(57)【要約】式Ｉ：2021521172.tif 000195［式中、Ｒ’’は式ＩＩ：2021521172.tif 000196（ｎ及びｍのそれぞれが１、２、及び３から独立して選択される）の基である］ならびにその塩及び溶媒和物を含む化合物。
2021521172.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ：
【化１】
2021521172.tif 000152
［式中、Ｒ’’は式ＩＩ：
【化２】
2021521172.tif 000153
（ｎ及びｍのそれぞれが１、２、及び３から独立して選択され；
ＲOは、Ｈ、メチル、エチル、イソプロピル、及びベンジルからなる群より選択され；
ＱCはＮ及びＣＨから選択される）の基であり；
Ｙ及びＹ’はＯ、Ｓ、又はＮＨから選択され；
Ｃ２とＣ３との間に二重結合が存在するとき、Ｒ2は：
（ｉａ）ハロ、ニトロ、シアノ、エーテル、カルボキシ、エステル、Ｃ1-7アルキル、Ｃ3-7ヘテロシクリル、及びビス−オキシ−Ｃ1-3アルキレンを含む群より選択される１つ以上の置換基によって任意選択的に置換されているＣ5-10アリール基；
（ｉｂ）Ｃ1-5飽和脂肪族アルキル；
（ｉｃ）Ｃ3-6飽和シクロアルキル；
（ｉｄ）
【化３】
2021521172.tif 000154
（式中、Ｒ11、Ｒ12及びＲ13のそれぞれは、Ｈ、Ｃ1-3飽和アルキル、Ｃ2-3アルケニル、Ｃ2-3アルキニル、及びシクロプロピルから独立して選択され、Ｒ2基における炭素原子の合計数が多くて５である）；
（ｉｅ）
【化４】
2021521172.tif 000155
（式中、Ｒ15a及びＲ15bの一方がＨであり、他方が、ハロ、メチル、メトキシによって任意選択的に置換されているフェニル；ピリジル；及びチオフェニルから選択される）；及び
（ｉｆ）
【化５】
2021521172.tif 000156
（Ｒ14は以下：Ｈ；Ｃ1-3飽和アルキル；Ｃ2-3アルケニル；Ｃ2-3アルキニル；シクロプロピル；ハロ、メチル、メトキシによって任意選択的に置換されているフェニル；ピリジル；及びチオフェニルから選択される）；からなる群より選択され；
Ｃ２とＣ３との間に単結合が存在するとき、
Ｒ2は、Ｈ又は
【化６】
2021521172.tif 000157
（Ｒ16a及びＲ16bは、Ｈ、Ｆ、Ｃ1-4飽和アルキル、Ｃ2-3アルケニルから独立して選択され、このアルキル基及びアルケニル基は、Ｃ1-4アルキルアミド及びＣ1-4アルキルエステルから選択される基によって任意選択的に置換されているか；又はＲ16a及びＲ16bの一方がＨであるとき、他方はニトリル及びＣ1-4アルキルエステルから選択される）であり；
Ｃ２’とＣ３’との間に二重結合が存在するとき、Ｒ2’は：
（ｉｉａ）ハロ、ニトロ、シアノ、エーテル、カルボキシ、エステル、Ｃ1-7アルキル、Ｃ3-7ヘテロシクリル、及びビス−オキシ−Ｃ1-3アルキレンを含む群より選択される１つ以上の置換基によって任意選択的に置換されているＣ5-10アリール基；
（ｉｉｂ）Ｃ1-5飽和脂肪族アルキル；
（ｉｉｃ）Ｃ3-6飽和シクロアルキル；
（ｉｉｄ）
【化７】
2021521172.tif 000158
（式中、Ｒ21、Ｒ22、及びＲ23のそれぞれは、Ｈ、Ｃ1-3飽和アルキル、Ｃ2-3アルケニル、Ｃ2-3アルキニル、及びシクロプロピルから独立して選択され、前記Ｒ2’基における炭素原子の合計数が多くて５である）；
（ｉｉｅ）
【化８】
2021521172.tif 000159
（式中、Ｒ25a及びＲ25bの一方がＨであり、他方が、ハロ、メチル、メトキシによって任意選択的に置換されているフェニル；ピリジル；及びチオフェニルから選択される）；及び
（ｉｉｆ）
【化９】
2021521172.tif 000160
（Ｒ24は以下：Ｈ；Ｃ1-3飽和アルキル；Ｃ2-3アルケニル；Ｃ2-3アルキニル；シクロプロピル；ハロ、メチル、メトキシによって任意選択的に置換されているフェニル；ピリジル；及びチオフェニルから選択される）；からなる群より選択され；
Ｃ２’とＣ３’との間に単結合が存在するとき、
Ｒ2’は、Ｈ又は
【化１０】
2021521172.tif 000161
（Ｒ26a及びＲ26bは、Ｈ、Ｆ、Ｃ1-4飽和アルキル、Ｃ2-3アルケニルから独立して選択され、このアルキル基及びアルケニル基は、Ｃ1-4アルキルアミド及びＣ1-4アルキルエステルから選択される基によって任意選択的に置換されているか；又はＲ26a及びＲ26bの一方がＨであるとき、他方はニトリル及びＣ1-4アルキルエステルから選択される）であり；
Ｒ6及びＲ9は、Ｈ、Ｒ、ＯＨ、ＯＲ、ＳＨ、ＳＲ、ＮＨ2、ＮＨＲ、ＮＲＲ’、ニトロ、Ｍｅ3Ｓｎ、及びハロから独立して選択され；
ここでＲ及びＲ’は、任意選択的に置換されているＣ1-12アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基、及びＣ5-20アリール基から独立して選択され；
Ｒ7は、Ｈ、Ｒ、ＯＨ、ＯＲ、ＳＨ、ＳＲ、ＮＨ2、ＮＨＲ、ＮＨＲＲ’、ニトロ、Ｍｅ3Ｓｎ、及びハロから選択され；
Ｒ6’、Ｒ7’、Ｒ9’はそれぞれ、Ｒ6、Ｒ7及びＲ9と同じ基から選択され；
Ｒ11aは、ＯＨ、ＯＲA（ＲAはＣ1-4アルキルである）、及びＳＯzＭ（ｚは２又は３であり、Ｍは一価の薬学的に許容可能なカチオンである）から選択され；
（ａ）Ｒ30はＨであり、Ｒ31はＯＨ、ＯＲAであるか（ＲAはＣ1-4アルキルである）；
（ｂ）Ｒ30及びＲ31は、それらが結合している窒素原子と炭素原子との間に窒素−炭素二重結合を形成するか；あるいは
（ｃ）Ｒ30はＨであり、Ｒ31はＳＯzＭ（ｚは２又は３であり、Ｍは一価の薬学的に許容可能なカチオンであり、式中、Ｒ11a及びＲ31がＳＯzＭである場合に、Ｍは二価の薬学的に許容可能なカチオンを表す場合もある）であり、
ＲLは、
（ｉｉｉａ）：
【化１１】
2021521172.tif 000162
（式中、
Ｑは、
【化１２】
2021521172.tif 000163
（ＱXは、Ｑがアミノ酸残基、ジペプチド残基、又はトリペプチド残基であるようなものである）であり；
Ｘは、
【化１３】
2021521172.tif 000164
（ａ＝０〜５、ｂ＝０〜１６、ｃ＝０又は１、ｄ＝０〜５である）であり；
ＧLは、リガンド単位に連結されるリンカーである）；及び
（ｉｉｉｂ）：
【化１４】
2021521172.tif 000165
（ＲL1及びＲL2は、Ｈ及びメチルから独立して選択されるか、又はそれらが結合している炭素原子と一緒になって、シクロプロピレン基若しくはシクロブチレン基を形成し；
ｅは０又は１である）から選択される、細胞結合剤に連結するためのリンカーである］ならびにその塩及び溶媒和物を含む化合物。
【請求項２】
Ｙ及びＹ’がＯである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
ＲOがＨである、請求項１又は請求項２のいずれかに記載の化合物。
【請求項４】
ＲOがメチルである、請求項１又は請求項２のいずれかに記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ’’が式ＩＩａ：
【化１５】
2021521172.tif 000166
（ＲO1は、Ｈ及びメチルからなる群より選択される）のものである、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ6、Ｒ9、Ｒ6’、及びＲ9’がＨであり、Ｒ7及びＲ7’がメトキシである、請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ11aがＯＨである、請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ30及びＲ31は、それらが結合している窒素原子と炭素原子との間に窒素−炭素二重結合を形成する、請求項１〜７のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項９】
請求項１に記載の化合物であって、
（ｉ）式Ｉａ：
【化１６】
2021521172.tif 000167
（式中、Ｒ2aとＲ2a’は同じであり、以下：
（ａ）
【化１７】
2021521172.tif 000168
；
（ｂ）
【化１８】
2021521172.tif 000169
；
（ｃ）
【化１９】
2021521172.tif 000170
；
（ｄ）
【化２０】
2021521172.tif 000171
；
（ｅ）
【化２１】
2021521172.tif 000172
；
（ｆ）
【化２２】
2021521172.tif 000173
；
（ｇ）
【化２３】
2021521172.tif 000174
；及び
（ｈ）
【化２４】
2021521172.tif 000175
から選択される）；
（ｉｉ）式Ｉｂ：
【化２５】
2021521172.tif 000176
；
（ｉｉｉ）式Ｉｃ：
【化２６】
2021521172.tif 000177
；
（式中、Ｒ7aとＲ7a’は同じであり、メトキシ及びベンジルオキシから選択される）である、前記化合物。
【請求項１０】
ＲLが式ＩＩＩａのものであり、Ｑが
CO−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−NH、
CO−Ｖａｌ−Ａｌａ−NH、
CO−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−NH、
CO−Ａｌａ−Ｌｙｓ−NH、
CO−Ｖａｌ−Ｃｉｔ−NH、
CO−Ｐｈｅ−Ｃｉｔ−NH、
ＣO−Ｌｅｕ−Ｃｉｔ−NH、
CO−Ｉｌｅ−Ｃｉｔ−NH、
CO−Ｐｈｅ−Ａｒｇ−NH、及び
CO−Ｔｒｐ−Ｃｉｔ−NH
から選択されるジペプチド残基である、請求項１〜９のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１１】
ＲLが式ＩＩＩａのものであり、ａが０であり、ｃが１であり、ｄが２であり、ｂが０〜８である、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１２】
ＲLが式ＩＩＩａのものであり、ＧLが
【化２７】
2021521172.tif 000178
（ＡｒはＣ5-6アリーレン基、例えばフェニレンを表し、ＸはＣ1-4アルキルを表す）から選択される、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１３】
ＲLが式ＩＩＩｂのものである、請求項１〜９のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１４】
リガンド単位に連結された請求項１〜１３のいずれか１つによる式Ｉの化合物、又はその薬学的に許容可能な塩若しくは溶媒和物を含む複合体。
【請求項１５】
式ＩＶ：
Ｌ−（ＤL）p（ＩＶ）
［式中、Ｌはリガンド単位であり、ＤLは、式ＩＩＩ：
【化２８】
2021521172.tif 000179
（式中、Ｒ2、Ｒ6、Ｒ7、Ｒ9、Ｒ11a、Ｙ、Ｒ’’、Ｙ’、Ｒ2’、Ｒ6’、Ｒ7’、Ｒ9’、Ｒ30及びＲ31は、請求項１〜８のいずれか１項で定義された通りであり；
ＲLLは、
（ｉｉｉａ）：
【化２９】
2021521172.tif 000180
（Ｑ及びＸは請求項１、１０、及び１１で定義された通りであり、ＧLLはリガンド単位に連結されるリンカーである）；及び
（ｉｉｉｂ）：
【化３０】
2021521172.tif 000181
（ＲL1及びＲL2は、請求項１で定義された通りである）から選択される細胞結合剤に連結するためのリンカーである）のものであり；
ｐは１〜２０の整数である］又はその薬学的に許容可能な塩若しくは溶媒和物の複合体。
【請求項１６】
ＧLLが
【化３１】
2021521172.tif 000182
（ＡｒはＣ5-6アリーレン基、例えばフェニレンを表し、ＸはＣ1-4アルキルを表す）から選択される、請求項１５に記載の複合体。
【請求項１７】
ＤLが、
（ｉ）式ＩＩＩａ：
【化３２】
2021521172.tif 000183
（Ｒ2aとＲ2a’は同じであり、以下：
（ａ）
【化３３】
2021521172.tif 000184
；
（ｂ）
【化３４】
2021521172.tif 000185
；
（ｃ）
【化３５】
2021521172.tif 000186
；
（ｄ）
【化３６】
2021521172.tif 000187
；
（ｅ）
【化３７】
2021521172.tif 000188
；
（ｆ）
【化３８】
2021521172.tif 000189
；
（ｇ）
【化３９】
2021521172.tif 000190
；及び
（ｈ）
【化４０】
2021521172.tif 000191
から選択される）；
（ｉｉ）式ＩＩＩｂ：
【化４１】
2021521172.tif 000192
；
（ｉｉｉ）式ＩＩＩｃ：
【化４２】
2021521172.tif 000193
；
（Ｒ7aとＲ7a’は同じであり、メトキシ及びベンジルオキシから選択される）のものである、請求項１５に記載の複合体。
【請求項１８】
前記リガンド単位が抗体又はその活性断片である、請求項１４〜１７のいずれか１項に記載の複合体。
【請求項１９】
前記抗体又は抗体断片が、（１）〜（８８）：
（１）ＢＭＰＲ１Ｂ；
（２）Ｅ１６；
（３）ＳＴＥＡＰ１；
（４）０７７２Ｐ；
（５）ＭＰＦ；
（６）Ｎａｐｉ３ｂ；
（７）Ｓｅｍａ５ｂ；
（８）ＰＳＣＡｈｌｇ；
（９）ＥＴＢＲ；
（１０）ＭＳＧ７８３；
（１１）ＳＴＥＡＰ２；
（１２）ＴｒｐＭ４；
（１３）ＣＲＩＰＴＯ；
（１４）ＣＤ２１；
（１５）ＣＤ７９ｂ；
（１６）ＦｃＲＨ２；
（１７）ＨＥＲ２；
（１８）ＮＣＡ；
（１９）ＭＤＰ；
（２０）ＩＬ２０Ｒ−アルファ；
（２１）Ｂｒｅｖｉｃａｎ；
（２２）ＥｐｈＢ２Ｒ；
（２３）ＡＳＬＧ６５９；
（２４）ＰＳＣＡ；
（２５）ＧＥＤＡ；
（２６）ＢＡＦＦ−Ｒ；
（２７）ＣＤ２２；
（２８）ＣＤ７９ａ；
（２９）ＣＸＣＲ５；
（３０）ＨＬＡ−ＤＯＢ；
（３１）Ｐ２Ｘ５；
（３２）ＣＤ７２；
（３３）ＬＹ６４；
（３４）ＦｃＲＨ１；
（３５）ＩＲＴＡ２；
（３６）ＴＥＮＢ２；
（３７）ＰＳＭＡ−ＦＯＬＨ１；
（３８）ＳＳＴ；
（３８．１）ＳＳＴＲ２；
（３８．２）ＳＳＴＲ５；
（３８．３）ＳＳＴＲ１；
（３８．４）ＳＳＴＲ３；
（３８．５）ＳＳＴＲ４；
（３９）ＩＴＧＡＶ；
（４０）ＩＴＧＢ６；
（４１）ＣＥＡＣＡＭ５；
（４２）ＭＥＴ；
（４３）ＭＵＣ１；
（４４）ＣＡ９；
（４５）ＥＧＦＲｖＩＩＩ；
（４６）ＣＤ３３；
（４７）ＣＤ１９；
（４８）ＩＬ２ＲＡ；
（４９）ＡＸＬ；
（５０）ＣＤ３０−ＴＮＦＲＳＦ８；
（５１）ＢＣＭＡ−ＴＮＦＲＳＦ１７；
（５２）ＣＴＡｇｓ−ＣＴＡ；
（５３）ＣＤ１７４（ルイスＹ）−ＦＵＴ３；
（５４）ＣＬＥＣ１４Ａ；
（５５）ＧＲＰ７８−ＨＳＰＡ５；
（５６）ＣＤ７０；
（５７）幹細胞特異的抗原；
（５８）ＡＳＧ−５；
（５９）ＥＮＰＰ３；
（６０）ＰＲＲ４；
（６１）ＧＣＣ−ＧＵＣＹ２Ｃ；
（６２）Ｌｉｖ−１−ＳＬＣ３９Ａ６；
（６３）５Ｔ４；
（６４）ＣＤ５６−ＮＣＭＡ１；
（６５）ＣａｎＡｇ；
（６６）ＦＯＬＲ１；
（６７）ＧＰＮＭＢ；
（６８）ＴＩＭ−１−ＨＡＶＣＲ１；
（６９）ＲＧ−１／前立腺腫瘍標的ミンディン−ミンディン／ＲＧ−１；
（７０）Ｂ７−Ｈ４−ＶＴＣＮ１；
（７１）ＰＴＫ７；
（７２）ＣＤ３７；
（７３）ＣＤ１３８−ＳＤＣ１；
（７４）ＣＤ７４；
（７５）クローディン−ＣＬ；
（７６）ＥＧＦＲ；
（７７）Ｈｅｒ３；
（７８）ＲＯＮ−ＭＳＴ１Ｒ；
（７９）ＥＰＨＡ２；
（８０）ＣＤ２０−ＭＳ４Ａ１；
（８１）テネイシンＣ−ＴＮＣ；
（８２）ＦＡＰ；
（８３）ＤＫＫ−１；
（８４）ＣＤ５２；
（８５）ＣＳ１−ＳＬＡＭＦ７；
（８６）エンドグリン−ＥＮＧ；
（８７）アネキシンＡ１−ＡＮＸＡ１；
（８８）Ｖ−ＣＡＭ（ＣＤ１０６）−ＶＣＡＭ１
から選択される１つ以上の腫瘍関連抗原又は細胞表面受容体に結合する抗体である、請求項１８に記載の複合体。
【請求項２０】
複合体化合物の混合物中の平均ｐが約１〜約８である、請求項１５〜１９のいずれか１項に記載の複合体の混合物を含む組成物。
【請求項２１】
療法に使用するための、請求項１４〜１９のいずれか１項に記載の複合体。
【請求項２２】
請求項１４〜１９のいずれか１項に記載の複合体、及び薬学的に許容可能な希釈剤、担体又は賦形剤を含む医薬組成物。
【請求項２３】
対象の増殖性疾患の治療に使用するための、請求項１４〜１９のいずれか１項に記載の複合体又は請求項２２に記載の医薬組成物。
【請求項２４】
式ＲＥＬ：
【化４３】
2021521172.tif 000194
（式中、Ｒ2、Ｒ6、Ｒ7、Ｒ9、Ｙ、Ｒ’’、Ｙ’、Ｒ2’、Ｒ6’、Ｒ7’、Ｒ9’、Ｒ30及びＲ31は、請求項１〜８のいずれか１項で定義された通りである）ならびにその塩及び溶媒和物を含む化合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ピロロベンゾジアゼピン（ＰＢＤ）及び標的複合体へのその含有に関する。本発明のＰＢＤは、２つのＰＢＤ部分を連結する基が、カルボキシ基又はエステル基で置換されたベンゼン環又はピリジン環を含む二量体である。
【背景技術】
【０００２】
ピロロベンゾジアゼピン
ピロロベンゾジアゼピン（ＰＢＤ）の中には、ＤＮＡの特定配列を認識して結合する能力を有するものがあり、好適な配列はＰｕＧＰｕである。最初のＰＢＤ抗腫瘍抗生物質であるアントラマイシンは、１９６５に発見された（Ｌｅｉｍｇｒｕｂｅｒ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．ＡＭ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，８７，５７９３−５７９５（１９６５）、Ｌｅｉｍｇｒｕｂｅｒ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．ＡＭ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，８７，５７９１−５７９３（１９６５））。それ以来、天然に存在するＰＢＤがいくつか報告されており、多様な類似体を合成する１０を超える合成経路が開発されている（Ｔｈｕｒｓｔｏｎ，ｅｔ  ａｌ．，Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．１９９４，４３３−４６５（１９９４））。このファミリーに属するものとして、アベイマイシン（Ｈｏｃｈｌｏｗｓｋｉ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，４０，１４５−１４８（１９８７））、チカマイシン（Ｋｏｎｉｓｈｉ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，３７，２００−２０６（１９８４）），ＤＣ−８１（ＪａｐａｎｅｓｅＰａｔｅｎｔ  ５８−１８０４８７、Ｔｈｕｒｓｔｏｎ，ｅｔ  ａｌ．，Ｃｈｅｍ．Ｂｒｉｔ．，２６，７６７−７７２（１９９０）、Ｂｏｓｅ，ｅｔ  ａｌ．，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ，４８，７５１−７５８（１９９２））、マゼトラマイシン（Ｋｕｍｉｎｏｔｏ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，３３，６６５−６６７（１９８０））、ネオトラマイシンＡ及びＢ（Ｔａｋｅｕｃｈｉ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，２９，９３−９６（１９７６））、ポロトラマイシン（Ｔｓｕｎａｋａｗａ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，４１，１３６６−１３７３（１９８８））、プロトラカルシン（Ｓｈｉｍｉｚｕ，ｅｔ  ａｌ，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，２９，２４９２−２５０３（１９８２）、Ｌａｎｇｌｅｙ  ａｎｄ  Ｔｈｕｒｓｔｏｎ，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，５２，９１−９７（１９８７））、シバノマイシン（ＤＣ−１０２）（Ｈａｒａ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，４１，７０２−７０４（１９８８）、Ｉｔｏｈ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，４１，１２８１−１２８４（１９８８））、シビロマイシン（Ｌｅｂｅｒ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．ＡＭ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，１１０，２９９２−２９９３（１９８８））、ならびにトママイシン（Ａｒｉｍａ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，２５，４３７−４４４（１９７２））が挙げられる。ＰＢＤは、以下の一般式のものである。
【化１】
2021521172.tif 000003
【０００３】
ＰＢＤは、その芳香環Ａ及びピロロ環Ｃの両方で、置換基の個数、種類、及び位置が異なるとともに、環Ｃの飽和度も異なる。環Ｂでは、Ｎ１０−Ｃ１１の位置が、イミン（Ｎ＝Ｃ）、カルビノールアミン（ＮＨ−ＣＨ（ＯＨ））、又はカルビノ−ルアミンメチルエーテル（ＮＨ−ＣＨ（ＯＭｅ））のいずれかになっており、ここがＤＮＡアルキル化の原因となる求電子中心である。既知の天然産物は全て、キラルなＣ１１ａ位に（Ｓ）型配置を有し、このため、ＰＢＤを環Ｃから環Ａに向かって見たときに、これらは右巻きになっている。このことが、ＰＢＤに、Ｂ型ＤＮＡの副溝との螺旋性一致（ｉｓｏｈｅｌｉｃｉｔｙ）（イソらせん性）に適切な三次元形状を与え、その結果、結合部位でのぴったりとした一致をもたらす（Ｋｏｈｎ，Ｉｎ  Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ  ＩＩＩ．Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ｐｐ．３−１１（１９７５）、Ｈｕｒｌｅｙ  ａｎｄ  Ｎｅｅｄｈａｍ−ＶａｎＤｅｖａｎｔｅｒ，Ａｃｃ．Ｃｈｅｍ．Ｒｅｓ．，１９，２３０−２３７（１９８６））。副溝で付加体を形成するＰＢＤの能力により、ＰＢＤはＤＮＡプロセシングに干渉することができ、したがって、ＰＢＤを抗腫瘍剤として使用することが可能となる。
【０００４】
特に有利なピロロベンゾジアゼピン化合物は、Ｇｒｅｇｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．（Ｃｈｅｍ．Ｃｏｍｍｕｎ．１９９９，７９７−７９８）に化合物１として、Ｇｒｅｇｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．（Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００１，４４，１１６１−１１７４）に化合物４ａとして記載されている。ＳＧ２０００とも称するこの化合物を以下に示す：
【化２】
2021521172.tif 000004
。
【０００５】
ＷＯ２００７／０８５９３０は、抗体などの細胞結合剤に連結するためのリンカー基を有する二量体ＰＢＤ化合物を記載している。当該リンカーは、二量体の単量体ＰＢＤ単位を連結する架橋において存在する。
【０００６】
抗体などの細胞結合剤に連結するためのリンカー基を有する二量体ＰＢＤ化合物は、ＷＯ２０１１／１３０５９８に記載されている。これらの化合物におけるリンカーは、利用可能なＮ１０位のうちの１つに結合されており、リンカー基における酵素の作用によって概して開裂される。近年、弾頭：
【化３】
2021521172.tif 000005
が薬物リンカー及び抗体薬物複合体に使用されている。ＷＯ２０１４／０５７０７４は以下を開示する：
【化４】
2021521172.tif 000006
【０００７】
ＷＯ２０１５／０５２３２２は以下を開示する：
【化５】
2021521172.tif 000007
。
【０００８】
ＵＳ２０１４／１５５５９０、ＷＯ２０１４／１５９９８１、ＷＯ２０１４／１４０８６２、及びＷＯ２０１６／０３８３８３などのいくつかの開示に、ＷＯ２０１４／１５９９８１の化合物３３
【化６】
2021521172.tif 000008
などの、テザー内の芳香族基から連結されたＰＢＤ二量体、ならびにその合成過程の中間体が開示されている。
【発明の概要】
【０００９】
本発明は、２つのＰＢＤ部分を連結する基が、カルボキシ基又はエステル基で置換されたベンゼン環又はピリジン環を含む、薬物リンカーとしてのＰＢＤ二量体、及びその薬物リンカーで作製される複合体、ならびに放出薬を提供する。
【００１０】
カルボキシ基又はエステル基が存在すると、非置換の類似する薬物リンカー及び弾頭と比較して、薬物リンカー及び弾頭の活性が低下するはずである。しかしながら、エステル基を有する複合体は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ及びｉｎ  ｖｉｖｏで、類似する非置換複合体に匹敵するレベルの良好な活性を示す。理論に束縛されることを望まないが、カルボキシ基は、弾頭が複合体化されていない場合に細胞に進入する能力を制限する可能性があると考えられる。
【００１１】
本発明の第１の態様は、式Ｉ：を有する化合物、
【化７】
2021521172.tif 000009
ならびにその塩及び溶媒和物を含み、式中：
Ｒ’’は式ＩＩ：
【化８】
2021521172.tif 000010
（ｎ及びｍのそれぞれが１、２、及び３から独立して選択され；
ＲOは、Ｈ、メチル、エチル、イソプロピル、及びベンジルからなる群より選択され；
ＱCはＮ及びＣＨから選択される）の基であり；
Ｙ及びＹ’はＯ、Ｓ、又はＮＨから選択され；
Ｃ２とＣ３との間に二重結合が存在するとき、Ｒ2は：
（ｉａ）ハロ、ニトロ、シアノ、エーテル、カルボキシ、エステル、Ｃ1-7アルキル、Ｃ3-7ヘテロシクリル、及びビス−オキシ−Ｃ1-3アルキレンを含む群より選択される１つ以上の置換基によって任意選択的に置換されているＣ5-10アリール基；
（ｉｂ）Ｃ1-5飽和脂肪族アルキル；
（ｉｃ）Ｃ3-6飽和シクロアルキル；
（ｉｄ）
【化９】
2021521172.tif 000011
（式中、Ｒ11、Ｒ12、及びＲ13のそれぞれは、Ｈ、Ｃ1-3飽和アルキル、Ｃ2-3アルケニル、Ｃ2-3アルキニル、及びシクロプロピルから独立して選択され、Ｒ2基における炭素原子の合計数が多くて５である）；
（ｉｅ）
【化１０】
2021521172.tif 000012
（式中、Ｒ15a及びＲ15bの一方がＨであり、他方が、ハロ、メチル、メトキシによって任意選択的に置換されているフェニル；ピリジル；及びチオフェニルから選択される）；及び
（ｉｆ）
【化１１】
2021521172.tif 000013
（Ｒ14は、Ｈ；Ｃ1-3飽和アルキル；Ｃ2-3アルケニル；Ｃ2-3アルキニル；シクロプロピル；ハロ、メチル、メトキシによって任意選択的に置換されているフェニル；ピリジル；及びチオフェニルから選択される）からなる群より選択され；
Ｃ２とＣ３との間に単結合が存在するとき、
Ｒ2は、Ｈ又は
【化１２】
2021521172.tif 000014
（Ｒ16a及びＲ16bは、Ｈ、Ｆ、Ｃ1-4飽和アルキル、Ｃ2-3アルケニルから独立して選択され、当該アルキル基及びアルケニル基は、Ｃ1-4アルキルアミド及びＣ1-4アルキルエステルから選択される基によって任意選択的に置換されているか；又はＲ16a及びＲ16bの一方がＨであるとき、他方はニトリル及びＣ1-4アルキルエステルから選択される）であり；
Ｃ２’とＣ３’との間に二重結合が存在するとき、Ｒ2’は：
（ｉｉａ）ハロ、ニトロ、シアノ、エーテル、カルボキシ、エステル、Ｃ1-7アルキル、Ｃ3-7ヘテロシクリル、及びビス−オキシ−Ｃ1-3アルキレンを含む群より選択される１つ以上の置換基によって任意選択的に置換されているＣ5-10アリール基；
（ｉｉｂ）Ｃ1-5飽和脂肪族アルキル；
（ｉｉｃ）Ｃ3-6飽和シクロアルキル；
（ｉｉｄ）
【化１３】
2021521172.tif 000015
（式中、Ｒ21、Ｒ22及びＲ23のそれぞれは、Ｈ、Ｃ1-3飽和アルキル、Ｃ2-3アルケニル、Ｃ2-3アルキニル、及びシクロプロピルから独立して選択され、Ｒ2’基における炭素原子の合計数が多くて５である）；
（ｉｉｅ）
【化１４】
2021521172.tif 000016
（式中、Ｒ25a及びＲ25bの一方がＨであり、他方が、ハロ、メチル、メトキシによって任意選択的に置換されているフェニル；ピリジル；及びチオフェニルから選択される）；
（ｉｉｆ）
【化１５】
2021521172.tif 000017
（Ｒ24は、Ｈ；Ｃ1-3飽和アルキル；Ｃ2-3アルケニル；Ｃ2-3アルキニル；シクロプロピル；ハロ、メチル、メトキシによって任意選択的に置換されているフェニル；ピリジル；及びチオフェニルから選択される）からなる群より選択され；
Ｃ２’とＣ３’との間に単結合が存在するとき、
Ｒ2は、Ｈ又は
【化１６】
2021521172.tif 000018
（Ｒ26a及びＲ26bは、Ｈ、Ｆ、Ｃ1-4飽和アルキル、Ｃ2-3アルケニルから独立して選択され、当該アルキル基及びアルケニル基は、Ｃ1-4アルキルアミド及びＣ1-4アルキルエステルから選択される基によって任意選択的に置換されているか；又はＲ26a及びＲ26bの一方がＨであるとき、他方はニトリル及びＣ1-4アルキルエステルから選択される）であり；
Ｒ6及びＲ9は、Ｈ、Ｒ、ＯＨ、ＯＲ、ＳＨ、ＳＲ、ＮＨ2、ＮＨＲ、ＮＲＲ’、ニトロ、Ｍｅ3Ｓｎ、及びハロから独立して選択され；
ここでＲ及びＲ’は、任意選択的に置換されているＣ1-12アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基、及びＣ5-20アリール基から独立して選択され；
Ｒ7は、Ｈ、Ｒ、ＯＨ、ＯＲ、ＳＨ、ＳＲ、ＮＨ2、ＮＨＲ、ＮＨＲＲ’、ニトロ、Ｍｅ3Ｓｎ、及びハロから選択され；
Ｒ6’、Ｒ7’、Ｒ9’はそれぞれ、Ｒ6、Ｒ7及びＲ9と同じ基から選択され；
Ｒ11aは、ＯＨ、ＯＲA（ＲAはＣ1-4アルキルである）、及びＳＯzＭ（ｚは２又は３であり、Ｍは一価の薬学的に許容可能なカチオンである）から選択され；
（ａ）Ｒ30はＨであり、Ｒ31はＯＨ、ＯＲAであるか（ＲAはＣ1-4アルキルである）；
（ｂ）Ｒ30及びＲ31は、それらが結合している窒素原子と炭素原子との間に窒素−炭素二重結合を形成するか；あるいは
（ｃ）Ｒ30はＨであり、Ｒ31はＳＯzＭ（ｚは２又は３であり、Ｍは一価の薬学的に許容可能なカチオンであり、式中、Ｒ11a及びＲ31がＳＯzＭである場合に、Ｍは二価の薬学的に許容可能なカチオンを表す場合もある）であり、
ＲLは、
（ｉｉｉａ）：
【化１７】
2021521172.tif 000019
［式中、
Ｑは、
【化１８】
2021521172.tif 000020
（ＱXは、Ｑがアミノ酸残基、ジペプチド残基、又はトリペプチド残基であるようなものである）であり；
Ｘは、
【化１９】
2021521172.tif 000021
（ａ＝０〜５、ｂ＝０〜１６、ｃ＝０又は１、ｄ＝０〜５である）であり；
ＧLは、リガンド単位に連結されるリンカーである］；及び
（ｉｉｉｂ）：
【化２０】
2021521172.tif 000022
（ＲL1及びＲL2は、Ｈ及びメチルから独立して選択されるか、又はそれらが結合している炭素原子と一緒になって、シクロプロピレン基若しくはシクロブチレン基を形成し；ｅは０又は１である）から選択される、細胞結合剤に連結するためのリンカーである。
【００１２】
本発明の第２の態様は、本発明の第１の態様の化合物を作製する方法を提供し、これには、以下に述べる方法ステップの少なくとも１つが含まれる。
【００１３】
第３の態様では、本発明は、リガンド単位／標的化薬剤に連結されたＰＢＤの二量体を含む複合体に関し、当該ＰＢＤ二量体は、式Ｉの誘導体、又はその薬学的に許容可能な塩若しくは溶媒和物である。
【００１４】
いくつかの実施形態において、複合体は以下の式ＩＶ：
Ｌ−（ＤL）p  （ＩＶ）
を有するか、又は薬学的に許容可能な塩若しくは溶媒和物であって、式中、Ｌはリガンド単位（すなわち標的化薬剤）であり、ＤLは、式ＩＩＩ：
【化２１】
2021521172.tif 000023
［式中、Ｒ2、Ｒ6、Ｒ7、Ｒ9、Ｒ11a、Ｙ、Ｒ’’、Ｙ’、Ｒ2’、Ｒ6’、Ｒ7’、Ｒ9’、Ｒ30及びＲ31は、本発明の第１の態様で定義された通りであり；
ＲLLは、
（ｉｉｉａ）：
【化２２】
2021521172.tif 000024
（Ｑ及びＸは第１の態様で定義された通りであり、ＧLLはリガンド単位に連結されるリンカーである）；及び
（ｉｉｉｂ）：
【化２３】
2021521172.tif 000025
（ＲL1及びＲL2は、第１の態様で定義された通りである）から選択される細胞結合剤に連結するためのリンカーである］のＰＢＤ二量体である薬物リンカー単位であり；
ｐは１〜２０の整数である。
【００１５】
したがって、複合体は、リンカー単位によって少なくとも１つの薬物単位に共有結合されたリガンド単位を含む。以下でより詳細に説明するリガンド単位は、標的部分に結合する標的化薬剤である。リガンド単位は、例えば、細胞成分（細胞結合剤）又は対象となる他の標的分子に特異的に結合することができる。したがって、本発明はまた、例えば、様々ながん及び自己免疫疾患の治療のための方法を提供する。これらの方法は、リガンド単位が、標的分子に特異的に結合する標的化薬剤である複合体の使用を包含する。リガンド単位は、例えば、抗体、抗体の抗原結合断片などのタンパク質、ポリペプチド若しくはペプチド、又はＦｃ融合タンパク質などの他の結合剤であり得る。
【００１６】
薬物負荷量はｐで表され、リガンド単位（例えば、抗体）あたりの薬物分子の数である。薬物負荷量は、リガンド単位（例えば、Ａｂ又はｍＡｂ）あたり１〜２０の薬物単位（Ｄ）の範囲であり得る。組成物の場合、ｐは組成物中の複合体の平均薬物負荷量を表し、ｐは１〜２０の範囲である。
【００１７】
本発明の第４の態様は、増殖性疾患を治療するための医薬品の製造における、本発明の第３の態様の複合体の使用を提供する。第４の態様は、増殖性疾患の治療に使用するための本発明の第３の態様の複合体も提供する。
【００１８】
当業者であれば、候補化合物が任意の特定の細胞型の増殖病態を治療するかどうかを容易に決定することができる。例えば、特定の化合物によって提供される活性を評価するために利便に用いることができるアッセイを以下の実施例に記載する。
【００１９】
本発明のさらなる態様は、式ＲＥＬ：
【化２４】
2021521172.tif 000026
を有する化合物、ならびにその塩及び溶媒和物を提供し、その場合、置換基は全て上記で定義された通りである。
【００２０】
定義
薬学的に許容可能なカチオン
薬学的に許容可能な一価及び二価カチオンの例は、参照により本明細書に援用される、Ｂｅｒｇｅ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．，６６，１−１９（１９７７）に記載されている。
【００２１】
薬学的に許容可能なカチオンは、無機であっても有機であってもよい。
【００２２】
薬学的に許容可能な一価の無機カチオンの例として、Ｎａ+及びＫ+などのアルカリ金属イオンが挙げられるが、これらに限定されない。薬学的に許容可能な二価の無機カチオンの例として、Ｃａ2+及びＭｇ2+などのアルカリ土類カチオンが挙げられるが、これらに限定されない。薬学的に許容可能な有機カチオンの例として、アンモニウムイオン（すなわち、ＮＨ4+）及び置換アンモニウムイオン（例えば、ＮＨ3Ｒ+、ＮＨ2Ｒ2+、ＮＨＲ3+、ＮＲ4+）が挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの好適な置換アンモニウムイオンの例は、エチルアミン、ジエチルアミン、ジシクロヘキシルアミン、トリエチルアミン、ブチルアミン、エチレンジアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、ピペラジン、ベンジルアミン、フェニルベンジルアミン、コリン、メグルミン、及びトロメタミン、ならびにリジン及びアルギニンなどのアミノ酸に由来するものである。一般的な第四級アンモニウムイオンの例は、Ｎ（ＣＨ3）4+である。
【００２３】
置換基
「任意選択的に置換されている」という句は、本明細書中で使用される場合、非置換であっても置換されていてもよい親基に関する。
【００２４】
他に特定されていない限り、「置換されている」という用語は、本明細書中で使用される場合、１つ以上の置換基を持つ親基に関する。「置換基」という用語は、本明細書において従来の意味で使用されており、親基に、共有結合的に結合している、場合により縮合している化学的部分を指す。多種多様の置換基が周知されており、また、種々の親基の形成及びこれらへの導入方法も周知されている。
【００２５】
置換基の例を、より詳細に以下に記載する。
【００２６】
Ｃ1-12アルキル：「Ｃ1-12アルキル」という用語は、本明細書中で使用される場合、脂肪族であっても脂環式であってもよく、また、飽和であっても不飽和（例えば、部分不飽和、完全不飽和）であってもよい、１〜１２個の炭素原子を有する炭化水素化合物の１つの炭素原子から１つの水素原子を除去することによって得られる一価部分に関する。「Ｃ1-nアルキル」という用語は、本明細書中で使用される場合、脂肪族であっても脂環式であってもよく、また、飽和であっても不飽和（例えば、部分不飽和、完全不飽和）であってもよい、１〜ｎ個の炭素原子を有する炭化水素化合物の１つの炭素原子から１つの水素原子を除去することによって得られる一価部分に関する。ゆえに、「アルキル」という用語は、以下に考察されている、サブクラスのアルケニル、アルキニル、シクロアルキルなどを含む。
【００２７】
飽和アルキル基の例として、メチル（Ｃ1）、エチル（Ｃ2）、プロピル（Ｃ3）、ブチル（Ｃ4）、ペンチル（Ｃ5）、ヘキシル（Ｃ6）及びヘプチル（Ｃ7）が挙げられるが、これらに限定されない。
【００２８】
飽和直鎖アルキル基の例として、メチル（Ｃ1）、エチル（Ｃ2）、ｎ−プロピル（Ｃ3）、ｎ−ブチル（Ｃ4）、ｎ−ペンチル（アミル）（Ｃ5）、ｎ−ヘキシル（Ｃ6）及びｎ−ヘプチル（Ｃ7）が挙げられるが、これらに限定されない。
【００２９】
飽和分岐鎖アルキル基の例として、イソ−プロピル（Ｃ3）、イソ−ブチル（Ｃ4）、ｓｅｃ−ブチル（Ｃ4）、ｔｅｒｔ−ブチル（Ｃ4）、イソ−ペンチル（Ｃ5）、及びネオ−ペンチル（Ｃ5）が挙げられる。
【００３０】
Ｃ2-12アルケニル：「Ｃ2-12アルケニル」という用語は、本明細書中で使用される場合、１つ以上の炭素−炭素二重結合を有するアルキル基に関する。
【００３１】
不飽和アルケニル基の例として、エテニル（ビニル、−ＣＨ＝ＣＨ2）、１−プロペニル（−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3）、２−プロペニル（アリル、−ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ2）、イソプロペニル（１−メチルビニル、−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ2）、ブテニル（Ｃ4）、ペンテニル（Ｃ5）、及びヘキセニル（Ｃ6）が挙げられるが、これらに限定されない。
【００３２】
Ｃ2-12アルキニル：「Ｃ2-12アルキニル」という用語は、本明細書中で使用される場合、１つ以上の炭素−炭素三重結合を有するアルキル基に関する。
【００３３】
不飽和アルキニル基の例として、エチニル（−Ｃ≡ＣＨ）及び２−プロピニル（プロパルギル、−ＣＨ2−Ｃ≡ＣＨ）が挙げられるが、これらに限定されない。
【００３４】
Ｃ3-12シクロアルキル：「Ｃ3-12シクロアルキル」という用語は、本明細書中で使用される場合、環式炭化水素（炭素環式）化合物の１つの脂環式環原子から１つの水素原子を除去することによって得られる一価部分であって、３〜７個の環原子を含めた３〜７個の炭素原子を有する、上記部分であり、シクリル基でもあるアルキル基に関する。
【００３５】
シクロアルキル基の例として、以下に由来するものが挙げられるが、これらに限定されない：
飽和単環式炭化水素化合物：
シクロプロパン（Ｃ3）、シクロブタン（Ｃ4）、シクロペンタン（Ｃ5）、シクロヘキサン（Ｃ6）、シクロヘプタン（Ｃ7）、メチルシクロプロパン（Ｃ4）、ジメチルシクロプロパン（Ｃ5）、メチルシクロブタン（Ｃ5）、ジメチルシクロブタン（Ｃ6）、メチルシクロペンタン（Ｃ6）、ジメチルシクロペンタン（Ｃ7）及びメチルシクロヘキサン（Ｃ7）、
不飽和単環式炭化水素化合物：
シクロプロペン（Ｃ3）、シクロブテン（Ｃ4）、シクロペンテン（Ｃ5）、シクロヘキセン（Ｃ6）、メチルシクロプロペン（Ｃ4）、ジメチルシクロプロペン（Ｃ5）、メチルシクロブテン（Ｃ5）、ジメチルシクロブテン（Ｃ6）、メチルシクロペンテン（Ｃ6）、ジメチルシクロペンテン（Ｃ7）及びメチルシクロヘキセン（Ｃ7）、ならびに
飽和多環式炭化水素化合物：
ノルカラン（Ｃ7）、ノルピナン（Ｃ7）、ノルボルナン（Ｃ7）。
【００３６】
Ｃ3-20ヘテロシクリル：「Ｃ3-20ヘテロシクリル」という用語は、本明細書中で使用される場合、複素環式化合物の１つの環原子から１つの水素原子を除去することによって得られる一価部分であって、３〜２０個の環原子を有し、このうち１〜１０個が環ヘテロ原子である、上記部分に関する。好ましくは、各環が、３〜７個の環原子を有し、このうち１〜４個が環ヘテロ原子である。
【００３７】
この文脈において、接頭語（例えば、Ｃ3-20、Ｃ3-7、Ｃ5-6など）は、炭素原子又はヘテロ原子にかかわらず、環原子数又は環原子数の範囲を示す。例えば、「Ｃ5-6ヘテロシクリル」という用語は、本明細書中で使用される場合、５又は６個の環原子を有するヘテロシクリル基に関する。
【００３８】
単環式ヘテロシクリル基の例として、以下に由来するものが挙げられるが、これらに限定されない：
Ｎ1：アジリジン（Ｃ3）、アゼチジン（Ｃ4）、ピロリジン（テトラヒドロピロ−ル）（Ｃ5）、ピロリン（例えば、３−ピロリン、２，５−ジヒドロピロール）（Ｃ5）、２Ｈ−ピロール又は３Ｈ−ピロール（イソピロール、イソアゾール）（Ｃ5）、ピペリジン（Ｃ6）、ジヒドロピリジン（Ｃ6）、テトラヒドロピリジン（Ｃ6）、アゼピン（Ｃ7）、
Ｏ1：オキシラン（Ｃ3）、オキセタン（Ｃ4）、オキソラン（テトラヒドロフラン）（Ｃ5）、オキソール（ジヒドロフラン）（Ｃ5）、オキサン（テトラヒドロピラン）（Ｃ6）、ジヒドロピラン（Ｃ6）、ピラン（Ｃ6）、オキセピン（Ｃ7）、
Ｓ1：チイラン（Ｃ3）、チエタン（Ｃ4）、チオラン（テトラヒドロチオフェン）（Ｃ5）、チアン（テトラヒドロチオピラン）（Ｃ6）、チエパン（Ｃ7）、
Ｏ2：ジオキソラン（Ｃ5）、ジオキサン（Ｃ6）、及びジオキセパン（Ｃ7）、
Ｏ3：トリオキサン（Ｃ6）、
Ｎ2：イミダゾリジン（Ｃ5）、ピラゾリシン（ジアゾリジン）（Ｃ5）、イミダゾリン（Ｃ5）、ピラゾリン（ジヒドロピラゾール）（Ｃ5）、ピペラジン（Ｃ6）、
Ｎ1Ｏ1：テトラヒドロオキサゾール（Ｃ5）、ジヒドロオキサゾール（Ｃ5）、テトラヒドロイソオキサゾール（Ｃ5）、ジヒドロイソオキサゾール（Ｃ5）、モルホリン（Ｃ6）、テトラヒドロオキサジン（Ｃ6）、ジヒドロオキサジン（Ｃ6）、オキサジン（Ｃ6）、
Ｎ1Ｓ1：チアゾリン（Ｃ5）、チアゾリジン（Ｃ5）、チオモルホリン（Ｃ6）、
Ｎ2Ｏ1：オキサジアジン（Ｃ6）、
Ｏ1Ｓ1：オキサチオール（Ｃ5）及びオキサチアン（チオキサン）（Ｃ6）、ならびに、
Ｎ1Ｏ1Ｓ1：オキサチアジン（Ｃ6）。
【００３９】
置換されている単環式ヘテロシクリル基の例として、環式形態の単糖類、例えば、フラノース（Ｃ5）、例えば、アラビノフラノース、リキソフラノース、リボフラノース、及びキシロフラノース、ならびにピラノース（Ｃ6）、例えば、アロピラノース、アルトロピラノース、グルコピラノース、マンノピラノース、グロピラノース、イドピラノース、ガラクトピラノース及びタロピラノースに由来するものが挙げられる。
【００４０】
Ｃ5-20アリール：「Ｃ5-20アリール」という用語は、本明細書中で使用される場合、芳香族化合物の１つの芳香族環原子から１つの水素原子を除去することによって得られる一価部分であって、３〜２０個の環原子を有する上記部分に関する。「Ｃ5-7アリール」という用語は、本明細書中で使用される場合、芳香族化合物の１つの芳香族環原子から１つの水素原子を除去することによって得られる一価部分であって、５〜７個の環原子を有する当該部分に関し、「Ｃ5-10アリール」という用語は、本明細書中で使用される場合、芳香族化合物の１つの芳香族環原子から１つの水素原子を除去することによって得られる一価部分であって、５〜１０個の環原子を有する上記部分に関する。好ましくは、各環は、５〜７個の環原子を有する。
【００４１】
この文脈において、接頭語（例えば、Ｃ3-20、Ｃ5-7、Ｃ5-6、Ｃ5-10など）は、炭素原子又はヘテロ原子にかかわらず、環原子数又は環原子数の範囲を示す。例えば、「Ｃ5-6アリール」という用語は、本明細書中で使用される場合、５又は６個の環原子を有するアリール基に関する。
【００４２】
上記環原子は、「カルボアリール基」におけるように全て炭素原子であってよい。
【００４３】
カルボアリール基の例として、ベンゼン（すなわちフェニル）（Ｃ6）、ナフタレン（Ｃ10）、アズレン（Ｃ10）、アントラセン（Ｃ14）、フェナントレン（Ｃ14）、ナフタセン（Ｃ18）、及びピレン（Ｃ16）に由来するものが挙げられるが、これらに限定されない。
【００４４】
縮合環を含み、その少なくとも１つが芳香族環であるアリール基の例として、インダン（例えば、２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン）（Ｃ9）、インデン（Ｃ9）、イソインデン（Ｃ9）、テトラリン（１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン）（Ｃ10）、アセナフテン（Ｃ12）、フルオレン（Ｃ13）、フェナレン（Ｃ13）、アセフェナントレン（Ｃ15）、及びアセアントレン（Ｃ16）に由来する基が挙げられるが、これらに限定されない。
【００４５】
代替的には、上記環原子は、「ヘテロアリール基」におけるように１つ以上のヘテロ原子を含んでいてよい。単環式ヘテロアリール基の例として、以下に由来するものが挙げられるが、これらに限定されない：
Ｎ1：ピロ−ル（アゾール）（Ｃ5）、ピリジン（アジン）（Ｃ6）、
Ｏ1：フラン（オキソール）（Ｃ5）、
Ｓ1：チオフェン（チオール）（Ｃ5）、
Ｎ1Ｏ1：オキサゾール（Ｃ5）、イソオキサゾール（Ｃ5）、イソキサジン（Ｃ6）、
Ｎ2Ｏ1：オキサジアゾール（フラザン）（Ｃ5）、
Ｎ3Ｏ1：オキサトリアゾール（Ｃ5）、
Ｎ1Ｓ1：チアゾール（Ｃ5）、イソチアゾール（Ｃ5）、
Ｎ2：イミダゾール（１，３−ジアゾール）（Ｃ5）、ピラゾール（１，２−ジアゾール）（Ｃ5）、ピリダジン（１，２−ジアジン）（Ｃ6）、ピリミジン（１，３−ジアジン）（Ｃ6）（例えば、シトシン、チミン、ウラシル）、ピラジン（１，４−ジアジン）（Ｃ6）、
Ｎ3：トリアゾール（Ｃ5）、トリアジン（Ｃ6）、及び、
Ｎ4：テトラゾール（Ｃ5）。
【００４６】
縮合環を含むヘテロアリールの例として：
ベンゾフラン（Ｏ1）、イソベンゾフラン（Ｏ1）、インドール（Ｎ1）、イソインドール（Ｎ1）、インドリジン（Ｎ1）、インドリン（Ｎ1）、イソインドリン（Ｎ1）、プリン（Ｎ4）（例えば、アデニン、グアニン）、ベンズイミダゾール（Ｎ2）、インダゾール（Ｎ2）、ベンズオキサゾール（Ｎ1Ｏ1）、ベンズイソオキサゾール（Ｎ1Ｏ1）、ベンゾジオキソール（Ｏ2）、ベンゾフラザン（Ｎ2Ｏ1）、ベンゾトリアゾール（Ｎ3）、ベンゾチオフラン（Ｓ1）、ベンゾチアゾール（Ｎ1Ｓ1）、ベンゾチアジアゾール（Ｎ2Ｓ）に由来する（２つの縮合環を含む）Ｃ9、
クロメン（Ｏ1）、イソクロメン（Ｏ1）、クロマン（Ｏ1）、イソクロマン（Ｏ1）、ベンゾジオキサン（Ｏ2）、キノリン（Ｎ1）、イソキノリン（Ｎ1）、キノリジン（Ｎ1）、ベンゾキサジン（Ｎ1Ｏ1）、ベンゾジアジン（Ｎ2）、ピリドピリジン（Ｎ2）、キノキサリン（Ｎ2）、キナゾリン（Ｎ2）、シンノリン（Ｎ2）、フタラジン（Ｎ2）、ナフチリジン（Ｎ2）、プテリジン（Ｎ4）に由来する（２つの縮合環を含む）Ｃ10、
ベンゾジアゼピン（Ｎ2）に由来する（２つの縮合環を含む）Ｃ11、
カルバゾール（Ｎ1）、ジベンゾフラン（Ｏ1）、ジベンゾチオフェン（Ｓ1）、カルボリン（Ｎ2）、ペリミジン（Ｎ2）、ピリドインドール（Ｎ2）に由来する（３つの縮合環を含む）Ｃ13、ならびに、
アクリジン（Ｎ1）、キサンテン（Ｏ1）、チオキサンテン（Ｓ1）、オキサントレン（Ｏ2）、フェノキサチイン（Ｏ1Ｓ1）、フェナジン（Ｎ2）、フェノキサジン（Ｎ1Ｏ1）、フェノチアジン（Ｎ1Ｓ1）、チアントレン（Ｓ2）、フェナントリジン（Ｎ1）、フェナントロリン（Ｎ2）、フェナジン（Ｎ2）に由来する（３つの縮合環を含む）Ｃ14
が挙げられるが、これらに限定されない。
【００４７】
単独であるか、又は、別の置換基の一部であるかにかかわらず、上記基は、それ自体が、それ自体及び以下に列挙するさらなる置換基から選択される１つ以上の基によって任意選択的に置換されていてよい。
【００４８】
ハロ：−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、及び−Ｉ。
【００４９】
ヒドロキシ：−ＯＨ。
【００５０】
エーテル：−ＯＲ、ここで、Ｒは、エーテル置換基、例えば、Ｃ1-7アルキル基（Ｃ1-7アルコキシ基とも称される、以下に考察されている）、Ｃ3-20ヘテロシクリル基（Ｃ3-20ヘテロシクリルオキシ基とも称される）、又はＣ5-20アリール基（Ｃ5-20アリールオキシ基とも称される）、好ましくはＣ1-7アルキル基である。
【００５１】
アルコキシ：−ＯＲ、ここで、Ｒは、アルキル基、例えば、Ｃ1-7アルキル基である。Ｃ1-7アルコキシ基の例として、−ＯＭｅ（メトキシ）、−ＯＥｔ（エトキシ）、−Ｏ（ｎＰｒ）（ｎ−プロポキシ）、−Ｏ（ｉＰｒ）（イソプロポキシ）、−Ｏ（ｎＢｕ）（ｎ−ブトキシ）、−Ｏ（ｓＢｕ）（ｓｅｃ−ブトキシ）、−Ｏ（ｉＢｕ）（イソブトキシ）、及び−Ｏ（ｔＢｕ）（ｔｅｒｔ−ブトキシ）が挙げられるが、これらに限定されない。
【００５２】
アセタール：−ＣＨ（ＯＲ1）（ＯＲ2）、ここで、Ｒ1及びＲ2は、独立して、アセタール置換基、例えば、Ｃ1-7アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基、若しくはＣ5-20アリール基、好ましくはＣ1-7アルキル基であり、又は、「環式」アセタール基の場合、Ｒ1及びＲ2は、これらが結合している２つの酸素原子、及びこれらが結合している炭素原子と一緒になって、４〜８個の環原子を有する複素環式環を形成している。アセタール基の例として、−ＣＨ（ＯＭｅ）2、−ＣＨ（ＯＥｔ）2、及び−ＣＨ（ＯＭｅ）（ＯＥｔ）が挙げられるが、これらに限定されない。
【００５３】
ヘミアセタール：−ＣＨ（ＯＨ）（ＯＲ1）、ここで、Ｒ1は、ヘミアセタール置換基、例えば、Ｃ1-7アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基、又はＣ5-20アリール基、好ましくはＣ1-7アルキル基である。ヘミアセタール基の例として、−ＣＨ（ＯＨ）（ＯＭｅ）及び−ＣＨ（ＯＨ）（ＯＥｔ）が挙げられるが、これらに限定されない。
【００５４】
ケタール：−ＣＲ（ＯＲ1）（ＯＲ2）、ここで、Ｒ1及びＲ2は、アセタールについて定義されている通りであり、Ｒは、水素以外のケタール置換基、例えば、Ｃ1-7アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基、又はＣ5-20アリール基、好ましくはＣ1-7アルキル基である。ケタール基の例として、−Ｃ（Ｍｅ）（ＯＭｅ）2、−Ｃ（Ｍｅ）（ＯＥｔ）2、−Ｃ（Ｍｅ）（ＯＭｅ）（ＯＥｔ）、−Ｃ（Ｅｔ）（ＯＭｅ）2、−Ｃ（Ｅｔ）（ＯＥｔ）2、及び−Ｃ（Ｅｔ）（ＯＭｅ）（ＯＥｔ）が挙げられるが、これらに限定されない。
【００５５】
ヘミケタール：−ＣＲ（ＯＨ）（ＯＲ1）、ここで、Ｒ1は、ヘミアセタールについて定義されている通りであり、Ｒは、水素以外のヘミケタール置換基、例えば、Ｃ1-7アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基、又はＣ5-20アリール基、好ましくはＣ1-7アルキル基である。ヘミアセタール基の例として、−Ｃ（Ｍｅ）（ＯＨ）（ＯＭｅ）、−Ｃ（Ｅｔ）（ＯＨ）（ＯＭｅ）、−Ｃ（Ｍｅ）（ＯＨ）（ＯＥｔ）、及び−Ｃ（Ｅｔ）（ＯＨ）（ＯＥｔ）が挙げられるが、これらに限定されない。
【００５６】
オキソ（ケト、−オン）：＝Ｏ。
【００５７】
チオン（チオケトン）：＝Ｓ。
【００５８】
イミノ（イミン）：＝ＮＲ、ここで、Ｒは、イミノ置換基、例えば、水素、Ｃ1-7アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基、又はＣ5-20アリール基、好ましくは水素又はＣ1-7アルキル基である。エステル基の例として、＝ＮＨ、＝ＮＭｅ、＝ＮＥｔ、及び＝ＮＰｈが挙げられるが、これらに限定されない。
【００５９】
ホルミル（カルボアルデヒド、カルボキシアルデヒド）：−Ｃ（＝Ｏ）Ｈ。
【００６０】
アシル（ケト）：−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ、ここで、Ｒは、アシル置換基、例えば、Ｃ17アルキル基（Ｃ1-7アルキルアシル若しくはＣ1-7アルカノイルとも称される）、Ｃ3-20ヘテロシクリル基（Ｃ3-20ヘテロシクリルアシルとも称される）、又はＣ5-20アリール基（Ｃ5-20アリールアシルとも称される）、好ましくはＣ1-7アルキル基である。アシル基の例として、−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ3（アセチル）、−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ2ＣＨ3（プロピオニル）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｃ（ＣＨ3）3（ｔ−ブチリル）、及び−Ｃ（＝Ｏ）Ｐｈ（ベンゾイル、フェノン）が挙げられるが、これらに限定されない。
【００６１】
カルボキシ（カルボン酸）：−Ｃ（＝Ｏ）ＯＨ。
【００６２】
チオカルボキシ（チオカルボン酸）：−Ｃ（＝Ｓ）ＳＨ。
【００６３】
チオロカルボキシ（チオロカルボン酸）：−Ｃ（＝Ｏ）ＳＨ。
【００６４】
チオノカルボキシ（チオノカルボン酸）：−Ｃ（＝Ｓ）ＯＨ。
【００６５】
イミド酸：−Ｃ（＝ＮＨ）ＯＨ。
【００６６】
ヒドロキサム酸：−Ｃ（＝ＮＯＨ）ＯＨ。
【００６７】
エステル（カルボキシラート、カルボン酸エステル、オキシカルボニル）：−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ、ここで、Ｒは、エステル置換基、例えば、Ｃ1-7アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基、又はＣ5-20アリール基、好ましくはＣ1-7アルキル基である。エステル基の例として、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＣＨ3、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＣＨ2ＣＨ3、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＣ（ＣＨ3）3、及び−Ｃ（＝Ｏ）ＯＰｈが挙げられるが、これらに限定されない。
【００６８】
アシルオキシ（逆エステル）：−ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ、ここで、Ｒは、アシルオキシ置換基、例えば、Ｃ1-7アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基、又はＣ5-20アリール基、好ましくはＣ1-7アルキル基である。アシルオキシ基の例として、−ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ3（アセトキシ）、−ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ2ＣＨ3、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｃ（ＣＨ3）3、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｐｈ、及び−ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ2Ｐｈが挙げられるが、これらに限定されない。
【００６９】
オキシカルボイルオキシ：−ＯＣ（＝Ｏ）ＯＲ、ここで、Ｒは、エステル置換基、例えば、Ｃ1-7アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基、又はＣ5-20アリール基、好ましくはＣ1-7アルキル基である。エステル基の例として、−ＯＣ（＝Ｏ）ＯＣＨ3、−ＯＣ（＝Ｏ）ＯＣＨ2ＣＨ3、−ＯＣ（＝Ｏ）ＯＣ（ＣＨ3）3、及び−ＯＣ（＝Ｏ）ＯＰｈが挙げられるが、これらに限定されない。
【００７０】
アミノ：−ＮＲ1Ｒ2、ここで、Ｒ1及びＲ2は、独立して、アミノ置換基、例えば、水素、Ｃ1-7アルキル基（Ｃ1-7アルキルアミノ若しくはジ−Ｃ1-7アルキルアミノとも称される）、Ｃ3-20ヘテロシクリル基、又はＣ5-20アリール基、好ましくはＨ又はＣ1-7アルキル基であり、あるいは、「環式」アミノ基の場合、Ｒ1及びＲ2は、これらが結合している窒素原子と一緒になって、４〜８個の環原子を有する複素環式環を形成している。アミノ基は、第一級（−ＮＨ2）、第二級（−ＮＨＲ1）、又は第三級（−ＮＨＲ1Ｒ2）であってよく、カチオン形態では、第四級（−+ＮＲ1Ｒ2Ｒ3）であってよい。アミノ基の例として、−ＮＨ2、−ＮＨＣＨ3、−ＮＨＣ（ＣＨ3）2、−Ｎ（ＣＨ3）2、−Ｎ（ＣＨ2ＣＨ3）2、及び−ＮＨＰｈが挙げられるが、これらに限定されない。環式アミノ基の例として、アジリジノ、アゼチジノ、ピロリジノ、ピペリジノ、ピペラジノ、モルホリノ、及びチオモルホリノが挙げられるが、これらに限定されない。
【００７１】
アミド（カルバモイル、カルバミル、アミノカルボニル、カルボキサミド）：−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ1Ｒ2、ここで、Ｒ1及びＲ2は、独立して、アミノ基について定義されているアミノ置換基である。アミド基の例として、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ2、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＣＨ3、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ3）2、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＣＨ2ＣＨ3、及び−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ2ＣＨ3）2、ならびに、Ｒ1及びＲ2が、これらが結合している窒素原子と一緒になって、例えば、ピペリジノカルボニル、モルホリノカルボニル、チオモルホリノカルボニル、及びピペラジノカルボニルにおけるように複素環式構造を形成しているアミド基が挙げられるが、これらに限定されない。
【００７２】
チオアミド（チオカルバミル）：−Ｃ（＝Ｓ）ＮＲ1Ｒ2、ここで、Ｒ1及びＲ2は、独立して、アミノ基について定義されているアミノ置換基である。アミド基の例として、−Ｃ（＝Ｓ）ＮＨ2、−Ｃ（＝Ｓ）ＮＨＣＨ3、−Ｃ（＝Ｓ）Ｎ（ＣＨ3）2、及び−Ｃ（＝Ｓ）ＮＨＣＨ2ＣＨ3が挙げられるが、これらに限定されない。
【００７３】
アシルアミド（アシルアミノ）：−ＮＲ1Ｃ（＝Ｏ）Ｒ2、ここで、Ｒ1は、アミド置換基、例えば、水素、Ｃ1-7アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基、又はＣ5-20アリール基、好ましくは水素又はＣ1-7アルキル基であり、Ｒ2は、アシル置換基、例えば、Ｃ1-7アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基、又はＣ5-20アリール基、好ましくは水素又はＣ1-7アルキル基である。アシルアミド基の例として、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ3、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ2ＣＨ3、及び−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｐｈが挙げられるが、これらに限定されない。Ｒ1及びＲ2は、例えば、スクシンイミジル、マレイミジル、及びフタルイミジル：
【化２５】
2021521172.tif 000027
におけるように、一緒になって環式構造を形成していてよい。
【００７４】
アミノカルボニルオキシ：−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＲ1Ｒ2、ここで、Ｒ1及びＲ2は、独立して、アミノ基について定義されているアミノ置換基である。アミノカルボニルオキシ基の例として、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ2、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨＭｅ、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＭｅ2、及び−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＥｔ2が挙げられるが、これらに限定されない。
【００７５】
ウレイド：−Ｎ（Ｒ1）ＣＯＮＲ2Ｒ3、ここで、Ｒ2及びＲ3は、独立して、アミノ基について定義されているアミノ置換基であり、Ｒ1は、ウレイド置換基、例えば、水素、Ｃ1-7アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基、又はＣ5-20アリール基、好ましくは水素又はＣ1-7アルキル基である。ウレイド基の例として、−ＮＨＣＯＮＨ2、−ＮＨＣＯＮＨＭｅ、−ＮＨＣＯＮＨＥｔ、−ＮＨＣＯＮＭｅ2、−ＮＨＣＯＮＥｔ2、−ＮＭｅＣＯＮＨ2、−ＮＭｅＣＯＮＨＭｅ、−ＮＭｅＣＯＮＨＥｔ、−ＮＭｅＣＯＮＭｅ2、及び−ＮＭｅＣＯＮＥｔ2が挙げられるが、これらに限定されない。
【００７６】
グアニジノ：−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ2。
【００７７】
テトラゾリル：４個の窒素原子及び１個の炭素原子を有する５員の芳香族環：
【化２６】
2021521172.tif 000028
【００７８】
イミノ：＝ＮＲ、ここで、Ｒは、イミノ置換基、例えば、例えば、水素、Ｃ1-7アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基、又はＣ5-20アリール基、好ましくはＨ又はＣ1-7アルキル基である。イミノ基の例として、＝ＮＨ、＝ＮＭｅ、及び＝ＮＥｔが挙げられるが、これらに限定されない。
【００７９】
アミジン（アミジノ）：−Ｃ（＝ＮＲ）ＮＲ2、ここで、各Ｒは、アミジン置換基、例えば、水素、Ｃ1-7アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基、又はＣ5-20アリール基、好ましくはＨ又はＣ1-7アルキル基である。アミジン基の例として、−Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ2、−Ｃ（＝ＮＨ）ＮＭｅ2、及び−Ｃ（＝ＮＭｅ）ＮＭｅ2が挙げられるが、これらに限定されない。
【００８０】
ニトロ：−ＮＯ2。
【００８１】
ニトロソ：−ＮＯ。
【００８２】
アジド：−Ｎ3。
【００８３】
シアノ（ニトリル、カルボニトリル）：−ＣＮ。
【００８４】
イソシアノ：−ＮＣ。
【００８５】
シアナト：−ＯＣＮ。
【００８６】
イソシアナト：−ＮＣＯ。
【００８７】
チオシアノ（チオシアナト）：−ＳＣＮ。
【００８８】
イソチオシアノ（イソチオシアナト）：−ＮＣＳ。
【００８９】
スルフヒドリル（チオール、メルカプト）：−ＳＨ。
【００９０】
チオエーテル（スルフィド）：−ＳＲ、ここで、Ｒは、チオエーテル置換基、例えば、Ｃ1-7アルキル基（Ｃ1-7アルキルチオ基とも称される）、Ｃ3-20ヘテロシクリル基、又はＣ5-20アリール基、好ましくはＣ1-7アルキル基である。Ｃ1-7アルキルチオ基の例として、−ＳＣＨ3及び−ＳＣＨ2ＣＨ3が挙げられるが、これらに限定されない。
【００９１】
ジスルフィド：−ＳＳ−Ｒ、ここで、Ｒは、ジスルフィド置換基、例えば、Ｃ1-7アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基、又はＣ5-20アリール基、好ましくはＣ1-7アルキル基（本明細書においてＣ1-7アルキルジスルフィドとも称される）である。Ｃ1-7アルキルジスルフィド基の例として、−ＳＳＣＨ3及び−ＳＳＣＨ2ＣＨ3が挙げられるが、これらに限定されない。
【００９２】
スルフィン（スルフィニル、スルホキシド）：−Ｓ（＝Ｏ）Ｒ、ここで、Ｒは、スルフィン置換基、例えば、Ｃ1-7アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基、又はＣ5-20アリール基、好ましくはＣ1-7アルキル基である。スルフィン基の例として、−Ｓ（＝Ｏ）ＣＨ3及び−Ｓ（＝Ｏ）ＣＨ2ＣＨ3が挙げられるが、これらに限定されない。
【００９３】
スルホン（スルホニル）：−Ｓ（＝Ｏ）2Ｒ、ここで、Ｒは、スルホン置換基、例えば、Ｃ1-7アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基、又はＣ5-20アリール基、好ましくは、例えば、フッ素化若しくは過フッ素化Ｃ1-7アルキル基を含めたＣ1-7アルキル基である。スルホン基の例として、−Ｓ（＝Ｏ）2ＣＨ3（メタンスルホニル、メシル）、−Ｓ（＝Ｏ）2ＣＦ3（トリフリル）、−Ｓ（＝Ｏ）2ＣＨ2ＣＨ3（エシル）、−Ｓ（＝Ｏ）2Ｃ4Ｆ9（ノナフリル）、−Ｓ（＝Ｏ）2ＣＨ2ＣＦ3（トレシル）、−Ｓ（＝Ｏ）2ＣＨ2ＣＨ2ＮＨ2（タウリル）、−Ｓ（＝Ｏ）2Ｐｈ（フェニルスルホニル、ベシル）、４−メチルフェニルスルホニル（トシル）、４−クロロフェニルスルホニル（クロシル）、４−ブロモフェニルスルホニル（ブロシル）、４−ニトロフェニル（ノシル）、２−ナフタレンスルホナート（ナプシル）、及び５−ジメチルアミノ−ナフタレン−１−イルスルホナート（ダンシル）が挙げられるが、これらに限定されない。
【００９４】
スルフィン酸（スルフィノ）：−Ｓ（＝Ｏ）ＯＨ、−ＳＯ2Ｈ。
【００９５】
スルホン酸（スルホ）：−Ｓ（＝Ｏ）2ＯＨ、−ＳＯ3Ｈ。
【００９６】
スルフィナート（スルフィン酸エステル）：−Ｓ（＝Ｏ）ＯＲ；ここで、Ｒは、スルフィナート置換基、例えば、Ｃ1-7アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基、又はＣ5-20アリール基、好ましくはＣ1-7アルキル基である。スルフィナート基の例として、−Ｓ（＝Ｏ）ＯＣＨ3（メトキシスルフィニル；メチルスルフィナート）及び−Ｓ（＝Ｏ）ＯＣＨ2ＣＨ3（エトキシスルフィニル；エチルスルフィナート）が挙げられるが、これらに限定されない。
【００９７】
スルホナート（スルホン酸エステル）：−Ｓ（＝Ｏ）2ＯＲ、ここで、Ｒは、スルホナート置換基、例えば、Ｃ1-7アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基、又はＣ5-20アリール基、好ましくはＣ1-7アルキル基である。スルホナート基の例として、−Ｓ（＝Ｏ）2ＯＣＨ3（メトキシスルホニル；メチルスルホナート）及び−Ｓ（＝Ｏ）2ＯＣＨ2ＣＨ3（エトキシスルホニル；エチルスルホナート）が挙げられるが、これらに限定されない。
【００９８】
スルフィニルオキシ：−ＯＳ（＝Ｏ）Ｒ、ここで、Ｒは、スルフィニルオキシ置換基、例えば、Ｃ1-7アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基、又はＣ5-20アリール基、好ましくはＣ1-7アルキル基である。スルフィニルオキシ基の例として、−ＯＳ（＝Ｏ）ＣＨ3及び−ＯＳ（＝Ｏ）ＣＨ2ＣＨ3が挙げられるが、これらに限定されない。
【００９９】
スルホニルオキシ：−ＯＳ（＝Ｏ）2Ｒ、ここで、Ｒは、スルホニルオキシ置換基、例えば、Ｃ1-7アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基、又はＣ5-20アリール基、好ましくはＣ1-7アルキル基である。スルホニルオキシ基の例として、−ＯＳ（＝Ｏ）2ＣＨ3（メシラート）及び−ＯＳ（＝Ｏ）2ＣＨ2ＣＨ3（エシラ−ト）が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１００】
サルフェート：−ＯＳ（＝Ｏ）2ＯＲ、ここで、Ｒは、サルフェート置換基、例えば、Ｃ1-7アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基、又はＣ5-20アリール基、好ましくはＣ1-7アルキル基である。サルフェート基の例として、−ＯＳ（＝Ｏ）2ＯＣＨ3及び−ＳＯ（＝Ｏ）2ＯＣＨ2ＣＨ3が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１０１】
スルファミル（スルファモイル、スルフィン酸アミド、スルフィンアミド）：−Ｓ（＝Ｏ）ＮＲ1Ｒ2、ここで、Ｒ1及びＲ2は、独立して、アミノ基について定義されているアミノ置換基である。スルファミル基の例として、−Ｓ（＝Ｏ）ＮＨ2、−Ｓ（＝Ｏ）ＮＨ（ＣＨ3）、−Ｓ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ3）2、−Ｓ（＝Ｏ）ＮＨ（ＣＨ2ＣＨ3）、−Ｓ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ2ＣＨ3）2、及び−Ｓ（＝Ｏ）ＮＨＰｈが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１０２】
スルホンアミド（スルフィナモイル、スルホン酸アミド、スルホンアミド）：−Ｓ（＝Ｏ）2ＮＲ1Ｒ2、ここで、Ｒ1及びＲ2は、独立して、アミノ基について定義されているアミノ置換基である。スルホンアミド基の例として、−Ｓ（＝Ｏ）2ＮＨ2、−Ｓ（＝Ｏ）2ＮＨ（ＣＨ3）、−Ｓ（＝Ｏ）2Ｎ（ＣＨ3）2、−Ｓ（＝Ｏ）2ＮＨ（ＣＨ2ＣＨ3）、−Ｓ（＝Ｏ）2Ｎ（ＣＨ2ＣＨ3）2、及び−Ｓ（＝Ｏ）2ＮＨＰｈが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１０３】
スルファミノ：−ＮＲ1Ｓ（＝Ｏ）2ＯＨ、ここで、Ｒ1は、アミノ基について定義されているアミノ置換基である。スルファミノ基の例として、−ＮＨＳ（＝Ｏ）2ＯＨ及び−Ｎ（ＣＨ3）Ｓ（＝Ｏ）2ＯＨが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１０４】
スルホンアミノ：−ＮＲ1Ｓ（＝Ｏ）2Ｒ、ここで、Ｒ1は、アミノ基について定義されているアミノ置換基であり、Ｒは、スルホンアミノ置換基、例えば、Ｃ1-7アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基、又はＣ5-20アリール基、好ましくはＣ1-7アルキル基である。スルホンアミノ基の例として、−ＮＨＳ（＝Ｏ）2ＣＨ3及び−Ｎ（ＣＨ3）Ｓ（＝Ｏ）2Ｃ6Ｈ5が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１０５】
スルフィンアミノ：−ＮＲ1Ｓ（＝Ｏ）Ｒ、ここで、Ｒ1は、アミノ基について定義されているアミノ置換基であり、Ｒは、スルフィンアミノ置換基、例えば、Ｃ1-7アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基、又はＣ5-20アリール基、好ましくはＣ1-7アルキル基である。スルフィンアミノ基の例として、−ＮＨＳ（＝Ｏ）ＣＨ3及び−Ｎ（ＣＨ3）Ｓ（＝Ｏ）Ｃ6Ｈ5が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１０６】
ホスフィノ（ホスフィン）：−ＰＲ2、ここで、Ｒは、ホスフィノ置換基、例えば、−Ｈ、Ｃ1-7アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基、又はＣ5-20アリール基、好ましくは−Ｈ、Ｃ1-7アルキル基、又はＣ5-20アリール基である。ホスフィノ基の例として、−ＰＨ2、−Ｐ（ＣＨ3）2、−Ｐ（ＣＨ2ＣＨ3）2、−Ｐ（ｔ−Ｂｕ）2、及び−Ｐ（Ｐｈ）2が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１０７】
ホスホ：−Ｐ（＝Ｏ）2。
【０１０８】
ホスフィニル（ホスフィンオキシド）：−Ｐ（＝Ｏ）Ｒ2、ここで、Ｒは、ホスフィニル置換基、例えば、Ｃ1-7アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基、又はＣ5-20アリール基、好ましくはＣ1-7アルキル基又はＣ5-20アリール基である。ホスフィニル基の例として、−Ｐ（＝Ｏ）（ＣＨ3）2、−Ｐ（＝Ｏ）（ＣＨ2ＣＨ3）2、−Ｐ（＝Ｏ）（ｔ−Ｂｕ）2、及び−Ｐ（＝Ｏ）（Ｐｈ）2が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１０９】
ホスホン酸（ホスホノ）：−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）2。
【０１１０】
ホスホナート（ホスホノエステル）：−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＲ）2、ここで、Ｒは、ホスホナート置換基、例えば、−Ｈ、Ｃ1-7アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基、又はＣ5-20アリール基、好ましくは−Ｈ、Ｃ1-7アルキル基、又はＣ5-20アリール基である。ホスホナート基の例として、−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＣＨ3）2、−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＣＨ2ＣＨ3）2、−Ｐ（＝Ｏ）（Ｏ−ｔ−Ｂｕ）2、及び−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＰｈ）2が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１１１】
リン酸（ホスホノオキシ）：−ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＨ）2。
【０１１２】
ホスフェート（ホスホノオキシエステル）：−ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＲ）2、ここで、Ｒは、ホスフェート置換基、例えば、−Ｈ、Ｃ1-7アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基、又はＣ5-20アリール基、好ましくは−Ｈ、Ｃ1-7アルキル基、又はＣ5-20アリール基である。ホスフェート基の例として、−ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＣＨ3）2、−ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＣＨ2ＣＨ3）2、−ＯＰ（＝Ｏ）（Ｏ−ｔ−Ｂｕ）2、及び−ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＰｈ）2が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１１３】
亜リン酸：−ＯＰ（ＯＨ）2。
【０１１４】
ホスファイト：−ＯＰ（ＯＲ）2、ここで、Ｒは、ホスファイト置換基、例えば、−Ｈ、Ｃ1-7アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基、又はＣ5-20アリール基、好ましくは−Ｈ、Ｃ1-7アルキル基、又はＣ5-20アリール基である。ホスファイト基の例として、−ＯＰ（ＯＣＨ3）2、−ＯＰ（ＯＣＨ2ＣＨ3）2、−ＯＰ（Ｏ−ｔ−Ｂｕ）2、及び−ＯＰ（ＯＰｈ）2が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１１５】
ホスホロアミダイト：−ＯＰ（ＯＲ1）−ＮＲ22、ここで、Ｒ1及びＲ2は、ホスホロアミダイト置換基、例えば、−Ｈ、（任意選択的に置換されている）Ｃ1-7アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基、又はＣ5-20アリール基、好ましくは−Ｈ、Ｃ1-7アルキル基、又はＣ5-20アリール基である。ホスホロアミダイト基の例として、−ＯＰ（ＯＣＨ2ＣＨ3）−Ｎ（ＣＨ3）2、−ＯＰ（ＯＣＨ2ＣＨ3）−Ｎ（ｉ−Ｐｒ）2、及び−ＯＰ（ＯＣＨ2ＣＨ2ＣＮ）−Ｎ（ｉ−Ｐｒ）2が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１１６】
ホスホロアミダート：−ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＲ1）−ＮＲ22、ここで、Ｒ1及びＲ2は、ホスホロアミダート置換基、例えば、−Ｈ、（任意選択的に置換されている）Ｃ1-7アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基、又はＣ5-20アリール基、好ましくは−Ｈ、Ｃ1-7アルキル基、又はＣ5-20アリール基である。ホスホロアミダート基の例として、−ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＣＨ2ＣＨ3）−Ｎ（ＣＨ3）2、−ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＣＨ2ＣＨ3）−Ｎ（ｉ−Ｐｒ）2、及び−ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＣＨ2ＣＨ2ＣＮ）−Ｎ（ｉ−Ｐｒ）2が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１１７】
アルキレン
Ｃ3-12アルキレン：「Ｃ3-12アルキレン」という用語は、本明細書中で使用される場合、脂肪族であっても脂環式であってもよく、また、飽和、部分不飽和、又は完全不飽和であってよい、３〜１２個の炭素原子（他に特定されない限り）を有する炭化水素化合物の２つの水素原子であって、両方が同じ炭素原子からであるか、２つの異なる炭素原子のそれぞれからのものであるかのいずれかである当該２つの水素原子を除去することによって得られる二座部分に関する。ゆえに、「アルキレン」という用語には、以下に考察されている、サブクラスのアルケニレン、アルキニレン、シクロアルキレンなどが含まれる。
【０１１８】
直鎖飽和Ｃ3-12アルキレン基の例として、ｎが３〜１２の整数である−（ＣＨ2）n−、例えば、−ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2−（プロピレン）、−ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2−（ブチレン）、−ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2−（ペンチレン）及び−ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ−2ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2−（ヘプチレン）が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１１９】
分岐鎖飽和Ｃ3-12アルキレン基の例として、−ＣＨ（ＣＨ3）ＣＨ2−、−ＣＨ（ＣＨ3）ＣＨ2ＣＨ2−、−ＣＨ（ＣＨ3）ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2−、−ＣＨ2ＣＨ（ＣＨ3）ＣＨ2−、−ＣＨ2ＣＨ（ＣＨ3）ＣＨ2ＣＨ2−、−ＣＨ（ＣＨ2ＣＨ3）−、−ＣＨ（ＣＨ2ＣＨ3）ＣＨ2−、及び−ＣＨ2ＣＨ（ＣＨ2ＣＨ3）ＣＨ2−が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１２０】
直鎖部分不飽和Ｃ3-12アルキレン基（Ｃ3-12アルケニレン、及びアルキニレン基）として、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ2−、−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ2−、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ2−ＣＨ2−、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ2−、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ2−、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ2−ＣＨ2−、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ−、及び−ＣＨ2−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ2−が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１２１】
分岐鎖部分不飽和Ｃ3-12アルキレン基（Ｃ3-12アルケニレン及びアルキニレン基）の例として、−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ−、−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ−ＣＨ2−、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ（ＣＨ3）−及び−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ（ＣＨ3）−が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１２２】
脂環式飽和Ｃ3-12アルキレン基（Ｃ3-12シクロアルキレン）の例として、シクロペンチレン（例えば、シクロペンタ−１，３−イレン）、及びシクロヘキシレン（例えば、シクロヘキサ−１，４−イレン）が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１２３】
脂環式部分不飽和Ｃ3-12アルキレン基（Ｃ3-12シクロアルキレン）の例として、シクロペンテニレン（例えば、４−シクロペンテン−１，３−イレン）、シクロヘキセニレン（例えば、２−シクロヘキセン−１，４−イレン、３−シクロヘキセン−１，２−イレン、２，５−シクロヘキサジエン−１，４−イレン）が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１２４】
ビス−オキシ−Ｃ1-3アルキレン：「ビス−オキシ−Ｃ1-3アルキレン」という用語は、本明細書中で使用される場合、式−Ｏ−（ＣＨ2）q−Ｏ−（ｑは１〜３、すなわち−ＯＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2Ｏ−、−ＯＣＨ2ＣＨ2Ｏ−、−ＯＣＨ2Ｏ−である）の二座部分に関する。
【０１２５】
カルバメート窒素保護基：「カルバメート窒素保護基」という用語は、イミン結合中の窒素をマスクする部分に関し、これは当該分野において周知されている。この基は以下の構造：
【化２７】
2021521172.tif 000029
（式中、Ｒ’10は上記で定義されたＲである）を有する。参照により本明細書に援用される、Ｇｒｅｅｎｅ，Ｔ．Ｗ．ａｎｄ  Ｗｕｔｓ，Ｇ．Ｍ．，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，３rd  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．，１９９９の頁５０３〜５４９に多数の好適な基が記載されている。
【０１２６】
ヘミアミナール窒素保護基：「ヘミアミナール窒素保護基」という用語は、以下の構造：
【化２８】
2021521172.tif 000030
（式中、Ｒ’10は上記で定義されたＲである）を有する基に関する。参照により本明細書に援用される、Ｇｒｅｅｎｅ，Ｔ．Ｗ．ａｎｄ  Ｗｕｔｓ，Ｇ．Ｍ．，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，３ｒｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．，１９９９の頁６３３〜６４７にアミド保護基として多数の好適な基が記載されている。
【０１２７】
カルバメート窒素保護基及びヘミアミナール窒素保護基といった基は、「合成用窒素保護基」と総称される場合がある。
【０１２８】
他の形態の包含
他に特定されていない限り、上記には、これらの置換基の周知のイオン形態、塩形態、溶媒和物形態、及び保護形態が含まれる。例えば、カルボン酸（−ＣＯＯＨ）に対する言及は、アニオン（カルボキシレート）形態（−ＣＯＯ-）、その塩又は溶媒和物、ならびに従来の保護形態も含む。同様に、アミノ基に対する言及は、プロトン化形態（−Ｎ+ＨＲ1Ｒ2）、アミノ基の塩又は溶媒和物、例えば、塩酸塩、ならびにアミノ基の従来の保護形態を含む。同様に、ヒドロキシル基に対する言及は、アニオン形態（−Ｏ-）、その塩又は溶媒和物、ならびに従来の保護形態も含む。
【０１２９】
塩
活性化合物の対応する塩、例えば、薬学的に許容可能な塩を調製、精製、及び／又は処理すると好都合又は望ましい場合がある。薬学的に許容可能な塩の例は、Ｂｅｒｇｅ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．，６６，１−１９（１９７７）に記載されている。
【０１３０】
例えば、化合物がアニオン性であるか、又はアニオン性であり得る官能基（例えば、−ＣＯＯＨは−ＣＯＯ-になり得る）を有する場合、好適なカチオンと塩を形成することができる。好適な無機カチオンの例として、Ｎａ+及びＫ+などのアルカリ金属イオン、Ｃａ2+及びＭｇ2+などのアルカリ土類カチオン、ならびにＡｌ+3などの他のカチオンが挙げられるが、これらに限定されない。好適な有機カチオンの例として、アンモニウムイオン（すなわち、ＮＨ4+）及び置換アンモニウムイオン（例えば、ＮＨ3Ｒ+、ＮＨ2Ｒ2+、ＮＨＲ3+、ＮＲ4+）が挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの好適な置換アンモニウムイオンの例は、エチルアミン、ジエチルアミン、ジシクロヘキシルアミン、トリエチルアミン、ブチルアミン、エチレンジアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、ピペラジン、ベンジルアミン、フェニルベンジルアミン、コリン、メグルミン、及びトロメタミン、ならびにリジン及びアルギニンなどのアミノ酸に由来するものである。一般的な第四級アンモニウムイオンの例は、Ｎ（ＣＨ3）4+である。
【０１３１】
化合物がカチオン性であるか、又はカチオン性であり得る官能基（例えば、−ＮＨ2は−ＮＨ3+になり得る）を有する場合、好適なアニオンと塩を形成することができる。好適な無機アニオンの例として、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、亜硫酸、硝酸、亜硝酸、リン酸、及びホスホン酸といった無機酸から誘導されるものが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１３２】
好適な有機アニオンの例として、２−アセトキシ安息香酸、酢酸、アスコルビン酸、アスパラギン酸、安息香酸、カンファースルホン酸、桂皮酸、クエン酸、エデト酸、エタンジスルホン酸、エタンスルホン酸、フマル酸、グルコヘプトン酸、グルコン酸、グルタミン酸、グリコール酸、ヒドロキシマレイン酸、ヒドロキシナフタレンカルボン酸、イセチオン酸、乳酸、ラクトビオン酸、ラウリン酸、マレイン酸、リンゴ酸、メタンスルホン酸、ムチン酸、オレイン酸、シュウ酸、パルミチン酸、パモ酸、パントテン酸、フェニル酢酸、フェニルスルホン酸、プロピオン酸、ピルビン酸、サリチル酸、ステアリン酸、コハク酸、スルファニル酸、酒石酸、トルエンスルホン酸、トリフルオロ酢酸及び吉草酸といった有機酸から誘導されるものが挙げられるが、これらに限定されない。好適なポリマー有機アニオンの例として、タンニン酸、カルボキシメチルセルロースといったポリマー酸から誘導されるものが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１３３】
溶媒和物
活性化合物の対応する溶媒和物を調製、精製、及び／又は処理すると好都合又は望ましい場合がある。「溶媒和物」という用語は、本明細書において従来の意味で使用されており、溶質（例えば、活性化合物、活性化合物の塩）と溶媒との複合体を指す。溶媒が水である場合、溶媒和物は、便宜上、水和物、例えば、一水和物、二水和物、三水和物などと称する場合がある。
【０１３４】
本発明は、溶媒がＰＢＤ部分のイミン結合間に付加される化合物を含み、溶媒が水又はアルコールである（ＲAＯＨ、ここでＲAはＣ1-4アルキルである）場合を以下に例示する：
【化２９】
2021521172.tif 000031
【０１３５】
この形態は、ＰＢＤのカルビノールアミン形態及びカルビノールアミンエーテル形態と呼ばれる場合がある（上記のＲ10に関する項に記載）。これらの平衡のバランスは、化合物が得られる条件に加え、部分自体の性質に応じて異なる。
【０１３６】
このような特定の化合物は、例えば、凍結乾燥により、固体形態で単離することができる。
【０１３７】
異性体
本発明のある特定の化合物は、１つ以上の特定の幾何学形態、光学形態、鏡像異性形態、ジアステレオマー形態、エピマー形態、アトロピー形態、立体異性形態、互変異性形態、配座形態、又はアノマー形態で存在する場合があり、シス体とトランス体；Ｅ体とＺ体；ｃ体、ｔ体、及びｒ体；エンド体とエキソ体；Ｒ体、Ｓ体、及びメソ体；Ｄ体とＬ体；ｄ体とｌ体；（＋）体と（−）体；ケト体、エノール体、及びエノラート体；シン体とアンチ体；シンクリナル体とアンチクリナル体；α体とβ体；アキシアル体とエカトリアル体；舟型、椅子型、ツイスト型、封筒型、及び半椅子型；ならびにそれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されず、以降「異性体」（又は「異性体形態」）と総称する。
【０１３８】
「キラル」という用語は、鏡像相手に重ね合わせできない特性を有する分子を指し、「アキラル」という用語は、鏡像相手に重ね合わせできる分子を指す。
【０１３９】
「立体異性体」という用語は、同一の化学組成を有するが、空間における原子又は基の配置に関しては異なる化合物を指す。
【０１４０】
「ジアステレオマー」とは、２つ以上のキラル中心を有し、その分子が互いに鏡像ではない立体異性体を指す。ジアステレオマーは、融点、沸点、スペクトル特性、及び反応性といった物理特性が異なる。ジアステレオマーの混合物は、電気泳動及びクロマトグラフィーなどの高分解能分析手順下で分離することができる。
【０１４１】
「鏡像異性体」とは、互いに重ね合わせできない鏡像である、化合物の２種の立体異性体を指す。
【０１４２】
本明細書中で使用される立体化学的定義及び規則は一般に、Ｓ．Ｐ．Ｐａｒｋｅｒ，Ｅｄ．，ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ  Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ  ｏｆ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｔｅｒｍｓ（１９８４）ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ  Ｂｏｏｋ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ；及びＥｌｉｅｌ，Ｅ．ａｎｄ  Ｗｉｌｅｎ，Ｓ．，“Ｓｔｅｒｅｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ”，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９９４に従う。本発明の化合物は、不斉中心又はキラル中心を含む場合があるため、異なる立体異性体形態で存在する。ジアステレオマー、鏡像異性体、及びアトロプ異性体、ならびにラセミ混合物などのそれらの混合物を含むがこれらに限定されない、本発明の化合物の立体異性体形態は全て、本発明の一部を形成することを意図する。多くの有機化合物は光学活性形態で存在する、すなわち、平面偏光の面を回転させる能力を有する。光学活性化合物を記載する際に、そのキラル中心（複数可）周りの分子の絶対配置を示すために接頭辞Ｄ及びＬ又はＲ及びＳが使用される。接頭辞ｄ及びｌ又は（＋）及び（−）は、化合物による平面偏光の回転符号を示すために用いられ、（−）の場合は、化合物が左旋性であることを意味する。接頭辞が（＋）又はｄである化合物は右旋性である。所与の化学構造に関して、立体異性体は、互いに鏡像であることを除いて同一である。特定の立体異性体は鏡像異性体と呼ばれることもあり、多くの場合、そのような異性体の混合物は鏡像異性混合物と呼ばれる。鏡像異性体の５０：５０混合物はラセミ混合物又はラセミ体と呼ばれ、これは化学反応又はプロセスにおいて立体選択性又は立体特異性がない場合に発生する可能性がある。「ラセミ混合物」及び「ラセミ体」という用語は、光学活性がない、２つの鏡像異性体種の等モル混合物を指す。
【０１４３】
本明細書中で使用される場合、互変異性体について以下で考察される場合を除いて、「異性体」という用語から具体的に除外されるのは、構造（又は構成）異性体（すなわち、単に空間内の原子の位置だけではなく、原子間の結合が異なる異性体）である点に留意されたい。例えば、メトキシ基、−ＯＣＨ3に対する言及は、その構造異性体であるヒドロキシメチル基、−ＣＨ2ＯＨに対する言及であると解釈されるべきではない。同様に、オルトクロロフェニルに対する言及は、その構造異性体であるメタクロロフェニルに対する言及であると解釈されるべきではない。しかしながら、構造のクラスに対する言及には、当然、そのクラス内に入る構造異性体が含まれ得る（例えば、Ｃ1-7アルキルには、ｎ−プロピル及びイソ−プロピルが含まれ；ブチルには、ｎ−、ｉｓｏ−、ｓｅｃ−、及びｔｅｒｔ−ブチルが含まれ；メトキシフェニルには、オルト−、メタ−、及びパラ−メトキシフェニルが含まれる）。
【０１４４】
上記の除外は、例えば、次の互変異性体：ケト／エノール（以下に例示）、イミン／エナミン、アミド／イミノアルコール、アミジン／アミジン、ニトロソ／オキシム、チオケトン／エネチオール、Ｎ−ニトロソ／ヒドロキシアゾ、及びニトロ／ａｃｉ−ニトロのように、互変異性体形態、例えばケト体、エノール体、及びエノラート体には関係しない。
【化３０】
2021521172.tif 000032
【０１４５】
「互変異性体」又は「互変異性体形態」という用語は、低エネルギー障壁を介して相互変換可能なエネルギーの異なる構造異性体を指す。例えば、プロトン互変異性体（プロトトロピック互変異性体としても知られる）には、ケト−エノール及びイミン−エナミン異性化などの、プロトンの移動を介した相互変換が含まれる。原子価互変異性体は、結合電子の一部の再編成による相互変換を含む。
【０１４６】
「異性体」という用語に具体的に含まれるのは、１つ以上の同位体置換を有する化合物である点に留意されたい。例えば、Ｈは、1Ｈ、2Ｈ（Ｄ）、及び3Ｈ（Ｔ）を含めた、任意の同位体形態であってよく；Ｃは、12Ｃ、13Ｃ、及び14Ｃを含めた、任意の同位体形態であってよく；Ｏは、16Ｏ及び18Ｏを含めた、任意の同位体形態などであってよい。
【０１４７】
本発明の化合物に組み込むことができる同位体の例としては、水素、炭素、窒素、酸素、リン、フッ素、及び塩素の同位体、例えば、2Ｈ（重水素、Ｄ）、3Ｈ（トリチウム）、11Ｃ、13Ｃ、14Ｃ、15Ｎ、18Ｆ、31Ｐ、32Ｐ、35Ｓ、36Ｃｌ、及び125Ｉが挙げられるが、これらに限定されない。本発明の種々の同位体標識化合物は、例えば３Ｈ、１３Ｃ、及び１４Ｃなどの放射性同位体が組み込まれたものである。このような同位体標識化合物は、代謝試験、反応速度試験、薬物若しくは基質の組織分布アッセイを含む、陽電子放出断層撮影（ＰＥＴ）若しくは単一光子放出コンピューター断層撮影（ＳＰＥＣＴ）などの検出若しくは画像技術、又は患者の放射性治療に有用であり得る。重水素標識又は置換された本発明の治療用化合物は、分布、代謝、及び排泄（ＡＤＭＥ）に関連して、改善されたＤＭＰＫ（薬物代謝及び薬物動態）特性を有し得る。重水素などのより重い同位体による置換は、代謝安定性の増加により得られる、ある種の治療上の利点、例えばｉｎ  ｖｉｖｏ半減期の増加、又は必要投与量の低減をもたらすことができる。１８Ｆ標識化合物は、ＰＥＴ又はＳＰＥＣＴの試験に有用であり得る。本発明の同位体標識化合物及びそのプロドラッグは、一般に、非同位体標識試薬に代えて、容易に入手可能な同位体標識試薬を用いて、以下に記載のスキーム又は実施例及び調製に開示される手順を実施することにより調製することができる。さらに、特に重水素（すなわち２Ｈ又はＤ）などのより重い同位体による置換は、代謝安定性の増加により得られる、ある種の治療上の利点、例えばｉｎ  ｖｉｖｏ半減期の増加、又は必要投与量の低減又は治療指数の改善が可能であり得る。本文脈における重水素は置換基とみなされるものと理解される。そのような重い同位体、特に重水素の濃度は、同位体濃縮係数によって定義することができる。本発明の化合物において、特定の同位体として具体的に指定されていない任意の原子は、その原子の任意の安定な同位体を表すことを意味する。
【０１４８】
他に特定されていない限り、特定の化合物に対する言及は、（完全に又は部分的に）ラセミ及び他のその混合物を含め、そのような異性体形態の全てを含む。そのような異性体形態の調製（例えば不斉合成）方法及び分離方法（例えば分別結晶法及びクロマトグラフィー法）は、当技術分野で公知であるか、又は本明細書で教示する方法又は公知の方法を公知の手段で適合させることにより容易に達成される。
【０１４９】
リガンド単位
リガンド単位はどの種類であってもよく、タンパク質、ポリペプチド、ペプチド、及び標的分子に特異的に結合する非ペプチド薬剤を含む。いくつかの実施形態において、リガンド単位は、タンパク質、ポリペプチド、又はペプチドであり得る。いくつかの実施形態において、リガンド単位は環状ポリペプチドであり得る。このようなリガンド単位は、少なくとも１つの標的分子結合部位、リンフォカイン、ホルモン、成長因子、又は標的に特異的に結合できる任意の他の細胞結合分子又は物質を含有する抗体又は抗体の断片を含み得る。
【０１５０】
「特異的に結合する」及び「特異的結合」という用語は、抗体又は他のタンパク質、ポリペプチド、若しくはペプチドによる所定の分子（例えば抗原）への結合を指す。通常、抗体又は他の分子は、少なくとも約１×１０7Ｍ-1の親和性で結合し、所定の分子又は密接に関連する分子以外の非特異的分子（例えば、ＢＳＡ、カゼイン）への結合における親和性よりも少なくとも２倍大きい親和性で所定の分子に結合する。
【０１５１】
リガンド単位の例は、本明細書に援用される、ＷＯ２００７／０８５９３０に使用について記載されている薬剤を含む。
【０１５２】
いくつかの実施形態において、リガンド単位は、細胞上の細胞外標的に結合する細胞結合剤である。そのような細胞結合剤は、タンパク質剤、ポリペプチド剤、ペプチド剤、又は非ペプチド剤であり得る。いくつかの実施形態において、細胞結合剤は、タンパク質、ポリペプチド、又はペプチドであり得る。いくつかの実施形態において、細胞結合剤は環状ポリペプチドであり得る。細胞結合剤はまた、抗体又は抗体の抗原結合断片であり得る。したがって、一実施形態では、本発明は、抗体薬物複合体（ＡＤＣ）を提供する。
【０１５３】
細胞結合剤
細胞結合剤はどの種類であってもよく、ペプチド及び非ペプチドを含む。これは、少なくとも１つの結合部位、リンフォカイン、ホルモン、ホルモン模倣体、ビタミン、成長因子、栄養素輸送分子、又は任意の他の細胞結合分子若しくは物質を含有する抗体又は抗体の断片を含み得る。
【０１５４】
ペプチド
一実施形態では、細胞結合剤は、４〜３０個、好ましくは６〜２０個の連続したアミノ酸残基を含む線状又は環状のペプチドである。本実施形態では、１つの細胞結合剤が１つの単量体又は二量体のピロロベンゾジアゼピン化合物に連結されることが好ましい。
【０１５５】
一実施形態では、細胞結合剤は、インテグリンαvβ6に結合するペプチドを含む。このペプチドは、ＸＹＳよりもαvβ6に対して選択性を有し得る。
【０１５６】
一実施形態では、細胞結合剤は、Ａ２０ＦＭＤＶ−Ｃｙｓポリペプチドを含む。Ａ２０ＦＭＤＶ−Ｃｙｓの配列はＮＡＶＰＮＬＲＧＤＬＱＶＬＡＱＫＶＡＲＴＣである。あるいは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０個のアミノ酸残基が別のアミノ酸残基で置換されているＡ２０ＦＭＤＶ−Ｃｙｓ配列の変異体を使用してもよい。さらに、ポリペプチドは配列ＮＡＶＸＸＸＸＸＸＸＸＸＸＸＸＸＸＸＲＴＣを有し得る。
【０１５７】
抗体
「抗体」という用語は、本明細書中、最も広義の意味で用いられ、具体的には、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、二量体、多量体、多重特異性抗体（例えば、二特異性抗体）、多価抗体、及び抗体断片を包含するが、ただし、それらが所望の生物活性を示す限りにおいてである（Ｍｉｌｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ（２００３）Ｊｏｕｒ．ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  １７０：４８５４−４８６１）。抗体は、マウス抗体、ヒト抗体、ヒト化抗体、キメラ抗体、又は他の種由来抗体が可能である。抗体とは、免疫系により産生される、特定の抗原を認識してそれに結合することができるタンパク質である。（Ｊａｎｅｗａｙ，Ｃ．，Ｔｒａｖｅｒｓ，Ｐ．，Ｗａｌｐｏｒｔ，Ｍ．，Ｓｈｌｏｍｃｈｉｋ（２００１）Ｉｍｍｕｎｏ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，５ｔｈ  Ｅｄ．，Ｇａｒｌａｎｄ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ）。標的抗原は、一般に、複数の抗体のＣＤＲで認識される多数の結合部位（エピトープとも呼ばれる）を有する。異なるエピトープに特異的に結合する抗体は、それぞれ異なる構造を有する。したがって、１つの抗原は、１つより多い対応する抗体を有する可能性がある。抗体として、全長免疫グロブリン分子又は全長免疫グロブリン分子の免疫学的活性部分、すなわち、注目している標的の抗原に免疫学的に結合する抗原結合部位又はその一部分を有する分子が挙げられ、そのような標的として、がん細胞又は自己免疫疾患に関連した自己免疫抗体を産生する細胞が挙げられるが、これらに限定されない。免疫グロブリンは、任意の型（例えばＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、及びＩｇＡ）、クラス（例えばＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１、及びＩｇＡ２）又はサブクラスの免疫グロブリン分子が可能である。免疫グロブリンは、任意の種由来のものが可能であり、ヒト、マウス、又はウサギ起原が挙げられる。
【０１５８】
「抗体断片」は、全長抗体の一部分、一般には全長抗体の抗原結合領域又は可変領域を含む。抗体断片の例として、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）2、及びｓｃＦｖ断片；ダイアボディ；線状抗体；Ｆａｂ発現ライブラリーによって生成される断片、抗イディオタイプ（抗Ｉｄ）抗体、ＣＤＲ（相補性決定領域）、及びがん細胞抗原、ウイルス抗原、又は微生物抗原に免疫特異的に結合する上記のいずれかのエピトープ結合断片、単鎖抗体分子；ならびに抗体断片から形成される多重特異性抗体が挙げられる。
【０１５９】
本明細書中で使用される場合、「モノクローナル抗体」という用語は、実質的に均一な抗体の集団から得られる抗体、すなわち、集団を構成する個々の抗体が、少量存在し得る可能性がある天然に存在する突然変異体を除いて同一であるものを指す。モノクローナル抗体は特異性が高く、単一の抗原部位に対して指向性である。さらに、異なる決定基（エピトープ）を指向する異なる抗体を含むポリクローナル抗体調製物とは対照的に、各モノクローナル抗体は、抗原上の単一の決定基を指向する。その特異性に加えて、モノクローナル抗体は、他の抗体が混入しないように合成できる点で有利である。修飾語「モノクローナル」とは、実質的に均一な抗体の集団から得られるという抗体の特徴を示しており、任意の特定の方法による抗体の産生を必要とすると解釈されるべきではない。例えば、使用されるモノクローナル抗体は、Ｋｏｈｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ（１９７５）Ｎａｔｕｒｅ  ２５６：４９５によって最初に記載されたハイブリドーマ法によって作製することも、又は組換えＤＮＡ法（例えば、ＵＳ４８１６５６７を参照）によって作製することもできる。モノクローナル抗体はまた、Ｃｌａｃｋｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ（１９９１）Ｎａｔｕｒｅ，３５２：６２４−６２８；Ｍａｒｋｓ  ｅｔ  ａｌ（１９９１）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２２：５８１−５９７に記載の技術を用いたファージ抗体ライブラリーからから単離することも、又は完全ヒト免疫グロブリン系を保有するトランスジェニックマウス（Ｌｏｎｂｅｒｇ（２００８）Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎｉｏｎ  ２０（４）：４５０−４５９）から単離することもできる。
【０１６０】
本明細書中のモノクローナル抗体は、具体的には、キメラ抗体、ヒト化抗体、及びヒト抗体を含む。
【０１６１】
細胞結合剤の例は、本明細書に援用される、ＷＯ２００７／０８５９３０に使用について記載されている薬剤を含む。
【０１６２】
本発明の実施形態で使用される腫瘍関連抗原及び同族の抗体を、以下に列挙し、本明細書に援用されるＷＯ／２０１７／１８６８９４の１４から８６頁にさらに詳細に記述する。
（１）ＢＭＰＲ１Ｂ（骨形成タンパク質受容体ＩＢ型）
（２）Ｅ１６（ＬＡＴ１、ＳＬＣ７Ａ５）
（３）ＳＴＥＡＰ１（前立腺の６回膜貫通型上皮抗原）
（４）０７７２Ｐ（ＣＡ１２５、ＭＵＣ１６）
（５）ＭＰＦ（ＭＰＦ、ＭＳＬＮ、ＳＭＲ、巨核球増強因子、メソテリン）
（６）Ｎａｐｉ３ｂ（ＮＡＰＩ−３Ｂ、ＮＰＴＩＩｂ、ＳＬＣ３４Ａ２、溶質輸送体ファミリー３４（リン酸ナトリウム）、メンバー２、ＩＩ型ナトリウム依存性リン酸輸送体３ｂ）
（７）Ｓｅｍａ  ５ｂ（ＦＬＪ１０３７２、ＫＩＡＡ１４４５、Ｍｍ．４２０１５、ＳＥＭＡ５Ｂ、ＳＥＭＡＧ、セマフォリン５ｂ  Ｈｌｏｇ、ｓｅｍａドメイン、７回トロンボスポンジン反復配列（ｓｅｖｅｎ  ｔｈｒｏｍｂｏｓｐｏｎｄｉｎ  ｒｅｐｅａｔｓ）（１型及び１型様）、膜貫通ドメイン（ＴＭ）、及び短細胞質ドメイン、（セマフォリン）５Ｂ）
（８）ＰＳＣＡ  ｈｌｇ（２７０００５０Ｃ１２Ｒｉｋ、Ｃ５３０００８Ｏ１６Ｒｉｋ、ＲＩＫＥＮ  ｃＤＮＡ  ２７０００５０Ｃ１２、ＲＩＫＥＮ  ｃＤＮＡ  ２７０００５０Ｃ１２遺伝子）
（９）ＥＴＢＲ（エンドセリンＢ型受容体）
（１０）ＭＳＧ７８３（ＲＮＦ１２４、仮想タンパク質ＦＬＪ２０３１５）
（１１）ＳＴＥＡＰ２（ＨＧＮＣ＿８６３９、ＩＰＣＡ−１、ＰＣＡＮＡＰ１、ＳＴＡＭＰ１、ＳＴＥＡＰ２、ＳＴＭＰ、前立腺癌関連遺伝子１、前立腺癌関連タンパク質１、前立腺の６回膜貫通型上皮抗原２、６回膜貫通型前立腺タンパク質）
（１２）ＴｒｐＭ４（ＢＲ２２４５０、ＦＬＪ２００４１、ＴＲＰＭ４、ＴＲＰＭ４Ｂ、一過性受容器電位カチオン５チャンネル、サブファミリーＭ、メンバー４）
（１３）ＣＲＩＰＴＯ（ＣＲ、ＣＲ１、ＣＲＧＦ、ＣＲＩＰＴＯ、ＴＤＧＦ１、奇形腫由来増殖因子）
（１４）ＣＤ２１（ＣＲ２（補体受容体２）又はＣ３ＤＲ（Ｃ３ｄ／エプスタイン・バーウイルス受容体）又はＨｓ．７３７９２）
（１５）ＣＤ７９ｂ（ＣＤ７９Ｂ、ＣＤ７９β、ＩＧｂ（免疫グロブリン関連β）、Ｂ２９）
（１６）ＦｃＲＨ２（ＩＦＧＰ４、ＩＲＴＡ４、ＳＰＡＰ１Ａ（ＳＨ２ドメイン含有ホスファターゼアンカータンパク質  ５  １ａ）、ＳＰＡＰ１Ｂ、ＳＰＡＰ１Ｃ）
（１７）ＨＥＲ２（ＥｒｂＢ２）
（１８）ＮＣＡ（ＣＥＡＣＡＭ６）
（１９）ＭＤＰ（ＤＰＥＰ１）
（２０）ＩＬ２０Ｒ−α（ＩＬ２０Ｒａ、ＺＣＹＴＯＲ７）
（２１）ブレビカン（ＢＣＡＮ、ＢＥＨＡＢ）
（２２）ＥｐｈＢ２Ｒ（ＤＲＴ、ＥＲＫ、Ｈｅｋ５、ＥＰＨＴ３、Ｔｙｒｏ５）
（２３）ＡＳＬＧ６５９（Ｂ７ｈ）
（２４）ＰＳＣＡ（前立腺幹細胞抗原前駆体）
（２５）ＧＥＤＡ
（２６）ＢＡＦＦ−Ｒ（Ｂ細胞活性化因子受容体、ＢＬｙＳ受容体３、ＢＲ３）
（２７）ＣＤ２２（Ｂ細胞受容体ＣＤ２２−Ｂアイソフォーム、ＢＬ−ＣＡＭ、Ｌｙｂ−８、Ｌｙｂ８、ＳＩＧＬＥＣ−２、ＦＬＪ２２８１４）
（２７ａ）ＣＤ２２（ＣＤ２２分子）
（２８）ＣＤ７９ａ（ＣＤ７９Ａ、ＣＤ７９α）、免疫グロブリン関連α、Ｂ細胞特異的タンパク質（Ｉｇβ（ＣＤ７９Ｂ）と共有結合で相互作用し、表面でＩｇＭ分子と複合体を形成し、Ｂ細胞分化に関与するシグナルを伝達する）、ｐＩ：４．８４、ＭＷ：２５０２８、ＴＭ：２［Ｐ］、遺伝子染色体：１９ｑ１３．２）。
（２９）ＣＸＣＲ５（バーキットリンパ腫受容体１、ＣＸＣＬ１３ケモカインにより活性化されるＧタンパク質共役受容体、このＧタンパク質共役受容体は、リンパ球遊走及び体液性防御において機能し、ＨＩＶ−２感染、ならびに恐らくはＡＩＤＳ、リンパ腫、骨髄腫、及び白血病の発症において１０の役割を果たす）。３７２ａａ、ｐｌ：８．５４、ＭＷ：４１９５９、ＴＭ：７［Ｐ］、遺伝子染色体：１１ｑ２３．３。
（３０）ＨＬＡ−ＤＯＢ（ペプチドに結合して、２０個のそのペプチドをＣＤ４＋Ｔリンパ球に提供するＭＨＣクラスＩＩ分子のβサブユニット（Ｉａ抗原））、２７３ａａ、ｐＩ：６．５６、ＭＷ：３０８２０、ＴＭ：１［Ｐ］、遺伝子染色体：６ｐ２１．３）
（３１）Ｐ２Ｘ５（プリン作動性受容体Ｐ２Ｘリガンド開口型イオンチャンネル５、細胞外ＡＴＰにより開口するイオンチャンネルであり、このチャンネルは、シナプス伝達及び神経新生に関与している可能性があり、この不全が突発性排尿筋不安定という病態生理の一因である可能性がある）、４２２ａａ）、ｐＩ：７．６３、ＭＷ：４７２０６、ＴＭ：１［Ｐ］、遺伝子染色体：１７ｐ１３．３）。
（３２）ＣＤ７２（Ｂ細胞分化抗原ＣＤ７２、Ｌｙｂ−２）；３５９ａａ、ｐＩ：８．６６、ＭＷ：４０２２５、ＴＭ：１５［Ｐ］、遺伝子染色体：９ｐ１３．３）。
（３３）ＬＹ６４（リンパ球抗原６４（ＲＰ１０５）、ロイシンに富む反復配列（ＬＲＲ）ファミリーのＩ型膜タンパク質であり、Ｂ細胞活性化及びアポトーシスを制御し、この機能喪失は、全身性エリテマトーデスの患者で疾患活性の上昇を伴う）。６６１ａａ、ｐＩ：６．２０、ＭＷ：７４１４７、ＴＭ：１［Ｐ］、遺伝子染色体：５ｑ１２）。
（３４）ＦｃＲＨ１（Ｆｃ受容体様タンパク質１、免疫グロブリンＦｃドメインの推定受容体であり、Ｃ２型Ｉｇ様ドメイン及びＩＴＡＭドメインを含有し、Ｂリンパ球２０分化において役割を果たす可能性がある）；４２９ａａ、ｐＩ：５．２８、ＭＷ：４６９２５  ＴＭ：１［Ｐ］、遺伝子染色体：１ｑ２１−１ｑ２２）
（３５）ＩＲＴＡ２（免疫グロブリンスーパーファミリー受容体転座関連２、Ｂ細胞発達及びリンパ腫形成で役割を担っている可能性がある推定免疫受容体である。転位置による遺伝子の調節解除が、ある種のＢ細胞悪性腫瘍で生じる）。９７７ａａ、ｐＩ：６．８８、ＭＷ：１０６４６８、ＴＭ：１［Ｐ］遺伝子染色体：１ｑ２１）
（３６）ＴＥＮＢ２（ＴＭＥＦＦ２、トモレギュリン（ｔｏｍｏｒｅｇｕｌｉｎ）、ＴＰＥＦ、ＨＰＰ１、ＴＲ、推定膜貫通３５プロテオグリカン、増殖因子及びフォリスタチンのＥＧＦ／ヘレグリンファミリーと関連）。３７４ａａ）
（３７）ＰＳＭＡ−ＦＯＬＨ１（葉酸ヒドロラーゼ（前立腺特異的膜抗原）１）
（３８）ＳＳＴ（ソマトスタチン受容体；注、５つのサブタイプが存在する）
（３８．１）ＳＳＴＲ２（ソマトスタチン受容体２）
（３８．２）ＳＳＴＲ５（ソマトスタチン受容体５）
（３８．３）ＳＳＴＲ１
（３８．４）ＳＳＴＲ３
（３８．５）ＳＳＴＲ４
ＡｖＢ６−両方のサブユニット（３９＋４０）
（３９）ＩＴＧＡＶ（インテグリン、αＶ）
（４０）ＩＴＧＢ６（インテグリン、β６）
（４１）ＣＥＡＣＡＭ５（癌胎児抗原関連細胞接着分子５）
（４２）ＭＥＴ（ｍｅｔ癌原遺伝子；肝細胞増殖因子受容体）
（４３）ＭＵＣ１（ムチン１、細胞表面関連）
（４４）ＣＡ９（炭酸脱水酵素ＩＸ）
（４５）ＥＧＦＲｖＩＩＩ（上皮増殖因子受容体（ＥＧＦＲ）、転写物変異型３）
（４６）ＣＤ３３（ＣＤ３３分子）
（４７）ＣＤ１９（ＣＤ１９分子）
（４８）ＩＬ２ＲＡ（インターロイキン２受容体、α）、ＮＣＢＩ参照配列：ＮＭ＿０００４１７．２）
（４９）ＡＸＬ（ＡＸＬ受容体チロシンキナーゼ）
（５０）ＣＤ３０−ＴＮＦＲＳＦ８（腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー、メンバー８）
（５１）ＢＣＭＡ（Ｂ細胞成熟抗原）−ＴＮＦＲＳＦ１７（腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー、メンバー１７）
（５２）ＣＴ Ａｇｓ−ＣＴＡ（癌精巣抗原）
（５３）ＣＤ１７４（ルイス式Ｙ）−ＦＵＴ３（フコシルトランスフェラーゼ３（ガラクトシド３（４）−Ｌ−フコシルトランスフェラーゼ、ルイス式血液型群）
（５４）ＣＬＥＣ１４Ａ（Ｃ型レクチンドメインファミリー１４、メンバーＡ、Ｇｅｎｂａｎｋ受入番号ＮＭ１７５０６０）
（５５）ＧＲＰ７８−ＨＳＰＡ５（熱ショック７０ｋＤａタンパク質５（グルコース制御タンパク質、７８ｋＤａ）
（５６）ＣＤ７０（ＣＤ７０分子）Ｌ０８０９６
（５７）幹細胞特異的抗原。例えば、以下：
・５Ｔ４（以下のエントリー（６３）を参照）
・ＣＤ２５（上記エントリー（４８）を参照）
・ＣＤ３２
・ＬＧＲ５／ＧＰＲ４９
・プロミニン（Ｐｒｏｍｉｎｉｎ）／ＣＤ１３３
（５８）ＡＳＧ−５
（５９）ＥＮＰＰ３（エクトヌクレオチドピロホスファターゼ／ホスホジエステラーゼ３）
（６０）ＰＲＲ４（プロリンリッチ４（涙腺））
（６１）ＧＣＣ−ＧＵＣＹ２Ｃ（グアニル酸シクラーゼ２Ｃ（熱安定性エンテロトキシン受容体）
（６２）Ｌｉｖ−１−ＳＬＣ３９Ａ６（溶質輸送体ファミリー３９（亜鉛輸送体）、メンバー６）
（６３）５Ｔ４、トロホブラスト糖タンパク質、ＴＰＢＧ−ＴＰＢＧ（トロホブラスト糖タンパク質）
（６４）ＣＤ５６−ＮＣＭＡ１（神経細胞接着分子１）
（６５）ＣａｎＡｇ（腫瘍関連抗原ＣＡ２４２）
（６６）ＦＯＬＲ１（葉酸受容体１）
（６７）ＧＰＮＭＢ（糖タンパク質（膜貫通型）ｎｍｂ）
（６８）ＴＩＭ−１−ＨＡＶＣＲ１（Ａ型肝炎ウイルス細胞受容体１）
（６９）ＲＧ−１／前立腺腫瘍標的ミンディン−ミンディン／ＲＧ−１
（７０）Ｂ７−Ｈ４−ＶＴＣＮ１（Ｖ−ｓｅｔドメイン含有Ｔ細胞活性化インヒビタ−１）
（７１）ＰＴＫ７（ＰＴＫ７タンパク質チロシンキナーゼ７）
（７２）ＣＤ３７（ＣＤ３７分子）
（７３）ＣＤ１３８−ＳＤＣ１（シンデカン１）
（７４）ＣＤ７４（ＣＤ７４分子、主要組織適合遺伝子複合体、クラスＩＩインバリアント鎖）
（７５）クローディン−ＣＬ（クローディン）
（７６）ＥＧＦＲ（上皮増殖因子受容体）
（７７）Ｈｅｒ３（ＥｒｂＢ３）−ＥＲＢＢ３（ｖ−ｅｒｂ−ｂ２赤芽球性白血病ウイルス性癌遺伝子ホモログ３（トリ））
（７８）ＲＯＮ−ＭＳＴ１Ｒ（マクロファージ刺激１受容体（ｃ−ｍｅｔ関連チロシンキナーゼ））
（７９）ＥＰＨＡ２（ＥＰＨ受容体Ａ２）
（８０）ＣＤ２０−ＭＳ４Ａ１（膜貫通の４つのドメイン（ｍｅｍｂｒａｎｅ−ｓｐａｎｎｉｎｇ  ４−ｄｏｍａｉｎｓ）、サブファミリーＡ、メンバー１）
（８１）テネイシンＣ−ＴＮＣ（テネイシンＣ）
（８２）ＦＡＰ（線維芽細胞活性化タンパク質、α）
（８３）ＤＫＫ−１（Ｄｉｃｋｋｏｐｆ１ホモログ（アフリカツメガエル））
（８４）ＣＤ５２（ＣＤ５２分子）
（８５）ＣＳ１−ＳＬＡＭＦ７（ＳＬＡＭファミリーメンバー７）
（８６）エンドグリン−ＥＮＧ（エンドグリン）
（８７）アネキシンＡ１−ＡＮＸＡ１（アネキシンＡ１）
（８８）Ｖ−ＣＡＭ（ＣＤ１０６）−ＶＣＡＭ１（血管細胞接着分子１）
【０１６３】
細胞結合剤を標識すると、例えば、複合体として又は複合体の一部として組み込む前の薬剤の検出又は精製を補助することができる。標識はビオチン標識であり得る。別の実施形態では、細胞結合剤を放射性同位体で標識することができる。
【０１６４】
リンカー単位とリガンド単位の連結
リガンド単位は、ジスルフィド結合によってリンカー単位と連結することができる。
【０１６５】
一実施形態において、リガンド単位と薬物リンカーとの間の連結は、リガンド単位のシステイン残基のチオール基と、薬物リンカー単位のマレイミド基との間で形成される。
【０１６６】
リガンド単位のシステイン残基は、連結を形成するためのリンカー単位の官能基との反応に利用可能であり得る。他の実施形態において、例えば、リガンド単位が抗体であるとき、抗体のチオール基は、鎖間ジスルフィド結合に関与し得る。これらの鎖間結合は、例えば、リンカー単位の官能基との反応の前に、ＤＴＴによる抗体の処理によって、遊離チオール基に変換され得る。
【０１６７】
いくつかの実施形態において、システイン残基が、抗体の重鎖又は軽鎖に導入される。抗体の重鎖又は軽鎖における、置換によるシステイン挿入の位置として、公開されている米国特許出願第２００７−００９２９４０号及び国際特許公開公報ＷＯ２００８０７０５９３に記載されているものが挙げられ、これらの文献は、本明細書に援用される。
【０１６８】
治療方法
本発明の化合物は、治療方法で使用することができる。治療方法も提供され、本方法は、治療を必要としている治療対象に、治療上有効量の式ＩＩの複合体を投与することを含む。「治療上有効量」という用語は、患者で有益性を示すのに十分な量である。そのような有益性とは、少なくとも１種の症状の少なくとも改善であってもよい。実際に投与される量ならびに投与の速度及び時間経過は、治療されようとしているものの性質及び重篤度に依存するだろう。治療の処方（例えば、投薬量の決定）は、一般医及び他の医師の責任能力の範囲内である。
【０１６９】
複合体は、治療しようとする症状に応じて、単独で投与することも、又は他の治療と、同時又は順次で併用投与することもできる。治療及び療法の例として、化学療法（例えば薬物をはじめとする活性作用剤の投与）、手術、及び放射線療法が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１７０】
本発明による、及び本発明に従って使用するための、医薬組成物（薬学的組成物）は、活性成分、すなわち式Ｉの複合体の他に、当業者に周知である薬学的に許容可能な賦形剤、担体、緩衝剤、安定剤、又は他の材料を含むことができる。そのような材料は、無毒でなければならず、かつ活性成分の効力に干渉してはならない。担体又は他の材料の詳細な性質は、投与経路に依存するだろう。投与経路は、経口であってもよいし、注射、例えば皮膚注射、皮下注射、又は静脈内注射によるものでもよい。
【０１７１】
経口投与用の医薬組成物（薬学的組成物）は、錠剤、カプセル剤、粉剤、又は液状の形状が可能である。錠剤は、固形担体又はアジュバントを含むことができる。液状医薬組成物（液状薬学的組成物）は、一般に、液状担体、例えば、水、石油、動物油若しくは植物油、鉱物油、又は合成油を含む。生理食塩水、ブドウ糖若しくは他の糖溶液、又はグリコール、例えばエチレングリコール、プロピレングリコール、又はポリエチレングリコールも含めることができる。カプセル剤は、固形担体、例えばゼラチンを含むことができる。
【０１７２】
静脈内注射、皮膚注射、又は皮下注射、あるいは患部への注射用として、活性成分は、非経口で許容可能な水溶液の形をとることができ、この水溶液は、発熱物質を含まず、かつ適切なｐＨ、等張力、及び安定性を有する。当業者なら、例えば、等張性ビヒクル（塩化ナトリウム注射液、リンゲル注射液、乳酸リンゲル注射液など）を用いて適切な溶液を調製することが容易にできる。保存剤、安定剤、緩衝液、抗酸化剤、及び／又は他の添加剤も、必要に応じて、含ませることができる。
【０１７３】
複合体は、増殖性疾患及び自己免疫疾患を治療するのに使用され得る。「増殖性疾患」という用語は、過剰細胞又は異常細胞の望ましくない又は制御不能の細胞増殖に関係し、そのような増殖は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏかｉｎ  ｖｉｖｏにおける、望ましくない、例えば腫瘍形成又は過形成性の増殖である。
【０１７４】
増殖性症状の例として、良性、前悪性、及び悪性の細胞増殖が挙げられるが、これらに限定されず、そのような細胞増殖として、新生物及び腫瘍（例えば、組織球腫、神経膠腫、星状細胞腫、骨腫）、がん（例えば、肺癌、小細胞肺癌、胃腸癌、腸癌、大腸癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、精巣癌、肝臓癌、腎臓癌、膀胱癌、膵臓癌、脳癌、肉腫、骨肉腫、カポジ肉腫、黒色腫)、白血病、乾癬、骨疾患、線維増殖性障害（例えば、結合組織のもの）、及び粥状動脈硬化が挙げられるが、これらに限定されない。対象となる他のがんとして、血液系、悪性腫瘍、例えば、白血病及びリンパ腫、例えば、非ホジキンリンパ腫、ならびにサブタイプ、例えば、ＤＬＢＣＬ、辺縁帯、マントル層及び小胞、ホジキンリンパ腫、ＡＭＬ、ならびにＢ又はＴ細胞由来の他のがんが挙げられるが、これらに限定されない。肺、胃腸（例えば、腸、結腸を含む）、乳房（乳腺）、卵巣、前立腺、肝臓（肝）、腎臓（腎）、膀胱、膵臓、脳、及び皮膚を含むがこれらに限定されない、あらゆる種類の細胞を治療することができる。
【０１７５】
自己免疫疾患の例として以下が挙げられる：関節リウマチ、自己免疫脱髄疾患（例えば、多発性硬化症、アレルギー性脳脊髄炎）、乾癬性関節炎、内分泌性眼障害、ぶどう膜網膜炎、全身性紅斑性狼瘡、重症筋無力症、グレーブス病、糸球体腎炎、自己免疫肝臓障害、炎症性腸疾患（例えば、クローン病）、アナフィラキシー、アレルギー反応、シェーグレン症候群、Ｉ型糖尿病、原発性胆汁性肝硬変、ウェゲナー肉芽腫症、線維筋痛、多発性筋炎、皮膚筋炎、多発性内分泌腺不全、シュミット症候群、自己免疫性ブドウ膜炎、アジソン病、副腎炎、甲状腺炎、橋本甲状腺炎、自己免疫性甲状腺疾患、悪性貧血、胃の萎縮症、慢性肝炎、ルポイド肝炎、粥状動脈硬化、亜急性皮膚エリテマトーデス、副甲状腺機能低下症、ドレスラー症候群、自己免疫性血小板減少症、突発性血小板減少性紫斑病、溶血性貧血、尋常性天疱瘡、天疱瘡、疱疹状皮膚炎、円形脱毛症、類天疱瘡、強皮症、進行性全身性硬化症、ＣＲＥＳＴ症候群（石灰沈着症、レイノー現象、食道運動障害、手指硬化症、及び毛細血管拡張症）、男性及び女性の自己免疫性不妊症、強直性脊椎炎、潰瘍性大腸炎、混合性結合組織病、結節性多発動脈炎、全身性壊死性血管炎、アトピー性皮膚炎、アトピー性鼻炎、グッドパスチャー症候群、シャーガス病、サルコイドーシス、リウマチ熱、喘息、再発性流産、抗リン脂質症候群、農夫肺、多形性紅斑、心術後症候群、クッシング症候群、自己免疫性慢性活動性肝炎、愛鳥家肺、中毒性表皮壊死症、アルポート症候群、肺胞炎、アレルギー性肺胞炎、線維化性肺胞炎、間質性肺疾患、結節性紅斑、壊疽性膿皮症、輸血反応、高安動脈炎、リウマチ性多発性筋痛、側頭動脈炎、住血吸虫症、巨細胞性動脈炎、回虫症、アスペルギルス症、サムター症候群、湿疹、リンパ腫様肉芽腫症、ベーチェット病、キャプラン症候群、川崎病、デング熱、脳脊髄炎、心内膜炎、心内膜心筋線維症、眼内炎、持久性隆起性紅斑、乾癬、胎児赤芽球症、好酸球性筋膜炎、シュルマン症候群、フェルティ症候群、フィラリア症、毛様体炎、慢性毛様体炎、異慢性毛様体炎、フックス毛様体炎、ＩｇＡ腎症、ヘノッホ−シェーンライン紫斑病、移植片対宿主病、移植拒絶反応、心筋症、イートン−ランバート症候群、再発性多発性軟骨炎、クリオグロブリン血症、ワルデンストレームマクログロブリン血症、エバンス症候群、及び自己免疫性腺機能不全。
【０１７６】
いくつかの実施形態において、自己免疫疾患は、Ｂリンパ球の障害（例えば、全身性紅斑性狼瘡、グッドパスチャー症候群、関節リウマチ、及びＩ型糖尿病）、Ｔｈ１リンパ球の障害（例えば、関節リウマチ、多発性硬化症、乾癬、シェーグレン症候群、橋本甲状腺炎、グレーブス病、原発性胆汁性肝硬変、ウェゲナー肉芽腫症、結核、若しくは移植片対宿主病）、又はＴｈ２リンパ球の障害（例えば、アトピー性皮膚炎、全身性紅斑性狼瘡、アトピー性喘息、鼻結膜炎、アレルギー性鼻炎、オーメン症候群、全身性硬化症、若しくは慢性移植片対宿主病）である。一般に、樹状細胞が関与する障害は、Ｔｈ１リンパ球又はＴｈ２リンパ球の障害を含む。いくつかの実施形態において、自己免疫性疾患は、Ｔ細胞媒介免疫障害である。
【０１７７】
治療法
本発明の複合体は、治療法に使用することができる。治療を必要とする対象に治療上有効量の本発明の複合体化合物を投与することを含む治療方法も提供される。「治療上有効量」という用語は、患者に効能を示すのに十分な量である。そのような効能とは、少なくとも１種の症状の少なくとも改善であってもよい。実際に投与される量ならびに投与の速度及び時間経過は、処置対象の性質及び重篤度に依存することになる。治療の処方（例えば、投与量の決定）は、一般医及び他の医師の責任能力の範囲内である。
【０１７８】
本発明の化合物は、治療しようとする病態に応じて、単独で投与することも、又は他の治療と同時に又は逐次に併用投与することもできる。治療及び療法の例として、化学療法（例えば化学療法剤などの薬物を含む、活性剤の投与）；手術；及び放射線療法が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１７９】
「化学療法剤」は、作用機序を問わず、がんの治療に有用な化合物である。化学療法剤のクラスとして、アルキル化剤、代謝拮抗剤、紡錘体毒植物アルカロイド、細胞毒性／抗腫瘍抗生物質、トポイソメラーゼ阻害剤、抗体、光増感剤、及びキナーゼ阻害剤が挙げられるが、これらに限定されない。化学療法剤には、「標的療法」及び従来の化学療法に使用される化合物が含まれる。
【０１８０】
化学療法剤の例として、エルロチニブ（ＴＡＲＣＥＶＡ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ／ＯＳＩ  Ｐｈａｒｍ．）、ドセタキセル（ＴＡＸＯＴＥＲＥ（登録商標）、Ｓａｎｏｆｉ−Ａｖｅｎｔｉｓ）、５−ＦＵ（フルオロウラシル、５−フルオロウラシル、ＣＡＳ番号５１−２１−８）、ゲムシタビン（ＧＥＭＺＡＲ（登録商標）、Ｌｉｌｌｙ）、ＰＤ−０３２５９０１（ＣＡＳ番号３９１２１０−１０−９、Ｐｆｉｚｅｒ）、シスプラチン（ｃｉｓ−ジアミン、ジクロロ白金（ＩＩ）、ＣＡＳ番号１５６６３−２７−１）、カルボプラチン（ＣＡＳ番号４１５７５−９４−４）、パクリタキセル（ＴＡＸＯＬ（登録商標）、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ，Ｎ．Ｊ．）、トラスツズマブ（ＨＥＲＣＥＰＴＩＮ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）、テモゾロミド（４−メチル−５−オキソ−２，３，４，６，８−ペンタザビシクロ［４．３．０］ノナ−２，７，９−トリエン−９−カルボキサミド、ＣＡＳ番号８５６２２−９３−１、ＴＥＭＯＤＡＲ（登録商標）、ＴＥＭＯＤＡＬ（登録商標）、Ｓｃｈｅｒｉｎｇ  Ｐｌｏｕｇｈ）、タモキシフェン（（Ｚ）−２−［４−（１，２−ジフェニルブタ−１−エニル）フェノキシ］−Ｎ，Ｎ−ジメチルエタンアミン、ＮＯＬＶＡＤＥＸ（登録商標）、ＩＳＴＵＢＡＬ（登録商標）、ＶＡＬＯＤＥＸ（登録商標））、及びドキソルビシン（ＡＤＲＩＡＭＹＣＩＮ（登録商標））、Ａｋｔｉ−１／２、ＨＰＰＤ、及びラパマイシンが挙げられる。
【０１８１】
化学療法剤のその他の例として、オキサリプラチン（ＥＬＯＸＡＴＩＮ（登録商標）、Ｓａｎｏｆｉ）、ボルテゾミブ（ＶＥＬＣＡＤＥ（登録商標）、Ｍｉｌｌｅｎｎｉｕｍ  Ｐｈａｒｍ．）、スーテント（ＳＵＮＩＴＩＮＩＢ（登録商標）、ＳＵ１１２４８、Ｐｆｉｚｅｒ）、レトロゾール（ＦＥＭＡＲＡ（登録商標）、Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、イマチニブメシル酸塩（ＧＬＥＥＶＥＣ（登録商標）、Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＸＬ−５１８（Ｍｅｋ阻害剤、Ｅｘｅｌｉｘｉｓ、ＷＯ２００７／０４４５１５）、ＡＲＲＹ−８８６（Ｍｅｋ阻害剤、ＡＺＤ６２４４、Ａｒｒａｙ  ＢｉｏＰｈａｒｍａ、Ａｓｔｒａ  Ｚｅｎｅｃａ）、ＳＦ−１１２６（ＰＩ３Ｋ阻害剤、Ｓｅｍａｆｏｒｅ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、ＢＥＺ−２３５（ＰＩ３Ｋ阻害剤、Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＸＬ−１４７（ＰＩ３Ｋ阻害剤、Ｅｘｅｌｉｘｉｓ）、ＰＴＫ７８７／ＺＫ２２２５８４（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、フルベストラント（ＦＡＳＬＯＤＥＸ（登録商標）、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）、ロイコボリン（葉酸）、ラパマイシン（シロリムス、ＲＡＰＡＭＵＮＥ（登録商標）、Ｗｙｅｔｈ）、ラパチニブ（ＴＹＫＥＲＢ（登録商標）、ＧＳＫ５７２０１６、Ｇｌａｘｏ  Ｓｍｉｔｈ  Ｋｌｉｎｅ）、ロナファルニブ（ＳＡＲＡＳＡＲ（商標）、ＳＣＨ  ６６３３６、Ｓｃｈｅｒｉｎｇ  Ｐｌｏｕｇｈ）、ソラフェニブ（ＮＥＸＡＶＡＲ（登録商標）、ＢＡＹ４３−９００６、Ｂａｙｅｒ  Ｌａｂｓ）、ゲフィチニブ（ＩＲＥＳＳＡ（登録商標）、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）、イリノテカン（ＣＡＭＰＴＯＳＡＲ（登録商標）、ＣＰＴ−１１、Ｐｆｉｚｅｒ）、ティピファルニブ（ＺＡＲＮＥＳＴＲＡ（商標）、Ｊｏｈｎｓｏｎ＆Ｊｏｈｎｓｏｎ）、ＡＢＲＡＸＡＮＥ（商標）（クレモフォールフリー）、パクリタキセルのアルブミン改変ナノ粒子製剤（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐａｒｔｎｅｒｓ，Ｓｃｈａｕｍｂｅｒｇ，ＩＩ）、バンデタニブ（ｒＩＮＮ、ＺＤ６４７４、ＺＡＣＴＩＭＡ（登録商標）、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）、クロラムブシル、ＡＧ１４７８、ＡＧ１５７１（ＳＵ  ５２７１；Ｓｕｇｅｎ）、テムシロリムス（ＴＯＲＩＳＥＬ（登録商標）、Ｗｙｅｔｈ）、パゾパニブ（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）、カンホスファミド（ＴＥＬＣＹＴＡ（登録商標）、Ｔｅｌｉｋ）、チオテパ、及びシクロホスファミド（ＣＹＴＯＸＡＮ（登録商標）、ＮＥＯＳＡＲ（登録商標））；ブスルファン、インプロスルファン、及びピポスルファンなどのスルホン酸アルキル；ベンゾドパ、カルボコン、メトレドパ、及びウレドパなどのアジリジン；アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホルアミド、トリエチレンチオホスホルアミド、及びトリメチロメラミンを含むエチレンイミン及びメチルアメラミン；アセトゲニン（特にブラタシン及びブラタシノン）；カンプトテシン（合成類似体トポテカンを含む）；ブリオスタチン；カリスタチン；ＣＣ−１０６５（そのアドゼレシン合成類似体、カルゼレシン合成類似体、及びビゼレシン合成類似体を含む）；クリプトフィシン（特にクリプトフィシン１及びクリプトフィシン８）；ドラスタチン；デュオカルマイシン（合成類似体、ＫＷ−２１８９及びＣＢ１−ＴＭ１を含む）；エリュテロビン；パンクラチスタチン；サルコジクチイン；スポンジスタチン；クロラムブシル、クロルナファジン、クロロホスファミド、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、メクロレタミンオキシド塩酸塩、メルファラン、ノブエンビキン、フェネステリン、プレドニムスチン、トロホスファミド、ウラシルマスタードなどのナイトロジェンマスタード；カルムスチン、クロロゾトシン、フォテムスチン、ロムスチン、ニムスチン、及びラニムスチンなどのニトロソウレア；エンジイン抗生物質（例えば、カリケアマイシン、カリケアマイシンガンマ１Ｉ、カリケアマイシンオメガＩ１（Ａｎｇｅｗ，Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔｌ．Ｅｄ．Ｅｎｇｌ．（１９９４）３３：１８３−１８６）などの抗生物質；ジネマイシン、ジネマイシンＡ；クロドロネートなどのビスホスホネート；エスペラマイシン；ならびにネオカルチノスタチン発色団及び関連色素タンパク質エンジイン抗生物質発色団、アクラシノマイシン、アクチノマイシン、オースラマイシン、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カラビシン、カルミノマイシン、カルジノフィリン、クロモマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン、６−ジアゾ−５−オキソ−Ｌ−ノルロイシン、モルホリノードキソルビシン、シアノモルホリノードキソルビシン、２−ピロリノードキソルビシン、及びデオキシドキソルビシン）、エピルビシン、エソルビシン、イダルビシン、ネモルビシン、マルセロマイシン、マイトマイシンＣなどのマイトマイシン、マイコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン、ペプロマイシン、ポルフィロマイシン、ピューロマイシン、ケラマイシン、ロドルビシン、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメクス、ジノスタチン、ゾルビシン；メトトレキサート及び５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）などの代謝拮抗薬；デノプテリン、メトトレキサート、プテロプテリン、トリメトレキサートなどの葉酸類似体；フルダラビン、６−メルカプトプリン、チアミプリン、チオグアニンなどのプリン類似体；アンシタビン、アザシチジン、６−アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロクスウリジンなどのピリミジン類似体；カルステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトンなどのアンドロゲン；アミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタンなどの抗副腎薬；フロリン酸などの葉酸補充薬；アセグラトン；アルドホスファミドグリコシド；アミノレブリン酸；エニルウラシル；アムサクリン；ベストラブシル；ビサントレン；エダトラキサート；デフォファミン；デメコルシン；ジアジクオン；エルホルニチン；酢酸エリプチニウム；エポチロン；エトグルシド；硝酸ガリウム；ヒドロキシウレア；レンチナン；ロニダイニン；マイタンシン及びアンサミトシンなどのマイタンシノイド；ミトグアゾン；ミトキサントロン；モピダンモール；ニトラエリン；ペントスタチン；フェナメット；ピラルビシン；ロソキサントロン；ポドフィリン酸；２−エチルヒドラジド；プロカルバジン；ＰＳＫ（登録商標）多糖複合体（ＪＨＳ  ���ａｔｕｒａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ，Ｅｕｇｅｎｅ，ＯＲ）；ラゾキサン；リゾキシン；シゾフィラン；スピロゲルマニウム；テヌアゾン酸；トリアジコン；２，２’，２”−トリクロロトリエチルアミン；トリコテセン（特にＴ−２毒素、ベラクリンＡ、ロリジンＡ、及びアングイジン）；ウレタン；ビンデシン；ダカルバジン；マンノムスチン；ミトブロニトール；ミトラクトール；ピポブロマン；ガシトシン；アラビノシド（「Ａｒａ−Ｃ」）；シクロホスファミド；チオテパ；６−チオグアニン；メルカプトプリン；メトトレキサート；シスプラチン及びカルボプラチンなどの白金類似体；ビンブラスチン；エトポシド（ＶＰ−１６）；イホスファミド；ミトキサントロン；ビンクリスチン；ビノレルビン（ＮＡＶＥＬＢＩＮＥ（登録商標））；ノバントロン；テニポシド；エダトレキサート；ダウノマイシン；アミノプテリン；カペシタビン（ＸＥＬＯＤＡ（登録商標）、Ｒｏｃｈｅ）イバンドロネート；ＣＰＴ−１１；トポイソメラーゼ阻害剤ＲＦＳ２０００；ジフルオロメチルオルニチン（ＤＭＦＯ）；レチノイン酸などのレチノイド；ならびに上記のいずれかの薬学的に許容可能な塩、酸、又は誘導体が挙げられる。
【０１８２】
「化学療法剤」の定義に含まれるのは以下の通りである：（ｉ）抗エストロゲン及び選択的エストロゲン受容体モジュレーター（ＳＥＲＭ）などの、腫瘍に対するホルモン作用を調節又は阻害するように作用する抗ホルモン剤、例えばタモキシフェン（ＮＯＬＶＡＤＥＸ（登録商標）；タモキシフェンクエン酸塩を含む）、ラロキシフェン、ドロロキシフェン、４−ヒドロキシタモキシフェン、トリオキシフェン、ケオキシフェン、ＬＹ１１７０１８、オナプリストン、及びＦＡＲＥＳＴＯＮ（登録商標）（トレミフェンクエン酸塩）を含む；（ｉｉ）副腎におけるエストロゲン産生を調節する酵素アロマターゼを阻害するアロマターゼ阻害剤、例えば、４（５）−イミダゾール、アミノグルテチミド、ＭＥＧＡＳＥ（登録商標）（酢酸メゲストロール）、ＡＲＯＭＡＳＩＮ（登録商標）（エキセメスタン；Ｐｆｉｚｅｒ）、フォルメスタニー、ファドロゾール、ＲＩＶＩＳＯＲ（登録商標）（ボロゾール）、ＦＥＭＡＲＡ（登録商標）（レトロゾール；Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、及びＡＲＩＭＩＤＥＸ（登録商標）（アナストロゾール；ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）など；（ｉｉｉ）抗アンドロゲン、例えばフルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、ロイプロリド、ゴセレリン；トロキサシタビン（１，３−ジオキソランヌクレオシドシトシン類似体）；（ｉｖ）プロテインキナーゼ阻害剤、例えばＭＥＫ阻害剤（ＷＯ２００７／０４４５１５）；（ｖ）脂質キナーゼ阻害剤；（ｖｉ）アンチセンスオリゴヌクレオチド、特に異常な細胞増殖に関与するシグナル伝達経路における遺伝子の発現、例えば、ＰＫＣ−アルファ、Ｒａｆ及びＨ−Ｒａｓを阻害するもの、例えばオブリメルセン（ＧＥＮＡＳＥＮＳＥ（登録商標）、Ｇｅｎｔａ  Ｉｎｃ．）；（ｖｉｉ）ＶＥＧＦ発現阻害剤（例えば、ＡＮＧＩＯＺＹＭＥ（登録商標））及びＨＥＲ２発現阻害剤などのリボザイム；（ｖｉｉｉ）遺伝子治療ワクチンなどのワクチン、例えばＡＬＬＯＶＥＣＴＩＮ（登録商標）、ＬＥＵＶＥＣＴＩＮ（登録商標）、及びＶＡＸＩＤ（登録商標）；ＰＲＯＬＥＵＫＩＮ（登録商標）ｒＩＬ−２；ＬＵＲＴＯＴＥＣＡＮ（登録商標）などのトポイソメラーゼ１阻害剤；ＡＢＡＲＥＬＩＸ（登録商標）ｒｍＲＨ；（ｉｘ）ベバシズマブ（ＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）などの抗血管新生剤；ならびに上記のいずれかの薬学的に許容可能な塩、酸、及び誘導体。
【０１８３】
「化学療法剤」の定義には、アレムツズマブ（Ｃａｍｐａｔｈ）、ベバシズマブ（ＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）；セツキシマブ（ＥＲＢＩＴＵＸ（登録商標）、Ｉｍｃｌｏｎｅ）；パニツムマブ（ＶＥＣＴＩＢＩＸ（登録商標）、Ａｍｇｅｎ）、リツキシマブ（ＲＩＴＵＸＡＮ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ／Ｂｉｏｇｅｎ  Ｉｄｅｃ）、ペルツズマブ（ＯＭＮＩＴＡＲＧ（商標）、２Ｃ４、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）、トラスツズマブ（ＨＥＲＣＥＰＴＩＮ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）、トシツモマブ（Ｂｅｘｘａｒ、Ｃｏｒｉｘｉａ）、及び抗体薬物複合体ゲムツズマブオゾガマイシン（ＭＹＬＯＴＡＲＧ（登録商標）、Ｗｙｅｔｈ）などの治療用抗体も含まれる。
【０１８４】
本発明の複合体と組み合わせた化学療法剤としての治療可能性を有するヒト化モノクローナル抗体として、アレムツズマブ、アポリズマブ、アセリズマブ、アトリズマブ、バピネウズマブ、ベバシズマブ、ビバツズマブメルタンシン、カンツズマブメルタンシン、セデリズマブ、セルトリズマブペゴル、シドフシツズマブ、シドツズマブ、ダクリズマブ、エクリズマブ、エファリズマブ、エプラツズマブ、エルリズマブ、フェルビズマブ、フォントリズマブ、ゲムツズマブオゾガマイシン、イノツズマブオゾガマイシン、イピリムマブ、ラベツズマブ、リンツズマブ、マツズマブ、メポリズマブ、モタビズマブ、ナタリズマブ、ニモツズマブ、ノロビズマブ、ヌマビズマブ、オクレリズマブ、オマリズマブ、パリビズマブ、パスコリズマブ、ペクシツズマブ、ペクツズマブ、ペルツズマブ、ペクセリズマブ、ラリビズマブ、ラニビズマブ、レスリビズマブ、レスリズマブ、レシビズマブ、ロベリズマブ、ルプリズマブ、シブロツズマブ、シプリズマブ、ソンツズマブ、タカツズマブテトラキセタン、タドシズマブ、タリズマブ、テフィバズマブ、トシリズマブ、トラリズマブ、トラスツズマブ、ツコツズマブセルモロイキン、ツクシツズマブ、ウマビズマブ、ウルトキサズマブ、及びビシリズマブが挙げられる。
【０１８５】
本発明に従う医薬組成物、及び本発明に従って使用するための医薬組成物は、活性成分、すなわち複合体化合物に加えて、薬学的に許容可能な賦形剤、担体、緩衝液、安定剤、又は当業者に周知である他の材料を含み得る。そのような材料は、無毒でなければならず、かつ活性成分の有効性を妨げてはならない。担体又は他の材料の厳密な性質は、投与経路に応じて異なり、投与経路は、経口であっても、注射、例えば皮膚注射、皮下注射、又は静脈内注射によるものでもよい。
【０１８６】
経口投与用の医薬組成物は、錠剤、カプセル剤、散剤、又は液状の形態が可能である。錠剤は、固形担体又はアジュバントを含み得る。液状医薬組成物は、一般に、液状担体、例えば、水、石油、動物油若しくは植物油、鉱物油又は合成油を含む。生理食塩水、デキストロース若しくは他の糖溶液、又はグリコール、例えばエチレングリコール、プロピレングリコール、又はポリエチレングリコールを含み得る。カプセル剤は、固形担体、例えばゼラチンを含み得る。
【０１８７】
静脈内注射、皮膚注射、若しくは皮下注射、又は患部への注射の場合、活性成分は、非経口で許容可能な水溶液形態をとり、発熱物質を含まず、かつ適切なｐＨ、等張性、及び安定性を有する。当業者であれば、例えば、等張性ビヒクル（塩化ナトリウム注射液、リンゲル注射液、乳酸リンゲル注射液など）を用いて適切な溶液を容易に調製することができる。必要に応じて保存剤、安定剤、緩衝液、抗酸化剤、及び／又は他の添加剤を含んでもよい。
【０１８８】
製剤
複合体化合物を単独で使用（例えば投与）することは可能であるが、組成物又は製剤として提示することが好ましい場合が多い。
【０１８９】
一実施形態では、組成物は、本明細書に記載の複合体化合物、及び薬学的に許容可能な担体、希釈剤、又は賦形剤を含む医薬組成物（例えば、製剤、調製物、医薬品）である。
【０１９０】
一実施形態では、組成物は、本明細書に記載の少なくとも１つの複合体化合物を、当業者に周知の１つ以上の他の薬学的に許容可能な成分とともに含む医薬組成物である。薬学的に許容可能な成分には、限定されるものではないが、薬学的に許容可能な担体、希釈剤、賦形剤、アジュバント、増量剤、緩衝液、保存剤、抗酸化剤、滑沢剤、安定剤、可溶化剤、界面活性剤（例えば、湿潤剤）、マスキング剤、着色剤、香味剤、及び甘味剤が含まれる。
【０１９１】
一実施形態では、組成物は、他の活性剤、例えば、他の治療薬又は予防薬をさらに含む。
【０１９２】
好適な担体、希釈剤、賦形剤などは、標準的な薬学教科書で参照することができる。例えば、Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ａｄｄｉｔｉｖｅｓ，２ｎｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ（ｅｄｓ．Ｍ．Ａｓｈ  ａｎｄ  Ｉ．Ａｓｈ），２００１（Ｓｙｎａｐｓｅ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ  Ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ，Ｉｎｃ．，Ｅｎｄｉｃｏｔｔ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ＵＳＡ）、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，２０ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，ｐｕｂ．Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ，２０００；及びＨａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ，２ｎｄ  ｅｄｉｔｉｏｎ，１９９４を参照のこと。
【０１９３】
本発明の別の態様は、本明細書で定義される少なくとも１つの［11Ｃ］−放射性標識複合体又は複合体様化合物を、当業者に周知の１つ以上の他の薬学的に許容可能な成分、例えば担体、希釈剤、賦形剤などと混合することを含む、医薬組成物の作製方法に関する。個別の単位（例えば、錠剤など）として製剤化される場合、各単位は、所定量（投与量）の活性化合物を含有する。
【０１９４】
本明細書中で使用される場合、「薬学的に許容可能」という用語は、化合物、成分、材料、組成物、剤形などが、過度の毒性、刺激、アレルギー反応、又は他の問題若しくは合併症を伴うことなく、堅実な医学的判断の範囲内で、当該対象（例えばヒト）の組織に接触させて使用するのに適しており、妥当なベネフィット／リスク比に見合うことを指す。各担体、希釈剤、賦形剤なども、製剤の他の成分と適合性があるという意味で「許容可能」でなければならない。
【０１９５】
製剤は、製薬業界で周知されている任意の方法で調製することができる。そのような方法は、活性化合物を、１つ以上の補助成分を構成する担体と会合させる工程を含む。一般に、製剤は、活性化合物を担体（例えば、液状担体、微粉化固体担体など）と均一かつ密接に会合させた後、必要に応じて製品を成形することによって調製される。
【０１９６】
製剤は、迅速放出若しくは低速放出；即時放出、遅延放出、時限放出、若しくは持続放出；又はそれらの組み合わせで提供するように調製することができる。
【０１９７】
非経口投与（例えば、注射による）に適した製剤として、活性成分が溶解、懸濁、又はその他の方法（例えば、リポソーム又は他の微粒子中）で供給される、水性又は非水性、等張性、発熱物質非含有の滅菌液体（例えば、溶液、懸濁液）が挙げられる。そのような液体は、目的とするレシピエントの血液（又は他の関連する体液）と製剤を等張にする他の薬学的に許容可能な成分、例えば抗酸化剤、緩衝液、保存剤、安定剤、静菌剤、懸濁剤、増粘剤、及び溶質などを追加で含有してもよい。賦形剤の例として、例えば、水、アルコール、ポリオール、グリセロール、植物油などが挙げられる。そのような製剤での使用に適した等張性担体の例として、塩化ナトリウム注射液、リンゲル液、又は乳酸リンゲル注射液が挙げられる。通常は、液体中の活性成分の濃度は、約１ｎｇ／ｍｌ〜約１０μｇ／ｍｌ、例えば約１０ｎｇ／ｍｌ〜約１μｇ／ｍｌである。製剤は、単回用量又は複数回用量の密封容器、例えば、アンプル及びバイアルで提供されても、使用直前に滅菌液状担体、例えば注射用水の添加のみを必要とするフリーズドライ（凍結乾燥）状態で保存されていてもよい。即時注射溶液及び懸濁液は、滅菌された散剤、顆粒剤、及び錠剤から調製することができる。
【０１９８】
投与量
複合体化合物及び複合体化合物を含む組成物の適切な投与量が、患者ごとに異なり得ることを当業者は理解されよう。最適な投与量の決定には、一般に、何らかのリスク又は有害な副作用に対する治療的効能レベルのバランス調整を伴うことになる。選択する投与量レベルは、特定の化合物の活性、投与経路、投与時間、化合物の排泄速度、治療の持続期間、併用される他の薬物、化合物及び／又は物質、病態の重篤度、ならびに患者の種、性別、年齢、体重、病態、全身健康状態及び以前の病歴を含むが、それに限定されない様々な要因に応じて異なる。一般に、実質的な有害又は有毒な副作用を引き起こすことなく所望の効果を達成する、作用部位での局所濃度を達成するように投与量が選択されるが、化合物の量及び投与経路は、最終的には医師、獣医、又は臨床医の裁量による。
【０１９９】
投与は、治療の過程を通して、連続的又は断続的に（例えば、適切な間隔の分割用量で）１回の用量で行うことができる。最も有効な投与手段及び投与量を決定する方法は当業者に周知であり、療法に使用される製剤、療法の目的、治療される標的細胞（複数可）、及び治療される対象に応じて異なる。治療を行う医師、獣医、又は臨床医が選択する用量レベル及びパターンで単回投与又は複数回投与を実施することができる。
【０２００】
一般に、活性化合物の好適な用量は、対象の体重１キログラムあたり約１００ｎｇ〜約２５ｍｇ（より典型的には約１μｇ〜約１０ｍｇ）／日の範囲内である。活性化合物が塩、エステル、アミド、プロドラッグなどである場合、投与量は親化合物に基づいて算出されるため、使用される実際の重量もそれに比例して増加する。
【０２０１】
一実施形態では、活性化合物は、約１００ｍｇ、１日３回という投与レジメンに従ってヒト患者に投与される。
【０２０２】
一実施形態では、活性化合物は、約１５０ｍｇ、１日２回という投与レジメンに従ってヒト患者に投与される。
【０２０３】
一実施形態では、活性化合物は、約２００ｍｇ、１日２回という投与レジメンに従ってヒト患者に投与される。
【０２０４】
しかしながら、一実施形態では、複合体化合物は、約５０ｍｇ又は約７５ｍｇ、１日３回又は４回という投与レジメンに従ってヒト患者に投与される。
【０２０５】
一実施形態では、複合体化合物は、約１００又は約１２５ｍｇ、１日２回という投与レジメンに従ってヒト患者に投与される。
【０２０６】
上記の投与量は、複合体（ＰＢＤ部分、及び抗体とのリンカーを含む）、又は提供されるＰＢＤ化合物の有効量、例えばリンカーの切断後に放出可能である化合物の量に該当し得る。
【０２０７】
疾患の予防又は治療の場合、本発明のＡＤＣの適切な投与量は、分子が予防目的で投与されるか治療目的で投与されるか、既存療法、患者の臨床歴及び抗体に対する反応性、ならびに主治医の裁量を問わず、上記で定義した治療される疾患の種類、疾患の重篤度及び経過に応じて異なる。分子は一度に又は一連の治療過程にわたって患者に適切に投与される。疾患の種類と重篤度に応じて、分子約１μｇ／ｋｇ〜１５ｍｇ／ｋｇ（例えば、０．１〜２０ｍｇ／ｋｇ）が患者に投与される初期候補投与量であり、これは例えば１回以上の個別の投与によるか連続注入によるかを問わない。通常の１日投与量は、上記の要因に応じて、約１μｇ／ｋｇ〜１００ｍｇ／ｋｇ以上の範囲内であり得る。患者に投与されるＡＤＣの例示的な投与量は、約０．１〜約１０ｍｇ／ｋｇ（患者の体重）の範囲内である。数日又はそれ以上の反復投与の場合、病態に応じて、疾患症状の望ましい抑制が生じるまで治療が持続される。例示的な投与レジメンは、約４ｍｇ／ｋｇの初期負荷用量の投与に続いて、ＡＤＣを毎週、２週間、又は３週間追加投与する過程を含む。他の投与レジメンが有用な場合もある。この療法の進捗は、従来の技術及びアッセイによって容易にモニタリングされる。
【０２０８】
薬物負荷量
薬物負荷量（ｐ）は、細胞結合剤（例えば抗体）あたりのＰＢＤ薬物の平均数である。本発明の化合物がシステインに結合している場合、薬物負荷量は、細胞結合剤あたり１〜８個の薬物（Ｄ）の範囲であり得る。すなわち、１、２、３、４、５、６、７、及び８個の薬物部分が細胞結合剤に共有結合している。複合体の組成物は、１〜８個の範囲の薬物と複合体化された細胞結合剤（例えば、抗体）の集合体を含む。本発明の化合物がリジンに結合している場合、薬物負荷量は、細胞結合剤あたり１〜８０個の薬物（Ｄ）の範囲であり得るが、４０、２０、１０、又は８個を上限とすることが好ましい場合がある。複合体の組成物は、１〜８０、１〜４０、１〜２０、１〜１０、又は１〜８個の範囲の薬物と複合体化された細胞結合剤（例えば、抗体）の集合体を含む。
【０２０９】
複合体化反応からＡＤＣを調製する際の抗体あたりの薬物の平均数を、ＵＶ、逆相ＨＰＬＣ、ＨＩＣ、質量分析、ＥＬＩＳＡアッセイ、及び電気泳動などの従来の手段で特性決定することができる。ｐに関するＡＤＣの定量分布を測定することもできる。ＡＤＣの特定の調製について、ｐの平均値をＥＬＩＳＡにより判定することができる（Ｈａｍｂｌｅｔｔ  ｅｔ  ａｌ（２００４）Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．１０：７０６３−７０７０；Ｓａｎｄｅｒｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ（２００５）Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．１１：８４３−８５２）。ただし、ｐ（薬物）値の分布は、ＥＬＩＳＡの抗体抗原結合及び検出限界では識別できない。また、抗体薬物複合体を検出するためのＥＬＩＳＡアッセイでは、重鎖断片若しくは軽鎖断片、又は特定のアミノ酸残基など、抗体に薬物部分が結合している場所は判定できない。場合によっては、ｐが他の薬物負荷量をもつＡＤＣによる特定の値である場合に、均一なＡＤＣの分離、精製、及び特性決定を、逆相ＨＰＬＣ又は電気泳動などの手段によって行うことができる。そのような技術は、他の種類の複合体にも適用可能である。
【０２１０】
一部の抗体薬物複合体では、抗体の結合部位の数によってｐが制限される場合がある。例えば、抗体は、システインチオール基を１個のみ又は数個有する場合もあれば、又は十分な反応性によってリンカーの結合を可能にするチオール基を１個のみ又は数個有する場合もある。薬物負荷量が大きい場合、例えばｐ＞５のとき、ある種の抗体薬物複合体の凝集、不溶性、毒性、又は細胞透過性の損失を引き起こす可能性がある。
【０２１１】
典型的には、複合体化反応時に抗体と複合体化される薬物部分は、理論的な最大数よりも少ない。抗体には、例えば、薬物リンカーと反応しない多くのリジン残基が含まれている場合がある。最も反応性の高いリジン基のみがアミン反応性リンカー試薬と反応することができる。また、最も反応性の高いシステインチオール基のみがチオール反応性リンカー試薬と反応することができる。一般に抗体は、薬物部分と連結可能な遊離した反応性のシステインチオール基を、あったとしてもあまり多くは含まない。化合物の抗体にあるシステインチオール残基の大半はジスルフィド結合として存在しており、部分的又は全体的な還元条件下で、ジチオトレイトール（ＤＴＴ）又はＴＣＥＰなどの還元剤で還元する必要がある。ＡＤＣの負荷量（薬物／抗体比）は、いくつかの異なる方法で制御することができる。このような方法として、（ｉ）抗体に対するモル過剰の薬物リンカーの制限、（ｉｉ）複合体化反応の時間又は温度の制限、及び（ｉｉｉ）システインチオール修飾の部分的又は限定的な還元条件が挙げられる。
【０２１２】
ある種の抗体は、還元可能な鎖間ジスルフィド、すなわちシステイン結合を有する。ＤＴＴ（ジチオトレイトール）などの還元剤で処理することにより、リンカー試薬による複合体化に対して抗体を反応性にすることができる。したがって、各システイン結合は、理論的には２つの反応性チオール求核分子を形成することになる。リジンと２−イミノチオラン（トラウト試薬）との反応により、追加の求核基を抗体に導入し、アミンをチオールに変換することができる。１つ、２つ、３つ、４つ、又はそれ以上のシステイン残基を操作する（例えば、１つ以上の非天然システインアミノ酸残基を含む変異抗体を調製する）ことにより、反応性チオール基を抗体（又はその断片）に導入することができる。ＵＳ７５２１５４１には、反応性システインアミノ酸の導入による抗体の操作が教示されている。
【０２１３】
抗体の反応部位のシステインアミノ酸を操作することができ、鎖内又は分子間ジスルフィド結合を形成しない（Ｊｕｎｕｔｕｌａ，ｅｔ  ａｌ．，２００８ｂ  Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈ．，２６（８）：９２５−９３２；Ｄｏｒｎａｎ  ｅｔ  ａｌ（２００９）Ｂｌｏｏｄ  １１４（１３）：２７２１−２７２９；ＵＳ７５２１５４１；ＵＳ７７２３４８５；ＷＯ２００９／０５２２４９）。改変システインチオールは、マレイミド又はアルファ−ハロアミドなどのチオール反応性求電子基を有する本発明のリンカー試薬又は薬物リンカー試薬と反応して、システイン改変抗体とＰＢＤ薬物部分とのＡＤＣを形成することができる。したがって、薬物部分の位置を、設計、制御、及び把握可能である。改変システインチオール基は通常、チオール反応性リンカー試薬又は薬物リンカー試薬と高収率で反応するため、薬物負荷量を制御することができる。ＩｇＧ抗体を操作して、重鎖又は軽鎖の単一の部位に、置換によりシステインアミノ酸を導入すると、対称性抗体に新たに２つのシステインが得られる。複合体生成物ＡＤＣがほぼ均一性であれば、２付近の薬物負荷量を達成することができる。
【０２１４】
抗体の複数の求核基又は求電子基が薬物リンカー中間体、又はリンカー試薬に続いて薬物部分試薬と反応すると、結果として得られる生成物は、抗体に結合した薬物部分の分布が、例えば、１、２、３などであるＡＤＣ化合物の混合物である。ポリマー逆相（ＰＬＲＰ）及び疎水性相互作用（ＨＩＣ）などの液体クロマトグラフィー法では、混合物中の化合物を薬物負荷値ごとに分離することができる。単一の薬物負荷値（ｐ）をもつＡＤＣの調製物は分離可能であるが、このような単一の負荷値のＡＤＣであっても、薬物部分がリンカーを介して抗体の異なる部位に結合している可能性があるため不均一な混合物になる可能性がある。
【０２１５】
したがって、本発明の抗体薬物複合体組成物は、抗体が１つ以上のＰＢＤ薬物部分を有し、薬物部分が様々なアミノ酸残基で抗体に結合され得る抗体薬物複合体化合物の混合物を含む。
【０２１６】
一実施形態では、細胞結合剤あたりの二量体ピロロベンゾジアゼピン基の平均数は、１〜２０の範囲内である。いくつかの実施形態において、範囲は、１〜８、２〜８、２〜６、２〜４、及び４〜８から選択される。
【０２１７】
いくつかの実施形態において、細胞結合剤あたりの二量体ピロロベンゾジアゼピン基は１つである。
【０２１８】
一般的な合成経路
ＰＢＤ化合物の合成は、以下の参照文献において広く論じられており、これらの考察は、参照により本明細書に援用される：
ａ）ＷＯ００／１２５０８（頁１４〜３０）、
ｂ）ＷＯ２００５／０２３８１４（頁３〜１０）、
ｃ）ＷＯ２００４／０４３９６３（頁２８〜２９）、及び
ｄ）ＷＯ２００５／０８５２５１（頁３０〜３９）。
【０２１９】
合成経路
式Ｉの本発明の化合物は、式ＩＰ：
【化３１】
2021521172.tif 000033
（ＲL-preは基ＲLの前駆体を表す）の化合物から合成され得る。ＲOがＨのとき、合成中にカルボキシ基を保護することができ（例えば、ｔｅｒｔ−ブチルエステル）、最終工程で除去することができる。
【０２２０】
例えば、ＲLが基：であるとき、
【化３２】
2021521172.tif 000034
ＲL-preは、
【化３３】
2021521172.tif 000035
、又はその保護型であり得る。ＧLの追加は、従来の手段によって達成することができる。ＰｒｏｔOが合成時の酸素保護基を表すとき、Ｒ３０及びＲ３１はそれぞれ窒素保護基及びＯＰｒｏｔOでもあり得、これらは適切に除去される。
【０２２１】
あるいは、式ＩＰの化合物は、式２と３の化合物をカップリングすることにより合成することができ、
【化３４】
2021521172.tif 000036
【化３５】
2021521172.tif 000037
ここでＨａｌはＩ、Ｃｌ、及びＢｒから選択され、ＰｒｏｔOは合成時の酸素保護基を表し、後に標準条件下でＰｒｏｔO基は除去される。
【０２２２】
カップリングは、例えば、Ｋ2ＣＯ3などの塩基と共にアセトンを還流させることで達成することができる。
【０２２３】
式２の化合物は、式４：
【化３６】
2021521172.tif 000038
の化合物から合成することができる。
【０２２４】
式５：
Ｈａｌ−Ｒ”−Ｑ  式５
（ＱはＩ、Ｃｌ、及びＢｒから選択される）の化合物をカップリングすることにより、例えば、Ｋ2ＣＯ3などの塩基と共にアセトンを還流させることで反応を達成することができる。所望の生成物を得るには、過剰の式５の化合物が必要である。
【０２２５】
式４の化合物は、式６：
【化３７】
2021521172.tif 000039
（ＰｒｏｔY’は、化合物の他の保護基と直交するＹ’の保護基である）の化合物から合成することができる。合成は、標準条件下でのＹ’の脱保護によって達成される。
【０２２６】
式３の化合物は、式７：
【化３８】
2021521172.tif 000040
（ＰｒｏｔYは、化合物の他の保護基と直交するＹの保護基である）の化合物から合成することができる。合成は、標準条件下でのＹの脱保護によって達成される。
【０２２７】
式７の化合物は、標準条件下で、ＯＨ基をＰｒｏｔOで保護することにより、式８：
【化３９】
2021521172.tif 000041
の化合物から合成することができる。
【０２２８】
式８の化合物は、酸化により、式９：
【化４０】
2021521172.tif 000042
の化合物から合成することができる。酸化は、例えば、デス・マーチン・ペルヨージナン（又は代わりにＴＰＡＰ／ＮＭＯ、ＴＦＡＡ／ＤＭＳＯ、ＳＯ3．ピリジン複合体／ＤＭＳＯ、ＰＤＣ、ＰＣＣ、ＢＡＩＢ／ＴＥＭＰＯ、又はスワーン条件下）で実施することができる。
【０２２９】
式９の化合物は、標準条件下で、ＯＨ基を脱保護することにより、式１０：
【化４１】
2021521172.tif 000043
の化合物から合成することができる。
【０２３０】
式１０の化合物はまた、式１１：
【化４２】
2021521172.tif 000044
の化合物を作製するために使用することができ、これは後続の環化により、式２の化合物にカップリングすることができる。
【０２３１】
２つのＰＢＤ（又はｐｒｅ−ＰＢＤ）部分の、Ｒ’’を含む基へのカップリングは、いずれの順序で実施してもよい。
【０２３２】
薬物複合体の合成
前述のように複合体を調製することができる。抗体は、Ｄｏｒｏｎｉｎａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２００３，２１，７７８−７８４）に記載されているように薬物リンカー化合物と複合化され得る。簡潔には、ｐＨ７．４で５０ｍＭのホウ酸ナトリウムを含有するＰＢＳ中の抗体（４〜５ｍｇ／ｍＬ）を、３７℃でトリス（カルボキシエチル）ホスフィン塩酸塩（ＴＣＥＰ）によって還元する。鎖間ジスルフィドを還元する反応の進行は、５，５’−ジチオビス（２−ニトロ安息香酸）との反応によってモニタリングし、所望のチオール／ｍＡｂレベルが達成されるまで続行する。次に、還元された抗体を０℃まで冷却し、抗体チオールあたり１．５当量のマレイミド薬物−リンカーによってアルキル化する。１時間後、５当量のＮ−アセチルシステインの添加によって反応をクエンチする。クエンチされた薬物−リンカーをＰＤ−１０カラム上でのゲル濾過によって除去する。さらに、０．２２μｍシリンジフィルターを通してＡＤＣを滅菌濾過する。タンパク質濃度は、それぞれ２８０ｎｍ及び３２９ｎｍでのスペクトル分析により、２８０ｎｍでの薬物吸光度の寄与を補正して決定することができる。抗体凝集の程度を決定するにはサイズ排除クロマトグラフィーを使用でき、残存するＮＡＣクエンチ後の薬物−リンカーのレベルを決定するにはＲＰ−ＨＰＬＣを使用することができる。
【０２３３】
さらなる優先事項
以下の優先事項は、上記の本発明の全ての態様に適用される場合もあれば、単一の態様に関する場合もある。任意の組み合わせの優先事項を一つに統合することができる。
【０２３４】
Ｒ6’、Ｒ7’、Ｒ9’、及びＹ’は、それぞれ、Ｒ6、Ｒ7、Ｒ9、及びＹと同じ基から選択される。いくつかの実施形態において、Ｒ6’、Ｒ7’、Ｒ9’、及びＹ’は、それぞれ、Ｒ6、Ｒ7、Ｒ9、及びＹと同じである。
【０２３５】
いくつかの実施形態において、Ｒ2’は、Ｒ2と同じである。
【０２３６】
二量体連結
Ｙ及びＹ’は、好ましくはＯである。
【０２３７】
いくつかの実施形態において、ｎは１である。他の実施形態において、ｎは２である。他の実施形態において、ｎは３である。
【０２３８】
いくつかの実施形態において、ｍは１である。他の実施形態において、ｍは２である。他の実施形態において、ｍは３である。
【０２３９】
ある特定の実施形態において、ｎとｍは同じである。本実施形態のいくつかにおいて、ｎ及びｍは１である。その他の本実施形態において、ｎ及びｍは２である。その他の本実施形態において、ｎ及びｍは３である。
【０２４０】
いくつかの実施形態において、ＱはＮである。他の実施形態において、ＱはＣＨである。
【０２４１】
いくつかの実施形態において、ＲOはＨである。他の実施形態において、ＲOはメチルである。他の実施形態において、ＲOはエチルである。他の実施形態において、ＲOはイソプロピルである。他の実施形態において、ＲOはベンジルである。
【０２４２】
特定の実施形態において、Ｒ’’は式ＩＩａ：
【化４３】
2021521172.tif 000045
（ＲO1は、Ｈ及びメチルからなる群より選択される）のものである。
【０２４３】
Ｒ6〜Ｒ9
いくつかの実施形態において、Ｒ9は、Ｈである。
【０２４４】
いくつかの実施形態において、Ｒ6は、Ｈ、ＯＨ、ＯＲ、ＳＨ、ＮＨ2、ニトロ及びハロから選択され、Ｈ又はハロから選択され得る。これらの実施形態のいくつかにおいて、Ｒ6は、Ｈである。
【０２４５】
いくつかの実施形態において、Ｒ7は、Ｈ、ＯＨ、ＯＲ、ＳＨ、ＳＲ、ＮＨ2、ＮＨＲ、ＮＲＲ’、及びハロから選択される。これらの実施形態のいくつかにおいて、Ｒ7は、Ｈ、ＯＨ及びＯＲから選択され、ここで、Ｒは、任意選択的に置換されているＣ1-7アルキル、Ｃ3-10ヘテロシクリル及びＣ5-10アリール基から選択される。Ｒは、より好ましくはＣ1-4アルキル基であってよく、置換されていても置換されていなくてもよい。対象となる置換基は、Ｃ5-6アリール基（例えば、フェニル）である。７位における特に好ましい置換基は、ＯＭｅ及びＯＣＨ2Ｐｈである。特定の対象となる他の置換基は、ジメチルアミノ（すなわち−ＮＭｅ2）、−（ＯＣ2Ｈ4）qＯＭｅ（ｑは、０〜２である）、モルホリノ、ピペリジニル及びＮ−メチル−ピペラジニルを含めた窒素含有Ｃ6ヘテロシクリルである。
【０２４６】
これらの実施形態及び優先事項は、それぞれＲ9’、Ｒ6’及びＲ7’に適用される。
【０２４７】
Ｒ2
Ｃ２とＣ３との間に二重結合が存在するとき、Ｒ2は、以下から選択される：
（ａ）ハロ、ニトロ、シアノ、エーテル、Ｃ1-7アルキル、Ｃ3-7ヘテロシクリル及びビス−オキシ−Ｃ1-3アルキレンを含む群より選択される１つ以上の置換基によって任意選択的に置換されているＣ5-10アリール基、
（ｂ）Ｃ1-5飽和脂肪族アルキル、
（ｃ）Ｃ3-6飽和シクロアルキル、
（ｄ）
【化４４】
2021521172.tif 000046
（Ｒ11、Ｒ12及びＲ13は、それぞれが、Ｈ、Ｃ1-3飽和アルキル、Ｃ2-3アルケニル、Ｃ2-3アルキニル及びシクロプロピルから独立して選択され、ここで、Ｒ2基における炭素原子の合計数が多くて５である）、
（ｅ）
【化４５】
2021521172.tif 000047
（Ｒ15a及びＲ15bの一方がＨであり、他方が：ハロ、メチル、メトキシによって任意選択的に置換されているフェニル；ピリジル；及びチオフェニルから選択される基である）、ならびに
（ｆ）
【化４６】
2021521172.tif 000048
（Ｒ14は：Ｈ；Ｃ1-3飽和アルキル；Ｃ2-3アルケニル；Ｃ2-3アルキニル；シクロプロピル；ハロ、メチル、メトキシによって任意選択的に置換されているフェニル；ピリジル；及びチオフェニルから選択される）。
【０２４８】
Ｒ2は、Ｃ5-10アリール基であるとき、Ｃ5-7アリール基であってよい。Ｃ5-7アリール基は、フェニル基又はＣ5-7ヘテロアリール基、例えばフラニル、チオフェニル及びピリジルであってよい。いくつかの実施形態において、Ｒ2は、好ましくはフェニルである。他の実施形態において、Ｒ2は、好ましくはチオフェニル、例えば、チオフェン−２−イル及びチオフェン−３−イルである。
【０２４９】
Ｒ2は、Ｃ5-10アリール基であるとき、Ｃ8-10アリール、例えばキノリニル又はイソキノリニル基であってよい。キノリニル又はイソキノリニル基は、任意の利用可能な環位を通してＰＢＤコアに結合されていてよい。例えば、キノリニルは、キノリン−２−イル、キノリン−３−イル、キノリン−４イル、キノリン−５−イル、キノリン−６−イル、キノリン−７−イル及びキノリン−８−イルであってよい。これらのうち、キノリン−３−イル及びキノリン−６−イルが好ましい場合がある。イソキノリニルは、イソキノリン−１−イル、イソキノリン−３−イル、イソキノリン−４イル、イソキノリン−５−イル、イソキノリン−６−イル、イソキノリン−７−イル及びイソキノリン−８−イルであってよい。これらのうち、イソキノリン−３−イル及びイソキノリン−６−イルが好ましい場合がある。
【０２５０】
Ｒ2は、Ｃ5-10アリール基であるとき、任意の数の置換基を持っていてよい。１〜３個の置換基を持つことが好ましく、１及び２がより好ましく、単独で置換されている基が最も好ましい。置換基は、任意の位置であってよい。
【０２５１】
Ｒ2がＣ5-7アリール基であるとき、単一の置換基が、化合物の残りへの結合に隣接しない環原子上にあることが好ましく、すなわち、化合物の残りへの結合に対してβ又はγであることが好ましい。そのため、Ｃ5-7アリール基がフェニルであるとき、置換基は、好ましくはメタ又はパラ位にあり、より好ましくはパラ位にある。
【０２５２】
Ｒ2は、Ｃ8-10アリール基、例えばキノリニル又はイソキノリニルであるとき、キノリン又はイソキノリン環の任意の位置に任意の数の置換基を持っていてよい。いくつかの実施形態において、Ｒ2は、１、２又は３つの置換基を持ち、これらが、近位及び遠位環のいずれか、又は両方（１を超える置換基があるとき）にあってよい。
【０２５３】
Ｒ2がＣ5-10アリール基であるときのＲ2置換基
Ｒ2がＣ5-10アリール基であるときのＲ2上の置換基がハロであるとき、該置換基は、好ましくはＦ又はＣｌ、より好ましくはＣｌである。
【０２５４】
Ｒ2がＣ5-10アリール基であるときのＲ2上の置換基がエーテルであるとき、該置換基は、いくつかの実施形態において、アルコキシ基、例えば、Ｃ1-7アルコキシ基（例えば、メトキシ、エトキシ）であってよく、又は、いくつかの実施形態において、Ｃ5-7アリールオキシ基（例えば、フェノキシ、ピリジルオキシ、フラニルオキシ）であってよい。アルコキシ基は、それ自体が、例えばアミノ基（例えば、ジメチルアミノ）によってさらに置換されていてよい。
【０２５５】
Ｒ2がＣ5-10アリール基であるときのＲ2上の置換基がＣ1-7アルキルであるとき、該置換基は、好ましくはＣ1-4アルキル基（例えば、メチル、エチル、プロピル、ブチル）であってよい。
【０２５６】
Ｒ2がＣ5-10アリール基であるときのＲ2上の置換基がＣ3-7ヘテロシクリルであるとき、該置換基は、いくつかの実施形態において、Ｃ6の窒素含有ヘテロシクリル基、例えば、モルホリノ、チオモルホリノ、ピペリジニル、ピペラジニルであってよい。これらの基は、窒素原子を介してＰＢＤ部分の残部に結合していてよい。これらの基は、例えばＣ1-4アルキル基によってさらに置換されていてよい。Ｃ6の窒素含有ヘテロシクリル基がピペラジニルであるとき、上記のさらなる置換基は、第２の窒素環原子上にあってよい。
【０２５７】
Ｒ2がＣ5-10アリール基であるときのＲ2上の置換基がビス−オキシ−Ｃ1-3アルキレンであるとき、該置換基は、好ましくはビス−オキシ−メチレン又はビス−オキシ−エチレンである。
【０２５８】
Ｒ2がＣ5-10アリール基であるときのＲ2上の置換基がエステルであるとき、該置換基は、好ましくはメチルエステル又はエチルエステルである。
【０２５９】
Ｒ2がＣ5-10アリール基であるとき特に好ましい置換基として、メトキシ、エトキシ、フルオロ、クロロ、シアノ、ビス−オキシ−メチレン、メチル−ピペラジニル、モルホリノ及びメチル−チオフェニルが挙げられる。Ｒ2についての他の特に好ましい置換基は、ジメチルアミノプロピルオキシ及びカルボキシである。
【０２６０】
Ｒ2がＣ5-10アリール基であるとき特に好ましい置換されているＲ2基として、４−メトキシ−フェニル、３−メトキシフェニル、４−エトキシ−フェニル、３−エトキシ−フェニル、４−フルオロ−フェニル、４−クロロ−フェニル、３，４−ビスオキシメチレン−フェニル、４−メチルチオフェニル、４−シアノフェニル、４−フェノキシフェニル、キノリン−３−イル及びキノリン−６−イル、イソキノリン−３−イル及びイソキノリン−６−イル、２−チエニル、２−フラニル、メトキシナフチル、及びナフチルが挙げられるが、これらに限定されない。別の可能な置換されているＲ12基は、４−ニトロフェニルである。特定の対象となるＲ12基として、４−（４−メチルピペラジン−１−イル）フェニル及び３，４−ビスオキシメチレン−フェニルが挙げられる。
【０２６１】
Ｒ2は、Ｃ1-5飽和脂肪族アルキルであるとき、メチル、エチル、プロピル、ブチル又はペンチルであってよい。いくつかの実施形態において、これは、メチル、エチル又はプロピル（ｎ−ペンチル若しくはイソプロピル）であってよい。これらの実施形態のいくつかにおいて、これは、メチルであってよい。他の実施形態において、これは、ブチル又はペンチルであってよく、これらは、直鎖又は分岐鎖であってよい。
【０２６２】
Ｒ2は、Ｃ3-6飽和シクロアルキルであるとき、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル又はシクロヘキシルであってよい。いくつかの実施形態において、Ｒ2は、シクロプロピルであってよい。
【０２６３】
Ｒ2が、
【化４７】
2021521172.tif 000049
であるとき、Ｒ11、Ｒ12及びＲ13は、それぞれが、Ｈ、Ｃ1-3飽和アルキル、Ｃ2-3アルケニル、Ｃ2-3アルキニル及びシクロプロピルから独立して選択され、ここで、Ｒ2基における炭素原子の合計数は、多くて５である。いくつかの実施形態において、Ｒ2基における炭素原子の合計数は、多くて４又は多くて３である。
【０２６４】
いくつかの実施形態において、Ｒ11、Ｒ12及びＲ13のうちの１つがＨであり、他の２つの基が、Ｈ、Ｃ1-3飽和アルキル、Ｃ2-3アルケニル、Ｃ2-3アルキニル及びシクロプロピルから選択される。
【０２６５】
他の実施形態において、Ｒ11、Ｒ12及びＲ13のうちの２つがＨであり、他の基が、Ｈ、Ｃ1-3飽和アルキル、Ｃ2-3アルケニル、Ｃ2-3アルキニル及びシクロプロピルから選択される。
【０２６６】
いくつかの実施形態において、Ｈではない基は、メチル及びエチルから選択される。これらの実施形態のいくつかにおいて、Ｈではない基は、メチルである。
【０２６７】
いくつかの実施形態において、Ｒ11は、Ｈである。
【０２６８】
いくつかの実施形態において、Ｒ12は、Ｈである。
【０２６９】
いくつかの実施形態において、Ｒ13は、Ｈである。
【０２７０】
いくつかの実施形態において、Ｒ11及びＲ12は、Ｈである。
【０２７１】
いくつかの実施形態において、Ｒ11及びＲ13は、Ｈである。
【０２７２】
いくつかの実施形態において、Ｒ12及びＲ13は、Ｈである。
【０２７３】
特定の対象となるＲ2基は：
【化４８】
2021521172.tif 000050
である。
【０２７４】
Ｒ2が
【化４９】
2021521172.tif 000051
であるとき、Ｒ15a及びＲ15bの一方がＨであり、他方が：ハロ、メチル、メトキシによって任意選択的に置換されているフェニル；ピリジル；及びチオフェニルから選択される。いくつかの実施形態において、Ｈではない基は、任意選択的に置換されているフェニルである。フェニルの任意選択的な置換基がハロであるとき、該置換基は、好ましくはフルオロである。いくつかの実施形態において、フェニル基は、置換されていない。
【０２７５】
Ｒ2が
【化５０】
2021521172.tif 000052
であるとき、Ｒ14は：Ｈ；Ｃ1-3飽和アルキル；Ｃ2-3アルケニル；Ｃ2-3アルキニル；シクロプロピル；ハロメチル、メトキシから選択される基によって任意選択的に置換されているフェニル；ピリジル；及びチオフェニルから選択される。フェニルの任意選択的な置換基がハロであるとき、該置換基は、好ましくはフルオロである。いくつかの実施形態において、フェニル基は、置換されていない。
【０２７６】
いくつかの実施形態において、Ｒ14は、Ｈ、メチル、エチル、エテニル及びエチニルから選択される。これらの実施形態のいくつかにおいて、Ｒ14は、Ｈ及びメチルから選択される。
【０２７７】
Ｃ２とＣ３との間に単結合が存在するとき、
Ｒ2は、Ｈ若しくは
【化５１】
2021521172.tif 000053
であり、ここで、Ｒ16a及びＲ16bは、Ｈ、Ｆ、Ｃ1-4飽和アルキル、Ｃ2-3アルケニルから独立して選択され、かかるアルキル及びアルケニル基は、Ｃ1-4アルキルアミド及びＣ1-4アルキルエステルから選択される基によって任意選択的に置換されており、又は、Ｒ16a及びＲ16bの一方がＨであるとき、他方は、ニトリル及びＣ1-4アルキルエステルから選択される。
【０２７８】
いくつかの実施形態において、Ｒ2は、Ｈである。
【０２７９】
いくつかの実施形態において、Ｒ2は
【化５２】
2021521172.tif 000054
である。
【０２８０】
いくつかの実施形態において、Ｒ16a及びＲ16bの両方がＨであることが好ましい。
【０２８１】
他の実施形態において、Ｒ16a及びＲ16bの両方がメチルであることが好ましい。
【０２８２】
さらなる実施形態において、Ｒ16a及びＲ16bのうちの１つがＨであり、他方が、Ｃ1-4飽和アルキル、Ｃ2-3アルケニルから選択され、かかるアルキル及びアルケニル基が、任意選択的に置換されていることが好ましい。
【０２８３】
Ｒ2’
上記のＲ2の優先事項は、Ｒ2’にも同様に適用される。
【０２８４】
Ｒ11a
いくつかの実施形態において、Ｒ11aはＯＨである。
【０２８５】
いくつかの実施形態において、Ｒ11aはＯＲAである。本実施形態のいくつかにおいて、ＲAはメチルである。
【０２８６】
いくつかの実施形態において、Ｒ11aは、ＯＨ、ＯＲA（ＲAはＣ1-4アルキルである）、及びＳＯzＭ（ｚは２又は３であり、Ｍは一価の薬学的に許容可能なカチオンである）から選択される。
【０２８７】
Ｒ30及びＲ31
いくつかの実施形態において、Ｒ30はＨであり、Ｒ31はＯＨである。他の実施形態において、Ｒ30はＨであり、Ｒ31はＯＲAである。本実施形態のいくつかにおいて、ＲAはメチルである。
【０２８８】
他の実施形態において、Ｒ30及びＲ31は、それらが結合している窒素原子と炭素原子との間に窒素−炭素二重結合を形成する。
【０２８９】
他の実施形態において、Ｒ30はＨであり、Ｒ31はＳＯzＭである（ｚは２又は３であり、Ｍは一価の薬学的に許容可能なカチオンである）。
【０２９０】
Ｍ及びｚ
Ｍは、一価の薬学的に許容可能なカチオンであることが好ましく、より好ましくはＮａ+である。
【０２９１】
ｚは好ましくは３である。
【０２９２】
リンカー（ＲL）
いくつかの実施形態において、ＲLは式ＩＩＩａのものである。
【０２９３】
いくつかの実施形態において、ＲLLは式ＩＩＩａ’のものである。
【０２９４】
ＧL
ＧLは、以下から選択され得、式中、Ａｒは、Ｃ5-6アリーレン基、例えば、フェニレンを表し、Ｘは、Ｃ1-4アルキルを表す。
【化５３】
2021521172.tif 000055
【０２９５】
いくつかの実施形態において、ＧLは、ＧL1-1及びＧL1-2から選択される。これらの実施形態のいくつかにおいて、ＧLは、ＧL1-1である。
【０２９６】
ＧLL
ＧLLは、以下から選択され得、式中、Ａｒは、Ｃ5-6アリーレン基、例えば、フェニレンを表し、Ｘは、Ｃ1-4アルキルを表す。
【化５４】
2021521172.tif 000056
【０２９７】
いくつかの実施形態において、ＧLLは、ＧLL1-1及びＧLL1-2から選択される。これらの実施形態のいくつかにおいて、ＧLLは、ＧLL1-1である。
【０２９８】
Ｘ
Ｘは、
【化５５】
2021521172.tif 000057
であり、
式中、ａ＝０〜５、ｂ＝０〜１６、ｃ＝０又は１、ｄ＝０〜５である。
【０２９９】
ａは、０、１、２、３、４又は５であってよい。いくつかの実施形態において、ａは、０〜３である。これらの実施形態のいくつかにおいて、ａは、０又は１である。さらなる実施形態において、ａは、０である。
【０３００】
ｂは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５又は１６であってよい。いくつかの実施形態において、ｂは、０〜１２である。これらの実施形態のいくつかにおいて、ｂは、０〜８であり、０、２、４又は８であってよい。
【０３０１】
ｃは、０又は１であってよい。
【０３０２】
ｄは、０、１、２、３、４又は５であってよい。いくつかの実施形態において、ｄは、０〜３である。これらの実施形態のいくつかにおいて、ｄは、１又は２である。さらなる実施形態において、ｄは、２である。
【０３０３】
Ｘのいくつかの実施形態において、ａは、０であり、ｃは、１であり、ｄは、２であり、ｂは、０〜８であってよい。これらの実施形態のいくつかにおいて、ｂは、０、４又は８である。
【０３０４】
Ｑ
一実施形態において、Ｑは、アミノ酸残基である。アミノ酸は、天然アミノ酸又は非天然アミノ酸であってよい。
【０３０５】
一実施形態において、Ｑは：Ｐｈｅ、Ｌｙｓ、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｃｉｔ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ａｒｇ、及びＴｒｐから選択され、Ｃｉｔは、シトルリンである。
【０３０６】
一実施形態において、Ｑは、ジペプチド残基を含む。ジペプチドにおけるアミノ酸は、天然アミノ酸及び非天然アミノ酸の任意の組み合わせであってよい。いくつかの実施形態において、ジペプチドは、天然アミノ酸を含む。リンカーがカテプシン不安定リンカーであるとき、ジペプチドは、カテプシン媒介開裂の作用部位である。ジペプチドは、次いでカテプシンの認識部位となる。
【０３０７】
一実施形態において、Ｑは、
CO−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−NH、
CO−Ｖａｌ−Ａｌａ−NH、
CO−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−NH、
CO−Ａｌａ−Ｌｙｓ−NH、
CO−Ｖａｌ−Ｃｉｔ−NH、
CO−Ｐｈｅ−Ｃｉｔ−NH、
CO−Ｌｅｕ−Ｃｉｔ−NH、
CO−Ｉｌｅ−Ｃｉｔ−NH、
CO−Ｐｈｅ−Ａｒｇ−NH、及び
CO−Ｔｒｐ−Ｃｉｔ−NH
から選択され、
Ｃｉｔはシトルリンである。
【０３０８】
好ましくは、Ｑは、
CO−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−NH、
CO−Ｖａｌ−Ａｌａ−NH、
CO−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−NH、
CO−Ａｌａ−Ｌｙｓ−NH、
CO−Ｖａｌ−Ｃｉｔ−NH
から選択される。
【０３０９】
最も好ましくは、Ｑは、CO−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−NH、CO−Ｖａｌ−Ｃｉｔ−NH及びCO−Ｖａｌ−Ａｌａ−NHから選択される。
【０３１０】
対象となる他のジペプチド組み合わせとして、
CO−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−NH、
CO−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−NH、及び
CO−Ｖａｌ−Ｇｌｕ−NH
が挙げられる。
【０３１１】
参照により本明細書に援用される、Ｄｕｂｏｗｃｈｉｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００２，１３，８５５−８６９に記載されているものを含めた他のジペプチド組み合わせが使用され得る。
【０３１２】
いくつかの実施形態において、ＱXは、トリペプチド残基である。トリペプチドにおけるアミノ酸は、天然アミノ酸及び非天然アミノ酸の任意の組み合わせであってよい。いくつかの実施形態において、トリペプチドは、天然アミノ酸を含む。リンカーがカテプシン不安定リンカーであるとき、トリペプチドは、カテプシン媒介開裂の作用部位である。トリペプチドは、次いでカテプシンの認識部位となる。
【０３１３】
一実施形態において、適切な場合、アミノ酸側鎖が化学的に保護されている。側鎖保護基は、以下に考察されている基であってよい。保護されているアミノ酸配列は、酵素によって開裂可能である。例えば、Ｂｏｃ側鎖保護Ｌｙｓ残基を含むジペプチド配列は、カテプシンによって開裂可能である。
【０３１４】
アミノ酸の側鎖のための保護基は、当該分野において周知であり、上記のように、Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ  Ｃａｔａｌｏｇに記載されている。
【０３１５】
いくつかの実施形態において、ＲLは、式ＩＩＩｂのものである。
【０３１６】
いくつかの実施形態において、ＲLLは、式ＩＩＩｂ’のものである。
【０３１７】
ＲL1及びＲL2は、Ｈ及びメチルから独立して選択され、又は、これらが結合している炭素原子と一緒になって、シクロプロピレン若しくはシクロブチレン基を形成している。
【０３１８】
いくつかの実施形態において、ＲL1及びＲL2は、両方がＨである。
【０３１９】
いくつかの実施形態において、ＲL1が、Ｈであり、ＲL2が、メチルである。
【０３２０】
いくつかの実施形態において、ＲL1及びＲL2は、両方がメチルである。
【０３２１】
いくつかの実施形態において、ＲL1及びＲL2は、これらが結合している炭素原子と一緒になって、シクロプロピレン基を形成している。
【０３２２】
いくつかの実施形態において、ＲL1及びＲL2は、これらが結合している炭素原子と一緒になって、シクロブチレン基を形成している。
【０３２３】
基ＩＩＩｂでは、いくつかの実施形態において、ｅは、０である。他の実施形態において、ｅは、１であり、ニトロ基は、環の任意の利用可能な位置にあってよい。これらの実施形態のいくつかにおいて、オルト位にある。これらの実施形態の他のものにおいて、パラ位にある。
【０３２４】
特定の一実施形態において、本発明の第１の態様は次の化合物である。
【０３２５】
本発明の第１の態様のいくつかの実施形態において、式Ｉａ、Ｉｂ、又はＩｃ：
【化５６】
2021521172.tif 000058
【化５７】
2021521172.tif 000059
【化５８】
2021521172.tif 000060
のものであり、
ここで、Ｒ2aとＲ2a’は同じであり、以下：
（ａ）
【化５９】
2021521172.tif 000061
；
（ｂ）
【化６０】
2021521172.tif 000062
；
（ｃ）
【化６１】
2021521172.tif 000063
；
（ｄ）
【化６２】
2021521172.tif 000064
；
（ｅ）
【化６３】
2021521172.tif 000065
；
（ｆ）
【化６４】
2021521172.tif 000066
；
（ｇ）
【化６５】
2021521172.tif 000067
；及び
（ｈ）
【化６６】
2021521172.tif 000068
から選択され；
Ｒ7aとＲ7a’は同じであり、メトキシ及びベンジルオキシから選択され；
ＲO、ＲL1、及びＲ11aは、上記に定義された通りである。
【０３２６】
本発明の第３の態様のいくつかの実施形態において、薬物リンカー（ＤL）は、式ＩＩＩａ、ＩＩＩｂ、又はＩＩＩｃ：
【化６７】
2021521172.tif 000069
【化６８】
2021521172.tif 000070
【化６９】
2021521172.tif 000071
のものであり、
ここで、Ｒ2aとＲ2a’は同じであり、以下：
（ａ）
【化７０】
2021521172.tif 000072
；
（ｂ）
【化７１】
2021521172.tif 000073
；
（ｃ）
【化７２】
2021521172.tif 000074
；
（ｄ）
【化７３】
2021521172.tif 000075
；
（ｅ）
【化７４】
2021521172.tif 000076
；
（ｆ）
【化７５】
2021521172.tif 000077
；
（ｇ）
【化７６】
2021521172.tif 000078
；及び
（ｈ）
【化７７】
2021521172.tif 000079
から選択され；
Ｒ7aとＲ7a’は同じであり、メトキシ及びベンジルオキシから選択され；
ＲO、ＲL1a、及びＲ11aは、上記に定義された通りである。
【実施例】
【０３２７】
一般的な情報
フラッシュクロマトグラフィーは、Ｂｉｏｔａｇｅ  Ｉｓｏｌｅｒａ  １（商標）を使用して、全ＵＶ活性成分がカラムから溶出されるまで、示されたヘキサン／ＥｔＯＡｃ又はＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ混合物での勾配溶出を用いて実施した。ＵＶ活性物質の十分な溶出が観察されるとすぐ、その勾配を手動で保持した。画分の純度を、Ｍｅｒｃｋ  Ｋｉｅｓｅｌｇｅｌ  ６０  Ｆ２５４シリカゲル（アルミニウムプレート上に蛍光指示薬が付いている）を用いて薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）により確認した。特に記載がない限り、ＴＬＣの視覚化は、ＵＶ光又はヨウ素蒸気で行った。抽出及びクロマトグラフィーの溶媒は、ＶＷＲ，Ｕ．Ｋ．から購入し、さらに精製することなく使用した。ファインケミカルは全て、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ又はＶＷＲから購入した。
【０３２８】
（反応モニタリング及び純度決定のための）分析用のＬＣ／ＭＳ条件は以下の通りであった。ポジティブモードエレクトロスプレー質量分析は、Ｓｈｉｍａｄｚｕ  Ｎｅｘｅｒａ（登録商標）／Ｐｒｏｍｉｎｅｎｃｅ（登録商標）ＬＣＭＳ−２０２０を使用して実施した。使用した移動相は、溶媒Ａ（０．１％ギ酸を含むＨ2Ｏ）及び溶媒Ｂ（０．１％ギ酸を含むＣＨ3ＣＮ）であった。
【０３２９】
ＬＣＭＳ−Ａ：３分間の実行時の勾配：初期組成の５％Ｂを２５秒間保持した後、５％Ｂから１００％Ｂまで１分３５秒間かけて増加させた。組成を１００％Ｂで５０秒間保持した後、５秒で５％Ｂへと戻し、そのまま５秒間保持した。勾配実行の合計持続時間は、流速０．８ｍＬ／分で３．０分間であった。カラム：Ｗａｔｅｒｓ  Ａｃｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣ（登録商標）ＢＥＨ  Ｓｈｉｅｌｄ  ＲＰ１８  ＶａｎＧｕａｒｄプレカラム、１３０Ａ、１．７μｍ、２．１ｍｍ×５ｍｍを装備した、５０℃のＷａｔｅｒｓ  Ａｃｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣ（登録商標）ＢＥＨ  Ｓｈｉｅｌｄ  ＲＰ１８  １．７μｍ  ２．１×５０ｍｍ
【０３３０】
ＬＣＭＳ−Ｂ：１５分間の実行時の勾配：初期組成の５％Ｂを１分間保持した後、５％Ｂから１００％Ｂまで９分間かけて増加させた。組成を１００％Ｂで２分間保持した後、１０秒で５％Ｂへと戻し、そのまま２分５０秒間保持した。勾配実行の合計持続時間は、流速０．６ｍＬ／分で１５．０分間であった。２５４ｎｍ、２２３ｎｍ、及び２１４ｎｍで検出をモニタリングした。Ｗａｔｅｒｓ  Ａｃｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣ（登録商標）ＢＥＨ  Ｓｈｉｅｌｄ  ＲＰ１８  ＶａｎＧｕａｒｄプレカラム、１３０Ａ、１．７μｍ、２．１ｍｍ×５ｍｍを装備した、ＡＣＥ  Ｅｘｃｅｌ  ２  Ｃ１８−ＡＲ、２μ、３．０×１００ｍｍ。
【０３３１】
中間体
【化７８】
2021521172.tif 000080
【０３３２】
（１１Ｓ，１１ａＳ）−１１−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）−８−ヒドロキシ−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−２，３，１１，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１０（５Ｈ）−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（Ｉ５）の合成
【化７９】
2021521172.tif 000081
Ｉ６は、ＷＯ２０１８／１８２３４１の化合物１５２である。
【０３３３】
（ｉ）（Ｓ）−（２−（２−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）−４−メチレンピロリジン−１−カルボニル）−４−メトキシ−５−（（トリイソプロピルシリル）オキシ）フェニル）カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（Ｉ７）
Ｉ６（４００ｇ、１当量）、ＣＨ2Ｃｌ2（４Ｌ）及びＢｏｃ2Ｏ（２０６．７ｇ、１．３当量）を反応器に加え、７０℃で２０時間撹拌した。混合物を室温に冷却し、減圧濃縮して、Ｉ７（４５０ｇ、９５％）を得て、それをさらに精製することなく使用した。
【０３３４】
（ｉｉ）（Ｓ）−（２−（２−（ヒドロキシメチル）−４−メチレンピロリジン−１−カルボニル）−４−メトキシ−５−（（トリイソプロピルシリル）オキシ）フェニル）カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（Ｉ８）
Ｉ７（２１０ｇ、１．０当量）ＴＨＦ（７６ｍＬ）、ＭｅＯＨ（７６ｍＬ）ＡｃＯＨ（５３３ｍＬ）、及びＨ2Ｏ（１５１ｍＬ）を反応器に加え、２０時間撹拌した。混合物をＥｔＯＡｃ（３０Ｖ）及びＨ2Ｏ（２０Ｖ）で希釈し、混合物を激しく撹拌した。有機相を飽和ＮａＨＣＯ3溶液（２０Ｖ）、次いでブライン（２０Ｖ）で洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させ、減圧濃縮した。フラッシュカラムクロマトグラフィー（８：１〜２：１石油エーテル／ＥｔＯＡｃ）により、Ｉ８を白色固体（１５０ｇ、８７％）として得た。
【０３３５】
（ｉｉｉ）（１１Ｓ，１１ａＳ）−１１−ヒドロキシ−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−８−（（トリイソプロピルシリル）オキシ）−２，３，１１，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１０（５Ｈ）−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（Ｉ９）
（ＣＯＣｌ）2（２８．５ｇ、１．０当量）をＮ2下で反応器内のＣＨ2Ｃｌ2（９００ｍＬ）に加え、混合物を−８０℃に冷却した。Ｉ８（１２０ｇ、１．０当量）のＣＨ2Ｃｌ2（６００ｍＬ）溶液を３０分かけて滴下した後、Ｅｔ3Ｎ（１１３．５ｇ、５．０当量）を３０分かけて滴下した。混合物を室温に温め、５時間撹拌し、５％クエン酸水溶液（１０Ｖ）を加えてクエンチした。有機相を飽和ＮａＨＣＯ3（５Ｖ）及びＨ2Ｏ（５Ｖ）で続けて洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させ、減圧濃縮した。粗生成物を９０℃でヘプタン（１０Ｖ）中で撹拌した後、０〜５℃に冷却した。得られた白色沈殿物を濾過により単離し、５０℃の真空オーブンで乾燥させて、Ｉ９（１０５ｇ、８８％）を得た。
【０３３６】
（ｉｖ）（１１Ｓ，１１ａＳ）−１１−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−８−（（トリイソプロピルシリル）オキシ）−２，３，１１．１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１０（５Ｈ）−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（Ｉ１０）
Ｉ９（１５０ｇ、１．０当量）及びＣＨ2Ｃｌ2（１．５Ｌ、１０Ｖ）を反応器に入れ、混合物を０〜５℃に冷却した。ルチジン（１２０．６ｇ、４．０当量）、次いでＴＢＳＯＴｆ（２２３．２ｇ、３．０当量）を加え、混合物を０〜１０℃で１０分間、室温で４時間撹拌した。５％クエン酸水溶液（５Ｖ）を添加して反応をクエンチし、有機相を飽和ＮａＨＣＯ3（５Ｖ）、Ｈ2Ｏ（５Ｖ）で続けて洗浄した後、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させ、減圧濃縮して、５（１７９ｇ、９８％）を橙色の油として得た。
【０３３７】
（ｖ）（１１Ｓ，１１ａＳ）−１１−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）−８−ヒドロキシ−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−２，３，１１，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１０（５Ｈ）−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（Ｉ５）
ＤＭＦ（１．８３Ｌ、１Ｖ）、Ｈ2Ｏ（３７．４ｍＬ、０．２Ｖ）、及びＩ１０（１８７ｇ、１．０当量）を反応器に入れた。ＬｉＯＡｃ（１９．１ｇ、１．０当量）を加え、混合物を１０〜２０℃で２０時間撹拌した。反応混合物を冷水（１０Ｖ）及びＥｔＯＡｃ（２０Ｖ）で希釈した。水相をＥｔＯＡｃ（１０Ｖ）で洗浄し、合一した有機相を、５％クエン酸水溶液（１０Ｖ）、５％ＮａＨＣＯ3水溶液（１０Ｖ）、及びＨ2Ｏ（１０Ｖ）で連続して洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させ、減圧濃縮した。得られた粗製物を７７℃でＥｔＯＡｃ（６Ｖ）に溶解し、ヘプタン（１２Ｖ）を加え、混合物を０〜５℃に冷却し、白色沈殿物を濾過により回収し、真空オーブンにて５０℃で乾燥させ、６（１０１ｇ、７１％）を得た。
【０３３８】
実施例１：３−（（（（１１Ｓ，１１ａＳ）−１０−（（（４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパンアミド）−３−メチルブタンアミド）プロパンアミド）ベンジル）オキシ）カルボニル）−１１−ヒドロキシ−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−２，３，５，１０，１１，１１ａ−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−８−イル）オキシ）メチル）−５−（（（（Ｓ）−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−２，３，５，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−８−イル）オキシ）メチル）安息香酸（１９）
【化８０】
2021521172.tif 000082
【０３３９】
（ｉ）（（（５−ヨード−１，３−フェニレン）ビス（メチレン））ビス（オキシ））ビス（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシラン）（２）
丸底フラスコにマグネチックスターラーバー、ＤＭＦ（１００ｍＬ）、ジオール１（１０．０ｇ、３７．８７ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＴＢＳＣｌ（１７．１ｇ、１１３．６ｍｍｏｌ、３．０当量）イミダゾール（１５．５ｇ、２２７．２ｍｍｏｌ、６．０当量）を入れ、混合物を２０分間撹拌した結果、ＬＣＭＳは反応の完了を示した。反応混合物を濾過し、ＥｔＯＡｃで希釈し、水で洗浄し、有機相をＭｇＳＯ4で乾燥させ、減圧濃縮した。Ｉｓｏｌｅｒａ（ヘキサン中０〜８％ＥｔＯＡｃ）により、所望の生成物を無色油（１７．９ｇ、９６％）として得た。ＬＣＭＳ−Ａ：２．２９分（ＥＳ＋）イオン化なし。
【０３４０】
（ｉｉ）３，５−ビス（（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）安息香酸ｔｅｒｔ−ブチル（３）
オーブンで乾燥させた３口丸底フラスコに、マグネチックスターラーバー、無水トルエン（７．５ｍＬ）を入れ、フラスコをＡｒでパージし、フラスコを−１０℃に冷却した。ＢｕＬｉ（２．５Ｍヘキサン溶液５．６ｍＬ、１４．００ｍｍｏｌ、２．０当量）、次いでゆっくりとＢｕＭｇＣｌ（２．０Ｍ  ＴＨＦ溶液３．５ｍＬ、７．０００ｍｍｏｌ、１．０当量）を加え、３０分間撹拌した。２（８．２１ｇ、１６．６７ｍｍｏｌ、２．４当量）の無水トルエン（１５ｍＬ）溶液をゆっくりと加え、−１０℃で２時間撹拌した。Ｂｏｃ2Ｏ（４．５５ｇ、２０．８４ｍｍｏｌ、３．０当量）の無水トルエン（７．５ｍＬ）溶液を−１０℃でゆっくりと加え、１時間撹拌してから、１０％冷クエン酸に注いだ。水相をＥｔＯＡｃで抽出し、有機物を合一し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、減圧濃縮した。Ｉｓｏｌｅｒａでの精製（ヘキサン中０〜２０％ＥｔＯＡｃ）により、生成物を無色油（７．３９ｇ、９５％）として得た。ＬＣＭＳ−Ａ：１．４８分（ＥＳ＋）イオン化なし。
【０３４１】
（ｉｉｉ）３，５−ビス（ヒドロキシメチル）安息香酸ｔｅｒｔ−ブチル（４）
丸底フラスコにマグネチックスターラー、３（７．３９ｇ、１５．８３ｍｍｏｌ、１．０当量）、及びＴＨＦ（７５ｍＬ）を入れた。ＴＢＡＦ（１Ｍ溶液３１．７ｍＬ、３１．７０ｍｍｏｌ、２．０当量）をシリンジで加え、２０分間撹拌した結果、ＬＣＭＳは反応の完了を示した。反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、Ｈ2Ｏで洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥させ、減圧濃縮して、生成物を白色の結晶性固体（３．２９ｇ、８７％）として得た。ＬＣＭＳ−Ａ：１．２４分（ＥＳ＋）イオン化なし。
【０３４２】
（ｉｖ）３，５−ビス（ブロモメチル）安息香酸ｔｅｒｔ−ブチル（５）
丸底フラスコにマグネチックスターラー、４（３．２９ｇ、１５．８３ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＣＨ2Ｃｌ2（２００ｍＬ）を入れ、−７８℃に冷却した。ＰＰｈ3（１７．４ｇ、６６．３４ｍｍｏｌ、４．２当量）を加えた後、ＣＢｒ4（２３．１ｇ、６９．６５ｍｍｏｌ、４．４当量）を少しずつ加え、反応物を室温まで温めた。反応物をＳｉＯ2（ＣＨ2Ｃｌ2／ヘキサン）で濾過し、ｉｓｏｌｅｒａ（ヘキサン中０〜２０％ＥｔＯＡｃ）により精製して、生成物を白色固体（１．４３ｇ、２６％）として得た。ＬＣＭＳ−Ａ：１．８１分（ＥＳ＋）イオン化なし。
【０３４３】
（ｖ）（Ｓ）−１−（５−メトキシ−２−ニトロ−４−（（トリイソプロピルシリル）オキシ）ベンゾイル）−４−メチレンピロリジン−２−カルボン酸メチル（８）
丸底フラスコにマグネチックスターラー、ＴＨＦ（１５ｍＬ）、６（１．８９ｇ、５．１１８ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＨＯＢｔ（７６１ｍｇ、５．６３０ｍｍｏｌ、１．１当量）、ＤＩＣ（８７２μＬ、５．６３０ｍｍｏｌ、１．１当量）、及びｉ−Ｐｒ2ＮＥｔ（１．９６ｍＬ、１１．２６ｍｍｏｌ、２．２当量）を加え、混合物を１０分間撹拌した。７（１．００ｇ、５．６３０ｍｍｏｌ、１．１当量）を少しずつ加え、反応混合物を１時間撹拌した。反応物をＣＨ2Ｃｌ2で希釈し、０．２Ｎ  ＨＣｌ溶液で洗浄し、有機物をＭｇＳＯ4で乾燥させ、減圧濃縮した。フラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン中２０〜３０％ＥｔＯＡｃ）により、所望の生成物を黄色油（１．１９ｇ、４７％）として得た。ＬＣＭＳ−Ａ：２．００分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４９３［Ｍ＋Ｈ］+、５１５［Ｍ＋Ｎａ］+
【０３４４】
（ｖｉ）（Ｓ）−（２−（ヒドロキシメチル）−４−メチレンピロリジン−１−イル）（５−メトキシ−２−ニトロ−４−（（トリイソプロピルシリル）オキシ）フェニル）メタノン（９）
丸底フラスコにマグネチックスターラー、ＴＨＦ（１５ｍＬ）、８（１．１７ｇ、２．３８３ｍｍｏｌ、１．０当量）を入れ、撹拌混合物を０℃に冷却した。慎重にＬｉＢＨ4（１５６ｍｇ、７．１４９ｍｍｏｌ、３．０当量）を加え、混合物を０℃で１時間、さらに室温で１．５時間撹拌した。反応物を氷冷Ｈ2Ｏの添加によりクエンチし、１Ｎ  ＨＣｌでｐＨを約６に調整した。水性混合物をＣＨ2Ｃｌ2で抽出し、有機物を合一し、ＭｇＳＯ4で乾燥させ、減圧濃縮して、所望の生成物を黄色泡状物（１．０６ｇ、９６％）として得、それをさらに精製することなく使用した。ＬＣＭＳ−Ａ：１．９２分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４６５［Ｍ＋Ｈ］+、４８７［Ｍ＋Ｎａ］+
【０３４５】
（ｖｉｉ）（Ｓ）−（２−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）−４−メチレンピロリジン−１−イル）（５−メトキシ−２−ニトロ−４−（（トリイソプロピルシリル）オキシ）フェニル）メタノン（１０）
丸底フラスコにマグネチックスターラー、ＣＨ2Ｃｌ2（１０ｍＬ）、９（１．０６ｇ、２．２８１ｍｍｏｌ、１．０当量）、イミダゾール（４６７ｍｇ、６．８５８ｍｍｏｌ、３．０当量）ＴＢＳＣｌ（５１７ｍｇ、３．４２９ｍｍｏｌ、１．５当量）を入れ、１時間撹拌した結果、ＬＣＭＳは反応の完了を示した。反応混合物を濾過し、濾液をＨ2Ｏ、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥させ、減圧濃縮した。フラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン中２０〜３０％ＥｔＯＡｃ）により、所望の生成物を黄色油（１．２７ｇ、９６％）として得た。ＬＣＭＳ−Ａ：２．３０分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ５７９［Ｍ＋Ｈ］+、６０１［Ｍ＋Ｎａ］+
【０３４６】
（ｖｉｉｉ）（Ｓ）−（２−アミノ−５−メトキシ−４−（（トリイソプロピルシリル）オキシ）フェニル）（２−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）−４−メチレンピロリジン−１−イル）メタノン（１１）
３口丸底フラスコにマグネチックスターラー、１０（１０．０ｇ、１７．２７ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＥｔＯＨ（１７０ｍＬ）、Ｚｎ（２３．６ｇ、３４５．４ｍｍｏｌ、２０当量）を入れ、０℃に冷却した。５％ＨＣＯ2ＨのＥｔＯＨ（３４０ｍＬ）溶液を滴下漏斗で滴下し、３０分間撹拌した結果、ＬＣＭＳは反応の完了を示した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）で希釈し、セライトで濾過した。飽和ＮａＨＣＯ3溶液を水相のｐＨが塩基性になるまで濾液に加えた。相を分離し、水相はＥｔＯＡｃ（２×１００ｍＬ）で洗浄し、有機相は合一して、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥させ、減圧濃縮して、黄色油を得て、それをさらに精製することなく使用した（８．９９ｇ、９５％）。ＬＣＭＳ−Ａ：２．２３分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ５４９［Ｍ＋Ｈ］+、５７１［Ｍ＋Ｎａ］+
【０３４７】
（ｉｘ）４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（（アリルオキシ）カルボニル）アミノ）−３−メチルブタンアミド）プロパンアミド）ベンジル（２−（（Ｓ）−２−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）−４−メチレンピロリジン−１−カルボニル）−４−メトキシ−５−（（トリイソプロピルシリル）オキシ）フェニル）カルバメート（１２）
丸底フラスコにマグネチックスターラー、１１（８．９９ｇ、１６．３８ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＴＨＦ（９０ｍＬ）、Ｅｔ3Ｎ（５．４ｍＬ、３５．９０ｍｍｏｌ、２．２当量）を入れ、フラスコをＡｒでパージし、混合物を−１０℃に冷却した。Ａｒを流しながらトリホスゲン（１．７５ｇ、５．８９７ｍｍｏｌ、０．３６当量）を一度に加えた。５分後、ＬＣＭＳは、イソシアネートの形成が完了したことを示した（ＭｅＯＨでのクエンチとカルバミン酸メチルの観察による）。Ａｒを流しながらＩ１（９．２７ｇ、２４．５７ｍｍｏｌ、１．５当量）を一度に加え、反応混合物を室温に温め、２４時間撹拌した。反応混合物を濾過し、真空中にてＳｉＯ2で濃縮し、フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＣＨ2Ｃｌ2中０〜３％ＭｅＯＨ）により精製して、生成物（１０．９ｇ、７０％）を得た。ＬＣＭＳ−Ａ：２．２０分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ９５２［Ｍ＋Ｈ］+、９７４［Ｍ＋Ｎａ］+
【０３４８】
（ｘ）４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（（アリルオキシ）カルボニル）アミノ）−３−メチルブタンアミド）プロパンアミド）ベンジル（２−（（Ｓ）−２−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）−４−メチレンピロリジン−１−カルボニル）−５−ヒドロキシ−４−メトキシフェニルカルバメート（１３）
丸底フラスコにマグネチックスターラー、シリルエーテル１２（１０．９ｇ、１１．４７ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＤＭＦ（８５ｍＬ）、Ｈ2Ｏ（１．７ｍＬ）、及びＬｉＯＡｃ（１．１７ｇ、１１．４７ｍｍｏｌ、１．０当量）を入れた。反応混合物を１６時間撹拌した結果、ＬＣＭＳは反応の完了を示した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ）で希釈し、Ｈ2Ｏ（５０ｍＬ）及びブライン（５０ｍＬ）で連続して洗浄した。有機相をＭｇＳＯ4で乾燥させ、Ｉｓｏｌｅｒａクロマトグラフィー（ＣＨ2Ｃｌ2中０〜４％ＭｅＯＨ）で精製して、生成物を黄色泡状物（６．６５ｇ、７３％）として得た。ＬＣＭＳ−Ａ：１．７８分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ７９６［Ｍ＋Ｈ］+、８１８［Ｍ＋Ｎａ］+
【０３４９】
（ｘｉ）３−（（５−（（（（４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（（アリルオキシ）カルボニル）アミノ）−３−メチルブタンアミド）プロパンアミド）ベンジル）オキシ）カルボニル）アミノ）−４−（（Ｓ）−２−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）−４−メチレンピロリジン−１−カルボニル）−２−メトキシフェノキシ）メチル）−５−（ブロモメチル）安息香酸ｔｅｒｔ−ブチル（１４）
丸底フラスコに、マグネチックスターラー、フェノール１３（１．０９ｇ、１．３６４ｍｍｏｌ、１当量）、ビスブロモ５（１．４３ｇ、４．０９３ｍｍｏｌ、３．０当量）、ＤＭＦ（１０ｍＬ）、及びＫ2ＣＯ3（２０７ｍｇ、１．５００ｍｍｏｌ、１．１当量）を入れ、反応物を３５℃で２．５時間撹拌した結果、ＬＣＭＳは反応の完了を示した。反応混合物をＨ2Ｏで希釈してＣＨ2Ｃｌ2で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥させ、減圧濃縮した。Ｉｓｏｌｅｒａでの精製（ヘキサン中１０〜５０％ＥｔＯＡｃ）により、生成物をオフホワイトの泡状物（９４６ｍｇ、６４％）として得た。ＬＣＭＳ−Ａ：２．０６分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ１１００．２０［Ｍ＋Ｎａ］+
【０３５０】
（ｘｉｉ）（１１Ｓ，１１ａＳ）−８−（（３−（（５−（（（（４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（（アリルオキシ）カルボニル）アミノ）−３−メチルブタンアミド）プロパンアミド）ベンジル）オキシ）カルボニル）アミノ）−４−（（Ｓ）−２−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）−４−メチレンピロリジン−１−カルボニル）−２−メトキシフェノキシ）メチル）−５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ベンジル）オキシ）−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−１１−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２，３，１１，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１０（５Ｈ）−カルボキシレート（１５）
丸底フラスコにマグネチックスターラー、１４（９４６ｍｇ、０．８７６６ｍｍｏｌ、１．０当量）、Ｉ２（４４４ｍｇ、０．９６４３ｍｍｏｌ、１．１当量）、ＤＭＦ（１２ｍＬ）、及びＫ2ＣＯ3（１３３ｍｇ、０．９６４３ｍｍｏｌ、１．１当量）を３５℃で３．５時間撹拌した結果、ＬＣＭＳは反応の完了を示した。反応混合物をＨ2Ｏで希釈し、ＥｔＯＡｃで洗浄し、有機相をＭｇＳＯ4で乾燥させ、減圧濃縮した。Ｉｓｏｌｅｒａでの精製（ヘキサン中４０〜１００％ＥｔＯＡｃ）により、生成物を白色泡状物（１．０４ｇ、８２％）として得た。ＬＣＭＳ−Ａ：２．１１分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ１４５８．２０［Ｍ＋Ｈ］+、１４８０．３５［Ｍ＋Ｎａ］+
【０３５１】
（ｘｉｉｉ）（１１Ｓ，１１ａＳ）−８−（（３−（（５−（（（（４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（（アリルオキシ）カルボニル）アミノ）−３−メチルブタンアミド）プロパンアミド）ベンジル）オキシ）カルボニル）アミノ）−４−（（Ｓ）−２−（ヒドロキシメチル）−４−メチレンピロリジン−１−カルボニル）−２−メトキシフェノキシ）メチル）−５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ベンジル）オキシ）−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−１１−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２，３，１１，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１０（５Ｈ）−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１６）
丸底フラスコにマグネチックスターラー、１５（１．０４ｇ、０．７１２９ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＴＨＦ（４０ｍＬ）ＡｃＯＨ（８２μＬ、１．４３０ｍｍｏｌ、２．０当量）、及びＴＢＡＦ（１Ｍ溶液２．１ｍＬ、２．１００ｍｍｏｌ、３．０当量）を入れ、反応物を１時間撹拌した結果、ＬＣＭＳは反応の完了を示した。反応混合物をＣＨＣｌ3で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ3で洗浄し、有機相をＭｇＳＯ4で乾燥させ、減圧濃縮した。Ｉｓｏｌｅｒａでの精製（ＣＨ2Ｃｌ2中０〜４％ＭｅＯＨ）により、生成物を白色泡状物（９６１ｍｇ、１００％）として得た。ＬＣＭＳ−Ａ：１．８６分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ１３４４．７０［Ｍ＋Ｈ］+、１３６６．８５［Ｍ＋Ｎａ］+
【０３５２】
（ｘｉｖ）４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（（アリルオキシ）カルボニル）アミノ）−３−メチルブタンアミド）プロパンアミド）ベンジル（１１Ｓ，１１ａＳ）−８−（（３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（（（（１１Ｓ，１１ａＳ）−１０−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−１１−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２，３，５，１０，１１，１１ａ−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−８−イル）オキシ）メチル）ベンジル）オキシ）−１１−ヒドロキシ−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−２，３，１１，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１０（５Ｈ）−カルボキシレート（１７）
丸底フラスコにマグネチックスターラー、１６（９６１ｍｇ、０．７１５０ｍｍｏｌ、１．０当量）ＤＭＳＯ（７ｍＬ）、及びＩＢＸ（４８９ｍｇ、０．７８６５、１．１当量）を入れ、反応混合物を３５℃で１６時間撹拌した。ＩＢＸ（５０ｍｇ、８０．３５μｍｏｌ、０．１１当量）を加え、反応混合物を４８時間撹拌し、その後、反応混合物を水に注ぎ、１０％ＭｅＯＨのＣＨ2Ｃｌ2溶液で洗浄し、有機層を合一し、ＭｇＳ０4で乾燥させ、減圧濃縮した。Ｉｓｏｌｅｒａでの精製（ＣＨ2Ｃｌ2中０〜４％ＭｅＯＨ）により、生成物を白色泡状物（４９２ｍｇ、５１％）として得た。混合画分をｉｓｏｌｅｒａ（ＣＨ2Ｃｌ2中０〜２．５％ＭｅＯＨ）で再度精製して、生成物を白色固体（３０２ｍｇ、３１％）として得た。両方の清浄な画分を合一し、生成物を白色泡状物（７９４ｍｇ、８３％）として得た。ＬＣＭＳ−Ａ：１．８３分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ１３６４．５５［Ｍ＋Ｎａ］+
【０３５３】
（ｘｖ）（１１Ｓ，１１ａＳ）−８−（（３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（（（（１１Ｓ，１１ａＳ）−１０−（（（４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパンアミド）−３−メチルブタンアミド）プロパンアミド）ベンジル）オキシ）カルボニル）−１１−ヒドロキシ−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−２，３，５，１０，１１，１１ａ−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−８−イル）オキシ）メチル）ベンジル）オキシ）−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−１１−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２，３，１１，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１０（５Ｈ）−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１８）
丸底フラスコにマグネチックスターラー、１７（７９４ｍｇ、０．５９１４ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＣＨ2Ｃｌ2（５０ｍＬ）、ピロリジン（１２１μｌ、１．４７９ｍｍｏｌ、２．５当量）を入れ、フラスコをＡｒでパージした。Ａｒを流しながらＰｄ（ＰＰｈ3）4（３４ｍｇ、２９．５８μｍｏｌ、０．０５０当量）を加え、反応混合物を１０分間撹拌した結果、ＬＣＭＳは反応の完了を示した。反応混合物を一晩完全に減圧濃縮して、微量のピロリジンを除去した。得られた残渣をＣＨ2Ｃｌ2（１０ｍＬ）に溶解し、マレイミドプロピオン酸（７８ｍｇ、０．４６１２、１．１当量）、ＥＤＣＩ．ＨＣｌ（８８０ｍｇ、０．４５８９ｍｍｏｌ、１．１当量）、及びｉ−Ｐｒ2ＮＥｔ（２１８μＬ、１．２５２ｍｍｏｌ、３．０当量）を加え、混合物を５時間撹拌した結果、ＬＣＭＳは反応の未完了を示した。０．１当量のＥＤＣＩ．ＨＣｌ、０．１当量のマレイミドプロピオン酸、及び０．３当量のｉ−Ｐｒ2ＮＥｔをさらに加え、混合物を１６時間撹拌した結果、ＬＣＭＳは反応の未完了を示した。０．２当量のＥＤＣＩ．ＨＣｌ、０．２当量のマレイミドプロピオン酸、及び０．６当量のｉ−Ｐｒ2ＮＥｔをさらに加え、混合物を２４時間撹拌し、ＣＨ2Ｃｌ2（２０ｍＬ）で希釈し、Ｈ2Ｏ（１０ｍＬ）で洗浄し、有機相をＭｇＳＯ4で乾燥させ、減圧濃縮した。Ｉｓｏｌｅｒａクロマトグラフィー（ＣＨ2Ｃｌ2中２〜６％ＭｅＯＨ）により、所望の生成物（２０５ｍｇ、３５％）を得た。ＬＣＭＳ−Ａ：１．７７分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ１４１０［Ｍ＋Ｈ］+、１４３１［Ｍ＋Ｎａ］+
【０３５４】
（ｘｖｉ）３−（（（（１１Ｓ，１１ａＳ）−１０−（（（４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパンアミド）−３−メチルブタンアミド）プロパンアミド）ベンジル）オキシ）カルボニル）−１１−ヒドロキシ−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−２，３，５，１０，１１，１１ａ−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−８−イル）オキシ）メチル）−５−（（（（Ｓ）−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−２，３，５，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−８−イル）オキシ）メチル）安息香酸（１９）
丸底フラスコにマグネチックスターラー、１８（２０５ｍｇ、０．１４５４ｍｍｏｌ、１．０当量）を入れ、約−５℃に冷却した。９５：５ｖ／ｖのＴＦＡ／Ｈ2Ｏを約−２０℃に冷却し、反応フラスコに入れ、７５分間撹拌した結果、ＬＣＭＳは反応の完了を示した。飽和ＮａＨＣＯ3を慎重に添加することにより、反応混合物のｐＨを約７に調整した結果、沈殿物が形成された。水性混合物を１０％ＭｅＯＨのＣＨ2Ｃｌ2で抽出し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させ、減圧濃縮した。分取ＨＰＬＣ（Ｂ中１５〜７０％Ａ）により、生成物を白色固体（５２ｍｇ、３１％、ＱＣ＝９４％）として得た。Ａ＝０．０５％ギ酸アセトニトリル溶液Ｂ＝０．０５％ギ酸水溶液
ＬＣＭＳ−Ｂ：７．１３分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ１１５１［Ｍ＋Ｈ］+
【０３５５】
実施例２：４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパンアミド）−３−メチルブタンアミド）プロパンアミド）ベンジル（１１Ｓ，１１ａＳ）−１１−ヒドロキシ−７−メトキシ−８−（（３−（（（（Ｓ）−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−２，３，５，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−８−イル）オキシ）メチル）−５−（メトキシカルボニル）ベンジル）オキシ）−２−メチレン−５−オキソ−２，３，１１，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１０（５Ｈ）−カルボキシレート（２７）
【化８１】
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【０３５６】
（ｉ）３，５−ビス（（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）安息香酸メチル（２０）
オーブンで乾燥させた３口丸底フラスコに、マグネチックスターラーバー、無水トルエン（１５ｍＬ）を入れ、フラスコをＡｒでパージし、フラスコを−１０℃に冷却した。ＢｕＬｉ（２．５Ｍヘキサン溶液９．９ｍＬ、２４．８６ｍｍｏｌ、２．０当量）、次いでゆっくりとＢｕＭｇＣｌ（２．０Ｍ  ＴＨＦ溶液３．５ｍＬ、１２．４０ｍｍｏｌ、１．０当量）を加え、３０分間撹拌した。２（１４．７ｇ、２９．８４ｍｍｏｌ、２．４当量）の無水トルエン（３０ｍＬ）溶液をゆっくりと加え、−１０℃で２時間撹拌した。ＣｌＣＯ2Ｍｅ（２．９ｍＬ、３７．２９ｍｍｏｌ、３．０当量）の無水トルエン（１５ｍＬ）溶液を−５０℃でゆっくりと加え、２時間撹拌してから、１０％冷クエン酸に注いだ。水相をＥｔＯＡｃで抽出し、有機物を合一し、ＮａＨＣＯ3で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥させ、減圧濃縮した。Ｉｓｏｌｅｒａでの精製（ヘキサン中０〜２０％ＥｔＯＡｃ）により、生成物を淡黄色油（１１．５ｇ、９１％）として得た。ＬＣＭＳ−Ａ：２．１８分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４２５［Ｍ＋Ｈ］+
【０３５７】
（ｉｉ）３，５−ビス（ブロモメチル）安息香酸メチル（２１）
丸底フラスコにマグネチックスターラー、ＡｃＯＨ（１５ｍＬ）、２０（１．００ｇ、２．３５４ｍｍｏｌ、１．０当量）、及びＨＢｒ（３３％ＡｃＯＨ溶液）（１０ｍＬ）を入れ、混合物を５０℃で２分間撹拌した。反応混合物を室温に冷却し、氷冷水に注ぎ、得られた沈殿物を濾過により回収し、ＣＨ2Ｃｌ2に溶解し、ＭｇＳＯ4で乾燥させ、減圧濃縮した。Ｉｓｏｌｅｒａ（ヘキサン中０〜５０％ＣＨ2Ｃｌ2）により、所望の生成物をオフホワイトの固体（４６０ｍｇ、６１％）として得た。ＬＣＭＳ−Ａ：１．５９分（ＥＳ＋）イオン化なし。
【０３５８】
（ｉｉｉ）（１１Ｓ，１１ａＳ）−８−（（３−（ブロモメチル）−５−（メトキシカルボニル）ベンジル）オキシ）−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−１１−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２，３，１１，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１０（５Ｈ）−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（２２）
丸底フラスコにマグネチックスターラー、ＤＭＦ（２０ｍＬ）、Ｉ２（２５６ｍｇ、０．５５５９ｍｍｏｌ、１．０当量）、２１（７１６ｍｇ、２．２２４ｍｍｏｌ、４．０当量）、及びＫ2ＣＯ3（８４．５ｍｇ、０．６１１５ｍｍｏｌ、１．１当量）を入れた。混合物を１時間４５分撹拌した結果、ＬＣＭＳは反応の完了を示した。ＤＭＦを減圧除去し、得られた残渣をＣＨ2Ｃｌ2に溶解し、飽和ＮＨ4Ｃｌ溶液で洗浄した。有機相を回収し、ＭｇＳＯ4で乾燥させ、ｉｓｏｌｅｒａ（ヘプタン中１０〜６０％ＥｔＯＡｃ）により精製して、所望の生成物を白色固体（２３４ｍｇ、６０％）として得た。ＬＣＭＳ−Ａ：１．７７分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ７０１［Ｍ＋Ｈ］+、７２３［Ｍ＋Ｎａ］+
【０３５９】
（ｉｖ）（１１Ｓ，１１ａＳ）−８−（（３−（（５−（（（（４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（（アリルオキシ）カルボニル）アミノ）−３−メチルブタンアミド）プロパンアミド）ベンジル）オキシ）カルボニル）アミノ）−４−（（Ｓ）−２−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）−４−メチレンピロリジン−１−カルボニル）−２−メトキシフェノキシ）メチル）−５−（メトキシカルボニル）ベンジル）オキシ）−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−１１−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２，３，１１，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１０（５Ｈ）−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（２３）
丸底フラスコにマグネチックスターラー、ＤＭＦ（２ｍＬ）、２２（２３４ｍｇ、０．３３３５ｍｍｏｌ、１．０当量）、１３（２９２ｍｇ、０．３６６９ｍｍｏｌ、１．１当量）、及びＫ2ＣＯ3（５１ｍｇ、０．３６９０ｍｍｏｌ、１．１当量）を入れた。混合物を４時間撹拌した結果、ＬＣＭＳは反応の完了を示した。ＤＭＦを減圧除去し、得られた残渣をＣＨ2Ｃｌ2に溶解し、飽和ＮＨ4Ｃｌ溶液で洗浄した。有機相を回収し、ＭｇＳＯ4で乾燥させ、ｉｓｏｌｅｒａ（ＣＨ2Ｃｌ2中０〜３％ＭｅＯＨ）により精製して、所望の生成物を白色固体（４５０ｍｇ、９５％）として得た。ＬＣＭＳ−Ａ：２．００分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ１４１６［Ｍ＋Ｈ］+、１４３８［Ｍ＋Ｎａ］+
【０３６０】
（ｖ）（１１Ｓ，１１ａＳ）−８−（（３−（（５−（（（（４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（（アリルオキシ）カルボニル）アミノ）−３−メチルブタンアミド）プロパンアミド）ベンジル）オキシ）カルボニル）アミノ）−４−（（Ｓ）−２−（ヒドロキシメチル）−４−メチレンピロリジン−１−カルボニル）−２−メトキシフェノキシ）メチル）−５−（メトキシカルボニル）ベンジル）オキシ）−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−１１−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２，３，１１，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１０（５Ｈ）−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（２４）
丸底フラスコにマグネチックスターラー、ＴＨＦ（１８ｍＬ）、２３（４５０ｍｇ、０．３１７６ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＡｃＯＨ（３６．３μＬ、０．６３５２ｍｍｏｌ、２．０当量）、及びＴＢＡＦ（１Ｍ  ＴＨＦ溶液９５３μＬ、０．９５３０ｍｍｏｌ、３．０当量）を入れた。混合物を室温で７時間撹拌した後、数滴のＴＢＡＦを加え、室温でさらに３時間撹拌した結果、ＬＣＭＳは反応の完了を示した。反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈して、Ｈ2Ｏ、次いでブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥させ、減圧濃縮した。Ｉｓｏｌｅｒａ（ＣＨ2Ｃｌ2中０〜４％ＭｅＯＨ）により、Ｂｕ4Ｎ＋塩を含む所望の生成物を、分離不可能な混合物として得た。得られた物質をさらに精製することなく使用した。ＬＣＭＳ−Ａ：１．７３分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ１３０２［Ｍ＋Ｈ］+、１３２４［Ｍ＋Ｎａ］+
【０３６１】
（ｖｉ）４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（（アリルオキシ）カルボニル）アミノ）−３−メチルブタンアミド）プロパンアミド）ベンジル（１１Ｓ，１１ａＳ）−８−（（３−（（（（１１Ｓ，１１ａＳ）−１０−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−１１−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２，３，５，１０，１１，１１ａ−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−８−イル）オキシ）メチル）−５−（メトキシカルボニル）ベンジル）オキシ）−１１−ヒドロキシ−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−２，３，１１，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１０（５Ｈ）−カルボキシレート（２５）
丸底フラスコにマグネチックスターラー、ＤＭＳＯ（３ｍＬ）、２４（約０．３１７６ｍｍｏｌ、１．０当量）、及びＩＢＸ（４５重量％）（２３７ｍｇ、０．３８１１ｍｍｏｌ、１．２当量）を入れた。混合物を室温で１６時間撹拌した後、ナイフ先端量のＩＢＸを加え、３５℃で２４時間撹拌した。反応混合物をＨ2Ｏで希釈し、ＣＨＣｌ3で抽出した。有機物を合一し、ＭｇＳＯ4で乾燥させ、減圧濃縮した。Ｉｓｏｌｅｒａ（ＣＨ2Ｃｌ2中０〜４％ＭｅＯＨ）により、所望の生成物を白色固体（３３３ｍｇ、８１％（２段階））として得た。ＬＣＭＳ−Ａ：１．７１分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ１３００［Ｍ＋Ｈ］+、１３２３［Ｍ＋Ｎａ］+
【０３６２】
（ｖｉｉ）（１１Ｓ，１１ａＳ）−８−（（３−（（（（１１Ｓ，１１ａＳ）−１０−（（（４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパンアミド）−３−メチルブタンアミド）プロパンアミド）ベンジル）オキシ）カルボニル）−１１−ヒドロキシ−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−２，３，５，１０，１１，１１ａ−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−８−イル）オキシ）メチル）−５−（メトキシカルボニル）ベンジル）オキシ）−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−１１−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２，３，１１，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１０（５Ｈ）−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（２６）
丸底フラスコにマグネチックスターラー、ＣＨ2Ｃｌ2（１９ｍＬ）、２５（３３３ｍｇ、０．２５６１ｍｍｏｌ、１．０当量）、ピロリジン（４２．１μＬ、０．５１２２ｍｍｏｌ、２．０当量）、及びＰｄ（ＰＰｈ3）4（７．４ｍｇ、６．４０３μｍｏｌ、０．０２５当量）を入れた。反応混合物を２０時間撹拌した結果、ＬＣＭＳは反応の完了を示した。反応混合物を一晩完全に減圧濃縮して、微量のピロリジンを除去した。得られた残渣をＣＨ2Ｃｌ2（３．５ｍＬ）に溶解し、マレイミドプロピオン酸ＮＨＳエステル（８２ｍｇ、０．３０８０ｍｍｏｌ、１．２当量）及びｉ−Ｐｒ2ＮＥｔ（５３．５μＬ、０．３０７３ｍｍｏｌ、１．２当量）を加え、混合物を２時間撹拌した結果、ＬＣＭＳは反応の完了を示した。反応混合物を減圧濃縮し、ｉｓｏｌｅｒａ（ＣＨ2Ｃｌ2中０〜４％ＭｅＯＨ）で精製して、所望の生成物を白色固体（１５０ｍｇ、４３％）として得た。ＬＣＭＳ−Ａ：１．６５分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ１３６８［Ｍ＋Ｈ］+、１３８９［Ｍ＋Ｎａ］+
【０３６３】
（ｖｉｉｉ）４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパンアミド）−３−メチルブタンアミド）プロパンアミド）ベンジル（１１Ｓ，１１ａＳ）−１１−ヒドロキシ−７−メトキシ−８−（（３−（（（（Ｓ）−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−２，３，５，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−８−イル）オキシ）メチル）−５−（メトキシカルボニル）ベンジル）オキシ）−２−メチレン−５−オキソ−２，３，１１，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１０（５Ｈ）−カルボキシレート（２７）
丸底フラスコにマグネチックスターラー、２６（１５０ｍｇ、０．１０９７ｍｍｏｌ、１．０当量）を入れ、０℃に冷却した。Ｈ2Ｏ中９５％ＴＦＡを約−２０℃に冷却し、一度に反応フラスコに入れ、混合物を３０分間撹拌した結果、ＬＣＭＳは反応の完了を示した。反応混合物を氷冷した飽和ＮａＨＣＯ3溶液に注ぎ、ｐＨがほぼ中性になるまで固体ＮａＨＣＯ3を加えた。水性混合物を１０％ＭｅＯＨのＣＨ2Ｃｌ2溶液で抽出し、有機物を合一し、ＭｇＳＯ4で乾燥させ、減圧濃縮した。ｉｓｏｌｅｒａ（ＣＨ2Ｃｌ2中０〜５％ＭｅＯＨ）での精製により、所望の生成物を白色固体（５２．８ｍｇ、収率４１％、ＱＣ９８．１％）として得た。ＬＣＭＳ−Ａ：７．９５分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ１１６５［Ｍ＋Ｈ］+
【０３６４】
実施例３：４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパンアミド）−３−メチルブタンアミド）プロパンアミド）ベンジル（１１Ｓ，１１ａＳ）−１１−ヒドロキシ−７−メトキシ−８−（（３−（（（（Ｓ）−７−メトキシ−２−メチル−５−オキソ−５，１１ａ−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−８−イル）オキシ）メチル）−５−（メトキシカルボニル）ベンジル）オキシ）−２−メチル−５−オキソ−１１，１１ａ−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１０（５Ｈ）−カルボキシレート（３３）及び３−（（（（１１Ｓ，１１ａＳ）−１０−（（（４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパンアミド）−３−メチルブタンアミド）プロパンアミド）ベンジル）オキシ）カルボニル）−１１−ヒドロキシ−７−メトキシ−２−メチル−５−オキソ−５，１０，１１，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−８−イル）オキシ）メチル）−５−（（（（Ｓ）−７−メトキシ−２−メチル−５−オキソ−５，１１ａ−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−８−イル）オキシ）メチル）安息香酸（３４）
【化８２】
2021521172.tif 000084
【０３６５】
（ｉ）（１１Ｓ，１１ａＳ）−８−（（３−（ブロモメチル）−５−（メトキシカルボニル）ベンジル）オキシ）−１１−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）−７−メトキシ−２−メチル−５−オキソ−１１，１１ａ−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１０（５Ｈ）−カルボン酸アリル（２８）
丸底フラスコにマグネチックスターラー、ＤＭＦ（１５ｍＬ）、Ｉ３（１８４ｍｇ、０．３８８３ｍｍｏｌ、１．０当量）、２１（５００ｍｇ、１．５５３ｍｍｏｌ、４．０当量）、Ｋ2ＣＯ3（５９ｍｇ、０．４２７１ｍｍｏｌ、１．１当量）、及びＴＢＡＩ（３．６ｍｇ、９．７０８μｍｏｌ、０．０２５当量）を入れ、混合物を６５℃で１６時間撹拌した。ＤＭＦを減圧除去し、得られた残渣をＥｔＯＡｃに溶解し、１Ｎ  ＨＣｌ溶液で洗浄した。有機相をＭｇＳＯ4で乾燥させ、減圧濃縮した。フラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン中０〜３０％ＥｔＯＡｃ）により、所望の生成物（１８３ｍｇ、６９％）を得た。ＬＣＭＳ−Ａ：２．０６分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ７１４［Ｍ＋Ｈ］+、７３７［Ｍ＋Ｎａ］+
【０３６６】
（ｉｉ）（１１Ｓ，１１ａＳ）−８−（（３−（（（（１１Ｓ，１１ａＳ）−１０−（（（４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（（アリルオキシ）カルボニル）アミノ）−３−メチルブタンアミド）プロパンアミド）ベンジル）オキシ）カルボニル）−１１−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）−７−メトキシ−２−メチル−５−オキソ−５，１０，１１，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−８−イル）オキシ）メチル）−５−（メトキシカルボニル）ベンジル）オキシ）−１１−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）−７−メトキシ−２−メチル−５−オキソ−１１，１１ａ−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１０（５Ｈ）−カルボン酸アリル（２９）
丸底フラスコにマグネチックスターラー、ＤＭＦ（１ｍＬ）、２８（１２８ｍｇ、０．１７８８ｍｍｏｌ、１．０当量）、Ｉ４（３５３ｍｇ、０．４４４６ｍｍｏｌ、２．５当量）、Ｋ2ＣＯ3（２７ｍｇ、０．１９６７ｍｍｏｌ、１．１当量）、及びＴＢＡＩ（１．７ｍｇ、４．４７０μｍｏｌ、０．０２５当量）を入れ、混合物を６５℃で２０時間撹拌した。ＤＭＦを減圧除去し、得られた残渣をＥｔＯＡｃに溶解し、Ｈ2Ｏ、次いでブラインで洗浄した。有機相をＭｇＳＯ4で乾燥させ、減圧濃縮した。フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＣＨ2Ｃｌ2中０〜３％ＭｅＯＨ）により、所望の生成物（１１７ｍｇ、４６％）を得た。ＬＣＭＳ−Ａ：２．２０分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ１４２８［Ｍ＋Ｈ］+、１４５０［Ｍ＋Ｎａ］+
【０３６７】
（ｉｉｉ）３−（（（（１１Ｓ，１１ａＳ）−１０−（（アリルオキシ）カルボニル）−１１−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）−７−メトキシ−２−メチル−５−オキソ−５，１０，１１，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−８−イル）オキシ）メチル）−５−（（（（１１Ｓ，１１ａＳ）−１０−（（（４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（（アリルオキシ）カルボニル）アミノ）−３−メチルブタンアミド）プロパンアミド）ベンジル）オキシ）カルボニル）−１１−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）−７−メトキシ−２−メチル−５−オキソ−５，１０，１１，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−８−イル）オキシ）メチル）安息香酸（３０）
マイクロ波バイアルにマグネチックスターラー、ＣＨＣｌ3（１ｍＬ）、２９（１００ｍｇ、０．０６９９９ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＳｎＭｅ3ＯＨ（１２７ｍｇ、０．６９９９ｍｍｏｌ、１０当量）を入れ、１００℃で１０時間照射した。反応混合物をセライト（登録商標）で濾過し、濾液を減圧濃縮した。得られた残渣をＴＨＦ（１ｍＬ）及びＨ2Ｏ（１ｍＬ）に溶解し、Ｋ2ＣＯ3（２０ｍｇ、０．１４００ｍｍｏｌ、２．０当量）及びクロロギ酸アリル（１４μＬ、０．１４００ｍｍｏｌ、２．０当量）を加えた。混合物を２時間撹拌した結果、ＬＣＭＳは反応の完了を示した。反応混合物を（ＥｔＯＡｃ）で希釈し、１Ｎ  ＨＣｌ溶液で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥させ、減圧濃縮した。フラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン中７０〜１００％ＥｔＯＡｃ、０．１％ＡｃＯＨ）により、所望の生成物（６７ｍｇ、６８％）を得た。ＬＣＭＳ−Ａ：２．１３分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ１４１４［Ｍ＋Ｈ］+、１４３６［Ｍ＋Ｎａ］+
【０３６８】
（ｉｖ−ａ）（１１Ｓ，１１ａＳ）−８−（（３−（（（（１１Ｓ，１１ａ）−１０−（（（４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（（アリルオキシ）カルボニル）アミノ）−３−メチルブタンアミド）プロパンアミド）ベンジル）オキシ）カルボニル）−１１−ヒドロキシ−７−メトキシ−２−メチル−５−オキソ−５，１０，１１，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−８−イル）オキシ）メチル）−５−（メトキシカルボニル）ベンジル）オキシ）−１１−ヒドロキシ−７−メトキシ−２−メチル−５−オキソ−１１，１１ａ−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１０（５Ｈ）−カルボン酸アリル（３１）
丸底フラスコにマグネチックスターラーを入れ、ＴＨＦ（１０ｍＬ）、２９（２００ｍｇ、０．１４００ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＡｃＯＨ（３２μＬ、０．５６００ｍｍｏｌ、４．０当量）、及びＴＢＡＦ（１Ｍ溶液５６０μＬ、０．５６００ｍｍｏｌ、４．０当量）を加え、反応物を室温まで徐々に温めながら１６時間撹拌した結果、ＬＣＭＳは反応の完了を示した。反応混合物をＣＨ2Ｃｌ2で希釈し、飽和ＮＨ4Ｃｌで洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥させ、減圧濃縮した。フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＣＨＣｌ3中３％ＭｅＯＨ）により、所望の生成物（１４０ｍｇ、８３％）を得た。ＬＣＭＳ−Ａ：１．６２分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ１２００［Ｍ＋Ｈ］+、１２２２［Ｍ＋Ｎａ］+
【０３６９】
（ｉｖ−ｂ）３−（（（（１１Ｓ，１１ａＳ）−１０−（（アリルオキシ）カルボニル）−１１−ヒドロキシ−７−メトキシ−２−メチル−５−オキソ−５，１０，１１，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−８−イル）オキシ）メチル）−５−（（（（１１Ｓ，１１ａＳ）−１０−（（（４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（（アリルオキシ）カルボニル）アミノ）−３−メチルブタンアミド）プロパンアミド）ベンジル）オキシ）カルボニル）−１１−ヒドロキシ−７−メトキシ−２−メチル−５−オキソ−５，１０，１１，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−８−イル）オキシ）メチル）安息香酸（３２）
丸底フラスコにマグネチックスターラー、ＴＨＦ（１０ｍＬ）、３０（１３５ｍｇ、０．０９５４２ｍｍｏｌ、１．０当量）を入れ、０℃に冷却し、１０分間撹拌した。ＡｃＯＨ（２１．９μＬ、０．３８１７ｍｍｏｌ、４．０当量）及びＴＢＡＦ（１Ｍ溶液４２９μＬ、０．４２９０ｍｍｏｌ、４．０当量）を加え、反応物を室温まで徐々に温めながら１６時間撹拌した結果、ＬＣＭＳは反応の完了を示した。反応混合物をＣＨ2Ｃｌ2で希釈し、飽和ＮＨ4Ｃｌで洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥させ、減圧濃縮した。フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＣＨ2Ｃｌ2中０〜５％ＭｅＯＨ）により、Ｂｕ4Ｎ+塩が混入した生成物を得た。得られた生成物はさらに精製することなく使用し、収率は１００％であると推定された。ＬＣＭＳ−Ａ：１．６３分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ１１８６［Ｍ＋Ｈ］+、１２０８［Ｍ＋Ｎａ］+
【０３７０】
（ｖ−ａ）４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパンアミド）−３−メチルブタンアミド）プロパンアミド）ベンジル（１１Ｓ，１１ａＳ）−１１−ヒドロキシ−７−メトキシ−８−（（３−（（（（Ｓ）−７−メトキシ−２−メチル−５−オキソ−５，１１ａ−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−８−イル）オキシ）メチル）−５−（メトキシカルボニル）ベンジル）オキシ）−２−メチル−５−オキソ−１１，１１ａ−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１０（５Ｈ）−カルボキシレート（３３）
丸底フラスコにマグネチックスターラー、ＣＨ2Ｃｌ2（１０ｍＬ）、３１（１２０ｍｇ、９９．９８μｍｏｌ、１．０当量）、ピロリジン（２１μＬ、２５０μｍｏｌ、２．５当量）、及びＰｄ（ＰＰｈ3）4（５．８ｍｇ、４．９９９μｍｏｌ、０．０５０当量）を入れた。Ａｒ下で混合物を３０分間撹拌した結果、ＬＣＭＳは反応の完了を示した。反応混合物を一晩完全に減圧濃縮して、微量のピロリジンを除去した。得られた残渣をＣＨ2Ｃｌ2（３．５ｍＬ）に溶解し、マレイミドプロピオン酸（１４．９ｍｇ、８８．３１μｍｏｌ、１．０当量）、及びＥＤＣＩ．ＨＣｌ（１３．７ｍｇ、８８．３１μｍｏｌ、１．０当量）を加え、混合物を２時間撹拌した結果、ＬＣＭＳは反応の完了を示した。反応混合物を減圧濃縮し、フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＣＨ2Ｃｌ2中３〜５％ＭｅＯＨ）、次いで分取ＨＰＬＣ（Ｂ中１５〜９０％Ａ）で精製して、所望の生成物を黄色固体（１０ｍｇ、収率９．７％）として得た。Ａ＝０．０５％ギ酸アセトニトリル溶液Ｂ＝０．０５％ギ酸水溶液ＬＣＭＳ−Ｂ：６．７８分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ１１６５［Ｍ＋Ｈ］+、１１８７［Ｍ＋Ｎａ］+
【０３７１】
（ｖ−ｂ）３−（（（（１１Ｓ，１１ａＳ）−１０−（（（（４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパンアミド）−３−メチルブタンアミド）プロパンアミド）ベンジル）オキシ）カルボニル）−１１−ヒドロキシ−７−メトキシ−２−メチル−５−オキソ−５，１０，１１，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−８−イル）オキシ）メチル）−５−（（（（Ｓ）−７−メトキシ−２−メチル−５−オキソ−５，１１ａ−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−８−イル）オキシ）メチル）安息香酸（３４）
丸底フラスコにマグネチックスターラー、ＣＨ2Ｃｌ2（８ｍＬ）、３２（前工程からの粗製物、約９５．４２μｍｏｌ、１．０当量））、ピロリジン（１９．６μＬ、２３８．６μｍｏｌ、２．５当量）、及びＰｄ（ＰＰｈ3）4（５．５ｍｇ、４．７７１μｍｏｌ、０．０５０当量）を入れ、Ａｒ下で混合物を３０分間撹拌した結果、ＬＣＭＳは反応の完了を示した。反応混合物をＣＨＣｌ3で希釈し、飽和ＮＨ4Ｃｌで洗浄し、有機物を合一し、ＭｇＳＯ4で乾燥させ、減圧濃縮した。得られた残渣をＴＨＦ（７ｍＬ）及びＮａＨＣＯ3（０．１Ｍ溶液１ｍＬ）に溶解し、マレイミドプロピオン酸ＮＨＳエステル（２８ｍｇ、１０５μｍｏｌ、１．１当量）を添加した。混合物を２０時間撹拌し、ＣＨＣｌ3で希釈し、飽和ＮＨ4Ｃｌ溶液で洗浄し、減圧濃縮した。分取ＨＰＬＣ（Ｂ中１５〜７０％Ａ）により、所望の生成物を黄色固体（６．４ｍｇ、収率５．８％、ＱＣ８４．６％）として得た。Ａ＝０．０５％ギ酸アセトニトリル溶液Ｂ＝０．０５％ギ酸水溶液ＬＣＭＳ−Ｂ：６．５２分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ１１５１［Ｍ＋Ｈ］+
【０３７２】
実施例４：４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパンアミド）−３−メチルブタンアミド）プロパンアミド）ベンジル（１１Ｓ，１１ａＳ）−１１−ヒドロキシ−７−メトキシ−８−（（６−（（（（Ｓ）−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−２，３，５，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−８−イル）オキシ）メチル）−４−（メトキシカルボニル）ピリジン−２−イル）メトキシ）−２−メチレン−５−オキソ−２，３，１１，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１０（５Ｈ）−カルボキシレート（４４）及び２−（（（（１１Ｓ，１１ａＳ）−１０−（（（４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパンアミド）−３−メチルブタンアミド）プロパンアミド）ベンジル）オキシ）カルボニル）−１１−ヒドロキシ−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−２，３，５．１０，１１，１１ａ−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−８−イル）オキシ）メチル）−６−（（（（Ｓ）−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−２，３，５，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−８−イル）オキシ）メチル）イソニコチン酸（４５）
【化８３】
2021521172.tif 000085
【０３７３】
（ｉ）２，６−ビス（ブロモメチル）イソニコチン酸メチル（３６）
丸底フラスコにマグネチックスターラーバー、アセトニトリル（４６ｍＬ）、３５（９２４ｍｇ、４．６８６ｍｍｏｌ、１．０当量）を入れ、混合物を０℃に冷却した。ＰＰｈ3（３．９６ｇ、１４．０６ｍｍｏｌ、３．０当量）を加えた後、ＣＢｒ4（４．６６ｇ、１４．０６ｍｍｏｌ、３．０当量）をゆっくりと加え、混合物を３０分間撹拌した。反応混合物を減圧濃縮し、ｉｓｏｌｅｒａ（ヘキサン中０〜１００％ＥｔＯＡｃ）で精製して、所望の生成物（１．０１ｇ、６７％）を得た。ＬＣＭＳ−Ａ：１．４６分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ３２１［Ｍ＋Ｈ］+
【０３７４】
（ｉｉ）２−（（５−（（（（４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（（アリルオキシ）カルボニル）アミノ）−３−メチルブタンアミド）プロパンアミド）ベンジル）オキシ）カルボニル）アミノ）−４−（（Ｓ）−２−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）−４−メチレンピロリジン−１−カルボニル）−２−メトキシフェノキシ）メチル）−６−（ブロモメチル）イソニコチン酸メチル（３７）
丸底フラスコにマグネチックスターラーバー、ＤＭＦ（１０ｍＬ）、１３（８１４ｍｇ、１．０２２ｍｍｏｌ、１．０当量）、３６（１．３２ｇ、４．０８７ｍｍｏｌ、４．０当量）、及びＫ2ＣＯ3（１５５ｍｇ、１．１２４ｍｍｏｌ、１．１当量）を入れ、３５℃で４０分間撹拌した結果、ＬＣＭＳは反応の完了を示した。ＤＭＦを減圧除去し、得られた残渣をＥｔＯＡｃに溶解し、Ｈ2Ｏ、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥させた。Ｉｓｏｌｅｒａ（ヘキサン中５０〜１００％ＥｔＯＡｃ）により、所望の生成物を淡黄色泡状物（７５０ｍｇ、７１％）として得た。ＬＣＭＳ−Ａ：１．９０分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ１０３７［Ｍ＋Ｈ］+
【０３７５】
（ｉｉｉ）ｔｅｒｔ−ブチル（１１Ｓ，１１ａＳ）−８−（（６−（（５−（（（（４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（アリルオキシ）カルボニル）アミノ）−３−メチルブタンアミド）プロパンアミド）ベンジル）オキシ）カルボニル）アミノ）−４−（（Ｓ）−２−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）−４−メチレンピロリジン−１−カルボニル）−２−メトキシフェノキシ）メチル）−４−（メトキシカルボニル）ピリジン−２−イル）メトキシ）−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−１１−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２，３，１１，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１０（５Ｈ）−カルボキシレート（３８）
丸底フラスコにマグネチックスターラーバー、ＤＭＦ（６ｍＬ）、３７（７５０ｍｇ、０．７２２５ｍｍｏｌ、１．０当量）、Ｉ２（３３３ｍｇ、０．７２２５ｍｍｏｌ、１．０当量）、及びＫ2ＣＯ3（１００ｍｇ、０．７２３５ｍｍｏｌ、１．０当量）を入れ、３５℃で８０分間撹拌した結果、ＬＣＭＳは反応の完了を示した。ＤＭＦを減圧除去し、得られた残渣をＥｔＯＡｃに溶解し、Ｈ2Ｏで洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥させた。減圧濃縮により、所望の生成物を淡黄色泡状物（９７９ｍｇ、９６％）として得た。ＬＣＭＳ−Ａ：１．９９分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ１４１７［Ｍ＋Ｈ］+
【０３７６】
（ｉｖ）ｔｅｒｔ−ブチル（１１Ｓ，１１ａＳ）−８−（（６−（（５−（（（（４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（（アリルオキシ）カルボニル）アミノ）−３−メチルブタンアミド）プロパンアミド）ベンジル）オキシ）カルボニル）アミノ）−４−（（Ｓ）−２−（ヒドロキシメチル）−４−メチレンピロリジン−１−カルボニル）−２−メトキシフェノキシ）メチル）−４−（メトキシカルボニル）ピリジン−２−イル）メトキシ）−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−１１−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２，３，１１，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１０（５Ｈ）−カルボキシレート（３９）
丸底フラスコにマグネチックスターラーバー、ＴＨＦ（９ｍＬ）、３８（８７９ｍｇ、０．６２００ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＴＢＡＦ（１Ｍ  ＴＨＦ溶液１．２４ｍＬ、１．２４０ｍｍｏｌ、２．０当量）を入れ、混合物を８０分間撹拌した結果、ＬＣＭＳは反応の完了を示した。反応混合物を減圧濃縮し、ｉｓｏｌｅｒａ（ＣＨ2Ｃｌ2中０〜４％ＭｅＯＨ）で精製して、所望の生成物（７４６ｍｇ、８３％）を得た。ＬＣＭＳ−Ａ：１．７１分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ１３０３［Ｍ＋Ｈ］+、１３２５［Ｍ＋Ｎａ］+
【０３７７】
（ｖ）４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（（アリルオキシ）カルボニル）アミノ）−３−メチルブタンアミド）プロパンアミド）ベンジル（１１Ｓ，１１ａＳ）−８−（（６−（（（（１１Ｓ，１１ａＳ）−１０−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−１１−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２，３，５，１０，１１，１１ａ−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−８−イル）オキシ）メチル）−４−（メトキシカルボニル）ピリジン−２−イル）メトキシ）−１１−ヒドロキシ−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−２，３，１１，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１０（５Ｈ）−カルボキシレート（４０）
丸底フラスコにマグネチックスターラーバー、アセトニトリル（１３ｍＬ）、３９（６４ｍｇ、０．４９５６ｍｍｏｌ、１．０当量）、Ｓｔａｈｌ好気的酸化ＴＥＭＰＯ溶液（０．２Ｍアセトニトリル溶液２４８μＬ、０．０４９６０ｍｍｏｌ、０．１０当量）、Ｃｕ（ＭｅＣＮ）4ＯＴｆ（１８．７ｍｇ、０．０４９５６ｍｍｏｌ、０．１０当量）を入れ、混合物をバルーン空気下で３日間撹拌した。反応混合物を減圧濃縮し、ｉｓｏｌｅｒａ（ＣＨ2Ｃｌ2中０〜４％ＭｅＯＨ）で精製して、所望の生成物を白色固体（５２３ｍｇ、８１％）として得た。ＬＣＭＳ−Ａ：１．６９分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ１３０１［Ｍ＋Ｈ］+、１３２３［Ｍ＋Ｎａ］+
【０３７８】
（ｖｉ）２−（（（（１１Ｓ，１１ａＳ）−１０−（（（４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（（アリルオキシ）カルボニル）アミノ）−３−メチルブタンアミド）プロパンアミド）ベンジル）カルボニル）−１１−ヒドロキシ−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−２，３，５，１０，１１，１１ａ−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−８−イル）オキシ）メチル）−６−（（（（１１Ｓ，１１ａＳ）−１０−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−１１−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２，３，５，１０，１１，１１ａ−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−８−イル）オキシ）メチル）イソニコチン酸（４１）
マイクロ波バイアルにマグネチックスターラーバー、（ＣＨ2Ｃｌ）2（０．５ｍＬ）、４０（１００ｍｇ、６４．６２μｍｏｌ、１．０当量）、ＳｎＭｅ3ＯＨ（３５．１ｍｇ、１９３．９μｍｏｌ、３．０当量）を入れ、バイアルを密封した。混合物を４時間かけて８０℃に加熱し、室温に冷却し、Ｈ2Ｏに注ぎ、１０％ＭｅＯＨのＣＨ2Ｃｌ2溶液で抽出し、有機物を合一し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させ、減圧濃縮した。Ｉｓｏｌｅｒａ（ＣＨ2Ｃｌ2中５〜１５％ＭｅＯＨ）により、所望の生成物（５３ｍｇ、６４％）を得た。ＬＣＭＳ−Ａ：分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ１２８７［Ｍ＋Ｈ］+、１３０９［Ｍ＋Ｎａ］+
【０３７９】
（ｖｉｉ−ａ）ｔｅｒｔ−ブチル（１１Ｓ，１１ａＳ）−８−（（６−（（（（１１Ｓ，１１ａＳ）−１０−（（（４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（３−（２．５−ジオキソ−２．５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパンアミド）−３−メチルブタンアミド）プロパンアミド））ベンジル）オキシ）カルボニル）−１１−ヒドロキシ−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−２，３，５，１０，１１，１１ａ−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−８−イル）オキシ）メチル）−４−（メトキシカルボニル）ピリジン−２−イル）メトキシ）−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−１１−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２，３，１１，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１０（５Ｈ）−カルボキシレート（４２）
丸底フラスコにマグネチックスターラーバー、４０（１００ｍｇ、７６．８４μｍｏｌ、１．０当量）、ＣＨ2Ｃｌ2（６ｍＬ）、ピロリジン（１２．６μＬ、１５３．７μｍｏｌ、２．０当量）、及びＰｄ（ＰＰｈ3）4（２．２ｍｇ、１．９２１μｍｏｌ、０．０２５当量）を入れた。Ａｒ下で混合物を２５分間撹拌した結果、ＬＣＭＳは反応の完了を示した。反応混合物を一晩完全に減圧濃縮して、微量のピロリジンを除去した。得られた残渣をＣＨ2Ｃｌ2（１ｍＬ）に溶解し、マレイミドプロピオン酸ＮＨＳエステル（２４．５ｍｇ、９２．２１μｍｏｌ、１．２当量）及びｉ−Ｐｒ2ＮＥｔ（１６．１μＬ、９２．２１μｍｏｌ、１．２当量）を加え、混合物を３．５時間撹拌した結果、ＬＣＭＳは反応の完了を示した。反応混合物を減圧濃縮し、ｉｓｏｌｅｒａ（ＣＨ2Ｃｌ2中０〜４％ＭｅＯＨ）で精製して、所望の生成物を白色固体（８９．５ｍｇ、８５％）として得た。ＬＣＭＳ−Ａ：１．６２分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ１３６８［Ｍ＋Ｈ］+、１３９０［Ｍ＋Ｎａ］+
【０３８０】
（ｖｉｉ−ｂ）２−（（（（１１Ｓ，１１ａＳ）−１０−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−１１−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２，３，５，１０，１１，１１ａ−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−８−イル）オキシ）メチル−６−（（（（１１Ｓ，１１ａＳ）−１０−（（（４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）２−（３−（２．５−ジオキソ−２．５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパンアミド）−３−メチルブタンアミド）プロパンアミド）ベンジル）オキシ）カルボニル）−１１−ヒドロキシ−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−２，３，５，１０，１１，１１ａ−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−８−イル）オキシ）メチル）イソニコチン酸（４３）
丸底フラスコにマグネチックスターラーバー、ＣＨ2Ｃｌ2（３ｍＬ）、４１（５３ｍｇ、４１．１７μｍｏｌ、１．０当量）、ピロリジン（１０．１μｍｏＬ、１２２．８ｍｍｏｌ、３．０当量）、Ｐｄ（ＰＰｈ3）4（１．２ｍｇ、１．０２４μｍｏｌ、０．０２５当量）を入れ、Ａｒ下で混合物を３０分間撹拌した結果、ＬＣＭＳは反応の完了を示した。反応混合物をＣＨ2Ｃｌ2で希釈し、ＮＨ4Ｃｌで洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させ、減圧濃縮した。反応混合物を一晩完全に減圧濃縮して、微量のピロリジンを除去した。得られた残渣をＴＨＦ（３ｍＬ）に溶解し、マレイミドプロピオン酸ＮＨＳエステル（１３．１ｍｇ、４９．１３μｍｏｌ、１．２当量）及びＮａＨＣＯ3（１００ｍＭ溶液０．４３ｍＬ）を加え、混合物を５時間撹拌した結果、ＬＣＭＳは反応の完了を示した。反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、ＮＨ4Ｃｌで洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥させ、減圧濃縮した。Ｉｓｏｌｅｒａ（ＣＨ2Ｃｌ2中２〜１０％ＭｅＯＨ）により、所望の生成物（３９．９ｍｇ、収率７２％）を得た。ＬＣＭＳ−Ａ：１．５８分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ１３５４［Ｍ＋Ｈ］+、１３７６［Ｍ＋Ｎａ］+
【０３８１】
（ｖｉｉｉ−ａ）４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパンアミド）−３−メチルブタンアミド）プロパンアミド）ベンジル（１１Ｓ，１１ａＳ）−１１−ヒドロキシ−７−メトキシ−８−（（６−（（（（Ｓ）−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−２，３，５，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−８−イル）オキシ）メチル）−４−（メトキシカルボニル）ピリジン−２−イル）メトキシ）−２−メチレン−５−オキソ−２，３，１１，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１０（５Ｈ）−カルボキシレート（４４）
丸底フラスコにマグネチックスターラーバー、４２（９０ｍｇ、６５．７７μｍｏｌ、１．０当量）を入れ、０℃に冷却した。Ｈ2Ｏ中９５％ＴＦＡ（３．５ｍＬ）を−２０℃に冷却し、一度に添加した。反応混合物を３０分間撹拌した結果、ＬＣＭＳは反応の完了を示した。反応混合物をＨ2Ｏ（１０ｍＬ）に注ぎ、ｐＨをＮａＨＣＯ3で約５に調整し、水性混合物を１０％ＭｅＯＨのＣＨ2Ｃｌ2溶液で抽出し、有機物をＮａ2ＳＯ4で乾燥させ、減圧濃縮した。Ｉｓｏｌｅｒａでの精製（ＣＨ2Ｃｌ2中０〜８％ＭｅＯＨ）、次いで分取ＨＰＬＣ（Ｂ中１５〜７０％Ａ）により、所望の生成物を白色固体（７ｍｇ、収率９．２％、ＱＣ９８．４％）として得た。Ａ＝０．０５％ギ酸アセトニトリル溶液Ｂ＝０．０５％ギ酸水溶液ＬＣＭＳ−Ｂ：７．６１分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ１１．６６［Ｍ＋Ｈ］+
【０３８２】
（ｖｉｉｉ−ｂ）２−（（（（１１Ｓ，１１ａＳ）−１０−（（（４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパンアミド）−３−メチルブタンアミド）プロパンアミド）ベンジル）オキシ）カルボニル）−１１−ヒドロキシ−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−２，３，５．１０，１１，１１ａ−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−８−イル）オキシ）メチル）−６−（（（（Ｓ）−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−２，３，５，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−８−イル）オキシ）メチル）イソニコチン酸（４５）
丸底フラスコにマグネチックスターラーバー、４３（３７ｍｇ、２７．３２μｍｏｌ、１．０当量）を入れ、０℃に冷却した。Ｈ2Ｏ中９５％ＴＦＡ（２ｍＬ）を−２０℃に冷却し、一度に添加した。反応混合物を３０分間撹拌した結果、ＬＣＭＳは反応の完了を示した。反応混合物をＨ2Ｏ（１０ｍＬ）に注ぎ、ｐＨをＮａＨＣＯ3で約５に調整した。溶液をＳＰＥカートリッジ（ＳＣＸ−２、１０ｇ）にロードし、Ｈ2Ｏ（２×１０ｍＬ）で洗浄した後、空気を吹き付けて乾燥させた。有機物をＭｅＯＨでカラムから溶出し、減圧濃縮した。分取ＨＰＬＣ（Ｂ中１５〜７０％Ａ）により、所望の生成物をオフホワイトの固体（５ｍｇ、収率１６％、ＱＣ９２．５％）として得た。Ａ＝０．０５％ギ酸アセトニトリル溶液Ｂ＝０．０５％ギ酸水溶液ＬＣＭＳ−Ｂ：６．９３分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ１１５２
【０３８３】
実施例５−複合体化
化合物１９との抗体薬物複合体、ＣｏｎｊＡ
ＤＬ−ジチオトレイトール（ＤＴＴ）の５０ｍＭリン酸緩衝生理食塩水ｐＨ７．４（ＰＢＳ）溶液（４０モル当量／抗体、１２マイクロモル、２４０μＬ）を、抗体トラスツズマブ（４５ｍｇ、３００ナノモル）の、ＰＢＳ及び１ｍＭエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）を含有する還元緩衝溶液７．５ｍＬに添加し、最終抗体濃度を４．０ｍｇ／ｍＬにした。
【０３８４】
還元混合物をオービタルシェーカー中で穏やかに（６０ｒｐｍ）振盪しながら室温で１７時間（又はＵＨＰＬＣによって完全な還元が観察されるまで）反応させた。還元された抗体をスピンフィルター遠心分離によってＰＢＳ及び１ｍＭ  ＥＤＴＡを含有する再酸化緩衝液へ緩衝液交換して、全ての過剰な還元剤を除去した。５０ｍＭデヒドロアスコルビン酸（ＤＨＡＡ、１５モル当量／抗体、４．５マイクロモル、９０μＬ）のＤＭＳＯ溶液を加え、抗体濃度１．５ｍｇ／ｍＬで再酸化混合物を穏やかに（５０ｒｐｍ）振盪しながら室温で２〜３時間反応させた（あるいは、システインチオールが完全に再酸化されて鎖間システインジスルフィドの再形成がＵＨＰＬＣで観察されるまで、ＤＨＡＡをさらに追加し、より長時間反応を持続した）。次に、再酸化混合物を滅菌濾過し、ＰＢＳ及び１ｍＭ  ＥＤＴＡを含有する複合体化緩衝液で希釈して、最終抗体濃度を２．０ｍｇ／ｍＬにした。この再酸化抗体溶液１０．０ｍＬ（１３．５ｍｇ、９０ナノモル）に、化合物１９をＤＭＳＯ溶液（１．０ｍＬ  ＤＭＳＯ中、１０モル当量／抗体、０．９マイクロモル）として添加し、最終ＤＭＳＯ濃度を１０％（ｖ／ｖ）にした。溶液を穏やかに振盪しながら室温で２時間反応させた。次に、Ｎ−アセチルシステイン（４．５マイクロモル、１００ｍＭで４５μＬ）を添加して複合体化をクエンチした後、１５ｍＬのＡｍｉｃｏｎ  Ｕｌｔｒａｃｅｌｌ  ５０ｋＤａ  ＭＷＣＯスピンフィルターを使用したスピン濾過により精製して滅菌濾過し、分析した。
【０３８５】
Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  ＭＡｂＰａｃ  ５０ｍｍ×２．１ｍｍカラムを使用したＳｈｉｍａｄｚｕ  Ｐｒｏｍｉｎｅｎｃｅシステムでの水及びアセトニトリルの勾配で溶出されるＣｏｎｊＡの還元試料に対する２８０ｎｍ及び３３０ｎｍ（化合物１９特異的）のＵＨＰＬＣ分析は、非複合体化軽鎖、及び非複合体化重鎖と、化合物１９の単一分子に結合した重鎖との混合物が、抗体あたり１．８９分子という化合物１９の薬物対抗体比（ＤＡＲ）と一致することを示す。
【０３８６】
Ｔｏｓｏｈ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ  ＴＳＫｇｅｌ  ＳｕｐｅｒＳＷ  ｍＡｂ  ＨＴＰ  ４μｍ  ４．６×１５０ｍｍカラム（４μｍ  ３．０×２０ｍｍガードカラム付き）を使用したＳｈｉｍａｄｚｕ  Ｐｒｏｍｉｎｅｎｃｅシステムでの、２００ｍＭリン酸カリウムｐＨ６．９５、２５０ｍＭ塩化カリウム、及び１０％イソプロパノール（ｖ／ｖ）を含有する滅菌濾過ＳＥＣ緩衝液により０．３ｍＬ／分で溶出されるＣｏｎｊＡの試料に対する２８０ｎｍのＵＨＰＬＣ分析は、９６％の単量体純度を示す。ＵＨＰＬＣ  ＳＥＣ分析では、ＣｏｎｊＡの最終濃度が８．０ｍＬ中１．３９ｍｇ／ｍＬであり、得られるＣｏｎｊＡの質量は１１．１５ｍｇである（収率７４％）。
【０３８７】
化合物２７との抗体薬物複合体、ＣｏｎｊＢ
ＤＬ−ジチオトレイトール（ＤＴＴ）の５０ｍＭリン酸緩衝生理食塩水ｐＨ７．４（ＰＢＳ）溶液（４０モル当量／抗体、２７μｍｏｌ、５３６μＬ）を、抗体トラスツズマブ（１００ｍｇ、０．６７マイクロモル）の、ＰＢＳ及び１ｍＭエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）を含有する還元緩衝溶液２５ｍＬに添加し、最終抗体濃度を４．０ｍｇ／ｍＬにした。
【０３８８】
還元混合物をオービタルシェーカー中で穏やかに（６０ｒｐｍ）振盪しながら室温で１７時間（又はＵＨＰＬＣによって完全な還元が観察されるまで）反応させた。室温に冷却後、還元された抗体を、ｍＰＥＳ、ＭｉｄｉＫｒｏｓ（登録商標）３０ｋＤａファイバーフィルター、表面積１１５ｃｍ2を使用したタンジェンシャルフロー濾過ユニット（ＴＦＦ）によって、ｐＨ７．４のＰＢＳ及び１ｍＭ  ＥＤＴＡを含有する再酸化緩衝液に緩衝液交換して、全ての過剰な還元剤を除去した。還元された抗体を４０００ｒｐｍで３分間遠心分離した後、０．２２μＭメンブレンフィルターを使用して濾過した。５０ｍＭデヒドロアスコルビン酸（ＤＨＡＡ、２０モル当量／抗体、１２マイクロモル、２４０μＬ）のＤＭＳＯ溶液を加え、抗体濃度約１．７ｍｇ／ｍＬで再酸化混合物を穏やかに（５０ｒｐｍ）振盪しながら室温で２〜３時間反応させた（あるいは、システインチオールが完全に再酸化されて鎖間システインジスルフィドの再形成がＵＨＰＬＣで観察されるまで、ＤＨＡＡをさらに追加し、より長時間反応を持続した）。次に、再酸化混合物を滅菌濾過し、ＰＢＳ及び１ｍＭ  ＥＤＴＡを含有する複合体化緩衝液で希釈して、最終抗体濃度を１．７ｍｇ／ｍＬにした。この再酸化抗体溶液１５．０ｍＬ（１５．３ｍｇ、０．１μモル）に、化合物２７をＤＭＳＯ溶液（１．５ｍＬ  ＤＭＳＯ中、１２モル当量／抗体、１．２マイクロモル）として添加し、最終ＤＭＳＯ濃度を１０％（ｖ／ｖ）にした。溶液を穏やかに振盪しながら室温で２時間反応させた。次に、Ｎ−アセチルシステイン（６．０マイクロモル、１００ｍＭで６０μＬ）を添加して複合体化をクエンチした後、１５ｍＬのＡｍｉｃｏｎ  Ｕｌｔｒａｃｅｌｌ  ５０ｋＤａ  ＭＷＣＯスピンフィルターを使用したスピン濾過により精製して滅菌濾過し、分析した。
【０３８９】
Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  ＭＡｂＰａｃ  ５０ｍｍ×２．１ｍｍカラムを使用したＳｈｉｍａｄｚｕ  Ｐｒｏｍｉｎｅｎｃｅシステムでの水及びアセトニトリルの勾配で溶出されるＣｏｎｊＢの還元試料に対する２８０ｎｍ及び３３０ｎｍ（化合物２７特異的）のＵＨＰＬＣ分析は、非複合体化軽鎖、及び非複合体化重鎖と、化合物２７の単一分子に結合した重鎖との混合物が、抗体あたり１．６９分子という化合物２７の薬物対抗体比（ＤＡＲ）と一致することを示す。
【０３９０】
Ｔｏｓｏｈ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ  ＴＳＫｇｅｌ  ＳｕｐｅｒＳＷ  ｍＡｂ  ＨＴＰ  ４μｍ  ４．６×１５０ｍｍカラム（４μｍ  ３．０×２０ｍｍガードカラム付き）を使用したＳｈｉｍａｄｚｕ  Ｐｒｏｍｉｎｅｎｃｅシステムでの、２００ｍＭリン酸カリウムｐＨ６．９５、２５０ｍＭ塩化カリウム、及び１０％イソプロパノール（ｖ／ｖ）を含有する滅菌濾過ＳＥＣ緩衝液により０．３ｍＬ／分で溶出されるＣｏｎｊＢの試料に対する２８０ｎｍのＵＨＰＬＣ分析は、９９％の単量体純度を示す。ＵＨＰＬＣ  ＳＥＣ分析では、ＣｏｎｊＢの最終濃度が５．８ｍＬ中２．３１ｍｇ／ｍＬであり、得られるＣｏｎｊＢの質量は１３．４ｍｇである（収率６７％）。
【０３９１】
化合物３３との抗体薬物複合体、ＣｏｎｊＣ
ＤＬ−ジチオトレイトール（ＤＴＴ）の５０ｍＭリン酸緩衝生理食塩水ｐＨ７．４（ＰＢＳ）溶液（１２５モル当量／抗体、２５マイクロモル、５００μＬ）を、抗体（３０ｍｇ、２００ナノモル）の、ＰＢＳ及び１ｍＭエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）を含有する還元緩衝溶液７．５ｍＬに添加し、最終抗体濃度を４．０ｍｇ／ｍＬにした。
【０３９２】
還元混合物をオービタルシェーカー中で穏やかに（６０ｒｐｍ）振盪しながら室温で３〜４時間（又はＵＨＰＬＣによって完全な還元が観察されるまで）反応させた。還元された抗体をスピンフィルター遠心分離によってＰＢＳ及び１ｍＭ  ＥＤＴＡを含有する再酸化緩衝液へ緩衝液交換して、全ての過剰な還元剤を除去した。５０ｍＭデヒドロアスコルビン酸（ＤＨＡＡ、２０モル当量／抗体、４マイクロモル、８０μＬ）のＤＭＳＯ溶液を加え、抗体濃度２．５ｍｇ／ｍＬで再酸化混合物を穏やかに（５０ｒｐｍ）振盪しながら室温で１６時間反応させた（あるいは、システインチオールが完全に再酸化されて鎖間システインジスルフィドの再形成がＵＨＰＬＣで観察されるまで、ＤＨＡＡをさらに追加し、より長時間反応を持続した）。次に、再酸化混合物を滅菌濾過し、ＰＢＳ及び１ｍＭ  ＥＤＴＡを含有する複合体化緩衝液で希釈して、最終抗体濃度を２．０ｍｇ／ｍＬにした。この再酸化抗体溶液６．７５ｍＬ（１５ｍｇ、１００ナノモル）に、化合物３３をＤＭＳＯ溶液（０．７５ｍＬ  ＤＭＳＯ中、１０モル当量／抗体、１マイクロモル）として添加し、最終ＤＭＳＯ濃度を１０％（ｖ／ｖ）にした。溶液を室温で４時間混合し（２時間後、溶解を補助するために０．５〜１．０ｍＬのプロピレングリコールを添加）、次に、Ｎ−アセチルシステイン（５マイクロモル、１００ｍＭで５０μＬ）を添加して複合体化をクエンチした後、１５ｍＬのＡｍｉｃｏｎ  Ｕｌｔｒａｃｅｌｌ  ５０ｋＤａ  ＭＷＣＯスピンフィルターを使用したスピン濾過により精製して滅菌濾過し、分析した。
【０３９３】
Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  ＭＡｂＰａｃ  ５０ｍｍ×２．１ｍｍカラムを使用したＳｈｉｍａｄｚｕ  Ｐｒｏｍｉｎｅｎｃｅシステムでの水及びアセトニトリルの勾配で溶出されるＣｏｎｊＣの還元試料に対する２８０ｎｍ及び３３０ｎｍ（化合物３３特異的）のＵＨＰＬＣ分析は、非複合体化軽鎖、及び非複合体化重鎖と、化合物３３の単一分子に結合した重鎖との混合物が、抗体あたり１．６３分子という化合物３３の薬物対抗体比（ＤＡＲ）と一致することを示す。
【０３９４】
Ｔｏｓｏｈ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ  ＴＳＫｇｅｌ  ＳｕｐｅｒＳＷ  ｍＡｂ  ＨＴＰ  ４μｍ  ４．６×１５０ｍｍカラム（４μｍ  ３．０×２０ｍｍガードカラム付き）を使用したＳｈｉｍａｄｚｕ  Ｐｒｏｍｉｎｅｎｃｅシステムでの、２００ｍＭリン酸カリウムｐＨ６．９５、２５０ｍＭ塩化カリウム、及び１０％イソプロパノール（ｖ／ｖ）を含有する滅菌濾過ＳＥＣ緩衝液により０．３ｍＬ／分で溶出されるＣｏｎｊＣの試料に対する２８０ｎｍのＵＨＰＬＣ分析は、９９％の単量体純度を示す。ＵＨＰＬＣ  ＳＥＣ分析では、ＣｏｎｊＣの最終濃度が７．０ｍＬ中１．８９ｍｇ／ｍＬであり、得られるＣｏｎｊＣの質量は１３．２ｍｇである（収率８８％）。
【０３９５】
化合物３４との抗体薬物複合体、ＣｏｎｊＤ
ＤＬ−ジチオトレイトール（ＤＴＴ）の５０ｍＭリン酸緩衝生理食塩水ｐＨ７．４（ＰＢＳ）溶液（４０モル当量／抗体、２８マイクロモル、５６０μＬ）を、抗体トラスツズマブ（１０５ｍｇ、７００ナノモル）の、ＰＢＳ及び１ｍＭエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）を含有する還元緩衝溶液２６．２５ｍＬに添加し、最終抗体濃度を４．０ｍｇ／ｍＬにした。
【０３９６】
還元混合物をオービタルシェーカー中で穏やかに（６０ｒｐｍ）振盪しながら室温で２０時間（又はＵＨＰＬＣによって完全な還元が観察されるまで）反応させた。３０ｋＤａ  ＭＷＣＯ、表面積１１５ｃｍ2の中空糸フィルターモジュール搭載Ｓｐｅｃｔｒｕｍ  Ｌａｂｓ  ＫｒｏｓＦｌｏ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ＩＩｉシステムを使用した、ＰＢＳ流速５０ｍＬ／分、膜貫通圧力（ＴＭＰ）０．５〜１．０ｂａｒでのタンジェンシャルフロー濾過（ＴＦＦ）によって、還元された抗体を、ＰＢＳ及び１ｍＭ  ＥＤＴＡを含有する再酸化緩衝液に緩衝液交換して、全ての過剰な還元剤を除去し、９７ｍｇ（６６７ナノモル）を回収した。５０ｍＭデヒドロアスコルビン酸（ＤＨＡＡ、２０モル当量／抗体、１２．９マイクロモル、２５９μＬ）のＤＭＳＯ溶液を加え、抗体濃度１．５ｍｇ／ｍＬで再酸化混合物を穏やかに（５０ｒｐｍ）振盪しながら室温で１７時間反応させた（あるいは、システインチオールが完全に再酸化されて鎖間システインジスルフィドの再形成がＵＨＰＬＣで観察されるまで、ＤＨＡＡをさらに追加し、より長時間反応を持続した）。次に、再酸化混合物を滅菌濾過し、ＰＢＳ及び１ｍＭ  ＥＤＴＡを含有する複合体化緩衝液で希釈して、最終抗体濃度を１．０ｍｇ／ｍＬにした。この再酸化抗体溶液１２．６ｍＬ（１４ｍｇ、９３ナノモル）に、化合物３４をＤＭＳＯ溶液（１．４ｍＬ  ＤＭＳＯ中、１５モル当量／抗体、１．４マイクロモル）として添加し、最終ＤＭＳＯ濃度を１０％（ｖ／ｖ）にした。溶液を室温で２時間混合し、＋４℃で１６時間保存した後、Ｎ−アセチルシステイン（３．７マイクロモル、１００ｍＭで３７μＬ）を添加して複合体化をクエンチした。反応混合物を、１５ｍＬのＡｍｉｃｏｎ  Ｕｌｔｒａｃｅｌｌ  ５０ｋＤａ  ＭＷＣＯスピンフィルターを使用したスピン濾過により精製し、ＴＦＦ（８００ｍＬ透過）でさらに精製して滅菌濾過し、分析した。Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ａｅｒｉｓ  ３．６ｕ  ＸＢ−Ｃ１８  １５０ｍｍ×２．１ｍｍカラムを使用したＳｈｉｍａｄｚｕ  Ｐｒｏｍｉｎｅｎｃｅシステムでの水及びアセトニトリルの勾配で溶出されるＣｏｎｊＤの還元試料に対する２８０ｎｍ及び３３０ｎｍ（化合物３４特異的）のＵＨＰＬＣ分析は、非複合体化軽鎖、及び非複合体化重鎖と、化合物３４の単一分子に結合した重鎖との混合物が、抗体あたり１．８１分子という化合物３４の薬物対抗体比（ＤＡＲ）と一致することを示す。
【０３９７】
Ｔｏｓｏｈ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ  ＴＳＫｇｅｌ  ＳｕｐｅｒＳＷ  ｍＡｂ  ＨＴＰ  ４μｍ  ４．６×１５０ｍｍカラム（４μｍ  ３．０×２０ｍｍガードカラム付き）を使用したＳｈｉｍａｄｚｕ  Ｐｒｏｍｉｎｅｎｃｅシステムでの、２００ｍＭリン酸カリウムｐＨ６．９５、２５０ｍＭ塩化カリウム、及び１０％イソプロパノール（ｖ／ｖ）を含有する滅菌濾過ＳＥＣ緩衝液により０．３ｍＬ／分で溶出されるＣｏｎｊＤの試料に対する２８０ｎｍのＵＨＰＬＣ分析は、９７％の単量体純度を示す。ＵＨＰＬＣ  ＳＥＣ分析では、ＣｏｎｊＤの最終濃度が５．５ｍＬ中０．４９ｍｇ／ｍＬであり、得られるＣｏｎｊＤの質量は２．５９ｍｇである（収率１９％）。
【０３９８】
化合物４４との抗体薬物複合体、ＣｏｎｊＥ
ＤＬ−ジチオトレイトール（ＤＴＴ）の５０ｍＭリン酸緩衝生理食塩水ｐＨ７．４（ＰＢＳ）溶液（４０モル当量／抗体、２７μｍｏｌ、５３６μＬ）を、トラスツズマブ抗体（１００ｍｇ、０．６７マイクロモル）の、ＰＢＳ及び１ｍＭエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）を含有する還元緩衝溶液２５ｍＬに添加し、最終抗体濃度を４．０ｍｇ／ｍＬにした。
【０３９９】
還元混合物をオービタルシェーカー中で穏やかに（６０ｒｐｍ）振盪しながら室温で１７時間（又はＵＨＰＬＣによって完全な還元が観察されるまで）反応させた。室温に冷却後、還元された抗体を、ｍＰＥＳ、ＭｉｄｉＫｒｏｓ（登録商標）３０ｋＤａファイバーフィルター、表面積１１５ｃｍ2を使用したタンジェンシャルフロー濾過ユニット（ＴＦＦ）によって、ｐＨ７．４のＰＢＳ及び１ｍＭ  ＥＤＴＡを含有する再酸化緩衝液に緩衝液交換して、全ての過剰な還元剤を除去した。還元された抗体を４０００ｒｐｍで３分間遠心分離した後、０．２２μＭメンブレンフィルターを使用して濾過した。５０ｍＭデヒドロアスコルビン酸（ＤＨＡＡ、２０モル当量／抗体、１２マイクロモル、２４０μＬ）のＤＭＳＯ溶液を加え、抗体濃度約１．７ｍｇ／ｍＬで再酸化混合物を穏やかに（５０ｒｐｍ）振盪しながら室温で２〜３時間反応させた（あるいは、システインチオールが完全に再酸化されて鎖間システインジスルフィドの再形成がＵＨＰＬＣで観察されるまで、ＤＨＡＡをさらに追加し、より長時間反応を持続した）。次に、再酸化混合物を滅菌濾過し、ＰＢＳ及び１ｍＭ  ＥＤＴＡを含有する複合体化緩衝液で希釈して、最終抗体濃度を１．７ｍｇ／ｍＬにした。この再酸化抗体溶液１５．０ｍＬ（１５．３ｍｇ、０．１μモル）に、化合物４４をＤＭＳＯ溶液（１．５ｍＬ  ＤＭＳＯ中、１０モル当量／抗体、１．０マイクロモル）として添加し、最終ＤＭＳＯ濃度を１０％（ｖ／ｖ）にした。溶液を穏やかに振盪しながら室温で２時間反応させた。次に、Ｎ−アセチルシステイン（５．０マイクロモル、１００ｍＭで５０μＬ）を添加して複合体化をクエンチした後、１５ｍＬのＡｍｉｃｏｎ  Ｕｌｔｒａｃｅｌｌ  ５０ｋＤａ  ＭＷＣＯスピンフィルターを使用したスピン濾過により精製して滅菌濾過し、分析した。
【０４００】
Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  ＭＡｂＰａｃ  ５０ｍｍ×２．１ｍｍカラムを使用したＳｈｉｍａｄｚｕ  Ｐｒｏｍｉｎｅｎｃｅシステムでの水及びアセトニトリルの勾配で溶出されるＣｏｎｊＥの還元試料に対する２８０ｎｍ及び３３０ｎｍ（化合物４４特異的）のＵＨＰＬＣ分析は、非複合体化軽鎖、及び非複合体化重鎖と、化合物４４の単一分子に結合した重鎖との混合物が、抗体あたり１．８５分子という化合物４４の薬物対抗体比（ＤＡＲ）と一致することを示す。
【０４０１】
Ｔｏｓｏｈ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ  ＴＳＫｇｅｌ  ＳｕｐｅｒＳＷ  ｍＡｂ  ＨＴＰ  ４μｍ  ４．６×１５０ｍｍカラム（４μｍ  ３．０×２０ｍｍガードカラム付き）を使用したＳｈｉｍａｄｚｕ  Ｐｒｏｍｉｎｅｎｃｅシステムでの、２００ｍＭリン酸カリウムｐＨ６．９５、２５０ｍＭ塩化カリウム、及び１０％イソプロパノール（ｖ／ｖ）を含有する滅菌濾過ＳＥＣ緩衝液により０．３ｍＬ／分で溶出されるＣｏｎｊＥの試料に対する２８０ｎｍのＵＨＰＬＣ分析は、９９％の単量体純度を示す。ＵＨＰＬＣ  ＳＥＣ分析では、ＣｏｎｊＥの最終濃度が６．８ｍＬ中２．０６ｍｇ／ｍＬであり、得られるＣｏｎｊＥの質量は１４ｍｇである（収率７０％）。
【０４０２】
化合物４５との抗体薬物複合体、ＣｏｎｊＦ
ＤＬ−ジチオトレイトール（ＤＴＴ）の５０ｍＭリン酸緩衝生理食塩水ｐＨ７．４（ＰＢＳ）溶液（４０モル当量／抗体、２７μｍｏｌ、５３６μＬ）を、抗体トラスツズマブ（１００ｍｇ、０．６７マイクロモル）の、ＰＢＳ及び１ｍＭエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）を含有する還元緩衝溶液２５ｍＬに添加し、最終抗体濃度を４．０ｍｇ／ｍＬにした。
【０４０３】
還元混合物をオービタルシェーカー中で穏やかに（６０ｒｐｍ）振盪しながら室温で１７時間（又はＵＨＰＬＣによって完全な還元が観察されるまで）反応させた。室温に冷却後、還元された抗体を、ｍＰＥＳ、ＭｉｄｉＫｒｏｓ（登録商標）３０ｋＤａファイバーフィルター、表面積１１５ｃｍ2を使用したタンジェンシャルフロー濾過ユニット（ＴＦＦ）によって、ｐＨ７．４のＰＢＳ及び１ｍＭ  ＥＤＴＡを含有する再酸化緩衝液に緩衝液交換して、全ての過剰な還元剤を除去した。還元された抗体を４０００ｒｐｍで３分間遠心分離した後、０．２２μＭメンブレンフィルターを使用して濾過した。５０ｍＭデヒドロアスコルビン酸（ＤＨＡＡ、２０モル当量／抗体、１２マイクロモル、２４０μＬ）のＤＭＳＯ溶液を加え、抗体濃度約１．７ｍｇ／ｍＬで再酸化混合物を穏やかに（５０ｒｐｍ）振盪しながら室温で２〜３時間反応させた（あるいは、システインチオールが完全に再酸化されて鎖間システインジスルフィドの再形成がＵＨＰＬＣで観察されるまで、ＤＨＡＡをさらに追加し、より長時間反応を持続した）。次に、再酸化混合物を滅菌濾過し、ＰＢＳ及び１ｍＭ  ＥＤＴＡを含有する複合体化緩衝液で希釈して、最終抗体濃度を１．７ｍｇ／ｍＬにした。この再酸化抗体溶液１５．０ｍＬ（１５．３ｍｇ、０．１μモル）に、化合物４５をＤＭＳＯ溶液（１．５ｍＬ  ＤＭＳＯ中、１０モル当量／抗体、１．０マイクロモル）として添加し、最終ＤＭＳＯ濃度を１０％（ｖ／ｖ）にした。溶液を穏やかに振盪しながら室温で２時間反応させた。次に、Ｎ−アセチルシステイン（５．０マイクロモル、１００ｍＭで５０μＬ）を添加して複合体化をクエンチした後、１５ｍＬのＡｍｉｃｏｎ  Ｕｌｔｒａｃｅｌｌ  ５０ｋＤａ  ＭＷＣＯスピンフィルターを使用したスピン濾過により精製して滅菌濾過し、分析した。
【０４０４】
Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  ＭＡｂＰａｃ  ５０ｍｍ×２．１ｍｍカラムを使用したＳｈｉｍａｄｚｕ  Ｐｒｏｍｉｎｅｎｃｅシステムでの水及びアセトニトリルの勾配で溶出されるＣｏｎｊＦの還元試料に対する２８０ｎｍ及び３３０ｎｍ（化合物４５特異的）のＵＨＰＬＣ分析は、非複合体化軽鎖、及び非複合体化重鎖と、化合物４５の単一分子に結合した重鎖との混合物が、抗体あたり１．７２分子という化合物４５の薬物対抗体比（ＤＡＲ）と一致することを示す。
【０４０５】
Ｔｏｓｏｈ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ  ＴＳＫｇｅｌ  ＳｕｐｅｒＳＷ  ｍＡｂ  ＨＴＰ  ４μｍ  ４．６×１５０ｍｍカラム（４μｍ  ３．０×２０ｍｍガードカラム付き）を使用したＳｈｉｍａｄｚｕ  Ｐｒｏｍｉｎｅｎｃｅシステムでの、２００ｍＭリン酸カリウムｐＨ６．９５、２５０ｍＭ塩化カリウム、及び１０％イソプロパノール（ｖ／ｖ）を含有する滅菌濾過ＳＥＣ緩衝液により０．３ｍＬ／分で溶出されるＣｏｎｊＦの試料に対する２８０ｎｍのＵＨＰＬＣ分析は、９９％の単量体純度を示す。ＵＨＰＬＣ  ＳＥＣ分析では、ＣｏｎｊＦの最終濃度が６．７ｍＬ中２．０２ｍｇ／ｍＬであり、得られるＣｏｎｊＦの質量は１３．５ｍｇである（収率６８％）。
【０４０６】
化合物１９との抗体薬物複合体、ＣｏｎｊＡ*
特許番号第ＵＳ２０１４／０３６１１１Ａ１号に従って、Ｒ３４７抗体（３０ｍｇ）を固体支持体にロードし、還元、再酸化、化合物１９との複合体化、精製、樹脂からの剥離、及び２５ｍＭヒスチジン、２００ｍＭスクロース、Ｔｗｅｅｎ−２０  ０．０２％、ｐＨ６．０での製剤化を行った。
【０４０７】
Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  ＭＡｂＰａｃ  ５０ｍｍ×２．１ｍｍｍｍカラムを使用したＳｈｉｍａｄｚｕ  Ｐｒｏｍｉｎｅｎｃｅシステムでの水及びアセトニトリルの勾配で溶出される複合体の還元試料に対する２１４ｎｍ及び３３０ｎｍ（化合物１９特異的）のＵＨＰＬＣ分析は、非複合体化軽鎖、及び非複合体化重鎖と、化合物１９の単一分子に結合した重鎖との混合物が、抗体あたり１．９分子という化合物１９の薬物対抗体比（ＤＡＲ）と一致することを示す。
【０４０８】
Ｔｏｓｏｈ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ  ＴＳＫｇｅｌ  ＳｕｐｅｒＳＷ  ｍＡｂ  ＨＴＰ  ４μｍ  ４．６×１５０ｍｍカラム（４μｍ  ３．０×２０ｍｍガードカラム付き）を使用したＳｈｉｍａｄｚｕ  Ｐｒｏｍｉｎｅｎｃｅシステムでの、２００ｍＭリン酸カリウムｐＨ６．９５、２５０ｍＭ塩化カリウム、及び１０％イソプロパノール（ｖ／ｖ）を含有する滅菌濾過ＳＥＣ緩衝液により０．３ｍＬ／分で溶出されるＡＤＣの試料に対する２８０ｎｍのＵＨＰＬＣ分析は、９７％の単量体純度を示す。Ｎａｎｏｄｒｏｐ  ＵＶ−Ｖｉｓ分析では、ＡＤＣの最終濃度が１０７ｍＬ中２．０ｍｇ／ｍＬであり、得られたＡＤＣの質量は２１４ｍｇである（収率７１％）。
【０４０９】
実施例６−ｉｎ  ｖｉｔｒｏ細胞毒性アッセイ
Ｔ７５フラスコ内のサブコンフルエント（集密度８０〜９０％）細胞培養物から培地を吸引し、フラスコをＰＢＳ（約２０ｍｌ）ですすぎ、空にした。トリプシン−ＥＤＴＡ（５ｍｌ）を加え、３７℃のガスインキュベーターにフラスコを最大約５分間戻した後、強く叩いて細胞をプラスチックから外して解離させた。細胞懸濁液を滅菌５０ｍｌねじ蓋付き遠心管に移し、増殖培地で最終体積１５ｍｌに希釈した後、遠心分離した（４００ｇで５分間）。上清を吸引し、ペレットを１０ｍｌの培養培地に再懸濁した。単分散の細胞懸濁液を生成するには、ピペッティングの繰り返しが必要な場合がある。細胞濃度及び細胞生存率は、トリパンブルー染色と、ＬＵＮＡ−ＩＩ（商標）Ａｕｔｏｍａｔｅｄ  Ｃｅｌｌ  Ｃｏｕｎｔｅｒを使用した計数により測定する。細胞を２×１０5／ｍｌに希釈して、９６ウェル平底プレートに分注（５０μｌ／ウェル）し、使用前に一晩インキュベートする。
【０４１０】
フィルター滅菌したＡＤＣを細胞培養培地に希釈することにより、抗体薬物複合体（ＡＤＣ）（２０μｇ／ｍｌ）の原液（１ｍｌ）を作製した。１００μｌを９００μｌの細胞培養培地へと継代培養することにより、ＡＤＣ原液の８×１０倍希釈液セットを２４ウェルプレートで作製した。前日に播種した５０μｌの細胞懸濁液を収容した９６ウェルプレートの４連複製ウェルにＡＤＣ希釈液（５０μｌ／ウェル）を分配した。対照ウェルに５０μｌの細胞培養培地を入れた。細胞とＡＤＣを入れた９６ウェルプレートを、曝露時間にわたりＣＯ２ガスインキュベーター内にて３７℃でインキュベートした。
【０４１１】
インキュベーション期間の終了後、細胞生存率をＭＴＳアッセイで測定した。ＭＴＳ（Ｐｒｏｍｅｇａ）を各ウェルに分注し（ウェルあたり２０μｌ）、ＣＯ2ガスインキュベーター内にて３７℃で４時間インキュベートした。４９０ｎｍでのウェルの吸光度を測定した。対照の未処理の４つのウェルの平均吸光度（１００％）と比較した、ＡＤＣ処理した４つのウェルの平均吸光度から細胞生存率を算出した。ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍを使用した用量反応データから、非線形曲線フィットアルゴリズム：シグモイド用量反応を用いてＩＣ50を決定した。Ｘはｌｏｇ（濃度）である。ＡＤＣのインキュベーション時間は、ＭＤＡ  ＭＢ  ４６８及びＮＣＩ  Ｎ８７それぞれの場合で４日及び７日であった。細胞増殖培地は、ＭＤＡ  ＭＢ  ４６８ではグルタマックス、１０％（ｖ／ｖ）ＨｙＣｌｏｎｅ（商標）ウシ胎仔血清を含むＲＰＭＩ  １６４０、ＮＣＩ  Ｎ８７では、グルタマックス、１０％（ｖ／ｖ）ＨｙＣｌｏｎｅ（商標）ウシ胎仔血清を含むＲＰＭＩ  １６４０であった。
【表１】
2021521172.tif 000086
【０４１２】
実施例７−ｉｎ  ｖｉｖｏアッセイ
マウス
重度複合免疫不全雌マウス（Ｆｏｘ  Ｃｈａｓｅ  ＳＣＩＤ（登録商標）、Ｃ．Ｂ−１７／Ｉｃｒ−Ｐｒｋｄｃｓｃｉｄ、Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ）は試験の初日、８〜１２週齢であった。動物には、水（逆浸透、Ｃｌ濃度１ｐｐｍ）と、１８．０％の粗タンパク質、５．０％の粗脂肪及び５．０％の粗繊維からなるＮＩＨ  ３１  Ｍｏｄｉｆｉｅｄａｎｄ  Ｉｒｒａｄｉａｔｅｄ  Ｌａｂ  Ｄｉｅｔ（登録商標）を不断給餌した。マウスは、静圧マイクロアイソレーター内の照射済Ｅｎｒｉｃｈｏ’ｃｏｂｓ（商標）Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ａｎｉｍａｌ  Ｂｅｄｄｉｎｇ上で、１２時間の照明周期、２０〜２２℃（６８〜７２°Ｆ）及び湿度４０〜６０％で飼育した。ＣＲ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓは、具体的には、拘束、飼畜、外科的手技、給餌及び体液調節、ならびに獣医による治療に関するＧｕｉｄｅ  ｆｏｒ  Ｃａｒｅ  ａｎｄ  Ｕｓｅ  ｏｆ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ａｎｉｍａｌｓの勧告を遵守している。ＣＲ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓの動物管理及び使用プログラムは、実験動物の管理及び使用に対する承認規格の遵守を保証する、Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ  ａｎｄ  Ａｃｃｒｅｄｉｔａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ａｎｉｍａｌ  Ｃａｒｅ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ（ＡＡＡＬＡＣ）によって公認されている。
【０４１３】
腫瘍細胞培養
ヒトＮＣＩ−Ｎ８７胃癌リンパ腫細胞を、１０％ウシ胎仔血清、２ｍＭグルタミン、１００単位／ｍＬのペニシリン、１００μｇ／ｍＬの硫酸ストレプトマイシン、及び２５μｇ／ｍＬのゲンタマイシンを補充したＲＰＭＩ−１６４０培地中で培養した。５％ＣＯ2と９５％空気の雰囲気中にて、３７℃の加湿インキュベーター内の組織培養フラスコで細胞を増殖させた。
【０４１４】
ｉｎ  ｖｉｖｏ移植及び腫瘍成長
移植に使用したＮＣＩ−Ｎ８７細胞を対数増殖期に採取し、５０％Ｍａｔｒｉｇｅｌ（商標）（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を含有するリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で再懸濁した。腫瘍移植当日、各試験マウスの右側腹部に１×１０7細胞（０．１ｍＬの細胞懸濁液）を皮下注射し、平均サイズが目標範囲である１００〜１５０ｍｍ3に到達するまで腫瘍の成長をモニタリングした。１１日後を試験初日と定め、算出した腫瘍サイズに従って、それぞれ動物１０匹で構成され、群平均腫瘍体積が等価である群にマウスを分類した。腫瘍はノギスを使用して２次元で測定し、体積は式：
腫瘍体積（ｍｍ3）＝０．５（ｗ2×ｌ）
を使用して算出した。式中、ｗ＝腫瘍の幅、及びｌ＝腫瘍の長さ、単位ｍｍである。腫瘍重量は、１ｍｇが腫瘍体積の１ｍｍ3に相当すると仮定して推定することができる。
【０４１５】
処置
試験１日目に、確立したＮＣＩ−Ｎ８７異種移植片を有する雌ＳＣＩＤマウスを群（ｎ＝１０）に分類し、以下に示すように投与を開始した。全ての薬剤は、１日目に１回の尾静脈注射により静脈内（ｉ．ｖ．）投与した（ｑｄ×１）。投与量は体重２０グラムあたり０．２ｍＬ（１０ｍＬ／ｋｇ）であり、個々の動物それぞれの体重に合わせて秤量した。ビヒクル処置群は、有効性分析のための対照群として利用した。週に２回ノギスを使用して腫瘍を測定し、エンドポイント体積である８００ｍｍ3に腫瘍が達したとき、又は試験の終了時（８５日目）のいずれか早い時点で、各動物を安楽死させた。
【０４１６】
治療転帰は、腫瘍増殖遅延率（ＴＧＤ％）から決定した。これは、対照マウスと比較した治療マウスのＴＴＥ中央値の増加率として定義され、ログランク生存分析を使用してＰ≦０．０５のとき、群間の差異を統計的有意であるとみなした。治療により、動物の腫瘍の部分的退縮（ＰＲ）又は完全退縮（ＣＲ）を引き起こすことができる。ＰＲ反応では、試験の過程で３回連続して測定したときに腫瘍体積が１日目の体積の５０％以下であり、これら３回の測定の１回以上で１３．５ｍｍ3以上であった。ＣＲ反応では、試験の過程で３回連続して測定したときに腫瘍体積が１３．５ｍｍ3未満であった。
【０４１７】
治療関連の副作用の兆候については、体重測定と頻繁な観察により治療忍容性を評価した。治療関連の副作用の兆候については、体重測定と頻繁な観察により治療忍容性を評価した。
【０４１８】
レジメンは全て許容範囲の忍容性であった。ビヒクル処置対照のＴＴＥの中央値は３３．５日であり、８５日の試験期間において最大可能ＴＧＤは５１．５日（１５４％）であった。
【０４１９】
ＡＤＣ処置は全て、ビヒクル処置対照とは有意に異なるＴＧＤ転帰を生じた（Ｐ＜０．００１）。
【表２】
2021521172.tif 000087
【０４２０】
実施例８−薬物ペイロードの合成
Ａ：
【化８４】
2021521172.tif 000088
【０４２１】
（ｉ）８，８’−（（（５−（メトキシカルボニル）−１，３−フェニレン）ビス（メチレン））ビス（オキシ））（１１Ｓ，１１ａＳ，１１’Ｓ，１１ａ’Ｓ）−ビス（１１−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）−７−メトキシ−２−メチル−５−オキソ−１１，１１ａ−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１０（５Ｈ）−カルボン酸ジアリル（４６）
フェノールＩ３（２４０ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ、２当量）及びジブロモ−ｍ−キシレン２１（８１ｍｇ、０．２５３ｍｍｏｌ、１当量）を乾燥ＤＭＦ（２０ｍＬ）に溶解した後、ＴＢＡＩ（１１ｍｇ、０．０３ｍｍｏｌ、０．１当量）及びＫ2ＣＯ3（７０ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ、２当量））を添加した。混合物を１時間かけて６０℃に加熱した時点で反応が完了した。ＤＭＦを減圧除去し、粗生成物をＢｉｏｔａｇｅクロマトグラフィーにより精製して、純粋な生成物４６（２７３ｍｇ、収率９７％）を得た。ＬＣＭＳ−Ａ：保持時間＝２．２４分、［Ｍ＋Ｈ］+＝１１０９。
【０４２２】
（ｉｉ）３，５−ビス（（（（Ｓ）−７−メトキシ−２−メチル−５−オキソ−５，１１ａ−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−８−イル）オキシ）メチル）安息香酸メチル（４７）
グローブボックス内で、エステル４６（６０ｍｇ、０．０５４ｍｍｏｌ、１当量）をＣＨ2Ｃｌ2（５ｍＬ）に溶解した後、ＰｄＰ（Ｐｈ3）4（３．５ｍｇ、０．００３ｍｍｏｌ、０．０５当量）及びピロリジン（１１μＬ、０．１３５ｍｍｏｌ、２．５当量）を加え、完了するまで混合物を撹拌した。ＣＨ2Ｃｌ2を追加して有機物を希釈し、飽和ＮＨ4Ｃｌ(aq)、水及びブラインで洗浄した後、ＭｇＳＯ4で乾燥させ、濾過し、揮発物を減圧除去した。粗物質をＢｉｏｔａｇｅクロマトグラフィーにより精製して、純粋な生成物４７（１７．８ｍｇ、収率４８％）を得た。ＬＣＭＳ−Ａ：保持時間＝１．４２分、［Ｍ＋Ｈ］+＝６７７；ＬＣＭＳ2：保持時間＝６．３５分、［Ｍ＋Ｈ］+＝６７７。
【０４２３】
（ｉｉｉ）３，５−ビス（（（（１１Ｓ，１１ａＳ）−１０−（（アリルオキシ）カルボニル）−１１−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）−７−メトキシ−２−メチル−５−オキソ−５，１０，１１，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−８−イル）オキシ）メチル）安息香酸（４８）
エステル４６（１８５ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ、１当量）をＴＨＦ／Ｈ2Ｏ／ＭｅＯＨ（１０ｍＬ）の１：１：１混合物に溶解し、混合物を１５時間撹拌し、後処理後、生成物４８（５９ｍｇ、収率３２％）が単離された。ＬＣＭＳ−Ａ：保持時間＝２．１５分、［Ｍ＋Ｈ］+＝１０９５。
【０４２４】
（ｉｖ）３，５−ビス（（（（Ｓ）−７−メトキシ−２−メチル−５−オキソ−５，１１ａ−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−８−イル）オキシ）メチル）安息香酸（４９）
グローブボックス内で、エステル４８（５９ｍｇ、０．０５４ｍｍｏｌ、１当量）をＣＨ2Ｃｌ2（５ｍＬ）に溶解した後、ＰｄＰ（Ｐｈ3）4（３．５ｍｇ、０．００３ｍｍｏｌ、０．０５当量）及びピロリジン（１１μＬ、０．１３５ｍｍｏｌ、２．５当量）を加え、完了するまで混合物を撹拌した。ＣＨ2Ｃｌ2を追加して有機物を希釈し、飽和ＮＨ4Ｃｌ(aq)、水及びブラインで洗浄した後、ＭｇＳＯ4で乾燥させ、濾過し、揮発物を減圧除去した。粗物質をＢｉｏｔａｇｅクロマトグラフィーにより精製して、純粋な生成物４９（１７．０８ｍｇ、収率４８％）を得た。ＬＣＭＳ−Ａ：保持時間＝１．３５分、［Ｍ＋Ｈ］+＝６６３；ＬＣＭＳ−Ｂ：保持時間＝５．７０分、［Ｍ＋Ｈ］+＝６６３。
【０４２５】
Ｂ：
【化８５】
2021521172.tif 000089
【化８６】
2021521172.tif 000090
【０４２６】
（ｉ）８，８’−（（（５−（メトキシカルボニル）−１，３−フェニレン）ビス（メチレン））ビス（オキシ））（１１Ｓ，１１ａＳ，１１’Ｓ，１１ａ’Ｓ）−ビス（７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−１１−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２，３，１１，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１０（５Ｈ）−カルボン酸）ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（５０）
フェノールＩ２（１００ｍｇ、０．２１７１ｍｍｏｌ、２．０当量）、臭化物２１（３５ｍｇ、０．１０８６ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＴＢＡＩ（１ｍｇ、０．００２７１５ｍｍｏｌ、０．０２５当量）及びＫ2ＣＯ3（３１．５ｍｇ、２２．８１ｍｍｏｌ、２．１当量）をＤＭＦ（１．５ｍＬ）に溶解し、混合物を３５℃で１６時間撹拌した結果、ＬＣＭＳは反応の完了を示した。反応混合物を減圧濃縮し、ｉｓｏｌｅｒａクロマトグラフィー（ヘキサン中５０〜８０％ＥｔＯＡｃ）で精製して、５０を油（９８．３ｍｇ、８４％）として得た。ＬＣＭＳ−Ａ：保持時間＝１．９３、［Ｍ＋Ｈ］+＝１１０３
【０４２７】
（ｉｉ）３，５−ビス（（（（Ｓ）−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−２，３，５，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−８−イル）オキシ）メチル）安息香酸メチル（５１）
５０（８６．６ｍｇ、８０．０９μｍｏｌ、１．０当量）を０℃の９５％ＴＦＡ水溶液（０．５ｍＬ）に溶解し、混合物を４０分間撹拌した結果、ＬＣＭＳは反応の完了を示した。氷冷水を反応混合物に加え、ｐＨが弱塩基性になるまで固体ＮａＨＣＯ3を加えた。水相をＣＨＣｌ3で抽出し、合一した有機物をＭｇＳＯ4で乾燥させ、減圧濃縮した。ＨＰＬＣ（Ａ＊中２０〜６０％Ｂ）により、５１を黄色固体（６．２ｍｇ、１１％）として得た。＊Ａ＝Ｈ2Ｏ中０．１％ＨＣＯ2Ｈ。Ｂ＝ＭｅＣＮ中０．１％ＨＣＯ2Ｈ。ＬＣＭＳ−Ｂ：保持時間＝６．３７分、［Ｍ＋Ｈ］+＝６７７。
【０４２８】
（ｉｉｉ）８，８’−（（（５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−１，３−フェニレン）ビス（メチレン））ビス（オキシ））（１１Ｓ，１１ａＳ，１１’Ｓ，１１ａ’Ｓ）−ビス（７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−１１−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２，３，１１，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１０（５Ｈ）−カルボン酸）ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（５２）
フェノールＩ２（１００ｍｇ、０．２１７１ｍｍｏｌ、２．０当量）、臭化物６（３９．５ｍｇ、０．１０８６ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＴＢＡＩ（１ｍｇ、０．００２７１５ｍｍｏｌ、０．０２５当量）及びＫ2ＣＯ3（３１．５ｍｇ、２２．８１ｍｍｏｌ、２．１当量）をＤＭＦ（１．５ｍＬ）に溶解し、混合物を３５℃で１６時間撹拌した結果、ＬＣＭＳは反応の完了を示した。反応混合物を減圧濃縮し、ｉｓｏｌｅｒａクロマトグラフィー（ヘキサン中５０〜８０％ＥｔＯＡｃ）で精製して、５２を油（１２０ｍｇ、９８％）として得た。ＬＣＭＳ−Ａ：保持時間＝２．０３、［Ｍ＋Ｈ］+＝１１４５
【０４２９】
（ｉｖ）３，５−ビス（（（（Ｓ）−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−２，３，５，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−８−イル）オキシ）メチル）安息香酸（５３）
５２（１０６ｍｇ、９４．３６μｍｏｌ、１．０当量）を０℃の９５％ＴＦＡ水溶液（０．５ｍＬ）に溶解し、混合物を４０分間撹拌した。氷冷水を反応混合物に加え、ｐＨが中性になるまで固体ＮａＨＣＯ3を加えた。水相をＣＨＣｌ3で抽出した。水相のｐＨを約ｐＨ３に調整し、ＣＨＣｌ3で抽出した。合一した有機物をＭｇＳＯ4で乾燥させ、減圧濃縮した。ＨＰＬＣ（Ａ＊中２０〜６０％Ｂ）により、５３を黄色固体（３．８ｍｇ、６．１％）として得た。＊Ａ＝Ｈ2Ｏ中０．１％ＨＣＯ2Ｈ。Ｂ＝ＭｅＣＮ中０．１％ＨＣＯ2Ｈ。ＬＣＭＳ−Ｂ：保持時間＝５．６８、［Ｍ＋Ｈ］+＝６６３
【０４３０】
Ｃ：
【化８７】
2021521172.tif 000091
【０４３１】
（ｉ）８，８’−（（（４−（メトキシカルボニル）ピリジン−２，６−ジイル）ビス（メチレン））ビス（オキシ））（１１Ｓ，１１ａＳ，１１’Ｓ，１１ａ’Ｓ）−ビス（１１−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−２，３，１１，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１０（５Ｈ）−カルボン酸）ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（５４）
フェノールＩ５（６６８ｍｇ、１．３６２ｍｍｏｌ、２．２当量）、臭化物３６（２００ｍｇ、０．０．６１９２ｍｍｏｌ、１．０当量）、及びＫ2ＣＯ3（１８８ｍｇ、１．３６２ｍｍｏｌ、２．２当量）をＤＭＦ（３ｍＬ）に溶解し、混合物を室温で３時間、次いで４０℃で２時間撹拌した結果、ＬＣＭＳは反応の完了を示した。反応混合物を減圧濃縮し、ｉｓｏｌｅｒａクロマトグラフィー（ＣＨ2Ｃｌ2中０〜５％ＭｅＯＨ）で精製して、５４を白色固体（６１０ｍｇ、８６％）として得た。ＬＣＭＳ−Ａ：保持時間＝２．１７、［Ｍ＋Ｎａ］+＝１１６４
【０４３２】
（ｉｉ）２，６−ビス（（（（Ｓ）−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−２，３，５，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−８−イル）オキシ）メチル）イソニコチン酸メチル（５５）
５４（２００ｍｇ、０．１７５１ｍｍｏｌ、１．０当量）を０℃の９５％ＴＦＡ水溶液（１４ｍＬ）に溶解し、混合物を３０分間撹拌した。氷冷水を反応混合物に加え、ｐＨが中性から弱塩基性になるまで固体ＮａＨＣＯ3を加えた。水相をＣＨＣｌ3で抽出し、ＭｇＳＯ4で乾燥させ、濃縮した。Ｉｓｏｌｅｒａクロマトグラフィー（ＣＨ2Ｃｌ2中０〜４％ＭｅＯＨ）により、５５（６１．４ｍｇ、５２％）を得た。ＬＣＭＳ−Ａ：保持時間＝５．４３分、［Ｍ＋Ｈ］+＝６７８
【０４３３】
（ｉｉｉ）２，６−ビス（（（（Ｓ）−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−２，３，５，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−８−イル）オキシ）メチル）イソニコチン酸（５６）
５５（５５ｍｇ、８１．１６μｍｏｌ、１．０当量）及びＳｎＭｅ3ＯＨ（５８．７ｍｇ、３２４．６μｍｏｌ、４．０当量）を（ＣＨ2Ｃｌ）2（０．６ｍＬ）に溶解し、混合物を８０℃に温めて２．５時間撹拌した結果、ＬＣＭＳは反応の完了を示した。反応混合物をＣＨ2Ｃｌ2で希釈し、セライトで濾過し、減圧濃縮した。ＨＰＬＣ（Ａ＊中５〜７０％Ｂ）により、５６（２０ｍｇ、３７％）を得た。＊Ａ＝Ｈ2Ｏ中０．１％ＨＣＯ2Ｈ。Ｂ＝ＭｅＣＮ中０．１％ＨＣＯ2Ｈ。ＬＣＭＳ−Ｂ：保持時間＝５．５０分、［Ｍ＋Ｈ］+＝６６４。
【０４３４】
Ｄ：
【化８８】
2021521172.tif 000092
【０４３５】
（ｉ）８，８’−（（１，３−フェニレンビス（メチレン））ビス（オキシ））（１１Ｓ，１１ａＳ，１１’Ｓ，１１ａ’Ｓ）−ビス（１１−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−２，３，１１，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１０（５Ｈ）−カルボン酸）ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（５７）
フェノールＩ５（４００ｍｇ、０．８１５２ｍｍｏｌ、２．１当量）、臭化物５６（１０３ｍｇ、０．３９０２ｍｍｏｌ、１．０当量）、及びＫ2ＣＯ3（１１５ｍｇ、０．８３２１ｍｍｏｌ、２．１当量）をＭＥＫ（５ｍＬ）に溶解し、混合物を４０℃で２時間、次いで９０℃で２時間撹拌した結果、ＬＣＭＳは反応の未完了を示した。ＫＩ（ナイフ先端量）を添加し、混合物を９０℃で２時間撹拌した結果、ＬＣＭＳは反応の完了を示した。反応混合物を減圧濃縮し、ｉｓｏｌｅｒａクロマトグラフィー（イソヘキサン中１０〜２５％ＥｔＯＡｃ）で精製して、５７をオフホワイトの泡状物（３９１ｍｇ、９２％）として得た。ＬＣＭＳ−Ａ：保持時間＝２．４７分、［Ｍ＋Ｈ］+＝１０８４
【０４３６】
（ｉｉ）（１１ａＳ，１１ａ’Ｓ）−８，８’−（（１，３−フェニレンビス（メチレン））ビス（オキシ））ビス（７−メトキシ−２−メチレン−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−５−オン）（５８）
５７（９８ｍｇ、０．０９０４５ｍｍｏｌ、１．０当量）を０℃の９５％ＴＦＡ水溶液（２ｍＬ）に溶解し、混合物を３０分間撹拌した。氷冷水を反応混合物に加え、ｐＨが中性から弱塩基性になるまで固体ＮａＨＣＯ3を加えた。水相をＣＨＣｌ3で抽出し、ＭｇＳＯ4で乾燥させ、濃縮した。Ｉｓｏｌｅｒａクロマトグラフィー（ＣＨ2Ｃｌ2中０〜４％ＭｅＯＨ）により、５８（２７．９ｍｇ、５０％）を淡黄色固体として得た。ＬＣＭＳ−Ｂ：保持時間＝７．５５分、［Ｍ＋Ｈ］+＝６１９。
【０４３７】
Ｋ５６２アッセイ
がん細胞株Ｋ５６２におけるｉｎ  ｖｉｔｒｏ細胞毒性アッセイによって、ＰＢＤ分子のそれぞれの効力を測定した。
【０４３８】
固体ＰＢＤ材料をＤＭＳＯに溶解して２ｍＭの原液にし、そこからＤＭＳＯで１：１０比の８つの段階希釈液を作製し、使用するまで−２０℃で保存した。
【０４３９】
付着したＫ５６２細胞をＤ−ＰＢＳで洗浄し、トリプシン−ＥＤＴＡで剥離した後、自動細胞カウンター（ＬＵＮＡ−ＩＩ（商標））を使用したトリパンブルー色素排除アッセイにより、細胞密度と生存率を２連で測定した。細胞懸濁液を増殖培地（グルタマックス＋１０％（ｖ／ｖ）ＨｙＣｌｏｎｅ（商標）ウシ胎仔血清を含むＲＰＭＩ１６４０）で１×１０5細胞／ｍｌに希釈し、ボルテックスした後、ウェルあたり２ｍＬを滅菌３ｍＬポリプロピレンプレートに分注した。次に、弾頭希釈液を適切なウェルに１０μｌ／ウェルで分注し、ピペッティングを繰り返して混合した。対照ウェルについては、１０μｌのＤＭＳＯを２ｍＬの細胞懸濁液に分注し、完全に混合した。次に、各試料１００μｌを滅菌平底９６ウェルマイクロプレートの２連の複製ウェルに分注し、３７℃のＣＯ2ガス（５％）インキュベーターでインキュベートした。インキュベーション期間（４日間）の終了時点で、細胞生存率をＣｅｌｌＴｉｔｅｒ９６（登録商標）Ａｑｕｅｏｕｓ  Ｏｎｅ（ＭＴＳ）アッセイで測定した。これは２０μｌ／ウェルで分注し、３７℃、５％ＣＯ2で４時間インキュベートした。次に、４９０ｎｍの吸光度を用いて、ＥｎＶｉｓｉｏｎ（登録商標）マルチラベルプレートリーダー（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）でプレートを読み取った。
【０４４０】
ＤＭＳＯのみで処理した２つの対照ウェルの平均吸光度（１００％）と比較した、試料ごとの２つの複製ウェルの平均吸光度から細胞生存率を算出した。ＩＣ50は、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍソフトウェア（Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）の非線形曲線フィットアルゴリズムを使用して、各データセットを可変勾配付きシグモイド用量反応曲線に適合させることにより決定した。
【０４４１】
この報告の実験は全て、３つの独立した実験で実施し、試験した。３つの独立した複製の平均としてのデータを報告する。
【０４４２】
ＮＣＩ−Ｎ８７アッセイ
がん細胞株ＮＣＩ−Ｎ８７におけるｉｎ  ｖｉｔｒｏ細胞毒性アッセイによって、ＰＢＤ分子のそれぞれの効力を測定した。
【０４４３】
固体ＰＢＤ材料をＤＭＳＯに溶解して２ｍＭの原液にし、そこからＤＭＳＯで１：１０比の８つの段階希釈液を作製し、使用するまで−２０℃で保存した。
【０４４４】
付着したＮＣＩ−Ｎ８７細胞をＤ−ＰＢＳで洗浄し、トリプシン−ＥＤＴＡで剥離した後、自動細胞カウンター（ＬＵＮＡ−ＩＩ（商標））を使用したトリパンブルー色素排除アッセイにより、細胞密度と生存率を２連で測定した。細胞懸濁液を増殖培地（グルタマックス＋１０％（ｖ／ｖ）ＨｙＣｌｏｎｅ（商標）ウシ胎仔血清を含むＲＰＭＩ１６４０）で１×１０5細胞／ｍｌに希釈し、ボルテックスした後、ウェルあたり２ｍＬを滅菌３ｍＬポリプロピレンプレートに分注した。次に、弾頭希釈液を適切なウェルに１０μｌ／ウェルで分注し、ピペッティングを繰り返して混合した。対照ウェルについては、１０μｌのＤＭＳＯを２ｍＬの細胞懸濁液に分注し、完全に混合した。次に、各試料１００μｌを滅菌平底９６ウェルマイクロプレートの２連の複製ウェルに分注し、３７℃のＣＯ2ガス（５％）インキュベーターでインキュベートした。インキュベーション期間（７日間）の終了時点で、細胞生存率をＣｅｌｌＴｉｔｅｒ９６（登録商標）Ａｑｕｅｏｕｓ  Ｏｎｅ（ＭＴＳ）アッセイで測定した。これは２０μｌ／ウェルで分注し、３７℃、５％ＣＯ2で４時間インキュベートした。次に、４９０ｎｍの吸光度を用いて、ＥｎＶｉｓｉｏｎ（登録商標）マルチラベルプレートリーダー（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）でプレートを読み取った。
【０４４５】
ＤＭＳＯのみで処理した２つの対照ウェルの平均吸光度（１００％）と比較した、試料ごとの２つの複製ウェルの平均吸光度から細胞生存率を算出した。ＩＣ50は、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍソフトウェア（Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）の非線形曲線フィットアルゴリズムを使用して、各データセットを可変勾配付きシグモイド用量反応曲線に適合させることにより決定した。
【０４４６】
この報告の実験は全て、３つの独立した実験で実施し、試験した。３つの独立した複製の平均としてのデータを報告する。
【表３】
2021521172.tif 000093
【０４４７】
これらの結果は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏで酸のペイロードがエステルよりもはるかに低い活性を示し、エステル基を追加するとペイロードの活性がわずかに低下することを示している。
【０４４８】
実施例９−複合体の毒性
ＣｏｎｊＡ*について、単回投与の非ＧＬＰ毒性試験を実施した。
【０４４９】
Ｓｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙ雄ラット（Ｅｎｖｉｇｏ，Ｉｎｃ）に、尾静脈経由の低速ボーラス静脈内注射によりＡＤＣを１回投与した。使用した希釈用ビヒクルは、２５ｍＭヒスチジン−ＨＣｌ、７％スクロース、０．０２％ポリソルベート８０、ｐＨ６．０であった。試験時に評価したパラメーターには、死亡率、理学的検査、ケージ外での観察、体重、体重変化、臨床病理学（臨床化学、血液学、及び凝固）、及び総病理学所見を含めた。動物は全て試験日（ＳＤ）２９に殺処分した。
ＣｏｎｊＡ＊
【表４】
2021521172.tif 000094
【０４５０】
いずれの用量の投与でも、早期死亡に至らなかった。血液学データのうち試験物品に伴う変化は骨髄毒性の指標であり、ほとんどの用量群で、あらゆる細胞系統（赤血球、網状赤血球、血小板、好中球、リンパ球、単球、及び好酸球）の減少がみられた。値は一般に後続区間では増加し、可逆性を示した。
【０４５１】
凝固データでは、アルブミンとＡ／Ｇ比の低下、及びグロブリンの増加に付随して、２９日目にフィブリノーゲンが増加しており、急性全身性炎症反応との一致がみられた。
【０４５２】
群２では、８日目に平均ＡＬＴの増加があり、その群での肝臓重量の増加及び軽度の多巣性肝細胞肥大と相関していた。これらの酵素の活性は、以降の１５日目及び２９日目の採取では、対照群に匹敵するか、それよりも低かった。８日目には群１のみ、ＡＬＰの増加に程度の減少が観察された。総コレステロール及びトリグリセリドも、１５日目及び／又は２９日目に両方の群で上昇した。これは、脂質代謝の変化と一致しており、肝臓酵素及び解剖学的病理所見と関連すると思われる。微視的変化には、群２の全動物におけるランダムな配向性の軽度の多巣性肝細胞肥大があった。この肝臓の変化は、肝臓重量の増加及び肝臓酵素の増加と相関していた。
【０４５３】
いずれの群でも骨髄に顕著な変化は見られず、これはピロロベンゾジアゼピン二量体に関連する典型的なプロファイルとは対照的である。
【０４５４】
略語：
Ａｃ              アセチル
Ａｃｍ            アセトアミドメチル
Ａｌｌｏｃ        アリルオキシカルボニル
Ｂｏｃ            二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル
ｔ−Ｂｕ          ｔｅｒｔ−ブチル
Ｂｚｌ            ベンジル。Ｂｚｌ−ＯＭｅはメトキシベンジル、Ｂｚｌ−Ｍｅはメチルベンゼン
Ｃｂｚ又はＺ    ベンジルオキシ−カルボニル。Ｚ−Ｃｌ及びＺ−Ｂｒはそれぞれクロロ−ベンジルオキシカルボニル及びブロモベンジルオキシカルボニル
ＤＭＦ            Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
Ｄｎｐ            ジニトロフェニル
ＤＴＴ            ジチオトレイトール
Ｆｍｏｃ          ９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシカルボニル
ｉｍｐ            Ｎ−１０イミン保護基：３−（２−メトキシエトキシ）プロパノエート−Ｖａｌ−Ａｌａ−ＰＡＢ
ＭＣ−ＯＳｕ      マレイミドカプロイル−Ｏ−Ｎ−スクシンイミド
Ｍｏｃ            メトキシカルボニル
ＭＰ              マレイミドプロパンアミド
Ｍｔｒ            ４−メトキシ−２，３，６−トリメチルベンゼンスルホニル
ＰＡＢ            パラアミノベンジルオキシカルボニル
ＰＥＧ            エチレンオキシ
ＰＮＺ            ｐ−ニトロベンジルカルバメート
Ｐｓｅｃ          ２−（フェニルスルホニル）エトキシカルボニル
ＴＢＤＭＳ        ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル
ＴＢＤＰＳ        ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル
Ｔｅｏｃ          ２−（トリメチルシリル）エトキシカルボニル
Ｔｏｓ            トシル
Ｔｒｏｃ          ２，２，２−トリクロロエトキシカルボニルクロリド
Ｔｒｔ            トリチル
Ｘａｎ            キサンチル
【０４５５】
本発明の番号付き記載
１．式Ｉ：
【化８９】
2021521172.tif 000095
［式中、Ｒ’’は式ＩＩ：
【化９０】
2021521172.tif 000096
（ｎ及びｍのそれぞれが１、２、及び３から独立して選択され；
ＲOは、Ｈ、メチル、エチル、イソプロピル、及びベンジルからなる群より選択され；
ＱCはＮ及びＣＨから選択される）の基であり；
Ｙ及びＹ’はＯ、Ｓ、又はＮＨから選択され；
Ｃ２とＣ３との間に二重結合が存在するとき、Ｒ2は：
（ｉａ）ハロ、ニトロ、シアノ、エーテル、カルボキシ、エステル、Ｃ1-7アルキル、Ｃ3-7ヘテロシクリル、及びビス−オキシ−Ｃ1-3アルキレンを含む群より選択される１つ以上の置換基によって任意選択的に置換されているＣ5-10アリール基；
（ｉｂ）Ｃ1-5飽和脂肪族アルキル；
（ｉｃ）Ｃ3-6飽和シクロアルキル；
（ｉｄ）
【化９１】
2021521172.tif 000097
（式中、Ｒ11、Ｒ12及びＲ13のそれぞれは、Ｈ、Ｃ1-3飽和アルキル、Ｃ2-3アルケニル、Ｃ2-3アルキニル、及びシクロプロピルから独立して選択され、Ｒ2基における炭素原子の合計数が多くて５である）；
（ｉｅ）
【化９２】
2021521172.tif 000098
（式中、Ｒ15a及びＲ15bの一方がＨであり、他方が、ハロ、メチル、メトキシによって任意選択的に置換されているフェニル；ピリジル；及びチオフェニルから選択される）；及び
（ｉｆ）
【化９３】
2021521172.tif 000099
（Ｒ14は以下：Ｈ；Ｃ1-3飽和アルキル；Ｃ2-3アルケニル；Ｃ2-3アルキニル；シクロプロピル；ハロ、メチル、メトキシによって任意選択的に置換されているフェニル；ピリジル；及びチオフェニルから選択される）からなる群より選択され；
Ｃ２とＣ３との間に単結合が存在するとき、
Ｒ2は、Ｈ又は
【化９４】
2021521172.tif 000100
（Ｒ16a及びＲ16bは、Ｈ、Ｆ、Ｃ1-4飽和アルキル、Ｃ2-3アルケニルから独立して選択され、このアルキル基及びアルケニル基は、Ｃ1-4アルキルアミド及びＣ1-4アルキルエステルから選択される基によって任意選択的に置換されているか；又はＲ16a及びＲ16bの一方がＨであるとき、他方はニトリル及びＣ1-4アルキルエステルから選択される）であり；
Ｃ２’とＣ３’との間に二重結合が存在するとき、Ｒ2’は：
（ｉｉａ）ハロ、ニトロ、シアノ、エーテル、カルボキシ、エステル、Ｃ1-7アルキル、Ｃ3-7ヘテロシクリル、及びビス−オキシ−Ｃ1-3アルキレンを含む群より選択される１つ以上の置換基によって任意選択的に置換されているＣ5-10アリール基；
（ｉｉｂ）Ｃ1-5飽和脂肪族アルキル；
（ｉｉｃ）Ｃ3-6飽和シクロアルキル；
（ｉｉｄ）
【化９５】
2021521172.tif 000101
（式中、Ｒ21、Ｒ22及びＲ23のそれぞれは、Ｈ、Ｃ1-3飽和アルキル、Ｃ2-3アルケニル、Ｃ2-3アルキニル、及びシクロプロピルから独立して選択され、Ｒ2’基における炭素原子の合計数が多くて５である）；
（ｉｉｅ）
【化９６】
2021521172.tif 000102
（式中、Ｒ25a及びＲ25bの一方がＨであり、他方が、ハロ、メチル、メトキシによって任意選択的に置換されているフェニル；ピリジル；及びチオフェニルから選択される）；及び
（ｉｉｆ）
【化９７】
2021521172.tif 000103
（Ｒ24は以下：Ｈ；Ｃ1-3飽和アルキル；Ｃ2-3アルケニル；Ｃ2-3アルキニル；シクロプロピル；ハロ、メチル、メトキシによって任意選択的に置換されているフェニル；ピリジル；及びチオフェニルから選択される）からなる群より選択され；
Ｃ２’とＣ３’との間に単結合が存在するとき、
Ｒ2’は、Ｈ又は
【化９８】
2021521172.tif 000104
（Ｒ26a及びＲ26bは、Ｈ、Ｆ、Ｃ1-4飽和アルキル、Ｃ2-3アルケニルから独立して選択され、このアルキル基及びアルケニル基は、Ｃ1-4アルキルアミド及びＣ1-4アルキルエステルから選択される基によって任意選択的に置換されているか；又はＲ26a及びＲ26bの一方がＨであるとき、他方はニトリル及びＣ1-4アルキルエステルから選択される）であり；
Ｒ6及びＲ9は、Ｈ、Ｒ、ＯＨ、ＯＲ、ＳＨ、ＳＲ、ＮＨ2、ＮＨＲ、ＮＲＲ’、ニトロ、Ｍｅ3Ｓｎ、及びハロから独立して選択され；
ここでＲ及びＲ’は、任意選択的に置換されているＣ1-12アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基、及びＣ5-20アリール基から独立して選択され；
Ｒ7は、Ｈ、Ｒ、ＯＨ、ＯＲ、ＳＨ、ＳＲ、ＮＨ2、ＮＨＲ、ＮＨＲＲ’、ニトロ、Ｍｅ3Ｓｎ、及びハロから選択され；
Ｒ6’、Ｒ7’、Ｒ9’はそれぞれ、Ｒ6、Ｒ7及びＲ9と同じ基から選択され；
Ｒ11aは、ＯＨ、ＯＲA（ＲAはＣ1-4アルキルである）、及びＳＯzＭ（ｚは２又は３であり、Ｍは一価の薬学的に許容可能なカチオンである）から選択され；
（ａ）Ｒ30はＨであり、Ｒ31はＯＨ、ＯＲAであるか（ＲAはＣ1-4アルキルである）；
（ｂ）Ｒ30及びＲ31は、それらが結合している窒素原子と炭素原子との間に窒素−炭素二重結合を形成するか；あるいは
（ｃ）Ｒ30はＨであり、Ｒ31はＳＯzＭ（ｚは２又は３であり、Ｍは一価の薬学的に許容可能なカチオンであり、式中、Ｒ11a及びＲ31がＳＯzＭである場合に、Ｍは二価の薬学的に許容可能なカチオンを表す場合もある）であり、
ＲLは、
（ｉｉｉａ）：
【化９９】
2021521172.tif 000105
（式中、
Ｑは、
【化１００】
2021521172.tif 000106
（ＱXは、Ｑがアミノ酸残基、ジペプチド残基、又はトリペプチド残基であるようなものである）であり；
Ｘは、
【化１０１】
2021521172.tif 000107
（ａ＝０〜５、ｂ＝０〜１６、ｃ＝０又は１、ｄ＝０〜５である）であり；
ＧLは、リガンド単位に連結されるリンカーである）；及び
（ｉｉｉｂ）：
【化１０２】
2021521172.tif 000108
（ＲL1及びＲL2は、Ｈ及びメチルから独立して選択されるか、又はそれらが結合している炭素原子と一緒になって、シクロプロピレン基若しくはシクロブチレン基を形成し；
ｅは０又は１である）から選択される、細胞結合剤に連結するためのリンカーである］ならびにその塩及び溶媒和物を含む化合物。
【０４５６】
２．Ｙ及びＹ’がＯである、記載１による化合物。
【０４５７】
３．ｎが１である、記載１又は記載２のいずれかによる化合物。
【０４５８】
４．ｎが２である、記載１又は記載２のいずれかによる化合物。
【０４５９】
５．ｎが３である、記載１又は記載２のいずれかによる化合物。
【０４６０】
６．ｍが１である、記載１〜５のいずれか１つによる化合物。
【０４６１】
７．ｍが２である、記載１〜５のいずれか１つによる化合物。
【０４６２】
８．ｍが３である、記載１〜５のいずれか１つによる化合物。
【０４６３】
９．ＱCがＮである、記載１〜８のいずれか１つによる化合物。
【０４６４】
１０．ＱCがＣＨである、記載１〜８のいずれか１つによる化合物。
【０４６５】
１１．ＲOがＨである、記載１〜１０のいずれか１つによる化合物。
【０４６６】
１２．ＲOがメチルである、記載１〜１０のいずれか１つによる化合物。
【０４６７】
１３．ＲOがエチルである、記載１〜１０のいずれか１つによる化合物。
【０４６８】
１４．ＲOがイソプロピルである、記載１〜１０のいずれか１つによる化合物。
【０４６９】
１５．ＲOがベンジルである、記載１〜１０のいずれか１つによる化合物。
【０４７０】
１６．Ｒ’’が式ＩＩａ：
【化１０３】
2021521172.tif 000109
（ＲO1は、Ｈ及びメチルからなる群より選択される）
のものである、記載１又は記載２のいずれかによる化合物。
【０４７１】
１７．Ｒ9及びＲ9’がＨである、記載１〜１６のいずれか１つによる化合物。
【０４７２】
１８．Ｒ6及びＲ6’がＨ及びハロから独立して選択される、記載１〜１７のいずれか１つによる化合物。
【０４７３】
１９．Ｒ6及びＲ6’がＨである、記載１８による化合物。
【０４７４】
２０．Ｒ7及びＲ7’がＨ、ＯＨ及びＯＲから独立して選択される、記載１〜１９のいずれか１つによる化合物。
【０４７５】
２１．Ｒ7及びＲ7’が独立してＣ1-4アルコキシ基である、記載２０による化合物。
【０４７６】
２２．Ｒ7及びＲ7’がメトキシである、記載２１による化合物。
【０４７７】
２３．Ｃ２とＣ３との間に二重結合があり、Ｒ2がＣ5-7アリール基である、記載１〜２２のいずれか１つによる化合物。
【０４７８】
２４．Ｒ2がフェニルである、記載２３による化合物。
【０４７９】
２５．Ｃ２とＣ３との間に二重結合があり、Ｒ2がＣ8-10アリール基である、記載１〜２２のいずれか１つによる化合物。
【０４８０】
２６．Ｒ2が１〜３個の置換基を有する、記載２３〜２５のいずれか１つによる化合物。
【０４８１】
２７．前記置換基が、メトキシ、エトキシ、フルオロ、クロロ、シアノ、ビス−オキシ−メチレン、メチル−ピペラジニル、モルホリノ、及びメチル−チオフェニルから選択される、記載２３〜２６のいずれか１つによる化合物。
【０４８２】
２８．Ｃ２とＣ３との間に二重結合があり、Ｒ2がＣ1-5飽和脂肪族アルキル基である、記載１〜２２のいずれか１つによる化合物。
【０４８３】
２９．Ｒ2がメチル、エチル、又はプロピルである、記載２８による化合物。
【０４８４】
３０．Ｃ２とＣ３との間に二重結合があり、Ｒ2がＣ3-6飽和シクロアルキル基である、記載１〜２２のいずれか１つによる化合物。
【０４８５】
３１．Ｒ2がシクロプロピルである、記載３０による化合物。
【０４８６】
３２．Ｃ２とＣ３との間に二重結合があり、Ｒ2が式：
【化１０４】
2021521172.tif 000110
の基である、記載１〜２２のいずれか１つによる化合物。
【０４８７】
３３．前記Ｒ2基における炭素原子の合計数が多くて４である、記載３２による化合物。
【０４８８】
３４．前記Ｒ2基における炭素原子の合計数が多くて３である、記載３２による化合物。
【０４８９】
３５．Ｒ11、Ｒ12、及びＲ13のうち１つがＨであり、他の２つの基がＨ、Ｃ1-3飽和アルキル、Ｃ2-3アルケニル、Ｃ2-3アルキニル、及びシクロプロピルから選択される、記載３２〜３４のいずれか１つによる化合物。
【０４９０】
３６．Ｒ11、Ｒ12、及びＲ13のうち２つがＨであり、他の基がＨ、Ｃ1-3飽和アルキル、Ｃ2-3アルケニル、Ｃ2-3アルキニル、及びシクロプロピルから選択される、記載３２〜３４のいずれか１つによる化合物。
【０４９１】
３７．Ｃ２とＣ３との間に二重結合があり、Ｒ2が式：
【化１０５】
2021521172.tif 000111
の基である、記載１〜２２のいずれか１つによる化合物。
【０４９２】
３８．Ｒ2が基：
【化１０６】
2021521172.tif 000112
である、記載３７による化合物。
【０４９３】
３９．Ｃ２とＣ３との間に二重結合があり、Ｒ2が式：
【化１０７】
2021521172.tif 000113
の基である、記載１〜２２のいずれか１つによる化合物。
【０４９４】
４０．Ｒ14がＨ、メチル、エチル、エテニル、及びエチニルから選択される、記載３９による化合物。
【０４９５】
４１．Ｒ14がＨ及びメチルから選択される、記載４０による化合物。
【０４９６】
４２．Ｃ２とＣ３との間に単結合があり、Ｒ2がＨである、記載１〜２２のいずれか１つによる化合物。
【０４９７】
４３．Ｃ２とＣ３との間に単結合があり、Ｒ2が
【化１０８】
2021521172.tif 000114
であり、Ｒ16aとＲ16bがいずれもＨである、記載１〜２２のいずれか１つによる化合物。
【０４９８】
４４．Ｃ２とＣ３との間に単結合があり、Ｒ2が
【化１０９】
2021521172.tif 000115
であり、Ｒ16aとＲ16bがいずれもメチルである、記載１〜２２のいずれか１つによる化合物。
【０４９９】
４５．Ｃ２とＣ３との間に単結合があり、Ｒ2が
【化１１０】
2021521172.tif 000116
であり、Ｒ16a及びＲ16bの一方はＨであり、他方はＣ1-4飽和アルキル、Ｃ2-3アルケニルから選択され、このアルキル基及びアルケニル基は任意選択的に置換される、記載１〜２２のいずれか１つによる化合物。
【０５００】
４６．Ｃ２’とＣ３’との間に二重結合があり、Ｒ2’がＣ5-7アリール基である、記載１〜４５のいずれか１つによる化合物。
【０５０１】
４７．Ｒ2’がフェニルである、記載４６による化合物。
【０５０２】
４８．Ｃ２’とＣ３’との間に二重結合があり、Ｒ2’がＣ8-10アリール基である、記載１〜４５のいずれか１つによる化合物。
【０５０３】
４９．Ｒ2’が１〜３個の置換基を有する、記載４６〜４８のいずれか１つによる化合物。
【０５０４】
５０．前記置換基が、メトキシ、エトキシ、フルオロ、クロロ、シアノ、ビス−オキシ−メチレン、メチル−ピペラジニル、モルホリノ、及びメチル−チオフェニルから選択される、記載４６〜４９のいずれか１つによる化合物。
【０５０５】
５１．Ｃ２とＣ３との間に二重結合があり、Ｒ2がＣ1-5飽和脂肪族アルキル基である、記載１〜４５のいずれか１つによる化合物。
【０５０６】
５２．Ｒ2’がメチル、エチル、又はプロピルである、記載５１による化合物。
【０５０７】
５３．Ｃ２’とＣ３’との間に二重結合があり、Ｒ2’がＣ3-6飽和シクロアルキル基である、記載１〜４５のいずれか１つによる化合物。
【０５０８】
５４．Ｒ2’がシクロプロピルである、記載５３による化合物。
【０５０９】
５５．Ｃ２’とＣ３’との間に二重結合があり、Ｒ2’が式：
【化１１１】
2021521172.tif 000117
の基である、記載１〜４５のいずれか１つによる化合物。
【０５１０】
５６．前記Ｒ2’基における炭素原子の合計数が多くて４である、記載５５による化合物。
【０５１１】
５７．前記Ｒ2’基における炭素原子の合計数が多くて３である、記載５６による化合物。
【０５１２】
５８．Ｒ21、Ｒ22、及びＲ23のうち１つがＨであり、他の２つの基がＨ、Ｃ1-3飽和アルキル、Ｃ2-3アルケニル、Ｃ2-3アルキニル、及びシクロプロピルから選択される、記載５５〜５７のいずれか１つによる化合物。
【０５１３】
５９．Ｒ21、Ｒ22、及びＲ23のうち２つがＨであり、他の基がＨ、Ｃ1-3飽和アルキル、Ｃ2-3アルケニル、Ｃ2-3アルキニル、及びシクロプロピルから選択される、記載５５〜５７のいずれか１つによる化合物。
【０５１４】
６０．Ｃ２’とＣ３’との間に二重結合があり、Ｒ2’が式：
【化１１２】
2021521172.tif 000118
の基である、記載１〜４５のいずれか１つによる化合物。
【０５１５】
６１．Ｒ2’が基：
【化１１３】
2021521172.tif 000119
である、記載６０による化合物。
【０５１６】
６２．Ｃ２’とＣ３’との間に二重結合があり、Ｒ2’が式：
【化１１４】
2021521172.tif 000120
の基である、記載１〜４５のいずれか１つによる化合物。
【０５１７】
６３．Ｒ24がＨ、メチル、エチル、エテニル、及びエチニルから選択される、記載６２による化合物。
【０５１８】
６４．Ｒ24がＨ及びメチルから選択される、記載６３による化合物。
【０５１９】
６５．Ｃ２’とＣ３’との間に単結合があり、Ｒ2’がＨである、記載１〜４５のいずれか１つによる化合物。
【０５２０】
６６．Ｃ２’とＣ３’との間に単結合があり、Ｒ2’が
【化１１５】
2021521172.tif 000121
であり、Ｒ26aとＲ26bがいずれもＨである、記載１〜４５のいずれか１つによる化合物。
【０５２１】
６７．Ｃ２’とＣ３’との間に単結合があり、Ｒ2が
【化１１６】
2021521172.tif 000122
であり、Ｒ26aとＲ26bがいずれもメチルである、記載１〜４５のいずれか１つによる化合物。
【０５２２】
６８．Ｃ２’とＣ３’との間に単結合があり、Ｒ2’が
【化１１７】
2021521172.tif 000123
であり、Ｒ26a及びＲ26bの一方はＨであり、他方はＣ1-4飽和アルキル、Ｃ2-3アルケニルから選択され、このアルキル基及びアルケニル基は任意選択的に置換される、記載１〜４５のいずれか１つによる化合物。
【０５２３】
６９．Ｒ11aがＯＨである、記載１〜６８のいずれか１つによる化合物。
【０５２４】
７０．Ｒ11aがＯＲAである、記載１〜６８のいずれか１つによる化合物。
【０５２５】
７１．ＲAがメチルである、記載７０による化合物。
【０５２６】
７２．Ｒ11aがＳＯzＭである、記載１〜６８のいずれか１つによる化合物。
【０５２７】
７３．ＭがＮａ+であり、ｚが３である、記載７２による化合物。
【０５２８】
７４．Ｒ30がＨであり、Ｒ31がＯＨである、記載１〜７３のいずれか１つによる化合物。
【０５２９】
７５．Ｒ30がＨであり、Ｒ31がＯＲAである、記載１〜７３のいずれか１つによる化合物。
【０５３０】
７６．ＲAがメチルである、記載７５による化合物。
【０５３１】
７７．Ｒ30及びＲ31は、それらが結合している窒素原子と炭素原子との間に窒素−炭素二重結合を形成する、記載１〜７３のいずれか１つによる化合物。
【０５３２】
７８．Ｒ30がＨであり、Ｒ31がＳＯzＭである、記載１〜７３のいずれか１つによる化合物。
【０５３３】
７９．ＭがＮａ+であり、ｚが３である、記載７８による化合物。
【０５３４】
８０．式Ｉａ：
【化１１８】
2021521172.tif 000124
（式中、Ｒ2aとＲ2a’は同じであり、以下：
（ａ）
【化１１９】
2021521172.tif 000125
；
（ｂ）
【化１２０】
2021521172.tif 000126
；
（ｃ）
【化１２１】
2021521172.tif 000127
；
（ｄ）
【化１２２】
2021521172.tif 000128
；
（ｅ）
【化１２３】
2021521172.tif 000129
；
（ｆ）
【化１２４】
2021521172.tif 000130
；
（ｇ）
【化１２５】
2021521172.tif 000131
；及び
（ｈ）
【化１２６】
2021521172.tif 000132
から選択され；
Ｒ7aとＲ7a’は同じであり、メトキシ及びベンジルオキシから選択される）である、記載１による化合物。
【０５３５】
８１．式Ｉｂ：
【化１２７】
2021521172.tif 000133
（式中、Ｒ7aとＲ7a’は同じであり、メトキシ及びベンジルオキシから選択される）である、記載１による化合物。
【０５３６】
８２．式Ｉｃ：
【化１２８】
2021521172.tif 000134
（式中、Ｒ7aとＲ7a’は同じであり、メトキシ及びベンジルオキシから選択される）である、記載１による化合物。
【０５３７】
８３．ＲLが式ＩＩＩａのものであり、ＱがＰｈｅ、Ｌｙｓ、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｃｉｔ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ａｒｇ、及びＴｒｐから選択されるアミノ酸残基である、記載１〜８２のいずれか１つによる化合物。
【０５３８】
８４．ＲLが式ＩＩＩａのものであり、Ｑが
CO−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−NH、
CO−Ｖａｌ−Ａｌａ−NH、
CO−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−NH、
CO−Ａｌａ−Ｌｙｓ−NH、
CO−Ｖａｌ−Ｃｉｔ−NH、
CO−Ｐｈｅ−Ｃｉｔ−NH、
ＣO−Ｌｅｕ−Ｃｉｔ−NH、
CO−Ｉｌｅ−Ｃｉｔ−NH、
CO−Ｐｈｅ−Ａｒｇ−NH、及び
CO−Ｔｒｐ−Ｃｉｔ−NHから選択されるジペプチド残基である、記載１〜８２のいずれか１つによる化合物。
【０５３９】
８５．Ｑが、CO−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−NH、CO−Ｖａｌ−Ｃｉｔ−NH、及びCO−Ｖａｌ−Ａｌａ−NHから選択される、記載８４による化合物。
【０５４０】
８６．ＲLが式ＩＩＩａのものであり、Ｑがトリペプチド残基である、記載１〜８２のいずれか１つによる化合物。
【０５４１】
８７．ＲLが式ＩＩＩａのものであり、ａが０〜３である、記載１〜８６のいずれか１つによる化合物。
【０５４２】
８８．ａが０である、記載８７による化合物。
【０５４３】
８９．ＲLが式ＩＩＩａのものであり、ｂが０〜１２である、記載１〜８８のいずれか１つによる化合物。
【０５４４】
９０．ｂが０〜８である、記載８９による化合物。
【０５４５】
９１．ＲLが式ＩＩＩａのものであり、ｄが０〜３である、記載１〜９０のいずれか１つによる化合物。
【０５４６】
９２．ｄが２である、記載９１による化合物。
【０５４７】
９３．ＲLが式ＩＩＩａのものであり、ａが０であり、ｃが１であり、ｄが２であり、ｂが０〜８である、記載１〜８６のいずれか１つによる化合物。
【０５４８】
９４．ｂが０、４、又は８である、記載９３による化合物。
【０５４９】
９５．ＲLが式ＩＩＩａのものであり、ＧLが
【化１２９】
2021521172.tif 000135
（ＡｒはＣ5-6アリーレン基、例えばフェニレンを表し、ＸはＣ1-4アルキルを表す）から選択される、記載１〜９４のいずれか１つによる化合物。
【０５５０】
９６．Ａｒがフェニレン基である、記載９５による化合物。
【０５５１】
９７．ＧLがＧL1-1及びＧL1-2から選択される、記載９５又は記載９６のいずれかによる化合物。
【０５５２】
９８．ＧLがＧL1-1である、記載９７による化合物。
【０５５３】
９９．ＲLが式ＩＩＩｂのものであり、ＲL1とＲL2はいずれもＨである、記載１〜８２のいずれか１つによる化合物。
【０５５４】
１００．ＲLが式ＩＩＩｂのものであり、ＲL1がＨであり、ＲL2がメチルである、記載１〜８２のいずれか１つによる化合物。
【０５５５】
１０１．ＲLが式ＩＩＩｂのものであり、ＲL1とＲL2はいずれもメチルである、記載１〜８２のいずれか１つによる化合物。
【０５５６】
１０２．ＲLが式ＩＩＩｂのものであり、かつＲL1及びＲL2が、それらが結合している炭素原子と一緒になって、シクロプロピレン基を形成する、記載１〜８２のいずれか１つによる化合物。
【０５５７】
１０３．ＲLが式ＩＩＩｂのものであり、かつＲL1及びＲL2が、それらが結合している炭素原子と一緒になって、シクロブチレン基を形成する、記載１〜８２のいずれか１つによる化合物。
【０５５８】
１０４．ＲLが式ＩＩＩｂのものであり、ｅが０である、記載１〜８２及び９９〜１０３のいずれか１つによる化合物。
【０５５９】
１０５．ＲLが式ＩＩＩｂのものであり、ｅが１である、記載１〜８２及び９９〜１０３のいずれか１つによる化合物。
【０５６０】
１０６．前記ニトロ基がパラ位にある、記載１０５による化合物。
【０５６１】
１０７．増殖性疾患を治療するための医薬品の製造における、記載１〜１０６のいずれか１つによる化合物の使用。
【０５６２】
１０８．増殖性疾患の前記治療に使用するための、記載１〜１０６のいずれか１つによる化合物。
【０５６３】
１０９．リガンド単位に連結された記載１〜１０６のいずれか１つによる式Ｉの化合物、又はその薬学的に許容可能な塩若しくは溶媒和物を含む複合体。
【０５６４】
１１０．式ＩＶ：
Ｌ−（ＤL）p  （ＩＶ）
［式中、Ｌはリガンド単位であり、ＤLは、式ＩＩＩ：
【化１３０】
2021521172.tif 000136
（式中、Ｒ2、Ｒ6、Ｒ7、Ｒ9、Ｒ11a、Ｙ、Ｒ’’、Ｙ’、Ｒ2’、Ｒ6’、Ｒ7’、Ｒ9’、Ｒ30及びＲ31は、記載１〜７９のいずれか１つで定義された通りであり；
ＲLLは、
（ｉｉｉａ）：
【化１３１】
2021521172.tif 000137
（Ｑ及びＸは記載１及び８３〜８６で定義された通りであり、ＧLLはリガンド単位に連結されるリンカーである）；及び
（ｉｉｉｂ）：
【化１３２】
2021521172.tif 000138
（ＲL1及びＲL2は、記載１及び９９〜１０３のいずれか１つで定義された通りである）から選択される細胞結合剤に連結するためのリンカーである）のものであり；
ｐは１〜２０の整数である］又はその薬学的に許容可能な塩若しくは溶媒和物の複合体。
【０５６５】
１１１．ＧLLが
【化１３３】
2021521172.tif 000139
（ＡｒはＣ5-6アリーレン基、例えばフェニレンを表し、ＸはＣ1-4アルキルを表す）から選択される、記載１１０による複合体。
【０５６６】
１１２．Ａｒがフェニレン基である、記載１１１による複合体。
【０５６７】
１１３．ＧLLがＧLL1-1及びＧLL1-2から選択される、記載１１１又は記載１１２のいずれかによる化合物。
【０５６８】
１１４．ＧLLがＧLL1-1である、記載１１２による化合物。
【０５６９】
１１５．ＤLが式ＩＩＩａ：
【化１３４】
2021521172.tif 000140
（Ｒ2aとＲ2a’は同じであり、以下：
（ａ）
【化１３５】
2021521172.tif 000141
；
（ｂ）
【化１３６】
2021521172.tif 000142
；
（ｃ）
【化１３７】
2021521172.tif 000143
；
（ｄ）
【化１３８】
2021521172.tif 000144
；
（ｅ）
【化１３９】
2021521172.tif 000145
；
（ｆ）
【化１４０】
2021521172.tif 000146
；
（ｇ）
【化１４１】
2021521172.tif 000147
；及び
（ｈ）
【化１４２】
2021521172.tif 000148
から選択され；
Ｒ7aとＲ7a’は同じであり、メトキシ及びベンジルオキシから選択される）のものである、記載１１０による複合体。
【０５７０】
１１６．ＤLが式ＩＩＩｂ：
【化１４３】
2021521172.tif 000149
（Ｒ7aとＲ7a’は同じであり、メトキシ及びベンジルオキシから選択される）
のものである、記載１１０による複合体。
【０５７１】
１１７．ＤLが式ＩＩＩｃ：
【化１４４】
2021521172.tif 000150
（Ｒ7aとＲ7a’は同じであり、メトキシ及びベンジルオキシから選択される）のものである、記載１１０による複合体。
【０５７２】
１１８．前記リガンド単位が抗体又はその活性断片である、記載１０９〜１１７のいずれか１つによる複合体。
【０５７３】
１１９．前記抗体又は抗体断片が腫瘍関連抗原に対する抗体又は抗体断片である、記載１１８による複合体。
【０５７４】
１２０．前記抗体又は抗体断片が、（１）〜（８８）：
（１）ＢＭＰＲ１Ｂ；
（２）Ｅ１６；
（３）ＳＴＥＡＰ１；
（４）０７７２Ｐ；
（５）ＭＰＦ；
（６）Ｎａｐｉ３ｂ；
（７）Ｓｅｍａ５ｂ；
（８）ＰＳＣＡｈｌｇ；
（９）ＥＴＢＲ；
（１０）ＭＳＧ７８３；
（１１）ＳＴＥＡＰ２；
（１２）ＴｒｐＭ４；
（１３）ＣＲＩＰＴＯ；
（１４）ＣＤ２１；
（１５）ＣＤ７９ｂ；
（１６）ＦｃＲＨ２；
（１７）ＨＥＲ２；
（１８）ＮＣＡ；
（１９）ＭＤＰ；
（２０）ＩＬ２０Ｒ−アルファ；
（２１）ブレビカン；
（２２）ＥｐｈＢ２Ｒ；
（２３）ＡＳＬＧ６５９；
（２４）ＰＳＣＡ；
（２５）ＧＥＤＡ；
（２６）ＢＡＦＦ−Ｒ；
（２７）ＣＤ２２；
（２８）ＣＤ７９ａ；
（２９）ＣＸＣＲ５；
（３０）ＨＬＡ−ＤＯＢ；
（３１）Ｐ２Ｘ５；
（３２）ＣＤ７２；
（３３）ＬＹ６４；
（３４）ＦｃＲＨ１；
（３５）ＩＲＴＡ２；
（３６）ＴＥＮＢ２；
（３７）ＰＳＭＡ−ＦＯＬＨ１；
（３８）ＳＳＴ；
（３８．１）ＳＳＴＲ２；
（３８．２）ＳＳＴＲ５；
（３８．３）ＳＳＴＲ１；
（３８．４）ＳＳＴＲ３；
（３８．５）ＳＳＴＲ４；
（３９）ＩＴＧＡＶ；
（４０）ＩＴＧＢ６；
（４１）ＣＥＡＣＡＭ５；
（４２）ＭＥＴ；
（４３）ＭＵＣ１；
（４４）ＣＡ９；
（４５）ＥＧＦＲｖＩＩＩ；
（４６）ＣＤ３３；
（４７）ＣＤ１９；
（４８）ＩＬ２ＲＡ；
（４９）ＡＸＬ；
（５０）ＣＤ３０−ＴＮＦＲＳＦ８；
（５１）ＢＣＭＡ−ＴＮＦＲＳＦ１７；
（５２）ＣＴＡｇｓ−ＣＴＡ；
（５３）ＣＤ１７４（ルイスＹ）−ＦＵＴ３；
（５４）ＣＬＥＣ１４Ａ；
（５５）ＧＲＰ７８−ＨＳＰＡ５；
（５６）ＣＤ７０；
（５７）幹細胞特異的抗原；
（５８）ＡＳＧ−５；
（５９）ＥＮＰＰ３；
（６０）ＰＲＲ４；
（６１）ＧＣＣ−ＧＵＣＹ２Ｃ；
（６２）Ｌｉｖ−１−ＳＬＣ３９Ａ６；
（６３）５Ｔ４；
（６４）ＣＤ５６−ＮＣＭＡ１；
（６５）ＣａｎＡｇ；
（６６）ＦＯＬＲ１；
（６７）ＧＰＮＭＢ；
（６８）ＴＩＭ−１−ＨＡＶＣＲ１；
（６９）ＲＧ−１／前立腺腫瘍標的ミンディン−ミンディン／ＲＧ−１；
（７０）Ｂ７−Ｈ４−ＶＴＣＮ１；
（７１）ＰＴＫ７；
（７２）ＣＤ３７；
（７３）ＣＤ１３８−ＳＤＣ１；
（７４）ＣＤ７４；
（７５）クローディン−ＣＬ；
（７６）ＥＧＦＲ；
（７７）Ｈｅｒ３；
（７８）ＲＯＮ−ＭＳＴ１Ｒ；
（７９）ＥＰＨＡ２；
（８０）ＣＤ２０−ＭＳ４Ａ１；
（８１）テネイシンＣ−ＴＮＣ；
（８２）ＦＡＰ；
（８３）ＤＫＫ−１；
（８４）ＣＤ５２；
（８５）ＣＳ１−ＳＬＡＭＦ７；
（８６）エンドグリン−ＥＮＧ；
（８７）アネキシンＡ１−ＡＮＸＡ１；
（８８）Ｖ−ＣＡＭ（ＣＤ１０６）−ＶＣＡＭ１
から選択される１つ以上の腫瘍関連抗原又は細胞表面受容体に結合する抗体である、記載１１９による複合体：
【０５７５】
１２１．前記抗体又は抗体断片がシステイン改変抗体である、記載１１８〜１２０のいずれか１つによる複合体。
【０５７６】
１２２．ｐが１〜８の整数である、記載１１０〜１２１のいずれか１つによる複合体。
【０５７７】
１２３．ｐが１、２、３、又は４である、記載１２２による複合体。
【０５７８】
１２４．複合体化合物の混合物中の平均ｐが約１〜約８である、記載１１０〜１２３のいずれか１つによる複合体の混合物を含む組成物。
【０５７９】
１２５．療法に使用するための、記載１０９〜１２３のいずれか１つによる複合体。
【０５８０】
１２６．記載１０９〜１２３のいずれか１つの複合体、及び薬学的に許容可能な希釈剤、担体又は賦形剤を含む医薬組成物。
【０５８１】
１２７．対象の増殖性疾患の治療に使用するための、記載１０９〜１２３のいずれか１つによる複合体又は記載１２６による医薬組成物。
【０５８２】
１２８．治療される前記疾患ががんである、記載１２７による使用のための複合体。
【０５８３】
１２９．記載１０９〜１２３のいずれか１つによる複合体又は記載１２６による医薬組成物の医学的治療方法における使用。
【０５８４】
１３０．記載１２６の医薬組成物を患者に投与することを含む医学的治療方法。
【０５８５】
１３１．前記医学的治療方法が、がんを治療するためのものである、記載１３０の方法。
【０５８６】
１３２．前記複合体と併用して化学療法剤を前記患者に投与する、記載１３１の方法。
【０５８７】
１３３．増殖性疾患を治療するための医薬品の製造方法における、記載１０９〜１２３のいずれか１つによる複合体の使用。
【０５８８】
１３４．記載１０９〜１２３のいずれか１つによる有効量の複合体又は記載１２６による医薬組成物を投与することを含む、増殖性疾患を有する哺乳動物を治療する方法。
【０５８９】
１３５．式ＲＥＬ：
【化１４５】
2021521172.tif 000151
（式中、Ｒ2、Ｒ6、Ｒ7、Ｒ9、Ｙ、Ｒ’’、Ｙ’、Ｒ2’、Ｒ6’、Ｒ7’、Ｒ9’、Ｒ30及びＲ31は、記載１〜７９のいずれか１つで定義された通りである）ならびにその塩及び溶媒和物を含む化合物。
【国際調査報告】
2021521172.tif 000197
2021521172.tif 000198
2021521172.tif 000199