(57)【要約】従来の治療法（例えば、ターゲティング療法、化学療法、及び血管新生阻害剤など）との組み合わせで、チェックポイント分子を標的とする免疫療法は、固形腫瘍又は液性腫瘍の治療に有望であることが示されている。しかし、このような治療法によって誘導されるアポトーシス調節性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）は、エクトヌクレオチダーゼ、すなわちＣＤ３９及びＣＤ７３によって厳密に制御されるアデノシン産生の増加を通じて、腫瘍微小環境（ＴＭＥ）において、より抑制的になることが多い。新規チェックポイント分子であるＣＤ３９／ＥＮＴＰＤ１は、腫瘍の血管系及び浸潤性免疫細胞上で高度に発現して活性化し、腫瘍増殖を促進する。ＣＤ３９の欠失又はブロックは、抗腫瘍免疫応答を増強すること及び腫瘍血管新生を阻害することによって、抗腫瘍活性を高める。本発明は、Ｔ細胞疲弊マーカーを有するＴ細胞などの免疫細胞上でのＣＤ３９の下方制御を媒介する抗ＣＤ３９抗体の開発と、前臨床モデルで最小限の副作用で腫瘍増殖をブロックするこれらの抗体の実証された有用性とに、少なくとも部分的に基づいている。2021527138.tif 000044
2021527138.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
それを必要とする対象におけるＴ細胞疲弊を低減するための方法であって、エクトヌクレオシド三リン酸ジホスホヒドロラーゼ−１（「ＣＤ３９」）に結合する抗原結合ドメインと、ＦｃγＲＩＩＩａに結合するＦｃγＲＩＩＩａ結合部分とを含む抗ＣＤ３９剤の医薬組成物の有効量を対象に投与するステップを含み、この抗体の投与が、ＣＤ４５＋免疫細胞上の検出可能なＣＤ３９レベルの低下をもたらす、方法。
【請求項２】
前記ＦｃγＲＩＩＩａ結合部分が、Ｆｃドメイン、ＦｃγＲＩＩＩａに結合する抗体又はその抗原結合断片、及びＦｃγＲＩＩＩａ結合ペプチドから選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記抗原結合ドメインが、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ又は一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
前記抗ＣＤ３９剤が、ＣＤ４５＋免疫細胞上のＣＤ３９の抗体媒介性標的膜動輸送を引き起こし、且つ（任意で）腫瘍血管内皮破壊からのＣＤ３９の抗体媒介性標的膜動輸送を引き起こすか、又は腫瘍内の血管網を崩壊させる、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
前記抗ＣＤ３９剤が、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３、５、７、９又は１１の可変領域と少なくとも６０％同一である重鎖可変領域、及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４、６、８、１０又は１２の可変領域と少なくとも６０％同一である軽鎖可変領域を含む抗体又はその抗原結合断片であり、該抗体がヒトＣＤ３９に特異的に結合できる、請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
前記抗ＣＤ３９剤が、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３、５、７、９又は１１のＣＤＲと少なくとも６０％同一であるＣＤＲを有する重鎖、及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４、６、８、１０又は１２のＣＤＲと少なくとも６０％同一であるＣＤＲを有する軽鎖を含む抗体又はその抗原結合断片であり、該抗体がヒトＣＤ３９に特異的に結合できる、請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
前記抗ＣＤ３９剤が、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３のＣＤＲを有する重鎖及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４のＣＤＲを有する軽鎖と、ヒトＣＤ３９に特異的に結合できる抗原結合部位を有するヒト化重鎖及び軽鎖を形成するためのヒトフレームワーク配列とを含む抗体又はその抗原結合断片である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
前記抗ＣＤ３９剤が、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５のＣＤＲを有する重鎖及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６のＣＤＲを有する軽鎖と、ヒトＣＤ３９に特異的に結合できる抗原結合部位を有するヒト化重鎖及び軽鎖を形成するためのヒトフレームワーク配列とを含む抗体又はその抗原結合断片である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
前記抗ＣＤ３９剤が、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７のＣＤＲを有する重鎖及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８のＣＤＲを有する軽鎖と、ヒトＣＤ３９に特異的に結合できる抗原結合部位を有するヒト化重鎖及び軽鎖を形成するためのヒトフレームワーク配列とを含む抗体である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
前記抗ＣＤ３９剤が、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９のＣＤＲを有する重鎖及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０のＣＤＲを有する軽鎖と、ヒトＣＤ３９に特異的に結合できる抗原結合部位を有するヒト化重鎖及び軽鎖を形成するためのヒトフレームワーク配列とを含む抗体である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
前記抗ＣＤ３９剤が、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１のＣＤＲを有する重鎖及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２のＣＤＲを有する軽鎖と、ヒトＣＤ３９に特異的に結合できる抗原結合部位を有するヒト化重鎖及び軽鎖を形成するためのヒトフレームワーク配列とを含む抗体である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
前記抗ＣＤ３９剤が、抗腫瘍療法の一部として投与される、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
前記抗ＣＤ３９剤が、抗ウイルス療法（ＨＩＶ及びＨＢＶ感染症の治療を含む）、マイコバクテリウム・ツベルクローシス（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）及び内臓リーシュマニア症の治療などの抗感染療法の一部として投与される、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
抗腫瘍免疫応答を促進するための方法であって、エクトヌクレオシド三リン酸ジホスホヒドロラーゼ−１（「ＣＤ３９」）に結合する抗ＣＤ３９抗体を、腫瘍を有するヒト患者に投与するステップを含み、該抗体がＦｃγＲＩＩＩａに結合し、抗体依存性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）を保持し、且つ該ヒト患者への該抗体の投与が、該腫瘍内の免疫細胞上のＣＤ３９の発現の減少をもたらす、方法。
【請求項１５】
前記抗ＣＤ３９抗体が、ＣＤ４５＋免疫細胞上のＣＤ３９の抗体媒介性標的膜動輸送を引き起こし、且つ（任意で）腫瘍血管内皮破壊からのＣＤ３９の抗体媒介性標的膜動輸送を引き起こすか、又は腫瘍内の血管網を崩壊させる、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記抗ＣＤ３９抗体が、ＩｇＧ１又はＩｇＧ３アイソタイプである、請求項１４又は１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記抗ＣＤ３９抗体が、低フコシル化又は脱フコシル化されている、請求項１４〜１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８】
前記抗ＣＤ３９抗体が、ヒト抗体又はヒト化抗体である、請求項１４〜１７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９】
前記抗ＣＤ３９抗体が、腫瘍抗原、免疫チェックポイント又は共刺激受容体に対する少なくとも１つの追加の抗原結合部位を含む二重特異性抗体であり、該追加の抗原結合部位が免疫チェックポイントに対するものである場合に該抗体はチェックポイント阻害剤として機能し、該追加の抗原結合部位が共刺激受容体に対するものである場合に該抗体は共刺激アゴニストとして機能する、請求項１４〜１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０】
前記追加の抗原結合部位が、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＣＴＬＡ−４／Ｂ７−１／Ｂ７−２、ＰＤ−Ｌ２、ＮＫＧ２Ａ、ＫＩＲ、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ−３、ＣＤ９６、ＶＩＳＴＡ、及びＴＩＧＩＴからなる群より選択されるチェックポイントタンパク質に結合する、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記追加の抗原結合部位が、Ｔ細胞上で発現上昇し且つＴ細胞疲弊に関連するチェックポイントタンパク質に結合する、請求項１９に記載の方法。
【請求項２２】
前記追加の抗原結合部位が、ＭＨＣＩ分子、ＢＴＬＡ受容体、ＯＸ４０、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤＳ、ＩＣＡＭ−１、ＬＦＡ−１（ＣＤ１１ａ／ＣＤ１８）、ＩＣＯＳ（ＣＤ２７８）、及び４−１ＢＢ（ＣＤ１３７）からなる群より選択される免疫共刺激受容体に結合する、請求項１９に記載の方法。
【請求項２３】
前記抗ＣＤ３９抗体が、膵臓がん、肝臓がん、肺がん、胃がん、食道がん、頭頸部扁平上皮がん、前立腺がん、結腸がん、乳がん、リンパ腫、胆嚢がん、腎臓がん、多発性骨髄腫、卵巣がん、子宮頸がん又は神経膠腫などの固形腫瘍を治療するための抗腫瘍療法の一部として投与される、請求項１４〜２２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２４】
前記抗ＣＤ３９抗体が、白血病などの液性腫瘍を治療するための抗腫瘍療法の一部として投与される、請求項１４〜２３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２５】
前記抗ＣＤ３９抗体が、１つ又は複数の化学療法剤、血管新生阻害剤、腫瘍免疫療法剤及び／又は放射線照射を伴う治療法の一部として投与される、請求項１４〜２４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２６】
前記治療法が、ＰＤ−１アンタゴニスト、ＣＴＬＡ−４アンタゴニスト、ＬＡＧ−３アンタゴニスト、ＴＩＭ−３アンタゴニスト及び／又はＴＩＧＩＴアンタゴニストなどの１つ又は複数のチェックポイント分子阻害剤（アンタゴニスト）を投与することを含む、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
前記治療法が、ＧＩＴＲアゴニスト、ＣＤ２７アゴニスト、４−１ＢＢアゴニスト、ＯＸ４０アゴニスト、ＣＤ１３７アゴニスト、ＩＣＯＳアゴニスト又はＣＤ２８アゴニストなどの１つ又は複数の共刺激分子活性化剤（アゴニスト）を投与することを含む、請求項２５に記載の方法。
【請求項２８】
前記治療法が、ＶＥＧＦＲ若しくはＶＥＧＦアンタゴニスト、ＥＧＦＲ若しくはＥＧＦアンタゴニスト、ＩＤＯ阻害剤、ＩＤＯ１阻害剤、ＨＤＡＣ阻害剤、ＰＩ３Ｋδ阻害剤、ＩＬ−１５アゴニスト、ＣＸＣＲ４アンタゴニスト、ＣＸＣＬ１２アンタゴニスト、ＤＮＭＴ阻害剤、インターロイキン−２１、抗ＫＩＲ抗体、抗ＣＳＦ−１Ｒ抗体、抗ＣＣＲ４抗体、ＧＭＣＳＦ、抗ＰＳ抗体、抗ＣＤ３０抗体−オーリスタチンＥコンジュゲート、抗ＣＤ１９抗体、抗ＣＥＡ−ＩＬ−２抗体、抗ＮＹ−ＥＳＯ−１抗体、抗ＮＫＧ２Ａ抗体、ＳＴＩＮＧアゴニスト、ＴＲＬ７／８アゴニスト、ＲＩＧ−１アゴニスト及び／又はＮＲＬＰ３阻害剤、又は抗ＣＤ７３抗体（ＭＥＤＩ９４４７など）のうちの１つ又は複数を投与することを含む、請求項２５に記載の方法。
【請求項２９】
前記抗ＣＤ３９抗体が、腫瘍ワクチン、養子細胞療法、抗腫瘍遺伝子療法、又は腫瘍溶解ウイルス療法を含む治療法の一部として投与される、請求項１４〜２４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３０】
Ｔ細胞疲弊を予防又は解除するため及び腫瘍に対する免疫応答を増強するための方法であって、
（ｉ）所定の閾値を超える１つ又は複数のＴ細胞疲弊マーカーを発現する、ある程度の腫瘍浸潤リンパ球を有するがん患者を同定するステップ；並びに
（ｉｉ）エクトヌクレオシド三リン酸ジホスホヒドロラーゼ−１（「ＣＤ３９」）及びＦｃγＲＩＩＩａに結合する抗ＣＤ３９抗体を該患者に投与し、該腫瘍浸潤リンパ球上の検出可能なＣＤ３９レベルを低下させ、それによってＴ細胞疲弊を解除する、ステップ
を含む、方法。
【請求項３１】
前記抗ＣＤ３９抗体が、ＣＤ４５＋免疫細胞上のＣＤ３９の抗体媒介性標的膜動輸送を引き起こし、且つ（任意で）腫瘍血管内皮破壊からのＣＤ３９の抗体媒介性標的膜動輸送を引き起こすか、又は腫瘍内の血管網を崩壊させる、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
前記抗ＣＤ３９抗体が、ＩｇＧ１又はＩｇＧ３アイソタイプである、請求項３０又は３１に記載の方法。
【請求項３３】
前記抗ＣＤ３９抗体が、低フコシル化又は脱フコシル化されている、請求項３０〜３２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３４】
前記抗ＣＤ３９抗体が、ＣＤ４５＋免疫細胞上のＣＤ３９の抗体媒介性標的膜動輸送を引き起こす、請求項３０〜３３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３５】
前記抗ＣＤ３９抗体が、腫瘍抗原、免疫チェックポイント又は共刺激受容体に対する少なくとも１つの追加の抗原結合部位を含む二重特異性抗体であり、該追加の抗原結合部位が免疫チェックポイントに対するものである場合に該抗体はチェックポイント阻害剤として機能し、該追加の抗原結合部位が共刺激受容体に対するものである場合に該抗体は共刺激アゴニストとして機能する、請求項３０〜３４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３６】
追加の抗原結合部位が、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＣＴＬＡ−４／Ｂ７−１／Ｂ７−２、ＰＤ−Ｌ２、ＮＫＧ２Ａ、ＫＩＲ、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ−３、ＣＤ９６、ＶＩＳＴＡ、及びＴＩＧＩＴからなる群より選択されるチェックポイントタンパク質に結合する、請求項３５に記載の方法。
【請求項３７】
追加の抗原結合部位が、Ｔ細胞上で発現上昇し且つＴ細胞疲弊に関連するチェックポイントタンパク質に結合する、請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
追加の抗原結合部位が、ＭＨＣＩ分子、ＢＴＬＡ受容体、ＯＸ４０、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤＳ、ＩＣＡＭ−１、ＬＦＡ−１（ＣＤ１１ａ／ＣＤ１８）、ＩＣＯＳ（ＣＤ２７８）、及び４−１ＢＢ（ＣＤ１３７）からなる群より選択される免疫共刺激受容体に結合する、請求項３６に記載の方法。
【請求項３９】
前記抗ＣＤ３９抗体が、膵臓がん、肝臓がん、肺がん、胃がん、食道がん、頭頸部扁平上皮がん、前立腺がん、結腸がん、乳がん、リンパ腫、胆嚢がん、腎臓がん、多発性骨髄腫、卵巣がん、子宮頸がん又は神経膠腫などの固形腫瘍を治療するための抗腫瘍療法の一部として投与される、請求項３０〜３８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４０】
前記抗ＣＤ３９抗体が、白血病などの液性腫瘍を治療するための抗腫瘍療法の一部として投与される、請求項３０〜３９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４１】
前記抗ＣＤ３９抗体が、１つ又は複数の化学療法剤、血管新生阻害剤、腫瘍免疫療法剤、低体温療法及び／又は放射線照射を伴う治療法の一部として投与される、請求項３０〜４０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４２】
前記治療法が、ＰＤ−１アンタゴニスト、ＰＤ−Ｌ１アンタゴニスト、ＣＴＬＡ−４アンタゴニスト、ＬＡＧ−３アンタゴニスト、ＴＩＭ−３アンタゴニスト及び／又はＴＩＧＩＴアンタゴニストなどの１つ又は複数のチェックポイント分子阻害剤（アンタゴニスト）を投与することを含む、請求項４１に記載の方法。
【請求項４３】
前記治療法が、ＧＩＴＲアゴニスト、ＣＤ２７アゴニスト、４−１ＢＢアゴニスト、ＯＸ４０アゴニスト、ＣＤ１３７アゴニスト、ＩＣＯＳアゴニスト又はＣＤ２８アゴニストなどの１つ又は複数の共刺激分子活性化剤（アゴニスト）を投与することを含む、請求項４１に記載の方法。
【請求項４４】
前記治療法が、ＶＥＧＦＲ若しくはＶＥＧＦアンタゴニスト、ＥＧＦＲ若しくはＥＧＦアンタゴニスト、ＩＤＯ阻害剤、ＩＤＯ１阻害剤、ＨＤＡＣ阻害剤、ＰＩ３Ｋδ阻害剤、ＩＬ−１５アゴニスト、ＣＸＣＲ４アンタゴニスト、ＣＸＣＬ１２アンタゴニスト、ＤＮＭＴ阻害剤、インターロイキン−２１、抗ＫＩＲ抗体、抗ＣＳＦ−１Ｒ抗体、抗ＣＣＲ４抗体、ＧＭＣＳＦ、抗ＰＳ抗体、抗ＣＤ３０抗体−オーリスタチンＥコンジュゲート、抗ＣＤ１９抗体、抗ＣＥＡ−ＩＬ−２抗体、抗ＮＹ−ＥＳＯ−１抗体、抗ＮＫＧ２Ａ抗体、ＳＴＩＮＧアゴニスト、ＴＲＬ７／８アゴニスト、ＲＩＧ−１アゴニスト、Ｐ２Ｘ７アンタゴニスト、抗ＣＤ７３抗体（ＭＥＤＩ９４４７など）及び／又はアデノシンＡ２ａ受容体アンタゴニストのうちの１つ又は複数を投与することを含む、請求項４１に記載の方法。
【請求項４５】
前記抗ＣＤ３９抗体が、腫瘍ワクチン、養子細胞療法、抗腫瘍遺伝子療法、又は腫瘍溶解ウイルス療法を含む治療法の一部として投与される、請求項３０〜４０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４６】
ステップ（ｉ）が、腫瘍浸潤リンパ球上のＣＤ３９、ＰＤ−１、ＣＴＬＡ−４、ＴＩＭ−３、ＬＡＧ−３、ＣＤ１６０、ＢＴＬＡ、又は２Ｂ４のうちの１つ又は複数の発現上昇の程度を示す、細胞の数若しくは割合又は抗体染色の強度を検出することをさらに含む、請求項３０〜４１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４７】
前記抗ＣＤ３９抗体が、前記所定の閾値を超える１つ又は複数のＴ細胞疲弊マーカーを発現する、ある程度の腫瘍浸潤リンパ球を有する患者に投与され、該患者が、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）、結腸直腸がん、進行性黒色腫、腎細胞がん（ＲＣＣ）、乳がん（トリプルネガティブ乳がんを含む）、胃がん、食道がん、尿路上皮がん（ＵＣ）、又は肝細胞がん（ＨＣＣ）を有する、請求項３０又は４６に記載の方法。
【請求項４８】
エクトヌクレオシド三リン酸ジホスホヒドロラーゼ−１（「ＣＤ３９」）に結合し且つＦｃγＲＩＩＩａに結合する抗体の治療有効量を含み、投与されると、ＣＤ４５＋免疫細胞上の検出可能なＣＤ３９レベルの低下をもたらし、Ｔ細胞疲弊又はＴ細胞アネルギーを示すＴ細胞のＴ細胞機能を回復するのに効果的である、それを必要とする対象におけるＴ細胞疲弊を低減する医薬製剤。
【請求項４９】
前記抗ＣＤ３９抗体が、ＣＤ４５＋免疫細胞上のＣＤ３９の抗体媒介性標的膜動輸送を引き起こし、且つ（任意で）腫瘍血管内皮破壊からのＣＤ３９の抗体媒介性標的膜動輸送を引き起こすか、又は腫瘍内の血管網を崩壊させる、請求項４８に記載の医薬製剤。
【請求項５０】
前記抗ＣＤ３９抗体が、ＩｇＧ１又はＩｇＧ３アイソタイプである、請求項４８又は４９に記載の医薬製剤。
【請求項５１】
前記抗ＣＤ３９抗体が、低フコシル化又は脱フコシル化されている、請求項４８〜５０のいずれか一項に記載の医薬製剤。
【請求項５２】
前記抗ＣＤ３９抗体が、ヒト抗体又はヒト化抗体である、請求項４８〜５１のいずれか一項に記載の医薬製剤。
【請求項５３】
前記抗ＣＤ３９抗体が、腫瘍抗原、免疫チェックポイント又は共刺激受容体に対する少なくとも１つの追加の抗原結合部位を含む二重特異性抗体であり、該追加の抗原結合部位が免疫チェックポイントに対するものである場合に該抗体はチェックポイント阻害剤として機能し、該追加の抗原結合部位が共刺激受容体に対するものである場合に該抗体は共刺激アゴニストとして機能する、請求項４８〜５２のいずれか一項に記載の医薬製剤。
【請求項５４】
前記抗ＣＤ３９抗体が、固形腫瘍又は液性腫瘍を治療するための抗腫瘍療法の一部として患者に投与するために製剤化されている、請求項４８〜５３のいずれか一項に記載の医薬製剤。
【請求項５５】
前記抗ＣＤ３９抗体が、１つ又は複数の化学療法剤、血管新生阻害剤、及び／又は腫瘍免疫療法剤と共に製剤化されている、請求項４８〜５４のいずれか一項に記載の医薬製剤。
【請求項５６】
前記抗ＣＤ３９抗体が、ヒトＣＤ３９への結合についてモノクローナル抗体５Ｆ２と競合する、請求項４８〜５５のいずれか一項に記載の医薬製剤。
【請求項５７】
それを必要とする対象におけるＴ細胞疲弊を低減する医薬製剤であって、エクトヌクレオシド三リン酸ジホスホヒドロラーゼ−１（「ＣＤ３９」）に結合し且つＦｃγＲＩＩＩａに結合する抗体の治療有効量を含み、投与されると、ＣＤ４５＋免疫細胞上の検出可能なＣＤ３９レベルの低下をもたらし、Ｔ細胞疲弊又はＴ細胞アネルギーを示すＴ細胞のＴ細胞機能を回復するのに効果的であり、該抗体が、
ａ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３のＣＤＲを有する重鎖及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４のＣＤＲを有する軽鎖、
ｂ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５のＣＤＲを有する重鎖及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６のＣＤＲを有する軽鎖、
ｃ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７のＣＤＲを有する重鎖及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８のＣＤＲを有する軽鎖、
ｄ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９のＣＤＲを有する重鎖及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０のＣＤＲを有する軽鎖、又は
ｅ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１のＣＤＲを有する重鎖及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２のＣＤＲを有する軽鎖
を含み、該重鎖及び軽鎖が、ヒトＣＤ３９に特異的に結合できる抗原結合部位を有するヒト化重鎖及び軽鎖を形成するためのヒトフレームワーク配列をさらに含む、医薬製剤。
【請求項５８】
ヒトＣＤ３９に特異的に結合する第１の結合部分と、腫瘍抗原、免疫チェックポイント又は共刺激受容体に特異的に結合する第２の結合部分とを含む、二重特異性抗体であって、追加の抗原結合部位が免疫チェックポイントに対するものである場合に該抗体はチェックポイント阻害剤として機能し、追加の抗原結合部位が共刺激受容体に対するものである場合に該抗体は共刺激アゴニストとして機能し、該二重特異性抗体が、ＣＤ４５＋免疫細胞上のＣＤ３９の抗体媒介性標的膜動輸送を引き起こし、且つ（任意で）腫瘍血管内皮破壊からのＣＤ３９の抗体媒介性標的膜動輸送を引き起こすか、又は腫瘍内の血管網を崩壊させる、二重特異性抗体。
【請求項５９】
それを必要とする対象におけるＴ細胞疲弊を低減するための薬物の調製における、エクトヌクレオシド三リン酸ジホスホヒドロラーゼ−１（「ＣＤ３９」）に結合する抗原結合ドメインと、ＦｃγＲＩＩＩａに結合するＦｃγＲＩＩＩａ結合部分とを含む抗ＣＤ３９剤の医薬組成物の有効量の使用であって、この抗体の投与がＣＤ４５＋免疫細胞上の検出可能なＣＤ３９レベルの低下をもたらす、使用。
【請求項６０】
前記ＦｃγＲＩＩＩａ結合部分が、Ｆｃドメイン、ＦｃγＲＩＩＩａに結合する抗体又はその抗原結合断片、及びＦｃγＲＩＩＩａ結合ペプチドから選択される、請求項５９に記載の使用。
【請求項６１】
前記抗原結合ドメインが、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ又は一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である、請求項５９に記載の使用。
【請求項６２】
前記抗ＣＤ３９剤が、ＣＤ４５＋免疫細胞上のＣＤ３９の抗体媒介性標的膜動輸送を引き起こし、且つ（任意で）腫瘍血管内皮破壊からのＣＤ３９の抗体媒介性標的膜動輸送を引き起こすか、又は腫瘍内の血管網を崩壊させる、請求項５９に記載の使用。
【請求項６３】
前記抗ＣＤ３９剤が、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３、５、７、９又は１１の可変領域と少なくとも６０％同一である重鎖可変領域、及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４、６、８、１０又は１２の可変領域と少なくとも６０％同一である軽鎖可変領域を含む抗体又はその抗原結合断片であり、該抗体がヒトＣＤ３９に特異的に結合できる、請求項５９に記載の使用。
【請求項６４】
前記抗ＣＤ３９剤が、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３、５、７、９又は１１のＣＤＲと少なくとも６０％同一であるＣＤＲを有する重鎖、及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４、６、８、１０又は１２のＣＤＲと少なくとも６０％同一であるＣＤＲを有する軽鎖を含む抗体又はその抗原結合断片であり、該抗体がヒトＣＤ３９に特異的に結合できる、請求項５９に記載の使用。
【請求項６５】
前記抗ＣＤ３９剤が、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３のＣＤＲを有する重鎖及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４のＣＤＲを有する軽鎖と、ヒトＣＤ３９に特異的に結合できる抗原結合部位を有するヒト化重鎖及び軽鎖を形成するためのヒトフレームワーク配列とを含む抗体又はその抗原結合断片である、請求項５９に記載の使用。
【請求項６６】
前記抗ＣＤ３９剤が、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５のＣＤＲを有する重鎖及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６のＣＤＲを有する軽鎖と、ヒトＣＤ３９に特異的に結合できる抗原結合部位を有するヒト化重鎖及び軽鎖を形成するためのヒトフレームワーク配列とを含む抗体又はその抗原結合断片である、請求項５９に記載の使用。
【請求項６７】
前記抗ＣＤ３９剤が、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７のＣＤＲを有する重鎖及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８のＣＤＲを有する軽鎖と、ヒトＣＤ３９に特異的に結合できる抗原結合部位を有するヒト化重鎖及び軽鎖を形成するためのヒトフレームワーク配列とを含む抗体である、請求項５９に記載の使用。
【請求項６８】
前記抗ＣＤ３９剤が、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９のＣＤＲを有する重鎖及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０のＣＤＲを有する軽鎖と、ヒトＣＤ３９に特異的に結合できる抗原結合部位を有するヒト化重鎖及び軽鎖を形成するためのヒトフレームワーク配列とを含む抗体である、請求項５９に記載の使用。
【請求項６９】
前記抗ＣＤ３９剤が、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１のＣＤＲを有する重鎖及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２のＣＤＲを有する軽鎖と、ヒトＣＤ３９に特異的に結合できる抗原結合部位を有するヒト化重鎖及び軽鎖を形成するためのヒトフレームワーク配列とを含む抗体である、請求項５９に記載の使用。
【請求項７０】
前記抗ＣＤ３９剤が、抗腫瘍療法の一部として投与される、請求項５９に記載の使用。
【請求項７１】
前記抗ＣＤ３９剤が、抗ウイルス療法（ＨＩＶ及びＨＢＶ感染症の治療を含む）、マイコバクテリウム・ツベルクローシス（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）、及び内臓リーシュマニア症の治療などの抗感染療法の一部として投与される、請求項５９に記載の使用。
【請求項７２】
腫瘍を有するヒト患者における抗腫瘍免疫応答を治療するための薬物の調製における、エクトヌクレオシド三リン酸ジホスホヒドロラーゼ−１（「ＣＤ３９」）に結合し且つＦｃγＲＩＩＩａに結合する抗ＣＤ３９抗体の使用であって、該抗体が抗体依存性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）を保持し、該抗体の該ヒト患者への投与が、腫瘍内の免疫細胞上のＣＤ３９の発現の減少をもたらす、使用。
【請求項７３】
前記抗ＣＤ３９抗体が、ＣＤ４５＋免疫細胞上のＣＤ３９の抗体媒介性標的膜動輸送を引き起こし、且つ（任意で）腫瘍血管内皮破壊からのＣＤ３９の抗体媒介性標的膜動輸送を引き起こすか、又は腫瘍内の血管網を崩壊させる、請求項７２に記載の使用。
【請求項７４】
前記抗ＣＤ３９抗体が、ＩｇＧ１又はＩｇＧ３アイソタイプである、請求項７２に記載の使用。
【請求項７５】
前記抗ＣＤ３９抗体が、低フコシル化又は脱フコシル化されている、請求項７２に記載の使用。
【請求項７６】
前記抗ＣＤ３９抗体が、ヒト抗体又はヒト化抗体である、請求項７２に記載の使用。
【請求項７７】
前記抗ＣＤ３９抗体が、腫瘍抗原、免疫チェックポイント又は共刺激受容体に対する少なくとも１つの追加の抗原結合部位を含む二重特異性抗体であり、該追加の抗原結合部位が免疫チェックポイントに対するものである場合に該抗体はチェックポイント阻害剤として機能し、該追加の抗原結合部位が共刺激受容体に対するものである場合に該抗体は共刺激アゴニストとして機能する、請求項７２に記載の使用。
【請求項７８】
前記追加の抗原結合部位が、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＣＴＬＡ−４／Ｂ７−１／Ｂ７−２、ＰＤ−Ｌ２、ＮＫＧ２Ａ、ＫＩＲ、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ−３、ＣＤ９６、ＶＩＳＴＡ、及びＴＩＧＩＴからなる群より選択されるチェックポイントタンパク質に結合する、請求項７７に記載の使用。
【請求項７９】
前記追加の抗原結合部位が、Ｔ細胞上で発現上昇し且つＴ細胞疲弊に関連するチェックポイントタンパク質に結合する、請求項７７に記載の使用。
【請求項８０】
前記追加の抗原結合部位が、ＭＨＣＩ分子、ＢＴＬＡ受容体、ＯＸ４０、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤＳ、ＩＣＡＭ−１、ＬＦＡ−１（ＣＤ１１ａ／ＣＤ１８）、ＩＣＯＳ（ＣＤ２７８）、及び４−１ＢＢ（ＣＤ１３７）からなる群より選択される免疫共刺激受容体に結合する、請求項７７に記載の使用。
【請求項８１】
前記抗ＣＤ３９抗体が、膵臓がん、肝臓がん、肺がん、胃がん、食道がん、頭頸部扁平上皮がん、前立腺がん、結腸がん、乳がん、リンパ腫、胆嚢がん、腎臓がん、多発性骨髄腫、卵巣がん、子宮頸がん又は神経膠腫などの固形腫瘍を治療するための抗腫瘍療法の一部として投与される、請求項７２に記載の使用。
【請求項８２】
前記抗ＣＤ３９抗体が、白血病などの液性腫瘍を治療するための抗腫瘍療法の一部として投与される、請求項７２に記載の使用。
【請求項８３】
前記抗ＣＤ３９抗体が、１つ又は複数の化学療法剤、血管新生阻害剤、腫瘍免疫療法剤及び／又は放射線照射を伴う治療法の一部として投与される、請求項７２に記載の使用。
【請求項８４】
前記治療法が、ＰＤ−１アンタゴニスト、ＣＴＬＡ−４アンタゴニスト、ＬＡＧ−３アンタゴニスト、ＴＩＭ−３アンタゴニスト及び／又はＴＩＧＩＴアンタゴニストなどの１つ又は複数のチェックポイント分子阻害剤（アンタゴニスト）を投与することを含む、請求項８３に記載の使用。
【請求項８５】
前記治療法が、ＧＩＴＲアゴニスト、ＣＤ２７アゴニスト、４−１ＢＢアゴニスト、ＯＸ４０アゴニスト、ＣＤ１３７アゴニスト、ＩＣＯＳアゴニスト又はＣＤ２８アゴニストなどの１つ又は複数の共刺激分子活性化剤（アゴニスト）を投与することを含む、請求項８３に記載の使用。
【請求項８６】
前記治療法が、ＶＥＧＦＲ若しくはＶＥＧＦアンタゴニスト、ＥＧＦＲ若しくはＥＧＦアンタゴニスト、ＩＤＯ阻害剤、ＩＤＯ１阻害剤、ＨＤＡＣ阻害剤、ＰＩ３Ｋδ阻害剤、ＩＬ−１５アゴニスト、ＣＸＣＲ４アンタゴニスト、ＣＸＣＬ１２アンタゴニスト、ＤＮＭＴ阻害剤、インターロイキン−２１、抗ＫＩＲ抗体、抗ＣＳＦ−１Ｒ抗体、抗ＣＣＲ４抗体、ＧＭＣＳＦ、抗ＰＳ抗体、抗ＣＤ３０抗体−オーリスタチンＥコンジュゲート、抗ＣＤ１９抗体、抗ＣＥＡ−ＩＬ−２抗体、抗ＮＹ−ＥＳＯ−１抗体、抗ＮＫＧ２Ａ抗体、ＳＴＩＮＧアゴニスト、ＴＲＬ７／８アゴニスト、ＲＩＧ−１アゴニスト及び／又はＮＲＬＰ３阻害剤、又は抗ＣＤ７３抗体（ＭＥＤＩ９４４７など）のうちの１つ又は複数を投与することを含む、請求項８３に記載の使用。
【請求項８７】
前記抗ＣＤ３９抗体が、腫瘍ワクチン、養子細胞療法、抗腫瘍遺伝子療法、又は腫瘍溶解ウイルス療法を含む治療法の一部として投与される、請求項７２に記載の使用。
【請求項８８】
Ｔ細胞疲弊を予防又は解除するため及び腫瘍に対する免疫応答を増強するための薬剤の調製における、エクトヌクレオシド三リン酸ジホスホヒドロラーゼ−１（「ＣＤ３９」）及びＦｃγＲＩＩＩａに結合する抗ＣＤ３９抗体の使用であって、
（ｉ）所定の閾値を超える１つ又は複数のＴ細胞疲弊マーカーを発現する、ある程度の腫瘍浸潤リンパ球を有するがん患者を同定するステップ；及び
（ｉｉ）該患者に該抗ＣＤ３９抗体を投与するステップであって、該抗体が該腫瘍浸潤リンパ球上の検出可能なＣＤ３９レベルを低下させ、それによってＴ細胞疲弊を解除する、ステップ
を含む、使用。
【請求項８９】
前記抗ＣＤ３９抗体が、ＣＤ４５＋免疫細胞上のＣＤ３９の抗体媒介性標的膜動輸送を引き起こし、且つ（任意で）腫瘍血管内皮破壊からのＣＤ３９の抗体媒介性標的膜動輸送を引き起こすか、又は腫瘍内の血管網を崩壊させる、請求項８８に記載の使用。
【請求項９０】
前記抗ＣＤ３９抗体が、ＩｇＧ１又はＩｇＧ３アイソタイプである、請求項８８に記載の使用。
【請求項９１】
前記抗ＣＤ３９抗体が、低フコシル化又は脱フコシル化されている、請求項８８に記載の使用。
【請求項９２】
前記抗ＣＤ３９抗体が、ＣＤ４５＋免疫細胞上のＣＤ３９の抗体媒介性標的膜動輸送を引き起こす、請求項８８に記載の使用。
【請求項９３】
前記抗ＣＤ３９抗体が、腫瘍抗原、免疫チェックポイント又は共刺激受容体に対する少なくとも１つの追加の抗原結合部位を含む二重特異性抗体であり、該追加の抗原結合部位が免疫チェックポイントに対するものである場合に該抗体はチェックポイント阻害剤として機能し、該追加の抗原結合部位が共刺激受容体に対するものである場合に該抗体は共刺激アゴニストとして機能する、請求項８８に記載の使用。
【請求項９４】
追加の抗原結合部位が、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＣＴＬＡ−４／Ｂ７−１／Ｂ７−２、ＰＤ−Ｌ２、ＮＫＧ２Ａ、ＫＩＲ、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ−３、ＣＤ９６、ＶＩＳＴＡ、及びＴＩＧＩＴからなる群より選択されるチェックポイントタンパク質に結合する、請求項９３に記載の使用。
【請求項９５】
追加の抗原結合部位が、Ｔ細胞上で発現上昇し且つＴ細胞疲弊に関連するチェックポイントタンパク質に結合する、請求項９４に記載の使用。
【請求項９６】
追加の抗原結合部位が、ＭＨＣＩ分子、ＢＴＬＡ受容体、ＯＸ４０、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤＳ、ＩＣＡＭ−１、ＬＦＡ−１（ＣＤ１１ａ／ＣＤ１８）、ＩＣＯＳ（ＣＤ２７８）、及び４−１ＢＢ（ＣＤ１３７）からなる群より選択される免疫共刺激受容体に結合する、請求項９４に記載の使用。
【請求項９７】
前記抗ＣＤ３９抗体が、膵臓がん、肝臓がん、肺がん、胃がん、食道がん、頭頸部扁平上皮がん、前立腺がん、結腸がん、乳がん、リンパ腫、胆嚢がん、腎臓がん、多発性骨髄腫、卵巣がん、子宮頸がん又は神経膠腫などの固形腫瘍を治療するための抗腫瘍療法の一部として投与される、請求項８８に記載の使用。
【請求項９８】
前記抗ＣＤ３９抗体が、白血病などの液性腫瘍を治療するための抗腫瘍療法の一部として投与される、請求項８８に記載の使用。
【請求項９９】
前記抗ＣＤ３９抗体が、１つ又は複数の化学療法剤、血管新生阻害剤、腫瘍免疫療法剤、低体温療法及び／又は放射線照射を伴う治療法の一部として投与される、請求項８８に記載の使用。
【請求項１００】
前記治療法が、ＰＤ−１アンタゴニスト、ＰＤ−Ｌ１アンタゴニスト、ＣＴＬＡ−４アンタゴニスト、ＬＡＧ−３アンタゴニスト、ＴＩＭ−３アンタゴニスト及び／又はＴＩＧＩＴアンタゴニストなどの１つ又は複数のチェックポイント分子阻害剤（アンタゴニスト）を投与することを含む、請求項９９に記載の使用。
【請求項１０１】
前記治療法が、ＧＩＴＲアゴニスト、ＣＤ２７アゴニスト、４−１ＢＢアゴニスト、ＯＸ４０アゴニスト、ＣＤ１３７アゴニスト、ＩＣＯＳアゴニスト又はＣＤ２８アゴニストなどの１つ又は複数の共刺激分子活性化剤（アゴニスト）を投与することを含む、請求項９９に記載の使用。
【請求項１０２】
前記治療法が、ＶＥＧＦＲ若しくはＶＥＧＦアンタゴニスト、ＥＧＦＲ若しくはＥＧＦアンタゴニスト、ＩＤＯ阻害剤、ＩＤＯ１阻害剤、ＨＤＡＣ阻害剤、ＰＩ３Ｋδ阻害剤、ＩＬ−１５アゴニスト、ＣＸＣＲ４アンタゴニスト、ＣＸＣＬ１２アンタゴニスト、ＤＮＭＴ阻害剤、インターロイキン−２１、抗ＫＩＲ抗体、抗ＣＳＦ−１Ｒ抗体、抗ＣＣＲ４抗体、ＧＭＣＳＦ、抗ＰＳ抗体、抗ＣＤ３０抗体−オーリスタチンＥコンジュゲート、抗ＣＤ１９抗体、抗ＣＥＡ−ＩＬ−２抗体、抗ＮＹ−ＥＳＯ−１抗体、抗ＮＫＧ２Ａ抗体、ＳＴＩＮＧアゴニスト、ＴＲＬ７／８アゴニスト、ＲＩＧ−１アゴニスト、Ｐ２Ｘ７アンタゴニスト、抗ＣＤ７３抗体（ＭＥＤＩ９４４７など）及び／又はアデノシンＡ２ａ受容体アンタゴニストのうちの１つ又は複数を投与することを含む、請求項９９に記載の使用。
【請求項１０３】
前記抗ＣＤ３９抗体が、腫瘍ワクチン、養子細胞療法、抗腫瘍遺伝子療法、又は腫瘍溶解ウイルス療法を含む治療法の一部として投与される、請求項８８に記載の使用。
【請求項１０４】
ステップ（ｉ）が、腫瘍浸潤リンパ球上のＣＤ３９、ＰＤ−１、ＣＴＬＡ−４、ＴＩＭ−３、ＬＡＧ−３、ＣＤ１６０、ＢＴＬＡ、又は２Ｂ４のうちの１つ又は複数の発現上昇の程度を示す、細胞の数若しくは割合又は抗体染色の強度を検出することをさらに含む、請求項８８に記載の使用。
【請求項１０５】
前記抗ＣＤ３９抗体が、所定の閾値を超える１つ又は複数のＴ細胞疲弊マーカーを発現する、ある程度の腫瘍浸潤リンパ球を有する患者に投与され、該患者が、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）、結腸直腸がん、進行性黒色腫、腎細胞がん（ＲＣＣ）、乳がん（トリプルネガティブ乳がんを含む）、胃がん、食道がん、尿路上皮がん（ＵＣ）、又は肝細胞がん（ＨＣＣ）を有する、請求項８８に記載の使用。
【請求項１０６】
前記抗原結合ドメインが、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ又は一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である、請求項１に記載の方法。
【請求項１０７】
前記抗ＣＤ３９剤が、ＣＤ４５＋免疫細胞上のＣＤ３９の抗体媒介性標的膜動輸送を引き起こし、且つ（任意で）腫瘍血管内皮破壊からのＣＤ３９の抗体媒介性標的膜動輸送を引き起こすか、又は腫瘍内の血管網を崩壊させる、請求項１に記載の方法。
【請求項１０８】
前記抗ＣＤ３９剤が、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３、５、７、９又は１１の可変領域と少なくとも６０％同一である重鎖可変領域、及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４、６、８、１０又は１２の可変領域と少なくとも６０％同一である軽鎖可変領域を含む抗体又はその抗原結合断片であり、該抗体がヒトＣＤ３９に特異的に結合できる、請求項１に記載の方法。
【請求項１０９】
前記抗ＣＤ３９剤が、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３、５、７、９又は１１のＣＤＲと少なくとも６０％同一であるＣＤＲを有する重鎖、及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４、６、８、１０又は１２のＣＤＲと少なくとも６０％同一であるＣＤＲを有する軽鎖を含む抗体又はその抗原結合断片であり、該抗体がヒトＣＤ３９に特異的に結合できる、請求項１に記載の方法。
【請求項１１０】
前記抗ＣＤ３９剤が、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３のＣＤＲを有する重鎖及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４のＣＤＲを有する軽鎖と、ヒトＣＤ３９に特異的に結合できる抗原結合部位を有するヒト化重鎖及び軽鎖を形成するためのヒトフレームワーク配列とを含む抗体又はその抗原結合断片である、請求項１に記載の方法。
【請求項１１１】
前記抗ＣＤ３９剤が、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５のＣＤＲを有する重鎖及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６のＣＤＲを有する軽鎖と、ヒトＣＤ３９に特異的に結合できる抗原結合部位を有するヒト化重鎖及び軽鎖を形成するためのヒトフレームワーク配列とを含む抗体又はその抗原結合断片である、請求項１に記載の方法。
【請求項１１２】
前記抗ＣＤ３９剤が、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７のＣＤＲを有する重鎖及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８のＣＤＲを有する軽鎖と、ヒトＣＤ３９に特異的に結合できる抗原結合部位を有するヒト化重鎖及び軽鎖を形成するためのヒトフレームワーク配列とを含む抗体である、請求項１に記載の方法。
【請求項１１３】
前記抗ＣＤ３９剤が、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９のＣＤＲを有する重鎖及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０のＣＤＲを有する軽鎖と、ヒトＣＤ３９に特異的に結合できる抗原結合部位を有するヒト化重鎖及び軽鎖を形成するためのヒトフレームワーク配列とを含む抗体である、請求項１に記載の方法。
【請求項１１４】
前記抗ＣＤ３９剤が、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１のＣＤＲを有する重鎖及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２のＣＤＲを有する軽鎖と、ヒトＣＤ３９に特異的に結合できる抗原結合部位を有するヒト化重鎖及び軽鎖を形成するためのヒトフレームワーク配列とを含む抗体である、請求項１に記載の方法。
【請求項１１５】
前記抗ＣＤ３９剤が、抗腫瘍療法の一部として投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項１１６】
前記抗ＣＤ３９剤が、抗ウイルス療法（ＨＩＶ及びＨＢＶ感染症の治療を含む）、マイコバクテリウム・ツベルクローシス（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）、及び内臓リーシュマニア症の治療などの抗感染療法の一部として投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項１１７】
前記抗ＣＤ３９抗体が、ＩｇＧ１又はＩｇＧ３アイソタイプである、請求項１４に記載の方法。
【請求項１１８】
前記抗ＣＤ３９抗体が、低フコシル化又は脱フコシル化されている、請求項１４に記載の方法。
【請求項１１９】
前記抗ＣＤ３９抗体が、ヒト抗体又はヒト化抗体である、請求項１４に記載の方法。
【請求項１２０】
前記抗ＣＤ３９抗体が、腫瘍抗原、免疫チェックポイント又は共刺激受容体に対する少なくとも１つの追加の抗原結合部位を含む二重特異性抗体であり、該追加の抗原結合部位が免疫チェックポイントに対するものである場合に該抗体はチェックポイント阻害剤として機能し、該追加の抗原結合部位が共刺激受容体に対するものである場合に該抗体は共刺激アゴニストとして機能する、請求項１４に記載の方法。
【請求項１２１】
前記追加の抗原結合部位が、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＣＴＬＡ−４／Ｂ７−１／Ｂ７−２、ＰＤ−Ｌ２、ＮＫＧ２Ａ、ＫＩＲ、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ−３、ＣＤ９６、ＶＩＳＴＡ、及びＴＩＧＩＴからなる群より選択されるチェックポイントタンパク質に結合する、請求項１２０に記載の方法。
【請求項１２２】
前記追加の抗原結合部位が、Ｔ細胞上で発現上昇し且つＴ細胞疲弊に関連するチェックポイントタンパク質に結合する、請求項１２０に記載の方法。
【請求項１２３】
前記追加の抗原結合部位が、ＭＨＣＩ分子、ＢＴＬＡ受容体、ＯＸ４０、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤＳ、ＩＣＡＭ−１、ＬＦＡ−１（ＣＤ１１ａ／ＣＤ１８）、ＩＣＯＳ（ＣＤ２７８）、及び４−１ＢＢ（ＣＤ１３７）からなる群より選択される免疫共刺激受容体に結合する、請求項１２０に記載の方法。
【請求項１２４】
前記抗ＣＤ３９抗体が、膵臓がん、肝臓がん、肺がん、胃がん、食道がん、頭頸部扁平上皮がん、前立腺がん、結腸がん、乳がん、リンパ腫、胆嚢がん、腎臓がん、多発性骨髄腫、卵巣がん、子宮頸がん又は神経膠腫などの固形腫瘍を治療するための抗腫瘍療法の一部として投与される、請求項１４に記載の方法。
【請求項１２５】
前記抗ＣＤ３９抗体が、白血病などの液性腫瘍を治療するための抗腫瘍療法の一部として投与される、請求項１４に記載の方法。
【請求項１２６】
前記抗ＣＤ３９抗体が、１つ又は複数の化学療法剤、血管新生阻害剤、腫瘍免疫療法剤及び／又は放射線照射を伴う治療法の一部として投与される、請求項１４に記載の方法。
【請求項１２７】
前記治療法が、ＰＤ−１アンタゴニスト、ＣＴＬＡ−４アンタゴニスト、ＬＡＧ−３アンタゴニスト、ＴＩＭ−３アンタゴニスト及び／又はＴＩＧＩＴアンタゴニストなどの１つ又は複数のチェックポイント分子阻害剤（アンタゴニスト）を投与することを含む、請求項１２６に記載の方法。
【請求項１２８】
前記治療法が、ＧＩＴＲアゴニスト、ＣＤ２７アゴニスト、４−１ＢＢアゴニスト、ＯＸ４０アゴニスト、ＣＤ１３７アゴニスト、ＩＣＯＳアゴニスト又はＣＤ２８アゴニストなどの１つ又は複数の共刺激分子活性化剤（アゴニスト）を投与することを含む、請求項１２６に記載の方法。
【請求項１２９】
前記治療法が、ＶＥＧＦＲ若しくはＶＥＧＦアンタゴニスト、ＥＧＦＲ若しくはＥＧＦアンタゴニスト、ＩＤＯ阻害剤、ＩＤＯ１阻害剤、ＨＤＡＣ阻害剤、ＰＩ３Ｋδ阻害剤、ＩＬ−１５アゴニスト、ＣＸＣＲ４アンタゴニスト、ＣＸＣＬ１２アンタゴニスト、ＤＮＭＴ阻害剤、インターロイキン−２１、抗ＫＩＲ抗体、抗ＣＳＦ−１Ｒ抗体、抗ＣＣＲ４抗体、ＧＭＣＳＦ、抗ＰＳ抗体、抗ＣＤ３０抗体−オーリスタチンＥコンジュゲート、抗ＣＤ１９抗体、抗ＣＥＡ−ＩＬ−２抗体、抗ＮＹ−ＥＳＯ−１抗体、抗ＮＫＧ２Ａ抗体、ＳＴＩＮＧアゴニスト、ＴＲＬ７／８アゴニスト、ＲＩＧ−１アゴニスト及び／又はＮＲＬＰ３阻害剤、又は抗ＣＤ７３抗体（ＭＥＤＩ９４４７など）のうちの１つ又は複数を投与することを含む、請求項１２６に記載の方法。
【請求項１３０】
前記抗ＣＤ３９抗体が、腫瘍ワクチン、養子細胞療法、抗腫瘍遺伝子療法、又は腫瘍溶解ウイルス療法を含む治療法の一部として投与される、請求項１４に記載の方法。
【請求項１３１】
前記抗ＣＤ３９抗体が、ＩｇＧ１又はＩｇＧ３アイソタイプである、請求項３０に記載の方法。
【請求項１３２】
前記抗ＣＤ３９抗体が、低フコシル化又は脱フコシル化されている、請求項３０に記載の方法。
【請求項１３３】
前記抗ＣＤ３９抗体が、ＣＤ４５＋免疫細胞上のＣＤ３９の抗体媒介性標的膜動輸送を引き起こす、請求項３０に記載の方法。
【請求項１３４】
前記抗ＣＤ３９抗体が、腫瘍抗原、免疫チェックポイント又は共刺激受容体に対する少なくとも１つの追加の抗原結合部位を含む二重特異性抗体であり、該追加の抗原結合部位が免疫チェックポイントに対するものである場合に該抗体はチェックポイント阻害剤として機能し、該追加の抗原結合部位が共刺激受容体に対するものである場合に該抗体は共刺激アゴニストとして機能する、請求項３０に記載の方法。
【請求項１３５】
追加の抗原結合部位が、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＣＴＬＡ−４／Ｂ７−１／Ｂ７−２、ＰＤ−Ｌ２、ＮＫＧ２Ａ、ＫＩＲ、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ−３、ＣＤ９６、ＶＩＳＴＡ、及びＴＩＧＩＴからなる群より選択されるチェックポイントタンパク質に結合する、請求項１３４に記載の方法。
【請求項１３６】
追加の抗原結合部位が、Ｔ細胞上で発現上昇し且つＴ細胞疲弊に関連するチェックポイントタンパク質に結合する、請求項１３５に記載の方法。
【請求項１３７】
追加の抗原結合部位が、ＭＨＣＩ分子、ＢＴＬＡ受容体、ＯＸ４０、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤＳ、ＩＣＡＭ−１、ＬＦＡ−１（ＣＤ１１ａ／ＣＤ１８）、ＩＣＯＳ（ＣＤ２７８）、及び４−１ＢＢ（ＣＤ１３７）からなる群より選択される免疫共刺激受容体に結合する、請求項１３５に記載の方法。
【請求項１３８】
前記抗ＣＤ３９抗体が、膵臓がん、肝臓がん、肺がん、胃がん、食道がん、頭頸部扁平上皮がん、前立腺がん、結腸がん、乳がん、リンパ腫、胆嚢がん、腎臓がん、多発性骨髄腫、卵巣がん、子宮頸がん又は神経膠腫などの固形腫瘍を治療するための抗腫瘍療法の一部として投与される、請求項３０に記載の方法。
【請求項１３９】
前記抗ＣＤ３９抗体が、白血病などの液性腫瘍を治療するための抗腫瘍療法の一部として投与される、請求項３０に記載の方法。
【請求項１４０】
前記抗ＣＤ３９抗体が、１つ又は複数の化学療法剤、血管新生阻害剤、腫瘍免疫療法剤、低体温療法及び／又は放射線照射を伴う治療法の一部として投与される、請求項３０に記載の方法。
【請求項１４１】
前記治療法が、ＰＤ−１アンタゴニスト、ＰＤ−Ｌ１アンタゴニスト、ＣＴＬＡ−４アンタゴニスト、ＬＡＧ−３アンタゴニスト、ＴＩＭ−３アンタゴニスト及び／又はＴＩＧＩＴアンタゴニストなどの１つ又は複数のチェックポイント分子阻害剤（アンタゴニスト）を投与することを含む、請求項１４０に記載の方法。
【請求項１４２】
前記治療法が、ＧＩＴＲアゴニスト、ＣＤ２７アゴニスト、４−１ＢＢアゴニスト、ＯＸ４０アゴニスト、ＣＤ１３７アゴニスト、ＩＣＯＳアゴニスト又はＣＤ２８アゴニストなどの１つ又は複数の共刺激分子活性化剤（アゴニスト）を投与することを含む、請求項１４０に記載の方法。
【請求項１４３】
前記治療法が、ＶＥＧＦＲ若しくはＶＥＧＦアンタゴニスト、ＥＧＦＲ若しくはＥＧＦアンタゴニスト、ＩＤＯ阻害剤、ＩＤＯ１阻害剤、ＨＤＡＣ阻害剤、ＰＩ３Ｋδ阻害剤、ＩＬ−１５アゴニスト、ＣＸＣＲ４アンタゴニスト、ＣＸＣＬ１２アンタゴニスト、ＤＮＭＴ阻害剤、インターロイキン−２１、抗ＫＩＲ抗体、抗ＣＳＦ−１Ｒ抗体、抗ＣＣＲ４抗体、ＧＭＣＳＦ、抗ＰＳ抗体、抗ＣＤ３０抗体−オーリスタチンＥコンジュゲート、抗ＣＤ１９抗体、抗ＣＥＡ−ＩＬ−２抗体、抗ＮＹ−ＥＳＯ−１抗体、抗ＮＫＧ２Ａ抗体、ＳＴＩＮＧアゴニスト、ＴＲＬ７／８アゴニスト、ＲＩＧ−１アゴニスト、Ｐ２Ｘ７アンタゴニスト、抗ＣＤ７３抗体（ＭＥＤＩ９４４７など）及び／又はアデノシンＡ２ａ受容体アンタゴニストのうちの１つ又は複数を投与することを含む、請求項１４０に記載の方法。
【請求項１４４】
前記抗ＣＤ３９抗体が、腫瘍ワクチン、養子細胞療法、抗腫瘍遺伝子療法、又は腫瘍溶解ウイルス療法を含む治療法の一部として投与される、請求項３０に記載の方法。
【請求項１４５】
ステップ（ｉ）が、腫瘍浸潤リンパ球上のＣＤ３９、ＰＤ−１、ＣＴＬＡ−４、ＴＩＭ−３、ＬＡＧ−３、ＣＤ１６０、ＢＴＬＡ、又は２Ｂ４のうちの１つ又は複数の発現上昇の程度を示す、細胞の数若しくは割合又は抗体染色の強度を検出することをさらに含む、請求項３０に記載の方法。
【請求項１４６】
前記抗ＣＤ３９抗体が、所定の閾値を超える１つ又は複数のＴ細胞疲弊マーカーを発現する、ある程度の腫瘍浸潤リンパ球を有する患者に投与され、該患者が、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）、結腸直腸がん、進行性黒色腫、腎細胞がん（ＲＣＣ）、乳がん（トリプルネガティブ乳がんを含む）、胃がん、食道がん、尿路上皮がん（ＵＣ）、又は肝細胞がん（ＨＣＣ）を有する、請求項３０に記載の方法。
【請求項１４７】
前記抗ＣＤ３９抗体が、ＩｇＧ１又はＩｇＧ３アイソタイプである、請求項４８に記載の医薬製剤。
【請求項１４８】
前記抗ＣＤ３９抗体が、低フコシル化又は脱フコシル化されている、請求項４８に記載の医薬製剤。
【請求項１４９】
前記抗ＣＤ３９抗体が、ヒト抗体又はヒト化抗体である、請求項４８に記載の医薬製剤。
【請求項１５０】
前記抗ＣＤ３９抗体が、腫瘍抗原、免疫チェックポイント又は共刺激受容体に対する少なくとも１つの追加の抗原結合部位を含む二重特異性抗体であり、該追加の抗原結合部位が免疫チェックポイントに対するものである場合に該抗体はチェックポイント阻害剤として機能し、該追加の抗原結合部位が共刺激受容体に対するものである場合に該抗体は共刺激アゴニストとして機能する、請求項４８に記載の医薬製剤。
【請求項１５１】
前記抗ＣＤ３９抗体が、固形腫瘍又は液性腫瘍を治療するための抗腫瘍療法の一部として患者に投与するために製剤化されている、請求項４８に記載の医薬製剤。
【請求項１５２】
前記抗ＣＤ３９抗体が、１つ又は複数の化学療法剤、血管新生阻害剤、及び／又は腫瘍免疫療法剤と共に製剤化されている、請求項４８に記載の医薬製剤。
【請求項１５３】
前記抗ＣＤ３９抗体が、ヒトＣＤ３９への結合についてモノクローナル抗体５Ｆ２と競合する、請求項４８に記載の医薬製剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
研究連邦政府の資金による研究に関する声明
本発明は、米国国立衛生研究所によって交付されたた助成金番号ＣＡ２２１７０２、ＣＡ１６４９７０、ＨＬ０９４４００、及びＨＬ６３９７２の下で政府の支援を受けてなされた。政府は、本発明に一定の権利を有する。
【０００２】
配列表
本出願は、その内容全体が参照により援用される、ＡＳＣＩＩ形式で電子的に提出された配列表を含む。２０１９年６月１３日に作成された前記ＡＳＣＩＩコピーは、「０１９４８−２６０ＷＯ２＿Ｓｅｑｕｅｎｃｅ＿Ｌｉｓｔｉｎｇ＿０６．１３．１９＿ＳＴ２５」と命名され、サイズは６９，６４１バイトである。
【背景技術】
【０００３】
発明の背景
腫瘍関連抗原及び腫瘍反応性免疫細胞の発見は、腫瘍抗原特異的免疫応答に基づく新規がん治療の有望性をもたらした。プログラム細胞死タンパク質１（ＰＤ１）、ＰＤ１リガンド１（ＰＤ１１）、及び細胞傷害性Ｔリンパ球抗原４（ＣＴＬＡ４）に対する阻害抗体に基づく、進行性がんにおける免疫療法の成功にもかかわらず、かなりの割合の患者がこれらの治療法に応答しないままである（生得的抵抗として知られている）。さらに、患者の３分の１は初期応答後に再発する（適応抵抗として知られている）。成功裏のがん免疫療法を妨げているのは、腫瘍の微小環境内に共存する複数の非冗長な免疫抑制機構の発生である。
【０００４】
細胞外アデノシンは、免疫機能の阻害剤として知られている。細胞内アデノシンがエネルギー代謝、核酸代謝、及びメチオニンサイクルに関与している一方で、細胞外アデノシンは細胞間シグナル伝達に重要な役割を果たしている。その信号は細胞表面のＧタンパク質共役型アデノシン受容体によって伝達され、神経学的、心血管系、及び免疫系をはじめとする多様な生理学的機能に影響を及ぼす。アデノシンの細胞外濃度は、代謝の変化に応じて増加し得る。細胞が栄養素又は酸素を奪われた場合、不十分なＡＴＰの生合成は、ＡＴＰ／アデノシン比を低下させる傾向がある。ＡＴＰの消費を抑えるために、細胞は大量の細胞成分の生合成を必要とする細胞増殖などのエネルギー消費活動を中断することもある。
【０００５】
アデノシンＡ２Ａ受容体（Ａ２ＡＲ）を通じた免疫抑制性アデノシン３’５’−一リン酸（ｃＡＭＰ）媒介経路シグナル伝達は、低酸素性、炎症性、及びがん性微小環境内でＴリンパ球及びナチュラルキラー（ＮＫ）細胞を抑制し得る。さらに、アデノシン産生経路ＣＤ３９／ＣＤ７３をブロックすることで、乳がん、結腸直腸がん、及び黒色腫動物モデルの退縮を誘導する。しかし、炎症及び炎症性／自己免疫疾患の憎悪などの有害な影響の可能性があるため、Ａ２ＡＲ阻害剤の使用は、がん患者への投薬制限／段階的縮小又は薬物の中止にさえ至る有害事象状態を引き起こす、望ましくない全身的影響を有し得る。これらの細胞表面アデノシン産生酵素（「エクトヌクレオチダーゼ」）との結合を通じたアデノシンへのＡＴＰ異化作用の阻害に主眼を置いた、抗ＣＤ３９抗体及び抗ＣＤ７３抗体療法の場合、全身的な副作用のリスクがあるだけでなく、抗体はこれらの細胞表面タンパク質が有することもある活性の全範囲には対処しない。これは、かなりの割合の患者において、腫瘍免疫療法（抗ＰＤ−１など）に対する抵抗性に寄与し得る、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）における疲弊Ｔ細胞の産生が上方制御された場合に、特に明らかである。したがって、新たな治療法が必要とされている。
【発明の概要】
【０００６】
本発明は、ＣＤ３９などのエクトヌクレオシド三リン酸ジホスホヒドロラーゼに対する特定の抗体が、ＣＤ４５＋免疫細胞上のＣＤ３９の抗体媒介性標的膜動輸送（除去）のプロセスを通じて、Ｔ細胞疲弊を予防又は解除し、免疫応答を増強できるという発見に基づく。
【０００７】
本発明の一態様は、エクトヌクレオシド三リン酸ジホスホヒドロラーゼ−１（「ＣＤ３９」）に結合する抗原結合ドメインと、ＦｃγＲＩＩＩａに結合するＦｃγＲＩＩＩａ結合部分とを含む抗ＣＤ３９剤の医薬組成物の有効量を対象に投与することを含む、それを必要とする対象におけるＴ細胞疲弊を低減するための方法及び治療薬を提供し、この抗体の投与は、ＣＤ４５＋免疫細胞上の検出可能なＣＤ３９レベルの低下をもたらす。
【０００８】
特定の実施形態では、ＦｃγＲＩＩＩａ結合部分は、Ｆｃドメイン、ＦｃγＲＩＩＩａに結合する抗体又はその断片、及びＦｃγＲＩＩＩａ結合ペプチドから選択される。
【０００９】
特定の実施形態では、抗原結合ドメインは、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ又は一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。
【００１０】
特定の実施形態では、抗ＣＤ３９剤は、ＣＤ４５＋免疫細胞上のＣＤ３９の抗体媒介性標的膜動輸送をもたらす。特定の実施形態では、抗ＣＤ３９剤は、腫瘍内の疲弊Ｔ細胞（例えば、Ｔ細胞疲弊について表現型であるＴ細胞）の割合を減少させる。
【００１１】
特定の実施形態では、抗ＣＤ３９剤は、腫瘍血管内皮からのＣＤ３９の抗体媒介性標的膜動輸送をもたらす。特定の実施形態では、抗ＣＤ３９剤は、血管新生阻害性であるか、又はそうでなければ腫瘍内の血管網を破壊するか若しくは崩壊させる。
【００１２】
特定の実施形態では、抗ＣＤ３９剤は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３、５、７、９又は１１の可変領域と少なくとも６０％（例えば、７０％、８０％、９０％、９５％、９７％、９９％、又は１００％）同一である重鎖可変領域、及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４、６、８、１０又は１２の可変領域と少なくとも６０％（例えば、７０％、８０％、９０％、９５％、９７％、９９％、又は１００％）同一である軽鎖可変領域を含む抗体又はその抗原結合断片であり、該抗体はヒトＣＤ３９に特異的に結合できる。
【００１３】
特定の実施形態では、抗ＣＤ３９剤は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３、５、７、９又は１１のＣＤＲと少なくとも６０％（例えば、７０％、８０％、９０％、９５％、９７％、９９％、又は１００％）同一であるＣＤＲを有する重鎖、及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４、６、８、１０又は１２のＣＤＲと少なくとも６０％（例えば、７０％、８０％、９０％、９５％、９７％、９９％、又は１００％）同一であるＣＤＲを有する軽鎖を含む抗体又はその抗原結合断片であであり、該抗体はヒトＣＤ３９に特異的に結合できる。
【００１４】
特定の実施形態では、抗ＣＤ３９剤は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３のＣＤＲを有する重鎖及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４のＣＤＲを有する軽鎖と、ヒトＣＤ３９に特異的に結合できる抗原結合部位を有するヒト化重鎖及び軽鎖を形成するためのヒトフレームワーク配列とを含む、抗体又はその抗原結合断片である。
【００１５】
特定の実施形態では、抗ＣＤ３９剤は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５のＣＤＲを有する重鎖及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６のＣＤＲを有する軽鎖と、ヒトＣＤ３９に特異的に結合できる抗原結合部位を有するヒト化重鎖及び軽鎖を形成するためのヒトフレームワーク配列とを含む、抗体又はその抗原結合断片である。
【００１６】
特定の実施形態では、抗ＣＤ３９剤は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７のＣＤＲを有する重鎖及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８のＣＤＲを有する軽鎖と、ヒトＣＤ３９に特異的に結合できる抗原結合部位を有するヒト化重鎖及び軽鎖を形成するためのヒトフレームワーク配列とを含む抗体である。
【００１７】
特定の実施形態では、抗ＣＤ３９剤は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９のＣＤＲを有する重鎖及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０のＣＤＲを有する軽鎖と、ヒトＣＤ３９に特異的に結合できる抗原結合部位を有するヒト化重鎖及び軽鎖を形成するためのヒトフレームワーク配列とを含む抗体である。
【００１８】
特定の実施形態では、抗ＣＤ３９剤は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１のＣＤＲを有する重鎖及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２のＣＤＲを有する軽鎖と、ヒトＣＤ３９に特異的に結合できる抗原結合部位を有するヒト化重鎖及び軽鎖を形成するためのヒトフレームワーク配列とを含む抗体である。
【００１９】
特定の実施形態では、抗ＣＤ３９剤は、抗腫瘍療法の一部として投与される。
【００２０】
特定の実施形態では、抗ＣＤ３９剤は、抗ウイルス療法（ＨＩＶ及びＨＢＶ感染症の治療を含む）、マイコバクテリウム・ツベルクローシス（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）の治療、及び内臓リーシュマニア症の治療などの抗感染療法の一部として投与される。
【００２１】
本発明の別の態様は、エクトヌクレオシド三リン酸ジホスホヒドロラーゼ−１（「ＣＤ３９」）に結合する抗ＣＤ３９抗体を、腫瘍を有するヒト患者に投与することを含み、その抗体がＦｃγＲＩＩＩａに結合し、抗体依存性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）を保持し、抗体のヒト患者への投与が、腫瘍内の免疫細胞上のＣＤ３９の発現の減少をもたらす、抗腫瘍免疫応答を促進するための方法及び治療剤を提供する。
【００２２】
特定の実施形態では、抗ＣＤ３９抗体は、ＣＤ４５＋免疫細胞上のＣＤ３９の抗体媒介性標的膜動輸送をもたらす。特定の実施形態では、抗ＣＤ３９剤は、腫瘍内の疲弊Ｔ細胞（例えば、Ｔ細胞疲弊について表現型であるＴ細胞）の百分率を（例えば、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、又は１００％）低下させる。
【００２３】
特定の実施形態では、抗ＣＤ３９剤は、腫瘍血管内皮からのＣＤ３９の抗体媒介性標的膜動輸送をもたらす。特定の実施形態では、抗ＣＤ３９剤は、血管新生阻害性であるか、又はそうでなければ腫瘍内の血管網を破壊するか若しくは崩壊させる。
【００２４】
特定の実施形態では、抗ＣＤ３９抗体は、ＩｇＧ１又はＩｇＧ３アイソタイプである。
【００２５】
特定の実施形態では、抗ＣＤ３９抗体は、低フコシル化又は脱フコシル化されている。
【００２６】
特定の実施形態では、抗ＣＤ３９抗体は、ヒト抗体又はヒト化抗体である。
【００２７】
特定の実施形態では、抗ＣＤ３９抗体（又はより一般的には、抗ＣＤ３９剤）は、腫瘍抗原、免疫チェックポイント又は共刺激受容体のための少なくとも１つの追加の抗原結合部位を含む、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体（又は多重特異性抗ＣＤ３９剤）であり、追加の抗原結合部位が免疫チェックポイントに対するものである場合、それはチェックポイント阻害剤として機能し、追加の抗原結合部位が共刺激受容体に対するものである場合、それは共刺激アゴニストとして機能する。例えば、追加の抗原結合部位は、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＣＴＬＡ−４／Ｂ７−１／Ｂ７−２、ＰＤ−Ｌ２、ＮＫＧ２Ａ、ＫＩＲ、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ−３、ＣＤ９６、ＶＩＳＴＡ、及びＴＩＧＩＴからなる群より選択されるものなどのチェックポイントタンパク質に結合するものであり得て、追加の抗原結合部位は、チェックポイント阻害剤である。特定の好ましい実施形態では、追加の抗原結合部位は、Ｔ細胞上で発現上昇し且つＴ細胞疲弊に関連するチェックポイントタンパク質に結合する。追加の抗原結合部位はまた、ＭＨＣＩ分子、ＢＴＬＡ受容体、ＯＸ４０、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤＳ、ＩＣＡＭ−１、ＬＦＡ−１（ＣＤ１１ａ／ＣＤ１８）、ＩＣＯＳ（ＣＤ２７８）、及び４−１ＢＢ（ＣＤ１３７）からなる群より選択されるものなどの免疫共刺激受容体に結合するものであり得て、追加の抗原結合部位は、共刺激アゴニストである。
【００２８】
特定の実施形態では、抗ＣＤ３９抗体（又はより一般的には、抗ＣＤ３９剤）は、固形腫瘍又は液性腫瘍を治療するための抗腫瘍療法の一部として投与される。主題の方法によって治療され得る例示的な固形腫瘍としては、膵臓がん、肝臓がん、肺がん、胃がん、食道がん、頭頸部扁平上皮がん、前立腺がん、結腸がん、乳がん、リンパ腫、胆嚢がん、腎臓がん、多発性骨髄腫、卵巣がん、子宮頸がん又は神経膠腫が挙げられる。主題の方法によって治療され得る例示的な液性腫瘍としては、骨髄性又は顆粒球性白血病、リンパ性白血病、リンパ球性白血病、又はリンパ芽球性白血病などの白血病、及び真性多血症又は赤血球血症が挙げられる。
【００２９】
抗ＣＤ３９抗体などの抗ＣＤ３９剤は、１つ又は複数の化学療法剤、血管新生阻害剤、腫瘍免疫療法剤及び／又は放射線照射を伴う治療法の一部として投与され得る。例示的なチェックポイント分子阻害剤（例えば、アンタゴニスト）としては、ＰＤ−１アンタゴニスト、ＰＤ−Ｌ１アンタゴニスト、ＣＴＬＡ−４アンタゴニスト、ＬＡＧ−３アンタゴニスト、ＴＩＭ−３アンタゴニスト、及びＴＩＧＩＴアンタゴニストが挙げられる。例示的な共刺激分子活性化剤（例えば、アゴニスト）としては、ＧＩＴＲアゴニスト、ＣＤ２７アゴニスト、４−１ＢＢアゴニスト、ＯＸ４０アゴニスト、ＣＤ１３７アゴニスト、ＩＣＯＳアゴニスト、及びＣＤ２８アゴニストが挙げられる。抗ＣＤ３９剤による治療法の一部として投与され得るその他の治療薬の例としては、ＶＥＧＦ／ＶＥＧＦＲアンタゴニスト（抗ＶＥＧＦ−２抗体様Ｃｙｒａｍｚａなど）、ＥＧＦ／ＥＧＦＲアンタゴニスト（抗ＥＧＦＲ抗体様Ｎｅｃｉｔｕｍｕｍａｂなど）、ＩＤＯ阻害剤（ＮＬＧ９１９など）又はＩＤＯ１阻害剤（Ｅｐａｃａｄｏｓｔａｔなど）、ＨＤＡＣ阻害剤（エンチノスタット（ｅｎｔｉｏｓｔａｔ）など）、ＰＩ３Ｋδ阻害剤（ＴＧＲ−１２０２など）、ＩＬ−１５アゴニスト（ＩＬ１５Ｒａ−Ｆｃ融合タンパク質ＡＬＴ−８０３など）、ＣＸＣＲ４アンタゴニスト（Ｕｌｏｃｕｐｌｕｍａｂ、Ｐｌｅｒｉｘａｆｏｒ、及びＢＬ−８０４０など）、ＣＸＣＬ１２アンタゴニスト（Ｓｐｉｅｇｅｌｍｅｒ  ＮＯＸ−Ａ１２など）、ＤＮＭＴ阻害剤（アザシチジンなど）、インターロイキン−２１、抗ＫＩＲ抗体（Ｌｉｒｉｌｕｍａｂなど）、抗ＣＳＦ−１Ｒ抗体（ＦＰＡ００８又はＲＯ５５０９５５４など）、抗ＣＣＲ４抗体（Ｍｏｇａｍｕｌｉｚｕｍａｂなど）、ＧＭＣＳＦ（サルグラモスチム（ｓａｒｇａｍｏｓｔｉｍ）など）、抗ＰＳ抗体（Ｂａｖｉｔｕｘｉｍａｂなど）、抗ＣＤ３０抗体−オーリスタチン（ａｕｒｓｔａｔｉｎ）Ｅコンジュゲート（Ａｄｃｅｔｒｉｓなど）、抗ＣＤ１９抗体（ＭＥＤＩ−５５１など）、抗ＣＥＡ  ＩＬ−２抗体（ＲＧ７８１３など）、ａ抗ＮＹ−ＥＳＯ−１抗体（ＣＤＸ−１４０１など）、抗ＮＫＧ２Ａ抗体（ＩＰＨ２２０１など）、ＳＴＩＮＧアゴニスト（ＡＤＵ−Ｓ１００、ＭＫ−１４５４又はＳＢ１１２８５など）、ＴＲＬ７／８アゴニスト（ＭＥＤＩ９１９７など）、ＲＩＧ−１アゴニスト（ＲＧＴ１００など）、又は抗ＣＤ７３抗体（ＭＥＤＩ９４４７など）が挙げられる。
【００３０】
本発明の主題の方法はまた、腫瘍ワクチン、養子細胞療法（ＣＡＲ−Ｔ及びＡＣＴＲ療法を含む）、抗腫瘍遺伝子療法、阻害性核酸療法（ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、アンチセンス、ＣＲＩＳＰＲ、及びＴＡＬＥＮ療法など）又は腫瘍溶解ウイルス療法を含む治療法の一部として使用され得る。
【００３１】
本発明のなおも別の態様は、
（ｉ）所定の閾値を超える１つ又は複数のＴ細胞疲弊マーカーを発現する、腫瘍浸潤リンパ球の程度を有するがん患者を同定するステップと；
（ｉｉ）エクトヌクレオシド三リン酸ジホスホヒドロラーゼ−１（「ＣＤ３９」）とＦｃγＲＩＩＩａとに結合する抗ＣＤ３９抗体を患者に投与して、腫瘍浸潤リンパ球上の検出可能なＣＤ３９レベルを低下させ、それによってＴ細胞の疲弊を解除する、ステップと
を含む、Ｔ細胞疲弊を予防又は解除して腫瘍に対する免疫応答を増強するための方法を提供する。
【００３２】
特定の実施形態では、抗ＣＤ３９抗体は、ＣＤ４５＋免疫細胞上のＣＤ３９の抗体媒介性標的膜動輸送をもたらす。特定の実施形態では、抗ＣＤ３９剤は、腫瘍内の疲弊Ｔ細胞（例えば、Ｔ細胞疲弊について表現型であるＴ細胞）の割合を減少させる。
【００３３】
特定の実施形態では、抗ＣＤ３９剤は、腫瘍血管内皮からのＣＤ３９の抗体媒介性標的膜動輸送をもたらす。特定の実施形態では、抗ＣＤ３９剤は、血管新生阻害性であるか、又はそうでなければ腫瘍内の血管網を破壊するか若しくは崩壊させる。
【００３４】
特定の実施形態では、抗ＣＤ３９抗体は、ＩｇＧ１又はＩｇＧ３アイソタイプである。
【００３５】
特定の実施形態では、抗ＣＤ３９抗体は、低フコシル化又は脱フコシル化されている。
【００３６】
特定の実施形態では、抗ＣＤ３９抗体は、ヒト抗体又はヒト化抗体である。
【００３７】
特定の実施形態では、抗ＣＤ３９抗体は、腫瘍抗原、免疫チェックポイント又は共刺激受容体に対する少なくとも１つの追加の抗原結合部位を含む多重特異性（例えば、二重特異性）抗体であり、追加の抗原結合部位が免疫チェックポイントに対するものである場合、それはチェックポイント阻害剤として機能し、追加の抗原結合部位が共刺激受容体に対するものである場合、それは共刺激アゴニストとして機能する。例えば、追加の抗原結合部位は、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＣＴＬＡ−４／Ｂ７−１／Ｂ７−２、ＰＤ−Ｌ２、ＮＫＧ２Ａ、ＫＩＲ、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ−３、ＣＤ９６、ＶＩＳＴＡ、及びＴＩＧＩＴからなる群より選択されるものなどのチェックポイントタンパク質に結合するものであり得て、追加の抗原結合部位は、チェックポイント阻害剤である。特定の好ましい実施形態では、追加の抗原結合部位は、Ｔ細胞上で発現上昇し且つＴ細胞疲弊に関連するチェックポイントタンパク質に結合する。追加の抗原結合部位はまた、ＭＨＣＩ分子、ＢＴＬＡ受容体、ＯＸ４０、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤＳ、ＩＣＡＭ−１、ＬＦＡ−１（ＣＤ１１ａ／ＣＤ１８）、ＩＣＯＳ（ＣＤ２７８）、及び４−１ＢＢ（ＣＤ１３７）からなる群より選択されるものなどの免疫共刺激受容体に結合するものであり得て、追加の抗原結合部位は、共刺激アゴニストである。
【００３８】
特定の実施形態では、抗ＣＤ３９抗体は、例えば、固形腫瘍又は液性腫瘍などの腫瘍を治療するための抗腫瘍療法の一部として投与される。主題の方法によって治療され得る例示的な固形腫瘍としては、肉腫、がん腫、及びリンパ腫、などの（ｓｕｃｈ  ａｓ）膵臓がん、肝臓がん、肺がん、胃がん、食道がん、頭頸部扁平上皮がん、前立腺がん、結腸がん、乳がん、リンパ腫、胆嚢がん、腎臓がん、多発性骨髄腫、卵巣がん、子宮頸がん、及び神経膠腫、並びにリンパ腫（ホジキンリンパ腫及び非ホジキンリンパ腫の双方）が挙げられる。主題の方法によって治療され得る例示的な液性腫瘍としては、骨髄性又は顆粒球性白血病、リンパ性白血病、リンパ球性白血病、又はリンパ芽球性白血病などの白血病、及び真性多血症又は赤血球血症が挙げられる。
【００３９】
抗ＣＤ３９抗体は、１つ又は複数の化学療法剤、血管新生阻害剤、腫瘍免疫療法剤及び／又は放射線照射を伴う治療法の一部として投与され得る。例示的なチェックポイント分子阻害剤（アンタゴニスト）としては、ＰＤ−１アンタゴニスト、ＰＤ−Ｌ１アンタゴニスト、ＣＴＬＡ−４アンタゴニスト、ＬＡＧ−３アンタゴニスト、ＴＩＭ−３アンタゴニスト、及びＴＩＧＩＴアンタゴニストが挙げられる。例示的な共刺激分子活性化剤（アゴニスト）としては、ＧＩＴＲアゴニスト、ＣＤ２７アゴニスト、４−１ＢＢアゴニスト、ＯＸ４０アゴニスト、ＣＤ１３７アゴニスト、ＩＣＯＳアゴニスト、及びＣＤ２８アゴニストが挙げられる。抗ＣＤ３９剤による治療法の一部として投与され得るその他の治療薬の例としては、ＶＥＧＦＲ／ＶＥＧＦアンタゴニスト、ＥＧＦＲ／ＥＧＦアンタゴニスト、ＩＤＯ阻害剤（ＩＤＯ１及びＩＤＯ２阻害剤を含む）、ＨＤＡＣ阻害剤、ＰＩ３Ｋδ阻害剤、ＩＬ−１５アゴニスト、ＣＸＣＲ４アンタゴニスト、ＣＸＣＬ１２アンタゴニスト、ＤＮＭＴ阻害剤、インターロイキン−２１、抗ＫＩＲ抗体、抗ＣＳＦ−１Ｒ抗体、抗ＣＣＲ４抗体、ＧＭＣＳＦ、抗ＰＳ抗体、抗ＣＤ３０抗体薬物（例えば、オーリスタチンＥ）コンジュゲート、抗ＣＤ１９抗体、抗ＣＥＡ−ＩＬ−２抗体、抗ＮＹ−ＥＳＯ−１抗体、抗ＮＫＧ２Ａ抗体、ＳＴＩＮＧアゴニスト、ＴＲＬ７／８アゴニスト、ＲＩＧ−１アゴニスト、抗ＣＤ７３抗体、Ｐ２Ｘ７アンタゴニスト、及びアデノシンＡ２ａ受容体アンタゴニストが挙げられる。
【００４０】
本発明の主題の方法はまた、腫瘍ワクチン、養子細胞療法（ＣＡＲ−Ｔ及びＡＣＴＲ療法を含む）、抗腫瘍遺伝子療法、阻害性核酸療法（ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、アンチセンス、ＣＲＩＳＰＲ、及びＴＡＬＥＮ療法など）又は腫瘍溶解ウイルス療法を含む治療法の一部として使用され得る。
【００４１】
特定の実施形態では、ステップ（ｉ）は、腫瘍浸潤性リンパ球上のＣＤ３９、ＰＤ−１、ＣＴＬＡ−４、ＴＩＭ−３、ＬＡＧ−３、ＣＤ１６０、ＢＴＬＡ、又は２Ｂ４のうちの１つ又は複数の発現上昇の程度を示す、細胞の数若しくは割合（％）又は抗体染色の強度を検出することをさらに含む。これらの実施形態では、他のＴ細胞疲弊マーカーの発現上昇の状態を使用して、抗ＣＤ３９抗体の投与を受けるための患者の適格性が判定され得て、例えば、所定の閾値を超える１つ又は複数のＴ細胞疲弊マーカーを発現するある程度の腫瘍浸潤リンパ球を有する患者に抗体が投与される。このようなＴ細胞疲弊マーカーは、例えば、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）、結腸直腸がん、進行性黒色腫、腎細胞がん（ＲＣＣ）、乳がん（トリプルネガティブ乳がんを含む）、胃がん、食道がん、尿路上皮がん（ＵＣ）、又は肝細胞がん（ＨＣＣ）に罹患している患者でよく見られる。
【００４２】
本発明のなおも別の態様は、投与されると（ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｏｒｓ）、ＣＤ４５＋免疫細胞上の検出可能なＣＤ３９レベルの低下をもたらし、Ｔ細胞疲弊又はＴ細胞アネルギーを示すＴ細胞のＴ細胞機能を回復するのに効果的である、エクトヌクレオシド三リン酸ジホスホヒドロラーゼ−１（「ＣＤ３９」）に結合し且つＦｃγＲＩＩＩａに結合する、抗体の治療有効量を含む、それを必要とする対象におけるＴ細胞疲弊を低減する医薬製剤を提供する。
【００４３】
特定の実施形態では、抗ＣＤ３９抗体は、ＣＤ４５＋免疫細胞上のＣＤ３９の抗体媒介性標的膜動輸送をもたらす。特定の実施形態では、抗ＣＤ３９剤は、腫瘍内の疲弊Ｔ細胞（例えば、Ｔ細胞疲弊について表現型であるＴ細胞）の割合を減少させる。
【００４４】
特定の実施形態では、抗ＣＤ３９剤は、腫瘍血管内皮からのＣＤ３９の抗体媒介性標的膜動輸送をもたらす。特定の実施形態では、抗ＣＤ３９剤は、血管新生阻害性であるか、又はそうでなければ腫瘍内の血管網を破壊するか若しくは崩壊させる。
【００４５】
特定の実施形態では、抗ＣＤ３９抗体は、ＩｇＧ１又はＩｇＧ３アイソタイプである。
【００４６】
特定の実施形態では、抗ＣＤ３９抗体は、低フコシル化又は脱フコシル化されている。
【００４７】
特定の実施形態では、抗ＣＤ３９抗体は、ヒト抗体又はヒト化抗体である。
【００４８】
特定の実施形態では、抗ＣＤ３９抗体は、腫瘍抗原、免疫チェックポイント又は共刺激受容体に対する少なくとも１つの追加の抗原結合部位を含む多重特異性（例えば、二重特異性）抗体であり、追加の抗原結合部位が免疫チェックポイントに対するものである場合、それはチェックポイント阻害剤として機能し、追加の抗原結合部位が共刺激受容体に対するものである場合、それは共刺激アゴニストとして機能する。例えば、追加の抗原結合部位は、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＣＴＬＡ−４／Ｂ７−１／Ｂ７−２、ＰＤ−Ｌ２、ＮＫＧ２Ａ、ＫＩＲ、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ−３、ＣＤ９６、ＶＩＳＴＡ、及びＴＩＧＩＴからなる群より選択されるものなどのチェックポイントタンパク質に結合するものであり得て、追加の抗原結合部位は、チェックポイント阻害剤である。特定の好ましい実施形態では、追加の抗原結合部位は、Ｔ細胞上で発現上昇し且つＴ細胞疲弊に関連するチェックポイントタンパク質に結合する。追加の抗原結合部位はまた、ＭＨＣＩ分子、ＢＴＬＡ受容体、ＯＸ４０、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤＳ、ＩＣＡＭ−１、ＬＦＡ−１（ＣＤ１１ａ／ＣＤ１８）、ＩＣＯＳ（ＣＤ２７８）、及び４−１ＢＢ（ＣＤ１３７）からなる群より選択されるものなどの免疫共刺激受容体に結合するものであり得て、追加の抗原結合部位は、共刺激アゴニストである。
【００４９】
特定の実施形態では、抗ＣＤ３９抗体は、固形腫瘍又は液性腫瘍を治療するための抗腫瘍療法の一部として患者に投与するために製剤化されている。主題の方法によって治療され得る例示的な固形腫瘍又は液性腫瘍としては、膵臓がん、肝臓がん、肺がん、胃がん、食道がん、頭頸部扁平上皮がん、前立腺がん、結腸がん、乳がん、胆嚢がん、腎臓がん、多発性骨髄腫、卵巣がん、子宮頸がん、及び神経膠腫、並びにリンパ腫（ホジキンリンパ腫及び非ホジキンリンパ腫の双方）が挙げられる。主題の方法によって治療され得る例示的な液性腫瘍としては、骨髄性又は顆粒球性白血病、リンパ性白血病、リンパ球性白血病、又はリンパ芽球性白血病などの白血病、及び真性多血症又は赤血球血症が挙げられる。
【００５０】
特定の実施形態では、抗ＣＤ３９抗体は、１つ又は複数の化学療法剤、血管新生阻害剤、腫瘍免疫療法剤及び／又は放射線照射との同時投与のためのキットと共に製剤化され得て、又はその中に存在し得る。例示的なチェックポイント分子阻害剤（アンタゴニスト）としては、ＰＤ−１アンタゴニスト、ＰＤ−Ｌ１アンタゴニスト、ＣＴＬＡ−４アンタゴニスト、ＬＡＧ−３アンタゴニスト、ＴＩＭ−３アンタゴニスト、及びＴＩＧＩＴアンタゴニストが挙げられる。例示的な共刺激分子活性化剤（アゴニスト）としては、ＧＩＴＲアゴニスト、ＣＤ２７アゴニスト、４−１ＢＢアゴニスト、ＯＸ４０アゴニスト、ＣＤ１３７アゴニスト、ＩＣＯＳアゴニスト、及びＣＤ２８アゴニストが挙げられる。抗ＣＤ３９剤による治療法の一部として投与され得るその他の治療薬の例としては、ＶＥＧＦＲ／ＶＥＧＦアンタゴニスト、ＥＧＦＲ／ＥＧＦアンタゴニスト、ＩＤＯ阻害剤（ＩＤＯ１及びＩＤＯ２阻害剤を含む）、ＨＤＡＣ阻害剤、ＰＩ３Ｋδ阻害剤、ＩＬ−１５アゴニスト、ＣＸＣＲ４アンタゴニスト、ＣＸＣＬ１２アンタゴニスト、ＤＮＭＴ阻害剤、インターロイキン−２１、抗ＫＩＲ抗体、抗ＣＳＦ−１Ｒ抗体、抗ＣＣＲ４抗体、ＧＭＣＳＦ、抗ＰＳ抗体、抗ＣＤ３０抗体薬物（例えば、オーリスタチンＥ）コンジュゲート、抗ＣＤ１９抗体、抗ＣＥＡ−ＩＬ−２抗体、抗ＮＹ−ＥＳＯ−１抗体、抗ＮＫＧ２Ａ抗体、ＳＴＩＮＧアゴニスト、ＴＲＬ７／８アゴニスト、ＲＩＧ−１アゴニスト、抗ＣＤ７３抗体、Ｐ２Ｘ７アンタゴニスト、及びアデノシンＡ２ａ受容体アンタゴニストが挙げられる。
【００５１】
本発明の主題の方法はまた、腫瘍ワクチン、養子細胞療法（ＣＡＲ−Ｔ及びＡＣＴＲ療法を含む）、抗腫瘍遺伝子療法、阻害性核酸療法（ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、アンチセンス、ＣＲＩＳＰＲ、及びＴＡＬＥＮ療法など）又は腫瘍溶解ウイルス療法を含む治療法の一部として使用され得る。
【００５２】
特定の実施形態では、ステップ（ｉ）は、腫瘍浸潤性リンパ球上のＣＤ３９、ＰＤ−１、ＣＴＬＡ−４、ＴＩＭ−３、ＬＡＧ−３、ＣＤ１６０、ＢＴＬＡ、又は２Ｂ４のうちの１つ又は複数の発現上昇の程度を示す、細胞の数若しくは割合（％）又は抗体染色の強度を検出することをさらに含む。これらの実施形態では、他のＴ細胞疲弊マーカーの発現上昇の状態を使用して、抗ＣＤ３９抗体の投与を受けるための患者の適格性が判定され得て、例えば、所定の閾値を超える１つ又は複数のＴ細胞疲弊マーカーを発現する程度の腫瘍浸潤リンパ球を有する患者に抗体が投与される。このようなＴ細胞疲弊マーカーは、例えば、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）、結腸直腸がん、進行性黒色腫、腎細胞がん（ＲＣＣ）、乳がん（トリプルネガティブ乳がんを含む）、胃がん、食道がん、尿路上皮がん（ＵＣ）、又は肝細胞がん（ＨＣＣ）に罹患している患者でよく見られる。
【００５３】
本発明の別の態様は、投与されると、ＣＤ４５＋免疫細胞上の検出可能なＣＤ３９レベルの低下をもたらし、Ｔ細胞疲弊又はＴ細胞アネルギーを示すＴ細胞のＴ細胞機能を回復するのに効果的である、エクトヌクレオシド三リン酸ジホスホヒドロラーゼ−１（「ＣＤ３９」）に結合し且つＦｃγＲＩＩＩａに結合する、抗体の治療有効量を含む、それを必要とする対象におけるＴ細胞疲弊を低減する医薬製剤を提供する。抗体は、
ａ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３のＣＤＲを有する重鎖及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４のＣＤＲを有する軽鎖、
ｂ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５のＣＤＲを有する重鎖及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６のＣＤＲを有する軽鎖、
ｃ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７のＣＤＲを有する重鎖及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８のＣＤＲを有する軽鎖、
ｄ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９のＣＤＲを有する重鎖及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０のＣＤＲを有する軽鎖、又は
ｅ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１のＣＤＲを有する重鎖及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２のＣＤＲを有する軽鎖
を含んでもよい。
重鎖及び軽鎖は、ヒトＣＤ３９に特異的に結合できる抗原結合部位を有するヒト化重鎖及び軽鎖を形成するためのヒトフレームワーク配列をさらに含んでもよい。
【００５４】
本発明の別の態様は、ヒトＣＤ３９に特異的に結合する第１の結合部分と、腫瘍抗原、免疫チェックポイント、又は共刺激受容体に特異的に結合する第２の結合部分とを含む二重特異性抗体を提供し、追加の抗原結合部位が免疫チェックポイントに対するものである場合、それはチェックポイント阻害剤として機能し、追加の抗原結合部位が共刺激受容体に対するものである場合、それは共刺激アゴニストとして機能し、二重特異性抗体は、ＣＤ４５＋免疫細胞上のＣＤ３９の抗体媒介性標的膜動輸送を引き起こす。
【図面の簡単な説明】
【００５５】
【図１Ａ】図１Ａ−１Ｂは、抗ＣＤ３９  ５Ｆ２抗体が、マウス及びヒトのＣＤ３９陽性細胞に対してＡＤＣＣ活性を実証することを示すグラフである。ｍＣＤ３９を発現するＣＨＯ細胞（図１Ａ）又はｈＣＤ３９を発現するＲａｊｉ細胞（図１Ｂ）が、それぞれ標的細胞として使用された。ルシフェラーゼをコードするプラスミドで形質移入されたＪｕｒｋａｔ細胞がＰｒｏｍｅｇａから購入され、ｐＬｅｎｔｉＴｄＴ−ｍＦｃγＲＩＶでさらに感染させた。ＴｄＴｏｍａｔｏ陽性Ｊｕｒｋａｔ細胞がＦＡＣＳ選別され、エフェクター細胞として使用された。野生型（ＷＴ）又は脱フコシル化（Ａｆｕｃ）５Ｆ２−ｍＩｇＧ２ｃが、連続希釈濃度で添加された。バックグラウンドに対するルシフェラーゼ活性の増加倍数におけるＡＤＣＣは、抗体を標的細胞及びエフェクター細胞と６時間インキュベートした後に測定された。
【図１Ｂ】図１Ａの説明を参照。
【図２】図２Ａ−２Ｃは、５Ｆ２−ｍＩｇＧ２ｃ  ｍＡｂ処置後の個々のマウスにおけるＢ１６／Ｆ１０腫瘍増殖の動態を示す一組のグラフである。図２Ａは生理食塩水の対照を示し、図２Ｂは５Ｆ２−ｍＩｇＧ２ｃで処置された場合の腫瘍増殖を示し、図２ＣはＡｆｕｃ  ５Ｆ２−ｍＩｇＧ２ｃで処置された場合の腫瘍増殖を示す。
【図３】図３Ａ−３Ｂは、５Ｆ２−ｍＩｇＧ２ｃ  ｍＡｂ処置後における、Ｂ１６／Ｆ１０保有マウスの平均腫瘍体積（図３Ａ）及び腫瘍重量（図３Ｂ）を示す一組のグラフである。
【図４】図４Ａ−４Ｂは、ＷＴ  ５Ｆ２−ｍＩｇＧ１  ｍＡｂ処置後の個々のマウスにおける、Ｂ１６／Ｆ１０腫瘍増殖の論動態を示す一組のグラフである。図４Ａは生理食塩水の対照を示し、図４ＢはＷＴ  ５Ｆ２−ｍＩｇＧ１で処置された場合の腫瘍増殖を示す。
【図５】図５Ａ−５Ｂは、ＷＴ  ５Ｆ２−ｍＩｇＧ１  ｍＡｂ処置後における、Ｂ１６／Ｆ１０保有マウスの平均腫瘍体積（図５Ａ）及び腫瘍重量（図５Ｂ）を示す一組のグラフである。
【図６】図６Ａ−６Ｄは、様々なタイプの５Ｆ２  ｍＡｂ処置後の個々のマウスにおける、Ｂ１６／Ｆ１０長腫瘍増殖の動態を示す一組のグラフである。図６ＡはＷＴ  ５Ｆ２−ｍＩｇＧ１で処置された場合の腫瘍増殖を示し、図６ＢはＡｆｕｃ  ５Ｆ２−ｍＩｇＧ１で処置された場合の腫増殖を示し、図６Ｃは５Ｆ２−ｍＩｇＧ２ｃで処置された場合の腫瘍増殖を示し、図６ＤはＡｆｕｃ  ５Ｆ２−ｍＩｇＧ２ｃで処置された場合の腫瘍増殖を示す。
【図７】５Ｆ２  ｍＡｂ処置後における、Ｂ１６／Ｆ１０保有マウスの平均腫瘍体積を示すグラフである。
【図８】５Ｆ２  ｍＡｂ処置後における、Ｂ１６／Ｆ１０保有マウスの生存率（安楽死までの時間）を示すグラフである。
【図９】図９Ａ−９Ｂは、Ａｆｕｃ  ５Ｆ２−ｍＩｇＧ２ｃ  ｍＡｂ処置後（図９Ｂ）又は生理食塩水処置後（図９Ａ）の個々のマウスにおける、Ｂ１６／Ｆ１０腫瘍増殖の動態を示す一組のグラフである。
【図１０】Ａｆｕｃ  ５Ｆ２−ｍＩｇＧ２ｃ  ｍＡｂ処置後における、Ｂ１６／Ｆ１０保有マウスの平均腫瘍体積を示すグラフである。
【図１１】Ａｆｕｃ  ５Ｆ２−ｍＩｇＧ２ｃ  ｍＡｂ処置後における、Ｂ１６／Ｆ１０保有マウスの生存率（安楽死までの時間）を示すグラフである。
【図１２】図１２Ａは、３回のＡｆｕｃ  ５Ｆ２−ｍＩｇＧ２ｃ  ｍＡｂ処置を受けたＢ１６／Ｆ１０保有マウスの平均腫瘍体積を示すグラフである。０日目に、１．６×１０５個のｌｕｃ−Ｂ１６／Ｆ１０細胞が、野生型ＦｏｘＰ３−ＧＦＰノックインレポーターマウス（１６〜１８週齢の雌；施設内）の右下脇腹に注射された（ｓ．ｃ．）。９日目、１３日目、及び１６日目に、Ａｆｕｃ  ５Ｆ２−ｍＩｇＧ２ｃ  ｍＡｂ（ｉ．ｐ．を介した２００μｌの生理食塩水中の２００μｇ）が、腫瘍保有マウスに投与された（マウスは腫瘍体積に基づいて２つのグループに無作為化された）。２００μｌの生理食塩水を投与されたマウスが、対照の役割を果たした。腫瘍体積は上記のように測定され、１７日目に試験を終了した。群当たりｎ＝３。図１２Ｂは、２回のＡｆｕｃ  ５Ｆ２−ｍＩｇＧ２ｃ  ｍＡｂ処置を受けたＢ１６／Ｆ１０保有マウスの平均腫瘍体積を示すグラフである。０日目に、１．０×１０５個のｌｕｃ−Ｂ１６／Ｆ１６細胞が、野生型ＦｏｘＰ３−ＧＦＰノックインレポーターマウス（８週齢の雌；施設内）の右下脇腹に注射された（ｓ．ｃ．）。１３日目及び１６日目に、Ａｆｕｃ  ５Ｆ２−ｍＩｇＧ２ｃ  ｍＡｂ（ｉ．ｐ．を介した２００μｌの生理食塩水中の２００μｇ）が、腫瘍保有マウスに投与された（マウスは腫瘍体積に基づいて２つのグループに無作為化された）。２００μｌの生理食塩水を投与されたマウスが、対照として使用された。腫瘍体積が上記のように測定され、１７日目に試験を終了した。群当たりｎ＝４〜５。
【図１３】図１３Ａ−１３Ｄは、Ａｆｕｃ  ５Ｆ２−ｍＩｇＧ２ｃ  ｍＡｂ処置後の個々のマウスにおける、ＭＣ３８腫瘍増殖の動態を示す一組のグラフである。マウスは、雄又は雌のどちらかであった（図１３Ｂ及び１３Ｄ）。対照は、食塩水で処置された（図１３Ａ及び図１３Ｃ）。
【図１４】図１４Ａ−１４Ｂは、Ａｆｕｃ  ５Ｆ２−ｍＩｇＧ２ｃ  ｍＡｂ処置後における、ＭＣ３８を保有する雄（図１４Ｂ）又は雌（図１４Ａ）マウスの平均腫瘍体積を示す一組のグラフである。
【図１５】Ａｆｕｃ  ５Ｆ２−ｍＩｇＧ２ｃ  ｍＡｂ処置後における、ＭＣ３８保有マウスの平均腫瘍体積を示すグラフである。
【図１６】Ａｆｕｃ  ５Ｆ２−ｍＩｇＧ２ｃ  ｍＡｂ処置後に、脾臓とは対照的に、腫瘍内でＣＤ３９発現が劇的に上昇していることを示すグラフである。
【図１７】図１７Ａ−１７Ｃは、腫瘍において、Ａｆｕｃ  ５Ｆ２−ｍＩｇＧ２ｃ  ｍＡｂ処置が、生理食塩水処置マウスと比較して、Ｔ細胞サブタイプ（ＣＤ４５＋ＣＤ３＋）、骨髄由来細胞（ＣＤ４５＋ＣＤ１１ｂ＋／又はＦ４／８０＋）（図１７Ａ及び図１７Ｂ）、並びに非リンパ球（ＣＤ４５−）（図１７Ｃ）中のＣＤ３９発現の著しい減少につながることを示す一組のグラフである。
【図１８】図１８Ａ−１８Ｂは、Ｔｒｅｇ細胞の枯渇（ＣＤ４＋ＦｏｘＰ３＋／ＣＤ４＋）（図１８Ａ）及びＦ４／８０マクロファージの増加したレベル（ＣＤ１１ｂ＋Ｆ４／８０＋／ＣＤ１１ｂ＋）（図１８Ｂ）が、Ａｆｕｃ  ５Ｆ２−ｍＩｇＧ２ｃ  ｍＡｂ処置後の腫瘍内で認められなかったことを示す一組のグラフである。
【図１９】図１９Ａ−１９Ｂは、脾臓において、生理食塩水処置マウスと比較して、Ａｆｕｃ  ５Ｆ２−ｍＩｇＧ２ｃ  ｍＡｂ処置後に、Ｔ細胞サブタイプ（ＣＤ４５＋ＣＤ３＋）（図１９Ａ）及び骨髄由来細胞（ＣＤ４５＋ＣＤ１１ｂ＋／又はＦ４／８０＋）（図１９Ｂ）上で、ＣＤ３９発現の減少が認められたことを示す一組のグラフである。
【図２０】図２０Ａ−２０Ｂは、流入領域リンパ節において、生理食塩水処置対照と比較して、Ａｆｕｃ  ５Ｆ２−ｍＩｇＧ２ｃ  ｍＡｂ処置後にＴｒｅｇ（ＣＤ４５＋ＣＤ３＋ＣＤ４＋ＦｏｘＰ３＋）（図２０Ａ）及びＣＤ４５＋ＣＤ１１ｂ＋（図２０Ｂ）細胞で、ＣＤ３９発現の減少が観察されたことを示す一組のグラフである。
【図２１】図２１Ａ−２１Ｃは、Ａｆｕｃ  ５Ｆ２−ｍＩｇＧ２ｃ  ｍＡｂ処置が、生理食塩水処置マウスと比較して、腫瘍（図２１Ａ）及び脾臓（図２１Ｂ）におけるＴ細胞サブタイプ（ＣＤ４５＋ＣＤ３＋）上のＣＴＬＡ４発現の有意な減少をもたらすが、流入領域リンパ節（図２１Ｃ）ではもたらさないことを示す一組のグラフである。
【図２２】図２２Ａ−２２Ｃは、腫瘍（図２２Ａ）、脾臓（図２２Ｂ）又は流入領域リンパ節（図２２Ｃ）におけるＴ細胞サブタイプ（ＣＤ４５＋ＣＤ３＋）上のＰＤ−１発現が、生理食塩水処置マウスと比較して、Ａｆｕｃ  ５Ｆ２−ｍＩｇＧ２ｃ  ｍＡｂ処置によって変化しないことを示す一組のグラフである。
【図２３】図２３Ａ−２３Ｃは、腫瘍（図２３Ａ）、脾臓（図２３Ｂ）又は流入領域リンパ節（図２３Ｃ）における骨髄由来細胞（ＣＤ４５＋ＣＤ１１ｂ＋）上のＰＤ−Ｌ１発現が、生理食塩水処置マウスと比較して、Ａｆｕｃ  ５Ｆ２−ｍＩｇＧ２ｃ  ｍＡｂ処置によって変化しないことを示す一組のグラフである。
【図２４】図２４Ａ−２４Ｂは、脾臓において、生理食塩水処置マウスとは対照的に、Ａｆｕｃ  ５Ｆ２−ｍＩｇＧ２ｃ  ｍＡｂ処置後に、全ての主要リンパ球（ＣＤ４５＋）でＣＤ３９発現の減少が認められることを示す一組のグラフである。
【図２５】図２５Ａ−２５Ｂは、リンパ節において、生理食塩水処置マウスと比較して、Ａｆｕｃ  ５Ｆ２−ｍＩｇＧ２ｃ  ｍＡｂ処置後に、選択されたリンパ球集団（ＣＤ４５＋）において、ＣＤ３９発現の減少が認められることを示す一組のグラフである。
【図２６】肝臓において、生理食塩水処置マウスと比較して、Ａｆｕｃ  ５Ｆ２−ｍＩｇＧ２ｃ  ｍＡｂ処置後に、ほとんどのリンパ球集団（ＣＤ４５＋）でＣＤ３９発現の減少が認められることを示すグラフである。
【図２７】リンパ節又は脾臓において、対照マウスと比較して、Ａｆｕｃ  ５Ｆ２−ｍＩｇＧ２ｃ  ｍＡｂ処置後に、Ｔｒｅｇ細胞（ＣＤ３＋ＣＤ４＋ＦｏｘＰ３＋／ＣＤ３＋）枯渇が認められないことを示すグラフである。
【図２８】１０００μｇのａｆｕｃ  ５Ｆ２  ＩｇＧ２ｃで３回（ＣＴＸ８〜１０）で処置された腫瘍のないマウスにおいて、肝機能（ＡＬＴ及びＡＳＴ）と腎機能（ＢＵＮ）についての評価で、有意な細胞傷害性が認められないことを示す表である。肝機能及び腎機能が評価され、有意な毒性は認められなかった。
【図２９】図２９Ａ−２９Ｂは、脾臓において、Ａｆｕｃ  ５Ｆ２−ｍＩｇＧ２ｃ  ｍＡｂ処置が、生理食塩水処置又は任意のその他の各種５Ｆ２  ｍＡｂ処置マウスと比較して、全ての主要リンパ球（ＣＤ４５＋）でＣＤ３９発現の最大の減少をもたらすことを示す一組のグラフである。
【図３０】図３０Ａ−３０Ｂは、リンパ節において、生理食塩水処置マウスと比較して、５Ｆ２  ｍＡｂが、Ｔ細胞サブタイプ（ＣＤ４５＋ＣＤ３＋）でＣＤ３９発現の減少をもたらすことを示す一組のグラフである。
【図３１】図３１Ａ−３１Ｂは、血中において、生理食塩水処置マウスと比較して、５Ｆ２  ｍＡｂが、選択されたリンパ球集団（ＣＤ４５＋）でＣＤ３９発現の減少をもたらすことを示す一組のグラフである。
【図３２】対照マウスと比較して、様々な５Ｆ２  ｍＡｂ処置後に、脾臓及びリンパ節で、Ｔｒｅｇ細胞（ＣＤ４＋ＦｏｘＰ３＋／ＣＤ３＋）の枯渇が認められないことを示すグラフである。
【図３３】図３３Ａ−３３Ｃは、脾臓（図３３Ａ）、リンパ節（図３３Ｂ）、又は血液（図３３Ｃ）中のＴ細胞サブタイプ（ＣＤ４５＋ＣＤ３＋）上のＣＴＬＡ４発現が、生理食塩水処置マウスとは対照的に、５Ｆ２  ｍＡｂ処置によって変化しないことを示す一組のグラフである。
【図３４】図３４Ａ−３４Ｃは、脾臓（図３４Ａ）、リンパ節（図３４Ｂ）、又は血液（図３４Ｃ）中の骨髄由来細胞集団（ＣＤ１１ｂ＋）上のＰＤ−Ｌ１発現が、生理食塩水処置マウスと比較して、５Ｆ２  ｍＡｂ処置によって変化しないことを示す一組のグラフである
【図３５】図３５Ａ−３５Ｂは、Ａｆｕｃ  ５Ｆ２−ｍＩｇＧ２ｃ  ｍＡｂ（図３５Ｂ）又は生理食塩水（図３５Ａ）処置後の個々のＬｙｓＭＣｒｅ／ＣＤ３９ＫＯマウスにおける、ＭＣ３８腫瘍増殖の動態を示す一組のグラフである。
【図３６】Ａｆｕｃ  ５Ｆ２−ｍＩｇＧ２ｃ  ｍＡｂ処置後における、ＭＣ３８保有ＬｙｓＭＣｒｅ／ＣＤ３９ＫＯマウスの平均腫瘍体積を示すグラフである。
【図３７】図３７Ａ−３７Ｅは、様々なタイプの５Ｆ２  ｍＡｂ処置後の個々のマウスにおける、ＭＣ３８腫瘍増殖の動態を示す一組のグラフである。図３７Ａは生理食塩水処置対照マウスを示し、図３７ＢはＷＴ  ５Ｆ２−ｍＩｇＧ１処置マウスの腫瘍増殖を示し、図３７ＣはＡｆｕｃ  ５Ｆ２−ｍＩｇＧ１処置マウスの腫瘍増殖を示し、図３７Ｄは５Ｆ２−ｍＩｇＧ２ｃ処置マウスの腫瘍増殖を示し、図３７ＥはＡｆｕｃ  ５Ｆ２−ｍＩｇＧ２ｃ処置マウスの腫瘍増殖を示す。
【図３８】５Ｆ２  ｍＡｂ処置後における、ＭＣ３８保有マウスの平均腫瘍体積を示すグラフである。
【図３９Ａ】図３９Ａ−３９Ｅは、腫瘍において、生理食塩水処置マウスとは対照的に、５Ｆ２  ｍＡｂ処置後の全てのＴ細胞サブセット（ＣＤ４５＋ＣＤ３＋）でＣＤ３９発現の減少が認められることを示す一組のグラフである。
【図３９Ｂ】図３９Ａの説明を参照。
【図３９Ｃ】図３９Ａの説明を参照。
【図３９Ｄ】図３９Ａの説明を参照。
【図３９Ｅ】図３９Ａの説明を参照。
【図４０Ａ】図４０Ａ−４０Ｄは、腫瘍において、生理食塩水処置マウスとは対照的に、５Ｆ２  ｍＡｂ処置後の全ての骨髄由来サブ集団（ＣＤ４５＋ＣＤ１１ｂ＋）でＣＤ３９発現の減少が、Ｇｒ１高個体群を除いて認められることを示す一組のグラフである。
【図４０Ｂ】図４０Ａの説明を参照。
【図４０Ｃ】図４０Ａの説明を参照。
【図４０Ｄ】図４０Ａの説明を参照。
【図４１Ａ】図４１Ａ−４１Ｅは、脾臓において、生理食塩水処置マウスとは対照的に、５Ｆ２  ｍＡｂ処置後の全てのＴ細胞サブセット（ＣＤ４５＋ＣＤ３＋）でＣＤ３９発現の減少が認められることを示す一組のグラフである。
【図４１Ｂ】図４１Ａの説明を参照。
【図４１Ｃ】図４１Ａの説明を参照。
【図４１Ｄ】図４１Ａの説明を参照。
【図４１Ｅ】図４１Ａの説明を参照。
【図４２】図４２Ａ−４２Ｄは、脾臓において、生理食塩水処置マウスとは対照的に、５Ｆ２  ｍＡｂ処置後の全ての骨髄由来細胞サブ集団（ＣＤ４５＋ＣＤ１１ｂ＋）でＣＤ３９発現の減少が認められることを示す一組のグラフである。
【図４３Ａ】図４３Ａ−４３Ｆは、流入領域リンパ節（ＤＬＮ）において、５Ｆ２  ｍＡｂ処置後の全てのＴ細胞サブセット（ＣＤ４５＋ＣＤ３＋）（図４３Ａ〜４３Ｅ）並びに骨髄由来サブ集団（ＣＤ４５＋ＣＤ１１ｂ＋）（図４３Ｆ）で、ＣＤ３９発現の減少が認められることを示す一組のグラフである。
【図４３Ｂ】図４３Ａの説明を参照。
【図４３Ｃ】図４３Ａの説明を参照。
【図４３Ｄ】図４３Ａの説明を参照。
【図４３Ｅ】図４３Ａの説明を参照。
【図４３Ｆ】図４３Ａの説明を参照。
【図４４Ａ】図４４Ａ−４４Ｅは、血液において、生理食塩水処置マウスとは対照的に、５Ｆ２  ｍＡｂ処置後の全てのＴ細胞サブセット（ＣＤ４５＋ＣＤ３＋）でＣＤ３９発現の減少が認められることを示す一組のグラフである。
【図４４Ｂ】図４４Ａの説明を参照。
【図４４Ｃ】図４４Ａの説明を参照。
【図４４Ｄ】図４４Ａの説明を参照。
【図４４Ｅ】図４４Ａの説明を参照。
【図４５Ａ】図４５Ａ−４５Ｄは、血中において、生理食塩水処置マウスとは対照的に、骨髄由来サブ集団（ＣＤ４５＋ＣＤ１１ｂ＋）上のＣＤ３９発現が、いかなる５Ｆ２  ｍＡｂ処置によっても変化しないことを示す一組のグラフである。
【図４５Ｂ】図４５Ａの説明を参照。
【図４５Ｃ】図４５Ａの説明を参照。
【図４５Ｄ】図４５Ａの説明を参照。
【図４６Ａ】図４６Ａ−４６Ｄは、生理食塩水（図４６Ａ及び図４６Ｂ）又は脱フコシル化５Ｆ２−ｍｌｇＧ２ｃ（図４６Ｃ及び図４６Ｄ）処置腫瘍血管系のＣＤ３９染色を示すＩＨＣ画像の組である。
【図４６Ｂ】図４６Ａの説明を参照。
【図４６Ｃ】図４６Ａの説明を参照。
【図４６Ｄ】図４６Ａの説明を参照。
【図４７】図４７Ａは、抗ＰＤ−１抗体で処置された黒色腫保有野生型マウスからの腫瘍の写真である。図４７Ｂは、抗ＰＤ−１抗体で処置された黒色腫保有野生型マウスの腫瘍体積を示すグラフである。図４７Ｃは、抗ＰＤ−１抗体で処置された黒色腫保有ＣＤ３９ヌルマウスの腫瘍体積を示すグラフである。
【図４８Ａ】図４８Ａ−４８Ｅは、ＣＤ３９発現を示す一組のグラフである。ＰＢ１（図４８Ａ）、ＰＢ２（図４８Ｂ）、ＰＢ３（図４８Ｃ）、ＰＢ４（図４８Ｄ）及びＰＢ５（図４８Ｅ）と称される抗ｈＣＤ３９抗体は、少なくとも部分的にＣＤ３９の抗体媒介性標的膜動輸送を通じて、さもなければＣＤ３９陽性であるヒトＢリンパ芽球細胞（ＨＣＣ１７３９ＢＬ）上のＣＤ３９を枯渇させ得る。ＣＤ３９発現ＨＣＣ１７３９ＢＬ細胞は、ヒトＦｃ（ＩｇＧ１）でキメラ化されたウサギ抗ｈＣＤ３９抗体（４μｇ／ｍｌ）又はヒトＩｇＧ１アイソタイプ対照（４μｇ／ｍｌ）の存在下で、ＴＨＰ−１単球細胞あり（ＴＨＰ−１：ＨＣＣ１７３９ＢＬ＝３：２）又はなしで、４３時間又は２時間共培養された。ＨＣＣ１７３９ＢＬ細胞におけるＣＤ３９発現は、このキメラ抗体とは異なるエピトープを認識する染色抗体によって検出された。ＴＨＰ−１及びＨＣＣ１７３９ＢＬ細胞は、ＣｙｔｏＦｌｅｘＬＸフローサイトメーターを使用して、ＣＤ２０染色によって別々にゲートされた。各図の最初のパネルは、共培養物のうちの、ヒトＩｇＧ１アイソタイプ対照で処置された細胞と比較した場合の、キメラ抗体で処置された細胞の相対強度を表すデータである。各図の第２のパネルは、ＨＣＣ１７３９ＢＬ細胞単独と比較した場合の、共培養された細胞の相対強度を表すデータである。
【図４８Ｂ】図４８Ａの説明を参照。
【図４８Ｃ】図４８Ａの説明を参照。
【図４８Ｄ】図４８Ａの説明を参照。
【図４８Ｅ】図４８Ａの説明を参照。
【図４９Ａ】図４９Ａ−４９Ｄは、ＣＤ３９枯渇を示すグラフである。抗ｈＣＤ３９抗体は、ＨＣＣ１７３９ＢＬ細胞における脱落及び／又は内部移行もまた含む機序を通じて、ＣＤ３９枯渇を引き起こしてもよい。ＣＤ３９を発現するＨＣＣ１７３９ＢＬ細胞は、ヒトＦｃ（ＩｇＧ１）（２μｇ／ｍｌ）でキメラ化されたウサギ抗ｈＣＤ３９抗体と共に、表示される時間にわたり細胞培養インキュベーター内でインキュベートされた。抗体インキュベーション後、細胞は２回洗浄され、二次抗体（ロバ抗ヒトＩｇＧ、ＡＦ４８８にコンジュゲートされたＦｃγ断片特異的抗体）で染色され、ＣｙｔｏＦｌｅｘＬＸ装置上でのフローサイトメトリー分析がそれに続いた。図４９ＡはＰＢ１を示し、図４９ＢはＰＢ３を示し、図４９ＣはＰＢ４を示し、図４９ＤはＰＢ５を示す。
【図４９Ｂ】図４９Ａの説明を参照。
【図４９Ｃ】図４９Ａの説明を参照。
【図４９Ｄ】図４９Ａの説明を参照。
【発明を実施するための形態】
【００５６】
発明の詳細な説明
Ｉ．概要
アデノシン依存性の免疫抑制を不活性化するためには、細胞外アデノシンの代謝を考えることが有益であろう。細胞外アデノシンの起源は、細胞外区画のＡＴＰであると考えられている。細胞表面には、ＣＤ３９及びＣＤ７３と称されるヌクレオチダーゼがある。ＣＤ３９はＡＴＰ／ＡＤＰのＡＭＰへの加水分解を触媒し、ＣＤ７３はＡＭＰをアデノシンに変換する。組織の低酸素は、アデノシン産生を増加させ、アデノシン除去を減少させることによって、細胞外アデノシンの蓄積を誘導し得る。低酸素はＣＤ３９及びＣＤ７３のｍＲＮＡレベルと酵素活性を誘導し、アデノシン産生を増加させる。アデノシンの除去速度は、アデノシンキナーゼの低酸素依存性の阻害によって低下し得て、アデノシンのさらなる蓄積をもたらし得る。
【００５７】
ＣＤ８＋Ｔリンパ球が腫瘍を排除する能力は、免疫抑制的な微小環境を作り出すそれらの相殺的能力によって制限される。最近、腫瘍浸潤性ＣＤ８＋Ｔ細胞のサブセットが、ＣＤ３９の高発現レベルによって特徴づけられるという証拠が浮上している。ＣＤ３９ｈｉｇｈＣＤ８＋Ｔ細胞の頻度は腫瘍増殖に伴って増加したが、リンパ器官では不在であった。高いＣＤ３９発現を有する腫瘍浸潤性ＣＤ８＋Ｔ細胞は、ＴＮＦ及びＩＬ２の産生の減少、及び共抑制受容体の発現などの疲弊の特徴を示した。マウスからの疲弊ＣＤ３９＋ＣＤ８＋Ｔ細胞は細胞外ＡＴＰを加水分解し、ＣＤ３９が酵素的に活性であることが確認された。さらに、疲弊ＣＤ３９＋ＣＤ８＋Ｔ細胞は、応答性ＣＤ８＋Ｔ細胞によるＩＦＮγ産生を阻害した。乳がん及び黒色腫患者の検体では、ＣＤ３９＋ＣＤ８＋Ｔ細胞は腫瘍内及び浸潤性又は転移性リンパ節内に存在していたが、浸潤性でないリンパ節内ではほとんど検出されず、末梢血中には存在しなかった。これらの細胞は、損なわれたＩＦＮγ、ＴＮＦ、ＩＬ２の産生、及び共抑制受容体の高発現を有する、疲弊表現型を示した。ヒトＣＤ８＋Ｔ細胞上でＣＤ３９を誘導するのには、Ｔ細胞受容体の係合で十分であったが、ＩＬ６及びＩＬ２７への曝露は、ヒト又はマウス起源の刺激されたＣＤ８＋Ｔ細胞上で、ＣＤ３９の発現を促進した。これらの観察結果は、腫瘍微小環境がＣＤ８＋Ｔ細胞上の免疫調節分子としてのＣＤ３９の獲得をどのように促進するかを示し、Ｔ細胞機能不全のバイオマーカー及び免疫療法介入の標的を定義することを暗示する。疲弊Ｔ細胞は、それらの機能を損なう複数の共阻害分子を発現し、慢性ウイルス感染に対する免疫を制限する。ＣＤ３９は、慢性ウイルス感染、微生物及び寄生性病原体感染に関連する、疲弊ＣＤ８＋Ｔ細胞のマーカーである。慢性感染においてＣＤ８＋Ｔ細胞によって発現されるＣＤ３９は、酵素的に活性であり、ＰＤ−１と同時発現され、Ｔ細胞疲弊の転写シグネチャを有する細胞をマークして、ＨＩＶ及びＨＣＶにおけるウイルス負荷と相関している。慢性リンパ球性脈絡髄膜炎ウイルス感染症のマウスモデルでは、ウイルス特異的ＣＤ８＋Ｔ細胞は、急性感染によって惹起される機能的記憶細胞には存在しない、ＣＤ３９ｈｉｇｈＣＤ８＋Ｔ細胞の集団を含有する。このＣＤ３９ｈｉｇｈＣＤ８＋Ｔ細胞集団は、末期疲弊の表現型及び機能的プロファイルを有する細胞に富む。これは、慢性感染に関連したＴ細胞疲弊の制御に、プリン作動性経路が関与していることを示唆する。
【００５８】
本発明は、ＣＤ３９などのエクトヌクレオシド三リン酸ジホスホヒドロラーゼに対する特定の抗体が、トロゴサイトーシス（がんの場合は腫瘍性トロゴサイトーシス）のプロセスを通じて、Ｔ細胞疲弊を予防又は解除して、免疫応答を増強できるという発見に少なくとも部分的に基づいている。
【００５９】
特定の実施形態では、本発明は、エクトヌクレオシド三リン酸ジホスホヒドロラーゼ−１（「ＣＤ３９」）に結合し、ＦｃγＲＩＩＩ（ＦｃγＲＩＩＩａ及び／又はＦｃγＲＩＩＩｃなど）にもまた結合し、ＣＤ３９ｈｉｇｈＣＤ４５＋免疫細胞（ＣＤ３９ｈｉｇｈＣＤ８＋Ｔ細胞など）を有する患者に投与されると、ＣＤ３９ｈｉｇｈＣＤ４５＋免疫細胞の減少をもたらし、好ましくは、ＣＤ４５＋免疫細胞の数を実質的に減少させることがない、抗体を含む医薬組成物を提供する。いかなる特定の理論による拘束も望まないが、ＣＤ３９ｈｉｇｈＣＤ８＋Ｔ細胞などのＣＤ３９ｈｉｇｈＣＤ４５＋免疫細胞の減少は、明らかに、例えば、細胞殺滅によって免疫細胞を枯渇させない、免疫細胞からのＣＤ３９のＦｃγＲＩＩＩ結合依存性除去（以下に定義されるＣＤ３９トロゴサイトーシスと称されるプロセス）の結果である。その結果、免疫細胞数は保持されるが、疲弊表現型から免疫能力のある状態に戻る。
【００６０】
特定の実施形態では、抗ＣＤ３９剤は、腫瘍血管内皮からのＣＤ３９の抗体媒介性標的膜動輸送をもたらす。特定の実施形態では、抗ＣＤ３９剤は、血管新生阻害性であるか、又はそうでなければ腫瘍内の血管網を破壊するか若しくは崩壊させる。
【００６１】
ＩＩ．定義
本発明の理解を容易にするために、いくつかの用語及び語句を以下に定義する。
【００６２】
「分化抗原群３９」、「エクトヌクレオシド三リン酸ジホスホヒドロラーゼ−１」又は（遺伝子）「ＥＮＴＰＤ１」及び（タンパク質）「ＮＴＰＤａｓｅ１」とも称される「ＣＤ３９」は、ＡＴＰ、ＡＤＰ、ＵＴＰ、及びＵＤＰなどのＰ２受容体リガンドを加水分解するなど、トリホスホヌクレオシド及びジホスホヌクレオシドのγ−及びβ−リン酸残基のモノホスホヌクレオシド誘導体（酵素：ＥＣ３．６．１．５）への加水分解を触媒する、細胞外に面する触媒部位を有する、細胞表面に位置するエクトヌクレオチダーゼである。代表的なヒトＮＴＰＤａｓｅ１タンパク質配列は、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢエントリ「Ｐ４９９６１（ＥＮＴＰ１＿ＨＵＭＡＮ）」で提供され、代表的なヒトコード配列列は、ＧｅｎＢａｎｋ受入番号Ｓ７３８１３で提供される。
【００６３】
「ＣＤ３９抗体」（或いは「抗ＣＤ３９抗体」）は、ＮＴＰＤａｓｅ１タンパク質の１つ又は複数のエピトープに選択的に結合する抗体を指し、モノパラトピック抗体、並びにバイパラトピック及びその他のマルチパラトピック形態の抗体を含む。
【００６４】
本発明の文脈における「抗体媒介性標的膜動輸送」又は「ＡＭＴＣ」とは、例えば、ＣＤ４５＋免疫細胞死の誘発以外のプロセスを通じて、ＣＤ４５＋免疫細胞の数を実質的に減少させることなく、ＣＤ４５＋免疫細胞の表面からＣＤ３９を抗体の媒介により枯渇させることを指す。本明細書に記載されるように、好ましいＣＤ３９抗体は、ＮＴＰＤａｓｅ１の細胞外エピトープに結合し、ＦｃγＲＩＩＩにもまた結合し（例えば、抗体のＦｃドメイン又はその他のＦｃγＲＩＩＩ結合部分を介して）、なおもより好ましくは、ＣＤ４５＋免疫細胞からのＣＤ３９のＦｃγＲＩＩＩ結合依存性抗体媒介性標的膜動輸送を媒介できる。
【００６５】
ａ．抗体及びその他のポリペプチド
本明細書の用法では「抗体」という用語は、タンパク質、ポリペプチド、ペプチド、炭水化物、ポリヌクレオチド、脂質、又は前述のいずれかの組み合わせなどの標的を認識し、少なくとも１つの抗原結合部位を介してそれらに特異的に結合する免疫グロブリン分子を指し、抗原結合部位は通常、免疫グロブリン分子の可変領域内にある。本明細書の用法では用語は、無傷のポリクローナル抗体、無傷のモノクローナル抗体、抗原結合断片（Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、及びＦｖ断片など）、それらの断片がＦｃ又はその他のＦｃγＲＩＩＩ結合ドメインを含むように整形されているという条件で一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）抗体、多重特異性抗体、二重特異性抗体、単一特異性抗体、一価の抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体、ヒト抗体、抗体の抗原結合部位を含む融合タンパク質（Ｆｃ又はその他のＦｃγＲＩＩＩ結合ドメインを含むように整形されている）、及び抗体が所望の生物学的活性を示すという条件で抗原結合部位を含む、任意のその他の改変免疫グロブリン分子を包含する
【００６６】
本明細書の用法では抗体の「抗原結合部分」という用語は、抗原（例えば、ヒトＣＤ３９）に特異的に結合する能力を保持する抗体の１つ又は複数の断片を指す。抗体の抗原結合機能は、全長抗体の断片によって遂行され得ることが示されている。例えば、本明細書に記載の抗ＣＤ３９抗体などの抗体の「抗原結合部分」という用語内に包含される結合断片の例としては、（ｉ）ＶＬ、ＶＨ、ＣＬ、及びＣＨ１ドメインからなる一価の断片である、Ｆａｂ断片；（ｉｉ）ヒンジ領域のジスルフィド架橋によって連結する２つのＦａｂ断片を含む二価の断片である、Ｆ（ａｂ’）２断片；（ｉｉｉ）ＶＨ及びＣＨ１ドメインからなるＦｄ断片；（ｉｖ）抗体の単一アームのＶＬ及びＶＨドメインからなるＦｖ断片；（ｖ）ＶＨドメインからなるｄＡｂ断片（Ｗａｒｄ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８９）Ｎａｔｕｒｅ  ３４１：５４４−５４６）；及び（ｖｉ）単離相補性決定領域（ＣＤＲ）；又は（ｖｉｉ）任意で合成リンカーによって連結されていてもよい、２つ以上の単離ＣＤＲの組み合わせが挙げられる。このような一本鎖抗体もまた、抗体の「抗原結合部分」という用語に包含されることが意図される。これら及びその他の可能なコンストラクトは、Ｃｈａｎ  ＆  Ｃａｒｔｅｒ（２０１０）Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１０：３０１に記載されている。これらの抗原結合断片は、当業者に公知の従来の技術を用いて得られ、断片は非損傷抗体と同一様式で、有用性についてスクリーニングされる。抗原結合部分は、組換えＤＮＡ技術によって、又は無傷の免疫グロブリンの酵素的又は化学的切断によって生じ得る。
【００６７】
抗体の「可変領域」という用語は、抗体軽鎖の可変領域、又は抗体重鎖の可変領域を単独で又は組み合わせで指す。一般的には、重鎖及び軽鎖の可変領域は、それぞれ４つのフレームワーク領域（ＦＲ）と３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）とからなり、「超可変領域」としても知られている。各鎖中のＣＤＲは、フレームワーク領域によって近傍にまとめられており、もう一方の鎖からのＣＤＲは、抗体の抗原結合部位の形成に寄与する。ＣＤＲを判定するための少なくとも２つの技術がある：（１）異種間の配列変動性に基づくアプローチ（例えば、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，１９９１，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ  Ｍｄ．）、及び（２）抗原抗体複合体の結晶学的研究に基づくアプローチ（Ａｌ  Ｌａｚｉｋａｎｉ  ｅｔ  ａｌ．，１９９７，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２７３：９２７−９４８）。さらに、これらの２つのアプローチの組み合わせが、ＣＤＲ判定技術分野で利用されることもある。
【００６８】
抗体は、それぞれα、δ、ε、γ、及びμと称されるそれらの重鎖定常ドメインの同一性に基づいて、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、及びＩｇＭの免疫グロブリンの５つの主要なクラスのいずれか、又はそれらのサブクラス（アイソタイプ）（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１、及びＩｇＡ２）であり得るものの、ＦｃγＲＩＩＩを最も効果的に係合させるために（例えば、１０−７以下のＫｄを有する）、好ましいＣＤ３９抗体はＩｇＧ１及びＩｇＧ３アイソタイプである。
【００６９】
特定の実施形態では、抗体は「低フコシル化」され、「脱フコシル化」されていてもよい。「低フコシル化」抗体調製物とは、オリゴ糖鎖の５０％未満がα−１，６−フコースを含有する抗体調製物を指す。典型的には、「低フコシル化」抗体調製物中では、オリゴ糖鎖の約４０％未満、約３０％未満、約２０％未満、約１０％未満、又は約５％未満、又は約１％未満が、α−１，６−フコースを含有する。「脱フコシル化」抗体は、ＩｇＧ重鎖のＣＨ２ドメインに結合した炭水化物中に、α−１，６−フコースを欠く。
【００７０】
本明細書の用法では「モノクローナル抗体」という用語は、特定のエピトープに対して単一の結合特異性及び親和性を示す抗体、又はその中の全ての抗体が特定のエピトープに対して単一の結合特異性及び親和性を示す抗体組成物を指す。典型的には、このようなモノクローナル抗体は、単一の細胞又は核酸（当該抗体をコードするもの）に由来し、意図的に配列の改変を導入することなく増殖されるであろう。したがって、「ヒトモノクローナル抗体」という用語は、ヒト生殖系列免疫グロブリン配列に由来する可変領域と任意の定常領域とを有する、モノクローナル抗体を指す。一実施形態では、ヒトモノクローナル抗体は、遺伝子組換え又は染色体導入非ヒト動物（例えば、ヒト重鎖導入遺伝子及び軽鎖導入遺伝子を含むゲノムを有する、遺伝子組換えマウス）から得られたＢ細胞を不死化細胞に融合させることによって得られた、ハイブリドーマによって産生される。
【００７１】
本明細書の用法では「ヒト化抗体」という用語は、特異的な免疫グロブリン鎖、キメラ免疫グロブリン、又は最小限の非ヒト配列を含有するそれらの断片である、非ヒト（例えば、マウス）抗体の形態を指す。典型的には、ヒト化抗体は、ＣＤＲの残基が、所望の特異性、親和性、及び／又は結合能力を有する非ヒト種（例えば、マウス、ラット、ウサギ、又はハムスター）のＣＤＲからの残基で置換されている、ヒト免疫グロブリンである。場合によっては、ヒト免疫グロブリンのＦｖフレームワーク領域残基は、非ヒト種由来の抗体中の対応する残基で置換される。ヒト化抗体は、Ｆｖフレームワーク領域中の、及び／又は置換された非ヒト残基中のどちらかの追加の残基の置換によってさらに修飾されて、抗体特異性、親和性、及び／又は結合能力が洗練されて最適化され得る。ヒト化抗体が、非ヒト免疫グロブリンに対応するＣＤＲの全て又は実質的に全てを含有する可変ドメインを含んでなってもよい一方で、フレームワーク領域の全て又は実質的に全ては、ヒト免疫グロブリン配列のものである。いくつかの実施形態では、可変ドメインは、ヒト免疫グロブリン配列のフレームワーク領域を含む。いくつかの実施形態では、可変ドメインは、ヒト免疫グロブリンコンセンサス配列のフレームワーク領域を含む。ヒト化抗体はまた、典型的にヒト免疫グロブリンである、免疫グロブリン定常領域又はドメイン（Ｆｃ）の少なくとも一部を含み得る。ヒト化抗体は、通常、キメラ抗体とは異なるものと見なされる。
【００７２】
本明細書の用法では「ヒト抗体」という用語は、ヒトによって産生された抗体を指し、又は当該技術分野で公知の技術のいずれかを用いて作製された、ヒトによって産生された抗体に対応するアミノ酸配列を有する抗体を意味する。
【００７３】
本明細書の用法では「キメラ抗体」という用語は、免疫グロブリン分子のアミノ酸配列が２つ以上の種に由来する抗体を指す。典型的には、軽鎖及び重鎖の双方の可変領域が、所望の特異性、親和性、及び／又は結合能力がある、哺乳動物の一つの種（例えば、マウス、ラット、ウサギなど）に由来する抗体の可変領域に相当する一方で、定常領域は、別の種（通常はヒト）に由来する抗体の配列と相同的であり、その生物種において免疫応答を引き起こすことが回避される。
【００７４】
「Ｆｃ受容体」又は「ＦｃＲ」は、免疫グロブリンのＦｃ領域に結合する受容体である。ＩｇＧ抗体に結合するＦｃＲは、対立遺伝子変異体及びこれらの受容体の選択的スプライス形態をはじめとするＦｃγＲファミリーの受容体を含む。ＦｃγＲファミリーは、３つの活性化型（マウスではＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩＩ、及びＦｃγＲＩＶｉｎ；ヒトではＦｃγＲＩＡ、ＦｃγＲＩＩＡ、及びＦｃγＲＩＩＩＡ）と、１つの阻害型（ＦｃγＲＩＩＢ）受容体とからなる。
【００７５】
「ＦｃγＲＩＩＩ結合部分」とは、抗ＣＤ３９抗体の抗原結合部位に結合した場合に、ＦｃγＲＩＩＩ（ＣＤ１６）に結合して、抗体媒介性標的膜動輸送を媒介できるペプチド、タンパク質、核酸又はその他の部分である。
【００７６】
「エピトープ」及び「抗原性決定因子」という用語は本明細書で同義的に使用され、特定の抗体によって認識され、特異的に結合することできる抗原の部分を指す。抗原がポリペプチドである場合、エピトープは、タンパク質の三次折り畳みによって並置された隣接アミノ酸及び非隣接アミノ酸の双方から形成され得る。隣接アミノ酸から形成されるエピトープ（線形エピトープとも称される）は、典型的には、タンパク質の変性時に保持される一方で、三次折り畳みによって形成されたエピトープ（高次構造的エピトープとも称される）は、典型的には、タンパク質の変性時に失われる。エピトープは、典型的には、固有の空間的立体配座にある少なくとも１つ（例えば、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、又はそれ以上）のアミノ酸を含む。
【００７７】
本明細書の用法では、「に特異的に結合する」又は「に特異的である」という用語は、生体分子をはじめとする分子の不均一集団の存在下での標的の存在を決定する、標的と抗体の間の結合などの、測定可能で再現可能な相互作用を指す。例えば、標的（それはエピトープであり得る）に特異的に結合する抗体は、それがその他の標的に対する結合するよりも、より大きな親和性、結合力で、より容易に、及び／又はより長い持続時間で、この標的に結合する抗体である。一実施形態では、例えば、ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）による測定で、無関係な標的に対する抗体の結合の程度は、標的に対する抗体の結合の約１０％未満である。特定の実施形態では、標的に特異的に結合する抗体は、１μＭ、１００ｎＭ、１０ｎＭ、１ｎＭ以下、又は０．１ｎＭにさえ至る、解離定数（Ｋｄ）を有する。特定の実施形態では、抗体は、異なる種からのタンパク質の間で保存されている、タンパク質上のエピトープに特異的に結合する。別の実施形態では、特異的結合は、排他的結合を含み得るが、排他的結合を必要としない。
【００７８】
「ポリペプチド」、「ペプチド」、及び「タンパク質」という用語は、本明細書で同義的に使用されて、任意の長さのアミノ酸ポリマーを指す。ポリマーは直鎖状であっても分岐状であってもよく、修飾アミノ酸を含んでなってもよく、非アミノ酸によって中断されていてもよい。この用語はまた、例えば、ジスルフィド結合形成、グリコシル化、脂質化、アセチル化、リン酸化、又は標識成分とのコンジュゲーションなどの任意のその他の操作又は修飾によって、天然に又は介入によって修飾されているアミノ酸ポリマーも包含する。例えば、アミノ酸（例えば、非天然アミノ酸を含む）の１つ又は複数の類似体を含有するポリペプチド、並びに当該技術分野で公知のその他の修飾もまた、定義に含まれる。本発明のポリペプチドは、抗体又は免疫グロブリンスーパーファミリーのその他のメンバーに基づいていてもよいので、特定の実施形態では、ポリペプチドは、一本鎖又は結合連鎖として生じ得ることが理解される。
【００７９】
２つ以上の核酸又はポリペプチドの文脈における用語「同一」又はパーセント「同一性」は、保存的アミノ酸置換を配列同一性の一部と見なさずに、最大の一致のために比較し整列した場合（必要に応じてギャップを導入する）、同一であるか、又は規定の百分率の同一ヌクレオチド又はアミノ酸残基を有する、２つ以上の配列又は部分配列を指す。同一性百分率は、配列比較ソフトウェア又はアルゴリズムを使用して、又は目視検査によって測定されてもよい。アミノ酸配列又はヌクレオチド配列のアラインメントを得るために使用されてもよい様々なアルゴリズム及びソフトウェアは、当該技術分野で周知である。これらとしては、ＢＬＡＳＴ、ＡＬＩＧＮ、Ｍｅｇａｌｉｇｎ、ＢｅｓｔＦｉｔ、ＧＣＧ  Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ  Ｐａｃｋａｇｅ、及びそれらの変種が挙げられるが、これらに限定されるものではない。いくつかの実施形態では、本発明の２つの核酸又はポリペプチドは実質的に同一であり、これは、配列比較アルゴリズムによる測定で、又は目視検査によって、最大一致のために比較し整列したときに、それらが少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、及びいくつかの実施形態では少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％、９９％のヌクレオチド残基又はアミノ酸残基の同一性を有することを意味する。いくつかの実施形態では、同一性は、長さが、少なくとも約１０残基、少なくとも約２０残基、少なくとも約４０〜６０残基、少なくとも約６０〜８０残基、又はそれらの間の任意の積分値（ｉｎｔｅｇｒａｌ）である、アミノ酸配列の領域にわたって存在する。いくつかの実施形態では、同一性は、少なくとも約８０〜１００残基など、６０〜８０残基よりも長い領域にわたって存在し、いくつかの実施形態では、配列は、標的タンパク質又は抗体のコード領域など、比較される配列の全長にわたって実質的に同一である。いくつかの実施形態では、同一性は、長さが、少なくとも約１０塩基、少なくとも約２０塩基、少なくとも約４０〜６０塩基、少なくとも約６０〜８０塩基、又はそれらの間の任意の積分値（ｉｎｔｅｇｒａｌ）である、ヌクレオチド配列の領域にわたって存在する。いくつかの実施形態では、同一性は、例えば少なくとも約８０〜１０００塩基以上など、６０〜８０塩基よりも長い領域にわたって存在し、いくつかの実施形態では、配列は、例えば、関心のあるタンパク質をコードするヌクレオチド配列など、比較される配列の全長にわたって実質的に同一である。
【００８０】
「保存的アミノ酸置換」とは、１つのアミノ酸残基が、類似側鎖を有する別のアミノ酸残基で置換されているものをいう。類似側鎖を有するアミノ酸残基のファミリーは、塩基性側鎖（例えば、リジン、アルギニン、ヒスチジン）、酸性側鎖（例えば、アスパラギン酸、グルタミン酸）、非荷電極性側鎖（例えば、グリシン、アスパラギン、グルタミン、セリン、スレオニン、チロシン、システイン）、非極性側鎖（例えば、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン、トリプトファン）、β−分岐状側鎖（例えば、スレオニン、バリン、イソロイシン）、及び芳香族側鎖（例えば、チロシン、フェニルアラニン、トリプトファン、ヒスチジン）をはじめとするものが、一般的に当該技術分野で定義されている。例えば、チロシンに対するフェニルアラニンの置換は、保存的置換である。一般的には、本発明のポリペプチド、可溶性タンパク質、及び／又は抗体の配列中の保存的置換は、アミノ酸配列を含有するポリペプチド、可溶性タンパク質、又は抗体の標的結合部位への結合を抑制しない。結合を排除しないアミノ酸の保存的置換を同定する方法は、当該技術分野で周知である。
【００８１】
「単離された」ポリペプチド、可溶性タンパク質、抗体、ポリヌクレオチド、ベクター、細胞、又は組成物は、自然界では見られない形態のポリペプチド、可溶性タンパク質、抗体、ポリヌクレオチド、ベクター、細胞、又は組成物である。単離されたポリペプチド、可溶性タンパク質、抗体、ポリヌクレオチド、ベクター、細胞又は組成物には、もはや天然に見られる形態でない程度にまで精製されているものが含まれる。いくつかの実施形態では、単離されたポリペプチド、可溶性タンパク質、抗体、ポリヌクレオチド、ベクター、細胞、又は組成物は、実質的に純粋である。
【００８２】
本明細書の用法では「実質的に純粋」という用語は、少なくとも５０％の純度（例えば、汚染物質を含まない）、少なくとも９０％の純度、少なくとも９５％の純度、少なくとも９８％の純度、又は少なくとも９９％の純度を有する物質を指す。
【００８３】
本明細書の用法では「融合タンパク質」又は「融合ポリペプチド」という用語は、少なくとも２つの遺伝子のヌクレオチド配列を含む核酸分子によって発現される、ハイブリッドタンパク質を指す。
【００８４】
本明細書の用法では「リンカー」又は「リンカー領域」という用語は、第１のポリペプチド（例えば、抗ＣＤ３９抗体）と、第２のポリペプチド（例えば、Ｆｃ又はその他のＦｃγＲＩＩＩ結合部分；ＣＤ３９の二価性を保持する二重特異性抗体フォーマットを生成するための、異なるタンパク質に結合するｓｃＦＶ、Ｖｈｈドメインなど）との間に挿入されたリンカーを指す。いくつかの実施形態では、リンカーはペプチドリンカーである。リンカーは、ポリペプチドの発現、分泌、又は生物活性に悪影響を及ぼすべきではない。好ましくは、リンカーは、抗原性でなく免疫応答を惹起しない。
【００８５】
ｂ．核酸
「ポリヌクレオチド」及び「核酸」及び「核酸分子」という用語は、本明細書で同義的に使用され、任意の長さのヌクレオチドのポリマーを指し、ＤＮＡ及びＲＮＡを含む。ヌクレオチドは、デオキシリボヌクレオチド、リボヌクレオチド、修飾ヌクレオチド又は塩基、及び／又はそれらの類似体、又はＤＮＡ又はＲＮＡポリメラーゼによってポリマーに組み込まれ得る任意の基質であり得る。
【００８６】
本明細書の用法では、「コードする核酸分子」、「コードするＤＮＡ配列」、及び「コードするＤＮＡ」という用語は、デオキシリボ核酸デオキシリボヌクレオチドの鎖に沿ったヌクレオチドの順序又は配列を指す。これらのデオキシリボヌクレオチドの順序は、ポリペプチド（タンパク質）鎖に沿ったアミノ酸の順序を決定する。したがって、アミノ酸配列をコードする核酸配列。
【００８７】
ヌクレオチド配列に関して使用される場合、本明細書の用法では「配列」は、文法的及びその他の形態では、ＤＮＡ又はＲＮＡを含んでなってもよく、一本鎖又は二本鎖であってもよい。核酸配列は、変異していてもよい。核酸配列は、例えば、２〜０００，０００またはそれ以上のヌクレオチド（又はそれを超える又はその間の任意の積分値（ｉｎｔｅｇｒａｌ））、例えば、約１００〜約１０，０００、又は約２００〜約５００ヌクレオチドなどの任意の長さを有してもよい。
【００８８】
本明細書の用法では「ベクター」という用語は、宿主細胞に、関心のある１つ又は複数の遺伝子又は配列を送達でき、通常は、発現できるコンストラクトを意味する。ベクターの例としては、ウイルスベクター、裸のＤＮＡ又はＲＮＡ発現ベクター、プラスミド、コスミド、又はファージベクター、カチオン縮合剤に関連するＤＮＡ又はＲＮＡ発現ベクター、及びリポソーム中にカプセル化されたＤＮＡ又はＲＮＡ発現ベクターが挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００８９】
本明細書の用法では、「形質移入」という用語は、真核細胞への外因性核酸の導入を指す。形質移入は、リン酸カルシウム−ＤＮＡ共沈殿、ＤＥＡＥ−デキストラン媒介形質移入、ポリブレン媒介形質移入、電気穿孔、マイクロインジェクション、リポソーム融合、リポフェクション、プロトプラスト融合、レトロウイルス感染、レトロウイルス感染、及び遺伝子銃技術（遺伝子銃）をはじめとする、当該技術分野で公知の様々な手段によって達成され得る。
【００９０】
本明細書の用法では「担体」という用語は、細胞の内部に組成物を送達するために使用され得る単離核酸を含む単離核酸である。直鎖ポリヌクレオチド、イオン性又は両親媒性化合物に関連するポリヌクレオチド、プラスミド、及びウイルスをはじめとするが、これらに限定されるものではない、いくつかの担体が当該技術分野で公知である。したがって、「ベクター」という用語は、自律的に複製するプラスミド又はウイルスを含む。この用語はまた、例えば、ポリリジン化合物、リポソームなどの非プラスミド及び非ウイルス性化合物の細胞内への核酸の移入を容易にすることを含むと解釈されるべきである。ウイルスベクターの例としては、アデノウイルスベクター、アデノ随伴ウイルスベクター、レトロウイルスベクターなどが挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００９１】
本明細書の用法では、「発現ベクター」という用語は、発現制御配列を含む組換えポリヌクレオチドと、作動可能に連結された発現されるヌクレオチド配列とからなるベクターを指す。発現ベクターは、発現に使用される十分なシス作用エレメント（シス作用エレメント）を含み；発現のためのその他のエレメントは、宿主細胞又は生体外発現系から提供され得る。発現ベクターとしては、コスミド、プラスミド（例えば、裸の又はリポソームに含まれる）、及びウイルス（例えば、レンチウイルス、レトロウイルス、アデノウイルス、及びアデノ随伴ウイルス）など、当該技術分野で公知のもの全てが挙げられる。
【００９２】
本明細書の用法では、「作動可能に連結された」という用語は、調節配列と異種核酸配列との間の機能的連結を指し、それは後者の発現をもたらす。例えば、第１の核酸配列及び第２の核酸配列が、第１の核酸配列と第２の核酸配列との間の機能的関係にある場合、作動可能に連結されている。例えば、プロモーターがコード配列の転写又は発現に影響を及ぼす場合、プロモーターはコード配列に作動可能に連結されている。典型的には、作動可能に連結されたＤＮＡ配列決定は連続しており、必要に応じて同一読み枠内の２つのタンパク質コード領域を結合する。
【００９３】
本明細書の用法では、「プロモーター」という用語は、ポリヌクレオチド配列の細胞特異的転写の合成機構に必要な合成機構によって認識され、又は導入される、プロモーターＤＮＡ配列として定義される。
【００９４】
本明細書の用法では「構成的発現」という用語は、生理的条件下で発現される全てを指す。
【００９５】
本明細書の用法では「誘導性発現」という用語は、Ｔ細胞抗原が結合したときに起こるような、特定条件下で発現されることを指す。ルーチンの熟練者はどのように「発現を誘導する」のか。
【００９６】
「電気穿孔」という用語は、生体膜に微視的経路（孔）を誘導するための膜貫通電界パルスの使用を指し；それらの存在は、プラスミド又はその他のオリゴヌクレオチドなどの生体分子が細胞膜の一方の側からもう一方の側に通過できるようにする。
【００９７】
ｃ．チェックポイント阻害剤、共刺激アゴニスト、及び化学療法剤
「チェックポイント分子」は、組織及び／又は免疫細胞によって発現され、チェックポイント分子の発現レベルに依存する様式で免疫応答の有効性を低下させるタンパク質を指す。これらのタンパク質がブロックされた場合、免疫系の「ブレーキ」が解除され、例えば、Ｔ細胞はがん細胞をより効果的に殺滅できる。Ｔ細胞又はがん細胞上に見られるチェックポイントタンパク質の例としては、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１及びＣＴＬＡ−４／Ｂ７−１／Ｂ７−２、ＰＤ−Ｌ２、ＮＫＧ２Ａ、ＫＩＲ、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ−３、ＣＤ９６、ＶＩＳＴＡ、及びＴＩＧＩＴが挙げられる。
【００９８】
「チェックポイント阻害剤」は、チェックポイント分子からの免疫抑制シグナル伝達を解除する薬物実体を指す。
【００９９】
「共刺激分子」は、共刺激リガンドに特異的に結合し、それによって増殖などであるがこれに限定されるものではない、共刺激を媒介する、Ｔ細胞同族結合パートナーなどの免疫細胞を指す。共刺激分子は、抗原受容体又はリガンド以外の細胞表面分子であり、効果的な免疫応答を促進する。共刺激分子としては、ＭＨＣＩ分子、ＢＴＬＡ受容体及びＴｏｌｌリガンド、及びＯＸ４０、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤＳ、ＩＣＡＭ−１、ＬＦＡ−１（ＣＤ１１ａ／ＣＤ１８）、ＩＣＯＳ（ＣＤ２７８）、及び４−１ＢＢ（ＣＤ１３７）が挙げられるが、これらに限定されるものではない。共刺激分子の例としては、ＣＤＳ、ＩＣＡＭ−１、ＧＩＴＲ、ＢＡＦＦＲ、ＨＶＥＭ（ＬＩＧＨＴＲ）、ＳＬＡＭＦ７、ＮＫｐ８０（ＫＬＲＦ１）、ＮＫｐ４４、ＮＫｐ３０、ＮＫｐ４６、ＣＤ１６０、ＣＤ１９、ＣＤ４、ＣＤ８α、ＣＤ８β、ＩＬ２Ｒβ、ＩＬ２Ｒγ、ＩＬ７Ｒα、ＩＴＧＡ４、ＶＬＡ１、ＣＤ４９ａ、ＩＴＧＡ４、ＩＡ４、ＣＤ４９Ｄ、ＩＴＧＡ６、ＶＬＡ−６、ＣＤ４９ｆ、ＩＴＧＡＤ、ＣＤ１１ｄ、ＩＴＧＡＥ、ＣＤ１０３、ＩＴＧＡＬ、ＣＤ１１ａ、ＬＦＡ−１、ＩＴＧＡＭ、ＣＤ１１ｂ、ＩＴＧＡＸ、ＣＤ１１ｃ、ＩＴＧＢ１、ＣＤ２９、ＩＴＧＢ２、ＣＤ１８、ＬＦＡ−１、ＩＴＧＢ７、ＮＫＧ２Ｄ、ＮＫＧ２Ｃ、ＴＮＦＲ２、ＴＲＡＮＣＥ／ＲＡＮＫＬ、ＤＮＡＭ１（ＣＤ２２６）、ＳＬＡＭＦ４（ＣＤ２４４，２Ｂ４）、ＣＤ８４、ＣＤ９６（Ｔａｃｔｉｌｅ）、ＣＥＡＣＡＭ１、ＣＲＴＡＭ、Ｌｙ９（ＣＤ２２９）、ＣＤ１６０（ＢＹ５５）、ＰＳＧＬ１、ＣＤ１００（ＳＥＭＡ４Ｄ）、ＣＤ６９、ＳＬＡＭＦ６（ＮＴＢ−Ａ、Ｌｙ１０８）、ＳＬＡＭ（ＳＬＡＭＦ１、ＣＤ１５０、ＩＰＯ−３）、ＢＬＡＭＥ（ＳＬＡＭＦ８）、ＳＥＬＰＬＧ（ＣＤ１６２）、ＬＴＢＲ、ＬＡＴ、ＧＡＤＳ、ＳＬＰ−７６、ＰＡＧ／Ｃｂｐ、ＣＤ１９ａ、及びＣＤ８３リガンドが挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【０１００】
「共刺激アゴニスト」は、共刺激リガンドなどの共刺激分子を活性化（アゴニスト化）し、免疫刺激シグナルを生じるか、そうでなければ免疫応答の効力又は効率を増加させる薬物実体を指す。
【０１０１】
「化学療法剤」は、がんの治療に有用な化合物である。化学療法剤の例としては、チオテパ及びシクロホスファミド（ＣＹＴＯＸＡＮ）などのアルキル化剤；ブスルファン、インプロスルファン、及びピポスルファンなどのスルホン酸アルキル；ベンゾドパ、カルボコン、メトレドパ、及びウレドパなどのアジリジン；アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホルアミド、トリエチレンチオホスホルアミド、及びトリメチルオロメラミンをはじめとするエチレンイミン及びメチルアメラミン；アセトゲニン（特にブラタシン及びブラタシノン）；δ−９−テトラヒドロカンナビノール（ドロナビノール、ＭＡＲＩＮＯＬ）；β−ラパコン；ラパコール；コルヒチン；ベツリン酸；カンプトテシン（合成類似体トポテカン（ＨＹＣＡＭＴＩＮ）、ＣＰＴ−１１（イリノテカン、ＣＡＭＰＴＯＳＡＲ）、アセチルカンプトテシン、スコポレクチン、及び９−アミノカンプトテシンを含む）；ブリオスタチン；ペメトレキセド；カリスタチン；ＣＣ−１０６５（そのアドゼレシン、カルゼレシン及びビゼレシン合成類似体を含む）；ポドフィロトキシン；ポドフィリン酸；テニポシド；クリプトフィシン（特にクリプトフィシン１及びクリプトフィシン８）；ドラスタチン；デュオカルマイシン（合成類似体、ＫＷ−２１８９及びＣＢ１−ＴＭ１を含む）；エレウテロビン；パンクラチスタチン；ＴＬＫ−２８６；ＣＤＰ３２３、経口α−４インテグリン阻害剤；サルコジクチン；スポンギスタチン；クロラムブシル、クロルナファジン、クロロホスファミド、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、メクロレタミンオキシド塩酸塩、メルファラン、ノベンビキン、フェネステリン、プレドニムスチン、トロホスファミド、ウラシルマスタードなどのナイトロジェンマスタード；カルムスチン、クロロゾトシン、フォテムスチン、ロムスチン、ニムスチン、及びラニムスチンなどのニトロソウレア（ｎｉｔｒｏｓｕｒｅａｓ）；エンジイン抗生物質などの抗生物質（例えば、カリケアマイシン、特にカリケアマイシンγ１Ｉ及びカリケアマイシンωＩ１（例えば、Ｎｉｃｏｌａｏｕ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ  Ｉｎｔｌ．Ｅｄ．Ｅｎｇｌ．，３３：１８３−１８６（１９９４を参照されたい））；ダイネミシンＡをはじめとするダイネミシン；エスペラミシン；並びにネオカルチノスタチン発色団及び関連色素タンパク質エンジイン抗生物質発色団）；アクラシノマイシン（ａｃｌａｃｉｎｏｍｙｓｉｎｓ）；アクチノマイシン；オートラマイシン；アザセリン；ブレオマイシン；カクチノマイシン’カラビシン；カルミノマイシン；カルジノフィリン；クロモマイシン（ｃｈｒｏｍｏｍｙｃｉｎｉｓ）；ダクチノマイシン；ダウノルビシン；デトルビシン；６−ジアゾ−５−オキソ−Ｌ−ノルロイシン；ドキソルビシン（アドリアマイシン、モルホリノ−ドキソルビシン、シアノモルホリノ−ドキソルビシン、２−ピロリノ−ドキソルビシン、ドキソルビシンＨＣｌリポソーム注射（ドキシル）、及びデオキシドキソルビシンを含む）；エピルビシン；エソルビシン；イダルビシン；マルセロマイシン；マイトマイシンＣなどのマイトマイシン；ミコフェノール酸；ノガラマイシン；オリボマイ��ン；ペプロマイシン；ポトフィロマイシン；ピューロマイシン；ケラマイシン；ロドルビシン；ストレプトニグリン；ストレプトゾシン；ツベルシジン；ウベニメクス；ジノスタチン；ゾルビシン；メトトレキサート、ゲムシタビン（ＧＥＭＺＡＲ）、テガフール（ＵＦＴＯＲＡＬ）、カペシタビン（ＸＥＬＯＤＡ）、エポチロン、及び５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）などの代謝アンタゴニスト；デノプテリン、メトトレキサート、プテロプテリン、トリメトレキサートなどの葉酸類似体；フルダラビン、６−メルカプトプリン、チアミプリン、チオグアニンなどのプリン類似体；アンシタビン、アザシチジン、６−アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロクスウリジン、イマチニブ（２−フェニルアミノピリミジン誘導体）などのピリミジン類似体、並びにその他のｃ−Ｋｉｔ阻害剤；アミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタンなどの抗副腎；フォリン酸（ｆｒｏｌｉｎｉｃ）などの葉酸補給剤；アセグラトン；アルドホスファミド配糖体；アミノレブリン酸；エニルウラシル；アムサクリン；ベストラブシル；ビサントレン；エダトレキサート（ｅｄａｔｒａｘａｔｅ）；デフォファミン；デメコルシン；ジアジコン；エフロルニチン（ｅｌｆｏｒｎｉｔｈｉｎｅ）；酢酸エリプチニウム；エトグルシド；硝酸ガリウム；ヒドロキシ尿素；レンチナン；ロニダミン（ｌｏｎｉｄａｉｎｉｎｅ）；メイタンシン及びアンサミトシンなどのメイタンシノイド；ミトグアゾン；ミトキサントロン；モピダモール（ｍｏｐｉｄａｎｍｏｌ）；ニトラミン（ｎｉｔｒａｅｒｉｎｅ）；ペントスタチン；フェナメット；ピラルビシン；ロソキサントロン；２−エチルヒドラジド；プロカルバジン；ＰＳＫ多糖複合体（ＪＨＳ  Ｎａｔｕｒａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ，Ｅｕｇｅｎｅ，Ｏｒｅｇ．）；ラゾキサン；リゾキシン；シゾフィラン；スピロゲルマニウム；テヌアゾン酸；トリアジコン；２，２’，２”−トリクロロトリエチルアミン；トリコテセン（特にＴ−２毒素、ベルカリン（ｖｅｒｒａｃｕｒｉｎ）Ａ、ロリジンＡ及びアングイジン）；ウレタン；ビンデシン（ＥＬＤＩＳＩＮＥ、ＦＩＬＤＥＳＩＮ）；ダカルバジン；マンノムスチン；ミトブロニトール；ミトラクトール；ピポブロマン；ガシトシン；アラビノシド（「Ａｒａ−Ｃ」）；チオテパ；例えば、パクリタキセル（ＴＡＸＯＬ）、パクリタキセル（ＡＢＲＡＸＡＮＥ）のアルブミン操作ナノ粒子製剤、及びドセタキセル（ｄｏｘｅｔａｘｅｌ）（ＴＡＸＯＴＥＲＥ）などのタキソイド；クロラムブシル（ｃｈｌｏｒａｎｂｕｃｉｌ）；６−チオグアニン；メルカプトプリン；メトトレキサート；シスプラチン及びカルボプラチンなどの白金類似体；ビンブラスチン（ベルバン）；白金；エトポシド（ＶＰ−１６）；イホスファミド；ミトキサントロン；ビンクリスチン（オンコビン）；オキサリプラチン；ロイコボリン（ｌｅｕｃｏｖｏｖｉｎ）；ビノレルビン（ナベルビン）；ノバントロン；エダトレキサート；ダウノマイシン；アミノプテリン；イバンドロネート；トポイソメラーゼ阻害剤ＲＦＳ２０００；ジフルオロメチルオルニチン（ｄｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｌｈｙｌｏｒｎｉｔｈｉｎ���）（ＤＭＦＯ）；レチノイン酸などのレチノイド；上記のいずれかの薬学的に許容可能な塩、酸又は誘導体；並びにシクロホスファミド、ドキソルビシン、ビンクリスチン、及びプレドニゾロンの併用療法の略称であるＣＨＯＰ、及び５−ＦＵ及びロイコボリン（ｌｅｕｃｏｖｏｖｉｎ）と併用されるオキサリプラチン（ＥＬＯＸＡＴＩＮ）による治療レジメンの略称であるＦＯＬＦＯＸなどの上記の２つ以上の組み合わせが挙げられる。
【０１０２】
また、この定義には、がんの増殖を促進し得るホルモンの効果を調節し、低減し、ブロックし、又は阻害するように作用する抗ホルモン剤もまた含まれ、多くの場合、全身的又は全身治療の形態であることが多い。それらは、ホルモンそれ自体であってもよい。例としては、タモキシフェン（ＮＯＬＶＡＤＥＸタモキシフェンを含む）、ラロキシフェン（ＥＶＩＳＴＡ）、ドロロキシフェン、４−ヒドロキシタモキシフェン、トリオキシフェン、ケオキシフェン、ＬＹ１１７０１８、オナプリストン、及びトレミフェン（ＦＡＲＥＳＴＯＮ）をはじめとする抗エストロゲン及び選択的エストロゲン受容体調節因子（ＳＥＲＭ）；抗プロゲステロン；エストロゲン受容体ダウンレギュレーター（ＥＲＤ）；フルベストラント（フェソロデックス）などのエストロゲン受容体アンタゴニスト；例えば、酢酸ロイプロリド（ＬＵＰＲＯＮ及びＥＬＩＧＡＲＤ）、酢酸ゴセレリン、酢酸ブセレリン、及びトリプトレリン（ｔｒｉｐｔｅｒｅｌｉｎ）などの黄体形成（ｌｅｕｔｉｎｉｚｉｎｇ）ホルモン放出ホルモン（ＬＨＲＨ）アゴニストなどの卵巣を抑制するか又は停止するように機能する薬剤；フルタミド、ニルタミド、及びビカルタミドなどの抗アンドロゲン；及び例えば、４（５）−イミダゾール、アミノグルテチミド、酢酸メゲストロール（ＭＥＧＡＳＥ）、エキセメスタン（ＡＲＯＭＡＳＩＮ）、フォルメスタン（ｆｏｒｍｅｓｔａｎｉｅ）、ファドロゾール、ボロゾール（ＲＩＶＩＳＯＲ）、レトロゾール（ＦＥＭＡＲＡ）、及びアナストロゾール（ＡＲＩＭＩＤＥＸ）などの副腎におけるエストロゲン産生を調節する酵素アロマターゼを阻害するアロマターゼ阻害剤が挙げられる。さらに、このような化学療法剤の定義は、クロドロネート（例えば、ＢＯＮＥＦＯＳ又はＯＳＴＡＣ）、エチドロネート（ＤＩＤＲＯＣＡＬ）、ＮＥ−５８０９５、ゾレドロン酸／ゾレドロネート（ＺＯＭＥＴＡ）、アレンドロネート（ＦＯＳＡＭＡＸ）、パミドロネート（ＡＲＥＤＩＡ）、チルドロネート（ＳＫＥＬＩＤ）、又はリセドロネート（ＡＣＴＯＮＥＬ）などのビスホスホネート；並びにトロキサシタビン（１，３−ジオキソランヌクレオシドシトシン類似体）；例えば、ＰＫＣ−α、Ｒａｆ、Ｈ−Ｒａｓ、及び上皮成長因子受容体（ＥＧＦ−Ｒ）などのアンチセンスオリゴヌクレオチド、特に異常な（ａｂｈｅｒａｎｔ）細胞増殖に関与するシグナル伝達経路における遺伝子の発現を阻害するオリゴヌクレオチド；ＴＨＥＲＡＴＯＰＥワクチン及び遺伝子療法ワクチンなどのワクチン、例えば、ＡＬＬＯＶＥＣＴＩＮワクチン、ＬＥＵＶＥＣＴＩＮワクチン、及びＶＡＸＩＤワクチン；トポイソメラーゼ１（例えば、ＬＵＲＴＯＴＥＣＡＮ）；フルベストラントなどの抗エストロゲン；イマチニブ又はＥＸＥＬ−０８６２（チロシンキナーゼ阻害剤）などのＫｉｔ阻害剤；エルロチニブ又はセツキシマブなどのＥＧＦＲ阻害剤；ベバシズマブなどの抗ＶＥＧＦ阻害剤；イリノテカン（ａｒｉｎｏｔｅｃａｎ）；ｒｍＲＨ（例えば、ＡＢＡＲＥＬＩＸ）；ラパチニブ及びラパチニブジトシレート（ＥｒｂＢ−２及びＥＧＦＲ二重チロシンキナーゼ小分子阻害剤、ＧＷ５７２０１６としても知られている）；１７ＡＡＧ（熱ショックタ���パク質（Ｈｓｐ）９０  ｐｏｉｓｏｎであるゲルダナマイシン誘導体）；及び上記のいずれかの薬学的に許容可能な塩、酸、又は誘導体を含む。
【０１０３】
本明細書の用法では、「サイトカイン」という用語は、総称的に細胞間メディエーターとして別の細胞に作用し、又はタンパク質を産生する細胞に対するオートクリン効果を有する、１つの細胞集団によって放出されるタンパク質を指す。このようなサイトカインの例としては、リンフォカイン；モノカイン；プロロイキンｒＩＬ−２をはじめとするＩＬ−１、ＩＬ−１α、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−９、ＩＬ１０、ＩＬ−１１、ＩＬ−１２、ＩＬ−１３、ＩＬ−１５、ＩＬ−１７Ａ−Ｆ、ＩＬ−１８ｔｏＩＬ−２９（ＩＬ−２３など）、ＩＬ−３１などのインターロイキン（「ＩＬ」）；ＴＮＦ−α又はＴＮＦ−β、ＴＧＦ−β１−３などの腫瘍壊死因子；及び白血病抑制因子（「ＬＩＦ」）、毛様体神経栄養因子（「ＣＮＴＦ」）、ＣＮＴＦ−同様のサイトカイン（「ＣＬＣ」）、カルジオトロフィン（「ＣＴ」）、及びキットリガンド（「ＫＬ」）をはじめとするその他のポリペプチド因子が挙げられる。
【０１０４】
本明細書の用法では、「ケモカイン」という用語は、白血球の走化性及び活性化選択的に誘導する能力を有する可溶性因子（例えば、サイトカイン）を指す。それらはまた、血管新生、炎症、創傷治癒、及び腫瘍形成のプロセスを始動する。ケモカインの例としては、マウスケラチノサイト化学誘引物質（ＫＣ）のヒトホモログであるＩＬ−８が挙げられる。
【０１０５】
ｄ．治療
免疫機能不全の文脈における「機能不全」という用語は、抗原刺激に対する免疫応答性が低下した状態を指す。用語には、その中で抗原認識が起こってもよい疲弊及び／又はアネルギーの双方の共通要素が含まれるが、続いて起こる免疫応答は、感染又は腫瘍増殖を制御するのに効果がない。
【０１０６】
本明細書の用法では、「機能不全」という用語はまた、抗原認識について不応性又は無応答であることを含み、具体的には、増殖、サイトカイン産生（例えば、ＩＬ−２）及び／又は標的細胞殺滅などの下流のＴ細胞エフェクター機能に、抗原認識を変換する能力の低下も含む。
【０１０７】
「アネルギー」という用語は、Ｔ細胞受容体を通じて送達される不完全又は不十分なシグナルに起因する、抗原刺激に対する無応答状態を指す（例えば、ｒａｓ活性化の不在下における細胞内Ｃａ＋２の増加）。Ｔ細胞アネルギーはまた、共刺激の非存在下での抗原による刺激時に生じ得て、共刺激の状況においてさえ、引き続く抗原による活性化に対して細胞を不応性にする。無応答状態は、インターロイキン−２の存在によってしばしば無効にされ得る。アネルギーＴ細胞は、クローン増殖を受けず、及び／又はエフェクター機能を獲得しない。
【０１０８】
「疲弊」という用語は、多くの慢性感染症及びがんにおいて発生する持続的なＴＣＲシグナル伝達から生じるＴ細胞機能不全の状態としてのＴ細胞疲弊を指す。不完全な又は不十分なシグナル伝達を通じてではなく持続的なシグナル伝達から生じるという点で、アネルギーとは区別される。不十分なエフェクター機能、阻害性受容体の持続的発現、及び機能的エフェクター又はメモリーＴ細胞の転写状態とは異なる転写状態によって定義される。疲弊は、感染及び腫瘍の最適な制御を妨げる。
【０１０９】
「Ｔ細胞機能の増強」とは、Ｔ細胞が持続的な又は増幅された生物学的機能を有するように誘導、誘発又は刺激すること、或いは疲弊Ｔ細胞又は不活性Ｔ細胞を再生させ又は再活性化することを意味する。Ｔ細胞機能の増強の例としては、ＣＤ８＋ Ｔ細胞からのγ−インターフェロンの分泌の増加、増殖の増加、介入前のこのようなレベルと比較した抗原応答性（例えば、ウイルス、病原体、又は腫瘍クリアランス）の増加が挙げられる。一実施形態では、増強のレベルは、少なくとも５０％、或いは６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、１２０％、１５０％、又は２００％である。この増強を測定する方法は、当業者に知られている。
【０１１０】
「Ｔ細胞機能不全障害」は、抗原刺激に対する応答性の低下を特徴とするＴ細胞の障害又は病状である。特定の実施形態では、Ｔ細胞機能不全障害は、ＣＤ３９のレベルの不適切な増加に特に関連する障害である。別の実施形態では、Ｔ細胞機能不全障害は、Ｔ細胞がアレルギー性であるか、又はサイトカインを分泌する能力、増殖する能力、又は細胞溶解活性を遂行する能力が低下しているものである。特定の態様では、応答性の低下は、免疫原を発現する病原体又は腫瘍の効果のない制御をもたらす。Ｔ細胞機能不全を特徴とするＴ細胞機能不全障害の例としては、未解決の急性感染、慢性感染、及び腫瘍免疫が挙げられる。
【０１１１】
「腫瘍免疫」は、腫瘍が免疫認識及びクリアランスを回避するプロセスを指す。したがって、治療概念として、腫瘍免疫は、このような回避が弱められる場合に「治療」され、腫瘍は免疫系によって認識され攻撃される。腫瘍認識の例としては、腫瘍結合、腫瘍縮小、及び腫瘍クリアランスが挙げられる。
【０１１２】
「持続的応答」は、治療中止後における腫瘍増殖の減少に対する持続的効果を指す。例えば、腫瘍サイズは、投与段階の開始時のサイズと比較して、それ以下のままであってもよい。いくつかの実施形態では、持続的応答は、少なくとも治療期間と同じ長さ、少なくとも１．５倍、２．０倍、２．５倍、又は３．０倍の長さを有する。
【０１１３】
本明細書の用法では、「がん」及び「がん性」という用語は、細胞集団が無制御の細胞増殖によって特徴付けられる、哺乳類の生理学的状態を指し又は記述する。がんの例としては、がん腫、芽球腫、肉腫、及びリンパ腫と白血病などの血液学的がんが挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【０１１４】
本明細書の用法では、「腫瘍」及び「新生物」という用語は、良性（非がん性）又は前がん性病変を含む悪性（がん性）のどちらかの過剰な細胞増殖又は急増から生じる、組織の任意の塊を指す。腫瘍増殖は一般的に無制御で進行性であり、正常細胞の増殖は誘導も阻害もしない。腫瘍は、膀胱、骨、脳、乳房、軟骨、グリア細胞、食道、卵管、胆嚢、心臓、腸、腎臓、肝臓、肺、リンパ節、神経組織、卵巣、膵臓、前立腺、骨格筋、皮膚、脊髄、脾臓、胃、精巣、胸腺、甲状腺、気管、尿道、尿管、尿道、子宮、膣の器官又は組織又は対応する細胞から選択されるものをはじめとするが、これらに限定されるものではない、様々な細胞、組織又は器官に影響を及ぼし得る。腫瘍としては、肉腫、がん腫、形質細胞腫、又は（悪性形質細胞）などのがんが挙げられる。本発明の腫瘍としては、白血病（例えば、急性白血病、急性リンパ芽球性白血病、急性骨髄性白血病、急性骨髄性白血病、急性前骨髄球性白血病、急性骨髄系−単球性白血病、急性単球性白血病、急性白血病、慢性白血病、慢性骨髄性白血病、慢性リンパ球性白血病、真性赤血球増加症）；リンパ腫（ホジキン病、非ホジキン病）；原発性マクログロブリン血症；重鎖病；及び肉腫がん（例えば、線維肉腫、粘液肉腫、脂肪肉腫、軟骨肉腫、骨肉腫、脊索腫、内皮肉腫、リンパ管肉腫、血管肉腫、リンパ管内肉腫、滑膜腫（ｓｙｎｏｖｉｏｍａ  ｖｉｏｍａ）、中皮腫、ユーイング腫瘍、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、大腸がん、膵臓がん、乳がん、卵巣がん、前立腺がん、扁平上皮細胞がん、基底細胞がん、腺がん、汗腺がん、皮脂腺がん、乳頭状がん腫、乳頭状腺がん、がん腫、気管支原性肺がん、髄様がん、腎細胞がん、肝細胞腫、胆管（Ｎｉｌｅ  ｄｕｃｔ）がん、絨毛がん、精原細胞腫瘍、胚性がん、ウィルムス腫瘍、子宮頸がん、子宮がん、精巣がん、肺がん、小細胞肺がん、膀胱がん、上皮性がん、神経膠腫、星状細胞腫、髄芽腫、頭蓋咽頭腫、上衣腫、松果体腫、血管芽細胞腫、聴神経腫、乏突起膠腫、シュワン細胞腫、髄膜腫、黒色腫、神経芽腫、網膜芽細胞腫）などの固形腫瘍、食道がん；胆嚢がん；腎臓がん；多発性骨髄腫が挙げられてもよいが、これらに限定されるものではない。好ましくは、「腫瘍」としては、膵臓がん、肝臓がん、肺がん、胃がん、食道がん、頭頸部扁平上皮がん、前立腺がん、結腸がん、乳がん、リンパ腫、胆嚢がん、腎臓がん、白血病、多発性骨髄腫、卵巣がん、子宮頸がん、及び神経膠腫が挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【０１１５】
本明細書の用法では、「転移」という用語は、がんが発生部位から身体のその他の領域に広がり、又は転移し、新しい場所で同様のがん性病変が発生するプロセスを指す。「転移性」又は「転移する」細胞は、隣接する細胞との接着接触を失い、血流又はリンパを介して疾患の原発部位から移動して、隣接する身体構造に侵入する細胞である。
【０１１６】
「がん細胞」及び「腫瘍細胞」という用語は、がん又は腫瘍又は前がん病変に由来する総細胞集団を指し、がん細胞集団の大部分を構成する非腫瘍形成性細胞と、腫瘍形成性幹細胞（がん幹細胞）との双方を含む。本明細書の用法では、再生及び分化する能力を欠く細胞のみを指す場合、「非腫瘍形成性」という用語によって「がん細胞」又は「腫瘍細胞」という用語が修飾され、これらの腫瘍細胞をがん幹細胞から区別する。
【０１１７】
本明細書で使用される本明細書の用法では「有効量」という用語は、治療的又は予防的利益を提供する量を指す。
【０１１８】
本明細書の用法では、「完全奏効」又は「ＣＲ」は、全ての標的病変の消失を指し；「部分奏功」又は「ＰＲ」は、ベースラインＳＬＤを基準として、標的病変の最長径（ＳＬＤ）の合計が少なくとも３０％減少することを指し；「安定性疾患」又は「ＳＤ」は、治療開始以来の最小のＳＬＤを基準として、ＰＲと認定されるのに十分な標的病変の縮小がなく、ＰＤと認定されるのに十分な増加もないことを指す。
【０１１９】
本明細書の用法では、「進行性疾患」又は「ＰＤ」は、治療開始以来に記録された最小のＳＬＤを基準とした標的病変のＳＬＤの少なくとも２０％の増加、又は１つ又は複数の新しい病変の存在を指す。
【０１２０】
本明細書の用法では、「無増悪生存期間」（ＰＦＳ）は、治療中及び治療後に、治療されている疾患（例えば、がん）が悪化しない時間の長さを指す。無増悪生存期間には、患者が完全奏効又は部分奏効を経験した時間、並びに患者が安定性疾患を経験した時間が含まれてもよい。
【０１２１】
本明細書の用法では、「全奏功率」（ＯＲＲ）は、完全奏功（ＣＲ）率と部分奏功（ＰＲ）率の合計を指す。
【０１２２】
本明細書の用法では、「全生存」は、あるグループにおける、特定の期間の後に生存する可能性が高い個人の割合（％）を指す。
【０１２３】
本明細書の用法では、「治療」という用語は、細胞の介入によって引き起こされる臨床疾患のプロセス又は治療を変更しようとしている個人を指し、臨床病理の予防的介入コースのいずれかであってもよい。疾患の発生又は再発を予防するための治療、症状の緩和、あらゆる疾患の直接的又は間接的な病理学的帰結の軽減、転移の予防、疾患進行速度の遅延、疾患の寛解の改善又は寛解、又は予後の改善をはじめとするが、これらに限定されるものではない。
【０１２４】
「対象」という用語は、特定の治療の受容者であるヒト、非ヒト霊長類、イヌ、ネコ、齧歯類などをはじめとするが、これらに限定されるものではない、任意の動物（例えば、哺乳類）を指す。典型的には、「対象」及び「患者」という用語は、ヒト対象に関して本明細書で同義的に使用される。
【０１２５】
本明細書の用法では、「アゴニスト」及び「作動性」という用語は、標的及び／又は経路の生物学的活性を直接的又は間接的に、実質的に誘導し、活性化し、促進し、増加させ、又は増強できる抗ＣＤ３９抗体を指し又は記述する。「アゴニスト」という用語は、本明細書では、タンパク質又はその他の関心のある標的の活性を部分的に又は完全に誘導し、活性化し、促進し、増加させ、又は増強する任意の薬剤を含めるために使用される。
【０１２６】
本明細書の用法では、「アンタゴニスト」及び「拮抗性」という用語は、標的及び／又は経路の生物学的活性を直接的又は間接的に、部分的又には完全にブロックし、阻害し、低減し、又は中和できる抗ＣＤ３９抗体を指し又は記述する。「アンタゴニスト」という用語は、本明細書では、タンパク質又はその他の関心のある標的の活性を部分的に又は完全にブロックし、阻害し、低減し、又は中和する任意の薬剤を含めるように使用される。
【０１２７】
本明細書の用法では、「調節」及び「調節する」という用語は、生物学的活性の変化又は改変を指す。調節としては、活動を刺激し又は活動を阻害することが挙げられるが、これらに限定されるものではない。調節は、タンパク質、経路、システム、又はその他の関心のある生物学的標的の活性に関連する、生物学的、機能的、又は免疫学的特性における、活性の増加又は活性の低下、結合特性の変化、又は任意のその他の変化であってもよい。
【０１２８】
本明細書の用法では、「免疫応答」という用語は、自然免疫系と適応免疫系の双方からの応答を含む。これには、細胞媒介免疫及び／又は体液性免疫応答の双方が含まれる。これには、Ｔ細胞とＢ細胞の双方の応答、及びナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、単球、マクロファージなどの免疫系のその他の細胞からの応答が含まれる。
【０１２９】
「薬学的に許容可能」という用語は、ヒトをはじめとする動物での使用のために、連邦政府又は州政府の規制機関によって承認されている又は承認可能な物質、又は米国薬局方又はその他の一般に認められた薬局方に収載されている物質を意味する。
【０１３０】
「薬学的に許容可能な賦形剤、担体又はアジュバント」又は「許容可能な薬学的担体」という用語は、本開示の少なくとも１つの薬剤と共に対象に投与され得て、その薬理学的活性を破壊せず、且つ治療効果を提供するのに十分な量で投与されたときに非毒性である賦形剤、担体又はアジュバントを指す。一般的に、当業者及び米国ＦＤＡは、薬学的に許容可能な賦形剤、担体、又はアジュバントをあらゆる製剤の不活性成分であると見なす。
【０１３１】
「有効量」又は「治療有効量」又は「治療効果」という用語は、本明細書に記載の抗ＣＤ３９抗体（例えば、融合タンパク質、可溶性受容体、抗体、ポリペプチド、ポリヌクレオチド、小型有機分子、又はその他の薬物）の量が、哺乳類などの対象における疾患又は障害を「治療」するのに有効であることを意味する。がん又は腫瘍の場合、抗ＣＤ３９抗体（例えば、ポリペプチド、可溶性タンパク質、又は抗体）の治療有効量は、治療効果を有し、したがって、免疫応答を増強し、抗腫瘍応答を増強し、免疫細胞の細胞溶解活性を高め、免疫細胞による腫瘍細胞の殺滅を高め、腫瘍細胞の数を減少させ；腫瘍原性、腫瘍形成頻度、又は腫瘍形成性能を低下させ；がん幹細胞の数及び出現頻度を低下させ；腫瘍サイズを縮小させ；がん細胞の数を減少させ；例えば、軟部組織及び骨へのがんの拡散をはじめとする末梢器官へのがん細胞の浸潤を阻害し又は停止させ；腫瘍又はがん細胞の転移を阻害し停止させ；腫瘍又はがん細胞の増殖を阻害し停止させ；がんに関連する症状の１つ又は複数をある程度緩和し；罹患率及び死亡率を低下させ；生活の質を改善し得て、又はこのような効果の組み合わせを有する。
【０１３２】
「治療（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」又は「治療（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」又は「治療する」又は「緩和」又は「緩和する」という用語は、（１）症状を治癒し、遅延させ、軽減し、且つ／又は診断された病的状態又は障害の進行を食い止める治療手段、及び（２）標的病的状態又は障害の進行を阻止し又は遅延させる予防又は防止手段の双方を指す。したがって治療を必要とする対象としては、既に障害がある対象；障害を起こし易い対象；障害が予防される対象が挙げられる。がん又は腫瘍の場合、患者が以下の１つ又は複数を示す場合に、対象は本発明の方法に従って成功裏に「治療される」：免疫応答の増加、抗腫瘍応答の増加、免疫細胞の細胞溶解活性の増加、免疫細胞による腫瘍細胞の殺滅の増加、がん細胞の数の減少又は完全な不在；腫瘍サイズの縮小；軟部組織及び骨へのがん細胞の拡散をはじめとする末梢器官へのがん細胞浸潤の阻害又は欠如；腫瘍又はがん細胞の転移の阻害又は不在；がん増殖の阻害又は不在；特定のがんに関連する１つ又は複数の症状の緩和；罹患率及び死亡率の低下；生活の質の改善；腫瘍原性の低下；がん幹細胞の数又は出現頻度の減少；又は効果のいくつかの組み合わせ。
【０１３３】
ｅ．その他
本明細書で実施形態が、「含む」という言葉を用いて記述される場合は常に、「からなる」及び／又は「から本質的になる」によって記述される、その他の点では類似した実施形態もまた提供されるものと理解される。また本明細書で実施形態が、「から本質的になる」という言葉を用いて記述される場合は常に、「からなる」によって記述される、その他の点では類似した実施形態もまた提供されるものと理解される。
【０１３４】
本明細書の用法では、値又はパラメータの「約」又は「およそ」への言及は、その値又はパラメータに向けられた実施形態を含む（そして記述する）。例えば、「約Ｘ」を参照する記述は、「Ｘ」の記述を含む。
【０１３５】
本明細書において、「Ａ及び／又はＢ」などの語句で使用される「及び／又は」という用語は、ＡとＢの双方、Ａ又はＢ、Ａ（単独）、及びＢ（単独）を含むことが意図される。同様に、「Ａ、Ｂ、及び／又はＣ」などの語句における用法では、「及び／又は」という用語は、以下の実施形態のそれぞれを包含することが意図される：Ａ、Ｂ、及びＣ；Ａ、Ｂ、又はＣ；Ａ又はＣ；Ａ又はＢ；Ｂ又はＣ；Ａ及びＣ；Ａ及びＢ；Ｂ及びＣ；Ａ（単独）；Ｂ（単独）；及びＣ（単独）。
【０１３６】
ＩＩＩ．抗ＣＤ３９抗体
ａ．モノクローナル抗体
抗ＣＤ３９抗体は、モノクローナル抗体であってもよい。モノクローナル抗体は、Ｋｏｈｌｅｒ  ａｎｄ  Ｍｉｌｓｔｅｉｎ，Ｎａｔｕｒｅ，２５６：４９５（１９７５）によって記載されるものなどのハイブリドーマ法を用いて調製されてもよい。ハイブリドーマ法では、マウス、ハムスター、又はその他の適切な宿主動物が免疫剤によって典型的に免疫化されて、免疫剤に特異的に結合する抗体を産生する又は産生できるリンパ球を生じる。代案としては、リンパ球は、生体外で免疫化されてもよい。
【０１３７】
免疫剤は、典型的には、ＣＤ３９ポリペプチド又はその融合タンパク質を含むであろう。一般的には、ヒト起源の細胞が所望される場合は末梢血リンパ球（「ＰＢＬ」）が使用され、或いは非ヒト哺乳類起源の細胞が所望される場合は脾細胞又はリンパ節細胞が使用される。次に、リンパ球は、ポリエチレングリコールなどの適切な融合剤を使用して不死化細胞株と融合され、ハイブリドーマ細胞が形成される（Ｇｏｄｉｎｇ，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，（１９８６）ｐｐ．５９−１０３）。不死化細胞株は、通常、形質転換哺乳類細胞であり、特に齧歯類、ウシ、及びヒト起源の骨髄腫細胞である。通常、ラット又はマウス骨髄腫細胞株が使用される。ハイブリドーマ細胞は、好ましくは、未融合不死化細胞の増殖又は生存を阻害する１つ又は複数の物質を好ましくは含有する、適切な培養培地中で培養されてもよい。例えば、親細胞が酵素ヒポキサンチングアニンホスホリボシルトランスフェラーゼ（ＨＧＰＲＴ又はＨＰＲＴ）を欠く場合、ハイブリドーマの培養培地は典型的には、ＨＧＰＲＴ欠損細胞の増殖を妨げる物質である、ヒポキサンチン、アミノプテリン、及びチミジン（ＨＡＴ培地）を含むであろう。
【０１３８】
好ましい不死化細胞株は、効率的に融合し、選択された抗体産生細胞による抗体の安定した高レベルの発現をサポートし、ＨＡＴ培地などの培地に感受性のものである。より好ましい不死化細胞株は、例えば、Ｓａｌｋ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  Ｃｅｌｌ  Ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ  Ｃｅｎｔｅｒ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，Ｃａｌｉｆ．及びＡｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ，Ｍａｎａｓｓａｓ，Ｖａ．から得られ得るマウス骨髄腫株である。ヒト骨髄腫及びマウス・ヒトヘテロ骨髄腫細胞株もまた、ヒトモノクローナル抗体の産生について記載されている（Ｋｏｚｂｏｒ，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１３３：３００１（１９８４）；Ｂｒｏｄｅｕｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，（１９８７）ｐｐ．５１−６３）。
【０１３９】
次に、その中でハイブリドーマ細胞が培養された培養培地が、ポリペプチドに対して向けられたモノクローナル抗体の存在についてアッセイされ得る。好ましくは、ハイブリドーマ細胞によって産生されるモノクローナル抗体の結合特異性は、免疫沈降によって、又は放射免疫アッセイ（ＲＩＡ）又は酵素結合免疫吸収アッセイ（ＥＬＩＳＡ）などの生体外結合アッセイによって判定される。このような技術及びアッセイは、当該技術分野で公知である。モノクローナル抗体の結合親和性は、例えば、Ｍｕｎｓｏｎ  ａｎｄ  Ｐｏｌｌａｒｄ，Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１０７：２２０（１９８０）の分析によって判定され得る。
【０１４０】
所望のハイブリドーマ細胞が同定された後、クローンは、限界希釈法によってサブクローン化され、標準的な方法（Ｇｏｄｉｎｇ、前出）によって増殖され得る。この目的に適した培養培地としては、例えば、ダルベッコの改変イーグル培地及びＲＰＭＩ−１６４０培地が挙げられる。代案としては、ハイブリドーマ細胞は、哺乳類の腹水として生体内で増殖されてもよい。
【０１４１】
サブクローンによって分泌されたモノクローナル抗体は、例えば、プロテインＡ−セファロース、ヒドロキシアパタイトクロマトグラフィー、ゲル電気泳動、透析、又はアフィニティークロマトグラフィーなどの従来の免疫グロブリン精製手順によって、培養培地又は腹水から単離又は精製されてもよい。
【０１４２】
モノクローナル抗体はまた、米国特許第４，８１６，５６７号明細書に記載されているものなどの組換えＤＮＡ法によって作製されてもよい。本発明のモノクローナル抗体をコードするＤＮＡは、従来の手順を使用して、（例えば、マウス抗体の重鎖及び軽鎖をコードする遺伝子に特異的に結合できる、オリゴヌクレオチドプローブの使用によって）容易に単離され配列決定され得る。本発明のハイブリドーマ細胞は、このようなＤＮＡの好ましい供給源として機能する。ひとたび単離されると、ＤＮＡは発現ベクターに入れられてもよく、次にそれは、サルＣＯＳ細胞、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、又は免疫グロブリンタンパク質を産生しない骨髄腫細胞などの宿主細胞に形質移入されて、組換え宿主細胞におけるモノクローナル抗体の合成が得られる。ＤＮＡはまた、例えば、ヒト重鎖及び軽鎖定常ドメインのコード配列で相同マウス配列を置換することによって（米国特許第４，８１６，５６７号明細書；Ｍｏｒｒｉｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．、前出）、又は非免疫グロブリンポリペプチドのコード配列の全部又は一部を免疫グロブリンコード配列に共有結合させることによって、修飾されてもよい。このような非免疫グロブリンポリペプチドは、本発明の抗体の定常ドメインを置換し得て、又は本発明の抗体の１つの抗原結合部位の可変ドメインを置換し得て、キメラ二価抗体が生成され得る。
【０１４３】
ｂ．ヒト抗体及びヒト化抗体
本発明の抗ＣＤ３９抗体は、ヒト化抗体又はヒト抗体をさらに含んでなってもよい。非ヒト（例えばマウス）抗体などのヒト化形態は、非ヒト免疫グロブリンに由来する最小配列を含有する、キメラ免疫グロブリン、免疫グロブリン鎖又はその断片（抗体のＦｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２又はその他の抗原結合部分配列など）である。ヒト化抗体としては、受容者の相補性決定領域（ＣＤＲ）からの残基が、所望の特異性、親和性、及び能力を有する、マウス、ラット又はウサギなどの非ヒト生物種（供与者抗体）のＣＤＲからの残基によって置換されている、ヒト免疫グロブリン（受容者抗体）が挙げられる。場合によっては、ヒト免疫グロブリンのＦｖフレームワーク残基が、対応する非ヒト残基によって置換される。ヒト化抗体はまた、受容者抗体又は移入ＣＤＲ又はフレームワーク配列のどちらにも見られない、残基を含んでなってもよい。一般的に、ヒト化抗体は、少なくとも１つ及び典型的に２つの可変ドメインの実質的に全てを含み、ＣＤＲ領域の全て又は実質的に全てが非ヒト免疫グロブリンのものに対応し、ＦＲ領域の全て又は実質的に全てがヒト免疫グロブリン共通配列のものである。ヒト化抗体は、至適には、典型的にヒト免疫グロブリン定常領域である、免疫グロブリン定常領域（Ｆｃ）の少なくとも一部もまた含む（Ｊｏｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３２１：５２２−５２５（１９８６）；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３３２：３２３−３２９（１９８８）；及びＰｒｅｓｔａ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．，２：５９３−５９６（１９９２））。
【０１４４】
非ヒト抗体をヒト化する方法は、当該技術分野で周知である。一般的に、ヒト化抗体は、非ヒト起源から導入された１つ又は複数のアミノ酸残基を有する。これらの非ヒトアミノ酸残基は、しばしば「移入」残基と称され、それは典型的に「移入」可変ドメインから得られる。ヒト化は、Ｗｉｎｔｅｒ及び共同研究者ら（Ｊｏｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３２１：５２２−５２５（１９８６）；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３３２：３２３−３２７（１９８８）；Ｖｅｒｈｏｅｙｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２３９：１５３４−１５３６（１９８８））の方法に従って、齧歯類ＣＤＲ群又はＣＤＲ配列でヒト抗体の対応する配列を置換することによって、本質的に実施され得る。したがって、このような「ヒト化」抗体は、キメラ抗体（米国特許第４，８１６，５６７号明細書）であり、その中では、非損傷ヒト可変ドメインよりも実質的に少ない量が、非ヒト生物種からの対応する配列によって置換されている。実際には、ヒト化抗体は典型的に、いくつかのＣＤＲ残基と、おそらくはいくつかのＦＲ残基とが、齧歯類抗体中の類似部位からの残基によって置換されている、ヒト抗体である。
【０１４５】
ヒト抗体はまた、ファージディスプレイライブラリをはじめとする当該技術分野で公知の様々な技術を用いて作製され得る（Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ  ａｎｄ  Ｗｉｎｔｅｒ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２７：３８１（１９９１）；Ｍａｒｋｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２２：５８１（１９９１））。Ｃｏｌｅら及びＢｏｅｒｎｅｒらの技術もまた、ヒトモノクローナル抗体の調製のために利用できる（Ｃｏｌｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ａｎｄ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ，Ａｌａｎ  Ｒ．Ｌｉｓｓ，ｐ．７７（１９８５）；及びＢｏｅｒｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１４７（１）：８６−９５（１９９１））。同様に、ヒト抗体は、例えば、免疫グロブリン遺伝子が部分的に又は完全に不活性化されているマウスなどの遺伝子組換え動物に、ヒト免疫グロブリン遺伝子座を導入することによって作製され得る。挑戦に際して、ヒト抗体の産生が観察され、それは遺伝子の再配列、アセンブリー、及び抗体レパートリーをはじめとする全ての点で、ヒト抗体で観察されるものと酷似している。このアプローチは、例えば、米国特許第５，５４５，８０７号明細書；米国特許第５，５４５，８０６号明細書；米国特許第５，５６９，８２５号明細書；米国特許第５，６２５，１２６号明細書；米国特許第５，６３３，４２５号明細書；米国特許第５，６６１，０１６号明細書、及び以下の科学出版物に記載されている：Ｍａｒｋｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １０，７７９−７８３（１９９２）；Ｌｏｎｂｅｒｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３６８  ８５６−８５９（１９９４）；Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，Ｎａｔｕｒｅ  ３６８，８１２−１３（１９９４）；Ｆｉｓｈｗｉｌｄ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １４，８４５−５１（１９９６）；Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒ，Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １４，８２６（１９９６）；Ｌｏｎｂｅｒｇ  ａｎｄ  Ｈｕｓｚａｒ，Ｉｎｔｅｒｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３  ６５−９３（１９９５）。
【０１４６】
また、本発明の抗体は、上述したように公知の選択及び／又は変異誘発法を用いて親和性成熟させてもよい。好ましい親和性成熟抗体は、成熟抗体がそれから調製された出発抗体（一般的に、マウス、ヒト化又はヒト）よりも５倍、より好ましくは１０倍、なおもより好ましくは２０倍又は３０倍高い親和性を有する。
【０１４７】
ｃ．二重特異性抗体
本明細書に記載の抗ＣＤ３９抗体には、二重特異性分子が含まれる。抗ＣＤ３９抗体又はその抗原結合部分は、誘導体化され得て、又は例えば、別のペプチド又はタンパク質（例えば、受容体に対する別の抗体又はリガンド）などの別の機能性分子に連結され得て、少なくとも２つの異なる結合部位又は標的分子に結合する、二重特異性分子が生成する。本明細書に記載の抗体は、実際には、誘導体化されていてもよいし、２つ以上の他の機能性分子に連結されて、３つ以上の異なる結合部位及び／又は標的分子に結合する多重特異性分子を形成してもよい；このような多重特異性分子もまた、本明細書の用法では「二重特異性分子」という用語に包含されることが意図される。本明細書に記載の二重特異性分子を作製するために、本明細書に記載の抗体は、二重特異性分子が生じるように、（例えば、化学共役、遺伝子融合、非共有結合などによって）別の抗体、抗原結合断片、ペプチド又は結合模倣物などの１つ又は複数のその他の結合分子に、機能的に連結され得る。
【０１４８】
したがって、本明細書で提供されるのは、ＣＤ３９に対する少なくとも１つの第１の結合特異性と、第２の標的エピトープに対する第２の結合特異性とを含む二重特異性分子である。二重特異性分子が多重特異性である本明細書に記載される実施形態では、分子は、第３の結合特異性をさらに含み得る。
【０１４９】
特定の実施形態では、対象の二重特異性（又は場合によっては多重特異性）は、例えば、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＣＴＬＡ−４／Ｂ７−１／Ｂ７−２、ＰＤ−Ｌ２、ＮＫＧ２Ａ、ＫＩＲ、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ−３、ＣＤ９６、ＶＩＳＴＡ及び／又はＴＩＧＩＴなどのチェックポイント阻害剤である、免疫チェックポイントのための１つ又は複数の結合ドメインを含む。特定の実施形態では、多重特異性は、特にＬＡＧ−３、ＴＩＭ−３又はＴＩＧＩＴなどの、Ｔ細胞疲弊に関連するチェックポイントである、Ｔ細胞上のチェックポイントタンパク質に結合する結合ドメインを含む。特定の実施形態では、多重特異性は、ＣＤ３９及び１つ又は複数のその他のＴ細胞関連チェックポイントに結合し、ＣＤ３９及びそれが結合するその他のチェックポイントタンパク質の双方の抗体媒介性標的膜動輸送をもたらす。
【０１５０】
特定の実施形態では、対象の二重特異性（又は場合によっては多重特異性）は、例えば、ＭＨＣＩ分子、ＢＴＬＡ受容体、及びＴｏｌｌリガンドのアゴニスト、及びＯＸ４０、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤＳ、ＩＣＡＭ−１、ＬＦＡ−１（ＣＤ１１ａ／ＣＤ１８）、ＩＣＯＳ（ＣＤ２７８）、及び４−１ＢＢ（ＣＤ１３７）などの共刺激アゴニスト（活性化剤）である、免疫共刺激受容体のための１つ又は複数の結合ドメインを含む。多重特異性に含まれ得る共刺激分子の例としては、ＣＤＳ、ＩＣＡＭ−１、ＧＩＴＲ、ＢＡＦＦＲ、ＨＶＥＭ（ＬＩＧＨＴＲ）、ＳＬＡＭＦ７、ＮＫｐ８０（ＫＬＲＦ１）、ＮＫｐ４４、ＮＫｐ３０、ＮＫｐ４６、ＣＤ１６０、ＣＤ１９、ＣＤ４、ＣＤ８α、ＣＤ８β、ＩＬ２Ｒβ、ＩＬ２Ｒγ、ＩＬ７Ｒα、ＩＴＧＡ４、ＶＬＡ１、ＣＤ４９ａ、ＩＴＧＡ４、ＩＡ４、ＣＤ４９Ｄ、ＩＴＧＡ６、ＶＬＡ−６、ＣＤ４９ｆ、ＩＴＧＡＤ、ＣＤ１１ｄ、ＩＴＧＡＥ、ＣＤ１０３、ＩＴＧＡＬ、ＣＤ１１ａ、ＬＦＡ−１、ＩＴＧＡＭ、ＣＤ１１ｂ、ＩＴＧＡＸ、ＣＤ１１ｃ、ＩＴＧＢ１、ＣＤ２９、ＩＴＧＢ２、ＣＤ１８、ＬＦＡ−１、ＩＴＧＢ７、ＮＫＧ２Ｄ、ＮＫＧ２Ｃ、ＴＮＦＲ２、ＴＲＡＮＣＥ／ＲＡＮＫＬ、ＤＮＡＭ１（ＣＤ２２６）、ＳＬＡＭＦ４（ＣＤ２４４，２Ｂ４）、ＣＤ８４、ＣＤ９６（Ｔａｃｔｉｌｅ）、ＣＥＡＣＡＭ１、ＣＲＴＡＭ、Ｌｙ９（ＣＤ２２９）、ＣＤ１６０（ＢＹ５５）、ＰＳＧＬ１、ＣＤ１００（ＳＥＭＡ４Ｄ）、ＣＤ６９、ＳＬＡＭＦ６（ＮＴＢ−Ａ、Ｌｙ１０８）、ＳＬＡＭ（ＳＬＡＭＦ１、ＣＤ１５０、ＩＰＯ−３）、ＢＬＡＭＥ（ＳＬＡＭＦ８）、ＳＥＬＰＬＧ（ＣＤ１６２）、ＬＴＢＲ、ＬＡＴ、ＧＡＤＳ、ＳＬＰ−７６、ＰＡＧ／Ｃｂｐ、ＣＤ１９ａ、及びＣＤ８３リガンドが挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【０１５１】
一実施形態では、本明細書に記載の二重特異性分子は、少なくとも１つの抗体、又は例えば、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、又は一本鎖Ｆｖをはじめとするその抗原結合断片を結合特異性として含む。抗体はまた、軽鎖又は重鎖二量体、又はＦｖ又は一本鎖（ｓｃＦｖ）コンストラクトなどのそれらの任意の最小断片であってもよい。
【０１５２】
二重特異性分子のそれらの特異的標的への結合は、酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）、放射免疫アッセイ（ＲＩＡ）、ＦＡＣＳ分析、生物検定（例えば、増殖阻害）、又はウエスタンブロットアッセイなどの技術分野で認められた方法を用いて確認され得る。これらのアッセイのそれぞれは、一般的に、特に関心のある複合体に特異的な標識試薬（例えば、抗体）を使用することによって、特に関心のあるタンパク質−抗体複合体の存在を検出する。
【０１５３】
二重特異性抗体を作製するための方法は、当該技術分野で公知である。伝統的に、二重特異性抗体の組換え生産は、２つの重鎖が異なる特異性を有する２つの免疫グロブリン重鎖／軽鎖対の同時発現に基づいている（Ｍｉｌｓｔｅｉｎ  ａｎｄ  Ｃｕｅｌｌｏ，Ｎａｔｕｒｅ，３０５：５３７−５３９（１９８３））。免疫グロブリンの重鎖及び軽鎖の無作為の組み合わせのため、これらのハイブリドーマ（クアドローマ）は１０種類の抗体分子の可能な混合物を生じるが、そのうちの１つだけが正しい二重特異性構造を有する。正しい分子の精製は、通常、アフィニティークロマトグラフィーのステップによって行われる。同様の手順は、１９９３年５月１３日に公開された国際公開第９３／０８８２９号パンフレット、及びＴｒａｕｎｅｃｋｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，ＥＭＢＯ  Ｊ．，１０：３６５５−３６５９（１９９１）で開示されている。
【０１５４】
所望の結合特異性（抗体−抗原結合部位）を有する抗体可変ドメインを免疫グロブリン定常ドメイン配列に融合させ得る。融合は、好ましくは、ヒンジ、ＣＨ２、及びＣＨ３領域の少なくとも一部を含む、免疫グロブリン重鎖定常ドメインとの融合である。融合物の少なくとも１つに存在する軽鎖結合に必要な部位を含有する、第１の重鎖定常領域（ＣＨ１）を有することが好ましい。免疫グロブリン重鎖融合物、及び必要に応じて免疫グロブリン軽鎖をコードするＤＮＡは、別々の発現ベクターに挿入され、適切な宿主生物に同時形質移入される。二重特異性抗体の作製の詳細については、例えば、Ｓｕｒｅｓｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，１２１：２１０（１９８６）を参照されたい。
【０１５５】
国際公開第９６／２７０１１号パンフレットに記載されている別のアプローチによれば、１対の抗体分子の間の界面が操作されて、組換え細胞培養物から回収されるヘテロ二量体の百分率が最大化され得る。好ましい境界面は、抗体定常ドメインのＣＨ３領域の少なくとも一部を含む。この方法では、第１の抗体分子の界面からの１つ又は複数の小型アミノ酸側鎖が、より大型の側鎖（例えば、チロシン又はトリプトファン）で置換される。より大型の側鎖と同一の又は類似サイズの代償性「窩洞」は、より大型のアミノ酸側鎖をより小型のもの（例えば、アラニン又はスレオニン）で置き換えることによって、第２の抗体分子の界面に作られる。これは、ホモ二量体などのその他の不要な最終生成物よりも、ヘテロ二量体の収量を増加させる機序を提供する。
【０１５６】
二重特異性抗体は、全長抗体又は抗原結合断片（例えば、Ｆ（ａｂ’）２二重特異性抗体）として調製され得る。抗原結合断片から二重特異性抗体を作製するための技術は、文献に記載されている。例えば、二重特異性抗体は、化学結合を用いて調製され得る調製され得る（ｃａｎ  ｂｅ  ｐｒｅｐａｒｅｄ  ｃａｎ  ｂｅ  ｐｒｅｐａｒｅｄ）。Ｂｒｅｎｎａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２２９：８１（１９８５）は、無傷の抗体をタンパク質分解的に切断してＦ（ａｂ’）２断片を作製する手順を記載する。これらの断片は、ジチオール錯化剤である亜ヒ酸ナトリウムの存在下で還元され、隣接するジチオールを安定化して、分子間ジスルフィド形成を妨げる。次に生じたＦａｂ’断片は、チオニトロ安息香酸（ＴＮＢ）誘導体に変換される。次に、Ｆａｂ’−ＴＮＢ誘導体の１つは、メルカプトエチルアミンでの還元によってＦａｂ’−チオールに再変換され、等モル量のその他のＦａｂ’−ＴＮＢ誘導体と混合されて、二重特異性抗体が形成する。生成された二重特異性抗体は、酵素の選択的固定化のための薬剤として使用され得る。
【０１５７】
Ｆａｂ’断片は大腸菌から直接回収され、化学的に結合されて二重特異性抗体が形成してもよい。Ｓｈａｌａｂｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１７５：２１７−２２５（１９９２）は、完全ヒト化二重特異性抗体Ｆ（ａｂ’）２分子の作製について記載する。各Ｆａｂ’断片は大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）から別々に分泌され、生体外で直接化学共役を受けて二重特異性抗体が形成した。このように形成された二重特異性抗体は、ＥｒｂＢ２受容体を過剰発現する細胞及び正常なヒトＴ細胞に結合でき、並びにヒト乳房腫瘍標的に対するヒト細胞傷害性リンパ球の溶解活性を誘発できた。
【０１５８】
組換え細胞培養物から直接二重特異性抗原結合断片を作製し単離するための様々な技術もまた記載されている。例えば、二重特異性抗体が、ロイシンジッパーを使用して作製されている。Ｋｏｓｔｅｌｎｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４８（５）：１５４７−１５５３（１９９２）。Ｆｏｓ及びＪｕｎタンパク質からのロイシンジッパーペプチドは、遺伝子融合によって２つの異なる抗体のＦａｂ’部分と連結された。抗体ホモ二量体はヒンジ領域で還元されて単量体を形成し、次に再酸化されて抗体ヘテロ二量体を形成した。この方法は、抗体ホモ二量体の作製のためにもまた利用され得る。Ｈｏｌｌｉｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９０：６４４４−６４４８（１９９３）によって記載された「ダイアボディ」技術は、二重特異性抗原結合断片を作製するための代替機序を提供している。この断片は、同一鎖上の２つのドメイン間の対合を可能にするには短すぎるリンカーによって、軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）に接続された、重鎖可変ドメイン（ＶＨ）を含む。したがって、１つの断片のＶＨドメイン及びＶＬドメインは、別の断片の相補的なＶＬドメイン及びＶＨドメインと、強制的に対合され、それによって２つの抗原結合部位が形成される。一本鎖Ｆｖ（ｓＦｖ）二量体の使用によって二重特異性抗原結合断片を作製するための別のストラテジーも報告されている。Ｇｒｕｂｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５２：５３６８（１９９４）を参照されたい。
【０１５９】
２より大きな結合価を有する抗体が企図される。非限定的な一例として、三重特異性抗体が調製され得る。例えば、Ｔｕｔｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４７：６０（１９９１）を参照されたい。
【０１６０】
ｄ．ヘテロコンジュゲート抗体
ヘテロコンジュゲート抗体もまた、本発明の範囲内である。ヘテロコンジュゲート抗体は、２つの共有結合的に結合した抗体から構成される。このような抗体は、例えば、免疫系細胞を望ましくない細胞へとターゲティングするために（米国特許第４，６７６，９８０号明細書）、及びＨＩＶ感染症の治療のために（国際公開第９１／００３６０号パンフレット；国際公開第９２／２００３７３号パンフレット；欧州特許第０３０８９号明細書）提案されている。抗体は、架橋剤が関与するものをはじめとする合成タンパク質化学における既知の方法を使用して、生体外で調製されてもよいことが企図される。例えば、免疫毒素は、ジスルフィド交換反応を用いて、又はチオエーテル結合を形成することによって構築されてもよい。この目的に適した試薬の例としては、イミノチオレート及びメチル−４−メルカプトブチリミデート、及び例えば、米国特許第４，６７６，９８０号号明細書に開示されているものが挙げられる。
【０１６１】
ｅ．エフェクター機能操作
例えば、がんの治療における抗ＣＤ３９抗体の有効性を高めるために、エフェクター機能に関して本発明の抗体を改変することが望ましい場合がある。例えば、システイン残基がＦｃ領域に導入されてもよく、それによって、この領域における鎖間ジスルフィド結合形成を可能にする。このように生成されたホモ二量体抗体は、改善された内部移行能力及び／又は補体媒介性細胞殺滅及び抗体依存性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）の増加を有してもよい。Ｃａｒｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｅｘｐ  Ｍｅｄ．，１７６：１１９１−１１９５（１９９２）ａｎｄ  Ｓｈｏｐｅｓ，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１４８：２９１８−２９２２（１９９２）を参照されたい。特定の好ましい実施形態では、操作されるエフェクター機能は、例えば、細胞殺滅によって免疫細胞集団を枯渇させることなく、免疫細胞からのＣＤ３９のＦｃγＲＩＩＩ結合依存性除去（抗ＣＤ３９抗体媒介性標的膜動輸送などによる）を誘導する、抗ＣＤ３９抗体の能力である。
【０１６２】
抗腫瘍活性が増強されたホモ二量体抗体はまた、Ｗｏｌｆｆ  ｅｔ  ａｌ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，５３：２５６０−２５６５（１９９３）に記載されているように、ヘテロ二機能性架橋剤を使用して調製されてもよい。代案としては、二重Ｆｃ領域を有し、それによって増強されたＣＤ３９トロゴサイトーシス能力を有してもよい抗体が操作され得る。Ｓｔｅｖｅｎｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｔｉ−Ｃａｎｃｅｒ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ，３：２１９−２３０（１９８９）を参照されたい。
【０１６３】
いくつかの実施形態では、マウス抗体である抗ＣＤ３９抗体が生成された。例えば、マウスモノクローナル５Ｆ２は、マウスＣＤ３９に特異的に結合し、ヒトＣＤ３９との交差反応性がある。５Ｆ２抗体の軽鎖及び重鎖のアミノ酸配列は、標準技術を用して判定された。この抗体の軽鎖可変領域配列は、
2021527138.tif 000003
であり、この抗体の重鎖可変領域配列は、
2021527138.tif 000004
である。
【０１６４】
いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３９抗体又はその抗原結合断片は、マウス５Ｆ２抗体のヒト化バージョンである。
【０１６５】
いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３９抗体又はその抗原結合断片は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１と少なくとも６０％同一であり、なおもより好ましくはＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１と少なくとも６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９７％、９９％、又は１００％同一である、少なくとも１つの軽鎖可変部分を含み、ヒトＣＤ３９に特異的に結合できる。
【０１６６】
いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３９抗体又はその抗原結合断片は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２と少なくとも６０％同一であり、なおもより好ましくはＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２と少なくとも６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９７％、９９％、又は１００％同一である少なくとも１つの重鎖可変部分を含み、ヒトＣＤ３９に特異的に結合できる。
【０１６７】
特定の実施形態では、抗ＣＤ３９抗体は、ヒト化抗体は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１及び／又は２のＣＤＲ、又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１又は２と少なくとも６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９７％、９９％、又は１００％同一であるＣＤＲと、ヒトＣＤ３９に特異的に結合できる抗原結合部位を有するヒト化重鎖及び軽鎖を形成するためのヒトフレームワーク配列とを含む。
【０１６８】
特定の実施形態では、本明細書で提供される抗体はキメラ抗体である。一例では、キメラ抗体は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１又は２からの可変領域の片方又は双方などの非ヒト可変領域（例えば、マウス、ラット、ハムスター、ウサギ、又はサルなどの非ヒト霊長類由来の可変領域）と、ヒト定常領域とを含む。本明細書で関心のあるキメラ抗体としては、非ヒト霊長類（例えば、ヒヒ、アカゲザル、又はカニクイザルなどの旧世界ザル）に由来する可変ドメイン抗原結合配列と、ヒト定常領域配列とを含む「霊長類化」抗体が挙げられる。さらなる実施例では、キメラ抗体は、クラス又はサブクラスが親抗体のものから変更された、「クラススイッチ」抗体である。キメラ抗体としては、その抗原結合断片が挙げられる。
【０１６９】
その他の実施形態では、生成された抗ＣＤ３９抗体は、ウサギモノクローナル抗体であった。例えば、本明細書でＰＢ１、ＰＢ２、ＰＢ３、ＰＢ４、及びＰＢ５と称されるモノクローナル抗体は、ヒトＣＤ３９に特異的に結合するモノクローナル抗体である。ＰＢ１〜ＰＢ５抗体の軽鎖及び重鎖のアミノ酸配列は標準技術を用いて決定され、重鎖及び軽鎖の配列は以下のとおりである：
ＰＢ１
重鎖：
2021527138.tif 000005
軽鎖：
2021527138.tif 000006
ＰＢ２
重鎖：
2021527138.tif 000007
軽鎖：
2021527138.tif 000008
ＰＢ３
重鎖：
2021527138.tif 000009
軽鎖：
2021527138.tif 000010
ＰＢ４
重鎖：
2021527138.tif 000011
軽鎖：
2021527138.tif 000012
ＰＢ５
重鎖：
2021527138.tif 000013
軽鎖：
2021527138.tif 000014
【０１７０】
いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３９抗体又はその抗原結合断片は、ＰＢ１、ＰＢ２、ＰＢ３、ＰＢ４又はＰＢ５抗体のヒト化バージョンである。
【０１７１】
いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３９抗体又はその抗原結合断片は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３の可変領域と少なくとも６０％同一であり、なおもより好ましくはＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３の可変領域と少なくとも６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９７％、９９％、又は１００％同一である、少なくとも１つの重鎖可変部分を含み、ヒトＣＤ３９に特異的に結合できる。
【０１７２】
いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３９抗体又はその抗原結合断片は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５の可変領域と少なくとも６０％同一であり、なおもより好ましくはＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５の可変領域と少なくとも６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９７％、９９％、又は１００％同一である、少なくとも１つの重鎖可変部分を含み、ヒトＣＤ３９に特異的に結合できる。
【０１７３】
いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３９抗体又はその抗原結合断片は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７の可変領域と少なくとも６０％同一であり、なおもより好ましくはＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７の可変領域と少なくとも６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９７％、９９％、又は１００％同一である、少なくとも１つの重鎖可変部分を含み、ヒトＣＤ３９に特異的に結合できる。
【０１７４】
いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３９抗体又はその抗原結合断片は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９の可変領域と少なくとも６０％同一であり、なおもより好ましくはＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９の可変領域と少なくとも６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９７％、９９％、又は１００％同一である、少なくとも１つの重鎖可変部分を含み、ヒトＣＤ３９に特異的に結合できる。
【０１７５】
いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３９抗体又はその抗原結合断片は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１の可変領域と少なくとも６０％同一であり、なおもより好ましくはＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１の可変領域と少なくとも６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９７％、９９％、又は１００％同一である、少なくとも１つの重鎖可変部分を含み、ヒトＣＤ３９に特異的に結合できる。
【０１７６】
いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３９抗体又はその抗原結合断片は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４の可変領域と少なくとも６０％同一であり、なおもより好ましくはＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４の可変領域と少なくとも６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９７％、９９％、又は１００％同一である、少なくとも１つの軽鎖可変領域を含み、ヒトＣＤ３９に特異的に結合できる。
【０１７７】
いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３９抗体又はその抗原結合断片は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６の可変領域と少なくとも６０％同一であり、なおもより好ましくはＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６の可変領域と少なくとも６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９７％、９９％、又は１００％同一である、少なくとも１つの軽鎖可変領域を含み、ヒトＣＤ３９に特異的に結合できる。
【０１７８】
いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３９抗体又はその抗原結合断片は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４８の可変領域と少なくとも６０％同一であり、なおもより好ましくはＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８の可変領域と少なくとも６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９７％、９９％、又は１００％同一である、少なくとも１つの軽鎖可変領域を含み、ヒトＣＤ３９に特異的に結合できる。
【０１７９】
いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３９抗体又はその抗原結合断片は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０の可変領域と少なくとも６０％同一であり、なおもより好ましくはＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０の可変領域と少なくとも６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９７％、９９％、又は１００％同一である、少なくとも１つの軽鎖可変領域を含み、ヒトＣＤ３９に特異的に結合できる。
【０１８０】
いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３９抗体又はその抗原結合断片は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２の可変領域と少なくとも６０％同一であり、なおもより好ましくはＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２の可変領域と少なくとも６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９７％、９９％、又は１００％同一である、少なくとも１つの軽鎖可変領域を含み、ヒトＣＤ３９に特異的に結合できる。
【０１８１】
特定の実施形態では、重鎖のＦｃドメインは、ヒトＩｇＧ１又はＩｇＧ３ Ｆｃアイソタイプである。ヒトＩｇＧ１ Ｆｃを含むＰＢ１〜ＰＢ５キメラの例示的な配列は、以下のとおりである：
2021527138.tif 000015
2021527138.tif 000016
【０１８２】
特定の実施形態では、抗ＣＤ３９抗体は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３のＣＤＲを有する重鎖及び／又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４のＣＤＲを有する軽鎖、又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３及び／又は４のものと少なくとも６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９７％、９９％、又は１００％同一であるＣＤＲと、ヒトＣＤ３９に特異的に結合できる抗原結合部位を有するヒト化重鎖及び軽鎖を形成するためのヒトフレームワーク配列とを含む、さらなるヒト化抗体である。
【０１８３】
特定の実施形態では、抗ＣＤ３９抗体は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５のＣＤＲを有する重鎖及び／又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６のＣＤＲを有する軽鎖、又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５及び／又は６のものと少なくとも６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９７％、９９％、又は１００％同一であるＣＤＲと、ヒトＣＤ３９に特異的に結合できる抗原結合部位を有するヒト化重鎖及び軽鎖を形成するためのヒトフレームワーク配列とを含む、さらなるヒト化抗体である。
【０１８４】
特定の実施形態では、抗ＣＤ３９抗体は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７のＣＤＲを有する重鎖及び／又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８のＣＤＲを有する軽鎖、又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７及び／又は８のものと少なくとも６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９７％、９９％、又は１００％同一であるＣＤＲと、ヒトＣＤ３９に特異的に結合できる抗原結合部位を有するヒト化重鎖及び軽鎖を形成するためのヒトフレームワーク配列とを含む、さらなるヒト化抗体である。
【０１８５】
特定の実施形態では、抗ＣＤ３９抗体は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９のＣＤＲを有する重鎖及び／又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０のＣＤＲを有する軽鎖、又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９及び／又は１０のものと少なくとも６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９７％、９９％、又は１００％同一であるＣＤＲと、ヒトＣＤ３９に特異的に結合できる抗原結合部位を有するヒト化重鎖及び軽鎖を形成するためのヒトフレームワーク配列とを含む、さらなるヒト化抗体である。
【０１８６】
特定の実施形態では、抗ＣＤ３９抗体は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１のＣＤＲを有する重鎖及び／又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２のＣＤＲを有する軽鎖、又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１及び／又は１２のものと少なくとも６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９７％、９９％、又は１００％同一であるＣＤＲと、ヒトＣＤ３９に特異的に結合できる抗原結合部位を有するヒト化重鎖及び軽鎖を形成するためのヒトフレームワーク配列とを含む、さらなるヒト化抗体である。
【０１８７】
特定の実施形態では，抗ＣＤ３９抗体は、ＣＡＲＧＧＡＶＹＡＡＹＡＧＶＦＦＧＬＷ、ＣＶＲＲＶＮＧＹＧＬＷ、ＣＡＳＤＳＧＡＰＧＳＳＤＳＴＬＷ、ＣＡＲＤＱＹＤＤＳＧＮＬＷ、及びＣＡＲＤＱＹＤＤＳＧＮＬＷからなる群より選択されるＣＤＲ３配列を有する重鎖と、ＣＱＳＹＦＧＩＧＧＹＧＬＡＦ、ＣＱＧＣＹＧＩＳＳＹＧＤＳＦ、ＣＱＳＹＹＡＬＳＴＹＧＴＡＦ、ＣＱＮＷＹＧＩＳＳＹＧＲＡＦ、及びＣＱＮＷＹＧＩＳＴＹＧＲＡＦからなる群より選択されるＣＤＲ３配列を有する軽鎖とを含む、ヒト化抗体である。
【０１８８】
その他の実施形態では、抗ＣＤ３９抗体の重鎖及び軽鎖は、ＰＢ１、ＰＢ２、ＰＢ３、ＰＢ４又はＰＢ５モノクローナルの（対応する）重鎖及び軽鎖のコード配列：
ＰＢ１
重鎖：
2021527138.tif 000017
軽鎖：
2021527138.tif 000018
ＰＢ２
重鎖：
2021527138.tif 000019
軽鎖：
2021527138.tif 000020
ＰＢ３
重鎖：
2021527138.tif 000021
軽鎖：
2021527138.tif 000022
ＰＢ４
重鎖：
2021527138.tif 000023
軽鎖：
2021527138.tif 000024
ＰＢ５
重鎖：
2021527138.tif 000025
軽鎖：
2021527138.tif 000026
と同一であるか、又はストリンジェントな条件下（例えば、４５℃での６×塩化ナトリウム／クエン酸ナトリウム（ＳＳＣ）、及び５０〜６５℃での０．２×ＳＳＣ／０．１％ＳＤＳでの洗浄など）でそれとハイブリッド形成する、核酸によってコードされ得る。
【０１８９】
その他の実施形態では、抗ＣＤ３９抗体の重鎖及び軽鎖の可変領域は、ＰＢ１、ＰＢ２、ＰＢ３、ＰＢ４又はＰＢ５モノクローナル（上記）の重鎖及び軽鎖の可変領域（対応する）コード配列と同一であるか、又はストリンジェントな条件下（例えば、４５℃での６×塩化ナトリウム／クエン酸ナトリウム（ＳＳＣ）、及び５０〜６５℃での０．２×ＳＳＣ／０．１％ＳＤＳでの洗浄など）でそれとハイブリッド形成する、核酸によってコードされ得る。
【０１９０】
その他の実施形態では、抗ＣＤ３９抗体の重鎖及び軽鎖のＣＤＲは、ＰＢ１、ＰＢ２、ＰＢ３、ＰＢ４又はＰＢ５モノクローナル（上記）の重鎖及び軽鎖のＣＤＲ（対応する）コード配列と同一であるか、又はストリンジェントな条件下（例えば、４５℃での６×塩化ナトリウム／クエン酸ナトリウム（ＳＳＣ）、及び５０〜６５℃での０．２×ＳＳＣ／０．１％ＳＤＳでの洗浄など）でそれとハイブリッド形成する、核酸によってコードされ得る。
【０１９１】
特定の実施形態では、キメラ抗体はヒト化抗体である。典型的には、非ヒト抗体はヒト化されて、親非ヒト抗体の特異性及び親和性を保持しながら、ヒトに対する免疫原性が低下される。一般的には、ヒト化抗体は１つ又は複数の可変ドメインを含み、その中では、例えばＣＤＲなどのＨＶＲ（又はその一部）が非ヒト抗体に由来し、ＦＲ（又はその一部）がヒト抗体配列に由来する。ヒト化抗体はまた、任意で、ヒト定常領域の少なくとも一部を含むであろう。いくつかの実施形態では、ヒト化抗体中のいくつかのＦＲ残基は、非ヒト抗体（例えば、それにＨＶＲ残基が由来する抗体）からの対応する残基で置換され、例えば、抗体の特異性又は親和性が回復又は改善される。
【０１９２】
ヒト化抗体及びそれらを作製する方法は、例えば、Ａｌｍａｇｒｏ  ａｎｄ  Ｆｒａｎｓｓｏｎ，Ｆｒｏｎｔ．Ｂｉｏｓｃｉ．１３：１６１９−１６３３（２００８）でレビューされており、例えば、Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３３２：３２３−３２９（１９８８）；Ｑｕｅｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ  Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８６：１００２９−１００３３（１９８９）；米国特許第５，８２１，３３７号明細書、米国特許第７，５２７，７９１号明細書、米国特許第６，９８２，３２１号明細書、及び米国特許第７，０８７，４０９号明細書；Ｋａｓｈｍｉｒｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ３６：２５−３４（２００５）（特異性決定領域（ＳＤＲ）グラフト化を説明する）；Ｐａｄｌａｎ，Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２８：４８９−４９８（１９９１）（「表面再構成」を説明する）；Ｄａｌｌ’Ａｃｑｕａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ３６：４３−６０（２００５）（「ＦＲシャフリング」を説明する）；及びＯｓｂｏｕｒｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ３６：６１−６８（２００５）；及びＫｌｉｍｋａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ，８３：２５２−２６０（２０００）（ＦＲシャフリングへの「誘導される選択」アプローチを説明する）でさらに説明されている。
【０１９３】
ヒト化に使用できるヒトフレームワーク領域としては、「最良適合」法を使用して選択されたフレームワーク領域（例えば、Ｓｉｍｓ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５１：２２９６（１９９３）を参照されたい）；軽鎖又は重鎖可変領域の特定のサブグループのヒト抗体のコンセンサス配列に由来するフレームワーク領域（例えば、Ｃａｒｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８９：４２８５（１９９２）；及びＰｒｅｓｔａ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１５１：２６２３（１９９３）を参照されたい）；ヒト成熟（体細胞変異）フレームワーク領域又はヒト生殖細胞系フレームワーク領域（例えば、Ａｌｍａｇｒｏ  及びＦｒａｎｓｓｏｎ，Ｆｒｏｎｔ．Ｂｉｏｓｃｉ．１３：１６１９−１６３３（２００８）を参照されたい）；及びＦＲライブラリーのスクリーニングから得られたフレームワーク領域（例えば、Ｂａｃａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２：１０６７８−１０６８４（１９９７）及びＲｏｓｏｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７１：２２６１１−２２６１８（１９９６）を参照されたい）が挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【０１９４】
特定の実施形態では、本明細書で提供される抗ＣＤ３９抗体は、ヒト抗体である。ヒト抗体は、当該技術分野で公知の様々な技術を用いて作製され得る。ヒト抗体は、ｖａｎ  Ｄｉｊｋ  ａｎｄ  ｖａｎ  ｄｅ  Ｗｉｎｋｅｌ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．５：３６８−７４（２００１）；及びＬｏｎｂｅｒｇ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２０：４５０−４５９（２００８）で概説される。
【０１９５】
例えば、ヒト抗体は、抗原チャレンジに応答して、無傷のヒト抗体を産生し、又はヒト可変領域を有する無傷の抗体を産生するように改変されている、遺伝子組換え動物に、免疫原を投与することによって調製されてもよい。このような動物は、典型的に、内因性免疫グロブリン遺伝子座を置き換え、又は染色体外に存在し、又は動物の染色体にランダムに組み込まれる、ヒト免疫グロブリン遺伝子座の全部又は一部を含む。このような遺伝子組換えマウスでは、内因性免疫グロブリン遺伝子座は、一般に不活性化されている。遺伝子組換え動物からヒト抗体を得る方法のレビューについては、Ｌｏｎｂｅｒｇ，Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．２３：１１１７−１１２５（２００５）を参照されたい。ＸＥＮＯＭＯＵＳＥ技術を説明する米国特許第６，０７５，１８１号明細書及び米国特許第６，１５０，５８４号明細書；ＨｕＭＡＢ技術を説明する米国特許第５，７７０，４２９号明細書；Ｋ−Ｍ  ＭＯＵＳＥ技術を説明する米国特許第７，０４１，８７０号明細書；及びＶＥＬＯＣＩＭＯＵＳＥ技術を説明する米国特許出願公開第２００７／００６１９００号明細書）もまた参照されたい。このような動物によって産生された無傷の抗体からのヒト可変領域は、例えば、異なるヒト定常領域と組み合わせることによって、さらに改変されてもよい。
【０１９６】
ヒト抗体はまた、ハイブリドーマベースの方法によって作製され得る。ヒトモノクローナル抗体を作製するためのヒト骨髄腫及びマウス−ヒトヘテロ骨髄腫細胞株が記載されている。（例えば、Ｋｏｚｂｏｒ  Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１３３：３００１（１９８４）；Ｂｒｏｄｅｕｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，ｐｐ．５１−６３（Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９８７）；及びＢｏｅｒｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１４７：８６（１９９１）を参照されたい）。ヒトＢ細胞ハイブリドーマ技術を介して作製されたヒト抗体はまた、Ｌｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ  ＵＳＡ，１０３：３５５７−３５６２（２００６）にも記載されている。さらなる方法としては、例えば、米国特許第７，１８９，８２６号明細書（ハイブリドーマ細胞株からのモノクローナルヒトＩｇＭ抗体の作製を説明する）、及びＮｉ，Ｘｉａｎｄａｉ  Ｍｉａｎｙｉｘｕｅ，２６（４）：２６５−２６８（２００６）（ヒト−ヒトハイブリドーマを説明する）に記載されているものが挙げられる。ヒトハイブリドーマ技術（トリオーマ技術）はまた、Ｖｏｌｌｍｅｒｓ  ａｎｄ  Ｂｒａｎｄｌｅｉｎ，Ｈｉｓｔｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｈｉｓｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｙ，２０（３）：９２７−９３７（２００５）；及びＶｏｌｌｍｅｒｓ  ａｎｄ  Ｂｒａｎｄｌｅｉｎ，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ａｎｄ  Ｆｉｎｄｉｎｇｓ  ｉｎ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  ａｎｄ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，２７（３）：１８５−９１（２００５）にも記載されている。
【０１９７】
ヒト抗体はまた、ヒト由来のファージ、酵母又は細菌ディスプレイライブラリから選択されたＦｖクローン可変ドメイン配列を単離することによって作製されてもよい。次に、このような可変ドメイン配列は、所望のヒト定常ドメインと組み合わされてもよい。抗体ライブラリからヒト抗体を選択するための技術を以下に記載する。
【０１９８】
例示のために、本発明の抗ＣＤ３９抗体は、所望の活性又は活性群を有する抗体のコンビナトリアルライブラリーをスクリーニングすることによって単離されてもよい。例えば、ファージ又は酵母ディスプレイライブラリを作製し、所望の結合特性を有する抗体についてこのようなライブラリをスクリーニングするための様々な方法が、当該技術分野で知られている。このような方法は、例えば、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ  ｅｔ  ａｌ．ｉｎ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  １７８：１−３７（Ｏ’Ｂｒｉｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，ｅｄ．，Ｈｕｍａｎ  Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，Ｎ．Ｊ．，２００１）でレビューされ、例えば、ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３４８：５５２−５５４；Ｃｌａｃｋｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３５２：６２４−６２８（１９９１）；Ｍａｒｋｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２２：５８１−５９７（１９９２）；Ｍａｒｋｓ  ａｎｄ  Ｂｒａｄｂｕｒｙ，ｉｎ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ２４８：１６１−１７５（Ｌｏ，ｅｄ．，Ｈｕｍａｎ  Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，Ｎ．Ｊ．，２００３）；Ｓｉｄｈｕ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３３８（２）：２９９−３１０（２００４）；Ｌｅｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３４０（５）：１０７３−１０９３（２００４）；Ｆｅｌｌｏｕｓｅ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  １０１（３４）：１２４６７−１２４７２（２００４）；及びＬｅｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  ２８４（１−２）：１１９−１３２（２００４）でさらに説明されている。
【０１９９】
ファージディスプレイ法の一例として、Ｗｉｎｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１２：４３３−４５５（１９９４）に記載されているように、ＶＨ及びＶＬ遺伝子のレパートリーがポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）によって別々にクローン化され、ファージライブラリ中でランダムに組換えられ、次にそれは抗原結合ファージについてスクリーニングされ得る。ファージは典型的には、一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）断片又はＦａｂ断片のどちらかとして、抗原結合断片を提示する。免疫源からのライブラリは、ハイブリドーマを構築する必要なしに、免疫原に対する高親和性抗体を提供する。代案としては、Ｇｒｉｆｆｉｔｈｓ  ｅｔ  ａｌ．，ＥＭＢＯ  Ｊ，１２：７２５−７３４（１９９３）によって記載されたように、（例えば、ヒトから）ナイーブレパートリーがクローン化され、いかなる免疫化もなしに、広範囲の非自己及び自己抗原に対する抗体の単一起源が提供され得る。最後に、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ  ａｎｄ  Ｗｉｎｔｅｒ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２７：３８１−３８８（１９９２）によって記載されたように、ナイーブライブラリはまた、幹細胞から非再構成型Ｖ遺伝子セグメントをクローン化し、ランダム配列を含有するＰＣＲプライマーを使用して、高度に可変性のＣＤＲ３領域をコードし、生体外で再配列を達成することによって合成的に作製され得る。ヒト抗体ファージライブラリを記載する特許刊行物としては、例えば、米国特許第５，７５０，３７３号明細書、及び米国特許公開第２００５／００７９５７４号明細書、米国特許公開第２００５／０１１９４５５号明細書、米国特許公開第２００５／０２６６０００号明細書、米国特許公開第２００７／０１１７１２６号明細書、米国特許公開第２００７／０１６０５９８号明細書、米国特許公開第２００７／０２３７７６４号明細書、米国特許公開第２００７／０２９２９３６号明細書、及び米国特許公開第２００９／０００２３６０号明細書が挙げられる。
【０２００】
ヒト抗体ライブラリから単離された抗体又は抗原結合断片は、本明細書ではヒト抗体又はヒト抗原結合断片と見なされる。
【０２０１】
ＦｃｙＲＩＩＩ結合はまた、最先端技術による方法に従って、例えば、抗体のＦｃ部分のアミノ酸配列又はＦｃ部分のグリコシル化を改変することによって増加させ得る（例えば、欧州特許第２２３５０６１号明細書を参照されたい）。特定の実施形態では、対象の抗体は細胞によって産生され、その中では、グリコシル化された場合、抗体上のオリゴ糖鎖の５０％未満がα−１，６−フコースを含有する。典型的には、「低フコシル化」抗体調製物中では、オリゴ糖鎖の約４０％未満、約３０％未満、約２０％未満、約１０％未満、又は５％未満、は約１％未満が、α−１，６−フコースを含有する。「脱フコシル化」抗体は、ＩｇＧ重鎖のＣＨ２ドメインに結合した炭水化物中に、α−１，６−フコースを欠く。Ｍｏｒｉ，Ｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｙｔｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ５５（２００７）１０９及びＳａｔｏｈ  Ｍ，ｅｔ  ａｌ．，Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ  Ｂｉｏｌ  Ｔｈｅｒ．６（２００６）１１６１−１１７３は、脱フコシル化抗体を作製するためのＦＵＴ８（α−１，６−フコシルトランスフェラーゼ）遺伝子ノックアウトＣＨＯ系統について述べている。
【０２０２】
ＩＶ．発現ベクター
特定の実施形態では、組換え発現ベクターを使用して、本明細書に記載の抗ＣＤ３９抗体をコードするＤＮＡが増幅され発現される。例えば、組換え発現ベクターは、哺乳類、微生物、ウイルス又は昆虫の遺伝子に由来する適切な転写及び／又は翻訳調節エレメントと作動可能に連結された、抗ＣＤ３９抗体のポリペプチド鎖をコードする合成又はｃＤＮＡ由来のＤＮＡ断片を有する、複製可能なＤＮＡコンストラクトであり得る。転写単位は、一般的には、（１）例えば、転写プロモーター又はエンハンサーなどの遺伝子発現において調節的役割を有する、１つの遺伝要素又は要素群、（２）ｍＲＮＡに転写されてタンパク質に翻訳される、構造配列又はコード配列、及び（３）適切な転写及び翻訳の開始及び終止配列のアセンブリを含む。調節エレメントは、転写を制御するオペレーター配列を含み得る。通常は複製起点によって与えられる宿主で複製する能力、及び形質転換体の認識を容易にするための選択遺伝子がさらに組み込まれ得る。ＤＮＡ領域は、機能的に相互に関連している場合、「作動的に連結」される。例えば、シグナルペプチド（分泌リーダー）のＤＮＡは、ポリペプチドの分泌に関与する前駆体として発現される場合、ポリペプチドのＤＮＡと作動可能に連結され；プロモーターは、配列の転写を制御する場合、コード配列と作動可能に連結されており；又はリボソーム結合部位は、翻訳を可能にするように配置されている場合、コード配列と作動可能に連結されている。いくつかの実施形態では、酵母発現系における使用を意図された構造要素は、宿主細胞による翻訳されたタンパク質の細胞外分泌を可能にするリーダー配列を含む。組換えタンパク質がリーダー又は輸送配列なしで発現されるその他の実施形態では、それは、Ｎ末端メチオニン残基を含み得る。この残基は、発現された組換えタンパク質から、任意で引き続いて切断され、最終生成物を提供し得る。
【０２０３】
発現制御配列及び発現ベクターの選択は、宿主細胞の選択に依存する。多種多様な発現宿主／ベクターの組み合わせが用いられ得る。真核宿主のための有用な発現ベクターとしては、例えば、ＳＶ４０、ウシ乳頭腫ウイルス、アデノウイルス及びサイトメガロウイルスからの発現制御配列を含む、ベクターが挙げられる。細菌宿主の有用な発現ベクターとしては、ｐＣＲ１、ｐＢＲ３２２、ｐＭＢ９、及びそれらの誘導体をはじめとする大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）からのプラスミドなどの既知の細菌プラスミド、及びＭ１３及びその他の繊維状一本鎖ＤＮＡファージなどのより広い宿主範囲のプラスミドが挙げられる。
【０２０４】
抗ＣＤ３９抗体（又は標的として使用されるタンパク質）のポリペプチド鎖の発現に適した宿主細胞としては、適切なプロモーターの制御下にある、原核生物、酵母細胞、昆虫細胞、又は高等真核細胞が挙げられる。原核生物としては、例えば、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）又はバチルス属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）などのグラム陰性又はグラム陽性生物が挙げられる。高等真核細胞としては、下述されるような樹立された哺乳類起源の細胞系が挙げられる。無細胞翻訳システムもまた用いられてもよい。細菌、真菌、酵母、及び哺乳類の細胞宿主で使用するための適切なクローン化及び発現ベクターは、当業者に良く知られている。
【０２０５】
様々な哺乳類細胞培養システムが使用されて、組換えポリペプチドが発現される。このようなタンパク質は一般的には正しく折り畳まれて適切に修飾され、生物学的に機能性であるので、哺乳類細胞内における組換えタンパク質の発現が好ましくあり得る。適切な哺乳類宿主細胞株の例としては、ＣＯＳ−７（サル腎臓由来）、Ｌ−９２９（マウス線維芽細胞由来）、Ｃ１２７（マウス乳腺腫瘍由来）、３Ｔ３（マウス線維芽細胞由来）、ＣＨＯ（チャイニーズハムスター卵巣由来）、ＨｅＬａ（ヒト子宮頸がん由来）、ＢＨＫ（ハムスター腎臓線維芽細胞由来）、及びＨＥＫ−２９３（ヒト胎児腎臓由来）細胞株及びそれらの変異型が挙げられる。哺乳類発現ベクターは、複製起点、発現される遺伝子と連結する適切なプロモーター及びエンハンサー、及びその他の５’又は３’フランキング非転写配列などの非転写要素、及び必要なリボソーム結合部位、ポリアデニル化部位、スプライス供与体及びアクセプター部位、及び転写終止配列などの５’又は３’非翻訳配列を含み得る。
【０２０６】
昆虫細胞培養システム（例えば、バキュロウイルス）での組換えタンパク質の発現もまた、正しく折り畳まれ生物学的に機能性のタンパク質を作製するための堅牢な方法を提供する。昆虫細胞において異種タンパク質を産生するためのバキュロウイルスシステムは、当業者に良く知られている。
【０２０７】
特定の実施形態では、ポリヌクレオチドは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１と少なくとも６０％同一であり、なおもより好ましくはＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１と少なくとも６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９７％、９９％、又は１００％同一であり、ヒトＣＤ３９に特異的に結合できる、可変領域を含む抗体軽鎖をコードするポリヌクレオチドを含む。
【０２０８】
特定の実施形態では、ポリヌクレオチドは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２と少なくとも６０％同一であり、なおもより好ましくはＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２と少なくとも６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９７％、９９％、又は１００％同一であり、ヒトＣＤ３９に特異的に結合できる、可変領域を含む抗体重鎖をコードするポリヌクレオチドを含む。
【０２０９】
Ｖ．生体内送達のためのコードされた抗ＣＤ３９抗体
患者で発現される抗ＣＤ３９抗体のコード配列を送達するための治療用ベクターは、ウイルス性、非ウイルス性、又は物理的であり得る。例えば、Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２４２：１５７５−１５７８，１９８８；及びＷｏｌｆｆ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８６：９０１１−９０１４（１９８９）を参照されたい。遺伝子療法で使用するための方法及び組成物の考察としては、Ｅｃｋ  ｅｔ  ａｌ．，ｉｎ  Ｇｏｏｄｍａｎ  ＆  Ｇｉｌｍａｎ’ｓ  Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，Ｎｉｎｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｈａｒｄｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，ｅｄｓ．，ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，（１９９６），Ｃｈａｐｔｅｒ  ５，ｐｐ．７７−１０１；Ｗｉｌｓｏｎ，Ｃｌｉｎ．Ｅｘｐ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１０７（Ｓｕｐｐｌ．１）：３１−３２，１９９７；Ｗｉｖｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｈｅｍａｔｏｌｏｇｙ／Ｏｎｃｏｌｏｇｙ  Ｃｌｉｎｉｃｓ  ｏｆ  Ｎｏｒｔｈ  Ａｍｅｒｉｃａ，Ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒａｐｙ，Ｓ．Ｌ．Ｅｃｋ，ｅｄ．，１２（３）：４８３−５０１，１９９８；Ｒｏｍａｎｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌｓ，１８：１９−３９，２０００、及びその中で引用された参考文献が挙げられる。米国特許第６，０８０，７２８号明細書もまた、多種多様な遺伝子送達方法及び組成物についての考察を提供する。送達経路としては、例えば、全身投与及び原位置投与が挙げられる。周知のウイルス送達技術としては、アデノウイルス、レトロウイルス、レンチウイルス、泡沫状ウイルス、単純ヘルペスウイルス、ワクシニアウイルス、及びアデノ随伴ウイルスベクターの使用が挙げられる。
【０２１０】
ａ．ウイルスベクター
好ましいウイルスベクターは、非細胞変性真核生物ウイルスに基づき、非必須遺伝子は、エピトープと関心のある標的配列とをコードする核酸配列を保有する核酸コンストラクトで置き換えられている。本発明の特定の実施形態で好ましいウイルスは、遺伝子療法におけるヒトでの使用がすでに承認されている二本鎖ＤＮＡウイルスであるアデノウイルス及びアデノ随伴（ＡＡＶ）ウイルスである。さらに、寛容化するための好ましいベクターは、免疫刺激配列を含まない。
【０２１１】
アデノウイルスベクター
１つ又は複数の核酸配列の生体内送達のための１つの例示的な方法は、アデノウイルス発現ベクターの使用を伴う。「アデノウイルス発現ベクター」は、（ａ）コンストラクトのパッケージングをサポートし、（ｂ）その中にセンス又はアンチセンス方向でクローン化されたポリヌクレオチドを発現するのに十分なアデノウイルス配列を含有するコンストラクトを含むことが意図される。もちろん、アンチセンスコンストラクトの文脈において、発現は、遺伝子産物が合成されることを必要としない。特定の実施形態では、送達ベクターは、Ｃ末端Ｆｌａｇ及びＨｉｓタグを有する、アデノウイルスベクターｐＡｄの転写変異体１である、チトクロームｂ５還元酵素３（ＣＹＢ５Ｒ３）の市販のＯＲＦに関係する（Ｖｉｇｅｎｅ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ製品コードＡＨ８８９４２８）。ＰＣＴ公開国際公開第２０１５／０５０３６４号パンフレットはまた、Ｃｙｂ５ｒ３遺伝子を含む発現コンストラクトを備えたベクターも教示する。
【０２１２】
アデノウイルスベクターは免疫原性が高く、そのため抗原提示によって耐性を誘導するための投与、又は自己免疫疾患の場合には好ましさに劣る。しかし、これらのベクターを使用して、例えば、インフルエンザ、ＨＢＶ、ＨＣＶ、及びＨＩＶをはじめとする感染症などの治療において免疫が誘導され得る。
【０２１３】
アデノ随伴ウイルスベクター（ＡＡＶ）
ＡＡＶは、例えば遺伝子操作された（組換え）が、宿主ゲノムに組み込まれないなど、その安全性のおかげで、送達ビヒクルの良好な選択である。同様に、ＡＡＶは病原性ではなく、いかなる病気にも関連していない。ウイルスコード配列の除去は、ウイルス遺伝子発現に対する免疫反応を最小化し、したがってｒＡＡＶは炎症反応を引き起こさない。特定の実施形態によれば、本明細書に記載の核酸コンストラクトを含有するエピトープ配列を含有するＡＡＶベクターは、ＡＰＣを形質導入するのに有用である。
【０２１４】
典型的には、核酸コンストラクトを含有するエピトープを含有するウイルスベクターは、所望のエピトープ、適切な調節エレメント、及び細胞形質導入を媒介するエピトープ発現に必要なエレメントをコードするポリヌクレオチドから組み立てられる。一実施形態では、アデノ随伴ウイルス性（ＡＡＶ）ベクターが使用される。より具体的な実施形態では、ＡＡＶベクターは、ＡＡＶ１、ＡＡＶ６、又はＡＡＶ８である。
【０２１５】
ＡＡＶ  ＩＴＲによって囲まれる関心のあるＤＮＡ分子を保有するＡＡＶ発現ベクターは、それから主要なＡＡＶオープン読み取り枠（「ＯＲＦ」）が切除されたＡＡＶゲノムに、選択された配列を直接挿入することによって構築され得る。本発明のＡＡＶに含まれてもよい構成的プロモーターの例としては、限定することなく、例示されるＣＭＶ即時初期エンハンサー／ニワトリβ−アクチン（ＣＢＡ）プロモーターが挙げられる。
【０２１６】
真核細胞では、発現制御配列は、典型的に、プロモーター、免疫グロブリン遺伝子、ＳＶ４０、サイトメガロウイルスなどに由来するものなどのエンハンサー、及びスプライス供与部位と受容部位を含んでもよいポリアデニル化配列を含む。ポリアデニル化配列は、一般に、導入遺伝子配列の後ろ、３’ＩＴＲ配列の前に挿入される。一実施形態では、ウシ成長ホルモンポリＡが使用されてもよい。
【０２１７】
これらの及びその他の一般的なベクター及び調節エレメントの選択は従来通りであり、このような多くの配列が利用できる。例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋ  ｅｔ  ａｌ．と、その中の例えば、３．１８〜３．２６頁及び１６．１７〜１６．２７頁などで引用される参考文献；及びＡｕｓｕｂｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９８９を参照されたい）。もちろん、全てのベクター及び発現制御配列が、本発明の全ての導入遺伝子を発現するために同等に十分に機能するとは限らない。しかし、当業者は、本発明の範囲から逸脱することなく、これらの発現制御配列の中から選択を行ってもよい。適切なプロモーター／エンハンサー配列は、本出願によって提供される指標を使用して、当業者によって選択されてもよい。このような選択は日常的な事項であり、分子又はコンストラクトの制限ではない。
【０２１８】
レトロウイルスベクター
特定の実施形態では、ウイルスベクターは、レトロウイルスベクターであってもよい。「レトロウイルス」は、ＲＮＡゲノムを有するウイルスである。特定の実施形態では、レトロウイルスベクターは、例えば、（ａ）ベクターの両端にある長い末端反復（ＬＴＲ）又はその一部；（ｂ）マイナス及びプラス鎖ＤＮＡ合成のためのプライマー結合部位；及び（ｃ）ゲノムＲＮＡをビリオンに組み込むのに必要なパッケージングシグナルなどのウイルスゲノムのパッケージング及び組み込みに必要な全てのシス作用性配列を含有する。レトロウイルスベクターに関してより詳しくは、Ｂｏｅｓｅｎ，ｅｔ  ａｌ．，１９９４，Ｂｉｏｔｈｅｒａｐｙ  ６：２９１−３０２；Ｃｌｏｗｅｓ，ｅｔ  ａｉ，１９９４，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．９３：６４４−６５１；Ｋｉｅｍ，ｅｔ  ａｌ．，１９９４，Ｂｌｏｏｄ  ８３：１４６７−１４７３；Ｓａｌｍｏｎｓ  ａｎｄ  Ｇｕｎｚｂｅｒｇ，１９９３，Ｈｕｍａｎ  Ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒａｐｙ  ４：１２９−１４１；Ｍｉｌｌｅｒ，ｅｔ  ａｌ．，１９９３，Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚｙｍｏｌ．２１７：５８１−  ５９９；及びＧｒｏｓｓｍａｎ  ａｎｄ  Ｗｉｌｓｏｎ，１９９３，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．ｉｎ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  ａｎｄ  Ｄｅｖｅｌ．３：１１０−１  １４にある。
【０２１９】
「ガンマレトロウイルス」は、レトロウイルス科の属を指す。例示的なガンマレトロウイルスとしては、マウス幹細胞ウイルス、マウス白血病ウイルス、ネコ白血病ウイルス、ネコ肉腫ウイルス、及びトリ細網内皮症ウイルスが挙げられる。
【０２２０】
広く使用されているレトロウイルスベクターとしては、マウス白血病ウイルス（ＭｕＬＶ）、テナガザル白血病ウイルス（ＧａＬＶ）、サル免疫不全ウイルス（ＳＩＶ）、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、及びそれらの組み合わせに基づくのものが挙げられる（例えば、Ｂｕｃｈｓｃｈｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．６６：２７３１−２７３９，１９９２；Ｊｏｈａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．６６：１６３５−１６４０，１９９２；Ｓｏｍｍｅｒｆｅｌｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｖｉｒｏｌ．１７６：５８−５９，１９９０；Ｗｉｌｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．６３：２３７４−２３７８，１９８９；Ｍｉｌｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．６５：２２２０−２２２４，１９９１；及びＰＣＴ／ＵＳ９４／０５７００号明細書を参照されたい）。
【０２２１】
レンチウイルスベクターは、分裂及び非分裂細胞に感染でき、典型的に高いウイルス力価を生じる、レトロウイルスの属を指す。レンチウイルスのいくつかの例としては、ＨＩＶ（ヒト免疫不全ウイルス：ＨＩＶタイプ１及びＨＩＶタイプ２を含む）；ウマ伝染性貧血ウイルス；ネコ免疫不全ウイルス（ＦＩＶ）；ウシ免疫不全ウイルス（ＢＩＶ）；及びサル免疫不全ウイルス（ＳＩＶ）が挙げられる。
【０２２２】
特定の実施形態では、その他のレトロウイルスベクターが使用され得る。これらには、例えば、ヒト泡沫状ウイルス（ＨＦＶ）又はスプマウイルス属のその他のウイルスに基づくベクターが挙げられる。泡沫状ウイルス（ＦＶ）は、今日知られている最大のレトロウイルスであり、全ての非ヒト霊長類種をはじめとする異なる哺乳類に蔓延しているが、ヒトには存在しない。この完全な非病原性は、ＦＶベクターをヒトにおける遺伝子療法のための理想的な遺伝子移入ビヒクルとして適格にし、遺伝子送達システムとしてのＦＶベクターをＨＩＶ由来及びガンマレトロウイルス由来のベクターと明確に区別する。
【０２２３】
非細胞変性ウイルスとしては、レトロウイルス（例えば、レンチウイルス）が挙げられ、そのライフサイクルは、ゲノムウイルスＲＮＡのＤＮＡへの逆転写と、それに続く宿主細胞ＤＮＡへのプロウイルスの組み込みを伴う。レトロウイルスは、ヒトの遺伝子療法試験のために承認されている。最も有用なのは、複製欠損性のレトロウイルスである（例えば、所望のタンパク質の合成を指示できるが、感染性粒子は生成できない）。このような遺伝子改変されたレトロウイルス発現ベクターは、生体内での遺伝子の高効率形質導入のための一般的な有用性を有する。複製欠損性レトロウイルスを作製するための標準プロトコル（外因性遺伝物質のプラスミドへの取り込み、プラスミドで裏打ちされたパッケージング細胞の形質移入、パッケージング細胞株による組換えレトロウイルスの産生、組織培養培地からのウイルス粒子の採取、及びウイルス粒子による標的細胞の感染のステップを含む）は、当業者に知られている。
【０２２４】
レトロウイルスゲノムは、カプシドタンパク質、ポリメラーゼ酵素、及びエンベロープ成分をそれぞれコードするｇａｇ、ｐｏｌ、及びｅｎｖの３つの遺伝子を含有する。ｇａｇ遺伝子の上流にある配列は、ゲノムをビリオン内にパッケージングするためのシグナルを含有する。レトロウイルスベクターは、２つのレトロウイルスＬＴＲの間に異種核酸が存在する、遺伝子導入プラスミドである。レトロウイルスベクターは、典型的には、レトロウイルスベクターを、又はレトロウイルスベクターを鋳型として使用して転写されたＲＮＡを、適切なパッケージング細胞株中でウイルスビリオン内にパッケージングできるようにする、適切なパッケージングシグナルを含む（例えば、米国特許第４，６５０，７６４号明細書を参照されたい）。これらの２つの長い末端反復（ＬＴＲ）配列は、ウイルスゲノムの５’及び３’末端に存在する。これらは、強力なプロモーター及びエンハンサー配列を含み、宿主細胞ゲノムへの組み込みにも必要である（Ｃｏｆｆｉｎ，１９９０）。レトロウイルスベクターを構築するために、特定のウイルス配列の代わりに、関心のある１つ又は複数のオリゴヌクレオチド又はポリヌクレオチド配列をコードする核酸がウイルスゲノム中に挿入され、複製欠損のウイルスが作製される。レンチウイルス（例えば、レトロウイルスの１タイプ）に基づく、レトロウイルスベクターのエピソーム形態又は非組み込み形態もまた含まれる。
【０２２５】
レンチウイルスベクターは安定した発現が必要な場合に有用であるが、レンチウイルスベクターは免疫原性であり得て、その他の望ましくない影響を及ぼす可能性がある。したがって、レンチウイルスベクターは研究には便利であるが、ヒト投与のために使用される場合、特に免疫ではなく耐性を誘導することが望まれる場合は、注意が必要である。レンチウイルスは、がん治療のために生体外でＴ細胞又は樹状細胞又はその他の抗原提示細胞を操作するのに適しているが、ｍＲＮＡ電気穿孔の方がより安全である。しかし、最近の２つの進歩によって、レンチウイルスの使用がより安全で、臨床的に翻訳可能なものになっている。第１に、薬物が投与されたときにその産物が機能性になる抗原と自殺遺伝子との共発現。典型的な例は、単純ヘルペスウイルスチミジンキナーゼ（ＨＳＶ−Ｔｋ）である。これらの遺伝子を発現する細胞は、薬物ガンシクロビルを代謝して、細胞死を誘発する細胞傷害性産物にし得る。したがって、いくつかの形質導入細胞が悪性になった場合、それらは根絶され得る。このような約１２のシステムがある（Ｄｕａｒｔｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｌｅｔｔｅｒｓ，３２４：１６０−１７０，２０１２）。第２に、組み込まれないレンチウイルスベクター、したがって非発がん性のレンチウイルスベクターが開発中である（Ｎｉｇｈｔｉｎｇａｌｅ  ｅｔ  ａｌ．，２００６，Ｍｏｌ．Ｔｈｅｒ．，１３：１１２１−１１３２）。これらの方法は、当業者の判断に従って、本発明と共に用いられ得る。
【０２２６】
本明細書で使用するのに適するレトロウイルスベクターは、例えば、このようなレトロウイルスベクターを使用して、ヒト細胞に核酸を効率的に導入するための方法の説明を提供する、米国特許第５，３９９，３４６号明細書及び米国特許第５，２５２，４７９号明細書；及びＰＣＴ公開国際公開第９２／０７５７３号パンフレット、国際公開第９０／０６９９７号パンフレット、国際公開第８９／０５３４５号パンフレット、国際公開第９２／０５２６６号パンフレット、及び国際公開第９２／１４８２９号パンフレットに記載されている。その他のレトロウイルスベクターとしては、例えば、マウス乳腺腫瘍ウイルスベクター（例えば、Ｓｈａｃｋｌｅｆｏｒｄ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．８５：９６５５−９６５９，１９９８）、レンチウイルスなどが挙げられる。例示的なウイルスベクターは、ｐｌｅｎｔｉｌｏｘ−ＩＲＥＳ−ＧＦＰである。
【０２２７】
抗ＣＤ３９抗体剤をコードする導入遺伝子の送達に容易に適合させ得るさらなるレトロウイルスウイルス送達システムとしては、公開されたＰＣＴ出願の単なる例示として、そのそれぞれの開示が参照により本明細書に援用される、国際公開第２０１０／０４５００２号パンフレット、国際公開第２０１０／１４８２０３号パンフレット、国際公開第２０１１／１２６８６４号パンフレット、国際公開第２０１２／０５８６７３号パンフレット、国際公開第２０１４／０６６７００号パンフレット、国際公開第２０１５／０２１０７７号パンフレット、国際公開第２０１５／１４８６８３号パンフレット、及び国際公開第２０１７／０４０８１５号パンフレットが挙げられる。
【０２２８】
特定の実施形態では、レトロウイルスは、レトロウイルスＧＡＧタンパク質をコードする核酸配列；レトロウイルスＰＯＬタンパク質をコードする核酸配列；レトロウイルスエンベロープをコードする核酸配列；オンコレトロウイルスポリヌクレオチド配列の５’及び３’末端に長い末端反復（ＬＴＲ）配列を含む、オンコレトロウイルスポリヌクレオチド配列；抗ＣＤ３９抗体剤のコード配列に作動可能に連結された内部リボソーム侵入部位（ＩＲＥＳ）を含み、３’ＬＴＲのＵ３領域に対して５’に配置され、レトロウイルスエンベロープをコードする配列に対して３’に配置されているカセット；及び逆転写、パッケージング、及び標的細胞への組み込みのためのシス作用性配列を含む、組換え複製能力があるレトロウイルスである。
【０２２９】
特定の実施形態では、レトロウイルスは、レトロウイルスＧＡＧタンパク質；レトロウイルスＰＯＬタンパク質；レトロウイルスエンベロープ；レトロウイルスポリヌクレオチド配列の３’末端の長い末端反復（ＬＴＲ）配列と、レトロウイルスポリヌクレオチドの５’末端のプロモーター配列とを含み、プロモーターが、哺乳類細胞、ｇａｇ核酸ドメイン、ｐｏｌ核酸ドメイン、及びｅｎｖ核酸ドメインでの発現に適している、レトロウイルスポリヌクレオチド；異種ポリヌクレオチドに作動可能に連結された抗ＣＤ３９抗体剤コード配列を含み、３’ＬＴＲに対して５’に配置されて作動可能に連結され、レトロウイルスエンベロープをコードするｅｎｖ核酸ドメインに対して３’に配置されているカセット；及び逆転写、パッケージング、及び標的細胞への組み込みに必要なシス作用性配列を含む、組換え複製能力があるレトロウイルスである。
【０２３０】
組換え複製能力があるレトロウイルスの特定の好ましい実施形態では、エンベロープは、両栄養性、多種栄養性、異種栄養性、１０Ａ１、ＧＡＬＶ、ヒヒ内在性ウイルス、ＲＤ１１４、ラブドウイルス、アルファウイルス、はしか、又はインフルエンザウイルスエンベロープの１つから選択される。
【０２３１】
組換え複製能力があるレトロウイルスの特定の好ましい実施形態にでは、レトロウイルスポリヌクレオチド配列は、マウス白血病ウイルス（ＭＬＶ）、モロニーマウス白血病ウイルス（ＭｏＭＬＶ）、ネコ白血病ウイルス（ＦｅＬＶ）、ヒヒ内在性レトロウイルス（ＢＥＶ）、ブタ内在性ウイルス（ＰＥＲＶ）、ネコ由来レトロウイルスＲＤ１１４、リスザルレトロウイルス、異種栄養性マウス白血病ウイルス関連ウイルス（ＸＭＲＶ）、トリ網状内皮症ウイルス（ＲＥＶ）、又はテナガザル白血病ウイルス（ＧＡＬＶ）からなる群より選択されるウイルスから操作される。
【０２３２】
組換え複製能力があるレトロウイルスの特定の好ましい実施形態では、レトロウイルスはガンマレトロウイルスである。
【０２３３】
組換え複製能力があるレトロウイルスの特定の好ましい実施形態では、別のチェックポイント阻害剤ポリペプチドなどの第２の治療用タンパク質のコード配列を含む第２のカセットがあり、例えばカセット下流に、（単なる例示として）共刺激ポリペプチド及び／又は免疫刺激サイトカインがある。特定の場合では、第２のカセットは、第２の治療用タンパク質のコード配列に作動可能に連結された、内部リボソーム侵入部位（ＩＲＥＳ）又はミニプロモーター又はｐｏｌＩＩＩプロモーターを含み得る。
【０２３４】
組換え複製能力があるレトロウイルスの特定の好ましい実施形態では、それは非溶菌性の両栄養性レトロウイルス複製ベクターであり、それは好ましくは、腫瘍微小環境の細胞に選択的に感染し自己複製する。
【０２３５】
発現コンストラクトとしてのその他のウイルスベクター
オリゴヌクレオチド又はポリヌクレオチド配列を宿主細胞へ送達するために、本発明の発現コンストラクトとして、その他のウイルスベクターが使用されてもよい。ワクシニアウイルス、ポリオウイルス、及びヘルペスウイルスなどのウイルスに由来するベクターが、使用されてもよい。それらは、様々な哺乳類細胞にいくつかの魅力的な機能を提供する。Ｂ型肝炎ウイルスもまた含まれる。
【０２３６】
ｂ．非ウイルスベクター
プラスミドベクター
その他のベクターとしては、プラスミドベクターが挙げられる。プラスミドベクターは当該技術分野で広範に記載されており、当業者に良く知られている。例えば、上で引用されたＳａｍｂｒｏｏｋ  ｅｔ  ａｌ．，１９８９を参照されたい。過去数年間、プラスミドベクターは、生体内において、抗原をコードする遺伝子を細胞に送達するためのＤＮＡワクチンとして使用されている。それらは、多くのウイルスベクターのような安全性の懸念がないため、特に有利である。しかし、これらのプラスミドは、宿主細胞と適合性のあるプロモーターを有しており、プラスミド内の核酸によってコードされるペプチドエピトープを発現し得る。その他のプラスミドは、当業者に良く知られている。さらに、プラスミドは、制限酵素及びライゲーション反応を使用してカスタム設計され、ＤＮＡの特定の断片が除去され追加されてもよい。プラスミドは、様々な非経口、粘膜、及び局所経路によって送達されてもよい。例えば、ＤＮＡプラスミドは、筋肉内、皮内、皮下、又はその他の経路によって注射され得る。それはまた、鼻腔内スプレー又は滴剤、直腸坐剤、及び経口によって投与されてもよい。それはまた、遺伝子銃を使用して、表皮内に又は粘膜表面に投与されてもよい。プラスミドは、水溶液中で、金粒子上で乾燥させて、又はリポソーム、デンドリマー、渦巻形及びマイクロカプセル化をはじめとするが、これらに限定されるものではない、別のＤＮＡ送達システムと関連して投与されてもよい。
【０２３７】
したがって、一態様では、プラスミドは、転写ユニットとも称される発現カセットを含む核酸コンストラクトを含有するエピトープの発現のために、提供される。プラスミドがエピトープ発現に適した環境に置かれると、転写単位は、エピトープをコードする配列、ＥＴＳ及びＭＨＣＩＩアクチベーター配列、又はエピトープ及び分泌シグナル配列をコードする配列、及びコンストラクト中でコードされるその他のものを含む、ポリヌクレオチドを発現するであろう。転写単位は、細胞性免疫応答エレメントコード配列と転写的に連結されている転写制御配列を含む。転写制御配列は、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）プロモーター／エンハンサー配列などのプロモーター／エンハンサー配列を含んでもよい。しかし、当業者は、真核細胞での発現に適した様々なその他のプロモーター配列が知られており、本明細書で開示されるコンストラクトで同様に使用され得ることを認識するであろう。核酸産物の発現レベルは、関連するプロモーター、及び関連するエンハンサーエレメントの存在と活性化に依存するであろう。
【０２３８】
特定の実施形態では、所望のエピトープ及び標的配列をコードする配列は、転写、翻訳、ＲＮＡ安定性及び複製のための調節エレメント（例えば、転写制御配列を含む）を含む、発現プラスミドにクローン化され得る。このような発現プラスミドは当該技術分野で周知であり、当業者は、細胞免疫応答エレメントが発現可能であるように、細胞免疫応答エレメント又はその断片をコードする配列を含むポリヌクレオチドを用いて、適切な発現コンストラクトを設計できる。配列を含むポリヌクレオチドがそれにクローン化され得る、ｐＣＩ−ｎｅｏ、ｐＵＭＶＣ又はｐｃＤＮＡ３などの適切な発現プラスミドの多数の例がある。
【０２３９】
細胞性免疫応答エレメント又はその断片の発現のためのプラスミドを保有する大量の細菌宿主が発酵されてもよく、プラスミドはその後の使用のために精製され得る。プラスミドを使用した現行のヒト臨床試験は、このアプローチを利用している。Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ  ＤＮＡ  Ａｄｖｉｓｏｒｙ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ  Ｄａｔａ  Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ  Ｒｅｐｏｒｔ，Ｈｕｍａｎ  Ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒａｐｙ  ６：５３５−５４８，１９９４。当該技術分野で公知の現行のＤＮＡ単離方法には、プラスミドを増殖させるために使用される細菌からの汚染物質である、リポ多糖（内毒素）の除去が含まれる。内毒素は強力なアジュバントとして作用し、望まれない免疫刺激を生じ得るので、このステップは、最も好ましくは、寛容原性ＤＮＡワクチンの使用のために行われる。
【０２４０】
プラスミドの目的は、細胞又は組織における治療用エピトープへの核酸配列の効率的な送達と発現である。特に、プラスミドの目的は、高いコピー数を達成し、プラスミド不安定性の潜在的な原因を回避し、プラスミド選択のための手段を提供することであってもよい。発現に関しては、核酸カセットは、カセット内の核酸の発現に必要なエレメントを含有する。発現には、挿入遺伝子、核酸配列、又は核酸カセットのプラスミドによる効率的な転写が含まれる。発現産物は、タンパク質、ポリペプチド、又はＲＮＡであってもよい。核酸配列は、核酸カセットに含有され得る。核酸の発現は、連続的であり得るか又は調節され得る。
【０２４１】
ミニサークル
本明細書に記載の核酸コンストラクトの実施形態は、ミニサークルＤＮＡの形態でプロセスされても良い。ミニサークルＤＮＡは、原核生物の全てのベクター部分から解放された、小型（２〜４ｋｂ）円形プラスミド誘導体に由来する。ミニサークルＤＮＡベクターは、細菌のＤＮＡ配列を含有しないので、異物として認識され破壊される可能性がより低い。（典型的な導入遺伝子送達方法は、外来性ＤＮＡを含有するプラスミドを伴う。）結果として、これらのベクターは、従来のプラスミド（数日から数週間）と比較して、より長い期間（数週間又は数ヶ月程度）発現され得る。ミニサークルのサイズが小さいほどクローン化能力が向上し、細胞への送達が容易になる。ミニサークルＤＮＡを生成するためのキットは、当該技術分野で公知であり市販されている（Ｓｙｓｔｅｍ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｉｎｃ．，Ｐａｌｏ  Ａｌｔｏ，Ｃａｌｉｆ．）。ミニサークルＤＮＡに関する情報は、Ｄｉｅｔｚ  ｅｔ  ａｌ．，Ｖｅｃｔｏｒ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  ａｎｄ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ（２０１３）；２１  ８，１５２６−１５３５、及びＨｏｕ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ−Ｍｅｔｈｏｄｓ  ＆  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，Ａｒｔｉｃｌｅ  ｎｕｍｂｅｒ：１４０６２（２０１５）ｄｏｉ：１０．１０３８／ｍｔｍ．２０１４．６２で提供される。ミニサークルＤＮＡに関するさらなる情報は、Ｃｈｅｎ  Ｚ  Ｙ，Ｈｅ  Ｃ  Ｙ，Ｅｈｒｈａｒｄｔ  Ａ，Ｋａｙ  Ｍ  Ａ．Ｍｏｌ  Ｔｈｅｒ．２００３  Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ；８（３）：４９５−５００；及びＭｉｎｉｃｉｒｃｌｅ  ＤＮＡ  ｖｅｃｔｏｒｓ  ａｃｈｉｅｖｅ  ｓｕｓｔａｉｎｅｄ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｒｅｆｌｅｃｔｅｄ  ｂｙ  ａｃｔｉｖｅ  ｃｈｒｏｍａｔｉｎ  ａｎｄ  ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌ  ｌｅｖｅｌ．Ｇｒａｃｅｙ  Ｍａｎｉａｒ  Ｌ  Ｅ，Ｍａｎｉａｒ  Ｊ  Ｍ，Ｃｈｅｎ  Ｚ  Ｙ，Ｌｕ  Ｊ，Ｆｉｒｅ  Ａ  Ｚ，Ｋａｙ  Ｍ  Ａ．Ｍｏｌ  Ｔｈｅｒ．２０１３  Ｊａｎｕａｒｙ；２１（１）：１３１−８で提供される。
【０２４２】
核酸によってコードされた産物の発現を最終的に得るプロセスの最初のステップは、細胞による核酸の取り込みをもたらすことである。細胞による核酸の取り込みはいくつかの要因に依存し、その１つは、核酸が細胞表面に近接している時間の長さである。例えば、緩衝液中のプラスミドＤＮＡの筋肉内（ｉ．ｍ．）投与後に筋肉をマッサージすると、おそらく直接的な又はリンパ管を介した筋肉からのＤＮＡ漏出に起因する遺伝子発現の著しい低下が観察された（Ｈｕｍａｎ  Ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒａｐｙ  ４：１５１−１５９；１９９３）。したがって、核酸の細胞内取り込みが所望される部位から核酸が拡散し又は運び去られる速度を遅らせる化合物と共に、核酸を製剤化することが望ましい場合がある。さらに、これらの化合物は、核酸の細胞内取り込みを増加させるのに必要な物理的特性を保持し又は回復しながら、注射などの手段による生物への投与に適し得る。
【０２４３】
オリゴヌクレオチド又はポリヌクレオチド配列の発現をもたらすためには、発現コンストラクトが細胞に送達されなければならない。本発明の特定の実施形態では、１つ又は複数のオリゴヌクレオチド又はポリヌクレオチド配列を含む発現コンストラクトは、単に裸の組換えＤＮＡ又はプラスミドからなってもよい。
【０２４４】
免疫をプライミングするために、任意のタイプのＤＮＡワクチンベクターが、（免疫細胞上のＴＬＲ９を刺激するために）ＣｐＧに富むように操作され、又は逆にＣｐＧを除去するように操作され、可能であれば、ＣｐＧモチーフがＧｐＧモチーフで置き換えられる（Ｈｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．７１（９）：４９２０−６，２００３；Ｈｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１７５（９）：６２２６−３４，２００５）。ＤＮＡワクチンは、抗原／エピトープを含有するように操作され得て、抗原との共発現のためのさらなる遺伝子を含有し得て、アジュバント又は免疫調節剤（多重プロモーターベクターとして作用する。これらのＤＮＡワクチンは、例えば、Ｔ１Ｄ患者において臨床的に安全であることが分かっている（Ｒｏｅｐ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉ．Ｔｒａｎｓｌ．Ｍｅｄ．５（１９１）：１９１ｒａ８２，２０１３）。
【０２４５】
機械的送達システム
さらなる非ウイルス送達方法としては、Ｗｏｆｆｅｎｄｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９１（２４）：１１５８１，１９９４に記載されているアプローチ、光重合ハイドロゲル材料の沈着又は電離放射線の使用（例えば、米国特許第５，２０６，１５２号明細書、及び国際公開第９２／１１０３３号パンフレットを参照されたい）；ハンドヘルド遺伝子移入粒子銃の使用（例えば、米国特許第５，１４９，６５５号明細書を参照されたい）；及び移入された遺伝子を活性化するための電離放射線の使用（例えば、米国特許第５，２０６，１５２号明細書及び国際公開第９２／１１０３３号パンフレットを参照されたい）など、生体外で使用され得る機械的送達システムが挙げられるが、これらに限定されるものではない。送達装置はまた生体適合性であり得て、また生分解性であってもよい。製剤は、好ましくは、比較的一定レベルの活性成分放出を提供する。他方、投与直後のより迅速な放出速度が所望されることもある。このような組成物の配合は、既知の技術を使用する当業者のレベルの範囲内である。
【０２４６】
送達を強化する物理的な方法としては、全て当業者に知られている、電気穿孔（高電圧の短いパルスが膜を越えて核酸を運ぶ）、遺伝子銃（ＤＮＡが金粒子上に負荷され、細胞へのＤＮＡの浸透を達成するように強制される）、ソノポレーション、マグネトフェクション、水力学的送達などが挙げられる。ＤＮＡはまた、リポソーム、好ましくはカチオン性リポソーム、又はポリメソーム（合成リポソーム）内にカプセル化でき、これらは細胞膜と相互作用して融合し得て、又はエンドサイトーシスを受けてＤＮＡの細胞内への移行をもたらし得る。ＤＮＡは、ポリマー（ポリプレックス）又はデンドリマーとの複合体を形成し得て、それは細胞の細胞質内に積荷を直接放出し得る。
【０２４７】
この点において有用な例示的な担体としては、ポリ（ラクチド−コ−グリコリド）、ポリアクリレート、ラテックス、デンプン、セルロース、デキストランなどの微粒子が挙げられる。その他の例示的な遅延放出担体としては、非液体親水性コア（例えば、架橋多糖又はオリゴ糖）、及び任意で、リン脂質などの両親媒性化合物を含む外層を含む、超分子バイオベクターが挙げられる（例えば、米国特許第５，１５１，２５４号明細書、及びＰＣＴ出願国際公開第９４／２００７８号パンフレット、国際公開第９４／２３７０１号パンフレット、及び国際公開第９６／０６６３８号パンフレットを参照されたい）。徐放性製剤に含有される活性剤の量は、移植部位、放出の速度と予測される持続時間、及び治療又は予防される病状の性質に依存する。
【０２４８】
生分解性微小球（例えば、ポリ乳酸ポリグリコレート）が、組成物の担体として使用されてもよい。適切な生分解性微小球は、例えば米国特許第４，８９７，２６８号明細書；米国特許第５，０７５，１０９号明細書；米国特許第５，９２８，６４７号明細書；米国特許第５，８１１，１２８号明細書；米国特許第５，８２０，８８３号明細書；米国特許第５，８５３，７６３号明細書；米国特許第５，８１４，３４４号明細書；米国特許第５，４０７，６０９号明細書；及び米国特許第５，９４２，２５２号明細書で開示されている。国際公開第／９９４０９３４号パンフレット及びその中の参考文献に記載されているような改変Ｂ型肝炎コアタンパク質担体システムもまた、多くの用途に有用である。別の例示的な担体／送達システムは、米国特許第５，９２８，６４７号明細書に記載されているような粒子−タンパク質複合体を含む担体を使用し、それは、抗ＣＤ３９抗体剤のコード配列を送達するために腫瘍内で使用されると、患者の腫瘍組織を標的とするＭＨＣＩ拘束性細胞傷害性Ｔリンパ球応答を誘導できるという、さらなる利点を有し得る。
【０２４９】
生分解性高分子ナノ粒子は、細胞への非ウイルス性核酸の移行を容易にする。小型の（およそ２００ｎｍ）正に荷電された（約１０ｍＶ）粒子は、カチオン性の加水分解性ポリ（β−アミノエステル）とプラスミドＤＮＡとの自己組織化によって形成される。
【０２５０】
ポリヌクレオチドはまた、直接マイクロインジェクション、一時的な細胞透過化（例えば、リプレッサー及び／又はアクチベーターと細胞透過剤の同時投与）、膜移行ペプチドへの融合などによって、細胞に投与されてもよい。
【０２５１】
本開示の特定の実施形態では、遺伝子コンストラクトは、電気穿孔を通じて標的細胞に導入される。電気穿孔は、細胞（又は組織）及びＤＮＡ（又はＤＮＡ複合体）の高電圧放電への曝露を伴う。生体内電気穿孔は、プラスミドＤＮＡを多くの異なる組織に効率的に送達するために、成功裏に使用されている遺伝子送達技術である。研究では、Ｂ１６黒色腫及びその他の腫瘍組織にプラスミドＤＮＡを送達するための生体内電気穿孔の投与が報告されている。プラスミドによってコードされる遺伝子又はｃＤＮＡの全身的及び局所的発現は、生体内電気穿孔の投与によって得られ得る。生体内電気穿孔の使用は、腫瘍組織におけるプラスミドＤＮＡの取り込みを増強し、腫瘍内での発現をもたらし、プラスミドを筋肉組織に送達し、サイトカインなどの分泌タンパク質の全身発現をもたらす（例えば、米国特許第８０２６２２３号明細書を参照されたい）。生体内で抗ＣＤ３９抗体剤導入遺伝子を細胞に電気穿孔するための例示的な技術、ベクター、及び装置としては、国際公開第２０１７／１０６７９５号パンフレット、国際公開第２０１６／１６１２０１号パンフレット、国際公開第２０１６／１５４４７３号パンフレット、国際公開第２０１６／１１２３５９号パンフレット、及び国際公開第２０１４／０６６６５５号パンフレットが挙げられる。
【０２５２】
米国特許第７，２４５，９６３３号明細書は、モジュラー電極システムと、身体又は植物の選択された組織の細胞への生体分子の導入を容易にするためのそれらの使用とについて記載する。モジュラー電極システムは、複数の針電極；皮下針；プログラム可能な定電流パルスコントローラから複数の針電極への導電性リンクを提供する電気コネクタ；及び動力源を含む。操作者は、支持構造に取り付けられた複数の針電極をつかみ、それらを身体又は植物の選択された組織にしっかりと挿入し得る。次に、皮下注射針を介して、選択された組織に生体分子が送達される。プログラム可能な定電流パルスコントローラが作動して、定電流電気パルスが複数の針電極に印加される。適用された定電流電気パルスは、複数の電極間の細胞（ｃｅｉｌ）への生体分子の導入を容易にする。米国特許第７，２４５，９６３号明細書の内容全体が、参照により本明細書に援用される。
【０２５３】
米国特許出願公開第２００５／００５２６３０号明細書は、身体又植物の選択された組織の細胞への生体分子の導入を効果的に促進するのに使用されてもよい、電気穿孔装置を記載する。電気穿孔装置は、動作がソフトウェア又はファームウェアによって規定される、動電学的装置（「ＥＫＤ装置」）を含む。ＥＫＤ装置は、ユーザー制御とパルスパラメータの入力に基づいて、アレイ内の電極間に一連のプログラム可能な定電流パルスパターンを生成し、電流波形データの保存と取得ができるようにする。針電極のアレイを有する交換可能な電極ディスクと、注射針用の中央注射チャネルと、取り外し可能なガイドディスクとを含む電気穿孔装置（例えば、米国特許出願公開第２００５／００５２６３０号明細書を参照されたい）もまた、参照により本明細書に援用される。
【０２５４】
米国特許第７，２４５，９６３号明細書及び米国特許出願公開第２００５／００５２６３０号明細書に記載されている電極アレイ及び方法は、筋肉などの組織だけでなく、その他の組織又は器官への深部浸透のためにも適合されている。電極アレイの構成のため、（選択された生体分子を送達するための）注射針もまた標的器官に完全に挿入され、注入は、電極によって予め画定された領域で、標的問題（ｉｓｓｕｅ）に垂直に投与される。
【０２５５】
典型的には、生体内細胞電気穿孔に必要な電界は、一般に、生体外細胞に必要な電界と同様の大きさである。一実施形態では、電界の規模は、約１０Ｖ／ｃｍ〜約１５００Ｖ／ｃｍ、好ましくは約３００Ｖ／ｃｍ〜１５００Ｖ／ｃｍ、好ましくは約１０００Ｖ／ｃｍ〜１５００Ｖ／ｃｍの範囲である。代案としては、電界強度がより低い場合は（約１０Ｖ／ｃｍ〜１００Ｖ／ｃｍ、より好ましくは約２５Ｖ／ｃｍ〜７５Ｖ／ｃｍ）、パルス長が長くなる。例えば、公称電界が約２５〜７５Ｖ／ｃｍである場合、好ましければパルス長は約１０ミリ秒である。
【０２５６】
パルス長は、約１０秒〜約１００ミリ秒であり得る。典型的には、毎秒１〜１００パルスである、任意の所望のパルス数が存在し得る。パルスの組の間の遅延は、１秒などの任意の時間であり得る。波形、電界強度、及びパルス持続時間はまた、細胞のタイプと、電気穿孔を通じて細胞に入る分子のタイプに依存してもよい。
【０２５７】
電気化学的インピーダンス分光法（「ＥＩＳ」）を組み込んだ電気穿孔装置もまた、包含される。このような装置は、生体内でのリアルタイム情報、特に腫瘍内電気穿孔効率のリアルタイム情報を提供し、条件の最適化ができるようにする。ＥＩＳを組み込んだ電気穿孔装置の例は、例えば、参照により本明細書に援用される国際公開第２０１６／１６１２０１号パンフレットに見いだされ得る。
【０２５８】
本発明の非ウイルス送達ベクターの取り込みはまた、なだれ形質移入とも称される、プラズマ電気穿孔によって増強されてもよい。簡潔に述べると、マイクロ秒の放電が、電極表面にキャビテーションマイクロバブルを作り出す。磁界と組み合わされた崩壊するマイクロバブルによって生じる機械力は、従来の電気穿孔に伴う拡散媒介輸送と比較して、細胞膜を越える輸送効率を高めるのに役立つ。プラズマ電気穿孔の技術は、米国特許第７，９２３，２５１号明細書及び米国特許第８，２８３，１７１号明細書に記載されている。この技術はまた、細胞の形質転換のために生体内で使用されてもよい。Ｃｈａｉｂｅｒｇ，ｅｔ  ａｌ（２００６）Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｖｅ  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌｏｇｙ  ＆  Ｖｉｓｕａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ４７：４０８３−４０９０；Ｃｈａｉｂｅｒｇら、米国特許第８，１０１１６９号（２０１２年１月２４日公開）。
【０２５９】
その他の代替電気穿孔技術もまた、企図される。生体内プラスミド送達はまた、低温プラズマを使用して実施され得る。プラズマは物質の４つの基本状態の１つであり、その他は固体、液体、気体である。プラズマは、結合していない正及び負の粒子の電気的に中性の媒体である（例えば、プラズマの全体的な電荷はほぼゼロである）。プラズマは、気体を加熱するか、又はレーザー又はマイクロ波発生器を使用して強力な電磁場に曝すことによって生成され得る。これは、電子の数を減少又は増加させ、イオンと称される正又は負の荷電粒子を生成し（Ｌｕｏ，ｅｔ  ａｌ．（１９９８）Ｐｈｙｓ．Ｐｌａｓｍａ  ５：２８６８−２８７０）、存在する場合は、分子結合の解離を伴う。
【０２６０】
低温プラズマ（例えば、非熱プラズマ）は、パルス高電圧信号を適切な電極に供給することによって生成される。低温プラズマ装置は、ガスジェット装置又は誘電体バリア放電（ＤＢＤ）装置の形態であってもよい。比較的低いガス温度でプラズマを供給する利点から、低温プラズマは多くの熱意と関心を集めている。このような温度でのプラズマの供給は、創傷治癒、抗細菌プロセス、様々なその他の医学的治療及び滅菌をはじめとする、様々な用途のために興味深い。先に述べたように、低温プラズマ（例えば、非熱プラズマ）は、パルス高電圧信号を適切な電極に供給することによって生成される。低温プラズマ装置は、ガスジェット装置、誘電体バリア放電（ＤＢＤ）装置、又は多周波高調波に富む電源の形態であってもよい。
【０２６１】
誘電体バリア放電装置は、異なるプロセスに依存して低温プラズマを生成する。誘電体バリア放電（ＤＢＤ）装置は、誘電体層で覆われた導電性電極を少なくとも１つ含有する。電気的リターンパスは、低温プラズマ処理を受けているターゲット基板によって提供され得るアースによって、又は電極に内蔵されたアースを提供することによって、形成される。誘電体バリア放電装置のエネルギーは、上記のような高電圧電源によって提供され得る。より一般的には、エネルギーがパルスＤＣ電圧の形態で誘電体バリア放電装置に入力され、プラズマ放電が形成される。誘電体層のおかげで、放電は導電性電極から分離され、電極のエッチング及びガス加熱が減少する。パルスＤＣ電圧は、振幅と周波数を変化させて、様々な動作方式が達成され得る。このような低温プラズマ生成の原理を組み込んだ任意の装置（例えば、ＤＢＤ電極装置）は、本発明の様々な実施形態の範囲内にある。
【０２６２】
低温プラズマは、細胞を外来核酸で形質移入するために使用されている。特に、腫瘍細胞の形質移入（例えば、Ｃｏｎｎｏｌｌｙ，ｅｔ  ａｌ．（２０１２）Ｈｕｍａｎ  Ｖａｃｃｉｎｅｓ  ＆  Ｉｍｍｕｎｅ−ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ  ８：１７２９−１７３３；及びＣｏｎｎｏｌｌｙ  ｅｔ  ａｌ（２０１５）Ｂｉｏｅｌｅｃｔｒｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  １０３：１５−２１を参照されたい）。
【０２６３】
特定の例示的な実施形態では、本発明の抗ＣＤ３９抗体剤をコードする導入遺伝子コンストラクトは、アプリケーター；アプリケーターから延びる複数の電極（電極はカバー領域に関連付けられている）；電極と電気的に通信する電源（電源はカバー領域内の細胞への１つ又は複数の電気穿孔信号を生じるように構成される）；電極に結合されたガイド部材（ガイド部材は電極のカバー領域を調整するように構成される）を含む電気穿孔装置を使用して送達される。電極の少なくとも一部は、円錐形の配置でアプリケーター内に配置され得る。１つ又は複数の電気穿孔信号は、それぞれ電界に関連付けられてもよい。装置は、電源及び電極に結合した電位差計をさらに含んでなってもよい。電位差計は、電界を実質的に所定の範囲内に保持するように構成されてもよい。
【０２６４】
１つ又は複数の電気穿孔信号は、それぞれ電界に関連付けられてもよい。装置は、電源及び電極に結合した電位差計をさらに含んでなってもよい。電位差計は、カバー領域内の細胞の恒久的損傷を実質的に防止し、且つ／又は疼痛を実質的に最小化するように、電界を所定の範囲内に保持するように構成されてもよい。例えば、電位差計は、電界を約１３００Ｖ／ｃｍに保持するように構成されてもよい。
【０２６５】
電源は、第１の電気信号を第１の電極に提供し、第２の電気信号を第２の電極に提供してもよい。第１及び第２の電気信号は合わさって、うなり周波数を有する波を生じてもよい。第１及び第２の電気信号はそれぞれ、単極波形及び双極波形の少なくとも１つを有してもよい。第１の電気信号は、第１の周波数及び第１の振幅を有してもよい。第２の電気信号は、第２の周波数及び第２の振幅を有してもよい。第１の周波数は、第２の周波数と異なり、又は同じであってもよい。第１の振幅は、第２の振幅と異なり、又は同じであってもよい。
【０２６６】
特定の実施形態では、本発明は、抗ＣＤ３９抗体剤をコードするプラスミドの有効量を腫瘍に注射するステップと；腫瘍に電気穿孔療法を施すステップとを含む、腫瘍を有する対象を治療するための方法を提供する。特定の実施形態では、電気穿孔療法は、約１００マイクロ秒〜約２０ミリ秒のパルス幅にわたって、約２００Ｖ／ｃｍ〜約１５００Ｖ／ｃｍの少なくとも１つの電圧パルスを投与するステップをさらに含む。
【０２６７】
特定の実施形態では、プラスミド（又は第２の電気穿孔されたプラスミド）は、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、及びＩＬ−１２とＩＬ−１５の組み合わせをコードする群から選択されるものなどの、少なくとも１つの免疫刺激性サイトカインをさらにコードする。
【０２６８】
核酸コンストラクトをコードする抗ＣＤ３９抗体を送達するための脂質及びポリカチオン性分子
脂質が媒介する核酸送達、及びｍＲＮＡをはじめとする外来核酸の発現は、生体外及び生体内で非常に成功している。脂質ベースの非ウイルス製剤は、アデノウイルス遺伝子療法の代替法を提供する。現行の生体内脂質送達方法は、皮下、皮内、腫瘍内、又は頭蓋内注射を使用する。脂質製剤の進歩は、生体内遺伝子移入の効率を改善している（ＰＣＴ公開国際公開第９８／０７４０８号パンフレットを参照されたい）。例えば、等モル比の１，２−ビス（オレオイルオキシ）−３−（トリメチルアンモニオ）プロパン（ＤＯＴＡＰ）及びコレステロールから構成される脂質製剤は、全身性の生体内遺伝子移入を著しく向上させ得る。ＤＯＴＡＰ：コレステロール脂質製剤は、「サンドイッチリポソーム」と称されるユニークな構造を形成する。この製剤は、陥入した二層構造又は「花瓶」構造の間に、ＤＮＡを「サンドイッチ」することが報告されている。これらの脂質構造の有益な特性としては、正のｐ、コレステロールによるコロイド安定化、二次元核酸パッキング、及び血清安定性の増加が挙げられる。
【０２６９】
カチオン性リポソーム技術は、正に帯電した頭部基と疎水性の脂質尾部とを保有する両親媒性脂質が、負に帯電したＤＮＡ又はＲＮＡに結合して、一般にエンドサイトーシスによって細胞に入る粒子を形成する能力に基づく。一部のカチオン性リポソームは、哺乳類細胞によるリポソームの取り込みを促進すると考えられている、中性の共脂質もまた含有する。同様に、ポリ−ｌ−リジン及びポリエチレンイミンなどのその他のポリカチオンは、電荷相互作用を介して核酸と複合体を形成し、ＤＮＡ又はＲＮＡのナノ粒子への凝縮を助け、次にはナノ粒子はエンドソームが媒介する取り込みの基質になる。これらのカチオン性核酸複合体技術のいくつかは、プラスミドＤＮＡ（ｐＤＮＡ）、オリゴデオキシヌクレオチド、及び様々な形態の合成ＲＮＡとの複合体をはじめとする、潜在的な臨床製品として開発されている。
【０２７０】
本明細書で開示される核酸コンストラクトは、細胞への取り込みを促進するのに役立つポリカチオン性分子と関連していてもよい。核酸コンストラクトをポリカチオン性分子と複合体化することはまた、それらのサイズが減少するようにコンストラクトをパッケージングするのを助け、これは細胞内取り込みを助けると考えられている。ひとたびエンドソームに入ると、複合体は低いｐＨのために解離し、ポリカチオン性分子はエンドソームの膜を破壊して、ＤＮＡが分解される前にその細胞質への脱出を容易にし得る。予備的データは、核酸コンストラクトの実施形態が、ポリカチオン性分子であるポリリジン又はポリエチレンイミンと複合体化した場合、ＤＣよりもＳＣへの取り込みが増強されたことを示す。
【０２７１】
核酸コンストラクトとの複合体化に有用なポリカチオン性分子の一例としては、細胞透過性ペプチド（ＣＰＰ）が挙げられ、例としては、ポリリジン（上記）、ポリアルギニン、及びＴａｔペプチドが挙げられる。細胞透過性ペプチド（ＣＰＰ）は小型ペプチドであり、それはＤＮＡに結合し得て、ひとたび放出されると細胞膜を透過し、エンドソームから細胞質へのＤＮＡの脱出を容易にする。ＣＰＰの別の例は、ＭＰＧと称される２７残基のキメラペプチドに関係し、それは安定した様式でｓｓ−及びｄｓ−オリゴヌクレオチドに結合することが少し前に示されており、ＤＮａｓｅによる分解から核酸を保護する非共有結合複合体をもたらして、オリゴヌクレオチドを生体外で細胞に効果的に送達する（Ｍａｈａｐａｔｒｏ  Ａ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｎａｎｏｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ，２０１１，９：５５）。異なるペプチド：ＤＮＡ比、１０：１及び５：１比（それぞれ１５０ｎｍ及び１ｕｍ）を試験すると、複合体は約１５０ｎｍ〜１ｕｍの小型粒子を形成した。別のＣＰＰは、修飾テトラペプチド（グアニジノカルボニルピロール（ＧＣＰ）基（ＴＬ−ＧＣＰ）を含有するテトラリジン）に関係し、これは６．２ｋｂのプラスミドＤＮＡに高い親和性で結合し、７００〜９００ｎｍの正に荷電された凝集体をもたらすことが報告されている。Ｌｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｇｎｅｗ  Ｃｈｅｍ  Ｉｎｔ  Ｅｄ  Ｅｎｌ  ２０１５；５４（１０）：２９４１−４）。ＲＮＡはまた、生体内送達のために、このようなポリカチオン性分子によって複合体化され得る。
【０２７２】
本明細書に記載の核酸コンストラクトと複合体化し得るポリカチオン性分子のその他の例としては、ＪＥＴＰＲＩＭＥ（登録商標）及び生体内ＪＥＴ（Ｐｏｌｙｐｕｓ−ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ，Ｓ．Ａ．，Ｉｌｌｋｉｒｃｈ，Ｆｒａｎｃｅ）として市販されているポリカチオン性ポリマーが挙げられる。
【０２７３】
ＶＩ．使用方法及び医薬組成物
本発明の抗ＣＤ３９抗体は、がんの免疫療法などの治療的処置方法をはじめとするが、これらに限定されるものではない、様々な用途において有用である。特定の実施形態では、本明細書に記載の抗ＣＤ３９抗体は、免疫応答を活性化し、促進し、向上させ、及び／又は増強し、腫瘍増殖を阻害し、腫瘍体積を減少させ、腫瘍退縮を誘導し、腫瘍細胞アポトーシスを増加させ、及び／又は腫瘍の腫瘍原性を減少させるのに有用である。特定の実施形態では、本発明の抗ＣＤ３９抗体は、ウイルスなどの病原体に対する免疫療法にもまた有用である。特定の実施形態では、本明細書に記載の抗ＣＤ３９抗体は、ウイルス感染の阻害、ウイルス感染の減少、ウイルス感染細胞アポトーシスの増加、及び／又はウイルス感染細胞の殺滅の増加に有用である。使用方法は、試験管内、生体外、又は生体内法であってもよい。
【０２７４】
本発明は、本明細書に記載の抗ＣＤ３９抗体を使用して、対象における免疫応答を活性化する方法を提供する。いくつかの実施形態では、本発明は、本明細書に記載の抗ＣＤ３９抗体を使用して、対象における免疫応答を促進する方法を提供する。いくつかの実施形態では、本発明は、本明細書に記載の抗ＣＤ３９抗体を使用して、対象における免疫応答を高める方法を提供する。いくつかの実施形態では、本発明は、本明細書に記載の抗ＣＤ３９抗体を使用して、対象における免疫応答を増強する方法を提供する。いくつかの実施形態では、免疫応答の活性化、促進、増加、及び／又は増強は、細胞媒介性免疫を増加させることを含む。いくつかの実施形態では、免疫応答の活性化、促進、増加、及び／又は増強は、Ｔｈ１型応答を増加させることを含む。いくつかの実施形態では、免疫応答の活性化、促進、増加、及び／又は増強は、Ｔ細胞活性を増加させることを含む。いくつかの実施形態では、免疫応答の活性化、促進、増加、及び／又は増強は、ＣＤ４＋Ｔ細胞活性を増加させることを含む。いくつかの実施形態では、免疫応答の活性化、促進、増加、及び／又は増強は、ＣＤ８＋Ｔ細胞活性を増加させることを含む。いくつかの実施形態では、免疫応答の活性化、促進、増加、及び／又は増強は、ＣＴＬ活性を増加させることを含む。いくつかの実施形態では、免疫応答の活性化、促進、増加、及び／又は増強は、ＮＫ細胞活性を増加させることを含む。いくつかの実施形態では、免疫応答の活性化、促進、増加、及び／又は増強は、Ｔ細胞活性の増加及びＮＫ細胞活性を増加させることを含む。いくつかの実施形態では、免疫応答の活性化、促進、増加、及び／又は増強は、ＣＵ活性の増加及びＮＫ細胞活性を増加させることを含む。いくつかの実施形態では、免疫応答の活性化、促進、増加、及び／又は増強は、Ｔｒｅｇ細胞の抑制活性を阻害し又は減少させることを含む。いくつかの実施形態では、免疫応答の活性化、促進、増加、及び／又は増強は、ＭＤＳＣの抑制活性を阻害し又は減少させることを含む。いくつかの実施形態では、免疫応答の活性化、促進、増加、及び／又は増強は、記憶Ｔ細胞の百分率数を増加させることを含む。いくつかの実施形態では、免疫応答の活性化、促進、増加、及び／又は増強は、長期の免疫記憶機能を増加させることを含む。いくつかの実施形態では、免疫応答の活性化、促進、増加、及び／又は増強は、長期の記憶を増加させることを含む。いくつかの実施形態では、免疫応答の活性化、促進、増加、及び／又は増強は、実質的な副作用及び／又は免疫に基づく毒性の証拠を含まない。いくつかの実施形態では、免疫応答の活性化、促進、増加、及び／又は増強は、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）又はサイトカインストームの証拠を含まない。いくつかの実施形態では、免疫応答は抗原刺激の結果である。いくつかの実施形態では、抗原刺激は腫瘍細胞である。いくつかの実施形態では、抗原刺激はがんである。いくつかの実施形態では、抗原刺激は病原体である。いくつかの実施形態では、抗原刺激はウイルス感染細胞である。
【０２７５】
抗ＣＤ３９抗体が免疫応答を調節し、活性化し、又は阻害するかどうかを判定するための生体内及び生体外アッセイは、当該技術分野で公知であり、又は開発中である。
【０２７６】
本明細書に記載の方法の特定の実施形態では、腫瘍の再発又は腫瘍の再増殖を阻害する持続的又は長期の免疫を誘導する方法は、抗ＣＤ３９抗体の治療有効量を対象に投与するステップを含む。
【０２７７】
いくつかの実施形態では、腫瘍は固形腫瘍である。特定の実施形態では、腫瘍は、直腸結腸腫瘍、膵臓腫瘍、肺腫瘍、卵巣腫瘍、肝腫瘍、乳房腫瘍、腎臓腫瘍、前立腺腫瘍、神経内分泌腫瘍、胃腸腫瘍、黒色腫、頸部腫瘍、膀胱腫瘍、神経膠芽腫、リンパ腫及び頭頸部腫瘍からなる群より選択される腫瘍である。特定の実施形態では、腫瘍は直腸結腸腫瘍である。特定の実施形態では、腫瘍は卵巣腫瘍である。いくつかの実施形態では、腫瘍は肺腫瘍である。特定の実施形態では、腫瘍は膵臓腫瘍である。特定の実施形態では、腫瘍は黒色腫である。いくつかの実施形態では、腫瘍は膀胱腫瘍である。
【０２７８】
いくつかの実施形態では、腫瘍は液性腫瘍である。特定の実施形態では、腫瘍は、骨髄性又は顆粒球性白血病、リンパ性白血病、リンパ球性白血病、又はリンパ芽球性白血病などの白血病、及び真性多血症又は赤血球血症である。
【０２７９】
いくつかの実施形態では、腫瘍は、腫瘍抗原に特異的に結合する抗原結合部位を含む二重特異性薬剤などの抗ＣＤ３９抗体によって標的とされる腫瘍抗原を発現又は過剰発現する。
【０２８０】
本発明は、本明細書に記載の抗ＣＤ３９抗体の治療有効量を対象に投与するステップを含む、対象におけるがんを治療するための方法をさらに提供する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３９抗体は、がんの増殖を阻害又は低減する。
【０２８１】
本発明は、本明細書に記載の抗ＣＤ３９抗体の治療有効量を対象（例えば、治療を必要とする対象）に投与するステップを含む、がんを治療するための方法を提供する。特定の実施形態では、対象はヒトである。特定の実施形態では、対象はがん性腫瘍を有する。特定の実施形態では、対象は腫瘍が除去されている。
【０２８２】
特定の実施形態では、がんは、結腸直腸がん、膵臓がん、肺がん、卵巣がん、肝臓がん、乳がん、腎臓がん、前立腺がん、胃腸がん、黒色腫、子宮頸がん、神経内分泌がん、膀胱がん、脳がん、神経膠芽腫、及び頭頸部がんからなる群より選択されるがんである。特定の実施形態では、がんは膵臓がんである。特定の実施形態では、がんは卵巣がんである。特定の実施形態では、がんは結腸直腸がんである。特定の実施形態では、がんは乳がんである。特定の実施形態では、がんは前立腺がんである。特定の実施形態では、がんは肺がんである。特定の実施形態では、がんは黒色腫である。いくつかの実施形態では、がんは膀胱がんである。
【０２８３】
本発明は、本明細書に記載の抗ＣＤ３９抗体を含む組成物を提供する。本発明は、本明細書に記載の抗ＣＤ３９抗体と薬学的に許容可能なビヒクルとを含む、医薬組成物もまた提供する。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、免疫療法における使用を見いだす。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、免疫腫瘍学における使用を見いだす。いくつかの実施形態では、組成物は、腫瘍増殖の阻害における使用を見いだす。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、対象（例えば、ヒト患者）における腫瘍増殖の阻害における使用を見出す。いくつかの実施形態では、組成物は、がんの治療における使用を見いだす。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、対象（例えば、ヒト患者）におけるがんの治療における使用を見いだす。
【０２８４】
製剤は、本発明の精製された薬剤を薬学的に許容可能なビヒクル（例えば、担体又は賦形剤）と組み合わせることによって、貯蔵及び使用のために調製される。当業者は、一般に、薬学的に許容可能な担体、賦形剤、及び／又は安定剤を製剤又は医薬組成物の不活性成分であると見なす。
【０２８５】
いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３９抗体は、凍結乾燥され、及び／又は凍結乾燥形態で保存される。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗ＣＤ３９抗体を含む製剤は、凍結乾燥される。
【０２８６】
適切な薬学的に許容可能なビヒクルとしては、リン酸塩、クエン酸塩、及びその他の有機酸などの非毒性緩衝液；塩化ナトリウムなどの塩；アスコルビン酸及びメチオニンをはじめとする抗酸化剤；塩化オクタデシルジメチルベンジルアンモニウム、塩化ヘキサメトニウム、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、フェノール、ブチル又はベンジルアルコール、メチル又はプロピルパラベンなどのアルキルパラベン、カテコール、レソルシノール、シクロヘキサノール、３−ペンタノール、及びｍ−クレゾールなどの保存料；低分子量ポリペプチド（例えば、約１０アミノ酸残基未満）；血清アルブミン、ゼラチン又は免疫グロブリンなどのタンパク質；ポリビニルピロリドンなどの親水性ポリマー；グリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニン又はリジンなどのアミノ酸；単糖類、二糖類、グルコース、マンノース、又はデキストリンなどの炭水化物；ＥＤＴＡなどのキレート化剤；スクロース、マンニトール、トレハロース又はソルビトールなどの糖類；ナトリウムなどの塩形成対イオン；Ｚｎ−タンパク質複合体などの金属錯体；及びツイーン又はポリエチレングリコール（ＰＥＧ）などの非イオン性界面活性剤が挙げられるが、これらに限定されるものではない。（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，２２．ｓｕｐ．ｎｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，２０１２，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｓｓ，Ｌｏｎｄｏｎ）。
【０２８７】
本発明の医薬組成物は、局所的又は全身的治療のどちらかのために任意の数の方法で投与され得る。投与は、表皮又は経皮パッチ、軟膏、ローション、クリーム、ジェル、滴剤、坐剤、スプレー、液体及び粉末による局所投与；ネブライザー、気管内、及び鼻腔内をはじめとする、粉末又は煙霧剤の吸入又は吹送による経肺投与；経口投与；又は静脈内、動脈内、腫瘍内、皮下、腹腔内、筋肉内（例えば、注射又は輸液）、又は頭蓋内（例えば、クモ膜下腔内又は脳室内）をはじめとする非経口投与であり得る。
【０２８８】
治療製剤は、単位用量剤形であり得る。このような製剤としては、錠剤、丸薬、カプセル、粉末、顆粒、水又は非水性媒体中の溶液又は懸濁液、又は坐薬が挙げられる。錠剤などの固体組成物中では、主要な有効成分が薬学的担体と混合される。従来の打錠成分としては、コーンスターチ、乳糖、スクロース、ソルビトール、滑石、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム、リン酸二カルシウム又はガム、及び希釈剤（例えば、水）が挙げられる。これらを使用して、本発明の化合物の均質な混合物、又は非毒性のその薬学的に許容可能な塩を含有する、固体の予備製剤組成物が形成され得る。次に、固体の予備製剤組成物は、上記のタイプの単位用量剤形に細分化される。製剤又は組成物の錠剤、丸薬などは、長期作用の利点をもたらす剤形を提供するために、コーティングされ又はその他の方法で配合され得る。例えば、錠剤又は丸薬は、外部構成成分によって被覆された内部組成物を含み得る。さらに、崩壊に抵抗するのに役立ち、内部成分が無傷で胃を通過し又は放出を遅延できるようにする腸溶層によって、２つの構成成分が分離され得る。このような腸溶層又はコーティングのために様々な材料が使用され得て、このような材料としては、いくつかのポリマー酸、及びポリマー酸と、シェラック、セチルアルコール、及び酢酸セルロースなどの材料との混合物が挙げられる。
【０２８９】
抗ＣＤ３９抗体はまた、マイクロカプセルに封入され得る。このようなマイクロカプセルは、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，２２．ｓｕｐ．ｎｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，２０１２，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｓｓ，Ｌｏｎｄｏｎに記載されているように、例えば、コロイド薬物送達システム（例えば、リポソーム、アルブミン微小球、マイクロエマルション、ナノ粒子、及びナノカプセル）中で、又はマクロエマルション中で、それぞれ、例えば、ヒドロキシメチルセルロース又はゼラチン−マイクロカプセル及びポリ−（メタクリル酸メチル（ｍｅｔｈｙｌｍｅｔｈａｃｙｌａｔｅ））マイクロカプセルなどの、コアセルベーション技術によって又は界面重合によって、調製される。
【０２９０】
特定の実施形態では、医薬製剤は、リポソームと複合体化した抗ＣＤ３９抗体を含む。リポソームを製造する方法は、当業者に知られている。例えば、いくつかのリポソームは、ホスファチジルコリン、コレステロール、及びＰＥＧ誘導体化ホスファチジルエタノールアミン（ＰＥＧ−ＰＥ）を含む脂質組成物を用いた逆相蒸発によって、作製され得る。リポソームは、規定の孔径のフィルターを通して押出し得て、所望の直径を有するリポソームがもたらされる。
【０２９１】
特定の実施形態では、抗ＣＤ３９抗体を含む徐放性製剤が製造され得る。徐放性製剤の適切な例としては、抗ＣＤ３９抗体を含有する固体疎水性ポリマーの半透性マトリックスが挙げられ、マトリックスは成形品（例えば、フィルム又はマイクロカプセル）の形態である。徐放性マトリックスの例としては、ポリエステル、ポリ（２−ヒドロキシエチル−メタクリレート）又はポリ（ビニルアルコール）などのハイドロゲル、ポリラクチド、Ｌ−グルタミン酸と７エチル−Ｌ−グルタミン酸との共重合体、非分解性エチレン−酢酸ビニル、ＬＵＰＲＯＮ  ＤＥＰＯＴ（乳酸−グリコール酸共重合体と酢酸ロイプロリドとからなる注射用微小球）などの分解性乳酸−グリコール酸共重合体、イソ酪酸酢酸スクロース、及びポリ−Ｄ−（−）−３−ヒドロキシ酪酸が挙げられる。
【０２９２】
特定の実施形態では、抗ＣＤ３９抗体を投与するステップに加えて、方法又は治療は、少なくとも１つの追加の免疫応答刺激剤を投与するステップをさらに含む。いくつかの実施形態では、追加の免疫応答刺激剤としては、コロニー刺激因子（例えば、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）、マクロファージコロニー刺激因子（Ｍ−ＣＳＦ）、顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）、幹細胞因子（ＳＣＦ））、インターロイキン（例えば、ＩＬ−１、ＩＬ２、ＩＬ−３、ＩＬ−７、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−１８）、チェックポイント阻害剤、免疫抑制機能をブロックする抗体（例えば、抗ＣＴＬＡ−４抗体、抗ＣＤ２８抗体、抗ＣＤ３抗体）、Ｔｏｌｌ様受容体（例えば、ＴＬＲ４、ＴＬＲ７、ＴＬＲ９）、又はＢ７ファミリーのメンバー（例えば、ＣＤ８０、ＣＤ８６）が挙げられるが、これらに限定されるものではない。追加の免疫応答刺激剤は、抗ＣＤ３９抗体の投与に先立って、抗ＣＤ３９抗体の投与と同時に、及び／又はその後に投与され得る。抗ＣＤ３９抗体及び免疫応答刺激剤を含む医薬組成物もまた提供される。いくつかの実施形態では、免疫応答刺激剤は、１、２、３、又はそれ以上の免疫応答刺激剤を含む。
【０２９３】
特定の実施形態では、抗ＣＤ３９抗体を投与するステップに加えて、方法又は治療は、少なくとも１つの追加の治療薬を投与するステップをさらに含む。追加の治療薬は、抗ＣＤ３９抗体の投与に先立って、抗ＣＤ３９抗体の投与と同時に、及び／又はその後に投与され得る。抗ＣＤ３９抗体及び追加の治療薬を含む医薬組成物もまた提供される。いくつかの実施形態では、少なくとも１つの追加の治療薬は、１、２、３、又はそれ以上の追加の治療薬を含む。
【０２９４】
２つ以上の治療剤との併用療法では、必須ではないが、異なる作用機序で作用する薬剤が使用されることが多い。異なる作用機序を有する薬剤を使用する併用療法は、相加効果又は相乗効果をもたらしてもよい。併用療法は、単剤療法で使用されるよりも低用量の各薬剤を可能にしてもよく、その結果、毒性の副作用を減少させ、及び／又は抗ＣＤ３９抗体の治療指数を増加させる。併用療法は、耐性のあるがん細胞が発生する可能性を減少させてもよい。いくつかの実施形態では、併用療法は、免疫応答に影響を及ぼす（例えば、応答を増強し又は活性化する）治療薬と、腫瘍／がん細胞に影響を及ぼす（例えば、阻害し又は殺滅する）治療薬とを含む。
【０２９５】
本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、抗ＣＤ３９抗体と少なくとも１つの追加の治療薬との組み合わせは、相加的又は相乗的な結果をもたらす。いくつかの実施形態では、併用療法は、抗ＣＤ３９抗体の治療指数の増加をもたらす。いくつかの実施形態では、併用療法は、追加の治療薬の治療指数の増加をもたらす。いくつかの実施形態では、併用療法は、抗ＣＤ３９抗体の毒性及び／又は副作用の減少をもたらす。いくつかの実施形態では、併用療法は、追加の治療薬の毒性及び／又は副作用の減少をもたらす。
【０２９６】
有用な治療剤のクラスとしては、例えば、抗チューブリン剤、オーリスタチン、ＤＮＡ副溝結合剤、ＤＮＡ複製阻害剤、アルキル化剤（例えば、シスプラチン、モノ（白金）、ビス（白金）、及び三核白金錯体、及びカルボプラチンなどの白金錯体）、アントラサイクリン、抗生物質、葉酸アンタゴニスト、代謝アンタゴニスト、化学療法増感剤、デュオカルマイシン、エトポシド、フッ素化ピリミジン、イオノフォア、レキシトロプシン、ニトロソウレア、プラチノール、プリン代謝アンタゴニスト、ピューロマイシン、放射線増感剤、ステロイド、タキサン、トポイソメラーゼ阻害剤、ビンカアルカロイドなどが挙げられる。特定の実施形態では、第２の治療薬は、アルキル化剤、代謝アンタゴニスト、有糸分裂阻害剤、トポイソメラーゼ阻害剤、又は血管新生阻害剤である。
【０２９７】
本明細書に記載の抗ＣＤ３９抗体と組み合わせて投与されてもよい治療薬としては、化学療法剤が挙げられる。したがって、いくつかの実施形態では、方法又は治療は、化学療法剤と組み合わせた、又は化学療法剤のカクテルと組み合わせた、抗ＣＤ３９抗体の投与を伴う。抗ＣＤ３９抗体による治療は、化学療法の投与前、投与と同時に、又は投与後に実施され得る。併用投与は、単一医薬製剤中での又は別個の製剤を使用しての同時投与、又はいずれかの順序での連続投与を含み得るが、一般に、全ての活性剤がそれらの生物学的活性を同時に発揮し得るような期間内である。このような化学療法剤の調製及び投薬スケジュールは、製造業者の説明書に従って、又は熟練した実務家によって経験的に決定されるように用いられ得る。このような化学療法の調製及び投薬スケジュールは、Ｔｈｅ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ  Ｓｏｕｒｃｅ  Ｂｏｏｋ，４．ｓｕｐ．ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，２００８，Ｍ．Ｃ．Ｐｅｒｒｙ，Ｅｄｉｔｏｒ，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，Ｐａ．にも記載されている。
【０２９８】
本発明で有用な化学療法剤としては、チオテパ及びシクロフォスファミド（ｃｙｃｌｏｓｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ）（ＣＹＴＯＸＡＮ）などのアルキル化剤；ブスルファン、インプロスルファン、及びピポスルファンなどのスルホン酸アルキル；ベンゾドパ、カルボコン、メトレドパ、及びウレドパなどのアジリジン；アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホルアミド、トリエチレンチオホスホルアミド（ｔｒｉｅｔｈｙｌｅｎｅｔｈｉｏｐｈｏｓｐｈａｏｒａｍｉｄｅ）及びトリメチルオロメラミン（ｔｒｉｍｅｔｈｙｌｏｌｏｍｅｌａｍｉｍｅ）をはじめとするエチレンイミン及びメチルアメラミン；クロラムブシル、クロルナファジン、クロロホスファミド、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、メクロレタミンオキシド塩酸塩、メルファラン、ノベンビキン、フェネステリン、プレドニムスチン、トロホスファミド、ウラシルマスタードなどのナイトロジェンマスタード；カルムスチン、クロロゾトシン、フォテムスチン、ロムスチン、ニムスチン、ラニムスチンなどのニトロソウレア（ｎｉｔｒｏｓｕｒｅａｓ）；アクラシノマイシン（ａｃｌａｃｉｎｏｍｙｓｉｎｓ）、アクチノマイシン、オートラマイシン、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カリケアマイシン、カラビシン、カミノマイシン、カルジノフィリン、クロモマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン、６−ジアゾ−５−オキソ−Ｌ−ノルロイシン、ドキソルビシン、エピルビシン、エソルビシン、イダルビシン、マルセロマイシン、マイトマイシン、ミコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン、ペプロマイシン、ポトフィロマイシン、ピューロマイシン、ケラマイシン、ロドルビシン、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメクス、ジノスタチン、ゾルビシンなどの抗生物質；メトトレキサート及び５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）などの代謝アンタゴニスト；デノプテリン、メトトレキサート、プテロプテリン、トリメトレキサートなどの葉酸類似体；フルダラビン、６−メルカプトプリン、チアミプリン、チオグアニンなどのプリン類似体；アンシタビン、アザシチジン、６−アザウリジン、カルモフール、シトシンアラビノシド、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロクスウリジン、５−ＦＵなどのピリミジン類似体；カルステロン、プロピオン酸ドロモスタロン、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトンなどのアンドロゲン；アミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタンなどの抗副腎；フォリン酸などの葉酸補給剤；アセグラトン；アルドホスファミド配糖体；アミノレブリン酸；アムサクリン；ベストラブシル；ビサントレン；エダトレキサート（ｅｄａｔｒａｘａｔｅ）；デフォファミン；デメコルシン；ジアジコン；エルフォルミチン；酢酸エリプチニウム；エトグルシド；硝酸ガリウム；ヒドロキシ尿素；レンチナン；ロニダミン；ミトグアゾン；ミトキサントロン；モピダモール；ニトラクリン；ペントスタチン；フェナメット；ピラルビシン；ポドフィリン酸；２−エチルヒドラジド；プロカルバジン；ＰＳＫ；ラゾキサン；シゾフラン；スピロゲルマニウム；テヌアゾン酸；トリアジコン；２，２’，２”−トリクロロトリエチルアミン；ウレタン；ビンデシン；ダカルバジン；マンノムスチン；ミトブロニトール；ミトラクトール；ピポブロマン；ガシトシン；アラビノシド（Ａｒａ−Ｃ）；例えば、パクリタキセル（ＴＡＸＯＬ）及びドセタキセル（ＴＡＸＯＴＥＲＥ）などのタキソイド；クロラムブシル；ゲムシタビン；６−チオグアニン；メルカプトプリン；シスプラチン及びカルボプラチンなどの白金類似体；ビンブラスチン；白金；エトポシド（ＶＰ−１６）；イホスファミド；マイトマイシンＣ；ミトキサントロン；ビンクリスチン；ビノレルビン；ナベルビン；ノバントロン；テニポシド；ダウノマイシン；アミノプテリン；イバンドロネート；ＣＰＴ１１；トポイソメラーゼ阻害剤ＲＦＳ ２０００；ジフルオロメチルオルニチン（ＤＭＦＯ）；レチノイン酸；エスペラミシン；カペシタビン（ＸＥＬＯＤＡ）；及び上記のいずれかの薬学的に許容可能な塩、酸、又は誘導体が挙げられるが、これらに限定されるものではない。化学療法剤はまた、例えば、タモキシフェン、ラロキシフェン、アロマターゼ阻害性４（５）−イミダゾール、４−ヒドロキシタモキシフェン、トリオキシフェン、ケオキシフェン、ＬＹ１１７０１８、オナプリストン、及びトレミフェン（ＦＡＲＥＳＴＯＮ）；及びフルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、ロイプロリド、及びゴセレリンなどの抗アンドロゲン；及び上記のいずれかの薬学的に許容可能な塩、酸、又は誘導体をはじめとする抗エストロゲンなど、腫瘍に対するホルモン作用を調節し又は阻害するように作用する抗ホルモン剤も含む。特定の実施形態では、追加の治療薬はシスプラチンである。特定の実施形態では、追加の治療薬はカルボプラチンである。
【０２９９】
本明細書に記載の方法の特定の実施形態では、化学療法剤はトポイソメラーゼ阻害剤である。トポイソメラーゼ阻害剤は、トポイソメラーゼ酵素（例えば、トポイソメラーゼＩ又はＩＩ）の作用を妨げる化学療法剤である。トポイソメラーゼ阻害剤としては、ドキソルビシンＨＣｌ、ダウノルビシンクエン酸塩、ミトキサントロンＨＣｌ、アクチノマイシンＤ、エトポシド、トポテカンＨＣｌ、テニポシド（ＶＭ−２６）、及びイリノテカン、並びにこれらのいずれかの薬学的に許容可能な塩、酸、又は誘導体が挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【０３００】
特定の実施形態では、化学療法剤は代謝アンタゴニストである。代謝アンタゴニストは、正常な生化学反応に必要な代謝物に類似した構造を有する化学物質であるが、なおも細胞分裂などの細胞の１つ又は複数の正常な機能を妨げるのに十分な違いがある。代謝アンタゴニストとしては、ゲムシタビン、フルオロウラシル、カペシタビン、メトトレキサートナトリウム、ラルチトレキセド（ｒａｌｉｔｒｅｘｅｄ）、ペメトレキセド、テガフール、シトシンアラビノシド、チオグアニン、５−アザシチジン、６−メルカプトプリン、アザチオプリン、６−チオグアニン、ペントスタチン、リン酸フルダラビン、及びクラドリビン、並びにこれらのいずれかの薬学的に許容可能な塩、酸、又は誘導体が挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【０３０１】
本明細書に記載の方法の特定の実施形態では、化学療法剤は、チューブリンに結合する薬剤をはじめとするが、これに限定されるものではない、有糸分裂阻害剤である。いくつかの実施形態では、薬剤はタキサンである。特定の実施形態では、薬剤は、パクリタキセル又はドセタキセル、又はパクリタキセル又はドセタキセルの薬学的に許容可能な塩、酸、又は誘導体である。特定の実施形態では、薬剤は、パクリタキセル（ＴＡＸＯＬ）、ドセタキセル（ＴＡＸＯＴＥＲＥ）、アルブミン結合パクリタキセル（ｎａｂ−パクリタキセル；ＡＢＲＡＸＡＮＥ）、ＤＨＡ−パクリタキセル、又はＰＧ−パクリタキセルである。特定の代替実施形態では、有糸分裂阻害剤は、ビンクリスチン、ビンブラスチン、ビノレルビン、又はビンデシンなどのビンカアルカロイド、又はそれらの薬学的に許容可能な塩、酸、又は誘導体体を含む。いくつかの実施形態では、有糸分裂阻害剤は、キネシンＥｇ５の阻害剤、又はオーロラＡ又はＰｌｋ１などの有糸分裂キナーゼの阻害剤である。
【０３０２】
本明細書に記載の方法の特定の実施形態では、主題の抗ＣＤ３９剤は、腫瘍内でＡＴＰの放出を誘導し及び／又は腫瘍内でＣＤ３９又はＣＤ７３の発現上昇を引き起こす化学療法剤と共に、より大きな組み合わせ効果（恐らくは相乗効果でさえある）をもたらすことが予想される。腫瘍細胞死を誘発する際に細胞外空間へのＡＴＰの放出を引き起こす、例えば、アントラサイクリン（ドキソルビシン、ダウノルビシン、エピルビシン、及びイダルビシンなど）、白金ベースの薬物（シスプラチン、カルボプラチン、及びオキサリプラチンなど）、及びプロテアソーム阻害剤（ボルテゾミブなど）などの広範な化学療法剤がある（がこれらに限定されるものではない）。放射線療法及び光線力学療法（ＰＤＴ）もまた、ＡＴＰ放出及び／又はＣＤ３９及び／又はＣＤ７３の腫瘍内レベルの上方制御をもたらしてもよい。
【０３０３】
本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、追加の治療薬は、小分子などの薬剤を含む。例えば、治療は、抗ＣＤ３９抗体と、ＥＧＦＲ、ＨＥＲ２（ＥｒｂＢ２）、及び／又はＶＥＧＦをはじめとするが、これらに限定されるものではない、腫瘍関連抗原に対する阻害剤の役割を果たす小分子との併用投与を伴い得る。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３９抗体は、ゲフィチニブ（ＩＲＥＳＳＡ）、エルロチニブ（ＴＡＲＣＥＶＡ）、スニチニブ（ＳＵＴＥＮＴ）、ラパチニブ（ｌａｐａｔａｎｉｂ）、バンデタニブ（ＺＡＣＴＩＭＡ）、ＡＥＥ７８８、ＣＩ−１０３３、セジラニブ（ＲＥＣＥＮＴＩＮ）、ソラフェニブ（ＮＥＸＡＶＡＲ）、及びパゾパニブ（ＧＷ７８６０３４Ｂ）からなる群より選択される、タンパク質キナーゼ阻害剤と組み合わせて投与される。いくつかの実施形態では、追加の治療薬は、ｍＴＯＲ阻害剤を含む。
【０３０４】
本明細書に記載の方法の特定の実施形態では、追加の治療薬は、がん幹細胞経路を阻害する小分子である。いくつかの実施形態では、追加の治療薬は、Ｎｏｔｃｈ経路の阻害剤である。いくつかの実施形態では、追加の治療薬は、Ｗｎｔ経路の阻害剤である。いくつかの実施形態では、追加の治療薬は、ＢＭＰ経路の阻害剤である。いくつかの実施形態では、追加の治療薬は、Ｈｉｐｐｏ経路の阻害剤である。いくつかの実施形態では、追加の治療薬は、ｍＴＯＲ／ＡＫＲ経路の阻害剤である。いくつかの実施形態では、追加の治療薬は、ＲＳＰＯ／ＬＧＲ経路の阻害剤である。
【０３０５】
本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、追加の治療薬は、抗体などの生体分子を含む。例えば、治療は、抗ＣＤ３９抗体と、ＥＧＦＲ、ＨＥＲ２／ＥｒｂＢ２、及び／又はＶＥＧＦに結合する抗体をはじめとするが、これらに限定されるものではない、腫瘍関連抗原に対する抗体との併用投与を含み得る。特定の実施形態では、追加の治療薬は、がん幹細胞マーカーに特異的な抗体である。いくつかの実施形態では、追加の治療薬は、Ｎｏｔｃｈ経路の構成要素に結合する抗体である。いくつかの実施形態では、追加の治療薬は、Ｗｎｔ経路の構成要素に結合する抗体である。特定の実施形態では、追加の治療薬は、がん幹細胞経路を阻害する抗体である。いくつかの実施形態では、追加の治療薬は、Ｎｏｔｃｈ経路の阻害剤である。いくつかの実施形態では、追加の治療薬は、Ｗｎｔ経路の阻害剤である。いくつかの実施形態では、追加の治療薬は、ＢＭＰ経路の阻害剤である。いくつかの実施形態では、追加の治療薬は、β−カテニンシグナル伝達を阻害する抗体である。特定の実施形態では、追加の治療薬は、血管新生阻害剤である抗体（例えば、抗ＶＥＧＦ又はＶＥＧＦ受容体抗体）である。特定の実施形態では、追加の治療薬は、ベバシズマブ（ＡＶＡＳＴＩＮ）、ラムシルマブ、トラスツズマブ（ＨＥＲＣＥＰＴＩＮ）、ペルツズマブ（ＯＭＮＩＴＡＲＧ）、パニツマブ（ＶＥＣＴＩＢＩＸ）、ニモツズマブ、ザルツムマブ、又はセツキシマブ（ＥＲＢＩＴＵＸ）である。
【０３０６】
Ｉ／Ｏ組み合わせ−代表的なチェックポイント阻害剤及び共刺激アゴニスト
本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、追加の治療薬は、免疫応答を調節する抗体である。いくつかの実施形態では、追加の治療薬は、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、抗ＬＡＧ−３抗体、及び抗ＴＩＭ−３抗体又は抗ＴＩＧＩＴ抗体である。
【０３０７】
例えば、治療法は、免疫チェックポイント分子阻害剤又は共刺激分子活性化剤、又はそれらの組み合わせを投与することをさらに含み得る。免疫チェックポイントの例示的な阻害剤としては、ＰＤ−１、ＣＴＬＡ−４、ＴＩＭ−３、ＬＡＧ−３、ＣＥＡＣＡＭ、ＶＩＳＴＡ、ＢＴＬＡ、ＴＩＧＩＴ、ＬＡＩＲ１、ＣＤ１６０、２Ｂ４、ＮＬＲＰ１、ＮＲＬＰ３、ＳＴＩＮＧ又はＴＧＦＲβの１つ又は複数が挙げられる。共刺激分子の例示的な活性化剤としては、ＯＸ４０、ＣＤ２、ＣＤ２７、ＣＤＳ、ＩＣＡＭ−１、ＬＦＡ−１（ＣＤ１１ａ／ＣＤ１８）、ＩＣＯＳ（ＣＤ２７８）、４−１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＧＩＴＲ、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＢＡＦＦＲ、ＨＶＥＭ、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、ＳＬＡＭＦ７、ＮＫｐ８０、ＣＤ１６０、Ｂ７−Ｈ３又はＣＤ８３リガンドの１つ又は複数のアゴニストが挙げられる。免疫チェックポイントの例示的な阻害剤及び共刺激分子の例示的な活性化剤は、参照により本明細書に援用されるＰＣＴ公開国際公開第２０１６／０５４５５５号パンフレットに見いだされ得る。
【０３０８】
ＰＤ−１アンタゴニスト
ＰＤ−１遺伝子は、Ｉｇ遺伝子スーパーファミリーの一部である５５ｋＤａのＩ型膜貫通タンパク質である（Ａｇａｔａ  ｅｔ  ａｌ．（１９９６）Ｉｎｔ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ８：７６５−７２）。ＰＤ−１は、膜近位免疫受容体チロシン阻害モチーフ（ＩＴＩＭ）と、膜遠位チロシンベーススイッチモチーフ（ＩＴＳＭ）とを含有する（Ｔｈｏｍａｓ，Ｍ．Ｌ．（１９９５）Ｊ  Ｅｘｐ  Ｍｅｄ  １８１  ：１９５３−６；Ｖｉｖｉｅｒ，Ｅ  ａｎｄ  Ｄａｅｒｏｎ，Ｍ（１９９７）Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｔｏｄａｙ  １８：２８６−９１）。ＰＤ−１の２つのリガンドであるＰＤ−Ｌ１及びＰＤ−Ｌ２が同定されており、ＰＤ−１への結合時にＴ細胞の活性化を下方制御することが示されている（Ｆｒｅｅｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．（２０００）Ｊ  Ｅｘｐ  Ｍｅｄ  １９２：１０２７−３４；Ｌａｔｃｈｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．（２００１）Ｎａｔ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ２：２６１−８；Ｃａｒｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（２００２）Ｅｕｒ  Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ３２：６３４−４３）。ＰＤ−Ｌ１とＰＤ−Ｌ２は、どちらもＰＤ−１に結合するＢ７ホモログであるが、その他のＣＤ２８ファミリーメンバーには結合しない。ＰＤ−Ｌ１は、様々なヒトのがんに豊富にある（Ｄｏｎｇ  ｅｔ  ａｌ．（２００２）Ｎａｔ．Ｍｅｄ．８：７８７−９）。ＰＤ−１とＰＤ−Ｌ１の間の相互作用は、腫瘍浸潤リンパ球の減少、Ｔ細胞受容体媒介性増殖の減少、及びがん性細胞による免疫回避をもたらす（Ｄｏｎｇ  ｅｔ  ａｌ．（２００３）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｍｅｄ．８１：２８１−７；Ｂｌａｎｋ  ｅｔ  ａｌ．（２００５）Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．５４：３０７−  ３１４；Ｋｏｎｉｓｈｉ  ｅｔ  ａｌ．（２００４）Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．１０：５０９４−１００）。免疫抑制は、ＰＤ−１とＰＤ−Ｌ１の局所的な相互作用を阻害することによって解除され得て、ＰＤ−１とＰＤ−Ｌ２の相互作用もまたブロックされると、効果は相加的である（Ｉｗａｉ  ｅｔ  ａｌ．（２００２）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９９：１２２９３−７；Ｂｒｏｗｎ  ｅｔ  ａｌ．（２００３）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１７０：１２５７−６６）。
【０３０９】
本明細書の用法では、「プログラム死１」、「プログラム細胞死１」、「タンパク質ＰＤ−１」、「ＰＤ−１」、「ＰＤ１」、「ＰＤＣＤ１」、「ｈＰＤ−１」、及び「ｈＰＤ−Ｉ」という用語は同義的に使用され、ヒトＰＤ−１の変異型、イソ型、種ホモログ、及びヒトＰＤ−１と少なくとも１つの共通エピトープを有する類似体が含まれる。完全なヒトＰＤ−１配列は、ＧｅｎＢａｎｋ受入番号Ｕ６４８６３の下に見いだされ得る。
【０３１０】
本明細書の用法では、「プログラム細胞死１リガンド１」、「ＰＤ−Ｌ１」、「ＰＤ１１」、「ＰＤＣＤ１Ｌ１」、「ＰＤＣＤ１ＬＧ１」、「ＣＤ２７４」、「Ｂ７ホモログ１」、「Ｂ７−Ｈ１」、「Ｂ７−Ｈ」、及び「Ｂ７Ｈ１」という用語は同義的に使用され、ヒトＰＤ１−１の変異型、イソ型、種ホモログ、及びヒトＰＤ１−１と少なくとも１つの共通エピトープを有する類似体が含まれる。完全なヒトＰＤ−Ｌ１アミノ酸配列（イソ型ａ前駆体）は、ＧｅｎＢａｎｋ受入番号ＮＰ＿０５４８６２．１の下に見いだされ得る。完全なヒトＰＤ−Ｌ１アミノ酸配列（イソ型ｂ前駆体）は、ＧｅｎＢａｎｋ受入番号ＮＰ＿００１２５４６３５．１の下に見いだされ得る。
【０３１１】
「ＰＤ−１系結合アンタゴニスト」という用語は、ＰＤ−１シグナル伝達系上のシグナル伝達に起因するＴ細胞機能障害を取り除き、その結果、Ｔ細胞機能（例えば、増殖、サイトカイン産生、標的細胞殺滅）を回復させ又は増強するように、ＰＤ−１系結合パートナーとその結合パートナーの１つ又は複数との相互作用を阻害する分子である。本明細書の用法では、ＰＤ−１系結合アンタゴニストは、ＰＤ−１結合アンタゴニスト、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニスト、及びＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストを含む。
【０３１２】
「ＰＤ−１結合アンタゴニスト」という用語は、ＰＤ−１と、ＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２などのその結合パートナーの１つ又は複数との相互作用の結果生じるシグナル伝達を減少させ、ブロックし、阻害し、無効化し、又は妨害する分子である。いくつかの実施形態では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、ＰＤ−１とその結合パートナーとの結合を阻害する分子である。特定の態様では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、ＰＤ−１と、ＰＤ−Ｌ１及び／又はＰＤ−Ｌ２との結合を阻害する。例えば、ＰＤ−１結合アンタゴニストとしては、抗ＰＤ−１抗体、それらの抗原結合断片、イムノアドヘシン、融合タンパク質、オリゴペプチド、及びＰＤ−１とＰＤ−Ｌ１及び／又はＰＤ−Ｌ２との相互作用に起因するシグナル伝達を減少させ、ブロックし、阻害し、無効化し、又は妨害するその他の分子が挙げられる。一実施形態では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、機能不全のＴ細胞の機能不全をより少なくする（例えば、抗原認識に対するエフェクター応答を増強する）ように、ＰＤ−１を介したシグナル伝達を媒介するＴリンパ球上で発現される細胞表面タンパク質によって、又は細胞表面タンパク質を介して媒介される、負の共刺激シグナルを減少させる。いくつかの実施形態では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、抗ＰＤ−１抗体である。特定の態様では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、本明細書に記載のＭＤＸ−１１０６である。別の特定の態様では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、本明細書に記載のＭｅｒｃｋ３７４５である。別の特定の態様では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、本明細書に記載のＣＴ−０１１である。
【０３１３】
「ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニスト」という用語は、ＰＤ−Ｌ１と、ＰＤ−１、Ｂ７−１などのその結合パートナーの１つ又は複数との相互作用から生じるシグナル伝達を減少させ、ブロックし、阻害し、無効化し、又は妨害する分子である。いくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ１と、その結合パートナーとの結合を阻害する分子である。特定の態様では、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ１と、ＰＤ−１及び／又はＢ７−１との結合を阻害する。いくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストとしては、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、それらの抗原結合断片、イムノアドヘシン、融合タンパク質、オリゴペプチド、及びＰＤ−Ｌ１と、ＰＤ−１、Ｂ７−１などのその結合パートナーの１つ又は複数との相互作用から生じるシグナル伝達を減少させ、ブロックし、阻害し、無効化し、又は妨害するその他の分子が挙げられる。一実施形態では、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、機能不全のＴ細胞の機能不全をより少なくする（例えば、抗原認識に対するエフェクター応答を増強する）ように、ＰＤ−Ｌ１を介したシグナル伝達を媒介するＴリンパ球上で発現される細胞表面タンパク質によって、又は細胞表面タンパク質を介して媒介される、負の共刺激シグナルを減少させる。いくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、抗ＰＤ−Ｌ１抗体である。特定の態様では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、本明細書に記載のＹＷ２４３．５５．Ｓ７０である。別の特定の態様では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、本明細書に記載のＭＤＸ−１１０５である。なおも別の特定の態様では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、本明細書に記載のＭＰＤ１３２８０Ａである。
【０３１４】
「ＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニスト」という用語は、ＰＤ−Ｌ２と、ＰＤ−１などのその結合パートナーの１つ又は複数との相互作用から生じるシグナル伝達を減少させ、ブロックし、阻害し、無効化し、又は妨害する分子である。いくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ２とその結合パートナーとの結合を阻害する分子である。特定の態様では、ＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ２とＰＤ−１との結合を阻害する。いくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌ２アンタゴニストとしては、抗ＰＤ−Ｌ２抗体、それらの抗原結合断片、イムノアドヘシン、融合タンパク質、オリゴペプチド、及びＰＤ−Ｌ２と、ＰＤ−１などの結合パートナーの１つ又は複数との相互作用から生じるシグナル伝達を減少させ、ブロックし、阻害し、無効化し、又は妨害するその他の分子が挙げられる。一実施形態では、ＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストは、機能不全のＴ細胞の機能不全をより少なくする（例えば、抗原認識に対するエフェクター応答を増強する）ように、ＰＤ−Ｌ２を介したシグナル伝達を媒介するＴリンパ球上で発現される細胞表面タンパク質によって、又は細胞表面タンパク質を介して媒介される、負の共刺激シグナルを減少させる。いくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストは、イムノアドヘシンである。
【０３１５】
ＰＤ−１経路：ＰＤ−１経路のメンバーは、ＰＤ−１シグナル伝達に関連する全てのタンパク質である。一方では、これらは、例えば、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、及びＰＤ−Ｌ２のリガンド、及びシグナル伝達受容体ＰＤ−１など、ＰＤ−１の上流でＰＤ−１シグナル伝達を誘導するタンパク質であり得る。他方、これらはＰＤ−１受容体の下流にあるシグナル伝達タンパク質であり得る。本発明の文脈におけるＰＤ−１経路のメンバーとして特に好ましいのは、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、及びＰＤ−Ｌ２である。
【０３１６】
ＰＤ−１経路阻害剤：本発明の文脈において、ＰＤ−１経路阻害剤は、好ましくはＰＤ−１受容体によって媒介されるシグナル伝達である、ＰＤ−１経路シグナル伝達を損ない得る化合物として、好ましくは本明細書で定義される。したがって、ＰＤ−１経路阻害剤は、ＰＤ−１経路シグナル伝達に拮抗できるＰＤ−１経路の任意のメンバーに対して向けられた、任意の阻害剤であってもよい。この文脈において、阻害剤は、ＰＤ−１経路の任意のメンバーを標的とする、好ましくはＰＤ−１受容体、ＰＤ−Ｌ１又はＰＤ−Ｌ２に対する、本明細書で定義されるアンタゴニスト抗体であってもよい。このアンタゴニスト抗体はまた、核酸によってコードされてもよい。このようなコードされた抗体は、本明細書で定義されるように「細胞内抗体」とも称される。また、ＰＤ−１経路阻害剤は、ＰＤ−１リガンドの活性をブロックする、ＰＤ−１受容体の断片又はＰＤ−１−受容体であってもよい。Ｂ７−１又はその断片もまた、ＰＤ１阻害リガンドとして機能してもよい。さらに、ＰＤ−１経路阻害剤は、好ましくはＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１又はＰＤ−Ｌ２である、ＰＤ−１経路のメンバーに対して向けられたｓｉＮＡ（低分子干渉ＲＮＡ）又はアンチセンスＲＮＡであってもよい。さらに、ＰＤ−１経路阻害剤は、ＰＤ−１に結合できるが、例えば、ＰＤ−１とＢ７−Ｈ１又はＢ７−ＤＬとの相互作用を阻害することによって、ＰＤ−１シグナル伝達を妨げる、アミノ酸配列を含むタンパク質（又はそれをコードする核酸）であってもよい。さらに、ＰＤ−１経路阻害剤は、例えば、ＰＤ−１結合ペプチド又は小型有機分子など、ＰＤ−１経路シグナル伝達を阻害できる小分子阻害剤であってもよい。
【０３１７】
特定の実施形態では、本発明のＰＤ−１アンタゴニストは、ＰＤ−１のリガンドに結合し、１つ又は複数のリガンドのＰＤ−１受容体への結合を妨害し、減少させ、又は阻害するか、又はＰＤ−１受容体を介したシグナル伝達に関与することなく、ＰＤ−１受容体に直接結合する薬剤を含む。一実施形態では、ＰＤ−１アンタゴニストは、ＰＤ−１に直接結合し、ＰＤ−１阻害シグナル伝達をブロックする。別の実施形態では、ＰＤ−１アンタゴニストは、ＰＤ−１の１つ又は複数のリガンド（例えば、ＰＤ−Ｌ１及びＰＤ−Ｌ２）に結合し、リガンドがＰＤ−１を通じて阻害シグナル伝達を誘発することを低減又は阻害する。一実施形態では、ＰＤ−１アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ１に直接結合し、ＰＤ−Ｌ１がＰＤ−１に結合するのを阻害し又は妨げることにより、ＰＤ−１阻害シグナル伝達をブロックする。
【０３１８】
ＰＤ−１結合スキャフォールドタンパク質をはじめとする本発明の方法及び組成物で使用されるＰＤ−１アンタゴニストとしては、ＰＤ−リガンド、抗体、及び多価剤が挙げられるが、これらに限定されるものではない。特定の実施形態では、アンタゴニストは、ＡＭＰ−２２４などの融合タンパク質である。別の実施形態では、アンタゴニストは、抗ＰＤ−１抗体（「ＰＤ−１抗体」）である。本発明で使用するのに適する抗ヒトＰＤ−１抗体（又はそれに由来するＶＨ及び／又はＶＬドメイン）は、当該技術分野で周知の方法を用いて作製され得る。代案としては、当該技術分野で認められている抗ＰＤ−１抗体が使用され得る。例えば、抗体ＭＫ−３４７５又はＣＴ−０１１が使用され得る。さらに、その教示が参照により本明細書に援用される、国際公開第２００６／１２１１６８号パンフレットに記載されているモノクローナル抗体５Ｃ４、１７Ｄ８、２Ｄ３、４Ｈ１、４Ａ１１、７Ｄ３、及び５Ｆ４が使用され得る。また、これらの技術分野で認められた抗体のいずれかと、ＰＤ−１への結合について競合する抗体もまた使用され得る。
【０３１９】
別の実施形態では、ＰＤ−１アンタゴニストは、抗ＰＤ−Ｌ１抗体である。本発明で使用するのに適する抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体（又はそれに由来するＶＨ及び／又はＶＬドメイン）は、当該技術分野で周知の方法を用いて作製され得る。代案としては、当該技術分野で認められている抗ＰＤ−Ｌ１抗体が使用され得る。例えば、ＭＥＤＩ４７３６（Ａｎｔｉ−Ｂ７−Ｈ１としても知られている）又はＭＰＤ１３２８０Ａ（ＲＧ７４４６としても知られている）が使用され得る。さらに、その教示が参照により本明細書に援用される国際公開第２００７／００５８７４号パンフレット及び米国特許第７，９４３，７４３号明細書に記載されている、モノクローナル抗体１２Ａ４、３Ｇ１０、１０Ａ５、５Ｆ８、１０Ｈ１０、１Ｂ１２、７Ｈ１、１１Ｅ６、１２Ｂ７、及び１３Ｇ４が使用され得る。また、これらの技術分野で認められた抗体のいずれかと、ＰＤ−Ｌ１への結合について競合する抗体もまた使用され得る。
【０３２０】
例示的な抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、１２Ａ４である（国際公開第２００７／００５８７４号パンフレット及び米国特許第７，９４３，７４３号明細書）。一実施形態では、抗体は、１２Ａ４の重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又はＶＲを含む。したがって、一実施形態では、抗体は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１で示される配列を有する１２Ａ４のＶＨ領域のＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３ドメインと、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３で示される配列を有する１２Ａ４のＶＬ領域のＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメインとを含む。別の実施形態では、抗体は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５、６、及び７に記載される配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３ドメインと、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８、９、及び１０に記載される配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３ドメインとを含む。別の実施形態では、抗体は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１及び／又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３に記載されるアミノ酸配列を有する、１２Ａ４のＶＨ及び／又はＶＬ領域を含む。別の実施形態では、抗体は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２及び／又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４に記載される核酸配列によってコードされた、重鎖可変（ＶＨ）領域及び／又は軽鎖可変（ＶＬ）領域を含む。別の実施形態では、抗体は、上記抗体と結合を競合し、且つ／又はＰＤ−Ｌ１上で上記抗体と同じエピトープに結合する。別の実施形態では、抗体は、上記抗体と少なくとも約９０％の可変領域アミノ酸配列同一性（例えば、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３と少なくとも約９０％、９５％又は９９％の可変領域同一性１２Ａ４）を有する。
【０３２１】
抗ＰＤ−１又は抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、１０−７Ｍ、５ｘ１０−８Ｍ、１０−８Ｍ、５ｘ１０−９Ｍ、１０−９Ｍ、５ｘ１０−１０Ｍ、１０−１０Ｍ、またはそれより小さいＫＤで、それぞれＰＤ−１又はＰＤ−Ｌ１に結合し得る。
【０３２２】
一実施形態では、ＰＤ−１阻害剤は、ニボルマブ、ペンブロリズマブ又はピジリズマブから選択される抗ＰＤ−１抗体である。好ましいＰＤ−１阻害剤は、ニボルマブである。
【０３２３】
いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−１抗体は、ニボルマブである。ニボルマブの別名としては、ＭＤＸ−１１０６、ＭＤＸ−１１０６−０４、ＯＮＯ−４５３８、又はＢＭＳ−９３６５５８が挙げられる。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−１抗体は、ニボルマブ（ＣＡＳ登録番号：９４６４１４−９４−４）である。ニボルマブは、ＰＤ１を特異的にブロックする完全ヒトＩｇＧ４モノクローナル抗体である。ニボルマブ（クローン５Ｃ４）及びＰＤ１に特異的に結合するその他のヒトモノクローナル抗体は、米国特許第８，００８，４４９号明細書（参照により援用される）及び国際公開第２００６／１２１１６８号パンフレット（参照により援用される）で開示されている。その他の実施形態では、抗ＰＤ−１抗体は、ペンブロリズマブである。ペンブロリズマブ（商品名ＫＥＹＴＲＵＤＡ、以前のＬａｍｂｒｏｌｉｚｕｍａｂ、Ｍｅｒｃｋ  ３７４５、ＭＫ−３４７５、又はＳＣＨ−９００４７５としても知られている）は、ＰＤ１に結合するヒト化ＩｇＧ４モノクローナル抗体である。ペンブロリズマブは、例えば、Ｈａｍｉｄ，Ｏ．ｅｔ  ａｌ．（２０１３）Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  ３６９（２）：１３４−４４、国際公開第２００９／１１４３３５号パンフレット（参照により援用される）、及び米国特許第８，３５４，５０９号明細書（参照により援用される）で開示されている。
【０３２４】
いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−１抗体は、ピジリズマブである。ピジリズマブ（ＣＴ−０１１；Ｃｕｒｅ  Ｔｅｃｈ）は、ＰＤ１に結合するヒト化ＩｇＧｌｋモノクローナル抗体である。ピジリズマブ及びその他のヒト化抗ＰＤ−１モノクローナル抗体は、国際公開第２００９／１０１６１１号パンフレットで開示されている。その他の抗ＰＤ１抗体は、米国特許第８，６０９，０８９号明細書、米国特許出願公開第２０１００２８３３０号明細書、及び／又は米国特許出願公開第２０１２０１１４６４９号明細書で開示されている。その他の抗ＰＤ１抗体としては、ＡＭＰ  ５１４（Ａｍｐｌｉｍｍｕｎｅ）が挙げられる。
【０３２５】
いくつかの実施形態では、ＰＤ−１阻害剤は、イムノアドヘシン｛例えば、定常領域｛例えば、免疫グロブリン配列のＦｃ領域）に融合したＰＤ−Ｌ１又はＰＤ−Ｌ２の細胞外又はＰＤ−１結合部分を含むイムノアドヘシンである。いくつかの実施形態では、ＰＤ−１阻害剤は、ＡＭＰ−２２４である。いくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体である。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０、ＭＰＤ１３２８０Ａ、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ−００１０７１８Ｃ、又はＭＤＸ−１１０５である。
【０３２６】
一実施形態では、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、ＭＤＸ−１１０５である。ＢＭＳ−９３６５５９としても知られているＭＤＸ−１１０５は、国際公開第２００７／００５８７４号パンフレットに記載されている抗ＰＤ−Ｌ１抗体である。一実施形態では、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０である。ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０抗体は、国際公開第２０１０／０７７６３４号パンフレット（参照により援用される）に記載されている抗ＰＤ−Ｌ１である（重鎖及び軽鎖可変領域配列は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０及び２１に示される）。
【０３２７】
一実施形態では、ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、ＭＤＰＬ３２８０Ａ（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ／Ｒｏｃｈｅ）である。ＭＤＰＬ３２８０Ａは、ＰＤ−Ｌ１に結合するヒトＦｃ最適化ＩｇＧ１モノクローナル抗体である。ＭＤＰＬ３２８０Ａ、及びＰＤ−Ｌ１に対するその他のヒトモノクローナル抗体は、米国特許第７，９４３，７４３号明細書（参照により援用される）及び米国特許出願公開第２０１２／００３９９０６号明細書（参照により援用される）で開示されている。その他の実施形態では、ＰＤ−Ｌ２阻害剤は、ＡＭＰ−２２４である。ＡＭＰ−２２４は、ＰＤ１とＢ７−Ｈ１の間の相互作用をブロックするＰＤ−Ｌ２  Ｆｃ融合可溶性受容体である（Ｂ７−ＤＣＩｇ；Ａｍｐｌｉｍｍｕｎｅ；例えば、国際公開第２０１０／０２７８２７号パンフレット（参照により援用される）及び国際公開第２０１１／０６６３４２号パンフレット（参照により援用される）で開示されている）。
【０３２８】
特定の実施形態では、ＰＤ−１経路阻害剤は、ＰＤ−１経路シグナル伝達の小分子アンタゴニストである。このような小分子アンタゴニストとしては、ＰＤ−１、ＰＤ−１Ｌ及び／又はＰＤ−１Ｌ２の１つ又は複数に結合し、ＰＤ−１とＰＤ−１Ｌ１及び／又はＰＤ−１Ｌ２との相互作用を阻害する薬剤が挙げられる。
【０３２９】
ＰＤ−１経路シグナル伝達の例示的な小分子アンタゴニストは、とりわけ、そのそれぞれが参照により本明細書に援用される、米国特許出願公開第２０１４／０２９４８９８号明細書及び米国特許出願公開第２０１４／０１９９３３４号明細書、及びＰＣＴ出願国際公開第２０１３／１３２３１７号パンフレット及び国際公開第２０１２／１６８９４４号パンフレットに見いだされ得る。
【０３３０】
単なる例示として、対象の併用療法は、
2021527138.tif 000027
からなる群より選択される小分子アンタゴニストを用いて実施され得る。
【０３３１】
その他の実施形態では、小分子アンタゴニストは、一般式
2021527138.tif 000028
で表されるか、又はレトロ類似体又は薬学的に許容可能な立体異性体又はその薬学的に許容可能な塩であり、
式中、
Ｒ１は、Ｓｅｒの遊離Ｃ末端又はアミド化Ｃ末端であり；
Ｌは、−ＮＨ（ＣＨ２）ｎＮＨ−又は−ＮＨ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎＮＨ−から選択されるリンカーであり；
Ｒ４は、水素、アミノ（Ｃ１〜Ｃ２０）アルキル、−ＮＨＣＯＣＨ３又は−ＮＨＣＯＮＨ２から選択される。
【０３３２】
なおもその他の実施形態では、小分子アンタゴニストは、一般式
2021527138.tif 000029
で表されるか、又はレトロ類似体又は薬学的に許容可能な立体異性体又はその薬学的に許容可能な塩であり、
式中、
Ｒ１は、ＳｅｒのＮ末端であるか；又はＳｅｒのヒドロキシル基又はアミノ基のどちらかで置換された（Ｃ１〜Ｃ２０）アシルであり；
Ｌは、−ＮＨ（ＣＨ２）ｎＮＨ−、−ＮＨ（ＣＨ２）ｎＣＨ（ＮＨ２）ＣＯ−、−ＯＯＣ（ＣＨ２）ｍＣＯＯ−、−ＮＨ（ＣＨ２）ｎＣＯ−、−ＮＨ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎＮＨ−、−ＮＨ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎＣＯ−又は−ＣＯ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎＣＯ−から選択されるリンカーであり；
Ｒ２は、Ａｍ２の遊離Ｃ末端、アミド化Ｃ末端又はＮ末端であり；又はＹ−Ｒ５であり；
Ｙは、−ＯＯＣ（ＣＨ２）ｍＣＯＯ−、−ＣＯ（ＣＨ２）ｎＮＨ−、−ＣＯ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎＮＨ−又は−ＣＯＣＨ２（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｎＮＨ−から選択される任意選択的リンカーであり；
Ｒ５は、マレイミドプロピオン酸などのアルブミン結合部分であり；
Ｒ３は、ＯＨ又はＮＨ２であり；
Ｒ４は、Ｐｈｅのフェニル基上の置換基であり、水素、アミノ（Ｃ１〜Ｃ２０）アルキル、−ＮＨＣＯＣＨ３又は−ＮＨＣＯＮＨ２から選択され；
ｎは、２〜１０（両端を含む）から選択された値を含む整数であり；
ｍは、０〜８（両端を含む）から選択された値を含む整数であり；
Ｓｅｒ−Ａｓｎ、Ａｓｎ−Ｔｈｒ又はＴｈｒ−Ｓｅｒのペプチド結合（−ＣＯＮＨ−）の１つは、改変ペプチド結合
2021527138.tif 000030
（式中、Ｑは水素、−ＣＯ（Ｃ１〜Ｃ２０）アルキル又は−ＣＯＯ（Ｃ１〜Ｃ２０）アルキル基であり；１つ又は複数の又は全てのアミノ酸はＤ配置にあってもよい）で置き換えられてもよい。
【０３３３】
例えば、小分子アンタゴニストは、
2021527138.tif 000031
2021527138.tif 000032
2021527138.tif 000033
2021527138.tif 000034
2021527138.tif 000035
2021527138.tif 000036
からなる群より選択され得る。
【０３３４】
ＣＴＬＡ−４アンタゴニスト
特定の実施形態では、本明細書に記載される組み合わせは、ＣＴＬＡ−４阻害剤もまた含む。例示的な抗ＣＴＬＡ−４抗体としては、トレメリムマブ（Ｐｆｉｚｅｒから入手可能なＩｇＧ２モノクローナル抗体、以前はチシリムマブとして知られていた、ＣＰ−６７５，２０６）；及びイピリムマブ（ＣＴＬＡ−４抗体、ＭＤＸ−０１０、ＣＡＳ番号４７７２０２−００−９としても知られている）が挙げられる。
【０３３５】
本明細書で提供される方法で使用するためのトレメリムマブ（又はその抗原結合断片）に関する情報は、その開示全体が参照により本明細書に援用される、米国特許第６，６８２，７３６号明細書（参照により援用される）（その中でこれは１１．２．１と称される）に見いだされ得る。トレメリムマブ（ＣＰ−６７５，２０６、ＣＰ−６７５、ＣＰ−６７５２０６、及びチシリムマブとしても知られている）は、ＣＴＬＡ−４に対して高度に選択的で、ＣＤ８０（Ｂ７．１）及びＣＤ８６（Ｂ７．２）に対するＣＴＬＡ−４の結合をブロックする、ヒトＩｇＧ２モノクローナル抗体である。これは、生体外で免疫活性化をもたらすことが示されており、トレメリムマブで治療された一部の患者は腫瘍の退縮を示している。
【０３３６】
本明細書で提供される方法で使用するためのトレメリムマブは、重鎖と軽鎖、又は重鎖可変領域と軽鎖可変領域を含む。特定の態様では、本明細書で提供される方法で使用するためのトレメリムマブ又はその抗原結合断片は、本明細書で上に示されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、本明細書で上に示されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域とを含む。特定の態様では、本明細書で提供される方法で使用するためのトレメリムマブ又はその抗原結合断片は、重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含み、その中で重鎖可変領域は、本明細書で上に示されるＫａｂａｔ定義ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３配列を含み、軽鎖可変領域は、本明細書で上に示されるＫａｂａｔ定義ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３配列を含む。当業者は、当業者に知られている、Ｃｈｏｔｈｉａ定義、Ａｂｍ定義、又はその他のＣＤＲ定義を容易に識別できるであろう。特定の態様では、本明細書で提供される方法で使用するためのトレメリムマブ又はその抗原結合断片は、その全体が参照により本明細書に援用される、米国特許第６，６８２，７３６号明細書で開示されているような抗体の可変重鎖及び可変軽鎖ＣＤＲ配列を含む。
【０３３７】
Ｈｕｘｌｅｙ  ｅｔ  ａｌ．２００４  Ｃｅｌｌ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  １１：１６５１−１６５８によって記載されたように、本発明はまた、ＣＴＬＡ−４の小分子阻害剤を使用することを企図し、それは、式：
2021527138.tif 000037
の化合物を含む。
【０３３８】
その他の小分子ＣＴＬＡ−４アンタゴニストとしては、
2021527138.tif 000038
が挙げられる。
【０３３９】
一実施形態では、組み合わせは、免疫ＤＡＳＨ阻害剤と、例えば、本明細書に記載されるような抗ＰＤ−１抗体分子と、例えば、イピリムマブなどの抗ＣＴＬＡ−４抗体とを含む。使用され得る例示的な用量としては、例えば、３ｍｇ／ｋｇなどの約１〜１０ｍｇ／ｋｇの抗ＰＤ−１抗体分子の用量、及び例えば、約３ｍｇ／ｋｇのイピリムマブなどの抗ＣＴＬＡ−４抗体の用量が挙げられる。
【０３４０】
その他の例示的な抗ＣＴＬＡ−４抗体は、例えば、米国特許第５，８１１，０９７号明細書に開示されている。
【０３４１】
本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、追加の治療薬は、免疫応答を調節する抗体である。いくつかの実施形態では、追加の治療薬は、抗−ＰＤ−１抗体、抗ＬＡＧ−３抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、抗ＴＩＭ−３抗体、又は抗ＴＩＧＩＴ抗体である。
【０３４２】
いくつかの実施形態では、ＬＡＧ３抗体は、ＩＭＰ７０１、ＩＭＰ７３１、ＢＭＳ−９８６０１６、ＬＡＧ５２５、及びＧＳＫ２８３１７８１である。いくつかの実施形態では、ＬＡＧ３アンタゴニストは、例えば、ＩＭＰ３２１などの可溶性ＬＡＧ３受容体を含む。
【０３４３】
いくつかの実施形態では、免疫応答刺激剤は、ＣＤ２８アゴニスト、４−１ＢＢアゴニスト、ＯＸ４０アゴニスト、ＣＤ２７アゴニスト、ＣＤ８０アゴニスト、ＣＤ８６アゴニスト、ＣＤ４０アゴニスト、及びＧＩＴＲアゴニストからなる群より選択される。いくつかの実施形態では、ＯＸ４０アゴニストは、ＯＸ４０リガンド、又はそのＯＸ４０−結合部分を含む。例えば、ＯＸ４０アゴニストは、ＭＥＤＩ６３８３であってもよい。いくつかの実施形態では、ＯＸ４０アゴニストは、ＯＸ４０に特異的に結合する抗体である。いくつかの実施形態では、ＯＸ４０に結合する抗体は、ＭＥＤＩ６４６９、ＭＥＤＩ０５６２、又はＭＯＸＲ０９１６（ＲＧ７８８８）である。いくつかの実施形態では、ＯＸ４０アゴニストは、ＯＸ４０リガンドを発現できるベクター（例えば、発現ベクター又はアデノウイルスなどのウイルス）である。いくつかの実施形態では、ＯＸ４０発現ベクターは、δ−２４−ＲＧＤＯＸ又はＤＮＸ２４０１である。
【０３４４】
いくつかの実施形態では、４−１ＢＢ（ＣＤ１３７）アゴニストは、アンチカリンなどの結合分子である。いくつかの実施形態では、アンチカリンは、ＰＲＳ−３４３である。いくつかの実施形態では、４−１ＢＢアゴニストは、４−１ＢＢに特異的に結合する抗体である。いくつかの実施形態では、４−１ＢＢに結合する抗体は、ＰＦ−２５６６（ＰＦ−０５０８２５６６）又はウレルマブ（ＢＭＳ−６６３５１３）である。
【０３４５】
いくつかの実施形態では、ＣＤ２７アゴニストは、ＣＤ２７に特異的に結合する抗体である。いくつかの実施形態では、ＣＤ２７に結合する抗体は、バリルマブ（ＣＤＸ−１１２７）である。
【０３４６】
いくつかの実施形態では、ＧＩＴＲアゴニストは、ＧＩＴＲリガンド又はそのＧＩＴＲ−結合部分を含む。いくつかの実施形態では、ＧＩＴＲアゴニストは、ＧＩＴＲに特異的に結合する抗体である。いくつかの実施形態では、ＧＩＴＲに結合する抗体は、ＴＲＸ５１８、ＭＫ−４１６６、又はＩＮＢＲＸ−１１０である。
【０３４７】
特定の実施形態では、抗ＣＤ３９抗体は、好ましくは医薬組成物の一部として、ＳＴＩＮＧアゴニストと組み合わされる。環式−ジ−ヌクレオチド（ＣＤＮｓ）環式−ジ−ＡＭＰ（リステリア・モノサイトゲネス（Ｌｉｓｔｅｒｉａ  ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓ）及びその他の細菌によって産生される）及びその類似体環式−ジ−ＧＭＰ及び環式−ＧＭＰ−ＡＭＰは、インターフェロン遺伝子（ＳＴＩＮＧ）の刺激因子として知られている病原体認識受容体（ＰＲＲ）に結合する病原体関連分子パターン（ＰＡＭＰ）として、宿主細胞によって認識される。ＳＴＩＮＧは、宿主哺乳類細胞の細胞質中のアダプタータンパク質であり、それはＴＡＮＫ結合キナーゼ（ＴＢＫ１）−ＩＲＦ３及びＮＦ−κＢシグナル伝達系を活性化し、自然免疫を強力に活性化するＩＦＮ−γ及びその他の遺伝子産物の誘導をもたらす。現在、ＳＴＩＮＧは宿主の細胞質ゾル監視経路の構成要素であることが認識されており（Ｖａｎｃｅ  ｅｔ  ａｌ．，２００９）、それは細胞内病原体の感染を感知し、それに応じてＩＦＮ−γの産生を誘導して、抗原特異的ＣＤ４＋及びＣＤ８＋Ｔ細胞の双方、並びに病原体特異的抗体からなる適応型保護病原体特異的免疫応答の発生をもたらす。米国特許第７，７０９，４５８号明細書及び米国特許第７，５９２，３２６号明細書；ＰＣＴ公開国際公開第２００７／０５４２７９号パンフレット、国際公開第２０１４／０９３９３６号パンフレット、国際公開第２０１４／１７９３３５号パンフレット、国際公開第２０１４／１８９８０５号パンフレット、国際公開第２０１５／１８５５６５号パンフレット、国際公開第２０１６／０９６１７４号パンフレット、国際公開第２０１６／１４５１０２号パンフレット、国際公開第２０１７／０２７６４５号パンフレット、国際公開第２０１７／０２７６４６号パンフレット、及び国際公開第２０１７／０７５４７７号パンフレット；並びにＹａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ  Ｌｅｔｔ．１８：５６３１−４，２００８。
【０３４８】
例示的な組み合わせ
好ましい実施形態では、本発明は、がんの治療、より具体的には、肺がん、肉腫、悪性黒色腫、前立腺がん、膵臓がん、胃がん、卵巣がん、肝細胞腫、乳がん、結腸直腸がん、腎臓がん、脳がん、及びリンパ腫から選択されるがんの治療における、抗ＣＤ３９抗体と抗腫瘍白金配位錯体との組み合わせを対象とする。この化学療法薬群としては、シスプラチン、オキサリプラチン、カルボプラチン、四硝酸トリプラチン（ＢＢＲ３４６４）、サトラプラチン、テトラプラチン、オルミプラチン、イプロプラチン、ネダプラチン、及びロバプラチンが挙げられるが、これらに限定されるものではない。特に好ましいのは、がんの治療における、より具体的には肺がん、肉腫、悪性黒色腫、前立腺がん、膵臓がん、胃がん、卵巣がん、肝細胞腫、乳がん、結腸直腸がん、腎臓がん、及び脳がんから選択されるがんの治療における、抗ＣＤ３９抗体と、シスプラチン、オキサリプラチン、カルボプラチン、四硝酸トリプラチン、サトラプラチン、テトラプラチン、オルミプラチン、イプロプラチン、ネダプラチン、及びロバプラチンとの組み合わせであり、なおもより好ましいのは、シスプラチン及びオキサリプラチンとの組み合わせである。別の好ましい実施形態では、本発明は、がんの治療における、より具体的には肺がん、肉腫、悪性黒色腫、膀胱がん、前立腺がん、膵臓がん、胃がん、卵巣がん、肝細胞腫、乳がん、結腸直腸がん、腎臓がん、食道がん、脳がん、肛門がん、白血病、及びリンパ腫がんから選択されるがんの治療における、抗ＣＤ３９抗体と代謝アンタゴニストとの組み合わせを対象とする。この化学療法薬群としては、５−フルオロウラシル、ゲムシタビン、シタラビン、カペシタビン、デシタビン、フロクスウリジン、フルダラビン、アミノプテリン、メトトレキサート、ペメトレキセド、ラルチトレキセド、クラドリビン、クロファラビン、メルカプトプリン、ペントスタチン、及びチオグアニンが挙げられるが、これらに限定されるものではない。特に好ましいのは、がんの治療における、より具体的には肺がん、肉腫、悪性黒色腫、前立腺がん、膵臓がん、胃がん、卵巣がん、肝細胞腫、乳がん、結腸直腸がん、腎臓がん、脳がん、白血病、及びリンパ腫から選択されるがんの治療における、抗ＣＤ３９抗体と、５−フルオロウラシル、ゲムシタビン、シタラビン、カペシタビン、デシタビン、フロクスウリジン、フルダラビン、アミノプテリン、メトトレキサート、ペメトレキセド、ラルチトレキセド、クラドリビン、クロファラビン、メルカプトプリン、ペントスタチン、及びチオグアニンとの組み合わせであり、なおもより好ましいのは、５−フルオロウラシル、ゲムシタビン、シタラビン、及びメトトレキサートとの組み合わせである。
【０３４９】
別の好ましい実施形態では、本発明は、がんの治療における、より具体的には肺がん、肉腫、前立腺がん、胃がん、卵巣がん、肝細胞腫、乳がん、結腸直腸がん、腎臓がん、脳がん、白血病、及びリンパ腫から選択されるがんの治療における、抗ＣＤ３９抗体と有糸分裂阻害剤との組み合わせを対象とする。この化学療法薬群としては、パクリタキセル、ドセタキセル、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、及びビノレルビンが挙げられるが、これらに限定されるものではない。特に好ましいのは、がんの治療における、より具体的には肺がん、肉腫、前立腺がん、胃がん、卵巣がん、肝細胞腫、乳がん、結腸直腸がん、腎臓がん、及び脳がんから選択されるがんの治療における、抗ＣＤ３９抗体とパクリタキセル、ドセタキセル、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、及びビノレルビンとの組み合わせであり、なおもより好ましいのは、パクリタキセル、ドセタキセル、ビンクリスチン、及びビノレルビンとの組み合わせである。
【０３５０】
別の好ましい実施形態では、本発明は、がんの治療における、より具体的には肺がん、肉腫、悪性黒色腫、膀胱がん、前立腺がん、膵臓がん、甲状腺がん、胃がん、卵巣がん、肝細胞腫、乳がん、結腸直腸がん、腎臓がん、神経芽腫、脳がん、肛門がん、精巣がん、白血病、多発性骨髄腫、及びリンパ腫の治療における、抗ＣＤ３９抗体と抗がん抗生物質との組み合わせを対象とする。この化学療法薬群群としては、ダウノルビシン、ドキソルビシン、エピルビシン、イダルビシン、ミトキサントロン、ピクサントロン、バルルビシン、マイトマイシンＣ、ブレオマイシン、アクチノマイシンＡ、及びミトラマイシンが挙げられるが、これらに限定されるものではない。特に好ましいのは、がんの治療における、より具体的には肺がん、肉腫、悪性黒色腫、前立腺がん、膵臓がん、胃がん、卵巣がん、肝細胞腫、乳がん、結腸直腸がん、腎臓がん、脳がん、白血病、及びリンパ腫の治療における、抗ＣＤ３９抗体とダウノルビシン、ドキソルビシン、エピルビシン、イダルビシン、ミトキサントロン、ピクサントロン、バルルビシン、マイトマイシンＣ、ブレオマイシン、アクチノマイシンＤ、及びミトラマイシンとの組み合わせであり、なおもより好ましいのは、ダウノルビシン、ドキソルビシン、マイトマイシンＣ、及びアクチノマイシンＤとの組み合わせである。
【０３５１】
別の好ましい実施形態では、本発明は、がんの治療における、より具体的には肺がん、肉腫、悪性黒色腫、前立腺がん、膵臓がん、胃がん、卵巣がん、肝細胞腫、乳がん、結腸直腸がん、腎臓がん、神経芽腫、脳がん、子宮頸がん、精巣がん、白血病、及びリンパ腫の治療における、抗ＣＤ３９抗体とトポイソメラーゼＩ及び／又はＩＩ阻害剤との組み合わせを対象とする。この化学療法薬群としては、トポテカン、ＳＮ−３８、イリノテカン、カンプトテシン、ルビテカン、エトポシド、アムサクリン、及びテニポシドが挙げられるが、これらに限定されるものではない。特に好ましいのは、がんの治療における、より具体的には肺がん、肉腫、悪性黒色腫、前立腺がん、膵臓がん、胃がん、卵巣がん、肝細胞腫、乳がん、結腸直腸がん、腎臓がん、及び脳がんの治療における、ＰＭ００１０４又はその薬学的に許容可能な塩と、トポテカン、ＳＮ−３８、イリノテカン、カンプトテシン、ルビテカン、エトポシド、アムサクリン、及びテニポシドとの組み合わせであり、なおもより好ましいのは、トポテカン、イリノテカン、及びエトポシドとの組み合わせである。
【０３５２】
別の好ましい実施形態では、本発明は、がんの治療における、より具体的には肺がん、前立腺がん、膵臓がん、胃がん、肝細胞腫、結腸直腸がん、脳がん、多発性骨髄腫、及びリンパ腫の治療における、抗ＣＤ３９抗体とプロテオソーム阻害剤との組み合わせを対象とする。この化学療法薬群としては、ボルテゾミブ、ジスルフィラム、没食子酸エピガロカテキン、及びサリノスポラミドＡが挙げられるが、これらに限定されるものではない。特に好ましいのは、がんの治療における、より具体的には肺がん、前立腺がん、膵臓がん、胃がん、肝細胞腫、結腸直腸がん、及び脳がんの治療における、抗ＣＤ３９抗体と、ボルテゾミブ、ジスルフィラム、没食子酸エピガロカテキン、及びサリノスポラミドＡとの組み合わせであり、なおもより好ましいのは、ボルテゾミブとの組み合わせである。
【０３５３】
別の好ましい実施形態では、本発明は、がんの治療における、より具体的には肺がん、肉腫、前立腺がん、膵臓がん、胃がん、卵巣がん、乳がん、結腸直腸がん、腎臓がん、脳がん、及びリンパ腫の治療における、抗ＣＤ３９抗体とヒストンデアセチラーゼ阻害剤との組み合わせを対象とする。この化学療法薬群としては、ロミデプシン、パノビノスタット、ボリノスタット、モセチノスタット、ベリノスタット、エンチノスタット、レスミノスタット、ＰＣＩ−２４７８１、ＡＲ−４２、ＣＵＤＣ−１０１、及びバルプロ酸が挙げられるが、これらに限定されるものではない。特に好ましいのは、がんの治療における、より具体的には肺がん、肉腫、前立腺がん、膵臓がん、胃がん、卵巣がん、乳がん、結腸直腸がん、腎臓がん、及び脳がんの治療における、抗ＣＤ３９抗体とロミデプシン、パノビノスタット、ボリノスタット、モセチノスタット、ベリノスタット、エンチノスタット、レスミノスタット、ＰＣＩ−２４７８１、ＡＲ−４２、ＣＵＤＣ−１０１、及びバルプロ酸との組み合わせであり、なおもより好ましいのは、ボリノスタットとの組み合わせである。
【０３５４】
別の好ましい実施形態では、本発明は、がんの治療における、より具体的には肺がん、肉腫、膀胱がん、胃がん、卵巣がん、肝細胞腫、乳がん、結腸直腸がん、腎臓がん、白血病、多発性骨髄腫、及びリンパ腫の治療における、抗ＣＤ３９抗体とナイトロジェンマスタードアルキル化剤との組み合わせを対象とする。この化学療法薬群としては、メルファラン、イホスファミド、クロラムブシル、シクロホスファミド、メクロレタミン、ウラムスチン、エストラムスチン及びベンダムスチンが挙げられるが、これらに限定されるものではない。特に好ましいのは、がんの治療における、より具体的には肺がん、肉腫、胃がん、卵巣がん、肝細胞腫、乳がん、結腸直腸がん、及び腎臓がんの治療における、抗ＣＤ３９抗体と、メルファラン、イホスファミド、クロラムブシル、シクロホスファミド、メクロレタミン、ウラムスチン、エストラムスチン及びベンダムスチンとの組み合わせであり、なおもより好ましいのは、シクロホスファミドとの組み合わせである。別の好ましい実施形態では、本発明は、がんの治療における、より具体的には肺がん、卵巣がん、乳がん、脳がん、多発性骨髄腫及びリンパ腫の治療における、抗ＣＤ３９抗体とニトロソ尿素アルキル化剤との組み合わせを対象とする。この化学療法薬群としては、ロムスチン、セムスチン、カルムスチン、フォテムスチン、及びストレプトゾトシンが挙げられるが、これらに限定されるものではない。特に好ましいのは、がんの治療における、より具体的には肺がん、卵巣がん、及び乳がんの治療における、抗ＣＤ３９抗体と、ロムスチン、セムスチン、カルムスチン、フォテムスチン、及びストレプトゾトシンとの組み合わせであり、なおもより好ましいのは、カルムスチンとの組み合わせである。
【０３５５】
別の好ましい実施形態では、本発明は、がんの治療における、より具体的には肺がん、肉腫、悪性黒色腫、膵臓がん、胃がん、卵巣がん、乳がん、結腸直腸がん、腎臓がん、脳がん、白血病、及びリンパ腫の治療における、抗ＣＤ３９抗体と非古典的アルキル化剤との組み合わせを対象とする。この化学療法薬群としては、プロカルバジン、ダカルバジン、テモゾロマイド、及びアルトレタミンが挙げられるが、これらに限定されるものではない。特に好ましいのは、肺がん、肉腫、悪性黒色腫、胃がん、卵巣がん、乳がん、結腸直腸がん、腎臓がん、及び脳がんの治療における、抗ＣＤ３９抗体と、プロカルバジン、ダカルバジン、テモゾロマイド、及びアルトレタミンとの組み合わせであり、なおもより好ましいのは、ダカルバジン及びテモゾロマイド（ｔｅｚｏｌｏｍｉｄｅ）との組み合わせである。別の好ましい実施形態では、本発明は、がんの治療における、より具体的には乳がんの治療における、抗ＣＤ３９抗体とエストロゲンアンタゴニストとの組み合わせを対象とする。この化学療法薬群としては、トレミフェン、フルベストラント、タモキシフェン、及びナフォキシジンが挙げられるが、これらに限定されるものではない。特に好ましいのは、乳がんの治療における、抗ＣＤ３９抗体とトレミフェン、フルベストラント、タモキシフェン、及びナフォキシジンとの組み合わせであり、なおもより好ましいのは、タモキシフェンとの組み合わせである。
【０３５６】
別の好ましい実施形態では、本発明は、がんの治療における、より具体的には前立腺がんの治療における、抗ＣＤ３９抗体とアンドロゲンアンタゴニストとの組み合わせを対象とする。この化学療法薬群としては、ビカルタミド、フルタミド、ＭＤＶ３１００、及びニルタミドが挙げられるが、これらに限定されるものではない。特に好ましいのは、前立腺がんの治療における、抗ＣＤ３９抗体と、ビカルタミド、フルタミド、ＭＤＶ３１００、及びニルタミドとの組み合わせであり、なおもより好ましいのは、フルタミドとの組み合わせである。
【０３５７】
別の好ましい実施形態では、本発明は、がんの治療における、より具体的には肺がん、肉腫、悪性黒色腫、前立腺がん、膵臓がん、胃がん、卵巣がん、乳がん、結腸直腸がん、腎臓がん、及び脳がんの治療における、抗ＣＤ３９抗体とｍＴＯＲ阻害剤との組み合わせを対象とする。この化学療法薬群としては、シロリムス、テムシロリムス、エベロリムス、リダフォロリムス、ＫＵ−００６３７９４、及びＷＹＥ−３５４が挙げられるが、これらに限定されるものではない。特に好ましいのは、肺がん、肉腫、悪性黒色腫、前立腺がん、膵臓がん、胃がん、卵巣がん、乳がん、結腸直腸がん、及び脳がんの治療における、抗ＣＤ３９抗体と、シロリムス、テムシロリムス、エベロリムス、リダフォロリムス、ＫＵ−００６３７９４、及びＷＹＥ−３５４との組み合わせであり、なおもより好ましいのは、テムシロリムスとの組み合わせである。
【０３５８】
別の好ましい実施形態では、本発明は、がんの治療における、より具体的には肺がん、肉腫、前立腺がん、膵臓がん、胃がん、卵巣がん、肝細胞腫、乳がん、結腸直腸がん、腎臓がん、及び脳がんから選択されるがんの治療における、抗ＣＤ３９抗体とチロシンキナーゼ阻害剤との組み合わせを対象とする。この化学療法薬群としては、エルロチニブ、ソラフェニブ、アキシチニブ、ボスチニブ、セジラニブ、クリゾチニブ、ダサチニブ、ゲフィチニブ、イマチニブ、カネルチニブ、ラパチニブ、レスタウルチニブ、ネラチニブ、ニロチニブ、セマキサニブ、スニチニブ、バタラニブ、及びバンデタニブが挙げられるが、これらに限定されるものではない。特に好ましいのは、がんの治療における、より具体的には肺がん、肉腫、前立腺がん、膵臓がん、胃がん、卵巣がん、肝細胞腫、乳がん、結腸直腸がん、腎臓がん、及び脳がんから選択されるがんの治療における、抗ＣＤ３９抗体とエルロチニブ、ソラフェニブ、アキシチニブ、ボスチニブ、セジラニブ、クリゾチニブ、ダサチニブ、ゲフィチニブ、イマチニブ、カネルチニブ、ラパチニブ、レスタウルチニブ、ネラチニブ、ニロチニブ、セマキサニブ、スニチニブ、バタラニブ、及びバンデタニブとの組み合わせであり、なおもより好ましいのは、エルロチニブとの組み合わせである。
【０３５９】
本発明の別の態様は、ＭＡＰキナーゼ経路阻害剤又はＷＮＴ経路阻害剤を患者に投与するステップをさらに含む、前述の方法のいずれか１つに関する。
【０３６０】
いくつかの実施形態では、ＭＡＰキナーゼ経路阻害剤は、ＢＲＡＦ阻害剤、ＭＥＫ阻害剤、ＰＩ３Ｋ阻害剤、及びｃ−ＫＩＴ阻害剤からなる群より選択される。
【０３６１】
いくつかの実施形態では、ＢＲＡＦ阻害剤は、ＧＤＣ−０８７９、ＰＬＸ−４７２０、ソラフェニブトシレート、ダブラフェニブ、及びＬＧＸ８１８からなる群より選択される。
【０３６２】
いくつかの実施形態では、ＭＥＫ阻害剤は、ＧＳＫ１１２０２１２、セルメチニブ、及びＭＥＫ１６２からなる群より選択される。
【０３６３】
いくつかの実施形態では、ＷＮＴ経路阻害剤は、β−カテニン阻害剤又はｆｒｉｚｚｌｅｄ阻害剤である。
【０３６４】
いくつかの実施形態では、β−カテニン阻害剤は、ニクロサミド、ＸＡＶ−９３９、ＦＨ  ５３５、及びＩＣＧ  ００１からなる群より選択される。
【０３６５】
本発明の別の態様は、患者にがんワクチンを投与するステップをさらに含む、前述の方法のいずれか１つに関する。いくつかの実施形態では、がんワクチンは樹状細胞ワクチンである。
【０３６６】
本発明の別の態様は、養子細胞移入を患者に施与するステップをさらに含む、前述の方法のいずれか１つに関する。
【０３６７】
いくつかの実施形態では、養子細胞移入は、ＣＡＲ−Ｔ細胞療法である。
【０３６８】
本発明の別の態様は、抗体療法を患者に施与するステップをさらに含む、前述の方法のいずれか１つに関する。
【０３６９】
本発明の別の態様は前述の方法のいずれか１つに関し、抗ＣＤ３９抗体の投与が抗体療法の抗体依存性細胞媒介性細胞傷害性を増強する。
【０３７０】
いくつかの実施形態では、抗体療法は、トラスツズマブ（ｔｒａｓｔｕｚａｍａｂ）、セツキシマブ、ベバシズマブ、及びリツキシマブからなる群より選択される。
【０３７１】
さらに、抗ＣＤ３９抗体による治療は、１つ又は複数のサイトカイン（例えば、リンフォカイン、インターロイキン、腫瘍壊死因子、及び／又は増殖因子）などのその他の生物学的分子との併用治療を含み得て、或いは腫瘍の外科的除去、がん細胞の除去、又は治療医によって必要と見なされる何れかの他の治療法を伴い得る。いくつかの実施形態では、追加の治療薬は、免疫応答刺激剤である。
【０３７２】
本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、抗ＣＤ３９抗体は、アドレノメデュリン（ＡＭ）、アンギオポエチン（Ａｎｇ）、ＢＭＰ、ＢＤＮＦ、ＥＧＦ、エリスロポエチン（ＥＰＯ）、ＦＧＦ、ＧＤＮＦ、Ｇ−ＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、ＧＤＦ９、ＨＧＦ、ＨＤＧＦ、ＩＧＦ、遊走刺激因子、ミオスタチン（ＧＤＦ−８）、ＮＧＦ、ニューロトロフィン、ＰＤＧＦ、トロンボポエチン、ＴＧＦ−α、ＴＧＦ−β、ＴＮＦ−α、ＶＥＧＦ、Ｐ１ＧＦ、ＩＬ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、及びＩＬ−１８からなる群より選択される成長因子と組み合わせられ得る。
【０３７３】
本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、追加の治療薬は、免疫応答刺激剤である。いくつかの実施形態では、免疫応答刺激剤は、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）、マクロファージコロニー刺激因子（Ｍ−ＣＳＦ）、顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）、インターロイキン３（ＩＬ−３）、インターロイキン１２（ＩＬ−１２）、インターロイキン１（ＩＬ−１）又はインターロイキン２（ＩＬ−２）からなる群より選択される。
【０３７４】
投与スケジュール
本明細書に記載の方法の特定の実施形態では、治療は、放射線療法と組み合わせた抗ＣＤ３９抗体の投与を伴う。抗ＣＤ３９抗体による治療は、放射線療法の投与前、投与と同時に、又は投与後に実施され得る。このような放射線療法の投与スケジュールは、熟練した開業医によって決定され得る。
【０３７５】
本明細書に記載の方法の特定の実施形態では、治療は、抗ウイルス療法と組み合わせた抗ＣＤ３９抗体の投与を伴う。抗ＣＤ３９抗体による治療は、抗ウイルス療法の投与前、投与と同時に、又は投与後に実施され得る。併用療法で使用される抗ウイルス薬は、対象が感染しているウイルスに依存する。
【０３７６】
併用投与は、単一医薬製剤中での又は別個の製剤を使用しての同時投与、又はいずれかの順序での連続投与を含み得るが、一般に、全ての活性剤がそれらの生物学的活性を同時に発揮し得るような期間内である。
【０３７７】
抗ＣＤ３９抗体と少なくとも１つの追加の治療薬との組み合わせは、任意の順序で又は同時に投与されてもよいことが理解されるであろう。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３９抗体は、第２の治療薬による治療を以前に受けている患者に投与されるであろう。特定の他の実施形態では、抗ＣＤ３９抗体及び第２の治療薬は、実質的に同時に、又は同時に投与されるであろう。例えば、対象は、第２の治療薬（例えば、化学療法）による一連の治療を受けている間に、抗ＣＤ３９抗体を与えられてもよい。特定の実施形態では、抗ＣＤ３９抗体は、第２の治療薬による治療の１年以内に投与されるであろう。特定の代替実施形態では、抗ＣＤ３９抗体は、第２の治療薬による任意の治療の１０、８、６、４、又は２ヶ月以内に投与されるであろう。特定のその他の実施形態では、抗ＣＤ３９抗体は、第２の治療薬による任意の治療の４、３、２、又は１週間以内に投与されるであろう。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３９抗体は、第２の治療薬による任意の治療の５、４、３、２、又は１日以内に投与されるであろう。２つ（又はそれ以上）の薬剤又は治療が、数時間又は数分以内に（例えば、実質的に同時に）対象に投与され得ることが、さらに理解されるであろう。
【０３７８】
疾患を治療するために、抗ＣＤ３９抗体の適切な投与量は、全て治療医の自由裁量で、治療される疾患のタイプ、疾患の重症度及び経過、疾患の応答性、抗ＣＤ３９抗体が治療目的又は予防目的のどちらで投与されるか、以前の治療、患者の病歴などに依存する。抗ＣＤ３９抗体は、１回投与され、又は数日から数ヶ月続く一連の治療にわたって、又は治癒がもたらされるか、又は病態の減少が達成されるまで（例えば、腫瘍サイズの縮小）投与され得る。最適な投薬スケジュールは、患者の体内の薬物蓄積の測定値から算出され得て、個々の薬剤の相対的な効力次第で変動する。投与する医師は、最適な投与量、投薬方法、及び反復率を決定し得る。特定の実施形態では、投与量は、０．０１μｇ〜１００ｍｇ／ｋｇ体重、０．１μｇ〜１００ｍｇ／ｋｇ体重、１μｇ〜１００ｍｇ／ｋｇ体重、１ｍｇ〜１００ｍｇ／ｋｇ体重、１ｍｇ〜８０ｍｇ／ｋｇ体重、１０ｍｇ〜１００ｍｇ／ｋｇ体重、１０ｍｇ〜７５ｍｇ／ｋｇ体重、又は１０ｍｇ〜５０ｍｇ／ｋｇ体重である。特定の実施形態では、抗ＣＤ３９抗体の投与量は、約０．１ｍｇ〜約２０ｍｇ／ｋｇ体重である。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３９抗体の投与量は、約０．１ｍｇ／ｋｇ体重である。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３９抗体の投与量は、約０．２５ｍｇ／ｋｇ体重である。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３９抗体の投与量は、約０．５ｍｇ／ｋｇ体重である。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３９抗体の投与量は、約１ｍｇ／ｋｇ体重である。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３９抗体の投与量は、約１．５ｍｇ／ｋｇ体重である。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３９抗体の投与量は、約２ｍｇ／ｋｇ体重である。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３９抗体の投与量は、約２．５ｍｇ／ｋｇ体重である。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３９抗体の投与量は、約５ｍｇ／ｋｇ体重である。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３９抗体の投与量は、約７．５ｍｇ／ｋｇ体重である。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３９抗体の投与量は、約１０ｍｇ／ｋｇ体重である。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３９抗体の投与量は、約１２．５ｍｇ／ｋｇ体重である。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３９抗体の投与量は、約１５ｍｇ／ｋｇ体重である。特定の実施形態では、投与量は、１日、１週間、１ヶ月、又は１年に１回であってもそれより多くてもよい。特定の実施形態では、抗ＣＤ３９抗体は、１週間に週１回、２週間に１回、３週間に１回、又は４週間に１回与えられる。
【０３７９】
いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３９抗体は、最初の高「負荷」用量で投与されて、その後、１回又は複数回のより低い用量での投与がそれに続いてもよい。いくつかの実施形態では、投与の頻度もまた変更されてもよい。いくつかの実施、形態では、投薬レジメンは、最初の用量を投与し、週に１回、２週間に１回、３週間に１回、又は毎月１回、追加用量（又は「維持」用量）の投与がそれに続くステップを含んでなってもよい。例えば、投薬レジメンは、最初の負荷用量が投与され、例えば、最初の用量の半分などの毎週の維持用量がそれに続くステップを含んでなってもよい。又は投薬レジメンは、最初の負荷用量が投与され、例えば隔週で、最初の用量の半分などの維持用量がそれに続くステップを含んでなってもよい。又は投薬レジメンは、３週間にわたり３回の最初の用量が投与され、例えば隔週で、同一量などの維持用量がそれに続くステップを含んでなってもよい。
【０３８０】
当業者に知られているように、任意の治療薬の投与は、副作用及び／又は毒性をもたらすこともある。場合によっては、副作用及び／又は毒性が非常に深刻であるため、治療的に有効な用量での特定の薬剤の投与が不可能になる。場合によっては、薬物療法を中断する必要があり、その他の薬剤が試されることもある。しかし、同じ治療薬クラスの多くの薬剤は、類似の副作用及び／又は毒性を示すことが多く、これは、患者が治療を中止しなければならないか、又は可能であれば、治療薬に関連する不快な副作用に苦しむことを意味する。
【０３８１】
いくつかの実施形態では、投薬スケジュールは、特定の数の投与又は「サイクル」に制限されてもよい。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３９抗体は、３サイクル、４サイクル、５サイクル、６サイクル、７サイクル、８サイクル、又はそれより多くのサイクルで投与される。例えば、抗ＣＤ３９抗体が２週間毎に６サイクル投与され、抗ＣＤ３９抗体が３週間毎に６サイクル投与され、抗ＣＤ３９抗体が２週間毎に４サイクル投与され、抗ＣＤ３９抗体が３週間毎に４サイクルなどと投与される。投薬スケジュールは、当業者によって決定され、引き続いて修正され得る。
【０３８２】
したがって、本発明は、１つ又は複数の薬剤を投与するために間欠投薬ストラテジーを用いる、本明細書に記載の抗ＣＤ３９抗体を対象に投与するステップを含む方法を提供し、それは抗ＣＤ３９抗体、化学療法剤などの投与に伴う副作用及び／又は毒性を減少させてもよい。いくつかの実施形態では、ヒト対象におけるがんを治療するための方法は、抗ＣＤ３９抗体治療の有効量を化学療法剤の治療的に有効な用量と組み合わせて、対象に投与するステップを含み、その中で、薬剤の片方又は双方は、間欠投薬ストラテジーに従って投与される。いくつかの実施形態では、間欠投薬ストラテジーは、抗ＣＤ３９抗体の最初の用量を対象に投与し、抗ＣＤ３９抗体の後続用量を約２週間に１回投与するステップを含む。いくつかの実施形態では、間欠投薬ストラテジーは、抗ＣＤ３９抗体の最初の用量を対象に投与し、抗ＣＤ３９抗体の後続用量を約３週間に１回投与するステップを含む。いくつかの実施形態では、間欠投薬ストラテジーは、抗ＣＤ３９抗体の最初の用量を対象に投与し、抗ＣＤ３９抗体の後続用量を約４週間に１回投与するステップを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３９抗体は間欠投薬ストラテジーを用いて投与され、化学療法剤は毎週投与される。
【０３８３】
抗感染治療薬の組み合わせ
一実施形態では、本発明は、抗ＣＤ３９抗体を使用して、ウイルス感染症に罹患している対象を治療するための方法を提供する。一実施形態では、ウイルス感染は、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、肝炎ウイルス（Ａ、Ｂ、又はＣ）、ヘルペスウイルス（例えば、ＶＺＶ、ＨＳＶ−Ｉ、ＨＡＶ−６、ＨＳＶ−ＩＩ、及びＣＭＶ、エプスタイン・バーウイルス）、アデノウイルス、インフルエンザウイルス、フラビウイルス、エコーウイルス、ライノウイルス、コクサッキーウイルス、コロナウイルス、呼吸器合胞体ウイルス、おたふく風邪ウイルス、ロタウイルス、麻疹ウイルス、風疹ウイルス、パルボウイルス、ワクシニアウイルス、ＨＴＬＶウイルス、デングウイルス、パピローマウイルス、軟属腫ウイルス、ポリオウイルス、狂犬病ウイルス、ＪＣウイルス又はアルボウイルス脳炎ウイルスからなる群より選択されるウイルスによる感染である。
【０３８４】
一実施形態では、本発明は、抗ＣＤ３９抗体を使用して、細菌感染症に罹患している対象を治療するための方法を提供する。一実施形態では、細菌感染は、クラミジア属（Ｃｈｌａｍｙｄｉａ）、リケッチア細菌、マイコバクテリア、ブドウ球菌（ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｉ）、連鎖球菌（ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｉ）、肺炎連鎖球菌（ｐｎｅｕｍｏｎｏｃｏｃｃｉ）、髄膜炎菌（ｍｅｎｉｎｇｏｃｏｃｃｉ）及び淋菌（ｇｏｎｏｃｏｃｃｉ）、クレブシエラ（ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ）、プロテウス（ｐｒｏｔｅｕｓ）、セラチア（ｓｅｒｒａｔｉａ）、シュードモナス（ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）、レジオネラ属（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ）、コリネバクテリウム・ジフテリアエ（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａｅ）、サルモネラ属（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ）、桿菌、ビブリオ・コレラエ（Ｖｉｂｒｉｏ  ｃｈｏｌｅｒａｅ）、破傷風菌（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｔｅｔａｎ）、クロストリジウム・ボツリヌム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｂｏｔｕｌｉｎｕｍ）、炭疽菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｎｔｈｒａｃｉｓ）（ａｎｔｈｒｉｃｉｓ）、エルシニア・ペスチス（Ｙｅｒｓｉｎｉａ  ｐｅｓｔｉｓ）、マイコバクテリウム・レプラエ（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｌｅｐｒａｅ）、マイコバクテリウム・レプロマトーシス（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｌｅｐｒｏｍａｔｏｓｉｓ）、及びボレリア属（Ｂｏｒｒｅｌｉａ）（Ｂｏｒｒｉｅｌｌａ）からなる群より選択される細菌による感染である。
【０３８５】
一実施形態では、本発明は、抗ＣＤ３９抗体を使用して、真菌感染症に罹患している対象を治療するための方法を提供する。一実施形態では、真菌感染は、カンジダ属（Ｃａｎｄｉｄａ）（アルビカンス（ａｌｂｉｃａｎｓ）、クルセイ（ｋｒｕｓｅｉ）、グラブラタ（ｇｌａｂｒａｔａ）、トロピカリス（ｔｒｏｐｉｃａｌｉｓ）など）、クリプトコッカス・ネオフォルマンス（Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｎｅｏｆｏｒｍａｎｓ）、アスペルギルス属（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）（フミガツス（ｆｕｍｉｇａｔｕｓ）、ニガー（ｎｉｇｅｒ）など）、ケカビ目（Ｇｅｎｕｓ  Ｍｕｃｏｒａｌｅｓ）（ケカビ属（ｍｕｃｏｒ）、アブシジア属（ａｂｓｉｄｉａ）、クモノスカビ属（ｒｈｉｚｏｐｕｓ））、スポロトリックス・シェンキイ（Ｓｐｏｒｏｔｈｒｉｘ  ｓｃｈｅｎｃｋｉｉ）（ｓｃｈｅｎｋｉｉ）、ブラストミセス・デルマチチジス（Ｂｌａｓｔｏｍｙｃｅｓ  ｄｅｒｍａｔｉｔｉｄｉｓ）、パラコクシジオイデス・ブラジリエンシス（Ｐａｒａｃｏｃｃｉｄｉｏｉｄｅｓ  ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ）、コクシジオイデス・イミチス（Ｃｏｃｃｉｄｉｏｉｄｅｓ  ｉｍｍｉｔｉｓ）及びヒストプラズマ・カプスラーツム（Ｈｉｓｔｏｐｌａｓｍａ  ｃａｐｓｕｌａｔｕｍ）からなる群より選択される真菌による感染である。
【０３８６】
一実施形態では、本発明は、抗ＣＤ３９抗体を使用して、寄生虫感染症に罹患している対象を治療するための方法を提供する。一実施形態では、寄生虫感染は、赤痢アメーバ（Ｅｎｔａｍｏｅｂａ  ｈｉｓｔｏｌｙｔｉｃａ）、大腸バランチジウム（Ｂａｌａｎｔｉｄｉｕｍ  ｃｏｌｉ）、ネグレリア・フォーレリ（Ｎａｅｇｌｅｒｉａ  ｆｏｗｌｅｒｉ）、アカントアメーバ属（Ａｃａｎｔｈａｍｏｅｂａ）、ランブル鞭毛虫（Ｇｉａｒｄｉａ  ｌａｍｂｌｉａ）（ｌａｍｂｉａ）、クリプトスポリジウム属（Ｃｒｙｐｔｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍ）、ニューモシスチス・カリニ（Ｐｎｅｕｍｏｃｙｓｔｉｓ  ｃａｒｉｎｉｉ）、三日熱マラリア原虫（Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ  ｖｉｖａｘ）、ネズミバベシア（Ｂａｂｅｓｉａ  ｍｉｃｒｏｔｉ）、トリパノソーマ・ブルセイ（Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ  ｂｒｕｃｅｉ）、トリパノソーマ・クルージ（Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ  ｃｒｕｚｉ）、ドノバンリーシュマニア（Ｌｅｉｓｈｍａｎｉａ  ｄｏｎｏｖａｎｉ）、トキソプラズマ・ゴンディイ（Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ  ｇｏｎｄｉｉ）、及びブラジル鉤虫（Ｎｉｐｐｏｓｔｒｏｎｇｙｌｕｓ  ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ）からなる群より選択される寄生虫による感染である。
【０３８７】
ＶＩＩ．抗ＣＤ３９抗体コンジュゲート
本明細書で開示される抗ＣＤ３９抗体はまた、化学部分にコンジュゲートされていてもよい。化学部分は、とりわけ、ポリマー、放射性核種又は細胞傷害性因子であってもよい。
【０３８８】
例えば、薬物などの治療薬部分にコンジュゲートされた抗ＣＤ３９抗体が注目される。治療薬部分は、例えば、細胞毒、化学療法剤、サイトカイン、免疫抑制剤、免疫刺激因子、溶菌性ペプチド、又は放射性同位体であり得る。このようなコンジュゲートは、本明細書で「抗体薬物コンジュゲート」又は「ＡＤＣ」と称される。したがって、一態様では、上記の任意の態様又は実施形態による抗ＣＤ３９抗体は、治療薬部分にコンジュゲートされる。例示的な治療薬部分としては、細胞傷害性部分、放射性同位体、サイトカイン、及び溶菌性ペプチドが挙げられる。
【０３８９】
特定の実施形態では、抗ＣＤ３９抗体は、細胞障害性部分にコンジュゲートされ又は関連する抗体の内在化によって、ＣＤ３９発現細胞において細胞障害性を誘導できる。細胞傷害性部分は、例えば、タキソール；サイトカラシンＢ；グラミシジンＤ；臭化エチジウム；エメチン；マイトマイシン；エトポシド；テニポシド（ｔｅｎｏｐｏｓｉｄｅ）；ビンクリスチン；ビンブラスチン；コルヒチン；ドキソルビシン；ダウノルビシン；ジヒドロキシアントラシンジオン；メイタンシン又はその類似体又は誘導体などのチューブリン阻害剤；モノメチルオーリスタチンＥ又はＦ又はその類似体又は誘導体などの有糸分裂阻害剤；ドラスタチン１０又は１５又はその類似体；イリノテカン又はその類似体；ミトキサントロン；ミトラマイシン；アクチノマイシンＤ；１−デヒドロテストステロン；グルココルチコイド；プロカイン；テトラカイン；リドカイン；プロプラノロール；ピューロマイシン；カリケアマイシン又はその類似体又は誘導体；メトトレキサート、６メルカプトプリン、６チオグアニン、シタラビン、フルダラビン（ｆｌｕｄａｒａｂｉｎ）、５フルオロウラシル、ダカルバジン（ｄｅｃａｒｂａｚｉｎｅ）、ヒドロキシ尿素、アスパラギナーゼ、ゲムシタビン、又はクラドリビンなどの代謝アンタゴニスト；メクロレタミン、チオテパ（ｔｈｉｏｅｐａ）、クロラムブシル、メルファラン、カルムスチン（ＢＳＮＵ）、ロムスチン（ＣＣＮＵ）、シクロホスファミド、ブスルファン、ジブロモマンニトール、ストレプトゾトシン、ダカルバジン（ＤＴＩＣ）、プロカルバジン、マイトマイシンＣなどのアルキル化剤；シスプラチン又はカルボプラチンなどの白金誘導体；デュオカルマイシンＡ、デュオカルマイシンＳＡ、ラケルマイシン（ＣＣ−１０６５）、又はその類似体又は誘導体；ダクチノマイシン、ブレオマイシン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、イダルビシン、ミトラマイシン、マイトマイシン、ミトキサントロン、プリカマイシン、アントラマイシン（ＡＭＣ））などの抗生物質；ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］−ベンゾジアゼピン（ＰＤＢ）；ジフテリアＡ鎖及びその活性断片及びハイブリッド分子などのジフテリア毒素及び関連分子；リシンＡ又は脱グリコシル化リシンＡ鎖毒素などのリシン毒素；コレラ毒素；ＳＬＴ  Ｉ、ＳＬＴ  ＩＩ、ＳＬＴ  ＩＩＶ、ＬＴ毒素などの志賀毒素様毒素；Ｃ３毒素；志賀毒素；百日咳毒素；破傷風毒素；大豆ボーマン・バークプロテアーゼ阻害剤；シュードモナス属（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）菌体外毒素；アルドリン（ａｌｏｒｉｎ）；サポリン；モデシン；ゲラニン；アブリンＡ鎖；モデシンＡ鎖；α−サルシン；シナアブラギリ（Ａｌｅｕｒｉｔｅｓ  ｆｏｒｄｉｉ）タンパク質；ジアンチンタンパク質；ＰＡＰＩ、ＰＡＰＩＩ、及びＰＡＰ−Ｓなどのヨウシュヤマゴボウ（Ｐｈｙｔｏｌａｃｃａ  ａｍｅｒｉｃａｎａ）タンパク質；ニガウリ（ｍｏｍｏｒｄｉｃａ  ｃｈａｒａｎｔｉａ）阻害剤；クルシン；クロチン；サボンソウ（Ｓａｐｏｎａｒｉａ  ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ）（ｓａｐａｏｎａｒｉａ  ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ）阻害剤；ゲロニン；ミトギリン；レストリクトシン；フェノマイシン；及びエノマイシン毒素；リボヌクレアーゼ（ＲＮａｓｅ）；ＤＮａｓｅ  Ｉ；ブドウ球菌エンテロトキシンＡ；ヨウシュヤマゴボウ抗ウイルスタンパク質；ジフテリア毒素；及びシュードモナス属（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）内毒素からなる群より選択されてもよい。
【０３９０】
一実施形態では、抗ＣＤ３９抗体は、オーリスタチン又はそのペプチド類似体、誘導体又はプロドラッグにコンジュゲートされる。オーリスタチンは、微小管動態、ＧＴＰ加水分解、及び核と細胞の分裂を妨げることが示されており（Ｗｏｙｋｅ  ｅｔ  ａｌ（２００１）Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔｓ  ａｎｄ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．４５（１２）：３５８０−３５８４）、抗がん活性（米国特許第５，６６３，１４９号明細書）及び抗真菌活性（Ｐｅｔｔｉｔ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９８）Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔｓ  ａｎｄ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．４２：２９６１−２９６５を有する。例えば、オーリスタチンＥは、パラアセチル安息香酸又はベンゾイル吉草酸と反応して、それぞれＡＥＢ及びＡＥＶＢが生成し得る。その他の典型的なオーリスタチン誘導体としては、ＡＦＰ、ＭＭＡＦ（モノメチルオーリスタチンＦ）、及びＭＭＡＥ（モノメチルオーリスタチンＥ）が挙げられる。適切なオーリスタチン及びオーリスタチン類似体、誘導体及びプロドラッグ、並びにオーリスタチンの抗体へのコンジュゲーションのための適切なリンカーは、例えば、米国特許第５，６３５，４８３号明細書、米国特許第５，７８０，５８８号明細書、及び米国特許第６，２１４，３４５号明細書、及び国際特許出願公開国際公開第０２０８８１７２号パンフレット、国際公開第２００４０１０９５７号パンフレット、国際公開第２００５０８１７１１号パンフレット、国際公開第２００５０８４３９０号パンフレット、国際公開第２００６１３２６７０号パンフレット、国際公開第０３０２６５７７号パンフレット、国際公開第２００７００８６０号パンフレット、国際公開第２０７０１１９６８号パンフレット、及び国際公開第２０５０８２０２３パンフレットに記載されている。
【０３９１】
別の実施形態では、抗ＣＤ３９抗体は、ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］−ベンゾジアゼピ（ＰＤＢ）又はその類似体、誘導体又はプロドラッグにコンジュゲートされる。適切なＰＤＢ及びＰＤＢ誘導体、及び関連技術は、例えば、Ｈａｒｔｌｅｙ  Ｊ．Ａ．ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ  ２０１０；７０（１７）：６８４９−６８５８；Ａｎｔｏｎｏｗ  Ｄ．ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｊ  ２００８；１４（３）：１５４−１６９；Ｈｏｗａｒｄ  Ｐ．Ｗ．ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  Ｌｅｔｔ  ２００９；１９：６４６３−６４６６；及びＳａｇｎｏｕ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  Ｌｅｔｔ  ２０００；１０（１８）：２０８３−２０８６に記載されている。
【０３９２】
別の実施形態では、抗ＣＤ３９抗体は、アントラサイクリン、メイタンシン、カリケアマイシン、デュオカルマイシン、ラケルマイシン（ＣＣ−１０６５）、ドラスタチン１０、ドラスタチン１５、イリノテカン、モノメチルオーリスタチンＥ、モノメチルオーリスタチンＦ、ＰＤＢ、又はそれらのいずれかの類似体、誘導体、又はプロドラッグからなる群より選択される細胞傷害性部分にコンジュゲートされる。
【０３９３】
特定の実施形態では、抗ＣＤ３９抗体は、アントラサイクリン又はその類似体、誘導体又はプロドラッグにコンジュゲートされる。別の特定の実施形態では、抗体は、メイタンシン又はその類似体、誘導体又はプロドラッグにコンジュゲートされる。別の特定の実施形態では、抗体は、カリケアマイシン又はその類似体、誘導体又はプロドラッグにコンジュゲートされる。別の特定の実施形態では、抗体は、デュオカルマイシン又はその類似体、誘導体又はプロドラッグにコンジュゲートされる。別の特定の実施形態では、抗体は、ラケルマイシン（ＣＣ−１０６５）又はその類似体、誘導体又はプロドラッグにコンジュゲートされる。別の特定の実施形態では、抗体は、ドラスタチン１０又はその類似体、誘導体又はプロドラッグにコンジュゲートされる。別の特定の実施形態では、抗体は、ドラスタチン１５又はその類似体、誘導体又はプロドラッグにコンジュゲートされる。別の特定の実施形態では、抗体は、モノメチルオーリスタチンＥ又はその類似体、誘導体又はプロドラッグにコンジュゲートされる。別の特定の実施形態では、抗体は、モノメチルオーリスタチンＦ又はその類似体、誘導体又はプロドラッグにコンジュゲートされる。別の特定の実施形態では、抗体は、ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］−ベンゾジアゼピ又はその類似体、誘導体又はプロドラッグにコンジュゲートされる。別の特定の実施形態では、抗体は、イリノテカン又はその類似体、誘導体又はプロドラッグにコンジュゲートされる。
【０３９４】
一実施形態では、本発明の抗ＣＤ３９抗体は、核酸又は核酸関連分子にコンジュゲートされる。このような一実施形態では、共役核酸は、細胞傷害性リボヌクレアーゼ（ＲＮａｓｅ）又はデオキシリボヌクレアーゼ（例えば、ＤＮａｓｅ  Ｉ）、アンチセンス核酸、阻害性ＲＮＡ分子（例えば、ｓｉＲＮＡ分子）又は免疫賦活性核酸（例えば、免疫刺激ＣｐＧモチーフ含有ＤＮＡ分子）である。別の実施形態では、本発明のＣＤ３９特異的抗体は、アプタマー又はリボザイムにコンジュゲートされる。
【０３９５】
一実施形態では、本発明の抗ＣＤ３９抗体は、例えば、融合タンパク質として、ＣＬＩＰ、マガイニン２、メリチン、セクロピン、及びＰ１８などの溶菌性ペプチドにコンジュゲートされる。
【０３９６】
一実施形態では、抗ＣＤ３９抗体は、例えば、ＩＬ−２、ＩＬ−４、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−１０、ＩＬ−１２、ＩＬ−１３、ＩＬ−１５、ＩＬ−１８、ＩＬ−２３、ＩＬ−２４、ＩＬ−２７、ＩＬ−２８ａ、ＩＬ−２８ｂ、ＩＬ−２９、ＫＧＦ、ＩＦＮα、ＩＦＮβ、ＩＦＮγ、ＧＭ−ＣＳＦ、ＣＤ４０Ｌなどのサイトカイン；Ｆｌｔ３リガンド；幹細胞因子；アンセスチム；及びＴＮＦαにコンジュゲートされる。
【０３９７】
特定の実施形態では、化学部分は、対象の体内の抗体又は断片の半減期を延長するポリマーである。適切なポリマーとしては、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）（例えば、２ｋＤａ、５ｋＤａ、１０ｋＤａ、１２ｋＤａ、２０ｋＤａ、３０ｋＤａ又は４０ｋＤａの分子量を有するＰＥＧ）、デキストラン、及びモノメトキシポリエチレングリコール（ｍＰＥＧ）をはじめとするが、これらに限定されるものではない、親水性ポリマーが挙げられるが、これらに限定されるものではない。Ｌｅｅ，ｅｔ  ａｌ．，（１９９９）（Ｂｉｏｃｏｎｊ．Ｃｈｅｍ．１０：９７３−９８１）は、ＰＥＧ共役一本鎖抗体を開示している。Ｗｅｎ，ｅｔ  ａｌ．，（２００１）（Ｂｉｏｃｏｎｊ．Ｃｈｅｍ．１２：５４５−５５３）は、抗体を放射性金属キレート剤（ジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ））に結合したＰＥＧとコンジュゲートさせることを開示している。
【０３９８】
抗ＣＤ３９抗体は、９９Ｔｃ、９０Ｙ、１１１Ｉｎ、３２Ｐ、１４Ｃ、１２５Ｉ、３Ｈ、１３１Ｉ、１１Ｃ、１５Ｏ、１３Ｎ、１８Ｆ、３５Ｓ、５１Ｃｒ、５７Ｔｏ、２２６Ｒａ、６０Ｃｏ、５９Ｆｅ、５７Ｓｅ、１５２Ｅｕ、６７ＣＵ、２１７Ｃｉ、２１１Ａｔ、２１２Ｐｂ、４７Ｓｃ、１０９Ｐｄ、２３４Ｔｈ、４０Ｋ、１５７Ｇｄ、５５Ｍｎ、５２Ｔｒ、及び５６Ｆｅなどの標識にコンジュゲートされてもよい。
【０３９９】
抗ＣＤ３９抗体はまた、希土類キレートなどのフルオロフォア、フルオレセインとその誘導体、ローダミンとその誘導体、イソチオシアネート、フィコエリトリン、フィコシアニン、アロフィコシアニン、ｏ−フタルアルデヒド（ｐｈｔｈａｌａｄｅｈｙｄｅ）、フルオレスカミン、１５２Ｅｕ、ダンシル、ウンベリフェロン、ルシフェリン、ルミナル標識、イソルミナル標識、芳香族アクリジニウムエステル標識、イミダゾール標識、アクリジニウム塩標識、シュウ酸エステル標識、エクオリン標識、２，３−ジヒドロフタラジンジオン、ビオチン／アビジン、スピン標識、及び安定型フリーラジカルをはじめとする蛍光又は化学発光（ｃｈｅｍｉｌｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔ）標識にコンジュゲートされてもよい。
【０４００】
Ｈｕｎｔｅｒ，ｅｔ  ａｌ．，（１９６２）Ｎａｔｕｒｅ  １４４：９４５；Ｄａｖｉｄ，ｅｔ  ａｌ．，（１９７４）Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  １３：１０１４；Ｐａｉｎ，ｅｔ  ａｌ．，（１９８１）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈ．４０：２１９；及びＮｙｇｒｅｎ，Ｊ．，（１９８２）Ｈｉｓｔｏｃｈｅｍ．ａｎｄ  Ｃｙｔｏｃｈｅｍ．３０：４０７によって記載されている方法など、本発明の抗体及びその抗原結合断片を様々な部分にコンジュゲートさせるための当該技術分野で知られている任意の方法が使用されてもよい。抗体及び断片をコンジュゲートさせるための方法は従来のものであり、当該技術分野で周知である。
【０４０１】
ＶＩＩＩ．医薬組成物
本発明の抗ＣＤ３９抗体、抗原結合断片、核酸、又はベクターは、組成物に、特に医薬組成物に、製剤化され得る。このような組成物は、治療有効量又は予防有効量の本発明の抗ＣＤ３９抗体、抗原結合断片、核酸又はベクターと、例えば、薬学的に許容可能な薬剤などの適切な担体との混合物を含む。典型的には、本発明の抗ＣＤ３９抗体、抗原結合断片、核酸、又はベクターは、医薬組成物に製剤化する前に、動物への投与のために十分に精製される。
【０４０２】
本医薬組成物で使用するための薬学的に許容可能な薬剤としては、担体、賦形剤、希釈剤、抗酸化剤、保存料、着色料、着香料及び希釈剤、乳化剤、懸濁剤、溶剤、充填剤、増量剤、緩衝液、送達ビヒクル、等張化剤、共溶媒、湿潤剤、錯化剤、緩衝剤、抗菌剤、及び界面活性剤が挙げられる。
【０４０３】
中性緩衝生理食塩水、又は血清アルブミンと混合された生理食塩水は、例示的な適切な担体である。医薬組成物は、アスコルビン酸などの抗酸化剤；低分子量ポリペプチド；血清アルブミン、ゼラチン又は免疫グロブリンなどのタンパク質；ポリビニルピロリドンなどの親水性ポリマー；グリシン、グルタミン、アスパラギン、アルギニン又はリジンなどのアミノ酸；グルコース、マンノース、又はデキストリンをはじめとする単糖類、二糖類、及びその他の炭水化物；ＥＤＴＡなどのキレート化剤；マンニトール又はソルビトールなどの糖アルコール；ナトリウムなどの塩形成対イオン；及び／又はツイーン、プルロニック、又はポリエチレングリコール（ＰＥＧ）などの非イオン性界面活性剤を含み得る。また、例として、適切な張性増強剤としては、アルカリ金属ハロゲン化物（好ましくは塩化ナトリウム又は塩化カリウム）、マンニトール、ソルビトールなどが挙げられる。適切な保存料としては、塩化ベンザルコニウム、チメロサール、フェネチルアルコール、メチルパラベン、プロピルパラベン、クロルヘキシジン、ソルビン酸などが挙げられる。過酸化水素もまた、保存料として使用され得る。適切な共溶媒としては、グリセリン、プロピレングリコール、及びＰＥＧが挙げられる。適切な錯化剤としては、カフェイン、ポリビニルピロリドン、β−シクロデキストリン又はヒドロキシ−プロピル−β−シクロデキストリンが挙げられる。適切な界面活性剤又は湿潤剤としては、ソルビタンエステル、ポリソルベート８０などのポリソルベート、トロメタミン、レシチン、コレステロール、チロキサポール（ｔｙｌｏｘａｐａｌ）などが挙げられる。緩衝液は、酢酸塩、ホウ酸塩、クエン酸塩、リン酸塩、炭酸水素塩、又はトリス−ＨＣｌなどの従来の緩衝液であり得る。酢酸緩衝液は約ｐＨ４〜５．５であってもよく、トリス緩衝液は約ｐＨ７〜８．５であり得る。さらなる医薬品は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１８ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ａ．Ｒ．Ｇｅｎｎａｒｏ，ｅｄ．，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，１９９０に記載されている。
【０４０４】
組成物は、液体形態又は凍結乾燥又は凍結乾燥形態であり得て、１つ又は複数の凍結防止剤、賦形剤、界面活性剤、高分子量構造添加剤及び／又は増量剤を含んでもよい（例えば、米国特許第６，６８５，９４０号明細書、米国特許第６，５６６，３２９号明細書、及び米国特許第６，３７２，７１６号明細書を参照されたい）。一実施形態では、スクロース、乳糖又はトレハロースなどの非還元糖である、凍結防止剤が含まれる。一般的に含まれる凍結防止剤の量は、再構成時に、得られる製剤が等張になるようなものであるが、高張又はわずかに低張の製剤もまた適切であってもよい。さらに、凍結防止剤の量は、凍結乾燥時のタンパク質の許容できない量の分解及び／又は凝集を防ぐのに十分でなければならない。予備凍結乾燥製剤中の糖類（例えば、スクロース、乳糖、トレハロース）の例示的な凍結防止剤濃度は、約１０ｍＭ〜約４００ｍＭである。別の実施形態では、例えば、ポリソルベート（例えば、ポリソルベート２０、ポリソルベート８０）などの非イオン性界面活性剤及びイオン性界面活性剤；ポロクサマー（例えば、ポロクサマー１８８）；ポリ（エチレングリコール）フェニルエーテル（例えば、トリトン）；ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）；ラウリル硫酸ナトリウム（ｓｏｄｉｕｍ  ｌａｕｒｅｌ  ｓｕｌｆａｔｅ）；オクチルグリコシドナトリウム；ラウリル（Ｉａｕｒｙｌ）−、ミリスチル−、リノリル−、又はステアリル−スルホベタイン；ラウリル（Ｉａｕｒｙｌ）−、ミリスチル−、リノリル−又はステアリル−サルコシン；リノリル−、ミリスチル−、又はセチル−ベタイン；ラウラミドプロピル（ｌａｕｒｏａｍｉｄｏｐｒｏｐｙｌ）−、コカミドプロピル−、コラミドプロピル（Ｈｎｏｌｅａｍｉｄｏｐｒｏｐｙｌ）−、ミリスタミドプロピル−、パルミドプロピル−、又はイソステラミドプロピル−ベタイン（例えば、ラウラミドプロピル（ｌａｕｒｏａｍｉｄｏｐｒｏｐｙｌ）；ミリスタミドプロピル−、パルミドプロピル−、又はイソステラミドプロピル−ジメチルアミン；ナトリウムメチルココイル−、又は二ナトリウムメチルオレイル（ｏｆｅｙｌ）−タウレート；及びＭＯＮＡＱＵＡＴ（商標）シリーズ（Ｍｏｎａ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．，Ｐａｔｅｒｓｏｎ，ＮＪ．）、ポリエチルグリコール、ポリプロピルグリコール、及びエチレンとプロピレングリコールとの共重合体（例えば、プルロニック、ＰＦ６８など）などの界面活性剤が含まれる。予備凍結乾燥製剤中に存在してもよい界面活性剤の例示的な量は、約０．００１〜０．５％である。高分子量構造添加剤（例えば、充填剤、結合剤）は、例えば、アカシア、アルブミン、アルギン酸、リン酸カルシウム（二塩基性）、セルロース、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、微結晶セルロース、デキストラン、デキストリン、デキストレート、スクロース、チロース、α化デンプン、硫酸カルシウム、アミロース、グリシン、ベントナイト、マルトース、ソルビトール、エチルセルロース、リン酸水素二ナトリウム、リン酸二ナトリウム、ピロ亜硫酸二ナトリウム���ポリビニルアルコール、ゼラチン、グルコース、グアーガム、液体グルコース、圧縮性糖、ケイ酸アルミニウムマグネシウム、マルトデキストリン、ポリエチレンオキシド、ポリメタクリレート、ポビドン、アルギン酸ナトリウム、トラガカント微結晶セルロース、デンプン、及びゼインを含んでもよい。高分子量構造添加剤の例示的な濃度は、０．１重量％〜１０重量％である。その他の実施形態では、増量剤（例えば、マンニトール、グリシン）が含まれてもよい。
【０４０５】
組成物は、非経口投与に適し得る。例示的な組成物は、関節内、皮下、静脈内、筋肉内、腹腔内、大脳内（脳実質内）、脳室内、筋肉内、眼内、動脈内、又は病巣内経路などの、当業者が利用できる任意の経路による、動物への注射又は輸液に適する。非経口製剤は、典型的には、無菌で発熱性物質を含まない等張性水溶液であり、任意で薬学的に許容可能な保存料を含有する。
【０４０６】
非水性溶剤の例は、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、オリーブ油などの植物油、及びオレイン酸エチルなどの注射可能な有機エステルである。水性担体としては、生理食塩水及び緩衝媒体をはじめとする、水、アルコール性／水性溶液、エマルション又は懸濁液が挙げられる。非経口ビヒクルとしては、塩化ナトリウム溶液、リンゲルデキストロース、デキストロース及び塩化ナトリウム、乳酸加リンゲル、又は不揮発性油が挙げられる。静脈内ビヒクルとしては、体液・栄養補給剤、リンゲルデキストロースベースにしたものなどの電解質補給剤などが挙げられる。例えば、抗菌剤、抗酸化剤、キレート化剤、不活性ガスなどの保存料及びその他の添加剤が存在してもよい。一般的には、参照により本明細書に援用される、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ，１６ｔｈ  Ｅｄ．，Ｍａｃｋ  Ｅｄｓ．，１９８０を参照されたい。
【０４０７】
本明細書に記載の医薬組成物は、製品の局所濃度（例えば、ボーラス、デポー効果）及び／又は特定の局所環境における安定性又は半減期の増加を提供する様式で、制御送達又は徐放のために製剤化され得る。組成物は、ポリ乳酸、ポリグリコール酸などの高分子化合物の粒子状調製物を用いた本発明の抗ＣＤ３９抗体、抗原結合断片、核酸、又は本発明のベクターの製剤、並びに生分解性マトリックス、注射可能なマイクロスフィア、マイクロカプセル粒子、マイクロカプセル、生物学的に可溶性の粒子ビーズ、リポソーム、及び移植可能な送達デバイスなどの薬剤を含み得て、活性剤の制御放出又は徐放を提供し、デポー注射として送達され得る。このような徐放又は制御送達の手段を処方する技術は知られており、薬物の制御放出及び送達のために様々なポリマーが開発され使用されている。このようなポリマーは、典型的には生分解性及び生体適合性である。エナンチオマーポリマー又はポリペプチドセグメントと、温度又はｐＨ感受性特性を有するハイドロゲルとの複合体形成によって形成されるものをはじめとするポリマーハイドロゲルは、生物活性タンパク質剤（例えば、抗体）の捕捉に関与する穏和で水性の条件のために、薬物デポー効果を提供するために望ましくあってもよい。例えば、ＰＣＴ出願公開国際公開第９３／１５７２２号パンフレットにおける、医薬組成物の送達のための制御放出多孔質ポリマー微粒子の説明を参照されたい。
【０４０８】
この目的に適した材料としては、ポリラクチド（例えば、米国特許第３，７７３，９１９号明細書を参照されたい）；ポリ−Ｄ−（−）−３−ヒドロキシ酪酸（欧州特許第１３３，９８８Ａ号明細書）などのポリ−（ａ−ヒドロキシカルボン酸）のポリマー；Ｌ−グルタミン酸とγエチル−Ｌ−グルタミン酸の共重合体（Ｓｉｄｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｐｏｌｙｍｅｒｓ，２２：５４７−５５６（１９８３））；ポリ（２−ヒドロキシエチル−メタクリレート）（Ｌａｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｍｅｄ．Ｍａｔｅｒ．Ｒｅｓ．，１５：１６７−２７７（１９８１）、及びＬａｎｇｅｒ，Ｃｈｅｍ．Ｔｅｃｈ．，１２：９８−１０５（１９８２））、酢酸ビニルエチレン；又はポリ−Ｄ（〜）〜３−ヒドロキシ酪酸が挙げられる。その他の生分解性ポリマーとしては、ポリ（ラクトン）、ポリ（アセタール）、ポリ（オルトエステル）、及びポリ（オルト炭酸塩）が挙げられる。徐放性組成物はまた、いくつかの当該技術分野で公知の方法のいずれかによって調製され得る、リポソームを含んでもよい（例えば、Ｅｐｐｓｔｅｉｎ  ｅｔ  ａｌ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８２：３６８８−９２（１９８５）を参照されたい）。担体それ自体、又はその分解産物は、標的組織において非毒性でなければならず、病状をさらに悪化させてはならない。これは、標的障害の動物モデルでの、又はこのようなモデルが利用できない場合には、正常な動物モデルでのルーチンスクリーニングによって決定できる。徐放のための組換えタンパク質のマイクロカプセル化は、ヒト成長ホルモン（ｒｈＧＨ）、インターフェロン−（ｒｈＩＦＮγ）、インターロイキン−２、及びＭＮｒｇｐｌ２０で成功裏に実施されている。Ｊｏｈｎｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔ．Ｍｅｄ．，２：７９５−７９９（１９９６）；Ｙａｓｕｄａ，Ｂｉｏｍｅｄ．Ｔｈｅｒ．，２７：１２２１−１２２３（１９９３）；Ｈｏｒａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｖ．８：７５５−７５８（１９９０）；Ｃｌｅｌａｎｄ，“Ｄｅｓｉｇｎ  ａｎｄ  Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｓｉｎｇｌｅ  Ｉｍｍｕｎｉｚａｔｉｏｎ  Ｖａｃｃｉｎｅｓ  Ｕｓｉｎｇ  Ｐｏｌｙｌａｃｔｉｄｅ  Ｐｏｌｙｇｌｙｃｏｌｉｄｅ  Ｍｉｃｒｏｓｐｈｅｒｅ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，”ｉｎ  Ｖａｃｃｉｎｅ  Ｄｅｓｉｇｎ：Ｔｈｅ  Ｓｕｂｕｎｉｔ  ａｎｄ  Ａｄｊｕｖａｎｔ  Ａｐｐｒｏａｃｈ，Ｐｏｗｅｌｌ  ａｎｄ  Ｎｅｗｍａｎ，ｅｄｓ，（Ｐｌｅｎｕｍ  Ｐｒｅｓｓ：Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９９５），ｐｐ．４３９−４６２；国際公開第９７／０３６９２号パンフレット、国際公開第９６／４００７２号パンフレット、国際公開第９６／０７３９９号パンフレット；及び米国特許第５，６５４，０１０号明細書。これらのタンパク質の徐放性製剤は、その生体適合性及び広範な生分解特性により、ポリ乳酸−コグリコール酸（ＰＬＧＡ）ポリマーを使用して開発された。ＰＬＧＡ、乳酸、及びグリコール酸の分解産物は、人体内で速やかにクリアされ得る。さらに、このポリマーの分解性は、その分子量及び組成に依存し得る。Ｌｅｗｉｓ，“Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  ｒｅｌｅａｓｅ  ｏｆ  ｂｉｏａｃｔｉｖｅ  ａｇｅｎｔｓ  ｆｒｏｍ  ｌａｃｔｉｄｅ／ｇｌｙｃｏｌｉｄｅ  ｐｏｌｙｍｅｒ，”ｉｎ：Ｍ．Ｃｈａｓｉｎ  ａｎｄ  Ｒ．Ｌａｎｇｅｒ（Ｅｄｓ．），Ｂｉｏｄｅｇｒａｄａｂｌｅ  Ｐｏｌｙｍｅｒｓ  ａｓ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ（Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ：Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９９０），ｐｐ．１−４１。徐放性組成物のさらなる例としては、例えば、欧州特許第５８，４８ＩＡ号明細書；米国特許第３，８８７，６９９号明細書；欧州特許第１５８，２７７Ａ号明細書、カナダ国特許第１１７６５６５号明細書；Ｕ．Ｓｉｄｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｐｏｌｙｍｅｒｓ  ２２，５４７（１９８３）；Ｒ．Ｌａｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｈｅｍ．Ｔｅｃｈ．１２，９８（１９８２）；Ｓｉｎｈａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｃｏｎｔｒｏｌ．Ｒｅｌｅａｓｅ  ９０，２６１（２００３）；Ｚｈｕ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１８，２４（２０００）；及びＤａｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｏｌｌｏｉｄｓ  Ｓｕｒｆ  Ｂ  Ｂｉｏｉｎｔｅｒｆａｃｅｓ  ４１，１１７（２００５）が挙げられる。
【０４０９】
生体接着性ポリマーもまた、本発明の組成物中で又は組成物と共に、使用することが企図される。生体接着剤は、生物学的基質に長期間接着できる合成及び天然物質である。例えば、カーボポールとポリカルボフィルは、どちらもポリ（アクリル酸）の合成架橋誘導体である。天然物質に基づく生体接着剤送達システムとして、例えば、ヒアルロナンとしても知られているヒアルロン酸が挙げられる。ヒアルロン酸は、Ｄ−グルクロン酸とＮ−アセチル−Ｄ−グルコサミンの残基からなる天然ムコ多糖である。ヒアルロン酸は、結合組織中をはじめとする脊椎動物の細胞外組織マトリックス中に、並びに滑液中及び眼の硝子体と房水中に見られる。ヒアルロン酸のエステル化誘導体を使用して、生体適合性及び生分解性（ｂｉｏｄｅｇｒａｂｌｅ）の送達で使用するための微小球が製造されている（例えば、Ｃｏｒｔｉｖｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ（１９９１）１２：７２７−７３０；欧州特許第５１７，５６５号明細書；国際公開第９６／２９９９８号パンフレット；Ｉｌｉｕｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  ＲｅＩ．（１９９４）２９：１３３−１４１を参照されたい）。本発明の例示的なヒアルロン酸含有組成物は、ヒアルロン酸ポリマーに対するＩＬ−１／３結合抗体又は断片のおよそ０．１％〜約４０％（ｗ／ｗ）の量のヒアルロン酸エステルポリマーを含む。生分解性及び非生分解性双方のポリマーマトリックスを使用して、本発明の組成物が送達されてもよく、このようなポリマーマトリックスは、天然又は合成ポリマーを含んでなってもよい。生分解性マトリックスが好ましい。放出が発生する期間は、ポリマーの選択に基づく。典型的には、数時間から３か月〜１２か月の範囲の期間にわたる放出が最も望ましい。生分解性送達システムを形成するために使用され得る例示的な合成ポリマーとしては、乳酸及びグリコール酸のポリマー、ポリアミド、ポリカーボネート、ポリアルキレン、ポリアルキレングリコール、ポリアルキレン酸化物、ポリアルキレンテレフタレート（ｔｅｒｅｐｔｈａｌａｔｅｓ）、ポリビニルアルコール、ポリビニルエーテル、ポリビニルエステル、ポリ−ビニルハロゲン化物、ポリビニルピロリドン、ポリグリコリド、ポリシロキサン、ポリ酸無水物、ポリウレタンとそのコポリマー、ポリ酪酸（ｂｕｔｉｃ  ａｃｉｄ）、ポリ（吉草酸）、アルキルセルロース、ヒドロキシアルキルセルロース、セルロースエーテル、セルロースエステル、ニトロセルロース、アクリルエステル及びメタクリル酸エステルのポリマー、メチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシ−プロピルメチルセルロース、ヒドロキシブチルメチルセルロース、酢酸セルロース、プロピオン酸セルロース、酢酸酪酸セルロース、酢酸フタル酸セルロース、カルボキシルエチルセルロース、三酢酸セルロース、セルロース硫酸ナトリウム塩、ポリ（メタクリル酸メチル）、ポリ（メタクリル酸エチル）、ポリ（ブチルメタクリル酸）、ポリ（メタクリル酸イソブチル）、ポリ（メタクリル酸シクロヘキシル）、ポリ（メタクリル酸イソデシル）、ポリ（メタクリル酸ラウリル）、ポリ（メタクリル酸フェニル）、ポリ（アクリル酸メチル）、ポリ（アクリル酸イソプロピル）、ポリ（アクリル酸イソブチル）、ポリ（アクリル酸オクタデシル）、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリ（エチレングリコール）、ポリエチレンオキシド）、テレフタル酸ポリエチレン）、ポリ（ビニルアルコール）、ポリ酢酸ビニル、ポリ塩化ビニル、ポリスチレン、及びポリビニルピロリドンが挙げられる。例示的な天然ポリマーとしては、アルギン酸塩、並びにデキストラン及びセルロース、コラーゲン、それらの化学誘導体（置換、例えば、アルキル、アルキレンなどの化学基の付加、ヒドロキシル化、酸化、及び当業者によって日常的に行われるその他の修飾）；アルブミン及びその他の親水性タンパク質；ゼイン及びその他のプロラミン；及び疎水性タンパク質、共重合体及びそれらの混合物をはじめとするその他の多糖が挙げられる。一般的に、これらの材料は、生体内で酵素加水分解又は水への暴露によって、表面侵食又はバルク侵食のいずれかによって分解される。ポリマーは、任意でハイドロゲルの形態であり（例えば国際公開第０４／００９６６４号パンフレット、国際公開第０５／０８７２０１号パンフレット；及びＳａｗｈｎｅｙ，ｅｔ  ａｌ．，Ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ，１９９３，２６，５８１−５８７を参照されたい）、それは、水中でその重量の約９０％まで吸収し得て、さらに、任意で多価イオン又はその他のポリマーで架橋されている。
【０４１０】
送達システムとしては、コレステロール、コレステロールエステル、及び脂肪酸などのステロール、又はモノグリセリド、ジグリセリド、トリグリセリドなどの中性脂肪を含む脂質である、非ポリマー系システム；ヒドロゲル放出システム；シラスチックシステム；ペプチドベースのシステム；ワックスコーティング；従来の結合剤及び賦形剤を使用した圧縮錠剤；部分的に融合したインプラントなどもまた挙げられる。特定の実施例としては、（ａ）米国特許第４，４５２，７７５号明細書、米国特許第４，６７５，１８９号明細書、及び米国特許第５，７３６，１５２号明細書に記載されているものなどの製品がマトリックス中に含有される形態である侵食システム、及び（ｂ）米国特許第３，８５４，４８０号明細書、米国特許第５，１３３，９７４号明細書、及び、米国特許第５，４０７，６８６号明細書に記載されているような、ポリマーから製品を制御速度で浸透させる拡散システムが挙げられるが、これらに限定されるものではない。製品を含有するリポソームは、例えば、以下のような既知の方法によって調製されてもよい：（独国特許第３，２１８，１２１号明細書；Ｅｐｓｔｅｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８２：３６８８−３６９２（１９８５）；Ｈｗａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，７７：４０３０−４０３４（１９８０）；欧州特許第５２，３２２号明細書；欧州特許第３６，６７６号明細書；欧州特許第８８，０４６号明細書；欧州特許第１４３，９４９号明細書；欧州特許第１４２，６４１号明細書；日本国特許出願第８３−１１８００８号公報；米国特許第４，４８５，０４５号明細書及び米国特許第４，５４４，５４５号明細書；及び欧州特許第１０２，３２４号明細書）。
【０４１１】
代案としては又はそれに加えて、組成物は、本発明の抗ＣＤ３９抗体、抗原結合断片、核酸、又はベクターがその上に吸収され又はカプセル化されている、メンブレン、スポンジ、又はその他の適切な材料の患部への留置術を介して局所的に投与され得る。留置装置が使用される場合、装置は任意の適切な組織又は器官に留置され得て、本発明の抗ＣＤ３９抗体、抗原結合断片、核酸、又はベクターの送達は、ボーラスを介してか、又は連続投与を介して、又は連続注入を用いてカテーテルを介して、装置を介して直接行われ得る。
【０４１２】
本発明の抗ＣＤ３９抗体、抗原結合断片、核酸、又はベクターを含む医薬組成物は、例えば、乾燥粉末など、吸入のために製剤化され得る。吸入溶液はまた、煙霧剤送達のための液化噴射剤に製剤化され得る。なおも別の製剤中では、溶液は噴霧されてもよい。肺内投与のためのさらなる医薬組成物としては、例えば、化学的に修飾されたタンパク質の肺送達を開示する、ＰＣＴ出願公開国際公開第９４／２００６９号パンフレットに記載されているものが挙げられる。肺送達のためには、粒度は、遠位肺への送達に適したものでなければならない。例えば、粒子径は、１μｍ〜５μｍであり得る；しかし、例えば、各粒子がかなり多孔質であれば、より大型の粒子が使用されてもよい。
【０４１３】
本発明の抗ＣＤ３９抗体、抗原結合断片、核酸、又はベクターを含有する特定の製剤は、経口投与され得る。この様式で投与される製剤は、錠剤及びカプセルなどの固形剤形の調合に習慣的に使用される担体あり又はなしで、製剤化され得る。例えば、カプセルは、生物学的利用能が最大化され体循環前の分解が最小化された場合に、胃腸管内のある点で製剤の活性部分を放出するように設計され得る。選択的結合剤の吸収を促進するために、追加の薬剤が含まれ得る。希釈剤、着香料、低融点ワックス、植物油、潤滑剤、懸濁剤、錠剤崩壊剤、及びバインダーもまた用いられ得る。
【０４１４】
別の製剤は、錠剤の製造に適した非毒性賦形剤との混合物中にある、本発明の抗ＣＤ３９抗体、抗原結合断片、核酸、又はベクターの有効量を含み得る。錠剤を滅菌水又は別の適切なビヒクルに溶解することによって、単位用量形態で溶液が調製され得る。適切な賦形剤としては、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム又は炭酸水素塩、乳糖、又はリン酸カルシウムなどの不活性希釈剤；又はデンプン、ゼラチン、又はアカシアなどの結合剤；又はステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、又は滑石などの潤滑剤が挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【実施例】
【０４１５】
ＩＸ．例示的な方法
図１Ａ及び１Ｂ
抗ＣＤ３９  ５Ｆ２抗体は、マウス及びヒトのＣＤ３９陽性細胞に対するＡＤＣＣ活性を実証する。ｍＣＤ３９を発現するＣＨＯ細胞（図１Ａ）又はｈＣＤ３９を発現するＲａｊｉ細胞（図１Ｂ）をそれぞれ標的細胞として使用した。ルシフェラーゼをコードするプラスミドで形質移入されたＪｕｒｋａｔ細胞をＰｒｏｍｅｇａから購入し、ｐＬｅｎｔｉＴｄＴ−ｍＦｃγＲＩＶでさらに感染させた。ＴｄＴｏｍａｔｏ陽性Ｊｕｒｋａｔ細胞をＦＡＣＳ選別し、エフェクター細胞として使用した。野生型（ＷＴ）又は脱フコシル化（Ａｆｕｃ）５Ｆ２−ｍＩｇＧ２ｃを連続希釈濃度で添加した。バックグラウンドに対するルシフェラーゼ活性の増加倍数におけるＡＤＣＣは、抗体を標的細胞及びエフェクター細胞と６時間インキュベートした後に測定した。
【０４１６】
図２Ａ〜１２Ｂは、Ｂ１６／Ｆ１０のデータである。
脱フコシル化抗ＣＤ３９モノクローナル抗体（ｍＡｂ）５Ｆ２−ｍＩｇＧ２ｃは、生体内でＢ１６／Ｆ１０黒色腫に対する抗腫瘍活性を実証する。０日目に、１．６×１０５個のｌｕｃ−Ｂ１６／Ｆ１０細胞（ルシフェラーゼを内因的に過剰発現するＢ１６／Ｆ１０）をＣ５７ＢＬ／６マウス（８週齢の雄；Ｔａｃｏｎｉｃから入手）の右下脇腹に皮下注射（ｓ．ｃ．）し、１日目、４日目、及び７日目に、ｉ．ｐ．を介した２００μｌの生理食塩水中の２００μｇの野生型（ＷＴ）又は脱フコシル化（Ａｆｕｃ）５Ｆ２−ｍＩｇＧ２ｃによる処置がそれに続いた。２００μｌの生理食塩水を投与されたマウスが、対照の役割を果たした。腫瘍が触知可能になったときに、デジタル式キャリパーを使用して垂直方向の腫瘍の直径を直接測定し、その後は週に２〜３回測定した。腫瘍体積は、積分によって決定した：Σｔ１＋ｔ２＋．．．．ｔｎ（ｔ＝ｔ＝ａ２ｘｂｘ０．５２；ａ＝より小さな腫瘍直径、ｂ＝より大きな腫瘍直径）。腫瘍体積が約４０００ｍｍ３に達した時点で、試験を終了した。群当たりｎ＝５〜７。
【０４１７】
野生型（ＷＴ）５Ｆ２−ｍＩｇＧ１は、生体内でＢ１６／Ｆ１０腫瘍の増殖をブロックできない。０日目に、１．８×１０５個のｌｕｃ−Ｂ１６／Ｆ１０細胞をＣ５７ＢＬ／６マウス（８週齢の雄；Ｔａｃｏｎｉｃから入手）の右下脇腹にｓ．ｃ．留置し、１日目、４日目、及び７日目に、野生型（ＷＴ）５Ｆ２−ｍＩｇＧ１（ｉ．ｐを介した２００μｌの生理食塩水中の２００μｇ）による処置がそれに続いた。生理食塩水処置マウスを対照群と見なした。腫瘍体積は上記のように決定した。試験は１８日目に終了した。群当たりｎ＝６。
【０４１８】
脱フコシル化５Ｆ２−ｍＩｇＧ２ｃは、樹立されたＢ１６／Ｆ１０黒色腫に対して、その他の各種５Ｆ２  ｍＡｂよりも優れた生体内腫瘍阻害活性を示す。０日目に、１．０×１０５個のｌｕｃ−Ｂ１６／Ｆ１０細胞をＣ５７ＢＬ／６マウス（１０週齢の雄；Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙから入手）の右下脇腹に注射した（ｓ．ｃ．）。腫瘍が、５０〜１００ｍｍ３の平均体積に達したときに、抗体処置（ｉ．ｐを介した２００μｌの生理食塩水中の２００μｇの各ｍＡｂ）を開始した。マウスは腫瘍体積に基づいて４つのグループに無作為化した。具体的には、１１、１４、及び１７日目に、３回投与しした。腫瘍体積は上記のように測定した。動物は、腫瘍体積が約３５００〜４０００ｍｍ３に達したときに安楽死させた。腫瘍潰瘍が発生した場合は、より早期の安楽死を実施した。群当たりｎ＝７。
【０４１９】
脱フコシル化５Ｆ２−ｍＩｇＧ２ｃによる治療は、Ｂ１６／Ｆ１０保有野生型ＦｏｘＰ３−ＧＦＰノックインマウスにおける腫瘍退縮及び生存期間の延長をもたらす。０日目に、１．０×１０５個のｌｕｃ−Ｂ１６／Ｆ１０細胞をＣ５７ＢＬ／６系統の野生型ＦｏｘＰ３−ＧＦＰノックインマウス（ＦｏｘＰ３＋  Ｔｒｅｇ細胞中に緑色蛍光タンパク質（ＧＦＰ）を発現するレポーターマウス系統）の右下脇腹に注射した（ｓ．ｃ．）（１２〜１６週齢の雄；施設内）。１１日目、１４日目、及び１７日目に、Ａｆｕｃ  ５Ｆ２−ｍＩｇＧ２ｃ  ｍＡｂ（ｉ．ｐを介した２００μｌの生理食塩水中の２００μｇ）を腫瘍保有マウスに投与した（マウスは腫瘍体積に基づいて２つのグループに無作為化した）。２００μｌの生理食塩水を投与されたマウスを対照として使用した。腫瘍体積は上記のように測定した。動物は、腫瘍体積が約３５００〜４０００ｍｍ３に達したときに安楽死させた。群当たりｎ＝４〜５。
【０４２０】
脱フコシル化５Ｆ２−ｍＩｇＧ２ｃ  ｍＡｂ処置ストラテジーの最適化。Ａｆｕｃ  ５Ｆ２−ｍＩｇＧ２ｃの２回投与は、野生型ＦｏｘＰ３−ＧＦＰノックインマウスにおいて、Ｂ１６／Ｆ１０腫瘍退縮を誘導できる。
【０４２１】
図１２Ａ。平均腫瘍体積のＢ１６／Ｆ１０を保有するマウスに、３回のＡｆｕｃ  ５Ｆ２−ｍＩｇＧ２ｃ  ｍＡｂ処置を実施した。０日目に、１．６×１０５個のｌｕｃ−Ｂ１６／Ｆ１０細胞を野生型ＦｏｘＰ３−ＧＦＰノックインレポーターマウス（１６〜１８週齢の雌；施設内）の右下脇腹に注射した（ｓ．ｃ．）。９日目、１３日目、及び１６日目に、Ａｆｕｃ  ５Ｆ２−ｍＩｇＧ２ｃ  ｍＡｂ（ｉ．ｐ．を介した２００μｌの生理食塩水中の２００μｇ）を腫瘍保有マウスに投与した（マウスは腫瘍体積に基づいて２つのグループに無作為化した）。２００μｌの生理食塩水を投与されたマウスが、対照の役割を果たした。腫瘍体積を上記のように測定し、１７日目に試験を終了した。群当たりｎ＝３。
【０４２２】
図１２Ｂ。平均腫瘍体積のＢ１６／Ｆ１０を保有するマウスに、２回のＡｆｕｃ  ５Ｆ２−ｍＩｇＧ２ｃ  ｍＡｂ処置を実施した。０日目に、１．０×１０５個のｌｕｃ−Ｂ１６／Ｆ１０細胞を、野生型ＦｏｘＰ３−ＧＦＰノックインレポーターマウス（８週齢の雌；施設内）の右下脇腹に注射した（ｓ．ｃ．）。１３日目及び１６日目に、Ａｆｕｃ  ５Ｆ２−ｍＩｇＧ２ｃ  ｍＡｂ（ｉ．ｐ．を介した２００μｌの生理食塩水中の２００μｇ）を腫瘍保有マウスに投与した（マウスは腫瘍体積に基づいて２つのグループに無作為化した）。２００μｌの生理食塩水を投与されたマウスを対照として使用した。腫瘍体積を上記のように測定し、１７日目に試験を終了した。群当たりｎ＝４〜５。
【０４２３】
図１３Ａ〜１３Ｄ＆１４Ａ及び１４Ｂ；ＢＴ２７１−３０８
脱フコシル化抗ＣＤ３９モノクローナル抗体（ｍＡｂ）５Ｆ２−ｍＩｇＧ２ｃは、生体内で樹立されたＭＣ３８結腸直腸がんに対して抗腫瘍活性を実証する。０日目に、１．０×１０５個のＭＣ３８細胞を野生型ＦｏｘＰ３−ＧＦＰノックインレポーターマウス（９〜１２週齢の雄及び雌の双方；施設内）の右下脇腹に皮下（ｓ．ｃ．）注射した。７日目、１０日目、１４日目、及び２１日目に、Ａｆｕｃ  ５Ｆ２−ｍＩｇＧ２ｃ  ｍＡｂ（ｉ．ｐ．を介した２００μｌの生理食塩水中の２００μｇ）を腫瘍保有マウスに投与した（マウスは性別毎に腫瘍体積に基づいて２つのグループに無作為化した）。２００μｌの生理食塩水を投与されたマウスが、対照の役割を果たした。腫瘍体積は上記のように測定した。腫瘍体積が約４０００ｍｍ３に達した時点で、試験を終了した。雄では群当たりｎ＝６、雌では群当たりｎ＝８。
【０４２４】
図１５〜２３Ｃ；ＢＴ３９１−４０９。
脱フコシル化５Ｆ２−ｍＩｇＧ２ｃ  ｍＡｂによるＭＣ３８増殖の阻害は、主要な免疫細胞コンパートメント上のＣＤ３９発現の減少と、選択された免疫細胞サブタイプ中のＣＴＬＡ−４の同時減少とに関連する。０日目に、１．０×１０５個のＭＣ３８細胞を野生型ＦｏｘＰ３−ＧＦＰノックインレポーターマウス（１０〜１２週齢の雄；施設内）の右下脇腹に皮下（ｓ．ｃ．）注射した。１０日目、１３日目、及び１６日目に、Ａｆｕｃ  ５Ｆ２−ｍＩｇＧ２ｃ  ｍＡｂ（ｉ．ｐ．を介した２００μｌの生理食塩水中の２００μｇ）を腫瘍保有マウスに投与した（マウスは腫瘍体積に基づいて２つのグループに無作為化した）。２００μｌの生理食塩水を投与されたマウスが、対照の役割を果たした。腫瘍体積を上記のように測定し、１８日目に試験を終了した。血漿を採取した。脾臓、右鼠径リンパ節（流入領域リンパ節（ＤＬＮ）と見なされる、及び腫瘍全体から（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ  ＢｉｏｔｅｃからのＭｏｕｓｅ  Ｔｕｍｏｒ  Ｄｉｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  Ｋｉｔ及びｇｅｎｔｌｅＭＡＣＳ  Ｄｉｓｓｏｃｉａｔｏｒを使用して）単細胞懸濁液を調製し、ＣｙｔｏＦＬＥＸフローサイトメーターを使用してＦＡＣＳ分析に供した。全てのリンパ球をゲート制御するための表面マーカーとして、ＣＤ４５を使用した。５Ｆ２とは完全に異なるエピトープを認識するラット抗マウスＣＤ３９抗体である、Ｄｕｈａ５９（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ）をＦＡＣＳ染色のために使用した。群当たりｎ＝８。
【０４２５】
図２４Ａ〜２７；ＢＴ３７１−３８６。腫瘍のない健常マウス
脱フコシル化５Ｆ２−ｍＩｇＧ２ｃ  ｍＡｂ処置はまた、腫瘍を有するマウスよりもはるかに少ない程度に、腫瘍のない健常野生型マウスの主要な免疫細胞コンパートメント上のＣＤ３９発現の減少をもたらす。１日目及び４日目に、Ａｆｕｃ  ５Ｆ２−ｍＩｇＧ２ｃ  ｍＡｂ（ｉ．ｐ．を介した２００μｌの生理食塩水中の２００μｇ）を健常野生型ＦｏｘＰ３−ＧＦＰノックインレポーターマウス（８〜１０週齢の雄；施設内）に２回投与した。２００μｌの生理食塩水を投与されたマウスが、対照の役割を果たした。試験は５日目に終了した。血漿を採取した。脾臓、両脚の鼠径リンパ節、及び肝臓から単細胞懸濁液を調製し、ＣｙｔｏＦＬＥＸフローサイトメーターを使用してＦＡＣＳ分析に供した。全てのリンパ球をゲート制御するための表面マーカーとして、ＣＤ４５を使用した。５Ｆ２とは完全に異なるエピトープを認識する抗マウスＣＤ３９抗体であるＤｕｈａ５９をＦＡＣＳ染色のために使用した。群当たりｎ＝６。
【０４２６】
図２８；ＣＴＸ１〜１０。腫瘍のない健常マウスでの肝臓及び腎臓の細胞傷害性
健常野生型マウスにおける脱フコシル化５Ｆ２−ｍＩｇＧ２ｃ  ｍＡｂの安全性評価。１日目、４日目、及び７日目に、ｉ．ｐ．を介して、２つの異なる濃度（１００μｇ（ＣＴＸ５〜７）又は１０００μｇ（ＣＴＸ８〜１０））で、Ａｆｕｃ  ５Ｆ２−ｍＩｇＧ２ｃ  ｍＡｂを健常野生型Ｃ５７ＢＬ／６マウス（８〜１２週齢の雄；Ｔａｃｏｎｉｃ）に３回投与した。２００μｌの生理食塩水（ＣＴＸ１）、又は１００μｇのＩｇＧ２ｃアイソタイプ対照抗体（カタログ番号ＰＺＭＵ００７；ＡＢ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｃｏｎｃｏｒｄ，ＭＡ）（ＣＴＸ２〜４）を投与されたマウスが、対照の役割を果たした。試験は８日目に終了した。血漿ＡＬＴ、ＡＳＴ、及びＢＵＮ濃度は、自動分析装置（ＡＢＬ８０  ＦＬＥＸ  ＣＯ−ＯＸ；Ｒａｄｉｏｍｅｔｅｒ  Ａｍｅｒｉｃａ  Ｉｎｃ．，Ｂｒｅａ，ＣＡ）によって測定した。
【０４２７】
図２９Ａ〜３４Ｃ；ＢＴ４３１−４４５。４種の様々な５Ｆ２  ｍＡｂを投与された腫瘍のない健常マウス
腫瘍のない健常野生型マウスでは、脱フコシル化５Ｆ２−ｍＩｇＧ２ｃ  ｍＡｂ処置は、その他の各種５Ｆ２  ｍＡｂと比較して、全ての主要な免疫細胞コンパートメント上でＣＤ３９発現の最も劇的な減少をもたらす。１日目及び４日目に、様々な５Ｆ２  ｍＡｂ（ｉ．ｐ．を介した２００μｌの生理食塩水中の２００μｇの各ｍＡｂ）で、健常野生型ＦｏｘＰ３−ＧＦＰノックインレポーターマウス（１５〜１６週齢の雌；施設内）を処置した。２００μｌの生理食塩水を投与されたマウスが、対照の役割を果たした。試験は６日目に終了した。脾臓、両脚の鼠径リンパ節、及び血液から単細胞懸濁液を調製し、ＣｙｔｏＦＬＥＸフローサイトメーターを使用してＦＡＣＳ分析に供した。全てのリンパ球をゲート制御するための表面マーカーとして、ＣＤ４５を使用した。５Ｆ２とは完全に異なるエピトープを認識するラット抗マウスＣＤ３９抗体であるＤｕｈａ５９をＦＡＣＳ染色のために使用した。群当たりｎ＝３。
【０４２８】
図３５Ａ及び３５Ｂ＆３６；ＢＴ４７１−４８５。Ａｆｕｃ  ５Ｆ２−ｍＩｇＧ２ｃを投与されたＬｙｓＭＣｒｅ／ＣＤ３９  ＫＯ  ＭＣ３８腫瘍保有マウス
脱フコシル化５Ｆ２−ｍＩｇＧ２ｃ  ｍＡｂは、単球及びマクロファージ（ＬｙｓＭＣｒｅ／ＣＤ３９ＫＯ）上のＣＤ３９の条件的欠失があるマウスにおけるＭＣ３８腫瘍増殖をブロックできない。０日目に、１．０×１０５個のＭＣ３８細胞をＬｙｓＭＣｒｅ／ＣＤ３９ＫＯマウス（１０〜１６週齢の雌；施設内）の右下脇腹に注射した（ｓ．ｃ．）。８日目、１１日目、及び１４日目に、Ａｆｕｃ  ５Ｆ２−ｍＩｇＧ２ｃ  ｍＡｂ（ｉ．ｐを介した２００μｌの生理食塩水中の２００μｇ）を腫瘍保有マウスに投与した（マウスは腫瘍体積に基づいて２つのグループに無作為化した）。２００μｌの生理食塩水を投与されたマウスが、対照の役割を果たした。腫瘍体積は上記のように測定した。研究は、２７日目に（いずれかの腫瘍の体積が約４０００ｍｍ３に達したときに）終了した。群当たりｎ＝５。
【０４２９】
図３７Ａ〜４６Ｄ；ＢＴ５４１−５８４。４種の様々な５Ｆ２  ｍＡｂを投与されたＭＣ３８腫瘍保有マウス
脱フコシル化５Ｆ２−ｍＩｇＧ２ｃは、樹立されたＭＣ３８結腸直腸がんに対して他の各種５Ｆ２  ｍＡｂよりも優れた生体内腫瘍阻害活性を示す。０日目に、１．０×１０５個のＭＣ３８細胞を野生型ＦｏｘＰ３−ＧＦＰノックインレポーターマウス（８〜１６週齢の雄；施設内）の右下脇腹に注射した（ｓ．ｃ．）。９日目、１２日目、及び１５日目に、様々な５Ｆ２  ｍＡｂ（ｉ．ｐ．を介した２００μｌの生理食塩水中の２００μｇの各ｍＡｂ）を腫瘍保有マウスに投与した（マウスは５つのグループに無作為化した）。腫瘍体積は上記のように測定した。試験は１７日目に終了した。２００μｌの生理食塩水を投与されたマウスが、対照の役割を果たした。脾臓、右鼠径リンパ節（流入領域リンパ節（ＤＬＮ）として）、血液、並びに腫瘍から単細胞懸濁液を調製し、ＣｙｔｏＦＬＥＸフローサイトメーターを使用してＦＡＣＳ分析に供した。全てのリンパ球をゲート制御するための表面マーカーとして、ＣＤ４５を使用した。５Ｆ２とは完全に異なるエピトープを認識する抗マウスＣＤ３９抗体であるＤｕｈａ５９をＦＡＣＳ染色のために使用した。生理食塩水群ではｎ＝７、ｍＡｂ処置マウスでは群当たりｎ＝４〜５。
【０４３０】
図４７Ａ及び４７Ｂ；抗ＰＤ−１  Ａｂを投与された黒色腫保有野生型又はＣＤ３９ヌルマウス
黒色腫保有野生型マウスを抗ＰＤ−１で処置した。抗ＰＤ−１は、野生型マウスでのみ抗腫瘍効果を示し、ＣＤ３９ヌルマウスでは示さなかった。これは、ＰＤ−１が、少なくとも部分的に、プリン作動性シグナル伝達の経路と共通の経路を利用することによって、機能してもよいことを示唆する。
【０４３１】
図４８Ａ〜４８Ｅ及び４９Ａ〜４９Ｄ；ＣＤ３９発現（ｅｘｐｒｅｓｉｏｎ）及び枯渇
ＰＢ１（図４８Ａ）、ＰＢ２（図４８Ｂ）、ＰＢ３（図４８Ｃ）、ＰＢ４（図４８Ｄ）及びＰＢ５（図４８Ｅ）と称される抗ｈＣＤ３９抗体は、少なくとも部分的にＣＤ３９の抗体媒介性標的膜動輸送を通じて、さもなければＣＤ３９陽性であるヒトＢリンパ芽球細胞（ＨＣＣ１７３９ＢＬ）上のＣＤ３９を枯渇させ得る。ＣＤ３９発現ＨＣＣ１７３９ＢＬ細胞をヒトＦｃ（ＩｇＧ１）（４μｇ／ｍｌ）又はヒトＩｇＧ１アイソタイプ対照（４μｇ／ｍｌ）でキメラ化されたウサギ抗ｈＣＤ３９抗体の存在下で、ＴＨＰ−１単球細胞（ＴＨＰ−１：ＨＣＣ１７３９ＢＬ＝３：２）あり又はなしで、４３時間又は２時間共培養した。ＨＣＣ１７３９ＢＬ細胞におけるＣＤ３９発現は、このキメラ抗体とは異なるエピトープを認識する染色抗体によって検出した。ＴＨＰ−１及びＨＣＣ１７３９ＢＬ細胞は、ＣｙｔｏＦｌｅｘＬＸフローサイトメーターを使用して、ＣＤ２０染色によって別々にゲート制御した。各図の最初のパネルは、共培養物内で、ヒトＩｇＧ１アイソタイプ対照で処置された細胞と比較して、キメラ抗体で処置された細胞の相対強度を表すデータである。各図の第２のパネルは、ＨＣＣ１７３９ＢＬ細胞単独と比較した、共培養細胞の相対強度を表すデータである。
【０４３２】
抗ｈＣＤ３９抗体は、ＨＣＣ１７３９ＢＬ細胞における脱落及び／又は内部移行もまた含む機序を通じて、ＣＤ３９枯渇を引き起こしてもよい。ＣＤ３９を発現するＨＣＣ１７３９ＢＬ細胞をヒトＦｃ（ＩｇＧ１）でキメラ化されたウサギ抗ｈＣＤ３９抗体（２μｇ／ｍｌ）と共に、表示される時間にわたり細胞培養インキュベーター内でインキュベートした。抗体インキュベーション後、細胞を２回洗浄し、二次抗体（ロバ抗ヒトＩｇＧ、ＡＦ４８８にコンジュゲートされたＦｃγ断片特異的抗体）で染色し、ＣｙｔｏＦｌｅｘＬＸ装置上でのフローサイトメトリー分析がそれに続いた。図４９ＡはＰＢ１を示し、図４９ＢはＰＢ３を示し、図４９ＣはＰＢ４を示し、図４９ＤはＰＢ５を示す。
【０４３３】
ＩＨＣデータの説明：
ＭＣ３８保有マウスから得られたｓ．ｃ．腫瘍切片の免疫組織化学染色は、ＣＤ３９のタンパク質発現が、腫瘍浸潤リンパ球及び腫瘍血管系の双方で（ＣＤ３１による染色で）、生理食塩水処置対照マウスからの腫瘍部位内で強く誘導されることを明らかにした。興味深いことに、Ａｆｕｃ  ５Ｆ２−ｍＩｇＧ２ｃ  ｍＡｂ処置に際して、双方の腫瘍細胞コンパートメント上のこのような高レベルのＣＤ３９は顕著に減少した。これらのデータは、Ａｆｕｃ  ５Ｆ２−ｍＩｇＧ２ｃ  ｍＡｂを単独で（単剤療法として）使用したＣＤ３９の遮断は、これらの２つの主要な腫瘍細胞コンパートメント内のＣＤ３９の機能を並行阻害することによって、例えば、抗がん免疫を増強し、腫瘍血管新生を制限することで、増強された抗がん活性を達成できることを示す。
【０４３４】
材料と方法
動物：
７週齢の雄又は雌の野生型Ｃ５７ＢＬ／６マウスは、Ｔａｃｏｎｉｃ（ＭＡ）又はＪａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ（Ｂａｒ  Ｈａｒｂｏｒ，ＭＥ）から購入し、実験前に少なくとも１〜２週間、Ｂｅｔｈ  Ｉｓｒａｅｌ  Ｄｅａｃｏｎｅｓｓ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｃｅｎｔｅｒ（ＢＩＤＭＣ）の動物研究施設で飼育した。Ｃ５７ＢＬ／６系統の８〜１８週齢の雄又は雌の野生型ＦｏｘＰ３−ＧＦＰノックインマウス（ＦｏｘＰ３＋  Ｔｒｅｇ細胞中に緑色蛍光タンパク質（ＧＦＰ）を発現するレポーターマウス系統）は以前記載されたように作製した（Ｄｅａｇｌｉｏ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｅｘｐ  Ｍｅｄ（２００７）２０４：１２５７；及びＳｕｎ  ｅｔ  ａｌ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ（２０１０）１３９：１０３０）。ＣＤ３９ｆｌｏｘ対立遺伝子を含むマウスは、骨髄系特異的プロモーターであるリソソームＭ（ＬｙｓＭ）の制御下にあるＣｒｅリコンビナーゼを発現するマウス（Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙからの在庫番号００４７８１）と交配させ、単球、成熟マクロファージ、及び顆粒球においてＣＤ３９が欠失しているマウス（ＬｙｓＭＣｒｅ／ＣＤ３９ＫＯ）を作製した。動物実験プロトコルは、ＢＩＤＭＣの動物実験委員会（ＩＡＣＵＣ：Ｉｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａｌ  Ａｎｉｍａｌ  Ｃａｒｅ  ａｎｄ  Ｕｓｅ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ）によってレビューされ、承認された。
【０４３５】
細胞株：
全長マウスＣＤ３９  ｃＤＮＡ遺伝子（ＡＦ０３７３６６）は、ＭｌｕＩ及びＸｈｏＩ部位でｐＴＯＧ３ベクター（Ａｎｔａｇｅｎ，Ｂｏｓｔｏｎ，ＭＡ）にクローン化した。製造業者の説明書に従ってＦｕＧｅｎｅ  ６試薬を使用して、１．０μｇのｐＴＯＧ３−ｍＣＤ３９を２０ｎｇのＣｒｅ発現プラスミドｐＯＧ２３１（Ａｄｄｇｅｎｅ）と共に、ＣＨＯ−Ｅ細胞（Ａｎｔａｇｅｎ）に同時形質移入した。形質移入の２日後に、１０ｃｍ組織培養プレート内で、５％ＦＢＳ、２ｍＭのＬ−グルタミン、並びに１００単位／ｍＬのペニシリン及びストレプトマイシンを添加したＤＭＥＭ中で、ハイグロマイシンＢ（８００μｇ／ｍＬ）を使用して細胞を選択した。さらに１０日後、薬剤耐性の単一コロニーを顕微鏡下で剥離させ、２００μＬのピペットチップを用いて４８ウェルプレートに移した。ＦＡＣＳ染色によって同定された陽性クローンを増殖させ、形態と成長が最良のクローンを選択し、ｍＣＤ３９．ＣＨＯ細胞株を樹立した。
【０４３６】
全長ヒトＣＤ３９  ｃＤＮＡ遺伝子（イソ型２、Ｐ４９９６１−２）をＮｏｔＩ及びＢａｍＨＩ部位でｐＬｅｎｔｉＴｄＴベクター（Ａｎｔａｇｅｎ）にクローン化した。製造業者の説明書に従ってＦｕＧｅｎｅ  ６試薬を使用して、２．０μｇのｐＬｅｎｔｉＴｄＴ−ｈＣＤ３９をＥｎｖ、Ｇａｇ、及びＰｏｌを発現するパッケージングプラスミドと共に、ＨＥＫ２９３細胞に同時形質移入した。レンチウイルスを含有する上清を３日後に採取し、Ｒａｊｉ細胞の感染に使用した。ＴｄＴｏｍａｔｏ陽性Ｒａｊｉ細胞をＦＡＣＳ選別し、ｈＣＤ３９．Ｒａｊｉ細胞株を樹立した。
【０４３７】
ＮＦＡＴ応答エレメントの制御下にあるホタルルシフェラーゼ遺伝子をコードするプラスミドと、ヒトＦｃＲγ共通鎖遺伝子をコードする別のプラスミドとで、同時形質移入されたＪｕｒｋａｔ細胞は、ＡＤＣＣ  Ｂｉｏａｓｓａｙ  Ｃｏｒｅ  Ｋｉｔ（カタログ番号Ｇ７０１０）の一部としてＰｒｏｍｅｇａから購入した。これらの細胞を抗ｈＦｃγＲＩＩＩＡで染色し、ＦＡＣＳ選別してｈＦｃγＲＩＩＩＡ陰性集団を得て、ｐＬｅｎｔｉＴｄＴ−ｍＦｃγＲＩＶによるさらなる感染がそれに続いた。ＴｄＴｏｍａｔｏ陽性Ｊｕｒｋａｔ細胞をＦＡＣＳで選別し、マウス抗体のＡＤＣＣを測定するためのエフェクター細胞として使用した。
【０４３８】
ルシフェラーゼを発現する腫瘍細胞株Ｂ１６／Ｆ１０（ｌｕｃ−Ｂ１６／Ｆ１０）及びＭＣ３８結腸直腸がん細胞は、ＤＭＥＭ（１０％ＦＢＳ、２ｍＭのＬ−グルタミン、１００単位／ｍＬのペニシリン及びストレプトマイシン、及び１５μｇ／ｍＬのプロマイシンを添加）及びＲＰＭＩ  １６４０（１０％ＦＢＳ、２ｍＭのＬ−グルタミン、及び１００単位／ｍＬのペニシリン及びストレプトマイシンを添加）中で、それぞれ、以前記載されたように維持した（Ｓｕｎ  ｅｔ  ａｌ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ（２０１０）１３９：１０３０；及びＦｅｎｇ  ｅｔ  ａｌ．Ｎｅｏｐｌａｓｉａ（２０１１）１３：２０６）。
【０４３９】
腫瘍細胞接種：
Ｌｕｃ−Ｂ１６／Ｆ１０又はＭＣ３８細胞をトリプシン処理によって回収し、注射のために２％ＦＢＳを含有するＨＢＳＳで再懸濁した。１．０〜２．０×１０５個のがん細胞をマウスの右下脇腹に皮下（ｓ．ｃ．）注射した。腫瘍が触知可能になったときに、デジタル式キャリパーを使用して垂直方向の腫瘍直径を示された時点で直接測定した。腫瘍体積は、積分によって決定した：Σｔ１＋ｔ２＋．．．．ｔｎ（ｔ＝ａ２ｘｂｘ０．５２；ａ＝より小さな腫瘍直径、ｂ＝より大きな腫瘍直径）。腫瘍潰瘍が発生した場合は、より早期の安楽死を実施した。
【０４４０】
抗体及び試薬：
全ての化学物質は、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）から入手した。生体内処置のためのＩｎＶｉｖｏＭａｂ抗マウスＰＤ−１（ＣＤ２７９；クローンＪ４３）は、ＢｉｏＸＣｅｌｌ（カタログ番号ＢＥ００３３−２；Ｗｅｓｔ  Ｌａｂａｎｏｎ，ＮＨ）から購入した。ＦＡＣＳ分析に使用した抗体は、Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ（Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）、ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ／Ｔｈｅｒｍｏｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ（Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ，ＣＡ）、及びＲ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ（Ｍｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ，ＭＮ）からのものであった。ＦＡＣＳ抗体の詳細な一覧を表１として添付した。免疫組織化学検査で使用したポリクローナル抗体は、ウサギ抗マウスＣＤ３１（カタログ番号ＧＷＢ−３３０８７９；Ｇｅｎｗａｙ  Ｂｉｏｔｅｃｈ  Ｉｎｃ．，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）及びポリクローナルヒツジ抗マウスＣＤ３９（カタログ番号ＡＦ４３９８；Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）であった。
【０４４１】
ＡＤＣＣアッセイ：
アッセイの１日前に、標的細胞を１００μＬの培地中に１０，０００個の細胞／ウェルで、低蒸発蓋（Ｆａｌｃｏｎ、カタログ番号３５３２９６）を有する平底白色不透明組織培養９６ウェルプレート内に播種した。翌日、標的細胞に、合計７５μＬの培地中のＪｕｒｋａｔエフェクター細胞（２００，０００個の細胞／ウェル）と滴定用量の抗体をさらに添加して、３７℃で６時間インキュベートした。インキュベーション後、プレートを室温で１５分間冷却し、７５μＬのＢｉｏ  Ｇｌｏ（Ｐｒｏｍｅｇａ、カタログ番号Ｇ７１９Ａ）を各ウェルに添加した。３０分後に、グロー型ルミネセンス読み取り能力を有するプレートリーダーを使用して、プレートを発光について読み取った。バックグラウンドの倍増のルシフェラーゼ活性をＡＤＣＣ活性として使用した。
【０４４２】
血液、脾臓、リンパ節、肝臓又は腫瘍からの単細胞懸濁液の調製：
ヘパリン化血液をマウスの下大静脈から採取し、製造業者の説明書に従って６ｍＬの１×ＢＤ  ＲＢＣ  Ｌｙｓｉｎｇ  Ｂｕｆｆｅｒ（カタログ番号５５５８９９；ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を使用して、３００μＬの血液を溶解した。
【０４４３】
脾細胞は、２５．５Ｇの針でシリンジを用いて脾臓をフラッシングし、引き続く７０μＭの細胞ストレーナーによる濾過によって調製した。血液細胞は、３ｍＬの１×ＢＤ  ＲＢＣ  Ｌｙｓｉｎｇ  Ｂｕｆｆｅｒ（カタログ番号５５５８９９；ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を使用して、穏やかにボルテックスし、短時間の遠心分離によって除去した。
【０４４４】
リンパ節は、７０μＭ細胞ストレーナーを通して単純にメッシュ化した。
【０４４５】
安楽死させたマウスから肝臓及び／又は腫瘍を摘出し、外科用メスを用いて小片に切断し、製造業者の説明書に従って、ｇｅｎｔｌｅＭＡＣＳ  Ｄｉｓｓｏｃｉａｔｏｒ（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ  Ｂｉｏｔｅｃ  Ｉｎｃ．，Ａｕｂｕｒｎ，ＣＡ）上で、それぞれＭｏｕｓｅ  Ｌｉｖｅｒ  Ｄｉｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  Ｋｉｔ（カタログ番号１３０−１０５−８０７）及びＭｏｕｓｅ  Ｔｕｍｏｒ  Ｄｉｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  Ｋｉｔ（カタログ番号１３０−０９６−７３０）を使用して、酵素的及び物理的解離に供した。
【０４４６】
フローサイトメトリー分析：
ＦＡＣＳ試験は、ＣｙｔｏＦＬＥＸフローサイトメーター（Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｃｏｕｌｔｅｒ，Ｂｒｅａ，ＣＡ）上で、マウスＣＤ４５、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ１１ｂ、Ｇｒ１、Ｌｙ６Ｃ、Ｌｙ６Ｇ、Ｆ４／８０、Ｂ２２０、ＣＴＬＡ４、ＰＤ−１、及びＰＤ−Ｌ１（表１に示す）に対する共役抗体を使用して実施した。ＦＡＣＳデータは、ＣｙｔＥｘｐｅｒｔ  ２．０（Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｃｏｕｌｔｅｒ）を使用して分析した。
【０４４７】
組織学及び免疫組織化学検査：
ｓ．ｃ．腫瘍のパラフィン包埋切片又は凍結切片は、ＣＤ３１に対するウサギ抗マウス抗体、又はヒツジ抗マウスＣＤ３９抗体を使用して、わずかな修正を加えて記載されているように（Ｓｕｎ  ｅｔ  ａｌ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ（２０１０）１３９：１０３０；及びＳｕｎ  ｅｔ  ａｌ．Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ（２０１３）５７：２０５）免疫組織化学染色（ＩＨＣ）によって分析した。
【０４４８】
統計解析：
結果は、値の平均値±ＳＥＭとして表される。統計解析では、両側スチューデントｔ−検定（２群間）又はチューキー（Ｔｕｒｋｅｙ）後検定付きＡＮＯＶＡ（３群以上の間）を用いた。動物の生存期間（安楽死までの時間）はカプラン・マイヤー法を用いて分析し、対数順位検定（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ，Ｌａ  Ｊｏｌｌａ，ＣＡ）を用いて比較した。有意性はＰ＜０．０５として定義した。
【０４４９】
（表１）抗体
2021527138.tif 000039
2021527138.tif 000040
2021527138.tif 000041
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2021527138.tif 000043
【０４５０】
その他の実施形態
本発明は、その特定の実施形態に関連して記載されているが、それはさらに修正可能であり、本出願は、一般的には、本発明の原理に従った本発明の任意の変形、用途、又は応用をカバーすることを意図しており、本発明が関連し、前述の本質的な特徴に適用されてもよい、特許請求の範囲に従う、当該技術分野における既知の又は慣習的な慣行の範囲内にある本発明からのそのような逸脱を含むものと理解される。
【図１Ａ】
2021527138.tif 000045
【図１Ｂ】
2021527138.tif 000046
【図２】
2021527138.tif 000047
【図３】
2021527138.tif 000048
【図４】
2021527138.tif 000049
【図５】
2021527138.tif 000050
【図６】
2021527138.tif 000051
【図７】
2021527138.tif 000052
【図８】
2021527138.tif 000053
【図９】
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【図１０】
2021527138.tif 000055
【図１１】
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【図１２】
2021527138.tif 000057
【図１３】
2021527138.tif 000058
【図１４】
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【図１５】
2021527138.tif 000060
【図１６】
2021527138.tif 000061
【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５】
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【図２６】
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【図２７】
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【図２８】
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【図２９】
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【図３０】
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【図３１】
2021527138.tif 000076
【図３２】
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【図３３】
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【図３４】
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【図３５】
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【図３６】
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【図３７】
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【図３８】
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【図３９Ａ】
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【図３９Ｂ】
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【図３９Ｃ】
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【図３９Ｄ】
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【図３９Ｅ】
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【図４０Ａ】
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【図４０Ｂ】
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【図４０Ｃ】
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【図４０Ｄ】
2021527138.tif 000092
【図４１Ａ】
2021527138.tif 000093
【図４１Ｂ】
2021527138.tif 000094
【図４１Ｃ】
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【図４１Ｄ】
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【図４１Ｅ】
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【図４２】
2021527138.tif 000098
【図４３Ａ】
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【図４３Ｂ】
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【図４３Ｃ】
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【図４３Ｄ】
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【図４３Ｅ】
2021527138.tif 000103
【図４３Ｆ】
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【図４４Ａ】
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【図４４Ｂ】
2021527138.tif 000106
【図４４Ｃ】
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【図４４Ｄ】
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【図４４Ｅ】
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【図４５Ａ】
2021527138.tif 000110
【図４５Ｂ】
2021527138.tif 000111
【図４５Ｃ】
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【図４５Ｄ】
2021527138.tif 000113
【図４６Ａ】
2021527138.tif 000114
【図４６Ｂ】
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【図４６Ｃ】
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【図４６Ｄ】
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【図４７】
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【図４８Ａ】
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【図４８Ｂ】
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【図４８Ｃ】
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【図４８Ｄ】
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【図４８Ｅ】
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【図４９Ａ】
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【図４９Ｂ】
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【図４９Ｃ】
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【図４９Ｄ】
2021527138.tif 000127
【配列表】
2021527138000001.app
【手続補正書】
【提出日】令和3年2月15日(2021.2.15)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００１】
研究連邦政府の資金による研究に関する声明
本発明は、米国国立衛生研究所によって交付されたた助成金番号ＣＡ２２１７０２、ＣＡ１６４９７０、ＨＬ０９４４００、及びＨＬ０６３９７２の下で政府の支援を受けてなされた。政府は、本発明に一定の権利を有する。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５４】
本発明の別の態様は、ヒトＣＤ３９に特異的に結合する第１の結合部分と、腫瘍抗原、免疫チェックポイント、又は共刺激受容体に特異的に結合する第２の結合部分とを含む二重特異性抗体を提供し、追加の抗原結合部位が免疫チェックポイントに対するものである場合、それはチェックポイント阻害剤として機能し、追加の抗原結合部位が共刺激受容体に対するものである場合、それは共刺激アゴニストとして機能し、二重特異性抗体は、ＣＤ４５＋免疫細胞上のＣＤ３９の抗体媒介性標的膜動輸送を引き起こす。
[本発明1001]
それを必要とする対象におけるＴ細胞疲弊を低減するための方法であって、エクトヌクレオシド三リン酸ジホスホヒドロラーゼ−1（「ＣＤ39」）に結合する抗原結合ドメインと、ＦｃγＲＩＩＩａに結合するＦｃγＲＩＩＩａ結合部分とを含む抗ＣＤ39剤の医薬組成物の有効量を対象に投与するステップを含み、この抗体の投与が、ＣＤ45＋免疫細胞上の検出可能なＣＤ39レベルの低下をもたらす、方法。
[本発明1002]
前記ＦｃγＲＩＩＩａ結合部分が、Ｆｃドメイン、ＦｃγＲＩＩＩａに結合する抗体又はその抗原結合断片、及びＦｃγＲＩＩＩａ結合ペプチドから選択される、本発明1001の方法。
[本発明1003]
前記抗原結合ドメインが、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）2、Ｆｖ又は一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である、本発明1001又は1002の方法。
[本発明1004]
前記抗ＣＤ39剤が、ＣＤ45＋免疫細胞上のＣＤ39の抗体媒介性標的膜動輸送を引き起こし、且つ（任意で）腫瘍血管内皮破壊からのＣＤ39の抗体媒介性標的膜動輸送を引き起こすか、又は腫瘍内の血管網を崩壊させる、本発明1001〜1003のいずれかの方法。
[本発明1005]
前記抗ＣＤ39剤が、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：3、5、7、9又は11の可変領域と少なくとも60％同一である重鎖可変領域、及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：4、6、8、10又は12の可変領域と少なくとも60％同一である軽鎖可変領域を含む抗体又はその抗原結合断片であり、該抗体がヒトＣＤ39に特異的に結合できる、本発明1001〜1004のいずれかの方法。
[本発明1006]
前記抗ＣＤ39剤が、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：3、5、7、9又は11のＣＤＲと少なくとも60％同一であるＣＤＲを有する重鎖、及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：4、6、8、10又は12のＣＤＲと少なくとも60％同一であるＣＤＲを有する軽鎖を含む抗体又はその抗原結合断片であり、該抗体がヒトＣＤ39に特異的に結合できる、本発明1001〜1004のいずれかの方法。
[本発明1007]
前記抗ＣＤ39剤が、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：3のＣＤＲを有する重鎖及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：4のＣＤＲを有する軽鎖と、ヒトＣＤ39に特異的に結合できる抗原結合部位を有するヒト化重鎖及び軽鎖を形成するためのヒトフレームワーク配列とを含む抗体又はその抗原結合断片である、本発明1001〜1004のいずれかの方法。
[本発明1008]
前記抗ＣＤ39剤が、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：5のＣＤＲを有する重鎖及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：6のＣＤＲを有する軽鎖と、ヒトＣＤ39に特異的に結合できる抗原結合部位を有するヒト化重鎖及び軽鎖を形成するためのヒトフレームワーク配列とを含む抗体又はその抗原結合断片である、本発明1001〜1004のいずれかの方法。
[本発明1009]
前記抗ＣＤ39剤が、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：7のＣＤＲを有する重鎖及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：8のＣＤＲを有する軽鎖と、ヒトＣＤ39に特異的に結合できる抗原結合部位を有するヒト化重鎖及び軽鎖を形成するためのヒトフレームワーク配列とを含む抗体である、本発明1001〜1004のいずれかの方法。
[本発明1010]
前記抗ＣＤ39剤が、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：9のＣＤＲを有する重鎖及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：10のＣＤＲを有する軽鎖と、ヒトＣＤ39に特異的に結合できる抗原結合部位を有するヒト化重鎖及び軽鎖を形成するためのヒトフレームワーク配列とを含む抗体である、本発明1001〜1004のいずれかの方法。
[本発明1011]
前記抗ＣＤ39剤が、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：11のＣＤＲを有する重鎖及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：12のＣＤＲを有する軽鎖と、ヒトＣＤ39に特異的に結合できる抗原結合部位を有するヒト化重鎖及び軽鎖を形成するためのヒトフレームワーク配列とを含む抗体である、本発明1001〜1004のいずれかの方法。
[本発明1012]
前記抗ＣＤ39剤が、抗腫瘍療法の一部として投与される、本発明1001〜1011のいずれかの方法。
[本発明1013]
前記抗ＣＤ39剤が、抗ウイルス療法（ＨＩＶ及びＨＢＶ感染症の治療を含む）、マイコバクテリウム・ツベルクローシス（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）及び内臓リーシュマニア症の治療などの抗感染療法の一部として投与される、本発明1001〜1012のいずれかの方法。
[本発明1014]
抗腫瘍免疫応答を促進するための方法であって、エクトヌクレオシド三リン酸ジホスホヒドロラーゼ−1（「ＣＤ39」）に結合する抗ＣＤ39抗体を、腫瘍を有するヒト患者に投与するステップを含み、該抗体がＦｃγＲＩＩＩａに結合し、抗体依存性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）を保持し、且つ該ヒト患者への該抗体の投与が、該腫瘍内の免疫細胞上のＣＤ39の発現の減少をもたらす、方法。
[本発明1015]
前記抗ＣＤ39抗体が、ＣＤ45＋免疫細胞上のＣＤ39の抗体媒介性標的膜動輸送を引き起こし、且つ（任意で）腫瘍血管内皮破壊からのＣＤ39の抗体媒介性標的膜動輸送を引き起こすか、又は腫瘍内の血管網を崩壊させる、本発明1014の方法。
[本発明1016]
前記抗ＣＤ39抗体が、ＩｇＧ1又はＩｇＧ3アイソタイプである、本発明1014又は1015の方法。
[本発明1017]
前記抗ＣＤ39抗体が、低フコシル化又は脱フコシル化されている、本発明1014〜1016のいずれかの方法。
[本発明1018]
前記抗ＣＤ39抗体が、ヒト抗体又はヒト化抗体である、本発明1014〜1017のいずれかの方法。
[本発明1019]
前記抗ＣＤ39抗体が、腫瘍抗原、免疫チェックポイント又は共刺激受容体に対する少なくとも1つの追加の抗原結合部位を含む二重特異性抗体であり、該追加の抗原結合部位が免疫チェックポイントに対するものである場合に該抗体はチェックポイント阻害剤として機能し、該追加の抗原結合部位が共刺激受容体に対するものである場合に該抗体は共刺激アゴニストとして機能する、本発明1014〜1018のいずれかの方法。
[本発明1020]
前記追加の抗原結合部位が、ＰＤ−1、ＰＤ−Ｌ1、ＣＴＬＡ−4／Ｂ7−1／Ｂ7−2、ＰＤ−Ｌ2、ＮＫＧ2Ａ、ＫＩＲ、ＬＡＧ−3、ＴＩＭ−3、ＣＤ96、ＶＩＳＴＡ、及びＴＩＧＩＴからなる群より選択されるチェックポイントタンパク質に結合する、本発明1019の方法。
[本発明1021]
前記追加の抗原結合部位が、Ｔ細胞上で発現上昇し且つＴ細胞疲弊に関連するチェックポイントタンパク質に結合する、本発明1019の方法。
[本発明1022]
前記追加の抗原結合部位が、ＭＨＣＩ分子、ＢＴＬＡ受容体、ＯＸ40、ＣＤ27、ＣＤ28、ＣＤＳ、ＩＣＡＭ−1、ＬＦＡ−1（ＣＤ11ａ／ＣＤ18）、ＩＣＯＳ（ＣＤ278）、及び4−1ＢＢ（ＣＤ137）からなる群より選択される免疫共刺激受容体に結合する、本発明1019の方法。
[本発明1023]
前記抗ＣＤ39抗体が、膵臓がん、肝臓がん、肺がん、胃がん、食道がん、頭頸部扁平上皮がん、前立腺がん、結腸がん、乳がん、リンパ腫、胆嚢がん、腎臓がん、多発性骨髄腫、卵巣がん、子宮頸がん又は神経膠腫などの固形腫瘍を治療するための抗腫瘍療法の一部として投与される、本発明1014〜1022のいずれかの方法。
[本発明1024]
前記抗ＣＤ39抗体が、白血病などの液性腫瘍を治療するための抗腫瘍療法の一部として投与される、本発明1014〜1023のいずれかの方法。
[本発明1025]
前記抗ＣＤ39抗体が、1つ又は複数の化学療法剤、血管新生阻害剤、腫瘍免疫療法剤及び／又は放射線照射を伴う治療法の一部として投与される、本発明1014〜1024のいずれかの方法。
[本発明1026]
前記治療法が、ＰＤ−1アンタゴニスト、ＣＴＬＡ−4アンタゴニスト、ＬＡＧ−3アンタゴニスト、ＴＩＭ−3アンタゴニスト及び／又はＴＩＧＩＴアンタゴニストなどの1つ又は複数のチェックポイント分子阻害剤（アンタゴニスト）を投与することを含む、本発明1025の方法。
[本発明1027]
前記治療法が、ＧＩＴＲアゴニスト、ＣＤ27アゴニスト、4−1ＢＢアゴニスト、ＯＸ40アゴニスト、ＣＤ137アゴニスト、ＩＣＯＳアゴニスト又はＣＤ28アゴニストなどの1つ又は複数の共刺激分子活性化剤（アゴニスト）を投与することを含む、本発明1025の方法。
[本発明1028]
前記治療法が、ＶＥＧＦＲ若しくはＶＥＧＦアンタゴニスト、ＥＧＦＲ若しくはＥＧＦアンタゴニスト、ＩＤＯ阻害剤、ＩＤＯ1阻害剤、ＨＤＡＣ阻害剤、ＰＩ3Ｋδ阻害剤、ＩＬ−15アゴニスト、ＣＸＣＲ4アンタゴニスト、ＣＸＣＬ12アンタゴニスト、ＤＮＭＴ阻害剤、インターロイキン−21、抗ＫＩＲ抗体、抗ＣＳＦ−1Ｒ抗体、抗ＣＣＲ4抗体、ＧＭＣＳＦ、抗ＰＳ抗体、抗ＣＤ30抗体−オーリスタチンＥコンジュゲート、抗ＣＤ19抗体、抗ＣＥＡ−ＩＬ−2抗体、抗ＮＹ−ＥＳＯ−1抗体、抗ＮＫＧ2Ａ抗体、ＳＴＩＮＧアゴニスト、ＴＲＬ7／8アゴニスト、ＲＩＧ−1アゴニスト及び／又はＮＲＬＰ3阻害剤、又は抗ＣＤ73抗体（ＭＥＤＩ9447など）のうちの1つ又は複数を投与することを含む、本発明1025の方法。
[本発明1029]
前記抗ＣＤ39抗体が、腫瘍ワクチン、養子細胞療法、抗腫瘍遺伝子療法、又は腫瘍溶解ウイルス療法を含む治療法の一部として投与される、本発明1014〜1024のいずれかの方法。
[本発明1030]
Ｔ細胞疲弊を予防又は解除するため及び腫瘍に対する免疫応答を増強するための方法であって、
（ｉ）所定の閾値を超える1つ又は複数のＴ細胞疲弊マーカーを発現する、ある程度の腫瘍浸潤リンパ球を有するがん患者を同定するステップ；並びに
（ｉｉ）エクトヌクレオシド三リン酸ジホスホヒドロラーゼ−1（「ＣＤ39」）及びＦｃγＲＩＩＩａに結合する抗ＣＤ39抗体を該患者に投与し、該腫瘍浸潤リンパ球上の検出可能なＣＤ39レベルを低下させ、それによってＴ細胞疲弊を解除する、ステップ
を含む、方法。
[本発明1031]
前記抗ＣＤ39抗体が、ＣＤ45＋免疫細胞上のＣＤ39の抗体媒介性標的膜動輸送を引き起こし、且つ（任意で）腫瘍血管内皮破壊からのＣＤ39の抗体媒介性標的膜動輸送を引き起こすか、又は腫瘍内の血管網を崩壊させる、本発明1030の方法。
[本発明1032]
前記抗ＣＤ39抗体が、ＩｇＧ1又はＩｇＧ3アイソタイプである、本発明1030又は1031の方法。
[本発明1033]
前記抗ＣＤ39抗体が、低フコシル化又は脱フコシル化されている、本発明1030〜1032のいずれかの方法。
[本発明1034]
前記抗ＣＤ39抗体が、ＣＤ45＋免疫細胞上のＣＤ39の抗体媒介性標的膜動輸送を引き起こす、本発明1030〜1033のいずれかの方法。
[本発明1035]
前記抗ＣＤ39抗体が、腫瘍抗原、免疫チェックポイント又は共刺激受容体に対する少なくとも1つの追加の抗原結合部位を含む二重特異性抗体であり、該追加の抗原結合部位が免疫チェックポイントに対するものである場合に該抗体はチェックポイント阻害剤として機能し、該追加の抗原結合部位が共刺激受容体に対するものである場合に該抗体は共刺激アゴニストとして機能する、本発明1030〜1034のいずれかの方法。
[本発明1036]
追加の抗原結合部位が、ＰＤ−1、ＰＤ−Ｌ1、ＣＴＬＡ−4／Ｂ7−1／Ｂ7−2、ＰＤ−Ｌ2、ＮＫＧ2Ａ、ＫＩＲ、ＬＡＧ−3、ＴＩＭ−3、ＣＤ96、ＶＩＳＴＡ、及びＴＩＧＩＴからなる群より選択されるチェックポイントタンパク質に結合する、本発明1035の方法。
[本発明1037]
追加の抗原結合部位が、Ｔ細胞上で発現上昇し且つＴ細胞疲弊に関連するチェックポイントタンパク質に結合する、本発明1036の方法。
[本発明1038]
追加の抗原結合部位が、ＭＨＣＩ分子、ＢＴＬＡ受容体、ＯＸ40、ＣＤ27、ＣＤ28、ＣＤＳ、ＩＣＡＭ−1、ＬＦＡ−1（ＣＤ11ａ／ＣＤ18）、ＩＣＯＳ（ＣＤ278）、及び4−1ＢＢ（ＣＤ137）からなる群より選択される免疫共刺激受容体に結合する、本発明1036の方法。
[本発明1039]
前記抗ＣＤ39抗体が、膵臓がん、肝臓がん、肺がん、胃がん、食道がん、頭頸部扁平上皮がん、前立腺がん、結腸がん、乳がん、リンパ腫、胆嚢がん、腎臓がん、多発性骨髄腫、卵巣がん、子宮頸がん又は神経膠腫などの固形腫瘍を治療するための抗腫瘍療法の一部として投与される、本発明1030〜1038のいずれかの方法。
[本発明1040]
前記抗ＣＤ39抗体が、白血病などの液性腫瘍を治療するための抗腫瘍療法の一部として投与される、本発明1030〜1039のいずれかの方法。
[本発明1041]
前記抗ＣＤ39抗体が、1つ又は複数の化学療法剤、血管新生阻害剤、腫瘍免疫療法剤、低体温療法及び／又は放射線照射を伴う治療法の一部として投与される、本発明1030〜1040のいずれかの方法。
[本発明1042]
前記治療法が、ＰＤ−1アンタゴニスト、ＰＤ−Ｌ1アンタゴニスト、ＣＴＬＡ−4アンタゴニスト、ＬＡＧ−3アンタゴニスト、ＴＩＭ−3アンタゴニスト及び／又はＴＩＧＩＴアンタゴニストなどの1つ又は複数のチェックポイント分子阻害剤（アンタゴニスト）を投与することを含む、本発明1041の方法。
[本発明1043]
前記治療法が、ＧＩＴＲアゴニスト、ＣＤ27アゴニスト、4−1ＢＢアゴニスト、ＯＸ40アゴニスト、ＣＤ137アゴニスト、ＩＣＯＳアゴニスト又はＣＤ28アゴニストなどの1つ又は複数の共刺激分子活性化剤（アゴニスト）を投与することを含む、本発明1041の方法。
[本発明1044]
前記治療法が、ＶＥＧＦＲ若しくはＶＥＧＦアンタゴニスト、ＥＧＦＲ若しくはＥＧＦアンタゴニスト、ＩＤＯ阻害剤、ＩＤＯ1阻害剤、ＨＤＡＣ阻害剤、ＰＩ3Ｋδ阻害剤、ＩＬ−15アゴニスト、ＣＸＣＲ4アンタゴニスト、ＣＸＣＬ12アンタゴニスト、ＤＮＭＴ阻害剤、インターロイキン−21、抗ＫＩＲ抗体、抗ＣＳＦ−1Ｒ抗体、抗ＣＣＲ4抗体、ＧＭＣＳＦ、抗ＰＳ抗体、抗ＣＤ30抗体−オーリスタチンＥコンジュゲート、抗ＣＤ19抗体、抗ＣＥＡ−ＩＬ−2抗体、抗ＮＹ−ＥＳＯ−1抗体、抗ＮＫＧ2Ａ抗体、ＳＴＩＮＧアゴニスト、ＴＲＬ7／8アゴニスト、ＲＩＧ−1アゴニスト、Ｐ2Ｘ7アンタゴニスト、抗ＣＤ73抗体（ＭＥＤＩ9447など）及び／又はアデノシンＡ2ａ受容体アンタゴニストのうちの1つ又は複数を投与することを含む、本発明1041の方法。
[本発明1045]
前記抗ＣＤ39抗体が、腫瘍ワクチン、養子細胞療法、抗腫瘍遺伝子療法、又は腫瘍溶解ウイルス療法を含む治療法の一部として投与される、本発明1030〜1040のいずれかの方法。
[本発明1046]
ステップ（ｉ）が、腫瘍浸潤リンパ球上のＣＤ39、ＰＤ−1、ＣＴＬＡ−4、ＴＩＭ−3、ＬＡＧ−3、ＣＤ160、ＢＴＬＡ、又は2Ｂ4のうちの1つ又は複数の発現上昇の程度を示す、細胞の数若しくは割合又は抗体染色の強度を検出することをさらに含む、本発明1030〜1041のいずれかの方法。
[本発明1047]
前記抗ＣＤ39抗体が、前記所定の閾値を超える1つ又は複数のＴ細胞疲弊マーカーを発現する、ある程度の腫瘍浸潤リンパ球を有する患者に投与され、該患者が、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）、結腸直腸がん、進行性黒色腫、腎細胞がん（ＲＣＣ）、乳がん（トリプルネガティブ乳がんを含む）、胃がん、食道がん、尿路上皮がん（ＵＣ）、又は肝細胞がん（ＨＣＣ）を有する、本発明1030又は1046の方法。
[本発明1048]
エクトヌクレオシド三リン酸ジホスホヒドロラーゼ−1（「ＣＤ39」）に結合し且つＦｃγＲＩＩＩａに結合する抗体の治療有効量を含み、投与されると、ＣＤ45＋免疫細胞上の検出可能なＣＤ39レベルの低下をもたらし、Ｔ細胞疲弊又はＴ細胞アネルギーを示すＴ細胞のＴ細胞機能を回復するのに効果的である、それを必要とする対象におけるＴ細胞疲弊を低減する医薬製剤。
[本発明1049]
前記抗ＣＤ39抗体が、ＣＤ45＋免疫細胞上のＣＤ39の抗体媒介性標的膜動輸送を引き起こし、且つ（任意で）腫瘍血管内皮破壊からのＣＤ39の抗体媒介性標的膜動輸送を引き起こすか、又は腫瘍内の血管網を崩壊させる、本発明1048の医薬製剤。
[本発明1050]
前記抗ＣＤ39抗体が、ＩｇＧ1又はＩｇＧ3アイソタイプである、本発明1048又は1049の医薬製剤。
[本発明1051]
前記抗ＣＤ39抗体が、低フコシル化又は脱フコシル化されている、本発明1048〜1050のいずれかの医薬製剤。
[本発明1052]
前記抗ＣＤ39抗体が、ヒト抗体又はヒト化抗体である、本発明1048〜1051のいずれかの医薬製剤。
[本発明1053]
前記抗ＣＤ39抗体が、腫瘍抗原、免疫チェックポイント又は共刺激受容体に対する少なくとも1つの追加の抗原結合部位を含む二重特異性抗体であり、該追加の抗原結合部位が免疫チェックポイントに対するものである場合に該抗体はチェックポイント阻害剤として機能し、該追加の抗原結合部位が共刺激受容体に対するものである場合に該抗体は共刺激アゴニストとして機能する、本発明1048〜1052のいずれかの医薬製剤。
[本発明1054]
前記抗ＣＤ39抗体が、固形腫瘍又は液性腫瘍を治療するための抗腫瘍療法の一部として患者に投与するために製剤化されている、本発明1048〜1053のいずれかの医薬製剤。
[本発明1055]
前記抗ＣＤ39抗体が、1つ又は複数の化学療法剤、血管新生阻害剤、及び／又は腫瘍免疫療法剤と共に製剤化されている、本発明1048〜1054のいずれかの医薬製剤。
[本発明1056]
前記抗ＣＤ39抗体が、ヒトＣＤ39への結合についてモノクローナル抗体5Ｆ2と競合する、本発明1048〜1055のいずれかの医薬製剤。
[本発明1057]
それを必要とする対象におけるＴ細胞疲弊を低減する医薬製剤であって、エクトヌクレオシド三リン酸ジホスホヒドロラーゼ−1（「ＣＤ39」）に結合し且つＦｃγＲＩＩＩａに結合する抗体の治療有効量を含み、投与されると、ＣＤ45＋免疫細胞上の検出可能なＣＤ39レベルの低下をもたらし、Ｔ細胞疲弊又はＴ細胞アネルギーを示すＴ細胞のＴ細胞機能を回復するのに効果的であり、該抗体が、
ａ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：3のＣＤＲを有する重鎖及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：4のＣＤＲを有する軽鎖、
ｂ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：5のＣＤＲを有する重鎖及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：6のＣＤＲを有する軽鎖、
ｃ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：7のＣＤＲを有する重鎖及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：8のＣＤＲを有する軽鎖、
ｄ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：9のＣＤＲを有する重鎖及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：10のＣＤＲを有する軽鎖、又は
ｅ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：11のＣＤＲを有する重鎖及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：12のＣＤＲを有する軽鎖
を含み、該重鎖及び軽鎖が、ヒトＣＤ39に特異的に結合できる抗原結合部位を有するヒト化重鎖及び軽鎖を形成するためのヒトフレームワーク配列をさらに含む、医薬製剤。
[本発明1058]
ヒトＣＤ39に特異的に結合する第1の結合部分と、腫瘍抗原、免疫チェックポイント又は共刺激受容体に特異的に結合する第2の結合部分とを含む、二重特異性抗体であって、追加の抗原結合部位が免疫チェックポイントに対するものである場合に該抗体はチェックポイント阻害剤として機能し、追加の抗原結合部位が共刺激受容体に対するものである場合に該抗体は共刺激アゴニストとして機能し、該二重特異性抗体が、ＣＤ45＋免疫細胞上のＣＤ39の抗体媒介性標的膜動輸送を引き起こし、且つ（任意で）腫瘍血管内皮破壊からのＣＤ39の抗体媒介性標的膜動輸送を引き起こすか、又は腫瘍内の血管網を崩壊させる、二重特異性抗体。
[本発明1059]
それを必要とする対象におけるＴ細胞疲弊を低減するための薬物の調製における、エクトヌクレオシド三リン酸ジホスホヒドロラーゼ−1（「ＣＤ39」）に結合する抗原結合ドメインと、ＦｃγＲＩＩＩａに結合するＦｃγＲＩＩＩａ結合部分とを含む抗ＣＤ39剤の医薬組成物の有効量の使用であって、この抗体の投与がＣＤ45＋免疫細胞上の検出可能なＣＤ39レベルの低下をもたらす、使用。
[本発明1060]
前記ＦｃγＲＩＩＩａ結合部分が、Ｆｃドメイン、ＦｃγＲＩＩＩａに結合する抗体又はその抗原結合断片、及びＦｃγＲＩＩＩａ結合ペプチドから選択される、本発明1059の使用。
[本発明1061]
前記抗原結合ドメインが、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）2、Ｆｖ又は一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である、本発明1059の使用。
[本発明1062]
前記抗ＣＤ39剤が、ＣＤ45＋免疫細胞上のＣＤ39の抗体媒介性標的膜動輸送を引き起こし、且つ（任意で）腫瘍血管内皮破壊からのＣＤ39の抗体媒介性標的膜動輸送を引き起こすか、又は腫瘍内の血管網を崩壊させる、本発明1059の使用。
[本発明1063]
前記抗ＣＤ39剤が、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：3、5、7、9又は11の可変領域と少なくとも60％同一である重鎖可変領域、及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：4、6、8、10又は12の可変領域と少なくとも60％同一である軽鎖可変領域を含む抗体又はその抗原結合断片であり、該抗体がヒトＣＤ39に特異的に結合できる、本発明1059の使用。
[本発明1064]
前記抗ＣＤ39剤が、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：3、5、7、9又は11のＣＤＲと少なくとも60％同一であるＣＤＲを有する重鎖、及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：4、6、8、10又は12のＣＤＲと少なくとも60％同一であるＣＤＲを有する軽鎖を含む抗体又はその抗原結合断片であり、該抗体がヒトＣＤ39に特異的に結合できる、本発明1059の使用。
[本発明1065]
前記抗ＣＤ39剤が、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：3のＣＤＲを有する重鎖及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：4のＣＤＲを有する軽鎖と、ヒトＣＤ39に特異的に結合できる抗原結合部位を有するヒト化重鎖及び軽鎖を形成するためのヒトフレームワーク配列とを含む抗体又はその抗原結合断片である、本発明1059の使用。
[本発明1066]
前記抗ＣＤ39剤が、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：5のＣＤＲを有する重鎖及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：6のＣＤＲを有する軽鎖と、ヒトＣＤ39に特異的に結合できる抗原結合部位を有するヒト化重鎖及び軽鎖を形成するためのヒトフレームワーク配列とを含む抗体又はその抗原結合断片である、本発明1059の使用。
[本発明1067]
前記抗ＣＤ39剤が、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：7のＣＤＲを有する重鎖及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：8のＣＤＲを有する軽鎖と、ヒトＣＤ39に特異的に結合できる抗原結合部位を有するヒト化重鎖及び軽鎖を形成するためのヒトフレームワーク配列とを含む抗体である、本発明1059の使用。
[本発明1068]
前記抗ＣＤ39剤が、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：9のＣＤＲを有する重鎖及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：10のＣＤＲを有する軽鎖と、ヒトＣＤ39に特異的に結合できる抗原結合部位を有するヒト化重鎖及び軽鎖を形成するためのヒトフレームワーク配列とを含む抗体である、本発明1059の使用。
[本発明1069]
前記抗ＣＤ39剤が、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：11のＣＤＲを有する重鎖及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：12のＣＤＲを有する軽鎖と、ヒトＣＤ39に特異的に結合できる抗原結合部位を有するヒト化重鎖及び軽鎖を形成するためのヒトフレームワーク配列とを含む抗体である、本発明1059の使用。
[本発明1070]
前記抗ＣＤ39剤が、抗腫瘍療法の一部として投与される、本発明1059の使用。
[本発明1071]
前記抗ＣＤ39剤が、抗ウイルス療法（ＨＩＶ及びＨＢＶ感染症の治療を含む）、マイコバクテリウム・ツベルクローシス（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）、及び内臓リーシュマニア症の治療などの抗感染療法の一部として投与される、本発明1059の使用。
[本発明1072]
腫瘍を有するヒト患者における抗腫瘍免疫応答を治療するための薬物の調製における、エクトヌクレオシド三リン酸ジホスホヒドロラーゼ−1（「ＣＤ39」）に結合し且つＦｃγＲＩＩＩａに結合する抗ＣＤ39抗体の使用であって、該抗体が抗体依存性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）を保持し、該抗体の該ヒト患者への投与が、腫瘍内の免疫細胞上のＣＤ39の発現の減少をもたらす、使用。
[本発明1073]
前記抗ＣＤ39抗体が、ＣＤ45＋免疫細胞上のＣＤ39の抗体媒介性標的膜動輸送を引き起こし、且つ（任意で）腫瘍血管内皮破壊からのＣＤ39の抗体媒介性標的膜動輸送を引き起こすか、又は腫瘍内の血管網を崩壊させる、本発明1072の使用。
[本発明1074]
前記抗ＣＤ39抗体が、ＩｇＧ1又はＩｇＧ3アイソタイプである、本発明1072の使用。
[本発明1075]
前記抗ＣＤ39抗体が、低フコシル化又は脱フコシル化されている、本発明1072の使用。
[本発明1076]
前記抗ＣＤ39抗体が、ヒト抗体又はヒト化抗体である、本発明1072の使用。
[本発明1077]
前記抗ＣＤ39抗体が、腫瘍抗原、免疫チェックポイント又は共刺激受容体に対する少なくとも1つの追加の抗原結合部位を含む二重特異性抗体であり、該追加の抗原結合部位が免疫チェックポイントに対するものである場合に該抗体はチェックポイント阻害剤として機能し、該追加の抗原結合部位が共刺激受容体に対するものである場合に該抗体は共刺激アゴニストとして機能する、本発明1072の使用。
[本発明1078]
前記追加の抗原結合部位が、ＰＤ−1、ＰＤ−Ｌ1、ＣＴＬＡ−4／Ｂ7−1／Ｂ7−2、ＰＤ−Ｌ2、ＮＫＧ2Ａ、ＫＩＲ、ＬＡＧ−3、ＴＩＭ−3、ＣＤ96、ＶＩＳＴＡ、及びＴＩＧＩＴからなる群より選択されるチェックポイントタンパク質に結合する、本発明1077の使用。
[本発明1079]
前記追加の抗原結合部位が、Ｔ細胞上で発現上昇し且つＴ細胞疲弊に関連するチェックポイントタンパク質に結合する、本発明1077の使用。
[本発明1080]
前記追加の抗原結合部位が、ＭＨＣＩ分子、ＢＴＬＡ受容体、ＯＸ40、ＣＤ27、ＣＤ28、ＣＤＳ、ＩＣＡＭ−1、ＬＦＡ−1（ＣＤ11ａ／ＣＤ18）、ＩＣＯＳ（ＣＤ278）、及び4−1ＢＢ（ＣＤ137）からなる群より選択される免疫共刺激受容体に結合する、本発明1077の使用。
[本発明1081]
前記抗ＣＤ39抗体が、膵臓がん、肝臓がん、肺がん、胃がん、食道がん、頭頸部扁平上皮がん、前立腺がん、結腸がん、乳がん、リンパ腫、胆嚢がん、腎臓がん、多発性骨髄腫、卵巣がん、子宮頸がん又は神経膠腫などの固形腫瘍を治療するための抗腫瘍療法の一部として投与される、本発明1072の使用。
[本発明1082]
前記抗ＣＤ39抗体が、白血病などの液性腫瘍を治療するための抗腫瘍療法の一部として投与される、本発明1072の使用。
[本発明1083]
前記抗ＣＤ39抗体が、1つ又は複数の化学療法剤、血管新生阻害剤、腫瘍免疫療法剤及び／又は放射線照射を伴う治療法の一部として投与される、本発明1072の使用。
[本発明1084]
前記治療法が、ＰＤ−1アンタゴニスト、ＣＴＬＡ−4アンタゴニスト、ＬＡＧ−3アンタゴニスト、ＴＩＭ−3アンタゴニスト及び／又はＴＩＧＩＴアンタゴニストなどの1つ又は複数のチェックポイント分子阻害剤（アンタゴニスト）を投与することを含む、本発明1083の使用。
[本発明1085]
前記治療法が、ＧＩＴＲアゴニスト、ＣＤ27アゴニスト、4−1ＢＢアゴニスト、ＯＸ40アゴニスト、ＣＤ137アゴニスト、ＩＣＯＳアゴニスト又はＣＤ28アゴニストなどの1つ又は複数の共刺激分子活性化剤（アゴニスト）を投与することを含む、本発明1083の使用。
[本発明1086]
前記治療法が、ＶＥＧＦＲ若しくはＶＥＧＦアンタゴニスト、ＥＧＦＲ若しくはＥＧＦアンタゴニスト、ＩＤＯ阻害剤、ＩＤＯ1阻害剤、ＨＤＡＣ阻害剤、ＰＩ3Ｋδ阻害剤、ＩＬ−15アゴニスト、ＣＸＣＲ4アンタゴニスト、ＣＸＣＬ12アンタゴニスト、ＤＮＭＴ阻害剤、インターロイキン−21、抗ＫＩＲ抗体、抗ＣＳＦ−1Ｒ抗体、抗ＣＣＲ4抗体、ＧＭＣＳＦ、抗ＰＳ抗体、抗ＣＤ30抗体−オーリスタチンＥコンジュゲート、抗ＣＤ19抗体、抗ＣＥＡ−ＩＬ−2抗体、抗ＮＹ−ＥＳＯ−1抗体、抗ＮＫＧ2Ａ抗体、ＳＴＩＮＧアゴニスト、ＴＲＬ7／8アゴニスト、ＲＩＧ−1アゴニスト及び／又はＮＲＬＰ3阻害剤、又は抗ＣＤ73抗体（ＭＥＤＩ9447など）のうちの1つ又は複数を投与することを含む、本発明1083の使用。
[本発明1087]
前記抗ＣＤ39抗体が、腫瘍ワクチン、養子細胞療法、抗腫瘍遺伝子療法、又は腫瘍溶解ウイルス療法を含む治療法の一部として投与される、本発明1072の使用。
[本発明1088]
Ｔ細胞疲弊を予防又は解除するため及び腫瘍に対する免疫応答を増強するための薬剤の調製における、エクトヌクレオシド三リン酸ジホスホヒドロラーゼ−1（「ＣＤ39」）及びＦｃγＲＩＩＩａに結合する抗ＣＤ39抗体の使用であって、
（ｉ）所定の閾値を超える1つ又は複数のＴ細胞疲弊マーカーを発現する、ある程度の腫瘍浸潤リンパ球を有するがん患者を同定するステップ；及び
（ｉｉ）該患者に該抗ＣＤ39抗体を投与するステップであって、該抗体が該腫瘍浸潤リンパ球上の検出可能なＣＤ39レベルを低下させ、それによってＴ細胞疲弊を解除する、ステップ
を含む、使用。
[本発明1089]
前記抗ＣＤ39抗体が、ＣＤ45＋免疫細胞上のＣＤ39の抗体媒介性標的膜動輸送を引き起こし、且つ（任意で）腫瘍血管内皮破壊からのＣＤ39の抗体媒介性標的膜動輸送を引き起こすか、又は腫瘍内の血管網を崩壊させる、本発明1088の使用。
[本発明1090]
前記抗ＣＤ39抗体が、ＩｇＧ1又はＩｇＧ3アイソタイプである、本発明1088の使用。
[本発明1091]
前記抗ＣＤ39抗体が、低フコシル化又は脱フコシル化されている、本発明1088の使用。
[本発明1092]
前記抗ＣＤ39抗体が、ＣＤ45＋免疫細胞上のＣＤ39の抗体媒介性標的膜動輸送を引き起こす、本発明1088の使用。
[本発明1093]
前記抗ＣＤ39抗体が、腫瘍抗原、免疫チェックポイント又は共刺激受容体に対する少なくとも1つの追加の抗原結合部位を含む二重特異性抗体であり、該追加の抗原結合部位が免疫チェックポイントに対するものである場合に該抗体はチェックポイント阻害剤として機能し、該追加の抗原結合部位が共刺激受容体に対するものである場合に該抗体は共刺激アゴニストとして機能する、本発明1088の使用。
[本発明1094]
追加の抗原結合部位が、ＰＤ−1、ＰＤ−Ｌ1、ＣＴＬＡ−4／Ｂ7−1／Ｂ7−2、ＰＤ−Ｌ2、ＮＫＧ2Ａ、ＫＩＲ、ＬＡＧ−3、ＴＩＭ−3、ＣＤ96、ＶＩＳＴＡ、及びＴＩＧＩＴからなる群より選択されるチェックポイントタンパク質に結合する、本発明1093の使用。
[本発明1095]
追加の抗原結合部位が、Ｔ細胞上で発現上昇し且つＴ細胞疲弊に関連するチェックポイントタンパク質に結合する、本発明1094の使用。
[本発明1096]
追加の抗原結合部位が、ＭＨＣＩ分子、ＢＴＬＡ受容体、ＯＸ40、ＣＤ27、ＣＤ28、ＣＤＳ、ＩＣＡＭ−1、ＬＦＡ−1（ＣＤ11ａ／ＣＤ18）、ＩＣＯＳ（ＣＤ278）、及び4−1ＢＢ（ＣＤ137）からなる群より選択される免疫共刺激受容体に結合する、本発明1094の使用。
[本発明1097]
前記抗ＣＤ39抗体が、膵臓がん、肝臓がん、肺がん、胃がん、食道がん、頭頸部扁平上皮がん、前立腺がん、結腸がん、乳がん、リンパ腫、胆嚢がん、腎臓がん、多発性骨髄腫、卵巣がん、子宮頸がん又は神経膠腫などの固形腫瘍を治療するための抗腫瘍療法の一部として投与される、本発明1088の使用。
[本発明1098]
前記抗ＣＤ39抗体が、白血病などの液性腫瘍を治療するための抗腫瘍療法の一部として投与される、本発明1088の使用。
[本発明1099]
前記抗ＣＤ39抗体が、1つ又は複数の化学療法剤、血管新生阻害剤、腫瘍免疫療法剤、低体温療法及び／又は放射線照射を伴う治療法の一部として投与される、本発明1088の使用。
[本発明1100]
前記治療法が、ＰＤ−1アンタゴニスト、ＰＤ−Ｌ1アンタゴニスト、ＣＴＬＡ−4アンタゴニスト、ＬＡＧ−3アンタゴニスト、ＴＩＭ−3アンタゴニスト及び／又はＴＩＧＩＴアンタゴニストなどの1つ又は複数のチェックポイント分子阻害剤（アンタゴニスト）を投与することを含む、本発明1099の使用。
[本発明1101]
前記治療法が、ＧＩＴＲアゴニスト、ＣＤ27アゴニスト、4−1ＢＢアゴニスト、ＯＸ40アゴニスト、ＣＤ137アゴニスト、ＩＣＯＳアゴニスト又はＣＤ28アゴニストなどの1つ又は複数の共刺激分子活性化剤（アゴニスト）を投与することを含む、本発明1099の使用。
[本発明1102]
前記治療法が、ＶＥＧＦＲ若しくはＶＥＧＦアンタゴニスト、ＥＧＦＲ若しくはＥＧＦアンタゴニスト、ＩＤＯ阻害剤、ＩＤＯ1阻害剤、ＨＤＡＣ阻害剤、ＰＩ3Ｋδ阻害剤、ＩＬ−15アゴニスト、ＣＸＣＲ4アンタゴニスト、ＣＸＣＬ12アンタゴニスト、ＤＮＭＴ阻害剤、インターロイキン−21、抗ＫＩＲ抗体、抗ＣＳＦ−1Ｒ抗体、抗ＣＣＲ4抗体、ＧＭＣＳＦ、抗ＰＳ抗体、抗ＣＤ30抗体−オーリスタチンＥコンジュゲート、抗ＣＤ19抗体、抗ＣＥＡ−ＩＬ−2抗体、抗ＮＹ−ＥＳＯ−1抗体、抗ＮＫＧ2Ａ抗体、ＳＴＩＮＧアゴニスト、ＴＲＬ7／8アゴニスト、ＲＩＧ−1アゴニスト、Ｐ2Ｘ7アンタゴニスト、抗ＣＤ73抗体（ＭＥＤＩ9447など）及び／又はアデノシンＡ2ａ受容体アンタゴニストのうちの1つ又は複数を投与することを含む、本発明1099の使用。
[本発明1103]
前記抗ＣＤ39抗体が、腫瘍ワクチン、養子細胞療法、抗腫瘍遺伝子療法、又は腫瘍溶解ウイルス療法を含む治療法の一部として投与される、本発明1088の使用。
[本発明1104]
ステップ（ｉ）が、腫瘍浸潤リンパ球上のＣＤ39、ＰＤ−1、ＣＴＬＡ−4、ＴＩＭ−3、ＬＡＧ−3、ＣＤ160、ＢＴＬＡ、又は2Ｂ4のうちの1つ又は複数の発現上昇の程度を示す、細胞の数若しくは割合又は抗体染色の強度を検出することをさらに含む、本発明1088の使用。
[本発明1105]
前記抗ＣＤ39抗体が、所定の閾値を超える1つ又は複数のＴ細胞疲弊マーカーを発現する、ある程度の腫瘍浸潤リンパ球を有する患者に投与され、該患者が、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）、結腸直腸がん、進行性黒色腫、腎細胞がん（ＲＣＣ）、乳がん（トリプルネガティブ乳がんを含む）、胃がん、食道がん、尿路上皮がん（ＵＣ）、又は肝細胞がん（ＨＣＣ）を有する、本発明1088の使用。
[本発明1106]
前記抗原結合ドメインが、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）2、Ｆｖ又は一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である、本発明1001の方法。
[本発明1107]
前記抗ＣＤ39剤が、ＣＤ45＋免疫細胞上のＣＤ39の抗体媒介性標的膜動輸送を引き起こし、且つ（任意で）腫瘍血管内皮破壊からのＣＤ39の抗体媒介性標的膜動輸送を引き起こすか、又は腫瘍内の血管網を崩壊させる、本発明1001の方法。
[本発明1108]
前記抗ＣＤ39剤が、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：3、5、7、9又は11の可変領域と少なくとも60％同一である重鎖可変領域、及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：4、6、8、10又は12の可変領域と少なくとも60％同一である軽鎖可変領域を含む抗体又はその抗原結合断片であり、該抗体がヒトＣＤ39に特異的に結合できる、本発明1001の方法。
[本発明1109]
前記抗ＣＤ39剤が、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：3、5、7、9又は11のＣＤＲと少なくとも60％同一であるＣＤＲを有する重鎖、及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：4、6、8、10又は12のＣＤＲと少なくとも60％同一であるＣＤＲを有する軽鎖を含む抗体又はその抗原結合断片であり、該抗体がヒトＣＤ39に特異的に結合できる、本発明1001の方法。
[本発明1110]
前記抗ＣＤ39剤が、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：3のＣＤＲを有する重鎖及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：4のＣＤＲを有する軽鎖と、ヒトＣＤ39に特異的に結合できる抗原結合部位を有するヒト化重鎖及び軽鎖を形成するためのヒトフレームワーク配列とを含む抗体又はその抗原結合断片である、本発明1001の方法。
[本発明1111]
前記抗ＣＤ39剤が、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：5のＣＤＲを有する重鎖及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：6のＣＤＲを有する軽鎖と、ヒトＣＤ39に特異的に結合できる抗原結合部位を有するヒト化重鎖及び軽鎖を形成するためのヒトフレームワーク配列とを含む抗体又はその抗原結合断片である、本発明1001の方法。
[本発明1112]
前記抗ＣＤ39剤が、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：7のＣＤＲを有する重鎖及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：8のＣＤＲを有する軽鎖と、ヒトＣＤ39に特異的に結合できる抗原結合部位を有するヒト化重鎖及び軽鎖を形成するためのヒトフレームワーク配列とを含む抗体である、本発明1001の方法。
[本発明1113]
前記抗ＣＤ39剤が、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：9のＣＤＲを有する重鎖及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：10のＣＤＲを有する軽鎖と、ヒトＣＤ39に特異的に結合できる抗原結合部位を有するヒト化重鎖及び軽鎖を形成するためのヒトフレームワーク配列とを含む抗体である、本発明1001の方法。
[本発明1114]
前記抗ＣＤ39剤が、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：11のＣＤＲを有する重鎖及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：12のＣＤＲを有する軽鎖と、ヒトＣＤ39に特異的に結合できる抗原結合部位を有するヒト化重鎖及び軽鎖を形成するためのヒトフレームワーク配列とを含む抗体である、本発明1001の方法。
[本発明1115]
前記抗ＣＤ39剤が、抗腫瘍療法の一部として投与される、本発明1001の方法。
[本発明1116]
前記抗ＣＤ39剤が、抗ウイルス療法（ＨＩＶ及びＨＢＶ感染症の治療を含む）、マイコバクテリウム・ツベルクローシス（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）、及び内臓リーシュマニア症の治療などの抗感染療法の一部として投与される、本発明1001の方法。
[本発明1117]
前記抗ＣＤ39抗体が、ＩｇＧ1又はＩｇＧ3アイソタイプである、本発明1014の方法。
[本発明1118]
前記抗ＣＤ39抗体が、低フコシル化又は脱フコシル化されている、本発明1014の方法。
[本発明1119]
前記抗ＣＤ39抗体が、ヒト抗体又はヒト化抗体である、本発明1014の方法。
[本発明1120]
前記抗ＣＤ39抗体が、腫瘍抗原、免疫チェックポイント又は共刺激受容体に対する少なくとも1つの追加の抗原結合部位を含む二重特異性抗体であり、該追加の抗原結合部位が免疫チェックポイントに対するものである場合に該抗体はチェックポイント阻害剤として機能し、該追加の抗原結合部位が共刺激受容体に対するものである場合に該抗体は共刺激アゴニストとして機能する、本発明1014の方法。
[本発明1121]
前記追加の抗原結合部位が、ＰＤ−1、ＰＤ−Ｌ1、ＣＴＬＡ−4／Ｂ7−1／Ｂ7−2、ＰＤ−Ｌ2、ＮＫＧ2Ａ、ＫＩＲ、ＬＡＧ−3、ＴＩＭ−3、ＣＤ96、ＶＩＳＴＡ、及びＴＩＧＩＴからなる群より選択されるチェックポイントタンパク質に結合する、本発明1120の方法。
[本発明1122]
前記追加の抗原結合部位が、Ｔ細胞上で発現上昇し且つＴ細胞疲弊に関連するチェックポイントタンパク質に結合する、本発明1120の方法。
[本発明1123]
前記追加の抗原結合部位が、ＭＨＣＩ分子、ＢＴＬＡ受容体、ＯＸ40、ＣＤ27、ＣＤ28、ＣＤＳ、ＩＣＡＭ−1、ＬＦＡ−1（ＣＤ11ａ／ＣＤ18）、ＩＣＯＳ（ＣＤ278）、及び4−1ＢＢ（ＣＤ137）からなる群より選択される免疫共刺激受容体に結合する、本発明1120の方法。
[本発明1124]
前記抗ＣＤ39抗体が、膵臓がん、肝臓がん、肺がん、胃がん、食道がん、頭頸部扁平上皮がん、前立腺がん、結腸がん、乳がん、リンパ腫、胆嚢がん、腎臓がん、多発性骨髄腫、卵巣がん、子宮頸がん又は神経膠腫などの固形腫瘍を治療するための抗腫瘍療法の一部として投与される、本発明1014の方法。
[本発明1125]
前記抗ＣＤ39抗体が、白血病などの液性腫瘍を治療するための抗腫瘍療法の一部として投与される、本発明1014の方法。
[本発明1126]
前記抗ＣＤ39抗体が、1つ又は複数の化学療法剤、血管新生阻害剤、腫瘍免疫療法剤及び／又は放射線照射を伴う治療法の一部として投与される、本発明1014の方法。
[本発明1127]
前記治療法が、ＰＤ−1アンタゴニスト、ＣＴＬＡ−4アンタゴニスト、ＬＡＧ−3アンタゴニスト、ＴＩＭ−3アンタゴニスト及び／又はＴＩＧＩＴアンタゴニストなどの1つ又は複数のチェックポイント分子阻害剤（アンタゴニスト）を投与することを含む、本発明1126の方法。
[本発明1128]
前記治療法が、ＧＩＴＲアゴニスト、ＣＤ27アゴニスト、4−1ＢＢアゴニスト、ＯＸ40アゴニスト、ＣＤ137アゴニスト、ＩＣＯＳアゴニスト又はＣＤ28アゴニストなどの1つ又は複数の共刺激分子活性化剤（アゴニスト）を投与することを含む、本発明1126の方法。
[本発明1129]
前記治療法が、ＶＥＧＦＲ若しくはＶＥＧＦアンタゴニスト、ＥＧＦＲ若しくはＥＧＦアンタゴニスト、ＩＤＯ阻害剤、ＩＤＯ1阻害剤、ＨＤＡＣ阻害剤、ＰＩ3Ｋδ阻害剤、ＩＬ−15アゴニスト、ＣＸＣＲ4アンタゴニスト、ＣＸＣＬ12アンタゴニスト、ＤＮＭＴ阻害剤、インターロイキン−21、抗ＫＩＲ抗体、抗ＣＳＦ−1Ｒ抗体、抗ＣＣＲ4抗体、ＧＭＣＳＦ、抗ＰＳ抗体、抗ＣＤ30抗体−オーリスタチンＥコンジュゲート、抗ＣＤ19抗体、抗ＣＥＡ−ＩＬ−2抗体、抗ＮＹ−ＥＳＯ−1抗体、抗ＮＫＧ2Ａ抗体、ＳＴＩＮＧアゴニスト、ＴＲＬ7／8アゴニスト、ＲＩＧ−1アゴニスト及び／又はＮＲＬＰ3阻害剤、又は抗ＣＤ73抗体（ＭＥＤＩ9447など）のうちの1つ又は複数を投与することを含む、本発明1126の方法。
[本発明1130]
前記抗ＣＤ39抗体が、腫瘍ワクチン、養子細胞療法、抗腫瘍遺伝子療法、又は腫瘍溶解ウイルス療法を含む治療法の一部として投与される、本発明1014の方法。
[本発明1131]
前記抗ＣＤ39抗体が、ＩｇＧ1又はＩｇＧ3アイソタイプである、本発明1030の方法。
[本発明1132]
前記抗ＣＤ39抗体が、低フコシル化又は脱フコシル化されている、本発明1030の方法。
[本発明1133]
前記抗ＣＤ39抗体が、ＣＤ45＋免疫細胞上のＣＤ39の抗体媒介性標的膜動輸送を引き起こす、本発明1030の方法。
[本発明1134]
前記抗ＣＤ39抗体が、腫瘍抗原、免疫チェックポイント又は共刺激受容体に対する少なくとも1つの追加の抗原結合部位を含む二重特異性抗体であり、該追加の抗原結合部位が免疫チェックポイントに対するものである場合に該抗体はチェックポイント阻害剤として機能し、該追加の抗原結合部位が共刺激受容体に対するものである場合に該抗体は共刺激アゴニストとして機能する、本発明1030の方法。
[本発明1135]
追加の抗原結合部位が、ＰＤ−1、ＰＤ−Ｌ1、ＣＴＬＡ−4／Ｂ7−1／Ｂ7−2、ＰＤ−Ｌ2、ＮＫＧ2Ａ、ＫＩＲ、ＬＡＧ−3、ＴＩＭ−3、ＣＤ96、ＶＩＳＴＡ、及びＴＩＧＩＴからなる群より選択されるチェックポイントタンパク質に結合する、本発明1134の方法。
[本発明1136]
追加の抗原結合部位が、Ｔ細胞上で発現上昇し且つＴ細胞疲弊に関連するチェックポイントタンパク質に結合する、本発明1135の方法。
[本発明1137]
追加の抗原結合部位が、ＭＨＣＩ分子、ＢＴＬＡ受容体、ＯＸ40、ＣＤ27、ＣＤ28、ＣＤＳ、ＩＣＡＭ−1、ＬＦＡ−1（ＣＤ11ａ／ＣＤ18）、ＩＣＯＳ（ＣＤ278）、及び4−1ＢＢ（ＣＤ137）からなる群より選択される免疫共刺激受容体に結合する、本発明1135の方法。
[本発明1138]
前記抗ＣＤ39抗体が、膵臓がん、肝臓がん、肺がん、胃がん、食道がん、頭頸部扁平上皮がん、前立腺がん、結腸がん、乳がん、リンパ腫、胆嚢がん、腎臓がん、多発性骨髄腫、卵巣がん、子宮頸がん又は神経膠腫などの固形腫瘍を治療するための抗腫瘍療法の一部として投与される、本発明1030の方法。
[本発明1139]
前記抗ＣＤ39抗体が、白血病などの液性腫瘍を治療するための抗腫瘍療法の一部として投与される、本発明1030の方法。
[本発明1140]
前記抗ＣＤ39抗体が、1つ又は複数の化学療法剤、血管新生阻害剤、腫瘍免疫療法剤、低体温療法及び／又は放射線照射を伴う治療法の一部として投与される、本発明1030の方法。
[本発明1141]
前記治療法が、ＰＤ−1アンタゴニスト、ＰＤ−Ｌ1アンタゴニスト、ＣＴＬＡ−4アンタゴニスト、ＬＡＧ−3アンタゴニスト、ＴＩＭ−3アンタゴニスト及び／又はＴＩＧＩＴアンタゴニストなどの1つ又は複数のチェックポイント分子阻害剤（アンタゴニスト）を投与することを含む、本発明1140の方法。
[本発明1142]
前記治療法が、ＧＩＴＲアゴニスト、ＣＤ27アゴニスト、4−1ＢＢアゴニスト、ＯＸ40アゴニスト、ＣＤ137アゴニスト、ＩＣＯＳアゴニスト又はＣＤ28アゴニストなどの1つ又は複数の共刺激分子活性化剤（アゴニスト）を投与することを含む、本発明1140の方法。
[本発明1143]
前記治療法が、ＶＥＧＦＲ若しくはＶＥＧＦアンタゴニスト、ＥＧＦＲ若しくはＥＧＦアンタゴニスト、ＩＤＯ阻害剤、ＩＤＯ1阻害剤、ＨＤＡＣ阻害剤、ＰＩ3Ｋδ阻害剤、ＩＬ−15アゴニスト、ＣＸＣＲ4アンタゴニスト、ＣＸＣＬ12アンタゴニスト、ＤＮＭＴ阻害剤、インターロイキン−21、抗ＫＩＲ抗体、抗ＣＳＦ−1Ｒ抗体、抗ＣＣＲ4抗体、ＧＭＣＳＦ、抗ＰＳ抗体、抗ＣＤ30抗体−オーリスタチンＥコンジュゲート、抗ＣＤ19抗体、抗ＣＥＡ−ＩＬ−2抗体、抗ＮＹ−ＥＳＯ−1抗体、抗ＮＫＧ2Ａ抗体、ＳＴＩＮＧアゴニスト、ＴＲＬ7／8アゴニスト、ＲＩＧ−1アゴニスト、Ｐ2Ｘ7アンタゴニスト、抗ＣＤ73抗体（ＭＥＤＩ9447など）及び／又はアデノシンＡ2ａ受容体アンタゴニストのうちの1つ又は複数を投与することを含む、本発明1140の方法。
[本発明1144]
前記抗ＣＤ39抗体が、腫瘍ワクチン、養子細胞療法、抗腫瘍遺伝子療法、又は腫瘍溶解ウイルス療法を含む治療法の一部として投与される、本発明1030の方法。
[本発明1145]
ステップ（ｉ）が、腫瘍浸潤リンパ球上のＣＤ39、ＰＤ−1、ＣＴＬＡ−4、ＴＩＭ−3、ＬＡＧ−3、ＣＤ160、ＢＴＬＡ、又は2Ｂ4のうちの1つ又は複数の発現上昇の程度を示す、細胞の数若しくは割合又は抗体染色の強度を検出することをさらに含む、本発明1030の方法。
[本発明1146]
前記抗ＣＤ39抗体が、所定の閾値を超える1つ又は複数のＴ細胞疲弊マーカーを発現する、ある程度の腫瘍浸潤リンパ球を有する患者に投与され、該患者が、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）、結腸直腸がん、進行性黒色腫、腎細胞がん（ＲＣＣ）、乳がん（トリプルネガティブ乳がんを含む）、胃がん、食道がん、尿路上皮がん（ＵＣ）、又は肝細胞がん（ＨＣＣ）を有する、本発明1030の方法。
[本発明1147]
前記抗ＣＤ39抗体が、ＩｇＧ1又はＩｇＧ3アイソタイプである、本発明1048の医薬製剤。
[本発明1148]
前記抗ＣＤ39抗体が、低フコシル化又は脱フコシル化されている、本発明1048の医薬製剤。
[本発明1149]
前記抗ＣＤ39抗体が、ヒト抗体又はヒト化抗体である、本発明1048の医薬製剤。
[本発明1150]
前記抗ＣＤ39抗体が、腫瘍抗原、免疫チェックポイント又は共刺激受容体に対する少なくとも1つの追加の抗原結合部位を含む二重特異性抗体であり、該追加の抗原結合部位が免疫チェックポイントに対するものである場合に該抗体はチェックポイント阻害剤として機能し、該追加の抗原結合部位が共刺激受容体に対するものである場合に該抗体は共刺激アゴニストとして機能する、本発明1048の医薬製剤。
[本発明1151]
前記抗ＣＤ39抗体が、固形腫瘍又は液性腫瘍を治療するための抗腫瘍療法の一部として患者に投与するために製剤化されている、本発明1048の医薬製剤。
[本発明1152]
前記抗ＣＤ39抗体が、1つ又は複数の化学療法剤、血管新生阻害剤、及び／又は腫瘍免疫療法剤と共に製剤化されている、本発明1048の医薬製剤。
[本発明1153]
前記抗ＣＤ39抗体が、ヒトＣＤ39への結合についてモノクローナル抗体5Ｆ2と競合する、本発明1048の医薬製剤。
【国際調査報告】
2021527138.tif 000128
2021527138.tif 000129
2021527138.tif 000130
2021527138.tif 000131