(57)【要約】  本発明の医薬組成物は、１−ADP−ヘプトース複合体を含み、免疫原または免疫チェックポイント阻害薬を含んでいてもよく、免疫応答を促進するために使用される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
免疫応答を促進する方法であって、免疫応答の促進を必要とするヒトに、１−ADP−ヘプトース複合体を含む組成物を投与することを含む方法。
【請求項２】
前記ヘプトースの立体配置が、L/D−glycero−α/β−L/D−manno/gluco/galacto−ヘプトースである、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記ヘプトースの立体配置が、L/D−glycero−α/β−L/D−manno−ヘプトースである、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記ヘプトースの立体配置が、L/D−glycero−α/β−D−manno−ヘプトースである、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記ヘプトースの立体配置が、L/D−glycero−β−D−manno−ヘプトースである、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記複合体が１−ADP−ヘプトース−７−リン酸である、請求項１、２、３、４または５に記載の方法。
【請求項７】
前記ヒトに免疫原を投与することをさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
細菌、ウイルス、寄生虫またはがん細胞の抗原を含む免疫原を前記ヒトに投与することをさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
前記ヒトに免疫チェックポイント阻害薬を投与することをさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
アデノシンＡ２Ａ受容体（A2AR）、分化抗原群276（CD276；B7-H3）、B and T Lymphocyte Attenuator（BTLA；CD272）、細胞傷害性Ｔリンパ球関連タンパク質４（CTLA-4）；インドールアミン２，３−ジオキシゲナーゼ（IDO）；キラー免疫グロブリン様受容体（KIR）；リンパ球活性化遺伝子３（LAG-3；CD223）；PD-1／プログラム死リガンド１もしくは２（PD-L1もしくはPD-L2）；Ｔ細胞免疫グロブリンムチン３（TIM-3）；またはV-domain Ig suppressor of T cell activation（VISTA）に特異的な治療抗体を含む免疫チェックポイント阻害薬を前記ヒトに投与することをさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
前記組成物が前記免疫原または前記阻害薬を含む、請求項７、８、９または１０に記載の方法。
【請求項１２】
１−ADP−ヘプトース複合体を含む免疫応答促進用医薬組成物。
【請求項１３】
免疫原をさらに含む、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１４】
免疫チェックポイント阻害薬をさらに含む、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１５】
単位剤形である、請求項１２、１３または１４に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
感染因子に対する感受性の増加および免疫系障害は、数多くの疾患および病変に関連している。外科手術、放射線療法または化学療法を受けた患者、および自己免疫疾患やその他の免疫不全症の患者は、感染症による病的状態を発症するリスクが高い。免疫活性化戦略を利用して免疫応答を誘導することにより、感染症を予防したり、感染症に対抗することができる。
【０００２】
ワクチンは、細菌、ウイルス、真菌を含む様々な感染性生物による感染症の予防または治療に広く利用されており、また、がんの治療を目的とした様々なワクチンおよび免疫療法が開発されているが、これらのワクチンや免疫療法の効力を高めるために、様々な戦略およびアジュバントが利用されている。
【０００３】
感染因子による感染症、癌性細胞、および免疫性疾患または炎症性疾患のさらなる治療オプションおよび予防オプションの開発が依然として必要とされている。
【０００４】
関連文献として、WO2016054745およびGaudet et al. Science 348, 1251-1255 (2015)が挙げられる。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明は、免疫応答を促進する方法、およびこの方法において使用される医薬組成物を提供する。
【０００６】
一態様において、本発明は、免疫応答を促進する方法であって、免疫応答の促進を必要とするヒトに、１−ADP−ヘプトース複合体を含む組成物を投与することを含む方法を提供する。
【０００７】
実施形態において、前記ヘプトースの立体配置は、L/D−glycero−α/β−L/D−manno/gluco/galacto−ヘプトースである。
【０００８】
実施形態において、前記ヘプトースの立体配置は、L/D−glycero−α/β−L/D−manno−ヘプトースである。
【０００９】
実施形態において、前記ヘプトースの立体配置は、L/D−glycero−α/β−D−manno−ヘプトースである。
【００１０】
実施形態において、前記ヘプトースの立体配置は、L/D−glycero−β−D−manno−ヘプトースである。
【００１１】
実施形態において、前記ヘプトースの立体配置は、L−glycero−β−D−gluco−ヘプトース、L−glycero−β−L−galacto−ヘプトース、D−glycero−β−D−gluco−ヘプトース、D−glycero−β−L−galacto−ヘプトース、L−glycero−α−D−gluco−ヘプトース、L−glycero−α−L−galacto−ヘプトース、D−glycero−α−D−gluco−ヘプトース、D−glycero−α−L−galacto−ヘプトース、L−glycero−β−L−gluco−ヘプトース、L−glycero−β−D−manno−ヘプトース、D−glycero−β−L−gluco−ヘプトース、D−glycero−β−D−manno−ヘプトース、L−glycero−α−L−gluco−ヘプトース、L−glycero−α−D−manno−ヘプトース、D−glycero−α−L−gluco−ヘプトース、D−glycero−α−D−manno−ヘプトース、L−glycero−β−D−galacto−ヘプトース、L−glycero−β−L−manno−ヘプトース、D−glycero−β−D−galacto−ヘプトース、D−glycero−β−L−manno−ヘプトース、L−glycero−α−D−galacto−ヘプトース、L−glycero−α−L−manno−ヘプトース、D−glycero−α−D−galacto−ヘプトースまたはD−glycero−α−L−manno−ヘプトースである。
【００１２】
実施形態において、前記複合体は、１−ADP−ヘプトース−７−リン酸である。
【００１３】
実施形態において、前記方法は、免疫原、好ましくは、細菌、ウイルス、寄生虫またはがん細胞の抗原を含む免疫原を前記ヒトに投与することをさらに含む。
【００１４】
実施形態において、前記方法は、免疫チェックポイント阻害薬、好ましくは、アデノシンＡ２Ａ受容体（A2AR）、分化抗原群276（CD276；B7-H3）、B and T Lymphocyte Attenuator（BTLA；CD272）、細胞傷害性Ｔリンパ球関連タンパク質４（CTLA-4）；インドールアミン２，３−ジオキシゲナーゼ（IDO）；キラー免疫グロブリン様受容体（KIR）；リンパ球活性化遺伝子３（LAG-3；CD223）；PD-1／プログラム死リガンド１または２（PD-L1またはPD-L2）；Ｔ細胞免疫グロブリンムチン３（TIM-3）；またはV-domain Ig suppressor of T cell activation（VISTA）に特異的な治療抗体を含む免疫チェックポイント阻害薬を前記ヒトに投与することをさらに含む。
【００１５】
実施形態において、前記チェックポイント阻害薬は、デュルバルマブ、アテゾリズマブ、アベルマブなどのPD-L1阻害薬である治療抗体、またはトレメリムマブやトレメリムマブなどのCTLA-4阻害薬である治療抗体である。
【００１６】
実施形態において、前記方法は、前記免疫原または前記免疫チェックポイント阻害薬を前記ヒトに投与することをさらに含み、該免疫原または該阻害薬は前記組成物中に含まれる。
【００１７】
一態様において、本発明は、１−ADP−ヘプトース複合体を含む免疫応答促進用医薬組成物を提供する。
【００１８】
実施形態において、前記組成物は、免疫原または免疫チェックポイント阻害薬をさらに含む。
【００１９】
実施形態において、前記組成物は単位剤形である。
【００２０】
本発明は、本明細書に記載の特定の実施形態のあらゆる組み合わせを包含する。
【図面の簡単な説明】
【００２１】
【図１Ａ】ADP−ヘプトースおよびその類似体（UDP−ヘプトース、CDP−ヘプトース、dCDP−ヘプトース、dADP−ヘプトース、dGDP−ヘプトース、GDP−ヘプトースおよびdTDP−ヘプトース）により、293T細胞においてNF-κBが用量依存的に活性化された。NF-κBの活性化は、ルシフェラーゼレポーター活性により測定した。
【００２２】
【図１Ｂ】ADP−ヘプトースおよびその類似体により、293T細胞においてTIFAのリン酸化が誘導された。EGFP-TIFAを安定に発現する293T細胞を各ADP−ヘプトース類似体（５μＭ）で５時間処理し、抗pT9-TIFA免疫ブロット法で分析した。
【００２３】
【図１Ｃ】ADP−ヘプトースは、インビボにおいて、血清オボアルブミン（OVA）に特異的なIgGの産生を増加させるアジュバント活性を示した。PBS、アラム（２ｍｇ／マウス）またはADP−ヘプトース（０．５ｍｇ／マウス）と混合した１０μｇのOVAを筋肉内注射することによりC57BL/6Nマウス（１群あたり８匹のマウス）を免疫した。２１日後にOVA特異的IgGの血清力価をELISAで測定した。
【００２４】
【図１Ｄ−１Ｅ】腫瘍形成後にADP−ヘプトースを用いて処置したB16-OVA腫瘍の増殖の抑制を示す。０日目に、C57BL/6Nマウス（１群あたりのマウスの頭数：ｎ＝６）に２×１０５個のB16-OVA悪性黒色腫細胞を皮下注射した。腫瘍接種後８日目、１１日目、１４日目および１７日目に、ADP−ヘプトース（０．５ｍｇ／マウス）を腫瘍内注射により投与した。腫瘍体積（Ｄ）と腫瘍重量（Ｅ）を示す。
【００２５】
【図１Ｆ】腫瘍形成後にADP−ヘプトースとチェックポイント阻害薬を用いて処置したMC38腫瘍の増殖の抑制を示す。０日目に、C57BL/6Nマウス（１群あたりのマウスの頭数：ｎ＝６）に２×１０５個のMC38結腸直腸腺癌細胞を皮下注射した。腫瘍接種後１３日目、１６日目、１９日目、２２日目、２５日目および２８日目に、ADP−ヘプトース（０．５ｍｇ／マウス、腫瘍内注射）と抗PD-1抗体（４０μｇ／マウス、腹腔内注射）を投与した。
【発明を実施するための形態】
【００２６】
特定の実施形態および実施例に関する以下の説明は、説明のみを目的として提供されたものであり、本発明を限定するものではない。当業者であれば、重要ではない様々なパラメーターを変更または修正して、実質的に同様の結果を得ることができることを容易に理解できるであろう。本発明は様々な実施形態を提供する。
【００２７】
以下の詳細な説明および本明細書全体を通して、不適切である場合や別段の記載がない限り、「a」および「an」は１つ以上のものを意味し、「または」は「および／または」を意味し、「ポリヌクレオチド配列」は、逆鎖および本明細書に記載の別の骨格を包含すると解される。
【００２８】
前記免疫原は、感染性の病原細菌、病原ウイルスまたは病原寄生虫などの感染因子の抗原であってもよく、このような感染因子として、ナイセリア属（髄膜炎菌（Neisseria meningitidis）および淋菌（Neisseria gonorrhoeae）を含む）、エシェリキア属（大腸菌（Escherichia coli）を含む）、クレブシエラ属（肺炎杆菌（Klebsiella pneumoniae）を含む）、サルモネラ属（ネズミチフス菌（Salmonella typhimurium）を含む）、シゲラ属（志賀赤痢菌（Shigella dysenteriae）、フレクスナー赤痢菌（Shigella flexneri）およびソンネ赤痢菌（Shigella sonnei）を含む）、ビブリオ属（コレラ菌（Vibrio cholerae）を含む）、ヘリコバクター属（ヘリコバクター・ピロリ（Helicobacter pylori）を含む）、シュードモナス属（緑膿菌（Pseudomonas aeruginosa）を含む）、バークホルデリア属（バークホルデリア・マルティボランス（Burkholderia multivorans）を含む）、ヘモフィルス属（インフルエンザ菌（Haemophilus influenzae）を含む）、モラクセラ属（モラクセラ・カタラーリス（Moraxella catarrhalis）を含む）、ボルデテラ属（百日咳菌（Bordetella pertussis）を含む）、フランシセラ属（野兎病菌（Francisella tularensis）を含む）、パスツレラ属（パスツレラ・ムルトシダ（Pasteurella multocida）を含む）、レジオネラ属（レジオネラ・ニューモフィラ（Legionella pneumophila）を含む）、ボレリア属（ボレリア・ブルグドルフェリ（Borrelia burgdorferi）を含む）、カンピロバクター属（カンピロバクター・ジェジュニ（Campylobacter jejuni）を含む）、エルシニア属（ペスト菌（Yersinia pestis）およびエルシニア・エンテロコリチカ（Yersinia enterocolitica）を含む）、リケッチア属（斑点熱リケッチア（Rickettsia rickettsii）を含む）、トレポネーマ属（梅毒トレポネーマ（Treponema pallidum）を含む）、クラミジア属（クラミジア・トラコマチス（Chlamydia trachomatis）およびクラミジア・ニューモニエ（Chlamydia pneumoniae）を含む）またはブルセラ属に属するグラム陰性病原細菌；ならびにスタフィロコッカス属（黄色ブドウ球菌（Staphylococcus aureus）を含む）、ストレプトコッカス属（肺炎レンサ球菌（Streptococcus pneumoniae）および化膿レンサ球菌（Streptococcus pyogenes）を含む）、リステリア属（リステリア・モノサイトジェネス（Listeria monocytogenes）を含む）、コリネバクテリウム属（ジフテリア菌（Corynebacterium diphtheriae）を含む）、エンテロコッカス属（エンテロコッカス・フェカーリス（Enterococcus faecalis）を含む）、クロストリジウム属、またはマイコバクテリウム属（ヒト結核菌（Mycobacterium tuberculosis）、らい菌（Mycobacterium leprae）およびマイコバクテリウム・アビウム（Mycobacterium avium）を含む）に属するグラム陽性病原細菌が挙げられる。
【００２９】
また、前記免疫原または前記抗原は、アデノウイルス科（アデノウイルスを含む）、ヘルペスウイルス科（エプスタイン・バーウイルス、単純ヘルペスウイルス、サイトメガロウィルスおよび水痘・帯状疱疹ウイルスを含む）、パピローマウイルス科（パピローマウイルスを含む）、ポックスウイルス科、ヘパドナウイルス科（Ｂ型肝炎ウイルスを含む）、パルボウイルス科、アストロウイルス科、カリシウイルス科、ピコルナウイルス科（コクサッキーウイルス、Ａ型肝炎ウイルスおよびポリオウイルスを含む）、コロナウイルス科、フラビウイルス科（Ｃ型肝炎ウイルスおよびデング熱ウイルスを含む）、トガウイルス科（風疹ウイルスを含む）、ヘペウイルス科、レトロウイルス科（HIVを含む）、オルソミクソウイルス科（インフルエンザウイルスを含む）、アレナウイルス科、ブニヤウイルス科、フィロウイルス科、パラミクソウイルス科（麻疹ウイルス、流行性耳下腺炎ウイルス、パラインフルエンザウイルスおよびＲＳウイルス（Respiratory Syncytial virus）を含む）、ラブドウイルス科（狂犬病ウイルスを含む）、レオウイルス科などの病原ウイルスに由来するものであってもよい。
【００３０】
さらに、前記免疫原または前記抗原は、カンジダ属、アスペルギルス属、クリプトコッカス属、ヒストプラズマ属、ニューモシスチス属またはコクシジオイデス属により引き起こされる感染症などの病原真菌感染症に由来するものであってもよい。また、ワクチンは、リーシュマニア属、プラスモジウム属、トキソプラズマ属、トリパノソーマ属、住血吸虫属などの病原寄生虫を標的としてもよい。
【００３１】
前記免疫原または前記抗原は、対象自身の細胞に発現されるタンパク質またはその他の抗原（腫瘍抗原やがん抗原など）に由来するものであってもよく、このような免疫原または抗原を使用することによって、病原性細胞または病原性組織に対する免疫応答が刺激される。一実施形態において、本発明の組成物を腫瘍内に直接導入することによって、腫瘍に対する免疫応答を増強してもよい。前記免疫原は、ワクチン製剤の一部として投与することもできる。
【００３２】
本発明の方法および本発明の組成物において使用される前記化合物は、適切な形態および単位剤形であればどのような形態や単位剤形であってもよく、適切な形態および単位剤形として、塩、プロドラッグ、立体異性体、非晶質形態などが挙げられる。
【００３３】
「薬学的に許容される塩」は、本明細書に記載の化合物に含まれる特定の置換基に応じて、比較的無毒な酸または塩基を使用して調製される活性化合物の塩を含むことを意味する。本発明の化合物が比較的酸性度の高い官能基を有している場合、無溶媒あるいは適切な不活性溶媒中で、このような中性の化合物を十分な量の所望の塩基と接触させることにより塩基付加塩を得ることができる。薬学的に許容される塩基付加塩の例としては、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩、アンモニウム塩、有機アミノ塩、マグネシウム塩および類似の塩が挙げられる。本発明の化合物が比較的塩基性度の高い官能基を有している場合、無溶媒あるいは適切な不活性溶媒中で、このような中性の化合物を十分な量の所望の酸と接触させることにより酸付加塩を得ることができる。薬学的に許容される酸付加塩の例としては、塩酸塩、臭化水素酸塩、硝酸塩、炭酸塩、炭酸水素塩、リン酸塩、リン酸一水素塩、リン酸二水素塩、硫酸塩、硫酸水素塩、ヨウ化水素酸塩、亜リン酸塩などの無機酸由来の塩、および酢酸塩、プロピオン酸塩、イソ酪酸塩、シュウ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、安息香酸塩、コハク酸塩、スベリン酸塩、フマル酸塩、マンデル酸塩、フタル酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−トリルスルホン酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、メタンスルホン酸塩などの、比較的毒性のない有機酸由来の塩が挙げられる。アルギニン酸塩などのアミノ酸塩、およびグルクロン酸塩またはガラクツロン酸塩などの有機酸塩も含まれる。本発明の特定の化合物は、塩基性官能基と酸性官能基の両方を含んでいることから、塩基付加塩および酸付加塩に変換することが可能である。
【００３４】
従来の方法により、前記塩を塩基または酸と接触させ、親化合物を単離することによって、中性の化合物を再生してもよい。親化合物は、極性溶媒への溶解度などの物理的特性の点で様々な塩の形態と異なるが、本発明の目的に対してその他の点では、塩は親化合物と同等である。
【００３５】
本発明は、塩の形態に加えて、プロドラッグの形態の化合物を提供する。本明細書に記載の化合物のプロドラッグは、生理学的条件下において化学変化を起こし、本発明の化合物へと変換される化合物である。さらに、プロドラッグは、エクスビボ環境での化学的方法または生化学的方法によって本発明の化合物へと変換することができる。たとえば、プロドラッグは、適切な酵素または化学試薬とともに経皮パッチのリザーバー内に封入すると、本発明の化合物に徐々に変換することができる。いくつかの状況下では、プロドラッグは親薬物よりも投与が容易であるため、有用である場合が多い。たとえば、プロドラッグは、経口投与によるバイオアベイラビリティが親薬物よりも良好である場合がある。また、プロドラッグは、薬理学的組成物中での溶解度が親薬物よりも高い場合がある。様々なプロドラッグ誘導体が当技術分野で公知であり、たとえば、加水分解または酸化的活性化に依存したプロドラッグなどが知られている。プロドラッグの例として、エステル（「プロドラッグ」）として投与され、代謝的に加水分解されて活性体であるカルボン酸に変換される本発明の化合物が挙げられるが、これに限定されない。別の例として、本発明の化合物のペプチド性誘導体が挙げられる。
【００３６】
本発明の特定の化合物は、溶媒和されていない形態で存在していてもよく、水和形態を含む溶媒和された形態で存在していてもよい。通常、溶媒和形態は、溶媒和されていない形態と同じであり、本発明の範囲内に含まれるものとする。本発明の特定の化合物は、様々な結晶形態で存在していてもよく、非晶質形態で存在していてもよい。通常、本発明で意図する使用に対して、あらゆる物理的形態を等しく用いることができ、あらゆる物理的形態が本発明の範囲内に含まれるものとする。
【００３７】
本発明の特定の化合物は、不斉炭素原子（光学中心）または二重結合を有し、本発明の化合物のラセミ体、ジアステレオマー、幾何異性体および個々の異性体はいずれも本発明の範囲内に含まれるものとする。
【００３８】
「治療有効量」は、組織、系、動物またはヒトにおいて、研究者、獣医、医師またはその他の臨床医が所望する生物学的反応または医学的反応を有意な程度で誘導することが可能な量の本発明の化合物を指し、たとえば、本発明の化合物を投与した場合に、治療の対象となる病態または障害の１つ以上の症状の発症を阻止したり、これらの症状をある程度まで緩和したりするのに十分な量を指す。治療有効量は、化合物、疾患およびその重症度、ならびに治療を受ける哺乳動物の年齢や体重などに応じて異なる。
【００３９】
さらに、本発明は、本発明の化合物と薬学的に許容される添加剤を含む医薬組成物を提供し、特に、本発明の化合物の単位用量を含むそのような組成物を提供し、特に、（本明細書に記載の）適応疾患または適応病態の治療に本発明の組成物を使用することが記載された説明書が一緒に包装されたそのような組成物を提供する。
【００４０】
本発明の投与用組成物は、バルク溶液、バルク懸濁液またはバルク粉末の形態を取ることができる。しかしながら、より一般的には、正確な投薬を容易にするため、本発明の組成物は単位剤形で提供される。「単位剤形」は、ヒト対象およびその他の哺乳動物に対する単位用量として適切な、物理的に分かれた単位を指し、各単位は、所望の治療効果がもたらされるように計算された所定量の活性物質と、適切な医薬添加剤とを含む。典型的な単位剤形として、あらかじめ計量した液体組成物を充填したアンプルまたはシリンジが挙げられ、固形組成物の場合は、丸剤、錠剤、カプセル剤、トローチ剤などが挙げられる。このような組成物において、本発明の化合物は、通常、（約０．１〜約５０重量％、または好ましくは約１〜約４０重量％の）微量成分として含まれ、所望の投与形態の形成を容易にするための加工助剤および様々な溶媒または担体が残りを占める。
【００４１】
適切な添加剤または担体、および投与可能な組成物を調製する方法は、当業者に公知または明らかであり、Remington’s Pharmaceutical Science, Mack Publishing Co, NJ (1991)などの刊行物にさらに詳細に説明されている。さらに、本発明の化合物は、本明細書に記載の別の治療剤または当技術分野で公知のその他の治療剤（特にその他の抗壊死剤）と併用すると有利な場合がある。したがって、これらの組成物は、別々に投与してもよく、組み合わせて投与してもよく、単位剤形中で組み合わせてもよい。
【００４２】
投与量は、本発明の化合物の処方や投与経路などに左右され、通常、日常的な試験において実験により決定され、標的、宿主、投与経路などに応じて必然的に変動する。通常、単位用量製剤中の活性化合物の量は、特定の用途に応じて、約１ｍｇ、約３ｍｇ、約１０ｍｇまたは約３０ｍｇから約３０ｍｇ、約１００ｍｇ、約３００ｍｇまたは約１０００ｍｇまでの範囲で変動してもよく、このような範囲に調整してもよい。特定の一実施形態において、単位剤形は、連続使用に適したマルチパックに包装されており、たとえば、少なくとも６個、９個または１２個の単位剤形を含むシートを含むブリスターパックに包装されている。実際の投与量は、患者に必要とされる量および治療を受けている状態の重症度に応じて変動してもよい。当業者であれば、特定の状況に応じて適切な投与量を決定することができる。通常、治療は、本発明の化合物の至適用量よりも少ない投与量で開始される。その後、そのような状況下で至適効果に達するまで、投与量を少しずつ増加する。便宜上、所望に応じて、１日の総投与量を分割し、１日に複数回投与してもよい。
【００４３】
本発明の化合物は、予防処置および／または治療処置を目的として、非経口投与、外用投与、経口投与、局所投与（エアロゾルを使用した投与や経皮投与など）（ただしこれらに限定されない）を含む様々な方法で投与することができる。また、熟練の臨床医の知識に従うとともに、投与した治療剤の患者に対する観察された効果と、投与した治療剤に対する疾患の観察された反応とを考慮して、治療プロトコル（たとえば投与量および投与回数）を様々に変えることができる。
【００４４】
本発明の治療剤は、患者の治療を目的とした治療に有効なプロトコルを実施する過程において、治療に有効な投与量および治療有効量で投与することができる。最適な投与量は化合物によって異なり、各化合物に対して実験に基づいて決定されるが、より強力な化合物の場合、患者の体重１ｋｇあたりμｇ単位の量で十分な場合があり、たとえば、患者の体重１ｋｇあたり約１μｇ／ｋｇ、約１０μｇ／ｋｇまたは約１００μｇ／ｋｇから約０．０１ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ、約１ｍｇ／ｋｇ、約１０ｍｇ／ｋｇまたは約１００ｍｇ／ｋｇまでの範囲で十分な場合がある。
【００４５】
通常、臨床試験において実施される日常的な実験により、最適な治療効果を得るための特定の範囲を決定することができ、各治療剤、各投与プロトコルおよび特定の患者への投与も、患者の状態および初回投与に対する反応性に応じて、有効かつ安全な範囲となるように調整される。しかし、最終的な投与プロトコルは、患者の年齢、状態および体の大きさ、化合物の効力、治療を受けている疾患の重症度などの要因を考慮に入れて、主治医の判断に従って調節される。たとえば、本発明の化合物の投与計画として、１０ｍｇ／日〜２０００ｍｇ／日、好ましくは１０ｍｇ／日〜１０００ｍｇ／日、より好ましくは５０ｍｇ／日〜６００ｍｇ／日を２〜４回（好ましくは２回）に分割して経口投与することができる。間欠療法（たとえば３週のうち１週または４週のうち３週のみ治療を行う）を行ってもよい。
【００４６】
本発明の化合物は、単独で使用してもよく、別の治療剤と組み合わせて使用してもよい。したがって、併用療法は、少なくとも１種の薬学的に許容される結晶形態または非晶質形態の本発明の化合物と少なくとも１種の別の治療上活性な薬剤を投与することを含む。本発明の化合物と（１種または複数種の）別の治療上活性な薬剤は、単一の医薬組成物として一緒に投与してもよく、あるいは別々に投与してもよく、別々に投与する場合、同時に投与してもよく、どのような順序で連続して投与してもよい。本発明の化合物の量および（１種または複数種の）別の治療上活性な薬剤の量、ならびにこれらを投与する際の相対的なタイミングは、これらの併用により所望の治療効果が達成されるように選択される。したがって、さらなる一態様において、薬学的に許容される結晶形態または非晶質形態の本発明の化合物と、１種以上の別の治療上活性な薬剤とを含む組み合わせが提供される。
【００４７】
本発明の化合物は、適切な投与経路であればどのような投与経路で投与してもよく、適切な投与経路として、全身投与および外用投与の両方が含まれる。全身投与は、経口投与、非経口投与、経皮投与、直腸投与および吸入による投与を含む。非経口投与は、腸内投与、経皮投与および吸入投与以外の投与経路を指し、通常、注射または点滴により行われる。非経口投与は、静脈内注射、筋肉内注射および皮下注射ならびに点滴を含む。吸入は、口腔または鼻腔を通した吸入による患者の肺への投与を指す。外用投与は、皮膚への塗布を含む。
【００４８】
本発明の化合物は、１回のみ投与してもよく、投与計画に従って所定の期間にわたり様々な時間間隔で複数回投与してもよい。たとえば、１日あたり１回、２回、３回または４回投与してもよい。所望の治療効果が達成されるまで投与を行ってもよく、あるいは所望の治療効果を維持するために無期限に投与を行ってもよい。本発明の化合物に適した投与計画は、当業者であれば測定可能な吸収、分布、半減期などの本発明の化合物の薬物動態特性に応じて決定される。さらに、投与計画の継続期間が含まれる本発明の化合物の適切な投与計画は、治療を受けている疾患または障害、治療を受けている疾患または障害の重症度、治療を受けている患者の年齢および体調、治療を受ける予定の患者の病歴、併用療法の特性、所望の治療効果、ならびに当業者の知識および専門知識の範囲内の同様の要因に応じて決定される。また、当業者であれば、投与計画に対する個々の患者の反応を考慮に入れる必要があったり、あるいは時間の経過とともに個々の患者が変更を必要とすることから、適切な投与計画には調整が必要となる場合があることも理解できるであろう。１日の総投与量は１ｍｇ〜２０００ｍｇの範囲である。
【００４９】
本発明の化合物は、治療法での使用において、通常、患者への投与前に医薬組成物または投与単位に製剤化されるが、医薬組成物や投与単位への製剤化が必ずしも必要なわけではない。したがって、本発明はさらに、本発明の化合物と１種以上の薬学的に許容される添加剤を含む医薬組成物に関する。さらに、本発明は、本発明の化合物と１種以上の薬学的に許容される添加剤を含む投与単位に関する。
【００５０】
本発明の医薬組成物または投与単位は、バルク形態で調製した後に包装し、そこから本発明の化合物の有効量を取り出し、粉末、シロップ、注射用溶液などと混合して患者に投与される。別の方法として、本発明の医薬組成物または投与単位を調製し、単位剤形に包装してもよい。経口適用では、たとえば、１つ以上の錠剤またはカプセル剤を投与してもよい。医薬組成物の１回投与量は、少なくとも本発明の化合物の治療有効量を含む。単位剤形に調製した場合、本発明の医薬組成物または投与単位は、本発明の化合物を１ｍｇ〜１０００ｍｇ含んでいてもよい。
【００５１】
本明細書において提供され、本発明の化合物を１ｍｇ〜１０００ｍｇ含む単位剤形（医薬組成物または投与単位）は、１日あたり１回、２回、３回または４回投与してもよく、１日あたり１回、２回または３回投与することが好ましく、１日あたり１回または２回投与することがより好ましい。
【００５２】
本明細書において「薬学的に許容される添加剤」は、本発明の組成物への形態または粘稠度の付与に関与する材料、組成物または溶媒を意味する。各添加剤は、医薬組成物中のその他の成分と混合した場合に、患者への投与後に本発明の化合物の効力を大幅に低下させる相互作用が起こることによって薬学的に許容されない医薬組成物となる事態を回避できるように、医薬組成物中のその他の成分と適合するものでなければならない。さらに、当然のことながら、各添加剤は、薬学的に許容できるように、十分に純度の高いものでなければならない。
【００５３】
本発明の化合物および１種以上の薬学的に許容される添加剤は、通常、所望の投与経路による患者への投与に適した剤形に製剤化される。従来の剤形として、
（１）経口投与に適した剤形、たとえば、錠剤、カプセル剤、カプレット剤、丸剤、トローチ剤、散剤、シロップ剤、エリキシル剤、懸濁剤、液剤、乳剤、分包、カシェ剤など；
（２）非経口投与に適した剤形、たとえば、滅菌液剤、懸濁剤、再構築用粉末など；
（３）経皮投与に適した剤形、たとえば、経皮パッチなど；
（４）直腸投与に適した剤形、たとえば、坐剤など；
（５）吸入に適した剤形、たとえば、エアロゾルや液剤など；および
（６）外用投与に適した剤形、たとえば、クリーム剤、軟膏剤、ローション剤、液剤、ペースト剤、スプレー剤、フォーム剤、ゲル剤など
が挙げられる。
【００５４】
薬学的に許容される適切な添加剤は、選択される特定の剤形に応じて様々に異なる。さらに、薬学的に許容される適切な添加剤は、医薬組成物中において発揮されうる特定の機能を得ることを目的として選択してもよい。たとえば、薬学的に許容される特定の添加剤は、均一な剤形の製造を容易にする能力を得ることを目的として選択してもよい。また、薬学的に許容される特定の添加剤は、安定な剤形の製造を容易にする能力を得ることを目的として選択してもよい。また、薬学的に許容される特定の添加剤は、患者に投与した場合に、１つの臓器または生体の一部分から別の臓器または生体の別の部分への１種以上の本発明の化合物の運搬または輸送を容易にする能力を得ることを目的として選択してもよい。さらに、薬学的に許容される特定の添加剤は、患者のコンプライアンスを高める能力を得ることを目的として選択してもよい。
【００５５】
薬学的に許容される適切な添加剤として、希釈剤、充填剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、流動促進剤、造粒剤、コーティング剤、湿潤剤、溶媒、共溶媒、懸濁化剤、乳化剤、甘味料、香料、矯臭剤、着色料、固化防止剤、保湿剤、キレート剤、可塑剤、増粘剤、酸化防止剤、保存剤、安定剤、界面活性剤および緩衝剤が挙げられる。当業者であれば、特定の薬学的に許容される添加剤が、２種以上の機能を発揮してもよく、製剤中に含まれる添加剤の量および製剤中に含まれるその他の成分に応じて、別の機能を発揮してもよいことを十分に理解できるであろう。当業者であれば、当技術分野における知識および技能を備え、これらを利用して、薬学的に許容される適切な添加剤を本発明で使用するために適正な量で選択することができる。さらに、当業者は、薬学的に許容される添加剤が記載された数多くの情報源を利用することができ、これらは、薬学的に許容される適切な添加剤を選択する際に有用である可能性がある。このような情報源の例として、Remington's Pharmaceutical Sciences（Mack Publishing Company）、The Handbook of Pharmaceutical Additives（Gower Publishing Limited）、ならびにThe Handbook of Pharmaceutical Excipients（the American Pharmaceutical Associationおよびthe Pharmaceutical Press）が挙げられる。
【００５６】
本発明の医薬組成物は、当業者に公知の技術および方法を使用して調製される。当技術分野において一般的に使用される方法のいくつかは、Remington's Pharmaceutical Sciences（上掲）に記載されている。したがって、本発明の別の一実施形態は、医薬組成物または投与単位を調製する方法であって、薬学的に許容される結晶形態の本発明の化合物と１種以上の薬学的に許容される添加剤とを混合する工程を含む方法である。
【００５７】
一態様において、本発明は、有効量の本発明の化合物と希釈剤または充填剤とを含む経口固形剤形（たとえば錠剤やカプセル剤など）に関する。適切な希釈剤および充填剤としては、ラクトース、スクロース、デキストロース、マンニトール、ソルビトール、デンプン（たとえばトウモロコシデンプン、バレイショデンプンおよびアルファ化デンプン）、セルロースおよびその誘導体（たとえば微結晶セルロース）、硫酸カルシウムならびに第二リン酸カルシウムが挙げられる。前記経口固形剤形は、結合剤をさらに含んでいてもよい。適切な結合剤として、デンプン（たとえばトウモロコシデンプン、バレイショデンプンおよびアルファ化デンプン）、ゼラチン、アラビアゴム、アルギン酸ナトリウム、アルギン酸、トラガカント、グアーガム、ポビドン、ならびにセルロースおよびその誘導体（たとえば微結晶セルロース）が挙げられる。前記経口固形剤形は、崩壊剤をさらに含んでいてもよい。適切な崩壊剤として、クロスポビドン、デンプングリコール酸ナトリウム、クロスカルメロース、アルギン酸およびカルボキシルメチルセルロースナトリウムが挙げられる。前記経口固形剤形は、滑沢剤をさらに含んでいてもよい。適切な滑沢剤として、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウムおよびタルクが挙げられる。
【００５８】
本明細書に記載の実施例および実施形態は、説明のみを目的としたものである。このことから、これらの実施例および実施形態を様々に修正したり変更したりできることが当業者に示唆されており、これらの修正および変更は、本願の要旨および範囲ならびに添付の請求項の範囲に含まれる。本明細書において引用された刊行物、特許および特許出願（これらの文献中の引用文献を含む）は、いずれも参照によりその全体があらゆる目的で本明細書に援用される。
【実施例】
【００５９】
αキナーゼ１は、細菌由来１−ADP−ヘプトースの細胞質ゾル内自然免疫受容体である
パターン認識受容体による病原体関連分子パターン（PAMP）の免疫検出によって、しばしば炎症誘発性NF-κBシグナル伝達が活性化されるが、この免疫検出に応じて細菌に対する防御力が決まる。細菌のPAMPとしては、数種類の構造分子またはヌクレオチドセカンドメッセンジャーしか知られていない。過去の研究では、エルシニア属およびその他の病原細菌のIII型分泌装置（T3SS）が、宿主のNF-κBシグナル伝達を活性化しうることが示されている。本研究において本発明者らは、Y. pseudotuberculosis（仮性結核菌）におけるトランスポゾンスクリーニングと生化学的分析を組み合わせて、T3SS依存性NF-κB活性化と炎症性サイトカインの産生を仲介する糖代謝物１−ADP−β−D−manno−ヘプトース（ADP-Hep）を同定した。ADP-Hepは、その生合成前駆体D−glycero−β−D−manno−ヘプトース１，７−ビスリン酸（HBP）とは異なり、それ単独で宿主細胞の細胞質ゾル内に侵入することができ、THP-1細胞および293T細胞においてNF-κBの活性化とサイトカインの誘導（インターロイキン８など）を引き起こす。これを踏まえ、本発明者らは、CRISPR/Cas9を用いたゲノムワイドスクリーニングを行うことにより、ADP-Hep誘導性のNF-κB活性化に必要とされるαキナーゼ１（ALPK1）−TIFA系を同定することができた。ALPK1のＮ末端ドメイン（NTD）がADP-Hepに直接結合すると、このNTDに結合しているＣ末端キナーゼドメインが刺激されてTIFAをリン酸化し、TIFAのオリゴマー化が誘導される。ALPK1-NTD/ADP-Hep複合体の結晶構造から、このリガンドと受容体の間の認識における原子機構が明らかになった。また、HBPは、宿主に由来するアデニリルトランスフェラーゼによって、ALPK1を活性化できるADP−ヘプトース−７−Ｐに変換されうるが、このことから、HBPをトランスフェクトした宿主細胞においてNF-κBの活性化が観察されることを説明することができる。マウスへのADP-Hepの注射または細菌性感染症により、強力な炎症反応がAlpk1依存的に誘導される（一方、細胞非透過性HBPではこのような炎症反応の誘導は認められない）。ADP-HepとALPK1は、抗細菌免疫において新規かつ汎用なパターン認識経路である。
【００６０】
ADP-Hep単独または細菌性感染症におけるADP-Hepにより、強力な免疫応答がAlpk1依存的に誘導される
インビボにおいてADP-Hepが単独で自然免疫応答を刺激できるのかどうかを調べるため、急性炎症の評価用に樹立された背側空気嚢マウスモデルを使用した（Gaudet et al. Science 348, 1251-1255 (2015)）。
【００６１】
化学的合成したADP-LD-Hepを空気嚢に注射したところ、空気嚢中に大量の好中球が動員された。これに対して、化学的合成した同量のHBPを注射しても空気嚢中の好中球数は増加せず、HBPが哺乳動物細胞内に侵入できないということと一致した結果が得られた。次に、注射を行ったマウスから得た血清および空気嚢洗浄物において、36種のサイトカインを含む多重イムノアッセイを行った。IL-6、TNFα、C-X-Cモチーフケモカイン10（IP-10/CXCL10）、単球走化性タンパク質−１および単球走化性タンパク質−３（MCP-1/3）、IFNγ、GM-CSF、MIP-1α、MIP-1βならびにRANTESを含む一連の炎症誘発性サイトカインおよびケモカインは、生理食塩水コントロールと比較して、ADP-LD-Hepを注射した空気嚢において大幅な上昇が認められた。ADP-LD-Hep注射によって、角化細胞由来ケモカイン（GRO-α/KC/CXCL1）、IP-10およびMCP-1の血清中濃度も上昇した。ADP-LD-Hepとは対照的に、HBPを空気嚢に注射しても、NF-κBを介した転写の標的として知られているこれらの炎症性サイトカインおよびケモカインの局所産生および全身産生に影響は認められなかった。したがって、ADP-Hepは単独でマウスの自然免疫応答を強力に活性化することができるが、HBPはマウスの自然免疫応答を活性化できないことが示された。
【００６２】
１−ADP−L/D−glycero−α/β−L/D−manno/gluco/galacto−ヘプトース複合体は強力な免疫応答を促進する
１−ADP−ヘプトースおよび１−ADP−ヘプトース−７−リン酸がインビボにおいて自然免疫応答を刺激できるかどうかを確認するため、急性炎症の評価用に樹立された背側空気嚢マウスモデルを使用した（Gaudet et al. Science 348, 1251-1255 (2015)）。
【００６３】
１−ADP−ヘプトースまたは１−ADP−ヘプトース−７−リン酸を空気嚢に注射すると、空気嚢中に好中球が動員される。次に、注射を行ったマウスから得た血清および空気嚢洗浄物において、同じ多重イムノアッセイで36種のサイトカインを測定すると、IL-6、TNFα、C-X-Cモチーフケモカイン10（IP-10/CXCL10）、単球走化性タンパク質−１および単球走化性タンパク質−３（MCP-1/3）、IFNγ、GM-CSF、MIP-1α、MIP-1βならびにRANTESを含む一連の炎症誘発性サイトカインおよびケモカインが、生理食塩水コントロールと比較して、１−ADP−ヘプトースまたは１−ADP−ヘプトース−７−リン酸を注射した空気嚢において大幅に上昇する。１−ADP−ヘプトースまたは１−ADP−ヘプトース−７−リン酸の注射によって、角化細胞由来ケモカイン（GRO-α/KC/CXCL1）、IP-10およびMCP-1の血清中濃度も上昇する。化合物１〜２４（表１）および化合物２５〜３８（表２）は、いずれも好中球の動員とサイトカイン／ケモカインの誘導がADP-LD-Hepの約３０〜２００％に増強されている。従って、これらの１−ADP−L/D−glycero−α/β−L/D−manno/gluco/galacto−ヘプトース複合体は、インビボにおいて強力な免疫応答を促進する。
【００６４】
本発明者らによる研究の結果から特に以下のことが示された。293T細胞においてNF-κBを活性化することができ、かつTIFAのリン酸化を誘導することが可能な様々なADP−ヘプトース類似体（UDP−ヘプトース、CDP−ヘプトース、dCDP−ヘプトース、dADP−ヘプトース、dGDP−ヘプトース、GDP−ヘプトースおよびdTDP−ヘプトースを含む）が同定された。ADP−ヘプトースは、血清中抗原に特異的なIgG産生を増加させるアジュバント活性をインビボで示した。ADP−ヘプトースを腫瘍内注射すると、B16-OVA腫瘍の増殖を抑制することができる。さらに、ADP−ヘプトースと抗PD-1抗体を組み合わせることによってMC38腫瘍の増殖を抑制することができる。図１Ａ〜１Ｆを参照されたい。
【００６５】
【表１】
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【００６６】
【表２】
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【図１】
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【国際調査報告】
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