(57)【要約】本発明は、トキンソウ抽出物又はその分画物を有効成分として含む組成物に関する。本発明の組成物は、毛髪の生成及び成長を促進するので、脱毛予防、改善、治療に優れた効果を示すだけでなく、発毛促進のために使用することができる。
2021521264.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
トキンソウ抽出物又はその分画物を含む脱毛予防又は治療用薬剤学的組成物。
【請求項２】
トキンソウ抽出物は、水、炭素数１〜４のアルコール、又はこれらの混合溶媒抽出物であることを特徴とする請求項１に記載の薬剤学的組成物。
【請求項３】
トキンソウ抽出物は、トキンソウメタノール又はエタノール抽出物であることを特徴とする請求項１に記載の薬剤学的組成物。
【請求項４】
トキンソウ抽出物は、トキンソウ１０〜９０重量％メタノール水溶液抽出物又はトキンソウ１０〜９０重量％エタノール水溶液抽出物であることを特徴とする請求項３に記載の薬剤学的組成物。
【請求項５】
トキンソウ分画物は、ヘキサン、ジクロロメタンおよび酢酸でなる群から選択されるいずれか一つ以上の分画溶媒の分画物であることを特徴とする請求項１に記載の薬剤学的組成物。
【請求項６】
トキンソウ分画物は、トキンソウジクロロメタン分画溶媒の分画物であることを特徴とする請求項５に記載の薬剤学的組成物。
【請求項７】
トキンソウは、トキンソウの全草であることを特徴とする請求項１に記載の薬剤学的組成物。
【請求項８】
脱毛は、栄養障害性脱毛、内分泌性脱毛、血管障害性脱毛、壮年性脱毛、結髪性脱毛、円形脱毛、神経性脱毛、非剛性脱毛、トリコチロマニア、悪性脱毛、女性型脱毛、男性型脱毛、アンドロゲン性脱毛、休止期脱毛、頭部白癬、前頭脱毛、減耗症、遺伝性寡毛症、全身薬剤性脱毛、機械的脱毛、外傷性脱毛、圧迫性脱毛、成長期脱毛、非剛性脱毛、毎毒性脱毛、脂漏性脱毛、症候性脱毛、瘢痕性脱毛及び先天性脱毛からなる群から選択される１つ以上であることを特徴とする請求項１に記載の薬剤学的組成物。
【請求項９】
薬剤学的組成物は、エアロゾル剤、軟膏、液剤、ローション剤、パッチ剤、塗布用粉末、オイル、クリームおよびゲルからなる群から選択されるいずれか一つの剤形であることを特徴とする請求項１に記載の薬剤学的組成物。
【請求項１０】
トキンソウ抽出物又はその分画物を含む脱毛予防又は改善用食品組成物。
【請求項１１】
トキンソウ抽出物又はその分画物を含む脱毛予防又は改善用化粧料組成物。
【請求項１２】
トキンソウ抽出物又はその分画物を含む脱毛予防又は改善用医薬部外品組成物。
【請求項１３】
トキンソウ抽出物又はその分画物の治療学的に有効量をこれを必要とする個体に投与する段階を含む脱毛予防又は治療方法。
【請求項１４】
脱毛予防又は治療に使用するためのトキンソウ抽出物又はその分画物を含む組成物。
【請求項１５】
脱毛予防又は治療用薬剤を製造するためのトキンソウ抽出物又はその分画物を含む組成物の用途。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、脱毛予防、改善、又は治療用組成物、発毛促進用組成物、並びにその用途に関する。
【背景技術】
【０００２】
脱毛は、先天的な要因（遺伝的要因）と後天的な要因（環境、食習慣、自己免疫疾患）により有病率の高い疾患の一つである。全世界的に脱毛人口は、１億４千万人以上ののぼり、全世界人口の１４％が脱毛患者である。韓国内の脱毛人口は、年々増加して１０００万人に達すると集計されており、特に外観に最も敏感な時期である２０〜３０代の脱毛患者の割合が４８．５％と最も多い年齢層である。
【０００３】
不規則な生活習慣やストレス、男性ホルモン、老化、遺伝及び栄養の不均衡により脱毛が発症し、軟毛化現象によって髪が細く、ハリコシが無くなってしまい、成長期が短縮され、休止期又は退行期に毛髪が脱落し、毛包の萎縮によって毛包に栄養供給が行き届かず、毛包の機能が喪失され、最終的には脱毛が進行するようになる。
【０００４】
脱毛症の治療法においても、まだ明確な効果を奏する治療法がなく、東医宝鑑では、神応養真丹など脱毛に関するいくつかの服用処方があり、胡麻油（ゴマ）などを脱毛部位にマッサージしたり、特定の漢方処方を酒浸して塗ったりする方法と、特定のツボを刺激する方法などがあるが、効果において、個人差が大きいとされている。
【０００５】
従来の脱毛症の治療方法としては、ホルモン説に関連して、女性ホルモンを主宰とした製剤があるが、皮膚炎が発生したり、ホルモン投与による副作用発生したりするなどの報告があり、現在は使用中止となっている。最近、使われている代表的な育毛剤としては、本来は血液循環を促進させる用途で開発され使われていたものだが、これを使用した患者の間で副作用が見られ、その副作用として発毛に効果が有るということが知られ、それ以来、発毛用原料としてアメリカ食品医薬品局（ＦＤＡ）で承認を受け、発毛治療剤として使用されている米国特許第３，３８２，２４７号のミノキシジル（６−Ａｍｉｎｏ−１，２−ｄｉｈｙｄｒｏ−１−ｈｙｄｒｏｘｙ−２−ｉｍｉｎｏ−４−ｐｈｅｎｏｘｙｐｙｒｉｍｉｄｉｎｅ）および米国特許第５，２１５，８９４号で言及されたメルク社のフィナステリド（ｆｉｎａｓｔｅｒｉｄｅ）がある。
【０００６】
しかし、ミノキシジルとフィナステリドは、５―アルファ還元酵素阻害剤を通じて脱毛治療剤として広く使用されているが、うつ病及び性機能障害などの副作用があり、長期間服用する必要があり、治療を中断した際、再び脱毛が始まるという副作用及び毒性に関する報告書が発表されている。このように、現在市販されている脱毛治療剤は、効果が不十分であったり、長期間服用しなければならなかったりと不都合があり、毒性と副作用が報告されたことによって、外科的な手術方法を探す患者も年々増加している。
【０００７】
したがって、近来、長期間服用しても毒性が少なく、副作用を最小化する天然物薬剤から抽出し、分離精製された脱毛治療剤の研究が活発に行われている。
【０００８】
一方、トキンソウ（Ｃｅｎｔｉｐｅｄａ  ｍｉｎｉｍａ）は、顕花植物門、モクレン綱、キク目、キク科トキンソウ属の一年生植物であって、韓国、日本、中国、インド、オーストラリア、シベリア東部、北アメリカなどに分布している。中国では、民族医薬として鼻炎、副鼻腔炎、鎮痛、腫れの減少、抗がん、肝臓保護、神経保護などの効能が知られている。また、葉と茎をそのまま擦って鼻の穴に刺して、一晩過ごせば、慢性マラリアに効
果があるとして知られている。インドでも眼、鼻、歯の痛みに使用する。しかし、発毛効果又は脱毛防止、及び毛髪成長の効能については知られていない。
大韓民国登録特許第１０−１８１０１３９号
大韓民国登録特許第１０−１７９７６６７号
米国特許第５，２１５，８９４号
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明の目的は、脱毛予防又は治療用薬剤学的組成物を提供するものである。
本発明のもう一つの目的は、脱毛予防又は改善用食品組成物を提供するものである。
本発明のもう一つの目的は、脱毛予防又は改善用化粧料組成物を提供するものである。
本発明のもう一つの目的は、脱毛予防又は改善用医薬部外品組成物を提供するものである。
本発明のもう一つの目的は、発毛促進用組成物を提供するものである。
本発明のもう一つの目的は、脱毛治療方法を提供するものである。
本発明のもう一つの目的は、脱毛治療のためのさまざまな用途を提供するものである。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
前記目的を達成するために、本発明者らは、従来の脱毛治療剤及び発毛剤を代替できる新たな物質に関する研究を続けていたところ、トキンソウ抽出物および／又はその分画物が脱毛予防、治療、および改善に優れた効果を示し、発毛を促進する効果があることを確認し、本発明を完成するに至った。
【００１１】
休止期（ｔｅｌｏｇｅｎ）又は退行期（ｃａｔａｇｅｎ）の毛包は、本発明に係る組成物の投与により、成長期（ａｎａｇｅｎ）に入ることができる。成長期毛包の最大の特徴は、毛包の一番下にある毛球であって、この毛球は、皮下脂肪層の下まで位置し、毛包の長さが最も長く、増殖性の高い未分化細胞で包まれている。成長期に、毛包数が多くなると、皮膚は黒く変わり、皮膚の厚みは、最も厚くなる。毛包の成長期は発育開始初期から、例えば、約２週間程度まで持続される。
【００１２】
本発明は、トキンソウ抽出物又はその分画物を含む脱毛予防又は治療用薬剤学的組成物を提供する。
【００１３】
本発明において、トキンソウは、Ｃｅｎｔｉｐｅｄａ  ｍｉｎｉｍａの学名を持ち、花のついた全草をハナヒリグサとも呼ぶ。本発明において、トキンソウの入手方法において制限はなく、栽培して使用したり、市販されているものを購入して使用することもできる。本発明において、トキンソウは生のトキンソウ、粉砕物、乾燥物、乾燥粉砕物、発酵物、抽出物、および／又は区画物であってもよい。具体的には、本発明に係る組成物において、トキンソウはトキンソウ抽出物又はその分画物である。本発明において、トキンソウは葉、花びら、根、茎、果実、又はこれらの組み合わせから選択されるいずれか一つ以上から抽出することができ、例えば、トキンソウの全草本から抽出することができ、草本の地上部、根部の一部、又は全部を使用することができる。本発明の具体的な実施例において、トキンソウは、全草を使用することができ、若しくはトキンソウの花が付いた全草を使用することができる。
【００１４】
本発明において、抽出物（ｅｘｔｒａｃｔ）は、抽出方法、抽出溶媒、抽出された成分、又は抽出物の形態を問わず、天然物から有効成分などを抽出することによって得られた物質を全て含むものであるが、また、天然物の成分を抽出して得られた物質を抽出した後、他の方法で加工又は処理して得られる物質を全部含む広範囲な概念である。前記「加工又は処理」は、例えば、抽出物を発酵又は酵素処理するものをさらに含むことができる。
【００１５】
したがって、本願において、抽出物は、抽出物のみならずその分画物を含むことができる。また、前記抽出物又はその分画物の調整剤物や精製物、又はこれらの希釈剤、濃縮物、乾燥物、発酵物、又はこれらの混合物など、トキンソウから形成可能なすべての剤形の抽出物を含むことができる。
【００１６】
本発明において、抽出物は、この分野で公知された一般的な製造方法を使用して製造することができ、特に制限されない。例えば、超音波抽出法、超臨界抽出法、減圧抽出法、還流抽出法、熱水抽出法、高温加圧抽出法、超高圧抽出法、酵素抽出法、溶媒抽出法、冷浸抽出法、水蒸気蒸留法、溶出法、圧搾法、加熱抽出法、ソックスレー抽出法又は抽出溶媒を用いて公知の方法によって製造する方法であってもよいが、これらに限定されるものではない。
【００１７】
本発明において、抽出物は水、有機溶媒又はこれらの混合物を抽出溶媒として製造することができる。前記水は、例えば、蒸留水、精製水、無菌水を挙げることができるが、これらに限定されるものではない。前記有機溶媒は、例えば、アルコール、グリセリン、ブチレングリコール、プロピレングリコール、メチルアセテート、エチルアセテート、アセトン、ベンゼン、ヘキサン、ジエチルエーテル及びジクロロメタンが挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００１８】
本発明において、抽出物は、好ましくは水、炭素数１〜６のアルコール、アセトン、エーテル、ベンゼン、クロロホルム、酢酸エチル、メチレンクロライド、ヘキサン、シクロヘキサン、およびこれらの混合物からなる群から選択された溶媒を抽出溶媒として抽出されたものであってもよい。前記炭素数１〜６のアルコールは、好ましくは、炭素数１〜４のアルコールであってもよい。好ましくは、水、炭素数１〜４のアルコール、又はこれらの混合溶媒であってもよい。例えば、メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、ブタノール、イソブタノール等であってもよい。前記炭素数１〜６のアルコールは、好ましくは、アルコール水溶液であってもよい。例えば、１０％〜９０重量％であることができ、１５％〜８５重量％、２０〜８０重量％、２１〜７５重量％、２２〜７３重量％、２３〜７０重量％、２５〜６５重量％、２５〜６０重量％、２５〜５５重量％、２５〜５０重量％、２５〜４５重量％、又は２５〜４０重量％であることができる。より低い含量でエタノール又はメタノールなどのアルコールを含むことにより、生産単価の面で点数を削減できるばかりでなく、投与対象によって有害で、且つ刺激となり得る抽出溶媒としてのアルコール成分を最小化し、人体などの適用に有利な長所を有する。また、前記のような長所とともに脱毛予防、治療、および改善に十分に優れた効果を示す。
【００１９】
本発明の具体的な実施例において、トキンソウ抽出物は、メタノールを抽出溶媒として抽出したものであってもよい。本発明の具体的な実施例において、トキンソウ抽出物は、約３０重量％エタノール水溶液を抽出溶媒として抽出したものであってもよい。本発明の具体的な実施例において、トキンソウ抽出物は、約７０重量％エタノール水溶液を抽出溶媒として抽出されたものであってもよい。
【００２０】
本発明の具体的な実施例において、トキンソウ抽出物は、エタノールを抽出溶媒として抽出されたものであってもよい。本発明の具体的な実施例において、トキンソウ抽出物は、約３０重量％エタノール水溶液を抽出溶媒として抽出されたものであってもよい。本発明の具体的な実施例において、トキンソウ抽出物は、約７０重量％エタノール水溶液を抽出溶媒として抽出されたものであってもよい。
【００２１】
本発明において、分画物とは、さまざまな構成成分を含む混合物から特定成分又は特定成分のグループを分離するために分画をして収得された結果を意味する。本発明において
、分画物は、抽出液を分画して製造され得る。
【００２２】
本発明において、前記分画物の製造に用いられる分画の溶媒は、例えば、水、炭素数１〜４のアルコール、ヘキサン（ＨＸ）、酢酸エチル（ＥｔＯＡｃ）、クロロホルム（ＣＨＣｌ３）、ジクロロメタン（ＣＨ２Ｃｌ２）又はこれらの混合物などが挙げられるが、これらに限定されるものではない。前記分画溶媒は、単独で使用される、又は２種以上を混合して使用することができ、溶媒の極性に応じて順次使用して、各溶媒の分画物を製造することができる。本発明の具体的な実施例において、トキンソウ抽出物の分画物は、ヘキサン分画物、ジクロロメタン分画物およびアセテート分画物からなる群から選択されるいずれか一つ以上とすることができる。好ましくは、ジクロロメタン分画物であることができる。
【００２３】
例えば、本発明に係るジクロロメタン分画物は、トキンソウのメタノール抽出物に分離されたジクロロメタン分画物であってもよい。例えば、本発明に係るジクロロメタン分画物は、トキンソウの３０重量％メタノール水溶液抽出物に分離されたジクロロメタン分画物であってもよい。例えば、本発明に係るジクロロメタン分画物は、トキンソウの７０重量％メタノール水溶液抽出物に分離されたジクロロメタン分画物であってもよい。
【００２４】
例えば、本発明に係るジクロロメタン分画物は、トキンソウのエタノール抽出物に分離されたジクロロメタン分画物であることができる。例えば、本発明に係るジクロロメタン分画物は、トキンソウの３０重量％エタノール水溶液抽出物に分離されたジクロロメタン分画物であることができる。例えば、本発明に係るジクロロメタン分画物は、トキンソウの７０重量％エタノール水溶液抽出物に分離されたジクロロメタン分画物であることができる。
【００２５】
本発明に係る分画物は、抽出物からの分画工程を通じて有効成分の含有量を増進させることによって脱毛予防、治療、および改善に十分に優れた効果を示す。
【００２６】
本発明において、抽出物又はその分画物は、さらなる精製過程をさらに実行して得られた結果物として精製物の形態で使用することもできる。
【００２７】
前記精製は、この分野に公知された一般的な方法を使用することができ、例えば、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｓｉｌｉｃａ  ｇｅｌ  ｃｏｌｕｍｎ  ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ）、薄層クロマトグラフィー（ｔｈｉｎ  ｌａｙｅｒ  ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ）、高性能液体クロマトグラフィー（ｈｉｇｈ  ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ
ｌｉｑｕｉｄ  ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ）などのようなさまざまなクロマトグラフィーが挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００２８】
本発明において、抽出物又はその分画物は、ろ過、濃縮又は乾燥過程を実行して、溶媒が除去されたり、又はろ過、濃縮、及び乾燥を全て実行したものであることができる。濾過は、例えば、濾紙又は減圧ろ過機を利用することができる。前記濃縮は、例えば、減圧濃縮器又は回転蒸発器を利用することができる。前記乾燥は、例えば、噴霧乾燥法又は凍結乾燥法で行うことができる。本発明において、前記乾燥の方法は、蒸発乾燥、噴霧乾燥、凍結乾燥であってもよく、具体的に凍結乾燥時には、−５０〜−７０℃で３〜４日間凍結乾燥を行うことができる。
【００２９】
また、本発明において、抽出物又はその分画物は、使用時まで急速冷凍冷蔵庫（ｄｅｅｐ  ｆｒｅｅｚｅｒ）に保管することができ、濃縮および凍結乾燥を通じて水分を完全に除去することができ、水分を完全に除去した抽出物は、粉末形態で使用したり、前記粉末を蒸留水又は通常の溶媒に溶かして使用することができる。
【００３０】
本発明において、トキンソウ抽出物は、組成物の総体積を基準として０．０１μｇ／ｍＬ〜２，０００μｇ／ｍＬの濃度であることができるが、これに限定されるものではない。
【００３１】
本発明において、脱毛とは、皮膚から毛髪が脱落する現象や毛髪が薄くなったり、細くなる状態を意味し、脱毛症と混用して使用することができる用語である。
【００３２】
本発明において、毛髪とは、髪の毛の毛根及び毛包、髪の毛及びまつげと眉毛、ひげ、脇、陰毛、毛根及び毛包がある体全体のすべての部位を含む。
【００３３】
本発明において、脱毛は、具体的に栄養障害性脱毛、内分泌性脱毛、血管障害性脱毛、壮年性脱毛、結髪性脱毛、円形脱毛、神経性脱毛、非剛性脱毛、トリコチロマニア、悪性脱毛、女性型脱毛、男性型脱毛、アンドロゲン性脱毛、休止期脱毛、頭部白癬、前頭脱毛、減耗症、遺伝性寡毛症、全身薬剤性脱毛、機械的脱毛、外傷性脱毛、圧迫性脱毛、成長期脱毛、非剛性脱毛、毎毒性脱毛、脂漏性脱毛、症候性脱毛、瘢痕性脱毛及び先天性脱毛からなる群から選択される１つ以上であることができる。しかしながら、脱毛は、発生の直接又は間接的な原因を問わず、この分野で脱毛に分類されるすべての症状を含む意味として理解されるべきである。
【００３４】
本発明によると、トキンソウ抽出物又はその分画物を含む組成物は、毛髪が脱落した状態で毛髪の生成及び成長を促進することができる。本発明によると、トキンソウ抽出物又はその分画物を含む組成物は、毛髪が薄くなる現象が現れる状態で毛髪の生成及び成長を促進することができる。本発明によると、トキンソウ抽出物又はその分画物を含む組成物は、毛髪が細くなる現象が現れる状態で毛髪の生成及び成長を促進することができるものである。本発明によると、トキンソウ抽出物又はその分画物を含む組成物は、予防又は改善の観点から、毛髪の成長を維持し、毛髪が細くなる現象を防止することができる。
【００３５】
本発明において、「有効成分」とは、単独で目的とする活性を示す、又は、それ自体は活性のない担体と一緒に活性を示すことができる成分を意味する。本発明に係る有効成分は、トキンソウ抽出物又はその分画物である。
【００３６】
本発明において、「予防」とは、本発明の薬剤学的組成物の投与により脱毛と関連する一つ以上の症状の発生又は発症が抑制されたり遅延したりするすべての行為を意味し、必ずしも脱毛の完全な発症抑制を意味するものではない。
【００３７】
本発明において、「治療」とは、本発明の薬剤学的組成物の投与により脱毛に関連する一つ以上の症状を示していたり、以前に現れた個体の症状が抑制されたり、減少したり、又は好転したりするすべての行為を意味する。前記個体は、ヒトを含む哺乳類であってもよく、好ましくはヒトである。
【００３８】
本発明において、「投与」とは、何らかの適切な方法で、個体に本発明の薬剤学的組成物を導入することを意味する。投与経路は、目的とする組織に到達することができる限り、いかなる一般的な経路を通じてでも経口又は非経口投与することができる。好ましくは、非経口投与、より好ましくは塗布による局部投与（ｔｏｐｉｃａｌ  ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ）方式で適用することができる。また、本発明の薬剤学的組成物が標的細胞に移動できるようにする任意の装置によって投与することができる。
【００３９】
本発明の薬剤学的組成物は、本発明の効果を損なわない範囲で、薬剤学的に許容される担体をさらに含むことができる。本発明で使用することができる薬剤学的に許容される担
体の種類は、特に制限されず、この技術分野で通常使用される担体であれば、どんなものでも使用することができる。前記担体は、例えば、食塩水、滅菌水、リンゲル液、緩衝食塩水、アルブミン注射液、ラクトース、デキストロース、スクロース、ソルビトール、マンニトール、キシリトール、エリスリトール、マルチトール、マルトデキストリン、グリセロール、エタノールなどが挙げられるが、これに限定されるものではない。前記担体は、単独で使用したり、２種以上を混合して使用したりすることができる。
【００４０】
本発明の薬剤学的組成物は、本発明の効果を損なわない範囲で、薬剤学的に許容される添加剤をさらに含むことができる。本発明で使用することができる薬剤学的に許容される添加剤の種類は特に制限されず、この技術分野で通常使用される添加剤であれば、どんなものでも使用することができる。前記添加剤は、例えば、充填剤、結合剤、崩壊剤、潤滑剤、懸濁化剤、溶剤、酸化防止剤、ｐＨ調整剤、湿潤剤、甘味料、および保存剤が挙げられるが、これらに限定されるものでない。前記添加剤は、単独で使用されたり、２種以上を混合して使用したりすることができる。
【００４１】
本発明の薬剤学的組成物は、経口投与又は非経口投与のために適しており、様々な剤形にすることができる。本発明において、経口投与用の剤形は、例えば、錠剤、丸剤、粉末、散剤、顆粒、ペレット、カプセル、トローチ（ｔｒｏｃｈｅｓ）、ローゼンジー（ｌｏｚｅｎｇｅ）、懸濁液、エマルジョン、シロップおよびエリキシル剤などが挙げられるが、これらに限定されるものではない。本発明において、非経口投与用剤形は、例えば、注射剤、坐剤、呼吸器吸入器、エアゾール剤、軟膏、液剤、ローション剤、パッチ剤、塗布用粉末、オイル、クリーム、ゲルなどが挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００４２】
本発明の薬剤学的組成物は、目的に応じて経口投与するか、非経口投与することができる。本発明において、非経口投与は、例えば、腹腔投与、直腸投与、皮下投与、静脈内投与、筋肉投与、胸部投与、脳血管投与、経皮投与、および毛髪投与を挙げることができ、組成物を疾患部位に塗布、又は噴霧、吸入することも挙げられるが、これらに限定されるものではない。本発明の具体的な実施例において、本発明の薬剤学的組成物は、局所に塗布することができる。
【００４３】
本発明の薬学的組成物は、薬学的に有効な量で投与する。本発明において、「薬学的に有効な量」とは、医学的治療に適用可能な合理的な恩恵／リスク比で疾患を治療するのに十分な量を意味し、有効な量の水準は、患者の状態、体重、性別、年齢、健康状態、疾患の程度、薬物に対する感度、投与時間、投与経路、排出速度、治療期間、同時に使用される薬物を含む要素およびその他の医学分野で広く知られている要素に応じて決定することができる。本発明の薬剤学的組成物の投与量は、通常の技術者によって適宜選択することができる。本発明の薬剤学的組成物の投与量は、トキンソウ抽出物の含有量を基準として１日０．１ｍｇ／ｋｇ〜２，０００ｍｇ／ｋｇであることができ、より好ましくは１ｍｇ／ｋｇ〜５００ｍｇ／ｋｇであることができるが、これらに限定されるものではない。また、前記投与量の本発明の範囲を限定するものではない。
【００４４】
本発明の薬剤学的組成物の投与は、一日に一回投与することもでき、数回に分けて投与することもでき、数日に一度投与することもできる。本発明の具体的な実施例では、本発明の組成物は、週１回〜２０回投与することができ、好ましくは、１日に２回投与することができる。
【００４５】
本発明の薬剤学的組成物の投与期間は、通常の技術者が、患者の状態、体重、性別、年齢、健康状態、病気の程度、薬物に対する感度、同時使用される薬物を含む要素およびその他の医学分野でよく知られている要素を考慮して決定することができる。本発明の具体
的な実施例では、本発明の組成物は、１週間から５２週間投与することができる。
【００４６】
本発明の薬剤学的組成物は、脱毛予防及び治療のために単独で、又は他の予防又は治療剤と併用して投与することができ、他の予防又は治療剤と同時に又は順次投与することができる。また、本発明の薬剤学的組成物は、手術、ホルモン療法、化学療法、および生物学的反応調節剤を使用する方法と併用して使用することができる。
【００４７】
本発明は、トキンソウ抽出物又はその分画物を含む脱毛予防又は改善用食品組成物を提供する。
【００４８】
本発明の食品組成物において、トキンソウ、抽出物、分画物および脱毛は、前で本発明の薬剤学的組成物について詳細に記載したものと同じである。
【００４９】
本発明の具体的な実施例によると、トキンソウ抽出物又はその分画物を含む食品組成物は、脱毛予防又は改善用として効果的に使用することができる。
【００５０】
本発明において、「予防」とは、本発明の食品組成物の摂取によって脱毛に関連する一つ以上の症状の発生又は発症が抑制又は遅延されたすべての行為を意味し、必ずしも脱毛の発症を完全に抑制することを意味するものではない。
【００５１】
本発明において、「改善」とは、本発明の食品組成物の摂取によって脱毛に関連する一つ以上の症状の程度が減少したり、好転したり、進行が遅延したりするすべての行為を意味する。
【００５２】
本発明の食品組成物は、トキンソウ抽出物又はその分画物をそのまま添加したり他の食品又は食品成分と一緒に使用したりすることができ、通常の方法に従って使用することができる。
【００５３】
本発明の食品組成物は、トキンソウ抽出物を有効成分として含み、有効成分の含有量は、使用目的に応じて適宜決定することができる。一般的に、トキンソウ抽出物は、食品組成物の総重量に対して０．０００１〜１００重量％で添加することができる。
【００５４】
本発明において、食品組成物の形態は特に制限されるものでなく、通常の意味での食品のすべてを含む。本発明が適用され得る食品としては、例えば、飲料、ドリンク剤、粉末剤、錠剤、および健康機能食品などがある。
【００５５】
本発明において、「健康機能食品」は、人体に有用な機能性を持った原料や成分を使用して、栄養供給のほかにも、生体調節機能が効率的に現れるよう製造および加工した食品を意味する。前記の健康機能食品は、場合によっては、機能性食品、健康食品又は健康補助食品などの用語と互用される。また、本発明において、「機能」とは、人体の構造及び機能について栄養素を調整したり、生理学的な作用により保健の用途において有用な効果を意味することができる。
【００５６】
本発明の食品組成物は、通常、食品の香り、味や視覚などを向上させることができる食品添加剤をさらに含むことができる。前記食品添加剤は、例えば、風味剤、増進剤、炭酸化剤防腐剤（ソルビン酸カリウム、安息香酸ナトリウム、サリチル酸、ジヒドロ酢酸ナトリウムなど）、殺菌剤（さらし粉と高度さらし粉、次亜塩素酸ナトリウムなど）、酸化防止剤（ブチルヒドロキシロキシアニゾール、ブチルヒドロキシトルエン等）、着色剤（タール色素など）、発色剤（亜硝酸ナトリウム、亜醋酸ナトリウムなど）、漂白剤（亜硫酸ナトリウム）、調味料（ＭＳＧグルタミン酸ナトリウム等）、甘味料（ズルチン、サイク
ラミン酸、サッカリン、ナトリウムなど）、香料（バニリン、ラクトン類等）、膨張剤（ミョウバン、Ｄ−酒石酸水素カリウムなど）、強化剤、乳化剤、増粘剤（糊料）、皮膜剤、ガム基礎剤、泡抑制剤、溶剤、および改良剤を挙げられるが、これらに限定されるものではない。前記添加物は、食品の種類に応じて選別され、適切な量で使用することができる。
【００５７】
本発明の食品組成物は、食品の機能性を向上させることができる追加の成分をさらに含むことができる。例えば、ビタミン（ｖｉｔａｍｉｎ）、ナイアシン（ｎｉａｃｉｎ）、ビオチン（ｂｉｏｔｉｎ）、葉酸塩（ｆｏｌａｔｅ）、パントテン酸（ｐａｎｔｈｏｔｅｎｉｃ  ａｃｉｄ）などを含むことができる。また、亜鉛（Ｚｎ）、鉄（Ｆｅ）、カルシウム（Ｃａ）、クロム（Ｃｒ）、マグネシウム（Ｍｇ）、マンガン（Ｍｎ）、銅（Ｃｕ）などのミネラルを含むことができる。また、リジン、トリプトファン、システイン、バリンなどのアミノ酸を含むことができる。
【００５８】
本発明の食品組成物は、食品添加物として使用することができ、これをそのまま添加したり他の食品又は食品成分と一緒に使用したりすることができ、通常の方法に従って使用することができる。
【００５９】
本発明の食品組成物が飲料や飲料剤である場合には、通常の飲料のように様々な香味剤又は天然炭水化物などを追加成分として含有することができる。前記香味剤は、例えば、サッカリン、アスパルテームなどが挙げられる。前記天然炭水化物は、例えば、単糖類（ブドウ糖、果糖など）、二糖類（マルトース、スクロースなど）、および多糖類（デキストリン、シクロデキストリンなど）のような通常の糖、およびキシリトール、ソルビトール、エリスリトールなどの糖アルコールが挙げられる。その他、本発明の食品組成物は、天然フルーツジュース、フルーツジュース及び野菜ジュースを製造するための果肉を含有することができる。これらの成分は、独立して、又は混合して使用することができる。
【００６０】
本発明は、トキンソウ抽出物又はその分画物を含む脱毛予防又は改善用化粧料組成物を提供する。
【００６１】
本発明の化粧料組成物において、トキンソウ、抽出物、分画物等は、前で本発明の薬剤学的及び食品組成物について詳細に記載したものと同じである。
【００６２】
本発明の具体的な実施例によると、トキンソウ抽出物を含む組成物は、毛髪の生成と成長を促進して、脱毛予防又は改善に優れた効果を示す。
【００６３】
本発明の化粧料組成物は、例えば、溶液、ソルゲル、懸濁液、エマルジョン、ペースト、マイクロカプセル、オイル、ワックス、エアゾールの形態で剤形化することができるが、これらに限定されるものではない。前記化粧料組成物の具体的な剤形は、例えば、ヘアトニック、ヘアコンディショナー、ヘアローション、ヘア栄養ローション、ヘアシャンプー、ヘアコンディショナー、ヘアトリートメント、ヘアクリーム、ヘア栄養クリーム、ヘアモイスチャークリーム、ヘアマッサージクリーム、ヘアワックス、ヘアエアゾール、ヘアパック、栄養ヘアパック、ヘア石鹸、ヘアクレンジングフォーム、ヘアオイル、毛髪乾燥剤、毛髪処理剤、毛髪染料剤、毛髪用ウエーブ剤、毛髪脱色剤、ヘアジェル、ヘアグレーズ、ヘアドレッシング、ヘアラッカー、ヘアモイスチャライザー、ヘアムース、ヘアスプレー、パッチ、軟膏剤、硬膏剤、リニメント剤、パスタ剤、カタプラズマ剤及び粉末剤などが挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００６４】
本発明の化粧料組成物を化粧学的に許容される担体をさらに含むことができる。本発明で用いられる化粧学的に許容される担体の種類は、特に制限されず、この技術分野で通常
使用される担体であれば、どんなものでも使用することができる。前記担体は、単独で使用したり、２種以上を混合して使用したりすることができる。
【００６５】
本発明の化粧料組成物は、本発明の効果を損なわない範囲で、化粧料組成物に通常使用される補助剤をさらに含むことができる。本発明で使用することができる補助剤の種類は、特に制限されず、この技術分野で通常使用される補助剤であれば、どんなものでも使用することができる。前記補助剤は、例えば、ゲル化剤、活性剤、保存剤、抗酸化剤、安定化剤、溶解剤、ビタミン、溶剤、芳香剤、充填剤、遮断剤、顔料、吸収剤及び染料などが挙げられるが、これに限定されるものではない。前記補助剤は、単独で使用したり、２種以上を混合して使用したりすることができる。
【００６６】
本発明の化粧料組成物は、毛髪又は頭皮に直接塗布又は散布するなどの方法により使用することができる。
【００６７】
本発明は、トキンソウ抽出物又はその分画物を含む脱毛予防又は改善用医薬部外品組成物を提供する。
【００６８】
本発明の医薬部外品組成物において、トキンソウ、抽出物、分画物等は、前で本発明の薬剤学的、食品及び化粧料組成物について詳細に記載したものと同じである。
【００６９】
本発明の医薬部外品組成物は、脱毛予防又は改善用として効果的に使用することができる。
【００７０】
本発明において、「医薬部外品」は、人や動物の病気を診断、治療、改善、軽減、処置又は予防の目的で使用される物品のうち、医薬品よりも作用が軽微な物品を意味するものであって、例えば、薬事法によれば、医薬部外品とは医薬品の用途に使用される物品を除くものであって、人や動物の疾病の治療や予防に使われる製品、人体に対する作用が軽微であったり、又は直接作用しない製品などが含まれる。
【００７１】
本発明の医薬部外品組成物は、当業界で通常製造されるいかなる剤形にも製造することができ、例えば、溶液、ソルゲル、懸濁液、エマルジョン、ペースト、マイクロカプセル、オイル、ワックス、エアゾールの形態に剤形化することができるが、これらに限定されるものではない。前記医薬部外品組成物の具体的な剤形は、例えば、消毒清潔剤、浴溶剤、ウェットティッシュ、軟膏、クリーム、ローション、石鹸、シャンプー、リンス、エッセンス、スプレー、およびパッチなどが挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００７２】
本発明の医薬部外品組成物は、本発明の効果を損なわない範囲で、化粧料組成物に通常使用される補助剤をさらに含むことができる。本発明で使用することができる補助剤の種類は、特に制限されず、この技術分野で通常使用される補助剤であれば、どんなものでも使用することができる。前記補助剤は、例えば、ゲル化剤、活性剤、保存剤、充填剤、抗酸化剤、安定化剤、溶解剤、ビタミン、顔料及び香料のような通常の補助剤を含むことができる。
【００７３】
本発明は、トキンソウ抽出物又はその分画物を含む発毛促進用組成物を提供する。
【００７４】
本発明の発毛促進用組成物において、トキンソウ、抽出物、分画物等は、前で本発明の薬剤学的、食品、化粧料及び医薬部外品組成物について詳細に記載したものと同じである。
【００７５】
本発明において、「発毛」は、毛髪の生成及び成長を意味し、この分野で使用される用語である養毛又は育毛の意味を含む広義の概念である。
【００７６】
本発明の組成物は、毛髪の生成及び成長を大きく促進することにより、発毛促進用に効果的に使用することができる。
【００７７】
本発明の発毛促進用組成物は、薬学的、食品、化粧料又は医薬部外品組成物として使用することができる。
【００７８】
本発明の発毛促進用組成物は、目的に応じて経口投与するか、非経口投与することができる。本発明において、非経口投与は、例えば、腹腔投与、直腸投与、皮下投与、静脈内投与、筋肉投与、胸部投与、経皮投与を挙げることができ、組成物を頭皮又は毛髪に塗布したり噴霧、吸入することも挙げられるが。これらに限定されるものではない。好ましくは、組成物を頭皮又は毛髪に塗布したり、噴霧したりするものであってもよい。
【００７９】
本発明の組成物は、毛髪成長促進補助成分をさらに含むことができる。毛髪成長促進補助成分は、５アルファ−還元酵素阻害成分、毛根及び毛包細胞の活性成分、毛包細胞血流増強成分、殺菌成分、フケ防止剤、角質軟化剤、清涼剤、保湿剤などを含むが、これらに限定されるものではない。
【００８０】
本発明は、また、トキンソウ抽出物又はその分画物の治療学的に有効量を、これを必要とする個体に投与する段階を含む脱毛予防又は治療方法を提供する。
【００８１】
本発明において、用語「治療学的に有効量（又は、有効な量）」は、好ましい効果を供するには非常に十分であるが、医学的判断による範囲内で深刻な副作用を十分に防止するほどの適切な量を意味する。本発明のトキンソウ抽出物又はその分画物の体内に投与される量は、投与経路、投与対象を考慮して適宜調整することができる。
【００８２】
前記「投与」は、任意の適切な方法で、個体に所定の本発明のトキンソウ抽出物又はその分画物を提供することを意味する。このとき、個体は、動物を指し、典型的に、本発明のトキンソウ抽出物又はその分画物を用いた治療で有益な効果を示すことができる哺乳動物であることができる。このような個体の好ましい例として、ヒトのような霊長類が含まれることができる。
【００８３】
本発明は、また、脱毛予防又は治療に使用するためのトキンソウ抽出物又はその分画物を含む組成物を提供する。
【００８４】
本発明は、また、脱毛予防又は治療用薬剤を製造するためのトキンソウ抽出物又はその分画物を含む組成物の用途を提供する。
【発明の効果】
【００８５】
本発明に係るトキンソウ抽出物又はその分画物を含む組成物は、毛髪の生成及び成長を促進し、休止期状態の毛包を成長期に迅速に移行させることにより毛髪の育毛と、それ自体の健康を増進させる効果が非常に優れている。特にトキンソウは、天然物として副作用及び毒性がないので、塗布、噴霧、および食用など、様々な投与経路による利用が容易で、長期間安定して使用が可能である。これにより、本発明の組成物は、脱毛予防、治療又は改善用、および発毛促進用に効果的に使用することができる。
【図面の簡単な説明】
【００８６】
【図１】実施例１−１にて試験物質投与群、陽性対照群１及び陽性対照群２の皮膚を７日目まで毎日観察した写真である。
【図２】実施例１−１にて正常群、陰性対照群、試験物質投与群、陽性対照群１（１、２）〜２（３）の１７日目の皮膚を観察した写真である。
【図３】実施例１−１にて目視検査を通じた発毛効能の評価点数の結果を数値化したグラフである。
【図４】実施例１−１にて１７日目の目視検査を通じた発毛効能の評価点数の結果を数値化したグラフである。
【図５】実施例１−２にて正常群、陰性対照群、試験物質投与群、陽性対照群１および２の組織を染色して光学顕微鏡で観察したことを示したものである。
【図６】実施例２−１にて正常個体群、陰性対照群、試験物質投与群（トキンソウ抽出物）、陽性対照群１（Ｔｏｆａｃｉｔｉｎｉｂ）と陽性対照群２（Ｍｉｎｏｘｉｄｉｌ）の皮膚を１２日目まで毎日観察して発毛変化を確認した結果である。
【図７】実施例２−１の試験期間の間、マウスの体重の変化を確認した結果である。
【図８】実施例２−１の試験期間の間、発毛効能の評価点数を数値化した結果である。（図８のＡ：日付別発毛効能の評価点数、図８のＢ：１２一次発毛効能の評価点数）
【図９】実施例２−２の正常群、陰性対照群、試験物質投与群（トキンソウ抽出物）、陽性対照群１及び陽性対照群２の組織を染色して光学顕微鏡で観察したことを示したものである。初期成長期（Ａｎａｇｅｎ＿Ｅａｒｌｙ、Ａ／ｅ）、後期成長期（Ａｎａｇｅｎ＿ｌａｔｅ、Ａ／ｌ）、初期退行期（Ｃａｔａｇｅｎ＿ｅａｒｌｙ、Ｃ／ｅ）、休止期（ｔｅｌｏｇｅｎ、ｔ）
【図１０】実施例３−１の試験期間の間、マウスの体重の変化を確認した結果である。
【図１１】実施例３−１の試験期間の間、発毛効能の評価点数を数値化した結果である。（図１１のＡ：日付別発毛効能の評価点数、図１１のＢ：１２一次発毛効能の評価点数）
【図１２】実施例３−２の正常群、陰性対照群、試験物質投与群（トキンソウ分画物（ＭＣ：ジクロロメタン））の組織を染色して光学顕微鏡で観察したことを示したものである。初期成長期（Ａｎａｇｅｎ＿Ｅａｒｌｙ、Ａ／ｅ）、後期成長期（Ａｎａｇｅｎ＿ｌａｔｅ、Ａ／ｌ）、初期退行期（Ｃａｔａｇｅｎ＿ｅａｒｌｙ、Ｃ／ｅ）、休止期（ｔｅｌｏｇｅｎ、ｔ）
【発明を実施するための形態】
【００８７】
以下では、本発明を具体的な製造例及び実施例を通じてより詳細に説明する。しかし、下記の実施例は、本発明の理解を助けるために提供されるものに過ぎず、実施例により本発明の範囲が限定されるものではない。
【００８８】
＜製造例＞
製造例１：トキンソウ抽出液の製造
トキンソウは、２０１７年８月に忠清北道槐山郡で収穫した乾燥トキンソウ（Ｃｅｎｔｉｐｅｄａ  ｍｉｎｉｍａ）の地上部（購入先：槐山薬草有機農産物協同組合）を２０１７年９月に購入して試料として使用した。
【００８９】
購入したトキンソウ１．０ｋｇを室温で８０％メタノール（ＭｅＯＨ）で２回抽出（各１５．０  Ｌ×３日）した後、ろ過してトキンソウ抽出物を得た。
【００９０】
製造例２−５：トキンソウ抽出液の分画物の製造
製造例１で得られたトキンソウ抽出物を減圧して蒸発させ、１９３．２ｇの粗抽出液（ｃｒｕｄｅ  ｅｘｔｒａｃｔ）を獲得し、再び８００ｍＬの蒸留水に懸濁した。
【００９１】
この懸濁液をＨＸ（８００ｍＬ×３）、ＣＨ２Ｃｌ２（８００ｍＬ×４）、ＥｔＯＡｃ
（８００ｍＬ×３）、およびｎ−ＢｕＯＨ（８００ｍＬ×３）を利用して、極性が増加する順次方向に系統的溶媒分画法を実行して、各分画を減圧濃縮して製造例２（ＨＸ（２３．０ｇ））、製造例３（ＣＨ２Ｃｌ２（９．０ｇ））、製造例４（ＥｔＯＡｃ（９．０ｇ））及び製造例５（ｎ−ＢｕＯＨ（３２．７ｇ））分画物を製造した。
【００９２】
製造例６−１１：トキンソウ抽出物の製造
トキンソウは、２０１８年８月に忠清北道槐山郡で収穫された乾燥トキンソウ（Ｃｅｎｔｉｐｅｄａ  ｍｉｎｉｍａ）の地上部（購入先：槐山薬草有機農産物協同組合）を２０１８年９月に購入して試料として使用した。
【００９３】
購入したトキンソウは、各抽出物別に１．０ｋｇを室温でエタノール（ＥｔＯＨ）３０％、エタノール（ＥｔＯＨ）７０％、エタノール（ＥｔＯＨ）１００％、３０％メタノール（ＭｅＯＨ）、７０％メタノール（ＭｅＯＨ）又は１００％メタノール（ＭｅＯＨ）でそれぞれ２回抽出（各１５．０Ｌ×３日）した後、ろ過してトキンソウ抽出物を得た。
【００９４】
製造例１２−１７：トキンソウ抽出液の分画物の製造
製造例２−５での分画物の製法と同じ方法で製造例６−１１のそれぞれの抽出物から順次方向に系統的溶媒分画法を実行し、各分画を減圧濃縮してジクロロメタン分画物を製造した。
【００９５】
＜製剤例＞
製剤例１：トキンソウ抽出物を含む剤形の製造
エタノールとグリセリンとを混合した溶媒（６５％：５％）を用いて製造例３のトキンソウ抽出物の含有量が全５％の濃度になるようにトニック剤形の試験物質を調製した。
【００９６】
製剤例２−１３：トキンソウ抽出物又は分画物を含む試験物質の製造
蒸留水に５％Ｔｗｅｅｎ  ８０と５％グリセリンとを混合した溶媒を用いて製造例６〜１７のトキンソウ抽出物又はジクロロメタン分画物のそれぞれを含有量が全２０％の濃度になるようにして試験物質を調製した。
【００９７】
＜実施例１＞退行期抑制動物モデル効能試験を通じたトキンソウ抽出物の脱毛予防、治療、改善効果、および発毛促進効果を確認
トキンソウ抽出物の退行期サプレッサーでの発毛効能試験を進めるためにオスＣ５７ＢＬ／６マウス（５週齢）を購入し、１週間馴化し、体重が１６〜２１ｇの動物を選定した。脱毛の際、皮膚の損傷が発生した動物又は肌色が黒色の場合には成長期がすでに進行した状態であって、本実験に不向きなため、実験から除外した。
試験群は、それぞれ、正常群、陰性対照群、試験物質投与群、陽性対照群１、２に分離し、正常群と陰性対照群は、それぞれ１匹、試験物質投与群は３匹、陽性対照群１は２匹、陽性対照群２は、１匹に群分離した。具体的には、正常群は溶媒又は試験物質を投与していない群であり、陰性対照群は溶媒のみ投与した群、試験物質群は、製造例３のトキンソウ抽出物を投与した群であり、陽性対照群１は、Ｍｉｎｏｘｉｄｉｌ投与群であり、陽性対照群２は、タンカラック（Ｌｉｔｓｅａ  ｇｌｕｔｉｎｏｓａ）抽出物を投与した群である。
製造例３のトニック剤形（製剤例１）を１００μＬ投与量で、一日に２回、６時間間隔で背中の皮膚に７日間塗布し、退行期誘導薬物であるデキサメタゾン（ペリデックス、緑十字）を０．１％、１ｍＬを除毛部位に５日間塗布した。陽性対照群１と２は、５％の濃度で１００μｌを塗布した。
【００９８】
実験期間中、試験物質を投与した後、写真撮影で発毛程度を肉眼で観察し、実験終了後に動物を犠牲にして、皮膚組織病理学試験を実施した。
また、発毛効能目視検査の結果を数値化するために、除毛全部位（溶媒又は試験物質、陽性対照物質塗布部位）で黒色を帯びたり（成長期）、発毛が始まる部位を画像解析プログラム（ＩｍａｇｅＰｒｏ  Ｐｌｕｓ  ５．０  、Ｃｙｂｅｒｎｅｔｉｃｓ、ＵＳＡ）で画像解析を実施し、％で数値化し、数値化されたデータは、医療統計解析プログラム（Ｐｒｉｓｍ  ５．０、Ｇｒａｐｈｐａｄ、ＵＳＡ）を利用して数値化されたグラフを作製した。
【００９９】
実施例１−１：目視検査
マウスの皮膚を肉眼で検査した結果、図１、図３及び図４に示すように試験物質投与群は、投与３日目に成長期に移行する傾向がある、他の群に比べてはるかに高く（１８．５％、２０．４％、３２．８％）、陽性対照群１（０．１％、０．３％）及び陽性対照群２（０．４％）では発毛が観察されなかった。投与７日目には、試験物質投与群（８４．９％、８８．２％、９７．０％）で最も優れた発毛効能を確認することができた。
【０１００】
また、図２に示すように、退行期をずっと維持させるためにデキサメタゾン０．１％を投与した結果、投与後も、最終的に１７日目に試験物質投与群（９３．５％、９６．７％、９８．２％）から、優れた発毛効能を肉眼観察を通じて確認することができた。しかし、皮膚組織病理学試験を通じて毛包の生成及び発毛効能をより明確に確認した結果、陽性対照群１（６．１％、２１．２％）及び陽性対照群２（３．３％）からは、試験物質投与群のように確実な発毛効能は確認されなかった。
【０１０１】
したがって、本発明のトキンソウ抽出物が脱毛予防、治療および改善、並びに発毛の促進に効果的に作用することができることを知ることができる。
【０１０２】
実施例１−２：皮膚組織病理学試験
皮膚組織病理学試験は、一般に広く用いられているヘマトキシリン（Ｈｅｍａｔｏｘｙｌｉｎ）とエオシン（Ｅｏｓｉｎ）を利用したＨ＆Ｅ染色で実施し、犠牲にした動物の皮膚組織から試料を採取して固定（ｆｉｘａｔｉｏｎ）、水洗（ｗａｓｈｉｎｇ）、透明（ｃｌｅａｒｉｎｇ）、パラフィン浸透（ｐａｒａｆｆｉｎ  ｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ）、包埋（ｅｍｂｅｄｄｉｎｇ）、薄切（ｍｉｃｒｏｔｏｍｅ  ｃｕｔｔｉｎｇ）、染色（ｓｔａｉｎｉｎｇ）と判読過程を経て、毛包の生成及び発毛現象を確認した。
【０１０３】
本試験では、初期成長期（Ａｎａｇｅｎ＿Ｅａｒｌｙ、Ａ／ｅ）は、毛がちょうど新しい発育を始めたということであり、後期成長期（Ａｎａｇｅｎ＿ｌａｔｅ、Ａ／ｌ）と初期退行期（Ｃａｔａｇｅｎ＿ｅａｒｌｙ、Ｃ／ｅ）は、毛の発育が真っ最中であると見ることができる。後期成長期（Ａｎａｇｅｎ＿ｌａｔｅ）と初期退行期（Ｃａｔａｇｅｎ＿ｅａｒｌｙ）は、組織学的に毛球の位置が類似しており、組織の切片による形の変化を考慮する際に、その区分において明確でない場合がよくあるということを考慮に入れるべきであるが、それにもかかわらず、後期成長期（Ａｎａｇｅｎ＿ｌａｔｅ）と初期退行期（Ｃａｔａｇｅｎ＿ｅａｒｌｙ）段階の毛包は、類似の発育段階としてみなし、結果を解釈するのが一般的である。
【０１０４】
前記のような内容に基づいて解析した結果を図５に示した。図５に示すように、正常群、陰性対照群からは特異的な毛包の生成及び発毛効能が観察されなかった。また、陽性対照群１および陽性対照群２からは、最小限の毛包の生成及び発毛効能程度しか観察されなかった。その一方、トキンソウ抽出物を投与した試験物質投与群からのみ特異的に優れた毛包の生成及び発毛効能を確認できた。
【０１０５】
したがって、本発明のトキンソウ抽出物が脱毛予防、治療及び改善、並びに発毛の促進に効果的に作用し得ることを知ることができる。
【０１０６】
＜実施例２＞トキンソウ抽出物の脱毛予防、治療、改善効果、および発毛促進効果を確認
トキンソウ抽出物の退行期サプレッサーでの発毛効能試験を進行するためにオスＣ５７ＢＬ／６マウス（５週齢）を購入し、１週間馴化して、体重が２０〜２４ｇの動物を選定した。除毛する際、皮膚の損傷が発生した動物又は肌色が黒色の場合には成長期がすでに進行した状態であって、本実験には不向きなため、実験から除外した。
試験群は、それぞれ、正常群、陰性対照群、試験物質投与群、陽性対照群１、２に分離し、正常群は３匹、陰性対照群は４匹、試験物質投与群はそれぞれ４匹、陽性対照群１（Ｔｏｆａｃｉｔｉｎｉｂ）は４匹、陽性対照群２（Ｍｉｎｏｘｉｄｉｌ）は４匹に群分離した。具体的には、正常群は溶媒又は試験物質を投与していない群であり、陰性対照群は溶媒のみ投与された群であり、試験物質群は、製造例６、８、９、および１１のトキンソウ抽出物（３０若しくは１００％エタノール、又は３０若しくは１００％メタノール）をそれぞれ投与した群であり、陽性対照群１は、Ｔｏｆａｃｉｔｉｎｉｂ群であり、陽性対照群２は、Ｍｉｎｏｘｉｄｉｌを投与した群である。
【０１０７】
製剤例２、４、５および７の試験物質調製液をそれぞれ１００μＬ投与量で、一日に２回、６時間間隔で背中の皮膚に７日間塗布し、退行期誘導薬物であるデキサメタゾン（ペリデックス、緑十字）を０．１％、１ｍＬを除毛部位に試験物質投与二日前から投与を開始し、試験終了日である１２日を繰り返し塗布した。陽性対照群１と２は、５％の濃度で１００μｌを塗布した。
【０１０８】
実験期間中、試験物質を投与した上、写真撮影により発毛程度を肉眼で観察し、実験終了後には動物を犠牲にして皮膚組織病理学試験を実施した。
【０１０９】
また、発毛効能の目視検査の結果を数値化するために、除毛全部位（溶媒又は試験物質、陽性対照物質塗布部位）において、黒色を帯びたり（成長期）、発毛が始まった部位を肉眼で観察し、除毛全部位に試験物質および陰性対照物質、陽性対照物質を塗布した部位の面積のうち、１０％以下の成長期の症状が観察された場合には１点、１０％〜３０％成長期の症状が観察された場合には２点、３０％〜５０％の成長期症状が観察された場合には３点、５０％〜８０％の成長期症状が観察された場合には４点、８０％〜１００％の成長期症状及び発毛が始まる症状が観察された場合には５点、と評価し、発毛効能の評価点数が数値化されたグラフに製作した。
【０１１０】
実施例２−１：目視検査
マウスの皮膚を肉眼で検査した結果を図６に示した。図６に示すように、試験物質投与群は、投与７日後５日目（＋１２  ｄａｙ）に成長期に移行する傾向がある、他の群に比べてはるかに高いことを確認した。
【０１１１】
具体的には、投与７日後５日目のそれぞれの投与群での発毛効能は、以下の表１のとおりである。
【０１１２】
【表１】
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【０１１３】
前記から確認できるように、本願発明に係るトキンソウ抽出物投与群からは、優れた発毛効能が確認できた。
【０１１４】
また、投与期間の間、体重変化及び発毛効能の評価点数の数値を図７および８にそれぞれ示した。
【０１１５】
図７から確認できるように、試験期間の間、マウスの体重には有意な変化がないことが確認できた。
【０１１６】
また、図８から確認できるように、トキンソウ抽出物投与群からは試験期間の間、有意に発毛効能が大きく増加したことが確認できた。具体的には、図８のＡ記載のように、試験期間の間、本発明に係るトキンソウ抽出物を投与した試験群から優れた発毛効能を確認することができ、図８のＢから確認できるように、最終的な評価日の１２日目には、陽性対照群よりもはるかに優れた効果を示した。
【０１１７】
前記の結果から、本発明のトキンソウ抽出物が脱毛予防、治療及び改善、並びに発毛の促進に効果的に作用し得ることを知ることができる。
【０１１８】
実施例２−２：皮膚組織病理学試験
皮膚組織病理学試験は、１２日目に、一般的に広く使用されるヘマトキシリン（Ｈｅｍａｔｏｘｙｌｉｎ）とエオシン（Ｅｏｓｉｎ）を利用したＨ＆Ｅ染色で実施し、犠牲にされた動物の皮膚組織から試料を採取して固定（ｆｉｘａｔｉｏｎ）、水洗（ｗａｓｈｉｎｇ）、透明（ｃｌｅａｒｉｎｇ）、パラフィン浸透（ｐａｒａｆｆｉｎ  ｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ）、包埋（ｅｍｂｅｄｄｉｎｇ）、薄切（ｍｉｃｒｏｔｏｍｅ  ｃｕｔｔｉｎｇ）、染色（ｓｔａｉｎｉｎｇ）と判読過程を経て、毛包の生成及び発毛現象を確認した。
【０１１９】
その結果を図９に示した。
【０１２０】
図９から確認できるように、正常群、陰性対照群からは特異的な毛包の生成及び発毛効能を観察することができなかった。また、陽性対照群１および陽性対照群２は、最小限の毛包の生成及び発毛効能程度を観察することができた。しかし、トキンソウ抽出物を投与した試験物質投与群からのみ特異的に毛包の生成及び発毛効能を確認することができた。
【０１２１】
＜実施例３＞トキンソウ分画物の脱毛予防、治療、改善効果、および発毛促進効果の確認
実施例２と同様の方式で、トキンソウ分画物を用いて脱毛予防、治療、改善、および発
毛促進効果を確認した。
【０１２２】
具体的には、正常群は溶媒又は試験物質を投与していない群であり、陰性対照群は溶媒のみ投与された群であり、試験物質群は製造例１２、１４、１５、および１７のトキンソウ分画物（３０若しくは１００％エタノールのジクロロメタン分画物、又は３０若しくは１００％メタノールのジクロロメタン分画物）をそれぞれ投与した群である。
【０１２３】
製剤例８、１０、１１、および１３の試験物質調製液をそれぞれ１００μＬ投与量で、一日に２回、６時間間隔で背中の皮膚に７日間塗布し、退行期誘導薬物であるデキサメタゾン（ペリデックス、緑十字）を０．１％、１ｍＬを除毛部位に試験物質投与二日前から投与を開始し、試験終了日である１２日間繰り返し塗布した。陽性対照群１と２は、５％の濃度で１００μｌを塗布し、残りの実験の方法は、実施例２と同様にした。
【０１２４】
実施例３−１：目視検査
試験物質投与群は、投与７日後５日目（＋１２  ｄａｙ）に成長期に移行する傾向が他の群に比べてはるかに高いことを、以下の表２に具体的に示した。表２は、投与７日後、５日目のそれぞれの投与群での発毛効能を示す。
【０１２５】
【表２】
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【０１２６】
前記から確認できるように、本願発明に係るトキンソウ分画物投与群から優れた発毛効能を確認できた。
【０１２７】
また、投与期間の間、体重変化及び発毛効能の評価点数の数値を図１０および１１にそれぞれ示した。
【０１２８】
図１０から確認できるように、試験期間の間、マウスの体重には有意な変化がないことを確認できた。
【０１２９】
また、図１１から確認できるように、トキンソウ分画物投与群から試験期間の間、有意に発毛効能が大きく増加したことが確認できた。具体的には、図１１のＡに示すように、試験期間の間、トキンソウ分画物を投与した試験群から優れた発毛効能を確認した。また、図１１のＢから確認できるように、最終的な評価日である１２日目に発毛効能が顕著したことを確認した。
【０１３０】
前記の結果から、本発明のトキンソウ分画物が脱毛予防、治療、改善、および発毛の促進に効果的に作用することがあることを知ることができる。
【０１３１】
実施例３−２：皮膚組織病理学試験
皮膚組織病理学試験は、１２日目に一般的に広く使用されるヘマトキシリン（Ｈｅｍａｔｏｘｙｌｉｎ）とエオシン（Ｅｏｓｉｎ）を用いたＨ＆Ｅ染色で実施し、犠牲にされた
動物の皮膚組織から試料を採取して固定（ｆｉｘａｔｉｏｎ）、水洗（ｗａｓｈｉｎｇ）、透明（ｃｌｅａｒｉｎｇ）、パラフィン浸透（ｐａｒａｆｆｉｎ  ｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ）、包埋（ｅｍｂｅｄｄｉｎｇ）、薄切（ｍｉｃｒｏｔｏｍｅ  ｃｕｔｔｉｎｇ）、染色（ｓｔａｉｎｉｎｇ）と判読過程を経て、毛包の生成及び発毛現象を確認した。
【０１３２】
その結果を図１２に示した。
【０１３３】
図１２から確認できるように、正常群、陰性対照群からは特異的な毛包の生成及び発毛効能を観察することができなかった。しかし、トキンソウ分画物を投与した試験物質投与群からのみ特異的に毛包の生成及び発毛効能を確認できた。
【０１３４】
前記の結果により本発明に係るトキンソウ抽出物又はその分画物を含む組成物は、毛髪の生成及び成長を促進し、休止期状態の毛包を成長期に速く移行させることにより毛髪の育毛と、それ自体の健康を増進させる効果が非常に優れていることを確認した。
【０１３５】
以上の説明から、本発明が属する技術分野における通常の技術者は、本発明がその技術的思想や必須の特徴を変更することなく、他の具体的な形態に実施することができることを理解できるであろう。これに関連し、以上で記述した例はすべての面で例示的なものであり、限定的なものではないものとして理解されるべきである。本発明の範囲は、前記の詳細な説明よりは、後述する特許請求の範囲の意味及び範囲、そしてその等価概念から導き出されるすべての変更又は変形された形態が本発明の範囲に含まれるものと解釈されるべきである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【手続補正書】
【提出日】令和3年3月11日(2021.3.11)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
トキンソウ抽出物又はその分画物を含む脱毛予防又は治療用薬剤学的組成物。
【請求項２】
トキンソウ抽出物は、水、アルコール、又はアルコール水溶液の抽出物であることを特徴とする請求項１に記載の薬剤学的組成物。
【請求項３】
トキンソウ抽出物は、メタノール抽出物又はエタノール抽出物であることを特徴とする請求項１に記載の薬剤学的組成物。
【請求項４】
トキンソウ抽出物は、トキンソウ１０〜９０重量％メタノール水溶液抽出物又はトキンソウ１０〜９０重量％エタノール水溶液抽出物であることを特徴とする請求項３に記載の薬剤学的組成物。
【請求項５】
トキンソウ抽出物は、トキンソウ３０〜１００重量％メタノール水溶液抽出物又はトキンソウ３０〜１００重量％エタノール水溶液抽出物であることを特徴とする請求項３に記載の薬剤学的組成物。
【請求項６】
トキンソウ分画物は、ヘキサン、ジクロロメタンおよび酢酸でなる群から選択されるいずれか一つ以上の分画溶媒の分画物であることを特徴とする請求項１に記載の薬剤学的組成物。
【請求項７】
トキンソウ分画物は、トキンソウジクロロメタン分画溶媒の分画物であることを特徴とする請求項６に記載の薬剤学的組成物。
【請求項８】
脱毛は、栄養障害性脱毛、内分泌性脱毛、血管障害性脱毛、若年性脱毛、結髪性脱毛、円形脱毛、神経性脱毛、粃糠性脱毛、トリコチロマニア、悪性脱毛、女性型脱毛、男性型脱毛、アンドロゲン性脱毛、休止期脱毛、頭部白癬、全頭脱毛、減毛症、遺伝性乏毛症、全身薬剤性脱毛、機械的脱毛、外傷性脱毛、圧迫性脱毛、成長期脱毛、梅毒性脱毛、脂漏性脱毛、症候性脱毛、瘢痕性脱毛及び先天性脱毛からなる群から選択される１つ以上であることを特徴とする請求項１〜７のいずれか一項に記載の薬剤学的組成物。
【請求項９】
頭皮又は毛髪に適用するためのものである、請求項１〜８のいずれか一項に記載の薬剤学的組成物。
【請求項１０】
頭皮又は毛髪に局所適用するためのものである、請求項９に記載の薬剤学的組成物。
【請求項１１】
トキンソウ抽出物又はその分画物が、経皮投与される、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の薬剤学的組成物。
【請求項１２】
トキンソウ抽出物又はその分画物が、エアロゾル剤、軟膏、液剤、ローション剤、パッチ剤、塗布用粉末、オイル、クリームおよびゲルからなる群から選択される一種として製剤化されることを特徴とする請求項１〜１１のいずれか一項に記載の薬剤学的組成物。
【請求項１３】
トキンソウ抽出物又はその分画物を含む、脱毛予防又は脱毛改善用の化粧料組成物。
【請求項１４】
化粧料組成物が、ヘアトニック、ヘアコンディショナー、ヘアローション、ヘア栄養ローション、ヘアシャンプー、ヘアリンス、ヘアトリートメント、ヘアクリーム、ヘア栄養クリーム、ヘアモイスチャークリーム、ヘアマッサージクリーム、ヘアワックス、ヘアエアゾール、ヘアパック、栄養ヘアパック、ヘア石鹸、ヘアクレンジングフォーム、ヘアオイル、毛髪乾燥剤、毛髪処理剤、毛髪染料剤、毛髪用ウェーブ剤、毛髪脱色剤、ヘアジェル、ヘアグレーズ、ヘアドレッシング、ヘアラッカー、ヘアモイスチャライザー、ヘアムース、ヘアスプレー、パッチ、軟膏剤、硬膏剤、リニメント剤、パスタ剤、カタプラズマ剤及び粉末剤からなる群から選択される一種以上であることを特徴とする、請求項１３に記載の化粧料組成物。
【請求項１５】
トキンソウ抽出物が、メタノール抽出物又はエタノール抽出物であることを特徴とする請求項１３又は１４に記載の化粧料組成物。
【請求項１６】
トキンソウ抽出物又はその分画物を有効成分として使用することを特徴とする、脱毛予防又は治療用薬剤の製造方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３３】
本発明において、脱毛は、具体的に栄養障害性脱毛、内分泌性脱毛、血管障害性脱毛、若年性脱毛、結髪性脱毛、円形脱毛、神経性脱毛、粃糠性脱毛、トリコチロマニア、悪性脱毛、女性型脱毛、男性型脱毛、アンドロゲン性脱毛、休止期脱毛、頭部白癬、全頭脱毛、減毛症、遺伝性乏毛症、全身薬剤性脱毛、機械的脱毛、外傷性脱毛、圧迫性脱毛、成長期脱毛、非剛性脱毛、梅毒性脱毛、脂漏性脱毛、症候性脱毛、瘢痕性脱毛及び先天性脱毛からなる群から選択される１つ以上であることができる。しかしながら、脱毛は、発生の直接又は間接的な原因を問わず、この分野で脱毛に分類されるすべての症状を含む意味として理解されるべきである。
【国際調査報告】
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