(57)【要約】  本発明は、疾患または障害の治療における使用のための組成物であって、該疾患または障害が、好ましくはアルドステロンの過剰曝露が該疾患または障害の症状に寄与する疾患または障害であり、該組成物が、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジンである化合物またはその薬学的に許容される塩を含み、好ましくは該化合物が、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩であり、該化合物が、９７％以上の（Ｒ）形態の鏡像体過剰率（ｅｅ）を有し、該組成物が、それを必要とする対象に１日１回投与される、使用のための組成物に関する。本発明はさらに、固定単位剤形の該化合物の１日投薬量を含む薬学的組成物と、（ｉ）該薬学的組成物または該化合物、および（ｉｉ）該薬学的組成物または該化合物を１日１回投与するための説明書を含む組み合わせとに関する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
疾患または障害の治療における使用のための組成物であって、前記疾患または障害が、好ましくは原発性アルドステロン症または続発性アルドステロン症、さらに好ましくは原発性アルドステロン症であり、前記組成物が、それを必要とする対象に１日１回投与され、前記組成物が、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジンである化合物またはその薬学的に許容される塩を含み、前記化合物が、９７％以上の前記（Ｒ）形態の鏡像体過剰率（ｅｅ）を有する、使用のための組成物。
【請求項２】
前記対象が、ヒトである、請求項１に記載の使用のための組成物。
【請求項３】
前記組成物が、経口投与され、好ましくは前記組成物が、１ｍｇ〜１６ｍｇ、より好ましくは２ｍｇ〜１６ｍｇ、さらにより好ましくは４ｍｇ〜１６ｍｇの投薬量で投与される、請求項１または２に記載の使用のための組成物。
【請求項４】
好ましくは質量分析（ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ）によって測定して、前記化合物の排出半減期（Ｔ１／２）が、８時間超であり、好ましくは前記化合物の排出半減期（Ｔ１／２）が、８時間〜１１時間であり、さらに好ましくは前記化合物の排出半減期（Ｔ１／２）が、約８時間〜約１０時間である、請求項１〜３のいずれかに記載の使用のための組成物。
【請求項５】
前記化合物が、９９％以上の前記（Ｒ）形態の鏡像体過剰率（ｅｅ）を有する、請求項１〜４のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
【請求項６】
前記化合物が、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩である、請求項１〜５のいずれかに記載の使用のための組成物。
【請求項７】
前記（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩が、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩の結晶形態Ｉであり、前記結晶形態Ｉが、ＣｕＫα放射線を使用して測定して、次の２θ値：１９．５０４、２１．９１９、および２４．１５９を含むＸ線粉末回折パターンを有し、各ピークが、±０．５度、または好ましくは±０．２度変動し得る、請求項６に記載の使用のための組成物。
【請求項８】
前記疾患または障害が、アルドステロンの過剰曝露が前記疾患または障害の症状に寄与する疾患または障害である、請求項１〜７のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
【請求項９】
前記疾患または障害が、原発性アルドステロン症、続発性アルドステロン症、心不全、慢性腎不全、高血圧症、再狭窄、肥満症、腎障害、心筋梗塞後、腎線維症、冠動脈心疾患、ナトリウム貯留、水分貯留、低カリウム血症、低マグネシウム血症、高血圧症、左室肥大、心筋線維症、心血管損傷、血漿レニンの抑制、腎線維症、不整脈、腎障害、浮腫、低カリウム血症による筋力低下、心細動、および心筋収縮の衰弱から選択され、好ましくは前記疾患または障害が、原発性アルドステロン症または続発性アルドステロン症である、請求項１〜８のいずれかに記載の使用のための組成物。
【請求項１０】
前記疾患または障害が、原発性アルドステロン症である、請求項１〜９のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
【請求項１１】
固定単位剤形の化合物の１日投薬量を含む薬学的組成物であって、前記化合物が、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジンまたはその薬学的に許容される塩であり、前記化合物が、９７％以上の前記（Ｒ）形態の鏡像体過剰率（ｅｅ）を有する、薬学的組成物。
【請求項１２】
前記化合物が、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩であり、好ましくは前記化合物が、９９％以上の前記（Ｒ）形態の鏡像体過剰率（ｅｅ）を有する、請求項１１に記載の薬学的組成物。
【請求項１３】
前記薬学的組成物が、経口投与用に製剤化され、好ましくは前記薬学的組成物が、錠剤の形態である、請求項１１または請求項１２に記載の薬学的組成物。
【請求項１４】
前記化合物の前記１日投薬量が、１ｍｇ〜１６ｍｇ、より好ましくは４ｍｇ〜１６ｍｇ、さらにより好ましくは４ｍｇ、８ｍｇ、または１６ｍｇである、請求項１１〜１３のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項１５】
組み合わせであって、
（ｉ）請求項１１〜１４のいずれか一項に記載の薬学的組成物、または
（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジンである化合物もしくはその薬学的に許容される塩であって、前記化合物が、９７％以上、好ましくは９８％以上、より好ましくは９９％以上、およびさらにより好ましくは９９．５％以上、さらにより好ましくは９９．８％以上、さらにより好ましくは９９．９％以上の前記（Ｒ）形態の鏡像体過剰率（ｅｅ）を有し、好ましくは前記化合物が、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩である、化合物もしくはその薬学的に許容される塩と、
（ｉｉ）前記薬学的組成物または前記化合物を１日１回投与するための説明書と、を含む、組み合わせ。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、疾患または障害の治療における使用のための組成物であって、該疾患または障害が、好ましくはアルドステロンの過剰曝露が該疾患または障害の症状に寄与する疾患または障害であり、該組成物が、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジンである化合物またはその薬学的に許容される塩を含み、好ましくは該化合物が、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩であり、該化合物が、９７％以上の（Ｒ）形態の鏡像体過剰率（ｅｅ）を有し、該組成物が、それを必要とする対象に１日１回投与される、使用のための組成物に関する。本発明はさらに、固定単位剤形の該化合物の１日投薬量を含む薬学的組成物と、（ｉ）該薬学的組成物または該化合物、および（ｉｉ）該薬学的組成物または該化合物を１日１回投与するための説明書を含む組み合わせとに関する。
【背景技術】
【０００２】
アルドステロン過剰は、ナトリウム貯留および水分貯留、低カリウム血症、低マグネシウム血症、高血圧、左室肥大、および心筋線維症を含む、様々な有害な代謝および心血管構造効果と関連しており、原発性アルドステロン症は、本態性高血圧症と比較して、実質的に有害な結果を有する。したがって、血圧の低下、および鉱質コルチコイド受容体の過剰活性化の拮抗の両方を行うための有効な医学療法は、重要な治療目的である（Ｐａｒｔｈａｓａｒａｔｈｙ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１，Ｊ  Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓ２９：９８０−９９０）。
【０００３】
従来技術では、原発性アルドステロン症（ＰＡ）は、アルドステロン産生がナトリウム状態に対して不適切に高く、主要な分泌制御因子（アンギオテンシンＩＩ、血漿カリウム濃度）から比較的自律的であり、かつナトリウム負荷によって抑制不能である、一群の障害と定義されている。アルドステロンのそのような不適切な産生は、高血圧症、心血管損傷、ナトリウム貯留、血漿レニンの抑制、およびカリウム排泄の増加を引き起こし、これは、（長期的かつ重度の場合）低カリウム血症をもたらし得る。ＰＡは一般的に、副腎腺腫、一側性もしくは両側性副腎皮質過形成症（ＢＡＨ）、またはまれな事例では副腎がんもしくは家族性高アルドステロン症の遺伝性病態によって引き起こされる。ＰＡはまた、コン症候群としても知られている（Ｆｕｎｄｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２０１６，Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ  Ｍｅｔａｂ１０１：１８８９−１９１６）。
【０００４】
副腎球状層細胞がアルドステロンを産生する能力は、アルドステロンシンターゼをコードする遺伝子である、ＣＹＰ１１Ｂ２の制御された転写によって、大部分が調節される。アルドステロンシンターゼ阻害は、鉱質コルチコイド受容体（ＭＲ）遮断に加えて、高血圧症、心不全、および腎障害の治療の選択肢として現れている。この目的は、血漿および組織の両方におけるアルドステロン濃度を低下させ、それによって心臓、血管、および腎臓の標的器官におけるＭＲ依存性効果およびＭＲ非依存性効果を減少させることである。アルドステロンの合成は、コルチゾールの合成と密接に関連しており、アルドステロンシンターゼは、コルチゾール合成の最終ステップを触媒する１１−β−ヒドロキシラーゼに類似しているため、高度に選択的なＣＹＰ１１Ｂ２阻害剤の検索は、複雑化している（Ａｚｉｚｉ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，Ｎｅｐｈｒｏｌ  Ｄｉａｌ  Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ２８：３６−４３）。
【０００５】
進行乳がんの治療に有効な非ステロイド性アロマターゼ阻害剤として知られているファドロゾール塩酸塩水和物（ＣＧＳ１６９４９Ａ、ＩＮＮ：ファドロゾール、ＵＳ４，６１７，３０７、ＵＳ４，７２８，６４５、ＵＳ５，０９８，９１１、Ｔｒｕｎｅｔ  ｅｔ  ａｌ．，１９９２，Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ  Ｍｅｔａｂ７４（３）：５７１−５７６）は、健康な男性対象に１日２回投与した場合、血清カリウムを有意に上昇させることなく、基礎血漿アルドステロンレベルにわずかな影響しか及ぼさないことが見出されている。
【０００６】
その後の前臨床研究により、ファドロゾールのＲ−鏡像体、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン塩化物（ＣＧＳ２０２８６、ＦＡＤ２８６Ａ）が、ＣＹＰ１１Ｂ２の強力な阻害剤である一方で、Ｓ−鏡像体が、ファドロゾールの強度かつ強力なアロマターゼ（ＣＹＰ１９）阻害活性に関与していることが実証された（Ｊ．Ｍｅｎａｒｄ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓ（２００６）２４：９９３、Ｆｉｅｂｅｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ（２００５）１１１：３０７８−９４、Ｆｕｒｅｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ（１９９３）３６：１３９３−１４００、ＵＳ５，０５７，５２１）。
【０００７】
一方では、その早期発見およびさらなる前臨床調査にも関わらず（Ｊ．Ｍｅｎａｒｄ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓ（２００６）２４：９９３、Ａｍａｒ  ｅｔ  ａｌ．（２０１０），Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ５６：８３１−８３８、ＵＳ４，８８９，８６１、ＵＳ５，０５７，５２１、Ｒｉｇｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，２０１０，ＪＰＥＴ３３４（１）：２３２−２４３）、ヒトにおける（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン塩化物の臨床開発は、これまでに報告されておらず、Ｒ−鏡像体の商業的に実行可能な合成も、その満足のいくキラル純度も開示されていない。
【０００８】
実際、ＦＡＤ２８６Ａのキラル純度は、対応する（Ｓ）鏡像体の強度かつ強力なアロマターゼ阻害活性に照らして、特に重要であると考えられているが、これは、臨床試験におけるアロマターゼ阻害剤の広範な評価により、アロマターゼの多数の有害な結果が明らかになったためである。例えば、３０，０２３人の乳がんを有する閉経後女性を登録し、アロマターゼ阻害剤で治療した７件の試験からなる、系統的再評価およびメタ分析により、骨折および心血管疾患の発生率の有意な増加が明らかになった（Ａｍｉｒ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１，Ｊ  Ｎａｔｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔ１０３：１２９９−１３０９）。
【０００９】
ＦＡＤ２８６と構造が類似した経口活性アルドステロンシンターゼ阻害剤であるＬＣＩ６９９が、ヒト使用のために開発され、原発性アルドステロン症を有する患者におけるＰＯＣ研究に適用されており、この研究では、ＬＣＩを、各０．５ｍｇの用量で患者に１日２回投与した（Ａｍａｒ  ｅｔ  ａｌ．，２０１０，Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ５６：８３１−８３８）。この第Ｉ相研究で観察されたＬＣＩ６９９の薬物動態パラメータ（１時間のピーク濃度までの時間、および約４時間の排泄半減期）、ならびに原発性アルドステロン症を有する患者に予想される高いアルドステロンレベルに基づいて、１日２回の投薬スキームが選択された。
【発明の概要】
【００１０】
健康な男性患者における第Ｉ相、プラセボ対照、安全性、忍容性、薬力学、および薬物動態研究では、本発明者らは、驚くべきことに、本発明の非常に好ましい化合物が、治療前の値およびプラセボで治療した対照の値と比較して、該患者における血漿アルドステロンレベルを効果的に抑制することができることを発見した。それが、単回および複数回の漸増用量試験で健康な男性対象において実証されたように、好ましい化合物の１日１回の投与後に観察されたため、この発見はさらに、特に注目に値する。さらに、薬力学的データにより、驚くべきことに、本発明の好ましい化合物が、血清コルチゾールまたは生殖ホルモン濃度（ＬＨ、ＦＳＨ、テストステロン、エストラジオール）に悪影響を及ぼさない用量で、２４時間にわたって血漿アルドステロン濃度を劇的に抑制することが明らかになった。さらに、上昇する血清カリウムレベルが強力なアルドステロン抑制の特徴と等しくなっている間でさえ、血漿アルドステロンの該劇的な抑制が得られることが示された。
【００１１】
したがって、かつ特に、本発明者らは、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジンである化合物またはその薬学的に許容される塩を含むか、またはそれからなる組成物のための新たな投薬レジメンであって、好ましくは該化合物が、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩であり、該化合物が、アルドステロンの過剰曝露が該疾患または障害の症状に寄与する疾患および障害の治療のための、９７％以上の（Ｒ）形態の鏡像体過剰率（ｅｅ）を有する、投薬レジメンを開発した。１日１回投与した場合、該組成物は、治療前の値およびプラセボで治療した対照の値と比較して、血漿アルドステロンレベルを効果的に抑制する（表１）。アルドステロン濃度を測定した全ての時点で、本発明の組成物中に含まれる該化合物の１日１回用量は、治療前の値およびプラセボ対照の値の両方と比較して、濃度を有意に抑制した。本発明の該化合物の最後の１日１回用量の２４時間後、用量は依然として、治療前の値と比較して、血漿アルドステロンをそれぞれ３２％および５０％だけ抑制した。
【００１２】
１日１回の投薬レジメンはまた、投薬の１日目および８日目に決定される本発明の化合物の排出半減期を記載する薬物動態データによって支持され、各用量の平均は、４ｍｇの用量で１日目の低い８．４７から、１６ｍｇの用量で８日目に測定した９．６７までの範囲である（表５）。全ての用量レベルのＣｍａｘおよびＡＵＣ０−∞の両方が、用量に比例していた。Ｔｍａｘは、本発明の化合物が、全ての用量レベルで急速に吸収され、１日目および８日目で同等であることを示している。８日目には、血漿中のＤＰ１３の蓄積はほとんどなく、ＡＵＣ０−ｔａｕの幾何平均蓄積率（ＲＡＯｂｓ）は１．１８であった。
【００１３】
本発明の該化合物が、複数回の１日用量と比較して、１日１回の投薬で治療利益を提供する能力は、いくつかの利益を提供する。特に、レジメンの単純性および利便性、ならびに結果として改善された患者の服薬遵守が非常に望ましく、高い医学的利益がある。したがって、服薬遵守は、観察可能な身体的知覚を発揮せず、したがって服薬遵守の逸脱に苦しむ可能性が高い高血圧性障害の治療における特定の利点である。加えて、１日に複数回の最大濃度の薬物への曝露の増加の結果として、副作用の経験の増加に寄与する可能性がより高い。経口薬物摂取後、循環中の薬物の濃度は、薬物吸収の程度および速度、ならびに薬物の処分プロファイルに依存する、最大値（Ｃｍａｘ）に達する。短期間の薬物の副作用（胃刺激、悪心、めまい、心拍数の増加、心房細動、低血圧など）は、Ｃｍａｘまたはその近くで発生する可能性が最も高い一方で、持続した作用継続時間を有する薬物の治療効果は通常、Ｃｍｉｎをわずかに超えた濃度で発生する。したがって、その有効なアルドステロンシンターゼ活性を有する本発明の化合物を１日１回のみ適用し、したがって本発明の化合物へのピーク薬物曝露を複数回ではなく１日１回に制限することが有利である。
【００１４】
本発明の化合物はさらに、所望の非常に高いアルドステロンシンターゼ活性に加えて、非常に減少した非常に低いアロマターゼ活性を有し、これにより、本発明の化合物を１日１回のみ単回用量で投与することが可能になる。非常に低いアロマターゼ活性は、本発明の化合物および組成物の安全性に関して最も重要であり、それは、特に閉経前女性、およびしたがって妊娠可能な女性、ならびに小児患者の、アルドステロンの過剰曝露に関連する疾患および障害を治療するための薬物としての臨床開発および登録された使用の前提条件であると考えられている。以来、後者は、特に当てはまり、アロマターゼの量およびアンドロゲンからエストロゲンへの変換パーセンテージは、性腺外組織中では定量的に少なく、いずれの組織中でも１％未満であることが多いが、ホルモン作用に関する効果は、依然として優れている（Ｂｌａｋｅｍｏｒｅ  ａｎｄ  Ｎａｆｔｏｌｉｎ，Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ（２０１６）３１：２５８−２６９）。該疾患および障害の生涯治療に対する典型的な必要性は、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジンまたはその薬学的に許容される塩を阻害する有益なアルドステロンシンターゼの汚染を最小化するという、本発明の化合物の利点を強化する。したがって、本発明の化合物は、強力なアロマターゼ阻害（Ｓ）−鏡像体によって引き起こされる汚染および悪影響を最小化することにより、アルドステロン産生によって悪影響を受ける障害の治療のための高い患者の服薬遵守を有する生涯薬物の可能性を提供する。
【００１５】
したがって、第１の態様では、本発明は、疾患または障害の治療における使用のための組成物であって、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジンである化合物またはその薬学的に許容される塩を含み、該化合物が、９７％以上の（Ｒ）形態の鏡像体過剰率（ｅｅ）を有し、該組成物が、それを必要とする対象に１日１回投与される、使用のための組成物を提供する。
【００１６】
2021522289.tif 000002
さらなる態様では、本発明は、疾患または障害の治療における使用のための組成物であって、該疾患または障害が、好ましくは原発性アルドステロン症または続発性アルドステロン症、さらに好ましくは原発性アルドステロン症であり、該組成物が、それを必要とする対象に１日１回投与され、該組成物が、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジンである化合物またはその薬学的に許容される塩を含み、該化合物が、９７％以上の（Ｒ）形態の鏡像体過剰率（ｅｅ）を有する、使用のための組成物を提供する。
【００１７】
さらなる態様では、本発明は、疾患または障害の治療における使用のための組成物であって、該疾患または障害が、アルドステロンの過剰曝露が該疾患または障害の症状に寄与する疾患または障害であり、該組成物が、それを必要とする対象に１日１回投与され、該組成物が、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジンである化合物またはその薬学的に許容される塩を含み、該化合物が、９７％以上の（Ｒ）形態の鏡像体過剰率（ｅｅ）を有する、使用のための組成物を提供する。
【００１８】
さらなる態様では、本発明は、疾患または障害の治療における使用のための組成物であって、該疾患または障害が、原発性アルドステロン症、続発性アルドステロン症、心不全、慢性腎不全、高血圧症、再狭窄、肥満症、腎障害、心筋梗塞後、腎線維症、冠動脈心疾患、ナトリウム貯留、水分貯留、低カリウム血症、低マグネシウム血症、高血圧症、左室肥大および心筋線維症、心血管損傷、血漿レニンの抑制、腎線維症、不整脈、腎障害、浮腫、および低カリウム血症による筋力低下、心細動、ならびに心筋収縮の衰弱から選択され、好ましくは該疾患または障害が、原発性アルドステロン症または続発性アルドステロン症であり、さらにより好ましくは該疾患または障害が、原発性アルドステロン症であり、該組成物が、それを必要とする対象に１日１回投与され、該組成物が、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジンである化合物またはその薬学的に許容される塩を含み、該化合物が、９７％以上の（Ｒ）形態の鏡像体過剰率（ｅｅ）を有する、使用のための組成物を提供する。
【００１９】
本発明者らは、本発明のプロセスによって調製した（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジン、薬学的に許容される塩、特にそのリン酸塩または二水素リン酸塩が、アロマターゼに対して前例のない低い阻害活性を示すことを発見した。実施例５、表８〜表１０に実証されるように、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジンはそれぞれ、８．１ｎＭおよび５７６０ｎＭのＩＣ５０で、ＮＣＩ−Ｈ２９５Ｒ副腎細胞によるアルドステロン産生（アルドステロンシンターゼ活性）およびエストラジオール産生（アロマターゼ活性）を阻害し、したがってアロマターゼ活性と比較して、アルドステロンシンターゼ活性の７００倍超より大きな阻害を実証し、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジンの本発明のリン酸塩、およびさらに（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩の非常に有益な安全性プロファイルを証明する。したがって、本発明は、特にヒトにおける適用に適している。
【００２０】
さらなる態様では、本発明は、固定単位剤形の化合物の１日投薬量を含む薬学的組成物であって、該化合物が、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジンまたはその薬学的に許容される塩であり、該化合物が、９７％以上の（Ｒ）形態のｅｅを有し、好ましくは該化合物が、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩である、薬学的組成物を提供する。
【００２１】
さらなる態様では、本発明は、疾患または障害の治療における使用のための薬学的組成物であって、好ましくは該疾患または障害が、原発性アルドステロン症または続発性アルドステロン症であり、さらに好ましくは該疾患または障害が、原発性アルドステロン症であり、該薬学的組成物が、固定単位剤形の化合物の１日投薬量を含み、該化合物が、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジンまたはその薬学的に許容される塩であり、該化合物が、９７％以上の（Ｒ）形態のｅｅを有し、好ましくは該化合物が、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩である、使用のための薬学的組成物を提供する。
【００２２】
さらなる態様では、本発明は、組み合わせであって、
（ｉ）本発明による薬学的組成物、または（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジンである化合物もしくはその薬学的に許容される塩であって、該化合物が、９７％以上、好ましくは９８％以上、より好ましくは９９％以上、およびさらにより好ましくは９９．５％以上、さらにより好ましくは９９．８％以上、さらにより好ましくは９９．９％以上の（Ｒ）形態のｅｅを有し、好ましくは該化合物が、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩である、化合物もしくはその薬学的に許容される塩と、
（ｉｉ）該薬学的組成物または該化合物を１日１回投与するための説明書と、を含む、組み合わせを提供する。好ましくは、該薬学的組成物または該化合物を投与するための該説明書は、好ましくは原発性アルドステロン症または続発性アルドステロン症であり、さらに好ましくは原発性アルドステロン症である、疾患または障害を治療するための方法で使用するための、該薬学的組成物または該化合物の説明書である。
【発明を実施するための形態】
【００２３】
別段定義されない限り、本明細書で使用される全ての技術用語および科学用語は、本発明が属する当業者によって一般的に理解されるのと同じ意味を有する。
【００２４】
使用される場合、「約」という用語は、別段示されない限り、特に±１０％、±５％、または±３％（それぞれ所定の数値を指す）を意味する。本発明の実施形態の各々では、「約」は、削除されることがある。本明細書に開示される値の全ての範囲は、範囲を定義する値を含む該範囲内にあるありとあらゆる値を指し、含むものとする。明確にするために、例えば、１２〜１３の値は、１２もしくは１３の値、または１２および１３の範囲内にあるありとあらゆる値を指すものとし、例えば、１ｍｇ〜１６ｍｇの１日投薬量は、１ｍｇもしくは１６ｍｇ、または１ｍｇおよび１６ｍｇの範囲内にあるありとあらゆる値の１日用量を指すものとする。
【００２５】
本明細書で使用される場合、「キラル純度」という用語は、キラルＨＰＬＣ（詳細については実施例を参照されたい）によって決定され、等式：
ｅｅ＝（ＡＲ−ＡＳ）／（ＡＲ＋ＡＳ）×１００％、
（式中、ＡＲは、試料溶液のＨＰＬＣクロマトグラムにおける（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジンピークの面積であり、ＡＳは、試料溶液のＨＰＬＣクロマトグラムにおける（Ｓ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジンピークの面積である）によって計算される、鏡像体過剰率（ｅｅ）によって定義される。
【００２６】
本明細書で使用される場合、「薬学的に許容される塩」という用語は、薬学的に許容され、親化合物の所望の薬理学的活性を有する塩を指す。そのような塩には、当業者に知られている無機酸または有機酸で形成される酸付加塩が含まれる（Ｐ．Ｈｅｉｎｒｉｃｈ  Ｓｔａｈｌ（Ｅｄｉｔｏｒ），Ｃａｍｉｌｌｅ  Ｇ．Ｗｅｒｍｕｔｈ（Ｅｄｉｔｏｒ）；Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ：Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ，ａｎｄ  Ｕｓｅ，２ｎｄ  Ｒｅｖｉｓｅｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｍａｒｃｈ２０１１，Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ，ＩＳＢＮ：９７８−３−９０６３９−０５１−２）。本発明において特に好ましい薬学的に許容される塩は、例えば、リン酸で形成される、塩酸塩またはリン酸塩などの酸付加塩、すなわち二水素リン酸塩である。
【００２７】
本出願で使用される場合、「リン酸塩」という用語は、そのプロトン化形態の（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジン、すなわち（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジンカチオンを含み、リン酸に由来するアニオンをさらに含む、化合物であって、該アニオンが、典型的にかつ好ましくは二水素リン酸塩［Ｈ２ＰＯ４］−または水素リン酸塩［ＨＰＯ４］２−である、化合物を指す。好ましくは、本出願で使用される場合、「リン酸塩」という用語は、式（Ｉ）の二水素リン酸塩を指し、つまり式（Ｉ）の化合物は、１回プロトン化されており、対イオンは、［Ｈ２ＰＯ４］−であり、したがってモノプロトン化（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジン対二水素リン酸塩の化学量論は、１：１である。後者の化合物は、本明細書では、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩と称される。
【００２８】
本出願で互換的に使用される場合、「塩酸塩」または「塩化物塩」という用語は、そのプロトン化形態の（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラ−ヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジン、すなわち（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジンカチオンを含み、塩化物アニオン（Ｃｌ−）をさらに含む、化合物を指す。
【００２９】
本明細書で使用される場合、「無晶性」という用語は、固体のように見えるが、長い範囲にわたって維持され、融点を有さず、むしろ軟化するか、またはそのガラス転移温度を超えて流動する、分子の規則的に反復する配置を有しない、過冷却液体または粘性液体を意味する。
【００３０】
本明細書で互換的に使用され、本発明の化合物に関連する場合、「結晶性」および「結晶性純度」という用語は、分子または外部表面平面の規則的に反復する配置を有する固体を指す。好ましくは、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩を含む（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩を指す場合、「結晶性」および「結晶純度」という用語は、結晶形態Ｉを指し、該結晶形態Ｉは、少なくとも総重量によって６０％で、好ましくは少なくとも総重量によって７０％で、さらに好ましくは少なくとも総重量によって８０％で、さらにより好ましくは少なくとも総重量によって９０重量％で、およびさらにより好ましくは少なくとも総重量によって９５重量％で存在する。さらなる構成成分は、例えば、無晶性（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩であってもよい。結晶純度は、本明細書に記載のようにＸＲＰＤの手段によって決定することができる。したがって、好ましい実施形態では、該ＸＲＰＤは、次のデバイス、パラメータ、および測定条件：機器：Ｂｒｕｋｅｒ  ＡＸＳ  Ｄ２ＰＨＡＳＥＲ、照射：ＣｕＫα（３０ｋＶ、１０ｍＡ）、走査範囲：５〜４５°（２シータ値）、試料回転５ｒｐｍ、０．５秒／ステップ、０．０１０°／ステップ、３．０ｍｍの検出器スリットを使用して決定することができる。
【００３１】
本明細書で使用される場合、「結晶形態Ｉ」という用語は、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩を指し、該（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩は、ＣｕＫα放射線を使用して測定して、次の２θ値：１９．５０４、２１．９１９、および２４．１５９を含むＸ線粉末回折パターンを有し、各ピークは、±１度だけ、または好ましくは±０．５度だけ、またはさらに好ましくは±０．２度だけ変動し得る。好ましい実施形態では、本明細書で使用される場合、「結晶形態Ｉ」は、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジンを指し、該（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩は、ＣｕＫα放射線を使用して測定して、次の２θ値：１９．５０４、２１．９１９、および２４．１５９を含むＸ線粉末回折パターンを有し、各ピークは、±１度だけ、または好ましくは±０．５度だけ、またはさらに好ましくは±０．２度だけ変動し得る。さらに好ましい実施形態では、本明細書で使用される場合、「結晶形態Ｉ」は、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩を指し、該（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩は、ＣｕＫα放射線を使用して測定して、次の２θ値：１９．５０４、２１．９１９、および２４．１５９を含むＸ線粉末回折パターンを有し、各ピークは、±０．５度だけ、または好ましくは±０．２度だけ変動し得る。さらに好ましい実施形態では、本明細書で使用される場合、「結晶形態Ｉ」という用語は、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩を指し、該（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩は、ＣｕＫα放射線を使用して測定して、次の２θ値、１９．５０４、２１．９１９、および２４．１５９を含むＸ線粉末回折パターンを有し、各ピークは、±０．２度だけ変動し得る。別の好ましい実施形態では、本明細書で使用される場合、「結晶形態Ｉ」は、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジンを指し、該（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩は、ＣｕＫα放射線を使用して測定して、次の２θ値：１９．５０４、２１．９１９、２４．１５９、１６．００３、２６．１０１、２７．１６８、２７．５４２、および２９．０２９を含むＸ線粉末回折パターンを有し、各ピークは、±１度だけ、または好ましくは±０．５度だけ、またはさらに好ましくは±０．２度だけ変動し得る。別の好ましい実施形���では、本明細書で使用される場合、「結晶形態Ｉ」は、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩を指し、該（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩は、ＣｕＫα放射線を使用して測定して、次の２θ値：１９．５０４、２１．９１９、２４．１５９、１６．００３、２６．１０１、２７．１６８、２７．５４２、および２９．０２９を含むＸ線粉末回折パターンを有し、各ピークは、±０．５度だけ、または好ましくは±０．２度だけ変動し得る。
【００３２】
本明細書で使用される場合、「無水」という用語は、３％未満、好ましくは２．５％未満、より好ましくは２％未満、より好ましくは１．５％未満、最も好ましくは１％未満の水和物水を含有する結晶形態を指す。
【００３３】
「非吸湿性」という用語は、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジンの本発明の薬学的に許容される塩、および特に（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジンのリン酸塩、より好ましくは（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩が、それらが粉末または顆粒として存在するときに、商業使用の前提として、凝集、集塊、吸水、または潮解の有害現象を生じることなく、２４時間、数週間、数ヶ月間、または数年間にわたって、周囲雰囲気の水蒸気への曝露に耐える能力を意味する。典型的にかつ好ましくは、本明細書で使用され、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジンのリン酸塩を指す場合、および好ましくは（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩を指す場合、「非吸湿性」という用語は、開放された通常の周囲条件下、典型的にかつ好ましくは２０〜２５℃、および２０％〜８０％、好ましくは３０％〜６０％の相対湿度での屋外での保管では、それが、少なくとも１日間、好ましくは１週間、さらに好ましくは１ヶ月間の期間にわたって、さらにより好ましくは少なくとも３ヶ月間にわたって、およびさらにより好ましくは少なくとも６ヶ月間の期間にわたって、およびさらにより好ましくは少なくとも１年間以上の期間にわたって、（好ましくは自由流動性）粉末または顆粒としてのその稠度を保つことで、規制ＩＣＨ基準を満たすことを意味する。さらに好ましくは、本明細書で使用され、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジンのリン酸塩を指す場合、および好ましくは（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩を指す場合、「非吸湿性」という用語は、典型的にかつ好ましくは実施例５において決定されるように、開放された通常の周囲条件下、典型的にかつ好ましくは２０〜２５℃、および２０％〜８０％、好ましくは３０％〜６０％の相対湿度での屋外での保管では、２４時間の期間にわたって、それが、５％未満、好ましくは３％未満、さらに好ましくは２％未満、さらにより好ましくは１％未満の重量増加を示すことを意味する。さらに好ましくは、本明細書で使用され、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジンのリン酸塩を指す場合、および好ましくは（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩を指す場合、「非吸湿性」という用語は、典型的にかつ好ましくは実施例５において決定されるように、開放された通常の周囲条件下、典型的にかつ好ましくは室温、最も好ましくは２０〜２５℃、および２０％〜８０％、好ましくは３０％〜６０％の相対湿度での屋外での保管では、２４時間の期間にわたって、該リン酸塩、好ましくは該（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩が、５％（ｗｔ／ｗｔ）未満、好ましくは３％（ｗｔ／ｗｔ）未満、さらに好ましくは２％（ｗｔ／ｗｔ）未満、さらにより好ましくは１％（ｗｔ／ｗｔ）未満の水取り込みを示すことを意味する。あるいは、本明細書で使用され、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジンのリン酸塩を指す場合、および好ましくは（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩を指す場合、「非吸湿性」という用語は、典型的にかつ好ましくは実施例９において決定されるように、開放された通常の周囲条件下、典型的にかつ好ましくは２５℃、および約６０％の相対湿度での屋外での保管では、２４時間の期間にわたって、好ましくは１ヶ月間の期間にわたって、より好ましくは少なくとも３ヶ月間の期間にわたって、およびさらにより好ましくは少なくとも６ヶ月間の期間にわたって、およびさらにより好ましくは少なくとも１年間の期間にわたって、水含有量が、０．５ｗｔ／ｗｔ％未満、好ましくは０．４ｗ／ｗ％未満、およびさらに好ましくは０．３ｗ／ｗ％未満であることを意味する。
【００３４】
本明細書で使用される場合、「比旋光度」という用語は、溶媒中のそれぞれの化合物の溶液の比旋光度を指し、該溶媒は、典型的にかつ好ましくはエタノールまたは１：１（ｖ／ｖ）のＣＨ３ＣＮ：Ｈ２Ｏ、さらに好ましくは１：１（ｖ／ｖ）のＣＨ３ＣＮ：Ｈ２Ｏであり、該比旋光度は、式：１００×α／（ｌｘｃ）（式中、α＝観察される旋光度（度）であり、ｌ＝セルパスの長さ（デシメートル）であり、ｃ＝１００ｍｌあたりのグラムでの濃度である）によって計算され、測定は、ナトリウムＤライン（すなわち５８９．３ｎｍ）で、室温、典型的にかつ好ましくは２０℃または２５℃で実行される。「比旋光度」という用語は、［α］Ｄ２０または［α］Ｄ２５と略記される。典型的には、［α］Ｄ２０または［α］Ｄ２５について、旋光度の符号（＋もしくは−）およびその実際の値が本明細書に示されるか、または［α］Ｄ２０もしくは［α］Ｄ２５が旋光度のその符号（＋もしくは−）および度（°）で示されるその実際の値によって提供されるかのいずれかである。上記に決定される完全な単位（ｄｅｇ  ｄｍ−１ｃｍ３ｇ−１）は、典型的には明確にするために省略されている。
【００３５】
本明細書で使用される場合、「溶解度」という用語は、Ｕ．Ｓ．Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ，Ｃｈａｐｔｅｒ，“Ｇｅｎｅｒａｌ  Ｎｏｔｉｃｅｓ”，§５．３０“Ｄｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｓｏｌｕｂｉｌｉｔｙ”による（かつ以下に定義される）、（例えば、水中での）簡略化された記述的溶解度を指す。
2021522289.tif 000003
【００３６】
「アロマターゼ」という用語は、シトクロムＰ４５０スーパーファミリーのメンバーであるＣＹＰ１９を指し、エストロゲンシンターゼとしても知られている。
【００３７】
「アルドステロンシンターゼ」という用語は、ステロイドヒドロキシラーゼシトクロムＰ４５０酵素ＣＹＰ１１Ｂ２を指す。
【００３８】
「ＩＣ５０」という表現は、当該技術分野で一般的に知られている最大阻害濃度の半分を指す。アロマターゼのＩＣ５０は、実施例５に記載の無細胞ヒト組換えアロマターゼアッセイによって決定される。アルドステロンシンターゼのＩＣ５０は、実施例５に記載のヒトＮＣＩ−Ｈ２９５Ｒ細胞アッセイによって決定される。
【００３９】
本明細書で使用される場合、「妊娠可能な女性」という用語は、妊娠することができる閉経前女性を指す。
【００４０】
本明細書で使用される場合、「小児患者」という用語は、０〜１８歳、好ましくは０〜１６歳の年齢カテゴリーの患者を指し、早産および満期の新生児（０〜２７日）、乳児および幼児（２８日〜２３ヶ月）、子供（２〜１１歳）、ならびに青年（２〜１６／１８歳）を含む。
【００４１】
「アロマターゼを超えるアルドステロンシンターゼに対する選択性」に言及する場合、次の比率：
2021522289.tif 000004
を意味し、アルドステロンシンターゼのＩＣ５０およびアロマターゼのＩＣ５０の両方は、好ましくは同時に、実施例５に記載のヒトＮＣＩ−Ｈ２９５Ｒ細胞アッセイによって決定される。
【００４２】
上記に概説したように、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジンのリン酸塩、好ましくは（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩はそれぞれ、８．１ｎＭおよび５７６０ｎＭのＩＣ５０で、ＮＣＩ−Ｈ２９５Ｒ副腎細胞によるアルドステロン産生（アルドステロンシンターゼ活性）およびエストラジオール産生（アロマターゼ活性）を阻害し（実施例５、表８および表９）、したがってアロマターゼを超えるアルドステロンシンターゼに対する約７００の選択性を実証する。
【００４３】
「疾患」および「障害」という用語は、本明細書では互換的に使用され、任意の撹乱または異常な病態もしくは機能、あるいは病的な身体的または精神的状態、特に組織、器官、または個体が、その機能を効率的に果たすことができない、疾病または傷害などの異常な医学的病態を指す。Ｄｏｒｌａｎｄ’ｓ  Ｉｌｌｕｓｔｒａｔｅｄ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ（ＶＳＩＢ，Ｓａｕｎｄｅｒｓ  Ｃｏ．，２７ｔｈ  ｅｄ．，１９８８）を参照されたい。典型的には、疾患は、そのような疾患の存在を示す特定の症状または徴候に関連しているが、必ずしもそうとは限らない。したがって、そのような症状または徴候の存在は、疾患に苦しむ組織、器官、または個体を示す可能性がある。好ましくは、「発症するリスクがある」組織、器官、または個体は、出現する疾患がまた、「疾患」または「障害」という用語によっても網羅される潜在性を示す。典型的には、疾患を発症するリスクは、そのような病気の初期または弱い兆候または症状に関連している。
【００４４】
本明細書で使用される場合、「アルドステロンの過剰曝露が該疾患または障害の症状に寄与する疾患または障害」という表現は、好ましくはアルドステロンシンターゼの異常または不適切な活性／発現による疾患または障害、およびアルドステロンシンターゼの異常または不適切な発現に関連する生物学的活性またはプロセスを指す。アルドステロンシンターゼの異常または不適切な活性／発現による疾患または障害の典型的な例は、原発性アルドステロン症、続発性アルドステロン症、心不全、慢性腎不全、高血圧症、再狭窄、肥満症、腎障害、心筋梗塞後、腎線維症、冠動脈心疾患、ナトリウム貯留、水分貯留、低カリウム血症、低マグネシウム血症、高血圧症、左室肥大および心筋線維症、心血管損傷、血漿レニンの抑制、腎線維症、不整脈、腎障害、浮腫、ならびに低カリウム血症による筋力低下、心細動、ならびに心筋収縮の衰弱である。好ましくは、アルドステロンシンターゼの異常または不適切な活性／発現による該疾患または障害は、原発性アルドステロン症、続発性アルドステロン症、心不全、慢性腎不全、高血圧症、再狭窄、肥満症、腎障害、心筋梗塞後、腎線維症、冠動脈心疾患、ナトリウム貯留、水分貯留、低カリウム血症、低マグネシウム血症、高血圧症、左室肥大および心筋線維症、心血管損傷、血漿レニンの抑制、腎線維症、不整脈、腎障害、浮腫である。
【００４５】
「原発性アルドステロン症」（ＰＡ）という用語は、本明細書では、レニンレベルの抑制をもたらす自律的なアルドステロン過剰を特徴とする、一群の障害と定義される。提唱されているスクリーニング検査は、ＰＡにおいて病理学的に増加した値を有するアルドステロン対レニンの比率である。したがって、ＰＡはまた、アルドステロン産生がナトリウム状態に対して不適切に高く、主要な分泌制御因子（アンギオテンシンＩＩ、血漿カリウム濃度）から比較的自律的であり、かつナトリウム負荷によって抑制不能である、障害も網羅する。「原発性アルドステロン症」という用語はまた、高アルドステロン症ならびにアルドステロンの不適切な産生の結果である疾患および障害も網羅し、これらは、典型的にかつ好ましくは高血圧症、心血管損傷、ナトリウム貯留、水分貯留、血漿レニンの抑制、ならびにカリウム排泄の増加および低カリウム血症、低マグネシウム血症、左室肥大、心筋線維症および腎線維症、心不全、不整脈、腎障害、浮腫、ならびに低カリウム血症による筋力低下、心細動、心筋収縮の衰弱、ならびに心不全から選択される。「原発性アルドステロン症」という用語はまた、ＰＡを引き起こす疾患または障害も網羅し、これらは、典型的にかつ好ましくは副腎腺腫、一側性および両側性副腎皮質過形成症（ＢＡＨ）（例えば、両側性特発性（微小結節型）副腎皮質過形成症および原発性（一側性）副腎皮質過形成症）、副腎がん（例えば、アルドステロン産生副腎皮質がんおよび異所性アルドステロン産生腺腫または癌腫）、グルココルチコイド治療可能アルドステロン症、家族性アルドステロン症の遺伝性病態、ならびにＩＩ型ＦＨである。ＰＡはまた、コン症候群としても知られている。ＰＡにおけるアルドステロン産生の過剰な増加は、アルドステロン−レニン−アルドステロンの正常な制御的調節から副腎球状層細胞集団が逃れた結果である。
【００４６】
本明細書で使用される場合、「続発性アルドステロン症」（ＳＡ）（高レニン症、または高レニン血症性高アルドステロン症）という用語は、副腎外の供給源からの刺激に続発するアルドステロンの過剰分泌を指す。副腎外刺激は、例えば、腎血流低下である。ＳＡは、レニン−アンギオテンシン−アルドステロン系の活動過剰によるものである。「続発性アルドステロン症」という用語は、アルドステロンおよびレニンの不適切な産生の結果である疾患および障害を網羅し、これらは、典型的にかつ好ましくは高血漿アルドステロンレベル、高血漿レニンレベル、高血圧症、突発性衰弱を引き起こす低カリウム性アルカローシス、異常知覚、一過性麻痺、テタニー、および末梢性浮腫から選択される。「続発性アルドステロン症」という用語はまた、腎血流の低減、閉塞性腎動脈疾患（例えば、アテローム、狭窄）、腎血管収縮、浮腫性障害（例えば、心不全、腹水を伴う肝硬変、ネフローゼ症候群）、レニン産生腫瘍、傍糸球体細胞腫瘍、線維筋性異形成、（バーター症候群およびギテルマン症候群に見られる）ナトリウムの再吸収低下、血液量減少／低血圧症などの、ＳＡを引き起こす疾患または障害も網羅する。「続発性アルドステロン症」という用語はまた、続発性高アルドステロン症も網羅する。
【００４７】
本明細書で使用される場合、「症状」という用語は、異常な状態、疾患、または障害の任意の兆候を指し、対象、好ましくは患者が気付くか、または異常な状態、障害、もしくは疾患の存在を反映して客観的に観察可能な（効果もしくは徴候）、正常な機能または正常な感覚からの逸脱を含む。
【００４８】
本明細書で使用される場合、「日」または「１日」という用語は、１暦日または１つの２４時間期間のいずれかを指し、好ましくは「日」または「１日」という用語は、１暦日を指す。
【００４９】
本明細書で使用される場合、「アルドステロンシンターゼの異常な活性」という用語は、野生型もしくは天然の遺伝子もしくはタンパク質の活性とは異なるか、または健康な対象における遺伝子もしくはタンパク質の活性とは異なる、アルドステロンシンターゼの活性を指す。異常な活性は、正常な活性よりも強い場合および弱い場合がある。
【００５０】
本明細書で使用される場合、「アルドステロンシンターゼの不適切な活性」という用語は、野生型もしくは天然の遺伝子もしくはタンパク質のアルドステロンシンターゼの活性、または健康な対象における遺伝子もしくはタンパク質の活性を指し、これは、健康な対象では適切であると考えられるが、同じ該活性は、罹患した対象には不適切であると考えられ、すなわち該活性は、罹患した対象には強すぎるか、または弱すぎる。
【００５１】
本明細書で使用される場合、「治療すること」および／または「治療」という用語は、対象、好ましくは、それらの病態の症状および合併症と闘うか、またはそれらを緩和する目的のために、１つ以上の治療化合物または組成物の投与の必要が示される疾患または障害を有する患者の管理およびケアを指す。治療には、１つ以上の本発明の製剤を投与して、症状もしくは合併症の発症を予防すること、症状もしくは合併症を緩和すること、または疾患もしくは障害を排除することが含まれる。本明細書で使用される場合、「治療」（または本明細書で互換的に使用される「療法」）という用語は、療法的治療および防止的または予防的手段の両方を指す。好ましくは、「治療」または「療法」は、療法的治療を指す。
【００５２】
本明細書で使用される場合、「薬学的に許容される賦形剤」という用語は、薬学的剤形で日常的に使用される任意の生理学的に不活性な添加剤を含む。薬学的に許容される賦形剤は、結合剤、希釈剤、担体、潤滑剤、滑剤、コーティング添加剤、またはそれらの組み合わせを含む群から選択される。本発明の活性塩の製剤に好適な追加の担体は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ，Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，２００６，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｉｌｋｉｎｓ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａに見出すことができる。
【００５３】
本明細書で使用される場合、「対象」という用語は、動物、好ましくはヒトを含む哺乳動物を意味するために使用される。哺乳動物の例には、ヒト、イヌ、ウシ、ウマ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、ネコが含まれる。特に好ましい実施形態では、該対象は、ヒトである。本明細書で使用される場合、「患者」および「ヒト」という用語は、互換的に使用される。
【００５４】
本明細書で使用される場合、「投与する」という用語は、治療剤を、対象、好ましくはそれを必要とする患者の体内または体に対して導入または適用して、疾患または病態を治療することを意味する。
【００５５】
「治療有効量」という用語は、疾患もしくは障害の少なくとも１つの徴候もしくは症状を治療するために、または活性剤が投与される特定の薬理学的応答を提供するために、有効であると見なされる活性剤の投薬量を指す。投与用の薬剤の量は、状況、例えば、治療される対象、好ましくは患者の病状、剤形、投与方法、対象因子、好ましくは患者因子などに基づいて変動し得る。特定の場合に特定の対象に投与される治療有効量の活性剤は、そのような投薬量が当業者によって治療有効量であると見なされたとしても、本明細書に記載の病態を治療するのに常に有効であるとは限らない。
【００５６】
「薬学的組成物」という用語は、対象、好ましくは患者に影響を及ぼす特定の疾患または病態を予防または治療するために、対象、好ましくは患者に投与される少なくとも１つの治療剤を含有する混合物を指す。
【００５７】
第１の態様では、本発明は、疾患または障害の治療における使用のための組成物であって、該疾患または障害が、好ましくは原発性および続発性アルドステロン症であり、該組成物が、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジンである化合物またはその薬学的に許容される塩であって、該化合物が、９７％以上、好ましくは９８％以上、より好ましくは９９％以上、およびさらにより好ましくは９９．５％以上、さらにより好ましくは９９．８％以上、さらにより好ましくは９９．９％以上の（Ｒ）形態の鏡像体過剰率（ｅｅ）を有し、該組成物が、それを必要とする対象に１日あたり１回（すなわち１日１回）投与される、使用のための組成物を提供する。
【００５８】
本発明による該化合物は、９７％以上の（Ｒ）形態のｅｅを有する。好ましい実施形態では、本発明による該化合物は、９８％以上、より好ましくは９９％以上、およびさらにより好ましくは９９．５％以上、さらにより好ましくは９９．８％以上、さらにより好ましくは９９．９％以上の（Ｒ）形態のｅｅを有する。好ましい実施形態では、本発明による該化合物は、９９．９％以上の（Ｒ）形態のｅｅを有する。
【００５９】
本発明はさらに、疾患または障害、好ましくは原発性および続発性アルドステロン症の治療のための方法であって、組成物を、それを必要とする対象に１日１回投与することを含み、該組成物が、治療有効量の（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジンである化合物、またはその薬学的に許容される塩、好ましくはそのリン酸塩、もしくはより好ましくはその二水素リン酸塩を含むか、またはそれからなり、該化合物が、９７％以上、好ましくは９８％以上、より好ましくは９９％以上、およびさらにより好ましくは９９．５％以上、さらにより好ましくは９９．８％以上、さらにより好ましくは９９．９％以上の（Ｒ）形態のｅｅを有する、方法を提供する。
【００６０】
本発明はさらに、薬物としての、すなわち疾患または障害、好ましくは原発性および続発性アルドステロン症の治療のための組成物の使用であって、該組成物が、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジンである化合物、またはその薬学的に許容される塩、好ましくはそのリン酸塩、より好ましくはもしくはその二水素リン酸塩を含むか、またはそれからなり、該化合物が、９７％以上、好ましくは９８％以上、より好ましくは９９％以上、およびさらにより好ましくは９９．５％以上、さらにより好ましくは９９．８％以上、さらにより好ましくは９９．９％以上の（Ｒ）形態のｅｅを有し、該組成物が、それを必要とする対象に１日１回投与される、使用に関する。
【００６１】
本発明はさらに、疾患または障害、好ましくは原発性および続発性アルドステロン症の治療のための薬物の製造のための組成物の使用であって、該組成物が、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジンである化合物、またはその薬学的に許容される塩、好ましくはそのリン酸塩、もしくはより好ましくはその二水素リン酸塩を含むか、またはそれからなり、該化合物が、９７％以上、好ましくは９８％以上、より好ましくは９９％以上、およびさらにより好ましくは９９．５％以上、さらにより好ましくは９９．８％以上、さらにより好ましくは９９．９％以上の（Ｒ）形態のｅｅを有し、該組成物が、それを必要とする対象に１日１回投与される、使用に関する。
【００６２】
本発明はさらに、疾患または障害の治療における本発明による組成物の使用であって、該疾患または障害が、好ましくは原発性アルドステロン症または続発性アルドステロン症、さらに好ましくは原発性アルドステロン症であり、該組成物が、それを必要とする対象に１日１回投与され、該組成物が、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジンである化合物またはその薬学的に許容される塩を含み、該化合物が、９７％以上の（Ｒ）形態の鏡像体過剰率（ｅｅ）を有する、使用に関する。
【００６３】
本発明はさらに、疾患または障害の治療における本発明による組成物の使用であって、該疾患または障害が、アルドステロンの過剰曝露が該疾患または障害の症状に寄与する疾患または障害であり、該組成物が、それを必要とする対象に１日１回投与され、該組成物が、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジンである化合物またはその薬学的に許容される塩を含み、該化合物が、９７％以上の（Ｒ）形態の鏡像体過剰率（ｅｅ）を有する、使用に関する。
【００６４】
本発明はさらに、疾患または障害の治療における本発明による組成物の使用であって、該疾患または障害が、原発性アルドステロン症、続発性アルドステロン症、心不全、慢性腎不全、高血圧症、再狭窄、肥満症、腎障害、心筋梗塞後、腎線維症、冠動脈心疾患、ナトリウム貯留、水分貯留、低カリウム血症、低マグネシウム血症、高血圧症、左室肥大および心筋線維症、心血管損傷、血漿レニンの抑制、腎線維症、不整脈、腎障害、浮腫、および低カリウム血症による筋力低下、心細動、ならびに心筋収縮の衰弱から選択され、好ましくは該疾患または障害が、原発性アルドステロン症または続発性アルドステロン症であり、さらにより好ましくは該疾患または障害が、原発性アルドステロン症であり、該組成物が、それを必要とする対象に１日１回投与され、該組成物が、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジンである化合物またはその薬学的に許容される塩を含み、該化合物が、９７％以上の（Ｒ）形態の鏡像体過剰率（ｅｅ）を有する、使用に関する。
【００６５】
好ましい実施形態では、本発明による使用のための該組成物は、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジンである化合物、またはその薬学的に許容される塩、好ましくはそのリン酸塩、もしくはより好ましくはその二水素リン酸塩からなる。
【００６６】
好ましい実施形態では、本発明による該化合物は、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジン塩酸塩、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩、および（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジン水素リン酸塩からなる群から選択される。
【００６７】
好ましい実施形態では、本発明による該化合物は、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジンの薬学的に許容される塩である。好ましい実施形態では、本発明による該化合物は、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジン塩酸塩、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩、および（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジン水素リン酸塩からなる群から選択される。
【００６８】
（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジンの急速かつ高い吸収に特に適した塩は、リン酸塩、より好ましくは、そのリン酸二水素塩である。吸収されると、本発明の化合物の寿命（または半減期Ｔ１／２）は、塩には依存しないが、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジンの（Ｒ）形態のｅｅには依存する。別の好ましい実施形態では、該薬学的に許容される塩は、結晶性である。別の好ましい実施形態では、該薬学的に許容される塩は、無水である。別の好ましい実施形態では、該薬学的に許容される塩は、非吸湿性である。別の好ましい実施形態では、該薬学的に許容される塩は、非吸湿性かつ無水である。別の好ましい実施形態では、該薬学的に許容される塩は、非吸湿性かつ結晶性である。別の好ましい実施形態では、該薬学的に許容される塩は、非吸湿性、無水、かつ結晶性である。
【００６９】
非常に好ましい実施形態では、本発明による該化合物は、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジンのリン酸塩、より好ましくは、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジンのリン酸二水素塩である。別の好ましい実施形態では、該化合物は、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジンのリン酸二水素塩であり、該化合物は、９９％以上の（Ｒ）形態のｅｅを有する。別の好ましい実施形態では、該化合物は、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジンのリン酸二水素塩であり、該化合物は、９９．９％以上の（Ｒ）形態のｅｅを有する。
【００７０】
したがって、非常に好ましい実施形態では、該化合物は、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩である。
【００７１】
別の好ましい実施形態では、該化合物は、結晶性（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩である。別の好ましい実施形態では、該化合物は、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩の結晶形態Ｉである、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩であり、該結晶形態Ｉは、ＣｕＫα放射線を使用して測定して、次の２θ値：１９．５０４、２１．９１９、および２４．１５９を含むＸ線粉末回折パターンを有し、各ピークは、±０．５度だけ、または好ましくは±０．２度だけ変動し得る。
【００７２】
該組成物は、それを必要とする対象に１日１回（ｑ．ｄ．）投与される。好ましくは、本発明による使用のための該組成物は、約２４時間の期間内に１回、対象に投与される。別の好ましい実施形態では、本発明の該組成物は、対象に、同じ時間に１日１回、例えば、朝、正午、夕方、または夜に１日１回投与される。別の好ましい実施形態では、本発明の組成物の２回の投与の間の期間は、約２４時間である。
【００７３】
本発明者らは、１日１回１、２、４、８、および１６ｍｇの経口用量で投与した（組成物中に製剤化されていないか、または製剤化された）本発明の該化合物が、治療前の値およびプラセボで治療した対照の値（表１および表４）と比較して、正常な男性における血漿アルドステロンレベルを効果的に抑制することを発見した。（実施例６に従って調製した（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩である）ＤＰ１３に対する正常な個体の応答を評価し、それらの血漿アルドステロンおよびカリウム反応を、互いに対して、およびプラセボで治療した個体に対して比較した。アルドステロン濃度を測定した全ての時点で、８ｍｇおよび１６ｍｇの１日１回用量は、治療前の値およびプラセボ対照の値の両方と比較して、濃度を有意に抑制した。８日目のＤＰ１３の最後の１日１回用量の２４時間後、８ｍｇおよび１６ｍｇの用量は、治療前の値と比較して、血漿アルドステロンをそれぞれ３２％および５０％だけ抑制した。ＤＰ１３の１ｍｇおよび２ｍｇの用量は、血漿アルドステロンをそれぞれ５２％および６１％だけ抑制した。ＤＰ１３の１ｍｇおよび２ｍｇの用量は、プラセボと比較して、血漿アルドステロンをそれぞれ５２％および６１％だけ抑制した。８日目のＤＰ１３の最後の１日１回用量の１８および２４時間後、１ｍｇおよび２ｍｇの用量は、治療前の値と比較して、血漿アルドステロンをそれぞれ１８％および３９％だけ抑制した。
【００７４】
したがって、好ましい実施形態では、本発明の組成物の１日１回用量の投与の２４時間後、血漿アルドステロンは、治療前の値と比較して、少なくとも約３０％だけ、好ましくは少なくとも約５０％だけ、好ましくは少なくとも約６０％だけ抑制され、好ましくは血漿アルドステロンレベルは、Ｃｏｖａｎｃｅ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｕｎｉｔ  Ｌｔｄ．によって実施された第Ｉ相臨床研究（以下の材料および方法を参照されたい）に記載のように測定し、特に、血漿試料は、ＤｉａＳｏｒｉｎ  Ｓ．ｐ．Ａ．、Ｉｔａｌｙによって供給されるＬｉａｉｓｏｎ（登録商標）化学発光イムノアッセイキットを使用してアルドステロンについて測定し、アッセイは、製造業者によって提供される説明書に従って実行し、分析感度は、０．９７ｎｇ／ｍｌ未満であった。このアッセイシステムは、アルドステロンに対するモノクローナル抗体を使用しているため、血清試料中の他の主要な潜在的反応物との交差反応はない。このアッセイは、０．９７〜１００ｎｇ／ｍｌの広い測定範囲を有し、アルドステロンを評価して、ＰＡの治療を診断および評価するために設計された。
【００７５】
１日１回の投薬は、投薬の１日目および８日目に決定される本発明の化合物の排出半減期を記載する薬物動態データによって支持され、各用量の平均は、１ｍｇの用量で１日目の低い８．１９または４ｍｇの用量で１日目の低い８．４７から、１６ｍｇの用量で８日目に測定した９．６７までの範囲である（表５）。
【００７６】
したがって、好ましい実施形態では、本発明の該化合物の排出半減期（Ｔ１／２）は、約８時間〜約１１時間、より好ましくは８時間〜１０時間である。好ましくは、本発明の該化合物の排出半減期（Ｔ１／２）は、質量分析（ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ）を介して精製された試料中で測定する（表５）。該試料は、好ましくはＧｅｍｉｎｉ３μｍ  ＮＸ−Ｃ１８、５×２ｍｍカラムを有するＷａｔｅｒｓ、Ａｃｑｕｉｔｙ、ＵＰＬＣを使用する液体クロマトグラフィーを介して精製する。試料は、材料および方法、薬物動態研究に後述されるように調製する。
【００７７】
ＤＰ１３および本発明の該化合物の全ての用量レベルについてのＣｍａｘおよびＡＵＣ０−∞の両方が、用量に比例していた（表５）。好ましい実施形態では、本発明の該化合物のＣｍａｘは、約５ｎｇ／ｍｌから、好ましくは約１２ｎｇ／ｍｌから、より好ましくは約１４．０ｎｇ／ｍｌから、さらにより好ましくは約３０ｎｇ／ｍｌから、約７７ｎｇ／ｍｌまでである。別のより好ましい実施形態では、本発明の該化合物のＣｍａｘは、約１４ｎｇ／ｍｌ〜約７７ｎｇ／ｍｌである。別のより好ましい実施形態では、本発明の該化合物のＣｍａｘは、投与の第１日目に約１４ｎｇ／ｍｌ〜約６７ｎｇ／ｍｌ、または投与の８日目に約１５ｎｇ／ｍｌ〜約７７ｎｇ／ｍｌである。該Ｃｍａｘ値は、好ましくは質量分析（ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ）を介して精製された試料中で測定する。該試料は、好ましくはＧｅｍｉｎｉ３μｍ  ＮＸ−Ｃ１８、５×２ｍｍカラムを有するＷａｔｅｒｓ、Ａｃｑｕｉｔｙ、ＵＰＬＣを使用する液体クロマトグラフィーを介して精製する。試料は、材料および方法、薬物動態研究に後述されるように調製する。
【００７８】
Ｔｍａｘは、ＤＰ１３が、全ての用量レベルで急速に吸収され、Ｔｍａｘは、１日目および８日目で同等であることを示している。８日目には、血漿中のＤＰ１３の蓄積はほとんどなく、ＡＵＣ０−ｔａｕの幾何平均蓄積率（ＲＡＯｂｓ）は１．１８であった（個々の範囲：１．０４〜１．３１）。
【００７９】
別の好ましい実施形態では、本発明の該化合物のＡＵＣ０−∞は、約１６７ｎｇ．ｈ／ｍｌ、好ましくは約３３５ｎｇ．ｈ／ｍｌ〜約７２５ｎｇ．ｈ／ｍｌである。ＡＵＣ０−ｔは、４６ｎｇ．ｈ／ｍｌから、好ましくは１３３ｎｇ．ｈ／ｍｌから、より好ましくは１３９ｎｇ．ｈ／ｍｌから、さらにより好ましくは約２８１ｎｇ．ｈ／ｍｌから、約７２５ｎｇ．ｈ／ｍｌまでである。該ＡＵＣ０−∞値は、好ましくは質量分析（ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ）を介して精製された試料中で測定される。該試料は、好ましくはＧｅｍｉｎｉ３μｍ  ＮＸ−Ｃ１８、５×２ｍｍカラムを有するＷａｔｅｒｓ、Ａｃｑｕｉｔｙ、ＵＰＬＣを使用する液体クロマトグラフィーを介して精製される。試料は、材料と方法、「材料および方法、薬物動態研究」に後述されるように調製される。
【００８０】
本明細書で表７に提示されるデータによって支持されるように、本発明の１日１回投薬はまた、１１β−デオキシコルチコステロン（ＤＯＣ）のその限られた産生のために、より大きな有効性を証明し得る。本発明の化合物は、プラセボのレベルおよび治療前のレベルの両方と比較して、全ての用量でＤＯＣレベルを上昇させた（表７）。しかしながら、他のアルドステロンシンターゼ（ＣＹＰ１１Ｂ２）阻害剤とは異なり、ＤＰ１３の１日１回の投与によって誘発されるＤＯＣの増加は、本発明に従って使用される組成物ではかなり低かった。１日２回服用した０．５および１．０ｍｇの用量のＬＣＩ６９９は、ＰＡ患者における血漿アルドステロンを７０〜８０％だけ減少させたが、ＤＯＣを７００％以上、９．８ｎｇ／ｍｌの平均レベルまで増加させ、個々のレベルは、１．０ｍｇを１日２回用量で８．０〜１２０．４ｎｇ／ｍｌの範囲であった（Ａｍａｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ（２０１０）５６：８３１）。対照的に、ＤＯＣの最大平均増加は、ＬＣＩ６９９について見られたものよりほぼ２０分の１少ない、わずか０．５２ｎｇ／ｍｌであり、最大の個々の値は、本発明による組成物を使用したときにＬＣＩ６９９について見られたものより５０分の１超少ない、１．９２ｎｇ／ｍｌであった。本発明による組成物を１日１回投与したときに観察されるＤＯＣ濃度は、有意なミネラルコルチコイド活性を発揮すると予想される臨界範囲、０．５ｎｇ／ｍｌ〜０．７ｎｇ／ｍｌをはるかに下回っている（Ａｍａｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ（２０１０）５６：８３１、Ｂａｘｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９７６，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．５８：５７９）。したがって、一実施形態では、本発明に従って使用される組成物によって誘発されるＤＯＣ濃度は、０．５ｎｇ／ｍｌ未満である。ＤＯＣは、好ましくはＬＣ−ＭＳ／ＭＳ方法論によって定量化する。より好ましくは、調製において、ステロイドを、Ｂｉｏｃｒａｔｅｓ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  ＡＧ、Ｉｎｎｓｂｒｕｃｋ，ＡｕｓｔｒｉａのＡｂｓｏｌｕｔｅ／ＤＱＳｔｅｒｅｏ１７キットを使用して抽出し、ステロイドを抽出し、製造業者の説明書に従ってＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析に供し、三連四重極型質量分析計（Ｗａｔｅｒｓ１−Ｃｌａｓｓ２Ｄ  ＵＰＬＣ  Ｘｅｖｏ  ＴＱ−Ｓ）を、キットに提供される標準物を使用して較正し、アッセイを製造業者によって提供されるように実行する。
【００８１】
アルドステロン媒介性障害の治療としてのファドロゾールの使用は、エストロゲンの抑制をもたらすアロマターゼ活性を阻害するその効果のために、支持されない。乳がんの治療としてのその有用性の基礎であるファドロゾールによるアロマターゼ阻害は、エストラジオールのその抑制から、ならびに健康な男性について報告される血漿テストステロン濃度および卵胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）濃度のその上昇から間接的に、明らかである（Ｂｈａｔｎａｇａｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９９２，Ｊ．Ｓｔｅｒｏｉｄ  Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｍｏｌｅｃ．Ｂｉｏｌ．４１（３−８）：４３７−４４３）。ファドロゾールとは異なり、ＤＰ１３は、４、８、または１６ｍｇで１日１回経口投薬した後に、エストラジオールの阻害も、循環テストステロンまたはＦＳＨの増加もさせなかった。エストラジオールは、ＤＰ１３治療の８日後に、４および８ｍｇの用量でわずかに増加した。したがって、ＤＰ１３で治療した正常な健康な男性におけるエストロゲン抑制（アロマターゼ阻害）の証拠はない。
【００８２】
したがって、好ましい実施形態では、本発明の該化合物は、１日１回の投与後に、循環テストステロンまたはＦＳＨを増加させない。好ましくは、本発明の該化合物は、４ｍｇ、８ｍｇ、または１６ｍｇの本発明の化合物の１日経口用量で１日１回投与した後に、循環テストステロンまたはＦＳＨのレベルを増加させない。さらに好ましい実施形態では、本発明の該化合物は、循環エストラジオールのレベルを増加させる。さらに好ましい実施形態では、本発明の該化合物は、循環エストラジオールのレベルを、約１５％以上だけ、好ましくは約１７％以上だけ、より好ましくは約２５％以上だけ、さらにより好ましくは約３０％以上だけ増加させる。好ましくは、血清エストラジオール、テストステロン、および卵胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）のレベルは、１０ｐｇ／ｍｌの感度を有するＡＤＶＩＡ  Ｃｅｎｔａｕｒ（登録商標）ＣＰシステム（Ｓｉｅｍｅｎｓ  ＡＧ）を用いて、Ｃｏｖａｎｃｅの診断ユニット（Ｈａｒｒｏｇａｔｅ，ＵＫ）によって測定される。ＡＤＶＩＡ  Ｃｅｎｔａｕｒ（登録商標）ＣＰ  ＦＳＨアッセイは、直接化学発光技術を使用する２部位サンドイッチイムノアッセイであり、これは、インタクトなＦＳＨ分子に対する特異性を有する２つの抗体を使用する。ＡＤＶＩＡ  Ｃｅｎｔａｕｒ（登録商標）ＣＰテストステロンアッセイは、直接化学発光技術を使用する競合固相イムノアッセイである。血清エストラジオール、テストステロン、およびＦＳＨのレベルの測定に使用される上記のアッセイの全ては、製造業者によって記載のように実施した。
【００８３】
好ましい実施形態では、本発明の組成物を必要とする該対象は、哺乳動物である。より好ましくは、該対象は、ヒトである。好ましくは、該ヒトには、妊娠可能な女性および小児患者が含まれる。好ましい実施形態では、該ヒトは、妊娠可能な女性および小児患者である。
【００８４】
好ましい実施形態では、本発明の組成物を必要とする該対象は、ヒトであり、該化合物は、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジンのリン酸塩であり、より好ましくは該化合物は、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩である。
【００８５】
好ましい実施形態では、本発明の該組成物は、該疾患または障害の症状に寄与するアルドステロンの過剰曝露を特徴とする疾患または障害の治療に使用される。より好ましくは、該疾患または障害は、原発性アルドステロン症、続発性アルドステロン症、心不全、慢性腎不全、高血圧症、再狭窄、肥満症、腎障害、心筋梗塞後、腎線維症、冠動脈心疾患、ナトリウム貯留、水分貯留、低カリウム血症、低マグネシウム血症、高血圧症、左室肥大、心筋線維症、心血管損傷、血漿レニンの抑制、腎線維症、不整脈、腎障害、浮腫、および低カリウム血症による筋力低下、心細動、および心筋収縮の衰弱からなる群から選択される。別の好ましい実施形態では、該疾患または障害は、原発性および続発性アルドステロン症、ナトリウム貯留、水分貯留、低カリウム血症、低マグネシウム血症、高血圧症、左室肥大、心筋線維症、ならびに腎線維症からなる群から選択される。別の好ましい実施形態では、原発性アルドステロン症、続発性アルドステロン症、心不全、慢性腎不全、高血圧症、再狭窄、肥満症、腎障害、心筋梗塞後、腎線維症、冠動脈心疾患、ナトリウム貯留、水分貯留、低カリウム血症、低マグネシウム血症、高血圧症、左室肥大、心筋線維症、心血管損傷、血漿レニンの抑制、腎線維症、不整脈、腎障害、および浮腫からなる群から選択される。さらにより好ましくは、該疾患または障害は、原発性および続発性アルドステロン症である。最も好ましくは、該疾患または障害は、原発性アルドステロン症である。
【００８６】
原発性アルドステロン症におけるアルドステロン産生の過剰な増加は、アルドステロン−レニン−アルドステロンの正常な制御的調節から副腎球状層細胞集団が逃れた結果であると考えられている。したがって、アルドステロンシンターゼ阻害剤は、適切な活性期間をもって適切な用量で提供した場合、過剰なアルドステロン合成の後遺症を予防する潜在性を有するとさらに考えられている。好ましい実施形態では、本発明に従って治療される該疾患または障害は、アルドステロンの過剰曝露に続くか、またはその結果として生じる病態である。
【００８７】
好ましい実施形態では、該疾患または障害は、原発性および続発性アルドステロン症であり、該化合物は、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジンのリン酸塩であり、より好ましくは該化合物は、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩である。好ましい実施形態では、該疾患または障害は、原発性および続発性アルドステロン症であり、該対象は、ヒトであり、該化合物は、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジンのリン酸塩であり、より好ましくは該化合物は、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩である。さらにより好ましくは、これらの実施形態の該（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩は、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩の結晶形態Ｉであり、該結晶形態Ｉは、ＣｕＫα放射線を使用して測定して、次の２θ値：１９．５０４、２１．９１９、および２４．１５９を含むＸ線粉末回折パターンを有し、各ピークは、±０．５度だけ、または好ましくは±０．２度だけ変動し得る。
【００８８】
好ましい実施形態では、本発明による使用のための該組成物は、１日１回経口投与される。また好ましい実施形態では、本発明による使用のための該組成物は、経口投与用に製剤化される（経口製剤）。該経口製剤は、好ましくは固体である。より好ましくは、該経口製剤は、錠剤、ピル、分散性顆粒、カシェ、カプセル、粉末、トローチ、坐剤、および停留浣腸からなる群から選択され、最も好ましくは錠剤のものである。
【００８９】
好ましい実施形態では、本発明による使用のための該組成物は、少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤をさらに含む。
【００９０】
好ましい実施形態では、本発明による使用のための該組成物は、連続したｎ日間にわたって投与され、ｎは、好ましくは１超である。好ましい実施形態では、本発明による使用のための該組成物は、ある期間にわたって連続して１日１回投与される。非常に好ましい実施形態では、本発明による使用のための該組成物は、慢性的に投与される。別の好ましい実施形態では、本発明による使用のための該組成物は、少なくとも１ヶ月間、好ましくは少なくとも２ヶ月間、より好ましくは少なくとも３ヶ月間、さらにより好ましくは少なくとも半年間、さらにより好ましくは少なくとも１年間、さらにより好ましくは少なくとも２年間、さらにより好ましくは少なくとも５年間、さらにより好ましくは少なくとも１０年間にわたって投与される。非常に好ましい実施形態では、本発明による使用のための該組成物は、生涯治療である。
【００９１】
好ましい実施形態では、本発明による使用のための該組成物は、本発明の該化合物の、すなわち（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジンである化合物、またはその薬学的に許容される塩、好ましくはそのリン酸塩、もしくはより好ましくはその二水素リン酸塩の、治療的に有効な１日１回投薬量を含むか、または好ましくはそれからなり、該化合物は、９７％以上、好ましくは９８％以上、より好ましくは９９％以上、およびさらにより好ましくは９９．５％以上、さらにより好ましくは９９．８％以上、さらにより好ましくは９９．９％以上の（Ｒ）形態のｅｅを有する。
【００９２】
好ましい実施形態では、本発明による使用のための該組成物は、１ｍｇ以上の本発明の該化合物の投薬量で１日１回投与される。別の好ましい実施形態では、本発明による使用のための該組成物は、１ｍｇ〜１６ｍｇ、好ましくは２ｍｇ〜１６ｍｇ、より好ましくは４ｍｇ〜１６ｍｇ、さらにより好ましくは８ｍｇ〜１６ｍｇ、さらにより好ましくは１２ｍｇ〜１６ｍｇの本発明の該化合物の投薬量で１日１回投与される。特定の好ましい実施形態では、本発明による使用のための該組成物は、１ｍｇ〜１６ｍｇの本発明の該化合物の投薬量で１日１回投与される。別のさらに好ましい実施形態では、本発明による使用のための該組成物は、１、２、４、８、１２、または１６ｍｇの本発明の該化合物の投薬量で１日１回投与される。
【００９３】
好ましい実施形態では、本発明による使用のための該組成物は、１ｍｇ以上の本発明の該化合物の投薬量で１日１回経口投与される。特定の好ましい実施形態では、本発明による使用のための該組成物は、１ｍｇ〜１６ｍｇの本発明の該化合物の投薬量で１日１回経口投与される。
【００９４】
好ましい実施形態では、本発明による使用のための該組成物は、１ｍｇ以上の本発明の該化合物の投薬量で１日１回投与され、該化合物は、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジンのリン酸塩であり、好ましくは該化合物は、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７、８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩であり、該疾患または障害は、原発性および続発性アルドステロン症である。
【００９５】
好ましい実施形態では、本発明による使用のための該組成物は、約１ｍｇ〜約１６ｍｇの本発明の該化合物の投薬量で１日１回投与され、該化合物は、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジンのリン酸塩であり、好ましくは該化合物は、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７、８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩であり、該疾患または障害は、原発性および続発性アルドステロン症である。好ましい実施形態では、本発明による使用のための該組成物は、約４ｍｇ〜約１６ｍｇの本発明の該化合物の投薬量で１日１回投与され、該化合物は、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジンのリン酸塩であり、好ましくは該化合物は、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７、８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩であり、該疾患または障害は、原発性および続発性アルドステロン症である。好ましい実施形態では、本発明による使用のための該組成物は、約８ｍｇ〜約１６ｍｇの本発明の該化合物の投薬量で１日１回投与され、該化合物は、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジンのリン酸塩であり、好ましくは該化合物は、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７、８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩であり、該疾患または障害は、原発性および続発性アルドステロン症である。好ましい実施形態では、本発明による使用のための該組成物は、約８ｍｇ〜約１６ｍｇの本発明の該化合物の投薬量で１日１回投与され、該化合物は、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジンのリン酸塩であり、好ましくは該化合物は、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７、８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩であり、該疾患または障害は、原発性および続発性アルドステロン症である。より好ましくは、これらの実施形態における該（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩は、結晶性であり、さらにより好ましくは該（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩は、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩の結晶形態Ｉであり、該結晶形態Ｉは、ＣｕＫα放射線を使用して測定して、次の２θ値：１９．５０４、２１．９１９、および２４．１５９を含むＸ線粉末回折パターンを有し、各ピークは、±０．５度だけ、または好ましくは±０．２度だけ変動し得る。
【００９６】
４ｍｇ／日のＤＰ１３の経口用量は、最後の８回の１日用量から２４時間後の９日目に、血漿アルドステロンを低下させることができなかった。この失敗は、用量前の日（０８：００時）に明らかな血漿カリウムレベルの有意な増加に起因する（表２）。血漿カリウムは、８日目までのより初期の時点でのアルドステロンの低減から生じる腎尿細管によるカリウムのナトリウムへの交換の減少に応答して増加し、循環カリウムの増加は、アルドステロン合成を刺激する。８ｍｇおよび１６ｍｇの２つのより高い用量は、循環カリウムの増加が見られる場合、８日目の最終用量から２４時間後の９日目でさえ、血漿アルドステロンの抑制を維持するのに十分に強力である（表２）。これらのデータは、本発明の該化合物が、高カリウムレベルでさえ、アルドステロンを長期間抑制することができることを示している。
【００９７】
低カリウム血症は、ＰＡの特徴であり、重大な潜在的結果を有するため、４ｍｇの用量のＤＰ１３が、投薬間隔全体を通してアルドステロンの抑制を持続することができないことは、原発性アルドステロン症（ＰＡ）を治療するための有効用量としてのその潜在的な利益を否定しない。したがって、４ｍｇの用量での循環カリウムの増加は、ＰＡ患者集団に対して有意な利益がある可能性がある。加えて、原発性アルドステロン症は、二次性高血圧の最も一般的な原因であり、この臨床病態における過剰なアルドステロンは、低カリウム血症および血圧上昇に関与していると考えられている（Ａｍａｒ  ｅｔ  ａｌ．，２０１０，ｏｐ．ｃｉｔ．）。
【００９８】
さらに、副腎皮質刺激ホルモン（ＡＣＴＨ）を本発明の化合物と同時投与した場合、１日１回与えられる４、８、または１６ｍｇのＤＰ１３の経口用量は、１日用量のプラセボを受けるだけの個体においてＡＣＴＨによって誘発されるアルドステロンの増加を予防することができた（表３）。例えば、ＡＣＴＨは、本発明の化合物を用いた治療の７日目、０８：００時の１日１回用量の本発明の化合物の２時間後に、静脈内（ｉ．ｖ．）に同時投与することができる。ＡＣＴＨに応答したプラセボ群の血漿アルドステロン濃度は、４３２ｐｍｏｌ／Ｌ〜８２５ｐｍｏｌ／Ｌの範囲であった。これらの値は、ＰＡ患者について公開されている範囲である、３５９〜９９７ｐｍｏｌ／Ｌと同等である（Ａｍａｒ  ｅｔ  ａｌ．，２０１０，ｏｐ．ｃｉｔ．）。加えて、この研究の単回用量部分では、１ｍｇほど低い用量でさえ、ＡＣＴＨ刺激アルドステロン応答を阻害した（表４）。
【００９９】
好ましい実施形態では、本発明による使用のための該組成物は、１ｍｇ〜１６ｍｇ、好ましくは２ｍｇ〜１６ｍｇ、より好ましくは４ｍｇ〜１６ｍｇ、さらにより好ましくは８ｍｇ〜１６ｍｇ、さらにより好ましくは１２ｍｇ〜１６ｍｇの１日１回投薬量で投与され、該疾患または障害は、原発性および続発性アルドステロン症ならびに高血圧症からなる群から選択され、好ましくは該１日１回用量は、ヒトに経口投与される。好ましい実施形態では、本発明による使用のための該組成物は、８ｍｇ〜１６ｍｇ、さらにより好ましくは１２ｍｇ〜１６ｍｇの１日１回用量で投与され、該疾患または障害は、原発性および続発性アルドステロン症であり、好ましくは１日１回用量は、ヒトに経口投与される。好ましくは、これらの実施形態における該化合物は、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩である。
【０１００】
好ましい実施形態では、本発明による使用のための（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジンの該薬学的に許容される塩は、非吸湿性塩である。より好ましくは、該非吸湿性塩は、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジンの非吸湿性リン酸塩、より好ましくは（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジンの非吸湿性二水素リン酸塩である。該リン酸塩、および特に該二水素リン酸塩は、非吸湿性であり、長期間にわたって安定しており、これにより純度、含水量、およびキラル純度に関して有利であることが見出されている。吸湿性は、典型的には薬学的有効成分の安定性に悪影響を及ぼすため、これは特に重要である。
【０１０１】
さらにかつ重要なことに、本発明による使用のための（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジンのリン酸塩、および特に（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩は、１つの安定した形態で、典型的にかつ好ましくは該結晶形態Ｉで、結晶性である。不安定な多形形態は、典型的には薬学的な有効性特性に悪影響を及ぼす。
【０１０２】
好ましい実施形態では、本発明による該化合物は、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジンの薬学的に許容される無水塩である。より好ましくは、該薬学的に許容される無水塩は、無水リン酸塩であり、さらにより好ましくは本発明による使用のための（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジンの無水二水素リン酸塩である。動的蒸気収着研究によって測定される（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩の水取り込みは、９０％超の湿度では１％未満であり、加えて、水取り込みは、可逆的である。さらに、２２５℃の温度まで加熱時の質量損失は、わずか１．４％であった。結論として、本発明のリン酸塩、好ましくは（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩は、吸湿性ではない。結果として、本発明の（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩は、周囲条件で、通例の薬学的封じ込め容器内で大量に保管することができる。
【０１０３】
さらに好ましい実施形態では、本発明による該化合物は、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジンの結晶性の薬学的に許容される塩、好ましくは結晶性リン酸塩、およびより好ましくは（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジンの結晶性二水素リン酸塩である。本発明による（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジンのリン酸塩、および特に二水素リン酸塩は、高度に結晶性であり、高レベルの結晶純度を有することが見出されている。さらに、記載の例外的なキラル純度を有する、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩のリン酸塩、および特に二水素リン酸塩は、定義されたＸ線構造およびそのキラル中心である炭素５上のＲ−（＋）−絶対配置を有する単一の結晶形態で存在する。多形性は、安全で効果的な形態の薬物を提供する場合に、重大な懸念である。これにも関わらず、本発明者らは、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩の結晶形態Ｉが物理的に安定していること、多形性が観察されず、予測可能かつ確実に得ることができることを発見した（実施例６、ステップ４）。さらに、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩のＸＲＰＤ分析は、この物質が、実質的に無晶性材料を含まない（すなわち無晶性材料が検出不能である）ことを示した。ＸＲＰＤは、別段記載されない限り、実施例の節に記載のように実行した。
【０１０４】
さらに好ましい実施形態では、本発明による該化合物は、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジンの薬学的に許容される無水結晶性塩である。より好ましくは、該薬学的に許容される無水結晶性塩は、無水リン酸塩であり、さらにより好ましくは本発明による使用のための（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジンの無水結晶性二水素リン酸塩である。
【０１０５】
一実施形態では、本発明による化合物は、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩の結晶形態Ｉであり、該結晶形態Ｉは、実施例のセクションに記載されているように測定された次の２θ値：１９．５０４、２１．９１９、および２４．１５９を含むＸ線粉末回折パターンを特徴とする。一実施形態では、本発明による使用のための（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩の結晶形態Ｉが提供され、該結晶形態Ｉは、実施例の節に記載のように測定して、次の２θ値：１９．５０４、２１．９１９、および２４．１５９を含むＸ線粉末回折パターンを特徴とし、各ピークは、±１度だけ、または好ましくは±０．５度だけ、またはさらに好ましくは±０．２度だけ変動し得る。好ましい実施形態では、該Ｘ線粉末回折パターンは、次の２θ値：１６．００３、２６．１０１、２７．１６８、２７．５４２、および２９．０２９をさらに含む。好ましい実施形態では、該Ｘ線粉末回折パターンは、次の２θ値：１６．００３、２６．１０１、２７．１６８、２７．５４２、および２９．０２９をさらに含み、各ピークは、±１度だけ、または好ましくは±０．５度だけ、またはさらに好ましくは±０．２度だけ変動し得る。特に好ましい実施形態では、本発明による使用のための（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩の結晶形態Ｉが提供され、該結晶形態Ｉは、次の２θ値：６．０２３１２９、９．９６９０３４、１１．２６２２４、１１．２２８４８、１１．９６５６６、１２．７７７６１、１３．７９３４７、１４．３９３１４、１５．３３９４、１６．００３１７、１６．２７３３７、１７．０７５０２、１７．２７５９３、１７．９９０４、１８．３８２３８、１８．６５４７１、１８．９６０９６、１９．１４２８１、１９．５０４、２０．０１２６５、２０．５８８０８、２０．４３３０２、２０．７２１１２、２１．１２６８３、２１．９１９０６、２２．５９２０２、２４．４４７８８、２４．１５９１７、２４．４８１１９、２５．７００７１、２６．１００９４、２６．５８１２７、２７．１６７６７、２７．５４１６５、２７．７１４０８、２８．２７６０３、２８．０９７２５、２８．５４９０９、２９．０２９３９、２９．７１３１４、３０．０７５７８、３０．６８８０８、３０．９２８６７、３１．６３７９、３２．２７００５、３２．７９８０６、３３．２０６３８、３３．２３３０４、３３．６５８０８、３４．４１７９３、３４．３５５１２、３５．０２１４２、３５．０６６７１、３５．６８９７８、３５．９３６２２、３６．５０３０５、３６．５６５９１、３６．９２０２３、３７．１４０２１、３９．６０８１５、３７．８９６２４、および４０．２２４６４のうちの少なくとも１つ、より好ましくは２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６個、または全てを含むＸ線粉末回折パターンを特徴とする。別の特に好ましい実施形態では、本発明による使用のための（Ｒ��−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩の結晶形態Ｉが提供され、該結晶形態Ｉは、次の２θ値：６．０２３１２９、９．９６９０３４、１１．２６２２４、１１．２２８４８、１１．９６５６６、１２．７７７６１、１３．７９３４７、１４．３９３１４、１５．３３９４、１６．００３１７、１６．２７３３７、１７．０７５０２、１７．２７５９３、１７．９９０４、１８．３８２３８、１８．６５４７１、１８．９６０９６、１９．１４２８１、１９．５０４、２０．０１２６５、２０．５８８０８、２０．４３３０２、２０．７２１１２、２１．１２６８３、２１．９１９０６、２２．５９２０２、２４．４４７８８、２４．１５９１７、２４．４８１１９、２５．７００７１、２６．１００９４、２６．５８１２７、２７．１６７６７、２７．５４１６５、２７．７１４０８、２８．２７６０３、２８．０９７２５、２８．５４９０９、２９．０２９３９、２９．７１３１４、３０．０７５７８、３０．６８８０８、３０．９２８６７、３１．６３７９、３２．２７００５、３２．７９８０６、３３．２０６３８、３３．２３３０４、３３．６５８０８、３４．４１７９３、３４．３５５１２、３５．０２１４２、３５．０６６７１、３５．６８９７８、３５．９３６２２、３６．５０３０５、３６．５６５９１、３６．９２０２３、３７．１４０２１、３９．６０８１５、３７．８９６２４、および４０．２２４６４のうちの少なくとも１つ、より好ましくは２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６個、または全てを含むＸ線粉末回折パターンを特徴とし、各ピークは、±１度だけ、または好ましくは±０．５度だけ、またはさらに好ましくは±０．２度だけ変動し得る。別の特に好ましい実施形態では、次の２θ値：６．０２３１２９、９．９６９０３４、１１．２６２２４、１１．２２８４８、１１．９６５６６、１２．７７７６１、１３．７９３４７、１４．３９３１４、１５．３３９４、１６．００３１７、１６．２７３３７、１７．０７５０２、１７．２７５９３、１７．９９０４、１８．３８２３８、１８．６５４７１、１８．９６０９６、１９．１４２８１、１９．５０４、２０．０１２６５、２０．５８８０８、２０．４３３０２、２０．７２１１２、２１．１２６８３、２１．９１９０６、２２．５９２０２、２４．４４７８８、２４．１５９１７、２４．４８１１９、２５．７００７１、２６．１００９４、２６．５８１２７、２７．１６７６７、２７．５４１６５、２７．７１４０８、２８．２７６０３、２８．０９７２５、２８．５４９０９、２９．０２９３９、２９．７１３１４、３０．０７５７８、３０．６８８０８、３０．９２８６７、３１．６３７９、３２．２７００５、３２．７９８０６、３３．２０６３８、３３．２３３０４、３３．６５８０８、３４．４１７９３、３４．３５５１２、３５．０２１４２、３５．０６６７１、３５．６８９７８、３５．９３６２２、３６．５０３０５、３６．５６５９１、３６．９２０２３、３７．１４０２１、３９．６０８１５、３７．８９６２４、および４０．２２４６４のうちの少なくとも１つ、より好ましく���２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６個、または全てを含むＸ線粉末回折パターンを特徴とする、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩の結晶形態Ｉが提供され、各ピークは、±０．５度だけ、または好ましくは±０．２度だけ変動し得る。一実施形態では、ＸＲＰＤ回折図中の結晶形態Ｉの３つの最大ピークは、１：０．８５：０．５５、特に１：０．９：０．６、より特に１：０．９５：０．６５、例えば、１：０．９７：０．６８の相対強度を有する（ＸＲＰＤ図中のピークの各々の積分によって得ることができる）。特定の実施形態では、それぞれ、最大ピークは、約２１．９１９の２シータ（θ）値にあり、２番目に大きなピークは、約１９．５０４の２シータ（θ）値にあり、３番目に大きいピークは、約２４．１５９の２シータ（θ）値にある。さらに特定の実施形態では、最大ピークは、約２１．９１９±０．５、または好ましくは±０．２度の２シータ（θ）値にあり、２番目に大きいピークは、約１９．５０４±０．５、または好ましくは±０．２度の２シータ（θ）値にあり、３番目に大きいピークは、それぞれ約２４．１５９±０．５、または好ましくは±０．２度の２シータ（θ）値にある。
【０１０６】
さらに、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩（結晶形態Ｉ）は、ＤＳＣによって測定して、１８９℃の単一の鋭く高い融点を有することが見出され、これは再び、高い物理的安定性を示しており、これはさらに、薬物の製造、保管、および薬学的製剤への加工に関して非常に有益である。したがって、一実施形態では、１８４℃〜１９３℃と等しいか、またはその間にある融点を有する、本発明による使用のための（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩であって、典型的にかつ好ましくは熱重量分析／示差走査熱量測定（ＴＧＡ／ＤＳＣ）を使用して、好ましくは１８８℃〜１９０℃と等しいか、またはその間にある融点を有する、該（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩が提供される。さらなる実施形態では、１８４℃、１８５℃、１８６℃、１８７℃、１８８℃、１８９℃、１９０℃、１９１℃、１９２℃、１９３℃、または１９４℃、最も好ましくは１８９℃の融点を有する、本発明による使用のための（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩が提供される。さらなる実施形態では、本発明による化合物は、１８９±５℃、１８９±２℃、１８９±１℃、または１８９±０．５℃の融点を有する、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩である。本明細書の溶融温度は、別段記載されない限り、実施例の節に記載のようにＴＧＡ／ＤＳＣよって得られる。
【０１０７】
本明細書に記載の鏡像体的に純粋な（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジン遊離塩基から調製され、したがって９９．９％超のｅｅを有する、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩は、＋９８．１°の比旋光度（［α］Ｄ２０）を有する（ＣＨ３ＣＮ：Ｈ２Ｏ１：１（ｖ／ｖ）、実施例６）ことが見出されている。したがって、本発明の非常に好ましい一実施形態では、本発明による化合物は、少なくとも＋９４°、好ましくは少なくとも＋９５°、さらに好ましくは少なくとも＋９６°、より好ましくは少なくとも＋９７°、さらにより好ましくは少なくとも＋９８°の比旋光度（［α］Ｄ２０）（ＣＨ３ＣＮ：Ｈ２Ｏ１：１（ｖ／ｖ））を有する（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩である。さらなる実施形態では、本発明による該化合物は、少なくとも＋１２０°、好ましくは少なくとも＋１２１°、さらに好ましくは少なくとも＋１２２°、さらにより好ましくは少なくとも＋１２３°、さらにより好ましくは少なくとも＋１２４°、さらにより好ましくは少なくとも＋１２５°、さらにより好ましくは少なくとも＋１２６°、およびさらにより好ましくは少なくとも＋１２７°の比旋光度［α］Ｄ２５（エタノール）を有する（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジンである。別の実施形態では、本発明による該化合物は、少なくとも＋９５°、好ましくは少なくとも＋９６°、さらに好ましくは少なくとも＋９７°、より好ましくは少なくとも＋９８°、さらにより好ましくは少なくとも＋９９°、さらに好ましくは少なくとも＋１００°、より好ましくは少なくとも＋１０１°、さらにより好ましくは少なくとも＋１０２°、およびさらにより好ましくは少なくとも＋１０３°、さらにより好ましくは少なくとも＋１０４°の比旋光度［α］Ｄ２０（エタノール）を有する、本発明による使用のための（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジンの塩化物塩である。
【０１０８】
一実施形態では、本発明による化合物は、式（Ｉ）の（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジン、またはその薬学的に許容される塩由来のもの、特に（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩であり、該化合物は、５０％ｖｏｌ／ｖｏｌ超の水への溶解度を有する。
【０１０９】
本発明者らは、驚くべきことに、本発明のプロセスによって調製した（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジン（実施例６）、およびそのリン酸塩、好ましくは（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロ−イミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩が、アロマターゼに対する前例のない低い阻害活性を示す（実施例５）ことを発見し、これは、アルドステロンシンターゼ活性の増強および／またはアルドステロンのレベルの増強に関連する疾患または障害を治療する方法において本発明の化合物を使用する場合、特に、妊娠可能な女性および小児患者に使用する場合に、アロマターゼの阻害に関連する副作用を回避するために重要である。
【０１１０】
したがって、好ましい実施形態では、本発明による該化合物は、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジンまたはその薬学的に許容される塩、好ましくはそのリン酸塩、さらに好ましくは（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩であり、該化合物は、実施例５に記載の無細胞ヒト組換えアロマターゼ酵素アッセイにおいて、７００ｎＭ以上、好ましくは７５０ｎＭ以上、より好ましくは８００ｎＭ以上、より好ましくは８５０ｎＭ以上、より好ましくは９００ｎＭ以上、より好ましくは９５０ｎＭ以上、より好ましくは１０００ｎＭ以上、より好ましくは１０５０ｎＭ以上、より好ましくは１１００ｎＭ以上、より好ましくは１１５０ｎＭ以上、より好ましくは１２００ｎＭ以上、より好ましくは１２５０ｎＭ以上、より好ましくは１３００ｎＭ以上、より好ましくは１３５０ｎＭ以上、より好ましくは１４００ｎＭ以上、より好ましくは１４５０ｎＭ以上、より好ましくは１５００ｎＭ以上、より好ましくは１５５０ｎＭ以上、最も好ましくは少なくとも１６００ｎＭ、例えば、１６１０ｎＭもしくは１６２０ｎＭもしくは１６３０ｎＭもしくは１６４０ｎＭ、または少なくとも１６５０ｎＭのＩＣ５０で、アロマターゼ活性を阻害する。より好ましい実施形態では、本発明による該化合物は、実施例５に記載の無細胞ヒト組換えアロマターゼ酵素アッセイにおいて、７００ｎＭ以上、好ましくは１０００ｎＭ以上、およびより好ましくは１５００ｎＭ以上のＩＣ５０で、アロマターゼ活性を阻害し、さらに好ましくは該化合物は、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩である。
【０１１１】
さらに好ましい実施形態では、本発明による該化合物は、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジンまたはその薬学的に許容される塩、好ましくはそのリン酸塩、さらに好ましくは（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩であり、本発明の該化合物は、実施例５に記載のＮＣＩ−Ｈ２９５Ｒ副腎細胞アッセイにおいて、１００ｎＭ以下のＩＣ５０で、アルドステロンシンターゼを阻害する。一実施形態では、本発明の化合物は、実施例５に記載のＮＣＩ−Ｈ２９５Ｒ副腎細胞アッセイにおいて、９０ｎＭ以下、８０ｎＭ以下、７０ｎＭ以下、６０ｎＭ以下、５０ｎＭ以下、４０ｎＭ以下、３５ｎＭ以下、３０ｎＭ以下、２５ｎＭ以下、または２０ｎＭ以下、特に１５ｎＭ以下、例えば、１５ｎＭ、１４ｎＭ、１３ｎＭ、１２ｎＭ、１１ｎＭ、１０ｎＭ、９ｎＭ、８ｎＭ、７ｎＭ、６ｎＭ、５ｎＭ、４ｎＭ、３ｎＭ、２ｎＭ、または１ｎＭ以下のＩＣ５０で、アルドステロンシンターゼを阻害する。好ましい実施形態では、本発明の化合物は、実施例５に記載のＮＣＩ−Ｈ２９５Ｒ副腎細胞アッセイにおいて、１０ｎＭ以下のＩＣ５０で、アルドステロンシンターゼを阻害する。より好ましい実施形態では、本発明による該化合物は、実施例５に記載のＮＣＩ−Ｈ２９５Ｒ副腎細胞アッセイにおいて、１００ｎＭ以下、好ましくは５０ｎＭ以下、およびより好ましくは１０ｎＭ以下のＩＣ５０で、アルドステロンシンターゼを阻害し、さらに好ましくは、該化合物は、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩である。
【０１１２】
さらに好ましい実施形態では、本発明による該化合物は、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジンまたはその薬学的に許容される塩、好ましくはそのリン酸塩、さらに好ましくは（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩であり、本発明の該化合物は、３０以上、好ましくは５０以上、より好ましくは１００以上、より好ましくは１５０以上、より好ましくは２００以上、より好ましくは２５０以上、より好ましくは３００以上、より好ましくは３５０以上、より好ましくは４００以上、より好ましくは４５０以上、より好ましくは５００以上、より好ましくは５５０以上、より好ましくは６００以上、より好ましくは６５０以上、最も好ましくは７００以上の、アロマターゼを超えるアルドステロンシンターゼに対する選択性を有し、該選択性は、アロマターゼおよびアルドステロンシンターゼの阻害のＩＣ５０値の比率によって決定され、アルドステロンシンターゼおよびアロマターゼの阻害のＩＣ５０値は両方とも、実施例５に記載のＮＣＩ−Ｈ２９５Ｒ副腎細胞アッセイにおいて、好ましくは同時に測定される。より好ましい実施形態では、本発明による該化合物は、５０以上、好ましくは１００以上、最も好ましくは７００以上の、アロマターゼを超えるアルドステロンシンターゼに対する選択性を有し、該選択性は、アロマターゼおよびアルドステロンシンターゼの阻害のＩＣ５０値の比率によって決定され、アルドステロンシンターゼおよびアロマターゼの阻害のＩＣ５０値は両方とも、実施例５に記載のＮＣＩ−Ｈ２９５Ｒ副腎細胞アッセイにおいて、好ましくは同時に測定され、さらに好ましくは、該化合物は、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩である。
【０１１３】
さらに非常に好ましい実施形態では、本発明による化合物は、９７％以上、好ましくは９８％以上、より好ましくは９９％以上、およびさらにより好ましくは９９．５％以上、さらにより好ましくは９９．８％以上、さらにより好ましくは９９．９％以上の（Ｒ）形態のｅｅを有する、ヒトにおける疾患または障害を治療する方法で使用するための、結晶性（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩、好ましくは無水結晶性（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩であり、該疾患または障害は、原発性アルドステロン症、続発性アルドステロン症、心不全、慢性腎不全、高血圧症、再狭窄、肥満症、腎障害、心筋梗塞後、腎線維症、冠動脈心疾患、ナトリウム貯留、水分貯留、低カリウム血症、低マグネシウム血症、高血圧症、左室肥大および心筋線維症、心血管損傷、血漿レニンの抑制、腎線維症、不整脈、腎障害、浮腫、および低カリウム血症による筋力低下、心細動、ならびに心筋収縮の衰弱から選択され、好ましくは該疾患または障害は、原発性または続発性アルドステロン症であり、好ましくは該ヒトは、妊娠可能な女性または小児患者であり、該（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩は、実施例５に記載の無細胞ヒト組換えアロマターゼ酵素アッセイにおいて、７００ｎＭ以上、好ましくは７５０ｎＭ以上、より好ましくは８００ｎＭ以上、より好ましくは８５０ｎＭ以上、より好ましくは９００ｎＭ以上、より好ましくは９５０ｎＭ以上、より好ましくは１０００ｎＭ以上、より好ましくは１０５０ｎＭ以上、より好ましくは１１００ｎＭ以上、より好ましくは１１５０ｎＭ以上、より好ましくは１２００ｎＭ以上、より好ましくは１２５０ｎＭ以上、より好ましくは１３００ｎＭ以上、より好ましくは１３５０ｎＭ以上、より好ましくは１４００ｎＭ以上、より好ましくは１４５０ｎＭ以上、より好ましくは１５００ｎＭ以上、より好ましくは１５５０ｎＭ以上、最も好ましくは少なくとも１６００ｎＭ、例えば、１６１０ｎＭもしくは１６２０ｎＭもしくは１６３０ｎＭもしくは１６４０ｎＭ、または少なくとも１６５０ｎＭのＩＣ５０で、アロマターゼ活性を阻害する。
【０１１４】
さらに非常に好ましい実施形態では、本発明による化合物は、９７％以上、好ましくは９８％以上、より好ましくは９９％以上、およびさらにより好ましくは９９．５％以上、さらにより好ましくは９９．８％以上、さらにより好ましくは９９．９％以上の（Ｒ）形態のｅｅを有する、ヒトにおける疾患または障害を治療する方法で使用するための、結晶性（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩、好ましくは無水結晶性（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩であり、該疾患または障害は、原発性アルドステロン症、続発性アルドステロン症、心不全、慢性腎不全、高血圧症、再狭窄、肥満症、腎障害、心筋梗塞後、腎線維症、冠動脈心疾患、ナトリウム貯留、水分貯留、低カリウム血症、低マグネシウム血症、高血圧症、左室肥大および心筋線維症、心血管損傷、血漿レニンの抑制、腎線維症、不整脈、腎障害、浮腫、および低カリウム血症による筋力低下、心細動、ならびに心筋収縮の衰弱から選択され、好ましくは該疾患または障害は、原発性または続発性アルドステロン症であり、好ましくは該ヒトは、妊娠可能な女性または小児患者であり、本発明による該化合物は、５０以上、好ましくは１００以上、最も好ましくは７００以上の、アロマターゼを超えるアルドステロンシンターゼに対する選択性を有し、該選択性は、アロマターゼおよびアルドステロンシンターゼの阻害のＩＣ５０値の比率によって決定され、アルドステロンシンターゼおよびアロマターゼの阻害のＩＣ５０値は両方とも、実施例５に記載のＮＣＩ−Ｈ２９５Ｒ副腎細胞アッセイにおいて、好ましくは同時に測定される。
【０１１５】
さらに非常に好ましい実施形態では、本発明による化合物は、９７％以上、好ましくは９８％以上、より好ましくは９９％以上、およびさらにより好ましくは９９．５％以上、さらにより好ましくは９９．８％以上、さらにより好ましくは９９．９％以上の（Ｒ）形態のｅｅを有する、ヒトにおける疾患または障害を治療する方法で使用するための、結晶性（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩、好ましくは無水結晶性（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩であり、該疾患または障害は、原発性および原発性アルドステロン症、続発性アルドステロン症、心不全、慢性腎不全、高血圧症、再狭窄、肥満症、腎障害、心筋梗塞後、腎線維症、冠動脈心疾患、ナトリウム貯留、水分貯留、低カリウム血症、低マグネシウム血症、高血圧症、左室肥大および心筋線維症、心血管損傷、血漿レニンの抑制、腎線維症、不整脈、腎障害、浮腫、および低カリウム血症による筋力低下、心細動、ならびに心筋収縮の衰弱から選択され、好ましくは該疾患または障害は、原発性または続発性アルドステロン症であり、好ましくは該ヒトは、妊娠可能な女性または小児患者であり、本発明による該化合物は、実施例５に記載のＮＣＩ−Ｈ２９５Ｒ副腎細胞アッセイにおいて、１００ｎＭ以下、好ましくは５０ｎＭ以下、およびより好ましくは１０ｎＭ以下のＩＣ５０で、アルドステロンシンターゼを阻害する。
【０１１６】
好ましい実施形態では、本発明による使用のための該組成物は、１ｍｇ〜１６ｍｇ、好ましくは２ｍｇ〜１６ｍｇ、より好ましくは４ｍｇ〜１６ｍｇ、さらにより好ましくは８ｍｇ〜１６ｍｇ、さらにより好ましくは１２ｍｇ〜１６ｍｇの１日１回投薬量で投与され、該疾患または障害は、原発性および続発性アルドステロン症ならびに高血圧症からなる群から選択され、好ましくは該１日１回用量は、ヒトに経口投与され、本発明による該化合物は、実施例５に記載のＮＣＩ−Ｈ２９５Ｒ副腎細胞アッセイにおいて、１００ｎＭ以下、好ましくは５０ｎＭ以下、およびより好ましくは１０ｎＭ以下のＩＣ５０で、アルドステロンシンターゼを阻害する。
【０１１７】
さらなる態様では、本発明は、固定単位剤形の本発明の該化合物の１日投薬量を含む薬学的組成物であって、本発明の該化合物が、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジンまたはその薬学的に許容される塩であり、該化合物が、９７％以上、好ましくは９８％以上、より好ましくは９９％以上、およびさらにより好ましくは９９．５％以上、さらにより好ましくは９９．８％以上、さらにより好ましくは９９．９％以上の（Ｒ）形態のｅｅを有する、薬学的組成物を提供する。したがって、有効成分である本発明の化合物の該１日１回投薬量は、単回固定単位剤形で薬学的組成物中に存在する。
【０１１８】
好ましくは、本発明の該薬学的組成物は、１日固定単位剤形である。該１日固定単位剤形は、固定１日用量の量の本発明の化合物を含む。
【０１１９】
好ましい実施形態では、本発明による該化合物は、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジン塩酸塩、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩、および（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジン水素リン酸塩からなる群から選択される。
【０１２０】
好ましい実施形態では、本発明による該化合物は、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジンの薬学的に許容される塩である。好ましい実施形態では、本発明による該化合物は、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジン塩酸塩、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩、および（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジン水素リン酸塩からなる群から選択される。
【０１２１】
別の好ましい実施形態では、該薬学的に許容される塩は、結晶性である。別の好ましい実施形態では、該薬学的に許容される塩は、無水である。別の好ましい実施形態では、該薬学的に許容される塩は、非吸湿性である。別の好ましい実施形態では、該薬学的に許容される塩は、非吸湿性かつ無水である。別の好ましい実施形態では、該薬学的に許容される塩は、非吸湿性かつ結晶性である。別の好ましい実施形態では、該薬学的に許容される塩は、非吸湿性、無水、かつ結晶性である。
【０１２２】
非常に好ましい実施形態では、本発明による該化合物は、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジンのリン酸塩、より好ましくは、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジンのリン酸二水素塩である。別の好ましい実施形態では、該化合物は、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジンのリン酸二水素塩であり、該化合物は、９９％以上の（Ｒ）形態のｅｅを有する。別の好ましい実施形態では、該化合物は、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジンのリン酸二水素塩であり、該化合物は、９９．９％以上の（Ｒ）形態のｅｅを有する。
【０１２３】
したがって、非常に好ましい実施形態では、該化合物は、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩である。
【０１２４】
別の好ましい実施形態では、該化合物は、結晶性（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩である。別の好ましい実施形態では、該化合物は、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩の結晶形態Ｉである、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩であり、該結晶形態Ｉは、ＣｕＫα放射線を使用して測定して、次の２θ値：１９．５０４、２１．９１９、および２４．１５９を含むＸ線粉末回折パターンを有し、各ピークは、±０．５度だけ、または好ましくは±０．２度だけ変動し得る。
【０１２５】
一実施形態では、該薬学的組成物は、経口投与用に製剤化される。該経口製剤は、好ましくは固体である。より好ましくは、該経口製剤は、錠剤、ピル、分散性顆粒、カシェ、カプセル、粉末、トローチ、坐剤、および停留浣腸からなる群から選択される。
【０１２６】
一実施形態では、該薬学的組成物は、経口単位剤形である。さらなる実施形態では、該薬学的組成物は、経口固形単位剤形、例えば、錠剤およびカプセルなどである。
【０１２７】
好ましい実施形態では、該薬学的組成物は、１ｍｇ以上の１日投薬量の本発明の化合物を含む。別の好ましい実施形態では、該薬学的組成物は、１ｍｇ〜１６ｍｇ、より好ましくは２ｍｇ〜１６ｍｇ、さらにより好ましくは４ｍｇ〜１６ｍｇ、さらにより好ましくは８ｍｇ〜１６ｍｇ、さらにより好ましくは１２ｍｇ〜１６ｍｇの１日投薬量の本発明の化合物を含む。特定の好ましい実施形態では、該薬学的組成物は、１ｍｇ〜１６ｍｇの本発明の該化合物の１日投薬量の本発明の化合物を含む。別のさらに好ましい実施形態では、該薬学的組成物は、１、２、４、８、１２、または１６ｍｇの１日投薬量の本発明の化合物を含む。
【０１２８】
好ましい実施形態では、該薬学的組成物は、経口投与用に製剤化され、１ｍｇ以上の本発明の該化合物の１日投薬量の本発明の化合物を含む。特定の好ましい実施形態では、該薬学的組成物は、経口投与用に製剤化され、１ｍｇ〜１６ｍｇの１日投薬量の本発明の化合物を含む。
【０１２９】
さらなる態様では、本発明は、（ｉ）本発明による薬学的組成物、または（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジンである化合物もしくはその薬学的に許容される塩と、（ｉｉ）該薬学的組成物または該化合物を１日１回投与するための説明書と、を含む、組み合わせを提供し、該化合物は、９７％以上、好ましくは９８％以上、より好ましくは９９％以上、およびさらにより好ましくは９９．５％以上、さらにより好ましくは９９．８％以上、さらにより好ましくは９９．９％以上の（Ｒ）形態のｅｅを有する。
【０１３０】
好ましい実施形態では、本発明による該化合物は、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジン塩酸塩、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩、および（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジン水素リン酸塩からなる群から選択される。
【０１３１】
好ましい実施形態では、本発明による該化合物は、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジンの薬学的に許容される塩である。好ましい実施形態では、本発明による該化合物は、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジン塩酸塩、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩、および（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジン水素リン酸塩からなる群から選択される。
【０１３２】
別の好ましい実施形態では、本発明による該化合物は、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジンのリン酸塩、より好ましくは、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジンのリン酸二水素塩である。
【０１３３】
より好ましくは、本発明の該薬学的組成物は、固定単位剤形の本発明の化合物の１日投薬量を含む。より好ましくは、本発明の該薬学的組成物は、１日固定単位剤形である。
【０１３４】
さらなる態様では、本発明は、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジンである化合物またはその薬学的に許容される塩を調製するためのプロセスであって、非常に好ましくは該薬学的に許容される塩が、そのリン酸塩、さらに好ましくは（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩である、プロセスを提供する。本発明のプロセスは、（ｉ）ラセミ５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジンを（−）−Ｏ，Ｏ’−アシル化Ｌ−酒石酸、特に（−）−Ｏ，Ｏ’−ジベンゾイル−Ｌ−酒石酸と反応させて、ジアステレオ異性（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジンジベンゾイル−Ｌ−酒石酸塩を形成するステップと、（ｉｉ）ステップｉで得られた酒石酸塩を少なくとも１回再結晶化するステップと、（ｉｉｉ）ステップｉｉで得られた該酒石酸塩の溶液に塩基を添加することによって、遊離塩基（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジンを遊離させるステップと、任意で（ｉｖ）該遊離塩基を、酸、好ましくはリン酸（Ｈ３ＰＯ４）と反応させることによって、薬学的に許容される塩を形成するステップと、を含む。一実施形態では、該（ｉ）ラセミ５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジンを（−）−Ｏ，Ｏ’−アシル化Ｌ−酒石酸、特に（−）−Ｏ，Ｏ’−ジベンゾイル−Ｌ−酒石酸と反応させて、ジアステレオ異性（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジンジベンゾイル−Ｌ−酒石酸塩を形成するステップは、アルコール溶液中、好ましくはエタノール溶液中で、約５０℃未満、好ましくは約４５℃未満、およびさらに好ましくは約４０℃未満の温度でもたらされる。一実施形態では、該（ｉｉ）ステップ（ｉ）で得られた酒石酸塩を少なくとも１回再結晶化するステップは、アルコール水溶液、好ましくはエタノール水溶液中でもたらされ、好ましくは水：エタノールの比率は、約２．４：約１０である。
【０１３５】
一実施形態では、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジンである化合物またはその薬学的に許容される塩を調製するための本発明のプロセスは、キラル分取ＨＰＬＣによる５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジン（ファドロゾール）のキラル分割のステップを含まず、本発明の（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジンである化合物またはその薬学的に許容される塩を調製するための該プロセスは、キラルＨＰＬＣによる５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジン（ファドロゾール）ののキラル分割のステップを含まない。キラルＨＰＬＣによるキラル分割のそのようなステップは、典型的には（ｉ）低容量カラムでの反復キラルＨＰＬＣ、または（ｉｉ）高容量カラムでの分取ＨＰＬＣを含み得る。
【０１３６】
好ましい実施形態では、本発明のプロセスは、９７％以上、好ましくは９８％以上、より好ましくは９９％以上、およびさらにより好ましくは９９．５％以上、さらにより好ましくはより高いまたは９９．８％以上、さらにより好ましくは以上、さらにより好ましくは以上、さらにより好ましくは９９．９％以上の（Ｒ）形態のｅｅを有する、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジンおよびその薬学的に許容される塩、特にそのリン酸塩、さらに好ましくは（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩を生じる。
【０１３７】
さらに好ましい実施形態では、本発明のプロセスは、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジンおよびその薬学的に許容される塩、特にそのリン酸塩、さらに好ましくは（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩を生じ、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジンおよびその薬学的に許容される塩は、実施例５に記載の無細胞ヒト組換えアロマターゼ酵素アッセイにおいて、７００ｎＭ以上、好ましくは７５０ｎＭ以上、より好ましくは８００ｎＭ以上、より好ましくは８５０ｎＭ以上、より好ましくは９００ｎＭ以上、より好ましくは９５０ｎＭ以上、より好ましくは１０００ｎＭ以上、より好ましくは１０５０ｎＭ以上、より好ましくは１１００ｎＭ以上、より好ましくは１１５０ｎＭ以上、より好ましくは１２００ｎＭ以上、より好ましくは１２５０ｎＭ以上、より好ましくは１３００ｎＭ以上、より好ましくは１３５０ｎＭ以上、より好ましくは１４００ｎＭ以上、より好ましくは１４５０ｎＭ以上、より好ましくは１５００ｎＭ以上、より好ましくは１５５０ｎＭ以上、最も好ましくは少なくとも１６００ｎＭ、例えば、１６１０ｎＭまたは１６２０ｎＭまたは１６３０ｎＭまたは１６４０ｎＭまたは少なくとも１６５０ｎＭ以上のＩＣ５０で、アロマターゼ活性を阻害する。
【０１３８】
したがって、本発明のプロセスは、結晶化を利用して、薬学的商業使用のための例外的に高いキラル純度の、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジンおよびその薬学的に許容される塩、ならびに非常に好ましくはそのリン酸塩、ならびにさらにより（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩を得る。商業規模では、結晶化は、より大きなバッチ調製、より安価な装置および設備を可能にし、専門知識を必要としないことによって、クロマトグラフィー分割よりも経済的であり、はるかに有利である。
【０１３９】
本発明のさらに好ましい態様および実施形態は次の通りである。
１．疾患または障害の治療における使用のための組成物であって、該疾患または障害が、好ましくは原発性アルドステロン症または続発性アルドステロン症、さらに好ましくは原発性アルドステロン症であり、該組成物が、それを必要とする対象に１日１回投与され、該組成物が、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジンである化合物またはその薬学的に許容される塩を含み、該化合物が、９７％以上の（Ｒ）形態の鏡像体過剰率（ｅｅ）を有する、使用のための組成物。
【０１４０】
２．疾患または障害の治療における使用のための組成物であって、該疾患または障害が、アルドステロンの過剰曝露が該疾患または障害の症状に寄与する疾患または障害であり、該組成物が、それを必要とする対象に１日１回投与され、該組成物が、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジンである化合物またはその薬学的に許容される塩を含み、該化合物が、９７％以上の（Ｒ）形態の鏡像体過剰率（ｅｅ）を有する、使用のための組成物。
【０１４１】
３．疾患または障害の治療における使用のための組成物であって、該疾患または障害が、原発性アルドステロン症、続発性アルドステロン症、心不全、慢性腎不全、高血圧症、再狭窄、肥満症、腎障害、心筋梗塞後、腎線維症、冠動脈心疾患、ナトリウム貯留、水分貯留、低カリウム血症、低マグネシウム血症、高血圧症、左室肥大および心筋線維症、心血管損傷、血漿レニンの抑制、腎線維症、不整脈、腎障害、浮腫、および低カリウム血症による筋力低下、心細動、ならびに心筋収縮の衰弱から選択され、好ましくは該疾患または障害が、原発性アルドステロン症または続発性アルドステロン症であり、さらにより好ましくは該疾患または障害が、原発性アルドステロン症であり、該組成物が、それを必要とする対象に１日１回投与され、該組成物が、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジンである化合物またはその薬学的に許容される塩を含み、該化合物が、９７％以上の（Ｒ）形態の鏡像体過剰率（ｅｅ）を有する、使用のための組成物。
【０１４２】
４．該化合物が、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジン塩酸塩、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩、および（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジン水素リン酸塩からなる群から選択される、実施形態１〜３のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
【０１４３】
５．該化合物が、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩である、実施形態１〜４のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
【０１４４】
６．該薬学的に許容される塩が、結晶性である、実施形態１〜５のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
【０１４５】
７．該薬学的に許容される塩が、無水である、実施形態１〜６のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
【０１４６】
８．該薬学的に許容される塩が、非吸湿性である、実施形態１〜７のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
【０１４７】
９．該（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩が、１８４℃〜１９３℃と等しいか、またはその間にある融点を有し、好ましくは該（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩が、熱重量分析／示差走査熱量測定（ＴＧＡ／ＤＳＣ）によって決定して、１８８℃〜１９０℃と等しいか、またはその間にある融点を有する、実施形態５〜８のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
【０１４８】
１０．該（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩が、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩の結晶形態Ｉであり、該結晶形態Ｉが、ＣｕＫα放射線を使用して測定して、次の２θ値：１９．５０４、２１．９１９、および２４．１５９を含むＸ線粉末回折パターンを有し、各ピークが、±０．５度だけ、または好ましくは±０．２度だけ変動し得る、実施形態５〜９のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
【０１４９】
１１．該化合物が、無細胞ヒト組換えアロマターゼ酵素アッセイにおいて、７００ｎＭ以上、好ましくは１０００ｎＭ以上、およびより好ましくは１５００ｎＭ以上のＩＣ５０で、アロマターゼ活性を阻害する、実施形態１〜１０のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
【０１５０】
１２．該化合物が、ＮＣＩ−Ｈ２９５Ｒ副腎細胞アッセイにおいて、１００ｎＭ以下、好ましくは５０ｎＭ以下、およびより好ましくは１０ｎＭ以下のＩＣ５０で、アルドステロンシンターゼを阻害する、実施形態１〜１１のいずれかに記載の使用のための組成物。
【０１５１】
１３．該化合物が、５０以上、好ましくは１００以上、最も好ましくは７００以上の、アロマターゼを超えるアルドステロンシンターゼに対する選択性を有し、該選択性が、アロマターゼおよびアルドステロンシンターゼの阻害のＩＣ５０値の比率によって決定され、アルドステロンシンターゼおよびアロマターゼの阻害のＩＣ５０値が両方とも、ＮＣＩ−Ｈ２９５Ｒ副腎細胞アッセイにおいて測定される、実施形態１〜１２のいずれかに記載の使用のための組成物。
【０１５２】
１４．好ましくは質量分析（ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ）によって測定して、該化合物の排出半減期（Ｔ１／２）が、８時間超であり、好ましくは該化合物の排出半減期（Ｔ１／２）が、８時間〜１１時間であり、さらに好ましくは該化合物の排出半減期（Ｔ１／２）が、約８時間〜約１０時間である、実施形態１〜１３のいずれかに記載の使用のための組成物。
【０１５３】
１５．該化合物のＣｍａｘが、好ましくは質量分析（ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ）によって測定して、約５ｎｇ／ｍｌ〜約９０ｎｇ／ｍｌ、好ましくは約１０ｎｇ／ｍｌ〜約８０ｎｇ／ｍｌ、さらに好ましくは約１４ｎｇ／ｍｌ〜約７７ｎｇ／ｍｌである、実施形態１〜１４のいずれかに記載の使用のための組成物。
【０１５４】
１６．該対象が、ヒトである、実施形態１〜１５のいずれかに記載の使用のための組成物。
【０１５５】
１７．該対象が、妊娠可能な女性または小児患者である、実施形態１〜１６のいずれかに記載の使用のための組成物。
【０１５６】
１８．アルドステロンの過剰曝露が、該疾患または障害の症状に寄与する疾患または障害の治療における、実施形態１〜１７のいずれかに記載の使用のための組成物。
【０１５７】
１９．該疾患または障害が、原発性アルドステロン症、続発性アルドステロン症、心不全、慢性腎不全、高血圧症、再狭窄、肥満症、腎障害、心筋梗塞後、腎線維症、冠動脈心疾患、ナトリウム貯留、水分貯留、低カリウム血症、低マグネシウム血症、高血圧症、左室肥大および心筋線維症、心血管損傷、血漿レニンの抑制、腎線維症、不整脈、腎障害、浮腫、ならびに低カリウム血症による筋力低下、心細動、および心筋収縮の衰弱から選択され、好ましくは該疾患または障害が、原発性アルドステロン症または続発性アルドステロン症であり、さらにより好ましくは該疾患または障害が、原発性アルドステロン症である、実施形態１〜１８のいずれかに記載の使用のための組成物。
【０１５８】
２０．該組成物が、経口投与される、実施形態１〜１９のいずれかに記載の使用のための組成物。
【０１５９】
２１．該組成物が、好ましくは経口投与を介して、１ｍｇ以上の本発明の該化合物の投薬量で１日１回投与される、実施形態１〜２０のいずれかに記載の使用のための組成物。
【０１６０】
２２．該組成物が、１ｍｇ〜１６ｍｇ、好ましくは２ｍｇ〜１６ｍｇ、より好ましくは４ｍｇ〜１６ｍｇ、さらにより好ましくは８ｍｇ〜１６ｍｇ、さらにより好ましくは１２ｍｇ〜１６ｍｇの該化合物の用量で１日１回投与される、実施形態１〜２１のいずれかに記載の使用のための組成物。
【０１６１】
２３．該疾患または障害が、好ましくは原発性アルドステロン症、さらに好ましくはヒトにおける原発性アルドステロン症であり、該治療が、そのような治療がもたらされない場合と比較して、血漿中のアルドステロンのレベルを減少させる、実施形態１〜２２のいずれかに記載の使用のための組成物。
【０１６２】
２４．該疾患または障害が、好ましくは原発性アルドステロン症、さらに好ましくはヒトにおける原発性アルドステロン症であり、該治療が、そのような治療がもたらされない場合と比較して、該１日１回の投与後に、少なくとも１８時間、好ましくは約２４時間の期間にわたって、血漿中のアルドステロンのレベルを少なくとも２０％だけ、好ましくは２５％だけ、さらにより好ましくは少なくとも３０％だけ減少させる、実施形態１〜２３のいずれかに記載の使用のための組成物。
【０１６３】
２５．該疾患または障害が、好ましくは原発性アルドステロン症、さらに好ましくはヒトにおける原発性アルドステロン症であり、該治療が、治療前の値と比較して、該１日１回の投与後に、少なくとも１８時間、好ましくは２４時間の期間にわたって、血漿中のアルドステロンのレベルを少なくとも約２０％だけ、好ましくは少なくとも約２５％だけ、より好ましくは少なくとも約３０％だけ、さらにより好ましくは少なくとも約５０％だけ減少させる、実施形態１〜２４のいずれかに記載の使用のための組成物。
【０１６４】
２６．固定単位剤形の化合物の１日投薬量を含む薬学的組成物であって、該化合物が、化合物が、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジンまたはその薬学的に許容される塩であり、該化合物が、９７％以上の（Ｒ）形態のｅｅを有し、好ましくは該化合物が、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩である、薬学的組成物。
【０１６５】
２７．経口投与用に製剤化される、実施形態２６に記載の薬学的組成物。
【０１６６】
２８．該１日投薬量が、１ｍｇ以上、好ましくは１ｍｇ〜１６ｍｇ、さらに好ましくは２ｍｇ〜１６ｍｇ、より好ましくは４ｍｇ〜１６ｍｇ、さらにより好ましくは８ｍｇ〜１６ｍｇ、さらにより好ましくは１２ｍｇ〜１６ｍｇである、実施形態２６または２７に記載の薬学的組成物。
【０１６７】
２９．該１日投薬量が、１ｍｇ、２ｍｇ、４ｍｇ、８ｍｇ、１２ｍｇ、または１６ｍｇであり、好ましくは該１日投薬量が、４ｍｇ、８ｍｇ、１２ｍｇ、または１６ｍｇである、実施形態２６または２７に記載の薬学的組成物。
【０１６８】
３０．該薬学的組成物が、錠剤、ピル、分散性顆粒、カシェ、カプセル、粉末、トローチ、坐剤、または保停留浣腸の形態であり、好ましくは該薬学的組成物が、錠剤の形態である、実施形態２６〜２９のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【０１６９】
３１．組み合わせであって、
（ｉ）実施形態２６〜３０に記載の薬学的組成物、または
（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジンである化合物もしくはその薬学的に許容される塩であって、該化合物が、９７％以上、好ましくは９８％以上、より好ましくは９９％以上、およびさらにより好ましくは９９．５％以上、さらにより好ましくは９９．８％以上、さらにより好ましくは９９．９％以上の（Ｒ）形態のｅｅを有し、好ましくは該化合物が、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩である、化合物もしくはその薬学的に許容される塩と、
（ｉｉ）該薬学的組成物または該化合物を１日１回投与するための説明書とを含む、組み合わせ。
【実施例】
【０１７０】
装置、材料、および方法
ＤＰ１３の投与
本明細書に提示されるＤＰ１３データは、Ｃｏｖａｎｃｅ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｕｎｉｔ  Ｌｔｄ．、Ｌｅｅｄｓ，ＵＫによって実施された、健康な男性対象におけるＤＰ１３の第Ｉ相、二重盲検、プラセボ対照、単回および複数回の漸増用量、安全性、忍容性、薬力学、および薬物動態研究で収集した。
【０１７１】
研究の単回用量部分では、個体は、１日目の０８：００時に、１、２、４、８、１２、または１６ｍｇのＤＰ１３を受けた。各用量で治療した６人の対象、およびプラセボで治療した１２人の対象がいた（２人のプラセボで治療した対象は、各用量群に含まれる）。研究の複数回用量部分では、３２人の個体を、ＤＰ１３の用量あたり８人の対象を有する３つの群で研究し、残りの８人の対象はプラセボを受けた。対象は、４、８、または１６ｍｇのＤＰ１３またはプラセボのいずれかの１日経口用量を、０８：００時に絶食状態で８日間毎日受けた。
【０１７２】
研究の複数回用量部分および単回用量部分の両方では、参加者は、ＤＰ１３またはプラセボのいずれかを用いた第１の経口治療の５日前からナトリウム／カリウム食に従うことが必要とされた。食事は、７０〜８０ｍＥｑ／日のナトリウムおよび８０〜９０ｍＥｑ／日のカリウムからなった。アルドステロン、１１β−デオキシコルチコステロン（ＤＯＣ）、およびカリウム（Ｋ＋）の測定のために、添付の表に示される時点で、血液試料を毎日得た。血液試料の全ては、対象が安静状態で座っている間に得た。
【０１７３】
ストレス試験のために、研究の単回用量相の１日目、または研究の複数回用量相の７日目に、ＡＣＴＨ（シナクテン）ストレス試験を次のように開始した。１日目または７日目のＤＰ１３またはプラセボの１日用量の１時間半後に、血液試料を採取し（Ｓｙｎａｃｔｅｎに対する応答のベースライン）、３０分後に、Ｓｙｎａｃｔｅｎの静脈内用量（２５０μｇ）を投与した。Ｓｙｎａｃｔｅｎの６０分後に、血液試料を得た。Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｕｎｉｔ  ａｔ  ｔｈｅ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｈｏｓｐｉｔａｌ  Ｉｎｓｅｌｓｐｉｔａｌ  Ｂｅｒｎ，Ｂｅｒｎ  Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄによって、アルドステロンおよび１１β−デオキシコルチコステロン（ＤＯＣ）について、試料を分析した。アルドステロンは、ＤｉａＳｏｒｉｎ  Ｓ．ｐ．Ａ．Ｉｔａｌｙによって供給されるＬｉａｉｓｏｎ（登録商標）化学発光イムノアッセイキットを使用して測定した。このアッセイシステムは、アルドステロンに対するモノクローナル抗体を使用しているため、血清試料中の他の主要な潜在的反応物との交差反応はない。アッセイは、製造業者によって提供される説明書に従って実行した。このアッセイは、０．９７〜１００ｎｇ／ｍｌの広い測定範囲を有し、アルドステロンを評価して、ＰＡの治療を診断および評価するために設計された。分析感度は、０．９７ｎｇ／ｍｌ未満であった。
【０１７４】
ＤＯＣは、ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ方法論によって定量化した。調製において、ステロイドを、Ｂｉｏｃｒａｔｅｓ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  ＡＧ，Ｉｎｎｓｂｒｕｃｋ，ＡｕｓｔｒｉａのＡｂｓｏｌｕｔｅ／ＤＱＳｔｅｒｅｏ１７キットを使用して抽出した。ステロイドを抽出し、製造業者の説明書に従ってＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析に供した。三連四重極型質量分析計（Ｗａｔｅｒｓ１−Ｃｌａｓｓ２Ｄ  ＵＰＬＣ  Ｘｅｖｏ  ＴＱ−Ｓ）を、キットに含まれている標準物を使用して較正した。アッセイを、製造業者によって提供されるように実行した。
【０１７５】
血清コルチゾール、エストラジオール、テストステロン、および卵胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）を、ＡＤＶＩＡ  Ｃｅｎｔａｕｒ（登録商標）ＣＰシステム（Ｓｉｅｍｅｎｓ  ＡＧ）を用いて、Ｃｏｖａｎｃｅの診断ユニット（Ｈａｒｒｏｇａｔｅ，ＵＫ）によって測定した。ＡＤＶＩＡ  Ｃｅｎｔａｕｒ（登録商標）ＣＰコルチゾールアッセイは、検出に化学発光技術を使用する競合二重抗体固相イムノアッセイであり、０．２０μｇ／ｄＬの分析感度を有する。ＡＤＶＩＡ  Ｃｅｎｔａｕｒ増強エストラジオールアッセイは、完全に自動化されたモノクローナル競合化学発光イムノアッセイであり、１０ｐｇ／ｍｌの感度を有する。ＡＤＶＩＡ  Ｃｅｎｔａｕｒ（登録商標）ＣＰ  ＦＳＨアッセイは、直接化学発光技術を使用する２部位サンドイッチイムノアッセイであり、これは、インタクトなＦＳＨ分子に対する特異性を有する２つの抗体を使用する。ＡＤＶＩＡ  Ｃｅｎｔａｕｒ（登録商標）ＣＰテストステロンアッセイは、直接化学発光技術を使用する競合固相イムノアッセイである。上記のアッセイの全ては、製造業者によって記載のように実施した。
【０１７６】
両側の対応のあるスチューデントｔ検定を使用して、ホルモン応答の統計的評価を実行して、治療群内のデータを評価し、治療群間のデータは、両側のｔ検定の等分散モデルを利用した。
【０１７７】
薬物動態研究
上記、特に実施例３に言及した薬物動態研究およびデータについて、投与の１日前および投与の０．５、１、１．５、２、３、４、６、８、１２、および１６時間後、ならびに投与の２〜７日前および８日目の投与の０．５、１、１．５、２、３、４、６、８、１２、１６、および２４時間後に、血液試料を得た。ＤＰ１３は、Ｃｏｖａｎｃｅ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃ  Ｕｎｉｔによって開発された手順によって次のように測定した。血液試料をＫ２ＥＤＴＡに収集し、遠心分離し、血漿を−８０℃で保管した。試料は、次のように、液体／液体抽出による分析のために調製した。５０μＬのアリコートを、２５μＬのメタノール：水（５０：５０）で抽出し、混合し、続いて２５０μＬの酢酸アンモニウム１００ｍＭ：水酸化アンモニウム（９５：５）を添加し、溶液を混合した。次に、７５０μＬの酢酸エチルを添加し、吸引によって混合し、約２５００×ｇで５分間遠心分離した。４００μＬの有機層を収集し、４０℃、窒素下で蒸発させた。乾燥した試料を、２００μＬの酢酸アンモニア１０ｍＭ：メタノール：水酸化アンモニウム（７０：３０：０．３５）中で再構成し、室温、２０００×ｇで５分間遠心分離した。次に、抽出した試料を、Ｇｅｍｉｎｉ３μｍ  ＮＸ−Ｃ１８、５×２ｍｍカラムを有するＷａｔｅｒｓ、Ａｃｑｕｉｔｙ、ＵＰＬＣを使用する液体クロマトグラフィーに供した。酢酸アンモニウム１０ｍＭ：水酸化アンモニウム（１００：０．５）からなる移動相Ａおよびメタノールからなる移動相Ｂを使用して、注入体積８μＬを分析した。次に、精製した試料を、質量分析（ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ）によって分析した。９９．８７の純度（ＨＰＬＣ）および９９．５以上の鏡像体純度を有するＤＰ１３の対照精製試料標準物は、Ａｌｃａｍｉ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、Ｔｈｅ  Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓによって提供された。有効較正範囲は、０．２〜２００ｎｇ／ｍｌであった。
【０１７８】
比旋光度［α］Ｄ
比旋光度［α］Ｄの測定は、標準的なＰｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ  Ｐｏｌａｒｉｍｅｔｅｒ３４３の５８９．３ｎｍでのナトリウムＤ線を使用して、溶液中で実行した。測定のために、１グラムの（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジン−二水素−リン酸塩を、１００ｍｌのそれぞれの溶媒中に溶解し、この溶液を、１デシメートルの長さの光学キュベットに移した。測定はそれぞれ、２０℃または２５℃の温度で行った。比旋光度［α］Ｄを、式１００×α／（ｌｘｃ）（式中、α＝観察される旋光度（度）であり、ｌ＝セルパスの長さ（デシメートル）であり、ｃ＝１００ｍｌあたりのグラムでの濃度である）によって計算する。
【０１７９】
元素分析
元素分析は、標準的な装置（例えば、ｖａｒｉｏ  ＥＬキューブ元素分析機）で実行し、炭素、水素、および窒素の値を決定した。
【０１８０】
キラルＨＰＬＣ
キラルＨＰＬＣは、Ａｇｉｌｅｎｔ１１００シリーズＬＣ２２機器で、次のカラム仕様および条件で実行した。
カラム：Ｃｈｉｒａｌｐａｃｋ  ＡＤ−Ｈ、粒度分析：５μｍ、２５０×４．６ｍｍ、ｎ°ＡＤＨ０ＣＥ−ＴＦ０８７
移動相：エタノール＋０．１％のジエチルアミン（ＤＥＡ）
検出器の波長：２３０ｎｍ
オーブン温度：２５℃
流量：０．５ｍＬ／分
注入体積：５μＬ
試料調製：エタノール中０．５ｍｇ／ｍＬ＋０．１％のＤＥＡ
【０１８１】
ＸＲＰＤ
Ｘ線粉末回折研究は、Ｂｒａｇｇ−Ｂｒｅｎｔａｎｏ構成のＢｒｕｋｅｒ  ＡＸＳ  Ｄ２ＰＨＡＳＥＲを使用して実行した。３０ｋＶ、１０ｍＡでＣｕアノードを使用、試料ステージ標準回転、Ｋβフィルター（０．５％のＮｉ）による単色化。スリット：固定発散スリット１．０ｍｍ（＝０．６１°）、一次軸ソーラスリット２．５°、二次軸ソーラスリット２．５°。検出器：受信スリット５°検出器開口部を有する線形検出器ＬＹＮＸＥＹＥ。標準的な試料ホルダー（（５１０）シリコンウェーハ内の０．１ｍｍの空洞）は、バックグラウンド信号に対する最小限の寄与を有した。測定条件：走査範囲５〜４５°２シータ、試料回転５ｒｐｍ、０．５秒／ステップ、０．０１０°／ステップ、３．０ｍｍの検出器スリット、全ての測定条件を機器調節ファイルに記録した。システムの適合性として、コランダム試料Ａ２６−８２６−Ｓ（ＮＩＳＴ標準）を毎日測定した。
【０１８２】
データ収集に使用したソフトウェアは、Ｄｉｆｆｒａｃ  Ｃｏｍｍａｎｄｅｒ  ｖ２．０．２６であった。データ分析は、Ｄｉｆｆｒａｃ．Ｅｖａ  ｖ１．４を使用して行った。パターンには、バックグラウンド補正またはスムージングは適用しなかった。
【０１８３】
単結晶Ｘ線分析
（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン−二水素−リン酸塩の単結晶を、ｎ−プロパノール／水混合物を溶媒として使用して成長させた。好適な単結晶を母液から取り出し、直ちに高粘度油でコーティングし、サイズに切断してＭｉｔａｇｅｎ  Ｍｉｃｒｏｌｏｏｐにマウントし、１５０Ｋに衝撃凍結した。φスキャンおよびωスキャンを使用して、Ｂｒｕｋｅｒ  Ｄ８Ｑｕｅｓｔ機器でＭｏＫα放射線を用いて測定を実行した。その後、直接法（ＳＨＥＬＸＴソフトウェア）によって分子構造を解析した。全ての非水素原子を、異方性温度因子で精製した。完成したモデルにＢｉｊｏｖｏｅｔ分析を実行して、絶対配置を決定した。
【０１８４】
ＴＧＡ／ＤＳＣ
熱重量分析および示差走査熱量測定（ＴＧＡ／ＤＳＣ）研究は、３４位置のオートサンプラーを有するＭｅｔｔｌｅｒ  Ｔｏｌｅｄｏ  ＴＧＡ／ＤＳＣ１ＳＴＡＲｅシステムを使用して実行した。ＡＩるつぼ（４０μＬ、穿孔）を使用して、試料を作製した。典型的には、５〜１０ｍｇの試料を事前に計量したＡｌるつぼに充填し、３０℃で５分間保持した後、それを１０℃／分で３０℃から３５０℃に加熱した。試料全体にわたって、４０ｍｌ／分の窒素パージを維持した。データの収集および評価に使用したソフトウェアは、ＳＴＡＲｅソフトウェアｖ１２．１０ビルド５９３７であった。温度記録には、補正は適用しなかった。
【０１８５】
ＤＳＣ
ＤＳＣ研究は、Ｍｅｔｔｌｅｒ  Ｔｏｌｅｄｏ  ＤＳＣ１ＳＴＡＲｅシステムを使用して実行した。Ａｌるつぼ（４０μＬ、穿孔）を使用して、試料を作製した。典型的には、１〜８ｍｇの試料を事前に計量したＡｌるつぼに充填し、３０℃で５分間保持した後、それを１０℃／分で３０℃から３５０℃に加熱し、３５０℃で１分間保持した。試料全体にわたって、４０ｍｌ／分の窒素パージを維持した。システムの適合性確認として、インジウムおよび亜鉛を参照として使用した。データの収集および評価に使用したソフトウェアは、ＳＴＡＲｅソフトウェアｖ１２．１０ビルド５９３７であった。温度記録には、補正は適用しなかった。
【０１８６】
ＤＶＳ
動的蒸気収着（ＤＶＳ）研究は、Ｓｕｒｆａｃｅ  Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  Ｌｔｄ．ＤＶＳ−１Ｎｏ  Ｖｉｄｅｏを使用して実行した。試料を天秤皿（典型的には２０〜３０ｍｇ）に充填し、０％のＲＨで平衡化した。材料が乾燥した後、ＲＨを、増分あたり１時間かけて、ステップあたり１０％で増加させ、９５％のＲＨで終了した。収着サイクルの完了後、同じ方法を使用して試料を乾燥させた。データ収集に使用したソフトウェアは、ＤＶＳＷｉｎ  ｖ３．０１Ｎｏ  Ｖｉｄｅｏであった。ＤＶＳ  Ｓｔａｎｄａｒｄ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  Ｓｕｉｔｅ  ｖ６．３．０（標準）を使用して、データ分析を実行した。
【０１８７】
溶解度
溶解度は、振盪フラスコ法を使用して決定し、溶解度は、２０℃で目視によって決定した。列挙される溶媒を、完全な溶解が得られるか、または０．０５ｍｇ／ｍｌ未満の溶解度に達するまで、添加の間に１５分間あけて、１０ｍｇの化合物に段階的に添加した。
【０１８８】
ハイスループット実験
ハイスループット実験は、冷却結晶化実験の温度調節用のＪｕｌａｂｏ  ＦＰＳＯを備えた結晶化構成のＦｒｅｅｓｌａｔｅ  Ｃｏｒｅ  Ｍｏｄｕｌｅ２を使用して、ウェルプレート形式で実行した。
【０１８９】
固体分注システム
固体は、Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ天秤を有する古典的およびＳＶホッパー構成のＦｒｅｅｓｌａｔｅ  Ｃｏｒｅ  Ｍｏｄｕｌｅ  Ｐｒｏｔｅｇｅ固体分注システムを使用して分注した。使用したホッパーは、８ｍｍのバルブサイズおよび４〜３ｍｍの漏斗サイズを有する２５ｍｌの古典的ホッパー、８ｍｍのバルブサイズおよび４〜３ｍｍの漏斗サイズを有する１０ｍｌの古典的ホッパー、ならびに標準的な４ｍｌのガラスバイアルを有するＳＶホッパーであった。
【０１９０】
ラセミ５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジン
表題化合物（ファドロゾール）は、例えば、Ｌ．Ｊ．Ｂｒｏｗｎｅら（Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９９１，３４，７２５．）によって記載の手順に従って調製しても、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈなどの商業供給業者によって得てもよい。
【０１９１】
実施例１
ＤＰ１３の１日１回投与
ＤＰ１３は、本明細書では、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジンの二水素リン酸塩を指して略記される。（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジンの二水素リン酸塩の合成は、本明細書の実施例６および７に記載されている。参照により本明細書に組み込まれる、本出願人の出願ＰＣＴ／ＥＰ２０１７／０７７５１１をさらに参照する。
【０１９２】
我々は、１日１回４、８、および１６ｍｇの経口用量で投与したＤＰ１３が、治療前の値およびプラセボで治療した対照の値と比較して、正常な男性における血漿アルドステロンレベルを効果的に抑制することを発見した（表１）。１日１回４、８、および１６ｍｇの経口用量（８人の対象／用量）でのＤＰ１３に対する２４人の正常な個体の応答を評価し、それらの血漿アルドステロン応答およびカリウム応答を互いに対して、および８人のプラセボで治療した個体に対して比較した。アルドステロン濃度を測定した全ての時点で、８および１６ｍｇの用量は、治療前の値およびプラセボ対照の値の両方と比較して、濃度を有意に抑制した。８日目のＤＰ１３の最後の用量の２４時間後、８および１６ｍｇの用量は、治療前の値と比較して、血漿アルドステロンをそれぞれ３２％および５０％だけ抑制した。
【０１９３】
これらのデータは、ＤＰ１３を用いた１日１回の投薬が、正常に機能するレニン−アンギオテンシン−アルドステロンフィードバックシステムを有する正常な個体における血漿アルドステロンレベルを効果的に抑制することができることを実証する。
2021522289.tif 000005
【０１９４】
４ｍｇ／日のＤＰ１３の経口用量は、最後の８回の１日用量から２４時間後の９日目に、血漿アルドステロンレベルをプラセボ対照のレベル未満に低下させることができなかった。この失敗は、用量の８日前（０８００時）に明らかな血漿カリウムレベルの有意な増加に起因する（表２）。血漿カリウムは、８日目までのより初期の時点でのアルドステロンの低減から生じる腎尿細管によるカリウムのナトリウムへの交換の減少に応答して増加し、循環カリウムの増加は、アルドステロン合成を刺激する。ＤＰ１３の８ｍｇおよび１６ｍｇの２つのより高い用量さえも、循環カリウムの増加が見られる場合、８日目の最終用量から２４時間後の９日目でさえ、血漿アルドステロンの抑制を維持するのに十分に強力である（表２）。これらのデータは、所与の１日１回の投与用量でのＤＰ１３が、アルドステロン合成の代償的な刺激を発揮することが知られている増加する循環カリウムレベルの存在下でさえ、より長い時間および継続期間にわたってアルドステロンレベルを抑制することができることを示している。
2021522289.tif 000006
【０１９５】
実施例２
ＡＣＴＨ投与後のアルドステロンの血漿レベル
１日１回与えられるＤＰ１３の用量が、ＰＡ患者に見られるように、自律的に分泌されるアルドステロンの上昇を抑制する潜在性を有することを実証するために、上記で評価した同じ３２人の正常な個体にＡＣＴＨを外因的に投与した。ＡＣＴＨは、０８：００時の１日用量のＤＰ１３の２時間後の、ＤＰ１３の７日目に静脈内（ｉ．ｖ．）投与し、アルドステロン測定のための血液試料を、ＡＣＴＨの１時間後に採取し、ＡＣＴＨの３０分前（ＤＰ１３投与の１時間半後）に採取した血液試料のそれと比較した。「ＡＣＴＨストレス試験」と呼ばれるこのプロセスは、１日１回与えられる４、８、または１６ｍｇのＤＰ１３の経口用量が、プラセボの１日用量のみを受ける個体において、ＡＣＴＨによって誘発されるアルドステロンの２〜３倍の増加を予防することができることを実証した（表３）。ＡＣＴＨに応答したプラセボ群の血漿アルドステロン濃度は、４３２〜８２５ｐｍｏｌ／Ｌの範囲であった。これらの値は、ＰＡ患者について公開されている範囲である、３５９〜９９７ｐｍｏｌ／Ｌと同等である（Ａｍａｒ  ｅｔ  ａｌ．，２０１０，ｏｐ．ｃｉｔ．）。
【０１９６】
この研究の単回用量部分では、１ｍｇほど低い用量でさえ、ＡＣＴＨ刺激アルドステロン応答を阻害した（表４）。
2021522289.tif 000007
2021522289.tif 000008
【０１９７】
実施例３
１日１回の投薬の薬物動態データ
１日１回の投薬は、投薬の１日目および８日目に決定されるＤＰ１３の排出半減期を記載する薬物動態データによって支持され、各用量の平均は、４ｍｇの用量で１日目の低い８．４７から、１６ｍｇの用量で８日目に測定した９．６７までの範囲である（表５）。ＤＰ１３の１および２ｍｇ用量のＡＵＣ０−ｔ、Ｃｍａｘ、Ｔｍａｘ、およびＴ１／２を、単回用量の薬物動態研究で決定した（表５）。
2021522289.tif 000009
2021522289.tif 000010
【０１９８】
全ての用量レベルのＣｍａｘおよびＡＵＣ０−∞の両方が、用量に比例していた。Ｔｍａｘは、薬物が、全ての用量レベルで急速に吸収され、１日目および８日目で同等であることを示している。８日目には、血漿中のＤＰ１３の蓄積はほとんどなく、ＡＵＣ０−ｔａｕの幾何平均蓄積率（ＲＡＯｂｓ）は１．１８であった（個々の範囲：１．０４〜１．３１）。
【０１９９】
実施例４
ＡＣＴＨ刺激に応答したコルチゾール濃度
１日１回の投薬は、アルドステロンシンターゼ阻害剤に関連するため、特定の利点を有する。アルドステロンシンターゼ（ＣＹＰ１１Ｂ２）は、ＣＹＰ１１Ｂ１の遺伝子を有するコード領域と９５％の同一性を共有し、これは、ＣＹＰ１１Ｂ１と同様に１１β−デオキシコルチコステロン（ＤＯＣ）をコルチコステロンに変換することができる。これら２つの１１−βヒドロキシル化酵素の遺伝暗号の類似性の結果として、アルドステロンシンターゼ（ＣＹＰ１１Ｂ２）の阻害に完全に選択的な化合物を特定することはこれまで困難であった。したがって、これまでに特定されたアルドステロンシンターゼ阻害剤は、ＣＹＰ１１Ｂ１およびＣＹＰ１１Ｂ２の両方を様々な程度で阻害し、これは、これらの酵素、特にＤＯＣの基質の増加をもたらす。ＤＯＣは、アルドステロンと同じ薬理学的活性を共有するミネラルコルチコイドであり、アルドステロンと同様に、ナトリウムおよびカリウムの恒常性を変化させ、その正常の血漿濃度をはるかに超えるレベルで存在する場合に、血圧を上昇させることができる（Ｂａｘｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．（１９７６）５８：５７９）。１１β−または１７−ヒドロキシラーゼ欠損に続発する高血圧症および低い血漿レニン活性を有する患者は、正常レベルの１０倍を超える上昇したＤＯＣレベルを有し、この上昇が、これらの患者が経験する高血圧症に関与しているようである（Ｂｒｏｗｎ  ａｎｄ  Ｓｔｒｏｔｔ，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｅｎｄｏｃｒ．（１９７１）。
【０２００】
上記で実証されるように、ＤＰ１３の半減期は、１日１回の投薬を支持する。したがって、本明細書に提示されるデータによって支持される、そのより少ないＤＯＣ産生のために、より大きな有効性を証明する可能性がある（表７）。ＤＰ１３は、プラセボのレベルおよび治療前のレベルの両方と比較して、全ての用量でＤＯＣレベルを上昇させた（表７）。しかしながら、ＬＣＩ６９９とは異なり、ＤＰ１３の１日１回の投与によって誘発されるＤＯＣの増加は、かなり低かった。１日２回服用した０．５および１．０ｍｇの用量のＬＣＩ６９９は、ＰＡ患者における血漿アルドステロンを７０〜８０％だけ減少させたが、ＤＯＣを７００％以上、９．８ｎｇ／ｍｌの平均レベルまで増加させ、個々のレベルは、１．０ｍｇを１日２回用量で８．０〜１２０．４ｎｇ／ｍｌの範囲であった（Ａｍａｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ（２０１０）５６：８３１）。対照的に、ＤＯＣの最大平均増加は、ＬＣＩ６９９について見られたものよりほぼ２０分の１少ない、わずか０．５２ｎｇ／ｍｌであり、最大の個々の値は、ＬＣＩ６９９について見られたものより５０分の１超少ない、１．９２ｎｇ／ｍｌであった。ＤＰ１３について観察されたＤＯＣ濃度は、臨界範囲である５〜７ｎｇ／ｍｌをはるかに下回っており、有意なミネラルコルチコイド活性を発揮することが予想される（Ａｍａｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ（２０１０）５６：８３１）。
【０２０１】
アルドステロンシンターゼ阻害剤によるＣＹＰ１１Ｂ１およびＣＹＰ１１Ｂ２の両方の潜在的な二重阻害のため、ＣＹＰ１１Ｂ１の阻害が、ストレスの多い状況の要求を満たすために必要な副腎のコルチゾール分泌応答の欠損をもたらし得るという懸念がある。前述のＡＣＴＨ（Ｓｙｎａｃｔｅｎ）ストレス試験は、応答の正常性を評価するための標準的な尺度である。コルチゾール濃度を５５２ｎｍｏｌ／Ｌ以上の値に上昇させるＡＣＴＨ刺激応答は、全身麻酔および大手術のストレスに対する正常な応答を予測する（Ｓａｎｔｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８９）６８：９９）。ＤＰ１３を受ける２４人の対象のうち、１人の対象のみがこのレベルを下回るコルチゾール値を有した。彼の値は、５５２ｎｍｏｌ／Ｌのガイドライン値のすぐ下のＡＣＴＨに応答して、３２４から５０４ｎｍｏｌ／Ｌに増加した。この対象は、最高用量のＤＰ１３（１６ｍｇ／日）を受けていた。
2021522289.tif 000011
【０２０２】
実施例５
（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩によるアロマターゼおよびアルドステロンシンターゼ阻害の評価
アルドステロンシンターゼ（ＣＹＰ１１Ｂ２）およびアロマターゼ（ＣＹＰ１９）活性のヒトＮＣＩ−Ｈ２９５Ｒ細胞アッセイ
【０２０３】
浸潤性原発性副腎皮質がんに由来する連続細胞株であるＮＣＩ−Ｈ２９５Ｒ細胞は、ＣＬＳ細胞株サービスＧｍｂＨ（カタログ番号３００４８３）から得た。ＮＣＩ−Ｈ２９５Ｒ細胞は、アルドステロンおよびエストラジオールの両方を産生するため、同一の条件下でアルドステロンシンターゼ活性およびアロマターゼ活性の測定を可能にする。アッセイに使用する前に、細胞を、５％の無ステロイド血清代替物であるＰａｎｅｘｉｎ  ＢＭＭ（ＰＡＮ  Ｂｉｏｔｅｃｈ、Ａｌｄｅｎｂａｃｈ，Ｇｅｒｍａｎｙ、カタログ番号ＰＯ４−９５１５Ａ２）、１％のペニシリン／ストレプトマイシン、１．２５％のＬ−グルタミン、および６．２５μｇ／ｍｌのインスリン、６．２５ｎｇ／ｍｌのセレン、５．３５μｇ／ｍｌのリノール酸、および１．２５ｍｇ／ｍｌのウシ血清アルブミンを補充した、１５ｍＭのＨＥＰＥＳおよび１．２ｇのＮａＨＣＯ３を有するＤＭＥＭ／Ｈａｍ培地中に維持した。細胞を、９５％の空気／５％のＣＯ２の雰囲気下で３７℃に維持した。アッセイのために、細胞を、２４ウェルプレート内でウェルあたり５×１０５個の細胞の密度で継代培養し、５０〜６０％の集密度まで成長させた（４８時間）。次に、成長培地を、エタノール／水１：１（ｖ／ｖ）中に溶解した試験化合物を含有する５００μｌの無血清ＤＭＥＭ：ＨａｍのＦ１２と交換して、アッセイの最終濃度が、０．５％のエタノールからなるようにした。６つの濃度を評価し、化合物を有しない対照試料に０．５％のエタノールを補充した。化合物を有する細胞を、９５％の空気／５％のＣＯ２下、３７℃で６時間インキュベートした。その後、上清を除去し、分析まで−２０℃で保管した。上清を除去した後、形態学的変化について位相差顕微鏡検査を利用する光学的評価によって、およびレサズリンの蛍光最終産物レゾルフィンへの変換を測定するレサズリン法によって、細胞を評価して、生存率を保証した。生存不能な細胞は、変換を行うための代謝能力を欠いている。Ｗａｌｌａｃ１４２０Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  Ｃｏｕｎｔｅｒ  Ｖｉｃｔｏｒ  Ｆｌｕｏｒｏｍｅｔｅｒ／Ｌｕｍｉｎａｔｏｒ（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ、Ｗｌａｔｈａｍ，ＭＡ）を使用して、それぞれ５４４ｎｍ／５９０ｎｍ（消光／発光）での蛍光を測定することによって、変換を定量化した。
【０２０４】
アルドステロンシンターゼ活性の尺度としてのアルドステロン濃度の定量化は、次のようにＬＣ−ＭＳによって達成した。分析の前に、アセトニトリルを使用して、試料タンパク質を沈殿させ、遠心分離後、無粒子上清をＬＣ−ＭＳに供した。ＨＰＬＣシステムは、Ａｃｃｅｌａ  Ｕ−ＨＰＬＣポンプおよびＡｃｃｅｌａ  Ｏｐｅｎオートサンプラー（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ）からなった。標準的なＸｃａｌｉｂｕｒソフトウェア２．２（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ）を実行しているＰＣに接続された加熱エレクトロスプレー（Ｈ−ＥＳＩ）インターフェイスを備えたＱ−Ｅｘａｃｔｉｖｅ  ＭＳ（Ｏｒｂｉｔｒａｐ）を使用して、質量分析を実行した。ＬＣは、０．１％のギ酸（溶媒Ａ）および０．１％の水溶性ギ酸溶媒Ｂを有するアセトニトリルを使用して、勾配モードで実行した。ポンプ流量は６００μｌ／分に設定し、Ｋｉｎｅｔｅｘ  Ｐｈｅｎｙｌ−Ｈｅｘｙｌ２．６μｍ、Ｃ６−フェニルを有する５０×２．１ｍｍの分析カラム（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ、Ｇｅｒｍａｎｙ）、定量化用の４×２．０ｍｍのＩＤプレカラムで分離を実行した。ＭＳチューンファイルとして、一般的なチューンファイルを使用し、内部較正のロックマスとして、溶媒系に存在するフタル酸ジイソオクチル（ｍ／ｚ３９１．２８４９２）の［Ｍ＋Ｈ］＋イオンを使用した。Ｏｒｂｉｔｒａｐ（商標）の質量分解能を３５，０００に設定して、完全なＭＳ−ＳＩＭ分析（ｍ／ｚ：２５０−４００）を適用した。試料注入体積は、全ての試料について２０μｌであった。結果を、ｎｇ／ｍｌとして表示し、アルドステロン産生の阻害を、未治療の対照と比較した、すなわちあらゆる阻害剤の非存在下での阻害パーセントとして表した（表８）。以下に示されるように、５０％のすぐ上および下にある試験化合物の濃度および対応する阻害パーセンテージを使用する線形補間を使用して、ＩＣ５０値を計算した。
ＩＣ５０＝（５０％−低ｉｎｈ％）／（高ｉｎｈ％−低ｉｎｈ％）×（高ｃｏｎｃ−低ｃｏｎｃ）＋低ｃｏｎｃ
式中、「ｉｎｈ」は、阻害であり、「ｃｏｎｃ」は、濃度である。
2021522289.tif 000012
【０２０５】
アロマターゼ活性は、以下に示されるはるかに高い濃度の阻害剤を使用して、ＩＣ５０を得たことを除いて、アルドステロンシンターゼ活性の決定のための、上記のＮＣＩ−Ｈ２９５Ｒ細胞のインキュベーションからの上清中のエストラジオール濃度の定量化によって測定した。エストラジオール濃度の定量化は、ＩＢＬ−Ｈａｍｂｕｒｇ（Ｈａｍｂｕｒｇ，Ｇｅｒｍａｎｙ）の１７−ベータ−エストラジオールＥＬＩＳＡキットを製造業者の説明書に従って使用して達成した。各参照標準の吸光度（ｙ軸）を対応する対数濃度（ｘ軸）に対してプロットすることによって、検量線を生成した。各試料の吸光度を使用して、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ５．０４ソフトウェア（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ  Ｉｎｃ．、Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）を使用して検量線から補間することによって、対応する値を決定した。
【０２０６】
ＩＣ５０は、本明細書では、表９に開示されるアルドステロンシンターゼデータについて上記の式を使用して計算した。
2021522289.tif 000013
【０２０７】
無細胞ヒト組換えアロマターゼアッセイ
アロマターゼ（ＣＹＰ１９）活性は、ヒトＣＹＰ１９アッセイキット（Ｃｏｒｎｉｎｇ（登録商標）、Ｃｏｒｎｉｎｇ，ＮＹ、製品番号４５６２６０）を製造業者の説明書に従って使用して測定した。アッセイシステムは、組換えヒト酵素、蛍光基質ＭＦＣ（７−メチル−４−トリフルオロ−メチル−クマリン）、ならびにグルコース−６−リン酸塩デヒドロゲナーゼ、ＮＡＤＰ＋、およびグルコース−６−ホスパヘート（ｐｈｏｓｐａｈａｔｅ）からなるＮＡＤＰＨ再生システムを利用した。酵素活性を５０％だけ阻害した試験化合物の濃度（ＩＣ５０）を決定するために、８つの試験濃度を試験した。試験化合物をエタノール／水１：１（ｖ／ｖ）中に溶解して、アッセイの最終エタノール濃度が１％になるようにした。ＮＡＤＰＨ再生システムとともに、様々な濃度の試験化合物を９６ウェルプレートに添加した。１０分間のプレインキュベーション後、予熱した酵素基質混合物の添加によって反応を開始し、３７℃でさらに３０分間継続させた。次に、８０％のアセトニトリルの溶液および２０％の０．５ＭのＴｒｉｓ塩基（停止溶液）の添加によって反応を停止させた。バックグラウンド蛍光を調節するために、（試験試料を含有しない）ブランクウェルもアッセイしたが、これらのウェルには、酵素基質混合物を添加する前に停止溶液を添加した。Ｗａｌｌａｃ１４２０Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  Ｃｏｕｎｔｅｒ  Ｖｉｃｔｏｒ  Ｆｌｕｏｒｏｍｅｔｅｒ／Ｌｕｍｉｎａｔｏｒ（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ、Ｗｌａｔｈａｍ，ＭＡ）を使用して、形成された蛍光産物である７−ヒドロキシ−４−トリフルオロ−メチル−クマリン（ＨＦＣ）を検出した。励起および発光の波長はそれぞれ、４０５ｎｍおよび５３５ｎｍであった。標準的なソフトウェアＷａｌｌａｃ１４２０Ｍａｎａｇｅｒ３．０を用いて、データをコンパイルした。上記に示されるブランクウェル試料を差し引くことに加えて、各試験物質を、自家蛍光について事前に試験した。この目的のために、ＮＡＤＰＨ生成システム（補因子混合物）および酵素／基質混合物を、対照タンパク質、アッセイ緩衝液、および試験化合物溶媒の同等の混合物に交換した。次に、これらの対照試料を、上記のようにプレインキュベートおよびアッセイした。ＩＣ５０の３つの独立した決定は、阻害％対阻害剤濃度の最良適合プロットの線から行った（表１０）。
2021522289.tif 000014
【０２０８】
実施例６
（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩（結晶形態Ｉ）の調製
ステップ１：（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジンジベンゾイル−Ｌ−酒石酸塩の調製
１０Ｌの反応器に、２０℃で、ラセミ５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジン（３２８ｇ、＝１．０当量）およびエタノール（２．３Ｌ）を充填した。混合物を４０℃に加熱し、次にエタノール（１Ｌ）中の（−）−Ｏ，Ｏ’−ジベンゾイル−Ｌ−酒石酸（２７６．４ｇ、０．５当量）の溶液を添加した。混合物を４０℃で１時間維持し、次に２時間かけて２０℃に冷却し、この温度で１時間維持し、次に０．５時間かけて１０℃に冷却し、最後に１０℃で一晩維持した。その後、沈殿物を濾別し、フィルターケーキを冷（０℃）エタノール（１Ｌ）で洗浄して、表題化合物を白色の湿った粉末として得た（４８５ｇ、＝４１３．７ｇの乾燥推定値、乾燥損失による、４８．４％、ｅｅ＝８７％）。
【０２０９】
ステップ２：（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジンジベンゾイル−Ｌ−酒石酸塩の再結晶化
１０Ｌの反応器に、２０℃で、ステップ１から得られた（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジンジベンゾイル−Ｌ−酒石酸塩（４８５ｇ、ｅｅ＝８７％、＝４１３．７ｇの乾燥推定値、乾燥損失による、＝１．０当量）、エタノール（１０Ｌ、２４Ｖ）、および水（２．４Ｌ、６Ｖ）を充填した。得られた混合物を加熱して、還流させたところ、溶液が形成された。次に、溶液を５０℃に冷却し、この温度で１時間維持した。続いて、混合物を２時間かけて１０℃に冷却し、次にこの温度で一晩維持した。沈殿物を濾別し、フィルターケーキを冷（０℃）エタノール（１．２Ｌ）で洗浄した。生成物を、減圧下、４０℃で乾燥させて、表題化合物を白色粉末として得た（２９４．８ｇ、７１％、単一鏡像体）。
鏡像体過剰率：ＨＰＬＣによって決定して、９９．９％超
【０２１０】
ステップ３：（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジン（遊離塩基）の調製
２Ｌの反応器に、ステップ２から得られた（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジンジベンゾイル−Ｌ−酒石酸塩（１７７ｇ、単一鏡像体）およびジクロロメタン（１．７７Ｌ、１０Ｖ）を充填した。次に、Ｎａ２ＣＯ３（７１ｇ、２．２当量）の水溶液（８７５ｍＬ）を添加した。室温で０．２５時間撹拌した後、混合物をデカントした。このようにして得られた液相は、澄んでおり、水相は、８〜９のｐＨを有した。有機相を水（２×８７５ｍＬ）で洗浄し、次に真空下で濃縮した。残留物をエタノール中に溶解し、再び真空下で濃縮して、表題化合物を油として得（７０ｇ、定量的）、これは、静置すると固化した。
【０２１１】
ステップ４：（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩
１Ｌの反応器内に、（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジン（９４ｇ、１．０当量）およびエタノール（５６４ｍＬ）を充填し、混合物を３５℃に加熱した。溶液を濾過し、反応器をエタノール（９４ｍＬ）で濯いだ。エタノール（２３５ｍＬ）中のＨ３ＰＯ４（９７ｇ、Ｈ２Ｏ中８５％ｗｔ／ｗｔ）の溶液を同じ温度で添加し、エタノール（４７ｍＬ）で濯いだ。３５℃で１時間撹拌した後、混合物を（−２０℃／時の速度で）１０℃に冷却し、この温度で１０時間維持した。得られた固体を濾別し、フィルターケーキを冷（１０℃）エタノール（３×９４ｍＬ）で洗浄した。減圧下、５０℃で乾燥した後、表題化合物を白色の結晶性自由流動性粉末（１００ｇ、７４％）として得た。
【０２１２】
その全体が参照により本明細書に組み込まれる、本出願人の出願ＰＣＴ／ＥＰ２０１７／０７７５１１の表１および図７に記載のＸＲＰＤ。特に、該ＸＲＰＤデータについては、この特定の開示が参照により本明細書に組み込まれる、本出願人の出願ＰＣＴ／ＥＰ２０１７／０７７５１１の表１および図７を参照する必要がある。
【０２１３】
融点：ＴＧＡ／ＤＳＣによって決定して、かつその全体が参照により本明細書に組み込まれるが、特に、該図７の特定の開示が参照により本明細書に組み込まれる、本出願人の出願ＰＣＴ／ＥＰ２０１７／０７７５１１の図７に示されるように、１８９℃。
【０２１４】
鏡像体過剰率（ｅｅ）：（その全体が参照により本明細書に組み込まれるが、特に、該図３の特定の開示が参照により本明細書に組み込まれる、本出願人の出願ＰＣＴ／ＥＰ２０１７／０７７５１１の図３に示されるように）９９．９％超。調製物の鏡像体過剰率を測定するためのキラルＨＰＬＣは、Ｒ−（＋）−鏡像体で１４．４５９分、およびＳ−（−）−鏡像体で９．８１４分の保持時間（ｔｒ）を特徴とした。
【０２１５】
絶対配置：単結晶Ｘ線によって決定して、炭素５上のＲ−（＋）−。比旋光度（ＣＨ３ＣＮ：Ｈ２Ｏ１：１（ｖ／ｖ））：［α］Ｄ２０＝＋９８．１。
【０２１６】
吸湿性：ＤＶＳによって決定して、９０％以上の相対湿度（ＲＨ）で１．０％。（その全体が参照により本明細書に組み込まれるが、特に、該図４〜図６の特定の開示が参照により本明細書に組み込まれる、本出願人の出願ＰＣＴ／ＥＰ２０１７／０７７５１１の図４〜図６に示されるように）水取り込みは可逆的であり、結晶形態はＤＶＳ処理時に変化しない。最大２２５℃まで加熱したときの質量損失は、ＴＧＡ／ＤＳＣによって決定して、１．４％である（上記を参照されたい）。（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩の結晶を、それらの元素分析によってさらに特性評価し、これは、分子式Ｃ１４Ｈ１６Ｎ３Ｏ４Ｐ（ＭＷ：３２１．２７）：Ｃ５２．４％、Ｈ５．１％、Ｎ１３．０３％から計算した値と一致したものである。
【０２１７】
実施例７
遊離塩基を介した（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロ−イミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩からの（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン−塩化物の調製
実施例３で調製した（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロ−イミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン二水素リン酸塩（１０００ｍｇ、３．１１ｍｍｏｌ）を、Ｅｔ２Ｏ（３０ｍｌ）中に懸濁し、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（３０ｍｌ）で抽出した。水層をジエチルエーテル（２×２０ｍｌ）で抽出し、合わせた有機層をブライン（１０ｍｌ）および蒸留水（１０ｍｌ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、蒸発させて、遊離塩基（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジンを白色固体として得、これを、５０℃、一晩真空乾燥した（５３０ｍｇ）。
融点：１０１〜１０２℃、比旋光度（エタノール）：［α］Ｄ２５＝＋１２７．３
【０２１８】
このようにして得られた（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピリジン（１００ｍｇ、０．４４７ｍｍｏｌ、１当量）を塩化メチレン（２．２ｍｌ）中に溶解し、ＨＣｌ（ジエチルエーテル中２Ｍ、０．３４ｍｌ、０．７６ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加し、混合物を室温で３０分間撹拌し、次に蒸発させ、８０℃で真空乾燥した。（Ｒ）−（＋）−５−（ｐ−シアノフェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロ−イミダゾリウム［１，５−ａ］ピリジン塩化物を、結晶性固体として単離した。
融点：２４０〜２４３℃、比旋光度（エタノール）：［α］Ｄ２０＝＋１０４．８、比旋光度（ＣＨ３ＣＮ：Ｈ２Ｏ１：１（ｖ／ｖ））：［α］Ｄ２０＝＋１２４．４。
【０２１９】
実施例８
ＤＰ１３治療後の血清エストラジオール、テストステロン、および卵胞刺激ホルモン濃度
上記のように、ファドロゾールとは異なり、ＤＰ１３は、４、８、または１６ｍｇで１日１回経口投薬した後に、エストラジオールの阻害も、循環テストステロンまたはＦＳＨの増加もさせなかった。エストラジオールは、ＤＰ１３治療の８日後に、４および８ｍｇの用量でわずかに増加した。したがって、ＤＰ１３で治療した正常な健康な男性におけるエストロゲン抑制（アロマターゼ阻害）の証拠はない。
【０２２０】
血清エストラジオール、テストステロン、および卵胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）レベルを、ＡＤＶＩＡ  Ｃｅｎｔａｕｒ（登録商標）ＣＰシステム（Ｓｉｅｍｅｎｓ  ＡＧ）を用いて、Ｃｏｖａｎｃｅの診断ユニット（Ｈａｒｒｏｇａｔｅ，ＵＫ）によって測定した。ＡＤＶＩＡ  Ｃｅｎｔａｕｒ増強エストラジオールアッセイは、完全に自動化されたモノクローナル競合化学発光イムノアッセイであり、１０ｐｇ／ｍｌの感度を有する。ＡＤＶＩＡ  Ｃｅｎｔａｕｒ（登録商標）ＣＰ  ＦＳＨアッセイは、直接化学発光技術を使用する２部位サンドイッチイムノアッセイであり、これは、インタクトなＦＳＨ分子に対する特異性を有する２つの抗体を使用する。ＡＤＶＩＡ  Ｃｅｎｔａｕｒ（登録商標）ＣＰテストステロンアッセイは、直接化学発光技術を使用する競合固相イムノアッセイである。血清エストラジオール、テストステロン、およびＦＳＨのレベルの測定に使用される上記のアッセイの全ては、製造業者によって記載のように実施した。
2021522289.tif 000015
【０２２１】
その全体が参照により本明細書に組み込まれる、ＰＣＴ／ＥＰ２０１７／０７７５１１、ならびに特に実施例および図、特に実施例３〜５および８をさらに参照する。
【国際調査報告】
2021522289.tif 000016
2021522289.tif 000017
2021522289.tif 000018
2021522289.tif 000019