施形態の１つの群では、ＲＢは、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキルＣ１〜Ｃ４アルキル、フェニルおよびフェニルＣ１〜Ｃ４アルキルからなる群から選択されるメンバーであり、ＲＢのシクロアルキル部分およびフェニル部分は、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ＯＨ、ＯＣ１〜Ｃ４アルキル、ＮＨ２、ＮＨＣ１〜Ｃ４アルキルおよびＮ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）２から選択される０〜３個の置換基により置換されている。
【０１０６】
実施形態の別の群では、ＲＢは、Ｈ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、イソペンチル、１−エチルプロピルまたはヘキシルである。他の実施形態では、ＲＢは、クロロメチルまたはブロモメチルである。他の実施形態では、ＲＢは、フェニルまたはハロ置換フェニルである。他の実施形態では、ＲＢは、フェニルまたはフルオロフェニルである。
【０１０７】
実施形態の別の群では、カンプトテシンコンジュゲートは、式ＣＰＴ３を有する薬物単位を含み、以下：
【化１２】
2021521111.tif 000014
（式中、基Ｌ、Ｚ、Ａ、Ｓ＊、ＬＰ、ＲＬおよびＹは、上、および本明細書において具体的に列挙されている実施形態のいずれかにおいて提示されている意味を有する）
から選択される式によって表される。
【０１０８】
実施形態の１つの群では、ＲＣは、Ｃ１〜Ｃ６アルキルである。一部の実施形態では、ＲＣは、メチルである。
【０１０９】
実施形態の１つの群では、ＲＣは、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルである。
【０１１０】
実施形態の別の群では、カンプトテシンコンジュゲートは、式ＣＰＴ４を有する薬物単位を含み、以下：
【化１３】
2021521111.tif 000015
【化１４】
2021521111.tif 000016
（式中、基Ｌ、Ｚ、Ａ、Ｓ＊、ＬＰ、ＲＬおよびＹは、上、および本明細書において具体的に列挙されている実施形態のいずれかにおいて提示されている意味を有する）
から選択される式によって表される。
【０１１１】
実施形態の別の群では、カンプトテシンコンジュゲートは、式ＣＰＴ５を有する薬物単位を含み、以下：
【化１５−１】
2021521111.tif 000017
【化１５−２】
2021521111.tif 000018
（式中、基Ｌ、Ｚ、Ａ、Ｓ＊、ＬＰ、ＲＬおよびＹは、上、および本明細書において具体的に列挙されている実施形態のいずれかにおいて提示されている意味を有する）
から選択される式によって表される。
【０１１２】
実施形態の１つの群では、ＲＦとＲＦ’のどちらも、Ｈである。
【０１１３】
実施形態の１つの群では、ＲＦおよびＲＦ’の少なくとも一方は、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ８アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ４アルキルアミノＣ１〜Ｃ８アルキル、（Ｃ１〜Ｃ４ヒドロキシアルキル）（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）アミノＣ１〜Ｃ８アルキル、ジ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）アミノＣ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ４ヒドロキシアルキルＣ１〜Ｃ８アミノアルキル、Ｃ２〜Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルＣ（Ｏ）−、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキルＣ（Ｏ）−およびＣ１〜Ｃ８アミノアルキルＣ（Ｏ）−からなる群から独立して選択されるメンバーである。
【０１１４】
実施形態の１つの群では、ＲＦおよびＲＦ’はそれぞれ、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ８アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ４アルキルアミノＣ１〜Ｃ８アルキル、（Ｃ１〜Ｃ４ヒドロキシアルキル）（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）アミノＣ１〜Ｃ８アルキル、ジ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）アミノＣ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ４ヒドロキシアルキルＣ１〜Ｃ８アミノアルキル、Ｃ２〜Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルＣ（Ｏ）−、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキルＣ（Ｏ）−およびＣ１〜Ｃ８アミノアルキルＣ（Ｏ）−からなる群から独立して選択されるメンバーである。
【０１１５】
実施形態の１つの群では、ＲＦおよびＲＦ’の少なくとも一方は、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキルＣ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキルＣ１〜Ｃ４アルキル、フェニル、フェニルＣ１〜Ｃ４アルキル、ジフェニルＣ１〜Ｃ４アルキル、ヘテロアリールおよびヘテロアリールＣ１〜Ｃ４アルキルからなる群から独立して選択されるメンバーであり、ＲＦおよびＲＦ’のシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、フェニルおよびヘテロアリール部分は、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ＯＨ、ＯＣ１〜Ｃ４アルキル、ＮＨ２、ＮＨＣ１〜Ｃ４アルキルおよびＮ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）２から選択される０〜３個の置換基により置換されている。
【０１１６】
実施形態の１つの群では、ＲＦおよびＲＦ’はそれぞれ、Ｈ、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキルＣ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキルＣ１〜Ｃ４アルキル、フェニル、フェニルＣ１〜Ｃ４アルキル、ジフェニルＣ１〜Ｃ４アルキル、ヘテロアリールおよびヘテロアリールＣ１〜Ｃ４アルキルからなる群から独立して選択されるメンバーであり、ＲＦおよびＲＦ’のシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、フェニルおよびヘテロアリール部分は、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ＯＨ、ＯＣ１〜Ｃ４アルキル、ＮＨ２、ＮＨＣ１〜Ｃ４アルキルおよびＮ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）２から選択される０〜３個の置換基により置換されている。
【０１１７】
一部の実施形態では、ＲＦは、Ｈであり、ＲＦ’は、Ｃ１〜Ｃ８アルキルである。
【０１１８】
実施形態の１つの群では、ＲＦおよびＲＦ’は、各々が結合している窒素原子と合わさり、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ＯＨ、ＯＣ１〜Ｃ４アルキル、ＮＨ２、ＮＨＣ１〜Ｃ４アルキルおよびＮ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）２から選択される０〜３個の置換基を有する、５員環、６員環または７員環を形成する。
【０１１９】
一部の実施形態では、カンプトテシンコンジュゲートは、式（ＩＣ）：
【化１６】
2021521111.tif 000019
または薬学的に許容されるその塩
（式中、
ｙは、１、２、３もしくは４であるか、または１もしくは４であり、
ｚは、２〜１２の整数であるか、または２、４、８もしくは１２であり、
ｐは、１〜１６である）
を有する。
【０１２０】
これらの実施形態の一部の態様では、ｐは、２、３、４、５、６、７、８、９または１０である。一部の態様では、ｐは、２、４または８である。
【０１２１】
一部の実施形態では、カンプトテシンコンジュゲートは、式：
【化１７】
2021521111.tif 000020
または薬学的に許容されるその塩
（式中、ｐは、２、４または８であり、好ましくは、ｐは、８である）
を有する。
【０１２２】
一部の実施形態では、カンプトテシンコンジュゲートは、式：
【化１８】
2021521111.tif 000021
または薬学的に許容されるその塩
（式中、ｐは、２、４または８であり、好ましくは、ｐは、８である）
を有する。
【０１２３】
これらの実施形態の一部の態様では、ｐは８である。
カンプトテシン−リンカー化合物
【０１２４】
一部の態様では、カンプトテシンコンジュゲートを調製する場合、標的化リガンドにコンジュゲーションする前に、完全な薬物−リンカー組合せ物、またはリンカーの一部と組み合わせて薬物を合成することが望ましいであろう。このような実施形態では、本明細書に記載されているカンプトテシン−リンカー化合物が中間化合物となる。これらの実施形態では、カンプトテシン−リンカー化合物中のストレッチャー単位は、リガンド単位に共有結合によりまだ結合されておらず、したがって、標的化リガンドへのコンジュゲーションのための官能基を有する（すなわち、ストレッチャー単位前駆体、Ｚ’である）。一態様では、カンプトテシン−リンカー化合物は、カンプトテシン（本明細書において、式ＣＰＴ１、ＣＰＴ２、ＣＰＴ３、ＣＰＴ４およびＣＰＴ５として示されている）、およびペプチド放出可能なリンカー（ＲＬ）を含むリンカー単位（Ｑ）であって、このペプチド放出可能なリンカー（ＲＬ）を介して、リガンド単位がカンプトテシンに結合しているリンカー単位（Ｑ）を含む。したがって、リンカー単位は、ＲＬ（これは、ペプチドリンカーである）に加えて、リガンド単位へのコンジュゲーションのための官能基であって、ＲＬをリガンド単位に結合させる（直接または間接的）ことが可能な上記の官能基を含むストレッチャー単位前駆体（Ｚ’）を含む。一部の実施形態では、並列コネクター単位（ＬＰ）は、側鎖の付属部分として分断剤（Ｐａｒｔｉｔｉｏｎｉｎｇ  Ａｇｅｎｔ）（Ｓ＊）に付与することが望ましい場合、存在することができる。一部の実施形態では、コネクター単位（Ａ）は、ストレッチャー単位とＲＬとの間に一層長い距離を付与することが望ましい場合に存在する。
【０１２５】
一態様では、カンプトテシン−リンカー化合物は、式ＣＰＴ１、ＣＰＴ２、ＣＰＴ３、ＣＰＴ４またはＣＰＴ５を有するカンプトテシン、およびリンカー単位（Ｑ）からなり、Ｑは、カンプトテシン−リンカー化合物のリンカー単位（すなわち、Ａ、Ｓ＊および／またはＬＰ（Ｓ＊））の介在構成要素への結合を介して、ストレッチャー単位前駆体（Ｚ’）に直接、またはＺ’に間接的に結合したペプチド放出可能なリンカーを含み、Ｚ’は、標的化リガンドへの共有結合を形成することが可能な官能基からなる。
【０１２６】
カンプトテシンコンジュゲートおよび／またはカンプトテシン−リンカー化合物の文脈において、組み立ては、その構成要素群に関連して最良に記載される。一部の手順もやはり、本明細書に記載されているが、コンジュゲートおよび化合物を調製するための組み立て順序ならびに一般条件は、当業者によって十分に理解されよう。
構成要素群
リガンド単位：
【０１２７】
本発明の一部の実施形態では、リガンド単位が存在する。リガンド単位（Ｌ−）は、標的部分に特異的に結合する標的化薬剤である。実施形態の１つの群では、リガンド単位は、細胞構成要素（細胞結合剤）に、または目的の他の標的分子に特異的かつ選択的に結合する。リガンド単位は、その標的化構成要素または分子の存在のために、リガンド単位が相互作用する特定の標的細胞集団に対して、カンプトテシン（ＣＰＴ１、ＣＰＴ２、ＣＰＴ３、ＣＰＴ４またはＣＰＴ５）またはカンプトテシンを含有する薬物構成要素を標的させて、提示するように作用し、標的細胞内（すなわち細胞内に）またはその近傍（すなわち細胞外）に遊離薬物を後で放出することを可能にする。リガンド単位、Ｌには、これらに限定されないが、タンパク質、ポリペプチドおよびペプチドが含まれる。適切なリガンド単位は、例えば、抗体、例えば、完全長抗体およびその抗原結合フラグメント、インターフェロン、リンフォカイン、ホルモン、成長因子およびコロニー刺激因子、ビタミン、栄養素−輸送分子（これらに限定されないが、トランスフェリンなど）、または任意の他の細胞結合分子もしくは物質を含む。一部の実施形態では、リガンド単位（Ｌ）は、抗体または非抗体タンパク質標的化薬剤である。
【０１２８】
実施形態の１つの群では、リガンド単位は、ペプチド放出可能なリンカーを含むＱ（リンカー単位）に結合している。上記の通り、さらに他の連結性構成要素が、本明細書に記載されているコンジュゲート中に存在して、カンプトテシン薬物化合物とリガンド単位（例えば、ストレッチャー単位および必要に応じてコネクター単位、Ａ）との間に追加的な空間をもたらす目的、または組成物に溶解度を増大する特性をもたらす（例えば、分断剤Ｓ＊）目的を果たすことができる。そのような実施形態の一部では、リガンド単位は、リガンド単位のヘテロ原子を介して、リンカー単位のＺに結合している。そのような結合のための、リガンド単位上に存在し得るヘテロ原子には、硫黄（一実施形態では、標的化リガンドのスルフヒドリル基に由来）、酸素（一実施形態では、標的化リガンドのカルボキシル基またはヒドロキシル基に由来）、および必要に応じて置換されている窒素（一実施形態では、標的化リガンドの一級もしくは二級アミン官能基、または別の実施形態では、必要に応じて置換されているアミド窒素に由来）が挙げられる。それらのヘテロ原子は、リガンドの天然状態にある標的化リガンド上に、例えば天然に存在する抗体中に存在することができるか、または化学修飾もしくは生物学的操作により、標的化リガンドに導入され得る。
【０１２９】
一実施形態では、リガンド単位は、スルフヒドリル官能基を有しており、その結果、リガンド単位は、スルフヒドリル官能基の硫黄原子を介して、リンカー単位に結合している。
【０１３０】
別の実施形態では、リガンド単位は、カンプトテシン−リンカー化合物中間体のストレッチャー単位前駆体の活性化エステル（このようなエステルは、以下に限定されないが、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（hydroxysuccimide）、ペンタフルオロフェニルおよびｐ−ニトロフェニルエステル）と反応することが可能な１つまたは複数のリシン残基を有しており、したがって、リガンド単位の窒素原子、およびリンカー単位のストレッチャー単位のＣ＝Ｏ基からなるアミド結合をもたらす。
【０１３１】
さらに別の態様では、リガンド単位は、１つまたは複数のスルフヒドリル基を導入するための化学修飾が可能な１つまたは複数のリシン残基を有する。それらの実施形態では、リガンド単位は、スルフヒドリル官能基の硫黄原子を介して、リンカー単位に共有結合により結合している。そのような方法でリシンを修飾するために使用することができる試薬には、以下に限定されないが、Ｎ−スクシンイミジルＳ−アセチルチオアセテート（ＳＡＴＡ）および２−イミノチオラン塩酸塩（トラウト試薬）が含まれる。
【０１３２】
別の実施形態では、リガンド単位は、修飾されて、１個または複数のスルフヒドリル官能基をもたらすことができる１個または複数の炭水化物基を有する。カンプトテシンコンジュゲート中の化学的に修飾されているリガンド単位は、スルフヒドリル官能基の硫黄原子を介して、リンカー単位構成要素（例えば、ストレッチャー単位）に結合している。
【０１３３】
さらに別の実施形態では、リガンド単位は、酸化させてアルデヒド（−ＣＨＯ）官能基をもたらすことができる１つまたは複数の炭水化物の基を有する（例えば、Laguzza,  et  al.,  1989,  J.  Med.  Chem.  32(3):548-55を参照されたい）。これらの実施形態では、対応するアルデヒドは、ストレッチャー単位前駆体上の反応部位と相互作用して、ストレッチャー単位とリガンド単位との間に結合を形成する。標的化リガンド単位上の反応性カルボニル含有官能基と相互作用することが可能なストレッチャー単位前駆体上の反応部位には、以下に限定されないが、ヒドラジンおよびヒドロキシルアミンが含まれる。リンカー単位（Ｑ）または関連種の結合のためのタンパク質の修飾のための他のプロトコルは、Coligan  et  al.,  Current  Protocols  in  Protein  Science,  vol.  2,  John  Wiley  &  Sons  (2002)に記載されている（参照により本明細書に組み込まれている）。
【０１３４】
一部の態様では、リガンド単位は、ストレッチャー単位前駆体（Ｚ’）上の反応性官能基と相互作用することにより結合を形成して、ストレッチャー単位（Ｚ）と、標的化リガンドに対応するリガンド単位との間の共有結合を形成することが可能である。標的化リガンドと相互作用するためのそのような能力を有するＺ’の官能基は、リガンド単位の性質に依存するであろう。一部の実施形態では、反応性基は、リガンド単位を形成するその結合の前の、ストレッチャー単位に存在するマレイミドである（すなわち、ストレッチャー単位前駆体のマレイミド部分）。ストレッチャー単位へのリガンド単位の共有結合は、Ｚ’のマレイミド官能基と相互作用するリガンド単位のスルフヒドリル官能基により行われて、チオ置換スクシンイミドを形成する。スルフヒドリル官能基は、リガンド単位の天然状態にあるリガンド単位上に、例えば天然に存在する残基中に存在することができるか、または化学修飾もしくは生物学的操作により、リガンド単位に導入され得る。
【０１３５】
さらに別の実施形態では、リガンド単位は抗体であり、スルフヒドリル基は、抗体の鎖間ジスルフィドの還元によって生成される。したがって、一部の実施形態では、リンカー単位は、還元した鎖間ジスルフィドに由来するシステイン残基にコンジュゲートされる。
【０１３６】
さらに別の実施形態では、リガンド単位は抗体であり、スルフヒドリル官能基は、例えば、システイン残基の導入によって抗体に化学的に導入される。したがって、一部の実施形態では、リンカー単位（結合したカンプトテシンを含むまたは含まない）は、リガンド単位の導入したシステイン残基により、リガンド単位にコンジュゲートされている。
【０１３７】
バイオコンジュゲートについて、薬物コンジュゲーションの部位は、コンジュゲーションの容易さ、薬物−リンカーの安定性、それゆえ得られたバイオコンジュゲートの生物物理学的特性に対する効果、およびｉｎ−ｖｉｔｒｏでの細胞毒性を含めたいくつかのパラメータに影響を与えることができることが観察された。薬物−リンカー安定性に関して、薬物−リンカー部分のリガンド単位へのコンジュゲーションの部位は、コンジュゲートされる薬物−リンカー部分が脱離反応を受ける能力、一部の場合では、遊離薬物の早すぎる放出を引き起こす能力に影響を及ぼし得る。標的化リガンドへのコンジュゲーションのための部位には、例えば、還元後の鎖間ジスルフィド、および操作された部位における選択されたシステイン残基が含まれる。一部の実施形態では、本明細書に記載されているカンプトテシンコンジュゲートを形成させるコンジュゲーション法は、還元したジスルフィド結合からのチオール残基を使用するコンジュゲーション法に比べると、脱離反応を受けにくい遺伝的に操作された部位（例えば、Ｋａｂａｔで説明されるＥＵ指標によれば、位置２３９）におけるチオール残基を使用する。他の実施形態では、本明細書に記載されているカンプトテシンコンジュゲートを形成するコンジュゲーション法は、脱離反応をより受けやすい部位のチオール残基（例えば、鎖間ジスルフィド還元に由来する）を使用する。
【０１３８】
一部の実施形態では、カンプトテシンコンジュゲートは、そのリガンド単位として、非免疫反応性タンパク質、ポリペプチドまたはペプチドを含む。したがって、一部の実施形態では、リガンド単位は、非免疫反応性タンパク質、ポリペプチドまたはペプチドである。例には、これらに限定されないが、トランスフェリン、上皮成長因子（「ＥＧＦ」）、ボンベシン、ガストリン、ガストリン放出ペプチド、血小板由来増殖因子、ＩＬ−２、ＩＬ−６、トランスフォーミング増殖因子（「ＴＧＦ」）、例えば、ＴＧＦ−αおよびＴＧＦ−β、ワクチニア増殖因子（「ＶＧＦ」）、インスリンおよびインスリン様成長因子ＩおよびＩＩ、ソマトスタチン、レクチン、ならびに低密度リポタンパク質からのアポタンパク質が含まれる。
【０１３９】
特に好ましいリガンド単位は、抗体由来である。実際は、本明細書に記載されている実施形態のいずれかにおいて、リガンド単位は、抗体に由来し得る。有用なポリクローナル抗体は、免疫された動物の血清に由来する抗体分子の不均質な集団である。有用なモノクローナル抗体は、特定の抗原決定基（例えば、がん細胞抗原、ウイルス抗原、微生物抗原、タンパク質、ペプチド、炭水化物、化学物質、核酸、またはそのフラグメント）に対する抗体の均質な集団である。目的の抗原に対するモノクローナル抗体（ｍＡｂ）は、培養において連続細胞系による抗体分子の産生を実現する当技術分野において公知の任意の技術を使用することによって調製することができる。
【０１４０】
有用なモノクローナル抗体には、これらに限定されないが、ヒトモノクローナル抗体、ヒト化モノクローナル抗体、またはキメラのヒト−マウス（または他の種）モノクローナル抗体が含まれる。抗体は、完全長抗体およびその抗原結合フラグメントを含む。ヒトモノクローナル抗体は、多数の当技術分野で公知の技術のいずれかによって作製し得る（例えば、Ｔｅｎｇら、１９８３年、Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  ＵＳＡ．、８０巻：７３０８〜７３１２頁；Ｋｏｚｂｏｒら、１９８３年、Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  Ｔｏｄａｙ、４巻：７２〜７９頁；およびＯｌｓｓｏｎら、１９８２年、Ｍｅｔｈ．  Ｅｎｚｙｍｏｌ．、９２巻：３〜１６頁）。
【０１４１】
抗体は、標的細胞（例えば、がん細胞抗原、ウイルス抗原、もしくは微生物抗原）に免疫特異的に結合する抗体の機能的活性フラグメント、誘導体もしくは類似体、または腫瘍細胞もしくはマトリックスに結合する他の抗体でよい。これに関しては、「機能的活性な」とは、フラグメント、誘導体または類似体が、標的細胞に免疫特異的に結合することができることを意味する。どのＣＤＲ配列が抗原に結合するかを決定するために、ＣＤＲ配列を含有する合成ペプチドを、当技術分野において公知の任意の結合アッセイ方法（例えば、ＢＩＡコアアッセイ）によって、抗原を用いる結合アッセイにおいて使用することができる（例えば、Ｋａｂａｔら、１９９１年、Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ、第５版、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ、Ｂｅｔｈｅｓｄａ，  Ｍｄ；Ｋａｂａｔ  Ｅら、１９８０年、Ｊ．  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、１２５巻（３号）：９６１〜９６９頁を参照されたい）。
【０１４２】
他の有用な抗体は、これらに限定されないが、Ｆ（ａｂ’）２フラグメント、Ｆａｂフラグメント、Ｆｖ、単鎖抗体、ダイアボディ、トリボディ、トリアボディ、ｓｃＦｖ、ｓｃＦｖ−ＦＶなどの抗体のフラグメント、または抗体と同じ特異性を有する任意の他の分子を含む。
【０１４３】
さらに、標準的組換えＤＮＡ技術を使用して作製することができる、ヒトおよび非ヒトポーションの両方を含む組換え抗体、例えば、キメラ抗体およびヒト化モノクローナル抗体は、有用な抗体である。キメラ抗体は、異なるポーションが、異なる動物種、例えば、マウスモノクローナルに由来する可変領域およびヒト免疫グロブリン定常領域を有するものに由来する分子である。（例えば、参照により本明細書中にその全体が組み込まれている米国特許第４，８１６，５６７号；および米国特許第４，８１６，３９７号を参照されたい。）ヒト化抗体は、非ヒト種からの１つまたは複数の相補性決定領域（ＣＤＲ）、およびヒト免疫グロブリン分子からのフレームワーク領域を有する非ヒト種からの抗体分子である。（例えば、参照により本明細書中にその全体が組み込まれている米国特許第５，５８５，０８９号を参照されたい。）このようなキメラ抗体およびヒト化モノクローナル抗体は、当技術分野で公知の組換えＤＮＡ技術によって、例えば、これらの各々が参照により本明細書中にその全体が組み込まれている、国際公開第ＷＯ８７／０２６７１号；欧州特許出願公開第０１８４１８７号；欧州特許出願公開第０１７１４９６号；欧州特許出願公開第０１７３４９４号；国際公開第ＷＯ８６／０１５３３号；米国特許第４，８１６，５６７号；欧州特許出願公開第０１２０２３号；Ｂｅｒｔｅｒら、１９８８年、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２４０巻：１０４１〜１０４３頁；Ｌｉｕら、１９８７年、Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  ＵＳＡ、８４巻：３４３９〜３４４３頁；Ｌｉｕら、１９８７年、Ｊ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１３９巻：３５２１〜３５２６頁；Ｓｕｎら、１９８７年、Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  ＵＳＡ、８４巻：２１４〜２１８頁；Ｎｉｓｈｉｍｕｒａら、１９８７年、Ｃａｎｃｅｒ．  Ｒｅｓ．、４７巻：９９９〜１００５頁；Ｗｏｏｄら、１９８５年、Ｎａｔｕｒｅ、３１４巻：４４６〜４４９頁；およびＳｈａｗら、１９８８年、Ｊ．  Ｎａｔｌ．  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔ．、８０巻：１５５３〜１５５９頁；Ｍｏｒｒｉｓｏｎ、１９８５年、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２２９巻：１２０２〜１２０７頁；Ｏｉら、１９８６年、ＢｉｏＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ、４巻：２１４頁；米国特許第５，２２５，５３９号；Ｊｏｎｅｓら、１９８６年、Ｎａｔｕｒｅ、３２１巻：５５２〜５２５頁；Ｖｅｒｈｏｅｙａｎら、１９８８年、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２３９巻：１５３４頁；およびＢｅｉｄｌｅｒら、１９８８年、Ｊ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１４１巻：４０５３〜４０６０頁に記載されている方法を使用して産生することができる。
【０１４４】
一部の例における（例えば、非ヒトまたはキメラ抗体に対する免疫原性が生じ得る場合）完全ヒト抗体はより望ましく、内在性免疫グロブリン重鎖および軽鎖遺伝子を発現することができないが、ヒト重鎖および軽鎖遺伝子を発現することができるトランスジェニックマウスを使用して産生することができる。
【０１４５】
抗体は、すなわち、このような共有結合による結合によって、抗体がその抗原結合免疫特異性を保持することを可能とする限り、任意のタイプの分子の共有結合による結合によって修飾されている類似体および誘導体を含む。例えば、限定するためではなく、抗体の誘導体および類似体は、例えば、グリコシル化、アセチル化、ＰＥＧ化、リン酸化、アミド化、公知の保護基／ブロック基による誘導体化、タンパク質分解的切断、細胞抗体単位または他のタンパク質への連結などによってさらに修飾されているものを含む。多数の化学修飾のいずれかは、これらに限定されないが、特異的化学切断、アセチル化、ホルミル化、ツニカマイシンの存在下での代謝合成などを含めた公知の技術によって行うことができる。さらに、類似体または誘導体は、１種または複数の非天然アミノ酸を含有することができる。
【０１４６】
抗体は、Ｆｃ受容体と相互作用するアミノ酸残基において修飾（例えば、置換、欠失または付加）を有することができる。特に、抗体は、抗ＦｃドメインおよびＦｃＲｎ受容体の間の相互作用に関与していると同定されているアミノ酸残基において修飾を有することができる（例えば、参照により本明細書中にその全体が組み込まれている国際公開第ＷＯ９７／３４６３１号を参照されたい）。
【０１４７】
がん細胞抗原に対して免疫特異的な抗体は、商業的に得ることができ、または当業者には公知の任意の方法、組換え発現技術などによって産生することができる。がん細胞抗原に対して免疫特異的な抗体をコードするヌクレオチド配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋデータベースまたは同様のデータベース、文献資料から、または通例のクローニングおよび配列決定によって得ることができる。
【０１４８】
特定の実施形態では、がんの処置のための公知の抗体を使用することができる。
【０１４９】
別の特定の実施形態では、自己免疫疾患の処置のための抗体は、本発明の組成物および方法に従って使用される。
【０１５０】
ある特定の実施形態では、有用な抗体は、活性化リンパ球上に発現する受容体または受容体複合体に結合することができる。受容体または受容体複合体は、免疫グロブリン遺伝子スーパーファミリーメンバー、ＴＮＦ受容体スーパーファミリーメンバー、インテグリン、サイトカイン受容体、ケモカイン受容体、主要組織適合性タンパク質、レクチン、または補体制御タンパク質を含むことができる。
【０１５１】
一部の態様では、カンプトテシンコンジュゲートに組み込まれる抗体は、ＣＤ１９、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ７０またはＬＩＶ−１に特異的に結合する。
【０１５２】
一部の態様では、カンプトテシンコンジュゲートに組み込まれる抗体は、ＣＤ３０に特異的に結合する。別の態様では、カンプトテシンコンジュゲートに組み込まれる抗体は、国際特許公開第ＷＯ０２／４３６６１号に記載されているｃＡＣ１０  抗ＣＤ３０抗体である。一部の実施形態では、抗ＣＤ３０抗体は、それぞれ、配列番号１、２、３、４、５および６のアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２、ＣＤＲ−Ｈ３、ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２およびＣＤＲ−Ｌ３を含む。一部の実施形態では、抗ＣＤ３０抗体は、配列番号７のアミノ酸配列と少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、最後に（at  last）９８％、少なくとも９９％または１００％が同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および配列番号８のアミノ酸配列と少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、最後に９８％、少なくとも９９％または１００％が同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。一部の実施形態では、抗ＣＤ３０抗体は、配列番号９または配列番号１０のアミノ酸配列を含む重鎖、および配列番号１１のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
【０１５３】
一部の態様では、カンプトテシンコンジュゲートに組み込まれる抗体は、ＣＤ７０に特異的に結合する。別の態様では、カンプトテシンコンジュゲートに組み込まれる抗体は、国際特許公開第ＷＯ２００６／１１３９０９号に記載されているｈ１Ｆ６抗ＣＤ７０抗体である。一部の態様では、カンプトテシンコンジュゲートに組み込まれる抗体は、ＣＤ４８に特異的に結合する。別の態様では、カンプトテシンコンジュゲートに組み込まれる抗体は、国際特許公開第ＷＯ２０１６／１４９５３５号に記載されているｈＭＥＭ１０２抗ＣＤ４８抗体である。一部の態様では、カンプトテシンコンジュゲートに組み込まれる抗体は、ＮＴＢ−Ａに特異的に結合する。別の態様では、カンプトテシンコンジュゲートに組み込まれる抗体は、国際特許公開第ＷＯ２０１７／００４３３０号に記載されているｈ２０Ｆ３抗ＮＴＢ−Ａ抗体である。
カンプトテシン：
【０１５４】
本明細書に記載されている様々な態様および実施形態において利用されるカンプトテシンは、本明細書に記載されている、以下の式：
【化１９】
2021521111.tif 000022
によって表される。
【０１５５】
特定の実施形態では、カンプトテシンは、以下の式：
【化２０】
2021521111.tif 000023
（式中、ＲＦおよびＲＦ’はそれぞれ、独立して、Ｈ、グリシル、ヒドロキシアセチル、エチルまたは２−（２−（２−アミノエトキシ）エトキシ）エチルであるか、またはＲＦおよびＲＦ’は、各々が結合している窒素原子と合わさり、５員、６員もしくは７員のヘテロシクロアルキル環を形成する）のものである。一部の態様では、ＲＦおよびＲＦ’は、それらの各々が結合している窒素原子と合わさり、６員環を形成する。一部の態様では、６員環は、モルホリニル基またはピペラジニル基である。一部の態様では、ＲＦ’は、Ｈであり、ＲＦは、グリシル、ヒドロキシアセチル、エチルまたは２−（２−（２−アミノエトキシ）エトキシ）エチルである。一部の態様では、ＲＦ’は、Ｈであり、ＲＦは、脂肪族基を含む。ＲＦ’は、Ｈであり、ＲＦは、アリール基を含む。一部の態様では、ＲＦ’は、Ｈであり、ＲＦは、アミド基を含む。一部の態様では、ＲＦ’は、Ｈであり、ＲＦは、エチレンオキシド基を含む。
【０１５６】
特定の実施形態では、カンプトテシンは、以下の式：
【化２１】
2021521111.tif 000024
または薬学的に許容されるその塩
（式中、ＲＢは、−Ｈ、−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル−ＯＨ、−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル−ＮＨ２、−Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８ハロアルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキルＣ１〜Ｃ４アルキル、フェニルまたはフェニルＣ１〜Ｃ４アルキルである）のものである。一部の態様では、ＲＢは、Ｃ１〜Ｃ８アルキルを含む。一部の態様では、ＲＢは、シクロプロピル、ペンチル、ヘキシル、ｔｅｒｔ−ブチルまたはシクロペンチル基を含む。
【０１５７】
さらに他のカンプトテシンは、本明細書に記載されているコンジュゲートおよび化合物の文脈において有用である。有効なことに、カンプトテシンは、式ＣＰＴ１、ＣＰＴ２、ＣＰＴ３、ＣＰＴ４およびＣＰＴ５として提供されるそのような構造に類似した５環または６環の縮合フレームワークを有するが、以下に限定されないが、ヒドロキシル、チオール、アミンまたはアミド官能基であって、それらの酸素、硫黄または必要に応じて置換されている窒素ヘテロ原子が、リンカーへの組み込みに可能である、上記の官能基を含めた追加の基を有してもよく、コンジュゲートから遊離薬物として放出されることが可能である。一部の態様では、そのような官能基は、薬物に、リンカー単位（Ｑ）への結合に利用可能な部位しか提供しない。得られる薬物−リンカー部分は、細胞傷害性作用、細胞分裂停止作用または免疫抑制作用を発揮させるために、そのリガンド単位により標的化される部位にその部分を有するカンプトテシンコンジュゲートから活性な遊離薬物を放出することができるものである。
【０１５８】
「遊離薬物」とは、薬物−リンカー部分から放出されると、存在する薬物を指す。一部の実施形態では、遊離薬物には、ペプチド放出可能なリンカー（ＲＬ）またはスペーサー単位（Ｙ）基のフラグメントが含まれる。一部の実施形態では、ペプチド放出可能なリンカー基のフラグメントを含む遊離薬物は、生物学的に活性である。ペプチド放出可能なリンカーまたはスペーサー単位（Ｙ）のフラグメントを含む遊離薬物は、放出可能なリンカーの切断により薬物−リンカー部分の残部から放出されるか、またはスペーサー単位（Ｙ）の基における結合の切断により放出されて、放出後に活性となる。一部の実施形態では、遊離薬物は、自壊的アセンブリー単位への結合のための薬物の官能基が、カンプトテシンコンジュゲートの構成要素（前に共有されたヘテロ原子以外）ともはや結合していないという点で、コンジュゲートされている薬物とは異なる。例えば、アルコール含有薬物の遊離ヒドロキシル官能基は、Ｄ−Ｏ＊Ｈと表すことができる一方、コンジュゲートした形態では、Ｏ＊によって表される酸素ヘテロ原子は、自壊的単位のメチレンカルバメート単位に組み込まれる。自壊的部分の活性化および遊離薬物の放出の際に、Ｏ＊への共有結合は、水素原子により置き換えられ、その結果、Ｏ＊により表される酸素ヘテロ原子は、−Ｏ−Ｈとして遊離薬物上に存在する。
【０１５９】
一部の実施形態では、カンプトテシンは、生物学的に活性である。一部の実施形態では、このようなカンプトテシンは、トポイソメラーゼを阻害する、腫瘍細胞を死滅する、腫瘍細胞、がん細胞または腫瘍の成長を阻害する、腫瘍細胞もしくはがん細胞の複製を阻害する、総合的な腫瘍負荷を低下させる、またはがん性細胞の数を低下させる、あるいはがんもしくは自己免疫疾患に関連する１つまたは複数の症状を改善する、方法に有用である。このような方法は、例えば、がん細胞にカンプトテシン化合物を接触させるステップを含む。
リンカー単位（Ｑ）
【０１６０】
上記の通り、一部の実施形態では、連結基Ｑは、以下の式：
−Ｚ−Ａ−Ｓ＊−ＲＬ−
−Ｚ−Ａ−ＬＰ（Ｓ＊）−ＲＬ−
−Ｚ−Ａ−Ｓ＊−ＲＬ−Ｙ−、および
−Ｚ−Ａ−ＬＰ（Ｓ＊）−ＲＬ−Ｙ−
（式中、Ｚは、ストレッチャー単位であり、Ａは、コネクター単位であり、ＬＰは、並列コネクター単位であり、Ｓ＊は、分断剤であり、ＲＬは、ペプチド放出可能なリンカーであり、Ｙは、スペーサー単位である）
からなる群から選択される式を有する。
【０１６１】
実施形態の１つの群では、Ｑは、以下：
−Ｚ−Ａ−Ｓ＊−ＲＬ−および−Ｚ−Ａ−Ｓ＊−ＲＬ−Ｙ−
（式中、Ｚは、ストレッチャー単位であり、Ａは、結合またはコネクター単位であり、Ｓ＊は、分断剤であり、Ｙは、スペーサー単位である）
からなる群から選択される式を有する。
ストレッチャー単位（Ｚ）または（Ｚ’）：
【０１６２】
ストレッチャー単位（Ｚ）は、カンプトテシンコンジュゲートの構成要素またはカンプトテシン−リンカー化合物、またはコンジュゲートの残部にリガンド単位を結合させる働きをする他の中間体である。その点では、リガンド単位への結合前のストレッチャー単位（すなわち、ストレッチャー単位前駆体Ｚ’）は、標的化リガンドの官能基と結合を形成することができる官能基を有する。
【０１６３】
一部の態様では、ストレッチャー単位前駆体（Ｚ’）は、リガンド単位（例えば、抗体）上に存在する反応性求核性基と相互作用することが可能な求電子性基を有して、リガンド単位とリンカー単位のストレッチャー単位との間に共有結合をもたらす。その能力を有する抗体上の求核性基には、以下に限定されないが、スルフヒドリル、ヒドロキシルおよびアミノ官能基が含まれる。抗体の求核性基のヘテロ原子は、ストレッチャー単位前駆体上の求電子性基に対して反応性があり、リガンド単位とリンカー単位または薬物−リンカー部分のストレッチャー単位との間に共有結合をもたらす。その目的に有用な求電子性基には、以下に限定されないが、マレイミド、ハロアセトアミド基およびＮＨＳエステルが含まれる。求電子性基は、カンプトテシンコンジュゲートまたはリガンド単位−リンカー中間体を形成する抗体結合に便利な部位を提供する。
【０１６４】
別の実施形態では、ストレッチャー単位前駆体は、リガンド単位（例えば、抗体）上に存在する求電子性基に対して反応性がある、求核性基を有する反応部位を有する。その目的のために有用な抗体上の求電子性基には、以下に限定されないが、アルデヒド基およびケトンカルボニル基が含まれる。ストレッチャー単位前駆体の求核性基のヘテロ原子は、抗体上の求電子性基と反応して、抗体への共有結合を形成することができる。その目的に有用なストレッチャー単位前駆体上の求核性基には、以下に限定されないが、ヒドラジド、ヒドロキシルアミン、アミノ、ヒドラジン、チオセミカルバゾン、ヒドラジンカルボキシレートおよびアリールヒドラジドが含まれる。抗体上の求電子性基は、カンプトテシンコンジュゲートまたはリガンド単位−リンカー中間体を形成する抗体結合のために便利な部位を提供する。
【０１６５】
一部の実施形態では、リガンド単位の硫黄原子は、標的化リガンドのチオール官能基と対応するストレッチャー単位前駆体のマレイミド部分との反応によって形成されるストレッチャー単位のスクシンイミド環系に結合している。他の実施形態では、リガンド単位のチオール官能基は、アルファハロアセトアミド部分と反応して、そのハロゲン置換基の求核的な置き換えにより、硫黄が結合したストレッチャー単位をもたらす。
【０１６６】
これらの実施形態の代表的なストレッチャー単位には、式ＺａおよびＺｂ（式中、リガンド単位は参照として示される）の角括弧内のものが含まれる：
【化２２】
2021521111.tif 000025
［式中、波線は、並列コネクター単位（ＬＰ）、またはＬＰが存在しない場合のコネクター単位（Ａ）、またはＬＰが存在しない場合の分断剤（Ｓ＊）への結合位置を示し、Ｒ１７は、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−、Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロアルキレン−、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ−、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ８アルキレン）−、−アリーレン−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−アリーレン−、−アリーレン−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−、−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−、−Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−、−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−、Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロアルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ８アルキレン）−Ｃ（＝Ｏ）−、−アリーレン−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−アリーレン−Ｃ（＝Ｏ）−、−アリーレン−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−Ｃ（＝Ｏ）−、−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−Ｃ（＝Ｏ）−、−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−ＮＨ−、Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロアルキレン−ＮＨ−、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ−ＮＨ−、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ８アルキレン）−ＮＨ−、−アリーレン−ＮＨ−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−アリーレン−ＮＨ−、−アリーレン−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−ＮＨ−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−ＮＨ−、−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−ＮＨ−、−Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ−ＮＨ−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−ＮＨ−、−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−ＮＨ−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−Ｓ−、Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロアルキレン−Ｓ−、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ−Ｓ−、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ８アルキレン）−Ｓ−、−アリーレン−Ｓ−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−アリーレン−Ｓ−、−アリーレン−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−Ｓ−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−Ｓ−、−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−Ｓ−、−Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ−Ｓ−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−Ｓ−または−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−Ｓ−である）］。
【０１６７】
一部の態様では、式ＺａのＲ１７基は、アミノアルキル部分、例えば−（ＣＨ２）ｘＮＨ２、−（ＣＨ２）ｘＮＨＲａおよび−（ＣＨ２）ｘＮＲａ２などの塩基性単位（ＢＵ）により必要に応じて置換されており、ｘは、１〜４の整数であり、Ｒａはそれぞれ、Ｃ１〜６アルキルおよびＣ１〜６ハロアルキルからなる群から独立して選択されるか、または２つのＲａ基は、それらが結合している窒素と合わさり、アゼチジニル基、ピロリジニル基またはピペリジニル基を形成する。
【０１６８】
例示的なストレッチャー単位は、式ＺａまたはＺｂのものであり、Ｒ１７は、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロアルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ８アルキレン）−Ｃ（＝Ｏ）−、−アリーレン−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−アリーレン−Ｃ（＝Ｏ）−、−アリーレン−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−Ｃ（＝Ｏ）−、−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−Ｃ（＝Ｏ）−または−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−である。
【０１６９】
別の例示的なストレッチャー単位は、式Ｚａのものであり、Ｒ１７は、−Ｃ１〜Ｃ５アルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−であり、アルキレンは、必要に応じて置換されているアミノアルキル、例えば、−（ＣＨ２）ｘＮＨ２、−（ＣＨ２）ｘＮＨＲａおよび−（ＣＨ２）ｘＮ（Ｒａ）２などの塩基性単位（ＢＵ）により必要に応じて置換されており、ｘは、１〜４の整数であり、Ｒａはそれぞれ、Ｃ１〜６アルキルおよびＣ１〜６ハロアルキルからなる群から独立して選択されるか、または２つのＲａ基は、それらが結合している窒素と合わさり、アゼチジニル基、ピロリジニル基またはピペリジニル基を形成する。合成中に、塩基性単位の塩基性アミノ官能基は、保護基によって保護され得る。
【０１７０】
リガンド単位に結合したストレッチャー単位の例示的な実施形態は、以下の通りである：
【化２３−１】
2021521111.tif 000026
【化２３−２】
2021521111.tif 000027
（式中、カルボニルに隣接する波線は、Ａおよび／またはＬＰの存在または非存在に応じて、上記の式中、ＬＰ、ＡまたはＳ＊への結合を示す）。
【０１７１】
一部の好ましい実施形態では、ストレッチャー単位（Ｚ）は、Ｌに結合している場合、式Ｚａ’の構造：
【化２４】
2021521111.tif 000028
（式中、カルボニルに隣接する波線は、Ａおよび／またはＬＰの存在または非存在に応じて、上記の式中、ＬＰ、ＡまたはＳ＊への結合を示す。Ｒ１７は、−Ｃ１〜Ｃ５アルキレン−であり、このアルキレンは、塩基性単位（ＢＵ）により置換されており、ＢＵは、−（ＣＨ２）ｘＮＨ２、−（ＣＨ２）ｘＮＨＲａまたは−（ＣＨ２）ｘＮ（Ｒａ）２であり、ｘは、１〜４の整数であり、Ｒａはそれぞれ、Ｃ１〜６アルキルおよびＣ１〜６ハロアルキルからなる群から独立して選択されるか、またはＲａの両方が、それらが結合している窒素と一緒になって、アゼチジニル基、ピロリジニル基またはピペリジニル基を定義する）によって表されるスクシンイミド部分からなる。
【０１７２】
リガンド単位−置換スクシンイミドは、加水分解された形態で存在することがあることが理解されよう。それらの形態は、Ｌに結合したＺａ’の加水分解に関して以下に例示されており、その加水分解に由来する位置異性体を表す構造は、式Ｚｂ’およびＺｃ’である。したがって、他の好ましい実施形態では、ストレッチャー単位（Ｚ）は、Ｌに結合している場合、以下：
【化２５】
2021521111.tif 000029
（式中、Ｒ１７に結合したカルボニルに隣接する波線は、Ａおよび／またはＬＰの存在または非存在に応じて、Ｚａ’に関して定義した通りである。Ｒ１７は、−Ｃ１〜Ｃ５アルキレン−であり、このアルキレンは、塩基性単位（ＢＵ）により置換されており、ＢＵは、（ＣＨ２）ｘＮＨ２、−（ＣＨ２）ｘＮＨＲａまたは−（ＣＨ２）ｘＮ（Ｒａ）２であり、ｘは、１〜４の整数であり、Ｒａはそれぞれ、Ｃ１〜６アルキルおよびＣ１〜６ハロアルキルからなる群から独立して選択されるか、またはＲａの両方が、それらが結合している窒素と一緒になって、アゼチジニル基、ピロリジニル基またはピペリジニル基を定義する）によって表される酸アミド部分からなる。
【０１７３】
一部の実施形態では、ストレッチャー単位（Ｚ）は、Ｌに結合している場合、式Ｚｄ’またはＺｅ’の構造：
【化２６】
2021521111.tif 000030
（式中、カルボニルに隣接する波線は、Ｚａ’に関して定義されている通りである）によって表される酸−アミド部分からなる。
【０１７４】
好ましい実施形態では、ストレッチャー単位（Ｚ）は、Ｌに結合している場合、以下の構造：
【化２７】
2021521111.tif 000031
によって表されるスクシンイミド部分からなり、上記の構造は、マレイミド−アミノ−プロピオニル（ｍＤＰＲ）類似体（３−アミノ−２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパン酸誘導体）から生成するか、またはＬに結合している場合、以下の構造：
【化２８】
2021521111.tif 000032
によって表される酸−アミド部分からなる。
【０１７５】
リガンド単位（Ｌ）およびコネクター単位（Ａ）に結合している例示的なストレッチャー単位は、Ｚａ、Ｚａ’、Ｚｂ’またはＺｃ’からの構造からなる、以下の構造を有し、−Ｒ１７−または−Ｒ１７（ＢＵ）−は、−ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２−または−ＣＨ（ＣＨ２ＮＨ２）−：
【化２９−１】
2021521111.tif 000033
【化２９−２】
2021521111.tif 000034
（式中、カルボニルに隣接する波線は、Ｚａ’に関して定義されている通りである）である。
【０１７６】
実施形態の１つの群では、Ｚ−Ａ−は、マレイミド−アルカン酸構成要素またはｍＤＰＲ構成要素を含む。例えば、ＷＯ２０１３／１７３３３７を参照されたい。実施形態の１つの群では、Ｚ−Ａ−は、マレイミドプロピオニル構成要素である。
【０１７７】
リガンド単位（Ｌ）およびコネクター単位（Ａ）に結合している他のストレッチャー単位は、上記の構造を有しており、上記のＺ−Ａ構造中のＡは、以下の構造
【化３０】
2021521111.tif 000035
（式中、ｎは、８〜２４の範囲である。ＲＰＥＧは、ＰＥＧ単位キャッピング基、好ましくは−ＣＨ３または−ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ２Ｈであり、アスタリスク（＊）は、構造中の式Ｚａ、Ｚａ’、Ｚｂ’またはＺｃ’に対応するストレッチャー単位への共有結合を示し、波線は、放出可能なリンカー（ＲＬ）への共有結合を示す）を有する並列コネクター単位によって置き換えられている。
【０１７８】
リガンド単位へのコンジュゲーション前の例示的なストレッチャー単位（すなわち、ストレッチャー単位前駆体）は、マレイミド部分からなり、式Ｚ’ａの構造：
【化３１】
2021521111.tif 000036
（式中、カルボニルに隣接する波線は、Ｚａ’に関して定義されている通りであり、Ｒ１７は、必要に応じて置換されているアミノアルキル、例えば、−（ＣＨ２）ｘＮＨ２、−（ＣＨ２）ｘＮＨＲａおよび−（ＣＨ２）ｘＮ（Ｒａ）２などの塩基性単位により必要に応じて置換されている−（ＣＨ２）１〜５−であり、ｘは、１〜４の整数であり、Ｒａはそれぞれ、Ｃ１〜６アルキルおよびＣ１〜６ハロアルキルからなる群から独立して選択されるか、または２つのＲａ基は、それらが結合している窒素と合わさり、アゼチジニル基、ピロリジニル基またはピペリジニル基を形成する）を含めた、構造によって表される。
【０１７９】
式Ｚ’ａの一部の好ましい実施形態では、ストレッチャー単位前駆体（Ｚ’）は、以下の構造：
【化３２】
2021521111.tif 000037
（式中、カルボニルに隣接する波線は、Ｚａ’に関して定義されている通りである）のうちの１つによって表される。
【０１８０】
他の好ましい実施形態では、ストレッチャー単位前駆体（Ｚ’）は、マレイミド部分からなり、式Ｚａ’の構造：
【化３３】
2021521111.tif 000038
（式中、Ｒ１７に結合したカルボニルに隣接する波線は、Ｚａ’に関して定義した通りであり、Ｒ１７は、−Ｃ１〜Ｃ５アルキレン−であり、このアルキレンは、塩基性単位（ＢＵ）により置換されており、ＢＵは、−（ＣＨ２）ｘＮＨ２、−（ＣＨ２）ｘＮＨＲａまたは−（ＣＨ２）ｘＮ（Ｒａ）２であり、ｘは、１〜４の整数であり、Ｒａはそれぞれ、Ｃ１〜６アルキルおよびＣ１〜６ハロアルキルからなる群から独立して選択されるか、またはＲａの両方が、それらが結合している窒素と一緒になって、アゼチジニル基、ピロリジニル基またはピペリジニル基を定義する）によって表される。
【０１８１】
より好ましい実施形態では、ストレッチャー単位前駆体（Ｚ’）は、マレイミド部分からなり、以下の構造：
【化３４】
2021521111.tif 000039
（式中、カルボニルに隣接する波線は、Ｚａ’に関して定義されている通りである）によって表される。
【０１８２】
ＢＵ部分を有するストレッチャー単位では、その部分のアミノ官能基は、合成の間、アミノ保護基、例えば、酸に不安定な保護基（例えば、ＢＯＣ）により保護されていてもよいことが理解されよう。
【０１８３】
ＺａまたはＺａ’に由来する構造（式中、−Ｒ１７−または−Ｒ１７（ＢＵ）−は、−ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２−または−ＣＨ（ＣＨ２ＮＨ２）−である）からなるコネクター単位に共有結合により結合している例示的なストレッチャー単位前駆体は、以下の構造：
【化３５】
2021521111.tif 000040
（式中、カルボニルに隣接する波線は、Ｚａ’に関して定義されている通りである）を有する。
【０１８４】
コネクター単位（Ａ）に結合している他のストレッチャー単位前駆体は、上記の構造を有しており、上のＺ’−Ａ構造中のＡは、以下の構造
【化３６】
2021521111.tif 000041
（式中、ｎは、８〜２４の範囲である。ＲＰＥＧは、ＰＥＧ単位キャッピング基、好ましくは−ＣＨ３または−ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ２Ｈであり、アスタリスク（＊）は、構造中の式ＺａまたはＺａ’に対応するストレッチャー単位前駆体への共有結合を示し、波線は、ＲＬへの共有結合を示す）を有する並列コネクター単位および分断剤（−ＬＰ（Ｓ＊）−）によって置き換えられている。ここで示されているものなどの例では、示されているＰＥＧ基は、異なる長さのＰＥＧ基、および並列コネクター単位に直接、結合し得るか、またはそれに対する結合のために修飾され得る他の分断剤を含めた、様々な例示的な分断剤であることが意図される。
【０１８５】
別の実施形態では、ストレッチャー単位は、リガンド単位の硫黄原子とストレッチャー単位の硫黄原子との間のジスルフィド結合を介してリガンド単位に結合されている。この実施形態の代表的なストレッチャー単位は、式Ｚｂの角括弧内に示される：
【化３７】
2021521111.tif 000042
［式中、波線は、並列コネクター単位（ＬＰ）、またはＬＰが存在しない場合のコネクター単位（Ａ）、またはＡおよびＬＰが存在しない場合の分断剤（Ｓ＊）への結合位置を示し、Ｒ１７は、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−、Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロアルキレン−、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ−、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ８アルキレン）−、−アリーレン−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−アリーレン−、−アリーレン−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−、−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−、−Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−、−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−、Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロアルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ８アルキレン）−Ｃ（＝Ｏ）−、−アリーレン−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−アリーレン−Ｃ（＝Ｏ）−、−アリーレン−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−Ｃ（＝Ｏ）−、−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−Ｃ（＝Ｏ）−、−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−ＮＨ−、Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロアルキレン−ＮＨ−、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ−ＮＨ−、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ８アルキレン）−ＮＨ−、−アリーレン−ＮＨ−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−アリーレン−ＮＨ−、−アリーレン−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−ＮＨ−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−ＮＨ−、−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−ＮＨ−、−Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ−ＮＨ−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−ＮＨ−、−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−ＮＨ−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−Ｓ−、Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロアルキレン−Ｓ−、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ−Ｓ−、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ８アルキレン）−Ｓ−、−アリーレン−Ｓ−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−アリーレン−Ｓ−、−アリーレン−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−Ｓ−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−Ｓ−、−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−Ｓ−、−Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ−Ｓ−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−Ｓ−または−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−Ｓ−である）］。
【０１８６】
さらに別の実施形態では、ストレッチャー単位前駆体の反応性基は、リガンド単位の一級または二級アミノ基との結合を形成することができる反応部位を含む。これらの反応部位の例には、以下に限定されないが、スクシンイミドエステル、４−ニトロフェニルエステル、ペンタフルオロフェニルエステル、テトラフルオロフェニルエステル、無水物、酸塩化物、塩化スルホニル、イソシアネートおよびイソチオシアネートなどの活性化エステルが含まれる。この実施形態の代表的なストレッチャー単位は、式Ｚｅｉ、ＺｅｉｉおよびＺｅｉｉｉの角括弧内に示される：
【化３８】
2021521111.tif 000043
［式中、波線は、並列コネクター単位（ＬＰ）、またはＬＰが存在しない場合のコネクター単位（Ａ）、またはＡおよびＬＰが存在しない場合の分断剤（Ｓ＊）への結合位置を示し、Ｒ１７は、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−、Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロアルキレン−、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ−、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ８アルキレン）−、−アリーレン−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−アリーレン−、−アリーレン−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−、−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−、−Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−、−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−、Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロアルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ８アルキレン）−Ｃ（＝Ｏ）−、−アリーレン−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−アリーレン−Ｃ（＝Ｏ）−、−アリーレン−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−Ｃ（＝Ｏ）−、−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−Ｃ（＝Ｏ）−、−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−ＮＨ−、Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロアルキレン−ＮＨ−、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ−ＮＨ−、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ８アルキレン）−ＮＨ−、−アリーレン−ＮＨ−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−アリーレン−ＮＨ−、−アリーレン−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−ＮＨ−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−ＮＨ−、−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−ＮＨ−、−Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ−ＮＨ−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−ＮＨ−、−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−ＮＨ−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−Ｓ−、Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロアルキレン−Ｓ−、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ−Ｓ−、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ８アルキレン）−Ｓ−、−アリーレン−Ｓ−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−アリーレン−Ｓ−、−アリーレン−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−Ｓ−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−Ｓ−、−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−Ｓ−、−Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ−Ｓ−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−Ｓ−または−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−Ｓ−である）］。
【０１８７】
さらに別の態様では、ストレッチャー単位前駆体の反応性基は、リガンド単位上に存在するか、またはこれに導入される求電子剤と反応することが可能な反応性求核剤を含む。例えば、標的化リガンド上の炭水化物部分は、過ヨウ素酸ナトリウムなどの試薬を使用して軽度に酸化することができ、酸化された炭水化物の生じた求電子性官能基（−ＣＨＯ）は、ヒドラジド、オキシム、一級または二級アミン、ヒドラジン、チオセミカルバゾン、ヒドラジンカルボキシレート、またはKaneko,  T.  et  al.  (1991)  Bioconjugate  Chem.  2:133-41により記載されているものなどのアリールヒドラジドなどの反応性求核剤を含有するストレッチャー単位前駆体と縮合することができる。この実施形態の代表的なストレッチャー単位は、式Ｚｄｉ、ＺｄｉｉおよびＺｄｉｉｉの角括弧内に図示されている：
【化３９】
2021521111.tif 000044
【化４０】
2021521111.tif 000045
（式中、波線は、並列コネクター単位（ＬＰ）もしくはコネクター単位（Ａ）への結合を、またはＡおよびＬＰが存在しない場合、分断剤（Ｓ＊）を示し、Ｒ１７は、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−、Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロアルキレン−、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ−、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ８アルキレン）−、−アリーレン−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−アリーレン−、−アリーレン−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−、−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−、−Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−、−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−、Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロアルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ８アルキレン）−Ｃ（＝Ｏ）−、−アリーレン−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−アリーレン−Ｃ（＝Ｏ）−、−アリーレン−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−Ｃ（＝Ｏ）−、−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−Ｃ（＝Ｏ）−、−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−ＮＨ−、Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロアルキレン−ＮＨ−、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ−ＮＨ−、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ８アルキレン）−ＮＨ−、−アリーレン−ＮＨ−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−アリーレン−ＮＨ−、−アリーレン−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−ＮＨ−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−ＮＨ−、−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−ＮＨ−、−Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ−ＮＨ−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−ＮＨ−、−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−ＮＨ−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−Ｓ−、Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロアルキレン−Ｓ−、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ−Ｓ−、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ８アルキレン）−Ｓ−、−アリーレン−Ｓ−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−アリーレン−Ｓ−、−アリーレン−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−Ｓ−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−Ｓ−、−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−Ｓ−、−Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ−Ｓ−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−Ｓ−または−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−Ｓ−である）。
【０１８８】
本発明（prevent  invention）の一部の態様では、ストレッチャー単位は、約１０００ダルトン以下、約５００ダルトン以下、約２００ダルトン以下、約３０、５０もしくは１００ダルトン〜約１０００ダルトン、約３０、５０もしくは１００ダルトン〜約５００ダルトン、または約３０、５０もしくは１００ダルトン〜約２００ダルトンの質量を有する。
コネクター単位（Ａ）
【０１８９】
コネクター単位（Ａ）は、ストレッチャー単位（Ｚ）を分断剤（Ｓ＊）または並列コネクター単位／分断剤の組合せ（−ＬＰ（Ｓ＊）−）に結合させる働きをする。一部の実施形態では、コネクター単位（Ａ）は、構成要素に直接、連結する結合である。一部の実施形態では、コネクター単位（Ａ）は、ストレッチャー単位（Ｚ）またはその前駆体（Ｚ’）とペプチド放出可能なリンカー（ＲＬ）との間にさらなる距離を追加するために、カンプトテシンコンジュゲートまたはカンプトテシン−リンカー化合物に含まれている。一部の態様では、追加の距離は、ＲＬ内での活性化を補助するであろう。したがって、コネクター単位（Ａ）は、存在する場合、リンカー単位のフレームワークを延長させる。その点では、コネクター単位（Ａ）は、一方の末端において、ストレッチャー単位（またはその前駆体）と共有結合しており、そのもう一方の末端において、必要に応じた並列コネクター単位（ＬＰ）または分断剤（Ｓ＊）に共有結合により結合している。
【０１９０】
当業者は、コネクター単位は、分断剤／ペプチド放出可能なリンカー部分（−Ｓ＊−ＲＬ−）または並列コネクター単位／分断剤／ペプチド放出可能なリンカー部分（−ＬＰ（Ｓ＊）−ＲＬ−）が、リンカー単位（Ｑ）の残部に結合するよう働く、任意の基とすることができることを理解しているであろう。コネクター単位は、例えば、１個または複数（例えば、１〜１０個、好ましくは、１、２、３または４個）の天然アミノ酸または非天然アミノ酸、アミノアルコール、アミノアルデヒド、ジアミノ残基からなることができる。一部の態様では、コネクター単位は、単一の天然アミノ酸もしくは非天然アミノ酸、アミノアルコール、アミノアルデヒド、またはジアミノ残基である。コネクター単位として作用することが可能な例示的なアミノ酸は、β−アラニンである。
【０１９１】
一部の態様では、コネクター単位は、以下に表されている式：
【化４１】
2021521111.tif 000046
（式中、波線は、カンプトテシンコンジュゲートまたはカンプトテシンリンカー化合物内のコネクター単位の結合を示し、Ｒ１１１は、水素、ｐ−ヒドロキシベンジル、メチル、イソプロピル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ２ＳＣＨ３、−ＣＨ２ＣＯＮＨ２、−ＣＨ２ＣＯＯＨ、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＨ、−（ＣＨ２）３ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ２、−（ＣＨ２）３ＮＨ２、−（ＣＨ２）３ＮＨＣＯＣＨ３、−（ＣＨ２）３ＮＨＣＨＯ、−（ＣＨ２）４ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ２、−（ＣＨ２）４ＮＨ２、−（ＣＨ２）４ＮＨＣＯＣＨ３、−（ＣＨ２）４ＮＨＣＨＯ、−（ＣＨ２）３ＮＨＣＯＮＨ２、−（ＣＨ２）４ＮＨＣＯＮＨ２、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２ＮＨ２、２−ピリジルメチル−、３−ピリジルメチル−、４−ピリジルメチル−、
【化４２】
2021521111.tif 000047
からなる群から独立して選択され、Ｒ１００はそれぞれ、水素または−Ｃ１〜Ｃ３アルキル、好ましくは水素またはＣＨ３から独立して選択され、下付文字ｃは、１〜１０、好ましくは１〜３から独立して選択される整数である）を有する。
【０１９２】
分断剤（Ｓ＊）または−ＬＰ（Ｓ＊）−への結合のためのカルボニル基を有する代表的なコネクター単位は、以下の通りである：
【化４３】
2021521111.tif 000048
（式中、各場合において、Ｒ１３は、−Ｃ１〜Ｃ６アルキレン−、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ−、−アリーレン−、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロアルキレン−、−Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−アリーレン−、−アリーレン−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−、−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−および−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−からなる群から独立して選択され、下付文字ｃは、１〜４の範囲の整数である）。一部の実施形態では、Ｒ１３は、−Ｃ１〜Ｃ６アルキレンであり、ｃは、１である。
【０１９３】
分断剤（Ｓ＊）または−ＬＰ（Ｓ＊）−への結合のためのカルボニル基を有する別の代表的なコネクター単位は、以下の通りである：
【化４４】
2021521111.tif 000049
（式中、Ｒ１３は、−Ｃ１〜Ｃ６アルキレン−、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ−、−アリーレン−、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロアルキレン−、−Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−アリーレン−、−アリーレン−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−、−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−または−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−である）。一部の実施形態では、Ｒ１３は、−Ｃ１〜Ｃ６アルキレンである。
【０１９４】
分断剤（Ｓ＊）または−ＬＰ（Ｓ＊）−に結合するＮＨ部分を有する代表的なコネクター単位は、以下の通りである：
【化４５】
2021521111.tif 000050
（式中、各場合において、Ｒ１３は、−Ｃ１〜Ｃ６アルキレン−、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ−、−アリーレン−、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロアルキレン−、−Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−アリーレン−、−アリーレン−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−、−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−および−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−からなる群から独立して選択され、下付文字ｃは、１〜１４である）。一部の実施形態では、Ｒ１３は、−Ｃ１〜Ｃ６アルキレンであり、下付文字ｃは、１である。
【０１９５】
分断剤（Ｓ＊）または−ＬＰ（Ｓ＊）−に結合するＮＨ部分を有する別の代表的なコネクター単位は、以下の通りである：
【化４６】
2021521111.tif 000051
（式中、Ｒ１３は、−Ｃ１〜Ｃ６アルキレン−、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ−、−アリーレン−、−Ｃ１〜Ｃ１０ヘテロアルキレン−、−Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−アリーレン−、−アリーレン−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−、−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−、−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキレン−または−Ｃ１〜Ｃ６アルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−Ｃ１〜Ｃ６アルキレンである）。
【０１９６】
コネクター単位の選択された実施形態は、以下の構造
【化４７】
2021521111.tif 000052
（式中、窒素に隣接する波線は、共有結合、ストレッチャー単位（Ｚ）（またはその前駆体Ｚ’）を示し、カルボニルに隣接する波線は、分断剤（Ｓ＊）または−ＬＰ（Ｓ＊）−への共有結合を示し、ｍは、１〜６、好ましくは２〜６、より好ましくは２〜４の範囲の整数である）を有するものを含む。
ペプチド放出可能なリンカー（ＲＬ）：
【０１９７】
一部の実施形態では、ペプチド放出可能なリンカー（ＲＬ）は、２個またはそれより多い、アミノ酸の連続配列または非連続配列（例えば、その結果、ＲＬは、２〜１２個以下のアミノ酸を有する）を含む。ペプチド放出可能なリンカーは、例えば、ジペプチド、トリペプチド、テトラペプチド、ペンタペプチド、ヘキサペプチド、ヘプタペプチド、オクタペプチド、ノナペプチド、デカペプチド、ウンデカペプチドまたはドデカペプチド単位を含む、またはこれらからなることができる。一部の態様では、酵素の存在下（例えば、腫瘍関連プロテアーゼ）では、アミノ酸間のアミド連結は、切断され、これにより最後には、遊離薬物の放出をもたらす。
【０１９８】
各アミノ酸は、天然または非天然の、および／またはＤ−もしくはＬ−異性体とすることができ、ただし、ＲＬは、切断されると、カンプトテシンの放出を開始する、切断可能な結合を含むことを条件とする。一部の実施形態では、ペプチド放出可能なリンカーは、天然アミノ酸しか含まないであろう。一部の態様では、ペプチド放出可能なリンカーは、２〜１２個以下のアミノ酸を連続配列で有するであろう。
【０１９９】
一部の実施形態では、各アミノ酸は、アラニン、アルギニン、アスパラギン酸、アスパラギン、ヒスチジン、グリシン、グルタミン酸、グルタミン、フェニルアラニン、リシン、ロイシン、セリン、チロシン、トレオニン、イソロイシン、プロリン、トリプトファン、バリン、システイン、メチオニン、セレノシステイン、オルニチン、ペニシラミン、β−アラニン、アミノアルカン酸、アミノアルキン酸、アミノアルカン二酸、アミノ安息香酸、アミノ−ヘテロシクロ−アルカン酸、ヘテロシクロ−カルボン酸、シトルリン、スタチン、ジアミノアルカン酸、およびその誘導体からなる群から独立に選択される。一部の実施形態では、各アミノ酸は、アラニン、アルギニン、アスパラギン酸、アスパラギン、ヒスチジン、グリシン、グルタミン酸、グルタミン、フェニルアラニン、リシン、ロイシン、セリン、チロシン、トレオニン、イソロイシン、プロリン、トリプトファン、バリン、システイン、メチオニン、およびセレノシステインからなる群から独立に選択される。一部の実施形態では、各アミノ酸は、アラニン、アルギニン、アスパラギン酸、アスパラギン、ヒスチジン、グリシン、グルタミン酸、グルタミン、フェニルアラニン、リシン、ロイシン、セリン、チロシン、トレオニン、イソロイシン、プロリン、トリプトファン、およびバリンからなる群から独立に選択される。一部の実施形態では、各アミノ酸は、タンパク新生または非タンパク新生アミノ酸から選択される。
【０２００】
別の実施形態では、各アミノ酸は、以下のＬ−（天然）アミノ酸：アラニン、アルギニン、アスパラギン酸、アスパラギン、ヒスチジン、グリシン、グルタミン酸、グルタミン、フェニルアラニン、リシン、ロイシン、セリン、チロシン、トレオニン、イソロイシン、トリプトファンおよびバリンからなる群から独立して選択される。
【０２０１】
別の実施形態では、各アミノ酸は、このような天然アミノ酸の以下のＤ−異性体：アラニン、アルギニン、アスパラギン酸、アスパラギン、ヒスチジン、グリシン、グルタミン酸、グルタミン、フェニルアラニン、リシン、ロイシン、セリン、チロシン、トレオニン、イソロイシン、トリプトファンおよびバリンからなる群から独立して選択される。
【０２０２】
特定の実施形態では、ペプチド放出可能なリンカーは、天然アミノ酸だけからなる。他の実施形態では、ペプチド放出可能なリンカーは、非天然アミノ酸だけからなる。一部の実施形態では、ペプチド放出可能なリンカーは、非天然アミノ酸に結合した天然アミノ酸からなる。一部の実施形態では、ペプチド放出可能なリンカーは、天然アミノ酸のＤ−異性体に結合した天然アミノ酸からなる。
【０２０３】
別の実施形態では、各アミノ酸は、β−アラニン、Ｎ−メチルグリシン、グリシン、リシン、バリンおよびフェニルアラニンからなる群から独立して選択される。
【０２０４】
例示的なペプチド放出可能なリンカーには、−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−、−Ｖａｌ−Ｃｉｔ−、−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−または−Ｖａｌ−Ａｌａ−を有する、ジペプチドまたはトリペプチドが含まれる。
【０２０５】
有用なペプチド放出可能なリンカーは、特定の酵素、例えば、腫瘍関連プロテアーゼによる酵素的切断に対するその選択性の点で、設計されて最適化され得る。一部の実施形態では、連結の切断は、カテプシンＢ、ＣもしくはＤ、またはプラスミンプロテアーゼによって触媒される。
【０２０６】
一部の実施形態では、ペプチド放出可能なリンカー（ＲＬ）は、−（−ＡＡ−）２〜１２−または（−ＡＡ−ＡＡ−）１〜６によって表され、ＡＡは、出現毎に、天然アミノ酸または非天然アミノ酸から独立して選択される。一態様では、ＡＡは、出現する毎に、天然アミノ酸から独立して選択される。別の態様では、ＲＬは、式：ＡＡ１−ＡＡ２−ＡＡ３を有するトリペプチドであり、ＡＡ１、ＡＡ２およびＡＡ３は、それぞれ独立してアミノ酸であり、ＡＡ１は、−ＮＨ−に結合しており、ＡＡ３は、Ｓ＊に結合している。さらに別の態様では、ＡＡ３は、ｇｌｙまたはβ−ａｌａである。
【０２０７】
一部の実施形態では、ペプチド放出可能なリンカーは、以下の角括弧中に表示されている式を有しており、下付文字ｗは、２〜１２の範囲の整数であり、またはｗは、２、３または４であるか、またはｗは、３である：
【化４８】
2021521111.tif 000053
（Ｒ１９は、各場合において、水素、メチル、イソプロピル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ベンジル、ｐ−ヒドロキシベンジル、−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ２ＳＣＨ３、−ＣＨ２ＣＯＮＨ２、−ＣＨ２ＣＯＯＨ、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＨ、−（ＣＨ２）３ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ２、−（ＣＨ２）３ＮＨ２、−（ＣＨ２）３ＮＨＣＯＣＨ３、−（ＣＨ２）３ＮＨＣＨＯ、−（ＣＨ２）４ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ２、−（ＣＨ２）４ＮＨ２、−（ＣＨ２）４ＮＨＣＯＣＨ３、−（ＣＨ２）４ＮＨＣＨＯ、−（ＣＨ２）３ＮＨＣＯＮＨ２、−（ＣＨ２）４ＮＨＣＯＮＨ２、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２ＮＨ２、２−ピリジルメチル−、３−ピリジルメチル−、４−ピリジルメチル−、フェニル、シクロヘキシル、
【化４９】
2021521111.tif 000054
からなる群から独立して選択される）。
【０２０８】
一部の態様では、Ｒ１９はそれぞれ、独立して、水素、メチル、イソプロピル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、−（ＣＨ２）３ＮＨ２または−（ＣＨ２）４ＮＨ２である。一部の態様では、Ｒ１９はそれぞれ、独立して、水素、イソプロピルまたは−（ＣＨ２）４ＮＨ２である。
【０２０９】
例示的なペプチド放出可能なリンカーは、式（Ｐａ）、（Ｐｂ）および（Ｐｃ）
【化５０】
2021521111.tif 000055
（式中、Ｒ２０およびＲ２１は、以下：
【化５１】
2021521111.tif 000056
の通りである）
【化５２】
2021521111.tif 000057
（式中、Ｒ２０、Ｒ２１およびＲ２２は、以下：
【化５３】
2021521111.tif 000058
の通りである）
【化５４】
2021521111.tif 000059
（式中、Ｒ２０、Ｒ２１、Ｒ２２およびＲ２３は、以下：
【化５５】
2021521111.tif 000060
の通りである）によって表される。
【０２１０】
［０００１］一部の実施形態では、ＲＬは、ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｃｉｔ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｇｌｎ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｇｌｕ−ｇｌｙ、ｐｈｅ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｌｅｕ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｇｌｙ−ｖａｌ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ａｌａ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ｌｅｕ、ｌｅｕ−ｌｅｕ−ｇｌｙ、ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｐｈｅ−ｇｌｙ、ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｐｈｅ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｇｌｙおよびｖａｌ−ｌｙｓ−β−ａｌａからなる群から選択されるペプチドを含む。
【０２１１】
他の実施形態では、ＲＬは、ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｃｉｔ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｇｌｎ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｇｌｕ−ｇｌｙ、ｐｈｅ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｌｅｕ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｇｌｙ−ｖａｌ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ａｌａ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ｌｅｕ、ｌｅｕ−ｌｅｕ−ｇｌｙ、ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｐｈｅ−ｇｌｙおよびｖａｌ−ｌｙｓ−β−ａｌａからなる群から選択されるペプチドを含む。
【０２１２】
また他の実施形態では、ＲＬは、ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｃｉｔ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｇｌｎ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｇｌｕ−ｇｌｙ、ｐｈｅ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｌｅｕ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ａｌａ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ｌｅｕ、ｌｅｕ−ｌｅｕ−ｇｌｙおよびｖａｌ−ｌｙｓ−β−ａｌａからなる群から選択されるペプチドを含む。
【０２１３】
さらに他の実施形態では、ＲＬは、ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｇｌｙ−ｖａｌ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ｇｌｙ−ｇｌｙおよびｇｌｙ−ｇｌｙ−ｐｈｅ−ｇｌｙからなる群から選択されるペプチドを含む。
【０２１４】
他の実施形態では、ＲＬは、ｖａｌ−ｇｌｎ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｇｌｕ−ｇｌｙ、ｐｈｅ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｌｅｕ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ａｌａ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ｌｅｕ、ｌｅｕ−ｌｅｕ−ｇｌｙおよびｖａｌ−ｌｙｓ−β−ａｌａからなる群から選択されるペプチドである。
【０２１５】
また他の実施形態では、ＲＬは、ｖａｌ−ｌｙｓ−ｇｌｙである。
【０２１６】
また他の実施形態では、ＲＬは、ｖａｌ−ｌｙｓ−β−ａｌａである。
分断剤（Ｓ＊）：
【０２１７】
本明細書に記載されているカンプトテシンコンジュゲートはまた、分断剤（Ｓ＊）を含むことができる。分断剤の部分は、例えば、特定のカンプトテシンまたは他の連結単位構成要素の疎水性をマスクするために有用である。
【０２１８】
代表的な分断剤には、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）単位、シクロデキストリン単位、ポリアミド、親水性ペプチド、多糖およびデンドリマーが含まれる。
【０２１９】
ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）単位、シクロデキストリン単位、ポリアミド、親水性ペプチド、多糖またはデンドリマーが、Ｑに含まれている場合、これらの基は、「線状」構成要素として、または側鎖もしくは分岐状構成要素として存在してもよい。分岐型が存在するそのような実施形態の場合、リンカー単位は、通常、例えば、連結単位の残部へのＰＥＧ単位の単純な機能性コンジュゲーションをもたらす、リシン残基（または、並列コネクター単位、ＬＰ）を含むであろう。
【０２２０】
ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）単位
多分散性ＰＥＧ、単分散性ＰＥＧおよび別個のＰＥＧは、本発明の化合物における分断剤の部分として使用することができる。多分散性ＰＥＧは、サイズおよび分子量の不均一な混合物であり、一方、単分散性ＰＥＧは典型的には、不均一な混合物から精製され、したがって、単一の鎖長および分子量を実現する。好ましいＰＥＧは、別個のＰＥＧ、すなわち重合過程によるのではなくステップ毎の様式で合成された化合物である。別個のＰＥＧは、明確および特定の鎖長を有する単一分子を提供する。
【０２２１】
本明細書において提供するＰＥＧは、１個または複数のポリエチレングリコール鎖を含む。ポリエチレングリコール鎖は、少なくとも２つのエチレンオキシド（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）サブ単位からなる。ポリエチレングリコール鎖は、例えば、直鎖状、分岐状または星形状の構成で一緒に連結することができる。典型的には、ＰＥＧ鎖の少なくとも１つは、リンカー単位の構成要素（例えば、ＬＰ）上の適切な部位への共有結合のために一方の末端で誘導体化されているか、またはリンカー単位構成要素（例えば、Ｚ−Ａ−Ｓ＊−ＲＬ−、Ｚ−Ａ−Ｓ＊−ＲＬ−Ｙ−）の２つを共有結合によりつなげるために、線上の（例えば、二官能性）連結基として使用され得る。リンカー単位内の例示的な結合は、条件付きでなく切断可能な連結により、または条件付きで切断可能な連結を介する。例示的な結合は、アミド連結、エーテル連結、エステル連結、ヒドラゾン連結、オキシム連結、ジスルフィド連結、ペプチド連結またはトリアゾール連結を介してである。一部の態様では、リンカー単位内の結合は、条件付きでなく切断可能な連結によってである。一部の態様では、リンカー単位内の結合は、エステル連結、ヒドラゾン連結、オキシム連結、またはジスルフィド連結を介してではない。一部の態様では、リンカー単位内の結合は、ヒドラゾン連結を介してではない。
【０２２２】
条件付きで切断可能な連結は、血漿中で循環している間は切断に対して実質的に感受性でないが、細胞内または腫瘍内環境において切断に対して感受性である連結を指す。条件付きでなく切断可能な連結は、いかなる生物環境においても切断に対して実質的に感受性でないものである。ヒドラゾンの化学的加水分解、ジスルフィドの還元、およびペプチド結合またはグリコシド連結の酵素的切断は、条件付きで切断可能な連結の例である。
【０２２３】
一部の実施形態では、ＰＥＧ単位は、並列コネクター単位Ｂに直接結合している。ＰＥＧ単位の他の末端（複数可）は遊離し、繋がれておらず、メトキシ、カルボン酸、アルコールまたは他の適切な官能基の形態を取り得る。メトキシ、カルボン酸、アルコールまたは他の適切な官能基は、ＰＥＧ単位の末端ＰＥＧサブ単位のためのキャップとして作用する。繋がれていないとは、その繋がれていない部位において、カンプトテシンに、抗体に、または別の連結構成要素に、ＰＥＧ単位が結合していないことを意味する。ＰＥＧ単位は、繰り返しエチレングリコールサブ単位を含むことに加えて、また非ＰＥＧ材料を含有し得ることを当業者は理解する（例えば、複数のＰＥＧ鎖の互いへのカップリングを促進する）。非ＰＥＧ材料は、繰り返し−ＣＨ２ＣＨ２Ｏ−サブ単位の部分ではないＰＥＧ単位中の原子を指す。本明細書において提供する一部の実施形態では、ＰＥＧ単位は、非ＰＥＧ要素を介して互いに結合している２個のモノマーＰＥＧ鎖を含む。本明細書において提供する他の実施形態では、ＰＥＧ単位は、中心コアまたは並列コネクター単位に結合している２個の直鎖状ＰＥＧ鎖を含む（すなわち、ＰＥＧ単位自体は分岐状である）。
【０２２４】
当業者が利用可能ないくつかのＰＥＧ結合方法が存在する［例えば、Ｇｏｏｄｓｏｎら（１９９０年）Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、８巻：３４３頁（部位特異的突然変異誘発後のそのグリコシル化部位におけるインターロイキン−２のＰＥＧ化）；ＥＰ０４０１３８４（Ｇ−ＣＳＦへのＰＥＧのカップリング）；Ｍａｌｉｋら、（１９９２年）、Ｅｘｐ．  Ｈｅｍａｔｏｌ．、２０巻：１０２８〜１０３５頁（トレシルクロリドを使用したＧＭ−ＣＳＦのＰＥＧ化）；ＡＣＴ公開番号第ＷＯ９０／１２８７４号（システイン特異的ｍＰＥＧ誘導体を使用した組換え技術によって導入されたシステイン残基を含有するエリスロポエチンのＰＥＧ化）；米国特許第５，７５７，０７８号（ＥＰＯペプチドのＰＥＧ化）；米国特許第５，６７２，６６２号（ポリ（エチレングリコール）およびプロピオン酸またはブタン酸で一置換されている関連するポリマー、およびバイオ技術用途のためのその機能的誘導体）；米国特許第６，０７７，９３９号（ペプチドのＮ−末端アルファ炭素のＰＥＧ化）；Ｖｅｒｏｎｅｓｅら、（１９８５年）Ａｐｐｌ．  Ｂｉｏｃｈｅｍ．  Ｂｉｏｅｃｈｎｏｌ、１１巻：１４１〜１４２頁（ＰＥＧ−ニトロフェニルカーボネート（「ＰＥＧ−ＮＰＣ」）またはＰＥＧ−トリクロロフェニルカーボネートによるペプチドのＮ−末端α−炭素のＰＥＧ化）；ならびにＶｅｒｏｎｅｓｅ、（２００１年）Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ、２２巻：４０５〜４１７頁（ペプチドおよびタンパク質ＰＥＧ化についての総論）を参照されたい］。
【０２２５】
例えば、ＰＥＧは、反応性基を介してアミノ酸残基に共有結合し得る。反応性基は、それに対して活性化ＰＥＧ分子が結合し得るものである（例えば、遊離アミノまたはカルボキシル基）。例えば、Ｎ末端アミノ酸残基およびリシン（Ｋ）残基は、遊離アミノ基を有し、Ｃ末端アミノ酸残基は、遊離カルボキシル基を有する。チオール基（例えば、システイン残基上で見出されるような）はまた、ＰＥＧを結合させるための反応性基として有用である。さらに、ポリペプチドのＣ末端において特異的に活性化基（例えば、ヒドラジド、アルデヒド、および芳香族−アミノ基）を導入するための酵素によって補助される方法が記載されている（Ｓｃｈｗａｒｚら、（１９９０年）Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｅｎｚｙｍｏｌ．、１８４巻：１６０頁；Ｒｏｓｅら、（１９９１年）Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ．、２巻：１５４頁；およびＧａｅｒｔｎｅｒら、（１９９４年）Ｊ．  Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ．、２６９巻：７２２４頁を参照されたい］。
【０２２６】
一部の実施形態では、ＰＥＧ分子は、異なる反応性部分を有するメトキシル化ＰＥＧ（「ｍＰＥＧ」）を使用してアミノ基に結合し得る。このような反応性部分の非限定的例には、スクシンイミジルスクシネート（ＳＳ）、スクシンイミジルカーボネート（ＳＣ）、ｍＰＥＧ−イミデート、パラ−ニトロフェニルカーボネート（ＮＰＣ）、スクシンイミジルプロピオネート（ＳＰＡ）、および塩化シアヌルが含まれる。このようなｍＰＥＧの非限定的例は、ｍＰＥＧ−スクシンイミジルスクシネート（ｍＰＥＧ−ＳＳ）、ｍＰＥＧ２−スクシンイミジルスクシネート（ｍＰＥＧ２−ＳＳ）；ｍＰＥＧ−スクシンイミジルカーボネート（ｍＰＥＧ−ＳＣ）、ｍＰＥＧ２−スクシンイミジルカーボネート（ｍＰＥＧ２−ＳＣ）；ｍＰＥＧ−イミデート、ｍＰＥＧ−パラ−ニトロフェニルカーボネート（ｍＰＥＧ−ＮＰＣ）、ｍＰＥＧ−イミデート；ｍＰＥＧ２−パラ−ニトロフェニルカーボネート（ｍＰＥＧ２−ＮＰＣ）；ｍＰＥＧ−スクシンイミジルプロピオネート（ｍＰＥＧ−ＳＰＡ）；ｍＰＥＧ２−スクシンイミジルプロピオネート（ｍＰＥＧ、−ＳＰＡ）；ｍＰＥＧ−Ｎ−ヒドロキシ−スクシンイミド（ｍＰＥＧ−ＮＨＳ）；ｍＰＥＧ２−Ｎ−ヒドロキシ−スクシンイミド（ｍＰＥＧ２−ＮＨＳ）；ｍＰＥＧ−シアヌルクロリド；ｍＰＥＧ２−シアヌルクロリド；ｍＰＥＧ２−リシノール−ＮＰＣ、およびｍＰＥＧ２−Ｌｙｓ−ＮＨＳを含む。
【０２２７】
一般に、ＰＥＧ単位を構成するＰＥＧ鎖の少なくとも１つは、官能基化されており、その結果、他のリンカー単位構成要素への共有結合が可能となる。
【０２２８】
官能基化は、例えば、アミン、チオール、ＮＨＳエステル、マレイミド、アルキン、アジド、カルボニルまたは別の官能基によるものを含む。一部の実施形態では、ＰＥＧ単位は、他のリンカー単位構成要素へのカップリングを実現する、または２つもしくはそれより多いＰＥＧ鎖のカップリングを容易にするために、非ＰＥＧ材料（すなわち、−ＣＨ２ＣＨ２Ｏ−を含まない材料）をさらに含む。
【０２２９】
リンカー単位中のＰＥＧ単位（または他の分断剤）の存在は、得られたカンプトテシンコンジュゲートの薬物動態に及ぼす潜在的な２つのインパクトを有し得る。望ましいインパクトは、カンプトテシンコンジュゲートの露出した疎水性要素により誘発される、またはカンプトテシン自体への非特異的な相互作用の低下に起因する、クリアランスの低下（および、生じる暴露の増大）である。第２のインパクトは、望ましいものではなく、カンプトテシンコンジュゲートの分子量の増加に時として起因する、分布の体積および速度の低下である。ＰＥＧサブ単位の数が増加することによって、コンジュゲートの流体力学的半径が増加し、典型的には、拡散性の減少がもたらされる。ひいては、拡散性の減少により、典型的には、カンプトテシンコンジュゲートが腫瘍中に浸透する能力が低下する（Schmidt  and  Wittrup,  Mol  Cancer  Ther  2009;8:2861-2871）。これらの２つの競合する薬物動態学的効果のため、カンプトテシンコンジュゲートのクリアランスを減少させ、そうすることで血漿曝露を増大させるのに十分に大きいが、その拡散性を大きく低下させ、カンプトテシンコンジュゲートが意図する標的細胞集団に到達する能力を妨害する程度には大きくない、ＰＥＧを使用することが望ましい。特定の薬物−リンカーのための最適ＰＥＧサイズを選択するための方法に関しては、参照により本明細書に援用されている実施例（例えば、ＵＳ２０１６／０３１０６１２の実施例１、１８および２１）を参照されたい。
【０２３０】
実施形態の１つの群では、ＰＥＧ単位は、それぞれが、少なくとも２個のサブ単位、少なくとも３個のサブ単位、少なくとも４個のサブ単位、少なくとも５個のサブ単位、少なくとも６個のサブ単位、少なくとも７個のサブ単位、少なくとも８個のサブ単位、少なくとも９個のサブ単位、少なくとも１０個のサブ単位、少なくとも１１個のサブ単位、少なくとも１２個のサブ単位、少なくとも１３個のサブ単位、少なくとも１４個のサブ単位、少なくとも１５個のサブ単位、少なくとも１６個のサブ単位、少なくとも１７個のサブ単位、少なくとも１８個のサブ単位、少なくとも１９個のサブ単位、少なくとも２０個のサブ単位、少なくとも２１個のサブ単位、少なくとも２２個のサブ単位、少なくとも２３個のサブ単位、または少なくとも２４個のサブ単位を有する、１個または複数の直鎖状ＰＥＧ鎖を含む。好ましい実施形態では、ＰＥＧ単位は、合計少なくとも４個のサブ単位、少なくとも６個のサブ単位、少なくとも８個のサブ単位、少なくとも１０個のサブ単位、または少なくとも１２個のサブ単位を含む。一部のこのような実施形態では、ＰＥＧ単位は、合計約７２個のサブ単位以下、好ましくは合計約３６個のサブ単位以下を含む。
【０２３１】
実施形態の別の群では、ＰＥＧ単位は、合計４〜７２個、４〜６０個、４〜４８個、４〜３６個もしくは４〜２４個のサブ単位、５〜７２個、５〜６０個、５〜４８個、５〜３６個もしくは５〜２４個のサブ単位、６〜７２個、６〜６０個、６〜４８個、６〜３６個もしくは６〜２４個のサブ単位、７〜７２個、７〜６０個、７〜４８個、７〜３６個もしくは７〜２４個のサブ単位、８〜７２個、８〜６０個、８〜４８個、８〜３６個もしくは８〜２４個のサブ単位、９〜７２個、９〜６０個、９〜４８個、９〜３６個もしくは９〜２４個のサブ単位、１０〜７２個、１０〜６０個、１０〜４８個、１０〜３６個もしくは１０〜２４個のサブ単位、１１〜７２個、１１〜６０個、１１〜４８個、１１〜３６個もしくは１１〜２４個のサブ単位、１２〜７２個、１２〜６０個、１２〜４８個、１２〜３６個もしくは１２〜２４個のサブ単位、１３〜７２個、１３〜６０個、１３〜４８個、１３〜３６個もしくは１３〜２４個のサブ単位、１４〜７２個、１４〜６０個、１４〜４８個、１４〜３６個もしくは１４〜２４個のサブ単位、１５〜７２個、１５〜６０個、１５〜４８個、１５〜３６個もしくは１５〜２４個のサブ単位、１６〜７２個、１６〜６０個、１６〜４８個、１６〜３６個もしくは１６〜２４個のサブ単位、１７〜７２個、１７〜６０個、１７〜４８個、１７〜３６個もしくは１７〜２４個のサブ単位、１８〜７２個、１８〜６０個、１８〜４８個、１８〜３６個もしくは１８〜２４個のサブ単位、１９〜７２個、１９〜６０個、１９〜４８個、１９〜３６個もしくは１９〜２４個のサブ単位、２０〜７２個、２０〜６０個、２０〜４８個、２０〜３６個もしくは２０〜２４個のサブ単位、２１〜７２個、２１〜６０個、２１〜４８個、２１〜３６個もしくは２１〜２４個のサブ単位、２２〜７２個、２２〜６０個、２２〜４８個、２２〜３６個もしくは２２〜２４個のサブ単位、２３〜７２個、２３〜６０個、２３〜４８個、２３〜３６個もしくは２３〜２４個のサブ単位、または２４〜７２個、２４〜６０個、２４〜４８個、２４〜３６個もしくは２４個のサブ単位を含む。
【０２３２】
一部の実施形態では、分断剤Ｓ＊は、２〜２０個、または２〜１２個、または４〜１２個、または４個、８個もしくは１２個の−ＣＨ２ＣＨ２Ｏ−サブ単位を含む、直鎖状ＰＥＧ単位である。一部の実施形態では、直鎖状ＰＥＧ単位は、ＰＥＧ単位の一方の末端において、ＲＬ単位に結合しており、ＰＥＧ単位のもう一方の末端において、ストレッチャー単位／コネクター単位（Ｚ−Ａ−）に結合している。一部の実施形態では、ＰＥＧ単位は、ＲＬ単位とアミド結合を形成する−ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（Ｏ）−基を介して、ＲＬ単位に結合しており（例えば、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ−ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（Ｏ）−ＲＬ）、Ｚ−Ａ−部分とアミド結合を形成する−ＮＨ−基を介して、ストレッチャー単位／コネクター単位（Ｚ−Ａ−）に結合している（例えば、Ｚ−Ａ−ＮＨ−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ−）。
【０２３３】
ＲＬおよびストレッチャー単位／コネクター単位（Ｚ−Ａ−）に結合しているＰＥＧ単位に関する例示的な実施形態は、以下：
【化５６】
2021521111.tif 000061
に示されており、特定の実施形態では、ＰＥＧ単位は以下：
【化５７】
2021521111.tif 000062
（式中、左側の波線は、Ｚ−Ａ−への結合部位を示し、右側の波線は、ＲＬへの結合部位を示し、ｂはそれぞれ、２〜７２、４〜７２、６〜７２、８〜７２、１０〜７２、１２〜７２、２〜２４、４〜２４、６〜２４または８〜２４、２〜１２、４〜１２、６〜１２および８〜１２から独立して選択される）である。一部の実施形態では、下付文字ｂは、２、４、８、１２または２４である。一部の実施形態では、下付文字ｂは、２である。一部の実施形態では、下付文字ｂは、４である。一部の実施形態では、下付文字ｂは、８である。一部の実施形態では、下付文字ｂは、１２である。
【０２３４】
一部の実施形態では、直鎖状ＰＥＧ単位は、一方の末端において並列コネクター単位に結合しており、もう一方の末端において末端キャップを含む。一部の実施形態では、ＰＥＧ単位は、並列コネクター単位であるリシン残基のアミノ基とのアミド結合を形成するカルボニル基を介して、並列コネクター単位に結合しており（例えば、−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｎ−Ｃ（Ｏ）−ＬＰ−）、Ｃ１〜４アルキルおよびＣ１〜４アルキル−ＣＯ２Ｈからなる群から選択されるＰＥＧ単位末端キャップ基を含む。一部の実施形態では、分断剤Ｓ＊は、４個、８個または１２個の−ＣＨ２ＣＨ２Ｏ−サブ単位および末端メチルキャップを含む、直鎖状ＰＥＧ単位である。
【０２３５】
本明細書に提供されている実施形態のいずれかにおいて使用され得る例示的な直鎖状ＰＥＧ単位は、以下：
【化５８】
2021521111.tif 000063
の通りであり、特定の実施形態では、ＰＥＧ単位は以下：
【化５９】
2021521111.tif 000064
（式中、波線は、並列コネクター単位（ＬＰ）への結合部位を示し、ｎはそれぞれ、４〜７２、６〜７２、８〜７２、１０〜７２、１２〜７２、６〜２４または８〜２４から独立して選択される）である。一部の実施形態では、下付文字ｂは、約４、約８、約１２または約２４である。
【０２３６】
本明細書において使用する場合、用語「ＰＥＧ２」、「ＰＥＧ４」、「ＰＥＧ８」および「ＰＥＧ１２」とは、ＰＥＧサブ単位の数を含むＰＥＧ単位の特定の実施形態を指す（すなわち、サブスクリプション（subscription）「ｂ」の数）。例えば、「ＰＥＧ２」とは、２個のＰＥＧサブ単位を含むＰＥＧ単位の実施形態を指し、「ＰＥＧ４」とは、４個のＰＥＧサブ単位を含むＰＥＧ単位の実施形態を指し、「ＰＥＧ８」とは、８個のＰＥＧサブ単位を含むＰＥＧ単位の実施形態を指し、「ＰＥＧ１２」とは、１２個のＰＥＧサブ単位を含むＰＥＧ単位の実施形態を指す。カンプトテシン−ライナー化合物
【０２３７】
本明細書に記載されている通り、ＰＥＧサブ単位の数は、得られたカンプトテシンコンジュゲートのクリアランスを改善させるが、腫瘍に浸透するコンジュゲートの能力に大きくインパクトを与えないように選択される。実施形態では、使用のために選択されるＰＥＧサブ単位の数は、好ましくは、２個のサブ単位〜約２４個のサブ単位、４個のサブ単位〜約２４個のサブ単位、より好ましくは約４個のサブ単位〜約１２個のサブ単位を有する。
【０２３８】
本開示の好ましい実施形態では、ＰＥＧ単位は、約３００ダルトン〜約５キロダルトン；約３００ダルトン〜約４キロダルトン；約３００ダルトン〜約３キロダルトン；約３００ダルトン〜約２キロダルトン；または約３００ダルトン〜約１キロダルトンである。一部のこのような態様では、ＰＥＧ単位は、少なくとも６個のサブ単位または少なくとも８個、１０個または１２個のサブ単位を有する。一部のこのような態様では、ＰＥＧ単位は、少なくとも６個のサブ単位または少なくとも８個、１０個または１２個のサブ単位であるが、７２個以下のサブ単位、好ましくは３６個以下のサブ単位を有する。
【０２３９】
ＰＥＧサブ単位に言及するとき、および文脈によって、例えば、コンプトテシンコンジュゲートまたはコンプトテシン−リンカー化合物の集団に言及し、そして多分散性ＰＥＧを使用するとき、サブ単位の数は、平均数を表すことができることを認識されたい。
並列コネクター単位（ＬＰ）：
【０２４０】
一部の実施形態では、カンプトテシンコンジュゲートおよびカンプトテシンリンカー化合物は、分断剤（リンカー単位中、−ＬＰ（Ｓ＊）−として示されている）への結合点を提供する並列コネクター単位を含むであろう。一般的な実施形態として、ＰＥＧ単位は、以下に示されているリシンなどの並列コネクター単位に結合されることができ、波線およびアスタリスクは、カンプトテシンコンジュゲートのリンカー単位またはカンプトテシンリンカー化合物：
【化６０】
2021521111.tif 000065
内の共有結合的連結を示す。
【０２４１】
一部の実施形態では、並列コネクター単位（ＬＰ）および分断剤（Ｓ＊）（一緒になって、−ＬＰ（Ｓ＊）−）は、以下の構造
【化６１】
2021521111.tif 000066
（式中、ｎは、８〜２４の範囲である。ＲＰＥＧは、ＰＥＧ単位キャッピング基、好ましくは−ＣＨ３または−ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ２Ｈであり、アスタリスク（＊）は、式Ｚａ、Ｚａ’、Ｚｂ’またはＺｃ’において対応するコネクター単位Ａへの共有結合を示し、波線は、放出可能なリンカー（ＲＬ）への共有結合を示す）を有する。一部の実施形態では、この構造は、式ＺａまたはＺａ’中のコネクター単位Ａに結合している。一部の実施形態では、ｎは、２、４、８または１２である。ここで示されているものなどの例では、示されているＰＥＧ基は、異なる長さのＰＥＧ基、および並列コネクター単位に直接、結合し得るか、またはこの単位への結合のために修飾され得る他の分断剤を含めた、様々な分断剤の例示であることが意図される。
スペーサー（Ｙ）：
【０２４２】
一部の実施形態では、本明細書において提供されるカンプトテシンコンジュゲートは、放出可能なリンカー（ＲＬ）とカンプトテシンとの間にスペーサー（Ｙ）を有する。スペーサーは、ＲＬのカンプトテシンへの結合を容易にする官能基とすることができるか、またはコンジュゲートの残部からカンプトテシンの放出をさらに容易にする追加的な構造上の構成要素（例えば、自壊的パラ−アミノベンジル（ＰＡＢ）構成要素）を提供することができる。
【０２４３】
さらに他のスペーサー単位は、以下の式：
【化６２】
2021521111.tif 000067
（式中、各場合において、ＥＷＧは、電子求引基を表す）によって表される。一部の実施形態では、ＥＷＧは、−ＣＮ、−ＮＯ２、−ＣＸ３、−Ｘ、Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ’、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ’）２、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ’、−Ｃ（＝Ｏ）Ｘ、−Ｓ（＝Ｏ）２Ｒ’、−Ｓ（＝Ｏ）２ＯＲ’、−Ｓ（＝Ｏ）２ＮＨＲ’、−Ｓ（＝Ｏ）２Ｎ（Ｒ’）２、−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＲ’）２、−Ｐ（＝Ｏ）（ＣＨ３）ＮＨＲ’、−ＮＯ、−Ｎ（Ｒ’）３＋からなる群から選択され、Ｘは、−Ｆ、−Ｂｒ、−Ｃｌまたは−Ｉであり、Ｒ’は、水素およびＣ１〜６アルキルからなる群から独立して選択される。
【０２４４】
また他の実施形態では、スペーサー単位は、以下の式：
【化６３】
2021521111.tif 000068
によって表される。
【０２４５】
また他の実施形態では、スペーサー単位は、以下の式：
【化６４】
2021521111.tif 000069
によって表される。
下付文字「ｐ」
【０２４６】
本発明の一態様では、下付文字ｐは、個々のカンプトテシンコンジュゲートのリガンド単位上の薬物リンカー部分の数を表し、好ましくは、１〜１６、１〜１２、１〜１０または１〜８の範囲の整数である。個々のカンプトテシンコンジュゲートは、カンプトテシンコンジュゲート化合物として称することもできる。本明細書における実施形態のいずれかにおいて、個々のカンプトテシンコンジュゲートのリガンド単位にコンジュゲートされた１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５または１６個の薬物リンカー部分とすることができる。本発明の別の態様では、実施形態の群の１つは、各リガンド単位に結合したカンプトテシンリンカー化合物部分の数を除いて、実質的に同一の個々のカンプトテシンコンジュゲートの集団を記載し（すなわち、カンプトテシンコンジュゲート組成物）、したがって、ｐは、カンプトテシンコンジュゲート組成物のリガンド単位に結合しているカンプトテシンリンカー化合物部分の数平均を表す。実施形態のそのような群では、ｐは、１〜約１６、１〜約１２、１〜約１０または１〜約８、２〜約１６、２〜約１２、２〜約１０または２〜約８の範囲の数である。一部の態様では、ｐは、約２である。一部の態様では、ｐは、約４である。一部の態様では、ｐは、約８である。一部の態様では、ｐは、約１６である。一部の態様では、ｐは、２である。一部の態様では、ｐは、４である。一部の態様では、ｐは、８である。一部の態様では、ｐは、１６である。一部の態様では、Ｐ値は、平均薬物負荷量、および組成物中の主要なＡＤＣの薬物負荷量を指す。
【０２４７】
一部の態様では、コンジュゲーションは、鎖間ジスルフィドを介するものであり、リガンド分子にコンジュゲートされている１〜約８のカンプトテシンリンカー化合物（Ｑ−Ｄ）分子となろう。一部の態様では、コンジュゲーションは、導入したシステイン残基および鎖間ジスルフィドを介するものであり、リガンド分子にコンジュゲートされている１〜１０または１〜１２または１〜１４または１〜１６のカンプトテシンリンカー化合物分子となろう。一部の態様では、コンジュゲーションは、導入したシステイン残基を介するものとなり、リガンド分子にコンジュゲートされている２または４つのカンプトテシンリンカー化合物分子となろう。
部分放出された遊離薬物
【０２４８】
一部の実施形態では、コンジュゲート中のＲＬ単位が切断されて、そこに結合している１つのアミノ酸残基を有する薬物部分が残る化合物である。一部の実施形態では、部分放出遊離薬物（薬物−アミノ酸コンジュゲート）は、式（ＩＶ）の化合物：
【化６５】
2021521111.tif 000070
あるいは立体異性体、またはそれらの立体異性体の混合物、または薬学的に許容されるそれらの塩（Ｒｘは、本明細書に記載されているアミノ酸側鎖である）である。一部の実施形態では、Ｒｘは、Ｈ、メチル、イソプロピル、ベンジルまたは−（ＣＨ２）４−ＮＨ２である。一部の実施形態では、Ｒｘは、Ｈまたはメチルである。一部の実施形態では、Ｒｘは、Ｈである。一部の実施形態では、Ｒｘは、メチルである。
【０２４９】
一部の実施形態では、式（ＩＶ）の化合物は、生物活性化合物である。一部の実施形態では、このような化合物は、トポイソメラーゼを阻害する、腫瘍細胞を死滅させる、腫瘍細胞、がん細胞または腫瘍の成長を阻害する、腫瘍細胞もしくはがん細胞の複製を阻害する、総合的な腫瘍負荷を低下させる、またはがん性細胞の数を低下させる、あるいはがんもしくは自己免疫疾患に関連する１つまたは複数の症状を改善する方法に有用である。このような方法は、例えば、がん細胞に式（ＩＶ）の化合物を接触させるステップを含む。
カンプトテシンコンジュゲート混合物および組成物
【０２５０】
本発明は、本明細書に記載されている、カンプトテシンコンジュゲート混合物、およびカンプトテシンコンジュゲートのいずれかを含む医薬組成物を提供する。混合物および医薬組成物は、複数のコンジュゲートを含む。一部の態様では、混合物または組成物中のコンジュゲートはそれぞれ、同一であるか、または実質的に同一であるが、これらの混合物または組成物中のリガンド上の薬物−リンカーの分布および薬物負荷量は、様々となり得る。例えば、薬物−リンカーを標的化リガンドとしての抗体にコンジュゲートするために使用されるコンジュゲーション技術は、混合物および／または組成物中の抗体（リガンド単位）上のカンプトテシンリンカー化合物の分布に関して不均質な組成物または混合物をもたらす恐れがある。一部の態様では、このような分子の混合物または組成物中の抗体分子の各々に対するカンプトテシンリンカー化合物の負荷量は、１〜１４の範囲の整数である。
【０２５１】
それらの態様では、全体として組成物を述べる場合、薬物−リンカーの負荷量は、１〜約１４の範囲の数である。組成物または混合物中では、非コンジュゲート抗体の百分率がやはり小さくてもよい。混合物または組成物中のリガンド単位あたりの薬物−リンカーの数平均（すなわち、平均の薬物−負荷量）は、標的細胞に送達することができる薬物量の最大量が決まるので、重要な属性である。平均薬物負荷量は、１、２、または約２、３、または約３、４、または約４、５、または約５、６、または約６、７、または約７、８、または約８、９、または約９、１０、または約１０、１１、または約１１、１２、または約１２、１３、または約１３、１４、または約１４、１５、または約１５、１６、または約１６とすることができる。
【０２５２】
一部の態様では、混合物および医薬組成物は、複数の（すなわち、集団）のコンジュゲートを含むが、これらのコンジュゲートは、同一であるかまたは実質的に同一であり、混合物および／または組成物中のリガンド分子上の薬物−リンカーの分布に関して、ならびに混合物および／または組成物中のリガンド分子上の薬物−リンカーの負荷量に関して、実質的に均質である。このような態様の一部では、抗体リガンド単位上の薬物−リンカーの負荷量は、２または４である。組成物または混合物中では、非コンジュゲート抗体の百分率は、やはり小さくてもよい。このような実施形態では、平均薬物負荷量は、約２または約４である。通常、このような組成物および混合物は、部位特異的コンジュゲーション技法の使用に起因し、コンジュゲーションは、導入したシステイン残基によるものである。
【０２５３】
コンジュゲーション反応からの調製時におけるリガンド単位あたりのカンプトテシンまたはカンプトテシン−リンカー化合物の数平均は、質量分析法、ＥＬＩＳＡアッセイ、ＨＰＬＣ（例えば、ＨＩＣ）などの慣用的な手段によって特徴付けることができる。ｐに関する、カンプトテシンコンジュゲートの定量的分布もまた、決定することができる。一部の例では、均質なカンプトテシンコンジュゲートの分離、精製および特徴付けは、逆相ＨＰＬＣまたは電気泳動などの手段によって実現することができる。
【０２５４】
一部の態様では、本組成物は、本明細書に記載されているカンプトテシンコンジュゲートおよび薬学的に許容される担体を含む医薬組成物である。一部の態様では、本医薬組成物は、液状形態にある。一部の態様では、本医薬組成物は、固体である。一部の態様では、本医薬組成物は、凍結乾燥粉末である。
【０２５５】
医薬組成物を含めた組成物は、精製した形態で提供することができる。本明細書において使用する場合、「精製した」とは、単離したとき、単離物が、単離物の重量によって少なくとも９５％の、および、別の態様では、少なくとも９８％のコンジュゲートを含有することを意味する。
使用方法
がんの処置
【０２５６】
本明細書に記載のカンプトテシンコンジュゲートは、腫瘍細胞もしくはがん細胞の増殖を阻害し、腫瘍もしくはがん細胞においてアポトーシスをもたらし、または患者においてがんを処置するのに有用である。したがって、それを必要とする対象において、がんを処置する方法であって、該対象に本明細書に記載されている１種または複数のカンプトテシン（Captothecin）コンジュゲートを投与するステップを含む方法が、本明細書において提供される。
【０２５７】
したがって、がんの処置のための種々の状況においてカンプトテシンコンジュゲートを使用することができる。カンプトテシンコンジュゲートを使用して、薬物を腫瘍細胞またはがん細胞に送達することができる。理論に束縛されるものではないが、一実施形態では、カンプトテシンコンジュゲートのリガンド単位は、がん細胞もしくは腫瘍細胞関連抗原に結合し、または会合し、カンプトテシンコンジュゲートは、受容体媒介エンドサイトーシスまたは他の内部移行機序によって腫瘍細胞またはがん細胞内に取り込まれる（内部移行する）ことができる。抗原は、腫瘍細胞もしくはがん細胞に結合することができ、または腫瘍細胞もしくはがん細胞と関連している細胞外マトリックスタンパク質でよい。細胞内に入ると、薬物は、ペプチド切断によって細胞内で放出される。代わりの実施形態では、遊離の薬物は、腫瘍細胞またはがん細胞の外でカンプトテシンコンジュゲートから切断され、遊離の薬物はそれに続いて、細胞に浸透する。
【０２５８】
一実施形態では、リガンド単位は、腫瘍細胞またはがん細胞に結合する。
【０２５９】
別の実施形態では、リガンド単位は、腫瘍細胞またはがん細胞の表面上にある腫瘍細胞抗原またはがん細胞抗原に結合する。
【０２６０】
別の実施形態では、リガンド単位は、腫瘍細胞またはがん細胞と関連する細胞外マトリックスタンパク質である腫瘍細胞抗原またはがん細胞抗原に結合する。
【０２６１】
特定の腫瘍細胞またはがん細胞についてのリガンド単位の特異性は、最も効果的に処置されるこれらの腫瘍またはがんを決定するために重要であり得る。例えば、造血性のがんに存在するがん細胞抗原を標的とするカンプトテシンコンジュゲートは、血液悪性腫瘍を処置するために有用であり得る（例えば、抗ＣＤ３０、抗ＣＤ７０、抗ＣＤ１９、抗ＣＤ３３結合リガンド単位（例えば、抗体）は、血液悪性腫瘍を処置するのに有用であり得る）。固形腫瘍に存在するがん細胞抗原を標的とするカンプトテシンコンジュゲートは、このような固形腫瘍を処置するのに有用であり得る。
【０２６２】
カンプトテシンコンジュゲートで処置することができるがんには、これらに限定されないが、造血性のがん、例えば、リンパ腫（ホジキンリンパ腫および非ホジキンリンパ腫）および白血病など、ならびに固形腫瘍が含まれる。造血性のがんの例には、濾胞性リンパ腫、未分化大細胞リンパ腫、マントル細胞リンパ腫、急性骨髄芽球性白血病、慢性骨髄球性白血病、慢性リンパ球性白血病、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、および多発性骨髄腫が含まれる。固形腫瘍の例には、線維肉腫、粘液肉腫、脂肪肉腫、軟骨肉腫、骨原性肉腫、脊索腫、血管肉腫、内皮肉腫、リンパ管肉腫、リンパ管内皮肉腫、滑膜腫、中皮腫、ユーイング腫瘍、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、結腸がん、結腸直腸がん、腎臓がん、膵臓がん、骨がん、乳がん、卵巣がん、前立腺がん、食道がん、胃がん、口腔がん、鼻腔がん、咽喉がん、扁平上皮癌、基底細胞癌、腺癌、汗腺癌、皮脂腺癌、乳頭状癌、乳頭状腺癌、嚢胞腺癌、髄様癌、気管支原性癌、腎細胞癌、ヘパトーマ、胆管癌、絨毛癌、精上皮腫、胎児性癌、ウイルムス腫瘍、子宮頸がん、子宮がん、睾丸がん、小細胞肺癌、膀胱癌、肺がん、上皮癌、神経膠腫、多形神経膠芽腫、星状細胞腫、髄芽腫、頭蓋咽頭腫、上衣腫、松果体腫、血管芽細胞腫、聴神経腫、乏突起膠腫、髄膜腫、皮膚がん、黒色腫、神経芽細胞腫、および網膜芽細胞腫が含まれる。
【０２６３】
好ましい実施形態では、処置されるがんは、上で列挙したリンパ腫および白血病のうちのいずれか１つである。
がんについての多様式治療
【０２６４】
これらに限定されないが、腫瘍、転移、または制御されない細胞成長によって特徴付けられる他の疾患もしくは障害を含めたがんは、カンプトテシンコンジュゲートの投与によって処置または阻害することができる。
【０２６５】
他の実施形態では、がんを処置する方法であって、それを必要とする患者に有効量のカンプトテシンコンジュゲートおよび化学療法剤を投与することを含む、方法を提供する。一実施形態では、化学療法剤は、それによってがんの処置が難治性であると見出されてこなかったものである。別の実施形態では、化学療法剤は、それによってがんの処置が難治性であると見出されてきたものである。カンプトテシンコンジュゲートは、がんについての処置として手術をまた受けた患者に投与することができる。
【０２６６】
一部の実施形態では、患者はまた、さらなる処置、例えば、放射線療法を受ける。特定の実施形態では、カンプトテシンコンジュゲートは、化学療法剤とまたは放射線療法と併行的に投与される。別の特定の実施形態では、化学療法剤または放射線療法は、カンプトテシンコンジュゲートの投与の前または後に投与される。
【０２６７】
化学療法剤は、一連のセッションに亘って投与することができる。化学療法剤の任意の１つまたは組合せ、例えば、標準治療の化学療法剤（複数可）を投与することができる。
【０２６８】
さらに、カンプトテシンコンジュゲートによるがんの処置の方法は、化学療法または放射線療法が、かなり有毒であり、例えば、処置される被験体にとって許容されないまたは耐えられない副作用をもたらすことが証明され、または証明することができる場合に、化学療法または放射線療法への代替として提供される。処置される患者は、どの処置が許容されるまたは耐えられるかが分かるかに応じて、別のがん処置、例えば、手術、放射線療法または化学療法により任意選択で処置することができる。
自己免疫疾患の処置
【０２６９】
カンプトテシンコンジュゲートは、自己免疫疾患を生じさせる細胞を死滅させ、またはその細胞の複製を阻害するため、または自己免疫疾患を処置するために有用である。
【０２７０】
カンプトテシンコンジュゲートは、患者において自己免疫疾患の処置のために種々の状況においてそれに応じて使用することができる。カンプトテシンコンジュゲートを使用して、薬物を標的細胞へと送達することができる。理論に束縛されるものではないが、一実施形態では、カンプトテシンコンジュゲートは、炎症促進性または不適切に刺激された免疫細胞の表面上の抗原と会合し、次いで、カンプトテシンコンジュゲートは、受容体媒介エンドサイトーシスによって標的細胞内に取り込まれる。一旦細胞内に入ると、リンカー単位は切断され、カンプトテシンの放出をもたらす。次いで、放出されたカンプトテシンは、自由にサイトゾル中を移動し、細胞毒性活性または細胞増殖抑制活性が誘導される。代わりの実施形態では、薬物は、標的細胞の外側でカンプトテシンコンジュゲートから切断され、カンプトテシンはそれに続いて細胞に浸透する。
【０２７１】
一実施形態では、リガンド単位は、自己免疫性抗原へと結合する。一態様では、抗原は、自己免疫状態に関与している細胞の表面上に存在する。
【０２７２】
一実施形態では、リガンド単位は、自己免疫疾患の状態と関連する活性化リンパ球に結合する。
【０２７３】
さらなる実施形態では、カンプトテシンコンジュゲートは、特定の自己免疫疾患と関連する自己免疫性抗体を産生する細胞を死滅させ、またはその細胞の増殖を阻害する。
【０２７４】
カンプトテシンコンジュゲートで処置することができる特定のタイプの自己免疫疾患には、これらに限定されないが、Ｔｈ２リンパ球が関連する障害（例えば、アトピー性皮膚炎、アトピー性喘息、鼻結膜炎、アレルギー性鼻炎、オーメン症候群、全身性硬化症、および移植片対宿主病）；Ｔｈ１リンパ球が関連する障害（例えば、関節リウマチ、多発性硬化症、乾癬、シェーグレン症候群（Ｓｊｏｒｇｒｅｎ’ｓ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ）、橋本甲状腺炎、グレーブス病、原発性胆汁性肝硬変、ウェゲナー肉芽腫症、および結核）；ならびに活性化Ｂリンパ球が関連する障害（例えば、全身性エリテマトーデス、グッドパスチャー症候群、関節リウマチ、およびＩ型糖尿病）が含まれる。
自己免疫疾患の複数薬物療法
【０２７５】
自己免疫疾患を処置するための方法であって、それを必要とする患者に有効量のカンプトテシンコンジュゲート、および自己免疫疾患の処置のために公知である別の治療剤を投与することを含む、方法がまた開示されている。組成物および投与の方法
【０２７６】
本発明は、本明細書に記載されているカンプトテシンコンジュゲートおよび薬学的に許容される担体を含む医薬組成物を提供する。カンプトテシンコンジュゲートは、それにリガンド単位が結合する抗原の発現と関連する障害の処置のために、化合物を患者に投与することを可能とする任意の形態でよい。例えば、コンジュゲートは、液体または固体の形態でよい。好ましい投与経路は、非経口である。非経口投与は、皮下注射、静脈内注射、筋内注射、胸骨内注射または注入技術を含む。一態様では、組成物は、非経口的に投与される。一態様では、コンジュゲートは、静脈内に投与される。投与は、任意の好都合な経路によって、例えば、注入またはボーラス注射によってでよい。
【０２７７】
医薬組成物は、患者への組成物の投与によって化合物が生物学的に利用可能となるように製剤化することができる。組成物は、１個または複数の投薬単位の形態を取ることができる。
【０２７８】
医薬組成物の調製において使用される材料は、使用される量で無毒性であり得る。医薬組成物中の活性成分（複数可）の最適な投与量は、種々の要因によって決まることは当業者には明らかである。関連要因には、これらに限定されないが、動物のタイプ（例えば、ヒト）、化合物の特定の形態、投与の様式、および用いる組成物が含まれる。
【０２７９】
組成物は、例えば、液体の形態でよい。液体は、注射による送達のために有用であり得る。注射による投与のための組成物において、界面活性剤、保存剤、湿潤剤、分散化剤、懸濁化剤、緩衝剤、安定剤および等張剤の１つまたは複数をまた含むことができる。
【０２８０】
液体組成物はまた、これらが液剤、懸濁剤または他の同様の形態であろうとも、下記の１つまたは複数を含むことができる：無菌の賦形剤（ｄｉｌｕｅｎｔ）、例えば、注射用水、食塩溶液、好ましくは生理食塩水、リンゲル液、等張性塩化ナトリウム、不揮発性油、例えば、溶媒または懸濁媒としての役割を果たすことができる合成モノまたはジグリセリド（ｄｉｇｙｌｃｅｒｉｄｅ）、ポリエチレングリコール、グリセリン、シクロデキストリン、プロピレングリコールまたは他の溶媒；抗菌剤、例えば、ベンジルアルコールまたはメチルパラベン；抗酸化剤、例えば、アスコルビン酸または亜硫酸水素ナトリウム；キレート剤、例えば、エチレンジアミン四酢酸；緩衝剤、例えば、アミノ酸、アセテート、シトレートまたはホスフェート；洗剤、例えば、非イオン性界面活性剤、ポリオール；および浸透圧の調節のための剤、例えば、塩化ナトリウムまたはデキストロース。非経口の組成物は、ガラス、プラスチックまたは他の材料でできているアンプル、使い捨て注射器または複数用量バイアル中に封入することができる。生理食塩水は、例示的なアジュバントである。注射用組成物は好ましくは無菌である。
【０２８１】
特定の障害または状態の処置において有効であるコンジュゲートの量は障害または状態の性質によって決まり、標準的な臨床技術によって決定することができる。さらに、ｉｎ  ｖｉｔｒｏまたはｉｎ  ｖｉｖｏのアッセイを任意選択で用いて、最適な投与量範囲の同定を助けることができる。組成物中に用いる正確な用量はまた、投与経路、および疾患または障害の重症度によって決まり、医師の判断および各患者の状況によって決定すべきである。
【０２８２】
組成物は、適切な投与量が得られるような有効量の化合物を含む。典型的には、この量は、組成物の重量によって化合物の少なくとも約０．０１％である。
【０２８３】
静脈内投与のために、組成物は、動物の体重ｋｇ当たり約０．０１〜約１００ｍｇのカンプトテシンコンジュゲートを含むことができる。一態様では、組成物は、動物の体重ｋｇ当たり約１〜約１００ｍｇのカンプトテシンコンジュゲートを含むことができる。別の態様では、投与される量は、約０．１〜約２５ｍｇ／ｋｇ体重の範囲の化合物である。使用される薬物に応じて、投与量は、一層少なくすることができ、例えば、対象の体重の１．０μｇ／ｋｇ〜５．０ｍｇ／ｋｇ、４．０ｍｇ／ｋｇ、３．０ｍｇ／ｋｇ、２．０ｍｇ／ｋｇまたは１．０ｍｇ／ｋｇ、または１．０μｇ／ｋｇ〜５００．０μｇ／ｋｇとすることができる。
【０２８４】
一般に、患者に投与されるコンジュゲートの投与量は典型的には、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇ被験体の体重、または１．０μｇ／ｋｇ〜５．０ｍｇ／ｋｇ被験体の体重である。一部の実施形態では、患者に投与される投与量は、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約１５ｍｇ／ｋｇ被験体の体重である。一部の実施形態では、患者に投与される投与量は、約０．１ｍｇ／ｋｇ〜約１５ｍｇ／ｋｇ被験体の体重である。一部の実施形態では、患者に投与される投与量は、約０．１ｍｇ／ｋｇ〜約２０ｍｇ／ｋｇ被験体の体重である。一部の実施形態では、投与される投与量は、約０．１ｍｇ／ｋｇ〜約５ｍｇ／ｋｇまたは約０．１ｍｇ／ｋｇ〜約１０ｍｇ／ｋｇ被験体の体重である。一部の実施形態では、投与される投与量は、約１ｍｇ／ｋｇ〜約１５ｍｇ／ｋｇ被験体の体重である。一部の実施形態では、投与される投与量は、約１ｍｇ／ｋｇ〜約１０ｍｇ／ｋｇ被験体の体重である。一部の実施形態では、投与される投与量は、処置サイクルに亘って、約０．１〜４ｍｇ／ｋｇ、さらにより好ましくは０．１〜３．２ｍｇ／ｋｇ、またはさらにより好ましくは０．１〜２．７ｍｇ／ｋｇ被験体の体重である。
【０２８５】
用語「担体」とは、それと一緒に化合物を投与する、賦形剤、アジュバントまたは添加剤（ｅｘｃｉｐｉｅｎｔ）を指す。このような医薬担体は、液体、例えば、水および油（石油起源、動物起源、野菜起源または合成起源のものを含めた）、例えば、ピーナッツ油、ダイズ油、鉱油、ゴマ油でよい。担体は、食塩水、アラビアゴム、ゼラチン、デンプン糊、タルク、ケラチン、コロイド状シリカ、尿素でよい。さらに、助剤、安定化剤、増粘剤、滑沢剤および着色剤を使用することができる。一実施形態では、患者に投与するとき、化合物または組成物および薬学的に許容される担体は無菌である。
【０２８６】
化合物が静脈内に投与されるとき、水が例示的な担体である。食塩水およびデキストロース水溶液およびグリセロール溶液はまた、特に、注射用溶液のために、液体担体として用いることができる。適切な医薬担体はまた、添加剤、例えば、デンプン、グルコース、ラクトース、スクロース、ゼラチン、モルト、米、小麦粉、チョーク、シリカゲル、ステアリン酸ナトリウム、モノステアリン酸グリセロール、タルク、塩化ナトリウム、乾燥脱脂乳、グリセロール、プロピレン、グリコール、水、エタノールを含む。本組成物はまた、必要に応じて、微量の湿潤剤または乳化剤、またはｐＨ緩衝剤を含有することができる。
【０２８７】
一実施形態では、コンジュゲートは、動物、特に、人間への静脈内投与のために適合させた医薬組成物として通例の手順によって製剤化する。典型的には、静脈内投与のための担体またはビヒクルは、無菌の等張性の緩衝水溶液である。必要である場合、組成物はまた、可溶化剤を含むことができる。静脈内投与のための組成物は、注射の部位における疼痛を和らげるための局所麻酔剤、例えば、リグノカインを任意選択で含むことができる。一般に、成分は、別々に、または単位剤形で一緒に混合されて、例えば、密封された容器、例えば、活性剤の量を示すアンプルまたはサッシェ中の乾燥した凍結乾燥粉末または水非含有の濃縮物として提供される。コンジュゲートが注入によって投与される場合、これは、例えば、無菌の医薬グレードの水または食塩水を含有する注入ボトルで調剤することができる。コンジュゲートが注射によって投与される場合、成分を投与の前に混合することができるように、注射用滅菌水または食塩水のアンプルを提供することができる。
【０２８８】
医薬組成物は一般に、無菌の実質的に等張性のものとして、および米国食品医薬品局の全ての適正製造規範（ＧＭＰ）の規制に完全にのっとり製剤化される。
カンプトテシンコンジュゲートを調製する方法
【０２８９】
本明細書に記載されているカンプトテシンコンジュゲートは、抗体、リンカーおよび薬物単位の直列構成で、または一部を組み立てて、次に、完了した組み立て工程によって収束的にのどちらか一方で調製することができる。
【０２９０】
実施形態の１つの群では、本明細書において提供されるカンプトテシン−リンカー化合物は、好適なリガンド単位と合わさって、カンプトテシン−リンカー化合物のリガンド単位への共有結合を容易にする。一部の実施形態では、リガンド単位は、鎖間ジスルフィド連結を還元する結果として、リンカー化合物の結合に利用可能なチオールを少なくとも２つ、少なくとも４つ、少なくとも６つまたは８つ有する抗体である。一部の実施形態では、カンプトテシン−リンカー化合物は、抗体上に導入されたシステイン部分を介して、リガンド単位に結合する。
治療的使用向けキット
【０２９１】
一部の態様では、がん処置および自己免疫疾患の処置に使用するためのキットが提供される。このようなキットは、本明細書に記載されているカンプトテシンコンジュゲートを含む医薬組成物を含むことができる。
【０２９２】
一部の実施形態では、本キットは、本明細書に記載されている治療的方法のいずれかでの使用に関する指示書を含むことができる。含まれる指示書は、対象における、所期の活性、例えば、がんなどの疾患または状態の処置を実現するため、対象への医薬組成物の投与の説明を提示することができる。一部の実施形態では、本明細書に記載されている医薬組成物の使用に関連する指示書には、意図する処置のための投与量、投与スケジュールおよび投与経路に関する情報を含むことができる。容器は、単位用量、バルクパッケージ（例えば、多回用量パッケージ）またはサブ単位用量とすることができる。本開示のキットで供給される指示書は、通常、ラベル上の指示書または添付文書である。ラベルまたは添付文書は、本医薬組成物が、対象における、発症の処置、遅延、および／または疾患もしくは障害の改善のために使用されることを示す。
【０２９３】
一部の実施形態では、本明細書において提供されるキットは、好適なパッケージ中に存在する。好適なパッケージには、以下に限定されないが、バイアル、ボトル、広口瓶、可撓性パッケージ等が含まれる。同様に、吸入器、鼻腔投与用デバイスまたは注入用デバイスなどの特定のデバイスと組み合わせて使用するためのパッケージも企図される。一部の実施形態では、キットは、滅菌アクセスポートを有することができる（例えば、容器は、静脈内溶液バッグ、または皮下注射用ニードルによる穿刺可能な栓を有するバイアルとすることができる）。
【０２９４】
一部の実施形態では、本明細書において提供されるキットには、本明細書に記載されている自己免疫疾患のがんの処置に有用な追加的な治療剤が含まれる。
例示的な実施形態
【０２９５】
実施形態１：  以下の式：
Ｌ−（Ｑ−Ｄ）ｐ
または薬学的に許容されるその塩［式中、
Ｌは、リガンド単位であり、
Ｑは、以下：
−Ｚ−Ａ−Ｓ＊−ＲＬ−；−Ｚ−Ａ−ＬＰ（Ｓ＊）−ＲＬ−；−Ｚ−Ａ−Ｓ＊−ＲＬ−Ｙ−；および−Ｚ−Ａ−ＬＰ（Ｓ＊）−ＲＬ−Ｙ−
（式中、Ｚは、ストレッチャー単位であり、Ａは、結合またはコネクター単位であり、ＬＰは、並列コネクター単位であり、Ｓ＊は、分断剤であり、ＲＬは２〜８個のアミノ酸を含むペプチドであり、Ｙは、スペーサー単位である）
からなる群から選択される式を有するリンカー単位であり、
Ｄは、以下：
【化６６】
2021521111.tif 000071
（式中、
ＲＢは、Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８ハロアルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキルＣ１〜Ｃ４アルキル、フェニルおよびフェニルＣ１〜Ｃ４アルキルからなる群から選択されるメンバーであり、
ＲＣは、−Ｃ１〜Ｃ６アルキルおよびＣ３〜Ｃ６シクロアルキルからなる群から選択されるメンバーであり、
ＲＦおよびＲＦ’はそれぞれ、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ８アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ４アルキルアミノＣ１〜Ｃ８アルキル、（Ｃ１〜Ｃ４ヒドロキシアルキル）（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）アミノＣ１〜Ｃ８アルキル、ジ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）アミノＣ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ４ヒドロキシアルキルＣ１〜Ｃ８アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルＣ（Ｏ）−、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキルＣ（Ｏ）−、Ｃ１〜Ｃ８アミノアルキルＣ（Ｏ）−、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキルＣ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキルＣ１〜Ｃ４アルキル、フェニル、フェニルＣ１〜Ｃ４アルキル、ジフェニルＣ１〜Ｃ４アルキル、ヘテロアリールおよびヘテロアリールＣ１〜Ｃ４アルキルからなる群から独立して選択されるメンバーであるか、またはＲＦおよびＲＦ’は、各々が結合している窒素原子と合わさり、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ＯＨ、ＯＣ１〜Ｃ４アルキル、ＮＨ２、ＮＨＣ１〜Ｃ４アルキルおよびＮ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）２から選択される０〜３個の置換基を有する５員、６員または７員環を形成し、
ＲＢ、ＲＣ、ＲＦおよびＲＦ’のシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、フェニルおよびヘテロアリール部分は、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ＯＨ、ＯＣ１〜Ｃ４アルキル、ＮＨ２、ＮＨＣ１〜Ｃ４アルキルおよびＮ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）２から選択される０〜３個の置換基により置換されており、
下付き文字ｐは、１〜１６の整数であり、
Ｑは、ＣＰＴ１、ＣＰＴ２、ＣＰＴ３、ＣＰＴ４またはＣＰＴ５に存在するヒドロキシル基およびアミン基のいずれかを介して結合している）
からなる群から選択される薬物単位である］
を有するカンプトテシンコンジュゲート。
【０２９６】
実施形態２：Ｄが、式ＣＰＴ５を有する、実施形態１のカンプトテシンコンジュゲート。実施形態３：Ｄが、式ＣＰＴ２を有する、実施形態１のカンプトテシンコンジュゲート。実施形態４：Ｄが、式ＣＰＴ３を有する、実施形態１のカンプトテシンコンジュゲート。実施形態５：Ｄが、式ＣＰＴ４を有する、実施形態１のカンプトテシンコンジュゲート。実施形態６：Ｄが、式ＣＰＴ１を有する、実施形態１のカンプトテシンコンジュゲート。実施形態７：Ｌが抗体である、実施形態１のカンプトテシンコンジュゲート。実施形態８：ＲＢが、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ８アルキルおよびＣ１〜Ｃ８ハロアルキルからなる群から選択されるメンバーである、実施形態１または３のカンプトテシンコンジュゲート。実施形態９：ＲＢが、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキルＣ１〜Ｃ４アルキル、フェニルおよびフェニルＣ１〜Ｃ４アルキルからなる群から選択されるメンバーであり、ＲＢのシクロアルキルおよびフェニル部分が、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ＯＨ、ＯＣ１〜Ｃ４アルキル、ＮＨ２、ＮＨＣ１〜Ｃ４アルキルおよびＮ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）２から選択される０〜３個の置換基により置換されている、実施形態１または３のカンプトテシンコンジュゲート。実施形態１０：ＲＣが、Ｃ１〜Ｃ６アルキルである、実施形態１または４のカンプトテシンコンジュゲート。実施形態１１：ＲＣが、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルである、実施形態１または４のカンプトテシンコンジュゲート。実施形態１２：ＲＦとＲＦ’の両方がＨである、実施形態１または２のカンプトテシンコンジュゲート。実施形態１３：ＲＦおよびＲＦ’の少なくとも一方が、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ８アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ４アルキルアミノＣ１〜Ｃ８アルキル、（Ｃ１〜Ｃ４ヒドロキシアルキル）（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）アミノＣ１〜Ｃ８アルキル、ジ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）アミノＣ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ４ヒドロキシアルキルＣ１〜Ｃ８アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルＣ（Ｏ）−、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキルＣ（Ｏ）−およびＣ１〜Ｃ８アミノアルキルＣ（Ｏ）−からなる群から独立して選択されるメンバーである、実施形態１または２のカンプトテシンコンジュゲート。実施形態１４：ＲＦおよびＲＦ’がそれぞれ、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ８アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ４アルキルアミノＣ１〜Ｃ８アルキル、（Ｃ１〜Ｃ４ヒドロキシアルキル）（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）アミノＣ１〜Ｃ８アルキル、ジ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）アミノＣ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ４ヒドロキシアルキルＣ１〜Ｃ８アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルＣ（Ｏ）−、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキルＣ（Ｏ）−およびＣ１〜Ｃ８アミノアルキルＣ（Ｏ）−からなる群から独立して選択されるメンバーである、実施形態１または２のカンプトテシンコンジュゲート。実施形態１５：ＲＦおよびＲＦ’の少なくとも一方が、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキルＣ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキルＣ１〜Ｃ４アルキル、フェニル、フェニルＣ１〜Ｃ４アルキル、ジフェニルＣ１〜Ｃ４アルキル、ヘテロアリールおよびヘテロアリールＣ１〜Ｃ４アルキルからなる群から独立して選択されるメンバーであり、ＲＦおよびＲＦ’のシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、フェニルおよびヘテロアリール部分が、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ＯＨ、ＯＣ１〜Ｃ４アルキル、ＮＨ２、ＮＨＣ１〜Ｃ４アルキルおよびＮ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）２から選択される０〜３個の置換基により置換されている、実施形態１または２のカンプトテシンコンジュゲート。実施形態１６：ＲＦおよびＲＦ’がそれぞれ、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキルＣ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキルＣ１〜Ｃ４アルキル、フェニル、フェニルＣ１〜Ｃ４アルキル、ジフェニルＣ１〜Ｃ４アルキル、ヘテロアリールおよびヘテロアリールＣ１〜Ｃ４アルキルからなる群から独立して選択されるメンバーであり、ＲＦおよびＲＦ’のシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、フェニルおよびヘテロアリール部分が、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ＯＨ、ＯＣ１〜Ｃ４アルキル、ＮＨ２、ＮＨＣ１〜Ｃ４アルキルおよびＮ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）２から選択される０〜３個の置換基により置換されている、実施形態１または２のカンプトテシンコンジュゲート。実施形態１７：ＲＦおよびＲＦ’が、各々が結合している窒素原子と合わさり、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ＯＨ、ＯＣ１〜Ｃ４アルキル、ＮＨ２、ＮＨＣ１〜Ｃ４アルキルおよびＮ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）２から選択される０〜３個の置換基を有する、５員環、６員環または７員環を形成する、実施形態１または２のカンプトテシンコンジュゲート。実施形態１８：Ｑが、以下：
−Ｚ−Ａ−Ｓ＊−ＲＬ−；および−Ｚ−Ａ−Ｓ＊−ＲＬ−Ｙ−；
（式中、Ｚは、ストレッチャー単位であり、Ａは、結合またはコネクター単位であり、Ｓ＊は、分断剤であり、Ｙは、スペーサー単位である）からなる群から選択される式を有するリンカー単位である、実施形態１のカンプトテシンコンジュゲート。実施形態１９：Ｚ−Ａ−が、マレイミド−アルカン酸構成要素またはｍＤＰＲ構成要素を含む、実施形態１８のカンプトテシンコンジュゲート。実施形態２０：ＲＬがジペプチドである、実施形態１８のカンプトテシンコンジュゲート。実施形態２１：ＲＬがトリペプチドである、実施形態１のカンプトテシンコンジュゲート。実施形態２２：ＲＬがテトラペプチドである、実施形態１８のカンプトテシンコンジュゲート。実施形態２３：ＲＬがペンタペプチドである、実施形態１８のカンプトテシンコンジュゲート。実施形態２４：ＲＬが、β−アラニン、Ｎ−メチルグリシン、グリシン、リシン、バリンおよびフェニルアラニンからなる群から選択されるアミノ酸を含む、実施形態１８から２３のいずれか１つのカンプトテシンコンジュゲート。実施形態２５：Ｙが存在し、以下：
【化６７】
2021521111.tif 000072
（式中、ＥＷＧは電子求引基である）を含む、実施形態１のカンプトテシンコンジュゲート。実施形態２６：Ｙが存在し、以下：
【化６８】
2021521111.tif 000073
を含む、実施形態１のカンプトテシンコンジュゲート。
【０２９７】
実施形態２７：Ｙが存在し、以下：
【化６９】
2021521111.tif 000074
（式中、ＥＷＧは電子求引基である）を含む、実施形態１のカンプトテシンコンジュゲート。実施形態２８：ＥＷＧが、−ＣＮ、−ＮＯ２、−ＣＸ３、−Ｘ、Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ’、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ’）２、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ’、−Ｃ（＝Ｏ）Ｘ、−Ｓ（＝Ｏ）２Ｒ’、−Ｓ（＝Ｏ）２ＯＲ’、−Ｓ（＝Ｏ）２ＮＨＲ’、−Ｓ（＝Ｏ）２Ｎ（Ｒ’）２、−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＲ’）２、−Ｐ（＝Ｏ）（ＣＨ３）ＮＨＲ’、−ＮＯ、−Ｎ（Ｒ’）３＋からなる群から選択されるメンバーであり、Ｘが、−Ｆ、−Ｂｒ、−Ｃｌまたは−Ｉであり、Ｒ’が、水素およびＣ１〜６アルキルからなる群から独立して選択される、実施形態２５または２７のカンプトテシンコンジュゲート。実施形態２９：ＲＬが、ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｃｉｔ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｇｌｎ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｇｌｕ−ｇｌｙ、ｐｈｅ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｌｅｕ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｇｌｙ−ｖａｌ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ａｌａ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ｌｅｕ、ｌｅｕ−ｌｅｕ−ｇｌｙ、ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｐｈｅ−ｇｌｙ、ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｐｈｅ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｇｌｙおよびｖａｌ−ｌｙｓ−β−ａｌａからなる群から選択されるペプチドである、実施形態１から２７のいずれか１つのカンプトテシンコンジュゲート。実施形態３０：ＲＬが、ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｃｉｔ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｇｌｎ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｇｌｕ−ｇｌｙ、ｐｈｅ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｌｅｕ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｇｌｙ−ｖａｌ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ａｌａ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ｌｅｕ、ｌｅｕ−ｌｅｕ−ｇｌｙ、ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｐｈｅ−ｇｌｙ、ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｐｈｅ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｇｌｙおよびｖａｌ−ｌｙｓ−β−ａｌａからなる群から選択されるペプチドであり、Ｙが、ＰＥＧ単位であり、Ｚ−Ｘが、マレイミド−アルカン酸構成要素またはｍＤＰＲ構成要素である、実施形態１から２７のいずれか１つのカンプトテシンコンジュゲート。実施形態３１：Ｓ＊が、ＰＥＧ単位であり、Ｚ−Ａ−が、マレイミドプロピオニル構成要素またはｍＤＰＲ構成要素である、実施形態１から２７のいずれか１つのカンプトテシンコンジュゲート。実施形態３２：Ｚ−Ａ−が、マレイミドプロピオニル構成要素である、実施形態３１のカンプトテシンコンジュゲート。実施形態３３：Ｑが、以下の式：
【化７０】
2021521111.tif 000075
（式中、ｎは、２〜２０の整数であり、ＲＬは、ジ、トリ、テトラまたはペンタペプチドであり、１つの＊により印をつけた波線は、Ｄまたはスペーサー単位（Ｙ）への結合部位を示し、＊＊＊で印をつけた波線は、Ｌの硫黄原子への結合点を示す）を有する、実施形態３１のカンプトテシンコンジュゲート。実施形態３４：ｎが４〜１０の整数である、実施形態３３のカンプトテシンコンジュゲート。実施形態３５：Ｌが、ＣＤ１９、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ７０およびＬＩＶ−１からなる群から選択される抗原に特異的に結合する抗体である、実施形態１から３４のいずれか１つのカンプトテシンコンジュゲート。実施形態３６：コンジュゲートが、以下の式：
【化７１】
2021521111.tif 000076
（式中、Ａｂは、ＣＤ１９、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ７０およびＬＩＶ−１からなる群から選択される抗原に特異的な抗体であり、ＲＬは、ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ−β−ａｌａ、ｖａｌ−ｇｌｎ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ａｌａ、ｐｈｅ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｌｅｕ−ｌｅｕ−ｇｌｙ、ｌｅｕ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｇｌｕ−ｇｌｙ、ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ａｓｐ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ、ｖａｌ−ｇｌｙおよびｇｌｙ−ｖａｌ−ｌｙｓ−ｇｌｙからなる群から選択されるペプチドであり、ｐは、１〜１６の整数である）のものである、実施形態１のカンプトテシンコンジュゲート。実施形態３７：ＲＬが、ｖａｌ−ｌｙｓ−β−ａｌａ、ｖａｌ−ｇｌｎ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ａｌａ、ｐｈｅ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｌｅｕ−ｌｅｕ−ｇｌｙ、ｌｅｕ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｇｌｕ−ｇｌｙ、ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｇｌｙおよびｖａｌ−ａｓｐ−ｇｌｙからなる群から選択される、実施形態３６のカンプトテシンコンジュゲート。実施形態３８：ＲＬが、ｖａｌ−ｌｙｓ−β−ａｌａ、ｖａｌ−ｇｌｎ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ａｌａ、ｐｈｅ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｌｅｕ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｇｌｕ−ｇｌｙおよびｖａｌ−ａｓｐ−ｇｌｙからなる群から選択される、実施形態３６のカンプトテシンコンジュゲート。実施形態３９：ＲＬがｖａｌ−ｌｙｓ−ｇｌｙである、実施形態３６のカンプトテシンコンジュゲート。
【０２９８】
実施形態４０：  以下の式：
Ｚ’−Ａ−Ｓ＊−ＲＬ−Ｄ；
Ｚ’−Ａ−ＬＰ（Ｓ＊）−ＲＬ−Ｄ；
Ｚ’−Ａ−Ｓ＊−ＲＬ−Ｙ−Ｄ；および
Ｚ’−Ａ−ＬＰ（Ｓ＊）−ＲＬ−Ｙ−Ｄ；
［式中、
Ｌは、リガンド単位であり、
Ｑは、以下：
−Ｚ−Ａ−Ｓ＊−ＲＬ−；−Ｚ−Ａ−ＬＰ（Ｓ＊）−ＲＬ−；−Ｚ−Ａ−Ｓ＊−ＲＬ−Ｙ−；および−Ｚ−Ａ−ＬＰ（Ｓ＊）−ＲＬ−Ｙ−
（式中、Ｚは、ストレッチャー単位であり、Ａは、結合またはコネクター単位であり、ＬＰは、並列コネクター単位であり、Ｓ＊は、分断剤であり、ＲＬは２〜８個のアミノ酸を含むペプチドであり、Ｙは、スペーサー単位である）
からなる群から選択される式を有するリンカー単位であり、
Ｄは、以下：
【化７２】
2021521111.tif 000077
（式中、
ＲＢは、Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８ハロアルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキルＣ１〜Ｃ４アルキル、フェニルおよびフェニルＣ１〜Ｃ４アルキルからなる群から選択されるメンバーであり、
ＲＣは、−Ｃ１〜Ｃ６アルキルおよびＣ３〜Ｃ６シクロアルキルからなる群から選択されるメンバーであり、
ＲＦおよびＲＦ’はそれぞれ、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ８アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ４アルキルアミノＣ１〜Ｃ８アルキル、（Ｃ１〜Ｃ４ヒドロキシアルキル）（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）アミノＣ１〜Ｃ８アルキル、ジ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）アミノＣ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ４ヒドロキシアルキルＣ１〜Ｃ８アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルＣ（Ｏ）−、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキルＣ（Ｏ）−、Ｃ１〜Ｃ８アミノアルキルＣ（Ｏ）−、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキルＣ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキルＣ１〜Ｃ４アルキル、フェニル、フェニルＣ１〜Ｃ４アルキル、ジフェニルＣ１〜Ｃ４アルキル、ヘテロアリールおよびヘテロアリールＣ１〜Ｃ４アルキルからなる群から独立して選択されるメンバーであるか、またはＲＦおよびＲＦ’は、各々が結合している窒素原子と合わさり、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ＯＨ、ＯＣ１〜Ｃ４アルキル、ＮＨ２、ＮＨＣ１〜Ｃ４アルキルおよびＮ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）２から選択される０〜３個の置換基を有する５員、６員または７員環を形成し、
ＲＢ、ＲＣ、ＲＦおよびＲＦ’のシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、フェニルおよびヘテロアリール部分は、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ＯＨ、ＯＣ１〜Ｃ４アルキル、ＮＨ２、ＮＨＣ１〜Ｃ４アルキルおよびＮ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）２から選択される０〜３個の置換基により置換されており、
下付き文字ｐは、１〜１６の整数であり、
Ｑは、ＣＰＴ１、ＣＰＴ２、ＣＰＴ３、ＣＰＴ４またはＣＰＴ５に存在するヒドロキシル基およびアミン基のいずれかを介して結合している）
からなる群から選択される薬物単位である］
を有するカンプトテシン−リンカー化合物。
【０２９９】
実施形態４１：式（ｉ）または（ｉｉｉ）を有する、実施形態４０のカンプトテシン−リンカー化合物。実施形態４２：式（ｉｉ）または（ｉｖ）を有する、実施形態４０のカンプトテシン−リンカー化合物。実施形態４３：式（ｉ）を有する、実施形態４０のカンプトテシン−リンカー化合物。実施形態４４：式（ｉｉｉ）を有する、実施形態４０のカンプトテシン−リンカー化合物。実施形態４５：Ｄが、ＣＰＴ５である、実施形態４０から４４のいずれか１つのカンプトテシン−リンカー化合物。実施形態４６：ＲＢが、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ８アルキルおよびＣ１〜Ｃ８ハロアルキルからなる群から選択されるメンバーである、実施形態４０から４４のいずれか１つのカンプトテシン−リンカー化合物。実施形態４７：ＲＢが、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキルＣ１〜Ｃ４アルキル、フェニルおよびフェニルＣ１〜Ｃ４アルキルからなる群から選択されるメンバーであり、ＲＢのシクロアルキル部分およびフェニル部分が、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ＯＨ、ＯＣ１〜Ｃ４アルキル、ＮＨ２、ＮＨＣ１〜Ｃ４アルキルおよびＮ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）２から選択される０〜３個の置換基により置換されている、実施形態４０から４４のいずれか１つのカンプトテシン−リンカー化合物。実施形態４８：ＲＣが、Ｃ１〜Ｃ６アルキルである、実施形態４０から４４のいずれか１つのカンプトテシン−リンカー化合物。実施形態４９：ＲＣが、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルである、実施形態４０から４４のいずれか１つのカンプトテシン−リンカー化合物。実施形態５０：ＲＦとＲＦ’の両方がＨである、実施形態４０から４４のいずれか１つのカンプトテシン−リンカー化合物。実施形態５１：ＲＦおよびＲＦ’の少なくとも一方が、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ８アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ４アルキルアミノＣ１〜Ｃ８アルキル、（Ｃ１〜Ｃ４ヒドロキシアルキル）（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）アミノＣ１〜Ｃ８アルキル、ジ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）アミノＣ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ４ヒドロキシアルキルＣ１〜Ｃ８アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルＣ（Ｏ）−、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキルＣ（Ｏ）−およびＣ１〜Ｃ８アミノアルキルＣ（Ｏ）−からなる群から独立して選択されるメンバーである、実施形態４０から４４のいずれか１つのカンプトテシン−リンカー化合物。実施形態５２：ＲＦおよびＲＦ’がそれぞれ、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ８アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ４アルキルアミノＣ１〜Ｃ８アルキル、（Ｃ１〜Ｃ４ヒドロキシアルキル）（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）アミノＣ１〜Ｃ８アルキル、ジ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）アミノＣ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ４ヒドロキシアルキルＣ１〜Ｃ８アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルＣ（Ｏ）−、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキルＣ（Ｏ）−およびＣ１〜Ｃ８アミノアルキルＣ（Ｏ）−からなる群から独立して選択されるメンバーである、実施形態４０から４４のいずれか１つのカンプトテシン−リンカー化合物。実施形態５３：ＲＦおよびＲＦ’の少なくとも一方が、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキルＣ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキルＣ１〜Ｃ４アルキル、フェニル、フェニルＣ１〜Ｃ４アルキル、ジフェニルＣ１〜Ｃ４アルキル、ヘテロアリールおよびヘテロアリールＣ１〜Ｃ４アルキルからなる群から独立して選択されるメンバーであり、ＲＦおよびＲＦ’のシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、フェニルおよびヘテロアリール部分が、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ＯＨ、ＯＣ１〜Ｃ４アルキル、ＮＨ２、ＮＨＣ１〜Ｃ４アルキルおよびＮ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）２から選択される０〜３個の置換基により置換されている、実施形態４０から４４のいずれか１つのカンプトテシン−リンカー化合物。実施形態５４：ＲＦおよびＲＦ’がそれぞれ、Ｈ、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキルＣ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキルＣ１〜Ｃ４アルキル、フェニル、フェニルＣ１〜Ｃ４アルキル、ジフェニルＣ１〜Ｃ４アルキル、ヘテロアリールおよびヘテロアリールＣ１〜Ｃ４アルキルからなる群から独立して選択されるメンバーであり、ＲＦおよびＲＦ’のシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、フェニルおよびヘテロアリール部分が、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ＯＨ、ＯＣ１〜Ｃ４アルキル、ＮＨ２、ＮＨＣ１〜Ｃ４アルキルおよびＮ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）２から選択される０〜３個の置換基により置換されている、実施形態４０から４４のいずれか１つのカンプトテシン−リンカー化合物。実施形態５５：ＲＦおよびＲＦ’が、各々が結合している窒素原子と合わさり、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ＯＨ、ＯＣ１〜Ｃ４アルキル、ＮＨ２、ＮＨＣ１〜Ｃ４アルキルおよびＮ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）２から選択される０〜３個の置換基を有する、５員環、６員環または７員環を形成する、実施形態４０から４４のいずれか１つのカンプトテシン−リンカー化合物。実施形態５６：Ｚ’−Ａ−が、マレイミドプロピオニル、ｍＤＰＲ、マレイミドカプロイルまたはマレイミドプロピオニル−β−アラニルである、実施形態４０から５５のいずれか１つのカンプトテシン−リンカー化合物。実施形態５７：Ｚ’−Ａ−がマレイミドプロピオニルである、実施形態５６のカンプトテシン−リンカー化合物。実施形態５８：Ｚ’−Ａ−がｍＤＰＲである、実施形態５６のカンプトテシン−リンカー化合物。実施形態５９：Ｓ＊がＰＥＧ基である、実施形態４０のカンプトテシン−リンカー化合物。実施形態６０：ＲＬが、ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｃｉｔ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｇｌｎ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｇｌｕ−ｇｌｙ、ｐｈｅ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｌｅｕ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｇｌｙ−ｖａｌ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ａｌａ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ｌｅｕ、ｌｅｕ−ｌｅｕ−ｇｌｙ、ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｐｈｅ−ｇｌｙ、ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｐｈｅ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｇｌｙおよびｖａｌ−ｌｙｓ−β−ａｌａからなる群から選択されるペプチドを含む、実施形態４０のカンプトテシン−リンカー化合物。実施形態６２：ＲＬが、ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｇ��ｙ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｃｉｔ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｇｌｎ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｇｌｕ−ｇｌｙ、ｐｈｅ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｌｅｕ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｇｌｙ−ｖａｌ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ａｌａ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ｌｅｕ、ｌｅｕ−ｌｅｕ−ｇｌｙ、ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｐｈｅ−ｇｌｙ、ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｐｈｅ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｇｌｙおよびｖａｌ−ｌｙｓ−β−ａｌａからなる群から選択されるペプチドを含み、Ｚ’−Ａ−が、マレイミドプロピオニル、ｍＤＰＲまたはマレイミドプロピオニル−β−アラニルであり、Ｓ＊が、ＰＥＧ基である、実施形態４０のカンプトテシン−リンカー化合物。実施形態６２：以下：
【化７３】
2021521111.tif 000078
（式中、ＲＬは、ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ−β−ａｌａ、ｖａｌ−ｇｌｎ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ａｌａ、ｐｈｅ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｌｅｕ−ｌｅｕ−ｇｌｙ、ｌｅｕ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｇｌｕ−ｇｌｙ、ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ａｓｐ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ、ｖａｌ−ｇｌｙおよびｇｌｙ−ｖａｌ−ｌｙｓ−ｇｌｙからなる群から選択されるペプチドである）からなる群から選択される、実施形態４０のカンプトテシン−リンカー化合物。実施形態６３：ＲＬが、ｖａｌ−ｌｙｓ−β−ａｌａ、ｖａｌ−ｇｌｎ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ａｌａ、ｐｈｅ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｌｅｕ−ｌｅｕ−ｇｌｙ、ｌｅｕ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｇｌｕ−ｇｌｙ、ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｇｌｙおよびｖａｌ−ａｓｐ−ｇｌｙからなる群から選択される、実施形態６２のカンプトテシン−リンカー化合物。実施形態６４：ＲＬが、ｖａｌ−ｌｙｓ−β−ａｌａ、ｖａｌ−ｇｌｎ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ａｌａ、ｐｈｅ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｇｌｙ−ｇｌｙ、ｌｅｕ−ｌｙｓ−ｇｌｙ、ｖａｌ−ｇｌｕ−ｇｌｙおよびｖａｌ−ａｓｐ−ｇｌｙからなる群から選択される、実施形態６２のカンプトテシン−リンカー化合物。実施形態６５：ＲＬが、ｖａｌ−ｌｙｓ−ｇｌｙである、実施形態６２のカンプトテシン−リンカー化合物。
【０３００】
実施形態６６：以下の式：
【化７４】
2021521111.tif 000079
（式中、ＲＦおよびＲＦ’はそれぞれ、独立して、Ｈ、グリシル、ヒドロキシアセチル、エチルおよび２−（２−（２−アミノエトキシ）エトキシ）エチルからなる群から選択されるメンバーであるか、またはＲＦおよびＲＦ’は、各々が結合している窒素原子と合わさり、モルホリノを形成する）を有するカンプトテシン化合物。実施形態６７：ＲＦが、Ｈであり、ＲＦ’が、グリシル、ヒドロキシアセチル、エチル、２−（２−（２−アミノエトキシ）エトキシ）エチルである、実施形態６６のカンプトテシン化合物。実施形態６８：ＲＦおよびＲＦ’が、それらの各々が結合している窒素原子と合わさり、モルホリノを形成する、実施形態６６のカンプトテシン化合物。
【０３０１】
実施形態６９：以下の式：
【化７５】
2021521111.tif 000080
（式中、ＲＢは、シクロプロピル、ペンチル、ヘキシル、ｔｅｒｔ−ブチルおよびシクロペンチルからなる群から選択されるメンバーである）を有するカンプトテシン化合物。
【０３０２】
実施形態７０：それを必要とする対象におけるがんを処置する方法であって、対象に実施形態１から３９のいずれか１つのカンプトテシンコンジュゲートを投与するステップを含む、方法。実施形態７１：前記がんが、リンパ腫、白血病および固形腫瘍からなる群から選択される、実施形態７０の方法。実施形態７２：前記がんが、リンパ腫または白血病である、実施形態７０の方法。実施形態７３：追加的な治療剤をさらに含む、実施形態７０から７３のいずれか１つの方法。実施形態７４：前記追加的な治療剤が、１つまたは複数の化学療法剤または放射線療法である、実施形態７３の方法。
【０３０３】
実施形態７５：それを必要とする対象における自己免疫疾患を処置する方法であって、対象に実施形態１から３９のいずれか１つのカンプトテシンコンジュゲートを投与するステップを含む、方法。実施形態７６：前記自己免疫疾患が、Ｔｈ２リンパ球が関連する障害、Ｔｈ１リンパ球が関連する障害および活性化Ｂリンパ球が関連する障害からなる群から選択される、実施形態７５の方法。
【０３０４】
実施形態７７：実施形態１から３９のいずれか１つのカンプトテシンコンジュゲートを調製する方法であって、抗体を実施形態４０から６５のいずれか１つのカンプトテシン−リンカー化合物と反応させるステップを含む、方法。
【０３０５】
実施形態７８：実施形態１から３９のいずれか１つのカンプトテシンコンジュゲートを含むキット。実施形態７９：追加的な治療剤をさらに含む、実施形態７７のキット。
【実施例】
【０３０６】
実験手順
【表Ａ】
2021521111.tif 000081
物質および方法
特に示さない限り、以下の物質および方法が、この項目に記載されている合成手順に適用可能である。市販の無水溶媒はすべて、さらに精製することなく使用した。出発原料、試薬および溶媒は、商業的供給業者から購入した（ＳｉｇｍａＡｌｄｒｉｃｈおよびＦｉｓｃｈｅｒ）。生成物は、Ｂｉｏｔａｇｅ  Ｉｓｏｌｅｒａ  Ｏｎｅ  ｆｌａｓｈ精製システム（Ｃｈａｒｌｏｔｔｅ、ＮＣ）を利用するフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製した。ＵＰＬＣ−ＭＳは、Ｗａｔｅｒｓ  Ａｃｕｉｔｙ  ＵＰＬＣ  ＢＥＨ  Ｃ１８  ２．１×５０ｍｍ、１．７μｍ、逆相カラムを装備したＷａｔｅｒｓ  Ａｃｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣシステムにインターフェースしたＷａｔｅｒｓシングル四十極検出器の質量分析計で行った。溶離液は、０．１％ギ酸を含むアセトニトリルおよび０．１％水性ギ酸となる溶媒からなった。一般方法は、０．５ｍＬ／分の流速を用い、１．７分間かけて３〜６０％のアセトニトリル、次に、２．０分まで６０〜９５％で直線勾配、次いで、２．５分まで均一濃度の９５％アセトニトリル、次に、３％を２．８〜３．０分間、カラムを平衡にすることからなる勾配とした。２＝０．４ｍＬ／分）、Ａｃｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣ  ＢＥＨ  Ｃ１８  ２．１×５０ｍｍ、１．７μｍ  逆相カラムを装備した。分取ＨＰＬＣは、Ｗａｓｔｅｒｓ２９９８  ＰＤＡ検出器を構成した、Ｗａｔｅｒｓ  ２４５４二成分勾配モジュール溶媒送達システムで行った。生成物は、水中の０．０５％トリフルオロ酢酸およびアセトニトリル中の０．０５％トリフルオロ酢酸を溶出した、適切な直径のカラムのＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｍａｘ−ＲＰ  ４μｍ  Ｓｙｎｅｒｇｉ  ８０Å  ２５０ｍｍ逆相カラムを用いて精製した。
カンプトテシン化合物調製
【０３０７】
以下の実施例において提示したカンプトテシン化合物は、本明細書に記載されているカンプトテシン−リンカー化合物およびカンプトテシンコンジュゲートの調製に使用することができる。
（実施例１）
ＳＮ−３８のＴＢＳ保護：
【化７６】
2021521111.tif 000082
【０３０８】
ＭｅｄＣｈｅｍＥｘｐｒｅｓｓから購入した７−エチル−１０−ヒドロキシ−カンプトテシン（ＳＮ−３８）（１６０．０ｍｇ、０．４０７７ｍｍｍｏｌ）を無水ＤＣＭ（２ｍＬ）に懸濁した。ＤＩＰＥＡ（０．２２ｍＬ、１．３ｍｍｏｌ）、次いでＴＢＳＣｌ（１５４ｍｇ、１．０２ｍｍｏｌ）を加えた。ＳＮ−３８が可溶性になり、ＵＰＬＣ−ＭＳによって完全な変換が観察されるまで、この反応物を３０分間、撹拌した。この反応物をＭｅＯＨでクエンチし、シリカのプラグにより濾過して、真空で濃縮した。得られた無色油状物をＨｅｘにより粉末にした。生成物が溶液から沈殿した。沈殿物を濾過により採集し、Ｈｅｘですすぐと、ＴＢＳ−ＳＮ−３８（１）がオフホワイト色の固体（２００ｍｇ、０．３９５ｍｍｏｌ、９７％）として得られた。Ｒｔ＝１．８６分  疎水性ＵＰＬＣ法。ＭＳ（ｍ／ｚ）［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ２８Ｈ３５Ｎ２Ｏ５Ｓｉの計算値５０７．２３、実測値５０６．９６。
（実施例２）
【化７７】
2021521111.tif 000083
【０３０９】
化合物２−ａは、Burke,  P.  J.,  Jeffrey,  S.  C.  et  al.  in  Bioconjugate  Chem.  2009,  20,  1242-1250によって記載されている手順に従って合成した。化合物２−ａ（５０ｍｇ、０．１０８ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１ｍＬ）に溶解した。この反応物に、ＤＭＡＰ（１３ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）、次いでＢｏｃ２Ｏ（２４ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を加えた。この反応物を５分間、撹拌し、この時点で、所望の生成物への完全な変換が観察された。保護生成物をカラムクロマトグラフィー１０Ｇ  Ｂｉｏｔａｇｅ  Ｕｌｔｒａ、ＤＣＭ中の０〜５％ＭｅＯＨによって精製した。所望の生成物を含む画分を真空で濃縮すると、化合物２−ｂが黄色固体（４９ｍｇ、０．０８７ｍｍｏｌ、８０％）として得られた。Ｒｔ＝２．２４分、一般ＵＰＬＣ法。ＭＳ（ｍ／ｚ）［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ３０Ｈ３４Ｎ３Ｏ８の計算値５６４．２３、実測値５６４．１０。
【０３１０】
化合物２−ｂ（４９ｍｇ、０．０８７ｍｍｏｌ）を無水ＤＣＭ（２ｍＬ）に溶解した。ＤＭＡＰ（３７ｍｇ、０．３０４ｍｍｏｌ）を加え、この反応物を０℃まで冷却した。この反応物に、ＤＣＭに１０ｍｇ／ｍＬで溶解したトリホスゲン（１２ｍｇ、０．０３９ｍｍｏｌ）を１５分間かけて、滴下添加した。２ｕＬとなる一定分量を９８ｕＬのＭｅＯＨ希釈液にクエンチし、ＵＰＬＣ−ＭＳに注入した。ＭｅＯＨ付加物への完全な変換をＵＰＬＣ−ＭＳによって観察した。この反応混合物（化合物２）を好適なリンカーとのカップリング工程に直接使用することができる。Ｒｔ＝２．０９分、一般ＵＰＬＣ法。ＭＳ（ｍ／ｚ）［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ３２Ｈ３６Ｎ３Ｏ１０の計算値６２２．２４、実測値６２２．０２。
（実施例３）
【化７８】
2021521111.tif 000084
【０３１１】
化合物３−ａ（１５０ｍｇ、０．３３４ｍｍｏｌ）を無水ＤＣＭ（２ｍＬ）に溶解した。ＤＭＡＰ（１４３ｍｇ、１．１７ｍｍｏｌ）を加えた。無水ＤＣＭ（５０ｍｇ／ｍＬ）に溶解したトリホスゲン（４５ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）を５分間かけて、滴下添加した。この反応物を室温で３０分間、撹拌した。２ｕＬとなる反応混合物の一定分量を９８ｕＬのＭｅＯＨ希釈液でクエンチした。ＭｅＯＨカーボネートへのほぼ完全な変換が観察され、クロロギ酸エステルの形成が示された。生成物３を好適なリンカーとのカップリング工程にさらに精製することなく使用することができる。Ｒｔ＝１．５５分、一般ＵＰＬＣ法。ＭＳ（ｍ／ｚ）［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ２７Ｈ２７Ｎ２Ｏ８の計算値５０７．１８、実測値５０７．０６。
（実施例４）
７−メチルアミノ誘導体−メチレンジオキシカンプトテシン（本明細書において、７−ＭＡＤ−ＭＤＣＰＴまたは化合物４と称する）の調製
【化７９】
2021521111.tif 000085
【０３１２】
６−アミノ−３，４−（メチレンジオキシ）アセトフェノン（５．００ｇ、２７．９ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１００ｍＬ）に溶解した。この反応物を０℃に冷却し、ＤＩＰＥＡ（７．２９ｍＬ、４１．９ｍｍｏｌ）を加え、次いで塩化アセチル（２．４９ｍＬ、３４．９ｍＬ）をゆっくりと添加した。この反応物を室温まで温め、３０分間、撹拌した。ＵＰＬＣ−ＭＳによって、完全な変換が観察された。反応物をＭｅＯＨ（５ｍＬ）によりクエンチし、この反応物を真空で濃縮すると、化合物４−ａが白色固体として得られ、さらに精製することなく次の工程に使用した。Ｒｔ＝１．３７分、一般ＵＰＬＣ法。ＭＳ（ｍ／ｚ）［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ１１Ｈ１２ＮＯ４の計算値２２２．０８、実測値２２２．１１。
【０３１３】
前の工程からの化合物４−ａ（２７．９ｍｍｏｌ）をＡｃＯＨ（１００ｍＬ）に溶解した。ＡｃＯＨ中のＨＢｒ  ３３％ｗ／ｗ（９．７８ｍＬ、５５．８ｍｍｏＬ）をゆっくりと加えた。臭素（１．４４ｍＬ、２７．９ｍｍｏｌ）を１５分間かけて、滴下添加した。この反応物を３０分間、撹拌し、この時点で、所望の生成物への変換が観察された。この反応物を氷水に注ぎ入れて、沈殿物を濾過により採集し、水で洗浄した。濾液を乾燥すると黄色粉末が得られ、これは、出発原料を含む所望の生成物化合物４−ｂと不純物のジブロモ化生成物との混合物であり、この混合物をさらに精製することなく次の工程に使用した（７．２ｇ、２４ｍｍｏｌ、８６％）。Ｒｔ＝１．５８分、一般ＵＰＬＣ法。ＭＳ（ｍ／ｚ）［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ１１Ｈ１１ＢｒＮＯ４の計算値２９９．９９、実測値２９９．９０。
【０３１４】
化合物４−ｂ（７．２ｇ、２４ｍｍｏｌ）をＥｔＯＨ（１００ｍＬ）に溶解した。濃ＨＢｒ（５ｍＬ）を加え、この反応物を６０分間、加熱して還流した。脱保護生成物へのほぼ完全な変換が観察された。この反応物を真空で濃縮し、ＤＣＭ（２００ｍＬ）およびＨ２Ｏ（２００ｍＬ）により希釈した。水相をＤＣＭ（３×２００ｍＬ）により抽出し、採集した有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過して真空で濃縮した。粗生成物をＤＣＭ中の０〜１０％ＭｅＯＨのカラムクロマトグラフィーにより精製した。少量の不純物を含む所望の生成物を含有する画分を濃縮すると、化合物４−ｃが黄色粉末（４．０５ｇ、１５．７ｍｍｏｌ、６５％）として得られた。Ｒｔ＝１．５７分、一般ＵＰＬＣ法。ＭＳ（ｍ／ｚ）［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ９Ｈ９ＢｒＮＯ３の計算値２５７．９８、実測値２５７．７１。
【化８０】
2021521111.tif 000086
【０３１５】
化合物４−ｃ（１．００ｇ、３．８７ｍｍｏｌ）、ｐ−ＴＳＡ（６６７ｍｇ、３．８７ｍｍｏｌ）および４−エチル−４−ヒドロキシ−７，８−ジヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３，４−ｆ］インドリジン−３，６，１０（４Ｈ）−トリオン（１．０２ｇ、３．８７ｍｍｏｌ、Ａｖｒａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ  Ｐｖｔ．  Ｌｔｄ．から得た）をフラスコに投入した。ＤＣＭ（５ｍＬ）を加えて固体を均質にし、次に、窒素下で溶媒蒸発させた。次に、高真空下（１ｍｂａｒ）で無溶媒の固体を１２０℃まで６０分間、加熱した。反応物を室温まで冷却し、粗生成物がＨ２Ｏにより沈殿し、濾過してＨ２Ｏにより洗浄した。この沈殿物をＤＣＭ中の０〜１０％ＭｅＯＨのカラムクロマトグラフィーにより精製した。所望の生成物を含む画分を真空で濃縮すると、化合物４−ｄが褐色固体（９８９ｍｇ、２．０４ｍｍｏｌ、５３％）として得られた。Ｒｔ＝１．５７分、一般ＵＰＬＣ法。ＭＳ（ｍ／ｚ）［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ９Ｈ９ＢｒＮＯ３の計算値２５７．９８、実測値２５７．７１。Ｒｔ＝１．６２分、一般ＵＰＬＣ法。ＭＳ（ｍ／ｚ）［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ２２Ｈ１７ＢｒＮ２Ｏ６の計算値４８５．０３、実測値４８４．９５。
【０３１６】
化合物４−ｄ（１８８ｍｇ、０．３８７ｍｍｏｌ）をＥｔＯＨ（５ｍＬ）に溶解した。ヘキサメチレンテトラミン（１６３ｍｇ、１．１６ｍｍｏｌ）を加え、この反応物を還流して９０分間、撹拌した。この反応物を冷却し、水性濃ＨＣｌ（０．１ｍＬ）を加えた。この反応物を濃縮し、分取ＨＰＬＣによって精製した。所望の生成物を含む画分を凍結乾燥すると、化合物４がオフホワイト色の固体（１０９ｍｇ、０．２５９ｍｍｏｌ、６７％）として得られた。
【０３１７】
以下の化合物は、従来の方法を使用して、７−ＭＡＤ−ＭＤＣＰＴ（化合物４）または化合物４−ｄから調製することができる：
【表Ｉ−１】
2021521111.tif 000087
【表Ｉ−２】
2021521111.tif 000088
（実施例５）
【化８１】
2021521111.tif 000089
【０３１８】
基質（実施例４からの４−ｄ、１０．０ｍｇ、２０．６μｍｏｌ）を無水ＤＭＦ（０．２５ｍＬ）に溶解した。メチルアミン（ＴＨＦ中、２Ｍ、０．０３１ｍＬ、６２μｍｏｌ）を加えた。この反応物を３０分間、撹拌し、次に、ＡｃＯＨ（２０μＬ）によりクエンチした。この反応物を分取ＨＰＬＣによって精製した。所望の生成物（５）を含む画分を凍結乾燥すると、黄色固体（３．２７ｍｇ、７．５１μｍｏｌ、３６％）が得られた。Ｒｔ＝１．５７分、一般ＵＰＬＣ法。ＭＳ（ｍ／ｚ）［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ９Ｈ９ＢｒＮＯ３の計算値２５７．９８、実測値２５７．７１。Ｒｔ＝０．９３分、一般ＵＰＬＣ法。ＭＳ（ｍ／ｚ）［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ２３Ｈ２２Ｎ３Ｏ６の計算値４３６．１５、実測値４３５．７８。
【０３１９】
実施例５ａ〜５ａａは、化合物５に関して概説した一般手順に従い作製した。
【表ＩＩ−１】
2021521111.tif 000090
【表ＩＩ−２】
2021521111.tif 000091
【表ＩＩ−３】
2021521111.tif 000092
【表ＩＩ−４】
2021521111.tif 000093
【表ＩＩ−５】
2021521111.tif 000094
【表ＩＩ−６】
2021521111.tif 000095
【表ＩＩ−７】
2021521111.tif 000096
【表ＩＩ−８】
2021521111.tif 000097
（実施例６）
【化８２】
2021521111.tif 000098
【０３２０】
６−ニトロ−１，３−ベンゾジオキソール−５−カルボニトリル（２．００ｇ、１０．４ｍｍｏｌ）をＥｔＯＨ（５０ｍＬ）に溶解した。反応物を窒素雰囲気下に置いた。この反応物にＰｄ／Ｃ（２．２２ｇ、１０％ｗ／ｗ、２．０８ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を水素雰囲気下に置いた。この反応物を２時間、撹拌した。この反応物をセライト床により濾過して、ＭｅＯＨですすいだ。溶離液を真空で濃縮し、ＭｅＯＨ中の０〜１０％ＤＣＭのフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。所望の生成物を含む画分を濃縮すると、赤色固体（１．４６ｇ、９．００ｍｍｏｌ、８７％）が得られた。Ｒｔ＝１．１４分、一般ＵＰＬＣ法。ＭＳ（ｍ／ｚ）［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ８Ｈ７Ｎ２Ｏ２の計算値１６３．０５、実測値１６２．３７。
【化８３】
2021521111.tif 000099
【０３２１】
６−アミノ−１，３−ベンゾジオキソール−５−カルボニトリル（５０ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）を窒素雰囲気下に置き、無水ＴＨＦ（１ｍＬ）に溶解した。ＣｕＢｒ（１．５ｍｇ、０．０１０ｍｍｏｌ）、次いでＴＨＦ中１Ｍの臭化４−フルオロフェニルマグネシウム（１．２３ｍＬ）を加えた。この反応物を３０分間、６０℃まで加熱し、次に、室温まで冷却した。１５％  Ｈ２ＳＯ４溶液をこの反応物にゆっくりと加え、３０分間、撹拌した。この反応物を飽和ＮａＨＣＯ３（５０ｍＬ）に注ぎ入れて、ＥｔＯＡｃ（３×５０ｍＬ）により抽出した。有機物をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過して真空で濃縮した。粗生成物をＨｅｘ中の０〜１０％ＥｔＯＡｃによるカラムクロマトグラフィー１０Ｇ  Ｂｉｏｔａｇｅ  Ｕｌｔｒａによって精製した。所望の生成物を含む画分を真空で濃縮すると、赤色固体（４６．２ｍｇ、０．１７８ｍｍｏｌ、５８％）が得られた。Ｒｔ＝１．８１分、一般ＵＰＬＣ法。ＭＳ（ｍ／ｚ）［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ１４Ｈ１１ＦＮＯ３の計算値２６０．０７、実測値２５９．４６。
【化８４】
2021521111.tif 000100
【０３２２】
基質（４６．２ｍｇ、０．１７８ｍｍｏｌ）、ｐ−ＴＳＡ（３０．７ｍｇ、０．１７８ｍｍｏｌ）および４−エチル−４−ヒドロキシ−７，８−ジヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３，４−ｆ］インドリジン−３，６，１０（４Ｈ）−トリオン（４６．９ｍｇ、０．１７８ｍｍｏｌ）をシンチレーション用バイアルに投入した。ＤＣＭ（１ｍＬ）を加えて、固体を均質にした。溶媒を窒素下で濃縮した。高真空下（１ｍｂａｒ）で無溶媒の固体を６０分間、１２０℃まで加熱した。この反応物をＤＣＭ（５０ｍＬ）に再構成し、Ｈ２Ｏにより洗浄して、有機相をＭｇＳＯ４で洗浄乾燥し、濾過して真空で濃縮した。粗生成物をＤＣＭ中の０〜１０％ＭｅＯＨによるカラムクロマトグラフィー１０Ｇ  Ｂｉｏｔａｇｅ  Ｕｌｔｒａによって精製した。所望の生成物（６）を含む画分を真空で濃縮すると、赤色固体（３２．９ｍｇ、０．０６７６ｍｍｏｌ、３８％）が得られた。Ｒｔ＝１．８１分、一般ＵＰＬＣ法。ＭＳ（ｍ／ｚ）［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ２７Ｈ２０ＦＮ２Ｏ６の計算値４８７．１３、実測値４８７．１９。
【０３２３】
実施例６ａ〜６ｏは、化合物６に関して上記と類似の手順を使用して合成した。
【表ＩＩＩ−１】
2021521111.tif 000101
【表ＩＩＩ−２】
2021521111.tif 000102
【表ＩＩＩ−３】
2021521111.tif 000103
【表ＩＩＩ−４】
2021521111.tif 000104
（実施例７）
【化８５】
2021521111.tif 000105
【０３２４】
７−エチル−１０−ヒドロキシ−カンプトテシン（ＳＮ−３８）（７６．０ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ）をジクロロメタンに溶解し、次いで、トリエチルアミン（１２８μＬ、０．９２ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（２．６０ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を氷浴中で０℃に冷却し、次いで、塩化アセチル（１５．９μＬ、０．２２ｍｍｏｌ）を滴下添加した。反応混合物を室温で１６時間、撹拌した。この反応物をジクロロメタンにより希釈し、飽和ＮＨ４Ｃｌ、水およびブラインで洗浄した。次に、有機相をＭｇＳＯ４で脱水し、濾過して濃縮し、Ｂｉｏｔａｇｅフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ０〜１５％）によりシリカ上で精製すると、アセチル化ＳＮ−３８（７）が得られた。ＭＳ（ｍ／ｚ）、計算値４３５．１５（Ｍ＋Ｈ）＋、実測値４３５．０７。
（実施例８）
【０３２５】
実施例８における化合物を公開手順および一般方法に従い調製した。
【表ＩＶ−１】
2021521111.tif 000106
【表ＩＶ−２】
2021521111.tif 000107
カンプトテシンリンカーの調製
（実施例１−１）
ＭＣ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−アミノメトキシアセチル−７−ＭＡＤ−ＭＤＣＰＴの調製
【化８６】
2021521111.tif 000108
ＭＣ−ＧＧＦＧ−ヘミアミナール−グリコール酸の合成
【化８７】
2021521111.tif 000109
【０３２６】
公開されている手順（ＷＯ２０１５／１５５９９８、ＰＣＴ／ＪＰ２０１５／００２０２０）に基づいて、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−ＯＨ（４．７０ｇ、１３．３ｍｍｏｌ）を一部、ＴＨＦ（１２０ｍＬ）、トルエン（４０ｍＬ）およびピリジン（２ｍＬ）に溶解した。四酢酸鉛（７．３５ｇ、１６．６ｍｍｏｌ）を溶液に加えた。この溶液はオレンジ色になった。この反応物を加熱して還流した。１時間後、この溶液は、白色沈殿物を伴って無色になった。この反応物を合計で３時間、撹拌し、次に、セライト床により濾過して、ＥｔＯＡｃですすぎ、真空で濃縮した。この粗製残留物をＨｅｘ中の１０〜１００％ＥｔＯＡｃによるカラムクロマトグラフィー１００Ｇ  ＫＰ−Ｓｉｌによって精製した。所望の生成物を含む画分を真空で濃縮すると、無色固体（３．３９ｇ、９．１９ｍｍｏｌ、６９％）が得られた。Ｒｔ＝１．８５分、一般ＵＰＬＣ法。ＭＳ（ｍ／ｚ）［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ１８Ｈ１７Ｎ２Ｏ３の計算値３０９．１２、実測値３０９．１３によるヘミアミナールのフラグメントのために、イミニウムしか観察することができなかった。
ＰＰＴＳ置換：
【化８８】
2021521111.tif 000110
【０３２７】
基質（３．３９ｇ、９．１９ｍｍｏｌ）を無水ＤＣＭ（５０ｍＬ）に溶解した。グリコール酸ベンジル（benzyl  glycoate）（１３．０５ｍＬ、９１．９４ｍｍｏｌ）、次いでＰＰＴＳ（２３１ｍｇ、０．９１９ｍｍｏｌ）を加え、この反応物を一晩、還流した。ＵＰＬＣ−ＭＳによって、ほぼ完全な変換が観察された。反応混合物をＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）により希釈し、水（３×２００ｍＬ）により洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥して、濾過して真空で濃縮した。この粗製残留物をＨｅｘ中の１０〜１００％ＥｔＯＡｃによるカラムクロマトグラフィーによって精製した。所望の生成物を含む画分を濃縮すると、白色粉末（４．３０ｇ、９．０６ｍｍｏｌ、９９％）が得られた。Ｒｔ＝２．１８分、一般ＵＰＬＣ法。ＭＳ（ｍ／ｚ）［Ｍ＋Ｎａ］＋  Ｃ２７Ｈ２６Ｎ２ＮａＯ６の計算値４９７．１７、実測値４９７．０６。
Ｆｍｏｃ脱保護：
【化８９】
2021521111.tif 000111
【０３２８】
基質（１．００ｇ、２．１１ｍｍｏｌ）をＤＭＦ中の２０％ピペリジンに溶解して、２０分間、撹拌した。この反応物を真空で濃縮し、さらに精製することなく次の工程に使用した。
Ｆｍｏｃ−Ｐｈｅ−Ｏｓｕカップリング：
【化９０】
2021521111.tif 000112
【０３２９】
前の工程からの粗生成物（２．１１ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（２ｍＬ）に溶解した。ＤＩＰＥＡ（０．７３ｍＬ、４．２ｍｍｏｌ）、次いでＦｍｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＳｕ（１．７１ｇ、３．１６ｍｍｏｌ）を加えた。この反応物を室温で３０分間、撹拌し、次に、真空で濃縮して、Ｈｅｘ中の１０〜１００％ＥｔＯＡｃによるカラムクロマトグラフィー１００Ｇ  ＫＰ−Ｓｉｌによって精製した。所望の生成物を含む画分を濃縮すると、白色固体（９１０ｍｇ、１．４６ｍｍｏｌ、７０％）が得られた。Ｒｔ＝２．２８分、一般ＵＰＬＣ法。ＭＳ（ｍ／ｚ）［Ｍ＋Ｎａ］＋  Ｃ３６Ｈ３５Ｎ３ＮａＯ７の計算値６４４．２４、実測値６４４．０４。
Ｆｍｏｃ脱保護：
【化９１】
2021521111.tif 000113
【０３３０】
基質（９１０ｍｇ、１．４６ｍｍｏｌ）をＤＭＦ中の２０％ピペリジンに溶解して、２０分間、撹拌した。この反応物を真空で濃縮し、さらに精製することなく次の工程に使用した。
Ｆｍｏｃジペプチドカップリング：
【化９２】
2021521111.tif 000114
【０３３１】
前の工程からの粗生成物（１．４６ｍｍｏｌ）を無水ＤＭＦ（２ｍＬ）に溶解した。この反応物にＤＩＰＥＡ（１．００ｍＬ、５．７６ｍｍｏｌ）およびＦｍｏｃ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−ＯＨ（１．０７ｇ、３．０２ｍｍｏｌ）、次いでＨＡＴＵ（１．０９ｇ、２．８８ｍｍｏｌ）を加えた。この反応物を３０分間、撹拌した。この反応物をＡｃＯＨによりクエンチし、Ｈ２Ｏ（０．０５％ＴＦＡ）中の１０〜９５％ＭｅＣＮの分取ＨＰＬＣ  ５０ｍｍにより精製した。所望の生成物を含む画分を真空で濃縮すると、白色固体（６５０ｍｇ、０．８８ｍｍｏｌ、６１％）が得られた。Ｒｔ＝２．１３分、一般ＵＰＬＣ法。ＭＳ（ｍ／ｚ）［Ｍ＋Ｎａ］＋  Ｃ４０Ｈ４１Ｎ５ＮａＯ９の計算値７５８．２８、実測値７５８．１３。
Ｐｄ触媒によるベンジルエステルの脱保護：
【化９３】
2021521111.tif 000115
【０３３２】
基質（６５０ｍｇ、０．８８ｍｍｏｌ）を２：１  ＥｔＯＨ：ＥｔＯＡｃ（１２ｍＬ）に懸濁し、窒素雰囲気（atomosphere）下に置いた。溶液に、Ｐｄ／Ｃ（１０％ｗ／ｗ、１３２ｍｇ、０．１２４ｍｍｏｌ）を加えた。水素を１時間、反応物に通気した（１ａｔｍ）。反応物をセライトにより濾過して、ＭｅＯＨですすぎ、真空で濃縮した。さらに精製することなく次の工程に使用した。
Ｆｍｏｃ脱保護：
【化９４】
2021521111.tif 000116
【０３３３】
前の工程からの粗製固体（０．８８ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（８ｍＬ）に溶解した。ピペリジン（２ｍＬ）を加えた。１０分間、撹拌した。この反応物を真空で濃縮すると、白色固体が得られた。さらに精製することなく次の工程に使用した。
ＭＣ−ＯＳｕカップリング：
【化９５】
2021521111.tif 000117
【０３３４】
前の工程からの粗生成物（０．８８ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１０ｍＬ）に溶解した。ＤＩＰＥＡ（１ｍＬ）、次いでＭＣ−ＯＳｕ（４０７ｍｇ、１．３２ｍｍｏｌ）を加えた。この反応物を１０分間、撹拌した。ＵＰＬＣ−ＭＳによって、完全な変換が観察された。ＡｃＯＨ（１ｍＬ）を加えて反応をクエンチした。ＴＦＡ（Ｈ２Ｏ０．０５％）中の１０〜９５％ＭｅＣＮの分取ＨＰＬＣ  ５０ｍｍにより精製した。所望の生成物を含む画分を凍結乾燥すると、白色固体（４５３ｍｇ、０．７３５ｍｍｏｌ、８３％）が得られた。Ｒｔ＝１．２１分、一般ＵＰＬＣ法。ＭＳ（ｍ／ｚ）［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ２８Ｈ３７Ｎ６Ｏ１０の計算値６１７．２６、実測値６１７．０７。
ＭＣ−ＧＧＦＧ−グリコール酸リンカーの７−ＭＡＤ−ＭＤＣＰＴとのカップリング：
【化９６】
2021521111.tif 000118
【０３３５】
ＭＣ−ＧＧＦＧ−グリコール酸（４６ｍｇ、０．０７５ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（０．５ｍＬ）に溶解した。ＤＩＰＥＡ（２６μＬ、０．１４９ｍｍｏｌ）、次いでＣＯＭＵ（３２ｍｇ、０．０７５ｍｍｏｌ）を加えた。この反応物を室温で３０分間、撹拌した。活性化した酸溶液を、７−ＭＡＤ−ＭＤＣＰＴ薬物固体（実施例４に由来）に直接、加えた。５分後に、ＵＰＬＣ−ＭＳによって完全な変換が観察された。この反応物をＡｃＯＨによりクエンチし、Ｈ２Ｏ（０．０５％ＴＦＡ）中の１０〜９５％ＭｅＣＮの分取ＨＰＬＣにより精製した。所望の生成物を含む画分を凍結乾燥すると、所望の生成物が白色固体（８．００ｍｇ、７．８４μｍｏｌ、２１％）として得られた。Ｒｔ＝１．９３分、一般ＵＰＬＣ法。ＭＳ（ｍ／ｚ）［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ５０Ｈ５４Ｎ９Ｏ１５の計算値１０２０．３７、実測値１０２０．０９。
（実施例２−１）
ＭＣ−Ｖａｌ−Ｃｉｔ−ＰＡＢＡ−７−ＭＡＤ−ＭＤＣＰＴの調製
【化９７】
2021521111.tif 000119
【０３３６】
７−ＭＡＤ−ＭＤＣＰＴ  ＴＦＡ塩（２０．０ｍｇ、０．０３７４ｍｍｏｌ）およびＭＣ−Ｖａｌ−Ｃｉｔ−ＰＡＢＡ−ＰＮＰ（８２．７ｍｇ、０．１１２ｍｍｏｌ）を無水ＤＭＦ（０．５ｍＬ）に溶解した。ＤＩＰＥＡ（２６μＬ、０．１４９ｍｍｏｌ）を加えた。１０分後に、ＵＰＬＣ−ＭＳによって完全な変換が観察された。この反応物をＡｃＯＨによりクエンチし、Ｈ２Ｏ（０．０５％ＴＦＡ）中の１０〜９５％ＭｅＣＮの分取ＨＰＬＣ  ２１ｍｍにより精製した。所望の生成物を含む画分を凍結乾燥すると、白色粉末（２．４ｍｇ、２．４μｍｏｌ、６％）が得られた。Ｒｔ＝１．５９分、一般ＵＰＬＣ法。ＭＳ（ｍ／ｚ）［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ５１Ｈ５８Ｎ９Ｏ１４の計算値１０２０．４１、実測値１０２０．０９。
（実施例３−１）
ＭＰ−ＰＥＧ４−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−７−ＭＡＤ−ＭＤＣＰＴの調製
【化９８】
2021521111.tif 000120
ＭＰ−ＰＥＧ４−ＶＫ（Ｂｏｃ）−ＯＨの固相ペプチド合成
【０３３７】
反応容器に２−クロロトリチル樹脂（１．６ｍｍｏｌ／ｇ、２グラム）を加え、ＤＭＦにより２回、洗浄した。樹脂を２０ｍＬのＤＭＦ中で１０分間、膨潤させて、次に、排液した。１０ｍＬのＤＭＦに溶解したＦｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ（９３７ｍｇ、２ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（０．７ｍＬ、４ｍｍｏｌ）を樹脂に加え、室温で３０分間、振とうした。ＭｅＯＨ（５ｍＬ）を樹脂に加えて５分間、振とうし、次に排液して、ＤＭＦで５回、洗浄した。置換は、１ｍｍｏｌ／ｇであったと見なした。樹脂をＤＣＭで３回、洗浄し、ＭｅＯＨで３回、洗浄し、次に、一晩、高真空下で乾燥した。調製したＦｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−２−クロロトリチル樹脂（１グラム）を反応容器に加えた。樹脂をＤＭＦで３回、洗浄し、１０ｍＬ  ＤＭＦ中で１０分間、膨潤させて、次に、排液した。一般的な脱保護手順を使用して、Ｆｍｏｃを脱保護した。一般的なカップリング手順を使用して、Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨを樹脂にカップリングし、次に、一般脱保護手順を行った。一般的なカップリング手順を使用してＭＰ−ＰＥＧ４−ＯＨをカップリングした。次に、樹脂をＤＣＭで３回、次いでＭｅＯＨで３回、洗浄し、一晩、高真空下に置いた。１ｍＬの酢酸、２ｍＬのヘキサフルオロイソプロパノールおよび７ｍＬのＤＣＭの溶液中で樹脂を１時間、撹拌することによって、ペプチドを樹脂から切り離した。次に、樹脂を濾過して、ＤＣＭで３回、すすぎ、次に、この溶液を真空で濃縮した。白色粉末を２：１  ＤＭＡ：Ｈ２Ｏ（３ｍＬ）に溶解し、以下に記載する０．０５％水性ＴＦＡ中のＭｅＣＮ（０．０５％ＴＦＡ）の５〜６０〜９５％勾配溶出を使用する、３０×２５０ｍｍ  Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｍａｘ−ＲＰ  ４μｍ  Ｓｙｎｅｒｇｉ  ８０Å逆相カラムを使用する分取ＨＰＬＣにより精製した。所望の生成物を含む画分を凍結乾燥すると、白色粉末（３４３ｍｇ、０．４６１ｍｍｏｌ、４６％）が得られた。Ｒｔ＝１．５０分、一般ＵＰＬＣ法。ＭＳ（ｍ／ｚ）［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ３４Ｈ５７Ｎ５Ｏ１３の計算値７４４．１６、実測値７４４．４０。
５〜６０〜９５％の勾配溶出
【表Ｂ】
2021521111.tif 000121
【０３３８】
ＭＰ−ＰＥＧ４−ＶＫ（Ｂｏｃ）−ＯＨと７−ＭＡＤ−ＭＤＣＰＴとのカップリング、およびＢｏｃ脱保護
【化９９】
2021521111.tif 000122
【０３３９】
ＭＰ−ＰＥＧ４−ＶＫ（Ｂｏｃ）−ＯＨ（３０ｍｇ、０．０４０ｍｍｏｌ）を無水ＤＭＦ（０．５ｍＬ）およびＤＩＰＥＡ（５０μＬ、０．２８ｍｍｏｌ）に溶解した。この溶液にＨＡＴＵ（１５．３ｍｇ、０．０４０３ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を室温で３０分間、撹拌した。活性化酸溶液を７−ＭＡＤ−ＭＤＣＰＴ固体（１７ｍｇ、０．０４ｍｍｏｌ）に直接、加えた。ＵＰＬＣ−ＭＳによって、反応の完了をモニタリングした。完全な変換が、１２０分後に観察された。この反応物をＡｃＯＨ（５０μＬ、０．８７ｍｍｏｌ）で酸性にし、既に記載した０．０５％水性ＴＦＡ中のＭｅＣＮ（０．０５％ＴＦＡ）の５〜６０〜９５％勾配溶出を使用する、２１×２５０ｍｍ  Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｍａｘ−ＲＰ  ４μｍ  Ｓｙｎｅｒｇｉ  ８０Å逆相カラムを使用する分取ＨＰＬＣにより精製した。所望の生成物を含む画分を凍結乾燥すると、黄色粉末（５ｍｇ、０．００４４ｍｍｏｌ、１１％）が得られた。Ｒｔ＝１．７０分、一般ＵＰＬＣ法。ＭＳ（ｍ／ｚ）［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ５７Ｈ７５Ｎ７Ｏ１８の計算値１１４６．５２、実測値１１４７．１９。
【０３４０】
ＭＰ−ＰＥＧ４−ＶＫ（Ｂｏｃ）−７−ＭＡＤ−ＭＤＣＰＴをＤＣＭ中の２０％ＴＦＡに溶解した。ＵＰＬＣ−ＭＳによって、反応の完了をモニタリングした。１０分間後に完全な変換。この反応物を真空で濃縮し、２：１  ＤＭＡ：Ｈ２Ｏ中の１０％ＡｃＯＨに再構成し、既に記載した０．０５％水性ＴＦＡ中のＭｅＣＮ（０．０５％ＴＦＡ）の５〜６０〜９５％勾配溶出を使用する、２１×２５０ｍｍ  Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｍａｘ−ＲＰ  ４μｍ  Ｓｙｎｅｒｇｉ  ８０Å逆相カラムを使用する分取ＨＰＬＣによって精製した。３８５ｎｍの吸光度を有する画分を採集した。所望の生成物を含む画分を凍結乾燥すると、化合物３−１が黄色粉末（２．５ｍｇ、０．００２３ｍｍｏｌ、５５％）として得られた。Ｒｔ＝１．１２分、一般ＵＰＬＣ法。ＭＳ（ｍ／ｚ）［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ５２Ｈ６７Ｎ７Ｏ１６の計算値１０４６．４７、実測値１０４７．２６。
（実施例４−１）
ＭＰ−ＰＥＧ４−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−７−ＭＡＤ−ＭＤＣＰＴの調製
【化１００】
2021521111.tif 000123
ＭＰ−ＰＥＧ４−ＶＫ（Ｂｏｃ）Ｇ−ＯＨの固相ペプチド合成
【０３４１】
２−クロロトリチル樹脂に事前に１．１ｍｍｏｌ／ｇで負荷されている非保護グリシンをＢＡＣｈｅｍから購入した。樹脂（１グラム）を反応容器に加えた。樹脂をＤＭＦで４回、洗浄し、完全に排液した。樹脂をＤＭＦ中で３０分間、振とうすることによって膨潤させて、排液した。一般的なカップリング手順を使用して、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨを樹脂にカップリングした。一般脱保護手順を使用して、Ｆｍｏｃを脱保護した。一般的なカップリング手順を使用して、Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨを樹脂にカップリングして、次に、一般脱保護手順を行った。一般的なカップリング手順を使用してＭＰ−ＰＥＧ４−ＯＨをカップリングした。次に、樹脂をＤＣＭで３回、次いでＭｅＯＨで３回、洗浄し、一晩、高真空下に置いた。１ｍＬの酢酸、２ｍＬのヘキサフルオロイソプロパノールおよび７ｍＬのＤＣＭの溶液中で樹脂を１時間、撹拌することによって、ペプチドを樹脂から切断した。次に、樹脂を濾過して、ＤＣＭで３回、すすぎ、次に、この溶液を真空で濃縮した。白色粉末を２：１  ＤＭＡ：Ｈ２Ｏ（３ｍＬ）に溶解し、以下に記載する０．０５％水性ＴＦＡ中のＭｅＣＮ（０．０５％ＴＦＡ）の５〜６０〜９５％勾配溶出を使用する、３０×２５０ｍｍ  Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｍａｘ−ＲＰ  ４μｍ  Ｓｙｎｅｒｇｉ  ８０Å逆相カラムを使用する分取ＨＰＬＣにより精製した。所望の生成物を含む画分を凍結乾燥すると、白色粉末（３５４ｍｇ、０．４４２ｍｍｏｌ、４０％）が得られた。Ｒｔ＝１．３９分、一般ＵＰＬＣ法。ＭＳ（ｍ／ｚ）［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ３６Ｈ５９Ｎ６Ｏ１４の計算値８０１．４２、実測値８０１．０２。
５〜６０〜９５％の勾配溶出
【表Ｃ】
2021521111.tif 000124
一般Ｆｍｏｃ脱保護手順
【０３４２】
樹脂に２０％ピペリジンのＤＭＦ（１０ｍＬ）溶液を加え、１分間、振とうして排液した。この樹脂にさらなるＤＭＦ中の２０％ピペリジン（１０ｍＬ）を加え、３０分間、振とうして排液した。樹脂をＤＭＦで４回、洗浄し、完全に排液した。
一般的なカップリング手順
【０３４３】
Ｆｍｏｃアミノ酸（３ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（３ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（６ｍｍｏｌ）からなるＤＭＦ（１０ｍＬ）溶液を調製した。この溶液を樹脂に加え、６０分間、振とうした。この反応容器を排液し、ＤＭＦで４回、洗浄した。
ＭＰ−ＰＥＧ４−ＶＫ（Ｂｏｃ）Ｇ−ＯＳｕの合成
【０３４４】
ＭＰ−ＰＥＧ４−ＶＫＧ−ＯＨ（９０．０ｍｇ、０．１１２ｍｍｏｌ）を無水ＤＭＦ（０．３ｍＬ）に溶解し、ＤＩＰＥＡ（０．０５ｍＬ、０．３０２ｍｍｏｌ）を加えた。反応容器にＴＳＴＵ（６７．６ｍｇ、０．２２４ｍｍｏｌ）を加え、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（ＯＳｕ）活性化エステルへの変換をＵＰＬＣ−ＭＳによりモニタリングした。５分後に完全な変換が観察された。この反応物をＡｃＯＨ（０．０５ｍＬ、０．８７４ｍｍｏｌ）により酸性にした。ＤＣＭ中の０〜１０％ＭｅＯＨの勾配溶出を用いる、１０Ｇ  Ｕｌｔｒａシリカゲルカラムを使用するＢｉｏｔａｇｅフラッシュクロマトグラフィーによって反応物を精製した。所望の生成物を含む画分を真空で濃縮すると、白色固体が得られ、これは、所望の生成物ＭＰ−ＰＥＧ４−ＶＫ（Ｂｏｃ）Ｇ−ＯＳｕ（９１．２ｍｇ、０．１０２ｍｍｏｌ、９０％）であった。Ｒｔ＝１．４８、一般ＵＰＬＣ法。ＭＳ（ｍ／ｚ）［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ４０Ｈ６２Ｎ７Ｏ１６の計算値８９８．４４、実測値８９８．３３。
ＭＰ−ＰＥＧ４−ＶＫ（Ｂｏｃ）Ｇ−ＯＳｕと７−ＭＡＤ−ＭＤＣＰＴとのカップリング
【０３４５】
ＭＰ−ＰＥＧ４−ＶＫ（Ｂｏｃ）Ｇ−ＯＳｕ（５０ｍｇ、０．０５６ｍｍｏｌ）を含む反応容器に、無水ＤＭＦ（０．４８ｍＬ）に溶解した７−ＭＡＤ−ＭＤＣＰＴ（２４ｍｇ、０．０５７ｍｍｏｌ）の溶液を直接、加えた。この反応容器にＤＩＰＥＡ（０．０５ｍＬ、．３０３ｍｍｏｌ）を加えた。塩基を加えると、濁りのない黄色溶液が濁った。ＵＰＬＣ−ＭＳによって、反応の完了をモニタリングした。５分後に、所望のカップリングした生成物への完全な変換が観察された。この反応物をＡｃＯＨ（０．０５ｍＬ、０．８７ｍｍｏｌ）により酸性にし、ＤＣＭ中の０〜１０％ＭｅＯＨの勾配溶出を用いるシリカゲルカラムより濾過することによって精製した。この溶離液を真空で濃縮すると、黄色固体が得られ、これは、所望の生成物ＭＰ−ＰＥＧ４−ＶＫＧ−７−ＭＡＤ−ＭＤＣＰＴ（３２ｍｇ、０．０２７ｍｍｏｌ、４８％）であった。Ｒｔ＝１．５９分、一般ＵＰＬＣ法。ＭＳ（ｍ／ｚ）［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ５８Ｈ７７Ｎ９Ｏ１９の計算値１２０４．５４、実測値１２０４．２５。
ＭＰ−ＰＥＧ４−ＶＫ（Ｂｏｃ）Ｇ−７−ＭＡＤ−ＭＤＣＰＴのＢｏｃ脱保護
【０３４６】
ＭＰ−ＰＥＧ４−ＶＫ（Ｂｏｃ）−Ｇ−７−ＭＡＤ−ＭＤＣＰＴをＤＣＭ中の２０％ＴＦＡに溶解した。ＵＰＬＣ−ＭＳによって、反応の完了をモニタリングした。１０分後に完全な変換が観察された。この反応物を真空で濃縮し、２：１  ＤＭＡ：Ｈ２Ｏ中の１０％ＡｃＯＨに再構成し、既に記載した０．０５％水性ＴＦＡ中のＭｅＣＮ（０．０５％ＴＦＡ）の５〜６０〜９５％勾配溶出を使用する、２１×２５０ｍｍ  Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｍａｘ−ＲＰ  ４μｍ  Ｓｙｎｅｒｇｉ  ８０Å逆相カラムを使用する分取ＨＰＬＣにより精製した。３８５ｎｍの吸光度を有する画分を採集した。所望の生成物を含む画分を凍結乾燥すると、化合物実施例４−１が黄色粉末（３３ｍｇ、．０３０ｍｍｏｌ、８０％）として得られた。Ｒｔ＝１．１２分、一般ＵＰＬＣ法。ＭＳ（ｍ／ｚ）［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ５３Ｈ６９Ｎ９Ｏ１７の計算値１１０４．４９、実測値１１０４．７０。
（実施例４−２）
ＭＰ−ＰＥＧ２−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−７−ＭＡＤ−ＭＤＣＰＴの調製
【化１０１】
2021521111.tif 000125
【０３４７】
化合物実施例４−２は、ＰＥＧ４をＰＥＧ２に置き換えることによって、実施例４−１に記載されている一般手順を使用して合成した。
（実施例４−３）
ＭＰ−ＰＥＧ８−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−７−ＭＡＤ−ＭＤＣＰＴの調製
【化１０２】
2021521111.tif 000126
【０３４８】
化合物実施例４−３は、ＰＥＧ４をＰＥＧ８に置き換えることによって、実施例４−１に記載されている一般手順を使用して合成した。
（実施例４−４）
ＭＰ−ＰＥＧ１２−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−７−ＭＡＤ−ＭＤＣＰＴの調製
【化１０３】
2021521111.tif 000127
【０３４９】
化合物実施例４−４は、ＰＥＧ４をＰＥＧ１２に置き換えることによって、実施例４−１に記載されている一般手順を使用して合成した。
【０３５０】
以下の表は、化合物実施例４−２、実施例４−３および実施例４−４に関する特徴付けデータを要約している。
【表Ｖ】
2021521111.tif 000128
（実施例４−５）
ＭＰ−Ｌｙｓ［（Ｃ（Ｏ）（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１２−ＣＨ３）］−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−７−ＭＡＤ−ＭＤＣＰＴの調製
【化１０４】
2021521111.tif 000129
ＭＰ−Ｌｙｓ［（Ｃ（Ｏ）（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１２−ＣＨ３）］−Ｖａｌ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−Ｇｌｙ−ＯＨの固相ペプチド合成
【０３５１】
２−クロロトリチル樹脂に事前に０．８７ｍｍｏｌ／ｇで負荷されている非保護グリシンをＩｒｉｓ  Ｂｉｏｔｅｃｈから購入した。樹脂（０．２８７グラム、０．２５ｍｍｏｌ）を反応容器に加えた。樹脂をＤＭＦで３回、洗浄し、完全に排液した。樹脂をＤＭＦ中で３０分間、振とうすることによって膨潤させ、排液した。一般的なカップリング手順を使用して、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨを樹脂にカップリングした。一般脱保護手順を使用して、Ｆｍｏｃを脱保護した。一般的なカップリング手順を使用して、Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨを樹脂にカップリングし、次に、一般脱保護手順を行った。ＨＡＴＵを添加しない一般カップリング手順を使用して、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（ＰＥＧ１２）−ＯＳｕ（ＷＯ２０１５０５７６９９）をカップリングした。一般脱保護手順を使用して、Ｆｍｏｃを脱保護した。ＨＡＴＵを添加しない一般カップリング手順を使用して、３−（マレイミド）プロピオン酸Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステルをカップリングした。次に、樹脂をＤＣＭで３回、次いでＥｔ２Ｏで３回、洗浄し、一晩、高真空下に置いた。１ｍＬの酢酸、２ｍＬのトリフルオロエタノールおよび７ｍＬのＤＣＭの溶液中で樹脂を１時間、撹拌することによって、ペプチドを樹脂から切り離した。次に、樹脂を濾過して、ＤＣＭで３回、すすぎ、次に、この溶液を真空で濃縮した。粗製物質をＤＭＳＯ（２ｍＬ）に溶解し、水性０．１％ギ酸中のＭｅＣＮ（０．１％ギ酸）の５〜６０〜９５％勾配溶出を使用する、２１×２５０ｍｍ  Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｍａｘ−ＲＰ  ４μｍ  Ｓｙｎｅｒｇｉ  ８０Å逆相カラムを使用する分取ＨＰＬＣにより精製した。所望の生成物を含む画分を濃縮すると、粘ちょうな油状物が得られた。この油状物をＭｅＣＮ（２ｍＬ）に溶解し、Ｅｔ２Ｏで沈殿させた。生成物を濾過により採集すると、無色のアモルファス固体（１７０．７ｍｇ、０．１３６ｍｍｏｌ、５５％）が得られた。Ｒｔ＝１．３２分、一般ＵＰＬＣ法。ＭＳ（ｍ／ｚ）［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ５７Ｈ１０２Ｎ７Ｏ２３の計算値１２５２．７０、実測値１２５２．７９。
一般Ｆｍｏｃ脱保護手順
【０３５２】
樹脂に２０％ピペリジンのＤＭＦ（５ｍＬ）溶液を加え、１分間、振とうして排液した。樹脂にさらなるＤＭＦ中の２０％ピペリジン（５ｍＬ）を加え、３０分間、振とうして排液した。樹脂をＤＭＦで４回、洗浄し、完全に排液した。
一般的なカップリング手順
【０３５３】
Ｆｍｏｃアミノ酸（０．７５ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（０．７５ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（１．５ｍｍｏｌ）からなるＤＭＦ（５ｍＬ）溶液を調製した。この溶液を樹脂に加え、６０分間、振とうした。この反応容器を排液し、ＤＭＦで４回、洗浄した。
【化１０５】
2021521111.tif 000130
【０３５４】
ＭＰ−Ｌｙｓ［（Ｃ（Ｏ）（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１２−ＣＨ３）］−Ｖａｌ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−Ｇｌｙ−ＯＨ（５９．４ｍｇ、０．０４７５ｍｍｏｌ）を無水ＤＭＦ（０．１ｍＬ）に溶解した。ＤＩＰＥＡ（１２．４μＬ、０．０７１２ｍｍｏｌ）、次いでＴＳＴＵ（１４．３ｍｇ、０．０４７５ｍｍｏｌ）を加えた。この反応物を１０分間、撹拌し、酸のＮＨＳエステルへの活性化を完了させた。この反応物に７−ＭＡＤ−ＭＤＣＰＴ（１０．０ｍｇ、０．０２３７３ｍｍｏｌ、ＤＭＦ中１００ｍｇ／ｍＬ）を加えた。５分後に完全な変換が観察された。この反応物をＡｃＯＨ（２５μＬ）によりクエンチし、Ｈ２Ｏ（０．１％ＴＦＡ）中の５〜６０〜９５％ＭｅＣＮの分取ＨＰＬＣにより精製した。所望の生成物を含む画分を真空で濃縮すると、黄色固体（１２．３ｍｇ、０．００７４０ｍｍｏｌ、３１％）が得られた。Ｒｔ＝１．５６分、一般ＵＰＬＣ法。ＭＳ（ｍ／ｚ）［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ７９Ｈ１１８Ｎ１０Ｏ２８の計算値１６５５．８２、実測値１６５５．８９。
【化１０６】
2021521111.tif 000131
【０３５５】
化合物をＤＣＭ中の２０％ＴＦＡに溶解した。ＵＰＬＣ−ＭＳによって、反応の完了をモニタリングした。１０分後に完全な変換が観察された。この反応物を真空で濃縮し、Ｈ２Ｏ（０．０５％ＴＦＡ）中の４０％ＭｅＣＮに再構成し、凍結乾燥すると、化合物実施例４−５が、ＴＦＡ塩と推定される黄色粉末（１２．９９ｍｇ、０．００７７８ｍｍｏｌ、１０５．１６％）として得られた。Ｒｔ＝１．２７分、一般ＵＰＬＣ法。ＭＳ（ｍ／ｚ）［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ７４Ｈ１１１Ｎ１０Ｏ２６の計算値１５５５．７７、実測値１５５５．８６。
（実施例５−１）
ＭＰ−ＰＥＧ４−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−７−ＭＡＤ−ＭＤＣＰＴの調製
【化１０７】
2021521111.tif 000132
【０３５６】
ペプチドＭＰ−ＰＥＧ４−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−ＯＨは、以下の一般手順を使用して、固相ペプチド合成によって合成した。
膨潤の一般手順
【０３５７】
２−クロロトリチル樹脂に事前に１．１ｍｍｏｌ／ｇで負荷されている未保護アミノ酸樹脂（２００ｍｇ）をＢＡＣｈｅｍから購入した。樹脂を反応容器に加えた。樹脂をＤＭＦ（４×２ｍＬ）で洗浄し、完全に排液した。樹脂をＤＭＦ（２ｍＬ）中で３０分間、振とうすることによって膨潤させて、排液した。
一般Ｆｍｏｃ脱保護手順：
【０３５８】
樹脂に２０％ピペリジンのＤＭＦ（２ｍＬ）溶液を加え、１分間、振とうして排液した。樹脂にさらなるＤＭＦ中の２０％ピペリジン２ｍＬを加え、３０分間、振とうして排液した。樹脂をＤＭＦ（４×２ｍＬ）で洗浄し、完全に排液した。
一般的なカップリング手順：
【０３５９】
Ｆｍｏｃアミノ酸（０．６ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（０．６ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（０．６ｍｍｏｌ）からなるＤＭＦ（２ｍＬ）溶液を調製した。この溶液を樹脂に加え、６０分間、振とうした。反応容器を排液して、ＤＭＦ（４×２ｍＬ）で洗浄し、完全に排液した。
一般切断手順：
【０３６０】
１：２：７  ＡｃＯＨ：ヘキサフルオロイソプロパノール：ＤＣＭ（５ｍＬ）の溶液中で樹脂を１時間、撹拌することによって、ペプチドを樹脂から切り離した。次に、この樹脂を濾過して、ＤＣＭ（３×１０ｍＬ）によりすすぎ、次に、この溶液を真空で濃縮し、水性０．０５％ＴＦＡ中のＭｅＣＮ（０．０５％ＴＦＡ）の５〜６０〜９５％勾配溶出を使用する、２１×２５０ｍｍ  Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｍａｘ−ＲＰ  ４μｍ  Ｓｙｎｅｒｇｉ  ８０Å逆相カラムを使用する分取ＨＰＬＣにより精製した。所望の生成物を含む画分を凍結乾燥すると、白色粉末が得られた。
【０３６１】
固相ペプチド合成の一般手順を使用して、ペプチドＭＰ−ＰＥＧ４−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−ＯＨを合成し、白色粉末（４５ｍｇ、０．０８５ｍｍｏｌ、４２％）を得た。Ｒｔ＝０．８３分、一般ＵＰＬＣ法。ＭＳ（ｍ／ｚ）［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ２２Ｈ３５Ｎ４Ｏ１１の計算値５３１．２３、実測値５３０．８２。
ＴＳＴＵカップリング手順：
【０３６２】
ペプチド（４５ｍｇ、０．０８５ｍｍｏｌ）を、０．２ｍＬのＤＭＦに溶解した。ＴＳＴＵ（２８ｍｇ、０．０９３ｍｍｏｌ、１．１当量）を加えた。ＤＩＰＥＡ（１．２当量）を加え、この反応物を３０分間、撹拌した。この反応物をＡｃＯＨでクエンチした。ＤＣＭ中のＦＣＣ０〜１０％ＭｅＯＨによって精製した。所望の生成物を含む画分を真空で濃縮すると、白色粉末（１０ｍｇ、０．０１６ｍｍｏｌ、１９％）が得られた。Ｒｔ＝０．９６分、一般ＵＰＬＣ法。ＭＳ（ｍ／ｚ）［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ２６Ｈ３８Ｎ５Ｏ１３の計算値６２８．２５、実測値６２７．９４。
【０３６３】
ＤＭＦ中の２０ｍｇ／ｍＬの７−ＭＡＤ−ＭＤＣＰＴ（１．１当量）をＮＨＳエステルペプチドに直接、加えた。ＤＩＰＥＡ（１８μＬ、０．１０ｍｍｏｌ、１．２当量）を加え、３０分間、撹拌した。この反応物をＡｃＯＨでクエンチし、分取ＨＰＬＣによって精製した。所望の生成物を含む画分を凍結乾燥すると、白色粉末が得られた。Ｒｔ＝１．２５分、一般ＵＰＬＣ法。ＭＳ（ｍ／ｚ）［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ４４Ｈ５２Ｎ７Ｏ１６の計算値９３４．３５、実測値９３４．５２。
一般脱保護手順：
【０３６４】
酸不安定保護基を有するペプチドをベースとする薬物リンカーをＤＣＭ中の２０％ＴＦＡ（２ｍＬ）に溶解し、３０分間、撹拌した。この反応物を真空で濃縮した。
【０３６５】
実施例５−１に関して報告した一般手順を使用して、化合物５−１ａ〜５−１ｓを合成した。各実施例における薬物部分は、実施例５−１に関して示したアミノメチル窒素における、Ｎ連結を介して連結した式ＣＰＴ５のものである。
【表ＶＩ−１】
2021521111.tif 000133
【表ＶＩ−２】
2021521111.tif 000134
【表ＶＩ−３】
2021521111.tif 000135
【表ＶＩ−４】
2021521111.tif 000136
（実施例６−１）
ＭＣ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−７−ＮＨＣＨ２ＯＣＨ２−ＭＤＣＰＴの調製
【化１０８】
2021521111.tif 000137
ＭＣ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−ＯＨの固相ペプチド合成
【化１０９】
2021521111.tif 000138
【０３６６】
２−クロロトリチル樹脂に事前に１．１ｍｍｏｌ／ｇで負荷されている非保護フェニルアラニンをＢＡＣｈｅｍから購入した。樹脂（１グラム）を反応容器に加えた。樹脂をＤＭＦで４回、洗浄、し、完全に排液した。樹脂をＤＭＦ中で３０分間、振とうすることによって膨潤させ、排液した。一般的なカップリング手順を使用して、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨを樹脂にカップリングした。一般脱保護手順を使用して、Ｆｍｏｃを脱保護した。一般的なカップリング手順を使用して、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨを樹脂にカップリングして、次に、一般脱保護手順を行った。一般的なカップリング手順を使用して、ＭＣ−ＯＨをカップリングした。次に、樹脂をＤＣＭで３回、洗浄し、次いでＭｅＯＨで３回、洗浄し、一晩、高真空下に置いた。１ｍＬの酢酸、２ｍＬのヘキサフルオロイソプロパノールおよび７ｍＬのＤＣＭの溶液中で樹脂を１時間、撹拌することによって、ペプチドを樹脂から切断した。次に、樹脂を濾過して、ＤＣＭで３回、すすぎ、この溶液を真空で濃縮した。白色固体を、水性０．０５％ＴＦＡ中のＭｅＣＮ（０．０５％ＴＦＡ）の５〜６０〜９５％勾配溶出を使用する、３０×２５０ｍｍ  Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｍａｘ−ＲＰ  ４μｍ  Ｓｙｎｅｒｇｉ  ８０Å逆相カラムを使用する分取ＨＰＬＣにより精製した。所望の生成物を含む画分を凍結乾燥すると、白色粉末（２０７ｍｇ、０．４３８ｍｍｏｌ、４４％）が得られた。Ｒｔ＝１．２８分、一般ＵＰＬＣ法。ＭＳ（ｍ／ｚ）［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ２３Ｈ２９Ｎ４Ｏ７の計算値４７３．２０、実測値４７３．００。
ＦｍｏｃＧｌｙ−７−ＮＨＣＨ２ＯＣＨ２−ＭＤＣＰＴの調製
【化１１０】
2021521111.tif 000139
【０３６７】
基質（５２ｍｇ、０．０１４ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１ｍＬ）に溶解した。ＴＭＳＣｌ（０．２５ｍＬ）を加えた。この反応混合物を２０分間、撹拌し、次に、真空で濃縮した。粗生成物を次の工程に、直ちに使用した。
【化１１１】
2021521111.tif 000140
【０３６８】
前の工程からの活性化リンカーを無水ＤＣＭ（１ｍＬ）に溶解し、７−ＢＡＤ−ＭＤＣＰＴ（２０．０ｍｇ、０．０４７４ｍｍｏｌ）の固体に直接、加えた。この反応容器を密封し、６０℃で２４時間、撹拌した。この反応物をＭｅＯＨによりクエンチして、真空で濃縮した。粗生成物をＤＣＭ中の０〜１０％ＭｅＯＨによるカラムクロマトグラフィー１０Ｇ  Ｂｉｏｔａｇｅ  Ｕｌｔｒａによって精製した。所望の生成物および不純物である遊離薬物を含む画分を真空で濃縮すると、黄色固体（２５ｍｇ、５０％純度、０．０１７ｍｍｏｌ、３６％）が得られた。Ｒｔ＝１．７７分、一般ＵＰＬＣ法。ＭＳ（ｍ／ｚ）［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ４０Ｈ３５Ｎ４Ｏ１０の計算値７３１．２４、実測値７３１．０７。
【化１１２】
2021521111.tif 000141
【０３６９】
基質（０．０１７ｍｍｏｌ）をＤＭＦ中の２０％ピペリジン（１ｍＬ）に溶解した。この反応物を５分間、撹拌し、次に、真空で濃縮した。この反応物をＨ２Ｏ（０．０５％ＴＦＡ）中の１０〜９５％ＭｅＣＮによる分取ＨＰＬＣ  ２１ｍｍによって精製した。所望の生成物を含む画分を凍結乾燥すると、黄色固体（５．２ｍｇ、０．０１０ｍｍｏｌ、６０％）が得られた。Ｒｔ＝１．０２分、一般ＵＰＬＣ法。ＭＳ（ｍ／ｚ）［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ２５Ｈ２４Ｎ４Ｏ８の計算値５０９．１７、実測値５０９．００。
【化１１３】
2021521111.tif 000142
【０３７０】
ＭＣ−ＧＧＦＧ−ＯＨ（１４．５ｍｇ、０．０３０７ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（０．５ｍＬ）に溶解した。ＤＩＰＥＡ（９μＬ、０．０５ｍｍｏｌ）、次いでＴＳＴＵ（９．３ｍｇ、０．０３１ｍｏｌ）を加えた。この反応物を５分間、撹拌した。ＮＨＳエステル生成物への完全な変換をＵＰＬＣ−ＭＳによって観察した。薬物−Ｇｌｙ固体に、活性化ＮＨＳエステル溶液を直接加えた。５分後に完全な変換がＵＰＬＣ−ＭＳによって観察された。この反応物をＡｃＯＨでクエンチし、分取ＨＰＬＣによって精製した。所望の生成物を含む画分を凍結乾燥すると、黄色粉末（３．３０ｍｇ、３．４３μｍｏｌ、３４％）が得られた。Ｒｔ＝１．５３分、一般ＵＰＬＣ法。ＭＳ（ｍ／ｚ）［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ４８Ｈ５１Ｎ８Ｏ１４の計算値９６３．３５、実測値９６３．１４。
（実施例７−１）
ＭＰ−ＰＥＧ４−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−ＰＡＢＡ−７−ＭＡＤ−ＭＤＣＰＴの調製
【化１１４】
2021521111.tif 000143
ＥＥＤＱとＦｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＰＡＢＡのカップリング
【化１１５】
2021521111.tif 000144
【０３７１】
Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ（５００ｍｇ、１．０７ｍｍｏｌ）を１ｍＬのＤＣＭに懸濁し、撹拌した。ＥＥＤＱ（５２８ｍｇ、２．１３ｍｍｏｌ）、次いでＰＡＢＡ（２６３ｍｇ、２．１３ｍｍｏｌ）を加えた。反応剤は、１分後に可溶となり、次に、１０分後に混合物から沈殿した。ＵＰＬＣ−ＭＳによって、完全な変換が観察された。沈殿物を濾過して、ＤＣＭ（３×５０ｍＬ）により洗浄した。所望の生成物が、白色固体（６１２ｍｇ、１．０７ｍｍｏｌ、定量的）として得られた。さらに精製することなく次の工程に使用した。Ｒｔ＝２．０８分、一般ＵＰＬＣ法。ＭＳ（ｍ／ｚ）［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ３３Ｈ４０Ｎ３Ｏ６の計算値５７４．２９、実測値５７４．２８。
脱保護
【化１１６】
2021521111.tif 000145
【０３７２】
基質（６１２ｍｇ、１．０７ｍｍｏｌ）をＤＭＦ中の２０％ピペリジン溶液５ｍＬに溶解した。この反応物を室温で１０分間、撹拌した。ＵＰＬＣ−ＭＳによって、完全な変換が観察された。この反応物を真空で濃縮し、さらに精製することなく次の工程に使用した。Ｒｔ＝０．８０分、一般ＵＰＬＣ法。ＭＳ（ｍ／ｚ）［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ１８Ｈ３０Ｎ３Ｏ４の計算値３５２．２２、実測値３５１．６９。
Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−ＯＳｕのカップリング
【化１１７】
2021521111.tif 000146
【０３７３】
前の工程からの粗製基質（１．０７ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（２ｍＬ）に溶解した。Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−ＯＳｕ（５８１ｍｇ、１．３３ｍｍｏｌ）、次いでＤＩＰＥＡ（０．３７ｍＬ、２．１３ｍｍｏｌ）を加え、３０分間、撹拌した。ＵＰＬＣ−ＭＳによって、完全な変換が観察された。この反応をＡｃＯＨでクエンチし、真空で濃縮し、ＦＣＣ  １００Ｇ  ＫＰ−Ｓｉｌ（ＤＣＭ中の０〜１０％ＭｅＯＨ）によって精製した。所望の生成物を含む画分を真空で濃縮すると、白色固体（７１６ｍｇ、１．０６ｍｍｏｌ、９９％）が得られた。Ｒｔ＝２．１２分、一般ＵＰＬＣ法。ＭＳ（ｍ／ｚ）［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ３８Ｈ４９Ｎ４Ｏ７の計算値６７３．３６、実測値６７３．３１。
脱保護
【化１１８】
2021521111.tif 000147
【０３７４】
基質（７１６ｍｇ、１．０６ｍｍｏｌ）をＤＭＦ中の２０％ピペリジン溶液５ｍＬに溶解した。この反応物を室温で１０分間、撹拌した。ＵＰＬＣ−ＭＳによって、完全な変換が観察された。この反応物を真空で濃縮し、さらに精製することなく次の工程に使用した。Ｒｔ＝０．９４分、一般ＵＰＬＣ法。ＭＳ（ｍ／ｚ）［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ２３Ｈ３９Ｎ４Ｏ５の計算値４５１．２９、実測値４５０．７２。
ＭＰ−ＰＥＧ４−ＯＳｕカップリング
【化１１９】
2021521111.tif 000148
【０３７５】
前の工程からの粗製基質（１．０６ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１ｍＬ）に溶解した。ＭＰ−ＰＥＧ４−ＯＳｕ（１．０９ｍｇ、２．１３ｍｍｏｌ）、次いでＤＩＰＥＡ（０．５５ｍＬ、３．１９ｍｍｏｌ）を加え、３０分間、撹拌した。ＵＰＬＣ−ＭＳによって、完全な変換が観察された。粗製反応混合物を次の工程に使用した。Ｒｔ＝１．４０分、一般ＵＰＬＣ法。ＭＳ（ｍ／ｚ）［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ４１Ｈ６５Ｎ６Ｏ１３の計算値８４９．４６、実測値８４９．０６。
ＰＮＰ活性化
【化１２０】
2021521111.tif 000149
【０３７６】
以前のものに由来する粗製反応混合物に、ビス−ニトロフェノールカーボネート（９６９ｍｇ、３．１９ｍｍｏｌ）を加えた。この反応物を３０分間、撹拌した。ＵＰＬＣ−ＭＳによって、完全な変換が観察された。この反応物をＡｃＯＨによりクエンチし、Ｈ２Ｏ（０．０５％ＴＦＡ）中の１０〜５０〜７０〜９５％ＭｅＣＮの分取ＨＰＬＣ  ５０ｍｍにより精製した。ＧｅｎｅｖａｃのＨＰＬＣ溶解法を使用し、所望の生成物を含む画分を真空で濃縮した。濃縮画分は白色固体（６２１ｍｇ、０．６１２ｍｍｏｌ、５８％）をもたらした。Ｒｔ＝１．２６分、一般ＵＰＬＣ法。ＭＳ（ｍ／ｚ）［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ４８Ｈ６８Ｎ７Ｏ１７の計算値１０１４．４７、実測値１０１４．２５。
７−ＭＡＤ−ＭＤＣＰＴのカップリング
【化１２１】
2021521111.tif 000150
【０３７７】
活性化リンカー（９３ｍｇ、０．０９２ｍｍｏｌ）に、ＤＭＦ中、５０ｍｇ／ｍＬで溶解した７−ＭＡＤ−ＭＤＣＰＴ（１０ｍｇ、２４ｍｍｏｌ）を直接、加えた。ＤＩＰＥＡ（０．０４７ｍＬ、３６ｍｍｏｌ）を加え、この反応物を撹拌した。この反応物は、１０分後に生成物へとゆっくりと進行したことが観察された。反応を加速するため、触媒量のＤＭＡＰ（０．０１ｍｇ）を加えた。３０分後にＵＰＬＣ−ＭＳによって完全な変換が観察された。この反応物をＡｃＯＨによりクエンチし、Ｈ２Ｏ（０．０５％ＴＦＡ）中の１０〜３６〜５４〜９５％ＭｅＣＮの分取ＨＰＬＣ２１ｍｍにより精製した。所望の生成物を含む画分を凍結乾燥すると、黄色粉末（２２．４ｍｇ、１７．３μｍｏｌ、７２．５％）が得られた。Ｒｔ＝１．６６分、一般ＵＰＬＣ法。ＭＳ（ｍ／ｚ）［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ６４Ｈ８２Ｎ９Ｏ２０の計算値１２９６．５７、実測値１２９６．５４。
Ｂｏｃ脱保護：
【化１２２】
2021521111.tif 000151
【０３７８】
基質（３．５ｍｇ、２．７μｍｏｌ）をＤＣＭ中の１０％ＴＦＡ（２ｍＬ）に溶解した。１０分間、撹拌し、この時点で、ＵＰＬＣ−ＭＳによってほぼ完全な変換を観察した。反応物をＭｅＯＨ（２ｍＬ）により希釈し、真空で濃縮した。０．３ｍＬ  ＤＭＳＯ中で再構成した。濃縮後、生成物の分解は観察されなかった。０．０５％ＴＦＡを含むＨ２Ｏ中の５〜２５〜４１〜９５％ＭｅＣＮによる分取ＨＰＬＣ  １０ｍｍによって、この反応物を精製した。所望の生成物を含む画分を凍結乾燥すると、黄色粉末（１．９ｍｇ、１．６μｍｏｌ、５９％）が得られた。Ｒｔ＝１．２２分、一般ＵＰＬＣ法。ＭＳ（ｍ／ｚ）［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ５９Ｈ７４Ｎ９Ｏ１８の計算値１１９６．５２、実測値１１９６．２３。
（実施例８−１）
【０３７９】
生物学的実施例および後の表において、本実施例中の比較化合物を調製し、評価に使用した。それらの比較化合物の構造は、以下の通りである：
【化１２３】
2021521111.tif 000152
（実施例９−１）
ＭＰ−ＰＥＧ４−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−７−ＮＨ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）２ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣＨ２−ＭＤＣＰＴの調製
【化１２４】
2021521111.tif 000153
【０３８０】
ＭＰ−ＰＥＧ４−ＶＫ（Ｂｏｃ）−ＯＨペプチド（１０．０ｍｇ、０．０１８１ｍｍｏｌ）を無水ＤＭＦ（０．２ｍＬ）に溶解した。ＤＩＰＥＡ（６．３μＬ、０．０３６ｍｍｏｌ）、次いでＴＳＴＵ（５．９９ｍｇ、０．０１９９ｍｍｏｌ）を加えた。酸により２０分間、ＮＨＳエステルを活性化させた。０．１ｍＬのＤＭＦ中の薬物（化合物５ｙ）をこの反応物に加えた。５分後に完全な変換がＵＰＬＣ−ＭＳによって観察された。この反応物をＡｃＯＨ（１０μＬ）によりクエンチし、Ｈ２Ｏ（０．０５％ＴＦＡ）中の５〜６０〜９５％ＭｅＣＮの分取ＨＰＬＣ  ２１×２５０ｍｍにより精製した。所望の生成物を含む画分を凍結乾燥すると、黄色粉末（１１．６２ｍｇ、９．０９μｍｏｌ、５０％）が得られた。
【化１２５】
2021521111.tif 000154
【０３８１】
基質（１１．６２ｍｇ、９．０９μｍｏｌ）をＤＣＭ中の２０％ＴＦＡ（２ｍＬ）に溶解した。１０分後、脱保護生成物への完全な変換がＵＰＬＣ−ＭＳによって観察された。この反応物を真空で濃縮し、Ｈ２Ｏ（０．０５％ＴＦＡ）中の５〜６０〜９５％ＭｅＣＮによる分取ＨＰＬＣ  １０×２５０ｍｍ  ＭａｘＲＰによって精製した。所望の生成物を含む画分を凍結乾燥すると、黄色粉末（２．９６ｍｇ、２．５１μｍｏｌ、２８％）が得られた。
【化１２６】
2021521111.tif 000155
ＭＰ−ＰＥＧ４−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−７−ＮＨ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）２ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣＨ２−ＭＤＣＰＴの調製
【化１２７】
2021521111.tif 000156
【０３８２】
化合物実施例９−１ｂは、化合物実施例９−１ａの調製に関して上で記載した一般手順を使用して合成した。
【０３８３】
以下の表は、化合物実施例９−１ａおよび実施例９−１ｂに関する特徴付けデータを要約している。
【表ＶＩＩ】
2021521111.tif 000157
（実施例１０−１）
ｍＤＰＲ−ＰＥＧ８−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−７−ＭＡＤ−ＭＤＣＰＴの調製
【化１２８】
2021521111.tif 000158
Ｆｍｏｃ−ＶＫ（Ｂｏｃ）Ｇ−ＯＨの固相ペプチド合成：
【化１２９】
2021521111.tif 000159
【０３８４】
２−クロロトリチル樹脂に事前に０．８７ｍｍｏｌ／ｇで負荷されている非保護グリシンをＩｒｉｓ  Ｂｉｏｔｅｃｈから購入した。樹脂（２グラム）を反応容器に加えた。樹脂を３０分間、ＤＣＭにより膨潤させて、ＤＭＦで３回、洗浄し、完全に排液した。一般的なカップリング手順を使用して、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨを樹脂にカップリングした。一般脱保護手順を使用して、Ｆｍｏｃを脱保護した。一般的なカップリング手順を使用して、Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨを樹脂にカップリングした。次に、樹脂をＤＣＭで３回、次いでＥｔ２Ｏで３回、洗浄し、真空下で乾燥した。４ｍＬの酢酸、８ｍＬのトリフルオロエタノールおよび２８ｍＬのＤＣＭの溶液中で樹脂を１時間、撹拌することによって、ペプチドを樹脂から切り離した。次に、樹脂を濾過して、ＤＣＭで３回、すすぎ、次に、この溶液を真空で濃縮した。粗製残留物を２ｍＬのＭｅＣＮで溶解し、１００ｍＬのＥｔ２Ｏで沈殿させた。沈殿物を濾過により採集すると、白色粉末（７３８．６ｍｇ、１．１８０ｍｍｏｌ、６８％）が得られた。Ｒｔ＝２．０６分、一般ＵＰＬＣ法。ＭＳ（ｍ／ｚ）［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ３３Ｈ４５Ｎ４Ｏ８の計算値６２５．３２、実測値６２５．３０。
一般Ｆｍｏｃ脱保護手順
【０３８５】
樹脂に２０％ピペリジンのＤＭＦ（２０ｍＬ）溶液を加え、１分間、振とうして排液した。樹脂にさらなるＤＭＦ中の２０％ピペリジン２０ｍＬを加え、３０分間、振とうして排液した。樹脂をＤＭＦで４回、洗浄し、完全に排液した。
一般的なカップリング手順
【０３８６】
Ｆｍｏｃアミノ酸（５ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（５ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（５ｍｍｏｌ）からなるＤＭＦ（２０ｍＬ）溶液を調製した。この溶液を樹脂に加え、６０分間、振とうした。この反応容器を排液し、ＤＭＦで４回、洗浄した。
【化１３０】
2021521111.tif 000160
【０３８７】
Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−Ｇｌｙ−ＯＨペプチド（７３８．６ｍｇ、１．１８０ｍｍｏｌ）を無水ＤＭＦ（４ｍＬ）に溶解した。ＴＳＴＵ（３７３．７ｍｇ、１．２４ｍｍｏｌ）、次いでＤＩＰＥＡ（０．３１ｍＬ、１．７７ｍｍｏｌ）を加えた。この反応物を室温で１５分間、撹拌し、この時点で、ＵＰＬＣ−ＭＳによって完全な変換を観察した。この反応物をＡｃＯＨ（０．２０ｍＬ）によりクエンチした。反応物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）により希釈し、Ｈ２Ｏ（３×１００ｍＬ）で洗浄してＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過して真空で濃縮した。この残留物を最小量のＤＣＭ（５ｍＬ）に再懸濁し、ヘキサン（１００ｍＬ）で沈殿させた。沈殿物を濾過により採集して真空下で乾燥すると、所望の生成物Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−Ｇｌｙ−ＯＳｕが白色粉末（７５９．７ｍｇ、１．０５ｍｍｏｌ、８９％）として得られた。Ｒｔ＝２．１２分、一般ＵＰＬＣ法。ＭＳ（ｍ／ｚ）［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ３７Ｈ４８Ｎ５Ｏ１０の計算値７２２．３４、実測値７２２．３９。
【化１３１】
2021521111.tif 000161
【０３８８】
７−ＭＡＤ−ＭＤＣＰＴ（５０．０ｍｇ、０．１１８ｍｍｏＬ）を無水ＤＭＦ（１ｍＬ）に溶解した。Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−Ｇｌｙ−ＯＳｕ（１２９ｍｇ、０．１７８ｍｍｏｌ）、次いでＤＩＰＥＡ（０．０４１ｍＬ、０．２４ｍｍｏｌ）を加えた。この反応物を室温で５分間、撹拌し、この時点で、ＵＰＬＣ−ＭＳによって所望の生成物への完全な変換を観察した。この反応物を真空で濃縮し、ＦＣＣ  １０Ｇ  Ｂｉｏｔａｇｅ  Ｕｌｔｒａ（ＤＣＭ中の０〜６％ＭｅＯＨ）によって精製した。所望の生成物を含む画分を真空で濃縮すると、所望の生成物Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−Ｇｌｙ−７−ＭＡＤ−ＭＤＣＰＴが黄褐色固体（９７．９ｍｇ、０．０９５３ｍｍｏｌ、８０％）として得られた。Ｒｔ＝２．０７分、一般ＵＰＬＣ法。ＭＳ（ｍ／ｚ）［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ５６Ｈ６３Ｎ６Ｏ１３の計算値１０２８．４４、実測値１０２８．２２。
【化１３２】
2021521111.tif 000162
【０３８９】
Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−Ｇｌｙ−７−ＭＡＤ−ＭＤＣＰＴ（９７．９ｍｇ、０．０９５３ｍｍｏｌ）をＤＭＦ中の２０％ピペリジンに溶解した。この反応物を室温で１０分間、撹拌した。ＵＰＬＣ−ＭＳによってＦｍｏｃ脱保護生成物への完全な変換を観察した。この反応物を真空で濃縮すると、所望のＨ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−Ｇｌｙ−７−ＭＡＤ−ＭＤＣＰＴが黄褐色固体として得られ、これを無水ＤＭＦ（０．５ｍＬ）に溶解した。この反応物にＦｍｏｃ−ＰＥＧ８−ＮＨＳ（９０．６ｍｇ、０．１１９ｍｍｏｌ、Ｂｒｏａｄｐｈａｒｍ：ＢＰ−２１６３４、ＣＡＳ：１３３４１７０−０３−４）、次いでＤＩＰＥＡ（０．０２５ｍＬ、０．１４３ｍｍｏｌ）を加えた。この反応物を室温で３０分間、撹拌し、この時点で、ＵＰＬＣ−ＭＳによって完全な変換を観察した。この反応物をＡｃＯＨ（０．０２５ｍＬ）によりクエンチし、ギ酸中のＨ２Ｏ（０．１％ＴＦＡ）中の５〜４０〜９５％  ＭｅＣＮの分取ＨＰＬＣ  ２１×２５０ｍｍ  Ｍａｘ−ＲＰにより精製した。所望の生成物を含む画分を濃縮すると、所望の生成物Ｆｍｏｃ−ＰＥＧ８−Ｖａｌ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−Ｇｌｙ−７−ＭＡＤ−ＭＤＣＰＴが黄褐色固体（５３．２ｍｇ、０．０３６７ｍｍｏｌ、２工程通算で３８％）として得られた。Ｒｔ＝１．３２分  疎水性ＵＰＬＣ法。ＭＳ（ｍ／ｚ）［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ７４Ｈ９９Ｎ８Ｏ２２の計算値１４５１．６９、実測値１４５２．１５。
【化１３３】
2021521111.tif 000163
【０３９０】
Ｆｍｏｃ−ＰＥＧ８−Ｖａｌ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−Ｇｌｙ−７−ＭＡＤ−ＭＤＣＰＴ（５３．２ｍｇ、０．０３６７ｍｍｏｌ）をＤＭＦ中の２０％ピペリジンに溶解した。この反応物を室温で１０分間、撹拌し、この時点で、ＵＰＬＣ−ＭＳによって完全な変換を観察した。反応物を真空で濃縮すると、Ｈ−ＰＥＧ８−Ｖａｌ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−Ｇｌｙ−７−ＭＡＤ−ＭＤＣＰＴが黄褐色固体として得られた。粗生成物の無水ＤＭＦ中の０．０３６７Ｍの溶液を調製し、次の工程における試薬として使用し、マレイミド類似体を形成した。
【化１３４】
2021521111.tif 000164
【０３９１】
ＤＭＦ（０．５０ｍＬ、０．０１８ｍｍｏｌ）中の粗製Ｈ−ＰＥＧ８−Ｖａｌ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−Ｇｌｙ−７−ＭＡＤ−ＭＤＣＰＴ（０．０３６７Ｍ）を氷／水浴で冷却した。この反応物にＭＤＰＲ（Ｂｏｃ）−ＯＨ（１５．６ｍｇ、０．０５５０ｍｍｏｌ、ＣＡＳ：１４９１１５２−２３−８、調製は、ＷＯ２０１３１７３３３７に記載）およびＣＯＭＵ（２３．６ｍｇ、０．０５５０ｍｍｏｌ）、次いで２，６−ルチジン（lutidene）（１２．８μＬ、０．１１０ｍｍｏｌ）を加えた。この反応物を１時間かけて室温まで温め、一晩（１５時間）、撹拌した。ＵＰＬＣ−ＭＳによって、完全な変換が観察された。この反応物をＡｃＯＨ（０．０２０ｍＬ）によりクエンチし、Ｈ２Ｏ（０．１％ギ酸）中の５〜６０〜９５％ＭｅＣＮの分取ＨＰＬＣ  １０×２５０ｍｍ  Ｍａｘ−ＲＰにより精製した。所望の生成物を含む画分を真空で濃縮し、ｍＤＰＲ（Ｂｏｃ）−ＰＥＧ８−Ｖａｌ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−Ｇｌｙ−７−ＭＡＤ−ＭＤＣＰＴが黄色固体（１３．４ｍｇ、８．９７μｍｏｌ、４９％）として得られた。Ｒｔ＝１．７１分、一般ＵＰＬＣ法。ＭＳ（ｍ／ｚ）［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ７１Ｈ１０３Ｎ１０Ｏ２５の計算値１４９５．７１、実測値１４９５．０４。
【化１３５】
2021521111.tif 000165
【０３９２】
ＭＤＰＲ（Ｂｏｃ）−ＰＥＧ８−Ｖａｌ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−Ｇｌｙ−７−ＭＡＤ−ＭＤＣＰＴ（１３．４ｍｇ、８．９７μｍｏｌ）をＤＣＭ中の２０％ＴＦＡに溶解し、１０分間、撹拌した。ＵＰＬＣ−ＭＳによって、完全な変換が観察された。この反応物を真空で濃縮し、Ｈ２Ｏ（０．０５％ＴＦＡ）中の５〜３０〜９５％ＭｅＣＮによる分取ＨＰＬＣ  １０×２５０ｍｍ  Ｍａｘ−ＲＰによって精製した。所望の生成物を含有する画分を凍結乾燥すると、ｍＤＰＲ−ＰＥＧ８−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−７−ＭＡＤ−ＭＤＣＰＴ（化合物（Compund）実施例１０−１ａ）が黄色固体として得られ、これは、二ＴＦＡ塩（１３．４ｍｇ、８．７７μｍｏｌ、９８％）であると推定した。Ｒｔ＝１．０６分、一般ＵＰＬＣ法。ＭＳ（ｍ／ｚ）［Ｍ＋Ｎａ］＋  Ｃ６１Ｈ８６Ｎ１０ＮａＯ２１の計算値１３１７．５９、実測値１３１７．５０。
ＭＣ−ＰＥＧ８−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−７−ＭＡＤ−ＭＤＣＰＴの調製
【化１３６】
2021521111.tif 000166
【０３９３】
ＤＭＦ中、０．０３６７Ｍの粗製Ｈ−ＰＥＧ８−Ｖａｌ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−Ｇｌｙ−７−ＭＡＤ−ＭＤＣＰＴ（化合物実施例１０−１ａの調製に関する上の手順に由来）（０．５０ｍＬ、０．０１８ｍｍｏｌ）にＭＣＯＳｕ（１７．０ｍｇ、０．０５５０ｍｍｏｌ、ＴＣＩ  Ａｍｅｒｉｃａ：Ｓ０４２８、ＣＡＳ：５５７５０−６３−５）、次いでＤＩＰＥＡ（９．６μＬ、０．０５５ｍｍｏｌ）を加えた。この反応物を室温で５分間、撹拌し、この時点で完全な変換を観察した。この反応物をＡｃＯＨ（０．０２ｍＬ）によりクエンチし、Ｈ２Ｏ（０．１％ギ酸）中の５〜６０〜９５％ＭｅＣＮの分取ＨＰＬＣ  １０×２５０ｍｍ  Ｍａｘ−ＲＰにより精製した。所望の生成物を含む画分を真空で濃縮し、ＭＣ−ＰＥＧ８−Ｖａｌ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−Ｇｌｙ−７−ＭＡＤ−ＭＤＣＰＴが黄色固体（１７．４ｍｇ、１８．３μｍｏｌ、６７％）として得られた。Ｒｔ＝１．６３分、一般ＵＰＬＣ法。ＭＳ（ｍ／ｚ）［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ６９Ｈ１００Ｎ９Ｏ２３の計算値１４２２．６９、実測値１４２２．２７。
【化１３７】
2021521111.tif 000167
【０３９４】
ＭＣ−ＰＥＧ８−Ｖａｌ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−Ｇｌｙ−７−ＭＡＤ−ＭＤＣＰＴ（１７．４ｍｇ、１２．２μｍｏｌ）をＤＣＭ中の２０％ＴＦＡに溶解し、２０分間、撹拌した。ＵＰＬＣ−ＭＳによって、完全な変換が観察された。この反応物を真空で濃縮し、Ｈ２Ｏ（０．０５％ＴＦＡ）中の５〜４０〜９５％ＭｅＣＮによる分取ＨＰＬＣ  １０×２５０ｍｍ  Ｍａｘ−ＲＰによって精製した。所望の生成物を含有する画分を凍結乾燥すると、ＭＣ−ＰＥＧ８−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−７−ＭＡＤ−ＭＤＣＰＴ（化合物実施例１０−１ｂ）が黄色固体として得られ、これは、ＴＦＡ塩（１６．５４ｍｇ、１１．５２μｍｏｌ、９４％）であると推定した。Ｒｔ＝１．２７分、一般ＵＰＬＣ法。ＭＳ（ｍ／ｚ）［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ６４Ｈ９２Ｎ９Ｏ２１の計算値１３２２．６４、実測値１３２２．１５。
カンプトテシンコンジュゲーション法
【０３９５】
完全にまたは一部が還元されたＡＤＣを５０％プロピレングリコール（ＰＧ）１Ｘ  ＰＢＳ混合物中で調製した。還元したｍＡｂにＰＧの半分を加え、半分のＰＧを１ｍＭのカンプトテシン薬物−リンカーのＤＭＳＯストック溶液に加えた。還元したｍＡｂに、２５％の部分中で、ＰＧ／薬物−リンカーミックスを加えた。薬物−リンカーの添加を完了した後、活性炭（１ｍｇのｍＡｂに対して１ｍｇの活性炭）で処理することによって過剰の薬物−リンカーを除去した。次に、活性炭を濾過により除去し、ＮＡＰ５またはＰＤ１０カラムを使用し、得られたＡＤＣを１Ｘ  ＰＢＳ中の５％トレハロース（ｐＨ７．４）に緩衝液交換した。
生物学的実施例
ｉｎ  ｖｉｔｒｏでの低分子およびＡＤＣの評価
【０３９６】
ｉｎ  ｖｉｔｒｏの効力は、複数のがん細胞系列で評価した。全ての細胞系列は、ＩＤＥＸＸ  ＢｉｏｒｅｓｅａｒｃｈでＳＴＲプロファイリングによって認証されており、蘇生後２か月以内の培養であった。対数期増殖で培養した細胞を、２０％ＦＢＳを補充した１５０μｌのＲＰＭＩ１６４０を含有する９６ウェルプレート中で２４時間播種した。細胞培養培地中の抗体薬物コンジュゲートの段階希釈物を４倍の作業濃度にて調製し、５０μｌの各希釈物を９６ウェルプレートに加えた。試験物の添加の後、細胞を試験物質と共に３７℃にて４日間インキュベートした。９６時間後、増殖阻害をＣｅｌｌＴｉｔｅｒ  Ｇｌｏ（登録商標）（Ｐｒｏｍｅｇａ、Ｍａｄｉｓｏｎ、ＷＩ）によってアセスメントし、発光をプレートリーダーで測定した。三連で決定したＩＣ５０値を、未処置の対照に対する細胞成長における５０％の低減をもたらす濃度としてここで定義する。
【０３９７】
以下の表において、ＡＤＣおよびＣＰＴ遊離薬物に関する、ＩＣ５０値が、それぞれ、ｎｇ／ｍＬおよびｍｍｏｌ／ｍＬの濃度で示されており、括弧内の値は、未処置細胞に対する、試験した最高濃度（特に示さない限り、ＡＤＣの場合、１０００ｎｇ／ｍＬ、およびＣＰＴ遊離化合物の場合、１μＭ）で残留している細胞の割合を表す。細胞生存率は、ＡＤＣに９６時間、曝露させた後の、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ染色によって求めた。ＮＤ＝決定せず。Ａｇ１は、がん細胞に対して、偏在しており、かつ容易に内在化可能な抗原を標的とする抗体であり、Ａｇ２は、ＣＤ３０（＋）がん細胞を標的とするｃＡＣ１０抗体であり、Ａｇ３は、ＣＤ７０（＋）がん細胞を標的とするｈ１Ｆ６抗体であり、Ａｇ４は、ＣＤ４８（＋）がん細胞を標的とするｈＭＥＭ１０２抗体であり、Ａｇ５は、ＮＴＢ−Ａを発現するがん細胞を標的とするｈ２０Ｆ３抗体であり、ｈ００は、非結合性対照抗体である。
【０３９８】
表１Ａ〜１Ｄ。カンプトテシンＡＤＣ（ＤＡＲ＝８）のｉｎ  ｖｉｔｒｏ効力（ＩＣ５０値）。Ａ．腎癌細胞（７８６−Ｏ）、膵臓がん細胞（ＢｘＰＣ３）、肝臓癌細胞（ＨｅｐＧ２）、急性前骨髄球性白血病細胞（ＨＬ−６０）、ホジキンリンパ腫細胞（Ｌ５４０ｃｙ）、多発性骨髄腫細胞（ＭＭ．１Ｒ）、急性骨髄性白血病細胞（ＭＯＬＭ１３）、バーキットリンパ腫細胞（Ｒａｍｏｓ）、黒色腫細胞（ＳＫ−ＭＥＬ−５）およびＢリンパ球がん細胞（ＳＵ−ＤＨＬ−４およびＵ２６６）を標的とする抗Ａｇ１  ＡＤＣ、Ｂ．ホジキンリンパ腫細胞（ＤＥＬおよびＬ５４０ｃｙ）および非ホジキンリンパ腫細胞（Ｋａｒｐａｓ２９９）（これらは、抗原ネガティブである腎癌細胞（７８６−Ｏ）に試験した場合、抗原ポジティブである）を標的とする抗Ａｇ２  ＡＤＣ、Ｃ．腎癌細胞（７８６−Ｏ、Ｃａｋｉ−１およびＵＭ−ＲＣ−３）およびバーキットリンパ腫細胞（Ｒａｊｉ）を標的とする抗Ａｇ３  ＡＤＣ、ならびにＤ．多発性骨髄腫（myleoma）細胞（ＥＪＭ、ＫＭＭ−１、ＭＭ．１Ｒ）およびＢリンパ球がん細胞（ＮＣＩ−Ｈ９２９およびＵ−２６６）（これらは、抗原ネガティブリンパ芽球細胞系（ＴＦ−１ａ）に試験した場合、抗原ポジティブである）を標的とする抗Ａｇ４  ＡＤＣおよび抗Ａｇ５  ＡＤＣ。実施例８−１ａとは、Ａｇ１−ＭＣ−ＧＧＦＧ−ＮＨＣＨ２−ＤＸｄ（１）を指し、実施例４−１は、ＭＰ−ＰＥＧ４−ＶＫＧ−７−ＭＡＤ−ＭＤＣＰＴを指す。
【０３９９】
【表１Ａ】
2021521111.tif 000168
【０４００】
【表１Ｂ】
2021521111.tif 000169
【０４０１】
【表１Ｃ】
2021521111.tif 000170
【０４０２】
【表１Ｄ−１】
2021521111.tif 000171
【表１Ｄ−２】
2021521111.tif 000172
ＣＤ３０＋親ＤＥＬおよびＣＤ３０／ＭＤＲ＋ＤＥＬ−ＢＶＲ細胞系に対する特異的活性
【０４０３】
表２．  ＣＤ３０＋親ＤＥＬおよびＣＤ３０／ＭＤＲ＋ＤＥＬ−ＢＶＲ細胞系に対するカンプトテシンＡｇ２−Ｅｘ＿４−１（ＤＡＲ＝８）の特異的活性。ブレンツキシマブベドチンの存在下で親ＤＥＬリンパ腫細胞系を培養し、ＭＤＲ表現型の過剰発現を誘発し、ＤＥＬブレンツキシマブベドチン耐性系列（ＤＥＬ−ＢＶＲ）にした。Ａｇ２−ｖｃ−ＭＭＡＥ（ＤＡＲ＝４）である、ブレンツキシマブベドチンを対照として含ませた。実施例４−１は、ＭＰ−ＰＥＧ４−ＶＫＧ−７−ＭＡＤ−ＭＤＣＰＴを指す。
【表Ｄ】
2021521111.tif 000173
凝集レベル
【０４０４】
表３．  ペプチドをベースとするカンプトテシン薬物−リンカー（ＤＡＲ＝４）のＡＤＣ凝集レベル。ＡＤＣ凝集は、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）によって決定した。ペプチドをベースとするカンプトテシン薬物−リンカー構築物に親水性ペプチド配列および／またはＰＥＧ４単位を含ませると、凝集レベルは低く観察された。
【表３−１】
2021521111.tif 000174
【表３−２】
2021521111.tif 000175
【０４０５】
表４．様々ながん細胞系に対するペプチドをベースとするカンプトテシン抗Ａｇ１  ＤＡＲ４  ＡＤＣのｉｎ  ｖｉｔｒｏ効力（ＩＣ５０値）は、配列依存的効力があることを実証する。
【０４０６】
表４Ａ．腎がん細胞（７８６−Ｏ）、膵臓がん細胞（ＢｘＰＣ３）、肝臓がん細胞（ＨｅｐＧ２）および急性前骨髄球性白血病細胞（ＨＬ−６０）。
【０４０７】
表４Ｂ．  多剤抵抗性急性前骨髄球性白血病細胞（ＨＬ−６０／ＲＶ）、ホジキンリンパ腫細胞（Ｌ５４０ｃｙ）、多発性骨髄腫細胞（ＭＭ．Ｒ１）および急性骨髄性白血病細胞（ＭＯＬＭ１３）。
【０４０８】
表４Ｃ．  バーキットリンパ腫細胞（Ｒａｍｏｓ）、黒色腫細胞（ＳＫ−ＭＥＬ−５）およびＢリンパ球がん細胞（ＳＵ−ＤＨＬ−４およびＵ２６６）。
【表４Ａ−１】
2021521111.tif 000176
【表４Ａ−２】
2021521111.tif 000177
【表４Ｂ−１】
2021521111.tif 000178
【表４Ｂ−２】
2021521111.tif 000179
【表４Ｃ】
2021521111.tif 000180
【０４０９】
表５．  様々ながん細胞系に対する、選択した疎水性が様々なペプチドをベースとするカンプトテシン抗Ａｇ１（ＤＡＲ＝８）ＡＤＣの評価
【０４１０】
表５Ａ．  腎がん細胞（７８６−Ｏ）、膵臓がん細胞（ＢｘＰＣ３）、肝臓がん細胞（ＨｅｐＧ２）、ＭＤＲ（−）およびＭＤＲ（＋）急性前骨髄球性白血病細胞（それぞれ、ＨＬ−６０およびＨＬ６０／ＲＶ）およびホジキンリンパ腫細胞（Ｌ５４０ｃｙ）。
【０４１１】
表５Ｂ．  多発性骨髄腫細胞（ＭＭ．Ｒ１）、急性骨髄性白血病細胞（ＭＯＬＭ１３）、バーキットリンパ腫細胞（Ｒａｍｏｓ）、黒色腫細胞（ＳＫ−ＭＥＬ−５）およびＢリンパ球がん細胞（ＳＵ−ＤＨＬ−４およびＵ２６６）。
【表５Ａ−１】
2021521111.tif 000181
【表５Ａ−２】
2021521111.tif 000182
【表５Ｂ】
2021521111.tif 000183
【０４１２】
表６．  非結合性対照（ｈ００）ＡＤＣと比較した、Ａｇ１を発現する様々ながん細胞を標的とするペプチドをベースとするカンプトテシン（ＤＡＲ＝８）のｉｎ  ｖｉｔｒｏ評価
【０４１３】
表６Ａ．  腎がん細胞（７８６−Ｏ）、膵臓がん細胞（ＢｘＰＣ３）、肝臓がん細胞（ＨｅｐＧ２）、ＭＤＲ（−）およびＭＤＲ（＋）急性前骨髄球性白血病細胞（それぞれ、ＨＬ−６０およびＨＬ６０／ＲＶ）およびホジキンリンパ腫細胞（Ｌ５４０ｃｙ）。
【０４１４】
表６Ｂ．  多発性骨髄腫細胞（ＭＭ．Ｒ１）、急性骨髄性白血病細胞（ＭＯＬＭ１３）、バーキットリンパ腫細胞（Ｒａｍｏｓ）、黒色腫細胞（ＳＫ−ＭＥＬ−５）およびＢリンパ球がん細胞（ＳＵ−ＤＨＬ−４およびＵ２６６）。
【表６Ａ】
2021521111.tif 000184
【表６Ｂ−１】
2021521111.tif 000185
【表６Ｂ−１】
2021521111.tif 000186
【０４１５】
表７．  遊離薬物としてのカンプトテシン化合物の細胞傷害性効力。
【０４１６】
表７Ａ．  腎がん細胞（７８６−Ｏ）、膵臓がん細胞（ＢｘＰＣ３）、肝臓がん細胞（ＨｅｐＧ２）、ＭＤＲ（−）およびＭＤＲ（＋）急性前骨髄球性白血病細胞（それぞれ、ＨＬ−６０およびＨＬ６０／ＲＶ）、ホジキンリンパ腫細胞（Ｌ５４０ｃｙ）および多発性骨髄腫細胞（ＭＭ．１Ｒ）
【０４１７】
表７Ｂ．  急性骨髄性白血病細胞（ＭＯＬＭ−１３）、バーキットリンパ腫細胞（Ｒａｍｏｓ）、黒色腫細胞（ＳＫ−ＭＥＬ−５）およびＢリンパ球がん細胞（ＳＵ−ＤＨＬ−４およびＵ２６６）。
【０４１８】
＋＋＋＋  ＩＣ５０  ０．１〜＜１ｎＭの間、＋＋＋  ＩＣ５０  １〜≦１０ｎＭの間、＋＋  ＩＣ５０＞１０ｎＭ〜≦１００ｎＭの間、＋ＩＣ５０＞１００ｎＭ〜≦１０００ｎＭｍの間、□ＩＣ５０＞１０００ｎＭ。
【表７Ａ−１】
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【表７Ａ−２】
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【表７Ｂ−１】
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【表７Ｂ−２】
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ｉｎ  ｖｉｖｏモデル法
【０４１９】
実験はすべて、実験動物ケア評価認証協会（Association  for  Assessment  and  Accreditation  of  Laboratory  Animal  Care）によって完全に認定された設備において、動物実験承認委員会（Animal  Care  and  Use  Committee）に従って行った。有効性実験は、７８６−Ｏ、Ｌ５４０ｃｙおよびＫａｒｐａｓ／Ｋａｒｐａｓ−ＢＶＲ、ＤｅｌＢＶＲ、Ｋａｒｐａｓ２９９、Ｌ４２８、ＤＥＬ−１５およびＬ８２異種移植片モデルで行った。免疫力が低下したＳＣＩＤまたはヌードマウスに、腫瘍細胞を細胞懸濁液として皮下移植した。腫瘍生着に際して、平均腫瘍体積が約１００ｍｍ３に到達すると、マウスを試験群（１群あたり５匹のマウス）に無作為化した。ＡＤＣまたは対照を、腹腔内注射により１回、投与した。抗体に結合した薬物−リンカーの数平均は、ＡＤＣの次の括弧中に表示する（本明細書において、薬物−抗体比（ＤＡＲ）数、例えば、ＤＡＲ４、ＤＡＲ８などとも称する）。時間の関数としての腫瘍体積は、式（Ｌ×Ｗ２）／２を使用して決定した。腫瘍体積が７５０ｍｍ３に到達したら、動物を安楽死させた。埋め込み後の１０〜１２週間後に、持続的な退縮を示すマウスを終結させた。
【０４２０】
動物にＬ５４０ｃｙ細胞を埋め込んだ。７日後に１００ｍｍ３の平均腫瘍サイズを有する動物を群に分類し、次に、３または１０ｍｇ／ｋｇで、単回用量のカンプトテシンＡＤＣ  ｃＡＣ１０−Ｅｘ＿８−１ａ（４）またはｃＡＣ１０−Ｅｘ＿４−１（４）で処置した。別の実験において、１または３ｍｇ／ｋｇで、単回用量のカンプトテシンＡＤＣ  ｃＡＣ１０−Ｅｘ＿４−１（８）またはｃＡＣ１０−Ｅｘ＿４−３（８）により処置した。試験過程の間に、腫瘍サイズおよび生存兆候に関して動物を評価した。これらの結果が、図１Ａおよび１Ｂに示されている。
【０４２１】
動物に７８６−Ｏ細胞を埋め込んだ。１０日目に１００ｍｍ３の平均腫瘍サイズを有する動物を群に分類し、次に、１０ｍｇ／ｋｇで、単回用量のカンプトテシンＡＤＣ  ｃＡＣ１０−Ｅｘ＿８−１ａ（４）またはｃＡＣ１０−Ｅｘ＿４−１（４）で処置した。試験過程の間に、腫瘍サイズおよび生存兆候に関して動物を評価した。これらの結果が、図２に示されている。
【０４２２】
ＣＤ３０＋Ｋａｒｐａｓ２９９およびＣＤ３０−Ｋａｒｐａｓ２９９−ブレンツキシマブベドチン抵抗性（Ｋａｒｐａｓ２９９−ＢＶＲ）細胞の１：１混合物を動物に埋め込んだ。８日後に、１００ｍｍ３の平均腫瘍サイズを有する動物を群に分類し、次に、１０ｍｇ／ｋｇで、単回用量のカンプトテシンＡＤＣ  ｃＡＣ１０−Ｅｘ＿８−１ａ（４）またはｃＡＣ１０−Ｅｘ＿４−１（４）で処置した。別の実験において、３または１０ｍｇ／ｋｇで、単回用量のカンプトテシンＡＤＣ  ｃＡＣ１０−Ｅｘ＿８−１ａ（８）、ｃＡＣ１０−Ｅｘ＿４−１（８）またはｃＡＣ１０−Ｅｘ＿４−３（８）により動物を処置した。試験過程の間に、腫瘍サイズおよび生存兆候に関して動物を評価した。これらの結果が、図３Ａ〜３Ｃに示されている。
【０４２３】
動物にＤｅｌＢＶＲ細胞を埋め込んだ。７日目に１００ｍｍ３の平均腫瘍サイズを有する動物を群に分類し、次に、０．３または１ｍｇ／ｋｇで、単回用量のカンプトテシンＡＤＣ  ｃＡＣ１０−Ｅｘ＿４−１（８）、ｃＡＣ１０−Ｅｘ＿４−３（８）、ｃＡＣ１０−Ｅｘ＿４−４（８）またはｃＡＣ１０−Ｅｘ＿４−５（８）により処置した。試験過程の間に、腫瘍サイズおよび生存兆候に関して動物を評価した。これらの結果が、図４に示されている。
【０４２４】
動物にＤｅｌＢＶＲ細胞を埋め込んだ。７日目に、１００ｍｍ３の平均腫瘍サイズを有する動物を群に分類し、次に、１もしくは２ｍｇ／ｋｇで、単回用量のカンプトテシンＡＤＣ  ｃＡＣ１０−Ｅｘ＿４−１（４）またはｃＡＣ１０−Ｅｘ＿４−１（８）で、あるいは０．６もしくは１ｍｇ／ｋｇで、単回用量カンプトテシンＡＤＣ  ｃＡＣ１０−Ｅｘ＿４−３（４）またはｃＡＣ１０−Ｅｘ＿４−３（８）により処置した。試験過程の間に、腫瘍サイズおよび生存兆候に関して動物を評価した。これらの結果が、図５に示されている。
【０４２５】
動物にＫａｒｐａｓ２９９細胞を埋め込んだ。７日後に、１００ｍｍ３の平均腫瘍サイズを有する動物を群に分類し、次に、１、３もしくは１０ｍｇ／ｋｇで、単回用量の非結合性対照ｈ００−Ｅｘ＿４−３（８）、または単回用量または多回用量のどちらかで、カンプトテシンＡＤＣ  ｃＡＣ１０−Ｅｘ＿４−３（８）により処置した。試験過程の間に、腫瘍サイズおよび生存兆候に関して動物を評価した。これらの結果が、図６に示されている。
【０４２６】
動物にＬ４２８細胞を埋め込んだ。７日後に、１００ｍｍ３の平均腫瘍サイズを有する動物を群に分類し、次に、１、３もしくは１０ｍｇ／ｋｇで、単回用量または多回用量のどちらかで、カンプトテシンＡＤＣ  ｃＡＣ１０−Ｅｘ＿４−３（８）により処置した。試験過程の間に、腫瘍サイズおよび生存兆候に関して動物を評価した。これらの結果が、図７に示されている。
【０４２７】
動物にＤＥＬ−１５細胞を埋め込んだ。７日後に１００ｍｍ３の平均腫瘍サイズを有する動物を群に分類し、次に、０．１、０．３もしくは１ｍｇ／ｋｇで、単回用量のカンプトテシンＡＤＣ  ｃＡＣ１０−Ｅｘ＿４−３（８）により処置した。試験過程の間に、腫瘍サイズおよび生存兆候に関して動物を評価した。これらの結果が、図８に示されている。
【０４２８】
動物にＬ８２細胞を埋め込んだ。７日後に、１００ｍｍ３の平均腫瘍サイズを有する動物を群に分類し、次に、１ｍｇ／ｋｇで、単回用量のカンプトテシンＡＤＣ  ｃＡＣ１０−Ｅｘ＿４−１（８）により処置した。試験過程の間に、腫瘍サイズおよび生存兆候に関して動物を評価した。これらの結果が、図９に示されている。
【０４２９】
図１〜９のデータにより、ｃＡＣ１０−Ｅｘ＿４−１、ｃＡＣ１０−Ｅｘ＿４−３、ｃＡＣ１０−Ｅｘ＿４−４およびｃＡＣ１０−Ｅｘ＿４−５  ＡＤＣはすべて、試験したモデルに対して、ｉｎ  ｖｉｖｏで抗腫瘍活性を示すことが示された。図１〜９のデータにより、ｃＡＣ１０−Ｅｘ＿４−１およびｃＡＣ１０−Ｅｘ＿４−３  ＡＤＣは、Ｋａｒｐａｓ／Ｋａｒｐａｓ  ＢＶＲバイスタンダーモデルにおける活性の改善を含めた、ｃＡＣ１０−Ｅｘ＿８−１ａ  ＡＤＣに比べて、ｉｎ  ｖｉｖｏでの効力が改善されたことを示すことがやはり示された（図３Ａ〜３Ｃに示されている通り）。
ＡＤＣ血漿中安定性の決定
【０４３０】
ＡＤＣストック溶液をすべて、２．５ｍｇ／ｍＬに正規化した。使用前に、クエン酸処置した（citrated）マウス（Ｂａｌｂ  Ｃ）の２．５ｍＬの一定分量となる単回使用分を−８０Ｃで貯蔵した。マウス血漿中のＡＤＣ中のストック溶液を以下の通り作製した。１３．８５における最終ＰＢＳ濃度を含む２００μＬの血漿中のＡＤＣ（５０μｇ）（時間点あたり、０．２５ｍｇ／ｍＬ）。血漿試料を６時間、１日、３日および７日時点で、摂氏３７度でインキュベートし、二連でサンプリングした。各時間点の後に、分析のために試料を処理するまで、それらを摂氏−８０度で貯蔵した。１ＸＰＢＳ中のＩｇＳｅｌｅｃｔの５０％スラリーを調製した。各時間点の試料について、５０μＬのＩｇＳｅｌｅｃｔスラリーを３ｕＭのフィルタープレートに加え、真空を適用して上清を除去した。樹脂を洗浄（２Ｘ１ｍＬ  １ＸＰＢＳ）し、各洗浄後、真空を適用した。試料（１８０ｕＬ）を適用し、フィルタープレートを摂氏４度で１時間、振とう（１２００ｒｐｍ）した。次に、真空を適用して、血漿を除去した。樹脂を１ｍＬ  ＰＢＳ＋５０ｍＭ  ＮａＣｌ、１ｍＬ  ＰＢＳおよび１ｍＬの水で洗浄し、毎洗浄後、真空を適用した。次に、Ｗａｔｅｒｓ  ３５０μＬ収集プレート上で、試料プレートを５００×ｇで２分間、遠心分離した。５０μＬ  Ｇｌｙ  ｐＨ３（２×５０ｕＬ）により処理することによって、ＡＤＣを樹脂から溶出し、５００ｒｐｍにおいて、４Ｃで２分間、混合し、５００×ｇで３分間、遠心分離して、３５０μＬの９６ウェルプレートに入れ、各ウェルは、１Ｍ  Ｔｒｉｓ（ｐＨ７．４）緩衝液１０μＬを含有した。ＡＤＣ濃度は、ＵＶ−可視プレートリーダーを使用して決定した。試料あたり１μＬのＰＮＧアーゼを使用して試料を脱グリコシル化し、摂氏３７度で１時間、インキュベートした。１００ｍＭ  ＤＴＴを１２μＬ添加することによって各ＡＤＣを還元し、摂氏３７度で１５分間、インキュベートした。最後に、これらの試料（１０μＬまたは５０μＬの注入）を、１５分間のＰＬＲＰ−ＭＳ方法を使用して分析し、軽鎖および重鎖組成を評価して、各時間点における薬物−負荷量を定量した。図１０に示される通り、実施例４−１をベースとするＡＤＣは、実施例８−１ａおよび実施例８−１ｂをベースとするＡＤＣに比べて、マウスの血漿中のｅｘ  ｖｉｖｏでの薬物−リンカー安定性が改善されており、ｉｎ  ｖｉｖｏ活性の改善に寄与することを実証した。
ＡＤＣ  ＰＫ分析実験方法
【０４３１】
この手順は、げっ歯類Ｋ２ＥＤＴＡ血漿における全ヒトＩｇＧの定量に関する方法を記載する。
【０４３２】
この方法は、Ｋ２ＥＤＴＡげっ歯類血漿中の全抗体（ＴＡｂ）として、ヒト抗体および／または抗体−薬物コンジュゲート試験品を定量するために、捕捉試薬として、ビオチン−コンジュゲートしたマウス抗ヒト軽鎖カッパｍＡｂ（ＳＤＩＸ）、および検出試薬としてＡｌｅｘａｆｌｕｏｒ−６４７にコンジュゲートした同じ抗体を使用する。このアッセイは、ＧｙｒｏＬａｂ  ｘＰｌｏｒｅプラットフォームを使用して行い、このプラットフォームは、その表面でリガンド−結合アッセイを行うナノリットルスケールのストレプトアビジン被覆ビーズカラムを含むマイクロ流体構造体を含むディスクを利用する。手短に述べると、試験試料を、必要に応じてプールしたナイーブなげっ歯類のＫ２ＥＤＴＡ血漿により希釈し、次に、９６ウェルの試料プレートに負荷する前に、校正器と連動して、対照および血漿ブランクを最小量の必要な１：１０希釈（ＭＲＤ）で、Ｒｅｘｘｉｐ−ＨＸ緩衝液により希釈した。Ｔｗｅｅｎ−２０（ＰＢＳ−Ｔ）を含むリン酸緩衝生理食塩水（ｐＨ７．４）中、１ｕｇ／ｍＬのビオチン−抗ヒトカッパ捕捉試薬、Ｒｅｘｘｉｐ  Ｆ緩衝液中の２５ｎＭのＡＦ６４７−抗ヒトカッパ検出試薬、およびＰＢＳ−Ｔ洗浄用緩衝液を９６ウェル試薬用プレートに加え、両方のプレートを密封して、機器に加えた。実行ファイルをＧｙｒｏＬａｂ  Ｃｏｎｔｒｏｌソフトウェアで確立し、試料テンプレートをＥｘｃｅｌにエクスポートして、試料名称および希釈ファクターを入力した。次に、実行開始前に、このテンプレートをＧｙｒｏＬａｂ  Ｃｏｎｔｒｏｌにインポートして戻した。このアッセイは一連のものであった：ビオチン化捕捉試薬をまず、ＢｉｏＡｆｆｙ１０００  ＣＤに適用し、ディスクをＰＢＳ−Ｔですすぎ、次に、希釈した血漿ブランク、標準品、対照および試料を加えた。後のＰＢＳ−Ｔでのすすぎの後に、ＡＦ６４７−コンジュゲートした検出試薬を適用した。最後のＰＢＳ−Ｔのすすぎ後に、ディスクの各カラムをレーザー誘起蛍光検出（励起波長：６３５ｎｍ）で読み取った。蛍光応答を試料中に存在するｎｇ／ｍＬでの全抗体に変換するため、Ｇｙｒｏｌａｂ  Ｅｖａｌｕａｔｏｒソフトウェアを使用して、１％  ＰＭＴで検出した応答に５パラメータロジスティック回帰（５−ＰＬ）を施した。
【０４３３】
げっ歯類Ｋ２ＥＤＴＡ血漿中の全ヒトＩｇＧを定量するためのアッセイの範囲は、非コンジュゲート抗体試験品の場合、２２．９ｎｇ／ｍＬ（ＬＬＯＱ）〜５０，０００ｎｇ／ｍＬ（ＵＬＯＱ）であり、ＡＤＣの場合、２２．９ｎｇ／ｍＬ（ＬＬＯＱ）〜１００，０００ｎｇ／ｍＬ（ＵＬＯＱ）とした。品質対照レベルは、８０．０ｎｇ／ｍＬ（ＬＱＣ）、８００ｎｇ／ｍＬ（ＭＱＣ）および８，０００ｎｇ／ｍＬ（ＨＱＣ２）および４０，０００ｎｇ／ｍＬ（ＨＱＣ１）で確立した。
【０４３４】
カンプトテシン（ＤＡＲ８）のＡＤＣを、マウス血漿（Ｂａｌｂ  Ｃ）中、摂氏３７度でインキュベートした。血漿は、６時間時、２４時間時、７２時間時および７日目にサンプリングした。ＡＤＣは、ＩｇＳｅｌｅｃｔを含む血漿から単離し、ＰＮＧアーゼを用いて脱グリコシル化し、ジチオスレイトールで還元した。ＡＤＣの重鎖および軽鎖の両方をＰＬＲＰ−ＭＳにより評価し、各時間点に関して、薬物−負荷量を定量した。
【０４３５】
ラットに、１ｍｇ／ｋｇの親ＩｇＧ、またはＩｇＧ−カンプトテシン実施例４−１および実施例８ａのＡＤＣを注入した。予定した採血からの試料を処理し、ビオチン−コンジュゲートしたネズミ抗ヒト軽鎖カッパｍＡｂおよびストレプトアジピン被覆ビーズにより、血漿からヒトＩｇＧ抗体およびＡＤＣを捕捉した。ヒトＩｇＧ抗体およびＡＤＣは、ＡＦ６４７−抗ヒトカッパ検出試薬を使用するＥＬＩＳＡにより定量した。図１１に示される通り、実施例４−１をベースとするＡＤＣは、実施例８−１ａをベースとするＡＤＣに比べて、クッパー細胞（肝臓マクロファージ）による取り込みが低いことを示した。アッセイは、肝臓によるｉｎ  ｖｉｖｏでのＡＤＣクリアランスの代用であり、実施例４−１をベースとするＡＤＣの場合、クリアランス速度が低いことを示唆している。
クッパー細胞のｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイ
【０４３６】
クッパー細胞アッセイにおいて試験したＡＤＣは、蛍光色素および細胞傷害性マレイミド薬物−リンカーにより二重標識した。まず、抗体を蛍光色素（ＡｌｅｘａＦｌｕｏｒ６４７ＮＨＳエステル、ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ、品番Ａ２０００６）で平均ＤＡＲ＝４にコンジュゲートした。次に、ＴＣＥＰを使用して、色素標識化抗体を還元し、マレイミド薬物−リンカーを用いて、平均ＤＡＲ＝８にコンジュゲートした。精製済みラットクッパー細胞（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  Ｃｏｒｐ．品番ＲＴＫＣＣＳ）を、５０，０００個の細胞／ウェルの密度でコラーゲンＩをコーティングした９６ウェルプレート（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ、品番Ａ１１４２８０３）にプレート培養し、ＡＤＣを添加する前に２４〜４８時間、プレートに付着させた。細胞培養培地中、クッパー細胞を０．１ｍｇ／ｍＬの濃度のＡＤＣと共に２４時間インキュベートした。２４時間のインキュベート後、培地を除去し、Ｖｅｒｓｅｎｅで細胞を解離させて、コニカルボトムプレートに移し、遠心分離器中、４００×ｇで５分間、細胞をペレット化することにより１回、洗浄し、次に、ＰＢＳ＋２％  ＢＳＡ中に再懸濁した。ＦｏｒｅＣｙｔソフトウェアを装備したＩｎｔｅｌｌｉｃｙｔｅ  ｉＱｕｅスクリーナーを使用して計数し、各処理条件の場合の平均蛍光強度（ＭＦＩ）によって細胞に取り込まれたＡＤＣを測定した。図１２に示される通り、実施例４−１をベースとするＡＤＣ（ＤＡＲ８）は、実施例８−１ａをベースとするＡＤＣ（ＤＡＲ８）に比べて、クッパー細胞（肝臓マクロファージ）による取り込みは低いことを示した。アッセイは、肝臓によるｉｎ  ｖｉｖｏでのＡＤＣクリアランスの代用であり、実施例４−１をベースとするＡＤＣの場合、クリアランス速度が低いことを示唆している。
疎水性相互作用クロマトグラフィー（ＨＩＣ）を使用する疎水性試験
【０４３７】
裸のｃＡＣ１０、ｃＡＣ１０−Ｅｘ＿４−１（８）およびｃＡＣ１０−Ｅｘ＿８−１ａ（８）（約７５μｇ）を、２５℃でブチルＨＩＣ  ＮＰＲカラム（２．５μｍ、４．６ｍｍ×３．５ｍｍ、Ｔｏｓｏｈ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ、ＰＮ１４９４７）に注入し、０．８ｍＬ／分の流速で、Ｂが０〜１００％となる１２分間の直線勾配（移動相Ａ、２５ｍＭリン酸カリウム中の１．５Ｍ硫酸アンモニウム、ｐＨ７；移動相Ｂ、２５ｍＭリン酸カリウム、ｐＨ７、２５％イソプロパノール）で溶出した。多重波長検出器およびＥｍｐｏｗｅｒ３ソフトウェアを装備したＷａｔｅｒｓ  Ａｌｌｉａｎｃｅ  ＨＰＬＣシステムを使用して、抗体あたり様々な薬物比を有する抗体種を解像して定量した。図１３に示されている通り、ｃＡＣ１０−Ｅｘ＿４−１  ＡＤＣは、ｃＡＣ１０−Ｅｘ＿８−１ａ  ＡＤＣまたは裸のｃＡＣ１０抗体と比べて、疎水性が低下していることを示した。ＡＤＣの疎水性は、ＡＤＣクリアランスおよび非特異的なＡＤＣ取り込みへの寄与因子である。
薬物放出試験
【０４３８】
ｃＡＣ１０−Ｅｘ＿４−３  ＡＤＣ（ＤＡＲ８）からのｉｎ  ｖｉｔｒｏ薬物放出をＡＬＣＬ細胞系であるＫａｒｐａｓ２９９およびＨＬ細胞系であるＬ５４０ｃｙで試験した。非結合性ｈ００−Ｅｘ＿４−３ＡＤＣ（ＤＡＲ８）を対照に使用した。新しい培地（それぞれ、ＲＰＭＩ＋１０％ＦＢＳ、ＲＰＭＩ＋２０％  ＦＢＳ）において、Ｋａｒｐａｓ２９９（ＣＤ３０ポジティブ、Ｔ細胞リンパ腫）およびＬ５４０ｃｙ（ＣＤ３０ポジティブ、ホジキンリンパ腫）細胞を５Ｅ６個の細胞／ｍＬ（合計が５Ｅ６個の細胞）でプレート培養した。プレート培養の際に、細胞に、１０ｎｇ／ｍＬの培養物で、ｃＡＣ１０−Ｅｘ＿４−３  ＡＤＣ（ＤＡＲ８）およびｈ００−Ｅｘ＿４−３（ＤＡＲ８）を投与した。処置細胞を３７℃でインキュベートし、投与後２４時間で採取した。採取に際して、細胞をペレット化してＰＢＳにより洗浄し、少量のＰＢＳ中で凍結した。分析用の質量スペクトル（ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ）の試料調製に関すると、内部標準を含有する冷メタノール中に細胞を抽出し、氷上でインキュベートした。インキュベート後、試料を遠心分離にかけ、上清（抽出した低分子を含有）を除去して、窒素下で乾燥した。乾燥試料を、０．１％ギ酸を含有する９５％水中で再構成し、Ｓｃｉｅｘ６５００＋トリプル四重極質量分析計に接続したＷａｔｅｒｓ  Ａｃｑｕｉｔｙ  ＢＥＨ  Ｃ１８（１．７μｍ、２．１×５０ｍｍ）カラムに注入した。図１４Ａおよび１４Ｂにおいて示されている通り、遊離薬物化合物４および化合物４ｂは、ｃＡＣ１０−Ｅｘ＿４−３  ＡＤＣ（ＤＡＲ８）で処置した細胞中には存在したが、ｈ００−Ｅｘ＿４−３  ＡＤＣ（ＤＡＲ８）で処置した細胞中では検出不可能である。
【表Ｅ】
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【図１】
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【図２】
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【図３−１】
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【図３−２】
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【図４−１】
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【図４−２】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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