(57)【要約】  本発明は、脱髄を予防、阻害、軽減、又は改善すること、したがって、ミエリンの破壊及び喪失を特徴とする又はミエリンの破壊及び喪失に伴う病理学的状態の治療ための、非鉄金属−デスフェリオキサミンＢ錯体と免疫調節薬との組み合わせに関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
金属−デスフェリオキサミンＢ錯体（金属−ＤＦＯ錯体）又はその薬学的に許容される塩（ここでは前記金属は鉄ではない）と、免疫調節薬とを含む組み合わせと、薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物。
【請求項２】
前記金属−ＤＦＯ錯体が、亜鉛−、ガリウム−、マンガン−、銅−、アルミニウム−、バナジウム−、インジウム−、クロム−、ランタン−、金−、銀−、若しくは白金−ＤＦＯ錯体、ランタニド−ＤＦＯ錯体、又はそれらの混合物である、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
前記金属−ＤＦＯ錯体が、Ｚｎ−ＤＦＯ錯体、Ｇａ−ＤＦＯ錯体、又はそれらの混合物である、請求項２に記載の医薬組成物。
【請求項４】
前記金属−ＤＦＯ錯体が、Ｚｎ−ＤＦＯ錯体とＧａ−ＤＦＯ錯体との混合物であり、前記混合物内の前記Ｚｎ−ＤＦＯ錯体と前記Ｇａ−ＤＦＯ錯体との量比が、１００：１から１：１００の範囲である、請求項３に記載の医薬組成物。
【請求項５】
前記免疫調節薬が、フィンゴリモド、フマル酸ジメチル、テリフルノミド、酢酸グラチラマー、オクレリズマブ、ナタリズマブ、アレムツズマブ、免疫増強インターフェロンに基づく薬物、又はその薬学的に許容される塩である、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項６】
前記組み合わせ内の前記金属−ＤＦＯ錯体と前記免疫調節薬との量比が、１００：１から１：１００の範囲である、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項７】
経口、舌下、頬側、直腸内、静脈内、動脈内、筋肉内、腹腔内、髄腔内、胸膜内、気管内、皮膚、皮下、経皮、皮内、経鼻、膣内、点眼、点耳、又は局所投与のために、又は吸入のために製剤化される、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項８】
脱髄を予防、阻害、軽減、又は改善するための、請求項１〜７のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項９】
多発性硬化症（ＭＳ）、視神経脊髄炎（デビック病）、バロー同心円硬化症、シルダー病、慢性炎症性脱髄性多発ニューロパチー、進行性多巣性白質脳症、ギラン・バレー症候群、進行性炎症性ニューロパチー、急性散在性脳脊髄炎、視神経炎、横断性脊髄炎、副腎白質ジストロフィー、又は副腎脊髄ニューロパチーの治療のための、請求項８に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
機械的な力、虚血、除草剤若しくは殺虫剤などの有毒薬剤、又は出血によって引き起こされる傷害などの、傷害によって誘発される障害又は状態の治療のための、請求項８に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
脱髄を予防、阻害、軽減、又は改善するのに使用するための、金属−デスフェリオキサミンＢ錯体（金属−ＤＦＯ錯体）又はその薬学的に許容される塩（ここでは前記金属は鉄ではない）と、免疫調節薬との組み合わせ。
【請求項１２】
脱髄を予防、阻害、軽減、又は改善するための医薬組成物の調製における、金属−デスフェリオキサミンＢ錯体（金属−ＤＦＯ錯体）又はその薬学的に許容される塩（ここでは前記金属は鉄ではない）と、免疫調節性の医薬品との組み合わせの使用。
【請求項１３】
（ｉ）金属−デスフェリオキサミンＢ錯体（金属−ＤＦＯ錯体）又はその薬学的に許容される塩を含む医薬組成物Ａ；又は医薬組成物Ｂ及びＣ（ここでは、医薬組成物Ｂは、ＤＦＯ又はその薬学的に許容される塩を含み、医薬組成物Ｃは、金属のイオンを含み、前記金属は鉄ではない）；
（ｉｉ）免疫調節薬を含む医薬組成物Ｄ；及び
（ｉｉｉ）前記ＤＦＯ又はその薬学的に許容される塩と前記金属イオンとの錯体形成時に、金属−ＤＦＯ錯体又はその薬学的に許容される塩をインサイチュで形成するように、（ａ）医薬組成物Ａ及びＤを、任意の順序で且つ３６時間を超えない時間内に、同時に又は連続的に；又は（ｂ）医薬組成物Ｂ、Ｃ、及びＤを、任意の順序で且つ３６時間を超えない時間内に、同時に又は連続的に投与し、それによって、脱髄を予防、阻害、軽減、又は改善するための説明書
を含むキット。
【請求項１４】
前記金属−ＤＦＯ錯体が、亜鉛−、ガリウム−、マンガン−、銅−、アルミニウム−、バナジウム−、インジウム−、クロム−、金−、銀−、若しくは白金−ＤＦＯ錯体、ランタニド−ＤＦＯ錯体、又はそれらの混合物である；又は、前記医薬組成物Ｃが、亜鉛、ガリウム、マンガン、銅、アルミニウム、バナジウム、インジウム、クロム、金、銀、白金、ランタニド、又はそれらの混合物のイオンを含む、請求項１３に記載のキット。
【請求項１５】
前記金属−ＤＦＯ錯体が、Ｚｎ−ＤＦＯ錯体、Ｇａ−ＤＦＯ錯体、又はそれらの混合物である；又は、前記医薬組成物Ｃが、Ｚｎ、Ｇａ、又はＺｎとＧａの両方のイオンを含む、請求項１３に記載のキット。
【請求項１６】
前記金属−ＤＦＯ錯体が、Ｚｎ−ＤＦＯ錯体とＧａ−ＤＦＯ錯体との混合物であり、前記混合物内の前記Ｚｎ−ＤＦＯ錯体と前記Ｇａ−ＤＦＯ錯体との量比が、１００：１から１：１００の範囲である；又は、前記医薬組成物Ｃが、ＺｎとＧａの両方のイオンを含み、ＺｎイオンとＧａイオンとの量比が、１００：１から１：１００の範囲である、請求項１５に記載のキット。
【請求項１７】
前記免疫調節薬が、フィンゴリモド、フマル酸ジメチル、テリフルノミド、酢酸グラチラマー、オクレリズマブ、ナタリズマブ、アレムツズマブ、免疫増強インターフェロンに基づく薬物、又はその薬学的に許容される塩である、請求項１３に記載のキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ミエリンの破壊及び喪失を特徴とする病態の治療のための方法及び組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
中枢神経系（ＣＮＳ）脱髄疾患は、ミエリン、すなわち、神経線維を取り囲み、活動電位の適切な伝播のために必要とされる電気的絶縁層（鞘）を形成する、脂肪性の白色物質の破壊及び喪失を特徴とする障害と定義される。脱髄疾患は、脳及び脊髄における神経線維を覆う保護的なミエリンへの損傷をもたらすあらゆる状態である。ミエリン鞘が損傷を受ける場合、神経インパルスは、遅くなる、さらには停止して、神経障害を引き起こす。脱髄疾患では、病理学的プロセスは、主にミエリン鞘において起こるのに対して、軸索は、比較的に保護されるままである。脱髄プロセスは、大部分は、自己免疫応答、代謝異常、限局的な圧迫、虚血再灌流のエピソード、又はウイルス感染に起因する炎症によって引き起こされる。
【０００３】
ＣＮＳの最も一般的な脱髄障害は、自己免疫疾患である多発性硬化症（ＭＳ）である。この障害では、免疫系が、ミエリン鞘、又はミエリン鞘を産生及び維持する細胞を攻撃する。これは、炎症、及び鞘への、最終的には鞘が取り囲む神経線維への傷害を引き起こし、複数領域の瘢痕化（硬化）をもたらす可能性がある。
【０００４】
他の型の脱髄疾患のとしては、例えば、片眼又は両眼における視神経の炎症に起因する視神経炎；炎症、及び中枢神経系の、特に視神経及び脊髄の脱髄に起因する視神経脊髄炎（デビック病）；脊髄の炎症に起因する横断性脊髄炎；脳及び脊髄の炎症に起因する急性散在性脳脊髄炎；並びに、稀な遺伝性の代謝障害である副腎白質ジストロフィー及び副腎脊髄ニューロパチーが挙げられる。
【０００５】
ＭＳ及び他の脱髄疾患は、最も一般的には、視力喪失、筋力低下、筋硬直及び痙攣、協調及び感覚の喪失、疼痛、並びに膀胱及び腸機能の変化をもたらす。
【０００６】
ＭＳの病理学的特徴は、変動するグリオーシス、炎症、及び相対的な軸索保存を特徴とする、斑として知られる限局性の脱髄の領域からなる。斑の位置、並びにその数、大きさ、及び形状は、ＭＳ患者間で著しく異なる。病変は、ＣＮＳ全体にわたって散在しており、脳と脊髄の両方が罹患するが、視神経、脊髄の軟膜下領域、脳幹、小脳、及び脳室周囲白質領域への偏向を有する。ＣＮＳの脱髄障害には、例えば、視神経脊髄炎、バロー同心円硬化症、及びシルダー病が含まれる。
【０００７】
末梢神経系（ＰＮＳ）の免疫介在性脱髄疾患も、特徴付けられている。その著しく低い有病率に起因して、ＰＮＳの脱髄障害の病態生理に関するデータは、かなり限定されている。こうした障害の例としては、例えば、慢性炎症性脱髄性多発神経炎（ＣＩＤＰ）及びギラン・バレー症候群（ＧＢＳ）が挙げられる。
【０００８】
現在、ＭＳ及び他のＣＮＳ脱髄疾患のための治療法は存在しない。一次性進行型ＭＳについては、オクレリズマブ（Ｏｃｒｅｖｕｓ（登録商標））、すなわちヒト化抗ＣＤ２０モノクローナル抗体が、食品医薬品局（Ｆｏｏｄ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）（ＦＤＡ）によって承認された唯一の疾患修飾療法である。これは、この型のＭＳを有する人々における能力障害の悪化を遅くする。治療法の主目的は、発作（エピソード）後のミエリン機能を回復させる、新たな発作を予防する、及び能力障害を予防することである。ＭＳに関連する免疫応答の多くは、疾患の初期段階に起こる。これらの薬物療法での可能な限り早くの積極的治療は、再発率を下げる、また、新たな病変の形成を遅くすることができる。
【０００９】
再発寛解型ＭＳについては、フィンゴリモド（Ｇｉｌｅｎｙａ（登録商標））、フマル酸ジメチル（Ｔｅｃｆｉｄｅｒａ（登録商標））、テリフルノミド（Ａｕｂａｇｉｏ（登録商標））、酢酸グラチラマー（Ｃｏｐａｘｏｎｅ（登録商標））、及びインターフェロンに基づく医薬品などの免疫調節物質が、第一選択の治療を構成する。酢酸グラチラマーは、再発を、およそ３０％低下させることが示された（Ｈａｓｓａｎ−Ｓｍｉｔｈ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１）。一方で、Ｌａ  Ｍａｎｔｉａ  ｅｔ  ａｌ．，２０１０は、酢酸グラチラマーが、「ＭＳにおける主要評価項目、すなわち疾患進行に対する、いかなる有益な効果も示さず、且つ臨床的再発のリスクに実質的に影響を与えない」ことを開示している。これらの医薬品が多数の有害作用を示すことに注目するべきである。
【００１０】
酢酸グラチラマーは、１人あたり２０〜４０ｍｇの範囲の用量を使用して、毎日又は１日おきに皮下投与される免疫調節薬である。酢酸グラチラマーは、ミエリン塩基性タンパク質にみられる４つのアミノ酸、すなわち、グルタミン酸、リジン、アラニン、及びチロシンのランダムポリマーであり、免疫系に対するデコイとして働くことができる。これは、能力障害の進行を緩和する目的ではなく、再発の頻度を低下させる目的で、ＦＤＡによって臨床使用について承認されている。酢酸グラチラマーの作用機序は、現在、不明である；しかし、薬物の投与が、Ｔ細胞の集団を、炎症誘発性のＴｈｌ細胞から制御性Ｔｈ２細胞に変化させ、それによって炎症反応を抑制することが示唆された（Ａｍｏｎ  ａｎｄ  Ｓｅｌａ，１９９９）。
【００１１】
さらに、２つの追加のヒト化モノクローナル抗体、ナタリズマブ（Ｔｙｓａｂｒｉ（登録商標））及びアレムツズマブ（Ｌｅｍｔｒａｄａ（登録商標））が、臨床で利用可能であるが、これらの医薬品は、重度の副作用及び高い費用を特徴とする。
【００１２】
鉄、すなわちヒトの体を含めた哺乳類の組織中に豊富な金属元素は、生命にとって必須の要素であり、様々な生物系において重要な役割を果たしている。健康な成人では、鉄の総量は、３〜４ｇであり、そのうちの約１％は、細胞呼吸及び電子伝達に関与するタンパク質を含めた、鉄含有酵素及び酸化還元活性のあるタンパク質に結合されている、
【００１３】
「不安定鉄プール（Ｌａｂｉｌｅ  ｉｒｏｎ  ｐｏｏｌ）」（ＬＩＰ）は、鉄の総量のごく一部である。ＬＩＰは、本質的な細胞性の目的、並びにヒドロキシルラジカルなどのフリーラジカルを含めた活性酸素種（ｒｅａｃｔｉｖｅ  ｏｘｙｇｅｎ−ｄｅｒｉｖｅｄ  ｓｐｅｃｉｅｓ）（ＲＯＳ）の産生の触媒作用を果たす、不安定な及び酸化還元活性のある鉄からなる。ＲＯＳは、酸化ストレスを生じること、また、組織傷害及び炎症を引き起こすことが公知である。
【００１４】
不安定な鉄の蓄積及び酸化ストレスは、ＭＳを含めた脱髄障害と強く関連することが報告された（Ｍａｈａｄ  ｅｔ  ａｌ．，２０１５；Ｂａｇｎａｔｏ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３）。ＬＩＰによって媒介される傷害作用を最小限にする、及び脳内のＬＩＰ含有量を低下させるために、鉄のキレート療法が提案されている。
【００１５】
最も広く使用されている鉄キレート薬は、デスフェリオキサミンＢ（ＤＦＯ）のメシル酸塩であるデスフェラール（登録商標）である。ＤＦＯは、シデロフォア、すなわち、三価鉄（ｆｅｒｒｉｃ  ｉｒｏｎ）に対する高い親和性を有する小分子であり、これは、微生物によって分泌され、周囲（ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ）鉄の捕捉剤として、及び、鉄の微生物細胞への移入のための往復輸送体（ｓｈｕｔｔｌｅ）として働く。ＤＦＯは、一般に安全と認められる（ｇｅｎｅｒａｌｌｙ  ｒｅｃｏｇｎｉｚｅｄ  ａｓ  ｓａｆｅ）（ＧＲＡＳ）放線菌門ストレプトマイセス・ピロサス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｐｉｌｏｓｕｓ）によって合成される。デスフェラール（登録商標）は、鉄過剰の排除のための医薬品として、Ｃｉｂａ  Ｇｅｉｇｙ社によって開発され、１９６４年に臨床使用についてＦＤＡによって承認された。ヘモクロマトーシスの患者の異なる組織内に沈着する大量の鉄、及び脂質相中のデスフェラール（登録商標）の低溶解度に起因して、＞４０００ｍｇ／１日／１人の１日用量が患者に投与され、今でも投与されている。構造的には、ＤＦＯは、長い直鎖の親水性分子であり、細胞膜をゆっくりと控えめに透過し、ほとんど組織に入ることはない。したがって、デスフェラール（登録商標）投与の経路は、筋肉内、皮下、及び静脈内注射のみに限られる。
【００１６】
上に記載したデスフェラール（登録商標）の臨床使用の制限に打ち勝つために、ＤＦＯの「非鉄」金属−イオン錯体、例えばＤＦＯの亜鉛及びガリウム錯体などが調製された（米国特許第５，０７５，４６９号明細書及び同第５，６１８，８３８号明細書）。これらの錯体は、鉄介在性細胞及び組織傷害の治療において、デスフェラール（登録商標）単体よりも有効であることが判明した。
【００１７】
２〜５ｍｇ／ｋｇのＺｎ−ＤＦＯ錯体の投与は、長期にわたる虚血及び再灌流後の、視神経の高度な保護をもたらした（Ｏｂｏｌｅｎｓｋｙ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１）。これらのＤＦＯ錯体は、血液脳関門を通過する増強された能力を示した。また、これらの錯体のいずれかでの様々な状態の治療は、動物モデルにおいて、いかなる有害作用ももたらさなかった。
【００１８】
ＭＳのための現在利用可能な治療選択肢には、様々な状況から生じる炎症誘発性活性を抑制する、一連の免疫調節薬及びヒト化モノクローナル抗体が含まれる。これらの薬物の作用様式には、炎症細胞の活性化における介入、炎症の部位に到達する能力の低下、又は破壊のためにこれらの細胞を標的化することが含まれる。けれども、これらの薬物は、限定された有効性、及び重症度が異なる様々な有害反応を示す。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１９】
一態様では、本発明は、それを必要とする対象における脱髄を予防、阻害、軽減、又は改善し、それによって、より具体的には、脱髄を特徴とする又は脱髄に伴う疾患、障害、又は状態を治療するための方法であって、金属−デスフェリオキサミンＢ錯体（金属−ＤＦＯ錯体）又はその薬学的に許容される塩（ここでは前記金属は鉄ではない）と、免疫調節薬とを含む治療有効量の組み合わせを、前記対象に投与することを含む前記方法に関する。ある種の実施形態では、この方法に従って投与される組み合わせは、治療量以下の用量の前記免疫調節薬を含む。
【００２０】
別の態様では、本発明は、金属−ＤＦＯ錯体又はその薬学的に許容される塩（ここでは前記金属は鉄ではない）と、免疫調節薬と、薬学的に許容される担体との組み合わせを含む医薬組成物を提供する。こうした医薬組成物は、脱髄を予防、阻害、軽減、又は改善し、それによって、より具体的には、脱髄を特徴とする又は脱髄に伴う疾患、障害、又は状態を治療するのに有用である。
【００２１】
さらに別の態様では、本発明は、脱髄を予防、阻害、軽減、又は改善するのに使用するための、金属−ＤＦＯ錯体又はその薬学的に許容される塩（ここでは前記金属は鉄ではない）と、免疫調節薬との組み合わせに関する。
【００２２】
さらに別の態様では、本発明は、脱髄を予防、阻害、軽減、又は改善するための医薬組成物の調製における、金属−ＤＦＯ錯体又はその薬学的に許容される塩（ここでは前記金属は鉄ではない）と、免疫調節薬との組み合わせの使用に関する。
【００２３】
さらなる態様では、本発明は、
（ｉ）金属−ＤＦＯ錯体又はその薬学的に許容される塩を含む医薬組成物Ａ；又は医薬組成物Ｂ及びＣ（ここでは、医薬組成物Ｂは、ＤＦＯ又はその薬学的に許容される塩を含み、医薬組成物Ｃは、金属のイオンを含み、前記金属は鉄ではない）；
（ｉｉ）免疫調節薬を含む医薬組成物Ｄ；及び
（ｉｉｉ）前記ＤＦＯ又はその薬学的に許容される塩と前記金属イオンとの錯体形成時に、金属−ＤＦＯ錯体又はその薬学的に許容される塩をインサイチュで形成するように、（ａ）医薬組成物Ａ及びＤを、任意の順序で且つ３６時間を超えない時間内に、同時に又は連続的に；又は（ｂ）医薬組成物Ｂ、Ｃ、及びＤを、任意の順序で且つ３６時間を超えない時間内に、同時に又は連続的に投与し、それによって、脱髄を予防、阻害、軽減、又は改善するための説明書
を含むキットを提供する。
【発明を実施するための形態】
【００２４】
本明細書で互換的に使用される用語「ＤＦＯ」、「デフェロキサミン」、又は「デスフェリオキサミンＢ」は、化合物Ｎ’−［５−（アセチル−ヒドロキシ−アミノ）ペンチル］−Ｎ−［５−［３−（５−アミノペンチル−ヒドロキシ−カルバモイル）プロパノイルアミノ］ペンチル］−Ｎ−ヒドロキシ−ブタンジアミド、すなわち、６つの基本単位から構成され、且つ放線菌門ストレプトマイセス・ピロサス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｐｉｌｏｓｕｓ）によって天然に産生される、細菌のシデロフォアを指す。ＤＦＯは、金属に結合されていない時には、細胞に控えめに浸透する線状の麺様の分子である；しかし、金属に結合すると、より極性が低くなり、細胞に浸透することが可能な球状の錯体の形態をとる。これらの考察は、ＤＦＯ錯体が何故、より容易に細胞膜を透過し、酸化還元活性のある組織損傷を媒介する細胞内の鉄に、より効率的に結合するのかという理由を説明する。
【００２５】
ＲＯＳ形成を阻害する際にＤＦＯによって発揮される有用な効果のいくつかは、三価鉄のキレート剤（キーラント（ｃｈｅｌａｎｔ）、キレーター、又は封鎖剤）としてのその作用を通じて達成されることが想定される。さらに、ＤＦＯは、ある種の（非鉄）金属イオンと共に、可溶性の錯体、すなわちキレート（これは、酸化還元不活性であり、したがって、他の元素又はイオンと通常は反応することができない）を形成することが可能である。こうしたキレートは、しばしば、キレーター又は金属イオン単体の特性とは著しく異なる化学及び生物学的特性を有する。
【００２６】
ＤＦＯは、鉄に加えて、亜鉛及びガリウムなどの酸化還元サイレントな金属との堅固な錯体を形成する。Ｈ９Ｃ２心筋細胞を使用する組織培養モデルにおける、ＤＦＯ単体及びＺｎ−ＤＦＯ錯体が細胞に浸透する能力を比較する最近の実験では、Ｚｎ−ＤＦＯ錯体が、ＤＦＯ単体よりも３倍早く細胞に浸透することが判明している（データは示さない）。したがって、ＤＦＯの亜鉛（又は異なる非鉄金属）錯体を使用することは、酸化還元活性のある鉄がキレート化され、その酸化還元活性が阻止される、２ステップの抗酸化的保護を提供することができ；その後、ＤＦＯ錯体（これは、それ自体が抗酸化活性を有し、様々な酵素が適切に機能するために必要とされる）の一部であった亜鉛、又は他の非鉄金属は、制御された方式で放出される。
【００２７】
デスフェラール（登録商標）は、そのメタンスルホン酸（メシル酸）塩の形態で販売されている、市販品として入手可能なＤＦＯである。ＤＦＯの他の薬学的に許容される塩としては、限定はされないが、その塩化物、臭化物、ヨウ化物、酢酸塩、エタンスルホン酸塩（エシル酸塩）、エタンジスルホン酸塩（エジシル酸塩）、マレイン酸塩、フマル酸塩、酒石酸塩、酒石酸水素塩、硫酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、トシル酸塩、安息香酸塩、酢酸塩、リン酸塩、炭酸塩、炭酸水素塩、コハク酸塩、及びクエン酸塩が挙げられる。
【００２８】
Ｆｅ（ＩＩＩ）、Ｃｕ（ＩＩ）、Ｚｎ（ＩＩ）、及びＧａ（ＩＩＩ）とのＤＦＯ錯体についての相対的安定度定数は、それぞれ、１０３１、１０１４、１０１１、及び１０２８である（Ｋｅｂｅｒｌｅ，１９６４）。ランタニドイオンとのＤＦＯ錯体の安定度定数は、１０３１よりも低いことが予想される（Ｏｒｃｕｔｔ  ｅｔ  ａｌ．，２０１０）。これらの熱力学的特性に基づくと、大量の不安定且つ酸化還元活性のあるＦｅ有する細胞への透過時に、Ｚｎ−ＤＦＯ錯体は、ＺｎをＦｅと交換し、この錯体から放出された亜鉛は、追加の有益な抗酸化及び／又は他の効果を有するであろう。例えば、ＭＳ病態生理が、Ｚｎ喪失を含むことも示され（Ｐｏｐｅｓｃｕ  ｅｔ  ａｌ．，２０１７）、したがって、脳内でのＺｎの補充は、追加の有益な因子として働くこともできる。
【００２９】
示されている通り、非鉄金属−ＤＦＯ錯体、例えばＺｎ−ＤＦＯ錯体内の亜鉛イオン及びＧａ−ＤＦＯ錯体内のガリウムイオンなどとのその交換を通じた鉄の結合は、不安定な鉄によって触媒されるＲＯＳの形成を予防する、且つ炎症誘発性サイトカインの産生を抑制する、炎症性障害の種々のモデルにおける著しい抗酸化及び抗炎症性の可能性を示す（Ｏｂｏｌｅｎｓｋｙ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１；Ｂｉｂｉ  ｅｔ  ａｌ．，２０１４；Ｍｏｒａｄ  ｅｔ  ａｌ．，２００５）。これらの錯体は、虚血−再灌流傷害（これは、脱髄プロセスに寄与すると報告された（Ｒｅｎｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２０１７））の緩和において、完全に安全且つ効果的であるとさらに判明した（Ｋａｒｃｋ  ｅｔ  ａｌ．，２００１）。さらに、これらの錯体は、ＤＦＯ単体よりも著しく良く血液脳関門（ＢＢＢ）に浸透する能力を示す。本明細書の実験セクションにおいてさらに示す通り、Ｚｎ−ＤＦＯ及びＧａ−ＤＦＯ錯体は、脱髄プロセスの速度を低下させること、すなわち、脱髄を阻害、軽減、又は改善することにおいて非常に有効であり、したがって、脱髄に伴う又は脱髄を特徴とする医学的状態を治療することが可能である。動物モデルでは、これらの錯体のいずれかでの極めて多くの病態の治療が、いかなる有害作用ももたらさなかった。
【００３０】
重要なことには、組織由来の鉄によるＺｎ−ＤＦＯ錯体の亜鉛又はＧａ−ＤＦＯ錯体のガリウムの交換に起因するＦｅ−ＤＦＯ錯体は、鉄が酸化還元循環に関与しておらず体外に排出される、不活性な錯体である。
【００３１】
本発明の基礎をなす治療概念は、脱髄を予防、阻害、軽減、又は改善する、したがって、脱髄を特徴とする又は脱髄に伴う疾患、障害、又は状態を治療するための、非鉄金属−ＤＦＯ錯体（本明細書では「Ｚｙｇｏｓｉｄ」とも称される）、例えばＺｎ−ＤＦＯ、Ｇａ−ＤＦＯ、又はそれらの混合物と、免疫調節薬とを含む、又はこれらからなる組み合わせの使用である。脱髄は、大抵、自己免疫応答に起因する炎症によって引き起こされ、Ｚｙｇｏｓｉｄは、既に、糖尿病及び乾癬などの自己免疫性障害を含めたいくつかのモデル系において、顕著な有害な副作用を伴わずに強力な抗炎症活性を示している。したがって、開示した組み合わせは、脱髄を特徴とする又は脱髄に伴う疾患、障害、又は状態を患う対象に投与された場合、薬物単独のそれぞれ１つずつの有効性よりも（また、単独で投与された時に、活性な薬剤のそれぞれ１つずつの投薬量が、非常に低い治療効果を有する又はこうした効果をまったく有しない場合であっても）実質的に高い治療的有効性を有することが期待される。
【００３２】
金属−ＤＦＯ錯体の保護的な効果は、２つ以上の理由に由来することが想定される。１つ目は、ＲＯＳの形成抑制である。金属−ＤＦＯ錯体が、フリーラジカル形成のこうした顕著な減少を達成するための組み合わせられた「プッシュプル（ｐｕｓｈ−ｐｕｌｌ）」機構を介して作用する能力は、理論的考察と、以前に報告された実験的発見の両方によって裏付けられる。フェントン反応又は金属介在性のハーバー・ワイス機構では、反応性の低い種の、非常に反応性の高いヒドロキシルラジカルへの転換は、ＲＯＳ形成における必須の触媒として働く、痕跡量の酸化還元活性のある且つ不安定な鉄又は銅イオンの利用可能性に明らかに依存する（Ｃｈｅｖｉｏｎ，１９８８；Ｓａｍｕｎｉ  ｅｔ  ａｌ．，１９８３）。したがって、前記錯体、具体的にはＺｎ−ＤＦＯ及びＧａ−ＤＦＯ錯体は、ヒドロキシルラジカル形成のこの重要なステップに介入することによって、その保護的な効果を発揮することが仮定される。並行する作用機序は、脱髄を加速させる直接的原因とみなされる、鉄の除去である（Ｈａｍｅｔｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２０１８）。
【００３３】
したがって、一態様では、本発明は、それを必要とする対象において、脱髄を予防、阻害、軽減、又は改善し、それによって、より具体的には、脱髄を特徴とする又は脱髄に伴う疾患、障害、又は状態を治療するための方法であって、金属−ＤＦＯ錯体又はその薬学的に許容される塩（ここでは前記金属は鉄ではない）（本明細書では「非鉄金属−ＤＦＯ錯体」とも称される）と、免疫調節薬とを含む治療有効量の組み合わせを、前記対象に投与することを含む前記方法に関する。
【００３４】
ある種の実施形態では、本発明の方法に従って投与される非鉄金属−ＤＦＯ錯体は、亜鉛−ＤＦＯ錯体、ガリウム−ＤＦＯ錯体、マンガン−ＤＦＯ錯体、銅−ＤＦＯ錯体、アルミニウム−ＤＦＯ錯体、バナジウム−ＤＦＯ錯体、インジウム−ＤＦＯ錯体、クロム−ＤＦＯ錯体、金−ＤＦＯ錯体、銀−ＤＦＯ錯体、又は白金−ＤＦＯ錯体、ランタニド−ＤＦＯ錯体、又はそれらの混合物である。個々のランタニドとしては、ランタン、セリウム、プラセオジム、ネオジム、プロメチウム、サマリウム、ユウロピウム、ガドリニウム、テルビウム、ジスプロシウム、ホルミウム、エルビウム、ツリウム、イッテルビウム、及びルテチウムが挙げられ、これらのうち、ユウロピウム及びガドリニウムが好ましい。本発明によれば、２種以上の金属−ＤＦＯ錯体の混合物が投与される場合、前記混合物は、あらゆる量比で、前記金属−ＤＦＯ錯体を含むことができる。例えば、２種の金属−ＤＦＯ錯体の混合物が投与される場合、前記混合物は、約１００：１から約１：１００の量比で、例えば、約１００：１、約９０：１、約８０：１、約７０：１、約６０：１、約５０：１、約４０：１、約３０：１、約２０：１、約１０：１、約９：１、約８：１、約７：１、約６：１、約５：１、約４：１、約３：１、約２：１、約１：１、約１：２、約１：３、約１：４、約１：５、約１：６、約１：７、約１：８、約１：９、約１：１０、約１：２０、約１：３０、約１：４０、約１：５０、約１：６０、約１：７０、約１：８０、約１：９０、又は約１：１００の量比で、前記２種の金属−ＤＦＯ錯体を含むことができる。同様に、３種の金属−ＤＦＯ錯体の混合物が投与される場合、前記混合物は、例えば、約１：１：１、約１：２：３、約１：１０：５０、約１：２０：５０、約１：１０：１００、又は約１：５０：１００の量比で、前記３種の金属−ＤＦＯ錯体を含むことができる。
【００３５】
特定の実施形態では、本発明の方法に従って投与される非鉄金属−ＤＦＯ錯体は、Ｚｎ−ＤＦＯ錯体、Ｇａ−ＤＦＯ錯体、又はＺｎ−ＤＦＯ錯体と、上に列挙した他の非鉄金属−ＤＦＯ錯体のいずれか１つ（例えばＧａ−ＤＦＯ錯体）との混合物である。より具体的なこうした実施形態では、Ｚｎ−ＤＦＯ錯体と、追加の金属−ＤＦＯ錯体、例えばＧａ−ＤＦＯ錯体との混合物が投与され、例えば、ここでは、Ｚｎ−ＤＦＯ錯体と他の金属−ＤＦＯ錯体の量比は、約１００：１から約１：１００、例えば、約５０：１から約１：５０、約４０：１から約１：４０、約３０：１から約１：３０、約２０：１から約１：２０、約１０：１から約１：１０、約５：１から約１：５、約４：１から約１：４、約３：１から約１：３、約２：１から約１：２、又は約１：１の範囲である。ある種のこうした混合物は、Ｚｎ−ＤＦＯ錯体の量が、他の金属−ＤＦＯ錯体の量よりも多いもの、例えば、Ｚｎ−ＤＦＯ錯体と他の金属−ＤＦＯ錯体の量比が約１０：１から約２：１、例えば、約１０：１、約９：１、約８：１、約７：１、約６：１、約５：１、約４：１、約３：１、又は約２：１の範囲である混合物である。他のこうした混合物は、Ｚｎ−ＤＦＯ錯体の量が、他の金属−ＤＦＯ錯体の量よりも少ないもの、例えば、Ｚｎ−ＤＦＯ錯体と他の金属−ＤＦＯ錯体の量比が約１：２から約１：１０、例えば、約１：２、約１：３、約１：４、約１：５、約１：６、約１：７、約１：８、約１：９、又は約１：１０の範囲である混合物である。
【００３６】
本明細書で使用される用語「免疫調節薬」は、抗体形成の刺激又は白血球活性の阻害によって免疫応答を修飾すること又は免疫系の機能化が可能な、活性な薬剤を指す。
【００３７】
本発明の方法によれば、金属−ＤＦＯ錯体と組み合わせて投与される免疫調節薬は、フィンゴリモド、フマル酸ジメチル、テリフルノミド、酢酸グラチラマー、オクレリズマブ、ナタリズマブ、アレムツズマブ、免疫増強インターフェロンに基づく薬物、又はその薬学的に許容される塩であり得る。
【００３８】
ある種の実施形態では、本発明の方法に従って投与される免疫調節薬は、フィンゴリモド、又はその薬学的に許容される塩である。フィンゴリモドは、リンパ節にリンパ球を閉じ込め、リンパ球が自己免疫反応に寄与しないようにする、スフィンゴシン−１−リン酸受容体修飾薬である。具体的なこうした薬物は、１０歳以上の患者における再発型のＭＳを治療するために現在使用されているＧｉｌｅｎｙａ（登録商標）である。Ｇｉｌｅｎｙａ（登録商標）は、０．２５ｍｇ又は０．５ｍｇフィンゴリモドを（その塩酸塩として）含有するカプセルとして利用可能である。推奨される投薬量は、治療される対象の体重に応じて、０．５ｍｇ又は０．２５ｍｇ（１日１回、経口的）である。０．５ｍｇよりも高いＧｉｌｅｎｙａ（登録商標）用量は、追加の利益を伴うことなく、より高頻度の有害反応を伴う。
【００３９】
他の実施形態では、本発明の方法に従って投与される免疫調節薬は、再発型のＭＳを治療するために現在使用されているＴｅｃｆｉｄｅｒａ（登録商標）などの、フマル酸ジメチル又はその薬学的に許容される塩である。この薬物についての利用可能な投薬情報によれば、開始用量は、１日２回経口的に与えられる１２０ｍｇであり、これは、７日後に、１日２回２４０ｍｇの維持用量に増大される。維持用量に耐容性を示さない個人については、１日２回１２０ｍｇへの一時的な用量減少を考慮することができ；４週以内に、１日２回２４０ｍｇの推奨される用量に戻されるべきである。
【００４０】
さらなる実施形態では、本発明の方法に従って投与される免疫調節薬は、ピリミジンの新規合成に関与するミトコンドリアの酵素ジヒドロオロト酸デヒドロゲナーゼを阻害する、テリフルノミド又はその薬学的に許容される塩である。具体的なこうした薬物は、７ｍｇ又は１４ｍｇテリフルノミドを含有する経口投与のためのフィルムコーティングされた錠剤として製剤化されるＡｕｂａｇｉｏ（登録商標）であり、ここでは、推奨される用量は、１日１回、１錠である。
【００４１】
いっそうさらなる実施形態では、本発明の方法に従って投与される免疫調節薬は、ミエリン塩基性タンパク質にみられる４つのアミノ酸、すなわち、グルタミン酸、リジン、アラニン、及びチロシンから構成されるランダムサイズのペプチドの混合物である、酢酸グラチラマーである。ミエリン塩基性タンパク質は、ＭＳを有する人において自己免疫反応を刺激するニューロンのミエリン鞘内の抗原であるので、このペプチドは、攻撃する免疫細胞に対するデコイとして働くことができる。酢酸グラチラマーは、能力障害の進行を緩和するためではなく、再発の頻度を低下させるために承認されている。無作為化比較試験ではなく、観察研究は、酢酸グラチラマーが、能力障害の進行を緩和することができることを示唆している。ＭＳの確定診断は、症状及び徴候の２つ以上のエピソードの履歴を必要とするが、酢酸グラチラマーは、診断に先行する第１のエピソードを治療するために承認されている。具体的なこうした薬物は、再発寛解型ＭＳを含めたＭＳを治療するために現在使用されているＣｏｐａｘｏｎｅ（登録商標）である。Ｃｏｐａｘｏｎｅ（登録商標）は、毎日の２０ｍｇ注射、又は週に３回注射される４０ｍｇ用量として承認されている。Ｇｌａｔｏｐａ（登録商標）は、同じ適応症について同じ投薬量で承認されている、Ｃｏｐａｘｏｎｅ（登録商標）のジェネリック版である。
【００４２】
さらに他の実施形態では、本発明の方法に従って投与される免疫調節薬は、再発性ＭＳと一次性進行型ＭＳ（ＰＰＭＳ）の両方の治療のために承認されているヒト化モノクローナル抗体であるＯｃｒｅｖｕｓ（登録商標）などの、オクレリズマブ又はその薬学的に許容される塩である。Ｏｃｒｅｖｕｓ（登録商標）についての推奨される初回用量は、２週差で（各注射において３００ｍｇ）静脈内注射される６００ｍｇ、及び６か月ごとの後続用量の６００ｍｇ静脈内注入である。
【００４３】
いっそうさらなる実施形態では、本発明の方法に従って投与される免疫調節薬は、Ｔｙｓａｂｒｉ（登録商標）などのナタリズマブ又はその薬学的に許容される塩；又はＬｅｍｔｒａｄａ（登録商標）若しくはＣａｍｐａｔｈ（登録商標）（どちらもヒト化モノクローナル抗体）などのアレムツズマブ又はその薬学的に許容される塩である。ナタリズマブは、炎症性免疫細胞が腸及び血液脳関門の内側を覆う細胞層と接着して通過する能力を低下させることによって働くと考えられている。既存の医薬品を用いる比較調査以外に、ナタリズマブの長期使用並びに潜在的に致命的な有害事象に関する情報がないことにより、この薬物の使用に関して不安が示されてきた。推奨される用量は、４週間に１回の１時間かけた３００ｍｇ静脈内注入である。アレムツズマブは、その安全性プロフィールのおかげで、２つ以上の他の薬物に対する不適切な反応を有するＭＳ患者において使用される。この推奨される用量は、２つの別の治療コース：（ｉ）連続する５日間の１２ｍｇ／日の静脈内注射（総用量６０ｍｇ）；及び（ｉｉ）連続する３日間の１２ｍｇ／日の静脈内注射（総用量３６ｍｇ）として投与される。それに続くコースには、いずれかの事前の治療コースの最終投与の少なくとも１２か月後に、必要に応じて、連続する３日間の１２ｍｇ／日の静脈内投与（総用量３６ｍｇ）が含まれる。
【００４４】
インターフェロンは、サイトカイン、すなわち、細胞間シグナル伝達に関与する小さいタンパク質であり、ここでは、３つの型α、β、及びγが、免疫系の活性を制御する。インターフェロン−αは、リンパ球ではなく白血球によって産生され、インターフェロン−βは、線維芽細胞によって産生され、インターフェロン−γは、ナチュラルキラー細胞及び細胞傷害性Ｔリンパ球によって産生される。インターフェロンα及びβは、Ｉ型インターフェロンとして分類され、これは、主として、細胞におけるウイルス抵抗性を誘発し；インターフェロンγは、ＩＩ型として分類され、これは、主として、感染病原体又は癌性増殖に反応するように免疫系にシグナルを送る。
【００４５】
インターフェロンβに基づく医薬品は、ＭＳを治療するために使用されている。こうした医薬品は、増悪の頻度を低下させる、疾患の経過を安定化させる、また、症状の悪化を遅くし、経時的に能力障害を減らすのを助けることができる。５つの型の市販品として入手可能なインターフェロンβに基づく薬物が存在し、そのすべてが注射可能であり、これらは、インターフェロン−β１ａ薬物、すなわち、Ａｖｏｎｅｘ（登録商標）、Ｒｅｂｉｆ（登録商標）、及びＰｌｅｇｒｉｄｙ（登録商標）と；インターフェロン−β１ｂ薬物、すなわち、Ｂｅｔａｆｅｒｏｎ（登録商標）及びＥｘｔａｖｉａ（登録商標）に分類される。（ｉ）Ａｖｏｎｅｘ（登録商標）の推奨される投薬量は、３０μｇ（週１回、筋肉内注射）であり；（ｉｉ）Ｒｅｂｉｆ（登録商標）は、２２μｇ又は４４μｇ（週３回、皮下注射）であり；（ｉｉｉ）Ｐｌｅｇｒｉｄｙ（登録商標）は、１２５μｇ（１４日ごと、皮下注射）である。インターフェロン−β１ｂ薬物は、０．０６２５ｍｇ（１日おき）の初回投薬量で皮下投与され、これは、２週ごとに（増加分２５％で）、６週の期間をかけて、０．２５ｍｇ（１日おき）の維持用量まで増大される。
【００４６】
本発明の方法によれば、投与される非鉄金属−ＤＦＯ錯体と免疫調節薬は、あらゆる量比であり得る。ある種の実施形態では、前記組み合わせ中の前記金属−ＤＦＯ錯体と前記免疫調節薬との量比は、１００：１から１：１００の範囲、例えば、約１００：１、約９０：１、約８０：１、約７０：１、約６０：１、約５０：１、約４０：１、約３０：１、約２０：１、約１０：１、約９：１、約８：１、約７：１、約６：１、約５：１、約４：１、約３：１、約２：１、約１：１、約１：２、約１：３、約１：４、約１：５、約１：６、約１：７、約１：８、約１：９、約１：１０、約１：２０、約１：３０、約１：４０、約１：５０、約１：６０、約１：７０、約１：８０、約１：９０、又は約１：１００の量比である。
【００４７】
本明細書に開示した方法によれば、治療される対象に免疫調節薬と共に投与される金属−ＤＦＯ錯体は、前記免疫調節薬の投薬量を、治療量以下の用量、すなわち、単独で投与された場合には治療効果をもたらすには不十分である用量まで減らすこと、並びに前記免疫調節薬を利用する連続した治療の間隔を広げることを可能にすることができる。
【００４８】
ある種の実施形態では、上の実施形態のいずれか１つにおいて定義された本発明の方法に従って投与される組み合わせは、治療量以下の用量の免疫調節薬を含む。こうした組み合わせは、治療的に有効な用量で単独で投与された場合に前記免疫調節薬によって引き起こされる有害作用と比較して、有害作用の低下をもたらすことができる。
【００４９】
特定のこうした実施形態では、本発明に従って投与される組み合わせは、非鉄金属−ＤＦＯ錯体、例えば、Ｚａ−ＤＦＯ錯体、Ｇａ−ＤＦＯ錯体、又はそれらの混合物（例えば、ここでは、前記Ｚｎ−ＤＦＯ錯体と前記Ｇａ−ＤＦＯ錯体との量比は、１００：１から１：１００の範囲である）と、治療量以下の用量の、フィンゴリモド、フマル酸ジメチル、テリフルノミド、酢酸グラチラマー、オクレリズマブ、ナタリズマブ、アレムツズマブから選択される免疫調節薬、免疫増強インターフェロンに基づく薬物、又はその薬学的に許容される塩とを含む。より具体的なこうした実施形態は、非鉄金属−ＤＦＯ錯体が、上で定義した通りであり、且つ免疫調節薬が、（ｉ）Ｇｉｌｅｎｙａ（登録商標）；（ｉｉ）Ｔｅｃｆｉｄｅｒａ（登録商標）；（ｉｉｉ）Ａｕｂａｇｉｏ（登録商標）；Ｃｏｐａｘｏｎｅ（登録商標）；（ｉｖ）Ｇｌａｔｏｐａ（登録商標）；（ｖ）Ｏｃｒｅｖｕｓ（登録商標）；（ｖｉ）Ｔｙｓａｂｒｉ（登録商標）；（ｖｉｉ）Ｌｅｍｔｒａｄａ（登録商標）；又は（ｖｉｉｉ）Ｃａｍｐａｔｈ（登録商標）であるものである。
【００５０】
ある種の実施形態では、上の実施形態のいずれか１つにおいて定義された本発明の方法に従って投与される非鉄金属−ＤＦＯ錯体及び免疫調節薬は、１つ以上の投与経路を通じた、任意の順序の且つ３６時間を超えない時間内の同時又は連続的投与のための、別の、例えば２種の医薬組成物として製剤化される。本発明の方法によれば、投与される組成物のそれぞれ１つずつを、あらゆる好適な投与経路のために、例えば、経口、舌下、頬側、直腸内、静脈内、動脈内、筋肉内、腹腔内、髄腔内、胸膜内、気管内、皮膚、皮下、経皮、皮内、経鼻、膣内、点眼、点耳、又は局所投与のために、又は吸入のために、独立に製剤化することができる。
【００５１】
他の実施形態では、上の実施形態のいずれか１つにおいて定義された本発明の方法に従って投与される非鉄金属−ＤＦＯ錯体及び免疫調節薬は、ただ一つの医薬組成物として製剤化される。こうした組成物は、あらゆる好適な投与経路のために、例えば、経口、舌下、頬側、直腸内、静脈内、動脈内、筋肉内、腹腔内、髄腔内、胸膜内、気管内、皮膚、皮下、経皮、皮内、経鼻、膣内、点眼、点耳、又は局所投与のために、又は吸入のために、製剤化することができる。
【００５２】
上で定義した実施形態のいずれか１つによる、本明細書に開示した方法は、非鉄金属−ＤＦＯ錯体又はその薬学的に許容される塩と免疫調節薬とを含む治療有効量の薬物の組み合わせ、（本明細書では活性な薬剤の組み合わせとも称される）を投与することによって、それを必要とする対象における脱髄を予防、阻害、軽減、又は改善し、それによって、脱髄を特徴とする又は脱髄に伴う疾患、障害、又は状態を治療することを目的とする。
【００５３】
「脱髄疾患」とも称される用語「脱髄」は、ミエリン鞘が損傷を受ける、神経系において発生する病的プロセスである。ミエリンは、オリゴデンドロサイトと呼ばれるグリア細胞によってＣＮＳにおいて、また、シュワン細胞によってＰＮＳにおいて形成される脂肪性の物質である。ミエリン鞘に対する損傷は、罹患した神経におけるシグナルの伝達を損なう。したがって、伝達能力の低下は、関与する神経に応じて、感覚、運動、認知、及び／又は他の機能の欠乏を引き起こす。脱髄プロセスは、遺伝的特質、感染病原体、自己免疫反応、並びに未知の因子に起因する可能性がある。神経系における脱髄の最初の部位に応じて、これらの疾患は、ＣＮＳを侵す中枢脱髄と、ＰＮＳに影響を与える末梢脱髄に分けられる。脱髄疾患は、炎症の存在又は欠如に従って、炎症性疾患と非炎症性疾患に分けることもできる、さらに、脱髄の根本的原因に応じて、正常及び健康なミエリンが毒性物質、化学物質、又は自己免疫性物質によって破壊される髄鞘破壊性（ｍｙｅｌｉｎｏ−ｃｌａｓｔｉｃ）疾患と；ミエリンが異常であり変質する脱髄性白質ジストロフィー疾患とに分けることができる。
【００５４】
本明細書で使用される用語「対象」は、あらゆる哺乳類、例えば、ヒト、非ヒト霊長類、ウマ、フェレット、イヌ、ネコ、ウシ、及びヤギを指す。好ましい実施形態では、用語「対象」は、ヒト、すなわち、個人を指す。
【００５５】
脱髄を特徴とする又は脱髄に伴う疾患、障害、又は状態に関して本明細書で使用される用語「治療」は、前記疾患、障害、又は状態に伴う所望されない症状を改善する；こうした症状の発現を、それが起こる前に予防する；前記疾患、障害、又は状態の進行を遅くする；症状の悪化を遅くする；寛解期の開始を増進する；前記疾患、障害、又は状態の進行性の慢性期において引き起こされる不可逆的な損傷を遅くする；前記進行性の段階の開始を遅延させる；前記疾患、障害、又は状態の重症度を下げる、又は治癒させる；生存率又はより急速な回復を向上させる；及び／又は前記疾患、障害、又は状態が発生するのを予防するのに有効である、上に記載した通りの治療有効量の薬物の組み合わせの投与を指す。
【００５６】
本発明の方法に従って投与される薬物の組み合わせに関して本明細書で使用される用語「治療有効量」は、特定の期間、例えば、数日、数週、数か月、又は数年間の、特定のレジメンでの投与時に、それが投与される対象の身体において生じる脱髄を予防、阻害、軽減、又は改善するのに十分である、前記薬物の組み合わせの量、より具体的には、前記金属−ＤＦＯ錯体と前記免疫調節薬との量を指す。投与される金属−ＤＦＯ錯体と免疫調節薬との両方の実際の投薬量は、特定の対象及び投与様式について所望される予防／治療反応を達成するのに有効である、対象にとって毒性ではない、前記金属−ＤＦＯ錯体と前記免疫調節薬の量が得られるように、変動し得る。選択される投薬レベルは、用いられる金属−ＤＦＯ錯体の活性、投与経路、治療の期間、及び用いられる薬物の組み合わせと組み合わせて使用される他の薬物（もしあれば）、並びに治療される対象の年齢、性別、及び体重、及び医学的状態の重症度／進行を含めた、様々な因子に依存することとなる。一般に、予防的治療については、より低い用量が必要とされることとなるのに対して、前記脱髄の病理学的表現型を既に示している対象の治療については、より高い用量が必要とされることとなると推定することができる。薬物の組み合わせを構成する免疫調節薬に関して本明細書で使用される用語「治療量以下の用量」は、特定のレジメンで特定の期間、単独で（すなわち、前記非鉄金属−ＤＦＯ錯体を伴わずに）前記対象に投与した場合にそれを必要とする対象における脱髄を予防、阻害、軽減、又は改善するのに十分な用量よりも低い、前記免疫調節薬の１日用量を指す。
【００５７】
ある種の実施形態では、脱髄を特徴とする又は脱髄に伴う、したがって本発明の方法によって治療される、疾患、障害、又は状態には、限定はされないが、多発性硬化症、視神経脊髄炎（デビック病）、バロー同心円硬化症、シルダー病、慢性炎症性脱髄性多発ニューロパチー、進行性多巣性白質脳症、ギラン・バレー症候群、進行性炎症性ニューロパチー、急性散在性脳脊髄炎、視神経炎、横断性脊髄炎、副腎白質ジストロフィー、及び副腎脊髄ニューロパチーが含まれる。
【００５８】
他の実施形態では、脱髄を特徴とする又は脱髄に伴う、したがって本発明の方法によって治療される、障害又は状態は、傷害、例えば、機械的な力、虚血、有毒薬剤など、例えば、除草剤若しくは殺虫剤、又は出血などによって引き起こされる傷害によって誘発される。
【００５９】
別の態様では、本発明は、上で定義した通りの薬物の組み合わせ、すなわち、非鉄金属−ＤＦＯ錯体又はその薬学的に許容される塩と免疫調節薬との組み合わせと、薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物を提供する。
【００６０】
本発明の医薬組成物内に含まれる薬物の組み合わせは、非鉄金属−ＤＦＯ錯体又はその薬学的に許容される塩と、免疫調節薬とのあらゆる組み合わせであり得る。
【００６１】
ある種の実施形態では、本発明の医薬組成物内に含まれる非鉄金属−ＤＦＯ錯体は、亜鉛−ＤＦＯ錯体、ガリウム−ＤＦＯ錯体、マンガン−ＤＦＯ錯体、銅−ＤＦＯ錯体、アルミニウム−ＤＦＯ錯体、バナジウム−ＤＦＯ錯体、インジウム−ＤＦＯ錯体、クロム−ＤＦＯ錯体、金−ＤＦＯ錯体、銀−ＤＦＯ錯体、若しくは白金−ＤＦＯ錯体、ランタニド−ＤＦＯ錯体、又はそれらの混合物である。金属−ＤＦＯ錯体の混合物は、使用される場合、あらゆる量比の、例えば、約１００：１、約９０：１、約８０：１、約７０：１、約６０：１、約５０：１、約４０：１、約３０：１、約２０：１、約１０：１、約９：１、約８：１、約７：１、約６：１、約５：１、約４：１、約３：１、約２：１、約１：１、約１：２、約１：３、約１：４、約１：５、約１：６、約１：７、約１：８、約１：９、約１：１０、約１：２０、約１：３０、約１：４０、約１：５０、約１：６０、約１：７０、約１：８０、約１：９０、又は約１：１００の量比の、２種の金属−ＤＦＯ錯体を含むことができる。他の混合物は、あらゆる量比の、例えば、約１：１：１、約１：２：３、約１：１０：５０、約１：２０：５０、約１：１０：１００、又は約１：５０：１００の量比の、３種の金属−ＤＦＯ錯体を含むことができる。
【００６２】
特定の実施形態では、本発明の医薬組成物内に含まれる金属−ＤＦＯ錯体は、Ｚｎ−ＤＦＯ錯体、Ｇａ−ＤＦＯ錯体、又はＺｎ−ＤＦＯ錯体と上に列挙した他の金属−ＤＦＯ錯体のいずれか１つ（例えばＧａ−ＤＦＯ錯体）との混合物である。より具体的なこうした実施形態では、Ｚｎ−ＤＦＯ錯体と、追加の金属−ＤＦＯ錯体、例えばＧａ−ＤＦＯ錯体との混合物が使用され、例えば、ここでは、Ｚｎ−ＤＦＯ錯体と他の金属−ＤＦＯ錯体の量比は、約１００：１から約１：１００、例えば、約５０：１から約１：５０、約４０：１から約１：４０、約３０：１から約１：３０、約２０：１から約１：２０、約１０：１から約１：１０、約５：１から約１：５、約４：１から約１：４、約３：１から約１：３、約２：１から約１：２、又は約１：１の範囲である。ある種のこうした混合物は、Ｚｎ−ＤＦＯ錯体の量が、他の金属−ＤＦＯ錯体の量よりも多いもの、例えば、Ｚｎ−ＤＦＯ錯体と他の金属−ＤＦＯ錯体の量比が約１０：１から約２：１、例えば、約１０：１、約９：１、約８：１、約７：１、約６：１、約５：１、約４：１、約３：１、又は約２：１の範囲である混合物である。他のこうした混合物は、Ｚｎ−ＤＦＯ錯体の量が、他の金属−ＤＦＯ錯体の量よりも少ないもの、例えば、Ｚｎ−ＤＦＯ錯体と他の金属−ＤＦＯ錯体の量比が約１：２から約１：１０、例えば、約１：２、約１：３、約１：４、約１：５、約１：６、約１：７、約１：８、約１：９、又は約１：１０の範囲である混合物である。
【００６３】
ある種の実施形態では、本発明の医薬組成物内に含まれる免疫調節薬は、上に言及した通り、フィンゴリモド、フマル酸ジメチル、テリフルノミド、酢酸グラチラマー、オクレリズマブ、ナタリズマブ、アレムツズマブ、免疫増強インターフェロンに基づく薬物、又はその薬学的に許容される塩である。
【００６４】
本発明の医薬組成物内に含まれる薬物の組み合わせは、あらゆる量比の非鉄金属−ＤＦＯ錯体と免疫調節薬を含有することができる。ある種の実施形態では、薬物の組み合わせ中の前記金属−ＤＦＯ錯体と前記免疫調節薬との量比は、１００：１から１：１００の範囲、例えば、約１００：１、約９０：１、約８０：１、約７０：１、約６０：１、約５０：１、約４０：１、約３０：１、約２０：１、約１０：１、約９：１、約８：１、約７：１、約６：１、約５：１、約４：１、約３：１、約２：１、約１：１、約１：２、約１：３、約１：４、約１：５、約１：６、約１：７、約１：８、約１：９、約１：１０、約１：２０、約１：３０、約１：４０、約１：５０、約１：６０、約１：７０、約１：８０、約１：９０、又は約１：１００の量比である。
【００６５】
本発明の方法及び組成物による使用のための金属−ＤＦＯ錯体は、当技術分野で公知のあらゆる技術又は手順を利用して、例えば国際公開第２０１１０２１２０３号パンフレットに記載されている通りに調製することができる。特定の金属：ＤＦＯ化学量論比を有するＺｎ−ＤＦＯ及びＧａ−ＤＦＯ錯体の調製のための可能な手順を、本明細書において以下に提供する。異なる金属：ＤＦＯ化学量論比を有する他のこうした錯体も、同様の手順を使用して調製することができる。
【００６６】
１．０：１．０のＺｎ：ＤＦＯ化学量論比を有するＺｎ−ＤＦＯ錯体は、例えば、ＤＦＯの１０ｍＭ溶液を等体積の１０ｍＭ  ＺｎＣｌ２溶液と混合し、５．０から７．５のｐＨに調整し、この混合物を４５℃まで３０分間加熱し、冷却することによって調製することができる。或いは、こうした錯体は、１瓶（５００ｍｇ、０．７６ミリモル）のデスフェラール（登録商標）の内容物を、１６８ｍｇの酢酸亜鉛無水物（０．７６ミリモル）を添加することによって乾燥させ、この内容物が十分に溶解するまで２倍の蒸留水を添加し（約１０ｍｌ）、この溶液を４０℃まで４５分間温め、冷却することによって調製することができる。
【００６７】
１．０：１．２５のＺｎ：ＤＦＯ化学量論比を有するＺｎ−ＤＦＯ錯体は、例えば、ＤＦＯの１０ｍＭ溶液を等体積の６ｍＭ  ＺｎＣｌ２溶液と混合し、５．０から７．５のｐＨに調整し、４５℃まで３０分間加熱し、冷却することによって調製することができる。
【００６８】
０．６：１．０のＺｎ：ＤＦＯ化学量論比を有するＺｎ−ＤＦＯ錯体は、例えば、１０ｍＭ  ＤＦＯ溶液を等体積の１２．５ｍＭ  ＺｎＣｌ２溶液及び１０ｍｌの５．５ｍＭヒスチジンと混合し、５．０から７．５のｐＨに調整し、４５℃まで３０分間加熱し、冷却することによって調製することができる。
【００６９】
０．２：１．０のＺｎ：ＤＦＯ化学量論比を有するＺｎ−ＤＦＯ錯体は、例えば、５０ｍＭ  ＤＦＯ溶液を１／５体積の５０ｍＭ  ＺｎＳＯ４溶液と混合し、上に挙げた同じｐＨに調整し、４０℃まで４５分間加熱し、冷却することによって調製することができる。
【００７０】
１．０：１．０のＧａ：ＤＦＯ化学量論比を有するＧａ−ＤＦＯ錯体は、例えば、ＤＦＯの１０ｍＭ溶液を等体積の１０ｍＭ  ＧａＣｌ３溶液と混合し、約５．０のｐＨに、その後６．０から７．５のｐＨに（ＮａＯＨを使用して）調整することによって調製することができる。０．６：１．０のＧａ：ＤＦＯ化学量論比を有する同様の錯体は、例えば、５ｍＭ  ＤＦＯ溶液を等体積の３ｍＭ  ＧａＣｌ３溶液と混合し、５．０から７．５のｐＨに調整することによって調製することができる。
【００７１】
本明細書に開示した医薬組成物は、従来の技術によって、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，１９ｔｈ  Ｅｄ．，１９９５に記載された通りに調製することができる。この組成物は、例えば、活性な薬剤、すなわち非鉄金属−ＤＦＯ錯体（１種以上）及び免疫調節薬を、液体担体、微粉化した固体担体、又はこれらの両方と均一且つ完全に混合し、次いで、必要であれば、この生成物を所望される製剤に成形することによって調製することができる。活性な薬剤は、そのままで適用することもできるし、１つ以上の薬学的に許容される基、例えば糖、デンプン、アミノ酸、ポリエチレン−グリコール（ＰＥＧ）、ポリグリセロールに基づく化合物、ヒドラジン、ヒドロキシルアミン、アミン、又はハロゲン化物などと複合体化させることもできる。この組成物は、液体（例えば、溶液、乳濁液、若しくは懸濁液）、ゲル、クリーム、固体、半固体、フィルム、フォーム、凍結乾燥物（ｌｙｏｐｈｉｌｉｓａｔｅ）、又はエアロゾルの形態であり得、また、薬学的及び生理学的に許容される充填剤、担体、希釈剤、又は補助剤、並びに他の不活性な成分及び賦形剤をさらに含むことができる。一実施形態では、本発明の医薬組成物は、ナノ粒子又は微小粒子として製剤化される。
【００７２】
本発明の医薬組成物は、あらゆる好適な投与経路、例えば、経口、舌下、頬側、直腸内、静脈内、動脈内、筋肉内、腹腔内、髄腔内、胸膜内、気管内、皮膚、皮下、経皮、皮内、経鼻、膣内、点眼、点耳、又は局所投与のために、又は吸入のために製剤化することができる。
【００７３】
本発明の医薬組成物は、経口投与のために製剤化される場合、あらゆる好適な形態、例えば、錠剤、トローチ、ロゼンジ、水性又は油性の懸濁剤、分散可能な散剤若しくは顆粒剤、乳剤、ハード若しくはソフトカプセル、又はシロップ若しくはエリキシルであり得る。ある種の実施形態では、前記錠剤は、可溶性の活性な薬剤（１種又は複数）の放出が、活性な薬剤（１種又は複数）を、溶解液（インビトロ）又は胃腸液（インビボ）と接触した親水性ポリマーの膨潤後に形成されるゲルを通して拡散させることによって制御される、マトリックス錠の形態である。こうしたゲル、例えば、セルロースの誘導体、特にセルロースエーテル、例えばヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、メチルセルロース、又はメチルヒドロキシプロピルセルロースなどを形成することが可能な多くのポリマーが記載されており、様々な商用グレードのこれらのエーテルの中では、かなり高い粘度を示すものである。他の実施形態では、錠剤は、共に圧縮された、２つ以上の異なる層の造粒物（個々の層は互いに重なっており、それぞれ別の層は異なる活性な薬剤を含有する）から構成される二層又は多層錠剤として製剤化される。各層又は帯の端が露出しているので、二層錠剤は、サンドイッチの外観を有する。さらなる実施形態では、組成物は、制御放出のために、マイクロカプセル化された剤形（ここでは、数マイクロメートルから数ミリメートルの範囲内の粒子を形成するために、活性な薬剤（１種又は複数）の小滴が、コーティング又は膜によって取り囲まれている）に製剤化された活性な薬剤（１種又は複数）を含む。
【００７４】
経口投与のための医薬組成物は、活性な薬剤が加水分解することによる胃の内容物の酸性化を避けるために、胃での活性な薬剤の片方又は両方の放出を阻害する、すなわち、活性な薬剤の片方又は両方の放出を、剤形の少なくとも一部分が胃を通り抜けるまで遅延させるように製剤化してもよい。具体的なこうした組成物は、活性な薬剤がｐＨ依存性腸溶コーティングポリマーによってコーティングされたものである。ｐＨ依存性腸溶コーティングポリマーの例としては、限定はされないが、Ｅｕｄｒａｇｉｔ（登録商標）Ｓ（ポリ（メタクリル酸、メチルメタクリル酸）、１：２）、Ｅｕｄｒａｇｉｔ（登録商標）Ｌ  ５５（ポリ（メタクリル酸、エチルアクリル酸）、１：１）、Ｋｏｌｌｉｃｏａｔ（登録商標）（ポリ（メタクリル酸、エチルアクリル酸）、１：１）、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート（ＨＰＭＣＰ）、アルギン酸塩、カルボキシメチルセルロース、及びその組み合わせが挙げられる。ｐＨ依存性腸溶コーティングポリマーは、全組成物の重量に対して約１０％から約９５％の量で、組成物中に存在することができる。
【００７５】
ある種の実施形態では、本発明は、固体であり、且つ造粒物（ｇｒａｎｕｌａｔｅ）、顆粒（ｇｒａｎｕｌｅ）、粒状物（ｇｒａｉｎ）、ビーズ、又はペレットの形態であり得る、又は混合してカプセル若しくは小袋（ｓａｃｈｅｔ）に充填することができる、又は従来の方法によって錠剤に圧縮することができる、経口投与のための医薬組成物を提供する。いくつかの特定の実施形態では、医薬組成物は、二層又は多層錠剤の形態であり、ここでは、これらの層のそれぞれ１つずつが、２種の活性な薬剤のうちの１種を含み、且つこれらの層は、中間の不活性な層、例えば、１種又は複数の崩壊剤を含む層によって任意に分離される。
【００７６】
別の企図される製剤は、生分解性ポリマーをベースにするデポー系である。ポリマーが分解するにつれて、活性な薬剤（１種又は複数）がゆっくりと放出される。最も一般的なクラスの生分解性ポリマーは、乳酸、グリコール酸、又はこれらの２つの分子の組み合わせから調製される、加水分解的に不安定なポリエステルである。これらの個々のモノマーから調製されるポリマーには、ポリ（Ｄ，Ｌ−ラクチド）（ＰＬＡ）、ポリ（グリコリド）（ＰＧＡ）、及びコポリマー：ポリ（Ｄ，Ｌ−ラクチド−ｃｏ−グリコリド）（ＰＬＧ）が含まれる。
【００７７】
経口投与のための医薬組成物は、当技術分野で公知のあらゆる方法に従って調製することができ、薬学的に洗練され且つ口当たりのよい調製物を提供するために、甘味剤、着香料、着色剤、及び保存剤から選択される１つ以上の作用物質をさらに含むことができる。錠剤は、錠剤の製造に適した非毒性の薬学的に許容される賦形剤と混合して活性な薬剤を含有する。これらの賦形剤は、例えば、不活性な希釈剤、例えば炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、ラクトース、リン酸カルシウム、又はリン酸ナトリウムなど；造粒剤及び崩壊剤、例えば、トウモロコシデンプン又はアルギン酸；結合剤、例えば、デンプン、ゼラチン、又はアラビアゴム；並びに滑沢剤、例えばステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、又はタルクであり得る。錠剤は、コーティングされなくてもよいし、胃腸管内での崩壊及び吸収を遅延させ、それによって長期間にわたる持続作用を提供するために、公知の技術を利用してコーティングすることもできる。例えば、モノステアリン酸グリセリル又はジステアリン酸グリセリルなどの時間遅延材料を用いることができる。これらはまた、制御放出のための浸透圧性治療用錠剤を形成するために、米国特許第４，２５６，１０８号明細書、同第４，１６６，４５２号明細書、及び同第４，２６５，８７４号明細書に記載されている技術を使用してコーティングすることもできる。本発明の医薬組成物はまた、水中油型エマルジョンの形態であり得る。
【００７８】
医薬組成物の有用な剤形には、限定はされないが固体、半固体、及び液体系を含めた口腔内崩壊系（崩壊若しくは溶解錠が含まれる）、ソフト又はハードカプセル、ゲル、急速分散剤形、制御分散剤形、カプレット、フィルム、ウエハー（ｗａｆｅｒ）、膣坐剤（ｏｖｕｌｅ）、顆粒剤、頬側／粘膜付着性貼付剤、散剤、フリーズドライ（凍結乾燥）ウエハー、頬側／口腔内で唾液で崩壊する咀嚼錠、並びにその組み合わせが含まれる。有用なフィルムには、限定はされないが、単層の単独型（ｓｔａｎｄ−ａｌｏｎｅ）フィルム及び多層の単独型乾燥フィルムが含まれる。
【００７９】
本発明の医薬組成物は、１種又は複数の薬学的に許容される賦形剤を含むことができる。例えば、錠剤は、少なくとも１種の充填剤、例えば、ラクトース、エチルセルロース、微結晶セルロース、ケイ化微結晶セルロース；少なくとも１種の崩壊剤、例えば、架橋ポリビニルピロリジノン；少なくとも１種の結合剤、例えば、ポリビニルピリドン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース；少なくとも１種の界面活性剤、例えば、ラウリル硫酸ナトリウム；少なくとも１種の流動化剤、例えば、コロイド状二酸化ケイ素；及び少なくとも１種の滑沢剤、例えば、ステアリン酸マグネシウムを含むことができる。
【００８０】
直腸内投与のための医薬組成物は、あらゆる好適な形態、例えば、浣腸を使用する直腸を経由する腸の下部への注入のための液体又はゲルであってもよいし、座剤、すなわち、直腸への挿入のための固体剤形として製剤化されてもよい。
【００８１】
本発明の医薬組成物は、無菌の注射可能な水性又は油性の懸濁液の形態であり得、これは、好適な分散剤、湿潤剤、又は懸濁化剤を使用する公知の技術に従って製剤化することができる。無菌の注射可能な調製物はまた、非毒性の非経口的に許容される希釈剤又は溶媒中の、注射可能な溶液又は懸濁液であり得る。用いることができる許容される賦形剤及び溶媒には、限定はされないが、水、リンゲル液、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（ＨＰＣＤ）、Ｔｗｅｅｎ−８０などの界面活性剤、及び等張性塩化ナトリウム溶液が含まれる。
【００８２】
本発明による医薬組成物は、吸入のために製剤化される場合、あらゆる好適な形態、例えば、液体又は微粉末であり得、当技術分野で公知のあらゆる好適な装置、例えば加圧定量噴霧式吸入器、液体ネブライザー、ドライパウダー吸入器、噴霧器、熱気化器（ｔｈｅｒｍａｌ  ｖａｐｏｒｉｚｅｒ）、電気流体力学的エアロゾル発生器（ｅｌｅｃｔｒｏｈｙｄｒｏｄｙｎａｍｉｃ  ａｅｒｏｓｏｌｉｚｅｒ）などを利用して投与することができる。
【００８３】
上の実施形態のいずれか１つにおいて定義された本発明の医薬組成物は、脱髄を予防、阻害、軽減、又は改善し、それによって、より具体的には、上で定義した通りの脱髄を特徴とする又は脱髄に伴う疾患、障害、又は状態を治療することにおいて有用である。
【００８４】
本発明の医薬組成物は、様々な期間、例えば、数週、数か月、数年、又は数十年の間、例えば、連続的に、毎日、１日２回、１日３回、又は１日４回、投与することができる。投薬量は、患者の状態に依存することとなり、医者（ｐｒａｃｔｉｔｉｏｎｅｒ）によって適切であるとみなされた場合に時折、決定されることとなる。例えば、医師（ｐｈｙｓｉｃｉａｎ）又は獣医師は、所望される治療効果を達成するために必要とされるよりも低いレベルで、医薬組成物中で用いられる活性な薬剤の投与を開始し、所望される効果が得られるまで、投薬量を徐々に増大させることができるであろう。
【００８５】
さらに別の態様では、本発明は、脱髄を予防、阻害、軽減、又は改善するのに使用するための、上で定義した通りの薬物の組み合わせ、すなわち、上の実施形態のいずれか１つにおいて定義された非鉄金属−ＤＦＯ錯体又はその薬学的に許容される塩と免疫調節薬との組み合わせに関する。本明細書に開示した通り、前記薬物の組み合わせは、治療量以下の用量の免疫調節薬を含むことができる。すなわち、前記免疫調節薬の１日用量は、単独で投与された場合の前記薬物の治療有効用量よりも低くてもよい。
【００８６】
さらに別の態様では、本発明は、脱髄を予防、阻害、軽減、又は改善するための医薬組成物の調製における、上の実施形態のいずれか１つにおいて定義された非鉄金属−ＤＦＯ錯体又はその薬学的に許容される塩と免疫調節薬との組み合わせの使用に関する。本明細書に開示した通り、組成物の調製のために使用される免疫調節薬の用量は、治療用量又は治療量以下の用量であり得る。
【００８７】
以前に示された通り、ＤＦＯは、インビトロで、ヒト血漿からＦｅ及びＺｎなどの金属を抽出することが可能である（Ｓｏｏｒｉｙａａｒａｃｈｃｈｉ  ａｎｄ  Ｇａｉｌｅｒ，２０１０）。したがって、生理的条件下で、２つの別の組成物からの、ＤＦＯ又はその薬学的に許容される塩、及び金属イオン、例えばＺｎ−若しくはＧａ−イオンの同時又は連続的投与は、（２つの成分の投与の間隔が、最初に投与される成分の少なくとも主要な量が、第２の成分が投与される時点で、循環中で利用可能である（すなわち、まだ排出されていない）ように決定されるという条件で）、金属−ＤＦＯ錯体又はその薬学的に許容される塩のインサイチュでの形成をもたらすこととなることが想定される。
【００８８】
したがって、本発明は、さらに、それを必要とする対象における脱髄を予防、阻害、軽減、又は改善するための、上に定義した方法と同様の方法であって、治療有効量の非鉄金属−ＤＦＯ錯体又はその薬学的に許容される塩を投与する代わりに、前記対象が、ある量の（ｉ）ＤＦＯ又はその薬学的に許容される塩と；（ｉｉ）鉄以外の少なくとも１つの金属のイオンを、前記対象における脱髄を予防、阻害、軽減、又は改善するために投与される免疫調節薬と共に作用する前記ＤＦＯ又はその薬学的に許容される塩と前記金属イオンとの錯体形成時に、治療有効量の前記非鉄金属−ＤＦＯ錯体又はその薬学的に許容される塩をインサイチュで形成するように、任意の順序で且つ３６時間を超えない時間内に、同時に又は連続的に投与される方法に関する。
【００８９】
ある種の実施形態では、ＤＦＯ又はその薬学的に許容される塩と、金属のイオンは、最初に投与される成分の少なくとも主要な量が、第２の成分が投与される時点で、循環中で利用可能であり、したがって、前記金属−ＤＦＯ錯体又はその薬学的に許容される塩が、インサイチュで形成され得るように、任意の順序で同時に又は連続的に、且つ３６時間を超えない時間内に、例えば、最大約２、４、６、８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２２、２４、２６、２８、３０、３２、３４、又は３６時間の期間内に、同じ又は異なる投与様式を使用して、２つの別の医薬組成物から投与される。
【００９０】
上に記載した方法に従って投与することができる金属イオン及び免疫調節薬の例は、上に列挙している。特定の実施形態では、投与される金属イオンは、Ｚｎ；Ｇａ；又はＺｎの混合物のイオン、及び上に列挙した他の非鉄金属イオンのいずれか１つ（例えばＧａ）であり、例えば、ここでは、Ｚｎイオンと他の非鉄金属イオンとの量比は、１００：１から１：１００の範囲である。
【００９１】
投与される金属イオンは、あらゆる可能な価電子状態（具体的な金属に応じて）の陽イオン（塩）の形態、又はヘテロ原子含有部分を有する芳香族及び非芳香族化合物、例えば、カルボニル化合物、ヒドロキシ化合物、複素環式化合物などの有機化合物との錯体であり得る。金属錯体を形成する配位子（単座、二座、三座など）の非限定的な例は、酢酸、グルコン酸、及びアセチルアセトン、トリス（２−アミノエチル）アミン、クラウンエーテル、ポルフィリン、ジアルキルジチオリン酸などのリン酸アルキル、並びにテルピリジンなどの複素環、ピリチオン、及びメタロセンである。
【００９２】
例えば、亜鉛イオンは、亜鉛塩、例えばＺｎＣｌ２の形態で、又は、酢酸亜鉛、亜鉛−クラウンエーテル、Ｚｎ−ポルフィリン／クラウンエーテル結合体、亜鉛−プロトポルフィリン、亜鉛−クロロフィル及びバクテリオクロロフィル、ジアルキルジチオリン酸亜鉛モノマー、亜鉛−アセチルアセトン（３量体；Ｚｎ３（ＡｃＡｃ）６）、亜鉛−テルピリジン（三座；［Ｚｎ（Ｔｅｒｐｙ）Ｃｌ２］）、亜鉛−トリス（２−アミノエチル）アミン、炭酸脱水酵素（Ｚｎ金属酵素）、グルタミン酸カルボキシペプチダーゼＩＩ（Ｚｎ金属酵素）、ジエチル亜鉛（Ｉ）及びデカメチルジジンコセン（ｄｅｃａｍｅｔｈｙｌｄｉｚｉｎｃｏｃｅｎｅ）（ＩＩ）などの有機亜鉛化合物、グルコン酸亜鉛、並びにジンクピリチオンなどの錯体で存在することができる。ガリウムイオンは、ガリウム塩、例えばＧａＣｌ３の形態で存在することができる。
【００９３】
上で定義した通り、インサイチュで形成される非鉄金属−ＤＦＯ錯体又はその薬学的に許容される塩と、投与される免疫調節薬は、あらゆる量比で、例えば、上で定義した通りの１００：１から１：１００の範囲の量比であり得る。
【００９４】
さらなる態様では、本発明は、（ｉ）非鉄金属−ＤＦＯ錯体又はその薬学的に許容される塩を含む医薬組成物Ａ；又は医薬組成物Ｂ及びＣ（ここでは、医薬組成物Ｂは、ＤＦＯ又はその薬学的に許容される塩を含み、医薬組成物Ｃは、非鉄金属のイオンを含む）；（ｉｉ）免疫調節薬を含む医薬組成物Ｄ；及び（ｉｉｉ）前記ＤＦＯ又はその薬学的に許容される塩と前記金属イオンとの錯体形成時に、金属−ＤＦＯ錯体又はその薬学的に許容される塩をインサイチュで形成するように、（ａ）医薬組成物Ａ及びＤを、任意の順序で且つ３６時間を超えない時間内に、例えば、最大約２、４、６、８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２２、２４、２６、２８、３０、３２、３４、又は３６時間の期間内に、同時に又は連続的に投与し、それによって、脱髄を予防、阻害、軽減、又は改善する、したがって、より具体的には、脱髄を特徴とする又は脱髄に伴う疾患、障害、又は状態を治療する；又は（ｂ）医薬組成物Ｂ、Ｃ、及びＤを、前記ＤＦＯ又はその薬学的に許容される塩と前記金属イオンとの錯体形成時に、非鉄金属−ＤＦＯ錯体又はその薬学的に許容される塩をインサイチュで形成するように、任意の順序で且つ３６時間を超えない時間内に、同時に又は連続的に投与し、それによって、脱髄を予防、阻害、軽減、又は改善する、したがって、より具体的には、脱髄を特徴とする又は脱髄に伴う疾患、障害、又は状態を治療するための説明書を含むキットを提供する。
【００９５】
ある種の実施形態では、医薬組成物Ａ内に含まれる非鉄金属−ＤＦＯ錯体は、亜鉛−ＤＦＯ錯体、ガリウム−ＤＦＯ錯体、マンガン−ＤＦＯ錯体、銅−ＤＦＯ錯体、アルミニウム−ＤＦＯ錯体、バナジウム−ＤＦＯ錯体、インジウム−ＤＦＯ錯体、クロム−ＤＦＯ錯体、金−ＤＦＯ錯体、銀−ＤＦＯ錯体、若しくは白金−ＤＦＯ錯体、ランタニド−ＤＦＯ錯体、又はあらゆる量比のそれらの混合物である。他の実施形態では、医薬組成物Ｃ内に含まれる非鉄金属イオンは、亜鉛、ガリウム、マンガン、銅、アルミニウム、バナジウム、インジウム、クロム、金、銀、白金、ランタニドのイオン、又はあらゆる量比のそれらの混合物である。これらの金属イオンは、あらゆる可能な価電子状態の陽イオンの形態、又は上で定義した通りのヘテロ原子含有部分を有する芳香族及び非芳香族化合物などの有機化合物との錯体であり得る。
【００９６】
ある種の実施形態では、医薬組成物Ａ内に含まれる非鉄金属−ＤＦＯ錯体は、Ｚｎ−ＤＦＯ錯体、Ｇａ−ＤＦＯ錯体、又はＺｎ−ＤＦＯ錯体と上に列挙した他の非鉄金属−ＤＦＯ錯体のいずれか１つ（例えばＧａ−ＤＦＯ錯体）との混合物（例えば、ここでは、前記混合物内の前記Ｚｎ−ＤＦＯ錯体と他の金属−ＤＦＯ錯体との量比は、１００：１から１：１００の範囲である）である；又は、前記医薬組成物Ｃは、Ｚｎ、Ｇａ、若しくはＺｎのイオン、及び上に列挙した他の金属イオンのいずれか１つ（例えばＧａ）を含み、例えば、ここでは、Ｚｎイオンと他の金属イオンとの量比は、１００：１から１：１００の範囲である。
【００９７】
ある種の実施形態では、医薬組成物Ａに含まれる非鉄金属−ＤＦＯ錯体又はその薬学的に許容される塩の量、又は代わりに医薬組成物Ｂに含まれるＤＦＯ錯体又はその薬学的に許容される塩の量、及び医薬組成物Ｃに含まれる金属イオンの量は、投与される又はインサイチュで形成される金属−ＤＦＯ錯体と免疫調節薬が、あらゆる量比、例えば、上で定義した通りの１００：１から１：１００の範囲の量比であるように決定される。
【００９８】
本発明のキット内に含有される医薬組成物は、上で定義した通りのあらゆる好適な投与経路のために、それぞれ独立に製剤化することができる。
【００９９】
本明細書に開示したキットは、例えば局所、経鼻、又は経口投与のための液体として製剤化された、すぐに使用できる形態の組成物のそれぞれ１つずつを含むこともできるし、または代わりに液体経口剤形を提供するために溶媒で再構成することができる固体の組成物として、組成物の片方又は両方を含むこともできる。１種以上の組成物が、溶媒での再構成のための固体形態で提供される場合、キットは、投与前に前記溶媒に前記固体組成物を溶解するための再構成溶媒及び説明書をさらに含むことができる。こうした溶媒は、薬学的に許容されているべきであり、例えば、水、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）などの水性の液体、非水性の液体、又は水性の液体と非水性の液体との組み合わせであり得る。好適な非水性の液体には、限定はされないが、油、エタノールなどのアルコール、グリセリン、並びにポリエチレングリコール及びプロピレングリコールなどのグリコールが含まれる。
【０１００】
上で定義した実施形態のいずれか１つによる本発明のキットは、脱髄を予防、阻害、軽減、又は改善するために、したがって、脱髄を特徴とする又は脱髄に伴う疾患、障害、又は状態を治療するために有用である。
【０１０１】
他に指示がない限り、本発明の説明及び特許請求の範囲において使用される成分などの量を表す数値はすべて、すべての場合において、用語「約」によって修飾されるものと理解されるべきである。したがって、そうではないと示されない限り、本明細書及び添付の特許請求の範囲に記述される数値パラメータは、本発明によって得ることが求められる所望される性質に応じて最大でプラスマイナス１０％変化させることができるおおよその値である。
【０１０２】
本発明を、今から、以下の非限定的な実施例によって例示することとする。
【実施例】
【０１０３】
実施例１．血液脳関門（ＢＢＢ）透過
この研究では、Ｚｎ−ＤＦＯ錯体が脳に浸透する能力を調べた。ラットに、漸増量のＤＦＯ単体又はＺｎ−ＤＦＯ錯体を腹腔内（ＩＰ）注射し、その脳におけるＤＦＯの濃度を測定、したがって、その浸透性を測定した。
【０１０４】
具体的には、雄のＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ（ＳＤ）ラット（平均体重３００ｇ、３動物／群）に、ＤＦＯ（２５０、５００、又は１０００ｍｇ／ｋｇ（体重））をＩＰ注射した。比較のために、新たに調製した生理食塩水中のＺｎ−ＤＦＯ溶液を、ＩＰ注射した（２５０、５００、又は１０００ｍｇ／ｋｇ（体重）；それぞれ、２２１、４４２、又は８８３ｍｇ  ＤＦＯ／ｋｇ（体重）に等しい）。
【０１０５】
ラットの行動を、注射後に９０分間観察した。次いで、これらの動物を、ケタミン−キシラジンの注射を使用して安楽死させ、その心臓、肝臓、左の腎臓、及び脳を、切除して計量した。脳試料（３００ｍｇの組織）を、洗浄し、３ｍｌの溶解緩衝液中でホモジナイズした。組織ホモジネートを、１１０℃で５分間インキュベートし、１４，５００相対遠心力（ＲＣＦ）で５分間遠心分離した。等体積の４０％トリクロロ酢酸（ＴＣＡ）溶液を添加し、２０％  ＴＣＡを含有する溶液を形成し、これを、再びボルテックス処理及び遠心分離した。上清をキュベットに移し、１０ｍＭの三価鉄溶液（ｐＨ＝７．４の、鉄の弱い錯体、三価鉄−ニトリロ−トリ−アセテートとして）の添加後、ＤＦＯ濃度を分光光度測定によって測定し、λ＝３８０〜５８０ｎｍの範囲をスキャンした。最終濃度は、εＤＦＯ＝２４６０Ｍ−１ｃｍ−１を使用して、ベール・ランベルトの法則（Ｂｅｅｒ−Ｌａｍｂｅｒｔ  ｌａｗ）に従って算出した；組織１グラムあたり及び全脳あたりのＤＦＯの総量を算出した。得られた結果を、表１にまとめて示す。
【０１０６】
【表１】
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【０１０７】
１０００ｍｇ／ｋｇ  Ｚｎ−ＤＦＯ錯体の投与の１５分後、ラットは、受動的且つ無欲に見えた；しかし、５００ｍｇ／ｋｇ又は２５０ｍｇ／ｋｇのＺｎ−ＤＦＯ錯体の注射後には、ラットの行動の変化は確認できなかった。ＤＦＯ単体の注射後、３つの用量について、ラットの行動の変化は観察されなかった。
【０１０８】
脳に見られるＤＦＯの総量（ｍｇ／ｇ）を、実験の最後に、すべての群−ＤＦＯ単体（２５０、５００、及び１０００ｍｇ／ｋｇ）を投与される各群における３匹、及びＺｎ−ＤＦＯ（２５０、５００、及び１０００ｍｇ／ｋｇ）を投与される３匹について算出した。脳に浸透したＤＦＯの割合は、Ｚｎ−ＤＦＯの３つの用量についてほぼ一定であり、平均は０．０１３３％であった。ＤＦＯ単体の対応する用量については、（機器の制限された感受性に起因して）、値は０．００２％以下であった。したがって、Ｚｎ−ＤＦＯ錯体の脳への浸透性は、ＤＦＯ単体についての浸透性よりも、少なくとも６．８倍高い。
【０１０９】
実施例２．実験的自己免疫性脳脊髄炎−多発性硬化症（ＭＳ）のモデル
この研究では、マウス実験的自己免疫性脳脊髄炎（ＥＡＥ）モデルを使用して、酢酸グラチラマー（Ｃｏｐａｘｏｎｅ（登録商標））単体での又はＺｎ−ＤＦＯと組み合わせた治療の、多発性硬化症（ＭＳ）に対する治療効果を試験する。
【０１１０】
８週齢の雌Ｃ５７ＢＬ／６マウスにおいて、５ｍｇ／ｍｌの加熱殺菌された結核菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）を含有する完全フロイントアジュバント（ＣＦＡ）中に乳化させた１２５μｇのミエリンオリゴデンドロサイト糖タンパク質３５〜５５ペプチド（ＭＯＧ３５−５５）の、左傍腰部（ｐａｒａ−ｌｕｍｂａｒ）領域への皮下（ＳＣ）注射によって、ＥＡＥを誘発する。その後直ちに、また、４８時間時点で再び、マウスに０．５ｍｌの百日咳毒素（４００ｎｇ）を腹腔内（ＩＰ）接種する。７日後、マウスに、さらに、右傍腰部領域に注射されるＭＯＧ３５−５５ペプチド（ＣＦＡ中）の追加の注射を負荷する。
【０１１１】
【表２】
2021521189.tif 000003
【０１１２】
マウスを、第０日に、マンニトール４％乳濁液中の１動物あたり２００μｇの酢酸グラチラマー（Ｃｏｐａｘｏｎｅ（登録商標））のＳＣ注射で治療する。一部の動物は、ＩＰ注射（２ｍｇ／ｋｇ又は６ｍｇ／ｋｇ、実験の最後（第２８日）まで週３回）としてのＺｎ−ＤＦＯで治療し続ける。２つのさらなる群のマウスを、同様にＺｎ−ＤＦＯで治療するが、酢酸グラチラマーを用いる先行する注射は受けない。疾患の重症度を、表２に示したスケール（Ｂｉｔｔｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ，２０１４）を使用して評価する。
【０１１３】
治療なしでＭＯＧ３５−５５に曝露されたマウスは、最初の注射の１１〜１３日後の間に、疾患を発症し、１〜３のスコアに到達することとなることが予想される。疾患は、次の３〜４日間に悪化し、第１５日に、６〜７の臨床徴候スコアのピーク値に到達することとなる（表２参照）。次の２週の間、その状態は、５〜６の臨床スコアまで、わずかに改善することとなる。酢酸グラチラマー単体又はＺｎ−ＤＦＯ（２ｍｇ／ｋｇ）での治療は、疾患の発生を第１４日まで遅延させることが予想され、ピーク臨床スコアには第１７日に到達し、値は４〜５であることとなる。次の期間中に、スコアは３〜４まで改善することとなる。Ｚｎ−ＤＦＯ（６ｍｇ／ｋｇ）単体での治療は、疾患の発生を第１５日まで延長させることが予想され、そのピーク値（第１９日）を３〜４に抑える。Ｚｎ−ＤＦＯ（６ｍｇ／ｋｇ）と組み合わせた酢酸グラチラマーでの治療の結果として、疾患徴候は、第１５〜１６日に検出され、ピーク臨床スコアは３未満（第１９日）であり、その後、実験の最後までに１〜２のスコアまで改善することとなる。対照群は、いかなる臨床徴候も発現することが予想されない。
【０１１４】
参考文献
Ａｒｎｏｎ  Ｒ．，  Ｓｅｌａ  Ｍ．，  Ｔｈｅ  ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｃｏｐａｘｏｎｅ  ｄｒｕｇ．  Ｃｈｅｍ．  Ｉｓｒ  ．，  １９９９，  １，  １２−１７  Ｂａｇｎａｔｏ  Ｆ．，  Ｈａｍｅｔｎｅｒ  Ｓ．，  Ｗｅｌｃｈ  Ｅ．Ｂ．，  Ｖｉｓｕａｌｉｚｉｎｇ  ｉｒｏｎ  ｉｎ  ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ．  Ｍａｇｎ．  Ｒｅｓｏｒｔ．  Ｉｍａｇｉｎｇ．，  ２０１３，  ３１，  ３７６−３８４
Ｂｉｂｉ  Ｈ．，  Ｖｉｎｏｋｕｒ  Ｖ．，  Ｗａｉｓｍａｎ  Ｄ．，  Ｅｌｅｎｂｅｒｇ  Ｙ．，  Ｌａｎｄｅｓｂｅｒｇ  Ａ．，  Ｆａｉｎｇｅｒｓｈ  Ａ．，  Ｙａｄｉｄ  Ｍ．，  Ｂｒｏｄ  Ｖ．，  Ｐｅｓｉｎ  Ｊ．，  Ｂｅｒｅｎｓｈｔｅｉｎ  Ｅ．，  Ｅｌｉａｓｈａｒ  Ｒ．，  Ｃｈｅｖｉｏｎ  Ｍ．，  Ｚｎ／Ｇａ−ＤＦＯ  ｉｒｏｎ  ｃｈｅｌａｔｉｎｇ  ｃｏｍｐｌｅｘ  ａｔｔｅｎｕａｔｅｓ  ｔｈｅ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｐｒｏｃｅｓｓ  ｉｎ  ａ  ｍｏｕｓｅ  ｍｏｄｅｌ  ｏｆ  ａｓｔｈｍａ．  Ｒｅｄｏｘ  Ｂｉｏｌ．，  ２０１４，  ２，  ８１４−８１９
Ｂｉｔｔｎｅｒ  Ｓ．，  Ａｆｚａｌｉ  Ａ．Ｍ．，  Ｗｉｅｎｄｌ  Ｈ．，  Ｍｅｕｔｈ  Ｓ．Ｇ．，  Ｍｙｅｌｉｎ  ｏｌｉｇｏｄｅｎｄｒｏｃｙｔｅ  ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ  （ＭＯＧ３５−５５）  ｉｎｄｕｃｅｄ  ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ  ｅｎｃｅｐｈａｌｏｍｙｅｌｉｔｉｓ  （ＥＡＥ）  ｉｎ  Ｃ５７ＢＬ／６  ｍｉｃｅ．  Ｊ．  Ｖｉｓ．  Ｅｘｐ．，  ２０１４，  ８６，  ｅ５ｌ２７５
Ｃｈｅｖｉｏｎ  Ｍ．，  Ａ  ｓｉｔｅ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｍｅｃｈａｎｉｓｍ  ｆｏｒ  ｆｒｅｅ  ｒａｄｉｃａｌ  ｉｎｄｕｃｅｄ  ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ｄａｍａｇｅ：  ｔｈｅ  ｅｓｓｅｎｔｉａｌ  ｒｏｌｅ  ｏｆ  ｒｅｄｏｘ−ａｃｔｉｖｅ  ｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ  ｍｅｔａｌｓ．  Ｆｒｅｅ  Ｒａｄｉｃ．  Ｂｉｏｌ．  Ｍｅｄ．，  １９８８，  ５，  ２７−３７  Ｈａｍｅｔｎｅｒ  Ｓ．，  Ｄａｌ  Ｂｉａｎｃｏ  Ａ．，  Ｔｒａｔｔｎｉｇ  Ｓ．，  Ｌａｓｓｍａｎｎ  Ｈ．，  Ｉｒｏｎ  ｒｅｌａｔｅｄ  ｃｈａｎｇｅｓ  ｉｎ  ＭＳ  ｌｅｓｉｏｎｓ  ａｎｄ  ｔｈｅｉｒ  ｖａｌｉｄｉｔｙ  ｔｏ  ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚｅ  ＭＳ  ｌｅｓｉｏｎ  ｔｙｐｅｓ  ａｎｄ  ｄｙｎａｍｉｃｓ  ｗｉｔｈ  Ｕｌｔｒａ−ｈｉｇｈ  ｆｉｅｌｄ  ｍａｇｎｅｔｉｃ  ｒｅｓｏｎａｎｃｅ  ｉｍａｇｉｎｇ．  Ｂｒａｉｎ  Ｐａｔｈｏｌ．，  ２０１８，  ２８，  ７４３−７４９
Ｈａｓｓａｎ−Ｓｍｉｔｈ  Ｇ．，  Ｄｏｕｇｌａｓ  Ｍ．Ｒ．，  Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  ｄｉａｇｎｏｓｉｓ  ｏｆ  ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ．  Ｂｒ．  Ｊ．  Ｈｏｓｐ．  Ｍｅｄ．  （Ｌｏｎｄ．），  ２０１１，  ７２，  Ｍ１４６−１５１
Ｋａｒｃｋ  Ｍ．，  Ｔａｎａｋａ  Ｓ．，  Ｂｅｒｅｎｓｈｔｅｉｎ  Ｅ．，  Ｓｔｕｒｍ  Ｃ．，  Ｈａｖｅｒｉｃｈ  Ａ．，  Ｃｈｅｖｉｏｎ  Ｍ．，  Ｔｈｅ  ｐｕｓｈ−ａｎｄ−ｐｕｌｌ  ｍｅｃｈａｎｉｓｍ  ｔｏ  ｓｃａｖｅｎｇｅ  ｒｅｄｏｘ−ａｃｔｉｖｅ  ｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ  ｍｅｔａｌｓ：  ａ  ｎｏｖｅｌ  ｃｏｎｃｅｐｔ  ｉｎ  ｍｙｏｃａｒｄｉａｌ  ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ．  Ｊ．  Ｔｈｏｒａｃ．  Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ．  Ｓｕｒｇ．，  ２００１，  １２１，  １１６９−１１７８
Ｋｅｂｅｒｌｅ  Ｈ．，  Ｔｈｅ  ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  ｄｅｓｆｅｒｒｉｏｘａｍｉｎｅ  ａｎｄ  ｉｔｓ  ｒｅｌａｔｉｏｎ  ｔｏ  ｉｒｏｎ  ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ．  Ａｎｎ．  ＮＹ  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．，  １９６４，  １１９，  ７５８−７６８
Ｌａ  Ｍａｎｔｉａ  Ｌ．，  Ｍｕｎａｒｉ  Ｌ．Ｍ．，  Ｌｏｖａｔｉ  Ｒ．，  Ｇｌａｔｉｒａｍｅｒ  ａｃｅｔａｔｅ  ｆｏｒ  ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ．  Ｃｏｃｈｒａｎｅ  Ｄａｔａｂａｓｅ  Ｓｙｓｔ．  Ｒｅｖ．，  ２０１０，  ＣＤ００４６７８
Ｍａｈａｄ  Ｄ．Ｈ．，  Ｔｒａｐｐ  Ｂ．Ｄ．，  Ｌａｓｓｍａｎｎ  Ｈ．，  Ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ  ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ  ｉｎ  ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｖｅ  ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ．  Ｌａｎｃｅｔ  Ｎｅｕｒｏｌ．，  ２０１５，  １４，  １８３−１９３
Ｍｏｒａｄ  Ｙ．，  Ｂａｎｉｎ  Ｅ．，  Ａｖｅｒｂｕｋｈ  Ｅ．，  Ｂｅｒｅｎｓｈｔｅｉｎ  Ｅ．，  Ｏｂｏｌｅｎｓｋｙ  Ａ．，  Ｃｈｅｖｉｏｎ  Ｍ．，  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｏｃｕｌａｒ  ｔｉｓｓｕｅｓ  ｅｘｐｏｓｅｄ  ｔｏ  ｎｉｔｒｏｇｅｎ  ｍｕｓｔａｒｄ：  ｂｅｎｅｆｉｃｉａｌ  ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  ｚｉｎｃ  ｄｅｓｆｅｒｒｉｏｘａｍｉｎｅ  ｃｏｍｂｉｎｅｄ  ｗｉｔｈ  ｓｔｅｒｏｉｄｓ．  Ｉｎｖｅｓｔ．  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．  Ｖｉｓ．  Ｓｃｉ．，  ２００５，  ４６，  １６４０−１６４６
Ｏｂｏｌｅｎｓｋｙ  Ａ．，  Ｂｅｒｅｎｓｈｔｅｉｎ  Ｅ．，  Ｌｅｄｅｒｍａｎ  Ｍ．，  Ｂｕｌｖｉｋ  Ｂ．，  Ａｌｐｅｒ−Ｐｉｎｕｓ  Ｒ．，  Ｙａｕｌ  Ｒ．，  Ｄｅｌｅｏｎ  Ｅ．，  Ｃｈｏｗｅｒｓ  Ｌ，  Ｃｈｅｖｉｏｎ  Ｍ．，  Ｂａｎｉｎ  Ｅ．，  Ｚｉｎｃ−ｄｅｓｆｅｒｒｉｏｘａｍｉｎｅ  ａｔｔｅｎｕａｔｅｓ  ｒｅｔｉｎａｌ
ｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｒｄｌＯ  ｍｏｕｓｅ  ｍｏｄｅｌ  ｏｆ  ｒｅｔｉｎｉｔｉｓ  ｐｉｇｍｅｎｔｏｓａ．  Ｆｒｅｅ  Ｒａｄｉｃ．  Ｂｉｏｌ．  Ｍｅｄ．，  ２０１１，  ５１，  １４８２−１４９１
Ｏｒｃｕｔｔ  Ｋ．Ｍ．，  Ｊｏｎｅｓ  Ｗ．Ｓ．，  ＭｃＤｏｎａｌｄ  Ａ．，  Ｓｃｈｒｏｃｋ  Ｄ．，  Ｗａｌｌａｃｅ  Ｋ．Ｊ．，  Ａ  ｌａｎｔｈａｎｉｄｅ−ｂａｓｅｄ  ｃｈｅｍｏｓｅｎｓｏｒ  ｆｏｒ  ｂｉｏａｖａｉｌａｂｌｅ  Ｆｅ３＋ｕｓｉｎｇ  ａ  ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ  ｓｉｄｅｒｏｐｈｏｒｅ：  ａｎ  ａｓｓａｙ  ｄｉｓｐｌａｃｅｍｅｎｔ  ａｐｐｒｏａｃｈ．  Ｓｅｎｓｏｒｓ  （Ｂａｓｅｌ．），  ２０１０，  １０，  １３２６−１３３７
Ｐｏｐｅｓｃｕ  Ｂ．Ｆ．，  Ｆｒｉｓｃｈｅｒ  Ｊ．Ｍ．，  Ｗｅｂｂ  Ｓ．Ｍ．，  Ｔｈａｍ  Ｍ．，  Ａｄｉｅｌｅ  Ｒ．Ｃ．，  Ｒｏｂｉｎｓｏｎ  Ｃ．Ａ．，  Ｆｉｔｚ−Ｇｉｂｂｏｎ  Ｐ．Ｄ．，  Ｗｅｉｇａｎｄ  Ｓ．Ｄ．，  Ｍｅｔｚ  Ｌ，  Ｎｅｈｚａｔｉ  Ｓ．，  Ｇｅｏｒｇｅ  Ｇ．Ｎ．，  Ｐｉｃｋｅｒｉｎｇ  Ｉ．Ｊ．，  Ｂｒｉｉｃｋ  Ｗ．，  Ｈａｍｅｔｎｅｒ  Ｓ．，  Ｌａｓｓｍａｎｎ  Ｈ．，  Ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ  ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ｄｉｓｔｉｎｃｔ  ｐａｔｔｅｒｎｓ  ｏｆ  ｉｒｏｎ  ａｎｄ  ｚｉｎｃ  ｉｎ  ｃｈｒｏｎｉｃ  ＭＳ  ｌｅｓｉｏｎｓ．  Ａｃｔａ  Ｎｅｕｒｏｐａｔｈｏｌ．，  ２０１７，  １３４，  ４５−６４
Ｒｅｎｎｅｒ  Ｍ．，  Ｓｔｕｔｅ  Ｇ．，  Ａｌｚｕｒｅｉｑｉ  Ｍ．，  Ｒｅｉｎｈａｒｄ  Ｊ．，  Ｗｅｉｍａｎｎ  Ｓ．，  Ｓｃｈｍｉｄ  Ｈ．，  Ｆａｉｓｓｎｅｒ  Ａ，，  Ｄｉｃｋ  Ｈ．  Ｂ．，  Ｊｏａｃｈｉｍ  Ｓ．  Ｃ．，  Ｏｐｔｉｃ  ｎｅｒｖｅ  ｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ  ａｆｔｅｒ  ｒｅｔｉｎａｌ  ｉｓｃｈｅｍｉａ／ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ  ｉｎ  ａ  ｒｏｄｅｎｔ  ｍｏｄｅｌ．  Ｆｒｏｎｔ．  Ｃｅｌｌ．  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．，  ２０１７，  １１，  ２５４
Ｓａｍｕｎｉ  Ａ．，  Ａｒｏｎｏｖｉｔｃｈ  Ｊ．，  Ｇｏｄｉｎｇｅｒ  Ｄ．，  Ｃｈｅｖｉｏｎ  Ｍ．，  Ｃｚａｐｓｋｉ  Ｇ．，  Ｏｎ  ｔｈｅ  ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ  ｏｆ  ｖｉｔａｍｉｎ  Ｃ  ａｎｄ  ｍｅｔａｌ  ｉｏｎｓ．  Ａ  ｓｉｔｅ−  ｓｐｅｃｉｆｉｃ  Ｆｅｎｔｏｎ  ｍｅｃｈａｎｉｓｍ．  Ｅｕｒ．  Ｊ．  Ｂｉｏｃｈｅｍ．，  １９８３，  １３７，  １１９−１２４
Ｓｏｏｒｉｙａａｒａｃｈｃｈｉ  Ｍ．，  Ｇａｉｌｅｒ  Ｊ．，  Ｒｅｍｏｖａｌ  ｏｆ  Ｆｅ３＋ａｎｄ  Ｚｎ２＋ｆｒｏｍ  ｐｌａｓｍａ  ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｂｙ  ｉｒｏｎ  ｃｈｅｌａｔｉｎｇ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ  ｄｅｐｉｃｔｅｄ  ｗｉｔｈ  ＳＥＣ−ＩＣＰ−ＡＥＳ．  Ｄａｌｔｏｎ  Ｔｒａｎｓ．，  ２０１０，  ３９，  ７４６６−７４７３
【国際調査報告】
2021521189.tif 000004
2021521189.tif 000005
2021521189.tif 000006
2021521189.tif 000007
2021521189.tif 000008