(57)【要約】5-HT受容体アゴニストは、様々な疾患の処置において有用である。本明細書において提供するのは、例えば、5-HT4アゴニスト（例えば、フェンフルラミン）などの5-HT受容体アゴニストを用いる、ヒト患者の発作の発生率および/または重症度を低減する方法である。その必要がある対象に5-HT4アゴニスト（例えば、フェンフルラミン）を投与することによる、てんかんと診断された対象のてんかんもしくはてんかん性脳症を処置する方法、および/またはSUDEPの発生率を低減する、改善する、もしくは消失させる方法を提供する。本発明の方法を実施する際に使用するための薬学的組成物も提供する。2021526507.tif 000008
2021526507.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒト患者の発作の発生率または重症度を低減させる方法であって、
5-ヒドロキシトリプタミン受容体4アゴニスト（5-HT4アゴニスト）の治療的有効用量を該患者に投与する段階；および
5-HT4アゴニストに該患者の5-HT4受容体を刺激させ、それにより該患者の発作の発生率または重症度を低減させる段階
を含む、前記方法。
【請求項２】
ヒト患者の発作により誘発される呼吸停止（S-IRA）を阻害する方法であって、
5-HT4アゴニストの治療的有効用量を該患者に投与する段階；および
5-HT4アゴニストに該患者の5-HT4受容体を刺激させ、それにより該患者のS-IRAを阻害する段階
を含む、前記方法。
【請求項３】
ヒト患者の、発作後抑制（PID）期間平均の長さを低減させる方法であって、
5-HT4アゴニストの治療的有効用量を該患者に投与する段階；および
5-HT4アゴニストに該患者の5-HT4受容体を刺激させ、それにより該患者のPID期間を阻害する段階
を含む、前記方法。
【請求項４】
ヒト患者における、発作により誘発されるてんかん患者の予期せぬ突然死（Sudden Unexpected Death in Epilepsy；SUDEP）の確度を低減させる方法であって、
5-HT4アゴニストの治療的有効用量を該患者に投与する段階；および
5-HT4アゴニストに該患者の5-HT4受容体を刺激させ、それにより該患者のSUDEPの確度を低減させる段階
を含む、前記方法。
【請求項５】
発作により誘発されるてんかん患者の突然死（SUDEP）の可能性があると診断された患者の脳内の1つまたは複数の5-HT4受容体を刺激する方法であって、該患者が発作を示し、前記方法が、
5-HT4アゴニストの治療的有効用量を該患者に投与する段階；および
5-HT4アゴニストに該患者の5-HT4受容体を刺激させ、それにより該患者のSUDEPの可能性を低減させる段階
を含む、前記方法。
【請求項６】
5-HT4アゴニストがフェンフルラミン、BIMU-8、シサプリド、モサプリド、プルカロプリド、レンザプリド、RS-67506、テガセロッド、ザコプリド、メトクロプラミド、およびスルピリド、またはその薬学的に許容される塩からなる群より選択される、請求項1〜5のいずれか一項記載の方法。
【請求項７】
5-HT4アゴニストがフェンフルラミン、またはその薬学的に許容される塩である、請求項1〜5のいずれか一項記載の方法。
【請求項８】
フェンフルラミンを補助的な治療剤として投与する、請求項1〜7のいずれか一項記載の方法。
【請求項９】
フェンフルラミンの治療的有効用量が、0.2mg/kg/日〜0.08mg/kg/日から30mgの最大1日用量までからなる群より選択される、請求項7または8記載の方法。
【請求項１０】
フェンフルラミンの治療的有効用量を経口、注射、経皮、吸入、鼻内、直腸内、膣内および非経口からなる群より選択される剤形で投与する、請求項1〜9のいずれか一項記載の方法。
【請求項１１】
フェンフルラミンの治療的有効用量を経口液体剤形で投与する、請求項1〜10のいずれか一項記載の方法。
【請求項１２】
スチリペントールまたはその薬学的に許容される塩の有効用量を患者に投与する段階をさらに含む、請求項1〜11のいずれか一項記載の方法。
【請求項１３】
バルプロエートまたはその薬学的に許容される塩の有効用量を患者に投与する段階をさらに含む、請求項1〜12のいずれか一項記載の方法。
【請求項１４】
クロバザムまたはその薬学的に許容される塩の有効用量を患者に投与する段階をさらに含む、請求項1〜13のいずれか一項記載の方法。
【請求項１５】
フェンフルラミンが、患者に投与される唯一の薬学的活性薬物である、請求項1〜14のいずれか一項記載の方法。
【請求項１６】
5-HT4アゴニストが下記のうちの少なくとも1つである、請求項1〜15のいずれか一項記載の方法：
（a）5-HT2B受容体において不活性である；
（b）5-HT2B受容体の中性アゴニスト；および
（c）5-HT2B受容体5-HT2B受容体の逆アゴニスト。
【請求項１７】
患者が、プラシーボに比べて有意に高い応答率を示す、請求項1〜16のいずれか一項記載の方法。
【請求項１８】
患者がけいれん発作頻度の基準線からの≧40％低減を示すまでの日数の期間にわたり投与を繰り返す段階をさらに含む、請求項1〜17のいずれか一項記載の方法。
【請求項１９】
患者がけいれん発作の頻度の少なくとも≧50％低減を示す、請求項1〜18のいずれか一項記載の方法。
【請求項２０】
患者がけいれん発作の頻度の少なくとも≧75％低減を示す、請求項1〜19のいずれか一項記載の方法。
【請求項２１】
患者がけいれん発作の頻度の少なくとも≧90％低減を示す、請求項1〜20のいずれか一項記載の方法。
【請求項２２】
患者が発作を全く起こさない、請求項1〜21のいずれか一項記載の方法。
【請求項２３】
患者が5-HT4アゴニストの初回投与から2年後に生存している、請求項1〜22のいずれか一項記載の方法。
【請求項２４】
患者が、ドラベ症候群、レノックス・ガストー症候群、ドゥース症候群、点頭けいれん、ウェスト症候群、および難治性てんかんからなる群より選択されるてんかん症候群と診断されている、請求項1〜18のいずれか一項記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
分野
本発明は概して、てんかんまたはてんかん性脳症などの発作性障害と診断された患者の治療的処置に関する。より具体的には、本発明は、治療剤としてのフェンフルラミンの使用、ならびに、てんかんまたはてんかん性脳症の難治型と診断されかつ発作により誘発されるてんかん患者の予期せぬ突然死（Sudden Unexpected Death in Epilepsy；SUDEP）のリスクを有するヒト患者を処置するためのその使用法に関する。
【背景技術】
【０００２】
序
てんかんは、反復性発作に対する感受性によって特徴づけられる脳の状態である。てんかんには、出生時外傷、周産期感染症、無酸素症、感染性疾患、毒素の摂取、脳の腫瘍、遺伝性障害または変性疾患、頭部損傷または外傷、代謝障害、脳血管発作およびアルコール離脱を非限定的に含む、多くの原因がある。
【０００３】
てんかんの多数のサブタイプが特徴付けられており、それぞれが独自の臨床症状、徴候、および表現型、基礎となる病態生理ならびに異なる処置に対する別個の応答を有する。国際抗てんかん連盟（「ILAE」）の分類・用語委員会によって採用された系が、最新でありかつ当技術分野において広く受け入れられている（例えば、Berg et. al, ''Revised terminology and concepts for organization of seizures,'' Epilepsia, 51（4）:676-685 （2010）参照）。
【０００４】
（表１）てんかんサブタイプのILAE分類スキーム
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【０００５】
ILAE分類スキームの第V部は、リストが完全には程遠く、かつ、まだ完全に特徴付けられていないまたは別個の症候群として認識されるに至っていないてんかんまたはてんかん性脳症のサブタイプがまだ存在するという事実を強調している。すなわち、当業者であれば、てんかんの異なるサブタイプが異なる刺激によって誘発されること、異なる生物学的経路によって制御されること、かつ、遺伝的、環境的、および/または脳の疾患もしくは損傷が原因のいずれであろうと、異なる原因を有することを理解するであろう。すなわち、当業者であれば、1つのてんかんサブタイプに関する教示が他のいかなるサブタイプにも必ずしも当てはまらないことが最も一般的であると理解するであろう。
【０００６】
特に重要なのは、てんかんまたはてんかん性脳症の異なるタイプを処置するために使用される化合物が多数あり、てんかんまたはてんかん性脳症の異なるサブタイプは異なる抗けいれん薬に対して異なる応答をすることである。すなわち、特定の薬物はてんかんの1つの型に対して有効であり得るが、他の型に対してはまったく無効であり得るか、または発作の頻度および重症度の悪化などの症状の増悪のために禁忌にさえなり得る。その結果、特定のタイプのてんかんに対する特定の薬物の有効性は全く予測不可能であり、したがって、特定のタイプのてんかんまたはてんかん性脳症に有効であることが以前に知られていない特定の薬物が有効であると判明した場合、これは全く驚くべき発見である。これは、以前は難治性で公知の薬物に耐性であったてんかん症候群に特に当てはまる。
【０００７】
てんかんまたはてんかん性脳症の様々な型の処置において、多数の異なる薬物が使用されている。以下のリストは包括的ではないが、てんかんと診断された患者に広く処方される薬物が含まれていると考えられる。
【０００８】
（表２）一般に処方される抗てんかん薬
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【０００９】
てんかんまたはてんかん性脳症の異なるサブタイプは、異なる抗けいれん薬に対して異なる応答をするため、特定のタイプのてんかんまたはてんかん性脳症に対して特定の薬物が有効であることは、いずれにしても驚くべき結果である。
【００１０】
ドラベ症候群は、乳児期に始まる難治性てんかんのまれで悲惨な型である。最初に、患者は長期の発作を経験する。2年目にはさらなるタイプの発作が起こり始め、これは、おそらく絶え間ない発作の継続に起因する脳低酸素症の繰り返しによる、発達の低下または停滞と同時に起こる。これは、言語および運動技能の発達不良を引き起こす。ドラベ症候群の小児は、1日に複数回の発作を経験する可能性が高い。てんかん発作がドラベ症候群の患者の死亡をもたらす可能性はずっと高く；ドラベ症候群と診断された患者の約10〜15％は小児期、特に2歳から4歳の間に死亡する。さらに、患者は整形外科的な発達上の問題、成長障害および慢性上気道感染症を含む、多くの関連する状態のリスクを有する。ドラベ症候群の罹患小児は絶え間ない管理を必要とし、多くは10代に達すると施設収容を必要とするため、治療費も高い。
【００１１】
ドラベ症候群の症状および診断は、他の型のてんかんとは著しく異なる。Ceulemansは、ドラベ症候群は以下の点で他の型のてんかんと区別し得るとしている：「1歳になるまでの間の強直間代発作の出現、その後のミオクロニー発作および運動失調の発生、発作発症後の精神運動の発達障害、ならびに抗てんかん薬への応答不良。」（Ceulemans, Developmental Medicine & Child Neurology, 2011, 53（Suppl.2）: 19-23）。
【００１２】
Brunklausら（BRAIN, 2012, 135:2329-2336）は同様に以下を観察している：「ドラベ症候群は、典型的には、既に発達上の問題を有していない小児で、1歳になるまでに存在し、長期の熱性および無熱性、全般間代または半間代てんかん発作を伴う。ミオクロニー、焦点および非定型欠神発作を含む他の発作タイプは、1歳から4歳の間に出現する（Dravet, 1978）。」
【００１３】
したがって、ドラベ症候群の症状および診断は、他の型のてんかんとは著しく異なる。したがって、その特徴的な臨床特性を考慮すれば、当業者は、任意の特定の化合物がドラベ症候群において有効であることが明白であると見出すこと、またはそのように推定するだけの理由を有することはないであろう。
【００１４】
ドラベはまた、その遺伝的局面に関して特徴的である。2001年にニューロン特異的電位開口型ナトリウムチャネル（SCN1a）のαサブユニットにおける変異がドラベ症候群の主な遺伝的原因として発見されたことは、当技術分野において公知である（Ceulemans, Developmental Medicine & Child Neurology, 2011, 53（Suppl.2）: 19-23；Brunklaus et. al, BRAIN, 2012, 135:2329-2336）。したがって、ドラベ症候群の原因は、他の型のてんかんと比較して著しく異なる。さらに、他の型のてんかんとは異なり、ドラベの診断は臨床所見に加えてこれらの遺伝子変異の検出に部分的に基づいている。その結果、改善された遺伝子検査の出現に伴い、この疾患と診断される患者の数が増加している。
【００１５】
ドラベ症候群の小児がてんかん重積のエピソードに特に感受性であることは、特に懸念される。この重症かつ難治性の状態は、典型的には入院を伴う即時の医学的介入を必要とする医学的緊急事態として分類される。てんかん重積は致命的であり得る。また、脳低酸素症にも関連し得、おそらく脳組織への損傷につながる。ドラベ症候群の小児の頻繁な入院は、患者だけでなく、家族や介護者にとっても明らかに苦痛である。
【００１６】
また、てんかんと共に生きている人々に懸念されるのは、てんかん患者の予期せぬ突然死（SUDEP）のリスクである。SUDEPは、怪我、溺死、または他の公知の原因によるものではない、てんかんを有する人々の死亡を指す。推定値は変動するが、いくつかの試験は、毎年てんかんを有する1,000人ごとに約1.16例のSUDEPが見られることを示唆している。すべてではないがほとんどのSUDEPの症例は、発作の最中または直後に発生し、正確な原因は不明であるが、以下は役割を果たす可能性のある因子のリストである：
呼吸。発作は、無呼吸のため、または気道閉塞のために、ヒトの呼吸の休止を引き起こすことがある。これらの休止があまりにも長く続く場合、生命を脅かすレベルまで血中酸素を低下させ得る。心律動。発作は、危険な心律動または心不全までも引き起こすことがある。他の原因および混合原因。SUDEPは、呼吸困難および異常な心律動の両方を含む、複数の原因または組み合わせが原因で起こり得る。
【００１７】
部分発作に特に有効な3つの薬物は、GABAの全脳レベルを大幅に増大させる選択的かつ不可逆的なGABAトランスアミナーゼ阻害剤である、ビガバトリン；ニューロンおよびグリア細胞へのGABA取り込みの強力な阻害剤である、チアガビン；ならびに、Na+依存性かつ/またはCa2+依存性の活動電位の改変、ニューロンへのGABA媒介Cl-流動の増強、およびAMPA/カイニン酸型のグルタミン酸受容体におけるカイニン酸媒介コンダクタンスの阻害を含むいくつかのメカニズムを通じてその抗てんかん効果を生じると考えられる、トピラメートである。（Aengehagen, et al., 2003, Neurochemical Research, 28（2）:333-340）。
【００１８】
ドラベ症候群患者の発作の例を減らすためにいくつかの抗けいれん療法が用いられているが、そのような療法で得られる結果は典型的には不良であり、それらの療法はせいぜい発作の部分的停止に影響を与えるにすぎない。一般に、ドラベ症候群に関連する発作は典型的には、通常の処置に抵抗性であり、ナトリウムチャネルの遮断を介して作用する抗けいれん剤は、ドラベ症候群の発作を悪化させる。さらに、クロバザムおよびクロナゼパムなどの多くの抗けいれん剤は望ましくない副作用を有し、小児患者では特に深刻である。
【００１９】
最近、ドラベ症候群に特徴的な難治性発作は、3-トリフルオロメチル-N-エチルアンフェタミン（以下「フェンフルラミン」）なる薬物を投与することによって、頻度および/または重症度が有意に低減され、場合によっては完全に消失し得ることが発見された。Ceulemans et al., Successful use of fenfluramine as an add-on treatment for Dravet Syndrome, Epilepsia 53（7）:1131-1139, 2012を参照されたい。フェンフルラミンは、以下の構造を有するアンフェタミン誘導体である。
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【００２０】
フェンフルラミンは2つの鏡像異性体デクスフェンフルラミンおよびレボフェンフルラミンのラセミ混合物であり、気分、食欲および他の機能を調節する神経伝達物質、セロトニンの循環レベルを高めることが報告されている。
【００２１】
セロトニン（「5-ヒドロキシトリプタミン」または「5-HT」としても公知）は、哺乳動物の神経系における多くの感覚、運動および行動プロセスを調節すると考えられる、モノアミン作動性神経伝達物質である。これらの多様な応答は、受容体サブタイプの大きなファミリーの活性化を通じて誘発される。セロトニン受容体の多くのサブタイプのうち、5-HT1Bおよび5-HT2Cサブタイプは、摂食および体重の調節に最も強く関与するとされており、これらの受容体は食物摂取調節に関与すると考えられる視床下部領域で発現される。フェンフルラミンは、5-HT2A、5-HT2Bおよび5-HT2C受容体サブタイプに高い親和性を有し、かつこれらで活性を有することが公知で（Rothman et al., 2015）、5-HT2Cアゴニストが食欲抑制を誘発することから、フェンフルラミンはフェンフェン（すなわち、フェンフラミン/フェンテルミン）として販売されている一般的な減量薬物併用治療の一部としてフェンテルミンと共に同時投与することにより、肥満を処置するために使用された。フェンフェンは、肥満を予防し処置するために1973年に米国で最初に販売されたが、フェンフェンの使用が心弁膜症および肺高血圧症の発症を伴っていたため、1997年に米国および世界市場から撤退した。
【００２２】
食欲低下剤としてのフェンフェンの使用に関連する副作用は、フェンフルラミンの主要代謝物であるノルフェンフルラミンの5-HT2B受容体との相互作用に起因すると考えられ、5-HT2Bの活性化は心弁膜症を伴っていた。フェンフェンが市場から撤退し、いかなる治療分野での使用ももはや示されないのは、このためである。
【００２３】
高用量のフェンフルラミンを成人肥満の処置に用いた場合に生じた心血管の安全性に対する過去の懸念にもかかわらず、潜在的な治療上の利点とフェンフルラミンの公知の心血管リスクとを比較検討しながらその製品のさらなる治療用途を特定する試みがなされている。新しい処置選択肢が非常に必要とされている1つの障害が、てんかんまたはてんかん性脳症である。
【００２４】
いくつかの抗てんかん薬が開発されているが、てんかん患者の約3分の1は治療に抵抗性である。したがって、細胞興奮性を調節し得る新しいメカニズムおよび薬物の探索が続く。
【００２５】
歴史的に、てんかん患者におけるフェンフルラミンの有効性の調査は、一般的なパラダイム、すなわち、フェンフルラミンの主な効果は発作を引き起こすまたは誘発する挙動にあり、発作自体を処置するまたは予防するものではないとのパラダイムにつながった。例えば、AicardiおよびGastaut（New England Journal of Medicine （1985）, 313:1419およびArchives of Neurology （1988） 45:923-925）は、自己誘発光過敏性発作、すなわち患者が意図的に明るい光または太陽を見つめることによって引き起こされた発作4例を報告し、これらの発作はフェンフルラミンの処置に応答することが判明した。同様に、Clemensは、Epilepsy Research （1988） 2:340-343において、抗けいれん処置に抵抗性であったパターン過敏性により誘発される発作を患っている少年を、患者の発作誘発性強迫行動を抑制するためにフェンフルラミンで処置した症例試験を報告した。フェンフルラミンは、報告によると、これらの自己誘発発作をうまく終了させた。Clemensは、これは、フェンフルラミンが光過敏性誘発メカニズムを遮断したためで、二次的には、発作誘発行動/強制への病的衝動を減少させることにより、すなわち発作自体を処置することによるものではないと結論付けた。
【００２６】
Neuropaediatrics, （1996）; 27（4）:171-173において、BoelおよびCasaerは、難治性てんかんの小児におけるフェンフルラミンの効果に関する試験について報告し、全員が発作誘発性強迫行動を示した。彼らは、フェンフルラミンを0.5〜1mg/kg/日の用量で投与すると、患者が経験する発作の数が減少することを観察し、「この薬物は特発性疾患または症候性全般てんかんを有する若年患者、すなわち、自己誘発発作を起こす小児の選択された群において、有意な抗てんかん活性を有し得る」と結論付けた。著者らは、「フェンフルラミンは直接的な抗てんかん活性を有しないが、発作を誘発する強迫衝動に対するその効果を通じて作用するのかもしれない」と記載した。したがって、著者らは、フェンフルラミンは発作自体ではなく行動に影響を与えることを示唆した。
【００２７】
Epilepsiaにおいて発表された、その学術誌への短報（Epilepsia, 43（2）:205-206, 2002）において、BoelおよびCasaerは、フェンフルラミンが難治性てんかんおよび自己誘発発作の患者で治療上の利益があるようだと述べた。しかし、著者らは、フェンフルラミンの有効性が全般的抗けいれん活性によるとしなかった。
【００２８】
フェンフルラミンで処置し得るてんかんの別の型は、レノックス・ガストー症候群（LGS）である。LGSは1960年に最初に記載され、神経学者William G. Lennox（Boston, USA）およびHenri Gastaut（Marseille, France）にちなんで命名された。これは、2歳から6歳の間に出現することが最も多い小児期発症てんかんの処置が困難な型であるが、それよりも早く、または後の年齢で起こり得る。LGSは高頻度の発作および異なる発作タイプによって特徴付けられ；典型的には、発達遅延ならびに心理的および行動上の問題を伴う。小児では、LGSの一般的な原因には、周産期脳損傷、結節性硬化症または皮質異形成などの脳奇形、CNS感染、および神経系の変性または代謝障害が含まれる。
【００２９】
LGSでは、毎日複数の異なるタイプの発作が典型的である。同様に典型的であるのは、起こり得る広範囲の発作である。最も一般的な発作のタイプは、強直-軸性、脱力、および欠神発作であるが、ミオクロニー、全般強直間代、および焦点発作も任意のLGS患者で起こり得る。脱力、非定型欠神、強直、焦点、および強直間代発作も一般的である。加えて、多くのLGS患者は、めまい、無感情、および無反応によって特徴づけられる、多くの場合非けいれん型のてんかん重積を起こすことになる。さらに、ほとんどの患者は、筋肉の力が抜けて突然予期せず転倒する原因となる、失立発作とも呼ばれる脱力発作を起こして、重大な怪我を引き起こすことが多く、患者が頭部損傷を防ぐためにしばしばヘルメットを着用する理由である。
【００３０】
様々なタイプの毎日の複数の発作に加えて、LGSを有する子供たちは精神運動発達の停止/遅延および行動障害を有することが多い。この症候群はまた、脳波（EEG）における特異的所見、特に発作間欠期（すなわち、発作の間）の棘徐波複合および睡眠中の速波活動によっても特徴づけられる。
【００３１】
LGSの最適な処置はまだ確立されていない。現在、通常の抗てんかん薬、食事療法および手術を含む、様々な治療アプローチがLGSで使用されているが、これらの治療法を支持する証拠は弱く、処置はほとんどの場合無効のままである。いくつかの一般的な第一線処置の使用は、臨床経験または従来の知識に基づいており；例には、バルプロ酸、およびベンゾジアゼピン、最も多くはクロナゼパムおよびクロバザムなどの、広域抗けいれん薬が含まれる。少数の薬物が、二重盲検プラシーボ対照試験によって特定の発作タイプの一部の患者に有効であることが証明されており；例には、クロバザム、ラモトリジン、トピラメート、フェルバメート、およびルフィナミドが含まれるが、ほとんどの患者はこれらの薬剤を服用している間も重大な発作を起こし続ける。ゾニサミドなどの現在使用されている第二選択薬は、いくつかの非盲検非対照試験の結果に基づいて処方される。ケトン食療法は、医学的処置に抵抗性のLGS患者に有用である可能性がある。LGSの外科的選択肢には、脳梁離断術（失立発作に対し）、迷走神経刺激、および局所皮質切除（単一の切除可能病変存在下）が含まれる。しかし、これらの治療法のいずれか単独または組み合わせからの著しい改善はめったに起こらないことに留意すべきである。
【００３２】
LGSの症状の重症度およびそれが起こる頻度（すべての小児てんかんの最大10％を占める）にもかかわらず、現在、この疾患に対する標準的なエビデンスに基づく処置はない。文献の包括的な総説［The Cochrane Library 2013, Issue 2で発表されたHancock EC & Cross JH, Treatment of Lennox-Gastaut syndrome （Review）参照］は、この症候群の薬学的処置を評価した9つの無作為対照試験を発見したにすぎない。著者らは、研究の不足があり、「この症候群に非常に効果的であると判明している単剤療法はない（現在まで）」と結論付けた。同上、p.12。著者らはさらに、「LGSに対する最適な処置は不確実なままであり、これまでの試験で、いかなる薬物も非常に有効であると示したものはない」と結論づけた。同上、p.12。
【００３３】
フェンフルラミンは、特定のてんかんおよび/またはてんかん性脳症の処置において有望である。AES 2016 Annual Meeting in Houston, Txで提示された、Lagae et al., ''Add-on Therapy with Low Dose Fenfluramine （ZX008） in Lennox Gastaut Syndrome'' Abstract 3.366, 2016（追加療法としてのフェンフルラミンの一施設第2相パイロット非盲検用量試験の結果を提示；本文および図面は以下で入手可能：https://www.aesnet.org/meetings_events/annual_meeting_abstracts/view/240065）を参照されたく；また米国特許出願第15/246,346号も参照されたい。
【００３４】
したがって、難治性てんかん症候群の患者が患っている高頻度で重度の発作を処置、予防または改善するのに有効な治療剤に対する必要性は、緊急であり、長年にわたっており、かつ未だ満たされていない。本開示は、ドラベ症候群、ドゥース症候群、点頭けいれん、ウェスト症候群およびレノックス・ガストー症候群を含む、一連の異なるタイプのてんかんおよびてんかんサブタイプに関して適用性を有する。
【発明の概要】
【００３５】
概要
本明細書において開示する方法は概して、そのような処置を必要としている患者の発作性障害に関連する症状を処置、予防または改善するのに有用である。例えば、開示する方法は、ドラベ症候群、レノックス・ガストー症候群、ドゥース症候群、点頭けいれん、ウェスト症候群を非限定的に含む、通常の抗てんかん薬が不十分、無効、または禁忌である難治性発作性障害に関連する症状を予防、処置または改善するのに有用である。
【００３６】
いくつかの局面において、本明細書において提供するのは、ヒト患者における、発作またはてんかん患者の予期せぬ突然死（SUDEP）の頻度または重症度を低減させる方法であって、5-ヒドロキシトリプタミン受容体4アゴニスト（5-HT4アゴニスト）の治療的有効用量を該患者に投与する段階、および5-HT4アゴニストに該患者の5-HT4受容体を刺激させ、それにより該患者の発作の発生率、頻度または重症度を低減させる段階を含む、前記方法である。
【００３７】
いくつかの局面において、本明細書において提供するのは、ヒト患者の発作により誘発される呼吸停止（S-IRA）を阻害する方法であって、5-HT4アゴニストの治療的有効用量を該患者に投与する段階、および5-HT4アゴニストに該患者の5-HT4受容体を刺激させ、それにより該患者のS-IRAを阻害する段階を含む、前記方法である。
【００３８】
いくつかの局面において、本明細書において提供するのは、ヒト患者の発作後抑制（PID）期間平均の長さを低減させる方法であって、5-HT4アゴニストの治療的有効用量を該患者に投与する段階、および5-HT4アゴニストに該患者の5-HT4受容体を刺激させ、それにより該患者のPID期間を阻害する段階を含む、前記方法である。
【００３９】
いくつかの局面において、本明細書において提供するのは、ヒト患者における、発作により誘発されるてんかん患者の予期せぬ突然死（SUDEP）の確度を低減させる方法であって、5-HT4アゴニストの治療的有効用量を該患者に投与する段階、および5-HT4アゴニストに該患者の5-HT4受容体を刺激させ、それにより該患者のSUDEPの確度を低減させる段階を含む、前記方法である。
【００４０】
いくつかの局面において、本明細書において提供するのは、発作により誘発されるてんかん患者の突然死（SUDEP）の可能性があると診断された患者の脳内の1つまたは複数の5-HT4受容体を刺激する方法であって、該患者が発作を示し、前記方法が、5-HT4アゴニストの有効用量を該患者に投与する段階、および5-HT4アゴニストに該患者の5-HT4受容体を刺激させ、それにより該患者のSUDEPの可能性を低減させる段階を含む、前記方法である。
【００４１】
方法のいくつかの態様において、5-HT4アゴニストはフェンフルラミン、BIMU-8、シサプリド、モサプリド、プルカロプリド、レンザプリド、RS-67506、テガセロッド、ザコプリド、メトクロプラミド、およびスルピリドまたはその薬学的に許容される塩からなる群より選択される。
【００４２】
方法のいくつかの態様において、5-HT4アゴニストはフェンフルラミン、またはその薬学的に許容される塩である。
【００４３】
いくつかの態様において、フェンフルラミンを補助的な治療剤として投与する。
【００４４】
いくつかの態様において、フェンフルラミンの治療的有効用量は、0.2mg/kg/日〜0.08mg/kg/日から30mgの最大1日用量までからなる群より選択される。
【００４５】
方法のいくつかの態様において、フェンフルラミンの治療的有効用量は0.8mg/kg/日〜0.01mg/kg/日である。
【００４６】
方法のいくつかの態様において、フェンフルラミンの治療的有効用量を経口、注射、経皮、吸入、鼻内、直腸内、膣内および非経口からなる群より選択される剤形で投与する。
【００４７】
方法のいくつかの態様において、フェンフルラミンの治療的有効用量を経口液体剤形で投与する。
【００４８】
いくつかの態様において、方法はスチリペントールまたはその薬学的に許容される塩の有効用量を患者に投与する段階をさらに含む。
【００４９】
いくつかの態様において、方法はバルプロエートまたはその薬学的に許容される塩の有効用量を患者に投与する段階をさらに含む。
【００５０】
いくつかの態様において、方法はクロバザムまたはその薬学的に許容される塩の有効用量を患者に投与する段階をさらに含む。
【００５１】
方法のいくつかの態様において、有効用量は10.0mg/kg/日未満、または1.0mg/kg/日未満、または約0.8mg/kg/日、または約0.5mg/kg/日、または約0.2mg/kg/日、または約0.1mg/kg/日；または約0.01mg/kg/日である。方法のいくつかの態様において、フェンフルラミンの有効用量は0.5mg/kg/日である。方法のいくつかの態様において、フェンフルラミンの有効用量は0.01mg/kg/日〜0.8mg/kg/日の間である。
【００５２】
いくつかの態様において、剤形は30mg/日以下、20mg/日以下、10mg/日以下、および5mg/日以下からなる群より選択される量の経口組成物である。
【００５３】
方法のいくつかの態様において、フェンフルラミンを薬学的に許容される担体と共に製剤化する。
【００５４】
方法のいくつかの態様において、フェンフルラミンは、患者に投与される単独の（唯一の）薬学的活性薬物である。
【００５５】
方法のいくつかの態様において、5-HT4アゴニストは下記のうちの少なくとも1つである：
（a）5-HT2B受容体において不活性である；
（b）5-HT2B受容体の中性アゴニスト；および
（c）5-HT2B受容体5-HT2B受容体の逆アゴニスト。
【００５６】
いくつかの態様において、患者は、プラシーボに比べて有意に高い応答率を示す。
【００５７】
いくつかの態様において、方法は、患者がけいれん発作頻度の基準線からの≧40％低減を示すまでの日数の期間にわたり投与を繰り返す段階をさらに含む。
【００５８】
いくつかの態様において、患者はけいれん発作の頻度の少なくとも≧50％低減を示す。
【００５９】
いくつかの態様において、患者はけいれん発作の頻度の少なくとも≧75％低減を示す。
【００６０】
いくつかの態様において、患者はけいれん発作の頻度の少なくとも≧90％低減を示す。
【００６１】
いくつかの態様において、患者は発作を全く起こさない。
【００６２】
いくつかの態様において、患者は5-HT4アゴニストの初回投与から2年後に生存している。
【００６３】
いくつかの態様において、方法は、患者が≧1日の期間にわたり発作を起こさなくなるまで、投与を繰り返す段階をさらに含む。
【００６４】
いくつかの態様において、方法は、患者が≧1週間の期間にわたり発作を起こさなくなるまで、投与を繰り返す段階をさらに含む。
【００６５】
いくつかの態様において、方法は、患者が≧1ヶ月間の期間にわたり発作を起こさなくなるまで、投与を繰り返す段階をさらに含む。
【００６６】
いくつかの態様において、方法は、患者が≧1年間の期間にわたり発作を起こさなくなるまで、投与を繰り返す段階をさらに含む。
【００６７】
いくつかの態様において、方法は、患者が永久に発作を起こさなくなるまで、投与を繰り返す段階をさらに含む。
【００６８】
方法のいくつかの態様において、対象/患者は、ドラベ症候群、レノックス・ガストー症候群、ドゥース症候群、点頭けいれん、ウェスト症候群、および難治性てんかんからなる群より選択されるてんかん症候群と診断されている。いくつかの態様において、対象/患者は、てんかんの処置を受けていた、または受けていてもよい。いくつかの態様において、対象/患者は、てんかんまたはてんかん性脳症、例えば、ドラベ症候群および/またはレノックス・ガストー症候群の処置を受けている。いくつかの態様において、対象/患者は18歳以下である。他の態様において、対象/患者は成人（18歳以上）である。
【００６９】
本開示のいくつかの態様において、てんかん性脳症の症状は発作（例えば、けいれん発作または非けいれん発作）である。本開示のいくつかの態様において、てんかん性脳症の症状は発作により誘発されるてんかん患者の予期せぬ突然死（SUDEP）である。本開示のいくつかの態様において、てんかん性脳症の症状は発作後抑制（PID）である。本開示のいくつかの態様において、てんかん性脳症の症状は発作により誘発される呼吸停止（S-IRA）である。
【００７０】
方法のいくつかの態様において、5-HT4アゴニストの有効用量を薬学的に許容される担体中に投与する。
【００７１】
方法のいくつかの態様において、5-HT4アゴニストは経口剤形、静脈内剤形、直腸剤形、皮下剤形、および経皮剤形からなる群より選択される剤形に適合させた製剤中にある。
【００７２】
方法のいくつかの態様において、経口剤形は液剤、懸濁剤、錠剤、カプセル剤、ロゼンジ、および溶解ストリップからなる群より選択される。
【００７３】
もう1つの局面において、本開示は、本明細書において開示する任意の方法で用いる、治療剤、例えば、5-HT4アゴニスト、および使用説明書を含むキットを提供する。
【００７４】
前述のとおり、かつ当業者には理解されるとおり、治療剤は、フェンフルラミンまたは他の治療剤および当技術分野において現在公知の方法に比べて、より有効であり、かつ/または改善された安全性を示すという重要な利点を提供する。
【００７５】
本発明のこれらおよび他の目的、利点、および特徴は、当業者には、以下により詳細に記載する、治療剤およびその使用法の詳細を読めば明らかになるであろう。
【図面の簡単な説明】
【００７６】
本発明は、以下の詳細な記載を添付の図面と共に読めば、最もよく理解されよう。図面に含まれるのは以下の図である。
【図１Ａ】聴原発作（AGSz）に対するDBA/1マウスの感受性における、フェンフルラミン（FFA）の用量依存的および時間依存的抗けいれん効果を示す。
【図１Ｂ】聴原発作（AGSz）に対するDBA/1マウスの感受性における、フェンフルラミン（FFA）の用量依存的および時間依存的抗けいれん効果を示す。
【図１Ｃ】聴原発作（AGSz）に対するDBA/1マウスの感受性における、フェンフルラミン（FFA）の用量依存的および時間依存的抗けいれん効果を示す。
【図１Ｄ】聴原発作（AGSz）に対するDBA/1マウスの感受性における、フェンフルラミン（FFA）の用量依存的および時間依存的抗けいれん効果を示す。
【図２Ａ】DBA/1マウスにおけるFFAの選択的な発作により誘発される呼吸停止（S-IRA）阻止効果の時間経過を示す（8時間の試験プロトコル）。
【図２Ｂ】DBA/1マウスにおけるFFAの選択的な発作により誘発される呼吸停止（S-IRA）阻止効果の時間経過を示す（8時間の試験プロトコル）。
【図２Ｃ】DBA/1マウスにおけるFFAの選択的な発作により誘発される呼吸停止（S-IRA）阻止効果の時間経過を示す（8時間の試験プロトコル）。
【図２Ｄ】DBA/1マウスにおけるFFAの選択的な発作により誘発される呼吸停止（S-IRA）阻止効果の時間経過を示す（8時間の試験プロトコル）。
【図３】図3は、最後のプライミング試験期間（薬物投与前）に比べて、正向反射消失の期間によって規定される、発作後抑制（PID）期間平均の有意な低減を伴う、15mg/kg（n＝10）FFAによる選択的S-IRA阻止を示す。
【図４】図4Aおよび4Bは、FFA前処置による重度発作の発生率（頻度）低減およびS-IRAの予防を示す。
【図５】図5は、SUDEPのDBA/1マウスモデルにおけるS-IRAにつながることが公知のAGSz表現型である強直発作の発生率（頻度）を、FFAが有意に低減させたことを示す。
【図６】図6は、8時間の試験プロトコルを用いて5、10および15mg/kgの腹腔内FFAにより処置したDBA/1マウスで見られた選択的S-IRA阻止の全発生率（頻度）を示す。
【図７】図7は、FFAによるS-IRA阻止における5-HT4アンタゴニスト（GR125487）の影響を示す。
【図８】図8は、5-HT4アンタゴニスト（GR125487）がフェンフルラミンのS-IRA阻止効果を部分的に逆転させることを示す。
【発明を実施するための形態】
【００７７】
詳細な説明
本発明の組成物および方法を記載する前に、記載する特定の製剤および方法は、当然のことながら変動し得るため、本発明はそれらに限定されないことが理解されるべきである。また、本発明の範囲は添付の特許請求の範囲によってのみ限定されるため、本明細書において用いられる用語は特定の態様を記載するためにすぎず、限定的であることを意図しないことも理解されるべきである。
【００７８】
値の範囲が提供される場合、文脈が明らかにそうではないと示さないかぎり、その範囲の上限と下限との間の、下限の単位の10分の1までのそれぞれの介在値も、具体的に開示されることが理解されよう。指定の範囲における任意の指定の値または介在値と、その指定の範囲における任意の他の指定の値または介在値との間のより小さい範囲はそれぞれ、本発明の範囲内に含まれる。これらのより小さい範囲の上限および下限は独立に範囲に含まれるか除外されてもよく、指定の範囲において任意の具体的に除外される限界があるとの条件で、限界のいずれかもしくは両方がより小さい範囲に含まれるかまたはいずれも含まれない各範囲も本発明の範囲内に含まれる。指定の範囲が限界の一方または両方を含む場合、それらの含まれる限界のいずれかまたは両方を除外する範囲も本発明に含まれる。
【００７９】
特に記載がないかぎり、本明細書において用いられるすべての技術および科学用語は、本発明が属する分野の技術者によって一般に理解されるのと同じ意味を有する。本明細書に記載のものと類似または等価の任意の方法および材料を本発明の実施または試験において用い得るが、好ましい方法および材料をここに記載する。本明細書において言及するすべての出版物は、出版物が引用されるものと関連して方法および/または材料を開示および記載するために、参照により本明細書に組み入れられる。
【００８０】
本明細書および添付の特許請求の範囲において用いられる単数形「a」、「an」、および「the」は、文脈が明らかにそうではないと示さないかぎり、複数の指示物を含むことに留意しなければならない。
【００８１】
したがって、例えば、「製剤」への言及は複数のそのような製剤を含み、「方法」への言及は当業者には公知の1つまたは複数の方法およびその等価物への言及を含み、他も同様である。
【００８２】
本明細書において論じられる出版物は、本出願の提出日より前のそれらの開示だけを提供するものである。本明細書におけるなにものも、先行発明のせいでそのような出版物に先行する資格が本発明にはないとの自認であると解釈されるべきではない。さらに、提供される出版物の日付は実際の出版日とは異なることもあり、これらは独立に確認する必要があろう。
【００８３】
本発明は、てんかんまたはてんかん性脳症を示している、経験している、および/または診断されたヒト患者における、てんかん患者の予期せぬ突然死（SUDEP）の発生可能性または発作の重症度を、5-HT4受容体のアゴニストが低減させるという驚くべき発見に基づいている。
【００８４】
したがって、本開示は、処置を必要とする発作性疾患または障害と診断された患者を処置するのに有用な特定の治療剤を用いる方法を提供する。本開示はさらに、処置を必要とする患者の発作性疾患または障害に関連する症状を予防、処置または改善するのに有用な特定の治療剤を用いる方法を提供する。
【００８５】
本明細書において開示する方法は、1つまたは複数の治療剤の治療的有効量を投与する段階を含む。いくつかの治療剤を本発明の方法において用いることができる。いくつかの態様において、治療剤は5-HT4受容体アゴニストである。いくつかの態様において、治療剤は1つ以上の標的で、または2つ以上の標的で、または3つ以上の標的で、または4つ以上の標的で、または5つ以上の標的で、またはそれ以上で活性である。いくつかの態様において、治療剤は5-HT4受容体で活性である。
【００８６】
本開示は、処置を必要とする患者の発作性疾患または障害に関連する症状を予防、処置または改善する方法を提供し、ここで治療剤は1つまたは複数の標的で活性な化合物である。いくつかの局面において、治療剤は、5-HT4受容体のアゴニストなどの、5-HT受容体タンパク質を活性化する化合物を含む。
【００８７】
本開示は、本発明の方法で使用するための、本明細書において開示する1つまたは複数の治療剤を含む薬学的組成物をさらに提供する。いくつかの態様において、薬学的組成物は、経口剤形、静脈内剤形、直腸剤形、皮下剤形、および経皮剤形を含む1つまたは複数の剤形に適合させた製剤である。特定の態様において、経口剤形は、液剤、懸濁剤、錠剤、カプセル剤、ロゼンジ、および溶解ストリップからなる群より選択される。1つの態様において、経皮剤形はパッチである。
【００８８】
本開示は、疾患または障害と診断された患者のその疾患または障害の1つまたは複数の症状を予防、処置または改善する方法をさらに提供する。本局面の1つの態様において、患者は発作性障害と診断されている。さらなる態様において、発作性障害は、ある型の難治性てんかん、例えばドラベ症候群、レノックス・ガストー症候群、ドゥース症候群、およびウェスト症候群、ならびに他の型の難治性てんかんである。もう1つの態様において、症状は発作、特にてんかん重積である。もう1つの態様において、本開示は、患者の集団における、てんかん患者の予期せぬ突然死（SUDEP）を予防するまたはその発生率（頻度）を低減させる方法を提供する。もう1つの態様において、患者は肥満である。
【００８９】
てんかんは、一般集団と比較して若年死亡率の2〜3倍の増加に関連している。この若年死亡率増加の主な原因は、てんかん患者の予期せぬ突然死（SUDEP）で、これは末期発作に関連する良好な状況下で発生するが溺死、外傷、毒物効果、またはてんかん重積関連死を除く。SUDEPの目撃された臨床症例のほとんどで、呼吸不全および心不全につながる全身発作が報告された。てんかん患者の間のSUDEPの生涯リスクは最大8％と推定され、若年てんかん患者は一般集団よりも予期せぬ突然死のリスクが24または28倍高い。SUDEPは、損失生存年数に関して、神経疾患の中で卒中に次いで2位である。SUDEPに関係があるとされている主な病態生理学的メカニズムには、呼吸不全、不整脈および脳機能停止が含まれる。現在有効な処置がないため、SUDEPを予防し得る薬剤を見つける差し迫った必要がある。発作の重症度の1つの尺度は、頻度および/または持続時間を計測することである。
【００９０】
SUDEPのDBA/1マウスモデルは、電撃ショック、温熱、けいれん薬、および音響刺激により誘発される致命的発作（発作誘発死）に対する慢性的で異常に高い感受性を示す。高強度の音響刺激は、強直間代発作と、続く、（発作直後の期間の死亡につながる）発作に誘発される呼吸停止（S-IRA）とからなる、聴原発作（AGSz）を誘発する。呼吸の適時の機械的支援は、このSUDEPモデルでS-IRAを一貫して逆転させることができる。（Faingold CL, Randall M, Tupal S. 2010. DBA/1 mice exhibit chronic susceptibility to audiogenic seizures followed by sudden death associated with respiratory arrest. Epilepsy Behav. 17:436-40）。
【００９１】
試験は、DBA/1マウスのセロトニン産生および受容体発現の欠損を明らかにした。フルオキセチン、フルボキサミンおよびセルトラリンなどの選択的セロトニン再取り込み阻害剤（SSRI）を含む、セロトニン作動性神経伝達を増強する薬物、またはベンラファキシンおよびアトモキセチンなどのセロトニン-ノルエピネフリン再取り込みを阻害する薬物の全てではないが多くは、DBAマウスの発作により誘発される呼吸不全および死を用量依存的に防ぐことが報告されている。これとは対照的に、セロトニンアンタゴニストは、S-IRAに対するDBAマウスの感受性を高める。これらの知見および他のSUDEPモデルに関する追加試験は、SUDEPのセロトニン作動性仮説を引き出した。
【００９２】
SUDEPのセロトニン仮説は、セロトニン作動性機能を改変する処置が、DBA/1マウスを含むいくつかのてんかんモデルにおける発作により誘発される突然死に対する感受性を大幅に変化させるという知見に基づいている。最近、ヒトSUDEPでセロトニン作動性の異常が認められている。
【００９３】
米国特許出願公開2018/0092864号（米国特許出願第15/717159号）の内容はその全体が参照により本明細書に組み入れられるが、これに開示されているとおり、（5-HT）受容体サブタイプ（例えば、5-HT1A、5-HT1D、5-HT1E、5-HT2A、5-HT2C、5-HT4、5-HT5Aおよび5-HT7）ならびに他の受容体、例えば、アドレナリン受容体（例えば、β-1またはβ-2アドレナリン受容体）、ムスカリン性アセチルコリン受容体タンパク質（例えば、M1、M2、M3、M4またはM5ムスカリン性アセチルコリン受容体）、シャペロンタンパク質（例えば、シグマ1またはシグマ2受容体）、または電位依存性ナトリウムチャネルサブユニットタンパク質もしくはそのサブユニット（例えば、Nav1.1、Nav1.2、Nav1.3、Nav1.4、Nav1.5、Nav1.6、またはNav1.7）および/または神経伝達物質輸送タンパク質（例えば、セロトニン輸送体（SET）、ドーパミン輸送体（DAT）、ノルエピネフリン輸送体（NET））を含む、様々な受容体におけるフェンフルラミンおよびフェンフルラミン類縁体の結合特性、活性（例えば、アゴニストまたはアンタゴニスト）選択性、特異性および薬学的効果を判定するための方法が提供されている。動物モデルでの試験は、特定のこれらの候補がインビボ動物モデルにおいててんかん様活動を驚くほど減少させたという予期せぬ発見につながった。
【００９４】
最近、発作により誘発される突然死の阻止におけるフェフルラミンの作用を媒介する際のいくつかのセロトニン受容体サブタイプの寄与が、SUDEPのDBA/1マウスモデルで評価された。これらの試験において、脳内のセロトニン（5-ヒドロキシトリプタミン、5-HT）の放出を増強することが公知のフェンフルラミンは、DBA/1マウスにおける聴原発作（AGSz）および発作により誘発される呼吸停止（S-IRA）を阻止するのに有効であることが判明した。しかし、本開示の前に、フェンフルラミンの効果が特定の5-HT受容体によって媒介されるかどうかは不明であった。したがって、本発明において開示するとおり、いくつかの5-HT受容体特異的アンタゴニストを使用してフェンフルラミンの効果を調査し、5-HTアンタゴニストが、フェンフルラミンによって媒介される抗けいれん活性（および/またはS-IRA阻止、もしくは他の任意の効果）を逆転させ得るかどうかを判定し、フェンフルラミンが結合してアゴニストとして作用する5-HT受容体のサブセットを同定した。
【００９５】
これらの実験のために、DBA/1マウス（N=287）を用いて（AGSz後のS-IRAに対する一貫した感受性を保証するために、確立されたプライミング手順にかけた後）、様々な5-HT受容体に対するフェンフルラミンの効果を評価した。電気ベルを用いて発作を誘発し、げっ歯類の人工呼吸器を用いて蘇生を行った（Faingold et al., 2010）。プライミングの少なくとも24時間後、マウスにFFA（15mg/kg、i.p.）を投与し、16時間後にAGSzおよびS-IRA感受性について試験した。AGSz誘発の30分前に、選択的5-HT受容体アンタゴニストまたはビヒクルを投与して、特定の受容体がFFAのS-IRAを阻止する能力に寄与するかどうかを評価した。発作行動をビデオテープに記録し、定量し、ビヒクル処置した陰性対照およびFFA処置した陽性対照と統計的に比較した（カイ二乗検定；有意性はp＜0.05に設定）。
【００９６】
具体的には、試験したアンタゴニストは：5-HT1Aアンタゴニスト、WAY100635（0.1〜15mg/kg）；5-HT2アンタゴニスト、リタンセリン（10〜20mg/kg）；5-HT3アンタゴニスト、オンダンセトロン（1〜3mg/kg）；5-HT4アンタゴニスト、GR125487（20〜60mg/kg）；5-HT5Aアンタゴニスト、SB669551（10〜20mg/kg）；および5-HT7アンタゴニスト、SB269970（30〜40mg/kg）であった。5-HT6および5-HT1a/1bアンタゴニストの影響を調査する試験も進行中である。
【００９７】
特に、5-HT4アンタゴニスト（GR125487、30mg/kg）による処置の後、S-IRAの発生率（頻度）のFFA誘導性低減の逆転が観察された。この用量は、S-IRAのFFA誘導性低減のこの有意な（p＜0.05）阻止を誘導するのに有効であった。5-HT2、5-HT4および5-HT7受容体のアンタゴニストは、マウスのAGSzの重症度に対するFFAの抗けいれん効果を逆転させるが、FFAのS-IRA阻止効果は逆転させないことが判明した一方で、5-HT1aおよび5-HT3受容体アンタゴニストは、試験したいかなる用量でも無効であった。
【００９８】
具体的には、5-HT4アンタゴニスト（GR125487、30mg/kg）による30分間の処置の後に、FFA誘導性S-IRA阻止の有意な（p＜0.05）部分的逆転が観察された。したがって、GR125487は、フェンフルラミンのS-IRA阻害の有意な阻止を誘導する際に有効であった（図7および8参照）。興味深いことに、5-HT2、5-HT4および5-HT7受容体のアンタゴニストは、AGSzの重症度に対するFFAの抗けいれん効果を逆転させるが、S-IRA阻止効果を逆転させないことが判明した。
【００９９】
5-HT2（20mg/kg、リタンセリン）、5-HT4（30および60mg/kg、GR125487）および5-HT7（30mg/kgおよび40mg/kg、SB269970）受容体のアンタゴニストは、AGSzの重症度に対するFFAの抗けいれん効果を逆転させることができた。5-HT5aアンタゴニスト、SB669551は、20mg/kgでFFAの抗けいれん効果を遮断した。対照的に、5-HT1A（WAY100635、0.1〜15mg/kg）および5-HT3（オンダンセトロン、1〜3mg/kg）受容体アンタゴニストは、試験したいかなる用量でも無効であった。
【０１００】
これらの知見は、DBA/1マウスでAGSzによって誘発されるS-IRAに対するFFAの抗けいれん効果が、比較的選択的に、5-HT4受容体の活性化の結果として媒介されることを示唆している。DBA/1マウス脳内の5-HT4受容体の発現レベルが正常マウスのそれと有意差がないことが関連しているであろう（Faingold et al., 2011）。この結果は、発作の重症度を低減させS-IRAを阻止する選択的セロトニン再取り込み阻害剤の能力を媒介する受容体に関する以前の試験に照らして驚くべきことであり、選択的5-HT3アンタゴニストによってのみ逆転させることができる（Faingold et al., 2016）。したがって、特定の5-HT受容体（例えば、5-HT4受容体アゴニスト）を活性化するアゴニストは、SUDEPの動物モデルにおける将来の試験のための、およびヒトSUDEPの可能性のある予防処置としての関心対象である。
【０１０１】
一般に、5-HR1A、5-HT3、および受容体のアンタゴニストは、フェンフルラミンの効果を逆転させず、S-IRAおよび/またはAGSzに対するフェンフルラミンの効果は、これらの受容体との相互作用によって媒介されないことを示唆している。対照的に、5-HT2、5-HT5A、5-HT7アンタゴニスト（リタンセリン、20mg/kg；SB669551、20mg/kg；ならびにSB269970、30mg/kgおよび40mg/kg）は、FFAの抗けいれん効果を遮断することが判明し、これは、フェンフルラミンの抗けいれん効果がこれらの受容体との相互作用によって媒介される可能性を示唆している。特に、化合物GR125487は、フェンフルラミンの抗けいれん効果およびS-IRA阻止効果を部分的に逆転させることが判明したため、フェンフルラミンは5-HT4受容体でアゴニストとして特異的に作用することが判明したと結論づけられた。
【０１０２】
したがって、DBA/1マウスでAGSzによって誘発されるS-IRAに対するFFAの抗けいれん効果は少なくとも部分的に、5-HT4受容体の活性化によって媒介される。DBA/1マウス脳内の5-HT4受容体の発現レベルは、正常マウスのそれと有意差がない（Faingold et al., 2011）。これらの結果は、発作の重症度を低減させS-IRAを阻止する選択的セロトニン再取り込み阻害剤の能力を媒介する受容体に関する以前の試験に照らして驚くべきことであり、選択的な5-HT3アンタゴニストによってのみ逆転させることができる（Faingold et al., 2016）。
【０１０３】
特定の5-HT受容体を活性化するアゴニストは、SUDEPの動物モデルにおける将来の試験のための、およびヒトSUDEPの可能性のある予防処置としての関心対象である。
【０１０４】
本開示は、ヒト患者の発作の発生率（頻度）または重症度を低減させる方法であって、5-HT4アゴニストの治療的有効用量を該患者に投与する段階、および5-HT4アゴニストに該患者の5-HT4受容体を刺激させ、それにより該患者の発作の発生率（頻度）または重症度を低減させる段階を含み、ここで5-HT4アゴニストはフェンフルラミンである、前記方法を目的とする。
【０１０５】
本開示は、ヒト患者の発作により誘発される呼吸停止（S-IRA）を阻害する方法であって、5-HT4アゴニストの治療的有効用量を該患者に投与する段階、および5-HT4アゴニストに該患者の5-HT4受容体を刺激させ、それにより該患者の発作により誘発される呼吸停止（S-IRA）を阻害する段階を含み、ここで5-HT4アゴニストはフェンフルラミンである、前記方法を目的とする。
【０１０６】
本開示は、ヒト患者の発作後抑制（PID）期間平均の長さを低減させる方法であって、5-HT4アゴニストの治療的有効用量を該患者に投与する段階、および5-HT4アゴニストに該患者の5-HT4受容体を刺激させ、それにより該患者の発作後の発作後抑制（PID）期間平均の長さを低減させる段階を含み、ここで5-HT4アゴニストはフェンフルラミンである、前記方法を目的とする。
【０１０７】
本開示は、ヒト患者における、発作により誘発されるてんかん患者の予期せぬ突然死（SUDEP）の確度を低減させる方法であって、5-HT4アゴニストの治療的有効用量を該患者に投与する段階、および5-HT4アゴニストに該患者の5-HT4受容体を刺激させ、それにより該患者のSUDEPの確度を低減させる段階を含み、ここで5-HT4アゴニストはフェンフルラミンである、前記方法を目的とする。
【０１０８】
したがって、てんかんおよび/またはてんかん性脳症を処置するために提唱される1つの方法は、患者の脳内の1つまたは複数の5-HT受容体を刺激することであって、フェンフルラミンの有効用量を該患者に投与することであり得る。本開示のいくつかの態様において、1つまたは複数の5-HT受容体は、中でも5-HT1、5-HT1A、5-HT1B、5-HT1C、5-HT1D、5-HT1E、5-HT1F、5-HT2、5-HT2A、5-HT2B、5-HT2C、5-HT3、5-HT4、5-HT5、5-HT5A、5-HT5B 5-HT6、および5-HT7から選択される。本開示のいくつかの態様において、5-HT受容体は5-HT4である。本開示の特定の態様において、患者はてんかんと診断されている。
【０１０９】
理論に縛られるわけではないが、フェンフルラミン（FFA）は、その小胞貯蔵の崩壊により脳内のセロトニン（5-HT）のキャリア媒介性シナプス放出を増強することとその再取り込みを阻害することによって、セロトニン作動性神経伝達を増強する。その活性代謝物であるノルフェンフルラミン（N-FFA）は、この効果の延長に寄与する。最近の臨床試験により、FFAによる処置は、処置が困難でありかつSUDEPのリスクが悲劇的に高い、ドラベ症候群に特徴的な難治性発作を有する患者の発作制御を改善するための追加（補助）剤として有効であることが、判明した。薬物フェンフルラミンを投与することによって、発作活動は頻度および/または重症度が有意に低減され、場合によっては完全に消失した。
【０１１０】
ドラベ症候群のゼブラフィッシュモデルでの試験でも、FFAはエレクトログラフ活性ならびに発作様行動活性を阻止するのに有効であることが判明した。これらの知見に照らして、本開示は、フェンフルラミンがDBA/1マウスにおいてS-IRA感受性を低下させ発作頻度および/または重症度を低減させることができるかどうかを調べた。
【０１１１】
本開示は、SUDEPの哺乳動物モデルにおけるFFAの有効性を調査する最初の試験である。したがって、本開示は、発作に対するFFAの効果を解明することを目的とし；加えて、DBA/1マウスにおける発作により誘発される呼吸停止（S-IRA）に対するFFAの効果を調査した。
【０１１２】
本明細書において開示するとおり、フェンフルラミンは、DBA/1マウスモデルにおいて特定のセロトニン受容体サブタイプで抗けいれん剤として作用し、発作により誘発される呼吸停止（S-IRA）および発作により誘発されるてんかん患者の予期せぬ突然死（SUDEP）を予防することが、判明した。本開示までは、発作の処置におけるFFAの有効性のメカニズムは知られておらず、FFAの効果が任意の特定の5-HT受容体によって媒介されるかどうかは不明であった。本試験は、FFAが特定の5-HT受容体サブタイプで特定の効果を有することを明らかにし、さらに特定の5-HTアンタゴニストがFFAの抗けいれん効果およびS-IRA阻止効果を逆転させ得ると判定した。本開示のいくつかの態様において、5-HT受容体は5-HT4である。
【０１１３】
脳内のセロトニン（5-ヒドロキシトリプタミン、5-HT）の放出を増強するよう作用するフェンフルラミン（FFA）は、これらのDBA/1マウスにおける聴原発作（AGSz）および発作により誘発される呼吸停止を阻止するのに有効であることが判明した。
【０１１４】
発明の具体的局面
提供するのは、ドラベ症候群、レノックス・ガストー症候群、ドクース症候群、点頭けいれんおよびウェスト症候群、ならびに他の難治性てんかんを非限定的に含む、難治性てんかんまたはてんかん性脳症と診断された患者を非限定的に含む、疾患または障害と診断された患者の疾患または障害に関連する症状を予防、処置、または改善するのに有用な治療剤である。同様に提供するのは、疾患または障害と診断された患者の疾患または障害に関連する、てんかん患者の予期せぬ突然死（SUDEP）につながる発作および発作により誘発される呼吸停止（S-IRA）などの症状を予防、処置、または改善する方法、ならびに本発明の方法を実施するのに有用な薬剤を含む薬学的組成物および製剤である。
【０１１５】
治療剤
本発明者らは、てんかんまたはてんかん性脳症に関連する疾患または障害を非限定的に含み、かつ難治性発作、発作により誘発される呼吸停止（S-IRA）および/またはてんかん患者の予期せぬ突然死（SUDEP）を示す、疾患または障害を処置するのに、特定の治療剤（例えば、フェンフルラミン（FFA））が有用であるとの驚くべき発見を行った。したがって、本開示の1つの局面に従って、本明細書において提供するのは、疾患または障害と診断された患者を処置するのに有用でありかつ/または患者によって示される疾患または障害の症状を予防または改善するのに有用である、治療剤である。
【０１１６】
投与の用量/頻度：剤形を、1日1回投与、または1日複数回投与（例えば1日に2、3または4回投与）のために製剤化することができる。または、便宜上、剤形を、より低頻度の投与（例えば、毎月、隔週、毎週、4日ごと、3日ごと、または2日ごと）のために製剤化することができ、持続放出を促進する製剤は、当技術分野において公知である。
【０１１７】
本明細書において用いられる「半慢性投与」なる語句は、フェンフルラミンまたは5-HT4受容体アゴニストなどの治療剤の、数日、1週間、数週間、1ヶ月、数ヶ月、1年、または数年の期間の投与を指す。
【０１１８】
単一または複数の標的の結合
いくつかの態様において、本開示によって提供する治療剤は、1つ以上の標的、例えば、2つ以上の標的、3つ以上の標的、4つ以上の標的、5つ以上の標的、またはそれ以上に結合することができる。
【０１１９】
受容体タンパク質標的
いくつかの態様において、治療剤は5-HT4受容体に結合する。
【０１２０】
いくつかの態様において、治療剤は、シグマ-1受容体および1つまたは複数の5-HT受容体、例えば、5-HT1A受容体、5-HT1D受容体、5-HT1E受容体、5-HT2A受容体、5-HT2C受容体、5-HT4受容体、5-HT5A受容体、および/または5-HT7受容体に結合する。いくつかの態様において、治療剤はシグマ-1受容体および5-HT4受容体に結合する。
【０１２１】
機能活性
本開示に従って、「活性な」または「活性」なる用語は、細胞、核、または組織機能に対する効果を有することを意味するために本明細書において使用され、アゴニスト活性、逆アゴニスト活性、アンタゴニスト活性、相乗性、アロステリックアゴニズム、正、負および中性のアロステリック調節を含むアロステリック調節、正、負および中性のアゴアロステリック調節を含むアゴアロステリック調節、ならびにリガンド捕捉を含むことが意図される。
【０１２２】
受容体活性
いくつかの態様において、治療剤は、5-HT1A受容体、5-HT1D受容体、5-HT1E受容体、5-HT2A受容体、5-HT2C受容体、5-HT4受容体、5-HT5A受容体、および/または5-HT7受容体からなる群より選択される1つまたは複数の5-HT受容体タンパク質で活性である。いくつかの態様において、治療剤は5-HT4受容体で活性である。
【０１２３】
複数の標的で活性な治療剤
本開示は、1つ以上の標的、例えば、2以上の標的、3つ以上の標的、4つ以上の標的、5つ以上の標的、またはそれ以上で活性な治療剤をさらに提供する。
【０１２４】
例えば、1つの態様において、本開示は、2つ以上の5-HT受容体で活性な治療剤を提供する。これに関して本開示は、フェンフルラミンが5-HT4受容体で作用し、発作性疾患もしくは障害、てんかんおよび/またはてんかん性脳症を有する患者における、てんかん患者の予期せぬ突然死（SUDEP）につながる発作により誘発される呼吸停止（S-IRA）などの症状を予防、処置または改善するのに有用であるとの、驚くべき発見に向けられている。
【０１２５】
5-HT2B受容体で不活性な治療剤
好ましい態様において、本明細書において開示する治療剤は、5-HT2B受容体において弁膜症、肺高血圧症または他の有害作用などの有害作用を引き起こすのに十分な程度まで活性ではない。別の例示的態様において、薬剤は、5-HT2B受容体に結合しない、または5-HT2Bアンタゴニスト（すなわち、アゴニストの活性を阻止する作用物質）である、または5-HT2Bの逆アンタゴニスト（すなわち、受容体の基礎活性を低下させる作用物質）である、または5-HT2B受容体の中性アゴニスト（すなわち、アゴニストの結合を阻止する化合物）である。
【０１２６】
疾患および障害
本開示によって提供する治療剤は、いくつかの疾患および障害を処置するのに有用であり、かつ/またはそれらの症状を軽減もしくは改善するのに有用である。例えば、本明細書において開示する治療剤は、ドラベ症候群、レノックス・ガストー症候群、ドゥース症候群、点頭けいれん、ウェスト症候群、および他の難治性てんかん症候群などのてんかんの型を処置するのに有用であり、それらの状態と診断された患者のその症状を予防、軽減または改善するのに有用である。本明細書において提供する治療剤は、健忘、認知症、およびせん妄を非限定的に含む学習、記憶、認知、および/または問題解決に影響を与える認知障害を予防するのにも有用である。
【０１２７】
使用法
前述の治療剤を、様々な方法で用いることができる。上記のとおり、この方法の局面は、例えば関心対象の疾患もしくは状態と診断された患者へと、処置を必要としている患者を処置するために、またはその疾患もしくは障害と診断された患者の疾患もしくは障害の症状を予防、軽減もしくは改善するために、本明細書に記載の治療剤の治療的有効量を投与する段階を含む。例には、発作、特にてんかん重積、発作により誘発される呼吸停止（S-IRA）、およびてんかん患者の予期せぬ突然死（SUDEP）が含まれる。「治療的有効量」とは、所望の生物学的効果（例えば、発作により誘発される突然の呼吸停止（S-IRA）を含むがそれに限定されない、てんかんおよび関連する症状ならびに併存疾患の処置または予防）を誘発するのに十分な化合物の濃度を意味する。関心対象の疾患および状態には、てんかん、特にドラベ症候群、レノックス・ガストー症候群、ドゥース症候群、点頭けいれん、ウェスト症候群、および他の難治性てんかんを非限定的に含む、難治性型のてんかん、ならびに他の神経関連疾患、肥満、および肥満関連疾患が含まれるが、それらに限定されない。同様に関心対象であるのは、それらの疾患に関連する症状および併存疾患の予防または改善である。
【０１２８】
いくつかの態様において、本発明の方法は、神経関連疾患を処置するための化合物を対象に投与する段階を含む。関心対象の神経関連疾患には、乳児期の重度のミオクロニーてんかん（ドラベ症候群）、レノックス・ガストー症候群、ドゥース症候群、点頭けいれん、ウェスト症候群、および他の難治性てんかんを非限定的に含む、てんかん、特に重度または難治性型のてんかんが非限定的に含まれる。いくつかの態様において、本発明の方法は、S-IRA、SUDEP、および併存症状態を非限定的に含む症状を被包する。
【０１２９】
遺伝子検査
いくつかの場合に、特に、特定の薬剤が無効であるためまたは望ましくないもしくは重篤な副作用を有するため該薬剤の使用が禁忌である場合に、本開示によって提供するいくつかの治療剤の投与前に、患者の遺伝子変異を検査することが望ましいことがある。したがって、処置前に患者を検査することが望ましい場合がある。ドラベ症候群の患者の場合、SCN1A（例えば、電圧領域または細孔領域S4〜S6における）、SCN1B（ナトリウムチャネルβ1サブユニットをコードする領域などにおける）、SCN2A、SCN3A、SCN9A、GABRG2（γ2サブユニットをコードする領域などにおける）、GABRD（σサブユニットをコードする領域などにおける）の変異（部分的または完全欠失変異、切断変異および/またはミスセンス変異など）の検査を行うことができ、IまたはPCDH19遺伝子がドラベ症候群に関連付けられている。
【０１３０】
同様に、文献のいくつかの報告は、ドゥース症候群に対する強く、可能性の高い多因子遺伝成分を証明しており（例えば、Kelly et al., Developmental Medicine & Child Neurology 2010, 52: 988-993参照）、ナトリウムチャネルニューロン1型αサブユニット（SCN1A）変異、ナトリウムチャネルサブユニットβ-1（SCN1B）およびガンマアミノ酪酸受容体サブユニットγ-2（GABRG2）変異；SCN1Aのエクソン20における点変異を含むいくつかの変異が、多数のドゥース症候群患者で現れる。
【０１３１】
他の遺伝子検査を行うことができ、処置の条件として必要とすることができる。
【０１３２】
投薬
本明細書において開示する異なる治療剤を、異なる患者の年齢、サイズ、性別、状態ならびに異なる治療剤の使用に応じて、異なる量で患者に投薬することができる。
【０１３３】
例えば、投薬は、体重に基づく毎日の投薬であり得る。しかし、便宜上、投薬量を事前に設定することができる。一般に、特定の患者のために有効な最低用量を使用すべきである。患者に、特定の薬剤に適した量の治療剤から構成され得る単一の投薬単位を使用して、毎日投薬することができる。投薬単位は、送達経路に基づいて選択することができ、例えば、投薬単位は、経口送達、経皮送達、直腸送達、膣送達、口腔送達、鼻内および/もしくは吸入送達、肺送達または注射による送達に特異的であり得る。
【０１３４】
製剤
本発明の方法で投与する治療剤の用量を、経口崩壊錠、カプセル剤、ロゼンジ、経口液剤またはシロップ剤、経口乳剤、経口ゲル、経口用フィルム、バッカル液剤、例えば懸濁用の散剤などを含む錠剤などの経口剤形；注射用剤形；経皮パッチ、軟膏、クリームなどの経皮剤形；吸入剤形；および/または鼻、直腸、膣に投与する剤形を非限定的に含む、任意の薬学的に許容される剤形に製剤化することができる。そのような剤形は、1日1回投与のために、または1日に複数回の投与（例えば、1日に2、3または4回の投与）のために製剤化することができる。
【０１３５】
本発明の特定の製剤は液体剤形である。液体は溶液または懸濁液であり得、溶液の所定の量が得られるミリグラム量で目盛り付けされたピペット付きのボトルに含まれる、経口液剤またはシロップ剤であり得る。液剤によって、特定の治療剤に適した増分で投与されることができる小児用の液剤を調整することが可能になる。
【０１３６】
本発明の化合物の投与は、全身または局所であり得る。特定の態様において、哺乳動物への投与は、本発明の化合物の全身放出（例えば、血流中への）をもたらす。投与法には、経口、口腔、舌下、および直腸などの経腸経路；経皮および皮内などの局所投与；ならびに非経口投与が含まれ得る。適切な非経口経路には、皮下注射針またはカテーテルによる注射、例えば、静脈内、筋肉内、皮下、皮内、腹腔内、動脈内、心室内、くも膜下腔内、および前房内注射、ならびに膣内直腸、または鼻腔内投与などの非注射経路が含まれる。特定の態様において、本発明の化合物および組成物を経口投与する。特定の態様において、処置を必要としている領域に化合物を局所的に投与することが望ましい場合がある。いくつかの態様において、本発明の化合物の投与法は非経口投与である。これは、例えば、手術中の局所注入により、例えば、手術後の創傷包帯と併せての局所適用、注射により、カテーテルにより、坐剤により、または埋込物により達成され得、該埋込物はシアラスティック（sialastic）膜などの膜、もしくは繊維を含む、多孔質、非多孔質、またはゼラチン状の材料である。
【０１３７】
いくつかの態様において、本発明の方法は、肥満を処置するための本発明の化合物の食欲抑制量を対象に投与する段階を含む。肥満を処置するための任意の便利な方法は、本発明の治療剤との使用に適合させることができる。本明細書に記載の任意の薬学的組成物は、対象の肥満を処置する際に有用であり得る。併用療法は、本発明の化合物および1つまたは複数の追加の薬剤を含む単一の薬学的投与製剤の投与；ならびに本発明の化合物および1つまたは複数の追加の薬剤の、それ自体の別々の薬学的投与製剤の状態での投与を含む。例えば、本発明の化合物および食欲抑制活性を有する追加の薬剤（例えば、フェンテルミンまたはトピラメート）を、併用製剤などの単一の投与組成物の状態で一緒に患者に投与することができ、または各薬剤を別々の投与製剤の状態で投与することもできる。別々の投与製剤を使用する場合、本発明の化合物および1つまたは複数の追加の薬剤を同時に、または別々にずらした時間で、例えば、順次投与することもできる。いくつかの態様において、この方法は、抗てんかん剤を本発明の治療剤と共に対象に同時投与する段階をさらに含む。同時投与の方法において有用な関心対象の抗てんかん剤には、アセタゾラミド、カルバマゼピン、（テグレトール）、オンフィ（Onfi）（クロバザム）、クロナゼパム（クロノピン）、ラモトリジン、ニトラゼパム、ピラセタム、フェニトイン、レチガビン、スチリペントール、トピラメート、およびカルバトロール、エピトール（Epitol）、エケトロ（Equetro）、ガビトリル（Gabitril）（チアガビン）、ケプラ（レベチラセタム）、ラミクタール（ラモトリジン）、リリカ（プレガバリン）、グラリス（Gralise）、ホリザント、ニューロンチン、ガバロン（ガバペンチン）、ディランチン、プロンプト（Prompt）、ディフェン（Di-Phen）、エパヌチン（Epanutin）、フェニテク（Phenytek）（フェニトイン）、トパマックス、クデキシXR（Qudexy XR）、トロケンディXR（Trokendi XR）、トピラゲン（Topiragen）（トピラメート）、トリレプタル、オクステラー（Oxtellar）（オクスカルバゼピン）、デパコン（Depacon）、デパケン、デパコート（Depakote）、スタブゾル（Stavzor）（バルプロエート、バルプロ酸）、ゾネグラン（Zonegran）（ゾニサミド）、フィコンパ（ペランパネル）、アプティオム（Aptiom）（エスリカルバゼピン酢酸エステル）、ビンパット（ラコサミド）、サブリル（ビガバトリン）、バンゼル（Banzel）、イノベロン（Inovelon）（ルフィナミド）、セレビクス（Cerebyx）（ホスフェニトイン）、ザロンチン（エトスクシミド）、ソルフォトン（Solfoton）、ルミナル（Luminal）（フェノバルビタール）、バリウム、ダイアスタット（ジアゼパム）、アチバン（ロラゼパム）、ロノピン（Lonopin）、クロノピン（クロナゼパム）、フリジウム（Frisium）、ポチガ（Potiga）（エゾガビン）、フェルバトール（Felbatol）（フェルバメート）、マイソリン（プリミドン）が含まれるが、それらに限定されない。
【０１３８】
いくつかの態様において、本発明の方法は、試料を本発明の化合物と接触させる段階を含むインビトロ法である。これらの方法で使用できるプロトコルは多く、神経細胞からのセロトニン放出検定、無細胞検定、結合検定（例えば、5-HT2B受容体結合検定）；細胞表現型を測定する細胞検定、例えば、遺伝子発現検定；および関心対象の状態（例えば、ドラベ症候群、レノックス・ガストー症候群、ドゥース症候群、ウェスト症候群、および他の難治性てんかん）またはそのような状態に関連する症状もしくは併存疾患に関する特定の動物モデルを含む検定が含まれるが、それらに限定されない。
【０１３９】
薬学的製剤
同様に提供するのは、薬学的製剤である。薬学的製剤は、薬学的に許容されるビヒクル中に（単独でまたは、1つもしくは複数の追加の活性薬剤の存在下で）存在する化合物を含む組成物である。「薬学的に許容される」なる用語は、ヒトなどの哺乳動物で用いるために、連邦もしくは州政府の規制当局によって承認されている、または米国薬局方もしくは他の一般に認められた薬局方に収載されていることを意味する。「ビヒクル」なる用語は、哺乳動物への投与のためにそれと共に本発明の化合物を製剤化する、希釈剤、補助剤、賦形剤、または担体を意味する。
【０１４０】
賦形剤の選択は部分的に、特定の化合物によってならびに、組成物を投与するために用いる特定の方法によって決定される。したがって、本発明の薬学的組成に適した多様な製剤がある。
【０１４１】
本発明の方法において用いる治療剤の剤形は、治療剤を1つまたは複数の薬学的に許容される希釈剤、担体、補助剤などと、薬学的製剤の当業者には公知の様式で組み合わせることにより調製することができる。
【０１４２】
例として、治療剤を通常の薬学的に許容される担体および賦形剤（すなわち、ビヒクル）と混合し、水性液剤、錠剤、カプセル剤、エリキシル剤、懸濁剤、シロップ剤、ウェーファーなどの形で用いることができる。そのような薬学的組成物は、特定の態様において、約0.1重量％〜約90重量％の活性化合物、より一般的には約1重量％〜約30重量％の活性化合物を含む。薬学的組成物は、コーンスターチ、ゼラチン、ラクトース、デキストロース、ショ糖、微結晶セルロース、カオリン、マンニトール、リン酸2カルシウム、塩化ナトリウム、アルギン酸、植物油または他の類似の油、合成脂肪酸グリセリド、高級脂肪酸またはプロピレングリコールのエステル、コーンスターチ、ジャガイモデンプン、アカシア、トラガカント、ゼラチン、グリセリン、ソルビトール、エタノール、ポリエチレングリコール、コロイド状二酸化ケイ素、クロスカルメロースナトリウム、タルク、ステアリン酸マグネシウムおよびステアリン酸を非限定的に含む、可溶化剤、等張化剤、懸濁化剤、乳化剤、安定剤、保存剤、着色剤、希釈剤、緩衝化剤、界面活性剤、湿潤剤、着香剤および崩壊剤などの、一般的な担体および賦形剤を含み得る。本発明の製剤中で一般に用いる崩壊剤には、クロスカルメロース、微結晶セルロース、コーンスターチ、デンプングリコール酸ナトリウムおよびアルギン酸が含まれる。化合物を、植物油または他の類似の油、合成脂肪酸グリセリド、高級脂肪酸またはプロピレングリコールのエステルなどの水性または非水性溶媒に；望まれる場合には、可溶化剤、等張化剤、懸濁化剤、乳化剤、安定剤および保存剤などの通常の添加剤と共に、溶解、懸濁または乳化することにより、注射用調製物に製剤化することができる。
【０１４３】
いくつかの態様において、経口投与に適した製剤には、（a）水、または生理食塩水などの希釈剤中に溶解した有効量の化合物などの、液剤；（b）それぞれ所定の量の活性成分を、固体または顆粒として含む、カプセル剤、サシェまたは錠剤；（c）適切な液体中の懸濁剤；および（d）適切な乳剤が含まれ得る。錠剤の剤形は、ラクトース、マンニトール、コーンスターチ、ジャガイモデンプン、微結晶セルロース、アカシア、ゼラチン、コロイド状二酸化ケイ素、クロスカルメロースナトリウム、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、ならびに他の賦形剤、着色剤、希釈剤、緩衝化剤、湿潤剤、保存剤、着香剤、および薬理学的に適合性の賦形剤の1つまたは複数を含み得る。ロゼンジの剤形は、活性成分に加えて、本明細書に記載のものなどの賦形剤を含む、香料、通常はショ糖およびアカシアまたはトラガカント中の活性成分、ならびにゼラチンおよびグリセリン、またはショ糖およびアカシア、乳剤、ゲルなどの不活性基剤中に活性成分を含む香錠を含み得る。
【０１４４】
いくつかの場合に、化合物を経口投与用に製剤化する。いくつかの場合に、経口薬学的製剤のために、適切な賦形剤には、マンニトール、ラクトース、グルコース、ショ糖、デンプン、セルロース、ゼラチン、ステアリン酸マグネシウム、サッカリンナトリウム、および/または炭酸マグネシウムなどの、薬学的等級の担体が含まれる。経口液体製剤において用いるために、組成物を、例えば、水性生理食塩水、水性デキストロース、グリセロール、またはエタノールなどの水性担体、好ましくは水または通常生理食塩水中での水和に適した、固体または液体型のいずれかで供給する、液剤、懸濁剤、乳剤、またはシロップ剤として調製することができる。望まれる場合には、組成物は、湿潤剤、乳化剤、または緩衝剤などの、少量の非毒性補助物質を含むこともできる。
【０１４５】
本発明の特定の製剤は液体剤形である。液体は溶液または懸濁液であり得、溶液の所定の量が得られるミリグラム量で目盛り付けされたピペット付きのボトルに含まれる、経口液剤またはシロップ剤であり得る。液剤によって、0.5mL〜15mLのどこか、およびその間の任意の量を、0.5ミリグラムずつ増やして投与することができ、したがって0.5、1.0、1.5、2.0mLなどで投与することができる、小児用の液剤を調整することができる。
【０１４６】
液体組成物は一般には、適切な液体担体、例えば、エタノール、グリセリン、ソルビトール、非水性溶媒、例えばポリエチレングリコール、油または水中の化合物または薬学的に許容される塩と、懸濁化剤、保存剤、界面活性剤、湿潤剤、着香または着色剤との懸濁液または溶液からなる。または、液体製剤は、再構成用の粉末から調製することもできる。
【実施例】
【０１４７】
以下の実施例は、当業者に本発明をいかに作製し、使用するかを完全に開示および記載するために示すものであり、本発明者らがその発明であると考えるものの範囲を限定する意図はなく、また以下の実験が実施したすべてまたは唯一の実験であることを表す意図もない。用いる数字（例えば、量、温度など）に関して正確性を確保するために努力したが、いくらかの実験誤差および偏差は考慮されるべきである。特に記載がないかぎり、部は重量部であり、分子量は重量平均分子量であり、温度は摂氏度であり、かつ圧は大気圧または大気圧付近である。
【０１４８】
いくつかの選択的セロトニン（5-HT）再取り込み阻害剤は、DBAマウスで発作により誘発される呼吸停止（S-IRA）を予防することが判明した。しかし、5-HT受容体の活性化を増強する全ての薬物が、DBAマウスでS-IRAを有効に阻止するわけではない。したがって、フェンフルラミン（FFA）を調査して、その5-HT放出の増強がDBA/1マウスの聴原発作およびS-IRAに対する感受性を変化させるかどうかを判定した。
【０１４９】
実施例1
SUDEPの動物モデルにおけるフェンフルラミンの効果
材料と方法
動物
これらの試験は、ENVIGOから入手した同齢（＜80日）の雄DBA/1マウスを含んだ。DBA/1マウスのAGSz発生率（頻度）、重症度およびS-IRA感受性に有意な性差がなかったため、この試験では雄を使用した。マウスを以前の試験で記載したとおりにプライミングした（Faingold et al., （2010）. Epilepsy Behav. 17:436-40; Faingold, et al. （2011） Brain Res. 1418:104-10; Faingold, et al., （2011） Epilepsy Behav. 22:186-90）。簡単に言えば、マウスを、温度と湿度が制御された実験動物医学施設で12時間の明暗サイクル下、自由に摂食させて維持した。出生後23〜25日に開始して、マウスをプライミングし、前に記載のとおり、強い音声刺激を与えることによるAGSzおよびS-IRAに対する一貫した感受性について試験した。3回連続試験でS-IRAに対して一貫した感受性を示すマウスを以下の試験に含めた。
【０１５０】
発作誘発と蘇生
AGSzを、各DBA/1マウス（N=287）に、プラスチック製の円筒（直径43cm）の内側に設置した電気ベル（Heath Zenith Model #172C-A）からの強い（110dB SPL；re：0.0002dyne/cm2）広帯域音声刺激を提示することによって誘発した。電気ベルを用い、げっ歯類の人工呼吸器を用いて蘇生を行った（Faingold et al., (2010) DBA/1 mice exhibit chronic susceptibility to audiogenic seizures followed by sudden death associated with respiratory arrest. Epilepsy Behav. 17:436-40）。
【０１５１】
刺激を、マウスが強直発作を示すまで、または60秒の最大持続時間提示した。DBA/1マウスの典型的な発作の症候は、ワイルドランニング段階から始まり、続いて間代性強直発作と、次いで発作後行動抑制（PID）の間のS-IRAにただちにつながる強直後肢伸展が起こる。S-IRAの開始を、正向反射消失、耳介の弛緩と、次いで全身の筋緊張消失後の呼吸不全の発生によって視覚的に判定した。これらの行動は、DBAマウスの差し迫った突然死の信頼できる指標である。蘇生を、耳介弛緩および全身の筋緊張消失後10秒以内に開始し、これはS-IRAを逆転させ、マウスの＞90％を生き返らせるのに有効であった。マウスを仰臥位に置き、200回/分で1ccの室内空気をポンピングしている、げっ歯類呼吸器（Harvard Apparatus 680）の流出部に接続したポリエチレンチューブ（外径4.4mm）を、鼻孔の上に配置し、これは胸部の観察可能な変位を生じた。呼吸支援を、自発的呼吸リズムが戻るまで提供し、約19秒を要した。マウスを、正向反射を取り戻すまでモニターし、次いで飼育ケージに戻した。筋肉の緊張消失から正向反射の復帰までの時間によって示される、PIDの持続時間を含む、発作行動および回復のビデオ録画を、オフライン評価と分析のために行った。
【０１５２】
行動試験
本明細書において開示する実験は、異なる発作試験プロトコルを用いて、ビヒクル（生理食塩水）処置した対照マウスと比較しての、DBA/1マウスにおけるAGSz誘発行動に対するFFA（10〜40mg/kg、i.p.）の用量応答関係を調べた。この初期プロトコルは、薬物投与の30分、12時間および24時間後と、その後S-IRAへの感受性が戻るまで24時間間隔のAGSzの誘発を含んでいた。これらの試験は、FFAがAGSzの発生率（頻度）および重症度ならびにS-IRAに対する感受性を低減させ得るどうかを判定することを目的としていた。これらの結果に基づいて、5〜20mg/kgの用量範囲を選択して、効果の時間経過を詳細に評価するために、最初の24時間は8時間間隔を用い、その後は24時間の期間で、第2の発作試験プロトコルによってDBA/1マウスの別のグループにおけるFFAの効果の時間経過を判定した。DBA/1マウスにおけるAGSzの重症度に対するFFAの効果を判定するために、De Saroらの順序スコアリングシステムを用いた：発作なし＝0；ワイルドランニング＝1；間代発作＝2；強直発作＝3；死亡/S-IRA＝4。DBA/1マウスにおけるi.p.注射30分後のAGSzを阻止するためのFFAの50％有効量（ED50）を、最良適合（R2＝0.9989）を示す二次多項式（y＝65.113x2−2.0715x−63.578）を用いて計算した。
【０１５３】
薬物
Zogenix Internationalからご提供いただいたフェンフルラミン（FFA）を、Sigma-Aldrich（St. Louis, MO, U.S.A.）から入手した塩化ナトリウム錠（カタログ番号：07982-100TAB-F）を用いて、実験室で調製した滅菌生理食塩水ビヒクルに溶解した。
【０１５４】
統計分析
発作行動の動画を視覚的に分析し、薬物処置後のAGSzの発生率（頻度）、発作重症度、およびS-IRAの発生率（頻度）を、SPSSソフトウェアにより、カイ二乗、マン・ホイットニーUまたは二変量t-検定を使用して、ビヒクル対照と統計的に比較した。ED50を、SigmaPlot 13およびマイクロソフト(登録商標)エクセルを使用して計算した。これらの試験で使用する実験プロトコルは、Laboratory Animal Care and Use Committee of Southern Illinois University School of Medicineによって承認され、これらは実験動物の飼育および使用のための国立衛生研究所の指針に従っている。動物の使用ならびに疼痛および不快感を最小限に抑えるための措置が、これらの手順に含まれた。
【０１５５】
DBA/1マウスの調弦発作（AGSz）に対するFFAの用量および時間依存的抗けいれん効果
FFAの投与は、DBA/1マウスにおける用量および時間依存的様式でのAGSzの阻止をもたらした。初期の試験パラダイムを用いて、AGSzに対する感受性は、生理食塩水処置した対照と比較した場合、30分の時点での20および40mg/kg FFA（それぞれp＜0.01およびp＜0.001、カイ二乗試験）後に有意に低減した（図1A）。AGSzに対するFFAの効果を示す図1Aに関して、15mg/kg（薄い縦線のバー；n＝9）、20mg/kg（大きいドットのバー；n＝11）および40mg/kg（大きい斜めストライプ；n＝6）でのFFAの全身腹腔内（i.p.）注射は、生理食塩水処置した対照マウス（黒塗りのバー；n＝21）と比較して、AGSzの発生率（頻度）を有意に低減させることが観察された。10mg/kg（広い下向き斜線のバー；n＝11）のFFAを投与したマウスでは、AGSzの発生率（頻度）に有意な効果は見られなかった。［*p＜0.05；**p＜0.01；#p＜0.001はそれぞれ、カイ二乗検定で判定して、対照と統計差があることを示す］。
【０１５６】
図1Bは、DBA/1マウスにおけるAGSzに続くS-IRAの予防におけるFFAの効果を示す。生理食塩水処置した対照（上記のとおりのバー）と比較して、30分で開始するS-IRAの発生率（頻度）の有意な低減が、15、20および40mg/kg腹腔内FFAを投与したマウスで見られた。10mg/kg FFAを投与したマウスにおけるS-IRAの発生（頻度）は影響を受けなかった。FFA処置したDBA/1マウスにおけるS-IRA感受性の有意な復帰は72時間までで起こった。［*p＜0.05；**p＜0.01；#p＜0.001はそれぞれ、カイ二乗検定で判定して、対照と統計差があることを示す］。
【０１５７】
FFAの効果は、24時間で依然として有意であったため、比較的長期持続性であった。発作の頻度は、48時間ではもはや対照群と有意差はなかった。15mg/kg FFAを投与したマウスは、比較的短い持続時間（＜24時間）と、より遅い12時間でのAGSz阻止の開始を示した（p＜0.01、カイ二乗検定）。この試験パラダイムでは、FAAの10mg/kg用量はAGSzを阻止するのに無効であった。30分でのFFAによるAGSzの阻止のED50は21.7mg/kgであった（図1C）。図1C：50％有効量（ED50）は、50％の有効性の切片によって示されるとおり、FFA処置後30分でのDBA/1マウスのAGSz発生率（頻度）パーセントに対して10、15、20および40mg/kgのFFA用量の対数をプロットすることによって決定した。
【０１５８】
FFAはまた、DBA/1マウスのAGSz重症度を有意に低減させた。重症度スコアに基づくAGSz重症度低減データは、前述の発生率（頻度）データを反映していた。AGSz重症度の有意な低減の早期の開始（30分）は、20または40mg/kg FFAを投与したマウスで見られ、最大発作重症度の復帰はそれぞれ24時間および48時間で起こった（図1D）。図1Dに示すとおり：FFAは、DBA/1マウスのAGSzの重症度を効果的に低減させ； 20および40mg/kgのFFA（i.p）後30分で始まり、生理食塩水処置した対照と比較してAGSz重症度スコア中央値の有意な低減が観察された。10および15mg/kg FFAを投与したマウスの場合、重症度スコアの低減は遅れ、12時間で起こった。FFA処置したDBA/1マウスのAGSz重症度の有意な復帰は48時間までに起こった。［*p＜0.05；**p＜0.01；#p＜0.001はそれぞれ、マン・ホイットニーU検定で判定して、対照と統計差があることを示す］。15mg/kg FFAを投与したマウスのAGSz重症度低減は、持続時間が短く、開始がより遅くて12時間で起こり、これは、発作発生率データ（図1A）と同様であった。10mg/kgでは、FFAは12時間でDBA/1マウスのAGSz重症度を有意に低減させた（しかし発作発生率/頻度は低減させなかった）（p＜0.05、マンホイットニーU検定）。AGSz重症度に対する10mg/kgのFFAの効果は、24時間までになくなった。FFAによるS-IRAの阻止（図1B）は強直発作発生率の低減と一致することが判明した（図5）。DBA/1マウスのAGSzに続くS-IRAの発生率は、FFAの15〜40mg/kgにより、投与後30分で有意に低減した（p＜0.05、カイ二乗検定）。40mg/kg用量での単回全身注射後のS-IRAおよび強直発作発生率に対する効果は長期持続性であった。強直AGSzおよびS-IRA感受性は、40mg/kg FFAを投与したマウスで72時間までに戻ったが、これらのマウスの33.3%は、これらの発作行動に対する感受性を最大8日間示し続けた。対照的に、10mg/kgのFFAを投与したマウスは、12時間でS-IRA（36.4％）および強直発作（54.6％）のより短い持続時間およびより遅い開始を示した（p＜0.01、カイ二乗検定）。この試験パラダイムでは、10mg/kg FFAを投与した18.2％のマウスが12時間で強直発作後にS-IRA阻止を示した（図1Bおよび図5）が、この選択的S-IRA阻止効果の発生率は統計的に有意ではなかった。図5に示すとおり、FFAは、DBA/1マウスにおいて、S-IRAに至ることが公知のAGSz表現型である強直発作の発生率を有意に低減させた。20mg/kg FFA（大きいドットのバー；n＝11）および40mg/kg FFA（大きい格子；n＝6）の腹腔内投与後30分から、生理食塩水処置した対照（黒塗りのバー；n＝21）と比較して、強直発作発生率の有意な低減が見られた。この強直発作阻止効果は、15mg/kg FFA（薄い縦線のバー；n＝9）で処置したマウスで遅延し、一過性であった。10mg/kg FFA（広い下向き斜線のバー；n＝11）処置マウスにおける強直発作の発生率は影響を受けなかった。FFA処置したDBA/1マウスの間のS-IRA感受性の有意な復帰は72時間までに起こった。［*p＜0.05；**p＜0.01；#p＜0.001；#p＜0.001はそれぞれ、カイ二乗検定で判定して、対照と統計差があることを示す］。
【０１５９】
8時間試験プロトコルにおけるFFAの効果
図2A〜2Dは、DBA/1マウスにおけるFFAの選択的S-IRA阻止効果の時間経過を示す（8時間試験プロトコル）。最初の24時間の8時間試験プロトコルを、FFAの5〜20mg /kg（i.p.）用量の効果の試験の次のグループで使用した。AGSzの重症度スコア中央値の有意な（p＜0.01、マン・ホイットニーU検定）低減が、8時間でFFAの10〜20mg/kg用量で見られ（図2A）、AGSz重症度は24時間までに薬物投与前のレベルに戻り、これは初期試験プロトコルの結果（図1D）と同様である。図2Aに示すとおり、FFAはDBA/1マウスのAGSz重症度を低減させた。10mg/kg FFA（広い下向き斜線のバー；n＝10）、15mg/kg FFA（薄い縦線のバー；n＝10）および20mg/kg FFA（大きいドットのバー；n＝9）をi.p.注射したマウスは、生理食塩水処置した対照（黒塗りのバー；n＝12）と比較して、時間経過試験中の8時間で開始する、AGSz重症度スコア中央値の有意な低減を示した。AGSzの重症度は、5mg/kg FFA（薄い横線のバー；n＝9）を投与したマウスでは影響を受けないままであった。FFA処置したDBA/1マウスでAGSz重症度の有意な復帰は24時間までに起こった。［**p＜0.01；#p＜0.001は対照と統計差があることを示す、マン・ホイットニーU検定］。
【０１６０】
図2Bに示すとおり：FFAは、DBA/1マウスで、S-IRAをもたらし得る強直発作の発生率を低減させた。DBA/1でS-IRAに先行する強直発作の発生率は、生理食塩水処置した対照と比較して、8時間で10〜20mg/kgのFFAを投与したマウスで有意に低減した（図2B）。10、15および20mg/kgのFFAを投与したDBA/1マウスで、強直発作の発生率の有意な低減が8時間で見られた。FFAのこの効果は48時間までに逆転することが判明した。FFAの10〜20mg/kg用量を投与したマウスで、強直発作に対する感受性の復帰が16〜48時間の間に起こることが観察された。5mg/kg FFAの用量は、DBA/1マウスの強直発作に対して無効であった。［*p＜0.05；#p＜0.001はそれぞれ、カイ二乗検定で判定して、生理食塩水処置した対照と統計差があることを示す］。
【０１６１】
FFAはDBA/1マウスでS-IRAを予防した。10〜20mg/kgのFFAを投与したマウスは、8時間から始まるS-IRAの発生率の有意な減少を示した（図2C）。10、15および20mg/kg FFA投与後の8時間から始まり、S-IRAの発生率の有意な低減が、生理食塩水処置した対照と比較して起こった。5mg/kg FFAを投与したマウスのS-IRAの発生率は影響を受けなかった。このパラダイム下でのS-IRA発生率の低減は、主に強直AGSz感受性の発生率の有意な低減と一致した（図2B参照）。FFA処置したDBA/1マウスの間のS-IRA感受性の復帰は48時間で起こった。［*p＜0.05；**p＜0.01；#p＜0.001はそれぞれ、カイ二乗検定で判定して、対照と統計差があることを示す］。
【０１６２】
図2Dは、FFAの選択的S-IRA阻止効果を示す。S-IRAの発生率の有意な低減は16時間の時点で、15mg/kg FFA後に強直AGSzを示し、強直発作を示し続け、S-IRAの選択的阻止の有意な［#p＜0.001、カイ二乗検定］発生率を示したマウス（n＝5）の100％で見られた（図2B〜2D）。これらのFFA処置マウスにおけるAGSz後のS-IRAへの感受性の復帰は48時間までに見られた。
【０１６３】
図6を参照して、DBA/1マウスで見られる選択的S-IRA阻止の全発生率は、これらの時間経過試験中に70％であった（図6）。FFAで処置したDBA/1マウスにおいて、選択的S-IRA阻止の全発生率を図6に示す；5mg/kg FFA i.p.（薄い横線のバー；n＝9）、10mg/kg FFA i.p.（広い下向き斜線のバー；n＝10）および15mg/kg FFA i.p.（薄い縦線のバー；n＝10）により、8時間試験プロトコルで処置したマウス。［**p＜0.01は、生理食塩水処置した対照（黒塗りのバー；n＝12）と統計差があることを示す、カイ二乗検定］。20mg/kg FFAで処置したマウスも同様の傾向をたどったが、S-IRAおよび強直発作阻止の発生はいずれも、これらのマウスのほとんどで起こった（図2B〜2C）。FFAの5mg/kg用量は、DBA/1マウスの任意のAGSz行動を阻止する上で無効であった。
【０１６４】
図3は、15mg/kg FFA（n＝10）による選択的S-IRA阻止が、最後のプライミング試験期間（薬物投与前）と比較して、正向反射消失の持続時間によって定義される、発作後抑制（PID）期間平均の有意な低減に関連することを示す。［*p＜0.05（二変量t検定）］。DBA/1マウスにおけるAGSz後の正向反射消失の持続期間はPIDの尺度であり、これは患者のSUDEPの原因である。選択的S-IRA阻止を示すマウスにおける15mg/kg FFA後16時間のPIDの持続時間（34.6±13.3s）は、最後のプライミング発作（168.6±43.4s）と比較して、有意に低減した（p＜0.05、対応のあるt検定）（図3）。
【０１６５】
図4Aおよび4Bは、FFA前処置による重度発作の発生率低減およびS-IRAの予防を示す。その後の実験で、AGSzを、15mg/kgのFFA i.p.で処置したDBA/1マウスで試験したが、最初は16時間で試験した。図4A：15mg/kg FFA後16時間で初めて試験したDBA/1マウス（n＝73）は、生理食塩水処置した対照（n＝38）と比較して、強直発作（68.5％）およびS-IRA （21.9％）の全体的な発生率の有意な低減を示した（図4A）。図4Bは、15mg/kg FFAでの処置後16時間で強直発作を示し続けた DBA/1マウス（n＝50）の、生理食塩水処置した対照と比較しての、選択的S-IRA阻止の有意な発生率（68％）を示す。［#p＜0.001（カイ二乗検定］（図4B）。FFA処置マウスにおけるS-IRA感受性の復帰（94.5％）は48時間で起こり、以前の知見と一致した（図2C）。
【０１６６】
考察
本試験は、FFA投与が用量および時間依存的な様式でDBA/1マウスの発作重症度を有意に減少させる、またはAGSz感受性を有意に阻止することを見出した。FFAはまた、S-IRAの発生率を有意に低減させることも見出され、いかなる発作行動にも影響をおよぼさないS-IRAの選択的阻止も観察された。これらの知見は、FFAが発作制御を改善し、SUDEPを予防するための治療的可能性を有することを示唆している。
【０１６７】
これは、てんかんおよびSUDEPの哺乳動物モデルにおけるFFAの抗けいれん効果を調べる最初の試験である。FFAは、S-IRAにつながることが多い最も重度のタイプの発作と考えられる、強直発作の発生率を低減させ、また、用量に応じてDBA/ 1マウスのAGSzに対する感受性を低減させた。これらの効果は、高度の薬剤耐性と同様に、SUDEPの非常に高い発生率を示す小児てんかんの一種である、ドラベ症候群患者における追加（補助）FFA療法で観察される発作頻度の有意な低減と一致する。ドラベ症候群患者の臨床試験により、FFAを含むセロトニン受容体活性化を増強する薬物による追加療法が、発作頻度の有意な低減をもたらすことが判明した。
【０１６８】
本研究におけるDBA/1マウスのAGSzに対するFFAの単回投与の抗けいれん効果は、長期持続性であった。この知見は、同様のFFA用量が1週間持続する中枢セロトニン作動性効果を発揮したラット試験と一致する。FFAのこの持続性の効果は、その活性代謝物であるN-FFAに部分的に起因する可能性がある。比較的長期にわたる抗けいれん効果（72時間までに終わる）がフルオキセチンの試験で見られ、これはその活性代謝物であるノルフルオキセチンによって少なくとも部分的に媒介されると考えられる。しかし、40mg/kg用量のFFAによるDBA/1マウスの発作重症度の低減はより長期で、最大8日間持続し、この長期持続時間の基礎はさらなる試験を必要とするであろう。
【０１６９】
DBA/1マウスは、蘇生が迅速に提供されない限り、AGSz直後のS-IRAによる突然死に対して一貫した感受性を示す。本試験では、FFAはS-IRAおよびAGSzの有意な用量および時間依存的阻止を行った。8時間間隔での試験によるFFAの効果の時間経過に関するより詳細な調査により、15mg/kgのFFAが16時間でDBA/1マウスのいかなる発作行動も阻止することなくS-IRAの有意かつ選択的阻止を誘発することが明らかになった（図2D）。選択的S-IRA阻止の全発生率は、この群のマウスで70％であり（図6）、また、15mg/kgのFFAがPIDの持続時間を有意に短縮することも判明し（図3）、これは、長期PIDが主要なSUDEP危険因子であるため、重要である可能性もある。選択的S-IRA阻止の有意な発生は、15mg/kgのFFA後16時間で最初に試験したマウスでも見られ（図4B）、薬物の有効性および効果の時間経過がさらに確認された。本試験で使用したFFA用量のDBA/1マウスにおける予備的な薬物動態実験は、15mg/kg投与後16時間のFFAの血漿レベルならびにその曲線下面積が、FFAの単回経口投与（0.8mg/kg）後のドラベ症候群患者で観察されたレベルと同等であったことを示している。さらに、Reagan-Shawらによる体表面積に基づく成獣マウスにおける15mg/kg FFAの用量は、患者で使用する臨床的に有効な範囲［1.8mg/kg/日（小児）または1.2mg/kg/日（成人）］に変換される。本開示のFFA用量は、この薬物の本来の有用性を確立した、げっ歯類試験のものともほぼ同等である。
【０１７０】
したがって、15mg/kgのFFA投与の16時間後、S-IRAの選択的阻止が起こったが、DBA/1マウスのいかなる発作行動にも有意な変化はなかった。20〜40mg/kgのFFAの30分後、発作発生率および重症度の有意な低減ならびにS-IRA感受性が発生し、これらは長期持続性（≧48時間）であった。FFA注射後30分でAGSzを有意に低減させる50％有効用量（ED50）は21.7mg/kgであった。
【０１７１】
本開示は、哺乳動物のSUDEPモデルにおける発作および発作誘発死に対するFFAの有効性に関する証拠を提供する。低FFA用量がS-IRAを選択的に阻止できることは、SUDEPの予防におけるFFAの潜在的有用性を示唆する。これらの結果はさらに、SUDEPのセロトニン仮説を確認し、拡張する。
【０１７２】
DBA/1マウスで全身投与したFFAは、S-IRAを予防するのに有効であり、また、長期持続性および用量依存的抗けいれん効果を発揮する。中枢セロトニン放出を増強することが公知のFFAによるこれらの知見は、再取り込みを選択的に阻止することによってセロトニンの作用を増強する、フルオキセチンを用いた知見と一致している。前述のとおり、DBA/1マウスのAGSz後の死亡は呼吸不全から生じる。セロトニンは通常、脳幹呼吸中枢の呼吸刺激および活動の状態依存性変化を媒介する重要な調節的役割を果たす。脳幹縫線核ニューロンは脳セロトニンの主要な供給源であり、最近の神経画像試験は、DBA/1マウスにおけるS-IRAの結果として特定の縫線核で有意な活性変化が起こることを示している。中枢セロトニン作動性ニューロンの欠失は、遺伝子導入したげっ歯類のCO2レベル上昇に対する呼吸反応の覚醒低下および欠損をもたらした。DBA/1マウスは、トリプトファンヒドロキシラーゼ2の発現低下によるセロトニン合成の遺伝的欠損を示す。セロトニン合成の前駆体である5-ヒドロキシトリプトファンによる栄養素補充は、DBA/1マウスにおけるAGSz行動の発生率を有意に低減させ、S-IRAを阻止した。加えて、DBA/1マウスで5-HT2Cおよび5-HT3B受容体発現の有意な低下が起こり、DBA/1マウスのS-IRAを阻止するフルオキセチンの作用は部分的に、5-HT3受容体によって媒介される。DBA/1マウスにおける本発明者らの最初の試験を確認することに加えて、本知見はまた、中枢セロトニン作動性神経伝達を増強する抗けいれんおよび潜在的SUDEP予防効果の証拠を拡大する。てんかんおよびSUDEPにおけるセロトニンの重要性は、最近の試験によっても裏付けられ、FFAはドラベ症候群のゼブラフィッシュモデルにおける行動的および電気記録的てんかん様活動の両方を予防するのに有効であることが判明した。ヒトSUDEP症例における最近の剖検所見は、縫線核を含む脳幹核におけるセロトニン性異常も示している。（Patodia, et al., The ventrolateral medulla and medullary raphe in sudden unexpected death in epilepsy. Brain. Epub 2018 Mar 28）。これらを合わせると、これらの知見は患者のSUDEPの予防におけるFFAの潜在的有用性を示唆するものである。
【０１７３】
まとめると、SUDEP予防およびより良い発作制御は、以前は減量のために販売されていたフェンフルラミンの有望な新しい用途である。薬物の別の目的のための転用は、てんかんを含む多くの医学分野で迅速な同定と実験室から臨床への変換のために信用されている。FFAのS-IRAおよび発作阻止効果の媒介に関与する特定の脳領域およびセロトニン受容体型が決定され得る。セロトニン系に加えて、FFAは、シグマおよびアドレナリン受容体に対して作用することも公知である。これらの作用の役割とセロトニンおよび他のモノアミンの脳脊髄液レベルの決定は、FFAの効果のメカニズムおよび発作誘発死の病因に関する見識を提供し得る。FFAの慢性的な添加はドラベ症候群患者に有効であることが判明したため、継続的処置の効果の詳細な調査は、FFAの抗けいれんおよびSUDEP予防能力のさらなる証拠を提供することになる。
【０１７４】
実施例2
SUDEPおよびドラベ症候群のマウスモデルにおけるフェンフルラミンの活性を特徴付けるためのセロトニン（5-HT）アンタゴニストの使用
最近、発作により誘発される突然死の阻止におけるフェフルラミンの作用を媒介する際のいくつかのセロトニン受容体サブタイプの寄与が、SUDEPのDBA/1マウスモデルにおいて評価された。これらの試験において、脳内のセロトニン（5-ヒドロキシトリプタミン、5-HT）の放出を増強することが公知のフェンフルラミンは、DBA/1マウスにおける聴原発作（AGSz）および発作により誘発される呼吸停止（S-IRA）を阻止するのに有効であることが判明した（データは示していない）。しかし、本開示の前に、フェンフルラミンの効果が特定の5-HT受容体によって媒介されるかどうかは不明であった。したがって、本発明において開示するとおり、いくつかの5-HT受容体特異的アンタゴニストを使用して、フェンフルラミンの効果を調査し、アンタゴニストがフェンフルラミンによって媒介される抗けいれん活性（または任意の他の効果）を逆転させ得るかどうかを判定し、フェンフルラミンが結合してアゴニストとして作用する5-HT受容体のサブセットを同定した。
【０１７５】
DBA/1マウスのAGSzに対するフェンフルラミンの効果を逆転させる際のいくつかの5-HTアンタゴニストの有効性を評価した。5-HT1aのアンタゴニストである、5-HT2、5-HT3、5-HT4、5-HT5aおよび5-HT7受容体を試験し、結果を以下に詳述する。5-HT6および5-HT1a/1bアンタゴニストの影響を調査する試験が進行中である。
【０１７６】
これらの実験のために、DBA/1マウスを用いて（AGSz後のS-IRAに対する一貫した感受性を保証するために、確立されたプライミング手順にかけた後）、様々な5-HT受容体に対するフェンフルラミンの効果を評価した。電気ベルを用いて発作を誘発し、げっ歯類の人工呼吸器を用いて蘇生を行った（Faingold et al., 2010）。プライミングの少なくとも24時間後、マウスにFFA（15mg/kg、i.p.）を投与し、16時間後にAGSzおよびS-IRA感受性について試験した。AGSz誘発の30分前に、選択的5-HT受容体アンタゴニストまたはビヒクルを投与して、特定の受容体がFFAのS-IRAを阻止する能力に寄与するかどうかを評価した。発作行動をビデオテープに記録し、定量し、ビヒクル処置した陰性対照およびFFA処置した陽性対照と統計的に比較した（カイ二乗検定；有意性はp＜0.05に設定）。
【０１７７】
アンタゴニスト
具体的には、試験したアンタゴニストは：5-HT1Aアンタゴニスト、WAY100635（0.1〜15mg/kg）；5-HT2アンタゴニスト、リタンセリン（10〜20mg/kg）；5-HT3アンタゴニスト、オンダンセトロン（1〜3mg/kg）；5-HT4アンタゴニスト、GR125487（20〜60mg/kg）；5-HT5Aアンタゴニスト、SB669551（10〜20mg/kg）；および5-HT7アンタゴニスト、SB269970（30〜40mg/kg）であった。5-HT6および5-HT1a/1bアンタゴニストの影響を調査する試験も進行中である。
【０１７８】
結果：特に、5-HT4アンタゴニスト（GR125487、30mg/kg）による30分間の処置の後、FFA誘導性のS-IRA阻止の逆転が観察された。したがって、GR125487は、フェンフルラミンのS-IRA阻害の有意な阻止を誘導する際に有効であった（図7および8参照）。興味深いことに、5-HT2、5-HT4および5-HT7受容体のアンタゴニストは、AGSzの重症度に対するFFAの抗けいれん効果を逆転させるが、そのS-IRA阻止効果は逆転させないことが判明した。5-HT2（20mg/kg、リタンセリン）、5-HT4（30および60mg/kg、GR125487）および5-HT7（30mg/kgおよび40mg/kg、SB269970）受容体のアンタゴニストは、AGSzの重症度に対するFFAの抗けいれん効果を逆転させることができた。5-HT5aアンタゴニスト、SB669551は、20mg/kgでFFAの抗けいれん効果を遮断した。対照的に、5-HT1A（WAY100635、0.1〜15mg/kg）および5-HT3（オンダンセトロン、1〜3mg/kg）受容体アンタゴニストは、試験したいかなる用量でも無効であった。
【０１７９】
5-HR1A、5-HT3、および受容体のアンタゴニストは、フェンフルラミンの効果を逆転させず、S-IRAおよび/またはAGSzに対するフェンフルラミンの効果は、これらの受容体との相互作用によって媒介されないことを示唆している。対照的に、5-HT2、5-HT5A、5-HT7アンタゴニスト（リタンセリン、20mg/kg；SB669551、20mg/kg；ならびにSB269970、30mg/kgおよび40mg/kg）は、FFAの抗けいれん効果を遮断することが判明し、フェンフルラミンの抗けいれん効果がこれらの受容体との相互作用によって媒介される可能性を示唆している。特に、化合物GR125487は、フェンフルラミンの抗けいれん効果およびS-IRA阻止効果を部分的に逆転させることが判明したため、フェンフルラミンは5-HT4受容体でアゴニストとして特異的に作用することが判明したと結論づけた。
【０１８０】
したがって、DBA/1マウスでAGSzによって誘発されるS-IRAに対するFFAの抗けいれん効果は少なくとも部分的に、5-HT4受容体の活性化によって媒介される。DBA/1マウス脳内の5-HT4受容体の発現レベルは、正常マウスのそれと有意差がない（Faingold et al., 2011）。これらの結果は、発作の重症度を低減させS-IRAを阻止する選択的セロトニン再取り込み阻害剤の能力を媒介する受容体に関する以前の試験に照らして驚くべきことであり、選択的な5-HT3アンタゴニストによってのみ逆転させることができる（Faingold et al., 2016）。
【０１８１】
特定の5-HT受容体を活性化するアゴニストは、SUDEPの動物モデルにおける将来の試験のための、およびヒトSUDEPの可能性のある予防処置としての関心対象である。いくつかの態様において、5-HTアゴニストは5-HT4受容体アゴニストである。本明細書において開示するとおり、ヒト患者の発作の発生率または重症度を低減させる方法であって、5-HT4アゴニストの治療的有効用量を該患者に投与する段階、および5-HT4アゴニストに該患者の5-HT4受容体を刺激させる段階を含む前記方法は、患者の発作の発生率または重症度を低減させることができる。いくつかの態様において、5-HT4アゴニストはフェンフルラミンである。
【０１８２】
実施例3
DBA/1マウスにおけるフェンフルラミンの抗けいれん効果およびS-IRA阻止効果を媒介する神経伝達物質の判定
FFAは5-HT、ノルエピネフリンおよびプロラクチンの周囲および相（すなわち、発作後抑制の間の）レベルを有意かつ選択的に上昇させるため、およびFFAはDBA/1マウスのAGSzおよびSUDEPに対して有効であるため（前述のとおり）、中枢神経系におけるこれらの神経伝達物質のレベルの変化を試験することは、FFAの作用のメカニズムを確立するのに有用であろう。DBA/1マウスのAGSzおよびS-IRAを阻止するのに有効であると判明した時点およびFFAの用量で、DBA/1マウス血漿および脳におけるモノアミン（5-HT、ドーパミンおよびノルエピネフリン）、アデノシンおよびプロラクチンのレベルを、FFAおよびノルフェンフルラミンのレベルと比較して、質量分光法（LC-MS）と組み合わせた液体クロマトグラフィーを使用して分析する。
【０１８３】
実施例4
セロトニン前駆体によるDBA/1マウスの聴原発作（AGSz）および発作により誘発される呼吸停止（S-IRA）に対するFFAの効果の増強
フェンフルラミンは、中枢神経系における5-HT放出を増強することによって作用する。したがって、DBA/1マウスのAGSzおよびS-IRAに影響を及ぼす際の、セロトニン前駆体である5-ヒドロキシトリプトファン（5-HTP）のフェンフルラミンとの同時投与の増強効果を試験する。これらの試験の1つの目標は、有効性を損なうことなく、薬物の用量をさらに減らすことである。
【０１８４】
実施例5
S-IRAおよびSUDEP中に重度の低酸素症を起こすDBA/1マウスにおける脳領域の特定
発作により誘発される脳機能障害は血流低下によって媒介され、別々の脳領域で重度の低酸素症をもたらす（Farrell et al., 2016, 2017）。したがって、重度の低酸素症を経験し、DBA/1マウスのSUDEPの病因において役割を果たし得る脳領域を解明する。これらの脳領域は、FFAの薬理学的標的である。S-IRA後の塩酸ピモニダゾール（Hypoxyprobe(商標)キット）の取り込みとFFAによるその阻止の差を試験し、5-HT4およびシグマ1a受容体の限局的共局在を確立し、DBA/1マウスのAGSzおよびS-IRAに対するFFAの効果を媒介する脳領域および受容体を解明する。
【０１８５】
実施例6
DBA/1マウスもAGSzおよびS-IRAの間のEEG、ECGおよび呼吸に対するフェンフルラミンの効果
これらの試験は、FFAによって活性化される生理学的変化の判定を可能にする。EEG、EKGおよび呼吸活動の変化の時間経過に対するフェンフルラミンの効果を、AGSzおよびS-IRAの間に判定し、DBA/1マウスにおけるFFA処置後のS-IRA阻止と比較する。
【０１８６】
実施例7
FFAの抗けいれんおよびS-IRA阻止効果のさらなる試験
まず、5-HT4受容体アンタゴニスト（GR125487）が、DBA/1マウスモデルにおけるFFAの抗けいれんおよびS-IRA阻止効果を有意に逆転させることができたため、さらなる5-HT4受容体アゴニストの抗けいれんおよびS-IRA阻止能力を調べるためのさらなる試験を実施する。例えば、10〜30mg/kgのBIMU8を、単独およびFFAとの組み合わせで、AGSzおよびS-IRAに対するその効果について評価する（Manzke et al., 2003；Hasebe et al., 2015）。
【０１８７】
加えて、ヒトの臨床試験において、5-HT4受容体アゴニスト（例えば、フェンフルラミン）が発作、および/またはS-IRAおよび/またはSUDEPを低減、改善および/または消失させる効果を評価した。
【０１８８】
加えて、GR125487の脳血管内微小注射（10、20および40nmol）を実施して、脳内のFFA様標的に対するフェンフルラミンまたは他の5-HT4受容体アゴニストの効果をさらに調査する（De Deurwaerdere et al., 2002；Consolo et al., 1994参照）。
【０１８９】
さらに、5-HT4受容体アンタゴニストは、FFAの抗けいれんおよびS-IRA抑制効果を有意に低減させたため、その効果を媒介するシグマ1受容体の役割を調査する。DBA/1マウスにおけるAGSzおよびS-IRAの発生率に対するFFAの効果を逆転させる際の、シグマ1受容体アンタゴニスト、NE-100の有効性を、シグマ2アンタゴニスト（YUN252）と比較して試験する。
【０１９０】
最後に、シグマ受容体アンタゴニストがDBA/1マウスにおけるFFAの作用に影響をおよぼし得る場合、DBA/1マウスのAGSzおよびS-IRAに対するシグマ1または2アゴニストおよび正のアロステリック調節因子、E1R（10〜75mg/kg）の効果に関する追跡試験を行って、このメカニズムをさらに検証する。
【０１９１】
前述の記載は単に本発明の原理を示すにすぎない。当業者であれば、本明細書に明白に記載または示していないが、本発明の原理を具体化し、その精神および範囲内に含まれる、様々な配置を考案し得ることが理解されよう。さらに、本明細書において列挙するすべての例および条件の用語は、主として読者が本発明の原理および本発明者らによる技術の促進に寄与する概念を理解する際の助けとなることが意図され、そのような具体的に列挙する例および条件に対する制限はないと解釈されるべきである。さらに、本発明の原理、局面、および態様、ならびにその具体例を記載する、本明細書におけるすべての言明は、その構造的および機能的等価物の両方を含むことが意図される。加えて、そのような等価物は、現在公知の等価物および将来開発される等価物、すなわち、構造に関係なく、同じ機能を果たす任意の開発される要素の両方を含むことが意図される。したがって、本発明の範囲は、本明細書において示し、記載する、例示的態様に限定されると意図されない。それよりも、本発明の範囲および精神は添付の特許請求の範囲によって具体化される。
【図１Ａ】
2021526507.tif 000009
【図１Ｂ】
2021526507.tif 000010
【図１Ｃ】
2021526507.tif 000011
【図１Ｄ】
2021526507.tif 000012
【図２Ａ】
2021526507.tif 000013
【図２Ｂ】
2021526507.tif 000014
【図２Ｃ】
2021526507.tif 000015
【図２Ｄ】
2021526507.tif 000016
【図３】
2021526507.tif 000017
【図４】
2021526507.tif 000018
【図５】
2021526507.tif 000019
【図６】
2021526507.tif 000020
【図７】
2021526507.tif 000021
【図８】
2021526507.tif 000022
【手続補正書】
【提出日】令和3年4月8日(2021.4.8)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
5-HT4アゴニストの治療的有効用量を含む、
(a) ヒト患者における、発作により誘発されるてんかん患者の予期せぬ突然死（Sudden Unexpected Death in Epilepsy；SUDEP）の確度の低減させるための、または
(b) 発作を示し、発作により誘発されるてんかん患者の突然死（SUDEP）の可能性があると診断された患者の脳内の1つまたは複数の5-HT4受容体を刺激するための、
薬学的組成物。
【請求項２】
5-HT4アゴニストがフェンフルラミン、BIMU-8、シサプリド、モサプリド、プルカロプリド、レンザプリド、RS-67506、テガセロッド、ザコプリド、メトクロプラミド、およびスルピリド、またはその薬学的に許容される塩からなる群より選択される、請求項1記載の薬学的組成物。
【請求項３】
5-HT4アゴニストがフェンフルラミン、またはその薬学的に許容される塩である、請求項1記載の薬学的組成物。
【請求項４】
フェンフルラミンが補助的な治療剤として投与される、請求項2〜3のいずれか一項記載の薬学的組成物。
【請求項５】
フェンフルラミンの治療的有効用量が、0.2mg/kg/日〜0.08mg/kg/日から30mgの最大1日用量までからなる群より選択される、請求項3または4記載の薬学的組成物。
【請求項６】
フェンフルラミンの治療的有効用量が、経口、注射、経皮、吸入、鼻内、直腸内、膣内および非経口からなる群より選択される剤形で投与され、
任意で、フェンフルラミンの治療的有効用量が経口液体剤形で投与される、
請求項2〜5のいずれか一項記載の薬学的組成物。
【請求項７】
スチリペントールまたはその薬学的に許容される塩の有効用量と組み合わせて患者に投与される、請求項1〜6のいずれか一項記載の薬学的組成物。
【請求項８】
バルプロエートまたはその薬学的に許容される塩の有効用量と組み合わせて患者に投与される、請求項1〜7のいずれか一項記載の薬学的組成物。
【請求項９】
クロバザムまたはその薬学的に許容される塩の有効用量と組み合わせて患者に投与される、請求項1〜8のいずれか一項記載の薬学的組成物。
【請求項１０】
フェンフルラミンが、患者に投与される唯一の薬学的活性薬物である、請求項2〜9のいずれか一項記載の薬学的組成物。
【請求項１１】
5-HT4アゴニストが下記のうちの少なくとも1つである、請求項1〜10のいずれか一項記載の薬学的組成物：
（a）5-HT2B受容体において不活性である；
（b）5-HT2B受容体の中性アゴニスト；および
（c）5-HT2B受容体の逆アゴニスト。
【請求項１２】
患者が、プラシーボに比べて有意に高い応答率を示す、請求項1〜11のいずれか一項記載の薬学的組成物。
【請求項１３】
患者が、ドラベ症候群、レノックス・ガストー症候群、ドゥース症候群、点頭けいれん、ウェスト症候群、および難治性てんかんからなる群より選択されるてんかん症候群と診断されている、請求項1〜12のいずれか一項記載の薬学的組成物。
【請求項１４】
患者が、難治性てんかんと診断されている、請求項1〜12のいずれか一項記載の薬学的組成物。
【請求項１５】
難治性てんかんが、ドラベ症候群、レノックス・ガストー症候群、ドゥース症候群、点頭けいれん、ウェスト症候群、および難治性てんかんからなる群より選択されるてんかん症候群であり、任意で、難治性てんかんが、ドラベ症候群である、請求項14記載の薬学的組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００７５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００７５】
本発明のこれらおよび他の目的、利点、および特徴は、当業者には、以下により詳細に記載する、治療剤およびその使用法の詳細を読めば明らかになるであろう。
[本発明1001]
ヒト患者の発作の発生率または重症度を低減させる方法であって、
5-ヒドロキシトリプタミン受容体4アゴニスト（5-HT4アゴニスト）の治療的有効用量を該患者に投与する段階；および
5-HT4アゴニストに該患者の5-HT4受容体を刺激させ、それにより該患者の発作の発生率または重症度を低減させる段階
を含む、前記方法。
[本発明1002]
ヒト患者の発作により誘発される呼吸停止（S-IRA）を阻害する方法であって、
5-HT4アゴニストの治療的有効用量を該患者に投与する段階；および
5-HT4アゴニストに該患者の5-HT4受容体を刺激させ、それにより該患者のS-IRAを阻害する段階
を含む、前記方法。
[本発明1003]
ヒト患者の、発作後抑制（PID）期間平均の長さを低減させる方法であって、
5-HT4アゴニストの治療的有効用量を該患者に投与する段階；および
5-HT4アゴニストに該患者の5-HT4受容体を刺激させ、それにより該患者のPID期間を阻害する段階
を含む、前記方法。
[本発明1004]
ヒト患者における、発作により誘発されるてんかん患者の予期せぬ突然死（Sudden Unexpected Death in Epilepsy；SUDEP）の確度を低減させる方法であって、
5-HT4アゴニストの治療的有効用量を該患者に投与する段階；および
5-HT4アゴニストに該患者の5-HT4受容体を刺激させ、それにより該患者のSUDEPの確度を低減させる段階
を含む、前記方法。
[本発明1005]
発作により誘発されるてんかん患者の突然死（SUDEP）の可能性があると診断された患者の脳内の1つまたは複数の5-HT4受容体を刺激する方法であって、該患者が発作を示し、前記方法が、
5-HT4アゴニストの治療的有効用量を該患者に投与する段階；および
5-HT4アゴニストに該患者の5-HT4受容体を刺激させ、それにより該患者のSUDEPの可能性を低減させる段階
を含む、前記方法。
[本発明1006]
5-HT4アゴニストがフェンフルラミン、BIMU-8、シサプリド、モサプリド、プルカロプリド、レンザプリド、RS-67506、テガセロッド、ザコプリド、メトクロプラミド、およびスルピリド、またはその薬学的に許容される塩からなる群より選択される、本発明1001〜1005のいずれかの方法。
[本発明1007]
5-HT4アゴニストがフェンフルラミン、またはその薬学的に許容される塩である、本発明1001〜1005のいずれかの方法。
[本発明1008]
フェンフルラミンを補助的な治療剤として投与する、本発明1001〜1007のいずれかの方法。
[本発明1009]
フェンフルラミンの治療的有効用量が、0.2mg/kg/日〜0.08mg/kg/日から30mgの最大1日用量までからなる群より選択される、本発明1007または1008の方法。
[本発明1010]
フェンフルラミンの治療的有効用量を経口、注射、経皮、吸入、鼻内、直腸内、膣内および非経口からなる群より選択される剤形で投与する、本発明1001〜1009のいずれかの方法。
[本発明1011]
フェンフルラミンの治療的有効用量を経口液体剤形で投与する、本発明1001〜1010のいずれかの方法。
[本発明1012]
スチリペントールまたはその薬学的に許容される塩の有効用量を患者に投与する段階をさらに含む、本発明1001〜1011のいずれかの方法。
[本発明1013]
バルプロエートまたはその薬学的に許容される塩の有効用量を患者に投与する段階をさらに含む、本発明1001〜1012のいずれかの方法。
[本発明1014]
クロバザムまたはその薬学的に許容される塩の有効用量を患者に投与する段階をさらに含む、本発明1001〜1013のいずれかの方法。
[本発明1015]
フェンフルラミンが、患者に投与される唯一の薬学的活性薬物である、本発明1001〜1014のいずれかの方法。
[本発明1016]
5-HT4アゴニストが下記のうちの少なくとも1つである、本発明1001〜1015のいずれかの方法：
（a）5-HT2B受容体において不活性である；
（b）5-HT2B受容体の中性アゴニスト；および
（c）5-HT2B受容体5-HT2B受容体の逆アゴニスト。
[本発明1017]
患者が、プラシーボに比べて有意に高い応答率を示す、本発明1001〜1016のいずれかの方法。
[本発明1018]
患者がけいれん発作頻度の基準線からの≧40％低減を示すまでの日数の期間にわたり投与を繰り返す段階をさらに含む、本発明1001〜1017のいずれかの方法。
[本発明1019]
患者がけいれん発作の頻度の少なくとも≧50％低減を示す、本発明1001〜1018のいずれかの方法。
[本発明1020]
患者がけいれん発作の頻度の少なくとも≧75％低減を示す、本発明1001〜1019のいずれかの方法。
[本発明1021]
患者がけいれん発作の頻度の少なくとも≧90％低減を示す、本発明1001〜1020のいずれかの方法。
[本発明1022]
患者が発作を全く起こさない、本発明1001〜1021のいずれかの方法。
[本発明1023]
患者が5-HT4アゴニストの初回投与から2年後に生存している、本発明1001〜1022のいずれかの方法。
[本発明1024]
患者が、ドラベ症候群、レノックス・ガストー症候群、ドゥース症候群、点頭けいれん、ウェスト症候群、および難治性てんかんからなる群より選択されるてんかん症候群と診断されている、本発明1001〜1018のいずれかの方法。
【国際調査報告】
2021526507.tif 000023
2021526507.tif 000024
2021526507.tif 000025
2021526507.tif 000026
2021526507.tif 000027