(57)【要約】【構成】細胞培養用などのバイオプロセシング用の装置を提供するものである。この装置は細胞を有するチャンバー、および細胞の温度調節を行うチャンバーを有するバイオリアクターを有する。一部の実施態様では、バイオリアクターに冷凍機を接続し、チャンバー内の細胞を冷凍し、また加熱器を設けて、細胞を能動的に融解する。以上に対応する方法に関する。【選択図】図１
2021521797.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
細胞を有する第１チャンバー、および
この第１チャンバー内の細胞の温度制御を行う第２チャンバーを有することを特徴とするバイオリアクター。
【請求項２】
前記第２チャンバーが、前記バイオリアクターに接続した冷凍機を有する請求項１に記載のバイオリアクター。
【請求項３】
前記第２チャンバーが、前記第１チャンバーを取り囲むジャケットを有する請求項１に記載のバイオリアクター。
【請求項４】
前記ジャケットが、冷却した流体を受け取る入口および出口を有する請求項３に記載のバイオリアクター。
【請求項５】
前記ジャケットが、冷却した流体をこのジャケット内で循環させるパイプを有する請求項３に記載のバイオリアクター。
【請求項６】
前記ジャケットが、伝熱性流体を有する請求項５に記載のバイオリアクター。
【請求項７】
前記ジャケットが、冷却した流体を有する袋体を有し、これが前記第１チャンバーの壁部に接触する請求項３に記載のバイオリアクター。
【請求項８】
前記袋体が入口および出口を有する請求項７に記載のバイオリアクター。
【請求項９】
前記ジャケットが着脱可能なスリーブを有する請求項２に記載のバイオリアクター。
【請求項１０】
前記冷凍機が、流体を冷却する冷却装置、およびこの流体を循環させるポンプを有する請求項２に記載のバイオリアクター。
【請求項１１】
さらに、前記バイオリアクターを加熱する加熱器を有する請求項１に記載のバイオリアクター。
【請求項１２】
前記加熱器が、前記バイオリアクターを少なくとも部分的に受け取るようになっている請求項１１に記載のバイオリアクター。
【請求項１３】
前記加熱器が導電性ブロックを有し、このブロックに加熱要素を設けた請求項１１に記載のバイオリアクター。
【請求項１４】
前記加熱器を前記バイオリアクターに組み込んだ請求項１１に記載のバイオリアクター。
【請求項１５】
前記バイオリアクターの壁部内に少なくとも部分的に前記加熱器を設けた請求項１４に記載のバイオリアクター。
【請求項１６】
前記加熱器が、前記壁部内にワイヤを有し、このワイヤを電源に接続した請求項１５に記載のバイオリアクター。
【請求項１７】
前記加熱器が、前記壁部内にワイヤを有し、このワイヤを加熱された流体源に接続した請求項１５に記載のバイオリアクター。
【請求項１８】
前記バイオリアクターが、モジュール式バイオリアクターを有する請求項１に記載のバイオリアクター。
【請求項１９】
前記バイオリアクターが、構造化固定床を有する請求項１に記載のバイオリアクター。
【請求項２０】
前記の構造化固定床が、螺旋状床を有する請求項１９に記載のバイオリアクター。
【請求項２１】
細胞を有する液体を有するチャンバーを有するバイオリアクターを使用するバイオプロセシング方法であって、
前記バイオリアクター内の前記細胞を冷凍することを特徴とするバイオプロセシング方法。
【請求項２２】
前記冷凍工程で、冷却した流体が前記チャンバーと熱的連通するようにこれを配置する請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
前記の冷却した流体が気体を有する請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記配置工程で、前記冷却した流体を前記バイオリアクターのジャケットに送り出す請求項２２に記載の方法。
【請求項２５】
前記連絡工程で、前記の冷却した流体を前記チャンバーの外にあるパイプに送り出す請求項２２に記載の方法。
【請求項２６】
さらに、熱伝導性液体に少なくとも部分的に前記パイプを浸漬する工程を有する請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
前記配置工程で、前記チャンバーに対して外部にあるバッグに前記冷却した流体を送り出す請求項２２に記載の方法。
【請求項２８】
前記配置工程で、前記チャンバーに隣接する前記バイオリアクターの壁部に接触するパイプに前記の冷却した流体を送り出す請求項２２に記載の方法。
【請求項２９】
前記配置工程で、前記チャンバーに隣接する前記バイオリアクターの壁部に接触するバッグに前記の冷却した流体を送り出す請求項２２に記載の方法。
【請求項３０】
前記冷凍工程で、低温気体を前記チャンバーに送り出す請求項２２に記載の方法。
【請求項３１】
さらに、前記冷凍後に前記細胞を加熱する工程を有する請求項２２〜３０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３２】
前記加熱工程で、前記バイオリアクターを少なくとも部分的に加熱器内に配置する請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
前記加熱工程で、前記チャンバーの壁部を加熱する請求項３１に記載の方法。
【請求項３４】
前記壁部の加熱時に、ワイヤまたは前記壁部内に給電する請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
前記壁部の加熱時に、前記壁部内の流路に加熱された流体を供給する請求項３３に記載の方法。
【請求項３６】
さらに、前記加熱工程時に前記チャンバーの温度をモニターする工程を有する請求項３１に記載の方法。
【請求項３７】
さらに、前記冷凍工程に先立って前記細胞内に生成物を発生し、
前記細胞を解凍し、そして
前記生成物を回収する請求項２２に記載の方法。
【請求項３８】
さらに、前記冷凍工程時に前記チャンバーの温度をモニターする工程を有する請求項２２に記載の方法。
【請求項３９】
前記冷凍工程で、予め冷却したスリーブを前記バイオリアクターに被せる請求項２２に記載の方法。
【請求項４０】
細胞を有するチャンバーを有するバイオリアクターを使用するバイオプロセシング方法において、
前記細胞内に生成物を発生し、
前記細胞を冷凍し、
前記細胞を解凍し、そして
前記生成物を回収することを特徴とするバイオプロセシング方法。
【請求項４１】
請求項４０に記載の方法を使用して得た生成物。
【請求項４２】
細胞を有するバイオリアクター、および
これら細胞を冷凍する手段を有することを特徴とする装置。
【請求項４３】
さらに、前記細胞を解凍する手段を有する請求項４２に記載の装置。
【請求項４４】
細胞を有するチャンバーを有するバイオリアクター、および
前記バイオリアクターに接続され、前記チャンバー内の前記細胞を冷凍する冷凍機を有することを特徴とする装置。
【請求項４５】
前記冷凍機が、前記バイオリアクターのチャンバーを取り囲むジャケットを有する請求項４４に記載の装置。
【請求項４６】
前記ジャケットが、冷却している流体を受け取る入口および出口を有する請求項４５に記載の装置。
【請求項４７】
前記ジャケットが、このジャケット内部に冷却している流体を循環させるパイプを有する請求項４５に記載の装置。
【請求項４８】
前記ジャケットが伝熱性流体を有する請求項４７に記載の装置。
【請求項４９】
前記ジャケットが袋体を有し、この袋体が前記チャンバーの壁部に接触する冷却している流体を有する請求項４５に記載の装置。
【請求項５０】
前記袋体が入口および出口を有する請求項４９に記載の装置。
【請求項５１】
前記ジャケットが着脱可能なスリーブを有する請求項４５に記載の装置。
【請求項５２】
冷凍機が流体を冷却する冷却機、およびこの流体を循環させるポンプを有する請求項４４に記載の装置。
【請求項５３】
前記冷凍機が、気体を前記チャンバーに送り、前記細胞を冷凍するようになっている請求項４４に記載の装置。
【請求項５４】
さらに、前記チャンバーへ送るのに先立って前記気体を殺菌する殺菌フィルターを有する請求項５３に記載の装置。
【請求項５５】
さらに、前記チャンバーへ送るのに先立って前記気体を乾燥する脱水機を有する請求項５３に記載の装置。
【請求項５６】
さらに、前記バイオリアクターを加熱する加熱器を有する請求項４４に記載の装置。
【請求項５７】
前記加熱器が前記バイオリアクターを少なくとも部分的に受け取るようになっている請求項５６に記載の装置。
【請求項５８】
前記加熱器が導電性ブロックを有し、このブロックに加熱要素を加えた請求項５６に記載の装置。
【請求項５９】
前記加熱器を前記バイオリアクターに組み込んだ請求項５６に記載の装置。
【請求項６０】
前記バイオリアクターの壁部内に少なくとも部分的に前記加熱器を設けた請求項５６に記載の装置。
【請求項６１】
前記加熱器が前記壁部内にワイヤを有し、このワイヤを電源に接続した請求項６０に記載の装置。
【請求項６２】
前記加熱器を前記壁部内に流路を有し、この流路を加熱された流体源に接続する請求項６０に記載の装置。
【請求項６３】
前記バイオリアクターがモジュール式バイオリアクターを有する請求項４４に記載の装置。
【請求項６４】
前記バイオリアクターが構造化固定床を有する請求項４４に記載の装置。
【請求項６５】
前記の構造化固定床が螺旋状床を有する請求項６４に記載の装置。
【請求項６６】
一つかそれ以上の冷凍細胞を有する細胞培養床を有することを特徴とする装置。
【請求項６７】
前記細胞培養床が繊維基体を有する請求項６６に記載の装置。
【請求項６８】
前記細胞培養層が構造化固定床を有する請求項６６に記載の装置。
【請求項６９】
基底部、
この基底部に接続し、細胞培養用の第１流体を受け取る第１チャンバーを形成するようになった第１壁部、および
前記基底部に接続し、第２流体を受け取り、前記第１チャンバーの温度を制御する第２壁部を有することを特徴とするモジュール式バイオリアクター。
【請求項７０】
前記第１壁部が内側壁を有し、前記第２壁部が外側壁を有する請求項６９に記載のモジュール式バイオリアクター。
【請求項７１】
前記第２壁の高さが前記第１チャンバーの高さに対応する請求項６９に記載のモジュール式バイオリアクター。
【請求項７２】
さらに、前記第１チャンバー内の前記細胞を冷凍する冷凍機を有する請求項６９に記載のモジュール式バイオリアクター。
【請求項７３】
さらに、前記第１チャンバー内の一つかそれ以上の細胞が冷凍する十分な量まで前記第２流体を冷却する冷却機を有する請求項６９に記載のモジュール式バイオリアクター。
【請求項７４】
さらに、前記第２チャンバー内に配置する前記第２流体を有する袋体を有する請求項６９に記載のモジュール式バイオリアクター。
【請求項７５】
前記第１壁部が第２流体を受け取る入口を有し、この第２流体を放出する出口を有する請求項６９に記載のモジュール式バイオリアクター。
【請求項７６】
前記第２チャンバーが前記第２流体を受け取るコイルを有する請求項６９に記載のモジュール式バイオリアクター。
【請求項７７】
細胞を培養する第１チャンバー、および
この第１チャンバーの温度制御を行う第２チャンバーであって、凍結防止剤を有する液体を有する第２チャンバーを有することを特徴とするバイオリアクター。
【発明の詳細な説明】
【関連出願】
【０００１】
本出願は、米国仮特許出願第６２/６６１，４１３号の優先権を主張する出願であり、この明細書を援用する出願である。また、米国特許出願公開第２０１８/０２８２６７８号、国際特許出願ＰＣＴ/ＥＰ２０１８/０７６３５４号、米国仮特許出願第６２/７１１，０７０号および米国仮特許出願第６２/７２５，５４５号の開示内容もここに援用するものとする。
【技術分野】
【０００２】
本発明は、全体として細胞培養分野に関し、具体的には細胞生成物の回収率を改善する冷凍/融解性を備えたバイオリアクターおよび対応する方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
細胞培養ではバイオリアクターを利用することが多い。多くの場合、細胞が生成する目的の最終生成物（産生物）を実質的にすべて回収できない点が問題である。これは、細胞内に生成物の実質的部分（５０％など）が取り込まれたままになっているためであり、また少なくともバイオリアクターを開けなければ回収できず、さもなければ生成物は一体性を失い、無価値になりかねないためである。
【０００４】
従って、上記問題のひとつかそれ以上を解決できる改良バイオリアクターおよび方法が求められ、今まで発見されていないバイオリアクターおよび方法が求められている。このようなバイオリアクターおよび方法があれば、バイオプロセシング操作の完了時に通常は細胞内に取り込まれたままになっている、対象となる生成物の回収率が高くなると考えられる。
【発明の概要】
【０００５】
本発明の一態様に係るバイオリアクターは、  細胞を有する第１チャンバー、およびこの第１チャンバー内の細胞の温度制御を行う第２チャンバーを有する。一部の実施態様では、上記第２チャンバーが上記バイオリアクターに接続した冷凍機を有する。
【０００６】
一部の実施態様では、上記第２チャンバーが上記第１チャンバーを取り囲むジャケットを有する。上記ジャケットが、冷却した流体を受け取る入口および出口を有する。この流体は、バイオリアクター内の細胞のいずれか、あるいはすべてが冷凍する程度には十分な低温にある。一部の実施態様では、上記ジャケットが冷却した流体をこのジャケット内で循環させるパイプを有する。さらに、上記ジャケットは伝熱性流体を有する。上記ジャケットは、第１チャンバーの壁部に接触する冷却した流体を含む袋体を有し、この袋体は適宜入口および出口を有することができる。上記ジャケットは着脱可能なスリーブを有することができる。一部の実施態様では、上記冷凍機は流体を冷却する冷却装置、およびこの流体を循環させるポンプを有する。
【０００７】
さらに、上記バイオリアクターはこれを加熱する加熱器を有する。一部の実施態様では、上記加熱器は上記バイオリアクターを少なくとも部分的に受け取る構成を有する。一部の実施態様では、上記加熱器は導電性ブロックを有し、このブロックに加熱要素を設ける。一部の実施態様では、例えば上記バイオリアクターの壁部の少なくとも一部に設けるなどによって上記加熱器を上記バイオリアクターに組み込む。上記加熱器が上記壁部内にワイヤを有し、このワイヤを電源に接続し、および/またはこの加熱器が上記壁部内に流路を有し、これを加熱された流体源に接続することができる。
【０００８】
一部の実施態様では、上記バイオリアクターはモジュール式バイオリアクターを有する。一部の実施態様では、上記バイオリアクターは構造化固定床（ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｄ  ｆｉｘｅｄ  ｂｅｄ）を有する。一部の実施態様では、上記の構造化固定床は螺旋状床を有する。
【０００９】
本発明の別な態様は、細胞を有する液体を有するチャンバーを有するバイオリアクターを使用するバイオプロセシング方法に関する。本発明方法では、上記バイオリアクター内で上記細胞を冷凍する。
【００１０】
一部の実施態様において、上記冷凍工程は、冷却した流体を上記チャンバーと熱的連通するようにこれを配置する。上記の冷却した流体は気体を有することができる。上記配置工程で、上記冷却した流体を上記バイオリアクターのジャケットに送ることができる。上記配置工程で、上記の冷却した流体を上記チャンバーの外にあるパイプに送ることができる。本発明方法では、熱伝導性液体に少なくとも部分的に上記パイプを浸漬する工程を実施することができる。
【００１１】
一部の実施態様では、上記配置工程で、上記チャンバーに対して外部にあるバッグに上記冷却した流体を送る。この配置工程では、上記チャンバーに隣接する上記バイオリアクターの壁部に接触するパイプに上記の冷却した流体を送ることができる。上記配置工程で、上記チャンバーに隣接する上記バイオリアクターの壁部に接触するバッグに上記冷却した流体を送ることができる。一部の実施態様では、上記冷凍工程で、低温気体を上記チャンバーに送る。
【００１２】
一部の実施態様では、さらに、本方法は上記冷凍後に上記細胞を加熱する工程を有す。
上記加熱工程では、上記バイオリアクターを少なくとも部分的に加熱器内に配置することができる。一部の実施態様では、上記加熱工程で、上記チャンバーの壁部を加熱することができる。上記壁部の加熱時に、ワイヤまたは上記壁部内に給電することができ、および/またはさらに本発明方法では、適宜上記壁部の加熱時に、上記壁部内の流路に加熱された流体を供給することができる。本発明方法では、適宜、上記加熱工程時に上記チャンバーの温度をモニターする工程を有し、および/または上記冷凍工程時に上記チャンバーの温度をモニターすることができる。
【００１３】
本発明の一部の実施態様では、さらに、上記冷凍工程に先立って上記細胞内に生成物を発生する。次に、本発明方法では、上記細胞を融解し、そして上記生成物を回収することができる。上記冷凍工程では、例えば上記チャンバーの外壁に隣接するかその周囲に、予め冷却したスリーブを上記バイオリアクターに被せることができる。
【００１４】
本発明の別な態様は、細胞を有するチャンバーを有するバイオリアクターを使用するバイオプロセシング方法に関する。本発明方法では、上記細胞内に生成物を生成し、細胞を冷凍し、上記細胞を融解し、そして上記生成物を回収する。本発明は上記方法を使用して得た生成物にも関する。
【００１５】
本発明は、細胞を有するバイオリアクター、およびこれら細胞を冷凍する手段を有する装置にも関する。さらに、本装置は上記細胞を融解する手段を有する。
【００１６】
本発明のさらに別な態様は、細胞を有するチャンバーを有するバイオリアクター、および上記バイオリアクターに接続され、上記チャンバー内の上記細胞を冷凍する冷凍機を有する装置に関する。
【００１７】
一部の実施態様では、上記冷凍機が、上記バイオリアクターのチャンバーを少なくとも部分的に取り囲むジャケットを有する。一部の実施態様では、上記ジャケットは冷却している受け取る入口および出口を有する。上記ジャケットはこのジャケット内部に冷却している流体を循環させるパイプを有することができ、また上記ジャケットは伝熱性流体を有することができる。
【００１８】
上記ジャケットが袋体を有し、この袋体は上記チャンバーの壁部に接触する冷却している流体を有することができる。このジャケットは着脱可能なスリーブを有することができる。
【００１９】
一部の実施態様では、上記ジャケットは着脱可能なスリーブを有する。一部の実施態様では、冷凍機は流体を冷却する冷却機、およびこの流体を循環させるポンプを有する。上記冷凍機は、気体を上記チャンバーに送り、上記細胞を冷凍するように構成することができる。上記チャンバーへの送り出しに先立って上記気体を殺菌する殺菌フィルターを設けることができる。さらに、上記チャンバーへの送り出しに先立って上記気体を乾燥する脱水機を設けることもできる。
【００２０】
一部の実施態様では、本装置はさらに上記バイオリアクターを加熱する加熱器を有する。上記加熱器は上記バイオリアクターを少なくとも部分的に受け取るように構成することができる。上記加熱器は導電性ブロックを有し、このブロックに加熱要素を加えることができ、あるいは上記バイオリアクターに組み込むことができる。（このためには、上記バイオリアクターの壁部内に少なくとも部分的に設けてもよく、あるいはこの壁部内にワイヤとしても設けてもよく、このワイヤを電源または壁部内の流路、そして加熱された流体源に接続してもよい）。
【００２１】
一部の実施態様では、上記バイオリアクターがモジュール式バイオリアクターを有す。一部の実施態様では、上記バイオリアクターは、螺旋状固定床などの構造化固定床を有する。
【００２２】
本発明のさらに別な態様は、一つかそれ以上の冷凍細胞を有する細胞培養床を有する装置に関する。上記細胞培養床は繊維基体を有することができる。上記細胞培養層は構造化固定床を有することができる。
【００２３】
本発明のさらに別な態様は、基底部、この基底部に接続し、細胞培養用の第１流体を受け取る第１チャンバーを形成するようになった第１壁部、および上記基底部に接続し、第２流体を受け取り、上記第１チャンバーの温度を制御する第２壁部を有するモジュール式バイオリアクターに関する。
【００２４】
一部の実施態様では、上記第１壁部が内側壁を有し、上記第２壁部が外側壁を有する。
上記第２壁の高さは上記第１チャンバーの高さに対応していればよい。上記第１チャンバー内の上記細胞を冷凍する冷凍機を設けることも可能である。さらに、本装置は、上記第１チャンバー内の一つかそれ以上の細胞が冷凍する十分な量まで上記第２流体を冷却する冷却機を有することができる。さらに、袋体には上記第２チャンバー内に配置する上記第２流体を設けることができる。上記第１壁部は第２流体を受け取る入口を有し、この第２流体を放出する出口を有することができる。上記第２チャンバーは上記第２流体を受け取るコイルを有することができる。
【００２５】
本発明のさらに別な態様は、細胞を培養する第１チャンバー、およびこの第１チャンバーの温度制御を行う第２チャンバーであって、凍結防止剤を含む液体を有する第２チャンバーを有するバイオリアクターに関する。
【図面の簡単な説明】
【００２６】
特許請求の範囲に、本発明の具体的な態様の新規特徴を記載してある。本発明の特徴および作用効果については、発明の原理を記載する例示的な実施態様を記載する以下の詳細な説明により了解できるはずである。なお、以下に添付図面を説明する。
【００２７】
【図１】図１は、本発明に従って構成したバイオリアクターの第１実施態様を示す斜視図である。
【図２Ａ−２Ｃ】図２Ａ、図２Ｂおよび図２Ｃは、図１のバイオリアクターの一つの考えられる使用環境を示す図である。
【図３】図３は、いくつかの拡大図を含む、図１のバイオリアクターを示す斜視図である。
【図３Ａ−３Ｃ】図３Ａ、図３Ｂおよび図３Ｃは、本発明バイオリアクターのいずれかにおける細胞培養用の構造化固定床を形成する基材を示す図である。
【図４】図４は、本発明のバイオリアクターの第２実施態様を示す横断面図である。
【図５】図５は、図４のバイオリアクターの別な態様の一部を示す一部を切り取った図面である。
【図６Ａ−６Ｂ】図６Ａおよび図６Ｂは、バイオリアクターのさらに別な実施態様を示す横断面図である。
【図７−１０】図７、図８、図９および図１０は、冷凍融解性をバイオリアクターに付与する異なる方法を示す横断面図である。
【図１１】図１１は、冷凍融解性を備えた別な実施態様を示す概略図である。
【図１２−１６】図１２、図１３、図１４、図１５および図１６は、バイオリアクター、特にその内部の冷凍細胞の加熱または融解を促進させる各種の方法を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００２８】
図１、図２および図３を参照して説明するが、これら図面は本発明の一態様に従って構成した、細胞培養用バイオリアクター１００の一実施態様を示す。一部の実施態様では、バイオリアクター１００は内部区画を形成する外部ケーシングまたはハウジング１１２および内部区画を覆う着脱可能なカバー１１４を有し、このカバーには各種の開口Ｐを設けることができ、これら開口をカバーまたはキャップCで覆い、流体、（散布機などで散布する）気体、プローブ、センサー、サンプラーなどの選択的な導入または取り出しが可能になる。図２Ａ、図２Ｂおよび図２Ｃに示すように、一部の実施態様では、バイオリアクター１００に外部リザーバーおよび（例えば順・逆方向）導管１０４を併用して、流体をバイオリアクター１００に循環させるループを形成することができる。
【００２９】
バイオリアクターハウジング１１２が形成する内部区画内には、いくつかの区画、即ちチャンバーを設け、バイオリアクター１００全体に流体または気体を流すことができる。図３に示すように、一部の実施態様では、チャンバーはバイオリアクター１００の基底部に、あるいはその近くに第１チャンバー１１６を有していればよい。一部の実施態様では、この第１チャンバー１１６はバイオリアクター１００内に流体を流す撹拌機を有していればよい。一部の実施態様では、撹拌機は“ドロップイン式（ｄｒｏｐ−ｉｎ）の回転可能な非接触磁気羽根車（ｉｍｐｅｌｌｅｒ）１１８の形を取ることができる（後述するように、この羽根車は、流体を出し入れする複数の開口を有する容器（図示省略）内に取り込まれるか、あるいは収容することができる）。一部の実施態様では、撹拌の結果として、流体が上昇流（図２に矢印Ａで示す）として流れ、バイオリアクター１００の外側部分または周辺部分にそって環状チャンバー１２０に流入する。一部の実施態様では、バイオリアクター１００内には構造化螺旋状床１２２などの固定床を収容し、使用時、この固定床が増殖している細胞を収容し、かつ保持することができる。なお、本発明のバイオリアクターは固定床、充填床や流動床などを有する任意型式の細胞培養構成と併用することができる。図３に示すように、一部の実施態様では、螺旋状床１２２は、使用時点でチャンバー１２０に落とし込めるか、配置することができるカートリッジの形を取ることができる。一部の実施態様では、螺旋状床１２２は、搬送前に工場などでの製造時にチャンバー内に予め据え付けることが可能である。
【００３０】
一部の実施態様では、チャンバー１２０から流出した流体を螺旋状床１２２の一方の側（上側）に回し、ここで流体を（酸素や窒素などの）気体に暴露する。一部の実施態様では、流体は半径方向内側に流れ、中央の戻りチャンバー１２６に流入する。一部の実施態様では、中央の戻りチャンバーはそれ自体柱状で、無孔導管または管１２８で形成することができるか、あるいは構造化螺旋状床の中心開口によっても形成することができる。一部の実施態様では、チャンバー１２６が流体を第１チャンバー１１６（リターン矢印Ｒ）に戻し、バイオリアクター１００内を再循環する結果、連続ループが発生する（この例では下から上に）。一部の実施態様では、センサー、例えば温度プローブまたはセンサーＴを配設し、チャンバー１２６内の流体の温度を検出することができる。一部の実施態様では、（ｐＨ、酸素、溶存酸素、温度などを検出する）補助的なセンサーを、流体がチャンバー１１６に流入（または再流入）する前の位置に設けることも可能である。
【００３１】
図３Ａに、本発明のバイオリアクターの構造化固定床、特に螺旋状床１２２（または巻き付き式床）として使用する基材の一実施態様を示す。一部の実施態様では、メッシュ構造から形成する一つかそれ以上のスペーサー層１２２ｂに隣接し、一つかそれ以上の固定化層１２２ａを形成する。一部の実施態様では、場合によっては層化を何度も繰り返し、層を積層してもよい。一部の実施態様では、スペーサー層１２２ｂ内に含まれるメッシュ構造が細胞用の曲がりくねった流路を形成し、流体流れが半径方向外向きに固定化層１２２ａに流入し（固定化層１２２ａの基材に懸濁した、あるいは取り込まれた図３Ｂの細胞Ｌを参照）、細胞培養物が本願請求項に記載した発明を構成することができる。このように構成した結果、構造化固定床内では、細胞の均一性を維持できる。一部の実施態様では、このような曲がりくねった流路を形成する他のスペーサー構造も使用できる。一部の実施態様では、図３Ａに示すように、次に軸またはコア（例えば、多成分部分に設けることができる導管１２８）にそって構造化固定床を螺旋形に、あるいは同心円形に転動できる。一部の実施態様では、構造化固定床の層を固く巻き付ける。一部の実施態様では、コアの直径、層の長さおよび/または量が最終的に装置（アセンブリー）またはマトリックスのサイズを決定することになる。一部の実施態様では、層１２２ａ、１２２ｂそれぞれの厚さは０．１〜５ｍｍ、０．０１〜１０ｍｍ、あるいは０．００１〜１５ｍｍであればよい。
【００３２】
バイオリアクター２００の第２実施態様を図４、図５、図６Ａおよび図６Ｂを参照して説明する。一部の実施態様では、バイオリアクター２００は第１〜第５チャンバー２１６、２２０、２２４、２２６、２２８を有し、これらによって流体を上記のように循環させる。この実施態様では、場合に応じて、ハウジング２１２は複数のモジュール部で構成する。一部の実施態様では、モジュール部は基底部２３０、一つかそれ以上の中間部２５０およびカバー部２７０を有する。一部の実施態様では、これらモジュール部２３０、２５０、２７０を流密関係で相互作用させ、チャンバー２１６、２２０、２２４、２２６、２２８でバイオリアクアー２００を構成する。
【００３３】
一部の実施態様では、図４から恐らくはベストな理解が得られるように、基底部２３０は図示のように溝２３２の形をとる周辺コネクターを有し、中間部２５０の一つから突き出たタング２５２などの対応する周辺コネクターを受け取り、これと係合する。一部の実施態様では、内部的に、基底部２３０が直立した壁２３４を有し、これが（図示を省略した）流体撹拌機を受け取る第１チャンバー２１６になる。一部の実施態様では、直立壁２３４は開口または流路を有し、これらによって流体が基底部２３０の外側部分に半径方向に流入する。この外側部分が次の、即ち第２チャンバー２２０になる。一部の実施態様では、基底部２３０が存在する結果、流れが垂直に再配向するため、乱流が発生し、これがバイオリアクター全体における流体の混合および均一性を改善し、従って細胞培養プロセスも改善する。
【００３４】
２つの中間部２５０ａ、２５０ｂは図示のように積層し、第１（下）部分２５０ａの周辺コネクター（溝２５４）が第２（上）部分２５０ｂの対応するコネクター（タング２５２）に係合する。図４に示すように、一部の実施態様では、各中間部２５０ａ、２５０ｂは、タング２５２および溝２５４をそれぞれ支持する外側壁２５６を有する。一部の実施態様では、半径方向内向きに、内壁２５８が内側コネクターおよび外側コネクターを支持し、これらコネクターは直立したレッジ２６０、２６２の形を取ることができ、配管２３６の対応する端部を受け取り、従って第５チャンバー、即ち戻りチャンバー２２８の外周を形成することになる
【００３５】
一部の実施態様では、第１の、即ち下中間部２５０ａも細長い円弧状スロット２６４などの開口を有することができ、これら開口が壁部２３４から突き出た直立突出部２３４ａなどの基底部２３０のコネクターを少なくとも部分的に受け取る。一部の実施態様では、内部レッジ４６６が中間部２５０ａ、２５０ｂ内に中心開口２６６ａを形成するため、流体が壁部２３４によって形成する内側カラムに流入するだけでなく、温度センサー、浸漬管などを受け取ることができる。温度センサーなどは流体の固定床からの流出後に設けられる。一部の実施態様では、第２中間部２５０ｂは同様に交換可能性が改善するように構成することができ、この場合、第２中間部、即ち上中間部２５０ｂ内に開口（スロット２６４）があるため、既述したように、第５チャンバー、即ち戻りチャンバー２２８内に流体の薄い降下流または膜が発生する。
【００３６】
一部の実施態様では、内壁２５６と外壁２５８との間に複数の支持体２６８が延在する。一部の実施態様では、これら支持体２６８は半径方向に延在する支持部２６８ａおよび少なくとも一つの円周方向に延在する支持部２６８ｂを有し、これらが一体化して多孔性か、あるいは網目化したプレート状構造体になるため、流体が流れる（なお、この構造体はこの実施態様であれ、どの実施態様でもスクリーン、ネット、グリッドやその他の骨格構造であればよく、剛性、半剛性や可撓性を有するものであればよい）。実際、これら支持体２６８については、流体が通過する開口が形成するオープンスペースの量を最大化することによって、固定床の流体流れを強化できるように設計することができる。一部の実施態様では、細胞を培養するために、壁部２３４に巻き付けた螺旋状床（図示省略）などの固定床は、中間部２５０ａと２５０ｂとの間に設けられたチャンバー２２４に設けることができる。一部の実施態様は、上中間部２５０ｂから来る流体が部分的にカバー部２７０によって形成する第４チャンバー２２６に流入でき、第１チャンバー２１６に戻って再循環する前に、第５チャンバー２２８を形成するカラムに流入する。
【００３７】
一部の実施態様では、カバー部２７０はタング２７２などのコネクターを有し、これが第２中間部２５０ｂの対応するコネクター（溝２５４）に嵌合する。一部の実施態様では、カバー２７０も着脱可能なキャップまたは蓋２７６を受け取る直立壁２７４などの第１受け取り体、即ち中心受け取り体を有する。これらキャップまたは蓋は、流体やその他の物質をバイオリアクター４００（および第５チャンバー２２８）に運ぶ導管に接続する各種のポートＰを有する。一部の実施態様では、図示のようにキャップまたは蓋２７６も温度センサーやプローブＴだけでなくその他のセンサーを有し、添加剤を添加し、あるいはバイオリアクター２００から物質を取り出し、あるいは生成物製造プロセスを調節することができる。また、一部の実施態様では、見て取れるようにキャップまたは蓋２７６については、チャンバー２２８によって戻り流れに対応して検出を行うか、あるいは流体サンプリングを行うことができる位置に配置できる。一部の実施態様では、直立壁２７７などの第２の外周に位置する受け取り体も第２キャップまたは蓋２７８に接続し、センサーを受け取るか、あるいはバイオリアクターからの（培養サンプルを始めとする）物質を付着させるか、あるいは取り出すことができる。特にこの受け取り体の周辺部分は、細胞培養が終了する第３チャンバー２２６を有する。一部の実施態様では、キャップまたは蓋２７６、２７８については、異なる形式のポートＰを有していてもよく、あるいはサイズ/形状が異なっていてもよく、あるいは相互交換を容易にするために同一なものであってもよい。
【００３８】
一部の実施態様では、にかわなどの接着剤を接続部に使用して、構造体を一体化することができる。一部の実施態様では、ネジ式接続、あるいは（例えば差し込み式などの）ロック接続も利用でき、流密シールを維持し、漏出を防止し、かつ無菌状態を確実に維持するようにしてもよい。一部の実施態様では、モジュール部２３０、２５０、２７０を使用する構成であるため、バイオリアクター２００を現場で迅速に予め組み立て、あるいは組立を行うか、あるいは構成することができ、また潜在的可能性として解体を同様な迅速性をもって行うことができる。補助的な配管を付加して高さのある壁部２３４または中間部２５０を形成することが容易なため、固定床の設置数またはバイオリアクター２００の高さについて、用途に応じて個々の必要性やプロセス設定に合わせて調節することができる。
【００３９】
一部の実施態様では、チャンバーにおける一つの固定床から隣接固定床への流れは直接的であるか、あるいは妨害を受けない。一部の実施態様では、固定床を受け取る外側チャンバー２２４は、そこに存在する構造化固定床、構造化されていない固定床やその他の固定床などの複数の固定床を介して連続的な流路を作り出す。一部の実施態様では、この連続的で、妨害のない流れによって、モジュールが実際にあたかも単一の固定床のように作用し、均一性が高くなるため、細胞培養プロセスの予測可能性および特質が向上する。ここで、均一性とは、固定床全体の細胞分布が均一であるか、あるいは多少とも等しい広がりをもつことを意味する。
【００４０】
図６Ａおよび図６Ｂに、固定床２９６を有するモジュール式バイオリアクター２００の別な実施態様を示す。一部の実施態様では、基底部２３０およびカバー部２７０が外側ケーシング２９２に接続するため、中間部２５０の外周に対してギャップまたはスペースが発生する。図から理解できるように、外側ケーシング２９２の高さは細胞を培養する第３チャンバー２２６の高さ全体に実質的に等しい。あるいは、外側ケーシングを個々のチャンバーに分割し、分割部分を細胞培養チャンバーの対応する各部分に対応させてもよい。一部の実施態様では、ギャップＧまたはスペースを利用して、加熱効果または冷却効果によって、中間部２５０に対応する固定床の温度を制御することができる。あるいは、ギャップＧまたはスペースについては、固定床内の培養中の細胞に近く、温度変化の影響を受けやすいバイオリアクターの中間領域の壁部の断熱に利用してもよい。この断熱によって、バイオリアクターの基底部２３０の底部に加えられる熱が固定床（複数の場合もある）２９６内に付着している細胞に伝わることがなくなる。
【００４１】
図６Ａには、本発明の実施態様のいずれにも適用することができる、バイオリアクター内における散布（ｓｐａｒｇｉｎｇ）の考えられる使用形態も示す。図示の構成では、この散布は第５チャンバー２２８に設けた散布機２９４によって行う。この結果発生する泡が、戻る流体流れに対して上向きに逆流する。
【００４２】
これら図面には、中間部２５０は内部配管２３６に係合できることも示すが、これら配管は流体不透過性であるため、チャンバー２２８が流れを基底部２３０に戻し、ここで撹拌を行い、固定床に下から戻して、上昇させる（これは本発明実施態様のいずれにも該当する）。これら配管２３６については、一つの配管が図示のように存在する各固定床２９６に対応し、２つの中間部２５０が各配管２３６に係合（例えば、一つが下から、そして一つが上から係合する）するように配置することができる。なお、この実施態様あるいはその他の実施態様では、螺旋状床の最も内側の螺旋外皮などの固定床の最も内側の表面においても、流体に対して不透過性になるようにするか、あるいは状態調整を行うことによって同様な機能を発揮することができる。例えば、この表面に流体不透過性材や疎水性材を被覆して、固定床（複数の場合もある）内に流体を保持し、かつチャンバー２２８が形成する中心カラム内に明確な戻り流体流れを維持すればよい。
【００４３】
本発明の別な態様では、細胞を処理して対象となる生成物（例えばウイルスや蛋白質など）を生成する（上記バイオリアクター１００、２００か、あるいはその他公知形態のバイオリアクターであればよい）バイオリアクターを使用して、固定床内の細胞を細胞中の液体の凝固点以下の温度（０〜−２０℃の範囲にある温度、より好ましくは約−５〜約−２０℃の範囲にある温度）まで冷凍し、その後（場合によっては加熱を伴う）融解によって冷凍していない状態（たとえば室温）に戻せばよい。この温度サイクルによって、細胞膜が破れ、細胞内部に最終生成物が放出され、これによって対象となる生成物の回収率が向上する。この回収プロセスでは、バイオリアクターの完全性が損なわれることはない。本発明に従って冷凍する前に、バイオリアクターを実質的に排液するため、バイオリアクターが損傷することはない。なお、この損傷は、完全充填を行い、廃液時に冷凍する場合に冷凍液体の膨張により生じることがある。
【００４４】
バイオリアクター３００の実施態様の場合、冷凍機の内部に設けることなく上記“冷凍融解”操作を行うようになっている。なお、大半のバイオリアクターではサイズの制約から、冷凍機の内部に設置しないことは不可能でないにせよかなり難しい。具体的には、バイオリアクター３００は冷凍機に直接接続することができる。この接続の場合、例えば図７、図８、図９、図１０および図１１に示すように、各種の形態で実施可能である。図７を参照して説明すると、バイオリアクター３００は基底部３３０などの複数のモジュール部を有するハウジング３１２、一つかそれ以上の中間部３５０、およびカバー部３７０を有する。細胞培養用の一つかそれ以上のチャンバーを有する少なくとも中間部３５０を取り囲むジャケット３９０を設ける。このジャケット３９０はスペースを形成する円筒形部または環状部を有し、これが冷却した流体と共に対応する冷却機を形成する。この冷却機は、バイオリアクター３００内にあって中間部３５０に対応するチャンバー（複数の場合もある）を熱的に制御するために使用することができる。
【００４５】
ジャケット３９０は携帯式装置、あるいは着脱可能なスリーブの形を取ることができる。この装置またはスリーブの場合、バイオリアクター３００に滑り嵌め、あるいはスナップ嵌めすることができ、従って冷凍が望ましく、それ以外に使用しない場合にも使用することができる。スリーブについては、予め冷却/冷凍してもよく、再使用可能なものでもよく、使い捨て式のものでもよい。
【００４６】
バイオリアクター３００の細胞内での液体の冷凍については、各種の方法で実施することができる。一つの実施例では、ジャケット３９０（図８の入口３９２および出口３９４を参照）が覆うスペースに（低温空気などの）流体を送り、これをバイオリアクター３００の外面に直接接触させる。入口および出口に連絡するポンプＭによって流体を送り、気体をジャケット３９０内に連続循環させ、冷却機（ｃｏｏｌｅｒ  ｏｒ  ｃｈｉｌｌｅｒ）Ｎが循環時ジャケット３９０の外部にある流体を冷却する作用を行う。このように、ジャケット３９０、ポンプＭおよび冷却機Ｎが本実施例では冷却機として機能する。
【００４７】
図９に別な選択肢を示すが、ジャケット３９０内の冷却した流体（例えば液体グリコールなどの抗冷凍剤、液体グリコールと混合した水、場合によっては抗菌剤）を受け取る容器を用意する。このためには、ジャケット３９０によって境界が定められたスペース内に、可撓性や剛性を示すパイプ３９６などの一つかそれ以上の冷却導管を設ければよい。設ける各パイプ３９６も入口３９６ａ、３９６ｂ有するため、回路内の流体を冷凍機およびポンプで循環させることができる（図８を参照）。（積層構成における）一つかそれ以上のパイプを使用することは可能であり、こうすると、熱制御の程度を改善でき、またはそれぞれの入出口の位置をずらすことによって想定される“ホット”スポットを回避することができる。パイプ（複数の場合もある）３９６もすぐれたた熱導体として作用するジャケット３９０内の（液体グリコールなどの）流体に浸漬することも可能であるため、熱伝導率を改善でき、また伝熱度も改善する。バイオリアクター３００が円筒形の一般的な場合、パイプ３９６はそれ自体環状であり、バイオリアクター３００を螺旋状に横断する。以下に説明するように、パイプ３９６については、バイオリアクター３００の一つかそれ以上の壁部に組み込むことができる。
【００４８】
パイプ３９６（複数の場合もある）の代わりに、容器は図１０に示す一つかそれ以上の可撓性バッグ３９８などの袋体（ｂｌａｄｄｅｒ）を有することができる。このバッグ３９８も冷却した流体を循環させる入口３９８ａおよび出口３９８ｂを有することができる。バッグ３９８の表面積が広く、可撓性表面も広いことで、中間部３５０の外面との接触面積が広くなるため、伝熱度がすぐれたものになる。ここでも同様に、一般的な円筒形バイオリアクター３００の場合、バッグ３９８は全体として環状形状を与えるため、それぞれの表面は密な熱的な係合状態にあり、冷却の伝達を最大化することができる。あるいは、袋体、即ちバッグ３９８に入口または出口を設けずに、例えば中間部３５０または別な部分などの隣接構造体に加熱システムまたは冷却システムを組み込むことによって温度を制御することも可能である。いずれの場合も、袋体、即ちバッグは冷凍温度変化や循環温度変化に耐性をもつように設計された（ＨＤＰＥやＰＶＣなどの）ポリマー材から形成した多層の可撓性バッグを有することができ、また特定の構成の必要性に従って任意のバイオリアクターのチャンバーの周囲に、あるいは内部に嵌合するように設計することも可能である。
【００４９】
細胞内の、あるいは細胞周囲の液体が冷凍するいずれの場合も、冷却した流体のジャケット３９０への供給を単に停止するだけで、自然な融解が生じる。あるいは、温かい流体をジャケット３９０に供給して、融解過程を促進することも可能である。さらに別な態様では、以下に詳しく説明するように、冷凍した（部分的に冷凍した）細胞の融解操作を促進する加熱器を使用する。この場合には、ジャケット３９０かバイオリアクター３００それ自体に加温流体か緩衝液を添加すればよい。
【００５０】
融解を行うと、一旦冷凍した細胞の細胞膜が分解する。緩衝液などの流体をバイオリアクター３００に導入し、対象となる生成物や物質（ウイルスや蛋白質など）を取り出せばよい。冷凍前に、バイオリアクター３００から少なくとも部分的に排液を行い、これによって付加的な流体（即ち、緩衝液などであるが、この緩衝液についても加温を行い、解凍を促進するこができる）を受ける入れる余地を作り出すことができる。一旦液化すると、ポンプを使用して流体をバイオリアクター３００から保持タンクに送り、その後精製すればよい（融解流体単独でもよく、融解流体と組み合わせてもよい）。
【００５１】
本発明の別な態様について、図１１を参照して説明すると、低温空気などの低温媒体をバイオリアクター５００に送ることによって細胞を冷凍できる。この場合媒体温度は−５℃〜約−２０℃に設定するか、あるいは細胞の一部か全部が冷凍する十分な温度に設定する。図１１に概略を示すように、これは冷凍機５０２を使用して、入口５０４などのポートを介してバイオリアクター５００、およびバイオリアクターチャンバー５００ａに直接低温媒体を送り、細胞を培養し、このさい適宜冷凍機５０２の上流または下流にある殺菌フィルター５０６を使用してもよい。これは、バイオリアクターの外側チャンバーを使用して、流体を受け取り、これを冷凍する上記実施態様とは対照的な実施態様である。温度センサーまたはプローブ５０８を設けて、バイオリアクター５００及び、特に冷凍すべき細胞を有する任意の部分の温度をモニターすることも可能である。
【００５２】
媒体として空気を使用して細胞冷凍を行う場合、適宜脱水を行って、配管内の、そして殺菌フィルター５０６を使用する場合にはこのフィルター内の湿分が凝縮かつ凍結するのを防止し、これら部品が使用できなくなることを防止することができる。場合によっては、図示のように、脱水機５１０を使用して周囲空気を乾燥することによって脱水空気を供給できる。この脱水機としては分子篩、熱交換器やその他の熱源を使用でき、その位置は冷凍機５０２の上流または下流である。さらに、空気については、−２０℃の空気標的温度未満の温度、即ち−３０℃でこれをコイルやその他の源に暴露することによって（冷却を行う前あるいは後に）送るのに先立って乾燥することができる。空気の代わりに他の気体も使用可能である。
【００５３】
上述したように、細胞の冷凍に続いて、細胞を融解するのが望ましい。これについては、対応する冷凍機や冷凍手段から冷気を単に取り出し、待機するだけで受動的にあるいは自然に行うことができる。なお、例えば細胞やバイオリアクターの対応部分またはチャンバーを加温するか加熱するなどによって細胞を能動的に融解することも可能である。
【００５４】
一部の実施態様では、能動的な加熱については、外部から加える、あるいは伝達する熱によって行うことができ、この加熱の各種実施例は図１２〜図１６に示す通りである。図１２の場合、バイオリアクター６０２の熱源または加熱器６０２は伝熱ブロック６０４を有する。このブロック６０４は金属製であり、（基底部などの）バイオリアクター６００の少なくとも一部を受け取ることができるようになっている。ブロック６０４に加熱素子６０６を設けるが、これは図１３に示すように、ポリマーフィルム６０８などからなる可撓性ストリップからなり、この表面または中に電気ワイヤ６１０を取り付け（膠やカプセル化などによればよい）、このワイヤを電源Ｓに接続する。あるいは、ブロック６０４に流体流れを受け取る一つかそれ以上の流路（図示省略）を設けてもよい。いずれの場合も、バイオリアクター６００を加熱器６０２に対応させると、目的の伝熱を達成でき、バイオリアクター６００の一旦冷凍した細胞をより迅速に融解できる。
【００５５】
図１２および図１２Ａから理解できるように、バイオリアクター６００とこれを受け取るブロック６０４の凹部との間にギャップＰが存在し、この結果、次善の伝熱が生じる。従って、本発明のさらに別な実施態様について、図１４、図１５および図１６を参照して説明すると、バイオリアクター６００（本明細書に記載した任意の形態などを取ることができる）に代わりに、あるいは付加的に直接加熱器６０２を組み込んでもよい。図１４に、導電性ワイヤ６１２などの抵抗性のある加熱要素を射出成形（およびオーバーモールディング−こうすると、ワイヤおよびバイオリアクター壁部６００ａの材料（プラスチック）との接触が密になる。）などによってバイオリアクター６００の壁部６００ａに組み込むことができる。あるいは、またはこれに加えて、図１５に示すように、かつ加熱効果が最大化するように、壁部６００ａの外側にワイヤを設けることができる（例えば図示のように螺旋状パターンでワイヤを設けることができるが、覆う領域が最大化する他のパターンも使用可能である）。理解できるように、このように構成すると、細胞培養プロセスおよび/または加熱によって効率を最大化することが望ましい場合（例えば、細胞を培養するチャンバーに対応するバイオリアクターの部分のみを加熱するなど）に応じて、バイオリアクター６００の部分を選択的にかつより正確に加熱することができる。
【００５６】
図１６を参照して説明すると、能動的な融解を実施するさいの温度調節の別な選択肢では、バイオリアクター６００の壁部６００ａ内に流路６００ｂを組み込むことができる。流体（気体または液体）が流路６００ｂに流れ、目的の熱交換（加熱または冷却）を実施することができる。特に、流体は入口Ｉから出口Ｏに流れる。場合によっては、加熱器６１４に連絡する再循環ループの形で流れる。バイオリアクター６００の温度をより正確にモニターするために、温度プローブまたはセンサー６２０を設けることも可能である。このように構成すると、加熱や損傷することを確実に防止できる。
【００５７】
本発明は、バイオリアクターの一部、あるいはその他の部分であっても、冷凍細胞を備えた細胞培養床にも関する。
【００５８】
本明細書で使用する用語は、以下の意味をもつ。
【００５９】
本明細書で使用する単数表現については、文脈上反対の表現を意味しない限り、単数および複数表現の両者を指すものとする。例えば、“区画”は一つかそれ以上の区画を意味する。
【００６０】
パラメーター、量、一過性の期間などの測定可能な値を指す用語に使用する“約”については、本発明を好適に実施できる限り、具体的に記載した値の±２０％以下、好ましくは±１０％以下、より好ましくは±５％以下、さらにより好ましくは±１％、さらにより好ましくは±０．１％以下は許容範囲である。なお、修飾語“約”を伴う値についても具体的に開示する。
【００６１】
また、本明細書で使用する“有する”は“含む”、“含有する”などと同義であり、成分などの存在を具体的に示す包括的な、あるいは何の制約もない用語であり、付加的な、明示していない、公知かつ本明細書に記載する成分、特徴、要素、部材、工程などの存在を排除するものではない。
【００６２】
本発明の好適な実施態様について図示し、かつ説明してきたが、当業者にとっては、このような実施態様が例示のみを目的としていることを理解できるはずである。本発明から逸脱しなくても、多数の変更や置換などは当業者にとって自明なはずである。例えば、図示ではバイオリアクターを垂直方向に配置しているが、任意の方向に配置することができる。また、バイオリアクターについては、任意のアイソレーターやキャビネットに対応させずに明細書全体を通して説明してきたが、殺菌環境を維持するためにこれらは併用することができる。なお、本発明を実施するさいには、以上説明してきた本発明の実施態様を各種変更することができる。明細書冒頭に記載した特許請求の範囲が適用可能な法律に従って保護の範囲を定義するもので、これら請求項の範囲に包摂される方法および構造（体）や等価物はいずれもこれによって保護されるものである。
【符号の説明】
【００６３】
１００  バイオリアクター
１０４  導管
１１２  ハウジング
１１４  カバー
Ｐ      開口
１１６  第１チャンバー
１１８  非接触磁気羽根車（ｉｍｐｅｌｌｅｒ）
１２０  環状チャンバー
１２２  螺旋状床
１２２ａ  固定化層
１２２ｂ  スペーサー層
１２６  戻りチャンバー
１２８  管
２００  バイオリアクター
２１２  ハウジング
２１６  第１チャンバー
２２０  第２チャンバー
２２４  第３チャンバー
２２６  第４チャンバー
２２８  第５チャンバー
２３０  基底部
２３２  溝
２３４  壁
２３４ａ  直立突出部
２３６  配管
２５０ａ  中間部
２５０ｂ  中間部
２５２  タング
２５４  溝
２５６  外側壁
２５８  内壁
２６０、２６２  レッジ
２６４  スロット
２６６ａ  開口
２６８  支持体
２６８ａ  支持部
２６８ｂ  支持部
２７０  カバー部
２７２  タング
２７４  直立壁
２７６  蓋
Ｐ      ポート
Ｔ      プローブ
２７８  蓋
２９２  外側ケーシング
２９６  固定床
Ｇ      ギャップ
３００  バイオリアクター
３３０  基底部
３１２  ハウジング
３５０  中間部
３７０  カバー部
３９０  ジャケット
３９２  入口
３９４  出口
Ｍ      ポンプ
Ｎ      冷却機
３９６  パイプ
３９６ａ、３９６ｂ  入口
３９８  可撓性バッグ
４００  バイオリアクター
４６６  内部レッジ
５００  バイオリアクター
５００ａ  バイオリアクターチャンバー
５０２  冷凍機
５０６  殺菌フィルター
５０８  プローブ
５１０  脱水機
６００  バイオリアクター
６００ａ  壁部
６００ｂ  流路
６０２  加熱器
６０４  伝熱ブロック
６０６  加熱素子
６０８  ポリマーフィルム
６１０  電気ワイヤ
６２０  センサー
【図１】
2021521797.tif 000003
【図２Ａ】
2021521797.tif 000004
【図２Ｂ】
2021521797.tif 000005
【図２Ｃ】
2021521797.tif 000006
【図３】
2021521797.tif 000007
【図３Ａ】
2021521797.tif 000008
【図３Ｂ】
2021521797.tif 000009
【図３Ｃ】
2021521797.tif 000010
【図４】
2021521797.tif 000011
【図５】
2021521797.tif 000012
【図６Ａ】
2021521797.tif 000013
【図６Ｂ】
2021521797.tif 000014
【図７】
2021521797.tif 000015
【図８】
2021521797.tif 000016
【図９】
2021521797.tif 000017
【図１０】
2021521797.tif 000018
【図１１】
2021521797.tif 000019
【図１２−１２Ａ】
2021521797.tif 000020
【図１３】
2021521797.tif 000021
【図１４】
2021521797.tif 000022
【図１５】
2021521797.tif 000023
【図１６】
2021521797.tif 000024
【国際調査報告】
2021521797.tif 000025
2021521797.tif 000026
2021521797.tif 000027
2021521797.tif 000028
2021521797.tif 000029
2021521797.tif 000030