(57)【要約】一態様では、本開示は、少なくとも１つのＣＳＦ１Ｒ阻害剤、及び所望により抗炎症薬及び／又は呼吸薬であるさらなる治療薬の投与によって、喘息、アレルギー性結膜炎、アレルギー性皮膚炎、アレルギー性食道炎、アレルギー性鼻炎、アレルゲン特異的血清ＩｇＥ産生、アレルギー性肺及び気道の炎症、並びに最小限の肺有害反応を伴う気道過敏性（ＡＨＲ）を含むがこれらに限定されないアレルギー性炎症を特徴とする疾患又は状態を処置する方法に関する。いくつかの態様では、アレルギー性炎症を特徴とする処置に有用な開示ＣＳＦ１Ｒ阻害剤は、開示医薬組成物を使用して投与され得る。この要約は、特定の技術分野で検索することを目的としたスキャンツールとして意図されており、本開示を限定することを意図するものではない。【選択図】図９
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
対象におけるアレルギー性炎症を特徴とする疾患又は症状を処置する方法であって、
前記対象に、有効量の小分子ＣＳＦ１Ｒ阻害剤を投与することを含む、前記方法。
【請求項２】
ＣＳＦ１Ｒ阻害剤が、ＰＬＸ３３９７、ＤＣＣ−３０１４、ＢＬＺ９４５、ＧＷ２５８０、ＰＬＸ６４７、及びＡＲＲＹ−３８２、並びにその薬学的に許容可能な塩から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
ＣＳＦ１Ｒ阻害剤が、ＧＷ２５８０若しくはＰＬＸ３３９７、又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
有効量の小分子ＣＳＦ１Ｒ阻害剤が、前記小分子ＣＳＦ１Ｒ阻害剤を含む微粒子を含む、請求項１〜請求項３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
前記微粒子が、β−シクロデキストリン結合型ε−ポリリジンをさらに含む、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
ＣＳＦ１Ｒ阻害剤が、急性アレルギーのフレアアップ中に患者に投与される、請求項１〜請求項５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
ＣＳＦ１Ｒ阻害剤が、急性アレルギーのフレアアップに先立って患者に投与される、請求項１〜請求項５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
前記アレルギー性炎症を特徴とする疾患又は症状が、喘息、アレルギー性結膜炎、アレルギー性皮膚炎、アレルギー性食道炎、及びアレルギー性鼻炎から選択される、請求項１〜請求項７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
ＣＳＦ１Ｒ阻害剤が、ＧＷ２５８０若しくはＰＬＸ３３９７、又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
前記疾患又は症状が、喘息又はアレルギー性結膜炎である、請求項８又は請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
ＣＳＦ１Ｒ阻害剤が、鼻エアロゾル又は吸入によって患者に投与される、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記疾患又は症状がアレルギー性結膜炎である、請求項８又は請求項９に記載の方法。
【請求項１３】
ＣＳＦ１Ｒ阻害剤が、前記ＣＳＦ１Ｒ阻害剤を含む眼科用組成物の付与によって患者に投与される、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記アレルギー性炎症を特徴とする疾患又は症状がアレルギー性皮膚炎である、請求項８又は請求項９に記載の方法。
【請求項１５】
ＣＳＦ１Ｒ阻害剤が、前記ＣＳＦ１Ｒ阻害剤を含む局所クリーム又は軟膏の付与によって患者に投与される、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記アレルギー性炎症を特徴とする疾患又は症状がアレルギー性食道炎である、請求項８又は請求項９に記載の方法。
【請求項１７】
ＣＳＦ１Ｒ阻害剤が、前記ＣＳＦ１Ｒ阻害剤を含む経口組成物の摂取によって患者に投与される、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
ＣＳＦ１Ｒ阻害剤又はその薬学的に許容可能な塩を含む微粒子。
【請求項１９】
前記ＣＳＦ１Ｒ阻害剤が、ＰＬＸ３３９７、ＤＣＣ−３０１４、ＢＬＺ９４５、ＧＷ２５８０、ＰＬＸ６４７、及びＡＲＲＹ−３８２、並びにその薬学的に許容可能な塩から選択される、請求項１８に記載の微粒子。
【請求項２０】
β−シクロデキストリン結合型ε−ポリリジンをさらに含む、請求項１９に記載の微粒子。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本願は、２０１８年４月１９日に出願された米国仮出願第６２／６５９，７９１号及び２０１８年１０月２５日に出願された米国仮出願第６２／７５０，３５２号の利益を主張し、これらは参照によりその全体が本明細書に援用される。
【０００２】
連邦政府による資金提供を受けた研究開発の記載
本発明は、アメリカ国立衛生研究所（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ、ＮＩＨ）によって授与された助成金番号ＨＬ１２６８５２の下で米国政府の支援を受けてなされた。米国政府は本発明において一定の権利を有する。
【背景技術】
【０００３】
現在の標準的医療にもかかわらず、喘息の患者の多くは、長期的な障害を伴う症状を示している。喘息の新しい治療戦略を開発することが切実に必要とされている。気道の粘膜層で起こる現象は、Ｔｈ２免疫応答の発達を促進するために重要である。気道粘膜でＴｈ２免疫介在性アレルギー性炎症が開始されるメカニズムは、よりよく理解されている（Ｌａｍｂｒｅｃｈｔ  ＢＮ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ２００９  ３１：４１２−４２４；  Ｈａｍｍａｄ  Ｈ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ２０１５  ４３：２９−４０）。空気アレルゲンに対する粘膜免疫反応の早期の初期現象を標的とする治療戦略は、それに続く肺におけるアレルギー性炎症のＩｇＥ及びＴｈ２介在性態様をすべて無効にする可能性があるため、より大きな治療効果をもたらす可能性がある。
【０００４】
喘息は、断続的なフレアアップ（ｆｌａｒｅ−ｕｐ）を伴う慢性気道疾患である。人は、ハウスダストダニや花粉などの特定のアレルゲンに対する「感作」（ｓｅｎｓｉｔｉｚａｔｉｏｎ）のプロセスを通じて喘息になる。一旦感作されると、感作アレルゲンへの再曝露により、各人は気道の炎症及び息切れを発症する。アレルゲン感作を標的とする治療法は、喘息の制御に有効性を示している（Ｂｕｓｓｅ  ＷＷ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ  ２０１１  ３６４：１００５−１０１５；  Ｔｅａｃｈ  ＳＪ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｊ  Ａｌｌｅｒｇｙ  Ｃｌｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ２０１５  １３６：１４７６−１４８５）。空気アレルゲンの感作プロセスは、主に気道上皮細胞及び樹状細胞の２つの主要な細胞タイプによって実行される。
【０００５】
気道上皮細胞（Ａｉｒｗａｙ  Ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ  Ｃｅｌｌ、ＡＥＣ）は、吸入された粒子との最初の直接接触を通じて空気アレルゲンを感知するためのゲートウェイである（Ｌａｍｂｒｅｃｈｔ  ＢＮ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｊ  Ａｌｌｅｒｇｙ  Ｃｌｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ２０１４  １３４：４９９−５０７）。ＡＥＣのＴｏｌｌ様受容体（Ｔｏｌｌ−ｌｉｋｅ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ）を含むパターン認識受容体は、アレルゲンを認識し、その後のアレルギー性炎症シグナルを生成するために必要である。ＡＥＣは、空気アレルゲンによって活性化されると、サイトカイン、ケモカイン、及び内因性の危険信号を基底側及び管腔側に生成し、微小環境を変化させて自然免疫細胞を活性化する。ＡＥＣは、免疫細胞を動員し、免疫反応を優勢なＴｈ２パターンに偏らせるのに重要な役割を持つ先天性サイトカインを分泌する（Ｈａｍｍａｄ  Ｈ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ２０１５  ４３：２９−４０）。管腔側では、ＡＥＣがケモカインを肺胞腔に分泌し、アレルゲンチャレンジ時に単球由来の肺胞マクロファージを動員することが示されている（Ｌｅｅ  ＹＧ，  ｅｔ  ａｌ．  Ａｍ  Ｊ  Ｒｅｓｐｉｒ  Ｃｅｌｌ  Ｍｏｌ  Ｂｉｏｌ  ２０１５  ５２：７７２−７８４；  Ｚａｓｌｏｎａ  Ｚ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ２０１４  １９３：４２４５−４２５３）。これらの知見は、ＡＥＣが、気道の微小環境を調節して、空気アレルゲンに対応してアレルギー性炎症を支持することを示している。
【０００６】
感作時、樹状細胞（Ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ  Ｃｅｌｌ、ＤＣ）は「侵入してきた」アレルゲンを取り込み、処理し、局所リンパ節（Ｌｙｍｐｈ  Ｎｏｄｅ、ＬＮ）に移動することで、アレルゲン特異的なＴｈ２メモリーが確立される。ＤＣは、この自然免疫と適応免疫との間に不可欠なインターフェースを形成し、一次感作及び抗原特異的ＩｇＥの産生に重要な役割を果たす（Ｌａｍｂｒｅｃｈｔ  ＢＮ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ２００９  ３１：４１２−４２４）。ＤＣは吸入されたアレルゲンをＬＮに輸送し、そこでＴ細胞及びＢ細胞が関与する抗原特異的な適応免疫応答を開始する（Ｊｏｆｆｒｅ  Ｏ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｒｅｖ  ２００９  ２２７：２３４−２４７）。従来のＤＣ（Ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎａｌ  ＤＣ、ｃＤＣ）は、様々な種類の炎症における抗原提示において重要な役割を果たす。ｃＤＣは、リンパ節へのＤＣの活性化及びホーミング（ｈｏｍｉｎｇ）に関与するより高度なＣＣＲ７を発現する。ＤＣの２つの主要なサブセットであるｃＤＣ１とｃＤＣ２は、ヒト及びマウスの両方で固有の特徴及び特性を備えている。ｃＤＣ２はＩＲＦ４に強く依存し、複数のパターン認識受容体を発現するが、ｃＤＣ１はＩＲＦ８に依存し、ＣＤ８＋Ｔ細胞を活性化する。特に、ｃＤＣ２は、ＭＨＣクラス２依存性抗原提示において重要な役割を果たし、喘息の動物モデルにおける局所ＬＮへのアレルゲンのより効果的なキャリアである（Ｐｌａｎｔｉｎｇａ  Ｍ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ２０１３  ３８：３２２−３３５）。
【０００７】
しかしながら、ＡＥＣ及びＤＣが空気アレルゲンを感知する過程でどのように相互作用するかは完全には解明されていない。ＡＥＣはＤＣと協力して、アレルゲン感作を促進する（Ｍｏｏｎ  Ｈ−Ｇ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ２０１８  ４９：２７５−２８７．ｅ２７５）。ＡＥＣは、空気アレルゲンに応答してＣＳＦ１を肺胞腔に分泌する。ＣＳＦ１は、気管支鏡検査によって感作性アレルゲンでチャレンジした後の喘息患者の気管支肺胞洗浄（ＢＡＬ）液で著しく上昇した。関連する動物モデルを用いたところ、ＡＥＣがＢＡＬ液中のＣＳＦ１の主要な供給源であることが判明した。上皮分泌ＣＳＦ１はＤＣ（特にｃＤＣ２）を活性化し、ＬＮへのホーミングケモカイン受容体であるＣＣＲ７のＤＣ発現を調節することにより、局所ＬＮへの動員を促進した（Ｍｏｏｎ  Ｈ−Ｇ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ２０１８  ４９：２７５−２８７．ｅ２７５）。これは、空気アレルゲンに対する粘膜免疫反応の最も早期のイベントであるが、喘息性気道疾患を持続させるメモリー応答としても生じる。このプロセスをブロックすることによって、アレルゲンへの感作と、それに続くアレルゲンへの繰り返しの曝露の際のアレルギー性炎症を無効とすることができ得る。
【０００８】
例えば、アレルギー性炎症といった炎症研究の進歩にもかかわらず、そのような障害の処置に有用な強力かつ効果的で選択的である処置薬である化合物は依然として不足している。これらのニーズ及び他のニーズは、本開示によって満たされる。
【発明の概要】
【０００９】
一態様では、本開示は、少なくとも１つのＣＳＦ１Ｒ阻害剤及び所望により抗炎症薬及び／又は呼吸薬であるさらなる処置薬の投与によって、喘息、アレルギー性結膜炎、アレルギー性皮膚炎、アレルギー性食道炎、アレルギー性鼻炎、アレルゲン特異的血清ＩｇＥ産生、アレルギー性肺及び気道の炎症、並びに最小限の肺有害反応を伴う気道過敏性（ＡＨＲ）を含むがこれらに限定されないアレルギー性炎症を特徴とする疾患又は症状を処置する方法に関する。いくつかの態様では、アレルギー性炎症を特徴とする処置に有用な開示ＣＳＦ１Ｒ阻害剤は、開示医薬組成物を使用して投与され得る。
【００１０】
本明細書に開示されるように、ＣＳＦ１−ＣＳＦ１Ｒ経路は、局所リンパ節におけるＴｈ２メモリー応答を確立及び維持するために重要である。ＣＳＦ１Ｒ拮抗薬を運搬するナノ粒子の鼻腔内送達は有効性があり、重大な有害作用なしに好ましい薬物動態を示す。したがって、ＣＳＦ１Ｒ阻害は、アレルギー性炎症、特にアレルギー性喘息の有望な新しい治療アプローチである。
【００１１】
したがって、本開示の一態様は、対象におけるアレルギー性炎症を特徴とする疾患又は症状を処置する方法であって、上記対象に有効量の小分子ＣＳＦ１Ｒ阻害剤を投与することを含む、上記方法である。
【００１２】
本開示の別の態様は、感作されたアレルゲンに曝露された対象のアレルギー性炎症を調節する方法であって、上記対象に有効量の小分子ＣＳＦ１Ｒ阻害剤を投与することを含む、上記方法である。
【００１３】
特定の態様では、上記ＣＳＦ１Ｒ阻害剤は、ＰＬＸ３３９７、ＤＣＣ−３０１４、ＢＬＺ９４５、ＧＷ２５８０、ＰＬＸ６４７、及びＡＲＲＹ−３８２、並びにその薬学的に許容可能な塩から選択される。特に特定の態様では、上記ＣＳＦ１Ｒ阻害剤は、ＧＷ２５８０若しくはＰＬＸ３３９７、又はその薬学的に許容可能な塩である。
【００１４】
他の態様では、上記対象に、小分子ＣＳＦ１Ｒ阻害剤を含む微粒子が投与される。他の態様では、上記微粒子は、β−シクロデキストリン結合型イプシロン−ポリリジンをさらに含む。
【００１５】
一態様では、上記アレルギー性炎症を特徴とする疾患又は症状は、喘息、アレルギー性結膜炎、アレルギー性皮膚炎、アレルギー性食道炎、及びアレルギー性鼻炎から選択される。別の態様では、上記ＣＳＦ１Ｒ阻害剤は、急性アレルギーのフレアアップ中に上記患者に投与される。別の態様では、上記ＣＳＦ１Ｒ阻害剤は、急性アレルギーのフレアアップに先立って上記患者に投与される。
【００１６】
他の態様では、上記アレルギー性炎症を特徴とする疾患又は症状は、喘息又はアレルギー性鼻炎から選択され、炎症は、アレルギー性鼻炎、アレルギー性結膜炎、アレルギー性皮膚炎、及びアレルギー性食道炎である。
【００１７】
他の態様では、上記喘息またはアレルギー性鼻炎は、上記ＣＳＦ１Ｒ阻害剤を含むエアロゾル製剤を上記対象に投与することによって処置される。
【００１８】
他の態様では、上記アレルギー性結膜炎は、上記ＣＳＦ１Ｒ阻害剤を含む眼科用組成物を上記対象に投与することによって処置される。
【００１９】
他の態様では、上記アレルギー性皮膚炎は、上記ＣＳＦ１Ｒ阻害剤を含む局所クリーム又は軟膏を上記対象に投与することによって処置される。
【００２０】
他の態様では、上記アレルギー性食道炎は、上記ＣＳＦ１Ｒ阻害剤を含む経口製剤を上記対象に投与することによって処置される。
【００２１】
本開示の別の態様は、上記ＣＳＦ１Ｒ阻害剤又はその薬学的に許容可能な塩を含む微粒子である。一態様では、上記微粒子は、β−シクロデキストリン結合型イプシロン−ポリリジンをさらに含む。
【００２２】
本開示の別の態様は、上記ＣＳＦ１Ｒ阻害剤又はその薬学的に許容可能な塩を含むエアロゾル製剤である。
【００２３】
本開示の別の態様は、上記ＣＳＦ１Ｒ阻害剤又はその薬学的に許容可能な塩を含む眼用製剤である。
【００２４】
本開示の別の態様は、ＰＬＸ３３９７、ＤＣＣ−３０１４、ＢＬＺ９４５、ＧＷ２５８０、ＰＬＸ６４７、及びＡＲＲＹ−３８２、又はその薬学的に許容可能な塩から選択されるＣＳＦ１Ｒ阻害剤と、眼用賦形剤と、を含む局所投与用製剤である。
【００２５】
本開示の別の態様は、ＰＬＸ３３９７、ＤＣＣ−３０１４、ＢＬＺ９４５、ＧＷ２５８０、ＰＬＸ６４７、及びＡＲＲＹ−３８２、又はその薬学的に許容可能な塩から選択されるＣＳＦ１Ｒ阻害剤を含む経口投与用製剤である。
【００２６】
本開示の他のシステム、方法、特徴、及び利点は、以下の図面及び詳細な説明を検討することにより、当業者に明らかであるか又は明らかになるであろう。そのようなすべての追加のシステム、方法、特徴、及び利点が本明細書に含まれ、本開示の範囲内にあることが意図され、付随する特許請求の範囲によって保護される。また、記載された実施形態の全ての所望の好ましい特徴及び変更は、本明細書で教示される開示の全ての態様で使用可能である。さらに、従属請求項の個々の特徴、並びに記載された実施形態の全ての所望の好ましい特徴及び変更は、互いに組み合わせ可能であり、交換可能である。
【００２７】
本開示の多くの態様は、以下の図面を参照することにより、よりよく理解することができる。図面中の構成要素は必ずしも縮尺どおりではなく、むしろ本開示の原理を明確に示すことに重点が置かれている。さらに、図面において、同様の参照番号は、いくつかの図全体において対応する部分を示す。
【図面の簡単な説明】
【００２８】
【図１Ａ】図１Ａ〜図１Ｆは、ＣＳＦ１及びＣＳＦ１Ｒ＋ｃＤＣが、慢性ＤＲＡモデルのＢＡＬ液に非常に多く含まれることを示した図である。（図１Ａ）左：喘息の慢性ＤＲＡ誘発性マウスモデル（慢性ＤＲＡモデル）の実験スキーム。右：表示された時点でＢＡＬ液を得て、これらのＢＡＬ液中のＣＳＦ１のレベルをＥＬＩＳＡによって測定した。ＤＲＡ反応性血清ＩｇＥは、定常状態のＩｇＥレベルと比較した増加倍数として表す。＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１。
【図１Ｂ】図１Ａ〜図１Ｆは、ＣＳＦ１及びＣＳＦ１Ｒ＋ｃＤＣが、慢性ＤＲＡモデルのＢＡＬ液に非常に多く含まれることを示した図である。（図１Ｂ）図７に示すようなゲーティング戦略を使用することによって、ｃＤＣ集団及びＣＳＦ１Ｒ＋ｃＤＣ集団を、慢性ＤＲＡモデルの過程でＢＡＬ液において測定した。ＤＲＡ反応性血清ＩｇＥは、定常状態のＩｇＥレベルと比較した増加倍数として表す。＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１。
【図１Ｃ】図１Ａ〜図１Ｆは、ＣＳＦ１及びＣＳＦ１Ｒ＋ｃＤＣが、慢性ＤＲＡモデルのＢＡＬ液に非常に多く含まれることを示した図である。（図１Ｃ）総血清ＩｇＥ及びＤＲＡ反応性血清ＩｇＥの濃度を、表示された時点で測定した。ＤＲＡ反応性血清ＩｇＥは、定常状態のＩｇＥレベルと比較した増加倍数として表す。＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１。
【図２Ａ】図２は、ＡＥＣ由来のＣＳＦ１の枯渇は、アレルゲン感作を防ぎ、慢性アレルギー性肺炎を無効にすることを示した図である。（図２Ａ）Ｓｃｇｂ１ａ１−ｃｒｅＥＲＴ；Ｃｓｆ１ｆｌ／ｆｌ（ＣＳＦ１ΔＡＥＣ）マウスを使用して慢性ＤＲＡモデルでＡＥＣ由来ＣＳＦ１を枯渇させるための実験スキーム。タモキシフェン（Ｔａｍｏｘｉｆｅｎ）は、４週間ごとに５日間連続（１サイクル）経口投与した。全てのサンプルは１１週目の終了時に採取した。（図２Ｂ〜図２Ｅ）タモキシフェン単独では、ＤＲＡチャレンジがない場合（Ｔｍ＿Ｖｅｈ）、ＢＡＬサイトカインに影響を与えないが、基本的なＢＡＬ  ＣＳＦ１レベルはわずかに低下する（図２Ｂ）。ＤＲＡチャレンジは、ＢＡＬ  ＣＳＦ１、ＩＬ−４、及びＩＬ−１３（Ｖｅｈ＿ＤＲＡ）の著しい増加を誘発したが、Ｔｍ処置（Ｔｍ＿ＤＲＡ）によって大幅に減少した（図２Ｂ及び図２Ｅ）。総血清ＩｇＥ濃度及びＤＲＡ反応性血清ＩｇＥ濃度もＴｍ処置によって抑制された（図２Ｃ）。ＤＲＡ反応性血清ＩｇＥは、偽処置対照群（Ｖｅｈ＿Ｖｅｈ）と比較した増加倍数として表す。総ＢＡＬ細胞の増加はＴｍ処置によって抑制され、細胞は主にマクロファージとリンパ球とで構成されてした（図２Ｄ）。（図２Ｆ）形態計測デジタル病理分析は、「方法」に記載されているように、単一の肺野全体にわたって実施した。デジタル病理画像のカラーコードは、以下を示す。緑色：炎症細胞、黄色：気道領域、茶色：ボイドスペース。炎症領域は、Ｔｍ処置によって著しく減少した。スケールバーは、中央パネルが５ｍｍ、右パネルが５００μｍである。（図２Ｇ〜図２Ｉ）杯細胞の過ヨウ素酸シッフ（ＰＡＳ）染色と、抗コラーゲン抗体及び抗α平滑筋アクチン抗体による免疫蛍光染色とを、Ｔｍ処置群と偽処置ＤＲＡ群との間で比較した。シグナルは、フィールドごとのシグナルの測定によって定量化した。スケールバーは２００μｍを表す。＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１。
【図２Ｂ】図２は、ＡＥＣ由来のＣＳＦ１の枯渇は、アレルゲン感作を防ぎ、慢性アレルギー性肺炎を無効にすることを示した図である。（図２Ａ）Ｓｃｇｂ１ａ１−ｃｒｅＥＲＴ；Ｃｓｆ１ｆｌ／ｆｌ（ＣＳＦ１ΔＡＥＣ）マウスを使用して慢性ＤＲＡモデルでＡＥＣ由来ＣＳＦ１を枯渇させるための実験スキーム。タモキシフェン（Ｔａｍｏｘｉｆｅｎ）は、４週間ごとに５日間連続（１サイクル）経口投与した。全てのサンプルは１１週目の終了時に採取した。（図２Ｂ〜図２Ｅ）タモキシフェン単独では、ＤＲＡチャレンジがない場合（Ｔｍ＿Ｖｅｈ）、ＢＡＬサイトカインに影響を与えないが、基本的なＢＡＬ  ＣＳＦ１レベルはわずかに低下する（図２Ｂ）。ＤＲＡチャレンジは、ＢＡＬ  ＣＳＦ１、ＩＬ−４、及びＩＬ−１３（Ｖｅｈ＿ＤＲＡ）の著しい増加を誘発したが、Ｔｍ処置（Ｔｍ＿ＤＲＡ）によって大幅に減少した（図２Ｂ及び図２Ｅ）。総血清ＩｇＥ濃度及びＤＲＡ反応性血清ＩｇＥ濃度もＴｍ処置によって抑制された（図２Ｃ）。ＤＲＡ反応性血清ＩｇＥは、偽処置対照群（Ｖｅｈ＿Ｖｅｈ）と比較した増加倍数として表す。総ＢＡＬ細胞の増加はＴｍ処置によって抑制され、細胞は主にマクロファージとリンパ球とで構成されてした（図２Ｄ）。（図２Ｆ）形態計測デジタル病理分析は、「方法」に記載されているように、単一の肺野全体にわたって実施した。デジタル病理画像のカラーコードは、以下を示す。緑色：炎症細胞、黄色：気道領域、茶色：ボイドスペース。炎症領域は、Ｔｍ処置によって著しく減少した。スケールバーは、中央パネルが５ｍｍ、右パネルが５００μｍである。（図２Ｇ〜図２Ｉ）杯細胞の過ヨウ素酸シッフ（ＰＡＳ）染色と、抗コラーゲン抗体及び抗α平滑筋アクチン抗体による免疫蛍光染色とを、Ｔｍ処置群と偽処置ＤＲＡ群との間で比較した。シグナルは、フィールドごとのシグナルの測定によって定量化した。スケールバーは２００μｍを表す。＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１。
【図２Ｃ】図２は、ＡＥＣ由来のＣＳＦ１の枯渇は、アレルゲン感作を防ぎ、慢性アレルギー性肺炎を無効にすることを示した図である。（図２Ａ）Ｓｃｇｂ１ａ１−ｃｒｅＥＲＴ；Ｃｓｆ１ｆｌ／ｆｌ（ＣＳＦ１ΔＡＥＣ）マウスを使用して慢性ＤＲＡモデルでＡＥＣ由来ＣＳＦ１を枯渇させるための実験スキーム。タモキシフェン（Ｔａｍｏｘｉｆｅｎ）は、４週間ごとに５日間連続（１サイクル）経口投与した。全てのサンプルは１１週目の終了時に採取した。（図２Ｂ〜図２Ｅ）タモキシフェン単独では、ＤＲＡチャレンジがない場合（Ｔｍ＿Ｖｅｈ）、ＢＡＬサイトカインに影響を与えないが、基本的なＢＡＬ  ＣＳＦ１レベルはわずかに低下する（図２Ｂ）。ＤＲＡチャレンジは、ＢＡＬ  ＣＳＦ１、ＩＬ−４、及びＩＬ−１３（Ｖｅｈ＿ＤＲＡ）の著しい増加を誘発したが、Ｔｍ処置（Ｔｍ＿ＤＲＡ）によって大幅に減少した（図２Ｂ及び図２Ｅ）。総血清ＩｇＥ濃度及びＤＲＡ反応性血清ＩｇＥ濃度もＴｍ処置によって抑制された（図２Ｃ）。ＤＲＡ反応性血清ＩｇＥは、偽処置対照群（Ｖｅｈ＿Ｖｅｈ）と比較した増加倍数として表す。総ＢＡＬ細胞の増加はＴｍ処置によって抑制され、細胞は主にマクロファージとリンパ球とで構成されてした（図２Ｄ）。（図２Ｆ）形態計測デジタル病理分析は、「方法」に記載されているように、単一の肺野全体にわたって実施した。デジタル病理画像のカラーコードは、以下を示す。緑色：炎症細胞、黄色：気道領域、茶色：ボイドスペース。炎症領域は、Ｔｍ処置によって著しく減少した。スケールバーは、中央パネルが５ｍｍ、右パネルが５００μｍである。（図２Ｇ〜図２Ｉ）杯細胞の過ヨウ素酸シッフ（ＰＡＳ）染色と、抗コラーゲン抗体及び抗α平滑筋アクチン抗体による免疫蛍光染色とを、Ｔｍ処置群と偽処置ＤＲＡ群との間で比較した。シグナルは、フィールドごとのシグナルの測定によって定量化した。スケールバーは２００μｍを表す。＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１。
【図２Ｄ】図２は、ＡＥＣ由来のＣＳＦ１の枯渇は、アレルゲン感作を防ぎ、慢性アレルギー性肺炎を無効にすることを示した図である。（図２Ａ）Ｓｃｇｂ１ａ１−ｃｒｅＥＲＴ；Ｃｓｆ１ｆｌ／ｆｌ（ＣＳＦ１ΔＡＥＣ）マウスを使用して慢性ＤＲＡモデルでＡＥＣ由来ＣＳＦ１を枯渇させるための実験スキーム。タモキシフェン（Ｔａｍｏｘｉｆｅｎ）は、４週間ごとに５日間連続（１サイクル）経口投与した。全てのサンプルは１１週目の終了時に採取した。（図２Ｂ〜図２Ｅ）タモキシフェン単独では、ＤＲＡチャレンジがない場合（Ｔｍ＿Ｖｅｈ）、ＢＡＬサイトカインに影響を与えないが、基本的なＢＡＬ  ＣＳＦ１レベルはわずかに低下する（図２Ｂ）。ＤＲＡチャレンジは、ＢＡＬ  ＣＳＦ１、ＩＬ−４、及びＩＬ−１３（Ｖｅｈ＿ＤＲＡ）の著しい増加を誘発したが、Ｔｍ処置（Ｔｍ＿ＤＲＡ）によって大幅に減少した（図２Ｂ及び図２Ｅ）。総血清ＩｇＥ濃度及びＤＲＡ反応性血清ＩｇＥ濃度もＴｍ処置によって抑制された（図２Ｃ）。ＤＲＡ反応性血清ＩｇＥは、偽処置対照群（Ｖｅｈ＿Ｖｅｈ）と比較した増加倍数として表す。総ＢＡＬ細胞の増加はＴｍ処置によって抑制され、細胞は主にマクロファージとリンパ球とで構成されてした（図２Ｄ）。（図２Ｆ）形態計測デジタル病理分析は、「方法」に記載されているように、単一の肺野全体にわたって実施した。デジタル病理画像のカラーコードは、以下を示す。緑色：炎症細胞、黄色：気道領域、茶色：ボイドスペース。炎症領域は、Ｔｍ処置によって著しく減少した。スケールバーは、中央パネルが５ｍｍ、右パネルが５００μｍである。（図２Ｇ〜図２Ｉ）杯細胞の過ヨウ素酸シッフ（ＰＡＳ）染色と、抗コラーゲン抗体及び抗α平滑筋アクチン抗体による免疫蛍光染色とを、Ｔｍ処置群と偽処置ＤＲＡ群との間で比較した。シグナルは、フィールドごとのシグナルの測定によって定量化した。スケールバーは２００μｍを表す。＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１。
【図２Ｅ】図２は、ＡＥＣ由来のＣＳＦ１の枯渇は、アレルゲン感作を防ぎ、慢性アレルギー性肺炎を無効にすることを示した図である。（図２Ａ）Ｓｃｇｂ１ａ１−ｃｒｅＥＲＴ；Ｃｓｆ１ｆｌ／ｆｌ（ＣＳＦ１ΔＡＥＣ）マウスを使用して慢性ＤＲＡモデルでＡＥＣ由来ＣＳＦ１を枯渇させるための実験スキーム。タモキシフェン（Ｔａｍｏｘｉｆｅｎ）は、４週間ごとに５日間連続（１サイクル）経口投与した。全てのサンプルは１１週目の終了時に採取した。（図２Ｂ〜図２Ｅ）タモキシフェン単独では、ＤＲＡチャレンジがない場合（Ｔｍ＿Ｖｅｈ）、ＢＡＬサイトカインに影響を与えないが、基本的なＢＡＬ  ＣＳＦ１レベルはわずかに低下する（図２Ｂ）。ＤＲＡチャレンジは、ＢＡＬ  ＣＳＦ１、ＩＬ−４、及びＩＬ−１３（Ｖｅｈ＿ＤＲＡ）の著しい増加を誘発したが、Ｔｍ処置（Ｔｍ＿ＤＲＡ）によって大幅に減少した（図２Ｂ及び図２Ｅ）。総血清ＩｇＥ濃度及びＤＲＡ反応性血清ＩｇＥ濃度もＴｍ処置によって抑制された（図２Ｃ）。ＤＲＡ反応性血清ＩｇＥは、偽処置対照群（Ｖｅｈ＿Ｖｅｈ）と比較した増加倍数として表す。総ＢＡＬ細胞の増加はＴｍ処置によって抑制され、細胞は主にマクロファージとリンパ球とで構成されてした（図２Ｄ）。（図２Ｆ）形態計測デジタル病理分析は、「方法」に記載されているように、単一の肺野全体にわたって実施した。デジタル病理画像のカラーコードは、以下を示す。緑色：炎症細胞、黄色：気道領域、茶色：ボイドスペース。炎症領域は、Ｔｍ処置によって著しく減少した。スケールバーは、中央パネルが５ｍｍ、右パネルが５００μｍである。（図２Ｇ〜図２Ｉ）杯細胞の過ヨウ素酸シッフ（ＰＡＳ）染色と、抗コラーゲン抗体及び抗α平滑筋アクチン抗体による免疫蛍光染色とを、Ｔｍ処置群と偽処置ＤＲＡ群との間で比較した。シグナルは、フィールドごとのシグナルの測定によって定量化した。スケールバーは２００μｍを表す。＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１。
【図２Ｆ】図２は、ＡＥＣ由来のＣＳＦ１の枯渇は、アレルゲン感作を防ぎ、慢性アレルギー性肺炎を無効にすることを示した図である。（図２Ａ）Ｓｃｇｂ１ａ１−ｃｒｅＥＲＴ；Ｃｓｆ１ｆｌ／ｆｌ（ＣＳＦ１ΔＡＥＣ）マウスを使用して慢性ＤＲＡモデルでＡＥＣ由来ＣＳＦ１を枯渇させるための実験スキーム。タモキシフェン（Ｔａｍｏｘｉｆｅｎ）は、４週間ごとに５日間連続（１サイクル）経口投与した。全てのサンプルは１１週目の終了時に採取した。（図２Ｂ〜図２Ｅ）タモキシフェン単独では、ＤＲＡチャレンジがない場合（Ｔｍ＿Ｖｅｈ）、ＢＡＬサイトカインに影響を与えないが、基本的なＢＡＬ  ＣＳＦ１レベルはわずかに低下する（図２Ｂ）。ＤＲＡチャレンジは、ＢＡＬ  ＣＳＦ１、ＩＬ−４、及びＩＬ−１３（Ｖｅｈ＿ＤＲＡ）の著しい増加を誘発したが、Ｔｍ処置（Ｔｍ＿ＤＲＡ）によって大幅に減少した（図２Ｂ及び図２Ｅ）。総血清ＩｇＥ濃度及びＤＲＡ反応性血清ＩｇＥ濃度もＴｍ処置によって抑制された（図２Ｃ）。ＤＲＡ反応性血清ＩｇＥは、偽処置対照群（Ｖｅｈ＿Ｖｅｈ）と比較した増加倍数として表す。総ＢＡＬ細胞の増加はＴｍ処置によって抑制され、細胞は主にマクロファージとリンパ球とで構成されてした（図２Ｄ）。（図２Ｆ）形態計測デジタル病理分析は、「方法」に記載されているように、単一の肺野全体にわたって実施した。デジタル病理画像のカラーコードは、以下を示す。緑色：炎症細胞、黄色：気道領域、茶色：ボイドスペース。炎症領域は、Ｔｍ処置によって著しく減少した。スケールバーは、中央パネルが５ｍｍ、右パネルが５００μｍである。（図２Ｇ〜図２Ｉ）杯細胞の過ヨウ素酸シッフ（ＰＡＳ）染色と、抗コラーゲン抗体及び抗α平滑筋アクチン抗体による免疫蛍光染色とを、Ｔｍ処置群と偽処置ＤＲＡ群との間で比較した。シグナルは、フィールドごとのシグナルの測定によって定量化した。スケールバーは２００μｍを表す。＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１。
【図２Ｇ】図２は、ＡＥＣ由来のＣＳＦ１の枯渇は、アレルゲン感作を防ぎ、慢性アレルギー性肺炎を無効にすることを示した図である。（図２Ａ）Ｓｃｇｂ１ａ１−ｃｒｅＥＲＴ；Ｃｓｆ１ｆｌ／ｆｌ（ＣＳＦ１ΔＡＥＣ）マウスを使用して慢性ＤＲＡモデルでＡＥＣ由来ＣＳＦ１を枯渇させるための実験スキーム。タモキシフェン（Ｔａｍｏｘｉｆｅｎ）は、４週間ごとに５日間連続（１サイクル）経口投与した。全てのサンプルは１１週目の終了時に採取した。（図２Ｂ〜図２Ｅ）タモキシフェン単独では、ＤＲＡチャレンジがない場合（Ｔｍ＿Ｖｅｈ）、ＢＡＬサイトカインに影響を与えないが、基本的なＢＡＬ  ＣＳＦ１レベルはわずかに低下する（図２Ｂ）。ＤＲＡチャレンジは、ＢＡＬ  ＣＳＦ１、ＩＬ−４、及びＩＬ−１３（Ｖｅｈ＿ＤＲＡ）の著しい増加を誘発したが、Ｔｍ処置（Ｔｍ＿ＤＲＡ）によって大幅に減少した（図２Ｂ及び図２Ｅ）。総血清ＩｇＥ濃度及びＤＲＡ反応性血清ＩｇＥ濃度もＴｍ処置によって抑制された（図２Ｃ）。ＤＲＡ反応性血清ＩｇＥは、偽処置対照群（Ｖｅｈ＿Ｖｅｈ）と比較した増加倍数として表す。総ＢＡＬ細胞の増加はＴｍ処置によって抑制され、細胞は主にマクロファージとリンパ球とで構成されてした（図２Ｄ）。（図２Ｆ）形態計測デジタル病理分析は、「方法」に記載されているように、単一の肺野全体にわたって実施した。デジタル病理画像のカラーコードは、以下を示す。緑色：炎症細胞、黄色：気道領域、茶色：ボイドスペース。炎症領域は、Ｔｍ処置によって著しく減少した。スケールバーは、中央パネルが５ｍｍ、右パネルが５００μｍである。（図２Ｇ〜図２Ｉ）杯細胞の過ヨウ素酸シッフ（ＰＡＳ）染色と、抗コラーゲン抗体及び抗α平滑筋アクチン抗体による免疫蛍光染色とを、Ｔｍ処置群と偽処置ＤＲＡ群との間で比較した。シグナルは、フィールドごとのシグナルの測定によって定量化した。スケールバーは２００μｍを表す。＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１。
【図２Ｈ】図２は、ＡＥＣ由来のＣＳＦ１の枯渇は、アレルゲン感作を防ぎ、慢性アレルギー性肺炎を無効にすることを示した図である。（図２Ａ）Ｓｃｇｂ１ａ１−ｃｒｅＥＲＴ；Ｃｓｆ１ｆｌ／ｆｌ（ＣＳＦ１ΔＡＥＣ）マウスを使用して慢性ＤＲＡモデルでＡＥＣ由来ＣＳＦ１を枯渇させるための実験スキーム。タモキシフェン（Ｔａｍｏｘｉｆｅｎ）は、４週間ごとに５日間連続（１サイクル）経口投与した。全てのサンプルは１１週目の終了時に採取した。（図２Ｂ〜図２Ｅ）タモキシフェン単独では、ＤＲＡチャレンジがない場合（Ｔｍ＿Ｖｅｈ）、ＢＡＬサイトカインに影響を与えないが、基本的なＢＡＬ  ＣＳＦ１レベルはわずかに低下する（図２Ｂ）。ＤＲＡチャレンジは、ＢＡＬ  ＣＳＦ１、ＩＬ−４、及びＩＬ−１３（Ｖｅｈ＿ＤＲＡ）の著しい増加を誘発したが、Ｔｍ処置（Ｔｍ＿ＤＲＡ）によって大幅に減少した（図２Ｂ及び図２Ｅ）。総血清ＩｇＥ濃度及びＤＲＡ反応性血清ＩｇＥ濃度もＴｍ処置によって抑制された（図２Ｃ）。ＤＲＡ反応性血清ＩｇＥは、偽処置対照群（Ｖｅｈ＿Ｖｅｈ）と比較した増加倍数として表す。総ＢＡＬ細胞の増加はＴｍ処置によって抑制され、細胞は主にマクロファージとリンパ球とで構成されてした（図２Ｄ）。（図２Ｆ）形態計測デジタル病理分析は、「方法」に記載されているように、単一の肺野全体にわたって実施した。デジタル病理画像のカラーコードは、以下を示す。緑色：炎症細胞、黄色：気道領域、茶色：ボイドスペース。炎症領域は、Ｔｍ処置によって著しく減少した。スケールバーは、中央パネルが５ｍｍ、右パネルが５００μｍである。（図２Ｇ〜図２Ｉ）杯細胞の過ヨウ素酸シッフ（ＰＡＳ）染色と、抗コラーゲン抗体及び抗α平滑筋アクチン抗体による免疫蛍光染色とを、Ｔｍ処置群と偽処置ＤＲＡ群との間で比較した。シグナルは、フィールドごとのシグナルの測定によって定量化した。スケールバーは２００μｍを表す。＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１。
【図２Ｉ】図２は、ＡＥＣ由来のＣＳＦ１の枯渇は、アレルゲン感作を防ぎ、慢性アレルギー性肺炎を無効にすることを示した図である。（図２Ａ）Ｓｃｇｂ１ａ１−ｃｒｅＥＲＴ；Ｃｓｆ１ｆｌ／ｆｌ（ＣＳＦ１ΔＡＥＣ）マウスを使用して慢性ＤＲＡモデルでＡＥＣ由来ＣＳＦ１を枯渇させるための実験スキーム。タモキシフェン（Ｔａｍｏｘｉｆｅｎ）は、４週間ごとに５日間連続（１サイクル）経口投与した。全てのサンプルは１１週目の終了時に採取した。（図２Ｂ〜図２Ｅ）タモキシフェン単独では、ＤＲＡチャレンジがない場合（Ｔｍ＿Ｖｅｈ）、ＢＡＬサイトカインに影響を与えないが、基本的なＢＡＬ  ＣＳＦ１レベルはわずかに低下する（図２Ｂ）。ＤＲＡチャレンジは、ＢＡＬ  ＣＳＦ１、ＩＬ−４、及びＩＬ−１３（Ｖｅｈ＿ＤＲＡ）の著しい増加を誘発したが、Ｔｍ処置（Ｔｍ＿ＤＲＡ）によって大幅に減少した（図２Ｂ及び図２Ｅ）。総血清ＩｇＥ濃度及びＤＲＡ反応性血清ＩｇＥ濃度もＴｍ処置によって抑制された（図２Ｃ）。ＤＲＡ反応性血清ＩｇＥは、偽処置対照群（Ｖｅｈ＿Ｖｅｈ）と比較した増加倍数として表す。総ＢＡＬ細胞の増加はＴｍ処置によって抑制され、細胞は主にマクロファージとリンパ球とで構成されてした（図２Ｄ）。（図２Ｆ）形態計測デジタル病理分析は、「方法」に記載されているように、単一の肺野全体にわたって実施した。デジタル病理画像のカラーコードは、以下を示す。緑色：炎症細胞、黄色：気道領域、茶色：ボイドスペース。炎症領域は、Ｔｍ処置によって著しく減少した。スケールバーは、中央パネルが５ｍｍ、右パネルが５００μｍである。（図２Ｇ〜図２Ｉ）杯細胞の過ヨウ素酸シッフ（ＰＡＳ）染色と、抗コラーゲン抗体及び抗α平滑筋アクチン抗体による免疫蛍光染色とを、Ｔｍ処置群と偽処置ＤＲＡ群との間で比較した。シグナルは、フィールドごとのシグナルの測定によって定量化した。スケールバーは２００μｍを表す。＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１。
【図３Ａ】図３は、ＣＳＦ１の枯渇は、確立された慢性アレルギー性炎症及び気道リモデリングを逆転させ、ＬＮにおけるＴｈ２メモリー応答を抑制することを示した図である。（図３Ａ）確立された慢性ＤＲＡアレルギー性炎症モデルにおけるＡＥＣ由来ＣＳＦ１を枯渇させるための実験スキーム。Ｔｍを、慢性ＤＲＡモデルの６週目に、１サイクルだけ投与した。
【図３Ｂ】図３は、ＣＳＦ１の枯渇は、確立された慢性アレルギー性炎症及び気道リモデリングを逆転させ、ＬＮにおけるＴｈ２メモリー応答を抑制することを示した図である。（図３Ｂ）６週目にＴｍで単回処置（ＤＲＡ／Ｔｍ）すると、ＢＡＬ  ＣＳＦ１濃度が低下した。＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１。
【図３Ｃ】図３は、ＣＳＦ１の枯渇は、確立された慢性アレルギー性炎症及び気道リモデリングを逆転させ、ＬＮにおけるＴｈ２メモリー応答を抑制することを示した図である。（図３Ｃ〜図３Ｆ）前記モデルの後期のＴｍ処置は、ＢＡＬリンパ球増加症、血清ＩｇＥの増加、慢性肺炎症、杯細胞化生を逆転させることができた。＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１。
【図３Ｄ】図３は、ＣＳＦ１の枯渇は、確立された慢性アレルギー性炎症及び気道リモデリングを逆転させ、ＬＮにおけるＴｈ２メモリー応答を抑制することを示した図である。（図３Ｃ〜図３Ｆ）前記モデルの後期のＴｍ処置は、ＢＡＬリンパ球増加症、血清ＩｇＥの増加、慢性肺炎症、杯細胞化生を逆転させることができた。＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１。
【図３Ｅ】図３は、ＣＳＦ１の枯渇は、確立された慢性アレルギー性炎症及び気道リモデリングを逆転させ、ＬＮにおけるＴｈ２メモリー応答を抑制することを示した図である。（図３Ｃ〜図３Ｆ）前記モデルの後期のＴｍ処置は、ＢＡＬリンパ球増加症、血清ＩｇＥの増加、慢性肺炎症、杯細胞化生を逆転させることができた。（図３Ｅ）の左右及び（図３Ｆ）のスケールバーはそれぞれ５ｍｍ及び５００μｍ並びに２００μｍである。＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１。
【図３Ｆ】図３は、ＣＳＦ１の枯渇は、確立された慢性アレルギー性炎症及び気道リモデリングを逆転させ、ＬＮにおけるＴｈ２メモリー応答を抑制することを示した図である。（図３Ｃ〜図３Ｆ）前記モデルの後期のＴｍ処置は、ＢＡＬリンパ球増加症、血清ＩｇＥの増加、慢性肺炎症、杯細胞化生を逆転させることができた。（図３Ｅ）の左右及び（図３Ｆ）のスケールバーはそれぞれ５ｍｍ及び５００μｍ並びに２００μｍである。＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１。
【図３Ｇ】図３は、ＣＳＦ１の枯渇は、確立された慢性アレルギー性炎症及び気道リモデリングを逆転させ、ＬＮにおけるＴｈ２メモリー応答を抑制することを示した図である。（図３Ｇ）ＬＮからの細胞を各群から分離し、ＤＲＡの有無にかかわらず培養で７２時間、エクスビボで再刺激した。培養上清中のサイトカインを測定した。ＤＲＡによる再刺激は、ＬＮ培養におけるＩＬ−４、ＩＬ−１３、ＩＬ−１７、及びＩＦＮ−γの分泌を増加させた。しかしながら、Ｔｍ処置群（ＤＲＡ／Ｔｍ）は、ＩＬ−４及びＩＬ−１３に対して鈍い応答を示したが、ＩＬ−１７及びＩＦＮ−γのレベルは変化しなかった。＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１。
【図４Ａ】図４は、ＩＲＦ４＋ＣＳＦ１Ｒ＋細胞は、二次ＬＮのアレルゲン感作及びＴｈ２メモリーに必要であることを示した図である。（図４Ａ）Ｃｓｆ１ｒ−ｃｒｅＥＲＴ；Ｉｒｆ４ｆｌ／ｆｌ（Ｉｒｆ４ΔＡＰＣ）マウスにおけるＣＳＦ１Ｒ＋ＩＲＦ４＋抗原提示細胞を枯渇させるための実験スキーム。Ｔｍ２及びＴｍ６は、図示するように、Ｔｍ投与を慢性ＤＲＡモデルの２週目及び６週目に開始したことを示す。（図４Ｂ）Ｉｒｆ４ΔＡＰＣマウスにおけるＣＳＦ１Ｒ＋ＩＲＦ４＋の枯渇は、ＢＡＬ  ＣＳＦ１濃度に影響を与えなかった。（図４Ｃ〜図４Ｆ）しかしながら、２週目（Ｔｍ２）からのＣＳＦ１Ｒ＋ＩＲＦ４＋の枯渇は、ＢＡＬ炎症細胞の適度な減少、総血清ＩｇＥ及びＤＲＡ反応性血清ＩｇＥの有意な減少、慢性肺炎症及び杯細胞化生の顕著な減少をもたらした。Ｔｍ６群も同様の傾向を示したが、Ｔｍ２群よりも効果が低かった。（図４Ｅ）の左及び中央のスケールバーは、それぞれ５ｍｍと５００μｍである。（図４Ｇ）ＬＮの単細胞懸濁液を各群から単離し、ＤＲＡで７２時間再刺激した。培養上清中のサイトカインを測定した。ＤＲＡによる再刺激は、偽処置対照と比較して、ＩＬ−４、ＩＬ−１３、及びＩＬ−１７の分泌を促進した。しかしながら、Ｔｍ処置群は、ＩＬ−４及びＩＬ−１３産生に対して鈍い応答を示した一方、Ｔｍ６群のＩＬ−１７分泌はＴｍ処置の影響を受けなかったが、Ｔｍ２群はＩＬ−１７産生の軽度の減少を示した。＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１。
【図４Ｂ】図４は、ＩＲＦ４＋ＣＳＦ１Ｒ＋細胞は、二次ＬＮのアレルゲン感作及びＴｈ２メモリーに必要であることを示した図である。（図４Ｂ）Ｉｒｆ４ΔＡＰＣマウスにおけるＣＳＦ１Ｒ＋ＩＲＦ４＋の枯渇は、ＢＡＬ  ＣＳＦ１濃度に影響を与えなかった。＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１。
【図４Ｃ】図４は、ＩＲＦ４＋ＣＳＦ１Ｒ＋細胞は、二次ＬＮのアレルゲン感作及びＴｈ２メモリーに必要であることを示した図である。（図４Ｃ〜図４Ｆ）しかしながら、２週目（Ｔｍ２）からのＣＳＦ１Ｒ＋ＩＲＦ４＋の枯渇は、ＢＡＬ炎症細胞の適度な減少、総血清ＩｇＥ及びＤＲＡ反応性血清ＩｇＥの有意な減少、慢性肺炎症及び杯細胞化生の顕著な減少をもたらした。Ｔｍ６群も同様の傾向を示したが、Ｔｍ２群よりも効果が低かった。＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１。
【図４Ｄ】図４は、ＩＲＦ４＋ＣＳＦ１Ｒ＋細胞は、二次ＬＮのアレルゲン感作及びＴｈ２メモリーに必要であることを示した図である。（図４Ｃ〜図４Ｆ）しかしながら、２週目（Ｔｍ２）からのＣＳＦ１Ｒ＋ＩＲＦ４＋の枯渇は、ＢＡＬ炎症細胞の適度な減少、総血清ＩｇＥ及びＤＲＡ反応性血清ＩｇＥの有意な減少、慢性肺炎症及び杯細胞化生の顕著な減少をもたらした。Ｔｍ６群も同様の傾向を示したが、Ｔｍ２群よりも効果が低かった。＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１。
【図４Ｅ】図４は、ＩＲＦ４＋ＣＳＦ１Ｒ＋細胞は、二次ＬＮのアレルゲン感作及びＴｈ２メモリーに必要であることを示した図である。（図４Ｃ〜図４Ｆ）しかしながら、２週目（Ｔｍ２）からのＣＳＦ１Ｒ＋ＩＲＦ４＋の枯渇は、ＢＡＬ炎症細胞の適度な減少、総血清ＩｇＥ及びＤＲＡ反応性血清ＩｇＥの有意な減少、慢性肺炎症及び杯細胞化生の顕著な減少をもたらした。Ｔｍ６群も同様の傾向を示したが、Ｔｍ２群よりも効果が低かった。（図４Ｅ）の左及び中央のスケールバーは、それぞれ５ｍｍと５００μｍである。＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１。
【図４Ｆ】図４は、ＩＲＦ４＋ＣＳＦ１Ｒ＋細胞は、二次ＬＮのアレルゲン感作及びＴｈ２メモリーに必要であることを示した図である。（図４Ｃ〜図４Ｆ）しかしながら、２週目（Ｔｍ２）からのＣＳＦ１Ｒ＋ＩＲＦ４＋の枯渇は、ＢＡＬ炎症細胞の適度な減少、総血清ＩｇＥ及びＤＲＡ反応性血清ＩｇＥの有意な減少、慢性肺炎症及び杯細胞化生の顕著な減少をもたらした。Ｔｍ６群も同様の傾向を示したが、Ｔｍ２群よりも効果が低かった。＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１。
【図４Ｇ】図４は、ＩＲＦ４＋ＣＳＦ１Ｒ＋細胞は、二次ＬＮのアレルゲン感作及びＴｈ２メモリーに必要であることを示した図である。（図４Ｇ）ＬＮの単細胞懸濁液を各群から単離し、ＤＲＡで７２時間再刺激した。培養上清中のサイトカインを測定した。ＤＲＡによる再刺激は、偽処置対照と比較して、ＩＬ−４、ＩＬ−１３、及びＩＬ−１７の分泌を促進した。しかしながら、Ｔｍ処置群は、ＩＬ−４及びＩＬ−１３産生に対して鈍い応答を示した一方、Ｔｍ６群のＩＬ−１７分泌はＴｍ処置の影響を受けなかったが、Ｔｍ２群はＩＬ−１７産生の軽度の減少を示した。＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１。
【図５Ａ】図５は、ＣＳＦ１Ｒ阻害剤を運ぶＣＤＰＬ−ＧＷナノ粒子が、ｃＤＣ２の移動及びアレルゲン感作をブロックすることを示した図である。（図５Ａ）４分子のＧＷ２５８０、選択的ＣＳＦ１Ｒ阻害剤、及びＺＷ８００−１蛍光色素を運ぶＣＤＰＬ−ＧＷナノ粒子の構造。（図５Ｂ〜図５Ｃ）ＣＤＰＬ−ＧＷの用量を最適化する実験スキーム。ＢＡＬ液中の総肺胞マクロファージ（ａｌｖｅｏｌａｒ  ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ、ＡＭ）数及びＶ＋ＡＭをフローサイトメトリーで測定した。ＢＡＬ液中のＡＭ及び好酸球は、それぞれＣＤ１１ｃ＋ＳｉｇｌｅｃＦ＋、ＣＤ１１ｃ−ＳｉｇｌｅｃＦ＋によって識別した。ＤＲＡチャレンジは、ＢＡＬでのＡＭ及び好酸球の増加を誘発したが、これはＣＤＰＬ−ＧＷ処置によって用量依存的に阻害された。しかしながら、マウスあたりＣＤＰＬ−ＧＷ１ｎｇ（＝１０００ｐｇ）までのアネキシンＶ＋細胞の割合に変化はなく、ＢＡＬ好酸球動員及び総血清ＩｇＥ上昇を抑制するのに充分な用量であった（ｎ＝４〜５）。（図５Ｄ）遊走性ＤＣ（ＣＤ４５＋ｌｉｎｅａｇｅ−ＣＤ１１ｃ＋ＭＨＣｌｌ＋ＣＣＲ７＋で定義）は、縦隔ＬＮから分離された単一細胞懸濁液で測定した。ＣＤＰＬ−ＧＷ阻害剤の用量を鼻腔内経路により増加したところ、ＬＮの遊走性ＤＣの数は徐々に減少した（ｎ＝４〜５）。＊ｐ＜０．０５。
【図５Ｂ】図５は、ＣＳＦ１Ｒ阻害剤を運ぶＣＤＰＬ−ＧＷナノ粒子が、ｃＤＣ２の移動及びアレルゲン感作をブロックすることを示した図である。（図５Ｂ〜図５Ｃ）ＣＤＰＬ−ＧＷの用量を最適化する実験スキーム。ＢＡＬ液中の総肺胞マクロファージ（ａｌｖｅｏｌａｒ  ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ、ＡＭ）数及びＶ＋ＡＭをフローサイトメトリーで測定した。ＢＡＬ液中のＡＭ及び好酸球は、それぞれＣＤ１１ｃ＋ＳｉｇｌｅｃＦ＋、ＣＤ１１ｃ−ＳｉｇｌｅｃＦ＋によって識別した。ＤＲＡチャレンジは、ＢＡＬでのＡＭ及び好酸球の増加を誘発したが、これはＣＤＰＬ−ＧＷ処置によって用量依存的に阻害された。しかしながら、マウスあたりＣＤＰＬ−ＧＷ１ｎｇ（＝１０００ｐｇ）までのアネキシンＶ＋細胞の割合に変化はなく、ＢＡＬ好酸球動員及び総血清ＩｇＥ上昇を抑制するのに充分な用量であった（ｎ＝４〜５）。＊ｐ＜０．０５。
【図５Ｃ】図５は、ＣＳＦ１Ｒ阻害剤を運ぶＣＤＰＬ−ＧＷナノ粒子が、ｃＤＣ２の移動及びアレルゲン感作をブロックすることを示した図である。（図５Ｂ〜図５Ｃ）ＣＤＰＬ−ＧＷの用量を最適化する実験スキーム。ＢＡＬ液中の総肺胞マクロファージ（ａｌｖｅｏｌａｒ  ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ、ＡＭ）数及びＶ＋ＡＭをフローサイトメトリーで測定した。ＢＡＬ液中のＡＭ及び好酸球は、それぞれＣＤ１１ｃ＋ＳｉｇｌｅｃＦ＋、ＣＤ１１ｃ−ＳｉｇｌｅｃＦ＋によって識別した。ＤＲＡチャレンジは、ＢＡＬでのＡＭ及び好酸球の増加を誘発したが、これはＣＤＰＬ−ＧＷ処置によって用量依存的に阻害された。しかしながら、マウスあたりＣＤＰＬ−ＧＷ１ｎｇ（＝１０００ｐｇ）までのアネキシンＶ＋細胞の割合に変化はなく、ＢＡＬ好酸球動員及び総血清ＩｇＥ上昇を抑制するのに充分な用量であった（ｎ＝４〜５）。＊ｐ＜０．０５。
【図５Ｄ】図５は、ＣＳＦ１Ｒ阻害剤を運ぶＣＤＰＬ−ＧＷナノ粒子が、ｃＤＣ２の移動及びアレルゲン感作をブロックすることを示した図である。（図５Ｄ）遊走性ＤＣ（ＣＤ４５＋ｌｉｎｅａｇｅ−ＣＤ１１ｃ＋ＭＨＣｌｌ＋ＣＣＲ７＋で定義）は、縦隔ＬＮから分離された単一細胞懸濁液で測定した。ＣＤＰＬ−ＧＷ阻害剤の用量を鼻腔内経路により増加したところ、ＬＮの遊走性ＤＣの数は徐々に減少した（ｎ＝４〜５）。＊ｐ＜０．０５。
【図６Ａ】図６は、ＣＤＰＬ−ＧＷナノ粒子の鼻腔内送達が、ＤＲＡモデルにおける慢性アレルゲン性肺炎症を無効にすることを示した図である。マウスを慢性ＤＲＡモデルに供し、次いで、図１４に示すように、３つの異なるデザインでＣＤＰＬ−ＧＷで処置（鼻腔内経路を介して１ｎｇ／マウスで週に２回）した。ＣＤＰＬ−ＧＷ  ３ｗｋ（３週目）は、ＣＤＰＬ−ＧＷによる処置が慢性ＤＲＡモデルの３週目に開始され、８週目（合計６週間）まで維持されたことを示す。ＣＤＰＬ−ＧＷ  ５ｗｋ（５週目）及びＣＤＰＬ−ＧＷ  ７ｗｋ（７週目）に対して同様の方法で実施した。全ての測定は１１週目に実施した。（図６Ａ）ＣＤＰＬ−ＧＷによる処置は、主にマクロファージ及びリンパ球を含むＤＲＡ誘発性のＢＡＬ細胞動員を著しく減少させた。（図６Ｂ〜図６Ｅ）慢性ＤＲＡモデルの３週目及び５週目（ＣＤＰＬ−ＧＷ  ３ｗｋ及びＣＤＰＬ−ＧＷ  ５ｗｋ）で開始するＣＤＰＬ−ＧＷ処置は、総血清ＩｇＥ及びＤＲＡ反応性血清ＩｇＥ、ＢＡＬでのＩＬ−４及びＩＬ−５の増加を効果的にブロックし、肺の炎症及び杯細胞化生を軽減した。しかしながら、ＣＤＰＬ−ＧＷ  ７ｗｋ群は同様の傾向を示したが、ＤＲＡ反応性血清ＩｇＥ、肺炎症、杯細胞化生に関して統計的有意性に達することはなかった。スケールバーは２００μｍを表す。（図６Ｆ）局所ＬＮの単一細胞懸濁液をＤＲＡで７２時間再刺激した。ＤＲＡの再刺激により、ＩＬ−４、ＩＬ−１３、及びＩＬ−１７の分泌が増加したが、ＣＤＰＬ−ＧＷ処置によりこれらの増加がブロックされた。しかしながら、ＣＤＰＬ−ＧＷ  ７ｗｋ群から得られた細胞からのサイトカインレベルは、減少傾向を示したものの、偽処置ＤＲＡ群のものと比較して統計的有意性に達しなかった。（図６Ｇ）気道抵抗は、ＤＲＡチャレンジ後の偽処置群及びＣＤＰＬ−ＧＷ処置群でメタコリンの用量を増やして測定した。ＣＤＰＬ−ＧＷ処置群は３群全て、偽処置慢性ＤＲＡ群と比較して有意に低い気道抵抗を示した。
【図６Ｂ】図６は、ＣＤＰＬ−ＧＷナノ粒子の鼻腔内送達が、ＤＲＡモデルにおける慢性アレルゲン性肺炎症を無効にすることを示した図である。マウスを慢性ＤＲＡモデルに供し、次いで、図１４に示すように、３つの異なるデザインでＣＤＰＬ−ＧＷで処置（鼻腔内経路を介して１ｎｇ／マウスで週に２回）した。ＣＤＰＬ−ＧＷ  ３ｗｋ（３週目）は、ＣＤＰＬ−ＧＷによる処置が慢性ＤＲＡモデルの３週目に開始され、８週目（合計６週間）まで維持されたことを示す。ＣＤＰＬ−ＧＷ  ５ｗｋ（５週目）及びＣＤＰＬ−ＧＷ  ７ｗｋ（７週目）に対して同様の方法で実施した。全ての測定は１１週目に実施した。（図６Ｂ〜図６Ｅ）慢性ＤＲＡモデルの３週目及び５週目（ＣＤＰＬ−ＧＷ  ３ｗｋ及びＣＤＰＬ−ＧＷ  ５ｗｋ）で開始するＣＤＰＬ−ＧＷ処置は、総血清ＩｇＥ及びＤＲＡ反応性血清ＩｇＥ、ＢＡＬでのＩＬ−４及びＩＬ−５の増加を効果的にブロックし、肺の炎症及び杯細胞化生を軽減した。しかしながら、ＣＤＰＬ−ＧＷ  ７ｗｋ群は同様の傾向を示したが、ＤＲＡ反応性血清ＩｇＥ、肺炎症、杯細胞化生に関して統計的有意性に達することはなかった。スケールバーは２００μｍを表す。
【図６Ｃ】図６は、ＣＤＰＬ−ＧＷナノ粒子の鼻腔内送達が、ＤＲＡモデルにおける慢性アレルゲン性肺炎症を無効にすることを示した図である。マウスを慢性ＤＲＡモデルに供し、次いで、図１４に示すように、３つの異なるデザインでＣＤＰＬ−ＧＷで処置（鼻腔内経路を介して１ｎｇ／マウスで週に２回）した。ＣＤＰＬ−ＧＷ  ３ｗｋ（３週目）は、ＣＤＰＬ−ＧＷによる処置が慢性ＤＲＡモデルの３週目に開始され、８週目（合計６週間）まで維持されたことを示す。ＣＤＰＬ−ＧＷ  ５ｗｋ（５週目）及びＣＤＰＬ−ＧＷ  ７ｗｋ（７週目）に対して同様の方法で実施した。全ての測定は１１週目に実施した。（図６Ｂ〜図６Ｅ）慢性ＤＲＡモデルの３週目及び５週目（ＣＤＰＬ−ＧＷ  ３ｗｋ及びＣＤＰＬ−ＧＷ  ５ｗｋ）で開始するＣＤＰＬ−ＧＷ処置は、総血清ＩｇＥ及びＤＲＡ反応性血清ＩｇＥ、ＢＡＬでのＩＬ−４及びＩＬ−５の増加を効果的にブロックし、肺の炎症及び杯細胞化生を軽減した。しかしながら、ＣＤＰＬ−ＧＷ  ７ｗｋ群は同様の傾向を示したが、ＤＲＡ反応性血清ＩｇＥ、肺炎症、杯細胞化生に関して統計的有意性に達することはなかった。スケールバーは２００μｍを表す。
【図６Ｄ】図６は、ＣＤＰＬ−ＧＷナノ粒子の鼻腔内送達が、ＤＲＡモデルにおける慢性アレルゲン性肺炎症を無効にすることを示した図である。マウスを慢性ＤＲＡモデルに供し、次いで、図１４に示すように、３つの異なるデザインでＣＤＰＬ−ＧＷで処置（鼻腔内経路を介して１ｎｇ／マウスで週に２回）した。ＣＤＰＬ−ＧＷ  ３ｗｋ（３週目）は、ＣＤＰＬ−ＧＷによる処置が慢性ＤＲＡモデルの３週目に開始され、８週目（合計６週間）まで維持されたことを示す。ＣＤＰＬ−ＧＷ  ５ｗｋ（５週目）及びＣＤＰＬ−ＧＷ  ７ｗｋ（７週目）に対して同様の方法で実施した。全ての測定は１１週目に実施した。（図６Ｂ〜図６Ｅ）慢性ＤＲＡモデルの３週目及び５週目（ＣＤＰＬ−ＧＷ  ３ｗｋ及びＣＤＰＬ−ＧＷ  ５ｗｋ）で開始するＣＤＰＬ−ＧＷ処置は、総血清ＩｇＥ及びＤＲＡ反応性血清ＩｇＥ、ＢＡＬでのＩＬ−４及びＩＬ−５の増加を効果的にブロックし、肺の炎症及び杯細胞化生を軽減した。しかしながら、ＣＤＰＬ−ＧＷ  ７ｗｋ群は同様の傾向を示したが、ＤＲＡ反応性血清ＩｇＥ、肺炎症、杯細胞化生に関して統計的有意性に達することはなかった。スケールバーは２００μｍを表す。
【図６Ｅ】図６は、ＣＤＰＬ−ＧＷナノ粒子の鼻腔内送達が、ＤＲＡモデルにおける慢性アレルゲン性肺炎症を無効にすることを示した図である。マウスを慢性ＤＲＡモデルに供し、次いで、図１４に示すように、３つの異なるデザインでＣＤＰＬ−ＧＷで処置（鼻腔内経路を介して１ｎｇ／マウスで週に２回）した。ＣＤＰＬ−ＧＷ  ３ｗｋ（３週目）は、ＣＤＰＬ−ＧＷによる処置が慢性ＤＲＡモデルの３週目に開始され、８週目（合計６週間）まで維持されたことを示す。ＣＤＰＬ−ＧＷ  ５ｗｋ（５週目）及びＣＤＰＬ−ＧＷ  ７ｗｋ（７週目）に対して同様の方法で実施した。全ての測定は１１週目に実施した。（図６Ｂ〜図６Ｅ）慢性ＤＲＡモデルの３週目及び５週目（ＣＤＰＬ−ＧＷ  ３ｗｋ及びＣＤＰＬ−ＧＷ  ５ｗｋ）で開始するＣＤＰＬ−ＧＷ処置は、総血清ＩｇＥ及びＤＲＡ反応性血清ＩｇＥ、ＢＡＬでのＩＬ−４及びＩＬ−５の増加を効果的にブロックし、肺の炎症及び杯細胞化生を軽減した。しかしながら、ＣＤＰＬ−ＧＷ  ７ｗｋ群は同様の傾向を示したが、ＤＲＡ反応性血清ＩｇＥ、肺炎症、杯細胞化生に関して統計的有意性に達することはなかった。スケールバーは２００μｍを表す。
【図６Ｆ】図６は、ＣＤＰＬ−ＧＷナノ粒子の鼻腔内送達が、ＤＲＡモデルにおける慢性アレルゲン性肺炎症を無効にすることを示した図である。マウスを慢性ＤＲＡモデルに供し、次いで、図１４に示すように、３つの異なるデザインでＣＤＰＬ−ＧＷで処置（鼻腔内経路を介して１ｎｇ／マウスで週に２回）した。ＣＤＰＬ−ＧＷ  ３ｗｋ（３週目）は、ＣＤＰＬ−ＧＷによる処置が慢性ＤＲＡモデルの３週目に開始され、８週目（合計６週間）まで維持されたことを示す。ＣＤＰＬ−ＧＷ  ５ｗｋ（５週目）及びＣＤＰＬ−ＧＷ  ７ｗｋ（７週目）に対して同様の方法で実施した。全ての測定は１１週目に実施した。（図６Ｆ）局所ＬＮの単一細胞懸濁液をＤＲＡで７２時間再刺激した。ＤＲＡの再刺激により、ＩＬ−４、ＩＬ−１３、及びＩＬ−１７の分泌が増加したが、ＣＤＰＬ−ＧＷ処置によりこれらの増加がブロックされた。しかしながら、ＣＤＰＬ−ＧＷ  ７ｗｋ群から得られた細胞からのサイトカインレベルは、減少傾向を示したものの、偽処置ＤＲＡ群のものと比較して統計的有意性に達しなかった。
【図６Ｇ】図６は、ＣＤＰＬ−ＧＷナノ粒子の鼻腔内送達が、ＤＲＡモデルにおける慢性アレルゲン性肺炎症を無効にすることを示した図である。マウスを慢性ＤＲＡモデルに供し、次いで、図１４に示すように、３つの異なるデザインでＣＤＰＬ−ＧＷで処置（鼻腔内経路を介して１ｎｇ／マウスで週に２回）した。ＣＤＰＬ−ＧＷ  ３ｗｋ（３週目）は、ＣＤＰＬ−ＧＷによる処置が慢性ＤＲＡモデルの３週目に開始され、８週目（合計６週間）まで維持されたことを示す。ＣＤＰＬ−ＧＷ  ５ｗｋ（５週目）及びＣＤＰＬ−ＧＷ  ７ｗｋ（７週目）に対して同様の方法で実施した。全ての測定は１１週目に実施した。（図６Ｇ）気道抵抗は、ＤＲＡチャレンジ後の偽処置群及びＣＤＰＬ−ＧＷ処置群でメタコリンの用量を増やして測定した。ＣＤＰＬ−ＧＷ処置群は３群全て、偽処置慢性ＤＲＡ群と比較して有意に低い気道抵抗を示した。
【図７Ａ】図７は、（図７Ａ）ＢＡＬ液中の肺胞ｃＤＣ１及びｃＤＣ２を特定するＦＡＣＳ戦略を示した図である。系統マーカーは「方法」で定義した。（図７Ｂ）定常状態では、ＣＳＦ１Ｒ＋ｃＤＣは呼吸器系に多く存在していたが、ＣＳＦ１Ｒ＋ｃＤＣ数は骨髄と血液では非常に少なかった。注目すべきことに、ＣＳＦ１Ｒ＋ｃＤＣ１は肺及びＢＡＬ液の両方に高度に存在していたが、ＣＳＦ１Ｒ＋ｃＤＣ２はＢＡＬ液にのみ出現した。
【図７Ｂ】図７は、（図７Ａ）ＢＡＬ液中の肺胞ｃＤＣ１及びｃＤＣ２を特定するＦＡＣＳ戦略を示した図である。系統マーカーは「方法」で定義した。（図７Ｂ）定常状態では、ＣＳＦ１Ｒ＋ｃＤＣは呼吸器系に多く存在していたが、ＣＳＦ１Ｒ＋ｃＤＣ数は骨髄と血液では非常に少なかった。注目すべきことに、ＣＳＦ１Ｒ＋ｃＤＣ１は肺及びＢＡＬ液の両方に高度に存在していたが、ＣＳＦ１Ｒ＋ｃＤＣ２はＢＡＬ液にのみ出現した。
【図８】図８は、（Ａ）実験スキームに示すように、全てのマウスをＤＲＡでチャレンジしたことを示した図である。ＡＥＣ由来のＣＳＦ１を枯渇させるために、Ｓｃｇｂ１ａ１−ｃｒｅＥＲＴ；Ｃｓｆ１ｆｌ／ｆｌ（ＣＳＦ１ΔＡＥＣ）マウスに、Ｔｍ（７５ｍｇ／ｋｇ）を強制経口投与した。ＣＳＦ１（茶色）は、ＤＲＡチャレンジマウスの気道上皮細胞で高度に発現しているが、偽処置マウスでは発現していない（ビヒクルのみ）。Ｔｍの投与はＣＳＦ１発現を枯渇させ、これによりＴｍ投与の６週間後に回復した。ＥＬＩＳＡによるＣＳＦ１の測定には対側肺を使用した。Ｔｍ処置により、肺ＣＳＦ１が即座に減少し、４週目までにベースラインへと回復した。スケールバーは２００μｍを表す。＊ｐ＜０．０５。
【図９】図９は、化合物ＧＷ２５８０のドッキングポーズを示した図である。（図９Ａ）ＣＳＦ１Ｒキナーゼドメイン（ＰＤＢ：４Ｒ７Ｈ）におけるＧＷ２５８０のドッキングポーズ。（図９Ｂ）ＣＳＦ１Ｒキナーゼドメインの極めて重要な残基と化合物ＧＷ２５８０との相互作用。ＣＳＦ１Ｒキナーゼドメインの残基は黄褐色で着色され、ＧＷ２５８０はシアンで着色されている。水素結合（Ｈ結合）相互作用は緑色の破線で示し、Ｐｉ−Ｐｉ相互作用は紫色の直線で示す。２つの水分子（赤）は、水素結合の相互作用において重要な役割を果たす。
【図１０】図１０は、鼻腔内経路で投与されたＣＤＰＬ−ＧＷを示した図である。４時間で、腹腔内画像及び胸部画像を、可視カラーイメージング及びデュアル近赤外線（ＮＩＲ）チャネルＦＬＡＲＥ（商標）イメージングシステムによって同時に取得した。マウスから臓器を分離し、画像を撮影した。シグナル対バックグラウンド比（ＳＢＲ）を各臓器で測定した。＊ｐ＜０．０５。
【図１１】図１１は、ＮａｎｏＳｉｇｈｔ（ナノサイト）によって測定されたＣＤＰＬ−ＧＷナノ粒子のサイズ分布を示した図である。
【図１２】図１２は、鼻腔内送達によるＣＤＰＬ−ＺＷの細胞分布を示した図である。ＣＤＰＬ−ＧＷのフルオロフォアＺＷ８００−１をトレースすることにより、フローサイトメトリーによって蛍光細胞をカウントすることにより、ＣＤＰＬ−ＧＷの分布を評価した。マウスあたり１ｎｇ及び１００ｎｇのＣＤＰＬ−ＧＷが、それぞれ鼻腔内経路で送達された。２時間で、肺組織は単一細胞懸濁液となった。肺からの単一細胞懸濁液を陽性ＺＷ８００にゲーティングし、その後、細胞を細胞特異的マーカーで同定した。
【図１３】図１３は、図５Ｂに示す実験スキームの対象となったマウスのデータを示した図である。ＣＤＰＬ−ＧＷの増加用量が鼻腔内経路を介して送達された際に、ＢＡＬタンパク質及びアルブミンの濃度を測定した。
【図１４】図１４は、図５Ｂと同じ実験設定でのＣＤＰＬ−ＺＷの有害作用を示した図である。ＣＤＰＬ−ＺＷが、肺胞マクロファージ及び内皮／上皮のアポトーシスに有意な影響を及ぼさなかったことは、それぞれ、非常に高いＢＡＬタンパク質濃度及びアルミニウム量で表される。
【図１５Ａ】図１５は、図６の実験設定を示した図である。ＣＤＰＬ−ＧＷ鼻腔内処置は、ＤＲＡへの曝露を繰り返しながら、慢性ＤＲＡモデルにおいて３週目、５週目、及び７週目の異なる３時点で開始し、８週目まで継続した。３週間の休息後、１１週目にマウスを分析した。慢性アレルギー性炎症におけるＣＤＰＬ−ＧＷの反復投与は、総タンパク質及びアルブミンのＢＡＬ濃度に影響を与えなかった。
【図１５Ｂ】図１５は、図６の実験設定を示した図である。ＣＤＰＬ−ＧＷ鼻腔内処置は、ＤＲＡへの曝露を繰り返しながら、慢性ＤＲＡモデルにおいて３週目、５週目、及び７週目の異なる３時点で開始し、８週目まで継続した。３週間の休息後、１１週目にマウスを分析した。慢性アレルギー性炎症におけるＣＤＰＬ−ＧＷの反復投与は、総タンパク質及びアルブミンのＢＡＬ濃度に影響を与えなかった。
【図１６Ａ】図１６は、ＰＬＸ３３９７は、喘息の急性ＤＲＡ誘発性マウスモデルにおいて、アレルゲン感作をブロックし、その後のアレルギー性肺炎症を軽減したことを示した図である。（図１６Ａ）ＰＬＸ３３９７のＳＰＲ結合分析。ＰＬＸ３３９７は、ヒト組換えＣＳＦ１受容体に対して強い薬理学的結合親和性を示し、ＫＤ値は５．３１±０．５１ｎＭである。（図１６Ｂ）実験計画。示されているように、ＤＲＡトリプルアレルゲンは鼻腔内経路を介して送達された。ＰＬＸ３３９７（１０ｍｇ／ｋｇ）を１０日目、１２日目、及び１４日目に腹腔内注射した。（図１６Ｃ〜図１６Ｅ）急性ＤＲＡモデルでは、ＰＬＸ３３９７による処置により、ＢＡＬ液への好酸球の動員がブロックされ、ＢＡＬ液中の血清ＩｇＥの上昇及びＴｈ２サイトカインの増加が抑制された。（図１６Ｆ）肺病理は、ＰＬＸ３３９７処置群が著しく低減したアレルギー性肺炎症を示したことを明らかにした。
【図１６Ｂ】図１６は、ＰＬＸ３３９７は、喘息の急性ＤＲＡ誘発性マウスモデルにおいて、アレルゲン感作をブロックし、その後のアレルギー性肺炎症を軽減したことを示した図である。（図１６Ｂ）実験計画。示されているように、ＤＲＡトリプルアレルゲンは鼻腔内経路を介して送達された。ＰＬＸ３３９７（１０ｍｇ／ｋｇ）を１０日目、１２日目、及び１４日目に腹腔内注射した。
【図１６Ｃ】図１６は、ＰＬＸ３３９７は、喘息の急性ＤＲＡ誘発性マウスモデルにおいて、アレルゲン感作をブロックし、その後のアレルギー性肺炎症を軽減したことを示した図である。（図１６Ｃ〜図１６Ｅ）急性ＤＲＡモデルでは、ＰＬＸ３３９７による処置により、ＢＡＬ液への好酸球の動員がブロックされ、ＢＡＬ液中の血清ＩｇＥの上昇及びＴｈ２サイトカインの増加が抑制された。
【図１６Ｄ】図１６は、ＰＬＸ３３９７は、喘息の急性ＤＲＡ誘発性マウスモデルにおいて、アレルゲン感作をブロックし、その後のアレルギー性肺炎症を軽減したことを示した図である。（図１６Ｃ〜図１６Ｅ）急性ＤＲＡモデルでは、ＰＬＸ３３９７による処置により、ＢＡＬ液への好酸球の動員がブロックされ、ＢＡＬ液中の血清ＩｇＥの上昇及びＴｈ２サイトカインの増加が抑制された。
【図１６Ｅ】図１６は、ＰＬＸ３３９７は、喘息の急性ＤＲＡ誘発性マウスモデルにおいて、アレルゲン感作をブロックし、その後のアレルギー性肺炎症を軽減したことを示した図である。（図１６Ｃ〜図１６Ｅ）急性ＤＲＡモデルでは、ＰＬＸ３３９７による処置により、ＢＡＬ液への好酸球の動員がブロックされ、ＢＡＬ液中の血清ＩｇＥの上昇及びＴｈ２サイトカインの増加が抑制された。
【図１６Ｆ】図１６は、ＰＬＸ３３９７は、喘息の急性ＤＲＡ誘発性マウスモデルにおいて、アレルゲン感作をブロックし、その後のアレルギー性肺炎症を軽減したことを示した図である。（図１６Ｆ）肺病理は、ＰＬＸ３３９７処置群が著しく低減したアレルギー性肺炎症を示したことを明らかにした。
【発明を実施するための形態】
【００２９】
本開示のさらなる利点は、一部は以下の説明に記載され、一部は説明から明らかであるか、又は本開示の実施によって理解されるであろう。本開示の利点は、添付の特許請求の範囲で特に注目される要素及び組み合わせによって実現及び達成されるであろう。前述の全般的な説明及び以下の詳細な説明の両方は、例示的かつ説明的なものにすぎず、特許請求されるように、開示を限定するものではないことを理解されたい。
【００３０】
本明細書に開示される多くの修正及び他の実施形態は、開示組成物及び方法が、前述の説明及び関連する図面に提示された教示の利益を有することに関係していると、当業者は想到するであろう。したがって、本開示は、開示された特定の実施形態に限定されるべきではなく、修正及び他の実施形態は、添付の特許請求の範囲内に含まれることが意図されていることを理解されたい。当業者は、本明細書に記載の態様の多くの変形及び適合を認識するであろう。これらの変形及び適合は、本開示の教示に含まれ、本明細書の特許請求の範囲に含まれることを意図している。
【００３１】
本明細書では特定の用語が使用されているが、それらは通常の説明的な意味でのみ使用されており、限定の目的ではない。
【００３２】
本開示を理解する当業者には明らかであるように、本明細書に記載及び図示された個々の実施形態の各々は、本開示の範囲又は精神から逸脱することなく、他のいくつかの実施形態のいずれかの特徴から容易に分離又は組み合わせることができる別個の構成要素及び特徴を有する。
【００３３】
任意の列挙された方法は、列挙されたイベントの順序で、又は論理的に可能な他の任意の順序で実施することができる。すなわち、特に明記しない限り、本明細書に記載の方法又は態様は、その工程が特定の順序で実施されることを要求すると解釈されることを決して意図するものではない。したがって、方法クレームが、前記工程が特定の順序に限定されることを請求項又は説明に具体的に述べていない場合、いかなる点においても、順序が推論されることを意図するものではない。これは、工程の配置又は操作フローに関する論理の問題、文法的な構成若しくは句読点から派生した明白な意味、又は明細書に記載されている態様の数若しくは種類を含む、解釈の可能な非明示的な根拠に当てはまる。
【００３４】
本明細書で言及される全ての刊行物は、それら刊行物が引用されることに関連して方法及び／又は材料を開示及び説明するために参照により本明細書に援用される。本明細書で論じられている刊行物は、本出願の出願日以前のそれらの開示のためにのみ提供されている。本明細書のいかなるものも、本発明が先行発明を理由としてそのような刊行物に先行する権利がないことを認めるものと解釈されるべきではない。さらに、本明細書に記載されている発行日は実際の発行日とは異なる場合があり、独立した確認が必要になる場合がある。
【００３５】
本開示の態様は、システム法定分類（ｓｙｓｔｅｍ  ｓｔａｔｕｔｏｒｙ  ｃｌａｓｓ）などの特定の法定分類で説明及び特許請求され得るが、これは便宜上のものであり、当業者は、あらゆる法定分類において本開示の各態様が説明及び特許請求され得ることを理解するであろう。
【００３６】
本明細書で使用される用語は、特定の態様を説明することのみを目的としており、限定することを考慮するものではないことも理解されたい。別段の定義がない限り、本明細書で使用される全ての技術用語及び科学用語は、開示組成物及び方法が属する技術分野の当業者によって通常理解されるのと同じ意味を有する。通常使用される辞書で定義されているような用語は、本明細書及び関連技術の文脈におけるそれらの意味と一致する意味を有すると解釈されるべきであり、本明細書で明示的に定義されていない限り、理想化された又は過度に形式的な意味で解釈されるべきではないことがさらに理解されよう。
【００３７】
本開示の様々な態様を説明する前に、以下の定義が提供され、特に明記しない限り使用されるものとする。さらなる用語は、本開示の他の記載において定義され得る。
【００３８】
Ａ．定義
本明細書で使用される場合、「含む」（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）は、言及された特徴、整数、工程、又は成分（構成要素）の存在を指定するものとして解釈されるべきであるが、１以上の特徴、整数、工程、又は成分（構成要素）、若しくはそれらの群の存在又は追加を排除するものではない。さらに、「によって」（ｂｙ）、「含んでいる」（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）、「含む（構成する）」（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）、「含む（構成する）」（ｃｏｍｐｒｉｓｅｄ  ｏｆ）、「含んでいる」（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）、「含む」（ｉｎｃｌｕｄｅ）、「含まれる」（ｉｎｃｌｕｄｅｄ）、「含んでいる」（ｉｎｖｏｌｖｉｎｇ）、「含む」（ｉｎｖｏｌｖｅ）、「含まれる」（ｉｎｖｏｌｖｅｄ）、及び「そのような」（ｓｕｃｈ  ａｓ）という用語のそれぞれは、オープンで非限定的な意味で使用され、互換的に使用され得る。さらに、「含む」（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）という用語は、「本質的にからなる」（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ  ｏｆ）及び「からなる」（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｏｆ）という用語に包含される例及び態様を含むことを意図している。同様に、「本質的にからなる」（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ  ｏｆ）という用語は、「からなる」（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｏｆ）という用語に包含される例を含むことを意図している。
【００３９】
明細書及び添付の特許請求の範囲で使用されるように、単数形「１（つの）」（ａ）、「１（つの）」（ａｎ）、及び「前記」（ｔｈｅ）は、文脈が明確に別段の指示をしない限り、複数の指示対象を含む。したがって、例えば、単数の「ＣＳＦ１Ｒ阻害剤」、「医薬組成物」、又は「微粒子」への言及は、２又はそれ以上のそのようなＣＳＦ１Ｒ阻害剤、医薬組成物、又は微粒子などを含むが、これらに限定されない。
【００４０】
比率、濃度、量、及び他の数値データは、本明細書では範囲形式で表され得ることに留意されたい。さらに、各範囲のエンドポイント（終点）は、他のエンドポイントに関連して、及び他のエンドポイントとは独立して、意味を持つことが理解されよう。多くの値が本明細書に開示されており、各値はまた、値自体に加えて、その特定の値について「約」（ａｂｏｕｔ）として本明細書に開示されることも理解される。例えば、値「１０」が開示されている場合、「約１０」も開示されている。範囲は、本明細書では、ある特定の値について「約」から（約・・・〜）、及び／又は別の特定の値について「約」まで（〜約・・・）として表され得る。同様に、値が近似値として表される場合、先行詞「約」を使用することにより、特定の値がさらなる側面を形成することが理解されよう。例えば、「約１０」の値が開示されている場合、「１０」も開示されている。
【００４１】
範囲が表される場合、さらなる態様は、１つの特定の値から及び／又は他の特定の値までを含む。例えば、記載された範囲が一方又は両方の限界値を含む場合、それらの含まれる限界値のいずれか又は両方を除外する範囲もまた、本開示に含まれ、例えば、「ｘ〜ｙ」という句には、「ｘ」から「ｙ」までの範囲と、「ｘ」より大きく「ｙ」より小さい範囲とが含まれる。範囲は、上限として表されてもよく、例えば、「約ｘ、ｙ、ｚ、又はそれ以下」であり、「約ｘ」、「約ｙ」、及び「約ｚ」の特定の範囲並びに「ｘ未満」、「ｙ未満」、及び「ｚ未満」の範囲を含むと解釈されるものとする。同様に、「ｘ、ｙ、ｚ、又はそれ以上」という句は、「約ｘ」、「約ｙ」、及び「約ｚ」の特定の範囲並びに「ｘより大きい」、「ｙより大きい」、及び「ｚより大きい」の範囲を含むと解釈されるものとする。また、「約「ｘ」〜「ｙ」」（「ｘ」及び「ｙ」は数値）には、「約「ｘ」〜約「ｙ」」が含まれる。
【００４２】
このような範囲書式は、便宜上及び簡潔にするために使用され、したがって、範囲の限界値として明示的に記載されている数値だけを含めるのではなく、各数値及び副範囲が明示的に記載されているかのように、その範囲内に含まれる全ての個々の数値又は副範囲を含めるように柔軟に解釈されるものとする。説明のために、「約０．１％〜５％」の数値範囲は、明示的に記載された約０．１％〜約５％の値だけでなく、その指定範囲内にある個々の値（例えば、約１％、約２％、約３％、及び約４％）及び副範囲（例えば、約０．５％〜約１．１％、約５％〜約２．４％、約０．５％〜約３．２％、及び約０．５％〜約４．４％、並びにその他の可能な副範囲）も含むと解釈されるものとする。
【００４３】
本明細書で使用される場合、「約（値）」、「概算（値）」、「（値）又は約（値）で」、及び「実質的に（値）」という用語は、特許請求の範囲及び明細書に記載の通り、問題の量又は値が、正確な値又は同等の結果若しくは効果を提供する値であり得ることを意味する。すなわち、量、サイズ、配合、パラメーター、並びに他の量及び特性は、正確でないか正確でなくてもよいが、許容度、換算係数、四捨五入、測定誤差など、並びに同等の結果又は効果が得られるような当業者に知られている他の要因を反映して、必要に応じて概算及び／又はより大きく若しくはより小さくてもよいことが理解される。状況によっては、同等の結果又は効果を提供する値を合理的に決定し得ない場合がある。そのような場合、本明細書で使用される場合、「約（値）」及び「（値）又は約（値）で」は、特に明記又は推測されない限り、±１０％の変動を示す公称値を意味すると通常理解される。通常、量、サイズ、配合、パラメーター、又は他の量若しくは特性は、そのように明示的に述べられているかどうかにかかわらず、「約（値）」、「概算（値）」、又は「（値）又は約（値）で」である。定量値の前に、「約（値）」、「概算（値）」、又は「（値）又は約（値）で」が使用される場合、特に明記しない限り、前記パラメーターは特定の定量値自体も含むことが理解される。
【００４４】
「微粒子」とは、小分子ＣＳＦ１Ｒ阻害剤を組み込んだ、約１μｍ〜約１０００μｍの範囲内の粒径を有する天然又は合成ポリマーからなる粒子を意味する。薬物送達のための多種多様な微粒子の調製は、当技術分野で知られている。
【００４５】
「調節すること」（ｍｏｄｕｌａｔｉｎｇ）又は「調節する」（ｍｏｄｕｌａｔｅ）とは、機能、症状、又は障害の処置、予防、抑制、増強、又は誘導を指す。例えば、本開示の化合物は、ＣＳＦ１Ｒの小分子阻害剤の投与によってＣＳＦ１／ＣＳＦ１Ｒ経路を遮断することによって喘息を調節することができると考えられる。
【００４６】
本明細書で使用される「処置する」（ｔｒｅａｔｉｎｇ）又は「処置」（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）は、対象（好ましくはヒト）における、本明細書に記載の疾患又は障害の処置を包含し、すなわち、（ｉ）その進行を阻止すること、（ｉｉ）疾患や障害を緩和すること（例えば、障害の退行を引き起こすこと）、（ｉｉｉ）障害の進行を遅らせること、及び／又は（ｉｖ）疾患又は障害の１以上の症状の発症又は進行を阻害、緩和、又は遅らせること、を含む。
【００４７】
「対象」は、本明細書に記載の１以上の疾患及び障害に罹患している、又は罹患する可能性がある、哺乳動物（好ましくはヒト、又はヒト小児など）などの温血動物を指す。
【００４８】
本明細書で使用される場合、「有効量」は、細胞、組織、系、動物、又はヒトの有益なまたは望ましい生物学的、感情的、医学的、又は臨床的応答をもたらすのに充分な、本明細書で提供される開示化合物又は医薬組成物の量を指し得る。有効量は、１以上の投与、適用、又は投与量で投与されてもよい。この用語は、その範囲内に、実質的に正常な生理学的機能を増強又は回復するのに有効な量を含むこともできる。
【００４９】
本明細書で使用される場合、「治療有効量」という用語は、所望の治療結果を達成するために、又は望ましくない症状に影響を与えるために充分であるが、通常の有害な副作用を引き起こすには不充分である量を指す。任意の特定の患者に対する特定の治療上有効な用量レベルは、様々な要因に依存し、それらには、治療中の障害及びその障害の重症度、採用した特定の組成、患者の年齢、体重、健康状態全般、性別、及び食生活、投与時間、投与経路、使用した特定の化合物の排泄率、治療期間、使用される特定の化合物と組み合わせて又は同時に使用される薬物など、医療従事者の知識と専門知識の範囲内であり、医療分野で周知であり得る要因が含まれる。特定の疾患又は症状を処置する場合、場合によっては、所望の応答が疾患又は症状の進行を阻害する可能性がある。これは一時的に疾患の進行を遅らせることだけを含む場合もある。しかしながら、他の例では、疾患の進行を永久に停止することが望ましい場合がある。これは、特定の疾患について当業者に公知の日常的な診断方法によってモニタリング可能である。また、疾患又は症状の処置に対する望ましい応答は、発症を遅らせることや疾患又症状の発症を予防することでさえあり得る。
【００５０】
例えば、所望の治療効果を達成するために必要とされるレベルよりも低いレベルで化合物の用量を開始し、所望の効果が達成されるまで用量を徐々に増加させることは、充分に当業者の技術の範囲内である。所望により、有効な１日量を投与の目的で複数の用量に分割することができる。結果として、単回投与組成物は、１日用量を構成するような量又はその約倍数を含んでいてもよい。禁忌が発生した場合は、個々の医師が投与量を調整できる。本発明の薬剤の最大用量（単独で又は他の治療薬と組み合わせて）、すなわち、健全な医学的判断による最高の安全用量を使用することが通常好ましい。しかしながら、当業者は、患者が、医学的理由、心理的理由、又は事実上の他の理由のために、より低い用量又は許容可能な用量を主張し得ることが理解されるであろう。
【００５１】
例えば、開示化合物及び／又は医薬組成物の治療有効用量に対する応答は、治療薬又は薬剤の投与後の疾患症状の減少又は喪失などの、治療又は薬物療法の生理学的効果を決定することによって測定することができる。他のアッセイは当業者に公知であり、応答のレベルを測定するために使用してもよい。治療薬の量は、例えば、開示化合物及び／又は医薬組成物の量を増加又は減少させることによって、投与される開示化合物及び／又は医薬組成物を変更することによって、投与経路を変更することによって、投与タイミングを変更することによってなどにより変えてもよい。投与量は変更してもよく、１日又は数日間、毎日１回以上の投与で投与可能である。特定のクラスの医薬品の適切な投与量に関するガイダンスは、文献から分かる。
【００５２】
本明細書で使用される場合、「予防的有効量」という用語は、疾患又は症状の発症又は開始を予防するのに有効な量を指す。
【００５３】
本明細書で使用される場合、「予防する」又は「予防すること」という用語は、特に事前の行為によって、何かが起こるのを防止する、回避する、未然に防ぐ、発生を防ぐ、止める、又は妨害することを指す。本明細書で「低減」、「阻害」、又は「予防」が使用される場合、特に明記しない限り、他の２つの単語の使用も明示的に開示されることが理解される。
【００５４】
「薬学的に許容可能な」という用語は、生物学的又は他の方法で望ましくない、すなわち、許容できないレベルの望ましくない生物学的効果を引き起こしたり、有害な方法で相互作用したりしない材料を表す。
【００５５】
「薬学的に許容可能なビヒクル」という用語は、本開示の化合物と共に投与される希釈剤、アジュバント、賦形剤、又は担体を指す。「有効量」又は「薬学的有効量」という用語は、毒性がないが、所望の生物学的成果を提供するのに充分な量の薬剤を指す。その成果は、疾患の兆候、症状、又は原因の低減及び／又は緩和、あるいは生物システムの任意の他の望ましい変化であり得る。個々の場合における適切な「有効」量は、日常的な実験を用いて当業者によって決定され得る。
【００５６】
治療的使用のための「薬学的に許容可能な担体」は、製薬分野で周知であり、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（第１８版）（ペンシルベニア州イーストン、Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ、１９９０）に記載されている。例えば、生理的ｐＨの滅菌生理食塩水及びリン酸緩衝生理食塩水を使用してもよい。保存剤、安定剤、染料、さらには香料も医薬組成物中に提供され得る。例えば、安息香酸ナトリウム、ソルビン酸、及びｐ−ヒドロキシ安息香酸のエステルを保存剤として加えてもよい。同書（１４４９）。さらに、酸化防止剤及び懸濁剤を使用してもよい。同書。
【００５７】
本明細書で使用される「薬学的に許容可能な塩」という用語は、活性な主要薬剤の塩を意味し、治療有効量で投与された際に生物システムによって許容又は対象によって許容可能であるか、又は生物システムによって許容及び対象によって許容可能な酸又は塩基で調製される。本開示の化合物が比較的酸性の官能基を含む場合、塩基付加塩は、そのような化合物の中性形態を、そのまま又は適切な不活性溶媒中で、充分量の所望の塩基と接触させることによって得ることができる。薬学的に許容可能な塩基付加塩の例として、ナトリウム、カリウム、カルシウム、アンモニウム、有機アミノ、マグネシウム塩、リチウム塩、ストロンチウム塩、又は同様の塩が挙げられるが、これらに限定されない。本開示の化合物が比較的塩基性の官能基を含む場合、酸付加塩は、そのような化合物の中性形態を、そのまま又は適切な不活性溶媒中で、充分量の所望の酸と接触させることによって得ることができる。薬学的に許容可能な酸付加塩の例として、塩酸、臭化水素酸、硝酸、炭酸、一水素炭酸、リン酸、一水素リン酸、二水素リン酸、硫酸、一水素硫酸、ヨウ化水素酸、または亜リン酸などの無機酸に由来するもの、並びに酢酸、プロピオン酸、イソ酪酸、マレイン酸、マロン酸、安息香酸、コハク酸、スベリン酸、フマル酸、乳酸、マンデル酸、フタル酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トリルスルホン酸、クエン酸、酒石酸、メタンスルホン酸などの比較的毒性のない有機酸に由来する塩などが挙げられるが、これらに限定されない。また、アルギナートなどのアミノ酸の塩、グルクロン酸やガラクツロン酸などの有機酸の塩も含まれる。
【００５８】
「薬学的に許容可能なエステル」という用語は、インビボで加水分解し、人体で容易に分解して親化合物又はその塩を残すものを含む、本開示の化合物のエステルを指す。本開示の薬学的に許容可能な非毒性エステルの例には、Ｃ１〜Ｃ６アルキルエステルおよびＣ５〜Ｃ７シクロアルキルエステルが含まれるが、Ｃ１〜Ｃ４アルキルエステルが好ましい。開示化合物のエステルは、従来の方法に従って調製され得る。薬学的に許容可能なエステルは、ヒドロキシ基を含む化合物を、酸及び酢酸などのアルキルカルボン酸と、又は酸及び安息香酸などのアリールカルボン酸と反応させることによって、ヒドロキシ基に付加することができる。カルボン酸基を含む化合物の場合、薬学的に許容可能なエステルは、化合物をトリエチルアミン及びハロゲン化アルキルなどの塩基と、例えばヨウ化メチル、ヨウ化ベンジル、ヨウ化シクロペンチル、又はトリフラートアルキルと反応させることにより、カルボン酸基を含む化合物から調製される。また、それらは、上記化合物を塩酸などの酸及びエタノール又はメタノールなどのアルコールと反応させることによって調製され得る。
【００５９】
「薬学的に許容可能なアミド」という用語は、アンモニア、一級Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミン及び二級Ｃ１〜Ｃ６ジアルキルアミンに由来する本開示の非毒性アミドを指す。また、二級アミンの場合、当該アミンは、窒素原子を１つ含む５員又は６員の複素環の形態であり得る。アンモニア由来のアミド、Ｃ１〜Ｃ３アルキル第一級アミド、及びＣ１〜Ｃ２ジアルキル第二級アミドが好ましい。開示化合物のアミドは、従来の方法に従って調製され得る。医薬的に許容可能なアミドは、アミノ基を含む化合物を無水アルキル、無水アリール、ハロゲン化アシル、またはハロゲン化アロイルと反応させることにより、第一級または第二級アミン基を含む化合物から調製され得る。カルボン酸基を含む化合物の場合、薬学的に許容可能なアミドは、化合物をトリエチルアミン、ジシクロヘキシルカルボジイミド又はカルボニルジイミダゾールなどの脱水剤、及びアルキルアミン、ジアルキルアミン、例えばメチルアミン、ジエチルアミン、及びピペリジンと反応させることにより、カルボン酸基を含む化合物から調製される。また、それらは、上記化合物を、硫酸などの酸及び酢酸などのアルキルカルボン酸と、又はモレキュラーシーブを添加するなどの脱水条件下で酸及び安息香酸などのアリールカルボン酸と反応させることによって調製され得る。上記組成物は、薬学的に許容可能なプロドラッグの形態で本開示の化合物を含み得る。
【００６０】
「薬学的に許容可能なプロドラッグ」又は「プロドラッグ」という用語は、健全な医学的判断の範囲内で、過度の毒性、刺激、アレルギー反応などを伴わずにヒト及び下等動物の組織と接触して使用するのに適した、本開示の化合物のプロドラッグを表し、合理的な利益／リスク比に見合ったものであり、それらの使用目的に効果的である。本開示のプロドラッグは、例えば、血液中での加水分解によって、インビボで、開示化合物の構造を有する親化合物に迅速に変換され得る。網羅的検討が、Ｔ．  Ｈｉｇｕｃｈｉ  ａｎｄ  Ｖ．  Ｓｔｅｌｌａ，  Ｐｒｏ−ｄｒｕｇｓ  ａｓ  Ｎｏｖｅｌ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，  Ｖ．  １４  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａ．Ｃ．Ｓ．  Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ  Ｓｅｒｉｅｓ及びＥｄｗａｒｄ  Ｂ．  Ｒｏｃｈｅ，  ｅｄ．，  Ｂｉｏｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ  Ｃａｒｒｉｅｒｓ  ｉｎ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ，  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｐｅｒｇａｍｏｎ  Ｐｒｅｓｓ  （１９８７）においてなされている。
【００６１】
本明細書で使用される場合、「誘導体」という用語は、親化合物の構造に由来する構造を有する化合物（例えば、本明細書に開示される化合物）であって、その構造が本明細書に開示されるものと充分に類似しており、その類似性に基づいて、当業者が、特許請求される化合物と同じ又は類似の活性及び有用性を示すか、又は前駆体として同じ又は類似の活性及び有用性を誘発すると予想される化合物を指す。例示的な誘導体として、親化合物の塩、エステル、アミド、エステル又はアミドの塩、及びＮ−オキシドが挙げられる。
【００６２】
本明細書で使用される「接触する」という用語は、開示化合物又は医薬組成物を、細胞、標的タンパク質、又は他の生物学的実体に、近接させることを指し、その際、開示化合物又は医薬組成物は、直接的に、すなわち、上記細胞、標的タンパク質、又は他の生物学的実体自体と相互作用することによって、又は間接的に、すなわち、上記細胞、標的タンパク質、又は他の生物学的実体自体の活性が依存している別の分子、補因子、因子、又はタンパク質と相互作用することによって、細胞、標的タンパク質、又は他の生物学的実体の活性に影響を及ぼすことが可能である。
【００６３】
本明細書で使用される場合、有機化合物を含む化合物の命名は、一般名、ＩＵＰＡＣ、ＩＵＢＭＢ、又はＣＡＳの命名法の推奨事項を使用して付与され得る。１以上の立体化学特性が存在する場合、立体化学のＣａｈｎ−Ｉｎｇｏｌｄ−Ｐｒｅｌｏｇ則を使用して、立体化学における優先順位、Ｅ／Ｚ表示法などを指定できる。当業者は、命名される場合、命名規則を使用して化合物構造を体系的に縮小することによって、又はＣＨＥＭＤＲＡＷ（商標）（Ｃａｍｂｒｉｄｇｅｓｏｆｔ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、米国）などの市販のソフトウェアによって、化合物の構造を容易に確認することができる。
【００６４】
本明細書で使用される場合、「任意」又は「所望により」という用語は、その後に説明される事象又は状況が発生する可能性があることを意味し、その説明には当該事象又は状況が発生する場合と発生しない場合が含まれる。
【００６５】
特に明記しない限り、本明細書で言及される温度は、大気圧（すなわち、１気圧）に基づくことが理解される。
【００６６】
一態様では、本開示は、少なくとも１つのＣＳＦ１Ｒ阻害剤、及び所望により抗炎症薬及び／又は呼吸薬であるさらなる治療薬の投与によって、喘息、アレルギー性結膜炎、アレルギー性皮膚炎、アレルギー性食道炎、アレルギー性鼻炎、アレルゲン特異的血清ＩｇＥ産生、アレルギー性肺及び気道の炎症、並びに最小限の肺有害反応を伴う気道過敏性（ＡＨＲ）を含むがこれらに限定されないアレルギー性炎症を特徴とする疾患又は症状を処置する方法に関する。いくつかの態様では、アレルギー性炎症を特徴とする処置に有用な開示ＣＳＦ１Ｒ阻害剤は、開示医薬組成物を使用して投与され得る。本開示の他の組成物、化合物、方法、特徴、及び利点は、以下の図面、詳細な説明、及び実施例を検討することにより、当業者に明らかであるか又は明らかになるであろう。そのようなすべての追加の組成物、化合物、方法、特徴、及び利点が本明細書に含まれ、本開示の範囲内にあることが意図されている。
【００６７】
以下に示すように、ＣＳＦ１−ＣＳＦ１Ｒシグナル伝達経路の阻害は、慢性喘息のマウスモデルにおいて、空気アレルゲンに対する感作とその結果としてのアレルギー性肺炎症を効果的に抑制する。ＣＤＰＬ−ＧＷナノ粒子は、ＣＤＰＬ−ＧＷナノ粒子の吸入処置及び鼻腔内吹送送達に好ましい薬物動態を示し、アレルゲン特異的血清ＩｇＥ産生、アレルギー性肺及び気道炎症、及び最小限の肺有害反応を伴う気道過敏性（ＡＨＲ）などの喘息の病態を改善した。
【００６８】
Ｂ．ＣＳＦ１Ｒ阻害剤化合物
本明細書で使用される場合、「小分子ＣＳＦ１Ｒ阻害剤」は、ＣＳＦ１受容体ＣＳＦ１Ｒを選択的にブロックすることによってＣＳＦ１／ＣＳＦ１Ｒ経路を遮断する、約９００ダルトン未満（好ましくは約５００ダルトン未満）の分子量を有する有機化合物を意味する。
【００６９】
さらなる態様では、ＣＳＦ１Ｒ阻害剤は、限定されるものではないが、ＡＢ−５３０（Ｎ−［４−［３−（５−ｔｅｒｔ−ブチル−１，２−オキサゾール−３−イル）ウレイド］フェニル］イミダゾ［２，１−ｂ］ベンゾチアゾール−２−カルボキサミドとしても知られる）（第一三共株式会社（Ｄａｉｉｃｈｉ  Ｓａｎｋｙｏ））、ＡＣ−７０８（Ａｍｂｉｔ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ社）、ＡＣ−７１０（Ａｍｂｉｔ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ社）、ＡＣ−８５５（Ａｍｂｉｔ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ社）、ＡＲＲＹ−３８２（Ａｒｒａｙ  ＢｉｏＰｈａｒｍａ社）、ＡＺ−６８３（Ａｓｔｒａ−Ｚｅｎｅｃａ社）、ＡＺＤ−６４９５（Ａｓｔｒａ  Ｚｅｎｅｎｃａ社）、ＢＬＺ−３４９５（Ｎｏｖａｒｔｉｓ社）、ＢＬＺ−９４５（Ｎｏｖａｒｔｉｓ社）、Ｎ−（４−［［（５−ｔｅｒｔ−ブチル−１，２−オキサゾール−３−イル）カルバモイル］アミノ］フェニル）−５−［（１，２，２，６，６−ペンタメチルピペリジン−４−イル）オキシ］ピリジン−２−カルボキサミド−メタンスルホン酸塩（第一三共株式会社）、Ｎ−（４−［［（５−ｔｅｒｔ−ブチル−１，２−オキサゾール−３−イル）カルバモイル］アミノ］フェニル）−５−［（１，２，２，６，６−ペンタメチルピペリジン−４−イル）オキシ］ピリジン−２−カルボキサミド−メタンスルホン酸塩（第一三共株式会社）、ＣＴ  １５７８（ＣＴＩ  ＢｉｏＰｈａｒｍａ社）、ＣＹＴ−６４５（Ｇｉｌｅａｄ社）、ＤＣＣ  ２９０９（Ｄｅｃｉｐｈｅｒａ社）、ＤＣＣ−３０１４（Ｄｅｃｉｐｈｅｒａ社）、ＤＰ−４５７７（Ｄｅｃｉｐｈｅｒａ社）、ＤＰ−５５９９（Ｄｅｃｉｐｈｅｒａ社）、ＤＰ−６２６１（Ｄｅｃｉｐｈｅｒａ社）、ＥＮＭＤ−９８１６９３（ＥｎｔｒｅＭｅｄ社）、ＦＭＳキナーゼ阻害剤（ＡＥｇｅｒａ社）、ＧＴ−７９（Ｇｅｒｉｎｄａ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ社）、ＧＷ−２５８０（５−［３−メトキシ−４−（４−メトキシベンジルオキシ）ベンジル］ピリミジン−２，４−ジアミンとしても知られる）（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ社）、イロラセチブ（Ｉｌｏｒａｓｅｒｔｉｂ）（シカゴ大学（Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｃｈｉｃａｇｏ））、Ｋｉ−２０２２７（協和発酵キリン株式会社（Ｋｙｏｗａ  Ｈａｋｋｏ  Ｋｉｒｉｎ））、リニファニブ（Ｌｉｎｉｆａｎｉｂ）（ＡｂｂＶｉｅ社）、マシチニブ（Ｍａｓｉｔｉｎｉｂ）（ＡＢ  Ｓｃｉｅｎｃｅ社）、ペキシダルチニブ（Ｐｅｘｉｄａｒｔｉｎｉｂ）（Ｐｌｅｘｘｉｋｏｎ社）、ＰＬＸ  ５６２２（Ｐｌｅｘｘｉｋｏｎ社）、ＰＬＸ  ＦＫ１（Ｐｌｅｘｘｉｋｏｎ社）、ＰＬＸ−７４８６（Ｐｌｅｘｘｉｋｏｎ社）、ＲＥＤＸ−０５１８２（Ｒｅｄｘ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ社）、５−シアノ−Ｎ−［２−（シクロヘキセン−１−イル）−４−［１−［２−（ジメチルアミノ）アセチル］ピペリジン−４−イル］フェニル］−１Ｈ−イミダゾール−２−カルボキサミド、４−シアノ−Ｎ−（２−（４，４−ジメチルシクロヘキサ−１−エン−１−イル）−６−（２，２，６，６−テトラメチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）ピリジン−３−イル）−１Ｈ−イミダゾール−２−カルボキサミド、又はそれらの溶媒和物、水和物、互変異性体、若しくは薬学的に許容可能な塩（Ｊｏｈｎｓｏｎ  ＆  Ｊｏｈｎｓｏｎ社、Ｉｌｌｉｇ，  Ｃ．，  ｅｔ  ａｌ．、２００９年４月２３日公開の米国特許公開第２００９／０１０５２９６号に記載）であり得る。
【００７０】
さらなる態様では、小分子ＣＳＦ−１Ｒ阻害剤は、ＡＢ−５３０（Ｎ−［４−［３−（５−ｔｅｒｔ−ブチル−１，２−オキサゾール−３−イル）ウレイド］フェニル］イミダゾ［２，１−ｂ］ベンゾチアゾール−２−カルボキサミドとしても知られる）（第一三共株式会社）、ＡＣ−７０８（Ａｍｂｉｔ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ社）、ＡＣ−７１０（Ａｍｂｉｔ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ社）、ＡＣ−８５５（Ａｍｂｉｔ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ社）、ＢＬＺ−３４９５（Ｎｏｖａｒｔｉｓ社）、ＤＣＣ−３０１４（Ｄｅｃｉｐｈｅｒａ社）、ＧＷ−２５８０（５−［３−メトキシ−４−（４−メトキシベンジルオキシ）ベンジル］ピリミジン−２，４−ジアミンとしても知られる）（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ社）、イロラセチブ（Ｉｌｏｒａｓｅｒｔｉｂ）（シカゴ大学）、マシチニブ（Ｍａｓｉｔｉｎｉｂ）（ＡＢ  Ｓｃｉｅｎｃｅ社）、ペキシダルチニブ（Ｐｅｘｉｄａｒｔｉｎｉｂ）（Ｐｌｅｘｘｉｋｏｎ社）、ＰＬＸ  ５６２２（Ｐｌｅｘｘｉｋｏｎ社）、ＰＬＸ  ＦＫ１（Ｐｌｅｘｘｉｋｏｎ社）、ＰＬＸ−７４８６（Ｐｌｅｘｘｉｋｏｎ社）、ＲＥＤＸ−０５１８２（Ｒｅｄｘ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ社）、及び４−シアノ−Ｎ−（２−（４，４−ジメチルシクロヘキサ−１−エン−１−イル）−６−（２，２，６，６−テトラメチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）ピリジン−３−イル）−１Ｈ−イミダゾール−２−カルボキサミド、又はそれらの溶媒和物、水和物、互変異性体、若しくは薬学的に許容可能な塩からなる群から選択される。
【００７１】
さらなる態様では、小分子ＣＳＦ１Ｒ阻害剤としては、ＰＬＸ３３９７、ＤＣＣ−３０１４、ＢＬＺ９４５、ＧＷ２５８０、ＰＬＸ６４７、及びＡＲＲＹ−３８２が挙げられるがこれらに限定されない。
【００７２】
「ＰＬＸ３３９７」（ペキシダルチニブ（Ｐｅｘｉｄａｒｔｉｎｉｂ））は、５−（（５−クロロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）メチル）−Ｎ−（（６−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）メチル）ピリジン−２−アミンを意味する。ＰＬＸ３３９７は、例えば、Ｐｌｅｘｘｉｋｏｎ  Ｉｎｃ．社（カリフォルニア州バークレー）から市販されており、下記式で表される構造を有する化合物を指す。
【化１】
2021522214.tif 000003
【００７３】
「ＤＣＣ−３０１４」は、Ｄｅｃｉｐｈｅｒａ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，  Ｉｎｃ．社（マサチューセッツ州ウォルサム）により開発された小分子ＣＳＦ１Ｒ阻害剤を意味する。
【００７４】
「ＢＬＺ９４５」は、４−［［２−［［（１Ｒ，２Ｒ）−２−ヒドロキシシクロヘキシル］アミノ］−６−ベンゾチアゾリル］オキシ］−Ｎ−メチル−２−ピリジンカルボキサミドを意味する。ＢＬＺ９４５は、例えば、Ｃａｙｍａｎ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ社（ミシガン州アナーバー）から市販されており、下記式で表される構造を有する化合物を指す。
【化２】
2021522214.tif 000004
【００７５】
「ＧＷ２５８０」は、５−［［３−メトキシ−４−［（４−メトキシフェニル）メトキシ］フェニル］メチル］ピリミジン−２，４−ジアミンを意味する。ＧＷ２５８０は、例えば、Ｃａｙｍａｎ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ社（ミシガン州アナーバー）から市販されており、下記式で表される構造を有する化合物を指す。
【化３】
2021522214.tif 000005
【００７６】
「ＰＬＸ６４７」は、５−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イルメチル）−Ｎ−［［４−（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］−２−ピリジンアミンを意味する。ＰＬＸ６４７は、例えば、Ｃａｙｍａｎ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ社（ミシガン州アナーバー）から市販されており、下記式で表される構造を有する化合物を指す。
【化４】
2021522214.tif 000006
【００７７】
「ＡＲＲＹ−３８２」は、Ａｒｒａｙ  Ｂｉｏｐｈａｒｍａ社（コロラド州ボールダー）により開発された小分子ＣＳＦ１Ｒ阻害剤を意味する。
【００７８】
様々な態様において、開示化合物は、共結晶の形態であり得る。「共結晶」という用語は、非共有相互作用を通じてそれらの安定性を負う２以上の分子の物理的会合を意味する。この分子複合体の１以上の構成要素により、結晶格子に安定したフレームワークが提供される。特定の例では、ゲスト分子は、無水物又は溶媒和物として結晶格子に組み込まれる。例えば、「Ｃｒｙｓｔａｌ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｈａｓｅｓ．  Ｄｏ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｃｏ−ｃｒｙｓｔａｌｓ  Ｒｅｐｒｅｓｅｎｔ  ａ  Ｎｅｗ  Ｐａｔｈ  ｔｏ  Ｉｍｐｒｏｖｅｄ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅｓ？」  Ａｌｍａｒａｓｓｏｎ，  Ｏ．，  ｅｔ．  ａｌ．，  Ｔｈｅ  Ｒｏｙａｌ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  ｏｆ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，  １８８９−１８９６，  ２００４を参照。好ましい共結晶には、ｐ−トルエンスルホン酸及びベンゼンスルホン酸が含まれる。
【００７９】
「薬学的に許容可能な共結晶」という用語は、製剤の他の成分と適合性があり、そのレシピエントに有害ではないものを意味する。
【００８０】
さらなる態様において、開示化合物は、溶媒和物として、そして特に、例えば、溶媒又は水溶液からの結晶化によって得ることが可能な開示化合物の水和物として、単離され得る。これに関連して、１、２、３、又は任意の数の溶媒和物又は水分子が、本発明に係る化合物と結合して、溶媒和物及び水和物を形成し得る。
【００８１】
開示化合物は、無機酸又は有機酸に由来する塩の形態で使用してもよい。薬学的に許容可能な塩には、開示化合物に存在する酸性又は塩基性基の塩が含まれる。好適な薬学的に許容可能な塩としては塩基付加塩が挙げられ、例えば、ナトリウム塩又はカリウム塩などのアルカリ金属塩、カルシウム塩又はマグネシウム塩などのアルカリ土類金属塩、及び第四級アンモニウム塩などの適切な有機配位子で形成された塩が含まれ、これらは薬物化合物を好適な薬学的に許容可能な塩基と反応させることによって同様に調製され得る。上記塩は、ｉｎ  ｓｉｔｕで、本開示の化合物の最終的な単離及び精製中に、又は、開示化合物の遊離塩基官能基（例えば第二級又は第三級アミンなど）を好適な無機酸又は有機酸と反応させることによる、若しくは開示化合物の遊離酸官能基（例えばカルボン酸など）を好適な無機塩基又は有機塩基と反応させることによる最終的な単離に続いて、調製され得る。
【００８２】
酸性付加塩は、ｉｎ  ｓｉｔｕで、開示化合物の最終的な単離及び精製中に、又は１以上の窒素基を含む部分を好適な酸と反応させることによって別途、調製することが可能である。様々な態様において、薬学的に許容可能な酸付加塩を形成するために使用可能な酸には、塩酸、硫酸、及びリン酸などの無機酸、並びにシュウ酸、マレイン酸、コハク酸、及びクエン酸などの有機酸が含まれる。さらなる態様では、塩としてさらに以下のものが挙げられるが、これらに限定されない：塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、硝酸塩、硫酸塩、重硫酸塩、リン酸塩、酸性リン酸塩、イソニコチン酸塩、酢酸塩、乳酸塩、サリチル酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、パントテン酸塩、重酒石酸塩、アスコルビン酸塩、コハク酸塩、マレイン酸塩、ゲンチジン酸塩、フマル酸塩、グルコン酸塩、グルクロン酸塩、糖酸塩、ギ酸塩、安息香酸塩、グルタミン酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、酪酸塩、樟脳酸塩、樟脳スルホン酸塩、ジグルコン酸、グリセロリン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、フマル酸塩、塩酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩（イセチオン酸塩）、ニコチン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、シュウ酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３−フェニルプロピオン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、リン酸塩、グルタミン酸塩、重炭酸塩、ウンデカン酸塩、及びパモ酸塩（すなわち、１，１’−メチレン−ビス−（２−ヒドロキシ−３−ナフトエート））。また、塩基性窒素含有基は、塩化、臭化、及びヨウ化メチル、エチル、プロピル、及びブチルなどの低級ハロゲン化アルキル；硫酸ジメチル、ジエチル、ジブチル、及びジアミルなどの硫酸ジアルキル；塩化、臭化、及びヨウ化デシル、ラウリル、ミリスチル、及びステアリルなどの長鎖ハロゲン化物；臭化ベンジル及びフェネチルなどのハロゲン化アラルキル；並びにその他といった薬剤で四級化されていてもよい。
【００８３】
塩基性付加塩は、ｉｎ  ｓｉｔｕで、開示化合物の最終的な単離及び精製中に、又は、カルボン酸部分を、薬学的に許容可能な金属カチオンの好適な塩基（例えば水酸化物、炭酸塩、若しくは重炭酸塩など）又はアンモニア又は有機第一級、第二級、若しくは第三級アミンと反応させることによって別途、調製することが可能である。薬学的に許容可能な塩として、限定されるものではないが、ナトリウム、リチウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、及びアルミニウム塩などのアルカリ及びアルカリ土類金属に基づくカチオン、並びにアンモニウム、テトラメチルアンモニウム、テトラエチルアンモニウム、メチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、トリエチルアミン、エチルアミンなどを含むがこれらに限定されない非毒性アンモニウム、第４級アンモニウム、及びアミンカチオンなどが挙げられる。塩基付加塩の形成に有用な他の代表的な有機アミンには、ジエチルアミン、エチレンジアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、ピペラジンなどが含まれる。さらなる態様では、薬学的に許容可能な塩の調製に使用可能な塩基として以下が挙げられる：アンモニア、Ｌ−アルギニン、ベネタミン、ベンザチン、水酸化カルシウム、コリン、デアノール、ジエタノールアミン、ジエチルアミン、２−（ジエチルアミノ）−エタノール、エタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ−メチル−グルカミン、ヒドラバミン、１Ｈ−イミダゾール、Ｌ−リジン、水酸化マグネシウム、４−（２−ヒドロキシエチル）−モルホリン、ピペラジン、水酸化カリウム、１−（２−ヒドロキシエチル）−ピロリジン、二級アミン、水酸化ナトリウム、トリエタノールアミン、トロメタミン、及び水酸化亜鉛。
【００８４】
Ｃ．医薬組成物
特定の態様において、本開示は、治療有効量の１以上の小分子ＣＳＦ１Ｒ阻害剤、及び１以上の薬学的に許容可能な希釈剤、保存剤、可溶化剤、乳化剤、アジュバント、賦形剤、又は担体を含む医薬組成物である。医薬組成物は、例えば、アレルギー性炎症を特徴とする疾患又は症状を処置するために使用することができる。
【００８５】
非液体製剤に適した賦形剤も当業者に公知である。薬学的に許容可能な賦形剤及び塩についての網羅的な検討が、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（第１８版）（ペンシルベニア州イーストン、Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ、１９９０）に記載されている。
【００８６】
さらに、湿潤剤又は乳化剤、生物学的緩衝物質、界面活性剤などの補助物質が、そのようなビヒクル中に存在してもよい。生物学的緩衝液は、薬理学的に許容可能であり、製剤に所望のｐＨ（すなわち生理学的に許容可能な範囲内のｐＨ）を提供する任意の溶液であり得る。緩衝液の例には、生理食塩水、リン酸緩衝生理食塩水、トリス緩衝生理食塩水、ハンクス緩衝生理食塩水などが挙げられる。
【００８７】
目的とする投与様式に応じて、医薬組成物は、例えば、錠剤、坐剤、丸薬、カプセル剤、粉末、液剤、懸濁液、クリーム、軟膏、ローションなどの固体、半固体、又は液体剤形の形態であり得、正確な投与量の単回投与に適した単位剤形であることが好ましい。上記組成物は、薬学的に許容可能な担体と組み合わせて、有効量の選択された薬物を含み、さらに、他の医薬品、アジュバント、希釈剤、緩衝液などを含んでいてもよい。
【００８８】
通常、本開示の組成物は、認められた投与様式のいずれかによって治療有効量で投与されるであろう。好適な投与量の範囲は、処置される疾患の重症度、対象の年齢及び相対的健康、使用される化合物の効力、投与経路及び形態、投与が意図される適応症、関与する医師の優先傾向及び経験など、多くの要因に依存する。そのような疾患を処置する当業者は、過度の実験なしに、そして個人の知識及び本出願の開示に依って、所与の疾患に対する開示の組成物の治療有効量を確認することができるであろう。
【００８９】
したがって、本開示の組成物は、経口（口腔内及び舌下を含む）、直腸、鼻、局所、肺、膣、又は非経口（筋肉内、動脈内、髄腔内、皮下、及び静脈内を含む）投与に適したもの又は吸入または吹送による投与に適した形態のものを含む、医薬製剤として投与することができる。
【００９０】
固体組成物については、従来の非毒性固体担体には、例えば、医薬品グレードのマンニトール、ラクトース、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、サッカリンナトリウム、タルク、セルロース、グルコース、スクロース、炭酸マグネシウムなどが含まれる。液体の薬学的に投与可能な組成物は、例えば、本明細書に記載の活性化合物及び所望の医薬アジュバントを、例えば、水、生理食塩水、水性デキストロース、グリセロール、エタノールなどの賦形剤に溶解、分散などすることによって調製して、溶液又は懸濁液を形成することができる。また、必要に応じて、投与される医薬組成物は、少量の湿潤剤又は乳化剤、ｐＨ緩衝剤などの非毒性補助物質、例えば、酢酸ナトリウム、モノラウリン酸ソルビタン、トリエタノールアミン酢酸ナトリウム、オレイン酸トリエタノールアミンなどを含み得る。そのような剤形を調製する実際の方法は、当技術分野の当業者に公知であるか、明らかであろう。例えば、上述のＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓを参照。
【００９１】
さらに別の態様は、以下のポリマーを含む浸透促進剤賦形剤の使用である：ポリカチオン（キトサン及びその第四級アンモニウム誘導体、ポリ−Ｌ−アルギニン、アミノ化ゼラチン）；ポリアニオン（Ｎ−カルボキシメチルキトサン、ポリアクリル酸）；及びチオール化ポリマー（カルボキシメチルセルロース−システイン、ポリカルボフィル−システイン、キトサン−チオブチルアミジン、キトサン−チオグリコール酸、キトサン−グルタチオンコンジュゲート）。
【００９２】
経口投与については、上記組成物は、通常、錠剤、カプセル剤、ソフトゲルカプセル剤の形態をとるか、水溶液若しくは非水溶液、懸濁液、又はシロップ剤であり得る。錠剤及びカプセル剤が好ましい経口投与形態である。経口使用のための錠剤及びカプセル剤は、ラクトース及びコーンスターチなどの１以上の一般的に使用される担体を含んでいてもよい。ステアリン酸マグネシウムなどの潤滑剤も典型的には添加される。典型的には、本開示の組成物は、ラクトース、デンプン、スクロース、グルコース、メチルカルロース、ステアリン酸マグネシウム、リン酸二カルシウム、硫酸カルシウム、マンニトール、ソルビトールなどの経口の非毒性の薬学的に許容可能な不活性担体と組み合わせてもよい。さらに、所望により又は必要に応じて、好適な結合剤、滑沢剤、崩壊剤、及び着色剤も混合物に組み込むことができる。好適な結合剤としては、デンプン、ゼラチン、グルコース又はβラクトースなどの天然糖、トウモロコシ甘味料、アカシア、トラガカント、又はアルギン酸ナトリウムなどの天然及び合成ゴム、カルボキシメチルセルロース、ポリエチレングリコール、ワックスなどが挙げられる。これらの剤形で使用される潤滑剤としては、オレイン酸ナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウムなどが挙げられる。崩壊剤としては、デンプン、メチルセルロース、寒天、ベントナイト、キサンタンガムなどが挙げられるが、これらに限定されない。
【００９３】
液体懸濁液を使用する場合、活性剤は、エタノール、グリセロール、水などの任意の経口の非毒性の薬学的に許容可能な不活性担体、並びに乳化剤及び懸濁剤と組み合わせることができる。所望により、香料、着色料、及び／又は甘味料も加えてもよい。本明細書の経口製剤に組み込むための他の所望の成分としては、保存剤、懸濁剤、増粘剤などが挙げられるが、これらに限定されない。
【００９４】
非経口製剤は、液体溶液若しくは懸濁液、注射前の液体への可溶化又は懸濁に適した固体形態、又は乳濁液のいずれかとして、従来の形態で調製することができる。好ましくは、無菌の注射可能な懸濁液は、好適な担体、分散剤又は湿潤剤、及び懸濁剤を使用して、当技術分野で公知の手法に従って製剤化される。また、無菌の注射可能な製剤は、無菌の注射可能な溶液又は非毒性の非経口的に許容可能な希釈剤若しくは溶媒中の懸濁液であり得る。使用できる許容可能なビヒクル及び溶媒には、水、リンゲル液、及び等張塩化ナトリウム溶液がある。また、無菌の固定油、脂肪エステル、又はポリオールが、溶媒又は懸濁媒体として従来使用されている。さらに、非経口投与は、一定レベルの投与量が維持されるように、徐放又は持続放出システムの使用を伴ってもよい。
【００９５】
非経口投与には、関節内、静脈内、筋肉内、皮内、腹腔内、及び皮下投与経路が含まれ、製剤を目的のレシピエントの血液と等張にする抗酸化剤、緩衝液、静菌剤、及び溶質を含み得る水性及び非水性の等張滅菌注射液、及び懸濁剤、可溶化剤、増粘剤、安定剤、及び保存剤を含み得る水性及び非水性の滅菌懸濁液を含む。特定の非経口経路を介した投与は、滅菌シリンジ又は連続注入システムなどの他の機械的装置によって推進される針又はカテーテルを介して、本開示の製剤を患者の体内に導入することを含み得る。本開示によって提供される製剤は、シリンジ、注入器、ポンプ、又は非経口投与のために当技術分野で認められている他の任意の装置を使用して投与することができる。
【００９６】
無菌の注射可能な懸濁液は、好適な担体、分散剤又は湿潤剤、及び懸濁剤を使用して、当技術分野で公知の手法に従って製剤化されることが好ましい。また、無菌の注射可能な製剤は、無菌の注射可能な溶液又は非毒性の非経口的に許容可能な希釈剤若しくは溶媒中の懸濁液であり得る。使用できる許容可能なビヒクル及び溶媒には、水、リンゲル液、及び等張塩化ナトリウム溶液がある。また、無菌の固定油、脂肪エステル、又はポリオールが、溶媒又は懸濁媒体として従来使用されている。さらに、非経口投与は、一定レベルの投与量が維持されるように、徐放又は持続放出システムの使用を伴ってもよい。
【００９７】
非経口投与のための本開示に係る調製物は、無菌水溶液又は非水溶液、懸濁液、又は乳濁液を含む。非水性溶媒又はビヒクルの例としては、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、オリーブ油及びコーン油などの植物油、ゼラチン、及びオレイン酸エチルなどの注射可能な有機エステルが挙げられる。そのような剤形は、保存剤、湿潤剤、乳化剤、及び分散剤などのアジュバントも含むことができる。それらは、例えば、細菌保持フィルターによる濾過によって、滅菌剤を組成物に組み込むことによって、組成物を照射することによって、又は組成物を加熱することによって、滅菌することができる。また、使用直前に滅菌水又はその他の無菌注射剤を使用して製造することもできる。
【００９８】
無菌の注射可能な溶液は、本開示の化合物を１以上、必要に応じて上記した他の様々な成分と共に好適な溶媒に必要な量で組み込み、続いて濾過滅菌することによって調製される。通常、分散液は、様々な滅菌した有効成分を、基本的な分散媒体及び上記したものから必要な他の成分を含む滅菌ビヒクルに組み込むことによって調製される。無菌の注射可能な溶液を調製するための無菌粉末の場合、好ましい調製方法は、真空乾燥法及び凍結乾燥法であり、これにより、有効成分の粉末に加えて、事前に無菌濾過した溶液から任意の追加の所望の成分が得られる。したがって、例えば、注射による投与に適した非経口組成物は、１０体積％のプロピレングリコール及び水中で１．５重量％の活性成分を撹拌することによって調製される。上記溶液は塩化ナトリウムで等張にされ滅菌される。
【００９９】
あるいは、本開示の医薬組成物は、直腸投与用の坐剤の形態で投与することができる。これらは、室温では固体であるが直腸温度では液体であることから直腸で溶融して薬物を放出する適切な非刺激性賦形剤と薬剤とを混合することによって調製することができる。このような材料には、カカオバター、蜜蝋、ポリエチレングリコールが含まれる。
【０１００】
局所薬物送達のための好ましい製剤は、軟膏及びクリームである。軟膏は、通常、ワセリン又は他の石油誘導体ベースの半固形製剤である。選択した活性剤を含むクリームは、当技術分野で公知であるように、水中油型または油中水型のいずれかの粘性液体又は半固体乳濁液である。クリーム基剤は水洗可能で、油相、乳化剤、水相を含む。「内部」相とも呼ばれる油相は、通常ワセリン及びセチル又はステアリルアルコールなどの脂肪アルコールで構成され、水相は大抵、必ずしもそうではないが、体積で油相を超えており、通常保水剤を含む。クリーム製剤中の乳化剤は、通常、非イオン性、アニオン性、カチオン性、又は両性の界面活性剤である。当業者によって理解されるように、使用される特定の軟膏又はクリーム基剤は、最適な薬物送達を提供するものである。他の担体やビヒクルと同様に、軟膏基剤は不活性で、安定し、刺激がなく、感作性がないものとする。
【０１０１】
口腔内投与用の製剤には、錠剤、トローチ剤、ゲルなどが含まれる。あるいは、口腔内投与は、当業者に公知の経粘膜送達システムを使用して実施してもよい。また、本開示の化合物は、従来の経皮薬物送達システム、すなわち、薬剤が典型的には、体表面に固定される薬物送達デバイスとして機能する積層構造内に含まれる、経皮「パッチ」を使用して、皮膚又は筋組織を介して送達され得る。そのような構造では、薬物組成物は、通常、上部裏打ち層の下にある層又は「リザーバー」に含まれる。積層デバイスは、単一のリザーバーを含んでいても、複数のリザーバーを含んでいてもよい。一態様では、リザーバーは、薬物送達中にシステムを皮膚に固定する、薬学的に許容可能な接触接着剤材料のポリマーマトリックスを含む。好適な皮膚接触接着剤材料の例としては、ポリエチレン、ポリシロキサン、ポリイソブチレン、ポリアクリレート、ポリウレタンなどが挙げられるが、これらに限定されない。あるいは、薬物含有リザーバー及び皮膚接触接着剤は、別々の固有の層として存在し、リザーバーの下に接着剤があり、この場合、上記のようなポリマーマトリックスであるか、液体又はゲルのリザーバーであるか、若しくは他の形態をとることも可能である。デバイスの上面として機能するこれらのラミネートの裏打ち層は、積層構造の主要な構造要素として機能し、デバイスに多くの柔軟性を付与する。裏打ち層用に選択した材料は、活性剤及び存在する他の材料に対して実質的に不浸透性でなければならない。
【０１０２】
本開示の医薬組成物は、鼻エアロゾル又は吸入によって投与することも可能である。そのような組成物は、医薬製剤の分野で周知の技術に従って調製され、ベンジルアルコール又は他の好適な保存剤、生物学的利用能を高めるための吸収促進剤、フルオロカーボンや窒素などの推進剤、及び／又は他の従来の可溶化剤若しくは分散剤を使用して、生理食塩水中の溶液として調製することができる。
【０１０３】
本開示の組成物は、特に気道への、鼻腔内投与を含むエアロゾル投与用に処方することが可能である。そのような組成物は、医薬製剤の分野で周知の技術に従って調製され、ベンジルアルコール又は他の好適な保存剤、生物学的利用能を高めるための吸収促進剤、及び／又は他の従来の可溶化剤若しくは分散剤を使用して、生理食塩水中の溶液として調製することが可能である。上記化合物は、通常、例えば５ミクロン以下のオーダーの小さな粒径を有するであろう。そのような粒径は、当技術分野で公知の手段によって、例えば、微粉化によって得ることもできる。有効成分は、クロロフルオロカーボン（ＣＦＣ）、例えば、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、二酸化炭素、又は他の好適な気体などの適切な推進剤と共に加圧パックで提供される。エアロゾルは、レシチンなどの界面活性剤も簡便に含んでいてもよい。薬剤の投与量は、計量バルブによって制御可能である。あるいは、有効成分は、乾燥粉末の形態で、例えば、ラクトース、デンプン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース及びポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）などのデンプン誘導体などの好適な粉末基剤中の化合物の粉末混合物として提供することが可能である。粉末担体は鼻腔内でゲルを形成する。粉末組成物は、例えば、吸入器によって粉末を投与し得るゼラチン又はブリスターパックなどのカプセル剤又はカートリッジで、単位剤形で提示することができる。
【０１０４】
ＣＳＦ１Ｒ阻害剤は、対象への投与に適した眼科用組成物に組み込むことが可能である。典型的には、眼科用組成物又は製剤は、眼用賦形剤を含む。眼用賦形剤は、緩衝液、張性調節剤、湿潤剤、及び／又は抗酸化剤であり得る。緩衝液は、ホウ酸及び／又はリン酸であり得る。緩衝液は、ヌクレアーゼ組成物のｐＨへの変化を最小限に抑え得る。張性調節剤は、等張環境を提供し得、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化マグネシウム、及び／又はまたはホウ酸を含み得る。酸化防止剤には、例えば、メタ重亜硫酸ナトリウム及びＥＤＴＡが含まれる。抗酸化剤は、ヌクレアーゼ組成の安定化を補助するために使用され得る。ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）及びポリソルベート８０を含む湿潤剤は、ヌクレアーゼ組成物を眼全体に広げることを可能にし得る。他の眼用賦形剤には、塩化ベンザルコニウム（ＢＡＫ）、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、亜塩素酸ナトリウム（Ｐｕｒｉｔｅ（登録商標））、クロロブタノール、過ホウ酸ナトリウム及びソルビン酸、過ホウ酸ナトリウム、亜塩素酸ナトリウム（Ｐｕｒｉｔｅ（登録商標））、ポリオール、グリセリン、ポリソルベート８０、デキストラン７０、プロピレングリコール、並びにＰＥＧ−４００などのポリエチレングリコールなどが含まれる。眼用賦形剤は、鉱油、白色ワセリン、白色軟膏、又はラノリンなどの軟膏であり得る。水性ビヒクルと同様に、ワセリン及び鉱油は、眼との接触時間を増加させるための軟膏製剤中のビヒクルとして役立ち得る。これらの成分は、ムチンと水層を強化することにより、眼球の表面に閉塞膜を形成し、涙液膜の組成を改善するのに役立ち得る。眼用賦形剤は、ムチン様の特性を提供し、及び／又は蒸発による水層の損失を減少させ得る。眼用賦形剤は、以下に記載されるような薬学的に許容可能な担体などの担体として機能し得る。
【０１０５】
眼科用組成物は、眼用送達に適した薬学的に許容可能な担体をさらに含み得る。好適な眼用担体は当業者に公知であり、そのような全ての従来の担体を本開示で使用することができる。眼組織又は付属器組織への局所組成物の経皮送達を促進及び早めるために使用され得る好適な担体として、アルコール（エタノール、プロパノール、ノナノール）、脂肪アルコール（ラウリルアルコール）、脂肪酸（吉草酸、カプロン酸、カプリン酸）、脂肪酸エステル（ミリスチン酸イソプロピル及びｎ−ヘキサノエートイソプロピル）、アルキルエステル（酢酸エチル及び酢酸ブチル）、ポリオール（プロピレングリコール、プロパンジオン、及びヘキサントリオール）、スルホキシド（ジメチルスルホキシド及びデシルメチルスルホキシド）、アミド（尿素、ジメチルアセトアミド、及びピロリドン誘導体）、界面活性剤（ラウリル硫酸ナトリウム、臭化セチルトリメチルアンモニウム、ポロキサマー、Ｓｐａｎ、Ｔｗｅｅｎ、胆汁酸塩、レシチン）、テルペン（ｄ−リモネン、α−テルペネオール、１，８−シネオール、及びメントン）、及びアルカノン（Ｎ−ヘプタン及びＮ−ノナン）が挙げられるが、これらに限定されない。さらに、局所投与される組成物は、カドヘリンアンタゴニスト、セレクチンアンタゴニスト、及びインテグリンアンタゴニストを含むがこれらに限定されない表面接着分子調整剤を含む。所望により、上記組成物は、生理学的に許容可能な塩、カーボポール（Ｃａｒｂｏｐｏｌ（登録商標））を有するポロキサマー類似体、カーボポール／ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、カーボポールメチルセルロース、カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）、ヒアルロン酸、シクロデキストリン、及び石油からなる群から選択される化合物をさらに含む。さらに、局所投与される組成物は、カドヘリンアンタゴニスト、セレクチンアンタゴニスト、及びインテグリンアンタゴニストを含むがこれらに限定されない表面接着分子調整剤を含み得る。したがって、特定の担体は、無菌の眼用軟膏、クリーム、ゲル、溶液、又は分散液の形態をとり得る。また、好適な眼用担体としては、徐放性ポリマー、例えば、「オキュサート」（Ｏｃｕｓｅｒｔ（登録商標））ポリマー、「ハイドロン」（Ｈｙｄｒｏｎ）ポリマーなどが挙げられる。
【０１０６】
例えば、ＥＤＴＡなどのキレート剤といった安定剤も使用することができる。酸化防止剤、例えば、亜硫酸水素ナトリウム、チオ亜硫酸ナトリウム、８−ヒドロキシキノリン、又はアスコルビン酸も使用することができる。無菌性は、通常、水性製剤用の従来の眼用保存剤、例えば、クロロブタノール（ｃｈｉｏｒｂｕｔａｎｏｌ）、塩化ベンザルコニウム、塩化セチルピリジウム、フェニル水銀塩、チメロサールなどによって維持され、無毒であり、通常約０．００１重量％〜約０．１重量％まで変化する水溶液の量で使用される。軟膏用の従来の保存剤には、メチル及びプロピルパラベンが含まれる。典型的な軟膏基剤には、白色ワセリン及び鉱油又は液体ワセリンが含まれる。しかしながら、保存された水性担体が好ましい。溶液は、好適な剤形、例えば点眼薬として手動で眼に送達され得るか、又は典型的には計量された用量の薬剤を与える適切なマイクロドロップレット又はスプレー装置によって送達され得る。適切な眼用担体の例には、少量、すなわち、約５重量％未満のヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニルアルコール、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、グリセリン、及びＥＤＴＡを含む無菌の実質的に等張の水溶液が含まれる。上記溶液は、好ましくは、実質的に中性のｐＨに維持され、適切な量の従来の緩衝液、例えば、リン酸塩、ホウ酸塩、酢酸塩、トリスと等張である。
【０１０７】
製薬上許容可能な眼用担体は、ヌクレアーゼの保存寿命又は有効性を高めることが可能な湿潤剤又は乳化剤、保存剤、又は緩衝剤、抗生物質化合物、抗ウイルス化合物、トール様受容体拮抗薬、１型インターフェロン拮抗薬、カテリシジン阻害剤、及び／又は好中球エラスターゼ阻害剤などの補助物質の量をさらに含んでいてもよい。
【０１０８】
ＣＳＦ１Ｒ阻害剤を含む組成物の薬学的又は治療的に有効な量が対象に送達されるであろう。正確な有効量は対象ごとに異なり、種、年齢、対象の体格と健康状態、処置される症状の性質と程度、処置する医師の推奨事項、及び投与に選択された治療法又は複数の治療法の組み合わせによって異なる。したがって、所与の状況に対する有効量は、日常的な実験によって決定することができる。対象に、問題となる障害の徴候、症状、又は原因を軽減及び／又は緩和するために、又は生物システムの他の所望の変化をもたらすために必要な用量を投与することができる。必要に応じて、製剤は、有効成分の徐放性又は制御放出投与に適合した腸溶性コーティングで調製してもよい。
【０１０９】
医薬製剤は、単位剤形であることが好ましい。そのような形態では、調製物は、適切な量の活性成分を含む単位用量に細分化される。単位剤形は、パッケージ化された製剤であり得、パッケージは、パケット化された錠剤、カプセル剤、及びバイアル又はアンプル中の粉末などの個別の量の製剤を含む。また、単位剤形は、カプセル剤、錠剤、又はトローチ剤自体であるか、又はパッケージ化された形態のこれらのいずれかの適切な数量であり得る。
【０１１０】
開示医薬組成物は、開示ＣＳＦ１Ｒ阻害剤と、アレルゲン特異的血清ＩｇＥ産生、アレルギー性肺及び気道炎症、及び最小限の肺有害反応を伴う気道過敏性（ＡＨＲ）が挙げられるがこれらに限定されない喘息の病態などの気道炎症性障害を処置するために従来から使用される１以上の追加の治療薬と、を含み得る。さらなる態様では、上記１以上の治療薬は、アレルゲン特異的血清ＩｇＥ産生、アレルギー性肺及び気道炎症、並びに最小限の肺有害反応を伴う気道過敏性（ＡＨＲ）を含むがこれらに限定されない、喘息の病状などの気道炎症性障害を処置するために使用される以下の１以上の治療薬であり得る：喘息阻害剤、喘息拮抗薬、及び／又は気管支拡張薬（例えば、β作動薬）を含む呼吸器薬又は抗炎症薬（例えば、コルチコステロイド、リポオキシゲナーゼ阻害剤、安定化剤）など。さらなる態様では、上記１以上の治療薬は、コルチコステロイド、抗ＩｇＥ治療薬、β−アドレナリン作動薬、メチルキサンチン、抗コリン作動薬、コルチコステロイド、メディエーター放出阻害剤、抗ロイコトリエン薬、抗エンドセリン薬、プロスタサイクリン薬、イオンチャネル又はポンプインヒビター、エンハンサー、又はモジュレーター、並びに薬学的に許容可能な類似体、誘導体、及びそれらの混合物であり得る。他の態様では、上記１以上の追加の治療薬として、喘息の症状、特に運動、冷気、及びアレルギーによって引き起こされる症状を予防するのに役立つ、Ｉｎｔａｌ（登録商標）（クロモリン）及び／又はＴｉｌａｄｅ（登録商標）（ネドクロミル）が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１１１】
１以上の追加の治療薬の例示的であるが非限定的な例示としては、以下が挙げられる：（ａ）コルチコステロイドとして、コルチゾール、コルチゾン、ヒドロコルチゾン、フルドロコルチゾン、プレドニゾン、メチルプレドニゾロン、またはプレドニゾロンなどが挙げられるが、これらに限定されない。（ｂ）気管支拡張薬として、イプラトロピウムなどの抗コリン作用薬、又はアルブテロール、メタプロテレノール、ピルブテロール、レバルブテロールなどのベータ作動薬が挙げられるが、これらに限定されない。（ｃ）抗ＩｇＥ治療薬として、中等度から重度の持続性喘息、一年中アレルギーがあり、定期的にステロイドを吸入している個人に承認されているＸｏｌａｉｒ（オマリズマブ）が挙げられる。（ｄ）例えば、Ａｃｃｏｌａｔｅ（登録商標）（ザフィルルカスト）、Ｓｉｎｇｕｌａｉｒ（登録商標）（モンテルカスト）、Ｚｙｆｌｏ（登録商標）（ジロイトン）などのロイコトリエン修飾剤。
【０１１２】
さらなる態様では、上記１以上の追加の治療薬として以下が挙げられる：アルブテロール、エピネフリン、メタプロテレノール、テルブタリン、プソイドエフェドリン塩酸塩、バンブテロール、ビトルテロール、カルブテロール、クレンブテロール、クロルプレナリン、ジオキセテドリン、エプロジノール、エテフェドリン、エチルノレピネフリン、フェノテロール、フェンスピリド、ヘキソプレナリン、イソエタリン、イソプロテレノール、マブテロール、メトキシフェナミン、ピルブテロール、プロカテロール、プロトキロール、リミテロール、サルメテロール、ソテレノール、トレトキノール、ツロブテロール、カフェイン、テオフィリン、アミノフィリン、アセフィリン、バミフィリン、ドキソフィリン、ジプロフィリン、エタミフィリン、エトフィリン、プロキシフィリン、リプロテロール、テオブロミン−１−酢酸、アトロピン、臭化イプラトロピウム、臭化フルトロピウム、臭化オキシトロピウム、臭化チオトロピウム、ブデソニド、ベクロメタゾン、シクレソニド、デキサメタゾン、フルニソリド、プロピオン酸フルチカゾン、トリアムシノロンアセトニド、プレドニゾロン、メチルプレドニゾロン、ヒドロコルチゾン、クロモリンナトリウム、ネドクロミルナトリウム、モンテルカスト、ザフィルルカスト、ピルフェニドン、ＣＰＸ、ＩＢＭＸ、シロミラスト、ロフルミラスト、プマフェントリン、ドミトロバン、イスラパファント、ラマトロバン、セラトロダスト、チアラミド、ジロートン、アンブリセンタン、ボセンタン、エンラセンタン、シタクスセンタン、テゾセンタン、イロプロスト、トレプロスチニル、並びにそれらの薬学的に許容可能な類似体、誘導体、及び混合物からなる群から選択される呼吸器用薬。
【０１１３】
本明細書で使用される場合、「コルチコステロイド」という用語は、副腎皮質から単離された、又は合成的に産生された副腎コルチコステロイドホルモンのいずれか、及び関節炎、喘息、乾癬、炎症性腸疾患、ループスなどの炎症性疾患の処置に使用されるその誘導体を指す。コルチコステロイドには、天然に存在する、合成の、又は半合成の起源のものが含まれ、例えばコレステロール、ジヒドロキシコレステロール、スチグマステロール、及びラノステロール構造に見られるような、４つの融合環のステロイド核が存在することを特徴とする。コルチコステロイド薬としては、コルチゾン、コルチゾール、ヒドロコルチゾン（１１β、１７−ジヒドロキシ、２１−（ホスホノオキシ）−プレグン−４−エン、３，２０−ジオン二ナトリウム）、ジヒドロキシコルチゾン、デキサメタゾン（２１−（アセチルオキシ）−９−フルオロ−１１β、１７−ジヒドロキシ−１６α−ｍ−エチルプレグナ−１，４−ジエン−３，２０−ジオン）、及びベコナーゼ（９−クロロ−１１β，１７，２１，トリヒドロキシ−１６β−メチルプレグナ−１，４ジエン−３，２０−ジオン１７，２１−ジプロピオネートであるジプロピオン酸ベクロメタゾン）などの高度に誘導体化されたステロイド薬が挙げられる。コルチコステロイドの他の例としては、フルニソリド、プレドニゾン、プレドニゾロン、メチルプレドニゾロン、トリアムシノロン、デフラザコート、及びベタメタゾンが挙げられる。
【０１１４】
本明細書に記載の医薬組成物及び処置方法での使用に適した気管支拡張薬のクラスには、βアドレナリン作動薬、メチルキサンチン、及び抗コリン作動薬が含まれる。本明細書に記載の方法及びデバイスでの使用に適した抗炎症薬のクラスには、コルチコステロイド、メディエーター放出阻害剤、抗ロイコトリエン薬、及び他の阻害剤又はアンタゴニストが含まれる。本明細書に記載の方法及びデバイスでの使用に適した他のクラスの呼吸器薬には、肺線維症又は高血圧症の処置に特に有用な抗エンドセリン薬及びプロスタサイクリン薬、並びに嚢胞性線維症の処置に特に有用なイオンチャネル又はポンプ阻害剤、増強剤、及び調整剤が含まれる。例示的なβアドレナリン作動薬としては、アルブテロール、エピネフリン、メタプロテレノール、テルブタリン、プソイドエフェドリン塩酸塩、バンブテロール、ビトルテロール、カルブテロール、クレンブテロール、クロルプレナリン、ジオキセテドリン、エプロジノール、エフェドリン、エチルノレピネフリン、フェノテロール、フェンスピリド、ヘキソプレナリン、イソエタリン、イソプロテレノール、マブテロール、メトキシフェナミン、ピルブテロール、プロカテロール、プロトキロール、リミテロール、サルメテロール、ソテレノール、トレトキノール、ツロブテロール、並びにそれらの薬学的に許容可能な類似体、誘導体、及び混合物が挙げられるが、これらに限定されない。例示的なメチルキサンチンとしては、カフェイン、テオフィリン、アミノフィリン、アセフィリン、バミフィリン、ドキソフィリン、ジフィリン、エタミフィリン、エトフィリン、プロキシフィリン、リプロテロール、テオブロミン−１−酢酸、並びにそれらの薬学的に許容可能な類似体、誘導体、及び混合物が挙げられるが、これらに限定されない。例示的な抗コリン作用薬としては、アトロピン、臭化イプラトロピウム、臭化フルトロピウム、臭化オキシトロピウム、臭化チオトロピウム、並びにそれらの薬学的に許容可能な類似体、誘導体、及び混合物が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１１５】
例示的なコルチコステロイドとしては、ブデソニド、ベクロメタゾン、シクレソニド、デキサメタゾン、フルニソリド、プロピオン酸フルチカゾン、トリアムシノロンアセトニド、プレドニゾロン、メチルプレドニゾロン、ヒドロコルチゾン、並びにそれらの薬学的に許容可能な類似体、誘導体、及び混合物が挙げられるが、これらに限定されない。例示的なメディエーター放出阻害剤としては、クロモリンナトリウム、ネドクロミルナトリウム、並びにそれらの薬学的に許容可能な類似体、誘導体、及び混合物が挙げられるが、これらに限定されない。例示的な抗ロイコトリエンとしては、モンテルカスト、ザフィルルカスト、並びにそれらの薬学的に許容可能な類似体、誘導体、及び混合物が挙げられるが、これらに限定されない。他の適切な呼吸薬としては、ピルフェニドン、ＣＰＸ、ＩＢＭＸ、シロミラスト、ロフルミラスト、プマフェントリン、ドミトロバン、イスラパファント、ラマトロバン、セラトロダスト、チアラミド、ジロートン、アンブリセンタン、ボセンタン、エンラセンタン、シタクスセンタン、テゾセンタン、イロプロスト、並びにそれらの薬学的に許容可能な類似体、誘導体、及び混合物が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１１６】
Ｄ．炎症性疾患の処置方法
アレルギー性喘息を含むアレルギー性炎症の現在の処置法は、病状及び臨床転帰を制御するには不十分である。粘膜免疫の初期のイベントにおける空気アレルゲンセンシングを対象とした新しいアプローチは、より大きな利益をもたらす可能性がある。ＣＳＦ１−ＣＳＦ１Ｒ経路は、樹状細胞を活性化することにより、アレルゲンを局所リンパ節に輸送する上で重要な役割を果たす。この経路への介入は、アレルゲン感作及びそれに続くＴｈ２アレルギー性炎症を防ぐ。
【０１１７】
一態様では、本開示は、ＣＳＦ１Ｒ阻害剤である化合物を利用して気道炎症性障害を処置する方法に関する。いくつかの態様において、気道炎症性障害は、アレルゲン特異的血清ＩｇＥ産生、アレルギー性肺及び気道炎症、並びに最小限の肺有害反応を伴う気道過敏性（ＡＨＲ）などの喘息病態であり得るが、これらに限定されない。いくつかの態様において、気道炎症性障害の処置に有用な開示ＣＳＦ１Ｒ阻害剤は、開示化合物又は医薬組成物として投与され、その実施例は、本明細書で以下に論じられる。
【０１１８】
Ｅ．キット
更なる態様において、本開示は、少なくとも１つの開示ＣＳＦ１Ｒ阻害剤、又はその薬学的に許容可能な塩、水和物、溶媒和物、若しくは多形と、以下の１以上と、を含むキットに関する：（ａ）炎症に関連する障害を治療することが公知である少なくとも１つの薬剤；（ｂ）アレルギー性炎症を治療することが公知である少なくとも１つの薬剤；（ｃ）呼吸器疾患を治療することが公知である少なくとも１つの薬剤；（ｄ）炎症に関連する障害を治療するための指示；（ｅ）アレルギー性炎症を治療するための指示；又は（ｆ）呼吸器疾患の治療に関連して化合物を投与するための指示。
【０１１９】
開示化合物及び／又は開示化合物を含む医薬組成物は、キットとして簡便に提示することができ、それにより、活性又は不活性成分、担体、希釈剤などであり得る２以上の成分が、患者又は患者に薬物を投与する人による実際の剤形の調製のための指示と共に提供される。そのようなキットは、その中に含まれる全ての必要な材料及び成分とともに提供され得るか、患者若しくは患者に薬物を投与する人によって独立して入手されなければならない材料若しくは成分を使用又は製造するための指示を含み得る。さらなる態様では、キットは、粉末形態を再構成するためのバイアル、注射用のシリンジ、カスタマイズされた静脈注射（ＩＶ）送達システム、吸入器など、患者への単位用量の投与の一助となる所望の成分を含んでいてもよい。さらに、キットは、組成物の調製及び投与のための指示を含み得る。上記キットは、１人の患者に対する単回使用の単位用量、特定の患者に対する複数回の使用として製造でき（一定の用量で、又は治療が進むにつれて個々の化合物の効力が異なる場合がある）、あるいはキットには、複数の患者への投与に適した複数の用量が含まれ得る（「バルク包装」）。上記キットの構成要素は、カートン、ブリスターパック、ボトル、チューブなどに組み立てることも可能である。
【０１２０】
さらなる態様では、本開示キットは、１日投与量レジメンで包装してもよい（例えば、カードで包装、投薬カードで包装、ブリスター又はブロー成形プラスチックで包装）。このような包装は、製品を高め、患者の服薬コンプライアンスを向上させる。このような包装は、患者の混同を低減することもできる。本発明はまた、使用説明書をさらに含むそのようなキットを特徴とする。
【０１２１】
さらなる態様では、本開示はまた、本発明の医薬組成物の１以上の成分で満たされた１以上の容器を含む医薬パック又はキットを提供する。そのような容器に関連するのは、医薬品又は生物学的製品の製造、使用、又は販売を規制する政府機関によって規定された形式の通知であり得、この通知は、ヒト投与のための製造、使用、又は販売の機関による承認を反映する。
【０１２２】
様々な態様において、開示されたキットはまた、他の成分と共にパッケージングされ、処方され、及び／又は送達される化合物及び／又は生成物を含み得る。例えば、製薬会社、薬剤再販業者、医師、調合店、又は薬剤師は、開示された化合物及び／又は生成物並びに患者に送達するための別の成分を含むキットを提供してもよい。
【０１２３】
開示されたキットは、開示された製造方法、開示された使用又は処置の方法、及び／又は開示された組成物に関連して使用され得ることが企図される。
【０１２４】
Ｆ．引用文献
引用文献は、以下の番号付き文献の１以上に対応する括弧で囲まれた参照番号の形式を使用して、本明細書全体で引用される。例えば、本明細書の直下の引用文献番号１及び２の引用は、本開示において（１、２）として示されるであろう。
【０１２５】
１．  Ｌａｍｂｒｅｃｈｔ  ＢＮ，  Ｈａｍｍａｄ  Ｈ．  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ｏｆ  ｌｕｎｇ  ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ  ｃｅｌｌｓ  ａｔ  ｔｈｅ  ｏｒｉｇｉｎ  ｏｆ  ａｓｔｈｍａ．  Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ２００９；  ３１：  ４１２−４２４．
【０１２６】
２．  Ｈａｍｍａｄ  Ｈ，  Ｌａｍｂｒｅｃｈｔ  ＢＮ．  Ｂａｒｒｉｅｒ  Ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ  Ｃｅｌｌｓ  ａｎｄ  ｔｈｅ  Ｃｏｎｔｒｏｌ  ｏｆ  Ｔｙｐｅ  ２  Ｉｍｍｕｎｉｔｙ．  Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ２０１５；  ４３：  ２９−４０．
【０１２７】
３．  Ｂｕｓｓｅ  ＷＷ，  Ｍｏｒｇａｎ  ＷＪ，  Ｇｅｒｇｅｎ  ＰＪ，  Ｍｉｔｃｈｅｌｌ  ＨＥ，  Ｇｅｒｎ  ＪＥ，  Ｌｉｕ  ＡＨ，  Ｇｒｕｃｈａｌｌａ  ＲＳ，  Ｋａｔｔａｎ  Ｍ，  Ｔｅａｃｈ  ＳＪ，  Ｐｏｎｇｒａｃｉｃ  ＪＡ，  Ｃｈｍｉｅｌ  ＪＦ，  Ｓｔｅｉｎｂａｃｈ  ＳＦ，  Ｃａｌａｔｒｏｎｉ  Ａ，  Ｔｏｇｉａｓ  Ａ，  Ｔｈｏｍｐｓｏｎ  ＫＭ，  Ｓｚｅｆｌｅｒ  ＳＪ，  Ｓｏｒｋｎｅｓｓ  ＣＡ．  Ｒａｎｄｏｍｉｚｅｄ  ｔｒｉａｌ  ｏｆ  ｏｍａｌｉｚｕｍａｂ  （ａｎｔｉ−ＩｇＥ）  ｆｏｒ  ａｓｔｈｍａ  ｉｎ  ｉｎｎｅｒ−ｃｉｔｙ  ｃｈｉｌｄｒｅｎ．  Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ  ２０１１；  ３６４：  １００５−１０１５．
【０１２８】
４．  Ｔｅａｃｈ  ＳＪ，  Ｇｉｌｌ  ＭＡ，  Ｔｏｇｉａｓ  Ａ，  Ｓｏｒｋｎｅｓｓ  ＣＡ，  Ａｒｂｅｓ  ＳＪ，  Ｊｒ．，  Ｃａｌａｔｒｏｎｉ  Ａ，  Ｗｉｌｄｆｉｒｅ  ＪＪ，  Ｇｅｒｇｅｎ  ＰＪ，  Ｃｏｈｅｎ  ＲＴ，  Ｐｏｎｇｒａｃｉｃ  ＪＡ，  Ｋｅｒｃｓｍａｒ  ＣＭ，  Ｋｈｕｒａｎａ  Ｈｅｒｓｈｅｙ  ＧＫ，  Ｇｒｕｃｈａｌｌａ  ＲＳ，  Ｌｉｕ  ＡＨ，  Ｚｏｒａｔｔｉ  ＥＭ，  Ｋａｔｔａｎ  Ｍ，  Ｇｒｉｎｄｌｅ  ＫＡ，  Ｇｅｒｎ  ＪＥ，  Ｂｕｓｓｅ  ＷＷ，  Ｓｚｅｆｌｅｒ  ＳＪ．  Ｐｒｅｓｅａｓｏｎａｌ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｗｉｔｈ  ｅｉｔｈｅｒ  ｏｍａｌｉｚｕｍａｂ  ｏｒ  ａｎ  ｉｎｈａｌｅｄ  ｃｏｒｔｉｃｏｓｔｅｒｏｉｄ  ｂｏｏｓｔ  ｔｏ  ｐｒｅｖｅｎｔ  ｆａｌｌ  ａｓｔｈｍａ  ｅｘａｃｅｒｂａｔｉｏｎｓ．  Ｊ  Ａｌｌｅｒｇｙ  Ｃｌｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ２０１５；  １３６：  １４７６−１４８５．
【０１２９】
５．  Ｌａｍｂｒｅｃｈｔ  ＢＮ，  Ｈａｍｍａｄ  Ｈ．  Ａｌｌｅｒｇｅｎｓ  ａｎｄ  ｔｈｅ  ａｉｒｗａｙ  ｅｐｉｔｈｅｌｉｕｍ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ：  ｇａｔｅｗａｙ  ｔｏ  ａｌｌｅｒｇｉｃ  ｓｅｎｓｉｔｉｚａｔｉｏｎ．  Ｊ  Ａｌｌｅｒｇｙ  Ｃｌｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ２０１４；  １３４：  ４９９−５０７．
【０１３０】
６．  Ｌｅｅ  ＹＧ，  Ｊｅｏｎｇ  ＪＪ，  Ｎｙｅｎｈｕｉｓ  Ｓ，  Ｂｅｒｄｙｓｈｅｖ  Ｅ，  Ｃｈｕｎｇ  Ｓ，  Ｒａｎｊａｎ  Ｒ，  Ｋａｒｐｕｒａｐｕ  Ｍ，  Ｄｅｎｇ  Ｊ，  Ｑｉａｎ  Ｆ，  Ｋｅｌｌｙ  ＥＡ，  Ｊａｒｊｏｕｒ  ＮＮ，  Ａｃｋｅｒｍａｎ  ＳＪ，  Ｎａｔａｒａｊａｎ  Ｖ，  Ｃｈｒｉｓｔｍａｎ  ＪＷ，  Ｐａｒｋ  ＧＹ．  Ｒｅｃｒｕｉｔｅｄ  ａｌｖｅｏｌａｒ  ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ，  ｉｎ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｔｏ  ａｉｒｗａｙ  ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ−ｄｅｒｉｖｅｄ  ｍｏｎｏｃｙｔｅ  ｃｈｅｍｏａｔｔｒａｃｔａｎｔ  ｐｒｏｔｅｉｎ  １／ＣＣｌ２，  ｒｅｇｕｌａｔｅ  ａｉｒｗａｙ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｒｅｍｏｄｅｌｉｎｇ  ｉｎ  ａｌｌｅｒｇｉｃ  ａｓｔｈｍａ．  Ａｍ  Ｊ  Ｒｅｓｐｉｒ  Ｃｅｌｌ  Ｍｏｌ  Ｂｉｏｌ  ２０１５；  ５２：  ７７２−７８４．
【０１３１】
７．  Ｚａｓｌｏｎａ  Ｚ，  Ｐｒｚｙｂｒａｎｏｗｓｋｉ  Ｓ，  Ｗｉｌｋｅ  Ｃ，  ｖａｎ  Ｒｏｏｉｊｅｎ  Ｎ，  Ｔｅｉｔｚ−Ｔｅｎｎｅｎｂａｕｍ  Ｓ，  Ｏｓｔｅｒｈｏｌｚｅｒ  ＪＪ，  Ｗｉｌｋｉｎｓｏｎ  ＪＥ，  Ｍｏｏｒｅ  ＢＢ，  Ｐｅｔｅｒｓ−Ｇｏｌｄｅｎ  Ｍ．  Ｒｅｓｉｄｅｎｔ  ａｌｖｅｏｌａｒ  ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ  ｓｕｐｐｒｅｓｓ，  ｗｈｅｒｅａｓ  ｒｅｃｒｕｉｔｅｄ  ｍｏｎｏｃｙｔｅｓ  ｐｒｏｍｏｔｅ，  ａｌｌｅｒｇｉｃ  ｌｕｎｇ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｍｕｒｉｎｅ  ｍｏｄｅｌｓ  ｏｆ  ａｓｔｈｍａ．  Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ２０１４；  １９３：  ４２４５−４２５３．
【０１３２】
８．  Ｊｏｆｆｒｅ  Ｏ，  Ｎｏｌｔｅ  ＭＡ，  Ｓｐｏｒｒｉ  Ｒ，  Ｒｅｉｓ  ｅ  Ｓｏｕｓａ  Ｃ．  Ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｓｉｇｎａｌｓ  ｉｎ  ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ  ｃｅｌｌ  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｔｈｅ  ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ａｄａｐｔｉｖｅ  ｉｍｍｕｎｉｔｙ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｒｅｖ  ２００９；  ２２７：  ２３４−２４７．
【０１３３】
９．  Ｐｌａｎｔｉｎｇａ  Ｍ，  Ｇｕｉｌｌｉａｍｓ  Ｍ，  Ｖａｎｈｅｅｒｓｗｙｎｇｈｅｌｓ  Ｍ，  Ｄｅｓｗａｒｔｅ  Ｋ，  Ｂｒａｎｃｏ−Ｍａｄｅｉｒａ  Ｆ，  Ｔｏｕｓｓａｉｎｔ  Ｗ，  Ｖａｎｈｏｕｔｔｅ  Ｌ，  Ｎｅｙｔ  Ｋ，  Ｋｉｌｌｅｅｎ  Ｎ，  Ｍａｌｉｓｓｅｎ  Ｂ，  Ｈａｍｍａｄ  Ｈ，  Ｌａｍｂｒｅｃｈｔ  ＢＮ．  Ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎａｌ  ａｎｄ  ｍｏｎｏｃｙｔｅ−ｄｅｒｉｖｅｄ  ＣＤ１１ｂ（＋）  ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ  ｃｅｌｌｓ  ｉｎｉｔｉａｔｅ  ａｎｄ  ｍａｉｎｔａｉｎ  Ｔ  ｈｅｌｐｅｒ  ２  ｃｅｌｌ−ｍｅｄｉａｔｅｄ  ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ｔｏ  ｈｏｕｓｅ  ｄｕｓｔ  ｍｉｔｅ  ａｌｌｅｒｇｅｎ．  Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ２０１３；  ３８：  ３２２−３３５．
【０１３４】
１０．  Ｍｏｏｎ  Ｈ−Ｇ，  Ｋｉｍ  Ｓ−ｊ，  Ｊｅｏｎｇ  ＪＪ，  Ｈａｎ  Ｓ−Ｓ，  Ｊａｒｊｏｕｒ  ＮＮ，  Ｌｅｅ  Ｈ，  Ａｂｂｏｕｄ−Ｗｅｒｎｅｒ  ＳＬ，  Ｃｈｕｎｇ  Ｓ，  Ｃｈｏｉ  ＨＳ，  Ｎａｔａｒａｊａｎ  Ｖ，  Ａｃｋｅｒｍａｎ  ＳＪ，  Ｃｈｒｉｓｔｍａｎ  ＪＷ，  Ｐａｒｋ  ＧＹ．  Ａｉｒｗａｙ  Ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ  Ｃｅｌｌ−Ｄｅｒｉｖｅｄ  Ｃｏｌｏｎｙ  Ｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇ  Ｆａｃｔｏｒ−１  Ｐｒｏｍｏｔｅｓ  Ａｌｌｅｒｇｅｎ  Ｓｅｎｓｉｔｉｚａｔｉｏｎ．  Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ２０１８；  ４９：  ２７５−２８７．ｅ２７５．
【０１３５】
１１．  Ｇｏｐｌｅｎ  Ｎ，  Ｋａｒｉｍ  ＭＺ，  Ｌｉａｎｇ  Ｑ，  Ｇｏｒｓｋａ  ＭＭ，  Ｒｏｚａｒｉｏ  Ｓ，  Ｇｕｏ  Ｌ，  Ａｌａｍ  Ｒ．  Ｃｏｍｂｉｎｅｄ  ｓｅｎｓｉｔｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｍｉｃｅ  ｔｏ  ｅｘｔｒａｃｔｓ  ｏｆ  ｄｕｓｔ  ｍｉｔｅ，  ｒａｇｗｅｅｄ，  ａｎｄ  Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｓｐｅｃｉｅｓ  ｂｒｅａｋｓ  ｔｈｒｏｕｇｈ  ｔｏｌｅｒａｎｃｅ  ａｎｄ  ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｓ  ｃｈｒｏｎｉｃ  ｆｅａｔｕｒｅｓ  ｏｆ  ａｓｔｈｍａ．  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ａｌｌｅｒｇｙ  ａｎｄ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  ２００９；  １２３：  ９２５−９３２．ｅ９１１．
【０１３６】
１２．  Ｐａｒｋ  ＧＹ，  Ｌｅｅ  ＹＧ，  Ｂｅｒｄｙｓｈｅｖ  Ｅ，  Ｎｙｅｎｈｕｉｓ  Ｓ，  Ｄｕ  Ｊ，  Ｆｕ  Ｐ，  Ｇｏｒｓｈｋｏｖａ  ＩＡ，  Ｌｉ  Ｙ，  Ｃｈｕｎｇ  Ｓ，  Ｋａｒｐｕｒａｐｕ  Ｍ，  Ｄｅｎｇ  Ｊ，  Ｒａｎｊａｎ  Ｒ，  Ｘｉａｏ  Ｌ，  Ｊａｆｆｅ  ＨＡ，  Ｃｏｒｂｒｉｄｇｅ  ＳＪ，  Ｋｅｌｌｙ  ＥＡ，  Ｊａｒｊｏｕｒ  ＮＮ，  Ｃｈｕｎ  Ｊ，  Ｐｒｅｓｔｗｉｃｈ  ＧＤ，  Ｋａｆｆｅ  Ｅ，  Ｎｉｎｏｕ  Ｉ，  Ａｉｄｉｎｉｓ  Ｖ，  Ｍｏｒｒｉｓ  ＡＪ，  Ｓｍｙｔｈ  ＳＳ，  Ａｃｋｅｒｍａｎ  ＳＪ，  Ｎａｔａｒａｊａｎ  Ｖ，  Ｃｈｒｉｓｔｍａｎ  ＪＷ．  Ａｕｔｏｔａｘｉｎ  ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｌｙｓｏｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｉｃ  ａｃｉｄ  ｍｅｄｉａｔｅｓ  ａｌｌｅｒｇｉｃ  ａｓｔｈｍａｔｉｃ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ．  Ａｍ  Ｊ  Ｒｅｓｐｉｒ  Ｃｒｉｔ  Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ  ２０１３；  １８８：  ９２８−９４０．
【０１３７】
１３．  Ａｎｄｅｒｓｏｎ  ＤＡ，  ３ｒｄ，  Ｍｕｒｐｈｙ  ＫＭ，  Ｂｒｉｓｅｎｏ  ＣＧ．  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，  Ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ，  ａｎｄ  Ｆｕｎｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ  Ｃｅｌｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｕｓｅ  ａｎｄ  Ｈｕｍａｎ．  Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂ  Ｐｅｒｓｐｅｃｔ  Ｂｉｏｌ  ２０１７．
【０１３８】
１４．  Ｂａｊａｎａ  Ｓ，  Ｔｕｒｎｅｒ  Ｓ，  Ｐａｕｌ  Ｊ，  Ａｉｎｓｕａ−Ｅｎｒｉｃｈ  Ｅ，  Ｋｏｖａｔｓ  Ｓ．  ＩＲＦ４  ａｎｄ  ＩＲＦ８  Ａｃｔ  ｉｎ  ＣＤ１１ｃ＋  Ｃｅｌｌｓ  Ｔｏ  Ｒｅｇｕｌａｔｅ  Ｔｅｒｍｉｎａｌ  Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｌｕｎｇ  Ｔｉｓｓｕｅ  Ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ  Ｃｅｌｌｓ．  Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ２０１６；  １９６：  １６６６−１６７７．
【０１３９】
１５．  Ｂｕｔｏｗｓｋｉ  Ｎ，  Ｃｏｌｍａｎ  Ｈ，  Ｄｅ  Ｇｒｏｏｔ  ＪＦ，  Ｏｍｕｒｏ  ＡＭ，  Ｎａｙａｋ  Ｌ，  Ｗｅｎ  ＰＹ，  Ｃｌｏｕｇｈｅｓｙ  ＴＦ，  Ｍａｒｉｍｕｔｈｕ  Ａ，  Ｈａｉｄａｒ  Ｓ，  Ｐｅｒｒｙ  Ａ，  Ｈｕｓｅ  Ｊ，  Ｐｈｉｌｌｉｐｓ  Ｊ，  Ｗｅｓｔ  ＢＬ，  Ｎｏｌｏｐ  ＫＢ，  Ｈｓｕ  ＨＨ，  Ｌｉｇｏｎ  ＫＬ，  Ｍｏｌｉｎａｒｏ  ＡＭ，  Ｐｒａｄｏｓ  Ｍ．  Ｏｒａｌｌｙ  ａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｅｄ  ｃｏｌｏｎｙ  ｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇ  ｆａｃｔｏｒ  １  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ＰＬＸ３３９７  ｉｎ  ｒｅｃｕｒｒｅｎｔ  ｇｌｉｏｂｌａｓｔｏｍａ：  ａｎ  Ｉｖｙ  Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ  Ｅａｒｌｙ  Ｐｈａｓｅ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｔｒｉａｌｓ  Ｃｏｎｓｏｒｔｉｕｍ  ｐｈａｓｅ  ＩＩ  ｓｔｕｄｙ．  Ｎｅｕｒｏ  Ｏｎｃｏｌ  ２０１６；  １８：  ５５７−５６４．
【０１４０】
１６．  Ｔａｐ  ＷＤ，  Ｗａｉｎｂｅｒｇ  ＺＡ，  Ａｎｔｈｏｎｙ  ＳＰ，  Ｉｂｒａｈｉｍ  ＰＮ，  Ｚｈａｎｇ  Ｃ，  Ｈｅａｌｅｙ  ＪＨ，  Ｃｈｍｉｅｌｏｗｓｋｉ  Ｂ，  Ｓｔａｄｄｏｎ  ＡＰ，  Ｃｏｈｎ  ＡＬ，  Ｓｈａｐｉｒｏ  ＧＩ，  Ｋｅｅｄｙ  ＶＬ，  Ｓｉｎｇｈ  ＡＳ，  Ｐｕｚａｎｏｖ  Ｉ，  Ｋｗａｋ  ＥＬ，  Ｗａｇｎｅｒ  ＡＪ，  Ｖｏｎ  Ｈｏｆｆ  ＤＤ，  Ｗｅｉｓｓ  ＧＪ，  Ｒａｍａｎａｔｈａｎ  ＲＫ，  Ｚｈａｎｇ  Ｊ，  Ｈａｂｅｔｓ  Ｇ，  Ｚｈａｎｇ  Ｙ，  Ｂｕｒｔｏｎ  ＥＡ，  Ｖｉｓｏｒ  Ｇ，  Ｓａｎｆｔｎｅｒ  Ｌ，  Ｓｅｖｅｒｓｏｎ  Ｐ，  Ｎｇｕｙｅｎ  Ｈ，  Ｋｉｍ  ＭＪ，  Ｍａｒｉｍｕｔｈｕ  Ａ，  Ｔｓａｎｇ  Ｇ，  Ｓｈｅｌｌｏｏｅ  Ｒ，  Ｇｅｅ  Ｃ，  Ｗｅｓｔ  ＢＬ，  Ｈｉｒｔｈ  Ｐ，  Ｎｏｌｏｐ  Ｋ，  ｖａｎ  ｄｅ  Ｒｉｊｎ  Ｍ，  Ｈｓｕ  ＨＨ，  Ｐｅｔｅｒｆｙ  Ｃ，  Ｌｉｎ  ＰＳ，  Ｔｏｎｇ−Ｓｔａｒｋｓｅｎ  Ｓ，  Ｂｏｌｌａｇ  Ｇ．  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ−Ｇｕｉｄｅｄ  Ｂｌｏｃｋａｄｅ  ｏｆ  ＣＳＦ１Ｒ  Ｋｉｎａｓｅ  ｉｎ  Ｔｅｎｏｓｙｎｏｖｉａｌ  Ｇｉａｎｔ−Ｃｅｌｌ  Ｔｕｍｏｒ．  Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ  ２０１５；  ３７３：  ４２８−４３７．
【０１４１】
１７．  Ｋａｎｇ  Ｈ，  Ｇｒａｖｉｅｒ  Ｊ，  Ｂａｏ  Ｋ，  Ｗａｄａ  Ｈ，  Ｌｅｅ  ＪＨ，  Ｂａｅｋ  Ｙ，  Ｅｌ  Ｆａｋｈｒｉ  Ｇ，  Ｇｉｏｕｘ  Ｓ，  Ｒｕｂｉｎ  ＢＰ，  Ｃｏｌｌ  ＪＬ，  Ｃｈｏｉ  ＨＳ．  Ｒｅｎａｌ  Ｃｌｅａｒａｂｌｅ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｎａｎｏｃａｒｒｉｅｒｓ  ｆｏｒ  Ｂｉｏｉｍａｇｉｎｇ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ．  Ａｄｖ  Ｍａｔｅｒ  ２０１６；  ２８：  ８１６２−８１６８．
【０１４２】
１８．  Ｃｈｏｉ  ＨＳ，  Ａｓｈｉｔａｔｅ  Ｙ，  Ｌｅｅ  ＪＨ，  Ｋｉｍ  ＳＨ，  Ｍａｔｓｕｉ  Ａ，  Ｉｎｓｉｎ  Ｎ，  Ｂａｗｅｎｄｉ  ＭＧ，  Ｓｅｍｍｌｅｒ−Ｂｅｈｎｋｅ  Ｍ，  Ｆｒａｎｇｉｏｎｉ  ＪＶ，  Ｔｓｕｄａ  Ａ．  Ｒａｐｉｄ  ｔｒａｎｓｌｏｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ  ｆｒｏｍ  ｔｈｅ  ｌｕｎｇ  ａｉｒｓｐａｃｅｓ  ｔｏ  ｔｈｅ  ｂｏｄｙ．  Ｎａｔ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ  ２０１０；  ２８：  １３００−１３０３．
【０１４３】
１９．  Ｈｏｓｅ  ＡＪ，  Ｄｅｐｎｅｒ  Ｍ，  Ｉｌｌｉ  Ｓ，  Ｌａｕ  Ｓ，  Ｋｅｉｌ  Ｔ，  Ｗａｈｎ  Ｕ，  Ｆｕｃｈｓ  Ｏ，  Ｐｆｅｆｆｅｒｌｅ  ＰＩ，  Ｓｃｈｍａｕｓｓｅｒ−Ｈｅｃｈｆｅｌｌｎｅｒ  Ｅ，  Ｇｅｎｕｎｅｉｔ  Ｊ，  Ｌａｕｅｎｅｒ  Ｒ，  Ｋａｒｖｏｎｅｎ  ＡＭ，  Ｒｏｄｕｉｔ  Ｃ，  Ｄａｌｐｈｉｎ  ＪＣ，  Ｒｉｅｄｌｅｒ  Ｊ，  Ｐｅｋｋａｎｅｎ  Ｊ，  ｖｏｎ  Ｍｕｔｉｕｓ  Ｅ，  Ｅｇｅ  ＭＪ，  Ｍａｓ，  ｇｒｏｕｐｓ  Ｐｓ．  Ｌａｔｅｎｔ  ｃｌａｓｓ  ａｎａｌｙｓｉｓ  ｒｅｖｅａｌｓ  ｃｌｉｎｉｃａｌｌｙ  ｒｅｌｅｖａｎｔ  ａｔｏｐｙ  ｐｈｅｎｏｔｙｐｅｓ  ｉｎ  ２  ｂｉｒｔｈ  ｃｏｈｏｒｔｓ．  Ｊ  Ａｌｌｅｒｇｙ  Ｃｌｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ２０１７；  １３９：  １９３５−１９４５  ｅ１９１２．
【０１４４】
２０．  Ｒｈｏｄｅｓ  ＨＬ，  Ｔｈｏｍａｓ  Ｐ，  Ｓｐｏｒｉｋ  Ｒ，  Ｈｏｌｇａｔｅ  ＳＴ，  Ｃｏｇｓｗｅｌｌ  ＪＪ．  Ａ  ｂｉｒｔｈ  ｃｏｈｏｒｔ  ｓｔｕｄｙ  ｏｆ  ｓｕｂｊｅｃｔｓ  ａｔ  ｒｉｓｋ  ｏｆ  ａｔｏｐｙ：  ｔｗｅｎｔｙ−ｔｗｏ−ｙｅａｒ  ｆｏｌｌｏｗ−ｕｐ  ｏｆ  ｗｈｅｅｚｅ  ａｎｄ  ａｔｏｐｉｃ  ｓｔａｔｕｓ．  Ａｍ  Ｊ  Ｒｅｓｐｉｒ  Ｃｒｉｔ  Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ  ２００２；  １６５：  １７６−１８０．
【０１４５】
２１．  Ｂａｌｌａｒｄｉｎｉ  Ｎ，  Ｂｅｒｇｓｔｒｏｍ  Ａ，  Ｗａｈｌｇｒｅｎ  ＣＦ，  ｖａｎ  Ｈａｇｅ  Ｍ，  Ｈａｌｌｎｅｒ  Ｅ，  Ｋｕｌｌ  Ｉ，  Ｍｅｌｅｎ  Ｅ，  Ａｎｔｏ  ＪＭ，  Ｂｏｕｓｑｕｅｔ  Ｊ，  Ｗｉｃｋｍａｎ  Ｍ．  ＩｇＥ  ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ｉｎ  ｒｅｌａｔｉｏｎ  ｔｏ  ｐｒｅｖａｌｅｎｃｅ  ａｎｄ  ｍｕｌｔｉｍｏｒｂｉｄｉｔｙ  ｏｆ  ｅｃｚｅｍａ，  ａｓｔｈｍａ，  ａｎｄ  ｒｈｉｎｉｔｉｓ  ｆｒｏｍ  ｂｉｒｔｈ  ｔｏ  ａｄｏｌｅｓｃｅｎｃｅ．  Ａｌｌｅｒｇｙ  ２０１６；  ７１：  ３４２−３４９．
【０１４６】
２２．  Ｄｕｒｈａｍ  ＳＲ，  Ｅｍｍｉｎｇｅｒ  Ｗ，  Ｋａｐｐ  Ａ，  ｄｅ  Ｍｏｎｃｈｙ  ＪＧ，  Ｒａｋ  Ｓ，  Ｓｃａｄｄｉｎｇ  ＧＫ，  Ｗｕｒｔｚｅｎ  ＰＡ，  Ａｎｄｅｒｓｅｎ  ＪＳ，  Ｔｈｏｌｓｔｒｕｐ  Ｂ，  Ｒｉｉｓ  Ｂ，  Ｄａｈｌ  Ｒ．  ＳＱ−ｓｔａｎｄａｒｄｉｚｅｄ  ｓｕｂｌｉｎｇｕａｌ  ｇｒａｓｓ  ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ：  ｃｏｎｆｉｒｍａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｄｉｓｅａｓｅ  ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ２  ｙｅａｒｓ  ａｆｔｅｒ  ３  ｙｅａｒｓ  ｏｆ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｉｎ  ａ  ｒａｎｄｏｍｉｚｅｄ  ｔｒｉａｌ．  Ｊ  Ａｌｌｅｒｇｙ  Ｃｌｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ２０１２；  １２９：  ７１７−７２５  ｅ７１５．
【０１４７】
２３．  Ｄｕｒｈａｍ  ＳＲ，  Ｅｍｍｉｎｇｅｒ  Ｗ，  Ｋａｐｐ  Ａ，  Ｃｏｌｏｍｂｏ  Ｇ，  ｄｅ  Ｍｏｎｃｈｙ  ＪＧ，  Ｒａｋ  Ｓ，  Ｓｃａｄｄｉｎｇ  ＧＫ，  Ａｎｄｅｒｓｅｎ  ＪＳ，  Ｒｉｉｓ  Ｂ，  Ｄａｈｌ  Ｒ．  Ｌｏｎｇ−ｔｅｒｍ  ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｅｆｆｉｃａｃｙ  ｉｎ  ｇｒａｓｓ  ｐｏｌｌｅｎ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｒｈｉｎｏｃｏｎｊｕｎｃｔｉｖｉｔｉｓ  ａｆｔｅｒ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｗｉｔｈ  ＳＱ−ｓｔａｎｄａｒｄｉｚｅｄ  ｇｒａｓｓ  ａｌｌｅｒｇｙ  ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ  ｔａｂｌｅｔ．  Ｊ  Ａｌｌｅｒｇｙ  Ｃｌｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ２０１０；  １２５：  １３１−１３８  ｅ１３１−１３７．
【０１４８】
２４．  Ｄｕ  Ｔｏｉｔ  Ｇ，  Ｒｏｂｅｒｔｓ  Ｇ，  Ｓａｙｒｅ  ＰＨ，  Ｂａｈｎｓｏｎ  ＨＴ，  Ｒａｄｕｌｏｖｉｃ  Ｓ，  Ｓａｎｔｏｓ  ＡＦ，  Ｂｒｏｕｇｈ  ＨＡ，  Ｐｈｉｐｐａｒｄ  Ｄ，  Ｂａｓｔｉｎｇ  Ｍ，  Ｆｅｅｎｅｙ  Ｍ，  Ｔｕｒｃａｎｕ  Ｖ，  Ｓｅｖｅｒ  ＭＬ，  Ｇｏｍｅｚ  Ｌｏｒｅｎｚｏ  Ｍ，  Ｐｌａｕｔ  Ｍ，  Ｌａｃｋ  Ｇ，  Ｔｅａｍ  ＬＳ．  Ｒａｎｄｏｍｉｚｅｄ  ｔｒｉａｌ  ｏｆ  ｐｅａｎｕｔ  ｃｏｎｓｕｍｐｔｉｏｎ  ｉｎ  ｉｎｆａｎｔｓ  ａｔ  ｒｉｓｋ  ｆｏｒ  ｐｅａｎｕｔ  ａｌｌｅｒｇｙ．  Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ  ２０１５；  ３７２：  ８０３−８１３．
【０１４９】
２５．  Ｈａｍｍａｄ  Ｈ，  Ｐｌａｎｔｉｎｇａ  Ｍ，  Ｄｅｓｗａｒｔｅ  Ｋ，  Ｐｏｕｌｉｏｔ  Ｐ，  Ｗｉｌｌａｒｔ  ＭＡ，  Ｋｏｏｌ  Ｍ，  Ｍｕｓｋｅｎｓ  Ｆ，  Ｌａｍｂｒｅｃｈｔ  ＢＮ．  Ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ  ｃｅｌｌｓ−−ｎｏｔ  ｂａｓｏｐｈｉｌｓ−−ａｒｅ  ｎｅｃｅｓｓａｒｙ  ａｎｄ  ｓｕｆｆｉｃｉｅｎｔ  ｆｏｒ  ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｔｈ２  ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ｔｏ  ｉｎｈａｌｅｄ  ｈｏｕｓｅ  ｄｕｓｔ  ｍｉｔｅ  ａｌｌｅｒｇｅｎ．  Ｊ  Ｅｘｐ  Ｍｅｄ  ２０１０；  ２０７：  ２０９７−２１１１．
【０１５０】
２６．  Ｓｔａｎｌｅｙ  ＥＲ，  Ｃｈｉｔｕ  Ｖ．  ＣＳＦ−１  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  ｉｎ  ｍｙｅｌｏｉｄ  ｃｅｌｌｓ．  Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂ  Ｐｅｒｓｐｅｃｔ  Ｂｉｏｌ  ２０１４；  ６．
【０１５１】
２７．  Ｔｕｒｎｅｒ  Ｓ，  Ｆｒａｎｃｉｓ  Ｂ，  Ｖｉｊｖｅｒｂｅｒｇ  Ｓ，  Ｐｉｎｏ−Ｙａｎｅｓ  Ｍ，  Ｍａｉｔｌａｎｄ−ｖａｎ  ｄｅｒ  Ｚｅｅ  ＡＨ，  Ｂａｓｕ  Ｋ，  Ｂｉｇｎｅｌｌ  Ｌ，  Ｍｕｋｈｏｐａｄｈｙａｙ  Ｓ，  Ｔａｖｅｎｄａｌｅ  Ｒ，  Ｐａｌｍｅｒ  Ｃ，  Ｈａｗｃｕｔｔ  Ｄ，  Ｐｉｒｍｏｈａｍｅｄ  Ｍ，  Ｂｕｒｃｈａｒｄ  ＥＧ，  Ｌｉｐｗｏｒｔｈ  Ｂ，  Ｐｈａｒｍａｃｏｇｅｎｏｍｉｃｓ  ｉｎ  Ｃｈｉｌｄｈｏｏｄ  Ａｓｔｈｍａ  Ｃ．  Ｃｈｉｌｄｈｏｏｄ  ａｓｔｈｍａ  ｅｘａｃｅｒｂａｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  ｔｈｅ  Ａｒｇ１６  ｂｅｔａ２−ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ：  Ａ  ｍｅｔａ−ａｎａｌｙｓｉｓ  ｓｔｒａｔｉｆｉｅｄ  ｂｙ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ．  Ｊ  Ａｌｌｅｒｇｙ  Ｃｌｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ２０１６；  １３８：  １０７−１１３  ｅ１０５．
【０１５２】
２８．  Ｚｈｕ  Ｓ，  Ｃｈａｎ−Ｙｅｕｎｇ  Ｍ，  Ｂｅｃｋｅｒ  ＡＢ，  Ｄｉｍｉｃｈ−Ｗａｒｄ  Ｈ，  Ｆｅｒｇｕｓｏｎ  ＡＣ，  Ｍａｎｆｒｅｄａ  Ｊ，  Ｗａｔｓｏｎ  ＷＴ，  Ｐａｒｅ  ＰＤ，  Ｓａｎｄｆｏｒｄ  ＡＪ．  Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ＩＬ−４，  ＴＮＦ−ａｌｐｈａ，  ａｎｄ  Ｆｃｅｐｓｉｌｏｎ  ＲＩｂｅｔａ  ｇｅｎｅｓ  ａｎｄ  ｔｈｅ  ｒｉｓｋ  ｏｆ  ａｌｌｅｒｇｉｃ  ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ  ｉｎ  ａｔ−ｒｉｓｋ  ｉｎｆａｎｔｓ．  Ａｍ  Ｊ  Ｒｅｓｐｉｒ  Ｃｒｉｔ  Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ  ２０００；  １６１：  １６５５−１６５９．
【０１５３】
２９．  Ｓｏｒｄｉｌｌｏ  ＪＥ，  Ｋｅｌｌｙ  Ｒ，  Ｂｕｎｙａｖａｎｉｃｈ  Ｓ，  ＭｃＧｅａｃｈｉｅ  Ｍ，  Ｑｉｕ  Ｗ，  Ｃｒｏｔｅａｕ−Ｃｈｏｎｋａ  ＤＣ，  Ｓｏｔｏ−Ｑｕｉｒｏｓ  Ｍ，  Ａｖｉｌａ  Ｌ，  Ｃｅｌｅｄｏｎ  ＪＣ，  Ｂｒｅｈｍ  ＪＭ，  Ｗｅｉｓｓ  ＳＴ，  Ｇｏｌｄ  ＤＲ，  Ｌｉｔｏｎｊｕａ  ＡＡ．  Ｇｅｎｏｍｅ−ｗｉｄｅ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｐｒｏｆｉｌｅｓ  ｉｄｅｎｔｉｆｙ  ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  ｔａｒｇｅｔｓ  ｆｏｒ  ｇｅｎｅ−ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ  ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ  ｉｎ  ａｓｔｈｍａ  ｓｅｖｅｒｉｔｙ．  Ｊ  Ａｌｌｅｒｇｙ  Ｃｌｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ２０１５；  １３６：  ８８５−８９２  ｅ８８２．
【０１５４】
３０．  Ｓｈｉｎ  ＥＫ，  Ｌｅｅ  ＳＨ，  Ｃｈｏ  ＳＨ，  Ｊｕｎｇ  Ｓ，  Ｙｏｏｎ  ＳＨ，  Ｐａｒｋ  ＳＷ，  Ｐａｒｋ  ＪＳ，  Ｕｈ  ＳＴ，  Ｋｉｍ  ＹＫ，  Ｋｉｍ  ＹＨ，  Ｃｈｏｉ  ＪＳ，  Ｐａｒｋ  ＢＬ，  Ｓｈｉｎ  ＨＤ，  Ｐａｒｋ  ＣＳ．  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｂｅｔｗｅｅｎ  ｃｏｌｏｎｙ−ｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇ  ｆａｃｔｏｒ  １  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｇｅｎｅ  ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ  ａｎｄ  ａｓｔｈｍａ  ｒｉｓｋ．  Ｈｕｍ  Ｇｅｎｅｔ  ２０１０；  １２８：  ２９３−３０２．
【０１５５】
３１．  Ｇｕｉｌｌｉａｍｓ  Ｍ，  Ｓｃｏｔｔ  ＣＬ．  Ｄｏｅｓ  ｎｉｃｈｅ  ｃｏｍｐｅｔｉｔｉｏｎ  ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ  ｔｈｅ  ｏｒｉｇｉｎ  ｏｆ  ｔｉｓｓｕｅ−ｒｅｓｉｄｅｎｔ  ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ？  Ｎａｔ  Ｒｅｖ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ２０１７；  １７：  ４５１−４６０．
【０１５６】
３２．  ｖａｎ  ｄｅ  Ｌａａｒ  Ｌ，  Ｓａｅｌｅｎｓ  Ｗ，  Ｄｅ  Ｐｒｉｊｃｋ  Ｓ，  Ｍａｒｔｅｎｓ  Ｌ，  Ｓｃｏｔｔ  ＣＬ，  Ｖａｎ  Ｉｓｔｅｒｄａｅｌ  Ｇ，  Ｈｏｆｆｍａｎｎ  Ｅ，  Ｂｅｙａｅｒｔ  Ｒ，  Ｓａｅｙｓ  Ｙ，  Ｌａｍｂｒｅｃｈｔ  ＢＮ，  Ｇｕｉｌｌｉａｍｓ  Ｍ．  Ｙｏｌｋ  Ｓａｃ  Ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ，  Ｆｅｔａｌ  Ｌｉｖｅｒ，  ａｎｄ  Ａｄｕｌｔ  Ｍｏｎｏｃｙｔｅｓ  Ｃａｎ  Ｃｏｌｏｎｉｚｅ  ａｎ  Ｅｍｐｔｙ  Ｎｉｃｈｅ  ａｎｄ  Ｄｅｖｅｌｏｐ  ｉｎｔｏ  Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  Ｔｉｓｓｕｅ−Ｒｅｓｉｄｅｎｔ  Ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ．  Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ２０１６；  ４４：  ７５５−７６８．
【０１５７】
３３．  Ｍｏｏｎ  Ｈ−Ｇ，  Ｋｉｍ  Ｓ−ｊ，  Ｊｅｏｎｇ  ＪＪ，  Ｈａｎ  Ｓ−Ｓ，  Ｊａｒｊｏｕｒ  ＮＮ，  Ｌｅｅ  Ｈ，  Ａｂｂｏｕｄ−Ｗｅｒｎｅｒ  ＳＬ，  Ｃｈｕｎｇ  Ｓ，  Ｃｈｏｉ  ＨＳ，  Ｎａｔａｒａｊａｎ  Ｖ，  Ａｃｋｅｒｍａｎ  ＳＪ，  Ｃｈｒｉｓｔｍａｎ  ＪＷ，  Ｐａｒｋ  ＧＹ．  Ａｉｒｗａｙ  Ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ  Ｃｅｌｌ−Ｄｅｒｉｖｅｄ  Ｃｏｌｏｎｙ  Ｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇ  Ｆａｃｔｏｒ−１  Ｐｒｏｍｏｔｅｓ  Ａｌｌｅｒｇｅｎ  Ｓｅｎｓｉｔｉｚａｔｉｏｎ．  Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ２０１８；  ４９：  ２７５−２８７．ｅ２７５．
【０１５８】
３４．  Ｍｏｏｎ  ＨＧ，  Ｔａｅ  ＹＭ，  Ｋｉｍ  ＹＳ，  Ｇｙｕ  Ｊｅｏｎ  Ｓ，  Ｏｈ  ＳＹ，  Ｓｏｎｇ  Ｇｈｏ  Ｙ，  Ｚｈｕ  Ｚ，  Ｋｉｍ  ＹＫ．  Ｃｏｎｖｅｒｓｉｏｎ  ｏｆ  Ｔｈ１７−ｔｙｐｅ  ｉｎｔｏ  Ｔｈ２−ｔｙｐｅ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ  ｂｙ  ａｃｅｔｙｌ  ｓａｌｉｃｙｌｉｃ  ａｃｉｄ  ｖｉａ  ｔｈｅ  ａｄｅｎｏｓｉｎｅ  ａｎｄ  ｕｒｉｃ  ａｃｉｄ  ｐａｔｈｗａｙ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｌｕｎｇ．  Ａｌｌｅｒｇｙ  ２０１０；  ６５：  １０９３−１１０３．
【０１５９】
３５．  Ｇｒｏｚｄａｎｏｖｉｃ  Ｍ，  Ｌａｆｆｅｙ  ＫＧ，  Ａｂｄｅｌｋａｒｉｍ  Ｈ，  Ｈｉｔｃｈｉｎｓｏｎ  Ｂ，  Ｈａｒｉｊｉｔｈ  Ａ，  Ｍｏｏｎ  ＨＧ，  Ｐａｒｋ  ＧＹ，  Ｒｏｕｓｓｌａｎｇ  ＬＫ，  Ｍａｓｔｅｒｓｏｎ  ＪＣ，  Ｆｕｒｕｔａ  ＧＴ，  Ｔａｒａｓｏｖａ  ＮＩ，  Ｇａｐｏｎｅｎｋｏ  Ｖ，  Ａｃｋｅｒｍａｎ  ＳＪ．  Ｎｏｖｅｌ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅ−ｂｉａｓｅｄ  ａｎｔａｇｏｎｉｓｔ  ｏｆ  ＣＣＲ３  ｂｌｏｃｋｓ  ｅｏｓｉｎｏｐｈｉｌ  ｒｅｃｒｕｉｔｍｅｎｔ  ａｎｄ  ａｉｒｗａｙ  ｈｙｐｅｒｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅｎｅｓｓ．  Ｊ  Ａｌｌｅｒｇｙ  Ｃｌｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ２０１８．
【０１６０】
３６．  Ｋａｎｇ  Ｈ，  Ｇｒａｖｉｅｒ  Ｊ，  Ｂａｏ  Ｋ，  Ｗａｄａ  Ｈ，  Ｌｅｅ  ＪＨ，  Ｂａｅｋ  Ｙ，  Ｅｌ  Ｆａｋｈｒｉ  Ｇ，  Ｇｉｏｕｘ  Ｓ，  Ｒｕｂｉｎ  ＢＰ，  Ｃｏｌｌ  ＪＬ，  Ｃｈｏｉ  ＨＳ．  Ｒｅｎａｌ  Ｃｌｅａｒａｂｌｅ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｎａｎｏｃａｒｒｉｅｒｓ  ｆｏｒ  Ｂｉｏｉｍａｇｉｎｇ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ．  Ａｄｖ  Ｍａｔｅｒ  ２０１６；  ２８：  ８１６２−８１６８．
【０１６１】
Ｓ５．  Ｓｃｈｒoｄｉｎｇｅｒ  Ｒｅｌｅａｓｅ  ２０１６−１：  Ｓｃｈｒoｄｉｎｇｅｒ  Ｓｕｉｔｅ  ２０１６−１  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ  Ｗｉｚａｒｄ；  Ｅｐｉｋ  ｖｅｒｓｉｏｎ  ３．５，  Ｓｃｈｒoｄｉｎｇｅｒ，  ＬＬＣ，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，  ＮＹ；  Ｉｍｐａｃｔ  ｖｅｒｓｉｏｎ  ７．０，  Ｓｃｈｒoｄｉｎｇｅｒ，  ＬＬＣ，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，  ＮＹ；  Ｐｒｉｍｅ  ｖｅｒｓｉｏｎ  ４．３，  Ｓｃｈｒoｄｉｎｇｅｒ，  ＬＬＣ，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，  ＮＹ．  ２０１６．
【０１６２】
３７．  Ｊｏｒｇｅｎｓｅｎ  ＷＬ，  Ｍａｘｗｅｌｌ  ＤＳ，  ＴｉｒａｄｏＲｉｖｅｓ  Ｊ．  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ａｎｄ  ｔｅｓｔｉｎｇ  ｏｆ  ｔｈｅ  ＯＰＬＳ  ａｌｌ−ａｔｏｍ  ｆｏｒｃｅ  ｆｉｅｌｄ  ｏｎ  ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎａｌ  ｅｎｅｒｇｅｔｉｃｓ  ａｎｄ  ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ  ｏｆ  ｏｒｇａｎｉｃ  ｌｉｑｕｉｄｓ．  Ｊ  Ａｍ  Ｃｈｅｍ  Ｓｏｃ  １９９６；  １１８：  １１２２５−１１２３６．
【０１６３】
３８．  Ｓｃｈｒoｄｉｎｇｅｒ  Ｒｅｌｅａｓｅ  ２０１６−１：  ｌｉｇｐｒｅｐ，  ｖｅｒｓｉｏｎ  ３．７，  Ｓｃｈｒoｄｉｎｇｅｒ，  ＬＬＣ，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，  ＮＹ．  ２０１６．
【０１６４】
３９．  Ｖｅｒｄｏｎｋ  ＭＬ，  Ｃｏｌｅ  ＪＣ，  Ｈａｒｔｓｈｏｒｎ  ＭＪ，  Ｍｕｒｒａｙ  ＣＷ，  Ｔａｙｌｏｒ  ＲＤ．  Ｉｍｐｒｏｖｅｄ  ｐｒｏｔｅｉｎ−ｌｉｇａｎｄ  ｄｏｃｋｉｎｇ  ｕｓｉｎｇ  ＧＯＬＤ．  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ：  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，  Ｆｕｎｃｔｉｏｎ，  ａｎｄ  Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ  ２００３；  ５２：  ６０９−６２３．
【０１６５】
４０．  Ｋｏｒｂ  Ｏ，  Ｓｔuｔｚｌｅ  Ｔ，  Ｅｘｎｅｒ  ＴＥ．  Ｅｍｐｉｒｉｃａｌ  Ｓｃｏｒｉｎｇ  Ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ  ｆｏｒ  Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｐｒｏｔｅｉｎ−Ｌｉｇａｎｄ  Ｄｏｃｋｉｎｇ  ｗｉｔｈ  ＰＬＡＮＴＳ．  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｍｏｄｅｌｉｎｇ  ２００９；  ４９：  ８４−９６．
【０１６６】
Ｇ．態様
以下の例示的な態様のリストは、本明細書で提供される開示を支持し、それによって支持される。
【０１６７】
態様１．対象におけるアレルギー性炎症を特徴とする疾患又は症状を処置する方法であって、上記対象に、有効量の小分子ＣＳＦ１Ｒ阻害剤を投与することを含む、上記方法。
【０１６８】
態様２．ＣＳＦ１Ｒ阻害剤が、ＰＬＸ３３９７、ＤＣＣ−３０１４、ＢＬＺ９４５、ＧＷ２５８０、ＰＬＸ６４７、及びＡＲＲＹ−３８２、並びにその薬学的に許容可能な塩から選択される、態様１に記載の方法。
【０１６９】
態様３．ＣＳＦ１Ｒ阻害剤が、ＧＷ２５８０若しくはＰＬＸ３３９７、又はその薬学的に許容可能な塩である、態様２に記載の方法。
【０１７０】
態様４．上記小分子ＣＳＦ１Ｒ阻害剤を含む微粒子が上記対象に投与される、態様１〜３のいずれか一つに記載の方法。
【０１７１】
態様５．上記微粒子が、β−シクロデキストリン結合型イプシロン−ポリリジンをさらに含む、態様１〜４のいずれか一つに記載の方法。
【０１７２】
態様６．ＣＳＦ１Ｒ阻害剤が、急性アレルギーのフレアアップ中に患者に投与される、態様１〜５のいずれか一つに記載の方法。
【０１７３】
態様７．ＣＳＦ１Ｒ阻害剤が、急性アレルギーのフレアアップに先立って患者に投与される、態様１〜５のいずれか一つに記載の方法。
【０１７４】
態様８．上記アレルギー性炎症を特徴とする疾患又は症状が、喘息、アレルギー性結膜炎、アレルギー性皮膚炎、アレルギー性食道炎、及びアレルギー性鼻炎から選択される、態様１〜７のいずれか一つに記載の方法。
【０１７５】
態様９．ＣＳＦ１Ｒ阻害剤が、ＧＷ２５８０若しくはＰＬＸ３３９７、又はその薬学的に許容可能な塩である、態様８に記載の方法。
【０１７６】
態様１０．上記アレルギー性炎症を特徴とする疾患又は症状が喘息である、態様９に記載の方法。
【０１７７】
態様１１．ＣＳＦ１Ｒ阻害剤が、鼻エアロゾル又は吸入によって患者に投与される、態様１０に記載の方法。
【０１７８】
態様１２．上記アレルギー性炎症を特徴とする疾患又は症状がアレルギー性鼻炎である、態様９に記載の方法。
【０１７９】
態様１３．ＣＳＦ１Ｒ阻害剤が、ＣＳＦ１Ｒ阻害剤を含む組成物の鼻エアロゾル又は吸入によって患者に投与される、態様１２に記載の方法。
【０１８０】
態様１４．上記アレルギー性炎症を特徴とする疾患又は症状がアレルギー性結膜炎である、態様９に記載の方法。
【０１８１】
態様１５．ＣＳＦ１Ｒ阻害剤が、ＣＳＦ１Ｒ阻害剤を含む眼科用組成物の付与によって患者に投与される、態様１４に記載の方法。
【０１８２】
態様１６．上記アレルギー性炎症を特徴とする疾患又は症状がアレルギー性皮膚炎である、態様９に記載の方法。
【０１８３】
態様１７．ＣＳＦ１Ｒ阻害剤が、ＣＳＦ１Ｒ阻害剤を含む局所クリーム又は軟膏の塗布によって患者に投与される、態様１６に記載の方法。
【０１８４】
態様１８．上記アレルギー性炎症を特徴とする疾患又は症状がアレルギー性食道炎である、態様９に記載の方法。
【０１８５】
態様１９．ＣＳＦ１Ｒ阻害剤が、ＣＳＦ１Ｒ阻害剤を含む経口組成物の摂取によって患者に投与される、態様１８に記載の方法。
【０１８６】
態様２０．感作されたアレルゲンに曝露された対象のアレルギー性炎症を調節する方法であって、上記対象に有効量の小分子ＣＳＦ１Ｒ阻害剤を投与することを含む、上記方法。
【０１８７】
態様２１．ＣＳＦ１Ｒ阻害剤が、ＰＬＸ３３９７、ＤＣＣ−３０１４、ＢＬＺ９４５、ＧＷ２５８０、ＰＬＸ６４７、及びＡＲＲＹ−３８２、並びにその薬学的に許容可能な塩から選択される、態様２０に記載の方法。
【０１８８】
態様２２．ＣＳＦ１Ｒ阻害剤が、ＰＬＸ３３９７、ＤＣＣ−３０１４、ＢＬＺ９４５、ＧＷ２５８０、ＰＬＸ６４７、及びＡＲＲＹ−３８２、並びにその薬学的に許容可能な塩から選択される、態様２１に記載の方法。
【０１８９】
態様２３．ＣＳＦ１Ｒ阻害剤が、ＧＷ２５８０若しくはＰＬＸ３３９７、又はその薬学的に許容可能な塩である、態様２１に記載の方法。
【０１９０】
態様２４．上記小分子ＣＳＦ１Ｒ阻害剤を含む微粒子が上記対象に投与される、態様２１に記載の方法。
【０１９１】
態様２５．ナノ粒子が、β−シクロデキストリン結合型イプシロン−ポリリジンをさらに含む、態様２４に記載の方法。
【０１９２】
態様２６．上記アレルギー性炎症を特徴とする疾患又は症状が、喘息、アレルギー性結膜炎、アレルギー性皮膚炎、アレルギー性食道炎、及びアレルギー性鼻炎から選択される、態様２０〜２４のいずれか一つに記載の方法。
【０１９３】
態様２７．上記アレルギー性炎症を特徴とする疾患又は症状が喘息である、態様２６に記載の方法。
【０１９４】
態様２８．ＣＳＦ１Ｒ阻害剤が、ＣＳＦ１Ｒ阻害剤を含む組成物の鼻エアロゾル又は吸入によって患者に投与される、態様２７に記載の方法。
【０１９５】
態様２９．上記アレルギー性炎症を特徴とする疾患又は症状がアレルギー性鼻炎である、態様２０〜２４のいずれか一つに記載の方法。
【０１９６】
態様３０．ＣＳＦ１Ｒ阻害剤が、ＣＳＦ１Ｒ阻害剤を含む組成物の鼻エアロゾル又は吸入によって患者に投与される、態様２９に記載の方法。
【０１９７】
態様３１．上記アレルギー性炎症を特徴とする疾患又は症状がアレルギー性結膜炎である、態様２０〜２４のいずれか一つに記載の方法。
【０１９８】
態様３２．ＣＳＦ１Ｒ阻害剤が、ＣＳＦ１Ｒ阻害剤を含む眼科用組成物の付与によって患者に投与される、態様３１に記載の方法。
【０１９９】
態様３３．上記アレルギー性炎症を特徴とする疾患又は症状がアレルギー性皮膚炎である、態様２０〜２４のいずれか一つに記載の方法。
【０２００】
態様３４．ＣＳＦ１Ｒ阻害剤が、ＣＳＦ１Ｒ阻害剤を含む局所クリーム又は軟膏の塗布によって患者に投与される、態様３３に記載の方法。
【０２０１】
態様３５．上記アレルギー性炎症を特徴とする疾患又は症状がアレルギー性食道炎である、態様２０〜２４のいずれか一つに記載の方法。
【０２０２】
態様３６．ＣＳＦ１Ｒ阻害剤が、ＣＳＦ１Ｒ阻害剤を含む経口組成物の摂取によって患者に投与される、態様３５に記載の方法。
【０２０３】
態様３７．ＣＳＦ１Ｒ阻害剤又はその薬学的に許容可能な塩を含む微粒子。
【０２０４】
態様３８．ＣＳＦ１Ｒ阻害剤が、ＰＬＸ３３９７、ＤＣＣ−３０１４、ＢＬＺ９４５、ＧＷ２５８０、ＰＬＸ６４７、及びＡＲＲＹ−３８２、並びにその薬学的に許容可能な塩から選択される、態様３７に記載の微粒子。
【０２０５】
態様３９．β−シクロデキストリン結合型イプシロン−ポリリジンをさらに含む、態様３７又は３８に記載の微粒子。
【０２０６】
態様４０．上記ＣＳＦ１Ｒ阻害剤が、ＰＬＸ３３９７若しくはＧＷ２５８０、又はその薬学的に許容可能な塩である、態様３９に記載の微粒子。
【０２０７】
態様４１．ＰＬＸ３３９７、ＤＣＣ−３０１４、ＢＬＺ９４５、ＧＷ２５８０、ＰＬＸ６４７、及びＡＲＲＹ−３８２、並びにその薬学的に許容可能な塩から選択されるＣＳＦ１Ｒ阻害剤を含むエアロゾル製剤。
【０２０８】
態様４２．ＰＬＸ３３９７、ＤＣＣ−３０１４、ＢＬＺ９４５、ＧＷ２５８０、ＰＬＸ６４７、及びＡＲＲＹ−３８２、並びにその薬学的に許容可能な塩から選択されるＣＳＦ１Ｒ阻害剤を含む眼用製剤。
【０２０９】
態様４３．ＰＬＸ３３９７、ＤＣＣ−３０１４、ＢＬＺ９４５、ＧＷ２５８０、ＰＬＸ６４７、及びＡＲＲＹ−３８２、並びにその薬学的に許容可能な塩から選択されるＣＳＦ１Ｒ阻害剤と、眼用賦形剤と、を含む局所投与用製剤。
【０２１０】
態様４４．ＰＬＸ３３９７、ＤＣＣ−３０１４、ＢＬＺ９４５、ＧＷ２５８０、ＰＬＸ６４７、及びＡＲＲＹ−３８２、並びにその薬学的に許容可能な塩から選択されるＣＳＦ１Ｒ阻害剤を含む経口投与用製剤。
【０２１１】
前述のことから、本明細書における態様は、明らかであり、構成に固有である他の利点と共に、上記の全ての目標及び目的を達成するように十分に適合されていることが分かるであろう。
【０２１２】
特定の要素及び工程は互いに関連して説明されているが、本明細書で提供される任意の要素及び／又は工程は、任意の他の要素及び／又は工程と組み合わせ可能であると考えられるが、依然として本明細書において提供される範囲内である。
【０２１３】
特定の機能及びサブコンビネーションは有用であり、他の機能及びサブコンビネーションを参照せずに用いられることが理解されよう。これは、特許請求の範囲によって意図され、その範囲内にある。
【０２１４】
特許請求の範囲から逸脱することなく多くの可能な態様を作成することができるので、本明細書に記載又は添付の図面及び詳細な説明に示される全ての事項は、限定的な意味ではなく例示として解釈されるべきである。
【０２１５】
本明細書で使用される用語は、特定の態様を説明することのみを目的としており、限定することを考慮するものではないことも理解されたい。当業者は、本明細書に記載の態様の多くの変形及び適合を認識するであろう。これらの変形及び適合は、本開示の教示に含まれ、本明細書の特許請求の範囲に含まれることを意図している。
【０２１６】
本開示の態様を説明したので、概して、以下の実施例は、本開示のいくつかの追加の態様を説明する。本開示の態様は、以下の実施例及び対応する文章及び図に関連して説明されているが、本開示の態様をこの説明に限定する意図はない。むしろ、本開示の精神及び範囲内に含まれる全ての代替案、修正、及び均等物を網羅することを意図している。
【０２１７】
Ｈ．実施例
以下の実施例は、当業者に、本明細書で特許請求される化合物、組成物、物品、デバイス、及び／又は方法がどのように製造及び評価されるかについての完全な開示及び説明を提供するために提示され、本開示を純粋に例示することを意図しており、本発明者らがそれらの開示と見なす範囲を制限することを意図していない。数値（例えば、量、温度など）に関して正確さを確保するための努力がなされているが、ある程度の誤差や偏差は考慮されるものとする。特に明記されていない限り、「部（ｐａｒｔ）」は「重量部」（ｐａｒｔ  ｂｙ  ｗｅｉｇｈｔ）であり、温度は℃単位又は周囲温度であり、圧力は大気圧又は大気圧近傍である。
【０２１８】
［マウス］
Ｃ５７ＢＬ／６、Ｓｃｇｂ１ａ１−ＣｒｅＥＲＴ（ストック番号０１６２２５）、Ｉｒｆ４ｆｌ／ｆｌ（ストック番号００９３８０）、及びＭＡＦＩＡ（ストック番号００５０７０）マウスは、ジャクソン研究所（Ｔｈｅ  Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ、メイン州バーハーバー）から購入した。Ｓｃｇｂ１ａ１−ｃｒｅＥＲＴ；Ｃｓｆ１ｆｌ／ｆｌ及びＣｓｆ１ｒ−ｃｒｅＥＲＴ；Ｉｒｆ４ｆｌ／ｆｌは、前述のように生成した（Ｍｏｏｎ  Ｈ−Ｇ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ２０１８  ４９：２７５−２８７．ｅ２７５）。マウスは、イリノイ大学シカゴ校（Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｉｌｌｉｎｏｉｓ  ａｔ  Ｃｈｉｃａｇｏ、ＵＩＣ）が管理する特定病原体除去施設で飼育された。全てのマウス実験は、イリノイ大学シカゴ校の動物実験委員会（Ｉｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａｌ  Ａｎｉｍａｌ  Ｃａｒｅ  ａｎｄ  Ｕｓｅ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ）によって承認された。週齢及び性別を一致させた７〜１０週齢のマウスを実験に使用した。
【０２１９】
［ＤＲＡ誘発慢性喘息モデル］
前述のＤＲＡ誘発喘息モデルに、わずかな変更を加えて使用した（Ｇｏｐｌｅｎ  Ｎ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｊ  Ａｌｌｅｒｇｙ  Ｃｌｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ２００９  １２３：９２５−９３２．ｅ９１１）。簡潔には、マウスに、ハウスダストダニ、ブタクサ、及びアスペルギルス（それぞれ、５μｇ／マウス、５０μｇ／マウス、５μｇ／マウス）からなるＤＲＡ混合物を、鼻腔内経路で８週間、週２回投与した。次に、マウスを３週間休ませてから、１１週目にサンプルを収集した。Ｓｃｇｂ１ａ１−ｃｒｅＥＲＴ；Ｃｓｆ１ｆ／ｆ（ＣＳＦ１ΔＡＥＣ）及びＣｓｆ１ｒ−ｃｒｅＥＲＴ；Ｉｒｆ４ｆｌ／ｆｌ（ＩＲＦ４ΔＡＰＣ）を含む実験で標的遺伝子を枯渇させるため、タモキシフェン（Ｔｍ、７５ｍｇ／ｋｇ、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ社、ミズーリ州セントルイス）を、「結果」に示したスケジュールに従って、５日間連続して強制経口投与した。
【０２２０】
［エクスビボＤＲＡ抗原リコール想起アッセイ］
ＬＮは、ＤＲＡ誘発性アレルギー性肺モデルに供したマウスの縦隔から得られた。ＬＮから単細胞懸濁液を作成し、合計４×１０６細胞／ｍＬを２４ウェルプレートに播種した。感作性アレルゲンによる刺激のために、細胞をＤＲＡ（イエダニ、ブタクサ、及びアスペルギルスをそれぞれ１０μｇ／ｍＬ、１００μｇ／ｍＬ、１０μｇ／ｍＬ）有り又は無しで３日間処理した。細胞をスピンダウンし、上清をＥＬＩＳＡに使用した。
【０２２１】
［形態計測分析及びデジタル病理学］
前述のように、スライド画像全体の組織炎症を自動分類及び定量化するためのツールであるＧｅｎｉｅ  Ｓｙｓｔｅｍ（Ａｐｅｒｉｏ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社、米国カリフォルニア州ビスタ）を使用した（Ｐａｒｋ  ＧＹ，  ｅｔ  ａｌ．  Ａｍ  Ｊ  Ｒｅｓｐｉｒ  Ｃｒｉｔ  Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ  ２０１３  １８８：９２８−９４０）。このシステムでは、ユーザーは、分析対象である組織クラスの例である目的の領域の概要を示すことにより、定量化する組織のカテゴリを識別する。肺病理は、正常な肺実質、気道、空隙（気道内腔など）、及び炎症の４つのタイプに分類することにより、肺野全体にわたって自動的に定量化した。分析を実施する病理医に対して、実験群は匿名化された。
【０２２２】
［統計分析］
２群の比較には２標本ｔ検定を使用し、複数群の比較にはＡＮＯＶＡを使用した。検定は両側で実施し、全てのデータが検定の前提条件を満たしていた。各ドットはパラメーターの単一の測定値を表し、グラフのバーは平均±ＳＥＭを表す。サンプルサイズを事前に決定するために統計的手法を使用しなかったが、正規分布であると想定され、分散は群間で等しいと想定された。全ての分析を、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ（カリフォルニア州ラホヤ）を使用して実施した。
【０２２３】
［ＥＬＩＳＡ］
マウスＣＳＦ１  ＥＬＩＳＡキットは、Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ社（マサチューセッツ州ミネアポリス）から購入し、マウスＩＬ−４、ＩＬ−１３、ＩＬ−１７Ａ、及びＩＦＮ−γＥＬＩＳＡキットは、ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ社（マサチューセッツ州ウォルサム）から入手し、抗マウスＩｇＥＥＬＩＳＡキットは、ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ社（カリフォルニア州サンディエゴ）から入手した。全ての手順は、製造元の指示に従った。ＤＲＡ反応性ＩｇＥを測定するために、高親和性結合９６ウェルプレートをコーティングバッファー中で４℃で一晩ＤＲＡ（Ｄ．ｆ：１００μｇ／ｍＬ、ブタクサ：１０００μｇ／ｍＬ、及びアスペルギルス：１００μｇ／ｍＬ、Ｇｒｅｅｒ  Ｌａｂから購入）でコーティングした。次に、１％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）をブロッキングバッファーとして室温で１時間使用し、残りの手順は前述のＩｇＥ  ＥＬＩＳＡキットプロトコルに従った（Ｍｏｏｎ  Ｈ−Ｇ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ２０１８  ４９：２７５−２８７．ｅ２７５）。
【０２２４】
［フローサイトメトリー］
ＢＡＬ細胞、肺組織、全血、及び骨髄をフローサイトメトリー用に記載の通りに調製した（Ｍｏｏｎ  ＨＧ，  ｅｔ  ａｌ．  Ａｌｌｅｒｇｙ  ２０１０  ６５：１０９３−１１０３）。抗マウスＣＤ３（ＡＰＣ、ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ社）、抗マウスＢ２２０（ＡＰＣ、ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ社）、抗マウスＴＥＲ−１１９（ＡＰＣ、ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ社）、抗マウスＦ４／８０（ＡＰＣ、ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ社）、及び抗マウスＣＤ６４（ＡＰＣ、ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ社）を含む系統マーカー（Ｌｉｎ）を使用して、Ｔリンパ球及びＢリンパ球、赤血球、並びにマクロファージを分析から除外した。抗マウスＣＤ１１ｃ（ＰＥ／Ｃｙ７、ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ社）、抗マウスＩ−Ａ／Ｉ−Ｅ（ＢＶ６０５、ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ社）、抗マウスＣＤ２４（ＢＶ５１０、ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ社）、及び抗マウスＣＤ１７２ａ（ＡＦ７００、ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ社）をｃＤＣ１マーカー及びｃＤＣ２マーカーに使用した。抗ＧＦＰ（ＡＦ４８８、ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ社）及び抗マウスＣＳＦ１Ｒ（Ｐｅｒｃｐ、Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ社）をＭＡＦＩＡマウスにおけるＣＳＦ１Ｒ発現の分析に使用した。アポトーシスを特定するために、アネキシンＶアポトーシス検出キット（ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ社）を製造元の指示に従って使用した。従来のＤＣ集団及びＣＳＦ１Ｒ発現の分析は、Ｋａｌｕｚａソフトウェア（Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｃｏｕｌｔｅｒ社、インディアナ州インディアナポリス）を使用して実施した。
【０２２５】
［組織学、免疫組織化学（ＩＨＣ）、及び過ヨウ素酸シッフ（ＰＡＳ）染色］
肺組織のホルマリン固定及びパラフィン包埋切片を、ヘマトキシリン・エオジン（ＨＥ）染色、免疫組織化学（ＩＨＣ）、及び過ヨウ素酸シッフ（ＰＡＳ）染色に使用した。研究に使用した一次抗体には、抗ＣＳＦ１、抗コラーゲン、及び抗αＳＭＡ抗体（Ａｂｃａｍ社、マサチューセッツ州ケンブリッジ）が含まれる。組織学的な組織の処理及び分析は、ＵＩＣのＲｅｓｅａｒｃｈ  Ｈｉｓｔｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｔｉｓｓｕｅ  Ｉｍａｇｅ  Ｃｏｒｅ（ＲＨＴＩＣ）によって実施された。全ての画像は、オリンパスＢＸ５１蛍光顕微鏡を使用して撮影された（オリンパス株式会社）。
【０２２６】
［気管支過敏性の測定］
マウスをケタミン／キシラジン混合物で麻酔し、気管切開チューブを挿入した。ｆｌｅｘｉＶｅｎｔ（登録商標）小動物人工呼吸器（ＳＣＩＲＥＱ社、ケベック州モントリオール）を使用して機械的人工呼吸を開始した。継続的なＥＫＧ及びパルスオキシメータのモニタリングを行った。気道抵抗は、前述のようにメタコリンの用量を順次増加させた後に測定した（Ｇｒｏｚｄａｎｏｖｉｃ  Ｍ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｊ  Ａｌｌｅｒｇｙ  Ｃｌｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ２０１８）。
【０２２７】
［β−シクロデキストリン（β−ＣＤ）結合イプシロン−ポリリジン（ＣＤＰＬ）の合成］
ＣＤＰＬは以前に開発された方法で作成した（Ｋａｎｇ  Ｈ，  ｅｔ  ａｌ．  Ａｄｖ  Ｍａｔｅｒ  ２０１６  ２８：８１６２−８１６８）。簡潔には、β−シクロデキストリン（β−ＣＤ）のヒドロキシル基を酸化するために、β−ＣＤ（１ｇ）とデス−マーチンペルヨージナン（Ｄｅｓｓ−Ｍａｒｔｉｎ  ｐｅｒｉｏｄｉｎａｎｅ）（０．８ｇ）を無水ＤＭＳＯ（２５ｍＬ）に溶解し、室温で１２時間撹拌した。反応混合物を沈殿法により冷アセトンで数回洗浄して不溶性不純物を除去し、白色固体を真空乾燥した。アルデヒド−ＣＤ（７００ｍｇ）を２５ｍＬの酢酸緩衝液（０．２Ｍ、ｐＨ４．５）に溶解し、イプシロン−ポリリジン（１００ｍｇ）と混合した。１時間撹拌した後、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（２６３ｍｇ）を反応混合物に加え、続いてさらに７２時間撹拌した。透析は、脱イオン水に対して１２〜１４ｋＤａの分子量カットオフ（ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｗｅｉｇｈｔ  ｃｕｔｏｆｆ、ＭＷＣＯ）のセルロース膜で２４時間実施し、得られた溶液を凍結乾燥させた。ＣＤＰＬナノ粒子を視覚化するために、ＮＩＲフルオロフォア（ＺＷ８００−１Ｃ）を従来のＮ−ヒドロキシスクシンイミド（ＮＨＳ）エステル化学を使用してＣＤＰＬ鎖に結合させた。最後に、無水コハク酸（ＣＤＰＬ鎖上のアミン数の半分）をＰＢＳ（ｐＨ８．０）中のＺＷ８００−ＣＤＰＬに添加して、表面電荷を正から双性イオンに変換し、得られた混合物をアセトンで洗浄し、真空乾燥した。
【０２２８】
［ＧＷ２５８０−ＣＤＰＬ包接複合体の調製］
ＣＤＰＬ（水中２．５μＭ）をＧＷ２５８０溶液（ＤＭＳＯ／ＰＢＳ中２０μＭ、５０／５０体積％（％（ｖ／ｖ）））と混合し、混合物を室温で２４時間ボルテックスした。次に、Ｍｉｃｒｏ  Ｂｉｏ−Ｓｐｉｎ（商標）Ｐ−６ゲルカラム（Ｂｉｏ−ｒａｄ社）を使用して、未結合のＧＷ２５８０を除去した。次に、精製されたＣＤＰＬ−ＧＷ溶液の吸光度を約２８０ｎｍで測定し、ＧＷ２５８０の量を計算した。
【０２２９】
［インビボでのＧＷ２５８０−ＣＤＰＬの生体内分布及び薬物動態］
動物はＡＡＡＬＡＣ認定施設に収容され、承認された施設プロトコル（＃２０１６Ｎ０００１３６）に従って、マサチューセッツ総合病院（Ｍａｓｓａｃｈｕｓｅｔｔｓ  Ｇｅｎｅｒａｌ  Ｈｏｓｐｉｔａｌ、ＭＧＨ）の動物実験委員会（Ｉｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａｌ  Ａｎｉｍａｌ  Ｃａｒｅ  ａｎｄ  Ｕｓｅ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ、ＩＡＣＵＣ）の監督下で研究された。６週齢のＣＤ−１マウス（オス、２５〜３０ｇ）は、Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ社（マサチューセッツ州ウィルミントン）から購入した。マウスは、イソフルランの吸入又は１００ｍｇ／ｋｇのケタミン及び１０ｍｇ／ｋｇのキシラジン（ＷｅｂｓｔｅｒＶｅｔｅｒｉｎａｒｙ社、マサチューセッツ州フォートデベンズ）の腹腔内注射による麻酔下で維持された。尾の端は採血可能なようにカットした。次に、注射前に、血液をヘパリン化キャピラリーチューブ（Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社、ペンシルベニア州ピッツバーグ）に参照用に採取し、収集した血液の凝固を防ぐためにアイスボックスに保存した。生理食塩水中の１０ｎｍｏｌのＣＤＰＬ−ＧＷをマウスに注射し、血液を採取して血液の半減期を推定した。自社製のリアルタイム術中ＮＩＲイメージングシステムを使用してマウスをイメージングした。７６０ｎｍの励起レーザー光源（４ｍＷ／ｃｍ）を白色光（４００〜６５０ｎｍ、４０，０００ルクス）で使用した。注射の４時間後、臓器におけるＣＤＰＬ−ＧＷの生体内分布を評価するためにマウスを犠牲にした。
【０２３０】
［ＣＳＦ１Ｒキナーゼドメインの分子ドッキング研究］
ＣＳＦ１Ｒキナーゼの結晶構造は、ＲＣＳＢタンパク質データバンクからダウンロードし、シュレディンガー（Ｓｃｈｒoｄｉｎｇｅｒ）２０１６のタンパク質調製ウィザードによって調製した（Ｓｃｈｒoｄｉｎｇｅｒ  Ｒｅｌｅａｓｅ  ２０１６−１：Ｓｃｈｒoｄｉｎｇｅｒ  Ｓｕｉｔｅ  ２０１６−１  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ  Ｗｉｚａｒｄ、Ｅｐｉｋバージョン３．５、Ｓｃｈｒoｄｉｎｇｅｒ，  ＬＬＣ、ニューヨーク州ニューヨーク；Ｉｍｐａｃｔバージョン７．０、Ｓｃｈｒoｄｉｎｇｅｒ，  ＬＬＣ、ニューヨーク州ニューヨーク；Ｐｒｉｍｅバージョン４．３、Ｓｃｈｒoｄｉｎｇｅｒ，  ＬＬＣ、ニューヨーク州ニューヨーク、２０１６）。タンパク質の調製手順中に、水素を添加し、ＯＰＬＳ３力場に部分電荷を割り当て（Ｊｏｒｇｅｎｓｅｎ  ＷＬ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｊ  Ａｍ  Ｃｈｅｍ  Ｓｏｃ  １９９６  １１８：１１２２５−１１２３６）、その後、添加した全ての水素が最小限に抑えられた。ＧＷ２５８０の３Ｄ構造は、シュレディンガー２０１６のＬｉｇＰｒｅｐモジュール（Ｓｃｈｒoｄｉｎｇｅｒ  Ｒｅｌｅａｓｅ  ２０１６−１：ＬｉｇＰｒｅｐバージョン３．７、Ｓｃｈｒoｄｉｎｇｅｒ，  ＬＬＣ、ニューヨーク州ニューヨーク、２０１６）によって処理され、ＧＷ２５８０は、ＧＯＬＤｖ５．２．２を使用して上記で準備されたＣＳＦ１Ｒキナーゼにドッキングされた（Ｖｅｒｄｏｎｋ  ＭＬ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ：  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，  Ｆｕｎｃｔｉｏｎ，  ａｎｄ  Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ  ２００３  ５２：６０９−６２３）。ＧＷ２５８０はフレキシブルに設定し、ＣＳＦ１Ｒキナーゼはリジッドに設定した。他のパラメーターには、標準のデフォルト設定を使用した。ＧＷ２５８０の結合ポーズは、ＣｈｅｍＰＬＰスコアリング関数を使用して評価し（Ｋｏｒｂ  Ｏ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｍｏｄｅｌｉｎｇ  ２００９  ４９：８４−９６）、最高スコアリングドッキングコンフォメーションを選択した。
【０２３１】
［ＣＳＦ１及びＣＳＦ１Ｒ＋ｃＤＣは、喘息の慢性ＤＲＡ誘発マウスモデルのＢＡＬ液に高度に濃縮されている］
ヒト喘息の慢性炎症性表現型を要約するために、喘息の慢性ＤＲＡ誘発マウスモデル（以下、慢性ＤＲＡモデル）を採用した（図１Ａ）（Ｍｏｏｎ  Ｈ−Ｇ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ２０１８  ４９：２７５−２８７．ｅ２７５；  Ｇｏｐｌｅｎ  Ｎ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｊ  Ａｌｌｅｒｇｙ  Ｃｌｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ２００９  １２３：９２５−９３２．ｅ９１１）。急性一過性喘息モデルとは異なり、肺及びＢＡＬ液の好酸球増加症は慢性ＤＲＡモデルではほとんど見られなかった。代わりに、ＢＡＬ細胞の大部分はリンパ球及びマクロファージからなり、慢性気道炎症及び気道リモデリングの特徴がこのモデルでよく示されている。ＡＥＣはアレルゲン曝露に応答してＣＳＦ１を肺胞腔に分泌することから（Ｍｏｏｎ  Ｈ−Ｇ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ２０１８  ４９：２７５−２８７．ｅ２７５）、慢性的なＤＲＡ曝露がＢＡＬ  ＣＳＦ１濃度にどのように影響するかを調べた。ＢＡＬ  ＣＳＦ１は即座に増加し、６週目にピークに達したが、ＢＡＬ  ＣＳＦ２（ＧＭ−ＣＳＦ）は、それが上昇し始めた６週まで変化しなかった（図１Ａ）。定常状態では、ｃＤＣは呼吸器系に多く存在していたが、血中のｃＤＣの数は少なかった（図７）。次に、マウスを慢性ＤＲＡモデルに供し、ＢＡＬ中のｃＤＣを、図７に示されるようにフローサイトメトリーゲーティングを使用することによって測定した。ＢＡＬ  ＣＳＦ１のパターンと同様に、ｃＤＣ２は慢性ＤＲＡモデルの過程で急速に増加したが、ｃＤＣ１は６週目まで遅延した。ＣＳＦ１Ｒ＋ｃＤＣ２がアレルゲン感作に重要な役割を果たすため（Ｍｏｏｎ  Ｈ−Ｇ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ２０１８  ４９：２７５−２８７．ｅ２７５）、さらに、ＢＡＬ液中のＣＳＦ１Ｒ＋ｃＤＣを分析した。慢性的なＤＲＡ曝露は、ＣＳＦ１Ｒ＋ｃＤＣ１よりも早期に高度なＣＳＦ１Ｒ＋ｃＤＣ２の増加を誘発した（図１Ｂ）。総血清ＩｇＥレベル及びＤＲＡ反応性血清ＩｇＥレベルも徐々に増加し、アレルゲンへの反復暴露によってアレルゲン感作が強化されたことを示している（図１Ｃ）。
【０２３２】
［ＡＥＣ由来のＣＳＦ１は、慢性アレルギー性肺炎の発症及び気道リモデリングに必要である］
ＡＥＣによって分泌されたＣＳＦ１が慢性アレルギー性炎症及び気道リモデリングを確立するために必要かどうかを試験するために、タモキシフェン（Ｔｍ）注射によりＡＥＣにおいて選択的にＣＳＦ１の誘導性ノックアウトマウスであるＳｃｇｂ１ａ１−ｃｒｅＥＲＴ；Ｃｓｆ１ｆｌ／ｆｌ（以下、ＣＳＦ１ΔＡＥＣ）マウスを使用した（Ｍｏｏｎ  Ｈ−Ｇ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ２０１８  ４９：２７５−２８７．ｅ２７５）。まず、ＣＳＦ１枯渇の期間は、Ｔｍ摂取の１つの単一サイクル（連続した５日間からなる）によって測定した。ＡＥＣ及びＢＡＬ液におけるＣＳＦ１の枯渇は、経口Ｔｍの１サイクルによって４週間まで続いた（図８）。したがって、タモキシフェンは、慢性ＤＲＡモデルの間、４週間ごとに投与した（図２Ａ）。ＢＡＬのＣＳＦ１は、偽処置群またはタモキシフェン単独投与群（Ｖｅｈ＿Ｖｅｈ、Ｔｍ＿Ｖｅｈ）と比較して、慢性ＤＲＡ群（Ｖｅｈ＿ＤＲＡ）で約２〜３倍増加したが、タモキシフェン投与はＣＳＦ１（Ｔｍ＿ＤＲＡ）の増加を無効にした（図２Ｂ）。ＣＳＦ１は、ＤＣ動員を促進することにより、アレルゲン感作及びＩｇＥ産生に重要な役割を果たす（Ｍｏｏｎ  Ｈ−Ｇ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ２０１８  ４９：２７５−２８７．ｅ２７５）。慢性ＤＲＡモデルでは、ＣＳＦ１のＡＥＣ分泌をブロックすると、総血清ＩｇＥ及びＤＲＡ反応性血清ＩｇＥ産生が有意に減少し（図２Ｃ）、その後のアレルギー性肺炎症、炎症性細胞浸潤、Ｔｈ２サイトカイン産生、並びに杯細胞化生、コラーゲン沈着、及び平滑筋肥大を含む気道リモデリングが無効となった（図２Ｄ〜図２Ｉ）。
【０２３３】
［ＣＳＦ１の枯渇は、確立された慢性アレルギー性炎症及び気道リモデリングを逆転させ、Ｔｈ２記憶応答を抑制する］
ヒト喘息の治療との関連性を確保するために、アレルギー性肺炎症が完全に確立された後にＣＳＦ１枯渇が起こったモデル（図３Ａ）を作成した。このモデルでは、慢性ＤＲＡモデルの６週目に１サイクルの経口Ｔｍ摂取を行った。１サイクルの経口Ｔｍ投与は、有意に減少したＢＡＬ  ＣＳＦ１をもたらした（図３Ｂ）。慢性ＤＲＡモデルにおけるＣＳＦ１の遅延した枯渇は、アレルゲン感作（血清ＩｇＥ）、炎症性細胞浸潤、アレルギー性肺炎症、及び杯細胞化生を逆転させることができた（図３Ｃ〜図３Ｆ）。単一細胞懸濁液は、上記のモデルに供されたマウスから得られたＬＮから作製し、「方法」に記載されているようにエクスビボＤＲＡ抗原リコールアッセイに使用した。ＩＬ−４及びＩＬ−１３分泌は、ＤＲＡによる再チャレンジによって増強されたが、ＣＳＦ１枯渇マウスから得られた細胞では鈍化され（図３Ｇ）、Ｔｈ２メモリー応答がＣＳＦ１枯渇マウスで有意に減少したことを示している。興味深いことに、ＣＳＦ１の枯渇は、ＤＲＡ再刺激によるＩＬ−１７及びＩＦＮ−γ分泌に影響を及ぼさず、ＣＳＦ１の影響がＴｈ２免疫応答に選択的であることを示唆している。
【０２３４】
［慢性ＤＲＡモデルの二次ＬＮのＴｈ２メモリーには、ＩＲＦ４＋  ＣＳＦ１Ｒ＋細胞が必要である］
ｃＤＣ２はＣＳＦ１依存性アレルゲン感作において重要な役割を果たす（Ｍｏｏｎ  Ｈ−Ｇ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ２０１８  ４９：２７５−２８７．ｅ２７５）。ｃＤＣ２の発生が選択的に除去されるマウス系統はないことから（Ａｎｄｅｒｓｏｎ  ＤＡ，  ３ｒｄ，  Ｍｕｒｐｈｙ  ＫＭ，  Ｂｒｉｓｅｎｏ  ＣＧ．  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，  Ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ，  ａｎｄ  Ｆｕｎｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ  Ｃｅｌｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｕｓｅ  ａｎｄ  Ｈｕｍａｎ．  Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂ  Ｐｅｒｓｐｅｃｔ  Ｂｉｏｌ  ２０１７）、Ｃｓｆ１ｒ−ｃｒｅＥＲＴ；Ｉｒｆ４ｆｌ／ｆｌ（以下、ＩＲＦ４ΔＡＰＣ）を、ｃＤＣ２を標的とした実験に使用した（Ｍｏｏｎ  Ｈ−Ｇ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ２０１８  ４９：２７５−２８７．ｅ２７５）。ＩＲＦ４はｃＤＣ２の発達及び機能に必要であるが、ｃＤＣ１には必要ではなく（Ｂａｊａｎａ  Ｓ，  Ｔｅｔ  ａｌ．  Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ２０１６；  １９６：１６６６−１６７７）、Ｃｓｆ１ｒ発現マクロファージはＬＮへの抗原輸送に関与していないことから、このマウスは、アレルゲン感作の実験モデルでｃＤＣ２機能を標的にするために使用可能であった（Ｍｏｏｎ  Ｈ−Ｇ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ２０１８  ４９：２７５−２８７．ｅ２７５）。マウスは、図４Ａに示されるように慢性ＤＲＡモデルに供された。これらの２つのモデルでは、アレルギー性炎症が最初に確立され、次にＴｍが投与されて２週目（Ｔｍ２）又は６週目（Ｔｍ６）にＣＳＦ１Ｒ＋ＩＲＦ４＋細胞が枯渇した。ＢＡＬ液中に十分なＣＳＦ１が存在するにもかかわらず（図４Ｂ）、ＣＳＦ１Ｒ＋ＩＲＦ４＋細胞の枯渇は、炎症性細胞浸潤並びに総血清ＩｇＥ及びＤＲＡ反応性血清ＩｇＥ産生の減少、そして肺炎症及び杯細胞化生の減弱をもたらしたが、Ｔｍ６群は中程度の効果しか示さなかった（図４Ｃ〜図４Ｆ）。エクスビボＤＲＡ抗原リコールアッセイは、ＣＳＦ１Ｒ＋  ＩＲＦ４＋の枯渇が、Ｔｍ２処置群及びＴｍ６処置群の両方でＤＲＡ再刺激によるＩＬ−４及びＩＬ−１３の産生をブロックしたことを示した一方で、ＩＬ−１７産生はＴｍ６群ではインタクトのままであったが、Ｔｍ２群からのサンプルは部分的な減少を示した（図４Ｇ）。まとめると、これらのデータは、ＣＳＦ１Ｒ＋ｃＤＣ２がＴｈ２メモリー細胞の形成に必要であることを示しており、ｃＤＣ２機能の妨害がＴｈ２免疫性疾患の治療に有益であることを示している。
【０２３５】
［ＣＳＦ１Ｒ阻害剤を運搬するナノ粒子は、ｃＤＣ２の移動及びアレルゲン感作をブロックする］
選択的ＣＳＦ１Ｒ阻害剤は、最小限の有害作用で癌治療のための継続的な臨床試験で使用されてきた（Ｂｕｔｏｗｓｋｉ  Ｎ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｎｅｕｒｏ  Ｏｎｃｏｌ  ２０１６  １８：５５７−５６４；  Ｔａｐ  ＷＤ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ  ２０１５  ３７３：４２８−４３７）。ＣＳＦ１Ｒ阻害剤であるＧＷ２５８０は、ヒトＣＳＦ１Ｒ組換えタンパク質に対して優れた結合親和性を示した（Ｍｏｏｎ  Ｈ−Ｇ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ２０１８  ４９：２７５−２８７．ｅ２７５）。シミュレーションタンパク質構造モデリングは、ＧＷ２５８０がＣＳＦ１Ｒのキナーゼドメインの２つの重要な細胞内チロシン残基（Ｙ５４６及びＹ６６５）と相互作用することを示した（図９）。さらに、ＧＷ２５８０の全身投与は、局所ＬＮへのｃＤＣ２の移行を効果的にブロックした（Ｍｏｏｎ  Ｈ−Ｇ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ２０１８  ４９：２７５−２８７．ｅ２７５）。吸入経路は、化合物を標的臓器に効果的に送達し、全身性の有害作用を最小限に抑えることができるため、喘息治療に適している。吸入送達の場合、ＣＳＦ１Ｒ阻害剤を含むＣＰＤＬカプセル化ナノ粒子は、前述の方法を使用して生成した（Ｋａｎｇ  Ｈ，  ｅｔ  ａｌ．  Ａｄｖ  Ｍａｔｅｒ  ２０１６  ２８：８１６２−８１６８）。ＣＤＰＬナノ粒子は、ゲスト分子の化学的安定性及び生物学的利用能を高め、他の組織に付着することなく、親油性ＧＷ２５８０の肺への部位特異的送達を確実にする（Ｃｈｏｉ  ＨＳ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｎａｔ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ  ２０１０  ２８：１３００−１３０３）。各ＣＰＤＬナノ粒子は、ＧＷ２５８０の４つの分子及びＺＷ８００−１フルオロフォアを運搬する（ＣＤＰＬ−ＧＷ）（図５Ａ）。予想通り、ＣＤＰＬ−ＧＷの鼻腔内送達は良好な肺沈着を示した（図１０）。ＮａｎｏＳｉｇｈｔ（Ｓｏｌｉｓｂｕｒｙ社、英国）による測定では、ほとんどのＣＰＤＬナノ粒子が１００ｎｍ未満であることが示された（図１１）。次に、２つの異なる用量のＣＤＰＬ−ＧＷ（１ｎｇ及び１００ｎｇ／マウス）の細胞分布を、肺への鼻腔内注入を介して分析した（図１２）。好中球、ＤＣ及び肺胞マクロファージ（ＡＭ）は、粒子を取り込んだ主要な細胞であった。肺におけるＤＣ遊走を阻害するためのＣＤＰＬ−ＧＷの用量を最適化するために、マウスをＣＤＰＬ−ＧＷの用量を増加させて（１ｐｇ／マウスから１ｎｇ／マウスへ）、５日間ＤＲＡチャレンジに供し、サンプルを５日目に採取した（図５Ｂ）。総ＢＡＬ細胞はＤＲＡチャレンジによって増加したが、ＣＤＰＬ−ＧＷによって用量依存的に抑制され（図５Ｂ）、ＢＡＬ好酸球数及び血清ＩｇＥ濃度も１ｎｇ／マウスのＣＤＰＬ−ＧＷによって著しく減少した（図５Ｂ〜図５Ｃ）。しかしながら、ＡＭの有意なアポトーシス死又はＣＤＰＬ−ＧＷ処理によるＢＡＬ総タンパク質若しくはアルブミン濃度の増加はなかった（図５Ｂ及び図１３）。ＤＣに対するＣＤＰＬ−ＧＷの影響をさらに特徴づけるために、移動性ＤＣ（ＣＤ４５＋ｌｉｎ−ＣＤ１１ｃ＋ＭＨＣｌｌ＋ＣＣＲ７＋）の数を局所ＬＮで評価した。ＣＤＰＬ−ＧＷは、用量依存的に移動性ｃＤＣ２を抑制した（図５Ｄ）。これらのデータから、次の実験の治療用���として１ｎｇのＣＤＰＬ−ＧＷ／マウス（８０００ナノ粒子に相当）が決定された。
【０２３６】
［ＣＳＦ１Ｒ阻害剤を運搬するナノ粒子は、ＤＲＡモデルの慢性アレルギー性肺炎症を無効にする］
慢性アレルギー性炎症に対する鼻腔内ＣＤＰＬ−ＧＷ処置の有効性を測定するために、図１４に示すように３つの異なる実験を行った。これらの実験では、ＣＤＰＬ−ＧＷ鼻腔内処置は、ＤＲＡへの曝露を繰り返しながら、慢性ＤＲＡモデルにおいて３週目、５週目、及び７週目の異なる３時点で開始し、８週目まで継続した。３週間の休息後、１１週目にマウスを分析した。３つの実験全てにおける鼻腔内ＣＤＰＬ−ＧＷ処置は、偽処置群と比較して、ＣＤＰＬ−ＧＷ  ７ｗｋ群は中程度の効果しかなかったが、気道炎症細胞動員、総血清ＩｇＥ及びＤＲＡ反応性血清ＩｇＥ、ＢＡＬ  Ｔｈ２サイトカイン、肺組織炎症、並びに杯細胞化生を含む喘息の病状を効果的に軽減した（図６Ａ〜図６Ｅ）。総タンパク質及びアルブミンのＢＡＬ濃度に変化はなかった（図１４）。ＣＤＰＬ−ＧＷ  ７ｗｋ群は統計的有意性に達しなかったが、ＣＤＰＬ−ＧＷ処置は二次ＬＮにおけるＴｈ２メモリー細胞形成を効果的に阻害した（図６Ｆ）。３つのＣＤＰＬ−ＧＷ処置群は全て、偽処置慢性ＤＲＡ群と比較して、気管支過敏性の低下を示した（図６Ｇ）。
【０２３７】
開示される研究では、喘息の病状の発症及び悪化に対するアレルゲン感作のブロック又は最小化の効果がそれぞれ強調される。最近の臨床研究は、環境アレルゲンへの感作及び血清ＩｇＥの過剰産生が、幼児期のアレルギー性喘息の症状に先行することを示している（Ｈｏｓｅ  ＡＪ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｊ  Ａｌｌｅｒｇｙ  Ｃｌｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ２０１７  １３９：１９３５−１９４５  ｅ１９１２；  Ｒｈｏｄｅｓ  ＨＬ，  ｅｔ  ａｌ．  Ａｍ  Ｊ  Ｒｅｓｐｉｒ  Ｃｒｉｔ  Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ  ２００２  １６５：１７６−１８０）。新生児の大規模なグループのコホートでは、喘息の有病率は、感作されていない子供と比較して、アレルギー感作された子供の間で有意に高かった（Ｂａｌｌａｒｄｉｎｉ  Ｎ，  ｅｔ  ａｌ．  Ａｌｌｅｒｇｙ  ２０１６  ７１：３４２−３４９）。これらのデータは、アレルゲン感作と臨床喘息の発症との因果関係を強く示唆している。アレルゲン感作を減らすための治療法は、多くの異なるアプローチを使用して試みられてきた。アレルゲン抽出物を用いたアレルゲン免疫療法は、アレルゲン特異的ＩｇＥを低下させるだけでなく、特異的ＩｇＧ４レベルを上昇させることができ、季節性鼻炎及びピーナッツアレルギーに対する強力で長期的な効果をもたらす（Ｄｕｒｈａｍ  ＳＲ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｊ  Ａｌｌｅｒｇｙ  Ｃｌｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ２０１２  １２９：７１７−７２５  ｅ７１５；  Ｄｕｒｈａｍ  ＳＲ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｊ  Ａｌｌｅｒｇｙ  Ｃｌｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ２０１０  １２５：１３１−１３８  ｅ１３１−１３７；  Ｄｕ  Ｔｏｉｔ  Ｇ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ  ２０１５  ３７２：８０３−８１３）。アレルゲンに対する感作は、新しい喘息の発症だけでなく、確立された喘息の悪化でも起こる。アレルギー性喘息のマウスＤＲＡモデルにおいて、感作性アレルゲンへの再曝露により血清ＩｇＥが増加する（Ｍｏｏｎ  Ｈ−Ｇ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ２０１８  ４９：２７５−２８７．ｅ２７５）。継続的な感作プロセスに介入することで、既に感作されている患者の喘息の悪化を防ぐことが示されている。例えば、ヒト化モノクローナル抗ＩｇＥ抗体であるオマリズマブ（ｏｍａｌｉｚｕｍａｂ）によるＩｇＥを標的とした直接治療は、既にゴキブリに感作されている市街地の子供たちの喘息増悪を制御する上で大きな利点を示した（Ｂｕｓｓｅ  ＷＷ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ  ２０１１  ３６４：１００５−１０１５）。オマリズマブによる季節前治療は、コントロール不良の喘息患者の季節性増悪のコントロールにも効果的であった（Ｔｅａｃｈ  ＳＪ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｊ  Ａｌｌｅｒｇｙ  Ｃｌｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ２０１５  １３６：１４７６−１４８５）。本明細書では、新たなアレルギー性喘息の発症を予防し、完全に確立されたアレルギー性肺炎症を逆転させるためのＣＳＦ１−ＣＳＦ１Ｒ経路への介入の効果を検証するために、３つの動物モデルを検討した。３つのモデル全てにおいて、データは、ＣＳＦ１−ＣＳＦ１Ｒ経路をブロックすると、感作プロセスが効果的に無効になり（総血清ＩｇＥ及びアレルゲン反応性血清ＩｇＥの両方が減少）、その後のアレルギー性肺炎症が抑制されることを示した。これらのデータは、アレルゲン感作プロセスをブロックすることで、アレルギー性炎症の発症に関係なく、その後のＴｈ２アレルギー性炎症プロセスを効果的に防ぐことができ、慢性喘息の維持療法として使用できるという概念を支持している。
【０２３８】
ＤＣサブセットの中で、ｃＤＣ２はアレルギー性肺炎症における抗原提示において重要な役割を果たすことが知られている（Ｐｌａｎｔｉｎｇａ  Ｍ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ２０１３  ３８：３２２−３３５；  Ｍｏｏｎ  Ｈ−Ｇ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ２０１８  ４９：２７５−２８７．ｅ２７５；  Ｈａｍｍａｄ  Ｈ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｊ  Ｅｘｐ  Ｍｅｄ  ２０１０  ２０７：２０９７−２１１１）。データは、ＤＲＡ喘息モデルのＢＡＬ液中のｃＤＣ２の著しい急増を示している（Ｍｏｏｎ  Ｈ−Ｇ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ２０１８  ４９：２７５−２８７．ｅ２７５）。しかしながら、肺胞ｃＤＣ２がアレルギー性炎症でどのように調節されているかは完全には理解されていない。ＣＳＦ１−ＣＳＦ１Ｒ経路は、局所ＬＮへのホーミングと、吸入されたアレルゲンに応答した後続のＴｈ２免疫反応の確立とを通じて、ｃＤＣ２の活性化に重要である。ＡＥＣ由来のＣＳＦ１がｃＤＣ２の受容体に結合すると、ケモカイン受容体ＣＣＲ７の発現が促進される（Ｍｏｏｎ  Ｈ−Ｇ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ２０１８  ４９：２７５−２８７．ｅ２７５）。この科学的前提に基づいて、本明細書では、この経路の介入が、新たに確立されたアレルギー性肺の炎症を制御するのに有益であるかどうかを厳密に検討した。治療効果を調べるために、より臨床的に関連性のある慢性喘息マウスモデルを採用した（Ｇｏｐｌｅｎ  Ｎ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｊ  Ａｌｌｅｒｇｙ  Ｃｌｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ２００９  １２３：９２５−９３２．ｅ９１１）。アレルギー性喘息の一過性急性モデルとは異なり、このモデルは、顕著な炎症性細胞浸潤及び構造変化、顕著な組織線維症及び慢性炎症を含む顕著な気道リモデリングを示し、好酸球増加症が減少している（図２）。このモデルは、確立された喘息の病状、この場合は抗ＣＳＦ１抗体及びＣＳＦ１Ｒアンタゴニストを運搬するナノ粒子による治療に対する喘息治療の長期的効果を評価するのにより適している。
【０２３９】
ＣＳＦ１及びその受容体（ＣＳＦ１Ｒ）は、自然免疫応答において重要な役割を果たす骨髄系細胞の機能を調節する（Ｓｔａｎｌｅｙ  ＥＲ，  Ｃｈｉｔｕ  Ｖ．  ＣＳＦ−１  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  ｉｎ  ｍｙｅｌｏｉｄ  ｃｅｌｌｓ．  Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂ  Ｐｅｒｓｐｅｃｔ  Ｂｉｏｌ  ２０１４  ６）。ＣＳＦ１Ｒは、５つの細胞外免疫グロブリンドメイン、膜貫通ドメイン、及び２つの細胞内ドメインで構成されている。ＣＳＦ１Ｒ遺伝子は進化的によく保存されており、種間で高い配列相同性がある。特に、ヒト及びマウスのＣＳＦ１Ｒ遺伝子の細胞内ドメインは同一である（ＮＣＢＩ  ＨｏｍｏｌｏｇＧｅｎｅ）。ヒトでは、ＣＳＦ１Ｒ遺伝子は染色体領域５ｑ３２に位置しており、ＩＬ−４、ＩＬ−５、及びＡＤＲＢ２（２７−２９）などの喘息に対する遺伝的感受性に関連する遺伝子に近接している。さらに、ＣＳＦ１Ｒ遺伝子の多型は、ヒトの喘息のリスク増加と関連していることが報告されている（Ｓｈｉｎ  ＥＫ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｈｕｍ  Ｇｅｎｅｔ  ２０１０  １２８：２９３−３０２）。そのリガンドであるＣＳＦ１と結合すると、ＣＳＦ１Ｒの細胞内キナーゼドメインは自己リン酸化を受け、複数の下流経路を活性化する（Ｓｔａｎｌｅｙ  ＥＲ，  Ｃｈｉｔｕ  Ｖ．  ＣＳＦ−１  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  ｉｎ  ｍｙｅｌｏｉｄ  ｃｅｌｌｓ．  Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂ  Ｐｅｒｓｐｅｃｔ  Ｂｉｏｌ  ２０１４  ６）。ＣＳＦ１Ｒ阻害剤は、細胞内キナーゼドメインのチロシン残基に結合する。シミュレーションは、ＣＳＦ１Ｒ阻害剤であるＧＷ２５８０が２つのチロシン残基（Ｙ５４６及びＹ６６５）に結合することを示している（図９）。ＣＳＦ１ＲへのＧＷ２５８０結合の効果及びアレルギー性気道反応に関連する下流のシグナル伝達経路の調節を詳述するには、さらなる研究が必要である。
【０２４０】
抗癌剤としてのＣＳＦ１Ｒ阻害剤の全身投与は、進行期の悪性腫瘍の患者においてさえ、優れた臨床的安全性及び良好な耐性を有することが示されている（Ｂｕｔｏｗｓｋｉ  Ｎ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｎｅｕｒｏ  Ｏｎｃｏｌ  ２０１６  １８：５５７−５６４；  Ｔａｐ  ＷＤ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ  ２０１５  ３７３：４２８−４３７）。本明細書では、局所投与したＣＳＦ１Ｒ阻害剤ＧＷ２５８０の治療効果及び潜在的な肺毒性を検討した。データは、マウス１匹あたり８，０００ナノ粒子に相当する１ｎｇ／マウスの用量でＣＤＰＬ−ＧＷを吸入投与すると、ＢＡＬ好酸球数及び血清ＩｇＥレベルが低下することを示している。これらのデータは、アレルゲン感作に関与するＤＣがＣＳＦ１−ＣＳＦ１Ｒ経路の遮断に非常に感受性であることを示している。ＤＣだけでなくマクロファージもＣＳＦ１Ｒを発現するため、ＣＳＦ１Ｒ阻害に関連するマクロファージの機能不全は潜在的な有害作用をもたらす可能性がある。ＡＭは、抗原提示には関与していないが、吸入された外来粒子に対する防御の第一線である。本明細書では、局所投与したＣＳＦ１Ｒ阻害剤ナノ粒子の潜在的な肺毒性を検討した。ＣＤＰＬ−ＧＷの鼻腔内送達（最大１ｎｇ／マウス）は、アポトーシス性ＡＭの数という点ではＡＭ細胞死を増加させなかった。ＧＭ−ＣＳＦ又はその受容体（ＣＳＦ２Ｒ）の機能障害により、様々な形態の肺胞タンパク症（ＰＡＰ）が発症し得る。本明細書の研究は、ＣＳＦ１ＲがＧＭ−ＣＳＦ受容体と構造的に異なり、これら２つの受容体間に既知の交差反応性がない場合でも、ＣＤＰＬ−ＧＷがマウスでＰＡＰを誘導するかどうかを検討した。データは、ＢＡＬ液中の総タンパク質又はアルブミン濃度の増加がなく、鼻腔内ＣＤＰＬ−ＧＷによる処置後に肺の病理がＰＡＰのエビデンスを有さなかったことを示した。これらのデータは、ＣＳＦ１Ｒ阻害に対するＣＳＦ１Ｒ受容体の感受性が細胞の種類によって異なることを示唆している。骨髄細胞間でのＣＳＦ１Ｒの可変発現を示す以前の報告は、この仮説を支持している（Ｍｏｏｎ  Ｈ−Ｇ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ２０１８  ４９：２７５−２８７．ｅ２７５）。興味深いことに、ＣＳＦ１−ＣＳＦ１Ｒ経路をブロックすると、Ｔｈ２メモリーが選択的に阻害されるが、Ｔｈ１及びＴｈ１７のメモリー機能は損なわれず、ウイルス及び細菌感染に対する免疫防御も損なわれない可能を示唆するものの、これにはさらなる検討を要する。以前の報告は、ＡＭの分化及び生存がＧＭ−ＣＳＦ及びその受容体に大きく依存していることを示しており（Ｇｕｉｌｌｉａｍｓ  Ｍ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｎａｔ  Ｒｅｖ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ２０１７  １７：４５１−４６０；  ｖａｎ  ｄｅ  Ｌａａｒ  Ｌ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ２０１６  ４４：７５５−７６８）、ＣＳＦ１Ｒが肺胞ニッチのマクロファージに不要である可能性があることを示唆している。肺胞マクロファージにおけるＣＳＦ１受容体の生物学的機能を明らかにするには、さらなる研究が必要である。
【０２４１】
要約すると、開示されたデータは、アレルゲン感作のプロセスをブロックするためにＣＳＦ１−ＣＳＦ１Ｒ経路を標的とする喘息のＤＣ中心の新しい治療の有効性を支持する。アレルゲン感作は、新しいアトピー性喘息を確立するためだけでなく、既に確立された喘息におけるアレルギー性炎症の悪化にも必要とされるため、感作プロセスをブロックするアプローチは、喘息の治療のための長期維持療法として使用できる。
【０２４２】
本開示の範囲又は精神から逸脱することなく、本開示において様々な修正及び変形を実施可能であることは当業者には明らかであろう。本開示の他の実施形態は、本明細書に開示される本開示の明細書及び実施を考慮することから当業者には明らかであろう。本明細書及び実施例は例示としてのみ見なされることが意図されており、開示の実際の範囲及び精神は以下の特許請求の範囲によって示されている。
【図１Ａ】
2021522214.tif 000007
【図１Ｂ】
2021522214.tif 000008
【図１Ｃ】
2021522214.tif 000009
【図２Ａ】
2021522214.tif 000010
【図２Ｂ】
2021522214.tif 000011
【図２Ｃ】
2021522214.tif 000012
【図２Ｄ】
2021522214.tif 000013
【図２Ｅ】
2021522214.tif 000014
【図２Ｆ】
2021522214.tif 000015
【図２Ｇ】
2021522214.tif 000016
【図２Ｈ】
2021522214.tif 000017
【図２Ｉ】
2021522214.tif 000018
【図３Ａ】
2021522214.tif 000019
【図３Ｂ】
2021522214.tif 000020
【図３Ｃ】
2021522214.tif 000021
【図３Ｄ】
2021522214.tif 000022
【図３Ｅ】
2021522214.tif 000023
【図３Ｆ】
2021522214.tif 000024
【図３Ｇ】
2021522214.tif 000025
【図４Ａ】
2021522214.tif 000026
【図４Ｂ】
2021522214.tif 000027
【図４Ｃ】
2021522214.tif 000028
【図４Ｄ】
2021522214.tif 000029
【図４Ｅ】
2021522214.tif 000030
【図４Ｆ】
2021522214.tif 000031
【図４Ｇ】
2021522214.tif 000032
【図５Ａ】
2021522214.tif 000033
【図５Ｂ】
2021522214.tif 000034
【図５Ｃ】
2021522214.tif 000035
【図５Ｄ】
2021522214.tif 000036
【図６Ａ】
2021522214.tif 000037
【図６Ｂ】
2021522214.tif 000038
【図６Ｃ】
2021522214.tif 000039
【図６Ｄ】
2021522214.tif 000040
【図６Ｅ】
2021522214.tif 000041
【図６Ｆ】
2021522214.tif 000042
【図６Ｇ】
2021522214.tif 000043
【図７Ａ】
2021522214.tif 000044
【図７Ｂ】
2021522214.tif 000045
【図８】
2021522214.tif 000046
【図９】
2021522214.tif 000047
【図１０】
2021522214.tif 000048
【図１１】
2021522214.tif 000049
【図１２】
2021522214.tif 000050
【図１４】
2021522214.tif 000051
【図１５Ａ】
2021522214.tif 000052
【図１５Ｂ】
2021522214.tif 000053
【図１６Ａ】
2021522214.tif 000054
【図１６Ｂ】
2021522214.tif 000055
【図１６Ｃ】
2021522214.tif 000056
【図１６Ｄ】
2021522214.tif 000057
【図１６Ｅ】
2021522214.tif 000058
【図１６Ｆ】
2021522214.tif 000059
【国際調査報告】
2021522214.tif 000060
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