(57)【要約】  本発明は、式(Ｉ)に示すような構造を有する化合物、その立体異性体および薬学的に許容される塩の形態に関し、さらに前記化合物の調製方法、治療有効用量の前記化合物を含む医薬組成物、および癌の予防および／または治療での調製用途に関する。本発明により提供される化合物は、新規な構造を有し、親環の１０位および１１位にメチレンジオキシ基を導入し、７位に異なる置換基を有するカンプトテシン誘導体を導入し、その調製方法は、容易に原料を入手し、合成方法が簡単で、精製方法も単純で迅速であり、かつ本発明の前記化合物は優れたインビトロ細胞毒活性および優れたインビボ抗腫瘍効果を有するため、このような化合物は幅広い医学的展望を有する。【化１】2021526560.tif 000061【選択図】なし
2021526560.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式(Ｉ)に示す構造を有する化合物、その立体異性体および薬学的に許容される塩の形態。
【化１】
2021526560.tif 000048
ここで、Ｒは
【化２】
2021526560.tif 000049
であり、ただし、
Ｘは
【化３】
2021526560.tif 000050
であり、ｎは０〜２の整数であり、ｍは０〜２の整数であり、
Ｚは環構造であり、Ｚ環は、置換または非置換ベンゼン環、置換または非置換ピリジン環、置換または非置換フラン環、置換または非置換チオフェン環、置換または非置換ピラゾール環、置換または非置換インドール環、置換または非置換ベンゾピラゾール環、置換または非置換ピペリジン環、置換または非置換モルホリン環、置換または非置換チオモルホリン環、置換または非置換ナフタレン環、および置換または非置換トリアゾール環から選択され、
置換構造の場合、前記置換基は、ハロゲン原子、置換または非置換アルキル基、置換または非置換エステル基、置換または非置換アリール基、置換または非置換ピロリジニル基、置換または非置換ピペリジニル基、置換または非置換モルホリニル基、および置換または非置換チオモルホリニル基から選択され、
前記置換は単一置換または複数置換であり、
ｎとｍの両方が０である場合、前記Ｚ環は非置換ベンゼン環ではない。
【請求項２】
前記Ｘは
【化４】
2021526560.tif 000051
であり、ｍは１または２であり、Ｚ環は置換または非置換ベンゼン環であることを特徴とする請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
式(Ｉ)のＲは以下から選択されたいずれか１つであることを特徴とする請求項１に記載の化合物。
【化５】
2021526560.tif 000052
【請求項４】
前記Ｘは
【化６】
2021526560.tif 000053
であり、ｎは２であり、Ｚ環は置換または非置換ベンゼン環であることを特徴とする請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
式(Ｉ)のＲは以下から選択されたいずれか１つであることを特徴とする請求項１に記載の化合物。
【化７】
2021526560.tif 000054
【請求項６】
Ｘは
【化８】
2021526560.tif 000055
であり、前記ｎとｍの両方が０であることを特徴とする請求項１に記載の化合物。
【請求項７】
式(Ｉ)のＲは以下から選択されたいずれか１つであることを特徴とする請求項１に記載の化合物。
【化９】
2021526560.tif 000056
【請求項８】
前記化合物は
【化１０】
2021526560.tif 000057
であることを特徴とする請求項１に記載の化合物。
【請求項９】
前記Ｘは
【化１１】
2021526560.tif 000058
であり、ｎは０〜２の整数であり、Ｚ環は、置換または非置換ピペリジン環、置換または非置換モルホリン環および置換または非置換チオモルホリン環から選択される、ことを特徴とする請求項１に記載の化合物。
【請求項１０】
式(Ｉ)のＲは以下から選択されたいずれか１つであることを特徴とする請求項１に記載の化合物。
【化１２】
2021526560.tif 000059
【請求項１１】
Ｒは置換または非置換トリアゾール環であり、前記化合物は式(ＩＩ)に示す構造を有することを特徴とする請求項１に記載の化合物。
【化１３】
2021526560.tif 000060
ここで、Ｒ１は置換または非置換アルキル基、置換または非置換エステル基、置換または非置換イソヒドロキサム酸鎖、および置換または非置換アリール基から選択される。
【請求項１２】
癌を予防および／または治療する薬物の調製における請求項１〜１１のいずれか１項に記載の化合物の用途。
【請求項１３】
前記癌は肺癌、結腸癌、前立腺癌、白血病および乳癌から選択されることを特徴とする請求項１２に記載の用途。
【請求項１４】
請求項１〜１１のいずれか１項に記載の化合物のＥＧＦまたはＦＧＦ阻害剤としての用途。
【請求項１５】
１)治療有効用量の請求項１〜１１のいずれか１項に記載の化合物、および
２)薬学的に許容される担体
を含む医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、医薬技術の分野に属し、具体的には、新しいタイプのカンプトテシン誘導体およびその調製方法並びに用途に関する。
【背景技術】
【０００２】
カンプトテシン誘導体は、２０世紀における抗がん剤の３つの主要な発見の１つとして知られており、広域スペクトルの抗腫瘍活性を示し、膨大な研究と応用の見通しがある。初期のカンプトテシン化合物は、その作用メカニズムがＴｏｐ  ＩおよびＤＮＡと三元複合体を形成しているため、ＤＮＡの複製と転写を妨げ、選択性が低く、毒性と副作用が高いなどの欠点があった。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
化学技術の発展に伴い、近年、分子標的抗腫瘍薬が研究のホットスポットになり、このような薬が腫瘍細胞の分化と増殖に関連する信号伝達経路に選択的に作用することができる。
【課題を解決するための手段】
【０００４】
本発明は、カンプトテシンをリード化合物として、その構造を変更して、より効率的で毒性の低い抗腫瘍候補化合物を開発するものである。
カンプトテシンの構造に基づいて、１０位と１１位にメチレンジオキシ基を導入し、７位に異なる置換基を導入して、抗腫瘍活性がより高く、毒性がより低く、溶解性が良好な化合物を取得した。
【０００５】
本発明は、腫瘍を予防または治療する薬を調製するために使用することができる、カンプトテシン誘導体およびその調製方法並びに用途を提供するものである。
【０００６】
上記の技術的問題を解決するためになされた、本発明の一態様では、式(Ｉ)に示す構造を有する化合物、その立体異性体および薬学的に許容される塩形態を提供する：
【０００７】
【化１】
2021526560.tif 000003
【０００８】
ここで、Ｒは
【化２】
2021526560.tif 000004
であり、ただし、
Ｘは
【化３】
2021526560.tif 000005
であり、ｎは０〜２の整数であり、ｍは０〜２の整数であり、
Ｚは環構造であり、Ｚ環は、置換または非置換ベンゼン環、置換または非置換ピリジン環、置換または非置換フラン環、置換または非置換チオフェン環、置換または非置換ピラゾール環、置換または非置換インドール環、置換または非置換ベンゾピラゾール環、置換または非置換ピペリジン環、置換または非置換モルホリン環、置換または非置換チオモルホリン環、置換または非置換ナフタレン環、および置換または非置換トリアゾール環から選択され、
置換構造の場合、前記置換基は、ハロゲン原子、置換または非置換アルキル基、置換または非置換エステル基、置換または非置換アリール基、置換または非置換ピロリジニル基、置換または非置換ピペリジニル基、置換または非置換モルホリニル基、および置換または非置換チオモルホリニル基から選択され、
前記置換は単一置換または複数置換であり、
ｎとｍの両方が０の場合、前記Ｚ環は非置換ベンゼン環ではない。
【０００９】
好ましくは、前記ハロゲン原子はＦである。
【００１０】
前記立体異性体には、立体配座異性体、光学異性体(エナンチオマーやジアステレオマーなど)、幾何学的異性体(シス-トランス異性体など)が含まれる。これらの異性体またはその組み合わせは、ラセミ混合物、個々のエナンチオマー、個々のジアステレオマー、ジアステレオマー混合物、シスまたはトランス異性体として存在し得る。
【００１１】
前記薬学的に許容される塩とは、上記の化合物と、無機酸、有機酸、アルカリ金属またはアルカリ土類金属などとの反応によって生成される塩を指す。これらの塩には、(１)塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などの無機酸とで形成された塩、(２)酢酸、乳酸、クエン酸、コハク酸、フマル酸、グルコン酸、安息香酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ-トルエンスルホン酸、シュウ酸、コハク酸、酒石酸、マレイン酸、またはアルギニン酸などの有機酸とで形成された塩、(３)アルカリ金属またはアルカリ土類金属(ナトリウム、カリウム、カルシウムまたはマグネシウム)とで形成された塩、アンモニウム塩または水溶性アミン塩(Ｎ-メチルグルカミン塩など)、低級アルカノールアンモニウム塩、および他の薬学的に許容されるアミン塩(メチルアミン塩、エチルアミン塩、プロピルアミン塩、ジメチルアミン塩、トリメチルアミン塩、ジエチルアミン塩、トリエチルアミン塩、第三級ブチルアミン塩、エチレンジアミン塩、ヒドロキシルエチルアミン塩、ジヒドロキシルエチルアミン塩、トリヒドロキシルエチルアミン塩、およびモルホリン、ピペラジン、リジンによって形成されたアミン塩など)、または他の通常の「プロドラッグ」が含まれるが、これらに限定されない。
【００１２】
さらに、本発明は、上記化合物の前駆体を提供し、前記前駆体とは、適切な方法によって摂取された後、この化合物の前駆体が患者のインビボで代謝または化学反応して変換された本発明の一般式に含まれる化合物、および化合物の塩または溶液を指す。化合物の前駆体には、前記化合物のカルボン酸エステル、炭酸エステル、リン酸エステル、硝酸エステル、硫酸エステル、スルホンエステル、スルホキシドエステル、アミノ化合物、カルバメート、アゾ化合物、ホスホルアミド、グルコシド、エーテル、アセタールなどが含まれるが、これらに限定されない。
【００１３】
好ましい実施例では、前記Ｘは
【化４】
2021526560.tif 000006
であり、ｍは１または２であり、Ｚ環は、置換または非置換ベンゼン環である。特に好ましくは、式(Ｉ)のＲは以下から選択されたいずれか１つである：
【００１４】
【化５】
2021526560.tif 000007
【００１５】
別の好ましい実施例では、前記Ｘは
【化６】
2021526560.tif 000008
であり、ｎは２であり、Ｚ環は置換または非置換ベンゼン環である。特に好ましくは、式(Ｉ)のＲは以下から選択されたいずれか１つである：
【００１６】
【化７】
2021526560.tif 000009
【００１７】
別の好ましい実施例では、Ｘは
【化８】
2021526560.tif 000010
であり、前記ｎとｍの両方は０である。特に好ましくは、式(Ｉ)のＲは以下から選択されたいずれか１つである：
【００１８】
【化９】
2021526560.tif 000011
【００１９】
より好ましくは、前記化合物は、
【化１０】
2021526560.tif 000012
である。
【００２０】
別の好ましい実施例では、前記Ｘは
【化１１】
2021526560.tif 000013
であり、ｎは０〜２の整数であり、Ｚ環は置換または非置換ピペリジン環、置換または非置換モルホリン環、および置換または非置換チオモルホリン環から選択される。特に好ましくは、式(Ｉ)のＲは以下から選択されたいずれか１つである：
【００２１】
【化１２】
2021526560.tif 000014
【００２２】
別の好ましい実施例では、式(Ｉ)のＲは置換または非置換トリアゾール環であり、前記化合物は式(ＩＩ)に示す構造を有する：
【００２３】
【化１３】
2021526560.tif 000015
【００２４】
ここで、Ｒ１は、置換または非置換アルキル基、置換または非置換エステル基、置換または非置換イソヒドロキサム酸鎖、および置換または非置換アリール基から選択される。
【００２５】
本発明の別の態様は、癌を予防および／または治療する薬物の調製での上記化合物の用途を提供する。好ましくは、前記癌は肺癌、結腸癌、前立腺癌、白血病、および乳癌から選択される。
【００２６】
本発明の別の態様は、上記化合物のＥＧＦまたはＦＧＦ阻害剤としての用途を提供する。
【００２７】
本発明の別の態様は、１)有効用量の上記化合物、および２)薬学的に許容される担体を含む医薬組成物を提供する。
【００２８】
前記医薬組成物は、錠剤、カプセル、粉末、顆粒、ロゼンジ、坐剤、経口液体または無菌非経口懸濁液などの液体調製形態、および大量または少量注射剤、凍結乾燥粉末などの注射形態で調製することができる。上記投与形態の薬物は、製薬分野における通常の方法に従って調製することができる。
【００２９】
必要に応じて、本発明の医薬組成物には、１つまたは複数の薬学的に許容される担体を添加することもでき、担体には、医薬分野における通常の希釈剤、充填剤、結合剤、湿潤剤、吸収促進剤、界面活性剤、吸着キャリア、潤滑剤などが含まれる。
【００３０】
本発明の別の態様は、上記化合物の調製方法をさらに提供し、その特徴は、以下のステップを含む：
【００３１】
(１)３,４-メチレンジオキシアセトフェノン(Ａ)を出発原料として、濃硝酸ニトロ化と水素−パラジウム炭素還元の２階段反応により６-アミノ-３,４-メチレンジオキシアセトフェノン(Ｃ)を得た。
【化１４】
2021526560.tif 000016
【００３２】
(２)構造式が(Ｉ)であり、Ｘが
【化１５】
2021526560.tif 000017
であり、ｍが１または２であり、Ｚ環が置換または非置換ベンゼン環であり、式(Ｉ)の化合物のＲは１〜７の基である場合、６-アミノ-３,４-メチレンジオキシアセトフェノンは、クライゼン-シュミット反応により、任意に置換されたベンズアルデヒドまたは任意に置換されたシンナムアルデヒドと反応して中間体Ｄを得て、５′(Ｓ)-１,５-ジオキソ-(５′-エチル-５′-ヒドロキシ-２′Ｈ,５′Ｈ,６′Ｈ-６-オキソピラン)-[３′,４′,ｆ]-Δ６(８)-テトラヒドロインドリジン(Ｍ)と縮合および環化反応して、化合物１〜７を得た。
【００３３】
【化１６】
2021526560.tif 000018
【００３４】
(３)構造式が(Ｉ)であり、Ｘが
【化１７】
2021526560.tif 000019
であり、ｎが２であり、Ｚ環が置換または非置換ベンゼン環であり、式(Ｉ)の化合物のＲが８〜２０の基である場合、ステップ(２)で得られた７位フェネチル置換のカンプトテシン誘導体を接触水素化して、化合物８〜２０を得た。
【００３５】
【化１８】
2021526560.tif 000020
【００３６】
(４)構造式が(Ｉ)であり、ｎとｍの両方が０であり、式(Ｉ)化合物のＲが２１〜４２の基である場合、ステップ(１)で得られた６-アミノ-３,４-メチレンジオキシアセトフェノン(Ｃ)と５′(Ｓ)-１,５-ジオキソ-(５′-エチル-５′-ヒドロキシ-２′Ｈ,５′Ｈ,６′Ｈ-６-オキソピラン)-[３′,４′,ｆ]-Δ６(８)-テトラヒドロインドリジン(Ｍ)は、ｐ-トルエンスルホン酸の触媒下で加熱還流され縮合反応を起こし、次に無水酢酸とアシル化反応し、過酸化水素酸化して中間体Ｆを得、Ｆを臭化オキサリルで臭素化して２０-Ｏ-アセチル-７-ブロモ-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシン(Ｇ)を得、Ｇを異なる芳香族複素環式フェニルボロン酸または芳香族環フェニルボロン酸とカップリング反応させ、ナトリウムメトキシドによるアセチル基の脱保護して、７位が芳香族複素環または異なる置換フェニルで修飾された(上記構造式Ｉで示される２１〜４２の基)化合物２１〜４２を得た。
【００３７】
【化１９】
2021526560.tif 000021
【００３８】
(５)構造式が(Ｉ)であり、式(Ｉ)のＲは４３〜４６の基である場合、ステップ４で得られた中間体２０-Ｏ-アセチル-７-ブロモ-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシン(Ｇ)を異なる複素環と置換反応させ７位がＮ-メチルモルホリン、Ｎ-メチルピペリジン、Ｎ-メチル-２-メチルピペリジンおよびＮ-メチルチオモルホリンで修飾された化合物４３〜４６を得た。
【００３９】
(６)構造式が(Ｉ)であり、式(Ｉ)のＲが４７〜５０の基である場合、ステップ４で得られた中間体(Ｆ)を、異なる窒素含有複素環と置換反応させ、７位がＮ-メチレンモルホリン、Ｎ-メチレンピペリジン、Ｎ-メチレン-２-メチルピペリジンおよびＮ-メチレンチオモルホリンで置換された(上記構造式Ｉに示される４７〜５０の基)化合物４７〜５０を得た。
【００４０】
(７)構造式が(Ｉ)であり、式(Ｉ)のＲが５１〜５４基である場合、ステップ(１)で調製された中間体Ｃを、Ｎ,Ｎ-ジメチルホルムアミドジメチルアセタールによる縮合、複素環置換基による置換して、異なる複素環置換された中間体(Ｊ)を得、ｐ-トルエンスルホン酸の触媒下でインドリジンＭと加熱還流され、縮合反応を起こし、７位にＮ-エチルモルホリン、Ｎ-エチルピペリジン、Ｎ-エチル-２-メチルピペリジンおよびＮ-エチルチオモルホリンで修飾された化合物５１〜５４を得た。
【００４１】
(８)Ｒが異なる置換基を含むトリアゾール環であり、構造式が(ＩＩ)である場合、ステップ４で得られた中間体２０-Ｏ-アセチル-７-ブロモ-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシン(Ｇ)とトリメチルシリルアセチレンを酢酸パラジウムの触媒下で反応し、トリメチルシリルアセチレンとフッ化カリウム作用で２０-Ｏ-アセチル-７-エチル-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシン(Ｋ)を得、Ｋが異なる置換基を含むアジド化合物とクリック化学反応して、式(ＩＩ)化合物を得た。
【００４２】
本発明は、上記中間体Ｍの調製方法をさらに提供し：
【化２０】
2021526560.tif 000022
Ｍ６を第三級ブトキシドカリウムの作用下で炭酸ジエチルと反応させて中間体Ｍ７を得、中間体Ｍ７をブロモエタンと反応させて中間体Ｍ８を得、中間体Ｍ８を高圧下でラネーニッケルの接触水素化して中間体Ｍ９を得、中間体Ｍ９を亜硝酸ナトリウムと反応させて中間体Ｍ１０を得、中間体Ｍ１０を四塩化炭素中で還流させ再配列して中間体Ｍ１１を得、中間体Ｍ１１を酸素酸化して中間体Ｍ１２を得、中間体Ｍ１２はキラル化合物であり、キラルイソシアナートによる誘導体化によってキラル化され、中間体Ｍ１２は塩化第一銅の触媒下でキラルイソシアナートと反応して２つのジアステレオ異性体Ｍ１３ＲとＭ１３Ｓを得、これらをカラムクロマトグラフィーで分離および精製し、中間体Ｍ１３Ｓをアルカリ性条件下で加水分解して中間体Ｍ１４を得、中間体Ｍ１４をトリフルオロ酢酸の条件下で脱保護して立体特異的な三環式中間体Ｍ１５(すなわち中間体Ｍ)を得た。
【発明の効果】
【００４３】
本発明の化合物は、従来のカンプトテシン化合物よりも腫瘍組織に対する選択性が高く、従来のカンプトテシン化合物よりも溶解性が高く、親化合物と比較して抗腫瘍活性が大幅に改善されているが、同時に毒性が小さい。癌を予防または治療するための医薬を調製するのに使用できる。本発明のカンプトテシン誘導体は、構造特徴が明確で、容易に合成し、単純かつ迅速に精製でき、良好な生物学的活性を有するため、このような化合物は、癌の予防または治療において幅広く応用され得ることが期待されている。
【図面の簡単な説明】
【００４４】
【図１】本発明の化合物の合成経路の概略図である。
【図２】ＨＣＴ-１１６を移植した腫瘍モデルマウスの腫瘍体積の変化に対する化合物２３の効果を示す図である。
【図３】ＨＣＴ-１１６を移植した腫瘍モデルマウスの体重変化に対する化合物２３の効果を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００４５】
本発明の方法および技術は、特に明記しない限り、通常当該技術分野で知られている従来の方法に従って実施される。本明細書に記載の生物学、薬理学、医学および薬化学に関連する命名法、実験方法および技術は当該技術分野で既知で一般的に使用されているものである。化学合成法、化学分析法、医療方法、混合方法と伝達方法、および患者の治療法は標準的な技術を採用している。
【００４６】
特に明記しない限り、本明細書で使用されている科学技術用語は、この分野の一般的な意味を持つものとする。次の用語は以下のように定義される：
【００４７】
「癌」とは、体内の異常な細胞の制御されていない増殖を特徴とする様々な疾患を指す。制御されていない細胞分裂と増殖分裂は悪質な腫瘍または細胞につながり、それらは隣接する組織に侵入し、リンパシステムや血流を介して体の遠位部分に移動することもある。本発明における「癌の治療」の別な同等な説明は、「腫瘍の治療」または「抗がん」または「抗腫瘍」である。
【００４８】
癌は、制御されていない細胞が体の臓器やシステムの正常な機能を妨げる病気である。癌の被験者は、体内に測定できる癌細胞が客観的に存在する被験者である。癌を発症するリスクのある被験者は、癌を発症しやすい(例えば家族歴、遺伝的素因)被験者、放射線または他の試薬への曝露により癌を発症しやすい被験者である。
【００４９】
本発明の化合物は、様々な癌または癌を発症するリスクのある被験者を治療するために使用することができる。このような癌の例として、乳癌、前立腺癌、肺癌、卵巣癌、子宮頸癌、皮膚癌、黒色腫、結腸癌、胃癌、肝癌、食道癌、腎臓癌、喉癌、甲状腺癌、膵臓癌、精巣癌、脳癌、骨癌、および血液がん(例えば白血病、慢性リンパ球性白血病)などが挙げられる。他の癌は、基底細胞癌、胆道癌、膀胱癌、骨癌、脳および中枢神経系(ＣＮＳ)癌、子宮頸癌、脈絡膜癌、結腸直腸癌、結合組織癌、消化器系癌、子宮内膜癌、食道癌、眼癌、頭頸部癌、上皮性腫瘍、喉癌、肺癌(小細胞、大細胞)、リンパ腫(包括ホジキンリンパ腫和非ホジキンリンパ腫を含む)、黒色腫、神経芽細胞腫、口腔癌(例えば唇、舌、口、喉)、網膜芽細胞腫、平滑筋肉腫、呼吸器癌、肉腫、卵巣癌、尿路癌、および他の癌や肉腫を含むが、これらに限定されない。
【００５０】
「治療有効用量」とは、以下のことを達成できる薬物の任意用量であり、単独でまたは別の治療薬と組み合わせて使用すると、この量の薬物により疾患の衰退を促進する可能性がある。疾患の衰退とは、疾患の重症度の症状が低減する、無疾患症状の頻度と継続期間が増加する、または病気によって引き起こされる障害を予防することを指す。薬物の治療有効量または用量は、「予防有効量」または「予防有効用量」を含み、「予防有効量」または「予防有効用量」は以下のことを達成できる薬物の任意用量であり、単独でまたは別の治療薬と組み合わせてこの用量で疾患の発症または疾患の再発リスクのある被験者に投与すると、疾患の発症または再発を抑制することができる。疾患の衰退または疾患の発症または再発を抑制する治療薬の能力は、当業者に知られている様々な方法によって評価することができ、例えばヒトの被験者の臨床試験、ヒトにおける有効性を予測することができる動物モデルシステム、またはインビトロ測定システムにおいて、試薬の活性を測定する。
【００５１】
一例として、抗がん剤(癌を治療する医薬組成物)は、被験者のインビボの腫瘍衰退を促進する。好ましい実施形態では、治療有効用量の薬物により、癌細胞の衰退を促進し、さらには癌を排除する。「癌の衰退を促進する」とは、単独でまたは抗腫瘍剤(ａｎｔｉ-ｎｅｏｐｌａｓｔｉｃ  ａｇｅｎｔ)と組み合わせて治療有効量の薬物を投与することにより、腫瘍の増殖が減少または大きさ減小、腫瘍壊死、少なくとも１つの疾患症状の重症度の低下をもたらし、無疾患症状の頻度と継続期間が増加し、病気による障碍を予防し、または他の方式で患者の疾患症状を改善することができる。さらに、治療に関する「有効」および「有効性」という用語には、薬理学的有効性および生理学的安全性の両方が含まれる。薬理学的有効性とは、患者の癌の衰退を促進する薬物の能力を指す。生理学的安全性とは、薬物投与によって引き起こされる細胞、器官、および／または生物学的レベルでの毒性または他の有害な生理学的影響（悪影響）のレベルを指す。
【００５２】
腫瘍治療の例として、未治療の被験者と比較すると、治療有効量または用量の薬物は、好ましくは、細胞増殖または腫瘍増殖を少なくとも約２０％、より好ましくは少なくとも約４０％、さらに好ましくは少なくとも約６０％、さらにより好ましくは少なくとも約８０％抑制することができる。最も好ましい実施形態では、治療有効量または用量の薬物は、細胞増殖または腫瘍増殖を完全に抑制することができ、すなわち、細胞増殖または腫瘍増殖を１００％抑制することができる。腫瘍増殖を抑制する化合物の能力は、動物モデルシステムで評価することができ、ヒト腫瘍におけるそれらの有効性を予測することができる。あるいは、組成物のこの特性は、細胞増殖を抑制する化合物の能力を評価することによって評価することができ、当業者に知られている測定方法によってインビトロで測定することができる。本発明の他の好ましい実施形態では、腫瘍衰退は、好ましくは少なくとも約２０日、より好ましくは少なくとも約４０日、またはさらに好ましくは少なくとも約６０日継続して観察され得る。
【００５３】
被験者に対する「治療」とは、疾患関連の症状、合併症、状態、または生化学的指標の出現、進行、発達、重症度または再発を逆転、軽減、改善、阻害、減速または予防する目的での被験者の治療を指す。
【実施例】
【００５４】
以下、実施例と併せて本発明をさらに詳細に説明する。
【００５５】
本発明は、親環の１０位および１１位にメチレンジオキシ基を導入し、７位に異なる置換基を有する一連の新規構造のカンプトテシン誘導体を合成および試験した。これらの化合物のいくつかの例は例えば以下の表に示される：
【００５６】
【化２１】
2021526560.tif 000023
【００５７】
【化２２】
2021526560.tif 000024
【００５８】
【化２３】
2021526560.tif 000025
【００５９】
【化２４】
2021526560.tif 000026
【００６０】
【化２５】
2021526560.tif 000027
【００６１】
【化２６】
2021526560.tif 000028
【００６２】
試験後、本発明の化合物によって合成された化合物は、一般に良好な水溶性を有する。
【００６３】
図１は上記化合物の合成経路の概略図を示す。以下、具体的な実施例と併せて説明する：
【００６４】
化合物１〜７の概略合成経路は次の通りである：
【化２７】
2021526560.tif 000029
【００６５】
実施例１  ２０(Ｓ)-７-フェニルブタジエニル-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシン(化合物１)の調製
ステップ(１)  (２Ｅ,４Ｅ)-１-(５-アミノベンゾ[ｄ][１,３]ジオキソ-６-イル)-５-フェニルペンタン-２,４-ジエン-１-ケトン(Ｄ１)の調製
室温で、濃硝酸(２０．７ｍｌ)を３,４-メチレンジオキシアセトフェノン(８．１ｇ,４９．３ｍｍｏｌ)のニトロメタン(８０ｍｌ)溶液にゆっくりと滴下し、２時間攪拌し、反応溶液に飽和重炭酸ナトリウム溶液をゆっくりと滴下し、ｐＨを中性に調整し、ジクロロメタンで３回抽出し、有機相を合わせ、飽和塩水で３回洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮して黄色の油性液体を得、シリカゲルカラムクロマトグラフィー(石油エーテル：酢酸エチル＝８：１)で分離し、濃縮後、淡黄色の固体６-ニトロ-３,４-メチレンジオキシアセトフェノン７．８ｇを得た。収率が７６％で、ｍｐが１１０〜１１２℃であった。
【００６６】
６-ニトロ-３,４-メチレンジオキシアセトフェノン(７．８ｇ,３７．３ｍｍｏｌ)を酢酸エチル(７０ｍｌ)に溶解し、触媒量のパラジウム炭素を加え、水素バルーンを充填し、室温で１２時間攪拌し反応させ、触媒を濾過により除去し、濃縮後、淡黄色固体６-アミノ-３,４-メチレンジオキシアセトフェノン５．５ｇを得た。収率が８３％であった。ｍｐが１２３〜１２４℃であった。
【００６７】
６-アミノ-３,４-メチレンジオキシアセトフェノン(０．２ｇ,１．１ｍｍｏｌ)を１００ｍｌナス型フラスコに加え、無水エタノール(１０ｍｌ)で溶解し、水酸化ナトリウム(０．４ｇ,１１ｍｍｏｌ)およびシンナムアルデヒド(０．１４ｇ,１．３ｍｍｏｌ)を加え、室温で１２時間攪拌し反応させ、エタノールを濃縮により除去し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー(石油エーテル：酢酸エチル＝４：１)で精製し、濃縮後、黄色の固体Ｄ１(０．２１ｇ)を得た。収率が７１％であった。ｍｐが１３０〜１３２℃であった。
【００６８】
１Ｈ  ＮＭＲ(５００ＭＨｚ,ＤＭＳＯ-ｄ６)δ  ７．８１(ｄｄ,Ｊ＝８．５,５．７Ｈｚ,２Ｈ), ７．７７(ｓ,１Ｈ),７．３５(ｄ,Ｊ＝１６．３Ｈｚ,１Ｈ),７．２５(ｔ,Ｊ＝７．４Ｈｚ,２Ｈ),７．２３(ｓ,１Ｈ),７．１６(ｄ,Ｊ＝１６．３Ｈｚ,１Ｈ),６．３１(ｓ,２Ｈ)．
【００６９】
１３Ｃ  ＮＭＲ(１２６ＭＨｚ,ＤＭＳＯ-ｄ６)δ  １９２．０,１６４．９,１６３．０,１５２．７,１４９．３,１４４．６,１４１．４,１３２．７,１３１．６,１３１．１,１２６．３,１１６．５,１１６．３,１０８．１,１０５．３,１０４．５．
【００７０】
ステップ(２)  中間体(２Ｅ,４Ｅ)-１-(５-アミノベンゾ[ｄ][１,３]ジオキソ-６-イル)-５-フェニルペンタン-２,４-ジエン-１-ケトン(Ｄ１)(２００ｍｇ,０．７６ｍｍｏｌ)を５０ｍｌナス型フラスコに加え、無水トルエン(２５ｍｌ)に溶解し、次に(２Ｅ,４Ｅ)-１-(５-アミノベンゾ[ｄ][１,３]ジオキソ-６-イル)-５-フェニルペンタン-２,４-ジエン-１-ケトン(Ｍ)(０．４１ｇ,１．４ｍｍｏｌ)、ｐ-トルエンスルホン酸(１３．０ｍｇ,０．０８ｍｍｏｌ)を加え、窒素保護下にて１１０℃で２４時間還流反応した後、室温まで冷却し、回転蒸発により溶媒を濃縮して除去し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー(ジクロロメタン：アセトン＝１０：１)で分離し、黄色の薄片状固体化合物１  ６０ｍｇを得た。収率が１５％であった。ｍｐが２０６‐２１４℃であった。ＭＳ(ＥＳＩ)：ｍ／ｚ,５２１．４  [Ｍ+Ｈ]＋．
【００７１】
１Ｈ  ＮＭＲ(６００ＭＨｚ,ＣＦ３ＣＯＯＤ)δ  ８．２３(ｓ,１Ｈ),８．０６−７．９４(ｍ,１Ｈ),７．９２(ｓ,１Ｈ),７．８４(ｄ,Ｊ＝１６．４Ｈｚ,１Ｈ),７．７９(ｓ,１Ｈ),７．７２(ｄ,Ｊ＝７．４Ｈｚ,１Ｈ),７．６７(ｄ,Ｊ＝１８．５Ｈｚ,１Ｈ),７．５３(ｄ,Ｊ＝８．１Ｈｚ,１Ｈ),７．４８(ｄ,Ｊ＝１５．６Ｈｚ,１Ｈ),７．４３(ｄ,Ｊ＝９．７Ｈｚ,１Ｈ),７．３６(ｓ,２Ｈ),７．２９−７．１４(ｍ,１Ｈ),６．５７−６．４３(ｍ,２Ｈ),６．０１(ｄ,Ｊ＝２６．７Ｈｚ,２Ｈ),５．７０(ｄ,Ｊ＝１６．７Ｈｚ,１Ｈ),２．２９(ｄ,Ｊ＝２７．２Ｈｚ,２Ｈ),１．３５(ｄｄ,Ｊ＝１１７．８,１２．９Ｈｚ,３Ｈ)．
【００７２】
１３Ｃ  ＮＭＲ(１５１ＭＨｚ,ＣＦ３ＣＯＯＤ)δ  １７６．５,１６１．１,１５７．５,１５７．６,１４９．３,１４７．４,１４６．５,１４５．５,１３４．３,１３１．７,１３０．３,１２９．５,１２８．７,１２８．５,１２８．０,１２７．９,１２７．４,１２６．９,１２１．０,１１７．９,１１５．７,１１３．８,１１１．２,１０５．５,９７．４,７４．０,６６．５,６５．５,３１．７,１１．８,５．４．
【００７３】
実施例２  ２０(Ｓ)-７-(４-フルオロフェネチル)-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシン(化合物３)の調製
実施例１のステップ(１)中のシンナムアルデヒドを４-フルオロベンズアルデヒドに置き換え、他の原料、試薬、調製方法は実施例１のステップ(１)および(２)と同じであり、２０(Ｓ)-７-(４-フルオロフェネチル)-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシンの黄色の固体化合物３を調製することができた。ｍｐ＞２５０℃、  ＭＳ(ＥＳＩ)：ｍ／ｚ,５１３．５  [Ｍ+Ｈ]＋．
【００７４】
１Ｈ  ＮＭＲ(５００ＭＨｚ,ＣＦ３ＣＯＯＤ)δ  ８．２３(ｓ,１Ｈ),８．００(ｓ,１Ｈ),７．９５(ｄｄ,Ｊ＝７．８,５．４Ｈｚ,１Ｈ),７．８７(ｄ,Ｊ＝１６．５Ｈｚ,１Ｈ),７．８５−７．７８(ｍ,１Ｈ),７．７３(ｓ,１Ｈ),７．３０(ｄｄ,Ｊ＝２２．８,１４．３Ｈｚ,２Ｈ),７．１０(ｄｄ,Ｊ＝３６．５,２５．０Ｈｚ,１Ｈ),６．５２(ｓ,２Ｈ),６．０３(ｔ,Ｊ＝１１．９Ｈｚ,１Ｈ),６．０１−５．８３(ｍ,２Ｈ),５．６９(ｄ,Ｊ＝１７．０Ｈｚ,１Ｈ),２．２４(ｄｄ,Ｊ＝１７．８,１１．０Ｈｚ,２Ｈ),１．３３−１．１６(ｍ,３Ｈ)．
【００７５】
１３Ｃ  ＮＭＲ(１２５ＭＨｚ,ＣＦ３ＣＯＯＤ)δ  １７６．２,１５７．４,１５２．１,１５１．８,１４８．９,１４５．０,１４０．１,１３９．８,１３８．８,１３０．６,１３０．０,１３０．０,１２６．１,１２６．０,１２１．０,１１７．３,１１６．１,１１６．０,１０５．０,１０３．４,１０１．１,９７．３,７３．９,６６．２,５２．５,３１．０,１１．７,５．８．
【００７６】
実施例３  ２０(Ｓ)-７-(３-フルオロフェネチル)-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシン(化合物４)の調製
実施例１のステップ(１)中のシンナムアルデヒドを３-フルオロベンズアルデヒドに置き換え、他の原料、試薬、調製方法は実施例１のステップ(１)および(２)と同じであり、２０(Ｓ)-７-(４-フルオロフェネチル)-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシンの黄色の固体化合物４を調製することができた。ｍｐ＞２５０℃、  ＭＳ(ＥＳＩ)：ｍ／ｚ,５１３．５  [Ｍ+Ｈ]＋．
【００７７】
１Ｈ  ＮＭＲ(５００ＭＨｚ,ＣＦ３ＣＯＯＤ)δ  ８．２３(ｓ,１Ｈ),８．００(ｓ,１Ｈ),７．９５(ｄｄ,Ｊ＝７．８,５．４Ｈｚ,１Ｈ),７．８７(ｄ,Ｊ＝１６．５Ｈｚ,１Ｈ),７．８５−７．７８(ｍ,１Ｈ),７．７３(ｓ,１Ｈ),７．３０(ｄｄ,Ｊ＝２２．８,１４．３Ｈｚ,２Ｈ),７．１４(ｄｄ,Ｊ＝３６．５,２５．０Ｈｚ,１Ｈ),６．５６(ｓ,２Ｈ),６．０３(ｔ,Ｊ＝１１．９Ｈｚ,１Ｈ),６．２１−５．８４(ｍ,２Ｈ),５．６９(ｄ,Ｊ＝１７．０Ｈｚ,１Ｈ),２．２４(ｄｄ,Ｊ＝１７．８,１１．０Ｈｚ,２Ｈ),１．３３−１．１６(ｍ,３Ｈ)．
【００７８】
１３Ｃ  ＮＭＲ(１２６ＭＨｚ,ＣＦ３ＣＯＯＤ)δ  １７６．２,１５７．４,１５２．１,１５１．８,１４８．９,１４５．０,１４０．１,１３９．８,１３８．８,１３０．６,１３０．４,１３０．０,１２６．８,１２６．０,１２１．０,１１７．５,１１６．１,１１６．０,１０５．０,１０３．４,１０１．１,９７．３,７３．９,６６．２,５２．５,３１．０,１１．７,５．８．
【００７９】
実施例４  ２０(Ｓ)-７-(２-フルオロフェネチル)-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシン(化合物５)の調製
実施例１のステップ(１)中のシンナムアルデヒドを２-フルオロベンズアルデヒドに置き換え、他の原料、試薬、調製方法は実施例１のステップ(１)および(２)と同じであり、２０(Ｓ)-７-(４-フルオロフェネチル)-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシンの黄色の固体化合物５を調製することができた。ｍｐ＞２５０℃、  ＭＳ(ＥＳＩ)：ｍ／ｚ,５１３．５  [Ｍ+Ｈ]＋．
【００８０】
１Ｈ  ＮＭＲ(５００ＭＨｚ,ＣＦ３ＣＯＯＤ)δ  ８．２３(ｓ,１Ｈ),８．００(ｓ,１Ｈ),７．９５(ｄｄ,Ｊ＝７．８,５．４Ｈｚ,１Ｈ),７．８７(ｄ,Ｊ＝１６．５Ｈｚ,１Ｈ),７．８１−７．７８(ｍ,１Ｈ),７．５３(ｓ,１Ｈ),７．３０(ｄｄ,Ｊ＝２２．８,１４．３Ｈｚ,２Ｈ),７．２８(ｄｄ,Ｊ＝３６．５,２５．０Ｈｚ,１Ｈ),６．５６(ｓ,２Ｈ),６．０３(ｔ,Ｊ＝１１．９Ｈｚ,１Ｈ),６．２１−５．８４(ｍ,２Ｈ),５．６９(ｄ,Ｊ＝１７．０Ｈｚ,１Ｈ),２．２４(ｄｄ,Ｊ＝１７．８,１１．０Ｈｚ,２Ｈ),１．３３−１．１６(ｍ,３Ｈ)．
【００８１】
１３Ｃ  ＮＭＲ(１２６ＭＨｚ,ＣＦ３ＣＯＯＤ)δ  １７６．２,１５７．４,１５２．１,１５１．８,１４８．９,１４５．０,１４０．１,１３９．７,１３８．８,１３０．９,１３０．４,１３０．０,１２６．８,１２６．０,１２１．０,１１７．５,１１６．１,１１６．０,１０５．０,１０３．４,１０１．１,９７．３,７３．９,６６．２,５２．５,３１．０,１１．７,５．８．
【００８２】
化合物８-２０の概略合成経路は次の通りである：
【化２８】
2021526560.tif 000030
【００８３】
実施例  ５    ２０(Ｓ)-７-(４-(４-モルホリン)フェネチル)-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシン(化合物８)の調製
実施例１のステップ(１)中のシンナムアルデヒドを４-モルホリンベンズアルデヒドに置き換え、他の原料、試薬、調製方法は実施例１のステップ(１)および(２)と同じであり、２０(Ｓ)-７-(４-(４-モルホリン)フェネチル)-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシンを調製することができ、次に酢酸エチルで触媒量のパラジウム炭素を加え、水素バルーンで水素ガスを供給し、室温で１０時間攪拌反応し、触媒を濾過により除去し、ろ液を回転蒸発により濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー(ジクロロメタン：アセトン＝１０：１)で精製し、白色の固体２０(Ｓ)-７-(４-(４-モルホリン)フェネチル)-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシン(化合物８)を得た。ｍｐ＞２５０℃。
【００８４】
１Ｈ  ＮＭＲ(５００ＭＨｚ,ＤＭＳＯ)δ  ７．５８(ｓ,１Ｈ),７．４６(ｓ,１Ｈ),７．１９(ｓ,１Ｈ),６．９５(ｄ,Ｊ＝８．３Ｈｚ,２Ｈ),６．７４(ｄ,Ｊ＝８．１Ｈｚ,２Ｈ),６．２５(ｓ,２Ｈ),５．３３(ｔ,Ｊ＝１１．８Ｈｚ,２Ｈ),４．７５(ｑ,Ｊ＝１８．８Ｈｚ,２Ｈ),３．６５(ｓ,４Ｈ),３．２６(ｓ,２Ｈ),２．９３(ｓ,４Ｈ),２．８３(ｓ,２Ｈ),１．８７−１．７６(ｍ,２Ｈ),０．８３(ｔ,Ｊ＝７．２Ｈｚ,３Ｈ)．
【００８５】
１３Ｃ  ＮＭＲ(１２５ＭＨｚ,ＤＭＳＯ)δ  １７２．９４,１５７．１４,１５１．２９,１５０．４９,１５０．１０,１４９．４４,１４９．３８,１４７．５４,１４６．６７,１４２．３８,１３１．８３,１２９．６０,１２８．３２,１２４．６８,１１８．３１,１１５．５７,１０５．８８,１０３．０１,９９．９４,９６．４５,７２．７４,６６．４０,６５．６３,４９．８５,４９．２２,３４．３９,３２．３４,３０．６２,８．１７．
【００８６】
実施例６    ２０(Ｓ)-７-(４-(１-ピロリジニル)フェネチル)-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシン(化合物９)の調製
実施例１のステップ(１)中のシンナムアルデヒドを４-(１-ピロリジニル)-ベンズアルデヒドに置き換え、他の原料、試薬、調製方法は実施例１のステップ(１)および(２)と同じであり、２０(Ｓ)-７-(４-(１-ピロリジニル)フェネチル)-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシンを調製することができ、次に酢酸エチルで触媒量のパラジウム炭素を加え、水素バルーンで水素ガスを供給し、室温で１０時間攪拌反応し、触媒を濾過により除去し、ろ液を回転蒸発により濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー(ジクロロメタン：アセトン＝１０：１)で精製し、黄色の粉末２０(Ｓ)-７-(４-(４-(１-ピロリジニル)フェネチル)-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシン(化合物９)を得た。ｍｐ  ２０５〜２０７℃。
【００８７】
１Ｈ  ＮＭＲ(５００ＭＨｚ,ＤＭＳＯ)δ  ７．６１(ｓ,１Ｈ),７．４７(ｓ,１Ｈ),７．１９(ｓ,１Ｈ),６．８９(ｄ,Ｊ＝８．２Ｈｚ,２Ｈ),６．３５(ｄ,Ｊ＝８．１Ｈｚ,２Ｈ),６．２６(ｓ,２Ｈ),５．３５(ｓ,２Ｈ),４．７７(ｑ,Ｊ＝１８．７Ｈｚ,２Ｈ),３．２５(ｄ,Ｊ＝７．４Ｈｚ,２Ｈ),３．０６(ｓ,４Ｈ),２．８０(ｓ,２Ｈ),１．９１−１．７６(ｍ,６Ｈ),０．８３(ｔ,Ｊ＝７．３Ｈｚ,３Ｈ)．
【００８８】
１３Ｃ  ＮＭＲ(１２５ＭＨｚ,ＤＭＳＯ)δ  １７２．９４,１５７．１２,１５１．２８,１５０．５０,１４９．４７,１４９．３８,１４７．５６,１４７．０７,１４６．７２,１４２．５２,１２９．５４,１２８．３５,１２７．６１,１２４．６８,１１８．２９,１１２．０７,１０５．９３,１０３．０１,９９．９９,９６．３７,７２．７５,６５．６２,４９．８８,４７．９３,３４．５３,３２．７１,３０．５６,２５．２４,８．１８．
【００８９】
実施例７    ２０(Ｓ)-７-(３-フルオロ-４-(４-モルホリン)フェネチル)-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシン(化合物１０)の調製
実施例１のステップ(１)中のシンナムアルデヒドを３-フルオロ-４-(４-モルホリン)-ベンズアルデヒドに置き換え、他の原料、試薬、調製方法は実施例１のステップ(１)および(２)と同じであり、２０(Ｓ)-７-(４-(４-モルホリン)フェネチル)-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシンを調製することができ、次に酢酸エチルで触媒量のパラジウム炭素を加え、水素バルーンで水素ガスを供給し、室温で１０時間攪拌反応し、触媒を濾過により除去し、ろ液を回転蒸発により濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー(ジクロロメタン：アセトン＝１０：１)で精製し、黄色の粉末２０(Ｓ)-７-(３-フルオロ-４-(４-モルホリン)フェネチル)-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシン(化合物１０)を得た。ｍｐ＞２５０℃．
【００９０】
１Ｈ  ＮＭＲ(５００ＭＨｚ,ＤＭＳＯ)δ  ７．５６(ｓ,１Ｈ),７．４４(ｓ,１Ｈ),７．２０(ｓ,１Ｈ),６．９９(ｄ,Ｊ＝１３．３Ｈｚ,１Ｈ),６．９１−６．８２(ｍ,２Ｈ),６．２３(ｓ,２Ｈ),５．３５(ｑ,Ｊ＝１６．３Ｈｚ,２Ｈ),４．９０(ｑ,Ｊ＝１８．７Ｈｚ,２Ｈ),３．６６(ｓ,４Ｈ),３．２７(ｓ,２Ｈ),２．８４(ｓ,６Ｈ),１．８１(ｄｔ,Ｊ＝２４．６,７．０Ｈｚ,２Ｈ),０．８３(ｔ,Ｊ＝７．２Ｈｚ,３Ｈ)．
【００９１】
１３Ｃ  ＮＭＲ(１２５ＭＨｚ,ＤＭＳＯ)δ  １７２．９８,１５７．２４,１５１．３１,１５０．５６,１４９．５３,１４９．４０,１４７．５４,１４６．６７,１４２．１６,１３６．１８,１２８．１５,１２５．３６,１２４．７２,１１９．２４,１１８．３５,１１６．７５,１１６．５９,１０５．８１,１０３．０２,９９．９９,９６．５６,７２．７７,６６．５４,６５．６５,５１．０７,４９．９１,３４．１２,３１．７７,３０．６４,８．１６．
【００９２】
実施例８    ２０(Ｓ)-７-(３-フルオロ-４-(１-ピロリジニル)フェネチル)-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシン(化合物１１)の調製
実施例１のステップ(１)中のシンナムアルデヒドを３-フルオロ-４-(１-ピロリジニル)-ベンズアルデヒドに置き換え、他の原料、試薬、調製方法は実施例１のステップ(１)および(２)と同じであり、２０(Ｓ)-７-(４-(１-ピロリジニル)フェネチル)-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシンを調製することができ、次に酢酸エチルで触媒量のパラジウム炭素を加え、水素バルーンで水素ガスを供給し、室温で１０時間攪拌反応し、触媒を濾過により除去し、ろ液を回転蒸発により濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー(ジクロロメタン：アセトン＝１０：１)で精製し、黄色の粉末２０(Ｓ)-７-(３-フルオロ-４-(１-ピロリジニル)フェネチル)-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシン(化合物１１)を得た。ｍｐ＞２５０℃。
【００９３】
１Ｈ  ＮＭＲ(６００ＭＨｚ,ＤＭＳＯ-ｄ６)δ  ７．６０(ｓ,１Ｈ),７．４７(ｓ,１Ｈ),７．２３(ｓ,１Ｈ),６．８９(ｄｄ,Ｊ＝１４．９,１．９Ｈｚ,１Ｈ),６．７５(ｄ,Ｊ＝８．２Ｈｚ,１Ｈ),６．５９−６．５３(ｍ,１Ｈ),６．２６(ｄ,Ｊ＝２．２Ｈｚ,２Ｈ),５．３７(ｑ,Ｊ＝１６．０Ｈｚ,２Ｈ),４．８６(ｑ,Ｊ＝１８．６Ｈｚ,２Ｈ),３．２７(ｄ,Ｊ＝６．１Ｈｚ,２Ｈ),３．１５(ｄ,Ｊ＝２．１Ｈｚ,４Ｈ),２．８２(ｄ,Ｊ＝５．０Ｈｚ,２Ｈ),１．８７−１．７８(ｍ,６Ｈ),０．８５(ｔ,Ｊ＝７．３Ｈｚ,３Ｈ)．
【００９４】
１３Ｃ  ＮＭＲ(１５１ＭＨｚ,ＤＭＳＯ-ｄ６)δ  １７３．１４,１５７．３４,１５１．４４,１５０．７１,１４９．５３,１４９．５１,１４７．６２,１４６．７８,１４２．４０,１３６．２２,１３０．８６,１２８．２８,１２５．２７,１２４．７９,１１８．４３,１１６．５０,１１５．９７,１０５．９１,１０３．１６,１００．０４,９６．７０,７２．９０,６５．７４,５０．１２,４９．９７,３４．１１,３２．２５,３０．７３,２５．０７,８．２６．
【００９５】
実施例９    ２０(Ｓ)-７-(３-フルオロ-４-(ピペリジン-１-イル)フェネチル)-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシン(化合物１２)の調製
実施例１のステップ(１)中のシンナムアルデヒドを３-フルオロ-４-(ピペリジン-１-イル)-ベンズアルデヒドに置き換え、他の原料、試薬、調製方法は実施例１のステップ(１)および(２)と同じであり、２０(Ｓ)-７-(４-(ピペリジン-１-イル)フェネチル)-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシンを調製することができ、次に酢酸エチルで触媒量のパラジウム炭素を加え、水素バルーンで水素ガスを供給し、室温で１０時間攪拌反応し、触媒を濾過により除去し、ろ液を回転蒸発により濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー(ジクロロメタン：アセトン＝１０：１)で精製し、黄色の粉末２０(Ｓ)-７-(３-フルオロ-４-(３-フルオロ-４-(ピペリジン-１-イル)フェネチル)-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシン(化合物１２)を得た。ｍｐ＞２５０℃。
【００９６】
１Ｈ  ＮＭＲ(５００ＭＨｚ,ＤＭＳＯ)δ  ７．６１(ｓ,１Ｈ),７．４７(ｓ,１Ｈ),７．２０(ｓ,１Ｈ),６．９５(ｄ,Ｊ＝１３．４Ｈｚ,１Ｈ),６．８６−６．８０(ｍ,２Ｈ),６．２５(ｓ,２Ｈ),５．３４(ｔ,Ｊ＝９．８Ｈｚ,２Ｈ),４．９０(ｔ,Ｊ＝１３．９Ｈｚ,２Ｈ),３．３０(ｓ,２Ｈ),２．８２(ｄ,Ｊ＝２５．５Ｈｚ,６Ｈ),１．８２(ｔｄ,Ｊ＝１４．２,６．７Ｈｚ,２Ｈ),１．５６(ｓ,４Ｈ),１．４５(ｓ,２Ｈ),０．８３(ｔ,Ｊ＝７．３Ｈｚ,３Ｈ)．
【００９７】
１３Ｃ  ＮＭＲ(１２５ＭＨｚ,ＤＭＳＯ)δ  １７２．９５,１５７．１９,１５１．３０,１５０．４８,１４９．５６,１４９．４０,１４７．５８,１４６．６９,１４２．１７,１２８．２６,１２５．２２,１２４．７２,１１９．６０,１１８．３５,１１６．４３,１０５．８８,１０２．９９,１００．０４,９６．４３,７２．７５,６５．６５,５２．０８,４９．９２,３４．１６,３１．７９,３０．６１,２６．０３,２４．１６,８．１５．
【００９８】
実施例１０    ２０(Ｓ)-７-(３-(４-モルホリン)フェネチル)-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシン(化合物１４)の調製
実施例１のステップ(１)中のシンナムアルデヒドを３-(４-モルホリン)-ベンズアルデヒドに置き換え、他の原料、試薬、調製方法は実施例１のステップ(１)および(２)と同じであり、２０(Ｓ)-７-(３-(４-モルホリン)フェネチル)-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシンを調製することができ、次に酢酸エチルで触媒量のパラジウム炭素を加え、水素バルーンで水素ガスを供給し、室温で１０時間攪拌反応し、触媒を濾過により除去し、ろ液を回転蒸発により濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー(ジクロロメタン：アセトン＝１０：１)で精製し、白色の粉末２０(Ｓ)-７-(３-(４-モルホリン)フェネチル)-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシン(化合物１４)を得た。ｍｐ  １６３-１６５℃。
【００９９】
１Ｈ  ＮＭＲ(５００ＭＨｚ,ＤＭＳＯ)δ  ７．６１(ｓ,１Ｈ),７．４７(ｓ,１Ｈ),７．２０(ｓ,１Ｈ),７．０７(ｔ,Ｊ＝７．８Ｈｚ,１Ｈ),６．７０(ｄ,Ｊ＝７．６Ｈｚ,１Ｈ),６．６４(ｄ,Ｊ＝７．５Ｈｚ,１Ｈ),６．５７(ｓ,１Ｈ),６．２５(ｓ,２Ｈ),５．３６(ｓ,２Ｈ),４．８４(ｄ,Ｊ＝１８．７Ｈｚ,１Ｈ),４．７３(ｄ,Ｊ＝１８．７Ｈｚ,１Ｈ),３．６２(ｓ,４Ｈ),３．３７−３．２６(ｍ,２Ｈ),２．８７(ｓ,６Ｈ),１．８６−１．７６(ｍ,２Ｈ),０．８３(ｔ,Ｊ＝７．２Ｈｚ,３Ｈ)．
【０１００】
１３Ｃ  ＮＭＲ(１２５ＭＨｚ,ＤＭＳＯ)δ  １７２．９５,１５７．１８,１５１．４３,１５１．３２,１５０．５６,１４９．４９,１４９．３９,１４７．６０,１４６．６９,１４２．４１,１４１．９１,１２９．３８,１２８．３６,１２４．７５,１２０．２１,１１８．３５,１１６．１１,１１３．８１,１０５．８９,１０３．０２,１００．０４,９６．４４,７２．７７,６６．４４,６５．６２,４９．０７,３５．５６,３１．９６,３０．６１,８．１９．
【０１０１】
実施例１１    ２０(Ｓ)-７-(２-(４-モルホリン)フェネチル)-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシン(化合物１５)の調製
実施例１のステップ(１)中のシンナムアルデヒドを２-(４-モルホリン)-ベンズアルデヒドに置き換え、他の原料、試薬、調製方法は実施例１のステップ(１)および(２)と同じであり、２０(Ｓ)-７-(２-(４モルホリン)フェネチル)-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシンを調製することができ、次に酢酸エチルで触媒量のパラジウム炭素を加え、水素バルーンで水素ガスを供給し、室温で１０時間攪拌反応し、触媒を濾過により除去し、ろ液を回転蒸発により濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー(ジクロロメタン：アセトン＝１０：１)で精製し、白色の粉末２０(Ｓ)-７-(２-(４-モルホリン)フェネチル)-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシン(化合物１５)を得た。ｍｐ＞２５０℃。
【０１０２】
１Ｈ  ＮＭＲ(５００ＭＨｚ,ＤＭＳＯ)δ  ７．７１(ｓ,１Ｈ),７．４７(ｓ,１Ｈ),７．４０(ｄ,Ｊ＝７．１Ｈｚ,１Ｈ),７．１９−７．１４(ｍ,２Ｈ),７．０７(ｄｄ,Ｊ＝１５．５,７．５Ｈｚ,２Ｈ),６．２７(ｓ,２Ｈ),５．３６(ｓ,２Ｈ),４．８８(ｄ,Ｊ＝１８．７Ｈｚ,１Ｈ),４．７６(ｄ,Ｊ＝１８．６Ｈｚ,１Ｈ),３．４５(ｄ,Ｊ＝９．８Ｈｚ,４Ｈ),３．３１−３．２０(ｍ,２Ｈ),３．００(ｔ,Ｊ＝７．４Ｈｚ,２Ｈ),２．５５(ｄｄ,Ｊ＝３４．３,１３．２Ｈｚ,４Ｈ),１．８１(ｔｄ,Ｊ＝１４．５,７．２Ｈｚ,２Ｈ),０．８３(ｔ,Ｊ＝７．３Ｈｚ,３Ｈ)．
【０１０３】
１３Ｃ  ＮＭＲ(１２５ＭＨｚ,ＤＭＳＯ)δ  １７２．８９,１５７．１４,１５１．９３,１５１．２６,１５０．５４,１４９．５１,１４９．３５,１４７．５０,１４６．６２,１４２．４１,１３７．０９,１３１．０７,１２８．００,１２７．８９,１２５．１０,１２４．９７,１２１．０１,１１８．４０,１０５．９６,１０３．０７,９９．９８,９６．３９,７２．７５,６６．７７,６５．６１,５３．５２,４９．８０,３２．３９,３０．５５,３０．４４,８．２０．
【０１０４】
実施例１２    ２０(Ｓ)-７-(２-(１-ピロリジニル)フェネチル)-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシン(化合物１６)の調製
実施例１のステップ(１)中のシンナムアルデヒドを２-(１-ピロリジニル)-ベンズアルデヒドに置き換え、他の原料、試薬、調製方法は実施例１のステップ(１)および(２)と同じであり、２０(Ｓ)-７-(２-(１-ピロリジニル)フェネチル)-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシンを調製することができ、次に酢酸エチルで触媒量のパラジウム炭素を加え、水素バルーンで水素ガスを供給し、室温で１０時間攪拌反応し、触媒を濾過により除去し、ろ液を回転蒸発により濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー(ジクロロメタン：アセトン＝１０：１)で精製し、白色の粉末２０(Ｓ)-７-(２-(１-ピロリジニル)フェネチル)-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシン(化合物１６)を得た。ｍｐ  １３９〜１４０℃。
【０１０５】
１Ｈ  ＮＭＲ(５００ＭＨｚ,ＤＭＳＯ)δ  ７．６６(ｓ,１Ｈ),７．４７(ｓ,１Ｈ),７．１８(ｄ,Ｊ＝７．５Ｈｚ,２Ｈ),７．０８(ｄ,Ｊ＝７．４Ｈｚ,１Ｈ),６．９９(ｄ,Ｊ＝８．０Ｈｚ,１Ｈ),６．８６(ｔ,Ｊ＝７．２Ｈｚ,１Ｈ),６．２６(ｓ,２Ｈ),５．３７(ｓ,２Ｈ),４．９５(ｄ,Ｊ＝１８．７Ｈｚ,１Ｈ),４．８７(ｄ,Ｊ＝１８．７Ｈｚ,１Ｈ),３．２６(ｄ,Ｊ＝１０．４Ｈｚ,２Ｈ),３．００(ｔ,Ｊ＝７．４Ｈｚ,２Ｈ),２．９６−２．８７(ｍ,４Ｈ),１．８６−１．７５(ｍ,６Ｈ),０．８３(ｔ,Ｊ＝７．３Ｈｚ,３Ｈ)．
【０１０６】
１３Ｃ  ＮＭＲ(１２５ＭＨｚ,ＤＭＳＯ)δ  １７２．８８,１５７．１９,１５１．２０,１５０．４４,１４９．５８,１４９．２８,１４７．５６,１４７．４６,１４６．７２,１４２．５２,１３４．５９,１３１．１６,１２８．３５,１２７．６１,１２５．０３,１２２．６８,１１８．９７,１１２．０７,１０５．９０,１０３．０１,９９．９９,９６．３５,７２．７５,６５．５９,５２．４９,３４．５３,３２．７１,３０．５６,２５．２４,８．１８．
【０１０７】
実施例１３    ２０(Ｓ)-７-(４-(ピペリジン-１-イル)フェネチル)-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシン(化合物１７)の調製
実施例１のステップ(１)中のシンナムアルデヒドを４-(ピペリジン-１-イル)-ベンズアルデヒドに置き換え、他の原料、試薬、調製方法は実施例１のステップ(１)および(２)と同じであり、２０(Ｓ)-７-(４-(ピペリジン-１-イル)フェネチル)-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシンを調製することができ、次に酢酸エチルで触媒量のパラジウム炭素を加え、水素バルーンで水素ガスを供給し、室温で１０時間攪拌反応し、触媒を濾過により除去し、ろ液を回転蒸発により濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー(ジクロロメタン：アセトン＝１０：１)で精製し、白色の粉末２０(Ｓ)-７-(４-(ピペリジン-１-イル)フェネチル)-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシン(化合物１７)を得た。ｍｐ＞２５０℃。
【０１０８】
１Ｈ  ＮＭＲ(５００ＭＨｚ,ＤＭＳＯ)δ  ７．５７(ｓ,１Ｈ),７．４５(ｓ,１Ｈ),７．１７(ｓ,１Ｈ),６．８４(ｓ,２Ｈ),６．７０(ｓ,２Ｈ),６．２４(ｓ,２Ｈ),５．３２(ｔ,Ｊ＝１０．８Ｈｚ,２Ｈ),４．６４(ｑ,Ｊ＝１８．８Ｈｚ,２Ｈ),３．２４(ｄ,Ｊ＝７．２Ｈｚ,２Ｈ),２．９７(ｓ,４Ｈ),２．８１(ｄ,Ｊ＝４．８Ｈｚ,２Ｈ),１．８０(ｄｔ,Ｊ＝２３．４,７．０Ｈｚ,２Ｈ),１．４５(ｓ,６Ｈ),０．８３(ｔ,Ｊ＝７．３Ｈｚ,３Ｈ)．
【０１０９】
１３Ｃ  ＮＭＲ(１２５ＭＨｚ,ＤＭＳＯ)δ  １７２．９６,１５７．１１,１５１．２８,１５０．４６,１４９．３８,１４７．５３,１４６．６５,１４２．３３,１２９．６２,１２８．４４,１２４．６６,１１８．２８,１０５．９０,１０３．０２,９９．９２,９６．４０,７２．７６,６５．６４,５６．３９,４９．８３,３４．４２,３２．３９,３０．６０,２５．１２,１８．８６,８．１７．
【０１１０】
実施例１４    ２０(Ｓ)-７-(３,５-ジフルオロ-４-(４-モルホリン))フェネチル)-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシン(化合物１８)の調製
実施例１のステップ(１)中のシンナムアルデヒドを３,５-ジフルオロ-４-(４-モルホリン))-ベンズアルデヒドに置き換え、他の原料、試薬、調製方法は実施例１のステップ(１)および(２)と同じであり、２０(Ｓ)-７-(３,５-ジフルオロ-４-(４-モルホリン))フェネチル)-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシンを調製することができ、次に酢酸エチルで触媒量のパラジウム炭素を加え、水素バルーンで水素ガスを供給し、室温で１０時間攪拌反応し、触媒を濾過により除去し、ろ液を回転蒸発により濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー(ジクロロメタン：アセトン＝１０：１)で精製し、白色の粉末２０(Ｓ)-７-(３,５-ジフルオロ-４-(４-モルホリン))フェネチル)-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシン(化合物１８)を得た。ｍｐ  ２４６〜３４７℃。
【０１１１】
１Ｈ  ＮＭＲ(５００ＭＨｚ,ＤＭＳＯ)δ  ７．６２(ｓ,１Ｈ),７．４７(ｓ,１Ｈ),７．２１(ｓ,１Ｈ),７．０３−６．９４(ｍ,２Ｈ),６．２４(ｓ,２Ｈ),５．３６(ｄ,Ｊ＝１６．８Ｈｚ,２Ｈ),５．１０(ｔ,Ｊ＝１１．５Ｈｚ,２Ｈ),３．６３(ｓ,４Ｈ),３．３１(ｓ,２Ｈ),２．９８(ｓ,４Ｈ),２．８５(ｓ,２Ｈ),１．８２(ｄ,Ｊ＝１０．８Ｈｚ,２Ｈ),０．８３(ｔ,Ｊ＝７．１Ｈｚ,３Ｈ)．
【０１１２】
１３Ｃ  ＮＭＲ(１２５ＭＨｚ,ＤＭＳＯ)δ  １７２．９８,１５７．２４,１５４．１２,１５１．３１,１５０．５６,１４９．５３,１４９．４０,１４７．５４,１４６．６７,１４２．１６,１３８．４４,１３６．１８,１２８．１５,１２５．３６,１２４．７２,１１９．２４,１１８．３５,１１６．７５,１１６．５９,１０５．８１,１０３．０２,９９．９９,９６．５６,７２．７７,６６．５４,６５．６５,５１．０７,４９．９１,３４．１２,３１．７７,３０．６４,８．１６．
【０１１３】
実施例１５    ２０(Ｓ)-７-(３,５-ジフルオロ-４-(１-ピロリジニル))フェネチル)-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシン(化合物１９)の調製
実施例１のステップ(１)中のシンナムアルデヒドを３,５-ジフルオロ-４-(１-ピロリジニル))-ベンズアルデヒドに置き換え、他の原料、試薬、調製方法は実施例１のステップ(１)および(２)と同じであり、２０(Ｓ)-７-(３,５-ジフルオロ-４-(１-ピロリジニル))フェネチル)-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシンを調製することができ、次に酢酸エチルで触媒量のパラジウム炭素を加え、水素バルーンで水素ガスを供給し、室温で１０時間攪拌反応し、触媒を濾過により除去し、ろ液を回転蒸発により濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー(ジクロロメタン：アセトン＝１０：１)で精製し、白色の粉末２０(Ｓ)-７-(３,５-ジフルオロ-４-(１-ピロリジニル))フェネチル)-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシン(化合物１９)を得た。ｍｐ＞２５０℃。
【０１１４】
１Ｈ  ＮＭＲ(５００ＭＨｚ,ＤＭＳＯ)δ  ７．５７(ｓ,１Ｈ),７．４４(ｓ,１Ｈ),７．２１(ｓ,１Ｈ),６．９０−６．８４(ｍ,２Ｈ),６．２４(ｄ,Ｊ＝１．６Ｈｚ,２Ｈ),５．３７(ｔ,Ｊ＝１１．８Ｈｚ,２Ｈ),５．０１(ｄ,Ｊ＝１．９Ｈｚ,２Ｈ),３．２７(ｄ,Ｊ＝１７．６Ｈｚ,６Ｈ),２．８２−２．７６(ｍ,２Ｈ),１．８９−１．７７(ｍ,６Ｈ),０．８６(ｔ,Ｊ＝７．３Ｈｚ,３Ｈ)．
【０１１５】
１３Ｃ  ＮＭＲ(１２５ＭＨｚ,ＤＭＳＯ)δ  １７２．９６,１５７．２４,１５６．２１,１５４．３５,１５１．２８,１５０．５４,１４９．６０,１４９．３８,１４７．５３,１４６．６８,１４１．９６,１３３．３０,１２８．０１,１２４．６７,１２４．４７,１１８．３８,１１３．０３,１１２．８４,１０５．７９,１０３．０２,９９．９９,９６．４９,７２．７６,６５．６７,５１．２９,４９．９２,３３．８３,３１．４５,３０．６６,２５．４５,８．１７．
【０１１６】
実施例１６    ２０(Ｓ)-７-(４-(４-チオモルホリン))フェネチル)-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシン(化合物２０)の調製
実施例１のステップ(１)中のシンナムアルデヒドを４-(４-チオモルホリン)-ベンズアルデヒドに置き換え、他の原料、試薬、調製方法は実施例１のステップ(１)および(２)と同じであり、２０(Ｓ)-７-(４-(４-チオモルホリン))フェネチル)-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシンを調製することができ、次に酢酸エチルで触媒量のパラジウム炭素を加え、水素バルーンで水素ガスを供給し、室温で１０時間攪拌反応し、触媒を濾過により除去し、ろ液を回転蒸発により濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー(ジクロロメタン：アセトン＝１０：１)で精製し、白色の粉末２０(Ｓ)-７-(４-(４-チオモルホリン))フェネチル)-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシン(化合物２０)を得た。ｍｐ  １５４〜１５６℃。
【０１１７】
１Ｈ  ＮＭＲ(６００ＭＨｚ,ＤＭＳＯ-ｄ６)δ  ７．６３(ｓ,１Ｈ),７．４９(ｓ,１Ｈ),７．２０(ｓ,１Ｈ),６．８１(ｄ,Ｊ＝８．６Ｈｚ,２Ｈ),６．６７(ｄ,Ｊ＝８．６Ｈｚ,２Ｈ),６．２８(ｄ,Ｊ＝２．９Ｈｚ,２Ｈ),５．４２−５．３２(ｍ,２Ｈ),４．５８(ｑ,Ｊ＝１８．２Ｈｚ,２Ｈ),３．４４(ｄ,Ｊ＝４．９Ｈｚ,４Ｈ),３．３０(ｄ,Ｊ＝８．０Ｈｚ,２Ｈ),２．９０−２．８４(ｍ,２Ｈ),２．４６(ｄ,Ｊ＝２．８Ｈｚ,４Ｈ),１．８７−１．７６(ｍ,２Ｈ),０．８５(ｔ,Ｊ＝７．４Ｈｚ,３Ｈ)．
【０１１８】
１３Ｃ  ＮＭＲ(１２５ＭＨｚ,ＤＭＳＯ)δ  １７２．９５,１５７．０７,１５１．２８,１５０．３２,１４９．３８,１４９．２７,１４８．５２,１４７．５３,１４６．５６,１４２．２６,１３０．６５,１３０．０２,１２８．７２,１２４．７１,１１８．４１,１１５．９７,１０５．９２,１０３．０３,９９．９７,９９．１７,９６．３９,７２．７２,６５．７５,５１．２４,４９．８０,３４．４０,３２．４３,３０．６５,２４．７２,８．１９．
【０１１９】
化合物２１-４２の概略合成経路は次の通りである：
【化２９】
2021526560.tif 000031
【０１２０】
実施例１７    ２０(Ｓ)-７-(ピリジン-４-イル)-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシン(化合物２１)の調製
ステップ(１)実施例１のステップ(１)で得られた中間体Ｃを、実施例１のステップ(２)の方法に従って直接縮合環化反応に供し、次にピリジンおよびＤＭＡＰの存在下で無水酢酸とともにヒドロキシル基を保護し、中間体Ｅを得た。他の原料、試薬、調製方法は実施例１のステップ(１)および(２)と同じである。
【０１２１】
ステップ(２)２０(Ｓ)-Ｏ-アセチル-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシン(０．２４ｇ,０．５５ｍｍｏｌ)、および氷酢酸(２０ｍｌ)を５０ｍｌナス型フラスコに加え、攪拌しながら３０％過酸化水素溶液(３．２ｍｌ,２８ｍｍｏｌ)を加え、７５℃で３時間反応した後、反応溶液を濃縮し蒸発乾固させて、黄色の粉末中間体Ｆを得た。２１０ｍｇ、収率８５％、
【０１２２】
ステップ(３)前のステップで得られた固体中間体Ｆ(０．２１ｇ,０．４７ｍｍｏｌ)とＤＭＦ(２０ｍｌ)を５０ｍｌナス型フラスコに加え、溶液を０℃まで冷却し、臭化オキサリル(０．１ｍｌ,１．１ｍｍｏｌ)を加え、１５℃で３時間反応した後、反応溶液を氷水(５０ｍｌ)に注ぎ、ジクロロメタンで３回抽出し、有機相を合わせ、無水硫酸マグネシウムで有機相を乾燥させた。ろ液を濃縮し、ナトリウムメトキシドのメタノール溶液(１．０ｇ／１００．０ｍＬ、２ｍｌ)を加え、室温で２時間反応させたところ、ＴＬＣにより反応が完了したことが検出された。１Ｍの塩酸を加え、ｐＨを２に調整し、３０分攪拌し、減圧下で有機溶媒を蒸発乾固させ、カラムクロマトグラフィー(ジクロロメタン：メタノール＝１０：１)を行って、０．１６ｇの黄色の固体中間体Ｇを得た。０．１６ｇ、収率７５％。ｍｐ＞２５０℃。
【０１２３】
１Ｈ  ＮＭＲ(５００ＭＨｚ,ＣＦ３ＣＯＯＤ)δ  ８．１４(ｓ,１Ｈ),７．８９(ｓ,１Ｈ),７．７１(ｓ,１Ｈ),６．４７(ｓ,２Ｈ),５．９３(ｄ,Ｊ＝１７．２Ｈｚ,１Ｈ),５．７２(ｓ,２Ｈ),５．５９(ｄ,Ｊ＝１７．１Ｈｚ,１Ｈ),２．１６(ｑ,Ｊ＝７．４Ｈｚ,２Ｈ),１．１５(ｔ,Ｊ＝７．４Ｈｚ,３Ｈ)．
【０１２４】
１３Ｃ  ＮＭＲ(１２５ＭＨｚ,ＣＦ３ＣＯＯＤ)δ  １７６．０１,１５８．４１,１５３．９６,１５１．２３,１３９．５４,１３９．３７,１３８．５１,１３８．２１,１３１．５６,１２８．７０,１２５．５２,１２２．４５,１０９．９８,１０５．３８,１０２．８３,９７．４４,７３．６８,６６．１７,５３．２６,３１．０９,５．７６．
【０１２５】
ステップ(４)２０(Ｓ)-７-ブロモ-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシン(Ｇ)(３７．６ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ)、４-ピリジンホウ酸(２０ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ)およびフッ化セシウム(２５ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ)を２５ｍＬの二首フラスコに加え、窒素の供給・放出を３回行った後テトラトリフェニルホスフィンパラジウム(９．２ｍｇ、８×１０-３ｍｍｏｌ)を加えて、次にジオキサン、エタノールおよび水(９．２ｍＬ、１．９ｍＬ、３．２ｍＬ)を順次加え、窒素の供給・放出を６回行った後、１０５℃まで加熱し、６時間マイクロ波反応した。ＴＬＣにより反応が完了したことが検出された後、回転蒸発により溶媒を濃縮し除去して、カラムクロマトグラフィー(ジクロロメタン：メタノール＝１０：１)を行って、１９ｍｇ褐色の固体２０(Ｓ)-７-(ピリジン-４-イル)-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシン(化合物２１)を得た。収率５０．３％。ｍｐ＞２５０℃。
【０１２６】
１Ｈ  ＮＭＲ(５００ＭＨｚ,ＣＦ３ＣＯＯＤ)δ  ９．３２(ｓ,２Ｈ),８．４８(ｄｄ,Ｊ＝１３．７,５．３Ｈｚ,２Ｈ),８．２２(ｓ,１Ｈ),７．８４(ｄ,Ｊ＝１１．１Ｈｚ,１Ｈ),７．１３(ｄ,Ｊ＝６．５Ｈｚ,１Ｈ),６．４５(ｓ,２Ｈ),５．８７(ｄ,Ｊ＝１７．５Ｈｚ,１Ｈ),５．５６(ｔ,Ｊ＝１４．９Ｈｚ,３Ｈ),２．１９−２．１０(ｍ,２Ｈ),１．１３(ｄｄ,Ｊ＝１６．１,８．７Ｈｚ,３Ｈ)．
【０１２７】
１３Ｃ  ＮＭＲ(１２５ＭＨｚ,ＣＦ３ＣＯＯＤ)δ  １７５．９３,１６２．７６,１６０．８９,１５８．４１,１５４．０８,１５１．７６,１５１．２５,１４４．１４,１４３．３４,１４１．２５,１３９．９２,１３８．８４,１２８．０６,１２６．４３,１２４．８２,１１４．１９,１０５．６８,１０４．７０,１００．４１,９７．９５,７３．６２,６６．０４,５１．１１,３１．０６,５．６７．
【０１２８】
実施例１８    ２０(Ｓ)-７-(３-ピリジン)-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシン(化合物２２)の調製
調製および精製方法は化合物２１と同じであり、実施例１７のステップ(４)の４-ピリジンホウ酸を３-ピリジンホウ酸に置き換え、黄色の粉末状固体２３ｍｇを得た。収率６２％。ｍｐ  ２４５〜２４６℃。
【０１２９】
１Ｈ  ＮＭＲ(５００ＭＨｚ,ＣＦ３ＣＯＯＤ)δ  ９．３９(ｄ,Ｊ＝２３．３Ｈｚ,１Ｈ),９．２６(ｄ,Ｊ＝５．８Ｈｚ,１Ｈ),８．９８(ｄｄ,Ｊ＝１４．９,８．０Ｈｚ,１Ｈ),８．５１(ｔ,Ｊ＝７．１Ｈｚ,１Ｈ),８．１８(ｓ,１Ｈ),７．８０(ｄ,Ｊ＝４．７Ｈｚ,１Ｈ),７．１３(ｄ,Ｊ＝２．４Ｈｚ,１Ｈ),６．４２(ｄ,Ｊ＝５．７Ｈｚ,２Ｈ),５．８５(ｄ,Ｊ＝１７．３Ｈｚ,１Ｈ),５．５８−５．４９(ｍ,３Ｈ),２．１２(ｄ,Ｊ＝７．６Ｈｚ,２Ｈ),１．１２(ｔ,Ｊ＝７．３Ｈｚ,３Ｈ)．
【０１３０】
１３Ｃ  ＮＭＲ(１２５ＭＨｚ,ＣＦ３ＣＯＯＤ)δ  １７５．９６,１５８．３５,１５７．７０,１５４．０５,１５１．２２,１４７．６３,１４３．３９,１４２．６０,１４１．８８,１４１．１２,１３９．８７,１３８．９５,１３３．０６,１２８．９８,１２７．５８,１２２．５２,１０９．９９,１０５．６５,１０４．６８,１００．５５,９７．８６,７３．６６,６６．０９,３１．０７,１８．４４,５．６７．
【０１３１】
実施例１９    ２０(Ｓ)-７-(３-フラン)-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシン(化合物２３)の調製
調製および精製方法は化合物２１と同じであり、実施例１７のステップ(４)の４-ピリジンホウ酸を３-フランホウ酸に置き換え、黄色の粉末状固体化合物２３  ２２ｍｇを得た。収率６２％。ｍｐ  ２４６〜２４７℃。
【０１３２】
１Ｈ  ＮＭＲ(５００ＭＨｚ,ＣＦ３ＣＯＯＤ)δ  ８．１４(ｓ,１Ｈ),８．０７(ｓ,１Ｈ),７．８５(ｓ,１Ｈ),７．７７(ｓ,１Ｈ),７．６９(ｄ,Ｊ＝１２．２Ｈｚ,１Ｈ),６．８８(ｓ,１Ｈ),６．４２(ｄ,Ｊ＝２４．８Ｈｚ,２Ｈ),５．８９(ｄ,Ｊ＝１６．６Ｈｚ,１Ｈ),５．６１(ｄｄ,Ｊ＝５０．１,２５．２Ｈｚ,３Ｈ),２．１３(ｓ,２Ｈ),１．１３(ｓ,３Ｈ)．
【０１３３】
１３Ｃ  ＮＭＲ(１２５ＭＨｚ,ＣＦ３ＣＯＯＤ)δ  １７６．０７,１５７．９７,１５７．６１,１５２．８５,１５１．２６,１４５．８８,１４４．０５,１４０．６８,１４０．０７,１３９．７９,１３９．１３,１２８．０６,１２７．０８,１０９．４７,１０５．３６,１０４．９３,１０３．８５,１０２．２５,９７．４７,９７．２４,７３．７４,６６．１５,５２．０７,３１．０１,５．７１．
【０１３４】
実施例２０    ２０(Ｓ)-７-(３-チオフェン)-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシン(化合物２４)の調製
調製および精製方法は化合物２１と同じであり、実施例１７のステップ(４)の４-ピリジンホウ酸を３-チオフェンホウ酸に置き換え、他の原料、試薬は同じである。ｍｐ  ２３７〜２３８℃。
【０１３５】
１Ｈ  ＮＭＲ(５００ＭＨｚ,ＣＦ３ＣＯＯＤ)δ  ８．１５(ｓ,１Ｈ),７．９１(ｓ,１Ｈ),７．８４(ｓ,１Ｈ),７．６９(ｓ,１Ｈ),７．６３(ｓ,１Ｈ),７．４５(ｄ,Ｊ＝４．６Ｈｚ,１Ｈ),６．４０(ｓ,２Ｈ),５．９０(ｄ,Ｊ＝１７．１Ｈｚ,１Ｈ),５．５６(ｄ,Ｊ＝１５．６Ｈｚ,２Ｈ),２．１５(ｑ,Ｊ＝７．２Ｈｚ,２Ｈ),１．１４(ｔ,Ｊ＝７．３Ｈｚ,３Ｈ)．
【０１３６】
１３Ｃ  ＮＭＲ(１２５ＭＨｚ,ＣＦ３ＣＯＯＤ)δ  １７６．０８,１５７．５８,１５２．７７,１５１．２４,１４９．１５,１４０．０４,１３９．８３,１３９．３３,１３１．５１,１２８．９３,１２８．６４,１２８．３１,１２７．４１,１２６．４４,１２１．６４,１０９．９９,１０４．８８,１０３．７７,１０２．５５,９７．０８,７３．７４,６６．１４,５１．８９,３０．９８,５．６８．
【０１３７】
実施例２１    ２０(Ｓ)-７-(４-(１-メチルピラゾール))-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシン(化合物２５)の調製
調製および精製方法は化合物２１と同じであり、実施例１７のステップ(４)の４-ピリジンホウ酸を４-(１-メチルピラゾール)-ホウ酸に置き換え、他の原料、試薬は同じである。  ｍｐ  ２３７〜２３８℃。
【０１３８】
１Ｈ  ＮＭＲ(５００ＭＨｚ,ＣＦ３ＣＯＯＤ)δ  ８．７６(ｓ,１Ｈ),８．７０(ｓ,１Ｈ),８．１７(ｓ,１Ｈ),７．７５(ｓ,１Ｈ),７．５９(ｓ,１Ｈ),６．４５(ｓ,２Ｈ),５．９１(ｄ,Ｊ＝１７．２Ｈｚ,１Ｈ),５．７２(ｄ,Ｊ＝３．１Ｈｚ,２Ｈ),５．５７(ｄ,Ｊ＝１７．１Ｈｚ,１Ｈ),４．５０(ｓ,３Ｈ),２．１６(ｑ,Ｊ＝７．３Ｈｚ,２Ｈ),１．１５(ｔ,Ｊ＝７．３Ｈｚ,３Ｈ)．
【０１３９】
１３Ｃ  ＮＭＲ(１２５ＭＨｚ,ＣＦ３ＣＯＯＤ)δ  １７６．０２,１５８．０９,１５７．７３,１５３．７１,１５１．２１,１４０．５８,１３９．６８,１３９．５２,１３９．２３,１３６．１１,１３５．９２,１２９．２２,１２７．２７,１２２．２０,１０９．９９,１０５．４１,１０４．１７,１０１．０１,９７．６１,７３．６８,６６．０９,５１．８５,３８．４６,３１．０３,５．６７．
【０１４０】
実施例２２    ２０(Ｓ)-７-(２-チオフェン)-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシン(化合物２６)の調製
調製および精製方法は化合物２１と同じであり、実施例１７のステップ(４)の４-ピリジンホウ酸を２-チオフェン-ホウ酸に置き換え、他の原料、試薬は同じである。ｍｐ  ２４０〜２４１℃。
【０１４１】
１Ｈ  ＮＭＲ(５００ＭＨｚ,ＣＦ３ＣＯＯＤ)δ  ８．１５(ｓ,１Ｈ),７．９９(ｄ,Ｊ＝５．０Ｈｚ,１Ｈ),７．８７(ｓ,１Ｈ),７．６９(ｄ,Ｊ＝４．２Ｈｚ,２Ｈ),７．５１(ｔ,Ｊ＝４．１Ｈｚ,１Ｈ),６．４２(ｓ,２Ｈ),５．９１(ｄ,Ｊ＝１７．０Ｈｚ,１Ｈ),５．６８(ｓ,２Ｈ),５．５７(ｄ,Ｊ＝１７．０Ｈｚ,１Ｈ),２．１６(ｑ,Ｊ＝７．３Ｈｚ,２Ｈ),１．１５(ｔ,Ｊ＝７．３Ｈｚ,３Ｈ)．
【０１４２】
１３Ｃ  ＮＭＲ(１２５ＭＨｚ,ＣＦ３ＣＯＯＤ)δ  １７６．０８,１５７．５７,１５３．０２,１５１．２４,１４６．９６,１４０．００,１３９．７７,１３９．４２,１３２．８１,１３２．０１,１３１．０２,１２８．７８,１２８．１９,１２７．２１,１２１．６９,１０９．９９,１０４．９７,１０３．７５,１０２．７７,９７．１７,７３．７５,６６．１５,５２．３５,３０．９９,５．６８．
【０１４３】
実施例２３    ２０(Ｓ)-７-(２-フラン)-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシン(化合物２７)の調製
調製および精製方法は化合物２１と同じであり、実施例１７のステップ(４)の４-ピリジンホウ酸を２-フラン-ホウ酸に置き換え、他の原料、試薬は同じである。ｍｐ＞２５０℃。
【０１４４】
１Ｈ  ＮＭＲ(５００ＭＨｚ,ＣＦ３ＣＯＯＤ)δ  ８．１９(ｓ,１Ｈ),８．１２(ｄ,Ｊ＝１５．７Ｈｚ,２Ｈ),７．７１−７．６７(ｍ,１Ｈ),７．６４(ｓ,１Ｈ),７．００(ｓ,１Ｈ),６．４４(ｄ,Ｊ＝１６．８Ｈｚ,２Ｈ),５．９３(ｄ,Ｊ＝２３．４Ｈｚ,３Ｈ),５．５９(ｄ,Ｊ＝１６．９Ｈｚ,１Ｈ),２．１６(ｄ,Ｊ＝７．２Ｈｚ,２Ｈ),１．１５(ｔ,Ｊ＝７．１Ｈｚ,３Ｈ)．
【０１４５】
１３Ｃ  ＮＭＲ(１２５ＭＨｚ,ＣＦ３ＣＯＯＤ)δ  １７６．０８,１５７．５８,１５２．７７,１５１．２４,１４９．１５,１４０．０４,１３９．８３,１３９．３３,１３１．５１,１２８．９３,１２８．６４,１２８．３１,１２７．４１,１２６．４４,１２１．６４,１１０．８０,１０４．８８,１０３．７７,１０２．５５,９７．０８,７３．７４,６６．１４,５１．８９,３０．９８,５．６８．
【０１４６】
化合物４３-４６の概略合成経路は次の通りである：
【化３０】
2021526560.tif 000032
【０１４７】
実施例２４    ２０(Ｓ)-７-モルホリニル-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシン(化合物４３)の調製
実施例１７のステップ(１)、(２)、(３)で調製された中間体Ｇ  ２０(Ｓ)-７-ブロモ-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシン(３７．６ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ)、モルホリン(１ｍＬ)および炭酸セシウム(５２ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ)を２５ｍＬ二首フラスコに加え、１,４-ジオキサン(１５ｍＬ)を加えて、窒素雰囲気下で、８５℃まで加熱し、一晩で攪拌し反応した。ＴＬＣにより反応が完了したことが検出された後、回転蒸発により溶媒を濃縮し除去して、カラムクロマトグラフィー(ジクロロメタン：メタノール＝１０：１)を行って、１９ｍｇ褐色の固体化合物４３を得た。収率５０．３％。ｍｐ＞２５０℃。
【０１４８】
１Ｈ  ＮＭＲ(５００ＭＨｚ,ＣＦ３ＣＯＯＤ)δ  ８．１４(ｓ,１Ｈ),７．８９(ｓ,１Ｈ),７．７１(ｓ,１Ｈ),６．４７(ｓ,２Ｈ),５．９３(ｄ,Ｊ＝１７．２Ｈｚ,１Ｈ),５．７２(ｓ,２Ｈ),５．５９(ｄ,Ｊ＝１７．１Ｈｚ,１Ｈ),３．３７−３．２６(ｍ,２Ｈ),２．８７(ｓ,６Ｈ)、２．１６(ｑ,Ｊ＝７．４Ｈｚ,２Ｈ),１．１５(ｔ,Ｊ＝７．４Ｈｚ,３Ｈ)．
【０１４９】
１３Ｃ  ＮＭＲ(１２５ＭＨｚ,ＣＦ３ＣＯＯＤ)δ  １７６．０１,１５８．４１,１５３．９６,１５１．２３,１３９．５４,１３９．３７,１３８．５１,１３８．２１,１３１．５６,１２８．７０,１２５．５２,１２２．４５,１０９．９８,１０５．３８,１０２．８３,９７．４４,７３．６８,６６．１７,５３．２６,３５．５６,３１．９６,３１．０９,３０．６１,５．７６．
【０１５０】
化合物４７-５０の概略合成経路は次の通りである：
【化３１】
2021526560.tif 000033
【０１５１】
実施例２５  ２０(Ｓ)-７-モルホリンメチル-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシン(化合物４７)の調製
ステップ(１)中間体２０(Ｓ)-７-クロロメチル-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシン(Ｈ)の調製
【０１５２】
実施例１７のステップ(１)、(２)で調製された中間体Ｆ(３７．６ｍｇ、０．０６ｍｍｏｌ)を２５ｍＬ二首フラスコに加え、氷浴下で氷酢酸(１ｍＬ)を加え、十分に攪拌して溶解した後、２-クロロアセトアルデヒド(０．５ｍＬ)を加え、室温で一晩攪拌し反応した。ＴＬＣにより反応が完了したことが検出された後、回転蒸発により溶媒を濃縮し除去して、カラムクロマトグラフィー(ジクロロメタン：メタノール＝１０：１)を行って、２１ｍｇ黄色の固体中間体Ｈを得た。収率６０．３％。ｍｐ＞２５０℃。
【０１５３】
１Ｈ  ＮＭＲ(５００ＭＨｚ,ＤＭＳＯ)δ  ８．４５(ｓ,１Ｈ),７．４９(ｓ,２Ｈ),７．２４(ｓ,１Ｈ),６．４７(ｓ,１Ｈ),６．２７(ｓ,２Ｈ),５．３９(ｄ,Ｊ＝１６．５Ｈｚ,２Ｈ),５．２０(ｓ,２Ｈ),４．５２(ｓ,２Ｈ),１．９０−１．７９(ｍ,２Ｈ),０．９１−０．８１(ｍ,３Ｈ)．
【０１５４】
１３Ｃ  ＮＭＲ(１２５ＭＨｚ,ＤＭＳＯ)δ  １７２．９８,１５７．２８,１５１．７８,１５０．５０,１５０．４１,１４９．０９,１４７．０３,１４６．３７,１３０．６０,１２８．８８,１２６．０６,１１８．５４,１０５．２９,１０３．５６,１０３．０３,９６．３４,７２．８５,６５．６９,６２．２１,５０．６３,３０．６８,８．２３．
【０１５５】
ステップ(２)上記ステップ(１)で調製された中間体Ｈ(２６．４ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ)を２５ｍＬ二首フラスコに加え、室温でモルホリン(３ｍＬ)およびＤＭＦ(１０ｍＬ)を順次加え、室温で一晩攪拌し反応した。ＴＬＣにより反応が完了したことが検出された後、回転蒸発により溶媒を濃縮し除去して、カラムクロマトグラフィー(ジクロロメタン：メタノール＝１０：１)を行って、１３ｍｇ黄色の固体化合物４７を得た。収率３３．３％。ｍｐ＞２５０℃。
【０１５６】
１Ｈ  ＮＭＲ(５００ＭＨｚ,ＤＭＳＯ)δ  ８．４５(ｓ,１Ｈ),７．４９(ｓ,２Ｈ),７．２４(ｓ,１Ｈ),６．４７(ｓ,１Ｈ),６．２７(ｓ,２Ｈ),５．３９(ｄ,Ｊ＝１６．５Ｈｚ,２Ｈ),５．２０(ｓ,２Ｈ),４．５２(ｓ,２Ｈ),３．３７−３．２６(ｍ,２Ｈ),２．８７(ｓ,６Ｈ)、１．９０−１．７９(ｍ,２Ｈ),０．９１−０．８１(ｍ,３Ｈ)．
【０１５７】
１３Ｃ  ＮＭＲ(１２５ＭＨｚ,ＤＭＳＯ)δ  １７２．９８,１５７．２８,１５１．７８,１５０．５０,１５０．４１,１４９．０９,１４７．０３,１４６．３７,１３０．６０,１２８．８８,１２６．０６,１１８．５４,１０５．２９,１０３．５６,１０３．０３,９６．３４,７２．８５,６５．６９,６２．２１,５０．６３,３５．５６,３１．９６,３１．０９,３０．６８,３０．６１,８．２３．
【０１５８】
化合物５１-５４の概略合成経路は次の通りである：
【化３２】
2021526560.tif 000034
【０１５９】
実施例２６  ２０(Ｓ)-７-モルホリンエチル-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシン(化合物５１)の調製
ステップ(１)中間体６′-アミノ-３′,４′-メチレンジオキシモルホリンエチルベンゾフェノンの調製
【０１６０】
実施例１で調製された中間体Ｃ(７．６ｇ,３７．３ｍｍｏｌ)を適切な量のＮ,Ｎ-ジメチルホルムアミドジメチルアセタール(ＤＭＦ-ＤＭＡ)に溶解し、１１０℃で２時間加熱還流した後、反応溶液を室温まで冷却し、ｎ-ヘキサンを加え、黄色の固体を沈殿させ、吸引濾過し、固体９．４ｇを得た。収率９５％、上記の固体(９．４ｇ,３５．６ｍｍｏｌ)をジオキサン(６０ｍｌ)に溶解し、モルホリン(３．６ｍｌ,３６ｍｍｏｌ)を加え、６時間加熱還流した後、反応溶液を減圧下で濃縮して黄色の油性液体を得、シリカゲルカラムクロマトグラフィー(石油エーテル：酢酸エチル＝１：２)で分離し、濃縮した後淡黄色の固体８．７ｇを得た。収率８０％、上記の固体(８．０ｇ,２６．１ｍｍｏｌ)を氷酢酸(２０ｍｌ)に溶解し、反応溶液を０℃まで冷却し、ホウ水素化ナトリウム(４９３．１ｍｇ,１３．１ｍｍｏｌ)を加え３時間攪拌し、反応溶液を減圧下で濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー(石油エーテル：酢酸エチル＝１：２)で精製し、濃縮した後淡黄色の固体中間体６′-アミノ-３′,４′-メチレンジオキシモルホリンエチルベンゾフェノン５．６ｇを得た。収率７０％。
【０１６１】
１Ｈ  ＮＭＲ(５００ＭＨｚ,ＤＭＳＯ)δ  ７．３４(ｓ,２Ｈ),７．２４(ｓ,１Ｈ),６．２９(ｓ,１Ｈ),５．９２(ｓ,２Ｈ),３．５７−３．５０(ｍ,２Ｈ),２．９４(ｔ,Ｊ＝７．４Ｈｚ,２Ｈ),２．５７(ｔ,Ｊ＝７．３Ｈｚ,２Ｈ),２．３７(ｓ,４Ｈ)．
【０１６２】
ステップ(２)化合物５′(Ｓ)-１,５-ジオキソ-(５′-エチル-５′-ヒドロキシ-２′Ｈ,５′Ｈ,６′Ｈ-６-オキソピラン)-[３′,４′,ｆ]-Δ６(８)-テトラヒドロインドリジン  Ｍ(２００ｍｇ,０．７６ｍｍｏｌ)を２５０ｍｌナス型フラスコに加え、無水トルエン(７０ｍｌ)に溶解し、上記調製された６′-アミノ-３′,４′-メチレンジオキシモルホリンエチルベンゾフェノン(０．３８ｇ,１．３７ｍｍｏｌ)、ｐ-トルエンスルホン酸(２６．２ｍｇ,０．１５ｍｍｏｌ)をさらに加え、窒素保護下で１１０℃で２４時間還流反応し、室温まで冷却し、回転蒸発により溶媒を濃縮し除去して、シリカゲルカラムクロマトグラフィー(ジクロロメタン：メタノール＝９７：３)で精製し、淡黄色の粉末状固体化合物５１  ０．１５ｇを得た。収率４０％。ｍｐ＞２５０℃。
【０１６３】
１Ｈ  ＮＭＲ(ＣＦ３ＣＯＯＤ,６００ＭＨｚ)δ：７．２６(ｓ,１Ｈ),６．９８(ｓ,１Ｈ),６．７４(ｓ,１Ｈ),５．９(ｓ,２Ｈ),４．７６(ｄ,１Ｈ),４．７４(ｄ,１Ｈ),４．２２(ｓ,２Ｈ),３．６７(ｍ,４Ｈ),２．６９(ｄ,２Ｈ),２．６５(ｄ,２Ｈ),２．３７(ｄ,４Ｈ),１．８７(ｍ,２Ｈ),０．９６(ｔ,３Ｈ)．
【０１６４】
１３Ｃ  ＮＭＲ(ＣＦ３ＣＯＯＤ,１５０ＭＨｚ)δ：１７８．６,１５９．４,１５７．７,１５６．９,１５１．７,１４９．４,１４５．８,１４１．４,１３９．２,１２６．２,１２３．５,１２０．９,１０８．３,１０２．２,１０１．５,１０１．４,７３．０,６６．８,５８．１,５５．５,５３．７,４５．６,３０．２,２８．５,２８．４,２６．２,５．６．
【０１６５】
実施例２７    ２０(Ｓ)-７-チオモルホリンエチル-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシン(化合物５４)の調製
調製および精製方法は化合物５１と同じであり、実施例２４のステップ(１)のモルホリンをチオモルホリンに置き換え、他の原料、試薬は同じであり、６′-アミノ-３′,４′-メチレンジオキシチオモルホリンエチルベンゾフェノンを調製した。さらに、実施例２４のステップ(２)と同じ方法によって２０(Ｓ)-７-チオモルホリンエチル-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシン(化合物５４)を調製した。ｍｐ＞２５０℃。
【０１６６】
１Ｈ  ＮＭＲ(ＣＦ３ＣＯＯＤ,６００ＭＨｚ)δ：７．２６(ｓ,１Ｈ),６．９８(ｓ,１Ｈ),６．７４(ｓ,１Ｈ),５．９(ｓ,２Ｈ),４．７６(ｄ,１Ｈ),４．７４(ｄ,１Ｈ),４．２２(ｓ,２Ｈ),２．７３(ｍ,４Ｈ),２．６９(ｄ,２Ｈ),２．６５(ｄ,２Ｈ),２．５４(ｄ,４Ｈ),１．８７(ｍ,２Ｈ),０．９６(ｔ,３Ｈ)．
【０１６７】
１３Ｃ  ＮＭＲ(ＣＦ３ＣＯＯＤ,１５０ＭＨｚ)δ：１７２．６,１５９．４,１５７．７,１５６．９,１５１．７,１４９．４,１４５．８,１４１．４,１３９．２,１２６．２,１２３．５,１２０．９,１０８．３,１０２．２,１０１．５,１０１．４,７３．０,６５．１,５８．３,５８．１,５５．５,４５．６,３０．２,２８．５,２８．４,２６．２,５．６．
【０１６８】
実施例２８  ２０(Ｓ)-７-ピペリジンエチル-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシン(化合物５２)、２０(Ｓ)-７-((２-メチル)-ピペリジン)-エチル-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシン(化合物５３)の調製
調製および精製方法は化合物５１と同じであり、実施例２４のステップ(１)のモルホリンをピペリジンに置き換え、他の原料、試薬は同じであり、６′-アミノ-３′,４′-メチレンジオキシピペリジンエチルベンゾフェノンを調製した。さらに、実施例２４のステップ(２)とおなじ方法によって２０(Ｓ)-７-ピペリジンエチル-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシン(化合物５２)を調製した。
【０１６９】
調製および精製方法は化合物５１と同じであり、実施例２４のステップ(１)のモルホリンを２-メチルピペリジンに置き換え、他の原料、試薬は同じであり、６′-アミノ-３′,４′-メチレンジオキシ-((２-メチル)-ピペリジン)-エチルベンゾフェノンを調製した。さらに、実施例２４のステップ(２)と同じ方法によって２０(Ｓ)-７-((２-メチル)ピペリジン)-エチル-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシン(化合物５３)を調製した。
【０１７０】
７位に異なるトリアゾール置換基が導入された１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシン誘導体の概略合成経路は次の通りである：
【化３３】
2021526560.tif 000035
【０１７１】
実施例２９    ２０(Ｓ)-７-(１-ブチル-１Ｈ-１,２,３-トリアゾール-４-イル)-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシン(化合物５５)の調製
ステップ(１)中間体２０(Ｓ)-Ｏ-アセチル-７-エチル-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシン(Ｋ)の調製
実施例１７のステップ(１)、(２)、(３)で調製された中間体Ｇ、２０(Ｓ)-７-ブロモ-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシンを原料として、まず無水酢酸と反応してヒドロキシル基を保護し、次に酢酸パラジウム、ｒａｃ-ＢＩＮＡＰおよび炭酸カリウムの存在下で、窒素保護下で、脱気したトリメチルシリルアセチレンに溶解したトルエン溶液を加え、反応混合液を１００℃まで加熱し、９時間反応した。反応が完了した後、反応溶液を濃縮し蒸発乾固させ、シリカゲルカラムクロマトグラフィー(ジクロロメタン：アセトン＝３０：１)で精製し、濃縮した後固体２０(Ｓ)-Ｏ-アセチル-７-(２-トリメチルシリルアセチレン)-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシンを得た。収率６５％、三首フラスコに上記合成された固体２０(Ｓ)-Ｏ-アセチル-７-(２-トリメチルシリルアセチレン)-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシン(０．３５ｇ,０．６６ｍｍｏｌ)、フッ化カリウム(７７ｍｇ,１．３２ｍｍｏｌ)および無水メタノール(２５ｍｌ)を加え、室温で１２時間攪拌し反応した。反応が完了した後、反応溶液を減圧下で濃縮した後適切な量の水を加え、クロロホルムで３回抽出し、有機相を合わせ、無水硫酸マグネシウムで有機相を乾燥した。有機相を減圧下で濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー(ジクロロメタン：アセトン＝３０：１)で精製し、濃縮した後黄色の固体中間体Ｋ、０．２４ｇを得た。収率８０％。
【０１７２】
１Ｈ  ＮＭＲ(ＣＦ３ＣＯＯＤ,６００ＭＨｚ)δ：７．２９(ｓ,１Ｈ),６．８８(ｓ,１Ｈ),６．７４(ｓ,１Ｈ),５．９０(ｓ,２Ｈ),４．７６(ｄ,１Ｈ),４．７４(ｄ,１Ｈ),４．２２(ｓ,２Ｈ),３．０６(ｓ,１Ｈ),２．０４(ｄ,１Ｈ),１．９６(ｍ,２Ｈ),０．９６(ｔ,３Ｈ)．
１３Ｃ  ＮＭＲ(ＣＦ３ＣＯＯＤ,１５０ＭＨｚ)δ：１７２．５,１７０．３,１５９．７,１５７．３,１５７．０,１５０．７,１４９．９,１４５．５,１４１．０,１３０．６,１２９．１,１２６．８,１２０．０,１０８．１,１０６．３,１０１．６,１０１．２,７６．０,７３．５,６９．７,６５．５,４３．８,２７．０,２１．１,５．８.
【０１７３】
ステップ(２)  ２０(Ｓ)-７-(１-ブチル-１Ｈ-１,２,３-トリアゾール-４-イル)-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシンの調製
２０(Ｓ)-Ｏ-アセチル-７-エチル-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシン(０．２４ｇ,０．５２ｍｍｏｌ)、ｔ−ブタノール(１０ｍｌ)および水(１０ｍｌ)を５０ｍｌナス型フラスコに加え、攪拌しながらアジド１-ブチル(０．１０ｇ,１．０４ｍｍｏｌ)、硫酸銅溶液(１０ｍｍｏｌ／Ｌ,０．００５ｍｍｏｌ)およびアスコルビン酸ナトリウム(０．０２ｇ,０．１ｍｍｏｌ)を加えた。反応溶液を６０℃までゆっくりと加熱し、６時間反応した。反応が完了した後、反応溶液を氷水に流し込み、クロロホルムで抽出した。有機相を合わせ、有機相を無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥した有機相を減圧下で濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー(ジクロロメタン：アセトン＝３０：１)で精製し、濃縮した後黄色の固体０．２３ｇを得た。収率８０％。２０(Ｓ)-Ｏ-アセチル-７-(１-ブチル-１Ｈ-１,２,３-トリアゾール-４-イル)-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシン(０．２３ｇ,０．４１ｍｍｏｌ)およびメタノール(２０ｍｌ)を５０ｍｌナス型フラスコに順次加え、攪拌しながらナトリウムメトキシド(０．０５ｇ、０．８４ｍｍｏｌ)を加え、室温で３時間攪拌反応した。反応が完了した後、反応溶液をｐＨ＝７．０に調整し、反応溶液を減圧下で濃縮した。シリカゲルカラムクロマトグラフィー(ジクロロメタン：アセトン＝３０：１)で精製し、濃縮した後黄色の固体２０(Ｓ)-７-(１-ブチル-１Ｈ-１,２,３-トリアゾール-４-イル)-１０,１１-メチレンジオキシカンプトテシン０．１８ｇを得た。収率８５％。
【０１７４】
１Ｈ  ＮＭＲ(ＣＦ３ＣＯＯＤ,６００ＭＨｚ)δ：７．６(ｓ,１Ｈ),７．２９(ｓ,１Ｈ),６．８８(ｓ,１Ｈ),６．７４(ｓ,１Ｈ),５．９０(ｓ,２Ｈ),４．７６(ｄ,１Ｈ),４．７４(ｄ,１Ｈ),４．２２(ｓ,２Ｈ),３．７３(ｔ,２Ｈ),１．８７(ｍ,２Ｈ),１．７７(ｍ,２Ｈ),１．３３(ｍ,２Ｈ),０．９８(ｔ,２Ｈ),０．９６(ｔ,３Ｈ)．
【０１７５】
１３Ｃ  ＮＭＲ(ＣＦ３ＣＯＯＤ,１５０ＭＨｚ)δ：１７２．５,１５９．７,１５７．３,１５７．０,１５１．６,１４９．９,１４６．３,１４５．５,１４１．９,１４１．０,１３０．４,１２４．０,１２０．０,１１９．１,１０８．１,１０６．３,１０１．６,１０１．２,７３．５,６５．８,５２．２,４４．６,３０．６,３０．３,３０．３,２０．３,１３．８,５．８．
【０１７６】
実施例３０  本発明に関与する重要な中間体Ｍの合成
中間体Ｍの概略合成経路は次の通りである：
【化３４】
2021526560.tif 000036
【０１７７】
試薬と反応条件：(ｇ)ＣＯ(ＯＥｔ)２,ｔ-ＢｕＯＫ,ＴＨＦ、(ｈ)Ｃ２Ｈ５Ｂｒ,Ｋ２ＣＯ３,ＣＨ３ＣＮ、(ｉ)Ｈ２,Ｒａｎｅｙ  Ｎｉ,ＨＯＡＣ,Ａｃ２Ｏ、(ｊ)ＮａＮＯ２,０℃、(ｋ)ＣＣｌ４,ｒｅｆｌｕｘ、(ｌ)１)Ｏ２,Ｒａｎｅｙ  Ｎｉ  ,ＣｕＣｌ,２)Ｈ２ＳＯ４、(ｍ)ＣｕＣｌ,ＣＨ２Ｃｌ２、(ｎ)ＫＯＨ,ＣＨ３ＯＨ、(ｏ)ＣＦ３ＣＯＯＨ,ｒ．ｔ．
【０１７８】
一言で言えば、中間体Ｍ６はカリウムｔｅｒｔ-ブトキシドの作用下で炭酸ジエチルと反応して、中間体Ｍ７を得、中間体Ｍ７はブロモエタンと反応して中間体Ｍ８を得、中間体Ｍ８は高圧下でラネーニッケルと接触水素化して中間体Ｍ９を得、中間体Ｍ９は亜硝酸ナトリウムと反応して中間体Ｍ１０を得、中間体Ｍ１０は四塩化炭素で還流し再配列して中間体Ｍ１１を得、中間体Ｍ１１は酸素で酸化されて中間体Ｍ１２を得、中間体Ｍ１２はキラル化合物であり、キラルイソシアナート誘導体化法を使用してキラル分解し、中間体Ｍ１２は塩化第一銅触媒下でキラルイソシアナートと反応して２つのジアステレオ異性体１３Ｒおよび１３Ｓを得、カラムクロマトグラフィーで両者を分離・精製し、中間体１３Ｓはアルカリ性条件下で加水分解して中間体Ｍ１４を得、中間体１４はトリフルオロ酢酸条件下での脱保護により立体特異的三環式中間体Ｍ(すなわち本発明の上記の中間体Ｍ)を得た。具体的な合成ステップは以下の通りである：
【０１７９】
ステップ(１)：６-シアノ-１,１-エチレンジオキシ-７-エトキシカルボニルメチル-５-オキソ-Δ６(８)-テトラヒドロインドリジン(中間体Ｍ７)の調製
Ｍ６(２０ｇ,８６ｍｍｏｌ)を無水テトラヒドロフラン(１２０ｍｌ)に溶解し、室温でカリウムｔｅｒｔ-ブトキシド(４３．４３ｇ,３８７ｍｍｏｌ)を加え、攪拌しながら炭酸ジエチル(４０．６ｇ,３４４ｍｍｏｌ)をゆっくりと滴下し、加熱還流され５時間反応し、室温まで冷却し、氷酢酸(５ｍｌ)を加え反応をクエンチし、濃縮して暗褐色の固体を得、シリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し(ジクロロメタン：酢酸エチル＝６：１)、白色の固体２３．６５ｇを得た。収率９０％、ｍｐ  １７２〜１７３℃。
【０１８０】
ステップ(２)：６-シアノ-１,１-エチレンジオキシ-７-(１′-エトキシカルボニル)プロピル-５-オキソ-Δ６(中間体８)-テトラヒドロインドリジン(中間体Ｍ８)の調製
【化３５】
2021526560.tif 000037
【０１８１】
上記合成されたＭ７(２０．００ｇ,６５．６４ｍｍｏｌ)をアセトニトリル(３００ｍｌ)に溶解し、炭酸カリウム(２４．００ｇ,１７２ｍｍｏｌ)およびブロモエタン(１７．５８ｇ,１６２ｍｍｏｌ)を順次加え、８５℃で３時間還流反応し、室温まで冷却し、濾過で無機塩を除去し、濾過残留物をアセトニトリルで３回洗浄し、ろ液を回転蒸発により濃縮して黄土色の固体２１．８２ｇを得た。収率９５％。
【０１８２】
ステップ(３)：６-アセトキシメチル-１,１-エチレンジオキシ-７-(１′-エトキシカルボニル)プロピル-５-オキソ-[３′,４′,ｆ]-Δ６(８)-テトラヒドロインドリジン(中間体Ｍ１１)の調製
【化３６】
2021526560.tif 000038
【０１８３】
中間体Ｍ８(１２．００ｇ,３６．１ｍｍｏｌ)を無水酢酸(１５０ｍＬ)と氷酢酸(５０ｍＬ)の混合溶液に溶解し、ラネーニッケル(６ｇ)を加え、水素ガスを４×１０５Ｐａまで供給し、４５℃で６時間攪拌反応し、触媒を濾過により除去し、濾過残留物を氷酢酸で３回洗浄し、ろ液を濃縮して黄色油性液体を得、無水酢酸(１５０ｍＬ)および氷酢酸(５０ｍＬ)を加え、氷浴下で亜硝酸ナトリウム(１３．０ｇ,１８８ｍｍｏｌ)を加え、２時間攪拌し、吸引濾過により無機塩を除去し、濾過残留物を氷酢酸で３回洗浄し、ろ液を回転蒸発により濃縮して黄色油性液体を得、四塩化炭素(２００ｍｌ)を加え、１２時間還流反応し、室温まで冷却し、蒸留水、飽和塩水で３回洗浄し、有機相を合わせ、有機相を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過濃縮して黄色油性液体１６．２ｇを得た。収率８０％。
【０１８４】
ステップ(４)：１,１-エチレンジオキシ-５-オキソ-(５′-エチル-５′-ヒドロキシ-２′Ｈ,５′Ｈ,６′Ｈ-６-オキソピラン)-[３′,４′,ｆ]-Δ６(８)-テトラヒドロインドリジン(中間体Ｍ１２)の調製
【化３７】
2021526560.tif 000039
【０１８５】
Ｒａｎｅｙ  Ｎｉ(３．０ｇ,５１．１ｍｍｏｌ)、塩化第一銅(０．２ｇ,２ｍｍｏｌ)および無水炭酸カリウム(８．０ｇ,５７．９ｍｍｏｌ)を無水メタノール(３００ｍｌ)に加え、室温で窒素ガスを供給し１時間バブリングし、中間体Ｍ１１(２１．０ｇ,５３ｍｍｏｌ)を加え、酸素ガスを供給し６時間バブリングし反応して、触媒を濾過により除去し、有機相を濃縮して黄色油性液体を加え、蒸留水(２００ｍｌ)を加え、１Ｎの希硫酸でＰＨを２〜３に調整し、ジクロロメタンで３回抽出し、有機相を合わせ、有機相を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過濃縮して、シリカゲルカラムクロマトグラフィー(ジクロロメタン：酢酸エチル＝８：１)で精製し、濃縮した後白色の固体８ｇを得た。収率４９％、ｍｐ  １７７〜１７９℃。
【０１８６】
１Ｈ  ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３,６００ＭＨｚ)δ：６．５７(ｓ,１Ｈ,Ａｒ-Ｈ),５．１６−５．６３(ｍ,２Ｈ,ＡｒＣＨ２Ｏ),４．１６(ｍ,６Ｈ,ＯＣＨ２ＣＨ２Ｏ,ＮＣＨ２),３．６９(ｓ,１Ｈ,ＯＨ),２．４２(ｔ,２Ｈ,ＮＣＨ２ＣＨ２),１．８１(ｍ,２Ｈ,ＣＨ２ＣＨ３),０．９８(ｔ,３Ｈ,ＣＨ３)．
【０１８７】
ステップ(５)：(４′Ｓ)-４′-エチル-３′,１０′-ジオキソ-３′,４′,７′,８′-テトラヒドロスピロ[１,３-エチレンジオキシ-２,６′-１′Ｈ,６′Ｈ-ピラン[３,４,ｆ]インドリジン]-４′-イルＮ-(１-フェニルエチル)カルバメート(中間体Ｍ１３Ｓ)の調製
【化３８】
2021526560.tif 000040
【０１８８】
中間体Ｍ１２(５．５ｇ,１７．９０ｍｍｏｌ)を無水ジクロロメタン(２００ｍｌ)に溶解し、(Ｒ)-α-フェニルエチルイソシアナート(５．２６ｇ,３５．８０ｍｍｏｌ)および塩化第一銅(３．５４ｇ,３５．８０ｍｍｏｌ)を加え、室温で８時間攪拌反応し、触媒を濾過により除去し、濾過残留物をジクロロメタンで３回洗浄し、ろ液を順次蒸留水、飽和塩水で洗浄し、有機相を合わせ、有機相を無水硫酸マグネシウムで一晩乾燥し、濾過して、ろ液を濃縮した後黄色油性液体を得、シリカゲルカラムクロマトグラフィー(ジクロロメタン：酢酸エチル＝４：１)で分離し、２つのジアステレオマーＭ１３ＲおよびＭ１３Ｓを得た。
【０１８９】
化合物Ｍ１３Ｒ  ３．９２ｇを得た。収率５０％。[α]２０Ｄ  −９．３６°(ｃ  ０．５、ＣＨＣｌ３)、  ＭＳ(ＥＳＩ)：ｍ／ｚ,４５５．３  [Ｍ+Ｈ]＋．
【０１９０】
１Ｈ  ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３,６００ＭＨｚ)δ：７．３０(ｍ,５Ｈ,Ａｒ-Ｈ),６．１０(ｓ,１Ｈ,Ａｒ-Ｈ),５．２３、５．５５(ｓ,２Ｈ,ＡｒＣＨ２Ｏ),４．７８(ｍ,１Ｈ,ＡｒＣＨ),４．０-４．２(ｍ,６Ｈ,ＯＣＨ２ＣＨ２Ｏ,ＮＣＨ２),２．３８(ｔ,２Ｈ,ＮＣＨ２ＣＨ２),１．９５、２．１３(ｓ,２Ｈ,ＣＨ２ＣＨ３),１．５２(ｄ,３Ｈ,ＣＨＣＨ３),０．９５(ｔ,３Ｈ,ＣＨ３)．
【０１９１】
化合物Ｍ１３Ｓ  ２．８６ｇを得た。収率４５％。[α]２０Ｄ  ＋１３９°(ｃ  ０．５、ＣＨＣｌ３)、  ＭＳ(ＥＳＩ)：ｍ／ｚ,４５５．１  [Ｍ+Ｈ]＋．
【０１９２】
１Ｈ  ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３,６００ＭＨｚ)δ：７．３１(ｍ,５Ｈ,Ａｒ-Ｈ),６．１２(ｓ,１Ｈ,Ａｒ-Ｈ),５．２０、５．５５(ｓ,２Ｈ,ＡｒＣＨ２Ｏ),４．７１(ｍ,１Ｈ,ＡｒＣＨ),３．９-４．１(ｍ,６Ｈ,ＯＣＨ２ＣＨ２Ｏ,ＮＣＨ２),２．３８(ｔ,２Ｈ,ＮＣＨ２ＣＨ２),１．９８、２．１７(ｓ,２Ｈ,ＣＨ２ＣＨ３),１．５５(ｄ,３Ｈ,ＣＨＣＨ３),０．９５(ｔ,３Ｈ,ＣＨ３)．
【０１９３】
ステップ(６)：(５′Ｓ)-１,１-エチレンジオキシ-５-オキソ-(５′-エチル-５′-ヒドロキシ-２′Ｈ,５′Ｈ,６′Ｈ-６-オキソピラン)-[３′,４′-ｆ]-Δ６(８)-テトラヒドロインドリジン(中間体Ｍ１４)の調製
【化３９】
2021526560.tif 000041
【０１９４】
水酸化カリウム(０．５６ｇ,９．９ｍｍｏｌ)を化合物Ｍ１３Ｓ(１．１ｇ,２．４ｍｍｏｌ)のメタノール(２５ｍｌ)溶液に加え、６７℃まで加熱し５時間攪拌反応し、反応溶液を１Ｍの希塩酸でｐＨを３〜４に調整し、濃縮して、ジクロロメタン(２５ｍｌ)を加え、順次蒸留水、飽和塩水で３回洗浄し、有機相を合わせ、有機相を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し濃縮した。シリカゲルカラムクロマトグラフィー(ジクロロメタン：酢酸エチル＝４：１)で精製し、白色の固体０．５８ｇを得た。収率８０％。ｍｐ  １６３〜１６４℃、ＭＳ(ＥＳＩ)：ｍ／ｚ,３０８．４  [Ｍ+Ｈ]＋．
【０１９５】
ステップ(７)：(５′Ｓ)-１,５-ジオキソ-(５′-エチル-５′-ヒドロキシ-２′Ｈ,５′Ｈ,６′Ｈ-６-オキソピラン)-[３′,４′,ｆ]-Δ６(８)-テトラヒドロインドリジン(中間体Ｍ)の調製
【化４０】
2021526560.tif 000042
【０１９６】
中間体Ｍ１４(１．０ｇ,３．２６ｍｍｏｌ)をトリフルオロ酢酸(３０ｍｌ)に溶解し、室温で６時間攪拌反応し、回転蒸発により濃縮して暗褐色の油性液体を得、シリカゲルカラムクロマトグラフィー(ジクロロメタン：酢酸エチル＝４：１)で精製し、淡黄色の固体０．８８ｇを得た。収率９３％。ｍｐ  １８３〜１８５℃、  [α]２０Ｄ  ＋１０１°(ｃ  ０．５,ＣＨＣｌ３)、  ＭＳ(ＥＳＩ)：ｍ／ｚ,２６４．３  [Ｍ+Ｈ]＋．
【０１９７】
１Ｈ  ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３,６００ＭＨｚ)δ：６．８５(ｓ,１Ｈ,Ａｒ-Ｈ),５．３４-５．４２(ＡＢｑ,２Ｈ,ＡｒＣＨ２Ｏ),４．１３(ｍ,２Ｈ,ＮＣＨ２),２．８９(ｔ,２Ｈ,ＮＣＨ２ＣＨ２),１．７８(ｍ,２Ｈ,ＣＨ２ＣＨ３),０．８０(ｔ,３Ｈ,ＣＨ３)．
【０１９８】
実施例３１  本発明の化合物のインビトロ抗腫瘍活性試験
当業者に知られている方法を使用して、本発明の化合物の様々な腫瘍細胞株の増殖抑制情况を試験し、その抗腫瘍活性を示した。選択された腫瘍細胞株は、Ａ５４９細胞(ヒト非小細胞肺癌細胞株)、Ｋ５６２細胞(ヒト慢性骨髄性白血病細胞）、ＮＣＩ-Ｈ１９７５細胞(ヒト非小細胞肺腺癌細胞)、ＭＤＡ-ＭＢ-２３１細胞(ヒト乳癌細胞)およびＨＣＴ-１１６細胞(ヒト結腸癌細胞)を含む。
【０１９９】
【表１】
2021526560.tif 000043
【０２００】
表１に示すように、本発明に係る化合物は市販されている薬物であるカンプトテシン誘導体トポテカンと比較して、ほとんどは良好な細胞抑制活性を示した。化合物３、１１、１６、２０、４２、４３および５１は、Ａ５４９細胞に対して１−１０ｎＭの抑制ＩＣ５０を有し、化合物１２、１４、１８、３２、４１および４３は、Ａ５４９細胞に対して１０−５０ｎＭの抑制ＩＣ５０を有し、Ｋ５６２ヒト赤白血病細胞株と比較すると、試験された標的化合物は、Ａ５４９ヒト肺腺癌細胞に対して良好な抑制活性を有し、本発明の化合物の抗腫瘍活性が選択的であることを示した。
【０２０１】
【表２】
2021526560.tif 000044
【０２０２】
表２に示すように、本発明に係る化合物２１−３０は、３つの腫瘍細胞(ＮＣＩ-Ｈ１９７５細胞、ＭＤＡ-ＭＢ-２３１細胞およびＨＣＴ-１１６細胞)に対する活性は、すべてトポテカンよりも優れ、そのうち化合物２６はＮＣＩ-Ｈ１９７５およびＭＤＡ-ＭＢ-２３１細胞株に対して最も強い細胞毒性活性を持っていた。化合物２４はＨＣＴ-１１６細胞株に対して最も強い細胞毒性活性を持っていた。ＩＣ５０値から分かるように、ＨＣＴ-１１６細胞株は化合物２１−２９化合物に対して最も敏感であった。
以上のインビトロ試験から分かるように、本発明の化合物は顕著な抗腫瘍活性を有し、癌を予防または治療する薬物を調製するために使用することができる。
【０２０３】
実施例３２  本発明の化合物は、高分子相互作用実験を通じて、化合物とＥＧＦ、ＦＧＦの組み合わせが細胞増殖に影響を与えることを実証した。
【０２０４】
実験スキーム：
１、小分子をチップ上に固定し、化合物は
【表２−１】
2021526560.tif 000045
移動サンプル：ＥＧＦ(１μＭ)、ＦＧＦ(１μＭ)、ＨＳＰ９０(１００ｎＭ)、ＦＫＢＰ１２(１００ｎＭ)
陽性対照：ＲＡＰＡと  ＦＫＢＰ１２
【０２０５】
２、テスト指標
提供された小分子化合物が熱ショックタンパク質ＨＳＰ９０、上皮成長因子ＥＧＦおよび線維芽細胞成長因子ＦＧＦと結合されているかどうかを検出し、結合動態に関連するデータを提供する。
【０２０６】
３、テスト結果
【表３】
2021526560.tif 000046
【０２０７】
表３に示すように、高分子相互作用装置の検出を通じて、測定されたサンプルは熱ショックタンパク質Ｈｓｐ９０に結合しなかった。化合物３、７、５１、２１はＥＧＦに結合し、化合物６、７、５１、５２および２１はＦＧＦに結合し、これらの化合物は細胞増殖関連するタンパク質に結合できるのは、化合物が線維芽細胞成長因子(ＦＧＦｓ)、上皮成長因子(ＥＧＦ)との結合を介して腫瘍細胞の増殖を抑制し影響を与え、これらの２つのタンパク質を標的とした。したがって、本発明の化合物は、ＦＧＦまたはＥＧＦ阻害剤として使用されることが期待される。
【０２０８】
実施例３３  インビボ抗腫瘍活性試験
本発明者は、当該技術分野で知られている技術を使用して、インビボでの化合物の抗腫瘍活性を、昆明マウス移植腫瘍モデルで試験した。試験の移植腫瘍モデルはＡ５４９(肺癌)移植腫瘍モデルおよびＲＭ-１(前立腺癌)移植腫瘍モデルを含む。本発明の化合物は腹腔内注射により投与され、低濃度(９ｍｇ／ｋｇ)でも腫瘍増殖を効果的に抑制でき(阻害率７０％以上)、同時にマウスに対する毒性が小さく、薬物となる可能性がある。
【０２０９】
本発明の化合物１１、１５、２３および５１はトポテカンよりも優れた抗腫瘍活性を有し、薬物となる可能性がある。
【０２１０】
実施例３４  化合物２３のインビボ抗腫瘍活性試験
本発明者は、当該技術分野で知られている技術を使用して、マウス移植腫瘍モデルを通じて、本発明の化合物２３のインビボ抗腫瘍活性を試験した。
【０２１１】
試験方法は次の通りである：
マウス結腸癌細胞株ＨＣＴ‐１１６を液体窒素で蘇生し、１０％ウシ胎児血清を含む５Ａ培地で培養し、培養フラスコで細胞を増殖させ、必要な細胞容量に達した後、消化して細胞を回収した。１０％ウシ胎児血清を含む５Ａ培地で２５０００万／ｍｌの細胞懸濁液に希釈し、一般的な消毒後、１匹約０．１ｍｌごとＢＡＬＢ／ｃ‐ｎｕマウスの右前肢脇の下の皮下に接種した。腫瘍が約１ｇの組織塊に増殖したら、約１ｍｍ角の腫瘍塊に切り、カテーテル法を用いて皮下に移植し、移植後６日目に薬物を投与し始めた。マウスを腫瘍体積で、溶媒対照組、イリノテカン組(６ｍｇ／ｋｇ)、５‐フルオロウラシル組(２０ｍｇ／ｋｇ)、化合物２３低用量組(２．５ｍｇ／ｋｇ)および高用量組(５ｍｇ／ｋｇ)のようにランダムに７組に分けた。化合物２３低用量組および高用量組では、それぞれ胃内に週１回投与し、イリノテカン組、５‐フルオロウラシル組では、それぞれ３日に１回静脈内投与し、週３回マウスの体重変化および腫瘍体積の大きさを記録した。
【０２１２】
結果の観察：
ＢＡＬＢ／ｃ‐ｎｕマウスにＨＣＴ‐１１６腫瘍塊を皮下接種した後、腫瘍体積が１．０１±０．６５ｍｍ３に達し、ランダムに各組に投与した。２３日目に、溶媒対照組の腫瘍組織が７７１．７０±１０１．０５ｍｍ３に増殖し、すべてのマウスを犠牲にし、腫瘍組織を剥がし、−８０℃で保存した。
【０２１３】
図２に示すように、投与日数を横軸とし、腫瘍体積の増殖曲線を描いた。溶媒対照組および陽性薬物組と比較すると、化合物２３の低用量および高用量投与の両方は、マウスＨＣＴ‐１１６移植腫瘍の増殖を顕著に抑制でき、２３日投与した後、阻害率はそれぞれ９５．４５％および８７．０４％であった(表４)。
【０２１４】
【表４】
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注：＊ｐ＜０．０１ｖｓ溶媒対照組：ａは投与２３日後のデータに基づいて算出される。
【０２１５】
投与日数を横軸とし、マウス体重変化曲線を描き、結果が図３に示される。溶媒対照組ではマウス体重が徐々に増加した。
【０２１６】
化合物２３の投与後、高、低用量組では、マウス体重が減少し、１０日後に徐々に回復したが、対照組マウス体重よりも低く、一定の毒性と副作用があることを示唆し、わずかな毒性の副作用は、カンプトテシン化合物に共通の問題である。
【産業上の利用可能性】
【０２１７】
以上は本発明の好ましい実施例に過ぎず、本発明を限定するものではなく、当業者であれば、上記開示した技術的内容に基づいて同等の変更や修正を加えて新しい等価実施例を得ることができる。本発明の技術的思想から逸脱することなく、本発明の技術的本質に基づいて上記の実施例に加えられた任意の単純な修正、同等変更は、すべて本発明の技術的解決策の保護範囲に含まれる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【国際調査報告】
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