(57)【要約】本発明は、腫瘍に罹患した患者における腫瘍の処置に使用され得る、インターフェロン遺伝子刺激因子（STING）のアゴニスト生物活性を有する化合物を提供する。本化合物は、本明細書において定義される式(I)で表される。本発明の方法を実施するための化合物は、全身暴露のための経口送達を介して送達され得、また腫瘍内送達でも送達され得る。式(I)の化合物を使用する抗腫瘍治療は、有効量の免疫チェックポイント標的薬の投与をさらに含み得る。2021514375.tif 000166
2021514375.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記の式(I)で表される化合物またはその薬学的に許容される塩を含むインターフェロン遺伝子刺激因子（STING）アゴニストの有効量を患者に投与する工程を含む、インターフェロン遺伝子の発現を刺激する方法：
2021514375.tif 000091
式中、
各R1は、独立に、（C1〜C4）アルキルまたはCNであり、nr1は0、1、2、または3であり、ただし各R1は炭素原子に結合することを条件とし；かつ
ARは、式-C(=O)N(R)Ar1で表される基であり；
RはHまたは(C1〜C4)アルキルであり；
Ar1は下記：
2021514375.tif 000092
からなる群より選ばれ；
式中、波線は結合する位置を示し；
いずれかのAr1は、下記：
-(C1〜C4)-アルキル、-(C1〜4)-アルキルO、-(C1〜C4)-アルキルOC(O)、-CN、-ハロ、-(C3〜C7)シクロアルキル、-(C1〜C4)-アルキOC(O)、-COOH、(C3〜C7)-シクロアルキルOC(O)、-SF5、-メチレンジオキシ、-ジフルオロメチレンジオキシ、-エチレンジオキシ、-CF3、-OCF3、-C(O)NH2、-C(O)NH(CH2)2OH、-CH2OH、-NR2、-C(/)ONH-アルギニン、-C(O)O(CH2)2NR2、
2021514375.tif 000093
からなる群より選ばれる独立に選択されたR2基のnr2で置換され；波線は結合する位置を示し；かつnr2は0、1、2、または3である；または、
ARは、下記式：
2021514375.tif 000094
で表される基であり；
式中、R3は、下記：
(C1〜C4)-アルキル、(C1〜C4)-アルキルO、(C1〜C4)-アルキルOC(O)、CN、ハロ、(C3〜C7)シクロアルキル、(C1〜C4)-アルキOC(O)、COOH、(C3〜C7)-シクロアルキルOC(O)、-SF5、メチレンジオキシ、ジフルオロメチレンジオキシ、エチレンジオキシ、CF3、-OCF3、CONH2、CONH(CH2)2OH、CH2OH、NR2、CONH-アルギニン、およびC(O)O(CH2)2NR2からなる群より選択され；かつnr3は、0、1、2、または3である。
【請求項２】
投与が、経口投与、腫瘍内投与、または経口投与と腫瘍内投与の両方を含む、請求項1記載の方法。
【請求項３】
投与が、抗体薬物複合体としてまたはリポソーム製剤で患者に投与することを含む、請求項1記載の方法。
【請求項４】
有効量の免疫チェックポイント標的薬の投与をさらに含む、請求項1記載の方法。
【請求項５】
免疫チェックポイント標的薬が、抗PD-L1抗体、抗PD-1抗体、抗CTLA-4抗体、または抗4-1BB抗体を含む、請求項4記載の方法。
【請求項６】
電離放射線または抗がん剤の投与をさらに含む、請求項１記載の方法。
【請求項７】
下記式：
2021514375.tif 000095
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のいずれか一つの化合物またはその薬学的に許容される塩である、請求項1記載の方法。
【請求項８】
下記の式(I)で表される化合物またはその薬学的に許容される塩を含むインターフェロン遺伝子刺激因子（STING）アゴニストの有効量を患者に投与する工程を含む、患者における腫瘍を処置する方法：
2021514375.tif 000116
式中、
各R1は、独立に、（C1〜C4）アルキルまたはCNであり、nr1は0、1、2、または3であり、ただし各R1は炭素原子に結合することを条件とし；かつ
ARは、式-C(=O)N(R)Ar1で表される基であり；
RはHまたは(C1〜C4)アルキルであり；
Ar1は下記：
2021514375.tif 000117
からなる群より選ばれ；
式中、波線は結合する位置を示し；
いずれかのAr1は、下記：
-(C1〜C4)-アルキル、-(C1〜C4)-アルキルO、-(C1〜C4)-アルキルOC(O)、-CN、-ハロ、-(C3〜C7)シクロアルキル、-(C1〜C4)-アルキOC(O)、-COOH、(C3〜C7)-シクロアルキルOC(O)、-SF5、-メチレンジオキシ、-ジフルオロメチレンジオキシ、-エチレンジオキシ、-CF3、-OCF3、-C(O)NH2、-C(O)NH(CH2)2OH、-CH2OH、-NR2、-C(/)ONH-アルギニン、-C(O)O(CH2)2NR2、
2021514375.tif 000118
からなる群より選ばれる独立に選択されたR2基のnr2で置換され；波線は結合する位置を示し；かつnr2は0、1、2、または3である；または、
ARは、下記式：
2021514375.tif 000119
で表される基であり；
式中、R3は、下記：
(C1〜C4)-アルキル、(C1〜C4)-アルキルO、(C1〜C4)-アルキルOC(O)、CN、ハロ、(C3〜C7)シクロアルキル、(C1〜C4)-アルキOC(O)、COOH、(C3〜C7)-シクロアルキルOC(O)、-SF5、メチレンジオキシ、ジフルオロメチレンジオキシ、エチレンジオキシ、CF3、-OCF3、CONH2、CONH(CH2)2OH、CH2OH、NR2、CONH-アルギニン、およびC(O)O(CH2)2NR2からなる群より選択され；かつnr3は、0、1、2、または3である。
【請求項９】
投与が、経口投与、腫瘍内投与、または経口投与と腫瘍内投与の両方を含む、請求項8記載の方法。
【請求項１０】
投与が、抗体薬物複合体としてまたはリポソーム製剤で患者に投与することを含む、請求項8記載の方法。
【請求項１１】
有効量の免疫チェックポイント標的薬の投与をさらに含む、請求項8記載の方法。
【請求項１２】
免疫チェックポイント標的薬が、抗PD-L1抗体、抗PD-1抗体、抗CTLA-4抗体、または抗4-1BB抗体を含む、請求項11記載の方法。
【請求項１３】
電離放射線または抗がん剤の投与をさらに含む、請求項8記載の方法。
【請求項１４】
下記式：
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2021514375.tif 000121
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のいずれか一つの化合物またはその薬学的に許容される塩である、請求項8記載の方法。
【請求項１５】
下記の式(I)で表される化合物またはその薬学的に許容される塩：
2021514375.tif 000141
式中、
各R1は、独立に、（C1〜C4）アルキルまたはCNであり、nr1は0、1、2、または3であり、ただし各R1は炭素原子に結合することを条件とし；かつ
ARは、式-C(=O)N(R)Ar1で表される基であり；
RはHまたは(C1〜C4)アルキルであり；
Ar1は下記：
2021514375.tif 000142
からなる群より選ばれ；
式中、波線は結合する位置を示し；
いずれかのAr1は、下記：
-(C1〜C4)-アルキル、-(C1〜C4)-アルキルO、-(C1〜C4)-アルキルOC(O)、-CN、-ハロ、-(C3〜C7)シクロアルキル、-(C1〜C4)-アルキOC(O)、-COOH、(C3〜C7)-シクロアルキルOC(O)、-SF5、-メチレンジオキシ、-ジフルオロメチレンジオキシ、-エチレンジオキシ、-CF3、-OCF3、-C(O)NH2、-C(O)NH(CH2)2OH、-CH2OH、-NR2、-C(/)ONH-アルギニン、-C(O)O(CH2)2NR2、
2021514375.tif 000143
からなる群より選ばれる独立に選択されたR2基のnr2で置換され；波線は結合する位置を示し；かつnr2は0、1、2、または3である；または、
ARは、下記式：
2021514375.tif 000144
で表される基であり；
式中、R3は、下記：
(C1〜C4)-アルキル、(C1〜C4)-アルキルO、(C1〜C4)-アルキルOC(O)、CN、ハロ、(C3〜C7)シクロアルキル、(C1〜C4)-アルキOC(O)、COOH、(C3〜C7)-シクロアルキルOC(O)、-SF5、メチレンジオキシ、ジフルオロメチレンジオキシ、エチレンジオキシ、CF3、-OCF3、CONH2、CONH(CH2)2OH、CH2OH、NR2、CONH-アルギニン、およびC(O)O(CH2)2NR2からなる群より選択され；かつnr3は、0、1、2、または3である。
【請求項１６】
下記式：
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のいずれか一つの化合物またはその薬学的に許容される塩。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、2018年2月21日に出願された米国仮出願第62/633,409号に対する優先権を主張するものであり、仮出願の開示はその全体が参照により本明細書に組み入れられる。
【背景技術】
【０００２】
背景
cGAS-STINGシグナル経路は、哺乳動物宿主細胞が多様なDNAウイルスおよびRNAウイルスの排除を開始する自然免疫応答において重要な役割を果たす。STING（インターフェロン遺伝子刺激因子）は、小胞体（ER）内在シグナルタンパク質であり、ミトコンドリア関連膜に部分的に局在し、免疫細胞型および非免疫細胞型の両方で広範囲に発現される。環状GMP-AMP合成酵素（cGAS）による細胞質ゾルDNAへの応答において産生される2'-3’cGAMPを含む、環状ジヌクレオチド（CDN）に対する応答において、STINGは核周辺領域に移行し、これは、TBK1-/IRF3-依存様式でI型インターフェロン（IFN）および炎症促進性サイトカイン産生を迅速に誘導する。直接的なDNA検出活性の生理学的関連性はまだ十分に特徴づけられていないが、STINGが細胞質ゾルDNAに直接結合することも発見されている。
【０００３】
近年の研究においては、STINGが、腫瘍細胞に対する免疫応答において不可欠な役割を果たすことが示されている。腫瘍微小環境内で効率の良い腫瘍開始T細胞初回刺激においては、常在樹状細胞によるインターフェロンβ（IFN-b）産生を必要とし、IFN-bの発現がSTING経路の活性化に依存することが示されている(1)。実際、ヌクレオチドベースのSTINGアゴニストの腫瘍内送達により、同系マウスモデルにおける定着腫瘍の広範囲な退縮が誘導されることが示された(1)。さらに、STING経路の活性化が、放射線照射した腫瘍微小環境内のIFN-b媒介免疫応答を介して、放射線の抗腫瘍効果に顕著に貢献することも示された。
【発明の概要】
【０００４】
概要
様々な態様において、本発明は、腫瘍の処置に使用し得るインターフェロン遺伝子刺激因子（STING）のアゴニストを提供する。
【０００５】
例えば、本発明は、下記式(I)の化合物またはその薬学的に許容される塩を含むインターフェロン遺伝子刺激因子（STING）のアゴニストの有効量を患者に投与する工程を含む、インターフェロン遺伝子の発現を刺激する方法を提供し得、および下記式(I)の化合物またはその薬学的に許容される塩を含むインターフェロン遺伝子刺激因子（STING）のアゴニストの有効量を患者に投与する工程を含む、患者における腫瘍を処置する方法を提供し得る。
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式中、
各R1は、独立に、（C1〜C4）アルキルまたはCNであり、nr1は0、1、2、または3であり、ただし各R1は炭素原子に結合することを条件とし；かつ
ARは、式-C(=O)N(R)Ar1で表される基であり；
Ar1は下記：
2021514375.tif 000004
からなる群より選ばれ；
ここで、波線は結合する位置を示し；
いずれかのAr1は、下記：-(C1〜C4)-アルキル、-(C1〜C4)-アルキルO、-(C1〜C4)-アルキルOC(O)、-CN、-ハロ、-(C3〜C7)シクロアルキル、-(C1〜C4)-アルキOC(O)、-COOH、(C3〜C7)-シクロアルキルOC(O)、-CN、-F、-Cl、-SF5、-メチレンジオキシ、-ジフルオロメチレンジオキシ、-エチレンジオキシ、-CF3、-OCF3、-C(O)NH2、-C(O)NH(CH2)2OH、-CH2OH、-NR2、-C(/)ONH-アルギニン、-C(O)O(CH2)2NR2、
2021514375.tif 000005
からなる群より選ばれる独立に選択されたR2基のnr2で置換され；ここで、波線は結合する位置を示し；かつnr2は0、1、2、または3である；または、
ARは、下記式：
2021514375.tif 000006
で表される基であり；
式中、R3は、下記：(C1〜C4)-アルキル、(C1〜C4)-アルキルO、(C1-C4)-アルキルOC(O)、CN、ハロ、(C3〜C7)シクロアルキル、(C1〜C4)-アルキOC(O)、COOH、(C3〜C7)-シクロアルキルOC(O)、CN、F、Cl、-SF5、メチレンジオキシ、ジフルオロメチレンジオキシ、エチレンジオキシ、CF3、-OCF3、CONH2、CONH(CH2)2OH、CH2OH、NR2、CONH-アルギニン、およびC(O)O(CH2)2NR2
からなる群から選択され；かつnr3は、0、1、2、または3である。
【０００６】
より具体的には、n1が0であるか；またはn1が1または2であり、R1がメチルである、式(I)の化合物を用いて方法を実施し得る。
【０００７】
より具体的には、Xがメチル、エチル、またはイソプロピルカルボン酸エステルである、式(I)の化合物を用いて方法を実施し得る。さらに、Xが1,1,1,3,3,3-ヘキサフルオロプロパン-2-オール-2-イル基である、式(I)の化合物を用いて方法を実施し得る。さらに、Arがフェニルである、式(I)の化合物を用いて方法を実施し得る。さらに、式(I)の化合物を用いて方法を実施し得る。さらに、R2が独立に選択されたフルオロ、クロロ、(C1〜C4)アルキル、トリフルオロメチル、またはシアノであり、n2が1または2であるか；または2つのR2が一緒にメチレンジオキシ基を形成する、式(I)の化合物を用いて方法を実施し得る。
【０００８】
さらに、本明細書に開示されるいずれか一つの特定の化合物の有効量を用いて本発明の方法を実施し得る。例えば、表1、2および5を参照されたい。
【０００９】
様々な態様において、腫瘍を処置する方法は、式(I)の化合物または本明細書に開示されるいずれかの特定の化合物の有効量を、経口投与、腫瘍内投与、またはその両方を介して投与する工程をさらに含む。
【００１０】
様々な態様において、腫瘍を処置する方法は、式(I)の化合物または本明細書に開示されるいずれかの特定の化合物の有効量を投与する工程をさらに含み、投与が、抗体薬物複合体として、またはリポソーム製剤で患者に化合物を投与することを含む。
【００１１】
様々な態様において、腫瘍を処置する方法は、式(I)の化合物または本明細書に開示されるいずれかの特定の化合物の有効量を投与する工程をさらに含み、有効量の免疫チェックポイント標的薬の投与をさらに含む。例えば、免疫チェックポイント標的薬は、抗PD-L1抗体、抗PD-1抗体、抗CTLA-4抗体、または抗4-1BB抗体であり得る。
【００１２】
様々な態様において、腫瘍を処置する方法は、式(I)の化合物または本明細書に開示されるいずれかの特定の化合物の有効量を投与する工程をさらに含み、電離放射線または抗がん剤の投与をさらに含む。
【００１３】
本発明は、本明細書に開示およびクレームされた、式(I)の新規な化合物も含み得る。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】野生型およびSTING KO THP-1のISRE-ルシフェラーゼレポーター細胞を漸増用量の2’3’-cGAMPで処置し、レポーター活性（発光）を処置から４８時間後に評価した(A)。タンパク質負荷対照として用いたγ-チューブリンによるウエスタンブロット法により、STING KO THP-1細胞ではSTINGタンパク質の発現がないことが確認された(B)。野生型およびSTING KO THP-1レポーター細胞を漸増用量の化合物164（Cmpd164）で処置し、レポーター活性および細胞生存を処置から24時間後に評価した(C〜D)。
【図２】野生型およびSTING KO THP-1細胞を、RIG-IおよびcGAS依存性シグナルカスケードの公知の活性化剤であるポリ(dA:dT)で刺激し、下流標的遺伝子発現を、qPCRにより48時間後に評価した(A)。野生型およびSTING KO THP-1細胞を、指示用量の2’3’-cGAMPまたはCmpd164で刺激し、I型インターフェロンシグナリングの活性化を、IFNB1（B）およびインターフェロン刺激遺伝子であるIFIT3（C）およびCXCL10（D）の遺伝子発現解析により評価した。
【図３】ヒトSTINGタンパク質（アミノ酸138〜379）のc末端ドメインを、2’3’-cGAMP[100μM]（A）またはCmpd181[100μM]（B）および1X蛍光色素でインキュベートし、次に上昇させた温度に付した。融解温度(Tm)を誘導法を用いて計算し、適切なビヒクル対照に標準化することによって、リガンド結合により誘導される融解温度変化（ΔTm）を得た（C）。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
発明の詳細な説明
多様ながん免疫療法への適用に対し、STING経路アゴニストの進展に大きな関心が存在する。最も注目すべきは、単独のチェックポイント阻害剤に応答しない患者において、免疫チェックポイント標的薬を伴う併用療法の一部として、STING経路アゴニストが大きな潜在的適用性を有することである。
【００１６】
非ヌクレオチド小分子STINGアゴニストを特定するためのしっかりとしたプラットフォームを確立した。これは、IFNシグナル応答配列の5つの複製を有するIRF誘導性レポーターを保有するヒトTHP-1セルラインを含む一次アッセイを用いて確立された。ルシフェラーゼ人工産物を除去し、ヒト-齧歯動物異種間反応性および経路選択性を確保するために、他のレポーター構成物、齧歯動物細胞ベースのアッセイ、およびcGASおよびSTINGノックアウトセルラインを含む、カウンタースクリーンを使用した。cGAS酵素活性およびSTINGタンパク質結合アッセイを含む生化学分析は、同定されヒットした特定の標的を同定するのに使用される。今日まで、約100,000の化合物の初期スクリーニングから、少なくとも一つの新規で高度に扱いやすい真正なSTINGアゴニスト骨格の化合物164（表１）（EC50 約1μM、表１）を特定した。該化合物は、2’-3’cGAMPについて観察される有効性と同等の有効性を有するヒトPBMCにおける関連する細胞型およびI型IFNタンパク質発現においてインターフェロン刺激遺伝子の特徴的な発現を誘導する。野生型およびcGASノックアウト細胞において、表1の化合物164に観察される活性は、STINGノックアウト細胞で観察される活性欠如とともに、この化合物系が、STINGアゴニストとして直接的に作用することによって機能しているという証拠を提供するものである。STINGタンパク質の熱変位データにより、更なる証拠が提供される。その化合物系内の約100の類縁体の計画、合成および試験を含む予備的な医薬品化学における試みにより、活性に必要となる分子の重要な特徴が特定されるとともに、細胞ベースの作用強度で約10倍の改善（例えば、アニリン環上の置換パタンを調節することによって）を有し、血漿安定性で約50倍の改善（エステルの置換基のサイズを調節することによって）を有する誘導体の特定に至った。
【００１７】
本明細書における意義の範囲内で「処置する」または「処置」は、障害もしくは疾患に関連する症状の緩和、またはこれら症状のさらなる進行もしくは悪化の抑制、または疾患もしくは障害の防止もしくは予防、または疾患もしくは障害の治療を意味する。同様に、本明細書において使用されるように、本発明の化合物の「有効量」または「治療的有効量」は、障害もしくは疾患に関連する症状を全部または部分的に緩和する、またはこれらの症状のさらなる進行もしくは悪化を中断するもしくは遅延させる、または障害または状態を防止するもしくはそのための予防を提供する、化合物の量を意味する。特に、「治療的有効量」は、所望の治療的結果を達成するために、投薬時および必要な期間の間に有効である量を意味する。治療的有効量は、治療的に有益な効果が、本発明の化合物の何らかの毒性または有害な影響を上回る量でもある。
【００１８】
障害を患っている個体の治療を記載するのに使用される場合の「有効量」という表現は、STINGが障害に関与する場合に、個体の組織におけるSTINGを阻害するか、あるいはSTINGに作用するのに有効な本発明の化合物の量または濃度を意味し、そのような阻害または他の作用は、有益な治療的効果を生み出すのにある程度十分に起こる。
【００１９】
「薬学的に許容される塩」という用語は、非毒性の無機酸または有機酸および／または塩基付加塩を意味する。例えば、本明細書に組み入れられる、Lit et al., Salt Selection for Basic Drugs (1986), Int J. Pharm., 33, 201-217を参照されたい。
【００２０】
当技術分野において周知であるような化学基について、標準的な略語を使用した；例えば、Me = メチル、Et = エチル、i-Pr = イソプロピル、Bu = ブチル、t-Bu = tert-ブチル、Ph = フェニル、Bn = ベンジル、Ac = アシル、Bz = ベンゾイル等である。
【００２１】
「ハロ」または「ハロゲン」または「ハライド」という用語それ自体、または他の置換基の一部としての用語は、他に言及がない場合は、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素原子を意味し、好ましくはフッ素、塩素または臭素である。
【００２２】
「ハロアルキル」基は、モノハロアルキル基、全てのハロ原子が同一または異なり得るポリハロアルキル基、および全ての水素原子が同一または異なるフッ素および／または塩素原子などのハロゲン原子で置換されたパーハロアルキル基を含む。ハロアルキルの例は、トリフルオロメチル、1,1-ジクロロエチル、1,2-ジクロロエチル、1,3-ブロモ-3,3-ジフルオロプロピル、パーフルオロブチル等を含む。
【００２３】
アリール基は、環にヘテロ原子を含まない、環状芳香族炭化水素である。当技術分野で周知の芳香族化合物は、4n+2π電子（nは整数である）を含む多重不飽和環状系である。したがって、アリール基は、フェニル基、アズレニル基、ヘプタレニル基、ビフェニル基、インダセニル基、フルオレニル基、フェナントレニル基、トリフェニレニル基、ピレニル基、ナフタセニル基、クリセニル基、ビフェニレニル基、アントラセニル基、およびナフチル基を含むがこれに限定されない。いくつかの態様において、アリール基は、基の環部分に約6〜約14の炭素を含む。アリール基は、上記定義のとおり、非置換であるか、または置換されていてもよい。代表的な置換アリール基は、モノ置換または2以上の置換基、例えば2、3、4、5、または6置換フェニルまたは2〜8置換ナフチル基が挙げられ得るがこれらに限定されず、これらは上記に列挙したような炭素基または非炭素基で置換され得る。
【００２４】
ヘテロシクリル基または「ヘテロシクリル」という用語は、一または複数の環状原子が、N、OおよびSなどを含むがこれに限定されないヘテロ原子である、3員環またはそれ以上の員環を含む芳香族または非芳香族の環状化合物を含む。したがって、ヘテロシクリルは、シクロヘテロアルキル、またはヘテロアリール、または多環式の場合はそれらのいずれかの組合せであり得る。いくつかの態様において、ヘテロシクリル基は、3員環〜約20員環を含み、一方で他のヘテロシクリル基は3員環〜約15員環を有する。C2-ヘテロシクリルと記載されたヘテロシクリル基は、2つの炭素原子と3つのヘテロ原子を有する5員環、2つの炭素原子と4つのヘテロ原子を有する6員環などであり得る。同様に、C4-ヘテロシクリルは、1つのヘテロ原子を有する5員環、2つのヘテロ原子を有する6員環などであり得る。炭素原子数およびヘテロ原子数の合計は環の総原子数に等しい。環のサイズは、環における総原子数によっても記載され得、例えば、3〜10員ヘテロシクリル基は、環の炭素原子と非炭素原子の両方をカウントする。ヘテロシクリル環は一つまたは複数の二重結合も含み得る。ヘテロアリール環は、ヘテロシクリル基の一態様である。「ヘテロシクリル基」という用語は、芳香族基および非芳香族基の縮合基を含む基を含む、縮合環種を含む。例えば、ジオキソラニル環およびベンズジオキソラニル環系（メチレンジオキシフェニル環系）は、本明細書の意義の範囲内でいずれもヘテロシクリル基である。当該用語は、例えば、キヌクリジルなどのただしこれに限定されない、1つまたは複数のヘテロ原子を含むビシクロおよびトリシクロ環系といった多環も含む。ヘテロシクリル基は、非置換であり得、または置換されていてもよい。
【００２５】
ヘテロアリール基は、5員またはそれ以上の環員を含み、そのうちの1つまたは複数がN、OおよびSなどであるがこれらに限定されないヘテロ原子である、複素環式芳香族環化合物であり；例えば、ヘテロアリール環は、5員環〜約8〜12員環を有し得る。ヘテロアリール基は、芳香族電子構造を有する様々なヘテロシクリル基であり、4n+2π電子（nは整数である）を含む多重不飽和環状系である。C2-ヘテロアリールと記載されたヘテロアリール基は、2つの炭素原子と3つのヘテロ原子を有する5環（すなわち5員環）、2つの炭素原子と4つのヘテロ原子を有する6環（すなわち6員環）などであり得る。同様に、C4-ヘテロアリールは、1つのヘテロ原子を有する5環、2つのヘテロ原子を有する6環などであり得る。炭素原子数およびヘテロ原子数の合計は環の総原子数に等しい。
【００２６】
本明細書に記載されるヘテロアリール環系の例は、下記式：
2021514375.tif 000007
で表される構造単位、イミダゾリル−ピリダジンを含み、これは下記：
2021514375.tif 000008
のようにも記載し得ると理解される。本明細書に記載される他のヘテロアリール環系は、下記式：
2021514375.tif 000009
で表され、これは下記：
2021514375.tif 000010
のようにも記載し得ると理解される。同様に、本明細書に記載される他のアリール（例えば、フェニル）環系およびヘテロアリール（例えばピリジル）環系は、明確な二重結合またはアリール「円」命名法のいずれかで記載し得るが、その意味は同じである。
【００２７】
シクロアルキル基は、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロヘキシル基、シクロヘプチル基、およびシクロオクチル基を含むがこれらに限定されない、一つまたは複数の炭素環を含む基である。いくつかの態様において、シクロアルキル基は、3員環〜約8〜12員環を有し得、他の態様においては、環の炭素原子数は3〜4、5、6または7の範囲にある。シクロアルキル基は、ノルボルニル基、アダマンチル基、ボルニル基、カンフェニル基、イソカンフェニル基、およびカレニル基などの、しかしこれらに限定されない多環式シクロアルキル基、ならびにデカリニルなどの、しかしこれらに限定されない縮合環等をさらに含む。シクロアルキル基は、上記で定義した直鎖アルキル基または分岐鎖アルキル基で置換された環も含む。
【００２８】
シクロアルケニル基は、2つの炭素の間に少なくとも一つの二重結合を有するシクロアルキル基を含む。したがって、例えば、シクロアルケニル基は、シクロヘキセニル基、シクロペンテニル基、およびシクロヘキサジエニル基を含むが、これらに限定されない。シクロアルケニル基は、3員環〜約8〜12員環を有し得、他の態様においては、環の炭素原子数は3〜5、6または7の範囲にある。シクロアルキル基は、ノルボルニル基、アダマンチル基、ボルニル基、カンフェニル基、イソカンフェニル基、およびカレニル基などの、しかしこれらに限定されない多環式シクロアルキル基、ならびにデカリニルなどの、しかしこれらに限定されない縮合環等をさらに含み、これらは環中に少なくとも一つの二重結合を含む。シクロアルケニル基は、上記で定義した直鎖アルキル基または分岐鎖アルキル基で置換された環も含む。
【００２９】
ヘテロシクリル基または「ヘテロシクリル」という用語は、一または複数の環状原子が、N、OおよびSなどを含むがこれに限定されないヘテロ原子である、3員環またはそれ以上の員環を含む芳香族または非芳香族の環状化合物を含む。したがって、ヘテロシクリルは、シクロヘテロアルキル、またはヘテロアリール、または多環式の場合はそれらのいずれかの組合せであり得る。いくつかの態様において、ヘテロシクリル基は、3員環〜約20員環を含み、一方で他のヘテロシクリル基は3員環〜約15員環を有する。C2-ヘテロシクリルと記載されたヘテロシクリル基は、2つの炭素原子と3つのヘテロ原子を有する5員環、2つの炭素原子と4つのヘテロ原子を有する6員環などであり得る。同様に、C4-ヘテロシクリルは、1つのヘテロ原子を有する5員環、2つのヘテロ原子を有する6員環などであり得る。炭素原子数およびヘテロ原子数の合計は環の総原子数に等しい。環のサイズは、環における総原子数によっても記載され得、例えば、3〜10員ヘテロシクリル基は、環の炭素原子と非炭素原子の両方をカウントする。ヘテロシクリル環は一つまたは複数の二重結合も含み得る。ヘテロアリール環は、ヘテロシクリル基の一態様である。「ヘテロシクリル基」という用語は、芳香族基および非芳香族基の縮合基を含む基を含む、縮合環種を含む。例えば、ジオキソラニル環およびベンズジオキソラニル環系（メチレンジオキシフェニル環系）は、本明細書の意義の範囲内でいずれもヘテロシクリル基である。当該用語は、例えば、キヌクリジルなどのただしこれに限定されない、1つまたは複数のヘテロ原子を含むビシクロおよびトリシクロ環系といった多環も含む。
【００３０】
（表１）構造、生物活性、および補足構造データ
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【００３１】
2021514375.tif 000077
【００３２】
関連文献
[1] Corrales L, Glickman LH, McWhirter SM, Kanne DB, Sivick KE, Katibah GE, Woo SR, Lemmens E, Banda T, Leong JJ, Metchette K, Dubensky TW Jr, Gajewski TF.  (2015) Direct Activation of STING in the Tumor Microenvironment Leads to Potent and Systemic Tumor Regression and Immunity. Cell Rep. 11: 1018-30.
[2] Deng, L. et al. (2014) STING-Dependent Cytosolic DNA Sensing Promotes
Radiation-Induced Type I Interferon-DependentAntitumor Immunity in Immunogenic Tumors,  Immunity. 41: 843.
[3] Corrales L, Matson V, Flood B, Spranger S, Gajewski TF. (2017) Innate immune signaling and regulation in cancer immunotherapy. Cell Res. 27: 96-108.
[4] Corrales L, McWhirter SM, Dubensky TW Jr, Gajewski TF. (2016) The host STING pathway at the interface of cancer and immunity. J Clin Invest. 126: 2404-11.
【００３３】
本発明の化合物および免疫チェックポイント標的薬の投与を含む併用療法に関し、または電離放射線ベースのアプローチおよびDNA-損傷ベースの化学療法などの現存する化学療法のアプローチの増強のための併用療法として、本発明のSTINGアゴニストは、これらの公知の治療的アプローチの効果を補完し、かつ増強し得ると確信する。これは、これらのアプローチを用いるSTING依存的小核媒介腫瘍クリアランスの重要な役割を示す近年の文献に基づくものである。例えば以下を参照されたい。
[5] Mackenzie, K.F., et all, (2017), cGAS surveillance of micronuclei links genome instability to innate immunity, Nature, 548, 461.
[6] Wang, W. et al., (2016), Effector T Cells Abrogate Stroma-Mediated
Chemoresistance in Ovarian Cancer, Cell, 165, 1092-1105.
[7] Charlotte E. Ariyan, et al., January 16, 2018; DOI: 10.1158/2326-6066, Robust antitumor responses result from local chemotherapy and CTLA-4 blockade, cancerimmunolres.aacrjournals.org on January 31, 2018.
[8] Chung Kil Song, et al., www.moleculartherapy.org vol. 15 no. 8 aug. 2007, Chemotherapy Enhances CD8+ T Cell-mediated Antitumor Immunity Induced by Vaccination With Vaccinia Virus.
【００３４】
本発明の化合物は、有効量の免疫チェックポイント標的薬の投与との療法の併用において使用し得る。例えば、免疫チェックポイント標的薬は、抗PD-L1抗体、抗PD-1抗体、抗CTLA-4抗体、または抗4-1BB抗体であり得る。例えば以下を参照されたい。
[9] Ager, CR, et al., (2017) Cancer Immunol Res; 5(8), 676.
[10] Fu, J. et al. (2015) Sci Transl Med. 2015 April 15; 7(283): 283ra52. doi:10.1126/scitranslmed.aaa4306.
[11] Wang, H., et al. (2017) PNAS | February 14, 2017 | vol. 114 | no. 7 | 1637-1642.
【実施例】
【００３５】
組織培養
他に言及がない場合、野生型（カタログ番号：thpl-isg）およびSTING KO (カタログ番号：thpd-kostg)THP-1-Lucia ISG細胞をInvivogen社から購入し、RPMI 1640、2mM L-グルタミン、25 mM HEPES、10% 熱-不活性化ウシ胎仔血清（FBS）、1,000 単位/mlペニシリン、1,000μg/mlストレプトマイシン、0.25μg/ml アンホテリシンB、および100μg/mlゼオシンからなる成長培地で維持した。
【００３６】
1型インターフェロン刺激
ポリ（dA:dT）および2’3’-cGAMPをInvivogen社から購入し、製造業者の指示書に従って再懸濁した。
【００３７】
ISRE-ルシフェラーゼアッセイ
THP-1 Lucia ISG細胞を、5 x 105細胞/mlの密度の低-血清成長培地（2% FBS）で再懸濁し、試験物品またはビヒクル（DMSO）で処置した。50μLの細胞を384ウエルの白色グライナープレートの各ウエルに播種し、24時間インキュベートした。ルシフェラーゼレポーターの発現を評価するため、30μlのQuanti-luc (Invivogen)検出試薬を各ウエルに加え、0.1秒の積分時間でEnvisionプレートリーダー（Perkin Elmer）セットを用いて発光を読み取った。
【００３８】
生存アッセイ
細胞を、5 x 105細胞/mlの密度の低-血清成長培地で再懸濁し、試験物品またはビヒクル（DMSO）で処置した。50μLの細胞を384ウエルの白色グライナープレートの各ウエルに播種し、24時間インキュベートした。ルシフェラーゼレポーターの発現を評価するため、30μlのCellTiter-Glo (Promega)検出試薬を各ウエルに加え、0.1秒の積分時間でEnvisionプレートリーダーセットを用いて発光を読み取った。
【００３９】
ウエスタンブロット
細胞を、新たに添加したプロテアーゼおよびホスファターゼ阻害剤（Cell Signaling）とともに、1Xタンパク質溶解バッファー（25 mM HEPES、pH 7.4、300 mM NaCl、1.5 mM MgCl2、1 mM EGTA、1% P-40、1% デオキシコール酸ナトリウム、2.5 mM ピロリン酸ナトリウム、1 mM グリセロリン酸塩）に溶解した。製造業者(ThermoFisher Scientific)の指示書に従って、Bolt（商標）4〜12% Bis-TrisゲルおよびBolt（商標）ミニ移送システム（mini transfer system）を用いてウエスタンブロット法を実施した。STINGおよびγ-チューブリン抗体をCell Signaling社から購入し、5% BSA、1X TBS-T バッファーで希釈した（表３）。抗ウサギHRP抗体を、1X TBS-Tバッファーの5%無脂肪乾燥ミルクで希釈し、ChemiDoc Imager (BioRad)を用いて発光シグナルを画像化した。
【００４０】
半定量的リアルタイムPCR (qPCR)
THP-1細胞を、5 x 105細胞/mlの密度の低-血清成長培地で再懸濁し、試験物品またはビヒクル（DMSO）で処置した。2.5mLの細胞を6ウエルプレートの各ウエルに播種し、24時間インキュベートした。RNeasy Plus Mini Kit (Qiagen)を用いてRNAを単離し、1μgの精製RNAをcDNAに逆転写した(VILO、カタログ番号：11755050、ThermoFisher Scientific)。製造業者の指示書に従って、Taqman Universal Mix II(カタログ番号：4440038、ThermoFisher)で表４に列挙したTaqmanプライマーおよびプローブを用いて、遺伝子発現を評価した。ΔΔCt法を用いて遺伝子発現を標準化し、発現における倍率変化として遺伝子発現を記録した。
【００４１】
STINGサーマルシフトアッセイ（TSA）
すでに詳しく報告されているとおり（Ouyang et al., 2012）、ヒトおよびマウスSTINGのc-末端ドメイン（CTD）を発現し、精製した。試験物品またはビヒクル対照を、Protein Thermal Shift Dye Kit (カタログ番号：# 4461146, ThermoFisher Scientific)で提供される1Xタンパク質サーマルシフトバッファー中の希釈STINGタンパク質(0.22 mg/ml)に加えた。Dyeキット用に概説されたパラメータにしたがって、融解曲線を実施する前に、サーマルシフト染料を加えて混合した。タンパク質サーマルシフトソフトウエアv1.3(カタログ番号：# 4466038, ThermoFisher Scientific)を用いる誘導法によって融解温度（Tm）を算出した。
【００４２】
（表２）細胞シグナリング抗体
2021514375.tif 000078
【００４３】
（表３）サーモフィッシャーサイエンティフィック（ThermoFisher Scientific） Taqmanプライマー／プローブ
2021514375.tif 000079
【００４４】
Ouyang, S., Song, X., Wang, Y., Ru, H., Shaw, N., Jiang, Y., Niu, F., Zhu, Y., Qiu, W., Parvatiyar, K., et al. (2012). Structural analysis of the STING adaptor protein reveals a hydrophobic dimer interface and mode of cyclic di-GMP binding. Immunity 36, 1073-1086.
【００４５】
本発明の方法を実施するのに有用な化合物は、専門家においては明白である適切な試薬に代替して、有機合成の通常の知識および技術とともに、以下の手順にしたがって調製し得る。
【００４６】
実験手順
略語
下記の略語が使用される：テトラヒドロフラン（THF）、ジクロロメタン(DCM)、N,N-ジメチルホルムアミド(DMF)、ジメチルアセトアミド(DMA)、ジメチルスルホキシド(DMSO)、トリフルオロ酢酸(TFA)、トリエチルアミン(TEA)、ジイソプロピルエチルアミン(DIPEA)、(1-シアノ-2-エトキシ-2-オキソエチリデンアミノオキシ)ジメチルアミノ-モルホリノ-カルベニウム ヘキサフルオロフォスファート(COMU)、1-[ビス(ジメチルアミノ)メチレン]-1H-1,2,3-トリアゾロ[4,5-b]ピリジニウム3-オキシド ヘキサフルオロフォスファート、N-[(ジメチルアミノ)-1H-1,2,3-トリアゾロ-[4,5-b]ピリジン-1-イルメチレン]-N-メチルメタンアミニウム ヘキサフルオロフォスファート N-オキシド(HATU)。
【００４７】
本発明の化合物の調製のための一般的な例
本発明の化合物の出発原料および中間体は、下記に記載される方法の応用または適用により、それらの明らかな化学的等価物により、あるいは、例えば、The Science of Synthesis, Volumes 1-8. Editors E. M. Carreira et al. Thieme publishers (2001-2008)などの文献に記載されるとおり、調製し得る。試薬および反応オプションの詳細は、Scifinder (www.cas.org)またはReaxys (www.reaxys.com)などの商用のコンピューターサーチエンジンを用いる構造サーチおよび反応サーチも利用可能である。
【００４８】
パートI：中間体の調製
スキーム1：中間体Aの合成
2021514375.tif 000080
【００４９】
6-(1H-イミダゾール-1-イル)ピリダジン-3-カルボン酸、A:
乾燥DMF(10 mL)中、メチル6-クロロピリダジン-3-カルボキシラート(1g、5.8mmol)およびイミダゾール(400 mg、5.8 mmol)懸濁液に、K2CO3(950 mg、6.8mmol)を加え、反応混合物を120℃で3時間撹拌した。反応はLCMSでモニターした。メチル6-(1H-イミダゾール-1-イル)ピリダジン-3-カルボキシラートに完全に転換した後、反応混合物に2.5 M LiOH (2.8 mL、6.96 mmol)水溶液を加え、60℃で1時間撹拌した。反応はLCMSでモニターした。反応の終了後、反応混合物を1M HCl水溶液で酸性にし、得られた沈殿物を濾過し、水で洗浄し、オフホワイトの固体として酸A(720 mg)を得た。これをさらなる精製を行わずに次の工程で使用した。LC-MS (ESI+): m/z 191.0 [M+H]+。
【００５０】
パートII：実施例化合物の調製
全ての化合物を下記に例示される手順を用いて調製した。
実施例１
スキーム2：化合物１の合成：
2021514375.tif 000081
【００５１】
メチル2-(6-(1H-イミダゾール-1-イル)ピリダジン-3-カルボキサミド)ベンゾアート、1:
中間体A (190 mg、1 mmol)、メチル2-アミノベンゾアート(166 mg、1.1 mmol)、HATU (456 mg、1.2 mmol)およびDIPEA (0.52 mL, 3 mmol) をDMF (5 mL)に溶解し、室温で一昼夜撹拌した。反応終了後、減圧下で溶媒を蒸発させ、得られた粗物質を、2〜5% MeOHのDCMを用いてシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、オフホワイトの固体として化合物１を得た(226 mg)。LC-MS (ESI+): m/z 324.27 [M+H]+。
【００５２】
スキーム3
2021514375.tif 000082
a試薬および条件：
a)塩化チオニル、還流3時間；エチル2-アミノシクロヘキセ-1-エン-1-カルボキシラート、DIPEA、アセトニトリル、室温、30分
【００５３】
エチル2-(6-(1H-イミダゾール-1-イル)ピリダジン-3-カルボキサミド)シクロヘキセ-1-エン-1-カルボキシラート:
6-(1H-イミダゾール-1-イル)ピリダジン-3-カルボン酸(19 mg、0.1 mmol)を0.3 mLの塩化チオニルに溶解し、混合物を還流下で3時間加熱した。次に、過剰のチオニルを真空下で除去した。固体を0.5mLの無水アセトニトリルに溶解し、エチル2-アミノシクロヘキセ-1-エン-1-カルボキシラート(16.9 mg、0.1 mmol)およびDIPEA (26.1μL、0.15 mmol)の0.5mL無水アセトニトリル溶液を室温で加えた。30分間撹拌した後、粗混合物を濾過し、分取HPLCで精製して、生成物を得た(6.8 mg、収率20 %)。
【００５４】
スキーム4：化合物8の合成
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【００５５】
メチル2-(6-(1H-イミダゾール-1-イル)ピリダジン-3-カルボキサミド)-5-フルオロ-4-メトキシベンゾアート、8:
SOCl2(5 mL)の存在下、中間体A(190 mg、1 mmol)を80℃で2時間撹拌した。次に揮発性物質を除去し、次にメチル2-アミノ-5-フルオロ-4-メトキシベンゾアート(219 mg、1.1 mmol)およびDIPEA (0.52 mL、3 mmol)のアセトニトリル(5 mL)溶液を加えた。得られた反応混合物を室温で1時間撹拌した。反応をLCMSでモニターした。反応終了後、溶媒を除去し、得られた粗物質を2〜5% MeOHのDCMを用いてシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、オフホワイトの固体として化合物8を得た(223 mg)。LC-MS (ESI+): m/z 372.1 [M+H]+。
【００５６】
実施例2-Li
スキーム5：化合物2-Liの合成
2021514375.tif 000084
【００５７】
リチウム2-(6-(1H-イミダゾール-1-イル)ピリダジン-3-カルボキサミド)-5-メトキシベンゾアート、2-Li:
化合物1（スキームC）にしたがった手順を用いて、メチル2-(6-(1H-イミダゾール-1-イル)ピリダジン-3-カルボキサミド)-5-メトキシベンゾアートを調製した。得られたエステル(20 mg、0.057 mmol)をDMSO (0.8 mL)に溶解し、次に0.1M LiOH (0.68 mL, 1.2 mmol)水溶液を加え、次に反応が完了するまで（約3時間）室温で撹拌した。反応はLCMSでモニターした。次に、反応混合物に1M塩酸を滴下して酸性化し、所望の酸を生成させた。得られた沈殿物を単離し、水で洗浄し、オフホワイトの固体として酸2を得た。LC-MS (ESI+): m/z 340.4 [M+H]+。酸2 (10.2 mg、0.03 mmol)を、2.5 mLの水(0.25 mL/mg)でさらに懸濁化し、20分間超音波処理して、均一な懸濁液を調製した。その後、1M LiOH (30μL、0.03 mmol)を加え、リチウム塩の澄明な溶液を得、次に濾過して、任意の不溶性粒子を除去した。得られた溶液を凍結乾燥し、対応するリチウム塩2-Liを得た。LC-MS (ESI+): m/z 340.4 [M+H]+。
【００５８】
2021514375.tif 000085
【００５９】
メチル2-(6-(1H-イミダゾール-1-イル)ピリダジン-3-カルボキサミド)-4,5-ジフルオロベンゾアート、5:
化合物1（スキームC）にしたがった手順を用いて、化合物5を調製した。LC-MS (ESI+): m/z 360.21 [M+H]+。
【００６０】
実施例6-Li
2021514375.tif 000086
【００６１】
リチウム2-(6-(1H-イミダゾール-1-イル)ピリダジン-3-カルボキサミド)-4,5-ジフルオロベンゾアート、6-Li:
化合物2-Li（スキームD）にしたがった手順を用いて、化合物6-Liを調製した。LC-MS (ESI+): m/z 346.1 [M+H]+。
【００６２】
実施例7-Li
2021514375.tif 000087
【００６３】
リチウム2-(6-(1H-イミダゾール-1-イル)ピリダジン-3-カルボキサミド)-4-フルオロ-5-メチルベンゾアート、7-Li:
化合物2-Li（スキームD）にしたがった手順を用いて、化合物7-Liを調製した。LC-MS (ESI+): m/z 342.11 [M+H]+。
【００６４】
実施例8
スキームF：化合物8の合成：
2021514375.tif 000088
【００６５】
メチル2-(6-(1H-イミダゾール-1-イル)ピリダジン-3-カルボキサミド)-5-フルオロ-4-メトキシベンゾアート、8:
SOCl2(5 mL)の存在下、中間体A(190 mg、1 mmol)を80℃で2時間撹拌した。次に揮発性物質を除去し、次にメチル2-アミノ-5-フルオロ-4-メトキシベンゾアート(219 mg、1.1 mmol)およびDIPEA (0.52 mL、3 mmol)のアセトニトリル(5 mL)溶液を加えた。得られた反応混合物を室温で1時間撹拌した。反応をLCMSでモニターした。反応終了後、溶媒を除去し、得られた粗物質を2〜5% MeOHのDCMを用いてシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、オフホワイトの固体として化合物8を得た(223 mg)。LC-MS (ESI+): m/z 372.1 [M+H]+。
【００６６】
スキームG: ジメチルオキサジノン化合物の合成
2021514375.tif 000089
a試薬および条件：
a)塩化チオニル、還流3時間；DIPEA、アセトニトリル、室温、30分
【００６７】
2-(6-(1H-イミダゾール-1-イル)ピリダジン-3-イル)-6,7-ジメチル-4H-ベンゾ[d][1,3]オキサジン-4-オン：
2-(6-(1H-イミダゾール-1-イル)ピリダジン-3-カルボキサミド)-4,5-ジメチル安息香酸 (33.7 mg, 0.1 mmol)を0.3 mLの塩化チオニルに溶解し、混合物を還流下で3時間加熱した。次に、過剰のチオニルを真空下で除去した。固体を0.5mLの無水アセトニトリルに溶解し、DIPEA (26.1μL、0.15 mmol)の0.5mL無水アセトニトリル溶液を室温で加えた。30分間撹拌した後、得られた沈殿物を単離し、アセトニトリルで洗浄し、生成物を得た(26.2 mg、収率82 %)。
【００６８】
スキームH：ジフルオロオキサジン化合物の合成
2021514375.tif 000090
a試薬および条件：
a)ホルムアミド、マイクロ波、200℃
【００６９】
2-(6-(1H-イミダゾール-1-イル)ピリダジン-3-イル)-6,7-ジフルオロキナゾリン-4(3H)-オン:
2-(6-(1H-イミダゾール-1-イル)ピリダジン-3-イル)-6,7-ジフルオロ-4H-ベンゾ[d][1,3]オキサジン-4-オン(32.7mg, 0.1 mmol)の2mLホルムアミド溶液を10mLマイクロ波バイアルに入れて密閉し、200℃の温度で15分間放射線を当てた。反応をLCMSでモニターした。反応完了後、4mLのメタノールを加え、粗混合物を濾過し、分取HPLCで精製して生成物を得た(13.0 mg、収率40%)。
【００７０】
当業者が本発明を作り、使用するために、本発明は十分に詳細に記載され、例示されている一方、クレームの精神および範囲から逸脱することなく、様々な代替手段、修正、および改善は当業者に対して自明である。
【００７１】
各個別の刊行物が、その全体が参照として組み入れられてあたかも具体的にかつ個別に示されていたように、本明細書に示される全ての特許および刊行物は、同じ程度で本明細書に参照として組み入れられる。
【図１】
2021514375.tif 000167
【図２】
2021514375.tif 000168
【図３】
2021514375.tif 000169
【手続補正書】
【提出日】令和2年10月8日(2020.10.8)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記の式(I)で表される化合物またはその薬学的に許容される塩を含むインターフェロン遺伝子刺激因子（STING）アゴニストを含む、インターフェロン遺伝子の発現を刺激するための薬学的組成物であって、該インターフェロン遺伝子刺激因子（STING）アゴニストの有効量が患者に投与される、薬学的組成物：
2021514375.tif 000170
式中、
各R1は、独立に、（C1〜C4）アルキルまたはCNであり、nr1は0、1、2、または3であり、ただし各R1は炭素原子に結合することを条件とし；かつ
ARは、式-C(=O)N(R)Ar1で表される基であり；
RはHまたは(C1〜C4)アルキルであり；
Ar1は下記：
2021514375.tif 000171
からなる群より選ばれ；
式中、波線は結合する位置を示し；
いずれかのAr1は、下記：
-(C1〜C4)-アルキル、-(C1〜4)-アルキルO、-(C1〜C4)-アルキルOC(O)、-CN、-ハロ、-(C3〜C7)シクロアルキル、-(C1〜C4)-アルキOC(O)、-COOH、(C3〜C7)-シクロアルキルOC(O)、-SF5、-メチレンジオキシ、-ジフルオロメチレンジオキシ、-エチレンジオキシ、-CF3、-OCF3、-C(O)NH2、-C(O)NH(CH2)2OH、-CH2OH、-NR2、-C(/)ONH-アルギニン、-C(O)O(CH2)2NR2、
2021514375.tif 000172
からなる群より選ばれる独立に選択されたR2基のnr2で置換され；波線は結合する位置を示し；かつnr2は0、1、2、または3である；または、
ARは、下記式：
2021514375.tif 000173
で表される基であり；
式中、R3は、下記：
(C1〜C4)-アルキル、(C1〜C4)-アルキルO、(C1〜C4)-アルキルOC(O)、CN、ハロ、(C3〜C7)シクロアルキル、(C1〜C4)-アルキOC(O)、COOH、(C3〜C7)-シクロアルキルOC(O)、-SF5、メチレンジオキシ、ジフルオロメチレンジオキシ、エチレンジオキシ、CF3、-OCF3、CONH2、CONH(CH2)2OH、CH2OH、NR2、CONH-アルギニン、およびC(O)O(CH2)2NR2からなる群より選択され；かつnr3は、0、1、2、または3である。
【請求項２】
投与が、経口投与、腫瘍内投与、または経口投与と腫瘍内投与の両方を含む、請求項1記載の薬学的組成物。
【請求項３】
抗体薬物複合体としてまたはリポソーム製剤で患者に投与される、請求項1記載の薬学的組成物。
【請求項４】
有効量の免疫チェックポイント標的薬と併用して投与される、請求項1記載の薬学的組成物。
【請求項５】
免疫チェックポイント標的薬が、抗PD-L1抗体、抗PD-1抗体、抗CTLA-4抗体、または抗4-1BB抗体を含む、請求項4記載の薬学的組成物。
【請求項６】
電離放射線または抗がん剤と併用して投与される、請求項１記載の薬学的組成物。
【請求項７】
インターフェロン遺伝子刺激因子（STING）アゴニストが、下記式：
2021514375.tif 000174
2021514375.tif 000175
2021514375.tif 000176
2021514375.tif 000177
2021514375.tif 000178
2021514375.tif 000179
2021514375.tif 000180
2021514375.tif 000181
2021514375.tif 000182
2021514375.tif 000183
2021514375.tif 000184
2021514375.tif 000185
2021514375.tif 000186
2021514375.tif 000187
2021514375.tif 000188
2021514375.tif 000189
2021514375.tif 000190
2021514375.tif 000191
2021514375.tif 000192
2021514375.tif 000193
2021514375.tif 000194
のいずれか一つの化合物またはその薬学的に許容される塩である、請求項1記載の薬学的組成物。
【請求項８】
下記の式(I)で表される化合物またはその薬学的に許容される塩を含むインターフェロン遺伝子刺激因子（STING）アゴニストを含む、患者における腫瘍を処置するための薬学的組成物であって、該インターフェロン遺伝子刺激因子（STING）アゴニストの有効量が患者に投与される、薬学的組成物：
2021514375.tif 000195
式中、
各R1は、独立に、（C1〜C4）アルキルまたはCNであり、nr1は0、1、2、または3であり、ただし各R1は炭素原子に結合することを条件とし；かつ
ARは、式-C(=O)N(R)Ar1で表される基であり；
RはHまたは(C1〜C4)アルキルであり；
Ar1は下記：
2021514375.tif 000196
からなる群より選ばれ；
式中、波線は結合する位置を示し；
いずれかのAr1は、下記：
-(C1〜C4)-アルキル、-(C1〜C4)-アルキルO、-(C1〜C4)-アルキルOC(O)、-CN、-ハロ、-(C3〜C7)シクロアルキル、-(C1〜C4)-アルキOC(O)、-COOH、(C3〜C7)-シクロアルキルOC(O)、-SF5、-メチレンジオキシ、-ジフルオロメチレンジオキシ、-エチレンジオキシ、-CF3、-OCF3、-C(O)NH2、-C(O)NH(CH2)2OH、-CH2OH、-NR2、-C(/)ONH-アルギニン、-C(O)O(CH2)2NR2、
2021514375.tif 000197
からなる群より選ばれる独立に選択されたR2基のnr2で置換され；波線は結合する位置を示し；かつnr2は0、1、2、または3である；または、
ARは、下記式：
2021514375.tif 000198
で表される基であり；
式中、R3は、下記：
(C1〜C4)-アルキル、(C1〜C4)-アルキルO、(C1〜C4)-アルキルOC(O)、CN、ハロ、(C3〜C7)シクロアルキル、(C1〜C4)-アルキOC(O)、COOH、(C3〜C7)-シクロアルキルOC(O)、-SF5、メチレンジオキシ、ジフルオロメチレンジオキシ、エチレンジオキシ、CF3、-OCF3、CONH2、CONH(CH2)2OH、CH2OH、NR2、CONH-アルギニン、およびC(O)O(CH2)2NR2からなる群より選択され；かつnr3は、0、1、2、または3である。
【請求項９】
投与が、経口投与、腫瘍内投与、または経口投与と腫瘍内投与の両方を含む、請求項8記載の薬学的組成物。
【請求項１０】
抗体薬物複合体としてまたはリポソーム製剤で患者に投与される、請求項8記載の薬学的組成物。
【請求項１１】
有効量の免疫チェックポイント標的薬と併用して投与される、請求項8記載の薬学的組成物。
【請求項１２】
免疫チェックポイント標的薬が、抗PD-L1抗体、抗PD-1抗体、抗CTLA-4抗体、または抗4-1BB抗体を含む、請求項11記載の薬学的組成物。
【請求項１３】
電離放射線または抗がん剤と併用して投与される、請求項8記載の薬学的組成物。
【請求項１４】
インターフェロン遺伝子刺激因子（STING）アゴニストが、下記式：
2021514375.tif 000199
2021514375.tif 000200
2021514375.tif 000201
2021514375.tif 000202
2021514375.tif 000203
2021514375.tif 000204
2021514375.tif 000205
2021514375.tif 000206
2021514375.tif 000207
2021514375.tif 000208
2021514375.tif 000209
2021514375.tif 000210
2021514375.tif 000211
2021514375.tif 000212
2021514375.tif 000213
2021514375.tif 000214
2021514375.tif 000215
2021514375.tif 000216
2021514375.tif 000217
2021514375.tif 000218
2021514375.tif 000219
のいずれか一つの化合物またはその薬学的に許容される塩である、請求項8記載の薬学的組成物。
【請求項１５】
下記の式(I)で表される化合物またはその薬学的に許容される塩：
2021514375.tif 000220
式中、
各R1は、独立に、（C1〜C4）アルキルまたはCNであり、nr1は0、1、2、または3であり、ただし各R1は炭素原子に結合することを条件とし；かつ
ARは、式-C(=O)N(R)Ar1で表される基であり；
RはHまたは(C1〜C4)アルキルであり；
Ar1は下記：
2021514375.tif 000221
からなる群より選ばれ；
式中、波線は結合する位置を示し；
いずれかのAr1は、下記：
-(C1〜C4)-アルキル、-(C1〜C4)-アルキルO、-(C1〜C4)-アルキルOC(O)、-CN、-ハロ、-(C3〜C7)シクロアルキル、-(C1〜C4)-アルキOC(O)、-COOH、(C3〜C7)-シクロアルキルOC(O)、-SF5、-メチレンジオキシ、-ジフルオロメチレンジオキシ、-エチレンジオキシ、-CF3、-OCF3、-C(O)NH2、-C(O)NH(CH2)2OH、-CH2OH、-NR2、-C(/)ONH-アルギニン、-C(O)O(CH2)2NR2、
2021514375.tif 000222
からなる群より選ばれる独立に選択されたR2基のnr2で置換され；波線は結合する位置を示し；かつnr2は0、1、2、または3である；または、
ARは、下記式：
2021514375.tif 000223
で表される基であり；
式中、R3は、下記：
(C1〜C4)-アルキル、(C1〜C4)-アルキルO、(C1〜C4)-アルキルOC(O)、CN、ハロ、(C3〜C7)シクロアルキル、(C1〜C4)-アルキOC(O)、COOH、(C3〜C7)-シクロアルキルOC(O)、-SF5、メチレンジオキシ、ジフルオロメチレンジオキシ、エチレンジオキシ、CF3、-OCF3、CONH2、CONH(CH2)2OH、CH2OH、NR2、CONH-アルギニン、およびC(O)O(CH2)2NR2からなる群より選択され；かつnr3は、0、1、2、または3である。
【請求項１６】
下記式：
2021514375.tif 000224
2021514375.tif 000225
2021514375.tif 000226
2021514375.tif 000227
2021514375.tif 000228
2021514375.tif 000229
2021514375.tif 000230
2021514375.tif 000231
2021514375.tif 000232
2021514375.tif 000233
2021514375.tif 000234
2021514375.tif 000235
2021514375.tif 000236
2021514375.tif 000237
2021514375.tif 000238
2021514375.tif 000239
2021514375.tif 000240
2021514375.tif 000241
2021514375.tif 000242
2021514375.tif 000243
2021514375.tif 000244
のいずれか一つの化合物またはその薬学的に許容される塩。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１３】
本発明は、本明細書に開示およびクレームされた、式(I)の新規な化合物も含み得る。
[本発明1001]
下記の式(I)で表される化合物またはその薬学的に許容される塩を含むインターフェロン遺伝子刺激因子（STING）アゴニストの有効量を患者に投与する工程を含む、インターフェロン遺伝子の発現を刺激する方法：
2021514375.tif 000245
式中、
各R1は、独立に、（C1〜C4）アルキルまたはCNであり、nr1は0、1、2、または3であり、ただし各R1は炭素原子に結合することを条件とし；かつ
ARは、式-C(=O)N(R)Ar1で表される基であり；
RはHまたは(C1〜C4)アルキルであり；
Ar1は下記：
2021514375.tif 000246
からなる群より選ばれ；
式中、波線は結合する位置を示し；
いずれかのAr1は、下記：
-(C1〜C4)-アルキル、-(C1〜4)-アルキルO、-(C1〜C4)-アルキルOC(O)、-CN、-ハロ、-(C3〜C7)シクロアルキル、-(C1〜C4)-アルキOC(O)、-COOH、(C3〜C7)-シクロアルキルOC(O)、-SF5、-メチレンジオキシ、-ジフルオロメチレンジオキシ、-エチレンジオキシ、-CF3、-OCF3、-C(O)NH2、-C(O)NH(CH2)2OH、-CH2OH、-NR2、-C(/)ONH-アルギニン、-C(O)O(CH2)2NR2、
2021514375.tif 000247
からなる群より選ばれる独立に選択されたR2基のnr2で置換され；波線は結合する位置を示し；かつnr2は0、1、2、または3である；または、
ARは、下記式：
2021514375.tif 000248
で表される基であり；
式中、R3は、下記：
(C1〜C4)-アルキル、(C1〜C4)-アルキルO、(C1〜C4)-アルキルOC(O)、CN、ハロ、(C3〜C7)シクロアルキル、(C1〜C4)-アルキOC(O)、COOH、(C3〜C7)-シクロアルキルOC(O)、-SF5、メチレンジオキシ、ジフルオロメチレンジオキシ、エチレンジオキシ、CF3、-OCF3、CONH2、CONH(CH2)2OH、CH2OH、NR2、CONH-アルギニン、およびC(O)O(CH2)2NR2からなる群より選択され；かつnr3は、0、1、2、または3である。
[本発明1002]
投与が、経口投与、腫瘍内投与、または経口投与と腫瘍内投与の両方を含む、本発明1001の方法。
[本発明1003]
投与が、抗体薬物複合体としてまたはリポソーム製剤で患者に投与することを含む、本発明1001の方法。
[本発明1004]
有効量の免疫チェックポイント標的薬の投与をさらに含む、本発明1001の方法。
[本発明1005]
免疫チェックポイント標的薬が、抗PD-L1抗体、抗PD-1抗体、抗CTLA-4抗体、または抗4-1BB抗体を含む、本発明1004の方法。
[本発明1006]
電離放射線または抗がん剤の投与をさらに含む、本発明1001の方法。
[本発明1007]
下記式：
2021514375.tif 000249
2021514375.tif 000250
2021514375.tif 000251
2021514375.tif 000252
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2021514375.tif 000256
2021514375.tif 000257
2021514375.tif 000258
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2021514375.tif 000260
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2021514375.tif 000267
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のいずれか一つの化合物またはその薬学的に許容される塩である、本発明1001の方法。
[本発明1008]
下記の式(I)で表される化合物またはその薬学的に許容される塩を含むインターフェロン遺伝子刺激因子（STING）アゴニストの有効量を患者に投与する工程を含む、患者における腫瘍を処置する方法：
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式中、
各R1は、独立に、（C1〜C4）アルキルまたはCNであり、nr1は0、1、2、または3であり、ただし各R1は炭素原子に結合することを条件とし；かつ
ARは、式-C(=O)N(R)Ar1で表される基であり；
RはHまたは(C1〜C4)アルキルであり；
Ar1は下記：
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からなる群より選ばれ；
式中、波線は結合する位置を示し；
いずれかのAr1は、下記：
-(C1〜C4)-アルキル、-(C1〜C4)-アルキルO、-(C1〜C4)-アルキルOC(O)、-CN、-ハロ、-(C3〜C7)シクロアルキル、-(C1〜C4)-アルキOC(O)、-COOH、(C3〜C7)-シクロアルキルOC(O)、-SF5、-メチレンジオキシ、-ジフルオロメチレンジオキシ、-エチレンジオキシ、-CF3、-OCF3、-C(O)NH2、-C(O)NH(CH2)2OH、-CH2OH、-NR2、-C(/)ONH-アルギニン、-C(O)O(CH2)2NR2、
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からなる群より選ばれる独立に選択されたR2基のnr2で置換され；波線は結合する位置を示し；かつnr2は0、1、2、または3である；または、
ARは、下記式：
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で表される基であり；
式中、R3は、下記：
(C1〜C4)-アルキル、(C1〜C4)-アルキルO、(C1〜C4)-アルキルOC(O)、CN、ハロ、(C3〜C7)シクロアルキル、(C1〜C4)-アルキOC(O)、COOH、(C3〜C7)-シクロアルキルOC(O)、-SF5、メチレンジオキシ、ジフルオロメチレンジオキシ、エチレンジオキシ、CF3、-OCF3、CONH2、CONH(CH2)2OH、CH2OH、NR2、CONH-アルギニン、およびC(O)O(CH2)2NR2からなる群より選択され；かつnr3は、0、1、2、または3である。
[本発明1009]
投与が、経口投与、腫瘍内投与、または経口投与と腫瘍内投与の両方を含む、本発明1008の方法。
[本発明1010]
投与が、抗体薬物複合体としてまたはリポソーム製剤で患者に投与することを含む、本発明1008の方法。
[本発明1011]
有効量の免疫チェックポイント標的薬の投与をさらに含む、本発明1008の方法。
[本発明1012]
免疫チェックポイント標的薬が、抗PD-L1抗体、抗PD-1抗体、抗CTLA-4抗体、または抗4-1BB抗体を含む、本発明1011の方法。
[本発明1013]
電離放射線または抗がん剤の投与をさらに含む、本発明1008の方法。
[本発明1014]
下記式：
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のいずれか一つの化合物またはその薬学的に許容される塩である、本発明1008の方法。
[本発明1015]
下記の式(I)で表される化合物またはその薬学的に許容される塩：
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式中、
各R1は、独立に、（C1〜C4）アルキルまたはCNであり、nr1は0、1、2、または3であり、ただし各R1は炭素原子に結合することを条件とし；かつ
ARは、式-C(=O)N(R)Ar1で表される基であり；
RはHまたは(C1〜C4)アルキルであり；
Ar1は下記：
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からなる群より選ばれ；
式中、波線は結合する位置を示し；
いずれかのAr1は、下記：
-(C1〜C4)-アルキル、-(C1〜C4)-アルキルO、-(C1〜C4)-アルキルOC(O)、-CN、-ハロ、-(C3〜C7)シクロアルキル、-(C1〜C4)-アルキOC(O)、-COOH、(C3〜C7)-シクロアルキルOC(O)、-SF5、-メチレンジオキシ、-ジフルオロメチレンジオキシ、-エチレンジオキシ、-CF3、-OCF3、-C(O)NH2、-C(O)NH(CH2)2OH、-CH2OH、-NR2、-C(/)ONH-アルギニン、-C(O)O(CH2)2NR2、
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からなる群より選ばれる独立に選択されたR2基のnr2で置換され；波線は結合する位置を示し；かつnr2は0、1、2、または3である；または、
ARは、下記式：
2021514375.tif 000298
で表される基であり；
式中、R3は、下記：
(C1〜C4)-アルキル、(C1〜C4)-アルキルO、(C1〜C4)-アルキルOC(O)、CN、ハロ、(C3〜C7)シクロアルキル、(C1〜C4)-アルキOC(O)、COOH、(C3〜C7)-シクロアルキルOC(O)、-SF5、メチレンジオキシ、ジフルオロメチレンジオキシ、エチレンジオキシ、CF3、-OCF3、CONH2、CONH(CH2)2OH、CH2OH、NR2、CONH-アルギニン、およびC(O)O(CH2)2NR2からなる群より選択され；かつnr3は、0、1、2、または3である。
[本発明1016]
下記式：
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のいずれか一つの化合物またはその薬学的に許容される塩。
【国際調査報告】
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