(57)【要約】  本発明は、Ｂｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤及び化学療法剤、特に、遊離又は薬学的に許容される塩又は溶媒和物形態の式Ｉ−ＡのＢｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤及びホモハリングトニン又はその活性誘導体を含む組み合わせ製品に関する。本発明は、また、癌、特に血液悪性腫瘍の予防及び／又は治療のための医薬の調製のための上述の組み合わせの使用、並びに上述の組み合わせを使用した、癌、特に血液悪性腫瘍の予防及び／又は治療のための方法に関する。
2021535129.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｂｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤及び化学療法剤を含む組み合わせ製品であって、前記Ｂｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤は、以下の式Ｉ−Ａ
【化１】
2021535129.tif 000081
［式中、
Ａ3は、
【化２】
2021535129.tif 000082
からなる群から選択され；
Ｅ3は、Ｃ原子であり、且つ
【化３】
2021535129.tif 000083
は、二重結合であるか；
又はＥ3は、−Ｃ（Ｈ）−であり、且つ
【化４】
2021535129.tif 000084
は、単結合であるか；
又はＥ3は、Ｎ原子であり、且つ
【化５】
2021535129.tif 000085
は、単結合であり；
Ｘ31、Ｘ32、及びＸ33は、各々独立して、−ＣＲ38＝又は−Ｎ＝であり；
Ｒ31a及びＲ31bは、それらが結合される前記Ｃ原子と合わせて、３員、４員、又は５員の任意選択的に置換されたシクロアルキルを形成するか；又は
Ｒ31a及びＲ31bは、それらが結合される前記Ｃ原子と合わせて、４員又は５員の任意選択的に置換されたヘテロ環を形成し；
Ｒ32は、−ＮＯ2、−ＳＯ2ＣＨ3、又は−ＳＯ2ＣＦ3であり；
Ｒ32aは、Ｈ又はＸであり；
Ｒ33は、Ｈ、−ＣＮ、−Ｃ≡ＣＨ、又は−Ｎ（Ｒ34a）（Ｒ34b）であり；
Ｒ34aは、任意選択的に置換されたＣ1-6アルキル、任意選択的に置換されたＣ3-6シクロアルキル、ヘテロ環、ヘテロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、又はヘテロシクロアルキルであり；
Ｒ34bは、Ｈ又はＣ1-4アルキルであり；
Ｒ35は、任意選択的に置換されたＣ1-6アルキル、ヘテロ環、ヘテロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、又はヘテロシクロアルキルであり；
Ｒ36a、Ｒ36c、Ｒ36e、Ｒ36f及びＲ36gは、各々独立して、Ｈ、任意選択的に置換されたＣ1-6アルキル、任意選択的に置換されたＣ3-6シクロアルキル、任意選択的に置換されたアリール、任意選択的に置換されたヘテロアリール、ヘテロ環、ヘテロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、又はヘテロシクロアルキルであり；
Ｒ36b及びＲ36dは、各々独立して、Ｈ、Ｃ1-4アルキル、又はハロゲンであり；
Ｒ37は、任意選択的に置換されたＣ1-6アルキル、ヘテロ環、ヘテロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、又はヘテロシクロアルキルであり；
Ｒ38は、Ｈ又はハロゲンである］
を有する化合物若しくはその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物であるか、
又は、前記Ｂｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤は、一般式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、若しくは（ＩＶ）：
【化６】
2021535129.tif 000086
［式中、環Ａ1は、
【化７】
2021535129.tif 000087
であり；
置換又は非置換のＸ11は、アルキレン、アルケニレン、シクロアルキレン、シクロアルケニレン、及びヘテロシクロアルキレンからなる群から選択され；
Ｙ11は、（ＣＨ2）nＮ（Ｒ11a）及び
【化８】
2021535129.tif 000088
からなる群から選択され；
Ｑ11は、Ｏ、Ｏ（ＣＨ2）1-3、ＮＲ11c、ＮＲ11c（Ｃ1-3アルキレン）、ＯＣ（＝Ｏ）（Ｃ1-3アルキレン）、Ｃ（＝Ｏ）Ｏ、Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（Ｃ1-3アルキレン）、ＮＨＣ（＝Ｏ）（Ｃ1-3アルキレン）、Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ、及びＣ（＝Ｏ）ＮＨ（Ｃ1-3アルキレン）からなる群から選択され；
Ｚ11は、Ｏ又はＮＲ11cであり；
Ｒ11及びＲ12は、独立して、Ｈ、ＣＮ、ＮＯ2、ハロゲン、アルキル、シクロアルキル、アルケニル、シクロアルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル、ＯＲ1’、ＳＲ1’、ＮＲ1’Ｒ1’’、ＣＯＲ1’、ＣＯ2Ｒ1’、ＯＣＯＲ1’、ＣＯＮＲ1’Ｒ1’’、ＣＯＮＲ1’ＳＯ2Ｒ1’’、ＮＲ1’ＣＯＲ1’’、ＮＲ1’ＣＯＮＲ1’’Ｒ1’’’、ＮＲ1’Ｃ＝ＳＮＲ1’’Ｒ1’’’、ＮＲ1’ＳＯ2Ｒ1’’、ＳＯ2Ｒ1’、及びＳＯ2ＮＲ1’Ｒ1’’からなる群から選択され；
Ｒ13は、Ｈ、アルキル、シクロアルキル、アルケニル、シクロアルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル、ＯＲ1’、ＮＲ1’Ｒ1’’、ＯＣＯＲ1’、ＣＯ2Ｒ1’、ＣＯＲ1’、ＣＯＮＲ1’Ｒ1’’、ＣＯＮＲ1’ＳＯ2Ｒ1’’、Ｃ1-3アルキレンＣＨ（ＯＨ）ＣＨ2ＯＨ、ＳＯ2Ｒ1’、及びＳＯ2ＮＲ1’Ｒ1’’からなる群から選択され；
Ｒ1’、Ｒ1’’、及びＲ1’’’は、各々独立して、Ｈ、アルキル、シクロアルキル、アルケニル、シクロアルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、Ｃ1-3アルキレンヘテロシクロアルキル、又はヘテロシクロアルキルであり；
Ｒ1’及びＲ1’’又はＲ1’’及びＲ1’’’は、それらが結合している前記原子と合わせて、３〜７員環を形成し得；
Ｒ14は、水素、ハロゲン、Ｃ1-3アルキル、ＣＦ3又はＣＮであり；
Ｒ15は、水素、ハロゲン、Ｃ1-3アルキル、置換Ｃ1-3アルキル、ヒドロキシアルキル、アルコキシ、又は置換アルコキシであり；
Ｒ16は、Ｈ、ＣＮ、ＮＯ2、ハロゲン、アルキル、シクロアルキル、アルケニル、シクロアルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル、ＯＲ1’、ＳＲ1’、ＮＲ1’Ｒ1’’、ＣＯ2Ｒ1’、ＯＣＯＲ1’、ＣＯＮＲ1’Ｒ1’’、ＣＯＮＲ1’ＳＯ2Ｒ1’’、ＮＲ1’ＣＯＲ1’’、ＮＲ1’ＣＯＮＲ1’’Ｒ1’’’、ＮＲ1’Ｃ＝ＳＮＲ1’’Ｒ1’’’、ＮＲ1’ＳＯ2Ｒ1’’、ＳＯ2Ｒ1’、及びＳＯ2ＮＲ1’Ｒ1’’からなる群から選択され；
置換又は非置換のＲ17は、水素、アルキル、アルケニル、（ＣＨ2）0-3−シクロアルキル、（ＣＨ2）0-3−シクロアルケニル、（ＣＨ2）0-3−ヘテロシクロアルキル、（ＣＨ2）0-3アリール、及び（ＣＨ2）0-3ヘテロアリールからなる群から選択され；
Ｒ18は、水素、ハロゲン、ＮＯ2、ＣＮ、ＣＦ3ＳＯ2、及びＣＦ3からなる群から選択され；
Ｒ11aは、水素、アルキル、ヘテロアルキル、アルケニル、ヒドロキシアルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、シクロアルキル、シクロアルケニル、及びヘテロシクロアルキルからなる群から選択され；
Ｒ11bは、水素又はアルキルであり；
Ｒ11cは、水素、アルキル、置換アルキル、ヒドロキシアルキル、アルコキシ及び置換アルコキシからなる群から選択され；
ｎ1、ｒ1及びｓ1は、各々独立して、１、２、３、４、５、又は６であり；
Ｒ21は、ＳＯ2Ｒ2’であり；
Ｒ22は、アルキル、好ましくはＣ1-4アルキル、より好ましくはメチル、プロピル、又はイソプロピルであり；
Ｒ23は、アルキル、好ましくはＣ1-4アルキル、より好ましくはメチル、プロピル、又はイソプロピルであり；
Ｒ24は、ハロゲン、好ましくはフッ素、塩素であり；
Ｒ25は、ハロゲン、好ましくはフッ素、塩素であり；
Ｒ26は、Ｈ、ハロゲン、及びアルキル、好ましくはフルオロ、クロロ、Ｃ1-4アルキル、より好ましくはメチル、プロピル、又はイソプロピルからなる群から選択され；
Ｒ21bは、Ｈ又はアルキル、好ましくはＣ1-4アルキル、より好ましくはメチル、プロピル、又はイソプロピルであり；
ｎ2、ｒ2、及びｓ2は、各々独立して、１、２、３、４、５、又は６であり、より好ましくは、ｒ2及びｓ2は、両方とも２であり、ｎ2は、３、４、又は５であり、より好ましくは、ｎ2、ｒ2、及びｓ2は全て、２であり；
Ｒ2’は、アルキル、好ましくはＣ1-4アルキル、より好ましくはメチル、プロピル、又はイソプロピルである］
を有する化合物若しくはその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物である、組み合わせ製品。
【請求項２】
式Ｉ−Ａの前記阻害剤が、以下の式Ｉ−ｉ
【化９】
2021535129.tif 000089
［式中、Ｒ32aは、Ｈ又はＦであり、Ｒ34aは、
【化１０】
2021535129.tif 000090
からなる群から選択される］
を有する化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物である、請求項１に記載の組み合わせ製品。
【請求項３】
式Ｉ−Ａの前記阻害剤が、以下：
【化１１】
2021535129.tif 000091
の化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物から選択される、請求項１又は２に記載の組み合わせ製品。
【請求項４】
式Ｉ−Ａの前記阻害剤が、以下の式：
【化１２】
2021535129.tif 000092
の化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の組み合わせ製品。
【請求項５】
前記Ｂｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤が：
【化１３】
2021535129.tif 000093
から選択されるか、又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物である、請求項１に記載の組み合わせ製品。
【請求項６】
前記化学療法剤が、アクチノマイシン、オールトランスレチノイン酸、アザシチジン、アザチオプリン、ブレオマイシン、ボルテゾミブ、カルボプラチン、カペシタビン、シスプラチン、クロラムブシル、シクロホスファミド、シタラビン、ダウノルビシン、ドセタキセル、ドキシフルリジン、ドキソルビシン、エピルビシン、アドリアマイシン、エポチロン、エトポシド、フルオロウラシル、ゲムシタビン、ヒドロキシウレア、イダルビシン、イマチニブ、イリノテカン、メクロレタミン、メルカプトプリン、メトトレキサート、ミトキサントロン、オキサリプラチン、パクリタキセル、ペメトレキセド、テニポシド、チオグアニン、トポテカン、バルルビシン、ベムラフェニブ、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、ビノレルビン、カンプトテシン、ヒドロキシカンプトテシン、又はセファロタキシンアルカロイドのうちの１つ以上から選択される、請求項１〜５のいずれか一項に記載の組み合わせ製品。
【請求項７】
前記化学療法剤が、ハリングトニン、イソハリングトニン、ホモハリングトニン、デオキシハリングトニン、ホモデオキシハリングトニン、又はその活性誘導体から選択されるセファロタキシンアルカロイドである、請求項１〜５のいずれか一項に記載の組み合わせ製品。
【請求項８】
前記化学療法剤が、ホモハリングトニンである、請求項１〜５のいずれか一項に記載の組み合わせ製品。
【請求項９】
前記組み合わせ製品が、医薬組成物の形態であり、薬学的に許容される担体、希釈剤、又は賦形剤を任意選択的に含む、請求項１〜８のいずれか一項に記載の組み合わせ製品。
【請求項１０】
前記Ｂｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤及び前記化学療法剤が、各々、別々の製剤中にある、請求項１〜８のいずれか一項に記載の組み合わせ製品。
【請求項１１】
前記Ｂｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤及び前記化学療法剤が、同時に又は逐次的に投与される、請求項１０に記載の組み合わせ製品。
【請求項１２】
前記組み合わせ製品が、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、シロップ剤、散剤、トローチ剤、サシェ剤、カシェ剤、エリキシル剤、懸濁剤、乳剤、液剤、シロップ剤、噴霧剤、軟膏剤、クリーム剤、及び注射剤の形態である、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の組み合わせ製品。
【請求項１３】
癌の予防及び／又は治療のための医薬の製造における請求項１〜１２のいずれか一項に記載の組み合わせ製品の使用。
【請求項１４】
前記癌が、組織癌又は血液悪性腫瘍から選択される、請求項１３に記載の使用。
【請求項１５】
前記癌が、膀胱癌、乳癌、子宮頸癌、結腸癌（結腸直腸癌を含む）、食道癌、頭頸部癌、肝臓癌、肺癌（小細胞肺癌及び非小細胞肺癌）、黒色腫、骨髄腫、神経芽細胞腫、卵巣癌、膵臓癌、前立腺癌、腎癌、肉腫（骨肉腫を含む）、皮膚癌（扁平上皮癌を含む）、胃癌、精巣癌、甲状腺癌、子宮癌、中皮腫、胆管細胞癌、平滑筋肉腫、脂肪肉腫、黒色腫、上咽頭癌、神経内分泌癌、卵巣癌、腎癌、唾液腺癌、紡錘細胞癌によって引き起こされる腫瘍転移から選択される組織癌タイプ；又は急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性好酸球性細胞白血病、急性赤血球性白血病、急性巨核芽球性白血病、急性単球性白血病、急性前骨髄球性白血病、成人Ｔ細胞白血病／リンパ腫、アグレッシブＮＫ細胞白血病、肥満細胞白血病、有毛細胞白血病、混合性白血病、非ホジキンリンパ腫、ホジキンリンパ腫、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、濾胞性リンパ腫（ＦＬ）、Ｂ細胞リンパ腫、ＭＡＬＴリンパ腫、未分化大細胞型リンパ腫、Ｔ細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫、Ｔ−リンパ芽球性リンパ腫、中枢神経系原発悪性リンパ腫、原発性滲出性リンパ腫、多発性骨髄腫、マクログロブリン血症、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、原発性血小板血症、真性多血症、原発性骨髄線維症から選択される血液悪性腫瘍である、請求項１３に記載の使用。
【請求項１６】
前記癌が、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）又は骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）である、請求項１３〜１５のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１７】
前記癌が、抵抗性である、請求項１３〜１６のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１８】
請求項１〜１２のいずれか一項に記載の組み合わせの共同治療有効量が、それらを必要とする患者に投与される、癌の予防及び／又は治療のための方法。
【請求項１９】
前記癌が、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性好酸球性細胞白血病、急性赤血球性白血病、急性巨核芽球性白血病、急性単球性白血病、急性前骨髄球性白血病、成人Ｔ細胞白血病／リンパ腫、アグレッシブＮＫ細胞白血病、肥満細胞白血病、有毛細胞白血病、混合性白血病、非ホジキンリンパ腫、ホジキンリンパ腫、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、濾胞性リンパ腫（ＦＬ）、Ｂ細胞リンパ腫、ＭＡＬＴリンパ腫、未分化大細胞型リンパ腫、Ｔ細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫、Ｔ−リンパ芽球性リンパ腫、中枢神経系原発悪性リンパ腫、原発性滲出性リンパ腫、多発性骨髄腫、マクログロブリン血症、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、原発性血小板血症、真性多血症、又は原発性骨髄線維症から選択される血液悪性腫瘍である、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記癌が、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）又は骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）である、請求項１８又は１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記癌が、抵抗性である、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
組み合わせ製品中のＢｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物が、約０．００２５〜１５００ｍｇ／日の量で投与される、請求項１８〜２１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２３】
組み合わせ製品中の化学療法剤又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物が、約０．００５ｍｇ／日〜約１０００ｍｇ／日の量で投与される、請求項１８〜２１のいずれか一項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、医薬の技術分野に属し、特にＢｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤及び化学療法剤を含む組み合わせ製品、並びに癌、特に血液悪性腫瘍の予防、進行遅延、及び／又は治療におけるその使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
プログラムされた細胞死としても知られるアポトーシスは、生物の正確に制御された細胞死メカニズムである。これは、ｉｎ  ｖｉｖｏで不要な細胞又は損傷した細胞を整然と排除することができ、胚発生及び細胞の恒常性維持に重要な影響を及ぼす。
【０００３】
アポトーシス機能と関連するＢｃｌ−２タンパク質ファミリーは、アポトーシス調節プロセスにおいて重要な役割を果たすと考えられ、タンパク質ファミリーメンバーは、構造及び機能に従って、２つのサブファミリー、つまり、Ｂｃｌ−２、Ｂｃｌ−ｘｌ、Ｍｃｌ−１などの抗アポトーシスタンパク質ファミリー、及びＢａｋ、Ｂａｘ、Ｂｉｍ、Ｂｉｄ、Ｎｏｘａ、Ｐｕｍａなどのアポトーシス促進タンパク質ファミリーに分けることができる。
【０００４】
Ｂｃｌ−２、Ｂｃｌ−ｘｌ、Ｍｃｌ−１などの抗アポトーシスタンパク質は、細胞のアポトーシス、分化、及び細胞周期調節に関与し、細胞死を阻害し得る。次いで、抗アポトーシスタンパク質の過剰発現は、細胞の過剰増殖を引き起こすことがあり、更に癌又は悪性腫瘍を引き起こすことがあり、腫瘍の薬剤耐性の発生と密接に関連している。研究は、抗アポトーシスタンパク質は確かに多くの種類の癌で過剰発現し、癌細胞がアポトーシスを回避する主な方法の１つは、抗アポトーシスＢｃｌ−２ファミリータンパク質を上方制御することであることを示している。これらの過剰発現は、いくつかの種類の癌の予後不良、並びに化学療法剤及び放射線に対する臨床的耐性に関連する。臨床観察と一致して、実験室研究は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ及びｉｎ  ｖｉｖｏでのＢｃｌ−２又はＢｃｌ−ｘＬの過剰発現は、癌細胞を化学療法に対してより抵抗性にすることを確立した（Ｄ．Ｔ．Ｃｈａｏ  ｅｔ  ａｌ，Ａｎｎｕ  Ｒｅｖ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １９９８；１６；３９５−４１９；Ｊ．Ｃ．Ｒｅｅｄ  ｅｔ  ａｌ，Ａｄｖａｎｃｅｓ  ｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  １９９７；４１；５０１−５５３；Ｊ．Ｃ．Ｒｅｅｄ  ｅｔ  ａｌ，Ｊ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍ  １９９６；６０：２３−３２；Ａ．Ｊ．Ｍｉｎｎ  ｅｔ  ａｌ，Ａｄｖａｎｃｅｓ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  １９９８；７０；２４５−２７９；Ｊ．Ｍ．Ａｄａｍｓ  ｅｔ  ａｌ，Ｓｃｉｅｎｃｅ  １９９８；２８１；１３２２）。
【０００５】
従って、抗アポトーシスタンパク質Ｂｃｌ−２などを標的とすることは、癌を治療するためのストラテジーとして使用されてきており、癌細胞のＢｃｌ−２活性を阻害すると、癌細胞死が増加し、化学療法耐性が低下する可能性がある。例えば、抗アポトーシスＢｃｌ−２ファミリータンパク質の過剰発現は、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）患者などの血液悪性腫瘍における化学療法耐性及び予後不良の一般的な原因であり、前臨床試験では、ＢＣＬ−２阻害剤であるＶｅｎｅｔｏｃｌａｘがアポトーシスを引き起こすことにより急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）を感作することが示されている（Ｐａｎ，Ｒ．，ｅｔ  ａｌ（２０１７）“Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ  Ｌｅｔｈａｌｉｔｙ  ｏｆ  Ｃｏｍｂｉｎｅｄ  Ｂｃｌ−２  Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｐ５３  Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｉｎ  ＡＭＬ：Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ  ａｎｄ  Ｓｕｐｅｒｉｏｒ  Ａｎｔｉｌｅｕｋｅｍｉｃ  Ｅｆｆｉｃａｃｙ”，Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｌｌ  ３２（６）：７４８−７６０  ｅ７４６）。従って、抗アポトーシスＢｃｌ−２ファミリータンパク質の阻害は、血液悪性腫瘍、例えばＡＭＬ又は骨髄異形成症候群などの癌の治療のための効果的なストラテジーである。
【０００６】
抗アポトーシスタンパク質メンバーであるＢｃｌ−２、Ｂｃｌ−ｘＬ、Ｍｃｌ−１などは、Ｂａｋ、Ｂａｘ、Ｂｉｍ、Ｂｉｄなどのアポトーシス促進タンパク質によるヘテロ二量体化により、アポトーシスを阻害する。従って、２つの間のヘテロ二量体化をブロックする阻害剤は、抗アポトーシスタンパク質Ｂｃｌ−２などのアンタゴニストとして作用し得、抗アポトーシスタンパク質が過剰発現されるヒトの癌治療の可能性がある（国際公開第２０１８０２７０９７Ａ１号パンフレット）。
【０００７】
タンパク質翻訳伸長阻害剤であるホモハリングトニンは、１９９０年から中国の薬局方に挙げられており、急性非リンパ性白血病及び慢性リンパ腫などのさまざまな造血系疾患の臨床治療に使用されており（中国特許第１０２９７６９２４Ｂ号明細書）、米国では慢性顆粒球性白血病の治療薬として承認されている。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
分子生物学の進歩により、分子を標的とする療法が医学、特に腫瘍研究において活発な分野になった。大部分の腫瘍の生物学的挙動は、単一のシグナル伝達経路によって支配されず、複数のシグナル伝達経路が共働する。いくつかの場合、異なる作用メカニズムを有する薬剤を組み合わせて使用してもよい。しかし、異なる作用メカニズムを有するが同様の分野で作用する薬剤の任意の組み合わせは、有益な効果を伴う組み合わせを生み出す可能性があるということは必要ではない。従って、異なる標的タンパク質及び／又は異なるシグナル伝達経路に向ける組み合わせレジメン及び製品が当該技術分野で必要とされているが、腫瘍形成メカニズムの複雑さ、異なる薬剤間の相互作用の予測不可能性などを考慮して、実行可能であり、単一の薬剤と比較してより優れた効果（単一の薬剤の投与量の低減、単一の薬剤の毒性副作用の低減、及び／又は相乗的に作用するなど）をもたらすことができる組み合わせレジメン及び製品を見出すことは、医療分野において課題のままである。一方、癌治療の実施に際して、単一標的薬に対する腫瘍細胞の薬剤耐性の発生もまた、克服するのが難しい問題である。
【０００９】
長期的且つ広範な研究により、驚くべきことに、本発明者らは、Ｂｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤及び化学療法剤を含む組み合わせ製品が、本明細書、特に請求項で定義されるとおり、癌、特に血液悪性腫瘍に対して、相乗的な方法で予防及び／又は治療効果を提供することができることを見出した。特に、この２つの組み合わせは、ＡＭＬ又は骨髄異形成症候群などの薬剤耐性血液悪性腫瘍に対して相乗的な方法で予防及び／又は治療効果を発揮する可能性があり、それにより、疾患に対するより効果的な治療を提供する。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明は、Ｂｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤及び化学療法剤を含む組み合わせ製品、並びに癌の予防及び／又は治療におけるその使用を提供する。
【００１１】
特に、本発明の第１の態様は、Ｂｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤及び化学療法剤を含む組み合わせ製品であって、阻害剤が、式Ｉ−Ａ：
【化１】
2021535129.tif 000003
［式中、
Ａ3は、
【化２】
2021535129.tif 000004
からなる群から選択され、
Ｅ3は、Ｃ原子であり、且つ
【化３】
2021535129.tif 000005
は、二重結合であるか；
又はＥ3は、−Ｃ（Ｈ）−であり、且つ
【化４】
2021535129.tif 000006
は、単結合であるか；
又はＥ3は、Ｎ原子であり、且つ
【化５】
2021535129.tif 000007
は、単結合であり；
Ｘ31、Ｘ32、及びＸ33は、各々独立して、−ＣＲ38＝又は−Ｎ＝であり；
Ｒ31a及びＲ31bは、それらが結合されるＣ原子と合わせて、３員、４員、又は５員の任意選択的に置換されたシクロアルキルを形成するか；又は
Ｒ31a及びＲ31bは、それらが結合されるＣ原子と合わせて、４員又は５員の任意選択的に置換されたヘテロ環を形成し；
Ｒ32は、−ＮＯ2、−ＳＯ2ＣＨ3、又は−ＳＯ2ＣＦ3であり；
Ｒ32aは、Ｈ又はＸであり；
Ｒ33は、Ｈ、−ＣＮ、−Ｃ≡ＣＨ、又は−Ｎ（Ｒ34a）（Ｒ34b）であり；
Ｒ34aは、任意選択的に置換されたＣ1-6アルキル、任意選択的に置換されたＣ3-6シクロアルキル、ヘテロ環、ヘテロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、又はヘテロシクロアルキルであり；
Ｒ34bは、Ｈ又はＣ1-4アルキルであり；
Ｒ35は、任意選択的に置換されたＣ1-6アルキル、ヘテロ環、ヘテロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、又はヘテロシクロアルキルであり；
Ｒ36a、Ｒ36c、Ｒ36e、Ｒ36f及びＲ36gは、各々独立して、Ｈ、任意選択的に置換されたＣ1-6アルキル、任意選択的に置換されたＣ3-6シクロアルキル、任意選択的に置換されたアリール、任意選択的に置換されたヘテロアリール、ヘテロ環、ヘテロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、及びヘテロシクロアルキルであり；
Ｒ36b及びＲ36dは、各々独立して、Ｈ、Ｃ1-4アルキル、又はハロゲンであり；
Ｒ37は、任意選択的に置換されたＣ1-6アルキル、ヘテロ環、ヘテロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、又はヘテロシクロアルキルであり；
Ｒ38は、Ｈ又はハロゲンである］
の化合物である、組み合わせ製品に関する。
【００１２】
いくつかの実施形態では、阻害剤は、本明細書の表１及び表１Ａ〜１Ｃで示される化合物、特に以下：
【化６】
2021535129.tif 000008
の化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物からなる群から選択される。
【００１３】
いくつかの実施形態では、組み合わせ製品中の阻害剤は、以下：
【化７】
2021535129.tif 000009
の化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物である。
【００１４】
いくつかの実施形態では、Ｂｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤は、式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、又は（ＩＶ）：
【化８】
2021535129.tif 000010
［式中、環Ａ1は、
【化９】
2021535129.tif 000011
であり、
置換又は非置換のＸ11は、アルキレン、アルケニレン、シクロアルキレン、シクロアルケニレン、及びヘテロシクロアルキレンからなる群から選択され；
Ｙ11は、（ＣＨ2）nＮ（Ｒ11a）及び
【化１０】
2021535129.tif 000012
からなる群から選択され、
Ｑ11は、Ｏ、Ｏ（ＣＨ2）1-3、ＮＲ11c、ＮＲ11c（Ｃ1-3アルキレン）、ＯＣ（＝Ｏ）（Ｃ1-3アルキレン）、Ｃ（＝Ｏ）Ｏ、Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（Ｃ1-3アルキレン）、ＮＨＣ（＝Ｏ）（Ｃ1-3アルキレン）、Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ、及びＣ（＝Ｏ）ＮＨ（Ｃ1-3アルキレン）からなる群から選択され；
Ｚ11は、Ｏ又はＮＲ11cであり；
Ｒ11及びＲ12は、独立して、Ｈ、ＣＮ、ＮＯ2、ハロゲン、アルキル、シクロアルキル、アルケニル、シクロアルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル、ＯＲ1’、ＳＲ1’、ＮＲ1’Ｒ1’’、ＣＯＲ1’、ＣＯ2Ｒ1’、ＯＣＯＲ1’、ＣＯＮＲ1’Ｒ1’’、ＣＯＮＲ1’ＳＯ2Ｒ1’’、ＮＲ1’ＣＯＲ1’’、ＮＲ1’ＣＯＮＲ1’’Ｒ1’’’、ＮＲ1’Ｃ＝ＳＮＲ1’’Ｒ1’’’、ＮＲ1’ＳＯ2Ｒ1’’、ＳＯ2Ｒ1’、及びＳＯ2ＮＲ1’Ｒ1’’からなる群から選択され；
Ｒ13は、Ｈ、アルキル、シクロアルキル、アルケニル、シクロアルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル、ＯＲ1’、ＮＲ1’Ｒ1’’、ＯＣＯＲ1’、ＣＯ2Ｒ1’、ＣＯＲ1’、ＣＯＮＲ1’Ｒ1’’、ＣＯＮＲ1’ＳＯ2Ｒ1’’、Ｃ1-3アルキレンＣＨ（ＯＨ）ＣＨ2ＯＨ、ＳＯ2Ｒ1’、及びＳＯ2ＮＲ1’Ｒ1’’からなる群から選択され；
Ｒ1’、Ｒ1’’、及びＲ1’’’は、各々独立して、Ｈ、アルキル、シクロアルキル、アルケニル、シクロアルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、Ｃ1-3アルキレンヘテロシクロアルキル、又はヘテロシクロアルキルであり；
Ｒ1’及びＲ1’’又はＲ1’’及びＲ1’’’は、それらが結合している原子と合わせて、３〜７員環を形成し得；
Ｒ14は、水素、ハロゲン、Ｃ1-3アルキル、ＣＦ3又はＣＮであり；
Ｒ15は、水素、ハロゲン、Ｃ1-3アルキル、置換Ｃ1-3アルキル、ヒドロキシアルキル、アルコキシ、又は置換アルコキシであり；
Ｒ16は、Ｈ、ＣＮ、ＮＯ2、ハロゲン、アルキル、シクロアルキル、アルケニル、シクロアルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル、ＯＲ1’、ＳＲ1’、ＮＲ1’Ｒ1’’、ＣＯ2Ｒ1’、ＯＣＯＲ1’、ＣＯＮＲ1’Ｒ1’’、ＣＯＮＲ1’ＳＯ2Ｒ1’’、ＮＲ1’ＣＯＲ1’’、ＮＲ1’ＣＯＮＲ1’’Ｒ1’’’、ＮＲ1’Ｃ＝ＳＮＲ1’’Ｒ1’’’、ＮＲ1’ＳＯ2Ｒ1’’、ＳＯ2Ｒ1’、及びＳＯ2ＮＲ1’Ｒ1’’からなる群から選択され；
置換又は非置換のＲ17は、水素、アルキル、アルケニル、（ＣＨ2）0-3−シクロアルキル、（ＣＨ2）0-3−シクロアルケニル、（ＣＨ2）0-3−ヘテロシクロアルキル、（ＣＨ2）0-3アリール、及び（ＣＨ2）0-3ヘテロアリールからなる群から選択され；
Ｒ18は、水素、ハロゲン、ＮＯ2、ＣＮ、ＣＦ3ＳＯ2、及びＣＦ3からなる群から選択され；
Ｒ11aは、水素、アルキル、ヘテロアルキル、アルケニル、ヒドロキシアルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、シクロアルキル、シクロアルケニル、及びヘテロシクロアルキルからなる群から選択され；
Ｒ11bは、水素又はアルキルであり；
Ｒ11cは、水素、アルキル、置換アルキル、ヒドロキシアルキル、アルコキシ及び置換アルコキシからなる群から選択され；
ｎ1、ｒ1、及びｓ１は、各々独立して、１、２、３、４、５、又は６であり；
Ｒ21は、ＳＯ2Ｒ2’であり；
Ｒ22は、アルキル、好ましくはＣ1-4アルキル、より好ましくはメチル、プロピル、又はイソプロピルであり；
Ｒ23は、アルキル、好ましくはＣ1-4アルキル、より好ましくはメチル、プロピル、又はイソプロピルであり；
Ｒ24は、ハロゲン、好ましくはフッ素、塩素であり；
Ｒ25は、ハロゲン、好ましくはフッ素、塩素であり；
Ｒ26は、Ｈ、ハロゲン、及びアルキル、好ましくはフルオロ、クロロ、Ｃ1-4アルキル、より好ましくはメチル、プロピル、又はイソプロピルからなる群から選択され；
Ｒ21bは、Ｈ又はアルキル、好ましくはＣ1-4アルキル、より好ましくはメチル、プロピル、又はイソプロピルであり；
ｎ2、ｒ2、及びｓ2は、各々独立して、１、２、３、４、５、又は６であり、より好ましくは、ｒ2及びｓ2は、両方とも２であり、ｎ2は、３、４、又は５であり、より好ましくは、ｎ2、ｒ2、及びｓ2は全て、２であり；
Ｒ2’は、アルキル、好ましくはＣ1-4アルキル、より好ましくはメチル、プロピル、又はイソプロピルである］
を有する化合物である。
【００１５】
いくつかの実施形態では、Ｂｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤は、本明細書の表２の化合物から選択される。いくつかの実施形態では、Ｂｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤は、化合物８１及び化合物９７から選択される。
【００１６】
いくつかの実施形態では、化学療法剤は、アクチノマイシン、オールトランスレチノイン酸、アザシチジン、アザチオプリン、ブレオマイシン、ボルテゾミブ、カルボプラチン、カペシタビン、シスプラチン、クロラムブシル、シクロホスファミド、シタラビン、ダウノルビシン、ドキシフルリジン、ドキソルビシン、エピルビシン、バルルビシン、アドリアマイシン、エポチロン、フルオロウラシル、ゲムシタビン、ヒドロキシウレア、イダルビシン、イマチニブ、イリノテカン、メクロレタミン、メルカプトプリン、メトトレキサート、ミトキサントロン、オキサリプラチン、パクリタキセル、ドセタキセル、ペメトレキセド、テニポシド、エトポシド、チオグアニン、トポテカン、ベムラフェニブ、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、ビノレルビン、カンプトテシン、又はヒドロキシカンプトテシンのうちの１つ以上から選択される。
【００１７】
いくつかの実施形態では、化学療法剤は、セファロタキシン、ハリングトニン、イソハリングトニン、ホモハリングトニン、デオキシハリングトニン、ホモデオキシハリングトニン、ドルパシン（ＣＡＳ番号４９６８６−５７−９）、デメチルセファロタキシノン（ＣＡＳ番号５１０２０−４５−２）、１１−ヒドロキシセファロタキシン、又はエピウィルソニン（ＣＡＳ番号３９０２４−１５−２）が挙げられるがこれらに限定されない、セファロタキシンアルカロイド又はその活性誘導体から選択される。
【００１８】
いくつかの実施形態では、化学療法剤は、ホモハリングトニン（ＨＨＴ）である。
【００１９】
いくつかの実施形態では、本発明の組み合わせ製品は、
【化１１】
2021535129.tif 000013
並びにホモハリングトニンからなる群から選択される阻害剤を含む。
【００２０】
いくつかの実施形態では、組み合わせ製品は、医薬組成物の形態である。
【００２１】
いくつかの実施形態では、Ｂｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤及び化学療法剤は、各々、別々の製剤中にある。
【００２２】
いくつかの実施形態では、Ｂｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤及び化学療法剤は、同時に又は逐次的に投与される。
【００２３】
いくつかの実施形態では、組み合わせ製品は、薬学的に許容される担体、希釈剤、又は賦形剤を更に含む。
【００２４】
いくつかの実施形態では、組み合わせ製品は、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、シロップ剤、散剤、トローチ剤、サシェ剤、カシェ剤、エリキシル剤、懸濁剤、乳剤、液剤、シロップ剤、噴霧剤、軟膏剤、クリーム剤、及び注射剤の形態である。
【００２５】
本発明の第２の態様は、癌の予防及び／又は治療のための医薬の製造における化学療法剤と組み合わせたＢｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤の使用、特に、癌の予防及び／又は治療のための医薬の製造における、上記第１の態様の化学療法剤と組み合わせたＢｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤の使用に関する。
【００２６】
本発明の第３の態様は、Ｂｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤及び化学療法剤、特に癌の予防及び／又は治療にて使用するための、上記第１の態様で記載されるようなＢｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤及び化学療法剤を含む組み合わせ製品に関する。
【００２７】
本発明の第４の態様は、それを必要としている患者に、共同有効量の化学療法剤と組み合わせたＢｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤、特に、上記第１の態様で記載されるような化学療法剤と組み合わせたＢｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤を投与することを含む、癌の予防及び／又は治療のための方法に関する。
【００２８】
本発明の様々な態様に関して、癌としては固形腫瘍などの組織癌タイプ、又は血液悪性腫瘍などの移動性癌タイプが挙げられるが、これらに限定されない。このような固形腫瘍としては、膀胱癌、乳癌、子宮頸癌、結腸癌（結腸直腸癌を含む）、食道癌、頭頸部癌、肝臓癌、肺癌（小細胞肺癌及び非小細胞肺癌）、黒色腫、骨髄腫、神経芽細胞腫、卵巣癌、膵臓癌、前立腺癌、腎癌、肉腫（骨肉腫を含む）、皮膚癌（扁平上皮癌を含む）、胃癌、精巣癌、甲状腺癌、子宮癌、中皮腫、胆管細胞癌、平滑筋肉腫、脂肪肉腫、黒色腫、上咽頭癌、神経内分泌癌、卵巣癌、腎癌、唾液腺癌、紡錘細胞癌によって引き起こされる腫瘍転移が挙げられるがこれらに限定されない；癌は、また、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性好酸球性細胞白血病（ａｃｕｔｅ  ｅｏｓｉｎｏｐｈｉｌｉｃ  ｃｅｌｌ  ｌｅｕｋｅｍｉａ）、急性赤血球性白血病（ａｃｕｔｅ  ｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｉｃ  ｌｅｕｋｅｍｉａ）、急性巨核芽球性白血病、急性単球性白血病、急性前骨髄球性白血病、成人Ｔ細胞白血病／リンパ腫、アグレッシブＮＫ細胞白血病、肥満細胞白血病、有毛細胞白血病、混合性白血病、非ホジキンリンパ腫、ホジキンリンパ腫、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、濾胞性リンパ腫（ＦＬ）、Ｂ細胞リンパ腫、粘膜関連リンパ組織（ＭＡＬＴ）リンパ腫、未分化大細胞型リンパ腫、Ｔ細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫、Ｔ−リンパ芽球性リンパ腫、中枢神経系原発悪性リンパ腫、原発性滲出性リンパ腫、多発性骨髄腫、マクログロブリン血症、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、原発性血小板血症、真性多血症、原発性骨髄線維症が挙げられるがこれらに限定されない血液悪性腫瘍などの移動性腫瘍が挙げられる。
【００２９】
いくつかの実施形態では、癌は、急性骨髄性白血病であり；他の実施形態では、癌は、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）である。
【００３０】
いくつかの実施形態では、癌は、薬剤耐性急性骨髄性白血病又は骨髄異形成症候群が挙げられるがこれらに限定されない薬剤耐性血液悪性腫瘍などの薬剤耐性癌である。
【００３１】
いくつかの実施形態では、Ｂｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物は、約０．００２５〜１５００ｍｇ／日の量で投与される。
【００３２】
いくつかの実施形態では、化学療法剤又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物は、約０．００５ｍｇ／日〜約１０００ｍｇ／日の量で投与される。
【図面の簡単な説明】
【００３３】
【図１】ＡＭＬ／ＭＤＳ細胞株における腫瘍細胞に対するホモハリングトニンと組み合わせた化合物６の相乗的な抗増殖効果を示す：ＡＭＬ／ＭＤＳ細胞を化合物６、ホモハリングトニン（ＨＨＴ）の勾配濃度で単一又は組み合わせて２４時間処理し、細胞増殖阻害活性をＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ発光で測定し、細胞生存率を平均±ＳＥＭ及びｎ＝２で表した。
【図２】ＡＭＬ／ＭＤＳ細胞株における腫瘍細胞に対するホモハリングトニンと組み合わせた化合物６の相乗的なアポトーシス誘導効果を示す：１０ｎＭ又は３０ｎＭのホモハリングトニン（ＨＨＴ）と１０ｎＭ化合物６を単独又は組み合わせて２４時間ｉｎ  ｖｉｔｒｏで処理する；Ａ：アポトーシスのグラフ表示；Ｂ：図Ａの統計；*：ｐ＜０．０５対ＤＭＳＯ群；＄：ｐ＜０．０５対化合物６単独療法；＃：ｐ＜０．０５対ホモハリングトニン（ＨＨＴ）単独療法；アネキシンＶ+細胞（即ち、アポトーシス細胞）のパーセンテージは、平均±ＳＥＭ、ｎ＝２として表されている。
【図３】ホモハリングトニンと組み合わせた化合物６は、抗アポトーシスタンパク質ＭＣＬ−１及びプロトオンコプロテインＭＹＣの発現を低下させ、ＡＭＬ／ＭＤＳ細胞株においてアポトーシスマーカーｃｌ−カスパーゼ及びｃｌ−ＰＡＲＰの発現を増強したことを示す：対数増殖期のＭＶ−４−１１、ＯＣＩ−ＡＭＬ−３、及びＳＫＭ−１細胞を、タンパク質抽出及び免疫ブロット分析用に細胞を収集する前に、指示された濃度のホモハリングトニンと組み合わせた１０ｎＭの化合物６でｉｎ  ｖｉｔｒｏにて４時間処理した。
【図４Ａ−Ｂ】化合物６のホモハリングトニンとの組み合わせは、複合体Ｂｃｌ−２：ＢＩＭ（４Ａ）、Ｍｃｌ−１：ＢＩＭ（４Ｂ）、Ｍｃｌ−１：ＢＡＫ（４Ｃ）、及びＢｃｌ−１：ＰＵＭＡ（４Ｄ）を破壊し、ＡＭＬ／ＭＤＳ細胞株においてアポトーシス促進タンパク質であるＢＩＭ、ＢＡＫ、及びＰＵＭＡを放出したことを示す：対数増殖期のＭＶ−４−１１、ＯＣＩ−ＡＭＬ−３、及びＳＫＭ−１細胞を、タンパク質抽出及びＭＳＤ分析用に細胞を収集する前に、ホモハリングトニン（ＨＨＴ）と組み合わせた指示された濃度の化合物６でｉｎ  ｖｉｔｒｏにて４時間処理した。電気化学的信号強度は、平均±ＳＥＭ、ｎ＝２として表される。
【図４Ｃ−Ｄ】化合物６のホモハリングトニンとの組み合わせは、複合体Ｂｃｌ−２：ＢＩＭ（４Ａ）、Ｍｃｌ−１：ＢＩＭ（４Ｂ）、Ｍｃｌ−１：ＢＡＫ（４Ｃ）、及びＢｃｌ−１：ＰＵＭＡ（４Ｄ）を破壊し、ＡＭＬ／ＭＤＳ細胞株においてアポトーシス促進タンパク質であるＢＩＭ、ＢＡＫ、及びＰＵＭＡを放出したことを示す：対数増殖期のＭＶ−４−１１、ＯＣＩ−ＡＭＬ−３、及びＳＫＭ−１細胞を、タンパク質抽出及びＭＳＤ分析用に細胞を収集する前に、ホモハリングトニン（ＨＨＴ）と組み合わせた指示された濃度の化合物６でｉｎ  ｖｉｔｒｏにて４時間処理した。電気化学的信号強度は、平均±ＳＥＭ、ｎ＝２として表される。
【図５】皮下ＭＶ−４−１１ＡＭＬ異種移植片における化合物６のＨＨＴとの組み合わせの相乗的抗腫瘍効果を示す（研究番号ＳＺ−ＥＦ−３０−２０１８）。（Ａ）腫瘍増殖曲線、（Ｂ）体重変化（％）。
【図６】皮下ＯＣＩ−ＡＭＬ−３ＡＭＬ異種移植片における化合物６のＨＨＴとの組み合わせの相乗的抗腫瘍効果を示す（研究番号ＳＺ−ＥＦ−６９−２０１９）。（Ａ）腫瘍増殖曲線、（Ｂ）体重変化（％）。
【発明を実施するための形態】
【００３４】
定義
用語「Ｂｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ」は、本明細書で使用する場合、Ｂｃｌ−２、Ｂｃｌ−ｘＬ、又はＢｃｌ−２及びＢｃｌ−ｘＬ、即ち、Ｂｃｌ−２及び／又はＢｃｌ−ｘＬを指す。
【００３５】
用語「薬学的に許容される塩」は、本明細書で使用する場合、遊離塩基を好適な有機酸又は無機酸と反応させるか、又は酸を好適な有機塩基又は無機塩基と反応させることによって典型的には調製される遊離酸又は遊離塩基の塩を指す。用語は、本発明における任意の化合物に使用してよい。代表的な塩としては：酢酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、重炭酸塩、重硫酸塩、重酒石酸塩、ホウ酸塩、臭化物、エデト酸カルシウム、カンファースルホン酸塩、炭酸塩、塩化物、クラブラン酸塩、クエン酸塩、二塩酸化合物、エデト酸塩、エジシル酸塩、エストレート、エタンスルホン酸塩（エシレート）、フマル酸塩、グルコヘプトン酸塩、グルコン酸塩、グルタミン酸塩、グリコリルアルサニル酸塩、ヘキシルレゾルシネート、ヒドラバミン、臭化水素酸塩、塩酸塩、ヒドロキシナフトエ酸塩、ヨウ化物、イセチオン酸塩、乳酸塩、ラクトビオン酸塩、ラウリン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マンデル酸塩、メタンスルホン酸塩、亜臭素酸塩、亜硝酸塩、亜硫酸塩、ブテン二酸モノカリウム塩、ムチン酸塩、ナフタレンスルホン酸塩、硝酸塩、Ｎ−メチルグルコサミン塩、シュウ酸塩、パモ酸塩、パルチミン酸塩、パントテン酸塩、リン酸塩／二リン酸塩、ポリガラクツロ酸塩、カリウム塩、サリチル酸塩、ナトリウム塩、ステアリン酸塩、塩基性酢酸塩、コハク酸塩、タンニン酸塩、酒石酸塩、テオクル酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、トリエチオドード（ｔｒｉｅｔｈｉｏｄｏｄｅ）、トリメチルアミン、及び吉草酸塩が挙げられる。−ＣＯＯＨなどの酸性置換基が存在する場合、アンモニウム塩、モルホリン塩、ナトリウム塩、カリウム塩、バリウム塩、カルシウム塩などが剤形における使用のために形成され得る。例えばアミノ基又はピリジルなどの塩基性ヘテロアリール基などの塩基性基が存在する場合（例えば、リモノイド又は１，１−ジメチルビグアナイド）、塩酸塩、臭化水素酸塩、リン酸塩、硫酸塩、トリフルオロ酢酸塩、トリクロロ酢酸塩、酢酸塩、シュウ酸塩、マレイン酸塩、ピルビン酸塩、マロン酸塩、コハク酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、フマル酸塩、マンデル酸塩、安息香酸塩、桂皮酸塩、メシレート、エタンスルホン酸塩、ピクリン酸塩などの酸性塩が形成され得る。
【００３６】
用語「溶媒和物」は、本明細書で使用する場合、複合体、物理的会合、及び／又は溶媒和、例えば溶媒分子を用いた本発明によって企図される化合物の二、一、半溶媒和物である。本発明の化合物は、水、メタノール、エタノールなどの薬学的に許容される溶媒との溶媒和形態であり得、これは、化合物の薬理学的活性又は毒性に著しく影響を及ぼさず、且つ薬理学的均等物として作用し得る。
【００３７】
用語「セファロタキシンアルカロイド」は、本明細書で使用する場合、主に、セファロタキサス・フォーチュネイ（Ｃｅｐｈａｌｏｔａｘｕｓ  ｆｏｒｔｕｎｅｉ）、セファロタキサス・シネンシス（Ｃｅｐｈａｌｏｔａｘｕｓ  ｓｉｎｅｎｓｉｓ）、セファロタキサス・ハイナネンシス（Ｃｅｐｈａｌｏｔａｘｕｓ  ｈａｉｎａｎｅｎｓｉｓ）、セファロタキサス・ハリングトニア（Ｃｅｐｈａｌｏｔａｘｕｓ  ｈａｒｒｉｎｇｔｏｎｉａ）、セファロタキサス・オリべリ（Ｃｅｐｈａｌｏｔａｘｕｓ  ｏｌｉｖｅｒｉ）などのイヌガヤ属（Ｃｅｐｈａｌｏｔａｘｕｓ）の植物から誘導されるアルカロイド化合物を指し、植物細胞の培養によって得られるアルカロイド化合物、又は事前に合成された異なるエステル側鎖を天然セファロタキサスアルカロイドに結合することによって得られる半合成セファロタキサスアルカロイドも含む。また、この用語は、全合成法により得られるセファロタキシン化合物も含む。具体例としては、上記の発明セクションの要約に示されているものが挙げられる。
【００３８】
用語「セファロタキシンアルカロイドの活性誘導体」は、本明細書で使用する場合、誘導体がセファロタキシンアルカロイドの生物学的活性を保持する生物学的又は化学的手段を含むがこれらに限定されない手段によってセファロタキシンアルカロイドを修飾することによって得られる誘導体を指す。
【００３９】
用語「ホモハリングトニン」は、本明細書で使用する場合、以下の構造、ＣＡＳ  ２６８３３−８７−４：
【化１２】
2021535129.tif 000014
を有する。
【００４０】
用語「予防すること」又は「予防」又は「予防的」は、本明細書で使用する場合、疾患又は障害（例えば、癌）に関連して使用される場合、化合物又は薬剤は、化合物又は薬剤（例えば、本明細書で特許請求されるような組み合わせ製品）を投与されていない対象と比較して、対象における医学的障害の症状の頻度を低減するか、又は発症を遅らせることができることを意味する。
【００４１】
用語「治療すること」又は「治療」又は「治療的」は、本明細書で使用する場合、疾患若しくは障害の症状を軽減すること、緩和すること若しくは改善すること、根本的な代謝誘発症状を改善すること、疾患若しくは障害を阻害すること、例えば、疾患若しくは障害の拡大を停止すること、疾患若しくは障害を緩和すること、疾患若しくは障害の退行を引き起こすこと、疾患若しくは障害によって引き起こされた病態を緩和すること、又は疾患若しくは障害の症状を停止することを指す。
【００４２】
用語「癌」は、本明細書で使用する場合、異常な制御されない細胞増殖により引き起こされる新生物又は腫瘍を指す。癌は、隣接する組織に浸潤し、骨、肝臓、肺、又は脳などの遠隔臓器に拡散（転移）することが多い。用語「癌」の非限定的な例としては、本明細書で使用する場合、移動性腫瘍タイプ（限定されないが、黒色腫、リンパ腫、白血病、線維肉腫、横紋筋肉腫、及び肥満細胞腫瘍など）、及び組織癌タイプ（限定されないが、とりわけ、膠芽腫結腸直腸癌、小細胞肺癌及び非小細胞肺癌、乳癌、膵臓癌、膀胱癌、腎癌、胃癌、膠芽腫、原発性肝癌、卵巣癌、前立腺癌、尿路癌、甲状腺癌、食道癌、並びに子宮平滑筋肉腫など）、特に、本発明の詳細な説明に記載されているそれらの例示的な癌が挙げられる。
【００４３】
用語「癌」は、本明細書で使用する場合、前癌細胞及び悪性癌細胞の両方が関与する疾患を含み、化学療法に抵抗性のある本発明の全てのタイプの癌も含む。
【００４４】
用語「対象」は、本明細書で使用する場合、ヒト（例えば、ヒト患者）及び動物（例えば、マウス、ラット、イヌ、ネコ、ウサギ、ニワトリ、サルなど）を含むことを意味する。対象がヒト患者（典型的には、６０ｋｇの体重を有する）である場合、本明細書に記載の投与量は、特に明記しない限り、実験動物の換算係数を使用して換算することができる（例えば、ヒトの用量＝マウスの用量／１２．３）（例えば、ｋｉｎ  Ｔａｍ，“Ｅｓｔｉｍａｔｉｎｇ  ｔｈｅ  “Ｆｉｒｓｔ  ｉｎ  ｈｕｍａｎ”ｄｏｓｅ−ａ  ｒｅｖｉｓｉｔ  ｗｉｔｈ  ｐａｒｔｉｃｕｌａｒ  ｅｍｐｈａｓｉｓ  ｏｎ  ｏｎｃｏｌｏｇｙ  ｄｒｕｇｓ，ＡＤＭＥＴ＆ＤＭＰＫ  １（４）（２０１３）６３−７５を参照のこと）。当業者は、一般的な知識に基づいて、対象の比重、疾患の種類及び重症度、並びに他の要因に基づいて投与量を合理的に調整することができ、そのような調整された技術的解決策は、本明細書で特許請求されている発明の範囲内である。
【００４５】
用語「有効量」又は「予防有効量及び／又は治療有効量」は、本明細書で使用する場合、治療される疾患又は障害の症状のうちの１つ以上をある程度緩和するであろう、投与される薬剤又は化合物の十分量（例えば、用量）を指す。結果は、病態若しくは疾患の原因の低減及び／若しくは軽減又は生物システムの任意の他の所望の変化であり得る。例えば、治療的使用に関する「有効量」は、過度の有毒な副作用なく、疾患又は障害の臨床的症状の著しい低減をもたらす化合物又は薬剤（例えば、本明細書で特許請求されるとおりの組み合わせ製品）の量である。
【００４６】
用語「共投与（ｃｏ−ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）」、「同時投与（ｃｏｎｃｕｒｒｅｎｔ  ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）」、「同時投与（ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ  ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）」及び同様の表現は、本明細書で使用する場合、治療される対象への２つ以上の薬剤の同時投与を指す。「同時」とは、各薬剤が同時に投与されるか、又は各薬剤は異なる時点で任意の順序で連続して投与されることを意味する。同時ではない場合、それは、それらが任意の順序で個体に投与され、所望の治療効果を提供するのに十分な時間で接近することを意味する。
【００４７】
用語「キット」は、本明細書で使用する場合、成分（遊離又は薬学的に許容される塩又は溶媒和物形態のＢｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤及び本発明の組み合わせパートナーである化学療法剤）が、互いに独立して、又は指定された量の成分との異なる固定された組み合わせを使用することによって、即ち、異なる時点で、又は同時に投与することができることを意味する。従って、キットのパーツは、同時に又は時系列にずらして、即ち、異なる時点で、キットの各部分に対して等しい又は異なる時間間隔で投与してもよい。時間間隔は、好ましくは、パーツの組み合わせた使用が、いずれかのパーツを単独で使用することによって得られる効果よりも大きい疾患又は病態に対する治療効果をもたらすように選択される。キットの構成要素は、各々別々の製剤中にあってもよく、これは同じであっても異なっていてもよい。
【００４８】
「キット」は、好ましくは、少なくとも１つの有益な効果、例えば、相互に増強される個々の組み合わせパートナーの効果、更なる有利な効果、より少ない副作用、１つ又は個々の構成要素の非有効用量での組み合わせた治療効果、特に相乗効果、例えば、本発明の遊離又は薬学的に許容される塩又は溶媒和物形態のＢｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤と化学療法剤との間の相加効果より大きい効果を有する。
【００４９】
用語「用量」は、本明細書で使用する場合、対象の体重の１キログラム（ｋｇ）当たりの活性物質の重量（例えば、ミリグラム（ｍｇ））を指す。
【００５０】
用語「ＩＣ50」は、本明細書で使用する場合、対応する効果を測定するアッセイで最大効果の５０％阻害を達成する薬物の濃度を指す。
【００５１】
用語「室温」は、本明細書で使用する場合、２５℃±１℃を意味する。一方、実験温度は、特に指示がない限り、全て室温である。
【００５２】
用語「約」は、本明細書で使用する場合、本用語によって修飾される数値の±１０％、より好ましくは±５％、最も好ましくは±２％を意味し、そのため、当業者は、修飾される数値に従って用語「約」の範囲を明確に決定することができる。
【００５３】
別途定義されていない限り、本明細書で使用される技術用語及び科学用語は、本発明が属する分野の当業者に一般に理解されている意味と同じ意味を有する。
【００５４】
詳細な説明
本発明の薬理学的研究は、Ｂｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤、特に本明細書及び請求項で定義されるとおりの好ましい阻害剤、並びに化学療法剤、特にホモハリングトニンの組み合わせた使用により、癌細胞増殖、特に急性骨髄性白血病細胞増殖を相乗的に著しく阻害することができ、癌細胞、特に急性骨髄性白血病細胞のアポトーシスを相乗的に著しく誘発することができることを示した。
【００５５】
更に、本発明者らの研究は、また、上記の２つの組み合わせた使用により、プロトオンコプロテインＭＹＣ及びＭｃｌ−１のレベルが著しく低下し、癌細胞中のＢｃｌ−２：ＢＩＭ、Ｍｃｌ−１：ＢＡＫ、及びＢｃｌ−１：ＰＵＭＡ複合体が相乗的に破壊され、それによりアポトーシス促進タンパク質であるＢＩＭ、ＢＡＫ、及びＰＵＭＡを放出することを示した。
【００５６】
従って、第１の態様では、本発明は、Ｂｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤及び化学療法剤を含むか又はそれらからなる組み合わせ製品であって、阻害剤が、式Ｉ−Ａ：
【化１３】
2021535129.tif 000015
［式中、
Ａ3は、
【化１４】
2021535129.tif 000016
からなる群から選択され、
Ｅ3は、Ｃ原子であり、且つ
【化１５】
2021535129.tif 000017
は、二重結合であるか；
又はＥ3は、−Ｃ（Ｈ）−であり、且つ
【化１６】
2021535129.tif 000018
は、単結合であるか；
又はＥ3は、Ｎ原子であり、且つ
【化１７】
2021535129.tif 000019
は、単結合であり；
Ｘ31、Ｘ32、及びＸ33は、各々独立して、−ＣＲ38＝又は−Ｎ＝であり；
Ｒ31a及びＲ31bは、それらが結合されるＣ原子と合わせて、３員、４員、又は５員の任意選択的に置換されたシクロアルキルを形成するか；又は
Ｒ31a及びＲ31bは、それらが結合されるＣ原子と合わせて、４員又は５員の任意選択的に置換されたヘテロ環を形成し；
Ｒ32は、−ＮＯ2、−ＳＯ2ＣＨ3、又は−ＳＯ2ＣＦ3であり；
Ｒ32aは、Ｈ又はＸであり；
Ｒ33は、Ｈ、−ＣＮ、−Ｃ≡ＣＨ、又は−Ｎ（Ｒ34a）（Ｒ34b）であり；
Ｒ34aは、任意選択的に置換されたＣ1-6アルキル、任意選択的に置換されたＣ3-6シクロアルキル、ヘテロ環、ヘテロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、又はヘテロシクロアルキルであり；
Ｒ34bは、Ｈ又はＣ1-4アルキルであり；
Ｒ35は、任意選択的に置換されたＣ1-6アルキル、ヘテロ環、ヘテロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、又はヘテロシクロアルキルであり；
Ｒ36a、Ｒ36c、Ｒ36e、Ｒ36f及びＲ36gは、各々独立して、Ｈ、任意選択的に置換されたＣ1-6アルキル、任意選択的に置換されたＣ3-6シクロアルキル、任意選択的に置換されたアリール、任意選択的に置換されたヘテロアリール、ヘテロ環、ヘテロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、及びヘテロシクロアルキルであり；
Ｒ36b及びＲ36dは、各々独立して、Ｈ、Ｃ1-4アルキル、又はハロゲンであり；
Ｒ37は、任意選択的に置換されたＣ1-6アルキル、ヘテロ環、ヘテロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、又はヘテロシクロアルキルであり；
Ｒ38は、Ｈ又はハロゲンである］
を有する化合物である、組み合わせ製品を提供する。
【００５７】
上記式Ｉ−Ａの化合物では、可変Ｒ32aの定義における「Ｘ」は、ハロゲンを指す。更に、ハロゲンは、フッ素（Ｆ）、塩素（Ｃｌ）、臭素（Ｂｒ）、又はヨウ素（Ｉ）を意味する。
【００５８】
いくつかの実施形態では、阻害剤は、式Ｉ−Ａを有する化合物であって、式中、Ａ3は、Ａ−１、Ａ−２、Ａ−３、Ａ−４、Ａ−５、Ａ−６、Ａ−７、Ａ−８、又はＡ−９であり；Ｒ34aは、任意選択的に置換されたＣ1-6アルキル、ヘテロ環、ヘテロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、又はヘテロシクロアルキルであり；Ｒ36a、Ｒ36C、Ｒ36e、Ｒ36f、及びＲ36gは、各々独立して、Ｈ、任意選択的に置換されたＣ1-6アルキル、ヘテロ環、ヘテロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、又はヘテロシクロアルキルである。
【００５９】
いくつかの実施形態では、阻害剤は、式Ｉ−ｂ：
【化１８】
2021535129.tif 000020
［式中、
Ｅ3は、Ｃ原子であり、且つ
【化１９】
2021535129.tif 000021
は、二重結合であるか；又はＥ3は、−Ｃ（Ｈ）−であり、且つ
【化２０】
2021535129.tif 000022
は、単結合であるか；又はＥ3は、Ｎ原子であり、且つ
【化２１】
2021535129.tif 000023
は、単結合であり；
Ｒ31a及びＲ31bは、それらが結合されるＣ原子と合わせて、３員、４員又は５員の任意選択的に置換されたシクロアルキルを形成するか；又は
Ｒ31a及びＲ31bは、それらが結合されるＣ原子と合わせて、４員又は５員の任意選択的に置換されたヘテロ環を形成し；
Ｒ32は、−ＮＯ2、−ＳＯ2ＣＨ3、又は−ＳＯ2ＣＦ3であり；
Ｒ33は、Ｈ、−ＣＮ、−Ｃ≡ＣＨ、又は−Ｎ（Ｒ34a）（Ｒ34b）であり；
Ｒ34aは、任意選択的に置換されたＣ1-6アルキル、ヘテロ環、（シクロアルキル）アルキル、又はヘテロシクロアルキルであり；
Ｒ34bは、Ｈ又はＣ1-4アルキルである］
を有する化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物である。
【００６０】
いくつかの実施形態では、阻害剤は、式Ｉ−ｃ：
【化２２】
2021535129.tif 000024
［式中、Ｙ3は、−ＣＨ2−又は−Ｏ−であり、Ｒ32及びＲ34aは、式Ｉ−ｂについて定義されたとおりである］
を有する化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物である。
【００６１】
いくつかの実施形態では、阻害剤は、式Ｉ−ｄ：
【化２３】
2021535129.tif 000025
［式中、Ｙ3は、−ＣＨ2−又は−Ｏ−であり、Ｒ32及びＲ34aは、式Ｉ−ｂについて定義されたとおりである］
を有する化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物である。
【００６２】
いくつかの実施形態では、阻害剤は、式Ｉ−ｅ：
【化２４】
2021535129.tif 000026
［式中、Ｙ3は、−ＣＨ2−又は−Ｏ−であり、Ｒ32及びＲ34aは、式Ｉ−ｂについて定義されたとおりである］
を有する化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物である。
【００６３】
いくつかの実施形態では、阻害剤は、式Ｉ−ｆ：
【化２５】
2021535129.tif 000027
［式中、Ｙ3は、−ＣＨ2−又は−Ｏ−であり、Ａ3、Ｘ31、Ｘ32、及びＸ33は、式Ｉ−Ａについて定義されたとおりである］
を有する化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物である。
【００６４】
いくつかの実施形態では、阻害剤は、式Ｉ−ｇ：
【化２６】
2021535129.tif 000028
［式中、Ｙ3は、−ＣＨ2−又は−Ｏ−であり、Ａ3は、式Ｉ−Ａについて定義されたとおりである］
を有する化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物である。
【００６５】
いくつかの実施形態では、阻害剤は、式Ｉ−Ａ、Ｉ−ｆ若しくはＩ−ｇを有する化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物であり、式中、Ａ3は、Ａ−１である。
【００６６】
いくつかの実施形態では、阻害剤は、式Ｉ−Ａ、Ｉ−ｆ若しくはＩ−ｇを有する化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物であり、式中、Ａ3は、Ａ−２である。
【００６７】
いくつかの実施形態では、阻害剤は、式Ｉ−Ａ、Ｉ−ｆ若しくはＩ−ｇを有する化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物であり、式中、Ａ3は、Ａ−３である。
【００６８】
いくつかの実施形態では、阻害剤は、式Ｉ−Ａ、Ｉ−ｆ若しくはＩ−ｇを有する化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物であり、式中、Ａ3は、Ａ−４である。
【００６９】
いくつかの実施形態では、阻害剤は、式Ｉ−Ａ、Ｉ−ｆ若しくはＩ−ｇを有する化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物であり、式中、Ａ3は、Ａ−５である。
【００７０】
いくつかの実施形態では、阻害剤は、式Ｉ−Ａ、Ｉ−ｆ若しくはＩ−ｇを有する化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物であり、式中、Ａ3は、Ａ−６である。
【００７１】
いくつかの実施形態では、阻害剤は、式Ｉ−Ａ、Ｉ−ｆ若しくはＩ−ｇを有する化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物であり、式中、Ａ3は、Ａ−７である。
【００７２】
いくつかの実施形態では、阻害剤は、式Ｉ−Ａ、Ｉ−ｆ若しくはＩ−ｇを有する化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物であり、式中、Ａ3は、Ａ−８である。
【００７３】
いくつかの実施形態では、阻害剤は、式Ｉ−Ａ、Ｉ−ｆ若しくはＩ−ｇを有する化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物であり、式中、Ａ3は、Ａ−９である。
【００７４】
いくつかの実施形態では、阻害剤は、式Ｉ−Ａ、Ｉ−ｆ若しくはＩ−ｇを有する化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物であり、式中、Ａ3は、Ａ−１０である。
【００７５】
いくつかの実施形態では、阻害剤は、式Ｉ−ｈ：
【化２７】
2021535129.tif 000029
［式中、Ｙ3は、−ＣＨ2−又は−Ｏ−であり、Ｘ31、Ｘ32、Ｘ33、Ｒ32、及びＲ34aは、式Ｉ−Ａについて定義されたとおりである］
を有する化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物である。
【００７６】
いくつかの実施形態では、阻害剤は、式Ｉ−Ａ、Ｉ−ｆ若しくはＩ−ｈを有する化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物であり、式中、Ｘ31、Ｘ32、及びＸ33は全て、−ＣＨ＝である。
【００７７】
いくつかの実施形態では、阻害剤は、式Ｉ−Ａ、Ｉ−ｆ若しくはＩ−ｈを有する化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物であり、式中、Ｘ31は、−ＣＦ＝であり、Ｘ32及びＸ33は両方とも、−ＣＨ＝である。
【００７８】
いくつかの実施形態では、阻害剤は、式Ｉ−Ａ、Ｉ−ｆ若しくはＩ−ｈを有する化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物であり、式中、Ｘ31及びＸ33は両方とも、−ＣＨ＝であり、Ｘ32は、−ＣＦ＝である。
【００７９】
いくつかの実施形態では、阻害剤は、式Ｉ−Ａ、Ｉ−ｆ若しくはＩ−ｈを有する化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物であり、式中、Ｘ31及びＸ32は両方とも、−ＣＨ＝であり、Ｘ33は、−ＣＦ＝である。
【００８０】
いくつかの実施形態では、阻害剤は、式Ｉ−Ａ、Ｉ−ｆ若しくはＩ−ｈを有する化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物であり、式中、Ｘ31は、−Ｎ＝であり、Ｘ32及びＸ33は両方とも、−ＣＨ＝である。
【００８１】
いくつかの実施形態では、阻害剤は、式Ｉ−Ａ、Ｉ−ｆ若しくはＩ−ｈを有する化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物であり、式中、Ｘ31及びＸ33は両方とも、−ＣＨ＝であり、Ｘ32は、−Ｎ＝である。
【００８２】
いくつかの実施形態では、阻害剤は、式Ｉ−Ａ、Ｉ−ｆ若しくはＩ−ｈを有する化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物であり、式中、Ｘ31及びＸ32は両方とも、−ＣＨ＝であり、Ｘ33は、−Ｎ＝である。
【００８３】
いくつかの実施形態では、阻害剤は、式Ｉ−ｃ〜Ｉ−ｈのいずれか１つを有する化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物であり、式中、Ｙ3は、−Ｏ−である。
【００８４】
いくつかの実施形態では、阻害剤は、式Ｉ−ｃ〜Ｉ−ｈのいずれか１つを有する化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物であり、式中、Ｙ3は、−ＣＨ2−である。
【００８５】
いくつかの実施形態では、阻害剤は、式Ｉ−Ａ若しくはＩ−ｂ〜Ｉ−ｈのいずれか１つを有する化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物であり、式中、Ｒ32は、−ＮＯ2である。
【００８６】
いくつかの実施形態では、阻害剤は、式Ｉ−ｂ〜Ｉ−ｅのいずれか１つを有する化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物であり、式中、Ｒ34aは：
【化２８】
2021535129.tif 000030
である。
【００８７】
いくつかの実施形態では、阻害剤は、式Ｉ−ａ若しくはＩ−ｆ〜Ｉ−ｈのいずれか１つを有する化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物であり、式中、Ｒ34a、Ｒ35、Ｒ36a、及びＲ37は、独立して：
【化２９】
2021535129.tif 000031
である。
【００８８】
いくつかの実施形態では、阻害剤は、式Ｉ−ｉを有する化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物であり、式中、Ｒ32aは、Ｈ又はＦであり、Ｒ34aは、式Ｉ−Ａについて定義されたとおりである。
【化３０】
2021535129.tif 000032
【００８９】
いくつかの実施形態では、阻害剤は、式Ｉ−ｉを有する化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物であり、式中、Ｒ34aは：
【化３１】
2021535129.tif 000033
である。
【００９０】
本出願の上記式Ｉ−Ａ〜Ｉ−ｉの阻害剤に関して、それ自体で又は別の基の一部としての用語「ハロゲン」は、−Ｃｌ、−Ｆ、−Ｂｒ、又は−Ｉを指す。
【００９１】
本出願の上記式Ｉ−Ａ〜Ｉ−ｉの阻害剤に関して、単独で又は別の基の一部として用いられる用語「ニトロ」は、−ＮＯ2を意味する。
【００９２】
本出願の上記式Ｉ−Ａ〜Ｉ−ｉの阻害剤に関して、そのようなものとして又は別の基の一部としての用語「シアノ」は、−ＣＮを指す。
【００９３】
本出願の上記式Ｉ−Ａ〜Ｉ−ｉの阻害剤に関して、単独で又は別の基の一部として用いられる用語「ヒドロキシ」は、−ＯＨを指す。
【００９４】
本出願の上記式Ｉ−Ａ〜Ｉ−Ｉの阻害剤に関して、それ自体で又は別の基の一部として用いられる用語「アミノ」は、−ＮＨ2を指す。
【００９５】
本出願の上記式Ｉ−Ａ〜Ｉ−ｉの阻害剤に関して、それ自体で又は別の基の一部として用いられる用語「アルキル」は、１〜１２個の炭素原子を含有する非置換の直鎖又は分枝鎖脂肪族炭化水素、即ち、Ｃ1-12アルキル、又は指定された数の炭素原子、例えば、メチルなどのＣ1アルキル、エチルなどのＣ2アルキル、プロピル若しくはイソプロピルなどのＣ3アルキル、メチル、エチル、プロピル、若しくはイソプロピルなどのＣ1-3アルキルなどを指す。一実施形態では、アルキルは、直鎖Ｃ1-6基である。別の実施形態では、アルキル基は分枝鎖Ｃ3-6アルキル基である。別の実施形態では、アルキル基は直鎖Ｃ1-4アルキル基である。別の実施形態では、アルキル基は分枝鎖Ｃ3-4アルキル基である。別の実施形態では、アルキル基は直鎖又は分枝鎖Ｃ3-4アルキル基である。別の実施形態では、アルキル基は、部分的に又は完全に重水素化されている、即ち、アルキル基の１個以上の水素原子は、重水素原子で置換されている。非限定的で例示的なＣ1-12アルキル基としては、メチル、−ＣＤ3、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、イソブチル、３−ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニル、及びデシルが挙げられる。非限定的で例示的なＣ1-4アルキル基としては、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、及びイソブチルが挙げられる。非限定的で例示的なＣ1-4基としては、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、及びｔｅｒｔ−ブチルが挙げられる。
【００９６】
本出願の上記式Ｉ−Ａ〜Ｉ−ｉの阻害剤に関して、それ自体で又は別の基の一部としての用語「任意選択的に置換されたアルキル」は、非置換のアルキル、又はハロゲン、ニトロ、シアノ、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、及び任意選択的に置換されたアリールから独立して選択される１つ、２つ、又は３つの置換基で置換されたアルキルを指す。一実施形態では、任意選択的に置換されたアルキルは２つの置換基で置換されている。別の実施形態では、任意選択的に置換されたアルキルは１つの置換基で置換されている。別の実施形態では、任意選択的に置換されたアルキルは非置換である。非限定的で任意選択的に置換されたアルキル基としては、−ＣＨ2Ｐｈ、−ＣＨ2ＣＨ2ＮＯ2、−ＣＨ2ＣＨ2ＯＨ、−ＣＨ2ＣＨ2ＯＣＨ3、及び−ＣＨ2ＣＨ2Ｆが挙げられる。
【００９７】
本出願の上記式Ｉ−Ａ〜Ｉ−ｉの阻害剤に関して、それ自体で又は別の基の一部としての用語「シクロアルキル」とは、非置換飽和又は部分的不飽和の、例えば、３個〜１２個の炭素原子を有する１つ〜３つの環を含有する、１個又は２個の二重結合を含有する、環状脂肪族炭化水素、即ち、Ｃ3-12シクロアルキル、又は指定された数の炭素原子を含有する、１個又は２個の二重結合を含有する、環状脂肪族炭化水素を指す。一実施形態では、シクロアルキル基は２つの環を有する。一実施形態では、シクロアルキル基は１つの環を有する。別の実施形態では、シクロアルキルは、Ｃ3-8シクロアルキルである。別の実施形態では、シクロアルキルは、Ｃ3-6シクロアルキルである。別の実施形態では、シクロアルキルは、Ｃ3-5シクロアルキルである。用語「シクロアルキル」は、−ＣＨ2−が−Ｃ（＝Ｏ）−で置換されている基を含むことを意味する。非限定的で例示的なシクロアルキル基としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチル、ノルボニル、デカリン、アダマンチル、シクロヘキセニル、シクロペンテニル、シクロペンタノン、スピロ［３．３］ヘプタン、及びビシクロ［３．３］ノナンが挙げられる。
【００９８】
本出願の上記式Ｉ−Ａ〜Ｉ−ｉの阻害剤に関して、それ自体で又は別の基の一部としての用語「任意選択的に置換されたシクロアルキル」は、非置換のシクロアルキル又は：ハロゲン、ニトロ、シアノ、ヒドロキシ、アルキル、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、ハロアルキル、及びヘテロシクリルから独立して選択される１つ、２つ又は３つの置換基で置換されたシクロアルキルを指す。一実施形態では、任意選択的に置換されたシクロアルキルは２つの置換基で置換されている。別の実施形態では、任意選択的に置換されたシクロアルキルは１つの置換基で置換されている。別の実施形態では、任意選択的に置換されたシクロアルキルは非置換である。
【００９９】
本出願の上記式Ｉ−Ａ〜Ｉ−ｉの阻害剤に関して、そのようなものとして又は別の基の一部としての用語「ハロアルキル」は、１個以上のフッ素原子、塩素原子、臭素原子及び／又はヨウ素原子で置換されているアルキル基を指す。一実施形態では、アルキル基は、１個、２個又は３個のフッ素原子及び／又は塩素原子で置換されている。別の実施形態では、ハロアルキルは、Ｃ1-4ハロアルキルである。非限定的で例示的なハロアルキル基としては、フルオロメチル、２−フルオロエチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、ペンタフルオロエチル、１，１−ジフルオロエチル、２，２−ジフルオロエチル、２，２，２−トリフルオロエチル、３，３，３−トリフルオロプロピル、４，４，４−トリフルオロブチル、及びトリクロロメチルが挙げられる。
【０１００】
本出願の上記式Ｉ−Ａ〜Ｉ−ｉの阻害剤に関して、それ自体で又は別の基の一部としての用語「アルコキシ」は、末端酸素原子に結合した任意選択的に置換されたアルキル基を指す。一実施形態では、アルコキシは、末端酸素原子に結合したＣ1-6アルキルである。別の実施形態では、アルコキシは、末端酸素原子に結合したＣ1-4アルキルである。非限定的で例示的なアルコキシ基としては、メトキシ、エトキシ、及びｔ−ブトキシが挙げられる。
【０１０１】
本出願の上記式Ｉ−Ａ〜Ｉ−ｉの阻害剤に関して、それ自体で又は別の基の一部としての用語「アリール」は、６〜１４個の炭素原子を有する非置換の単環式又は二環式芳香環系、即ち、Ｃ6-14アリールを指す。非限定的で例示的なアリール基としては、フェニル（「Ｐｈ」と略される）、ナフチル、フェナントリル、アントラシル、インデニル、アズレニル、ビフェニル、ビフェニレン、及びフルオレニルが挙げられる。一実施形態では、アリールは、フェニル又はナフチルである。
【０１０２】
本出願の上記式Ｉ−Ａ〜Ｉ−ｉの阻害剤に関して、それ自体で又は別の基の一部としての用語「任意選択的に置換されたアリール」は、非置換のアリール、又はハロゲン、ニトロ、シアノ、ヒドロキシ、アルキル、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、ハロアルキル、及びヘテロシクリルから独立して選択される１〜５つの置換基で置換されたアリールを指す。一実施形態では、任意選択的に置換されたアリールは、任意選択的に置換されたフェニルである。別の実施形態では、任意選択的に置換されたフェニル基は、１個の置換基を有する。別の実施形態では、任意選択的に置換されたフェニルは非置換である。非限定的で例示的な置換されたアリール基としては、２−メチルフェニル、２−メトキシフェニル、２−フルオロフェニル、及び４−クロロフェニルが挙げられる。
【０１０３】
本出願の上記式Ｉ−Ａ〜Ｉ−ｉの阻害剤に関して、それ自体で又は別の基の一部としての用語「ヘテロシクリル」は、非置換飽和又は部分的不飽和の、例えば、１つ又は２つの二重結合を含有し、３〜１４個の環員を有する１つ、２つ、又は３つの環を含有する環状基、即ち、１つの環の少なくとも１個の炭素原子がヘテロ原子で置換されている３〜１４員のヘテロ環を意味する。用語「ヘテロシクリル」は、イミダゾリジン−２−オンなどの環状尿素基、βラクタム、γラクタム、δラクタム、及びεラクタムなどの環状アミド基、並びにオキサゾリジン−２−オンなどの環状カルバメート基を包含することを意味する。一実施形態では、ヘテロシクリルは、１つの環、並びに１個若しくは２個の酸素原子及び／又は窒素原子を含有する、４−員環基、５−員環基、６−員環基，７−員環基、又は８−員環基である。一実施形態では、ヘテロシクリルは、１つの環、及び１個又は２個の窒素原子を含有する、５−員環基又は６−員環基である。一実施形態では、ヘテロシクリルは、２つの環、及び１個又は２個の窒素原子を含有する、８−員環基、９−員環基、１０−員環基、１１−員環基、又は１２−員環基である。一実施形態では、ヘテロシクリルは、１つの環、及び１個の酸素原子を含有する、４−員環基又は５−員環基である。ヘテロシクリル基は、任意選択的に、炭素原子又は窒素原子を介して分子の残部に結合していてもよい。非限定的で例示的なヘテロシクリル基としては、１，４−ジオキサン、２−オキソピロリジン−３−イル、２−イミダゾリジノン、ピペリジニル、モルホリニル、ピペラジニル、ピロリジニル、８−アザビシクロ［３．２．１］オクタン（ノルトロパン）、６−アザスピロ［２．５］オクタン、６−アザスピロ［３．４］オクタン、インドリニル、インドリン−２−オン、及び１，３−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２−オンが挙げられる。
【０１０４】
本出願の上記式Ｉ−Ａ〜Ｉ−ｉの阻害剤に関して、本明細書で使用されるそれ自体で又は別の基の一部としての用語「任意選択的に置換されたヘテロシクリル」は、非置換のヘテロシクリル又は：ハロゲン、ニトロ、シアノ、ヒドロキシ、アルキル、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、ハロアルキル、及びヘテロシクリルから独立して選択される１つ、２つ又は３つの置換基で置換されたヘテロシクリルを指す。非限定的な任意選択的に置換されたヘテロシクリル基としては：
【化３２】
2021535129.tif 000034
が挙げられる。
【０１０５】
本出願の上記式Ｉ−Ａ〜Ｉ−ｉの阻害剤に関して、単独で又は別の基の一部として用いられる用語「アルキルアミノ」は、−ＮＨＲ10［式中、Ｒ10はＣ1-6アルキルである］を指す。一実施形態では、Ｒ10はＣ1-4アルキルである。非限定的で例示的なアルキルアミノ基としては、−Ｎ（Ｈ）ＣＨ3及び−Ｎ（Ｈ）ＣＨ2ＣＨ3が挙げられる。
【０１０６】
本出願の上記式Ｉ−Ａ〜Ｉ−ｉの阻害剤に関して、単独で又は別の基の一部として用いられる用語「ジアルキルアミノ」は、−ＮＲ11aＲ11b［式中、Ｒ11a及びＲ11bは、各々独立して、Ｃ1-6アルキルである］を指す。一実施形態では、Ｒ11a及びＲ11bは、各々独立して、Ｃ1-4アルキルである。非限定的で例示的なジアルキルアミノ基としては、−Ｎ（ＣＨ3）2及び−Ｎ（ＣＨ3）ＣＨ2ＣＨ（ＣＨ3）2が挙げられる。
【０１０７】
本出願の上記式Ｉ−Ａ〜Ｉ−ｉの阻害剤に関して、それ自体で又は別の基の一部として用いられる用語「（シクロアルキル）アルキル」は、１つの任意選択的に置換されたシクロアルキルで置換されているアルキル基を指す。一実施形態では、（シクロアルキル）アルキルは、１つの任意選択的に置換されたＣ3-6シクロアルキルで置換されたＣ1-4アルキルである。一実施形態では、任意選択的に置換されたシクロアルキルは、ヘテロシクリルで置換されている。非限定的で例示的な（シクロアルキル）アルキル基としては：
【化３３】
2021535129.tif 000035
が挙げられる。
【０１０８】
本出願の上記式Ｉ−Ａ〜Ｉ−ｉの阻害剤に関して、それ自体で又は別の基の一部として用いられる用語「ヘテロシクロアルキル」は、１つの任意選択的に置換されたヘテロ環基で置換されているアルキル基を指す。一実施形態では、ヘテロシクロアルキルは、１つの任意選択的に置換された４〜６員ヘテロシクリルで置換されているＣ1-4アルキル基である。ヘテロ環基は、炭素原子又は窒素原子を介してアルキル基に結合していてもよい。非限定的で例示的な（ヘテロ環）アルキル基としては：
【化３４】
2021535129.tif 000036
が挙げられる。
【０１０９】
本出願の上記式Ｉ−Ａ〜Ｉ−ｉの阻害剤に関して、それ自体で又は別の基の一部として用いられる用語「ヘテロアルキル」は、６〜１２個の鎖原子を含有する非置換の直鎖又は分枝鎖脂肪族炭化水素、即ち、６〜１２員のヘテロアルキル、又は指定された数の鎖原子を含有する非置換の直鎖又は分枝鎖脂肪族炭化水素を指し、ここで少なくとも２つの−ＣＨ2−基は、独立して−Ｏ−、−Ｎ（Ｈ）−、又は−Ｓ−により置換されている。−Ｏ−、−Ｎ（Ｈ）−、又は−Ｓ−は、各−Ｏ−、−Ｎ（Ｈ）−、又は−Ｓ−基が、少なくとも２つの−ＣＨ2−基によって分離されている場合、脂肪族炭化水素鎖の任意の内部位置に独立して配置されてもよい。一実施形態では、２つの−ＣＨ2−基は、２つの−Ｏ−基によって置換されている。別の実施形態では、３つの−ＣＨ2−基は、３つの−Ｏ−基によって置換されている。非限定的で例示的なヘテロアルキル基としては、−ＣＨ2ＣＨ2ＯＣＨ2ＣＨ2ＯＣＨ3、−ＣＨ2ＣＨ2ＯＣＨ2ＣＨ2Ｎ（Ｈ）ＣＨ3、及び−ＣＨ2ＣＨ2ＯＣＨ2ＣＨ2ＯＣＨ2ＣＨ2ＯＣＨ3が挙げられる。
【０１１０】
いくつかの実施形態では、式Ｉ−Ａ〜Ｉ−ｉの阻害剤は、以下の表中の化合物のうちの１つ以上又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物である。
【０１１１】
【表１】
2021535129.tif 000037
【０１１２】
【表２】
2021535129.tif 000038
【０１１３】
【表３】
2021535129.tif 000039
【０１１４】
【表４】
2021535129.tif 000040
【０１１５】
【表５】
2021535129.tif 000041
【０１１６】
【表６】
2021535129.tif 000042
【０１１７】
いくつかの実施形態では、式Ｉ−Ａ〜Ｉ−ｉの阻害剤は、表１−Ａの１つ以上の化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物である。
【０１１８】
【表７】
2021535129.tif 000043
【０１１９】
【表８】
2021535129.tif 000044
【０１２０】
【表９】
2021535129.tif 000045
【０１２１】
【表１０】
2021535129.tif 000046
【０１２２】
【表１１】
2021535129.tif 000047
【０１２３】
【表１２】
2021535129.tif 000048
【０１２４】
【表１３】
2021535129.tif 000049
【０１２５】
【表１４】
2021535129.tif 000050
【０１２６】
【表１５】
2021535129.tif 000051
【０１２７】
いくつかの実施形態では、式Ｉ−Ａ〜Ｉ−ｉの阻害剤は、表１−Ｂの化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物である。
【０１２８】
【表１６】
2021535129.tif 000052
【０１２９】
いくつかの実施形態では、式Ｉ−Ａ〜Ｉ−ｉの阻害剤は、表１−Ｃの化合物の１つ以上から選択される化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物である。
【０１３０】
【表１７】
2021535129.tif 000053
【０１３１】
【表１８】
2021535129.tif 000054
【０１３２】
【表１９】
2021535129.tif 000055
【０１３３】
上記一般式Ｉ−Ａ、Ｉ−ｂ〜Ｉ−ｉの化合物及び本発明で使用される個々の具体的な化合物は、国際公開第２０１８／０２７０９７Ａ１号パンフレットに開示されており、国際公開第２０１８／０２７０９７Ａ１号パンフレット（その全体の内容が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されている方法に従って合成し、活性について試験することができる。
【０１３４】
本発明にて使用するための上記一般式Ｉ−Ａ、Ｉ−ｂ〜Ｉ−ｉの化合物は、約１０μＭ未満のＢｃｌ−２及び／又はＢｃｌ−ｘＬのＩＣ５０、例えば、約５μＭ未満、約１μＭ未満、約０．５μＭ未満、約０．１μＭ未満、約０．０５μＭ未満、約０．０２５μＭ未満、約０．０１０μＭ未満、約０．００５μＭ未満、約０．００２５μＭ未満、約０．００１μＭ未満のＢｃｌ−２及び／又はＢｃｌ−ｘＬのＩＣ５０を有する。特に、表１及び表１−Ａ、１−Ｂ、並びに１−Ｃに記載されている化合物は、Ｂｃｌ−２に対する選択的阻害活性を示す。
【０１３５】
いくつかの実施形態では、Ｂｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤は、一般式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、又は（ＩＶ）：
【化３５】
2021535129.tif 000056
［式中、環Ａ1は
【化３６】
2021535129.tif 000057
であり、
置換又は非置換のＸ11は、アルキレン、アルケニレン、シクロアルキレン、シクロアルケニレン、及びヘテロシクロアルキレンからなる群から選択され；
Ｙ11は、（ＣＨ2）nＮ（Ｒ11a）及び
【化３７】
2021535129.tif 000058
からなる群から選択され、
Ｑ11は、Ｏ、Ｏ（ＣＨ2）1-3、ＮＲ11c、ＮＲ11c（Ｃ1-3アルキレン）、ＯＣ（＝Ｏ）（Ｃ1-3アルキレン）、Ｃ（＝Ｏ）Ｏ、Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（Ｃ1-3アルキレン）、ＮＨＣ（＝Ｏ）（Ｃ1-3アルキレン）、Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ、及びＣ（＝Ｏ）ＮＨ（Ｃ1-3アルキレン）からなる群から選択され；
Ｚ11は、Ｏ又はＮＲ11cであり；
Ｒ11及びＲ12は、独立して、Ｈ、ＣＮ、ＮＯ2、ハロゲン、アルキル、シクロアルキル、アルケニル、シクロアルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル、ＯＲ1’、ＳＲ1’、ＮＲ1’Ｒ1’’、ＣＯＲ1’、ＣＯ2Ｒ1’、ＯＣＯＲ1’、ＣＯＮＲ1’Ｒ1’’、ＣＯＮＲ1’ＳＯ2Ｒ1’’、ＮＲ1’ＣＯＲ1’’、ＮＲ1’ＣＯＮＲ1’’Ｒ1’’’、ＮＲ1’Ｃ＝ＳＮＲ1’’Ｒ1’’’、ＮＲ1’ＳＯ2Ｒ1’’、ＳＯ2Ｒ1’、及びＳＯ2ＮＲ1’Ｒ1’’からなる群から選択され；
Ｒ13は、Ｈ、アルキル、シクロアルキル、アルケニル、シクロアルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル、ＯＲ1’、ＮＲ1’Ｒ1’’、ＯＣＯＲ1’、ＣＯ2Ｒ1’、ＣＯＲ1’、ＣＯＮＲ1’Ｒ1’’、ＣＯＮＲ1’ＳＯ2Ｒ1’’、Ｃ1-3アルキレンＣＨ（ＯＨ）ＣＨ2ＯＨ、ＳＯ2Ｒ1’、及びＳＯ2ＮＲ1’Ｒ1’’からなる群から選択され；
Ｒ1’、Ｒ1’’、及びＲ1’’’は、各々独立して、Ｈ、アルキル、シクロアルキル、アルケニル、シクロアルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、Ｃ1-3アルキレンヘテロシクロアルキル、又はヘテロシクロアルキルであり；
Ｒ1’及びＲ1’’又はＲ1’’及びＲ1’’’は、それらが結合している原子と合わせて、３〜７員環を形成し得；
Ｒ14は、水素、ハロゲン、Ｃ1-3アルキル、ＣＦ3又はＣＮであり；
Ｒ15は、水素、ハロゲン、Ｃ1-3アルキル、置換Ｃ1-3アルキル、ヒドロキシアルキル、アルコキシ、又は置換アルコキシであり；
Ｒ16は、Ｈ、ＣＮ、ＮＯ2、ハロゲン、アルキル、シクロアルキル、アルケニル、シクロアルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル、ＯＲ1’、ＳＲ1’、ＮＲ1’Ｒ1’’、ＣＯ2Ｒ1’、ＯＣＯＲ1’、ＣＯＮＲ1’Ｒ1’’、ＣＯＮＲ1’ＳＯ2Ｒ1’’、ＮＲ1’ＣＯＲ1’’、ＮＲ1’ＣＯＮＲ1’’Ｒ1’’’、ＮＲ1’Ｃ＝ＳＮＲ1’’Ｒ1’’’、ＮＲ1’ＳＯ2Ｒ1’’、ＳＯ2Ｒ1’、及びＳＯ2ＮＲ1’Ｒ1’’からなる群から選択され；
置換又は非置換のＲ17は、水素、アルキル、アルケニル、（ＣＨ2）0-3−シクロアルキル、（ＣＨ2）0-3−シクロアルケニル、（ＣＨ2）0-3−ヘテロシクロアルキル、（ＣＨ2）0-3アリール、及び（ＣＨ2）0-3ヘテロアリールからなる群から選択され；
Ｒ18は、水素、ハロゲン、ＮＯ2、ＣＮ、ＣＦ3ＳＯ2、及びＣＦ3からなる群から選択され；
Ｒ11aは、水素、アルキル、ヘテロアルキル、アルケニル、ヒドロキシアルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、シクロアルキル、シクロアルケニル、及びヘテロシクロアルキルからなる群から選択され；
Ｒ11bは、水素又はアルキルであり；
Ｒ11cは、水素、アルキル、置換アルキル、ヒドロキシアルキル、アルコキシ及び置換アルコキシからなる群から選択され；
ｎ1、ｒ1、及びｓ１は、各々独立して、１、２、３、４、５、又は６であり；
Ｒ21は、ＳＯ2Ｒ2’であり；
Ｒ22は、アルキル、好ましくはＣ1-4アルキル、より好ましくはメチル、プロピル、又はイソプロピルであり；
Ｒ23は、アルキル、好ましくはＣ1-4アルキル、より好ましくはメチル、プロピル、又はイソプロピルであり；
Ｒ24は、ハロゲン、好ましくはフッ素、塩素であり；
Ｒ25は、ハロゲン、好ましくはフッ素、塩素であり；
Ｒ26は、Ｈ、ハロゲン、及びアルキル、好ましくはフルオロ、クロロ、Ｃ1-4アルキル、より好ましくはメチル、プロピル、又はイソプロピルからなる群から選択され；
Ｒ21bは、Ｈ又はアルキル、好ましくはＣ1-4アルキル、より好ましくはメチル、プロピル、又はイソプロピルであり；
ｎ2、ｒ2、及びｓ2は、各々独立して、１、２、３、４、５、又は６であり、より好ましくは、ｒ2及びｓ2は、両方とも２であり、ｎ2は、３、４、又は５であり、より好ましくは、ｎ2、ｒ2、及びｓ2は全て、２であり；
Ｒ2’は、アルキル、好ましくはＣ1-4アルキル、より好ましくはメチル、プロピル、又はイソプロピルである］
を有する化合物である。
【０１３６】
上記の一般式（Ｉ）、（ＩＩ）又は（ＩＩＩ）において、いくつかの実施形態では、Ｒ11及びＲ12又はＲ12及びＲ13は、合わせて環を形成し得る。他の実施形態では、Ｒ1’及びＲ1’’又はＲ1’’及びＲ1’’’は、それらが結合している原子と合わせて、３〜７員環を形成し得る。
【０１３７】
いくつかの好ましい実施形態では、Ｘ11は、アルキレンであり、好ましい実施形態では、Ｃ1-3アルキレンである。
【０１３８】
いくつかの実施形態では、Ｙ11は、
【化３８】
2021535129.tif 000059
である。
【０１３９】
好ましい実施形態では、ｎ1は、２である。他の好ましい実施形態では、Ｒ11bは、水素又はＣ1-3アルキルである。
【０１４０】
他の好ましい実施形態では、Ｑ11は、Ｏ、Ｏ（ＣＨ2）1-3、Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（ＣＨ2）1-3、ＯＣ（＝Ｏ）（ＣＨ2）1-3、又はＣ（＝Ｏ）Ｏ（Ｃ3Ｈ7）1-3である。いくつかの実施形態では、Ｑ11は、Ｏ、ＯＣＨ2、Ｃ（＝Ｏ）ＯＣＨ2、Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（ＣＨ2）2、Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（ＣＨ2）3、ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ2、又はＣ（＝Ｏ）Ｏ（ＣＨ（ＣＨ3）ＣＨ2）である。
【０１４１】
いくつかの実施形態では、Ｚ11は、Ｏ、ＮＨ又はＮ（Ｃ1-3アルキル）である。好ましい実施形態では、Ｚ11は、Ｏ、ＮＨ、又はＮＣＨ3である。
【０１４２】
いくつかの実施形態では、Ｒ11は、ＳＯ2Ｒ1’、ＳＯ2ＮＲ1’Ｒ1’’、ＮＲ1’ＳＯＲ1’’、Ｈ又はアルキルである。いくつかの好ましい実施形態では、Ｒ11は、ＳＯ2（Ｃ1-3アルキル）、ＳＯ2Ｎ（Ｃ1-3アルキル）2、ＮＨＳＯ2（Ｃ1-3アルキル）、Ｈ、又はＣ1-3アルキルである。Ｒ11の好ましい一実施形態は、ＳＯ2ＣＨ3である。
【０１４３】
いくつかの実施形態では、Ｒ12及びＲ13は、独立して、Ｈ、Ｃ1-3アルキル又はシクロアルキルである。Ｒ12は、また、ハロゲンであり得る。いくつかの好ましい実施形態では、Ｒ12及びＲ13は、独立して、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、シクロペンチル、又はシクロヘキシルである。Ｒ12は、また、Ｃｌ又はＦであり得る。
【０１４４】
いくつかの実施形態では、Ｒ14は、Ｈ又はハロゲンであり、好ましくはＨ、Ｃｌ、又はＦである。他の実施形態では、Ｒ15は、Ｈ、ハロゲン又はＣ1-3アルキルであり、好ましくはＨ、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、Ｆ、又はＣｌである。他の実施形態では、Ｒ16は、Ｈ、ハロゲン、アルキル、又はシクロアルキルである。いくつかの好ましい実施形態では、Ｒ16は、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｃ1-3アルキル、シクロペンチル、又はシクロヘキシルである。
【０１４５】
いくつかの実施形態では、Ｒ17は、（ＣＨ2）0-3-シクロアルキル又は（ＣＨ2）0-3ヘテロシクロアルキルである。好ましい実施形態では、Ｒ17は、（ＣＨ2）0-3-シクロアルキルであり、任意選択的に−ＯＨで置換される。一実施形態では、Ｒ17は、
【化３９】
2021535129.tif 000060
である。
【０１４６】
いくつかの実施形態では、Ｒ18は、ＣＦ3ＳＯ2又はＣＦ3である。様々な実施形態では、Ｒ11a、Ｒ11b及びＲ11Cは、各々独立して、Ｈ又はＣ1-3アルキルである。
【０１４７】
本発明の一般式（Ｉ）〜（ＩＶ）の上記Ｂｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤について、用語「アルキル」は、直鎖又は分枝鎖飽和Ｃ1-10炭化水素基を指し、その非限定的な例としては、メチル、エチル及び直鎖又は分枝鎖プロピル、ブチル、ペンチル、へキシル、ヘプチル、オクチル、ノニル、並びにデシルが挙げられる。用語「Ｃn」は、アルキル基がｎ個の炭素原子を有することを意味する。用語「アルキレン」は、置換基を有するアルキル基を指す。メチルなどのアルキル又は−ＣＨ2−などのアルキレンは、非置換であるか、又は例えば、ハロゲン、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、ヒドロキシ、アルコキシ、ニトロ、シアノ、アルキルアミノ、若しくはアミノで置換されていてもよい。
【０１４８】
本発明の一般式（Ｉ）〜（ＩＶ）の上記Ｂｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤について、用語「アルケニル」及び「アルケニレン」は、炭素−炭素二重結合を含むことを除いて、用語「アルキル」及び「アルキレン」と同じように定義される。用語「アルキニル」及び「アルキニレン」は、炭素−炭素三重結合を含むことを除いて、用語「アルキル」及び「アルキレン」と同じように定義される。
【０１４９】
本発明の一般式（Ｉ）〜（ＩＶ）の上記Ｂｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤について、用語「アリール」は、単環式又は多環式芳香族基、好ましくは単環式又は二環式芳香族基を指す。別段の指示がない限り、アリール基は、非置換であるか、又は例えば、ハロゲン、アルキル、アルケニル、−ＯＣＦ3、−ＣＦ3、−ＮＯ2、−ＣＮ、−ＮＣ、−ＯＨ、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、−ＣＯ2Ｈ、−ＣＯ2アルキル、−ＯＣＯアルキル、アリール、及びヘテロアリールから独立して選択される、１つ以上、特に１〜４つの基により置換されていてもよい。
【０１５０】
本発明による一般式（Ｉ）〜（ＩＶ）の上記Ｂｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤について、用語「ヘテロアリール」は、１つ又は２つの芳香環、及び芳香環に少なくとも１個の窒素、酸素、又は硫黄原子を含む単環式又は二環式環系を指す。別段の指示がない限り、ヘテロアリール基は、非置換であるか、又は例えば、ハロゲン、アルキル、アルケニル、−ＯＣＦ3、−ＣＦ3、−ＮＯ2、−ＣＮ、−ＮＣ、−ＯＨ、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、−ＣＯ2Ｈ、−ＣＯ2アルキル、−ＯＣＯアルキル、アリール、及びヘテロアリールから選択される、１つ以上、特に１〜４つの置換基により置換されていてもよい。
【０１５１】
本発明の一般式（Ｉ）〜（ＩＶ）の上記Ｂｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤について、用語「シクロアルキル」は、３〜８個の炭素原子を含有する単環式脂肪族環を指す。用語「ヘテロシクロアルキル」は、環系に少なくとも１個の窒素、酸素、又は硫黄原子を含む単環式又は二環式環系を指す。用語「ヘテロアリール」及び「ヘテロシクロアルキル」は、少なくとも１個の酸素、窒素、又は硫黄原子を含む環系を含み、酸素及び窒素原子、酸素及び硫黄原子、窒素及び硫黄原子、並びに窒素、酸素及び硫黄原子を含む環系を含む。
【０１５２】
いくつかの実施形態では、一般式（Ｉ）〜（ＩＶ）のＢｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤は、下の表２の化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物から選択される。
【０１５３】
【表２０】
2021535129.tif 000061
【０１５４】
【表２１】
2021535129.tif 000062
【０１５５】
【表２２】
2021535129.tif 000063
【０１５６】
【表２３】
2021535129.tif 000064
【０１５７】
【表２４】
2021535129.tif 000065
【０１５８】
【表２５】
2021535129.tif 000066
【０１５９】
【表２６】
2021535129.tif 000067
【０１６０】
【表２７】
2021535129.tif 000068
【０１６１】
【表２８】
2021535129.tif 000069
【０１６２】
【表２９】
2021535129.tif 000070
【０１６３】
【表３０】
2021535129.tif 000071
【０１６４】
いくつかの実施形態では、一般式（Ｉ）〜（ＩＶ）のＢｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤は、（Ｒ）−２−（１−（３−（４−（Ｎ−（４−（４−（３−（２−（４−クロロフェニル）−１−イソプロピル−５−メチル−４−（メチルスルホニル）−１Ｈ−ピロール−３−イル）−５−フルオロフェニル）ピペラジン−１−イル）フェニル）スルファモイル）−２−（トリフルオロメチルスルホニル）フェニルアミノ）−４−（フェニルスルファニル）ブチル）ピペリジン−４−カルボニルオキシ）プロピルホスホン酸（即ち、上記表中の化合物８１、単に「化合物８１」と呼ばれることもある）又はその薬学的に許容される塩であり、以下の構造式で表される。
【化４０】
2021535129.tif 000072
【０１６５】
化合物８１は、第２世代の新しい標的ＢＣＬ−２／Ｂｃｌ−ｘＬタンパク質阻害剤であり、Ｂｃｌ−２、Ｂｃｌ−ｘＬ、及びＢｃｌ−ｗタンパク質と高い親和性で選択的に結合し、ＩＣ５０は、それぞれ、１．６ｎＭ、４．４ｎＭ、及び９．３ｎＭである。化合物８１は、Ｍｃｌ−１に弱く結合する。化合物８１は、化学構造の修飾により、血液循環における第１世代のＢＣＬ−２阻害剤の血小板毒性の欠陥を効果的に低減するが、組織内の特定の酵素によって活性化され、腫瘍細胞を効果的に殺すこともできる；その血小板毒性は１０〜３０倍減少するが、その活性は第１世代のＢＣＬ−２阻害剤の約１０倍である。
【０１６６】
本発明による一般式（Ｉ）〜（ＩＶ）のＢｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤は、また、好ましくは（Ｒ）−１−（３−（４−（Ｎ−（４−（４−（３−（２−（４−クロロフェニル）−１−イソプロピル−５−メチル−４−（メチルスルホニル）−１Ｈ−ピロール−３−イル）−５−フルオロフェニル）ピペラジン−１−イル）フェニル）−スルファモイル）−２−（トリフルオロメチルスルホニル）フェニルアミノ）−４−（フェニルスルファニル）ブチル）ピペリジン−４−カルボン酸（即ち、上記表中の化合物９７、「化合物９７」と略されることもあり、化合物８１の活性代謝物である化合物９７）又はその薬学的に許容される塩であり、以下の構造式で表される。
【化４１】
2021535129.tif 000073
【０１６７】
本発明の医薬組成物中の上記一般式（Ｉ）〜（Ｖ）のＢｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤は、国際公開第２０１４／１１３４１３Ａ１号パンフレットにおいて記載される方法に従って、合成し、その活性を検証することができる。
【０１６８】
上記式（Ｉ）、（ＩＩ）、又は（ＩＩＩ）の化合物は、国際公開第２０１４／１１３４１３Ａ１号パンフレット（その全体の内容が参照により本明細書に組み込まれる）において開示されている。上記一般式（ＩＶ）は、ＰＣＴ特許出願番号ＰＣＴ／ＣＮ２０１９／０７０５０８号明細書（その明細書の全体の内容が参照により本明細書に組み込まれる）において開示されている。
【０１６９】
いくつかの実施形態では、本発明で使用される化学療法剤は、アクチノマイシン、オールトランスレチノイン酸、アザシチジン、アザチオプリン、ブレオマイシン、ボルテゾミブ、カルボプラチン、カペシタビン、シスプラチン、クロラムブシル、シクロホスファミド、シタラビン、ダウノルビシン、ドキシフルリジン、ドキソルビシン、エピルビシン、バルルビシン、アドリアマイシン、エポチロン、フルオロウラシル、ゲムシタビン、ヒドロキシウレア、イダルビシン、イマチニブ、イリノテカン、メクロレタミン、メルカプトプリン、メトトレキサート、ミトキサントロン、オキサリプラチン、パクリタキセル、ドセタキセル、ペメトレキセド、テニポシド、エトポシド、チオグアニン、トポテカン、ベムラフェニブ、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、ビノレルビン、カンプトテシン、又はヒドロキシカンプトテシンのうちの１つ以上から選択される。
【０１７０】
いくつかの実施形態では、化学療法剤は、セファロタキシン、ハリングトニン、イソハリングトニン、ホモハリングトニン、デオキシハリングトニン、ホモデオキシハリングトニン、ドルパシン、デメチルセファロタキシノン、１１−ヒドロキシセファロタキシン、又はエピウィルソニンが挙げられるがこれらに限定されない、セファロタキシンアルカロイド又はその活性誘導体からなる群から選択される。
【０１７１】
好ましい実施形態では、化学療法剤は、ホモハリングトニン又はその活性誘導体である。
【０１７２】
いくつかの実施形態では、組み合わせ製品は、医薬組成物の形態である。
【０１７３】
いくつかの実施形態では、Ｂｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤及び化学療法剤は、各々別々の製剤中にある。
【０１７４】
いくつかの実施形態では、組み合わせ製品は、キットの形態である。
【０１７５】
いくつかの実施形態では、Ｂｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤及び化学療法剤は、同時に又は逐次的に投与される。
【０１７６】
いくつかの実施形態では、Ｂｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤及び化学療法剤は、約１分、約５分、約１０分、約１５分、約３０分、約４５分、約１時間、約２時間、約４時間、約６時間、約１２時間、約２４時間、約４８時間、約７２時間、約９６時間、約１週間、約２週間、約３週間、約４週間、約５週間、約６週間、約８週間、又は約１２週間の時間間隔で逐次的に投与される。
【０１７７】
いくつかの実施形態では、医薬組成物の形態の（好ましくは、各々別々の単位剤形の）Ｂｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤及び化学療法剤を含む本発明の組み合わせ製品は、限定されるわけではないが、必要に応じて、１日に：１、２、３、４、５、又は６回投与され得る。
【０１７８】
いくつかの実施形態では、医薬組成物の形態の（好ましくは、単位剤形の）Ｂｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤及び化学療法剤を含む本発明の組み合わせ製品は、限定されるわけではないが、必要に応じて、１日に：１、２、３、４、５、又は６回投与され得る。
【０１７９】
いくつかの実施形態では、組み合わせ製品は：経口、頬側、吸入スプレー、舌下、直腸、経皮、膣粘膜、経粘膜、局所、経鼻又は腸内投与；注射、例えば筋肉内注射、皮下注射、髄内注射並びに髄腔内、脳への直接的な投与、生体内原位置投与、皮下、腹腔内、静脈内注射、関節滑膜内、胸骨内、肝臓内、病巣内、頭蓋内、腹腔内、経鼻若しくは眼球内注射又は他の薬物送達様式により投与され得る。
【０１８０】
いくつかの実施形態では、Ｂｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物は、体重６０ｋｇの成人に約０．００２５〜１５００ｍｇ／日の量で投与される。上記Ｂｃｌ−２選択的阻害剤の量は、１ｍｇ、５ｍｇ、１０ｍｇ、２０ｍｇ、３０ｍｇ、４０ｍｇ、５０ｍｇ、６０ｍｇ、７０ｍｇ、８０ｍｇ、９０ｍｇ、１００ｍｇ、１５０ｍｇ、２００ｍｇ、２５０ｍｇ、３００ｍｇ、３５０ｍｇ、４００ｍｇ、４５０ｍｇ、４６０ｍｇ、４７０ｍｇ、４８０ｍｇ、４８７ｍｇ、４９０ｍｇ、５００ｍｇ、５５０ｍｇ、６００ｍｇ、６５０ｍｇ、７００ｍｇ、７５０ｍｇ、８００ｍｇ、８５０ｍｇ、９００ｍｇ、９５０ｍｇ、１０００ｍｇであり、例えば、１ｍｇ〜１０００ｍｇ、３０ｍｇ〜９００ｍｇ、３０ｍｇ〜８００ｍｇ、３０ｍｇ〜９００ｍｇ、３０ｍｇ〜８００ｍｇ、３０ｍｇ〜７００ｍｇ、３０ｍｇ〜６００ｍｇ、３０ｍｇ〜５００ｍｇ、３０ｍｇ〜４９０ｍｇ、３０ｍｇ〜４８７ｍｇなどの量の間の範囲であり、化学療法剤又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物は、約０．００５ｍｇ／日〜約５０００ｍｇ／日の量で投与される。ホモハリングトニンなどの化学療法剤の量は、０．１ｍｇ、０．２ｍｇ、０．３ｍｇ、０．４ｍｇ、０．５ｍｇ、０．６ｍｇ、０．７ｍｇ、０．８ｍｇ、０．９ｍｇ、１ｍｇ、２ｍｇ、３ｍｇ、４ｍｇ、４．１ｍｇ、４．２ｍｇ、４．３ｍｇ、４．４ｍｇ、４．５ｍｇ、４．６ｍｇ、４．７ｍｇ、４．８ｍｇ、４．８８ｍｇ、４．９ｍｇ、５ｍｇ、６ｍｇ、７ｍｇ、８ｍｇ、９ｍｇ、１０ｍｇ、１５ｍｇ、２０ｍｇ、２５ｍｇ、３０ｍｇ、３５ｍｇ、４０ｍｇ、４５ｍｇ、５０ｍｇ、５５ｍｇ、６０ｍｇ、６５ｍｇ、７０ｍｇ、７５ｍｇ、８０ｍｇ、８５ｍｇ、９０ｍｇ、９５ｍｇ、１００ｍｇ、１５０ｍｇ、２００ｍｇ、２５０ｍｇ、３００ｍｇ、３５０ｍｇ、４００ｍｇ、４５０ｍｇ、５００ｍｇ、５５０ｍｇ、６００ｍｇ、６５０ｍｇ、７００ｍｇ、７５０ｍｇ、８００ｍｇ、８５０ｍｇ、９００ｍｇ、９５０ｍｇ、１０００ｍｇであり、例えば、０．１〜１０００ｍｇ、０．５ｍｇ〜１０００ｍｇ、１ｍｇ〜１０００ｍｇ、４．８８ｍｇ〜１０００ｍｇ、４．８８ｍｇ〜９００ｍｇ、４．８８ｍｇ〜８００ｍｇ、４．８８ｍｇ〜７００ｍｇ、４．８８ｍｇ〜６００ｍｇ、４．８８ｍｇ〜５００ｍｇ、４．８８ｍｇ〜４００ｍｇ、４．８８ｍｇ〜３００ｍｇ、４．８８ｍｇ〜２００ｍｇ、４．８８ｍｇ〜１００ｍｇ、４．８８ｍｇ〜５０ｍｇ、４．８８ｍｇ〜１０ｍｇなどの量の間の範囲である。
【０１８１】
いくつかの実施形態では、組み合わせ製品は、薬学的に許容される担体、希釈剤又は賦形剤を更に含む。
【０１８２】
いくつかの実施形態では、組み合わせ製品は、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、シロップ剤、散剤、トローチ剤、サシェ剤、カシェ剤、エリキシル剤、懸濁剤、乳剤、液剤、シロップ剤、噴霧剤、軟膏剤、クリーム剤、及び注射剤の形態である。
【０１８３】
第２の態様では、本発明は、癌から選択される疾患を予防及び／又は治療するための医薬の調製のための、Ｂｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤及び化学療法剤の使用に関する。
【０１８４】
いくつかの実施形態では、Ｂｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤及び化学療法剤は、それらの化合物（例えば、化合物Ｉ−Ａ、又は式（Ｉ）〜（ＩＶ）の化合物）であり、本発明の第１の態様に具体的に記載されている化学療法剤又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物である。
【０１８５】
いくつかの実施形態では、医薬は、医薬組成物の形態である。
【０１８６】
いくつかの実施形態では、Ｂｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤及び化学療法剤は、各々別々の製剤中にある。
【０１８７】
いくつかの実施形態では、Ｂｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤及び化学療法剤は、同時に又は逐次的に投与される。
【０１８８】
いくつかの実施形態では、Ｂｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤及び化学療法剤は、約１分、約５分、約１０分、約１５分、約３０分、約４５分、約１時間、約２時間、約４時間、約６時間、約１２時間、約２４時間、約４８時間、約７２時間、約９６時間、約１週間、約２週間、約３週間、約４週間、約５週間、約６週間、約８週間又は約１２週間の時間間隔で逐次的に投与される。
【０１８９】
いくつかの実施形態では、医薬組成物の形態の（好ましくは、各々別々の単位剤形の）Ｂｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤及び化学療法剤を含む本発明の医薬は、所望の場合、限定されるものではないが、１日に：１、２、３、４、５、又は６回投与され得る。
【０１９０】
いくつかの実施形態では、医薬組成物の形態の（好ましくは、単位剤形の）Ｂｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤及び化学療法剤を含む本発明の医薬は、所望の場合、限定されるものではないが、１日に：１、２、３、４、５、又は６回投与され得る。
【０１９１】
いくつかの実施形態では、医薬は：経口、頬側、吸入スプレー、舌下、直腸、経皮、膣粘膜、経粘膜、局所、経鼻又は腸内投与；注射、例えば筋肉内注射、皮下注射、髄内注射並びに髄腔内、脳への直接的な投与、生体内原位置投与、皮下、腹腔内、静脈内注射、関節滑膜内、胸骨内、肝臓内、病巣内、頭蓋内、腹腔内、経鼻若しくは眼球内注射又は他の薬物送達様式により投与され得る。
【０１９２】
いくつかの実施形態では、Ｂｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物及び化学療法剤又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物の一日量は、上記詳細な説明における本発明の第１の態様において記載されるとおりである。
【０１９３】
更に、本発明において記載される癌としては、副腎癌、リンパ上皮腫、腺房細胞癌、リンパ腫、聴神経腫瘍、急性リンパ性白血病、末端黒子型黒色腫、急性骨髄性白血病、先端汗腺腫、慢性リンパ性白血病、急性好酸球性白血病、肝臓癌、急性赤芽球性白血病、小細胞肺癌、急性リンパ性白血病、非小細胞肺癌、急性巨核芽球性白血病、ＭＡＬＴリンパ腫、急性単球性白血病、悪性線維性組織球腫、急性前骨髄球性白血病、前縦隔悪性末梢神経鞘腫瘍、腺癌、悪性トリトン腫瘍、腺様嚢胞癌、マントル細胞リンパ腫、腺腫、辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、腺様歯原性腫瘍、肥満細胞白血病、腺扁平上皮癌、縦隔胚細胞腫、脂肪組織腫瘍、乳腺髄様癌、副腎皮質癌、甲状腺髄様癌、成人Ｔ細胞白血病／リンパ腫、髄芽腫、アグレッシブＮＫ細胞白血病、黒色腫、ＡＩＤＳ関連リンパ腫、髄膜腫、胞巣状横紋筋肉腫、メルケル細胞癌、胞巣状軟部肉腫、中皮腫、エナメル上皮線維腫、転移性尿路上皮癌、未分化大細胞型リンパ腫、ミューラー管混合腫瘍、組織非形成性甲状腺癌、粘液性腫瘍、血管免疫芽球性Ｔ細胞リンパ腫、多発性骨髄腫、血管筋脂肪腫、筋組織腫瘍、血管肉腫、菌状息肉腫、星状細胞腫、粘液性脂肪肉腫、非定型奇形ラブドイド腫瘍、粘液腫、Ｂ細胞性慢性リンパ性白血病、粘液肉腫、Ｂ細胞性前リンパ球性白血病、上咽頭癌、Ｂ細胞リンパ腫、神経鞘腫、基底細胞癌、神経芽細胞腫、胆道癌、神経線維腫、膀胱癌、神経腫、芽細胞腫、結節性メラノーマ、骨癌、眼癌、ブレンナー腫瘍、乏突起膠星細胞腫、ブラウン腫瘍、乏突起神経膠腫、バーキットリンパ腫、オンコサイトーマ、乳癌、視神経鞘髄膜腫、脳癌、視神経腫瘍、細胞腫、口腔癌、上皮内癌、骨肉腫、癌肉腫、卵巣癌、軟骨腫瘍、パンコースト腫瘍、セメント質腫、甲状腺乳頭癌、骨髄肉腫、傍神経節腫、軟骨腫、松果体芽腫、脊索腫、松果体細胞腫、絨毛癌、下垂体細胞腫、脈絡叢乳頭腫、下垂体腺腫、腎臓明細胞肉腫、下垂体腫瘍、頭蓋咽頭腫、形質細胞腫、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、多胎芽腫、子宮頸癌、前駆Ｔリンパ芽球性リンパ腫、結腸直腸癌、原発性中枢神経系リンパ腫、デゴス病、原発性体液性リンパ腫、線維形成性小円形細胞腫瘍、原発性腹膜癌、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、前立腺癌、胚芽異形成性神経上皮腫瘍、膵臓癌、未分化胚細胞腫、咽頭癌、胚性癌腫、腹膜偽粘液腫、内分泌系腫瘍、腎細胞癌、卵黄嚢腫瘍、腎髄質癌、腸症関連Ｔ細胞リンパ腫、網膜芽細胞腫、食道癌、横紋筋腫、胎児内胎児、横紋筋肉腫、線維腫、リヒター形質転換、線維肉腫、直腸癌、濾胞性リンパ腫、肉腫、濾胞性甲状腺癌、神経鞘腫症、神経節腫、セミノーマ、胃腸癌、セルトリ細胞腫、胚細胞性腫瘍、性索性腺間質腫瘍、妊娠性絨毛癌、印環細胞癌、巨細胞性線維芽細胞腫、皮膚癌、骨巨細胞腫、小青円形細胞腫瘍、グリア系腫瘍、小細胞癌、多形神経膠芽腫、軟部肉腫、神経膠腫、ソマトスタチン産生腫瘍、大脳神経膠腫症、煤煙性いぼ、グルカゴン産生腫瘍、脊椎腫瘍、性腺芽腫、脾臓周辺帯リンパ腫、顆粒膜細胞腫、扁平上皮癌、男女性胚細胞腫、滑膜肉腫、胆嚢癌、セザリー病、胃癌、小腸癌、ヘアリーセル白血病、扁平上皮癌、血管芽腫、胃癌、頭頸部癌、Ｔ細胞リンパ腫、血管外皮腫、精巣癌、血液系腫瘍、莢膜腫瘍、肝芽腫、甲状腺癌、肝脾Ｔ細胞リンパ腫、移行上皮癌、ホジキンリンパ腫、喉頭癌、非ホジキンリンパ腫、尿膜管癌、浸潤性小葉癌、泌尿生殖器癌、腸癌、尿路上皮癌、腎臓癌、ぶどう膜黒色腫、喉頭癌、子宮癌、悪性黒子、疣状癌、正中線癌、視路グリオーマ、白血病、外陰癌、ライディッヒ細胞腫、腟癌、脂肪肉腫、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、肺癌、ワルチン腫瘍、リンパ管腫、ウィルムス腫瘍、及びリンパ管肉腫からなる群から選択される癌が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１９４】
好ましくは、癌は、膀胱癌、乳癌、子宮頸癌、結腸癌（結腸直腸癌を含む）、食道癌、頭頸部癌、肝臓癌、肺癌（小細胞肺癌及び非小細胞肺癌）、黒色腫、骨髄腫、神経芽細胞腫、卵巣癌、膵臓癌、前立腺癌、腎臓癌、肉腫（骨肉腫を含む）、皮膚癌（扁平上皮癌を含む）、胃癌、精巣癌、甲状腺癌、子宮癌、中皮腫、胆管細胞癌、平滑筋肉腫、脂肪肉腫、黒色腫、上咽頭癌、神経内分泌癌、卵巣癌、腎癌、唾液腺癌、紡錘細胞癌によって引き起こされる転移性腫瘍、非ホジキンリンパ腫、ホジキンリンパ腫、及び急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、濾胞性リンパ腫（ＦＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）などの血液悪性腫瘍からなる群から選択される。
【０１９５】
好ましくは、癌は、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性好酸球性細胞白血病、急性赤血球性白血病、急性巨核芽球性白血病、急性単球性白血病、急性前骨髄球性白血病、成人Ｔ細胞白血病／リンパ腫、アグレッシブＮＫ細胞白血病、肥満細胞白血病、有毛細胞白血病、混合性白血病、非ホジキンリンパ腫、ホジキンリンパ腫、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、濾胞性リンパ腫（ＦＬ）、Ｂ細胞リンパ腫、粘膜関連リンパ組織（ＭＡＬＴ）リンパ腫、未分化大細胞型リンパ腫、Ｔ細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫、Ｔ−リンパ芽球性リンパ腫、中枢神経系原発悪性リンパ腫、原発性滲出性リンパ腫、多発性骨髄腫、マクログロブリン血症、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、原発性血小板血症、真性多血症、原発性骨髄線維症が挙げられるが、これらに限定されない血液悪性腫瘍から選択される。
【０１９６】
好ましくは、癌は、化学療法に抵抗性のある上記のクラスのものである。
【０１９７】
最も好ましくは、癌は、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）又は骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、特に化学療法抵抗性急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）又は骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）である。
【０１９８】
第３の態様では、本発明は、癌の予防及び／又は治療にて使用するための、Ｂｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤及び化学療法剤を含む組み合わせ製品に関する。更に、癌としては、本発明の第２の態様における本発明の上記の詳細な説明に記載されているものが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１９９】
いくつかの実施形態では、Ｂｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤は、本発明の第１の態様において特に記載されている化合物（例えば、化合物Ｉ−Ａ、又は式（Ｉ）〜（ＩＶ）の化合物）又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物であり、化学療法剤は、本発明の第１の態様において特に記載されている物又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物である。
【０２００】
いくつかの実施形態では、組み合わせ製品は、医薬組成物の形態である。
【０２０１】
いくつかの実施形態では、Ｂｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤及び化学療法剤は、各々別々の製剤中にある。
【０２０２】
いくつかの実施形態では、組み合わせ製品は、キットの形態である。
【０２０３】
いくつかの実施形態では、Ｂｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤及び化学療法剤は、同時に又は逐次的に投与される。
【０２０４】
いくつかの実施形態では、Ｂｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤及び化学療法剤は、約１分、約５分、約１０分、約１５分、約３０分、約４５分、約１時間、約２時間、約４時間、約６時間、約１２時間、約２４時間、約４８時間、約７２時間、約９６時間、約１週間、約２週間、約３週間、約４週間、約５週間、約６週間、約８週間又は約１２週間の時間間隔で逐次的に投与される。
【０２０５】
いくつかの実施形態では、医薬組成物の形態の（好ましくは、各々別々の単位剤形の）Ｂｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤及び化学療法剤を含む本発明の組み合わせ製品、例えばキットは、限定されるわけではないが、必要に応じて、１日に：１、２、３、４、５、又は６回投与され得る。
【０２０６】
いくつかの実施形態では、医薬組成物の形態の（好ましくは、単位剤形の）Ｂｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤及び化学療法剤を含む本発明の組み合わせ製品は、限定されるわけではないが、必要に応じて、１日に：１、２、３、４、５、又は６回投与され得る。
【０２０７】
いくつかの実施形態では、組み合わせ製品は：経口、頬側、吸入スプレー、舌下、直腸、経皮、膣粘膜、経粘膜、局所、経鼻又は腸内投与；注射、例えば筋肉内注射、皮下注射、髄内注射並びに髄腔内、脳への直接的な投与、生体内原位置投与、皮下、腹腔内、静脈内注射、関節滑膜内、胸骨内、肝臓内、病巣内、頭蓋内、腹腔内、経鼻若しくは眼球内注射又は他の薬物送達様式により投与され得る。
【０２０８】
いくつかの実施形態では、Ｂｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物及び化学療法剤又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物の一日の投与量は、本発明の上記の詳細な説明における本発明の第１の態様において記載されるとおりである。
【０２０９】
第４の態様では、本発明は、癌を予防及び／又は治療する方法であって、それを必要とする対象に予防有効量及び／又は治療有効量のＢｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤及び化学療法剤を投与することを含む方法に関する。更に、癌としては、本発明の上記の詳細な説明における本発明の第２の態様において記載されるものが挙げられるが、これらに限定されない。
【０２１０】
いくつかの実施形態では、Ｂｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤は、本発明の第１の態様において特に記載されている化合物（例えば、化合物Ｉ−Ａ、又は式（Ｉ）〜（ＩＶ）の化合物）又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物であり、化学療法剤は、本発明の第１の態様において特に記載されている物又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物である。
【０２１１】
いくつかの実施形態では、Ｂｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤及び化学療法剤は、医薬組成物中にある。
【０２１２】
いくつかの実施形態では、Ｂｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤及び化学療法剤は、各々、別々の製剤中に、例えばキット中にある。
【０２１３】
いくつかの実施形態では、Ｂｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤及び化学療法剤は、同時に又は逐次的に投与される。
【０２１４】
いくつかの実施形態では、Ｂｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤及び化学療法剤は、約１分、約５分、約１０分、約１５分、約３０分、約４５分、約１時間、約２時間、約４時間、約６時間、約１２時間、約２４時間、約４８時間、約７２時間、約９６時間、約１週間、約２週間、約３週間、約４週間、約５週間、約６週間、約８週間又は約１２週間の時間間隔で逐次的に投与される。
【０２１５】
いくつかの実施形態では、医薬組成物（好ましくは、各々別々の単位剤形の）中のＢｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤及び化学療法剤は、限定されるわけではないが、必要に応じて、１日に：１、２、３、４、５、又は６回投与され得る。
【０２１６】
いくつかの実施形態では、医薬組成物（好ましくは、単位剤形の）中のＢｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤及び化学療法剤は、限定されるわけではないが、必要に応じて、１日に：１、２、３、４、５、又は６回投与され得る。
【０２１７】
いくつかの実施形態では、Ｂｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤及び化学療法剤は：経口、頬側、吸入スプレー、舌下、直腸、経皮、膣粘膜、経粘膜、局所、経鼻又は腸内投与；注射、例えば筋肉内注射、皮下注射、髄内注射並びに髄腔内、脳への直接的な投与、生体内原位置投与、皮下、腹腔内、静脈内注射、関節滑膜内、胸骨内、肝臓内、病巣内、頭蓋内、腹腔内、経鼻若しくは眼球内注射又は他の薬物送達様式により投与され得る。
【０２１８】
いくつかの実施形態では、Ｂｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤は、一日に、０．０１７ｍｇ／ｋｇ、０．０８３ｍｇ／ｋｇ、０．１７ｍｇ／ｋｇ、０．３３ｍｇ／ｋｇ、０．５ｍｇ／ｋｇ（６０ｋｇの対象で１日あたり３０ｍｇ）、０．６７ｍｇ／ｋｇ、０．８３ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、１．１６ｍｇ／ｋｇ、１．３３ｍｇ／ｋｇ、１．５ｍｇ／ｋｇ、１．６７ｍｇ／ｋｇ、２．５ｍｇ／ｋｇ、３．３３ｍｇ／ｋｇ、４．１７ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ、５．８３ｍｇ／ｋｇ、６．６７ｍｇ／ｋｇ、７．５ｍｇ／ｋｇ、７．６７ｍｇ／ｋｇ、７．８３ｍｇ／ｋｇ、８ｍｇ／ｋｇ、８．１２ｍｇ／ｋｇ（６０ｋｇの対象で１日あたり４８７ｍｇ）、８．１６ｍｇ／ｋｇ、８．３３ｍｇ／ｋｇ、９．１７ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、１０．８３ｍｇ／ｋｇ、１１．６６ｍｇ／ｋｇ、１２．５ｍｇ／ｋｇ、１３．３３ｍｇ／ｋｇ、１４．１７ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇ、１５．８３ｍｇ／ｋｇ、１６．６７ｍｇ／ｋｇ、及び例えば０．０１７ｍｇ〜１６．６７ｍｇ／ｋｇ、０．０８３ｍｇ〜１６．６７ｍｇ／ｋｇ、０．１７ｍｇ〜１６．６７ｍｇ／ｋｇ、０．３３ｍｇ〜１６．６７ｍｇ／ｋｇ、０．５ｍｇ〜１５ｍｇ／ｋｇ、０．５ｍｇ〜１３．３３ｍｇ／ｋｇ、０．５ｍｇ〜１１．６７ｍｇ／ｋｇ、０．５ｍｇ〜１０ｍｇ／ｋｇ、０．５ｍｇ〜８．３３ｍｇ／ｋｇ、０．５ｍｇ〜８．１６ｍｇ／ｋｇ、０．５ｍｇ〜８．１２ｍｇ／ｋｇなどの間の範囲で投与され、ホモハリングトニンなどの化学療法剤の１日の投与は、０．００１ｍｇ／ｋｇ、０．００５ｍｇ／ｋｇ、０．０１ｍｇ／ｋｇ、０．０２ｍｇ／ｋｇ、０．０３ｍｇ／ｋｇ、０．０４ｍｇ／ｋｇ、０．０５ｍｇ／ｋｇ、０．０４ｍｇ／ｋｇ、０．０６ｍｇ／ｋｇ、０．０７ｍｇ／ｋｇ、０．０８ｍｇ／ｋｇ、０．０９ｍｇ／ｋｇ、０．１ｍｇ／ｋｇ、０．５ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、２ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇ、２０ｍｇ／ｋｇ、２５ｍｇ／ｋｇ、３０ｍｇ／ｋｇ、３５ｍｇ／ｋｇ、４０ｍｇ／ｋｇ、４５ｍｇ／ｋｇ、５０ｍｇ／ｋｇ、５５ｍｇ／ｋｇ、６０ｍｇ／ｋｇ、６５ｍｇ／ｋｇ、７０ｍｇ／ｋｇ、７５ｍｇ／ｋｇ、８０ｍｇ／ｋｇ、８５ｍｇ／ｋｇ、９０ｍｇ／ｋｇ、９５ｍｇ／ｋｇ、１００ｍｇ／ｋｇ、１５０ｍｇ／ｋｇ、２００ｍｇ／ｋｇ、２５０ｍｇ／ｋｇ、３００ｍｇ／ｋｇ、３５０ｍｇ／ｋｇ、４００ｍｇ／ｋｇ、４５０ｍｇ／ｋｇ、５００ｍｇ、及び例えば、０．００１ｍｇ〜５００ｍｇ／ｋｇ、０．００５ｍｇ〜５００ｍｇ／ｋｇ、０．０１ｍｇ〜５００ｍｇ／ｋｇ、０．０５ｍｇ〜５００ｍｇ／ｋｇ、０．０８ｍｇ〜５００ｍｇ／ｋｇ、０．０８ｍｇ〜４００ｍｇ／ｋｇ、０．０８ｍｇ〜３００ｍｇ／ｋｇ、０．０８ｍｇ〜２００ｍｇ／ｋｇ、０．０８ｍｇ〜１００ｍｇ／ｋｇ、０．０８ｍｇ〜５０ｍｇ／ｋｇ、０．０８ｍｇ〜１０ｍｇ／ｋｇ、０．０８ｍｇ〜１ｍｇ／ｋｇ、０．０８ｍｇ〜０．５ｍｇ／ｋｇ、０．０８ｍｇ〜０．１ｍｇ／ｋｇなどの間の範囲である。
【０２１９】
最も驚くべきことに、本発明者らは、本明細書で定義されるようなＢｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤及び化学療法剤の組み合わせた投与により、有益な、特に相乗的な治療効果が得られるだけでなく、予想外に延長された有効性、より広い範囲の疾患治療、並びにＡＭＬ／ＭＤＳ関連疾患及び病態に対する予想外に有益な効果など、組み合わせた治療による更なる利益が得られること、例えば、有効性が大幅に向上し、それによって投与サイクルが延長され、患者により長い延命効果などがもたらされることなどを実験的に見出した。
【０２２０】
更なる利点は、本発明に従って組み合わせるそれぞれの薬剤がより低い用量で使用できることであり、例えば、必要な用量がより少ないだけでなく、頻度もより少ない；又は、治療される患者の要求及び要件と一致する副作用の発生率を低減するために使用され得る。特に、本発明の組み合わせ製品は、上記Ｂｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤に関連する血液学的毒性及びセファロタキシンアルカロイドに関連する心血管毒性をある程度低減する可能性がある。
【０２２１】
Ｂｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤及び化学療法剤、特に化合物６及びホモハリングトニンの組み合わせは、技術的に確立された試験モデル、特に本明細書に記載されているものによって、ＡＭＬ／ＭＤＳなどの癌の予防又は治療においてより効果的であることが実証され得る。
【０２２２】
当業者は、適切な動物試験モデルを選択して、前述及び以下に示す治療指標及び有益な効果を証明することが完全に可能である。薬理活性は、例えば、以下に記載されるように、マウスにおけるｉｎ  ｖｉｖｏアッセイ法又は臨床研究により実証され得る。
【０２２３】
本発明の列挙された様々な実施形態における所与の特徴の一般的又は好ましい定義は、文脈が明確に別段の指示をしない限り、他の特徴の一般的又は好ましい定義と組み合わせて、そのような組み合わせが本明細書に具体的且つ個別に記載されているかのように、本発明の更なる実施形態をもたらし得る。
【０２２４】
式が明らかに間違っていない限り、本発明のいずれかの化合物の化学名が所与の式と矛盾する場合、その式が優先される。
【０２２５】
本明細書において、いくつかの以前の刊行物が参照される。これらの刊行物は、本発明の特許性に関連するとは見なされないが、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。本明細書における任意の先行刊行物（又はそれから派生した情報）への言及は、対応する先行刊行物（又はそれから派生した情報）が、本明細書が関係する技術の分野における一般的な一般知識の一部を形成するという承認又は容認又はいかなる形式の提案ではなく、そのようにみなされるべきではない。
【実施例】
【０２２６】
具体的な実施形態
本発明は、以下の具体的実施例及び比較実施例により更に例示されるが、これらは、より詳細に単に例示的であると解釈されるべきであり、いかなる方法においても、開示の残りの部分を限定するものではない。
【０２２７】
以下の実施例において具体的な条件が記述されていない実験手順は、一般に、そのような反応の従来の条件に従って、又は製造業者が推奨する条件に従って実施される。
【０２２８】
以下の実施例において使用される実験材料及び試薬は、特に明記しない限り、市販されているか、従来技術の方法に従って調製されるか、又は本出願に開示されているものと同様の方法に従って調製される。
【０２２９】
合成例：例示的なＢｃｌ−２選択的阻害剤化合物（化合物３、６、及び１３）の調製
化合物３の合成：２−（（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イル）オキシ）−４−（４−（（６−（４−クロロフェニル）スピロ［３．５］ノナ−６−エン−７−イル）メチル）ピペラジン−１−イル）−Ｎ−（（３−ニトロ−４−（（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）メチル）アミノ）フェニル）スルホニル）ベンズアミド
【化４２】
2021535129.tif 000074
２−（（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イル）オキシ）−４−（４−（（６−（４−クロロフェニル）スピロ［３．５］ノナ−６−エン−７−イル）メチル）ピペラジン−１−イル）安息香酸（１．７５ｇ、３ｍｍｏｌ）、３−ニトロ−４−（（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）メチル）アミノ）ベンゼンスルホンアミド（１．４３ｇ、４．５ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ（１．１５ｇ、６ｍｍｏｌ）、及び４−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）ピリジン（５５０ｍｇ、４．５ｍｍｏｌ）、並びにジクロロメタン（４０ｍｌ）の混合物を、室温で一晩反応させた後、水を添加した。水層をジクロロメタンで抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、濃縮し、シリカゲルカラムにより精製して、２−（（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イル）オキシ）−４−（４−（（６−（４−クロロフェニル）スピロ［３．５］ノナ−６−エン−７−イル）メチル）ピペラジン−１−イル）−Ｎ−（（３−ニトロ−４−（（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）メチル）アミノ）フェニル）スルホニル）ベンズアミド（１．７ｇ、６４．４％）を黄色固体として得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール−ｄ４）δ  ８．７０（ｄ，Ｊ＝２．３Ｈｚ，１Ｈ），８．０１（ｄ，Ｊ＝２．７Ｈｚ，１Ｈ），７．８７（ｄ，Ｊ＝９．２，２．３Ｈｚ，１Ｈ），７．６６（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，１Ｈ），７．５５（ｄ，Ｊ＝２．７Ｈｚ，１Ｈ），７．４７（ｄ，Ｊ＝３．４Ｈｚ，１Ｈ），７．３８（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．１０（ｄ，Ｊ  ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），６．９７（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，１Ｈ），６．７７（ｄｄ，Ｊ＝８．９，２．４Ｈｚ，１Ｈ），６．４４（ｄ，Ｊ＝３．４Ｈｚ，１Ｈ），６．３４（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），４．０２−３．９４（ｍ，３Ｈ），３．６６（ｓ，３Ｈ），３．４９−３．３８（ｍ，２Ｈ），３．４１−３．２５（ｍ，７Ｈ），２．４２（ｓ，３Ｈ），２．２６（ｓ，３Ｈ），２．００−１．６７（ｍ，４Ｈ），１．４５−１．３８（ｍ，２Ｈ）．
【０２３０】
化合物１３の合成：（Ｒ）−Ｎ−（（４−（（（１，４−ジオキサン−２−イル）メチル）アミノ）−３−ニトロフェニル）スルホニル）−２−（（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イル）オキシ）−４−（４−（（６−（４−クロロフェニル）スピロ［３．５］ノナ−６−エン−７−イル）メチル）ピペラジン−１−イル）ベンズアミド
【化４３】
2021535129.tif 000075
標題の化合物を、化合物３の合成について記載されるものと類似の手順を用いて調製した。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール−ｄ４）δ  ８．６６（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），７．９９（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），７．８４（ｄｄ，Ｊ＝９．２，２．４Ｈｚ，１Ｈ），７．６４（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，１Ｈ），７．５１（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，２Ｈ），７．４５（ｄ，Ｊ＝３．３Ｈｚ，１Ｈ），７．３７（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．１０（ｄ，Ｊ  ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），６．９４（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，１Ｈ），６．７６（ｄｄ，Ｊ＝８．９，２．３Ｈｚ，１Ｈ），６．４０（ｄ，Ｊ＝３．３Ｈｚ，１Ｈ），６．３６（ｄ，Ｊ＝２．３Ｈｚ，１Ｈ），３．８７（ｄｄ，Ｊ＝１１．８，４．２Ｈｚ，３Ｈ），３．８３−３．７０（ｍ，３Ｈ），３．６７（ｓ，２Ｈ），３．６２（ｄｄ，Ｊ＝１１．７，２．９Ｈｚ，１Ｈ），３．５１−３．４１（ｍ，２Ｈ），３．４０−３．３５（ｍ，１Ｈ），３．２９（ｄｑ，Ｊ＝３．２，１．６Ｈｚ，１Ｈ），２．４１（ｓ，２Ｈ），２．２６（ｓ，２Ｈ），２．００−１．７７（ｍ，６Ｈ）
【０２３１】
化合物６の合成：（Ｓ）−Ｎ−（（４−（（（１，４−ジオキサン−２−イル）メチル）アミノ）−３−ニトロフェニル）スルホニル）−２−（（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イル）オキシ）−４−（４−（（６−（４−クロロフェニル）スピロ［３．５］ノナ−６−エン−７−イル）メチル）ピペラジン−１−イル）ベンズアミド
【化４４】
2021535129.tif 000076
標題の化合物を、化合物１３の合成について記載されるものと類似の手順を用いて調製した。ＭＳ：Ｃ45Ｈ48ＣｌＮ7Ｏ8Ｓの実測値８８２．３０４７、計算値８８２．３０４６。
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ−ＤＭＳＯ）：δ  ｐｐｍ：１１．７０（１Ｈ，ｓ）；１１．３５（１Ｈ，ｂｒ）；８．５９（２Ｈ，ｍ）；８．０５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．６）；７．８４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ１＝９．２；Ｊ２＝２．３）；７．５１（３Ｈ，ｍ）；７．３３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４）；７．１０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．２）；７．０４（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４）；６．６６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ１＝８．８，Ｊ２＝１．２）；６．３９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ１＝３．６，Ｊ２＝２．０）；６．１９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．２）；３．７７〜３．８２（３Ｈ，ｍ）；３．６４（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝１１．２）；３．６２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ１＝１０．８，Ｊ２＝２．４）；３．３０〜３．５２（４Ｈ，ｍ）；３．０６（４Ｈ，ｍ）；２．７２（２Ｈ，ｍ）；２．１３〜２．２３（８Ｈ，ｍ）；１．６７〜１．８６（６Ｈ，ｍ）；１．５８（２Ｈ，ｍ）．
【０２３２】
作業例
略語のリスト
略語  英語でのフルネーム
ＡＭＬ  急性骨髄性白血病（Ａｃｕｔｅ  ｍｙｅｌｏｉｄ  ｌｅｕｋｅｍｉａ）
ＨＨＴ  ホモハリングトニン（Ｈｏｍｏｈａｒｒｉｎｇｔｏｎｉｎｅ）
ＢＡＫ  ＢＣＬ−２結合Ｘタンパク質（ＢＣＬ−２  ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  Ｘ  ｐｒｏｔｅｉｎ）
ＢＣＬ−２  Ｂ細胞リンパ腫２（Ｂ−ｃｅｌｌ  Ｌｙｍｐｈｏｍａ  ２）
ＣＩ  組み合わせ指数（Ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ  ｉｎｄｅｘ）
ＣＴＧ  セルタイター−ジオ（ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ）
ＤＭＳＯ  ジメチルスルホキシド（Ｄｉｍｅｔｈｙｌ  ｓｕｌｆｏｘｉｄｅ）
ＦＣＭ  フローサイトメトリー（Ｆｌｏｗ  ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ）
ｈ時間（Ｈｏｕｒｓ）
ＩＣ50  半数阻害濃度（Ｈａｌｆ  ｍａｘｉｍｕｍ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ  ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ）
ＭＣＬ−１  骨髄細胞白血病１（Ｍｙｅｌｏｉｄ  Ｃｅｌｌ  Ｌｅｕｋｅｍｉａ  １）
ＭＳＤ  ＭＳＤ電気化学発光検出（ＭＳＤ  ｅｌｅｃｔｒｏｃｈｅｍｉ  ｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ  ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ）
ＰＡＲＰ−１  ポリ（ＡＤＰリボース）ポリメラーゼ−１（Ｐｏｌｙ  ＡＤＰ−ｒｉｂｏｓｅ  ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ−１）
ＰＢＳ  リン酸緩衝食塩水（Ｐｈｏｓｐｈｏｎａｔｅ  ｂｕｆｆｅｒｅｄ  ｓａｌｉｎｅ）
ＰＩ  ヨウ化プロピジウム（Ｐｒｏｐｉｄｉｕｍ  ｉｏｄｉｄｅ）
ＳＥＭ  平均の標準誤差（Ｓｔａｎｄａｒｄ  ｅｒｒｏｒ  ｏｆ  ｍｅａｎ）
【０２３３】
一般材料及び方法
１．細胞株
ＡＭＬ細胞株は、Ｎａｎｊｉｎｇ  ＣＯＢＩＯＥＲ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｌｔｄ（ＯＣＩ−ＡＭＬ−３及びＭＶ−４−１１）、Ｊａｐａｎｅｓｅ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｒｅｓｏｕｒｃｅ  Ｂａｎｋ（ＪＣＲＢ：ＳＫＭ−１）などの民間の供給元から入手可能である。細胞は、５％ＣＯ2インキュベータ内で全て３７℃の対応する培地で培養された。本研究で使用されるＡＭＬ細胞株に関する培養条件を表１に示す。
【０２３４】
【表３１】
2021535129.tif 000077
【０２３５】
抗増殖試験では、細胞を９６ウェルプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ、カタログ３９０３）に、１００００細胞／ウェル／細胞株で播種した。アポトーシスアッセイでは、細胞を２４ウェルプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ、カタログ３５２４）に、２０００００細胞／ウェル／細胞株で播種した。
【０２３６】
２．試薬
本実験で使用される試薬の供給源を以下に示す：ＲＰＭＩ１６４０基本培地（Ｇｉｂｃｏ、カタログＣ１１８７５５００ＢＴ）、ＩＭＤＭ基本培地（Ｇｉｂｃｏ、カタログＣ１２４４０５００ＢＴ）、ペニシリン−ストレプトマイシン（Ｇｉｂｃｏ、カタログ１５１４０１２２）、ウシ胎児血清（ＡＵＳＧＥＮＥＸ、カタログＦＢＳＳＡ５００−Ｓ）、ジメチルスルホキシド（Ｓｉｇｍａ、カタログＤ８４１８）、ＡＣＫ溶解バッファ（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、カタログＡ１０４９２０１）、アポトーシス試験キット（ＢＤ、カタログ５５６５４７）、ＲＩＰＡ細胞溶解バッファ（Ｂｅｙｏｔｉｍｅ、カタログＰ００１３Ｂ）、ＰＭＳＦ（ＹＥＡＳＥＮ、カタログ２０１０４ＥＳ０８）、ＢＣＡタンパク質濃度定量キット（Ｂｅｙｏｔｉｍｅ、カタログＰ００１２）、プロテアーゼ阻害剤（ＹＥＡＳＥＮ、カタログ２０１２４ＥＳ１０）、ホスファターゼ阻害剤（ＹＥＡＳＥＮ、カタログ２０１０９ＥＳ０５）、４〜２０％ＳＤＳ−ＰＡＧＥ−プレキャストゲル（ＧｅｎＳｃｒｉｐｔ（登録商標）、カタログＭ４２０１０Ｍ）、ＰＶＤＦ転写フィルム（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ、カタログＩＰＶＨ０００１０）、ＢＳＡ（ウシ血清アルブミン）（ＧＥＮＶＩＥＷ、カタログＦＡ０１６−２５０）、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（登録商標）発光細胞生存検出キット（Ｐｒｏｍｅｇａ、カタログＧ７５７１）、２０×ＴＢＳ（Ｓａｎｇｏｎ  Ｂｉｏｔｅｃｈ．、カタログＢ５４８１０５−０５００）、強化ＥＣＬ化学発光検出キット（ＹＥＡＳＥＮ、カタログ３６２２２ＥＳ７６）、抗ＭＣＬ−１（Ｙ３７）抗体（Ａｂｃａｍ、カタログＡｂ１８６８２２）、抗ＢＩＭ抗体（Ａｂｃａｍ、カタログＡｂ３２１５８）、抗ＰＵＭＡ抗体（Ａｂｃａｍ、カタログＡｂ１８６９１７）、抗ＢＡＫ抗体（Ａｂｃａｍ、カタログＡｂ２２０７９０）、ＰＡＲＰ−１抗体（ＣＳＴ、カタログ９５３２Ｓ）、β−アクチン（ＣＳＴ、カタログ３７００Ｓ）、ＭＣＬ−１抗体（ＣＳＴ、カタログ９４２９６Ｓ）、ＭＹＣ抗体（ＣＳＴ、カタログ１３９８７Ｔ）、カスパーゼ−３抗体（ＣＳＴ、カタログ９６６５Ｓ）、抗ＧＡＰＤＨ抗体（ＣＳＴ、カタログ２１１８ｓ）、ヤギ抗ウサギ−ＨＲＰ（ＹＥＡＳＥＮ、カタログ３３１０１ＥＳ６０）、及びヤギ抗マウス−ＨＲＰ（ＹＥＡＳＥＮ、カタログ３３２０１ＥＳ６０）、アネキシンＶ−ＰＩ（ヨウ化プロピジウム）染色キット（ＢＤ、カタログ番号５５６５４７）。
【０２３７】
３．試験試料
試験試料原液を、表２に記載されている溶媒を用いて調製した。原液の濃度は１０-2Ｍであり、−２０℃で暗所に保存して使用できる。原液は、希釈剤として無血清培地を使用して、所望の作業濃度に希釈された。
【０２３８】
【表３２】
2021535129.tif 000078
【０２３９】
４．機器
試験で使用される機器としては：安全キャビネット（ＥＳＣＯ、モデルＡＣ２−４Ｓ１）；ＣＯ2インキュベータ（ＥＳＣＯ、モデルＣＬＭ−１７０Ｂ−８−ＮＦ）；倒立顕微鏡（ＣＯＩＣ  ＩＮＤＵＳＴＲＩＡＬ、モデル：ＸＤＳ−１Ｂ）；Ｓｍａｆｙ電気吸引装置（Ｓｈａｎｇｈａｉ  Ｂａｏｊｉａ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  Ｌｉｍｉｔｅｄ、モデルＹＸ  ９３０Ｄ）；天秤（Ｍｅｔｔｌｅｒ−Ｔｏｌｅｄｏ、ＡＢ１３５−Ｓ）；低速遠心分離器（Ｓｈａｎｇｈａｉ  Ｌｕ  Ｘｉａｎｇｙｉ  Ｃｅｎｔｒｉｆｕｇｅ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ  Ｃｏ，．Ｌｔｄ、モデルＬ６００）；ＥＬＩＡＳＡ／マイクロプレートリーダー（Ｂｉｏ−Ｔｅｋ、モデル：Ｓｙｎｅｒｇｙ  Ｈ１）；１０μＬ、２０μＬ、１００μＬ、２００μＬ、１０００μＬシングルチャンネルピペット（Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ）；マルチチャンネルピペット（Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ）；ピペットコントローラー（ＩＮＴＥＧＲＡ  ＰＩＰＥＴＢＯＹ２、１５５０００ｃｌａｓｓｉｃ）；サーモスタットウォーターバス（Ｓｈａｎｇｈａｉ  ＹｉＨｅｎｇ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  Ｃｏ．，Ｌｔｄ．、ＤＫ−８ＡＸ）；Ｖｏｒｔｅｘオシレータ（Ｈａｉｍｅｎ  Ｑｉｌｉｎ−Ｂｅｉｅｒ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ  Ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｅ  Ｃｏ．，ＬＴＤ、Ｋｙｌｉｎ−Ｂｅｌｌ５）；滅菌ポット（Ｓｈａｎｇｈａｉ  ＳｈｅｎＡｎ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  Ｃｏ．，Ｌｔｄ．、ＬＤＺＭ−６０ＫＣＳ）；化学発光イメージャ（Ａｚｕｒｅ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ、モデル：Ａｚｕｒｅ  ｃ３００）；フローサイトメーター（Ｌｉｆｅ  ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、モデル：Ａｔｔｕｎｅ  ＮｘＴ）；  超高感度ファクター電気化学発光分析器（Ｍｅｓｏ  Ｓｃａｌｅ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ、モデル：ＳＥＣＴＯＲ  Ｓ６００）が挙げられる。
【０２４０】
５．組み合わせた医薬の効果を分析するための方法
組み合わせ試験について、ＣａｌｃｕＳｙｎプログラムを使用して結果を更に分析し、組み合わせ指数（ＣＩ）（Ｃｈｏｕ，Ｔ．Ｃ．（２０１０）“Ｄｒｕｇ  ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ  ｓｔｕｄｉｅｓ  ａｎｄ  ｔｈｅｉｒ  ｓｙｎｅｒｇｙ  ｑｕａｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｕｓｉｎｇ  ｔｈｅ  Ｃｈｏｕ−Ｔａｌａｌａｙ  ｍｅｔｈｏｄ．”，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ  ７０（２）：４４０−４４６）を計算した。Ｃａｌｃｕｓｙｎはプロの混合薬剤分析ソフトウェアであり、Ｃａｌｃｕｓｙｎソフトウェアを使用して、組み合わせた薬剤効果を正確に分析し、相乗効果、相加効果、拮抗効果などを含む様々な薬剤の相互作用を迅速に計算及び分析することができる。２つの薬剤の組み合わせのＣＩ値が１未満の場合、その組み合わせは相乗効果を有することを示す；ＣＩ値＝１は、２つの薬剤の組み合わせが相加効果を有することを示す；ＣＩ値＞１は、組み合わせが拮抗的であることを示す。
ＣＩ（組み合わせ指数）：
＜０．１：５＋非常に強い
０．１〜０．３：４＋強い
０．３〜０．７：３＋中間
０．７〜０．８５：２＋比較的穏やか
０．８５〜０．９０：１＋穏やか
【０２４１】
実施例１：化合物６及びホモハリングトニンの組み合わせの相乗的な抗増殖効果
［実験方法］：ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（登録商標）発光細胞生存アッセイ（ＣＴＧ実験）
３つのＡＭＬ／ＭＤＳ細胞株、即ちＭＶ−４−１１（化合物６  感受性細胞株）、ＯＣＩ−ＡＭＬ−３（化合物６  非感受性細胞株）、及びＳＫＭ−１（化合物６  非感受性細胞株）の試験試料の抗増殖効果を、製造業者の指示書に従って、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ発光細胞生存検出キットを用いてＡＴＰを定量することにより測定した。
【０２４２】
まず、対数増殖期の細胞を収集し、遠心分離にかけ、細胞懸濁液をカウントし、所望の濃度まで希釈／調節した。混合後、９０μＬの細胞懸濁液を９６ウェルプレートの各ウェルに１０×１０3細胞／ウェルで添加し、細胞をインキュベータ内で３７℃、５％ＣＯ2下で２時間インキュベートした。細胞を含まない培地（１００μＬ／ウェル）のみを含有する３つ超のブランク対照ウェルを同じプレートにセットして、バックグラウンド発光を得て、細胞対照ウェル、即ち細胞を含むがビヒクル対照で処理したウェルをセットした。
【０２４３】
様々な薬剤に対する様々な細胞の感受性に基づいて、適切な初期最高濃度が選択され、段階希釈は１：３の比率で行われ、７つの段階濃度が得られた。２つの試験試料を、５μＬ／ウェルで各ウェルに添加し、各ウェルで試験される薬剤の最終濃度を図１の横軸に示した。プレートを５％ＣＯ2インキュベータ中で３７℃で２４時間インキュベートした。複製ウェルを各試験濃度に調製した。倒立顕微鏡下で細胞増殖を毎日観察した。
【０２４４】
培養が完了すると、９６ウェルプレート及び内容物をインキュベータから取り出し、室温で室温まで調整し、３０μＬのＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ試薬を各ウェルに（暗所で）添加した。９６ウェルプレートをオービタルシェーカー上に置き、内容物を２分混合し、十分な細胞溶解を可能にした；蛍光シグナルを安定させるために、９６ウェルプレートを室温で１０分間インキュベートした。
【０２４５】
Ｂｉｏｔｅｋ  ｓｙｎｅｒｇｙ  Ｈ１マイクロプレートリーダーを用いて、発光シグナルを検出した。２つの複製ウェルの平均蛍光シグナル値を使用して、細胞生存率のパーセンテージを以下の式によって計算した：
細胞生存率（％）＝（試験ウェルの蛍光シグナル値−ブランク対照ウェルの蛍光シグナル値）／（細胞対照ウェルの蛍光シグナル値−ブランク対照ウェルの蛍光シグナル値）×１００％。
【０２４６】
［実験結果］
結果は、組み合わせのプロファイルは、化合物６及びＨＨＴのみのプロファイルと比較して左にシフトし、化合物６が試験した全てのＡＭＬ／ＭＤＳ細胞株で抗増殖効果を増強したことを示唆することを示す。組み合わせの効果分析は、複数の組み合わせ濃度で０．１未満の組み合わせ指数（ＣＩ値）を示し、ＨＨＴと組み合わせた化合物６は、試験した全てのＡＭＬ／ＭＤＳ細胞株で相乗的な抗増殖効果があることを示している。ＨＨＴと組み合わせた化合物６についての具体的なＣＩ値及び元の用量効果成長阻害曲線を図１に詳述する。
【０２４７】
実施例２：化合物６及びホモハリングトニンの効果を誘導する相乗的アポトーシス
［実験方法］：フローサイトメーター分析
化合物６のみ、ＨＨＴのみ、又は両方の組み合わせで２４時間処理した後、細胞を回収し、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で１回洗浄した。細胞をアネキシン−Ｖ及びＰＩで染色し、Ａｔｔｕｎｅ  ＮｘＴフローサイトメーターを用いて分析した。アポトーシスのプロファイルは、１実験条件当たり２００００個の細胞を分析することにより得た。
【０２４８】
製造業者の指示書に従って、アネキシンＶ−ＰＩ（ヨウ化プロピジウム）染色キットを用いて、アポトーシスを検出した。細胞ＭＶ−４−１１、ＯＣＩ−ＡＭＬ−３、及びＳＫＭ−１を１０ｎＭの化合物６のみ、１０ｎＭ若しくは３０ｎＭのＨＨＴのみ、又は両方の組み合わせで２４時間処理した後、細胞を回収し、ＰＢＳで１回洗浄した。細胞をＡｎｎｅｎｉｘＶ−ＦＩＴＣ及びＰＩで二色染色した。染色が完了した後、Ａｔｔｕｎｅ  ＮｘＴフローサイトメーターを用いて分析を実施した。アポトーシスのプロファイルは、１実験条件当たり２００００個の細胞を分析することにより得た。
【０２４９】
［実験結果］
結果を図２に示す。化合物６及びＨＨＴを単独で投与すると、ビヒクル対照ＤＭＳＯと比較して、試験したＡＭＬ細胞株に特定のアポトーシスが誘導される。しかし、その組み合わせはアポトーシスの比率を著しく増大させる。例えば、ＯＣＩ−ＡＭＬ−３細胞では、化合物６（１０ｎＭ）及びＨＨＴ（３０ｎＭ）単独により、それぞれ、１２．１％及び２５．０％のアポトーシスが誘導される一方で、両方の組み合わせにより、８０．１％のアポトーシスが誘導され、ＤＭＳＯ群及び各薬剤単独とは統計的且つ有意に異なる。ＭＶ−４−１１及びＳＫＭ−１細胞の検出結果はまた、化合物６及びＨＨＴの組み合わせが、ビヒクル対照群及び各単一薬剤群とは統計的に有意な差を伴って、アポトーシスを著しく誘導し得ることを示す。アポトーシスのプロファイル及びデータの統計は、図２に詳細に記載されている。
【０２５０】
実施例３：ホモハリングトニンと組み合わせた化合物６は、プロトオンコプロテインＭＹＣ及びＭＣＬ−１の濃度を著しく減少させ、アポトーシスマーカーの発現を高める
［実験方法］：ウェスタンブロットアッセイ
対数増殖期の細胞を、化合物６、ＨＨＴ、を単独又は組み合わせのいずれかで４時間処理した後、ウェスタンブロットアッセイを実施した。
【０２５１】
１０ｎＭ又は３０ｎＭのＨＨＴと組み合わせた１０ｎＭの化合物６での４時間の相互作用の後、細胞を回収し、予冷したＰＢＳで１回洗浄した。１％のＰＭＳＦ及び１％のプロテアーゼ阻害剤を含有するＲＩＰＡライセートを使用して細胞ペレットを溶解した。ＢＣＡタンパク質濃度検出キットを用いて、タンパク質濃度を検出した。４〜２０％のＳＤＳ−ＰＡＧＥにより、細胞ライセート（２０〜５０μｇ）を分離した。分離したタンパク質をＰＶＤＦメンブレンに転写し、１％ＢＳＡ（ウシ血清アルブミン）バッファを使用して室温で１時間ブロックした後、１％ＢＳＡを含有する１×ＴＢＳＴ（トリス緩衝生理食塩水  Ｔｗｅｅｎ−２０）で希釈した一次抗体とともに４℃のシェーカーで一晩インキュベートした。メンブレンを１×ＴＢＳＴで３回、各々１０分間洗浄し、次いで西洋ワサビペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）タグ付き二次抗体（ヤギ抗ウサギ−ＨＲＰ（Ｙｅａｓｅｎ、カタログ番号３３１０１ＥＳ６０）及びヤギ抗マウス−ＨＲＰ（Ｙｅａｓｅｎ、カタログ番号３３２０１ＥＳ６０）、製造業者の指示書に従って希釈した）を使用して室温で１時間インキュベートした。メンブレンを１×ＴＢＳＴで３回、各々１０分間洗浄した。ＨＲＰ基質をＰＶＤＦメンブレン上に添加した。ＥＣＬ過敏性試薬（強化ＥＣＬ化学発光検出キット）を使用して、シグナルを発生させた。シグナル強度は、タンパク質の発現レベルを直接反映する。
【０２５２】
［実験結果］
ウェスタンブロットの結果を図３に示す。ＭＶ−４−１１、ＯＣＩ−ＡＭＬ−３、及びＳＫＭ−１細胞株において、ＨＨＴ単剤群と化合物６及びＨＨＴの組み合わせ群との両方が、抗アポトーシスタンパク質ＭＣＬ−１の発現レベルを低下させることができ、特にＭＶ−４−１１に有意差が見られる。化合物６及びＨＨＴの組み合わせ群において、切断されたカスパーゼ３（ＣＬ−カスパーゼ）及び切断されたＰＡＲＰ−１（ＣＬ−ＰＡＲＰ）の発現が著しく強化され、これは、２つの組み合わせが相乗的にアポトーシスを誘導できることを示す。一方、３つの細胞株において、化合物６及びＨＨＴの組み合わせは、また、プロトオンコプロテインＭＹＣを著しく低下させる。
【０２５３】
実施例４：ホモハリングトニンと組み合わせた化合物６は、ＢＣＬ−２：ＢＩＭ、ＭＣＬ−１：ＢＡＫ、及びＭＣＬ−１：ＰＵＭＡ複合体に干渉する。
［実験方法］：ＭＳＤ（Ｍｅｓｏ  Ｓｃａｌｅ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ）法
対数増殖期の細胞を、化合物６、ＨＨＴ、を単独又は組み合わせのいずれかで４時間処理した後、アポトーシス関連タンパク質複合体を、ＭＳＤ電気化学発光法により検出した。
【０２５４】
ＭＳＤ法を実施し、ＢＣＬ−２：ＢＩＭ、ＭＣＬ−１：ＰＵＭＡ、及びＭＣＬ−１：ＢＡＫタンパク質複合体を検出した。ＡＭＬ／ＭＤＳ細胞株を化合物６又はＨＨＴと組み合わせて４時間処理して採取し、次いで弱いタンパク質ライセート（ＲＩＰＡライセート、Ｂｅｙｏｔｉｍｅ、Ｐ００１３Ｄ）でタンパク質を抽出し、使用するために濃度を１ｍｇ／ｍＬに調整した。ストレプトアビジンでコーティングした９６ウェルプレートを、１５０μＬのブロッキング溶液（ＭｅｓｏＳｃａｌｅ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ、Ｒ９３ＡＡ−２）で一晩ブロックした。抗ＢＣＬ−２抗体及び抗ＭＣＬ−１タンパク質を、Ｓｕｌｆｏ−Ｔａｇ（Ｓｕｌｆｏ−Ｔａｇ  ＮＨＳエステル、ＭｅｓｏＳｃａｌｅ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ、Ｒ９１ＡＯ−１）で標識した；抗ＢＩＭ、抗ＰＵＭＡ、及び抗ＢＡＫ抗体をビオチンで標識した。５０μＬ（１μｇ／ｍＬ）のビオチン標識した抗ＢＩＭ抗体、抗ＰＵＭＡ抗体、又は抗ＢＡＫ抗体を、ストレプトアビジン標識したプレートに添加し、１時間インキュベートした後、０．５％のＴｗｅｅｎ−２０を含有するＰＢＳで、プレートを３回洗浄した。次いで、５０μｇの細胞ライセートを添加し、１時間インキュベートした。インキュベートした後、０．５％のＴｗｅｅｎ−２０を含有するＰＢＳで、プレートを３回洗浄した。次いで、Ｓｕｌｆｏ−ｔａｇ標識されたＭＣＬ−１又はＢＣＬ−２（４μｇ／ｍＬ）とともに６０分間インキュベートすることによって、抗体を検出した。Ｍｅｓｏ  Ｓｃａｌｅ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  Ｓｅｃｔｏｒ  Ｓ６００でエレクトロルミネセンスシグナル強度を検出した。
【０２５５】
［実験結果］
ＭＳＤの結果を図４に示す。細胞を化合物６で処理した後、ＢＣＬ−２：ＢＩＭ複合体の発現レベルは低下し、化合物６がＢＣＬ−２及びＢＩＭの結合に拮抗し、ＢＣＬ−２の抗アポトーシス機能を阻害し、アポトーシス促進タンパク質ＢＩＭを放出できることを確認する。化合物６のみで処理された群と比較して、化合物６及びＨＨＴの組み合わせで処理された群におけるＭＣＬ−１：ＢＩＭ複合体の有意な減少は、化合物６及びＨＨＴの組み合わせが、ＢＣＬ−２：ＢＩＭ及びＭＣＬ−１：ＢＩＭ複合体を同時に減少させ、それによってアポトーシス促進タンパク質ＢＩＭを放出することができることを示す（図４Ａ及び４Ｂ）。
【０２５６】
図４Ｃにて示すように、化合物６及びＨＨＴの組み合わせの群におけるＭＣＬ／ＢＡＫ複合体は、対照群及び化合物６群と比較して著しく減少し、ＨＨＴと組み合わせた化合物６がアポトーシス促進タンパク質ＢＡＫを放出することを示唆している。図４Ｄにて示すように、ＭＣＬ−１：ＰＵＭＡ複合体はまた、対照及び単剤群と比較して、化合物６及びＨＨＴの組み合わせ群で、ある程度低減し、ＨＨＴと組み合わせた化合物６がアポトーシス促進タンパク質ＰＵＭＡを放出し得ることを示唆している。
【０２５７】
まとめると、ＨＨＴと組み合わせた化合物６は、アポトーシス促進タンパク質ＢＩＭ、ＢＡＫ、及びＰＵＭＡをより放出し得る。
【０２５８】
実施例５：マウスのヒトＭＶ−４−１１ＡＭＬ異種移植モデルにおけるホモハリングトニンと組み合わせた化合物６の相乗的抗腫瘍活性。
上記ｉｎ  ｖｉｔｒｏでの細胞系アッセイにおいて、ＭＶ−４−１１細胞は、化合物６に対して中程度の感受性を有するヒトＡＭＬ細胞株の１つとして示されている。従って、この研究は、ＨＨＴと組み合わせた化合物６の抗腫瘍活性を評価するために、ヒトＭＶ−４−１１細胞でマウスにおける異種移植腫瘍モデルを確立した。
【０２５９】
［実験方法］
ＭＶ−４−１１ＡＭＬ異種移植モデルは、ＭＶ−４−１１腫瘍細胞（１０×１０6細胞＋マトリゲル  ゲル／動物）を、無菌条件下で、雌のＢＡＬＢ／ｃヌードマウス（供給元：Ｌｉｎｇｃｈａｎｇ、ＳＣＸＫ（Ｓｈａｎｇｈａｉ）２０１８−０００３；承認番号：２０１８０００３００４１５７）の右脇腹に皮下注射することによって確立した。腫瘍が適切なサイズ（１２５ｍｍ3）に達したとき、マウスは６つの群：ビヒクル対照、化合物６（５０ｍｇ／ｋｇ）、陽性対照ＡＢＴ−１９９（５０ｍｇ／ｋｇ）（バッチ番号：Ｋ０１−１３１−２；Ｊｉａｎｇｓｕ  Ａｉｋｏｎ  Ｂｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｒ＆Ｄ  Ｃｏ．，Ｌｔｄ）、ＨＨＴ（１ｍｇ／ｋｇ）、ＨＨＴと組み合わせた化合物６治療群、及びＨＨＴと組み合わせたＡＢＴ−１９９治療群にランダム化された。群分けした日（１日目）に治療を開始した。化合物６及びＡＢＴ−１９９は、２１日間連続して１日１回経口投与された。ＨＨＴは、１４日間連続して１日１回腹腔内投与された。腫瘍サイズ（キャリパー）及び動物の体重は、週に２回測定した。
【０２６０】
［実験結果］
上記で測定した相対的腫瘍体積（ＲＴＶ）に関して、相対的腫瘍増殖率Ｔ／Ｃ（％）を以下の式に従って計算した：
Ｔ／Ｃ＝ＴRTV／ＣRTV×１００％、
式中、ＴRTVは、治療群についてのＲＴＶである；ＣRTVは、ビヒクル対照群についてのＲＴＶである；評価基準は：Ｔ／Ｃ（％）＞４０％は効果なし；Ｔ／Ｃ（％）が４０％以下で統計的ｐ＜０．０５は効果的である。
【０２６１】
図５Ａ及び５Ｂにて示すように、５０ｍｇ／ｋｇでの化合物６又は５０ｍｇ／ｋｇでのＡＢＴ−１９９による治療は、ＭＶ−４−１１異種移植モデルにおいて抗腫瘍活性を示さず、それぞれ、６２．７６％（ｐ＞０．０５、対ビヒクル対照）及び８８．２７％（ｐ＞０．０５、対ビヒクル対照）のＴ／Ｃ値が得られた。１ｍｇ／ｋｇでのＨＨＴによる治療は、中程度の抗腫瘍活性を示し、Ｔ／Ｃ値は３２．４３％（ｐ＞０．０５、対ビヒクル対照）、ＳＤは３／５であった。化合物６及びＨＨＴの組み合わせ治療は、有意な相乗的抗ＡＭＬ活性を示し、相乗効果比６．１４及び寛解率１００％（６／６  ＰＲ）で３．３１％のＴ／Ｃ値（ｐ＜０．０５、対ビヒクル対照；ｐ＜０．０１、対化合物６群）を達成した。並行して、ＨＨＴ（１ｍｇ／ｋｇ）と組み合わせた別のＦＤＡ−承認ＢＣＬ−２阻害剤ＡＢＴ−１９９（ｖｅｎｅｔｏｃｌａｘ、５０ｍｇ／ｋｇ）は、また、有意な相乗的抗ＡＭＬ活性を示し、相乗効果比１１．０７及び寛解率１００％（６／６  ＰＲ）で２．５９％のＴ／Ｃ値（ｐ＜０．０５、対ビヒクル対照；ｐ＜０．０１、対ＡＢＴ−１９９群）を達成した。対照的に、化合物６又はＡＢＴ−１９９単体群ではＣＲ又はＰＲは発生しなかった。これらの結果は、ＨＨＴと組み合わせた化合物６はＨＨＴと組み合わせたＡＢＴ−１９９の効果と同等の有意な抗ＡＭＬ効果を有することを示した。全ての治療で明らかな体重減少は観察されず（図５Ｂ）、上記の投与レジメンに対する良好な耐性を示している。
【０２６２】
【表３３】
2021535129.tif 000079
【０２６３】
結果は、ＨＨＴと組み合わせた化合物６が、ＡＭＬ異種移植モデルで相乗的抗腫瘍活性を発揮することを示唆し、ＡＭＬ患者の治療におけるこの組み合わせの潜在的な治療への応用を示している。
【０２６４】
実施例６：マウスのヒトＯＣＩ−ＡＭＬ−３ＡＭＬ異種移植モデルにおけるホモハリングトニン（ＨＨＴ）と組み合わせた化合物６の相乗的抗腫瘍活性。
ＯＣＩ−ＡＭＬ−３細胞などの抗アポトーシスタンパク質ＭＣＬ−１を高度に発現する腫瘍細胞は、ＢＣＬ−２選択的阻害剤（ＡＢＴ−１９９）治療に対して一次耐性を示すことが示されている（Ｐａｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１７，Ｃａｎｃｅｒ  ｃｅｌｌ．３２（６），７４８−７６０  ｅ７４６．）。従って、ＨＨＴと組み合わせた化合物６がＭＣＬ−１の高発現によって誘発された化合物６に対するＡＭＬの一次耐性を克服できるかどうかを調査するため、本研究は、ＯＣＩ−ＡＭＬ−３細胞を使用して、マウスにおけるＳＣ異種移植モデルを確立した。
【０２６５】
［実験方法］
ＯＣＩ−ＡＭＬ  ＡＭＬ異種移植モデルは、１×１０6細胞／動物のＯＣＩ−ＡＭＬ−３細胞を、無菌条件下で、雌のＮＯＤ  ＳＣＩＤマウス（供給元：Ｖｉｔａｌ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，ＳＣＸＫ（ＢｅｉＪｉｎｇ）２０１６−０００６；承認番号：１１００１１１９１１０５６９７１）の右脇腹に皮下注射することによって確立した。腫瘍が適切なサイズ（１３３ｍｍ3）に達したとき、マウスは４つの群：ビヒクル対照、化合物６（５０ｍｇ／ｋｇ）、ＨＨＴ（０．７５ｍｇ／ｋｇ）、及びＨＨＴと組み合わせた化合物６治療群にランダム化された。群分けした日（１日目）に治療を開始した。化合物６は、１４日間連続して１日１回経口投与された。ＨＨＴは、２日目から７日間連続して１日１回腹腔内注射された。腫瘍サイズ（キャリパー）及び動物の体重は、週に２回測定した。
【０２６６】
［実験結果］
上記実施例５に記載されているように、Ｔ／Ｃ（％）を決定した。
【０２６７】
図６Ａ及び６Ｂにて示すように、ＯＣＩ−ＡＭＬ−３は、急速に成長する異種移植腫瘍として示した；ビヒクル対照の動物は、それらの腫瘍サイズが動物福祉に許容される範囲を超えたために安楽死させられ、従って、研究は１５日目で終了した。１５日間の治療中に、５０ｍｇ／ｋｇの化合物６単体群は、予想通り有意な抗腫瘍活性を示さず、６１．３６％のＴ／Ｃ値をもたらした（ｐ＞０．０５、対ビヒクル対照）；０．７５ｍｇ／ｋｇのＨＨＴによる治療も、６６．７７％のＴ／Ｃ値で有意な抗腫瘍活性を示さなかった（ｐ＞０．０５、対ビヒクル対照）。重要なことに、化合物６及びＨＨＴの組み合わせ治療は、有意な相乗的抗腫瘍活性を示し、相乗効果比１．２４で３３．０２％のＴ／Ｃ値（ｐ＜０．０５、対ビヒクル対照）を達成した。全ての治療で明らかな体重減少は観察されず（図６Ｂ）、上記の投与レジメンに対する良好な耐性を示している。
【０２６８】
【表３４】
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【０２６９】
結果は、化合物６のＨＨＴとの組み合わせが、相乗的抗腫瘍活性を発揮することを示唆し、細胞殺傷に対する耐性モデルを敏感にし、ＡＭＬ患者のためのより効果的な治療のための新しい組み合わせストラテジーを提供する。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４Ａ−Ｂ】
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【図４Ｃ−Ｄ】
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【図５】
2021535129.tif 000099
【図６】
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【国際調査報告】
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2021535129.tif 000102
2021535129.tif 000103
2021535129.tif 000104
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