(57)【要約】  １−（３，４−ジヒドロ−１Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］インドール−２（５Ｈ）−イル）−２−ヒドロキシエタノン【化１】2021515804.tif 000084  が開示される。これらの化合物は、インターフェロン産生細胞型におけるヒトｃＧＡＳの阻害剤である。したがって、それらは、ヒトにおけるｃＧＡＳ関連自己免疫疾患を治療するための治療薬として有用である。
2021515804.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）の化合物であって、
【化１】
2021515804.tif 000079
式中、
Ｒ１は、水素、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、ＣＨ２ＣＨ２−ＯＲ３、またはフルオロ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルであり、
Ｒ２は、水素、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、またはＣＨ２ＣＨ２−ＯＲ３であるか、またはＲ２およびＲ３０は、それらが結合している原子と一緒になって、４〜６員の脂肪族環を形成してもよく、
Ｒ３は、水素または（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルであり、
Ｒ４は、水素、ハロゲン、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシ、場合により置換されることのある単環式ヘテロシクリル環、シアノ、場合により置換されることのあるフェニル環、場合により置換されることのある二環式ヘテロシクリル環、アミノ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルアミノ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、（Ｃ１〜Ｃ３）ジアルキルアミノ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、（Ｃ１〜Ｃ６）ヒドロカルビル、ヘテロシクリル（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、ベンジル、ヘテロシクリル置換ベンジル、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルアミノカルボニル、（Ｃ１〜Ｃ３）アシルアミノから選択され、
ここで、
前記場合により置換されることのある単環式ヘテロシクリルは、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、アミノ、シアノ、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルアミノ、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシ、オキソ、フルオロ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、およびヒドロキシ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルから選択される１つまたは複数の置換基で置換されていてもよく、
前記場合により置換されることのあるフェニルは、アミノ、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルアミノ、メタ（Ｃ１〜Ｃ３）ジアルキルアミノ、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシ、ヒドロキシ、ハロゲン、オルトシアノ、メタシアノ、アミノカルボニル、メチレンジオキシ、エチレンジオキシ、（Ｃ１〜Ｃ３）アシルアミノ、フルオロ（Ｃ１〜Ｃ３）アシルアミノ、およびヒドロキシ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルアミノスルホニルから選択される１つまたは複数の置換基で置換されていてもよく、
前記場合により置換されることのある二環式ヘテロシクリルは、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、ヒドロキシ、およびオキソから選択される１つまたは複数の置換基で置換されていてもよく、
Ｒ５は、水素、ハロゲン、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシ、フルオロ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、フルオロ（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシ、シアノ、および
【化２】
2021515804.tif 000080
から選択され、
Ｒ６は、水素、ハロゲン、シアノ、−Ｃ≡ＣＨ、−ＣＨ＝ＣＨ２、メチル、およびトリフルオロメチルから選択され、
Ｒ７は、水素、ハロゲン、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシ、フルオロ（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシ、シアノ、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、およびフルオロ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルから選択され、
Ｒ２０は、水素または（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルであるか、またはＲ２０およびＲ２１は、それらが結合している炭素と一緒になって、３〜５員の脂肪族炭素環を形成してもよく、
Ｒ２１は、水素または（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルであるか、またはＲ２１およびＲ２０は、それらが結合している炭素と一緒になって、３〜５員の脂肪族炭素環を形成してもよく、
Ｒ３０は、水素であるか、またはＲ３０およびＲ２は、それらが結合している原子と一緒になって、４〜６員の脂肪族環を形成してもよく、
ｎは、１または２であり、
ただし、以下の条件：
（１）Ｒ２が（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルである場合、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、およびＲ７のすべてが水素であることはない、
（２）Ｒ１が水素であり、Ｒ２がメチルであり、Ｒ５がハロゲンである場合、Ｒ７は、Ｈでもクロロでもない、
（３）Ｒ２が（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルであり、Ｒ５がメトキシまたはカルボキシである場合、Ｒ７は、Ｈではない
を満たす、化合物。
【請求項２】
ｉ）Ｒ２０が水素または（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルであり、
ｉｉ）Ｒ２１が水素であり、
ｉｉｉ）Ｒ３０が水素であり、
ｉｖ）ｎが１である、
請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ１が水素またはメチルである、請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ１が水素である、請求項３に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ２が水素またはメチルである、請求項２に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ２が水素である、請求項５に記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ７が水素、ハロゲン、メトキシ、シアノ、およびトリフルオロメチルから選択される、請求項２に記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ７がハロゲンである、請求項７に記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ７がクロロまたはフルオロである、請求項８に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｒ７がフルオロである、請求項９に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｒ６がハロゲンである、請求項２に記載の化合物。
【請求項１２】
Ｒ６がクロロである、請求項１１に記載の化合物。
【請求項１３】
Ｒ６がブロモである、請求項１１に記載の化合物。
【請求項１４】
Ｒ６がフルオロである、請求項１１に記載の化合物。
【請求項１５】
Ｒ７がフルオロである、請求項１２に記載の化合物。
【請求項１６】
Ｒ５が水素、ハロゲン、シアノ、およびトリフルオロメチルから選択される、請求項２に記載の化合物。
【請求項１７】
Ｒ５が水素である、請求項１６に記載の化合物。
【請求項１８】
Ｒ５が水素である、請求項１５に記載の化合物。
【請求項１９】
Ｒ２０が水素またはメチルである、請求項２に記載の化合物。
【請求項２０】
Ｒ４が場合により置換されることのあるフェニル、場合により置換されることのある二環式ヘテロシクリル、および場合により置換されることのある単環式ヘテロアリールから選択される、請求項２に記載の化合物。
【請求項２１】
Ｒ４がアミノ、ハロゲン、オルトシアノ、メタシアノ、メトキシ、ヒドロキシ、およびアミノカルボニルから選択される置換基で場合により置換されることのあるフェニルである、請求項２０に記載の化合物。
【請求項２２】
前記場合により置換される置換基がパラアミノ、フルオロ、オルトシアノ、メタシアノ、オルトヒドロキシ、メタヒドロキシ、およびメタアミノカルボニルから選択される、請求項２１に記載の化合物。
【請求項２３】
Ｒ４がアミノ、ハロゲン、メチル、ジフルオロメチル、メトキシ、およびシアノから選択される置換基で場合により置換されることのある単環式ヘテロアリールである、請求項２０に記載の化合物。
【請求項２４】
前記場合により置換されることのある単環式ヘテロアリールがフラン、チオフェン、ピロール、ピラゾール、オキサゾール、オキサジアゾール、チアゾール、イソキサゾール、イソチアゾール、イミダゾール、トリアゾール、ピリジン、ピリミジン、ピラジン、およびピリダジンから選択される、請求項２３に記載の化合物。
【請求項２５】
前記場合により置換されることのある単環式ヘテロアリールがピラゾール、オキサゾール、イソキサゾール、トリアゾール、オキサジアゾール、およびイミダゾールから選択される、請求項２４に記載の化合物。
【請求項２６】
前記場合により置換されることのある単環式ヘテロアリールがピラゾールまたはトリアゾールである、請求項２５に記載の化合物。
【請求項２７】
前記場合により置換される置換基がメチルである、請求項２６に記載の化合物。
【請求項２８】
Ｒ４が
【化３】
2021515804.tif 000081
であり、Ｒ２０が水素またはメチルであり、Ｒ２が水素である、請求項１８に記載の化合物。
【請求項２９】
前記場合により置換されることのある二環式ヘテロシクリルがインドール、イソインドール、ベンゾイミダゾール、ベンゾフラン、ベンゾチオフェン、ベンゾオキサジアゾール、ベンゾチアゾール、ピラゾロピリジン、キノリン、イソキノリン、キナゾリン、キノキサリン、ベンゾジオキソール、ジヒドロベンゾオキサジン、およびプリンから選択される、請求項２０に記載の化合物。
【請求項３０】
前記場合により置換されることのある二環式ヘテロシクリルがベンゾオキサジアゾール、ピラゾロピリジン、ベンゾジオキソール、ジヒドロベンゾオキサジン、およびプリンから選択される、請求項２９に記載の化合物。
【請求項３１】
式（ＩＩ）の化合物を投与することを含む、患者における炎症反応を阻害する方法であって、
【化４】
2021515804.tif 000082
式中、
Ｒ１は、水素、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、ＣＨ２ＣＨ２−ＯＲ３、またはフルオロ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルであり、
Ｒ２は、水素または（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、ＣＨ２ＣＨ２−ＯＲ３であるか、またはＲ２およびＲ３０は、それらが結合している原子と一緒になって、４〜６員の脂肪族環を形成してもよく、
Ｒ３は、水素または（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルであり、
Ｒ４は、水素、ハロゲン、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシ、場合により置換されることのある単環式ヘテロシクリル、シアノ、場合により置換されることのあるフェニル、場合により置換されることのある二環式ヘテロシクリル、アミノ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルアミノ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、（Ｃ１〜Ｃ３）ジアルキルアミノ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、（Ｃ１〜Ｃ６）ヒドロカルビル、ヘテロシクリル（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、ベンジル、ヘテロシクリル置換ベンジル、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルアミノカルボニル、（Ｃ１〜Ｃ３）アシルアミノから選択され、
ここで、
前記場合により置換されることのある単環式ヘテロシクリルは、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、アミノ、シアノ、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルアミノ、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシ、オキソ、フルオロ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、およびヒドロキシ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルから選択される１つまたは複数の置換基で置換されていてもよく、
前記場合により置換されることのあるフェニルは、アミノ、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルアミノ、メタ（Ｃ１〜Ｃ３）ジアルキルアミノ、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシ、ヒドロキシ、ハロゲン、オルトシアノ、メタシアノ、アミノカルボニル、メチレンジオキシ、エチレンジオキシ、（Ｃ１〜Ｃ３）アシルアミノ、フルオロ（Ｃ１〜Ｃ３）アシルアミノ、およびヒドロキシ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルアミノスルホニルから選択される１つまたは複数の置換基で置換されていてもよく、
前記場合により置換されることのある二環式ヘテロシクリルは、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、ヒドロキシ、およびオキソから選択される１つまたは複数の置換基で置換されていてもよく、
Ｒ５は、水素、ハロゲン、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシ、フルオロ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、フルオロ（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシ、シアノ、および
【化５】
2021515804.tif 000083
から選択され、
Ｒ６は、水素、ハロゲン、シアノ、−Ｃ≡ＣＨ、−ＣＨ＝ＣＨ２、メチル、およびトリフルオロメチルから選択され、
Ｒ７は、水素、ハロゲン、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシ、フルオロ（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシ、シアノ、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、およびフルオロ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルから選択され、
Ｒ２０は、水素または（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルであるか、またはＲ２０およびＲ２１は、それらが結合している炭素と一緒になって、３〜５員の脂肪族炭素環を形成してもよく、
Ｒ２１は、水素または（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルであるか、またはＲ２１およびＲ２０は、それらが結合している炭素と一緒になって、３〜５員の脂肪族炭素環を形成してもよく、
Ｒ３０は、水素であるか、またはＲ３０およびＲ２は、それらが結合している原子と一緒になって、４〜６員の脂肪族環を形成してもよく、
ｎは、１または２である、
患者における炎症反応を阻害する方法。
【請求項３２】
患者における炎症を阻害する方法であって、請求項１〜３０のいずれかに記載の化合物を投与することを含む、患者における炎症を阻害する方法。
【請求項３３】
前記患者におけるｄｓＤＮＡトリガーインターフェロン発現を阻害することをさらに含む、請求項３１に記載の方法。
【請求項３４】
哺乳類におけるｄｓＤＮＡトリガーインターフェロン発現を阻害する方法であって、請求項１〜３０のいずれかに記載の化合物を前記哺乳類に投与することを含む、哺乳類におけるｄｓＤＮＡトリガーインターフェロン発現を阻害する方法。
【請求項３５】
患者におけるがん転移を治療する方法であって、式（ＩＩ）の化合物を投与することを含む、患者におけるがん転移を治療する方法。
【請求項３６】
患者におけるがん転移を治療する方法であって、請求項１〜３０のいずれかに記載の化合物を投与することを含む、患者におけるがん転移を治療する方法。
【請求項３７】
薬学的に許容される担体と、
請求項１〜３０のいずれかに記載の化合物と
を含む、医薬製剤。
【発明の詳細な説明】
【発明の分野】
【０００１】
本発明は、主要なインターフェロン産生細胞型におけるヒトｃＧＡＳの阻害剤である、２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］インドール誘導体、特に、１−（３，４−ジヒドロ−１Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］インドール−２（５Ｈ）−イル）−２−ヒドロキシエタノンに関する。したがって、それらは、ヒトにおけるｃＧＡＳ関連自己免疫疾患を治療するための治療薬として有用である。
【発明の背景】
【０００２】
自然免疫は、病原体の侵入から宿主細胞を防御し、適応免疫系へのシグナル伝達を開始する第一線の細胞ストレス反応と考えられている。これらのプロセスは、多様なパターン認識受容体（ＰＲＲ）によるセンシングと、それに続くサイトカインおよびＩ型インターフェロン遺伝子発現の活性化を通した保存された病原体関連分子パターン（ＰＡＭＰ）によってトリガーされる。単球、マクロファージ、樹状細胞などの主要な抗原提示細胞は、インターフェロンを産生し、適応Ｔ細胞およびＢ細胞免疫系反応を誘発するのに重大である。主要なＰＲＲは、細胞表面、リソソーム膜の内部、またはサイトゾルのいずれかで、異常な、すなわち、誤った場所に局在化した、未成熟、または未修飾の核酸を検出する。
【０００３】
環状ＧＭＰ−ＡＭＰシンターゼ（ｃＧＡＳ／ＭＢ２１Ｄ１）は、病原体または核もしくはミトコンドリア自己ｄｓＤＮＡの誤った局在化から生じるサイトゾルｄｓＤＮＡの主要なセンサーである。ｃＧＡＳへのｄｓＤＮＡの結合は、ｃ［Ｇ（２’，５’）ｐＡ（３’，５’）ｐ］の合成を活性化し、これは、ｃＧＡＭＰと称される拡散性環状ジヌクレオチドであり、小胞体膜アンカーアダプタータンパク質、インターフェロン遺伝子の刺激因子（ＳＴＩＮＧ／ＴＭＥＭ１７３）に移動してこれらを活性化する。活性化されたＳＴＩＮＧは、ＴＡＮＫ結合キナーゼ１（ＴＢＫ１）を動員し、活性化し、これは、次々にインターフェロン調節因子（ＩＲＦ）の転写因子ファミリーをリン酸化し、サイトカインおよびＩ型インターフェロンｍＲＮＡ発現を誘導する。Ｉ型インターフェロンは、１０を超えるＩＦＮＡ遺伝子および１つのＩＦＮＢ１遺伝子から発現される。
【０００４】
ｄｓＤＮＡセンシングにおけるｃＧＡＳの重要な役割は、様々な病原菌、ウイルス、およびレトロウイルスにおいて確立されている。加えて、ｃＧＡＳは、細胞老化および潜在的ながん細胞の監視における破裂性小核の認識などの他の様々な生物学的プロセスに必須である。
【０００５】
ｃＧＡＳ経路は、侵入病原体に対する宿主防御に重要であるが、細胞ストレスおよび遺伝的要因も、例えば、核またはミトコンドリアの漏出からサイトゾルにおける自己ｄｓＤＮＡの蓄積を引き起こし得る。これは、自己炎症反応をトリガーし得る。ループスのような重度の自己炎症性免疫介在性疾患であるアイカルディ・グティエール症候群（ＡＧＳ）は、サイトゾルにおける異常なＤＮＡの分解を司っている一次ＤＮＡエキソヌクレアーゼであるＴＲＥＸ１における機能喪失型変異から生じる。ＴＲＥＸ１欠損マウスにおけるｃＧＡＳのノックアウトは、ｃＧＡＳを薬物標的およびインターフェロノパシーのドライバーとして支持する、さもなければ致命的な自己免疫反応を予防した。同様に、エンドサイトーシス中にリソソームにおける過剰なＤＮＡの分解を司っているエンドヌクレアーゼであるＤＮａｓｅ  ＩＩの欠乏によって引き起こされる胚致死は、ＳＴＩＮＧまたはｃＧＡＳの追加のノックアウトによって完全に救出される。したがって、ｃＧＡＳの阻害は、その病因が抗ｄｓＤＮＡ抗体を伴う自己炎症性疾患を予防するための重要な治療戦略を構成する。全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）は、そのような疾患の１つであり得る［Ｐｉｓｅｔｓｋｙ，Ｎａｔ  Ｒｅｖ  Ｒｈｅｕｍａｔｏｌ  １２，１０２−１１０（２０１６）］。
【０００６】
結果的に、ｃＧＡＳおよびＳＴＩＮＧは、阻害剤および／または活性化剤の同定に関する構造生物学者および医薬品化学者の関心を集めた。マウスｃＧＡＳ−ＤＮＡ結晶構造を使用したインシリコスクリーニングの取り組みにより、はっきり特徴づけられる小分子抗マラリア薬であるキナクリンが潜在的なｃＧＡＳ阻害剤として同定された［Ａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９４，４０８９−４０９３（２０１５）］。しかしながら、既知のＤＮＡインターカレーターであるキナクリンは、酵素に直接結合し、これを阻害する代わりに、酵素を活性化できないｄｓＤＮＡコンフォメーションの破壊を通じて、ｃＧＡＳ活性に間接的に影響を与えることが見出された。加えて、ＲＩＧ−Ｉ経路に対する干渉を通してかなりのオフターゲット効果が観察された。
【０００７】
ｃＧＡＳに特異的な小分子阻害剤は、不適切なｃＧＡＳ活性およびその結果生じる望ましくないＩ型インターフェロン活性から生じる疾患の治療に大きな価値がある。そのような自己免疫疾患の例には、アイカルディ・グティエール症候群（ＡＧＳ）および全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、１５０万人を超えるアメリカ人を苦しめている複雑な慢性全身性自己免疫疾患が含まれる。ＳＬＥの現在の治療は、衰弱性の有害な副作用に関連する免疫抑制療法を伴う。望ましくないＩ型インターフェロン活性の抑制に関連する他の可能なユーティリティには、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）の治療が含まれる。さらに、非標準的なｃＧＡＳ経路依存ＮＦ−ｋＢシグナル伝達の抑制は、がん転移のプロセスを妨害する可能性がある［Ｂａｋｈｏｕｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ５５３，４６７−４７２（２０１８）］。
【発明の概要】
【０００８】
１−（３，４−ジヒドロ−１Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］インドール−２（５Ｈ）−イル）−２−ヒドロキシエタノン誘導体は、ヒトｃＧＡＳの強力かつ特異的な阻害剤であり、初代ヒトマクロファージを含めたインターフェロン産生細胞型において活性であることが見出された。
【０００９】
一態様では、本発明は、式Ｉの化合物に関する：
【化１】
2021515804.tif 000003
式中、
Ｒ１は、水素、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、ＣＨ２ＣＨ２−ＯＲ３、またはフルオロ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルであり、
Ｒ２は、水素、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、またはＣＨ２ＣＨ２−ＯＲ３であるか、またはＲ２およびＲ３０は、それらが結合している原子と一緒になって、４〜６員の脂肪族環を形成してもよく、
Ｒ３は、水素または（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルであり、
Ｒ４は、水素、ハロゲン、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシ、場合により置換されることのある単環式ヘテロシクリル、シアノ、場合により置換されることのあるフェニル、場合により置換されることのある二環式ヘテロシクリル、アミノ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルアミノ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、（Ｃ１〜Ｃ３）ジアルキルアミノ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、（Ｃ１〜Ｃ６）ヒドロカルビル、ヘテロシクリル（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、ベンジル、ヘテロシクリル置換ベンジル、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルアミノカルボニル、（Ｃ１〜Ｃ３）アシルアミノから選択され、
ここで、
前記場合により置換されることのある単環式ヘテロシクリルは、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、アミノ、シアノ、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルアミノ、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシ、オキソ、フルオロ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、およびヒドロキシ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルから選択される１つまたは複数の置換基で置換されていてもよく、
前記場合により置換されることのあるフェニルは、アミノ、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルアミノ、メタ（Ｃ１〜Ｃ３）ジアルキルアミノ、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシ、ヒドロキシ、ハロゲン、オルトシアノ、メタシアノ、アミノカルボニル、メチレンジオキシ、エチレンジオキシ、（Ｃ１〜Ｃ３）アシルアミノ、フルオロ（Ｃ１〜Ｃ３）アシルアミノ、およびヒドロキシ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルアミノスルホニルから選択される１つまたは複数の置換基で置換されていてもよく、
前記場合により置換されることのある二環式ヘテロシクリルは、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、ヒドロキシ、およびオキソから選択される１つまたは複数の置換基で置換されていてもよく、
Ｒ５は、水素、ハロゲン、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシ、フルオロ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、フルオロ（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシ、シアノ、および
【化２】
2021515804.tif 000004
から選択され、
Ｒ６は、水素、ハロゲン、シアノ、−Ｃ≡ＣＨ、−ＣＨ＝ＣＨ２、メチル、およびトリフルオロメチルから選択され、
Ｒ７は、水素、ハロゲン、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシ、フルオロ（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシ、シアノ、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、およびフルオロ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルから選択され、
Ｒ２０は、水素または（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルであるか、またはＲ２０およびＲ２１は、それらが結合している炭素と一緒になって、３〜５員の脂肪族炭素環を形成してもよく、
Ｒ２１は、水素または（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルであるか、またはＲ２１およびＲ２０は、それらが結合している炭素と一緒になって、３〜５員の脂肪族炭素環を形成してもよく、
Ｒ３０は、水素であるか、またはＲ３０およびＲ２は、それらが結合している原子と一緒になって、４〜６員の脂肪族環を形成してもよく、
ｎは、１または２であり、
ただし、以下の条件を満たすものとする：
（１）Ｒ２が（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルである場合、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、およびＲ７のすべてが水素であることはない、
（２）Ｒ１が水素であり、Ｒ２がメチルであり、Ｒ５がハロゲンである場合、Ｒ７は、Ｈでもクロロでもない、
（３）Ｒ２が（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルであり、Ｒ５がメトキシまたはカルボキシである場合、Ｒ７は、Ｈではない。
【００１０】
一態様では、本発明は、患者における炎症反応を阻害する方法であって、式（ＩＩ）の化合物を投与することを含む、患者における炎症反応を阻害する方法に関する：
【化３】
2021515804.tif 000005
式中、
Ｒ１は、水素、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、ＣＨ２ＣＨ２−ＯＲ３、またはフルオロ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルであり、
Ｒ２は、水素または（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、ＣＨ２ＣＨ２−ＯＲ３であるか、またはＲ２およびＲ３０は、それらが結合している原子と一緒になって、４〜６員の脂肪族環を形成してもよく、
Ｒ３は、水素または（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルであり、
Ｒ４は、水素、ハロゲン、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシ、場合により置換されることのある単環式ヘテロシクリル、シアノ、場合により置換されることのあるフェニル、場合により置換されることのある二環式ヘテロシクリル、アミノ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルアミノ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、（Ｃ１〜Ｃ３）ジアルキルアミノ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、（Ｃ１〜Ｃ６）ヒドロカルビル、ヘテロシクリル（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、ベンジル、ヘテロシクリル置換ベンジル、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルアミノカルボニル、（Ｃ１〜Ｃ３）アシルアミノから選択され、
ここで、
前記場合により置換されることのある単環式ヘテロシクリルは、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、アミノ、シアノ、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルアミノ、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシ、オキソ、フルオロ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、およびヒドロキシ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルから選択される１つまたは複数の置換基で置換されていてもよく、
前記場合により置換されることのあるフェニルは、アミノ、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルアミノ、メタ（Ｃ１〜Ｃ３）ジアルキルアミノ、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシ、ヒドロキシ、ハロゲン、オルトシアノ、メタシアノ、アミノカルボニル、メチレンジオキシ、エチレンジオキシ、（Ｃ１〜Ｃ３）アシルアミノ、フルオロ（Ｃ１〜Ｃ３）アシルアミノ、およびヒドロキシ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルアミノスルホニルから選択される１つまたは複数の置換基で置換されていてもよく、
前記場合により置換されることのある二環式ヘテロシクリルは、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、ヒドロキシ、およびオキソから選択される１つまたは複数の置換基で置換されていてもよく、
Ｒ５は、水素、ハロゲン、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシ、フルオロ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、フルオロ（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシ、シアノ、および
【化４】
2021515804.tif 000006
から選択され、
Ｒ６は、水素、ハロゲン、シアノ、−Ｃ≡ＣＨ、−ＣＨ＝ＣＨ２、メチル、およびトリフルオロメチルから選択され、
Ｒ７は、水素、ハロゲン、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシ、フルオロ（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシ、シアノ、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、およびフルオロ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルから選択され、
Ｒ２０は、水素または（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルであるか、またはＲ２０およびＲ２１は、それらが結合している炭素と一緒になって、３〜５員の脂肪族炭素環を形成してもよく、
Ｒ２１は、水素または（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルであるか、またはＲ２１およびＲ２０は、それらが結合している炭素と一緒になって、３〜５員の脂肪族炭素環を形成してもよく、
Ｒ３０は、水素であるか、またはＲ３０およびＲ２は、それらが結合している原子と一緒になって、４〜６員の脂肪族環を形成してもよく、
ｎは、１または２である。
【００１１】
別の態様では、本発明は、本明細書に記載の化合物を用いて患者におけるｄｓＤＮＡトリガーインターフェロン発現を阻害するための方法に関する。
【００１２】
別の態様では、本発明は、本明細書に記載の化合物を用いて患者におけるがん転移を治療するための方法に関する。
【００１３】
別の態様では、本発明は、薬学的に許容される担体と、本明細書に記載の化合物とを含む医薬組成物に関する。
【発明の詳細な説明】
【００１４】
組成物態様では、本発明は、上記のように、式Ｉの化合物に関する：
【化５】
2021515804.tif 000007
【００１５】
一部の実施形態では、Ｒ１は、水素である。他の実施形態では、Ｒ１は、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル基、特に、メチルである。さらに他の実施形態では、Ｒ１は、ＣＨ２ＣＨ２−ＯＲ３であり、ここで、Ｒ３は、水素および（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルから選択される。さらに他の実施形態では、Ｒ１は、フルオロ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル基である。
【００１６】
一部の実施形態では、Ｒ２は、水素である。他の実施形態では、Ｒ２は、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル基、特にメチルである。さらに他の実施形態では、Ｒ２は、ＣＨ２ＣＨ２−ＯＲ３であり、ここで、Ｒ３は、再び水素および（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルから選択される。さらに他の実施形態では、Ｒ２およびＲ３０は、４〜６員の脂肪族環を形成する。
【００１７】
一部の実施形態では、Ｒ４は、水素である。他の実施形態では、Ｒ４は、ハロゲンである。さらに他の実施形態では、Ｒ４は、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシである。さらに他の実施形態では、Ｒ４は、シアノである。
【００１８】
一部の実施形態では、Ｒ４は、場合により置換されることのある単環式ヘテロシクリル環である。他の実施形態では、Ｒ４は、場合により置換されることのあるフェニル環である。さらに他の実施形態では、Ｒ４は、場合により置換されることのある二環式ヘテロシクリル環である。さらに他の実施形態では、Ｒ４は、アミノ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル基である。
【００１９】
Ｒ４が場合により置換されることのある単環式ヘテロシクリル環である一部の実施形態に関して、前記場合により置換される置換基は、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、アミノ基、シアノ置換基、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルアミノ基、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシ基、オキソ置換基、フルオロ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル基、ハロゲン置換基、ヒドロキシ置換基、およびヒドロキシ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル基の１つまたは複数から選択される。
【００２０】
Ｒ４が場合により置換されることのある単環式ヘテロシクリル環である一部の実施形態では、前記単環式ヘテロシクリル環は、場合により置換されることのある単環式ヘテロアリール環である。これらの実施形態の一部では、前記場合により置換される置換基は、アミノ置換基、ハロゲン置換基、メチル基、ジフルオロメチル基、メトキシ基、およびシアノ置換基の１つまたは複数から選択される。
【００２１】
Ｒ４が場合により置換されることのある単環式ヘテロアリール環である一部の実施形態に関して、単環式ヘテロアリール環は、フラン、チオフェン、ピロール、ピラゾール、オキサゾール、オキサジアゾール、チアゾール、イソキサゾール、イソチアゾール、イミダゾール、トリアゾール、ピリジン、ピリミジン、ピラジン、およびピリダジンから選択される。
【００２２】
Ｒ４が場合により置換されることのある単環式ヘテロアリール環である一部の実施形態では、置換された単環式ヘテロアリール環は、
【化６】
2021515804.tif 000008
であり、式中、Ｒ５０は、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルまたはフルオロ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルである。これらの実施形態の一部では、Ｒ４は、
【化７】
2021515804.tif 000009
である。
【００２３】
Ｒ４が場合により置換されることのあるフェニル環である実施形態に関して、前記場合により置換される置換基は、アミノ置換基（特に、パラアミノ）、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルアミノ基、メタ（Ｃ１〜Ｃ３）ジアルキルアミノ基、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシ基（特に、メトキシ）、ヒドロキシ置換基（特に、オルトまたはメタヒドロキシ）、ハロゲン置換基（特に、フルオロ）、オルトシアノ置換基、メタシアノ置換基、アミノカルボニル基（特に、メタアミノカルボニル）、１，２−メチレンジオキシ環、１，２−エチレンジオキシ環、（Ｃ１〜Ｃ３）アシルアミノ基、フルオロ（Ｃ１〜Ｃ３）アシルアミノ基、およびヒドロキシ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルアミノスルホニル基の１つまたは複数から選択される。
【００２４】
Ｒ４が場合により置換されることのある二環式ヘテロシクリル環である実施形態に関して、前記場合により置換される置換基は、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル基、ヒドロキシ置換基、およびオキソ置換基の１つまたは複数から選択される。
【００２５】
Ｒ４が場合により置換されることのある二環式ヘテロシクリル環である一部の実施形態に関して、二環式ヘテロシクリル環は、インドール、イソインドール、ベンゾイミダゾール、ベンゾフラン、ベンゾチオフェン、ベンゾオキサジアゾール、ベンゾチアゾール、ピラゾロピリジン、キノリン、イソキノリン、キナゾリン、キノキサリン、ベンゾジオキソール、ジヒドロベンゾオキサジン、およびプリンから選択される。
【００２６】
一部の実施形態では、Ｒ４は、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルアミノ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル基である。他の実施形態では、Ｒ４は、（Ｃ１〜Ｃ３）ジアルキルアミノ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル基である。さらに他の実施形態では、Ｒ４は、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル基である。さらに他の実施形態では、Ｒ４は、（Ｃ１〜Ｃ６）ヒドロカルビル基である。
【００２７】
一部の実施形態では、Ｒ４は、ヘテロシクリル（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル基である。他の実施形態では、Ｒ４は、ベンジル基である。さらに他の実施形態では、Ｒ４は、ヘテロシクリル置換ベンジル基である。さらに他の実施形態では、Ｒ４は、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルアミノカルボニルまたは（Ｃ１〜Ｃ３）アシルアミノ基である。
【００２８】
一部の実施形態では、Ｒ５は、水素である。他の実施形態では、Ｒ５は、ハロゲン置換基である。さらに他の実施形態では、Ｒ５は、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル基である。さらに他の実施形態では、Ｒ５は、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシ基である。
【００２９】
一部の実施形態では、Ｒ５は、フルオロ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル基、特に、トリフルオロメチルである。他の実施形態では、Ｒ５は、フルオロ（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシ基である。さらに他の実施形態では、Ｒ５は、シアノ置換基である。さらに他の実施形態では、Ｒ５は、
【化８】
2021515804.tif 000010
である。
【００３０】
一部の実施形態では、Ｒ６は、水素である。他の実施形態では、Ｒ６は、ハロゲン置換基、特に、ブロモ、クロロ、またはフルオロである。さらに他の実施形態では、好ましくは、Ｒ７が同様にシアノ置換基でない場合、Ｒ６は、シアノ置換基である。さらに他の実施形態では、Ｒ６は、−Ｃ≡ＣＨ、−ＣＨ＝ＣＨ２、メチル、およびトリフルオロメチル基から選択される。
【００３１】
一部の実施形態では、Ｒ７は、水素である。他の実施形態では、Ｒ７は、ハロゲン置換基、特に、クロロまたはフルオロである。さらに他の実施形態では、好ましくは、Ｒ６が同様にシアノ置換基ではない場合、Ｒ７は、シアノ置換基である。さらに他の実施形態では、Ｒ７は、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシ基、特に、メトキシである。
【００３２】
一部の実施形態では、Ｒ７は、フルオロ（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシ基である。他の実施形態では、Ｒ７は、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル基である。さらに他の実施形態では、Ｒ７は、フルオロ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル基、特に、トリフルオロメチルである。
【００３３】
一部の実施形態では、Ｒ２０は、水素である。他の実施形態では、Ｒ２０は、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル基、特に、メチルである。一部の実施形態では、Ｒ２１は、水素である。他の実施形態では、Ｒ２１は、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル基、特に、メチルである。一部の実施形態では、Ｒ２０およびＲ２１は、それらが結合している炭素と一緒に、３〜５員の脂肪族炭素環を形成する。
【００３４】
一部の実施形態では、Ｒ３０は、水素である。他の実施形態では、Ｒ３０およびＲ２は、４〜６員の脂肪族環を形成する。
【００３５】
一部の実施形態では、ｎは、１である。他の実施形態では、ｎは、２である。
【００３６】
要約すると、本発明は、以下に関する。
【００３７】
［１］式ＩまたはＩＩの化合物。
【００３８】
［２］Ｒ１が水素である、上記［１］に記載の化合物。
【００３９】
［３］Ｒ１が（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルである、上記［１］に記載の化合物。
【００４０】
［４］Ｒ１がＣＨ２ＣＨ２−ＯＲ３であり、Ｒ３が水素および（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルから選択される、上記［１］に記載の化合物。
【００４１】
［５］Ｒ１がフルオロ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル基である、上記［１］に記載の化合物。
【００４２】
［６］Ｒ２が水素である、上記［１］〜［５］のいずれかに記載の化合物。
【００４３】
［７］Ｒ２が（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルである、上記［１］〜［５］のいずれかに記載の化合物。
【００４４】
［８］Ｒ２がＣＨ２ＣＨ２−ＯＲ３であり、Ｒ３が水素および（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルから選択される、上記［１］〜［５］のいずれかに記載の化合物。
【００４５】
［９］Ｒ４が水素である、上記［１］〜［８］のいずれかに記載の化合物。
【００４６】
［１０］Ｒ４がハロゲンである、上記［１］〜［８］のいずれかに記載の化合物。
【００４７】
［１１］Ｒ４が（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシである、上記［１］〜［８］のいずれかに記載の化合物。
【００４８】
［１２］Ｒ４がシアノである、上記［１］〜［８］のいずれかに記載の化合物。
【００４９】
［１３］Ｒ４が場合により置換されることのある単環式ヘテロシクリル環であり、前記場合により置換される置換基が（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、アミノ基、シアノ置換基、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルアミノ基、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシ基、オキソ置換基、フルオロ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル基、ハロゲン置換基、ヒドロキシ置換基、およびヒドロキシ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル基の１つまたは複数から選択される、上記［１］〜［８］のいずれかに記載の化合物。
【００５０】
［１４］Ｒ４が場合により置換されることのあるフェニル環であり、前記場合により置換される置換基がアミノ置換基（特に、パラアミノ）、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルアミノ基、メタ（Ｃ１〜Ｃ３）ジアルキルアミノ基、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシ基（特に、メトキシ）、ヒドロキシ置換基（特に、オルトまたはメタヒドロキシ）、ハロゲン置換基（特に、フルオロ）、オルトシアノ置換基、メタシアノ置換基、アミノカルボニル基（特に、メタアミノカルボニル）、１，２−メチレンジオキシ環、１，２−エチレンジオキシ環、（Ｃ１〜Ｃ３）アシルアミノ基、フルオロ（Ｃ１〜Ｃ３）アシルアミノ基、およびヒドロキシ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルアミノスルホニル基の１つまたは複数から選択される、上記［１］〜［８］のいずれかに記載の化合物。
【００５１】
［１５］Ｒ４が場合により置換されることのある二環式ヘテロシクリル環であり、前記場合により置換される置換基が（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル基、ヒドロキシ置換基、およびオキソ置換基の１つまたは複数から選択される、上記［１］〜［８］のいずれかに記載の化合物。
【００５２】
［１６］Ｒ４がアミノ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル基である、上記［１］〜［８］のいずれかに記載の化合物。
【００５３】
［１７］Ｒ４が場合により置換されることのある単環式ヘテロアリール環であり、前記場合により置換される置換基がアミノ置換基、ハロゲン置換基、メチル基、ジフルオロメチル基、メトキシ基、シアノ置換基の１つまたは複数から選択される、上記［１］〜［８］のいずれかに記載の化合物。
【００５４】
［１８］Ｒ４がフラン、チオフェン、ピロール、ピラゾール、オキサゾール、オキサジアゾール、チアゾール、イソキサゾール、イソチアゾール、イミダゾール、トリアゾール、ピリジン、ピリミジン、ピラジン、およびピリダジンから選択される場合により置換されることのある単環式ヘテロアリール環である、上記［１］〜［８］、［１３］、および［１７］のいずれかに記載の化合物。
【００５５】
［１９］Ｒ４が
【化９】
2021515804.tif 000011
であり、
式中、Ｒ５０が（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルまたはフルオロ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルである、
上記［１］〜［８］、［１３］、および［１７］〜［１８］のいずれかに記載の化合物。
【００５６】
［２０］Ｒ４が
【化１０】
2021515804.tif 000012
である、上記［１］〜［８］、［１３］、および［１７］〜［１８］のいずれかに記載の化合物。
【００５７】
［２１］Ｒ４が（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルアミノ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル基である、上記［１］〜［８］のいずれかに記載の化合物。
【００５８】
［２２］Ｒ４が（Ｃ１〜Ｃ３）ジアルキルアミノ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル基である、上記［１］〜［８］のいずれかに記載の化合物。
【００５９】
［２３］Ｒ４が（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル基である、上記［１］〜［８］のいずれかに記載の化合物。
【００６０】
［２４］Ｒ５が水素である、上記［１］〜［２３］のいずれかに記載の化合物。
【００６１】
［２５］Ｒ５がハロゲン置換基である、上記［１］〜［２３］のいずれかに記載の化合物。
【００６２】
［２６］Ｒ５が（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル基である、上記［１］〜［２３］のいずれかに記載の化合物。
【００６３】
［２７］Ｒ５が（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシ基である、上記［１］〜［２３］のいずれかに記載の化合物。
【００６４】
［２８］Ｒ５がフルオロ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル基である、上記［１］〜［２３］のいずれかに記載の化合物。
【００６５】
［２９］Ｒ５がフルオロ（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシ基である、上記［１］〜［２３］のいずれかに記載の化合物。
【００６６】
［３０］Ｒ５がシアノ置換基である、上記［１］〜［２３］のいずれかに記載の化合物。
【００６７】
［３１］Ｒ６が水素である、上記［１］〜［３０］のいずれかに記載の化合物。
【００６８】
［３２］Ｒ６がブロモ、フルオロ、またはクロロである、上記［１］〜［３０］のいずれかに記載の化合物。
【００６９】
［３３］Ｒ６がシアノ置換基である、上記［１］〜［３０］のいずれかに記載の化合物。
【００７０】
［３４］Ｒ７が水素である、上記［１］〜［３３］のいずれかに記載の化合物。
【００７１】
［３５］Ｒ７がフルオロまたはクロロである、上記［１］〜［３３］のいずれかに記載の化合物。
【００７２】
［３６］Ｒ７がシアノ置換基である、上記［１］〜［３３］のいずれかに記載の化合物。
【００７３】
［３７］Ｒ２０が水素である、上記［１］〜［３６］のいずれかに記載の化合物。
【００７４】
［３８］Ｒ２０がメチル基である、上記［１］〜［３６］のいずれかに記載の化合物。
【００７５】
［３９］Ｒ２１が水素である、上記［１］〜［３６］のいずれかに記載の化合物。
【００７６】
［４０］Ｒ２１がメチル基である、上記［１］〜［３６］のいずれかに記載の化合物。
【００７７】
［４１］Ｒ２０およびＲ２１が、それらが結合している炭素と一緒になって、３〜５員の脂肪族炭素環を形成する、上記［１］〜［３６］のいずれかに記載の化合物。
【００７８】
本明細書を通して、用語および置換基は、それらの定義を保持する。本明細書で提供される説明は、化学分野で知られている特定の用語を使用する。本明細書の説明全体を通じて特に明記しない限り、用語は、当業者によって理解されるとおりの意味を保持する。
【００７９】
本明細書で使用される場合、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」および「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」という用語またはその文法的変形は、述べられた特徴、整数、工程または構成要素を指定するものと解釈されるべきであるが、１つまたは複数の追加の特徴、整数、工程、構成要素またはその群の追加を排除するものではない。この用語は、「からなる」および「から本質的になる」という用語を包含する。「から本質的になる」という語句またはその文法的変形は、本明細書で使用される場合、述べられた特徴、整数、工程、または構成要素を指定するものとして解釈されるべきであるが、追加の特徴、整数、工程、構成要素、またはその群が特許請求された組成物または方法の基本的かつ新規な特徴を実質的に変更しない場合のみ、１つもしくは複数の追加の特徴、整数、工程、構成要素、またはその群を排除するものではない。
【００８０】
本明細書で使用される場合、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」という用語（ならびに「ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ」および「ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ」などのｃｏｍｐｒｉｓｅの任意の形）、「有する（ｈａｖｅ）」（ならびに「ｈａｓ」および「ｈａｖｉｎｇ」などのｈａｖｅの任意の形）、「含む（ｉｎｃｌｕｄｅ）」（ならびに「ｉｎｃｌｕｄｅｓ」および「ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ」などのｉｎｃｌｕｄｅの任意の形）、「含む（ｃｏｎｔａｉｎ）」（ならびに「ｃｏｎｔａｉｎｓ」および「ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ」などのｃｏｎｔａｉｎの任意の形）は、オープンエンド連結動詞である。結果として、１つまたは複数の工程または要素を「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」、「有する（ｈａｓ）」、「含む（ｉｎｃｌｕｄｅｓ）」、または「含む（ｃｏｎｔａｉｎｓ）」方法は、それらの１つまたは複数の工程または要素を所有するが、それらの１つまたは複数の工程または要素のみを所有することに限定されない。
【００８１】
「炭化水素」（またはそれが残基である場合は、「ヒドロカルビル」）は、アルキル、シクロアルキル、ポリシクロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、およびそれらの組合せを含む。例は、ベンジル、フェネチル、シクロヘキシルメチル、アダマンチル、カンホリル、およびナフチルエチルを含む。ヒドロカルビルは、唯一の要素成分としての水素および炭素で構成される任意の置換基を指す。「Ｃｘ〜Ｃｙ」または「（Ｃｘ〜Ｃｙ）」などの接頭辞は、接頭辞に続く基がｘからｙまでの炭素原子を有することを示す。例えば、「Ｃ１〜Ｃ２０炭化水素」は、１〜２０個の炭素原子を有する炭化水素を示す。脂肪族炭化水素は、芳香族ではない炭化水素であり、それらは、飽和または不飽和、環状、線状または分枝状とすることができる。脂肪族炭化水素の例は、イソプロピル、２−ブテニル、２−ブチニル、シクロペンチル、ノルボルニルなどを含む。芳香族炭化水素は、ベンゼン（フェニル）、ナフタレン（ナフチル）、アントラセンなどを含む。
【００８２】
特に明記しない限り、アルキル（または二価の場合はアルキレン）は、直鎖または分岐飽和炭化水素構造およびそれらの組合せを含むことを意図している。特に定義しない限り、「アルキル」は、１〜２０個の炭素原子、好ましくは、１〜１０個の炭素原子、より好ましくは、１〜６つの炭素原子のアルキル基を指す。アルキル基の例は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｓ−ブチル、ｔ−ブチルなどを含む。
【００８３】
シクロアルキルは、炭化水素のサブセットであり、３〜８つの炭素原子の環状炭化水素基を含む。シクロアルキル基の例は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、ノルボルニルなどを含む。
【００８４】
特に明記しない限り、「炭素環」という用語は、環原子がすべて炭素であるが任意の酸化状態のものである環系を含むことを意図している。したがって、（Ｃ３〜Ｃ１０）炭素環は、シクロプロパン、ベンゼン、シクロヘキセンなどの系を含めた非芳香族系と芳香族系の両方を指し、（Ｃ８〜Ｃ１２）カルボポリサイクルは、ノルボルナン、デカリン、インダン、およびナフタレンなどの系を指す。炭素環は、特に限定されない限り、単環、二環、および多環を指す。
【００８５】
複素環は、１〜４つの炭素がＮ、Ｏ、およびＳからなる群から選択されるヘテロ原子で置き換えられた脂肪族または芳香族の炭素環残基を意味する。特に明記しない限り、複素環は、非芳香族（ヘテロ脂肪族）または芳香族（ヘテロアリール）とすることができる。複素環の例は、ピロリジン、ピラゾール、ピロール、インドール、キノリン、イソキノリン、テトラヒドロイソキノリン、ベンゾフラン、ベンゾジオキサン、ベンゾジオキソール（置換基として生じる場合、一般にメチレンジオキシフェニルと称される）、テトラゾール、モルホリン、チアゾール、ピリジン、ピリダジン、ピリミジン、チオフェン、フラン、オキサゾール、オキサゾリン、イソキサゾール、ジオキサン、テトラヒドロフランなどを含む。ヘテロシクリル残基の例は、ピペラジニル、ピペリジニル、ピラゾリジニル、イミダゾリル、イミダゾリニル、イミダゾリジニル、ピラジニル、オキサゾリジニル、イソオキサゾリジニル、チアゾリジニル、イソチアゾリル、キヌクリジニル、イソチアゾリジニル、ベンズイミダゾリル、チアジアゾリル、ベンゾピラニル、ベンゾチアゾリル、ベンゾオキサゾリル、テトラヒドロフリル、テトラヒドロピラニル、チエニル（歴史的にはチオフェニルとも称される）、ベンゾチエニル、チアモルホリニル、オキサジアゾリル、トリアゾリル、およびテトラヒドロキノリニルを含む。
【００８６】
単環式ヘテロシクリルまたは単環式複素環は、単一の環で構成された芳香族または非芳香族複素環を意味する。単環式複素環の例は、フラン、チオフェン、ピロール、ピラゾール、オキサゾール、オキサジアゾール、チアゾール、イソキサゾール、イソチアゾール、イミダゾール、トリアゾール、ピリジン、ピリミジン、ピラジン、およびピリダジンを含む。二環式ヘテロシクリルは、環の一方または両方がヘテロ原子を含む２つの縮合環で構成された芳香族または非芳香族複素環を意味する。したがって、二環式ヘテロシクリルは、一方の環にヘテロ原子を有さないが、他方の環に１つまたは複数のヘテロ原子を含む縮合二環式構造を含む。両方の環が芳香族である必要はなく、一方または両方の環が芳香族であってもよい。しかしながら、少なくとも１つの環が芳香族である場合、その二環式ヘテロシクリルは、芳香族と見なされる。二環式複素環の例は、インドール、イソインドール、ベンゾイミダゾール、ベンゾフラン、ベンゾチオフェン、ベンゾオキサジアゾール、ベンゾチアゾール、ピラゾロピリジン、キノリン、イソキノリン、キナゾリン、キノキサリン、ベンゾジオキソール、ジヒドロベンゾオキサジン、およびプリンを含む。
【００８７】
ヒドロカルビルオキシは、酸素を介して親構造に結合した、１〜２０個の炭素原子、好ましくは１〜１０個の炭素原子、より好ましくは１〜６つの炭素原子の基を指す。アルコキシは、ヒドロカルビルオキシのサブセットであり、直線または分岐構成の群を含む。例は、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシなどを含む。低級アルコキシは、１〜４つの炭素を含む基を指す。「ハロゲン」という用語は、フッ素、塩素、臭素、またはヨウ素原子を意味する。
【００８８】
特に明記しない限り、アシルは、ホルミル、ならびにカルボニル官能基を介して親構造に結合している直鎖、分岐、環状配置、飽和、不飽和、芳香族およびそれらの組合せの１、２、３、４、５、６、７、および８炭素原子の基を指す。例は、アセチル、ベンゾイル、プロピオニル、イソブチリルなどを含む。低級アシルは、１〜４つの炭素を含む基を指す。
【００８９】
本明細書で使用される場合、「場合により置換されることのある」という用語は、「非置換または置換の」と互換的に使用され得る。「置換の」という用語は、特定のラジカルとの特定の基における１つまたは複数の水素原子の置換えを指す。例えば、置換アルキル、アリール、シクロアルキル、ヘテロシクリルなどは、各残基における１つまたは複数のＨ原子がハロゲン、ハロアルキル、アルキル、アシル、アルコキシアルキル、ヒドロキシ低級アルキル、カルボニル、フェニル、ヘテロアリール、ベンゼンスルホニル、ヒドロキシ、低級アルコキシ、ハロアルコキシ、オキサアルキル、カルボキシ、アルコキシカルボニル［−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−アルキル］、アルコキシカルボニルアミノ［ＨＮＣ（＝Ｏ）Ｏ−アルキル］、アミノカルボニル（カルボキサミドとも称される）［−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ２］、オキソ［＝Ｏ］アルキルアミノカルボニル［−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−アルキル］、シアノ、アセトキシ、ニトロ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、（アルキル）（アリール）アミノアルキル、アルキルアミノアルキル（シクロアルキルアミノアルキルを含む）、ジアルキルアミノアルキル、ジアルキルアミノアルコキシ、ヘテロシクリルアルコキシ、メルカプト、アルキルチオ、スルホキシド、スルホン、スルホニルアミノ、アルキルスルフィニル、アルキルスルホニル、アシルアミノアルキル、アシルアミノアルコキシ、アシルアミノ、アミジノ、アリール、ベンジル、ヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、フェノキシ、ベンジルオキシ、ヘテロアリールオキシ、ヒドロキシイミノ、アルコキシイミノ、オキサアルキル、アミノスルホニル、トリチル、アミジノ、グアニジノ、ウレイド、ベンジルオキシフェニル、およびベンジルオキシで置き換えられているアルキル、アリール、シクロアルキル、ヘテロシクリルを指す。一実施形態では、１、２、または３つの水素原子が特定のラジカルで置き換えられている。アルキルおよびシクロアルキルの場合、３つを超える水素原子がフッ素で置き換えられ得、実際、利用可能なすべての水素原子がフッ素で置き換えられ得る。
【００９０】
置換基Ｒｎは、一般に、導入される場合に定義され、本明細書全体およびすべての独立請求項においてその定義を保持する。
【００９１】
化合物の調製は、様々な化学基の保護および脱保護を伴い得る。保護および脱保護の必要性、ならびに適切な保護基の選択は、当業者により容易に決定され得る。その目的に適した基は、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｂｙ  Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ  ａｎｄ  Ｐ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ［Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９９９］，ｉｎ  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１ｓｔ  Ｅｄ．，Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ，２０００；ａｎｄ  ｉｎ  Ｍａｒｃｈ’ｓ  Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ：Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ，Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ，ａｎｄ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，５ｔｈ  Ｅｄ．，Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ，２００１などの化学分野の標準的な教科書で考察されている。
【００９２】
本明細書に記載の１つまたは複数の化合物は、最大２つの不斉中心を含み、したがって、エナンチオマー、ジアステレオマー、および絶対立体配置の観点から（Ｒ）−または（Ｓ）−として定義され得る他の立体異性体を生じさせ得る。本発明は、ラセミ化合物、光学的に純粋な形態、および中間混合物などのすべての可能な異性体を含むことを意味する。光学活性異性体は、ホモキラルシントンまたはホモキラル試薬を使用して調製され得るか、またはキラルクロマトグラフィーなどの従来の技術を使用して光学的に分割され得る。すべての互変異性型が含まれることが意図されている。本明細書で使用されているラセミ、アンビスケールミック、およびスケールミックまたはエナンチオマー的に純粋な化合物のグラフィック表現は、Ｍａｅｈｒ  Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｅｄ．６２，１１４−１２０（１９８５）から引用したものである：単純な単一の結合線は、結合性のみを伝達し、立体化学的関係は伝達せず、実線および破線のくさびは、キラル要素の絶対配置を示すために使用され、波線は、それが表す結合が生み出し得る任意の立体化学的関係の明示的な否認を示し、実線および太い破線は、相対的な構成を示す幾何記述子であるが、絶対配置を示さず、くさびの輪郭および点線または破線は、絶対配置が不確定のエナンチオマー的に純粋な化合物を示す。エナンチオマー的に純粋とは、８０ｅ．ｅ．を超える、好ましくは９０ｅ．ｅ．を超えることを意味する。
【００９３】
例えば、本発明の例示的な化合物を示す一般的な構造は、Ｒ２１が水素である場合、以下のように示される：
【化１１】
2021515804.tif 000013
この構造は、単一の不斉中心（アスタリスクでラベル付けされた）を含む。一実施形態では、この構造は、次のように表すことができる。
【化１２】
2021515804.tif 000014
この描写は、キラル中心に結合している原子に関する結合性のみを示している。この場合に表される化合物は、ＲおよびＳエナンチオマーの１００％Ｒから１００％Ｓまでのそれらの間の任意の比率の任意の混合物とすることができる。
【００９４】
個々のエナンチオマーは、以下のように描かれる：
【化１３】
2021515804.tif 000015
Ｒ２０が（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルである場合、左側の構造は、化合物がＳエナンチオマーでエナンチオマー的に濃縮されている（９０超：１０  Ｓ：Ｒまたは＞８０％ｅ．ｅ．Ｓ）ことを示し、右側の構造は、化合物がＲエナンチオマーでエナンチオマー的に濃縮されている（９０超：１０  Ｒ：Ｓまたは＞８０％ｅ．ｅ．Ｒ）ことを示している。この規則を使用して示されている構造に関して、絶対配置は、示されるようになることが知られている。
【００９５】
絶対立体配置は不明であるが、化合物がエナンチオマー的に濃縮されている（＞８０％ｅ．ｅ．）ことがわかっている場合、構造は、次のように描画される：
【化１４】
2021515804.tif 000016
この規則を使用するこれらの構造に関して、化合物は、エナンチオマー的に濃縮されている（＞８０％ｅ．ｅ．）が、絶対立体配置は不明である。知られているすべては、主要な異性体が特定のｅ．ｅ．で互いの鏡像であることである。この状況は、典型的に、エナンチオマー濃縮につながるキラル環境への曝露の結果である。
【００９６】
本明細書で使用される場合、「治療」もしくは「治療する」または「緩和する」または「回復させる」という用語は、治療効果および／または予防効果を含むがこれらに限定されない有益なまたは所望の結果を得るためのアプローチを指す。治療効果とは、治療されている基礎疾患の根絶または回復を意味する。また、患者が依然として基礎疾患に苦しんでいる可能性があるにもかかわらず、患者において改善が観察されるように、基礎疾患に関連する生理学的系の１つまたは複数の根絶または回復により治療効果が達成される。特に、ＳＬＥを治療する場合、家族素因を考慮する。したがって、３人の子供がいる家族があり、そのうち２人がＳＬＥおよび抗ｄｓＤＮＡ抗体を有する場合、３人目の子供がｄｓＤＮＡ抗体を示しているがまだ症状がない場合、臨床医は、遺伝的背景の理由で無症状の子供を治療する。
【００９７】
本明細書で使用され、当業者によって理解されるように、「化合物」の列挙は、明示的にさらに限定されない限り、その化合物の塩を含むことが意図される。特定の実施形態では、「式の化合物」という用語は、その化合物またはその薬学的に許容される塩を指す。
【００９８】
「薬学的に許容される塩」という用語は、無機酸および塩基ならびに有機酸および塩基を含めた、薬学的に許容される非毒性の酸または塩基から調製される塩を指す。本発明の化合物が塩基性である場合（ほとんどの場合そうであるように）、塩は、無機酸および有機酸を含めた薬学的に許容される非毒性の酸から調製され得る。本発明の化合物に適した薬学的に許容される酸付加塩は、酢酸、アジピン酸、アルギン酸、アスコルビン酸、アスパラギン酸、ベンゼンスルホン酸（ベシル酸）、安息香酸、ホウ酸、酪酸、ショウノウ酸、ショウノウスルホン酸、炭酸、クエン酸、エタンジスルホン酸、エタンスルホン酸、エチレンジアミン四酢酸、ギ酸、フマル酸、グルコヘプトン酸、グルコン酸、グルタミン酸、臭化水素酸、塩酸、ヨウ化水素酸、ヒドロキシナフトエ酸、イセチオン酸、乳酸、ラクトビオン酸、ラウリルスルホン酸、マレイン酸、リンゴ酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、粘液酸、ナフチレンスルホン酸、硝酸、オレイン酸、パモ酸、パントテン酸、リン酸、ピバル酸、ポリガラクツロン酸、サリチル酸、ステアリン酸、コハク酸、硫酸、タンニン酸、酒石酸、テオクラティック（ｔｅｏｃｌａｔｉｃ）酸、ｐ−トルエンスルホン酸などを含む。化合物が酸性官能基（例えば、−ＳＯ３Ｈ）を含む場合、本発明の化合物に適した薬学的に許容される塩基付加塩は、アルミニウム、カルシウム、リチウム、マグネシウム、カリウム、ナトリウム、および亜鉛から作られた金属塩、またはリジン、アルギニン、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、クロロプロカイン、コリン、ジエタノールアミン、エチレンジアミン、メグルミン（Ｎ−メチルグルカミン）、およびプロカインから作られた有機塩を含むが、これらに限定されない。さらなる薬学的に許容される塩は、適切な場合、非毒性のアンモニウムカチオン、および１〜２０個の炭素原子を有するアルキルに結合したカルボキシレート、スルホネート、およびホスホネートアニオンを含む。
【００９９】
また、本明細書では、上記で開示された化合物またはその薬学的に許容される塩を、その１つまたは複数の医薬担体および任意選択で１つまたは複数の他の治療成分とともに含む医薬組成物も提供される。担体は、製剤の他の成分と適合し、そのレシピエントに有害ではないという意味で「許容される」ものでなければならない。
【０１００】
製剤は、経口、非経口（皮下、皮内、筋肉内、静脈内、および関節内を含む）、直腸および局所（皮膚、口腔、舌下、および眼内を含む）投与に適したものを含む。最も適切な経路は、レシピエントの状態および障害に依存し得る。製剤は、単位剤形で好都合に提示されてもよく、製薬分野で周知の方法のいずれかにより調製されてもよい。すべての方法は、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩（「活性成分」）を、１つまたは複数の副成分を構成する担体と会合させる工程を含む。一般に、製剤は、活性成分を液体担体もしくは微粉化固体担体またはその両方と均一かつ密接に会合させ、その後、必要に応じて、生成物を所望の製剤に成形することにより調製される。
【０１０１】
経口投与に適した本発明の製剤は、所定量の活性成分をそれぞれ含有するカプセル、カシェ剤、または錠剤などの個別の単位として、粉末または顆粒として、水性液体または非水性液体中の溶液または懸濁液として、または水中油型液体エマルジョンもしくは油中水型液体エマルジョンとして提示され得る。活性成分は、ボーラス、舐剤、またはペーストとしても提示され得る。
【０１０２】
錠剤は、任意選択で１つまたは複数の副成分とともに、圧縮または成形により作られ得る。圧縮錠剤は、粉末または顆粒などの自由流動形態の活性成分を適切な機械において圧縮し、任意選択で結合剤、潤滑剤、不活性希釈剤、滑沢剤、界面活性剤、または分散剤と混合することにより調製され得る。成形錠剤は、不活性液体希釈剤で湿らせた粉末状化合物の混合物を適切な機械において成形することにより作られ得る。錠剤は、任意選択でコーティングされ得るまたは刻み目を付けられ得、その中の活性成分の持続、遅延、または制御放出を提供するように製剤化され得る。
【０１０３】
非経口投与用の製剤は、抗酸化剤、緩衝剤、静菌剤、および製剤を対象とするレシピエントの血液と等張にする溶質を含有し得る水性および非水性の無菌注射溶液を含む。非経口投与用の製剤は、懸濁剤および増粘剤を含み得る水性および非水性無菌懸濁液も含む。製剤は、複数回用量容器の単位用量、例えば、密封されたアンプルおよびバイアルで提示されてもよく、使用直前に、無菌液体担体、例えば、生理食塩水、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）などの添加のみを必要とする凍結乾燥（ｆｒｅｅｚｅ−ｄｒｉｅｄ）（凍結乾燥（ｌｙｏｐｈｉｌｉｚｅｄ））状態で保存され得る。即時注射溶液および懸濁液は、以前に記載された種類の無菌粉末、顆粒、および錠剤から調製され得る。
実験セクション
【０１０４】
Ｒ４がアリールまたはヘテロアリールである本発明の一部の化合物ｘは、合成経路Ａ１またはＡ２で以下に記載されるように調製され得る。マルチグラム合成には、合成経路Ａ２が好ましい。
合成経路Ａ１
【化１５】
2021515804.tif 000017
【０１０５】
パラジウム触媒によるｉとベンゾフェノンヒドラゾンのカップリングによりｉｉが提供され、これは、ヒドラジンｉｉｉに加水分解される。ヒドラジンｉｉｉをピペリジノンで環化して、テトラヒドロピリド［４，３−ｂ］インドールｉｖを提供する。テトラヒドロピリド［４，３−ｂ］インドールｉｖを４−ヒドロキシｖに脱メチル化し、ＢｏｃでＮ−保護し（ｖｉ）、無水トリフリックで活性化してｖｉｉを提供する。トリフラートｖｉｉを鈴木・宮浦カップリングを介してピナコールボロネート試薬とカップリングし、Ｒ４をｖｉｉｉに組み込む。Ｂｏｃ基が切断され、その酸塩化物を介して保護されたヒドロキシアセチル側鎖によって置き換えられ、アセチル保護された生成物ｉｘを提供する。アセチルは、水酸化リチウム水溶液で処理することにより、アセチル保護された生成物ｉｘから切断され、１−（３，４−ジヒドロ−１Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］インドール−２（５Ｈ）−イル）−２−ヒドロキシエタノンｘを提供する。
【０１０６】
例証のために合成例を提供する：
１−（６，７−ジクロロ−９−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−１，３，４，５−テトラヒドロ−２Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］インドール−２−イル）−２−ヒドロキシエタン−１−オン。
【化１６】
2021515804.tif 000018
１−ブロモ−３−クロロ−５−メトキシベンゼン（２０ｇ、９０．３ｍｍｏｌ）のジメチルホルムアミド（１００ｍＬ）溶液に、２５℃でトリクロロイソシアヌル酸（７．５６ｇ、３２．５ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を５０℃で１２時間撹拌した。混合物を水（２００ｍＬ）に注いだ。水相を酢酸エチル（２×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（３×１００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過した。ろ液を真空下で濃縮した。残留物を０℃で石油エーテル（２０ｍＬ）で粉砕した。固形物をろ取し、１−ブロモ−２，３−ジクロロ−５−メトキシベンゼンを得た。１Ｈ  ＮＭＲ：（ＣＤＣｌ３，４００  ＭＨｚ）δ  ７．１２（ｄ，Ｊ＝２．８  Ｈｚ，１Ｈ），７．００（ｄ，Ｊ＝２．８  Ｈｚ，１Ｈ），３．７９（ｓ，３Ｈ）．
１−ブロモ−２，３−ジクロロ−５−メトキシベンゼン（２０ｇ、７８．１ｍｍｏｌ）、ベンゾフェノンヒドラゾン（１８．４ｇ、９３．８ｍｍｏｌ）、キサントホス（７．４５ｇ、１２．９ｍｍｏｌ）、および炭酸セシウム（６３．７ｇ、１９６ｍｍｏｌ）の混合物のトルエン溶液（２００ｍＬ）に、酢酸パラジウム（１．７５ｇ、７．７９ｍｍｏｌ）を２５℃で窒素下で添加した。混合物を窒素下、１００℃で１０時間撹拌した。混合物を３０℃に冷却し、ろ過した。ろ液を濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、石油エーテル＝１）により精製して、１−（２，３−ジクロロ−５−メトキシフェニル）−２−（ジフェニルメチレン）ヒドラジンを得た。１Ｈ  ＮＭＲ：（ＣＤＣｌ３，４００  ＭＨｚ）δ  ８．１２（ｂｒｓ，１Ｈ），７．６５−７．５５（ｍ，５Ｈ），７．３９−７．３４（ｍ，５Ｈ），７．２５（ｄ，Ｊ＝４．０  Ｈｚ，１Ｈ），６．５３（ｄ，Ｊ＝４．０  Ｈｚ，１Ｈ），３．８６（ｓ，３Ｈ）．ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ  ３７１．０，３７３．０  ［Ｍ＋Ｈ］＋
１−（２，３−ジクロロ−５−メトキシフェニル）−２−（ジフェニルメチレン）ヒドラジン（７．０ｇ、１８．９ｍｍｏｌ）のジオキサン（６０ｍＬ）および濃塩酸（１２Ｍ、１５ｍＬ）溶液を１００℃で１時間撹拌した。混合物を０℃に冷却し、飽和重炭酸ナトリウム溶液の添加によりｐＨを８に調整した。水相を酢酸エチル（３×１５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（２００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過した。ろ液を真空下で濃縮した。残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝２０：１〜５：１）により精製して、１−（２，３−ジクロロ−５−メトキシフェニル）ヒドラジンを得た。１Ｈ  ＮＭＲ：（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００  ＭＨｚ）δ  ６．８３（ｂｒｓ，１Ｈ），６．７２（ｄ，Ｊ＝４．０  Ｈｚ，１Ｈ），６．４１（ｄ，Ｊ＝３．２  Ｈｚ，１Ｈ），４．２１（ｂｒｓ，２Ｈ），３．７３（ｓ，３Ｈ）．ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ  ２０７．０，２０８．９  ［Ｍ＋Ｈ］＋
１−（２，３−ジクロロ−５−メトキシフェニル）ヒドラジン（６．５ｇ、３１．４ｍｍｏｌ）および４−ピペリドン（５．１１ｇ、３７．７ｍｍｏｌ、ＨＣｌ塩）のジオキサン（７０ｍＬ）溶液に、濃硫酸を０℃で添加した（９．０２ｇ、９２．０ｍｍｏｌ、４．９ｍＬ）。混合物を８０℃で１２時間撹拌した。混合物を真空下で濃縮した。残留物を水（２０ｍＬ）で希釈し、水酸化ナトリウム水溶液（２Ｍ）の０℃での添加により、ｐＨを９に調整した。形成された沈殿物をろ過により収集した。沈殿物を酢酸エチル（１５ｍＬ）で粉砕して、６，７−ジクロロ−２，３，４，５−テトラヒドロ−９−メトキシ−１Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］インドールを得た。１Ｈ  ＮＭＲ：（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００  ＭＨｚ）δ  １１．６４（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），６．７３（ｓ，１Ｈ），４．３０（ｓ，２Ｈ），３．８６（ｓ，３Ｈ），３．５６（ｓ，２Ｈ），２．９６（ｓ，２Ｈ）．ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ  ２７１．０，２７３．０  ［Ｍ＋Ｈ］＋
６，７−ジクロロ−２，３，４，５−テトラヒドロ−９−メトキシ−１Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］インドール（２．０ｇ、７．３８ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（５０ｍＬ）溶液に、三臭化ホウ素（５．３０ｇ、２１．２ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。混合物を２５℃で１２時間撹拌した。混合物を減圧下で濃縮した。残留物を重炭酸ナトリウム飽和水溶液（３０ｍＬ）に注いだ。混合物を酢酸エチル（３×３０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（１０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過した。ろ液を真空下で濃縮して、６，７−ジクロロ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］インドール−９−オールを得た。１Ｈ  ＮＭＲ：（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００  ＭＨｚ）δ  １１．４８（ｂｒｓ，１Ｈ），６．６１（ｓ，１Ｈ），４．３３（ｓ，２Ｈ），３．３９−３．３５（ｍ，２Ｈ），３．００−３．９７（ｍ，２Ｈ）．
６，７−ジクロロ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］インドール−９−オール（１ｇ、３．８９ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（１．１８ｇ、１１．７ｍｍｏｌ、１．６２ｍＬ）のテトラヒドロフラン溶液（２０ｍＬ）に、Ｂｏｃ２Ｏ（６７９ｍｇ、３．１１ｍｍｏｌ、７１５μＬ）を２５℃で添加した。混合物を２５℃で１時間撹拌した。混合物を氷水（４０ｍＬ）に注いだ。混合物を酢酸エチル（３×２０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（２×２０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過した。ろ液を真空下で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、石油エーテル：酢酸エチル＝１０：１〜３：１）により精製して、ｔｅｒｔ−ブチル６，７−ジクロロ−３，４−ジヒドロ−９−ヒドロキシ−１Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］インドール−２（５Ｈ）−カルボキシレートを得た。１Ｈ  ＮＭＲ：（ＣＤＣｌ３，４００  ＭＨｚ）δ  ８．１６（ｂｒｓ，１Ｈ），７．９０（ｂｒｓ，１Ｈ），６．４８（ｓ，１Ｈ），４．８３（ｓ，２Ｈ），３．８１（ｔ，Ｊ＝６．０  Ｈｚ，２Ｈ），２．８５−２．８１（ｍ，２Ｈ），１．５９（ｓ，９Ｈ）．ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ  ３７９．０  ［Ｍ＋Ｎａ］＋
ｔｅｒｔ−ブチル６，７−ジクロロ−３，４−ジヒドロ−９−ヒドロキシ−１Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］インドール−２（５Ｈ）−カルボキシレート（７００ｍｇ、１．９６ｍｍｏｌ）のピリジン（５ｍＬ）およびジクロロメタン（１０ｍＬ）溶液に、Ｔｆ２Ｏ（１．１１ｇ、３．９３ｍｍｏｌ、６４７μＬ）を０℃で添加した。混合物を２５℃で１時間撹拌した。混合物を氷水（３０ｍＬ）に注いだ。混合物を酢酸エチル（２×２０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を塩酸水溶液（１Ｍ、２０ｍＬ）およびブライン（２×１０ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、真空下で濃縮して、ｔｅｒｔ−ブチル６，７−ジクロロ−９−（（（トリフルオロメチル）スルホニル）オキシ）−１，３，４，５−テトラヒドロ−２Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］インドール−２−カルボキシレートを得た。１Ｈ  ＮＭＲ：（ＣＤＣｌ３，４００  ＭＨｚ）δ  ８．４３（ｂｒｓ，１Ｈ），７．１６（ｓ，１Ｈ），４．７６（ｓ，２Ｈ），３．８３（ｔ，Ｊ＝５．６  Ｈｚ，２Ｈ），２．８９−２．８７（ｍ，２Ｈ），１．５１（ｓ，９Ｈ）．ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ  ４３２．９，４３４．９  ［ＭＳ−５５］＋
ジオキサン（１０ｍＬ）および水（３ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル６，７−ジクロロ−９−（（（トリフルオロメチル）スルホニル）オキシ）−１，３，４，５−テトラヒドロ−２Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］インドール−２−カルボキシレート（２００ｍｇ、４０９μｍｏｌ）、４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール（１１９ｍｇ、６１３μｍｏｌ）、および炭酸カリウム（１６９ｍｇ、１．２２ｍｍｏｌ）の混合物に、窒素下、２５℃でＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２・ＣＨ２Ｃｌ２（３３ｍｇ、４０μｍｏｌ）を添加した。混合物を８０℃で１０時間撹拌した。混合物をろ過し、ろ液を水（２０ｍＬ）に注いだ。混合物を酢酸エチル（３×１５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（１０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過した。ろ液を真空下で濃縮した。残留物を分取薄層クロマトグラフィー（ＳｉＯ２、石油エーテル：酢酸エチル＝２：１）により精製して、ｔｅｒｔ−ブチル６，７−ジクロロ−３，４−ジヒドロ−９−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−１Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］インドール−２（５Ｈ）−カルボキシレートを得た。１Ｈ  ＮＭＲ：（ＣＤ３ＯＤ，４００  ＭＨｚ）δ  ７．７５（ｓ，１Ｈ），７．６０（ｓ，１Ｈ），７．００（ｓ，１Ｈ），４．２４（ｓ，２Ｈ），３．７５（ｓ，２Ｈ），２．８５（ｔ，Ｊ＝５．６  Ｈｚ，２Ｈ），１．２０（ｓ，９Ｈ）．ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ  ４２９．０，４３１．０［Ｍ＋Ｎａ］＋
トリフルオロ酢酸（３ｍＬ）およびジクロロメタン（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル６，７−ジクロロ−３，４−ジヒドロ−９−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−１Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］インドール−２（５Ｈ）−カルボキシレート（１５０ｍｇ、３６８μｍｏｌ）の混合物を２５℃で１０時間撹拌した。溶液を真空下で濃縮して、６，７−ジクロロ−２，３，４，５−テトラヒドロ−９−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−１Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］インドール−ＴＦＡを得た。この材料をさらに精製することなく次の工程で使用した。１Ｈ  ＮＭＲ：（ＣＤ３ＯＤ，４００  ＭＨｚ）δ  １１．４８（ｂｒｓ，１Ｈ），８．０１（ｂｒｓ，１Ｈ），７．９９（ｓ，１Ｈ），７．８１（ｓ，２Ｈ），７．１０（ｓ，１Ｈ），４．０６（ｓ，２Ｈ），３．５８（ｔ，Ｊ＝６．４  Ｈｚ，２Ｈ），３．１８（ｔ，Ｊ＝６．０  Ｈｚ，２Ｈ）．
６，７−ジクロロ−２，３，４，５−テトラヒドロ−９−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−１Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］インドール−ＴＦＡ（１２０ｍｇ、２９７μｍｏｌ）およびトリエチルアミン（１１９ｍｇ、１．１８ｍｍｏｌ、１６３μＬ）のジクロロメタン（２ｍＬ）溶液に、（クロロカルボニル）酢酸メチル（８０ｍｇ、５８６μｍｏｌ、６３μＬ）を０℃で添加した。混合物を２５℃で０．５時間撹拌した。残留物を重炭酸ナトリウム飽和水溶液（２０ｍＬ）に注ぎ、混合物を１５分間撹拌した。水相を酢酸エチル（３×１５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（１０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過した。ろ液を真空下で濃縮して、２−（６，７−ジクロロ−３，４−ジヒドロ−９−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−１Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］インドール−２（５Ｈ）−イル）−２−オキソエチルアセテートを得て、これをさらに精製せずに次の工程で使用した。
２−（６，７−ジクロロ−３，４−ジヒドロ−９−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−１Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］インドール−２（５Ｈ）−イル）−２−オキソエチルアセテート（１５０ｍｇ、３６８μｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（３ｍＬ）および水（１ｍＬ）溶液に、水酸化リチウム一水和物（４６ｍｇ、１．１０ｍｍｏｌ）を２５℃で添加した。混合物を２５℃で１時間撹拌した。混合物を氷水（２０ｍＬ）に注ぎ、塩酸水溶液（１Ｍ）を添加することによりｐＨを７に調整した。混合物を酢酸エチル（３×１５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（２×１０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過した。ろ液を真空下で濃縮した。残留物を分取薄層クロマトグラフィー（酢酸エチル：メタノール、２０：１）により精製して、１−（６，７−ジクロロ−９−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−１，３，４，５−テトラヒドロ−２Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］インドール−２−イル）−２−ヒドロキシエタン−１−オンを得た。１Ｈ  ＮＭＲ：（ＣＤ３ＯＤ，４００  ＭＨｚ）δ  ７．８４（ｂｒｓ，１Ｈ），７．７３（ｂｒｓ，１Ｈ），７．０２（ｓ，１Ｈ），４．４６（ｓ，１Ｈ），４．３１（ｓ，１Ｈ），４．１９（ｓ，１Ｈ），４．０６（ｓ，１Ｈ），３．９４（ｔ，Ｊ＝５．６  Ｈｚ，１Ｈ），３．７４（ｔ，Ｊ＝５．６  Ｈｚ，１Ｈ），２．８９（ｔ，Ｊ＝５．６  Ｈｚ，１Ｈ），２．９５（ｔ，Ｊ＝５．６  Ｈｚ，１Ｈ）．ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ  ３６５．０［Ｍ＋Ｈ］＋
合成経路Ａ２
【化１７】
2021515804.tif 000019
【０１０７】
場合により置換されることのあるニトロベンゼン誘導体ｘｉの臭素化により、メタブロモ置換生成物ｘｉｉが提供される。鉄での還元によりアニリンｘｉｉｉが提供され、これは、次いで亜硝酸ナトリウムおよび塩化第一スズでヒドラジンｘｉｖに変換される。ヒドラジンｘｉｖは、ピペリジノンでのフィッシャーのインドール合成を経て、テトラヒドロピリド［４，３−ｂ］インドールｘｖを提供し、これは、その後キャップされて、アミドｘｖｉを提供する。鈴木・宮浦カップリング、それに続くアセテート保護基の加水分解により、化合物ｘが提供される。
【０１０８】
例証のために合成例を提供する：
１−（７−クロロ−６−フルオロ−９−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−１，３，４，５−テトラヒドロ−２Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］インドール−２−イル）−２−ヒドロキシエタン−１−オン。
【化１８】
2021515804.tif 000020
１−クロロ−２−フルオロ−３−ニトロベンゼン（１２０ｇ、６８４ｍｍｏｌ）のＨ２ＳＯ４（６５０ｍＬ）溶液に、ＮＢＳ（１４６ｇ、８２０ｍｍｏｌ）を２５℃で添加した。次いで、反応混合物を６５℃で４時間撹拌した。混合物を２５℃に冷却した。混合物を氷水（２．００Ｌ）に注ぎ、酢酸エチル（３×５００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（５００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過した。ろ液を濃縮して、５−ブロモ−１−クロロ−２−フルオロ−３−ニトロベンゼンを得た。１Ｈ  ＮＭＲ：（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００  ＭＨｚ）δ  ８．３９−８．３７（ｍ，１Ｈ），８．３４−３．３３（ｍ，１Ｈ）．
５−ブロモ−１−クロロ−２−フルオロ−３−ニトロベンゼン（８９．０ｇ、３５０ｍｍｏｌ）のＡｃＯＨ（５００ｍＬ）溶液に、Ｆｅ（５８．６ｇ、１．０５ｍｏｌ）を０℃で少しずつ添加した。混合物を２５℃で１６時間撹拌した。混合物を水（１．５０Ｌ）に注ぎ、ろ過した。フィルターケーキを酢酸エチル（５×２００ｍＬ）で洗浄した。ろ液を酢酸エチル（４×５００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（５００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過した。ろ液を濃縮して、残留物を得た。残留物をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、石油エーテル：酢酸エチル＝５０：１〜１：１）により精製して、５−ブロモ−３−クロロ−２−フルオロアニリンを得た。１Ｈ  ＮＭＲ：（ＣＤＣｌ３，４００  ＭＨｚ）δ  ６．８９−６．８７（ｍ，１Ｈ），６．８２−６．８０（ｍ，１Ｈ），３．６１−３．５９（ｍ，２Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ  ２２５．９［Ｍ＋Ｈ］＋
５−ブロモ−３−クロロ−２−フルオロアニリン（５０．０ｇ、２２３ｍｍｏｌ）のＨＣｌ（１２．０Ｍ、８２５ｍＬ）溶液に、ＮａＮＯ２（１８．９ｇ、２７４ｍｍｏｌ）の水（１００ｍＬ）溶液を窒素下、−５℃で滴下した。反応混合物を−５〜０℃で１時間撹拌した後、ＳｎＣｌ２・２Ｈ２Ｏ（１２６ｇ、５５８ｍｍｏｌ）のＨＣｌ（１２．０Ｍ、８２５ｍＬ）溶液を０℃で滴下した。混合物を０℃で３時間撹拌した。反応混合物をろ過し、フィルターケーキを水（２００ｍＬ）で洗浄した。収集した固形物を乾燥させて、（５−ブロモ−３−クロロ−２−フルオロフェニル）ヒドラジン−ＨＣｌを得た。ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ  ２４０．９［Ｍ＋Ｈ］＋
（５−ブロモ−３−クロロ−２−フルオロフェニル）ヒドラジン（８５．０ｇ、３０８ｍｍｏｌ、ＨＣｌ塩）およびピペリジン−４−オン（６２．７ｇ、４６２ｍｍｏｌ、ＨＣｌ塩）のジオキサン（１．９７Ｌ）溶液に、Ｈ２ＳＯ４（１８Ｍ、３４７ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を９０℃で１２時間撹拌した。反応混合物を濃縮して、残留物を得た。残留物を、適切に冷却しながらＮａＯＨ水溶液で塩基性化した（ｐＨ＝８）。混合物をろ過し、フィルターケーキを水（１００ｍＬ）で洗浄した。収集した固形物を乾燥させて、９−ブロモ−７−クロロ−６−フルオロ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］インドールを得た。１Ｈ  ＮＭＲ：（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００  ＭＨｚ）δ１１．９１（ｓ，１Ｈ），７．２６（ｄ，Ｊ＝４．８  Ｈｚ，１Ｈ），４．２１（ｍ，２Ｈ），３．０８（ｍ，２Ｈ），２．７４（ｍ，２Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ  ３０４．９［Ｍ＋Ｈ］＋
９−ブロモ−７−クロロ−６−フルオロ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］インドール（４０．０ｇ、１３２ｍｍｏｌ）およびＴＥＡ（４０．０ｇ、３９５ｍｍｏｌ、１７．０ｍＬ）のＴＨＦ（４００ｍＬ）溶液に、（２−クロロ−２−オキソ−エチル）アセテート（２１．６ｇ、１５８ｍｍｏｌ、１７．０ｍＬ）を０℃で添加した。混合物を２５℃で５時間撹拌した。反応混合物を水（２００ｍＬ）に注いだ。混合物を酢酸エチル（３×３００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（２００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過した。ろ液を濃縮して、粗残留物を得た。残留物を２５℃で１２時間、酢酸エチル（３０．０ｍＬ）で粉砕した。混合物をろ過し、フィルターケーキを乾燥させて、残留物を得た。残留物をクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、石油エーテル：酢酸エチル＝２０：１〜４：１）により精製して、２−（９−ブロモ−７−クロロ−６−フルオロ−１，３，４，５−テトラヒドロ−２Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］インドール−２−イル）−２−オキソエチルアセテートを得た。１Ｈ  ＮＭＲ：（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００  ＭＨｚ）δ  １２．０９−１２．０６（ｍ，１Ｈ），７．３０（ｄ，Ｊ＝５．６  Ｈｚ，１Ｈ），４．９２−４．８６（ｍ，４Ｈ），３．８４−３．７０（ｍ，２Ｈ），２．９０−２．７７（ｍ，２Ｈ），２．０９（ｓ，３Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ  ４０４．９［Ｍ＋Ｈ］＋
２−（９−ブロモ−７−クロロ−６−フルオロ−１，３，４，５−テトラヒドロ−２Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］インドール−２−イル）−２−オキソエチルアセテート（１１．０ｇ、２７．３ｍｍｏｌ）、１−メチル−３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール（５．６７ｇ、２７．２ｍｍｏｌ）、およびＫ２ＣＯ３（７．５３ｇ、５４．５ｍｍｏｌ）のジオキサン（３３０ｍＬ）溶液に、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（１．９９ｇ、２．７２ｍｍｏｌ）を２５℃で添加した。混合物を窒素雰囲気下で１００℃で１２時間撹拌した。反応混合物をろ過し、ろ液を濃縮して残留物を得た。残留物を逆相ＨＰＬＣ（ＦＡ条件）により精製した。溶離液を濃縮して、アセトニトリルを除去した。生じた溶液のｐＨを、ＮａＨＣＯ３水溶液を添加してｐＨ＝７に調整した。水層をＣＨ２Ｃｌ２（３×１００ｍＬ）で抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮した。残留物を酢酸エチル（２０．０ｍＬ）で２５℃で３時間（２回）粉砕して、２−（７−クロロ−６−フルオロ−９−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−１，３，４，５−テトラヒドロ−２Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］インドール−２−イル）−２−オキソエチルアセテートを得た。ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ  ４０５．０［Ｍ＋Ｈ］＋
２−（７−クロロ−６−フルオロ−９−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−１，３，４，５−テトラヒドロ−２Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］インドール−２−イル）−２−オキソエチルアセテート（４．５０ｇ、１１．１ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（５０．０ｍＬ）および水（５．００ｍＬ）溶液に、ＬｉＯＨ・Ｈ２Ｏ（１．３２ｇ、３１．５ｍｍｏｌ）を２５℃で添加した。混合物を２５℃で０．１７時間撹拌した。粗反応混合物を濃縮して、ＭｅＯＨを除去した。残留物を水（７５ｍＬ）に注ぎ、ｐＨをＨＣｌ水溶液（１Ｍ）を添加して６に調整した。混合物をろ過し、フィルターケーキを乾燥させて、１−（７−クロロ−６−フルオロ−９−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−１，３，４，５−テトラヒドロ−２Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］インドール−２−イル）−２−ヒドロキシエタン−１−オンを得た。初期のカップリング工程からの残留Ｐｄを除去するために、材料を逆ＭＰＬＣ（中性条件）によりさらに精製した。この材料をＥｔＯＨ（３５０ｍＬ）に溶解し、チオ尿素樹脂（６．２０ｇ）を添加した。混合物を８０℃で加熱し、８０℃で１６時間撹拌した。混合物を２５℃に冷却し、ろ過した。フィルターケーキをＥｔＯＨ（２×２０ｍＬ）で洗浄した。ろ液に、チオ尿素樹脂（３．１０ｇ）を添加し、混合物を８０℃に加熱し、８０℃で２時間撹拌した。混合物を２５℃に冷却し、ろ過した。フィルターケーキをＥｔＯＨ（２×２０ｍＬ）で洗浄した。ろ液を濃縮して、１−（７−クロロ−６−フルオロ−９−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−１，３，４，５−テトラヒドロ−２Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］インドール−２−イル）−２−ヒドロキシエタン−１−オンを得た。１Ｈ  ＮＭＲ：（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００  ＭＨｚ）δ  １１．８２−１１．７７（ｍ，１Ｈ），７．７７（ｓ，１Ｈ），７．１５−７．０９（ｍ，１Ｈ），６．５７−６．５２（ｍ，１Ｈ），４．５８−４．５５（ｍ，３Ｈ），４．１８−４．１７（ｍ，１Ｈ），４．１１−４．１０（ｍ，１Ｈ），３．９５−３．９２（ｍ，３Ｈ），３．８３−３．８２（ｍ，１Ｈ），３．６７−３．６４（ｍ，１Ｈ），２．８８−２．８２（ｍ，２Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ  ３６３．０［Ｍ＋Ｈ］＋
【０１０９】
本発明のいくつかの化合物に関して、Ｒ４は、ウルマン型反応を介して導入される。例を以下に示す。
【化１９】
2021515804.tif 000021
［２−［９−ブロモ−７−クロロ−６−フルオロ−５−（２−トリメチルシリルエトキシメチル）−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］インドール−２−イル］−２−オキソ−エチル］アセテート（０．２ｇ、３７５μｍｏｌ）、１Ｈ−ピラゾール（５１ｍｇ、７４９μｍｏｌ）、ＣｕＩ（７１ｍｇ、３７５μｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（１０４ｍｇ、７４９μｍｏｌ）、および（１Ｓ，２Ｓ）−Ｎ１，Ｎ２−ジメチルシクロヘキサン−１，２−ジアミン（５３ｍｇ、３７５μｍｏｌ）をＤＭＳＯ（３ｍＬ）中のマイクロ波管に取り込んだ。密封した管をマイクロ波照射下で１７０℃で１２０分間加熱した。反応混合物を水（２０ｍＬ）とＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）との間で分配した。有機相を分離し、ＥｔＯＡｃ（３×３０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮して、残留物を得た。残留物を分取ＨＰＬＣにより精製して、１−（７−クロロ−６−フルオロ−９−ピラゾール−１−イル−１，３，４，５−テトラヒドロピリド［４，３−ｂ］インドール−２−イル）−２−ヒドロキシ−エタノンを得た。１Ｈ  ＮＭＲ：（ＣＤ３ＯＤ，４００  ＭＨｚ）δ  ８．０２−７．９５（ｍ，１Ｈ），７．８３（ｂｒｄ，Ｊ＝１５．７  Ｈｚ，１Ｈ），７．１５（ｄｄ，Ｊ＝５．７，１３．３  Ｈｚ，１Ｈ），６．６４−６．５８（ｍ，１Ｈ），４．５９（ｓ，２Ｈ），４．３１（ｂｒｄ，Ｊ＝６．８  Ｈｚ，２Ｈ），４．０７（ｄ，Ｊ＝１３．６  Ｈｚ，２Ｈ），３．９５（ｔ，Ｊ＝５．８  Ｈｚ，１Ｈ），３．７４（ｔ，Ｊ＝５．３  Ｈｚ，１Ｈ），３．５０（ｂｒｓ，２Ｈ），３．０６−２．８８（ｍ，２Ｈ）．
【０１１０】
鈴木−宮浦またはウルマン型カップリングがＲ４を導入するために必要とされない本発明のいくつかの化合物は、合成経路Ｂで以下に記載されるように調製され得る。
合成経路Ｂ
【化２０】
2021515804.tif 000022
【０１１１】
例証のために合成例を提供する：
１−（７−ブロモ−６−フルオロ−１，３，４，５−テトラヒドロ−２Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］インドール−２−イル）−２−ヒドロキシエタン−１−オン。
【化２１】
2021515804.tif 000023
３−ブロモ−２−フルオロアニリン（２０．０ｇ、１０５ｍｍｏｌ）のＨＣｌ（１２．０Ｍ、１００ｍＬ、１１．４ｅｑ）溶液に、ＮａＮＯ２（１０．９ｇ、１５８ｍｍｏｌ、１．５０ｅｑ）の水（２０．０ｍＬ）溶液を０℃で滴下した。混合物を０℃で１時間撹拌した。ＳｎＣｌ２．２Ｈ２Ｏ（７１．３ｇ、３１６ｍｍｏｌ、３．００ｅｑ）のＨ２Ｏ（４０．０ｍＬ）溶液を０℃で混合物に添加した。混合物を２０℃で１２時間撹拌した。反応混合物をろ過した。フィルターケーキをＥｔＯＡｃ（２０．０ｍＬ）で洗浄し、ＥｔＯＡｃ（３０．０ｍＬ）で粉砕した。フィルターケーキを乾燥させて、（３−ブロモ−２−フルオロフェニル）ヒドラジン塩酸塩を得た。ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ  ２０５．１［Ｍ＋Ｈ］＋
（３−ブロモ−２−フルオロフェニル）ヒドラジン塩酸塩（２５．０ｇ、１０４ｍｍｏｌ、ＨＣｌ塩）およびピペリジン−４−オン（１６．８ｇ、１２４ｍｍｏｌ、ＨＣｌ塩）のジオキサン（１２５ｍＬ）溶液に、Ｈ２ＳＯ４（２７．３ｇ、２７８ｍｍｏｌ、１４．８ｍＬ）を０℃で添加した。混合物を８０℃に１４時間加熱した。混合物を水（１００ｍＬ）に注ぎ、ｐＨをＮａＯＨ水溶液（４Ｍ）を添加して１０に調整した。水層を酢酸エチル（３×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（２×１００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮した。残留物をＥｔＯＡｃ（４０．０ｍＬ）で粉砕し、ろ過して、７−ブロモ−６−フルオロ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］インドールを得た。ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ  ２６９．１［Ｍ＋Ｈ］＋
７−ブロモ−６−フルオロ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］インドール（１４．２ｇ、５２．８ｍｍｏｌ）およびＥｔ３Ｎ（１６．０ｇ、１５８ｍｍｏｌ、２２．０ｍＬ）のＴＨＦ（７０．０ｍＬ）溶液に、（２−クロロ−２−オキソ−エチル）アセテート（８．６５ｇ、６３．３ｍｍｏｌ、６．８１ｍＬ）を０℃で添加した。混合物を２５℃で３時間撹拌した。混合物を水（３００ｍＬ）に注いだ。混合物をＥｔＯＡｃ（３×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮した。残留物を２５℃で１時間、ＥｔＯＡｃ（６０．０ｍＬ）で粉砕した。混合物をろ過した。フィルターケーキを乾燥させて、２−（７−ブロモ−６−フルオロ−１，３，４，５−テトラヒドロ−２Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］インドール−２−イル）−２−オキソエチルアセテートを得た。１Ｈ  ＮＭＲ：（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００  ＭＨｚ）δ  １１．６９（ｄ，Ｊ＝１０．８  Ｈｚ，１Ｈ），７．２５−７．１５（ｍ，２Ｈ），４．９１（ｄ，Ｊ＝１２．４  Ｈｚ，２Ｈ），４．６２（ｓ，２Ｈ），３．８５−３．７１（ｍ，２Ｈ），２．８９−２．７７（ｍ，２Ｈ），２．０９（ｓ，３Ｈ）．
２−（７−ブロモ−６−フルオロ−１，３，４，５−テトラヒドロ−２Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］インドール−２−イル）−２−オキソエチルアセテート（１２．０ｇ、３２．５ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１５０ｍＬ）および水（１５．０ｍＬ）溶液に、ＬｉＯＨ・Ｈ２Ｏ（３．８６ｇ、９２．０ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を２５℃で２時間撹拌した。反応混合物を濃縮した。固形物を水（１００ｍＬ）で溶解し、ｐＨを１Ｍ  ＨＣｌ水溶液を添加して６に調整した。混合物をろ過し、フィルターケーキを乾燥させて、残留物を得た。残留物を２５℃で１時間、ＥｔＯＡｃ／アセトニトリル（３／１、４０ｍＬ）で粉砕した。混合物をろ過し、フィルターケーキを乾燥させて、１−（７−ブロモ−６−フルオロ−１，３，４，５−テトラヒドロ−２Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］インドール−２−イル）−２−ヒドロキシエタン−１−オンを得た。１Ｈ  ＮＭＲ：（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００  ＭＨｚ）δ  １１．６６＆１１．６４（ｓ，１Ｈ），７．２６−７．１４（ｍ，２Ｈ），４．６５−４．５５（ｍ，３Ｈ），４．２３−４．１９（ｍ，２Ｈ），３．８７（ｔ，Ｊ＝５．２  Ｈｚ，１Ｈ），３．６９（ｔ，Ｊ＝５．２  Ｈｚ，１Ｈ），２．８６−２．７７（ｍ，２Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ  ３２７．０［Ｍ＋Ｈ］＋
【０１１２】
Ｒ１がＨではない化合物は、適切に保護された中間体のアルキル化により作製され得る（合成経路Ｃ）：
合成経路Ｃ
【化２２】
2021515804.tif 000024
【０１１３】
Ｒ１がＨではないいくつかの化合物に関して、アルキル化剤は、Ｒ１−Ｘであり、ここで、Ｘは、適した脱離基である。２つの例を以下に示す：
【化２３】
2021515804.tif 000025
２−（７−クロロ−６−フルオロ−１，３，４，５−テトラヒドロ−２Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］インドール−２−イル）−２−オキソエチルアセテート（１８．８ｇ、５７．９ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（９０．０ｍＬ）溶液に、ＮａＨ（２．３５ｇ、５８．８ｍｍｏｌ、鉱物油中６０％）を０℃で添加した。混合物を０℃で１時間撹拌した。ヨウ化メチル（１４．５ｇ、１０２ｍｍｏｌ、６．３７ｍＬ）を０℃で添加した。混合物を２５℃で２時間撹拌した後、ヨウ化メチル（８．２２ｇ、５７．８９ｍｍｏｌ、３．６０ｍＬ）を追加した。混合物を２５℃で１時間撹拌した。混合物を飽和ＮＨ４Ｃｌ（１．００Ｌ）水溶液でクエンチし、生じた溶液をＥｔＯＡｃ（３×４００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を濃縮した。残留物を２５℃で１時間、ＥｔＯＡｃ（６０．０ｍＬ）で粉砕した。混合物をろ過し、フィルターケーキを乾燥させて、２−（７−クロロ−６−フルオロ−５−メチル−１，３，４，５−テトラヒドロ−２Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］インドール−２−イル）−２−オキソエチルアセテートを得た。１Ｈ  ＮＭＲ：（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００  ＭＨｚ）δ  ７．３１−７．２７（ｍ，１Ｈ），７．１０−７．０５（ｍ，１Ｈ），４．９２−４．８９（ｍ，２Ｈ），４．６１（ｓ，２Ｈ），３．８６−３．７４（ｍ，５Ｈ），２．９０−２．７９（ｍ，２Ｈ），２．０９（ｓ，３Ｈ）．
【化２４】
2021515804.tif 000026
無水ＤＭＦ（５ｍＬ）中の［２−（７−ブロモ−６−フルオロ−１，３，４，５−テトラヒドロピリド［４，３−ｂ］インドール−２−イル）−２−オキソ−エチル］アセテート（４００ｍｇ、１．０８ｍｍｏｌ）、２，２，２−トリフルオロエチルトリフルオロメタンスルホネート（３７７ｍｇ、１．６３ｍｍｏｌ、８０μＬ）、Ｋ２ＣＯ３（２９９ｍｇ、２．１７ｍｍｏｌ）、および１，４，７，１０，１３，１６−ヘキサオキサシクロオクタデカン（５７３ｍｇ、２．１７ｍｍｏｌ）の混合物を６５℃で３時間加熱撹拌した。反応を２０℃に冷却し、追加の反応物を混合物に添加した［２，２，２−トリフルオロエチルトリフルオロメタンスルホネート（３７７ｍｇ、１．６３ｍｍｏｌ、８０ｕＬ）、Ｋ２ＣＯ３（２９９ｍｇ、２．１７ｍｍｏｌ）、および１，４，７，１０，１３，１６−ヘキサオキサシクロオクタデカン（２８６ｍｇ、１．０８ｍｍｏｌ）］。反応を６５℃で３時間撹拌した。反応混合物を濃縮した。残留物を分取ＨＰＬＣ（ＴＦＡ条件）により精製して、［２−［７−ブロモ−６−フルオロ−５−（２，２，２−トリフルオロエチル）−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］インドール−２−イル］−２−オキソ−エチル］アセテートを得た。１Ｈ  ＮＭＲ：（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００  ＭＨｚ）δ  ７．３５−７．２６（ｍ，２Ｈ），５．１８−５．１１（ｍ，２Ｈ），４．９２（ｂｒｄ，Ｊ＝１２．６  Ｈｚ，２Ｈ），４．６３（ｓ，２Ｈ），３．９０−３．７２（ｍ，２Ｈ），２．９６−２．７６（ｍ，２Ｈ），２．０９（ｓ，３Ｈ）．
【０１１４】
Ｒ１＝ＣＨＦ２である化合物に関して、アルキル化剤は、Ｒ１Ｉの代わりにＢｒＦ２ＣＣＯＯＥｔであり、混合物を６０℃で約２．５時間加熱する。例を以下に示す：
【化２５】
2021515804.tif 000027
水素化ナトリウム（１３９ｍｇ、３．４８ｍｍｏｌ、鉱物油中６０％）をｔｅｒｔ−ブチル９−ブロモ−７−クロロ−６−フルオロ−１，３，４，５−テトラヒドロピリド［４，３−ｂ］インドール−２−カルボキシレート（０．７ｇ、１．７３ｍｍｏｌ）の１５℃のＤＭＦ（１５ｍＬ）撹拌溶液に少しずつ添加した。１５℃で０．５時間撹拌した後、２−ブロモ−２，２−ジフルオロ酢酸エチル（４２２ｍｇ、２．０８ｍｍｏｌ、２６７μＬ）を混合物に滴下した。反応混合物を６０℃で２．５時間撹拌した。反応混合物を、飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液（５０ｍＬ）の添加によりクエンチした。混合物をＥｔＯＡｃ（３×２０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（３０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、石油エーテル／酢酸エチル＝１５／１〜１０／１）により精製して、ｔｅｒｔ−ブチル９−ブロモ−７−クロロ−５−（ジフルオロメチル）−６−フルオロ−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］インドール−２−カルボキシレートを得た。１Ｈ  ＮＭＲ：（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００  ＭＨｚ）δ  ７．８０−７．４５（ｍ，１Ｈ），７．３７−７．３３（ｍ，１Ｈ），４．９５（ｂｒｓ，２Ｈ），３．７４（ｂｒｓ，２Ｈ），２．９９（ｂｒｓ，２Ｈ），１．５２（ｓ，９Ｈ）．
【０１１５】
上記の例に関して、Ｂｏｃ基を標準的な条件下（ＨＣｌ／ＥｔＯＡｃ）で除去し、α−ヒドロキシアミドを上記のように形成する。
【０１１６】
一般的に、Ｒ２がＨではない本発明の化合物は、前述のアセテート酸塩化物（すなわち、ＣｌＣ（＝Ｏ）ＣＨ２ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ３）の代わりに、必須のエーテル酸塩化物、すなわちＣｌＣ（＝Ｏ）ＣＨＲ３０ＯＲ２を使用して形成した。
【０１１７】
Ｒ２０が（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルであり、Ｒ２１が水素である、本発明のいくつかの化合物ｘｘｘｉｉｉ、ｘｘｘｉｖ、およびｘｘｘｖは、合成経路Ｄに下記で記載されているように調製され得る。Ｒ４がアリールまたはヘテロアリールであり、鈴木−宮浦がＲ４基を導入する場合、角括弧の工程は任意選択である。化合物ｘｘｘｉｖおよびｘｘｘｖは、互いに実質的に純粋な対掌体（＞８０％ｅ．ｅ．）であるが、それらの絶対配置は、未確定である。
合成経路Ｄ
【化２６】
2021515804.tif 000028
【０１１８】
場合により置換されることのあるニトロベンゼン誘導体ｘｘｉｉｉの反応は、インドール生成物ｘｘｉｖを提供し、これは、その場で形成された第三級イミンと反応して中間体ｘｘｖを提供する。アセタールｘｘｖの環化縮合により、アルコールｘｘｖｉが提供され、これは、ケトンｘｘｖｉｉに酸化される。（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルＲ２０基は、グリニャール試薬を介して導入されて、アルコールｘｘｖｉｉｉを提供し、これは、脱水／芳香族化を受けてピリジニウムイオンｘｘｉｘを形成する。ピリジニウムイオンｘｘｉｘを水素化ホウ素ナトリウムで還元すると、中間体ｘｘｘが提供される。中間体が臭化アリール中間体である場合、アリールおよびヘテロアリールＲ４基が前記中間体ｘｘｘに導入され得る。その後の保護基交換により、中間体Ｂｏｃ誘導体ｘｘｘｉｉが得られ、これは、上記の方法を介してラセミ置換化合物ｘｘｘｉｉｉに変換される。次いで、キラル超臨界流体クロマトグラフィーを介して分割を達成することにより、実質的に純粋なエナンチオマーｘｘｘｉｖおよびｘｘｘｖが提供され得る。
【０１１９】
例証のために合成スキーム例を示す。
【化２７】
2021515804.tif 000029
【０１２０】
合成の詳細および分割は、以下のとおりである。
【化２８】
2021515804.tif 000030
ＴＨＦ（２５０ｍＬ）中の５−ブロモ−１−クロロ−２−フルオロ−３−ニトロ−ベンゼン（２５．０ｇ、９８．３ｍｍｏｌ）の混合物に、ビニルマグネシウムブロミド（１Ｍ、５００ｍＬ）を窒素下で−６０℃で滴下した。混合物を１０℃に温め、２時間撹拌した。反応混合物を飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液（１．０Ｌ）に注ぎ、ｐＨをＨＣｌ水溶液（６Ｍ）を添加して７に調整した。溶液をＥｔＯＡｃ（３×５００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（１．０Ｌ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、石油エーテル：酢酸エチル＝１：０〜５０：１）により精製した。この材料をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、石油エーテル：酢酸エチル＝０：１〜４９：１）によりさらに精製して、４−ブロモ−６−クロロ−７−フルオロ−１Ｈ−インドールを得た。１Ｈ  ＮＭＲ：（ＣＤＣｌ３，４００  ＭＨｚ）δ８．５２（ｂｒｓ，１Ｈ），７．２９−７．２８（ｍ，２Ｈ），６．６１−６．５９（ｍ，１Ｈ）．
【化２９】
2021515804.tif 000031
ＡｃＯＨ（１４０ｍＬ）中の４−ブロモ−６−クロロ−７−フルオロ−１Ｈ−インドール（１４．０ｇ、５６．３ｍｍｏｌ）の混合物に、ＨＣＨＯ（５．０３ｇ、６２．０ｍｍｏｌ、４．６１ｍＬ、３７％水溶液）およびＮ−ベンジル−２，２−ジメトキシ−エタンアミン（１３．２ｇ、６７．６ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を２５℃で１２時間撹拌した。反応混合物を水（３００ｍＬ）で希釈し、混合物のｐＨをＮａＯＨ溶液（１Ｍ、水性）で８に調整した。溶液をＥｔＯＡｃ（３×１５０ｍＬ）で抽出した。有機層をブライン（２００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、石油エーテル：酢酸エチル＝９７：３〜９：１）により精製して、Ｎ−ベンジル−Ｎ−［（４−ブロモ−６−クロロ−７−フルオロ−１Ｈ−インドール−３−イル）メチル］−２，２−ジメトキシ−エタンアミンを得た。１Ｈ  ＮＭＲ：（ＣＤＣｌ３，４００  ＭＨｚ）δ７．３３−７．３１（ｍ，２Ｈ），７．２６−７．１７（ｍ，５Ｈ），４．４９−４．４１（ｍ，１Ｈ），４．０８−４．０７（ｍ，２Ｈ），３．７５−３．７２（ｍ，２Ｈ），３．２２−３．２０（ｍ，６Ｈ），２．７２−２．６９（ｍ，２Ｈ）．
【化３０】
2021515804.tif 000032
ジオキサン（８０ｍＬ）およびＨＣｌ水溶液（６Ｍ、８０ｍＬ）中のＮ−ベンジル−Ｎ−［（４−ブロモ−６−クロロ−７−フルオロ−１Ｈ−インドール−３−イル）メチル］−２，２−ジメトキシ−エタンアミン（８．０ｇ、１７．６ｍｍｏｌ）の混合物を１００℃で０．５時間撹拌した。反応混合物を水（３００ｍＬ）で希釈し、ｐＨを飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で８に調整した。混合物を２−メチルテトラヒドロフラン（３×１５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（２００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、石油エーテル：酢酸エチル＝１０：１〜３：１）により精製した。この材料をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、石油エーテル：酢酸エチル＝９：１〜３：１）によりさらに精製して、２−ベンジル−９−ブロモ−７−クロロ−６−フルオロ−１，３，４，５−テトラヒドロピリド［４，３−ｂ］インドール−４−オールを得た。１Ｈ  ＮＭＲ：（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００  ＭＨｚ）δ  １２．１４（ｓ，１Ｈ），７．４１−７．２６（ｍ，６Ｈ），５．３６（ｄ，Ｊ＝７．４６  Ｈｚ，１Ｈ），４．７４−４．７０（ｍ，１Ｈ），３．９３−３．８２（ｍ，２Ｈ），３．７７（ｓ，２Ｈ），２．９４−２．９０（ｍ，１Ｈ），２．５８−２．５３（ｍ，１Ｈ）．
【化３１】
2021515804.tif 000033
ＴＨＦ（１５ｍＬ）およびＤＣＭ（５ｍＬ）中の２−ベンジル−９−ブロモ−７−クロロ−６−フルオロ−１，３，４，５−テトラヒドロピリド［４，３−ｂ］インドール−４−オール（４８０ｍｇ、１．１７ｍｍｏｌ）の混合物に、デス・マーチン・ペルヨージナン（９９４ｍｇ、２．３４ｍｍｏｌ、７２５μＬ）を０℃で添加した。混合物を２５℃で２時間撹拌した。反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（３００ｍＬ）で希釈し、混合物を２−メチルテトラヒドロフラン（３×１５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（２００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、石油エーテル：２−メチルテトラヒドロフラン＝１０：１〜５：１）により精製して、２−ベンジル−９−ブロモ−７−クロロ−６−フルオロ−３，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］インドール−４−オンを得た。１Ｈ  ＮＭＲ：（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００  ＭＨｚ）δ  １３．００（ｂｒｓ，１Ｈ），７．４８（ｄ，Ｊ＝５．７５  Ｈｚ，１Ｈ），７．３９−７．３４（ｍ，４Ｈ），７．３３−７．２７（ｍ，１Ｈ），４．２４（ｓ，２Ｈ），３．８４（ｓ，２Ｈ），３．３８（ｓ，２Ｈ）．
【化３２】
2021515804.tif 000034
ＴＨＦ（１０ｍＬ）中の２−ベンジル−９−ブロモ−７−クロロ−６−フルオロ−３，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］インドール−４−オン（１．０ｇ、２．４５ｍｍｏｌ）の混合物に、ブロモ（メチル）マグネシウム（ジエチルエーテル中３Ｍ、４．９１ｍＬ）を０℃で添加した。混合物を２５℃で３時間撹拌した。反応混合物を飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液（５０ｍＬ）で希釈した。溶液をＥｔＯＡｃ（３×３０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（４０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、石油エーテル：酢酸エチル＝１９：１〜４：１）により精製して、２−ベンジル−９−ブロモ−７−クロロ−６−フルオロ−４−メチル−３，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］インドール−４−オールを得た。１Ｈ  ＮＭＲ：（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００  ＭＨｚ）δ  １２．０６（ｓ，１Ｈ），７．４２−７．４０（ｍ，２Ｈ），７．３６−７．３４（ｍ，２Ｈ），７．２８−７．２４（ｍ，２Ｈ），３．９３−３．８９（ｍ，１Ｈ），３．８３−３．７２（ｍ，３Ｈ），２．６２−２．６０（ｍ，２Ｈ），１．４７（ｓ，３Ｈ）．
【化３３】
2021515804.tif 000035
ジオキサン（２１ｍＬ）中の２−ベンジル−９−ブロモ−７−クロロ−６−フルオロ−４−メチル−３，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］インドール−４−オール（７００ｍｇ、１．６５ｍｍｏｌ）の混合物に、濃ＨＣｌ（１２Ｍ、２１ｍＬ）を添加した。混合物を８０℃で２時間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮して、２−ベンジル−９−ブロモ−７−クロロ−６−フルオロ−４−メチル−５Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］インドール−２−イウムを得、これを次の工程において直接使用した。
【化３４】
2021515804.tif 000036
ＥｔＯＨ（１５ｍＬ）および水（１５ｍＬ）中の２−ベンジル−９−ブロモ−７−クロロ−６−フルオロ−４−メチル−５Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］インドール−２−イウム（１．２ｇ、２．７３ｍｍｏｌ）の混合物に、ＮａＢＨ４（１．０３ｇ、２７ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。混合物を１００℃で６時間撹拌した。反応混合物を水（１００ｍＬ）に注いだ。混合物をＥｔＯＡｃ（３×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、石油エーテル：酢酸エチル＝１：０〜１７：３）により精製して、２−ベンジル−９−ブロモ−７−クロロ−６−フルオロ−４−メチル−１，３，４，５−テトラヒドロピリド［４，３−ｂ］インドールを得た。ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ  ４０９．１［Ｍ＋Ｈ］＋
【化３５】
2021515804.tif 000037
ジオキサン（１０ｍＬ）および水（２ｍＬ）中の２−ベンジル−９−ブロモ−７−クロロ−６−フルオロ−４−メチル−１，３，４，５−テトラヒドロピリド［４，３−ｂ］インドール（４３０ｍｇ、１．０５ｍｍｏｌ）の混合物に、１−メチル−３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ピラゾール（５４９ｍｇ、２．６４ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（３８６ｍｇ、５２８μｍｏｌ）、およびＫ２ＣＯ３（２９２ｍｇ、２．１１ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を脱気し、窒素で３回パージした。混合物を窒素下で１００℃で１２時間撹拌した。反応混合物を水（５０ｍＬ）で希釈し、ろ過した。ろ液をＥｔＯＡｃ（３×３０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、石油エーテル：酢酸エチル＝９：１〜３：１）で精製して、２−ベンジル−７−クロロ−６−フルオロ−４−メチル−９−（１−メチルピラゾール−３−イル）−１，３，４，５−テトラヒドロピリド［４，３−ｂ］インドールを得た。１Ｈ  ＮＭＲ：（ＣＤ３ＯＤ，４００  ＭＨｚ）δ  ７．５５（ｄ，Ｊ＝２．０８  Ｈｚ，１Ｈ），７．３５−７．２８（ｍ，５Ｈ），６．９８（ｄ，Ｊ＝６．４８  Ｈｚ，１Ｈ），６．２９（ｄ，Ｊ＝２．２０  Ｈｚ，１Ｈ），４．１３−４．１１（ｍ，１Ｈ），３．８７（ｓ，３Ｈ），３．７５（ｄ，Ｊ＝１２．５９  Ｈｚ，１Ｈ），３．５９（ｄ，Ｊ＝１２．５９  Ｈｚ，１Ｈ），３．２２−３．２１（ｍ，２Ｈ），３．１１−３．０７（ｍ，１Ｈ），２．３９−２．３４（ｍ，１Ｈ），１．３４（ｄ，Ｊ＝６．８５  Ｈｚ，３Ｈ）．
【化３６】
2021515804.tif 000038
ＭｅＯＨ（３ｍＬ）およびＴＨＦ（０．９ｍＬ）中の２−ベンジル−７−クロロ−６−フルオロ−４−メチル−９−（１−メチルピラゾール−３−イル）−１，３，４，５−テトラヒドロピリド［４，３−ｂ］インドール（３００ｍｇ、７３４μｍｏｌ）およびＢｏｃ２Ｏ（１７８ｍｇ、８１６μｍｏｌ、１８７．０９μＬ）の混合物に、Ｐｄ／Ｃ（２０ｍｇ、１０ｗｔ％）を添加した。混合物を脱気し、Ｈ２で３回パージした。混合物をＨ２（１５ｐｓｉ）下で２５℃で１時間撹拌した。反応混合物をろ過し、ろ液を減圧下で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、石油エーテル：酢酸エチル＝１９：１〜４：１）により精製して、ｔｅｒｔ−ブチル７−クロロ−６−フルオロ−４−メチル−９−（１−メチルピラゾール−３−イル）−１，３，４，５−テトラヒドロピリド［４，３−ｂ］インドール−２−カルボキシレートを得た。１Ｈ  ＮＭＲ：（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００  ＭＨｚ）δ  １１．７１（ｓ，１Ｈ），７．７６（ｓ，１Ｈ），７．０６（ｄ，Ｊ＝６．４８  Ｈｚ，１Ｈ），６．４９（ｓ，１Ｈ），４．４６−４．３９（ｍ，２Ｈ），３．９１（ｄ，Ｊ＝３．２  Ｈｚ，３Ｈ），３．６９−３．６５（ｍ，１Ｈ），３．４７−３．３５（ｍ，１Ｈ），３．０４−３．０１（ｍ，１Ｈ），１．３８（ｓ，９Ｈ），１．２７−１．２５（ｍ，３Ｈ）．
【化３７】
2021515804.tif 000039
ＥｔＯＡｃ（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル７−クロロ−６−フルオロ−４−メチル−９−（１−メチルピラゾール−３−イル）−１，３，４，５−テトラヒドロピリド［４，３−ｂ］インドール−２−カルボキシレート（２００ｍｇ、４７７μｍｏｌ）の混合物に、ＨＣｌ／ＥｔＯＡｃ（４Ｍ、１０ｍＬ）を添加した。混合物を２５℃で０．５時間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮して、７−クロロ−６−フルオロ−４−メチル−９−（１−メチルピラゾール−３−イル）−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］インドール−ＨＣｌを得た。ＨＣｌ塩（１９０ｍｇ）を水（３０ｍｌ）に溶解した。混合物のｐＨを飽和ＮａＨＣＯ３水溶液の添加により８に調整した。混合物をＥｔＯＡｃ（３×２０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（３０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮して、遊離塩基を得た。
【化３８】
2021515804.tif 000040
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の７−クロロ−６−フルオロ−４−メチル−９−（１−メチルピラゾール−３−イル）−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］インドール（１１０ｍｇ、３４５ｍｍｏｌ）の混合物に、ＨＯＢｔ（５０ｍｇ、３７０ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ（７１ｍｇ、３７０ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（１２０ｍｇ、９２８ｍｍｏｌ、１６０ｍＬ）、および２−ヒドロキシ酢酸（２８ｍｇ、３６８ｍｍｏｌ、２３ｍＬ）を添加した。混合物を２５℃で２時間撹拌した。反応混合物を水（３０ｍＬ）で希釈した。溶液をＥｔＯＡｃ（３×２０ｍＬ）で抽出した。有機層をブライン（３０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮した。残留物を分取薄層クロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル：エチルアルコール＝４：３：１）により精製した。純粋なエナンチオマーを、９７％ｅｅ超でＳＦＣを介したクロマトグラフィー分割（カラム：ＤＡＩＣＥＬ  ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＡＤ−Ｈ（２５０ｍｍ×３０ｍｍ、５μｍ）、移動相：［ＭｅＯＨ中０．１％ＮＨ４ＯＨ］、Ｂ％：５０％、３．８分）を介して得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００  ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ  ７．６７−７．６５（ｍ，１Ｈ），７．０７−７．０３（ｍ，１Ｈ），６．４５−６．４２（ｍ，１Ｈ），４．５８−４．３４（ｍ，２Ｈ），４．３０（ｓ，１Ｈ），４．２１−４．１９（ｍ，１Ｈ），４．００−３．９９（ｄ，３Ｈ），３．９４−３．９１（ｍ，０．５Ｈ），３．７８−３．７５（ｍ，０．５Ｈ），３．６８−３．６６（ｍ，０．５Ｈ），３．３６−３．３３（ｍ，０．５Ｈ），３．２２−３．０９（ｍ，１Ｈ），１．３４（ｑ，３Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ  ３７７．０［Ｍ＋Ｈ］＋
【０１２１】
Ｒ２０もＲ２１も水素ではない（例えば、Ｒ２０とＲ２１の両方がメチルである）本発明のいくつかの代表的な化合物は、合成経路Ｅに示されるように合成され得る：
合成経路Ｅ
【化３９】
2021515804.tif 000041
【０１２２】
場合により置換されることのあるケトンｘｘｖｉｉを、既知の手順（Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ＆Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｌｅｔｔｅｒｓ  ２５（２０１５）３３６８−３３７２）に従って、ジメチル亜鉛および四塩化チタンと反応させると、ジメチル誘導体ｘｘｘｖｉが提供され得る。ジメチル誘導体ｘｘｘｖｉは、上記の方法を介してＲ２０およびＲ２１がメチルである化合物ｘｘｘｖｉｉに変換され得る。Ｅｔ２Ｚｎ、Ｐｒ２Ｚｎ、ｉＰｒ２Ｚｎも既知であることに留意されたい。したがって、Ｒ２０およびＲ２１が（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルであるｘｘｘｖｉｉなどの化合物が入手され得る。
【０１２３】
Ｒ２０およびＲ２１が、それらが結合している炭素と一緒になってシクロプロピル環を形成する本発明のいくつかの代表的な化合物は、合成経路Ｆに示されるように合成され得る：
合成経路Ｆ
【化４０】
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【０１２４】
場合により置換されることのあるケトンｘｘｖｉｉのウィッティヒ反応により、アルケンｘｘｘｖｉｉｉが提供され得る。アルケンｘｘｘｖｉｉｉをジヨードメタンおよびジエチル亜鉛と反応させて、スピロシクロプロピル中間体ｘｘｘｉｘを提供することができ、これは、上述の方法を介してＲ２０およびＲ２１がシクロプロピル環を形成する化合物ｘｌに変換され得る。
【０１２５】
本発明の代表的な化合物の分光学的データを表１に示す：
【表１】
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【０１２６】
生物学的アッセイ
生化学的アッセイ：
化合物をＤＭＳＯを使用して１０ｍＭストック濃度で再懸濁し、試験して、ＲａｐｉｄＦｉｒｅ  ３６５質量分析（ＲＦ−ＭＳ）を使用して３８４ウェルポリプロピレンプレートにおいてｈ−ｃＧＡＳに対するＩＣ５０値を決定した。完全長ｈ−ｃＧＡＳ、ｄｓＤＮＡ、ＡＴＰ、およびＧＴＰの最終濃度は、それぞれ１００ｎＭ、２５ｎＭ、１００μＭ、および１００μＭであった。反応バッファーは、２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ７．４、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、５ｍＭ  ＭｇＣｌ２、１μＭ  ＺｎＣｌ２、および０．０１％Ｔｗｅｅｎ−２０で構成されていた。２０μｌの反応溶液を室温（ＲＴ）で７時間インキュベートし、ウェルあたり６０μｌの０．５％（ｖ／ｖ）ギ酸を添加して停止し、その後ＲＦ−ＭＳ分析を行った。ローディング／洗浄プロセスには、５ｍＭ酢酸アンモニウム、ｐＨ１０の水性溶媒を使用した。検体の溶出には、５０％の水、２５％のアセトン、２５％のアセトニトリル中に５ｍＭ酢酸アンモニウム、ｐＨ１０を含む有機溶媒を使用した。約３５μｌの各試料を３８４ウェルプレートから吸引し、黒鉛状炭素タイプＤカートリッジを使用して分離した。次いで、カートリッジにロードした試料を、水性溶媒を使用して、１．５ｍＬ  ｍｉｎ−１で４秒間洗浄した。ＡＴＰ、ＧＴＰ、およびｃＧＡＭＰを、１．５ｍＬ  ｍｉｎ−１の流速で有機溶媒を使用して５秒間溶出した後、１．５ｍＬ  ｍｉｎ−１の流速で水性溶媒で５秒間再平衡化した。試料を、質量分析計の負イオン化モードを使用して、ガス温度３５０℃、ネブライザ圧力３５ｐｓｉ、ガス流量１５Ｌ  ｍｉｎ−１で分析した。取得範囲は、すべてのクロマトグラムで３００〜８００ｍ／ｚであり、検出されたピークの分子量は、ＡＴＰ：５０５．９８３５、ＧＴＰ：５２１．９８５４、およびｃＧＡＭＰ：６７３．０９０６であった。各検体の抽出イオン数の曲線下面積（ＡＵＣ）をＡｇｉｌｅｎｔ  ＲａｐｉｄＦｉｒｅ  Ｉｎｔｅｇｒａｔｏｒソフトウェアを使用して計算した。ｃＧＡＭＰの生成物形成割合を生成物形成（％）＝［（ＡＵＣｃＧＡＭＰ×１００）／（ＡＵＣｃＧＡＭＰ＋１／２  ＡＵＣＡＴＰ＋１／２  ＡＵＣＧＴＰ）］として計算した。所定の阻害剤濃度での各試料からの生成物形成割合を使用して、陽性対照（ｄｓＤＮＡなし）および陰性対照（阻害剤なし）に対する正規化により阻害率を決定した。％阻害を以下のように計算した：％阻害＝１００×［（試料平均陰性対照）／（平均陽性対照−平均陰性対照）］。
【０１２７】
本発明の代表的な化合物を前述の生化学的アッセイで試験し、結果を表２に示す。
【表２】
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【０１２８】
細胞アッセイ：
ＴＨＰ１−Ｄｕａｌ細胞における細胞ベースのルチアルシフェラーゼアッセイ。
選択した阻害剤の効力を、インターフェロン誘発遺伝子発現を報告する分泌型ルシフェラーゼを運ぶヒトＴＨＰ１−Ｄｕａｌ細胞を使用して決定する。ＴＨＰ１−Ｄｕａｌ細胞を、２４ウェルプレート（２．５×１０５細胞／ウェル、５００μｌ／ウェル）で、示された濃度範囲の阻害剤で１時間プレインキュベートした。ＤＭＳＯを陰性対照として添加した。細胞に、リポフェクタミン２０００（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）と複合体を形成した０．５μｇ  ｍＬ−１の１００ｂｐ  ｄｓＤＮＡリガンドを２４時間トランスフェクトした。トランスフェクション複合体を、２５μｌ  Ｏｐｔｉ−ＭＥＭ（Ｇｉｂｃｏ）中の０．２５μｇのｄｓＤＮＡと２５μｌ  Ｏｐｔｉ−ＭＥＭ中の０．２５μｌのリポフェクタミン２０００を組み合わせ、細胞を含む各ウェルに５０μｌの合計容量を添加することにより調製した。製造者のプロトコールに従って、ＱＵＡＮＴＩ−Ｌｕｃルシフェラーゼ試薬（ＩｎｖｉｖｏＧｅｎ）を使用して、各試料のルシフェラーゼ発光を測定した。直ちに、ウェルあたり２０μｌの細胞培養上清を９６ウェルの白色不透明プレートに移し、以下のパラメーター：５０μｌのルシフェラーゼ試薬注入、開始時間４秒および読み取り時間０．１秒でのエンドポイント測定で、Ｂｉｏｔｅｋ  Ｓｙｎｅｒｇｙ  Ｎｅｏプレートリーダー（ＢｉｏＴｅｋ、Ｗｉｎｏｏｓｋｉ、ＶＴ）を使用して、発光を記録した。各化合物処理試料の相対ルシフェラーゼ活性を、リポフェクタミン２０００処理試料を陰性対照として、化合物なしのリポフェクタミン２０００：ｄｓＤＮＡ複合体処理試料を陽性対照として使用して計算した。つまり、相対ルシフェラーゼ活性＝（ＲＬＵ試料−ＲＬＵ陰性対照）／（ＲＬＵ陽性対照−ＲＬＵ陰性対照）、ここで、ＲＬＵは、生のルシフェラーゼ単位を示す。
【０１２９】
本発明の代表的な化合物を前述の細胞アッセイで試験し、結果を表３に示す。
【表３】
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細胞におけるＩＦＮＢ１  ｍＲＮＡ発現。
ｃＧＡＳ酵素の細胞活性化は、ＴＨＰ１細胞、初代ヒトマクロファージ細胞、およびヒトＰＢＭＣにおけるＩＦＮＢ１  ｍＲＮＡ発現をもたらす。ＩＦＮＢ１  ｍＲＮＡ発現を、ｑＲＴ−ＰＣＲを使用して定量化した。全ＲＮＡを、阻害剤で１時間プレインキュベートされた１２ウェルプレートのウェルあたり５×１０５  ＴＨＰ１細胞から単離した。ヒト初代マクロファージを１２ウェルプレートのウェルあたり３×１０５細胞で使用した。ヒトＰＢＭＣを１２ウェルプレートのウェルあたり１×１０６細胞で使用した。２μｌのリポフェクタミン２０００と複合化した２μｇの１００  ｂｐ  ｄｓＤＮＡを含む１００μｌのＯｐｔｉ−ＭＥＭトランスフェクション溶液を使用して、細胞をトランスフェクトした。トランスフェクションの４時間後に細胞を回収し、５００μｌのＴｒｉｚｏｌ（Ａｍｂｉｏｎ）を使用してＲＮＡを抽出した。８００ｎｇの全ＲＮＡを、２．５μＭのオリゴ（ｄＴ）２０プライマーおよび１０Ｕ／μｌのＳｕｐｅｒｓｃｒｉｐｔ  ＩＩＩ（Ｔｈｅｒｍｏ−Ｆｉｓｈｅｒ）を５０℃で５０分間使用して、２０μｌの最終反応容量でｃＤＮＡ合成のために逆転写した。定量的ＰＣＲを、Ｍｘ３０００Ｐ  ｑＰＣＲ  Ｓｙｓｔｅｍ（Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）で、各ｑＰＣＲ反応のインプットとして逆転写材料の１／２０容量を使用して行った。ＩＦＮＢ１およびＴＵＢＡ１Ｂ  ｍＲＮＡの発現レベルを各試料について技術的に３連で測定した。ＩＦＮＢ１  ｍＲＮＡに関して得られた閾値サイクル（ＣＴ）値をＴＵＢＡ１Ｂ  ＣＴ値に正規化し、ΔＣＴを計算するために使用した。ＩＦＮＢ１の相対ｍＲＮＡ発現レベルをΔΔＣＴ法（２ΔΔＣＴ）を使用して計算した。ｃＧＡＳ阻害の程度を、ＤＭＳＯのみの対照に対して、各試料のＩＦＮＢ１  ｍＲＮＡ発現レベルを正規化することにより決定した。
【０１３０】
本発明の代表的な化合物を前述の細胞アッセイで試験し、結果を表４に示す。
【表４】
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【０１３１】
インビボでの初期の実験は、本明細書に記載された化合物が血液脳関門を貫通することを示唆している。したがって、それらは、ＣＮＳ内の自己免疫疾患の治療に有用である。
【国際調査報告】
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