(57)【要約】  本発明は、組換えウイルスベクター系から発現される外因性ネコパラミクソウイルス遺伝子に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ネコ科動物に感染する少なくとも１つの病原体の、またはそれに関係する少なくとも１つの外因性抗原コード配列を含むウイルスベクター、好ましくは組換えおよび／または天然に存在しないウイルスベクターであって、前記ネコ科動物に感染する少なくとも１つの病原体は、ネコパラミクソウイルスである、ウイルスベクター。
【請求項２】
アビポックスウイルスウイルスベクター、イヌモルビリウイルスウイルスベクター、ヘルペスウイルスウイルスベクター、水痘ウイルスウイルスベクターからなる群から選択される、請求項１に記載のウイルスベクター。
【請求項３】
ネコパラミクソウイルスである前記ネコ科動物に感染する少なくとも１つの病原体が、
（ａ）ネコパラミクソウイルス２型（ＦＰａＶ−２）；
（ｂ）ネコパラミクソウイルス２型（ＦＰａＶ−２）であって、そのゲノムが、
（ｉ）配列番号１に記載の核酸配列、
（ｉｉ）配列番号１と少なくとも７０％同一である核酸配列
からなる群から選択される核酸配列に相補的なリボ核酸を含む、ネコパラミクソウイルス２型（ＦＰａＶ−２）；
（ｃ）寄託番号ＣＮＣＭＩ−５１２３として国立培養微生物コレクション（ＣＮＣＭ）に寄託されたネコパラミクソウイルス２型（ＦＰａＶ−２）；
（ｄ）ネコパラミクソウイルス２型（ＦＰａＶ−２）であって、そのゲノムが、
（ｉ）配列番号２に記載の核酸配列、
（ｉｉ）配列番号２と少なくとも７０％同一である核酸配列
からなる群から選択される核酸配列に相補的なリボ核酸を含む、ネコパラミクソウイルス２型（ＦＰａＶ−２）；
（ｅ）ネコモルビリウイルス（ＦｅＭｏＶ）；
（ｆ）ネコモルビリウイルス（ＦｅＭｏＶ）であって、そのゲノムが、
（ｉ）配列番号３に記載の核酸配列、
（ｉｉ）配列番号３と少なくとも７０％同一である核酸配列
からなる群から選択される核酸配列に相補的なリボ核酸を含む、ネコモルビリウイルス（ＦｅＭｏＶ）
からなる群から選択される、請求項１または２に記載のウイルスベクター。
【請求項４】
前記ウイルスベクターが、カナリアポックスベクター、好ましくは弱毒化カナリアポックスベクター、より好ましくはＡＬＶＡＣ、さらにより好ましくはＡＬＶＡＣ−１またはＡＬＶＡＣ−２、最も好ましくはブダペスト条約の条項に基づき寄託番号ＶＲ−２５４７としてアメリカ培養細胞系統保存機関（ＡＴＣＣ）に寄託されたＡＬＶＡＣであるか；または前記ウイルスベクターが、鶏痘ベクター、好ましくは弱毒化鶏痘ベクター、より好ましくはＴＲＯＶＡＣ、最も好ましくはブダペスト条約の条項に基づき寄託番号ＶＲ−２５５３としてアメリカ培養細胞系統保存機関（ＡＴＣＣ）に寄託されたＴＲＯＶＡＣであるか；または前記ウイルスベクターが、ｖＣＰ３０２５、ｖＣＰ３０２９、ｖＣＰ３０４１からなる群から選択される、請求項１〜３のいずれか１項に記載のウイルスベクター。
【請求項５】
前記少なくとも１つの外因性抗原コード配列が、血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列、マトリックスタンパク質（「Ｍ」）コード配列、融合タンパク質（「Ｆ」）コード配列、ヌクレオカプシドタンパク質（「Ｎ」）コード配列、リンタンパク質（「Ｐ」）コード配列、ＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼタンパク質（「Ｌ」）コード配列からなる群から選択され、より好ましくは血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列および／またはマトリックスタンパク質（「Ｍ」）コード配列および／または融合タンパク質（「Ｆ」）コード配列である、請求項１〜６のいずれか１項に記載のウイルスベクター。
【請求項６】
前記少なくとも１つの外因性抗原コード配列が、血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列であり、前記血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列は、配列番号４と少なくとも７０％同一であり、好ましくは配列番号４、配列番号５からなる群から選択される核酸配列を含むか、または前記少なくとも１つの外因性抗原コード配列が、血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列であり、前記血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列は、配列番号６と少なくとも７０％同一であり、好ましくは配列番号６に記載のアミノ酸配列であるアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードする核酸配列を含む、請求項５に記載のウイルスベクター。
【請求項７】
前記少なくとも１つの外因性抗原コード配列が、マトリックスタンパク質（「Ｍ」）コード配列であり、前記マトリックスタンパク質（「Ｍ」）コード配列は、配列番号７と少なくとも７０％同一であり、好ましくは配列番号７、配列番号８からなる群から選択される核酸配列を含むか、または前記少なくとも１つの外因性抗原コード配列が、マトリックスタンパク質（「Ｍ」）コード配列であり、前記マトリックスタンパク質（「Ｍ」）コード配列は、配列番号９と少なくとも７０％同一であり、好ましくは配列番号９に記載のアミノ酸配列であるアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードする核酸配列を含む、請求項５に記載のウイルスベクター。
【請求項８】
前記少なくとも１つの外因性抗原コード配列が、融合タンパク質（「Ｆ」）コード配列であり、前記融合タンパク質（「Ｆ」）コード配列は、配列番号１０と少なくとも７０％同一であり、好ましくは配列番号１０、配列番号１１からなる群から選択される核酸配列を含むか、または前記少なくとも１つの外因性抗原コード配列が、融合タンパク質（「Ｆ」）コード配列であり、前記融合タンパク質（「Ｆ」）コード配列は、配列番号１２と少なくとも７０％同一であり、好ましくは配列番号１２に記載のアミノ酸配列であるアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードする核酸配列を含む、請求項５に記載のウイルスベクター。
【請求項９】
２つまたはそれよりも多くの外因性抗原コード配列、好ましくは、血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列およびマトリックスタンパク質（「Ｍ」）コード配列、または血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列および融合タンパク質（「Ｆ」）コード配列、またはマトリックスタンパク質（「Ｍ」）コード配列および融合タンパク質（「Ｆ」）コード配列、または血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列およびマトリックスタンパク質（「Ｍ」）コード配列および融合タンパク質（「Ｆ」）コード配列を含む、請求項１〜８のいずれか１項に記載のウイルスベクター。
【請求項１０】
前記ウイルスベクターが、同じであるが２つの異なる株に由来する２つの外因性抗原コード配列（つまりＨ＋Ｈ、Ｆ＋Ｆ、Ｍ＋Ｍ、Ｐ＋Ｐ、Ｌ＋Ｌ、Ｎ＋Ｎ）を含み、例えば、ネコパラミクソウイルス２型（ＦＰａＶ−２）株、好ましくは「ゴードン株」または「ＴＶ２５株」に由来する１つの外因性抗原コード配列と、ネコモルビリウイルス株、好ましくは「ラポン株」に由来する他方の１つの外因性抗原コード配列を含み、例えば、１つの株の血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列と、別の株の血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列とを含み；より好ましくは、前記「１つの株の血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列」の前記１つの株は、ネコパラミクソウイルス２型（ＦＰａＶ−２）株、より好ましくは「ゴードン株」または「ＴＶ２５菌株」であり、前記「別の株の血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列」の前記別の株は、ネコモルビリウイルス株、さらにより好ましくは「ラポン株」であり；最も好ましくは、前記「１つの株の血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列」の前記１つの株は、血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列であり、前記血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列は、配列番号４または１９と少なくとも７０％同一であり、好ましくは配列番号４、配列番号５、配列番号１９からなる群から選択される核酸配列を含み；前記「別の株の血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列」の前記別の株は、血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列であり、前記血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列は、配列番号３１または９４と少なくとも７０％同一であり、好ましくは配列番号３１、配列番号３２、配列番号９４からなる群から選択される核酸配列を含む、請求項１〜８のいずれか１項に記載のウイルスベクター。
【請求項１１】
前記少なくとも１つの外因性抗原コード配列が、少なくとも１つの挿入遺伝子座に、好ましくは前記ウイルスベクターゲノムの非必須領域に挿入されており；または前記少なくとも１つの外因性抗原コード配列が、２つまたはそれよりも多くの挿入座に挿入されており；および／または前記少なくとも１つの挿入遺伝子座は、挿入遺伝子座Ｃ３であり；および／または前記ウイルスベクターが、前記挿入遺伝子座Ｃ３のフランキング配列、好ましくは配列番号４５（Ｃ３フランキング領域左アーム）および配列番号４６（Ｃ３フランキング領域右アーム）に記載の前記挿入遺伝子座Ｃ３のフランキング配列を含み；または前記少なくとも１つの挿入遺伝子座は、挿入遺伝子座Ｃ５であり；および／または前記ウイルスベクターが、前記挿入遺伝子座Ｃ５のフランキング配列、好ましくは配列番号４７（Ｃ５フランキング領域左アーム）および配列番号４８（Ｃ３フランキング領域右アーム）に記載の前記挿入遺伝子座Ｃ５のフランキング配列を含む、請求項１〜１０のいずれか１項に記載のウイルスベクター。
【請求項１２】
配列番号４９、配列番号５０、配列番号５１、配列番号９５からなる群から選択される核酸配列と少なくとも７０％同一であり、好ましくは配列番号４９、配列番号５０、配列番号５１、配列番号９５からなる群から選択される核酸配列である核酸配列を含む、請求項１〜１１のいずれか１項に記載のウイルスベクター。
【請求項１３】
前記ネコ科動物が、ネコ、好ましくはイエネコである、請求項１〜１２のいずれか１項に記載のウイルスベクター。
【請求項１４】
請求項１〜１３のいずれか１項に記載のウイルスベクターを含むことを特徴とする哺乳動物宿主細胞。
【請求項１５】
免疫原性組成物またはワクチンを製造するための、請求項１〜１３のいずれか１項に記載のウイルスベクターまたは請求項１４に記載の哺乳動物宿主細胞の使用。
【請求項１６】
（ａ）請求項１〜１３のいずれか１項に記載のウイルスベクターもしくは請求項１４に記載の哺乳動物宿主細胞、および／または
（ｂ）ウイルス、修飾生ウイルス、もしくはウイルス様粒子（ＶＬＰ）などの、請求項１〜１３のいずれか１項に記載のウイルスベクターによりコードされるポリペプチド、および
（ｃ）任意に、薬学的にまたは獣医学的に許容される担体もしくは賦形剤であって、好ましくは、前記担体は経口、皮内、筋肉内、または鼻腔内適用に好適である、担体もしくは賦形剤
を含み、
好ましくは、感染性ウイルスなどのウイルスを含む、免疫原性組成物。
【請求項１７】
（ａ）請求項１〜１３のいずれか１項に記載のウイルスベクターもしくは請求項１４に記載の哺乳動物宿主細胞、および／または
（ｂ）ウイルス、修飾生ウイルス、もしくはウイルス様粒子（ＶＬＰ）などの、請求項１〜１３のいずれか１項に記載のウイルスベクターによりコードされるポリペプチド、および
（ｃ）薬学的にまたは獣医学的に許容される担体もしくは賦形剤であって、好ましくは前記担体は、経口、皮内、筋肉内、または鼻腔内適用に好適である、担体もしくは賦形剤
を含み、
（ｄ）任意に、アジュバントをさらに含む、ワクチンまたは医薬組成物。
【請求項１８】
少なくとも１つの病原性パラミクソウイルスによる感染症に関連するかまたはそれにより引き起こされる１つまたは複数の臨床徴候の発生および／または重症度を低減するための免疫原性組成物またはワクチンを調製するための方法であって、
（ａ）請求項１４に記載の哺乳動物宿主細胞を、請求項１〜１３のいずれか１項に記載のウイルスベクターで感染させるステップ、
（ｂ）前記感染細胞を好適な条件下で培養するステップ、
（ｃ）感染細胞培養物を収集するステップ、
（ｄ）任意に、ステップ（ｃ）の収集した感染細胞培養物を精製するステップ、
（ｅ）任意に、前記収集した感染細胞培養物を薬学的に許容される担体と混合するステップ
を含む方法。
【請求項１９】
少なくとも１つの病原性パラミクソウイルスによる感染症により引き起こされる臨床徴候または疾患を低減または予防するための方法で使用するための、または少なくとも１つの病原性パラミクソウイルスによる感染症を治療および／または予防するための方法で使用するための、請求項１６に記載の免疫原性組成物または請求項１７に記載のワクチンであって、好ましくは、前記ネコ科動物は、ネコ、より好ましくはイエネコであり、好ましくは、前記少なくとも１つの病原性パラミクソウイルスは、少なくとも１つのネコパラミクソウイルスであり、好ましくは、前記少なくとも１つの病原性パラミクソウイルスによる感染症により引き起こされる臨床徴候もしくは疾患、または前記少なくとも１つの病原性パラミクソウイルスによる感染症は、ウイルス血症、発熱、環境へのウイルス排出、泌尿生殖器系の感染症、尿路系の感染症、腎臓疾患、慢性腎臓疾患（ＣＫＤ）、腎尿細管および腎間質組織の炎症、および特発性尿細管間質性腎炎（ＴＩＮ）からなる群から選択される、請求項１６に記載の免疫原性組成物または請求項１７に記載のワクチン。
【請求項２０】
ネコ、より好ましくはイエネコ、などのネコ科動物を、前記ネコ科動物において少なくとも１つの病原性パラミクソウイルスにより引き起こされる臨床疾患に対して免疫するための方法であって、請求項１６に記載の免疫原性組成物または請求項１７に記載のワクチンを前記ネコ科動物に投与するステップを含み、前記免疫原性組成物またはワクチンは、感染の臨床徴候を引き起こさないが、前記少なくとも１つのパラミクソウイルスの病原性形態に対して前記ネコ科動物を免疫する免疫応答を誘導することが可能であり、好ましくは、前記少なくとも１つの病原性パラミクソウイルスは、少なくとも１つのネコパラミクソウイルスであり、好ましくは、前記臨床疾患または前記感染の臨床徴候は、ウイルス血症、発熱、環境へのウイルス排出、泌尿生殖器系の感染症、尿路系の感染症、腎臓疾患、慢性腎臓疾患（ＣＫＤ）、腎尿細管および腎間質組織の炎症、特発性尿細管間質性腎炎（ＴＩＮ）からなる群から選択される方法。
【請求項２１】
ネコ科動物における少なくとも１つの病原性パラミクソウイルスに関連する疾患に対して、ネコ科動物、好ましくはネコ、より好ましくはイエネコにワクチン接種するための、および／またはネコ科動物において少なくとも１つの病原性パラミクソウイルスに関連するかまたはそれにより引き起こされる１つまたは複数の臨床徴候の発生または重症度を低減するためのキットであって、
（ａ）前記ネコ科動物にワクチンを投与することが可能なディスペンサー、および
（ｂ）請求項１６に記載の免疫原性組成物または請求項１７に記載のワクチン、および、
（ｃ）任意に、使用説明書を含み、
好ましくは、前記少なくとも１つの病原性パラミクソウイルスは、少なくとも１つのネコパラミクソウイルスであり、好ましくは、前記疾患または前記臨床徴候は、ウイルス血症、発熱、環境へのウイルス排出、泌尿生殖器系の感染症、尿路系の感染症、腎臓疾患、慢性腎臓疾患（ＣＫＤ）、腎尿細管および腎間質組織の炎症、特発性尿細管間質性腎炎（ＴＩＮ）からなる群から選択される、キット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
配列表
本出願は、連邦規則法典第３７巻１．８２１〜１．８２５に準拠した配列表を含む。本出願に添付されている配列表は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０００２】
Ａ．発明の分野
本発明は、（ベクター）ワクチンの分野、特に、組換えウイルスベクター系から発現される外因性ネコパラミクソウイルス遺伝子に関する。さらに、本発明は、組換えウイルスベクターに基づくネコパラミクソウイルスワクチンに関する。
【背景技術】
【０００３】
Ｂ．関連技術の背景および説明
ネコパラミクソウイルス
パラミクソウイルスは、ヒトおよび動物の少なからぬ感染性疾患に関連するエンベロープ付きマイナスセンス一本鎖ＲＮＡ［（−）ｓｓＲＮＡ］ウイルスである。パラミクソウイルスには、パラミクソウイルス亜科およびニューモウイルス亜科という２つの亜科があり、パラミクソウイルス亜科内には、少なくとも５つの属、すなわちレスピロウイルス、ルブラウイルス、モルビリウイルス、ヘニパウイルス、およびアブラウイルスがある。パラミクソウイルスの例としては、イヌジステンパーウイルス、麻疹ウイルス、牛疫ウイルス、おたふくかぜウイルス、およびヒトパラインフルエンザウイルスが挙げられる。パラミクソウイルスは、７つのウイルスポリペプチド：ヌクレオカプシドタンパク質、リンタンパク質、マトリックスタンパク質、融合タンパク質、赤血球凝集素タンパク質、およびポリメラーゼをコードする直鎖状ゲノムを有する。パラミクソウイルスビリオンは、エンベロープ付きであり、球状、糸状性、または多形態性であってもよく、約１５０ｎｍの直径を有してもよい。融合タンパク質および付着タンパク質（血球凝集素、「Ｈ」）は、スパイクとしてビリオン表面に出現する。エンベロープ内部のマトリックスタンパク質（「Ｍ」）は、ウイルスの構造を安定させる。ヌクレオカプシドコアは、ゲノムＲＮＡ、ヌクレオカプシドタンパク質（「Ｎ」）、リンタンパク質（「Ｐ」）、およびポリメラーゼタンパク質（「大型タンパク質」を表す「Ｌ」）で構成される。融合タンパク質（「Ｆ」）は、三量体としてエンベロープ表面から突き出ており、ウイルスエンベロープと細胞膜との融合を誘導することにより細胞進入を媒介する。
【０００４】
例えば、パラミクソウイルスは、ネコ、げっ歯動物、およびコウモリを含む野生動物および飼育動物だけでなくヒトからも単離されている。パラミクソウイルス感染症、特にパラミクソウイルス亜科のパラミクソウイルス感染症は、種々の種にみられる腎組織損傷による腎臓疾患に関連している。腎臓疾患、特に慢性腎臓疾患（ＣＫＤ）は、例えば、最も一般的な疾患の中でも、イエネコの、特により高齢の個体のイエネコの最も一般的な死因の１つである。Ｌｕｌｉｃｈら（Compendium on continuing education for the practicing veterinarian (1992) 14(2):127-152）には、慢性腎臓疾患の有病率が、イエネコ集団全体では約１．５％であり、１０歳よりも高齢のイエネコでは約７．５％であることが報告されている。こうした疾患の原因は、非常に多様であり得る。多くの場合、正確な病因を決定することはできない。その一方で、慢性腎臓疾患は、腎尿細管および腎間質組織の炎症の結果として最も頻繁に生じることが知られている。これは、特発性尿細管間質性腎炎（ＴＩＮ）と呼ばれる。
幾つかのネコパラミクソウイルスが、当技術分野に記載されている。米国特許出願公開第２０１３／０２３０５２９号明細書（国際公開第２０１３／１０７２９０号パンフレット）、Ｗｏｏら（Proc. Nat. Acad. Sci. (2012) 109(14):5435-5440）には、イエネコのＴＩＮに関連する、香港で単離されたネコモルビリウイルス（ＦｍｏＰＶ）が記載されている。日本（Sakaguchi et al. (2014) General Virology, 95(7), 1464-1468; Furuya et al. (2014) Archives of virology, 159(2), 371-373）、イタリア（Lorusso et al. (2013) Vet Ital. 51(3):235-237）、およびアメリカ合衆国（Sharp et al. (2016) Emerging Infectious Diseases 22(4):760）の他の研究グループも、ネコの尿試料にパラミクソウイルスを検出した。Ｓｉｅｇら（Virus Genes (2015) 51(2):294-297）には、慢性腎臓疾患を有するイエネコにネコパラミクソウイルスを発見したことが記載されている。
さらに、この点に関する従来技術は、以下の通りである：特開２０１５  １９８６５４号公報は、ネコモルビリウイルスの新規株を単離／特定するための手段、およびネコモルビリウイルス感染に対する有効な予防対策に関する。Ｍａｒｃａｃｃｉ  Ｍら（Journal of Virological Methods 2016, 234: 160-163）には、イタリアのネコモルビリウイルスのゲノム特徴付けが記載されている。
【０００５】
ウイルスベクター系
アビポックスウイルスウイルスベクター系は、天然で宿主限定的なポックスウイルスであるアビポックスウイルスに基づく。そのようなアビポックスウイルスの中でも、カナリアポックスウイルス（ＣＰＶ）は、外来性、異種性、外的、外因性の遺伝子産物を発現するように遺伝子操作されている（Taylor J et al., Vaccine 1991, 9(3): 190-193；Taylor J et al., Virology 1992, 187(1): 321-328；Taylor J et al., Dev Biol Stand 1994, 82: 131-135）。
組換えポックスウイルスは、当技術分野で公知であり、米国特許第４，７６９，３３０号明細書；第４，７２２，８４８号明細書；第４，６０３，１１２号明細書；第５，１１０，５８７号明細書；第５，１７４，９９３号明細書；第５，４９４，８０７号明細書；および第５，５０５，９４１号明細書に記載のワクシニアウイルスおよびアビポックスウイルスなどのポックスウイルスの合成組換え体を創出するための方法に類似する２ステップで構築することができる。これらの文献の開示は、参照により本明細書に組み込まれる。
【０００６】
具体的には、ＡＬＶＡＣは、カナリアポックスウイルスに由来する、遺伝子操作されたポックスウイルスベクターである（例えば、米国特許第５，７５６，１０３号明細書）。ＡＬＶＡＣは、ヒトカナリアポックスワクチンであるＫａｎａｐｏｘのプラーククローン派生物だった弱毒化カナリアポックスウイルスに基づくベクターである。外因性免疫原を発現する、ＡＬＶＡＣに基づく組換えウイルスも、ワクチンベクターとして有効であることが実証されている（例えば、Tartaglia J et al., J Virology 1993, 67(4): 2370-2375を参照）。このアビポックスベクターは、生産的複製が鳥類に限定されており、非トリ宿主では生産的に複製せず、これは、その安全性プロファイルを向上させると考えられる特徴である。ヒト細胞培養では、カナリアポックスウイルス複製は、ウイルス複製サイクルのウイルスＤＮＡ合成前に早期終了する。にもかかわらず、外因性免疫原を発現するように遺伝子操作されると、哺乳動物細胞での正常な発現およびプロセシングがｉｎ  ｖｉｔｒｏで観察され、多数の哺乳動物種への接種は、外因性免疫原に応答して抗体および細胞性免疫応答を誘導し、同種病原体による負荷に対する防御を提供する（Taylor J et al., Vaccine 1991, 9(3): 190-193；Taylor J et al., Virology 1992, 187(1): 321-328）。ＡＬＶＡＣは、ブダペスト条約の条項に基づき、アメリカ培養細胞系統保存機関（ＡＴＣＣ）に寄託番号ＶＲ−２５４７として寄託された（米国特許第５，７５６，１０３号明細書。この文献の開示は、参照により本明細書に組み込まれる）。
【０００７】
ＴＲＯＶＡＣは、１日齢ヒナのワクチン接種について認可されている鶏痘ウイルスのＦＰ１−ワクチン株に由来するプラーククローン分離株だった弱毒化鶏痘ウイルスベクターを指す（例えば、米国特許第５，７６６，５９９号明細書）。親ウイルス株Ｄｕｖｅｔｔｅは、ニワトリの鶏痘痂皮としてフランスで得られた。このウイルスは、ニワトリ有胚卵でおよそ５０回連続継代し、続いてニワトリ胚線維芽細胞で２５回継代することにより弱毒化された。このウイルスは、４回連続のプラーク精製にかけられた。１つのプラーク単離株が、初代ＣＥＦ細胞でさらに増幅され、ＴＲＯＶＡＣと命名されたストックウイルスが確立された。ＴＲＯＶＡＣは、ブダペスト条約の条項に基づき、アメリカ培養細胞系統保存機関（ＡＴＣＣ）に寄託番号ＶＲ−２５５３として寄託された（米国特許第５，７６６，５９９号明細書。この文献の開示は、参照により本明細書に組み込まれる）。
【０００８】
ＡＬＶＡＣおよびＴＲＯＶＡＣベクターに基づくワクチン接種手法の具体的な応用は、例えば、国際公開第２００６／０７３４３１号パンフレット、国際公開第２００６／１１５８４３号パンフレット、および国際公開第２０１３／１２３２４２号パンフレットに記載されている。これらの文献の開示は、参照により本明細書に組み込まれる。
さらなる従来技術は、以下の通りである：Ｗｅｌｉ  ＳＣら（Virology J. 2011, 8 (1): 49）には、アビポックスウイルス：ワクチンベクターとしての感染生物学およびそれらの使用が記載されている。国際公開第２００５／０１３９１８号パンフレットは、可溶性短縮ポックスウイルスエンベロープタンパク質を含むポックスウイルスワクチンに関する。Ｄｅ  Ｖｒｉｅｓ  Ｐら（J. Gen. Virol. 1988, 69: 2071-2083）には、イヌジステンパーウイルス（ＣＤＶ）免疫刺激性複合体（Ｉｓｃｏｍ）は、ＣＤＶ感染からイヌを防御するが、麻疹ウイルスｉｓｃｏｍは防御しないことが開示される。Ｍａｒｃｉａｎｉ  ＤＪら（Vaccine 1991, 9(2): 89-96）には、ネコ白血病ウイルスに対する遺伝子的に操作されたサブユニットワクチンのネコにおける防御免疫応答が記載されている。ＭｃＥａｃｈｅｒｎ  ＪＡら（Vaccine 2008, 26(31): 3842-3852）には、組換えサブユニットワクチン製剤が、致死性ニパウイルス負荷からネコを防御することが記載されている。
【０００９】
ほとんどの利用可能なパラミクソウイルスワクチンおよびより特定的にはモルビリウイルスは、修飾生ウイルスワクチンである。それらは、通常、安全および有効である。しかしながら、一部の古典的な修飾生ウイルスと同様に、時として病原性復帰突然変異（reversion to virulence）が生じる場合がある。例として、一部のジステンパーワクチン株の病原性復帰突然変異の幾つかの事例が報告されている。したがって、古典的な弱毒化株の潜在的安全性問題を克服する対策としての安全なベクターに対する必要性は満たされていない。
【発明の概要】
【００１０】
従来技術の欠点を克服するために、本発明は、ウイルスベクターワクチンおよびネコパラミクソウイルス（feline paramyxovirus）／ネコモルビリウイルス（feline morbillivirus）ワクチンから発現される新規の標的抗原を提供する。
本発明は、中でも、好ましくは、弱毒化カナリアポックスベクターまたは弱毒化鶏痘ベクター、例えばＡＬＶＡＣまたはＴＲＯＶＡＣなどのアビポックスウイルスウイルスベクターにより、ネコパラミクソウイルス（感染症）に対してネコ科動物を免疫する効果的なウイルスベクターワクチンを開発することに関する。そのような弱毒化ベクターは、少なくとも１つのネコパラミクソウイルス抗原をコードし、異種性タンパク質を発現することはできるが、複製は制限されるかまたは生産的でない。
本発明は、ネコ科動物に感染する少なくとも１つの病原体に関係する少なくとも１つの外因性抗原コード配列を含むウイルスベクター、好ましくは組換えおよび／または天然に存在しないウイルスベクターであって、ネコ科動物に感染する少なくとも１つの病原体は、ネコパラミクソウイルスである、ウイルスベクターに関する。好ましくは、ウイルスベクターは、アビポックスウイルスウイルスベクター、イヌモルビリウイルスウイルスベクター、ヘルペスウイルスウイルスベクター、水痘ウイルスウイルスベクターからなる群から選択される。
本発明は、本明細書に記載および特許請求されているウイルスベクターを含むことを特徴とする哺乳動物宿主細胞に関する。
本発明は、免疫原性組成物またはワクチンを製造するための、本明細書に記載および特許請求されているウイルスベクターまたは本明細書に記載および特許請求されている哺乳動物宿主細胞の使用に関する。
【００１１】
本発明は、
（ａ）本明細書に記載および特許請求されているウイルスベクターもしくは本明細書に記載および特許請求されている哺乳動物宿主細胞、および／または
（ｂ）ウイルス、修飾生ウイルス、もしくはウイルス様粒子（ＶＬＰ）などの、本明細書に記載および特許請求されているウイルスベクターによりコードされるポリペプチド、および
（ｃ）任意に、薬学的にまたは獣医学的に許容される担体もしくは賦形剤であって、好ましくは、前記担体は経口、皮内、筋肉内、または鼻腔内適用に好適である、担体もしくは賦形剤
を含み、
好ましくは、感染性ウイルスなどのウイルスを含む、免疫原性組成物に関する。
【００１２】
本発明は、
（ａ）本明細書に記載および特許請求されているウイルスベクターもしくは本明細書に記載および特許請求されている哺乳動物宿主細胞、および／または
（ｂ）ウイルス、修飾生ウイルス、もしくはウイルス様粒子（ＶＬＰ）などの、本明細書に記載および特許請求されているウイルスベクターによりコードされるポリペプチド、および
（ｃ）薬学的にまたは獣医学的に許容される担体もしくは賦形剤であって、好ましくは、前記担体は経口、皮内、筋肉内、または鼻腔内適用に好適である、担体もしくは賦形剤
を含み、
（ｄ）任意に、アジュバントをさらに含む、ワクチンまたは医薬組成物に関する。
【００１３】
本発明は、少なくとも１つの病原性パラミクソウイルスによる感染症に関連するかまたはそれにより引き起こされる１つまたは複数の臨床徴候の発生および／または重症度を低減するための免疫原性組成物またはワクチンを調製するための方法であって、
（ａ）本明細書に記載および特許請求されている哺乳動物宿主細胞を、本明細書に記載および特許請求されているウイルスベクターで感染させるステップ、
（ｂ）感染細胞を好適な条件下で培養するステップ、
（ｃ）感染細胞培養物を収集するステップ、
（ｄ）任意に、ステップ（ｃ）の収集した感染細胞培養物を精製するステップ、
（ｅ）任意に、前記収集した感染細胞培養物を薬学的に許容される担体と混合するステップ
を含む方法に関する。
【００１４】
本発明は、少なくとも１つの病原性パラミクソウイルスによる感染症により引き起こされる臨床徴候または疾患を低減または予防するための方法で使用するための、または少なくとも１つの病原性パラミクソウイルスによる感染症を治療および／または予防するための方法で使用するための、本明細書に記載および特許請求されている免疫原性組成物または本明細書に記載および特許請求されているワクチンであって、好ましくは、前記ネコ科動物は、ネコ、より好ましくはイエネコであり、好ましくは、少なくとも１つの病原性パラミクソウイルスは、少なくとも１つのネコパラミクソウイルスであり、好ましくは、前記少なくとも１つの病原性パラミクソウイルスによる感染症により引き起こされる臨床徴候もしくは疾患、または前記少なくとも１つの病原性パラミクソウイルスによる感染症は、ウイルス血症、発熱、環境へのウイルス排出、泌尿生殖器系の感染症、尿路系の感染症、腎臓疾患、慢性腎臓疾患（ＣＫＤ）、腎尿細管および腎間質組織の炎症、特発性尿細管間質性腎炎（ＴＩＮ）からなる群から選択される、免疫原性組成物またはワクチンに関する。
【００１５】
本発明は、ネコ、より好ましくはイエネコ、などのネコ科動物を、前記ネコ科動物において少なくとも１つの病原性パラミクソウイルスにより引き起こされる臨床疾患に対して免疫するための方法であって、本明細書に記載および特許請求されている免疫原性組成物または本明細書に記載および特許請求されているワクチンをネコ科動物に投与するステップを含み、前記免疫原性組成物またはワクチンは、感染の臨床徴候を引き起こさないが、前記少なくとも１つのパラミクソウイルスの病原性形態に対してネコ科動物を免疫する免疫応答を誘導することが可能であり、好ましくは、少なくとも１つの病原性パラミクソウイルスは、少なくとも１つのネコパラミクソウイルスであり、好ましくは、前記臨床疾患または前記感染の臨床徴候は、ウイルス血症、発熱、環境へのウイルス排出、泌尿生殖器系の感染症、尿路系の感染症、腎臓疾患、慢性腎臓疾患（ＣＫＤ）、腎尿細管および腎間質組織の炎症、特発性尿細管間質性腎炎（ＴＩＮ）からなる群から選択される方法に関する。
【００１６】
本発明は、ネコ科動物における少なくとも１つの病原性パラミクソウイルスに関連する疾患に対して、ネコ科動物、好ましくはネコ、より好ましくはイエネコにワクチン接種するための、および／またはネコ科動物において少なくとも１つの病原性パラミクソウイルスに関連するかまたはそれにより引き起こされる１つまたは複数の臨床徴候の発生または重症度を低減するためのキットであって、
（ａ）前記ネコ科動物にワクチンを投与することが可能なディスペンサー、および
（ｂ）本明細書に記載および特許請求されている免疫原性組成物または本明細書に記載および特許請求されているワクチン、および
（ｃ）任意に、使用説明書を含み、
好ましくは、少なくとも１つの病原性パラミクソウイルスは、少なくとも１つのネコパラミクソウイルスであり、好ましくは、前記疾患または前記臨床徴候は、ウイルス血症、発熱、環境へのウイルス排出、泌尿生殖器系の感染症、尿路系の感染症、腎臓疾患、慢性腎臓疾患（ＣＫＤ）、腎尿細管および腎間質組織の炎症、特発性尿細管間質性腎炎（ＴＩＮ）からなる群から選択されるキットに関する。
【００１７】
中でも、本発明の根本的な利点は、以下の通りである。
（１）ベクター化ワクチンは、弱毒化生ワクチンと比較して安全性が高いこと。
（２）免疫化が所与の（免疫優性）抗原に対して向けられることにより、ネコパラミクソウイルスの潜在的な免疫抑制タンパク質の発現が回避されること。
（３）ベクター化ワクチンは、市販ワクチン製品と同等の高力価になるまで増殖させることができること。
したがって、上記の技術的課題の解決策は、本明細書および特許請求の範囲で特徴付けられている実施形態により達成され、その異なる態様の本発明は、特許請求の範囲に従って実施される。
以下の図面は、本明細書の一部を形成し、本発明のある態様をさらに実証するために含まれている。本発明は、本明細書に示される具体的な実施形態の詳細な説明と組み合わせてこうした図面を参照することにより、さらにより良好に理解することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１８】
【図１Ａ−１】２つのドナープラスミドｐＣ３  ４２ｋゴードンＭ（ｏｐｔ）およびｐＣ５  Ｈ６ｐゴードンＨ（ｏｐｔ）によるｉｎ  ｖｉｔｒｏ組換え（ＩＶＲ）、および得られた２つの構築物ｖＣＰ３０２５およびｖＣＰ３０２９に関する模式的全体図を示す図である。
【図１Ａ−２】２つのドナープラスミドｐＣ３  ４２ｋゴードンＭ（ｏｐｔ）およびｐＣ５  Ｈ６ｐゴードンＨ（ｏｐｔ）によるｉｎ  ｖｉｔｒｏ組換え（ＩＶＲ）、および得られた２つの構築物ｖＣＰ３０２５およびｖＣＰ３０２９に関する模式的全体図を示す図である。
【図１Ａ−３】２つのドナープラスミドｐＣ３  ４２ｋゴードンＭ（ｏｐｔ）およびｐＣ５  Ｈ６ｐゴードンＨ（ｏｐｔ）によるｉｎ  ｖｉｔｒｏ組換え（ＩＶＲ）、および得られた２つの構築物ｖＣＰ３０２５およびｖＣＰ３０２９に関する模式的全体図を示す図である。
【図１Ｂ】２つのドナープラスミドｐＣ３  ４２ｋゴードンＭ（ｏｐｔ）およびｐＣ５  Ｈ６ｐゴードンＨ（ｏｐｔ）によるｉｎ  ｖｉｔｒｏ組換え（ＩＶＲ）、および得られた２つの構築物ｖＣＰ３０２５およびｖＣＰ３０２９に関する模式的全体図を示す図である。
【図２−１】挿入遺伝子座Ｃ５の右フランキング配列、Ｈ６プロモーター、ゴードンＨ（ｏｐｔ）、および挿入遺伝子座Ｃ５の左フランキング配列を含む、ｖＣＰ３０２５クローン挿入遺伝子座Ｃ５および塩基対３０４，７０１〜３０８，８７０のその確認されたヌクレオチド配列を示す図である。
【図２−２】挿入遺伝子座Ｃ５の右フランキング配列、Ｈ６プロモーター、ゴードンＨ（ｏｐｔ）、および挿入遺伝子座Ｃ５の左フランキング配列を含む、ｖＣＰ３０２５クローン挿入遺伝子座Ｃ５および塩基対３０４，７０１〜３０８，８７０のその確認されたヌクレオチド配列を示す図である。
【図３−１】挿入遺伝子座Ｃ５の右フランキング配列、Ｈ６プロモーター、ゴードンＨ（ｏｐｔ）、および挿入遺伝子座Ｃ５の左フランキング配列を含む、ｖＣＰ３０２９クローン挿入遺伝子座Ｃ５および塩基対３０４，１６６〜３０８，３８０のその確認されたヌクレオチド配列を示す図である。
【図３−２】挿入遺伝子座Ｃ５の右フランキング配列、Ｈ６プロモーター、ゴードンＨ（ｏｐｔ）、および挿入遺伝子座Ｃ５の左フランキング配列を含む、ｖＣＰ３０２９クローン挿入遺伝子座Ｃ５および塩基対３０４，１６６〜３０８，３８０のその確認されたヌクレオチド配列を示す図である。
【図４−１】挿入遺伝子座Ｃ３の右フランキング配列、４２ｋプロモーター、ゴードンＭ（ｏｐｔ）、および挿入遺伝子座Ｃ３の左フランキング配列を含む、ｖＣＰ３０２９クローン挿入遺伝子座Ｃ３および塩基対３８，６０８〜４２，８０７のその確認されたヌクレオチド配列を示す図である。
【図４−２】挿入遺伝子座Ｃ３の右フランキング配列、４２ｋプロモーター、ゴードンＭ（ｏｐｔ）、および挿入遺伝子座Ｃ３の左フランキング配列を含む、ｖＣＰ３０２９クローン挿入遺伝子座Ｃ３および塩基対３８，６０８〜４２，８０７のその確認されたヌクレオチド配列を示す図である。
【図５】負荷モデル臨床研究（実施例４）の実験計画および追跡研究に関する図式的全体図を示す図である。
【図６−１】親ＡＬＶＡＣベクターｖＣＰ３０２５およびドナープラスミドｐＣ３  ４２ｋ長ラポンＨ（ｗｔ、ＢａｍＨ１制限酵素部位を有しない）によるｉｎ  ｖｉｔｒｏ組換え（ＩＶＲ）および得られた構築物ｖＣＰ３０４１に関する模式的全体図を示す図である。
【図６−２】親ＡＬＶＡＣベクターｖＣＰ３０２５およびドナープラスミドｐＣ３  ４２ｋ長ラポンＨ（ｗｔ、ＢａｍＨ１制限酵素部位を有しない）によるｉｎ  ｖｉｔｒｏ組換え（ＩＶＲ）および得られた構築物ｖＣＰ３０４１に関する模式的全体図を示す図である。
【図６−３】親ＡＬＶＡＣベクターｖＣＰ３０２５およびドナープラスミドｐＣ３  ４２ｋ長ラポンＨ（ｗｔ、ＢａｍＨ１制限酵素部位を有しない）によるｉｎ  ｖｉｔｒｏ組換え（ＩＶＲ）および得られた構築物ｖＣＰ３０４１に関する模式的全体図を示す図である。
【図７−１】挿入遺伝子座Ｃ３の右フランキング配列、４２ｋ長プロモーター、ラポンＨ（ｗｔ；ＢａｍＨＩ制限酵素部位無し）、および挿入遺伝子座Ｃ３の左フランキング配列を含む、ｖＣＰ３０４１クローン挿入遺伝子座Ｃ３および塩基対３８，６１９〜４３，５８８のその理論的ヌクレオチド配列を示す図である。
【図７−２】挿入遺伝子座Ｃ３の右フランキング配列、４２ｋ長プロモーター、ラポンＨ（ｗｔ；ＢａｍＨＩ制限酵素部位無し）、および挿入遺伝子座Ｃ３の左フランキング配列を含む、ｖＣＰ３０４１クローン挿入遺伝子座Ｃ３および塩基対３８，６１９〜４３，５８８のその理論的ヌクレオチド配列を示す図である。
【図７−３】挿入遺伝子座Ｃ３の右フランキング配列、４２ｋ長プロモーター、ラポンＨ（ｗｔ；ＢａｍＨＩ制限酵素部位無し）、および挿入遺伝子座Ｃ３の左フランキング配列を含む、ｖＣＰ３０４１クローン挿入遺伝子座Ｃ３および塩基対３８，６１９〜４３，５８８のその理論的ヌクレオチド配列を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
本発明は、従来技術につきまとう問題を解決し、技術水準における顕著な進歩を提供する。
概して、本発明は、ネコ科動物に感染する少なくとも１つの病原体に関係する少なくとも１つの外因性抗原コード配列を含むウイルスベクターであって、ネコ科動物に感染する少なくとも１つの病原体は、ネコパラミクソウイルスである、ウイルスベクターに関する。
特定の態様では、本明細書に記載および特許請求されているそのようなウイルスベクターは、アビポックスウイルスウイルスベクター、イヌモルビリウイルスウイルスベクター、ヘルペスウイルスウイルスベクター、水痘ウイルスウイルスベクターからなる群から選択される。
【００２０】
別の特定の態様では、本明細書に記載および特許請求されているネコパラミクソウイルスであるネコ科動物に感染する少なくとも１つの病原体は、以下のものからなる群から選択される：
（ａ）ネコパラミクソウイルス２型（ＦＰａＶ−２）；
（ｂ）ネコパラミクソウイルス２型（ＦＰａＶ−２）であって、そのゲノムが、
（ｉ）配列番号１に記載の核酸配列、
（ｉｉ）配列番号１と少なくとも７０％同一である、配列番号１と少なくとも７５％同一である、配列番号１と少なくとも８０％同一である、配列番号１と少なくとも８５％同一である、配列番号１と少なくとも９０％同一である、配列番号１と少なくとも９１％同一である、配列番号１と少なくとも９２％同一である、配列番号１と少なくとも９３％同一である、配列番号１と少なくとも９４％同一である、配列番号１と少なくとも９５％同一である、配列番号１と少なくとも９６％同一である、配列番号１と少なくとも９７％同一である、配列番号１と少なくとも９８％同一である、配列番号１と少なくとも９９％同一である核酸配列
からなる群から選択される核酸配列に相補的なリボ核酸を含む、ネコパラミクソウイルス２型（ＦＰａＶ−２）；
（ｃ）寄託番号ＣＮＣＭＩ−５１２３として国立培養微生物コレクション（Collection Nationale de Culture de Microorganismes）（ＣＮＣＭ）に寄託されたネコパラミクソウイルス２型（ＦＰａＶ−２）；
（ｄ）ネコパラミクソウイルス２型（ＦＰａＶ−２）であって、そのゲノムが、
（ｉ）配列番号２に記載の核酸配列、
（ｉｉ）配列番号２と少なくとも７０％同一である、配列番号２と少なくとも７５％同一である、配列番号２と少なくとも８０％同一である、配列番号２と少なくとも８５％同一である、配列番号２と少なくとも９０％同一である、配列番号２と少なくとも９１％同一である、配列番号２と少なくとも９２％同一である、配列番号２と少なくとも９３％同一である、配列番号２と少なくとも９４％同一である、配列番号２と少なくとも９５％同一である、配列番号２と少なくとも９６％同一である、配列番号２と少なくとも９７％同一である、配列番号２と少なくとも９８％同一である、配列番号２と少なくとも９９％同一である核酸配列
からなる群から選択される核酸配列に相補的なリボ核酸を含む、ネコパラミクソウイルス２型（ＦＰａＶ−２）；
（ｅ）ネコモルビリウイルス（ＦｅＭｏＶ）；
（ｆ）ネコモルビリウイルス（ＦｅＭｏＶ）であって、そのゲノムが、
（ｉ）配列番号３に記載の核酸配列、
（ｉｉ）配列番号３と少なくとも７０％同一である、配列番号３と少なくとも７５％同一である、配列番号３と少なくとも８０％同一である、配列番号３と少なくとも８５％同一である、配列番号３と少なくとも９０％同一である、配列番号３と少なくとも９１％同一である、配列番号３と少なくとも９２％同一である、配列番号３と少なくとも９３％同一である、配列番号３と少なくとも９４％同一である、配列番号３と少なくとも９５％同一である、配列番号３と少なくとも９６％同一である、配列番号３と少なくとも９７％同一である、配列番号３と少なくとも９８％同一である、配列番号３と少なくとも９９％同一である核酸配列
からなる群から選択される核酸配列に相補的なリボ核酸を含む、ネコモルビリウイルス（ＦｅＭｏＶ）。
【００２１】
別の特定の態様では、本明細書に記載および特許請求されているネコパラミクソウイルスであるネコ科動物に感染する少なくとも１つの病原体は、以下のものからなる群から選択される：
（ｂ）ネコパラミクソウイルス２型（ＦＰａＶ−２）であって、そのゲノムが、
（ｉ）配列番号１に記載の核酸配列、
（ｉｉ）配列番号１と少なくとも７０％同一である、配列番号１と少なくとも７５％同一である、配列番号１と少なくとも８０％同一である、配列番号１と少なくとも８５％同一である、配列番号１と少なくとも９０％同一である、配列番号１と少なくとも９１％同一である、配列番号１と少なくとも９２％同一である、配列番号１と少なくとも９３％同一である、配列番号１と少なくとも９４％同一である、配列番号１と少なくとも９５％同一である、配列番号１と少なくとも９６％同一である、配列番号１と少なくとも９７％同一である、配列番号１と少なくとも９８％同一である、配列番号１と少なくとも９９％同一である核酸配列
からなる群から選択される核酸配列に相補的なリボ核酸を含む、ネコパラミクソウイルス２型（ＦＰａＶ−２）；
（ｃ）寄託番号ＣＮＣＭＩ−５１２３として国立培養微生物コレクション（ＣＮＣＭ）に寄託されたネコパラミクソウイルス２型（ＦＰａＶ−２）；
（ｄ）ネコパラミクソウイルス２型（ＦＰａＶ−２）であって、そのゲノムが、
（ｉ）配列番号２に記載の核酸配列、
（ｉｉ）配列番号２と少なくとも７０％同一である、配列番号２と少なくとも７５％同一である、配列番号２と少なくとも８０％同一である、配列番号２と少なくとも８５％同一である、配列番号２と少なくとも９０％同一である、配列番号２と少なくとも９１％同一である、配列番号２と少なくとも９２％同一である、配列番号２と少なくとも９３％同一である、配列番号２と少なくとも９４％同一である、配列番号２と少なくとも９５％同一である、配列番号２と少なくとも９６％同一である、配列番号２と少なくとも９７％同一である、配列番号２と少なくとも９８％同一である、配列番号２と少なくとも９９％同一である核酸配列
からなる群から選択される核酸配列に相補的なリボ核酸を含む、ネコパラミクソウイルス２型（ＦＰａＶ−２）。
【００２２】
別の特定の態様では、ウイルスベクターは、組換えであり、および／または天然で存在しない。
別の特定の態様では、本明細書に記載および特許請求されているウイルスベクターは、カナリアポックスベクター、好ましくは弱毒化カナリアポックスベクター、より好ましくはＡＬＶＡＣ、さらにより好ましくはＡＬＶＡＣ−１またはＡＬＶＡＣ−２、最も好ましくはブダペスト条約の条項に基づき寄託番号ＶＲ−２５４７としてアメリカ培養細胞系統保存機関（ＡＴＣＣ）に寄託されたＡＬＶＡＣである。
別の特定の態様では、本明細書に記載および特許請求されているウイルスベクターは、鶏痘ベクター、好ましくは弱毒化鶏痘ベクター、より好ましくはＴＲＯＶＡＣ、最も好ましくはブダペスト条約の条項に基づき寄託番号ＶＲ−２５５３としてアメリカ培養細胞系統保存機関（ＡＴＣＣ）に寄託されたＴＲＯＶＡＣである。
別の特定の態様では、本明細書に記載および特許請求されているウイルスベクターは、ｖＣＰ３０２５、ｖＣＰ３０２９、ｖＣＰ３０４１からなる群から選択される。
【００２３】
さらに別の特定の態様では、本明細書に記載および特許請求されている少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列、マトリックスタンパク質（「Ｍ」）コード配列、融合タンパク質（「Ｆ」）コード配列、ヌクレオカプシドタンパク質（「Ｎ」）コード配列、リンタンパク質（「Ｐ」）コード配列、ＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼタンパク質（「Ｌ」）コード配列からなる群から選択され、より好ましくは血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列および／またはマトリックスタンパク質（「Ｍ」）コード配列および／または融合タンパク質（「Ｆ」）コード配列である。
さらに別の特定の態様では、本明細書に記載および特許請求されている少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列であり、血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列は、配列番号４と少なくとも７０％同一であり、配列番号４と少なくとも７５％同一であり、配列番号４と少なくとも８０％同一であり、配列番号４と少なくとも８５％同一であり、配列番号４と少なくとも９０％同一であり、配列番号４と少なくとも９１％同一であり、配列番号４と少なくとも９２％同一であり、配列番号４と少なくとも９３％同一であり、配列番号４と少なくとも９４％同一であり、配列番号４と少なくとも９５％同一であり、配列番号４と少なくとも９６％同一であり、配列番号４と少なくとも９７％同一であり、配列番号４と少なくとも９８％同一であり、配列番号４と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号４、配列番号５からなる群から選択される核酸配列を含む。
【００２４】
さらに別の特定の態様では、本明細書に記載および特許請求されている少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列であり、血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列は、配列番号６と少なくとも７０％同一であり、配列番号６と少なくとも７５％同一であり、配列番号６と少なくとも８０％同一であり、配列番号６と少なくとも８５％同一であり、配列番号６と少なくとも９０％同一であり、配列番号６と少なくとも９１％同一であり、配列番号６と少なくとも９２％同一であり、配列番号６と少なくとも９３％同一であり、配列番号６と少なくとも９４％同一であり、配列番号６と少なくとも９５％同一であり、配列番号６と少なくとも９６％同一であり、配列番号６と少なくとも９７％同一であり、配列番号６と少なくとも９８％同一であり、配列番号６と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号６に記載のアミノ酸配列であるアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードする核酸配列を含む。
【００２５】
さらに別の特定の態様では、本明細書に記載および特許請求されている少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、マトリックスタンパク質（「Ｍ」）コード配列であり、マトリックスタンパク質（「Ｍ」）コード配列は、配列番号７と少なくとも７０％同一であり、配列番号７と少なくとも７５％同一であり、配列番号７と少なくとも８０％同一であり、配列番号７と少なくとも８５％同一であり、配列番号７と少なくとも９０％同一であり、配列番号７と少なくとも９１％同一であり、配列番号７と少なくとも９２％同一であり、配列番号７と少なくとも９３％同一であり、配列番号７と少なくとも９４％同一であり、配列番号７と少なくとも９５％同一であり、配列番号７と少なくとも９６％同一であり、配列番号７と少なくとも９７％同一であり、配列番号７と少なくとも９８％同一であり、配列番号７と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号７、配列番号８からなる群から選択される核酸配列を含む。
【００２６】
さらに別の特定の態様では、本明細書に記載および特許請求されている少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、マトリックスタンパク質（「Ｍ」）コード配列であり、マトリックスタンパク質（「Ｍ」）コード配列は、配列番号９と少なくとも７０％同一であり、配列番号９と少なくとも７５％同一であり、配列番号９と少なくとも８０％同一であり、配列番号９と少なくとも８５％同一であり、配列番号９と少なくとも９０％同一であり、配列番号９と少なくとも９１％同一であり、配列番号９と少なくとも９２％同一であり、配列番号９と少なくとも９３％同一であり、配列番号９と少なくとも９４％同一であり、配列番号９と少なくとも９５％同一であり、配列番号９と少なくとも９６％同一であり、配列番号９と少なくとも９７％同一であり、配列番号９と少なくとも９８％同一であり、配列番号９と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号９に記載のアミノ酸配列であるアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードする核酸配列を含む。
【００２７】
さらに別の特定の態様では、本明細書に記載および特許請求されている少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、融合タンパク質（「Ｆ」）コード配列であり、融合タンパク質（「Ｆ」）コード配列は、配列番号１０と少なくとも７０％同一であり、配列番号１０と少なくとも７５％同一であり、配列番号１０と少なくとも８０％同一であり、配列番号１０と少なくとも８５％同一であり、配列番号１０と少なくとも９０％同一であり、配列番号１０と少なくとも９１％同一であり、配列番号１０と少なくとも９２％同一であり、配列番号１０と少なくとも９３％同一であり、配列番号１０と少なくとも９４％同一であり、配列番号１０と少なくとも９５％同一であり、配列番号１０と少なくとも９６％同一であり、配列番号１０と少なくとも９７％同一であり、配列番号１０と少なくとも９８％同一であり、配列番号１０と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号１０、配列番号１１からなる群から選択される核酸配列を含む。
【００２８】
さらに別の特定の態様では、本明細書に記載および特許請求されている少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、融合タンパク質（「Ｆ」）コード配列であり、融合タンパク質（「Ｆ」）コード配列は、配列番号１２と少なくとも７０％同一であり、配列番号１２と少なくとも７５％同一であり、配列番号１２と少なくとも８０％同一であり、配列番号１２と少なくとも８５％同一であり、配列番号１２と少なくとも９０％同一であり、配列番号１２と少なくとも９１％同一であり、配列番号１２と少なくとも９２％同一であり、配列番号１２と少なくとも９３％同一であり、配列番号１２と少なくとも９４％同一であり、配列番号１２と少なくとも９５％同一であり、配列番号１２と少なくとも９６％同一であり、配列番号１２と少なくとも９７％同一であり、配列番号１２と少なくとも９８％同一であり、配列番号１２と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号１２に記載のアミノ酸配列であるアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードする核酸配列を含む。
【００２９】
さらに別の特定の態様では、本明細書に記載および特許請求されている少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、ヌクレオカプシドタンパク質（「Ｎ」）コード配列であり、ヌクレオカプシドタンパク質（「Ｎ」）コード配列は、配列番号１３と少なくとも７０％同一であり、配列番号１３と少なくとも７５％同一であり、配列番号１３と少なくとも８０％同一であり、配列番号１３と少なくとも８５％同一であり、配列番号１３と少なくとも９０％同一であり、配列番号１３と少なくとも９１％同一であり、配列番号１３と少なくとも９２％同一であり、配列番号１３と少なくとも９３％同一であり、配列番号１３と少なくとも９４％同一であり、配列番号１３と少なくとも９５％同一であり、配列番号１３と少なくとも９６％同一であり、配列番号１３と少なくとも９７％同一であり、配列番号１３と少なくとも９８％同一であり、配列番号１３と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号１３からなる群から選択される核酸配列を含む。
【００３０】
さらに別の特定の態様では、本明細書に記載および特許請求されている少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、ヌクレオカプシドタンパク質（「Ｎ」）コード配列であり、ヌクレオカプシドタンパク質（「Ｎ」）コード配列は、配列番号１４と少なくとも７０％同一であり、配列番号１４と少なくとも７５％同一であり、配列番号１４と少なくとも８０％同一であり、配列番号１４と少なくとも８５％同一であり、配列番号１４と少なくとも９０％同一であり、配列番号１４と少なくとも９１％同一であり、配列番号１４と少なくとも９２％同一であり、配列番号１４と少なくとも９３％同一であり、配列番号１４と少なくとも９４％同一であり、配列番号１４と少なくとも９５％同一であり、配列番号１４と少なくとも９６％同一であり、配列番号１４と少なくとも９７％同一であり、配列番号１４と少なくとも９８％同一であり、配列番号１４と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号１４に記載のアミノ酸配列であるアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードする核酸配列を含む。
【００３１】
さらに別の特定の態様では、本明細書に記載および特許請求されている少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、リンタンパク質（「Ｐ」）コード配列であり、リンタンパク質（「Ｐ」）コード配列は、配列番号１５と少なくとも７０％同一であり、配列番号１５と少なくとも７５％同一であり、配列番号１５と少なくとも８０％同一であり、配列番号１５と少なくとも８５％同一であり、配列番号１５と少なくとも９０％同一であり、配列番号１５と少なくとも９１％同一であり、配列番号１５と少なくとも９２％同一であり、配列番号１５と少なくとも９３％同一であり、配列番号１５と少なくとも９４％同一であり、配列番号１５と少なくとも９５％同一であり、配列番号１５と少なくとも９６％同一であり、配列番号１５と少なくとも９７％同一であり、配列番号１５と少なくとも９８％同一であり、配列番号１５と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号１５からなる群から選択される核酸配列を含む。
【００３２】
さらに別の特定の態様では、本明細書に記載および特許請求されている少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、リンタンパク質（「Ｐ」）コード配列であり、リンタンパク質（「Ｐ」）コード配列は、配列番号１６と少なくとも７０％同一であり、配列番号１６と少なくとも７５％同一であり、配列番号１６と少なくとも８０％同一であり、配列番号１６と少なくとも８５％同一であり、配列番号１６と少なくとも９０％同一であり、配列番号１６と少なくとも９１％同一であり、配列番号１６と少なくとも９２％同一であり、配列番号１６と少なくとも９３％同一であり、配列番号１６と少なくとも９４％同一であり、配列番号１６と少なくとも９５％同一であり、配列番号１６と少なくとも９６％同一であり、配列番号１６と少なくとも９７％同一であり、配列番号１６と少なくとも９８％同一であり、配列番号１６と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号１６に記載のアミノ酸配列であるアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードする核酸配列を含む。
【００３３】
さらに別の特定の態様では、本明細書に記載および特許請求されている少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、ＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼタンパク質（「Ｌ」）コード配列であり、ＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼタンパク質（「Ｌ」）コード配列は、配列番号１７と少なくとも７０％同一であり、配列番号１７と少なくとも７５％同一であり、配列番号１７と少なくとも８０％同一であり、配列番号１７と少なくとも８５％同一であり、配列番号１７と少なくとも９０％同一であり、配列番号１７と少なくとも９１％同一であり、配列番号１７と少なくとも９２％同一であり、配列番号１７と少なくとも９３％同一であり、配列番号１７と少なくとも９４％同一であり、配列番号１７と少なくとも９５％同一であり、配列番号１７と少なくとも９６％同一であり、配列番号１７と少なくとも９７％同一であり、配列番号１７と少なくとも９８％同一であり、配列番号１７と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号１７からなる群から選択される核酸配列を含む。
【００３４】
さらに別の特定の態様では、本明細書に記載および特許請求されている少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、ＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼタンパク質（「Ｌ」）コード配列であり、ＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼタンパク質（「Ｌ」）コード配列は、配列番号１８と少なくとも７０％同一であり、配列番号１８と少なくとも７５％同一であり、配列番号１８と少なくとも８０％同一であり、配列番号１８と少なくとも８５％同一であり、配列番号１８と少なくとも９０％同一であり、配列番号１８と少なくとも９１％同一であり、配列番号１８と少なくとも９２％同一であり、配列番号１８と少なくとも９３％同一であり、配列番号１８と少なくとも９４％同一であり、配列番号１８と少なくとも９５％同一であり、配列番号１８と少なくとも９６％同一であり、配列番号１８と少なくとも９７％同一であり、配列番号１８と少なくとも９８％同一であり、配列番号１８と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号１８に記載のアミノ酸配列であるアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードする核酸配列を含む。
【００３５】
さらに別の特定の態様では、本明細書に記載および特許請求されている少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列であり、血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列は、配列番号１９と少なくとも７０％同一であり、配列番号１９と少なくとも７５％同一であり、配列番号１９と少なくとも８０％同一であり、配列番号１９と少なくとも８５％同一であり、配列番号１９と少なくとも９０％同一であり、配列番号１９と少なくとも９１％同一であり、配列番号１９と少なくとも９２％同一であり、配列番号１９と少なくとも９３％同一であり、配列番号１９と少なくとも９４％同一であり、配列番号１９と少なくとも９５％同一であり、配列番号１９と少なくとも９６％同一であり、配列番号１９と少なくとも９７％同一であり、配列番号１９と少なくとも９８％同一であり、配列番号１９と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号１９からなる群から選択される核酸配列を含む。
【００３６】
さらに別の特定の態様では、本明細書に記載および特許請求されている少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列であり、血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列は、配列番号２０と少なくとも７０％同一であり、配列番号２０と少なくとも７５％同一であり、配列番号２０と少なくとも８０％同一であり、配列番号２０と少なくとも８５％同一であり、配列番号２０と少なくとも９０％同一であり、配列番号２０と少なくとも９１％同一であり、配列番号２０と少なくとも９２％同一であり、配列番号２０と少なくとも９３％同一であり、配列番号２０と少なくとも９４％同一であり、配列番号２０と少なくとも９５％同一であり、配列番号２０と少なくとも９６％同一であり、配列番号２０と少なくとも９７％同一であり、配列番号２０と少なくとも９８％同一であり、配列番号２０と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号２０に記載のアミノ酸配列であるアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードする核酸配列を含む。
【００３７】
さらに別の特定の態様では、本明細書に記載および特許請求されている少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、マトリックスタンパク質（「Ｍ」）コード配列であり、マトリックスタンパク質（「Ｍ」）コード配列は、配列番号２１と少なくとも７０％同一であり、配列番号２１と少なくとも７５％同一であり、配列番号２１と少なくとも８０％同一であり、配列番号２１と少なくとも８５％同一であり、配列番号２１と少なくとも９０％同一であり、配列番号２１と少なくとも９１％同一であり、配列番号２１と少なくとも９２％同一であり、配列番号２１と少なくとも９３％同一であり、配列番号２１と少なくとも９４％同一であり、配列番号２１と少なくとも９５％同一であり、配列番号２１と少なくとも９６％同一であり、配列番号２１と少なくとも９７％同一であり、配列番号２１と少なくとも９８％同一であり、配列番号２１と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号２１からなる群から選択される核酸配列を含む。
【００３８】
さらに別の特定の態様では、本明細書に記載および特許請求されている少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、マトリックスタンパク質（「Ｍ」）コード配列であり、マトリックスタンパク質（「Ｍ」）コード配列は、配列番号２２と少なくとも７０％同一であり、配列番号２２と少なくとも７５％同一であり、配列番号２２と少なくとも８０％同一であり、配列番号２２と少なくとも８５％同一であり、配列番号２２と少なくとも９０％同一であり、配列番号２２と少なくとも９１％同一であり、配列番号２２と少なくとも９２％同一であり、配列番号２２と少なくとも９３％同一であり、配列番号２２と少なくとも９４％同一であり、配列番号２２と少なくとも９５％同一であり、配列番号２２と少なくとも９６％同一であり、配列番号２２と少なくとも９７％同一であり、配列番号２２と少なくとも９８％同一であり、配列番号２２と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号２２に記載のアミノ酸配列であるアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードする核酸配列を含む。
【００３９】
さらに別の特定の態様では、本明細書に記載および特許請求されている少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、融合タンパク質（「Ｆ」）コード配列であり、融合タンパク質（「Ｆ」）コード配列は、配列番号２３と少なくとも７０％同一であり、配列番号２３と少なくとも７５％同一であり、配列番号２３と少なくとも８０％同一であり、配列番号２３と少なくとも８５％同一であり、配列番号２３と少なくとも９０％同一であり、配列番号２３と少なくとも９１％同一であり、配列番号２３と少なくとも９２％同一であり、配列番号２３と少なくとも９３％同一であり、配列番号２３と少なくとも９４％同一であり、配列番号２３と少なくとも９５％同一であり、配列番号２３と少なくとも９６％同一であり、配列番号２３と少なくとも９７％同一であり、配列番号２３と少なくとも９８％同一であり、配列番号２３と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号２３からなる群から選択される核酸配列を含む。
【００４０】
さらに別の特定の態様では、本明細書に記載および特許請求されている少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、融合タンパク質（「Ｆ」）コード配列であり、融合タンパク質（「Ｆ」）コード配列は、配列番号２４と少なくとも７０％同一であり、配列番号２４と少なくとも７５％同一であり、配列番号２４と少なくとも８０％同一であり、配列番号２４と少なくとも８５％同一であり、配列番号２４と少なくとも９０％同一であり、配列番号２４と少なくとも９１％同一であり、配列番号２４と少なくとも９２％同一であり、配列番号２４と少なくとも９３％同一であり、配列番号２４と少なくとも９４％同一であり、配列番号２４と少なくとも９５％同一であり、配列番号２４と少なくとも９６％同一であり、配列番号２４と少なくとも９７％同一であり、配列番号２４と少なくとも９８％同一であり、配列番号２４と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号２４に記載のアミノ酸配列であるアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードする核酸配列を含む。
【００４１】
さらに別の特定の態様では、本明細書に記載および特許請求されている少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、ヌクレオカプシドタンパク質（「Ｎ」）コード配列であり、ヌクレオカプシドタンパク質（「Ｎ」）コード配列は、配列番号２５と少なくとも７０％同一であり、配列番号２５と少なくとも７５％同一であり、配列番号２５と少なくとも８０％同一であり、配列番号２５と少なくとも８５％同一であり、配列番号２５と少なくとも９０％同一であり、配列番号２５と少なくとも９１％同一であり、配列番号２５と少なくとも９２％同一であり、配列番号２５と少なくとも９３％同一であり、配列番号２５と少なくとも９４％同一であり、配列番号２５と少なくとも９５％同一であり、配列番号２５と少なくとも９６％同一であり、配列番号２５と少なくとも９７％同一であり、配列番号２５と少なくとも９８％同一であり、配列番号２５と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号２５からなる群から選択される核酸配列を含む。
【００４２】
さらに別の特定の態様では、本明細書に記載および特許請求されている少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、ヌクレオカプシドタンパク質（「Ｎ」）コード配列であり、ヌクレオカプシドタンパク質（「Ｎ」）コード配列は、配列番号２６と少なくとも７０％同一であり、配列番号２６と少なくとも７５％同一であり、配列番号２６と少なくとも８０％同一であり、配列番号２６と少なくとも８５％同一であり、配列番号２６と少なくとも９０％同一であり、配列番号２６と少なくとも９１％同一であり、配列番号２６と少なくとも９２％同一であり、配列番号２６と少なくとも９３％同一であり、配列番号２６と少なくとも９４％同一であり、配列番号２６と少なくとも９５％同一であり、配列番号２６と少なくとも９６％同一であり、配列番号２６と少なくとも９７％同一であり、配列番号２６と少なくとも９８％同一であり、配列番号２６と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号２６に記載のアミノ酸配列であるアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードする核酸配列を含む。
【００４３】
さらに別の特定の態様では、本明細書に記載および特許請求されている少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、リンタンパク質（「Ｐ」）コード配列であり、リンタンパク質（「Ｐ」）コード配列は、配列番号２７と少なくとも７０％同一であり、配列番号２７と少なくとも７５％同一であり、配列番号２７と少なくとも８０％同一であり、配列番号２７と少なくとも８５％同一であり、配列番号２７と少なくとも９０％同一であり、配列番号２７と少なくとも９１％同一であり、配列番号２７と少なくとも９２％同一であり、配列番号２７と少なくとも９３％同一であり、配列番号２７と少なくとも９４％同一であり、配列番号２７と少なくとも９５％同一であり、配列番号２７と少なくとも９６％同一であり、配列番号２７と少なくとも９７％同一であり、配列番号２７と少なくとも９８％同一であり、配列番号２７と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号２７からなる群から選択される核酸配列を含む。
【００４４】
さらに別の特定の態様では、本明細書に記載および特許請求されている少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、リンタンパク質（「Ｐ」）コード配列であり、リンタンパク質（「Ｐ」）コード配列は、配列番号２８と少なくとも７０％同一であり、配列番号２８と少なくとも７５％同一であり、配列番号２８と少なくとも８０％同一であり、配列番号２８と少なくとも８５％同一であり、配列番号２８と少なくとも９０％同一であり、配列番号２８と少なくとも９１％同一であり、配列番号２８と少なくとも９２％同一であり、配列番号２８と少なくとも９３％同一であり、配列番号２８と少なくとも９４％同一であり、配列番号２８と少なくとも９５％同一であり、配列番号２８と少なくとも９６％同一であり、配列番号２８と少なくとも９７％同一であり、配列番号２８と少なくとも９８％同一であり、配列番号２８と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号２８に記載のアミノ酸配列であるアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードする核酸配列を含む。
【００４５】
さらに別の特定の態様では、本明細書に記載および特許請求されている少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、ＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼタンパク質（「Ｌ」）コード配列であり、ＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼタンパク質（「Ｌ」）コード配列は、配列番号２９と少なくとも７０％同一であり、配列番号２９と少なくとも７５％同一であり、配列番号２９と少なくとも８０％同一であり、配列番号２９と少なくとも８５％同一であり、配列番号２９と少なくとも９０％同一であり、配列番号２９と少なくとも９１％同一であり、配列番号２９と少なくとも９２％同一であり、配列番号２９と少なくとも９３％同一であり、配列番号２９と少なくとも９４％同一であり、配列番号２９と少なくとも９５％同一であり、配列番号２９と少なくとも９６％同一であり、配列番号２９と少なくとも９７％同一であり、配列番号２９と少なくとも９８％同一であり、配列番号２９と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号２９からなる群から選択される核酸配列を含む。
【００４６】
さらに別の特定の態様では、本明細書に記載および特許請求されている少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、ＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼタンパク質（「Ｌ」）コード配列であり、ＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼタンパク質（「Ｌ」）コード配列は、配列番号３０と少なくとも７０％同一であり、配列番号３０と少なくとも７５％同一であり、配列番号３０と少なくとも８０％同一であり、配列番号３０と少なくとも８５％同一であり、配列番号３０と少なくとも９０％同一であり、配列番号３０と少なくとも９１％同一であり、配列番号３０と少なくとも９２％同一であり、配列番号３０と少なくとも９３％同一であり、配列番号３０と少なくとも９４％同一であり、配列番号３０と少なくとも９５％同一であり、配列番号３０と少なくとも９６％同一であり、配列番号３０と少なくとも９７％同一であり、配列番号３０と少なくとも９８％同一であり、配列番号３０と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号３０に記載のアミノ酸配列であるアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードする核酸配列を含む。
【００４７】
さらに別の特定の態様では、本明細書に記載および特許請求されている少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列であり、血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列は、配列番号３１と少なくとも７０％同一であり、配列番号３１と少なくとも７５％同一であり、配列番号３１と少なくとも８０％同一であり、配列番号３１と少なくとも８５％同一であり、配列番号３１と少なくとも９０％同一であり、配列番号３１と少なくとも９１％同一であり、配列番号３１と少なくとも９２％同一であり、配列番号３１と少なくとも９３％同一であり、配列番号３１と少なくとも９４％同一であり、配列番号３１と少なくとも９５％同一であり、配列番号３１と少なくとも９６％同一であり、配列番号３１と少なくとも９７％同一であり、配列番号３１と少なくとも９８％同一であり、配列番号３１と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号３１、配列番号３２からなる群から選択される核酸配列を含む。
【００４８】
さらに別の特定の態様では、本明細書に記載および特許請求されている少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列であり、血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列は、配列番号３３と少なくとも７０％同一であり、配列番号３３と少なくとも７５％同一であり、配列番号３３と少なくとも８０％同一であり、配列番号３３と少なくとも８５％同一であり、配列番号３３と少なくとも９０％同一であり、配列番号３３と少なくとも９１％同一であり、配列番号３３と少なくとも９２％同一であり、配列番号３３と少なくとも９３％同一であり、配列番号３３と少なくとも９４％同一であり、配列番号３３と少なくとも９５％同一であり、配列番号３３と少なくとも９６％同一であり、配列番号３３と少なくとも９７％同一であり、配列番号３３と少なくとも９８％同一であり、配列番号３３と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号３３に記載のアミノ酸配列であるアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードする核酸配列を含む。
【００４９】
さらに別の特定の態様では、本明細書に記載および特許請求されている少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、マトリックスタンパク質（「Ｍ」）コード配列であり、マトリックスタンパク質（「Ｍ」）コード配列は、配列番号３４と少なくとも７０％同一であり、配列番号３４と少なくとも７５％同一であり、配列番号３４と少なくとも８０％同一であり、配列番号３４と少なくとも８５％同一であり、配列番号３４と少なくとも９０％同一であり、配列番号３４と少なくとも９１％同一であり、配列番号３４と少なくとも９２％同一であり、配列番号３４と少なくとも９３％同一であり、配列番号３４と少なくとも９４％同一であり、配列番号３４と少なくとも９５％同一であり、配列番号３４と少なくとも９６％同一であり、配列番号３４と少なくとも９７％同一であり、配列番号３４と少なくとも９８％同一であり、配列番号３４と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号３４、配列番号３５からなる群から選択される核酸配列を含む。
【００５０】
さらに別の特定の態様では、本明細書に記載および特許請求されている少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、マトリックスタンパク質（「Ｍ」）コード配列であり、マトリックスタンパク質（「Ｍ」）コード配列は、配列番号３６と少なくとも７０％同一であり、配列番号３６と少なくとも７５％同一であり、配列番号３６と少なくとも８０％同一であり、配列番号３６と少なくとも８５％同一であり、配列番号３６と少なくとも９０％同一であり、配列番号３６と少なくとも９１％同一であり、配列番号３６と少なくとも９２％同一であり、配列番号３６と少なくとも９３％同一であり、配列番号３６と少なくとも９４％同一であり、配列番号３６と少なくとも９５％同一であり、配列番号３６と少なくとも９６％同一であり、配列番号３６と少なくとも９７％同一であり、配列番号３６と少なくとも９８％同一であり、配列番号３６と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号３６に記載のアミノ酸配列であるアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードする核酸配列を含む。
【００５１】
さらに別の特定の態様では、本明細書に記載および特許請求されている少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、融合タンパク質（「Ｆ」）コード配列であり、融合タンパク質（「Ｆ」）コード配列は、配列番号３７と少なくとも７０％同一であり、配列番号３７と少なくとも７５％同一であり、配列番号３７と少なくとも８０％同一であり、配列番号３７と少なくとも８５％同一であり、配列番号３７と少なくとも９０％同一であり、配列番号３７と少なくとも９１％同一であり、配列番号３７と少なくとも９２％同一であり、配列番号３７と少なくとも９３％同一であり、配列番号３７と少なくとも９４％同一であり、配列番号３７と少なくとも９５％同一であり、配列番号３７と少なくとも９６％同一であり、配列番号３７と少なくとも９７％同一であり、配列番号３７と少なくとも９８％同一であり、配列番号３７と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号３７からなる群から選択される核酸配列を含む。
【００５２】
さらに別の特定の態様では、本明細書に記載および特許請求されている少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、融合タンパク質（「Ｆ」）コード配列であり、融合タンパク質（「Ｆ」）コード配列は、配列番号３８と少なくとも７０％同一であり、配列番号３８と少なくとも７５％同一であり、配列番号３８と少なくとも８０％同一であり、配列番号３８と少なくとも８５％同一であり、配列番号３８と少なくとも９０％同一であり、配列番号３８と少なくとも９１％同一であり、配列番号３８と少なくとも９２％同一であり、配列番号３８と少なくとも９３％同一であり、配列番号３８と少なくとも９４％同一であり、配列番号３８と少なくとも９５％同一であり、配列番号３８と少なくとも９６％同一であり、配列番号３８と少なくとも９７％同一であり、配列番号３８と少なくとも９８％同一であり、配列番号３８と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号３８に記載のアミノ酸配列であるアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードする核酸配列を含む。
【００５３】
さらに別の特定の態様では、本明細書に記載および特許請求されている少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、ヌクレオカプシドタンパク質（「Ｎ」）コード配列であり、ヌクレオカプシドタンパク質（「Ｎ」）コード配列は、配列番号３９と少なくとも７０％同一であり、配列番号３９と少なくとも７５％同一であり、配列番号３９と少なくとも８０％同一であり、配列番号３９と少なくとも８５％同一であり、配列番号３９と少なくとも９０％同一であり、配列番号３９と少なくとも９１％同一であり、配列番号３９と少なくとも９２％同一であり、配列番号３９と少なくとも９３％同一であり、配列番号３９と少なくとも９４％同一であり、配列番号３９と少なくとも９５％同一であり、配列番号３９と少なくとも９６％同一であり、配列番号３９と少なくとも９７％同一であり、配列番号３９と少なくとも９８％同一であり、配列番号３９と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号３９からなる群から選択される核酸配列を含む。
【００５４】
さらに別の特定の態様では、本明細書に記載および特許請求されている少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、ヌクレオカプシドタンパク質（「Ｎ」）コード配列であり、ヌクレオカプシドタンパク質（「Ｎ」）コード配列は、配列番号４０と少なくとも７０％同一であり、配列番号４０と少なくとも７５％同一であり、配列番号４０と少なくとも８０％同一であり、配列番号４０と少なくとも８５％同一であり、配列番号４０と少なくとも９０％同一であり、配列番号４０と少なくとも９１％同一であり、配列番号４０と少なくとも９２％同一であり、配列番号４０と少なくとも９３％同一であり、配列番号４０と少なくとも９４％同一であり、配列番号４０と少なくとも９５％同一であり、配列番号４０と少なくとも９６％同一であり、配列番号４０と少なくとも９７％同一であり、配列番号４０と少なくとも９８％同一であり、配列番号４０と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号４０に記載のアミノ酸配列であるアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードする核酸配列を含む。
【００５５】
さらに別の特定の態様では、本明細書に記載および特許請求されている少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、リンタンパク質（「Ｐ」）コード配列であり、リンタンパク質（「Ｐ」）コード配列は、配列番号４１と少なくとも７０％同一であり、配列番号４１と少なくとも７５％同一であり、配列番号４１と少なくとも８０％同一であり、配列番号４１と少なくとも８５％同一であり、配列番号４１と少なくとも９０％同一であり、配列番号４１と少なくとも９１％同一であり、配列番号４１と少なくとも９２％同一であり、配列番号４１と少なくとも９３％同一であり、配列番号４１と少なくとも９４％同一であり、配列番号４１と少なくとも９５％同一であり、配列番号４１と少なくとも９６％同一であり、配列番号４１と少なくとも９７％同一であり、配列番号４１と少なくとも９８％同一であり、配列番号４１と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号４１からなる群から選択される核酸配列を含む。
【００５６】
さらに別の特定の態様では、本明細書に記載および特許請求されている少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、リンタンパク質（「Ｐ」）コード配列であり、リンタンパク質（「Ｐ」）コード配列は、配列番号４２と少なくとも７０％同一であり、配列番号４２と少なくとも７５％同一であり、配列番号４２と少なくとも８０％同一であり、配列番号４２と少なくとも８５％同一であり、配列番号４２と少なくとも９０％同一であり、配列番号４２と少なくとも９１％同一であり、配列番号４２と少なくとも９２％同一であり、配列番号４２と少なくとも９３％同一であり、配列番号４２と少なくとも９４％同一であり、配列番号４２と少なくとも９５％同一であり、配列番号４２と少なくとも９６％同一であり、配列番号４２と少なくとも９７％同一であり、配列番号４２と少なくとも９８％同一であり、配列番号４２と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号４２に記載のアミノ酸配列であるアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードする核酸配列を含む。
【００５７】
さらに別の特定の態様では、本明細書に記載および特許請求されている少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、ＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼタンパク質（「Ｌ」）コード配列であり、ＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼタンパク質（「Ｌ」）コード配列は、配列番号４３と少なくとも７０％同一であり、配列番号４３と少なくとも７５％同一であり、配列番号４３と少なくとも８０％同一であり、配列番号４３と少なくとも８５％同一であり、配列番号４３と少なくとも９０％同一であり、配列番号４３と少なくとも９１％同一であり、配列番号４３と少なくとも９２％同一であり、配列番号４３と少なくとも９３％同一であり、配列番号４３と少なくとも９４％同一であり、配列番号４３と少なくとも９５％同一であり、配列番号４３と少なくとも９６％同一であり、配列番号４３と少なくとも９７％同一であり、配列番号４３と少なくとも９８％同一であり、配列番号４３と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号４３からなる群から選択される核酸配列を含む。
【００５８】
さらに別の特定の態様では、本明細書に記載および特許請求されている少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、ＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼタンパク質（「Ｌ」）コード配列であり、ＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼタンパク質（「Ｌ」）コード配列は、配列番号４４と少なくとも７０％同一であり、配列番号４４と少なくとも７５％同一であり、配列番号４４と少なくとも８０％同一であり、配列番号４４と少なくとも８５％同一であり、配列番号４４と少なくとも９０％同一であり、配列番号４４と少なくとも９１％同一であり、配列番号４４と少なくとも９２％同一であり、配列番号４４と少なくとも９３％同一であり、配列番号４４と少なくとも９４％同一であり、配列番号４４と少なくとも９５％同一であり、配列番号４４と少なくとも９６％同一であり、配列番号４４と少なくとも９７％同一であり、配列番号４４と少なくとも９８％同一であり、配列番号４４と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号４４に記載のアミノ酸配列であるアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードする核酸配列を含む。
【００５９】
さらに別の特定の態様では、本明細書に記載および特許請求されているウイルスベクターは、２つまたはそれよりも多くの外因性抗原コード配列、好ましくは、血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列およびマトリックスタンパク質（「Ｍ」）コード配列、または血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列および融合タンパク質（「Ｆ」）コード配列、またはマトリックスタンパク質（「Ｍ」）コード配列および融合タンパク質（「Ｆ」）コード配列、または血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列およびマトリックスタンパク質（「Ｍ」）コード配列および融合タンパク質（「Ｆ」）コード配列を含む。
【００６０】
さらに別の特定の態様では、本明細書に記載および特許請求されているウイルスベクターは、２つまたはそれよりも多くの外因性抗原コード配列、好ましくは同じであるが２つの異なる株に由来する２つの外因性抗原コード配列（つまり、Ｈ＋Ｈ、Ｆ＋Ｆ、Ｍ＋Ｍ、Ｐ＋Ｐ、Ｌ＋Ｌ、Ｎ＋Ｎ）を含み、例えば、ネコパラミクソウイルス２型（ＦＰａＶ−２）株、より好ましくは「ゴードン株」または「ＴＶ２５株」に由来する１つの外因性抗原コード配列と、ネコモルビリウイルス株、より好ましくは「ラポン株」に由来する他の１つの外因性抗原コード配列とを含み、例えば、１つの株の血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列と、別の株の血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列とを含む。好ましくは、「１つの株の血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列」の１つの株は、ネコパラミクソウイルス２型（ＦＰａＶ−２）株、より好ましくは「ゴードン株」または「ＴＶ２５菌株」であり、「別の株の血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列」の別の株は、ネコモルビリウイルス株、より好ましくは「ラポン株」である。最も好ましくは、「１つの株の血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列」の１つの株は、血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列であり、血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列は、配列番号４または１９と少なくとも７０％同一であり、配列番号４または１９と少なくとも７５％同一であり、配列番号４または１９と少なくとも８０％同一であり、配列番号４または１９と少なくとも８５％同一であり、配列番号４または１９と少なくとも９０％同一であり、配列番号４または１９と少なくとも９１％同一であり、配列番号４または１９と少なくとも９２％同一であり、配列番号４または１９と少なくとも９３％同一であり、配列番号４または１９と少なくとも９４％同一であり、配列番号４または１９と少なくとも９５％同一であり、配列番号４または１９と少なくとも９６％同一であり、配列番号４または１９と少なくとも９７％同一であり、配列番号４または１９と少なくとも９８％同一であり、配列番号４または１９と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号４、配列番号５、配列番号１９からなる群から選択される核酸配列を含み、「別の株の血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列」の別の株は、血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列であり、血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列は、配列番号３１または９４と少なくとも７０％同一であり、配列番号３１または９４と少なくとも７５％同一であり、配列番号３１または９４と少なくとも８０％同一であり、配列番号３１または９４と少なくとも８５％同一であり、配列番号３１または９４と少なくとも９０％同一であり、配列番号３１または９４と少なくとも９１％同一であり、配列番号３１または９４と少なくとも９２％同一であり、配列番号３１または９４と少なくとも９３％同一であり、配列番号３１または９４と少なくとも９４％同一であり、配列番号３１または９４と少なくとも９５％同一であり、配列番号３１または９４と少なくとも９６％同一であり、配列番号３１または９４と少なくとも９７％同一であり、配列番号３１または９４と少なくとも９８％同一であり、配列番号３１または９４と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号３１、配列番号３２、配列番号９４からなる群から選択される核酸配列を含む。
【００６１】
さらに別の特定の態様では、本明細書に記載および特許請求されている少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、少なくとも１つの挿入遺伝子座に、好ましくはウイルスベクターゲノムの非必須領域に挿入される。
さらに別の特定の態様では、本明細書に記載および特許請求されている少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、２つまたはそれよりも多くの挿入遺伝子座に挿入される。
さらに別の特定の態様では、本明細書に記載および特許請求されている挿入遺伝子座は、挿入遺伝子座Ｃ３である。
【００６２】
さらに別の特定の態様では、本明細書に記載および特許請求されているウイルスベクターは、挿入遺伝子座Ｃ３のフランキング配列、好ましくは配列番号４５（Ｃ３フランキング領域左アーム）および配列番号４６（Ｃ３フランキング領域右アーム）に記載の挿入遺伝子座Ｃ３のフランキング配列を含む。
さらに別の特定の態様では、本明細書に記載および特許請求されている挿入遺伝子座は、挿入遺伝子座Ｃ５である。
さらに別の特定の態様では、本明細書に記載および特許請求されているウイルスベクターは、挿入遺伝子座Ｃ５のフランキング配列、好ましくは配列番号４７（Ｃ５フランキング領域左アーム）および配列番号４８（Ｃ５フランキング領域右アーム）に記載の挿入遺伝子座Ｃ５のフランキング配列を含む。
【００６３】
さらに別の特定の態様では、本明細書に記載および特許請求されている挿入遺伝子座は、挿入遺伝子座Ｃ６である。
さらに別の特定の態様では、本明細書に記載および特許請求されている少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、少なくとも１つのプロモーター配列、好ましくは少なくとも１つの弱いプロモーター配列に作動可能に連結されている。
さらに別の特定の態様では、本明細書に記載および特許請求されているプロモーター配列は、Ｈ６ワクシニアプロモーターである。
さらに別の特定の態様では、本明細書に記載および特許請求されているプロモーター配列は、Ｉ３Ｌワクシニアプロモーターである。
さらに別の特定の態様では、本明細書に記載および特許請求されているプロモーター配列は、４２ｋ（長）ポックスウイルスプロモーターである。
さらに別の特定の態様では、本明細書に記載および特許請求されているプロモーター配列は、７．５ｋワクシニアプロモーターである。
さらに別の特定の態様では、本明細書に記載および特許請求されているプロモーター配列は、Ｐｉワクシニアプロモーターである。
【００６４】
さらに別の特定の態様では、本明細書に記載および特許請求されているウイルスベクターは、終結シグナルおよび／またはポリアデニル化配列などの追加の調節配列をさらに含む。
さらに別の特定の態様では、本明細書に記載および特許請求されているウイルスベクターは、配列番号４９、配列番号５０、配列番号５１からなる群から選択される核酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％同一であり、好ましくは、配列番号４９、配列番号５０、配列番号５１からなる群から選択される核酸配列である核酸配列を含む。
さらに別の特定の態様では、本明細書に記載および特許請求されているネコ科動物は、ネコ、好ましくはイエネコである。
本発明は、本明細書に記載および特許請求されているウイルスベクターを含むことを特徴とする哺乳動物宿主細胞に関する。
【００６５】
本発明は、免疫原性組成物またはワクチンを製造するための、本明細書に記載および特許請求されているウイルスベクターまたは本明細書に記載および特許請求されている哺乳動物宿主細胞の使用に関する。
本発明は、
（ａ）本明細書に記載および特許請求されているウイルスベクターもしくは本明細書に記載および特許請求されている哺乳動物宿主細胞、および／または
（ｂ）ウイルス、修飾生ウイルス、もしくはウイルス様粒子（ＶＬＰ）などの、本明細書に記載および特許請求されているウイルスベクターによりコードされるポリペプチド、および
（ｃ）任意に、薬学的にまたは獣医学的に許容される担体もしくは賦形剤であって、好ましくは、前記担体は経口、皮内、筋肉内、または鼻腔内適用に好適である、担体もしくは賦形剤
を含み、
好ましくは、感染性ウイルスなどのウイルスを含む、免疫原性組成物に関する。
【００６６】
本発明は、
（ａ）本明細書に記載および特許請求されているウイルスベクターもしくは本明細書に記載および特許請求されている哺乳動物宿主細胞、および／または
（ｂ）ウイルス、修飾生ウイルス、もしくはウイルス様粒子（ＶＬＰ）などの、本明細書に記載および特許請求されているウイルスベクターによりコードされるポリペプチド、および
（ｃ）薬学的にまたは獣医学的に許容される担体もしくは賦形剤であって、好ましくは、前記担体は経口、皮内、筋肉内、または鼻腔内適用に好適である、担体もしくは賦形剤
を含み、
（ｄ）任意に、アジュバントをさらに含む、ワクチンまたは医薬組成物に関する。
本発明は、少なくとも１つの病原性パラミクソウイルスによる感染症に関連するかまたはそれにより引き起こされる１つまたは複数の臨床徴候の発生および／または重症度を低減するための免疫原性組成物またはワクチンを調製するための方法であって、
（ａ）本明細書に記載および特許請求されている哺乳動物宿主細胞を、本明細書に記載および特許請求されているウイルスベクターで感染させるステップ、
（ｂ）感染細胞を好適な条件下で培養するステップ、
（ｃ）感染細胞培養物を収集するステップ、
（ｄ）任意に、ステップ（ｃ）の収集した感染細胞培養物を精製するステップ、
（ｅ）任意に、前記収集した感染細胞培養物を薬学的に許容される担体と混合するステップ
を含む方法に関する。
【００６７】
本発明は、少なくとも１つの病原性パラミクソウイルスによる感染症により引き起こされる臨床徴候または疾患を低減または予防するための方法で使用するための、または少なくとも１つの病原性パラミクソウイルスによる感染症を治療および／または予防するための方法で使用するための、本明細書に記載および特許請求されている免疫原性組成物または本明細書に記載および特許請求されているワクチンであって、好ましくは、前記ネコ科動物は、ネコ、より好ましくはイエネコであり、好ましくは、少なくとも１つの病原性パラミクソウイルスは、少なくとも１つのネコパラミクソウイルスであり、好ましくは、前記少なくとも１つの病原性パラミクソウイルスによる感染症により引き起こされる臨床徴候もしくは疾患、または前記少なくとも１つの病原性パラミクソウイルスによる感染症は、ウイルス血症、発熱、環境へのウイルス排出、泌尿生殖器系の感染症、尿路系の感染症、腎臓疾患、慢性腎臓疾患（ＣＫＤ）、腎尿細管および腎間質組織の炎症、特発性尿細管間質性腎炎（ＴＩＮ）からなる群から選択される、免疫原性組成物またはワクチンに関する。
【００６８】
本発明は、ネコ、より好ましくはイエネコ、などのネコ科動物を、前記ネコ科動物において少なくとも１つの病原性パラミクソウイルスにより引き起こされる臨床疾患に対して免疫するための方法であって、本明細書に記載および特許請求されている免疫原性組成物または本明細書に記載および特許請求されているワクチンをネコ科動物に投与するステップを含み、前記免疫原性組成物またはワクチンは、感染の臨床徴候を引き起こさないが、前記少なくとも１つのパラミクソウイルスの病原性形態に対してネコ科動物を免疫する免疫応答を誘導することが可能であり、好ましくは、少なくとも１つの病原性パラミクソウイルスは、少なくとも１つのネコパラミクソウイルスであり、好ましくは、前記臨床疾患または前記感染の臨床徴候は、ウイルス血症、発熱、環境へのウイルス排出、泌尿生殖器系の感染症、尿路系の感染症、腎臓疾患、慢性腎臓疾患（ＣＫＤ）、腎尿細管および腎間質組織の炎症、特発性尿細管間質性腎炎（ＴＩＮ）からなる群から選択される方法に関する。
【００６９】
本発明は、ネコ科動物における少なくとも１つの病原性パラミクソウイルスに関連する疾患に対して、ネコ科動物、好ましくはネコ、より好ましくはイエネコにワクチン接種するための、および／またはネコ科動物において少なくとも１つの病原性パラミクソウイルスに関連するかまたはそれにより引き起こされる１つまたは複数の臨床徴候の発生または重症度を低減するためのキットであって、
（ａ）前記ネコ科動物にワクチンを投与することが可能なディスペンサー、および
（ｂ）本明細書に記載および特許請求されている免疫原性組成物または本明細書に記載および特許請求されているワクチン、および
（ｃ）任意に、使用説明書を含み、
好ましくは、少なくとも１つの病原性パラミクソウイルスは、少なくとも１つのネコパラミクソウイルスであり、好ましくは、前記疾患または前記臨床徴候は、ウイルス血症、発熱、環境へのウイルス排出、泌尿生殖器系の感染症、尿路系の感染症、腎臓疾患、慢性腎臓疾患（ＣＫＤ）、腎尿細管および腎間質組織の炎症、特発性尿細管間質性腎炎（ＴＩＮ）からなる群から選択されるキットに関する。
【００７０】
定義
別様に定義されていない限り、本明細書で使用される技術用語および科学用語はすべて、出願時に本発明が属する当業者により一般的に理解されるものと同じ意味を有する。用語の意味および範囲は明瞭であるべきである。しかしながら、いかなる隠れた曖昧さがある場合でも、本明細書で提供される定義が、いかなる辞書的定義または外部的定義よりも優先する。さらに、状況により別様の必要がない限り、単数の用語は複数を含むものとし、複数の用語は単数を含むものとする。本明細書では、「または」の使用は、別様の記述がない限り、「および／または」を意味する。さらに、用語「含む（including）」、ならびに「含む（includes）」および「含んでいた（included）」などの他の形態の使用は、限定ではない。本明細書で引用された特許および刊行物はすべて、参照により本明細書に組み込まれる。
【００７１】
本発明の実施は、別様の指定がない限り、ウイルス学、分子生物学、微生物学、組換えＤＮＡ技術、タンパク質化学、および免疫学の従来技法を使用することになり、それらは当技術分野の技術内にある。そのような技法は、文献に十分に説明されている。例えば、Sambrook, Fritsch & Maniatis, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Vols. I, II and III, Second Edition (1989)；DNA Cloning, Vols. I and II (D. N. Glover ed. 1985)；Oligonucleotide Synthesis (M. J. Gait ed. 1984)；Nucleic Acid Hybridization (B. D. Hames & S. J. Higgins eds. 1984)；Animal Cell Culture (R. K. Freshney ed. 1986)；Immobilized Cells and Enzymes (IRL press, 1986)；Perbal, B., A Practical Guide to Molecular Cloning (1984)；the series, Methods In Enzymology (S. Colowick and N. Kaplan eds., Academic Press, Inc.)；Protein purification methods - a practical approach (E.L.V. Harris and S. Angal, eds., IRL Press at Oxford University Press)；およびHandbook of Experimental Immunology, Vols. I-IV (D. M. Weir and C. C. Blackwell eds., 1986, Blackwell Scientific Publications)を参照されたい。
【００７２】
本発明を詳細に説明する前に、本発明は、特定のＤＮＡ、ポリペプチド配列、またはプロセスパラメーターに限定されず、無論それらは様々であってもよいことが理解されるべきである。また、本明細書で使用される用語法は、本発明の特定の実施形態を説明するためのものに過ぎず、限定は意図されていないことも理解されるべきである。本明細書および添付の特許請求の範囲で使用される場合、単数形態「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」は、内容が明白に別様に指示しない限り、複数の指示物を含むことが留意されなければならない。したがって、例えば、「抗原」への言及は、２つまたはそれよりも多くの抗原の混合物を含み、「賦形剤」への言及は、２つまたはそれよりも多くの賦形剤の混合物を含むなどである。
【００７３】
用語「ベクター」は、当技術分野で公知であるように、ポリヌクレオチド構築物、典型的には、遺伝物質を宿主細胞へと伝達するために使用されるプラスミドまたはバクテリア人工染色体を指す。ベクターは、例えば、細菌、ウイルス、ファージ、バクテリア人工染色体、コスミド、またはプラスミドであってもよい。ベクターは、本明細書で使用される場合、ＤＮＡまたはＲＮＡのいずれで構成されていてもよく、またはいずれを含んでいてもよい。一部の実施形態では、ベクターは、ＤＮＡで構成されている。一部の実施形態では、ベクターは、感染性ウイルスである。そのようなウイルスベクターは、細胞培養中でも宿主動物中でもウイルスベクターの複製に関する機能を示さない外来性遺伝子を保持するように操作されたウイルスゲノムを含む。本開示の特定の態様によると、ベクターは、遺伝物質の単なる伝達などの種々の態様のために、宿主細胞または生物をトランスフェクションするために、ワクチン、例えばＤＮＡワクチンとして使用するために、または遺伝子発現目的のために使用することができる。遺伝子発現は、遺伝子と呼ばれる特定のポリヌクレオチド配列により指図される、細胞でのタンパク質生合成を記述する用語である。特定の態様では、ベクターは、適切な環境中に存在すると、ベクターにより保持されている１つまたは複数の遺伝子によりコードされるタンパク質の発現を指図することが可能なベクターである「発現ベクター」であってもよい。
【００７４】
発現用のベクター、ならびに発現用のベクター（または組換え体）を製作および／または使用するための方法は、以下の文献で開示されている方法によるものであってよくまたはそれらに類似していてもよい：米国特許第４，６０３，１１２号明細書、第４，７６９，３３０号明細書、第５，１７４，９９３号明細書、第５，５０５，９４１号明細書、第５，３３８，６８３号明細書、第５，４９４，８０７号明細書、第４，７２２，８４８号明細書、第５，９４２，２３５号明細書、第５，３６４，７７３号明細書、第５，７６２，９３８号明細書、第５，７７０，２１２号明細書、第５，９４２，２３５号明細書、第３８２，４２５号明細書、国際公開第９４／１６７１６号パンフレット、国際公開第９６／３９４９１号パンフレット、国際公開第９５／３００１８号パンフレット、Paoletti, "Applications of pox virus vectors to vaccination: An update," PNAS USA 93: 11349-11353, October 1996；Moss, "Genetically engineered poxviruses for recombinant gene expression, vaccination, and safety," PNAS USA 93: 11341-11348, October 1996；Smith et al.,米国特許第４，７４５，０５１号明細書（組換え体バキュロウイルス）;Richardson, C. D. (Editor), Methods in Molecular Biology 39, "Baculovirus Expression Protocols" (1995 Humana Press Inc.)；Smith et al., "Production of Human Beta Interferon in Insect Cells Infected with a Baculovirus Expression Vector", Molecular and Cellular Biology, December, 1983, Vol. 3, No. 12, p. 2156-2165；Pennock et al., "Strong and Regulated Expression of Escherichia coli B-Galactosidase in Infect Cells with a Baculovirus vector," Molecular and Cellular Biology March 1984, Vol. 4, No. 3, p. 406；ＥＰＡ０３７０５７３；米国特許出願第９２０，１９７号明細書、１９８６年１０月１６日出願；欧州特許出願公開第０２６５７８５号明細書；米国特許第４，７６９，３３１号明細書（組換え体ヘルペスウイルス）；Roizman, "The function of herpes simplex virus genes: A primer for genetic engineering of novel vectors," PNAS USA 93:11307-11312, October 1996；Andreansky et al., "The application of genetically engineered herpes simplex viruses to the treatment of experimental brain tumors," PNAS USA 93: 11313-11318, October 1996；Robertson et al., "Epstein-Barr virus vectors for gene delivery to B lymphocytes", PNAS USA 93: 11334-11340, October 1996；Frolov et al., "Alphavirus-based expression vectors: Strategies and applications," PNAS USA 93: 11371-11377, October 1996；Kitson et al., J. Virol. 65, 3068-3075, 1991；米国特許第５，５９１，４３９号明細書、第５，５５２，１４３号明細書；国際公開第９８／００１６６号パンフレット；特許授与されている米国特許出願第０８／６７５，５５６号明細書および第０８／６７５，５６６号明細書、両方とも１９９６年７月３日に出願（組換え体アデノウイルス）；Grunhaus et al., 1992, "Adenovirus as cloning vectors," Seminars in Virology (Vol. 3) p.237-52, 1993；Ballay et al. EMBO Journal, vol. 4, p.3861-65, Graham, Tibtech 8, 85-87, April, 1990；Prevec et al., J. Gen Virol. 70, 42434；国際公開第９１／１１５２５号パンフレット；Felgner et al. (1994), J. Biol. Chem. 269, 2550-2561, Science, 259: 1745-49, 1993；およびMcClements et al., "Immunization with DNA vaccines encoding glycoprotein D or glycoprotein B, alone or in combination, induces protective immunity in animal models of herpes simplex virus-2 disease", PNAS USA 93: 11414-11420, October 1996；および米国特許第５，５９１，６３９号明細書、第５，５８９，４６６号明細書、および第５，５８０，８５９号明細書、ならびに国際公開第９０／１１０９２号パンフレット、国際公開第９３／１９１８３号パンフレット、国際公開第９４／２１７９７号パンフレット、国際公開第９５／１１３０７号パンフレット、国際公開第９５／２０６６０号パンフレット；Tang et al., Nature, and Furth et al., Analytical Biochemistry、特にＤＮＡ発現ベクターに関する。また、以下の文献を参照されたい：国際公開第９８／３３５１０号パンフレット；Ju et al., Diabetologia, 41: 736-739, 1998（レンチウイルス発現系）；Sanford et al.,米国特許第４，９４５，０５０号明細書;Fischbachet al.(Intracel)；国際公開第９０／０１５４３号パンフレット；Robinson et al., Seminars in Immunology vol. 9, pp. 271-283 (1997)、（ＤＮＡベクター系）；Szoka et al.,米国特許第４，３９４，４４８号明細書（生細胞にＤＮＡを挿入するための方法）；McCormick et al.,米国特許第５，６７７，１７８号明細書（細胞変性ウイルスの使用）；および米国特許第５，９２８，９１３号明細書（遺伝子送達用のベクター）；ならびに本明細書で引用されている他の文献。
【００７５】
用語「ウイルスベクター」は、宿主細胞へのその進入が、特定の生物学的活性、例えば、ベクターにより保持されている導入遺伝子の発現をもたらすように、組換えＤＮＡ技術により操作された遺伝子改変ウイルスを記述する。特定の態様では、導入遺伝子は、抗原である。ウイルスベクターは、標的細胞、組織、または生物において複製コンピテントであってもよく、またはなくともよい。
ウイルスベクターの生成は、限定ではないが、例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋら（Molecular Cloning: A Laboratory Manual. Cold Spring Harbor Laboratory Press, N.Y. (1989)）またはＫ．ＭａｒａｍｏｒｏｓｃｈおよびＨ．Ｋｏｐｒｏｗｓｋｉ（Methods in Virology Volume VIII, Academic Press Inc. London, UK (2014)）に記載のような、制限エンドヌクレアーゼ消化、ライゲーション、形質転換、プラスミド精製、ＤＮＡ配列決定、細胞培養でのトランスフェクションの標準技法を含む、当技術分野で周知の任意の好適な遺伝子操作技法を使用して達成することができる。
ウイルスベクターには、任意の既知生物のゲノムに由来する配列を組み込むことができる。配列は、それらの天然形態で組み込まれてもよく、または所望の活性を得るように任意の様式で修飾されていてもよい。例えば、配列は、挿入、欠失、または置換を含んでいてもよい。
【００７６】
ウイルスベクターは、２つまたはそれよりも多くの目的のタンパク質のコード領域を含んでいてもよい。例えば、ウイルスベクターは、第１の目的のタンパク質のコード領域および第２の目的のタンパク質のコード領域を含んでいてもよい。第１の目的のタンパク質および第２の目的のタンパク質は、同じであってもよくまたは異なっていてもよい。一部の実施形態では、ウイルスベクターは、第３または第４の目的のタンパク質のコード領域を含んでいてもよい。第３および第４の目的のタンパク質は、同じであってもよくまたは異なっていてもよい。１つのウイルスベクターによりコードされる２つまたはそれよりも多くの目的のタンパク質の合計の長さは、様々であってもよい。例えば、２つまたはそれよりも多くのタンパク質の合計の長さは、少なくとも約２００アミノ酸、少なくとも約２５０アミノ酸、少なくとも約３００アミノ酸、少なくとも約３５０アミノ酸、少なくとも約４００アミノ酸、少なくとも約４５０アミノ酸、少なくとも約５００アミノ酸、少なくとも約５５０アミノ酸、少なくとも約６００アミノ酸、少なくとも約６５０アミノ酸、少なくとも約７００アミノ酸、少なくとも約７５０アミノ酸、少なくとも約８００アミノ酸、またはそれよりも長くてもよい。
【００７７】
好ましいウイルスベクターとしては、アビポックスウイルスウイルスベクター、イヌモルビリウイルスウイルスベクター、ヘルペスウイルスウイルスベクター、および水痘ウイルスウイルスベクターが挙げられる。
本発明の特定の態様によると、用語「ウイルスベクター」またはその代わりに「ウイルス構築物」は、アビポックスウイルスウイルスベクター、イヌモルビリウイルスウイルスベクター、ヘルペスウイルスウイルスベクター、および水痘ウイルスウイルスベクターから選択されるウイルスに由来する組換えウイルス構築物を指す。好ましいウイルスベクターとしては、ＡＬＶＡＣおよびＴＲＯＶＡＣなどのアビポックスウイルスウイルスベクターが挙げられる。
【００７８】
本発明の特定の態様によると、用語「アビポックスウイルスウイルスベクター」またはその代わりに「アビポックスウイルスベクター」は、天然で宿主限定的なポックスウイルスであるアビポックスウイルスに基づくベクター系を指す。そのようなアビポックスウイルスの中でも、カナリアポックスウイルス（ＣＰＶ）は、外来性、異種性、外的、外因性の遺伝子産物を発現するように遺伝子操作されている。具体的には、ＡＬＶＡＣは、カナリアポックスウイルスに由来する遺伝子操作されたポックスウイルスベクターである（米国特許第５，７５６，１０３号明細書。この文献の開示は、参照により本明細書に組み込まれる）。ＡＬＶＡＣは、ヒトカナリアポックスワクチンであるＫａｎａｐｏｘのプラーククローン派生物だった弱毒化カナリアポックスウイルスに基づくベクターである。このアビポックスベクターは、生産的複製が鳥類に限定されており、非トリ宿主では生産的に複製せず、これは、その安全性プロファイルを向上させると考えられる特徴である。ヒト細胞培養では、カナリアポックスウイルス複製は、ウイルス複製サイクルのウイルスＤＮＡ合成前に早期終了する。にもかかわらず、外因性免疫原を発現するように遺伝子操作されると、哺乳動物細胞での正常な発現およびプロセシングがｉｎ  ｖｉｔｒｏで観察され、多数の哺乳動物種への接種は、外因性免疫原に応答して抗体および細胞性免疫応答を誘導し、同種病原体による負荷に対する防御を提供する。ＡＬＶＡＣは、ブダペスト条約の条項に基づき、アメリカ培養細胞系統保存機関（ＡＴＣＣ）に寄託番号ＶＲ−２５４７として寄託された（米国特許第５，７５６，１０３号明細書。この文献の開示は、参照により本明細書に組み込まれる）。本発明によるＡＬＶＡＣ  ＡＴＣＣ  ＶＲ−２５４７寄託物由来のＡＬＶＡＣベクターは、親寄託ＡＬＶＡＣ  ＡＴＣＣ  ＶＲ−２５４７ベクターのようにＣ３およびＣ５挿入遺伝子座を含むｖＣＰ３０２５およびｖＣＰ３０２９を含む。ＴＲＯＶＡＣは、１日齢ヒナのワクチン接種について認可されている鶏痘ウイルスのＦＰ１−ワクチン株に由来するプラーククローン分離株だった弱毒化鶏痘ウイルスベクターを指す（例えば、米国特許第５，７６６，５９９号明細書。この文献の開示は、参照により本明細書に組み込まれる）。親ウイルス株Ｄｕｖｅｔｔｅは、ニワトリの鶏痘痂皮としてフランスで得られた。このウイルスは、ニワトリ有胚卵でおよそ５０回連続継代し、その後ニワトリ胚線維芽細胞で２５回継代することにより弱毒化された。このウイルスは、４回連続のプラーク精製にかけられた。１つのプラーク単離株が、初代ＣＥＦ細胞でさらに増幅され、ＴＲＯＶＡＣと命名されたストックウイルスが確立された。ＴＲＯＶＡＣは、ブダペスト条約の条項に基づき、アメリカ培養細胞系統保存機関（ＡＴＣＣ）に寄託番号ＶＲ−２５５３として寄託された（米国特許第５，７６６，５９９号明細書。この文献の開示は、参照により本明細書に組み込まれる）。
【００７９】
用語「ウイルスベクター」および「ウイルス構築物」は、同義的に使用することができる。
用語「構築物」は、本明細書で使用される場合、人為的に生成されたプラスミド、ＢＡＣ、または組換えウイルスなどの組換え核酸を指す。
用語「プラスミド」は、細菌宿主細胞内の細菌染色体とは独立して複製する細胞質ＤＮＡを指す。本発明の特定の態様では、用語「プラスミド」および／または「トランスファープラスミド」は、例えばウイルスベクターに挿入するための発現カセットの構築に有用な組換えＤＮＡ技術の要素を指す。別の特定の態様では、用語「プラスミド」は、ＤＮＡワクチン接種目的に有用なプラスミドを指定するために使用される場合がある。
【００８０】
本明細書で使用される場合、用語「核酸」および「ポリヌクレオチド」は、同義的であり、任意の核酸を指す。
用語「核酸」、「核酸配列」、「ヌクレオチド配列」、「ポリヌクレオチド」、「ポリヌクレオチド配列」、「ＲＮＡ配列」、ｃＤＮＡ配列、または「ＤＮＡ配列」は、本明細書で使用される場合、オリゴヌクレオチド、ヌクレオチド、またはポリヌクレオチド、ならびにそれらの断片および部分を指し、ならびに一本鎖または二本鎖であってもよく、センス鎖またはアンチセンス鎖であってもよい、ゲノム由来または合成由来のＤＮＡまたはＲＮＡを指す。配列は、非コードの配列、コード配列、または両方の混合物であってもよい。本発明の核酸配列は、当業者に周知の標準技法を使用して調製することができる。
【００８１】
用語「核酸」および「ポリヌクレオチド」は、具体的には、５つの生物学的に生じる塩基（アデニン、グアニン、チミン、シトシン、およびウラシル）以外の塩基で構成される核酸も含む。
用語「調節核酸」、「調節エレメント」、および「発現制御エレメント」は、同義的に使用され、特定の宿主生物における作動可能に連結されているコード配列の発現に影響を及ぼすことができる核酸分子を指す。こうした用語は、広義に使用され、プロモーター、プロモーター配列、ＲＮＡポリメラーゼと転写因子との基本的相互作用に必要なコアエレメント、上流エレメント、エンハンサー、および応答エレメントを含む、転写を促進または調節するすべてのエレメントを包含する。原核細胞における例示的な調節エレメントとしては、プロモーター、オペレーター配列、およびリボソーム結合部位が挙げられる。真核細胞で使用される調節エレメントとしては、限定ではないが、宿主細胞でのコード配列の発現および／またはコート化ポリペプチドの産生を提供および／または調節する、プロモーター、エンハンサー、スプライシングシグナル、ポリアデニル化シグナル、ターミネーター、タンパク質分解シグナル、内部リボソーム侵入部位（ＩＲＥＳ）、およびピコルナウイルス２Ａ配列などの、転写および翻訳制御配列を挙げることができる。
【００８２】
「内部リボソーム侵入部位」または「ＩＲＥＳ」は、ＩＲＥＳの５’にある遺伝子とは独立して翻訳開始を機能的に促進し、動物細胞中で２つのシストロン（オープンリーディングフレーム）が単一転写物から翻訳されることを可能にする配列を記述する。ＩＲＥＳは、それの直ぐ下流にあるオープンリーディングフレームを翻訳するための独立したリボソーム侵入部位を提供する。ポリシストロン性であり得る、つまり、ｍＲＮＡから連続して翻訳される幾つかの異なるポリペプチドをコードすることができる細菌ｍＲＮＡとは異なり、動物細胞のほとんどのｍＲＮＡは、モノシストロン性であり、１つのポリペプチドのみを合成するためにコードされている。真核細胞のポリシストロン性転写物の場合、翻訳は、最も５’にある翻訳開始部位から開始され、最初の終止コドンで終結し、転写物がリボソームから放出され、ｍＲＮＡの最初のコード化ポリペプチドのみの翻訳がもたらされることになる。真核細胞では、転写物の第２のまたはその後のオープンリーディングフレームに作動可能に連結されているＩＲＥＳを有するポリシストロン性転写物は、その下流のオープンリーディングフレームを連続的に翻訳して、同じ転写物によりコードされた２つまたはそれよりも多くのポリペプチドの産生を可能にする。ＩＲＥＳは、長さが様々であってもよく、および種々の供給源、例えば、脳心筋炎ウイルス（ＥＭＣＶ）、ピコルナウイルス、例えば、口蹄疫ウイルス、ＦＭＤＶ、もしくはポリオウイルス（ＰＶ）、またはＣ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）に由来してもよい。種々のＩＲＥＳ配列およびベクター構築物におけるそれらの使用は、当技術分野に記載されており、周知である。下流コード配列は、下流遺伝子の発現に否定的な効果を及ぼすことにならない任意の距離でＩＲＥＳの３’末端に作動可能に連結されている。ＩＲＥＳと下流遺伝子開始部との間の最適なまたは許容可能な距離は、距離を変更し、距離の関数として発現を測定することにより容易に決定することができる。
【００８３】
用語「２ａ」または「２ａペプチド」は、２ａおよび「２ａ様」と記載される短いオリゴペプチド配列が、リボソーム読み飛ばしとして定義されるプロセスにより、タンパク質間の翻訳時切断を媒介することができるリンカーとしての役目を果たすことを意味する。そのような２ａおよび「２ａ様」配列（ピコルナウイルス科および他のウイルスまたは細胞性配列に由来する）を使用して、複数の遺伝子配列を連結して単一遺伝子にして、同じ細胞内でのそれらの共発現を保証することができる（Luke and Ryan, 2013を参照）。
【００８４】
本明細書で使用される場合、用語「プロモーター」または「プロモーター配列」は、ＲＮＡポリメラーゼの結合を容認し、遺伝子の転写を指図するヌクレオチド配列を意味する。典型的には、プロモーターは、遺伝子の転写開始部位に対して近位にある、遺伝子の５’非コード領域に位置する。転写の開始に関して機能するプロモーター内の配列エレメントは、コンセンサスヌクレオチド配列により特徴付けられることが多い。プロモーターの例としては、これらに限定されないが、細菌、酵母、植物、ウイルス、および哺乳動物（ウマ、ブタ、ウシ、およびヒトを含む）、トリ、または昆虫などの動物に由来するプロモーターが挙げられる。プロモーターは、誘導可能であってもよく、抑制可能であってもよく、および／または構成的であってもよい。誘導可能なプロモーターは、温度の変化（Ptashne, 2014）など、培養条件のある変化に応答してそれらの制御下にあるＤＮＡからの転写レベルの増加を開始させる。当業者に周知のプロモーターの例は、例えば、ＳＶ４０ラージＴ、ＨＣＭＶおよびＭＣＭＶ前初期遺伝子１、ヒト伸長因子アルファプロモーター、バキュロウイルスポリヘドリンプロモーターである。
本明細書で使用される場合、本発明の状況では、用語「プロモーター」は、特に、弱いプロモーター（配列）、好ましくは、Ｈ６ワクシニアプロモーター、Ｉ３Ｌワクシニアプロモーター、４２ｋ（長）ポックスウイルスプロモーター、７．５ｋワクシニアプロモーター、および／またはＰｉワクシニアプロモーター、またはそれらの相補的ヌクレオチド配列を指し、配列同一性は、好ましくは、長さ全体にわたって（少なくとも）７２％である（またはそれよりもより高い）。
【００８５】
用語「エンハンサー」は、ｃｉｓ位置においてプロモーターの活性に作用し、したがってこのプロモーターに機能的に接続されている遺伝子またはコード配列の転写を刺激するポリヌクレオチド配列を意味する。プロモーターとは異なり、エンハンサーの効果は、位置および配向性に依存せず、したがってエンハンサーは、イントロン内のまたはさらにコード領域内の転写ユニットの前または後ろに位置していてもよい。エンハンサーは、転写ユニットのすぐ近傍に位置しても、プロモーターから相当な距離に位置してもいずれでもよい。プロモーターとの物理的および機能的なオーバーラップを有することも可能である。当業者であれば、独立したエレメントまたはポリヌクレオチド配列内にクローニングされているエレメントとして利用可能である、種々の供給源に由来する（例えば、ＡＴＣＣに寄託されたものか、または市販のおよび個々の供給源に由来する）少なからぬエンハンサー（およびＧｅｎＢａｎｋなどのデータバンクに寄託された、例えば、ＳＶ４０エンハンサー、ＣＭＶエンハンサー、ポリオーマエンハンサー、アデノウイルスエンハンサーなど）を認識するだろう。少なからぬプロモーター配列は、頻繁に使用されるＣＭＶプロモーターなどのエンハンサー配列も含む。ヒトＣＭＶエンハンサーは、これまでに特定された最も強力なエンハンサーの１つである。誘導可能なエンハンサーの一例は、メタロチオネインエンハンサーであり、これは、グルココルチコイドまたは重金属により刺激することができる。
【００８６】
用語「相補的ヌクレオチド配列」は、ＤＮＡまたはＲＮＡなどのポリヌクレオチドの２つの対合鎖の一方の鎖を記述する。相補鎖のヌクレオチド配列は、各アデノシンに対してはチミンを含み（ＲＮＡの場合はウラシル）、各グアニンに対してはシトシンを含み、その逆も同様となるように、その対合鎖のヌクレオチド配列を反映する。例えば、５’−ＧＣＡＴＡＣ−３’の相補的ヌクレオチド配列は、３’−ＣＧＴＡＴＧ−５’であるか、またはＲＮＡの場合は３’−ＣＧＵＡＵＧ−５’である。
用語「遺伝子」、「目的の遺伝子」は、本明細書で使用される場合、同じ意味を有し、目的の産物をコードする任意の長さのポリヌクレオチド配列を指す。遺伝子は、コード配列に先行する（５’非コードまたは非翻訳配列）および後続する（３’非コードまたは非翻訳配列）調節配列をさらに含んでいてもよい。選択された配列は、全長であってもよくまたは短縮されていてもよく、融合遺伝子またはタグ付き遺伝子であってもよく、ｃＤＮＡ、ゲノムＤＮＡ、またはＤＮＡ断片であってもよい。ポリペプチドまたはＲＮＡをコードするゲノムＤＮＡは、成熟メッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）からスプライシングされ、したがって同じポリペプチドまたはＲＮＡをコードするｃＤＮＡには存在しない非コード領域（つまり、イントロン）を含んでいてもよいことが一般に理解される。ゲノムＤＮＡは、天然配列、つまり天然に存在する形態であってもよく、または突然変異されていてもよく、または異なる供給源に由来する配列またはそうでなければ所望のように修飾されている配列を含んでいてもよい。こうした修飾としては、選択された宿主細胞でのコドン使用頻度を最適化するためのコドン最適化またはタグ付けが挙げられる。さらに、そうした修飾としては、少数の非限定的な例を挙げれば、（クリプティックな）スプライスドナー、アクセプター部位および分岐地点、ポリアデニル化シグナル、ＴＡＴＡボックス、カイ部位、リボソーム侵入部位、反復配列、二次構造（例えば、ステムループ）、転写因子または他の調節因子の結合部位、制限酵素部位などのシス作用性部位の除去または付加を挙げることができる。選択された配列は、分泌性、細胞質内、核内、膜結合性、または細胞表面のポリペプチドをコードすることができる。
【００８７】
用語「目的のヌクレオチド配列」は、本明細書で使用される場合、必ずしも遺伝子を含まなくともよいが、遺伝子または他の遺伝情報のエレメントまたは一部分、例えば、ｏｒｉ（複製起点）を含んでいてもよいため、目的の遺伝子よりも一般的な用語である。目的のヌクレオチド配列は、コード配列を含むか否かに関わりなく、任意のＤＮＡ配列またはＲＮＡ配列であってもよい。
「オープンリーディングフレーム」または「ＯＲＦ」は、ＡＴＧまたはＡＵＧなどの翻訳開始シグナルまたは開始コドンおよび終止コドンを含み、潜在的にポリペプチド配列に翻訳することができる、ＤＮＡまたはＲＮＡのいずれかである核酸配列の長さを指す。
【００８８】
用語「転写」は、細胞におけるｍＲＮＡの生合成を記述する。
用語「発現」は、本明細書で使用される場合、宿主細胞内での核酸配列の転写および／または翻訳を指す。本発明の特定の態様によると、用語「発現」は、宿主細胞内での異種性核酸配列および／または外因性核酸配列の転写および／または翻訳を指す。宿主細胞での所望の産物の発現レベルは、細胞に存在する対応するＲＮＡまたはｍＲＮＡの量、または選択された配列によりコードされた所望のポリペプチドの量のいずれかに基づいて決定することができる。例えば、選択された配列から転写されるｍＲＮＡは、ノーザンブロットハイブリッド形成法、リボヌクレアーゼＲＮＡ保護、細胞性ＲＮＡのｉｎ  ｓｉｔｕハイブリッド形成法、またはＲＴｑＰＣＲ（逆転写後の定量ＰＣＲ）により定量化することができる。選択された配列から発現されるタンパク質は、種々の方法により、例えば、ＥＬＩＳＡにより、ウエスタンブロッティングにより、ラジオイムノアッセイにより、免疫沈殿により、タンパク質の生物学的活性をアッセイすることにより、またはタンパク質を免疫染色し、続いてＦＡＣＳ分析することにより、定量化することができる。
【００８９】
用語「発現カセット」または「転写ユニット」または「発現ユニット」は、転写される１つまたは複数の遺伝子を含み、転写された遺伝子をコードするヌクレオチド配列ならびに発現カセット内に含まれる調節エレメントを含むポリヌクレオチド配列が互いに作動可能に連結されている、ベクター、構築物、またはポリヌクレオチド配列内の領域を画定する。それらは、プロモーターから転写され、転写は、少なくとも１つのポリアデニル化シグナルにより終結する。１つの特定の態様では、それらは、１つの単一プロモーターから転写される。その結果、異なる遺伝子が、少なくとも転写的に連結される。１つよりも多くのタンパク質または産物を、各転写ユニットから転写および発現させることができる（多シストロン性転写ユニット）。各転写ユニットは、ユニット内に含まれている選択された配列のいずれかの転写および翻訳に必要な調節エレメントを含むことになる。また、各転写ユニットは、同じまたは異なる調節エレメントを含んでいてもよい。例えば、各転写ユニットは、同じターミネーターを含んでいてもよく、転写ユニット内の遺伝子を機能的に連結するためにＩＲＥＳエレメントまたはイントロンが使用されていてもよい。ベクターまたはポリヌクレオチド配列は、１つよりも多くの転写ユニットを含んでいてもよい。
【００９０】
用語「発現の増加」、「力価または生産性の増加」、または「発現または生産性の向上」は、好適な対照と比較して、例えば、ｃＤＮＡによりコードされたタンパク質をイントロン含有遺伝子によりコードされたタンパク質と比べて、宿主細胞に導入された異種性および／または外因性配列、例えば治療用タンパク質をコードする遺伝子の発現、合成、または分泌が増加することを意味する。本発明による細胞が、本明細書に記載の発明による方法に従って培養され、この細胞が、比生産性または力価の少なくとも１．２倍、１．５倍、２倍、３倍、４倍、または５倍の増加を示す場合、力価または生産性の増加が存在する。また、本発明による細胞が、本明細書に記載の発明による方法に従って培養され、この細胞が、比生産性または力価の少なくとも１．２倍、または少なくとも１．５倍、または少なくとも２倍、または少なくとも３倍の増加を示す場合、力価または生産性の増加が存在する。また、本発明による細胞が、本明細書に記載の発明による方法に従って培養され、この細胞が、比生産性または力価の少なくとも１．２倍〜５倍、好ましくは１．５倍〜５倍、より好ましくは２倍〜５倍、特に好ましくは３倍〜５倍の増加を示す場合、特に力価または生産性の増加が存在する。「発現の増加」は、同様に、より多くの細胞が実際に目的の遺伝子／配列を発現していることを意味することができる。例えば、発現の増加は、本発明のプロモーターが、他のプロモーターと比べて、ウイルス複製サイクル中により長期間にわたって活性であることを意味することができる。
【００９１】
発現、力価、または生産性の増加は、本発明による異種性ウイルスベクターを使用することにより得ることができる。これは、追加の選択可能なマーカーとして、１つまたは複数の蛍光タンパク質（例えば、ＧＦＰ）または細胞表面マーカーを含む組換え宿主細胞のＦＡＣＳ支援選択などの他の手法と組み合わせることができる。発現の増加を得るための他の方法は、異なる方法の組合せも使用できるが、例えば、クロマチン構造を操作するためのシス活性エレメント（例えば、ＬＣＲ、ＵＣＯＥ、ＥＡＳＥ、アイソレーター、Ｓ／ＭＡＲ、ＳＴＡＲエレメント）を使用すること、（人工）転写因子を使用すること、内因性または異種性および／もしくは外因性遺伝子発現を上方調節するための天然または合成作用剤で細胞を処理すること、ｍＲＮＡまたはタンパク質の安定性（半減期）を向上させること、ｍＲＮＡ翻訳の開始を向上させること、エピゾームプラスミドを使用することにより遺伝子量を増加させること（ウイルス配列、例えば、ＳＶ４０、ポリオーマウイルス、アデノウイルス、ＥＢＶ、またはＢＰＶを複製起点として使用することに基づく）、増幅促進性配列またはＤＮＡコンカテマーに基づくｉｎ  ｖｉｔｒｏ増幅系を使用することに基づく。
【００９２】
「発現の増加」を測定するためのアッセイは、多重反応モニタリング法（ＭＲＭ）などのＬＣ−ＭＳ／ＭＳに基づくタンパク質測定；ウエスタンブロット法、ドットブロット法、または免疫拡散法、およびフローサイトメトリー法などの抗体に基づく検出方法；ならびに血球凝集アッセイによる生物学的活性の測定である。
「プロモーター活性」は、それぞれのプロモーターの制御下で転写されるｍＲＮＡを定量化することにより間接的に測定される。ｍＲＮＡは、内因性標準物質と比べてＲＴｑＰＣＲにより定量化される。
用語「ウイルス量」は、当業者に周知である。用語「ウイルス量」は、本明細書では、用語「ウイルス力価」と同義的に使用される。ウイルス量またはウイルス力価は、活性ウイルス感染症の重症度の尺度であり、当業者に公知の方法により決定することができる。決定は、ウイルスタンパク質に結合する抗体などによりウイルスタンパク質を検出することおよびさらなる検出に基づいてもよく、またはその代わりにＲＴ−ＰＣＲなどの増幅法によりウイルス核酸を検出することによるものであってもよい。核酸増幅法による血漿中のビリオン関連ウイルスＲＮＡのモニタリングは、レトロウイルス疾患の状態および進行を評価するために、ならびに予防的および治療的介入の有効性を評価するために広く用いられているパラメーターである。例えば、ウイルス量またはウイルス力価は、血漿１ミリリットル当たりのＲＮＡコピー数などの、関与する体液中のウイルス生存量を推定することにより算出することができる。好ましくは、用語「ウイルス量」または「ウイルス力価」は、ウイルス調製物１容積当たりの感染単位の尺度である。ウイルス力価は、生物学的手順のエンドポイントであり、並行して実施される試験のある割合が効果を示す場合の希釈度であると定義される（Reed and Muench, 1938）。具体的には、１ミリリットル当たりの組織培養感染量５０（ＴＣＩＤ５０／ｍｌ）は、その希釈度で並行して接種した細胞培養物の数の５０％が感染する、ウイルス調製物の希釈度を示す。
【００９３】
「転写調節エレメント」は、通常、発現される遺伝子配列の上流にあるプロモーター、転写開始および終結部位、ならびにポリアデニル化シグナルを含む。
用語「転写開始部位」は、一次転写産物、つまりｍＲＮＡ前駆体に組み込まれている最初の核酸に対応する、構築物中の核酸を指す。転写開始部位は、プロモーター配列とオーバーラップしてもよい。
「終結シグナル」または「ターミネーター」または「ポリアデニル化シグナル」または「ｐｏｌｙＡ」または「転写終結部位」または「転写終結エレメント」は、真核生物ｍＲＮＡの３’末端の特定部位での切断、および切断された３’末端での約１００〜２００アデニンヌクレオチドの配列（ｐｏｌｙＡ尾部）の転写後組込みを引き起こし、したがってＲＮＡポリメラーゼの転写終結を引き起こすシグナル配列である。ポリアデニル化シグナルは、切断部位の約１０〜３０ヌクレオチド上流の配列ＡＡＴＡＡＡ、および下流に位置する配列を含む。ｔｋ  ｐｏｌｙＡ、ＳＶ４０後期および初期ｐｏｌｙＡ、ＢＧＨ  ｐｏｌｙＡ（例えば、米国特許第５，１２２，４５８号明細書に記載されている）、またはハムスター成長ホルモンｐｏｌｙＡ（国際公開第２０１０／０１０１０７号パンフレット）などの種々のポリアデニル化エレメントが公知である。
【００９４】
「翻訳調節エレメント」は、発現される各個々のポリペプチド毎に、翻訳開始部位（ＡＵＧ）、終止コドン、およびｐｏｌｙＡシグナルを含む。一部の構築物には、内部リボソーム侵入部位（ＩＲＥＳ）が含まれていてもよい。発現を最適化するために、発現させようとする核酸配列の５’および／または３’非翻訳領域を除去、付加、または変更して、転写または翻訳のいずれかのレベルにおいて発現を妨害または低減させ得るあらゆる潜在的に余分で不適切な選択的翻訳開始コドンまたは他の配列を排除することが得策であり得る。コンセンサスリボソーム結合部位（コザック配列）を、開始コドンの直ぐ上流に挿入して、翻訳を、したがって発現を増強することができる。このリボソーム結合部位付近のＡ／Ｕ含有量の増加は、より効率的なリボソーム結合を促進する。
【００９５】
定義により、宿主細胞に挿入されたあらゆるポリヌクレオチド配列またはあらゆる遺伝子、およびそれによりコードされている対応するタンパク質またはＲＮＡは、異なる（ウイルス）種に由来する場合、宿主細胞に関して「外因性」、「外因性配列」、「外因性遺伝子」、「外因性コード配列」、「外因性抗原コード配列」と呼ばれる。したがって、本発明のネコパラミクソウイルス抗原は、ＡＬＶＡＣなどのアビポックスウイルスウイルスベクターに照らして外因性である。抗原などの目的の配列または遺伝子に関して本明細書で使用される場合、用語「外因性」または「外因性抗原コード配列」は、前記目的の配列または遺伝子、特に前記抗原が、その天然種の状況外で発現されることを意味する。したがって、ＦＰａＶ−２株「ゴードン」に由来するＨ抗原は、ＡＬＶＡＣなどのアビポックスウイルスウイルスベクターに関して外因性である抗原の一例である。したがって、ネコパラミクソウイルス抗原などの、任意の目的のネコパラミクソウイルス配列または遺伝子は、本発明の特定の態様による目的の外因性配列もしくは遺伝子または抗原である。
定義により、宿主細胞に挿入されるあらゆるポリヌクレオチド配列またはあらゆる遺伝子、およびそれによりコードされている対応するタンパク質またはＲＮＡは、宿主細胞に関して、「異種性」、「異種性配列」、「異種性遺伝子」、「異種性コード配列」、「導入遺伝子」、または「異種性タンパク質」と呼ばれる。これは、導入しようとする配列または導入しようとする遺伝子が、宿主細胞の内因性配列または内因性遺伝子と同一である場合でさえ、該当する。例えば、ＡＬＶＡＣ野生型ウイルスとは異なる部位にまたは修飾形態でＡＬＶＡＣウイルスベクターに導入されたＡＬＶＡＣプロモーター配列は、定義により異種性配列である。抗原などの目的の配列または遺伝子に関して本明細書で使用される場合、用語「異種性」は、前記目的の配列または遺伝子、特に前記抗原が、その天然亜種の状況外で発現されることを意味する。
【００９６】
そのため、抗原などの、任意のネコパラミクソウイルス特異的な目的の配列または遺伝子、例えば、ＦＰａＶ−２「ゴードン」株に由来するＨ抗原は、したがって、別の（ネコ）パラミクソウイルスウイルスベクターに関して、本発明の特定の態様による目的の異種性配列もしくは遺伝子または抗原である。
用語「天然に存在しない」は、ハイブリッド配列または異なる種に由来する抗原などの目的の配列もしくは遺伝子、あるいは人為的な突然変異、挿入、または欠失などによる、天然の産物ではない抗原などの目的の配列または遺伝子など、この状況では天然に生じない、抗原などの任意の目的の配列または遺伝子を意味する。
用語「組換え」は、本発明の明細書の全体にわたって、用語「天然に存在しない」、「異種性」、および「外因性」と同義的に使用される。したがって、「組換え」タンパク質は、異種性または外因性ポリヌクレオチド配列のいずれかから発現されるタンパク質である。用語「組換え」は、ウイルスに関して使用される場合、ウイルスゲノムの人為的操作により産生されるウイルスを意味する。外因性抗原コード配列などの異種性または外因性配列を含むウイルスは、組換えウイルスである。用語「組換えウイルス」および用語「天然に存在しないウイルス」は同義的に使用される。
【００９７】
したがって、用語「異種性ベクター」は、異種性または外因性ポリヌクレオチド配列を含むベクターを意味する。用語「組換えベクター」は、異種性または組換えポリヌクレオチド配列を含むベクターを意味する。
本明細書で使用される場合、用語「作動可能に連結された」は、調節エレメントと遺伝子またはそのコード領域との間の接続を記述するために使用される。典型的には、遺伝子発現は、１つまたは複数の調節エレメント、例えば、限定ではないが、構成的または誘導可能なプロモーター、組織特異的調節エレメント、およびエンハンサーの制御下に置かれている。遺伝子またはコード領域は、調節エレメントに「作動可能に連結されている」または「作動性に連結されている」または「作動可能に関連している」と言われ、遺伝子またはコード領域が、調節エレメントにより制御されるかまたは影響を受けることを意味する。例えば、プロモーターがコード配列の転写または発現を達成する場合、プロモーターは、コード配列に作動可能に連結されている。
【００９８】
さらに、本明細書の範囲内では、用語「機能的連結」、「機能的に連結された」、または「作動可能に連結された」は、２つまたはそれよりも多くの核酸配列または配列エレメントが、それらの意図されている様式で機能することを容認するように配置されていることを意味する。例えば、プロモーター／エンハンサーまたはターミネーターは、シス位にある連結された遺伝子配列の転写を制御またはモジュレートすることができる場合、コード遺伝子配列に機能的に連結されている。一般に、しかし必ずという訳ではないが、機能的に連結されているＤＮＡ配列は連続しており、２つのポリペプチドコード領域を接合することが必要な場合、または分泌シグナルペプチドの場合、連続しており、リーディングフレームにある。しかしながら、作動可能に連結されているプロモーターは、一般に、上流に位置するか、または作動可能に連結されているターミネーターは、一般に、コード配列の下流に位置するが、それとは必ずしも連続していない。エンハンサーは、コード配列の転写を増加させる限り、連続している必要はない。この場合、エンハンサーは、コード配列の上流に位置していてもよく、または下流に位置していてもよく、ある程度離れてさえいてもよい。ポリアデニル化部位は、転写がコード配列からポリアデニル化シグナルへと進行するようにコード配列の３’末端に位置する場合、コード配列に作動可能に連結されている。連結は、当技術分野で公知の組換え法により、例えば、好適な制限部位もしくは平滑末端でのライゲーションにより、または融合ＰＣＲ方法論を使用することにより達成される。好適な制限部位が存在しない場合は、合成オリゴヌクレオチドリンカーまたはアダプターを、従来の慣行に準じて使用することができる。
【００９９】
したがって、プロモーター配列の「機能的断片または誘導体」という用語は、断片または誘導体が依然としてプロモーター活性を達成することを意味する。プロモーター活性を評価する方法である機能的アッセイは、当業者に周知である（Bustin 2000, Nolan et al. 2006）。そのような機能的アッセイの例示的な実施形態としては、例えば、プロモーター動力学実験が挙げられる。プロモーターまたはその断片がレポーター導入遺伝子の転写を指図する発現カセットを保持するベクターウイルスで感染させた細胞を、様々な時間にわたってインキュベートする。感染後の様々な時点で収集した試料から全ＲＮＡを調製する。ＤＮＡｓｅＩ消化により夾雑ＤＮＡを破壊した後、ＲＮＡを逆転写する。ＲＮＡ調製物からの夾雑ＤＮＡの除去が成功したことを実証するために、逆転写酵素（ＲＴ）を添加して１つの複製試料を処理し、ＲＴを添加せずに第２の複製を処理する。得られたｃＤＮＡを精製し、従来のＰＣＲにおける鋳型として使用する。ＲＴを添加して処理した試料のみが、ＰＣＲ産物を生成することになる。その後、こうしたｃＤＮＡを、その転写が感染および複製の効率の内部標準を供給するウイルスベクターの必須遺伝子（内部標準遺伝子）のプライマーと共に、レポーター導入遺伝子のプライマーを用いたｑＰＣＲに使用することができる。レポーターのｑＰＣＲ値を、内部標準遺伝子のｑＰＣＲ値を使用して、異なる構築物の間および異なる感染後時間の間で正規化する。これにより、異なるプロモーターおよびそれらの断片のプロモーター活性の解釈が可能になる。
【０１００】
「配列相同性」は、本明細書で使用される場合、２つの配列の関連性を決定するための方法を指す。配列相同性を決定するため、２つまたはそれよりも多くの配列を最適にアラインし、必要に応じてギャップを導入する。しかしながら、「配列同一性」とは対照的に、配列相同性を決定する場合は、保存的アミノ酸置換を一致として数える。言い換えれば、参照配列と９５％配列相同性を有するポリペプチドまたはポリヌクレオチドを得るためには、参照配列のアミノ酸残基もしくはヌクレオチドの８５％、好ましくは９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、さらにより好ましくは９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、９９．９％が、別のアミノ酸もしくはヌクレオチドとの保存的置換と一致もしくは含まなければならないか、または総アミノ酸残基もしくはヌクレオチドの最大１５％、好ましくは最大１０％、９％、８％、７％、６％、さらにより好ましくは最大５％、４％、３％、２％、１％、０．１％の数の保存的置換を含まないアミノ酸またはヌクレオチドが、参照配列に挿入されていてもよい。好ましくは、相同体配列は、少なくとも５０ヌクレオチド、さらにより好ましくは１００ヌクレオチド、さらにより好ましくは２５０ヌクレオチド、さらにより好ましくは５００ヌクレオチドの伸長を含む。
【０１０１】
「配列同一性」は、当技術分野で公知のように、２つまたはそれよりも多くのポリペプチド配列間または２つまたはそれよりも多くのポリヌクレオチド配列間の、すなわち参照配列と、参照配列と比較しようとする所与の配列との関係性を指す。配列同一性は、所与の配列を、そのような配列の鎖間の一致により決定して最高度の配列類似性がもたらされるように最適にアラインした後で、参照配列と比較することにより決定される。そのようなアラインメントに際して、配列同一性は、位置ごとのベースで確認される。例えば、特定の位置でヌクレオチドまたはアミノ酸残基が同一である場合、配列は、その位置で「同一」である。その後、そのような位置同一性の総数を、参照配列のヌクレオチドまたは残基の総数で除算して、配列同一性％を得る。配列同一性は、これらに限定されないが、以下の文献に記載されているものを含む、公知の方法により容易に算出することができる：Computational Molecular Biology, Lesk, A. N., ed., Oxford University Press, New York (1988), Biocomputing: Informatics and Genome Projects, Smith, D.W., ed., Academic Press, New York (1993)；Computer Analysis of Sequence Data, Part I, Griffin, A.M., and Griffin, H. G., eds., Humana Press, New Jersey (1994)；Sequence Analysis in Molecular Biology, von Heinge, G., Academic Press (1987)；Sequence Analysis Primer, Gribskov, M. and Devereux, J., eds., M. Stockton Press, New York (1991)；およびCarillo, H., and Lipman, D., SIAM J. Applied Math., 48: 1073 (1988)。これらの文献の教示は、参照により本明細書に組み込まれる。配列同一性を決定するための好ましい方法は、試験される配列間で最大の一致をもたらすように設計される。配列同一性を決定するための方法は、所与の配列間の配列同一性を決定する公的に利用可能なコンピュータプログラムにコーディングされている。そのようなプログラムの例としては、これらに限定されないが、ＧＣＧプログラムパッケージ（Devereux, J., et al., Nucleic Acids Research, 12(1):387 (1984))、ＢＬＡＳＴＰ、ＢＬＡＳＴＮ、ＦＡＳＴＡ（Altschul, S. F. et al., J. Molec. Biol., 215:403-410 (1990)）が挙げられる。ＢＬＡＳＴＸプログラムは、ＮＣＢＩおよび他の供給源から公的に利用可能である（BLAST Manual, Altschul, S. et al., NCVI NLM NIH Bethesda, MD 20894、Altschul, S. F. et al., J. Molec. Biol., 215:403-410 (1990)。これらの文献の教示は、参照により本明細書に組み込まれる）。こうしたプログラムは、所与の配列と参照配列との間に最高レベルの配列同一性をもたらすために、初期設定ギャップ重みを使用して配列を最適にアラインする。例示として、参照ヌクレオチド配列と、少なくとも例えば８５％、好ましくは９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、さらにより好ましくは９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、９９．９％「配列同一性」を有するヌクレオチド配列を有するポリヌクレオチドとは、所与のポリヌクレオチド配列が、参照ヌクレオチド配列の各１００ヌクレオチド当たり、最大１５個の、好ましくは最大１０個の、さらにより好ましくは最大５個の点突然変異を含んでいてもよいことを除いて、所与のポリヌクレオチドのヌクレオチド配列が、参照配列と同一であることが意図されている。言い換えれば、参照ヌクレオチド配列と、少なくとも８５％、好ましくは９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、さらにより好ましくは９５％、９６％、９７％��９８％、９９％、９９．９％同一性を有するヌクレオチド配列を有するポリヌクレオチドでは、参照配列のヌクレオチドの最大１５％、好ましくは１０％、９％、８％、７％、６％、さらにより好ましくは５％、４％、３％、２％、１％、０．１％が欠失されていてもよくもしくは別のヌクレオチドに置換されていてもよく、または参照配列の総ヌクレオチドの最大１５％、好ましくは１０％、９％、８％、７％、６％、さらにより好ましくは５％、４％、３％、２％、１％、０．１％の数のヌクレオチドが、参照配列に挿入されていてもよい。参照配列のこうした突然変異は、参照ヌクレオチド配列の５’末端位置もしくは３’末端位置で生じてもよく、またはこれら末端位置間に任意の場所に生じてもよく、参照配列のヌクレオチド中に個々に点在しても、または参照配列内の１つもしくは複数の連続したグループであってもいずれでもよい。同様に、参照アミノ酸配列と、少なくとも例えば８５％、好ましくは９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、さらにより好ましくは９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、配列同一性を有する所与のアミノ酸配列を有するポリペプチドとは、所与のペプチド配列が参照アミノ酸配列の各１００アミノ酸当たり、最大１５個の、好ましくは最大１０、９、８、７、６個の、さらにより好ましくは最大５、４、３、２、１個のアミノ酸変更を含んでいてもよいことを除いて、ペプチドの所与のアミノ酸配列が、参照配列と同一であることが意図されている。言い換えれば、参照アミノ酸配列と、少なくとも８５％、好ましくは９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、さらにより好ましくは９５％、９６％、９７％、９８％、９９％配列同一性を有する所与のポリペプチド配列を得るためには、参照配列のアミノ酸残基の最大１５％、好ましくは最大１０％、９％、８％、７％、さらにより好ましくは最大５％、４％、３％、２％、１％が欠失されていてもよくもしくは別のアミノ酸に置換されていてもよく、または参照配列のアミノ酸残基の総数の最大１５％、好ましくは最大１０％、９％、８％、７％、さらにより好ましくは最大５％、４％、３％、２％、１％の数のアミノ酸が、参照配列に挿入されていてもよい。参照配列のこうした変更は、参照配列のアミノ末端位置もしくはカルボキシ末端位置に生じてもよく、またはこれら末端位置間に任意の場所に生じてもよく、参照配列の残基中に個々に点在しても、または参照配列内の１つもしくは複数の連続したグループであってもいずれでもよい。好ましくは、同一ではない残基位置は、保存的アミノ酸で置換されていることが異なる。しかしながら、配列同一性を決定する場合、保存的置換は一致には含まれない。
【０１０２】
用語「配列同一性」または「同一性パーセント」は、本明細書では同義的に使用される。この用語は、本発明の目的では、２つのアミノ酸配列または２つの核酸配列の同一性パーセントを決定するために、配列を最適な比較の目的でアラインすることであると定義される（例えば、第２のアミノ酸配列または核酸配列との最適なアラインメントのために、第１のアミノ酸または核酸の配列にギャップを導入してもよい）。その後、対応するアミノ酸位置またはヌクレオチド位置のアミノ酸残基またはヌクレオチド残基を比較する。第１の配列の位置が、第２の配列の対応する位置と同じアミノ酸残基またはヌクレオチド残基により占められている場合、分子は、その位置で同一である。２つの配列間の同一性パーセントは、配列により共有される同一位置の数の関数である（つまり、同一性％＝同一位置／位置（つまり、オーバーラップする位置）の総数×１００）。好ましくは、２つの配列は長さが同じである。
【０１０３】
配列比較は、比較されている２つの配列の長さ全体にわたって、または２つの配列の断片にわたって実施してもよい。典型的にはおよび好ましくは、本発明の範囲では、比較は、比較されている２つの配列の全長にわたって実施されることになる。しかしながら、配列同一性は、例えば、２０個、５０個、１００個、またはそれよりも多くの連続アミノ酸残基の領域にわたって実施してもよい。
本明細書で使用される場合、特に、用語「配列番号Ｙに記載の核酸配列／アミノ酸配列と少なくともＸ％配列同一性を有する」（またはその代わりに、用語「配列番号Ｙの／に示される核酸配列／アミノ酸配列と少なくともＸ％配列同一性を有する」）は、それぞれ、用語「配列番号Ｙの長さにわたって、配列番号Ｙに記載の核酸配列／アミノ酸配列と少なくともＸ％配列同一性を有する」または用語「配列番号Ｙの長さ全体にわたって、配列番号Ｙに記載の核酸配列／アミノ酸配列と少なくともＸ％配列同一性を有する」と等価である。
【０１０４】
当業者であれば、幾つかの異なるコンピュータプログラムが、２つの配列間の相同性を決定するために利用可能であるという事実を認識するだろう。例えば、配列の比較、および２つの配列間の同一性パーセントの決定は、数学的アルゴリズムを使用して達成することができる。特定の態様では、２つのアミノ酸配列または核酸配列間の同一性パーセントは、Ｂｌｏｓｕｍ６２マトリックスまたはＰＡＭ２５０マトリックスのいずれか、および１６、１４、１２、１０、８、６、または４のギャップ重み、および１、２、３、４、５、または６の長さ重みを使用して、Ａｃｃｅｌｒｙｓ  ＧＣＧソフトウエアパッケージ（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ａｃｃｅｌｒｙｓ．ｃｏｍ／ｐｒｏｄｕｃｔｓ／ｇｃｇ／にて利用可能）のＧＡＰプログラムに組み込まれているＮｅｅｄｌｅｍａｎおよびＷｕｎｓｃｈ（J. Mol. Biol. (48): 444-453 (1970)）アルゴリズムを使用して決定される。当業者であれば、こうした異なるパラメーターはすべて、わずかに異なる結果をもたらすことになるが、２つの配列の全体的な同一性パーセンテージは、異なるアルゴリズムを使用しても著しくは変更されないことを理解するだろう。
【０１０５】
本発明のタンパク質配列または核酸配列をさらに「クエリー配列」として使用して公的なデータベースでの検索を実施し、例えば、他のファミリーメンバーまたは関連配列を特定することができる。そのような検索は、Altschul, et al. (1990) J. Mol. Biol. 215:403-10のＢＬＡＳＴＮおよびＢＬＡＳＴＰプログラム（バージョン２．０）を使用して実施することができる。ＢＬＡＳＴタンパク質検索は、ＢＬＡＳＴＰプログラムを、スコア＝５０、ワード長＝３で実施して、本発明のタンパク質分子に相同的なアミノ酸配列を得ることができる。比較目的のギャップ付きアラインメントを得るためには、Altschul et al. (1997) Nucleic Acids Res. 25(17): 3389-3402に記載のＧａｐｐｅｄ  ＢＬＡＳＴを使用してもよい。ＢＬＡＳＴおよびＧａｐｐｅｄ  ＢＬＡＳＴプログラムを使用する場合、それぞれのプログラム（例えば、ＢＬＡＳＴＰおよびＢＬＡＳＴＮ）の初期設定パラメーターを使用してもよい。国立バイオテクノロジー情報センター（National Center for Biotechnology Information）のホームページ、ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／を参照されたい。
【０１０６】
用語「ネコ科動物（feline）」は、本発明の範囲では、ネコ科（Felidae）のファミリーのメンバー、特にネコ属（Felis）（本明細書ではこれが好ましい）、オオヤマネコ属（Lynx）、ヒョウ属（Panthera）、ウンピョウ属（Neofelis）、カラカル属（Caracal）、オセロット属（Leopardus）、ピューマ属（Puma）、チーター属（Acinonyx）、ベンガルヤマネコ属（Prionailurus）、およびオトコロブス属（Otocolobus）のメンバーを指す。ネコ属としては、例えば、フェリス・シルベストリス（Felis silvestris）の種、例えば、フェリス・シルベストリス・シルベストリス（Felis silvestris silvestris）（ヨーロッパヤマネコ）、野生のネコ（feral cat）、好ましくは、フェリス・シルベストリス・カツス（Felis silvestris catus）（フェリス・カツス（Felis catus）、つまりイエネコとしても知られている）、フェリス・カウス（Felis chau）、フェリス・ニグリペス（Felis nigripes）、フェリス・マルガリタ（Felis margarita）、およびフェリス・ビエチ（Felis bieti）が挙げられる。ヒョウ属としては、例えば、トラ（パンテラ・チグリス（Panthera tigris））、ライオン（パンテラ・レオ（Panthera leo））、ジャガー（パンテラ・オンカ（Panthera onca））、ヒョウ（パンテラ・パルズス（Panthera pardus））、ユキヒョウ（パンテラ・ウンシアール（Panthera uncial））、およびライガーが挙げられる。他のネコ科としては、これらに限定されないが、オオヤマネコ（Lynx lynx）、リュンクス・ルフス（Lynx rufus）、アキノニュクス・ユバトゥス（Acinonyx jubatus）（チーター）、ピューマ・コンコロル（クーガー）、レオパルドゥス・パルダリス（Leopardus pardalis）（オセロット）が挙げられる。好ましくは、「ネコ科動物」は、ネコ（cat）、最も好ましくはイエネコ（domestic cat）である。
【０１０７】
「免疫原性または免疫学的組成物」は、宿主において組成物に対する細胞性または抗体媒介性免疫応答の免疫学的応答を誘発させる少なくとも１つの抗原またはその免疫原性部分を含む物質の組成物を指す。好ましくは、免疫原性組成物は免疫応答を誘導し、より好ましくは、ネコパラミクソウイルス感染症の臨床徴候の１つまたは複数に対する防御免疫を付与する。宿主が、防御的な免疫学的応答を示し、新たな感染に対する抵抗性が増強されることになり、および／または疾患の臨床重症度が低減されることになる場合、免疫原性組成物は、「ワクチン」と記述される。
本明細書で使用される用語「抗原」は、当技術分野で十分に理解されており、免疫原性である物質、つまり免疫原、ならびに免疫不応答またはアネルギー、つまり外来性物質に対する身体の防衛機構による反応の欠如を誘導する物質を含む。本明細書で使用される場合、用語「抗原」は、全長タンパク質、ならびにエピトープを含有または含むそれらのペプチド断片を意味することが意図されている。さらに、用語「抗原コード配列」は、抗原をコードする配列に関する。好ましくは、抗原コード配列は、ｃＤＮＡ配列などの核酸配列である。しかしながら、用語「核酸配列」は、本明細書の他所で定義されている。
また、用語「少なくとも１つの外因性抗原コード配列」は、１つよりも多くの外因性抗原コード配列を包含する。したがって、用語「少なくとも１つの外因性抗原コード配列」は、２、３、４、５、または６つの外因性抗原コード配列を包含することが理解されなければならない。したがって、用語「少なくとも２つの外因性抗原コード配列」は、３、４、５、または６つの外因性抗原コード配列を包含する。
【０１０８】
用語「異なる外因性抗原コード配列」は、互いと比較してそれらの配列が異なる配列である。
「免疫原性組成物」は、本明細書で使用される場合、例えば、本明細書に記載のような免疫学的応答を誘発するウイルス表面タンパク質などの、ポリペプチドまたはタンパク質を指すことができる。用語「免疫原性断片」または「免疫原性部分」は、１つまたは複数のエピトープを含み、したがって本明細書に記載の免疫学的応答を誘発するタンパク質またはポリペプチドの断片または短縮形態および／もしくは置換形態を指す。一般に、そのような短縮形態および／もしくは置換形態または断片は、全長タンパク質に由来する少なくとも６個の連続アミノ酸を含むことになる。そのような断片は、当技術分野で周知の任意の数のエピトープマッピング技術を使用して特定することができる。例えば、Epitope Mapping Protocols in Methods in Molecular Biology, Vol. 66 (Glenn E. Morris, Ed., 1996) Humana Press, Totowa, New Jerseyを参照されたい。例えば、直鎖状エピトープは、タンパク質分子の部分に対応する多数のペプチドを共に固体支持体上に合成し、ペプチドが依然として固体支持体に付着している状態でペプチドを抗体と反応させることにより決定することができる。そのような技法は公知であり、当技術分野に記載されている。例えば、米国特許第４，７０８，８７１号明細書；Geysen et al. (1984) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 81:3998-4002；およびGeysen et al. (1986) Molec. Immunol. 23:709-715を参照されたい。同様に、立体構造エピトープは、例えば、Ｘ線結晶構造解析法および二次元核磁気共鳴法などによりアミノ酸の空間的立体構造を決定することにより容易に特定される。上記のエピトープマッピングプロトコールを参照されたい。合成抗原、例えば、ポリペプチド、フランキングエピトープ、および他の組換えまたは合成由来の抗原も、定義内に含まれる。例えば、Bergmann et al. (1993) Eur. J. Immunol. 23:2777-2781；Bergmann et al. (1996), J. Immunol. 157:3242-3249；Suhrbier, A. (1997), Immunol. and Cell Biol. 75:402-408；およびGardner et al., (1998) 12th World AIDS Conference, Geneva, Switzerland, June 28-July 3, 1998を参照されたい。これらの文献の教示および内容はすべて、参照により本明細書に組み込まれる。
【０１０９】
用語「免疫する」は、免疫しようとするネコ科動物に免疫原性組成物を投与し、それによりそのような免疫原性組成物に含まれる抗原に対する免疫学的応答を引き起こすことによる能動免疫化に関する。
用語「必要とする」または「必要のある」は、本明細書で使用される場合、投与／治療が、本発明による免疫原性組成物を受け取る動物の健康もしくは臨床徴候、または健康に対する任意の他の肯定的な医学的効果をブーストもしくは改善することに関連することを意味する。
【０１１０】
用語「ワクチン」は、本明細書で使用される場合、動物に免疫学的応答を誘導する少なくとも１つの免疫学的に活性な成分、および必ずというわけではないがおそらくは活性成分の免疫学的活性を増強する１つまたは複数の追加成分を含む医薬組成物を指す。加えて、ワクチンは、医薬組成物に典型的なさらなる成分を含んでいてもよい。区別のためであるが、ワクチンの免疫学的に活性な成分は、それらの元の形態の完全ウイルス粒子、またはいわゆる修飾生ワクチン（ＭＬＶ）における弱毒化粒子、またはいわゆる死菌ワクチン（ＫＶ）における適切な方法により不活化された粒子のいずれを含んでいてもよい。別の形態では、ワクチンの免疫学的に活性な成分は、生物の適切な要素を含んでいてもよく（サブユニットワクチン）、そうした要素は、粒子全体もしくはそのような粒子を含む増殖培地を破壊し、任意にその後の精製ステップを行って所望の構造を得ることによるか、または例えば、細菌、昆虫、哺乳動物、もしくは他の種に基づく好適な系を使用することによる適切な操作ならびに任意にその後の単離および精製手順を含む合成プロセスによるか、または好適な医薬組成物を使用して遺伝物質を直接組み込むこと（ポリヌクレオチドワクチン接種）によりワクチンを必要とする動物において合成プロセスを誘導することによるかのいずれかにより生成される。ワクチンは、上記に記載の要素の１つまたは同時に１つよりも多くを含んでいてもよい。本発明の特定の態様内で使用される場合、「ワクチン」は、組換えワクチンとも呼ばれる生ワクチンまたは生ウイルスを指す。本発明の別の特定の態様では、「ワクチン」は、ウイルス様粒子（ＶＬＰ）を含む、不活化または死菌ウイルスを指す。したがって、ワクチンは、サブユニットワクチンであってもよく、または死菌（ＫＶ）もしくは不活化ワクチンであってもよい。
【０１１１】
用語「ＤＮＡワクチン接種」または「ポリヌクレオチドワクチン接種」は、好適な医薬組成物を使用して遺伝物質を直接接種することを意味する。
種々の物理的および化学的な不活化法が当技術分野で公知である。用語「不活化」は、その免疫原性を維持したままそのようなウイルスを不活化または死滅させるように照射されているか（紫外線（ＵＶ）、Ｘ線、電子ビーム、またはガンマ線）、加熱されているか、または化学的に処理されている、以前は病毒性だったかまたは非病毒性のウイルスを指す。好適な不活化剤としては、β−プロピオラクトン、二成分またはベータ−またはアセチル−エチレンイミン、グルタルアルデヒド（gluteraldehyde）、オゾン、およびホルマリン（ホルムアルデヒド）が挙げられる。
ホルマリンまたはホルムアルデヒドによる不活化の場合、ホルムアルデヒドを、典型的には、水およびメチルアルコールと混合してホルマリンを創出する。メチルアルコールを添加することにより、活性化プロセス中の分解または交差反応が防止される。一実施形態では、約０．１〜１％の３７％ホルムアルデヒド溶液を使用して、ウイルスを不活化する。ホルマリンの量を調整して、物質は不活化されるが、高投薬量による副作用があまり生じないことを保証することが重要である。
【０１１２】
より詳しくは、用語「不活化」は、ウイルスの状況では、ウイルスがｉｎ  ｖｉｖｏまたはｉｎ  ｖｉｔｒｏで複製不能であることを意味する。例えば、用語「不活化」は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏで増殖され、化学的または物理的手段を使用して不活化され、もはや複製可能ではないウイルスを指すことができる。
本明細書で使用される場合、用語「不活化」、「死菌」、または「ＫＶ」は、同義的に使用される。
用語「生ワクチン」は、生体生物または複製コンピテントウイルスもしくはウイルスベクターのいずれかを含むワクチンを指す。
【０１１３】
「医薬組成物」は、それが投与される生物の、またはその生物内もしくはその生物上に生息する生物の生理学的な、例えば免疫学的な機能を改変することが可能な１つまたは複数の成分から本質的になる。この用語は、これらに制限されないが、抗生物質または駆虫剤、ならびにこれらに限定されないが、処理の特色、生殖不能性、安定性、経口、鼻腔内、静脈内、筋肉内、皮下、皮内などの経腸もしくは非経口経路、または他の好適な経路で組成物を投与する実現可能性、投与後の耐容性、または徐放特性などの、ある他の目的を達成するために一般的に使用される他の成分を含む。説明のために挙げるに過ぎないが、そのような医薬組成物の１つの非限定的な例は、以下のように調製することができる：感染細胞培養物の細胞培養上清を、安定化剤（例えば、スペルミジンおよび／またはウシ血清アルブミン（ＢＳＡ））と混合し、続いて混合物を凍結乾燥するか、または他の方法で脱水する。その後、ワクチン接種前に、混合物を、水溶液（例えば、生理食塩水、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ））または非水性溶液（例えば、油乳剤、アルミニウムに基づくアジュバント）で再水和する。
【０１１４】
本明細書で使用される場合、「薬学的にまたは獣医学的に許容される担体」としては、ありとあらゆる溶媒、分散媒、コーティング、アジュバント、安定化剤、希釈剤、保存剤、抗細菌剤および抗真菌剤、等張剤、ならびに吸着遅延剤などが挙げられる。一部の特定の態様では、および特に凍結乾燥された免疫原性組成物を含むものでは、本発明で使用するための安定化剤としては、凍結乾燥用またはフリーズドライ用の安定化剤が挙げられる。
【０１１５】
一部の実施形態では、本発明の免疫原性組成物は、アジュバントを含む。「アジュバント」としては、本明細書で使用される場合、水酸化アルミニウムおよびリン酸アルミニウム、サポニン、例えば、Ｑｕｉｌ  Ａ、ＱＳ−２１（Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈ  Ｉｎｃ．、ケンブリッジ、マサチューセッツ州）、ＧＰＩ−０１００（Ｇａｌｅｎｉｃａ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．、バーミンガム、アラバマ州）、油中水型エマルジョン、水中油型エマルジョン、水中油中水型エマルジョンを挙げることができる。エマルジョンは、以下のものに基づいていてもよい：特に、軽質流動パラフィン油（欧州薬局方タイプ）；スクアランまたはスクアレンなどのイソプレノイド油；アルケンの、特にイソブテンまたはデセンのオリゴマー化に起因する油；酸の、または直鎖状アルキル基を含むアルコールのエステル、より詳しくは、植物油、オレイン酸エチル、プロピレングリコールジ−（カプリレート／カプレート）、グリセリルトリ−（カプリレート／カプレート）、またはプロピレングリコールジオレエート；分岐状脂肪酸またはアルコールのエステル、特にイソステアリン酸エステル。油を乳化剤と組み合わせて使用してエマルジョンを形成する。乳化剤は、好ましくは、非イオン性界面活性剤、特に、エトキシル化されていてもよい、ソルビタンの、マンニドの（例えば、オレイン酸アンヒドロマンニトール）、グリコールの、ポリグリセロールの、プロピレングリコールの、およびオレイン酸、イソステアリン酸、リシノール酸、またはヒドロキシステアリン酸のエステルであり、ならびにポリオキシプロピレン−ポリオキシエチレンコポリマーブロック、特にプルロニック製品、特にＬ１２１である。Hunter et al., The Theory and Practical Application of Adjuvants (Ed.Stewart-Tull, D. E. S.), JohnWiley and Sons, NY, pp51-94 (1995)およびTodd et al., Vaccine 15:564-570 (1997)を参照されたい。例示的なアジュバントは、"Vaccine Design, The Subunit and Adjuvant Approach" edited by M. Powell and M. Newman, Plenum Press, 1995の１４７頁に記載のＳＰＴエマルジョン、および同書の１８３頁に記載のエマルジョンＭＦ５９である。
【０１１６】
アジュバントのさらなる例は、アクリル酸またはメタクリル酸のポリマー、および無水マレイン酸およびアルケニル誘導体のコポリマーから選択される化合物である。有利なアジュバント化合物は、架橋されている、特に糖または多価アルコールのポリアルケニルエーテルで架橋されているアクリル酸またはメタクリル酸のポリマーである。こうした化合物は、用語「カルボマー」として知られている（Phameuropa Vol. 8, No. 2, June 1996）。また、当業者は、米国特許第２，９０９，４６２号明細書を参照することができる。この文献には、少なくとも３つのヒドロキシル基、好ましくは８つ以下のヒドロキシル基を有し、少なくとも３つのヒドロキシルの水素原子が、少なくとも２つの炭素原子を有する不飽和脂肪族ラジカルにより置換されているポリヒドロキシル化化合物で架橋されているそのようなアクリルポリマーが記載されている。好ましいラジカルは、２〜４つの炭素原子を含むもの、例えば、ビニル、アリル、および他のエチレン性不飽和基である。不飽和ラジカルは、それら自体がメチルなどの他の置換基を含んでいてもよい。ＣＡＲＢＯＰＯＬ（登録商標）という名称で販売されている製品；（ＢＦ  Ｇｏｏｄｒｉｃｈ、オハイオ州、アメリカ合衆国）が特に適切である。それらは、アリルスクロースでまたはアリルペンタエリトリトールで架橋されている。中でも、Ｃａｒｂｏｐｏｌ  ９７４Ｐ、９３４Ｐ、および９７１Ｐに言及することができる。ＣＡＲＢＯＰＯＬ（登録商標）９７１Ｐの使用が最も好ましい。無水マレイン酸およびアルケニル誘導体のコポリマーの中には、無水マレイン酸およびエチレンのコポリマーであるコポリマーＥＭＡ（Ｍｏｎｓａｎｔｏ）がある。こうしたポリマーを水に溶解させると酸性溶液がもたらされ、酸性溶液は、免疫原性組成物、免疫学的組成物、またはワクチン組成物それ自体が組み込まれることになるアジュバント溶液を得るために、中和される、好ましくは生理学的なｐＨに中和されることになる。
【０１１７】
さらに好適なアジュバントとしては、これらに限定されないが、数ある中でも、以下のものが挙げられる：ＲＩＢＩアジュバント系（Ｒｉｂｉ  Ｉｎｃ．）、ブロックコポリマー（ＣｙｔＲｘ、アトランタ、ジョージア州）、ＳＡＦ−Ｍ（Ｃｈｉｒｏｎ、エメリービル、カリフォルニア州）、モノホスホリルリピドＡ、アブリジン脂質−アミンアジュバント、大腸菌に由来する易熱性エンテロトキシン（組換えまたは別様のもの）、コレラ毒素、ＩＭＳ１３１４すなわちムラミルジペプチド、または天然に存在するかもしくは組換えのサイトカインもしくはそれらの類似体、または内因的サイトカイン放出の刺激剤。
アジュバントは、１用量当たり約１００μｇ〜約１０ｍｇの量で、好ましくは１用量当たり約１００μｇ〜約１０ｍｇの量で、より好ましくは１用量当たり約５００μｇ〜約５ｍｇの量で、さらにより好ましくは１用量当たり約７５０μｇ〜約２．５ｍｇの量で、および最も好ましくは１用量当たり約１ｍｇの量で添加することができることが予想される。その代わりに、アジュバントは、最終製品の約０．０１〜５０容積％の濃度、好ましくは約２容積％〜３０容積％の濃度、より好ましくは約５容積％〜２５容積％の濃度、さらにより好ましくは約７容積％〜２２容積％の濃度、および最も好ましくは１０容積％〜２０容積％の濃度であってもよい。
【０１１８】
「希釈剤」としては、水、生理食塩水、デキストロース、エタノール、およびグリセロールなどを挙げることができる。等張剤としては、中でも、塩化ナトリウム、デキストロース、マンニトール、ソルビトール、およびラクトースを挙げることができる。安定化剤としては、中でも、アルブミン、およびエチレンジアミン四酢酸（ethylendiamintetracetic acid）のアルカリ塩が挙げられる。
「単離された」は、その天然状態から「人の手により」変更されていることを意味し、つまり、自然界で生じる場合であっても、変化されているか、もしくはその元の環境から取り出されているか、またはその両方である。例えば、この用語が本明細書で使用される場合、生体生物に天然で存在するポリヌクレオチドまたはポリペプチドは「単離」されていないが、その天然状態の共存物質から分離されている同じポリヌクレオチドまたはポリペプチドは、「単離」されている。
【０１１９】
「弱毒化」は、病原体の病毒性を低減させることを意味する。本発明では、「弱毒化」は、「非病毒性」と同義である。本発明では、弱毒化ウイルスは、感染の臨床徴候を引き起こさないが、対象動物において免疫応答を誘導することが可能なように病毒性が低減されているものであるが、弱毒化ウイルス、特に特許請求されているＡＬＶＡＣウイルスベクターで感染させた動物における臨床徴候の発症または重症度が、非弱毒化ウイルスもしくは病原体に感染させた動物または弱毒化ウイルスを受け取らなかった動物の「対照群」と比較して低減されることを意味することができる。この状況では、用語「低減させる／低減された」は、上記で定義されているような対照群と比較して、少なくとも１０％、好ましくは２５％、さらにより好ましくは５０％、またより好ましくは６０％、さらにより好ましくは７０％、またより好ましくは８０％、さらにより好ましくは９０％、および最も好ましくは１００％の低減を意味する。したがって、例えば、特許請求されている弱毒化ウイルスベクターなどの弱毒化非病毒性病原体、特に特許請求されているＡＬＶＡＣウイルスベクターは、修飾生ワクチン（ＭＬＶ）または修飾生免疫原性組成物の生成に好適である。
【０１２０】
用語「弱毒化」パラミクソウイルスは、本明細書に記載のように、特に、ｉｎ  ｖｉｔｒｏおよび／またはｉｎ  ｖｉｖｏで、より具体的には感受性細胞株および／または宿主にて弱毒化されているパラミクソウイルスに関する。この状況では、「弱毒化された」は、特に、パラミクソウイルスの病毒性低減に関し、「病毒性」は、病原性の度合いであると理解され、「病原性」は、病原体が宿主または宿主の子孫に臨床徴候を誘導する能力に関する。本発明のパラミクソウイルスによる感染症の考え得る臨床徴候は、例えば、対象の口渇感の増加、排尿の増加、体重減少、食欲減退、倦怠（lethargy）、および嘔吐を含む。本発明のパラミクソウイルスによる感染症に関連する対象の考え得る検査所見は、例えば、クレアチニンおよび対称性ジメチルアルギニン（ＳＤＭＡ）のレベルの増加を含む。本発明のパラミクソウイルスによる感染症に関連する対象の考え得る組織学的所見は、例えば、皮質および延髄の瘢痕化（cortical and medullary scarring）、管状の変性（tubular degeneration）、主としてリンパ球、形質細胞、マクロファージ、および顆粒球の浸潤による間質性炎症を含む。
【０１２１】
用語「治療および／または予防」は、特定のネコパラミクソウイルス感染症の発症の減少、または特定のネコパラミクソウイルス感染症により引き起こされるかもしくは関連する臨床徴候の重症度の低減を指す。したがって、用語「治療および／または予防」は、特定のネコパラミクソウイルスに感染する動物の数が低減されること（＝ネコパラミクソウイルス感染症の発症の減少）も、または本明細書で提供された有効量の免疫原性組成物を受け取った動物の群において、そのような免疫原性組成物を受け取らなかった動物の群と比較して、ネコパラミクソウイルス感染症に通常関連するかまたはそれにより引き起こされる臨床徴候の重症度が低減されることも指す。用語「治療および／または予防」は、一般に、そのような治療／予防を必要とするかまたはそのような治療／予防から利益を得ることができる１つまたは複数の動物に、本発明の有効量の免疫原性組成物を投与することを含む。用語「治療」は、動物または少なくとも一部の動物がそのようなネコパラミクソウイルスに既に感染し、そのような動物が、そのようなネコパラミクソウイルス感染により引き起こされるかまたは関連する幾つかの臨床徴候を既に示してから、有効量の免疫原性組成物を投与することを指す。用語「予防」は、そのような動物がネコパラミクソウイルスによる任意の感染症を有する前に、または少なくとも、そのような動物もしくは動物群の動物のいずれもが、そのようなネコパラミクソウイルスによる感染症により引き起こされるかまたは関連する臨床徴候を示さない場合に、動物に投与することを指す。用語「予防（prophylaxis）」および「防止（preventing）」は、本出願では同義的に使用される。
【０１２２】
用語「臨床徴候」は、本明細書で使用される場合、ネコパラミクソウイルスに由来する、動物の感染の徴候を指す。感染の臨床徴候は、選択される病原体に依存する。そのような臨床徴候の例としては、これらに限定されないが、対象の口渇感の増加、排尿の増加、体重減少、食欲減退、倦怠、嘔吐、ウイルス血症、発熱、および環境へのウイルスの排出が挙げられる。本発明のネコパラミクソウイルスによる対象の感染症に関連する考え得る検査所見は、例えば、クレアチニンおよび対称性ジメチルアルギニン（ＳＤＭＡ）のレベルの増加を含む。本発明のパラミクソウイルスによる感染症に関連する対象の考え得る組織学的所見は、例えば、皮質および延髄の瘢痕化、管状の変性、主としてリンパ球、形質細胞、マクロファージ、および顆粒球の浸潤による間質性炎症を含む。しかしながら、臨床徴候としては、それらに限定されないが、生体動物から直接的に観察可能である臨床徴候も挙げられる。
好ましくは、本発明に先立って利用可能だった免疫原性組成物で処置されていないかまたは処置されているかのいずれかであるが、続いて特定のネコパラミクソウイルスにより感染させた動物と比較して、処置された動物での発症または重症度が軽減される臨床徴候は、対象の口渇感の増加、排尿の増加、体重減少、食欲減退、倦怠、嘔吐、ウイルス血症、発熱、環境へのウイルスの排出、泌尿生殖器系の感染症、尿路系の感染症、腎臓病、慢性腎臓疾患（ＣＫＤ）、腎尿細管および腎間質組織の炎症、および特発性尿細管間質性腎炎（ＴＩＮ）を指す。
【０１２３】
本明細書では、「有効用量」は、これに限定されないが、抗原が投与された動物の臨床症状の低減をもたらす免疫応答を誘発するかまたは誘発することができる抗原の量を意味する。
本明細書で使用される場合、用語「有効量」は、組成物の状況では、動物における感染もしくは疾患の発生の発生率を低減するかまたは重症度を軽減する免疫応答を誘導することが可能な免疫原性組成物の量を意味する。そのような有効量は、ネコ科動物における特定のネコパラミクソウイルス感染症の発症を減少させることができるか、または特定のネコパラミクソウイルス感染症の臨床徴候の重症度を低減させることができる。特に、有効量は、１用量当たりのコロニー形成単位（ＣＦＵ）を指す。その代わりに、療法剤の状況では、用語「有効量」は、疾患または障害またはその１つもしくは複数の症状の重症度または継続期間を低減または改善するか、疾患または障害の進行を防止するか、疾患または障害の後退を引き起こすか、疾患または障害に関連する１つまたは複数の症状の再発、発生、発症、または進行を防止するか、あるいは別の療法剤または治療剤の予防または治療を増強または向上させるのに十分な療法剤の量を指す。
【０１２４】
「免疫応答」または「免疫学的応答」は、これに限定されないが、目的の（免疫原性）組成物またはワクチンに対する細胞性および／または抗体媒介性免疫応答の発生を意味する。通常、免疫または免疫学的応答としては、これらに限定されないが、以下の効果の１つまたは複数が挙げられる：目的の組成物またはワクチンに含まれている１つまたは複数の抗原に特異的に向けられる、抗体、Ｂ細胞、ヘルパーＴ細胞、サプレッサーＴ細胞、および／または細胞障害性Ｔ細胞の産生または活性化。好ましくは、宿主は、治療的または防御的のいずれかの免疫学的（メモリー）応答を示すことになり、新たな感染に対する抵抗性が増強され、および／または疾患の臨床重症度が低減されることになるだろう。そのような防御は、病原体の感染に関連する症状の数、症状の重症度の低減、または症状の１つもしくは複数の欠如のいずれか、ウイルス血症の発症の遅延、ウイルス存続の低減、全体的ウイルス量の低減、および／またはウイルス排泄の低減により示されることになる。
【０１２５】
「疾患からの防御」、「防御免疫」、「機能的免疫」、「臨床症状の低減」、「中和抗体および／または血清変換の誘導／産生」、および類似の語句は、疾患または感染症に曝された非免疫動物で予想されることになるものよりも少数の有害効果をもたらす本発明の１つもしくは複数の治療用組成物またはそれらの組合せの投与により生成される、疾患または状態に対する部分的または完全な応答を意味する。すなわち、ワクチン接種動物では、感染の有害効果の重症度が軽減される。ワクチン接種動物では、感染は、低減、遅延、またはおそらくは完全に予防される。本明細書では、感染の完全な予防が意味されている場合、明示的にそうであると述べられる。完全な予防であると述べられてない場合、この用語は、部分的な予防を含む。「防御的な免疫学的応答」または「防御免疫」は、感染宿主により通常示される臨床徴候の低減または欠如のいずれか、より速い回復時間、および／または感染性期間の低下、または感染宿主の組織もしくは体液もしくは排泄物での病原体力価の低下により示されることになる。
本明細書では、「臨床徴候の発症および／または重症度の低減」または「臨床症状の低減」は、これらに限定されないが、群中の感染動物数の低減、感染の臨床徴候を呈する動物数の低減もしくは消失、または野生型感染と比較した、１つもしくは複数の動物に存在する任意の臨床徴候の重症度の低減を意味する。例えば、それは、病原体量、病原体排出のあらゆる低減、病原体伝染の低減、またはネコパラミクソウイルス感染症に特徴的な任意の臨床徴候の低減を指すべきである。好ましくは、こうした臨床徴候は、本発明の治療用組成物を受け取った１つまたは複数の動物では、組成物を受け取っていない感染した動物と比較して少なくとも１０％低減される。より好ましくは、臨床徴候は、本発明の組成物を受け取った動物では、少なくとも２０％、好ましくは少なくとも３０％、より好ましくは少なくとも４０％、およびさらにより好ましくは少なくとも５０％低減される。
【０１２６】
用語「防御の増加」は、本明細書では、これに限定されないが、非ワクチン接種対照動物群と比べたワクチン接種動物群における感染性因子による感染に関連する１つまたは複数の臨床症状の統計的に有意な低減を意味する。用語「臨床症状の統計的に有意な低減」は、これらに限定されないが、ワクチン接種動物群での少なくとも１つの臨床症状の発症の頻度が、感染性因子の負荷後に、非ワクチン接種対照群よりも、少なくとも１０％、好ましくは２０％、より好ましくは３０％、さらにより好ましくは５０％、およびさらにより好ましくは７０％低いことを意味する。
用語「病原体」は、当業者に周知である。用語「病原体」は、細菌およびウイルスを含む。本発明の過程では、用語「ネコ科動物に感染する病原体」は、好ましくは、ネコパラミクソウイルスである。
「持続性防御」は、少なくとも３週間、しかしながらより好ましくは少なくとも３か月間、さらにより好ましくは少なくとも６か月間にわたって継続する「有効性の向上」を指すものとする。
用語「排出」は、鼻汁などの分泌物、およびさらに咳またはくしゃみにより創出されるエアゾールを指す。したがって、排出は、鼻腔スワブのウイルス力価または肺のウイルス力価を検査することにより決定することができる。用語「排出」は、感受性動物（つまり、歩哨動物）へのウイルスの移転をさらに包含する。ウイルス排出を測定する方法は、当業者の一般知識である。
【０１２７】
「安全性」は、これらに限定されないが、細菌に基づくワクチンの潜在的な病原性復帰突然変異、持続性全身性疾病またはワクチン投与部位での許容できない炎症などの臨床的に有意な副作用を含む、ワクチン接種後のワクチン接種動物での有害帰結の非存在を指す。
用語「ワクチン接種」または「ワクチン接種する」またはそれらの変異形は、本明細書で使用される場合、これに限定されないが、動物に投与すると、その動物に直接的にまたは間接的に免疫応答を誘発するかまたは誘発することができる本発明の免疫原性組成物を投与することを含むプロセスを意味する。
「死亡」は、本発明の状況では、感染症により引き起こされる死を指し、感染が非常に重度であるため、動物を安楽死させて、苦痛を防止し、その生涯に人道的な終焉が提供される状況を含む。
本発明の製剤は、有効免疫量の１つまたは複数の免疫原性組成物および生理学的に許容されるビヒクルを含む。ワクチンは、有効免疫量の１つまたは複数の免疫原性組成物および生理学的に許容されるビヒクルを含む。製剤は、投与様式に適合するべきである。
【０１２８】
また、免疫原性組成物は、所望の場合、少量の湿潤剤もしくは乳化剤、またはｐＨ緩衝剤を含むことができる。免疫原性組成物は、液体溶液、懸濁物、エマルジョン、錠剤、丸剤、カプセル剤、持続放出製剤、または散剤であってもよい。経口製剤は、医薬品等級のマンニトール、ラクトース、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、サッカリンナトリウム、セルロース、炭酸マグネシウムなどの標準的担体を含んでいてもよい。
好ましい投与経路としては、これらに限定されないが、鼻腔内、経口、皮内、皮下、および筋肉内が挙げられる。飲料水での、最も好ましくは単一用量での投与が望ましい。当業者であれば、本発明の組成物は、１、２、またはそれよりも多くの用量で、ならびに他の投与経路で投与することもできることが認識されるだろう。例えば、そのような他の経路としては、皮下、皮内、腹腔内が挙げられ、治療の所望持続期間および有効性に応じて、本発明による組成物は、１回または数回、また断続的に、例えば、数日間、数週間、または数か月間にわたって毎日ベースで、および約１×１０4〜１×１０9などの様々な投薬量で投与することができる（上記のウイルス力価を参照）。本発明の特定の態様では、投薬量は、約１×１０4〜１×１０8ＴＣＩＤ50である。
【０１２９】
用語「試料」は、体液の試料、分離細胞の試料、または組織もしくは器官に由来する試料を指す。体液の試料は、周知の技法により得ることができ、好ましくは、血液、血漿、血清、または尿の試料、より好ましくは、血液、血漿、または血清の試料が挙げられる。組織試料または器官試料は、任意の組織または器官から、例えば、生検により得ることができる。分離細胞は、遠心分離または細胞選別などの分離技法により体液または組織もしくは器官から得ることができる。
用語「得られる」は、当業者に公知の単離および／または精製ステップ、好ましくは沈殿、カラムなどを使用する単離および／または精製ステップを含んでいてもよい。
用語「免疫試験」および「ゲノム分析試験」は、本発明による免疫原性組成物をワクチン接種した動物、および天然に存在する（疾患に関連する）ネコパラミクソウイルスに感染した動物を区別するための根拠である。免疫試験の例としては、ＥＬＩＳＡ（酵素結合免疫吸着測定法）、ＥＩＡ（酵素免疫測定法）、ＲＩＡ（ラジオイムノアッセイ）、サンドイッチ酵素免疫試験、蛍光抗体試験（ＦＡＴ）電気化学発光サンドイッチ免疫測定法（electrochemiluminescence sandwich immunoassay）（ＥＣＬＩＡ）、解離促進ランタニド蛍光免疫測定法（dissociation-enhanced lanthanide fluoro immuno assay）（ＤＥＬＦＩＡ）、または固相免疫試験、免疫蛍光試験（ＩＦＴ）、免疫組織学的染色、ウエスタンブロット分析、または当業者に利用可能な任意の他の好適な方法などの任意の酵素免疫学的または免疫化学的検出法が挙げられる。使用されるアッセイに応じて、抗原または抗体は、酵素、フルオロフォア、または放射性同位体により標識されていてもよい。例えば、Coligan et al. Current Protocols in Immunology, John Wiley & Sons Inc., New York, N.Y. (1994)；およびFrye et al., Oncogen 4: 1153-1157, 1987を参照されたい。
【０１３０】
用語「ゲノム分析試験」は、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）、逆転写ポリメラーゼ連鎖反応（ＲＴ−ＰＣＲ）、リアルタイムＰＣＲ（ｒ−ＰＣＲ）、またはリアルタイム逆転写ＰＣＲ（ｒＲＴ−ＰＣＲ）、Ｔｅｍｐｌｅｘ−ＰＣＲ、核酸配列ベース増幅（ＮＡＳＢＡ）、ならびにポリメラーゼおよびプライマーとして特定のオリゴヌクレオチドを使用する等温増幅法に基づくゲノム分析法を指す。前述の増幅法は、当技術分野で周知である。
用語「タンパク質」、「ペプチド」、「ポリペプチド」、および「ポリペプチド断片」は、本明細書では同義的に使用され、任意の長さのアミノ酸残基のポリマーを指す。ポリマーは、直鎖状であってもよくまた分岐状であってもよく、修飾アミノ酸またはアミノ酸類似体を含んでいてもよく、アミノ酸以外の化学部分により中断されていてもよい。また、この用語は、天然にまたは介入により、例えば、ジスルフィド結合形成、グリコシル化、脂質化、アセチル化、リン酸化、または標識成分もしくは生物活性成分とのコンジュゲーションなどの任意の他の操作もしくは修飾により修飾されているアミノ酸ポリマーを包含する。
【０１３１】
ハイブリッド形成反応は、異なる「ストリンジェンシー」条件下で実施することができる。ハイブリッド形成反応のストリンジェンシーを増加させる条件は周知である。例えば、「Molecular Cloning: A Laboratory Manual」、第２版（Sambrook et al. 1989）を参照されたい。関連条件の例としては、以下のものが挙げられる（ストリンジェンシーを増加させる順に）：２５℃、３７℃、５０℃、および６８℃のインキュベーション温度；１０×ＳＳＣ、６×ＳＳＣ、１×ＳＳＣ、０．１×ＳＳＣ（ＳＳＣは、０．１５Ｍ  ＮａＣｌおよび１５ｍＭクエン酸の緩衝液である）および他の緩衝液系を使用したそれらの当量の緩衝液濃度；０％、２５％、５０％、および７５％のホルムアミド濃度；５分〜２４時間のインキュベーション時間；１回、２回、またはそれよりも多くの洗浄ステップ；１、２、または１５分間の洗浄インキュベーション時間；ならびに６×ＳＳＣ、１×ＳＳＣ、０．１×ＳＳＣ、または脱イオン水の洗浄溶液。
用語「エピトープ」は、特定のＢ細胞および／またはＴ細胞が応答する抗原またはハプテンの部位を指す。また、この用語は、「抗原決定基」または「抗原決定基部位」と同義的に使用される。同じエピトープを認識する抗体は、１つの抗体が、標的抗原に対する別の抗体の結合をブロックする能力を示す単純な免疫測定法で特定することができる。
【０１３２】
配列表
本出願は配列表を含む。配列表は、以下の配列を含む。
配列番号１  ＦＰａＶ−２「ゴードン株」完全ゲノム配列；マイナスＲＮＡ鎖ウイルスゲノムが転写されるプラスＲＮＡ鎖に対応するＤＮＡ配列として示されており、つまりそれはｍＲＮＡと同様に５’から３’方向にＯＲＦを含む。
配列番号２  ＦＰａＶ−２「ＴＶ２５株」完全ゲノム配列；マイナスＲＮＡ鎖ウイルスゲノムが転写されるプラスＲＮＡ鎖に対応するＤＮＡ配列として示されており、つまりそれはｍＲＮＡと同様に５’から３’方向にＯＲＦを含む。
配列番号３  ＦｅＭｏＶ「ラポン（Ｌａｐｏｎ）株」完全ゲノム配列；マイナスＲＮＡ鎖ウイルスゲノムが転写されるプラスＲＮＡ鎖に対応するＤＮＡ配列として示されており、つまりそれはｍＲＮＡと同様に５’から３’方向にＯＲＦを含む。
配列番号４  ＦＰａＶ−２「ゴードン（Ｇｏｒｄｏｎ）株」Ｈ抗原「野生型」核酸；ＤＮＡ配列として示される。
【０１３３】
配列番号５  主にネコ科動物での発現のためにコドン最適化されているＦＰａＶ−２「ゴードン株」Ｈ抗原核酸；ＤＮＡ配列として示される。
配列番号６  ＦＰａＶ−２「ゴードン株」Ｈ抗原翻訳アミノ酸配列。
配列番号７  ＦＰａＶ−２「ゴードン株」Ｍ抗原「野生型」核酸；ＤＮＡ配列として示される。
配列番号８  主にネコ科動物での発現のためにコドン最適化されているＦＰａＶ−２「ゴードン株」Ｍ抗原核酸；ＤＮＡ配列として示される。
配列番号９  ＦＰａＶ−２「ゴードン株」Ｍ抗原翻訳アミノ酸配列。
配列番号１０  ＦＰａＶ−２「ゴードン株」Ｆ抗原「野生型」核酸；ＤＮＡ配列として示される。
配列番号１１  主にネコ科動物での発現のためにコドン最適化されているＦＰａＶ−２「ゴードン株」Ｆ抗原核酸；ＤＮＡ配列として示される。
配列番号１２  ＦＰａＶ−２「ゴードン株」Ｆ抗原翻訳アミノ酸配列。
配列番号１３  ＦＰａＶ−２「ゴードン株」Ｎ抗原「野生型」核酸；ＤＮＡ配列として示される。
【０１３４】
配列番号１４  ＦＰａＶ−２「ゴードン株」Ｎ抗原翻訳アミノ酸配列。
配列番号１５  ＦＰａＶ−２「ゴードン株」Ｐ抗原「野生型」核酸；ＤＮＡ配列として示される。
配列番号１６  ＦＰａＶ−２「ゴードン株」Ｐ抗原翻訳アミノ酸配列。
配列番号１７  ＦＰａＶ−２「ゴードン株」Ｌ抗原「野生型」核酸；ＤＮＡ配列として示される。
配列番号１８  ＦＰａＶ−２「ゴードン株」Ｌ抗原翻訳アミノ酸配列。
配列番号１９  ＦＰａＶ−２「ＴＶ２５株」Ｈ抗原「野生型」核酸；ＤＮＡ配列として示される。
配列番号２０  ＦＰａＶ−２「ＴＶ２５株」Ｈ抗原翻訳アミノ酸配列。
配列番号２１  ＦＰａＶ−２「ＴＶ２５株」Ｍ抗原「野生型」核酸；ＤＮＡ配列として示される。
配列番号２２  ＦＰａＶ−２「ＴＶ２５株」Ｍ抗原翻訳アミノ酸配列。
配列番号２３  ＦＰａＶ−２「ＴＶ２５株」Ｆ抗原「野生型」核酸；ＤＮＡ配列として示される。
配列番号２４  ＦＰａＶ−２「ＴＶ２５株」Ｆ抗原翻訳アミノ酸配列。
配列番号２５  ＦＰａＶ−２「ＴＶ２５株」Ｎ抗原「野生型」核酸；ＤＮＡ配列として示される。
配列番号２６  ＦＰａＶ−２「ＴＶ２５株」Ｎ抗原翻訳アミノ酸配列。
【０１３５】
配列番号２７  ＦＰａＶ−２「ＴＶ２５株」Ｐ抗原「野生型」核酸；ＤＮＡ配列として示される。
配列番号２８  ＦＰａＶ−２「ＴＶ２５株」Ｐ抗原翻訳アミノ酸配列。
配列番号２９  ＦＰａＶ−２「ＴＶ２５株」Ｌ抗原「野生型」核酸；ＤＮＡ配列として示される。
配列番号３０  ＦＰａＶ−２「ＴＶ２５株」Ｌ抗原翻訳アミノ酸配列。
配列番号３１  ＦｅＭｏＶ「ラポン株」Ｈ抗原「野生型」核酸；ＤＮＡ配列として示される。
配列番号３２  主にネコ科動物での発現のためにコドン最適化されているＦｅＭｏＶ「ラポン株」Ｈ抗原核酸；ＤＮＡ配列として示される。
配列番号３３  ＦｅＭｏＶ「ラポン株」Ｈ抗原翻訳アミノ酸配列。
配列番号３４  ＦｅＭｏＶ「ラポン株」Ｍ抗原「野生型」核酸；ＤＮＡ配列として示される。
【０１３６】
配列番号３５  主にネコ科動物での発現のためにコドン最適化されているＦｅＭｏＶ「ラポン株」Ｍ抗原核酸；ＤＮＡ配列として示される。
配列番号３６  ＦｅＭｏＶ「ラポン株」Ｍ抗原翻訳アミノ酸配列。
配列番号３７  ＦｅＭｏＶ「ラポン株」Ｆ抗原「野生型」核酸；ＤＮＡ配列として示される。
配列番号３８  ＦｅＭｏＶ「ラポン株」Ｆ抗原翻訳アミノ酸配列。
配列番号３９  ＦｅＭｏＶ「ラポン株」Ｎ抗原「野生型」核酸；ＤＮＡ配列として示される。
配列番号４０  ＦｅＭｏＶ「ラポン株」Ｎ抗原翻訳アミノ酸配列。
配列番号４１  ＦｅＭｏＶ「ラポン株」Ｐ抗原「野生型」核酸；ＤＮＡ配列として示される。
配列番号４２  ＦｅＭｏＶ「ラポン株」Ｐ抗原翻訳アミノ酸配列。
配列番号４３  ＦｅＭｏＶ「ラポン株」Ｌ抗原「野生型」核酸；ＤＮＡ配列として示される。
配列番号４４  ＦｅＭｏＶ「ラポン株」Ｌ抗原翻訳アミノ酸配列。
【０１３７】
配列番号４５  ＡＬＶＡＣ挿入遺伝子座Ｃ３フランキング領域左アーム；ＤＮＡ配列として示される。
配列番号４６  ＡＬＶＡＣ挿入遺伝子座Ｃ３フランキング領域右アーム；ＤＮＡ配列として示される。
配列番号４７  ＡＬＶＡＣ挿入遺伝子座Ｃ５フランキング領域左アーム；ＤＮＡ配列として示される。
配列番号４８  ＡＬＶＡＣ挿入遺伝子座Ｃ５フランキング領域右アーム；ＤＮＡ配列として示される。
配列番号４９  Ｃ５フランキング領域右アーム、Ｈ６ワクシニアプロモーター、コドン最適化ゴードンＨ抗原、Ｃ５フランキング領域左アーム、つまり塩基対３０４，７０１〜３０８，８７０を含むｖＣＰ３０２５の第３代継代Ｃ５挿入遺伝子座。
配列番号５０  Ｃ５フランキング領域右アーム、Ｈ６ワクシニアプロモーター、コドン最適化ゴードンＨ抗原、Ｃ５フランキング領域左アーム、つまり塩基対３０４，１６６〜３０８，３８０を含むｖＣＰ３０２９の第３代継代Ｃ５挿入遺伝子座。
配列番号５１  Ｃ３フランキング領域右アーム、４２ｋ（長）ポックスウイルスプロモーター、コドン最適化ゴードンＭ抗原、Ｃ３フランキング領域左アーム、つまり塩基対３８，６０８〜４２，８０７を含むｖＣＰ３０２９の第３代継代Ｃ３挿入遺伝子座。
配列番号５２  ＰＣＲプライマー「Ｇｏｒｄｏｎ＿Ｍ＿ｐｒｏｂｅ＿Ｆ」
配列番号５３  ＰＣＲプライマー「Ｇｏｒｄｏｎ＿Ｍ＿ｐｒｏｂｅ＿Ｒ」
配列番号５４  ＰＣＲプライマー「Ｃ３Ｆ」
配列番号５５  ＰＣＲプライマー「Ｃ３Ｒ」
【０１３８】
配列番号５６  ＰＣＲプライマー「７５２０」
配列番号５７  ＰＣＲプライマー「７５２１」
配列番号５８  ＰＣＲプライマー「Ｃ３−ＰＣＲ−Ｆ」
配列番号５９  ＰＣＲプライマー「Ｃ３−ＰＣＲ−Ｒ」
配列番号６０  ＰＣＲプライマー「Ｃ３−Ｒ１」
配列番号６１  ＰＣＲプライマー「Ｃ３−Ｒ２」
配列番号６２  ＰＣＲプライマー「Ｃ３−Ｒ３」
配列番号６３  ＰＣＲプライマー「Ｃ３−Ｒ４」
配列番号６４  ＰＣＲプライマー「Ｃ３−Ｒ５」
配列番号６５  ＰＣＲプライマー「Ｃ３−Ｒ６」
配列番号６６  ＰＣＲプライマー「Ｃ３−Ｒ７」
配列番号６７  ＰＣＲプライマー「Ｃ３−Ｒ８」
配列番号６８  ＰＣＲプライマー「Ｃ３−Ｒ９」
【０１３９】
配列番号６９  ＰＣＲプライマー「Ｇｏｒｄｏｎ＿Ｍ＿１Ｆ」
配列番号７０  ＰＣＲプライマー「Ｇｏｒｄｏｎ＿Ｍ＿２Ｆ」
配列番号７１  ＰＣＲプライマー「Ｇｏｒｄｏｎ＿Ｍ＿３Ｆ」
配列番号７２  ＰＣＲプライマー「Ｇｏｒｄｏｎ＿Ｍ＿１Ｒ」
配列番号７３  ＰＣＲプライマー「Ｃ３−Ｆ５」
配列番号７４  ＰＣＲプライマー「Ｃ３−Ｆ７」
配列番号７５  ＰＣＲプライマー「７９３１」
配列番号７６  ＰＣＲプライマー「７９３２」
配列番号７７  ＰＣＲプライマー「７９２７．ＤＣ」
配列番号７８  ＰＣＲプライマー「７６９６．ＣＸＬ」
配列番号７９  ＰＣＲプライマー「７６９７．ＣＸＬ」
配列番号８０  ＰＣＲプライマー「７９２５．ＤＣ」
配列番号８１  ＰＣＲプライマー「７７９２．ＳＬ」
配列番号８２  ＰＣＲプライマー「７７９３ＳＬ」
配列番号８３  ＰＣＲプライマー「７９２８．ＤＣ」
【０１４０】
配列番号８４  ＰＣＲプライマー「７９２９．ＤＣ」
配列番号８５  ＰＣＲプライマー「７９２６．ＤＣ」
配列番号８６  ＰＣＲプライマー「Ｇｏｒｄｏｎ＿Ｈ＿１Ｒ」
配列番号８７  ＰＣＲプライマー「Ｇｏｒｄｏｎ＿Ｈ＿２Ｆ」
配列番号８８  ＰＣＲプライマー「Ｇｏｒｄｏｎ＿Ｈ＿ｐｒｏｂｅ＿Ｒ」
配列番号８９  ＰＣＲプライマー「Ｇｏｒｄｏｎ＿Ｈ＿ｐｒｏｂｅ＿Ｆ」
配列番号９０  ＰＣＲプライマー「Ｇｏｒｄｏｎ＿Ｈ＿１Ｆ」
配列番号９１  ＰＣＲプライマー「Ｇｏｒｄｏｎ＿Ｈ＿３Ｆ」
配列番号９２  ＰＣＲプライマー「Ｇｏｒｄｏｎ＿Ｈ＿４Ｆ」
配列番号９３  ＰＣＲプライマー「Ｇｏｒｄｏｎ＿Ｈ＿５Ｆ」
配列番号９４  ＦｅＭｏＶ「ラポン株」Ｈ抗原「野生型」−ＢａｍＨ１制限酵素部位を有していない−核酸；ＤＮＡ配列として示される。
配列番号９５  挿入遺伝子座Ｃ３の右フランキング配列、４２ｋ（長）プロモーター、ラポンＨ（ｗｔ；ＢａｍＨＩ制限酵素部位無し）、および挿入遺伝子座Ｃ３の左フランキング配列を含む、塩基対３８，６１９〜４３，５８８のｖＣＰ３０４１クローン挿入遺伝子座Ｃ３およびその理論的ヌクレオチド配列。
【０１４１】
加えて、本出願は以下の項を含む。
１．  ネコ科動物に感染する少なくとも１つの病原体に関係する少なくとも１つの外因性抗原コード配列を含むウイルスベクターであって、ネコ科動物に感染する少なくとも１つの病原体は、ネコパラミクソウイルスである、ウイルスベクター。
２．  ウイルスベクターは、アビポックスウイルスウイルスベクター、イヌモルビリウイルスウイルスベクター、ヘルペスウイルスウイルスベクター、水痘ウイルスウイルスベクターからなる群から選択される、第１項に記載のウイルスベクター。
３．  ネコパラミクソウイルスであるネコ科動物に感染する少なくとも１つの病原体は、
（ａ）ネコパラミクソウイルス２型（ＦＰａＶ−２）；
（ｂ）ネコパラミクソウイルス２型（ＦＰａＶ−２）であって、そのゲノムが、
（ｉ）配列番号１に記載の核酸配列、
（ｉｉ）配列番号１と少なくとも７０％同一である、配列番号１と少なくとも７５％同一である、配列番号１と少なくとも８０％同一である、配列番号１と少なくとも８５％同一である、配列番号１と少なくとも９０％同一である、配列番号１と少なくとも９１％同一である、配列番号１と少なくとも９２％同一である、配列番号１と少なくとも９３％同一である、配列番号１と少なくとも９４％同一である、配列番号１と少なくとも９５％同一である、配列番号１と少なくとも９６％同一である、配列番号１と少なくとも９７％同一である、配列番号１と少なくとも９８％同一である、配列番号１と少なくとも９９％同一である核酸配列
からなる群から選択される核酸配列に相補的なリボ核酸を含む、ネコパラミクソウイルス２型（ＦＰａＶ−２）；
（ｃ）寄託番号ＣＮＣＭＩ−５１２３で国立培養微生物コレクション（ＣＮＣＭ）に寄託されたネコパラミクソウイルス２型（ＦＰａＶ−２）；
（ｄ）ネコパラミクソウイルス２型（ＦＰａＶ−２）であって、そのゲノムが、
（ｉ）配列番号２に記載の核酸配列、
（ｉｉ）配列番号２と少なくとも７０％同一である、配列番号２と少なくとも７５％同一である、配列番号２と少なくとも８０％同一である、配列番号２と少なくとも８５％同一である、配列番号２と少なくとも９０％同一である、配列番号２と少なくとも９１％同一である、配列番号２と少なくとも９２％同一である、配列番号２と少なくとも９３％同一である、配列番号２と少なくとも９４％同一である、配列番号２と少なくとも９５％同一である、配列番号２と少なくとも９６％同一である、配列番号２と少なくとも９７％同一である、配列番号２と少なくとも９８％同一である、配列番号２と少なくとも９９％同一である核酸配列
からなる群から選択される核酸配列に相補的なリボ核酸を含む、ネコパラミクソウイルス２型（ＦＰａＶ−２）
（ｅ）ネコモルビリウイルス（ＦｅＭｏＶ）；
（ｆ）ネコモルビリウイルス（ＦｅＭｏＶ）であって、そのゲノムが、
（ｉ）配列番号３に記載の核酸配列、
（ｉｉ）配列番号３と少なくとも７０％同一である、配列番号３と少なくとも７５％同一である、配列番号３と少なくとも８０％同一である、配列番号３と少なくとも８５％同一である、配列番号３と少なくとも９０％同一である、配列番号３と少なくとも９１％同一である、配列番号３と少なくとも９２％同一である、配列番号３と少なくとも９３％同一である、配列番号３と少なくとも９４％同一である、配列番号３と少なくとも９５％同一である、配列番号３と少なくとも９６％同一である、配列番号３と少なくとも９７％同一である、配列番号３と少なくとも９８％同一である、配列番号３と少なくとも９９％同一である核酸配列
からなる群から選択される核酸配列に相補的なリボ核酸を含む、ネコモルビリウイルス（ＦｅＭｏＶ）
からなる群から選択され、
好ましくは、
（ｂ）ネコパラミクソウイルス２型（ＦＰａＶ−２）であって、そのゲノムが、
（ｉ）配列番号１に記載の核酸配列、
（ｉｉ）配列番号１と少なくとも７０％同一である、配列番号１と少なくとも７５％同一である、配列番号１と少なくとも８０％同一である、配列番号１と少なくとも８５％同一である、配列番号１と少なくとも９０％同一である、配列番号１と少なくとも９１％同一である、配列番号１と少なくとも９２％同一である、配列番号１と少なくとも９３％同一である、配列番号１と少なくとも９４％同一である、配列番号１と少なくとも９５％同一である、配列番号１と少なくとも９６％同一である、配列番号１と少なくとも９７％同一である、配列番号１と少なくとも９８％同一である、配列番号１と少なくとも９９％同一である核酸配列
からなる群から選択される核酸配列に相補的なリボ核酸を含む、ネコパラミクソウイルス２型（ＦＰａＶ−２）；
（ｃ）寄託番号ＣＮＣＭＩ−５１２３で国立培養微生物コレクション（ＣＮＣＭ）に寄託されたネコパラミクソウイルス２型（ＦＰａＶ−２）；
（ｄ）ネコパラミクソウイルス２型（ＦＰａＶ−２）であって、そのゲノムが、
（ｉ）配列番号２に記載の核酸配列、
（ｉｉ）配列番号２と少なくとも７０％同一である、配列番号２と少なくとも７５％同一である、配列番号２と少なくとも８０％同一である、配列番号２と少なくとも８５％同一である、配列番号２と少なくとも９０％同一である、配列番号２と少なくとも９１％同一である、配列番号２と少なくとも９２％同一である、配列番号２と少なくとも９３％同一である、配列番号２と少なくとも９４％同一である、配列番号２と少なくとも９５％同一である、配列番号２と少なくとも９６％同一である、配列番号２と少なくとも９７％同一である、配列番号２と少なくとも９８％同一である、配列番号２と少なくとも９９％同一である核酸配列
からなる群から選択される核酸配列に相補的なリボ核酸を含む、ネコパラミクソウイルス２型（ＦＰａＶ−２）
からなる群から選択される、第１項または第２項に記載のウイルスベクター。
【０１４２】
４．  ウイルスベクターは、組換えであるかおよび／または天然に存在しない、第１項〜第３項のいずれか１項に記載のウイルスベクター。
５．  ウイルスベクターは、カナリアポックスベクター、好ましくは弱毒化カナリアポックスベクター、より好ましくはＡＬＶＡＣ、さらにより好ましくはＡＬＶＡＣ−１またはＡＬＶＡＣ−２、最も好ましくはブダペスト条約の条項に基づき寄託番号ＶＲ−２５４７としてアメリカ培養細胞系統保存機関（ＡＴＣＣ）に寄託されたＡＬＶＡＣである、第１項〜第４項のいずれか１項に記載のウイルスベクター。
【０１４３】
６．  ウイルスベクターは、鶏痘ベクター、好ましくは弱毒化鶏痘ベクター、より好ましくはＴＲＯＶＡＣ、最も好ましくはブダペスト条約の条項に基づき寄託番号ＶＲ−２５５３としてアメリカ培養細胞系統保存機関（ＡＴＣＣ）に寄託されたＴＲＯＶＡＣである、第１項〜第４項のいずれか１項に記載のウイルスベクター。
７．  ウイルスベクターは、ｖＣＰ３０２５、ｖＣＰ３０２９、ｖＣＰ３０４１からなる群から選択される、第１項〜第５項のいずれか１項に記載のウイルスベクター。
８．  少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列、マトリックスタンパク質（「Ｍ」）コード配列、融合タンパク質（「Ｆ」）コード配列、ヌクレオカプシドタンパク質（「Ｎ」）コード配列、リンタンパク質（「Ｐ」）コード配列、ＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼタンパク質（「Ｌ」）コード配列からなる群から選択され、より好ましくは血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列および／またはマトリックスタンパク質（「Ｍ」）コード配列および／または融合タンパク質（「Ｆ」）コード配列である、第１項〜第７項のいずれか１項に記載のウイルスベクター。
【０１４４】
９．  少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列であり、血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列は、配列番号４と少なくとも７０％同一であり、配列番号４と少なくとも７５％同一であり、配列番号４と少なくとも８０％同一であり、配列番号４と少なくとも８５％同一であり、配列番号４と少なくとも９０％同一であり、配列番号４と少なくとも９１％同一であり、配列番号４と少なくとも９２％同一であり、配列番号４と少なくとも９３％同一であり、配列番号４と少なくとも９４％同一であり、配列番号４と少なくとも９５％同一であり、配列番号４と少なくとも９６％同一であり、配列番号４と少なくとも９７％同一であり、配列番号４と少なくとも９８％同一であり、配列番号４と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号４、配列番号５からなる群から選択される核酸配列を含む、第８項に記載のウイルスベクター。
【０１４５】
１０．  少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列であり、血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列は、配列番号６と少なくとも７０％同一であり、配列番号６と少なくとも７５％同一であり、配列番号６と少なくとも８０％同一であり、配列番号６と少なくとも８５％同一であり、配列番号６と少なくとも９０％同一であり、配列番号６と少なくとも９１％同一であり、配列番号６と少なくとも９２％同一であり、配列番号６と少なくとも９３％同一であり、配列番号６と少なくとも９４％同一であり、配列番号６と少なくとも９５％同一であり、配列番号６と少なくとも９６％同一であり、配列番号６と少なくとも９７％同一であり、配列番号６と少なくとも９８％同一であり、配列番号６と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号６に記載のアミノ酸配列であるアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードする核酸配列を含む、第８項に記載のウイルスベクター。
【０１４６】
１１．  少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、マトリックスタンパク質（「Ｍ」）コード配列であり、マトリックスタンパク質（「Ｍ」）コード配列は、配列番号７と少なくとも７０％同一であり、配列番号７と少なくとも７５％同一であり、配列番号７と少なくとも８０％同一であり、配列番号７と少なくとも８５％同一であり、配列番号７と少なくとも９０％同一であり、配列番号７と少なくとも９１％同一であり、配列番号７と少なくとも９２％同一であり、配列番号７と少なくとも９３％同一であり、配列番号７と少なくとも９４％同一であり、配列番号７と少なくとも９５％同一であり、配列番号７と少なくとも９６％同一であり、配列番号７と少なくとも９７％同一であり、配列番号７と少なくとも９８％同一であり、配列番号７と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号７、配列番号８からなる群から選択される核酸配列を含む、第８項に記載のウイルスベクター。
【０１４７】
１２．  少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、マトリックスタンパク質（「Ｍ」）コード配列であり、マトリックスタンパク質（「Ｍ」）コード配列は、配列番号９と少なくとも７０％同一であり、配列番号９と少なくとも７５％同一であり、配列番号９と少なくとも８０％同一であり、配列番号９と少なくとも８５％同一であり、配列番号９と少なくとも９０％同一であり、配列番号９と少なくとも９１％同一であり、配列番号９と少なくとも９２％同一であり、配列番号９と少なくとも９３％同一であり、配列番号９と少なくとも９４％同一であり、配列番号９と少なくとも９５％同一であり、配列番号９と少なくとも９６％同一であり、配列番号９と少なくとも９７％同一であり、配列番号９と少なくとも９８％同一であり、配列番号９と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号９に記載のアミノ酸配列であるアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードする核酸配列を含む、第８項に記載のウイルスベクター。
【０１４８】
１３．  少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、融合タンパク質（「Ｆ」）コード配列であり、融合タンパク質（「Ｆ」）コード配列は、配列番号１０と少なくとも７０％同一であり、配列番号１０と少なくとも７５％同一であり、配列番号１０と少なくとも８０％同一であり、配列番号１０と少なくとも８５％同一であり、配列番号１０と少なくとも９０％同一であり、配列番号１０と少なくとも９１％同一であり、配列番号１０と少なくとも９２％同一であり、配列番号１０と少なくとも９３％同一であり、配列番号１０と少なくとも９４％同一であり、配列番号１０と少なくとも９５％同一であり、配列番号１０と少なくとも９６％同一であり、配列番号１０と少なくとも９７％同一であり、配列番号１０と少なくとも９８％同一であり、配列番号１０と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号１０、配列番号１１からなる群から選択される核酸配列を含む、第８項に記載のウイルスベクター。
【０１４９】
１４．  少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、融合タンパク質（「Ｆ」）コード配列であり、融合タンパク質（「Ｆ」）コード配列は、配列番号１２と少なくとも７０％同一であり、配列番号１２と少なくとも７５％同一であり、配列番号１２と少なくとも８０％同一であり、配列番号１２と少なくとも８５％同一であり、配列番号１２と少なくとも９０％同一であり、配列番号１２と少なくとも９１％同一であり、配列番号１２と少なくとも９２％同一であり、配列番号１２と少なくとも９３％同一であり、配列番号１２と少なくとも９４％同一であり、配列番号１２と少なくとも９５％同一であり、配列番号１２と少なくとも９６％同一であり、配列番号１２と少なくとも９７％同一であり、配列番号１２と少なくとも９８％同一であり、配列番号１２と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号１２に記載のアミノ酸配列であるアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードする核酸配列を含む、第８項に記載のウイルスベクター。
【０１５０】
１５．  少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、ヌクレオカプシドタンパク質（「Ｎ」）コード配列であり、ヌクレオカプシドタンパク質（「Ｎ」）コード配列は、配列番号１３と少なくとも７０％同一であり、配列番号１３と少なくとも７５％同一であり、配列番号１３と少なくとも８０％同一であり、配列番号１３と少なくとも８５％同一であり、配列番号１３と少なくとも９０％同一であり、配列番号１３と少なくとも９１％同一であり、配列番号１３と少なくとも９２％同一であり、配列番号１３と少なくとも９３％同一であり、配列番号１３と少なくとも９４％同一であり、配列番号１３と少なくとも９５％同一であり、配列番号１３と少なくとも９６％同一であり、配列番号１３と少なくとも９７％同一であり、配列番号１３と少なくとも９８％同一であり、配列番号１３と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号１３からなる群から選択される核酸配列を含む、第８項に記載のウイルスベクター。
【０１５１】
１６．  少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、ヌクレオカプシドタンパク質（「Ｎ」）コード配列であり、ヌクレオカプシドタンパク質（「Ｎ」）コード配列は、配列番号１４と少なくとも７０％同一であり、配列番号１４と少なくとも７５％同一であり、配列番号１４と少なくとも８０％同一であり、配列番号１４と少なくとも８５％同一であり、配列番号１４と少なくとも９０％同一であり、配列番号１４と少なくとも９１％同一であり、配列番号１４と少なくとも９２％同一であり、配列番号１４と少なくとも９３％同一であり、配列番号１４と少なくとも９４％同一であり、配列番号１４と少なくとも９５％同一であり、配列番号１４と少なくとも９６％同一であり、配列番号１４と少なくとも９７％同一であり、配列番号１４と少なくとも９８％同一であり、配列番号１４と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号１４に記載のアミノ酸配列であるアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードする核酸配列を含む、第８項に記載のウイルスベクター。
【０１５２】
１７．  少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、リンタンパク質（「Ｐ」）コード配列であり、リンタンパク質（「Ｐ」）コード配列は、配列番号１５と少なくとも７０％同一であり、配列番号１５と少なくとも７５％同一であり、配列番号１５と少なくとも８０％同一であり、配列番号１５と少なくとも８５％同一であり、配列番号１５と少なくとも９０％同一であり、配列番号１５と少なくとも９１％同一であり、配列番号１５と少なくとも９２％同一であり、配列番号１５と少なくとも９３％同一であり、配列番号１５と少なくとも９４％同一であり、配列番号１５と少なくとも９５％同一であり、配列番号１５と少なくとも９６％同一であり、配列番号１５と少なくとも９７％同一であり、配列番号１５と少なくとも９８％同一であり、配列番号１５と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号１５からなる群から選択される核酸配列を含む、第８項に記載のウイルスベクター。
【０１５３】
１８．  少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、リンタンパク質（「Ｐ」）コード配列であり、リンタンパク質（「Ｐ」）コード配列は、配列番号１６と少なくとも７０％同一であり、配列番号１６と少なくとも７５％同一であり、配列番号１６と少なくとも８０％同一であり、配列番号１６と少なくとも８５％同一であり、配列番号１６と少なくとも９０％同一であり、配列番号１６と少なくとも９１％同一であり、配列番号１６と少なくとも９２％同一であり、配列番号１６と少なくとも９３％同一であり、配列番号１６と少なくとも９４％同一であり、配列番号１６と少なくとも９５％同一であり、配列番号１６と少なくとも９６％同一であり、配列番号１６と少なくとも９７％同一であり、配列番号１６と少なくとも９８％同一であり、配列番号１６と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号１６に記載のアミノ酸配列であるアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードする核酸配列を含む、第８項に記載のウイルスベクター。
【０１５４】
１９．  少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、ＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼタンパク質（「Ｌ」）コード配列であり、ＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼタンパク質（「Ｌ」）コード配列は、配列番号１７と少なくとも７０％同一であり、配列番号１７と少なくとも７５％同一であり、配列番号１７と少なくとも８０％同一であり、配列番号１７と少なくとも８５％同一であり、配列番号１７と少なくとも９０％同一であり、配列番号１７と少なくとも９１％同一であり、配列番号１７と少なくとも９２％同一であり、配列番号１７と少なくとも９３％同一であり、配列番号１７と少なくとも９４％同一であり、配列番号１７と少なくとも９５％同一であり、配列番号１７と少なくとも９６％同一であり、配列番号１７と少なくとも９７％同一であり、配列番号１７と少なくとも９８％同一であり、配列番号１７と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号１７からなる群から選択される核酸配列を含む、第８項に記載のウイルスベクター。
【０１５５】
２０．  少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、ＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼタンパク質（「Ｌ」）コード配列であり、ＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼタンパク質（「Ｌ」）コード配列は、配列番号１８と少なくとも７０％同一であり、配列番号１８と少なくとも７５％同一であり、配列番号１８と少なくとも８０％同一であり、配列番号１８と少なくとも８５％同一であり、配列番号１８と少なくとも９０％同一であり、配列番号１８と少なくとも９１％同一であり、配列番号１８と少なくとも９２％同一であり、配列番号１８と少なくとも９３％同一であり、配列番号１８と少なくとも９４％同一であり、配列番号１８と少なくとも９５％同一であり、配列番号１８と少なくとも９６％同一であり、配列番号１８と少なくとも９７％同一であり、配列番号１８と少なくとも９８％同一であり、配列番号１８と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号１８に記載のアミノ酸配列であるアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードする核酸配列を含む、第８項に記載のウイルスベクター。
【０１５６】
２１．  少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列であり、血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列は、配列番号１９と少なくとも７０％同一であり、配列番号１９と少なくとも７５％同一であり、配列番号１９と少なくとも８０％同一であり、配列番号１９と少なくとも８５％同一であり、配列番号１９と少なくとも９０％同一であり、配列番号１９と少なくとも９１％同一であり、配列番号１９と少なくとも９２％同一であり、配列番号１９と少なくとも９３％同一であり、配列番号１９と少なくとも９４％同一であり、配列番号１９と少なくとも９５％同一であり、配列番号１９と少なくとも９６％同一であり、配列番号１９と少なくとも９７％同一であり、配列番号１９と少なくとも９８％同一であり、配列番号１９と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号１９からなる群から選択される核酸配列を含む、第８項に記載のウイルスベクター。
【０１５７】
２２．  少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列であり、血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列は、配列番号２０と少なくとも７０％同一であり、配列番号２０と少なくとも７５％同一であり、配列番号２０と少なくとも８０％同一であり、配列番号２０と少なくとも８５％同一であり、配列番号２０と少なくとも９０％同一であり、配列番号２０と少なくとも９１％同一であり、配列番号２０と少なくとも９２％同一であり、配列番号２０と少なくとも９３％同一であり、配列番号２０と少なくとも９４％同一であり、配列番号２０と少なくとも９５％同一であり、配列番号２０と少なくとも９６％同一であり、配列番号２０と少なくとも９７％同一であり、配列番号２０と少なくとも９８％同一であり、配列番号２０と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号２０に記載のアミノ酸配列であるアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードする核酸配列を含む、第８項に記載のウイルスベクター。
【０１５８】
２３．  少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、マトリックスタンパク質（「Ｍ」）コード配列であり、マトリックスタンパク質（「Ｍ」）コード配列は、配列番号２１と少なくとも７０％同一であり、配列番号２１と少なくとも７５％同一であり、配列番号２１と少なくとも８０％同一であり、配列番号２１と少なくとも８５％同一であり、配列番号２１と少なくとも９０％同一であり、配列番号２１と少なくとも９１％同一であり、配列番号２１と少なくとも９２％同一であり、配列番号２１と少なくとも９３％同一であり、配列番号２１と少なくとも９４％同一であり、配列番号２１と少なくとも９５％同一であり、配列番号２１と少なくとも９６％同一であり、配列番号２１と少なくとも９７％同一であり、配列番号２１と少なくとも９８％同一であり、配列番号２１と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号２１からなる群から選択される核酸配列を含む、第８項に記載のウイルスベクター。
【０１５９】
２４．  少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、マトリックスタンパク質（「Ｍ」）コード配列であり、マトリックスタンパク質（「Ｍ」）コード配列は、配列番号２２と少なくとも７０％同一であり、配列番号２２と少なくとも７５％同一であり、配列番号２２と少なくとも８０％同一であり、配列番号２２と少なくとも８５％同一であり、配列番号２２と少なくとも９０％同一であり、配列番号２２と少なくとも９１％同一であり、配列番号２２と少なくとも９２％同一であり、配列番号２２と少なくとも９３％同一であり、配列番号２２と少なくとも９４％同一であり、配列番号２２と少なくとも９５％同一であり、配列番号２２と少なくとも９６％同一であり、配列番号２２と少なくとも９７％同一であり、配列番号２２と少なくとも９８％同一であり、配列番号２２と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号２２に記載のアミノ酸配列であるアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードする核酸配列を含む、第８項に記載のウイルスベクター。
２５．  少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、融合タンパク質（「Ｆ」）コード配列であり、融合タンパク質（「Ｆ」）コード配列は、配列番号２３と少なくとも７０％同一であり、配列番号２３と少なくとも７５％同一であり、配列番号２３と少なくとも８０％同一であり、配列番号２３と少なくとも８５％同一であり、配列番号２３と少なくとも９０％同一であり、配列番号２３と少なくとも９１％同一であり、配列番号２３と少なくとも９２％同一であり、配列番号２３と少なくとも９３％同一であり、配列番号２３と少なくとも９４％同一であり、配列番号２３と少なくとも９５％同一であり、配列番号２３と少なくとも９６％同一であり、配列番号２３と少なくとも９７％同一であり、配列番号２３と少なくとも９８％同一であり、配列番号２３と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号２３からなる群から選択される核酸配列を含む、第８項に記載のウイルスベクター。
【０１６０】
２６．  少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、融合タンパク質（「Ｆ」）コード配列であり、融合タンパク質（「Ｆ」）コード配列は、配列番号２４と少なくとも７０％同一であり、配列番号２４と少なくとも７５％同一であり、配列番号２４と少なくとも８０％同一であり、配列番号２４と少なくとも８５％同一であり、配列番号２４と少なくとも９０％同一であり、配列番号２４と少なくとも９１％同一であり、配列番号２４と少なくとも９２％同一であり、配列番号２４と少なくとも９３％同一であり、配列番号２４と少なくとも９４％同一であり、配列番号２４と少なくとも９５％同一であり、配列番号２４と少なくとも９６％同一であり、配列番号２４と少なくとも９７％同一であり、配列番号２４と少なくとも９８％同一であり、配列番号２４と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号２４に記載のアミノ酸配列であるアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードする核酸配列を含む、第８項に記載のウイルスベクター。
【０１６１】
２７．  少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、ヌクレオカプシドタンパク質（「Ｎ」）コード配列であり、ヌクレオカプシドタンパク質（「Ｎ」）コード配列は、配列番号２５と少なくとも７０％同一であり、配列番号２５と少なくとも７５％同一であり、配列番号２５と少なくとも８０％同一であり、配列番号２５と少なくとも８５％同一であり、配列番号２５と少なくとも９０％同一であり、配列番号２５と少なくとも９１％同一であり、配列番号２５と少なくとも９２％同一であり、配列番号２５と少なくとも９３％同一であり、配列番号２５と少なくとも９４％同一であり、配列番号２５と少なくとも９５％同一であり、配列番号２５と少なくとも９６％同一であり、配列番号２５と少なくとも９７％同一であり、配列番号２５と少なくとも９８％同一であり、配列番号２５と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号２５からなる群から選択される核酸配列を含む、第８項に記載のウイルスベクター。
【０１６２】
２８．  少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、ヌクレオカプシドタンパク質（「Ｎ」）コード配列であり、ヌクレオカプシドタンパク質（「Ｎ」）コード配列は、配列番号２６と少なくとも７０％同一であり、配列番号２６と少なくとも７５％同一であり、配列番号２６と少なくとも８０％同一であり、配列番号２６と少なくとも８５％同一であり、配列番号２６と少なくとも９０％同一であり、配列番号２６と少なくとも９１％同一であり、配列番号２６と少なくとも９２％同一であり、配列番号２６と少なくとも９３％同一であり、配列番号２６と少なくとも９４％同一であり、配列番号２６と少なくとも９５％同一であり、配列番号２６と少なくとも９６％同一であり、配列番号２６と少なくとも９７％同一であり、配列番号２６と少なくとも９８％同一であり、配列番号２６と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号２６に記載のアミノ酸配列であるアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードする核酸配列を含む、第８項に記載のウイルスベクター。
２９．  少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、リンタンパク質（「Ｐ」）コード配列であり、リンタンパク質（「Ｐ」）コード配列は、配列番号２７と少なくとも７０％同一であり、配列番号２７と少なくとも７５％同一であり、配列番号２７と少なくとも８０％同一であり、配列番号２７と少なくとも８５％同一であり、配列番号２７と少なくとも９０％同一であり、配列番号２７と少なくとも９１％同一であり、配列番号２７と少なくとも９２％同一であり、配列番号２７と少なくとも９３％同一であり、配列番号２７と少なくとも９４％同一であり、配列番号２７と少なくとも９５％同一であり、配列番号２７と少なくとも９６％同一であり、配列番号２７と少なくとも９７％同一であり、配列番号２７と少なくとも９８％同一であり、配列番号２７と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号２７からなる群から選択される核酸配列を含む、第８項に記載のウイルスベクター。
【０１６３】
３０．  少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、リンタンパク質（「Ｐ」）コード配列であり、リンタンパク質（「Ｐ」）コード配列は、配列番号２８と少なくとも７０％同一であり、配列番号２８と少なくとも７５％同一であり、配列番号２８と少なくとも８０％同一であり、配列番号２８と少なくとも８５％同一であり、配列番号２８と少なくとも９０％同一であり、配列番号２８と少なくとも９１％同一であり、配列番号２８と少なくとも９２％同一であり、配列番号２８と少なくとも９３％同一であり、配列番号２８と少なくとも９４％同一であり、配列番号２８と少なくとも９５％同一であり、配列番号２８と少なくとも９６％同一であり、配列番号２８と少なくとも９７％同一であり、配列番号２８と少なくとも９８％同一であり、配列番号２８と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号２８に記載のアミノ酸配列であるアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードする核酸配列を含む、第８項に記載のウイルスベクター。
【０１６４】
３１．  少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、ＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼタンパク質（「Ｌ」）コード配列であり、ＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼタンパク質（「Ｌ」）コード配列は、配列番号２９と少なくとも７０％同一であり、配列番号２９と少なくとも７５％同一であり、配列番号２９と少なくとも８０％同一であり、配列番号２９と少なくとも８５％同一であり、配列番号２９と少なくとも９０％同一であり、配列番号２９と少なくとも９１％同一であり、配列番号２９と少なくとも９２％同一であり、配列番号２９と少なくとも９３％同一であり、配列番号２９と少なくとも９４％同一であり、配列番号２９と少なくとも９５％同一であり、配列番号２９と少なくとも９６％同一であり、配列番号２９と少なくとも９７％同一であり、配列番号２９と少なくとも９８％同一であり、配列番号２９と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号２９からなる群から選択される核酸配列を含む、第８項に記載のウイルスベクター。
【０１６５】
３２．  少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、ＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼタンパク質（「Ｌ」）コード配列であり、ＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼタンパク質（「Ｌ」）コード配列は、配列番号３０と少なくとも７０％同一であり、配列番号３０と少なくとも７５％同一であり、配列番号３０と少なくとも８０％同一であり、配列番号３０と少なくとも８５％同一であり、配列番号３０と少なくとも９０％同一であり、配列番号３０と少なくとも９１％同一であり、配列番号３０と少なくとも９２％同一であり、配列番号３０と少なくとも９３％同一であり、配列番号３０と少なくとも９４％同一であり、配列番号３０と少なくとも９５％同一であり、配列番号３０と少なくとも９６％同一であり、配列番号３０と少なくとも９７％同一であり、配列番号３０と少なくとも９８％同一であり、配列番号３０と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号３０に記載のアミノ酸配列であるアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードする核酸配列を含む、第８項に記載のウイルスベクター。
【０１６６】
３３．  少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列であり、血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列は、配列番号３１と少なくとも７０％同一であり、配列番号３１と少なくとも７５％同一であり、配列番号３１と少なくとも８０％同一であり、配列番号３１と少なくとも８５％同一であり、配列番号３１と少なくとも９０％同一であり、配列番号３１と少なくとも９１％同一であり、配列番号３１と少なくとも９２％同一であり、配列番号３１と少なくとも９３％同一であり、配列番号３１と少なくとも９４％同一であり、配列番号３１と少なくとも９５％同一であり、配列番号３１と少なくとも９６％同一であり、配列番号３１と少なくとも９７％同一であり、配列番号３１と少なくとも９８％同一であり、配列番号３１と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号３１、配列番号３２からなる群から選択される核酸配列を含む、第８項に記載のウイルスベクター。
【０１６７】
３４．  少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列であり、血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列は、配列番号３３と少なくとも７０％同一であり、配列番号３３と少なくとも７５％同一であり、配列番号３３と少なくとも８０％同一であり、配列番号３３と少なくとも８５％同一であり、配列番号３３と少なくとも９０％同一であり、配列番号３３と少なくとも９１％同一であり、配列番号３３と少なくとも９２％同一であり、配列番号３３と少なくとも９３％同一であり、配列番号３３と少なくとも９４％同一であり、配列番号３３と少なくとも９５％同一であり、配列番号３３と少なくとも９６％同一であり、配列番号３３と少なくとも９７％同一であり、配列番号３３と少なくとも９８％同一であり、配列番号３３と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号３３に記載のアミノ酸配列であるアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードする核酸配列を含む、第８項に記載のウイルスベクター。
【０１６８】
３５．  少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、マトリックスタンパク質（「Ｍ」）コード配列であり、マトリックスタンパク質（「Ｍ」）コード配列は、配列番号３４と少なくとも７０％同一であり、配列番号３４と少なくとも７５％同一であり、配列番号３４と少なくとも８０％同一であり、配列番号３４と少なくとも８５％同一であり、配列番号３４と少なくとも９０％同一であり、配列番号３４と少なくとも９１％同一であり、配列番号３４と少なくとも９２％同一であり、配列番号３４と少なくとも９３％同一であり、配列番号３４と少なくとも９４％同一であり、配列番号３４と少なくとも９５％同一であり、配列番号３４と少なくとも９６％同一であり、配列番号３４と少なくとも９７％同一であり、配列番号３４と少なくとも９８％同一であり、配列番号３４と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号３４、配列番号３５からなる群から選択される核酸配列を含む、第８項に記載のウイルスベクター。
【０１６９】
３６．  少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、マトリックスタンパク質（「Ｍ」）コード配列であり、マトリックスタンパク質（「Ｍ」）コード配列は、配列番号３６と少なくとも７０％同一であり、配列番号３６と少なくとも７５％同一であり、配列番号３６と少なくとも８０％同一であり、配列番号３６と少なくとも８５％同一であり、配列番号３６と少なくとも９０％同一であり、配列番号３６と少なくとも９１％同一であり、配列番号３６と少なくとも９２％同一であり、配列番号３６と少なくとも９３％同一であり、配列番号３６と少なくとも９４％同一であり、配列番号３６と少なくとも９５％同一であり、配列番号３６と少なくとも９６％同一であり、配列番号３６と少なくとも９７％同一であり、配列番号３６と少なくとも９８％同一であり、配列番号３６と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号３６に記載のアミノ酸配列であるアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードする核酸配列を含む、第８項に記載のウイルスベクター。
【０１７０】
３７．  少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、融合タンパク質（「Ｆ」）コード配列であり、融合タンパク質（「Ｆ」）コード配列は、配列番号３７と少なくとも７０％同一であり、配列番号３７と少なくとも７５％同一であり、配列番号３７と少なくとも８０％同一であり、配列番号３７と少なくとも８５％同一であり、配列番号３７と少なくとも９０％同一であり、配列番号３７と少なくとも９１％同一であり、配列番号３７と少なくとも９２％同一であり、配列番号３７と少なくとも９３％同一であり、配列番号３７と少なくとも９４％同一であり、配列番号３７と少なくとも９５％同一であり、配列番号３７と少なくとも９６％同一であり、配列番号３７と少なくとも９７％同一であり、配列番号３７と少なくとも９８％同一であり、配列番号３７と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号３７からなる群から選択される核酸配列を含む、第８項に記載のウイルスベクター。
【０１７１】
３８．  少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、融合タンパク質（「Ｆ」）コード配列であり、融合タンパク質（「Ｆ」）コード配列は、配列番号３８と少なくとも７０％同一であり、配列番号３８と少なくとも７５％同一であり、配列番号３８と少なくとも８０％同一であり、配列番号３８と少なくとも８５％同一であり、配列番号３８と少なくとも９０％同一であり、配列番号３８と少なくとも９１％同一であり、配列番号３８と少なくとも９２％同一であり、配列番号３８と少なくとも９３％同一であり、配列番号３８と少なくとも９４％同一であり、配列番号３８と少なくとも９５％同一であり、配列番号３８と少なくとも９６％同一であり、配列番号３８と少なくとも９７％同一であり、配列番号３８と少なくとも９８％同一であり、配列番号３８と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号３８に記載のアミノ酸配列であるアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードする核酸配列を含む、第８項に記載のウイルスベクター。
【０１７２】
３９．  少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、ヌクレオカプシドタンパク質（「Ｎ」）コード配列であり、ヌクレオカプシドタンパク質（「Ｎ」）コード配列は、配列番号３９と少なくとも７０％同一であり、配列番号３９と少なくとも７５％同一であり、配列番号３９と少なくとも８０％同一であり、配列番号３９と少なくとも８５％同一であり、配列番号３９と少なくとも９０％同一であり、配列番号３９と少なくとも９１％同一であり、配列番号３９と少なくとも９２％同一であり、配列番号３９と少なくとも９３％同一であり、配列番号３９と少なくとも９４％同一であり、配列番号３９と少なくとも９５％同一であり、配列番号３９と少なくとも９６％同一であり、配列番号３９と少なくとも９７％同一であり、配列番号３９と少なくとも９８％同一であり、配列番号３９と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号３９からなる群から選択される核酸配列を含む、第８項に記載のウイルスベクター。
【０１７３】
４０．  少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、ヌクレオカプシドタンパク質（「Ｎ」）コード配列であり、ヌクレオカプシドタンパク質（「Ｎ」）コード配列は、配列番号４０と少なくとも７０％同一であり、配列番号４０と少なくとも７５％同一であり、配列番号４０と少なくとも８０％同一であり、配列番号４０と少なくとも８５％同一であり、配列番号４０と少なくとも９０％同一であり、配列番号４０と少なくとも９１％同一であり、配列番号４０と少なくとも９２％同一であり、配列番号４０と少なくとも９３％同一であり、配列番号４０と少なくとも９４％同一であり、配列番号４０と少なくとも９５％同一であり、配列番号４０と少なくとも９６％同一であり、配列番号４０と少なくとも９７％同一であり、配列番号４０と少なくとも９８％同一であり、配列番号４０と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号４０に記載のアミノ酸配列であるアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードする核酸配列を含む、第８項に記載のウイルスベクター。
【０１７４】
４１．  少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、リンタンパク質（「Ｐ」）コード配列であり、リンタンパク質（「Ｐ」）コード配列は、配列番号４１と少なくとも７０％同一であり、配列番号４１と少なくとも７５％同一であり、配列番号４１と少なくとも８０％同一であり、配列番号４１と少なくとも８５％同一であり、配列番号４１と少なくとも９０％同一であり、配列番号４１と少なくとも９１％同一であり、配列番号４１と少なくとも９２％同一であり、配列番号４１と少なくとも９３％同一であり、配列番号４１と少なくとも９４％同一であり、配列番号４１と少なくとも９５％同一であり、配列番号４１と少なくとも９６％同一であり、配列番号４１と少なくとも９７％同一であり、配列番号４１と少なくとも９８％同一であり、配列番号４１と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号４１からなる群から選択される核酸配列を含む、第８項に記載のウイルスベクター。
【０１７５】
４２．  少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、リンタンパク質（「Ｐ」）コード配列であり、リンタンパク質（「Ｐ」）コード配列は、配列番号４２と少なくとも７０％同一であり、配列番号４２と少なくとも７５％同一であり、配列番号４２と少なくとも８０％同一であり、配列番号４２と少なくとも８５％同一であり、配列番号４２と少なくとも９０％同一であり、配列番号４２と少なくとも９１％同一であり、配列番号４２と少なくとも９２％同一であり、配列番号４２と少なくとも９３％同一であり、配列番号４２と少なくとも９４％同一であり、配列番号４２と少なくとも９５％同一であり、配列番号４２と少なくとも９６％同一であり、配列番号４２と少なくとも９７％同一であり、配列番号４２と少なくとも９８％同一であり、配列番号４２と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号４２に記載のアミノ酸配列であるアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードする核酸配列を含む、第８項に記載のウイルスベクター。
【０１７６】
４３．  少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、ＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼタンパク質（「Ｌ」）コード配列であり、ＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼタンパク質（「Ｌ」）コード配列は、配列番号４３と少なくとも７０％同一であり、配列番号４３と少なくとも７５％同一であり、配列番号４３と少なくとも８０％同一であり、配列番号４３と少なくとも８５％同一であり、配列番号４３と少なくとも９０％同一であり、配列番号４３と少なくとも９１％同一であり、配列番号４３と少なくとも９２％同一であり、配列番号４３と少なくとも９３％同一であり、配列番号４３と少なくとも９４％同一であり、配列番号４３と少なくとも９５％同一であり、配列番号４３と少なくとも９６％同一であり、配列番号４３と少なくとも９７％同一であり、配列番号４３と少なくとも９８％同一であり、配列番号４３と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号４３からなる群から選択される核酸配列を含む、第８項に記載のウイルスベクター。
【０１７７】
４４．  少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、ＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼタンパク質（「Ｌ」）コード配列であり、ＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼタンパク質（「Ｌ」）コード配列は、配列番号４４と少なくとも７０％同一であり、配列番号４４と少なくとも７５％同一であり、配列番号４４と少なくとも８０％同一であり、配列番号４４と少なくとも８５％同一であり、配列番号４４と少なくとも９０％同一であり、配列番号４４と少なくとも９１％同一であり、配列番号４４と少なくとも９２％同一であり、配列番号４４と少なくとも９３％同一であり、配列番号４４と少なくとも９４％同一であり、配列番号４４と少なくとも９５％同一であり、配列番号４４と少なくとも９６％同一であり、配列番号４４と少なくとも９７％同一であり、配列番号４４と少なくとも９８％同一であり、配列番号４４と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号４４に記載のアミノ酸配列であるアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードする核酸配列を含む、第８項に記載のウイルスベクター。
【０１７８】
４５．  ２つもしくはそれよりも多くの外因性抗原コード配列、好ましくは、血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列およびマトリックスタンパク質（「Ｍ」）コード配列、または血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列および融合タンパク質（「Ｆ」）コード配列、またはマトリックスタンパク質（「Ｍ」）コード配列および融合タンパク質（「Ｆ」）コード配列、または血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列およびマトリックスタンパク質（「Ｍ」）コード配列および融合タンパク質（「Ｆ」）コード配列；あるいは好ましくは同じであるが２つの異なる株に由来する２つの外因性抗原コード配列（つまり、Ｈ＋Ｈ、Ｆ＋Ｆ、Ｍ＋Ｍ、Ｐ＋Ｐ、Ｌ＋Ｌ、Ｎ＋Ｎ）を含み、例えば、ネコパラミクソウイルス２型（ＦＰａＶ−２）株、より好ましくは「ゴードン株」または「ＴＶ２５株」に由来する１つの外因性抗原コード配列と、ネコモルビリウイルス株、より好ましくは「ラポン株」に由来する他の１つの外因性抗原コード配列とを含み、例えば、１つの株の血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列と、別の株の血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列とを含み；より好ましくは、「１つの株の血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列」の１つの株は、ネコパラミクソウイルス２型（ＦＰａＶ−２）株、より好ましくは「ゴードン株」または「ＴＶ２５菌株」であり、「別の株の血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列」の別の株は、ネコモルビリウイルス株、さらにより好ましくは「ラポン株」であり；最も好ましくは、「１つの株の血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列」の１つの株は、血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列であり、血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列は、配列番号４または１９と少なくとも７０％同一であり、配列番号４または１９と少なくとも７５％同一であり、配列番号４または１９と少なくとも８０％同一であり、配列番号４または１９と少なくとも８５％同一であり、配列番号４または１９と少なくとも９０％同一であり、配列番号４または１９と少なくとも９１％同一であり、配列番号４または１９と少なくとも９２％同一であり、配列番号４または１９と少なくとも９３％同一であり、配列番号４または１９と少なくとも９４％同一であり、配列番号４または１９と少なくとも９５％同一であり、配列番号４または１９と少なくとも９６％同一であり、配列番号４または１９と少なくとも９７％同一であり、配列番号４または１９と少なくとも９８％同一であり、配列番号４または１９と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号４、配列番号５、配列番号１９からなる群から選択される核酸配列を含み；「別の株の血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列」の別の株は、血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列であり、血球凝集素タンパク質（「Ｈ」）コード配列は、配列番号３１または９４と少なくとも７０％同一であり、配列番号３１または９４と少なくとも７５％同一であり、配列番号３１または９４と少なくとも８０％同一であり、配列番号３１または９４と少なくとも８５％同一であり、配列番号３１または９４と少なくとも９０％同一であり、配列番号３１または９４と少なくとも９１％同一であり、配���番号３１または９４と少なくとも９２％同一であり、配列番号３１または９４と少なくとも９３％同一であり、配列番号３１または９４と少なくとも９４％同一であり、配列番号３１または９４と少なくとも９５％同一であり、配列番号３１または９４と少なくとも９６％同一であり、配列番号３１または９４と少なくとも９７％同一であり、配列番号３１または９４と少なくとも９８％同一であり、配列番号３１または９４と少なくとも９９％同一であり、好ましくは配列番号３１、配列番号３２、配列番号９４からなる群から選択される核酸配列を含む、第１項〜第４４項のいずれか１項に記載のウイルスベクター。
【０１７９】
４６．  少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、少なくとも１つの挿入遺伝子座に、好ましくはウイルスベクターゲノムの非必須領域に挿入されている、第１項〜第４５項のいずれか１項に記載のウイルスベクター。
４７．  少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、２つまたはそれよりも多くの挿入座に挿入されている、第４６項に記載のウイルスベクター。
【０１８０】
４８．  少なくとも１つの挿入遺伝子座は、挿入遺伝子座Ｃ３である、第４６項または第４７項に記載のウイルスベクター。
４９．  挿入遺伝子座Ｃ３のフランキング配列、好ましくは配列番号４５（Ｃ３フランキング領域左アーム）および配列番号４６（Ｃ３フランキング領域右アーム）に記載の挿入遺伝子座Ｃ３のフランキング配列を含む、第４６項〜第４８項のいずれか１項に記載のウイルスベクター。
５０．  少なくとも１つの挿入遺伝子座は、挿入遺伝子座Ｃ５である、第４６項〜第４９項のいずれか１項に記載のウイルスベクター。
５１．  挿入遺伝子座Ｃ５のフランキング配列、好ましくは配列番号４７（Ｃ５フランキング領域左アーム）および配列番号４８（Ｃ５フランキング領域右アーム）に記載の挿入遺伝子座Ｃ５のフランキング配列を含む、第４６項〜第５０項のいずれか１項に記載のウイルスベクター。
５２．  少なくとも１つの挿入遺伝子座は、挿入遺伝子座Ｃ６である、第４６項〜第５１項のいずれか１項に記載のウイルスベクター。
５３．  少なくとも１つの外因性抗原コード配列は、少なくとも１つのプロモーター配列、好ましくは弱いプロモーター配列に作動可能に連結されている、第１項〜第４６項のいずれか１項に記載のウイルスベクター。
【０１８１】
５４．  少なくとも１つのプロモーター配列は、Ｈ６ワクシニアプロモーターである、第５３項に記載のウイルスベクター。
５５．  少なくとも１つのプロモーター配列は、Ｉ３Ｌワクシニアプロモーターである、第５３項または第５４項に記載のウイルスベクター。
５６．  少なくとも１つのプロモーター配列は、４２ｋ（長）ポックスウイルスプロモーターである、第５３項〜第５５項のいずれか１項に記載のウイルスベクター。
５７．  少なくとも１つのプロモーター配列は、７．５ｋワクシニアプロモーターである、第５３項〜第５６項のいずれか１項に記載のウイルスベクター。
５８．  少なくとも１つのプロモーター配列は、Ｐｉワクシニアプロモーターである、第５３項〜第５７項のいずれか１項に記載のウイルスベクター。
５９．  終結シグナルおよび／またはポリアデニル化配列など、追加の調節配列をさらに含む、第１項〜第５８項のいずれか１項に記載のウイルスベクター。
【０１８２】
６０．  配列番号４９、配列番号５０、配列番号５１、配列番号９５からなる群から選択される核酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％同一であり、好ましくは配列番号４９、配列番号５０、配列番号５１、配列番号９５からなる群から選択される核酸配列である核酸配列を含む、第１項〜第５９項のいずれか１項に記載のウイルスベクター。
６１．  ネコ科動物は、ネコ、好ましくはイエネコである、第１項〜第６０項のいずれか１項に記載のウイルスベクター。
６２．  第１項〜第６１項のいずれか１項に記載のウイルスベクターを含むことを特徴とする哺乳動物宿主細胞。
６３．  免疫原性組成物またはワクチンを製造するための、第１項〜第６１項のいずれか１項に記載のウイルスベクターまたは第６２項に記載の哺乳動物宿主細胞の使用。
６４．  （ａ）第１項〜第６１項のいずれか１項に記載のウイルスベクターもしくは第６２項に記載の哺乳動物宿主細胞、および／または
（ｂ）ウイルス、修飾生ウイルス、もしくはウイルス様粒子（ＶＬＰ）などの、第１項〜第６１項のいずれか１項に記載のウイルスベクターによりコードされるポリペプチド、および
（ｃ）任意に、薬学的にまたは獣医学的に許容される担体もしくは賦形剤であって、好ましくは、前記担体は経口、皮内、筋肉内、または鼻腔内適用に好適である、担体もしくは賦形剤
を含み、
好ましくは、感染性ウイルスなどのウイルスを含む、免疫原性組成物。
【０１８３】
６５．  （ａ）第１項〜第６１項のいずれか１項に記載のウイルスベクターもしくは第６２項に記載の哺乳動物宿主細胞、および／または
（ｂ）ウイルス、修飾生ウイルス、もしくはウイルス様粒子（ＶＬＰ）などの、第１項〜第６１項のいずれか１項に記載のウイルスベクターによりコードされるポリペプチド、および
（ｃ）薬学的にまたは獣医学的に許容される担体もしくは賦形剤であって、好ましくは前記担体は、経口、皮内、筋肉内、または鼻腔内適用に好適である、担体もしくは賦形剤
を含み、
（ｄ）任意に、アジュバントをさらに含む、ワクチンまたは医薬組成物。
【０１８４】
６６．  少なくとも１つの病原性パラミクソウイルスによる感染症に関連するかまたはそれにより引き起こされる１つまたは複数の臨床徴候の発生および／または重症度を低減するための免疫原性組成物またはワクチンを調製するための方法であって、
（ａ）第６２項に記載の哺乳動物宿主細胞を、第１項〜第６１項のいずれか１項に記載のウイルスベクターで感染させるステップ、
（ｂ）感染細胞を好適な条件下で培養するステップ、
（ｃ）感染細胞培養物を収集するステップ、
（ｄ）任意に、ステップ（ｃ）の収集した感染細胞培養物を精製するステップ、
（ｅ）任意に、前記収集した感染細胞培養物を薬学的に許容される担体と混合するステップ
を含む方法。
【０１８５】
６７．  少なくとも１つの病原性パラミクソウイルスによる感染症により引き起こされる臨床徴候または疾患を低減または予防するための方法で使用するための、または少なくとも１つの病原性パラミクソウイルスによる感染症を治療および／または予防するための方法で使用するための、第６４項に記載の免疫原性組成物または第６５項に記載のワクチンであって、好ましくは、前記ネコ科動物は、ネコ、より好ましくはイエネコであり、好ましくは、少なくとも１つの病原性パラミクソウイルスは、少なくとも１つのネコパラミクソウイルスであり、好ましくは、前記少なくとも１つの病原性パラミクソウイルスによる感染症により引き起こされる臨床徴候もしくは疾患、または前記少なくとも１つの病原性パラミクソウイルスによる感染症は、ウイルス血症、発熱、環境へのウイルス排出、泌尿生殖器系の感染症、尿路系の感染症、腎臓疾患、慢性腎臓疾患（ＣＫＤ）、腎尿細管および腎間質組織の炎症、特発性尿細管間質性腎炎（ＴＩＮ）からなる群から選択される、第６４項に記載の免疫原性組成物または第６５項に記載のワクチン。
【０１８６】
６８．  ネコ、より好ましくはイエネコ、などのネコ科動物を、前記ネコ科動物において少なくとも１つの病原性パラミクソウイルスにより引き起こされる臨床疾患に対して免疫するための方法であって、第６４項に記載の免疫原性組成物または第６５項に記載のワクチンをネコ科動物に投与するステップを含み、前記免疫原性組成物またはワクチンは、感染の臨床徴候を引き起こさないが、前記少なくとも１つのパラミクソウイルスの病原性形態に対してネコ科動物を免疫する免疫応答を誘導することが可能であり、好ましくは、少なくとも１つの病原性パラミクソウイルスは、少なくとも１つのネコパラミクソウイルスであり、好ましくは、前記臨床疾患または前記感染の臨床徴候は、ウイルス血症、発熱、環境へのウイルス排出、泌尿生殖器系の感染症、尿路系の感染症、腎臓疾患、慢性腎臓疾患（ＣＫＤ）、腎尿細管および腎間質組織の炎症、特発性尿細管間質性腎炎（ＴＩＮ）からなる群から選択される方法。
【０１８７】
６９．  ネコ科動物における少なくとも１つの病原性パラミクソウイルスに関連する疾患に対して、ネコ科動物、好ましくはネコ、より好ましくはイエネコにワクチン接種するための、および／またはネコにおいて少なくとも１つの病原性パラミクソウイルスに関連するかまたはそれにより引き起こされる１つまたは複数の臨床徴候の発生または重症度を低減するためのキットであって、
（ａ）前記ネコ科動物にワクチンを投与することが可能なディスペンサー、および
（ｂ）第６４項に記載の免疫原性組成物または第６５項に記載のワクチン、および、
（ｃ）任意に、使用説明書を含み、
好ましくは、少なくとも１つの病原性パラミクソウイルスは、少なくとも１つのネコパラミクソウイルスであり、好ましくは、前記疾患または前記臨床徴候は、ウイルス血症、発熱、環境へのウイルス排出、泌尿生殖器系の感染症、尿路系の感染症、腎臓疾患、慢性腎臓疾患（ＣＫＤ）、腎尿細管および腎間質組織の炎症、特発性尿細管間質性腎炎（ＴＩＮ）からなる群から選択される、キット。
【実施例】
【０１８８】
（実施例１）
ｖＣＰ３０２５の構築：ＡＬＶＡＣ  Ｃ５／Ｈ６ｐ合成ゴードンＨおよびｖＣＰ３０２９：ＡＬＶＡＣ  Ｃ３／４２ｋ長合成ゴードンＭ＋Ｃ５／Ｈ６ｐ合成ゴードンＨ（配列番号４９、５０、および５１を含む；図２、３、および４）
目的：２つのＡＬＶＡＣ構築物を生成する：１つは単一インサートを有し、１つは二重インサートを有する。単一構築物は、Ｈ６プロモーター下のＣ５挿入遺伝子座のコドン最適化ゴードンＨを発現する。二重構築物は、Ｈ６プロモーター下のＣ５挿入遺伝子座にあるコドン最適化ゴードンＨ、および４２ｋ長プロモーター下のＣ３挿入遺伝子座にあるコドン最適化ゴードンＭを両方とも発現する。
【０１８９】
遺伝子：合成ゴードンＨ；合成ゴードンＭ
組換え体の基本情報：
Ａ．  親ウイルス：後期継代由来のＡＬＶＡＣ、継代レベル；力価＝１．５×１０＾１０ｐｆｕ／ｍＬ以外は、本質的に親ＡＬＶＡＣ  ＡＴＣＣ  ＶＲ−２５４７と同じウイルス
Ｂ．  ドナープラスミド：ｐＣ５  Ｈ６ｐゴードンＨ（ｏｐｔ）；ｐＣ３  ４２ＫゴードンＭ（ｏｐｔ）
Ｃ．  挿入遺伝子座：単一＝Ｃ５；二重＝Ｃ３およびＣ５
Ｄ．  プロモーター：Ｃ５部位／挿入遺伝子座＝Ｈ６プロモーター；Ｃ３部位／挿入遺伝子座＝４２ｋ長プロモーター
Ｅ．  ｉｎ  ｖｉｔｒｏ組換え用の細胞：初代ニワトリ胚線維芽細胞（１−ＣＥＦ）
Ｆ．  組換え体を選択するための方法：ゴードンＨおよびゴードンＭ特異的プローブによるプラークハイブリッド形成法
【０１９０】
組換え体生成の詳細な説明。
１−ＣＥＦ細胞をＮｏｔ  Ｉ−線状化ドナープラスミドでトランスフェクションすることにより、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ組換え（ＩＶＲ）を実施する。２０μｇの各ドナープラスミド［ｐＣ５  Ｈ６ｐゴードンＨ（ｏｐｔ）およびｐＣ３  ４２ＫゴードンＭ（ｏｐｔ）］を使用して単一のＩＶＲを実施する。Ｆｕｇｅｎｅ  ＨＤ（Ｐｒｏｍｅｇａ  カタログ番号Ｅ２３１１）は、トランスフェクション試薬である。続いて、トランスフェクトした細胞を、レスキューウイルスとしての親ＡＬＶＡＣに１０のＭＯＩで感染させる。２４時間後、トランスフェクトした感染細胞を回収し、超音波処理し、組換えウイルススクリーニングに使用する。
組換えプラークを、プラークリフトハイブリッド形成法（plaque lift hybridization method）に基づきスクリーニングする。感染単層を、正に荷電されたナイロン転写膜（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  カタログ番号ＲＰＮ８２Ｂ）にリフトし、リフト緩衝液の存在下で追加のナイロン膜を元のリフトに対して押し付けることにより、そうしたリフトのコピーを製作する。ビオチン標識ゴードンＨ特異的プローブまたはビオチン標識ゴードンＭ特異的プローブのいずれかでコピーを探索した。ラウンド３および４にて、第３のセットのリフトを製作し、ＡＬＶＡＣ特異的親プローブで探索する（ラウンド３ではＣ３プローブ；ラウンド４ではＣ５プローブ）。ＡＬＶＡＣ親プローブは、組換え中に欠失されるＯＲＦの領域に結合する。Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  ＤｅｃａＬａｂｅｌ  ＤＮＡ標識キット；製品番号Ｋ０６２２を使用してプローブを標識する。探索したリフトを、Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ化学発光核酸検出モジュールキット；製品番号８９８８０を使用して発色させる。組換えプラークを選択し、元の膜から切り出し、次のラウンドの精製での感染に使用する。第３の連続ラウンドのプラーク精製にて、ｖＣＰ３０２９．２．２．１と命名した組換え体をピックアップする。薄膜での結果に基づくと、このプラークは、次のラウンドのスクリーニングにて二重インサートウイルスを産生すると予想される。しかしながら、このピックアップしたプラークを第４のラウンドのスクリーニングでプレーティングすることにより、単一インサート［Ｃ５部位のゴードンＨ（ｏｐｔ）］プラークおよび二重インサート［Ｃ５部位のゴードンＨ（ｏｐｔ）およびＣ３部位のゴードンＭ（ｏｐｔ）］プラークが両方とも産生される。二重インサートプラークをピックアップし、ｖＣＰ３０２９．２．２．１．２と表記する。単一インサートプラークをピックアップし、ｖＣＰ３０２５．２．２．１．１と表記する。
【０１９１】
第５のおよび最後のラウンドのプラーク精製を、ｖＣＰ３０２５．２．２．１．１、およびｖＣＰ３０２９．２．２．１．２について実施する。個々のプラークの２つのアガロース打抜き物を、ｖＣＰ３０２５．２．２．１．１の無希釈プレートから得る（ｖＣＰ３０２５．２．２．１．１．１およびｖＣＰ３０２５．２．２．１．１．２）。同様に、個々のプラークの３つのアガロース打抜き物を、ｖＣＰ３０２９．２．２．１．２の無希釈プレートから得る。（ｖＣＰ３０２９．２．２．１．２．３、ｖＣＰ３０２９．２．２．１．２．４、およびｖＣＰ３０２９．２．２．１．２．５）。こうした打抜き物を増殖させて、Ｐ１（第１代継代）を得る（Ｔ−２５フラスコ）。ＰＣＲ試験により、ｖＣＰ３０２５．２．２．１．１．２が、ゴードンＨ（ｏｐｔ）インサートをＣ５部位に含み、ゴードンＭ（ｏｐｔ）インサートをＣ３部位に含まないないことを確認する。同様に、ＰＣＲ試験により、ｖＣＰ３０２９．２．２．１．２．３が、Ｃ５部位にゴードンＨ（ｏｐｔ）インサート、およびＣ３部位にゴードンＭ（ｏｐｔ）インサートを含むことを確認する。ｖＣＰ３０２５．２．２．１．１．２（単一インサート）およびｖＣＰ３０２９．２．２．１．２．３（二重インサート）を増殖させて、Ｐ２（第２代継代）とする（各構築物毎に２つのＴ−１５０フラスコ）。こうしたＰ２ストックを、ｖＣＰ３０２５  Ｐ２およびｖＣＰ３０２９  Ｐ２と呼ぶ。
【０１９２】
ｖＣＰ３０２５  Ｐ２およびｖＣＰ３０２９  Ｐ２を大規模化して、Ｐ３（第３代継代）とする（１構築物当たり４つのローラーボトル）。Ｐ３物質を、スクロースペレットにより濃縮および精製する。こうしたＰ３ストックを、ｖＣＰ３０２５およびｖＣＰ３０２９と呼ぶ。
組換え体の分析：Ｐ３ストックに対して以下の分析を実施する。
生殖不能性：ｖＣＰ３０２５およびｖＣＰ３０２９のＰ３ストックに対して生殖不能性試験を実施する。各構築物の５０μＬアリコートを、２つのサブローデキストロース寒天培地（ＳＤＡ）プレートの各々および５％ヒツジ血液を有する２つのトリプチケースソイ寒天培地（ＴＳＡ  ＩＩ  ５％ＳＢ）プレートの各々（ＢＢＬ  それぞれカタログ番号２２１１８０およびカタログ番号２２１２３９）にプレーティングする。各構築物について、一方のＳＤＡプレートおよび一方のＴＳＡ  ＩＩ  ５％ＳＢプレートを、３７℃で１０日間インキュベートし、他方のセットのプレートを室温で１０日間インキュベートする。１０日間の終了時では、いずれのプレートも、細菌増殖または真菌増殖のいかなる徴候も示さない。
【０１９３】
遺伝子純度の確認：
Ｐ３ストックの純度を、幾つかの別々のＰＣＲ反応により確認する。第１のＰＣＲ反応では、Ｃ５アームのいずれかの末端に位置するプライマーが使用される（プライマー７９３１および７９３２）。こうしたプライマーは、野生型ＡＬＶＡＣでは２，４７０ｂｐバンド、およびＣ５部位にゴードンＨ（ｏｐｔ）を含む組換え体では４２４０ｂｐバンドをもたらす。Ｃ３領域全体を増幅することになるプライマーが存在するが、そうしたプライマーは、野生型ＡＬＶＡＣでは４５３９ｂｐバンド、およびＣ３部位にゴードンＭ（ｏｐｔ）を含む組換え体では４２８９ｂｐバンドをもたらすことになる。このサイズ差は、ゲルで検出するのが困難である。そのため、２つの他のＰＣＲを実施してＣ３部位を分析する。第１の反応では、ゴードンＭプローブ（Ｇｏｒｄｏｎ＿Ｍ＿ｐｒｏｂｅ＿Ｆおよびゴードン＿Ｍ＿ｐｒｏｂｅ＿Ｒ）を製作するために使用したプライマーを、試料の増幅に使用する。こうしたプライマーは、Ｃ３部位にゴードンＭ（ｏｐｔ）を含む組換え体では６２１ｂｐバンドをもたらし、野生型ＡＬＶＡＣではバンドをもたらさない。第２の反応では、野生型Ｃ３プローブを製作するために使用したプライマー（Ｃ３ＦおよびＣ３Ｒ）を、試料の増幅に使用する。こうしたプライマーは、組換え中に欠失される領域に位置し、野生型ＡＬＶＡＣでは１００７ｂｐバンドをもたらし、Ｃ３部位にゴードンＭ（ｏｐｔ）を含む組換え体ではバンドをもたらさない。
【０１９４】
配列分析：Ｐ３ストックのより詳細な配列分析を、ｖＣＰ３０２５のＣ５部位ならびにｖＣＰ３０２９のＣ３部位およびＣ５部位のＰＣＲ増幅および配列分析により実施する。Ｃ５組換えアームの直ぐ外部に位置するプライマー７９３１および７９３２を使用して、Ｃ５部位を増幅する。Ｃ３組換えアームの直ぐ外部に位置するプライマーＣ３−ＰＣＲ−ＦおよびＣ３−ＰＣＲ−Ｒを使用して、Ｃ３部位を増幅する。すべての場合で、ＰＣＲは、予想サイズの単一バンドをもたらし、配列決定は、組換えアームの場合の予想される結果を示す。
方法、試薬、およびプライマー
ゴードンＨ（ｏｐｔ）プローブを増幅するためのプライマー：
ゴードンＨプローブ  Ｆ  GTTCGCCACCGTGAACATCC（配列番号８９）
ゴードンＨプローブ  Ｒ  CACTGCCTTCACGGTCACG（配列番号８８）
【０１９５】
ゴードンＭ（ｏｐｔ）プローブを増幅するためのプライマー：
ゴードンＭプローブ  Ｆ  GGAGATCCTGACTCTGAACATCG（配列番号５２）
ゴードンＭプローブ  Ｒ  CTCCACAGAGTTTTATTCAGCCC（配列番号５３）
ＡＬＶＡＣ親プローブを増幅するためのプライマー（Ｃ３部位）：
Ｃ３Ｆ  CGTAGAGTTTTTTGTCTAGTTCTAT（配列番号５４）
Ｃ３Ｒ  GTTGTTTTATGCGGTAAAGAATAAT（配列番号５５）
ＡＬＶＡＣ親プローブを増幅するためのプライマー（Ｃ５部位）：
７５２０  TCTTGCTTCGCAGTCATCGTTCTG（配列番号５６）
７５２１  TCTAAAATGCATAATTTCTAA（配列番号５７）
【０１９６】
配列決定のためにＣ３部位をＰＣＲ増幅するためのプライマー：
Ｃ３−ＰＣＲ−Ｆ  GCTAACACAAGTTAGAGGCGTATTAC（配列番号５８）
Ｃ３−ＰＣＲ−Ｒ  CATTAATTATGTGATGAGGCATCCAAC（配列番号５９）
配列決定のためにＣ５部位をＰＣＲ増幅するためのプライマー：
７９３１  GAATCTGTTAGTTAGTTACTTGGAT（配列番号７５）
７９３２  TGATTATAGCTATTATCACAGACTC（配列番号７６）
Ｃ３部位を配列決定するためのプライマー：
C3-PCR-F  GCTAACACAAGTTAGAGGCGTATTAC（配列番号５８）
C3-PCR-R  CATTAATTATGTGATGAGGCATCCAAC（配列番号５９）
C3-R1     TTTATAGGTAAATCCAGGAA（配列番号６０）
C3-R2     GCCTACTAAGAAAACTAGAAGATAC（配列番号６１）
C3-R3     AGATTGATATAAATGAATATGTAA（配列番号６２）
C3-R4     CGACGTTAGGTTAGATACTG（配列番号６３）
C3-R5     ATGCGGTACCCTGTTCGAAG（配列番号６４）
C3-R6     CAGAAATGAGTAATGGAAGA（配列番号６５）
C3-R7     CTGGAAATAGTCCGTTATAT（配列番号６６）
C3-R8     CAGTATCTCATAAAGGCACTTA（配列番号６７）
C3-R9     CCGTTCTAAATATAGCTGTTGCAT（配列番号６８）
ゴードンＭ  １Ｆ  ATGACTGAGATCTTCAACCTGG（配列番号６９）
ゴードンＭ  ２Ｆ  TGAGCATGGGGACCATCCTG（配列番号７０）
ゴードンＭ  ３Ｆ  GGGCTGAATAAAACTCTGTGGAG（配列番号７１）
ゴードンＭプローブ  Ｆ  GGAGATCCTGACTCTGAACATCG（配列番号５２）
ゴードンＭ  １Ｒ  CGATGTTCAGAGTCAGGATCTCC（配列番号７２）
Ｃ３−Ｆ５  CACGGATTATCTACTGTGAT（配列番号７３）
Ｃ３−Ｆ７  GCAACAGTAGTTATACGATGAG（配列番号７４）
【０１９７】
Ｃ５部位を配列決定するためのプライマー：
7931      GAATCTGTTAGTTAGTTACTTGGAT（配列番号７５）
7932      TGATTATAGCTATTATCACAGACTC（配列番号７６）
7927.DC   CTCTTGCATATTCGTAATAGTAATTG（配列番号７７）
7696.CXL  ATTCTATCGGAAGATAGGATACCAG（配列番号７８）
7697.CXL  ATGCACAACTTCTTGTCTGCATGATG（配列番号７９）
7925.DC   TACGGCTATATGTAGAGGAGTTAACC（配列番号８０）
7792.SL   CTCTGAGACACAAAAGAGGTAGCTG（配列番号８１）
7793SL    CATAGAACGGTATAGAGCGTTAATC（配列番号８２）
7928.DC   CATCATGAGCAACGCGTTAGTATAT（配列番号８３）
7929.DC   GGAGATACCTTTAGATATGGATCTG（配列番号８４）
7926.DC   TCAACAACCGCTCGTGAACAGCTTC（配列番号８５）
ゴードンＨ  １Ｒ  GCTCGGTGCTCATTGCGTTG（配列番号８６）
ゴードンＨ  ２Ｆ  CAACGCAATGAGCACCGAGC（配列番号８７）
ゴードンＨプローブ  Ｒ  CACTGCCTTCACGGTCACG（配列番号８８）
ゴードンＨプローブ  Ｆ  GTTCGCCACCGTGAACATCC（配列番号８９）
ゴードンＨ  １Ｆ  TCGCGATATCCGTTAAGTTTGTA（配列番号９０）
ゴードンＨ  ３Ｆ  GAATATCCCCACCAGGTCTATCTAC（配列番号９１）
ゴードンＨ  ４Ｆ  TACCGACGATGTGCCCATCC（配列番号９２）
ゴードンＨ  ５Ｆ  ATCTCCGACGGCCTGATCAT（配列番号９３）
【０１９８】
ｉｎ  ｖｉｔｒｏ組換え用の細胞：初代ニワトリ胚線維芽細胞（１−ＣＥＦ）を、１×抗生物質／抗真菌剤（Ｐ／Ｓ／Ａ／Ａ、Ｇｉｂｃｏ  カタログ番号１５２４０）存在下の、４ｍＭグルタミン（Ｇｉｂｃｏ  カタログ番号２５０３０）および１ｍＭピルビン酸ナトリウム（Ｇｉｂｃｏ  カタログ番号１１３６０）で補完された１０％ＦＢＳ（Ｈｙｃｌｏｎｅ  カタログ番号ＳＨ３００７１．０３）ＤＭＥＭ（Ｇｉｂｃｏ  カタログ番号１１９６０）で増殖させる。Ｆｕｇｅｎｅトランスフェクション試薬（Ｐｒｏｍｅｇａ  カタログ番号Ｅ２３１１）。
【０１９９】
最終ウイルス濃縮物を、１ｍＭ  Ｔｒｉｓ、ｐＨ９．０に再懸濁する。
ｖＣＰ３０２５力価＝２．３×１０＾９ｐｆｕ／ｍＬ
ｖＣＰ３０２９力価＝１．９×１０＾９ｐｆｕ／ｍＬ
【０２００】
（実施例２）
ワクチン接種実施例（ｖＣＰ３０２５−ゴードンＨ；配列番号４９を含む；図２）
ＳＤ０およびＳＤ２１にて、およそ１×１０8ＴＣＩＤ50／ｍＬの力価を有する合計用量が１ｍＬのＡＬＶＡＣ−ゴードンＨベクターワクチンを、８匹のネコの群（群１）に投与する。この用量は、選択された抗原（ＦａＰＶ−２血球凝集素）に対する免疫応答を促進するために十分な量のワクチンウイルスを送達すると予想される。陰性対照（群３）には、無関係のＡＬＶＡＣベクター構築物（つまり、ＡＬＶＡＣ狂犬病）をワクチン接種する。動物は、ＳＤ０、ＳＤ２１、およびＳＤ４２にて血液を試料採取し、体液性免疫応答を、特定のＥＬＩＳＡ、免疫蛍光アッセイ（ＩＦＡ）、および／またはウイルス／血清中和試験（ＶＮＴ／ＳＮＴ）で測定する（実施例４）。ＳＤ４２にて、それぞれの群の動物に、下記に記載のように（実施例５）負荷ウイルスを静脈内（ＩＶ）接種し、加えて、所与の感染パラメーターを測定する（ウイルス血症、排出、ウイルス分布）。
【０２０１】
（実施例３）
ワクチン接種実施例（ｖＣＰ３０２９−ゴードンＨ＋ゴードンＭ；配列番号５０＋５１を含む；図３＋４）
ＳＤ０およびＳＤ２１にて、およそ１×１０8ＴＣＩＤ50／ｍＬの力価を有する合計用量が１ｍＬのＡＬＶＡＣ−ゴードンＨ＋４Ｍベクターワクチンを、８匹のネコの群（群２）に投与する。この用量は、選択された抗原（ＦａＰＶ−２血球凝集素およびマトリックスタンパク質）に対する免疫応答を促進するために十分な量のワクチンウイルスを送達すると予想される。陰性対照（群３）には、無関係のＡＬＶＡＣベクター構築物（つまり、ＡＬＶＡＣ狂犬病）をワクチン接種する。動物は、ＳＤ０、ＳＤ２１、およびＳＤ４２にて血液を試料採取し、体液性免疫応答を、特定のＥＬＩＳＡ、免疫蛍光アッセイ（ＩＦＡ）、および／またはウイルス／血清中和試験（ＶＮＴ／ＳＮＴ）で測定する（実施例４）。ＳＤ４２にて、それぞれの群の動物に、下記に記載のように（実施例５）負荷ウイルスを静脈内（ＩＶ）接種し、所与の感染パラメーターを測定する（ウイルス血症、排出、ウイルス分布）。
【０２０２】
（実施例４）
ウイルス中和試験（ＶＮＴ）／血清中和試験（ＳＮＴ）
ＦＰａＶ−２などのネコパラミクソウイルスに対する中和抗体を検出するために、ウイルス／血清中和アッセイ（ＶＮＴ／ＳＮＴ）を実施する。したがって、ネコ血清試料を、５６℃で３０分間処理して、補体因子を不活化する。こうした熱不活化血清試料の５０μｌを、ＦＰａＶ−２（単離株「ゴードン」）などのネコパラミクソウイルスの１００蛍光形成単位（fluorescence forming unit）（ＦＦＵ）を含む５０μｌのＤＭＥＭと混合し、その後４℃で１時間インキュベートする。混合物を使用して、３７℃で２時間、９６ウェル細胞培養プレートのＬＬＣ−ＭＫ２細胞に感染させる。その後、血清／ウイルス混合物を除去し、２％（容積／容積）熱不活化ＦＢＳ、ピルビン酸ナトリウム、非必須アミノ酸、ペニシリン、およびストレプトマイシンを含むＤＭＥＭで置換する。細胞を、３７℃、５％ＣＯ2、および９０％湿度で５日間インキュベートし、続いて下記に記載のように免疫蛍光染色を行う。試験血清試料の中和力価は、血清インキュベーションを行わなかったウイルス対照と比較してウイルス感染力が５０％低減された最も高い試験血清希釈度の逆数であると定義される。
ＦＰａＶ−２感染などのネコパラミクソウイルス感染を検出するために、ＬＬＣ−ＭＫ２細胞を下記に記載のように感染させ、免疫蛍光技法を使用してネコパラミクソウイルス特異的抗体で染色する。この目的のため、付着細胞を、５日間の感染期間後にＰＢＳで洗浄し、続いて−２０℃で１０分間８０％アセトンで固定する。細胞を、ＰＢＳで２回洗浄し、３７℃で１時間ＰＢＳ中５％ＢＳＡでインキュベーションすることにより、非特異的結合をブロックする。この後で、ＰＢＳ中１％ＢＳＡ中１μｇ／ｍｌの終濃度の抗ネコパラミクソウイルス抗体（例えば、抗ＦＰａＶ−２ヌクレオカプシド、ポリクローナル、ウサギ）と共に３７℃で１時間インキュベーションするステップを行う。細胞を、ＰＢＳで３回洗浄し、続いてＰＢＳ中１％ＢＳＡで１：１０００最終稀釈した「ヤギ抗ウサギＩｇＧ（Ｈ＋Ｌ）二次抗体、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ（登録商標）４８８コンジュゲート」（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を適用する。３７℃で１時間のインキュベーション時間後、細胞をＰＢＳで２回洗浄し、蛍光顕微鏡を使用してＦＰａＶ−２の存在について細胞をスクリーニングする。
【０２０３】
ウイルス培養では、ＬＬＣ−ＭＫ２およびＣｒＦＫ細胞を、５％二酸化炭素を含む雰囲気下３７℃および９０％湿度で、７５ｃｍ2細胞培養フラスコ中の５％ＦＢＳを有するＤＭＥＭ（ピルビン酸ナトリウムおよび非必須アミノ酸を有する）に播種する。７０〜８０％のコンフルエンスにて、細胞を、３７℃、５％ＣＯ2、および９０％湿度で一晩、１ミリリットルの尿および５ｍｌのＤＭＥＭ（ペニシリンおよびストレプトマイシンを有する）の混合物で感染させる。２４時間後、感染培地を、８ｍｌの培養培地（ＤＭＥＭ、ピルビン酸ナトリウム（sodium pyruvat）、非必須アミノ酸、５％ＦＢＳ、ペニシリン、およびストレプトマイシン）と置換し、指示条件でさらに６日間培養する。この感染に由来する細胞培養上清を、さらに３回継代する。その後、６００μｌの細胞培養上清を、ネコパラミクソウイルスの存在について試験する。
【０２０４】
（実施例５）
負荷モデル
感染および疾患発現の初期段階を調査するための負荷モデル臨床研究を使用する。１×１０5ＴＣＩＤ50／ｍＬの負荷用量にできるだけ近い用量でＦＰａＶ−２「ゴードン株」による静脈内（ＩＶ）負荷を実施し、負荷後５６日間追跡する。ＣＫＤの臨床徴候は予想されないため、負荷モデル臨床研究の主な目的は、原始感染、腎機能に対する感染の影響の可能性、感染に対する免疫応答をモニターして、伝播の可能性を評価し、免疫組織化学法（ＩＨＣ）により腎臓およびおそらくは他の器官におけるウイルス定着を確認することである。
疾患の初期段階で予想される症状は、ウイルス血症と関連する（無気力、高熱、体重減少）。後期段階で予想される徴候は、慢性腎不全に関係する可能性がある（体重喪失、尿毒症、粘膜病変）。ＦＰａＶ−２「ゴードン株」のウイルスストック（力価１×１０5ＴＣＩＤ50／ｍｌを有する）を、初代ネコ末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）で、またはＬＬＣ−ＭＫ２細胞株のような他の細胞で調製する。ストックは、一般的なネコ病原体（それぞれ、ネコ汎白血球減少症ウイルス、ネコ免疫不全ウイルス、ネコ白血病ウイルス、およびネココロナウイルスを含む）の存在について陰性であることが試験されている。雑種ネコに、１ｍｌのウイルスストック（１×１０5ＴＣＩＤ５０／ｍｌ）を静脈内（ＩＶ）接種する。
【０２０５】
実験計画および追跡：図式全体図は、図５を参照されたい。
下記では、ネコ群Ａ１、Ａ２、Ｂ１、Ｂ２、Ｃ１、およびＣ２は、剖検の異なるタイミングを表す：Ａ１およびＡ２はＤ１４、Ｂ１およびＢ２はＤ２８、Ｃ１およびＣ２はＤ５６。この細分化は、動物に対する過度のストレスを回避するために、すべてのネコの毎日の試料採取を回避することにより動機付けられる。
・Ｄ０〜Ｄ１４（週末を除く）では毎日ベースの、およびＤ１５〜Ｄ５６では週２回の臨床検査および直腸温
・Ｄ０〜Ｄ５６での週２回の体重測定
・ＰＣＲによるウイルス血症モニタリングのための血液試料採取
【表１】
2021514196.tif 000002
【０２０６】
・ＰＣＲによるウイルス血症モニタリングおよび脂肪尿のための尿試料採取
【表２】
2021514196.tif 000003
【０２０７】
・ＰＣＲによるウイルス血症モニタリングのためのＯｒｏ鼻腔スワブ
【表３】
2021514196.tif 000004
【０２０８】
・血液生化学および細胞数
【表４】
2021514196.tif 000005
・血清学のための血清試料採取
【表５】
2021514196.tif 000006
【０２０９】
・剖検および組織学
各動物の完全な剖検を実施して、腎臓、脾臓、肝臓、膀胱、および肺を試料採取する。組織学およびＰＣＲによるウイルス検出のために器官を試料採取する。
負荷モデル臨床研究により、本発明によるウイルスベクターに基づくワクチンベクターは、ネコに負荷するとネコパラミクソウイルスウイルス血症を予防ならびに／またはその強度および／もしくは持続期間を低減することができるという仮説を試験する。加えて、基礎をなす本発明のウイルスベクターでネコをワクチン接種することにより、例えば、ネコパラミクソウイルス血球凝集素抗原に対する抗体が誘導される。
【０２１０】
（実施例６）
ｖＣＰ３０４１の構築：ＡＬＶＡＣ  Ｃ５／Ｈ６ｐ合成ゴードンＨ＋Ｃ３／４２ｋ長野生型ラポンＨ（配列番号４９＋９５を含む）
目的：二重インサートを有するＡＬＶＡＣ構築物を生成する。構築物は、Ｈ６プロモーター下のＣ５挿入遺伝子座にあるコドン最適化ゴードンＨ（親として使用される）および４２ｋ長プロモーター下のＣ３挿入遺伝子座にある野生型ラポンＨ（ＢａｍＨ１制限酵素部位を有しない；配列番号９４）（新たなインサート）を発現する（図６および７）。
【０２１１】
遺伝子：合成ゴードンＨ；野生型ラポンＨ
組換え体の基本情報：
Ａ．  親ウイルス：ｖＣＰ３０２５：ＡＬＶＡＣ  Ｃ５／Ｈ６ｐ合成ゴードンＨ；力価＝２．３×１０＾９ｐｆｕ／ｍＬ
Ｂ．  ドナープラスミド：ｐＣ３  ４２ｋ長ラポンＨ（ｗｔ、ＢａｍＨ１制限酵素部位を有さない）
Ｃ．  挿入遺伝子座：Ｃ３
Ｄ．  プロモーター：４２ｋ長プロモーター
Ｅ．  ｉｎ  ｖｉｔｒｏ組換え用の細胞：初代ニワトリ胚線維芽細胞（１−ＣＥＦ）
Ｆ．  組換え体を選択するための方法：ゴードンＨ（ｏｐｔ）およびラパンＨ（ｗｔ）特異的プローブによるプラークハイブリッド形成法
組換え体生成の詳細な説明。
Ｇ．  ２０μｇのＮｏｔ  Ｉ−線状化ドナープラスミドで１−ＣＥＦ細胞をトランスフェクションすることによりｉｎ  ｖｉｔｒｏ組換え（ＩＶＲ）を実施する［ｐＣ３  ４２ｋ長ラポンＨ（ｗｔ、ＢａｍＨ１制限酵素部位を有しない）］。Ｆｕｇｅｎｅ  ＨＤ（Ｐｒｏｍｅｇａ  カタログ番号Ｅ２３１１）は、トランスフェクション試薬である。続いて、トランスフェクトした細胞を、レスキューウイルスとしてのｖＣＰ３０２５に１０のＭＯＩで感染させる。２４時間後、トランスフェクトした感染細胞を回収し、超音波処理し、組換えウイルススクリーニングに使用する。
【０２１２】
組換えプラークを、プラークリフトハイブリッド形成法に基づきスクリーニングする。感染単層を、正に荷電されたナイロン転写膜（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  カタログ番号ＲＰＮ８２Ｂ）にリフトし、リフト緩衝液の存在下で追加のナイロン膜を元のリフトに対して押し付けることにより、そうしたリフトのコピーを製作する。コピーを、ビオチン標識ラポンＨ（ｗｔ、ＢａｍＨ１制限酵素部位を有しない）特異的プローブまたはビオチン標識ＡＬＶＡＣ親Ｃ３プローブで探索する。ＡＬＶＡＣ親プローブは、組換え中に欠失されるＯＲＦの領域に結合する。Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  ＤｅｃａＬａｂｅｌ  ＤＮＡ標識キット；製品番号Ｋ０６２２を使用してプローブを標識する。探索したリフトを、Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ化学発光核酸検出モジュールキット；製品番号８９８８０を使用して発色させる。組換えプラークを選択し、元の膜から切り出し、次のラウンドの精製での感染に使用する。３または４ラウンドの連続プラーク精製後、Ｃ３遺伝子座にラポンＨ（ｗｔ、ＢａｍＨ１制限酵素部位を有しない）遺伝子を含む組換え体を単離する。
【０２１３】
最終ラウンドの精製では、幾つかのアガロース打抜き物を、単一の単離プラークとして得る。こうした打抜き物を増殖して、Ｐ１（第１代継代）を得る（Ｔ−２５フラスコ）。ＰＣＲ試験を実施して、Ｐ１がＣ５部位にゴードンＨ（ｏｐｔ）インサートおよびＣ３部位にラポンＨ（ｗｔ、ＢａｍＨ１制限酵素部位を有さない）インサートを両方とも含むことを確認する。２つの許容される候補を増殖させて、Ｐ２（第２代継代）とする（各構築物毎に２つのＴ−１５０フラスコ）。
単一のＰ２を大規模化して、Ｐ３（第３代継代）とする（４つのローラーボトル）。Ｐ３物質を、スクロースペレットにより濃縮および精製し、ｖＣＰ３０４１と呼ぶ。
組換え体の分析：Ｐ３ストックに対して以下の分析を実施する。
生殖不能性：ｖＣＰ３０４１のＰ３ストックに対して生殖不能性試験を実施する。５０μＬのアリコートを、２つのサブローデキストロース寒天培地（ＳＤＡ）プレートの各々および５％ヒツジ血液（ＴＳＡ  ＩＩ  ５％ＳＢ）を有する２つのトリプチケースソイ寒天培地プレートの各々（ＢＢＬ  それぞれカタログ番号２２１１８０およびカタログ番号２２１２３９）にプレーティングする。各構築物について、一方のＳＤＡプレートおよび一方のＴＳＡ  ＩＩ  ５％ＳＢプレートを、３７℃で１０日間インキュベートし、他方のセットのプレートを室温で１０日間インキュベートする。１０日後、いずれのプレートでも細菌増殖および真菌増殖がいずれも視認できない場合、構築物は生殖不能性試験に合格する。
【０２１４】
遺伝子純度の確認：
Ｐ３ストックの純度を、ＰＣＲにより確認する。Ｃ３アームのいずれかの末端に位置するプライマー（Ｃ３−ＰＣＲ−ＦおよびＣ３−ＰＣＲ−Ｒ）を使用して、試料を増幅する。これらプライマーは、Ｃ３部位に野生型配列を含むＡＬＶＡＣウイルスでは４５３９ｂｐバンド、およびＣ３部位にラポンＨ（ｗｔ、ＢａｍＨ１制限酵素部位を有しない）を含む組換え体では５０６３ｂｐバンドをもたらす。第１のＰＣＲで約４．５Ｋｂバンドと約５Ｋｂバンドとを区別することが難しい場合、第２のＰＣＲが有用であり得る。第２のＰＣＲは、野生型Ｃ３プローブ（Ｃ３ＦおよびＣ３Ｒ）を製作するために使用されたプライマーを含む。これらプライマーは、Ｃ３部位の組換え中に欠失される領域に位置し、野生型ＡＬＶＡＣ配列では１００７ｂｐバンドをもたらし、組換え体ではバンドをもたらさない。この第２のＰＣＲにより、親ウイルスがＰ３試料に残留しないことが確認される。
配列分析：Ｐ３ストックのより詳細な配列分析を、ｖＣＰ３０４１のＣ３部位およびＣ５部位のＰＣＲ増幅および配列分析により実施する。Ｃ５組換えアームの直ぐ外部に位置するプライマー７９３１および７９３２を使用して、Ｃ５部位を増幅する。Ｃ３組換えアームの直ぐ外部に位置するプライマーＣ３−ＰＣＲ−ＦおよびＣ３−ＰＣＲ−Ｒを使用して、Ｃ３部位を増幅する。増幅した領域を配列決定して、プロモーターおよび遺伝子の完全性を確認する。
【０２１５】
プライマー
ＡＬＶＡＣ親プローブを増幅するためのプライマー（Ｃ３部位）：
Ｃ３Ｆ  CGTAGAGTTTTTTGTCTAGTTCTAT（配列番号５４）
Ｃ３Ｒ  GTTGTTTTATGCGGTAAAGAATAAT（配列番号５５）
Ｃ３部位を増幅するためのプライマー：
Ｃ３−ＰＣＲ−Ｆ  GCTAACACAAGTTAGAGGCGTATTAC（配列番号５８）
Ｃ３−ＰＣＲ−Ｒ  CATTAATTATGTGATGAGGCATCCAAC（配列番号５９）
Ｃ５部位を増幅するためのプライマー：
７９３１  GAATCTGTTAGTTAGTTACTTGGAT（配列番号７５）
７９３２  TGATTATAGCTATTATCACAGACTC（配列番号７６）
【０２１６】
（実施例７）
ワクチン接種実施例（ｖＣＰ３０２５−ゴードンＨ；配列番号４９を含む；図２）
ＳＤ０およびＳＤ２１にて、およそ１×１０7.7ＴＣＩＤ50／用量の力価を有する合計用量が１ｍＬのＡＬＶＡＣ−ゴードンＨベクターワクチンを、７匹のネコの群（群Ａ）に投与する。この用量は、選択された抗原（ＦａＰＶ−２血球凝集素）に対する免疫応答を促進するために十分な量のワクチンウイルスを送達することが予想される。陰性対照（群Ｃ）にはワクチン接種しない。動物は、ＳＤ０、ＳＤ２１、およびＳＤ３５にて血液を試料採取し、体液性免疫応答を、特定のＥＬＩＳＡ、免疫蛍光アッセイ（ＩＦＡ）、および／またはウイルス／血清中和試験（ＶＮＴ／ＳＮＴ）で測定する（実施例９）。ＳＤ４９にて、それぞれの群の動物に、下記に記載のように（実施例１０）負荷ウイルスを静脈内（ＩＶ）接種し、加えて、所与の感染パラメーターを測定する（ウイルス血症、排出、ウイルス分布）。
【０２１７】
（実施例８）
ワクチン接種実施例（ｖＣＰ３０２９−ゴードンＨ＋ゴードンＭ；配列番号５０＋５１を含む；図３＋４）
ＳＤ０およびＳＤ２１にて、およそ１×１０7.7ＴＣＩＤ50／用量の力価を有する合計用量が１ｍＬのＡＬＶＡＣ−ゴードンＨ＋Ｍベクターワクチンを、７匹のネコの群（群Ｂ）に投与する。この用量は、選択された抗原（ＦａＰＶ−２血球凝集素およびマトリックスタンパク質）に対する免疫応答を促進するために十分な量のワクチンウイルスを送達することが予想される。陰性対照（群Ｃ）にはワクチン接種しない。動物は、ＳＤ０、ＳＤ２１、およびＳＤ３５にて血液を試料採取し、体液性免疫応答を、特定のＥＬＩＳＡ、免疫蛍光アッセイ（ＩＦＡ）、および／またはウイルス／血清中和試験（ＶＮＴ／ＳＮＴ）で測定する（実施例９）。ＳＤ４２にて、それぞれの群の動物に、下記に記載のように（実施例１０）負荷ウイルスを静脈内（ＩＶ）接種し、所与の感染パラメーターを測定する（ウイルス血症、排出、ウイルス分布）。
【０２１８】
（実施例９）
ウイルス中和試験（ＶＮＴ）／血清中和試験（ＳＮＴ）
ＦＰａＶ−２などのネコパラミクソウイルスに対する中和抗体を検出するために、ウイルス／血清中和アッセイ（ＶＮＴ／ＳＮＴ）を実施する。したがって、ネコ血清試料を、５６℃で３０分間処理して、補体因子を不活化する。こうした熱不活化血清試料の５０μｌを、ＦＰａＶ−２（単離株「ゴードン」）などのネコパラミクソウイルスの１００ＴＣＩＤ５０蛍光形成単位（ＦＦＵ）を含む５０μｌのＤＭＥＭと混合し、その後３７℃で１時間インキュベートする。混合物を使用して、３７℃で２時間、９６ウェル細胞培養プレートのＬＬＣ−ＭＫ２細胞に感染させる。細胞を、３７℃、５％ＣＯ2、および９０％湿度で５日間インキュベートし、続いて下記に記載のように免疫蛍光染色を行う。試験血清試料の中和力価は、血清インキュベーションを行わなかったウイルス対照と比較してウイルス感染力が５０％低減された最も高い試験血清希釈度の逆数であると定義される。
【０２１９】
ＦＰａＶ−２感染などのネコパラミクソウイルス感染を検出するために、ＬＬＣ−ＭＫ２細胞を下記に記載のように感染させ、免疫蛍光技法を使用してネコパラミクソウイルス特異的抗体で染色する。この目的のため、付着細胞を、５日間の感染期間後にＰＢＳで洗浄し、続いて−２０℃で１０分間８０％アセトンで固定する。細胞を、ＰＢＳで２回洗浄し、３７℃で１時間ＰＢＳ中５％ＢＳＡでインキュベーションすることにより、非特異的結合をブロックする。この後で、ＰＢＳ中１％ＢＳＡ中１μｇ／ｍｌの終濃度の抗ネコパラミクソウイルス抗体（例えば、抗ＦＰａＶ−２ヌクレオカプシド、ポリクローナル、ウサギ）と共に３７℃で１時間インキュベーションするステップを行う。細胞を、ＰＢＳで３回洗浄し、続いてＰＢＳ中１％ＢＳＡで１：１０００最終稀釈した「ヤギ抗ウサギＩｇＧ（Ｈ＋Ｌ）二次抗体、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ（登録商標）４８８コンジュゲート」（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を適用する。３７℃で１時間のインキュベーション時間後、細胞をＰＢＳで２回洗浄し、蛍光顕微鏡を使用してＦＰａＶ−２の存在について細胞をスクリーニングする。
【０２２０】
臨床試料からウイルスを単離するため、ＬＬＣ−ＭＫ２およびＣＲＦＫ細胞を、５％二酸化炭素を含む雰囲気下３７℃および９０％湿度で、７５ｃｍ2細胞培養フラスコ中の５％ＦＢＳを有するＤＭＥＭ（ピルビン酸ナトリウムおよび非必須アミノ酸を有する）に播種する。７０〜８０％のコンフルエンスにて、細胞を、３７℃、５％ＣＯ2、および９０％湿度で一晩にわたって、１ミリリットルの尿および５ｍｌのＤＭＥＭ（ペニシリンおよびストレプトマイシンを有する）の混合物に感染させる。２４時間後、感染培地を、８ｍｌの培養培地（ＤＭＥＭ、ピルビン酸ナトリウム、非必須アミノ酸、５％ＦＢＳ、ペニシリン、およびストレプトマイシン）と置換し、指示条件でさらに６日間培養する。この感染に由来する細胞培養上清を、さらに３回継代する。その後、６００μｌの細胞培養上清を、ネコパラミクソウイルスの存在について試験する。
【０２２１】
（実施例１０）
負荷モデル
感染および疾患発現の初期段階を調査するための負荷モデル臨床研究を使用する。１×１０5ＴＣＩＤ50／ｍＬの負荷用量にできるだけ近い用量でＦＰａＶ−２「ゴードン株」による静脈内（ＩＶ）負荷を実施し、負荷後５６日間追跡する。ＣＫＤの臨床徴候は予想されないため、負荷モデル臨床研究の主な目的は、原始感染、腎機能に対する感染の影響の可能性、感染に対する免疫応答をモニターして、伝播の可能性を評価し、免疫組織化学法（ＩＨＣ）により腎臓およびおそらくは他の器官におけるウイルス定着を確認することである。
疾患の初期段階での予想される症状は、ウイルス血症と関連する（無気力、高熱、体重減少）。後期段階で予想される徴候は、慢性腎不全に関係する可能性がある（体重喪失、尿毒症、粘膜病変）。ＦＰａＶ−２「ゴードン株」のウイルスストック（力価１×１０5ＴＣＩＤ50／ｍｌを有する）を、初代ネコ末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）で、またはＬＬＣ−ＭＫ２細胞株のような他の細胞で調製する。ストックは、一般的なネコ病原体（それぞれ、ネコ汎白血球減少症ウイルス、ネコ免疫不全ウイルス、ネコ白血病ウイルス、およびネココロナウイルスを含む）の存在について陰性であることが試験されている。雑種ネコに、１ｍｌのウイルスストック（１×１０5ＴＣＩＤ50／ｍｌ）を静脈内（ＩＶ）接種する。
【０２２２】
実験計画および追跡：
下記では、ネコ群Ａ１、Ａ２、Ｂ１、Ｂ２、Ｃ１、およびＣ２は、剖検の異なるタイミングを表す：Ａ１およびＡ２はＤ１４、Ｂ１およびＢ２はＤ２８、Ｃ１およびＣ２はＤ５６。この細分化は、動物に対する過度のストレスを回避するために、すべてのネコの毎日の試料採取を回避することにより動機付けられる。
・Ｄ０〜Ｄ１４（週末を除く）では毎日ベースの、およびＤ１５〜Ｄ５６では週２回の臨床検査および直腸温
・Ｄ０〜Ｄ５６での週２回の体重測定
・ＰＣＲによるウイルス血症モニタリングのための血液試料採取
【表６】
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【０２２３】
・ＰＣＲによるウイルス血症モニタリングおよび脂肪尿のための尿試料採取
【表７】
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【０２２４】
・ＰＣＲによるウイルス血症モニタリングのためのＯｒｏ鼻腔スワブ
【表８】
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【０２２５】
・血液生化学および細胞数
【表９】
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【０２２６】
・血清学のための血清試料採取
【表１０】
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【０２２７】
・剖検および組織学
各動物の完全な剖検を実施して、腎臓、脾臓、肝臓、膀胱、および肺を試料採取する。組織学およびＰＣＲによるウイルス検出のために器官を試料採取する。
負荷モデル臨床研究により、本発明によるウイルスベクターに基づくワクチンベクターは、ネコに負荷するとネコパラミクソウイルスウイルス血症を予防ならびに／またはその強度および／もしくは持続期間を低減することができるという仮説を試験する。加えて、基礎をなす本発明のウイルスベクターでネコをワクチン接種することにより、例えば、ネコパラミクソウイルス血球凝集素抗原に対する抗体が誘導される。
【０２２８】
（実施例１１）
ネコ血清の血清学的検査
ウイルス中和試験（ＶＮＴ）（実施例９）を使用して、ネコ血清の血清学的検査を実施する。ネコを３つの群に分割した：Ａ）ネコパラミクソウイルス２型「ゴードン」株の血球凝集素（Ｈ）タンパク質を発現する組換えＡＬＶＡＣベクター（ｖＣＰ３０２５）によるワクチン接種；Ｂ）ネコパラミクソウイルス２型「ゴードン」株の血球凝集素（Ｈ）およびマトリックス（Ｍ）タンパク質を発現する組換えＡＬＶＡＣベクター（ｖＣＰ３０２９）によるワクチン接種；Ｃ）ネコにワクチン接種しない（負荷対照群）。
【０２２９】
０日目（第１のワクチン接種の当日）、２１日目（第１のワクチン接種の２１日後）、３５日目（第２のワクチン接種の１４日後）、および４９日目に、ネコから血清試料を採取する。
ＶＮＴ方法論を使用することにより、動物はすべて、０日目においてワクチン接種前にＶＮＴ陰性を示すことが明らかに検出される（力価＜１：１０）。さらに、ワクチン接種しなかったネコは、負荷前のすべての時点でＶＮＴ陰性のままであり、これは有効な動物研究の要件である。
【０２３０】
初回ワクチン接種の２１日後（Ｄ２１）では、群Ａの１匹のワクチンネコが陽性を示し、ＶＮＴ力価は１：２０であり、群Ｂの１匹のネコは力価が１：１０である。３５日目（Ｄ３５）（第２のワクチン接種の１４日後）では、ワクチン群Ａのすべてのネコ（６／６）が、有意な中和力価（群の力価中央値は１：１６０）を有し、群Ｂでは、６匹のネコのうちの５匹が、ネコパラミクソウイルス２型に対して有意な中和力価（群の力価中央値は１：１６０）を有する。最後に、４９日目（Ｄ４９）では、すべてのネコがＶＮＴ陽性であり（６／６）、群Ａの群ＶＮＴ力価はさらに増加した（群の力価中央値は１：６９３．３３）。群Ｂでは、すべてのネコが、ネコパラミクソウイルス２型に陽性であり（６／６）、群の力価中央値は１：４０３．３３である。
結論として、ネコパラミクソウイルス２型「ゴードン」株のＨまたはＨ＋Ｍタンパク質を発現する組換えＡＬＶＡＣベクターのいずれかをワクチン接種したネコはすべて、ワクチン接種に際して強力に反応し、血清転換する。また、負荷ウイルスに対するウイルス中和力価の有意な値が、Ｄ３５およびＤ４９で検出される。群Ａの力価中央値は、３５日目で１：１６０、および４９日目で１：６９３．３３である。群Ｂの力価中央値は、３５日目では１：１６０であるが、４９日目では１：４０３．３３である。こうした日数は、それぞれ、第２のワクチン接種の１４および２８日後に対応する。そのような強力なネコパラミクソウイルス２型中和力価は、ネコパラミクソウイルス２型に対する非常に強力なワクチン接種応答を示す。
【０２３１】
（実施例１２）
負荷に際するウイルス血症の予防または低減
ネコを３つの群に分割する：Ａ）ネコパラミクソウイルス２型「ゴードン」株の血球凝集素（Ｈ）タンパク質を発現する組換えＡＬＶＡＣベクター（ｖＣＰ３０２５）によるワクチン接種；Ｂ）ネコパラミクソウイルス２型「ゴードン」株の血球凝集素（Ｈ）およびマトリックス（Ｍ）タンパク質を発現する組換えＡＬＶＡＣベクター（ｖＣＰ３０２９）によるワクチン接種；Ｃ）ネコにワクチン接種しない（負荷対照群）。
負荷の当日（Ｄ４９）、ネコに、１×１０5,1ＴＣＩＤ５０／ｍｌの感染力価を有する１ｍｌのネコパラミクソウイルス２型「ゴードン」株を静脈内（ＩＶ）感染させる。ウイルス接種後の３日目（Ｄ５２）およびウイルス接種後の７日目（Ｄ５６）にて、ネコから血漿試料を採取する。ＲＮＡを血漿から抽出し、ネコパラミクソウイルス２型特異的リアルタイムｑＰＣＲを実施する。ｑＰＣＲの感度は、２．９ｌｏｇ１０ＲＮＡコピー数／ｍＬであり、それを計算のカットオフとして使用する。
群Ｃ−ワクチン接種しなかったネコ（負荷対照）：ウイルス接種後の３日目（Ｄ５２）では、ワクチン接種しなかった対照群の６匹のネコのうち５匹がウイルス血症になり、平均ＲＮＡコピー数は３．６７ｌｏｇｓ10／ｍｌであるが、７日目（Ｄ５６）では、ワクチン接種しなかったネコに由来する試料はすべて陽性であり、平均ネコパラミクソウイルス２型ＲＮＡコピー数は、５．９７ｌｏｇ10／ｍｌである。
群Ａ−ＡＬＶＡＣゴードンＨワクチン：ＡＬＶＡＣ−ゴードン−Ｈワクチンをワクチン接種したネコは、負荷後の３日目および７日目の両日にて完全に陰性のままである。
【０２３２】
群Ｂ−ＡＬＶＡＣゴードンＨ＋Ｍワクチン：ＡＬＶＡＣ−ゴードン−Ｈ＋Ｍワクチンをワクチン接種したネコの群では、負荷後の３日目（Ｄ５２）および７日目（Ｄ５６）にて、４匹のネコは両日共に陰性のままであり、２匹のネコは、陽性であるが、ネコパラミクソウイルス２型ＲＮＡコピー数は低減した（それぞれ、３．７２ｌｏｇ10／ｍｌおよび３．３３ｌｏｇ10／ｍｌ）。
結論として、ネコパラミクソウイルス２型のＨタンパク質を発現する組換えＡＬＶＡＣベクターをワクチン接種したネコはすべて、十分に防御されまままであり、ネコパラミクソウイルス２型負荷ウイルスの接種後に検出可能なウイルス血症を示さない。ネコパラミクソウイルス２型のＨおよびＭタンパク質を発現するＡＬＶＡＣベクターをワクチン接種したネコは、防御され、４匹のネコが完全に陰性のままであり、２匹のネコは、両日共にワクチン接種の結果としてネコパラミクソウイルス２型ＲＮＡコピー数の低減を示す。
【０２３３】
本明細書で開示および特許請求されている組成物および方法はすべて、本開示に照らして過度の実験作業を行わずに製作および実施することができる。本発明の組成物および方法は、特定の態様の点で記載されているが、当業者であれば、本明細書に記載の組成物および方法、ならびに方法のステップもしくは方法のステップの順序に対して、本発明の概念、趣旨、および範囲から逸脱せずに変異を適用することができることは明白であろう。より詳しくは、化学的かつ生理学的に関係するある作用剤を、本明細書に記載の作用剤の代わりに用いることができ、その場合も同じまたは類似の結果が達成されることになることは明白だろう。当業者に明白なそのような類似の代用物および改変はすべて、以下の特許請求の範囲により画定される本発明の趣旨、範囲、および概念内にあるとみなされる。
【０２３４】
参考文献
以下の参考文献は、それらが、例示的な手続きまたは本明細書に示されるものに補完的な他の詳細を提供する範囲で、参照により本明細書に具体的に組み込まれる。
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【図１Ａ−１】
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【図１Ａ−２】
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【図１Ａ−３】
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【図１Ｂ】
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【図２−１】
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【図２−２】
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【図３−１】
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【図３−２】
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【図４−１】
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【図４−２】
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【図５】
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【図６−１】
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【図６−２】
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【図６−３】
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【図７−１】
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【図７−２】
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【図７−３】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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