(57)【要約】  間葉系幹細胞成長因子の組成物、ならびに皮膚障害を処置する、加齢の影響を緩和する、創傷、整形外科的障害、性機能障害を処置する、および／または炎症を低減するための該組成物の使用方法が開示されている。【特許請求の範囲】
【請求項１】
間葉系幹細胞（ＭＳＣ）セクレトーム組成物であって、
ＭＳＣ成長因子、ＭＳＣ細胞外小胞、ＭＳＣエクソソーム、およびＭＳＣ抽出物からなる群から選択されるＭＳＣ調製物を含む成長因子粉状助剤と、
医薬担体とを含み、
前記成長因子、エクソソーム、抽出物、および細胞外小胞が、ヒトＭＳＣ、動物ＭＳＣ、多分化能間質細胞、線維芽細胞、および線維芽細胞様細胞からなる群から選択される細胞から得られ、かつ
前記ＭＳＣ調製物が、標準的な高酸素培養条件下で培養された細胞および人工創傷治癒条件下で培養された細胞からなる群から選択される少なくとも１種のメンバーを含む、ＭＳＣセクレトーム組成物。
【請求項２】
前記成長因子、細胞外小胞、および／またはエクソソームの分解を低減するための保護コーティングをさらに含む、請求項１に記載のＭＳＣセクレトーム組成物。
【請求項３】
前記保護コーティングが凍結防止剤のオリゴ糖および／またはタンパク質溶液を含む、請求項２に記載のＭＳＣセクレトーム組成物。
【請求項４】
前記高酸素培養条件が、血清補充物質を含有する約２１％の酸素を含む、請求項１に記載のＭＳＣセクレトーム組成物。
【請求項５】
前記人工創傷治癒条件が２０％未満の酸素を含む、請求項１に記載のＭＳＣセクレトーム組成物。
【請求項６】
前記人工創傷治癒条件が、炎症性サイトカイン、血管新生因子、および低減したグルコースの存在下で約０．１％〜約５％の酸素を含む、請求項５に記載のＭＳＣセクレトーム組成物。
【請求項７】
前記成長因子粉状助剤が、凍結しているまたは凍結乾燥している、請求項１に記載のＭＳＣセクレトーム組成物。
【請求項８】
治療有効量の請求項１に記載のＭＳＣセクレトーム組成物を含む、絆創膏、ステント、スポンジ、足場、マトリックス、創傷被覆材、移植片、外科用ドレープ、縫合糸、膏薬、クリーム、または創傷接着剤。
【請求項９】
対象へ請求項１〜８のいずれかに記載のＭＳＣセクレトーム組成物を投与することを含む、前記対象における創傷、皮膚障害、整形外科的障害、整形外科的損傷、脊椎障害、または脊椎損傷を処置する方法。
【請求項１０】
対象における創傷、皮膚障害、整形外科的障害、整形外科的損傷、脊椎障害、または脊椎損傷を処置する方法であって、前記対象へ、間葉系幹細胞（ＭＳＣ）成長因子、ＭＳＣエクソソーム、ＭＳＣ細胞外小胞、およびＭＳＣ抽出物からなる群から選択されるＭＳＣ調製物と組成物基剤とを含む組成物を投与することを含み、前記成長因子および細胞外マトリックスが、ヒトＭＳＣ、動物ＭＳＣ、多分化能間質細胞、線維芽細胞、および線維芽細胞様細胞からなる群から選択される細胞から得られ、前記ＭＳＣ調製物が、標準的な高酸素培養条件下で培養された細胞および人工創傷治癒条件下で培養された細胞からなる群から選択される少なくとも１種のメンバーを含む、方法。
【請求項１１】
前記組成物が、創傷または皮膚障害に関して局所投与される、請求項１０に記載の創傷、皮膚障害、整形外科的障害、整形外科的損傷、脊椎障害、または脊椎損傷を処置する方法。
【請求項１２】
前記組成物が、前記創傷、関節、または椎間板内へと注射される、請求項１０に記載の創傷、皮膚障害、整形外科的障害、整形外科的損傷、脊椎障害、または脊椎損傷を処置する方法。
【請求項１３】
前記組成物が、静脈内注入を経て投与される、請求項１０に記載の創傷、皮膚障害、整形外科的障害、整形外科的損傷、脊椎障害、または脊椎損傷を処置する方法。
【請求項１４】
請求項１０〜１３のいずれかに記載の創傷、皮膚障害、整形外科的障害、整形外科的損傷、脊椎障害、または脊椎損傷を処置する方法であって、前記創傷、皮膚障害、整形外科的障害、整形外科的損傷、脊椎障害、または脊椎損傷が、身体的外傷または加齢と関連する変性疾患の症状であるかまたは前記変性疾患によって引き起こされる、方法。
【請求項１５】
請求項１０〜１３のいずれかに記載の創傷、皮膚障害、整形外科的障害、整形外科的損傷、脊椎障害、または脊椎損傷を処置する方法であって、前記創傷、皮膚障害、整形外科的障害、整形外科的損傷、脊椎障害、または脊椎損傷が、自己免疫疾患または自己炎症性疾患の症状である、方法。
【請求項１６】
請求項１０〜１３のいずれかに記載の創傷、皮膚障害、整形外科的障害、整形外科的損傷、脊椎障害、または脊椎損傷を処置する方法であって、前記創傷、皮膚障害が皮膚障害の症状である、方法。
【請求項１７】
請求項１０〜１３のいずれかに記載の創傷、皮膚障害、整形外科的障害、整形外科的損傷、脊椎障害、または脊椎損傷を処置する方法であって、前記創傷、皮膚障害、整形外科的障害、整形外科的損傷、脊椎障害、または脊椎損傷が、感染症の症状である、方法。
【請求項１８】
対象における疼痛を処置する方法であって、前記対象へ、請求項１〜８のいずれかに記載のＭＳＣセクレトーム組成物を投与することを含む、方法。
【請求項１９】
性機能障害を処置する方法であって、対象へ、請求項１〜８のいずれかに記載のＭＳＣセクレトーム組成物を投与することを含む、方法。
【請求項２０】
ＭＳＣセクレトーム組成物の構成要素となるようＭＳＣ調製物において使用するためのＭＳＣ助剤を調製する方法であって、
ａ）ＭＳＣを得ることと、
ｂ）標準的な高酸素培養条件または人工創傷治癒低酸素条件の下で前記ＭＳＣを培養することと、
ｃ）前記培養したＭＳＣを刺激して、集塊性混合物を形成する抗炎症性タンパク質、ペプチド、サイトカイン、ケモカイン、グリコサミノグリカン、細胞外マトリックス（ＥＣＭ）、プロテオグリカン、エクソソーム、およびセクレトームを選択的に分泌させることと、
ｄ）前記集塊性混合物を封入することと、を含む、方法。
【請求項２１】
前記集塊性混合物中の前記ＭＳＣが、溶解した後に、ステップｄにおいて封入される、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
封入後に集塊性混合物を凍結させることをさらに含む、請求項２０または２１に記載の方法。
【請求項２３】
前記凍結した集塊性混合物を凍結乾燥させて（ｌｙｏｐｈｉｌｉｚｉｎｇ）または凍結乾燥させて（ｆｒｅｅｚｅ−ｄｒｙｉｎｇ）、乾燥粉末を創出することをさらに含む、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記ＭＳＣ集塊性混合物をタンパク質またはコラーゲン粉末栄養補助食品と組み合わせることによってＭＳＣセクレトーム組成物を生成することをさらに含む、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
前記ＭＳＣ集塊性混合物をクリーム、膏薬、ローション、油、ジェル、ヒドロゲル、または軟膏と混合することによって幹細胞成長因子組成物を生成することをさらに含む、請求項請求項２０〜２４のいずれかに記載の方法。
【請求項２６】
前記ＭＳＣ集塊性混合物または幹細胞成長因子組成物を、薬用絆創膏、スポンジ、マトリックス、足場、ステント、創傷被覆材、移植片、外科用ドレープ、縫合糸、または創傷接着剤上に含浸させることをさらに含む、請求項請求項２０〜２４または２５のいずれかに記載の方法。
【請求項２７】
前記ＭＳＣ集塊性混合物を徐放性カプセル、ゼラチンカプセルもしくはヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）カプセル内へと組み合わせることによって、または経口摂食（ＰＯ）のためにカプレットもしくは錠剤へと圧縮することによって、幹細胞成長因子組成物を生成することをさらに含む、請求項請求項２０〜２４のいずれかに記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれる２０１８年５月３０日出願の米国仮出願第６２／６７７，７４４号、２０１８年６月６日出願の米国仮出願第６２／６８１，１７２号、２０１８年６月２１日出願の米国仮出願第６２／６８８，０１２号、および２０１８年７月１６日出願の米国仮出願第６２／６９８，６７３号の利益を主張する。
【背景技術】
【０００２】
Ｉ．背景
間葉系幹細胞（ＭＳＣ）は、ミオサイト、軟骨細胞、脂肪細胞、および骨芽細胞を含む、複数の細胞種類へと分化する能力を有する多分化能細胞である。典型的には、これらの細胞は、胎盤、臍帯血、脂肪組織、骨髄、羊水、または血管周囲組織において認知することができる。ＭＳＣは、その分化能に加えて、多くの異なるサイトカイン、成長因子、および細胞外小胞の発現を結果的にもたらす免疫調節能力を有することが長期にわたって認識されてきた。これらの効果を理由に、骨髄濃縮物、脂肪由来血管画分、または臍帯血、胎盤、骨膜、もしくは羊膜を含む出生後の生成物から得られた自家または同種異系間でのＭＳＣの養子移入が、創傷、炎症性容態、自己免疫疾患、自己炎症性疾患、移植片対宿主病、および敗血症を処置するために使用されてきた。しかしながら、これらの処置は、細胞の移入を包含し、それゆえ、移入された細胞の摩滅による治療上の損失を被り、おそらくドナーおよびレシピエントの組織を適合させることについての必要性を示す。必要なのは、移植された細胞療法と関係する欠点のない、自家および同種異系の細胞性ＭＳＣ由来生成物の利点を提供することができる新たな無細胞ＭＳＣ由来生成物である。
【発明の概要】
【０００３】
ＩＩ．概要
間葉系幹細胞（ＭＳＣ）セクレトーム組成物（ＭＳＣ由来成長因子、エクソソーム、抽出物、および／または組成物を含む細胞外小胞を含む）に関する方法および組成物、ならびにそれらの使用方法が開示されている。
【０００４】
一態様において、皮膚障害、創傷の処置、および整形外科的なまたは脊髄の処置において使用するためのＭＳＣセクレトーム組成物（ＭＳＣ成長因子、ＭＳＣエクソソーム、ＭＳＣ抽出物および／または細胞外小胞を含む組成物を含むがこれらに限定されない）であって、間葉系幹細胞（ＭＳＣ）成長因子、ＭＳＣエクソソーム、ＭＳＣ細胞外小胞、および／またはＭＳＣ抽出物からなる群から選択されるＭＳＣ調製物と組成物基剤とを含む成長因子粉状化助剤を含むＭＳＣセクレトーム組成物が本明細書に開示されており、この中で、成長因子および細胞外マトリックスは、ヒトＭＳＣ、動物ＭＳＣ、および線維芽細胞様細胞からなる群から選択される細胞から得られ、ＭＳＣ調製物は、標準的な高酸素培養条件（例えば、２１％酸素）の下で培養された細胞および（例えば、炎症性サイトカイン、血管新生因子および低減したグルコースの存在下での０．１％〜約２０．９％酸素のような）人工創傷治癒条件の下で培養された細胞からなる群から選択される少なくとも１種のメンバーを含む。一態様において、ＭＳＣセクレトーム組成物（ＭＳＣ成長因子、ＭＳＣエクソソーム、ＭＳＣ抽出物および／または細胞外小胞を含む組成物を含むがこれらに限定されない）は、凍結することができ、または凍結乾燥を介して粉状にすることができる。一態様において、ＭＳＣセクレトーム組成物（ＭＳＣ成長因子組成物および細胞外小胞組成物を含むがこれらに限定されず、かつ凍結したおよび／または凍結乾燥して粉状にした組成物を含む）は、成長因子および細胞外小胞の分解を低減させるために、（例えば、凍結保護オリゴ糖およびタンパク質溶液のような）保護コーティングをさらに含むことができる。
【０００５】
いかなる先行する態様の治療有効量のＭＳＣセクレトーム組成物（ＭＳＣ成長因子、ＭＳＣエクソソーム、ＭＳＣ抽出物、および／または細胞外小胞を含む組成物を含むがこれらに限定されず、かつ凍結したおよび／または凍結乾燥して粉状にした組成物を含む）も含むスポンジ、足場、ステント、マトリックス、移植片絆創膏、創傷被覆材、外科用ドレープ、縫合糸、軟膏、クリーム、または創傷接着剤も本明細書に開示される。
【０００６】
一態様において、対象における創傷、皮膚障害、整形外科的障害、整形外科的損傷、脊椎障害、または脊椎損傷を処置する方法であって、該対象に、いかなる先行態様のＭＳＣセクレトーム組成物（ＭＳＣ成長因子、ＭＳＣエクソソーム、ＭＳＣ抽出物、および／または細胞外小胞を含む組成物を含むがこれらに限定されず、かつ凍結したおよび／または凍結乾燥して粉状にした組成物を含む）も投与することを含む方法が本明細書に開示されている。例えば、対象における創傷、皮膚障害、整形外科的障害、整形外科的損傷、脊椎障害、または脊椎損傷を処置する方法であって、該対象に、間葉系幹細胞（ＭＳＣ）成長因子、ＭＳＣエクソソーム、細胞外小胞、およびＭＳＣ抽出物からなる群から選択されるＭＳＣ調製物と組成物基剤とを含む、ＭＳＣセクレトーム組成物（ＭＳＣ成長因子、ＭＳＣ抽出物、ＭＳＣエクソソーム、および／または細胞外小胞を含む組成物を含み、かつ凍結したおよび／または凍結乾燥した粉状組成物を含む）を含む組成物を投与することを含む方法が本明細書に開示されており、この中で、成長因子および細胞外マトリックスは、ヒトＭＳＣ、動物ＭＳＣ、および線維芽細胞様細胞からなる群から選択される細胞から得られ、ＭＳＣ調製物は、標準的な高酸素培養条件下で培養された細胞および人工創傷治癒条件下で培養された細胞からなる群から選択される少なくとも１種のメンバーを含む。
【０００７】
いかなる先行態様のＭＳＣセクレトーム組成物（ＭＳＣ成長因子および細胞外小胞を含む組成物を含むがこれらに限定されず、かつ凍結したならびに／または凍結乾燥して粉状にした組成物を含む）の構成要素であるようＭＳＣ調製物において使用するためのＭＳＣ助剤（凍結したまたは粉状にした助剤を含むがこれらに限定されない）を調製する方法であって、ａ）ＭＳＣを得ること、ｂ）標準的な高酸素培養条件または人工創傷治癒低酸素条件の下でＭＳＣを培養すること、ｃ）培養したＭＳＣを刺激して、集塊性混合物を形成する抗炎症性のタンパク質、ペプチド、サイトカイン、ケモカイン、グリコサミノグリカン、細胞外マトリックス（ＥＣＭ）、プロテオグリカン、エクソソーム、およびセクレトームを選択的に分泌すること、ならびにｄ）該集塊性混合物を封入すること、を含む方法も本明細書に開示されている。いくつかの態様において、集塊性混合物中のＭＳＣは、非損傷のままであるかまたは溶解した後に、工程ｄにおいて封入することができる。
【０００８】
一態様において、ＭＳＣセクレトーム組成物（ＭＳＣ成長因子、ＭＳＣエクソソーム、ＭＳＣ抽出物および／または細胞外小胞を含む組成物を含むがこれらに限定されず、かつ凍結したおよび／または凍結乾燥して粉状にした組成物を含む）の構成要素であるようＭＳＣ調製物において使用するための、いかなる先行する態様の（凍結したまたは粉状にした助剤を含むがこれらに限定されない）ＭＳＣ助剤を調製する方法であって、封入後に集塊性混合物を凍結させることをさらに含む方法が本明細書に開示されている。一態様において、該方法は、凍結した集塊性のかつ封入した混合物を凍結乾燥させること（ｌｙｏｐｈｉｌｉｚｉｎｇ）または凍結乾燥させること（ｆｒｅｅｚｅ−ｄｒｙｉｎｇ）をさらに含むことができる。
【図面の簡単な説明】
【０００９】
ＩＩＩ．図面の簡単な説明
添付の図面は、本明細書の一部に組み込まれ、本明細書の一部を構成し、いくつかの実施形態を図示し、本説明と共に、本開示の組成物および方法を説明する。
【００１０】
【図１】ＭＳＣ培地からの細胞外小胞のナノ粒子追跡解析（ＮＴＡ）を示す。ＮＴＡは、ＭＳＣ培地からの細胞外小胞の粒径および濃度を決定するためにブラウン運動を使用する、液体中のナノメートル規模の粒子を視覚化しおよび解析する方法である。
【００１１】
【図２】粒径および濃度を示す蛍光顕微鏡によって評価されたエクソソームを示す。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
ＩＶ．詳細な説明
本発明の以下の発明を実施するための形態において、本発明の数多くの詳細、例、および実施形態が説明されている。しかしながら、本発明が、明らかにされた実施形態に限定されないこと、および本発明が、いくつかの用途のうちのいずれかに適合することができることは、当業者に明確かつ明白であろう。
【００１３】
本化合物、組成物、物品、デバイスおよび／または方法が開示および説明される前に、別段の明示がない限り、特定の合成方法もしくは特定の組換え生物工学法に、または別段の明示がない限り、特定の試薬に限定されないことは理解されるべきであり、本化合物、組成物、物品、デバイスおよび／または方法はそれら自体、当然のことながら変えることができる。また、本明細書で使用される用語は、特定の実施形態のみを説明する目的のためであり、限定することを意図するものではないことも理解されたい。
【００１４】
Ａ．定義
本明細書および添付の特許請求の範囲において使用する場合、単数形「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」は、文脈からそうでないことが明確に示されない限り、複数の指示対象を含む。したがって、例えば、「医薬担体」への言及は、２種以上のそのような担体の混合物などを含む。
【００１５】
本明細書において、範囲は、「約」を頭につけたある特定値からおよび／または「約」を頭につけた別の特定値までとして表すことができる。そのような範囲が表されるとき、別の実施形態は、一方の特定の値から、および／または他方の特定の値までを含む。同様に、先行詞「約」を使用することによって、値が近似値として表されるとき、特定値により別の実施形態が形成されることは理解されるであろう。さらに、各範囲の端点が、その他の端点と関連している場合においても、その他の端点とは独立している場合においても、有意であることは理解されるであろう。また、本明細書に開示される値が多いこと、および各値がまた、その値自体に加えて、その特定の値の頭に「約」がつくものとしても本明細書に開示されていることも理解される。例えば、「１０」という値が開示されている場合、「約１０」もまた開示されている。また、当業者によって適切に理解されるように、値が開示されているとき、該値「以下」、「該値以上」および値間の可能な範囲もまた開示されることも理解される。例えば、「１０」という値が開示されている場合、「１０以下」および「１０以上」もまた開示されている。また、本出願全体を通じて、データが多くの異なる形式で提供されていること、ならびにこのデータが端点およびふりだし、ならびにデータ点のいずれかの組み合わせに対する範囲を表していることも理解される。例えば、「１０」という特定のデータ点および１５という特定のデータ点が開示されている場合、１０よりも大きいおよび１５よりも大きい、１０以上および１５以上、１０未満および１５未満、１０以下および１５以下、ならびに１０および１５に等しいことのほかに、１０と１５の間も考慮されて開示されていることは理解される。また、２つの特定の単位間の各単位もまた開示されていることも理解される。例えば、「１０および１５」が開示されている場合、１１、１２、１３および１４もまた開示されている。
【００１６】
「対象」という用語は、霊長類（例えば、ヒト）、ウシ、ウマ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、イヌ、ネコ、ウサギ、ラット、マウスなどを含むがこれらに限定されない哺乳動物のような動物を含むと本明細書で定義される。いくつかの実施形態において、対象は、ヒトである。
【００１７】
対象への「投与」は、対象へ作用薬を導入するまたは送達するいずれかの経路を含む。投与は、経口、局所、静脈内、皮下、経皮的、経真皮的、筋肉内、関節内、非経口、細動脈内、皮内、心室内、頭蓋内、腹腔内、病巣内、鼻腔内、直腸、膣、吸入による、植えられたリザーバを介する、非経口（例えば、皮下、静脈内、筋肉内、関節内、滑液内、胸骨内、髄腔内、腹腔内、肝臓内、病巣内および頭蓋内への注射または注入技術）などを含む、いずれかの適切な経路によって行うことができる。本明細書で使用される「同期投与」、「併用投与」、「同時投与」または「同時に投与される」とは、化合物が、別の化合物と同じ時点で、または別の化合物の本質的に直後に投与されることを意味する。後者の場合、２つの化合物は、観察された結果が、該化合物を同じ時点で投与するときに達成される結果と区別がつかないほど十分に近い時点で投与される。「全身投与」とは、例えば、循環系またはリンパ系への入口を経て、対象の身体の広範な領域（例えば、身体の５０％超）へ作用薬を導入するまたは送達する経路を介して、対象へ該作用薬を導入するまたは送達することを指す。これに対して、「局所投与」とは、作用薬を投与点の領域または投与点のすぐ近くの領域へ導入するまたは送達する経路、かつ該作用薬を治療上有意な量で全身に導入することがない経路を介して、対象へ該作用薬を導入することまたは送達することを指す。例えば、局所的に投与された作用薬は、投与点の局所的近傍では容易に検出可能であるが、対象の身体の遠位部分では検出可能ではないか、または無視できる量で検出可能である。投与は、自己投与および他者による投与を含む。
【００１８】
「生体適合性」とは概して、レシピエントに対して概して非毒性であり、かつ対象に有意な有害作用を引き起こさない材料およびそのいずれかの代謝産物または分解産物を指す。
【００１９】
「〜を含む」とは、組成物、方法などが、列挙された要素を含むが、他の要素を排除するものではないことを意味するよう意図している。組成物および方法を定義するために使用されるときの「〜から本質的になる」とは、列挙された要素を含むが、その組み合わせにとっていずれかの本質的に有意な他の要素を排除することを意味するものとする。したがって、本明細書で定義される要素から本質的になる組成物は、単離および精製の方法からの微量の不純物、ならびにリン酸緩衝塩類溶液、防腐剤などのような医薬として許容され得る担体を排除しないであろう。「〜からなる」とは、本発明の組成物を投与するために他の成分の、および実質的な方法ステップの、微量を超える要素を排除することを意味するものとする。これらの各移行句によって定義される実施形態は、本発明の範囲内である。
【００２０】
「対照」とは、比較目的のために実験において使用される代替的な対象または試料である。対照は、「陽性」または「陰性」であることができる。
【００２１】
「放出制御」または「徐放」とは、インビボで所望の薬物動態プロフィルを達成するために、制御された様式で所与の剤形から作用薬を放出することを指す。「放出制御」作用薬送達の一態様は、所望される作用薬放出の動態を確立するために、製剤および／または剤形を操作する能力である。
【００２２】
作用薬の「有効量」とは、所望の効果を提供するための作用薬の十分な量を指す。「有効」である作用薬の量は、対象の齢および全身状態、特定の１種または数種の作用薬などのような多くの因子に応じて、対象ごとに異なるであろう。したがって、定量化された「有効量」を明確に述べることは必ずしも可能ではない。しかしながら、いずれの対象の場合においても、適切な「有効量」は、所定の実験法を用いて、当業者によって決定されることができる。また、本明細書で使用する場合、かつ別途具体的に明記されていない限り、作用薬の「有効量」はまた、治療有効量および予防有効量のいずれも取り扱う量を指すこともできる。治療効果を達成するために必要な作用薬の「有効量」は、対象の齢、性別および体重のような因子によって異なることがある。薬用量投与計画は、最適な治療応答を提供するように調整することができる。例えば、数回に分けた用量を毎日投与してもよいし、または治療状況の緊急性によって適切であると示唆されるように用量を比例して低減してもよい。
【００２３】
「低下」は、遺伝子発現、タンパク質産生を、症状、疾患、組成物、容態または活性の量を結果的により少なめにする、いずれかの変化を指すことができる。物質を用いて遺伝子産物を遺伝的に出力させるのが、該物質を用いずに遺伝子産物を出力させるのと比較して少なめであるとき、該物質はまた、遺伝子の遺伝的出力を低下させると理解されている。また、低下は、例えば、障害の症状が以前に観察されたよりも低いように、該症状の変化であることができる。低下は、統計的に有意な量で、容態、症状、活性、組成のいずれかの個別の、中央値の、または平均値の低下であることができる。したがって、該低下が統計的に有意である限り、該低下は、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、または１００％の低下であることができる。
【００２４】
「抑制する」、「抑制すること」、および「抑制」は、活性、応答、容態、疾患、または他の生物学的パラメータを低下させることを意味する。このことは、活性、応答、容態、または疾患の完全な消失を含むことができるが、それに限定されない。このことはまた、例えば、天然のまたは対照のレベルと比較して、活性、応答、容態、または疾患の１０％の低減も含むことができる。したがって、該低減は、天然のまたは対照のレベルと比較して、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００％、またはこれらのうちの２つの間のいずれかの量の低減であることができる。
【００２５】
本明細書において使用される「予防する」、「予防すること」、「予防」という用語、およびその文法上の変形は、疾患の発症もしくは再発および／または該疾患に付随する症状の１種以上を部分的にまたは完全に遅延させるまたは妨げる、あるいは対象が疾患を獲得するまたは再獲得するのを防止する、あるいは疾患または該疾患に付随する症状の１種以上を獲得するまたは再取得する対象のリスクを低減させる、方法を指す。
【００２６】
「医薬として許容され得る」構成要素は、生物学的にまたは他の点で望ましくないものではない構成要素を指すことができ、すなわち、該構成要素は、有意な望ましくない生物学的効果を引き起こすことなく、または製剤中に該製剤の他の構成要素が含有される該製剤の該他の構成要素のうちのいずれかと有害な様式で相互作用することなく、本発明の医薬製剤に組み込まれることができ、および本明細書に説明するように対象へ投与することができる。ヒトへの投与に関して使用されるとき、該用語は概して、該構成要素が毒性試験および製造試験の所要規格を満たしていたこと、または該構成要素が米国食品医薬品局により作成されたＩｎａｃｔｉｖｅ  Ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔ  Ｇｕｉｄｅに掲載されていることを含意する。
【００２７】
「医薬として許容され得る担体」（時に「担体」と称される）は、概して安全かつ非毒性である医薬組成物または治療用組成物を調製する上で有用である、かつ獣医学でのおよび／またはヒトでの医薬としてのまたは治療上の使用にとって許容され得る担体を含む、担体または賦形剤を意味する。「担体」または「医薬として許容され得る担体」という用語は、リン酸緩衝塩類溶液、水、（油／水エマルションまたは水／油エマルションのような）エマルションおよび／または種々の種類の湿潤剤を含むことができるが、これらに限定されない。本明細書で使用する場合、「担体」という用語は、いずれかの賦形剤、希釈剤、増量剤、塩、緩衝剤、安定剤、可溶化剤、脂質、または医薬製剤において使用するために当技術分野で周知の、および本明細書でさらに説明されるような他の材料を包含するが、これらに限定されない。
【００２８】
「薬理学的に活性のある」誘導体または類似体におけるような「薬理学的に活性のある」（または単に「活性のある」）は、親化合物と同じ種類の薬理学的活性をほぼ同程度で有する誘導体または類似体（例えば、塩、エステル、アミド、複合体、代謝産物、異性体、断片など）を指すことができる。
【００２９】
「治療薬」とは、有益な生物学的効果を有するいずれかの組成物を指す。有益な生物学的効果には、治療効果、例えば、障害または他の望ましくない生理学的容態の処置と、予防効果、例えば、障害または他の望ましくない生理学的容態（例えば、非免疫原性癌）の予防との両方が含まれる。これらの用語はまた、塩、エステル、アミド、作用薬前駆体（ｐｒｏａｇｅｎｔ）、活性のある代謝産物、異性体、断片、類似体などを含むがこれらに限定されない、本明細書に具体的に言及されている有益な作用薬の医薬として許容され得る、薬理学的に活性のある誘導体も包含する。「治療薬」という用語が使用されるとき、加えて、または詳しい作用薬が具体的に特定されているとき、該用語は、該作用薬自体、および医薬として許容され得る、薬理学的に活性のある塩、エステル、アミド、作用薬前駆体、複合体、活性のある代謝産物、異性体、断片、類似体などを含むと理解されるべきである。
【００３０】
「ポリマー」とは、天然のまたは合成の比較的高分子量の有機化合物を指し、その構造は、繰り返される小さな単位であるモノマーで表すことができる。ポリマーの非限定的な例として、ポリエチレン、ゴム、セルロースが挙げられる。合成ポリマーは、典型的には、モノマーの付加重合または縮合重合によって形成される。「コポリマー」という用語は、２種以上の異なる繰り返し単位（モノマー残基）から形成されたポリマーを指す。例としてであって限定するものではないが、コポリマーは、交互コポリマー、ランダムコポリマー、ブロックコポリマー、またはグラフトコポリマーであることができる。また、ある特定の態様において、ブロックコポリマーのさまざまなブロックセグメントが、それ自体コポリマーを含むことができることも企図されている。「ポリマー」という用語は、天然ポリマー、合成ポリマー、ホモポリマー、ヘテロポリマーまたはコポリマー、付加ポリマーなどを含むがこれらに限定されないあらゆる形態のポリマーを包含する。
【００３１】
組成物（例えば、作用薬を含む組成物）の「治療有効量」または「治療有効用量」とは、所望の治療結果を達成するために有効である量を指す。いくつかの実施形態において、所望の治療結果は、Ｉ型糖尿病の制御である。いくつかの実施形態において、所望の治療結果は、肥満の制御である。所与の治療薬の治療有効量は、典型的には、処置されている障害または疾患の種類および重症度、ならびに対象の齢、性別および体重のような因子に関して異なるであろう。該用語はまた、疼痛緩和のような所望の治療効果を促進するために有効な治療薬の量、または治療薬の送達速度（例えば、経時的な量）を指すこともできる。正確な所望の治療効果は、処置されるべき容態、対象の耐性、投与されるべき作用薬および／または作用薬製剤（例えば、治療薬の効力、製剤中の作用薬濃度など）、ならびに当業者によって認識されているさまざまな他の因子によって異なるであろう。いくつかの例において、所望の生物学的なまたは医学的な応答は、数日間、数週間、または数年間にわたって組成物の複数の薬用量を対象へ投与した後に達成される。
【００３２】
本明細書および後続の特許請求の範囲において、以下の意味を有するように定義されるものとするいくつかの用語に言及する。
【００３３】
「場合による」または「場合により」とは、後述の事象または状況が発生しても発生しなくてもよいこと、および説明に該事象または状況が発生する場合と発生しない場合とが含まれることを意味する。
【００３４】
本出願全体を通じて、さまざまな公表物が参照されている。本出願が属する技術分野の水準をより完全に説明するために、これらの公表物の開示が、本明細書により本明細書へと参照により組み込まれる。開示された参考文献はまた、該参考文献が必要とされている文の中で論じられている、本明細書内に含まれる材料について、参照により本明細書に個別かつ具体的に組み込まれる。
【００３５】
Ｂ．組成物
開示された組成物を調製するために使用されるべき構成要素のほかに、本明細書に開示される方法の中で使用されるべき組成物自体も開示されている。これらおよび他の材料は本明細書に開示されており、これらの材料の組み合わせ、部分セット、相互作用、群などが開示されているとき、これらの化合物の、各さまざまな個々のおよび集合的な組み合わせならびに並べ替えへの具体的な言及は、明示的に開示されていないことがあるが、それぞれが本明細書で具体的に企図されおよび説明されていることは理解される。例えば、特定のＭＳＣセクレトームが開示されおよび論じられ、ＭＳＣセクレトーム組成物を含むいくつかの分子に対して行うことができるいくつかの改変が論じられている場合、別段の反対の指摘が具体的にされない限り、ＭＳＣの各々のおよびあらゆる可能な組み合わせおよび並べ替えが具体的に企図される。したがって、分子Ａ、ＢおよびＣのクラスのほかに、分子Ｄ、ＥおよびＦのクラス、ならびに組み合わせ分子の例であるＡ−Ｄが開示されている場合、それぞれが個別に列挙されていない場合でさえ、それぞれは、個別におよび集合的に企図された意味の組み合わせＡ−Ｅ、Ａ−Ｆ、Ｂ−Ｄ、Ｂ−Ｅ、Ｂ−Ｆ、Ｃ−Ｄ、Ｃ−ＥおよびＣ−Ｆが開示されているものと見なされる。同様に、これらのいずれかの部分セットまたは組み合わせも開示されている。したがって、例えば、Ａ−Ｅ、Ｂ−Ｆ、およびＣ−Ｅの部分群は、開示されているものと見なされるであろう。この考え方は、開示された組成物を調製するおよび使用する方法におけるステップを含むがこれらに限定されない、本出願のすべての態様に適用される。したがって、実行することができるさまざまな追加のステップが存在する場合、これらの追加のステップのそれぞれは、開示された方法の何らかの具体的な実施形態または実施形態の組み合わせを用いて実行することができることは理解される。
【００３６】
骨髄濃縮物もしくは脂肪由来間質血管画分（ＳＶＦ）または臍帯、胎盤もしくは羊膜、増殖したＭＳＣ培養物からのさまざまな出生後産物に含まれる既存の自家および同種異系の間葉系幹細胞（ＭＳＣ）は、創傷、整形外科病理学的疾患、および脊髄病理学的疾患を処置するために現に使用されており、既存の処置は、大量のＭＳＣセクレトーム（成長因子、サイトカイン、ケモカイン、エクソソーム、細胞外小胞、および／または抽出物を含むがこれらに限定されない）を含まない。加えて、幹細胞を含む処置（注射剤による処置を含む）は、加齢を防ぎ、瘢痕化、不均一な色素沈着を処置するのを助けることができるという当技術分野における根拠があるにも関わらず、クリーム、ローション、血清、化粧品などのような既存の皮膚用製品は、皮膚を処置しおよび強化するのに役立つ可能性のある成分を含むが、他の局所用製品は表皮に浸透せず、さらに重要なことに、ヒトＭＳＣ、またはＭＳＣ由来の成長因子およびタンパク質を含まない。実際、本開示よりも前に、これらの用途に使用することができる活性のあるＭＳＣ成長因子製品は開発されていない。したがって、一態様において、創傷、整形外科的障害、整形外科的損傷、眼科的疾患、脊椎損傷、または脊椎障害の処置において使用するための（ＭＳＣ成長因子、ＭＳＣエクソソーム、ＭＳＣ抽出物および／または細胞外小胞を含むがこれらに限定されない）ＭＳＣセクレトーム組成物が本明細書に開示されており、該処置用組成物は、（ｉ）間葉系幹細胞（ＭＳＣ）由来の調製物を含む成長因子粉状助剤、および（ｉｉ）医薬として許容され得る担体を含む。
【００３７】
先に記述のとおり、ＭＳＣは、ミオサイト、軟骨細胞、脂肪細胞、および骨芽細胞を含む、多数の細胞型へと分化する能力を持つ多分化能細胞である。典型的には、これらの細胞は、血管周囲組織を含め、胎盤、臍帯血、脂肪組織、骨髄、または羊水において認知することができる。本明細書で使用される場合、「ＭＳＣ」とは、多分化能幹細胞、多分化能間質細胞、間質血管細胞、周細胞、血管周囲細胞、間質細胞、多能性細胞、多分化能細胞、脂肪由来線維芽細胞様細胞、脂肪由来間質血管画分、脂肪由来ＭＳＣ、骨髄由来線維芽細胞様細胞、骨髄由来間質血管画分、骨髄由来ＭＳＣ、組織由来線維芽細胞様細胞、成体幹細胞、成体間質細胞、ケラチノサイト、および／またはメラノサイトを含むがこれらに限定されない高分化型以外の細胞を指す。
【００３８】
ＭＳＣは、その分化能に加えて、多くの異なるサイトカインおよび成長因子の発現をもたらす免疫調節能力を持っていることが長い間認識されてきた。本明細書で使用される場合、「ＭＳＣ調製物」または「ＭＳＣセクレトーム組成物」とは、ＭＳＣ成長因子、ＭＳＣエクソソーム、細胞外小胞、またはヒトＭＳＣ、線維芽細胞様細胞、ならびにウマ、ウシ、ブタ、ヒツジ、非ヒト霊長類、イヌ、ネコ、ウサギ、ラット、およびマウスからのＭＳＣを含むがこれらに限定されない非ヒト動物ＭＳＣから得られたＭＳＣまたはＭＳＣ可溶化液の無細胞抽出物を含む組成物を指す。実施形態において、ＭＳＣは、組成物が適用される患者に由来する（自家）か、または別の個体に由来する（同種異系）ことができる。ＭＳＣは、順化培地を収集するために、または可溶化液のための細胞の量を増加させるために、または本開示の組成物に組み込む前に新たに使用するために培養増殖することができる。
【００３９】
（ＭＳＣ成長因子、ＭＳＣエクソソーム、ＭＳＣ抽出物および／または細胞外小胞を含む組成物を含むがこれらに限定されない）ＭＳＣセクレトーム組成物は、約０．００００１〜約２０重量％、例えば約０．０１〜約１０重量％の間葉系幹細胞（ＭＳＣ）抽出物、ＭＳＣエクソソーム、またはＭＳＣ成長因子調製物を含むことができる。ＭＳＣ調製物は、ＭＳＣ順化培地または細胞培養増殖したＭＳＣからのＭＳＣ可溶化液のいずれかを含むことができる。いくつかの実施形態において、組成物は、ＭＳＣまたはＭＳＣ系統細胞の成長によって調整された無細胞培地の約０．０１〜約１０重量％をさらに含むことができ、この中で、細胞は、通常の高酸素培養条件下でまたは人工創傷治癒条件下で培養される。
【００４０】
本明細書に開示されるように、開示されたＭＳＣ助剤（成長因子セクレトーム組成物を凍結したかまたは粉状にしたかのいずれかの助剤を含む）を産生するために使用されるＭＳＣは、ＭＳＣ成長因子、セクレトーム、サイトカイン、ケモカイン、間葉系幹細胞タンパク質、ペプチド、グリコサミノグリカン、細胞外マトリックス（ＥＣＭ）、プロテオグリカン、セクレトーム、およびエクソソームを産生するために選択的に刺激することができる。本明細書で使用される場合、ＭＳＣ成長因子には、プロスタグランジンＥ２（ＰＧＥ２）、形質転換成長因子β１（ＴＧＦ−β１）、肝細胞成長因子（ＨＧＦ）、間質細胞由来因子−１（ＳＤＦ−１）、一酸化窒素、インドールアミン２，３−ジオキシゲナーゼ、インターロイキン−４（ＩＬ−４）、ＩＬ−６、インターロイキン−１０（ＩＬ−１０）、ＩＬ−１受容体アンタゴニストおよび可溶性ＴＮＦ−α受容体、インスリン様成長因子、線維芽細胞成長因子（ＦＧＦ）１〜２３（特に、ＦＧＦ１およびＦＧＦ２）、骨形成タンパク質（ＢＭＰ）１〜１５、表皮成長因子（ＥＧＦ）、形質転換成長因子−α（ＴＧＦ−α）マクロファージ刺激タンパク質（ＭＳＰ）、血小板由来成長因子（ＰＬＧＦ）、血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）、マクロファージコロニー刺激因子（Ｍ−ＣＳＦ）、インスリン、顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）、ならびにエストロゲンおよび甲状腺ホルモンを含むホルモンが含まれる。
【００４１】
一態様において、温度、酸素分圧、ｐＨ、グルコース飽和度、培養密度（ｃｏｎｆｌｕｅｎｃｙ）、および成長表面のような成長条件が、培養中に成長する細胞の遺伝子発現およびタンパク質産生に影響を及ぼすことができ、それにより異なる成長因子およびサイトカインが産生されているという結果をもたらすことができることは理解されており、本明細書で企図されている（表１を参照されたい）。例えば、成長表面の剛性（ヤング率）は、該成長表面の上で成長する細胞の遺伝子発現およびタンパク質産生に影響を及ぼす。脂肪細胞および軟骨細胞は通常、より柔らかく弾性のある成長表面（約１０ｋＰａ〜１２ｋＰａ）の上で維持されるのに対し、骨細胞は硬い表面（約１０６〜１２６ｋＰａ）の上でより良好に成長する。表面の剛性を調整することにより、細胞のセクレトームおよびそれらの伝達シグナル（成長因子、エクソソーム、サイトカインおよびケモカイン）に影響を及ぼすことができる。
[表１]
表１：成長因子分泌をもたらす成長条件                           
2021526556.tif 000002
培養システム内で創出された環境は、セクレトームおよび特定の成長因子の産生に影響を及ぼすことができる。基質の弾性率、温度、細胞の培養密度、栄養素の供給、およびさまざまな組み合わせのような環境の変化は、これらの変化に影響を及ぼすことができる。
【００４２】
一態様において、（例えば、ＭＳＣセクレトーム組成物のような）ＭＳＣ調製物は、ＭＳＣ成長因子、ＭＳＣエクソソーム、および／または標準的な高酸素培養条件（例えば、２１％酸素）下で培養されたＭＳＣもしくは（例えば、炎症性サイトカイン、血管新生因子、および低減したグルコースの存在下での０．１％〜約５％の酸素のような）人工創傷治癒条件下で培養されたＭＳＣから得られたＭＳＣの細胞抽出物もしくはＭＳＣ可溶化液の細胞抽出物を含む。
【００４３】
本明細書に開示されるように、人工創傷治癒条件は、局所血液循環の混乱によって通常引き起こされる栄養素供給の低減および老廃物除去の低減が存在する実際の創傷の成長条件を模倣する。このことは、新たな血管がつくられ、血液循環が回復するまで、細胞にとって過酷な環境を創出する。したがって、ＭＳＣを培養するために使用される人工創傷治癒条件は、グルコース利用能の低減、酸素分圧の低減、ｐＨの低減、および温度の上昇において、以下の成長条件のうちの１種以上を含むことができる。
【００４４】
一態様において、グルコース利用能は、通常の対照と比較して低減することができる。グルコースを低減させるが、細胞に損傷を与えないように改質された培地は、グルコースの０〜５０％の低減、より好ましくは、グルコースの約５％〜４０％の低減を生じることができる。例えば、ＭＳＣ人工創傷治癒培養条件は、約５％〜約１５％、約１０％〜約２０％、約１５％〜約２５％、約２０％〜約３０％、または約２５％から約３５％のグルコース低減のような、約１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、または５０％のグルコースの低減を含むことができる。
【００４５】
一態様において、酸素分圧は、酸素レベルを低酸素条件へと低減させることができる。通常の大気中の酸素はおよそ２１％であり、低減すると低酸素と見なされる。したがって、一態様において、ＭＳＣは、０．０％〜２０．９％の酸素、約０．１％〜約０．５％の酸素、約０．１％〜約２．０％、約０．１％〜約５．０％の酸素、約０．５％〜約５．０％の酸素、約１．０％〜約１０％の酸素、約５．０％から約１０．０％の酸素、および約１０．０％〜約１５．０％で、人工創傷治癒条件下で培養することができる。好ましくは、ＭＳＣ創傷治癒培養条件の間、酸素分圧は、例えば、０、０．０５、０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９、１．０、１．１、１．２、１．３、１．４、１．５、１．６、１．７、１．８、１．９、２．０、２．１、２．２、２．３、２．４、２．５、２．６、２．７、２．８、２．９、３．０、３．１、３．２、３．３、３．４、３．５、３．６、３．７、３．８、３．９、４．０、４．１、４．２、４．３、４．４、４．５、４．６、４．７、４．８、４．９、５．０、５．１、５．２、５．３、５．４、５．５、５．６、５．７、５．８、５．９、６．０、６．１、６．２、６．３、６．４、６．５、６．６、６．７、６．８、６．９、７．０、７．１、７．２、７．３、７．４、７．５、７．６、７．７、７．８、７．９、８．０、８．１、８．２、８．３、８．４、８．５、８．６、８．７、８．８、８．９、９．０、９．１、９．２、９．３、９．４、９．５、９．６、９．７、９．８、９．９、１０、１０．５、１１、１１．５、１２、１２．５、１３、１３．５、１４、１４．５、１５、１５．５、１６、１６．５、１７、１７．５、１８、１８．５、１９、１９．５、２０、または２０．５％の酸素のような、約０．５％〜２０．５％の酸素である。
【００４６】
また、ｐＨも、人工創傷治癒条件下で低減させることができる。生理的ｐＨは、非常に厳密に維持され、通常は中性ｐＨ＝７．２±０．２（７．０〜７．４）に非常に近い。しかしながら、創傷において、酸性環境は、ｐＨ＝６．２±０．２（すなわち、６．０〜約６．４のｐＨ）を有することができる。したがって、人工創傷治癒培養条件下で、ｐＨは、６．０、６．１、６．２、６．３、６．４、６．５、６．６、６．７、６．８、６．９、７．０、７．１、７．２、７．３または７．４のような、約６．０〜約７．４、例えば、６．０〜約６．４、約６．２〜約６．４、約６．２〜約６．６、約６．４〜約６．６、約６．４〜約６．８、または約６．６〜約７．０であることができる。
【００４７】
人工創傷治癒培養条件下では、培養環境の温度を上げて、創傷部位の温度上昇を模倣することができる。生理的恒常性の温度は、３７℃（９８．６°Ｆ）に維持される。わずかな上昇または低下は、細胞代謝に有意な変化を引き起こすことができる。温度を、３７℃を超えて約４０℃（１０４°Ｆ）までのいずれかの温度まで上昇させることにより、「熱をもつ」環境を創出することができる。したがって、一態様において、ＭＳＣのための人工創傷治癒培養条件は、約３５℃〜約３９℃、約３５℃〜約３６℃、約３６℃〜約３７℃、約３７℃〜約３８℃、約３８℃〜約３９℃、約３９℃〜約４０℃を含むことができる。一態様において、人工創傷治癒培養の温度は、３５．０、３５．１、３５．２、３５．３、３６．４、３５．５、３５．６、３５．７、３５．８、３５．９、３６．０、３６．１、３６．２、３６．３、３６．４、３６．５、３６．６、３６．７、３６．８、３６．９、３７．０、３７．１、３７．２、３７．３、３７．４、３７．５、３７．６、３７．７、３７．８、３７．９、３８．０、３８．１、３８．２、３８．３、３８．４、３８．５、３８．６、３８．７、３８．８、３８．９、３９．０、３９．１、３９．２、３９．３、３９．４、３９．５、３９．６、３９．７、３９．８、３９．９、または４０．０℃であることができる。
【００４８】
一態様において、ＭＳＣセクレトーム組成物（ＭＳＣ成長因子、ＭＳＣエクソソーム、ＭＳＣ抽出物および／または細胞外小胞を含む組成物を含むがこれらに限定されない）は、成長因子の分解を低減させるために、（例えば、凍結防止剤オリゴ糖およびタンパク質溶液のような）保護コーティングをさらに含むことができる。保護コーティングはポリマーとして操作することができることが理解されており、本明細書で企図されている。「ポリマー」とは、天然のまたは合成の比較的高分子量の有機化合物を指し、その構造は、繰り返される小さな単位であるモノマーで表すことができる。ポリマーの非限定的な例として、ポリエチレン、ゴム、セルロースが挙げられる。合成ポリマーは、典型的には、モノマーの付加重合または縮合重合によって形成される。「コポリマー」という用語は、２種以上の異なる繰り返し単位（モノマー残基）から形成されたポリマーを指す。例としてであって限定するものではないが、コポリマーは、交互コポリマー、ランダムコポリマー、ブロックコポリマー、またはグラフトコポリマーであることができる。また、ある特定の態様において、ブロックコポリマーのさまざまなブロックセグメントが、それ自体コポリマーを含むことができることも企図されている。「ポリマー」という用語は、天然ポリマー、合成ポリマー、ホモポリマー、ヘテロポリマーまたはコポリマー、付加ポリマーなどを含むがこれらに限定されないあらゆる形態のポリマーを包含する。一態様において、ゲルマトリックスは、コポリマー、ブロックコポリマー、２元ブロックコポリマー、および／または３元ブロックコポリマーを含むことができる。
【００４９】
一態様において、保護コーティングは、生体適合性ポリマーを含むことができる。一態様において、生体適合性ポリマーは、架橋することができる。このようなポリマーはまた、脂肪褐変薬および／または脂肪調節薬を組織内へと緩徐に放出するよう機能することもできる。本明細書で使用される場合、生体適合性ポリマーには、多糖類；親水性ポリペプチド；ポリ−Ｌ−グルタミン酸（ＰＧＳ）、ガンマ−ポリグルタミン酸、ポリ−Ｌ−アスパラギン酸、ポリ−Ｌ−セリン、またはポリ−Ｌ−リジンのようなポリ（アミノ酸）；ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリプロピレングリコール（ＰＰＧ）、およびポリ（エチレンオキシド）（ＰＥＯ）のようなポリアルキレングリコールおよびポリアルキレンオキシド；ポリ（オキシエチル化ポリオール）；ポリ（オレフィンアルコール）；ポリビニルピロリドン）；ポリ（ヒドロキシアルキルメタクリルアミド）；ポリ（ヒドロキシアルキルメタクリラート）；ポリ（サッカリド）；ポリ（ヒドロキシ酸）；ポリ（ビニルアルコール）、ポリ（乳酸）、ポリ（グリコール酸）、およびポリ（乳酸−コ−グリコール酸）のようなポリヒドロキシ酸；ポリ３−ヒドロキシブチラートまたはポリ４−ヒドロキシブチラートのようなポリヒドロキシアルカノアート；ポリカプロラクトン；ポリ（オルトエステル）；ポリ無水物；ポリ（ホスファゼン）；ポリ（ラクチド−コ−カプロラクトン）；チロシンポリカーボネートのようなポリカーボネート；ポリアミド（合成および天然ポリアミドを含む）、ポリペプチド、およびポリ（アミノ酸）；ポリエステルアミド；ポリエステル；ポリ（ジオキサノン）；ポリ（アルキレンアルキラート）；疎水性ポリエーテル；ポリウレタン；ポリエーテルエステル；ポリアセタール；ポリシアノアクリラート；ポリアクリラート；ポリメチルメタクリラート；ポリシロキサン；ポリ（オキシエチレン）／ポリ（オキシプロピレン）コポリマー；ポリケタール；ポリリン酸塩；ポリヒドロキシ吉草酸塩；ポリアルキレンシュウ酸塩；ポリアルキレンコハク酸塩；ポリ（マレイン酸）、ならびにこれらのコポリマーが含まれるが、それらに限定されない。また、生体適合性ポリマーには、ポリアミド、ポリカーボネート、ポリアルキレン、ポリアルキレングリコール、ポリアルキレンオキシド、ポリアルキレンテレフタラート、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、メタクリラートＰＶＡ（ｍ−ＰＶＡ）、ポリビニルエーテル、ポリビニルエステル、ポリビニルハロゲン化物、ポリビニルピロリドン、ポリグリコリド、ポリシロキサン、ポリウレタンおよびこれらのコポリマー、アルキルセルロース、ヒドロキシアルキルセルロース、セルロースエーテル、セルロースエステル、ニトロセルロース、アクリルエステルおよびメタクリルエステルのポリマー、メチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシブチルメチルセルロース、酢酸セルロース、プロピオン酸セルロース、セルロースアセタートブチラート、セルロースアセタートフタラート、カルボキシルエチルセルロース、三酢酸セルロース、硫酸セルロースナトリウム塩、ポリ（メチルメタクリラート）、ポリ（エチルメタクリラート）、ポリ（ブチルメタクリラート）、ポリ（イソブチルメタクリラート）、ポリ（ヘキシルメタクリラート）、ポリ（イソデシルメタクリラート）、ポリ（ラウリルメタクリラート）、ポリ（フェニルメタクリラート）、ポリ（メチルアクリラート）、ポリ（イソプロピルアクリラート）、ポリ（イソブチルアクリラート）、ポリ（オクタデシルアクリラート）、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリ（エチレングリコール）、ポリ（エチレンオキシド）、ポリ（エチレンテレフタラート）、ポリ（ビニルアルコール）、ポリ（酢酸ビニル、ポリビニルクロリドポリスチレンおよびポリビニルプリロリドン、それらの誘導体、それらの線状および分枝コポリマーならびにそれらのブロックコポリマー、ならびにそれらのブレンドも含むことができる。例示的な生分解性ポリマーとしては、ポリエステル、ポリ（オルトエステル）、ポリ（エチレンアミン）、ポリ（カプロラクトン）、ポリ（ヒドロキシブチラート）、ポリ（ヒドロキシバレラート）、ポリ無水物、ポリ（アクリル酸）、ポリグリコリド、ポリ（ウレタン）、ポリカーボネート、ポリリン酸エステル、ポリホスプリアゼン、これらの誘導体、それらの線状および分枝コポリマーならびにそれらのブロックコポリマー、ならびにそれらのブレンドが挙げられる。
【００５０】
いくつかの実施形態において、保護コーティングは、単糖の炭水化物構造物、および非還元の多糖または二糖を含むがこれらに限定されない二糖または多糖のような炭水化物ポリマー、およびこれらのいずれかの組み合わせを含む。保護コーティングにおいて使用することができる炭水化物の例は、グルコース、アルドース（Ｄ−アロース、Ｄ−アルトローズ、Ｄ−マンノースなど）、グルコピラノース、ペンタヒドロキシヘキサナール、α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｄ−グルコース、α−Ｄ−グルコピラノシル二水和物、β−Ｄ−グリコピラノシル単位のポリマー、β−Ｄ−フルクトフラノシルα−Ｄ−グルコピラノシド（無水物／二水和物）、β−Ｄ−ガラクトピラノシル−Ｄ−グルコース、α−Ｄ−グルコピラノシル−α−Ｄ−グルコピラノシド（無水物／二水和物）、ガラクトース、ペントース（リボース、キシロース、リキソース）、デキストロース、ドデカカーボンモノデカヒドラート、フルクトース、スクロース、ラクトース、マルトース、トレハロース、アガロース、Ｄ−ガラクトシル−β−（１−４）−無水−Ｌ−ガラクトシル、セルロース、β−Ｄ−グリコピラノシル単位のポリマー、およびデンプン、ならびに多価アルコール、ポリアルコール、アルジトール、エリスリトール、グリシトール、グリセロール、キシリトール、およびソルビトールを含む。
【００５１】
いくつかの実施形態において、保護コーティングは、ポリ（乳酸）、ポリ（グリコール酸）、およびポリ（乳酸−コ−グリコール酸）のような生体適合性および／または生分解性のポリエステルまたはポリ無水物を含有する。粒子は、以下のポリエステル、すなわち、本明細書で「ＰＧＡ」と称されるグリコール酸単位と、ポリ−Ｌ−乳酸、ポリ−Ｄ−乳酸、ポリ−Ｄ，Ｌ−乳酸、ポリ−Ｌ−ラクチド、ポリ−Ｄ−ラクチド、および「ＰＬＡ」と本明細書で集約的に称されるポリ−Ｄ，Ｌ−ラクチド５のような乳酸単位と、ポリ（ｅ−カプロラクトン）のような、「ＰＣＬ」と本明細書で集約的に称されるカプロラクトン単位とを含むホモポリマー；ならびに乳酸：グリコール酸の比を特徴とし、「ＰＬＧＡ」と本明細書で集約的に称されるポリ（乳酸−コ−グリコール酸）およびポリ（ラクチド−コ−グリコリド）のさまざまな形態のような、乳酸およびグリコール酸単位を含むコポリマー；ならびにポリアクリラート、およびその誘導体のうちのもう１つを含有することができる。また、例示的なポリマーとしては、ＰＬＧＡ−ＰＥＧまたはＰＬＡ−ＰＥＧコポリマーのさまざまな形態のような、本明細書で「ペグ化ポリマー」と集約的に称されるポリエチレングリコール（ＰＥＧ）と上述のポリエステルとのコポリマーも挙げられる。ある特定の実施形態において、ＰＥＧ領域は、ポリマーと共有結合して、開裂可能なリンカーによって「ペグ化ポリマー」を生成することができる。一態様において、ポリマーは、少なくとも６０、６５、７０、７５、８０、８５、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、または９９パーセントのアセタールペンダント基を含む。
【００５２】
本明細書に開示される３元ブロックコポリマーは、例えば、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリ酢酸ビニル、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、ポリエチレンオキシド（ＰＥＯ）、ポリ（ビニルピロリドン−コ−ビニルアセタート）、ポリメタクリラート、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンヒマシ油、ポリカプロラクタム、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、ポリ（乳酸−グリコール酸）、ポリ（乳酸コ−グリコール酸）（ＰＬＧＡ）、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロースなどのセルロース誘導体のようなコアポリマーを含む。
【００５３】
本明細書に開示される保護コーティングにおいて使用することができる２元ブロックコポリマーの例は、例えば、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリ酢酸ビニル、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、ポリエチレンオキシド（ＰＥＯ）、ポリ（ビニルピロリドン−コ−ビニルアセタート）、ポリメタクリラート、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンヒマシ油、ポリカプロラクタム、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、ポリ（乳酸−グリコール酸）、ポリ（乳酸コ−グリコール酸）（ＰＬＧＡ）のようなポリマーを含む。
【００５４】
一態様において、保護コーティング（すなわち、封入した、封入した組成物は、担体または封入材料としてレシチンまたは加水分解レシチンをさらに含むことができる。本明細書で使用される場合、レシチンおよび／または加水分解レシチンのコーティングは、ホスファチジルコリン、ホスファチジルイノシトール、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルセリン、およびホスファチジン酸を含むコーティングを含む。レシチンの供給源は、ｐｎａｔまたは動物の源であることができる。
【００５５】
一態様において、ＭＳＣ助剤を封入溶液中に入れることによって形成される保護コーティングを形成するために使用されるポリマー、単糖、二糖、または多糖のうちのいずれもが、保護コーティングを形成するのに適切な濃度であることができる。例えば、ポリマー、単糖、二糖、または多糖は、０．０１ｍＭ〜１０．０Ｍ濃度のいずれかの濃度、例えば、約０．０１Ｍ〜約０．１Ｍ、約０．１ｍＭ〜約１．０Ｍ、約１．０Ｍ〜約１０．０Ｍであることができる。例示的な濃度としては、０．０１、０．０２、０．０３、０．０４、０．０５、０．０６、０．０７、０．０８、０．０９、０．１、０．２、０．３、０．４、０．４、０．６、０．７、０．８、０．９、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、２００、２２５、２５０、２７５、３００、３２５、３５０、３７５、４００、４５０、５００、６００、７００、８００、９００ｍＭ、１、１．１、１．２、１．３、１．４、１．５、１．６、１．７、１．８、１．９、２、３、４、５、６、７、８、９、１０Ｍが挙げられる。
【００５６】
図１および図２に示すように、開示されたＭＳＣセクレトーム組成物中のエクソソームおよび細胞外小胞が生成された。
【００５７】
一態様において、創傷を処置する１つの方法は、ＭＳＣセクレトーム組成物（ＭＳＣ成長因子、ＭＳＣエクソソーム、ＭＳＣ抽出物および／または細胞外小胞を含む組成物を含むがこれらに限定されない）の投与を皮下に、筋肉内に、静脈内に、局所的に（例えば、膏薬、クリーム剤、および／または軟膏の使用を経るような）経るだけでなく、ＭＳＣセクレトーム組成物を含有するステント、スポンジ、マトリックス、足場、包帯、被覆材、縫合糸、移植片、外科用ドレープ、外科用接着剤、および／またはステープルを植え込むことによってもなされる。したがって、一態様において、治療有効量のＭＳＣセクレトーム組成物を含む薬用のステント、足場、スポンジ、マトリックス、絆創膏、創傷被覆材、移植片、外科用ドレープ、縫合糸、膏薬、クリーム剤、または創傷接着剤が、本明細書に開示される。ＭＳＣセクレトーム組成物（ＭＳＣ成長因子、ＭＳＣエクソソーム、ＭＳＣ抽出物および／または細胞外小胞を含む組成物を含むがこれらに限定されない）は、先に記述されるように、局所投与されることができ、顔、首、手、または身体のその他の所望の部分へ適用されることができる。絆創膏、創傷被覆材、移植片、外科用ドレープ、縫合糸、足場、マトリックス、スポンジ、またはステントへ適用するとき、ＭＳＣセクレトーム組成物は、粉末として適用することができる。
【００５８】
一態様において、本明細書に開示されるＭＳＣセクレトーム組成物（ＭＳＣ成長因子、ＭＳＣエクソソーム、ＭＳＣ抽出物および／または細胞外小胞を含む組成物を含むがこれらに限定されない）は、油、蝋もしくは他の標準的な脂肪性物質、または従来のゲル化剤および／もしくは増粘剤；乳化剤；保湿剤；皮膚軟化薬；日焼け止め；セラミドのような親水性もしくは親油性の活性作用薬；フリーラジカルと戦うための作用薬；殺菌薬；金属イオン封鎖剤；防腐剤；塩基性化剤または酸性化剤；香料；界面活性剤；増量剤；アロエまたは緑茶抽出物のような天然産物または天然産物の抽出物；ビタミン；あるいは着色剤のような、創傷治癒分野において典型的に認知されているいずれかの公知の成分を含んでもよい。粉末と組み合わせることができる他の成分は、さまざまな抗酸化物質から選択することができる抗酸化物質を含むことができる。適切な抗酸化物質には、ビタミンＣ（Ｌ−アスコルビン酸塩、アスコルバート−２ホスファートマグネシウム塩、アスコルビルパルミタート、テトラヘキシルデシルアスコルバート）、ビタミンＥ（トコトリエノール）、ビタミンＡ（レチノール、レチナール、レチノイン酸、ベータ−カロテンのようなプロビタミンＡカロテノイド）のようなビタミン、Ｎ−アセチルグルコサミン、またはグルコサミンの他の誘導体が含まれる。他の成分には、リノール酸（ＬＡ）、ガンマ−リノール酸（ＧＬＡ）、アルファ−リノール酸（ＡＬＡ）、ジホモ−γ−リノレン酸（ＤＧＬＡ）、アラキドン酸（ＡＲＡ）などのような、Ω−３、Ω−６、およびΩ−９ポリ不飽和脂肪酸のような少なくとも１種類の必須脂肪酸が含まれてもよい。脂肪酸は、ツキミソウ油、カシス油、ルリヂサ油、またはＧＬＡ修飾ベニバナ種子を含むさまざまな供給源から得ることができる。他の成分には、多血小板フィブリンマトリックス、Ｎ−アセチルグルコサミンまたはグルコサミンの他の誘導体、超低分子量（ＵＬＭＷ）ヒアルロン酸、コンドロイチン硫酸、またはケラタン硫酸のような、ＥＣＭ産生およびヒアルロン酸産生を支援するための少なくとも１種類の成分を含んでもよい。
【００５９】
本明細書に開示されるＭＳＣセクレトーム組成物は、創傷治癒による若返り、増強、および改善または回復した皮膚組織を提供できることは理解されており、本明細書で企図される。該組成物はまた、関節炎および変性した椎間板の処置における注射剤としても使用することができる。その上、該組成物の実施形態は、インスリン、インスリン様成長因子、甲状腺ホルモン、線維芽細胞成長因子、エストロゲン、レチノイン酸などのような追加の成長因子またはホルモンを含めることを必要としなくてもよい。いくつかの態様において、開示される幹細胞成長因子組成物は、抗生物質、抗ざ瘡薬、リポソーム、抗酸化物質、血小板に多いフィブリンマトリックス、鎮痛薬、抗炎症薬、およびインスリン、インスリン様成長因子、甲状腺ホルモン、線維芽細胞成長因子、エストロゲン、レチノイン酸などのような成長因子を含むがこれらに限定されない追加の有効成分を含むことができる。このような追加の有効成分は、本明細書に開示される幹細胞成長因子組成物および細胞外小胞組成物、ならびにＭＳＣ順化培地、ＭＳＣ可溶化液、およびＭＳＣ由来の生成物と混合することができ、次いでラノリンアルコール、蝋、および油を乳化させる混合物、または石油もしくは鉱油、第四級アンモニウム化合物、脂肪アルコール、および脂肪エステル皮膚軟化薬の混合物、または組成物中で実質的に同様であるローション剤の中で、解凍もしくは溶解、混合、または乳化することができる。
【００６０】
１．医薬担体／医薬製品の送達
先に説明したように、組成物はまた、医薬として許容され得る担体中で、インビボで投与することもできる。「医薬として許容され得る」が意味するのは、生物学的にまたはその他に望ましくないことがない賦形材料であり、すなわち、該材料は、いかなる望ましくない生物学的作用も引き起こすことなく、または材料が中に含有されている組成物の他の構成要素のうちのいずれとも有害な様式で相互作用することなく、核酸と共に、対象へ投与することができる。担体は、当業者に周知であろうとおり、当然のことながら、有効成分のいかなる分解も最小限にし、対象におけるいかなる有害な副作用も最小限にするように選択されるであろう。
【００６１】
組成物は、経口で、非経口で（例えば、静脈内に）、筋肉内注射によって、腹腔内注射によって、経真皮的に、体外に、局所鼻腔内投与または吸入薬による投与を含む局所的になどで投与することができる。本明細書で使用する場合、「局所鼻腔内投与」は、外鼻孔の片方または両方を経た鼻および鼻腔の内への組成物の送達を意味し、噴霧機構、噴霧器、もしくは液滴機構による、または組成物および／もしくは賦形剤のエアロゾル化を経た送達を含むことができる。吸入薬による組成物の投与は、噴霧機構または液滴機構による送達を介した鼻または口を経たものであることができる。また、噴霧器または挿管を介して呼吸器系のいずれかの領域（例えば、肺）へ直接送達することもできる。必要とされる組成物の正確な量は、対象の種、齢、体重および全身状態、処置下のアレルギー障害の重症度、使用する特定の組成物、組成物の投与様式などに応じて、対象ごとに異なるであろう。したがって、あらゆる組成物に対して正確な量を明示することは可能でない。しかしながら、適切な量は、本明細書の教示を考慮して、所定の療法を用いる担当医または当業者によって決定することができる。
【００６２】
局所投与に関して提供されるとき、組成物は、ローション、クリーム、顔料、日焼け止め、油、ジェル、ヒドロゲル、散剤、膏薬、軟膏などのような治療用組成物の適用のための基剤を含むことができる。このような基剤には、ファンデーション、フェイシャルマスク、リップケア製品、ヘアケア製品、スキンクレンザー、および角質除去剤のような化粧基剤、ならびに点眼用軟膏および点眼薬を含むことができる。加えて、基剤は、抗ざ瘡薬、リポソーム、抗酸化物質、および多血小板フィブリンマトリックス、ヒアルロン酸溶液のような追加の成分を含むことができるか、または薄膜ポリマーシートもしくは吸収性ポリ乳酸フィルムに適用することができる。したがって、一態様において、創傷（熱傷、剥削創および潰瘍を含む）、整形外科的障害、整形外科的損傷、脊椎損傷、または脊椎障害の処置において使用するための組成物が本明細書に開示されており、該処置用組成物は、（ｉ）間葉系幹細胞（ＭＳＣ）調製物を含むＭＳＣセクレトーム組成物（ＭＳＣ成長因子、ＭＳＣエクソソーム、ＭＳＣ抽出物、および／または細胞外小胞を含む組成物を含むがこれらに限定されず、かつ凍結したおよび／または凍結乾燥した粉状の組成物を含む）、および（ｉｉ）医薬担体を含み、該医薬担体は、組成物基剤を含む。
【００６３】
ＭＳＣセクレトーム組成物は、経口投与することができる。例えば、散剤として調製するとき、ＭＳＣセクレトーム組成物の最終的な粉末は、乳清タンパク質、クレアチン、またはウシ、ブタ、もしくはヒツジの皮膚、関節半月板、もしくは腱を含むさまざまな供給源からの、もしくは海藻からの加水分解コラーゲンのような、栄養補助食品粉末に添加することができる。この混合物は、酵素生成されたコラーゲンペプチドに、またはさまざまな供給源からのコラーゲンゼラチンに添加することができる。この成分は、独立した粉末として均質に組み合わせることができるか、またはゼラチンカプセル、徐放性カプセルもしくはヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）カプセルの中へ組み合わせることができるか、または経口摂食（ＰＯ）のためにカプレット剤もしくは錠剤へと圧縮することができる。したがって、ＭＳＣセクレトーム組成物は、ウシ、ブタ、ヒツジ、または海藻の供給源由来のコラーゲンまたはタンパク質と組み合わせると、食事不足または腸の炎症を処置するために使用することができる。幹細胞成長組成物（ＭＳＣ助剤粉末を含むがこれに限定されない）がゼラチンカプセル、ＨＰＭＣカプセルまたは錠剤の形態で提供されるとき、カプセルまたは錠剤は、コラーゲンまたはタンパク質粉末と組み合わせた約０．０１〜約１０重量％のＭＳＣ成長因子または抽出物調製物を含むことができる。ＭＳＣ成長因子または抽出物調製物には、増殖したＭＳＣまたはその可溶化液を含んでも含まなくてもよい。実施形態は、ヒトまたは動物の供給源に由来するＭＳＣおよび／またはＭＳＣ系譜細胞の成長による、約０．０１〜約１０重量％の無細胞順化培地セクレトームをさらに含んでもよい。
【００６４】
組成物の非経口投与は、使用される場合、概して注射を特徴とする。注射剤は、液状の液剤もしくは懸濁剤、注射前に液剤中の懸濁液の溶液に適した固体形態、またはエマルションとしてのいずれかで、従来の形式で調製することができる。比較的最近になって改変された非経口投与のためのアプローチは、一定の薬用量が維持されるように、緩徐放出または徐放の系の使用を包含する。例えば、参照により本明細書に組み込まれる米国特許第３，６１０，７９５号を参照されたい。
【００６５】
ａ）医薬として許容され得る担体
賦形剤を含む組成物は、医薬として許容され得る適切な担体との組み合わせで治療上使用することができる。
【００６６】
適切な担体および該担体の配合は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ（１９ｔｈ  ｅｄ．）ｅｄ．Ａ．Ｒ．Ｇｅｎｎａｒｏ，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ  １９９５において説明されている。典型的には、製剤を等張性にするために、適切な量の医薬として許容され得る塩が製剤中で使用される。医薬として許容され得る担体の例としては、生理塩類溶液、リンガー溶液およびデキストロース溶液が含まれるが、これらに限定されない。溶液のｐＨは、好ましくは約５〜約８、より好ましくは約７〜約７．５である。さらなる担体には、抗体を含有する固体疎水性ポリマーの半透性マトリックスであって、成形された物品、例えば、フィルム、リポソームまたは微粒子の形態である半透性マトリックスのような徐放性調製物が含まれる。ある特定の担体が、例えば、投与される組成物の投与経路および濃度に応じて、より好ましいものであることができることは、当業者に自明であろう。
【００６７】
医薬担体は、当業者に公知である。これらは、最も典型的には、無菌水、生理塩類溶液および生理的ｐＨで緩衝された溶液のような溶液を含む、ヒトへの薬物投与のための標準的な担体であろう。組成物は、局所的に、筋肉内にまたは皮下に投与することができる。他の化合物は、当業者によって使用される標準的な手順によって投与されるであろう。
【００６８】
医薬組成物は、選択された分子に加えて、担体、増粘剤、希釈剤、緩衝剤、防腐剤、界面活性剤などを含んでもよい。また、医薬組成物は、抗菌薬、抗炎症薬、麻酔薬などのような１種以上の有効成分も含んでもよい。
【００６９】
医薬組成物は、局所処置または全身処置が所望であるかどうかと、処置されるべき領域とに応じて、いくつかの方法で投与することができる。投与は、局所的に（眼に、膣に、直腸に、鼻腔内にを含む）、経口的に、吸入によって、または非経口的に、例えば、点滴静注、皮下注射、腹腔内注射または筋肉内注射によってであることができる。開示されている抗体は、静脈内に、腹腔内に、筋肉内に、皮下に、腔内に、または経真皮的に投与することができる。
【００７０】
非経口投与のための調製物には、無菌の水性または非水性の溶液、懸濁液、およびエマルションが含まれる。非水性溶媒の例は、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、オリーブ油のような植物油、およびオレイン酸エチルのような注射可能な有機エステルである。水性担体には、塩類溶液および緩衝された媒体を含む、水、アルコール性／水性溶液、エマルションまたは懸濁液が含まれる。非経口ビヒクルには、塩化ナトリウム溶液、デキストロースリンガー液、デキストロースおよび塩化ナトリウム、乳酸リンガー液、または不揮発性油が含まれる。静脈内ビヒクルには、流体および栄養素補充液、電解質補充液（デキストロースリンガー液に基づくもののような）などが含まれる。例えば、抗菌薬、酸化防止剤、キレート剤、および不活性ガスなどのような、防腐剤およびその他の助剤も存在してよい。
【００７１】
開示された幹細胞成長因子組成物の局所投与用の製剤には、軟膏、ローション、クリーム、ジェル、滴剤、坐剤、スプレー剤、液剤および散剤が含まれることができる。従来の医薬担体、水性、粉状または油性の基剤、増粘剤などが必要であるかもしれず、または望ましいかもしれない。いくつかの態様において、担体は、乳化ラノリンアルコール、蝋、および油の混合物、またはペトロラツムもしくは鉱油、第四級アンモニウム化合物、脂肪アルコール、および脂肪エステル皮膚軟化薬の混合物を含む基剤を含むことができる。あるいは、基剤は、乳化ラノリンアルコール、水、ペトロラツム、グリセリン、パルミチン酸イソステアリル、ブチレングリコール、ステアリン酸グリセリルの混合物またはこれらの混合物を含むクリームを含んでもよい。一態様において、本開示の組成物は、まつげ処置を含んでよく、したがって、化粧品基剤は、鉱油、亜麻仁油、ヒマシ油、ユーカリ、ラノリン、蜜蝋の混合物、または所望の場合、非常に少量の（＜２％）防腐剤、着色剤および／もしくは水を含むこれらの混合物を含んでもよい。
【００７２】
いくつかの実施形態において、創傷治癒、整形外科および脊髄の基剤は、例えば、約１〜約２０重量％の保湿剤、約０．１〜約１０重量％の増粘剤および水を含有することができる担体であってよい。あるいは、担体は、約７０〜約９９重量％の界面活性剤、および約０〜約２０重量％の脂肪を含んでもよい。あるいは、担体は、所望の場合、約８０％〜９９．９％の増粘剤、約５〜約１５％の界面活性剤、約２〜約１５％の保湿剤、約０〜約８０％の油、非常に少量（＜２％）の防腐剤、着色剤および／または香水、ならびに水を含んでもよい。
【００７３】
いくつかの態様において、組成物は、生理活性物質の創傷浸透を改善するための浸透増強剤をさらに含んでもよい。適切な浸透増強剤には、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ＤＭＳＯ様化合物、低分子量ヒアルロン酸、エタノール性化合物、ピログルタミン酸エステルなどを含むことができる。
【００７４】
経口投与用の組成物には、散剤もしくは顆粒剤、水もしくは非水性媒体中の懸濁剤もしくは溶剤、カプセル剤、サシェ剤または錠剤が含まれる。増粘剤、着香剤、希釈剤、乳化剤、分散助剤または結合剤が望ましいことがある。
【００７５】
組成物のいくつかはおそらく、塩酸、臭化水素酸、過塩素酸、硝酸、チオシアン酸、硫酸およびリン酸のような無機酸、ならびにギ酸、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、乳酸、ピルビン酸、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、マレイン酸およびフマル酸のような有機酸との反応によって、または水酸化ナトリウム、水酸化アンモニウム、水酸化カリウムのような無機塩基、ならびにモノ−、ジ−、トリアルキルアミンおよびモノ−、ジ−、トリアリールアミンならびに置換エタノールアミンのような有機塩基との反応によって形成される医薬として許容され得る酸付加塩または塩基付加塩として投与することができる。
【００７６】
ｂ）治療上の使用
組成物を投与するための有効な薬用量およびスケジュールは経験的に決定することができ、このような決定を行うことは当技術分野の範疇である。組成物の投与のための薬用量範囲は、障害の症状が影響を受けることができる所望の効果を生じるのに十分多い薬用量範囲である。薬用量は、望ましくない交叉反応、アナフィラキシー反応などの有害な副作用を引き起こすほど多いものとしない。概して、薬用量は、患者の齢、容態、性別、および疾患の程度、投与経路、または、他の薬剤が投与計画に含まれているか否かで異なっており、当業者により決定することができる。薬用量は、特定の必要性またはいずれかの禁忌の事象においては、個々の医師によって調整することができる。薬用量は変えることができ、１回以上の用量投与を毎日、１日または数日間、投与することができる。所与の部類の医薬品の適切な薬用量については、手引きを文献において認知することができる。例えば、抗体の適切な用量を選択する上での手引きは、抗体の治療上の使用に関する文献、例えば、Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，Ｆｅｒｒｏｎｅ  ｅｔ  ａｌ．，ｅｄｓ．，Ｎｏｇｅｓ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎｓ，Ｐａｒｋ  Ｒｉｄｇｅ，Ｎ．Ｊ．，（１９８５）ｃｈ．２２およびｐｐ．３０３−３５７、Ｓｍｉｔｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ｉｎ  Ｈｕｍａｎ  Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ  ａｎｄ  Ｔｈｅｒａｐｙ，Ｈａｂｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，ｅｄｓ．，Ｒａｖｅｎ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（１９７７）ｐｐ．３６５−３８９において認知することができる。単独で使用される抗体の典型的な１日薬用量は、先に記載の因子に応じて、１日当たり体重の約１μｇ／ｋｇ〜最大１００ｍｇ／ｋｇまたはそれを超える範囲であり得る。加えて、薬用量についての情報は、療法として幹細胞を使用して実施された研究から決定することができる。これらの研究には、特定の適応症のために送達される既知の細胞数を有しており、経過観察を使用して、成長因子、細胞外小胞などの細胞セクレトームに関する細胞の有効用量を決定することができる。ＭＳＣ集塊性混合物の用量は、培養において成長した細胞の数、培養時間、および濃縮、封入などを含むことができる順化培地処理に基づいて計算することができる。
【００７７】
Ｃ．組成物の作製方法
本明細書全体に記載されているように、開示された幹細胞成長因子組成物は、ＭＳＣ成長因子、細胞外小胞およびエクソソームならびに／またはＭＳＣ抽出物を含むＭＳＣ調製物を含む成長因子粉状助剤（凍結したおよび／または凍結乾燥した粉状助剤を含むが、これらに限定されない）を含む。粉状助剤を調製するために、ＭＳＣ（例えば、ヒトＭＳＣ、動物ＭＳＣ、多分化能間質細胞、線維芽細胞（ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ）、および／または線維芽細胞（ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ  ｃｅｌｌ））を、標準的な高酸素培養条件下でまたは人工創傷治癒低酸素条件下で培養し、これを使用してＭＳＣを刺激して、集塊性混合物を形成する所望の抗炎症性タンパク質、成長因子、ペプチド、サイトカイン、ケモカイン、グリコサミノグリカン、プロテオグリカン、エクソソーム、およびセクレトームを選択的に分泌させることができる。次に、集塊性混合物を封入しおよび凍結することができる。いったん凍結すると、封入した集塊性混合物を治療上使用し、または凍結乾燥させて（ｌｙｏｐｈｉｌｉｚｅｄ）（凍結乾燥させて（ｆｒｅｅｚｅ−ｄｒｉｅｄ））、乾燥粉末を創出することができる。したがって、一態様において、ＭＳＣを得ること、標準的な高酸素培養条件下で、または人工創傷治癒低酸素条件下でＭＳＣを培養して、ＭＳＣを刺激して、集塊性混合物を形成する抗炎症性タンパク質、成長因子、ペプチド、サイトカイン、ケモカイン、グリコサミノグリカン、プロテオグリカン、エクソソーム、およびセクレトームを選択的に分泌させること、ならびに該集塊性混合物を封入した後に凍結させること、ならびに、凍結して封入した集塊性混合物を治療上使用するかまたは粉状に凍結乾燥させること（ｌｙｏｐｈｉｌｉｚｉｎｇ）（凍結乾燥させること（ｆｒｅｅｚｅ−ｄｒｙｉｎｇ））によってＭＳＣ由来の粉状助剤を調製する方法が本明細書に開示される。
【００７８】
一態様において、幹細胞成長因子組成物は、粉末状以外の状態の成長因子助剤を含むＭＳＣ調製物を含むことができ、凍結乾燥させること（ｌｙｏｐｈｉｌｉｚｉｎｇ）または凍結乾燥させること（ｆｒｅｅｚｅ−ｄｒｙｉｎｇ）をせずに封入した集塊性混合物として使用して使用して、粉末を形成し得ることが認識される。したがって、一態様において、ＭＳＣ調製物における使用のためのＭＳＣ助剤を調製して、ＭＳＣセクレトーム組成物の構成要素となるようにする方法であって、ＭＳＣを取得すること、標準的な高酸素培養条件下でまたは人工創傷治癒低酸素条件下でＭＳＣを培養して、培養されたＭＳＣを刺激して、集塊性混合物を形成する抗炎症性タンパク質、成長因子、ペプチド、サイトカイン、ケモカイン、グリコサミノグリカン、細胞外マトリックス（ＥＣＭ）、プロテオグリカン、エクソソーム、およびセクレトームを選択的に分泌すること、ならびに集塊性混合物を封入することを含む方法が本明細書に開示される。場合による態様において、集塊性混合物は、封入後に凍結することができる。
【００７９】
一態様において、順化培地中で培養されたＭＳＣは、封入の前に溶解して、抽出物および／または成長因子の収量に添加することができる。溶解されたＭＳＣを含む集塊混合物は、抽出された可溶化液と呼ばれ得、その後、そのまま使用されるか、またはカプセル化の前に濃縮され得る。ＭＳＣを溶解させることは、細胞膜を破壊する凍結防止剤を使用することなく、低張液を添加するか、または凍結融解過程を繰り返すことで達成することができる。その上、細胞は、培養表面に付着しているかまたは懸濁液中にある間、溶解することができる。細胞はまた、機械的均質化によって酵素で放出されおよび／または溶解されることもできる。したがって、一態様において、ＭＳＣセクレトーム組成物の構成要素であるＭＳＣ調製物で使用するためのＭＳＣ助剤を調製する方法であって、ＭＳＣを得ること、標準的な高酸素培養条件下でまたは人工創傷治癒低酸素条件下でＭＳＣを培養して、培養したＭＳＣを刺激して、集塊性混合物を形成する抗炎症性タンパク質、成長因子、ペプチド、サイトカイン、ケモカイン、グリコサミノグリカン、細胞外マトリックス（ＥＣＭ）、プロテオグリカン、エクソソーム、およびセクレトームを選択的に分泌させること、集塊性混合物中にＭＳＣを溶解すること、ならびに集塊性混合物を封入することを含む方法が本明細書に開示される。場合による態様において、集塊性混合物は、封入後に凍結することができる。さらなる場合による態様において、凍結した集塊性混合物を凍結乾燥させて（ｌｙｏｐｈｉｌｉｚｅｄ）または凍結乾燥させて（ｆｒｅｅｚｅ−ｄｒｉｅｄ）、乾燥粉末を創出することができる。
【００８０】
ＭＳＣ集塊性混合物（粉末状を含む）を調製するための開示された調製方法において使用されるＭＳＣは、多分化能幹細胞、多分化能間質細胞、間質血管細胞、周細胞、血管周囲細胞、間質細胞、多能性細胞、多分化能細胞、脂肪由来線維芽細胞様細胞、脂肪由来間質血管画分、脂肪由来ＭＳＣ、骨髄由来線維芽細胞様細胞、骨髄由来間質血管画分、骨髄由来ＭＳＣ、組織由来線維芽細胞様細胞、成体幹細胞、成体間質細胞、ケラチノサイト、および／またはメラノサイトを含むがこれらに限定されない、高分化型以外のいずれかの型の細胞から選択することができる。本開示全体を通して記述されるように、このような細胞は、胎盤、臍帯血、脂肪組織、骨髄、骨膜、または羊水から得ることができる。ＭＳＣは、ヒトまたは動物の骨髄吸引物、脂肪組織の酵素消化、間質血管画分（ＳＶＦ）、骨組織、骨膜、羊膜由来組織などの酵素消化物から得ることができる。したがって、一態様において、ＭＳＣ集塊性混合物および／または粉状集塊性混合物を調製する開示された方法は、ＭＳＣを取得することを含み、この中で、該ＭＳＣは、ａ）ヒトまたは動物の骨髄吸引物、ｂ）脂肪組織の酵素消化、ｃ）間質血管画分（ＳＶＦ）、またはｄ）骨組織、骨膜、羊膜由来組織の酵素消化などによって得られる。
【００８１】
先に記述のように、ＭＳＣ集塊性混合物または抽出された可溶化液（すなわち、溶解したＭＳＣを含有する集塊性混合物）は、封入溶液中で保護コーティングを用いて封入することができる。このような溶液は、例えば、凍結防止剤、オリゴ糖、およびタンパク質溶液を含むことができる。封入溶液内に含まれる保護コーティングが、ポリマーとして操作することができることは理解されており、本明細書で企図されている。「ポリマー」とは、天然のまたは合成の比較的高分子量の有機化合物を指すことができ、その構造は繰り返される小さな単位であるモノマーで表すことができる。ポリマーの非限定的な例として、ポリエチレン、ゴム、セルロースが挙げられる。合成ポリマーは、典型的には、モノマーの付加重合または縮合重合によって形成される。「コポリマー」という用語は、２種以上の異なる繰り返し単位（モノマー残基）から形成されたポリマーを指すことができる。例としてであって限定するものではないが、コポリマーは、交互コポリマー、ランダムコポリマー、ブロックコポリマー、またはグラフトコポリマーであることができる。また、ある特定の態様において、ブロックコポリマーのさまざまなブロックセグメントが、それ自体コポリマーを含むことができることも企図されている。「ポリマー」という用語は、天然ポリマー、合成ポリマー、ホモポリマー、ヘテロポリマーまたはコポリマー、付加ポリマーなどを含むがこれらに限定されないあらゆる形態のポリマーを包含する。一態様において、ゲルマトリックスは、コポリマー、ブロックコポリマー、２元ブロックコポリマー、および／または３元ブロックコポリマーを含むことができる。
【００８２】
一態様において、封入溶液中の保護コーティングは、生体適合性ポリマーを含むことができる。一態様において、生体適合性ポリマーは、架橋することができる。このようなポリマーはまた、脂肪褐変薬および／または脂肪調節薬を組織内へと緩徐に放出するよう機能することもできる。本明細書で使用される場合、生体適合性ポリマーには、多糖類；親水性ポリペプチド；ポリ−Ｌ−グルタミン酸（ＰＧＳ）、ガンマ−ポリグルタミン酸、ポリ−Ｌ−アスパラギン酸、ポリ−Ｌ−セリン、またはポリ−Ｌ−リジンのようなポリ（アミノ酸）；ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリプロピレングリコール（ＰＰＧ）、およびポリ（エチレンオキシド）（ＰＥＯ）のようなポリアルキレングリコールおよびポリアルキレンオキシド；ポリ（オキシエチル化ポリオール）；ポリ（オレフィンアルコール）；ポリビニルピロリドン）；ポリ（ヒドロキシアルキルメタクリルアミド）；ポリ（ヒドロキシアルキルメタクリラート）；ポリ（サッカリド）；ポリ（ヒドロキシ酸）；ポリ（ビニルアルコール）、ポリ（乳酸）、ポリ（グリコール酸）、およびポリ（乳酸−コ−グリコール酸）のようなポリヒドロキシ酸；ポリ３−ヒドロキシブチラートまたはポリ４−ヒドロキシブチラートのようなポリヒドロキシアルカノアート；ポリカプロラクトン；ポリ（オルトエステル）；ポリ無水物；ポリ（ホスファゼン）；ポリ（ラクチド−コ−カプロラクトン）；チロシンポリカーボネートのようなポリカーボネート；ポリアミド（合成および天然ポリアミドを含む）、ポリペプチド、およびポリ（アミノ酸）；ポリエステルアミド；ポリエステル；ポリ（ジオキサノン）；ポリ（アルキレンアルキラート）；疎水性ポリエーテル；ポリウレタン；ポリエーテルエステル；ポリアセタール；ポリシアノアクリラート；ポリアクリラート；ポリメチルメタクリラート；ポリシロキサン；ポリ（オキシエチレン）／ポリ（オキシプロピレン）コポリマー；ポリケタール；ポリリン酸塩；ポリヒドロキシ吉草酸塩；ポリアルキレンシュウ酸塩；ポリアルキレンコハク酸塩；ポリ（マレイン酸）、ならびにこれらのコポリマーが含まれるが、それらに限定されない。また、生体適合性ポリマーには、ポリアミド、ポリカーボネート、ポリアルキレン、ポリアルキレングリコール、ポリアルキレンオキシド、ポリアルキレンテレフタラート、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、メタクリラートＰＶＡ（ｍ−ＰＶＡ）、ポリビニルエーテル、ポリビニルエステル、ポリビニルハロゲン化物、ポリビニルピロリドン、ポリグリコリド、ポリシロキサン、ポリウレタンおよびこれらのコポリマー、アルキルセルロース、ヒドロキシアルキルセルロース、セルロースエーテル、セルロースエステル、ニトロセルロース、アクリルエステルおよびメタクリルエステルのポリマー、メチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシブチルメチルセルロース、酢酸セルロース、プロピオン酸セルロース、セルロースアセタートブチラート、セルロースアセタートフタラート、カルボキシルエチルセルロース、三酢酸セルロース、硫酸セルロースナトリウム塩、ポリ（メチルメタクリラート）、ポリ（エチルメタクリラート）、ポリ（ブチルメタクリラート）、ポリ（イソブチルメタクリラート）、ポリ（ヘキシルメタクリラート）、ポリ（イソデシルメタクリラート）、ポリ（ラウリルメタクリラート）、ポリ（フェニルメタクリラート）、ポリ（メチルアクリラート）、ポリ（イソプロピルアクリラート）、ポリ（イソブチルアクリラート）、ポリ（オクタデシルアクリラート）、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリ（エチレングリコール）、ポリ（エチレンオキシド）、ポリ（エチレンテレフタラート）、ポリ（ビニルアルコール）、ポリ（酢酸ビニル、ポリビニルクロリドポリスチレンおよびポリビニルプリロリドン、それらの誘導体、それらの線状および分枝コポリマーならびにそれらのブロックコポリマー、ならびにそれらのブレンドも含むことができる。例示的な生分解性ポリマーとしては、ポリエステル、ポリ（オルトエステル）、ポリ（エチレンアミン）、ポリ（カプロラクトン）、ポリ（ヒドロキシブチラート）、ポリ（ヒドロキシバレラート）、ポリ無水物、ポリ（アクリル酸）、ポリグリコリド、ポリ（ウレタン）、ポリカーボネート、ポリリン酸エステル、ポリホスプリアゼン、これらの誘導体、それらの線状および分枝コポリマーならびにそれらのブロックコポリマー、ならびにそれらのブレンドが挙げられる。
【００８３】
いくつかの実施形態において、封入溶液中の保護コーティングは、単糖の炭水化物構造物、および非還元の多糖または二糖を含むがこれらに限定されない二糖または多糖のような炭水化物ポリマー、ならびにこれらのいずれかの組み合わせを含む。保護コーティングにおいて使用することができる炭水化物の例は、グルコース、アルドース（Ｄ−アロース、Ｄ−アルトローズ、Ｄ−マンノースなど）、グルコピラノース、ペンタヒドロキシヘキサナール、α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｄ−グルコース、α−Ｄ−グルコピラノシル二水和物、β−Ｄ−グリコピラノシル単位のポリマー、β−Ｄ−フルクトフラノシルα−Ｄ−グルコピラノシド（無水物／二水和物）、β−Ｄ−ガラクトピラノシル−Ｄ−グルコース、α−Ｄ−グルコピラノシル−α−Ｄ−グルコピラノシド（無水物／二水和物）、ガラクトース、ペントース（リボース、キシロース、リキソース）、デキストロース、ドデカカーボンモノデカヒドラート、フルクトース、スクロース、ラクトース、マルトース、トレハロース、アガロース、Ｄ−ガラクトシル−β−（１−４）−無水−Ｌ−ガラクトシル、セルロース、β−Ｄ−グリコピラノシル単位のポリマー、およびデンプン、ならびに多価アルコール、ポリアルコール、アルジトール、エリスリトール、グリシトール、グリセロール、キシリトール、およびソルビトールを含む。
【００８４】
いくつかの実施形態において、保護コーティングは、ポリ（乳酸）、ポリ（グリコール酸）、およびポリ（乳酸−コ−グリコール酸）のような生体適合性および／または生分解性のポリエステルまたはポリ無水物を含有する。粒子は、以下のポリエステル、すなわち、本明細書で「ＰＧＡ」と称されるグリコール酸単位と、ポリ−Ｌ−乳酸、ポリ−Ｄ−乳酸、ポリ−Ｄ，Ｌ−乳酸、ポリ−Ｌ−ラクチド、ポリ−Ｄ−ラクチド、および「ＰＬＡ」と本明細書で集約的に称されるポリ−Ｄ，Ｌ−ラクチド５のような乳酸単位と、ポリ（ｅ−カプロラクトン）のような、「ＰＣＬ」と本明細書で集約的に称されるカプロラクトン単位とを含むホモポリマー；ならびに乳酸：グリコール酸の比を特徴とし、「ＰＬＧＡ」と本明細書で集約的に称されるポリ（乳酸−コ−グリコール酸）およびポリ（ラクチド−コ−グリコリド）のさまざまな形態のような、乳酸およびグリコール酸単位を含むコポリマー；ならびにポリアクリラート、およびその誘導体のうちのもう１つを含有することができる。また、例示的なポリマーとしては、ＰＬＧＡ−ＰＥＧまたはＰＬＡ−ＰＥＧコポリマーのさまざまな形態のような、本明細書で「ペグ化ポリマー」と集約的に称されるポリエチレングリコール（ＰＥＧ）と上述のポリエステルとのコポリマーも挙げられる。ある特定の実施形態において、ＰＥＧ領域は、ポリマーと共有結合して、開裂可能なリンカーによって「ペグ化ポリマー」を生成することができる。一態様において、ポリマーは、少なくとも６０、６５、７０、７５、８０、８５、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、または９９パーセントのアセタールペンダント基を含む。
【００８５】
本明細書に開示され、封入溶液内で含まれる３元ブロックコポリマーは、例えば、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリ酢酸ビニル、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、ポリエチレンオキシド（ＰＥＯ）、ポリ（ビニルピロリドン−コ−ビニルアセタート）、ポリメタクリラート、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンヒマシ油、ポリカプロラクタム、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、ポリ（乳酸−グリコール酸）、ポリ（乳酸コ−グリコール酸）（ＰＬＧＡ）、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロースなどのようなセルロース誘導体のようなコアポリマーを含む。
【００８６】
本明細書に開示される封入溶液中の保護コーティングにおいて使用することができる２元ブロックコポリマーの例は、例えば、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリ酢酸ビニル、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、ポリエチレンオキシド（ＰＥＯ）、ポリ（ビニルピロリドン−コ−ビニルアセタート）、ポリメタクリラート、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンヒマシ油、ポリカプロラクタム、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、ポリ（乳酸−グリコール酸）、ポリ（乳酸コ−グリコール酸）（ＰＬＧＡ）のようなポリマーを含む。
【００８７】
先に述べたように、ＭＳＣを培養することは、標準的な高酸素培養条件（例えば、２１％酸素）下で生じることができるか、またはＭＳＣは、（例えば、炎症性サイトカイン、血管新生因子、および低減したグルコースの存在下で０．１％〜約５％の酸素のような）人工創傷治癒条件下で培養されることができる。本明細書に開示されるように、人工創傷治癒条件は、局所血液循環の混乱によって通常引き起こされる栄養素供給の低減および老廃物除去の低減が存在する実際の創傷の成長条件を模倣する。このことは、新たな血管がつくられ、血液循環が回復するまで、細胞にとって過酷な環境を創出する。したがって、ＭＳＣを培養するために使用される人工創傷治癒条件は、グルコース利用能の低減、酸素分圧の低減、ｐＨの低減、および温度の上昇において、以下の成長条件のうちの１種以上を含むことができる。低減した栄養素と代謝産物の環境（人工創傷治癒）との組み合わせは、培養細胞を誘因して、創傷治癒ならびに抗炎症性ＥＣＭタンパク質および成長因子を生じ、細胞外小胞に組織治癒をそこで指示させ、これが、コラーゲンおよびグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）のような新たなＥＣＭタンパク質、ならびに成長因子およびサイトカインの形態にあることができる。したがって、細胞培養密度、培地捕捉物質、栄養補助物質、酸素レベル、これらの条件での培養の長さ、細胞継代数もしくはそれらの組み合わせなどのような細胞成長条件を調整することによって、ＭＳＣを刺激して、所望の抗炎症性タンパク質、ペプチド、サイトカイン、ケモカイン、グリコサミノグリカン、細胞外マトリックス（ＥＣＭ）、プロテオグリカン、エクソソーム、およびセクレトームを選択的に分泌させることができる。
【００８８】
一態様において、温度、酸素分圧、ｐＨ、グルコース飽和度、培養密度、および成長表面のような成長条件が、培養中に成長する細胞の遺伝子発現およびタンパク質産生に影響を及ぼすことができ、それにより異なる成長因子およびサイトカインが産生されているという結果をもたらすことができることは理解されており、本明細書で企図されている。例えば、成長表面の剛性（ヤング率）は、該成長表面の上で成長する細胞の遺伝子発現およびタンパク質産生に影響を及ぼす。脂肪細胞および軟骨細胞は通常、より柔らかく弾性のある成長表面（約１０ｋＰａ〜１２ｋＰａ）の上で維持されるのに対し、骨細胞は硬い表面（約１０６〜１２６ｋＰａ）の上でより良好に成長する。表面の剛性を調整することにより、細胞のセクレトームおよびそれらの伝達シグナル（成長因子、エクソソーム、サイトカインおよびケモカイン）に影響を及ぼすことができる。
【００８９】
一態様において、グルコース利用能は、通常の対照と比較して低減することができる。グルコースを低減させるが、細胞に損傷を与えないように改質された培地は、グルコースの０〜５０％の低減、より好ましくは、グルコースの約５％〜４０％の低減を生じることができる。例えば、ＭＳＣ人工創傷治癒培養条件は、約５％〜約１５％、約１０％〜約２０％、約１５％〜約２５％、約２０％〜約３０％、または約２５％から約３５％のグルコース低減のような、約１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、または５０％のグルコースの低減を含むことができる。
【００９０】
一態様において、酸素分圧は、酸素レベルを低酸素条件へと低減させることができる。通常の大気中の酸素はおよそ２１％であり、低減すると低酸素と見なされる。したがって、一態様において、ＭＳＣは、０．０％〜２０．９％の酸素、約０．１％〜約０．５％の酸素、約０．１％〜約２．０％、約０．１％〜約５．０％の酸素、約０．５％〜約５．０％の酸素、約１．０％〜約１０％の酸素、約５．０％から約１０．０％の酸素、および約１０．０％〜約１５．０％で、人工創傷治癒条件下で培養することができる。好ましくは、ＭＳＣ創傷治癒培養条件の間、酸素分圧は、例えば、０、０．０５、０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９、１．０、１．１、１．２、１．３、１．４、１．５、１．６、１．７、１．８、１．９、２．０、２．１、２．２、２．３、２．４、２．５、２．６、２．７、２．８、２．９、３．０、３．１、３．２、３．３、３．４、３．５、３．６、３．７、３．８、３．９、４．０、４．１、４．２、４．３、４．４、４．５、４．６、４．７、４．８、４．９、５．０、５．１、５．２、５．３、５．４、５．５、５．６、５．７、５．８、５．９、６．０、６．１、６．２、６．３、６．４、６．５、６．６、６．７、６．８、６．９、７．０、７．１、７．２、７．３、７．４、７．５、７．６、７．７、７．８、７．９、８．０、８．１、８．２、８．３、８．４、８．５、８．６、８．７、８．８、８．９、９．０、９．１、９．２、９．３、９．４、９．５、９．６、９．７、９．８、９．９、１０、１０．５、１１、１１．５、１２、１２．５、１３、１３．５、１４、１４．５、１５、１５．５、１６、１６．５、１７、１７．５、１８、１８．５、１９、１９．５、２０、または２０．５％の酸素のような、約０．５％〜２０．５％の酸素である。
【００９１】
また、ｐＨも、人工創傷治癒条件下で低減させることができる。生理的ｐＨは、非常に厳密に維持され、通常は中性ｐＨ＝７．２±０．２（７．０〜７．４）に非常に近い。しかしながら、創傷において、酸性環境は、ｐＨ＝６．２±０．２（すなわち、６．０〜約６．４のｐＨ）を有することができる。したがって、人工創傷治癒培養条件下で、ｐＨは、６．０、６．１、６．２、６．３、６．４、６．５、６．６、６．７、６．８、６．９、または７．０のような、約６．０〜約７．０、例えば、６．０〜約６．４、約６．２〜約６．４、約６．２〜約６．６、約６．４〜約６．６、約６．４〜約６．８、または約６．６〜約７．０であることができる。
【００９２】
人工創傷治癒培養条件下では、培養環境の温度を上げて、創傷部位の温度上昇を模倣することができる。生理的恒常性の温度は、３７℃（９８．６°Ｆ）に維持される。わずかな上昇または低下は、細胞代謝に有意な変化を引き起こすことができる。温度を、３７℃を超えて約４０℃（１０４°Ｆ）までのいずれかの温度まで上昇させることにより、「熱をもつ」環境を創出することができる。したがって、一態様において、ＭＳＣのための人工創傷治癒培養条件は、約３７℃〜約３９℃、約３７℃〜約３８℃、約３８℃〜約３９℃、約３９℃〜約４０℃を含むことができる。一態様において、人工創傷治癒培養の温度は、３７．１、３７．２、３７．３、３７．４、３７．５、３７．６、３７．７、３７．８、３７．９、３８．０、３８．１、３８．２、３８．３、３８．４、３８．５、３８．６、３８．７、３８．８、３８．９、３９．０、３９．１、３９．２、３９．３、３９．４、３９．５、３９．６、３９．７、３９．８、３９．９、または４０．０℃であることができる。
【００９３】
一態様において、ＭＳＣ調製物において使用するためのＭＳＣ集塊性混合物または粉状集塊性混合物の調製中に、培地、集塊性混合物、抽出物可溶化液、およびこれらの封入版を濾過滅菌に供し、濃縮した後、凍結前に細胞保護剤と合わせることできることは理解されており、本明細書で企図されている。
【００９４】
これらの方法によって生成された最終的な集塊性混合物（粉状集塊性混合物を含む）をさまざまな賦形剤担体に添加して、濃縮された活性ＭＳＣ抗炎症性タンパク質、成長因子、エクソソームおよびセクレトームを、経皮皮膚パッチ、さまざまな粘膜送達系、静脈内（ＩＶ）注射、経口補助物質、丸剤もしくはカプセル剤を経て、または点眼薬、クリーム、ローションなどの使用を経て吸収させることができることは理解されており、本明細書で企図されている。
【００９５】
Ｄ．皮膚障害を処置する方法
一態様において、炎症性皮膚障害（例えば、微生物性疾患、自己免疫疾患、自己炎症性障害、および／または炎症によって媒介される身体的傷害によって引き起こされる皮膚障害のような）、加齢の影響（コラーゲンの低減、プロテオグリカンの低減、水分補給の低減などのような）、対象の皮膚障害によって引き起こされる炎症性の症状を処置する／抑制する／低減する、ならびに／あるいは皮膚の若返り、皮膚の増強、および／または皮膚の回復を上昇させる方法であって、対象へ治療有効量の本明細書に開示されるいずれかのＭＳＣセクレトーム組成物を投与することを含む方法が、本明細書に開示されている。一態様において、ＭＳＣセクレトーム組成物は、皺、ひだ、たるみ、シミ、不均一な色素沈着、菲薄化、弾性、瘢痕化、表面粗度、表面血管、発赤、毛穴の大きさ、関節炎、または局所的および全身の両方の炎症を含む容態を処置するために栄養補助食品へと組み込むことができる。栄養補助食品はまた、標準的な美容手順、筋肉損傷、筋肉の過剰運動、からの組織の成長および回復、ならびに筋肉の回復を提供することもできる。
【００９６】
本明細書に記載されるように、炎症性皮膚障害は、微生物感染によって引き起こされる皮膚障害（すなわち、微生物疾患）を含むがこれに限定されない、いずれかの数の傷害によって引き起こされる可能性がある。炎症が、感染によって引き起こされる疾患（「微生物性傷害」）の機序であることは理解されており、本明細書で企図されている。微生物性傷害によって引き起こされる炎症性皮膚障害は、例えば、ウイルス、細菌、真菌、または寄生虫のような微生物による感染に対する先天免疫応答から生じる。したがって、微生物のビルレンス因子によって引き起こされる微生物性損傷は、侵入する微生物のクリアランスを妨げ、器官の損傷に攻撃的な作用を加える、宿主産生性の炎症性メディエーターによってさらに悪化する。炎症およびその末期である敗血症は、公知の（または未知の）ビルレンス因子および微生物抗原によって誘起されるいずれかの微生物傷害に起因する可能性があることが理解されており、本明細書で企図されている。したがって、一態様において、対象へ本明細書に開示されるＭＳＣセクレトーム組成物のいずれかを投与することを含む、対象における炎症性皮膚障害を処置する方法が本明細書に開示されており、この中で、炎症性皮膚障害は、例えば、ウイルス、細菌、真菌、および／または寄生虫のような微生物性疾患によって引き起こされる。
【００９７】
一態様において、炎症性皮膚障害を処置する方法であって、該炎症性皮膚障害が、例えば、単純ヘルペスウイルス１型、単純ヘルペスウイルス２型、水痘帯状疱疹ウイルス、バリセラゾスターウイルス、エプスタイン・バーウイルス、サイトメガロウイルス、ヒトヘルペスウイルス６型、痘瘡ウイルス、水疱性口内炎ウイルス、Ａ型肝炎ウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、Ｄ型肝炎ウイルス、Ｅ型肝炎ウイルス、ライノウイルス、コロナウイルス、インフルエンザウイルスＡ型、インフルエンザウイルスＢ型、麻疹ウイルス、ポリオーマウイルス、ヒトパピローマウイルス、呼吸シンチウムウイルス、アデノウイルス、コクサッキーウイルス、デング熱ウイルス、ムンプスウイルス、ポリオウイルス、狂犬病ウイルス、ラウス肉腫ウイルス、レオウイルス、黄熱ウイルス、ジカウイルス、エボラウイルス、マールブルグウイルス、ラッサ熱ウイルス、東部ウマ脳炎ウイルス、日本脳炎ウイルス、セントルイス脳炎ウイルス、マレー渓谷脳炎ウイルス、ウェストナイル熱ウイルス、リフトバレー熱ウイルス、ロタウイルスＡ型、ロタウイルスＢ型、ロタウイルスＣ型、シンドビスウイルス、サル免疫不全ウイルス、ヒトＴ細胞白血病ウイルス１型、ハンタウイルス、風疹ウイルス、サル免疫不全ウイルス、ヒト免疫不全ウイルス１型、およびヒト免疫不全ウイルス２型からなる群から選択されるウイルスによる感染のようなウイルス感染によって引き起こされる、方法が本明細書に開示されている。
【００９８】
また、炎症性皮膚障害を処置する方法であって、該炎症性皮膚障害が細菌感染によって引き起こされ、該細菌感染が、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｂｏｖｉｓ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｂｏｖｉｓ株ＢＣＧ、ＢＣＧ亜株、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｖｉｕｍ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｆｒｉｃａｎｕｍ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｋａｎｓａｓｉｉ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｍａｒｉｎｕｍ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｕｌｃｅｒａｎｓ、パラ結核菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｖｉｕｍ  ｓｕｂｓｐｅｃｉｅｓ  ｐａｒａｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）、Ｎｏｃａｒｄｉａ  ａｓｔｅｒｏｉｄｅｓ、他のＮｏｃａｒｄｉａ種、Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ  ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａ、他のＬｅｇｉｏｎｅｌｌａ種、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｎｔｈｒａｃｉｓ、Ａｃｅｔｉｎｏｂａｃｔｅｒ  ｂａｕｍａｎｉｉ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｅｎｔｅｒｉｃａ、他のＳａｌｍｏｎｅｌｌａ種、Ｓｈｉｇｅｌｌａ  ｂｏｙｄｉｉ、Ｓｈｉｇｅｌｌａ  ｄｙｓｅｎｔｅｒｉａｅ、Ｓｈｉｇｅｌｌａ  ｓｏｎｎｅｉ、Ｓｈｉｇｅｌｌａ  ｆｌｅｘｎｅｒｉ、他のＳｈｉｇｅｌｌａ種、Ｙｅｒｓｉｎｉａ  ｐｅｓｔｉｓ、Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ  ｈａｅｍｏｌｙｔｉｃａ、Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ  ｍｕｌｔｏｃｉｄａ、他のＰａｓｔｅｕｒｅｌｌａ種、Ａｃｔｉｎｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｌｅｕｒｏｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｌｉｓｔｅｒｉａ  ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓ、Ｌｉｓｔｅｒｉａ  ｉｖａｎｏｖｉｉ、Ｂｒｕｃｅｌｌａ  ａｂｏｒｔｕｓ、他のＢｒｕｃｅｌｌａ種、Ｃｏｗｄｒｉａ  ｒｕｍｉｎａｎｔｉｕｍ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ  ｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉ、Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ  ａｖｉｕｍ、Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ  ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ、Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ  ｂｒｏｎｃｈｉｓｅｐｔｉｃａ、Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ  ｔｒｅｍａｔｕｍ、Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ  ｈｉｎｚｉｉ、Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ  ｐｔｅｒｉ、Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ  ｐａｒａｐｅｒｔｕｓｓｉｓ、Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ  ａｎｓｏｒｐｉｉ、他のＢｏｒｄｅｔｅｌｌａ種、Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ  ｍａｌｌｅｉ、Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ  ｐｓｕｅｄｏｍａｌｌｅｉ、Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ  ｃｅｐａｃｉａｎ、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｐｓｉｔｔａｃｉ、Ｃｏｘｉｅｌｌａ  ｂｕｒｎｅｔｉｉ、Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａｌ種、Ｅｈｒｌｉｃｈｉａ種、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｙｏｇｅｎｅｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ａｇａｌａｃｔｉａｅ、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ、Ｖｉｂｒｉｏ  ｃｈｏｌｅｒａｅ、Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ種、Ｎｅｉｓｅｒｒｉａ  ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ、Ｎｅｉｓｅｒｒｉａ  ｇｏｎｏｒｒｈｅａ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ、他のＰｓｅｕｄ��ｍｏｎａｓ種、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｄｕｃｒｅｙｉ、他のＨｅｍｏｐｈｉｌｕｓ種、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｔｅｔａｎｉ、他のＣｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ種、Ｙｅｒｓｉｎｉａ  ｅｎｔｅｒｏｌｉｔｉｃａ、および他のＹｅｒｓｉｎｉａ種からなる群から選択される細菌による感染である、方法も本明細書に開示されている。いくつかの場合において、細菌感染を引き起こす細菌は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｎｔｈｒａｃｉｓではない。
【００９９】
一態様において、炎症性皮膚障害を処置する方法であって、該炎症性皮膚障害が真菌感染によって引き起こされ、該真菌感染が、Ｃａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓ、Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｎｅｏｆｏｒｍａｎｓ、Ｈｉｓｔｏｐｌａｍａ  ｃａｐｓｕｌａｔｕｍ、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｆｕｍｉｇａｔｕｓ、Ｃｏｃｃｉｄｉｏｄｅｓ  ｉｍｍｉｔｉｓ、Ｐａｒａｃｏｃｃｉｄｉｏｄｅｓ  ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ、Ｂｌａｓｔｏｍｙｃｅｓ  ｄｅｒｍｉｔｉｄｉｓ、Ｐｎｅｕｍｏｃｙｓｔｉｓ  ｃａｒｎｉｉ、Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｍａｒｎｅｆｆｉ、およびＡｌｔｅｒｎａｒｉａ  ａｌｔｅｒｎａｔａからなる群から選択される真菌による感染である、方法が本明細書に開示されている。
【０１００】
また、炎症性皮膚障害を処置する方法であって、該炎症性皮膚障害が寄生虫感染によって引き起こされ、該寄生虫感染が、Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ  ｇｏｎｄｉｉ、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ  ｆａｌｃｉｐａｒｕｍ、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ  ｖｉｖａｘ、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ  ｍａｌａｒｉａｅ、他のＰｌａｓｍｏｄｉｕｍ種、Ｅｎｔａｍｏｅｂａ  ｈｉｓｔｏｌｙｔｉｃａ、Ｎａｅｇｌｅｒｉａ  ｆｏｗｌｅｒｉ、Ｒｈｉｎｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍ  ｓｅｅｂｅｒｉ、Ｇｉａｒｄｉａ  ｌａｍｂｌｉａ、Ｅｎｔｅｒｏｂｉｕｓ  ｖｅｒｍｉｃｕｌａｒｉｓ、Ｅｎｔｅｒｏｂｉｕｓ  ｇｒｅｇｏｒｉｉ、Ａｓｃａｒｉｓ  ｌｕｍｂｒｉｃｏｉｄｅｓ、Ａｎｃｙｌｏｓｔｏｍａ  ｄｕｏｄｅｎａｌｅ、Ｎｅｃａｔｏｒ  ａｍｅｒｉｃａｎｕｓ、Ｃｒｙｐｔｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍ属、Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ  ｂｒｕｃｅｉ、Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ  ｃｒｕｚｉ、Ｌｅｉｓｈｍａｎｉａ  ｍａｊｏｒ、他のＬｅｉｓｈｍａｎｉａ種、Ｄｉｐｈｙｌｌｏｂｏｔｈｒｉｕｍ  ｌａｔｕｍ、Ｈｙｍｅｎｏｌｅｐｉｓ  ｎａｎａ、Ｈｙｍｅｎｏｌｅｐｉｓ  ｄｉｍｉｎｕｔａ、Ｅｃｈｉｎｏｃｏｃｃｕｓ  ｇｒａｎｕｌｏｓｕｓ、Ｅｃｈｉｎｏｃｏｃｃｕｓ  ｍｕｌｔｉｌｏｃｕｌａｒｉｓ、Ｅｃｈｉｎｏｃｏｃｃｕｓ  ｖｏｇｅｌｉ、Ｅｃｈｉｎｏｃｏｃｃｕｓ  ｏｌｉｇａｒｔｈｒｕｓ、Ｄｉｐｈｙｌｌｏｂｏｔｈｒｉｕｍ  ｌａｔｕｍ、Ｃｌｏｎｏｒｃｈｉｓ  ｓｉｎｅｎｓｉｓ、Ｃｌｏｎｏｒｃｈｉｓ  ｖｉｖｅｒｒｉｎｉ、Ｆａｓｃｉｏｌａ  ｈｅｐａｔｉｃａ、Ｆａｓｃｉｏｌａ  ｇｉｇａｎｔｉｃａ、Ｄｉｃｒｏｃｏｅｌｉｕｍ  ｄｅｎｄｒｉｔｉｃｕｍ、Ｆａｓｃｉｏｌｏｐｓｉｓ  ｂｕｓｋｉ、Ｍｅｔａｇｏｎｉｍｕｓ  ｙｏｋｏｇａｗａｉ、Ｏｐｉｓｔｈｏｒｃｈｉｓ  ｖｉｖｅｒｒｉｎｉ、Ｏｐｉｓｔｈｏｒｃｈｉｓ  ｆｅｌｉｎｅｕｓ、Ｃｌｏｎｏｒｃｈｉｓ  ｓｉｎｅｎｓｉｓ、Ｔｒｉｃｈｏｍｏｎａｓ  ｖａｇｉｎａｌｉｓ、Ａｃａｎｔｈａｍｏｅｂａ種、Ｓｃｈｉｓｔｏｓｏｍａ  ｉｎｔｅｒｃａｌａｔｕｍ、Ｓｃｈｉｓｔｏｓｏｍａ  ｈａｅｍａｔｏｂｉｕｍ、Ｓｃｈｉｓｔｏｓｏｍａ  ｊａｐｏｎｉｃｕｍ、Ｓｃｈｉｓｔｏｓｏｍａ  ｍａｎｓｏｎｉ、他のＳｃｈｉｓｔｏｓｏｍａ種、Ｔｒｉｃｈｏｂｉｌｈａｒｚｉａ  ｒｅｇｅｎｔｉ、Ｔｒｉｃｈｉｎｅｌｌａ  ｓｐｉｒａｌｉｓ、Ｔｒｉｃｈｉｎｅｌｌａ  ｂｒｉｔｏｖｉ、Ｔｒｉｃｈｉｎｅｌｌａ  ｎｅｌｓｏｎｉ、Ｔｒｉｃｈｉｎｅｌｌａ  ｎａｔｉｖａ、およびＥｎｔａｍｏｅｂａ  ｈｉｓｔｏｌｙｔｉｃａからなる群から選択される寄生虫による感染である、方法も本明細書に開示されている。
【０１０１】
ある態様においては、該皮膚障害は加齢によるものである。説明されているＭＳＣ由来の組成物は、真皮線維芽細胞に新たなコラーゲンおよび親水性プロテオグリカンを創出させて、高度に水和して表皮層を支持する健常な細胞外マトリックスを創出させることができる。ＭＳＣ組成物中に存在するコラゲナーゼ阻害剤は、真皮の細胞外マトリックスのさらなる分解を防ぐ。したがって、一態様において、本明細書に開示されるＭＳＣセクレトーム組成物のいずれかを対象へ投与することを含む、対象の皮膚を回復させ、若返りさせ、増強し、または改善する方法が本明細書に開示されている。これは、ＭＳＣセクレトーム組成物を、表皮に浸透することができる賦形剤担体と組み合わせることによって、または真皮への注射によって達成することができる。
【０１０２】
Ｅ．自己免疫疾患を処置する方法
先に記載したように、本明細書に開示されるＭＳＣセクレトーム組成物は、多くの抗炎症性特性を有し、それゆえ全身性炎症を低減させる能力を有するＭＳＣ、ＭＳＣ由来成長因子、ＭＳＣ抽出物、および／またはＭＳＣ可溶化液を提供することができる。本明細書全体を通して記載されているように、ＭＳＣは、多くの型の免疫細胞のうちで複雑なフィードバック機構を備えた、一連の成長因子、アポトーシス小胞、エクソソーム、および抗炎症性タンパク質を分泌する。鍵となる免疫調節性サイトカインには、プロスタグランジンＥ２（ＰＧＥ２）、形質転換成長因子β１（ＴＧＦ−β１）、肝細胞成長因子（ＨＧＦ）、間質細胞由来因子１（ＳＤＦ−１）、一酸化窒素、インドールアミン２，３−ジオキシゲナーゼ、インターロイキン４（ＩＬ−４）、ＩＬ−６、インターロイキン１０（ＩＬ−１０）、ＩＬ−１受容体アンタゴニストおよび可溶性ＴＮＦ−α受容体が含まれる。したがって、本明細書に開示される新規の幹細胞成長因子組成物は、自己免疫疾患を含む疾患と関係した炎症駆動性破壊を抑制させ、低減させ、および／または阻止することができる。本明細書で使用される場合、「自己免疫疾患」とは、宿主生物に対する適応免疫応答（Ｔ細胞および／またはＢ細胞応答）に起因する一連の疾患、障害、または容態を指す。このような容態において、突然変異または他の根本的な原因のいずれかによって、宿主のＴ細胞および／もしくはＢ細胞ならびに／または抗体は、もはや宿主細胞を非自己抗原と区別することができず、宿主細胞が抗原に対して特異的である該抗原を有する宿主細胞を攻撃することができない。炎症性障害を引き起こすことができる自己免疫疾患の例としては、アカラシア、急性散在性脳脊髄炎、急性運動軸索ニューロパチー、アジソン病、有痛脂肪症、成人スチル病、無ガンマグロブリン血症、円形脱毛症、アルツハイマー病、アミロイドーシス、強直性脊椎炎、抗ＧＢＭ抗体型／抗ＴＢＭ抗体型腎炎、抗リン脂質抗体症候群、再生不良性貧血、自己免疫性血管性浮腫、自己免疫性自律神経失調、自己免疫性脳脊髄炎、自己免疫性腸症、自己免疫性溶血性貧血、自己免疫性肝炎、自己免疫性内耳疾患（ＡＩＥＤ）、自己免疫性心筋炎、自己免疫性卵巣炎、自己免疫性精巣炎、自己免疫性膵炎、自己免疫性多内分泌腺症候群、自己免疫性網膜症、自己免疫性蕁麻疹、軸索型およびニューロン型ニューロパチー（ＡＭＡＮ）、バロー病、ベーチェット病、瘢痕性類天疱瘡（Ｂｅｎｉｇｎ  ｍｕｃｏｓａｌ  ｅｍｐｈｉｇｏｉｄ）、ビッカースタッフ脳炎、水疱性類天疱瘡、キャッスルマン病（ＣＤ）、セリアック病、シャーガス病、慢性疲労症候群、慢性炎症性脱髄性多発神経炎（ＣＩＤＰ）、慢性再発性多発性骨髄炎（ＣＲＭＯ）、チャーグ・ストラウス症候群（ＣＳＳ）、好酸球性肉芽腫症（ＥＧＰＡ）、瘢痕性類天疱瘡、コーガン症候群、寒冷凝集素症、先天性心ブロック、コクサッキー心筋炎、ＣＲＥＳＴ症候群、クローン病、疱疹状皮膚炎、皮膚筋炎、デビック病（視神経脊髄炎）、１型糖尿病、円板状狼瘡、ドレスラー症候群、子宮内膜症、付着部炎、好酸球性食道炎（ＥｏＥ）、好酸球性筋膜炎、結節性紅斑、本態性混合型クリオグロブリン血症、エヴァンズ症候群、フェルティ症��群、筋肉リウマチ、線維化胞隔炎、巨細胞性動脈炎（側頭動脈炎）、巨細胞性心筋炎、糸球体腎炎、グッドパスチャー症候群、多発血管炎性肉芽腫症、グレーヴス病、ギラン・バレー症候群、橋本脳症、橋本甲状腺炎、溶血性貧血、ヘノッホ・シェーンライン紫斑病（ＨＳＰ）、妊娠性疱疹（ｈｅｒｐｅｓ  ｇｅｓｔａｔｉｏｎｉｓ）または妊娠性疱疹（ｐｅｍｐｈｉｇｏｉｄ  ｇｅｓｔａｔｉｏｎｉｓ（ＰＧ））、化膿性汗腺炎（ＨＳ）（反対型ざ瘡）、低ガンマグロブリン血症（Ｈｙｐｏｇａｍｍａｌｇｌｏｂｕｌｉｎｅｍｉａ）、ＩｇＡ腎症、ＩｇＧ４関連硬化性疾患、免疫性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、封入体筋炎（ＩＢＭ）、間質性膀胱炎（ＩＣ）、炎症性腸疾患（Ｉｎｆｌａｍａｔｏｒｙ  Ｂｏｗｅｌ  Ｄｉｓｅａｓｅ）（ＩＢＤ）、若年性関節炎、若年型糖尿病（１型糖尿病）、若年性筋炎（ＪＭ）、川崎病、ランバート・イートン症候群、白血球破砕性血管炎、扁平苔癬、硬化性苔癬、木質結膜炎、線状ＩｇＡ病（ＬＡＤ）、ループス腎炎、ループス血管炎、慢性ライム病、メニエール病、顕微鏡的多発血管炎（ＭＰＡ）、混合性結合組織病（ＭＣＴＤ）、モーレン角膜潰瘍、Ｍｕｃｈａ−Ｈａｂｅｒｍａｎｎ病、多巣性運動ニューロパチー（ＭＭＮ）またはＭＭＮＣＢ、多発性硬化症、重症筋無力症、筋炎、ナルコレプシー、新生児ループス、視神経脊髄炎、好中球減少、眼瘢痕性類天疱瘡、視神経炎、オード甲状腺炎、回帰性リウマチ（ＰＲ）、ＰＡＮＤＡＳ、腫瘍随伴性小脳変性症（ＰＣＤ）、発作性夜間ヘモグロビン尿症（ＰＮＨ）、パリー・ロンベルグ症候群、周辺部ぶどう膜炎（Ｐａｒｓ  ｐｌａｎｉｔｉｓ（ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ  ｕｖｅｉｔｉｓ））、パーソネイジ・ターナー症候群、天疱瘡、末梢神経障害、静脈周囲性脳脊髄炎、悪性貧血（ＰＡ）、ＰＯＥＭＳ症候群、結節性多発動脈炎、多腺性症候群（Ｐｏｌｙｇｌａｎｄｕｌａｒ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ）Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ型、リウマチ性多発筋痛、多発性筋炎、心筋梗塞後症候群、心膜切開後症候群、原発性胆汁性肝硬変、原発性硬化性胆管炎、プロゲステロン皮膚炎、乾癬、乾癬性関節炎、赤芽球癆（ＰＲＣＡ）、壊疽性膿皮症、レイノー現象、反応性関節炎、反射性交感神経性ジストロフィー、再発性多発軟骨炎、むずむず脚症候群（ＲＬＳ）、後腹膜線維症、リウマチ熱、関節リウマチ、リウマトイド血管炎、サルコイドーシス、シュミット症候群、シュニッツラー症候群、強膜炎、強皮症、シェーグレン症候群、精子・精巣自己免疫（Ｓｐｅｒｍ＆ｔｅｓｔｉｃｕｌａｒ  ａｕｔｏｉｍｍｕｎｉｔｙ）、スティフパーソン症候群（ＳＰＳ）、亜急性細菌性心内膜炎（ＳＢＥ）、スザック症候群、シデナム舞踏病、交感性眼炎（ＳＯ）、全身性エリテマトーデス、全身性強皮症、高安動脈炎、側頭動脈炎／巨細胞性動脈炎、血小板減少性紫斑病（ＴＴＰ）、トロサ・ハント症候群（ＴＨＳ）、横断性脊髄炎、１型糖尿病、潰瘍性大腸炎（ＵＣ）、未分化型結合組織病（ＵＣＴＤ）、蕁麻疹、蕁麻疹様血管炎、ぶどう膜炎、血管炎、尋常性白斑、フォークト・小柳・原田病、およびウエゲナー肉芽腫症（または多発血管炎性肉芽腫症（ＧＰＡ））が挙げられるが、これらに限定されない。一態様において、自己免疫疾患に罹患している対象���治療有効量の本明細書に開示されるＭＳＣセクレトーム組成物のうちのいずれかを投与することを含む、自己免疫疾患または自己免疫疾患と関係する炎症症状（例えば、自己免疫疾患によって引き起こされる炎症性障害または創傷のような）を処置する方法が本明細書に開示されている。
【０１０３】
Ｆ．自己炎症性障害を処置する方法
本明細書に開示されるＭＳＣセクレトーム組成物は、適応免疫応答に起因する炎症の処置に限定されないだけでなく、炎症駆動性破壊と関係した先天免疫応答（すなわち、ＮＫ細胞およびマクロファージと関係した免疫応答）を阻止する上でも有効である。本明細書で使用される場合、「自己炎症性障害」とは、先天免疫応答が宿主細胞を攻撃する障害を指す。自己炎症性障害の例としては、喘息、移植片対宿主病（ＧｖＨＤ）、アレルギー、移植片拒絶反応、家族性寒冷自己炎症性症候群（ＦＣＡＳ）、Ｍｕｃｋｌｅ−Ｗｅｌｌｓ症候群（ＭＷＳ）、新生児期発症多臓器系炎症性疾患（ＮＯＭＩＤ）（慢性乳児神経皮膚関節症候群としても公知）、家族性地中海熱（ＦＭＦ）、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）関連周期性症候群（ＴＲＡＰＳ）、ＴＮＦＲＳＦ１１Ａ関連遺伝性熱疾患（ＴＲＡＰＳ１１）、周期熱症候群随伴性高イムノグロブリン血症Ｄ（ＨＩＤＳ）、メバロン酸酸性尿（ＭＡ）、メバロン酸キナーゼ欠損症（ＭＫＤ）、インターロイキン１β（ＩＬ−１β）受容体アンタゴニスト欠損症（ＤＩＲＡ）（骨膜炎膿疱症随伴性無菌性多発性骨髄炎としても公知）、マジード症候群、慢性非細菌性骨髄炎（ＣＮＯ）、早期発症型炎症性腸疾患、憩室炎、インターロイキン３６受容体アンタゴニスト欠損症（ＤＩＴＲＡ）、家族性乾癬（ＰＳＯＲＳ２）、膿疱性乾癬、化膿性無菌性関節炎・壊疽性膿皮症・アクネ症候群（ＰＡＰＡ）、免疫不全・熱・発育遅延随伴性先天性鉄芽球性貧血（Ｃｏｎｇｅｎｉｔａｌ  ｓｉｄｅｒｏｂｌａｓｔｉｃ  ａｎｅｍｉａ  ｗｉｔｈ  ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ，ｆｅｖｅｒｓ，ａｎｄ  ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ  ｄｅｌａｙ）（ＳＩＦＤ）、小児型肉芽腫性関節炎（Ｐｅｄｉａｔｒｉｃ  Ｇｒａｎｕｌｏｍａｔｏｕｓ  Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ）（ＰＧＡ）、家族性ベーチェット病様自己免疫性症候群、ＮＬＲＰ１２関連周期熱症候群、プロテアソーム関連自己炎症性症候群（ＰＲＡＡＳ）、免疫調節障害随伴性脊椎骨端異形成症（Ｓｐｏｎｄｙｌｏｅｎｃｈｏｎｄｒｏｄｙｓｐｌａｓｉａ  ｗｉｔｈ  ｉｍｍｕｎｅ  ｄｙｓｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ（ＳＰＥＮＣＤＩ）、乳児発症性ＳＴＩＮＧ関連血管症（ＳＴＩＮＧ−ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｖａｓｃｕｌｏｐａｔｈｙ  ｗｉｔｈ  ｏｎｓｅｔ  ｉｎ  ｉｎｆａｎｃｙ）（ＳＡＶＩ）、Ａｉｃａｒｄｉ−Ｇｏｕｔｉｅｒｅｓ症候群、急性熱性好中球性皮膚疾患（Ａｃｕｔｅ  Ｆｅｂｒｉｌｅ  Ｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌｉｃ  Ｄｅｒｍａｔｏｓｉｓ）、Ｘ連鎖家族性血球貪食性リンパ組織球症、およびＬｙｎキナーゼ関連自己炎症性疾患（ＬＡＩＤ）が挙げられる。したがって、一態様において、自己炎症性疾患に罹患している対象へ治療有効量の本明細書に開示されるＭＳＣセクレトーム組成物のうちのいずれかを投与することを含む、自己炎症性障害または自己炎症性障害と関係する炎症症状（例えば、自己炎症性障害によって引き起こされる炎症性皮膚障害または創傷のような）を処置する方法が本明細書に開示されている。
【０１０４】
Ｇ．身体的傷害を処置する方法
本明細書に開示される方法は、皮膚の疾患および障害（創傷および／もしくは炎症性皮膚障害または皮膚の他の炎症性傷害由来の症状を含むがこれらに限定されない）を処置することを包含する。多くの炎症性容態は、炎症によって媒介される身体的損傷（例えば、心筋梗塞、剥削、穿刺、裂傷、挫傷、鈍的外力性外傷、虚血、潰瘍、出血性脳卒中、手術、移植、脊髄病変、関節または外傷の修復、骨折、日焼け、化学熱傷、高温熱傷、低温熱傷のような））に起因する。先に記載したように、本明細書に開示されるＭＳＣセクレトーム組成物は、創傷修復を刺激し、炎症を低下させるための機能的間葉系幹細胞（ＭＳＣ）由来の抗炎症性タンパク質、ペプチド、サイトカイン、ケモカイン、プロテオグリカン、グリコサミノグリカン、セクレトーム、およびエクソソームを提供する。したがって、一態様において、身体的損傷（例えば、心筋梗塞、剥削、穿刺、裂傷、挫傷、鈍的外力性外傷、虚血、潰瘍、出血性脳卒中、手術、移植、日焼け、化学熱傷、高温熱傷、低温熱傷のような）によって引き起こされる炎症を処置するおよび／または創傷を修復する方法であって、身体的損傷を有する対象へ、治療有効量の本明細書に開示されるＭＳＣセクレトーム組成物のうちのいずれかを投与することを含む方法が本明細書に開示されている。
【０１０５】
治療有効量の本明細書に開示されるＭＳＣセクレトーム組成物のうちのいずれかを用いて創傷を処置することにより、創傷が処置されるだけでなく、治癒過程に必要な時間が、未処置の創傷と比較して短縮することができることはさらに理解される。したがって、創傷を、本明細書に開示されるＭＳＣセクレトーム組成物を含む治療有効量の組成物と接触させることを含む、創傷の治癒時間を短縮する方法が本明細書に開示されている。
【０１０６】
多くの炎症性容態の処置が、創傷の処置を包含することは理解されており、本明細書で企図されている。したがって、一態様において、創傷を、治療有効量の本明細書に開示されるＭＳＣセクレトーム組成物のうちのいずれかと接触させることを含む、創傷を処置する方法が本明細書に開示されている。本明細書全体を通して記載されているように、ＭＳＣセクレトーム組成物は、絆創膏、スポンジ、ステント、足場、マトリックス、創傷被覆材、移植片、外科用ドレープ、縫合糸、膏薬、クリーム、または創傷接着剤に適用されることができるか、またはその構成要素として製造することができる。したがって、一態様において、創傷を、治療有効量のＭＳＣセクレトーム組成物を含む絆創膏、創傷被覆材、移植片、外科用ドレープ、縫合糸、膏薬、クリーム、または創傷接着剤と接触させることを含む、創傷を処置する方法が本明細書に開示されている。いくつかの態様において、ＭＳＣセクレトーム組成物は、薄膜ポリマーシートまたは吸収性ポリ乳酸フィルムに適用され、次いで、創傷を処置するために使用することができる。
【０１０７】
Ｈ．性機能障害を処置する方法
自己免疫疾患（例えば、糖尿病、パーキンソン病、多発性硬化症のような）、代謝性疾患、ならびに心臓病、高血圧、高コレステロール、ストレス、うつ病、および一部の投薬による炎症を含む多くの炎症性疾患と関係する１つの合併症が、性的覚醒機能障害（例えば、覚醒中の膣の膨潤の低減および勃起不全のような）の合併症である可能性があることは理解されている。したがって、一態様において、根底にある炎症性疾患または炎症を処置することによって、性機能障害を処置することができる。加えて、ＭＳＣを使用して（最終的には、開示された幹細胞成長因子組成物において使用することができるＭＳＣ調製物として使用するために）ＭＳＣ集塊性混合物を調製するのと同じ方法で、刺激して間葉系幹細胞タンパク質、ペプチド、グリコサミノグリカン、細胞外マトリックス（ＥＣＭ）、プロテオグリカン、セクレトーム、ケモカイン、サイトカイン、およびエクソソームを選択的に分泌させることができ、刺激は、性機能障害を処置する上で支援することができる間葉系幹細胞タンパク質、ペプチド、グリコサミノグリカン、細胞外マトリックス（ＥＣＭ）、プロテオグリカン、セクレトーム、ケモカイン、サイトカイン、およびエクソソームを選択的に分泌させるためにも使用することができる。したがって、一態様において、対象へ有効量の本明細書に開示されているＭＳＣセクレトーム組成物のうちのいずれかを投与することを含む、対象における性機能障害（例えば、覚醒中の膣の膨潤の低減および勃起不全のような）を処置する方法が本明細書に開示されている。
【０１０８】
Ｉ．疼痛を処置する方法
疼痛は、病的容態の警告サインとして機能する重要な症状であり、いくつかの急性および慢性の病状についての鍵となる診断基準でもある。侵害受容、または疼痛知覚は、損傷の性質および部位に応じた、異なる種類の伝達／伝導機序と化学的メディエーターとの統合を包含する可能性がある。侵害受容器は、すべての種類の損傷シグナルに対して均一に感受性があるわけではなく、いくつかは、機械的、熱的、および毒性の化学的メディエーターまたは炎症性メディエーターに特異的である。
【０１０９】
近年、炎症誘発性バイオマーカーと疼痛との関連性は、炎症が疾患過程の鍵となる病理学的特色である疼痛容態を有する患者の集団において検討された。慢性全身性炎症は、疼痛、神経障害、および自己免疫疾患と関係した一連の容態の要因として関与している。例えば、炎症部位でマクロファージおよび単球によって産生されたサイトカインは、粥腫発生および冠動脈性心疾患において鍵となる役割を担っている。サイトカインのような炎症誘発性バイオマーカーは、慢性および急性のいずれの疼痛状態においても認められており、疼痛の発生における直接的な役割または促進的な役割のいずれかを示唆した。サイトカインは炎症の病態生理学的過程を反映しているので、特に疼痛、神経障害、または自己免疫疾患がないか弱化しているとき、炎症と連関した容態における障害の有望な候補バイオマーカーであるかもしれない。
【０１１０】
炎症反応中に複数のサイトカインが産生される。サイトカインは、特定のシグナル伝達機序の活性化、および他の細胞型の活性化によって炎症過程に寄与する。サイトカインは、細胞外（血液中）におよび間質区画に認められ、オートクリン／パラクリン様式で細胞を活性化させることができる。サイトカインのレベルの上昇は、侵害受容器の感作を増大させることにより、神経学的疼痛の感覚に影響を及ぼし、該感覚に寄与すると仮定されている。炎症事象中に組織が白血球によって侵入されまたは破壊されると、インターロイキン１（ＩＬ−１）、インターロイキン６（ＩＬ−６）、および腫瘍壊死因子α（ＴＮＦ−α）のようないくつかのメディエーターがその部位へ移動する。これらのメディエーターには、神経成長因子およびプロスタグランジンも含まれており、これらは、発痛促進性または疼痛原因と見なすことができる。
【０１１１】
組織損傷後、サイトカインおよびケモカインは、神経終末の局所環境内に放出され、そこでサイトカインおよびケモカインは疼痛侵害受容器の活性化に寄与し、おそらく痛覚過敏の発症に寄与する。痛覚過敏は、典型的には疼痛とは関係していない低強度の刺激が疼痛性刺激となるときに生じる。
【０１１２】
同時に、いくつかの鎮痛性メディエーターも放出され、該メディエーターは、炎症を起こした組織内で産生される。これらには、抗炎症性サイトカインおよびオピオイドペプチドが含まれる。ＭＳＣは、多くの抗炎症性特性を有する。多くの種類の筋骨格系外傷において、損傷部位でのまたは病状における炎症性容態は、局所的な前駆細胞および成熟細胞による天然の修復過程を妨げる。ＭＳＣは、パラクリン機序を介して支援し、抗炎症性のおよび免疫調節の機序を介して再生環境を調節する。ＩＬ−１、インターロイキン２（ＩＬ−２）、インターロイキン１２（ＩＬ−１２）、ＴＮＦ−α、プロスタグランジンＥ２（ＰＧＥ２）、およびインターフェロンガンマ（ＩＮＦ−γ）のような炎症性分子に応答して、ＭＳＣは、多くの型の免疫細胞の間で複雑なフィードバック機序を用いて一連の成長因子および抗炎症性タンパク質を分泌する。鍵となる免疫調節性サイトカインには、プロスタグランジンＥ２（ＰＧＥ２）、形質転換成長因子β１（ＴＧＦ−β１）、肝細胞成長因子（ＨＧＦ）、間質細胞由来因子１（ＳＤＦ−１）、一酸化窒素、インドールアミン２，３−ジオキシゲナーゼ、インターロイキン４（ＩＬ−４）、ＩＬ−６、インターロイキン１０（ＩＬ−１０）、ＩＬ−１受容体アンタゴニストおよび可溶性ＴＮＦ−α受容体が含まれる。ＭＳＣは、Ｔ細胞、ナチュラルキラー細胞、Ｂ細胞、単球、マクロファージおよび樹状細胞を含む、多くの炎症性免疫細胞の増殖および機能を防ぐ。種間のＭＳＣはＴ細胞の活性を調節することができるが、その機序は哺乳動物の種間で同一ではない。
【０１１３】
慢性的に炎症を起こした環境の特徴は、ヘルパーＴ細胞およびマクロファージの型の持続的な不均衡である。ＭＳＣは、Ｔ細胞をＴｒｅｇ細胞として間接的に維持し、ＩＮＦ−γを低減させ、ＩＬ−４およびＩＬ−１０を上昇させることにより、ＴＨ１細胞からＴＨ２細胞への移行を促進する。回復したＴＨ１／ＴＨ２の平衡状態は、軟骨、筋肉、その他の軟部組織の損傷における組織再生を改善し、自己免疫疾患の症状を緩和し、抗糖尿病効果を有することが示されている。同様に、ＩＮＦ−γの低減およびＩＬ−４の分泌は、骨格、筋肉、神経の治癒および再生に必要とされる効果である、マクロファージのＭ１型（炎症誘発性、抗血管新生性および組織成長の抑制）からＭ２型（抗炎症性、リモデリング促進性および組織治癒）への移行を促進する。
【０１１４】
未分化のＭＳＣは、免疫系による認識を避けるために、低〜中レベルのヒト白血球抗原（ＨＬＡ）クラスＩおよび低レベルのＨＬＡクラスＩＩを発現する。この特性により、ドナーＭＳＣは、同種異系療法において宿主免疫系によって検出されない、いわゆる「ステルス」能力を得る。しかしながら、クラスＩ抗原は検出可能なレベルで存在し、クラスＩＩ抗原の発現はＩＮＦ−γによって誘導することができる。同種異系ＭＳＣ拒絶および慢性的な免疫応答のうちのいくつかの症例が動物研究およびヒトの臨床試験において報告されている。この問題全体は、順化成長培地から回収された間葉系幹細胞タンパク質、ペプチド、グリコサミノグリカン、細胞外マトリックス（ＥＣＭ）、プロテオグリカン、セクレトーム、ケモカイン、サイトカイン、およびエクソソームを使用することにより回避することができる。したがって、一態様において、自己炎症性疾患に罹患している対象へ治療有効量の本明細書に開示されるＭＳＣセクレトーム組成物のうちのいずれかを投与することを含む、損傷または乾癬、自己免疫疾患、自己炎症性疾患、もしくは皮膚障害事象と関係する炎症（侵害受容を含む）を処置する、抑制する、または低減する方法が本明細書に開示されている。
【図１】
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【図２】
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【国際調査報告】
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