(57)【要約】１３Ｎ−オキシトシン分子、１３Ｎ−オキシトシン分子の製造方法、ならびに１３Ｎ−オキシトシン分子の頭蓋顔面またはその他の付与方法の後の分布および動態を決定することにおける１３Ｎ−オキシトシン分子の使用方法が開示される。放射標識されたオキシトシンペプチドの合成は、依然として難題であり、ＰＥＴなどの従来の画像化技術を使用する妨げになっている。本明細書では、新規の１３Ｎ標識オキシトシンペプチドおよびその製造方法を提供することによってこの課題を解決する手段を提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
配列番号１のアミノ酸配列を含む１３Ｎ標識オキシトシンペプチド。
【請求項２】
前記オキシトシンペプチドの１個の構成１４Ｎ原子が１３Ｎ放射性核種で置き換えられている、請求項１に記載の１３Ｎ標識オキシトシンペプチド。
【請求項３】
前記オキシトシンペプチドの１つの残基が、１３Ｎ放射性核種を含む部分を含むように修飾されている、請求項１または２に記載の１３Ｎ標識オキシトシンペプチド。
【請求項４】
前記オキシトシンペプチドの１つの残基が、１３ＮＨ２を含むように修飾されている、請求項３に記載の１３Ｎ標識オキシトシンペプチド。
【請求項５】
単一の１３Ｎ放射性核種を含む、請求項１から４のいずれか一項に記載の１３Ｎ標識オキシトシンペプチド。
【請求項６】
ａ）４位にあるグルタミン残基（配列番号２）、ｂ）５位にあるアスパラギン残基（配列番号３）、またはｃ）９位にあるグリシン残基（配列番号４）に１３Ｎ放射性核種を含む、請求項１から５のいずれか一項に記載の１３Ｎ標識オキシトシンペプチド。
【請求項７】
式（ＩＶ）の化合物である、請求項１に記載の１３Ｎ標識オキシトシンペプチド。
【請求項８】
配列番号１のアミノ酸配列を含む１３Ｎ標識オキシトシンペプチドを製造する方法であって、
ａ）式（Ｉｂ）の化合物をシアノホスホン酸ジエチル（ＤＥＣＰ）と反応させて、式（ＩＩｂ）の化合物を提供することと、
ｂ）前記式（ＩＩｂ）の化合物を気体１３ＮＨ３と反応させて、式（ＩＩＩｂ）の化合物を提供することと、
ｃ）前記式（ＩＩＩｂ）の化合物を脱保護して、前記１３Ｎ標識オキシトシンペプチドを提供することと
を含み、
前記１３Ｎ標識オキシトシンペプチドは、式（ＩＶ）の化合物である、方法。
【請求項９】
前記式（Ｉｂ）の化合物をＤＥＣＰと反応させることが、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、およびペンタメチルピペリジン（ＰＭＰ）の存在下で実施される、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
ＤＥＣＰの量が、約０．７当量〜約１．１当量の間である、請求項８または９に記載の方法。
【請求項１１】
ＤＭＳＯのＴＨＦに対する比が、約１：７〜約１：１１の間である、請求項９または１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記脱保護することが、前記式（ＩＩＩｂ）の化合物をＨＣｌ／ジオキサンと反応させることを含む、請求項８から１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
ステップｃ）において提供された前記１３Ｎ標識オキシトシンペプチドを精製して、試薬、有機溶媒、および前駆体を除去することをさらに含む、請求項８から１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
前記精製することが、固相抽出（ＳＰＥ）による精製を含む、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
ＳＰＥによる精製が、
ａ）前記１３Ｎ標識オキシトシンペプチドを第１の疎水性ＳＰＥカラムに付与して、１３Ｎ−オキシトシンおよび前駆体が第１の疎水性ＳＰＥカラム上に保持されるようにすることと、
ｂ）水性イオン対試薬を含む溶液を前記第１の疎水性ＳＰＥカラムに付与して、前記１３Ｎ−オキシトシンが第１の溶出液中に溶離するようにすることと、
ｃ）前記第１の溶出液を第２の疎水性ＳＰＥカラムに付与して、前記第１の溶出液の前記１３Ｎ−オキシトシンが、前記第２の疎水性ＳＰＥカラム上に保持されるようにすることと、
ｄ）前記１３Ｎ−オキシトシンを第２の溶出液中に溶離させることと
を含む、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記第１および／または第２の疎水性ＳＰＥカラムが、強い疎水性を有する、シリカを主体とする結合相を含む、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記水性イオン対試薬を含む溶液が、約１５％〜約２５％の間のアセトニトリルを含む、請求項１５または１６に記載の方法。
【請求項１８】
請求項８から１７のいずれか一項に記載の方法を含むプロセスによって調製された１３Ｎ標識オキシトシンペプチド。
【請求項１９】
個体において、外因的に投与されたオキシトシンの分布を決定する方法であって、
ａ）前記個体に、請求項１から８および１８のいずれか一項に記載の１３Ｎ標識オキシトシンペプチドを投与することと、
ｂ）前記１３Ｎ標識オキシトシンペプチドが組織または細胞部位で蓄積して画像化されるのを可能にすることと、
ｃ）前記細胞または組織を非侵襲性の画像化技術によって画像化することと
を含む方法。
【請求項２０】
個体においてオキシトシン受容体の分布を決定する方法であって、
ａ）前記個体に、請求項１から８および１８のいずれか一項に記載の１３Ｎ標識オキシトシンペプチドを投与することと、
ｂ）前記１３Ｎ標識オキシトシンペプチドがオキシトシン受容体に結合するのを可能にすることと、
ｃ）前記個体における前記１３Ｎ標識オキシトシンペプチドを非侵襲性の画像化技術によって画像化することと
を含む方法。
【請求項２１】
個体において、外因的に投与されたオキシトシンの動態を決定する方法であって、
ａ）前記個体に、請求項１から８および１８のいずれか一項に記載の１３Ｎ標識オキシトシンペプチドを投与することと、
ｂ）前記個体における前記１３Ｎ標識オキシトシンペプチドを、非侵襲性の画像化技術によって所定の期間にわたり画像化することと
を含む方法。
【請求項２２】
前記非侵襲性の画像化技術が陽電子放出断層撮影イメージングを含む、請求項１９から２１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２３】
前記非侵襲性の画像化技術が、コンピュータ断層撮影イメージングを用いた陽電子放出断層撮影、または磁気共鳴画像法を用いた陽電子放出断層撮影を含む、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記１３Ｎ標識オキシトシンペプチドが、頭蓋顔面粘膜投与によって投与される、請求項１９から２３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２５】
前記１３Ｎ標識オキシトシンペプチドが鼻腔内投与される、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
前記１３Ｎ標識オキシトシンペプチドが、静脈内、動脈内、腹腔内、小胞内、皮下、くも膜下腔内、肺内、筋肉内、気管内、眼科、経皮、または坐剤投与される、請求項１９から２３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２７】
前記１３Ｎ標識オキシトシンペプチドが静脈内投与される、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
請求項１から７および１８のいずれか一項に記載の１３Ｎ標識オキシトシンペプチドを含むキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、その内容が全体として参照により本明細書に援用される、２０１８年３月１日に出願された米国仮出願第６２／６３７，１８７号に基づく優先権利益を主張する。
ＡＳＣＩＩテキストファイルでの配列表の提出
【０００２】
次のＡＳＣＩＩテキストファイルでの提出物：コンピュータに読み込み可能な形式（ＣＲＦ）の配列表（ファイル名：６２３６３２００１６４０ＳＥＱＬＩＳＴ．ＴＸＴ、記録日：２０１９年３月１日、サイズ：１ＫＢ）の内容を全体として参照により本明細書に援用する。
技術分野
【０００３】
本発明は、１３Ｎ放射標識オキシトシンペプチドを含む組成物および１３Ｎ放射標識オキシトシンペプチドの製造方法を含めて、陽電子放出断層撮影（ＰＥＴ）および他の用途において使用するための、１３Ｎ放射標識オキシトシンペプチドに関する。
【背景技術】
【０００４】
オキシトシンは、子宮収縮、筋再生、および乳汁分泌を始めとする、いくつもの生理学的な身体機能への関与が示唆されている、自然に存在する９アミノ酸ポリペプチドである。加えて、オキシトシンは、いくつかの末梢および中枢神経系機能において重要な役割を果たすことが明らかにされている。たとえば、オキシトシンは、疼痛、自閉、食欲、不安、信頼、血糖のコントロール、および人と人との関係に関与することが示されている。
【０００５】
公表されている記事には、オキシトシンの頭蓋顔面粘膜、たとえば、経鼻投与によって、こうした機能を変調できることが示されたことが証明されている。たとえば、経鼻オキシトシン投与は、自閉症患者において社会的機能を改善し、片頭痛患者において疼痛を和らげることが示されている。しかし、頭蓋顔面粘膜適用後の身体内におけるオキシトシンの空間時間的分布について述べている利用可能な情報はない。オキシトシンの血中レベルの測定とは異なり、オキシトシンの付与後に、組織、特に神経系におけるオキシトシンのレベルを測定することは、本質的に難しい。頭蓋顔面または他の適用後にオキシトシンの組織中レベルを評価することができれば、治療有効性にとって肝要である組織オキシトシンレベルの決定が可能になる。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
投与されたオキシトシンの体内分布を評価するための一手法が、陽電子放出断層撮影（ＰＥＴ）によるものである。ＰＥＴは、身体における機能プロセスの画像または写真を生成する核医学イメージング技術である。このシステムは、生物活性分子に載せられて身体に導入される、陽電子を放射する放射性核種（トレーサー、放射性トレーサー、放射性医薬品など）によって間接的に放射されたガンマ線対を検出する。放射性核種（ｒａｄｉｏｎｕｃｌｉｄｅまたはｒａｄｉｏａｃｔｉｖｅ  ｎｕｃｌｉｄｅ）は、核内で新たに生み出された放射粒子へ、または内部転換を介して付与される利用可能な過剰のエネルギーを特徴とする、不安定な核を有する原子である。このプロセスの間、放射性核種は、放射性崩壊を経る結果、ガンマ線、および／またはアルファもしくはベータ粒子などの亜原子的粒子の放射をもたらすと言われている。こうした放射は、電離放射線を構成する。放射性核種は、放射性同位体（ｒａｄｉｏａｃｔｉｖｅ  ｉｓｏｔｏｐｅまたはｒａｄｉｏｉｓｏｔｏｐｅ）と呼ばれることが多い。身体内の放射性核種濃度の三次元分布を、ＰＥＴプロセスにおけるコンピュータ解析によって構築することができる。しかし、ＰＥＴにおいて放射性トレーサーとして使用するための放射標識オキシトシンペプチドの合成は、依然として困難である。
【０００７】
本明細書で参照のために引用したすべての公表文献、特許、特許出願、および公開特許出願の開示は、その全体が参照により本明細書に援用される。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
発明の簡単な要旨
本出願は、１３Ｎ−オキシトシン、１３Ｎ−オキシトシンを含む組成物、１３Ｎ−オキシトシンの使用方法、および１３Ｎ−オキシトシンの製造方法を提供する。
【０００９】
一部の実施形態では、配列番号１のアミノ酸配列を含む１３Ｎ標識オキシトシンペプチドが提供される。一部の実施形態では、オキシトシンペプチドの１個の構成１４Ｎ原子が、１３Ｎ放射性核種で置き換えられている。一部の実施形態では、オキシトシンペプチドの１つの残基が、１３Ｎ放射性核種を含む部分を含むように修飾されている。一部の実施形態では、オキシトシンペプチドの１つの残基が、１３ＮＨ２を含むように修飾されている。一部の実施形態では、１３Ｎ標識オキシトシンペプチドは、単一の１３Ｎ放射性核種を含む。
【００１０】
上述の１３Ｎ標識オキシトシンペプチドのいずれかに従う一部の実施形態において、１３Ｎ標識オキシトシンペプチドは、ａ）４位にあるグルタミン残基（配列番号２）、ｂ）５位にあるアスパラギン残基（配列番号３）、またはｃ）９位にあるグリシン残基（配列番号４）の箇所に１３Ｎ放射性核種を含む。
【００１１】
一部の実施形態では、１３Ｎ標識オキシトシンペプチドは、式（ＩＶ）の化合物である。
【００１２】
一部の実施形態では、配列番号１のアミノ酸配列を含む１３Ｎ標識オキシトシンペプチドを製造する方法であって、ａ）式（Ｉｂ）の化合物をシアノホスホン酸ジエチル（ＤＥＣＰ）と反応させて、式（ＩＩｂ）の化合物を提供することと、ｂ）式（ＩＩｂ）の化合物を気体１３ＮＨ３と反応させて、式（ＩＩＩｂ）の化合物を提供することと、ｃ）式（ＩＩＩｂ）の化合物を脱保護して、１３Ｎ標識オキシトシンペプチドを提供することとを含み、１３Ｎ標識オキシトシンペプチドは、式（ＩＶ）の化合物である、方法が提供される。一部の実施形態では、式（Ｉｂ）の化合物のＤＥＣＰとの反応は、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、およびペンタメチルピペリジン（ＰＭＰ）の存在下で実施される。一部の実施形態では、ＤＥＣＰの量は、約０．７当量〜約１．１当量の間である。一部の実施形態では、ＤＭＳＯのＴＨＦに対する比は、約１：７〜約１：１１の間である。一部の実施形態では、脱保護は、式（ＩＩＩｂ）の化合物をＨＣｌ／ジオキサンと反応させることを含む。
【００１３】
上述の方法のいずれかに従う一部の実施形態において、方法は、ステップｃ）において提供された１３Ｎ標識オキシトシンペプチドを精製して、試薬、有機溶媒、および前駆体を除去することをさらに含む。一部の実施形態では、精製は、固相抽出（ＳＰＥ）による精製を含む。一部の実施形態では、ＳＰＥによる精製は、ａ）１３Ｎ標識オキシトシンペプチドを第１の疎水性ＳＰＥカラムに付与して、１３Ｎ−オキシトシンおよび前駆体が第１の疎水性ＳＰＥカラムに保持されるようにすることと、ｂ）水性イオン対試薬を含む溶液を第１の疎水性ＳＰＥカラムに付与して、１３Ｎ−オキシトシンが第１の溶出液中に溶離するようにすることと、ｃ）第１の溶出液を第２の疎水性ＳＰＥカラムに付与して、第１の溶出液の１３Ｎ−オキシトシンが、第２の疎水性ＳＰＥカラムに保持されるようにすることと、ｄ）１３Ｎ−オキシトシンを第２の溶出液中に溶離させることとを含む。一部の実施形態では、第１および／または第２の疎水性ＳＰＥカラムは、強い疎水性を有する、シリカを主体とする結合相を含む。一部の実施形態では、水性イオン対試薬を含む溶液は、約１５％〜約２５％の間のアセトニトリルを含む。
【００１４】
一部の実施形態では、上述の方法のいずれかに従う方法を含むプロセスによって調製される１３Ｎ標識オキシトシンペプチドが提供される。
【００１５】
一部の実施形態では、個体において、外因的に投与されたオキシトシンの分布を決定する方法であって、ａ）個体に、上述の１３Ｎ標識オキシトシンペプチドのいずれかに従う１３Ｎ標識オキシトシンペプチドを投与することと、ｂ）１３Ｎ標識オキシトシンペプチドが組織または細胞部位で蓄積して画像化されるのを可能にすることと、ｃ）細胞または組織を非侵襲性の画像化技術によって画像化することとを含む方法が提供される。
【００１６】
一部の実施形態では、個体においてオキシトシン受容体の分布を決定する方法であって、ａ）個体に、上述の１３Ｎ標識オキシトシンペプチドのいずれかに従う１３Ｎ標識オキシトシンペプチドを投与することと、ｂ）１３Ｎ標識オキシトシンペプチドがオキシトシン受容体に結合するのを可能にすることと、ｃ）個体における１３Ｎ標識オキシトシンペプチドを非侵襲性の画像化技術によって画像化することとを含む方法が提供される。
【００１７】
一部の実施形態では、個体において、外因的に投与されたオキシトシンの動態を決定する方法であって、ａ）個体に、上述の１３Ｎ標識オキシトシンペプチドのいずれかに従う１３Ｎ標識オキシトシンペプチドを投与することと、ｂ）個体における１３Ｎ標識オキシトシンペプチドを、非侵襲性の画像化技術によって所定の期間にわたり画像化することとを含む方法が提供される。
【００１８】
上述の方法のいずれかに従う一部の実施形態において、非侵襲性の画像化技術は、陽電子放出断層撮影イメージングを含む。一部の実施形態では、非侵襲性の画像化技術は、コンピュータ断層撮影イメージングを用いた陽電子放出断層撮影、または磁気共鳴画像法を用いた陽電子放出断層撮影を含む。
【００１９】
上述の方法のいずれかに従う一部の実施形態において、１３Ｎ標識オキシトシンペプチドは、頭蓋顔面粘膜投与によって投与される。一部の実施形態では、１３Ｎ標識オキシトシンペプチドは、鼻腔内投与される。
【００２０】
上述の方法のいずれかに従う一部の実施形態において、１３Ｎ標識オキシトシンペプチドは、静脈内、動脈内、腹腔内、小胞内（ｉｎｔｒａｖｅｓｉｃｕｌａｒｌｙ）、皮下、くも膜下腔内、肺内、筋肉内、気管内、眼科、経皮、または坐剤投与される。一部の実施形態では、１３Ｎ標識オキシトシンペプチドは、静脈内投与される。
【００２１】
一部の実施形態では、上述の１３Ｎ標識オキシトシンペプチドのいずれかに従う１３Ｎ標識オキシトシンペプチドを含むキットが提供される。
【図面の簡単な説明】
【００２２】
【図１】図１は、１３Ｎ−オキシトシンの合成および製造についての流れ図である。
【００２３】
【図２】図２は、ＣＮＳ浸透が不十分であることを示す、オキシトシンの静脈内投与後のラットのＰＥＴおよびＭＲ走査像である。
【００２４】
【図３】図３は、ＣＮＳ浸透が不十分であることを示す、オキシトシンの鼻腔内投与後のラットのＰＥＴとＭＲ走査像の重ね合わせである。
【発明を実施するための形態】
【００２５】
発明の詳細な説明
オキシトシンが特定の適応症について治療上有効になるためには、適正なターゲット組織に効率よく送達されなければならない。送達は、付与経路および製剤組成を始めとするパラメーターによって影響を受ける場合がある。特定の適応症の処置に有効であることが示された経路および製剤によって投与されたオキシトシンの空間的および時間的分布を正確に決定することができると、前記適応症のための治療上有効な薬物動態プロファイルを決定することが可能になる。そうした薬物動態プロファイルの知識によって、投与経路と製剤の新たな組合せを評価して、治療有効性を最大にすることが可能になる。さらに、種々の適応症の処置についてオキシトシンの作用部位を発見することで、調査のための追加の治療ターゲットが得られる場合もある。
【００２６】
放射標識されたオキシトシンペプチドの合成は、依然として難題であり、ＰＥＴなどの従来の画像化技術を使用する妨げになっている。本明細書では、新規の１３Ｎ標識オキシトシンペプチドおよびその製造方法が提供される。
定義
【００２７】
本明細書で使用するとき、「オキシトシンペプチド」とは、自然のオキシトシンと関連付けられる生物活性を有する物質を指す。オキシトシンペプチドは、自然に存在する内因性ペプチド、その断片、類似体、または誘導体である場合がある。オキシトシンペプチドは、非内因性ペプチド、その断片、類似体、または誘導体である場合もある。一態様では、オキシトシンペプチドは、ヒトオキシトシンである。他の態様では、オキシトシンペプチドは、ヒトオキシトシンの類似体または誘導体になる場合がある。
【００２８】
本明細書で使用するとき、「類似体」または「誘導体」とは、ペプチド内の１つまたは複数のアミノ酸が置換され、欠失し、または挿入されている、自然に存在するオキシトシンに対するいずれかのペプチド類似体を指す。この用語は、１つまたは複数のアミノ酸（たとえば、１つ、２つ、または３つのアミノ酸）が、たとえば化学修飾によって修飾されているいずれかのペプチドも指す。一般に、この用語は、オキシトシン活性を示すが、所望なら、異なる効力または薬理学的プロファイルを有していてもよい、すべてのペプチドをカバーする。
【００２９】
用語「治療剤」、「治療能力のある薬剤」、または「処置薬」は、区別なく使用され、対象に投与されるといくらかの有益な効果を付与する分子または化合物を指す。有益な効果には、診断判定を可能にすること；疾患、症状、障害、または病的状態の改善；疾患、症状、障害、または状態の発症を低減または予防すること；および疾患、症状、障害、または病的状態に広く対抗することが含まれる。
【００３０】
本明細書で使用するとき、「処置」または「処置する」とは、限定はしないが治療利益を始めとする、有益または所望の結果を得るための手法を指す。治療利益とは、処置がなされている１つまたは複数の疾患、状態、または症状の、治療と関係のあるいずれかの改善、またはそれに対する効果を意味する。
【００３１】
用語「有効量」または「治療有効量」とは、有益または所望の結果をもたらすのに十分である薬剤の量を指す。治療有効量は、処置がなされる対象および疾患状態、対象の体重および年齢、疾患状態の重症度、投与方式などの１つまたは複数に応じて様々となる場合があり、当業者が容易に決定することができる。この用語は、本明細書に記載の画像化方法のいずれか１つによる検出用画像を提供する用量にも適用される。詳細な用量は、選択された特定の薬剤、従うべき投薬レジメン、その薬剤を他の化合物と組み合わせて投与するかどうか、投与のタイミング、画像化される組織、およびその薬剤を運搬する物質送達系の１つまたは複数に応じて様々となりうる。
【００３２】
「頭蓋顔面粘膜投与」とは、鼻、鼻道、鼻腔の粘膜表面；歯肉（歯茎）、口腔底、口唇、舌、舌小帯および口底を含む舌下口腔表面を含めた口腔の粘膜表面、ならびに結膜、涙腺、鼻涙管、および上下眼瞼および眼の粘膜を含めた眼あるいは眼周囲の粘膜表面への送達を指す。
【００３３】
「鼻腔内投与」または「鼻腔内投与される」とは、スプレー、滴剤、粉末、ゲル、フィルム、吸入剤、または他の手段による鼻、鼻道、または鼻腔への送達を指す。
【００３４】
「鼻腔の下方領域」とは、一般に、中および下鼻甲介骨が突き出る部分の鼻腔を指し、三叉神経によって大きく支配される鼻腔領域である。「鼻腔の上方領域」は、嗅覚神経支配下に置かれている、上部３分の１および篩板領域によって範囲が画定される。
【００３５】
用語「対象」、「個体」、および「患者」は、本明細書では、脊椎動物、好ましくは、哺乳動物、より好ましくは、ヒトを指すのに、区別なく使用される。哺乳動物には、限定はしないが、ネズミ、サル、ヒト、家畜、スポーツ動物、および愛玩動物が含まれる。ｉｎ  ｖｉｖｏで取得され、またはｉｎ  ｖｉｔｒｏで培養された生物学的存在の組織、細胞、およびその子孫も包含される。
【００３６】
本明細書で使用するとき、単数形「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」は、別段示さない限り、複数の言及を包含する。
【００３７】
本明細書における「約」値またはパラメーターへの言及は、その値またはパラメーターそれ自体に向けられる実施形態を含む（およびそれについて述べる）。たとえば、「約Ｘ」に言及する記述は、「Ｘ」の記述を含む。
【００３８】
値の範囲が示されている場合では、その範囲の上限と下限の間にある各介在値、およびその明示された範囲における他のいずれかの明示または介在値が、本開示内に包含されるものとされる。たとえば、１μｇ〜８μｇという範囲が明示される場合、２μｇ、３μｇ、４μｇ、５μｇ、６μｇ、および７μｇ、ならびに１μｇより大きいまたはそれに等しい値の範囲、および８μｇ未満またはそれに等しい値の範囲も、明確に開示されるものとされる。１０〜１４％という範囲が明示される場合、１０％、１１％、１２％、１３％、および１４％も明確に開示されるものとされる。さらに、明示された範囲における、その明示された範囲にあるいずれかの明示値または介在値と他のいずれかの明示または介在値の間にあるより小さい各範囲も、本開示内に包含される。こうしたより小さい範囲の上限および下限は、独立に、範囲に含まれる場合もあり、または除外される場合もあり、より小さい範囲に含まれるのがいずれかである、いずれでもない、または両方である各範囲も、明示された範囲に詳細に除外される境界があることを仮定して、本開示内に包含される。明示された範囲が境界の一方または両方を含む場合では、含まれるそうした境界のいずれかまたは両方を除外する範囲も、本開示に含まれる。
【００３９】
本発明の組成物および方法は、本明細書に記載の本発明の本質的な要素および制限事項、ならびに任意の付加的な、または必要に応じた、本明細書に記載する、またはそうでなくとも有用な成分、構成要素、または制限事項を含む、それからなる、またはそれから本質的になる場合がある。
【００４０】
別段指摘しない限り、技術用語は、従来の用法に従って使用する。
１３Ｎ−オキシトシン
【００４１】
オキシトシンは、単離され、配列決定されることになる最初のペプチドホルモンの１つであった。天然オキシトシンは、１位と６位間で２つのシステイン残基がジスルフィド架橋を形成している、９アミノ酸環状ペプチドホルモンである。ヒトオキシトシンのアミノ酸配列は、Ｃｙｓ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｇｌｎ−Ａｓｎ−Ｃｙｓ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ（配列番号１）である。
【００４２】
オキシトシンを生成する方法は、記載されており、たとえば、米国特許第２，９３８，８９１号および米国特許第３，０７６，７９７号を参照されたい。加えて、オキシトシンは、市販品として入手可能である。様々なペプチド類似体および誘導体が入手可能であり、他のものについては、本発明内での使用を企図することができ、公知の方法に従って、生成し、生物活性を試験することができる。オキシトシン類似体には、限定はしないが、４−トレオニン−１−ヒドロキシ−デアミノオキシトシン、４−セリン−８−イソロイシン−オキシトシン、９−デアミドオキシトシン、７−Ｄ−プロリン−オキシトシンおよびそのデアミノ類似体、（２，４−ジイソロイシン）−オキシトシン、デアミノオキシトシン類似体、１−デアミノ−１−モノカルバ−Ｅ１２−Ｔｙｒ（ＯＭｅ）］−ＯＴ（ｄＣＯＭＯＴ）、４−トレオニン−７−グリシン−オキシトシン（ＴＧ−ＯＴ）、オキシプレッシン、デアミノ−６−カルバ−オキシトキシン（ｄＣ６０）、Ｌ−３７１，２５７およびオルト−トリグルオロ−エトキシフェニルアセチルコアを含んでいる関連した一連の化合物、たとえばＬ−３７４，９４３が含まれうる。他の例示的なオキシトシン類似体には、４−トレオニン−１−ヒドロキシ−デアミノオキシトシン、グリシンアミド残基の代わりにグリシン残基を含んでいるオキシトシン類似体である９−デアミドオキシトシン、ナトリウム排泄増加および利尿活性を有するオキシトシン類似体である７−Ｄ−プロリン−オキシトシン（２，４−ジイソロイシン）−オキシトシン、デアミノオキシトシン類似体、長時間作用性オキシトシン類似体、１−デアミノ−１−モノカルバ−Ｅ１２−［Ｔｙｒ（ＯＭｅ）］−ＯＴ（ｄＣＯＭＯＴ）、カルベトシン、（１−ブタン酸−２−（Ｏ−メチル−Ｌ−チロシン）−１−カルバオキシトシン、デアミノ−１モノカルバ−（２−Ｏ−メチルチロシン）−オキシトシン［ｄ（ＣＯＭＯＴ）］）、［Ｔｈｒ４−Ｇｌｙ７］−オキシトシン（ＴＧ−ＯＴ）、オキシプレッシン、Ｉｌｅ−コノプレッシン、デアミノ−６−カルバ−オキシトキシン（ｄＣ６０）、ｄ［Ｌｙｓ（８）（５／６Ｃ−フルオレセイン）］ＶＴ、ｄ［Ｔｈｒ（４），Ｌｙｓ（８）（５／６Ｃ−フルオレセイン）］ＶＴ、［ＨＯ（１）］［Ｌｙｓ（８）（５／６Ｃ−フルオレセイン）］ＶＴ、［ＨＯ（１）］［Ｔｈｒ（４），Ｌｙｓ（８）（５／６Ｃフルオレセイン）］ＶＴ、ｄ［Ｏｍ（８）（５／６Ｃ−フルオレセイン）］ＶＴ、ｄ［Ｔｈｒ（４），Ｏｍ（８）（５／６Ｃ−フルオレセイン）］ＶＴ、［ＨＯ（１）］［Ｏｍ（８）（５／６Ｃ−フルオレセイン）］ＶＴ、［ＨＯ（１）］［Ｔｈｒ（４），Ｏｍ（８）（５／６Ｃ−フルオレセイン）］ＶＴ、残基１または６間のジスルフィド架橋がチオエーテルで置き換えられている１−デアミノ−オキシトシン、ならびにジスルフィド結合が、ジセレニド結合、ジテルリド結合、テルロセレノ結合、テルロスルフィド結合、またはセレノスルフィド結合で置き換えられているデサミノ−オキシトシン類似体（たとえば、参照により本明細書に援用されるＰＣＴ特許出願ＷＯ２０１１／１２０，０７１に記載されているオキシトシンのペプチド類似体）が含まれる。本発明内で使用されるペプチドは、自然に存在するまたは天然のペプチド配列内のアミノ酸の部分的な置換、付加、または欠失によって取得可能であるペプチドでよい。ペプチドは、たとえば、カルボキシル末端のアミド化（−ＮＨ２）、ペプチドにおけるＤアミノ酸の使用、小さい非ペプチジル部分の組み込み、ならびにアミノ酸それ自体の修飾（たとえば、側鎖Ｒ−基のアルキル化またはエステル化）によって化学修飾されていてよい。そのような類似体、誘導体、および断片は、天然オキシトシンペプチドの所望の生物活性を実質的に保持すべきである。一部の実施形態では、オキシトシン類似体は、４−セリン−８−イソロイシン−オキシトシンまたは９−デアミドオキシトシンである。一部の実施形態では、オキシトシン類似体は、カルベトシンである。本開示は、他の公知のオキシトシン類似体、たとえば、その内容全体が参照により本明細書に援用される、ＰＣＴ特許出願公開ＷＯ２０１２／０４２３７１およびWisniewski,  et  al.  J  Med  Chem.  2014,  57:5306-5317に記載されている、ペプチド性オキシトシン受容体作動薬も包含する。一部の実施形態では、オキシトシン類似体は、Wisniewski,  et  al.  J  Med  Chem.  2014,  57:5306-5317の中の表１〜３に記載されている化合物番号１〜６５から選択される化合物である。一部の実施形態では、オキシトシン類似体は、化合物番号３１（［２−ＴｈｉＭｅＧｌｙ７］ｄＯＴ）、化合物番号４７（カルバ−６−［Ｐｈｅ２，ＢｕＧｌｙ７］ｄＯＴ）、化合物番号５５（カルバ−６−［３−ＭｅＢｚｌＧｌｙ７］ｄＯＴ）、および化合物番号５７（メロトシン（ｍｅｒｏｔｏｃｉｎ）とも呼ばれるカルバ−１−［４−ＦＢｚｌＧｌｙ７］ｄＯＴ）からなる群から選択される。
【００４３】
「国際単位」（ＩＵ、ＵＩ、またはＩＥ）は、ビタミン、ホルモン、およびワクチンを定量化するのに使用される、活性についての国際的に認められた単位である。この単位によって、多数の原材料からの調製物を標準化するために、定められた生物学的アッセイを使用して求められる、活性の単位となる物質の量が規定される。同様に、ＵＳＰ単位は、薬物製品の同一性、強度、品質、純度、および一貫性を確実にするために、食品医薬品局と協同して米国薬局方によって制定された、明確な投与量単位である。一般に、ＵＳＰ単位は、整合化の取り組みにより、国際単位に等しい。慣例により、オキシトシンについては、一般に、１単位の活性がおよそ２マイクログラムの合成オキシトシンペプチドに等しい、または１ｍｇが５００単位に等しいと規定される（Stedman's  Medical  Dictionary）。したがって、本明細書で使用するとき、１「ＩＵ」または「国際単位」のオキシトシンペプチドとは、およそ２マイクログラムの合成ペプチドと同じ生物活性を有する、または同じレベルの生物学的効果（たとえば、ラット子宮細片の収縮応答）を生じる量のオキシトシンペプチドである。活性がより弱い類似体であれば、同じレベルの生物学的効果を実現するのにより多くの材料が必要となる。薬物効力の決定は、当業者に周知されており、合成オキシトシンを基準として使用するｉｎ  ｖｉｔｒｏまたはｉｎ  ｖｉｖｏアッセイを含むものでよい。Atke  and  Vilhardt  Acta  Endocrinol  1987:  115(1):155-60、Engstrom  et  al.  Eur  J  Pharmacol  1998:  355(2-3):203-10。
【００４４】
一部の実施形態では、本発明は、１３Ｎ標識オキシトシン（本明細書では、「１３Ｎ−オキシトシン」とも呼ぶ）を提供する。一部の実施形態では、オキシトシンペプチドの少なくとも１個の構成１４Ｎ原子が、１３Ｎ放射性核種で置き換えられている。一部の実施形態では、オキシトシンペプチドの少なくとも１つのアミノ酸が、１３Ｎ放射性核種を含む部分を含むように修飾されている。一部の実施形態では、１３Ｎ放射性核種を含む部分は、１３ＮＨ２である。一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチドは、単一の１３Ｎ放射性核種を含む。一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチドは、４位にあるグルタミン残基中に単一の１３Ｎ放射性核種を含む。一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチドは、５位にあるアスパラギン残基中に単一の１３Ｎ放射性核種を含む。一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチドは、９位にあるグリシン残基中に単一の１３Ｎ放射性核種を含む。一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチドは、１３ＮＨ２を含むように修飾されたグルタミン、アスパラギン、またはグリシン残基を含む。一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチドは、式（ＩＶ）の化合物である。一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチドは、本明細書に記載の実施形態のいずれかに従う１３Ｎ−オキシトシンペプチドの調製方法を含む工程によって調製される。
調製方法
【００４５】
一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチドの調製方法が提供される。本発明の１３Ｎ−オキシトシンペプチドは、以下で大まかに、後に実施例においてより詳細に記載するとおりのいくつかの工程によって調製することができる。以下の工程の記述において、記号は、示された式において使用されるとき、本明細書において式に関連して記載される基を表すと理解される。
【００４６】
化合物の特定の鏡像異性体を得ることが所望される場合では、対応する鏡像異性体混合物から、鏡像異性体を分離または分割するのに適する従来のいずれかの手順を使用して、これを実現することができる。すなわち、たとえば、鏡像異性体の混合物、たとえばラセミ体と、適切なキラル化合物とを反応させることにより、ジアステエレオマー誘導体を生成することができる。次いで、ジアステエレオマーを、従来のいずれかの手段、たとえば結晶化によって分離し、所望の鏡像異性体を回収することができる。別の分割方法では、キラル高速液体クロマトグラフィーを使用して、ラセミ体を分離することができる。別法として、所望であれば、記載した方法の一方において適切なキラル中間体を使用することにより、特定の鏡像異性体を得てもよい。
【００４７】
化合物の特定の異性体を得ること、またはそうでなく反応生成物を精製することが所望される場合でも、中間体または最終生成物を用いて、クロマトグラフィー（たとえば、ＨＰＬＣ）、再結晶、および他の従来の分離手順を使用することができる。
【００４８】
式（ＩＶ）の化合物は、スキーム１に従って調製することができ、スキーム１において、ＰＧ１は、アミン保護基（たとえば、ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ）、９−フルオレニルメチルオキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）、２，２，２−トリクロロエチルホルミル（Ｔｒｏｃ）、カルボキシベンジル、およびアリルオキシカルボニル）であり、Ｒは、ホスホン酸エステル（たとえば、ホスホン酸ジエチル）、Ｃ１〜Ｃ６アルキル（たとえば、エチル）、ベンジル、シリル（たとえば、トリメチルシリル）、またはアシル（たとえば、アセチル）であり、ＬＧは、脱離基（たとえば、ＯＨ、Ｏ−アシル、ＯＡｔ、ＯＢｔ、Ｃｌ、１−イミダゾリルなど）である。
【化１】
2021515005.tif 000002
【００４９】
化合物（Ｉ）をＲ−ＬＧと結合させると、中間体化合物（ＩＩ）が得られる。一部の実施形態では、Ｒ−ＬＧは、シアノホスホン酸ジエチル（ＤＥＣＰ）である。一部の実施形態では、化合物（Ｉ）のＲ−ＬＧとの結合は、反応槽においてｉｎ  ｓｉｔｕで実施される。化合物（ＩＩ）は、気体１３ＮＨ３の存在下で、化合物（ＩＩＩ）に変換される。一部の実施形態では、気体１３ＮＨ３は、液体ターゲット（たとえば、［１６Ｏ（ｐ，α）１３Ｎ］）にプロトン照射して１３ＮＨ３水溶液とした後、１３ＮＨ３水溶液を無希釈アルカリ水酸化物（たとえば、ＮａＯＨ）と合わせて気体１３ＮＨ３を放出させることにより生成される。一部の実施形態では、液体ターゲットは、［１６Ｏ（ｐ，α）１３Ｎ］である。一部の実施形態では、無希釈アルカリ水酸化物は、ＮａＯＨである。一部の実施形態では、１３ＮＨ３水溶液は、無希釈アルカリ水酸化物（たとえば、ＮａＯＨ）を含有する槽に移されて、気体１３ＮＨ３が、たとえば、ヘリウム流を伴うＴｅｆｌｏｎ管材料を通って放出される。一部の実施形態では、化合物（ＩＩ）は、気体１３ＮＨ３の存在下、約０℃〜約６５℃の間（たとえば、約０、５、１０、２０、３０、４０、５０、６０、または６５℃のいずれか；これらの値の間にあるいずれの範囲も含める）の温度で、化合物（ＩＩＩ）に変換される。一部の実施形態では、放出された気体１３ＮＨ３は、化合物（ＩＩ）を含有する反応槽に移される。一部の実施形態では、放出された気体１３ＮＨ３は、化合物（ＩＩ）を含有する反応槽に、陽圧によって、たとえば、シリンジの使用によって、手作業で移される。化合物（ＩＩＩ）のアミンを脱保護すると、式（ＩＶ）の化合物が得られる。
【００５０】
ある特定の活性または不適合基（たとえば、アミンまたはカルボン酸）の保護が必要となる場合において、スキーム１における式は、そうした活性または不適合基が適切な保護形態になっている化合物を企図し、包含すると理解される。保護基およびその使用の概要については、P.G.M.  Wuts  and  T.W.  Greene,  Greene's  Protective  Groups  in  Organic  Synthesis  4th  edition,  Wiley-Interscience,  New  York,  2006を参照されたい。
スキーム１における調製方法の調製実施形態をスキーム１ａに示しており、スキーム１ａにおいて、Ｒ１およびＲ２は、独立に、Ｃ１〜Ｃ６アルキルまたはＣ６〜Ｃ１４アリールであり、Ｒ１およびＲ２のＣ１〜Ｃ６アルキルおよびＣ６〜Ｃ１４アリールは、独立に、ハロゲン、シアノ、またはＣ１〜Ｃ６アルキルで必要に応じて置換されており、ＰＧ１は、アミン保護基（たとえば、ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ）、９−フルオレニルメチルオキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）、２，２，２−トリクロロエチルホルミル（Ｔｒｏｃ）、カルボキシベンジル、およびアリルオキシカルボニル）であり、ＬＧは、脱離基（たとえば、ＯＨ、Ｏ−アシル、ＯＡｔ、ＯＢｔ、Ｃｌ、１−イミダゾリルなど）である。
【化２】
2021515005.tif 000003
【００５１】
化合物（Ｉａ）をホスホン酸エステル化合物ＬＧ−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＲ１）（ＯＲ２）（たとえば、シアノホスホン酸ジエチル）と結合させると、中間体化合物（ＩＩａ）が得られる。一部の実施形態では、化合物（Ｉａ）のＬＧ−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＲ１）（ＯＲ２）との結合は、反応槽においてｉｎ  ｓｉｔｕで実施される。化合物（ＩＩａ）は、気体１３ＮＨ３の存在下で、化合物（ＩＩＩａ）に変換される。一部の実施形態では、気体１３ＮＨ３は、液体ターゲット（たとえば、［１６Ｏ（ｐ，α）１３Ｎ］）にプロトン照射して１３ＮＨ３水溶液とした後、１３ＮＨ３水溶液を無希釈アルカリ水酸化物（たとえば、ＮａＯＨ）と合わせて気体１３ＮＨ３を放出させることにより生成される。一部の実施形態では、液体ターゲットは、［１６Ｏ（ｐ，α）１３Ｎ］である。一部の実施形態では、無希釈アルカリ水酸化物は、ＮａＯＨである。一部の実施形態では、１３ＮＨ３水溶液は、無希釈アルカリ水酸化物（たとえば、ＮａＯＨ）を含有する槽に移されて、気体１３ＮＨ３が、たとえば、ヘリウム流を伴うＴｅｆｌｏｎ管材料を通って放出される。一部の実施形態では、化合物（ＩＩａ）は、気体１３ＮＨ３の存在下、約０℃〜約６５℃の間（たとえば、約０、５、１０、２０、３０、４０、５０、６０、または６５℃のいずれか；これらの値の間にあるいずれの範囲も含める）の温度で、化合物（ＩＩＩａ）に変換される。一部の実施形態では、放出された気体１３ＮＨ３は、化合物（ＩＩａ）を含有する反応槽に移される。一部の実施形態では、放出された気体１３ＮＨ３は、化合物（ＩＩａ）を含有する反応槽に、陽圧によって、たとえば、シリンジの使用によって、手作業で移される。化合物（ＩＩＩａ）のアミンを脱保護すると、式（ＩＶ）の化合物が得られる。
【００５２】
スキーム１における調製方法の別の調製実施形態をスキーム１ｂに示す。
【化３】
2021515005.tif 000004
【００５３】
化合物（Ｉｂ）をシアノホスホン酸ジエチル（ＤＥＣＰ）と結合させると、中間体化合物（ＩＩｂ）が得られる。一部の実施形態では、化合物（Ｉｂ）は、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、およびペンタメチルピペリジン（ＰＭＰ）の存在下で、ＤＥＣＰと結合される。一部の実施形態では、結合反応におけるＤＥＣＰは、約０．７当量〜約１．１当量の間（たとえば、約０．７、０．８、０．９、１．０、および１．１当量のいずれか）である。一部の実施形態では、結合反応におけるＤＥＣＰは、約０．９当量である。一部の実施形態では、結合反応におけるＤＭＳＯのＴＨＦに対する比は、約１：７〜約１：１１の間（たとえば、約１：７、１：８、１：９、１：１０、および１：１１のいずれか）である。一部の実施形態では、結合反応におけるＤＭＳＯのＴＨＦに対する比は、約１：９である。一部の実施形態では、化合物（Ｉｂ）のＤＥＣＰとの結合は、約０℃〜約６５℃の間（たとえば、約０、５、１０、２０、３０、４０、５０、６０、または６５℃のいずれか；これらの値の間にあるいずれの範囲も含める）の温度で実施される。一部の実施形態では、化合物（Ｉｂ）のＤＥＰＣとの結合は、反応槽においてｉｎ  ｓｉｔｕで実施される。一部の実施形態では、化合物（Ｉｂ）は、ＤＭＦ／ジオキサン、ＤＭＦ／ＴＨＦ、またはＤＭＳＯ／ジオキサンの存在下で、ＤＥＣＰと結合される。化合物（ＩＩｂ）は、気体１３ＮＨ３の存在下で、化合物（ＩＩＩｂ）に変換される。一部の実施形態では、気体１３ＮＨ３は、液体ターゲット（たとえば、［１６Ｏ（ｐ，α）１３Ｎ］）にプロトン照射して１３ＮＨ３水溶液とした後、１３ＮＨ３水溶液を無希釈アルカリ水酸化物（たとえば、ＮａＯＨ）と合わせて気体１３ＮＨ３を放出させることにより生成される。一部の実施形態では、液体ターゲットは、［１６Ｏ（ｐ，α）１３Ｎ］である。一部の実施形態では、無希釈アルカリ水酸化物は、ＮａＯＨである。一部の実施形態では、１３ＮＨ３水溶液は、無希釈アルカリ水酸化物（たとえば、ＮａＯＨ）を含有する槽に移されて、気体１３ＮＨ３が、たとえば、ヘリウム流を伴うＴｅｆｌｏｎ管材料を通って放出される。一部の実施形態では、化合物（ＩＩｂ）は、気体１３ＮＨ３の存在下、約０℃〜約６５℃の間（たとえば、約０、５、１０、２０、３０、４０、５０、６０、または６５℃のいずれか；これらの値の間にあるいずれの範囲も含める）の温度で、化合物（ＩＩＩｂ）に変換される。一部の実施形態では、放出された気体１３ＮＨ３は、化合物（ＩＩｂ）を含有する反応槽に移される。一部の実施形態では、放出された気体１３ＮＨ３は、化合物（ＩＩｂ）を含有する反応槽に、陽圧によって、たとえば、シリンジの使用によって、手作業で移される。化合物（ＩＩＩｂ）のアミンを脱保護すると、式（ＩＶ）の化合物が得られる。一部の実施形態では、化合物（ＩＩＩｂ）が、ＨＣｌおよびジオキサンの存在下で脱保護されて、化合物（ＩＶ）が得られる。一部の実施形態では、ＨＣｌは、約３．５Ｍ〜約４．５Ｍの間（たとえば、約３．５、３．６、３．７、３．８、３．９、４．０、４．１、４．２、４．３、４．４、または４．５Ｍのいずれか）の濃度である。一部の実施形態では、脱保護は、約４５℃〜約５５℃の間（たとえば、約４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、または５５℃のいずれか）の温度で実施される。一部の実施形態では、脱保護は、約５０℃で実施される。一部の実施形態では、脱保護は、約１分〜約５分の間（たとえば、約１、１．５、２、２．５、３、３．５、４、４．５、または５分のいずれか）の期間をかけて実施される。一部の実施形態では、脱保護は、約２．５分間実施される。一部の実施形態では、ジエチルエーテル中のＨＣｌ（たとえば、２Ｍ  ＨＣｌ）、ＴＨＦ／ジオキサン中のＨＣｌ（たとえば、１Ｍ  ＨＣｌ）、またはＭｅＯＨ中のＨＣｌ（たとえば、１Ｍ  ＨＣｌ）の存在下で化合物（ＩＩＩｂ）が脱保護されて、化合物（ＩＶ）が得られる。
【００５４】
一部の実施形態では、化合物（ＩＩＩ）、（ＩＩＩａ）、または（ＩＩＩｂ）の脱保護によって、式（ＩＶ）の化合物の粗調製物が得られる。一部の実施形態では、化合物（ＩＶ）の粗調製物を精製して、試薬、有機溶媒、および／または前駆体が除去される。一部の実施形態では、精製は、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）または固相抽出（ＳＰＥ）による。一部の実施形態では、精製は、１ステップで行われる。一部の実施形態では、精製は、複数のステップで行われる。たとえば、一部の実施形態では、精製は、ａ）化合物（ＩＶ）の粗調製物を第１の疎水性ＳＰＥカラムに付与して、１３Ｎ−オキシトシンおよび粗調製物の前駆体が第１の疎水性ＳＰＥカラムに保持されるようにすることと、ｂ）水性イオン対試薬を含む溶液を第１の疎水性ＳＰＥカラムに付与して、１３Ｎ−オキシトシンが第１の溶出液中に溶離するようにすることと、ｃ）第１の溶出液を第２の疎水性ＳＰＥカラムに付与して、第１の溶出液の１３Ｎ−オキシトシンが、第２の疎水性ＳＰＥカラムに保持されるようにすることと、ｄ）１３Ｎ−オキシトシンを第２の溶出液中に溶離させることとを含む。一部の実施形態では、第１および／または第２の疎水性ＳＰＥカラムは、Ｓｅｐ−Ｐａｋ  Ｃ１８カートリッジ（Ｗａｔｅｒｓ）などの、強い疎水性を有する、シリカを主体とする結合相を含む。一部の実施形態では、粗調製物は、第１の疎水性ＳＰＥカラムにかける前に希釈される。一部の実施形態では、水性イオン対試薬を含む溶液は、アセトニトリルを含む。一部の実施形態では、水性イオン対試薬を含む溶液は、約１５％〜約２５％の間（たとえば、約１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、または２５％のいずれか）の濃度でアセトニトリルを含む。一部の実施形態では、第１の溶出液は、第２の疎水性ＳＰＥカラムにかける前に希釈される。
使用方法
画像化
【００５５】
一部の実施形態では、対象において、外因的に投与されたオキシトシンをｉｎ  ｖｉｖｏで画像化する方法が提供される。方法は、（ａ）対象に、本明細書に記載の実施形態のいずれかに従う１３Ｎ標識オキシトシンペプチドを投与することと、（ｂ）１３Ｎ標識オキシトシンペプチドが、画像化しようとする組織または細胞部位に蓄積するのを可能にするのに十分な時間待機することと、（ｃ）細胞または組織を非侵襲性の画像化技術によって画像化することとを含む。非侵襲性の画像化技術は、陽電子放出断層撮影イメージング、またはコンピュータ断層撮影イメージングを用いた陽電子放出断層撮影、または磁気共鳴画像法を用いた陽電子放出断層撮影でよい。一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチドは、式（ＩＶ）の化合物である。一部の実施形態では、１３Ｎ標識オキシトシンは、たとえば、中枢神経系（ＣＮＳ）組織を画像化するために、頭蓋顔面粘膜投与（たとえば、経鼻、頬側、または舌下投与）によって投与される。一部の実施形態では、１３Ｎ標識オキシトシンは、鼻腔内投与される。一部の実施形態では、１３Ｎ標識オキシトシンは、たとえば、末梢組織を画像化するために、静脈内、動脈内、腹腔内、小胞内、皮下、くも膜下腔内、肺内、筋肉内、気管内、眼科（たとえば、眼内）、経皮、または坐剤投与される。一部の実施形態では、１３Ｎ標識オキシトシンは、静脈内投与される。
【００５６】
１３Ｎ標識オキシトシンペプチドの投与を含む本明細書に記載の方法のいずれかに従う一部の実施形態において、１３Ｎ標識オキシトシンペプチドは、非放射標識オキシトシンペプチドと共投与される。一部の実施形態では、１３Ｎ標識オキシトシンペプチドと非放射標識オキシトシンペプチドは、単一の製剤または組成物中に含有される。一部の実施形態では、１３Ｎ標識オキシトシンペプチドと非放射標識オキシトシンペプチドは、別個の製剤または組成物中に含有される。一部の実施形態では、方法は、非放射標識オキシトシンを含む一定量（たとえば、有効量）の組成物を投与するステップをさらに含む。一部の実施形態では、非放射標識オキシトシンの投与は、１３Ｎ標識オキシトシンペプチドの投与前、たとえば、１３Ｎ標識オキシトシンペプチドの投与の少なくとも約１０分前（たとえば、少なくとも約１０分、２０分、３０分、４５分、１時間、２時間、３時間、４時間、またはそれより長時間前のいずれか；これらの値の間にあるいずれの範囲も含める）に実施される。一部の実施形態では、非放射標識オキシトシンの投与は、１３Ｎ標識オキシトシンペプチドの投与後、たとえば、１３Ｎ標識オキシトシンペプチドの投与の少なくとも約１０分後（たとえば、少なくとも約１０分、２０分、３０分、４５分、１時間、２時間、３時間、４時間、またはそれより長時間後のいずれか；これらの値の間にあるいずれの範囲も含める）に実施される。一部の実施形態では、非放射標識オキシトシンの投与は、１３Ｎ標識オキシトシンペプチドの投与後、たとえば、１３Ｎ標識オキシトシンペプチドの投与の少なくとも約１０分後（たとえば、少なくとも約１０分、２０分、３０分、４５分、１時間、２時間、３時間、４時間、またはそれより長時間後のいずれか；これらの値の間にあるいずれの範囲も含める）に実施され、方法は、非放射標識オキシトシンの投与後、たとえば、非放射標識オキシトシンの投与の少なくとも約１０分後（たとえば、少なくとも約１０分、２０分、３０分、４５分、１時間、２時間、３時間、４時間、またはそれより長時間後のいずれか；これらの値の間にあるいずれの範囲も含める）に、ステップ（ａ）、（ｂ）、および（ｃ）を繰り返すことをさらに含む。一部の実施形態では、２用量の１３Ｎ標識オキシトシンペプチドが投与される場合において、２用量の１３Ｎ標識オキシトシンペプチドの投与間の時間間隔は、少なくとも約２０分（たとえば、少なくとも約２０分、３０分、４５分、１時間、２時間、３時間、４時間、またはそれより長時間のいずれか；これらの値の間にあるいずれの範囲も含める）である。一部の実施形態では、方法は、１回または複数の追加用量（たとえば、有効用量）の非放射標識オキシトシンの投与をさらに含む。一部の実施形態では、非放射標識オキシトシンが１３Ｎ標識オキシトシンと別々に投与される場合において、非放射標識オキシトシンは、１３Ｎ標識オキシトシンと同じ経路で投与される。一部の実施形態では、非放射標識オキシトシンが１３Ｎ標識オキシトシンと別々に投与される場合において、非放射標識オキシトシンは、１３Ｎ標識オキシトシンと異なる経路で投与される。一部の実施形態では、非放射標識オキシトシンは、頭蓋顔面粘膜投与（たとえば、経鼻、頬側、または舌下投与）によって投与される。一部の実施形態では、非放射標識オキシトシンは、鼻腔内投与される。一部の実施形態では、非放射標識オキシトシンは、静脈内、動脈内、腹腔内、小胞内、皮下、くも膜下腔内、肺内、筋肉内、気管内、眼科（たとえば、眼内）、経皮、または坐剤投与される。一部の実施形態では、非放射標識オキシトシンは、静脈内投与される。
【００５７】
１３Ｎ標識オキシトシンペプチドの投与を含む本明細書に記載の方法のいずれかに従う一部の実施形態において、１３Ｎ標識オキシトシンペプチドは、別の薬剤と共投与される。一部の実施形態では、他の薬剤は、オキシトシンの分布、動態、および／または薬力学に影響を及ぼす。一部の実施形態では、他の薬剤は、二価金属カチオン（たとえば、Ｍｇ２＋、Ｃａ２＋、Ｚｎ２＋、またはＣｕ２＋）である。一部の実施形態では、二価金属カチオンは、Ｍｇ２＋である。一部の実施形態では、他の薬剤は、バソプレシンである。一部の実施形態では、１３Ｎ標識オキシトシンペプチドと他の薬剤は、単一の製剤または組成物中に含有される。たとえば、一部の実施形態では、方法は、１３Ｎ標識オキシトシンペプチドと、二価金属カチオン（たとえば、Ｍｇ２＋、Ｃａ２＋、Ｚｎ２＋、もしくはＣｕ２＋）またはバソプレシンとを含む製剤または組成物の投与を含む。一部の実施形態では、１３Ｎ標識オキシトシンペプチドと他の薬剤は、別個の製剤または組成物中に含有される。たとえば、一部の実施形態では、方法は、１３Ｎ標識オキシトシンペプチドを含む製剤または組成物の投与と、二価金属カチオン（たとえば、Ｍｇ２＋、Ｃａ２＋、Ｚｎ２＋、もしくはＣｕ２＋）またはバソプレシンを含む製剤または組成物の投与とを含む。一部の実施形態では、他の薬剤は、１３Ｎ標識オキシトシンペプチドと同時に投与される。一部の実施形態では、他の薬剤および１３Ｎ標識オキシトシンペプチドが、順次投与される。一部の実施形態では、他の薬剤は、１３Ｎ標識オキシトシンペプチドの前に投与される。一部の実施形態では、他の薬剤は、１３Ｎ標識オキシトシンペプチドの後に投与される。一部の実施形態では、他の薬剤が１３Ｎ標識オキシトシンと別々に投与される場合において、他の薬剤は、１３Ｎ標識オキシトシンと同じ経路で投与される。一部の実施形態では、他の薬剤が１３Ｎ標識オキシトシンと別々に投与される場合において、他の薬剤は、１３Ｎ標識オキシトシンンと異なる経路で投与される。一部の実施形態では、他の薬剤は、頭蓋顔面粘膜投与（たとえば、経鼻、頬側、または舌下投与）によって投与される。一部の実施形態では、他の薬剤は、鼻腔内投与される。一部の実施形態では、他の薬剤は、静脈内、動脈内、腹腔内、小胞内、皮下、くも膜下腔内、肺内、筋肉内、気管内、眼科（たとえば、眼内）、経皮、または坐剤投与される。一部の実施形態では、他の薬剤は、静脈内投与される。
【００５８】
一部の実施形態では、対象において、外因的に投与されたオキシトシンを放射断層撮影によって画像化する方法が提供される。方法は、（ａ）対象に、本明細書に記載の実施形態のいずれかに従う１３Ｎ標識オキシトシンペプチドを投与するステップと、（ｂ）複数の検出器を使用して、対象から放射されたガンマ線を検出し、検出されたガンマ線に対応する信号を伝達するステップと、（ｃ）信号から、対象の目的の領域の一連の医用画像を再構築するステップとを含む。一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチドは、式（ＩＶ）の化合物である。一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチドは、頭蓋顔面粘膜投与（たとえば、鼻腔内投与）によって投与される。一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチドは、静脈内、動脈内、腹腔内、小胞内、皮下、くも膜下腔内、肺内、筋肉内、気管内、眼科（たとえば、眼内）、経皮、または坐剤投与される。
【００５９】
一部の実施形態では、本明細書に記載の実施形態のいずれかに従う１３Ｎ標識オキシトシンペプチドが検出可能な量投与されているヒト患者の画像を取得することを含む画像化方法が提供される。方法は、陽電子放出断層撮影イメージング、またはコンピュータ断層撮影イメージングを用いた陽電子放出断層撮影、または磁気共鳴画像法を用いた陽電子放出断層撮影を使用して、患者の画像（たとえば、脳画像）を取得することを含む場合がある。１３Ｎ標識オキシトシンペプチドの検出可能な量は、細胞または組織における１３Ｎ標識オキシトシンペプチドの蓄積を医学イメージング技術によって検出することを可能にするのに十分な量である。一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチドは、式（ＩＶ）の化合物である。一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチドは、頭蓋顔面粘膜投与（たとえば、鼻腔内投与）によって投与される。一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチドは、静脈内、動脈内、腹腔内、小胞内、皮下、くも膜下腔内、肺内、筋肉内、気管内、眼科（たとえば、眼内）、経皮、または坐剤投与される。
【００６０】
一部の実施形態では、対象において、外因的に投与されたオキシトシンの分布を決定する方法が提供される。一部の実施形態では、方法は、（ａ）対象に、本明細書に記載の実施形態のいずれかに従う１３Ｎ標識オキシトシンペプチドを投与することと、（ｂ）１３Ｎ標識オキシトシンペプチドが、画像化しようとする組織または細胞部位に蓄積するのを可能にすることと、（ｃ）細胞または組織を非侵襲性の画像化技術によって画像化することとを含む。非侵襲性の画像化技術は、陽電子放出断層撮影イメージング、またはコンピュータ断層撮影イメージングを用いた陽電子放出断層撮影、または磁気共鳴画像法を用いた陽電子放出断層撮影でよい。一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチドは、式（ＩＶ）の化合物である。一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチドは、頭蓋顔面粘膜投与（たとえば、鼻腔内投与）によって投与される。一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチドは、静脈内、動脈内、腹腔内、小胞内、皮下、くも膜下腔内、肺内、筋肉内、気管内、眼科（たとえば、眼内）、経皮、または坐剤投与される。
【００６１】
一部の実施形態では、対象においてオキシトシン受容体の分布を決定する方法が提供される。一部の実施形態では、方法は、（ａ）対象に、本明細書に記載の実施形態のいずれかに従う１３Ｎ標識オキシトシンペプチドを投与することと、（ｂ）１３Ｎ標識オキシトシンペプチドがオキシトシン受容体に結合するのを可能にすることと、（ｃ）個体における１３Ｎ標識オキシトシンペプチドを非侵襲性の画像化技術によって画像化することとを含む。非侵襲性の画像化技術は、陽電子放出断層撮影イメージング、またはコンピュータ断層撮影イメージングを用いた陽電子放出断層撮影、または磁気共鳴画像法を用いた陽電子放出断層撮影でよい。一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチドは、式（ＩＶ）の化合物である。一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチドは、頭蓋顔面粘膜投与（たとえば、鼻腔内投与）によって投与される。一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチドは、静脈内、動脈内、腹腔内、小胞内、皮下、くも膜下腔内、肺内、筋肉内、気管内、眼科（たとえば、眼内）、経皮、または坐剤投与される。
【００６２】
一部の実施形態では、個体において、外因的に投与されたオキシトシンの動態を決定する方法が提供される。一部の実施形態では、方法は、（ａ）対象に、本明細書に記載の実施形態のいずれかに従う１３Ｎ標識オキシトシンペプチドを投与することと、（ｂ）個体における１３Ｎ標識オキシトシンペプチドを、非侵襲性の画像化技術によって所定の期間にわたり画像化することとを含む。非侵襲性の画像化技術は、陽電子放出断層撮影イメージング、またはコンピュータ断層撮影イメージングを用いた陽電子放出断層撮影、または磁気共鳴画像法を用いた陽電子放出断層撮影でよい。一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチドは、式（ＩＶ）の化合物である。一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチドは、頭蓋顔面粘膜投与（たとえば、鼻腔内投与）によって投与される。一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチドは、静脈内、動脈内、腹腔内、小胞内、皮下、くも膜下腔内、肺内、筋肉内、気管内、眼科（たとえば、眼内）、経皮、または坐剤投与される。
放射断層撮影
【００６３】
一部の実施形態では、本明細書に記載の方法は、１３Ｎ標識オキシトシンペプチドを放射性トレーサーとして使用する画像化プロセスの間に対象の一連の医用画像を取得するための放射断層撮影システムを用いる。一部の実施形態では、システムは、対象から放射されたガンマ線を、対象への１３Ｎ標識オキシトシンペプチドの投与を基準として所定の期間かけて取得し、取得されたガンマ線に対応する信号を伝達するための、対象のまわりに配置されるように構成された複数の検出器と、複数の検出器からの信号を受信するように構成されたデータ処理システムと、データ処理システムからの信号を受信し、対象の一連の医用画像をそれから再構築するように構成された再構築システムとを含む。１３Ｎ標識オキシトシンペプチドは、本明細書に記載の１３Ｎ標識オキシトシンペプチドのいずれでもよい。
処置
【００６４】
一部の実施形態では、精神、神経精神、および心理障害、炎症状態、ならびに疼痛を始めとする障害または状態を処置する方法であって、それを必要とする個体に、有効用量のオキシトシンペプチド製剤を投与することを含み、オキシトシンペプチド製剤の投与の結果、個体におけるオキシトシンペプチドの分布および／または動態が、障害または状態の処置に好都合となる、方法が提供される。一部の実施形態では、個体におけるオキシトシンペプチドの分布および／または動態は、個体に、１３Ｎ標識オキシトシンを含む１３Ｎ−オキシトシンペプチド製剤または組成物を投与し、個体における１３Ｎ標識オキシトシンペプチドを、本明細書に記載の実施形態のいずれかに従って、たとえばＰＥＴによって画像化することにより明らかにされる。一部の実施形態では、オキシトシンペプチド製剤は、非放射標識オキシトシンをさらに含む。一部の実施形態では、オキシトシンペプチド製剤は、障害または状態を処置するための有効量のオキシトシン（１３Ｎ標識オキシトシンおよび非放射標識オキシトシンを含める）を含む。一部の実施形態では、オキシトシンペプチド製剤は、ａ）有効量の非放射標識オキシトシンと、ｂ）イメージングトレーサー、たとえば、ＰＥＴトレーサーとしての使用に適する量の１３Ｎ標識オキシトシンとを含む。一部の実施形態では、オキシトシンペプチド製剤は、頭蓋顔面粘膜投与（たとえば、鼻腔内投与）によって投与される。一部の実施形態では、オキシトシンペプチド製剤は、静脈内、動脈内、腹腔内、小胞内、皮下、くも膜下腔内、肺内、筋肉内、気管内、眼科（たとえば、眼内）、経皮、または坐剤投与される。一部の実施形態では、神経精神障害には、自閉症スペクトラム障害、自閉症スペクトラム障害と関連する１つまたは複数の症状を示す障害、社会的およびコミュニケーション障害、ならびに不安障害が含まれる。一部の実施形態では、疼痛には、口腔顔面および頭蓋顔面痛（たとえば、頭痛）、頚部痛（たとえば、後頭神経痛）、および上肢における疼痛が含まれる。
【００６５】
たとえば、一部の実施形態では、疼痛および／または炎症状態を処置する方法であって、それを必要とする個体に、有効用量のオキシトシンペプチド製剤を投与することを含み、オキシトシンペプチド製剤の投与の結果、オキシトシンペプチドが、三叉神経によって支配される鼻粘膜に分布する、方法が提供される。一部の実施形態では、個体におけるオキシトシンペプチドの分布は、個体に、１３Ｎ標識オキシトシンを含む１３Ｎ−オキシトシンペプチド製剤または組成物を投与し、個体における１３Ｎ標識オキシトシンペプチドを、本明細書に記載の実施形態のいずれかに従って、たとえばＰＥＴによって画像化することにより明らかにされる。一部の実施形態では、オキシトシンペプチド製剤は、頭蓋顔面粘膜投与（たとえば、鼻腔内投与）によって投与される。一部の実施形態では、オキシトシンペプチド製剤は、静脈内投与される。一部の実施形態では、疼痛には、口腔顔面および頭蓋顔面痛（たとえば、頭痛）、頚部痛（たとえば、後頭神経痛）、および上肢の疼痛が含まれる。
【００６６】
一部の実施形態では、精神、神経精神、または心理障害を処置する方法であって、それを必要とする個体に、有効用量のオキシトシンペプチド製剤を投与することを含み、オキシトシンペプチド製剤の投与の結果、オキシトシンペプチドが、嗅神経によって支配される鼻粘膜（たとえば、上方の大部分の粘膜）に分布する、方法が提供される。一部の実施形態では、個体におけるオキシトシンペプチドの分布は、個体に、検出可能な量の１３Ｎ標識オキシトシンが添加されたオキシトシンペプチド製剤または組成物を投与し、個体における１３Ｎ標識オキシトシンペプチドを、本明細書に記載の実施形態のいずれかに従って、たとえばＰＥＴによって画像化することにより明らかにされる。一部の実施形態では、オキシトシンペプチド製剤は、頭蓋顔面粘膜投与（たとえば、鼻腔内投与）によって投与される。一部の実施形態では、オキシトシンペプチド製剤は、静脈内投与される。一部の実施形態では、神経精神障害には、自閉症スペクトラム障害、自閉症スペクトラム障害と関連する１つまたは複数の症状を示す障害、社会的およびコミュニケーション障害、ならびに不安障害が含まれる。
【００６７】
一部の実施形態では、個体における、精神、神経精神、および心理障害、炎症状態、ならびに疼痛を始めとする障害または状態の処置について、オキシトシンペプチド製剤を評価する方法であって、ａ）１３Ｎ標識オキシトシンを含むオキシトシンペプチド製剤を個体に投与することと、ｂ）個体における１３Ｎ標識オキシトシンの分布および／または動態を、本明細書に記載の実施形態のいずれかに従って決定することと、ｃ）個体における１３Ｎ標識オキシトシンの分布および／または動態の好ましさに基づき、障害または状態の処置について、オキシトシンペプチド製剤を評価することとを含む方法が提供される。一部の実施形態では、オキシトシンペプチド製剤は、非放射標識オキシトシンをさらに含む。一部の実施形態では、オキシトシンペプチド製剤は、障害または状態を処置するための有効量のオキシトシン（１３Ｎ標識オキシトシンおよび非放射標識オキシトシンを含める）を含む。一部の実施形態では、オキシトシンペプチド製剤は、ａ）有効量の非放射標識オキシトシンと、ｂ）イメージングトレーサー、たとえば、ＰＥＴトレーサーとしての使用に適する量の１３Ｎ標識オキシトシンとを含む。一部の実施形態では、オキシトシンペプチド製剤は、頭蓋顔面粘膜投与（たとえば、鼻腔内投与）によって投与される。一部の実施形態では、オキシトシンペプチド製剤は、静脈内、動脈内、腹腔内、小胞内、皮下、くも膜下腔内、肺内、筋肉内、気管内、眼科（たとえば、眼内）、経皮、または坐剤投与される。
【００６８】
一部の実施形態では、精神、神経精神、および心理障害、炎症状態、ならびに疼痛を始めとする障害または状態の処置について、オキシトシンペプチド製剤を評価する方法であって、ａ）１３Ｎ標識オキシトシンを含むオキシトシンペプチド製剤を複数の個体に投与することと、ｂ）複数の個体における１３Ｎ標識オキシトシンの分布および／または動態を、本明細書に記載の実施形態のいずれかに従って決定することと、ｃ）複数の個体における１３Ｎ標識オキシトシンの分布および／または動態の好ましさに基づき、障害または状態の処置について、オキシトシンペプチド製剤を評価することとを含む方法が提供される。一部の実施形態では、オキシトシンペプチド製剤は、非放射標識オキシトシンをさらに含む。一部の実施形態では、オキシトシンペプチド製剤は、障害または状態を処置するための有効量のオキシトシン（１３Ｎ標識オキシトシンおよび非放射標識オキシトシンを含める）を含む。一部の実施形態では、オキシトシンペプチド製剤は、ａ）有効量の非放射標識オキシトシンと、ｂ）イメージングトレーサー、たとえば、ＰＥＴトレーサーとしての使用に適する量の１３Ｎ標識オキシトシンとを含む。一部の実施形態では、オキシトシンペプチド製剤は、頭蓋顔面粘膜投与（たとえば、鼻腔内投与）によって投与される。一部の実施形態では、オキシトシンペプチド製剤は、静脈内、動脈内、腹腔内、小胞内、皮下、くも膜下腔内、肺内、筋肉内、気管内、眼科（たとえば、眼内）、経皮、または坐剤投与される。
【００６９】
一部の実施形態では、個体における、精神、神経精神、および心理障害、炎症状態、ならびに疼痛を始めとする障害または状態を処置するためのオキシトシンペプチド製剤を選択する方法であって、ａ）１３Ｎ標識オキシトシンを含む、複数のオキシトシンペプチド製剤を個体に投与することと、ｂ）複数のオキシトシンペプチド製剤それぞれについての、個体における１３Ｎ標識オキシトシンの分布および／または動態を、本明細書に記載の実施形態のいずれかに従って決定することと、ｃ）個体における１３Ｎ標識オキシトシンの分布および／または動態が障害または状態の処置に最も好都合であるオキシトシンペプチド製剤を選択することとを含む方法が提供される。一部の実施形態では、オキシトシンペプチド製剤は、非放射標識オキシトシンをさらに含む。一部の実施形態では、オキシトシンペプチド製剤は、障害または状態を処置するための有効量のオキシトシン（１３Ｎ標識オキシトシンおよび非放射標識オキシトシンを含める）を含む。一部の実施形態では、オキシトシンペプチド製剤は、ａ）有効量の非放射標識オキシトシンと、ｂ）イメージングトレーサー、たとえば、ＰＥＴトレーサーとしての使用に適する量の１３Ｎ標識オキシトシンとを含む。一部の実施形態では、オキシトシンペプチド製剤は、頭蓋顔面粘膜投与（たとえば、鼻腔内投与）によって投与される。一部の実施形態では、オキシトシンペプチド製剤は、静脈内、動脈内、腹腔内、小胞内、皮下、くも膜下腔内、肺内、筋肉内、気管内、眼科（たとえば、眼内）、経皮、または坐剤投与される。
【００７０】
一部の実施形態では、精神、神経精神、および心理障害、炎症状態、ならびに疼痛を始めとする障害または状態を処置するためのオキシトシンペプチド製剤を選択する方法であって、ａ）１３Ｎ標識オキシトシンを含む、複数のオキシトシンペプチド製剤を複数の個体に投与することと、ｂ）複数のオキシトシンペプチド製剤それぞれについての、複数の個体それぞれにおける１３Ｎ標識オキシトシンの分布および／または動態を、本明細書に記載の実施形態のいずれかに従って決定することと、ｃ）複数の個体における１３Ｎ標識オキシトシンの分布および／または動態が障害または状態の処置に最も好都合であるオキシトシンペプチド製剤を選択することとを含む方法が提供される。一部の実施形態では、オキシトシンペプチド製剤は、非放射標識オキシトシンをさらに含む。一部の実施形態では、オキシトシンペプチド製剤は、障害または状態を処置するための有効量のオキシトシン（１３Ｎ標識オキシトシンおよび非放射標識オキシトシンを含める）を含む。一部の実施形態では、オキシトシンペプチド製剤は、ａ）有効量の非放射標識オキシトシンと、ｂ）イメージングトレーサー、たとえば、ＰＥＴトレーサーとしての使用に適する量の１３Ｎ標識オキシトシンとを含む。一部の実施形態では、オキシトシンペプチド製剤は、頭蓋顔面粘膜投与（たとえば、鼻腔内投与）によって投与される。一部の実施形態では、オキシトシンペプチド製剤は、静脈内、動脈内、腹腔内、小胞内、皮下、くも膜下腔内、肺内、筋肉内、気管内、眼科（たとえば、眼内）、経皮、または坐剤投与される。
【００７１】
一部の実施形態では、個体において、精神、神経精神、および心理障害、炎症状態、ならびに疼痛を始めとする障害または状態を処置するための、オキシトシンペプチド製剤の投与を含む療法を評価する方法であって、ａ）オキシトシンペプチド製剤が１３Ｎ標識オキシトシンを含む療法によって個体を処置することと、ｂ）個体における１３Ｎ標識オキシトシンの分布および／または動態を、本明細書に記載の実施形態のいずれかに従って決定することと、ｃ）個体における１３Ｎ標識オキシトシンの分布および／または動態の好ましさに基づき、障害または状態の処置について、療法を評価することとを含む方法が提供される。一部の実施形態では、オキシトシンペプチド製剤は、非放射標識オキシトシンをさらに含む。一部の実施形態では、オキシトシンペプチド製剤は、障害または状態を処置するための有効量のオキシトシン（１３Ｎ標識オキシトシンおよび非放射標識オキシトシンを含める）を含む。一部の実施形態では、オキシトシンペプチド製剤は、ａ）有効量の非放射標識オキシトシンと、ｂ）イメージングトレーサー、たとえば、ＰＥＴトレーサーとしての使用に適する量の１３Ｎ標識オキシトシンとを含む。療法は、「オキシトシン投与」と題した部に記載する方法などの、本明細書に記載の投与方法のいずれかによって投与される、「オキシトシンペプチド製剤」と題した部に記載する製剤などの、本明細書に記載の製剤のいずれかに従うオキシトシンペプチド製剤を含むものでよい。
【００７２】
一部の実施形態では、精神、神経精神、および心理障害、炎症状態、ならびに疼痛を始めとする障害または状態を処置するための、オキシトシンペプチド製剤の投与を含む療法を評価する方法であって、ａ）オキシトシンペプチド製剤が１３Ｎ標識オキシトシンを含む療法によって、複数の個体を処置することと、ｂ）複数の個体における１３Ｎ標識オキシトシンの分布および／または動態を、本明細書に記載の実施形態のいずれかに従って決定することと、ｃ）複数の個体における１３Ｎ標識オキシトシンの分布および／または動態の好ましさに基づき、障害または状態の処置について、療法を評価することとを含む方法が提供される。一部の実施形態では、オキシトシンペプチド製剤は、非放射標識オキシトシンをさらに含む。一部の実施形態では、オキシトシンペプチド製剤は、障害または状態を処置するための有効量のオキシトシン（１３Ｎ標識オキシトシンおよび非放射標識オキシトシンを含める）を含む。一部の実施形態では、オキシトシンペプチド製剤は、ａ）有効量の非放射標識オキシトシンと、ｂ）イメージングトレーサー、たとえば、ＰＥＴトレーサーとしての使用に適する量の１３Ｎ標識オキシトシンとを含む。療法は、「オキシトシン投与」と題した部に記載する方法などの、本明細書に記載の投与方法のいずれかによって投与される、「オキシトシンペプチド製剤」と題した部に記載する製剤などの、本明細書に記載の製剤のいずれかに従うオキシトシンペプチド製剤を含むものでよい。
【００７３】
一部の実施形態では、個体において、精神、神経精神、および心理障害、炎症状態、ならびに疼痛を始めとする障害または状態を処置するための、オキシトシンペプチド製剤の投与を含む療法を選択する方法であって、ａ）１３Ｎ標識オキシトシンを含むオキシトシンペプチド製剤の投与を含む複数の療法によって個体を処置することと、ｂ）複数の療法それぞれについての、個体における１３Ｎ標識オキシトシンの分布および／または動態を、本明細書に記載の実施形態のいずれかに従って決定することと、ｃ）個体における１３Ｎ標識オキシトシンの分布および／または動態が障害または状態の処置に最も好都合である療法を選択することとを含む方法が提供される。一部の実施形態では、オキシトシンペプチド製剤は、非放射標識オキシトシンをさらに含む。一部の実施形態では、オキシトシンペプチド製剤は、障害または状態を処置するための有効量のオキシトシン（１３Ｎ標識オキシトシンおよび非放射標識オキシトシンを含める）を含む。一部の実施形態では、オキシトシンペプチド製剤は、ａ）有効量の非放射標識オキシトシンと、ｂ）イメージングトレーサー、たとえば、ＰＥＴトレーサーとしての使用に適する量の１３Ｎ標識オキシトシンとを含む。療法は、「オキシトシン投与」と題した部に記載する方法などの、本明細書に記載の投与方法のいずれかによって投与される、「オキシトシンペプチド製剤」と題した部に記載する製剤などの、本明細書に記載の製剤のいずれかに従うオキシトシンペプチド製剤を含むものでよい。
【００７４】
一部の実施形態では、精神、神経精神、および心理障害、炎症状態、ならびに疼痛を始めとする障害または状態を処置するための、オキシトシンペプチド製剤の投与を含む療法を選択する方法であって、ａ）１３Ｎ標識オキシトシンを含むオキシトシンペプチド製剤の投与を含む複数の療法によって、複数の個体を処置することと、ｂ）複数の療法それぞれについての、複数の個体それぞれにおける１３Ｎ標識オキシトシンの分布および／または動態を、本明細書に記載の実施形態のいずれかに従って決定することと、ｃ）複数の個体における１３Ｎ標識オキシトシンの分布および／または動態が障害または状態の処置に最も好都合である療法を選択することとを含む方法が提供される。一部の実施形態では、オキシトシンペプチド製剤は、非放射標識オキシトシンをさらに含む。一部の実施形態では、オキシトシンペプチド製剤は、障害または状態を処置するための有効量のオキシトシン（１３Ｎ標識オキシトシンおよび非放射標識オキシトシンを含める）を含む。一部の実施形態では、オキシトシンペプチド製剤は、ａ）有効量の非放射標識オキシトシンと、ｂ）イメージングトレーサー、たとえば、ＰＥＴトレーサーとしての使用に適する量の１３Ｎ標識オキシトシンとを含む。療法は、「オキシトシン投与」と題した部に記載する方法などの、本明細書に記載の投与方法のいずれかによって投与される、「オキシトシンペプチド製剤」と題した部に記載する製剤などの、本明細書に記載の製剤のいずれかに従うオキシトシンペプチド製剤を含むものでよい。
疾患および状態
【００７５】
用語「自閉症スペクトラム障害（ＡＳＤ）」または「自閉症」とは、脳の発達の一群の複合障害を指す。こうした障害は、様々な程度で、社会的交流、言語および非言語コミュニケーションの困難、および反復行動を特徴とする。Diagnostic  and  Statistical  Manual  of  Mental  Disorders  (DSM-5)の第５版の２０１３年５月の刊行をもって、すべての自閉症障害が、ＡＳＤという一まとまりの診断に統合された。以前は、自閉性障害、小児期崩壊性障害、他に指定されない広汎性発達障害（ＰＤＤ−ＮＯＳ）、およびアスペルガー症候群を始めとするそうした障害が、異なった亜型として認識されていた。http://www.autismspeaks.org/what-autismを参照されたい。当業者には、自閉症スペクトラム障害の症状が、他の多くの精神障害と少なからず部分的に一致していることを認識されよう。自閉症スペクトラム障害において示されるものと同様の症状を示す障害の例としては、限定はしないが、社交不安障害、強迫性障害、社会的（語用論的）コミュニケーション障害、ならびに、限定はしないが、注意欠陥多動性障害、プラダー−ウィリー症候群、チモシー症候群、脆弱Ｘ症候群、レット症候群、およびウィリアムス症候群を始めとする神経発達障害が挙げられる。
【００７６】
自閉症スペクトラム障害（ＡＳＤ）は、社会的交流困難、コミュニケーションの課題、および反復行動をとる傾向を特徴とする。しかし、症状およびその重症度は、これらの３つのコア範囲にわたって変化に富む。ＡＳＤは、知的障害、運動協調および注意の困難、ならびに睡眠および胃腸障害などの身体的な健康問題と関連付けられる場合もある。ＡＳＤは、不安および抑うつを始めとする精神症状と関連付けられる場合もある。たとえば、Kim  et  al.,  Autism  2000,  4(2):117-132を参照されたい。
【００７７】
オキシトシンによって、自閉症スペクトラム障害における不安ならびに社会的およびコミュニケーション障害を始めとするいくつかの状態が処置されることは公知となっている。しかし、自閉症スペクトラム障害における社会的およびコミュニケーション障害を処置する際のオキシトシンの効果は、患者間で大きく異なることが観察されている。オキシトシンの受容体利用能および受容体親和性のばらつきが、効果のばらつきの一因である可能性がある。市販のオキシトシン製剤（たとえば、Ｓｙｎｔｏｃｉｎｏｎ（登録商標））をＡＳＤの処置に使用することにおける臨床的な取り組みは、有効性が不十分であり、忍容性が低いことにより無駄に終わった。現在入手可能なオキシトシン製剤は、効力が弱く大量であるために、点鼻スプレーによって投与されるとき、吸収される薬物の量は、有効になるのに不十分である。一部の実施形態では、本発明は、自閉症スペクトラム障害、自閉症スペクトラム障害と関連する１つまたは複数の症状を示す障害、社会的およびコミュニケーション障害、または不安障害を処置するためのオキシトシンペプチド療法を評価する方法を提供する。
【００７８】
本明細書に記載の方法のいずれかに従う一部の実施形態において、対象は、自閉症スペクトラム障害、自閉症スペクトラム障害と関連する１つまたは複数の症状を示す障害、社会的およびコミュニケーション障害、または不安障害に見舞われている。自閉症スペクトラム障害と関連する症状の例としては、限定はしないが、社会的コミュニケーションおよび社会的交流の永続的な障害、社交不安、ならびに限定された反復行動、興味、および活動が挙げられる。自閉症スペクトラム障害者において観察される他の行動および特徴には、身体的接触に対する嫌悪、全般不安症、単調な声または声量変調不能、対等な関係を築けないこと、楽しさおよび興味の分かち合いの欠如、ならびに社会的または感情的相互関係の欠如も含まれる。自閉症スペクトラム障害において示されるものと同様の症状を示す障害の例としては、限定はしないが、社交不安障害、強迫性障害、社会的（語用論的）コミュニケーション障害、ならびに、限定はしないが、注意欠陥多動性障害、プラダー−ウィリー症候群、チモシー症候群、脆弱Ｘ症候群、レット症候群、およびウィリアムス症候群を始めとする神経発達障害が挙げられる。
【００７９】
本明細書に記載の方法のいずれかに従う一部の実施形態において、対象は、プラダー−ウィリー症候群に見舞われている。プラダー−ウィリー症候群は、身体の多くの部分が冒される複雑な遺伝的状態であり、第１５染色体の特定の領域にある遺伝子の機能喪失によって引き起こされる。プラダー−ウィリー症候群の個体は、多くの場合、軽度から中程度の知的障害および学習困難を伴い、多くが、癇癪の表出、頑固さ、不正行動を始めとする行動の問題、および皮膚むしりを含む強迫性行動を示す。プラダー−ウィリー症候群の個体においてよく観察される他の症状は、社会的コミュニケーションおよび社会的交流の永続的な障害、不安および過敏性、ならびに睡眠の問題である。一部の実施形態では、
【００８０】
本明細書に記載の方法のいずれかに従う一部の実施形態において、対象は、プラダー−ウィリー症候群と関連する１つまたは複数の症状に見舞われている。プラダー−ウィリー症候群と関連する症状の例としては、限定はしないが、社会的コミュニケーションおよび社会的交流の永続的な障害、不安および過敏性、ならびに睡眠の問題が挙げられる。本明細書に記載の方法のいずれかに従う一部の実施形態において、対象は、プラダー−ウィリー症候群と関連する不安に見舞われている。
【００８１】
本明細書に記載の方法のいずれかに従う一部の実施形態において、対象は、社会的およびコミュニケーション障害に見舞われている。一部の実施形態では、社会的およびコミュニケーション障害は、コミュニケーション能力および／または社会的交流の障害、アイコンタクトの欠如、および／または社会的関係を形成および／または維持できないことである。
【００８２】
本明細書に記載の方法のいずれかに従う一部の実施形態において、対象は、自閉症スペクトラム障害と関連する不安に見舞われている。
【００８３】
本明細書に記載の方法のいずれかに従う一部の実施形態において、対象は、限定はせず、口腔顔面および頭蓋顔面痛（たとえば、頭痛）、頚部痛（たとえば、後頭神経痛）、および上肢における疼痛を始めとする疼痛に見舞われている。一部の実施形態では、疼痛は、体性痛である。一部の実施形態では、疼痛は、表在体性痛である。一部の実施形態では、疼痛は、深部体性痛である。一部の実施形態では、疼痛は、筋骨格痛である。一部の実施形態では、疼痛は、内臓痛である。一部の実施形態では、疼痛は、神経因性疼痛である。一部の実施形態では、疼痛は、頭部痛または頭蓋顔面痛である。一部の実施形態では、疼痛は、頭部および／または口腔顔面領域以外の身体部分にある。一部の実施形態では、疼痛は、本明細書に記載の慢性痛などの慢性痛である。一部の実施形態では、疼痛は、本明細書に記載の急性痛などの急性痛である。一部の実施形態では、疼痛は、本明細書に記載の疼痛の１つまたは複数の組合せである。一部の実施形態では、疼痛は、動作と関連する鋭く電撃的な疼痛である。一部の実施形態では、疼痛は、手術に関連した神経損傷などの神経損傷によって引き起こされる神経因性疼痛である。
【００８４】
一部の実施形態では、疼痛は、頭部痛である。一部の実施形態では、疼痛は、顔面痛である。一部の実施形態では、疼痛は、頚部痛である。一部の実施形態では、疼痛は、後頭神経痛である。一部の実施形態では、疼痛は、上肢における疼痛である。頚部および上肢の疼痛には、限定はしないが、神経圧迫障害（脊柱管狭窄）、椎間板および椎骨障害、糖尿病性神経障害、毛根管症候群、関節炎性疾患、外傷後、咬合小面障害、ヘルペス後神経痛などの例が含まれる。一部の実施形態では、疼痛は、抑うつ、不安、ストレスなどの精神障害によって悪化するものである。一部の実施形態では、疼痛は、食物（たとえば、カフェイン、チョコレート、アルコール）によって、または薬物過剰使用（たとえば、オピエート）によって誘発される、または悪化するものである。
【００８５】
一部の実施形態では、疼痛は、三叉神経と関連する疼痛である。三叉神経と関連する疼痛は、慢性、急性、および処置関連痛、ならびにこれらの組合せからなる群から選択されるものでよい。一部の実施形態では、慢性痛は、三叉神経痛、非定型顔面痛、有痛性感覚消失、ヘルペス後神経痛、頭頚部がん、片頭痛、および顎関節痛（ＴＭＪ）からなる群から選択される。一部の実施形態では、処置関連痛は、歯科、内科、外科、または美容手順から生じる疼痛である。一部の実施形態では、急性痛は、裂傷、熱傷、骨折、傷害、頭痛、歯の膿瘍形成、歯科疾患、細菌感染、または副鼻腔感染から生じる疼痛である。三叉神経系と関連する慢性、急性、または処置痛は、限定はしないが、三叉神経痛、非定型顔面痛、有痛性感覚消失、ヘルペス後神経痛、頭頚部がん、片頭痛、他のタイプの頭痛、ＴＭＪ、顔面および／または頭部に対する傷害、歯の傷害または感染、一般的な歯科手順、および美容形成手術などの顔面手術を始めとする、多くの症候群および疾患において経験される。
【００８６】
顔面および頭部領域における慢性痛は、限定はしないが、神経因性疼痛、頭痛、ＴＭＪ、がんおよび／またはがん処置からの疼痛を始めとする、様々な医学的状態から生じる場合がある。こうした疼痛症候群は、現行の薬物療法または観血的な介入では有効に処置されないことが多く、顔面および頭部領域における限局された疼痛緩和のための新たな方法が求められている。
【００８７】
一部の実施形態では、本明細書に記載の１３Ｎ−オキシトシンペプチド製剤または組成物は、三叉神経系に向けられる。一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチド製剤または組成物は、本明細書に記載の疾患および状態のいずれかに見舞われている対象に投与される。
【００８８】
本明細書に記載の方法の一部の実施形態では、個体は、哺乳動物である。一部の実施形態では、個体は、ヒトである。
オキシトシンペプチド製剤
【００８９】
一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチド製剤、ならびに１３Ｎ−オキシトシンペプチド製剤の（鼻への適用などの）頭蓋顔面粘膜適用後のオキシトシンの分布および動態を決定することにおけるその使用が提供される。一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチド製剤は、他の薬剤を含む。一部の実施形態では、他の薬剤は、非放射標識オキシトシンである。一部の実施形態では、他の薬剤は、オキシトシンの分布、動態、および／または薬力学に影響を及ぼす。一部の実施形態では、他の薬剤は、二価金属カチオン（たとえば、Ｍｇ２＋、Ｃａ２＋、Ｚｎ２＋、またはＣｕ２＋）である。一部の実施形態では、二価金属カチオンは、Ｍｇ２＋である。一部の実施形態では、他の薬剤は、バソプレシンである。
【００９０】
オキシトシンによって、ヒトおよびラットにおける頭部および頭蓋顔面痛が処置され、ラットの上肢では、鼻腔内投与したとき、オキシトシン受容体が過剰発現している慢性痛の処置において特に有効となることは、公知となっている。しかし、ヒト患者において頭部痛、たとえば、片頭痛を処置する際のオキシトシンの鎮痛効果は、投与後直ちには生じないことが観察されている。むしろ、有意な鎮痛が開始される前に２時間までの初期期間、最大の鎮痛効果には４時間が必要であり、患者は、この初期期間の間、疼痛に見舞われ続ける。オキシトシン製剤の種々の構成要素、たとえば、マグネシウムや他の二価カチオンは、オキシトシン療法に、疼痛強度の軽減、および鎮痛効果の開始および／もしくは期間の変調を始めとする影響を及ぼしうる。
【００９１】
一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチド製剤または組成物は、（１３Ｎ−オキシトシンペプチドおよび非放射標識オキシトシンを含めて）約０．０１ｍｇ／ｍＬ〜約１６ｍｇ／ｍＬの間のオキシトシンを含む液体製剤である。一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチド製剤または組成物は、約０．０１ｍｇ／ｍＬ〜約１２ｍｇ／ｍＬの間、約０．０５ｍｇ／ｍＬ〜約１６ｍｇ／ｍＬの間、約０．１ｍｇ／ｍＬ〜約１２ｍｇ／ｍＬの間、約０．１ｍｇ／ｍＬ〜約８ｍｇ／ｍＬの間、約０．１ｍｇ／ｍＬ〜約４ｍｇ／ｍＬの間、約０．１ｍｇ／ｍＬ〜約２ｍｇ／ｍＬの間、約０．１ｍｇ／ｍＬ〜約１．６ｍｇ／ｍＬの間、約０．１ｍｇ／ｍＬ〜約１．２ｍｇ／ｍＬの間、約０．１ｍｇ／ｍＬ〜約１ｍｇ／ｍＬの間、約０．１ｍｇ／ｍＬ〜約０．８ｍｇ／ｍＬの間、約０．１ｍｇ／ｍＬ〜約０．４ｍｇ／ｍＬの間、約０．１ｍｇ／ｍＬ〜約０．３ｍｇ／ｍＬの間、約０．２ｍｇ／ｍＬ〜約１６ｍｇ／ｍＬの間、約０．２ｍｇ／ｍＬ〜約１２ｍｇ／ｍＬの間、約０．２ｍｇ／ｍＬ〜約１０ｍｇ／ｍＬの間、約０．２ｍｇ／ｍＬ〜約８ｍｇ／ｍＬの間、約０．２ｍｇ／ｍＬ〜約６ｍｇ／ｍＬの間、約０．２ｍｇ／ｍＬ〜約４ｍｇ／ｍＬの間、約０．２ｍｇ／ｍＬ〜約２ｍｇ／ｍＬの間、約０．２ｍｇ／ｍＬ〜約１．６ｍｇ／ｍＬの間、約０．２ｍｇ／ｍＬ〜約１．２ｍｇ／ｍＬの間、約０．２ｍｇ／ｍＬ〜約１ｍｇ／ｍＬの間、約０．２ｍｇ／ｍＬ〜約０．８ｍｇ／ｍＬの間、約０．２ｍｇ／ｍＬ〜約０．６ｍｇ／ｍＬの間、約０．２ｍｇ／ｍＬ〜約０．４ｍｇ／ｍＬの間、約０．２ｍｇ／ｍＬ〜約０．３ｍｇ／ｍＬの間、約０．３ｍｇ／ｍＬ〜約１６ｍｇ／ｍＬの間、約０．３ｍｇ／ｍＬ〜約１２ｍｇ／ｍＬの間、約０．３ｍｇ／ｍＬ〜約１０ｍｇ／ｍＬの間、約０．３ｍｇ／ｍＬ〜約８ｍｇ／ｍＬの間、約０．３ｍｇ／ｍＬ〜約４ｍｇ／ｍＬの間、約０．３ｍｇ／ｍＬ〜約３ｍｇ／ｍＬの間、約０．３ｍｇ／ｍＬ〜約１ｍｇ／ｍＬの間、約０．３ｍｇ／ｍＬ〜約０．５ｍｇ／ｍＬの間、約０．５ｍｇ／ｍＬ〜約１６ｍｇ／ｍＬの間、約０．５ｍｇ／ｍＬ〜約１０ｍｇ／ｍＬの間、約０．５ｍｇ／ｍＬ〜約５ｍｇ／ｍＬの間、約０．５ｍｇ／ｍＬ〜約１ｍｇ／ｍＬの間、約１ｍｇ／ｍＬ〜約１６ｍｇ／ｍＬの間、約１ｍｇ／ｍＬ〜約１０ｍｇ／ｍＬの間、または約１ｍｇ／ｍＬ〜約５ｍｇ／ｍＬの間のオキシトシンを含む。一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチド製剤または組成物は、約０．１ｍｇ／ｍＬ〜約２ｍｇ／ｍＬの間、約０．１５ｍｇ／ｍＬ〜約１．５ｍｇ／ｍＬの間、または約０．２ｍｇ／ｍＬ〜約１．２ｍｇ／ｍＬの間のオキシトシンを含む。一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチドは、Ｃｙｓ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｇｌｎ−Ａｓｎ−Ｃｙｓ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ（配列番号１）からなるヒトオキシトシンアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチドは、式（ＩＶ）の化合物である。
【００９２】
一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチド製剤または組成物は、（１３Ｎ−オキシトシンペプチドおよび非放射標識オキシトシンを含めて）約５ＩＵ／ｍＬ〜約８０００ＩＵ／ｍＬのオキシトシンを含む液体製剤である。一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチド製剤または組成物は、約５００ＩＵ／ｍＬ〜約６０００ＩＵ／ｍＬの間、約２５ＩＵ／ｍＬ〜約８０００ＩＵ／ｍＬの間、約５０ＩＵ／ｍＬ〜約６０００ＩＵ／ｍＬの間、約５０ＩＵ／ｍＬ〜約４０００ＩＵ／ｍＬの間、約５０ＩＵ／ｍＬ〜約２０００ＩＵ／ｍＬの間、約５０ＩＵ／ｍＬ〜約１０００ＩＵ／ｍＬの間、約５０ＩＵ／ｍＬ〜約８００ＩＵ／ｍＬの間、約５０ＩＵ／ｍＬ〜約６００ＩＵ／ｍＬの間、約５０ＩＵ／ｍＬ〜約５００ＩＵ／ｍＬの間、約５０ＩＵ／ｍＬ〜約４００ＩＵ／ｍＬの間、約５０ＩＵ／ｍＬ〜約２００ＩＵ／ｍＬの間、約５０ＩＵ／ｍＬ〜約１５０ＩＵ／ｍＬの間、約１００ＩＵ／ｍＬ〜約８０００ＩＵ／ｍＬの間、約１００ＩＵ／ｍＬ〜約６０００ＩＵ／ｍＬの間、約１００ＩＵ／ｍＬ〜約５０００ＩＵ／ｍＬの間、約１００ＩＵ／ｍＬ〜約４０００ＩＵ／ｍＬの間、約１００ＩＵ／ｍＬ〜約３０００ＩＵ／ｍＬの間、約１００ＩＵ／ｍＬ〜約２０００ＩＵ／ｍＬの間、約１００ＩＵ／ｍＬ〜約１０００ＩＵ／ｍＬの間、約１００ＩＵ／ｍＬ〜約８００ＩＵ／ｍＬの間、約１００ＩＵ／ｍＬ〜約６００ＩＵ／ｍＬの間、約１００ＩＵ／ｍＬ〜約５００ＩＵ／ｍＬの間、約１００ＩＵ／ｍＬ〜約４００ＩＵ／ｍＬの間、約１００ＩＵ／ｍＬ〜約３００ＩＵ／ｍＬの間、約１００ＩＵ／ｍＬ〜約２００ＩＵ／ｍＬの間、約１００ＩＵ／ｍＬ〜約１５０ＩＵ／ｍＬの間、約１５０ＩＵ／ｍＬ〜約８０００ＩＵ／ｍＬの間、約１５０ＩＵ／ｍＬ〜約６０００ＩＵ／ｍＬの間、約１５０ＩＵ／ｍＬ〜約５０００ＩＵ／ｍＬの間、約１５０ＩＵ／ｍＬ〜約４０００ＩＵ／ｍＬの間、約１５０ＩＵ／ｍＬ〜約２０００ＩＵ／ｍＬの間、約１５０ＩＵ／ｍＬ〜約１５００ＩＵ／ｍＬの間、約１５０ＩＵ／ｍＬ〜約５００ＩＵ／ｍＬの間、約１５０ＩＵ／ｍＬ〜約２５０ＩＵ／ｍＬの間、約２５０ＩＵ／ｍＬ〜約８０００ＩＵ／ｍＬの間、約２５０ＩＵ／ｍＬ〜約５０００ＩＵ／ｍＬの間、約２５０ＩＵ／ｍＬ〜約２５００ＩＵ／ｍＬの間、約２５０ＩＵ／ｍＬ〜約５００ＩＵ／ｍＬの間、約５００ＩＵ／ｍＬ〜約８０００ＩＵ／ｍＬの間、約５００ＩＵ／ｍＬ〜約５０００ＩＵ／ｍＬの間、または約５００ＩＵ／ｍＬ〜約２５００ＩＵ／ｍＬの間のオキシトシンを含む。好ましい実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチド製剤または組成物は、約５０ＩＵ／ｍＬ〜約１０００ＩＵ／ｍＬの間、約７５ＩＵ／ｍＬ〜約７５０ＩＵ／ｍＬの間、または約１００ＩＵ／ｍＬ〜約６００ＩＵ／ｍＬの間のオキシトシンを含む。一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチドは、Ｃｙｓ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｇｌｎ−Ａｓｎ−Ｃｙｓ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ（配列番号１）からなるヒトオキシトシンアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチドは、式（ＩＶ）の化合物である。
【００９３】
いずれかの二価金属カチオン塩（たとえば、水溶性二価金属カチオン塩）を使用して、本発明の含二価金属カチオン１３Ｎ−オキシトシンペプチド製剤中に二価金属カチオン（たとえば、Ｍｇ２＋、Ｃａ２＋、Ｚｎ２＋、またはＣｕ２＋）を供給することができる。含二価金属カチオン１３Ｎ−オキシトシンペプチド製剤中に使用される二価金属カチオン塩は、製剤が投与されると送達されうる遊離二価金属カチオンイオンの量、液体製剤については二価金属カチオン塩の媒質への溶解度、対イオンの酸性度／塩基性度、および／または塩の解離定数などの、いくつかの要素に基づいて選択することができる。たとえば、液体製剤では、二価金属カチオン塩は、オキシトシンペプチドとの相乗的な鎮痛を生じるのに必要となる二価金属カチオンイオン濃度を送達するのに十分に、液体媒質に可溶性になる必要がある。製剤中の他の物質との適合性や、対イオンが製剤中で他の機能を発揮しうる能力などの、他の要素も、二価金属カチオン塩を選択する際に考慮に入れられる場合がある。たとえば、クエン酸マグネシウムは、望ましい量の二価金属カチオンまたは望ましい二価金属カチオンイオン濃度を提供するのに十分に、水溶液に可溶性であり、クエン酸塩は、薬学的に許容され、クエン酸イオンは、緩衝剤の一端をなす場合があり、クエン酸マグネシウムは、製剤に心地よい風味を添える場合もある。含二価金属カチオン１３Ｎ−オキシトシンペプチド製剤中の二価金属カチオンは、１種または複数の二価金属カチオン塩を使用して供給されてもよい。含二価金属カチオン１３Ｎ−オキシトシンペプチド製剤中の二価金属カチオン塩は、含二価金属カチオン１３Ｎ−オキシトシンペプチド製剤の調製において最初の時点で使用された、または含二価金属カチオン１３Ｎ−オキシトシンペプチド製剤を調製する間にｉｎ  ｓｉｔｕで生成された二価金属カチオン塩である場合がある。たとえば、製剤の調製において最初の時点で塩化マグネシウムが使用される場合があり、製剤にクエン酸が加えられると、クエン酸マグネシウムがｉｎ  ｓｉｔｕで生成される場合がある。このような場合では、含二価金属カチオン１３Ｎ−オキシトシンペプチド製剤中の二価金属カチオンは、塩化マグネシウムとクエン酸マグネシウムの両方によって供給される。
【００９４】
本明細書に記載の含二価金属カチオン１３Ｎ−オキシトシンペプチド製剤中に使用される二価金属カチオン塩は、市販品供給元から取得する、または当業界で公知である方法に従って調製することができる。たとえば、Staszczuk  P,  et  al.  Physicochem  Probl  Mineral  Proc  37:  149-158  (2003)、米国特許第１，９３６，３６４号、および米国特許第２，２６０，００４号に記載されている手順に従ってクエン酸マグネシウムを調製することができる。
【００９５】
一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチド製剤または組成物は、１種または複数の薬学的に許容される担体（すなわち、医薬組成物を構成する）、ならびに、必要に応じて、他の成分、たとえば、賦形剤、媒体、乳化剤、安定剤、保存剤、緩衝剤、および／または、安定性、送達、吸収、半減期、有効性、薬動学、および／もしくは薬力学を強化し、有害な副作用を減少させ、または薬学的使用に他の利点をもたらしうる他の添加剤をさらに含む。例示的な賦形剤として、可溶化剤、界面活性剤、およびキレート化剤が挙げられる。たとえば、製剤は、メチル−β−シクロデキストリン（Ｍｅ−β−ＣＤ）、エデト酸二ナトリウム、アルギニン、ソルビトール、ＮａＣｌ、メチルパラベンナトリウム（ＭＰ）、プロピルパラベンナトリウム（ＰＰ）、クロロブタノール（ＣＢ）、ベンジルアルコール、塩化亜鉛、エチルアルコール、ジデカノイルＬ−α−ホスファチジルコリン（ＤＤＰＣ）、ポリソルベート、ラクトース、クエン酸塩、酒石酸塩、酢酸塩、および／またはリン酸塩を含む場合がある。
【００９６】
液体担体には、限定はしないが、水、食塩水、デキストロース水溶液、および特に溶液については（等張であるとき）グリコールが含まれる。担体は、石油、動物、植物、または合成起源のものを含む種々の油（たとえば、ラッカセイ油、オリーブ油、大豆油、鉱油、ゴマ油など）から選択される場合もある。適切な医薬賦形剤には、限定はしないが、デンプン、セルロース、タルク、グルコース、ラクトース、スクロース、ゼラチン、麦芽、米、小麦粉、白亜、シリカゲル、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸ナトリウム、グリセロールモノステアリン酸エステル、塩化ナトリウム、乾燥脱脂乳、グリセロール、プロピレングリコール、水、エタノールなどが含まれる。組成物は、滅菌などの従来の製薬手順にかけることができ、保存剤、安定剤、還元剤、酸化防止剤、キレート化剤、湿潤剤、乳化剤、分散剤、ゼリー化剤（ｊｅｌｌｉｎｇ  ａｇｅｎｔ）、浸透圧調整用の塩、緩衝剤などの従来の医薬添加剤を含有する場合がある。液体担体は、体液に対して低張性または等張性になる場合があり、３．５〜８．５の範囲内のｐＨを有する場合がある。ペプチドおよび／またはタンパク質を主体とした組成物、特に医薬組成物の調製における添加剤の使用は、当業界で周知されている。一部の実施形態では、組成物は、約２〜約７のｐＨを有する。一部の実施形態では、組成物は、約４〜約７のｐＨを有する。好ましい実施形態では、製剤／組成物のｐＨは、約４．５である。
【００９７】
一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチド製剤または組成物は、（Ａ）〜（Ｋ）から選択される１種または複数の粘膜送達促進剤をさらに含む場合がある。（Ａ）可溶化剤、（Ｂ）電荷調節剤、（Ｃ）ｐＨ調整剤、（Ｄ）分解酵素阻害剤、（Ｅ）粘液溶解または粘液除去剤、（Ｆ）線毛静止剤（ｃｉｌｉｏｓｔａｔｉｃ  ａｇｅｎｔ）、（Ｇ）膜浸透性改善剤、（Ｈ）上皮接合部生理の変調剤、たとえば、一酸化窒素（ＮＯ）刺激剤、キトサン、キトサン誘導体、（Ｉ）血管拡張剤、（Ｊ）選択的輸送促進剤、および（Ｋ）１３Ｎ−オキシトシンペプチドが有効に複合化され、会合し、収容され、封入され、または結合されて、粘膜送達の促進のために活性薬剤を安定化させる、安定化送達媒体、担体、支持体、または錯体形成種。グループ（Ｇ）における膜浸透性改善剤は、（ｉ）界面活性剤、（ｉｉ）胆汁酸塩、（ｉｉｉ）リン脂質もしくは脂肪酸添加剤、混合ミセル、リポソーム、または担体、（ｉｖ）アルコール、（ｖ）エナミン、（ｉｖ）ＮＯ供与体化合物、（ｖｉｉ）長鎖両親媒性分子、（ｖｉｉｉ）小さい疎水性浸透性改善剤、（ｉｘ）ナトリウムまたはサリチル酸誘導体、（ｘ）アセト酢酸のグリセロールエステル、（ｘｉ）シクロデキストリンまたはベータ−シクロデキストリン誘導体、（ｘｉｉ）中鎖脂肪酸、（ｘｉｉｉ）キレート化剤、（ｘｉｖ）アミノ酸またはその塩、（ｘｖ）Ｎ−アセチルアミノ酸またはその塩、（ｘｖｉ）選択された膜構成要素に対して分解性である酵素、（ｘｖｉｉ）脂肪酸合成の阻害剤、（ｘｖｉｉｉ）コレステロール合成の阻害剤、または（ｘｉｖ）（ｉ）〜（ｘｖｉｉｉ）の膜浸透性改善剤のいずれかの組合せである場合がある。本発明の種々の実施形態において、１３Ｎ−オキシトシンペプチドは、（Ａ）〜（Ｋ）に列挙した粘膜送達促進剤の１種、２種、３種、４種、またはそれより多数と組み合わせることができる。こうした粘膜送達促進剤は、薬学的に許容される製剤または送達媒体において、単独で、もしくは一緒に、１３Ｎ−オキシトシンペプチドと混合される、または別な形で合わせられる場合がある。本明細書に記載の１３Ｎ−オキシトシンペプチド製剤または組成物によって、哺乳動物対象の（たとえば鼻腔における）粘膜表面への送達後の１３Ｎ−オキシトシンペプチドの生物学的利用能は、増大しうる。
【００９８】
本明細書で論じた担体および添加剤のリストは、決して完全でなく、医薬調製物で許可されているＧＲＡＳ（一般に安全と認められる）リストの化学物質、米国食品医薬品局によって局所および非経口製剤で現在許可されている化学物質、ならびに将来許可されていく化学物質から、当業者が担体および賦形剤を選択してよい。（Wang  et  al.,  (1980)  J.  Parent.  Drug  Assn.,  34:452-462,  Wang  et  al.,  (1988)  J.  Parent.  Sci.  and  Tech.,  42:S4-S26も参照されたい。）
【００９９】
一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチド製剤または組成物は、クロロブタノール、ベンザルコニウム、４−ヒドロキシ安息香酸メチル、４−ヒドロキシ安息香酸プロピル、酢酸、クエン酸、グリセロール、塩化ナトリウム、リン酸一水素ナトリウム、ソルビトール、および水からなる群から選択される１種または複数の溶媒または賦形剤をさらに含む。一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチド製剤または組成物は、クロロブタノール、酢酸、および水をさらに含む。
【０１００】
一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチド製剤または組成物は、キトサン含有賦形剤（たとえば、ＣｈｉＳｙｓ（登録商標）、http://www.archimedespharma.com/productArchiDevChiSys.html）をさらに含む。一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチド製剤または組成物は、約１％のキトサン含有賦形剤をさらに含む。一部の実施形態では、キトサングルタミン酸塩が、吸収促進能が優れているため、経鼻送達に好ましい場合がある。一部の実施形態では、キトサングルタミン酸塩および負に帯電したポリマー（たとえば、三リン酸ペンタナトリウム）を含有するナノ粒子などの、キトサンコポリマーナノ粒子が使用される場合もある。インスリンおよび還元型グルタチオンを含有する微粒子において使用されているチオール化キトサン（たとえば、２−イミノチオランで共有結合性に修飾されたキトサン）も、本明細書に記載の１３Ｎ−オキシトシンペプチド製剤または組成物における賦形剤として有用でありうる。
【０１０１】
一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチド製剤または組成物は、１３Ｎ−オキシトシンペプチド製剤が鼻腔においてゲルを形成し、したがって、１３Ｎ−オキシトシンペプチドの鼻吸収が強化されるような、１種または複数のゲル化剤をさらに含む。本明細書に記載の製剤および方法において有用なゲル化系には、化学反応性ペクチンを主体としたゲル化系（たとえば、ＰｅｃＳｙｓ（商標）、Ａｒｃｈｉｍｅｄｅｓ  Ｐｈａｒｍａ）や、熱反応性ポリマーゲル化系（たとえば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ１２７、ＢＡＳＦ）などの公知のいずれのゲル化系も含まれうる。ＰｅｃＳｙｓ（商標）は、微細な霧として送達され、鼻粘膜において各小滴がカルシウムイオンと接触するとゲル化する低粘度水性ペクチンを主体とした溶液である。他の低メトキシペクチンであっても、たとえば約１％の濃度で、用いることができる。Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ１２７は、エチレンオキシド／プロピレンオキシドブロックコポリマーを含有する。ゲル化温度は、構成要素の比率および最終製剤中に用いられるコポリマーの量に応じて様々となる。Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ１２７については、たとえば、ビタミンＢ１２ゲル補助食品（ＥｎｅｒＢ、Ｎａｔｕｒｅ’ｓ  Ｂｏｕｎｔｙ、ニューヨーク州）中や、１８％ｗｔ／ｖｏｌのＰｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ１２７および０．３％ｗｔ／ｖｏｌのＣａｒｂｏｐｏｌ（アニオン性生体接着ポリマーＣ９３４Ｐ）を含有するゲル化スマトリプタン中に使用されるとき、およそ１８〜２０％ｗｔ／ｖｏｌで、ヒト鼻腔におけるゲル化が実証されている。モノマー比率および濃度は、予定された１３Ｎ−オキシトシン製剤に合わせて調整して、鼻腔中の３４℃という典型的な温度付近である２５〜３７℃で確実にゲル化するようにすることができる。ゲル化温度が２５℃より低い場合、製剤は、室温でゲル化する場合があり、ゲル化温度が３７℃より高い場合、製剤は、鼻粘膜と接触しても十分にゲル化しないことになる。一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチド製剤または組成物は、Ｃａｒｂｏｐｏｌなどの粘膜付着性薬剤をさらに含む場合がある。粘膜付着剤を加える、たとえば、０．５％までのＣａｒｂｏｐｏｌを加えることで、ゲル化温度をさらに下げることができる。
【０１０２】
一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチド製剤または組成物は、非イオン界面活性剤（たとえば、ポリソルベート８０）などの界面活性剤、および１種または複数の緩衝剤、安定剤、または等張化剤（ｔｏｎｉｃｉｆｉｅｒ）をさらに含む。一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチド製剤または組成物は、噴射剤をさらに含む。点鼻スプレー溶液のｐＨは、必要に応じて、ｐＨ約３．０〜８．５の間であるが、所望されるとき、ｐＨは、仕込まれた高分子種（たとえば、治療用タンパク質またはペプチド）の実質的にイオン化していない状態での送達が最適化されるように調整される。用いる医薬用溶媒も、弱酸性の水性緩衝液（ｐＨ３〜６）でよい。こうした組成物内での使用に適する緩衝剤については、上述したとおり、またはそうでなく当業界で公知のとおりである。化学的安定性を増進または維持するために、保存剤、界面活性剤、分散剤、または気体を始めとする、他の構成要素が加えられる場合もある。適切な保存剤には、限定はしないが、フェノール、メチルパラベン、パラベン、ｍ−クレゾール、チオメルサール、塩化ベンザルコニウムなどが含まれる。適切な界面活性剤には、限定はしないが、オレイン酸、トリオレイン酸ソルビタン、ポリソルベート、レシチン、ホスファチジルコリン（phosphotidyl  choline）、ならびに種々の長鎖ジグリセリドおよびリン脂質が含まれる。適切な分散剤には、限定はしないが、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）などが含まれる。適切な気体には、限定はしないが、窒素、ヘリウム、クロロフルオロカーボン（ＣＦＣ）、ハイドロフルオロカーボン（ＨＦＣ）、二酸化炭素、空気などが含まれる。適切な安定剤および等張化剤には、糖および他のポリオール、アミノ酸、ならびに有機および無機塩が含まれる。一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチド製剤または組成物は、クエン酸塩、コハク酸塩、またはピロリン酸塩をさらに含む。
【０１０３】
１３Ｎ−オキシトシンペプチドの粘膜送達をさらに強化するために、酵素阻害剤、特に、プロテアーゼ阻害剤を製剤にさらに含めてもよい。プロテアーゼ阻害剤には、限定はしないが、アンチパイン、アルファメニンＡおよびＢ、ベンズアミジンＨＣｌ、ＡＥＢＳＦ、ＣＡ−０７４、カルパイン阻害剤ＩおよびＩＩ、カルペプチン、ペプスタチンＡ、アクチノニン、アマスタチン、ベスタチン、ボロロイシン、カプトプリル、クロロアセチル−ＨＯＬｅｕ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−ＮＨ２、ＤＡＰＴ、ジプロチンＡおよびＢ、エベラクトンＡおよびＢ、ホロキシミチン、ロイペプチン、ホスホラミドン、アプロチニン、ピューロマイシン、ＢＢＩ、大豆トリプシンインヒビター、フッ化フェニルメチルスルホニル、Ｅ−６４、キモスタチン、１，１０−フェナントロリン、ＥＤＴＡ、およびＥＧＴＡが含まれうる。バシトラシンなどの他の酵素阻害剤が製剤に含められる場合もある。
【０１０４】
１３Ｎ−オキシトシンペプチドの粘膜表面中への、もしくはこれを介した送達および／または吸収を強化するために、製剤に吸収促進剤を含めてもよい。そうした促進剤は、組成物の（たとえば、製剤送達媒体からの）放出または溶解性、拡散速度、浸透能力および浸透のタイミング、取込み、滞留時間、安定性、有効半減期、ピークまたは持続濃度レベル、クリアランス、および（たとえば、送達部位において測定されるような）他の所望の粘膜送達特性を強化しうる。したがって、粘膜送達の強化は、たとえば、１３Ｎ−オキシトシンペプチドの拡散、輸送、残存、または安定性を増大させる、膜流動性を増大させる、カルシウムおよび細胞内もしくは傍細胞透過を調節する他のイオンの利用能または作用を変調する、粘膜の膜構成要素（たとえば、脂質）を可溶化する、粘膜組織における非タンパク質およびタンパク質スルフヒドリルレベルを変化させる、粘膜表面を介した水分流動を増大させる、上皮接合部生理を変調する、粘膜上皮の表面を覆う粘液の粘度を低減する、粘液線毛クリアランス速度を減速させることによる様々な機序、ならびに他の機序のいずれかによって生じる場合がある。
【０１０５】
粘膜吸収を増大させる化合物には、限定はしないが、界面活性剤、胆汁酸塩、ジヒドロフシジン酸塩、生体接着／粘膜付着剤、リン脂質添加剤、混合ミセル、リポソーム、または担体、アルコール、エナミン、カチオン性ポリマー、ＮＯ供与体化合物、長鎖両親媒性分子、小さい疎水性浸透性改善剤、ナトリウムまたはサリチル酸誘導体、アセト酢酸のグリセロールエステル、シクロデキストリンまたはベータ−シクロデキストリン誘導体、中鎖脂肪酸、キレート化剤、アミノ酸またはその塩、Ｎ−アセチルアミノ酸またはその塩、粘液溶解剤、選択された膜構成要素を特異的ターゲットとする酵素、脂肪酸合成の阻害剤、およびコレステロール合成の阻害剤が含まれうる。
【０１０６】
本明細書において記載および／または企図するすべてのペプチドは、当業界で一般に公知である自動式または手動式いずれかの固相合成技術を使用する化学合成によって調製することができる。ペプチドは、当業界で公知の分子組換え技術を使用して調製してもよい。
オキシトシン投与
【０１０７】
１３Ｎ−オキシトシンペプチド製剤または組成物は、頭蓋顔面粘膜投与（たとえば、経鼻、頬側、舌下、または眼科投与）に適合させることができる。一部の実施形態では、組成物は、粘膜送達用のデバイスを用いた使用に適合化される場合がある。一部の実施形態では、組成物は、頬側および／または舌下粘膜送達に適合化され、単位用量容器、ポンプスプレー、ドロッパー、スクイーズボトル、エアレスおよび保存剤不使用スプレー、ネブライザー、定量吸入器、加圧定量吸入器などの、頬側および／または舌下粘膜投与用のデバイスを用いた使用向けになる場合がある。一部の実施形態では、組成物は、眼科送達に適合化され、ドロッパーやスクイーズボトルなどの結膜投与用のデバイスを用いた使用向けになる場合がある。一部の実施形態では、組成物は、鼻腔内投与に適合化され、ドロッパー、ポンプスプレー、スクイーズボトル、エアレスおよび保存剤不使用スプレー、または鼻用ポンプ装置、たとえば、エアロゾル化装置に取り付けられたレザバーボトルを含む鼻用ポンプ装置などの、鼻腔内投与用のデバイスを用いた使用向けになる場合がある。
【０１０８】
１３Ｎ−オキシトシンペプチド製剤または組成物が鼻腔内投与される実施形態において、組成物は、分散剤および／または生理的に許容される希釈剤と必要に応じて組み合わされた液体エアロゾル製剤として調製することができる。別法として、乾燥粉末エアロゾル製剤が企図され、固体形態の対象化合物を微粉砕したもの、および乾燥粉末粒子の即座の分散を可能にする分散剤を含有する場合がある。液体または乾燥粉末いずれのエアロゾル製剤でも、製剤は、エアロゾル化されて小さい液体または固体粒子となって、エアロゾル化された用量が鼻道または肺の粘膜に確実に到達するようになっている。用語「エアロゾル粒子」は、本明細書では、鼻または肺においてターゲットとされた粘膜または肺胞膜へ分布するのに十分に小さい粒径の適切な液体または固体粒子を述べるのに使用する。他の考慮事項には、送達デバイスの構造、製剤中の追加の構成要素、および粒子特性が含まれる。薬物の経鼻または肺投与のこうした側面は、当業界で周知であり、製剤の操作、エアロゾル化手段、および送達デバイスの構造は、当業界における技量の範囲内である。
【０１０９】
１３Ｎ−オキシトシンペプチド製剤または組成物が鼻腔内投与される実施形態では、鼻腔内送達用デバイスによって投与が実施される。デバイスは、１３Ｎ−オキシトシンペプチド製剤の鼻腔内投与に適するいずれかのデバイスでよい。一部の実施形態では、デバイスは、１３Ｎ−オキシトシンペプチドを鼻腔内の特定の領域に送達するのに適する。一部の実施形態では、デバイスは、１３Ｎ−オキシトシンペプチドを鼻腔の下方３分の２に送達するのに適する。一部の実施形態では、デバイスは、１３Ｎ−オキシトシンペプチドを鼻腔の上方３分の１に送達するのに適する。一部の実施形態では、デバイスは、１３Ｎ−オキシトシンペプチドを鼻道全体に送達するのに適する。
【０１１０】
一部の実施形態では、鼻腔内送達用デバイスは、鼻用ポンプ装置である。一部の実施形態では、鼻用ポンプ装置は、ポンプ作動装置に取り付けられたレザバーボトルを含む。一部の実施形態では、ポンプ作動装置は、指定の体積（たとえば、約５０〜約１５０μＬ、好ましくは、約５０μＬまたは約１００μＬ）を指定の小滴サイズ分布で送達するように計量供給を行う。一部の実施形態では、鼻用ポンプ装置は、エアロゾル化装置、たとえば、Ａｐｔａｒ  Ｐｈａｒｍａによって市販されているＥｑｕａｄｅｌポンプに取り付けられたレザバーボトルを含む。一部の実施形態では、経鼻投与用のデバイスは、一度閾値に達すると、ポンプにかかる圧力に関係なく機能する。大型の哺乳動物における投与については、鼻用ポンプ装置は、より大きい体積（たとえば、約１００μＬ〜約６００μＬ、またはそれより多量）を送達するように計量供給を行うポンプ作動装置に取り付けられたレザバーボトルを含む場合がある。
【０１１１】
一部の実施形態では、鼻腔内送達用デバイスは、薬物製剤の多数回の用量を送達するように設計されている。たとえば、鼻用ポンプ装置は、ポンプ作動装置に取り付けられたレザバーボトルを含み、レザバーボトルによって、多数回の用量の液体製剤が保持され、ポンプ作動装置によって、レザバーボトルの中に保持された液体製剤の分数である指定の体積が送達されるように計量供給がなされる場合がある。一部の実施形態では、ポンプ作動装置は、１スプレーあたり約５０μＬの液体製剤を送達するように計量供給を行う。鼻用ポンプ装置は、レザバーボトルに入る（たとえば、細菌性の）混入物を減少させるために、逆流を防ぐためのフィルターを含む場合がある。一部の実施形態では、鼻用ポンプ装置は、液体製剤を送達するための無金属の通路（たとえば、プラスチック通路）を含む。一部の実施形態では、ポンプ装置には、（鼻用装置を滅菌するのに使用される）ガンマ線照射に対して安定であるプラスチック材料が使用される。一部の実施形態では、鼻腔内送達用デバイスは、ポンプ作動装置の中に微生物フィルターおよび自動封鎖機構を含む多用量ポンプ、たとえば、米国特許第５，９８８，４４９号に記載されているスプレーデバイスを備えている。
【０１１２】
一部の実施形態では、鼻腔内送達用デバイスは、米国特許第７，７８４，４６０号および第７，８５４，２２７号に記載されているデバイスなどの、呼吸によって作動する経鼻送達デバイスである。このようなデバイスでは、鼻腔深くまでのターゲット部位への送達が改善される場合がある。一部の実施形態では、患者によってマウスピースに息が吹き込まれてデバイスが作動するのを可能にするハウジングに、標準の定量スプレーデバイスが組み込まれている。一部の実施形態では、デバイスは、円錐形の密閉性ノーズピースとマウスピースとから構成され、これに、伝統的な機械式スプレーポンプ（たとえば、Ａｐｔａｒ  Ｐｈａｒｍａによって市販されているＥｑｕａｄｅｌポンプ）、装入可能なばね、および呼吸作動機構が組み込まれている。この仕組みは、単用量または多用量送達に使用することができる。このような液体送達デバイスの一例が、ＯｐｔｉＮｏｓｅによって市販されているＯｐｔｉＭｉｓｔ（商標）デバイスである。使用の際は、デバイスの鼻用部分を鼻孔に挿入し、口用部分に息を吹き込む。これによって、軟口蓋が閉じ、圧力が鼻孔へと移り、道が開き、鼻中隔の後ろに空気流が供給され、空気が他方の鼻孔から出ることが可能になる（二方向の流れ）。デバイスは、呼吸によって作動するので、小さい粒子が肺に侵入することはない。流速および粒径を加減することで、特定の鼻領域をターゲットとすることが可能になる。
【０１１３】
一部の実施形態では、鼻腔内送達用デバイスは、１３Ｎ−オキシトシンペプチド製剤または組成物の単回投与に適した単位用量計量供給スプレーデバイスである。一部の実施形態では、鼻腔内送達用デバイスは、１３Ｎ−オキシトシンペプチドの反復投与に適した多用量計量供給スプレーポンプ装置である。
【０１１４】
液滴サイズ、プルーム体積（ｐｌｕｍｅ  ｖｏｌｕｍｅ）、および流速を加減して、特定の鼻領域をターゲットとすることができる。嗅上皮および／または呼吸上皮をターゲットとするには、液体スプレーによって、５ミクロン〜５０ミクロンの間の小滴サイズが実現される場合がある。より大きい小滴は、主として、鼻咽頭を下り、嚥下され、より小さい小滴は、肺組織に導かれる。質量中央値等価空気動力学径（Ｍａｓｓ  Ｍｅｄｉａｎ  Ｅｑｕｉｖａｌｅｎｔ  Ａｅｒｏｄｙｎａｍｉｃ  Ｄｉａｍｅｔｅｒ）（ＭＭＡＤ）を使用して、液滴サイズが指定される。点鼻スプレーのｐＨは、装入されたペプチドが大部分イオン化されていない状態で送達されるように最適化される。鼻は、一般に、ｐＨが約３〜８である溶液に耐容性を示す。鼻粘膜は、一般に、飽和が起こり、液体が鼻から滴り始める前に、およそ１００μＬの体積を吸収しうる。したがって、プルーム体積は、１００μＬまで（１００μＬを含む）になる場合がある。大型の哺乳動物における使用については、プルーム体積は、１５０μＬまで（１５０μＬを含む）またはそれより多量（たとえば、６００μＬまたはそれより多量）になる場合がある。乳児および小児への使用について、または小さめの動物（たとえば、げっ歯動物、ネコ）における獣医学的使用については、より小さいプルーム体積（５〜５０μＬ）を使用すればよい。
【０１１５】
一部の実施形態では、鼻腔内送達用デバイスは、側面作動誘発機構を備えるポンプ装置など、患者コンプライアンスを促進するように、人間工学的に設計されている。一部の実施形態では、鼻腔内送達用デバイスは、ポンプ装置の中に空気を侵入させず、したがって、空気中の微生物による汚染を防ぐ、密閉系として働く計量供給スプレーポンプを含む。一部の実施形態では、鼻腔内送達用デバイスは、フィルターと共に働く計量供給スプレーポンプを含む。吐き出された空気は、ポンプ内部に組み入れられたフィルターを介して吸い込まれ、空気中の微生物は、ポンプ装置の外に留められる。一部の実施形態では、鼻用ポンプ装置を含む鼻腔内送達デバイスは、データ伝送および処置モニタリングを促進しうる超小型電子技術デバイスをさらに含む場合がある。
【０１１６】
一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチド製剤または組成物は、１３Ｎ−オキシトシンペプチドを含み、１３Ｎ−オキシトシンペプチドは、本明細書に記載の鼻腔内送達用デバイスのいずれか１つに収容され、１３Ｎ−オキシトシンペプチド製剤または組成物中の（１３Ｎ−オキシトシンおよび非放射標識オキシトシンを含めた）オキシトシンの濃度は、デバイスと濃度のあるとあらゆる組合せを個々に記載するかの如く、本明細書に記載の濃度範囲のいずれかの範囲内にある。一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチド製剤または組成物は、１３Ｎ−オキシトシンペプチドと非放射標識オキシトシンとを含む。一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチド製剤または組成物中の１３Ｎ−オキシトシンペプチドの量は、約０．０５μｇ／ｍＬ〜約５μｇ／ｍＬ（たとえば、約０．０５、０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９、１、２、３、４、または５μｇ／ｍＬのいずれか；これらの値の間にあるいずれの範囲も含める）の範囲にある。
【０１１７】
一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチドは、他の薬剤と同時または順次投与される。一部の実施形態では、他の薬剤は、非放射標識オキシトシンである。一部の実施形態では、他の薬剤は、オキシトシンの分布、動態、および／または薬力学に影響を及ぼす。一部の実施形態では、他の薬剤は、二価金属カチオン（たとえば、Ｍｇ２＋、Ｃａ２＋、Ｚｎ２＋、またはＣｕ２＋）である。一部の実施形態では、二価金属カチオンは、Ｍｇ２＋である。一部の実施形態では、他の薬剤は、バソプレシンである。一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチドは、他の薬剤と、同じ単位用量として同時投与される。一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチドは、他の薬剤と、別個の単位用量または製剤として同時投与される。一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチドと他の薬剤が別々に投与される。一部の実施形態では、他の薬剤は、第１の投与において対象に投与され、次いで、１３Ｎ−オキシトシンペプチドは、第２の投与において対象に投与される。これら実施形態の一部において、１３Ｎ−オキシトシンペプチドは、他の薬剤の投与後約１０分〜約２時間の間に投与される。これら実施形態の一部において、１３Ｎ−オキシトシンペプチドは、他の薬剤の投与後約１０分〜約２時間の間、約１０分〜約１時間の間、約１０分〜約３０分の間、約２０分〜約２時間の間、約２０分〜約１時間の間、約３０分〜約２時間の間、または約３０分〜約１時間の間に投与される。これら実施形態の一部において、１３Ｎ−オキシトシンペプチドは、他の薬剤の投与から約１０分、約１５分、約２０分、約３０分、約４５分、約６０分、約９０分、または約１２０分後に投与される。これら実施形態の一部において、１３Ｎ−オキシトシンペプチドは、他の薬剤の投与から約１０分、約１５分、約２０分、約３０分後に投与される。一実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチドは、対象に最初に投与され、次いで、他の薬剤が対象に投与される。一部の実施形態では、対象は、ヒトである。
【０１１８】
一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチドと他の薬剤は、それを必要とする対象に、同じ経路または異なる経路で投与される場合がある。一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチドは、頭蓋顔面粘膜投与（たとえば、経鼻、頬側、舌下、または眼科投与）によって投与される。一実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチドと他の薬剤は、両方が同じ製剤にされて鼻腔内投与される。一実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチドは、頭蓋顔面粘膜から投与され、他の薬剤は、全身、たとえば、静脈内、筋肉内、経口、皮下、またはくも膜下腔内投与される。
【０１１９】
一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチドは、鼻腔内投与によって投与される。一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチドと他の薬剤が、鼻腔内投与によって投与される。１３Ｎ−オキシトシンペプチドおよび／または他の薬剤は、本明細書に記載の経鼻送達デバイスなどの適切な鼻腔内送達用デバイスを使用して、鼻腔内の粘膜組織に投与することができる。鼻腔内の適切な領域には、限定はしないが、鼻腔の下方３分の２、または上方３分の１、または鼻道全体がある。一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチドおよび／または他の薬剤は、鼻腔の上方３分の１に投与される。一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチドおよび／または他の薬剤は、鼻腔の下方３分の２に投与される。一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチドおよび／または他の薬剤は、特に、鼻腔の下方３分の２と上方３分の１の両方に到達するように送達される。
【０１２０】
一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチドは、Ｃｙｓ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｇｌｎ−Ａｓｎ−Ｃｙｓ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ（配列番号１）からなるヒトオキシトシンアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチドは、式（ＩＶ）の化合物である。一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチド製剤または組成物の有効用量は、約０．５μｇ〜約２０００μｇの範囲のオキシトシン（１３Ｎ−オキシトシンおよび非放射標識オキシトシンを含める）を含む。一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチド製剤または組成物におけるオキシトシンの有効用量は、約０．５μｇ〜約１０００μｇ、約１μｇ〜約１０００μｇ、または約１μｇ〜約２０００μｇである。一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチド製剤または組成物におけるオキシトシンの有効用量は、約４μｇ〜約１０００μｇ、約８μｇ〜約１０００μｇ、約８μｇ〜約８００μｇ、約８μｇ〜約５００μｇ、約８μｇ〜約４００μｇ、約８μｇ〜約３００μｇ、約８μｇ〜約２００μｇ、約８μｇ〜約１００μｇ、約８μｇ〜約８０μｇ、約８μｇ〜約５０μｇ、約１０μｇ〜約１０００μｇ、約１０μｇ〜約５００μｇ、約１０μｇ〜約２００μｇ、約１０μｇ〜約１００μｇ、約１６μｇ〜約１０００μｇ、約１６μｇ〜約８００μｇ、約１６μｇ〜約５００μｇ、約１６μｇ〜約４００μｇ、約１６μｇ〜約２００μｇ、約１６μｇ〜約１６０μｇ、約１６μｇ〜約１２０μｇ、約１６μｇ〜約８０μｇ、約２０μｇ〜約１０００μｇ、約２０μｇ〜約８００μｇ、約２０μｇ〜約５００μｇ、約２０μｇ〜約２００μｇ、約２０μｇ〜約１００μｇ、約３０μｇ〜約１０００μｇ、約３０μｇ〜約５００μｇ、約３０μｇ〜約３００μｇ、約３０μｇ〜約１２０μｇ、約３０μｇ〜約９０μｇ、約５０μｇ〜約１０００μｇ、約５０μｇ〜約５００μｇ、約５０μｇ〜約２５０μｇ、約５０μｇ〜約１００μｇ、または約５０μｇ〜約８０μｇである。一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチド製剤または組成物におけるオキシトシンの有効用量は、約８μｇ、約１６μｇ、約３２μｇ、約４８μｇ、約６４μｇ、約８０μｇ、約９６μｇ、約１２８μｇ、約２５６μｇ、約１０μｇ、約２０μｇ、約３０μｇ、約４０μｇ、約５０μｇ、約６０μｇ、約７０μｇ、約８０μｇ、約９０μｇ、約１００μｇ、約１２０μｇ、約１５０μｇ、約２００μｇ、約４００μｇ、約６００μｇ、約８００μｇ、または約１００μｇである。一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチド製剤または組成物におけるオキシトシンの有効用量は、約８μｇ〜約１２０μｇ、約１５μｇ〜約１２０μｇ、約３０μｇ〜約１２０μｇ、または約６６μｇである。一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチド製剤または組成物の有効用量における１３Ｎ−オキシトシンペプチドの量は、約１×１０−４μｇ〜約１×１０−２μｇ（たとえば、約１×１０−４、５×１０−３、１×１０−３、５×１０−２、または１×１０−２μｇのいずれか；これらの値の間にあるいずれの範囲も含める）の範囲にある。
【０１２１】
一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチド製剤または組成物におけるオキシトシン（１３Ｎ−オキシトシンおよび非放射標識オキシトシンを含める）の有効用量は、約０．２５ＩＵ〜約１０００ＩＵである。一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチド製剤または組成物におけるオキシトシンの有効用量は、約０．２５ＩＵ〜約５００ＩＵ、約０．５ＩＵ〜約５００ＩＵ、または約０．５ＩＵ〜約１０００ＩＵである。一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチド製剤または組成物におけるオキシトシンの有効用量は、約２ＩＵ〜約５００ＩＵ、約４ＩＵ〜約５００ＩＵ、約４ＩＵ〜約４００ＩＵ、約４ＩＵ〜約２５０ＩＵ、約４ＩＵ〜約２００ＩＵ、約４ＩＵ〜約１５０ＩＵ、約４ＩＵ〜約１００ＩＵ、約４ＩＵ〜約５０ＩＵ、約４ＩＵ〜約４０ＩＵ、約４ＩＵ〜約２５ＩＵ、約５ＩＵ〜約５００ＩＵ、約５ＩＵ〜約２５０ＩＵ、約５ＩＵ〜約１００ＩＵ、約５ＩＵ〜約５０ＩＵ、約８ＩＵ〜約５００ＩＵ、約８ＩＵ〜約４００ＩＵ、約８ＩＵ〜約２５０ＩＵ、約８ＩＵ〜約２００ＩＵ、約８ＩＵ〜約１００ＩＵ、約８ＩＵ〜約８０ＩＵ、約８ＩＵ〜約６０ＩＵ、約８ＩＵ〜約４０ＩＵ、約１０ＩＵ〜約５００ＩＵ、約１０ＩＵ〜約４００ＩＵ、約１０ＩＵ〜約２５０ＩＵ、約１０ＩＵ〜約１００ＩＵ、約１０ＩＵ〜約５０ＩＵ、約１５ＩＵ〜約５００ＩＵ、約１５ＩＵ〜約２５０ＩＵ、約１５ＩＵ〜約１５０ＩＵ、約１５ＩＵ〜約６０ＩＵ、約１５ＩＵ〜約４５ＩＵ、約２５ＩＵ〜約５００ＩＵ、約２５ＩＵ〜約２５０ＩＵ、約２５ＩＵ〜約１２５ＩＵ、約２５ＩＵ〜約５０ＩＵ、または約２５ＩＵ〜約４０ＩＵである。一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチド製剤または組成物におけるオキシトシンの有効用量は、約４ＩＵ、約８ＩＵ、約１６ＩＵ、約２４ＩＵ、約３２ＩＵ、約４０ＩＵ、約４８ＩＵ、約６４ＩＵ、約１２８ＩＵ、約５ＩＵ、約１０ＩＵ、約１５ＩＵ、約２０ＩＵ、約２５ＩＵ、約３０ＩＵ、約３５ＩＵ、約４０ＩＵ、約４５ＩＵ、約５０ＩＵ、約６０ＩＵ、約７５ＩＵ、約１００ＩＵ、約２００ＩＵ、約３００ＩＵ、約４００ＩＵ、または約５０ＩＵである。一部の実施形態では、１３Ｎ−オキシトシンペプチド製剤または組成物におけるオキシトシンの有効用量は、約４ＩＵ〜約６０ＩＵ、約７．５ＩＵ〜約６０ＩＵ、約１５ＩＵ〜約６０ＩＵ、または約３０ＩＵである。
キット
【０１２２】
本明細書では、本明細書に記載の方法のいずれかを実施するためのキットが提供される。キットは、１３Ｎ−オキシトシンの個体への投与（たとえば、頭蓋顔面粘膜投与、たとえば、鼻腔内投与）において使用するために提供される。一部の実施形態では、キットは、式（ＩＶ）に従うペプチドなどの１３Ｎ−オキシトシンペプチドを含む。一部の実施形態では、キットは、１３Ｎ−オキシトシンペプチドの合成において使用される、式（Ｉ）、（Ｉａ）、（Ｉｂ）、（ＩＩ）、（ＩＩａ）、および／または（ＩＩｂ）に従うペプチドなどの１３Ｎ−オキシトシンペプチド前駆体を含む。一部の実施形態では、キットは、前駆体からの１３Ｎ−オキシトシンペプチドの合成において使用される、ＤＥＣＰ、ＰＭＰ、ＤＭＳＯ、ＴＨＦ、ＨＣｌ、および／またはジオキサンを始めとする試薬を含む。一部の実施形態では、キットは、１３Ｎ−オキシトシンペプチドを精製するための、ＳＰＥカラム（たとえば、Ｃ１８ｓｅｐ−ｐａｋ）および／またはイオン対試薬を始めとする試薬および／または製造品を含む。一部の実施形態では、キットは、頭蓋顔面粘膜投与（たとえば、鼻腔内投与）用のデバイスを、適切な包装材料の中に含む。キットは、プロテアーゼ阻害剤および／または少なくとも１種の吸収促進剤を始めとする、本明細書に記載のオキシトシンペプチド製剤構成要素のいずれかをさらに含む場合がある。他のキットは、本明細書に記載の方法のいずれか１つの実施について使用者および／または保健医療提供者に情報を提供する使用説明書をさらに含む場合がある。
【０１２３】
頭蓋顔面粘膜投与用のデバイス（たとえば、鼻用ポンプ装置などの鼻腔内投与用のデバイス）に収容された本明細書に記載の１３Ｎ−オキシトシンペプチド製剤と、適切な包装材料とを含むキットも提供される。キットは、対象における１３Ｎ−オキシトシンペプチド製剤の投与についての使用説明書をさらに含む場合がある。
【０１２４】
本発明を実施するためのキットの使用に関する使用説明書には、一般に、キットの中身をどのように使用して本発明の方法を実施するかが記載されている。本発明のキットの中に供給される使用説明書は、通常は、ラベルまたは添付文書（たとえば、キットに含められる紙シート）上の書面の使用説明書であるが、機械読取り可能な使用説明書（たとえば、磁気または光学記憶ディスクに収容された使用説明書）も許容される。
例示的な実施形態
【０１２５】
実施形態１．  配列番号１のアミノ酸配列を含む１３Ｎ標識オキシトシンペプチド。
【０１２６】
実施形態２．  オキシトシンペプチドの１個の構成１４Ｎ原子が１３Ｎ放射性核種で置き換えられている、実施形態１の１３Ｎ標識オキシトシンペプチド。
【０１２７】
実施形態３．  オキシトシンペプチドの１つの残基が、１３Ｎ放射性核種を含む部分を含むように修飾されている、実施形態１または２の１３Ｎ標識オキシトシンペプチド。
【０１２８】
実施形態４．  オキシトシンペプチドの１つの残基が、１３ＮＨ２を含むように修飾されている、実施形態３の１３Ｎ標識オキシトシンペプチド。
【０１２９】
実施形態５．  単一の１３Ｎ放射性核種を含む、実施形態１から４のいずれか１つの１３Ｎ標識オキシトシンペプチド。
【０１３０】
実施形態６．  ａ）４位にあるグルタミン残基（配列番号２）、ｂ）５位にあるアスパラギン残基（配列番号３）、またはｃ）９位にあるグリシン残基（配列番号４）の箇所に１３Ｎ放射性核種を含む、実施形態１から５のいずれか１つの１３Ｎ標識オキシトシンペプチド。
【０１３１】
実施形態７．  式（ＩＶ）の化合物である、実施形態１の１３Ｎ標識オキシトシンペプチド。
【０１３２】
実施形態８．  配列番号１のアミノ酸配列を含む１３Ｎ標識オキシトシンペプチドを製造する方法であって、ａ）式（Ｉｂ）の化合物をシアノホスホン酸ジエチル（ＤＥＣＰ）と反応させて、式（ＩＩｂ）の化合物を提供することと、ｂ）式（ＩＩｂ）の化合物を気体１３ＮＨ３と反応させて、式（ＩＩＩｂ）の化合物を提供することと、ｃ）式（ＩＩＩｂ）の化合物を脱保護して、１３Ｎ標識オキシトシンペプチドを提供することとを含み、１３Ｎ標識オキシトシンペプチドは、式（ＩＶ）の化合物である、方法。
【０１３３】
実施形態９．  式（Ｉｂ）の化合物のＤＥＣＰとの反応が、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、およびペンタメチルピペリジン（ＰＭＰ）の存在下で実施される、実施形態８の方法。
【０１３４】
実施形態１０．  ＤＥＣＰの量が、約０．７当量〜約１．１当量の間である、実施形態８または９の方法。
【０１３５】
実施形態１１．  ＤＭＳＯのＴＨＦに対する比が、約１：７〜約１：１１の間である、実施形態９または１０の方法。
【０１３６】
実施形態１２．  脱保護することが、式（ＩＩＩｂ）の化合物をＨＣｌ／ジオキサンと反応させることを含む、実施形態８から１１のいずれか１つの方法。
【０１３７】
実施形態１３．  ステップｃ）において提供された１３Ｎ標識オキシトシンペプチドを精製して、試薬、有機溶媒、および前駆体を除去することをさらに含む、実施形態８から１２のいずれか１つの方法。
【０１３８】
実施形態１４．  精製することが、固相抽出（ＳＰＥ）による精製を含む、実施形態１３の方法。
【０１３９】
実施形態１５．  ＳＰＥによる精製が、ａ）１３Ｎ標識オキシトシンペプチドを第１の疎水性ＳＰＥカラムに付与して、１３Ｎ−オキシトシンおよび前駆体が第１の疎水性ＳＰＥカラム上に保持されるようにすることと、ｂ）水性イオン対試薬を含む溶液を第１の疎水性ＳＰＥカラムに付与して、１３Ｎ−オキシトシンが第１の溶出液中に溶離するようにすることと、ｃ）第１の溶出液を第２の疎水性ＳＰＥカラムに付与して、第１の溶出液の１３Ｎ−オキシトシンが、第２の疎水性ＳＰＥカラム上に保持されるようにすることと、ｄ）１３Ｎ−オキシトシンを第２の溶出液中に溶離させることとを含む、実施形態１４の方法。
【０１４０】
実施形態１６．  第１および／または第２の疎水性ＳＰＥカラムが、強い疎水性を有する、シリカを主体とする結合相を含む、実施形態１５の方法。
【０１４１】
実施形態１７．  水性イオン対試薬を含む溶液が、約１５％〜約２５％の間のアセトニトリルを含む、実施形態１５または１６の方法。
【０１４２】
実施形態１８．  実施形態８から１７のいずれか１つの方法を含むプロセスによって調製された１３Ｎ標識オキシトシンペプチド。
【０１４３】
実施形態１９．  個体において、外因的に投与されたオキシトシンの分布を決定する方法であって、ａ）個体に、実施形態１から８および１８のいずれか１つの１３Ｎ標識オキシトシンペプチドを投与することと、ｂ）１３Ｎ標識オキシトシンペプチドが組織または細胞部位で蓄積して画像化されるのを可能にすることと、ｃ）細胞または組織を非侵襲性の画像化技術によって画像化することとを含む方法。
【０１４４】
実施形態２０．  個体においてオキシトシン受容体の分布を決定する方法であって、ａ）個体に、実施形態１から８および１８のいずれか１つの１３Ｎ標識オキシトシンペプチドを投与することと、ｂ）１３Ｎ標識オキシトシンペプチドがオキシトシン受容体に結合するのを可能にすることと、ｃ）個体における１３Ｎ標識オキシトシンペプチドを非侵襲性の画像化技術によって画像化することとを含む方法。
【０１４５】
実施形態２１．  個体において、外因的に投与されたオキシトシンの動態を決定する方法であって、ａ）個体に、実施形態１から８および１８のいずれか１つの１３Ｎ標識オキシトシンペプチドを投与することと、ｂ）個体における１３Ｎ標識オキシトシンペプチドを、非侵襲性の画像化技術によって所定の期間にわたり画像化することとを含む方法。
【０１４６】
実施形態２２．  非侵襲性の画像化技術が陽電子放出断層撮影イメージングを含む、実施形態１９から２１のいずれか１つの方法。
【０１４７】
実施形態２３．  非侵襲性の画像化技術が、コンピュータ断層撮影イメージングを用いた陽電子放出断層撮影、または磁気共鳴画像法を用いた陽電子放出断層撮影を含む、実施形態２２の方法。
【０１４８】
実施形態２４．  １３Ｎ標識オキシトシンペプチドが、頭蓋顔面粘膜投与によって投与される、実施形態１９から２３のいずれか１つの方法。
【０１４９】
実施形態２５．  １３Ｎ標識オキシトシンペプチドが鼻腔内投与される、実施形態２４の方法。
【０１５０】
実施形態２６．  １３Ｎ標識オキシトシンペプチドが、静脈内、動脈内、腹腔内、小胞内、皮下、くも膜下腔内、肺内、筋肉内、気管内、眼科、経皮、または坐剤投与される、実施形態１９から２３のいずれか１つの方法。
【０１５１】
実施形態２７．  １３Ｎ標識オキシトシンペプチドが静脈内投与される、実施形態２６の方法。
【０１５２】
実施形態２８．  実施形態１から７および１８のいずれか１つの１３Ｎ標識オキシトシンペプチドを含むキット。
【実施例】
【０１５３】
当業者なら、本発明の範囲および精神の範囲内で、いくつかの実施形態が考えられることを認識するところとなる。これより、以下の非限定的な実施例を参照することにより、本発明がより詳細に説明される。以下の実施例は、本発明をさらに例証するものであるが、当然のことながら、何らその範囲を限定すると解釈されるべきでない。
（実施例１）
ラットにおけるオキシトシンの静脈内投与後の分布
【０１５４】
麻酔したラットを、マイクロＰＥＴ走査装置（ｎａｎｏｓｃａｎ  ｍｉｃｒｏＰＥＴ／１Ｔ  ＭＲＩ、Ｍｅｄｉｓｏ  Ｌｔｄ、ハンガリー国ブダペスト）を使用して走査する。体温を維持し、循環および呼吸をモニターする。まず、減弱補正のために構造的Ｔ２強調ＭＲＩ走査像を得る。引き続いて、ラットに、尾静脈から１３Ｎ−オキシトシン放射性トレーサーを注射する。取得時間を６０分としてリストモードプロトコールを使用する。放射走査のリストモードデータを、動的系列の枠に分割する。反復再構成を用いてデータを時間枠毎に再構成する。適切な補正係数を適用し、定量的な動的画像を生成する（マトリックスサイズ（ｘ、ｙ、ｚ）９３、９３、１２０。ボクセルサイズ０．４ｍｍ。モンテカルロに基づく推定、減弱、および散乱補正を用いた３Ｄ  Ｔｅｒａ−Ｔｏｍｏ再構成）。各６０分の走査からなる合計されたＰＥＴ画像を、生物医学的画像を定量化するための市販品として入手可能なソフトウェアパッケージであるＰＭＯＤソフトウェア（バージョン３．７、ＰＭＯＤ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  Ｌｔｄ、スイス国チューリヒ）を使用し、標準的なＳｐｒａｇｕｅ−ＤａｗｌｅｙラットＭＲＩ脳地図に同時登録して、目的の領域におけるデータを取得する。結果は、無次元標準取込値（ＳＵＶ）：［組織活性濃度（ＭＢｑ／ｇ）×体重（ｇ）／注入線量（ＭＢｑ）］として示す。
【０１５５】
一研究において、雌のＳｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙラットを、明１２時間／暗１２時間サイクル、平均温度２１℃、湿度５５％の中で、１ケージに２匹収容し、食物および水に自由に接触させた。動物実験は、倫理審査による承認を得、デンマーク国動物実験査察当局（Ｄａｎｉｓｈ  Ａｎｉｍａｌ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ  Ｉｎｓｐｅｃｔｏｒａｔｅ）（ＡＥＩ）によって制定された指針に従って、人道にかなった条件下で行った。
【０１５６】
雌Ｓｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙラット（体重：３５８ｇ）を、２％イソフルランで満たしたチャンバーの中で麻酔し、動的ＰＥＴを取得する間、イソフルラン送達用マスクによって維持した（１．５〜２％）。研究中は終始、体温、心拍数、および呼吸数をモニターした。麻酔された動物は、マイクロＰＥＴ走査装置（ｎａｎｏＳｃａｎ（登録商標）ｍｉｃｒｏＰＥＴ／１Ｔ  ＭＲＩシステム、Ｍｅｄｉｓｏ  Ｌｔｄ、ハンガリー国ブダペスト）（ＭＲＩ画像解像度１００μｍ）を使用し、アニメプローン（ａｎｉｍｅ  ｐｒｏｎｅ）をマイクロＰＥＴ開口部に配置することにより走査した。頭部をホルダーで固定して、頭部の動きを最小限に抑えた。まず、減弱補正のために構造的Ｔ２強調ＭＲＩ走査像を得た。引き続いて、ラットに、１３．３ＭＢｑの１３Ｎ−オキシトシン放射性トレーサーを尾静脈注射し、ＰＥＴ走査を開始した。データをＰＥＴリストモードで取得し、３Ｄ反復アルゴリズム（Ｔｅｒａ−Ｔｏｍｏ  ３Ｄ、完全検出器モデルおよび通常正則化（Ｍｅｄｉｓｏ、ハンガリー国ブダペスト）を、４回の反復および６つのサブセットで用い、０．４×０．４×０．４ｍｍ３（０．０６４ｍｍ３）のボクセルサイズで、２０の枠（３０分（８×１５秒、８×６０秒、４×５分））として再構成した。遅延合致ウィンドウを使用して、データを不感時間および減衰ならびに偶然の成り行きについて補正した。長さ１８分のＭＲ  ＧＲＥ  ＥＸＴ系列（１回の励起、ＴＲ  ２．０ｍｓ、ＴＥ  ２．１ｍｓ、フリップ角２５°、０．５ｍｍのスライス厚、水平配向）を使用して、画像を減衰および散乱について補正した。取得されたデータを観察すると、１３Ｎ−オキシトシンの脳への取込みは認められなかった（図２）。
（実施例２）
ラットにおけるオキシトシンの経鼻投与後の分布
【０１５７】
ラットにおける１３Ｎ−オキシトシンの経鼻投与後の分布を試験する。ラットにおいて、本明細書に記載の製剤のいずれかに従う１３Ｎ−オキシトシン含有水性製剤を経鼻適用し、ラットにおける１３Ｎ−オキシトシンの分布を、上述したとおりの走査によって決定する。
【０１５８】
一研究において、（体重が２５７ｇおよび２６０ｇである）２匹のラットにおいて１３Ｎ−オキシトシンの経鼻投与後の分布を調査した。各ラットについて、およそ１００μｌの１３Ｎ−オキシトシン溶液（１０％エタノール／９０％食塩水に溶解させたもの）（１〜２ＭＢｑ前後）をピペットで各鼻孔に入れ、ラットを直ちにＰＥＴ走査ベッドに移し、その後、実施例１に記載した方法に従って６０分のＰＥＴ走査を開始した後、磁気共鳴（ＭＲ）走査を行った。図３に示されるとおり、トレーサー１３Ｎ−オキシトシンは、主に、胆嚢、腎臓、および腸に分布し、目に見える脳への取込みはなかった。
（実施例３）
健常ヒト対象におけるオキシトシンの経鼻投与後の分布および動態
【０１５９】
健常ヒト対象における１３Ｎ−オキシトシンの経鼻投与後の分布および動態を試験する。採用／不採用判断基準、病歴および身体検査、臨床検査、ならびに他の通例の手順に基づき、健康なボランティアを選抜する。１３Ｎ−オキシトシンは、定量ネブライザーによって対象に鼻腔内送達される。たとえば、各鼻噴霧適用によって、０．１ｍｌの食塩水中の０．０１μｇ／ｋｇの用量の１３Ｎ−オキシトシンが対象に投与される。対照対象には、各鼻噴霧適用によって０．１ｍｌの食塩水だけが投与される。本明細書に記載の１３Ｎ−オキシトシン製剤のいずれを試験してもよい。個体において１３Ｎ−オキシトシンがＰＥＴによって経時的に画像化されて、１３Ｎ−オキシトシンの分布および動態が明らかになる。この実施例では、解剖学的確認を正確に行うために、構造的ＣＴまたはＭＲＩを最初に実施する。その後、１３Ｎ−オキシトシンを対象に投与した後、鼻をすすいで、オキシトシンパルスのタイミングの正確な決定を可能にする。健康なボランティア、片頭痛患者、または神経精神医学的患者をＰＥＴ走査装置（Ｓｉｅｍｅｎｓ  Ｂｉｏｇｒａｐｈ  ６４  Ｔｒｕｅｐｏｉｎｔ  ＰＥＴ）に正しく配置したらすぐに、６０分のＰＥＴ走査が開始される。ＴｒｕｅＸ  ３Ｄ  ＯＳＥＭ（３回の反復、２１のサブセット）、２５６×２５６×１０９マトリックス、および２ｍｍガウスフィルターを使用し、５×６０、３×３００、４×６００秒（合計１２枠、６０分）の時間枠構造を用いて、ＰＥＴデータを再構成する。生物医学的画像を定量化するための市販品として入手可能なソフトウェアパッケージであるＰＭＯＤ３．７（ＰＭＯＤ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  Ｌｔｄ、スイス国チューリヒ）を使用して、前処理ステップを行う。動的ＰＥＴ取得結果を目視によって調べ、体動アーチファクトを補正する。６人すべての参加者において、全身放射走査を実施する。注入前および注射後１２０分〜１５０分の間に、安全性試験、血液、尿、バイタルサイン、および心電図記録を取る。
【０１６０】
全身画像に対して、主要な臓器（脳、肺、縦隔、肝臓、脾臓、胆嚢、腎臓、膀胱、および尿管）にＲＯＩを配置する。各線源臓器および残部における活性を注入活性で割って、取込みを注入活性に対するパーセントとして求める。各線源臓器の滞留時間は、各線源臓器の対注射活性パーセントおよび時間経過情報から、ＯＬＩＮＤＡ  １．０／ＥＸＭソフトウェア（Ｖａｎｄｅｒｂｉｌｔ大学）を使用して指数曲線に適合させることによって算出される。成人男性模型を使用して、各線源臓器の平均滞留時間をＯＬＩＮＤＡ  １．０／ＥＸＭソフトウェアに入力することにより、線量計測値を求める。
（実施例４）
健常なヒトボランティア、神経精神医学的患者、または慢性片頭痛患者におけるオキシトシンの経鼻投与後の分布、動態、および薬力学
【０１６１】
ヒト対象（健常なボランティア、前兆のあるまたはない片頭痛に見舞われている患者、または神経精神医学的患者）を登録する。電話による聞き取りによって、また研究センターに初めて来訪した際に、研究への適格性を見極める。可能性のある参加者が研究センターに初めて来訪した際、病歴を調べ、健康診断を行う。特に、神経精神（neuropychiatric）病（たとえば、自閉症スペクトラム障害または不安障害）、前兆のあるまたはない慢性片頭痛または高頻度の偶発性片頭痛の診断は、当業者によって確立されている。参加者が採用判断基準に適合し、不採用判断基準に当てはまらない場合、書面によるインフォームドコンセントを得る。人口統計学的および医学的データが記録される。
【０１６２】
片頭痛患者において使用される疼痛評価ツールは、ＶＲＳ−４である。このツールでは、自己報告がなされ、対象は、自身の疼痛レベルを４区分のスケール（重度、中程度、軽度、なし）で等級付けする必要がある。対象は、安全な携帯型ｅＰＲＯデバイスを使用して、自身の疼痛スコアを入力する。対象は、スクリーニング来訪の際に、携帯型デバイスを使用して、ＶＲＳ−４の履行に関してトレーニングを受ける。
【０１６３】
神経精神医学的患者に対しては、Ａｕｔｉｓｍ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ  Ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎ  Ｓｃａｌｅ、Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｇｌｏｂａｌ  Ｉｍｐｒｅｓｓｉｏｎ−Ｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔ（ＣＧＩ−Ｉ）評価、および／またはＨａｍｉｌｔｏｎ  Ａｎｘｉｅｔｙ  Ｒａｔｉｎｇ  Ｓｃａｌｅなどの、適切な調査評価が使用される。
【０１６４】
オキシトシン製剤の有効性は、適切な測定ツールで、処置前と比較した投薬後の効果、ならびに効果が生じる時間および効果の持続時間を比較することにより評価される。
【０１６５】
まず、対象を構造的ＭＲＩまたはＣＴ走査にかける。その後、対象に、オキシトシンペプチド製剤を定期的に経鼻投与するが、オキシトシンは、１３Ｎ−オキシトシンに加えて非標識オキシトシンを含有する。１３Ｎ−オキシトシンペプチド製剤を投与した後、対象をＰＥＴによって画像化して、１３Ｎ−オキシトシンの動態および分布を決定する。ＰＥＴ画像を分析して、線量計測値および薬物動態ならびにこれら尺度の薬力学との関係を（有効性に関して）決定する。走査および分析は、上述のとおりに行う。
（実施例５）
１３Ｎ−オキシトシンの合成方法
【０１６６】
以下の実施例では、式（Ｉｂ）の化合物を出発試薬として使用して、カルボキシ末端１３ＮＨ２を含む式（ＩＶ）の１３Ｎ−オキシトシン化合物を合成する方法を記載する。式（Ｉｂ）の化合物を、反応バイアルにおいて、ペンタメチルピペリジン（ＰＭＰ）を含有するジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）−テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）（それぞれ１：９の比）の存在下で０．９当量のＤＥＣＰと共に室温でインキュベートして、式（ＩＩｂ）の化合物を生成した。サイクロトロンにおいて、液体ターゲット（［１６Ｏ（ｐ，α）１３Ｎ］）へのプロトン照射によって１３ＮＨ３を発生させ、ヘリウム流を伴うＴｅｆｌｏｎ管材料を通して、無希釈ＮａＯＨを含有するガラスバイアルに移した。放出された気体１３ＮＨ３を、室温で、式（ＩＩｂ）の化合物を含有する反応バイアルに、シリンジによって生じさせた陽圧によって手作業で移して、Ｎ−Ｂｏｃ保護された式（ＩＩＩｂ）の化合物を得た。Ｎ−Ｂｏｃ保護された式（ＩＩＩｂ）の化合物を、４Ｍ  ＨＣｌ／ジオキサンを使用して５０℃で２．５分間脱保護して、式（ＩＶ）の１３Ｎ−オキシトシン化合物の粗調製物を得た。
【０１６７】
式（ＩＶ）の１３Ｎ−オキシトシン化合物の粗調製物を、多段階の固相抽出（ＳＰＥ）プロトコールを使用して精製して、試薬、有機溶媒、および前駆体を除去した。第１のステップでは、式（ＩＶ）の１３Ｎ−オキシトシン化合物の粗調製物を希釈したものを、Ｃ１８  Ｓｅｐ−ｐａｋカートリッジにかけ、有機溶媒および試薬が溶出液中に流れるのを可能にした一方、１３Ｎ−オキシトシンおよび前駆体は、カートリッジの中に保持された。第２のステップでは、水性イオン対試薬を含むアセトニトリルの２０％溶液をかけることにより、１３Ｎ−オキシトシンをカートリッジから溶離させ、１３Ｎ−オキシトシンを含有する溶出液を収集した。この溶出液を希釈し、第２のＣ１８  Ｓｅｐ−ｐａｋカートリッジにかけた後、Ｈ２Ｏで洗浄して、アセトニトリルおよびイオン対試薬を除去した。最後に、ＥｔＯＨを用いて１３Ｎ−オキシトシンをカートリッジから溶離させ、精製された１３Ｎ−オキシトシンを含有する溶出液を収集した。
【表１】
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【図１】
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【図２】
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【図３】
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【国際調査報告】
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