(57)【要約】運動障害を有する対象、特にパーキンソン病を患う対象の生活の質（ＱＯＬ）を向上させるための補助剤として使用するための、ａ）ソラマメ(Vicia faba)、ｂ）カギカズラ(Uncaria rhyncophylla)及びｃ）カンゾウ(liquorice root)の乾燥抽出物、コエンザイムＱ１０、及び好ましくはビタミンＣとＥから選ばれる少なくとも一つのビタミンを含む組合せ。この組合せは、好ましくは経口製剤、さらに好ましくはフードサプリメントの形態である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
運動障害の治療及び予防における補助剤として使用するための、
・ａ）ソラマメ(Vicia faba)、ｂ）カギカズラ(Uncaria rhyncophylla)及びｃ）カンゾウ(liquorice root)の乾燥抽出物
・コエンザイムＱ１０
を含む組合せ。
【請求項２】
前記運動障害がパーキンソン病である、請求項１に記載の使用のための組合せ。
【請求項３】
前記組合せがビタミンＣ及びＥの少なくとも一つを含む、請求項１又は２に記載の使用のための組合せ。
【請求項４】
前記組合せがビタミンＣ及びＥの両方を含む、請求項３に記載の使用のための組合せ。
【請求項５】
・ａ）ソラマメ(Vicia faba)、ｂ）カギカズラ(Uncaria rhyncophylla)及びｃ）カンゾウ(liquorice root)の乾燥抽出物；
・コエンザイムＱ１０；
・ビタミンＣ及びビタミンＥ
からなる請求項４に記載の使用のための組合せ。
【請求項６】
適切な賦形剤及び／又は希釈剤と組み合わせて、経口製剤に含有される請求項１〜５のいずれか１項に記載の使用のための組合せ。
【請求項７】
前記経口製剤がフードサプリメントである、請求項６に記載の使用のための組合せ。
【請求項８】
前記フードサプリメントが、
・８００〜１２００ｍｇ、好ましくは１０００ｍｇのａ）の乾燥抽出物；
・８０〜１２０ｍｇ、好ましくは１００ｍｇのｂ）の乾燥抽出物；
・３０〜７０ｍｇ、好ましくは５０ｍｇのｃ）の乾燥抽出物であって、ｃ）の乾燥抽出物の総重量に基づく計算で、最低１０重量％、さらに好ましくは１８〜２２％のグリシルレチン酸を含有するｃ）の乾燥抽出物；
・３０〜７０ｍｇ、好ましくは５０ｍｇのコエンザイムＱ１０；
・６０〜１００ｍｇ、好ましくは８０ｍｇのビタミンＣ；
・１０〜１４ｍｇ、好ましくは１２ｍｇのビタミンＥ
を含有する１回量サシェの形態である、請求項７に記載の使用のための組合せ。
【請求項９】
前記経口製剤が１日１回のみ投与される、請求項６〜９のいずれか１項に記載の使用のための組合せ。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、運動障害を有する対象、特にパーキンソン病を患う対象の生活の質（ＱＯＬ）を向上させるための補助剤（コアジュバント）として使用するための経口製剤、特に栄養補助食品（フードサプリメント）に関する。
【背景技術】
【０００２】
運動障害という用語は、運動能力の減退及び／又は不随意運動（すなわち意志力で制御が困難な動き）の存在を特徴とする膨大な数の疾患をまとめたものである。最もよく知られている形態の中でもパーキンソン症候群は現代の神経疾病分類学の非常に多くの章を占めている１。原発型（パーキンソン病、多系統萎縮症、進行性核上まひ、大脳皮質基底核変性症、レビー小体型認知症）、続発型（いわゆる血管性、感染性、感染後、外傷後パーキンソニズム、非従来型薬剤によるパーキンソニズム、環境性、医原性、代謝毒性因子によるパーキンソニズム）及び中枢神経系の遺伝性疾患（ウィルソン病、若年型(Westphal variant)ハンチントン病、ハレルフォルデン・スパッツ病）に随伴する形態のパーキンソニズムの区別がある。これらの疾患のうち最もよく知られているのはパーキンソン病である１。パーキンソン病は、徐々に進行する神経系の変性疾患と定義される。脳の特定構造である黒質を構成する神経細胞が徐々に失われる。これらの細胞は、運動活動が迅速かつ調和的に行えるように、基本的神経伝達物質のドーパミンという物質を産生する。従って、それが欠乏すると、自発的な運動活動の減退、筋硬直、緩慢な随意運動の遂行及び振戦を招く１。生化学的観点からは、ドーパミンの量の減少、特徴的色素沈着の喪失（神経メラニン濃度の低下）、ミトコンドリア呼吸鎖の複合体Ｉの活性低下及びα−ケトグルタル酸デヒドロゲナーゼの活性低下２が、パーキンソン病患者のＳＮｐｃ（黒質緻密部）のレベルで確認されている。ミトコンドリアは著明なＲＯＳ（活性酸素種）源である。これらの種は、酸化的損傷を引き起こすほか、グルタミン酸やアスパラギン酸などの興奮性アミノ酸の放出を誘導することによってミトコンドリアの機能を阻害し、それが次にサイトゾル中に遊離Ｃａ＋２の増加を引き起こし、神経変性を招く一連の事象をもたらす２。そして、これこそがパーキンソン病患者で観察されるまさしくすべてのことである１，２。年齢別の有病率分析によれば、いかにパーキンソン病が６０歳を超える年齢群に明らかに多いかが強調されるが、性別の割合では男性にわずかに多いことが示されている。結論として、イタリアでは、最も正確な疫学研究に基づき、かつ最新の国勢調査時の居住人口を考慮すると、有病数は約１７０，０００例と推定される１。
【０００３】
この型の病態の旧来の治療は、絶対的にレボドパ又はＬ−ドパを用いた治療である。これらの薬物は、線条体のドーパミン作動性シナプス前ニューロン内で脱カルボキシル化されてドーパミンとなり、パーキンソン病における薬物の治療効果を担っている。レボドパの血漿中濃度は０．５〜２時間であり、半減期は１〜３時間である。この治療は一般的に、Ｌ−ドパの末梢副作用を低減する末梢ドパカルボキシラーゼ阻害薬（カルビドパ又はベンセラジド）と併用される８。
【０００４】
別の種類の治療は、モノアミンオキシダーゼ阻害薬（ＭＡＯ阻害薬）、具体的にはＢ−ＭＡＯ阻害薬であるセレギリンの投与を含む。この作用機序は、ドーパミンをニューロン内分解から保護することにより、ドーパミンの代謝を減少させることである８。
【０００５】
パーキンソン病の治療のための他の種類の薬物は、ドーパミンアゴニスト受容体、例えば、ブロモクリプチン及びいくつかの新薬、例えばロピニロール、プラミペキソール、ロチゴチン及びアポモルヒネである。
【０００６】
別の種類の治療はアマンタジンの投与を含む。この薬物は、ドーパミンの放出増大、アミン取込みの阻害、ドーパミン受容体に対する直接作用及び最終的にＮ−メチル−アスパラギン酸型のグルタミン受容体の阻害といった複数の作用機序を有する。
【０００７】
これらの薬物は有効ではあるが、長期的に見ればかなりの副作用を有する。
そこで、毎日投与され、上記薬物の日用量を削減することによって副作用の低減を可能にし、従って運動障害を患う対象のＱＯＬを改善できる例えばフードサプリメント（栄養補助食品）のような入手可能な経口製剤が求められていると感じられる。
【０００８】
ソラマメ(Vicia faba)は天然のレボドパ（Ｌ−ドパ）源であることも知られている。ソラマメの臨床使用がＬ−ドパの血漿中レベルの上昇とパーキンソン病患者の運動機能の改良にいかに貢献するかも示されている３，４，５。食品としてのソラマメ中のＬ−ドパの平均含有量は１．４３〜１．５１ｍｇ／ｄｌ水性抽出物の範囲であるので、パーキンソン病の食物治療としてのその合理的使用が仮定される６。
【０００９】
カギカズラ(Uncaria rhynchophylla)の水性抽出物は、パーキンソン病モデルの構築に使用される神経毒、６−ヒドロキシドーパミン（６−ＯＨＤＡ）による損傷の場合、ドーパミン作動性ニューロンを著しく保護する７。従って、カギカズラの水性抽出物は、臨床的パーキンソニズムの治療にとって重要な神経保護効果を発揮できる。カギカズラによる生物学的機序も、ドーパミンの血漿中レベルの上昇、ミトコンドリア−複合体Ｉの活性の正常化及びグルタチオン（抗酸化特性を有するトリペプチド）のレベルの正常化に関する８。アルファ−シヌクレイン（通常シナプス前神経終末に見出され、そこで神経インパルスの伝達に役割を果たしていると考えられる小タンパク質。パーキンソン病では、アルファ−シヌクレインは凝集して、レビー小体と呼ばれる典型的な沈着物を病的ニューロンに生じるより大きいオリゴマーを形成しやすい）のクリアランスを促進する潜在的活性がカギカズラに起因するとされる証拠がある９。
【００１０】
カンゾウに含有されるグリシルレチン酸は、ドーパミンＤ３受容体（ＤＲＤ３）に対して強力な結合親和性を示す。Ｄ３ドーパミン作動性受容体は、一連の神経学的過程、例えば、動機付け（モチベーション）、喜び、認知過程、記憶、学習、運動制御及び神経内分泌シグナル伝達経路の調節に役割を果たし、パーキンソン病を治療する薬物の主要標的の一つである１０。さらに、カンゾウは、小グリア細胞（中枢神経系において活性な第一の主要な免疫防御を担う）に対する特異的抗炎症作用と、海馬の神経細胞死に関連するグルタミン酸媒介性興奮毒性に対する低減作用を有する１１。
【００１１】
いくつかの証拠によれば、ミトコンドリアの機能不全と酸化的ストレスがパーキンソン病のドーパミン作動性神経変性に中心的役割を果たしていることが示唆されている。ミトコンドリアレベルでのフリーラジカル発生に対抗するのに活性な非酵素的抗酸化剤として、ビタミンＣ、ビタミンＥ及びコエンザイムＱ１０が挙げられる。ビタミンＥはラジカル捕捉機構として作用し、ペルオキシラジカル、ペルオキシ亜硝酸及びヒドロキシルラジカルを安定化させることにより、ラジカル連鎖の進行及び膜上での脂質過酸化の確立を阻害する１２。第二の抗酸化剤はビタミンＣで、これはビタミンＥとの共同作業により、α−トコフェロールラジカルからα−トコフェロールを再生する１２。コエンザイムＱ１０の場合、その抗酸化活性は、その酸化型（ユビキノン）とその還元型（ユビキノール）との間の酸化還元サイクルで２個の電子を交換する能力に由来する。ユビキノールは強力な抗酸化剤で、脂質過酸化過程を縮減し、ＤＮＡタンパク質の酸化を阻害する１２。これらの非酵素的抗酸化剤の統合は、パーキンソン病の基礎となる神経変性を防止する有効なツールとして認識されている１２。
【００１２】
ＵＳ２００８７１１８５８３は、３種類の有益植物、すなわちＥ型植物、言い換えればエネルギーを増強できる植物、バイオインテリジェンスを増強できる植物（Ｉ）及び最後にエネルギーの組織化を保証できる植物（Ｏ）の組合せによって形成される植物性栄養補助食品(phytonutraceutical)に関する。上記定義に入る例示的組成物が表Ｉに例示されており、そこにはキャッツクロー(Uncaria tormentosa)とコエンザイムＱ１０が含まれている。
【００１３】
ＵＳ２００７／１１６７９は、パーキンソン病で発生する変性過程の特定因子を緩和するための栄養補助食品に関し、活性成分として、ピルビン酸(pyruvate)、コハク酸(succinate)、オキサロ酢酸(oxaloacetate)が、微量栄養素、少数元素、アミノ酸、フラボノイド及び植物濃縮物と共に含まれている。
【００１４】
ＥＰ３２２５２４５には、ソラマメから得られた抽出物と、おそらくはビタミンＥの存在下で、変性疾患の治療及び／又は予防におけるその使用が記載されている。
ＣＮ１０４１７３４１９には、パーキンソン病治療のための、もやし(bean sprout)及び花粉末(flower powders)をＬ−ドパ源として含む錠剤を開示している。
【００１５】
ＣＮ１０１５４９０８２は、パーキンソン病治療のための、シュロソウ(veratrum)とカンゾウを含む組成物を特許請求している。
ＣＮ１０４７３８７４７には、パーキンソン病を予防及び制御するための、ビタミンＣ、クエン酸及び最後にスクロースを含有するソラマメ花飲料が開示されているが、本発明を予期するものでは全くない。
【００１６】
Ｋｅｍｐｓｔｅｒ  Ｐ．らは、“パーキンソン病におけるソラマメ(Vicia faba)の運動効果：単回投与試験(Motor effects of broad beans (Vicia faba) in Parkinson's disease: single dose studies). ＡＳＩＡ  ＰＡＣＩＦＩＣ  ＪＯＵＲＮＡＬ  ＯＦ  ＣＬＩＮＩＣＡＬ  ＮＵＴＲＩＴＩＯＮ  ＳＭＩＴＨ  ＧＯＲＤＯＮ−ＪＯＵＲＮＡＬ，  Ｌｏｎｄｏｎ，ＧＢ，８５−８９ページ  ｎｏ．２，６月１日，ＸＰ００９１９１２５０  ＩＳＳＮ：０３７８−８７４１，ＤＯＩ１０．１０６／ＪＥＰ  ２００９．０８．２３，２００９−０８−２２に検索”に、１００〜２００ｇのソラマメとカルビドパを投与されたパーキンソン病患者の運動効果についての研究を記載している。
【００１７】
Ｓｈｉｍらは、“カギカズラのカギの効果(Effects of the hook of Uncaria rhynchophylla)”に、この植物の抽出物が、細胞死とＲＯＳ生成をかなり削減し；ＧＳＨレベルを上昇させ、６−ＯＨＤＡ（６−ヒドロキシドーパミン）によって誘導されるカスパーゼ−３の活性を阻害し、誘発されるアポモルヒネ回転を著しく削減し、黒質緻密部におけるニューロンのドーパミン作動性喪失を減少させることを報告している。これは、この抽出物が、パーキンソン病モデルにおいて、抗酸化及び抗アポトーシス機序を通じて６−ＯＨＤＡ誘導神経毒性に対する神経保護活性を発揮することを示している。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１８】
【特許文献１】米国特許公開第２００８７１１８５８３号
【特許文献２】米国特許公開第２００７／１１６７９号
【特許文献３】欧州特許（公開）第３２２５２４５号
【特許文献４】中国特許（公開）第１０４１７３４１９号
【特許文献５】中国特許（公開）第１０１５４９０８２号
【特許文献６】中国特許（公開）第１０４７３８７４７号
【非特許文献】
【００１９】
【非特許文献１】Kempster P. et al "Motor effects of broad beans (Vicia faba) in Parkinson's disease: single dose studies. ASIA PACIFIC JOURNAL OF CLINICAL NUTRITION SMITH GORDON-JOURNAL, London, GB, pages 85-89 no. 2, 1 June, XP009191250 ISSN: 0378-8741, DOI10.106/JEP 2009.08.23, retrieved on 2009-08-22
【非特許文献２】Shim et al "Effects of the hook of Uncaria rhynchophylla”
【発明の概要】
【００２０】
出願人は、今回、
−  ａ）ソラマメ(Vicia Faba)、ｂ）カギカズラ(Uncaria Rhyncophylla)及びｃ）カンゾウ(liquorice root)の乾燥抽出物、及び
−  コエンザイムＱ１０
を含む組合せが、運動障害を患う患者の生活の質（ＱＯＬ）の向上のため、特にパーキンソン病の治療のための補助剤（コアジュバント）として効果的に使用できることを見出した。
【００２１】
実際、以下に報告されている実験テストで示されているように、出願人は、この組合せが、単一抽出物の活性と比較した場合に、予防作用を示すことができることを見出した。それは、
−  ニトロソ化ストレス指数である亜硝酸(nitrite)レベルの顕著な低減を決定できる；
−  乳酸デヒドロゲナーゼの活性、ひいては組織損傷の徴候を低減できる
ためであり；
そしてまた同時に、単一抽出物ａ）、ｂ）及びｃ）よりわずかに程度は低いが、
−  脂質過酸化の指数である８−イソ−ＰＧＦ２α（８−イソプロスタグランジンＦ２α）のレベルを低減できる（植物成分の中では中間的作用である）；
−  ＤＯＰＡＣ／ＤＡ比で評価されるドーパミン作動性ターンオーバーのレベルを低減できる（ここで、ＤＯＰＡＣはドーパミン“ＤＡ”の主要代謝産物）（図４）
ためでもある。
【００２２】
従って、この組合せは、単一乾燥抽出物ａ）、ｂ）及びｃ）ならびにコエンザイムＱ１０とは異なり、急性期の運動障害及び特にパーキンソン病に有効な治療作用を発揮できるほか、これらの病態に対して単一抽出物の一つより決定的に高い予防作用を導き出すことができる。
【図面の簡単な説明】
【００２３】
下記図面１〜４の凡例を以下に示す。
・ＬＰＳ＝リポ多糖
・６−ＯＨ−ＤＡ＝６−ヒドロキシドーパミン
・ダルベッコ緩衝液：未処理対照
・８−イソ−ＰＧＦ２α：８−イソプロスタグランジンＦ２α
・ＤＯＰＡＣ：３，４−ジヒドロキシフェニル酢酸（ドーパミン代謝産物）
・ＤＡ：ドーパミン
・ＤＯＰＡＣ／ＤＡ：ＤＡターンオーバーの尺度（この比は神経変性の場合に増加する）
・アポトーシス：プログラム細胞死
【図１】図１は、本発明の組合せ（製剤）対象物が線条体中の亜硝酸レベルに及ぼす効果を、単一抽出物ａ）、ｂ）及びｃ）を用いて得られた類似物と、陰性対照（ビヒクルのみで処理された線条体）及び陽性対照（ビヒクルとＬＰＳのみが投与された線条体）で得られたものと比較して示す。
【図２】図２は、グラフに示された組合せ（製剤）が線条体中のＬＤＨレベルに及ぼす効果を、単一抽出物ａ）、ｂ）及びｃ）を用いて得られたものと、陰性対照（ビヒクルのみで処理）及び陽性対照（すなわちビヒクルとＬＰＳで処理された線条体）で得られたものと比較して示す。
【図３】図３は、本発明による、グラフに示された組合せ（製剤）が線条体中の８−イソ−ＰＧＦ２αレベルに及ぼす効果を、単一抽出物ａ）、ｂ）及びｃ）を用いて得られたものと、ビヒクルのみで処理された陰性対照及び陽性対照（すなわちビヒクルとＬＰＳで処理された線条体）で得られたものと比較して示す。
【図４】図４は、本発明による、グラフに示された組合せ（製剤）が線条体中のＤＯＰＡＣ／ＤＡレベルに及ぼす効果を、単一抽出物ａ）、ｂ）及びｃ）を用いて得られたものと、ビヒクルのみで処理された線条体の陰性対照及びＬＰＳと６−ＯＨ−ＤＡでそれぞれ処理された陽性対照で得られたものとそれぞれ比較して示す。
【発明を実施するための形態】
【００２４】
本記載の背景技術に関する部分でも述べた通り、本発明の目的のために、定義“運動障害”は、運動能力の減退及び／又は不随意運動（すなわち意志力で制御が困難な動き）の存在を特徴とする膨大な数の疾患をまとめたものである。それらは、好ましくは、原発性パーキンソン症候群（パーキンソン病、多系統萎縮症、進行性核上まひ、大脳皮質基底核変性症、レビー小体型認知症）、続発性パーキンソン症候群（いわゆる血管性、感染性、感染後、外傷後パーキンソニズム及び非従来型薬剤によるパーキンソニズム、環境性、医原性、代謝毒性因子によるパーキンソニズム）及び中枢神経系の遺伝性疾患（ウィルソン病、若年型(Westphal variant)ハンチントン病、ハレルフォルデン・スパッツ病）に随伴する形態のパーキンソニズムである。好ましくは、本発明による組合せを用いて治療される運動障害はパーキンソン病である。
【００２５】
本発明の目的のために、定義“下記成分を含む”は、明示的に掲載及び引用されている成分以外の更なる成分の存在を排除しないが、定義“下記成分からなる”は、明示されている以外の他の成分の存在を排除するので、より限定的な意味を持つ。乾燥ソラマメ抽出物は好ましくは果実から得られる。好ましくは、本発明による使用のための組合せは、ビタミンＣ及びＥから選ばれる少なくとも一つのビタミンを含む。
【００２６】
さらに好ましくは、本発明による使用のための組合せは両ビタミンを含む。
なおさらに好ましくは、本発明による使用のための組合せは、
・ａ）ソラマメ(Vicia faba)、ｂ）カギカズラ(Uncaria rhyncophylla)及びｃ）カンゾウ(liquorice root)の乾燥抽出物、及び
・コエンザイムＱ１０
・ビタミンＣ及びビタミンＥ
によって構成される。
【００２７】
好ましくは、本発明による使用のための組合せは、適切な賦形剤及び／又は希釈剤と組み合わせた経口製剤、好ましくはフードサプリメントに含有される。
好ましくは、該フードサプリメントは、
・８００〜１２００ｍｇ、好ましくは１０００ｍｇのａ）の乾燥抽出物、
・８０〜１２０ｍｇ、好ましくは１００ｍｇのｂ）の乾燥抽出物、
・３０〜７０ｍｇ、好ましくは５０ｍｇのｃ）の乾燥抽出物で、ｃ）の乾燥抽出物の総重量を基に計算された重量パーセント含有量が最低１０％、さらに好ましくは１８〜２２％のグリシルレチン酸、
・３０〜７０ｍｇ、好ましくは５０ｍｇのコエンザイムＱ１０、
・６０〜１００ｍｇ、好ましくは８０ｍｇのビタミンＣ、
・１０〜１４ｍｇ、好ましくは１２ｍｇのビタミンＥ
を含有する１回量サシェの形態である。
【００２８】
好ましくは、本発明の目的のための組合せを含む経口製剤又はさらに詳しくはフードサプリメントは、好ましくは１日１回のみ投与される。
例示的非制限的目的のために、毎日の１回量サシェ製剤の例を以下の表１に報告する。表中には活性成分とその相対量は報告されているが、賦形剤もそれらの量も報告されていない。しかしながら、賦形剤は従来型のものであり、当業者には周知である。
【００２９】
表１−１回量サシェあたりの活性成分の配合表。賦形剤も含めた総重量は約４ｇで、これを約２５０ｍｌの水に溶解する。
【００３０】
【表１】
2021514957.tif 000002
【００３１】
＊この抽出物は４ｇの新鮮植物（好ましくは新鮮果実）から得られる
【実施例】
【００３２】
以下に報告されている下記実験テストは、神経変性過程に対する予防及び効果の両方に関する本発明の組合せ対象物の有効性を示す。
実験テスト
１．実験モデル
単一サンプルを可溶化後、エクスビボ実験モデルに従って試験する。
【００３３】
抽出物による刺激は、スカラー濃度の溶液を培地に添加することによって行われる。効果は、脳組織の慢性炎症の形態学的及び構造的変化に起因する神経伝達、酸化的ストレス及び炎症の特異的マーカーの定量的測定を通じて評価される。この目的に向けて、ＬＰＳ及び６−ヒドロキシドーパミンのような炎症誘発性及び変性刺激による処置に付された線条体核、前頭前皮質及び海馬の特定切片をラット脳から取り出した。
【００３４】
次に、培地への補給の効果を下記パラメーターを評価することによって評価した。
−  ドーパミンとその主要代謝産物（ＤＯＰＡＣ）のレベル：ＤＯＰＡＣ／ＤＡ比；
−  脂質過酸化バイオマーカー及び酸化的ストレス及び組織損傷における重要酵素、例えば乳酸デヒドロゲナーゼ、カタラーゼ、ミエロペルオキシダーゼ、シクロオキシゲナーゼ及び一酸化窒素シンターゼなどの活性。
【００３５】
試験で使用された単一抽出物の投与量は、完全製剤中に存在する量と同一であり、市販製剤の各種成分間の関係を尊重している。
２．結果と考察
本研究では、神経炎症及びパーキンソン病のエクスビボでの実験モデルにおいて、ソラマメ、カギカズラ、カンゾウ、コエンザイムＱ１０に基づくフードサプリメントの成分の役割を調査した。
【００３６】
この実験モデルでは、ラット線条体の生検標本を制御された雰囲気下３７℃で４時間、“ダルベッコ緩衝液”として知られるリン酸緩衝液からなる培地を用いてインキュベートした。
【００３７】
特に、組織は下記実験条件下でインキュベートされた。
・ビヒクル：ダルベッコ緩衝液のみで刺激；
・ＬＰＳ：細菌リポ多糖（ＬＰＳ）を追加したダルベッコ緩衝液で刺激；
・フードサプリメント：細菌リポ多糖（ＬＰＳ）とフードサプリメントを追加したダルベッコ緩衝液で刺激；
・６−ＯＨ−ＤＡ：６−ＯＨ−ＤＡを追加したダルベッコ緩衝液で刺激；
・フードサプリメント：６−ＯＨ−ＤＡを追加したダルベッコ緩衝液で刺激。
【００３８】
摘出ラット組織のＬＰＳによる処理は、インビボでの炎症性損傷及び酸化的損傷を再現できる有効な炎症の実験モデルである（Ｐｈｙｔｏｔｈｅｒ  Ｒｅｓ．２０１６  Ｓｅｐ；３０（９）：１５１３−８）。
【００３９】
他方、６−ＯＨ−ＤＡによる処理は、パーキンソン病の神経変性をエクスビボで再現する（Ｎｅｕｒｏｔｏｘ  Ｒｅｓ．２００７  Ａｐｒ；１１（３−４）：１５１−６７．）。
【００４０】
この実験条件で、線条体中の亜硝酸 (nitrites)及び乳酸デヒドロゲナーゼ（ＬＤＨ）などの酸化的ストレス及び組織損傷のマーカーの増加と、ドーパミンレベルの減少が観察される。
【００４１】
他方、炎症誘発性刺激に付された線条体生検標本を、抗酸化活性／抗炎症活性を有する薬物及び植物抽出物で処理すると、組織損傷の発症と酸化的ストレス及び組織損傷のマーカーの病的増加を防止できる。
【００４２】
この文脈において、フードサプリメントの使用は、
−  ニトロソ化ストレスの指数である亜硝酸レベルに顕著な減少を測定でき、これは単一成分の一つより強い作用である（図１）；
−  乳酸デヒドロゲナーゼの活性、ひいては組織損傷の徴候を低減でき、これは単一成分の一つより強い作用である（図２）；
−  脂質過酸化の指数である８−イソ−ＰＧＦ２α（８−イソプロスタグランジンＦ２α）のレベルを低減でき、これは植物成分間で中間的な作用である（図３）；
−  ＤＯＰＡＣ／ＤＡ比として評価されるドーパミン作動性ターンオーバーのレベルを低減できる（ここでＤＯＰＡＣはドーパミン“ＤＡ”の主要代謝産物である）（図４）
ことが証明されたことが観察された。
【００４３】
単一植物成分（ソラマメ、カギカズラ及びカンゾウ）は、製剤よりも、酸化的損傷の防止に無効であるか又は低効果であることが分かった。
ドーパミン作動性ターンオーバー（ＤＯＰＡＣ／ＤＡ比）に対する単一成分及びサプリメントの活性に関しては、ＬＰＳで刺激された組織において、製剤は、ソラマメより高く、ドーパミン作動性ターンオーバー及びアポトーシス経路に対してそれぞれ阻害効果を示すカンゾウ及びカギカズラに匹敵する保護作用を有していることが観察される（図４）。
【００４４】
他方、神経毒６−ＯＨ−ドーパミンで刺激された線条体組織に対しては、フードサプリメントは単一植物成分よりもわずかに低い作用を有し、カギカズラよりは高活性であるが、カンゾウ及びソラマメと比較するとわずかに低活性の結果となったことが観察される。しかしながら、陽性対照（６−ＯＨ−ＤＡ）と比較すると、サプリメントはＤＯＰＡＣ／ＤＡ比を衝撃的に低減し、混合物の有効性を正当化している。
【００４５】
従って、ＬＰＳで刺激された線条体のレベルで、フードサプリメントは、単一成分と比較すると、より強い保護効果を有すると結論付けることができる。これは多標的（マルチターゲット）抗酸化作用に由来するとみられる。他方、６−ＯＨ−ドーパミンによって誘導されたパーキンソン病モデルで示された有効性は、単一抽出物と比較するとごくわずかに低いが、急性期の神経変性疾患を特徴付ける脳の炎症状態及び酸化状態を低減できる保護剤としてのサプリメントの使用を支持するものである。
【００４６】
参考文献一覧
【００４７】
【表２−１】
2021514957.tif 000003
【００４８】
【表２−２】
2021514957.tif 000004
【図１】
2021514957.tif 000005
【図２】
2021514957.tif 000006
【図３】
2021514957.tif 000007
【図４】
2021514957.tif 000008
【国際調査報告】
2021514957.tif 000009
2021514957.tif 000010
2021514957.tif 000011