(57)【要約】  本発明は、アルブミンに非共有結合される医薬活性化合物を含む眼科用組成物に関する。本発明の組成物は、眼の疾患及び障害の治療のために有用である。【選択図】図１【特許請求の範囲】
【請求項１】
眼科用医薬活性化合物及びアルブミンを含み、前記眼科用医薬活性化合物の水溶解度が、医薬活性化合物の水溶解度に比較して、アルブミンの存在下で少なくとも１０％高められる眼科用組成物。
【請求項２】
前記水溶解度が、少なくとも２５％高められる、請求項１に記載の眼科用組成物。
【請求項３】
前記医薬活性化合物の少なくとも５０％が、アルブミンに非共有結合されている、請求項１又は２に記載の眼科用組成物。
【請求項４】
前記アルブミンが、ヒト血清アルブミン、組換えヒト血清アルブミン、そのＮ末端に少なくとも１つのアミノ酸切断を有する血清アルブミン、又はプレアルブミンである、請求項１〜３のいずれか１項に記載の眼科用組成物。
【請求項５】
前記眼科用医薬活性化合物が、眼アレルギー薬、抗生物質、ドライアイ治療薬、非ステロイド薬、コルチコステロイド薬、緑内障治療薬、及び帯状疱疹治療薬から成る群から選択される、請求項１〜４のいずれか１項に記載の眼科用組成物。
【請求項６】
前記眼科用医薬活性化合物が、以下の群：アルファアドレナリン作動薬、ベータ遮断薬、炭酸脱水酵素阻害薬、プロスタグランジン類似体、コリン作動薬、非ステロイド性抗炎症薬及びステロイド性抗炎症薬、抗生物質、及びＤＨＯＤＨ阻害剤の１つから選択される、請求項５に記載の眼科用組成物。
【請求項７】
前記眼科用医薬活性化合物が、リファイトグラスト、シクロスポリンＡ、アゼラスチンＨＣｌ、ビマトプロスト、ブリンゾラミド、ジピベフリンＨＣｌ、フシジン酸、レボカバスチン、ネパフェナク、メタル酸ネタルスジル、酢酸プレドニゾロン、又は３−（２，３，５，６−テトラフルオロ−３'−トリフルオロメトキシ−ビフェニル−４ −イルカルバモイル）−チオフェン−２−カルボン酸（ＰＰ−００１）である、請求項６に記載の眼科用組成物。
【請求項８】
１又は２以上の医薬的に許容できる賦形剤及び／又は担体をさらに含む、請求項１〜７のいずれか１項に記載の眼科用組成物。
【請求項９】
前記医薬的に許容できる賦形剤が、界面活性剤、防腐剤、粘度調整剤、ｐＨ調整剤、安定剤、及び張度調整剤から成る群から選択される、請求項１〜８のいずれか１項に記載の眼科用組成物。
【請求項１０】
前記医薬活性化合物が、約０．００５重量％〜約２０重量％含まれる、請求項１〜９のいずれか１項に記載の眼科用組成物。
【請求項１１】
前記アルブミンが、約１重量％〜約３０重量％含まれる、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の眼科用組成物。
【請求項１２】
前記眼科用組成物中のアルブミン：医薬活性化合物の重量比が、約１：５、又は１：１、又は２０：１、又は４００：１、又はそれ以上である、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の眼科用組成物。
【請求項１３】
局所点眼用である、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の眼科用組成物。
【請求項１４】
眼薬、ジェル、軟膏、スプレーの形である、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の眼科用組成物。
【請求項１５】
ドライアイ症候群、白内障手術、緑内障、結膜炎、アレルギー、細菌感染、眼瞼炎、感染性角膜潰瘍、角膜擦過傷、眼の炎症、角膜移植、又はブドウ膜炎に苦しむ患者の治療への使用のための、請求項１〜１４のいずれか１項に記載の眼科用組成物。
【請求項１６】
前記ドライアイ症候群が、涙液欠乏性ドライアイ又は蒸発性ドライアイである、請求項１５に記載の眼科用組成物。
【請求項１７】
前記ドライアイ症候群が、涙腺、眼球乾燥症、シェーグレン症候群、乾性角結膜炎、スティーブンス・ジョンソン症候群、類天疱瘡、眼科手術後のドライアイ、アレルギー性結膜炎を伴うドライアイ、ＶＤＴ（ビジュアルディスプレイターミナル）作業者の涙の減少、及び空調のためにドライルームによリ引き起こされる全身症状のない涙の減少を含むドライアイ様症状から成る群から選択される、請求項１５に記載の眼科用組成物。
【請求項１８】
医薬活性化合物としての３−（２，３，５，６−テトラフルオロ−３'−トリフルオロメトキシ−ビフェニル−４ −イルカルバモイル）−チオフェン−２−カルボン酸（ＰＰ−００１）、及びヒト血清アルブミンを含む眼科用組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、アルブミンに非共有結合される医薬活性化合物を含む眼科用組成物に関する。本発明の組成物は、眼の疾患及び障害の治療のために有用である。
【背景技術】
【０００２】
多くの眼疾患は、初期症状を有さない。それらは無痛であり、そして疾患がかなり進行するまで視覚の変化は、知覚され得ない。
【０００３】
ドライアイ疾患は、涙生成が低められる場合、又は涙の質の低下のために涙が急速に蒸発する場合に発生する。十分な潤滑を伴わない場合、眼は、ざらつき、乾燥、灼熱感、発赤、又は過度の涙の症状を伴って、乾燥する。
【０００４】
眼に必要な効果に加えて、眼科用潤滑剤は、いくつかの所望しない効果を引起す可能性がある。それらの副作用が全てに発生するとは限らないが、治療が必要になる場合がある。多かれ少なかれ、一般的な副作用は、この薬の使用の前に存在しない視力障害、眼の発赤又は不快感又は他の刺激、光に対する眼の高められた感度、まつげのつや消し又はべたつき、及び眼の潤いである。
【０００５】
ドライアイを助けることができる多くの市販薬及び処方薬が存在する。現在のところ、ドライアイを治療するためには、涙の補充を目的として人工涙液、及び自覚症状の緩和を目的としたコンドロイチン硫酸、グルタチオン、ヒアルロン酸、フィブロネクチン、上皮成長因子（ＥＧＦ）などが投与されるが、しかしその効果はまだ十分ではない。
【０００６】
欧州特許第０８３４３２０Ａ１号は、単一の活性成分としてアルブミンを含む、角膜及び結膜の病変、及びドライアイの治療のための医薬組成物を開示している。
【０００７】
欧州特許第０９８１３７５Ａ１号は、血漿タンパク質に非共有結合された治療的活性化合物を含む、非経口投与のための医薬組成物に関する。欧州特許第０９８１３７５Ａ１号によれば、治療的活性化合物が水混和性の医薬的に許容できる有機溶媒に溶解され、次に血漿タンパク質の水溶液と混合され、そして最後に有機溶媒が除去される。
【０００８】
欧州特許第０１７９４７７号は、少量のアルブミンが安定剤として使用される、改善された水溶解度を有するフィブロネクチン調製物を開示している。
【０００９】
しかしながら、効果的で且つ高い容認性の眼科用薬物が、依然として必要とされている。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
効果的で且つ十分に許容される眼科用製剤を提供することが本発明の目的である。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
その目的は、本明細書で請求され、そしてさらに説明される主題により解決される。
【００１２】
本発明は、アルブミンに非共有結合された医薬的活性化合物を含む製剤に関する。
【００１３】
本発明の１つの実施形態は、眼科用医薬活性化合物及びアルブミンを含み、前記眼科用医薬活性化合物の水溶解度が、医薬活性化合物単独での水溶解度に比較して、アルブミンの存在下で少なくとも１０％高められる眼科用組成物に関する。
【００１４】
本発明の１つの実施形態は、眼科用薬物及びアルブミンを含む眼科用組成物に関する。
【００１５】
本発明の１つの実施形態は、眼科用医薬活性化合物及びアルブミンを含み、前記眼科用医薬活性化合物の水溶解度が、医薬活性化合物単独での水溶解度に比較して、アルブミンの存在下で少なくとも１０％高められ、そして／又は前記医薬活性化合物の耐容性が、医薬活性化合物単独での耐容性に比較して、高められる、眼科用組成物に関する。
【００１６】
本発明のさらなる実施形態は、前記医薬活性化合物の少なくとも５０％が、アルブミンに非共有結合されている、本明細書に記載されるような眼科用組成物に関する。
【００１７】
本発明のさらなる実施形態は、前記アルブミンが、ヒト血清アルブミン、組換えヒト血清アルブミン、そのＮ末端に少なくとも１つのアミノ酸切断を有する血清アルブミン、又はプレアルブミンである、本明細書に記載されるような眼科用組成物に関する。
【００１８】
本発明の１つの実施形態は、前記眼科用医薬活性化合物が、眼アレルギー薬、抗生物質、ドライアイ治療薬、非ステロイド薬、コルチコステロイド薬、緑内障治療薬、帯状疱疹治療薬から成る群から選択され、好ましくは前記活性化合物が、リファイトグラスト、シクロスポリンＡ、又は３−（２，３，５，６−テトラフルオロ−３'−トリフルオロメトキシ−ビフェニル−４ −イルカルバモイル）−チオフェン−２−カルボン酸（ＰＰ−００１）である、本明細書に記載されるような眼科用組成物に関する。
【００１９】
本発明の１つの実施形態は、以下の群：アルファアドレナリン作動薬、ベータ遮断薬、炭酸脱水酵素阻害薬、プロスタグランジン類似体、コリン作動薬、非ステロイド性抗炎症薬及びステロイド性抗炎症薬の１つから選択された眼科薬、及びアルブミンを含む眼科用組成物を提供する。
【００２０】
本発明の別の実施形態は、ドルゾラミド及びブリンゾラミドから選択された炭酸脱水酵素阻害剤、及びアルブミンを含む眼科用組成物を提供する。
【００２１】
本発明の別の実施形態は、チモロール、カルテオロール、ベタキソロール、レボブノロール又はメチプラノロール、好ましくはチモロール及びレボブノロールから選択されたβ遮断薬、及びアルブミンを含む眼科用組成物を提供する。
【００２２】
本発明の別の実施形態は、ブリモニジン、アプラクロニジン、エピネフリン及びジピベフリンから選択されたアルファアドレナリン作動薬、及びアルブミンを含む眼科用組成物を提供する。
【００２３】
本発明の別の実施形態は、メタル酸ネタルスジル、又はビマトプロスト、ラタノプロスト、トラボプロスト、ウノプロストンイソプロピル、及びタフルプロストから選択されたプロスタグランジン類似体などの眼内圧低下化合物、及びアルブミンを含む眼科用組成物を提供する。
【００２４】
本発明の別の実施形態は、ピロカルピン、カルバコール及びエコーチオフェートから選択されるコリン作動薬、及びアルブミンを含む眼科用組成物を提供する。
【００２５】
本発明の別の実施形態は、ブロムフェナク、ジクロフェナク、フルルビプロフェン、ケトロラク、ネパフェナク、ナプロキセン、ケトプロフェン、及びリファイトグラストから選択された非ステロイド性抗炎症薬、及びアルブミンを含む眼科用組成物を提供する。
【００２６】
本発明の別の実施形態は、デキサメタゾン、ジフルプレドナート、ロテプレドノール、フルオシノロンアセトニド、トリアムシノロンアセトニド、ブデソニド、リメキソロン、プレドニゾロン、及びフルオロメトロンから選択されるステロイド系抗炎症薬、及びアルブミンを含む眼科用組成物を提供する。
【００２７】
本発明の別の実施形態は、アゼラスチン、レボカバスチン、オロパタジン及びエピナスチンから選択されたヒスタミン拮抗薬、及びアルブミンを含む眼科用組成物を提供する。
【００２８】
本発明の別の実施形態は、クロラムフェニコール、シプロフロキサシン、フラミセチン、フシジン酸、ゲンタマイシン、グラミシジン、ロメフロキサシン、ネオマイシン、オフロキサシン、ポリミキシンＢ、イセチオン酸プロパミジン、ベシフロキサシン、ガチフロキサシン、モキシフロキサシン、アジスロマイシン、エリスロマイシン、トブラマイシン、バンコマイシン、セファゾリン、セフタジジム、アミカシン、バシトラシン、セフロキシム、ドキシサイクリン、テトラサイクリン、メトロニダゾール及びトリメトプリムから選択された抗生物質、及びアルブミンを含む眼科用組成物を提供する。
【００２９】
本発明の別の実施形態は、シクロスポリンＡ及びメトトレキサートから選択された免疫抑制薬、及びアルブミンを含む眼科用組成物を提供する。
【００３０】
本発明のさらなる実施形態は、１又は２以上の医薬的に許容できる賦形剤及び／又は担体をさらに含む、本明細書に記載されるような眼科用組成物に関する。
【００３１】
本発明のさらなる実施形態は、医薬的に許容できる賦形剤が、界面活性剤、防腐剤、粘度調整剤、ｐＨ調整剤、安定剤、及び張度調整剤から成る群から選択される、本明細書に記載されるような眼科用組成物に関する。
【００３２】
本発明のさらなる実施形態は、医薬活性化合物が、約０．００５重量％〜約２０重量％、又は０．０１重量％〜１０重量％、又は０．０５重量％〜５重量％含まれる、本明細書に記載されるような眼科用組成物に関する。本発明の１つの実施形態によれば、ＰＰ−００１は、０．０５重量％〜１０重量％、又は０．０５重量％〜５重量％、又は０．０５重量％〜３重量％、又は０．０５重量％〜２重量％、又は０．０５重量％〜１重量％含まれる。
【００３３】
本発明のさらなる実施形態は、アルブミンが、約１重量％〜約３０重量％含まれる、本明細書に記載されるような眼科用組成物に関する。
【００３４】
本発明のさらなる実施形態は、眼科用組成物中のアルブミン：医薬活性化合物の重量比が、約１：５、又は１：３、又は１：２、又は１：１、又は２：１、又は３：１、又は５：１、又は２０：１、又は４００：１、又はそれ以上である、本明細書に記載されるような眼科用組成物に関する。本発明の１つの実施形態によれば、眼科用組成物中のアルブミン：ＰＰ−００１の比は、約１:１、又は２０:１、又は４００:１又はそれ以上である。
【００３５】
本発明のさらなる実施形態は、局所点眼用である、本明細書に記載されるような眼科用組成物に関する。
【００３６】
本発明のさらなる実施形態は、眼薬、ジェル、軟膏、スプレーの形である、本明細書に記載されるような眼科用組成物に関する。
【００３７】
本発明のさらなる実施形態は、ドライアイ症候群、白内障手術、緑内障、結膜炎、アレルギー、細菌感染、眼瞼炎、感染性角膜潰瘍、角膜擦過傷、眼の炎症、角膜移植、又はブドウ膜炎に苦しむ患者の治療への使用のための、本明細書に記載されるような眼科用組成物に関する。
【００３８】
本発明のさらなる実施形態は、ドライアイ症候群が、涙液欠乏性ドライアイ又は蒸発性ドライアイである、本明細書に記載されるような眼科用組成物に関する。
【００３９】
本発明のさらなる実施形態は、ドライアイ症候群が、涙腺、眼球乾燥症、シェーグレン症候群、乾性角結膜炎、スティーブンス・ジョンソン症候群、類天疱瘡、眼科手術後のドライアイ、アレルギー性結膜炎を伴うドライアイ、ＶＤＴ（ビジュアルディスプレイターミナル）作業者の涙の減少、及び空調のためにドライルームにより引き起こされる全身症状のない涙の減少を含むドライアイ様症状から成る群から選択される、本明細書に記載されるような眼科用組成物に関する。
【００４０】
本発明の１つの実施形態は、医薬活性化合物としての３−（２，３，５，６−テトラフルオロ−３'−トリフルオロメトキシ−ビフェニル−４ −イルカルバモイル）−チオフェン−２−カルボン酸（ＰＰ−００１）、及びヒト血清アルブミンを含む眼科用組成物に関する。
【図面の簡単な説明】
【００４１】
【図１】図１は、異なるＰＰ−００１製剤の快適性評価を示す。
【００４２】
【図２】図２は、ニュージーランド白ウサギへの局所投与の後のＰＰ−００１の平均結膜濃度（ｎｇ／ｇ）を示す。
【００４３】
【図３】図３は、ニュージーランド白ウサギへの局所投与の後のＰＰ−００１の平均角膜濃度（ｎｇ／ｇ）を示す。
【００４４】
【図４】図４は、マウスドライアイモデルにおける２０日目（９５％信頼区間の中央値）でのフルオレセイン染色を示す。
【００４５】
【図５】図５は、マウスドライアイモデルにおける２０日目での「未処置」グループに対する処置グループの角膜染色の平均値の差異を示す。
【００４６】
【図６】図６は、ＰＢＳからＰＢＳ中の溶解度（％）の５％ＨＡＳへの上昇を示す。
【００４７】
【図７】図７は、飽和点眼剤製剤における活性化合物のＨＳＡへの結合を示す。
【発明を実施するための形態】
【００４８】
薬物の治療効率は、治療作用を最大化し、そして患者への副作用を最小化する濃度及び頻度での標的部位での薬物の利用可能性に依存する。治療効果を最大にするために薬物担体が使用され得る。薬物担体は、薬物投与の選択性、有効性及び／又は安全性を改善するのに役立つ薬物送達の工程において使用される任意の基質であり得る。
【００４９】
アルブミンの天然の輸送機能、複数のリガンド結合部位及び細胞相互作用は、薬物送達のためのアルブミンの開発のために合理性を提供する。薬物を共有結合及び非共有結合する能力、又はアルブミン−薬物融合の発現が、臨床試験に又は市場でさえ採用されている広範囲の設計オプションを提供する。
【００５０】
薬物担体としてアルブミンを使用することのいくつかの利点が存在する：
１）内因性タンパク質として、ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）は、身体に固有のものである。それは天然において生分解性であり、非毒性であり、且つ非免疫原性であり；
２）アルブミンは強力なタンパク質である。それは、４〜９の広いｐＨで安定しており、有害な影響を与えることなく、６０℃で最大１０時間、加熱でき、中程度の濃度で変性剤及び溶媒により変更されない。
【００５１】
市販の点眼薬のほとんどは、灼熱感及び刺痛感を誘発する。点眼薬の悪影響を克服するために、いくつかの解決策がすでに調査されている。文献においては、リン酸緩衝液のホウ酸緩衝液による交換及び／又はカフェインの添加が、点眼薬の耐容性を高めることができたと言及されている。しかしながら、我々の試験においては、これはわずかな改善に過ぎなかった。さらに、シクロデキストリン又はミセル形成賦形剤を使用する試みも、問題を十分に解決できなかった。
【００５２】
局所送達のための薬物の開発の間、高められた水溶性及び安定性を含む改善された特性を有するそのような薬物物質の新規形を有することは好都合であり得る。一般的に、そのような固体形の溶解速度を早め、そしてそれらの生物学的利用能を潜在的に高めることもまた所望される。これはまた、眼科用薬物化合物の新規形の開発にも適用される。
【００５３】
本発明者らは、驚くべきことには、医薬活性化合物及びアルブミンを含む眼科用組成物が、医薬活性化合物の水溶性及び／又は医薬活性化合物の耐容性を、医薬活性化合物単独の水溶性又は耐容性に比較して、高めることを見出した。
【００５４】
本発明の１つの実施形態は、医薬活性化合物及びアルブミンを含む眼科用組成物に関し、ここで前記医薬活性化合物の水溶性が、医薬活性化合物単独の水溶性に比較して、アルブミンの存在下で少なくとも１０％高められる。本発明のさらなる実施形態は、少なくとも２０％、２５％、５０％、７５％、１００％、又はそれ以上の医薬活性化合物の溶解度の上昇に関する。
【００５５】
一般的な点眼液は、例えばエデト酸二ナトリウム、メチルスルホニルメタン（ＭＳＭ）、マイトマイシン、又はデキサメタゾンを含むことができる。抗真菌性眼科用製剤は、例えば溶液、軟膏又は懸濁液としてクロトリマゾール、アンフォテリシン、フルコナゾール、ボリコナゾール、又は硝酸ミコナゾールを含む眼科用製剤である。ドライアイ用の薬物は、例えば、単独の活性成分としてアルブミン、シクロスポリン（商品名Restasis（米国）及びIkervis（欧州））、タクロリムス、レチノイン酸、又は溶液又は軟膏としてカロシンを含む眼科用製剤である。眼科用抗生物質製剤は、例えば、活性成分として、クロラムフェニコール、シプロフロキサシン、フラミセチン、フシジン酸、ゲンタマイシン、グラミシジン、ロメフロキサシン、ネオマイシン、オフロキサシン、ポリミキシンＢ、イセチオン酸プロパミジン、モキシフロキサシン、トブラマイシン、バンコマイシン、セファゾリン、セフタジジム、アミカシン、セフロキシム、ドキシサイクリン、テトラサイクリン、メトロニダゾール又はトリメトプリマを含む製剤である。
【００５６】
リファイテグラスト（商品名Xiidra）は、乾性角結膜炎と呼ばれる症候群であるドライアイの兆候及び症状の治療に適用された、ＦＤＡ承認の薬剤である。リファイトグラストは、炎症性細胞結合を阻害することにより炎症を軽減する。臨床試験における共通する副作用は、目の刺激、不快感、かすみ目、味覚異常（味覚の歪み）である。
【００５７】
レスタシス点眼薬は、免疫抑制剤であるシクロスポリンを含む。シクロスポリンは、眼の炎症により減少された涙の産生を高めることができる。レスタシス点眼薬は、炎症により引き起こされる可能性がある慢性ドライアイの治療に使用される。レスタシスの最も一般的な副作用は、眼の一時的な灼熱感である。シクロスポリンの低い水溶性のために、レスタシスは、シクロスポリン懸濁液として配合される。同じ理由で、Ikervisは、エマルジョンとしてシクロスポリンを含む。
【００５８】
また、眼科疾患の治療において有益な効果を有するいくつかの活性化合物、例えば３−（２，３，５，６−テトラフルオロ−３'−トリフルオロメトキシ−ビフェニル−４ −イルカルバモイル）−チオフェン−２−カルボン酸（ＰＰ−００１）（国際公開第２０１５／１６９９４４号）が現在開発されている。しかしながら、ＰＰ−００１は、低い水溶性を有する（ｐＨ７．４のリン酸緩衝液において０．８ｍｇ／ｍｌ）。
【００５９】
ＰＰ−００１（３−（２，３，５，６−テトラフルオロ−３'−トリフルオロメトキシ−ビフェニル−４ −イルカルバモイル）−チオフェン−２−カルボン酸）は、顕著な抗ウィルス活性を有する。ＰＰ−００１は、ブドウ膜炎の治療にインビボでの有効性を示している。ブドウ膜炎の２つの異なるラットモデルにおいて、ＰＰ−００１は、疾患の臨床学的及び組織学的症状を完全に改善する。さらに、ＰＰ−００１による治療アプローチは、実験的自己免疫性ブドウ膜炎の再発を防ぐ。
【００６０】
本発明者らは、驚くべきことには、ＰＰ−００１及び他の眼科用化合物がアルブミンに可逆的に結合することを発見し、そして彼らは、この新規製剤が薬物の燃焼及び刺痛効果を低めることができることを想定した。さらに、アルブミンへの結合は、前記化合物の不良な水溶性を高める可能性がある。さらに、ヒト血漿アルブミンは、天然のヒトタンパク質及び涙液の成分である。さらに、アルブミン含有溶液は、ドライアイ患者の目を保湿するために、人工涙液（セルロース誘導体ＨＰＭＣ又はＣＭＣと同様に）としてすでに使用されている。
【００６１】
医学的用途において通常使用するのに適切な純度に精製されるヒト血清アルブミンは、いずれの特定の問題もなしに、本発明に好ましくは使用され得る。すなわち、アルブミンを８０％以上含むそれらが（電気分解による分析の場合）、好ましい。ウィルスなどを不活性化するためには、加熱処理することにより得られたそれらが好ましい。特に、薬物として市販されているヒト血清アルブミンが好ましくは、使用される。他方では、遺伝子組み換えにより得られた微生物により産生されたアルブミンもまた使用され得る。
【００６２】
本発明の製剤のために使用されるアルブミンの由来は特に限定されない。ヒト由来のアルブミン、例えばヒト血清アルブミンが好ましくは、使用される。
【００６３】
本発明の医薬組成物は、錠剤、丸剤、散剤、懸濁剤、カプセル剤、坐剤、注射剤、軟膏、点眼剤などなどの剤形であり得る。点眼薬を局所投与することが特に好ましい。製剤に依存して、補助賦形剤が、医薬組成物に存在することができる。
【００６４】
「医薬的に許容できる」という用語は、本明細書において使用される場合、健全な医学的判断の範囲内で、合理的な利益／リスク比に見合った過度の毒性、刺激、アレルギー反応、又は他の問題又は合併症を伴わないで、ヒト及び動物の組織と接触しての使用のために適切であるそれらのリガンド、材料、組成物及び／又は剤形を示す。
【００６５】
「医薬的に許容できる塩」とは、本明細書において使用される場合、無機塩基、有機塩基、無機酸、有機酸、又は塩基性又は酸性アミノ酸との塩を含む。無機塩基の塩は、例えばアルカリ金属、例えばナトリウム又はカリウム；アルカリ土類金属、例えばカルシウム及びマグネシウム又はアルミニウム；及びアンモニアを含む。有機塩基の塩は、例えばトリメチルアミン、トリエチルアミン、ピリジン、ピコリン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、及びトリエタノールアミンを含む。無機酸の塩は、例えば、塩酸、ホウ酸、硝酸、硫酸、及びリン酸を含む。有機酸の塩は、例えば、ギ酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、フマル酸、シュウ酸、酒石酸、マレイン酸、クエン酸、コハク酸、リンゴ酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、及びp−トルエンスルホン酸を含む。塩基性アミノ酸の塩は、例えばアルギニン、リシン及びオルニチンを含む。酸性アミノ酸は、例えば、アスパラギン酸及びグルタミン酸を含む。
【００６６】
用語「医薬的に許容できる担体」とは、本明細書において使用される場合、医薬的に許容できる材料、組成物又はビークル、例えば流体又は固体の充填剤、希釈剤、賦形剤、溶媒又は封入材料を意味する。本明細書において使用される場合、用語「医薬的に許容できる担体」とは、医薬投与に適合する、緩衝液、注射用滅菌水、溶媒、分散媒、コーティング、抗菌剤及び抗真菌剤、等張剤及び吸収遅延剤などを含む。各担体は、製剤の他の成分と適合し、そして患者に有害ではないという意味で「許容できる」ものでなければならない。
【００６７】
本明細書において使用される場合、用語「眼疾患（ocular disease）」、「眼の状態（ocular condition）」、「眼の疾患（eye  disease）」及び「眼の状態（eye condition）」とは、視力を脅かす可能性があり、目の不快感を導く可能性があり、そして全身性健康問題を示す可能性がある目の疾患／状態を指す。
【００６８】
眼の表面は、角膜、結膜、瞼、涙腺とマイボーム腺、及び相互接続神経から構成される。本明細書において使用される場合、用語「前眼部疾患」とは、目の表面、瞼、結膜、前房、虹彩、及び毛様体、及び目の水晶体に影響を及ぼす全ての障害を指す。
【００６９】
本明細書において使用される場合、用語「後眼部疾患」及び「眼球後部疾患」とは、眼の後部に影響を及ぼす全ての障害を指す。後眼部疾患は、後眼部、例えば脈絡膜又は強膜、硝子体、硝子体腔、網膜、視神経、及び血管、及び後眼部を血管新生又は神経支配する神経に主に影響を及ぼす疾患である。
【００７０】
従って、１つの側面によれば、本明細書に記載されるような製剤を局所投与することを含む眼の疾患又は状態を治療又は予防する方法が提供される。いくつかの実施形態によれば、眼の疾患は、前眼部疾患である。いくつかの実施形態によれば、眼の疾患は、ドライアイ症候群、シェーグレン症候群、ブドウ膜炎、前部ブドウ膜炎（虹彩炎）、脈絡網膜炎、結膜炎、アレルギー性結膜炎、角膜炎、角結膜炎、春季角結膜炎（VKC）、アトピー性角結膜炎、全身性免疫介在性疾患、例えば瘢痕形成結膜炎及び眼表面の他の自己免疫疾患、眼瞼炎、強膜炎、細菌感染、感染性角膜潰瘍、角膜剥離、眼の炎症、角膜移植、及びブドウ膜炎から成る群から選択された１つ又は２以上である。
【００７１】
１つの実施形態によれば、眼の疾患は、ドライアイである。１つの実施形態によれば、眼の疾患は、アレルギー性結膜炎である。１つの実施形態によれば、眼の疾患は、ウィルス性結膜炎である。
【００７２】
本明細書において使用される場合、用語「ドライアイ」とは、角膜及び結膜病変の有無に関係なく、涙の質の低下又は変化を伴う状態として定義される単純なドライアイ（涙の減少）だけでなく、しかしまた、種々のドライアイ状態、例えば涙腺、眼球乾燥症、シェーグレン症候群、乾性角結膜炎、スティーブンスジョンソン症候群及び類天疱瘡、眼瞼炎も含む。
【００７３】
さらに、用語「ドライアイ」とは、白内障手術後のアレルギー性結膜炎を伴うドライアイ、並びにドライアイ様症状、例えばＶＤＴ（ビジュアルディスプレイターミナル）作業者の涙の減少、及び空調のためにドライルームによリ引き起こされる全身症状のない涙の減少を含む。
【００７４】
本明細書において使用される場合、用語「治療」又は「治療する」とは、状態の予防、治癒及び軽減、及び状態の進行の停止又は軽減を含む、状態の制御の任意の手段を指す。
【００７５】
本開示の１つの側面は、本明細書に記載されているような化合物、又は医薬的許容できるその塩と血清アルブミンとの非共有結合複合体に向けられる。
【００７６】
いくつかの実施形態によれば、本明細書に記載されているような化合物と血清アルブミンとの非共有結合複合体は、約１：１〜約４００：１のアルブミン：化合物の重量比を有する。いくつかの実施形態によれば、前記重量比は、以下の範囲を有する：約１:１〜約３００:１、約１:１〜約２００:１、約１:１〜約１００:１、約１:１〜約５０:１、約１:１〜約４５ :１、約１:１〜約４０:１、約１:１〜約３５:１、約１:１〜約３０:１、約１:１〜約２５:１、約１ :１〜約２０:１、約１:１〜約１５:１、約１:１〜約１０:１、約１:１〜約９:１、約１:１〜約８: １、約１:１〜約７:１、約１:１〜約６:１、約１:１〜約５:１、約１:１〜約４:１、約１:１ 〜約３:１、又は約１:１〜約２:１。いくつかの実施形態によれば、前記重量比は、１:２、１:３、１:４、１:５、１:６、１:７、１:８、１:９、１:１０、１:１５、又は１:２０以下である。
【００７７】
いくつかの実施形態によれば、本明細書に記載されるような医薬的に許容できる活性化合物と血清アルブミンとの非共有結合複合体は、固体製剤である。固体製剤は、典型的には、凍結乾燥により均一な手段で製造されている。当業者は、固体製剤も製造することができる他の方法、例えば回転蒸発法を認識するであろう。
【００７８】
いくつかの実施形態によれば、本明細書に記載されるような医薬的に許容できる活性化合物と血清アルブミンとの非共有結合複合体は、水性製剤である。いくつかの実施形態によれば、前記化合物と血清アルブミンとの非共有結合複合体は、水以外の溶媒を実質的に含まない水性製剤である。いくつかの実施形態によれば、前記化合物と血清アルブミンとの非共有結合複合体は、約０．５重量％、０．３重量％、０．２重量％、０．１重量％、０．０７５重量％、０．０５重量％、０．０３重量％、０．０２重量％、０．０１重量％、０．００７５重量％、０．００５重量％、０．００３重量％、０．００２重量％、又は０．００１重量％以下の任意の非水溶媒を含む水溶液である。いくつかの実施形態によれば、前記化合物と血清アルブミンとの非共有結合複合体は、水以外の溶媒を含まない水性製剤である。
【００７９】
本明細書に記載されるような医薬活性化合物及び血清アルブミンの非共有結合複合体は、前記化合物単独と比較して、非常に増強された溶解度を有する。
【００８０】
本明細書に記載される場合、「少なくともＸｍｇ／ｍｌの水溶液への溶解度」とは、ｐＨ７．４で５０ｍＭのリン酸緩衝液又はリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）水溶液において、少なくともＸｍｇ／ｍｌの化合物の熱力学的溶解度を意味する。ＰＰ−００１は、ｐＨ７．４でのリン酸緩衝水溶液において０．８ｍｇ／ｍｌの溶解度を有する。しかしながら、水性緩衝液が５％のアルブミンを含む場合、ＰＰ−００１は少なくとも５ｍｇ／ｍｌの溶解度を有する。
【００８１】
医薬組成物はまた、アジュバント、例えば保存剤、湿潤剤、乳化剤及び分散剤を含むことができる。微生物の作用の防止は、種々の抗菌剤及び抗真菌剤、例えばパラベン、クロロブタノール、フェノールソルビン酸などの包含により確保され得る。張度調整剤、例えば糖などを組成物中に含めることもまた所望され得る。さらに、注射可能な医薬形の延長された吸収が、モノステアリン酸アルミニウム及びゼラチンなどの吸収を遅延する剤の包含によりもたらされ得る。
【００８２】
本発明の組成物が点眼薬をして配合される場合、その組成物は、約０．５ｍｇ／ｍｌ、又は３．０ｍｇ／ｍｌ、又は５．０ｍｇ／ｍｌ、又は１０．０ｍｇ／ｍｌの量で活性医薬化合物を含むことができる。
【００８３】
眼科用薬物は、眼の疾患又は障害を治療し、予防し、又は診断するために使用される薬物である。眼科用薬物の非限定的な例は、以下を含む：眼アレルギー薬、抗生物質、ドライアイ治療、非ステロイド薬、コルチコステロイド薬、緑内障治療薬、帯状疱疹治療薬、アルファアドレナリン作動薬、ベータブロッカー、炭酸脱水酵素阻害剤、プロスタグランジン類似体、コリン作動薬、及びそれらの組合せ。
【００８４】
代表的な眼アレルギー剤は、以下を含むが、但しそれらだけには限定されない：ケトロラック、ケトチフェン、ロテプレドノール、ベポタスチン、エピナスチン、エメダスチン、アルカフタジン、アゼラスチン、オロパタジン、オロパタジン、ネドクロミル、ロドキサミド、クロモリン、レボカバスチン、及び医薬的に許容できるそれらの塩、並びに／又はそれらの組合せ。
【００８５】
代表的な眼抗生物質は、以下を含むが、但しそれらだけには限定されない：クロラムフェニコール、シプロフロキサシン、フラミセチン、フシジン酸、ゲンタマイシン、グラミシジン、ロメフロキサシン、ネオマイシン、オフロキサシン、ポリミキシンB、イセチオン酸プロパミジン、ベシフロキサシン、ガチフロキサシン、モキシフロキサシン、アジスロマイシン、エリスロマイシン、トブラマイシン、バンコマイシン、セファゾリン、セフタジジム、アミカシン、バシトラシン、セフロキシム、ドキシサイクリン、テトラサイクリン、メトロニダゾール、トリメトプリム、及び医薬的に許容できるそれらの塩、並びに／又はそれらの組合せ。
【００８６】
代表的なドライアイ療法は、人工涙液、例えばヒマシ油、グリセロール、鉱油及び軽鉱油を含む。
【００８７】
代表的な眼非ステロイド剤は、以下を含むが、但しそれらだけには限定されない：ブロムフェナク、ジクロフェナク、フルルビプロフェン、ケトロラク、ネパフェナク、ナプロキセン、ケトプロフェン、リファイトグラスト、及び医薬的に許容できるそれらの塩、並びに／又はそれらの組合せ。
【００８８】
代表的な眼コルチコステロイド剤は、以下を含むが、但しそれらだけには限定されない：デキサメタゾン、ジフルプレドネート、ロテプレドノール、フルオシノロンアセトニド、トリアムシノロンアセトニド、ブデソニド、リメキソロン、プレドニゾロン、及びフルオロメトロン、及び医薬的に許容できるそれらの塩、並びに／又はそれらの組合せ。
【００８９】
代表的な眼の局所緑内障剤は、以下を含むが、但しそれらだけには限定されない：レボブノロール、チモロール、ベタキソロール、ビマトプロスト、トラボプロスト、ラタノプロスト、タフルプロスト、ブリモニジン、ブリンゾラミド、ドルゾラミド、及び医薬的に許容できるそれらの塩、並びに／又はそれらの組合せ。
【００９０】
１つの実施形態によれば、活性医薬化合物は、眼アレルギー薬、抗生物質、ドライアイ治療薬、非ステロイド薬、コルチコステロイド薬、緑内障治療薬、帯状疱疹治療薬から成る群から選択される。本発明のさらなる実施形態は、活性医薬化合物としてのＰＰ−００１、リファイトグラスト、シクロスポリンＡ、アゼラスチンＨＣｌ、ビマトプロスト、ブリンゾラミド、ジピベフリンＨＣｌ、フシジン酸、レボカバスチン、ネパフェナク、メタル酸ネタルスジル、酢酸プレドニゾロンに関する。
【００９１】
本発明の組成物が点眼薬として配合される場合、その組成物は、約１〜３００ｍｇ／ｍｌ、又は約１０〜２００ｍｇ／ｍｌ、又は約５０〜１００ｍｇ／ｍｌの量でアルブミンを含むことができる。組成物はさらに、医薬的に許容できる希釈剤も含むことができる。
【００９２】
本明細書において使用される場合、「医薬的に許容される希釈剤」とは、当業者に知られている眼科用組成物のために使用される任意の希釈剤、例えば水、生理食塩水、人工涙液など。
【００９３】
本発明の医薬組成物はさらに、通常の眼科用組成物に使用される種々の成分、例えば安定剤、滅菌剤、緩衝剤、張度調整剤、キレート剤、ｐＨ調整剤、界面活性剤などを含むことができる。
【００９４】
医薬組成物は典型的には、医薬的に許容できる担体を含む。医薬的に許容できる担体として作用することができる材料のいくつかの例は、以下を含む：（１）糖、例えばラクトース、グルコース、ス及びクロース；（２）デンプン、例えばトウモロコシデンプン、ジャガイモデンプン、及び置換又は非置換のβ-シクロデキストリン；（３）セルロース及びその誘導体、例えばナトリウムカルボキシメチルセルロース、エチルセルロース、及びセルロースアセテート；（４）トラガカントの粉；（５）麦芽；（６）ゼラチン；（７）タルク；（８）賦形剤、例えばココアバター及び坐剤ワックス; （９）オイル、例えば落花生油、綿実油、ベニバナ油、ゴマ油、オリーブ油、トウモロコシ油、及び大豆油；（１０）グリコール、例えばプロピレングリコール；（１１）ポリオール、例えばグリセリン、ソルビトール、マンニトール、及びポリエチレングリコール；（１２）エステル、例えばオレイン酸エチル及びラウリン酸エチル；（１３）寒天；（１４）緩衝剤、例えば水酸化マグネシウム及び水酸化アルミニウム；（１５）アルギン酸；（１６）発熱物質を含まない水；（１７）等張食塩水；（１８）リンガー液；（１９）エチルアルコール；（２０）リン酸緩衝液；及び（２１）医薬製剤に使用される他の非毒性適合性物質。特定の実施形態によれば、本明細書に提供される医薬組成物は、非発熱性であり、すなわち患者に投与される場合、有意な温度上昇を誘発しない。
【００９５】
医薬的に許容できる抗酸化剤の例は、以下を含む：（１）水溶性抗酸化剤、例えばアスコルビン酸、システイン塩酸塩、重硫酸ナトリウム、メタ重亜硫酸ナトリウム、亜硫酸ナトリウムなど；（２）油溶性抗酸化剤、例えばパルミチン酸アスコルビル、ブチル化ヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、ブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、レシチン、没食子酸プロピル、α−トコフェロールなど；及び（３）金属キレート剤、例えばクエン酸、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、ソルビトール、酒石酸、リン酸など。
【００９６】
安定剤の例は、以下を含む：通常のＬ型アミノ酸、例えばグリシン、及びアラニンなど、単糖類、例えばブドウ糖、マンノースなど、二糖類、例えばスクロース、マルトースなど、糖アルコール、例えばマンニトール、キシリトールなど、及び多糖類、例えばデキストランなど。
【００９７】
安定剤の例は、ベンザルコニウム塩、クロルヘキシジン塩、及びパラオキシ安息香酸のエステルなどを含む。
【００９８】
緩衝剤の例は、ホウ酸、リン酸、酢酸、及びクエン酸又はその塩を含む。
【００９９】
等張化剤の例は、塩化ナトリウム、塩化カリウム、及び糖類等を含む。
【０１００】
キレート剤の例は、エデト酸ナトリウム、及びクエン酸などを含む。
【０１０１】
眼科用製剤であるので、ｐＨは好ましくは、５〜８の範囲である。眼科用製剤のｐＨは、例えば、５．０、５．５、６．０、６．５、７．０、７．１、７．２、７．３、７．４、７．５、７．６、７．７、７．８、７．９、又は８．０である。
【０１０２】
本発明の１つの実施形態によれば、医薬活性化合物及びアルブミンを含む眼科用製剤は、本発明の医薬組成物として投与され得る。投与経路は、限定されないが、しかし眼への局所投与が最も好ましい。
【０１０３】
本発明の１つの実施形態によれば、医薬組成物は、約１〜１００μｌ／眼、好ましくは約１０〜５０μｌ／眼、及びより好ましくは、約２０〜４０μｌ／眼の投与量で投与され得る。医薬組成物は、１日当たり約１〜２０回、好ましくは、１日当たり１〜５回、及びより好ましくは、１日当たり１回、投与され得る。
【実施例】
【０１０４】
以下の実施例は、本発明の理解を助けるために記載されているが、本発明の範囲を限定することを意図しておらず、そして決してそのように解釈されるべきではない。 例には、従来の方法の詳細な説明は含まれていません。 そのような方法は、当業者によく知られている。
実施例１−アルブミンへのＰＰ−００１の結合：
【０１０５】
ＨＳＡ（ヒト血清アルブミン）へのＰＰ−００１の結合の分析のために、Thermo  ScientificＴＭからの迅速平衡透析（ＲＥＤ）アッセイを行った。異なるＰＰ−００１製剤を、装置のドナー側に適用し、そして５０ｍＭのリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）を、アクセプター媒体として使用した。透析において平衡を達成するのに必要とされる時間を、５時間と決定した。配合物を２３℃で３００ｒｐｍ下でインキュベートした。非結合画分を、透析膜を通してアクセプター緩衝液チャンバーに浸透させた。５時間の平衡時間の後、非結合画分を、ＨＰＬＣ／ＤＡＤを介して各コンパートメント内のＰＰ−００１の量を分析することにより、決定した。
【０１０６】
RED  Device  InsertsへのＰＰ−００１の非特異的結合を調査するために、５０ｍＭのリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）中、０．０５ｎｇ／ｍｌのＰＰ−００１の溶液を、対照サンプルとして使用した。アクセプターコンパートメントにおけるＰＰ−００１濃度は、ドナーコンパートメントにおける濃度の８２％以上であった。ＲＥＤ装置へのＰＰ−００１の小さな非特異的結合のみが決定された。
【０１０７】
材料：
ＲＥＤ：ＲＥＤデバイスインサート、５０ /パック、製品番号89809（ロット番号1897071）
テフロン（登録商標）素材で作られた再利用可能なベースプレート（製品番号89811、ロット番号NJ1617201）
９６ウェルプレート用シールテープ（製品番号15036、ロット番号NE171995）
インキュベーション装置：エッペンドルフサーモミキサー
サンプル容器：エッペンドルフ PPバイアル（1.５及び２ ｍＬ）
ＨＰＬＣ容器（Ｇ１）、ガラス、１．５ ｍＬ
遠心分離機Hettich Mikro 220 R、最大１４０００ ｒｐｍ
【０１０８】
結果：
【０１０９】
遊離ＰＰ−００１の量を、以下の等式に従って計算した：
％遊離率＝（ＰＰ−００１濃度アクセプターチャンバー）* １００％/（ＰＰ−００１濃度ドナーチャンバー）
【０１１０】
結合されたＰＰ−００１の量を、以下として計算する：
％結合率＝１００−％遊離率
【表１】
2021515777.tif 000002
高いＰＰ−００１濃度でさえ、ＰＰ−００１は、このアッセイにおいてアルブミンにほぼ完全に結合される。
実施例２−ＰＰ−００１／アルブミン点眼薬の配合：
【０１１１】
ＰＰ−００１原薬（１５０ｍｇ）を、水（２１．０ｇ）及び１ＭのＮａＯＨ水溶液（４８２μｌ）の混合物に混濁し、そしてその混合物を、室温で（２０〜２５℃）で０．５Ｏ〜３時間にわたって、７００ｒｐｍで攪拌し、その後、２０％アルブミン水溶液（７．５ｍｌ）を添加した。攪拌を、室温でさらに１〜２時間、続けた。溶液のｐＨ及び浸透圧を、１ＭのＨＣｌ水溶液及び２６％ＮａＣｌ水溶液（５７５μｌ）のゆっくりした（滴下）添加により、それぞれ、約７．４及び２７９〜３３０ｍＯｓｍ／ｋｇに調整した。黄色がかったほぼ透明な混合物をさらに１５分間、攪拌し、その後、０．２μｍの滅菌フィルターを用いて濾過した。
【０１１２】
図１に示されるように、３ｍｇ／ｍｌのＰＰ−００１及び５０ｍｇ／ｍｌのアルブミンを含む製剤は、試験された患者グループから卓越した快適性評価を受けた。
実施例３−実施例２で調製されたＰＰ−００１／アルブミン点眼薬の物理化学的特性：
【０１１３】
ｐＨ７．３９
【０１１４】
２７６ｍＯｓｍ ／ ｋｇ
【０１１５】
アルブミンへの９８％以上のＰＰ−００１結合
実施例４−ＰＰ−００１／アルブミン点眼薬の眼刺激性／快適性試験：
【０１１６】
ＰＰ−００１のアルブミン含有点眼製剤を、賦形剤としてＨＰＭＣ、ＰＶＰ及びグリセロールを含むＰＰ−００１点眼剤、及び市販のシクロスポリン点眼剤（Ikervis（登録商標））と比較した。１滴を、片眼に滴下した。全ての製剤は、３ｍｇ／ｍｌのＰＰ−００１を含んでいた。Ikervis（登録商標）は、エマルジョン製剤中に０．１％シクロスポリンを含む。異なる製剤の快適性を、以下の快適性評点に従って評価した：
１：快適（等張食塩水のように）
２：非常に穏やかな一時的な感覚
３：軽度の灼熱感又は異感覚
４：灼熱感又は刺すような感覚
５：強い灼熱又は刺すような感覚又は発赤
【０１１７】
ＨＰＭＣ、ＰＶＰ及びグリセロール中、ＰＰ−００１の製剤は志願者により灼熱及び刺痛として評価されたが、５％又は２０％アルブミンを含む製剤は、快適で眼に対して刺激がないとして評価された。同じ快適性評価（評点１）で、全ての試験されたプラセボ製剤が得られた（データは示されていない）。Ikervis（登録商標）は、ＨＰＭＣ、ＰＶＰ及びグリセロールを含むＰＰ−００１製剤と同様に灼熱性であることがわかった。
実施例５−ウサギにおけるＰＫ研究：
【０１１８】
ＰＰ−００１／アルブミン製剤が標的組織（すなわち、結膜及び角膜）に十分なＰＰ−００１を送達することを確認するために、薬物動態研究を、ニュージーランド白ウサギにおいて実施した。
【０１１９】
方法：
生後薬３カ月の１０匹の雌の動物を、時点０で、両眼に製剤１（３ｍｇ／ｍｌのＰＰ−００１）を１滴（３５μｌの滴径）投与した。動物を、投与後３０分、又は２、４又は１２時間後に犠牲にし、そして眼組織及び血漿を収集した。血漿及び組織中のＰＰ−００１濃度を、検証済みのＨＰＬＣ−ＭＣ分析方により決定した。
【０１２０】
結果：
結果は、それぞれ、結膜及び角膜について図２及び３に示されている。製剤中のアルブミンに結合された高いＰＰ−００１画分（９５％以上）にもかかわらず、相当量のＰＰ−００１が、そのような点眼薬の投与後、眼組織により吸収されている。
【０１２１】
ＰＰ−００１は、角膜において非常に持続的であり、ここで濃度は、投与後に時間までにＣｍａｘからそれほど減少しなかった。血漿においては、Ｃｍａｘは９ｎｇ／ｍｌ以下であった。結果的に、全身性の影響は、ＰＰ−００１／アルブミン点眼薬によっては予想されない。
実施例６−有効性の研究：
【０１２２】
有効性の研究の目的は、マウスドライアイ疾患モデルにおいて５％ＨＳＡに配合されたＰＰ−００１の抗炎症及び細胞保護効果を決定することであった。有効性を、参照化合物Restasis（登録商標）と比較した。
【０１２３】
方法：
雄のＣ５７ＢＬ／６マウスを、スコポラミンの経皮投与による制御された乾燥環境に暴露した。１０日目及び２０日目、角膜フルオレセイン染色を評価した。４つのグループ（ｎ＝８匹のマウス）を、この研究で評価した。グループは、未処置及びビークル処置された動物、５ｍｇ／ｍｌのＰＰ−００１／アルブミン製剤を受けるグループ又は参照化合物Restasis（登録商標）を受けるグループを含んだ。組織学的評価は、結膜胚細胞の定量化、涙腺病変の重症度評点及び角膜の厚さの測定を含んだ。
【０１２４】
結果：
５％ＨＳＡに配合された５ｍｇ／ｍｌのＰＰ−００１は、角膜フルオレセイン染色の変化において統計学的に有意な治療効果を示し、これはRestasis（登録商標）の効果に匹敵した（図４及び５を参照のこと）。涙腺病変の減少傾向が、ＰＰ−００１／アルブミン治療グループに観察された。
実施例７−異なる医薬活性化合物の熱力学的溶解度：
【０１２５】
異なる医薬活性化合物の熱力学的溶解度を、ＰＢＳ（リン酸緩衝生理食塩水）ｐＨ７．５及びＰＢＳ中５％ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）において決定した。このプロセスは、１ｍｌの定義された緩衝液を、約１ｍｇの固体化合物に添加することにより開始された。溶液を、少なくとも１５時間、混合した。目に見える溶液に溶解されていない物質が存在しない場合、固体化合物の追加部分を添加し、そしてその溶液をさらに、少なくとも１５時間、混合した。この工程を、平衡の飽和が達成されるまで、反復した；過剰な固体が明確に見えた。平衡状態になるまでの合計混合時間は、４０時間を越えるべきである。平衡に達した後、溶液を、１４，０００ｒｐｍで１０分間、遠心分離した。飽和溶液中の活性化合物の含有量を定義するために、上清液をＬＣ／ＭＳ分析に使用した。
【０１２６】
材料：
分析天びん：Radwag AS60 / 220 / C / 2（精度：０．１ mg）
サンプル容器、ガラスバイアル、２０ mL、Bionovo、（製品番号L−０３２３）
HPLC容器、ガラス、２ mL、製品番号VT００９M−１２３２
エッペンドルフ遠心分離機５８０４ R
その他：エッペンドルフチップ、エッペンドルフピペット、IKA KS ５０１デジタル
LC−MSシステム：
Degaser Ultimate 3000
ポンプUltimate 3000ポンプ
オートサンプラーUltimate 3000 RSオートサンプラー
カラムオーブンUltimate 3000 RSカラムコンパートメント
検出器Ultimate 3000フォトダイオードアレイ検出器
質量分析計Bruker Daltonics amaZon SL
カラム：Agilent Technologies、Eclipse XDB-C18、３．０ × ７５ｍｍ、３．５ μM、プレカラム付き
【０１２７】
結果：
【表２】
2021515777.tif 000003
【０１２８】
ＰＢＳ（ｐＨ７．４）のみでの水溶解度が、１００％として定義された（図６を参照のこと）。ＰＢＳ中、５％ＨＳＡを緩衝液として使用する場合、熱力学的溶解度の増加率（グラフ中のｙ軸）を、以下の等式に従って計算した：
％上昇率＝（ＰＢＳ中５％ＨＡＳにおける溶解度）* １００％/（ＰＢＳにおける溶解度）−１００％
【０１２９】
試験された全ての化合物について、医薬活性化合物単独の水溶解度と比較した場合、アルブミンの存在下で少なくとも１０％（グラフの線）の増加を達成した。溶解度の最高の増加は、ネタルスジルメシレート（２７４，７６５％以上）、ＰＰ−００１（５，９７８％）及びレボカパスチンＨＣｌ（２，３３３％）で示された。
実施例８−異なる医薬活性化合物のアルブミンへの結合：
【０１３０】
異なる医薬活性化合物のＨＳＡ（ヒト血清アルブミン）への結合の分析のために、Thermo  Scientific  TMからの迅速平衡透析（ＲＥＤ）アッセイを行った。異なる医薬活性化合物（実施例１で調製された飽和溶液中の）を、装置のドナー側に適用した。ＰＢＳ（ｐＨ７．４）を、アクセプター媒体として使用した。透析において平衡を達成するのに必要とされる時間を、５時間に決定された。製剤を３００ｒｐｍで２３℃でインキュベートした。非結合画分は、透析膜を通してアクセプター緩衝液チャンバーに浸透された。５時間の平衡時間の後、非結合画分を、ＬＣ／ＭＳを介して各コンパートメントの活性化合物の量を分析することにより決定した。
【０１３１】
材料：
ＲＥＤ：ＲＥＤデバイスインサート、５０ /パック、製品番号８９８０９（ロット番号Ｔｌ２６３５２５２）
テフロン（登録商標）素材で作られた再利用可能なベースプレート（製品番号８９８１１）
シーリングテープPerkinElmer（製品番号１４５０−４６１、ロット番号８７５−１５０８１）
インキュベーション装置：エッペンドルフサーモミキサー
サンプル容器、ガラスバイアル、２０ ｍＬ、Bionovo、（製品番号Ｌ−０３２３）
ＨＰＬＣコンテナ、ガラス、２ ｍＬ、製品番号ＶＴ００９Ｍ−１２３２
エッペンドルフ遠心分離機５８０４ Ｒ
ＬＣ−ＭＳシステム：
Degaser Ultimate 3000
ポンプUltimate 3000ポンプ
オートサンプラーUltimate 3000 RSオートサンプラー
カラムオーブンUltimate 3000 RSカラムコンパートメント
検出器Ultimate 3000フォトダイオードアレイ検出器
質量分析計Bruker Daltonics amaZon SL
カラム：Agilent Technologies、Eclipse XDB-C18、３．０ × ７５ ｍｍ、３．５ μＭ、プレカラム付き
【０１３２】
結果：
【０１３３】
遊離化合物の量を、以下の等式に従って計算した：
％遊離率＝（アクセプターチャンバー内の化合物の濃度）* １００％／（ドナーチャンバー内の化合物の濃度）
【０１３４】
結合された化合物の量を、％結合率＝１００−％遊離率として計算する。
【表３】
2021515777.tif 000004
【０１３５】
グラフは、５％ＨＳＡの飽和溶液中、ヒト血漿アルブミンに非共有結合される各化合物の％を示す（図７を参照のこと）。全ての試験された化合物は、６５％以上ＨＳＡに非共有結合される。
【０１３６】
メシル酸ネタールスジル及びＰＰ−００１は、飽和溶液中ＨＳＡにほぼ１００％結合される。描かれた線は、医薬活性化合物の５０％以上がアルブミンに結合されることを明確に示している。
【図１】
2021515777.tif 000005
【図２】
2021515777.tif 000006
【図３】
2021515777.tif 000007
【図４】
2021515777.tif 000008
【図５】
2021515777.tif 000009
【図６】
2021515777.tif 000010
【図７】
2021515777.tif 000011
【手続補正書】
【提出日】令和2年11月9日(2020.11.9)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
眼科用医薬活性化合物としての３−（２，３，５，６−テトラフルオロ−３'−トリフルオロメトキシ−ビフェニル−４ −イルカルバモイル）−チオフェン−２−カルボン酸（ＰＰ−００１）及びアルブミンを含む、眼科用組成物。
【請求項２】
前記アルブミンが、ヒト血清アルブミン、組換えヒト血清アルブミン、そのＮ末端に少なくとも１つのアミノ酸切断を有する血清アルブミン、又はプレアルブミンである、請求項１に記載の眼科用組成物。
【請求項３】
前記アルブミンがヒト血清アルブミンである、請求項２に記載の眼科用組成物。
【請求項４】
１又は２以上の医薬的に許容できる賦形剤及び／又は担体をさらに含む、請求項１〜３のいずれか１項に記載の眼科用組成物。
【請求項５】
前記医薬的に許容できる賦形剤が、界面活性剤、防腐剤、粘度調整剤、ｐＨ調整剤、安定剤、及び張度調整剤から成る群から選択される、請求項４に記載の眼科用組成物。
【請求項６】
前記医薬活性化合物が、約０．００５重量％〜約２０重量％含まれる、請求項１〜５のいずれか１項に記載の眼科用組成物。
【請求項７】
前記アルブミンが、約１重量％〜約３０重量％含まれる、請求項１〜６のいずれか１項に記載の眼科用組成物。
【請求項８】
前記眼科用組成物中のアルブミン：医薬活性化合物の重量比が、約１：５、又は１：１、又は２０：１、又は４００：１、又はそれ以上である、請求項１〜７のいずれか１項に記載の眼科用組成物。
【請求項９】
局所点眼用である、請求項１〜８のいずれか１項に記載の眼科用組成物。
【請求項１０】
眼薬、ジェル、軟膏、又はスプレーの形である、請求項１〜９のいずれか１項に記載の眼科用組成物。
【請求項１１】
ドライアイ症候群、白内障手術、緑内障、結膜炎、アレルギー、細菌感染、眼瞼炎、感染性角膜潰瘍、角膜擦過傷、眼の炎症、角膜移植、又はブドウ膜炎に苦しむ患者の治療への使用のための、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の眼科用組成物。
【請求項１２】
前記ドライアイ症候群が、涙液欠乏性ドライアイ又は蒸発性ドライアイである、請求項１１に記載の眼科用組成物。
【請求項１３】
前記ドライアイ症候群が、涙腺、眼球乾燥症、シェーグレン症候群、乾性角結膜炎、スティーブンス・ジョンソン症候群、類天疱瘡、眼科手術後のドライアイ、アレルギー性結膜炎を伴うドライアイ、ＶＤＴ（ビジュアルディスプレイターミナル）作業者の涙の減少、及び空調のためにドライルームによリ引き起こされる全身症状のない涙の減少を含むドライアイ様症状から成る群から選択される、請求項１１に記載の眼科用組成物。
【国際調査報告】
2021515777.tif 000012
2021515777.tif 000013
2021515777.tif 000014