(57)【要約】  本開示は、増加したスキンケア効果及び／又は複数のスキンケア効果を提供するための組成物及び方法を対象としている。本明細書に開示する方法及び組成物は、アミノ酸、メチル−アミン及びポリオールから選択される少なくとも４つのオスモライトを含むスキンケア組成物及びスキンケア製品を対象としている。より具体的には、本明細書に開示する方法及び組成物は、ベタイン、イノシトール、プロリン及びセリンからなる群から選択される少なくとも４つのオスモライトの組み合わせを含むスキンケア組成物及びスキンケア製品を対象としている。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
プロリン、セリン、ベタイン、及びイノシトールからなる群から選択される少なくとも４つのオスモライトの組み合わせを含むスキンケア組成物であって、前記組み合わせは、前記組成物の総重量に対して重量基準で、１０％〜２０％のプロリン、５％〜１０％のセリン、２０〜３０％のベタイン及び１％〜５％のイノシトールを含むスキンケア組成物。
【請求項２】
プロリン、セリン、ベタイン、及びイノシトールからなる群から選択される少なくとも４つのオスモライトの組み合わせを含むスキンケア組成物であって、前記組み合わせは、総オスモライト含量１００％に対して、オスモライト％基準で、３０％のプロリン、１４％のセリン、５０％のベタイン及び６％のイノシトールを含むスキンケア組成物。
【請求項３】
防腐剤及びｐＨ調整剤からなる群から選択される少なくとも１つの追加の化合物をさらに含む、請求項１又は２に記載のスキンケア組成物。
【請求項４】
前記追加の化合物は防腐剤である、請求項３に記載のスキンケア組成物。
【請求項５】
前記防腐剤は安息香酸ナトリウムである、請求項４に記載のスキンケア組成物。
【請求項６】
前記追加の化合物はｐＨ調整剤である、請求項３に記載のスキンケア組成物。
【請求項７】
前記ｐＨ調整剤はクエン酸である、請求項６に記載のスキンケア組成物。
【請求項８】
前記スキンケア組成物は透明な水溶液である、請求項１〜７のいずれか一項に記載のスキンケア組成物。
【請求項９】
請求項１〜８のいずれか一項に記載のスキンケア組成物の有効量のスキンケア製品における使用。
【請求項１０】
請求項１〜８のいずれか一項に記載のスキンケア組成物の有効量と、１つ以上の皮膚科学的又は美容的に許容される成分とを含むスキンケア製品。
【請求項１１】
前記スキンケア組成物の前記有効量は、前記スキンケア製品の総重量に対して重量基準で少なくとも約１％、２％、３％、４％、最大で５％である、請求項１０に記載のスキンケア製品。
【請求項１２】
前記１つ以上の皮膚科学的に許容される成分は、前記スキンケア製品の総重量に対して重量基準で約１０％〜約９９％を含む皮膚科学的に許容される担体である、請求項１０に記載のスキンケア製品。
【請求項１３】
３０：１４：５０：６の比のオスモライトのプロリン、セリン、ベタイン及びイノシトールの組み合わせを含むスキンケア製品。
【請求項１４】
前記スキンケア製品は、ローション、セラム、ゼリー、クリーム、ゲル、エマルション、マスク、パッチ及びスティックからなる群から選択される、請求項１０〜１３のいずれか一項に記載のスキンケア製品。
【請求項１５】
皮膚に増加したスキンケア効果を提供する方法であって、皮膚を、請求項１〜８のいずれか一項に記載のスキンケア組成物の有効量と、１つ以上の皮膚科学的又は美容的に許容される成分とを含むスキンケア製品と接触させることを含む方法。
【請求項１６】
前記増加したスキンケア効果は、増加した浸透圧保護、増加したＵＶ照射に対する保護、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記スキンケア製品は、前記スキンケア製品の総重量に対して重量基準で少なくとも１％、２％、３％、４％、最大で５％の前記スキンケア組成物を含む、ローション、セラム、ゼリー、クリーム、ゲル、エマルション、マスク、パッチ、又はスティックである、請求項１５に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本願は、２０１８年２月２６日に出願された米国仮特許出願第６２／６３５１５７号、２０１８年３月２０日に出願された米国仮特許出願第６２／６４５２３６号及び２０１８年１０月５日に出願された米国仮特許出願第６２／７４１７５５号の利益を主張するものであり、これらは各々参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０００２】
本開示は、増加したスキンケア効果及び／又は複数のスキンケア効果を提供するためのスキンケア組成物、スキンケア製品、及び方法を対象とする。より具体的には、本開示は、少なくともオスモライトのベタイン、イノシトール、プロリン及びセリンの組み合わせを含む方法及び組成物を対象とする。
【背景技術】
【０００３】
皮膚は、外部の、しばしば有害な物質の浸透から生物を保護するだけでなく、乾燥から生物を保護するバリアとして機能する。
【０００４】
表皮は、皮膚組織の最も外側の領域を構成し、したがって、環境に対する実際の保護シースを形成する。
【０００５】
表皮の外層（角質層（Ｓｔｒａｔｕｍ  ｃｏｒｎｅｕｍ）又は角質層（Ｈｏｒｎｙ  ｌａｙｅｒ））は環境と接する部分であり、角質層の特定の構造が皮膚を保護し、且つ規定量の水を結合することによってそれ自体の柔軟性を安定化する（Ｐ．Ｍ．Ｅｌｉａｓ，Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ａｎｄ  Ｆｕｎｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｓｔｒａｔｕｍ  Ｃｏｒｎｅｕｍ  Ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙ  Ｂａｒｒｉｅｒ，Ｄｒｕｇ  Ｄｅｖ．Ｒｅｓ．１３，１９８８，９７−１０５）。
【０００６】
オスモライトは、脱水などの高浸透圧ストレスに応答して細胞によって蓄積され、その後に、そこから急速に放出される化合物である（Ｋｗｏｎ  ａｎｄ  Ｈａｎｄｌｅｒ，Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．；１９９５；７：４６５−４７１及びＨａｕｓｓｉｎｇｅｒ  １９９６；Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．３１３：６９７−７１０）。オスモライトは、高濃度であっても細胞をほとんど混乱させず、さらに、前記細胞のタンパク質の機能を妨害しない（Ｂｕｒｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．１９９７；５９：４３７−４５５）。
【０００７】
身体に対し内因性の物質（例えば、水、脂質、電解質）の喪失に対する保護の増大、並びに有害な外部の化学的及び物理的影響からの保護の増大、又はそれらの任意の組み合わせなど（これらに限定されない）、増加したスキンケア効果及び／又は複数のスキンケア効果を提供するスキンケア組成物及びスキンケア製品を見出すことが依然として必要とされている。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本開示は、増加したスキンケア効果を提供する組成物及び方法を対象とする。本開示はまた、複数のスキンケア効果を提供する組成物及び方法を対象とする。本明細書に開示する方法及び組成物は、アミノ酸、メチル−アミン及びポリオールから選択される少なくとも４つのオスモライトを含むスキンケア組成物及びスキンケア製品を対象とする。より具体的には、本明細書に開示する方法及び組成物は、ベタイン、イノシトール、プロリン及びセリンからなる群から選択される少なくとも４つのオスモライトの組み合わせを含むスキンケア組成物及びスキンケア製品を対象とする。
【０００９】
一実施形態では、スキンケア組成物は、プロリン、セリン、ベタイン及びイノシトールからなる群から選択される少なくとも４つのオスモライトの組み合わせを含むスキンケア組成物であり、前記組み合わせは、前記組成物の総重量に対して重量基準で、１０％〜２０％のプロリン、５％〜１０％のセリン、２０〜３０％のベタイン及び１％〜５％のイノシトールを含む。
【００１０】
一実施形態では、スキンケア組成物は、プロリン、セリン、ベタイン、イノシトールからなる群から選択される少なくとも４つのオスモライトの組み合わせを含むスキンケア組成物であり、前記組み合わせは、総オスモライト含量１００％に対して、オスモライト％基準で、３０％のプロリン、１４％のセリン、５０％のベタイン及び６％のイノシトールを含む。
【００１１】
上記のスキンケア組成物は、防腐剤、ｐＨ調整剤、抗酸化剤及びキレート剤からなる群から選択される少なくとも１つの追加の化合物をさらに含有することができる。
【００１２】
一実施形態では、使用は、スキンケア製品における、本明細書に記載されるスキンケア組成物の有効量の使用である。
【００１３】
一実施形態では、スキンケア製品は、本明細書に記載のスキンケア組成物の有効量と、１つ以上の皮膚科学的又は美容的に許容される成分とを含むスキンケア製品である。一態様では、本明細書に記載のスキンケア組成物の有効量は、前記スキンケア製品の総重量に対して重量基準で少なくとも約０．１％〜５％であり得る。一態様では、本明細書に記載のスキンケア組成物の有効量は、前記スキンケア製品の総重量に対して重量基準で少なくとも約０．１％〜１０％であり得る。皮膚科学的に許容される成分は、スキンケア製品の総重量に対して重量基準で約１０％〜約９９％を含む皮膚科学的に許容される担体であり得る。
【００１４】
一実施形態では、スキンケア製品は、１つ以上の皮膚科学的又は美容的に許容される成分と、前記スキンケア製品の総重量に対して重量基準で少なくとも約１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、最大で１０％の本明細書に記載のスキンケア組成物とを含むローション、セラム、ゼリー、クリーム、ゲル、エマルション、マスク、パッチ、又はスティックである。
【００１５】
一実施形態では、スキンケア製品は、３０：１４：５０：６の比のオスモライトのプロリン、セリン、ベタイン及びイノシトールの組み合わせを含むスキンケア製品である。
【００１６】
一実施形態では、方法は、皮膚（皮膚表面、皮膚細胞を含む）に増加したスキンケア効果を提供する方法であり、前記方法は、皮膚を、本明細書に記載のスキンケア組成物の有効量と、１つ以上の皮膚科学的又は美容的に許容される成分とを含むスキンケア製品と接触させることを含む。増加したスキンケア効果は、増加した浸透圧保護、増加したＵＶ照射に対する保護、及びこれらの組み合わせからなる群から選択され得る。
【００１７】
一実施形態では、本方法は、皮膚に増加したスキンケア効果を提供する方法であり、皮膚を、ベタイン、イノシトール、プロリン及びセリンからなる群から選択される少なくとも４つのオスモライトの組み合わせを含むスキンケア製品と接触させることを含み、前記組み合わせは、前記スキンケア製品の総重量に対して重量基準で１％〜５０％含む。
【００１８】
一実施形態では、方法は、皮膚に複数のスキンケア効果を提供する方法であり、前記方法は、皮膚を、プロリン、セリン、ベタイン及びイノシトールからなる群から選択される少なくとも４つのオスモライトの組み合わせを含むスキンケア組成物の有効量を含むスキンケア製品と接触させることを含み、前記組み合わせは、前記組成物の総重量に対して重量基準で１０％〜２０％のプロリン、５％〜１０％のセリン、２０〜３０％のベタイン及び１％〜５％のイノシトールを含み、前記複数のスキンケア効果は、皮膚の保湿、皮膚の浸透圧に対する保護、皮膚の汚染からの保護、紫外線照射による損傷からの皮膚の保護、青色光による損傷からの皮膚の保護、酸化ストレスからの皮膚の保護、皮膚解毒、皮膚バリア機能の強化、及びこれらの任意の１つの組み合わせからなる群から選択される少なくとも２つのスキンケア効果である。
【００１９】
スキンケア効果としては、浸透圧に対する保護、ＵＶ照射からの保護、青色光からの保護、夜間光からの保護、酸化ストレスからの保護、皮膚の解毒、皮膚バリア機能の改善、又はこれらの任意の１つの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。
【発明を実施するための形態】
【００２０】
本開示の特徴及び利点は、以下の詳細な説明を読むことにより、当業者によってより容易に理解されるであろう。明確にするために別個の実施形態との関連で上記及び下記に記載される本開示の特定の特徴は、単一の要素における組み合わせでも提供され得ることは十分に理解されるべきである。反対に、簡潔にするために、単一の実施形態との関連で記載される本開示の様々な特徴は、別個に又は任意の副次的組み合わせでも提供され得る。
【００２１】
スキンケア組成物
本明細書で使用される場合、用語「スキンケア組成物」は、スキンケア効果を提供することができる少なくとも１つのスキンケア効果剤を含む組成物を指す。
【００２２】
本明細書で使用される場合、用語「スキンケア効果剤」は、スキンケア効果を提供し得る化合物を指す。
【００２３】
本明細書で使用される場合、用語「スキンケア効果」は、皮膚に適用された場合に、スキンケア組成物、又は前記スキンケア組成物を有効量含むスキンケア製品によって提供される効果を指し、その効果は、皮膚の保湿（皮膚の保湿を維持、回復及び／又は強化することによる皮膚の脱水からの保護）、皮膚の浸透圧に対する保護（身体に内因性の物質、例えば、水、脂質、電解質の喪失からの皮膚の保護）、環境ストレス（化学物質、微生物、アレルゲンなど）からの皮膚の保護、汚染からの皮膚の保護、紫外線照射による損傷からの皮膚の保護、青色光からの皮膚の保護、酸化ストレスからの皮膚の保護、皮膚の解毒、皮膚の老化の兆候の発現の予防若しくは遅延、皮膚のしわの出現の低減、皮膚の若返り、皮膚癒着の低減、細胞若しくは組織の寿命の促進、皮膚バリア機能の強化、又はこれらの任意の１つの組み合わせからなる群から選択される。
【００２４】
本明細書で使用される場合、スキンケア効果剤としては、アミノ酸、メチルアミン及びポリオールから選択されるオスモライトが挙げられるが、これらに限定されない。より具体的には、スキンケア効果剤としては、オスモライトのベタイン、イノシトール、プロリン、セリン、又はこれらの任意の機能的等価物若しくは誘導体が挙げられる。
【００２５】
ベタインは、テンサイのような植物中に存在し、テンサイ抽出物、及び糖の生産（例えば、テンサイ糖蜜、レスト糖蜜、ベタイン含有画分、ベタイン糖蜜、ベタイン結晶化又は蒸留残渣からの母液）又は発酵の副流から天然産物として回収することができる（米国特許第５１２７９５７号明細書、米国特許第６０９３３２６号明細書、国際公開第２００７／０８０２２８号パンフレット（２００７年７月１９日公開））。ベタインは両性化合物であり、水溶性である。
【００２６】
ベタインは、保湿及び浸透圧調節効果を有し、メチオニンコリン置換として働くことができる天然のテンサイ抽出物である（Ｗａｒｓｋｕｌａｔ  Ｕ．Ｊ  Ｉｎｖｅｓｔ  Ｄｅｒｍａｔｏｌ  １２３：５１６−５２１，２００４）。
【００２７】
一態様では、本開示において使用されるベタインは、任意の天然ベタイン、例えば、以下に限定されないが、天然グリシンベタイン（天然トリメチルグリシン）、天然ヒスチジンベタイン、天然プロリンベタイン及び天然チロシンベタインであり得る。
【００２８】
本開示の一態様では、ベタインの誘導体を使用することができる。例えば、有機酸塩、無機酸、塩基塩などを使用することができる。
【００２９】
本明細書で使用される場合、用語「イノシトール」には、１，２，３，４，５，６−ヘキサヒドロキシシクロヘキサン及びｍｙｏ−イノシトールが含まれる。イノシトールは、テンサイのような植物中に存在し、テンサイ抽出物、テンサイ糖蜜、及び糖の生産又は発酵の副流から天然産物として回収することができる（国際公開第２００７／０８０２２８号パンフレット（２００７年７月１９日公開）；米国特許第６０９３３２６号明細書）。
【００３０】
Ｍｙｏ−イノシトールは、その遊離形態（例えば、サトウキビ、ビート糖蜜、及びアーモンド殻中に見出される）又はフィチンと呼ばれるヘキサホスフェート（例えば、トウモロコシ浸出液中に見出される）として天然に存在する（Ｗａｒｓｋｕｌａｔ  Ｕ．Ｊ  Ｉｎｖｅｓｔ  Ｄｅｒｍａｔｏｌ  １２３：５１６−５２１，２００４）。イノシトール及びイノシトールヘキサホスフェートは、イネから得ることもできる。
【００３１】
本明細書で使用される場合、用語「プロリン」には、Ｌ−プロリン及びＤ−プロリンが含まれる。アミノ酸であるプロリンは、種々のストレス条件に曝露された植物において有益な役割を果たす。優れたオスモライトとして作用することに加えて、プロリンは、生物がストレスに曝露された場合に、金属キレート剤、抗酸化防御分子、及びシグナル伝達分子として作用し得る。（Ｓｈａｍｓｕｌ  Ｈａｙａｔ．，Ｐｌａｎｔ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  ＆  Ｂｅｈａｖｉｏｕｒ  ７：１１，１４５６−１４６６，Ｎｏｖ  ２０１２）。
【００３２】
本明細書で使用される場合、用語「セリン」には、Ｌ−セリン及びＤ−セリンが含まれる。
【００３３】
アミノ酸であるセリンは、中性オスモライトとして作用することができる（Ａｒａｋａｗａ  Ｔ，ｅｔ．ａｌ．Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ｊ  １９８５  Ｍａｒ，４７（３）：４１１−４）。
【００３４】
一実施形態では、スキンケア組成物は、プロリン、セリン、ベタイン及びイノシトールからなる群から選択される少なくとも４つのオスモライトの組み合わせを含み、前記組み合わせは、前記組成物の総重量に対して重量基準で、１０％〜２０％のプロリン、５％〜１０％のセリン、２０〜３０％のベタイン及び１％〜５％のイノシトールを含む。
【００３５】
一態様では、スキンケア組成物は、前記組成物の総重量に対して重量基準で、１５％のプロリン、７％のセリン、２５％のベタイン、３％のイノシトールを含む。
【００３６】
一態様では、スキンケア組成物は、オスモライトのプロリン、セリン、ベタイン、イノシトールを、それぞれ、全オスモライトに対して３０：１４：５０：６の比で含む。
【００３７】
スキンケア組成物は、防腐剤、ｐＨ調整剤、抗酸化剤及びキレート剤からなる群から選択される追加の化合物を含むことができる。
【００３８】
防腐剤としては、パラベン、安息香酸ナトリウム、ソルビン酸カリウム、フェニルエチルアルコール、ラウリルアルギニンエチル（Ｌａｕｒｙｌ  ｅｔｈｙｌ  ａｒｇｉｎａｔｅ）（ＬＡＥ）及びこれらの任意の組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。
【００３９】
ｐＨ調整剤としては、弱酸、強酸、ｐＨを調整することができる任意の化合物、例えばクエン酸（これに限定されない）、又はそれらの任意の組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。
【００４０】
一態様では、スキンケア組成物は、防腐剤の安息香酸ナトリウムを０．４ｗｔ％、及び／又はｐＨ調整剤のクエン酸を０．８ｗｔ％、さらに含む。
【００４１】
抗酸化剤としては、ＢＨＡ、ＢＨＴ及びトコフェロールが挙げられるが、これらに限定されない。
【００４２】
本明細書に記載のスキンケア組成物は、水性組成物であり得る。
スキンケア組成物は、約３〜１２のｐＨを有することができる。一態様では、スキンケア組成物は、約４．０〜５．０のｐＨを有する。本明細書に記載のスキンケア組成物はスキンケア製品に使用することができ、スキンケア製品はｐＨを、前記スキンケア製品で所望されるようにさらに調整することができる。
【００４３】
本明細書に記載のスキンケア組成物は、沈殿物又は結晶又は繊維を含まない、無色透明で均質な組成物であり得る。
【００４４】
本明細書に記載のスキンケア組成物の有効量は、製剤及びスキンケア製品において使用され得る。
【００４５】
製剤又はスキンケア製品中のスキンケア組成物の有効量は、生体異物（汚染物質）の有害な作用を低減するのに役立ち、且つ環境ストレスと闘う皮膚の自然な応答に力を与える、本明細書に記載のスキンケア組成物の量であり得る。例えば、製剤又はスキンケア製品中のスキンケア組成物の有効量は、３つの主要な防御戦略、すなわち抗酸化、解毒及び皮膚バリア機能の改善によって、皮膚を保護することに寄与することで、汚染に対する保護効果及び浸透圧に対する保護効果を提供し、且つ皮膚が自然のモイスチャーバランスを維持するのを助ける量であり得る。
【００４６】
本明細書に記載されるように、製剤又はスキンケア製品中のスキンケア組成物の有効量は、汚染により誘発される脂質過酸化の減少（本明細書に記載のＭＤＡ試験）、ＵＶにより誘発されるタンパク質カルボニル化の減少（本明細書に記載のＦＴＺマーカー試験）、及びＵＶにより誘発されるＤＮＡ損傷の減少（本明細書に記載のＴＵＮＥＬマーカー試験）によって証明されるような、都市汚染及びＵＶによって引き起こされる酸化ストレスから皮膚細胞、皮膚表面又は皮膚を保護するのを助ける量であり得る。
【００４７】
本明細書に記載されるように、製剤又はスキンケア製品中のスキンケア組成物の有効量は、酸化ストレス転写因子の誘導（本明細書に記載のアリール炭化水素受容体（ＡｈＲ）試験及び赤血球系転写因子２関連転写因子（Ｎｒｆ２）試験）、抗酸化酵素の誘導（本明細書に記載のヘム−オキシゲナーゼ１（ＨＯ−１）試験）、及び汚染により活性化されるメタロチオネイン１（ＭＴ−１Ｈ）タンパク質の減少によって示されるような重金属曝露の影響を制限することに対する貢献によって証明されるような、皮膚（皮膚細胞、皮膚表面）解毒に貢献する量であり得る。
【００４８】
本明細書に記載されるように、製剤又はスキンケア製品中のスキンケア組成物の有効量は、ケラチノサイトタイトジャンクションの強化（本明細書に記載の経上皮電気抵抗（ＴＥＥＲ）試験）、及び物質拡散の減少（本明細書に記載のカフェイン拡散試験）に寄与することによって、スキンバリア機能を改善する量であり得る。
【００４９】
一実施形態では、スキンケア組成物は、プロリン、セリン、ベタイン、及びイノシトールからなる群から選択される少なくとも４つのオスモライトの組み合わせを含むスキンケア組成物であり、前記組み合わせは前記組成物の総重量に対して重量基準で１０％〜２０％のプロリン、５％〜１０％のセリン、２０〜３０％のベタイン、及び１％〜５％のイノシトールを含み、製剤又はスキンケア製品中の前記組成物の有効量は、汚染からの保護（限定はされないが、夜間汚染からの保護など）、浸透圧に対する保護、又はこれらの任意の１つの組み合わせからなる群から選択されるスキンケア効果を提供する。
【００５０】
汚染は、多くの場合、例えば、空気からの微細なダストの沈降のために、しばしば、夕方の早い時間から深夜の間にピークがある（本明細書では、夜間汚染と呼ぶ）。一態様では、本明細書に記載のスキンケア組成物の有効量は、皮膚バリアを強化し、酸化ストレスから保護し、皮膚を無毒化することによって、夜間汚染からの保護などの汚染からの保護を提供するのに役立つ、本明細書に記載のスキンケア組成物の量であり得る。
【００５１】
一実施形態では、スキンケア組成物は、プロリン、セリン、ベタイン、及びイノシトールからなる群から選択される少なくとも４つのオスモライトの組み合わせを含むスキンケア組成物であり、前記組み合わせは、前記組成物の総重量に対して重量基準で１０％〜２０％のプロリン、５％〜１０％のセリン、２０〜３０％のベタイン、及び１％〜５％のイノシトールを含み、製剤又はスキンケア製品中の前記組成物の有効量は、酸化ストレスの減少、解毒の増大、及びスキンバリア機能の増大、又はこれらの任意の１つの組み合わせからなる群から選択されるスキンケア効果を提供する。
【００５２】
一実施形態では、スキンケア組成物は、プロリン、セリン、ベタイン及びイノシトールからなる群から選択される少なくとも４つのオスモライトの組み合わせを含むスキンケア組成物であり、前記組み合わせは、前記組成物の総重量に対して重量基準で１０％〜２０％のプロリン、５％〜１０％のセリン、２０〜３０％のベタイン及び１％〜５％のイノシトールを含み、製剤又はスキンケア製品中の前記スキンケア組成物の有効量は、脂質過酸化の低減、ＵＶにより誘発されるタンパク質カルボニル化の低減、ＵＶにより誘発されるＤＮＡ損傷の低減、ＵＶ曝露下のＲＯＳの低減、酸化ストレス転写因子の増加、抗酸化酵素の増加、ＭＴ−１Ｈの活性化誘導の低減、ケラチノサイトタイトジャンクションの強化、カフェイン拡散の減少、又はこれらの任意の１つの組み合わせからなる群から選択されるスキンケア効果を提供する。
【００５３】
一実施形態では、スキンケア組成物は、プロリン、セリン、ベタイン及びイノシトールからなる群から選択される少なくとも４つのオスモライトの組み合わせを含むスキンケア組成物であり、前記組み合わせは、前記組成物の総重量に対して重量基準で１０％〜２０％のプロリン、５％〜１０％のセリン、２０〜３０％のベタイン及び１％〜５％のイノシトールを含み、前記スキンケア組成物の有効量は前記製剤又はスキンケア製品の総重量に対して重量基準で少なくとも約０．１％〜５％である。
【００５４】
一態様では、製剤又はスキンケア製品中のスキンケア組成物の有効量は、前記製剤又はスキンケア製品の総重量に対して重量基準で少なくとも約０．３％〜５．０％であり得る。この範囲は、その両端、及びその範囲内の全ての整数及び分数を含むものとする。
【００５５】
一態様では、本明細書に記載のスキンケア組成物の有効量は、前記スキンケア製品の総重量に対して重量基準で少なくとも約０．１％〜１０％であり得る。製剤及びスキンケア製品中のスキンケア組成物の有効量としては、前記製剤又はスキンケア製品の総重量に対して重量基準で、少なくとも０．１％、０．２％、０．３％、０．４％、０．５％、０．６％、０．７％、０．８％、０．９％、１．０％、１．１％、１．２％、１．３％、１．３％、１．４％、１．５％、１．６％、１．７％、１．８％、１．９％、２．０％、２．１％、２．２％、２．３％、２．４％、２．５％、２．６％、２．７％、２．８％、２．９％、３．０％、３．１％、３．２％、３．３％、３．４％、３．５％、３．６％、３．７％、３．８％、３．９％、４．０％、４．１％、４．２％、４．３％、４．４％、４．５％、４．６％、４．７％、４．８％、４．９％、５．０％、５．１％、５．２％、５．３％、５．４％、５．５％、５．６％、５．７％、５．８％、５．９％、６．０％、６．１％、６．２％、６．３％、６．４％、６．５％、６．６％、６．７％、６．８％、６．９％、７．０％、７．１％、７．２％、７．３％、７．４％、７．５％、７．６％、７．７％、７．８％、７．９％、８．０％、８．１％、８．２％、８．３％、８．４％、８．５％、８．６％、８．７％、８．８％、８．９％、９．０％、９．１％、９．２％、９．３％、９．４％、９．５％、９．６％、９．７％、９．８％、９．９％、１０％までのスキンケア組成物が挙げられる。
【００５６】
スキンケア製品
本明細書に記載のスキンケア組成物、又は前記スキンケア組成物の任意の有効量は、スキンケア製品に使用することができる。
【００５７】
本明細書で使用される場合、「スキンケア製品」は、本明細書に記載のスキンケア組成物の有効量を含む製品、例えば、以下に限定されないが、水溶液、エマルション、セラム、ゼリー、マスク、パッチ、フェイスマスク、ピールオフマスク、ローション、局所保湿剤、クリーム、ペースタ、バルム、軟膏、ポマード、ゲル、リキッド、スプレー、フォーム、キット、又はこれらの任意の１つの組み合わせを指す。
【００５８】
スキンケア製品はまた、例えば、メイクアップ、口紅、マスカラ、ファンデーション、ブラッシュ、アイライナー、リップグロス、マクロエマルション、他の化粧品、サンスクリーン剤、日焼け止めクリーム、バスゲル、シャワーゲル、ボディウォッシュ、フェースウォッシュ、スキンコンディショナー、コールドクリーム、保湿剤、ボディスプレー、石けん、ボディスクラブの形態であり得る。
【００５９】
スキンケア製品としては、溶媒としての水と、以下に限定されないが、活性剤、香料、着色剤、防腐剤、ｐＨ調整剤、キレート剤、又はこれらの任意の１つの組み合わせなどの水溶性添加剤（溶質）とを含む液体ローション（真溶液）が挙げられる。
【００６０】
スキンケア製品としては、エマルションなどの分散体（以下に限定されないが、以下のものなど：液体中液体［油中水型Ｗ／Ｏ、Ｏ／Ｗ、Ｗ／Ｏ／Ｗ］、懸濁液［固体／液体型、又は液体／固体型］、エアロゾル［液体／気体型、又は固体／気体型］、フォーム／ムース［気体／液体型、又は気体／エマルション型、又は気体／固体型］）が挙げられる。水中油型［Ｏ／Ｗ］エマルションの例としては、水相、乳化剤、脂肪相及び少なくとも１つの添加剤の組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。水相は、水、湿潤剤、及び安定剤［以下に限定されないが、合成ポリマー、カルボマー、天然ポリマー、キサンタンガム、アカシアガム、カラギーナン、ジェラン、又はこれらの任意の１つの組み合わせなど］を含むことができる。乳化剤としては、アニオン性乳化剤、カチオン性乳化剤、非イオン性乳化剤、両性乳化剤、シリコーン乳化剤、自己乳化剤（ａｕｔｏｅｍｕｌｓｉｆｙｉｎｇ  ａｇｅｎｔ）が挙げられるが、これらに限定されない。脂肪相（親油性成分）としては、ワックス、バター、脂肪酸エステル、トリグリセリド、植物油、鉱油（パラフィン）、シリコーン、及び増粘剤／油ゼリー化剤が挙げられるが、これらに限定されない。添加剤としては、防腐剤、香料（ほとんどの場合、親油性）、着色剤、抗酸化剤、キレート剤、活性剤、ｐＨ調整剤（クエン酸、乳酸、ＡＨＡ）、中和剤／ＮａＯＨなどの強塩基性剤、トリメチルアミン（アクリルポリマーをゼリー化するため）及び粉末が挙げられるが、これらに限定されない。
【００６１】
スキンケア製品としては、水相（水、湿潤剤、活性剤を含む）、ゼリー化剤（以下に限定されないが、合成ポリマー、天然ポリマー、キサンタンガム、アカシアガム、カラギーナン、ジェランなど）及び添加剤（以下に限定されないが、芳香剤、高ＨＬＢ界面活性剤、色、活性剤、防腐剤系、ｐＨ調整剤、中和剤、粉末など）を含む水性ゲルが挙げられる。
【００６２】
スキンケア製品としては、水相（水、湿潤剤）、界面活性剤、添加剤（以下に限定されないが、香料、高ＨＬＢ界面活性剤、着色剤、活性剤、防腐剤系、ｐＨ調整剤、中和剤、粉末など）、及び任意選択によるゼリー化剤（以下に限定されないが、合成ポリマー、天然ポリマー、キサンタンガム、アカシアガム、カラギーナン、ジェランなど）を含むクレンジング／界面活性剤系（以下に限定されないが、シャンプー、シャワーゲル、ミセル水など）が挙げられる。
【００６３】
本明細書に記載のように、本明細書に記載のプロリン、セリン、ベタイン及びイノシトールのオスモライトを含むスキンケア組成物の有効量を含むスキンケア製品又は製剤は、酸化ストレスの減少、解毒の増加、及び皮膚バリア機能の増大、又はこれらの任意の１つの組み合わせからなる群から選択されるスキンケア効果を提供する。
【００６４】
本明細書に記載のように、本明細書に記載のプロリン、セリン、ベタイン及びイノシトールのオスモライトを含むスキンケア組成物の有効量を含むスキンケア製品又は製剤は、脂質過酸化の低減、ＵＶにより誘発されるタンパク質カルボニル化の低減、ＵＶにより誘発されるＤＮＡ損傷の低減、ＵＶ曝露下でのＲＯＳの低減、酸化ストレス転写因子の増加、抗酸化酵素の増加、ＭＴ−１Ｈの活性化誘導の低減、ケラチノサイトタイトジャンクションの強化、カフェイン拡散の減少、又はこれらの任意の１つの組み合わせからなる群から選択されるスキンケア効果を提供する。上に列挙したスキンケア製品又は製剤中のスキンケア組成物の有効量は、前記製剤又はスキンケア製品の総重量に対して重量基準で少なくとも約０．１％〜５％であり得る。
【００６５】
一実施形態では、スキンケア製品は、プロリン、セリン、ベタイン、及びイノシトールからなる群から選択される少なくとも４つのオスモライトの組み合わせを含むスキンケア組成物の有効量を含むスキンケア製品であり、前記組み合わせは、前記組成物の総重量に対して重量基準で１０％〜２０％のプロリン、５％〜１０％のセリン、２０〜３０％のベタイン、及び１％〜５％のイノシトールを含み、前記スキンケア組成物の前記有効量は、酸化ストレスの減少、解毒の増大、及びスキンバリア機能の増大、又はこれらの任意の１つの組み合わせからなる群から選択されるスキンケア効果を提供する。前記スキンケア製品中のスキンケア組成物の有効量は、前記製剤又はスキンケア製品の総重量に対して重量基準で、少なくとも約０．１％〜５％、少なくとも約０．１％〜６％、少なくとも約０．１％〜７％、少なくとも約０．１％〜８％、少なくとも約０．１％〜９％、少なくとも約０．１％〜１０％であり得る。一態様では、前記スキンケア製品中のスキンケア組成物の有効量は、前記製剤又はスキンケア製品の総重量に対して重量基準で、少なくとも約０．１％、０．２％、０．３％、０．４％、０．５％、０．６％、０．７％、０．８％、０．９％、１．０％、１．１％、１．２％、１．３％、１．４％、１．５％、１．６％、１．７％、１．８％、１．９％、２．０％、２．１％、２．２％、２．３％、２．４％、２．５％、２．６％、２．７％、２．８％、２．９％、３．０％、３．１％、３．２％、３．３％、３．４％、３．５％、３．６％、３．７％、３．８％、３．９％、４．０％、４．１％、４．２％、４．３％、４．４％、４．５％、４．６％、４．７％、４．８％、４．９％、５．０％、５．１％、５．２％、５．３％、５．４％、５．５％、５．６％、５．７％、５．８％、５．９％、６．０％、６．１％、６．２％、６．３％、６．４％、６．５％、６．６％、６．７％、６．８％、６．９％、７．０％、７．１％、７．２％、７．３％、７．４％、７．５％、７．６％、７．７％、７．８％、７．９％、８．０％、８．１％、８．２％、８．３％、８．４％、８．５％、８．６％、８．７％、８．８％、８．９％、９．０％、９．１％、９．２％、９．３％、９．４％、９．５％、９．６％、９．７％、９．８％、９．９％、１０％までであり得る。
【００６６】
一実施形態では、スキンケア製品は、プロリン、セリン、ベタイン及びイノシトールからなる群から選択される少なくとも４つのオスモライトの組み合わせを含むスキンケア組成物の有効量を含むスキンケア製品であり、前記組み合わせは、前記組成物の総重量に対して重量基準で１０％〜２０％のプロリン、５％〜１０％のセリン、２０〜３０％のベタイン及び１％〜５％のイノシトールを含み、前記スキンケア組成物の前記有効量は、脂質過酸化の低減、ＵＶにより誘発されるタンパク質カルボニル化の低減、ＵＶにより誘発されるＤＮＡ損傷の減少、ＵＶ曝露下のＲＯＳの低減、酸化ストレス転写因子の増加、抗酸化酵素の増加、ＭＴ−１Ｈの活性化誘導の低減、ケラチノサイトタイトジャンクションの強化、カフェイン拡散の減少、又はこれらの任意の１つの組み合わせからなる群から選択されるスキンケア効果を提供する。前記スキンケア製品中のスキンケア組成物の有効量は、前記製剤又はスキンケア製品の総重量に対して重量基準で少なくとも約０．１％〜５％であり得る。
【００６７】
本明細書に記載のように、プロリン、セリン、ベタイン及びイノシトールのオスモライトがスキンケア組成物又はスキンケア製品において組み合わせると、驚くべきことに、また予想しなかったことに、増加したスキンケア効果が得られることがわかった。
【００６８】
一態様では、増加したスキンケア効果は、増加した浸透圧保護によって証明することができ、それによって、皮膚の保湿を回復、維持、又は強化することができる。
【００６９】
本明細書で使用される場合、用語「増加したスキンケア効果」には、スキンケア組成物（又は有効量の前記組成物を含むスキンケア製品）を皮膚に適用することから得られる効果が含まれ、前記効果は、スキンケア組成物（スキンケア製品）と比較して等量の全オスモライトを含む参照組成物（参照スキンケア製品）のスキンケア効果よりも大きい。
【００７０】
例えば、ベタインＷｍｇ／ｍｌ、イノシトールＸｍｇ／ｍｌ、プロリンＹｍｇ／ｍｌ及びセリンＺｍｇ／ｍｌを含むスキンケア組成物（又はスキンケア製品）のスキンケア効果（ここで、オスモライトの総濃度はＴ（Ｔ＝Ｗ＋Ｘ＋Ｙ＋Ｚｍｇ／ｍｌ）である）が、１つのオスモライトのみ（ベタイン、イノシトール、プロリン又はセリンから選択される）を総濃度Ｔｍｇ／ｍｌで含む参照組成物（又は参照製品）から得られるスキンケア効果よりも大きい場合、増加したスキンケア効果が観察される。
【００７１】
例えば、本明細書に記載されるように、一態様では、スキンケア製品は、Ｌ−プロリン３ｍｇ／ｍｌ、Ｌ−セリン１．４ｍｇ／ｍｌ、セリン５ｍｇ／ｍｌ及びイノシトール０．６ｍｇ／ｍｌで、オスモライト合計が１０ｍｇ／ｍｌとなる量のオスモライトの組み合わせを含み得る。上記スキンケア製品から得られるスキンケア効果は、上記スキンケア組成物のオスモライトの総濃度に等しい総濃度で１つのオスモライト（ベタイン、イノシトール、プロリン又はセリンから選択される）のみ（例えば、プロリン１０ｍｇ／ｍｌ）を含む参照製品から得られるスキンケア効果と比較することができる。スキンケア製品から得られるスキンケア効果が、参照製品から得られるスキンケア効果よりも大きい場合、スキンケア製品は、増加したスキンケア効果を提供する。
【００７２】
本明細書で使用される場合、用語「増加したスキンケア効果」にはまた、少なくとも４つのオスモライトの組み合わせを含むスキンケア組成物（又は、前記スキンケア組成物の有効量を含むスキンケア製品）を皮膚に適用することから得られる効果が含まれ、前記効果は、前記組み合わせの個々の各成分から得られる全ての効果の合計よりも大きく、それによって前記増加したスキンケア効果を提供する。そのような増加したスキンケア効果は、ベタインＷｍｇ／ｍｌ、イノシトールＸｍｇ／ｍｌ、プロリンＹｍｇ／ｍｌ及びセリンＺｍｇ／ｍｌを含むスキンケア組成物（又はスキンケア製品）のスキンケア効果（ここで、オスモライトの総濃度はＴ（Ｔ＝Ｗ＋Ｘ＋Ｙ＋Ｚｍｇ／ｍｌ）である）が、［唯一のオスモライトとしてベタインＷｍｇ／ｍｌを含む参照組成物（参照製品）のスキンケア効果＋イノシトールＸｍｇ／ｍｌを含む参照組成物（参照製品）のスキンケア効果、唯一のオスモライトとしてプロリンＹｍｇ／ｍｌを含む参照組成物（参照製品）のスキンケア効果＋唯一のオスモライトとしてセリンＺｍｇ／ｍｌを含む参照組成物（参照製品）のスキンケア効果］の合計よりも大きく、それによって前記増加したスキンケア効果を提供する場合に観察される。
【００７３】
本明細書で使用される場合、用語「増加したスキンケア効果」にはまた、少なくとも４つのオスモライトの組み合わせを含むスキンケア組成物（又は、前記スキンケア組成物の有効量を含むスキンケア製品）を皮膚に適用することから得られる効果が含まれ、前記効果は、前記組み合わせの個々の各成分から得られる全ての効果の合計よりも大きく、それによって前記増加したスキンケア効果を提供する。そのような増加したスキンケア効果は、（重量％基準で）ベタインｗ％、イノシトールｘ％、プロリンｙ％及びセリンｚ％を含むスキンケア組成物（又はスキンケア製品）のスキンケア効果が、［唯一のオスモライトとしてベタインｗ％を含む参照組成物（参照製品）のスキンケア効果＋イノシトールｘ％を含む参照組成物（参照製品）のスキンケア効果、唯一のオスモライトとしてプロリンｙ％を含む参照組成物（参照製品）のスキンケア効果＋唯一のオスモライトとしてセリンｚ％を含む参照組成物（参照製品）のスキンケア効果］の合計よりも大きく、それによって前記増加したスキンケア効果を提供する場合に観察される。
【００７４】
本明細書に記載されるように、プロリン、セリン、ベタイン及びイノシトールのオスモライトを、本明細書に記載のスキンケア組成物、又は前記スキンケア組成物の有効量を含むスキンケア製品において組み合わせると、驚くべきことに、また予想しなかったことに、高浸透圧ストレスに曝露された細胞の増加した浸透圧保護が得られることがわかった。
【００７５】
本明細書に記載されるように、プロリン、セリン、ベタイン及びイノシトールの組み合わせを含むスキンケア製品は、汚染により誘発される脂質過酸化（ＭＤＡマーカー）の低減、ＵＶにより誘発されるカルボニル化タンパク質（ＦＴＺマーカー）の低減、及びＵＶにより誘発されるＤＮＡの損傷（ＴＵＮＥＬマーカー）の低減からも明らかなように、酸化ストレスから皮膚を保護するのを助けることができた。
【００７６】
さらに、本明細書に記載されるように、プロリン、セリン、ベタイン及びイノシトールの組み合わせを含むスキンケア組成物及びスキンケア製品は、酸化ストレス転写因子ＡｈＲ（アリール炭化水素受容体）及びＮｒｆ２（赤血球系転写因子２関連転写因子）並びに抗酸化酵素ＨＯ−１（ヘム−オキシゲナーゼ１）の誘導によって、また、汚染によって誘導される金属調節タンパク質ＭＴ−１Ｈ（メタロチオネイン１）の減少からも明らかなように、皮膚解毒に寄与した。
【００７７】
さらに、本明細書に記載されるように、プロリン、セリン、ベタイン及びイノシトールの組み合わせを含むスキンケア組成物及びスキンケア製品は、ケラチノサイトタイトジャンクションの強化（ＴＥＥＲ試験）及び物質拡散の減少（カフェイン拡散試験）からも明らかなように、皮膚のバリア機能を改善することができた。
【００７８】
本明細書に記載されるように、プロリン、セリン、ベタイン及びイノシトールの組み合わせを含むスキンケア組成物及びスキンケア製品は、汚染に対する皮膚の保護を提供することができた。
【００７９】
本明細書に記載のスキンケア製品は、既知の又はその他のスキンケアで使用するのに効果的な１つ以上の皮膚科学的又は美容的に許容される成分をさらに含んでもよい。ただし、任意成分が本明細書に記載の必須成分と物理的及び化学的に適合性があるか、さもなければ製品の安定性、審美性、又は性能を過度に損なわないことを条件とする。このような任意成分の非限定的な例は、Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｏｓｍｅｔｉｃ  Ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔ  Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ，Ｎｉｎｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，２００２，及びＣＴＦＡ  Ｃｏｓｍｅｔｉｃ  Ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ，Ｔｅｎｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，２００４に開示されている。
【００８０】
一態様では、皮膚科学的又は美容的に許容される成分は、約１０ｗｔ％〜約９９．９ｗｔ％、或いは約５０ｗｔ％〜約９５ｗｔ％、或いは約７５ｗｔ％〜約９５ｗｔ％の皮膚科学的に許容される担体を含む皮膚科学的に許容される担体である。組成物との使用に好適な担体としては、例えば、ムース、トニック、ゲル、皮膚保湿剤、及びローションの配合物で使用されるものを挙げることができる。担体は、水；有機油；シリコーン、例えば、揮発性シリコーン、アミノ又は非アミノのシリコーンガム又は油、及びこれらの混合物；鉱油；植物油、例えば、オリーブ油、ヒマシ油、菜種油、ヤシ油、小麦麦芽油、甘扁桃油、アボカード油、マカダミア油、アプリコット油、ベニバナ油、ククイ油、亜麻仁油、タマヌ油、レモン油、及びこれらの混合物；ワックス；並びに有機化合物、例えば、Ｃ２〜Ｃ１０アルカン、アセトン、メチルエチルケトン、揮発性有機Ｃ１〜Ｃ１２アルコール、Ｃ１〜Ｃ２０酸及びＣ１〜Ｃ８アルコールのエステル、例えば、酢酸メチル、酢酸ブチル、酢酸エチル、及びミリスチン酸イソプロピル、ジメトキシエタン、ジエトキシエタン、Ｃ１０〜Ｃ３０脂肪アルコール、例えば、ラウリルアルコール、セチルアルコール、ステアリルアルコール、及びベヘニルアルコール；Ｃ１０〜Ｃ３０脂肪酸、例えば、ラウリン酸及びステアリン酸；Ｃ１０〜Ｃ３０脂肪アミド、例えば、ラウリン酸ジエタノールアミド；Ｃ１０〜Ｃ３０脂肪アルキルエステル、例えば、Ｃ１０〜Ｃ３０脂肪アルキルベンゾエート；ヒドロキシプロピルセルロース；並びにこれらの混合物を含み得る。一態様では、担体は、水、脂肪アルコール、揮発性有機アルコール、及びこれらの混合物を含む。当業者であれば他の担体を配合することができる。
【００８１】
本明細書に記載のスキンケア製品はさらに、組成物に所望の粘度を付与する助けとなるゲル化剤を約０．１％〜約１０％、或いは約０．２％〜約５．０％含み得る。好適な任意選択のゲル化剤の非限定的な例としては、架橋カルボン酸ポリマー；非中和型架橋カルボン酸ポリマー；非中和型変性架橋カルボン酸ポリマー；架橋エチレン／無水マレイン酸コポリマー；非中和型架橋エチレン／無水マレイン酸コポリマー（例えば、Ｍｏｎｓａｎｔｏから市販されているＥＭＡ８１）；非中和型架橋アルキルエーテル／アクリレートコポリマー（例えば、Ａｌｌｉｅｄ  Ｃｏｌｌｏｉｄｓから市販されているＳＡＬＣＡＲＥ（商標）ＳＣ９０）；ポリアクリル酸ナトリウム、鉱油、及びＰＥＧ−１  トリデセス−６の非中和型架橋コポリマー（例えば、Ａｌｌｉｅｄ  Ｃｏｌｌｏｉｄｓから市販されているＳＡＬＣＡＲＥ（商標）ＳＣ９１）；メチルビニルエーテル及び無水マレイン酸の非中和型架橋コポリマー（例えば、Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｓｐｅｃｉａｌｔｙ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓから市販されているＳＴＡＢＩＬＥＺＥ（商標）ＱＭ−ＰＶＭ／ＭＡコポリマー）；疎水変性ノニオン性セルロースポリマー；疎水変性エトキシレートウレタンポリマー（例えば、Ｕｎｉｏｎ  Ｃａｒｂｉｄｅから市販されるアルカリ膨潤性ポリマーのＵＣＡＲＥ（商標）Ｐｏｌｙｐｈｏｂｅ  Ｓｅｒｉｅｓ）；並びにこれらの組み合わせが挙げられる。これに関連して、用語「非中和型」は、任意選択のポリマー及びコポリマーゲル化剤材料が非中和型酸モノマーを含有していることを意味する。
【００８２】
美容的に許容される媒体は、脂肪物質を、製品の総重量に対して一般に約１０〜約９０重量％の割合で含有することができ、ここで、脂肪相は、少なくとも１つの液体、固体又は半固体の脂肪物質を含有する。脂肪物質としては、油、ワックス、ガム、及びいわゆるペースト状脂肪物質が挙げられるが、これに限定されるものではない。或いは、製品は、油中水型又は水中油型エマルションなどの安定した分散液の形態であってもよい。さらに、スキンケア製品は、１つ以上の従来の化粧品又は皮膚科用添加剤又は補助剤、例えば、以下に限定されないが、抗酸化剤、保存剤、充填剤、界面活性剤、ＵＶＡ及び／又はＵＶＢサンスクリーン剤、香料、増粘剤、湿潤剤及びアニオン性、ノニオン性又は両性ポリマー、並びに染料又は顔料（着色剤）を含有し得る。
【００８３】
皮膚科学的に許容される担体は、少なくとも１つの乳化剤、少なくとも１つの界面活性剤、又はそれらの任意の組み合わせを含有する保湿剤製剤であってもよい。
【００８４】
スキンケア製品はさらに、サンスクリーン剤、保湿剤、湿潤剤、皮膚に有益な物質、界面活性剤などの付着剤、閉塞剤、水分バリア、潤滑剤、皮膚軟化剤、抗老化剤、帯電防止剤、研磨剤、抗菌剤、コンディショナー、剥離剤、香料、粘性化剤、塩、脂質、リン脂質、ビタミン、気泡安定剤、ｐＨ調整剤、防腐剤、懸濁化剤、シリコーンオイル、シリコーン誘導体、精油、油、脂肪、脂肪酸、脂肪酸エステル、脂肪アルコール、ワックス、ポリオール、炭化水素、及びこれらの混合物を含む、スキンケア活性成分材料を含み得る。
【００８５】
スキンケア製品に含まれ得る他の成分としては、限定はされないが、皮膚疾患の治療又は予防するための、美容効果を提供するための、又は皮膚に保湿効果を提供するための少なくとも１つの活性成分、例えば、酸化亜鉛、ワセリン、白色ワセリン、鉱油、タラ肝油、ラノリン、ジメチコン、硬質脂肪、ビタミンＡ、アラントイン、カラミン、カオリン、グリセリン、又はコロイド状オートミール、及びこれらの組み合わせ、１つ以上の天然保湿因子（例えば、セラミド、ヒアルロン酸、グリセリン、スクワラン、アミノ酸、コレステロール、脂肪酸、トリグリセリド、リン脂質、スフィンゴ糖脂質、尿素、リノール酸、グリコサミノグリカン、ムコ多糖、乳酸ナトリウム、又はピロリドンカルボン酸ナトリウムなど）、グリセリド、杏仁油、キャノーラ油、スクワラン、スクワレン、ココナッツ油、トウモロコシ油、ホホバ油、ホホバワックス、レシチン、オリーブ油、バニバナ油、ゴマ油、シアバター、大豆油、甘扁桃油、ヒマワリ油、ティーツリー油、シアバター、ヤシ油、コレステロール、コレステロールエステル、ワックスエステル、脂肪酸、及びオレンジ油が挙げられる。
【００８６】
一実施形態では、スキンケア製品は、有効量の本明細書に記載のスキンケア組成物（プロリン、セリン、ベタイン、及びイノシトールからなる群から選択される少なくとも４つのオスモライトの組み合わせを含み、前記組み合わせは、前記組成物の総重量に対して重量基準で１０％〜２０％のプロリン、５％〜１０％のセリン、２０〜３０％のベタイン、及び１％〜５％のイノシトールを含む有効量のスキンケア組成物など）と、１つ以上の皮膚科学的又は美容的に許容される成分とを含むスキンケア製品である。
【００８７】
一実施形態では、スキンケア製品は、有効量の本明細書に記載のスキンケア組成物（プロリン、セリン、ベタイン、及びイノシトールからなる群から選択される少なくとも４つのオスモライトを含む有効量のスキンケア組成物であって、前記組み合わせは、前記組成物の総重量に対して重量基準で１０％〜２０％のプロリン、５％〜１０％のセリン、２０〜３０％のベタイン、及び１％〜５％のイノシトールを含む、有効量のスキンケア組成物など）と、１つ以上の皮膚科学的又は美容的に許容される成分とを含むスキンケア製品であり、前記有効量のスキンケア組成物は、前記スキンケア製品の総重量に対して重量基準で少なくとも約１％、２％、３％、４％、最大で５％である。
【００８８】
一実施形態では、スキンケア製品は、３０：１４：５０：６の比のオスモライトのプロリン、セリン、ベタイン及びイノシトールの組み合わせを含むスキンケア製品である。
【００８９】
一実施形態では、スキンケア製品は、有効量の本明細書に記載のスキンケア組成物と、１つ以上の皮膚科学的又は美容的に許容される成分とを含むスキンケア製品であり、１つ以上の皮膚科学的に許容される成分は、前記スキンケア製品の総重量に対して重量基準で約１０％〜約９９％を含む皮膚科学的に許容される担体である。
【００９０】
一実施形態では、スキンケア製品は、前記スキンケア製品の総重量に対して重量基準で少なくとも１％、２％、３％、４％、最大で５％の本明細書に記載のスキンケア組成物を含むローション、セラム、ゼリー、クリーム、ゲル、エマルション、マスク（以下に限定されないが、ゲルマスク及びピールオフマスクなど）、パッチ、又はスティックである。
【００９１】
一実施形態では、スキンケア製品は、スキンケア製品を皮膚に適用した場合、増加したスキンケア効果を提供するような濃度で、少なくともベタイン、イノシトール、プロリン及びセリンの組み合わせを含む製品である。
【００９２】
一態様では、スキンケア製品はさらに、最大で２５ｗｔ％の制汗剤、抗菌剤、防腐剤、香料、又はこれらの任意の組み合わせを含む。
【００９３】
液体スキンケア製品は、通常、最大で約７０重量％の水と０重量％〜約３０重量％の水溶性成分とを含有する、水性であり得る。
【００９４】
スキンケア製品に一般的に使用されている、任意の数の皮膚科学的に許容される材料もまた、スキンコンディショニング剤及び皮膚着色剤などの本スキンケア製品に組み入れることができる。
【００９５】
本明細書で定義されるスキンコンディショニング剤には、皮膚を引き締める収斂剤；死んだ皮膚細胞を除去するスクラブ剤；滑らかで柔軟な外観を維持するのを助ける皮膚軟化剤；皮膚の表層の水分含量を増加させる湿潤剤；皮膚表面からの水の蒸発を遅らせる閉塞剤；及び乾燥又は損傷した皮膚の外観を増強するか、又は剥離を減少させ、柔軟性を回復させる種々の化合物が含まれるが、これらに限定されない。スキンコンディショニング剤は当該技術分野においてよく知られており（例えば、Ｇｒｅｅｎ  ｅｔ  ａｌ．（国際公開第０１／０７００９号パンフレット）を参照）、様々な供給元から市販されている。スキンコンディショニング剤の好適な例としては、ラクトビオン酸、グルコン酸、アルファ−ヒドロキシ酸、ベータ−ヒドロキシ酸、ポリオール、ヒアルロン酸、Ｄ，Ｌ−パンテノール、ポリサリチレート、ビタミンＡパルミテート、ビタミンＥアセテート、グリセリン、ソルビトール、シリコーン、シリコーン誘導体、ラノリン、天然油、キシリトール、フコース、ラムノース、及びトリグリセリドエステルが挙げられるが、これらに限定されない。スキンコンディショニング剤としては、ポリサリチラート、プロピレングリコール（ＣＡＳ番号５７−５５−６、Ｄｏｗ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ、Ｍｉｄｌａｎｄ、ＭＩ）、グリセリン（ＣＡＳ番号５６−８１−５、Ｐｒｏｃｔｏｒ  ＆  Ｇａｍｂｌｅ  Ｃｏ．、Ｃｉｎｃｉｎｎａｔｉ、ＯＨ）、グリコール酸（ＣＡＳ番号７９−１４−１、ＤｕＰｏｎｔ  Ｃｏ．、Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ、ＤＥ）、乳酸（ＣＡＳ番号５０−２１−５、Ａｌｆａ  Ａｅｓａｒ、Ｗａｒｄ  Ｈｉｌｌ、ＭＡ）、リンゴ酸（ＣＡＳ番号６１７−４８−１、Ａｌｆａ  Ａｅｓａｒ）、クエン酸（ＣＡＳ番号７７−９２−９、Ａｌｆａ  Ａｅｓａｒ）、酒石酸（ＣＡＳ番号１３３−３７−９、Ａｌｆａ  Ａｅｓａｒ）、グルカル酸（ＣＡＳ番号８７−７３−０）、ガラクタル酸（ＣＡＳ番号５２６−９９−８）、３−ヒドロキシ吉草酸（ＣＡＳ番号１０２３７−７７−１）、サリチル酸（ＣＡＳ番号６９−７２−７、Ａｌｆａ  Ａｅｓａｒ）、及び１，３プロパンジオール（ＣＡＳ番号５０４−６３−２、ＤｕＰｏｎｔ  Ｃｏ．、Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ、ＤＥ）が挙げられる。ポリサリチラートは、Ｗｈｉｔｅらによって米国特許第４，８５５，４８３号明細書に記載されている方法によって調製することができ、この文献は参照により本明細書に組み込まれる。グルカル酸は、Ｍｅｒｂｏｕｈらによって記載されている方法Ｃａｒｂｏｈｙｄｒ．Ｒｅｓ．３３６：７５−７８（２００１））を使用して合成され得る。３−ヒドロキシ吉草酸は、Ｂｒａｍｕｃｃｉによって国際公開第０２／０１２５３０号パンフレットに記載されているように調製することができる。
【００９６】
皮膚着色剤としては、以下の染料：Ｄ＆Ｃ  Ｒｅｄ  Ｎｏ．２１などのエオシン誘導体、Ｄ＆Ｃ  Ｒｅｄ  Ｎｏ．２７、Ｄ＆Ｃ  Ｒｅｄ  Ｎｏ．２１及びＤ＆Ｃ  Ｏｒａｎｇｅ  Ｎｏ．１０と併用するＤ＆Ｃ  Ｒｅｄ  Ｏｒａｎｇｅ  Ｎｏ．５などのハロゲン化フルオレセイン誘導体、並びに顔料：二酸化チタン、二酸化チタンナノ粒子、酸化亜鉛、Ｄ＆Ｃ  Ｒｅｄ  Ｎｏ．３６及びＤ＆Ｃ  Ｏｒａｎｇｅ  Ｎｏ．１７、Ｄ＆Ｃ  Ｒｅｄ  Ｎｏ．７、１１、３１及び３４のカルシウムレーキ、Ｄ＆Ｃ  Ｒｅｄ  Ｎｏ．１２のバリウムレーキ、Ｄ＆Ｃ  Ｒｅｄ  Ｎｏ．１３のストロンチウムレーキ、ＦＤ＆Ｃ  Ｙｅｌｌｏｗ  Ｎｏ．５のアルミニウムレーキ、ＦＤ＆Ｃ  Ｙｅｌｌｏｗ  Ｎｏ．６のアルミニウムレーキ、Ｄ＆Ｃ  Ｒｅｄ  Ｎｏ．２７のアルミニウムレーキ、Ｄ＆Ｃ  Ｒｅｄ  Ｎｏ．２１のアルミニウムレーキ、ＦＤ＆Ｃ  Ｂｌｕｅ  Ｎｏ．１のアルミニウムレーキ、酸化鉄、マンガンバイオレット、酸化クロム、群青、カーボンブラックを挙げることができる。着色剤はまた、日光への曝露なしに皮膚に日焼けした外見を作り出す、ジヒドロキシアセトンなどのサンレス・タンニング・ローション剤であってもよい。
【００９７】
スキンケア製品は、以下に限定されないが、着色剤／染料、香料、活性剤、防腐剤、ｐＨ調整剤、キレート剤、及び抗酸化剤などのスキンケア添加剤を含むことができる。
【００９８】
一実施形態では、スキンケア製品は、有効量の本明細書に記載のスキンケア組成物（プロリン、セリン、ベタイン、及びイノシトールからなる群から選択される少なくとも４つのオスモライトを含む有効量のスキンケア組成物であって、前記組み合わせは、前記組成物の総重量に対して重量基準で１０％〜２０％のプロリン、５％〜１０％のセリン、２０〜３０％のベタイン、及び１％〜５％のイノシトールを含む、有効量のスキンケア組成物など）と、１つ以上の表１８に列挙した成分とを含むスキンケアローションであり、前記有効量のスキンケア組成物は、前記スキンケア製品の総重量に対して重量基準で少なくとも約１％、２％、３％、４％、５％、最大で１０％である。
【００９９】
一実施形態では、スキンケア製品は、有効量の本明細書に記載のスキンケア組成物（プロリン、セリン、ベタイン、及びイノシトールからなる群から選択される少なくとも４つのオスモライトを含む有効量のスキンケア組成物であって、前記組み合わせは、前記組成物の総重量に対して重量基準で１０％〜２０％のプロリン、５％〜１０％のセリン、２０〜３０％のベタイン、及び１％〜５％のイノシトールを含む、有効量のスキンケア組成物など）と、１つ以上の表１９に列挙した成分とを含むスキンケアゼリーであり、前記有効量のスキンケア組成物は、前記スキンケア製品の総重量に対して重量基準で少なくとも約１％、２％、３％、４％、５％、最大で１０％である。
【０１００】
一実施形態では、スキンケア製品は、有効量の本明細書に記載のスキンケア組成物（プロリン、セリン、ベタイン、及びイノシトールからなる群から選択される少なくとも４つのオスモライトを含む有効量のスキンケア組成物であって、前記組み合わせは、前記組成物の総重量に対して重量基準で１０％〜２０％のプロリン、５％〜１０％のセリン、２０〜３０％のベタイン、及び１％〜５％のイノシトールを含む、有効量のスキンケア組成物など）と、１つ以上の表２０に列挙した成分とを含むスキンケアクリームであり、前記有効量のスキンケア組成物は、前記スキンケア製品の総重量に対して重量基準で少なくとも約１％、２％、３％、４％、５％、最大で１０％である。
【０１０１】
一実施形態では、スキンケア製品は、有効量の本明細書に記載のスキンケア組成物（プロリン、セリン、ベタイン、及びイノシトールからなる群から選択される少なくとも４つのオスモライトを含む有効量のスキンケア組成物であって、前記組み合わせは、前記組成物の総重量に対して重量基準で１０％〜２０％のプロリン、５％〜１０％のセリン、２０〜３０％のベタイン、及び１％〜５％のイノシトールを含む、有効量のスキンケア組成物など）と、１つ以上の表２１に列挙した成分とを含むスキンケアゲルであり、前記有効量のスキンケア組成物は、前記スキンケア製品の総重量に対して重量基準で少なくとも約１％、２％、３％、４％、５％、最大で１０％である。
【０１０２】
一実施形態では、スキンケア製品は、有効量の本明細書に記載のスキンケア組成物（プロリン、セリン、ベタイン、及びイノシトールからなる群から選択される少なくとも４つのオスモライトを含む有効量のスキンケア組成物であって、前記組み合わせは、前記組成物の総重量に対して重量基準で１０％〜２０％のプロリン、５％〜１０％のセリン、２０〜３０％のベタイン、及び１％〜５％のイノシトールを含む、有効量のスキンケア組成物など）と、１つ以上の表２２に列挙した成分とを含むスキンケアエマルションであり、前記有効量のスキンケア組成物は、前記スキンケア製品の総重量に対して重量基準で少なくとも約１％、２％、３％、４％、５％、最大で１０％である。
【０１０３】
一実施形態では、スキンケア製品は、有効量の本明細書に記載のスキンケア組成物（プロリン、セリン、ベタイン、及びイノシトールからなる群から選択される少なくとも４つのオスモライトを含む有効量のスキンケア組成物であって、前記組み合わせは、前記組成物の総重量に対して重量基準で１０％〜２０％のプロリン、５％〜１０％のセリン、２０〜３０％のベタイン、及び１％〜５％のイノシトールを含む、有効量のスキンケア組成物など）と、１つ以上の表２３に列挙した成分とを含むスキンケアスティックであり、前記有効量のスキンケア組成物は、前記スキンケア製品の総重量に対して重量基準で少なくとも約１％、２％、３％、４％、最大で１０％である。
【０１０４】
一実施形態では、スキンケア製品は、有効量の本明細書に記載のスキンケア組成物（プロリン、セリン、ベタイン、及びイノシトールからなる群から選択される少なくとも４つのオスモライトを含む有効量のスキンケア組成物であって、前記組み合わせは、前記組成物の総重量に対して重量基準で１０％〜２０％のプロリン、５％〜１０％のセリン、２０〜３０％のベタイン、及び１％〜５％のイノシトールを含む、有効量のスキンケア組成物など）と、１つ以上の表２４に列挙した成分とを含むスキンケアゲルマスクであり、前記有効量のスキンケア組成物は、前記スキンケア製品の総重量に対して重量基準で少なくとも約１％、２％、３％、４％、５％、最大で１０％である。
【０１０５】
一実施形態では、スキンケア製品は、有効量の本明細書に記載のスキンケア組成物（プロリン、セリン、ベタイン、及びイノシトールからなる群から選択される少なくとも４つのオスモライトを含む有効量のスキンケア組成物であって、前記組み合わせは、前記組成物の総重量に対して重量基準で１０％〜２０％のプロリン、５％〜１０％のセリン、２０〜３０％のベタイン、及び１％〜５％のイノシトールを含む、有効量のスキンケア組成物など）と、１つ以上の表２５又は表２６に列挙した成分とを含むスキンケアクリームであり、前記有効量のスキンケア組成物は、前記スキンケア製品の総重量に対して重量基準で少なくとも約１％、２％、３％、４％、最大で１０％である。
【０１０６】
一実施形態では、スキンケア製品は、有効量の本明細書に記載のスキンケア組成物（プロリン、セリン、ベタイン、及びイノシトールからなる群から選択される少なくとも４つのオスモライトを含む有効量のスキンケア組成物であって、前記組み合わせは、前記組成物の総重量に対して重量基準で１０％〜２０％のプロリン、５％〜１０％のセリン、２０〜３０％のベタイン、及び１％〜５％のイノシトールを含む、有効量のスキンケア組成物など）と、１つ以上の皮膚科学的又は美容的に許容される成分とを含むスキンケアピールオフマスクであり、前記有効量のスキンケア組成物は、前記スキンケア製品の総重量に対して重量基準で少なくとも約１％、２％、３％、４％、最大で１０％である。一態様では、ピールオフマスクは、ゲル及び活性化スプレー溶液から作製され、ゲル及び／又は活性化スプレー溶液は有効量の本明細書に記載のスキンケア組成物を含有する。ゲルは、花びら又は天然ビーズのような、任意に目で見ることができる懸濁天然成分を含む透明な又は着色されたゲルであり得る。活性溶液は、任意に目で見ることができる頭花又は花びらを内部に含む透明な又は着色された液体であり得る。一態様では、ピールオフマスクは、前記スキンケア製品の総重量に対して重量基準で４％の本明細書に記載のスキンケア組成物（実施例１）を含む。
【０１０７】
一実施形態では、スキンケア製品は、有効量の本明細書に記載のスキンケア組成物（プロリン、セリン、ベタイン、及びイノシトールからなる群から選択される少なくとも４つのオスモライトを含む有効量のスキンケア組成物であって、前記組み合わせは、前記組成物の総重量に対して重量基準で１０％〜２０％のプロリン、５％〜１０％のセリン、２０〜３０％のベタイン、及び１％〜５％のイノシトールを含む、有効量のスキンケア組成物など）と、約１％、２％、３％、４％、最大で５％のＧＥＮＥＮＣＡＲＥ（登録商標）ＯＳＭＳ  ＢＡ（ＤｕＰｏｎｔ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）と、約１％、２％、３％、４％、最大で５％のＧＥＮＥＮＣＡＲＥ（登録商標）ＯＳＭＳ  ＭＩ（ＤｕＰｏｎｔ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）とを含むマクロエマルションクリームであり、前記有効量のスキンケア組成物は、前記スキンケア製品の総重量に対して重量基準で少なくとも約１％、２％、３％、４％、最大で１０％である。一態様では、マクロエマルションクリームは、前記スキンケア製品の総重量に対して重量基準で、１％、２％、３％、４％、最大で５％の本明細書に記載のスキンケア組成物と、３％のＧＥＮＥＮＣＡＲＥ（登録商標）ＯＳＭＳ  ＢＡと、１％のＧＥＮＥＮＣＡＲＥ（登録商標）ＯＳＭＳ  ＭＩと含む。
【０１０８】
本明細書に記載のスキンケア組成物及び製品は、１つ以上のスキンケア効果を提供するキット、例えば、以下に限定されないが、皮膚の保湿用キット、皮膚の浸透圧保護（例えば、身体に内因性の物質、例えば、水、脂質、電解質の喪失から皮膚を保護する）用キット、皮膚を環境ストレス（化学物質、微生物など）から保護するキット、皮膚を汚染から保護するキット、皮膚を紫外線照射による損傷から保護するキット、皮膚を青色光から保護するキット、皮膚を酸化ストレスから保護するキット、皮膚解毒用キット、皮膚の老化の徴候の発現を防止又は遅延させるキット、皮膚のしわの出現を減少させるキット、皮膚の癒着を減少させるキット、細胞若しくは組織の寿命を促進するキット、皮膚のバリア機能を強化するキット、又はこれらのいずれか１つの組み合わせの一部であってもよい。一態様では、キットは、プロリン、セリン、ベタイン、及びイノシトールからなる群から選択される少なくとも４つのオスモライトの組み合わせを含むスキンケア組成物の有効量を含む第１の成分（ここで、前記組み合わせは、前記組成物の総重量に対して重量基準で１０％〜２０％のプロリン、５％〜１０％のセリン、２０〜３０％のベタイン、及び１％〜５％のイノシトールを含む）と、活性化スプレー溶液を含む第２の成分とを含む、スキンケア効果を提供するためのキットである。一態様では、キットは、プロリン、セリン、ベタイン、及びイノシトールからなる群から選択される少なくとも４つのオスモライトの組み合わせを含むスキンケア組成物の有効量を含む活性化スプレー溶液（ここで、前記組み合わせは、前記組成物の総重量に対して重量基準で１０％〜２０％のプロリン、５％〜１０％のセリン、２０〜３０％のベタイン、及び１％〜５％のイノシトールを含む）と、ゲルとを含み、任意選択により、前記ゲル及び活性化スプレー溶液はピールオフマスクを作製することができる、スキンケア効果を提供するためのキットである。
【０１０９】
スキンケア組成物及びスキンケア製品の接触／適用
本明細書に記載の有効量のスキンケア組成物は、直接又はスキンケア製品の一部として、皮膚と接触させる（皮膚に適用する）ことができる。
【０１１０】
一態様では、本明細書に記載の有効量のスキンケア組成物、又は有効量の本明細書に記載のスキンケア組成物を含むスキンケア製品を、高浸透圧ストレス下でケラチノサイト細胞と接触させる。
【０１１１】
一態様では、本明細書に記載の有効量のスキンケア組成物、又は有効量の本明細書に記載のスキンケア組成物を含むスキンケア製品を、高浸透圧ストレス下及び／又はＵＶ照射下のケラチノサイト細胞と接触させる。
【０１１２】
スキンケア製品は、皮膚の任意の表面と接触させる（適用する）ことができる。スキンケア製品は、皮膚に局所的に適用することができ、本明細書では、局所スキンケア組成物と称される。
【０１１３】
一態様では、スキンケア製品はヒトに用いられ、他の態様では、スキンケア製品は、非ヒト動物で（例えば、獣医学に関係する用途において）使用される。
【０１１４】
本明細書で使用される場合、「接触させること」は、有効量の本明細書に記載のスキンケア組成物、又は有効量の本明細書に記載のスキンケア組成物を含むスキンケア製品を、皮膚（皮膚細胞、皮膚表面）と接触させて置くことを指す。接触としては、本明細書に記載のスキンケア組成物を含む本明細書に記載のスキンケア製品である溶液を皮膚表面へ噴霧する、処理する、浸漬する、フラッシングする、注ぎかける又は注ぎ入れる、混合する、混ぜ合わせる、塗布する、コーティングする、適用する、貼り付けることが挙げられる。
【０１１５】
皮膚細胞は、インビトロ細胞、インビボ細胞、細胞培養物、例えば、以下に限定されないが、ヒト又は動物の皮膚細胞であり得る。
【０１１６】
増加したスキンケア効果を提供する方法
本明細書に記載のスキンケア製品は、増加したスキンケア効果を提供する方法において使用され得る。
【０１１７】
一実施形態では、方法は、皮膚（皮膚表面、皮膚細胞）に増加したスキンケア効果を提供する方法であり、前記方法は、皮膚（皮膚表面、皮膚細胞）を、有効量の本明細書に記載のスキンケア組成物を含むスキンケア製品に皮膚（皮膚表面、皮膚細胞）と接触させることを含む。一態様では、有効量の本明細書に記載のスキンケア組成物は、前記スキンケア製品の総重量に対して重量基準で、少なくとも１％、２％、３％、４％、最大で５％の本明細書に記載のスキンケア組成物である。
【０１１８】
一実施形態では、方法は、皮膚に増加したスキンケア効果を提供するための方法であり、前記方法は、皮膚を、有効量の本明細書に記載のスキンケア組成物を含むスキンケア製品に皮膚を接触させることを含み、前記増加したスキンケア効果は、増加した浸透圧保護、ＵＶ照射により誘発される損傷保護からの増加した保護、又はこれらの組み合わせからなる群から選択される。
【０１１９】
複数のスキンケア効果を提供する方法
本明細書に記載のスキンケア製品は、複数のスキンケア効果を提供する方法において使用され得る。
【０１２０】
一実施形態では、方法は、皮膚に複数のスキンケア効果を提供する方法であり、前記方法は、皮膚を、プロリン、セリン、ベタイン及びイノシトールからなる群から選択される少なくとも４つのオスモライトの組み合わせを含むスキンケア組成物の有効量を含むスキンケア製品と接触させることを含み、前記組み合わせは、前記組成物の総重量に対して重量基準で１０％〜２０％のプロリン、５％〜１０％のセリン、２０〜３０％のベタイン及び１％〜５％のイノシトールを含み、前記複数のスキンケア効果は、皮膚の保湿、皮膚の浸透圧に対する保護、皮膚の汚染からの保護、紫外線照射による損傷からの皮膚の保護、青色光による損傷からの皮膚の保護、酸化ストレスからの皮膚の保護、皮膚解毒、皮膚バリア機能の強化、及びこれらの任意の１つの組み合わせからなる群から選択される少なくとも２つのスキンケア効果である。
【０１２１】
スキンケア効果としては、浸透圧に対する保護、ＵＶ照射からの保護、青色光からの保護、夜間光からの保護、酸化ストレスからの保護、皮膚の解毒、皮膚バリア機能の改善、又はこれらの任意の１つの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１２２】
一般的定義
全ての引用される特許及び非特許文献の開示は、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【０１２３】
本開示において、多数の用語及び略語が用いられている。特に明記しない限り、以下の定義が適用される。
【０１２４】
本明細書で使用される場合、本発明の１つの要素又は成分に先行する冠詞「１つの（ａ）」、「１つの（ａｎ）」及び「その（ｔｈｅ）」は、その要素若しくは成分の事例（すなわち、出現）の数に関して非制限的であることが意図されている。このため、「１つの（ａ）」、「１つの（ａｎ）」及び「その（ｔｈｅ）」は、１つ又は少なくとも１つを含むと読まれるべきであり、要素又は成分の単数語形は、その数が明らかに単数であることを意味しない限り複数形も含む。
【０１２５】
本明細書で使用される場合、使用される成分又は反応物質の量を修飾する「約」という用語は、例えば、現実世界において濃縮物又は使用溶液を作成するために使用される典型的な計量及び液体取扱い手順を通して；これらの手順における偶発的誤差を通して；組成物を作成するため、又は本方法を実施するために使用される成分の製造、入手源又は純度における差などを通して発生する可能性がある数量における変動を意味している。用語「約」はまた、特定の初期混合物から生じる組成物についての異なる平衡条件に起因して異なる量も包含する。用語「約」によって修飾されているか否かに関わりなく、特許請求の範囲は、量に関する均等物を含む。
【０１２６】
本明細書で使用される場合、用語「〜を含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」は、特許請求の範囲で言及された既定の特徴、整数、工程又は成分の存在を意味するが、１つ以上の他の特徴、整数、工程、成分又はそれらの群の存在又は添加を排除するものではない。用語「〜を含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」は、用語「実質的に〜からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ  ｏｆ）」及び「〜からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｏｆ）」によって包含される実施形態を含むことを意図する。同様に、用語「実質的に〜からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ  ｏｆ）」は、用語「〜からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｏｆ）」によって包含される実施形態を含むことを意図する。
【０１２７】
本明細書で使用される場合、用語「実施形態」又は「開示」は、限定的であることを意味するものではなく、特許請求の範囲で定義されるか又は本明細書に記載される実施形態のいずれにも一般に適用される。これらの用語は、本明細書において互換的に用いられる。
【０１２８】
本明細書中で使用される場合、用語「有効量」は、所望の効果を得るために標的材料に供する（例えば、本明細書に記載の少なくとも１つのスキンケア効果を得るために、本明細書に記載のスキンケア組成物を含むスキンケア製品に細胞又は皮膚を供する）本明細書に記載のスキンケア組成物などの所与の状態及び／又は組成物の量を指す。所望の効果は、スキンケア効果を提供することを含み、そのスキンケア効果は、皮膚の保湿（皮膚の保湿を維持、回復及び／又は強化することによる皮膚の脱水からの保護）、皮膚の浸透圧に対する保護（身体に内因性の物質、例えば、水、脂質、電解質の喪失からの皮膚の保護）、環境ストレス（化学物質、微生物など）からの皮膚の保護、汚染からの皮膚の保護、紫外線照射による損傷からの皮膚の保護、青色光からの皮膚の保護、酸化ストレスからの皮膚の保護、皮膚の解毒、皮膚の老化の兆候の発現の予防若しくは遅延、皮膚のしわの出現の低減、皮膚の若返り、皮膚癒着の低減、細胞若しくは組織の寿命の促進、皮膚バリア機能の強化、又はこれらの任意の１つの組み合わせからなる群から選択される。一態様では、皮膚に供されたスキンケア製品中のスキンケア組成物の有効量は、増加した効果、例えば、増加した浸透圧保護、環境ストレスに対する皮膚の増加した保護、紫外線照射による損傷に対する皮膚の増加した保護、又はこれらの任意の１つの組み合わせをもたらすことができる。
【０１２９】
一態様では、スキンケア製品中の本明細書に記載のスキンケア組成物の有効量は、前記スキンケア製品の総重量に対して重量基準で、少なくとも約１％、２％、３％、４％、５％、最大で１０％である。
【０１３０】
存在する場合、全ての範囲は、包括的であり且つ結合可能である。例えば、「１〜５」の範囲が示された場合、その示された範囲は、「１〜４」、「１〜３」、「１〜２」、「１〜２及び４〜５」、「１〜３及び５」などの範囲を含むと解釈すべきである。
【０１３１】
量、濃度、又はその他の値若しくはパラメーターが、範囲、好ましい範囲、又は好ましい上限値及び好ましい下限値のリストとして与えられる場合、これは、範囲が別個に開示されているか否かにかかわらず、任意の上限範囲若しくは好ましい値及び任意の下限範囲若しくは好ましい値の任意の対で形成された範囲の全てを具体的に開示していると理解すべきである。数値の範囲が本明細書に示されている場合、他に特に明記しない限り、その範囲は、それらの端点、並びにその範囲内の全ての整数及び分数を含むことを意図する。本発明の範囲が範囲を規定するときに列挙された特定の値に限定することは意図されない。
【０１３２】
本出願に明記される様々な範囲での数値の使用は、他に特に明確に示さない限り、述べた範囲内の最小値及び最大値が両方とも「約」という語によって先行されるかのように近似値として述べられている。このように、述べた範囲の上下のわずかな変動を用いて、この範囲内の数値と実質的に同じ結果を達成することができる。また、これらの範囲の開示は、最小値と最大値との間の各値及びあらゆる値を含む連続範囲を意図している。
【０１３３】
用語「重量パーセント」、「重量百分率（ｗｔ％）」及び「重量−重量百分率（％ｗ／ｗ）」は、本明細書においては互換的に用いられる。重量パーセントは、組成物、混合物、溶液又は製品中に含まれる質量を基準とした材料の百分率を指す。
【０１３４】
本明細書で使用される場合、用語「皮膚表面」は、皮膚効果剤の標的として役立ち得る、皮膚の任意の表面を指す。現在、特許請求の範囲に記載されている方法及び組成物は、スキンケア用途及びスキンケア製品を対象としている。したがって、皮膚表面は、皮膚、好ましくは哺乳動物の皮膚を含む。一実施形態では、皮膚表面はヒトの皮膚である。
【０１３５】
本明細書で使用される場合、スキンケア組成物又はスキンケア製品を「皮膚」に適用することには、スキンケア組成物又はスキンケア製品を皮膚表面に、インビトロ又はインビボ皮膚細胞（以下に限定されないが、表皮ケラチノサイトなど）に適用することが含まれる。
【０１３６】
一態様では、本明細書に記載の皮膚細胞は、ヒト皮膚細胞又は動物皮膚細胞などの哺乳動物皮膚細胞である。
【０１３７】
本明細書で使用される場合、スキンケア組成物（又は有効量の前記組成物を含むスキンケア製品）をスキン表面と接触させることには、スキンケア組成物又はスキンケア製品をインビトロ又はインビボ皮膚細胞（以下に限定されないが、表皮ケラチノサイトなど）と接触させることが含まれる。
【０１３８】
保湿剤、ローション又はボディローションという用語は、油と水の低〜中粘度エマルションを指し、ほとんどの場合、水中油型であるが油中水型もあり、スキンケア適用において皮膚を水和するか又は皮膚の水分喪失を減少させる主要な効果を有する。ほとんど全ての保湿剤は、皮膚軟化剤、閉塞剤、及び湿潤剤の組み合わせを含有する。皮膚軟化剤は、主に脂質及び油であり、水和し、皮膚の外観を改善する。多種多様な好適な皮膚軟化剤が知られており、本明細書で使用され得る（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｏｓｍｅｔｉｃ  Ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔ  Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ  ａｎｄ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ，ｅｄｓ．Ｗｅｎｎｉｎｇｅｒ  ａｎｄ  ＭｃＥｗｅｎ，ｐｐ．１６５６−６１，１６２６，ａｎｄ  １６５４−５５（Ｔｈｅ  Ｃｏｓｍｅｔｉｃ，Ｔｏｉｌｅｔｒｙ，ａｎｄ  Ｆｒａｇｒａｎｃｅ  Ａｓｓｏｃ．，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｄ．Ｃ．，７ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，１９９７）（「ＩＣＩ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ」と呼ばれる）は、適切な材料の多くの例を含む）。ワセリン、ラノリン及び蜜蝋などの閉塞剤は、皮膚上に疎水性バリアを作り出すことによって、経表皮水分蒸散量を減少させる。グリセロール及び尿素などの湿潤剤は、外部環境から水を引き付け、真皮から表皮への水の吸収を増強することができる。さらに、保湿製剤は、エマルションの安定性を維持するために乳化剤を含有し、且つ増粘剤を使用して所望の粘度及び皮膚感触を達成することができる。香料、染料、防腐剤、治療剤、タンパク質及び安定剤などの多種多様な他の成分が、他の消費者の好ましい属性を付与するために一般に添加される。
【０１３９】
本明細書で使用される場合、用語「生物学的汚染物質」は、以下に限定されないが、微生物、胞子、ウイルス、プリオン、及びこれらの混合物を含む、望ましくない及び／又は病原性の生物学的実体の１つ以上を指す。
【０１４０】
本明細書で使用される場合、用語「賦形剤」は、製剤中、活性成分の担体として使用される不活性な物質を指す。賦形剤は、活性成分の貯蔵安定性など、製剤中の活性成分を安定化するために使用され得る。賦形剤はまた、活性成分を含有する製剤の増量のために使用されることもある。「活性成分」としては、本明細書に記載のスキンケア効果剤が挙げられる。
【０１４１】
本明細書に開示する組成物及び方法の非限定的な例としては、以下が挙げられる。
【０１４２】
１．プロリン、セリン、ベタイン及びイノシトールからなる群から選択される少なくとも４つのオスモライトの組み合わせを含むスキンケア組成物であって、前記組み合わせは、前記組成物の総重量に対して重量基準で、１０％〜２０％のプロリン、５％〜１０％のセリン、２０〜３０％のベタイン及び１％〜５％のイノシトールを含むスキンケア組成物。
【０１４３】
２．プロリン、セリン、ベタイン、及びイノシトールからなる群から選択される少なくとも４つのオスモライトの組み合わせを含むスキンケア組成物であって、前記組み合わせは、総オスモライト含量１００％に対して、オスモライト％基準で、３０％のプロリン、１４％のセリン、５０％のベタイン及び６％のイノシトールを含むスキンケア組成物。
【０１４４】
３．防腐剤、ｐＨ調整剤、抗酸化剤及びキレート剤からなる群から選択される少なくとも１つの追加の化合物をさらに含む、実施形態１又は２に記載のスキンケア組成物。
【０１４５】
４．前記追加の化合物は防腐剤である、実施形態３に記載のスキンケア組成物。
【０１４６】
５．防腐剤は安息香酸ナトリウムである、実施形態４に記載のスキンケア組成物。
【０１４７】
６．前記追加の化合物はｐＨ調整剤である、実施形態３に記載のスキンケア組成物。
【０１４８】
７．前記ｐＨ調整剤はクエン酸である、実施形態６に記載のスキンケア組成物。
【０１４９】
８ａ．前記スキンケア組成物は透明な水溶液である、実施形態１〜７のいずれか１つに記載のスキンケア組成物。
【０１５０】
８ｂ．製剤又はスキンケア製品中の有効量の前記組成物は、酸化ストレスの減少、増加した解毒、及び増加した皮膚バリア機能、又はこれらの任意の１つの組み合わせからなる群から選択される、スキンケア効果又は複数のスキンケア効果を提供する、実施形態１〜８のいずれか１つに記載のスキンケア組成物。
【０１５１】
８ｃ．製剤又はスキンケア製品中の有効量の前記組成物は、脂質過酸化の低減、ＵＶにより誘発されるタンパク質カルボニル化の低減、ＵＶにより誘発されるＤＮＡ損傷の低減、ＵＶ曝露下でのＲＯＳの低減、酸化ストレス転写因子の増加、抗酸化酵素の増加、ＭＴ−１Ｈの活性化誘導の低減、ケラチノサイトタイトジャンクションの強化、カフェイン拡散の減少、又はこれらの任意の１つの組み合わせからなる群から選択されるスキンケア効果又は複数のスキンケア効果を提供する、実施形態１〜８のいずれか１つに記載のスキンケア組成物。
【０１５２】
８ｄ．前記スキンケア組成物の有効量は、前記製剤又はスキンケア製品の総重量に対して重量基準で少なくとも約０．１％〜５％である、実施形態８ｂ又は８ｃに記載のスキンケア組成物。
【０１５３】
９．実施形態１〜８のいずれか１つに記載のスキンケア組成物の有効量のスキンケア製品における使用。
【０１５４】
１０．実施形態１〜８のいずれか１つに記載のスキンケア組成物の有効量と、１つ以上の皮膚科学的又は美容的に許容される成分とを含むスキンケア製品。
【０１５５】
１１．スキンケア組成物の前記有効量は、前記スキンケア製品の総重量に対して重量基準で少なくとも約１％、２％、３％、４％、最大で５％である、実施形態１０に記載のスキンケア製品。
【０１５６】
１２．前記１つ以上の皮膚科学的に許容される成分は、前記スキンケア製品の総重量に対して重量基準で約１０％〜約９９％を含む皮膚科学的に許容される担体である、実施形態１０に記載のスキンケア製品。
【０１５７】
１３．３０：１４：５０：６の比のオスモライトのプロリン、セリン、ベタイン及びイノシトールの組み合わせを含むスキンケア製品。
【０１５８】
１４ａ．前記スキンケア製品は、ローション、セラム、ゼリー、クリーム、ゲル、エマルション、マスク、フェイスマスク、パッチ及びスティックからなる群から選択される、実施形態１０〜１３のいずれか１つに記載のスキンケア製品。
【０１５９】
１４ｂ．実施形態１〜８のいずれか１つに記載のスキンケア組成物の有効量を含むスキンケア製品又は製剤であって、前記スキンケア組成物の前記有効量は、酸化ストレスの減少、増加した解毒、及び増加した皮膚バリア機能、又はこれらの任意の１つの組み合わせからなる群から選択される、スキンケア効果又は複数のスキンケア効果を提供するスキンケア製品又は製剤。
【０１６０】
１４ｃ．実施形態１〜８のいずれか１つに記載のスキンケア組成物の有効量を含むスキンケア製品又は製剤であって、前記スキンケア組成物の前記有効量は、脂質過酸化の低減、ＵＶにより誘発されるタンパク質カルボニル化の低減、ＵＶにより誘発されるＤＮＡ損傷の低減、ＵＶ曝露下でのＲＯＳの低減、酸化ストレス転写因子の増加、抗酸化酵素の増加、ＭＴ−１Ｈの活性化誘導の低減、ケラチノサイトタイトジャンクションの強化、カフェイン拡散の減少、又はこれらの任意の１つの組み合わせからなる群から選択されるスキンケア効果又は複数のスキンケア効果を提供するスキンケア製品又は製剤。
【０１６１】
１４ｄ．スキンケア組成物の有効量は、前記製剤又はスキンケア製品の総重量に対して重量基準で少なくとも約０．１％〜５％である、実施形態１４ａ〜ｃのいずれか１つに記載のスキンケア製品又は製剤。
【０１６２】
１５．皮膚に増加したスキンケア効果を提供する方法であって、皮膚を、実施形態１〜８のいずれか１つに記載のスキンケア組成物の有効量と、１つ以上の皮膚科学的又は美容的に許容される成分とを含むスキンケア製品と接触させることを含む方法。
【０１６３】
１６．前記増加したスキンケア効果は、増加した浸透圧保護、ＵＶ照射による損傷に対する増加した保護、青色光に対する増加した保護、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される、実施形態１５に記載の方法。
【０１６４】
１７．前記スキンケア製品は、皮膚科学的に許容される担体と、前記スキンケア製品の総重量に対して重量基準で少なくとも１％、２％、３％、４％、最大で５％の前記スキンケア組成物とを含む、ローション、セラム、ゼリー、クリーム、ゲル、エマルション、マスク、パッチ、又はスティックである、実施形態１５に記載の方法。
【０１６５】
１８．複数のスキンケア効果を皮膚に提供する方法であって、皮膚を、有効量の実施形態１〜８のいずれか１つに記載のスキンケア組成物を含むスキンケア製品と接触させることを含み、前記複数のスキンケア効果は、皮膚の保湿、皮膚の浸透圧保護（〜の喪失からの皮膚の保護）、皮膚の汚染から保護、紫外線照射による損傷からの皮膚の保護、青色光による損傷からの皮膚の保護、酸化ストレスからの皮膚の保護、皮膚の解毒、皮膚バリア機能の強化、及びこれらの任意の１つの組み合わせからなる群から選択される少なくとも２つのスキンケア効果である方法。
【０１６６】
１９．プロリン、セリン、ベタイン及びイノシトールからなる群から選択される少なくとも４つのオスモライトの組み合わせを含む有効量のスキンケア組成物（ここで、前記組み合わせは、前記組成物の総重量に対して重量基準で１０％〜２０％のプロリン、５％〜１０％のセリン、２０〜３０％のベタイン、及び１％〜５％のイノシトールを含む）と、１つ以上の表１８に列挙した成分とを含むスキンケアローションであって、スキンケア組成物の前記有効量は、前記スキンケア製品の総重量に対して重量基準で少なくとも約１％、２％、３％、４％、５％、最大で１０％であるスキンケアローション。
【０１６７】
２０．プロリン、セリン、ベタイン及びイノシトールからなる群から選択される少なくとも４つのオスモライトの組み合わせを含む有効量のスキンケア組成物（ここで、前記組み合わせは、前記組成物の総重量に対して重量基準で１０％〜２０％のプロリン、５％〜１０％のセリン、２０〜３０％のベタイン、及び１％〜５％のイノシトールを含む）と、１つ以上の表１９に列挙した成分とを含むスキンケアゼリーであって、スキンケア組成物の前記有効量は、前記スキンケア製品の総重量に対して重量基準で少なくとも約１％、２％、３％、４％、５％、最大で１０％であるスキンケアゼリー。
【０１６８】
２１．プロリン、セリン、ベタイン及びイノシトールからなる群から選択される少なくとも４つのオスモライトの組み合わせを含む有効量のスキンケア組成物（ここで、前記組み合わせは、前記組成物の総重量に対して重量基準で１０％〜２０％のプロリン、５％〜１０％のセリン、２０〜３０％のベタイン、及び１％〜５％のイノシトールを含む）と、１つ以上の表２０に列挙した成分とを含むスキンケアクリームであって、スキンケア組成物の前記有効量は、前記スキンケア製品の総重量に対して重量基準で少なくとも約１％、２％、３％、４％、５％、最大で１０％であるスキンケアクリーム。
【０１６９】
２２．プロリン、セリン、ベタイン及びイノシトールからなる群から選択される少なくとも４つのオスモライトの組み合わせを含む有効量のスキンケア組成物（ここで、前記組み合わせは、前記組成物の総重量に対して重量基準で１０％〜２０％のプロリン、５％〜１０％のセリン、２０〜３０％のベタイン、及び１％〜５％のイノシトールを含む）と、１つ以上の表２１に列挙した成分とを含むスキンケアゲルであって、スキンケア組成物の前記有効量は、前記スキンケア製品の総重量に対して重量基準で少なくとも約１％、２％、３％、４％、５％、最大で１０％であるスキンケアゲル。
【０１７０】
２３．プロリン、セリン、ベタイン及びイノシトールからなる群から選択される少なくとも４つのオスモライトの組み合わせを含む有効量のスキンケア組成物（ここで、前記組み合わせは、前記組成物の総重量に対して重量基準で１０％〜２０％のプロリン、５％〜１０％のセリン、２０〜３０％のベタイン、及び１％〜５％のイノシトールを含む）と、１つ以上の表２２に列挙した成分とを含むスキンケアエマルションであって、スキンケア組成物の前記有効量は、前記スキンケア製品の総重量に対して重量基準で少なくとも約１％、２％、３％、４％、５％、最大で１０％であるスキンケアエマルション。
【０１７１】
２４．プロリン、セリン、ベタイン及びイノシトールからなる群から選択される少なくとも４つのオスモライトの組み合わせを含む有効量のスキンケア組成物（ここで、前記組み合わせは、前記組成物の総重量に対して重量基準で１０％〜２０％のプロリン、５％〜１０％のセリン、２０〜３０％のベタイン、及び１％〜５％のイノシトールを含む）と、１つ以上の表２３に列挙した成分とを含むスキンケアスティックであって、スキンケア組成物の前記有効量は、前記スキンケア製品の総重量に対して重量基準で少なくとも約１％、２％、３％、４％、最大で１０％であるスキンケアスティック。
【０１７２】
２５．プロリン、セリン、ベタイン及びイノシトールからなる群から選択される少なくとも４つのオスモライトの組み合わせを含む有効量のスキンケア組成物（ここで、前記組み合わせは、前記組成物の総重量に対して重量基準で１０％〜２０％のプロリン、５％〜１０％のセリン、２０〜３０％のベタイン、及び１％〜５％のイノシトールを含む）と、１つ以上の表２４に列挙した成分とを含むスキンケアゲルマスクであって、スキンケア組成物の前記有効量は、前記スキンケア製品の総重量に対して重量基準で少なくとも約１％、２％、３％、４％、５％、最大で１０％であるスキンケアゲルマスク。
【０１７３】
２６．プロリン、セリン、ベタイン及びイノシトールからなる群から選択される少なくとも４つのオスモライトの組み合わせを含む有効量のスキンケア組成物（ここで、前記組み合わせは、前記組成物の総重量に対して重量基準で１０％〜２０％のプロリン、５％〜１０％のセリン、２０〜３０％のベタイン、及び１％〜５％のイノシトールを含む）と、１つ以上の表２５又は表２６に列挙した成分とを含むスキンケアナイトクリームであって、スキンケア組成物の前記有効量は、前記スキンケア製品の総重量に対して重量基準で少なくとも約１％、２％、３％、４％、最大で１０％であるスキンケアナイトクリーム。
【０１７４】
２７．プロリン、セリン、ベタイン及びイノシトールからなる群から選択される少なくとも４つのオスモライトの組み合わせを含む有効量のスキンケア組成物（ここで、前記組み合わせは、前記組成物の総重量に対して重量基準で１０％〜２０％のプロリン、５％〜１０％のセリン、２０〜３０％のベタイン、及び１％〜５％のイノシトールを含む）と、１つ以上の皮膚科学的又は美容的に許容される成分とを含むスキンケアピールオフマスクであって、スキンケア組成物の前記有効量は、前記スキンケア製品の総重量に対して重量基準で少なくとも約１％、２％、３％、４％、最大で１０％であるスキンケアピールオフマスク。
【０１７５】
２８．プロリン、セリン、ベタイン及びイノシトールからなる群から選択される少なくとも４つのオスモライトの組み合わせを含む有効量のスキンケア組成物（ここで、前記組み合わせは、前記組成物の総重量に対して重量基準で１０％〜２０％のプロリン、５％〜１０％のセリン、２０〜３０％のベタイン、及び１％〜５％のイノシトールを含む）と、約１％、２％、３％、４％、最大で５％のＧＥＮＥＮＣＡＲＥ（登録商標）ＯＳＭＳ  ＢＡ（ＤｕＰｏｎｔ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）と、約１％、２％、３％、４％、最大で５％のＧＥＮＥＮＣＡＲＥ（登録商標）ＯＳＭＳ  ＭＩ（ＤｕＰｏｎｔ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）とを含むマクロエマルションクリームであって、前記有効量のスキンケア組成物は、前記スキンケア製品の総重量に対して重量基準で少なくとも約１％、２％、３％、４％、最大で１０％であるマクロエマルションクリーム。
【実施例】
【０１７６】
以下の実施例では、他に特に明記しない限り、部及びパーセンテージは重量によるものであり、度は摂氏である。これらの実施例は、本開示の実施形態を示しているが、単に例示するためにのみ提供されていることを理解すべきである。上記の考察及びこれらの実施例から、当業者であれば様々な用法及び条件に適合させるために本開示に様々な変更及び修正を加えることができる。そのような修正もまた、添付の特許請求の範囲に含まれることが意図されている。
【０１７７】
本明細書における以下の略語は、以下のような測定単位、手法、特性、又は化合物に対応する：「ｓｅｃ」又は「ｓ」は秒を意味し、「ｍｉｎ」は分を意味し、「ｈ」又は「ｈｒ」は時間を意味し、「μＬ」はマイクロリットルを意味し、「ｍＬ」はミリリットルを意味し、「Ｌ」はリットルを意味し、「ｍＭ」はミリモルを意味し、「Ｍ」はモルを意味し、「ｍｍｏｌ」はミリモルを意味し、「ｐｐｍ」は百万分率を意味し、「ｗｔ」は重量を意味し、「ｗｔ％」は重量パーセントを意味し、「ｇ」はグラムを意味し、「ｍｇ」はミリグラムを意味し、「μｇ」はマイクログラムを意味し、「ｎｇ」はナノグラムを意味し、「ｃｏｎｃ．」は濃度を意味し、「Ｔｒｔ」は処理を意味する。
【０１７８】
実施例１
スキンケア製品に使用するためのスキンケア組成物。
オスモライトのＬ−プロリン、Ｌ−セリン、ベタイン及びイノシトールを粉末形態で得、水溶液中、オスモライト全体の％でＬ−プロリン３０％、Ｌ−セリン１４％、ベタイン５０％及びイノシトール６％の比率で混合した（表１）。
【０１７９】
【表１】
2021514970.tif 000002
【０１８０】
一態様では、スキンケア組成物は、防腐剤の安息香酸ナトリウムを０．４ｗｔ％、及び／又はｐＨ調整剤のクエン酸を０．８ｗｔ％、さらに含んだ。
【０１８１】
スキンケア組成物は、本明細書に記載の製剤及びスキンケア製品において使用することができ、前記製剤又はスキンケア製品の総重量に対して重量基準で少なくとも約０．３％〜５．０％含まれる。
【０１８２】
実施例２
浸透圧保護のためのベタイン、イノシトール、プロリン及びセリンのオスモライト組み合わせ
１００％の総オスモライト含量に対してオスモライト％基準でプロリン３０％、セリン１４％、ベタイン５０％及びイノシトール６％の比率で、オスモライトのプロリン、セリン、ベタイン及びイノシトールを含む、スキンケア製品に使用するための組成物の有効性を試験するために、同じ比率のオスモライトを含むが、オスモライトの総濃度は異なる２つの異なる製品を調製した。組み合わせＣ１は合計１０ｍｇ／ｍｌのオスモライトを含有し、組み合わせＣ２は合計３ｍｇ／ｍｌのオスモライトを含有した（表２）。
【０１８３】
【表２】
2021514970.tif 000003
【０１８４】
また、唯一のオスモライトとして３ｍｇ／ｍｌのＬ−プロリン（Ｌ−プロリン３ｍｇ／ｍｌと呼ぶ）、又は唯一のオスモライトとして１０ｍｇ／ｍｌのＬ−プロリン（Ｌ−プロリン１０ｍｇ／ｍｌと呼ぶ）、又は１０ｍｇ／ｍｌのベタイン（ベタイン１０ｍｇ／ｍｌと呼ぶ）を含む参照溶液を調製した。
【０１８５】
実施例３
ストレス及び／又は照射条件下でのケラチノサイト細胞の生存率及び形態に対するオスモライト組み合わせの浸透圧保護効果。
オスモライト組み合わせＣ１及びＣ２（実施例２）のケラチノサイト細胞に対する浸透圧保護効果について試験し、オスモライトとしてＬ−プロリンのみを含む（３ｍｇ／ｍｌ又は１０ｍｇ／ｍｌ）参照組成物の効果と比較した。
【０１８６】
生物学的モデル
この研究のために使用した細胞のタイプは、第３継代で使用した、正常ヒト表皮ケラチノサイト（ＮＨＥＫ）、Ｂｉｏａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅｓ  ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ  Ｋ３４１であった。培養条件は以下のとおりであった：３７℃、５％ＣＯ２。培養液は、上皮成長因子（ＥＧＦ）０．２５ｎｇ／ｍｌ、下垂体抽出物（ＰＥ）２５μｇ／ｍｌ、ゲンタマイシン２５μｇ／ｍｌを添加した「ケラチノサイト−ＳＦＭ」と呼ばれる。アッセイ培地は、ゲンタマイシン２５μｇ／ｍｌを添加した「ケラチノサイト−ＳＦＭ」であった。
【０１８７】
培養及び処理
ケラチノサイト（ＮＨＥＫ）を２４ウェルプレートに播種し、培養培地中で２４時間培養した。次いで、培地を、単一のオスモライト又はオスモライト組み合わせＣ１若しくはＣ２を含有するか又は含有しない（対照）アッセイ培地に置き換え、細胞を２４時間プレインキュベートした。
【０１８８】
プレインキュベーション後：
高浸透圧条件のために、培地を除去し、１５０ｍＭのＮａＣｌを含有し、且つ単一のオスモライト又はオスモライト組み合わせ（Ｃ１若しくはＣ２）を含有するアッセイ培地に置き換えた。次いで、細胞を４８時間インキュベートした。並行して、正常浸透圧対照（浸透圧ストレスのない対照）を行った。
【０１８９】
ＵＶ照射条件では、次いで、培地を除去し、アッセイ培地に置き換え、細胞に２５０ｍＪ／ｃｍ２のＵＶＢ（＋１．６Ｊ／ｃｍ２のＵＶＡ）を照射した。使用したランプは、Ｈ２フィルターを備えたＳＯＬ５００  Ｓｕｎシミュレーター（Ｄｒ．Ｈｏｅｌｅ、ＡＧ）であった。非照射対照条件を並行して行った。照射後、培地を除去し、単一のオスモライト又はオスモライト組み合わせ（Ｃ１若しくはＣ２）を含有するか又は含有しない（対照）アッセイ培地に置き換え、細胞を４８時間インキュベートした。
【０１９０】
ＵＶ照射条件及び高浸透圧条件では、次いで、培地を除去し、アッセイ培地に置き換え、細胞に２５０ｍＪ／ｃｍ２のＵＶＢ（＋１．６Ｊ／ｃｍ２のＵＶＡ）を照射した。使用したランプは、Ｈ２フィルターを備えたＳＯＬ５００  Ｓｕｎシミュレーター（Ｄｒ．Ｈｏｅｌｅ、ＡＧ）であった。照射後、培地を除去し、１５０ｍＭのＮａＣｌを含有し（高浸透圧条件）し、且つ単一のオスモライト又はオスモライト組み合わせ（Ｃ１若しくはＣ２）を含有するアッセイ培地に置き換え、細胞を４８時間インキュベートした。並行して、非照射及び正常浸透圧対照を行った。
【０１９１】
全ての実験条件をｎ＝３で行った。
【０１９２】
評価／エンドポイント
細胞培養物を顕微鏡で形態学的変化について観察し、フローサイトメーターで分析した。
【０１９３】
フローサイトメトリー分析
インキュベーションの終わりに、培養培地を除去し、細胞をＰＢＳ溶液で洗浄した。次いで、トリプシンにより処理して細胞をはがし、チューブに移した。細胞を０．２％のＰＢＳ／ＢＳＡで数回洗浄した後、ヨウ化プロピジウム（ＰＩ）溶液で標識した（死細胞の染色）。次いで、細胞集団を、ＢＤ  ＦＡＣＳＶｅｒｓｅ（商標）フローサイトメーターを使用してフローサイトメトリーにより、数（一定時間中の１ウェルあたりのイベントの総数）、サイズ（ＦＳＣ）、粒度（ＳＳＣ）及び生存率パラメーター（ＰＩ陽性細胞％（死細胞％に相当））について分析した。
【０１９４】
−獲得１は、一定時間にわたってサイトメーターレーザーの前を１つずつ通過するイベントの数（＝細胞の数）を表す。この段階では、死細胞であるか生細胞であるかは区別されない。正常浸透圧条件におけるイベントの総数から（高浸透圧又は照射条件における）イベントの数を差し引くことによって、ストレス条件のために溶解した細胞の数を算出することができる。
【０１９５】
−獲得２は、一定数のイベントにおいて、１）細胞がレーザー、ＦＳＣ−Ａを横切るときに散乱する光の検出を表し、それから細胞サイズを計算することができ、２）ヨウ化プロピジウムによって染色された細胞（死細胞）の検出を表し、それから生存細胞の％を計算することができる。
【０１９６】
アッセイの検証
アッセイを検証するために、ＮＨＥＫを１５０ｍＭのＮａＣｌで４８時間処理し、細胞の総数、細胞サイズ及び生存率を減少させた（それぞれ、正常浸透圧条件下の非処理対照の１６％、７５％及び６２％）。これらの結果は予想され、アッセイの妥当性が確認された。
【０１９７】
同様に、ＮＨＥＫに組み合わせたストレス（ＵＶＢ照射＋ＮａＣｌ）をかけたところ、細胞の総数、細胞サイズ及び生存率が減少した（正常浸透圧及び非照射条件下の非処理対照の１７％、７７％及び７５％（平均））。
【０１９８】
結果−オスモライト組み合わせの浸透圧保護効果
対照、及びＬ−プロリン（３ｍｇ／ｍｌ若しくは１０ｍｇ／ｍｌ）によって、又はオスモライトのＣ１組み合わせ（全オスモライト１０ｍｇ／ｍｌ）によってプレインキュベートした細胞の、対照正常浸透圧条件及び高浸透圧ストレス条件における、細胞数に対する評価の結果を表３に示す。
【０１９９】
表４は、対照、及びＬ−プロリン（３ｍｇ／ｍｌ若しくは１０ｍｇ／ｍｌ）によって、又はオスモライトのＣ１組み合わせ（全オスモライト１０ｍｇ／ｍｌ）若しくはＣ２組み合わせ（全オスモライト３ｍｇ／ｍｌ）によってプレインキュベートした細胞の、対照正常浸透圧条件及び高浸透圧ストレス条件における、溶融細胞数に対する評価の結果を示す。
【０２００】
表５は、対照、及びＬ−プロリン（３ｍｇ／ｍｌ若しくは１０ｍｇ／ｍｌ）によって、又はオスモライトのＣ１組み合わせ（全オスモライト１０ｍｇ／ｍｌ）によってプレインキュベートした細胞の、対照正常浸透圧条件及び高浸透圧ストレス条件における、細胞サイズに対する評価の結果を示す。
【０２０１】
表６は、対照、及びＬ−プロリン（３ｍｇ／ｍｌ若しくは１０ｍｇ／ｍｌ）によって、又はオスモライトのＣ１組み合わせ（全オスモライト１０ｍｇ／ｍｌ）によってプレインキュベートした細胞の、対照正常浸透圧条件及び高浸透圧ストレス条件における、細胞生存率に対する評価の結果を示す。
【０２０２】
結果は、高浸透圧対照の％で、又は組み合わせ（Ｃ１、Ｃ２）についてＬ−プロリン（３ｍｇ／ｍｌ及び／若しくは１０ｍｇ／ｍｌ）の％でも表し、組み合わせの効果がＬ−プロリンの効果よりも有意に優れている場合の有意差のレベルの指標を含む。有意差の説明は次のとおりである：ｎｓ：＞０．０５、有意差なし；＊：０．０１〜０．０５、有意差あり；＊＊：０．００１〜０．０１、大きな有意差あり、及び＊＊＊：＜０．００１、極めて大きな有意差あり。
【０２０３】
【表３】
2021514970.tif 000004
【０２０４】
【表４】
2021514970.tif 000005
【０２０５】
【表５】
2021514970.tif 000006
【０２０６】
【表６】
2021514970.tif 000007
【０２０７】
表２〜５の結果はＣ１のオスモライト組み合わせ（総オスモライト濃度１０ｍｇ／ｍｌでＬ−プロリン＋Ｌ−セリン＋ベタイン＋イノシトールを含む）が、高浸透圧ストレスに対して予想外の驚くほど高い保護を示すことを示した。１５０ｍＭのＮａＣｌを含む高浸透圧条件下で、最高濃度（１０ｍｇ／ｍｌ）で試験したＬ−プロリン＋Ｌ−セリン＋ベタイン＋イノシトールの組み合わせは、細胞数を大きく増加させ（高浸透圧対照の５０９％−表３）、細胞溶解％を大きく減少させ（８４．４％から７．５％へ−表４）、細胞サイズを大きく増加させ（高浸透圧対照の１１６％−表５）、且つ細胞サイズ細胞生存率を大きく増加させる（高浸透圧対照の１９１％−表６）ことによって、高浸透圧ストレスに対する保護効果を誘導した。
【０２０８】
さらに、表７に示されるように、浸透圧物質のこの組み合わせは、オスモライトを含まない高浸透圧ストレス条件と比較して細胞サイズの減少を防止し、予想外の驚くべき保護効果をさらに支持する。
【０２０９】
【表７】
2021514970.tif 000008
【０２１０】
Ｃ１組み合わせから得られる浸透圧保護の大きさは、同じ総濃度のオスモライト（Ｌ−プロリン１０ｍｇ／ｍｌなど）を含む組成物の効果と比較した場合、予想を超えた驚くべきものである。表３に示すように、細胞数に対するＣ１組み合わせの効果は非常に大きい（Ｌ−プロリン１０ｍｇ／ｍｌの効果と比較した場合、２０９％高い）。さらに、表４に示されるように、溶解細胞の数に対するＣ１組み合わせの効果もまた非常に大きく（Ｌ−プロリン１０ｍｇ／ｍｌで観察された細胞溶解４１．７％に対してＣ１組み合わせで観察された細胞溶解７．５％）、細胞溶解において３４．２％の減少を示した。
【０２１１】
Ｃ１組成物（３ｍｇ／ｍｌのＬ−プロリンを含む）の効果をＬ−プロリン３ｍｇ／ｍｌの参照組成物と比較した場合も予想外のものである。表３に示すように、細胞数に対するＣ１組み合わせの効果は非常に大きい（Ｌ−プロリン３ｍｇ／ｍｌの効果と比較した場合、３９１％高い）。また、表４に示されるように、溶解細胞の数に対するＣ１組み合わせの効果もまた非常に大きく（Ｌ−プロリン１０ｍｇ／ｍｌで観察された細胞溶解６７．２％に対してＣ１組み合わせで観察された細胞溶解７．５％）、細胞溶解において５９．７％の減少を示した。１５０ｍＭのＮａＣｌを含む高浸透圧条件下、３ｍｇ／ｍｌの濃度で試験したＬ−プロリン＋Ｌ−セリン＋ベタイン＋イノシトールの組み合わせ（Ｃ２）は、細胞サイズを有意に増加させた（高浸透圧対照の１１１％−表５）が、同じ濃度３ｍｇ／ｍｌのＬ−プロリンは細胞サイズを有意には増加させなかった。１０ｍｇ／ｍｌのＣ２組み合わせ（３ｍｇ／ｍｌのＬ−プロリンを含む）はまた、細胞生存率に対し、３ｍｇ／ｍｌのＬ−プロリンよりも有意に高い（Ｌ−プロリン３ｍｇ／ｍｌの１３４％）保護効果を示した。
【０２１２】
結果−オスモライト組み合わせのＵＶＢ照射に対する保護
対照、及びＬ−プロリン（３ｍｇ／ｍｌ若しくは１０ｍｇ／ｍｌ）によって、又はオスモライトのＣ１組み合わせ（全オスモライト１０ｍｇ／ｍｌ）によってプレインキュベートした細胞の、非照射対照条件並びに非照射及び正常浸透圧対照条件における、細胞サイズに対する評価の結果を表８に示す。
【０２１３】
【表８】
2021514970.tif 000009
【０２１４】
表９は、対照、及びＬ−プロリン（３ｍｇ／ｍｌ又は１０ｍｇ／ｍｌ）によって、又はオスモライトのＣ１組み合わせ（全オスモライト１０ｍｇ／ｍｌ）によってプレインキュベートされた細胞の、非照射対照条件における、細胞生存に対する評価の結果を示す。
【０２１５】
【表９】
2021514970.tif 000010
【０２１６】
細胞を、２５０ｍＪ／ｃｍ２のＵＶＢ照射単独又は高浸透圧ストレスと組み合わせたＵＶＢ照射に付した場合、Ｌ−プロリンでは明らかな効果は観察されなかった（表８）。２５０ｍＪ／ｃｍ２のＵＶＢに応答して組み合わせＣ２（１０ｍｇ／ｍｌ）の細胞サイズ及び細胞生存率に対する効果が誘導された（それぞれ照射対照の１１３％及び１０７％（それぞれ表８及び表９））ことは注目できよう。表９に示すように、細胞生存に対する組み合わせＣ２の効果は、Ｌ−プロリン３ｍｇ／ｍｌの効果よりも有意に高い（照射対照の＋１０３％）。
【０２１７】
オスモライト組み合わせＣ２はまた、ＵＶＢ（２５０ｍＪ／ｃｍ２）及び高浸透圧ストレス（ＮａＣｌ  １５０ｍＭ）の組み合わせに対して保護効果を示し、高浸透圧及び照射対照の＋１０５％という細胞サイズの増加を示した（表８）。
【０２１８】
実施例４
再構築ヒト表皮（ＲＨＥ）のカフェイン拡散試験
表皮は、物理的及び透過性のバリアを提供する。このバリアは、角化又は表皮分化として知られるプロセスでケラチノサイトを最終的に分化させることによって連続的に再生される。表皮には、タンパク質（すなわち、クローディン、デスモグレイン、フィラグリンなど）、脂質（すなわち、セラミド）及びプロテアーゼを含む、バリア機能に重要な複数の成分が存在する。表皮は適正に機能すると、水分の蒸散を防ぎ、アレルゲン及び細菌の侵入に対するバリアとなる。
【０２１９】
カフェインはその活性及び皮膚バリアに浸透する能力のために、化粧品において使用が増えている成分である。したがって、カフェインは、強度とも呼ばれる皮膚バリア透過性を評価する参照分子として使用される。表皮は皮膚の主なバリアであり、再構築表皮モデル（ＲＨＥ）を用いて主な皮膚バリア特性をインビトロで複製する。
再構築された表皮を介した局所的に適用されたカフェインの拡散は、表皮バリア機能を強化する化合物の能力を調べる好適な方法を示す。表皮構造及びバリア機能が強くなればなるほど、カフェインはそれを通って拡散することができなくなる。バリアが強くなると、カフェインの拡散は、より遅くなるか又はより減少する。
【０２２０】
本実施例において、本発明者らは、放射性カフェイン（［１４Ｃ］カフェイン）を表皮（ＲＨＥ）表面に局所的に置いた後、それがＲＨＥから内部に拡散するのを観察することによる、表皮バリア機能に対するオスモライトの組み合わせ（組み合わせＣ１及びＣ２）並びに参照オスモライト組成物（３ｍｇ／ｍｌ又は１０ｍｇ／ｍｌのＬ−セリン；１０ｍｇ／ｍｌのベタイン）の効果の評価について記載する。下清中のカフェインの量（ｃｐｍ−カウント毎分）を測定することによってカフェインの拡散を計算し、次いで、このデータをバリア機能（対照％）に変換することができる。
【０２２１】
生物学的モデル
使用された表皮は、３７℃、５％ＣＯ２の培養条件に置かれた、「ＲＨＥ」と呼ばれる再構築ヒト表皮、０日齢、バッチｎ°０１０１５−４４４であった。アッセイ培地は、Ｂｉｏａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅｓ維持培地であった。
【０２２２】
培地及び処理
０日目（大気／液体界面に置いたとき）のＲＨＥを、化合物の組み合わせ又は参照（２００μｇ／ｍｌのビタミンＣ）を含有するか又は含有しない（対照）アッセイ培地に置いた。これは、局所適用と区別するため、全身適用と呼ばれる。次いで、ＲＨＥを７日間インキュベートし、３日目及び５日目に処理を更新した。全ての実験条件をｎ＝３で行った。
【０２２３】
カフェイン拡散
インキュベーション終了時（７日目）に、放射性カフェイン（［１４Ｃ］カフェイン）を各表皮の表面に適用した。下清に含まれる放射能を、インキュベーションの３０分、１、２、３、４、５、６、７及び８時間後に、液体シンチレーションによって測定した。
【０２２４】
バリア機能の算出
バリア機能は、以下の式に従って計算される：
【数１】
2021514970.tif 000011
【０２２５】
アッセイの検証
非処置条件下での対照再構築ヒト表皮（ＲＨＥ）を介するカフェイン拡散は、全動的期間の間、進行性であった。２００μｇ／ｍｌで試験した、ビタミンＣによるＲＨＥの全身処置は、この拡散を有意に減少させ、したがって、表皮バリア機能の増加を強調した。これらの結果は予想され、アッセイの妥当性が確認された。
【０２２６】
結果
結果を表１０に示すが、結果は、アッセイの実験条件下での、３及び１０ｍｇ／ｍｌ（それぞれＣ２及びＣ１）で試験したＬ−プロリン＋Ｌ−セリン＋ベタイン＋イノシトールのオスモライト組み合わせによるＲＨＥの全身処理により、最初の２時間の間にカフェイン拡散の減少が誘導され、３０分及び１時間で統計的に有意な効果を示したことを示す。
【０２２７】
３ｍｇ／ｍｌで試験した、単一のオスモライト、ベタインのみを含む組成物によるＲＨＥの全身処置では、３０分後のみ、ＲＨＥを介したカフェイン拡散の減少が誘導された。インキュベーションのより後の時点においても、より大きい濃度（１０ｍｇ／ｍｌ）に対する応答であっても、阻害効果は観察されなかった。３及び１０ｍｇ／ｍｌで試験した、単一のオスモライト、Ｌ−プロリンのみを含む組成物によるＲＨＥの全身処置では、ＲＨＥを介したカフェイン拡散は減少しなかった。
【０２２８】
さらに、明らかに、全ての時点で、オスモライト組み合わせのバリア機能に対する効果がＬ−プロリンよりも有意に高くなっている。
−組み合わせＣ２（３ｍｇ／ｍｌ）は、３０ｍｉｎ、１ｈ、２ｈ及び３時間ではＬ−プロリン（３ｍｇ／ｍｌ）よりも良好に機能し、また、最初の３０ｍｉｎ及び１時間ではＬ−プロリン（１０ｍｇ／ｍｌ）よりも良好に機能している。
−組み合わせＣ１（１０ｍｇ／ｍｌ）は、８時間（試験終了）までの全ての時点でＬ−プロリン（３ｍｇ／ｍｌ）よりも良好に機能し、４時間（含まれる）まではＬ−プロリン（１０ｍｇ／ｍｌ）よりも良好に機能している。
−組み合わせＣ１及びＣ２はまた、２、３及び５時間でベタイン（１０ｍｇ／ｍｌ）よりも有意に良好に機能している。
【０２２９】
【表１０−１】
2021514970.tif 000012
【０２３０】
【表１０−２】
2021514970.tif 000013
【０２３１】
【表１０−３】
2021514970.tif 000014
【０２３２】
表１０に示すように、３０分でのＣ１のバリア機能は１００％での対照に対して１５４％であり、これは、３０分後にカフェイン拡散が５４％減少したことを示している。さらに、表１０に示すように、オスモライト組み合わせＣ１（これは、１ｗｔ％で実施例のスキンケア組成物の有効量を含む製剤又は製品の代表である）は、最初の４時間の間、カフェイン拡散の減少に寄与しており、したがって、皮膚バリア機能を改善するのに役立つ。
【０２３３】
実施例１のスキンケア組成物の有効量が皮膚のバリア機能の改善に役立ち得るというさらなる証拠が、チョップスティック型電極を用いたケラチノサイト培養物（ＮＨＥＫ）上の経上皮電気抵抗（ＴＥＥＲ）の測定から得られた。タイトジャンクションは顆粒層におけるケラチノサイトの細胞間結合である。タイトジャンクションの強度は、皮膚バリア機能に関連する。タイトジャンクション強度を、細胞培養インサートで培養した正常ヒト表皮ケラチノサイト培養物で試験した。細胞の分化及び細胞間のタイトジャンクションの形成を、１．４５ｍＭのＣａＣｌ２を適用することにより、よく知られた方法で誘導した。分化開始後３日目に試験溶液を添加し、チョップスティック型電極を用いてタイトジャンクションの強度を測定した。１ｗｔ％での実施例１のスキンケア組成物の有効量の適用により、１％スキンケア組成物を含まない培地対照（それぞれ−５％、−７％及び１４％を有する）に対して、２８％（２時間で）、２８％（３時間で）及び４３％（５時間で）のＴＥＥＲ％がもたらされた。このデータは、５時間後に２９％のＴＥＥＲ増加（４３％対１４％）が有効量のスキンケア組成物で観察されたことを示した。このデータはさらに、実施例１のスキンケア組成物の有効量がタイトジャンクションの強度の増加に寄与し、それによって皮膚のバリア機能の改善を助けることを示した。
【０２３４】
実施例５
エクスビボでの生きたヒト皮膚外植片における２つの製品の抗汚染活性の評価
製品
研究の間、製品を室温で保存した。製品Ａ（表１１）を水で希釈して、以下の濃度の製品を得た：製品Ｐ１＝Ａ４％、製品Ｐ２＝Ａ２％及び製品Ｐ３＝Ａ１％。製品Ｂを水で希釈して、以下の濃度の製品を得た：製品Ｐ４＝Ｂ１％（１０ｍｇ／ｍｌ）、製品Ｐ５＝Ｂ０．５％（５ｍｇ／ｍｌ）及び製品Ｐ６＝Ｂ０．３％（３ｍｇ／ｍｌ）。
【０２３５】
【表１１】
2021514970.tif 000015
【０２３６】
製品Ｂ：Ｌ−プロリン
外植片の調製
平均直径１４ｍｍ（±１ｍｍ）の５９のヒト皮膚外植片を、４７歳の白人女性の腹壁形成術で調製した。外植片を、湿った５％−ＣＯ２雰囲気中、３７℃のＢＥＭ培養培地中で生存させた。表１２に示すように、外植片を５つのバッチに分配した。
【０２３７】
【表１２】
2021514970.tif 000016
【０２３８】
汚染物質
【０２３９】
【表１３】
2021514970.tif 000017
【０２４０】
溶液Ａ（ＩＣＰマルチエレメントスタンダードＶ）は、炭化水素（Ｂ＋Ｃ＋Ｄ）を追加した重金属の混合物である。この汚染物質混合物の各成分の組成及び濃度を以下に示す。
【０２４１】
炭化水素及びディーゼル粒子を追加したＩＣＰマルチエレメントスタンダードＶ  Ｃｅｒｔｉ  Ｐｕｒ（登録商標）溶液（Ｍｅｒｃｋ；リファレンス１．１０７１４．０５００；バッチＨＣ３０９２０２）の各化合物の外植片に適用した最終濃度：
重金属
Ａｌ  ０．０１ｍｇ／ｍＬ
ＡＳ  ０．０１ｍｇ／ｍＬ
Ｂ  ０．００１ｍｇ／ｍＬ
Ｂａ  ０．００１ｍｇ／ｍＬ
Ｂｅ  ０．０００５ｍｇ／ｍＬ
Ｃａ  ０．００５ｍｇ／ｍＬ
Ｃｄ  ０．００１ｍｇ／ｍＬ
Ｃｒ  ０．００１ｍｇ／ｍＬ
Ｃｕ  ０．００１ｍｇ／ｍＬ
Ｆｅ  ０．００１ｍｇ／ｍＬ
Ｈｇ  ０．００２５ｍｇ／ｍＬ
Ｋ  ０．０４９５ｍｇ／ｍＬ
Ｌｉ  ０．００１ｍｇ／ｍＬ
Ｍｇ  ０．０００５ｍｇ／ｍＬ
Ｍｎ  ０．０００５ｍｇ／ｍＬ
Ｎａ  ０．０１ｍｇ／ｍＬ
Ｎｉ  ０．００２５ｍｇ／ｍＬ
Ｐ  ０．００５ｍｇ／ｍＬ
Ｐｂ  ０．０１ｍｇ／ｍＬ
Ｓｃ  ０．０００５ｍｇ／ｍＬ
Ｓａ  ０．０１ｍｇ／ｍＬ
Ｓｒ  ０．０００５ｍｇ／ｍＬ
Ｔｅ  ０．０１ｍｇ／ｍＬ
Ｔｉ  ０．００１ｍｇ／ｍＬ
Ｙ  ０．０００５ｍｇ／ｍＬ
Ｚｎ  ０．００１ｍｇ／ｍＬ
炭化水素：
ベンゼン  １μＬ／ｍＬ
キシレン  １μＬ／ｍＬ
トルエン  １μｌ／ｍＬ
【０２４２】
外植片の処理
０日目に、製品Ｐ１〜Ｐ６を含む又は含まない２ｍＬの培養培地に外植片を入れた。対照はいかなる処理も受けなかった。試験製品を、２μｌ／ｃｍ２基準で局所適用し、０、１、２、３及び４日目に１日２回（朝及び夕）、小さなへらを用いて広げた。汚染物質の曝露後２日目に培養培地を半分新しくし（１ｍＬ／ウェル）、４日目に完全に新しくした（２ｍＬ／ウェル）。
【０２４３】
皮膚外植片の汚染物質への曝露
４日目に、バッチＭＬ及びＰＭＬの外植片を、９００μｌのＨＢＳＳと共に３Ｄグリッド上に置き、ＰｏｌｌｕＢｏｘ（登録商標）システム中に置いた。３ｍＬの溶液「ＭＬ」（１５０μｌ／ｍｌのＮａＣｌ  ０．９％を補充）を、以下の図に示すように、１時間半、蒸発によって曝露した。曝露の間、１ウェル当たり９００μｌのＨＢＳＳ溶液が入った１２ウェル培養プレートに、バッチＴ及びＰの外植片を入れた。曝露の終わりに、全ての外植片を、１ウェルあたり２ｍｌの新鮮なＢＥＭ培地中で標準培養条件下のインキュベーターに戻した。
【０２４４】
試料採取
０日目に、バッチＴ０から３つの外植片を収集し、２つの部分に切断した。半分を緩衝ホルマリン中に固定し、半分を−８０℃で凍結した。５日目に、全てのバッチの４つの外植片を収集して０日目と同じ方法で処理し、全てのバッチから２ｍｌの培養培地を収集し、ＭＤＡのために−８０℃で保存した。
【０２４５】
組織学的プロセシング
試料を緩衝ホルマリン中で２４時間固定した後、脱水し、文献ＭＯ−Ｈ−１４９に従ってＬｅｉｃａ  ＴＰ１０２０脱水オートマットを用いてパラフィンに浸した。Ｌｅｉｃａ  ＥＧ  １１６０包埋ステーションを用いて試料を包埋した。Ｌｅｉｃａ  ＲＭ  ２１２５  Ｍｉｎｏｔ型ミクロトームを用いて５μｍ厚の切片を作製し、この切片をＳｕｐｅｒｆｒｏｓｔ（登録商標）組織学的スライドガラス上に載置した。Ｌｅｉｃａ  ＤＭＬＢ又はＯｌｙｍｐｕｓ  ＢＸ４３顕微鏡を用いて顕微鏡観察を行った。写真を数値ＤＰ７２  Ｏｌｙｍｐｕｓカメラでデジタル化し、ＣｅｌｌＤ保存ソフトウェア（Ｏｌｙｍｐｕｓ  Ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ、Ｍａｔｒｉｘ  Ｏｐｔｉｃｓ（Ｍ）ＳｄｎＢｈｄ、Ｔａｍａｎ  Ｍａｙｈａｎｇ、Ｍａｙｌａｓｉａ）で解析した。
【０２４６】
評価／エンドポイント
・ＭＤＡの生化学的アッセイ
マロンジアルデヒド（ＭＤＡ）は、細胞膜の脂質過酸化から生じる生成物である。酸化ストレス（ＵＶＡ、汚染物質、重金属、殺虫剤など）によって誘導されるフリーラジカルは多価不飽和脂質を分解し、ヒドロペルオキシドを生成し、ラジカル中間体及びアルデヒド、特にＭＤＡを形成する（Ｊａｎｅｒｏ．Ｆｒｅｅ  Ｒａｄｉｃ  Ｂｉｏｉ  Ｍｅｄ．１９９０；９（６｝：５１５−４０）。ＴＢＡＲｓ（チオバルビツール酸反応種）アッセイの強化法でＭＤＡアッセイを行った。ＭＤＡを、ＴＢＡＲｓ溶液（チオバルビツール酸、塩酸及びトリクロロ酢酸）の添加によってＨＢＳＳ培地中でアッセイし、水浴（８０℃、１５分間）中に置いた。脂質過酸化に関連しない多くの物質（グルコースなど）がチオバルビツール酸（チオバルビツール酸試薬＝ＴＢＡＲＳ）と反応するので、アッセイの特異性を高めるために、ブタノールでの液体／液体抽出によってＭＤＡを抽出した。ブタノール中のＭＤＡを、Ｔｅｃａｎ  Ｉｎｆｉｎｉｔｅ  Ｍ２００  Ｐｒｏマイクロプレートリーダーを用い、分光蛍光分析（励起：５１５ｎｍ、発光：５５０ｎｍ）により測定した。このアッセイにより、３日目の培養培地ＢＥＭに含まれるＭＤＡを、１バッチ当たり４つの外植片について測定した。ＭＤＡ濃度を、ｐｍｏｌ（ＭＤＡ）／ｍｌ（培地）で表した。該当するバッチ：５日目の全てのバッチ、１バッチ当たり４つの外植片。
【０２４７】
・Ｎｒｆ２の免疫染色
Ｎｒｆ２（赤血球系転写因子２関連転写因子）は、酸化ストレスに対する細胞応答における転写因子である。酸化ストレス下で、Ｎｒｆ２は活性化され、その阻害物質（Ｋｅａｐ１）から分離し、核に移行し、そこでＡＲＥ位置（抗酸化応答エレメント、全抗酸化系のマスターレギュレーター）でＤＮＡに結合する。Ｎｒｆ２は、ＵＶＡ線誘発損傷からヒト皮膚ケラチノサイトを保護する役割を有する（Ｔｉａ  ｅｔ  ａｌ．２０１１．Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ  Ｔｒｅｎｄｓ  ５：２３−２９）。Ｎｒｆ２誘導を、ヒト皮膚外植片の生きている表皮を以下のように免疫染色することによって分析した：Ｎｒｆ２免疫染色は、パラフィン切片に対し、ＰＢＳ−ＢＳＡ  ０．３％−Ｔｗｅｅｎ２０  ０．０５％で１：２００に希釈した、モノクローナル抗体の抗Ｎｒｆ２（ａｂｃａｍ、リファレンス  ａｂ７６０２６、クローン  ＥＰ１８０９Ｙ）を用い、室温で１時間、Ｖｅｃｔａｓｔａｉｎ  ＲＴＵ  Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ  ＶＥＣＴＯＲストレプトアビジン／ビオチンシステムにより行い、紫色ペルオキシダーゼ基質のＶＩＰ（Ｖｅｃｔｏｒ  ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、ＳＫ４６００）を用いて可視化した。免疫染色を自動スライドプロセシングシステム（Ａｕｔｏｓｔａｉｎｅｒ、Ｄａｋｏ）を用いて行い、顕微鏡観察によって評価した。関係するバッチ：全てのバッチ
【０２４８】
・ＡＨＲの免疫染色
アリール炭化水素受容体（ＡｈＲ）は、多環芳香族炭化水素及びオゾンを含むいくつかの化合物に曝露後の分子応答に関与する転写因子である（Ｈａａｒｍａｎｎ−Ｓｔｅｍｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．２０１２．ＪＩＤ  １３２：７−９；Ａｆａｑ  ｅｔ  ａｌ．，２００９  ＪＩＤ  １２９：２３９６−２４０３）。ＡｈＲはチトクロームファミリー遺伝子とＣＹＰ４５０解毒酵素の活性化に関与している。汚染の存在で、ＡｈＲはタンパク質複合体（ＨＳＰ９０）から分離し、核に移行し、ＡＲＮｔと二量体化し、標的遺伝子上のＤＮＡに結合する（生体異物に反応して活性化されるチトクロームファミリー）（Ｉｋｕｔａ  ｅｔ  ａｌ．，２００９．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ．７７：５８８−５９６）。ＡｈＲ発現を、ヒト皮膚外植片の生きている表皮を以下のように免疫染色することによって分析した：ＡＨＲ免疫染色は、パラフィン切片に対し、ＰＢＳ−ＢＳＡ  ０．３％−Ｔｗｅｅｎ２０  ０．０５％で１：１００に希釈した、モノクローナル抗体の抗ＡＨＲ（ＴｈｅｒｍｏＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、リファレンス  ＭＡ１−５１４、クローン  ＲＰＴ１）を用い、室温で１時間、Ｖｅｃｔａｓｔａｉｎ  ＲＴＵ  Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ  ＶＥＣＴＯＲストレプトアビジン／ビオチンシステムにより行い、紫色ペルオキシダーゼ基質のＶＩＰ（Ｖｅｃｔｏｒ  ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、リファレンス  ＳＫ４６００）を用いて可視化した。免疫染色を自動スライドプロセシングシステム（Ａｕｔｏｓｔａｉｎｅｒ、Ｄａｋｏ）を用いて行い、顕微鏡観察によって評価した。関係するバッチ：全てのバッチ
【０２４９】
・ＨＯ−１（ヘムオキシゲナーゼ−１）の免疫染色
ヘムオキシゲナーゼは、細胞抗酸化分子を生成する第ＩＩ相皮膚抗酸化酵素である。ＨＯ−１の発現は、細胞酸化ストレスの特異的分子指標と考えられている。ヘムオキシゲナーゼ（ＨＯ）は、ヘムをビリベルジンに分解する遍在性のレドックス制御酵素であり、ビリベルジンは、ビリベルジンレダクターゼ、一酸化炭素、及び鉄によってビリルビンに急速に変換される（Ｋｕｔｔｙ  ｅｔ  ａｌ，１９９５．ＰＮＡＳ．９２：１１７７−１１８１；Ｍａｉｎｅｓ，１９９７．Ａｎｎ  Ｒｅｖ  Ｐｈａｒｍａｃｏ／Ｔｏｘｉｃｏ／３７：５１７−５５４）。哺乳動物においては、ＨＯ−１  ｍＲＮＡの発現が、皮膚を含む様々な細胞及び組織において報告されている（Ｈａｎｓｅｌｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ，２００１．Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｊ  ３５３：４５９−４６６）。その発現は細胞の酸化ストレスの最も感度が高く信頼できる指標と考えられている（Ｋｕｔｔｙ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５．ＰＮＡＳ．９２：１１７７−１１８１；Ｍａｉｎｅｓ，１９９７．Ａｎｎ  Ｒｅｖ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｔｏｘｉｃｏｌ  ３７：５１７−５５４）。ＵＶＡ照射及び他のオキシダントが皮膚におけるＨＯ−１  ｍＲＮＡの発現を上方制御すること（Ｋｅｙｓｅ  ａｎｄ  Ｔｙｒｒｅｌｌ，１９８９；Ｋｅｙｓｅ  ｅｔ  ａｌ，１９９０）、及びＨＯ−１  ｍＲＮＡの発現が培養ヒトケラチノサイトにおいて一酸化窒素によって誘導されること（Ｃｌａｒｋ  ｅｔ  ａｌ，１９９７）が示されている。ＨＯ−１の発現を、ヒト皮膚外植片の生きている表皮を以下のように免疫染色することによって分析した：ＨＯ−１免疫染色は、パラフィン切片に対し、ＰＢＳ−ＢＳＡ  ０．３％−Ｔｗｅｅｎ２０  ０．０５％で１：２５に希釈した、モノクローナル抗体の抗ＨＯ−１（Ｎｏｖｕｓ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ、リファレンス  ＮＢＰ１−９７５０７、クローン  ＨＯ−１−１）を用い、室温で終夜、Ｖｅｃｔａｓｔａｉｎ  ＲＴＵ  Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ  ＶＥＣＴＯＲストレプトアビジン／ビオチンシステムにより行い、紫色ペルオキシダーゼ基質のＶＩＰ（Ｖｅｃｔｏｒ  ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、リファレンス  ＳＫ４６００）を用いて可視化した。免疫染色を自動スライドプロセシングシステム（Ａｕｔｏｓｔａｉｎｅｒ、Ｄａｋｏ）を用いて行い、顕微鏡観察によって評価した。関係するバッチ：全てのバッチ
【０２５０】
・ＭＴ−１Ｈの免疫染色
メタロチオネイン（ＭＴ）は、２０個のシステイン残基からなる金属結合ドメインを有する独特の熱安定性タンパク質である。ＭＴＦ−１（金属転写因子）は、酸化ストレスに対する防御に関与する一連の遺伝子の転写を調節するＺｎ応答性タンパク質である。より具体的には、ＭＴＦ−１は、ＭＲＥ（金属応答エレメント）と呼ばれる領域に位置するメタロチオネイン（ＭＴ）遺伝子の転写を制御する。ＭＴ−１Ｈは、亜鉛及び銅などの必須金属、並びにカドミウム及び水銀などの有害金属に結合し、それらによって誘導されるその高い親和性のために、必須金属のホメオスタシス機能に、また有毒金属に対する解毒に、重要な役割を果たしていると考えられている。ＭＴ−１Ｈの発現を、ヒト皮膚外植片の生きている表皮を以下のように免疫染色することによって分析した：ＭＴ−１Ｈ免疫染色は、パラフィン切片に対し、ＰＢＳ−ＢＳＡ  ０．３％−Ｔｗｅｅｎ２０  ０．０５％で１：２００に希釈した、モノクローナル抗体の抗ＭＴ−１Ｈ（Ｄａｋｏ、リファレンス  Ｍ０６３９、クローン  Ｅ９）を用い、室温で１時間、Ｖｅｃｔａｓｔａｉｎ  ＲＴＵ  Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ  ＶＥＣＴＯＲストレプトアビジン／ビオチンシステムにより行い、紫色ペルオキシダーゼ基質のＶＩＰ（Ｖｅｃｔｏｒ  ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、リファレンス  ＳＫ４６００）を用いて可視化した。免疫染色を自動スライドプロセシングシステム（Ａｕｔｏｓｔａｉｎｅｒ、Ｄａｋｏ）を用いて行い、顕微鏡観察によって評価した。関係するバッチ：全てのバッチ。
【０２５１】
画像解析
画像解析は、ＣｅｌｌＤ保存ソフトウェア（Ｏｌｙｍｐｕｓ  Ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ、Ｍａｔｒｉｘ  Ｏｐｔｉｃｓ（Ｍ）ＳｄｎＢｈｄ、Ｔａｍａｎ  Ｍａｙｈａｎｇ、Ｍａｙｌａｓｉａ）を用い、各バッチの全ての画像（９〜１２画像）について行った。外植片の各バッチについて、染色によって覆われた目的領域のパーセンテージ（染色された表面のパーセンテージ）を、画像分析によって決定した。各処理（Ｐ）の染色表面パーセンテージ（Ｓｕｒｆ％）を、未処理条件（Ｔ＝対照未処理条件）の染色表面パーセンテージと比較した（Ｐ対Ｔ比較）。同じ比較を、処理した曝露バッチ（ＰＭＬ＝重金属の存在下でオスモライト処理）と処理なし曝露バッチ（ＭＬ＝オスモライト処理なしで重金属に曝露）で行った（ＰＭＬ対ＭＬ比較）。
【０２５２】
誘発比較
汚染物質に曝露された条件における未曝露レベルを考慮に入れるために、ΔＭＬを以下のように計算した。未処理条件では、未露光条件（Ｔ）の平均Ｓｕｒｆ％値を、汚染物質に曝露された条件（ＭＬ）の各Ｓｕｒｆ％値から差し引いた。これは、汚染物質曝露によって誘発されるＳｕｒｆ％の変動＝ΔＭＬを表す。（汚染曝露条件と非汚染条件との比較。ΔＭＬ＝（汚染条件結果）−（非汚染条件結果））。各処理ＰでのΔＭＬを同じ方法を使用して計算し、ΔＰＭＬ、すなわちＰで処理した場合の汚染物質曝露によって誘発されるＳｕｒｆ％の変動を得た。したがって、平均ΔＭＬを、平均ΔＰＭＬと比較することができる（ΔＰＭＬ対ΔＭＬ。）
【０２５３】
解析バッチの一覧
ＡｈＲ免疫染色の解析
解析バッチ：５日目のＴ、Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、Ｐ６、ＭＬ、Ｐ１ＭＬ、Ｐ２ＭＬ、Ｐ３ＭＬ及びＰ６ＭＬ（１０バッチ、３外植片／バッチ、したがって３０外植片）（ＴＪ５、Ｐ１Ｊ５、Ｐ２Ｊ５、Ｐ３Ｊ５、Ｐ６Ｊ５、ＭＬＪ５、Ｐ１ＭＬＪ５、Ｐ２ＭＬＪ５、Ｐ３ＭＬＪ５及びＰ６ＭＬＪ５と称する）。ＴＪ５：５日目（Ｄ５）の非汚染非処理対照；Ｐ１Ｊ５：Ｄ５の製品Ａ  ４％、非汚染；Ｐ２Ｊ５：Ｄ５の製品Ａ  ２％、非汚染；Ｐ３Ｊ５：Ｄ５の製品Ａ  １％、非汚染；Ｐ６Ｊ５：Ｄ５の製品Ｂ  ０．３％、非汚染；ＭＬＪ５：Ｄ５の汚染非処理対照バッチ；Ｐ１ＭＬＪ５：Ｄ５の製品Ａ  ４％／汚染；Ｐ２ＭＬＪ５：Ｄ５の製品Ａ  ２％／汚染；Ｐ３ＭＬＪ５：Ｄ５の製品Ａ  １％／汚染；Ｐ６ＭＬＪ５：Ｄ５の製品Ｂ  ０．３％／汚染。
【０２５４】
Ｎｆｒ２免疫染色の解析
解析バッチ：５日目のＴ、Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、ＭＬ、Ｐ１ＭＬ、Ｐ２ＭＬ及びＰ３ＭＬ（８バッチ、３外植片／バッチ、したがって２４外植片）（ＴＪ５、Ｐ１Ｊ５、Ｐ２Ｊ５、Ｐ３Ｊ５、ＭＬＪ５、Ｐ１ＭＬＪ５、Ｐ２ＭＬＪ５及びＰ３ＭＬＪ５と称する）。
【０２５５】
ＨＯ−１免疫染色の解析
解析バッチ：５日目のＴ、Ｐ２、ＭＬ、Ｐ２ＭＬ（４バッチ、３外植片／バッチ、したがって１２外植片）（ＴＪ５、Ｐ２Ｊ５、ＭＬＪ５、Ｐ２ＭＬＪ５と称する）。
【０２５６】
ＭＴ−１Ｈ免疫染色の解析
解析バッチ：５日目のＴ、Ｐ２、ＭＬ、Ｐ２ＭＬ（４バッチ、３外植片／バッチ、したがって１２外植片）（ＴＪ５、Ｐ２Ｊ５、ＭＬＪ５、Ｐ２ＭＬＪ５と称する）。
結果を表１４に示す。
【０２５７】
【表１４】
2021514970.tif 000018
【０２５８】
ＭＤＡ分析
重金属なしＭＬで、製品Ｐ１〜Ｐ６がＭＤＡ濃度の変動を誘導すると考える場合、各外植片についてＭＤＡの誘導（ＭＬあり又はＭＬなし）を比較し、これらの減少の平均をブランクバッチのそれと比較することが可能である。ブランクバッチＴＪ５の平均を計算した（１５４．０ｎｍｏｌ／Ｌ）。次いで、ＭＬＪ５の各外植片について、この平均値をＴＪ５から差し引いた。これは、ＭＬを含まないバッチの平均と比較して、各外植片についてＭＬによって誘導されるＭＤＡのデルタ（増加）を計算することに対応し、それはΔＭＬである。同じ方法を用いて、ＭＤＡ誘導の平均デルタを、製品Ｐ１〜Ｐ６の存在下で計算した（ΔＰＭＬ）。次いで、これらの平均デルタを、処理なしのＭＤＡ誘導の平均デルタ（ΔＭＬ）と比較した。
【０２５９】
汚染物質の混合物への皮膚外植片の曝露は、ＭＤＡΔＨＭ（ｎｍｏｌ／Ｌ）が対照試料を表す７３．６であったので、脂質酸化に対して有意な効果を有した。製品Ａ−Ｐ１は、４０．９のＭＤＡΔＨＭ（ｎｍｏｌ／Ｌ）を示した。
【０２６０】
表１４に示す製品Ａ（汚染物質曝露後）に関して、製品Ｐ１はＭＤＡの増加を４４％有意に減少させた。製品Ｐ２は、ＭＤＡの増加を非有意で１８％減少させた。製品Ｐ３は、ＭＤＡの増加を非有意で８％減少させた。したがって、製品Ａは、用量依存性抗酸化効果を示す。さらに、製品Ａは、汚染物質曝露によって誘発される酸化ストレスを有意に減少させた。これらのデータは、汚染誘発脂質過酸化の減少からも明らかなように、プロリン、セリン、ベタイン及びイノシトールの組み合わせを含む製品が、皮膚外植片に曝露された場合、酸化ストレスから皮膚を保護するのを助けることができることを示した。
【０２６１】
製品Ｂ（汚染物質曝露後）に関して、製品Ｐ４はＭＤＡの増加を３４％減少させた。製品Ｐ５はＭＤＡの増加を４８％減少させ、製品Ｐ６はＭＤＡの増加を６２％減少させた。したがって、製品Ｂは、有意な逆用量依存性抗酸化効果を示す。濃度０．３％で最も強い効果が得られ、濃度１％で最も弱い効果が得られた。
【０２６２】
Ｎｒｆ２誘導分析
汚染物質なし（重金属曝露なし、−ＨＭ）。
５日目に、対照処理は６．４％の染色表面を示し、Ｐ３は７．５％の染色表面を示し、Ｐ２は９％＊の染色表面を示し、Ｐ１は１０．９＊％の染色表面を示した。
【０２６３】
表１４に示すように、Ｎｒｆ２発現に対する製品適用の効果のバッチＴＪ５に対する比較は、Ｐ対Ｔの列に示され、製品Ｐ１は７１％＊＊の有意な増加を誘導し、製品Ｐ２は４１％＊の有意な増加を誘導し、製品Ｐ３は１７％の非有意な増加を誘導したことを示している。このデータは、製品ＡがＮｒｆ２発現に対し、用量依存性刺激効果を示すことを示しており、製品Ａが防御酵素の量を増加させ、それによって皮膚が汚染物質を無害化しようとするのを助けることを示唆している。
【０２６４】
汚染物質曝露後（重金属曝露あり、＋ＨＭ）
５日目に、対照＋ＨＭ処理は１０．５％の染色表面を示し、Ｐ３＋ＨＭは８．５％の染色表面を示し、Ｐ２＋ＨＭは９．４％の染色表面を示し、Ｐ１は１６．０＊＊％の染色表面を示した。
【０２６５】
製品で処理していないバッチと比較した、汚染物質によって誘導されるＮｒｆ２発現に対する製品適用の効果（ΔＰＭＬ対ΔＭＬ）を表１４に示す：製品Ｐ１はＮｒｆ２誘導を２４％ｎｓ非有意に増加させた。
【０２６６】
製品Ｐ２はＮｒｆ２誘導を８９％＊有意に減少させ、これは実施例１のスキンケア組成物の有効量が汚染誘導Ｎｒｆ２増加を８９％有意に制限することを示している。製品Ｐ３は、Ｎｒｆ２誘導を７５％＊有意に減少させた。
【０２６７】
これらのデータは、汚染物質曝露後、有効量のスキンケア組成物が用量依存性効果でＮｒｆ２誘導に対する汚染物質の影響を抑制し、有効量のスキンケア組成物が２ｗｔ％であると、Ｎｒｆ２誘導に対する汚染物質の影響をほぼ完全に抑制することを示している。
【０２６８】
ＡＨＲ分析
汚染物質なし（重金属曝露なし、−ＨＲ）
５日目に、対照処理は４１％の染色表面を示し、Ｐ３は５８％の染色表面を示し、Ｐ２は７０％＊の染色表面を示し、Ｐ１は８２＊％の染色表面を示した。
【０２６９】
表１４は、Ｄ５における、バッチＴＪ５と比較した、ＡｈＲ発現に対する製品適用の効果を示す。表１４に示すように、製品Ｐ１（４％のＡ）は、ＡｈＲ発現の９７％の有意な増加を誘導した。製品Ｐ２（２％のＡ）は、ＡｈＲ発現の７０％の有意な増加を誘導した。製品Ｐ３（１％のＡ）は、ＡｈＲ発現の４０％の有意な増加を誘導した。製品Ｐ６（０．３％のＢ）は、ＡｈＲ発現の６３％の有意な減少を誘導した。
Ｐ２対Ｐ６：ＡＨＲ発現は７８％＊＊有意に高かった。
【０２７０】
これは、製品ＡがＡＨＲ発現に対して用量依存的な刺激効果を示したことを示しており、皮膚が汚染物質と闘おうとするのを助ける受容体（ＣＹＰ４５０のような第Ｉ相解毒酵素など）の量を増加させることを示唆している。
【０２７１】
製品Ｂは、ＡＨＲ発現を減少させ、汚染物質曝露に抵抗する皮膚の潜在力を低下させた。
【０２７２】
汚染物質曝露後（重金属曝露あり、＋ＨＭ）
重金属への皮膚外植片の曝露（対照汚染曝露＋ＨＭ）は、ＡｈＲが非処理対照（対照−ＨＭ）に対して１２８％＊＊誘導されたので、ＡｈＲ誘導に有意な効果を示した。５日目に、対照＋ＨＭ処理は９４．４％の染色表面を示し、Ｐ３＋ＨＭは８２．８＊＊％の染色表面を示し、Ｐ２＋ＨＭは３７．７＊＊％の染色表面を示し、Ｐ１は５１．６＊＊％の染色表面を示した。
【０２７３】
製品で処理していないバッチと比較した、汚染物質によって誘導されＡＨＲ発現に対する製品適用の効果（ΔＰＭＬ対ΔＭＬ）：製品Ｐ１（４％のＡ）はＡＨＲ誘導を１５６％＊＊有意に減少させた。製品Ｐ２（２％のＡ）はＡＨＲ誘導を１６１％＊＊有意に減少させた。製品Ｐ３（１％のＡ）はＡＨＲ誘導を５３％有意に減少させた。
【０２７４】
これらのデータは、汚染物質曝露後、有効量のスキンケア組成物が用量依存性効果でＡｈＲ誘導に対する汚染物質の影響をほぼ完全に抑制することを示している。
【０２７５】
製品Ｐ６（０．３％のＢ）は、ＡＨＲ誘導を２３％＊有意に増加させた。ΔＰ２ＭＬ対ΔＰ６ＭＬ（オスモライト組み合わせ内に０．３％のプロリン対０．３％のプロリンそれ自体で）：ＡＨＲ誘導は３０２％＊＊有意に低かった。
【０２７６】
ＨＯ−１結論
汚染物質なし（重金属曝露なし、−ＨＭ）。
５日目に、対照処理は５５．１％の染色表面を示し、Ｐ２は７６．７＊％の染色表面を示した。
【０２７７】
表１４に示すように、５日目（Ｄ５）に、バッチＴＪ５と比較した、ＨＯ−１発現に対する製品適用の効果は以下のとおりである。製品Ｐ２（２％のＡ）は３９％＊＊の有意なＨＯ−１増加を誘導し、これは、製品Ｐ２が細胞中の抗酸化剤の量を増加させ、皮膚が汚染物質の害を減少させるか又は無害にしようとするのを助けることを示唆している。
【０２７８】
製品Ｐ４（１％のＢ）は、ＨＯ−１発現に影響しないようである。
【０２７９】
汚染物質曝露後（重金属曝露あり、＋ＨＭ）。
５日目に、対照＋ＨＭ処理は９１．５＊＊％の染色表面を示し、Ｐ２＋ＨＭは６５．０＊＊％の染色表面を示した。５日目に、対照非処理（対照−ＨＭ）に対して、皮膚外植片の汚染物質曝露は６６％＊＊のＨＯ−１発現の有意な増加を誘導した（＝対照汚染曝露＋ＨＭ）（ＭＬＪ５対ＴＪ５）。
【０２８０】
表１４（汚染物質に曝露されたバッチ（ＭＬＪ５）と比較した、ＨＯ−１発現に対する製品適用の効果）に示すように、製品Ｐ２（２％のＡ）は２９％＊＊の有意な減少を誘導した。
【０２８１】
表１４（製品で処理されていないバッチと比較した、汚染物質によって誘導されるＨＯ−１発現に対する製品適用の効果（ΔＰＭＬ対ΔＭＬ））に示すように、製品Ｐ２（２％のＡ）はＨＯ−１誘導を１３２％＊＊有意に減少させた。
【０２８２】
これらのデータは、汚染物質曝露後、製品Ａ（Ｐ２）がＨＯ−１誘導に対する汚染物質の影響の抑制に寄与することを示している。製品Ｂ（Ｐ４）は、汚染物質の影響を大きく減少させたが、製品Ａよりも少なかった。
【０２８３】
ＭＴ−１Ｈ結論：
汚染物質なし（重金属曝露なし、−ＨＭ）。
５日目に、対照処理は３．２％の染色表面を示し、Ｐ２は２．４＊＊％の染色表面を示した。
【０２８４】
汚染物質曝露後（重金属曝露あり、＋ＨＭ）
５日目に、対照処理＋ＨＭは４４．７％＊＊の染色表面を示し、Ｐ２は２８．６＊＊％の染色表面を示した。
【０２８５】
５日目に、対照非処理（対照−ＨＭ）に対して、皮膚外植片の汚染物質曝露は１２９７％＊＊のＭＴ−１Ｈ発現の有意な増加を誘導した（＝対照汚染曝露＋ＨＭ）（ＭＬＪ５対ＴＪ５）。
【０２８６】
表１４（汚染物質に曝露されたバッチ（ＭＬＪ５）と比較した、ＭＴ−１Ｈ発現に対する製品適用の効果）に示すように、製品Ｐ２（２％のＡ）は３６％＊＊の有意な減少を誘導した。
【０２８７】
製品で処理していないバッチと比較した、汚染物質によって誘導されＭＴ−１Ｈ発現に対する製品適用の効果（ΔＰＭＬ対ΔＭＬ）：製品Ｐ２（２％のＡ）はＭＴ−１Ｈ誘導を３７％＊＊有意に減少させる。
【０２８８】
汚染物質曝露後、製品Ａ（Ｐ２）は、汚染物質の影響をほぼ完全に抑制する。製品Ｂ（Ｐ４）は、汚染物質の影響を大きく減少させているようだが、製品Ａよりも少ない。
【０２８９】
表１４（ＭＴ−１Ｈデータ）に示すように、汚染物質曝露後の製品Ａは、汚染物質の影響をほぼ完全に抑制した。汚染物質曝露後の製品Ｂは、汚染物質の影響を大きく減少させた。
【０２９０】
これらのデータは、金属調節マーカーＭＴ−１Ｈ（メタロチオネイン）の減少から明らかなように、プロリン、セリン、ベタイン及びイノシトールの組み合わせを含む製品が、皮膚の解毒に寄与し得ることを示した。
【０２９１】
実施例６
エクスビボでの生きたヒト皮膚外植片におけるＵＶ誘発蛋白質及びＤＮＡ損傷に対する２つの製品の有効性評価
製品
実施例５と同じ。
【０２９２】
外植片の調製
平均直径１２ｍｍ（±１ｍｍ）の４５のヒト皮膚外植片を、４１歳の白人女性の腹壁形成術で調製した。外植片を、湿った５％−ＣＯ２雰囲気中、３７℃のＢＥＭ培養培地中で生存させた。表１５に示すように、外植片を５つのバッチに分配した。
【０２９３】
【表１５】
2021514970.tif 000019
【０２９４】
外植片の処理
０日目（Ｄ０）、１日目、２日目、及び３日目（照射の３時間前）に、試験製品を、２ｍｇ／ｃｍ２の割合で、Ｄ１及びＤ２では１日２回、Ｄ０及びＤ３では１日１回、皮膚外植片の表面に局所的に適用した。ブランクバッチＴは、培養培地を新しい培地に換える以外は、いかなる処理も受けなかった。培地は２日目に半分新しくした（１ウェル当たり１ｍｌ）。
【０２９５】
ＵＶ照射
３日目に、全てのバッチの培養培地をＨＢＳＳ溶液（ハンクス平衡塩液；１外植片当たり１ｍｌ）で置き換えた。バッチ「ＵＶ」を、ＵＶシミュレーターＶｉｂｅｒｔ  Ｌｏｕｒｍａｔ  ＲＭＸ  ３Ｗを使用して、１８Ｊ／ｃｍ２の線量のＵＶＡ（４ＭＥＤ、最小紅斑線量）及び０．３Ｊ／ｃｍ２のＵＶＢ（２ＭＥＤ）でＵＶＡ＋ＵＶＢを照射した。非照射のバッチを暗所でＨＢＳＳ中に保持した。照射の終わりに、外植片を２ｍＬのＢＥＭ培地に戻した。
【０２９６】
試料採取
０日目に、バッチＴ０から３つの外植片を収集し、２つの部分に切断し、半分は−８０℃で凍結し、半分は緩衝ホルマリン溶液中に固定した。４日目に、各バッチから３つの外植片を収集してＤ０と同じ方法で処理した。
【０２９７】
組織学的プロセシング
試料を緩衝ホルマリン中で２４時間固定した後、脱水し、Ｌｅｉｃａ  ＰＥＡＲＬ脱水オートマットを用いてパラフィンに浸した。Ｌｅｉｃａ  ＥＧ  １１６０包埋ステーションを用いて試料を包埋した。Ｌｅｉｃａ  ＲＭ  ２１２５  Ｍｉｎｏｔ型ミクロトームを用いて５μｍ厚の切片を作製し、この切片をＳｕｐｅｒｆｒｏｓｔ（登録商標）組織学的スライドガラス上に載置した。凍結サンプルを、Ｌｅｉｃａ  ＣＭ  ３０５０クライオスタットを用いて７μｍ厚の切片に切断した。次いで、切片を、Ｓｕｐｅｒｆｒｏｓｔ（登録商標）ｐｌｕｓシラン化スライドガラス上に載置した。Ｌｅｉｃａ  ＤＭＬＢ又はＯｌｙｍｐｕｓ  ＢＸ４３顕微鏡を用いて顕微鏡観察を行った。写真を、ＣｅｌｌＤ保存ソフトウェアを備えた数値ＤＰ７２  Ｏｌｙｍｐｕｓカメラでデジタル化した。
【０２９８】
・ＴＵＮＥＬアッセイ（ＤＮＡ損傷アッセイ）
ＤＮＡ酸化は、ＵＶ曝露によって生成される活性酸素種（ＲＯＳ）によって促進され得る一種の損傷である。ＴＵＮＥＬアッセイを、以下のように、ヒト皮膚外植片の生きた表皮における免疫染色によって実施した：ＤＮＡ損傷を、パラフィン切片について、インサイチュー細胞死検出キット（Ｒｏｃｈｅ、リファレンス  １１  ６８４  ８１７  ９１０）を使用し、ＰＢＳで１：２に希釈したＴＵＮＥＬ試薬を用いて室温で１時間、１：４に希釈しＰＯＤコンバーター、次いで、ＶＩＰ（Ｖｅｃｔｏｒ、リファレンス  ＳＫ−４６００）により可視化して評価した。染色を顕微鏡観察によって評価した。ＴＪ４、ＴＵＶＪ４、Ｐ１ＵＶＪ４、Ｐ２ＵＶＪ４、Ｐ３ＵＶＪ４とも称する、４日目のバッチＴ、ＴＵＶ、Ｐ１ＵＶ、Ｐ２ＵＶ、Ｐ３ＵＶ（Ｔ＝非処理、非照射の対照バッチ；ＴＪ４＝４日目（Ｄ４）のＴ；ＴＵＶ：非処理、ＵＶ照射の対照バッチ；ＴＵＶＪ４＝４日目のＴＪ４；Ｐ１Ｊ４：Ｄ４の非照射の製品Ａ（４％）；Ｐ２Ｊ４：Ｄ４の非照射の製品Ａ（２％）；Ｐ３Ｊ４：Ｄ４の非照射の製品Ａ（１％）；Ｐ１ＵＶ：ＵＶ照射の製品Ａ（４％）；Ｐ１ＵＶＪ４：Ｄ４のＵＶ照射の製品Ａ（４％）；Ｐ２ＵＶ：ＵＶ照射の製品Ａ（２％）；Ｐ２ＵＶＪ４：Ｄ４のＵＶ照射の製品Ａ（２％）；Ｐ３ＵＶ：ＵＶ照射の製品Ａ（１％）；Ｐ３ＵＶＪ４：Ｄ４のＵＶ照射の製品Ａ（１％））を分析した。
【０２９９】
・カルボニル化タンパク質（ＦＴＺ）の免疫染色
タンパク質カルボニル化は、ＵＶ曝露によって生成される活性酸素種（ＲＯＳ）によって促進され得る一種のタンパク質酸化である。ＦＴＺマーカーアッセイを、以下のように、ヒト皮膚外植片の生きた表皮における免疫染色によって実施した：凍結切片のカルボニル化タンパク質を、ＭＥＳ−Ｎａ＋中、０．５μＭに希釈した抗カルボニル化タンパク質プローブ（フルオレセイン−５−チオセミカルバジド−ＦＴＺ）（Ｌｉｆｅｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、リファレンス  Ｆ−１２１）で染色し、暗所及び室温で３０分間インキュベートした。染色を落射蛍光によって観察し、顕微鏡観察によって評価した。ＴＪ４、ＴＵＶＪ４、Ｐ１ＵＶＪ４、Ｐ２ＵＶＪ４、Ｐ３ＵＶＪ４とも称する４日目のバッチＴ、ＴＵＶ、Ｐ１ＵＶ、Ｐ２ＵＶ、Ｐ３ＵＶを分析した。
【０３００】
【表１６】
2021514970.tif 000020
【０３０１】
表１６に示すように、製品Ｐ４は、ＵＶ照射によって誘発されるＤＮＡ損傷（ＴＵＮＥＬアッセイ）の増加を強力に抑制したことから明らかなように、ＵＶ誘発ＤＮＡ損傷に対して良好な活性を有した。製品Ｐ４はまた、ＵＶ照射によって誘発されるカルボニル化タンパク質の形成を阻害した。製品Ｐ５「５ｍｇ／ｍｌのＬ−プロリン」は、ＵＶ誘発ＤＮＡ損傷に対して良好な活性を示す。実際、それは、ＵＶ照射によって誘発されるＤＮＡ損傷（ＴＵＮＥＬアッセイ）の増加を完全に阻害する。さらに、それは、ＵＶ照射によって誘発されるカルボニル化タンパク質の形成をわずかに阻害する。
生成物Ｐ６「３ｍｇ／ｍｌのＬ−プロリン」は、ＵＶ誘発ＤＮＡ損傷に対して良好な活性を示し、ＵＶ誘発タンパク質損傷に対してかなり良好な活性を示す。実際、それは、ＵＶ照射によって誘発されるＤＮＡ損傷（ＴＵＮＥＬアッセイ）の増加を完全に阻害する。さらに、それは、ＵＶ照射によって誘発されるカルボニル化タンパク質の形成をわずかに阻害する。
【０３０２】
【表１７Ａ】
2021514970.tif 000021
【０３０３】
【表１７Ｂ】
2021514970.tif 000022
【０３０４】
【表１７Ｃ】
2021514970.tif 000023
【０３０５】
対照非処理非照射皮膚外植片（ＴＵＮＥＬ試験）は２５％の染色表面を示したが、対照非処理ＵＶ照射皮膚外植片は４０％の染色表面を示し、ＵＶ照射によって５８％＊＊の有意な増加が誘導されたことを示した（ＴＵＶＪ４対ＴＪ４、表１７Ｂ）。
【０３０６】
ＵＶが照射されたバッチ（ＴＵＶＪ４）と比較した、ＤＮＡ損傷の形成に及ぼす製品適用の効果を表１６に示し、製品Ｐ１が１８％＊の有意な減少を誘導し、製品Ｐ２が５８％＊＊の有意な減少を誘導し、製品Ｐ３が３９％＊＊の有意な減少を誘導することを示した。
【０３０７】
これらのデータは、４％（Ｐ１）、２％（Ｐ２）及び１％（Ｐ３）の製品ＡがＵＶ誘発ＤＮＡ損傷に対して良好な保護を示すことを示している。実際、それは、ＵＶ照射によって誘発されるＤＮＡ損傷（ＴＵＮＥＬアッセイ）の増加を有意に阻害した。Ｐ２はＤＮＡ損傷の増加を完全に阻害した。
【０３０８】
ＦＴＺマーカーアッセイでは、４日目に、非処理の非照射対照は３３．３％の染色表面を示し、非処理の照射対照は８０．６％＃の染色表面を示し、照射＋Ｐ２処理は６５．４％＊＊の染色表面を示し、照射＋Ｐ１処理は５７．３％＊の染色表面を示した。
【０３０９】
ＵＶ照射により、対照非処理＿ＵＶ照射皮膚表面に、１４２％＊＊（ＴＵＶＪ４対ＴＪ４、表１７Ｂ）のカルボニル化タンパク質生成の有意な増加が誘導された。
【０３１０】
表１６に示すように、カルボニル化タンパク質（ＦＴＺアッセイ）に対する製品適用の効果は、ＵＶが照射されたバッチ（ＴＵＶＪ４）と比較して、製品Ｐ１が２９％のカルボニル化タンパク質誘導の有意な減少を誘導し、製品Ｐ２が１９％の有意な減少を誘導し、製品Ｐ３が２８％の有意な減少を誘導したことを示した。
【０３１１】
これらのデータは、４％（Ｐ１）、２％（Ｐ２）及び１％（Ｐ３）の製品ＡがＵＶ照射によって誘導されるカルボニル化タンパク質の生成を有意に阻害したことを示している。
【０３１２】
実施例７
皮膚の汚染保護のためのスキンケアローション。
皮膚の解毒及び汚染保護のための、オスモライト全体の％でそれぞれＬ−プロリン３０％、Ｌ−セリン１４％、ベタイン５０％、及びイノシトール６％の比率で、オスモライトのＬ−プロリン、Ｌ−セリン、ベタイン、及びイノシトールの組み合わせを含む、本明細書に記載のスキンケア組成物の有効量を含むスキンケアローションが、本明細書において提供される。
【０３１３】
これらのローションは、解毒、保湿及び活性化の効果を有する皮膚のための汚染保護の第１の層を提供することができる。トニックとセラムの間で、この「オイル・イン・エッセンス」ローションは、ローション中に油滴が懸濁された革新的なテクスチャーを特徴とする。一滴の感覚で、このエモリエント効果を有するが脂っぽくないテクスチャーは、皮膚を柔らかくしなやかで且つ快適に保つ。セラムの前の、快適さと保護のための追加の層を必要とする乾燥肌の場合。このローションは、懸濁した油滴を含む半透明で無色の流体ゲルであり得る。
【０３１４】
表１８に、皮膚の汚染からの保護を提供することができるスキンケアローションの処方を示す。
【０３１５】
【表１８】
2021514970.tif 000024
【０３１６】
解毒及び汚染保護のための、このスキンケア製品の重要な成分は、オスモライト全体の％でそれぞれＬ−プロリン３０％、Ｌ−セリン１４％、ベタイン５０％、及びイノシトール６％の比率で、オスモライトのＬ−プロリン、Ｌ−セリン、ベタイン、及びイノシトールの組み合わせを含む、本明細書に記載のスキンケア組成物（実施例１）の有効量である。
【０３１７】
さらに、オスモライト、グリコール及びＳｗｉｓｓ温泉水は、皮膚のリフレッシュ、水和及び活性化を助ける。
【０３１８】
このスキンケア製品は、ホモジナイザーで相Ａの成分を相Ｂ及びＣと完全に分散するまで混合することによって調製することができる。相Ｂはホモジナイザーで約１０分間分散させることにより、均質なゲルを得ることができ、相Ｃ（芳香相）は予め分散させ、相Ａの混合物にゆっくりと添加することができる。
【０３１９】
実施例８
皮膚の汚染保護のためのスキンケアゼリー。
皮膚の解毒及び汚染保護のための、オスモライト全体の％でそれぞれＬ−プロリン３０％、Ｌ−セリン１４％、ベタイン５０％、及びイノシトール６％の比率で、オスモライトのＬ−プロリン、Ｌ−セリン、ベタイン、及びイノシトールの組み合わせを含む、本明細書に記載のスキンケア組成物の有効量を含むスキンケアゼリーが、本明細書において提供される。
【０３２０】
このスキンケアゼリーは、実施例７に記載のスキンケアローションを提供後、皮膚に提供することができる。表１８に記載のスキンケアゼリーは、解毒、保湿、及び活性化の効果を有する皮膚のための汚染保護の第２の層を提供することができる。クイックブレークソルベテクスチャー（ｑｕｉｃｋ−ｂｒｅａｋ  ｓｏｒｂｅｔ  ｔｅｘｔｕｒｅ）のおかげで、このゼリーは瞬時に溶けて皮膚になじみ、瞬時に新鮮な潤い感が得られる。この新鮮なソルベは、非粘着性の後感触の滑らかさを皮膚に与える。このテクスチャーは、非常に軽く、あらゆるタイプの皮膚に、最も敏感なタイプでさえも、適している。このゼリーは、フロステッドテクスチャーを有する白色の半透明ゲルであり得る。
【０３２１】
表１９に、皮膚の解毒及び汚染保護を提供することができるスキンケアゼリーの処方を示す。
【０３２２】
【表１９】
2021514970.tif 000025
【０３２３】
解毒及び汚染保護のための、このスキンケア製品の重要な成分は、オスモライト全体の％でそれぞれＬ−プロリン３０％、Ｌ−セリン１４％、ベタイン５０％、及びイノシトール６％の比率で、オスモライトのＬ−プロリン、Ｌ−セリン、ベタイン、及びイノシトールの組み合わせを含む、本明細書に記載のスキンケア組成物（実施例１）の有効量である。さらに、オスモライト、Ｚｅｍｅａ（登録商標）プロパンジオール及びＳｗｉｓｓ温泉水は、皮膚のリフレッシュ、水和及び活性化を助ける。
【０３２４】
スキンケアゼリーは、以下のように調製することができる：水を８０℃に加熱し、次いで、ホモジナイザーでＡを混合する。２．ホモジナイザーの下で中和する。３．Ｂをホモジナイザーで１０分間分散させる。４．Ｄをホモジナイザーで１０分間分散させる。５．ホモジナイザーの下で５分間、Ｅを添加する。６．ホモジナイザーの下でＦを添加する。
【０３２５】
実施例９
皮膚の汚染保護のためのスキンケアクリーム。
皮膚の解毒、輝き、保湿及び汚染保護のための、オスモライト全体の％でそれぞれＬ−プロリン３０％、Ｌ−セリン１４％、ベタイン５０％、及びイノシトール６％の比率で、オスモライトのＬ−プロリン、Ｌ−セリン、ベタイン、及びイノシトールの組み合わせを含む、本明細書に記載のスキンケア組成物の有効量を含むスキンケアクリームが、本明細書において提供される。
【０３２６】
保湿クリームの真珠光沢のある白色のソフトビーズをデトックス汚染防止濃縮液に浸す。破壊された後、真珠を溶融し、セラムと共に高級クリームに溶け込ませ、瞬時の皮膚の輝きのために、残留物のない柔らかくてベルベット状の膜を残す。
【０３２７】
このスキンケアクリームは、透明な液体に浸漬された真珠光沢のある白色のソフトビーズとして提供することができる。
【０３２８】
表２０に、皮膚の解毒及び汚染保護を提供することができるスキンケアクリームの処方を示す。
【０３２９】
【表２０】
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【０３３０】
解毒及び汚染保護のための、このスキンケア製品の重要な成分は、オスモライト全体の％でそれぞれＬ−プロリン３０％、Ｌ−セリン１４％、ベタイン５０％、及びイノシトール６％の比率で、オスモライトのＬ−プロリン、Ｌ−セリン、ベタイン、及びイノシトールの組み合わせを含む、本明細書に記載のスキンケア組成物（実施例１）の有効量である。
【０３３１】
さらに、オスモライト、グリコール及びＳｗｉｓｓ温泉水は、皮膚のリフレッシュ、水和及び活性化を助け、真珠光沢のある顔料は瞬時の輝きの提供を助ける。
【０３３２】
このスキンケア製品は、以下のように調製することができる：完全に溶解するまで、ペール（ヘリックス）スターラーでＡを混合する（室温にて）。２．香料を予め分散させる。３．Ｃを手動で加える。
【０３３３】
実施例１０
皮膚の汚染保護のためのスキンケアゲル。
皮膚の解毒を助ける、皮膚の汚染保護、皮膚の保湿及び活性化のための、オスモライト全体の％でそれぞれＬ−プロリン３０％、Ｌ−セリン１４％、ベタイン５０％、及びイノシトール６％の比率で、オスモライトのＬ−プロリン、Ｌ−セリン、ベタイン、及びイノシトールの組み合わせを含む、本明細書に記載のスキンケア組成物の有効量を含むスキンケアゲルが、本明細書において提供される。
【０３３４】
この形状記憶固体様ゲルテクスチャーは、混合すると氷のように破壊することができ、着色固体様透明ゲルにすることができる。このスキンケアゲルは、フェースゲルとして提供することができる。
【０３３５】
表２１に、皮膚の解毒及び汚染保護を提供することができるスキンケアゲルの処方を示す。
【０３３６】
【表２１】
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【０３３７】
解毒及び汚染保護のための、このスキンケア製品の重要な成分は、オスモライト全体の％でそれぞれＬ−プロリン３０％、Ｌ−セリン１４％、ベタイン５０％、及びイノシトール６％の比率で、オスモライトのＬ−プロリン、Ｌ−セリン、ベタイン、及びイノシトールの組み合わせを含む、本明細書に記載のスキンケア組成物（実施例１）の有効量である。
【０３３８】
さらに、オスモライト、Ｚｅｍｅａ（登録商標）プロパンジオール、Ｓｗｉｓｓ氷河水及び抗酸化剤に富むアークティッククラウドベリーは、皮膚のリフレッシュ、水和及び活性化を助ける。
【０３３９】
このスキンケア製品は、以下のように調製することができる：１．コールドプロセス。２．Ｂを、完全に溶解するまで、デフロキュレーションスターラーで穏やかに混合しながらＡに広げる。３．デフロキュレーションスターラーで穏やかに混合しながら、成分Ｃ〜Ｌを１成分ずつ添加する。各添加の間に均質化が完了したことを確認する。
【０３４０】
実施例１１
皮膚の汚染保護のためのスキンケアエマルション。
皮膚の解毒、皮膚の保湿及び汚染保護のための、オスモライト全体の％でそれぞれＬ−プロリン３０％、Ｌ−セリン１４％、ベタイン５０％、及びイノシトール６％の比率で、オスモライトのＬ−プロリン、Ｌ−セリン、ベタイン、及びイノシトールの組み合わせを含む、本明細書に記載のスキンケア組成物の有効量を含むスキンケアエマルションが、本明細書において提供される。
【０３４１】
適用されると、スキンケアエマルションは皮膚表面を滑る水滴を放出し、新鮮な朝の露の感覚を与えることができる。
【０３４２】
このスキンケアエマルションは、白色固体クリームとして提供することができる。
【０３４３】
表２２に、皮膚の解毒及び汚染保護を提供することができるスキンケアエマルションの処方を示す。
【０３４４】
【表２２】
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【０３４５】
解毒及び汚染保護のための、このスキンケア製品の重要な成分は、オスモライト全体の％でそれぞれＬ−プロリン３０％、Ｌ−セリン１４％、ベタイン５０％、及びイノシトール６％の比率で、オスモライトのＬ−プロリン、Ｌ−セリン、ベタイン、及びイノシトールの組み合わせを含む、本明細書に記載のスキンケア組成物（実施例１）の有効量である。
【０３４６】
さらに、オスモライト、Ｚｅｍｅａ（登録商標）プロパンジオール、Ｓｗｉｓｓ氷河水及び抗酸化剤に富むアークティッククラウドベリーは、皮膚のリフレッシュ、水和及び活性化を助ける。
【０３４７】
このスキンケア製品は、以下のように調製することができる：１．Ａ５及びＡ６を除くＡ相の全ての成分を混合し、８０℃に加熱する。２．Ｂ相の全ての成分を混合し、８０℃に加熱する。３．乳化の直前にＡ相の残りのＡ５及びＡ６を添加する。４．乳化を進める：Ｂ相をＡ相へ非常にゆっくりと注ぎながら、混合速度を徐々に増加させる（最大１０００ｒｐｍ）。５．７０〜８０℃で、直ちに液体エマルションをパッケージに注ぐ。
【０３４８】
実施例１２
皮膚の汚染保護のためのスキンケアスティック。
目の周囲など（これに限定されない）の皮膚の汚染保護のための、オスモライト全体の％でそれぞれＬ−プロリン３０％、Ｌ−セリン１４％、ベタイン５０％、及びイノシトール６％の比率で、オスモライトのＬ−プロリン、Ｌ−セリン、ベタイン、及びイノシトールの組み合わせを含む、本明細書に記載のスキンケア組成物の有効量を含むスキンケアスティックが、本明細書において提供される。
【０３４９】
このスキンケアスティックは、瞬時に氷冷効果を提供することができ、また、皮膚との接触で溶融して驚くべき新鮮な効果を付与することができる固体スティックであり得る。スティックは目の周囲の繊細な領域に適用することができ、外観を活性化し、且つ保湿する。
【０３５０】
表２３に、皮膚の解毒及び汚染保護を提供することができるスキンケアスティックの処方を示す。
【０３５１】
【表２３】
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【０３５２】
解毒及び汚染保護のための、このスキンケア製品の重要な成分は、オスモライト全体の％でそれぞれＬ−プロリン３０％、Ｌ−セリン１４％、ベタイン５０％、及びイノシトール６％の比率で、オスモライトのＬ−プロリン、Ｌ−セリン、ベタイン、及びイノシトールの組み合わせを含む、本明細書に記載のスキンケア組成物（実施例１）の有効量である。
【０３５３】
さらに、オスモライト及びグリコールは、皮膚の水和及び活性化を助ける。
【０３５４】
このスキンケア製品は、以下のように調製することができる：１．水を８０℃に加熱し、次いで、ペール（ヘリックス）スターラーでＡを混合する。２．Ｂをペール（ヘリックス）スターラーで１０分間分散させる。３．ペール（ヘリックス）スターラー下、６０℃でＣを添加する。４．ペール（ヘリックス）スターラー下、６０℃でＤを添加する。５．香料を予め分散し、次いで、ペール（ヘリックス）スターラー下、混合物にＥを添加した。６．ペール（ヘリックス）スターラーの下で色を調整する。５０℃〜６０℃でスティックに加熱注入する。
【０３５５】
実施例１３
皮膚の汚染保護のためのスキンケアマスク。
夜の汚染保護など（これに限定されない）の皮膚の汚染保護のための、オスモライト全体の％でそれぞれＬ−プロリン３０％、Ｌ−セリン１４％、ベタイン５０％、及びイノシトール６％の比率で、オスモライトのＬ−プロリン、Ｌ−セリン、ベタイン、及びイノシトールの組み合わせを含む、本明細書に記載のスキンケア組成物の有効量を含むスキンケアマスクが、本明細書において提供される。
【０３５６】
このスキンケアマスクは、皮膚の解毒、青色光保護及び保湿のために夜に適用される天然オイルゲルマスクであり得る。水と接触すると、ゲルマスクは、容易に洗い流せるように、乳状物質に変化する。それは皮膚を快適且つ清潔にし、実施例１４に記載されるスキンケアクリームのようなナイトクリームの適用に備える。
【０３５７】
このマスクは、夜に、透明な粘稠なオイルゲルの厚い層を適用し、１５分間そのままにし、ぬるま湯で洗い流すことによって適用することができる。
【０３５８】
表２４に、皮膚の解毒及び汚染保護の提供を助けるスキンケアマスクの処方を示す。
【０３５９】
【表２４】
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【０３６０】
このスキンケア製品は、以下のように調製することができる：１．穏やかに撹拌しながらスクロ−エステルをグリセリン中に分散させることによってＡ相を調製する。８０℃に加熱し、Ａ相の他の成分を添加する。；２．Ｂ層の成分を８０℃で加熱する；３．Ｂ相をＡ相に高せん断力混合しながら添加する。（Ｕｌｔｒａｔｕｒａｘ／Ｓｉｌｖｅｒｓｏｎ−５０００〜１００００ｒｐｍ）；４．冷却を開始する。Ｔ°＜４０℃で、Ｃ相の成分を添加する。；５．配合物がまだ熱いときに、パッケージに注ぐ。
【０３６１】
実施例１４
皮膚の汚染保護のためのスキンケアクリーム。
夜の汚染保護及び青色光保護並びに皮膚の解毒など（これに限定されない）の皮膚の汚染保護のための、オスモライト全体の％でそれぞれＬ−プロリン３０％、Ｌ−セリン１４％、ベタイン５０％、及びイノシトール６％の比率で、オスモライトのＬ−プロリン、Ｌ−セリン、ベタイン、及びイノシトールの組み合わせを含む、本明細書に記載のスキンケア組成物の有効量を含むスキンケアクリームが、本明細書において提供される。
【０３６２】
このスキンケアクリームは、適用すると溶融するバター状の濃厚なテクスチャーを有する白色又は着色した濃厚なクリームであり得る。
【０３６３】
表２５に、皮膚の、青色光保護などの、解毒及び汚染保護を提供するのを助けるスキンケアクリームの処方を示す。
【０３６４】
【表２５】
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【０３６５】
表２５の成分を含むスキンケア処方は、１％、２％、３％、４％、最大５％のＧＥＮＥＮＣＡＲＥ（登録商標）ＯＳＭＳ  ＢＡをさらに含むことができる。一態様では、処方は表２６に示すとおりである。
【０３６６】
【表２６】
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【０３６７】
表２５〜２６に示すスキンケア製品は、以下のように調製することができる：１．１．主タンク内でＡを７５℃に加熱した；２．Ｂを予備混合してＡに加え、均質になるまで７５℃で５分間混合する；３．Ｚｅｍｅａ（登録商標）を添加し、７５℃で５分間混合を続ける；４．Ｄ相を７５℃で５分間、均質になるまで予備混合する；５．ＤをＡＢＣに７５℃で１５分間の高速混合で添加することによって乳化を進める；６．５０℃までゆっくりと冷却し、次いで、２分間高速混合する；７．より遅く混合しながら３５℃まで冷却した後、主タンクにＥを加え、５分間混合する；８．均質になるまで５分間混合することによってＦを調製する；そして９．Ｆ、次いでＧ、Ｈ、Ｉ、及び任意選択でＪを１つずつ主タンクに加える。各添加の間に、均質になるまで５分間混合する。
【国際調査報告】
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