(57)【要約】抗クローディン１８．２（ＣＬＤＮ１８．２）抗体およびその断片が、提供される。抗ＣＬＤＮ１８．２抗体をコードする単離された核酸分子、そのような核酸を含むベクター、およびそのようなベクターまたは核酸を含む宿主細胞もまた、提供される。抗ＣＬＤＮ１８．２を作製する方法が、提供される。関連する医薬組成物、およびそのような医薬組成物を、異常なＣＬＤＮ１８．２発現と関連する障害、たとえば、がんの処置において使用する方法もまた、提供される。
2021515583.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
抗ＣＬＤＮ１８．２抗体または抗原結合性断片であって、
（ａ）ＧＸ１Ｘ２ＦＸ３Ｘ４Ｘ５Ｘ６Ｘ７Ｘ８（配列番号１１）を含む、ＣＤＲ−Ｈ１であって、Ｘ１が、ＦまたはＹであり、Ｘ２が、ＴまたはＳであり、Ｘ３が、ＴまたはＳであり、Ｘ４が、Ｄ、Ｇ、Ｖ、Ｎ、またはＳであり、Ｘ５が、Ｙ、Ｗ、またはＮであり、Ｘ６が、Ｇ、Ｎ、Ｓ、またはＡであり、Ｘ７が、ＭまたはＩであり、Ｘ８が、Ｆ、Ｈ、Ｓ、Ｙ、またはＮである、ＣＤＲ−Ｈ１と、
（ｂ）Ｘ１ＩＸ２Ｘ３Ｘ４Ｘ５Ｘ６Ｘ７Ｘ８Ｘ９Ｘ１０Ｘ１１Ｘ１２Ｘ１３Ｘ１４ＫＧ（配列番号３０）を含む、ＣＤＲ−Ｈ２であって、Ｘ１が、Ｙ、Ｅ、Ｔ、Ｈ、またはＮであり、Ｘ２が、Ｓ、Ｎ、Ｄ、Ｙ、またはＩであり、Ｘ３が、Ｓ、Ｐ、またはＩであり、Ｘ４が、Ｇ、Ｎ、Ｋ、Ｒ、またはＹであり、Ｘ５が、Ｓ、Ｎ、Ｇ、またはＹであり、Ｘ６が、Ｓ、Ｇ、Ｔ、Ｎ、またはＤであり、Ｘ７が、Ｎ、Ｔ、Ｖ、Ｙ、Ｉ、またはＰであり、Ｘ８が、Ｉ、Ｔ、またはＦであり、Ｘ９が、Ｙ、Ｈ、またはＮであり、Ｘ１０が、ＹまたはＳであり、Ｘ１１が、Ａ、Ｎ、Ｐ、Ｔ、またはＶであり、Ｘ１２が、Ｄ、Ｑ、またはＥであり、Ｘ１３が、Ｔ、Ｋ、Ｓ、またはＲであり、Ｘ１４が、Ｖ、Ｆ、Ｍ、またはＬである、ＣＤＲ−Ｈ２と、
（ｃ）Ｘ１Ｘ２Ｘ３ＧＮＸ４Ｘ５Ｘ６Ｙ（配列番号４３）を含む、ＣＤＲ−Ｈ３であって、Ｘ１が、Ｉ、Ｆ、Ｐ、Ａ、Ｑ、またはＨであり、Ｘ２が、Ａ、Ｙ、Ｖ、Ｔであり、Ｘ３が、ＲまたはＹであり、Ｘ４が、Ａ、Ｖ、Ｓ、またはＴであり、Ｘ５が、Ｍ、Ｌ、またはＦであり、Ｘ６が、ＤまたはＡである、ＣＤＲ−Ｈ３と、
（ｄ）Ｘ１ＳＸ２ＱＸ３ＬＸ４ＮＸ５Ｘ６ＮＸ７Ｘ８ＮＹＬＸ９（配列番号５４）を含む、ＣＤＲ−Ｌ１であって、Ｘ１が、ＫまたはＲであり、Ｘ２が、ＳまたはＲであり、Ｘ３が、ＳまたはＩであり、Ｘ４が、ＬまたはＦであり、Ｘ５が、ＳまたはＴであり、Ｘ６が、ＧまたはＥであり、Ｘ７が、ＱまたはＬであり、Ｘ８が、ＫまたはＲであり、Ｘ９が、Ｔ、Ａ、またはＳである、ＣＤＲ−Ｌ１と、
（ｅ）ＷＸ１ＳＴＲＸ２Ｓ（配列番号５８）を含む、ＣＤＲ−Ｌ２であって、Ｘ１が、ＡまたはＴであり、Ｘ２が、ＥまたはＤである、ＣＤＲ−Ｌ２と、
（ｆ）ＱＸ１Ｘ２Ｘ３Ｘ４Ｘ５ＰＸ６Ｘ７（配列番号７１）を含む、ＣＤＲ−Ｌ３であって、Ｘ１が、ＮまたはＤであり、Ｘ２が、Ｄ、Ｇ、Ｎ、またはＡであり、Ｘ３が、ＹまたはＦであり、Ｘ４が、Ｆ、Ｓ、Ｉ、またはＹであり、Ｘ５が、ＹまたはＦであり、Ｘ６が、ＬまたはＦであり、Ｘ７が、ＴまたはＰである、ＣＤＲ−Ｌ３と
を含む、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体または抗原結合性断片。
【請求項２】
（ａ）配列番号１〜６および８〜１０のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）配列番号１２〜１６および１８〜２８のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）配列番号３１〜４２のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）配列番号４４〜４７および４９〜５２のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）配列番号５５〜５７のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）配列番号５９〜６３および６５〜７０のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｌ３とを含む、請求項１に記載の抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片。
【請求項３】
（ｉ）（ａ）ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＦ（配列番号１）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＹＩＳＳＧＳＳＮＩＹＹＡＤＴＶＫＧ（配列番号１２）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＩＡＲＧＮＡＭＤＹ（配列番号３１）を含むＣＤＲ−Ｈ３とを含む、ＶＨドメイン、および／もしくは（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号４４）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＤＹＦＹＰＬＴ（配列番号５９）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む、ＶＬドメイン、
（ｉｉ）（ａ）ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＨ（配列番号２）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＹＩＮＳＧＳＳＴＩＹＹＡＤＴＶＫＧ（配列番号１３）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＦＡＲＧＮＶＬＤＹ（配列番号３２）を含むＣＤＲ−Ｈ３とを含む、ＶＨドメイン、および／もしくは（ｄ）ＲＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＲＮＹＬＴ（配列番号４５）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＧＹＳＹＰＬＴ（配列番号６０）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む、ＶＬドメイン、
（ｉｉｉ）（ａ）ＧＹＳＦＴＧＹＮＩＨ（配列番号３）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＹＩＤＰＮＮＧＶＴＹＳＮＱＫＦＫＧ（配列番号１４）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＰＹＹＧＮＳＦＤＹ（配列番号３３）を含むＣＤＲ−Ｈ３とを含む、ＶＨドメイン、および／もしくは（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＬＲＮＹＬＴ（配列番号４６）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＤＧＹＦＹＰＦＰ（配列番号６１）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む、ＶＬドメイン、
（ｉｖ）（ａ）ＧＹＴＦＴＶＷＳＭＳ（配列番号４）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＥＩＹＰＫＳＧＮＴＨＹＮＥＫＦＫＧ（配列番号１５）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＡＹＹＧＮＳＦＡＹ（配列番号３４）を含むＣＤＲ−Ｈ３とを含む、ＶＨドメイン、および／もしくは（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＲＮＹＬＴ（配列番号４７）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＤＦＩＹＰＦＴ（配列番号６２）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む、ＶＬドメイン、
（ｖ）（ａ）ＧＦＴＦＳＮＮＡＭＳ（配列番号５）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＴＩＩＩＧＧＴＹＴＹＹＰＤＳＶＫＧ（配列番号１６）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＱＶＹＧＮＳＦＡＹ（配列番号３５）を含むＣＤＲ−Ｈ３とを含む、ＶＨドメイン、および／もしくは（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号４４）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、および（ｆ）ＱＮＮＹＦＹＰＦＴ（配列番号６３）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む、ＶＬドメイン、
（ｖｉ）（ａ）ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＨ（配列番号２）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＹＩＳＳＧＳＳＴＩＹＹＡＤＴＭＫＧ（配列番号１８）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＦＶＲＧＮＳＭＤＹ（配列番号３６）を含むＣＤＲ−Ｈ３とを含む、ＶＨドメイン、および／もしくは（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号４４）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＡＹＳＹＰＬＴ（配列番号６５）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む、ＶＬドメイン、
（ｖｉｉ）（ａ）ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＨ（配列番号２）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＨＩＳＳＧＳＮＩＩＨＹＡＤＴＬＫＧ（配列番号１９）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＦＡＲＧＮＴＭＤＹ（配列番号３７）を含むＣＤＲ−Ｈ３とを含む、ＶＨドメイン、および／もしくは（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号４４）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＡＹＳＦＰＬＴ（配列番号６６）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む、ＶＬドメイン、
（ｖｉｉｉ）（ａ）ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＨ（配列番号２）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＹＩＳＳＧＳＳＴＩＹＹＡＤＴＭＫＧ（配列番号１８）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＦＡＲＧＮＴＭＤＹ（配列番号３７）を含むＣＤＲ−Ｈ３とを含む、ＶＨドメイン、および／もしくは（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＲＮＹＬＴ（配列番号４７）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＧＹＳＹＰＬＴ（配列番号６０）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む、ＶＬドメイン、
（ｉｘ）（ａ）ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＨ（配列番号２）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＹＩＳＳＧＳＮＴＦＹＹＴＤＴＶＫＧ（配列番号２０）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＦＴＲＧＮＡＬＤＹ（配列番号３８）を含むＣＤＲ−Ｈ３とを含む、ＶＨドメイン、および／もしくは（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号４４）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＡＹＳＹＰＬＴ（配列番号６５）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む、ＶＬドメイン、
（ｘ）（ａ）ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＹ（配列番号６）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＹＩＳＳＧＳＮＴＩＹＹＡＤＴＶＫＧ（配列番号２１）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＩＡＲＧＮＡＭＤＹ（配列番号３１）を含むＣＤＲ−Ｈ３とを含む、ＶＨドメイン、および／もしくは（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号４４）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＤＹＩＹＰＬＴ（配列番号６７）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む、ＶＬドメイン、
（ｘｉ）（ａ）ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＨ（配列番号２）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＨＩＳＳＧＳＳＴＩＹＹＡＤＴＭＫＧ（配列番号２２）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＦＶＲＧＮＡＬＤＹ（配列番号３９）を含むＣＤＲ−Ｈ３とを含む、ＶＨドメイン、および／もしくは（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号４４）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＧＹＳＹＰＬＴ（配列番号６０）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む、ＶＬドメイン、
（ｘｉｉ）（ａ）ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＨ（配列番号２）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＹＩＳＳＧＳＳＴＩＨＹＶＤＴＭＫＧ（配列番号２３）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＦＡＲＧＮＴＬＤＹ（配列番号４０）を含むＣＤＲ−Ｈ３とを含む、ＶＨドメイン、および／もしくは（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＦＮＴＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号４９）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＮＧＹＳＹＰＬＴ（配列番号６０）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む、ＶＬドメイン、
（ｘｉｉｉ）（ａ）ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＹ（配列番号６）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＹＩＳＳＧＳＳＴＩＹＹＡＤＴＶＫＧ（配列番号２４）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＩＡＲＧＮＡＭＤＹ（配列番号３１）を含むＣＤＲ−Ｈ３とを含む、ＶＨドメイン、および／もしくは（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＦＮＳＧＮＱＲＮＹＬＡ（配列番号５０）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＤＹＦＹＰＬＴ（配列番号５９）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む、ＶＬドメイン、
（ｘｉｖ）（ａ）ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＨ（配列番号２）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＹＩＳＳＧＳＳＰＩＹＹＡＤＴＶＫＧ（配列番号２５）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＦＡＲＧＮＡＭＤＹ（配列番号４１）を含むＣＤＲ−Ｈ３とを含む、ＶＨドメイン、および／もしくは（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号４４）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＤＳ（配列番号５６）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＮＹＹＹＰＬＴ（配列番号６８）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む、ＶＬドメイン、
（ｘｖ）（ａ）ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＨ（配列番号２）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＹＩＳＳＧＳＳＴＩＹＹＡＤＴＭＫＧ（配列番号１８）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＦＶＲＧＮＳＭＤＹ（配列番号３６）を含むＣＤＲ−Ｈ３とを含む、ＶＨドメイン、および／もしくは（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号４４）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＡＹＳＹＰＬＴ（配列番号６５）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む、ＶＬドメイン、
（ｘｖｉ）（ａ）ＧＦＴＦＳＮＹＡＭＳ（配列番号８）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＴＩＩＩＧＧＴＹＴＹＹＰＤＳＶＫＧ（配列番号１６）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＱＶＹＧＮＳＦＡＹ（配列番号３５）を含むＣＤＲ−Ｈ３とを含む、ＶＨドメイン、および／もしくは（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号４４）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＮＹＩＹＰＦＴ（配列番号６９）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む、ＶＬドメイン、
（ｘｖｉｉ）（ａ）ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＹ（配列番号６）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＹＩＳＳＧＳＮＮＩＹＹＡＤＴＶＫＧ（配列番号２６）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＩＡＲＧＮＡＭＤＹ（配列番号３１）を含むＣＤＲ−Ｈ３とを含む、ＶＨドメイン、および／もしくは（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号４４）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＤＹＩＹＰＬＴ（配列番号６７）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む、ＶＬドメイン、
（ｘｖｉｉｉ）（ａ）ＧＹＴＦＴＳＷＳＩＳ（配列番号９）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＥＩＹＰＲＳＤＮＩＨＹＮＥＫＦＫＧ（配列番号２７）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＡＹＹＧＮＳＦＡＹ（配列番号３４）を含むＣＤＲ−Ｈ３とを含む、ＶＨドメイン、および／もしくは（ｄ）ＫＳＳＱＩＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号５１）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＤＹＹＹＰＦＴ（配列番号７０）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む、ＶＬドメイン、または
（ｘｉｘ）（ａ）ＧＹＳＦＴＧＹＮＭＮ（配列番号１０）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＮＩＮＰＹＹＳＮＴＮＹＮＱＲＦＫＧ（配列番号２８）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＣＤＲＧＮＳＦＤＹ（配列番号４２）を含むＣＤＲ−Ｈ３とを含む、ＶＨドメイン、および／もしくは（ｄ）ＫＳＲＱＳＬＦＮＳＥＮＱＫＮＹＬＳ（配列番号５２）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＴＳＴＲＥＳ（配列番号５７）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＮＹＩＹＰＦＴ（配列番号６９）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む、ＶＬドメイン
を含む、請求項１または２に記載の抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片。
【請求項４】
配列番号７２〜７６、７８〜８５、および８７〜９２のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＶＨドメイン、ならびに／または
配列番号９４〜９８、１００〜１０７、および１０９〜１１４のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＶＬドメイン
を含む、請求項１から３のいずれか一項に記載の抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片。
【請求項５】
（ｉ）配列番号７２を含むＶＨドメイン、および／もしくは配列番号９４を含むＶＬドメイン、
（ｉｉ）配列番号７３を含むＶＨドメイン、および／もしくは配列番号９５を含むＶＬドメイン、
（ｉｉｉ）配列番号７４を含むＶＨドメイン、および／もしくは配列番号９６を含むＶＬドメイン、
（ｉｖ）配列番号７５を含むＶＨドメイン、および／もしくは配列番号９７を含むＶＬドメイン、
（ｖ）配列番号７６を含むＶＨドメイン、および／もしくは配列番号９８を含むＶＬドメイン、
（ｖｉ）配列番号７８を含むＶＨドメイン、および／もしくは配列番号１００を含むＶＬドメイン、
（ｖｉｉ）配列番号７９を含むＶＨドメイン、および／もしくは配列番号１０１を含むＶＬドメイン、
（ｖｉｉｉ）配列番号８０を含むＶＨドメイン、および／もしくは配列番号１０２を含むＶＬドメイン、
（ｉｘ）配列番号８１を含むＶＨドメイン、および／もしくは配列番号１０３を含むＶＬドメイン、
（ｘ）配列番号８２を含むＶＨドメイン、および／もしくは配列番号１０４を含むＶＬドメイン、
（ｘｉ）配列番号８３を含むＶＨドメイン、および／もしくは配列番号１０５を含むＶＬドメイン、
（ｘｉｉ）配列番号８４を含むＶＨドメイン、および／もしくは配列番号１０６を含むＶＬドメイン、
（ｘｉｉｉ）配列番号８５を含むＶＨドメイン、および／もしくは配列番号１０７を含むＶＬドメイン、
（ｘｉｖ）配列番号８７を含むＶＨドメイン、および／もしくは配列番号１０９を含むＶＬドメイン、
（ｘｖ）配列番号８８を含むＶＨドメイン、および／もしくは配列番号１１０を含むＶＬドメイン、
（ｘｖｉ）配列番号８９を含むＶＨドメイン、および／もしくは配列番号１１１を含むＶＬドメイン、
（ｘｖｉｉ）配列番号９０を含むＶＨドメイン、および／もしくは配列番号１１２を含むＶＬドメイン、
（ｘｖｉｉｉ）配列番号９１を含むＶＨドメイン、および／もしくは配列番号１１３を含むＶＬドメイン、または
（ｘｉｘ）配列番号９２を含むＶＨドメイン、および／もしくは配列番号１１４を含むＶＬドメイン
を含む、請求項１から４のいずれか一項に記載の抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片。
【請求項６】
ＣＬＤＮ１８．１に特異的に結合しない、請求項１から５のいずれか一項に記載の抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片。
【請求項７】
抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片であって、
（ａ）ＧＦＸ１ＦＳＤＹＧＭＸ２（配列番号１２１）を含む、ＣＤＲ−Ｈ１であって、Ｘ１が、ＴまたはＳであり、Ｘ２が、ＨまたはＹである、ＣＤＲ−Ｈ１と、
（ｂ）Ｘ１ＩＳＳＧＳＳＸ２ＩＹＸ３ＡＤＴＸ４ＫＧ（配列番号１２２）を含む、ＣＤＲ−Ｈ２であって、Ｘ１が、Ｙ、Ｈ、またはＦであり、Ｘ２が、ＳまたはＴであり、Ｘ３が、ＹまたはＣであり、Ｘ４が、ＶまたはＭである、ＣＤＲ−Ｈ２と、
（ｃ）Ｘ１ＡＲＧＮＸ４ＭＤＹ（配列番号１２３）を含む、ＣＤＲ−Ｈ３であって、Ｘ１が、ＩまたはＦであり、Ｘ４が、ＴまたはＡである、ＣＤＲ−Ｈ３と、
（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＸ１Ｘ２ＮＹＬＸ３（配列番号１２４）を含む、ＣＤＲ−Ｌ１であって、Ｘ１が、ＱまたはＬであり、Ｘ２が、ＲまたはＫであり、Ｘ３が、ＴまたはＡである、ＣＤＲ−Ｌ１と、
（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）を含む、ＣＤＲ−Ｌ２と、
（ｆ）ＱＮＸ１ＹＸ２ＹＰＬＴ（配列番号１２５）を含む、ＣＤＲ−Ｌ３であって、Ｘ１が、ＧまたはＤであり、Ｘ２が、ＳまたはＦである、ＣＤＲ−Ｌ３と
を含む、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片。
【請求項８】
（ａ）配列番号２、６、および７のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）配列番号１７、２２、および２９のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）配列番号３１または配列番号３７に記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｈ３とを含む、ＶＨドメイン、ならびに／または
（ｄ）配列番号４４、４８、および５３のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）配列番号５５に記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）配列番号５９、６０、および６４のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｌ３とを含む、ＶＬドメイン
を含む、請求項７に記載の抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片。
【請求項９】
（ｉ）（ａ）ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＨ（配列番号２）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＹＩＳＳＧＳＳＳＩＹＹＡＤＴＶＫＧ（配列番号１７）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＩＡＲＧＮＡＭＤＹ（配列番号３１）を含むＣＤＲ−Ｈ３とを含む、ＶＨドメイン、および／もしくは（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＲＮＹＬＡ（配列番号４８）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＤＹＳＹＰＬＴ（配列番号６４）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む、ＶＬドメイン、
（ｉｉ）（ａ）ＧＦＳＦＳＤＹＧＭＨ（配列番号７）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＨＩＳＳＧＳＳＴＩＹＹＡＤＴＭＫＧ（配列番号２２）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＦＡＲＧＮＴＭＤＹ（配列番号３７）を含むＣＤＲ−Ｈ３とを含む、ＶＨドメイン、および／もしくは（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号４４）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＧＹＳＹＰＬＴ（配列番号６０）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む、ＶＬドメイン、または
（ｉｉｉ）（ａ）ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＹ（配列番号６）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＦＩＳＳＧＳＳＴＩＹＣＡＤＴＶＫＧ（配列番号２９）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＩＡＲＧＮＡＭＤＹ（配列番号３１）を含むＣＤＲ−Ｈ３とを含む、ＶＨドメイン、および／もしくは（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＬＫＮＹＬＴ（配列番号５３）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＤＹＦＹＰＬＴ（配列番号５９）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む、ＶＬドメイン
を含む、請求項７または８に記載の抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片。
【請求項１０】
配列番号７７、８６、および９３のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＶＨドメイン、ならびに／または
配列番号９９、１０８、および１１５のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＶＬドメイン
を含む、請求項７から９のいずれか一項に記載の抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片。
【請求項１１】
（ｉ）配列番号７７を含むＶＨドメイン、および／もしくは配列番号９９を含むＶＬドメイン、
（ｉｉ）配列番号８６を含むＶＨドメイン、および／もしくは配列番号１０８を含むＶＬドメイン、または
（ｉｉｉ）配列番号９３を含むＶＨドメイン、および／もしくは配列番号１１５を含むＶＬドメイン
を含む、請求項７から１０のいずれか一項に記載の抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片。
【請求項１２】
４つのアミノ酸、４つを下回るアミノ酸、または３つのアミノ酸からなるＣＤＲ−Ｈ３を含む、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片。
【請求項１３】
抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片であって、
（ａ）ＧＹＴＦＸ１Ｘ２ＹＸ３Ｘ４Ｈ（配列番号１３９）を含むＣＤＲ−Ｈ１を含む、ＣＤＲ−Ｈ１であって、Ｘ１が、ＴまたはＩであり、Ｘ２が、ＳまたはＮであり、Ｘ３が、ＬまたはＶであり、Ｘ４が、ＩまたはＭである、ＣＤＲ−Ｈ１と、
（ｂ）ＹＩＮＰＸ１Ｘ２ＤＧＴＫＹＮＥＫＦＫＧ（配列番号１４０）を含むＣＤＲ−Ｈ２を含む、ＣＤＲ−Ｈ２であって、Ｘ１が、ＹまたはＦであり、Ｘ２が、ＮまたはＤである、ＣＤＲ−Ｈ２と、
（ｃ）ＧＤＸ１を含む、ＣＤＲ−Ｈ３であって、Ｘ１が、ＦまたはＹである、ＣＤＲ−Ｈ３と、
（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号４４）を含む、ＣＤＲ−Ｌ１と、
（ｅ）ＷＡＳＸ１ＲＸ２Ｓ（配列番号１４１）を含む、ＣＤＲ−Ｌ２であって、Ｘ１が、ＴまたはＩであり、Ｘ２が、ＡまたはＤである、ＣＤＲ−Ｌ２と、
（ｆ）ＬＮＤＹＳＦＰＬＴ（配列番号１３１）を含む、ＣＤＲ−Ｌ３と
を含む、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片。
【請求項１４】
（ａ）配列番号１２８または１３２に記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｈ１と、
（ｂ）配列番号１２９または１３３に記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｈ２と、
（ｃ）ＧＤＦまたはＧＤＹを含む、ＣＤＲ−Ｈ３と、
（ｄ）配列番号４４に記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｌ１と、
（ｅ）配列番号１３０または１３４に記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｌ２と、
（ｆ）配列番号１３１に記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｌ３と
を含む、請求項１２または１３に記載の抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片。
【請求項１５】
（ｉ）（ａ）ＧＹＴＦＩＳＹＬＩＨ（配列番号１２８）を含むＣＤＲ−Ｈ１、（ｂ）ＹＩＮＰＹＮＤＧＴＫＹＮＥＫＦＫＧ（配列番号１２９）を含むＣＤＲ−Ｈ２、（ｃ）ＧＤＦを含むＣＤＲ−Ｈ３を含む、ＶＨドメイン、および／もしくは（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号４４）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＩＲＡＳ（配列番号１３０）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＬＮＤＹＳＦＰＬＴ（配列番号１３１）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む、ＶＬドメイン、または
（ｉｉ）（ａ）ＧＹＴＦＴＮＹＶＭＨ（配列番号１３２）を含むＣＤＲ−Ｈ１、（ｂ）ＹＩＮＰＦＤＤＧＴＫＹＮＥＫＦＫＧ（配列番号１３３）を含むＣＤＲ−Ｈ２、（ｃ）ＧＤＹを含むＣＤＲ−Ｈ３を含む、ＶＨドメイン、および／もしくは（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号４４）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＤＳ（配列番号１３４）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＬＮＤＹＳＦＰＬＴ（配列番号１３１）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む、ＶＬドメイン
を含む、請求項１２から１４のいずれか一項に記載の抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片。
【請求項１６】
配列番号１３５および１３６のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＶＨドメイン、ならびに／または
配列番号１３７および１３８のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＶＬドメイン
を含む、請求項１２から１５のいずれか一項に記載の抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片。
【請求項１７】
（ｉ）配列番号１３５を含むＶＨドメイン、および／または配列番号１３７を含むＶＬドメイン、
（ｉｉ）配列番号１３６を含むＶＨドメイン、および／または配列番号１３８を含むＶＬドメイン
を含む、請求項１２から１６のいずれか一項に記載の抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片。
【請求項１８】
クローディン１８．１（ＣＬＤＮ１８．１）に結合する、請求項７から１１のいずれか一項に記載の抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片。
【請求項１９】
クローディン１８．１（ＣＬＤＮ１８．１）に特異的に結合する、請求項１２から１７のいずれか一項に記載の抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片。
【請求項２０】
ヒトＩｇＧのＦｃ配列を含む、請求項１から１９のいずれか一項に記載の抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片。
【請求項２１】
前記ヒトＩｇＧが、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４である、請求項２０に記載の抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片。
【請求項２２】
キメラ抗体、ヒト化抗体、またはヒト抗体である、請求項１から２１のいずれか一項に記載の抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片。
【請求項２３】
Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）’２、一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）、Ｆｖ断片、ダイアボディ、および線形抗体からなる群から選択される、請求項１から１２２のいずれか一項に記載の抗ＣＬＤＮ１８．２抗体の抗原結合性断片。
【請求項２４】
多重特異性抗体である、請求項１から２２のいずれか一項に記載の抗ＣＬＤＮ１８．２抗体。
【請求項２５】
前記ＣＬＤＮ１８．２が、ヒトＣＬＤＮ１８．２である、請求項１から２４のいずれか一項に記載の抗ＣＬＤＮ１８．２抗体。
【請求項２６】
治療剤にコンジュゲートされている、請求項１から２５のいずれか一項に記載の抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片。
【請求項２７】
標識にコンジュゲートされている、請求項１から２５のいずれか一項に記載の抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片。
【請求項２８】
前記標識が、放射性同位体、蛍光色素、および酵素からなる群から選択される、請求項２７に記載の抗体。
【請求項２９】
請求項１から２５のいずれか一項に記載の抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片をコードする、単離された核酸分子。
【請求項３０】
請求項２９に記載の核酸分子をコードする、発現ベクター。
【請求項３１】
請求項２９に記載の核酸分子または請求項３０に記載の発現ベクターを含む、宿主細胞。
【請求項３２】
抗ＣＬＤＮ１８．２抗体を産生する方法であって、請求項３１に記載の宿主細胞を培養するステップと、前記抗体を前記細胞培養物から回収するステップとを含む、方法。
【請求項３３】
請求項１から２６のいずれか一項に記載の抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片と、薬学的に許容される担体とを含む、組成物。
【請求項３４】
患者からの試料中のＣＬＤＮ１８．２タンパク質を検出する方法であって、請求項１から２５および２７から２８のいずれか一項に記載の抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片を、前記試料と接触させるステップと、前記ＣＬＤＮ１８．２タンパク質に結合した前記抗ＣＬＤＮ１８．２抗体を検出するステップとによる、方法。
【請求項３５】
前記抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片が、免疫組織化学アッセイ（ＩＨＣ）またはＥＬＩＳＡアッセイにおいて使用される、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
対象におけるがんを処置する方法であって、有効量の請求項３３に記載の組成物を、前記対象に投与するステップを含む、方法。
【請求項３７】
前記がんが、固形腫瘍、胃がん、食道がん、胃食道接合部のがん、膵臓がん、胆管のがん、肺がん、卵巣がん、結腸がん、肝臓がん、頭頸部がん、胆嚢がんから選択される、請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
前記対象に、抗新生物剤、化学療法剤、成長阻害剤、および細胞毒性剤からなる群から選択される治療剤が、さらに投与される、請求項３６または３７に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本特許出願は、２０１８年３月１４日に出願された米国仮出願第６２／６４３，０３５号および２０１９年２月８日に出願された米国仮出願第６２／８０３，２９７号の優先権を主張し、これらの内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
ＡＳＣＩＩテキストファイルでの配列表の提出
【０００２】
以下のＡＳＣＩＩテキストファイルでの提出の内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる：コンピュータ可読形式（ＣＲＦ）の配列表（ファイル名称：７７６１７２０００１４０ＳＥＱＬＩＳＴ、記録日：２０１９年３月１４日、サイズ：８０．６ＫＢ）。
【背景技術】
【０００３】
クローディンは、上皮または内皮において発現され、傍細胞バリアおよび細孔を形成し、それによってタイトジャンクションの透過性が決定される、タイトジャンクション膜タンパク質ファミリーである。クローディン１８アイソタイプ２（ＣＬＤＮ１８．２）は、クローディン１８タンパク質のスプライスバリアントであり、寿命の短い分化胃上皮細胞に発現される胃系統抗原である。ＣＬＤＮ１８．２の発現は、典型的には、他の健常なヒト組織においては検出可能でない。しかしながら、ＣＬＤＮ１８．２は、胃食道がんおよび膵臓がんを含む、様々なヒトがんにおいて、有意なレベルで異所的に発現される（Sahin  et  al.  (2008)  Clin  Cancer  Res,  14(23):  7624-34）。ＣＬＤＮ１８．２はまた、胃がんの転移においても、頻繁に検出される。
胃がんは、世界で最も多いがんの１つであり、先進国におけるがん関連死の４番目（男性）および５番目（女性）に多い原因である。９５１，６００件の新しい胃がん症例および７２３，１００件の死亡が、２０１２年に生じたと推測される（Torre  et  al.  (2015)  CA  Cancer  J.  Clin.  65(2):  87-108）。胃がんを有する患者の大半は、進行した疾患ステージで診断されることが多く、処置は、典型的に、一時緩和の化学療法を伴い、８〜１０カ月の生存期間中央値をもたらす。したがって、ＣＬＤＮ１８．２を発現するがん細胞を対象とする抗体療法の必要性が存在する。本発明は、この必要性および他の必要性を満たす。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】Sahin  et  al.  (2008)  Clin  Cancer  Res,  14(23):  7624-34
【非特許文献２】Torre  et  al.  (2015)  CA  Cancer  J.  Clin.  65(2):  87-108
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００５】
抗ＣＬＤＮ１８．２抗体または抗原結合性断片であって、（ａ）ＧＸ１Ｘ２ＦＸ３Ｘ４Ｘ５Ｘ６Ｘ７Ｘ８（配列番号１１）を含む、ＣＤＲ−Ｈ１であって、Ｘ１が、ＦまたはＹであり、Ｘ２が、ＴまたはＳであり、Ｘ３が、ＴまたはＳであり、Ｘ４が、Ｄ、Ｇ、Ｖ、Ｎ、またはＳであり、Ｘ５が、Ｙ、Ｗ、またはＮであり、Ｘ６が、Ｇ、Ｎ、Ｓ、またはＡであり、Ｘ７が、ＭまたはＩであり、Ｘ８が、Ｆ、Ｈ、Ｓ、Ｙ、またはＮである、ＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）Ｘ１ＩＸ２Ｘ３Ｘ４Ｘ５Ｘ６Ｘ７Ｘ８Ｘ９Ｘ１０Ｘ１１Ｘ１２Ｘ１３Ｘ１４ＫＧ（配列番号３０）を含む、ＣＤＲ−Ｈ２であって、Ｘ１が、Ｙ、Ｅ、Ｔ、Ｈ、またはＮであり、Ｘ２が、Ｓ、Ｎ、Ｄ、Ｙ、またはＩであり、Ｘ３が、Ｓ、Ｐ、またはＩであり、Ｘ４が、Ｇ、Ｎ、Ｋ、Ｒ、またはＹであり、Ｘ５が、Ｓ、Ｎ、Ｇ、またはＹであり、Ｘ６が、Ｓ、Ｇ、Ｔ、Ｎ、またはＤであり、Ｘ７が、Ｎ、Ｔ、Ｖ、Ｙ、Ｉ、またはＰであり、Ｘ８が、Ｉ、Ｔ、またはＦであり、Ｘ９が、Ｙ、Ｈ、またはＮであり、Ｘ１０が、ＹまたはＳであり、Ｘ１１が、Ａ、Ｎ、Ｐ、Ｔ、またはＶであり、Ｘ１２が、Ｄ、Ｑ、またはＥであり、Ｘ１３が、Ｔ、Ｋ、Ｓ、またはＲであり、Ｘ１４が、Ｖ、Ｆ、Ｍ、またはＬである、ＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）Ｘ１Ｘ２Ｘ３ＧＮＸ４Ｘ５Ｘ６Ｙ（配列番号４３）を含む、ＣＤＲ−Ｈ３であって、Ｘ１が、Ｉ、Ｆ、Ｐ、Ａ、Ｑ、またはＨであり、Ｘ２が、Ａ、Ｙ、Ｖ、Ｔであり、Ｘ３が、ＲまたはＹであり、Ｘ４が、Ａ、Ｖ、Ｓ、またはＴであり、Ｘ５が、Ｍ、Ｌ、またはＦであり、Ｘ６が、ＤまたはＡである、ＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）Ｘ１ＳＸ２ＱＸ３ＬＸ４ＮＸ５Ｘ６ＮＸ７Ｘ８ＮＹＬＸ９（配列番号５４）を含む、ＣＤＲ−Ｌ１であって、Ｘ１が、ＫまたはＲであり、Ｘ２が、ＳまたはＲであり、Ｘ３が、ＳまたはＩであり、Ｘ４が、ＬまたはＦであり、Ｘ５が、ＳまたはＴであり、Ｘ６が、ＧまたはＥであり、Ｘ７が、ＱまたはＬであり、Ｘ８が、ＫまたはＲであり、Ｘ９が、Ｔ、Ａ、またはＳである、ＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＸ１ＳＴＲＸ２Ｓ（配列番号５８）を含む、ＣＤＲ−Ｌ２であって、Ｘ１が、ＡまたはＴであり、Ｘ２が、ＥまたはＤである、ＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＸ１Ｘ２Ｘ３Ｘ４Ｘ５ＰＸ６Ｘ７（配列番号７１）を含む、ＣＤＲ−Ｌ３であって、Ｘ１が、ＮまたはＤであり、Ｘ２が、Ｄ、Ｇ、Ｎ、またはＡであり、Ｘ３が、ＹまたはＦであり、Ｘ４が、Ｆ、Ｓ、Ｉ、またはＹであり、Ｘ５が、ＹまたはＦであり、Ｘ６が、ＬまたはＦであり、Ｘ７が、ＴまたはＰである、ＣＤＲ−Ｌ３とを含む、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体または抗原結合性断片が、提供される。
【０００６】
上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体または抗原結合性断片は、（ａ）配列番号１〜６および８〜１０のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）配列番号１２〜１６および１８〜２８のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）配列番号３１〜４２のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）配列番号４４〜４７および４９〜５２のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）配列番号５５〜５７のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）配列番号５９〜６３および６５〜７０のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｌ３とを含む。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片は、ＣＬＤＮ１８．１に特異的に結合しない。
【０００７】
上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体または抗原結合性断片は、（ａ）ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＦ（配列番号１）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＹＩＳＳＧＳＳＮＩＹＹＡＤＴＶＫＧ（配列番号１２）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＩＡＲＧＮＡＭＤＹ（配列番号３１）を含むＣＤＲ−Ｈ３とを含む、ＶＨドメイン、および／または（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号４４）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＤＹＦＹＰＬＴ（配列番号５９）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む、ＶＬドメインを含む。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体または抗原結合性断片は、（ａ）ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＨ（配列番号２）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＹＩＮＳＧＳＳＴＩＹＹＡＤＴＶＫＧ（配列番号１３）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＦＡＲＧＮＶＬＤＹ（配列番号３２）を含むＣＤＲ−Ｈ３とを含む、ＶＨドメイン、および／または（ｄ）ＲＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＲＮＹＬＴ（配列番号４５）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＧＹＳＹＰＬＴ（配列番号６０）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む、ＶＬドメインを含む。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体または抗原結合性断片は、（ａ）ＧＹＳＦＴＧＹＮＩＨ（配列番号３）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＹＩＤＰＮＮＧＶＴＹＳＮＱＫＦＫＧ（配列番号１４）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＰＹＹＧＮＳＦＤＹ（配列番号３３）を含むＣＤＲ−Ｈ３とを含む、ＶＨドメイン、および／または（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＬＲＮＹＬＴ（配列番号４６）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＤＧＹＦＹＰＦＰ（配列番号６１）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む、ＶＬドメインを含む。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体または抗原結合性断片は、（ａ）ＧＹＴＦＴＶＷＳＭＳ（配列番号４）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＥＩＹＰＫＳＧＮＴＨＹＮＥＫＦＫＧ（配列番号１５）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＡＹＹＧＮＳＦＡＹ（配列番号３４）を含むＣＤＲ−Ｈ３とを含む、ＶＨドメイン、および／または（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＲＮＹＬＴ（配列番号４７）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＤＦＩＹＰＦＴ（配列番号６２）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む、ＶＬドメインを含む。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体または抗原結合性断片は、（ａ）ＧＦＴＦＳＮＮＡＭＳ（配列番号５）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＴＩＩＩＧＧＴＹＴＹＹＰＤＳＶＫＧ（配列番号１６）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＱＶＹＧＮＳＦＡＹ（配列番号３５）を含むＣＤＲ−Ｈ３とを含む、ＶＨドメイン、および／または（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号４４）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＮＹＦＹＰＦＴ（配列番号６３）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む、ＶＬドメインを含む。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体または抗原結合性断片は、（ａ）ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＨ（配列番号２）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＹＩＳＳＧＳＳＴＩＹＹＡＤＴＭＫＧ（配列番号１８）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＦＶＲＧＮＳＭＤＹ（配列番号３６）を含むＣＤＲ−Ｈ３とを含む、ＶＨドメイン、および／または（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号４４）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＡＹＳＹＰＬＴ（配列番号６５）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む、ＶＬドメインを含む。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体または抗原結合性断片は、（ａ）ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＨ（配列番号２）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＨＩＳＳＧＳＮＩＩＨＹＡＤＴＬＫＧ（配列番号１９）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＦＡＲＧＮＴＭＤＹ（配列番号３７）を含むＣＤＲ−Ｈ３とを含む、ＶＨドメイン、および／または（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号４４）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＡＹＳＦＰＬＴ（配列番号６６）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む、ＶＬドメインを含む。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体または抗原結合性断片は、（ａ）ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＨ（配列番号２）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＹＩＳＳＧＳＳＴＩＹＹＡＤＴＭＫＧ（配列番号１８）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＦＡＲＧＮＴＭＤＹ（配列番号３７）を含むＣＤＲ−Ｈ３とを含む、ＶＨドメイン、および／または（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＲＮＹＬＴ（配列番号４７）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＧＹＳＹＰＬＴ（配列番号６０）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む、ＶＬドメインを含む。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体または抗原結合性断片は、（ａ）ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＨ（配列番号２）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＹＩＳＳＧＳＮＴＦＹＹＴＤＴＶＫＧ（配列番号２０）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＦＴＲＧＮＡＬＤＹ（配列番号３８）を含むＣＤＲ−Ｈ３とを含む、ＶＨドメイン、および／または（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号４４）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＡＹＳＹＰＬＴ（配列番号６５）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む、ＶＬドメインを含む。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体または抗原結合性断片は、（ａ）ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＹ（配列番号６）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＹＩＳＳＧＳＮＴＩＹＹＡＤＴＶＫＧ（配列番号２１）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＩＡＲＧＮＡＭＤＹ（配列番号３１）を含むＣＤＲ−Ｈ３とを含む、ＶＨドメイン、および／または（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号４４）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＤＹＩＹＰＬＴ（配列番号６７）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む、ＶＬドメインを含む。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体または抗原結合性断片は、（ａ）ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＨ（配列番号２）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＨＩＳＳＧＳＳＴＩＹＹＡＤＴＭＫＧ（配列番号２２）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＦＶＲＧＮＡＬＤＹ（配列番号３９）を含むＣＤＲ−Ｈ３とを含む、ＶＨドメイン、および／または（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号４４）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＧＹＳＹＰＬＴ（配列番号６０）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む、ＶＬドメインを含む。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体または抗原結合性断片は、（ａ）ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＨ（配列番号２）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＹＩＳＳＧＳＳＴＩＨＹＶＤＴＭＫＧ（配列番号２３）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＦＡＲＧＮＴＬＤＹ（配列番号４０）を含むＣＤＲ−Ｈ３とを含む、ＶＨドメイン、および／または（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＦＮＴＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号４９）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＮＧＹＳＹＰＬＴ（配列番号６０）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む、ＶＬドメインを含む。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体または抗原結合性断片は、（ａ）ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＹ（配列番号６）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＹＩＳＳＧＳＳＴＩＹＹＡＤＴＶＫＧ（配列番号２４）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＩＡＲＧＮＡＭＤＹ（配列番号３１）を含むＣＤＲ−Ｈ３とを含む、ＶＨドメイン、および／または（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＦＮＳＧＮＱＲＮＹＬＡ（配列番号５０）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＤＹＦＹＰＬＴ（配列番号５９）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む、ＶＬドメインを含む。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体または抗原結合性断片は、（ａ）ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＨ（配列番号２）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＹＩＳＳＧＳＳＰＩＹＹＡＤＴＶＫＧ（配列番号２５）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＦＡＲＧＮＡＭＤＹ（配列番号４１）を含むＣＤＲ−Ｈ３とを含む、ＶＨドメイン、および／または（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号４４）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＤＳ（配列番号５６）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＮＹＹＹＰＬＴ（配列番号６８）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む、ＶＬドメインを含む。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体または抗原結合性断片は、（ａ）ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＨ（配列番号２）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＹＩＳＳＧＳＳＴＩＹＹＡＤＴＭＫＧ（配列番号１８）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＦＶＲＧＮＳＭＤＹ（配列番号３６）を含むＣＤＲ−Ｈ３とを含む、ＶＨドメイン、および／または（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号４４）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＡＹＳＹＰＬＴ（配列番号６５）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む、ＶＬドメインを含む。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体または抗原結合性断片は、（ａ）ＧＦＴＦＳＮＹＡＭＳ（配列番号８）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＴＩＩＩＧＧＴＹＴＹＹＰＤＳＶＫＧ（配列番号１６）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＱＶＹＧＮＳＦＡＹ（配列番号３５）を含むＣＤＲ−Ｈ３とを含む、ＶＨドメイン、および／または（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号４４）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＮＹＩＹＰＦＴ（配列番号６９）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む、ＶＬドメインを含む。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体または抗原結合性断片は、（ａ）ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＹ（配列番号６）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＹＩＳＳＧＳＮＮＩＹＹＡＤＴＶＫＧ（配列番号２６）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＩＡＲＧＮＡＭＤＹ（配列番号３１）を含むＣＤＲ−Ｈ３とを含む、ＶＨドメイン、および／または（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号４４）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＤＹＩＹＰＬＴ（配列番号６７）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む、ＶＬドメインを含む。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体または抗原結合性断片は、（ａ）ＧＹＴＦＴＳＷＳＩＳ（配列番号９）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＥＩＹＰＲＳＤＮＩＨＹＮＥＫＦＫＧ（配列番号２７）
を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＡＹＹＧＮＳＦＡＹ（配列番号３４）を含むＣＤＲ−Ｈ３とを含む、ＶＨドメイン、および／または（ｄ）ＫＳＳＱＩＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号５１）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＤＹＹＹＰＦＴ（配列番号７０）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む、ＶＬドメインを含む。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体または抗原結合性断片は、（ａ）ＧＹＳＦＴＧＹＮＭＮ（配列番号１０）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＮＩＮＰＹＹＳＮＴＮＹＮＱＲＦＫＧ（配列番号２８）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＣＤＲＧＮＳＦＤＹ（配列番号４２）を含むＣＤＲ−Ｈ３とを含む、ＶＨドメイン、および／または（ｄ）ＫＳＲＱＳＬＦＮＳＥＮＱＫＮＹＬＳ（配列番号５２）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＴＳＴＲＥＳ（配列番号５７）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＮＹＩＹＰＦＴ（配列番号６９）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む、ＶＬドメインを含む。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片は、ＣＬＤＮ１８．１に特異的に結合しない。
【０００８】
上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体または抗原結合性断片は、配列番号７２〜７６、７８〜８５、および８７〜９２のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＶＨドメイン、ならびに／または配列番号９４〜９８、１００〜１０７、および１０９〜１１４のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＶＬドメインを含む。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体または抗原結合性断片は、配列番号７２を含むＶＨドメイン、および／または配列番号９４を含むＶＬドメインを含む。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体または抗原結合性断片は、配列番号７３を含むＶＨドメイン、および／または配列番号９５を含むＶＬドメインを含む。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体または抗原結合性断片は、配列番号７４を含むＶＨドメイン、および／または配列番号９６を含むＶＬドメインを含む。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体または抗原結合性断片は、配列番号７５を含むＶＨドメイン、および／または配列番号９７を含むＶＬドメインを含む。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体または抗原結合性断片は、配列番号７６を含むＶＨドメイン、および／または配列番号９８を含むＶＬドメインを含む。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体または抗原結合性断片は、配列番号７８を含むＶＨドメイン、および／または配列番号１００を含むＶＬドメインを含む。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体または抗原結合性断片は、配列番号７９を含むＶＨドメイン、および／または配列番号１０１を含むＶＬドメインを含む。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体または抗原結合性断片は、配列番号８０を含むＶＨドメイン、および／または配列番号１０２を含むＶＬドメインを含む。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体または抗原結合性断片は、配列番号８１を含むＶＨドメイン、および／または配列番号１０３を含むＶＬドメインを含む。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体または抗原結合性断片は、配列番号８２を含むＶＨドメイン、および／または配列番号１０４を含むＶＬドメインを含む。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体または抗原結合性断片は、配列番号８３を含むＶＨドメイン、および／または配列番号１０５を含むＶＬドメインを含む。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体または抗原結合性断片は、配列番号８４を含むＶＨドメイン、および／または配列番号１０６を含むＶＬドメインを含む。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体または抗原結合性断片は、配列番号８５を含むＶＨドメイン、および／または配列番号１０７を含むＶＬドメインを含む。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体または抗原結合性断片は、配列番号８７を含むＶＨドメイン、および／または配列番号１０９を含むＶＬドメインを含む。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体または抗原結合性断片は、配列番号８８を含むＶＨドメイン、および／または配列番号１１０を含むＶＬドメインを含む。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体または抗原結合性断片は、配列番号８９を含むＶＨドメイン、および／または配列番号１１１を含むＶＬドメインを含む。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体または抗原結合性断片は、配列番号９０を含むＶＨドメイン、および／または配列番号１１２を含むＶＬドメインを含む。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体または抗原結合性断片は、配列番号９１を含むＶＨドメイン、および／または配列番号１１３を含むＶＬドメインを含む。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体または抗原結合性断片は、配列番号９２を含むＶＨドメイン、および／または配列番号１１４を含むＶＬドメインを含む。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片は、ＣＬＤＮ１８．１に特異的に結合しない。
【０００９】
抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片であって、（ａ）ＧＦＸ１ＦＳＤＹＧＭＸ２（配列番号１２１）を含む、ＣＤＲ−Ｈ１であって、Ｘ１が、ＴまたはＳであり、Ｘ２が、ＨまたはＹである、ＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）Ｘ１ＩＳＳＧＳＳＸ２ＩＹＸ３ＡＤＴＸ４ＫＧ（配列番号１２２）を含む、ＣＤＲ−Ｈ２であって、Ｘ１が、Ｙ、Ｈ、またはＦであり、Ｘ２が、ＳまたはＴであり、Ｘ３が、ＹまたはＣであり、Ｘ４が、ＶまたはＭである、ＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）Ｘ１ＡＲＧＮＸ４ＭＤＹ（配列番号１２３）を含む、ＣＤＲ−Ｈ３であって、Ｘ１が、ＩまたはＦであり、Ｘ４が、ＴまたはＡである、ＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＸ１Ｘ２ＮＹＬＸ３（配列番号１２４）を含む、ＣＤＲ−Ｌ１であって、Ｘ１が、ＱまたはＬであり、Ｘ２が、ＲまたはＫであり、Ｘ３が、ＴまたはＡである、ＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）を含む、ＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＸ１ＹＸ２ＹＰＬＴ（配列番号１２５）を含む、ＣＤＲ−Ｌ３であって、Ｘ１が、ＧまたはＤであり、Ｘ２が、ＳまたはＦである、ＣＤＲ−Ｌ３とを含む、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片が、提供される。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片は、クローディン１８．１（ＣＬＤＮ１８．１）に結合する。
【００１０】
上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片は、（ａ）配列番号２、６、および７のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）配列番号１７、２２、および２９のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）配列番号３１もしくは配列番号３７に記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｈ３とを含む、ＶＨドメイン、ならびに／または（ｄ）配列番号４４、４８、および５３のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）配列番号５５に記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）配列番号５９、６０、および６４のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｌ３とを含む、ＶＬドメインを含む。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片は、クローディン１８．１（ＣＬＤＮ１８．１）に結合する。
【００１１】
上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片は、（ａ）ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＨ（配列番号２）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＹＩＳＳＧＳＳＳＩＹＹＡＤＴＶＫＧ（配列番号１７）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＩＡＲＧＮＡＭＤＹ（配列番号３１）を含むＣＤＲ−Ｈ３とを含む、ＶＨドメイン、および／または（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＲＮＹＬＡ（配列番号４８）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＤＹＳＹＰＬＴ（配列番号６４）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む、ＶＬドメインを含む。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片は、（ａ）ＧＦＳＦＳＤＹＧＭＨ（配列番号７）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＨＩＳＳＧＳＳＴＩＹＹＡＤＴＭＫＧ（配列番号２２）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＦＡＲＧＮＴＭＤＹ（配列番号３７）を含むＣＤＲ−Ｈ３とを含む、ＶＨドメイン、および／または（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号４４）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＧＹＳＹＰＬＴ（配列番号６０）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む、ＶＬドメインを含む。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片は、（ａ）ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＹ（配列番号６）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＦＩＳＳＧＳＳＴＩＹＣＡＤＴＶＫＧ（配列番号２９）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＩＡＲＧＮＡＭＤＹ（配列番号３１）を含むＣＤＲ−Ｈ３とを含む、ＶＨドメイン、および／または（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＬＫＮＹＬＴ（配列番号５３）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＤＹＦＹＰＬＴ（配列番号５９）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む、ＶＬドメインを含む。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片は、クローディン１８．１（ＣＬＤＮ１８．１）に結合する。
【００１２】
上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片は、配列番号７７、８６、および９３のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＶＨドメイン、ならびに／または配列番号９９、１０８、および１１５のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＶＬドメインを含む。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片は、配列番号７７を含むＶＨドメイン、および／または配列番号９９を含むＶＬドメインを含む。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片は、配列番号８６を含むＶＨドメイン、および／または配列番号１０８を含むＶＬドメインを含む。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片は、配列番号９３を含むＶＨドメイン、および／または配列番号１１５を含むＶＬドメインを含む。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片は、クローディン１８．１（ＣＬＤＮ１８．１）に結合する。
【００１３】
４つのアミノ酸、４つを下回るアミノ酸、または３つのアミノ酸からなるＣＤＲ−Ｈ３を含む、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片が、提供される。また、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片であって、（ａ）ＧＹＴＦＸ１Ｘ２ＹＸ３Ｘ４Ｈ（配列番号１３９）を含むＣＤＲ−Ｈ１を含む、ＣＤＲ−Ｈ１であって、Ｘ１が、ＴまたはＩであり、Ｘ２が、ＳまたはＮであり、Ｘ３が、ＬまたはＶであり、Ｘ４が、ＩまたはＭである、ＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＹＩＮＰＸ１Ｘ２ＤＧＴＫＹＮＥＫＦＫＧ（配列番号１４０）を含むＣＤＲ−Ｈ２を含む、ＣＤＲ−Ｈ２であって、Ｘ１が、ＹまたはＦであり、Ｘ２が、ＮまたはＤである、ＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＧＤＸ１を含む、ＣＤＲ−Ｈ３であって、Ｘ１が、ＦまたはＹである、ＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号４４）を含む、ＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＸ１ＲＸ２Ｓ（配列番号１４１）を含む、ＣＤＲ−Ｌ２であって、Ｘ１が、ＴまたはＩであり、Ｘ２が、ＡまたはＤである、ＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＬＮＤＹＳＦＰＬＴ（配列番号１３１）を含む、ＣＤＲ−Ｌ３とを含む、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片も、提供される。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片は、クローディン１８．１（ＣＬＤＮ１８．１）に特異的に結合する。
【００１４】
上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片は、（ａ）配列番号１２８または１３２に記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）配列番号１２９または１３３に記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＧＤＦまたはＧＤＹを含む、ＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）配列番号４４に記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）配列番号１３０または１３４に記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）配列番号１３１に記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｌ３とを含む。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片は、（ｉ）（ａ）ＧＹＴＦＩＳＹＬＩＨ（配列番号１２８）を含むＣＤＲ−Ｈ１、（ｂ）ＹＩＮＰＹＮＤＧＴＫＹＮＥＫＦＫＧ（配列番号１２９）を含むＣＤＲ−Ｈ２、（ｃ）ＧＤＦを含むＣＤＲ−Ｈ３を含む、ＶＨドメイン、および／または（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号４４）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＩＲＡＳ（配列番号１３０）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＬＮＤＹＳＦＰＬＴ（配列番号１３１）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む、ＶＬドメインを含む。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片は、（ａ）ＧＹＴＦＴＮＹＶＭＨ（配列番号１３２）を含むＣＤＲ−Ｈ１、（ｂ）ＹＩＮＰＦＤＤＧＴＫＹＮＥＫＦＫＧ（配列番号１３３）を含むＣＤＲ−Ｈ２、（ｃ）ＧＤＹを含むＣＤＲ−Ｈ３を含む、ＶＨドメイン、および／または（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号４４）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＤＳ（配列番号１３４）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＬＮＤＹＳＦＰＬＴ（配列番号１３１）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む、ＶＬドメインを含む。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片は、クローディン１８．１（ＣＬＤＮ１８．１）に特異的に結合する。
【００１５】
上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片は、配列番号１３５および１３６のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＶＨドメイン、ならびに／または配列番号１３７および１３８のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＶＬドメインを含む。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片は、配列番号１３５を含むＶＨドメイン、および／または配列番号１３７を含むＶＬドメインを含む。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片は、配列番号１３６を含むＶＨドメイン、および／または配列番号１３８を含むＶＬドメインを含む。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片は、クローディン１８．１（ＣＬＤＮ１８．１）に特異的に結合する。
【００１６】
上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片は、ヒトＩｇＧのＦｃ配列を含む。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、ヒトＩｇＧは、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４である。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片は、キメラ抗体、ヒト化抗体、またはヒト抗体である。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗原結合性断片は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）’２、一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）、Ｆｖ断片、ダイアボディ、および線形抗体からなる群から選択される。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗体は、多重特異性抗体である。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、ＣＬＤＮ１８．２は、ヒトＣＬＤＮ１８．２である。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、ＣＬＤＮ１８．１は、ヒトＣＬＤＮ１８．１である。
【００１７】
上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片は、治療剤にコンジュゲートされている。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片は、標識にコンジュゲートされている。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、標識は、放射性同位体、蛍光色素、および酵素からなる群から選択される。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片は、抗ＣＬＤＮ１８．２構築物、たとえば、キメラ抗原受容体（抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲ）の一部である。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲは、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片を含む細胞外ドメイン、膜貫通ドメイン、および細胞内シグナル伝達ドメインを含む。一部の実施形態では、細胞内シグナル伝達ドメインは、ＣＤ３ζ細胞内シグナル伝達配列および共刺激シグナル伝達配列または共刺激シグナル伝達配列の組合せを含む。一部の実施形態では、共刺激シグナル伝達配列は、ＣＤ２８細胞内シグナル伝達配列である。一部の実施形態では、共刺激シグナル伝達配列は、４−１−ＢＢ細胞内シグナル伝達配列である。一部の実施形態では、共刺激シグナル伝達配列は、ＣＤ２８および４−１−ＢＢまたは他の共刺激シグナル伝達配列の組合せである。一部の実施形態では、細胞内シグナル伝達ドメインは、ＣＤ３ζ細胞内シグナル伝達配列を含み、共刺激シグナル伝達配列または共刺激シグナル伝達配列の組合せは、サイトカイン導入遺伝子、たとえば、ＣＡＲ誘導性インターロイキン−１２（ｉＩＬ−１２）カセットとともにトランスフェクトされる。
【００１８】
上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片（またはＣＬＤＮ１８．２構築物）をコードする単離された核酸分子が、提供される。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）核酸分子をコードする発現ベクターもまた、提供される。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）核酸分子または発現ベクターを含む、宿主細胞が、提供される。上述の抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲ（たとえば、抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲＴ）のうちのいずれかを含む、免疫細胞（たとえば、Ｔ細胞、ＮＫ細胞、またはマクロファージ）、およびそのような免疫細胞を作製する方法もまた、提供される。
【００１９】
抗ＣＬＤＮ１８．２抗体を産生する方法であって、上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）宿主細胞を培養するステップを含む、方法もまた、提供される。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、方法は、細胞培養物から抗体を回収するステップをさらに含む。
【００２０】
患者から得られた試料中のＣＬＤＮ１８．２タンパク質を検出する方法であって、上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片を、試料と接触させるステップと、ＣＬＤＮ１８．２タンパク質に結合した抗ＣＬＤＮ１８．２抗体を検出するステップとを含む、方法が、提供される。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片は、免疫組織化学アッセイ（ＩＨＣ）またはＥＬＩＳＡアッセイにおいて使用される。
【００２１】
上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその抗原結合性断片と、薬学的に許容される担体とを含む、組成物もまた、提供される。対象におけるがんを処置する方法であって、有効量の上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）医薬組成物を、対象に投与するステップを含む、方法が、提供される。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、がんは、固形腫瘍、胃がん、食道がん、胃食道接合部のがん、膵臓がん、胆管のがん、肺がん、卵巣がん、結腸がん、肝臓がん、頭頸部がん、胆嚢がんから選択される。上述の実施形態のうちのいずれかによる（またはそれに適用される）一部の実施形態では、対象に、抗新生物剤、化学療法剤、成長阻害剤、および細胞毒性剤からなる群から選択される治療剤が、さらに投与される。
【００２２】
特許または出願書類は、少なくとも１つのカラー図面を含む。カラー図面（複数可）を有するこの特許または特許出願公開のコピーは、必要に応じて、かつ必要な費用の支払いに応じて、当局により提供される。
【図面の簡単な説明】
【００２３】
【図１】図１は、ＨＥＫ２９３−ＣＬＤＮ１８．２（赤色）、ＨＥＫ２９３−ＣＬＤＮ１８．１（青色）、および親ＨＥＫ２９３細胞（灰色）への抗体の結合を評価するために、ハイブリドーマ由来の上清を使用して行ったＦＡＣＳ分析の結果を示す。
【００２４】
【図２】図２は、精製されたキメラ抗ＣＬＤＮ１８．２抗体とＨＥＫ２９３−ＣＬＤＮ１８．１との相互作用を評価するために行ったＥＬＩＳＡの結果を示す。
【００２５】
【図３Ａ】図３Ａは、ＫＡＴＯ  ＩＩＩヒト胃癌細胞の表面上に発現したＣＬＤＮ１８．２への、抗ＣＬＤＮ抗体１０−Ｋ１２−Ａ、１−Ｂ１３−Ａ、１−Ｍ５−Ａ、２−Ｄ２２−Ａ、４−Ｎ１−Ａ、５−Ｊ２２−Ａ、６−Ｃ５−Ａ、６−Ｍ１１−Ａ、７−Ａ２１−Ａ、および７−Ｂ１５−Ａの結合を、参照抗ＣＬＤＮ１８．２抗体ＩＭＡＢ３６２と比較して評価するために行った実験の結果を提供する。
【００２６】
【図３Ｂ】図３Ｂは、ＫＡＴＯ  ＩＩＩヒト胃癌細胞の表面上に発現したＣＬＤＮ１８．２への、抗ＣＬＤＮ抗体７−Ｅ２０Ａ、７−Ｇ１７−Ａ、９−Ｂ１１−Ａ、９−Ｃ６−Ａ、９−Ｍ７−Ａ、９−Ｎ１４−Ａ、１０−Ｊ１０−Ｂ、および１０−Ｐ１２−Ａの結合を、参照抗ＣＬＤＮ１８．２抗体ＩＭＡＢ３６２と比較して評価するために行った実験の結果を提供する。
【００２７】
【図３Ｃ】図３Ｃは、ＮＵＧＣ−４ヒト胃腺癌細胞の表面上に発現したＣＬＤＮ１８．２への、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体１０−Ｋ１２−Ａ、１−Ｂ１３−Ａ、９−Ｍ７−Ａ、および１０−Ｐ１２−Ａの結合を、参照抗ＣＬＤＮ１８．２抗体ＩＭＡＢ３６２と比較して評価するために行った実験の結果を提供する。
【００２８】
【図４Ａ】図４Ａは、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体１０−Ｋ１２−Ａ、１−Ｂ１３−Ａ、６−Ｃ５−Ａ、７−Ａ２１−Ａ、７−Ｇ１７−Ａ、９−Ｂ１１−Ａ、９−Ｍ７−Ａ、９−Ｎ１４−Ａ、および１０−Ｊ１０−Ｂが、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体ＩＭＡＢ３６２にナノモル以下の親和性で結合することがこれまでに示されている環状ペプチドであるペプチド２Ｃに結合し得るかどうかを決定するために行ったＥＬＩＳＡ実験の結果を提供する。
【００２９】
【図４Ｂ】図４Ｂは、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体１０−Ｋ１２−Ａ、１−Ｂ１３−Ａ、６−Ｃ５−Ａ、７−Ａ２１−Ａ、７−Ｇ１７−Ａ、９−Ｂ１１−Ａ、９−Ｍ７−Ａ、９−Ｎ１４−Ａ、および１０−Ｊ１０−Ｂが、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体ＩＭＡＢ３６２にナノモル以下の親和性で結合することがこれまでに示されている環状ペプチドであるペプチド３Ｃに結合し得るかどうかを決定するために行ったＥＬＩＳＡ実験の結果を提供する。
【００３０】
【図５】図５は、ペプチド２Ｃまたは３Ｃが、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体１０−Ｋ１２−Ａ、１−Ｂ１３−Ａ、１−Ｍ５−Ａ、２−Ｄ２２−Ａ、４−Ｎ１−Ａ、５−Ｊ２２−Ａ、６−Ｃ５−Ａ、６−Ｍ１１−Ａ、７−Ａ２１−Ａ、７−Ｂ１５−Ａ、７−Ｅ２０Ａ、７−Ｇ１７−Ａ、９−Ｂ１１−Ａ、９−Ｃ６−Ａ、９−Ｍ７−Ａ、９−Ｎ１４−Ａ、１０−Ｊ１０−Ｂ、１０−Ｐ１２−Ａ、または参照抗体ＩＭＡＢ３６２のＨＥＫ２９３−ＣＬＤＮ１８．２細胞への結合を阻害するかどうかを決定するために行った競合アッセイの結果を提供する。
【００３１】
【図６Ａ】図６Ａおよび図６Ｂは、腫瘍成長の阻害における、抗体１−Ｂ１３−Ａ、７−Ｇ１７−Ａ、９−Ｍ７−Ａ、および参照抗体ＩＭＡＢ３６２のｉｎ  ｖｉｖｏでの有効性を評価するために行った、マウスにおける患者由来胃腫瘍異種移植片（ＰＤＸ）実験の結果を提供する。図６Ａは、それぞれの抗体（またはビヒクル対照）での処置の間の平均腫瘍体積を、時間の関数として示す。図６Ｂは、それぞれの抗体（またはビヒクル対照）での処置の間の腫瘍成長の阻害％を、時間の関数として示す。
【図６Ｂ】図６Ａおよび図６Ｂは、腫瘍成長の阻害における、抗体１−Ｂ１３−Ａ、７−Ｇ１７−Ａ、９−Ｍ７−Ａ、および参照抗体ＩＭＡＢ３６２のｉｎ  ｖｉｖｏでの有効性を評価するために行った、マウスにおける患者由来胃腫瘍異種移植片（ＰＤＸ）実験の結果を提供する。図６Ａは、それぞれの抗体（またはビヒクル対照）での処置の間の平均腫瘍体積を、時間の関数として示す。図６Ｂは、それぞれの抗体（またはビヒクル対照）での処置の間の腫瘍成長の阻害％を、時間の関数として示す。
【発明を実施するための形態】
【００３２】
定義
開示される実施形態を詳細に説明する前に、本開示は、特定の組成物または生物学的系に制限されるものではなく、当然ながら、変動し得ることを理解されたい。本明細書において使用される用語は、特定の実施形態を説明する目的のものにすぎず、制限することを意図するものではないこともまた、理解されたい。
【００３３】
本明細書および添付の特許請求の範囲において使用されるとき、単数形の「１つの（a）」、「１つの（an）」、および「その（the）」は、文脈により別途明確に指示されない限り、複数形の参照物を含む。したがって、たとえば、「１つの分子」への言及は、必要に応じて、２つまたはそれを上回るそのような分子の組合せなども含む。
【００３４】
「約」という用語は、本明細書において使用されるとき、当該技術分野の当業者に容易に理解される、それぞれの値の通常の誤差範囲を指す。本明細書において、「約」ある値またはパラメーターへの言及は、その値またはパラメーター自体を対象とする実施形態を含む（また、それについて記載する）。
【００３５】
本開示の態様および実施形態は、態様および実施形態を「含むこと」、それら「からなること」、およびそれら「から本質的になること」を含むことが理解される。
【００３６】
「クローディン１８」または「ＣＬＤＮ１８」という用語は、好ましくは、ヒトＣＬＤＮ１８を指し、ＣＬＤＮ  １８の任意のスプライスバリアント、たとえば、ＣＬＤＮ１８．１およびＣＬＤＮ１８．２を含む。ＣＬＤＮ１８．１およびＣＬＤＮ１８．２は、第１の膜貫通（ＴＭ）領域およびループ１を含むＮ末端部分が異なるが、Ｃ末端の主要なタンパク質配列は、同一である。
【００３７】
「ＣＬＤＮ１８．１」という用語は、好ましくは、ヒトＣＬＤＮ１８．１に関し、具体的には、アミノ酸配列
【化１】
2021515583.tif 000003
またはこのアミノ酸配列のバリアントを含む、タンパク質に関する。
【００３８】
「ＣＬＤＮ１８．２」という用語は、好ましくは、ヒトＣＬＤＮ１８．２に関し、具体的には、アミノ酸配列
【化２】
2021515583.tif 000004
またはこのアミノ酸配列のバリアントを含む、タンパク質に関する。
【００３９】
「ＣＬＤＮ」、「ＣＬＤＮ１８」、「ＣＬＤＮ１８．１」、および「ＣＬＤＮ１８．２」という用語は、任意の翻訳後修飾されたバリアントおよび立体配置バリアントを指す。
【００４０】
本明細書において使用されるとき、「抗体」という用語は、インタクトな（完全長）抗体；抗体断片（限定することなく、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆａｂ’−ＳＨ、Ｆｖ、ダイアボディ、ｓｃＦｖ、ｓｃＦｖ−Ｆｃ、単一ドメイン抗体、単一重鎖抗体、および単一軽鎖抗体を含む）、ただし、所望される生物学的活性（たとえば、エピトープ結合）を示すことを条件とする；モノクローナル抗体；ポリクローナル抗体；単一特異性抗体；多重特異性抗体（たとえば、二重特異性抗体）；ならびにたとえば、融合タンパク質、システイン操作抗体、共有結合により修飾された抗体、および抗体コンジュゲート（たとえば、抗体−薬物コンジュゲートまたは検出可能な標識にコンジュゲートされた抗体）を含むがこれらに限定されない、抗体様タンパク質を指し得る。
【００４１】
「単離された」抗体とは、その天然の環境、たとえば、宿主細胞または生物の成分から、分離および／または回収されている、抗体を指し得る。一部の実施形態では、抗体は、ＳＤＳ−ＰＡＧＥによって、たとえば、銀、クーマシーなどによる染色を使用して、重量を基準とした所望される純度（たとえば、少なくとも９５％）および／または均一性まで精製される。一部の実施形態では、単離された抗体は、１つまたは複数の精製ステップに従って得られる。
【００４２】
当該技術分野において公知のように、「ネイティブな」抗体とは、典型的には、２つの同一な軽鎖（Ｌ）および２つの同一な重鎖（Ｈ）を含む、ヘテロ四量体複合体を指す。鎖内ジスルフィド架橋に加えて、様々な数のジスルフィド結合が、２つの重鎖を接続し、１つのジスルフィド結合が、それぞれの軽鎖を重鎖に結合させる。重鎖には、可変ドメイン（ＶＨ）に続いて、（Ｎ末端からＣ末端に）３つまたは４つの定常ドメインが含まれる。軽鎖には、可変ドメイン（ＶＬ）に続いて、１つの定常ドメイン（ＣＬ）が含まれる。典型的に、哺乳動物軽鎖は、アミノ酸配列に基づいて、カッパおよびラムダの２つのカテゴリーのうちの１つに入る。
【００４３】
「定常ドメイン」は、たとえば、可変ドメインの外側の、抗体または断片の保存性の高い部分を指し得る。この用語は、ＣＬドメイン、ならびに重鎖定常ドメインＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３、および必要に応じてＣＨ４を含み得る。
【００４４】
重鎖の定常ドメインは、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、およびＩｇＭの５つの主要な型のうちの１つに割り当てられ得る。これらの主要な型の多くには、いくつかのサブタイプが存在している。異なるクラスの免疫グロブリンのサブユニットの構造および三次元立体配置は、周知であり、概して、たとえば、Abbas  et  al.  Cellular  and  Mol.  Immunology,  4th  ed.  (W.B.  Saunders,  Co.,  2000)に記載されている。
【００４５】
本明細書において使用されるとき、「抗体可変ドメイン」という用語は、相補性決定領域（ＣＤＲ、たとえば、ＣＤＲ  Ｌ１、ＣＤＲ  Ｌ２、ＣＤＲ  Ｌ３、ＣＤＲ  Ｈ１、ＣＤＲ  Ｈ２、およびＣＤＲ  Ｈ３）ならびにフレームワーク領域（ＦＲ）を含む、抗体の軽鎖および重鎖の部分を指す。
【００４６】
「可変」という用語は、可変ドメインの部分配列が、抗体間での配列が実質的に異なり、特定の抗体のその抗原に対する結合特異性に重要であるという事実を指す。可変性は、ＶＨドメインおよびＶＬドメインのいずれにおいても、３つの「超可変領域」（ＨＶＲ）または「相補性決定領域」（ＣＤＲ）に集中している。（「ＨＶＲ」および「ＣＤＲ」という用語は、本明細書において互換可能に使用される）。可変ドメインの保存性の高い部分は、フレームワーク領域（ＦＲ）と称され、そこに、ＣＤＲが、散在している。ネイティブな重鎖および軽鎖の可変ドメインは、それぞれ、ループを形成する３つのＣＤＲによって接続された４つのＦＲ領域を含む（Kabat  et  al.,  Sequences  of  Proteins  of  Immunological  Interest,  Fifth  Edition,  National  Institute  of  Health,  Bethesda,  Md.  (1991)を参照されたい）。
【００４７】
「超可変領域（ＨＶＲ）」または「相補性決定領域（ＣＤＲ）」という用語は、増強された配列可変性および／または定義されるループの形成によって特徴付けられる、ＶＨドメインおよびＶＬドメインの部分領域を指し得る。これらには、ＶＨドメインにおける３つのＣＤＲ（Ｈ１、Ｈ２、およびＨ３）ならびにＶＬドメインにおける３つのＣＤＲ（Ｌ１、Ｌ２、およびＬ３）が含まれる。Ｈ３は、優れた結合特異性を付与するのに重要であると考えられており、Ｌ３およびＨ３は、最も高いレベルの多様性を示す。Johnson  and  Wu,  in  Methods  in  Molecular  Biology  248:1-25  (Lo,  ed.,  Human  Press,  Totowa,  N.J.,  2003)を参照されたい。
【００４８】
いくつかのＣＤＲ／ＨＶＲの記述が、公知である。Ｋａｂａｔの相補性決定領域（ＣＤＲ）は、配列可変性に基づくものであり、最も一般的に使用されている（Kabat  et  al.,  Sequences  of  Proteins  of  Immunological  Interest,  5th  Ed.  Public  Health  Service,  National  Institutes  of  Health,  Bethesda,  Md.  (1991)）。Ｃｈｏｔｈｉａは、代わりに、構造的ループの位置を指す（Chothia  and  Lesk  J.  Mol.  Biol.  196:901-917  (1987)）。ＡｂＭのＨＶＲは、ＫａｂａｔのＨＶＲとＣｈｏｔｈｉａの構造的ループとの中間のもの（compromise）を表し、Ｏｘｆｏｒｄ  ＭｏｌｅｃｕｌａｒのＡｂＭ抗体モデリングソフトウェアによって使用されている。「ｃｏｎｔａｃｔ」ＨＶＲは、利用可能な複雑な結晶構造の分析に基づくものである。これらのＨＶＲ／ＣＤＲのそれぞれにより得られた残基を、以下に示す。「フレームワーク」または「ＦＲ」残基は、ＨＶＲ／ＣＤＲ残基以外の可変ドメイン残基である。
【化３】
2021515583.tif 000005
【００４９】
「拡張型」ＨＶＲもまた、公知である：ＶＬにおける２４〜３６または２４〜３４（Ｌ１）、４６〜５６または５０〜５６（Ｌ２）、および８９〜９７または８９〜９６（Ｌ３）、ならびにＶＨにおける２６〜３５（Ｈ１）、５０〜６５または４９〜６５（Ｈ２）、および９３〜１０２、９４〜１０２、または９５〜１０２（Ｈ３）（Ｋａｂａｔの番号付け）。
【００５０】
「Ｋａｂａｔによる番号付け」は、Kabat  et  al.（上記）における抗体の編集（compilation）の重鎖可変ドメインまたは軽鎖可変ドメインに使用される番号付けシステムを指し得る。実際の線形アミノ酸配列は、可変ドメインのＦＲまたはＨＶＲの短縮に対応するより少ないアミノ酸を含み得るか、またはそれへの挿入に対応する追加のアミノ酸を含み得る。Ｋａｂａｔの残基番号付けは、所与の抗体に関して、その抗体の配列の相同性の領域における、「標準の」Ｋａｂａｔの番号付けを行った配列とのアライメントによって、決定され得る。典型的に、Ｋａｂａｔの番号付けは、可変ドメイン内の残基（おおよそ軽鎖の残基１〜１０７および重鎖の残基１〜１１３）に言及する場合に使用されるが、一方で、ＥＵ番号付けシステムまたはインデックス（たとえば、ＫａｂａｔにおけるＥＵインデックス、ＥＵ  ＩｇＧ１による番号付け）は、一般に、重鎖定常領域内の残基に言及する場合に使用される。
【００５１】
「完全長」または「インタクトな」抗体は、典型的に、たとえば、抗体断片とは対照的に、Ｆｃ領域を有する重鎖を含む。単一の抗原結合性部位を有する抗原結合性「Ｆａｂ」断片は、パパイン消化によって、残りのＦｃ断片から放出され得る。Ｆ（ａｂ’）２断片は、抗体のペプシン処理によって産生される、２つの抗原結合性部位を含む。抗体断片は、しかしながら、１つまたは複数の抗体可変領域を含む。
【００５２】
「Ｆｖ」断片は、完全な抗原結合性部位を含む。一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）は、たとえば、抗体またはＦａｂ断片におけるように、ＶＨドメインおよびＶＬドメインが会合し、それによりＨＶＲが抗原結合性部位を形成するように、ペプチドリンカーによって連結されたＶＨドメインおよびＶＬドメインを含み得る。Pluckthun,  in  The  Pharmacology  of  Monoclonal  Antibodies,  vol.  113,  Rosenburg  and  Moore  eds.,  (Springer-Verlag,  New  York,  1994),  pp.  269-315を参照されたい。一部の実施形態では、ｓｃＦｖは、抗体Ｆｃドメインに融合されている（たとえば、ｓｃＦｖ−Ｆｃ）。典型的には、６つのＨＶＲが、抗原結合性部位を構成するが、３つのＨＶＲを有する単一の可変ドメインであっても、低い親和性ではあるものの、依然として、抗原に結合することができる。Hamers-Casterman  et  al.,  Nature  363:446-448  (1993)、Sheriff  et  al.,  Nature  Struct.  Biol.  3:733-736  (1996)を参照されたい。単一ドメイン抗体（たとえば、ラクダ抗体）は、典型的に、抗原結合のための単一の単量体可変ドメインを含む。単一重鎖（ＶＨＨ）抗体および単一軽鎖抗体もまた、公知である。Ｆａｂ’断片は、典型的に、Ｆａｂ断片よりもＣ末端側のいくつかのさらなる残基を含む。Ｆａｂ’−ＳＨは、遊離チオールを有するシステイン残基を含む。抗体断片の様々な化学カップリングが、当該技術分野において公知である。
【００５３】
「ダイアボディ」は、２つの抗原結合性部位を有する抗体断片を含む。これらは、典型的に同じ鎖内でのドメインの対合を促進するには短すぎるリンカーによって接続された、ＶＨドメインおよびＶＬドメインを含む。ダイアボディは、二価または二重特異性であり得る。トリボディおよびテトラボディ、または他の数のＶＨ／ＶＬドメインが、公知である。Hudson  et  al.,  Nat.  Med.  9:129-134  (2003)を参照されたい。
【００５４】
本明細書において使用されるとき、「モノクローナル」抗体は、実質的に均質な抗体の集団、たとえば、実質的に同一であるが、わずかなレベルのバックグラウンド変異および／または修飾は許容される抗体集団から得られた抗体を指す。「モノクローナル」とは、抗体の実質的に均質な特徴を指し、任意の特定の方法による抗体の産生を必要とするものではない。一部の実施形態では、モノクローナル抗体は、そのＨＶＲ、ＶＨ、および／もしくはＶＬ配列、ならびに／または結合特性によって選択され、たとえば、クローン（たとえば、組換え体、ハイブリドーマ、またはファージに由来する）のプールから選択される。モノクローナル抗体は、たとえば、抗体の結合親和性または他の特性に影響を及ぼす、ヒト化抗体またはキメラ抗体を作製する、抗体産生および／または均質性を改善する、多重特異性抗体を操作するための、１つまたは複数の変異を含むように操作することができ、その結果得られる抗体は、依然として、モノクローナルな性質であると考えられる。モノクローナル抗体の集団は、集団内の個々のモノクローナル抗体が、同じ抗原性部位を認識するため、ポリクローナル抗体とは区別することができる。モノクローナル抗体の産生のための様々な技法が公知であり、たとえば、ハイブリドーマ法（たとえば、Kohler  and  Milstein,  Nature,  256:495-97  (1975)、Hongo  et  al.,  Hybridoma,  14  (3):  253-260  (1995)、Harlow  et  al.,  Antibodies:  A  Laboratory  Manual,  (Cold  Spring  Harbor  Laboratory  Press,  2nd  ed.  1988)、Hammerling  et  al.,  in:  Monoclonal  Antibodies  and  T-Cell  Hybridomas  563-681  (Elsevier,  N.Y.,  1981)）、組換えＤＮＡ法（たとえば、米国特許第４，８１６，５６７号を参照されたい）、ファージディスプレイ技術（たとえば、Clackson  et  al.,  Nature,  352:  624-628  (1991)、Marks  et  al.,  J.  Mol.  Biol.  222:  581-597  (1992)、Sidhu  et  al.,  J.  Mol.  Biol.  338(2):  299-310  (2004)、Lee  et  al.,  J.  Mol.  Biol.  340(5):  1073-1093  (2004)、Fellouse,  Proc.  Natl.  Acad.  Sci.  USA  101(34):  12467-12472  (2004)、およびLee  et  al.,  J.  Immunol.  Methods  284(1-2):  119-132  (2004)を参照されたい）、ならびにヒト免疫グロブリン遺伝子座またはヒト免疫グロブリン配列をコードする遺伝子の一部またはすべてを有する動物においてヒト抗体またはヒト様抗体を産生するための技術（たとえば、ＷＯ１９９８／２４８９３、ＷＯ１９９６／３４０９６、ＷＯ１９９６／３３７３５、ＷＯ１９９１／１０７４１、Jakobovits  et  al.,  Proc.  Natl.  Acad.  Sci.  USA  90:  2551  (1993)、Jakobovits  et  al.,  Nature  362:  255-258  (1993)、Bruggemann  et  al.,  Year  in  Immunol.  7:33  (1993)、米国特許第５，５４５，８０７号、同第５，５４５，８０６号、同第５，５６９，８２５号、同第５，６２５，１２６号、同第５，６３３，４２５号、および同第５，６６１，０１６号、Marks  et  al.,  Bio/Technology  10:  779-783  (1992)、Lonberg  et  al.,  Nature  368:  856-859  (1994)、Morrison,  Nature  368:  812-813  (1994)、Fishwild  et  al.,  Nature  Biotechnol.  14:  845-851  (1996)、Neuberger,  Nature  Biotechnol.  14:  826  (1996)、およびLonberg  and  Huszar,  Intern.  Rev.  Immunol.  13:  65-93  (1995)を参照されたい）を参照されたい。
【００５５】
「キメラ」抗体は、重鎖および／または軽鎖の一部分が特定のアイソタイプ、クラス、または生物に由来し、別の部分が別のアイソタイプ、クラス、または生物に由来する、抗体を指し得る。一部の実施形態では、可変領域が、１つのソースまたは生物に由来し、定常領域が別のものに由来する。
【００５６】
「ヒト化抗体」は、主としてヒト配列を有し、最小限の量の非ヒト（たとえば、マウスまたはニワトリ）配列を有する抗体を指し得る。一部の実施形態では、ヒト化抗体は、ヒトレシピエント抗体フレームワーク（ＦＲ）にグラフトされた、非ヒト（たとえば、マウスまたはニワトリ）生物に由来する抗体に由来する１つまたは複数のＨＶＲ配列（目的の結合特異性を有する）を有する。一部の実施形態では、たとえば、抗体特性を改善するために、非ヒト残基が、さらに、ヒトフレームワークにグラフトされる（ソース抗体にもレシピエント抗体にも存在しない）。一般に、ヒト化抗体は、少なくとも１つ、典型的には２つの可変ドメインうちの実質的にすべてを含み、ここで、超可変ループのすべてまたは実質的にすべてが、非ヒト免疫グロブリンの超可変ループに対応し、ＦＲのすべてまたは実質的にすべてが、ヒト免疫グロブリン配列のＦＲである。ヒト化抗体はまた、必要に応じて、免疫グロブリン定常領域（Ｆｃ）の少なくとも一部分、典型的にはヒト免疫グロブリンのものを含み得る。Jones  et  al.,  Nature  321:522-525  (1986)、Riechmann  et  al.,  Nature  332:323-329  (1988)、およびPresta,  Curr.  Op.  Struct.  Biol.  2:593-596  (1992)を参照されたい。
【００５７】
「ヒト抗体」は、ヒトによって産生される抗体のアミノ酸配列に対応するアミノ酸配列を有する抗体、および／または本明細書において開示されるヒト抗体を作製する技法のうちのいずれかを使用して作製された抗体を指し得る。ヒト抗体は、ファージディスプレイライブラリーを含め、当該技術分野において公知の様々な技法を使用して産生することができる。Hoogenboom  and  Winter,  J.  Mol.  Biol.,  227:381  (1991)；Marks  et  al.,  J.  Mol.  Biol.,  222:581  (1991)；  Cole  et  al.,  Monoclonal  Antibodies  and  Cancer  Therapy,  Alan  R.  Liss,  p.  77  (1985)に記載されているヒトモノクローナル抗体の調製；Boerner  et  al.,  J.  Immunol.,  147(1):86-95  (1991)；ならびに抗原チャレンジに応答してそのような抗体を産生するように修飾されているが、内因性遺伝子座が無能となっているトランスジェニック動物、たとえば、免疫したｘｅｎｏｍｏｕｃｅ（たとえば、ＸＥＮＯＭＯＵＳＥ技術については米国特許第６，０７５，１８１号および同第６，１５０，５８４号を参照されたい）、またはヒト免疫グロブリン配列（複数可）を有するニワトリ（たとえば、ＷＯ２０１２１６２４２２、ＷＯ２０１１０１９８４４、およびＷＯ２０１３０５９１５９を参照されたい）に、抗原を投与することによる。
【００５８】
「細胞毒性剤」という用語は、本明細書において使用されるとき、細胞増殖を阻害するか、または細胞死を誘導する、任意の薬剤を指し得る。細胞毒性剤としては、化学療法剤、放射性同位体、成長阻害剤、ならびに毒素、たとえば、小分子毒素または酵素活性毒素（その断片および／またはバリアントを含む）が挙げられるが、これらに限定されない。例示的な細胞毒性剤としては、限定することなく、代謝阻害剤、微小管阻害剤（anti-microtubule  agent）、白金含有化合物、アルキル化剤、プロテアソーム阻害剤、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤、代謝拮抗剤、トポイソメラーゼＩ阻害剤、シグナル伝達経路阻害剤、非受容体型チロシンキナーゼ血管新生阻害剤（non-receptor  tyrosine  kinase  angiogenesis  inhibitor）、ホルモンおよびホルモン類似体、アポトーシス促進剤、ＬＤＨ−Ａの阻害剤、細胞周期阻害剤、ＨＤＡＣ阻害剤、ならびに抗生物質剤が挙げられる。
【００５９】
本明細書において使用されるとき、「標識」には、たとえば、本開示の標識抗体と高分子または細胞との間の結合の、検出剤として機能する任意の部分が含まれ得る。例示的な標識としては、限定することなく、蛍光性部分（たとえば、化合物もしくはタンパク質）、放射性部分、または酵素部分、ならびに親和性精製タグが挙げられる。
【００６０】
「検出すること」という用語は、物質の存在もしくは非存在を決定すること、または物質（たとえば、ＣＬＤＮ１８．２）の量を定量することを含むことを意図する。この用語は、したがって、定性的および定量的決定のための本発明の材料、組成物、および方法の使用を指す。一般に、検出に使用される具体的な技法は、本発明の実施にとって重要ではない。
【００６１】
たとえば、本発明による「検出すること」には、ＣＬＤＮ１８．２ポリペプチドのＣＬＤＮ１８．２遺伝子産物の存在または非存在、ＣＬＤＮ１８．２ポリペプチドのレベルまたは標的に結合した量の変化、ＣＬＤＮ１８．２ポリペプチドの生物学的機能／活性の変化を観察することが含まれ得る。一部の実施形態では、「検出すること」には、野生型ＣＬＤＮ１８．２レベル（たとえば、ポリペプチドレベル）を検出することが含まれ得る。検出することには、対照と比較して、１０％〜９０％の任意の値の、または３０％〜６０％の任意の値の、または１００％を上回る、変化（増加または減少）を定量することが含まれ得る。検出することには、両端を含め２倍〜１０倍、またはそれを上回る、たとえば、１００倍の、任意の値の変化を定量することが含まれ得る。
【００６２】
本明細書において使用されるとき、抗体は、抗体が、抗原のｉｎ  ｖｉｔｒｏおよび／またはｉｎ  ｖｉｖｏでの操作に有用となるのに十分な親和性で、抗原に「結合する」と言うことができる。
【００６３】
本明細書において使用されるとき、「親和性」または「結合親和性」という用語は、２つの分子の間の結合相互作用の強度を指す。一般に、結合親和性は、ある分子とその結合パートナーとの間、たとえば、高親和性ＳＩＲＰ−α  Ｄ１バリアントとＣＤ４７との間の非共有結合的相互作用の総計の強度を指す。別途示されない限り、結合親和性は、結合ペアのメンバー間での１：１の相互作用を反映する、本質的な結合親和性を指す。２つの分子の間の結合親和性は、一般に、解離定数（Ｋｄ）または結合定数（Ｋａ）で記載される。互いに低い結合親和性を有する２つの分子は、一般に、ゆっくりと結合し、容易に解離する傾向にあり、大きなＫｄを示す。互いに高い親和性を有する２つの分子は、一般に、容易に結合し、より長く結合したままとなる傾向にあり、小さなＫｄを示す。一部の実施形態では、２つの相互作用する分子のＫｄは、公知の方法および技法、たとえば、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）を使用して決定される。Ｋｄは、ｋｏｆｆ／ｋｏｎの比として計算することができる。
【００６４】
本明細書において使用されるとき、「を下回るＫｄ」という用語は、引用されたＫｄ値と比べて、Ｋｄ値の数字が小さいことおよび結合親和性が大きいこと指す。本明細書において使用されるとき、「を上回るＫｄ」という用語は、引用されたＫｄ値と比べて、Ｋｄ値の数字が大きいことおよび結合親和性が小さいことを指す。
【００６５】
本明細書において使用されるとき、「処置」とは、臨床結果を含む、有益なまたは所望される治療結果を得るための、分子、化合物、製剤、組成物などの治療的投与を指し得る。本発明の目的で、有益なまたは所望される臨床結果としては、以下のうちの１つまたは複数が挙げられるが、これらに限定されない：疾患により生じる１つもしくは複数の症状を軽減すること、疾患の程度を減少させること、疾患を安定させること（たとえば、疾患の悪化を予防もしくは遅延すること）、疾患の拡がり（たとえば、転移）を予防もしくは遅延すること、疾患の再発を予防もしくは遅延すること、疾患の進行を遅延もしくは緩徐化すること、疾患状態を緩和すること、疾患の寛解（部分的もしくは完全）をもたらすこと、疾患を処置するために必要とされる１つもしくは複数の他の医薬の用量を減少させること、病理学的症状もしくは疾患状態を緩和すること、生活の質を向上もしくは改善すること、過剰な体重減少を予防すること、予後を改善すること、疾患寛解を達成すること、および／または生存期間を延長すること。がんの病理学的結果（たとえば、腫瘍体積）の低減もまた、「処置」に包含される。本明細書において提供される方法は、処置のこれらの態様のうちのいずれか１つまたは複数を企図する。
【００６６】
本明細書において使用されるとき、疾患の「進行を遅延する」とは、疾患の病理過程の緩徐化、遅延、延期、その発生の延期、安定化、またはそれ以外では妨害を指し得る。一部の実施形態では、この用語は、たとえば、個体が疾患を発症するのを予防することにおいて、予防を効果的に包含するのに十分な遅延を指す。一部の実施形態、たとえば、進行がんでは、進行を遅延することには、転移を遅延することが含まれ得る。当業者であれば、遅延の正確な長さは、たとえば、具体的な疾患、個体の状態などに依存し得ることを理解する。
【００６７】
「再発」、「再燃」、または「再燃した」という用語は、疾患消失の臨床評価後に生じる、異常なＣＬＤＮ１８．２発現または異常なＣＬＤＮ１８．２活性によって特徴付けられる疾患または障害（たとえば、腫瘍またはがん、たとえば、胃がん、食道がん、胃食道接合部のがん、膵臓がん、胆管のがん、肺がん、卵巣がん、結腸がん、肝臓がん、頭頸部がん、胆嚢がんなど）の再来を指す。
【００６８】
「不応性」または「耐性」という用語は、特定の薬剤または薬剤の組合せでの処置に応答しなかった、異常なＣＬＤＮ１８．２発現または異常なＣＬＤＮ１８．２活性によって特徴付けられる疾患または障害（たとえば、がん、たとえば、胃がん、食道がん、胃食道接合部のがん、膵臓がん、胆管のがん、肺がん、卵巣がん、結腸がん、肝臓がん、頭頸部がん、胆嚢がんなど）を指す。
【００６９】
本明細書において使用されるとき、「有効量」という用語は、疾患、たとえば、異常なＣＬＤＮ１８．２発現または活性によって特徴付けられるＣＬＤＮ１８．２発現腫瘍またはがん、たとえば、胃がん、食道がん、胃食道接合部のがん、膵臓がん、胆管のがん、肺がん、卵巣がん、結腸がん、肝臓がん、頭頸部がん、胆嚢がんなどを有する患者の処置または進行の遅延において、所望される治療効果を達成するのに十分であり、それに有効である、本開示の抗体または本開示の抗体を含む医薬組成物の量を指し得る。一部の実施形態では、治療有効量は、有害な副作用を回避する、および／またはそのような副作用よりも有益な効果がまさる。有効量は、処置されている個体、たとえば、年齢、体重、性別、疾患状態、ならびに所望される応答をもたらす薬剤の能力に依存し得る。有効量は、１回または複数回の投与で投与され得る。臨床状況にあるように、薬物、化合物、または医薬組成物の有効量は、別の治療剤など、別の薬物、化合物、または医薬組成物との併用で達成されてもよく、またはそうでなくてもよい。したがって、「有効量」はまた、１つまたは複数の追加の治療剤を投与する文脈において考慮することができ、単一の薬剤は、１つまたは複数の薬剤との併用で、望ましい結果を得ることができるかまたは得られる場合に、有効量で提供されるとみなされ得る。
【００７０】
「治療有効量」という用語は、哺乳動物（患者または対象としても知られている）における疾患または障害を「処置する」のに有効な、本明細書において開示される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（もしくはその断片）または組成物の量を指す。がんの場合には、治療有効量の本明細書に開示される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（もしくはその断片）または組成物は、がん細胞の数を低減させ得る、腫瘍のサイズもしくは重量を低減させ得る、がん細胞の周辺器官への浸潤を阻害する（すなわち、ある程度緩徐にし、好ましくは停止させる）、腫瘍転移を阻害する（すなわち、ある程度緩徐にし、好ましくは停止させる）、腫瘍成長をある程度阻害する、および／またはがんと関連する症状のうちの１つもしくは複数をある程度緩和することができる。本明細書において開示されるＣＬＤＮ１８．２抗体（もしくはその断片）または組成物が、既存のがん細胞の成長を予防し、かつ／またはそれらを殺滅し得るという点で、それは、細胞分裂抑制性および／または細胞毒性であり得る。一実施形態では、治療有効量は、成長阻害量である。別の実施形態では、治療有効量は、患者の生存期間を延長させる量である。別の実施形態では、治療有効量は、患者の無増悪生存期間を改善する量である。
【００７１】
本明細書において使用されるとき、「医薬組成物」という用語は、活性成分、ならびに賦形剤または希釈剤（または賦形剤および希釈剤の両方）を含み、好適な投与方法による活性成分の投与を可能にする、医用製剤または薬学的製剤を指し得る。一部の実施形態では、本明細書において開示される医薬組成物は、本開示の１つまたは複数の抗体と適合性のある薬学的に許容される成分を含む。一部の実施形態では、医薬組成物は、経口投与のための錠剤もしくはカプセルの形態であるか、たとえば、注射による、静脈内投与もしくは皮下投与のための水性形態である。
【００７２】
本明細書において使用されるとき、「薬学的に許容される」または「薬理学的に適合性のある」とは、生物学的にもそれ以外にも望ましくないことのない材料を意味し、たとえば、この材料は、いずれの重大な望ましくない生物学的作用を引き起こすことも、この材料が含有されている組成物中の他の構成成分のいずれとも有害な様式で相互作用することもなく、患者に投与される医薬組成物中に組み込まれ得る。薬学的に許容される担体または賦形剤は、好ましくは、毒性学試験および製造試験の必要とされる基準を満たしており、かつ／またはＵ．Ｓ．Ｆｏｏｄ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎによって作成されたＩｎａｃｔｉｖｅ  Ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔ  Ｇｕｉｄｅに含まれる。
【００７３】
本明細書において使用されるとき、「対象」、「個体」、および「患者」という用語は、脊椎動物、たとえば、哺乳動物を指して互換可能に使用される。哺乳動物には、マウス、サル、ヒト、家畜、競技動物、および愛玩動物が含まれるが、これらに限定されない。
【００７４】
本明細書において特定されるポリペプチドおよび抗体配列に関する「アミノ酸配列同一性パーセント（％）」または「相同性」は、配列をアライメントした後に、比較されているポリペプチドにおけるアミノ酸残基と同一である、候補配列におけるアミノ酸残基の割合として定義され、いずれの保存的置換も、配列同一性の一部と考える。アミノ酸配列同一性パーセントを決定することを目的とするアライメントは、当業者の技能の範囲内である様々な手段で、たとえば、公的に入手可能なコンピュータソフトウェア、たとえば、ＢＬＡＳＴ、ＢＬＡＳＴ−２、ＡＬＩＧＮ、またはＭｅｇａｌｉｇｎ（ＤＮＡＳＴＡＲ）ソフトウェアを使用して、達成することができる。当業者であれば、比較されている配列の全長にわたって最大のアライメントを達成するのに必要な任意のアルゴリズムを含む、アライメントを測定するための適切なパラメーターを決定することができる。本明細書の目的では、しかしながら、アミノ酸配列同一性％値は、配列比較コンピュータプログラムＡＬＩＧＮ−２を使用して生成される。ＡＬＩＧＮ−２配列比較コンピュータプログラムは、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．によって作製されたものであり、ソースコードは、Ｕ．Ｓ．Ｃｏｐｙｒｉｇｈｔ  Ｏｆｆｉｃｅ、Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ  Ｄ．Ｃ．、２０５５９において利用者文書とともに保管されており、Ｕ．Ｓ．Ｃｏｐｙｒｉｇｈｔ  Ｒｅｇｉｓｔｒａｔｉｏｎ  Ｎｏ．ＴＸＵ５１００８７として登録されている。ＡＬＩＧＮ−２プログラムは、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．、Ｓｏｕｔｈ  Ｓａｎ  Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ、Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａを通じて公的に入手可能である。ＡＬＩＧＮ−２プログラムは、ＵＮＩＸ（登録商標）オペレーティングシステム、好ましくは、デジタルＵＮＩＸ（登録商標）  Ｖ４．０Ｄにおける使用のためにコンパイルされているはずである。すべての配列比較パラメーターは、ＡＬＩＧＮ−２プログラムによって設定され、変動しない。
【００７５】
特許出願および刊行物を含め、本明細書に引用されるすべての参考文献は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
抗クローディン１８．２（ＣＬＤＮ１８．２）抗体
【００７６】
本開示は、クローディン１８．２（ＣＬＤＮ１８．２）に結合する抗体の特定に基づく。本明細書において提供される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体は、様々な治療方法および診断方法において使用することができる。たとえば、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体は、固形腫瘍またはがん、たとえば、胃がん、食道がん、胃食道接合部のがん、膵臓がん、胆管のがん、肺がん、卵巣がん、結腸がん、肝臓がん、頭頸部がん、胆嚢がんなどを含むがこれらに限定されない、異常なＣＬＤＮ１８．２発現または異常なＣＬＤＮ１８．２活性によって特徴付けられる疾患または障害の処置において、単独または他の薬剤と組み合わせて使用することができる。本明細書において提供される抗体は、たとえば、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体を患者に投与し、（たとえば、ｉｎ  ｖｉｖｏもしくはｅｘ  ｖｉｖｏで）ＣＬＤＮ１８．２に結合した抗ＣＬＤＮ１８．２抗体を検出することによって、またはたとえば、患者から得られた試料を、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体と接触させ、ＣＬＤＮ１８．２タンパク質に結合した抗ＣＬＤＮ１８．２抗体を定性的もしくは定量的に検出することによって、患者または患者試料におけるＣＬＤＮ１８．２を検出するためにも使用することができる。
【００７７】
抗ＣＬＤＮ１８．２抗体は、十分な親和性および特異性でＣＬＤＮ１８．２に結合する抗体である。たとえば、本明細書において提供される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその生物学的に活性な断片）は、異常な／正常でないＣＬＤＮ１８．２の発現および／または活性と関連する疾患または状態の標的化および妨害において、治療剤として使用することができる。一部では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体は、キメラモノクローナル抗体である。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体は、本明細書において開示される抗体の少なくとも１つのＣＤＲ、重鎖可変ドメイン（ＶＨ）、および／また軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む。
【００７８】
ある特定の実施形態では、本明細書において提供される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）ＧＸ１Ｘ２ＦＸ３Ｘ４Ｘ５Ｘ６Ｘ７Ｘ８（配列番号１１）を含む、ＣＤＲ−Ｈ１であって、Ｘ１が、ＦまたはＹであり、Ｘ２が、ＴまたはＳであり、Ｘ３が、ＴまたはＳであり、Ｘ４が、Ｄ、Ｇ、Ｖ、Ｎ、またはＳであり、Ｘ５が、Ｙ、Ｗ、またはＮであり、Ｘ６が、Ｇ、Ｎ、Ｓ、またはＡであり、Ｘ７が、ＭまたはＩであり、Ｘ８が、Ｆ、Ｈ、Ｓ、Ｙ、またはＮである、ＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）Ｘ１ＩＸ２Ｘ３Ｘ４Ｘ５Ｘ６Ｘ７Ｘ８Ｘ９Ｘ１０Ｘ１１Ｘ１２Ｘ１３Ｘ１４ＫＧ（配列番号３０）を含む、ＣＤＲ−Ｈ２であって、Ｘ１が、Ｙ、Ｅ、Ｔ、Ｈ、またはＮであり、Ｘ２が、Ｓ、Ｎ、Ｄ、Ｙ、またはＩであり、Ｘ３が、Ｓ、Ｐ、またはＩであり、Ｘ４が、Ｇ、Ｎ、Ｋ、Ｒ、またはＹであり、Ｘ５が、Ｓ、Ｎ、Ｇ、またはＹであり、Ｘ６が、Ｓ、Ｇ、Ｔ、Ｎ、またはＤであり、Ｘ７が、Ｎ、Ｔ、Ｖ、Ｙ、Ｉ、またはＰであり、Ｘ８が、Ｉ、Ｔ、またはＦであり、Ｘ９が、Ｙ、Ｈ、またはＮであり、Ｘ１０が、ＹまたはＳであり、Ｘ１１が、Ａ、Ｎ、Ｐ、Ｔ、またはＶであり、Ｘ１２が、Ｄ、Ｑ、またはＥであり、Ｘ１３が、Ｔ、Ｋ、Ｓ、またはＲであり、Ｘ１４が、Ｖ、Ｆ、Ｍ、またはＬである、ＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）Ｘ１Ｘ２Ｘ３ＧＮＸ４Ｘ５Ｘ６Ｙ（配列番号４３）を含む、ＣＤＲ−Ｈ３であって、Ｘ１が、Ｉ、Ｆ、Ｐ、Ａ、Ｑ、またはＨであり、Ｘ２が、Ａ、Ｙ、Ｖ、Ｔであり、Ｘ３が、ＲまたはＹであり、Ｘ４が、Ａ、Ｖ、Ｓ、またはＴであり、Ｘ５が、Ｍ、Ｌ、またはＦであり、Ｘ６が、ＤまたはＡである、ＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）Ｘ１ＳＸ２ＱＸ３ＬＸ４ＮＸ５Ｘ６ＮＸ７Ｘ８ＮＹＬＸ９（配列番号５４）を含む、ＣＤＲ−Ｌ１であって、Ｘ１が、ＫまたはＲであり、Ｘ２が、ＳまたはＲであり、Ｘ３が、ＳまたはＩであり、Ｘ４が、ＬまたはＦであり、Ｘ５が、ＳまたはＴであり、Ｘ６が、ＧまたはＥであり、Ｘ７が、ＱまたはＬであり、Ｘ８が、ＫまたはＲであり、Ｘ９が、Ｔ、Ａ、またはＳである、ＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＸ１ＳＴＲＸ２Ｓ（配列番号５８）を含む、ＣＤＲ−Ｌ２であって、Ｘ１が、ＡまたはＴであり、Ｘ２が、ＥまたはＤである、ＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＸ１Ｘ２Ｘ３Ｘ４Ｘ５ＰＸ６Ｘ７（配列番号７１）を含む、ＣＤＲ−Ｌ３であって、Ｘ１が、ＮまたはＤであり、Ｘ２が、Ｄ、Ｇ、Ｎ、またはＡであり、Ｘ３が、ＹまたはＦであり、Ｘ４が、Ｆ、Ｓ、Ｉ、またはＹであり、Ｘ５が、ＹまたはＦであり、Ｘ６が、ＬまたはＦであり、Ｘ７が、ＴまたはＰである、ＣＤＲ−Ｌ３とからなる群から選択される１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つの相補性決定領域（ＣＤＲ）配列を含む。
【００７９】
ある特定の実施形態では、本明細書において提供される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）ＧＸ１Ｘ２ＦＸ３Ｘ４Ｘ５Ｘ６Ｘ７Ｘ８（配列番号１１）を含む、ＣＤＲ−Ｈ１であって、Ｘ１が、ＦまたはＹであり、Ｘ２が、ＴまたはＳであり、Ｘ３が、ＴまたはＳであり、Ｘ４が、Ｄ、Ｇ、Ｖ、Ｎ、またはＳであり、Ｘ５が、Ｙ、Ｗ、またはＮであり、Ｘ６が、Ｇ、Ｎ、Ｓ、またはＡであり、Ｘ７が、ＭまたはＩであり、Ｘ８が、Ｆ、Ｈ、Ｓ、Ｙ、またはＮである、ＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）Ｘ１ＩＸ２Ｘ３Ｘ４Ｘ５Ｘ６Ｘ７Ｘ８Ｘ９Ｘ１０Ｘ１１Ｘ１２Ｘ１３Ｘ１４ＫＧ（配列番号３０）を含む、ＣＤＲ−Ｈ２であって、Ｘ１が、Ｙ、Ｅ、Ｔ、Ｈ、またはＮであり、Ｘ２が、Ｓ、Ｎ、Ｄ、Ｙ、またはＩであり、Ｘ３が、Ｓ、Ｐ、またはＩであり、Ｘ４が、Ｇ、Ｎ、Ｋ、Ｒ、またはＹであり、Ｘ５が、Ｓ、Ｎ、Ｇ、またはＹであり、Ｘ６が、Ｓ、Ｇ、Ｔ、Ｎ、またはＤであり、Ｘ７が、Ｎ、Ｔ、Ｖ、Ｙ、Ｉ、またはＰであり、Ｘ８が、Ｉ、Ｔ、またはＦであり、Ｘ９が、Ｙ、Ｈ、またはＮであり、Ｘ１０が、ＹまたはＳであり、Ｘ１１が、Ａ、Ｎ、Ｐ、Ｔ、またはＶであり、Ｘ１２が、Ｄ、Ｑ、またはＥであり、Ｘ１３が、Ｔ、Ｋ、Ｓ、またはＲであり、Ｘ１４が、Ｖ、Ｆ、Ｍ、またはＬである、ＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）Ｘ１Ｘ２Ｘ３ＧＮＸ４Ｘ５Ｘ６Ｙ（配列番号４３）を含む、ＣＤＲ−Ｈ３であって、Ｘ１が、Ｉ、Ｆ、Ｐ、Ａ、Ｑ、またはＨであり、Ｘ２が、Ａ、Ｙ、Ｖ、Ｔであり、Ｘ３が、ＲまたはＹであり、Ｘ４が、Ａ、Ｖ、Ｓ、またはＴであり、Ｘ５が、Ｍ、Ｌ、またはＦであり、Ｘ６が、ＤまたはＡである、ＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）Ｘ１ＳＸ２ＱＸ３ＬＸ４ＮＸ５Ｘ６ＮＸ７Ｘ８ＮＹＬＸ９（配列番号５４）を含む、ＣＤＲ−Ｌ１であって、Ｘ１が、ＫまたはＲであり、Ｘ２が、ＳまたはＲであり、Ｘ３が、ＳまたはＩであり、Ｘ４が、ＬまたはＦであり、Ｘ５が、ＳまたはＴであり、Ｘ６が、ＧまたはＥであり、Ｘ７が、ＱまたはＬであり、Ｘ８が、ＫまたはＲであり、Ｘ９が、Ｔ、Ａ、またはＳである、ＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＸ１ＳＴＲＸ２Ｓ（配列番号５８）を含む、ＣＤＲ−Ｌ２であって、Ｘ１が、ＡまたはＴであり、Ｘ２が、ＥまたはＤである、ＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＸ１Ｘ２Ｘ３Ｘ４Ｘ５ＰＸ６Ｘ７（配列番号７１）を含む、ＣＤＲ−Ｌ３であって、Ｘ１が、ＮまたはＤであり、Ｘ２が、Ｄ、Ｇ、Ｎ、またはＡであり、Ｘ３が、ＹまたはＦであり、Ｘ４が、Ｆ、Ｓ、Ｉ、またはＹであり、Ｘ５が、ＹまたはＦであり、Ｘ６が、ＬまたはＦであり、Ｘ７が、ＴまたはＰである、ＣＤＲ−Ｌ３とを含む。
【００８０】
ある特定の実施形態では、本明細書において提供される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）ＧＸ１Ｘ２ＦＸ３Ｘ４Ｘ５Ｘ６Ｘ７Ｘ８（配列番号１１）を含む、ＣＤＲ−Ｈ１であって、Ｘ１が、ＦまたはＹであり、Ｘ２が、ＴまたはＳであり、Ｘ３が、ＴまたはＳであり、Ｘ４が、Ｄ、Ｇ、Ｖ、Ｎ、またはＳであり、Ｘ５が、Ｙ、Ｗ、またはＮであり、Ｘ６が、Ｇ、Ｎ、Ｓ、またはＡであり、Ｘ７が、ＭまたはＩであり、Ｘ８が、Ｆ、Ｈ、Ｓ、Ｙ、またはＮである、ＣＤＲ−Ｈ１、（ｂ）Ｘ１ＩＸ２Ｘ３Ｘ４Ｘ５Ｘ６Ｘ７Ｘ８Ｘ９Ｘ１０Ｘ１１Ｘ１２Ｘ１３Ｘ１４ＫＧ（配列番号３０）を含む、ＣＤＲ−Ｈ２であって、Ｘ１が、Ｙ、Ｅ、Ｔ、Ｈ、Ｎ、またはＦであり、Ｘ２が、Ｓ、Ｎ、Ｙ、またはＩであり、Ｘ３が、Ｓ、Ｐ、またはＩであり、Ｘ４が、Ｇ、Ｋ、Ｒ、またはＹであり、Ｘ５が、Ｓ、Ｇ、またはＹであり、Ｘ６が、Ｓ、Ｇ、Ｔ、Ｎ、またはＤであり、Ｘ７が、Ｎ、Ｔ、Ｙ、Ｓ、Ｉ、またはＰであり、Ｘ８が、Ｉ、Ｔ、またはＦであり、Ｘ９が、Ｙ、Ｈ、またはＮであり、Ｘ１０が、ＹまたはＣであり、Ｘ１１が、Ａ、Ｎ、Ｐ、Ｔ、またはＶであり、Ｘ１２が、Ｄ、Ｑ、またはＥであり、Ｘ１３が、Ｔ、Ｋ、Ｓ、またはＲであり、Ｘ１４が、Ｖ、Ｆ、Ｍ、またはＬである、ＣＤＲ−Ｈ２、（ｃ）Ｘ１Ｘ２Ｘ３ＧＮＸ４Ｘ５Ｘ６Ｙ（配列番号４３）を含む、ＣＤＲ−Ｈ３であって、Ｘ１が、Ｉ、Ｆ、Ｐ、Ａ、Ｑ、またはＨであり、Ｘ２が、Ａ、Ｙ、Ｖ、Ｔであり、Ｘ３が、ＲまたはＹであり、Ｘ４が、Ａ、Ｖ、Ｓ、またはＴであり、Ｘ５が、Ｍ、Ｌ、またはＦであり、Ｘ６が、ＤまたはＡである、ＣＤＲ−Ｈ３、（ｄ）ＫＳＸ１ＱＸ２ＬＸ３ＮＸ４Ｘ５ＮＸ６Ｘ７ＮＹＬＸ８（配列番号１１６）を含む、ＣＤＲ−Ｌ１であって、Ｘ１が、ＳまたはＲであり、Ｘ２が、ＳまたはＩであり、Ｘ３が、ＬまたはＦであり、Ｘ４が、ＳまたはＴであり、Ｘ５が、ＧまたはＥであり、Ｘ６が、ＱまたはＬであり、Ｘ７が、ＫまたはＲであり、Ｘ８が、Ｔ、Ａ、またはＳである、ＣＤＲ−Ｌ１、（ｅ）ＷＸ１ＳＴＲＸ２Ｓ（配列番号５８）を含む、ＣＤＲ−Ｌ２であって、Ｘ１が、ＡまたはＴであり、Ｘ２が、ＥまたはＤである、ＣＤＲ−Ｌ２、および（ｆ）ＱＮＸ２Ｘ３Ｘ４Ｘ５ＰＸ６Ｔ（配列番号１１７）を含む、ＣＤＲ−Ｌ３であって、Ｘ２が、Ｄ、Ｇ、Ｎ、またはＡであり、Ｘ３が、ＹまたはＦであり、Ｘ４が、Ｆ、Ｓ、Ｉ、またはＹであり、Ｘ５が、ＹまたはＦであり、Ｘ６が、ＬまたはＦである、ＣＤＲ−Ｌ３からなる群から選択される１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つの相補性決定領域（ＣＤＲ）配列を含む。
【００８１】
ある特定の実施形態では、本明細書において提供される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）ＧＸ１Ｘ２ＦＸ３Ｘ４Ｘ５Ｘ６Ｘ７Ｘ８（配列番号１１）を含む、ＣＤＲ−Ｈ１であって、Ｘ１が、ＦまたはＹであり、Ｘ２が、ＴまたはＳであり、Ｘ３が、ＴまたはＳであり、Ｘ４が、Ｄ、Ｇ、Ｖ、Ｎ、またはＳであり、Ｘ５が、Ｙ、Ｗ、またはＮであり、Ｘ６が、Ｇ、Ｎ、Ｓ、またはＡであり、Ｘ７が、ＭまたはＩであり、Ｘ８が、Ｆ、Ｈ、Ｓ、Ｙ、またはＮである、ＣＤＲ−Ｈ１、（ｂ）Ｘ１ＩＸ２Ｘ３Ｘ４Ｘ５Ｘ６Ｘ７Ｘ８Ｘ９Ｘ１０Ｘ１１Ｘ１２Ｘ１３Ｘ１４ＫＧ（配列番号３０）を含む、ＣＤＲ−Ｈ２であって、Ｘ１が、Ｙ、Ｅ、Ｔ、Ｈ、Ｎ、またはＦであり、Ｘ２が、Ｓ、Ｎ、Ｙ、またはＩであり、Ｘ３が、Ｓ、Ｐ、またはＩであり、Ｘ４が、Ｇ、Ｋ、Ｒ、またはＹであり、Ｘ５が、Ｓ、Ｇ、またはＹであり、Ｘ６が、Ｓ、Ｇ、Ｔ、Ｎ、またはＤであり、Ｘ７が、Ｎ、Ｔ、Ｙ、Ｓ、Ｉ、またはＰであり、Ｘ８が、Ｉ、Ｔ、またはＦであり、Ｘ９が、Ｙ、Ｈ、またはＮであり、Ｘ１０が、ＹまたはＣであり、Ｘ１１が、Ａ、Ｎ、Ｐ、Ｔ、またはＶであり、Ｘ１２が、Ｄ、Ｑ、またはＥであり、Ｘ１３が、Ｔ、Ｋ、Ｓ、またはＲであり、Ｘ１４が、Ｖ、Ｆ、Ｍ、またはＬである、ＣＤＲ−Ｈ２、（ｃ）Ｘ１Ｘ２Ｘ３ＧＮＸ４Ｘ５Ｘ６Ｙ（配列番号４３）を含む、ＣＤＲ−Ｈ３であって、Ｘ１が、Ｉ、Ｆ、Ｐ、Ａ、Ｑ、またはＨであり、Ｘ２が、Ａ、Ｙ、Ｖ、Ｔであり、Ｘ３が、ＲまたはＹであり、Ｘ４が、Ａ、Ｖ、Ｓ、またはＴであり、Ｘ５が、Ｍ、Ｌ、またはＦであり、Ｘ６が、ＤまたはＡである、ＣＤＲ−Ｈ３、（ｄ）ＫＳＸ１ＱＸ２ＬＸ３ＮＸ４Ｘ５ＮＸ６Ｘ７ＮＹＬＸ８（配列番号１１６）を含む、ＣＤＲ−Ｌ１であって、Ｘ１が、ＳまたはＲであり、Ｘ２が、ＳまたはＩであり、Ｘ３が、ＬまたはＦであり、Ｘ４が、ＳまたはＴであり、Ｘ５が、ＧまたはＥであり、Ｘ６が、ＱまたはＬであり、Ｘ７が、ＫまたはＲであり、Ｘ８が、Ｔ、Ａ、またはＳである、ＣＤＲ−Ｌ１、（ｅ）ＷＸ１ＳＴＲＸ２Ｓ（配列番号５８）を含む、ＣＤＲ−Ｌ２であって、Ｘ１が、ＡまたはＴであり、Ｘ２が、ＥまたはＤである、ＣＤＲ−Ｌ２、および（ｆ）ＱＮＸ２Ｘ３Ｘ４Ｘ５ＰＸ６Ｔ（配列番号１１７）を含む、ＣＤＲ−Ｌ３であって、Ｘ２が、Ｄ、Ｇ、Ｎ、またはＡであり、Ｘ３が、ＹまたはＦであり、Ｘ４が、Ｆ、Ｓ、Ｉ、またはＹであり、Ｘ５が、ＹまたはＦであり、Ｘ６が、ＬまたはＦである、ＣＤＲ−Ｌ３を含む。
【００８２】
ある特定の実施形態では、本明細書において提供される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）ＧＸ１Ｘ２ＦＸ３Ｘ４Ｘ５Ｘ６Ｘ７Ｘ８（配列番号１１）を含む、ＣＤＲ−Ｈ１であって、Ｘ１が、ＦまたはＹであり、Ｘ２が、ＴまたはＳであり、Ｘ３が、ＴまたはＳであり、Ｘ４が、Ｄ、Ｇ、Ｖ、Ｎ、またはＳであり、Ｘ５が、Ｙ、Ｗ、またはＮであり、Ｘ６が、Ｇ、Ｎ、Ｓ、またはＡであり、Ｘ７が、ＭまたはＩであり、Ｘ８が、Ｆ、Ｈ、Ｓ、Ｙ、またはＮである、ＣＤＲ−Ｈ１、（ｂ）Ｘ１ＩＸ２Ｘ３Ｘ４Ｘ５Ｘ６Ｘ７Ｘ８Ｘ９Ｘ１０Ｘ１１Ｘ１２Ｘ１３Ｘ１４ＫＧ（配列番号３０）を含む、ＣＤＲ−Ｈ２であって、Ｘ１が、Ｙ、Ｅ、Ｔ、Ｈ、またはＮであり、Ｘ２が、Ｓ、Ｎ、Ｄ、Ｙ、またはＩであり、Ｘ３が、Ｓ、Ｐ、またはＩであり、Ｘ４が、Ｇ、Ｎ、Ｋ、Ｒ、またはＹであり、Ｘ５が、Ｓ、Ｎ、Ｇ、またはＹであり、Ｘ６が、Ｓ、Ｇ、Ｔ、Ｎ、またはＤであり、Ｘ７が、Ｎ、Ｔ、Ｖ、Ｙ、Ｉ、またはＰであり、Ｘ８が、Ｉ、Ｔ、またはＦであり、Ｘ９が、Ｙ、Ｈ、またはＮであり、Ｘ１０が、ＹまたはＳであり、Ｘ１１が、Ａ、Ｎ、Ｐ、Ｔ、またはＶであり、Ｘ１２が、Ｄ、Ｑ、またはＥであり、Ｘ１３が、Ｔ、Ｋ、Ｓ、またはＲであり、Ｘ１４が、Ｖ、Ｆ、Ｍ、またはＬである、ＣＤＲ−Ｈ２、（ｃ）Ｘ１Ｘ２Ｘ３ＧＮＸ４Ｘ５Ｘ６Ｙ（配列番号４３）を含む、ＣＤＲ−Ｈ３であって、Ｘ１が、Ｉ、Ｆ、Ｐ、Ａ、Ｑ、またはＨであり、Ｘ２が、Ａ、Ｙ、Ｖ、Ｔであり、Ｘ３が、ＲまたはＹであり、Ｘ４が、Ａ、Ｖ、Ｓ、またはＴであり、Ｘ５が、Ｍ、Ｌ、またはＦであり、Ｘ６が、ＤまたはＡである、ＣＤＲ−Ｈ３、（ｄ）Ｘ１ＳＸ２ＱＸ３ＬＸ４ＮＸ５Ｘ６ＮＸ７Ｘ８ＮＹＬＸ９（配列番号５４）を含む、ＣＤＲ−Ｌ１であって、Ｘ１が、ＫまたはＲであり、Ｘ２が、ＳまたはＲであり、Ｘ３が、ＳまたはＩであり、Ｘ４が、ＬまたはＦであり、Ｘ５が、ＳまたはＴであり、Ｘ６が、ＧまたはＥであり、Ｘ７が、ＱまたはＬであり、Ｘ８が、ＫまたはＲであり、Ｘ９が、Ｔ、Ａ、またはＳである、ＣＤＲ−Ｌ１、（ｅ）ＷＸ１ＳＴＲＸ２Ｓ（配列番号５８）を含む、ＣＤＲ−Ｌ２であって、Ｘ１が、ＡまたはＴであり、Ｘ２が、ＥまたはＤである、ＣＤＲ−Ｌ２、（ｆ）ＱＸ１Ｘ２Ｘ３Ｘ４Ｘ５ＰＸ６Ｘ７（配列番号７１）を含む、ＣＤＲ−Ｌ３であって、Ｘ１が、ＮまたはＤであり、Ｘ２が、Ｄ、Ｇ、Ｎ、またはＡであり、Ｘ３が、ＹまたはＦであり、Ｘ４が、Ｆ、Ｓ、Ｉ、またはＹであり、Ｘ５が、ＹまたはＦであり、Ｘ６が、ＬまたはＦであり、Ｘ７は、ＴまたはＰである、ＣＤＲ−Ｌ３からなる群から選択される１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つの相補性決定領域（ＣＤＲ）配列を含む。
【００８３】
ある特定の実施形態では、本明細書において提供される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）ＧＸ１Ｘ２ＦＸ３Ｘ４Ｘ５Ｘ６Ｘ７Ｘ８（配列番号１１）を含む、ＣＤＲ−Ｈ１であって、Ｘ１が、ＦまたはＹであり、Ｘ２が、ＴまたはＳであり、Ｘ３が、ＴまたはＳであり、Ｘ４が、Ｄ、Ｇ、Ｖ、Ｎ、またはＳであり、Ｘ５が、Ｙ、Ｗ、またはＮであり、Ｘ６が、Ｇ、Ｎ、Ｓ、またはＡであり、Ｘ７が、ＭまたはＩであり、Ｘ８が、Ｆ、Ｈ、Ｓ、Ｙ、またはＮである、ＣＤＲ−Ｈ１、（ｂ）Ｘ１ＩＸ２Ｘ３Ｘ４Ｘ５Ｘ６Ｘ７Ｘ８Ｘ９Ｘ１０Ｘ１１Ｘ１２Ｘ１３Ｘ１４ＫＧ（配列番号３０）を含む、ＣＤＲ−Ｈ２であって、Ｘ１が、Ｙ、Ｅ、Ｔ、Ｈ、またはＮであり、Ｘ２が、Ｓ、Ｎ、Ｄ、Ｙ、またはＩであり、Ｘ３が、Ｓ、Ｐ、またはＩであり、Ｘ４が、Ｇ、Ｎ、Ｋ、Ｒ、またはＹであり、Ｘ５が、Ｓ、Ｎ、Ｇ、またはＹであり、Ｘ６が、Ｓ、Ｇ、Ｔ、Ｎ、またはＤであり、Ｘ７が、Ｎ、Ｔ、Ｖ、Ｙ、Ｉ、またはＰであり、Ｘ８が、Ｉ、Ｔ、またはＦであり、Ｘ９が、Ｙ、Ｈ、またはＮであり、Ｘ１０が、ＹまたはＳであり、Ｘ１１が、Ａ、Ｎ、Ｐ、Ｔ、またはＶであり、Ｘ１２が、Ｄ、Ｑ、またはＥであり、Ｘ１３が、Ｔ、Ｋ、Ｓ、またはＲであり、Ｘ１４が、Ｖ、Ｆ、Ｍ、またはＬである、ＣＤＲ−Ｈ２、（ｃ）Ｘ１Ｘ２Ｘ３ＧＮＸ４Ｘ５Ｘ６Ｙ（配列番号４３）を含む、ＣＤＲ−Ｈ３であって、Ｘ１が、Ｉ、Ｆ、Ｐ、Ａ、Ｑ、またはＨであり、Ｘ２が、Ａ、Ｙ、Ｖ、Ｔであり、Ｘ３が、ＲまたはＹであり、Ｘ４が、Ａ、Ｖ、Ｓ、またはＴであり、Ｘ５が、Ｍ、Ｌ、またはＦであり、Ｘ６が、ＤまたはＡである、ＣＤＲ−Ｈ３、（ｄ）Ｘ１ＳＸ２ＱＸ３ＬＸ４ＮＸ５Ｘ６ＮＸ７Ｘ８ＮＹＬＸ９（配列番号５４）を含む、ＣＤＲ−Ｌ１であって、Ｘ１が、ＫまたはＲであり、Ｘ２が、ＳまたはＲであり、Ｘ３が、ＳまたはＩであり、Ｘ４が、ＬまたはＦであり、Ｘ５が、ＳまたはＴであり、Ｘ６が、ＧまたはＥであり、Ｘ７が、ＱまたはＬであり、Ｘ８が、ＫまたはＲであり、Ｘ９が、Ｔ、Ａ、またはＳである、ＣＤＲ−Ｌ１、（ｅ）ＷＸ１ＳＴＲＸ２Ｓ（配列番号５８）を含む、ＣＤＲ−Ｌ２であって、Ｘ１が、ＡまたはＴであり、Ｘ２が、ＥまたはＤである、ＣＤＲ−Ｌ２、（ｆ）ＱＸ１Ｘ２Ｘ３Ｘ４Ｘ５ＰＸ６Ｘ７（配列番号７１）を含む、ＣＤＲ−Ｌ３であって、Ｘ１が、ＮまたはＤであり、Ｘ２が、Ｄ、Ｇ、Ｎ、またはＡであり、Ｘ３が、ＹまたはＦであり、Ｘ４が、Ｆ、Ｓ、Ｉ、またはＹであり、Ｘ５が、ＹまたはＦであり、Ｘ６が、ＬまたはＦであり、Ｘ７は、ＴまたはＰである、ＣＤＲ−Ｌ３を含む。
【００８４】
ある特定の実施形態では、本明細書において提供される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）ＧＸ１Ｘ２ＦＸ３Ｘ４Ｘ５Ｘ６Ｘ７Ｘ８（配列番号１１）を含む、ＣＤＲ−Ｈ１であって、Ｘ１が、ＦまたはＹであり、Ｘ２が、ＴまたはＳであり、Ｘ３が、ＴまたはＳであり、Ｘ４が、Ｄ、Ｇ、Ｖ、Ｎ、またはＳであり、Ｘ５が、Ｙ、Ｗ、またはＮであり、Ｘ６が、Ｇ、Ｎ、Ｓ、またはＡであり、Ｘ７が、ＭまたはＩであり、Ｘ８が、Ｆ、Ｈ、Ｓ、Ｙ、またはＮである、ＣＤＲ−Ｈ１、（ｂ）Ｘ１ＩＸ２Ｘ３Ｘ４Ｘ５Ｘ６Ｘ７Ｘ８Ｘ９ＹＸ１０Ｘ１１Ｘ１２Ｘ１３ＫＧ（配列番号１１８）を含む、ＣＤＲ−Ｈ２であって、Ｘ１が、Ｙ、Ｅ、Ｔ、Ｈ、またはＮであり、Ｘ２が、Ｓ、Ｎ、Ｙ、またはＩであり、Ｘ３が、Ｓ、Ｐ、またはＩであり、Ｘ４が、Ｇ、Ｋ、Ｒ、またはＹであり、Ｘ５が、Ｓ、Ｇ、またはＹであり、Ｘ６が、Ｓ、Ｇ、Ｔ、Ｎ、またはＤであり、Ｘ７が、Ｎ、Ｔ、Ｙ、Ｉ、またはＰであり、Ｘ８が、Ｉ、Ｔ、またはＦであり、Ｘ９が、Ｙ、Ｈ、またはＮであり、Ｘ１０が、Ａ、Ｎ、Ｐ、Ｔ、またはＶであり、Ｘ１１が、Ｄ、Ｑ、またはＥであり、Ｘ１２が、Ｔ、Ｋ、Ｓ、またはＲであり、Ｘ１３が、Ｖ、Ｆ、Ｍ、またはＬである、ＣＤＲ−Ｈ２、（ｃ）Ｘ１Ｘ２Ｘ３ＧＮＸ４Ｘ５Ｘ６Ｙ（配列番号４３）を含む、ＣＤＲ−Ｈ３であって、Ｘ１が、Ｉ、Ｆ、Ａ、Ｑ、またはＨであり、Ｘ２が、Ａ、Ｙ、Ｖ、Ｔであり、Ｘ３が、ＲまたはＹであり、Ｘ４が、Ａ、Ｓ、またはＴであり、Ｘ５が、Ｍ、Ｌ、またはＦであり、Ｘ６が、ＤまたはＡである、ＣＤＲ−Ｈ３、（ｄ）ＫＳＸ１ＱＸ２ＬＸ３ＮＸ４Ｘ５ＮＱＸ６ＮＹＬＸ７（配列番号１１９）を含む、ＣＤＲ−Ｌ１であって、Ｘ１が、ＳまたはＲであり、Ｘ２が、ＳまたはＩであり、Ｘ３が、ＬまたはＦであり、Ｘ４が、ＳまたはＴであり、Ｘ５が、ＧまたはＥであり、Ｘ６が、ＫまたはＲであり、Ｘ７が、Ｔ、Ａ、またはＳである、ＣＤＲ−Ｌ１、（ｅ）ＷＸ１ＳＴＲＸ２Ｓ（配列番号５８）を含む、ＣＤＲ−Ｌ２であって、Ｘ１が、ＡまたはＴであり、Ｘ２が、ＥまたはＤである、ＣＤＲ−Ｌ２、および（ｆ）ＱＮＸ１Ｘ２Ｘ３Ｘ４ＰＸ５Ｔ（配列番号１２０）を含む、ＣＤＲ−Ｌ３であって、Ｘ１が、Ｄ、Ｇ、Ｎ、またはＡであり、Ｘ２が、ＹまたはＦであり、Ｘ３が、Ｆ、Ｓ、Ｉ、またはＹであり、Ｘ４が、ＹまたはＦであり、Ｘ５が、ＬまたはＦである、ＣＤＲ−Ｌ３からなる群から選択される１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つの相補性決定領域（ＣＤＲ）配列を含む。
【００８５】
ある特定の実施形態では、本明細書において提供される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）ＧＸ１Ｘ２ＦＸ３Ｘ４Ｘ５Ｘ６Ｘ７Ｘ８（配列番号１１）を含む、ＣＤＲ−Ｈ１であって、Ｘ１が、ＦまたはＹであり、Ｘ２が、ＴまたはＳであり、Ｘ３が、ＴまたはＳであり、Ｘ４が、Ｄ、Ｇ、Ｖ、Ｎ、またはＳであり、Ｘ５が、Ｙ、Ｗ、またはＮであり、Ｘ６が、Ｇ、Ｎ、Ｓ、またはＡであり、Ｘ７が、ＭまたはＩであり、Ｘ８が、Ｆ、Ｈ、Ｓ、Ｙ、またはＮである、ＣＤＲ−Ｈ１、（ｂ）Ｘ１ＩＸ２Ｘ３Ｘ４Ｘ５Ｘ６Ｘ７Ｘ８Ｘ９ＹＸ１０Ｘ１１Ｘ１２Ｘ１３ＫＧ（配列番号１１８）を含む、ＣＤＲ−Ｈ２であって、Ｘ１が、Ｙ、Ｅ、Ｔ、Ｈ、またはＮであり、Ｘ２が、Ｓ、Ｎ、Ｙ、またはＩであり、Ｘ３が、Ｓ、Ｐ、またはＩであり、Ｘ４が、Ｇ、Ｋ、Ｒ、またはＹであり、Ｘ５が、Ｓ、Ｇ、またはＹであり、Ｘ６が、Ｓ、Ｇ、Ｔ、Ｎ、またはＤであり、Ｘ７が、Ｎ、Ｔ、Ｙ、Ｉ、またはＰであり、Ｘ８が、Ｉ、Ｔ、またはＦであり、Ｘ９が、Ｙ、Ｈ、またはＮであり、Ｘ１０が、Ａ、Ｎ、Ｐ、Ｔ、またはＶであり、Ｘ１１が、Ｄ、Ｑ、またはＥであり、Ｘ１２が、Ｔ、Ｋ、Ｓ、またはＲであり、Ｘ１３が、Ｖ、Ｆ、Ｍ、またはＬである、ＣＤＲ−Ｈ２、（ｃ）Ｘ１Ｘ２Ｘ３ＧＮＸ４Ｘ５Ｘ６Ｙ（配列番号４３）を含む、ＣＤＲ−Ｈ３であって、Ｘ１が、Ｉ、Ｆ、Ａ、Ｑ、またはＨであり、Ｘ２が、Ａ、Ｙ、Ｖ、Ｔであり、Ｘ３が、ＲまたはＹであり、Ｘ４が、Ａ、Ｓ、またはＴであり、Ｘ５が、Ｍ、Ｌ、またはＦであり、Ｘ６が、ＤまたはＡである、ＣＤＲ−Ｈ３、（ｄ）ＫＳＸ１ＱＸ２ＬＸ３ＮＸ４Ｘ５ＮＱＸ６ＮＹＬＸ７（配列番号１１９）を含む、ＣＤＲ−Ｌ１であって、Ｘ１が、ＳまたはＲであり、Ｘ２が、ＳまたはＩであり、Ｘ３が、ＬまたはＦであり、Ｘ４が、ＳまたはＴであり、Ｘ５が、ＧまたはＥであり、Ｘ６が、ＫまたはＲであり、Ｘ７が、Ｔ、Ａ、またはＳである、ＣＤＲ−Ｌ１、（ｅ）ＷＸ１ＳＴＲＸ２Ｓ（配列番号５８）を含む、ＣＤＲ−Ｌ２であって、Ｘ１が、ＡまたはＴであり、Ｘ２が、ＥまたはＤである、ＣＤＲ−Ｌ２、および（ｆ）ＱＮＸ１Ｘ２Ｘ３Ｘ４ＰＸ５Ｔ（配列番号１２０）を含む、ＣＤＲ−Ｌ３であって、Ｘ１が、Ｄ、Ｇ、Ｎ、またはＡであり、Ｘ２が、ＹまたはＦであり、Ｘ３が、Ｆ、Ｓ、Ｉ、またはＹであり、Ｘ４が、ＹまたはＦであり、Ｘ５が、ＬまたはＦである、ＣＤＲ−Ｌ３を含む。
【００８６】
ある特定の実施形態では、ＣＬＤＮ１８．２に特異的に結合する、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）であって、ＣＬＤＮ１８．２への結合に関して、（ａ）配列番号１〜１０のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）配列番号１２〜２９のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）配列番号３１〜４２のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）配列番号４４〜５３のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）配列番号５５〜５７のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）配列番号５９〜７０のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｌ３とを含む、第２の抗ＣＬＤＮ１８．２抗体と競合する、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）が、提供される。
【００８７】
ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）であって、（ａ）配列番号１〜１０のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）配列番号１２〜２９のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）配列番号３１〜４２のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）配列番号４４〜５３のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）配列番号５５〜５７のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）配列番号５９〜７０のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｌ３とを含む、第２の抗ＣＬＤＮ１８．２抗体と同じＣＬＤＮ１８．２のエピトープに特異的に結合する、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）が、提供される。
【００８８】
ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）配列番号１〜１０のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ１、（ｂ）配列番号１２〜２９のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ２、（ｃ）配列番号３１〜４２のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ３、（ｄ）配列番号４４〜５３のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ１、（ｅ）配列番号５５〜５７のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ２、および（ｆ）配列番号５９〜７０のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ３からなる群から選択される１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つの相補性決定領域（ＣＤＲ）配列を含む。
【００８９】
ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）配列番号１〜１０のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ１、（ｂ）配列番号１２〜２９のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ２、（ｃ）配列番号３１〜４２のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ３、（ｄ）配列番号４４〜５３のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ１、（ｅ）配列番号５５〜５７のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ２、および（ｆ）配列番号５９〜７０のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ３を含む。
【００９０】
ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号３１〜４２のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｈ３、および／または配列番号５９〜７０のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｌ３を含む。
【００９１】
ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）配列番号１〜１０のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）配列番号１２〜２９のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）配列番号３１〜４２のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）配列番号４４〜５３のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）配列番号５５〜５７のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）配列番号５９〜７０のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｌ３とからなる群から選択される１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つの相補性決定領域（ＣＤＲ）配列を含む。
【００９２】
ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）配列番号１〜１０のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）配列番号１２〜２９のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）配列番号３１〜４２のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）配列番号４４〜５３のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）配列番号５５〜５７のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）配列番号５９〜７０のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｌ３とを含む。
【００９３】
ある特定の実施形態では、本明細書において提供される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）ＧＦＸ１ＦＳＤＹＧＭＸ２（配列番号１２１）を含む、ＣＤＲ−Ｈ１であって、Ｘ１が、ＴまたはＳであり、Ｘ２が、ＨまたはＹである、ＣＤＲ−Ｈ１、（ｂ）Ｘ１ＩＳＳＧＳＳＸ２ＩＹＸ３ＡＤＴＸ４ＫＧ（配列番号１２２）を含む、ＣＤＲ−Ｈ２であって、Ｘ１が、Ｙ、Ｈ、またはＦであり、Ｘ２が、ＳまたはＴであり、Ｘ３が、ＹまたはＣであり、Ｘ４が、ＶまたはＭである、ＣＤＲ−Ｈ２、（ｃ）Ｘ１ＡＲＧＮＸ４ＭＤＹ（配列番号１２３）を含む、ＣＤＲ−Ｈ３であって、Ｘ１が、ＩまたはＦであり、Ｘ４が、ＴまたはＡである、ＣＤＲ−Ｈ３、（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＸ１Ｘ２ＮＹＬＸ３（配列番号１２４）を含む、ＣＤＲ−Ｌ１であって、Ｘ１が、ＱまたはＬであり、Ｘ２が、ＲまたはＫであり、Ｘ３が、ＴまたはＡである、ＣＤＲ−Ｌ１、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）を含む、ＣＤＲ−Ｌ２、および（ｆ）ＱＮＸ１ＹＸ２ＹＰＬＴ（配列番号１２５）を含む、ＣＤＲ−Ｌ３であって、Ｘ１が、ＧまたはＤであり、Ｘ２が、ＳまたはＦである、ＣＤＲ−Ｌ３からなる群から選択される１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つの相補性決定領域（ＣＤＲ）配列を含む。
【００９４】
ある特定の実施形態では、本明細書において提供される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）ＧＦＸ１ＦＳＤＹＧＭＸ２（配列番号１２１）を含む、ＣＤＲ−Ｈ１であって、Ｘ１が、ＴまたはＳであり、Ｘ２が、ＨまたはＹである、ＣＤＲ−Ｈ１、（ｂ）Ｘ１ＩＳＳＧＳＳＸ２ＩＹＸ３ＡＤＴＸ４ＫＧ（配列番号１２２）を含む、ＣＤＲ−Ｈ２であって、Ｘ１が、Ｙ、Ｈ、またはＦであり、Ｘ２が、ＳまたはＴであり、Ｘ３が、ＹまたはＣであり、Ｘ４が、ＶまたはＭである、ＣＤＲ−Ｈ２、（ｃ）Ｘ１ＡＲＧＮＸ４ＭＤＹ（配列番号１２３）を含む、ＣＤＲ−Ｈ３であって、Ｘ１が、ＩまたはＦであり、Ｘ４が、ＴまたはＡである、ＣＤＲ−Ｈ３、（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＸ１Ｘ２ＮＹＬＸ３（配列番号１２４）を含む、ＣＤＲ−Ｌ１であって、Ｘ１が、ＱまたはＬであり、Ｘ２が、ＲまたはＫであり、Ｘ３が、ＴまたはＡである、ＣＤＲ−Ｌ１、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）を含む、ＣＤＲ−Ｌ２、および（ｆ）ＱＮＸ１ＹＸ２ＹＰＬＴ（配列番号１２５）を含む、ＣＤＲ−Ｌ３であって、Ｘ１が、ＧまたはＤであり、Ｘ２が、ＳまたはＦである、ＣＤＲ−Ｌ３を含む。
【００９５】
ある特定の実施形態では、ＣＬＤＮ１８．２に特異的に結合する、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）であって、ＣＬＤＮ１８．２への結合に関して、（ａ）配列番号２、７、および６のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）配列番号１７、２２、および２９のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）配列番号３１または３７に記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）配列番号４４、４８、および５３のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）配列番号５５に記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）配列番号５９、６０、および６４のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｌ３とを含む、第２の抗ＣＬＤＮ１８．２抗体と競合する、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）が、提供される。
【００９６】
ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）であって、（ａ）配列番号２、７、および６のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）配列番号１７、２２、および２９のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）配列番号３１または３７に記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）配列番号４４、４８、および５３のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）配列番号５５に記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）配列番号５９、６０、および６４のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｌ３とを含む、第２の抗ＣＬＤＮ１８．２抗体と同じＣＬＤＮ１８．２のエピトープに特異的に結合する、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）が、提供される。
【００９７】
ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）配列番号２、７、および６のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ１、（ｂ）配列番号１７、２２、および２９のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ２、（ｃ）配列番号３１もしくは３７に記載されるアミノ酸配列、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ３、（ｄ）配列番号４４、４８、および５３のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ１、（ｅ）配列番号５５に記載されるアミノ酸配列、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ２、ならびに（ｆ）配列番号５９、６０、および６４のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ３からなる群から選択される１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つの相補性決定領域（ＣＤＲ）配列を含む。
【００９８】
ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）配列番号２、７、および６のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ１、（ｂ）配列番号１７、２２、および２９のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ２、（ｃ）配列番号３１もしくは３７に記載されるアミノ酸配列、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ３、（ｄ）配列番号４４、４８、および５３のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ１、（ｅ）配列番号５５に記載されるアミノ酸配列、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ２、ならびに（ｆ）配列番号５９、６０、および６４のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ３を含む。
【００９９】
ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号３１もしくは３７に記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｈ３、ならびに／または配列番号５９、６０、および６４のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｌ３を含む。
【０１００】
ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）配列番号２、７、および６のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）配列番号１７、２２、および２９のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）配列番号３１または３７に記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）配列番号４４、４８、および５３のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）配列番号５５に記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）配列番号５９、６０、および６４のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｌ３とからなる群から選択される１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つの相補性決定領域（ＣＤＲ）配列を含む。
【０１０１】
ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）配列番号２、７、および６のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）配列番号１７、２２、および２９のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）配列番号３１または３７に記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）配列番号４４、４８、および５３のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）配列番号５５に記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）配列番号５９、６０、および６４のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｌ３とを含む。
【０１０２】
ある特定の実施形態では、本明細書において提供される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体は、４つのアミノ酸、４つを下回るアミノ酸、または３つのアミノ酸を含む（たとえば、それからなる）ＣＤＲ−Ｈ３を含む。一部の実施形態では、４つのアミノ酸、４つを下回るアミノ酸、または３つのアミノ酸を含む（たとえば、それからなる）ＣＤＲ−Ｈ３を含む、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体は、ＣＬＤＮ１８．１およびＣＬＤＮ１８．２に特異的に結合する。
【０１０３】
ある特定の実施形態では、本明細書において提供される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）ＧＹＴＦＸ１Ｘ２ＹＸ３Ｘ４Ｈ（配列番号１３９）を含む、ＣＤＲ−Ｈ１であって、Ｘ１が、ＴまたはＩであり、Ｘ２が、ＳまたはＮであり、Ｘ３が、ＬまたはＶであり、Ｘ４が、ＩまたはＭである、ＣＤＲ−Ｈ１、（ｂ）ＹＩＮＰＸ１Ｘ２ＤＧＴＫＹＮＥＫＦＫＧ（配列番号１４０）を含む、ＣＤＲ−Ｈ２であって、Ｘ１が、ＹまたはＦであり、Ｘ２が、ＮまたはＤである、ＣＤＲ−Ｈ２、（ｃ）４つのアミノ酸、４つを下回るアミノ酸、または３つのアミノ酸を含む（たとえば、それからなる）、ＣＤＲ−Ｈ３、（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号４４）を含む、ＣＤＲ−Ｌ１、（ｅ）ＷＡＳＸ１ＲＸ２Ｓ（配列番号１４１）を含む、ＣＤＲ−Ｌ２であって、Ｘ１が、ＴまたはＩであり、Ｘ２が、ＡまたはＤである、ＣＤＲ−Ｌ２、および（ｆ）ＬＮＤＹＳＦＰＬＴ（配列番号１３１）を含む、ＣＤＲ−Ｌ３からなる群から選択される１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つの相補性決定領域（ＣＤＲ）配列を含む。一部の実施形態では、ＣＤＲ−Ｈ３は、ＧＤＸ１を含み（たとえば、それからなり）、ここで、Ｘ１は、ＦまたはＹである。ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体は、ＣＬＤＮ１８．１に特異的に結合する。
【０１０４】
ある特定の実施形態では、本明細書において提供される抗ＣＬＤＮ抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）ＧＹＴＦＸ１Ｘ２ＹＸ３Ｘ４Ｈ（配列番号１３９）を含む、ＣＤＲ−Ｈ１であって、Ｘ１が、ＴまたはＩであり、Ｘ２が、ＳまたはＮであり、Ｘ３が、ＬまたはＶであり、Ｘ４が、ＩまたはＭである、ＣＤＲ−Ｈ１、（ｂ）ＹＩＮＰＸ１Ｘ２ＤＧＴＫＹＮＥＫＦＫＧ（配列番号１４０）を含む、ＣＤＲ−Ｈ２であって、Ｘ１が、ＹまたはＦであり、Ｘ２が、ＮまたはＤである、ＣＤＲ−Ｈ２、（ｃ）４つのアミノ酸、４つを下回るアミノ酸、または３つのアミノ酸を含む（たとえば、それからなる）、ＣＤＲ−Ｈ３、（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号４４）を含む、ＣＤＲ−Ｌ１、（ｅ）ＷＡＳＸ１ＲＸ２Ｓ（配列番号１４１）を含む、ＣＤＲ−Ｌ２であって、Ｘ１が、ＴまたはＩであり、Ｘ２が、ＡまたはＤである、ＣＤＲ−Ｌ２、および（ｆ）ＬＮＤＹＳＦＰＬＴ（配列番号１３１）を含む、ＣＤＲ−Ｌ３を含む。一部の実施形態では、ＣＤＲ−Ｈ３は、ＧＤＸ１を含み（たとえば、それからなり）、ここで、Ｘ１は、ＦまたはＹである。ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体は、ＣＬＤＮ１８．１に特異的に結合する。
【０１０５】
ある特定の実施形態では、ＣＬＤＮ１８．２に特異的に結合する、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）であって、ＣＬＤＮ１８．２への結合に関して、（ａ）配列番号１２８または１３２に記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）配列番号１２９または１３３に記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）４つのアミノ酸、４つを下回るアミノ酸、または３つのアミノ酸を含む（たとえば、それからなる）、ＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）配列番号４４に記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）配列番号１３０または１３４に記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）配列番号１３１に記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｌ３とを含む、第２の抗ＣＬＤＮ１８．２抗体と競合する、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）が、提供される。一部の実施形態では、ＣＤＲ−Ｈ３は、ＧＤＸ１を含み（たとえば、それからなり）、ここで、Ｘ１は、ＦまたはＹである。ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体は、ＣＬＤＮ１８．１に特異的に結合する。
【０１０６】
ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）であって、（ａ）配列番号１２８または１３２に記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）配列番号１２９または１３３に記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）４つのアミノ酸、４つを下回るアミノ酸、または３つのアミノ酸を含む（たとえば、それからなる）、ＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）配列番号４４に記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）配列番号１３０または１３４に記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）配列番号１３１に記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｌ３とを含む、第２の抗ＣＬＤＮ１８．２抗体と同じＣＬＤＮ１８．２のエピトープに特異的に結合する、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）が、提供される。一部の実施形態では、ＣＤＲ−Ｈ３は、ＧＤＸ１を含み（たとえば、それからなり）、ここで、Ｘ１は、ＦまたはＹである。ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体は、ＣＬＤＮ１８．１に特異的に結合する。
【０１０７】
ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）配列番号１２８もしくは１３２に記載されるアミノ酸配列、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ１、（ｂ）配列番号１２９もしくは１３３に記載されるアミノ酸配列、または最大で約５つ（たとえば、約１、２、３、４、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ２、（ｃ）４つのアミノ酸、４つを下回るアミノ酸、または３つのアミノ酸を含む（たとえば、それからなる）ＣＤＲ−Ｈ３、（ｄ）配列番号４４に記載されるアミノ酸配列、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ１、（ｅ）配列番号１３０もしくは１３４に記載されるアミノ酸配列、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ２、および（ｆ）配列番号１３１に記載されるアミノ酸配列、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ３からなる群から選択される１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つの相補性決定領域（ＣＤＲ）配列を含む。一部の実施形態では、ＣＤＲ−Ｈ３は、ＧＤＸ１を含み（たとえば、それからなり）、ここで、Ｘ１は、ＦまたはＹである。ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体は、ＣＬＤＮ１８．１に特異的に結合する。
【０１０８】
ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）配列番号１２８もしくは１３２に記載されるアミノ酸配列、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ１、（ｂ）配列番号１２９もしくは１３３に記載されるアミノ酸配列、または最大で約５つ（たとえば、約１、２、３、４、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ２、（ｃ）４つのアミノ酸、４つを下回るアミノ酸、または３つのアミノ酸を含む（たとえば、それからなる）ＣＤＲ−Ｈ３、（ｄ）配列番号４４に記載されるアミノ酸配列、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ１、（ｅ）配列番号１３０もしくは１３４に記載されるアミノ酸配列、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ２、および（ｆ）配列番号１３１に記載されるアミノ酸配列、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ３を含む。一部の実施形態では、ＣＤＲ−Ｈ３は、ＧＤＸ１を含み（たとえば、それからなり）、ここで、Ｘ１は、ＦまたはＹである。ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体は、ＣＬＤＮ１８．１に特異的に結合する。
【０１０９】
ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、４つのアミノ酸、４つを下回るアミノ酸、もしくは３つのアミノ酸を含む（たとえば、それからなる）、ＣＤＲ−Ｈ３、および／または５９〜７０のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｌ３を含む。一部の実施形態では、ＣＤＲ−Ｈ３は、ＧＤＸ１を含み（たとえば、それからなり）、ここで、Ｘ１は、ＦまたはＹである。ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体は、ＣＬＤＮ１８．１に特異的に結合する。
【０１１０】
ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）配列番号１２８または１３２に記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｈ１、（ｂ）配列番号１２９または１３３に記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｈ２、（ｃ）アミノ酸配列ＧＤＦまたはＧＤＹを含む、ＣＤＲ−Ｈ３、（ｄ）配列番号４４に記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｌ１、（ｅ）配列番号１３０または１３４に記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｌ２、および（ｆ）配列番号１３１に記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｌ３からなる群から選択される１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つの相補性決定領域（ＣＤＲ）配列を含む。ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体は、ＣＬＤＮ１８．１に特異的に結合する。
【０１１１】
ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）配列番号１２８または１３２に記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）配列番号１２９または１３３に記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）アミノ酸配列ＧＤＦまたはＧＤＹを含む、ＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）配列番号４４に記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）配列番号１３０または１３４に記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）配列番号１３１に記載されるアミノ酸配列を含む、ＣＤＲ−Ｌ３とを含む。ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体は、ＣＬＤＮ１８．１に特異的に結合する。
【０１１２】
配列番号１〜１０、１１〜２９、３１〜４２、４４〜５３、５５〜５７、５９〜７０、および１２８〜１３４のアミノ酸配列を、以下の表１に提供する。
【表１】
2021515583.tif 000006
【０１１３】
一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号７２〜９３および１３５〜１３６のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列に少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％同一であるアミノ酸配列を含む、重鎖可変ドメイン（ＶＨ）、および／または配列番号９４〜１１５および１３７〜１３８のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列に少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％同一であるアミノ酸配列を含む、軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号７２〜９３および１３５〜１３６のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列に少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む、重鎖可変ドメイン（ＶＨ）、ならびに配列番号９４〜１１５および１３７〜１３８のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列に少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む、軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む。配列番号７２〜１１５のアミノ酸配列を、以下の表２に提供する。
【表２−１】
2021515583.tif 000007
【表２−２】
2021515583.tif 000008
【表２−３】
2021515583.tif 000009
【０１１４】
一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号７２〜９３および１３５〜１３６のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列に少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％同一であるアミノ酸配列を含む、重鎖可変ドメイン（ＶＨ）の１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲ、または配列番号９４〜１１５および１３７〜１３８のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列に少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％同一であるアミノ酸配列を含む、軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）の１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号７２〜９３および１３５〜１３６のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列に少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む、重鎖可変ドメイン（ＶＨ）、ならびに配列番号９４〜１１５および１３７〜１３８のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列に少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む、軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）の１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つのＣＤＲを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号７２〜９３のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列に少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む、重鎖可変ドメイン（ＶＨ）、および配列番号９４〜１１５のうちのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列に少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む、軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）の６つのＣＤＲを含む。
【０１１５】
ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＦ（配列番号１）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＹＩＳＳＧＳＳＮＩＹＹＡＤＴＶＫＧ（配列番号１２）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＩＡＲＧＮＡＭＤＹ（配列番号３１）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号４４）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＤＹＦＹＰＬＴ（配列番号５９）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ３とを含む。ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、ＩＡＲＧＮＡＭＤＹ（配列番号３１）を含むＣＤＲ−Ｈ３、および／またはＱＮＤＹＦＹＰＬＴ（配列番号５９）を含むＣＤＲ−Ｌ３を含む。ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＦ（配列番号１）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＹＩＳＳＧＳＳＮＩＹＹＡＤＴＶＫＧ（配列番号１２）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＩＡＲＧＮＡＭＤＹ（配列番号３１）を含むＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号４４）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＤＹＦＹＰＬＴ（配列番号５９）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号７２に少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＨドメイン、および／または配列番号９４に少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＬドメインを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号７２を含むＶＨドメインの３つのＣＤＲ、および／または配列番号９４を含むＶＬドメインの３つのＣＤＲを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号７２を含むＶＨドメイン、および配列番号９４を含むＶＬドメインを含む。
【０１１６】
ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＨ（配列番号２）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＹＩＮＳＧＳＳＴＩＹＹＡＤＴＶＫＧ（配列番号１３）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＦＡＲＧＮＶＬＤＹ（配列番号３２）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）ＲＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＲＮＹＬＴ（配列番号４５）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＧＹＳＹＰＬＴ（配列番号６０）を含む、ＣＤＲ−Ｌ３とを含む。ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、ＦＡＲＧＮＶＬＤＹ（配列番号３２）を含むＣＤＲ−Ｈ３、および／またはＱＮＧＹＳＹＰＬＴ（配列番号６０）を含むＣＤＲ−Ｌ３を含む。ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＨ（配列番号２）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＹＩＮＳＧＳＳＴＩＹＹＡＤＴＶＫＧ（配列番号１３）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＦＡＲＧＮＶＬＤＹ（配列番号３２）を含むＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）ＲＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＲＮＹＬＴ（配列番号４５）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＧＹＳＹＰＬＴ（配列番号６０）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号７３に少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＨドメイン、および／または配列番号９５に少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＬドメインを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号７３を含むＶＨドメインの３つのＣＤＲ、および／または配列番号９５を含むＶＬドメインの３つのＣＤＲを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号７３を含むＶＨドメイン、および配列番号９５を含むＶＬドメインを含む。
【０１１７】
ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）ＧＹＳＦＴＧＹＮＩＨ（配列番号３）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＹＩＤＰＮＮＧＶＴＹＳＮＱＫＦＫＧ（配列番号１４）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＰＹＹＧＮＳＦＤＹ（配列番号３３）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＬＲＮＹＬＴ（配列番号４６）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＤＧＹＦＹＰＦＰ（配列番号６１）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む。ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、ＰＹＹＧＮＳＦＤＹ（配列番号３３）を含むＣＤＲ−Ｈ３、および／またはＱＤＧＹＦＹＰＦＰ（配列番号６１）を含むＣＤＲ−Ｌ３を含む。ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）ＧＹＳＦＴＧＹＮＩＨ（配列番号３）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＹＩＤＰＮＮＧＶＴＹＳＮＱＫＦＫＧ（配列番号１４）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、ＰＹＹＧＮＳＦＤＹ（配列番号３３）を含むＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＬＲＮＹＬＴ（配列番号４６）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＤＧＹＦＹＰＦＰ（配列番号６１）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号７４に少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＨドメイン、および／または配列番号９６に少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＬドメインを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号７４を含むＶＨドメインの３つのＣＤＲ、および／または配列番号９６を含むＶＬドメインの３つのＣＤＲを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号７４を含むＶＨドメイン、および配列番号９６を含むＶＬドメインを含む。
【０１１８】
ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）ＧＹＴＦＴＶＷＳＭＳ（配列番号４）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＥＩＹＰＫＳＧＮＴＨＹＮＥＫＦＫＧ（配列番号１５）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＡＹＹＧＮＳＦＡＹ（配列番号３４）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＲＮＹＬＴ（配列番号４７）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＤＦＩＹＰＦＴ（配列番号６２）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ３とを含む。ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、ＡＹＹＧＮＳＦＡＹ（配列番号３４）を含むＣＤＲ−Ｈ３、および／またはＱＮＤＦＩＹＰＦＴ（配列番号６２）を含むＣＤＲ−Ｌ３を含む。ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）ＧＹＴＦＴＶＷＳＭＳ（配列番号４）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＥＩＹＰＫＳＧＮＴＨＹＮＥＫＦＫＧ（配列番号１５）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＡＹＹＧＮＳＦＡＹ（配列番号３４）を含むＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＲＮＹＬＴ（配列番号４７）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＤＦＩＹＰＦＴ（配列番号６２）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号７５に少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＨドメイン、および／または配列番号９７に少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＬドメインを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号７５を含むＶＨドメインの３つのＣＤＲ、および／または配列番号９７を含むＶＬドメインの３つのＣＤＲを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号７５を含むＶＨドメイン、および配列番号９７を含むＶＬドメインを含む。
【０１１９】
ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）ＧＦＴＦＳＮＮＡＭＳ（配列番号５）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＴＩＩＩＧＧＴＹＴＹＹＰＤＳＶＫＧ（配列番号１６）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＱＶＹＧＮＳＦＡＹ（配列番号３５）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号４４）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＮＹＦＹＰＦＴ（配列番号６３）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ３とを含む。ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、ＱＶＹＧＮＳＦＡＹ（配列番号３５）を含むＣＤＲ−Ｈ３、および／またはＱＮＮＹＦＹＰＦＴ（配列番号６３）を含むＣＤＲ−Ｌ３を含む。ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）ＧＦＴＦＳＮＮＡＭＳ（配列番号５）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＴＩＩＩＧＧＴＹＴＹＹＰＤＳＶＫＧ（配列番号１６）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＱＶＹＧＮＳＦＡＹ（配列番号３５）を含むＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号４４）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＮＹＦＹＰＦＴ（配列番号６３）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号７６に少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＨドメイン、および／または配列番号９８に少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＬドメインを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号７６を含むＶＨドメインの３つのＣＤＲ、および／または配列番号９８を含むＶＬドメインの３つのＣＤＲを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号７６を含むＶＨドメイン、および配列番号９８を含むＶＬドメインを含む。
【０１２０】
ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＨ（配列番号２）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＹＩＳＳＧＳＳＴＩＹＹＡＤＴＭＫＧ（配列番号１８）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＦＶＲＧＮＳＭＤＹ（配列番号３６）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号４４）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＡＹＳＹＰＬＴ（配列番号６５）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ３とを含む。ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ｃ）ＦＶＲＧＮＳＭＤＹ（配列番号３６）を含むＣＤＲ−Ｈ３、および／またはＱＮＡＹＳＹＰＬＴ（配列番号６５）を含むＣＤＲ−Ｌ３を含む。ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＨ（配列番号２）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＹＩＳＳＧＳＳＴＩＹＹＡＤＴＭＫＧ（配列番号１８）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＦＶＲＧＮＳＭＤＹ（配列番号３６）を含むＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号４４）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＡＹＳＹＰＬＴ（配列番号６５）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号７８に少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＨドメイン、および／または配列番号１００に少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＬドメインを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号７８を含むＶＨドメインの３つのＣＤＲ、および／または配列番号１００を含むＶＬドメインの３つのＣＤＲを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号７８を含むＶＨドメイン、および配列番号１００を含むＶＬドメインを含む。
【０１２１】
ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＨ（配列番号２）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＨＩＳＳＧＳＮＩＩＨＹＡＤＴＬＫＧ（配列番号１９）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＦＡＲＧＮＴＭＤＹ（配列番号３７）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号４４）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＡＹＳＦＰＬＴ（配列番号６６）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ３とを含む。ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、ＦＡＲＧＮＴＭＤＹ（配列番号３７）を含むＣＤＲ−Ｈ３、および／またはＱＮＡＹＳＦＰＬＴ（配列番号６６）を含むＣＤＲ−Ｌ３を含む。ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＨ（配列番号２）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＨＩＳＳＧＳＮＩＩＨＹＡＤＴＬＫＧ（配列番号１９）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＦＡＲＧＮＴＭＤＹ（配列番号３７）を含むＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号４４）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＡＹＳＦＰＬＴ（配列番号６６）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号７９に少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＨドメイン、および／または配列番号１０１に少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＬドメインを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号７９を含むＶＨドメインの３つのＣＤＲ、および／または配列番号１０１を含むＶＬドメインの３つのＣＤＲを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号７９を含むＶＨドメイン、および配列番号１０１を含むＶＬドメインを含む。
【０１２２】
ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＨ（配列番号２）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＹＩＳＳＧＳＳＴＩＹＹＡＤＴＭＫＧ（配列番号１８）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＦＡＲＧＮＴＭＤＹ（配列番号３７）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＲＮＹＬＴ（配列番号４７）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＧＹＳＹＰＬＴ（配列番号６０）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ３とを含む。ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、ＦＡＲＧＮＴＭＤＹ（配列番号３７）を含むＣＤＲ−Ｈ３、および／またはＱＮＧＹＳＹＰＬＴ（配列番号６０）を含むＣＤＲ−Ｌ３を含む。ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＨ（配列番号２）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＹＩＳＳＧＳＳＴＩＹＹＡＤＴＭＫＧ（配列番号１８）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＦＡＲＧＮＴＭＤＹ（配列番号３７）を含むＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＲＮＹＬＴ（配列番号４７）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＧＹＳＹＰＬＴ（配列番号６０）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号８０に少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＨドメイン、および／または配列番号１０２に少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＬドメインを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号８０を含むＶＨドメインの３つのＣＤＲ、および／または配列番号１０１を含むＶＬドメインの３つのＣＤＲを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号８０を含むＶＨドメイン、および配列番号１０２を含むＶＬドメインを含む。
【０１２３】
ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＨ（配列番号２）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＹＩＳＳＧＳＮＴＦＹＹＴＤＴＶＫＧ（配列番号２０）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＦＴＲＧＮＡＬＤＹ（配列番号３８）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号４４）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＡＹＳＹＰＬＴ（配列番号６５）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ３とを含む。ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、ＦＴＲＧＮＡＬＤＹ（配列番号３８）を含むＣＤＲ−Ｈ３、および／またはＱＮＡＹＳＹＰＬＴ（配列番号６５）を含むＣＤＲ−Ｌ３を含む。ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＨ（配列番号２）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＹＩＳＳＧＳＮＴＦＹＹＴＤＴＶＫＧ（配列番号２０）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＦＴＲＧＮＡＬＤＹ（配列番号３８）を含むＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号４４）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＡＹＳＹＰＬＴ（配列番号６５）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号８１に少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＨドメイン、および／または配列番号１０３に少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＬドメインを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号８１を含むＶＨドメインの３つのＣＤＲ、および／または配列番号１０３を含むＶＬドメインの３つのＣＤＲを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号８１を含むＶＨドメイン、および配列番号１０３を含むＶＬドメインを含む。
【０１２４】
ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、ａ）ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＹ（配列番号６）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＹＩＳＳＧＳＮＴＩＹＹＡＤＴＶＫＧ（配列番号２１）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ２と、ＩＡＲＧＮＡＭＤＹ（配列番号３１）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号４４）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＤＹＩＹＰＬＴ（配列番号６７）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ３とを含む。ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、ＩＡＲＧＮＡＭＤＹ（配列番号３１）を含むＣＤＲ−Ｈ３、および／またはＱＮＤＹＩＹＰＬＴ（配列番号６７）を含むＣＤＲ−Ｌ３を含む。ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、ａ）ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＹ（配列番号６）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＹＩＳＳＧＳＮＴＩＹＹＡＤＴＶＫＧ（配列番号２１）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＩＡＲＧＮＡＭＤＹ（配列番号３１）を含むＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号４４）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＤＹＩＹＰＬＴ（配列番号６７）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号８２に少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＨドメイン、および／または配列番号１０４に少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＬドメインを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号８２を含むＶＨドメインの３つのＣＤＲ、および／または配列番号１０４を含むＶＬドメインの３つのＣＤＲを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号８２を含むＶＨドメイン、および配列番号１０４を含むＶＬドメインを含む。
【０１２５】
ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＨ（配列番号２）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＨＩＳＳＧＳＳＴＩＹＹＡＤＴＭＫＧ（配列番号２２）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＦＶＲＧＮＡＬＤＹ（配列番号３９）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号４４）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＧＹＳＹＰＬＴ（配列番号６０）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ３とを含む。ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ｃ）ＦＶＲＧＮＡＬＤＹ（配列番号３９）を含むＣＤＲ−Ｈ３、および／またはＱＮＧＹＳＹＰＬＴ（配列番号６０）を含むＣＤＲ−Ｌ３を含む。ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＨ（配列番号２）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＨＩＳＳＧＳＳＴＩＹＹＡＤＴＭＫＧ（配列番号２２）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＦＶＲＧＮＡＬＤＹ（配列番号３９）を含むＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号４４）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＧＹＳＹＰＬＴ（配列番号６０）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号８３に少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＨドメイン、および／または配列番号１０５に少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＬドメインを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号８３を含むＶＨドメインの３つのＣＤＲ、および／または配列番号１０５を含むＶＬドメインの３つのＣＤＲを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号８３を含むＶＨドメイン、および配列番号１０５を含むＶＬドメインを含む。
【０１２６】
ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＨ（配列番号２）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＹＩＳＳＧＳＳＴＩＨＹＶＤＴＭＫＧ（配列番号２３）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＦＡＲＧＮＴＬＤＹ（配列番号４０）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＦＮＴＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号４９）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＮＧＹＳＹＰＬＴ（配列番号６０）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ３とを含む。ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、ＦＡＲＧＮＴＬＤＹ（配列番号４０）を含むＣＤＲ−Ｈ３、および／またはＮＧＹＳＹＰＬＴ（配列番号６０）を含むＣＤＲ−Ｌ３を含む。ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＨ（配列番号２）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＹＩＳＳＧＳＳＴＩＨＹＶＤＴＭＫＧ（配列番号２３）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＦＡＲＧＮＴＬＤＹ（配列番号４０）を含むＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＦＮＴＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号４９）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＮＧＹＳＹＰＬＴ（配列番号６０）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号８４に少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＨドメイン、および／または配列番号１０６に少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＬドメインを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号８４を含むＶＨドメインの３つのＣＤＲ、および／または配列番号１０６を含むＶＬドメインの３つのＣＤＲを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号８４を含むＶＨドメイン、および配列番号１０６を含むＶＬドメインを含む。
【０１２７】
ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＹ（配列番号６）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＹＩＳＳＧＳＳＴＩＹＹＡＤＴＶＫＧ（配列番号２４）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＩＡＲＧＮＡＭＤＹ（配列番号３１）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＦＮＳＧＮＱＲＮＹＬＡ（配列番号５０）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＤＹＦＹＰＬＴ（配列番号５９）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ３とを含む。ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、ＩＡＲＧＮＡＭＤＹ（配列番号３１）を含むＣＤＲ−Ｈ３、および／またはＱＮＤＹＦＹＰＬＴ（配列番号５９）を含むＣＤＲ−Ｌ３を含む。ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＹ（配列番号６）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＹＩＳＳＧＳＳＴＩＹＹＡＤＴＶＫＧ（配列番号２４）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＩＡＲＧＮＡＭＤＹ（配列番号３１）を含むＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＦＮＳＧＮＱＲＮＹＬＡ（配列番号５０）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＤＹＦＹＰＬＴ（配列番号５９）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号８５に少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＨドメイン、および／または配列番号１０７に少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＬドメインを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号８５を含むＶＨドメインの３つのＣＤＲ、および／または配列番号１０７を含むＶＬドメインの３つのＣＤＲを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号８５を含むＶＨドメイン、および配列番号１０７を含むＶＬドメインを含む。
【０１２８】
ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＨ（配列番号２）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＹＩＳＳＧＳＳＰＩＹＹＡＤＴＶＫＧ（配列番号２５）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＦＡＲＧＮＡＭＤＹ（配列番号４１）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号４４）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＤＳ（配列番号５６）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＮＹＹＹＰＬＴ（配列番号６８）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ３とを含む。ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、ＦＡＲＧＮＡＭＤＹ（配列番号４１）を含むＣＤＲ−Ｈ３、および／またはＱＮＮＹＹＹＰＬＴ（配列番号６８）を含むＣＤＲ−Ｌ３を含む。ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＨ（配列番号２）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＹＩＳＳＧＳＳＰＩＹＹＡＤＴＶＫＧ（配列番号２５）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＦＡＲＧＮＡＭＤＹ（配列番号４１）を含むＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号４４）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＤＳ（配列番号５６）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＮＹＹＹＰＬＴ（配列番号６８）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号８７に少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＨドメイン、および／または配列番号１０９に少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＬドメインを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号８７を含むＶＨドメインの３つのＣＤＲ、および／または配列番号１０９を含むＶＬドメインの３つのＣＤＲを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号８７を含むＶＨドメイン、および配列番号１０９を含むＶＬドメインを含む。
【０１２９】
ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＨ（配列番号２）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＹＩＳＳＧＳＳＴＩＹＹＡＤＴＭＫＧ（配列番号１８）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＦＶＲＧＮＳＭＤＹ（配列番号３６）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号４４）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＡＹＳＹＰＬＴ（配列番号６５）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ３とを含む。ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、ＦＶＲＧＮＳＭＤＹ（配列番号３６）を含むＣＤＲ−Ｈ３、および／またはＱＮＡＹＳＹＰＬＴ（配列番号６５）を含むＣＤＲ−Ｌ３を含む。ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＨ（配列番号２）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＹＩＳＳＧＳＳＴＩＹＹＡＤＴＭＫＧ（配列番号１８）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＦＶＲＧＮＳＭＤＹ（配列番号３６）を含むＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号４４）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＡＹＳＹＰＬＴ（配列番号６５）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号８８に少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＨドメイン、および／または配列番号１１０に少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＬドメインを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号８８を含むＶＨドメインの３つのＣＤＲ、および／または配列番号１１０を含むＶＬドメインの３つのＣＤＲを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号８８を含むＶＨドメイン、および配列番号１１０を含むＶＬドメインを含む。
【０１３０】
ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）ＧＦＴＦＳＮＹＡＭＳ（配列番号８）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＴＩＩＩＧＧＴＹＴＹＹＰＤＳＶＫＧ（配列番号１６）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＱＶＹＧＮＳＦＡＹ（配列番号３５）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号４４）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＮＹＩＹＰＦＴ（配列番号６９）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ３とを含む。ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、ＱＶＹＧＮＳＦＡＹ（配列番号３５）を含むＣＤＲ−Ｈ３、および／またはＱＮＮＹＩＹＰＦＴ（配列番号６９）を含むＣＤＲ−Ｌ３を含む。ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）ＧＦＴＦＳＮＹＡＭＳ（配列番号８）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＴＩＩＩＧＧＴＹＴＹＹＰＤＳＶＫＧ（配列番号１６）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＱＶＹＧＮＳＦＡＹ（配列番号３５）を含むＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号４４）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＮＹＩＹＰＦＴ（配列番号６９）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号８９に少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＨドメイン、および／または配列番号１１１に少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＬドメインを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号８９を含むＶＨドメインの３つのＣＤＲ、および／または配列番号１１１を含むＶＬドメインの３つのＣＤＲを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号８９を含むＶＨドメイン、および配列番号１１１を含むＶＬドメインを含む。
【０１３１】
ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＹ（配列番号６）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＹＩＳＳＧＳＮＮＩＹＹＡＤＴＶＫＧ（配列番号２６）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＩＡＲＧＮＡＭＤＹ（配列番号３１）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号４４）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＤＹＩＹＰＬＴ（配列番号６７）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ３とを含む。ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、ＩＡＲＧＮＡＭＤＹ（配列番号３１）を含むＣＤＲ−Ｈ３、および／またはＱＮＤＹＩＹＰＬＴ（配列番号６７）を含むＣＤＲ−Ｌ３を含む。ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＹ（配列番号６）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＹＩＳＳＧＳＮＮＩＹＹＡＤＴＶＫＧ（配列番号２６）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＩＡＲＧＮＡＭＤＹ（配列番号３１）を含むＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号４４）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＤＹＩＹＰＬＴ（配列番号６７）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号９０に少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＨドメイン、および／または配列番号１１２に少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＬドメインを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号９０を含むＶＨドメインの３つのＣＤＲ、および／または配列番号１１２を含むＶＬドメインの３つのＣＤＲを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号９０を含むＶＨドメイン、および配列番号１１２を含むＶＬドメインを含む。
【０１３２】
ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）ＧＹＴＦＴＳＷＳＩＳ（配列番号９）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＥＩＹＰＲＳＤＮＩＨＹＮＥＫＦＫＧ（配列番号２７）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＡＹＹＧＮＳＦＡＹ（配列番号３４）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）ＫＳＳＱＩＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号５１）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＤＹＹＹＰＦＴ（配列番号７０）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ３とを含む。ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、ＡＹＹＧＮＳＦＡＹ（配列番号３４）を含むＣＤＲ−Ｈ３、および／またはＱＮＤＹＹＹＰＦＴ（配列番号７０）を含むＣＤＲ−Ｌ３を含む。ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）ＧＹＴＦＴＳＷＳＩＳ（配列番号９）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＥＩＹＰＲＳＤＮＩＨＹＮＥＫＦＫＧ（配列番号２７）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＡＹＹＧＮＳＦＡＹ（配列番号３４）を含むＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）ＫＳＳＱＩＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号５１）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＤＹＹＹＰＦＴ（配列番号７０）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号９１に少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＨドメイン、および／または配列番号１１３に少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＬドメインを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号９１を含むＶＨドメインの３つのＣＤＲ、および／または配列番号１１３を含むＶＬドメインの３つのＣＤＲを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号９１を含むＶＨドメイン、および配列番号１１３を含むＶＬドメインを含む。
【０１３３】
ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）ＧＹＳＦＴＧＹＮＭＮ（配列番号１０）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＮＩＮＰＹＹＳＮＴＮＹＮＱＲＦＫＧ（配列番号２８）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＣＤＲＧＮＳＦＤＹ（配列番号４２）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）ＫＳＲＱＳＬＦＮＳＥＮＱＫＮＹＬＳ（配列番号５２）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＴＳＴＲＥＳ（配列番号５７）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＮＹＩＹＰＦＴ（配列番号６９）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ３とを含む。ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、ＣＤＲＧＮＳＦＤＹ（配列番号４２）を含むＣＤＲ−Ｈ３、および／またはＱＮＮＹＩＹＰＦＴ（配列番号６９）を含むＣＤＲ−Ｌ３を含む。ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）ＧＹＳＦＴＧＹＮＭＮ（配列番号１０）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＮＩＮＰＹＹＳＮＴＮＹＮＱＲＦＫＧ（配列番号２８）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＣＤＲＧＮＳＦＤＹ（配列番号４２）を含むＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）ＫＳＲＱＳＬＦＮＳＥＮＱＫＮＹＬＳ（配列番号５２）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＴＳＴＲＥＳ（配列番号５７）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＮＹＩＹＰＦＴ（配列番号６９）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号９２に少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＨドメイン、および／または配列番号１１４に少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＬドメインを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号９２を含むＶＨドメインの３つのＣＤＲ、および／または配列番号１１４を含むＶＬドメインの３つのＣＤＲを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号９２を含むＶＨドメイン、および配列番号１１４を含むＶＬドメインを含む。
【０１３４】
ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＨ（配列番号２）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＹＩＳＳＧＳＳＳＩＹＹＡＤＴＶＫＧ（配列番号１７）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＩＡＲＧＮＡＭＤＹ（配列番号３１）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＲＮＹＬＡ（配列番号４８）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＤＹＳＹＰＬＴ（配列番号６４）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ３とを含む。ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、ＩＡＲＧＮＡＭＤＹ（配列番号３１）を含むＣＤＲ−Ｈ３、および／またはＱＮＤＹＳＹＰＬＴ（配列番号６４）を含むＣＤＲ−Ｌ３を含むＶＬドメインを含む。ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＨ（配列番号２）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＹＩＳＳＧＳＳＳＩＹＹＡＤＴＶＫＧ（配列番号１７）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＩＡＲＧＮＡＭＤＹ（配列番号３１）を含むＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＲＮＹＬＡ（配列番号４８）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＤＹＳＹＰＬＴ（配列番号６４）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号７７に少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＨドメイン、および／または配列番号９９に少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＬドメインを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号７７を含むＶＨドメインの３つのＣＤＲ、および／または配列番号９９を含むＶＬドメインの３つのＣＤＲを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号７７を含むＶＨドメイン、および配列番号９９を含むＶＬドメインを含む。
【０１３５】
ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）ＧＦＳＦＳＤＹＧＭＨ（配列番号７）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＨＩＳＳＧＳＳＴＩＹＹＡＤＴＭＫＧ（配列番号２２）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＦＡＲＧＮＴＭＤＹ（配列番号３７）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号４４）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＧＹＳＹＰＬＴ（配列番号６０）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ３とを含む。ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、ＦＡＲＧＮＴＭＤＹ（配列番号３７）を含むＣＤＲ−Ｈ３、および／またはＱＮＧＹＳＹＰＬＴ（配列番号６０）を含むＣＤＲ−Ｌ３を含む。ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）ＧＦＳＦＳＤＹＧＭＨ（配列番号７）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＨＩＳＳＧＳＳＴＩＹＹＡＤＴＭＫＧ（配列番号２２）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＦＡＲＧＮＴＭＤＹ（配列番号３７）を含むＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号４４）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＧＹＳＹＰＬＴ（配列番号６０）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号８６に少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＨドメイン、および／または配列番号１０８に少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＬドメインを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号８６を含むＶＨドメインの３つのＣＤＲ、および／または配列番号１０８を含むＶＬドメインの３つのＣＤＲを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号８６を含むＶＨドメイン、および配列番号１０８を含むＶＬドメインを含む。
【０１３６】
ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＹ（配列番号６）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＦＩＳＳＧＳＳＴＩＹＣＡＤＴＶＫＧ（配列番号２９）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＩＡＲＧＮＡＭＤＹ（配列番号３１）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＬＫＮＹＬＴ（配列番号５３）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＤＹＦＹＰＬＴ（配列番号５９）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ３とを含む。ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、ＩＡＲＧＮＡＭＤＹ（配列番号３１）を含むＣＤＲ−Ｈ３、および／またはＱＮＤＹＦＹＰＬＴ（配列番号５９）を含むＣＤＲ−Ｌ３を含む。ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＹ（配列番号６）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＦＩＳＳＧＳＳＴＩＹＣＡＤＴＶＫＧ（配列番号２９）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＩＡＲＧＮＡＭＤＹ（配列番号３１）を含むＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＬＫＮＹＬＴ（配列番号５３）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号５５）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＱＮＤＹＦＹＰＬＴ（配列番号５９）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号９３に少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＨドメイン、および／または配列番号１１５に少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＬドメインを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号９３を含むＶＨドメインの３つのＣＤＲ、および／または配列番号１１５を含むＶＬドメインの３つのＣＤＲを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号９３を含むＶＨドメイン、および配列番号１１５を含むＶＬドメインを含む。
【０１３７】
ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）ＧＹＴＦＩＳＹＬＩＨ（配列番号１２８）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）配列番号ＹＩＮＰＹＮＤＧＴＫＹＮＥＫＦＫＧ（配列番号１２９）に記載されるアミノ酸配列、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＧＤＦ、または最大で約３つ（たとえば、約１つ、２つ、もしくは３つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む（たとえば、それからなる）、ＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号４４）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＩＲＡＳ（配列番号１３０）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＬＮＤＹＳＦＰＬＴ（配列番号１３１）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ３とを含む。ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、ＧＤＦを含む（たとえば、それからなる）ＣＤＲ−Ｈ３、および／またはＬＮＤＹＳＦＰＬＴ（配列番号１３１）を含むＣＤＲ−Ｌ３を含む。ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）ＧＹＴＦＩＳＹＬＩＨ（配列番号１２８）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＹＩＮＰＹＮＤＧＴＫＹＮＥＫＦＫＧ（配列番号１２９）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＧＤＦを含む（たとえば、それからなる）ＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号４４）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＩＲＡＳ（配列番号１３０）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＬＮＤＹＳＦＰＬＴ（配列番号１３１）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号１３５に少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＨドメイン、および／または配列番号１３７に少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＬドメインを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号１３５を含むＶＨドメインの３つのＣＤＲ、および／または配列番号１３５を含むＶＬドメインの３つのＣＤＲを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号１３５を含むＶＨドメイン、および配列番号１３７を含むＶＬドメインを含む。ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体は、ＣＬＤＮ１８．１に特異的に結合する。
【０１３８】
ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）ＧＹＴＦＴＮＹＶＭＨ（配列番号１３２）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＹＩＮＰＦＤＤＧＴＫＹＮＥＫＦＫＧ（配列番号１３３）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＧＤＹ、または最大で約３つ（たとえば、約１つ、２つ、もしくは３つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む（たとえば、それからなる）、ＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号４４）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＤＳ（配列番号１３４）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＬＮＤＹＳＦＰＬＴ（配列番号１３１）、または最大で約５つ（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは５つのうちのいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む、ＣＤＲ−Ｌ３とを含む。ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、ＧＤＹを含む（たとえば、それからなる）ＣＤＲ−Ｈ３、および／またはＬＮＤＹＳＦＰＬＴ（配列番号１３１）を含むＣＤＲ−Ｌ３を含む。ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、（ａ）ＧＹＴＦＴＮＹＶＭＨ（配列番号１３２）を含むＣＤＲ−Ｈ１と、（ｂ）ＹＩＮＰＦＤＤＧＴＫＹＮＥＫＦＫＧ（配列番号１３３）を含むＣＤＲ−Ｈ２と、（ｃ）ＧＤＹを含む（たとえば、それからなる）ＣＤＲ−Ｈ３と、（ｄ）ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴ（配列番号４４）を含むＣＤＲ−Ｌ１と、（ｅ）ＷＡＳＴＲＤＳ（配列番号１３４）を含むＣＤＲ−Ｌ２と、（ｆ）ＬＮＤＹＳＦＰＬＴ（配列番号１３１）を含むＣＤＲ−Ｌ３とを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号１３６に少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＨドメイン、および／または配列番号１３８に少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＬドメインを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号１３６を含むＶＨドメインの３つのＣＤＲ、および／または配列番号１３８を含むＶＬドメインの３つのＣＤＲを含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、配列番号１３６を含むＶＨドメイン、および配列番号１３８を含むＶＬドメインを含む。ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体は、ＣＬＤＮ１８．１に特異的に結合する。
【０１３９】
一部の実施形態では、本明細書に記載される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体のアミノ酸配列バリアント（「抗ＣＬＤＮ１８．２抗体バリアント」）が、提供される。たとえば、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体の結合親和性および／または他の生物学的特性を改善することが望ましい場合がある。抗ＣＬＤＮ１８．２抗体のアミノ酸配列バリアントは、抗体剤をコードするヌクレオチド配列に適切な修飾を導入することによって、またはペプチド合成によって、調製することができる。そのような修飾としては、たとえば、抗体剤のアミノ酸配列からの残基の欠失、および／または抗体剤のアミノ酸配列への残基の挿入、および／または抗体剤のアミノ酸配列内での残基の置換が挙げられる。最終的な構築物に到達するように、欠失、挿入、および置換の任意の組合せを行うことができるが、ただし、最終的な構築物が、所望される特徴、たとえば、抗原結合性を有することを条件とする。
【０１４０】
一部の実施形態では、１つまたは複数のアミノ酸置換を有する抗ＣＬＤＮ１８．２抗体バリアントが、提供される。置換による変異誘発の目的となる部位には、ＨＶＲおよびＦＲが含まれる。アミノ酸置換が、目的の抗体剤に導入され得、産物は、所望される活性、たとえば、抗原結合性の保持／改善、免疫原性の減少、またはＡＤＣＣもしくはＣＤＣの改善について、スクリーニングされ得る。
【０１４１】
例示的な置換バリアントは、親和性成熟抗体剤であり、これは、たとえば、ファージディスプレイに基づく親和性成熟技法を使用して、便宜的に生成することができる。簡単に述べると、１つまたは複数のＣＤＲ残基を変異させ、バリアント抗体部分がファージに提示され、これを、特定の生物学的活性（たとえば、結合親和性）についてスクリーニングする。改変（たとえば、置換）は、たとえば、抗体の親和性を改善するために、ＨＶＲに行われ得る。そのような改変は、ＨＶＲの「ホットスポット」、すなわち、体細胞成熟プロセス中に高頻度で変異を受けるコドンによってコードされる残基（たとえば、Chowdhury,  Methods  Mol.  Biol.  207:179-196  (2008)を参照されたい）、および／または特異性決定残基（ＳＤＲ）に行われ得、結果として得られるバリアントのＶＨまたはＶＬが、結合親和性に関して試験される。二次ライブラリーを構築しそこから再選択することによる親和性成熟は、たとえば、Hoogenboom  et  al.  in  Methods  in  Molecular  Biology  178:1-37  (O'Brien  et  al.,  ed.,  Human  Press,  Totowa,  NJ,  (2001).)において記載されている。
【０１４２】
親和性成熟の一部の実施形態では、様々な方法（たとえば、エラープローンＰＣＲ、鎖シャッフリング、またはオリゴヌクレオチド指定変異誘発）のうちのいずれかによって、多様性が、成熟に選択された可変遺伝子に導入される。次いで、二次ライブラリーが作製される。次に、ライブラリーがスクリーニングされ、所望される親和性を有する任意の抗体剤バリアントが特定される。多様性を導入するための別の方法には、いくつかのＨＶＲ残基（たとえば、一度に４〜６つの残基）がランダム化される、ＨＶＲ指定アプローチが含まれる。抗原結合性に関与するＨＶＲ残基は、たとえば、アラニンスキャニング変異誘発またはモデリングを使用して、特異的に同定することができる。特に、ＣＤＲ−Ｈ３およびＣＤＲ−Ｌ３が、標的とされることが多い。
【０１４３】
一部の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、そのような改変が、抗原に結合する抗体剤の能力を実質的に低減させない限り、１つまたは複数のＨＶＲにおいて生じてもよい。たとえば、結合親和性を実質的に低減させない保存的改変（たとえば、本明細書において提供される保存的置換）が、ＨＶＲに行われ得る。そのような改変は、ＨＶＲの「ホットスポット」またはＳＤＲの外側にあり得る。上記に提供されるバリアントＶＨおよびＶＬ配列の一部の実施形態では、それぞれのＨＶＲは、いずれも、未改変であるか、または１つ以下の、２つ以下の、もしくは３つ以下のアミノ酸置換を含む。
【０１４４】
変異誘発の標的とされ得る抗体剤の残基または領域の同定に有用な方法は、Cunningham  and  Wells  (1989)  Science,  244:1081-1085によって記載されている「アラニンスキャニング変異誘発」と称される。この方法では、残基または標的残基の群（たとえば、荷電残基、たとえば、ａｒｇ、ａｓｐ、ｈｉｓ、ｌｙｓ、およびｇｌｕ）を同定し、中性または負に荷電したアミノ酸（たとえば、アラニンまたはポリアラニン）により置き換えて、抗体剤と抗原との相互作用が影響を受けるかどうかを決定する。さらなる置換を、最初の置換に対して機能的感受性を示すアミノ酸位置に導入してもよい。代替的に、または追加として、抗体剤と抗原との間の接触点を特定するために、抗原−抗体剤複合体の結晶構造を決定してもよい。そのような接触残基および隣接する残基は、置換の候補として標的化または排除され得る。バリアントが所望される特性を含むかどうかを決定するために、それらをスクリーニングすることができる。
【０１４５】
アミノ酸配列の挿入には、長さが１個の残基から、１００個もしくはそれを上回る残基を含むポリペプチドまでの範囲に及ぶ、アミノ末端および／またはカルボキシ末端融合、ならびに単一または複数のアミノ酸残基の配列内挿入が挙げられる。末端挿入の例としては、Ｎ末端メチオニル残基を有する抗体剤が挙げられる。抗体剤分子の他の挿入バリアントとしては、抗体剤のＮ末端またはＣ末端への、酵素（たとえば、ＡＤＥＰＴのための）または抗体剤の血清半減期を増加させるポリペプチドへの融合体が挙げられる。
【０１４６】
ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ抗体バリアントにおけるアミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換である。ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ抗体バリアントにおけるアミノ酸置換は、非保存的アミノ酸置換である。ある特定の実施形態では、アミノ酸置換は、抗原に結合する抗体の能力を実質的に低減させない。たとえば、ＣＬＤＮ１８．２結合親和性を実質的に低減させない保存的改変（たとえば、本明細書において提供される保存的置換）が、行われ得る。抗ＣＬＤＮ１８．２抗体のＣＬＤＮ１８．２への結合親和性は、以下の実施例に記載される方法を使用して評価することができる。
【０１４７】
保存的置換は、表３において、「保存的置換」の表題で示されている。より実質的な変化は、表３において、「例示的な置換」の表題に提供されており、アミノ酸側鎖クラスを参照して以下にさらに記載されている。アミノ酸置換が、目的の抗体に導入され得、産物は、所望される活性、たとえば、ＣＬＤＮ１８．２結合の保持／改善について、スクリーニングされ得る。
【表３−１】
2021515583.tif 000010
【表３−２】
2021515583.tif 000011
【０１４８】
非保存的置換は、これらのクラスのうちのいずれかのメンバーを、別のクラスと交換することを伴う。例示的な置換バリアントは、親和性成熟抗体であり、これは、たとえば、本明細書に記載されるものなどのファージディスプレイに基づく親和性成熟技法を使用して、便宜的に生成することができる。簡単に述べると、１つまたは複数のＣＤＲ残基を変異させ、バリアント抗体がファージに提示され、特定の生物学的活性（たとえば、結合親和性）についてスクリーニングされる。改変（たとえば、置換）は、たとえば、抗体の親和性を改善するために、ＨＶＲに行われ得る。そのような改変は、ＨＶＲの「ホットスポット」、すなわち、体細胞成熟プロセス中に高頻度で変異を受けるコドンによってコードされる残基（たとえば、Chowdhury,  Methods  Mol.  Biol.  207:179-196  (2008)を参照されたい）、および／またはＳＤＲ（ａ−ＣＤＲ）に行われ得、結果として得られるバリアントのＶＨまたはＶＬが、結合親和性に関して試験される。二次ライブラリーを構築しそこから再選択することによる親和性成熟は、たとえば、Hoogenboom  et  al.  in  Methods  in  Molecular  Biology  178:1-37  (O'Brien  et  al.,  ed.,  Human  Press,  Totowa,  NJ,  (2001).)において記載されている。
【０１４９】
一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体は、ＣＬＤＮ１８．２タンパク質（またはその断片）の少なくとも１つの対立遺伝子バリアントと交差反応する。一部の実施形態では、対立遺伝子バリアントは、天然に存在するＣＬＤＮ１８．２（またはその断片）と比較して、最大で約３０個（たとえば、約１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０個、１５個、２０個、２５個、または３０個のうちのいずれか）のアミノ酸置換（たとえば、保存的置換）を有する。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体は、ＣＬＤＮ１８．２タンパク質（またはその断片）のいずれの対立遺伝子バリアントとも交差反応しない。
【０１５０】
一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（または抗体バリアント）は、少なくとも２つの異なる種に由来するＣＬＤＮ１８．２タンパク質に結合する（たとえば、それと交差反応する）。一部の実施形態では、たとえば、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（または抗体バリアント）は、ヒトＣＬＤＮ１８．２タンパク質（またはその断片）、およびマウス、ラット、または非ヒト霊長類（たとえば、カニクイザルもしくはアカゲザル）に由来するＣＬＤＮ１８．２タンパク質（またはその断片）に結合する。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体は、ヒトＣＬＤＮ１８．２に完全に特異的であり得、種または他の種類の非ヒト交差反応性を呈さない場合がある。
【０１５１】
一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体剤は、がん細胞（たとえば、固形腫瘍）の細胞表面上に発現されるＣＬＤＮ１８．２を特異的に認識する。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体剤は、表面腫瘍細胞またはがん性組織（たとえば、胃がん細胞、食道がん細胞、胃食道接合部がん細胞、胆管がん細胞、膵臓がん細胞、卵巣がん細胞、肝臓がん細胞、頭頸部がん細胞、胆嚢がん細胞、結腸がん細胞、および肺がん細胞）上に発現されるＣＬＤＮ１８．２を特異的に認識する。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体剤は、ＫＡＴＯ  ＩＩＩ（ＡＴＣＣ  ＨＴＢ−１０３）およびＮＵＧＣ−４（ＪＣＲＢ０８３４）を含むがこれらに限定されない、がん細胞株のうちの１つまたは複数の細胞表面上に発現されるＣＬＤＮ１８．２を特異的に認識する。
【０１５２】
ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体は、ＣＬＤＮ１８．２に結合するが、ＣＬＤＮ  １８．１には結合しない。ある特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体は、ＣＬＤＮ１８．２およびＣＬＤＮ１８．１の両方に結合する。ある特定の実施形態では、抗体は、ＣＬＤＮ１８．２に対して、ＣＬＤＮ１８．１に対するよりも強い結合親和性を有する。一部の実施形態では、抗体は、ＣＬＤＮ１８．２およびＣＬＤＮ１８．１に対して同等の親和性を有し、たとえば、ＣＬＤＮ１８．２への抗体の結合およびＣＬＤＮ１８．１への抗体の結合のＥＣ５０および／またはＫｄ値は、当該技術分野において周知の方法（たとえば、本明細書の他の箇所に記載されるもの）によって測定した場合に、約１０倍、９倍、８倍、７倍、６倍、５倍、４倍、３倍、２倍、または１．５倍のうちのいずれかよりも小さい範囲内である。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（任意の形式）は、約１０−７Ｍ〜約１０−１３Ｍ（たとえば、約１０−７Ｍ〜約１０−１３Ｍ、約１０−９Ｍ〜約１０−１３Ｍ、または約１０−１０Ｍ〜約１０−１２Ｍ）のＫｄで、ＣＬＤＮ１８．２に特異的に結合する。
【０１５３】
一部の実施形態では、ＣＬＤＮ１８．２抗体と非標的タンパク質との間の結合のＫｄは、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体とＣＬＤＮ１８．２との間の結合のＫｄよりも大きい。一部の実施形態では、非標的タンパク質は、ＣＬＤＮ１８．２ではない。一部の実施形態では、非標的タンパク質は、ＣＬＤＮ１８．１である。一部の実施形態では、非標的タンパク質は、ＣＬＤＮ１８．１ではない。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体の非標的タンパク質への結合のＫｄは、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体と標的ＣＬＤＮ１８．２との間の結合のＫｄよりも、少なくとも約１０倍、たとえば、約１０〜１００倍、約１００〜１０００倍、約１０３〜１０４倍、約１０４〜１０５倍、約１０５〜１０６倍、約１０６〜１０７倍、約１０７〜１０８倍、約１０８〜１０９倍、約１０９〜１０１０倍、約１０１０〜１０１１倍、または約１０１１〜１０１２倍大きくてもよい。
【０１５４】
一部の実施形態では、本明細書において提供されるＣＬＤＮ１８．２に特異的に結合するＣＬＤＮ１８．２抗体は、ＩＭＡＢ３６２が結合するＣＬＤＮ１８．２のエピトープとは異なる、ＣＬＤＮ１８．２（たとえば、ヒトＣＬＤＮ１８．２）のエピトープに結合する。一部の実施形態では、本明細書において提供されるＣＬＤＮ１８．２に特異的に結合するＣＬＤＮ１８．２抗体は、ＩＭＡＢ３６２が結合するＣＬＤＮ１８．２のエピトープとオーバーラップしない、ＣＬＤＮ１８．２（たとえば、ヒトＣＬＤＮ１８．２）のエピトープに結合する。ＩＭＡＢ３６２（ゾルベツキシマブまたはクローディキシマブ（claudiximab）としても知られている）は、ＣＬＤＮ１８．２に結合するキメラモノクローナル抗体である。
【０１５５】
ＣＬＤＮ１８．２に特異的に結合するＣＬＤＮ１８．２抗体は、上記に定義される様々な種類の抗体のうちのいずれのものであってもよいが、好ましくは、ヒト抗体、ヒト化抗体、キメラ抗体である。非ヒト抗ＣＬＤＮ１８．２抗体もまた、企図される。一部の実施形態では、非ヒト抗ＣＬＤＮ１８．２抗体は、本明細書に記載される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体に由来するヒトＣＤＲ配列、および非ヒトフレームワーク配列を含む。非ヒトフレームワーク配列としては、一部の実施形態では、本明細書に記載される１つまたは複数のヒトＣＤＲ配列を使用して、合成の重鎖および／または軽鎖可変領域を生成するために使用することができる、任意の配列が挙げられ、たとえば、哺乳動物、たとえば、マウス、ラット、ウサギ、ブタ、ウシ（たとえば、雌牛、雄牛、バッファロー）、シカ、ヒツジ、ヤギ、ニワトリ、ネコ、イヌ、フェレット、霊長類（たとえば、マーモセット、アカゲザル）などが挙げられる。一部の実施形態では、非ヒト抗ＣＬＤＮ１８．２抗体には、本明細書に記載される１つまたは複数のヒトＣＤＲ配列を、非ヒトフレームワーク配列（たとえば、マウスまたはニワトリフレームワーク配列）にグラフトすることによって生成される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体が含まれる。
【０１５６】
ある特定の実施形態では、抗体は、ヒトＩｇＧ、たとえば、ヒトＩｇＧ１、ヒトＩｇＧ２、ヒトＩｇＧ３、またはヒトＩｇＧ４のＦｃ配列を含む。ある特定の実施形態では、Ｆｃ配列は、多くの場合にＦｃ配列とＦｃ受容体（ＦｃＲ）との結合に関連する（ＡＤＣＣ）エフェクター機能が欠如するように、改変されているか、またはそうでなければ変更されている。エフェクター機能を改変させることができるＦｃ配列への変更または変異の例は多数存在し、本明細書の他の箇所に記載されているものが含まれるが、これらに限定されない。たとえば、ＷＯ００／４２０７２およびShields  et  al.  J  Biol.  Chem.  9(2):  6591-6604  (2001)は、改善または減少されたＦｃＲへの結合を有する抗体バリアントについて記載している。これらの刊行物の内容は、参照により具体的に本明細書に組み込まれる。抗体は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）’２、一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）、Ｆｖ断片、ダイアボディ、および線形抗体の形態であってもよい。また、抗体は、ＣＬＤＮ１８．２に結合するが、１つまたは複数の他の標的にも結合し、それらの機能を阻害する、多重特異性抗体であってもよい。抗体は、治療剤（たとえば、細胞毒性剤、放射性同位体、および化学療法剤）、または患者試料もしくはイメージングによりｉｎ  ｖｉｖｏでＣＬＤＮ１８．２を検出するための標識（たとえば、放射性同位体、蛍光色素、および酵素）にコンジュゲートすることができる。他の修飾としては、本明細書において提供される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体への毒素のコンジュゲーションが挙げられる。
抗クローディン１８．２抗体をコードする核酸
【０１５７】
本明細書に記載される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体をコードする核酸分子もまた、企図される。一部の実施形態では、本明細書に記載される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体のうちのいずれかを含む、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体をコードする核酸（または核酸のセット）が、提供される。一部の実施形態では、本明細書に記載される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体をコードする核酸（または核酸のセット）は、ペプチドタグ（たとえば、タンパク質精製タグ、たとえば、Ｈｉｓタグ、ＨＡタグ）をコードする核酸配列をさらに含み得る。
【０１５８】
本明細書に記載される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体のポリペプチド成分をコードする単離された核酸、および抗ＣＬＤＮ１８．２抗体のポリペプチド成分をコードする核酸を含むベクターを含む、単離された宿主細胞もまた、本明細書において企図される。
【０１５９】
本出願はまた、これらの核酸配列に対するバリアントも含む。たとえば、バリアントには、少なくとも中等度にストリンジェントなハイブリダイゼーション条件下において、本明細書に記載される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体をコードする核酸配列にハイブリダイズする、ヌクレオチド配列が含まれる。
【０１６０】
本発明はまた、本発明の核酸が挿入されるベクターも提供する。
【０１６１】
簡単な概要では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体をコードする天然または合成の核酸による抗ＣＬＤＮ１８．２抗体の発現は、核酸が、たとえば、プロモーター（たとえば、リンパ球特異的プロモーター）および３’非翻訳領域（ＵＴＲ）を含む、５’および３’調節エレメントに作動可能に連結されるように、核酸を、適切な発現ベクターに挿入することによって達成することができる。ベクターは、真核生物宿主細胞における複製および組込みに好適であり得る。典型的なクローニングおよび発現ベクターは、所望される核酸配列の発現の調節に有用な、転写および翻訳終結因子、開始配列、ならびにプロモーターを含む。
【０１６２】
本発明の核酸はまた、標準的な遺伝子送達プロトコールを使用して、核酸免疫および遺伝子療法にも使用することができる。遺伝子送達のための方法は、当該技術分野において公知である。たとえば、米国特許第５，３９９，３４６号、同第５，５８０，８５９号、同第５，５８９，４６６号を参照されたく、これらは参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。一部の実施形態では、本発明は、遺伝子療法ベクターを提供する。
【０１６３】
核酸は、いくつかの種類のベクターにクローニングすることができる。たとえば、核酸は、プラスミド、ファージミド、ファージ誘導体、動物ウイルス、およびコスミドを含むがこれらに限定されない、ベクターにクローニングすることができる。特に関心の高いベクターとしては、発現ベクター、複製ベクター、プローブ生成ベクター、およびシーケンシングベクターが挙げられる。
【０１６４】
さらに、発現ベクターは、ウイルスベクターの形態で細胞へと提供されてもよい。ウイルスベクター技術は、当該技術分野において周知であり、たとえば、Sambrook  et  al.  (2001,  Molecular  Cloning:  A  Laboratory  Manual,  Cold  Spring  Harbor  Laboratory,  New  York)、ならびに他のウイルス学および分子生物学のマニュアルに記載されている。ベクターとして有用なウイルスとしては、レトロウイルス、アデノウイルス、アデノ随伴ウイルス、ヘルペスウイルス、およびレンチウイルスが挙げられるが、これらに限定されない。一般に、好適なベクターは、少なくとも１つの生物において機能する複製起点、プロモーター配列、便利な制限エンドヌクレアーゼ部位、および１つまたは複数の選択的マーカーを含む（たとえば、ＷＯ０１／９６５８４、ＷＯ０１／２９０５８、および米国特許第６，３２６，１９３号を参照されたい）。
【０１６５】
哺乳動物細胞への遺伝子移入のために、いくつかのウイルスに基づく系が開発されている。たとえば、レトロウイルスは、遺伝子送達系の便利なプラットフォームを提供する。選択された遺伝子は、当該技術分野において公知の技法を使用して、ベクターに挿入し、レトロウイルス粒子にパッケージングすることができる。次いで、組換えウイルスを単離し、ｉｎ  ｖｉｖｏまたはｅｘ  ｖｉｖｏのいずれかで対象の細胞に送達することができる。いくつかのレトロウイルス系が、当該技術分野において公知である。一部の実施形態では、アデノウイルスベクターが使用される。いくつかのアデノウイルスベクターが、当該技術分野において公知である。一部の実施形態では、レンチウイルスベクターが使用される。レンチウイルスなど、レトロウイルスに由来するベクターは、導入遺伝子の長期間の安定した組込みおよび娘細胞における導入遺伝子の伝播（propagation）を可能するため、長期遺伝子移入を達成するのに好適なツールである。レンチウイルスベクターは、非増殖性細胞、たとえば、肝細胞の形質導入が可能であるという点で、オンコレトロウイルス、たとえば、マウス白血病ウイルスに由来するベクターよりも多くの利点を有する。それらは、免疫原性が低いというさらなる利点も有する。
【０１６６】
さらなるプロモーターエレメント、たとえば、エンハンサーは、転写開始の頻度を調節する。典型的に、これらは、開始部位の３０〜１１０ｂｐ上流の領域に位置するが、いくつかのプロモーターは、近年、開始部位の下流にも同様に機能的エレメントを含むことが示されている。多くの場合、プロモーターエレメント間の間隔には、柔軟性があり、そのため、プロモーター機能は、エレメントが互いに関して逆転した場合または移動した場合にも、保持される。チミジンキナーゼ（ｔｋ）プロモーターの場合、プロモーターエレメント間の間隔は、活性が低下し始める前に、５０ｂｐ話して拡大し得る。
【０１６７】
好適なプロモーターの１つの例は、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）最初期プロモーター配列である。このプロモーター配列は、そこに作動可能に連結された任意のポリヌクレオチド配列の高レベルの発現を作動させることができる、強力な構成的プロモーター配列である。好適なプロモーターの別の例は、Ｅｌｏｎｇａｔｉｏｎ  Ｇｒｏｗｔｈ  Ｆａｃｔｏｒ−１α（ＥＦ−１α）である。しかしながら、シミアンウイルス４０（ＳＶ４０）初期プロモーター、マウス乳腺腫瘍ウイルス（ＭＭＴＶ）、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）長い末端反復配列（ＬＴＲ）プロモーター、ＭｏＭｕＬＶプロモーター、トリ白血病ウイルスプロモーター、エプスタイン・バーウイルス最初期プロモーター、ラウス肉腫ウイルスプロモーター、ならびにアクチンプロモーター、ミオシンプロモーター、ヘモグロビンプロモーター、およびクレアチンキナーゼプロモーターなどであるがこれらに限定されないヒト遺伝子プロモーターが含まれるがこれらに限定されない、他の構成的プロモーター配列もまた、使用することができる。さらに、本発明は、構成的プロモーターの使用に限定されるものではない。誘導性プロモーターもまた、本発明の一部として企図される。誘導性プロモーターの使用は、それが動作可能なように連結されたポリヌクレオチド配列の発現を、そのような発現が所望されるときにはオンにし、発現が所望されないときには発現をオフにすることができる、分子スイッチを提供する。誘導性プロモーターの例としては、メタロチオニンプロモーター、グルココルチコイドプロモーター、プロゲステロンプロモーター、およびテトラサイクリンプロモーターが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１６８】
一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体剤の発現は、誘導性である。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体剤をコードする核酸配列は、本明細書に記載される任意の誘導性プロモーターを含む、誘導性プロモーターに作動可能に連結されている。
抗体産生の方法
【０１６９】
本開示の抗体は、当該技術分野において公知の任意の手段によって産生することができる。抗体産生のための例示的な技法は、以下に記載されているが、これらの例示的な技法は、例示目的のために提供されるにすぎず、制限することを意図するものではない。加えて、本明細書に記載される抗体での使用が企図される例示的な抗体特性が、さらに記載される。
【０１７０】
抗原を調製するために、抗原は、天然の供給源から精製もしくはそれ以外の方法で取得することができるか、または組換え技法を使用して発現させることができる。一部の実施形態では、抗原は、可溶性タンパク質として使用され得る。一部の実施形態では、抗原は、たとえば、その免疫原性を増加させるために、別のポリペプチドまたは他の部分にコンジュゲートされ得る。たとえば、本明細書に記載される抗原は、Ｆｃ領域と結合され得る。一部の実施形態では、抗原をその細胞表面上に発現する細胞を、抗原として使用することができる。
【０１７１】
ポリクローナル抗体は、抗原およびアジュバントの複数回の皮下（ｓｃ）または腹腔内（ｉｐ）注射によって、動物において出現させることができる。たとえば、ニワトリの免疫についての説明が、本明細書に記載される。一部の実施形態では、抗原を、二官能性剤または誘導体化剤を使用して、免疫原性タンパク質、たとえば、キーホールリンペットヘモシアニン、血清アルブミン、ウシサイログロブリン、またはダイズトリプシンインヒビターとコンジュゲートさせる。ニワトリの免疫の例示的な方法は、本明細書に提供される。様々な他の生物、たとえば、哺乳動物に好適な関連方法は、当該技術分野において周知である。
【０１７２】
上述のように、モノクローナル抗体は、様々な方法によって産生することができる。一部の実施形態では、本開示のモノクローナル抗体は、Kohler  et  al.,  Nature,  256:495  (1975)によって最初に説明され、Hongo  et  al.,  Hybridoma,  14  (3):  253-260  (1995)、Harlow  et  al.,  Antibodies:  A  Laboratory  Manual,  (Cold  Spring  Harbor  Laboratory  Press,  2nd  ed.  1988)、およびHammerling  et  al.,  in:  Monoclonal  Antibodies  and  T-Cell  Hybridomas  563-681  (Elsevier,  N.Y.,  1981)においてさらに説明されている、ハイブリドーマ法を使用して作製される。ヒトハイブリドーマ技術（トリオーマ技術）は、Vollmers  and  Brandlein,  Histology  and  Histopathology,  20(3):927-937  (2005)およびVollmers  and  Brandlein,  Methods  and  Findings  in  Experimental  and  Clinical  Pharmacology,  27(3):185-91  (2005)において記載されている。ハイブリドーマ細胞を成長させる培養培地は、たとえば、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ結合アッセイ、免疫沈降、ＥＬＩＳＡ、ＲＩＡなどによって、目的の抗体の存在についてスクリーニングすることができ、結合親和性は、たとえば、スキャッチャード解析によって決定することができる。所望される結合特性を有する抗体を産生するハイブリドーマを、サブクローニングし、公知の培養技法を使用して成長させ、動物において腹水腫瘍としてｉｎ  ｖｉｖｏで成長させることなどが可能である。
【０１７３】
一部の実施形態では、モノクローナル抗体は、ライブラリー方法、たとえば、ファージディスプレイライブラリーを使用して作製される。たとえば、Hoogenboom  et  al.  in  Methods  in  Molecular  Biology  178:1-37  (O'Brien  et  al.,  ed.,  Human  Press,  Totowa,  NJ,  2001)を参照されたい。一部の実施形態では、ＶＨ遺伝子およびＶＬ遺伝子のレパートリーを、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）によってクローニングし、ファージライブラリーにおいてランダムに組み換え、次いで、これを、たとえば、Winter  et  al.,  Ann.  Rev.  Immunol.,  12:  433-455  (1994)に記載されるように、抗原結合性ファージについてスクリーニングする。ファージは、典型的に、抗体断片を、一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）断片またはＦａｂ断片のいずれかとして提示する。あるいは、Griffiths  et  al.,  EMBO  J,  12:  725-734  (1993)によって記載されているように、ナイーブレパートリーを（たとえば、ヒトから）クローニングして、いずれの免疫も伴わずに、広範な非自己抗原およびさらには自己抗原に対する単一の抗体源を得ることができる。最後に、ナイーブライブラリーは、Hoogenboom  and  Winter,  J.  Mol.  Biol.,  227:  381-388  (1992)によって記載されているように、幹細胞由来の再配列されていないＶ遺伝子セグメントをクローニングし、ランダムな配列を含むＰＣＲプライマーを使用して、高度に可変のＣＤＲ３領域をコードしｉｎ  ｖｉｔｒｏで再配列を達成することによって、合成により作製することもできる。
【０１７４】
一部の実施形態では、本開示の抗体は、ニワトリ抗体である。ニワトリ抗体は、当該技術分野において公知の様々な技法を使用して産生することができ、たとえば、米国特許第６，１４３，５５９号、同第８，５９２，６４４号、および同第９，３８０，７６９号を参照されたい。
【０１７５】
一部の実施形態では、本開示の抗体は、キメラ抗体である。たとえば、米国特許第４，８１６，５６７号およびMorrison  et  al.,  Proc.  Natl.  Acad.  Sci.  USA,  81:6851-6855  (1984)を参照されたい。一部の実施形態では、キメラ抗体は、非ヒト可変領域（たとえば、ニワトリ、マウス、ラット、ハムスター、ウサギ、または非ヒト霊長類、たとえば、サルに由来する可変領域）、およびヒト定常領域を含む。一部の実施形態では、キメラ抗体は、クラスまたはサブクラスが、親抗体のものから変更されている、「クラススイッチ型」抗体である。キメラ抗体には、その抗原結合性断片が含まれる。
【０１７６】
一部の実施形態では、キメラ抗体は、ヒト化抗体である。非ヒト抗体は、親非ヒト抗体の特異性および親和性を保持しながら、ヒトに対する免疫原性を低減させるように、ヒト化することができる。一般に、ヒト化抗体は、ＨＶＲ、たとえば、ＣＤＲ（またはその部分）が、非ヒト抗体（たとえば、ニワトリ抗体）に由来し、ＦＲ（またはその部分）が、ヒト抗体配列に由来する、１つまたは複数の可変ドメインを含む。ヒト化抗体は、必要に応じて、ヒト定常領域の少なくとも一部分も含む。一部の実施形態では、ヒト化抗体におけるいくつかのＦＲ残基は、たとえば、抗体の特異性または親和性を回復または改善するために、非ヒト抗体（たとえば、ＨＶＲまたはＣＤＲ残基が由来する抗体）に由来する対応する残基と置換される。ヒト化抗体およびそれらを作製する方法は、たとえば、Almagro  and  Fransson,  Front.  Biosci.  13:1619-1633  (2008)において考察されている。ニワトリ抗体をヒト化する方法はまた、たとえば、ＷＯ２００５０１４６５３に記載されている。
【０１７７】
ヒト化に有用なヒトフレームワーク領域としては、「最適適合（best-fit）」方法を使用して選択されるフレームワーク領域、特定のサブグループの軽鎖または重鎖可変領域のヒト抗体のコンセンサス配列に由来するフレームワーク領域、ヒト体細胞変異型フレームワーク領域またはヒト生殖細胞系フレームワーク領域、ならびにＦＲライブラリーのスクリーニングに由来するフレームワーク領域が挙げられるが、これらに限定されない。たとえば、Sims  et  al.  J.  Immunol.  151:2296  (1993)、Carter  et  al.  Proc.  Natl.  Acad.  Sci.  USA,  89:4285  (1992)、Presta  et  al.  J.  Immunol.,  151:2623  (1993)、Almagro  and  Fransson,  Front.  Biosci.  13:1619-1633  (2008)、およびBaca  et  al.,  J.  Biol.  Chem.  272:10678-10684  (1997)を参照されたい。
【０１７８】
一部の実施形態では、本開示の抗体は、ヒト抗体である。ヒト抗体は、当該技術分野において公知の様々な技法を使用して産生することができる。一部の実施形態では、ヒト抗体は、非ヒト動物、たとえば、遺伝子操作されたニワトリ（たとえば、米国特許第８，５９２，６４４号および同第９，３８０，７６９号を参照されたい）ならびに／または本明細書に記載されるマウスによって、産生される。ヒト抗体は、一般に、Lonberg,  Curr.  Opin.  Immunol.  20:450-459  (2008)に記載されている。
【０１７９】
一部の実施形態では、本開示の抗体は、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆａｂ’−ＳＨ、Ｆｖ、もしくはｓｃＦｖ断片、または単一ドメイン抗体、単一重鎖抗体、もしくは単一軽鎖抗体を含むがこれらに限定されない、抗体断片である。抗体断片は、たとえば、酵素消化によって、または組換え技法によって、生成することができる。一部の実施形態では、たとえば、Morimoto  et  al.,  Journal  of  Biochemical  and  Biophysical  Methods  24:107-117  (1992)およびBrennan  et  al.,  Science,  229:81  (1985)に記載されるように、インタクトな抗体のタンパク質分解による消化を使用して、抗体断片が生成される。一部の実施形態では、抗体断片は、組換え宿主細胞によって産生される。たとえば、Ｆａｂ、Ｆｖ、およびＳｃＦｖ抗体断片は、Ｅ．ｃｏｌｉによって発現され、そこから分泌される。抗体断片は、代替として、抗体ファージライブラリーから単離することができる。
【０１８０】
Ｆａｂ’−ＳＨ断片は、Ｅ．ｃｏｌｉから直接的に回収することができ、化学的に結合させて、Ｆ（ａｂ’）２断片を形成することができる。Carter  et  al.,  Bio/Technology  10:163-167  (1992)を参照されたい。Ｆ（ａｂ’）２断片はまた、組換え宿主細胞培養物から直接的に単離することもできる。サルベージ受容体結合エピトープ残基を含む、増加したｉｎ  ｖｉｖｏ半減期を有するＦａｂおよびＦ（ａｂ’）２断片は、米国特許第５，８６９，０４６号に記載されている。
【０１８１】
一部の実施形態では、抗体は、一本鎖Ｆｖ断片（ｓｃＦｖ）である。ＷＯ９３／１６１８５、ならびに米国特許第５，５７１，８９４号および同第５，５８７，４５８号を参照されたい。ｓｃＦｖのアミノ末端またはカルボキシ末端のいずれかに、エフェクタータンパク質の融合をもたらすように、ｓｃＦｖ融合タンパク質を構築することができる。抗体断片はまた、たとえば、例として、米国特許第５，６４１，８７０号に記載されるような「線形抗体」であってもよい。そのような線形抗体は、単一特異性であってもよく、または二重特異性であってもよい。
【０１８２】
一部の実施形態では、本開示の抗体は、多重特異性抗体である。多重特異性抗体は、１つを上回る抗原に対する結合特異性（たとえば、２つ、３つ、またはそれを上回る結合特異性）を有する。一部の実施形態では、抗体は、二重特異性抗体である。一部の実施形態では、二重特異性抗体は、同じ抗原に対して２つの異なる結合特異性を含む（たとえば、同じ抗原の異なる結合親和性および／または特定のエピトープを有する）。一部の実施形態では、二重特異性抗体は、２つの異なる抗原に対する結合特異性を含む。一部の実施形態では、二重特異性抗体は、完全長抗体またはインタクトな抗体である。一部の実施形態では、二重特異性抗体は、本開示の抗体断片である。
【０１８３】
二重特異性抗体を生成および精製するための様々な方法が、当該技術分野において公知である。多数のアプローチが、説明されている。１つのアプローチは、「ノブイントゥホール（knob-into-hole）」または「くぼみにはまる突起（protuberance-into-cavity）」アプローチである（たとえば、米国特許第５，７３１，１６８号を参照されたい）。一部の実施形態では、Ｆｃドメイン単量体のヘテロ二量体化は、２つのＦｃドメイン単量体、たとえば、「ノブイントゥホール」残基対および荷電残基対に、異なるが適合性のある置換を導入することによって、促進される。ノブとホールの相互作用は、ヘテロ二量体の形成を好むが、ノブとノブ、およびホールとホールの相互作用は、立体衝突および好ましい相互作用の欠失に起因して、ホモ二量体の形成を妨害する。ホールとは、タンパク質における元のアミノ酸が、より小さな側鎖体積を有する異なるアミノ酸で置き換えられた場合に作製される、間隙（void）を指す。ノブとは、タンパク質における元のアミノ酸が、より大きな側鎖体積を有する異なるアミノ酸で置き換えられた場合に作製される、隆起を指す。たとえば、一部の実施形態では、置き換えられるアミノ酸は、Ｆｃドメイン単量体のＣＨ３抗体定常ドメインにあり、２つのＦｃドメイン単量体の二量体化に関与する。一部の実施形態では、一方のＣＨ３抗体定常ドメインにおけるホールは、もう一方のＣＨ３抗体定常ドメインにおけるノブを収容するように作製され、結果として、ノブおよびホールのアミノ酸が、２つのＦｃドメイン単量体のヘテロ二量体化を促進または支持するように作用する。一部の実施形態では、一方のＣＨ３抗体定常ドメインにおけるホールは、もう一方のＣＨ３抗体定常ドメインにおける元のアミノ酸を良好に収容するように作製される。一部の実施形態では、一方のＣＨ３抗体定常ドメインにおけるノブは、もう一方のＣＨ３抗体定常ドメインにおける元のアミノ酸とさらなる相互作用を形成するように作製される。
【０１８４】
一部の実施形態では、ホールは、ＣＨ３抗体定常ドメインにおける大きな側鎖を有するアミノ酸、たとえば、チロシンまたはトリプトファンを、小さな側鎖を有するアミノ酸、たとえば、アラニン、バリン、またはスレオニンで置き換えること、たとえば、Ｙ４０７Ｖ変異によって、構築される。同様に、一部の実施形態では、ノブは、ＣＨ３抗体定常ドメインにおける小さな側鎖を有するアミノ酸を、大きな側鎖を有するアミノ酸で置き換えること、たとえば、Ｔ３６６Ｗ変異によって、構築される。一部の実施形態では、一方のＦｃドメイン単量体は、ノブの変異Ｔ３６６Ｗを含み、他方のＦｃドメイン単量体は、ホールの変異Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３５８Ａ、およびＹ４０７Ｖを含む。ノブイントゥホールのアミノ酸対の例としては、表４に示されるものが挙げられるが、これらに限定されない。
【表４】
2021515583.tif 000012
【０１８５】
別のアプローチは、免疫グロブリン定常ドメイン配列、たとえば、ヒンジ領域、ＣＨ２領域、およびＣＨ３領域のうちの少なくとも一部を含む免疫グロブリン重鎖定常ドメインに融合された、所望される結合特異性（抗体−抗原結合部位）を有する抗体可変ドメインを使用する。一部の実施形態では、二重特異性抗体は、一方のアームに第１の結合特異性を有するハイブリッド免疫グロブリン重鎖、および他方のアームにハイブリッド免疫グロブリン重鎖−軽鎖対（第２の結合特異性を提供する）を有する。ＷＯ９４／０４６９０を参照されたい。別のアプローチは、架橋（たとえば、米国特許第４，６７６，９８０号を参照されたい）を使用して、ヘテロコンジュゲート抗体を産生する。一部の実施形態では、二重特異性抗体は、化学的連結を使用して（たとえば、Brennan  et  al.,  Science,  229:  81  (1985)を参照されたい）、タンパク質分解によりインタクトな抗体をＦ（ａｂ’）２断片に切断し、これをジチオール錯化剤の存在下において還元し、チオニトロベンゾエート（ＴＮＢ）誘導体に変換し、これらのうちの一方を、還元によってＦａｂ’−チオールに再変換し、他方のＦａｂ’−ＴＮＢ誘導体と混合して、二重特異性抗体を形成することにより、調製することができる。一部の実施形態では、Ｆａｂ’−ＳＨ断片は、化学的に結合される。一部の実施形態では、二重特異性抗体断片は、Kostelny  et  al.,  J.  Immunol.,  148(5):1547-1553  (1992)にあるように、ロイシンジッパーを使用して、細胞培養で産生される。他の二重特異性抗体形式については、たとえば、Spiess,  C.  et  al.  (2015)  Mol.  Immunol.  67:95-106を参照されたい。
【０１８６】
一部の実施形態では、本開示の抗体は、ダイアボディである。たとえば、Hollinger  et  al.,  Proc.  Natl.  Acad.  Sci.  USA,  90:6444-6448  (1993)を参照されたい。ダイアボディでは、１つの断片のＶＨおよびＶＬドメインが、別の断片の相補的なＶＬおよびＶＨドメインと対合し、それによって、２つの抗原結合性部位が形成される。一本鎖Ｆｖ（ｓＦｖ）二量体を使用して二重特異性抗体断片を作製するための別の戦略もまた、報告されている。Gruber  et  al,  J.  Immunol,  152:5368  (1994)を参照されたい。
【０１８７】
一部の実施形態では、本開示の抗体は、単一ドメイン抗体である。単一ドメイン抗体は、抗体の重鎖可変ドメインのすべてもしくは一部分または軽鎖可変ドメインのすべてもしくは一部分を含む、単一のポリペプチド鎖を指す。ある特定の実施形態では、単一ドメイン抗体は、ヒト単一ドメイン抗体である（たとえば、米国特許第６，２４８，５１６号Ｂ１を参照されたい）。一実施形態では、単一ドメイン抗体は、抗体の重鎖可変ドメインのすべてまたは一部分を含む。ラクダ抗体もまた、公知である。
【０１８８】
抗体は、組換え方法を使用して産生することができる。抗抗原抗体の組換え産生のために、抗体をコードする核酸を単離し、それを、さらなるクローニング（ＤＮＡの増幅）または発現のために、複製可能なベクターに挿入する。抗体をコードするＤＮＡは、従来的な手順を使用して（たとえば、抗体の重鎖および軽鎖をコードする遺伝子に特異的に結合することができるオリゴヌクレオチドプローブを使用することによって）、容易に単離し、シーケンシングすることができる。多数のベクターが、利用可能である。ベクター成分としては、一般に、以下のうちの１つまたは複数が挙げられるが、これらに限定されない：シグナル配列、複製起点、１つまたは複数のマーカー遺伝子、エンハンサーエレメント、プロモーター、および転写終結配列。
【０１８９】
本開示の抗体は、異種ポリペプチド、たとえば、シグナル配列または成熟タンパク質もしくはポリペプチドのＮ末端に特異的切断部位を有する他のポリペプチドとの融合ポリペプチドとして、組換えにより産生することができる。選択される異種シグナル配列は、宿主細胞によって認識され、プロセシングされる（たとえば、シグナルペプチダーゼによって切断される）ものであり得る。ネイティブな抗体シグナル配列を認識およびプロセシングしない原核生物宿主細胞については、シグナル配列は、たとえば、アルカリホスファターゼ、ペニシリナーゼ、ｌｐｐ、または熱安定性エンテロトキシンＩＩリーダーから選択される原核生物シグナル配列によって置換される。酵母分泌のために、ネイティブなシグナル配列は、たとえば、酵母インベルターゼリーダー、因子リーダー（ＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓおよびＫｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓ  α−因子リーダーを含む）、または酸性ホスファターゼリーダー、Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓグルコアミラーゼリーダーなどによって、置換され得る。哺乳動物細胞における発現の場合、哺乳動物シグナル配列ならびにウイルス分泌リーダー、たとえば、単純ヘルペスｇＤシグナルが、利用可能である。
【０１９０】
発現ベクターおよびクローニングベクターのいずれも、ベクターが１つまたは複数の選択された宿主細胞において複製することを可能にする、たとえば、ベクターが宿主染色体ＤＮＡとは独立して複製することを可能にする、核酸配列を含む。この配列には、複製起点または自律的複製配列が含まれ得る。そのような配列は、様々な細菌、酵母、およびウイルスについて、周知である。一般に、複製起点成分は、哺乳動物発現ベクターには必要ない（ＳＶ４０起点は初期プロモーターを含むため、それを使用することができる）。
【０１９１】
発現ベクターおよびクローニングベクターは、選択遺伝子または選択可能なマーカーを含み得る。典型的な選択遺伝子は、（ａ）抗生物質もしくは他の毒素、たとえば、アンピシリン、ネオマイシン、メトトレキサート、もしくはテトラサイクリンに対する耐性を付与するタンパク質、（ｂ）栄養要求性欠損を補うタンパク質、または（ｃ）複合培地から利用可能ではない重要な栄養素を供給するタンパク質をコードする。優性選択の例は、薬物であるネオマイシン、ミコフェノール酸、およびハイグロマイシンを使用する。哺乳動物細胞に好適な選択可能なマーカーの別の例は、抗体をコードする核酸を取り込む能力のある細胞の同定を可能にするもの、たとえば、ＤＨＦＲ、グルタミンシンテターゼ（ＧＳ）、チミジンキナーゼ、メタロチオネイン−Ｉおよび−ＩＩ、好ましくは霊長類メタロチオネイン遺伝子、アデノシンデアミナーゼ、オルニチンデカルボキシラーゼなどである。たとえば、内因性ＤＨＦＲ活性が欠損しているＤＨＦＲ遺伝子が形質転換されたチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞株は、ＤＨＦＲの競合的アンタゴニストであるメトトレキサート（Ｍｔｘ）を含有する培養培地において、形質転換体を培養することによって同定される。
【０１９２】
あるいは、目的の抗体、野生型ＤＨＦＲ遺伝子、および別の選択可能なマーカー、たとえば、アミノグリコシド３’−ホスホトランスフェラーゼ（ＡＰＨ）をコードするＤＮＡ配列が形質転換または共形質転換された宿主細胞（特に、内因性ＤＨＦＲを含む野生型宿主）は、選択可能なマーカーの選択剤、たとえば、アミノグリコシド抗生物質、たとえば、カナマイシン、ネオマイシン、またはＧ４１８を含有する培地における細胞成長によって、選択することができる。
【０１９３】
発現ベクターおよびクローニングベクターは、一般に、宿主生物によって認識され、抗体をコードする核酸に作動可能に連結される、プロモーターを含む。原核生物宿主で使用するのに好適なプロモーターとしては、ｐｈｏＡプロモーター、β−ラクタマーゼおよびラクトースプロモーター系、アルカリホスファターゼプロモーター、トリプトファン（ｔｒｐ）プロモーター系、ならびにハイブリッドプロモーター、たとえば、ｔａｃプロモーターが挙げられる。しかしながら、他の公知の細菌プロモーターが、好適である。プロモーター配列は、真核生物については公知である。酵母プロモーターは、当該技術分野において周知であり、成長条件によって調節される誘導性プロモーター／エンハンサーが含まれ得る。実質的にすべての真核生物遺伝子は、転写が開始される部位からおよそ２５〜３０塩基上流に位置するＡＴリッチ領域を有する。例としては、３−ホスホグリセリン酸キナーゼまたは他の糖分解酵素、たとえば、エノラーゼ、グリセルアルデヒド−３−リン酸デヒドロゲナーゼ、ヘキソキナーゼ、ピルビン酸デカルボキシラーゼ、ホスホフルクトキナーゼ、グルコース−６−リン酸イソメラーゼ、３−ホスホグリセリン酸ムターゼ、ピルビン酸キナーゼ、トリオースリン酸イソメラーゼ、ホスホグルコースイソメラーゼ、およびグルコキナーゼのプロモーターが挙げられるが、これらに限定されない。哺乳動物宿主細胞におけるベクターからの抗体の転写は、たとえば、ウイルスのゲノムから得られたプロモーターによって、制御され得る。ＳＶ４０ウイルスの初期および後期プロモーターは、便宜的に、ＳＶ４０ウイルス複製起点も含む、ＳＶ４０制限断片として得られる。ヒトサイトメガロウイルスの最初期プロモーターは、便宜的に、ＨｉｎｄＩＩＩ  Ｅ制限断片として得られる。あるいは、ラウス肉腫ウイルスの長い末端反復配列を、プロモーターとして使用してもよい。
【０１９４】
より高次の真核生物による本発明の抗体をコードするＤＮＡの転写は、エンハンサー配列をベクターに挿入することによって増加することが多い。現在では、哺乳動物遺伝子に由来する多くのエンハンサー配列が、公知である（グロビン、エラスターゼ、アルブミン、α−フェトプロテイン、およびインスリン）。しかしながら、典型的には、真核生物細胞ウイルスに由来するエンハンサーを使用することになる。
【０１９５】
真核生物宿主細胞（酵母、真菌、昆虫、植物、動物、ヒト、または他の多細胞生物に由来する有核細胞）において使用される発現ベクターはまた、転写の終結およびｍＲＮＡ安定化に必要とされる配列も含む。
【０１９６】
本明細書においてベクターにおけるＤＮＡのクローニングまたは発現に好適な宿主細胞は、前述の原核生物細胞、酵母細胞、または高次真核生物細胞である。この目的に好適な原核生物としては、真正細菌、たとえば、グラム陰性生物またはグラム陽性生物、たとえば、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒｉａｃｅａｅ、たとえば、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ、たとえば、Ｅ．ｃｏｌｉ、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ、Ｅｒｗｉｎｉａ、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ、Ｐｒｏｔｅｕｓ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ、たとえば、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ、Ｓｅｒｒａｔｉａ、たとえば、Ｓｅｒｒａｔｉａ  ｍａｒｃｅｓｃａｎｓ、およびＳｈｉｇｅｌｌａなどが挙げられる。原核生物に加えて、真核微生物、たとえば、糸状菌または酵母が、抗体をコードするベクターの好適なクローニングまたは発現宿主である。Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ、または一般的なパン酵母は、低次真核宿主微生物間で最も一般的に使用されている。グリコシル化経路が「ヒト化」されており、部分的または完全にヒトのグリコシル化パターンを有する抗体の産生をもたらす、ある特定の真菌または酵母株が、選択され得る。たとえば、Li  et  al.,  Nat.  Biotech.  24:210-215  (2006)を参照されたい。
【０１９７】
綿、トウモロコシ、ジャガイモ、ダイズ、ペチュニア、トマト、アオウキクサ（Ｌｅｎｉｎａｃｅａｅ）、アルファルファ（Ｍ．ｔｒｕｎｃａｔｕｌａ）、およびタバコの植物細胞培養物もまた、宿主として使用することができる。
【０１９８】
グリコシル化抗体の発現に好適な宿主細胞はまた、多細胞生物（無脊椎動物および脊椎動物）にも由来する。無脊椎動物細胞の例としては、植物細胞および昆虫細胞が挙げられる。多数のバキュロウイルス株およびバリアント、ならびにＳｐｏｄｏｐｔｅｒａ  ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ（イモムシ）、Ａｅｄｅｓ  ａｅｇｙｐｔｉ（蚊）、Ａｅｄｅｓ  ａｌｂｏｐｉｃｔｕｓ（蚊）、Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａ  ｍｅｌａｎｏｇａｓｔｅｒ（ミバエ）、およびＢｏｍｂｙｘ  ｍｏｒｉなどの宿主に由来する対応する許容昆虫宿主細胞が、特定されている。
【０１９９】
脊椎動物細胞は、宿主として使用することができ、培養（組織培養）における脊椎動物細胞の繁殖は、日常的な手技となっている。有用な哺乳動物宿主細胞株の例には、ＳＶ４０を形質転換したサル腎臓ＣＶ１株（ＣＯＳ−７、ＡＴＣＣ  ＣＲＬ  １６５１）、ヒト胎児腎臓株（２９３または懸濁培養における成長のためにサブクローニングした２９３細胞、Graham  et  al.,  J.  Gen  Virol.  36:59  (1977)）、ベビーハムスター腎臓細胞（ＢＨＫ、ＡＴＣＣ  ＣＣＬ  １０）、マウルセルトリ細胞（ＴＭ４、Mather,  Biol.  Reprod.  23:243-251  (1980)）、サル腎臓細胞（ＣＶ１  ＡＴＣＣ  ＣＣＬ  ７０）、アフリカミドリザル腎臓細胞（ＶＥＲＯ−７６、ＡＴＣＣ  ＣＲＬ−１５８７）、ヒト子宮頸癌細胞（ＨＥＬＡ、ＡＴＣＣ  ＣＣＬ  ２）、イヌ腎臓細胞（ＭＤＣＫ、ＡＴＣＣ  ＣＣＬ  ３４）、バッファローラット肝臓細胞（ＢＲＬ  ３Ａ、ＡＴＣＣ  ＣＲＬ  １４４２）、ヒト肺細胞（Ｗ１３８、ＡＴＣＣ  ＣＣＬ  ７５）、ヒト肝臓細胞（Ｈｅｐ  Ｇ２、ＨＢ  ８０６５）、マウス乳腺腫瘍（ＭＭＴ  ０６０５６２、ＡＴＣＣ  ＣＣＬ５１）、ＴＲＩ細胞（Mather  et  al.,  Annals  N.Y.  Acad.  Sci.  383:44-68  (1982)）、ＭＲＣ  ５細胞、ＦＳ４細胞、およびヒトヘパトーマ株（Ｈｅｐ  Ｇ２）がある。他の有用な哺乳動物宿主細胞株としては、ＤＨＦＲ−  ＣＨＯ細胞を含む、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞（Urlaub  et  al.,  Proc.  Natl.  Acad.  Sci.  USA  77:4216  (1980)）、ならびに骨髄腫細胞株、たとえば、ＮＳ０およびＳｐ２／０が挙げられる。抗体産生に好適なある特定の哺乳動物宿主細胞株の総説については、たとえば、Yazaki  and  Wu,  Methods  in  Molecular  Biology,  Vol.  248  (B.  K.  C.  Lo,  ed.,  Humana  Press,  Totowa,  N.J.,  2003),  pp.  255-268を参照されたい。
【０２００】
本開示の宿主細胞は、様々な培地において培養され得る。市販の培地、たとえば、Ｈａｍ’ｓ  Ｆ１０（Ｓｉｇｍａ）、最小必須培地（（ＭＥＭ）、（Ｓｉｇｍａ）、ＲＰＭＩ−１６４０（Ｓｉｇｍａ）、およびダルベッコ変法イーグル培地（（ＤＭＥＭ）、Ｓｉｇｍａ）が、宿主細胞を培養するのに好適である。加えて、Ham  et  al.,  Meth.  Enz.  58:44  (1979)、Barnes  et  al.,  Anal.  Biochem.  102:255  (1980)、米国特許第４，７６７，７０４号、同第４，６５７，８６６号、同第４，９２７，７６２号、同第４，５６０，６５５号、または同第５，１２２，４６９号、ＷＯ９０／０３４３０、ＷＯ８７／００１９５、または米国特許再発行出願第３０，９８５号に記載されている培地のうちのいずれかを、宿主細胞の培養培地として使用することができる。これらの培地のいずれも、必要に応じて、ホルモンおよび／または他の成長因子（たとえば、インスリン、トランスフェリン、または上皮成長因子）、塩（たとえば、塩化ナトリウム、カルシウム、マグネシウム、およびリン酸塩）、緩衝物質（たとえば、ＨＥＰＥＳ）、ヌクレオチド（たとえば、アデノシンおよびチミジン）、抗生物質（たとえば、ＧＥＮＴＡＭＹＣＩＮ（商標）薬物）、微量元素（通常マイクロモル濃度範囲の最終濃度で存在する無機化合物として定義される）、ならびにグルコースまたは同等のエネルギー源が、補充され得る。任意の他の必要な補充物質もまた、当業者に公知である適切な濃度で含まれ得る。培養条件、たとえば、温度、ｐＨなどは、発現に選択される宿主細胞でこれまでに使用されているものであり、当業者には明らかである。
【０２０１】
組換え技法を使用する場合、抗体は、細胞内、細胞膜周囲腔で産生され得るか、または培地内に直接的に分泌され得る。抗体が、細胞内で産生される場合、第１のステップとして、宿主細胞または溶解した断片のいずれかである微粒子残屑が、たとえば、遠心分離または限外濾過によって、除去される。Carter  et  al.,  Bio/Technology  10:163-167  (1992)は、Ｅ．ｃｏｌｉの細胞膜周囲腔に分泌される抗体を単離するための手順を説明している。
【０２０２】
細胞から調製された抗体組成物は、たとえば、ヒドロキシルアパタイトクロマトグラフィー、疎水性相互作用クロマトグラフィー、ゲル電気泳動、透析、および親和性クロマトグラフィーを使用して、精製することができるが、親和性クロマトグラフィーが、典型的に好まれる精製ステップの１つである。
グリコシル化バリアント
【０２０３】
一部の実施形態では、本明細書において提供される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体は、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体がグリコシル化される程度を増加または減少させるように、改変される。抗ＣＬＤＮ１８．２抗体へのグリコシル化部位の付加またはその欠失は、便宜的に、１つまたは複数のグリコシル化部位が作製または除去されるように、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはそのポリペプチド部分のアミノ酸配列を改変することによって、達成することができる。
【０２０４】
抗ＣＬＤＮ１８．２抗体がＦｃ領域を含む場合は、そこに結合した炭水化物を、改変してもよい。哺乳動物細胞によって産生されるネイティブな抗体は、典型的に、分岐鎖二分岐オリゴ糖を含み、これは、Ｆｃ領域のＣＨ２ドメインのＡｓｎ２９７へのＮ結合によって付加されることが一般的である。たとえば、Wright  et  al.,  TIBTECH  15:26-32  (1997)を参照されたい。オリゴ糖は、様々な炭水化物、たとえば、マンノース、Ｎ−アセチルグルコサミン（ＧｌｃＮＡｃ）、ガラクトース、およびシアル酸、ならびに二分岐オリゴ糖構造の「ステム」においてＧｌｃＮＡｃに付加されるフコースを含み得る。一部の実施形態では、本発明の抗ＣＬＤＮ１８．２抗体におけるオリゴ糖の修飾は、ある特定の改善された特性を有する抗ＣＬＤＮ１８．２抗体バリアントを作製するために行われ得る。
【０２０５】
ＦｃのＣＨ２ドメインに付加されるＮ−グリカンは、異種である。ＣＨＯ細胞において生成される抗体またはＦｃ融合タンパク質は、フコシルトランスフェラーゼ活性によってフコシル化される。Shoji-Hosaka  et  al.,  J.  Biochem.  2006,  140:777-  83を参照されたい。通常、わずかな割合の天然に存在する非フコシル化ＩｇＧが、ヒト血清中において検出され得る。ＦｃのＮ−グリコシル化は、ＦｃγＲへの結合にとって重要であり、Ｎ−グリカンの非フコシル化は、ＦｃのＦｃγＲＩＩＩａへの結合能力を増加させる。ＦｃγＲＩＩＩａ結合の増加により、ＡＤＣＣを増強することができ、これは、細胞毒性が望ましいある特定の抗体剤の治療適用において有利であり得る。
【０２０６】
一部の実施形態では、増強されたエフェクター機能は、Ｆｃに媒介される細胞毒性が望ましくない場合、有害であり得る。一部の実施形態では、Ｆｃ断片またはＣＨ２ドメインは、グリコシル化されない。一部の実施形態では、ＣＨ２ドメインにおけるＮ−グリコシル化部位を、グリコシル化を防止するために変異させる。
【０２０７】
一部の実施形態では、Ｆｃ領域を含む抗ＣＬＤＮ１８．２抗体バリアントが、提供され、ここで、Ｆｃ領域に付加される炭水化物構造は、低減されたフコースを有するか、またはフコースが欠如しており、これによって、ＡＤＣＣ機能が改善され得る。具体的には、野生型ＣＨＯ細胞において産生される同じ抗ＣＬＤＮ１８．２抗体におけるフコースの量と比べて、低減されたフコースを有する抗ＣＬＤＮ１８．２抗体が、本明細書において企図される。すなわち、それらは、ネイティブなＣＨＯ細胞（たとえば、ネイティブなグリコシル化パターンをもたらすＣＨＯ細胞、たとえば、ネイティブなＦＵＴ８遺伝子を含むＣＨＯ細胞）によって産生された場合に別途有するであろうフコースよりも少ない量のフコースを有することを特徴とする。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体は、その上のＮ結合型グリカンのうちの約５０％を下回る、４０％を下回る、３０％を下回る、２０％を下回る、１０％を下回る、または５％を下回るものが、フコースを含む抗体である。たとえば、そのような抗ＣＬＤＮ１８．２抗体におけるフコースの量は、１％〜８０％、１％〜６５％、５％〜６５％、または２０％〜４０％であり得る。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体は、その上のＮ結合型グリカンのうちのいずれも、フコースを含まない抗体であり、すなわち、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体は、完全にフコースを含まないか、またはフコースを有さないか、または非フコシル化されている。フコースの量は、たとえば、ＷＯ２００８／０７７５４６に記載されるように、ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ質量分析法によって測定される、Ａｓｎ２９７に結合しているすべての糖構造（たとえば、複合体構造、ハイブリッド構造、または高マンノース構造）の合計に対する、Ａｓｎ２９７における糖鎖内のフコースの平均量を計算することによって決定される。Ａｓｎ２９７は、Ｆｃ領域のおよそ２９７位に位置するアスパラギン残基を指すが（Ｆｃ領域残基のＥＵ番号付け）、しかしながら、Ａｓｎ２９７はまた、抗体におけるわずかな配列の変動に起因して、２９７位からアミノ酸±約３個分上流または下流に、すなわち、２９４位から３００位の間に、位置してもよい。そのようなフコシル化バリアントは、改善されたＡＤＣＣ機能を有し得る。たとえば、米国特許公開第ＵＳ２００３／０１５７１０８号（Ｐｒｅｓｔａ，Ｌ．）、同第ＵＳ２００４／００９３６２１号（Ｋｙｏｗａ  Ｈａｋｋｏ  Ｋｏｇｙｏ  Ｃｏ．，Ｌｔｄ）を参照されたい。「脱フコシル化」または「フコース欠損」抗体剤バリアントに関連する刊行物の例としては、ＵＳ２００３／０１５７１０８、ＷＯ２０００／６１７３９、ＷＯ２００１／２９２４６、ＵＳ２００３／０１１５６１４、ＵＳ２００２／０１６４３２８、ＵＳ２００４／００９３６２１、ＵＳ２００４／０１３２１４０、ＵＳ２００４／０１１０７０４、ＵＳ２００４／０１１０２８２、ＵＳ２００４／０１０９８６５、ＷＯ２００３／０８５１１９、ＷＯ２００３／０８４５７０、ＷＯ２００５／０３５５８６、ＷＯ２００５／０３５７７８、ＷＯ２００５／０５３７４２、ＷＯ２００２／０３１１４０、Okazaki  et  al.  J.  Mol.  Biol.  336:1239-1249  (2004)、Yamane-Ohnuki  et  al.  Biotech.  Bioeng.  87:  614  (2004)が挙げられる。脱フコシル化抗体を産生することができる細胞株の例としては、タンパク質フコシル化が欠損しているＬｅｃ１３  ＣＨＯ細胞（Ripka  et  al.  Arch.  Biochem.  Biophys.  249:533-545  (1986)、Ｐｒｅｓｔａ，Ｌの米国特許出願第ＵＳ２００３／０１５７１０８号Ａ１、およびＡｄａｍｓらのＷＯ２００４／０５６３１２Ａ１、特に実施例１１）、ならびにノックアウト細胞株、たとえば、α−１，６−フコシルトランスフェラーゼ遺伝子ＦＵＴ８ノックアウトＣＨＯ細胞（たとえば、Yamane-Ohnuki  et  al.  Biotech.  Bioeng.  87:  614  (2004)、Kanda,  Y.  et  al.,  Biotechnol.  Bioeng.,  94(4):680-688  (2006)、およびＷＯ２００３／０８５１０７を参照されたい）が挙げられる。
【０２０８】
たとえば、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体のＦｃ領域に付加された二分岐オリゴ糖が、ＧｌｃＮＡｃによって分岐された、分岐オリゴ糖を有する抗ＣＬＤＮ１８．２抗体バリアントが、さらに提供される。そのような抗ＣＬＤＮ１８．２抗体バリアントは、低減されたフコシル化および／または改善されたＡＤＣＣ機能を有し得る。そのような抗体剤バリアントの例は、たとえば、ＷＯ２００３／０１１８７８（Ｊｅａｎ−Ｍａｉｒｅｔら）、米国特許第６，６０２，６８４号（Ｕｍａｎａら）、ＵＳ２００５／０１２３５４６（Ｕｍａｎａら）、およびFerrara  et  al.,  Biotechnology  and  Bioengineering,  93(5):  851-861  (2006)に記載されている。Ｆｃ領域に付加されたオリゴ糖に少なくとも１つのガラクトース残基を有する抗ＣＬＤＮ１８．２抗体バリアントもまた、提供される。そのような抗ＣＬＤＮ１８．２抗体バリアントは、改善されたＣＤＣ機能を有し得る。そのような抗体剤バリアントは、たとえば、ＷＯ１９９７／３００８７（Ｐａｔｅｌら）、ＷＯ１９９８／５８９６４（Ｒａｊｕ，Ｓ．）、およびＷＯ１９９９／２２７６４（Ｒａｊｕ，Ｓ．）に記載されている。
【０２０９】
一部の実施形態では、Ｆｃ領域を含む抗ＣＬＤＮ１８．２抗体バリアントは、ＦｃγＲＩＩＩに結合することができる。一部の実施形態では、Ｆｃ領域を含む抗ＣＬＤＮ１８．２抗体バリアントは、ヒトエフェクター細胞（たとえば、Ｔ細胞）の存在下において、ＡＤＣＣ活性を有するか、またはヒトエフェクター細胞の存在下において、ヒト野生型ＩｇＧ１Ｆｃ領域を含む以外は同じ抗ＣＬＤＮ１８．２抗体と比較して、増加したＡＤＣＣ活性を有する。
システイン操作型バリアント
【０２１０】
一部の実施形態では、１つまたは複数のアミノ酸残基が、システイン残基で置換された、システイン操作型抗ＣＬＤＮ１８．２抗体を作製することが望ましい場合がある。一部の実施形態では、置換残基は、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体の接触可能な部位に生じる。それらの残基をシステインで置換することにより、反応性チオール基をそれによって抗ＣＬＤＮ１８．２抗体の接触可能な部位に位置させ、それを使用して、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体を他の部分、たとえば、薬物部分、またはリンカー−薬物部分にコンジュゲートして、本明細書にさらに記載されるような抗ＣＬＤＮ１８．２イムノコンジュゲートを作製することができる。システイン操作型抗ＣＬＤＮ１８．２抗体は、たとえば、米国特許第７，５２１，５４１号に記載されるように生成することができる。
エフェクター機能の操作
【０２１１】
たとえば、がんの処置における抗体の有効性を増強するために、エフェクター機能に関して、本明細書において提供される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体を修飾することが望ましい場合がある。たとえば、システイン残基を、Ｆｃ領域に導入し、それによって、この領域における鎖間ジスルフィド結合の形成を可能にすることができる。このようにして生成されたホモ二量体抗体は、改善された内部移行能力ならびに／または増加した補体媒介性細胞殺滅および抗体依存性細胞毒性（ＡＤＣＣ）を有し得る。Caron  et  al.,  J.  Exp.  Med.,  176:  1191-1195  (1992)およびShapes,  J.  Immunol.,  148:  2918-2922  (1992)を参照されたい。増強した抗腫瘍活性を有するホモ二量体抗体は、Wolff  et  al.,  Cancer  Research,  53:  2560-2565  (1993)に記載されるヘテロ二官能性架橋剤を使用して調製することもできる。あるいは、抗体は、通常のＦｃ領域を含むように操作することができ、それによって、増強された補体溶解およびＡＤＣＣ能力を有し得る。Stevenson  et  al.,  Anti-Cancer  Drug  Design3:  219-230  (1989)を参照されたい。
【０２１２】
Ｆｃ領域配列における変異または改変は、ＦｃＲ結合（たとえば、ＦｃγＲ、ＦｃＲｎへの結合）を改善するように作製することができる。一部の実施形態では、本明細書において提供される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体は、ネイティブなＩｇＧまたは親抗体と比較して、少なくとも１つの改変されたエフェクター機能、たとえば、改変されたＡＤＣＣ、ＣＤＣ、および／またはＦｃＲｎ結合を含む。一部の実施形態では、変異または改変を含む抗体のエフェクター機能は、親抗体と比べて増加している。一部の実施形態では、変異または改変を含む抗体のエフェクター機能は、親抗体と比べて減少している。いくつかの有用な特定の変異の例は、たとえば、Shields,  RL  et  al.  (2001)  JBC  276(6)6591-6604、Presta,  L.G.,  (2002)  Biochemical  Society  Transactions  30(4):487-490、およびＷＯ００／４２０７２に記載されている。
【０２１３】
一部の実施形態では、本明細書において提供される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体は、Ｆｃ受容体変異、たとえば、Ｆｃ領域の少なくとも１つの位置における置換変異を含む。そのような置換変異（複数可）は、たとえば、２３８、２３９、２４６、２４８、２４９、２５２、２５４、２５５、２５６、２５８、２６５、２６７、２６８、２６９、２７０、２７２、２７６、２７８、２８０、２８３、２８５、２８６、２８９、２９０、２９２、２９３、２９４、２９５、２９６、２９８、３０１、３０３、３０５、３０７、３０９、３１２、３１５、３２０、３２２、３２４、３２６、３２７、３２９、３３０、３３１、３３２、３３３、３３４、３３５、３３７、３３８、３４０、３６０、３７３、３７６、３７８、３８２、３８８、３８９、３９８、４１４、４１６、４１９、４３０、４３４、４３５、４３７、４３８、または４３９を含むがこれらに限定されない、Ｆｃドメイン内のアミノ酸位に行われ得、ここで、Ｆｃ領域における残基の番号付けは、ＥＵ番号付けシステムに従う。一部の実施形態では、Ｆｃ受容体変異は、Ｄ２６５Ａ置換である。一部の実施形態では、Ｆｃ受容体変異は、Ｎ２９７Ａ置換である。追加の好適な変異は、当該技術分野において周知である。例示的な変異は、たとえば、米国特許第７，３３２，５８１号に記載されている。
イムノコンジュゲートおよび共有結合による修飾
【０２１４】
本発明はまた、第２の部分にコンジュゲートされた抗体を含む、イムノコンジュゲートにも関する。一部の実施形態では、第２の部分は、細胞毒性剤、たとえば、化学療法剤、毒素（たとえば、細菌、真菌、植物、もしくは動物起源の酵素的に活性な毒素、またはそれらの断片）、または放射性同位体（たとえば、放射性コンジュゲート）である。
【０２１５】
使用することができる酵素的に活性な毒素およびその断片としては、ジフテリアＡ鎖、ジフテリア毒素の非結合性活性断片、外毒素Ａ鎖（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ由来）、リシンＡ鎖、アブリンＡ鎖、モデシンＡ鎖、アルファ−サルシン、Ａｌｅｕｒｉｔｅｓ  ｆｏｒｄｉｉタンパク質、ジアンチンタンパク質、Ｐｈｙｔｏｌａｃａ  ａｍｅｒｉｃａｎａタンパク質（ＰＡＰＩ、ＰＡＰＩＩ、およびＰＡＰ−Ｓ）、ｍｏｍｏｒｄｉｃａ  ｃｈａｒａｎｔｉａインヒビター、クルシン、クロチン、ｓａｐａｏｎａｒｉａ  ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓインヒビター、ゲロニン、ミトゲリン（mitogellin）、レストリクトシン、フェノマイシン、エノマイシン、ならびにトリコテセンが挙げられる。様々な放射性核種が、放射性コンジュゲート抗体の産生に利用可能である。例としては、２１２Ｂｉ、１３１Ｉ、１３１Ｉｎ、９０Ｙ、および１８６Ｒｅが挙げられる。そのようなイムノコンジュゲートの生成において有用な例示的な化学療法剤は、本明細書の他の箇所に記載されている。
【０２１６】
ある特定の実施形態では、本明細書において提供される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、メイタンシン、メイタンシノイド、またはカリケアマイシンにコンジュゲートされる。ある特定の実施形態では、本明細書において提供される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、メイタンシノイドＤＭ１にコンジュゲートされる。
【０２１７】
抗体および細胞毒性剤のコンジュゲートは、様々な二官能性タンパク質カップリング剤、たとえば、Ｎ−スクシンイミジル−３−（２−ピリジルジチオール）プロピオネート（ＳＰＤＰ）、イミノチオラン（ＩＴ）、イミドエステルの二官能性誘導体（たとえば、ジメチルアジピミデートＨＣｌ）、活性エステル（たとえば、スベリン酸ジスクシンイミジル）、アルデヒド（たとえば、グルタルアルデヒド）、ビス−アジド化合物（たとえば、ビス（ｐ−アジドベンゾイル）ヘキサンジアミン）、ビスジアゾニウム誘導体（たとえば、ビス−（ｐ−ジアゾニウムベンゾイル）−エチレンジアミン）、ジイソシアネート（たとえば、トリエン２，６−ジイソシアネート）、およびビス−活性フッ素化合物（たとえば、１，５−ジフルオロ−２，４−ジニトロベンゼン）を使用して作製される。たとえば、リシン免疫毒素は、Vitetta  et  al.,  Science,  238:  1098  (1987)に記載されるように調製することができる。炭素−１４標識１−イソチオシアナトベンジル−３−メチルジエチレントリアミン五酢酸（ＭＸ−ＤＴＰＡ）は、放射性ヌクレオチドを抗体にコンジュゲートするための例示的なキレート剤である。ＷＯ９４／１１０２６を参照されたい。
【０２１８】
別の実施形態では、抗体は、腫瘍のプレターゲティングに利用するために、「受容体」（たとえば、ストレプトアビジン）にコンジュゲートすることができ、ここで、抗体−受容体コンジュゲートは、患者に投与された後、未結合のコンジュゲートが、洗浄剤を使用して循環から除去され、次に、細胞毒性剤（たとえば、放射性ヌクレオチド）にコンジュゲートされる「リガンド」（たとえば、アビジン）の投与が行われる。
【０２１９】
少なくとも１つの他の抗体に共有結合で結合した、本明細書に記載される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体を含むヘテロコンジュゲート抗体もまた、提供される。たとえば、免疫系細胞を望ましくない細胞へと向けさせるため（米国特許第４，６７６，９８０号）およびＨＩＶ感染の処置のための、ヘテロコンジュゲート抗体が、提案されている。本明細書に記載される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体を含むヘテロコンジュゲート抗体は、架橋剤を含むものを含む、合成タンパク質化学における公知の方法を使用して、ｉｎ  ｖｉｔｒｏで調製することができる。たとえば、免疫毒素は、ジスルフィド交換反応を使用して、またはチオエーテル結合を形成することによって、構築することができる。この目的に好適な試薬の例としては、イミノチオレート（iminothiolate）およびメチル−４−メルカプトブチリミデート、ならびにたとえば米国特許第４，６７６，９８０号に開示されているものが挙げられる。
【０２２０】
少なくとも１つの共有結合による修飾を含む、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体もまた、提供される。共有結合による修飾の１つの種類には、抗ＣＬＤＮ１８．２の標的とされるアミノ酸残基を、抗体の選択された側鎖またはＮ末端残基もしくはＣ末端残基と反応することができる有機誘導体化剤と反応させることが含まれる。広く使用されている架橋剤としては、たとえば、１，１−ビス（ジアゾアセチル）−２−フェニルエタン、グルタルアルデヒド、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル、たとえば、４−アジドサリチル酸を有するエステル、ジスクシンイミジルエステル、たとえば、３，３’−ジチオビス（スクシンイミジル−プロピオネート）を含む、ホモ二官能性イミドエステル、二官能性マレイミド、たとえば、ビス−Ｎ−マレイミド−１，８−オクタン、ならびにメチル−３−［（ｐ−アジドフェニル）−ジチオ］プロピオイミデートなどの剤が挙げられるが、これらに限定されない。
【０２２１】
他の修飾としては、グルタミニルおよびアスパラギニル残基の、それぞれ、対応するグルタミルおよびアスパルチル残基への脱アミド化、プロリンおよびリシンのヒドロキシル化、セリルまたはスレオニル残基のヒドロキシル基のリン酸化、リシン、アルギニン、およびヒスチジン側鎖のα−アミノ基のメチル化［T.E.  Creighton,  Proteins:  Structure  and  Molecular  Properties,  W.H.  Freeman  &  Co.,  San  Francisco,  pp.  79-86  (1983)］、Ｎ末端アミンのアセチル化、ならびに任意のＣ末端カルボキシル基のアミド化が挙げられる。
【０２２２】
別の種類の共有結合による修飾は、本明細書において提供される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）を、米国特許第４，６４０，８３５号、同第４，４９６，６８９号、同第４，３０１，１４４号、同第４，６７０，４１７号、同第４，７９１，１９２号、または同第４，１７９，３３７号に記載されている様式で、様々な非タンパク質性ポリマーのうちのいずれか、たとえば、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリプロピレングリコール、またはポリオキシアルキレンに連結することを含む。
キメラ分子
【０２２３】
本明細書において提供される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）はまた、別の異種ポリペプチドまたはアミノ酸配列に融合された抗体を含むキメラ分子を形成するように修飾されてもよい。
【０２２４】
一実施形態では、そのようなキメラ分子は、本明細書において提供される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）と、たとえば、ヒト免疫不全ウイルスＴＡＴタンパク質のタンパク質形質導入ドメインを使用した、様々な組織への送達、およびより具体的には、血液脳関門を越える送達のための、ポリペプチドを標的とするタンパク質形質導入ドメインとの融合体を含む（Schwarze  et  al.,  1999,  Science  285:  1569-72）。
【０２２５】
別の実施形態では、そのようなキメラ分子は、本明細書において提供される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）と、抗タグ抗体が選択的に結合し得るエピトープを提供する、タグポリペプチドとの融合体を含む。エピトープタグは、一般に、ポリペプチドのアミノ末端またはカルボキシル末端に配置される。本明細書において提供される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）のそのようなエピトープタグ化形態の存在は、タグポリペプチドに対する抗体を使用して、検出することができる。様々なタグポリペプチドおよびそれらのそれぞれの抗体が、当該技術分野において公知である。例としては、ポリ−ヒスチジン（ポリ−Ｈｉｓ）またはポリ−ヒスチジン−グリシン（ポリ−Ｈｉｓ−ｇｌｙ）タグ、ｆｌｕ  ＨＡタグポリペプチドおよびその抗体１２ＣＡ５［Field  et  al.,  Mol.  Cell.  Biol.,  8:2159-2165  (1988)］、ｃ−ｍｙｃタグおよびそれに対する８Ｆ９、３Ｃ７、６Ｅ１０、Ｇ４、Ｂ７、および９Ｅ１０抗体［Evan  et  al.,  Molecular  and  Cellular  Biology,  5:3610-3616  (1985)］、ならびに単純ヘルペスウイルス糖タンパク質Ｄ（ｇＤ）タグおよびその抗体［Paborsky  et  al.,  Protein  Engineering,  3(6):547-553  (1990)］が挙げられる。他のタグポリペプチドとしては、Ｆｌａｇ−ペプチド［Hopp  et  al.,  BioTechnology,  6:1204-1210  (1988)］、ＫＴ３エピトープペプチド［Martin  et  al.,  Science,  255:192-194  (1992)］、およびα−チューブリンエピトープペプチド［Skinner  et  al.,  J.  Biol.  Chem.,  266:15163-15166  (1991)］、およびＴ７遺伝子１０タンパク質ペプチドタグ［Lutz-Freyermuth  et  al.,  Proc.  Natl.  Acad.  Sci.  USA,  87:6393-6397  (1990)］が挙げられる。
キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）およびＣＡＲエフェクター細胞
【０２２６】
一部の実施形態における抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその断片（「抗ＣＬＤＮ１８．２部分」と称される）は、抗ＣＬＤＮ１８．２構築物の一部である。一部の実施形態における抗ＣＬＤＮ１８．２構築物は、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体部分を含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）である（本明細書において、「抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲ」とも称される）。抗ＣＬＤＮ１８．２抗体部分を含むＣＡＲを含む、ＣＡＲエフェクター細胞（たとえば、Ｔ細胞、ＮＫ細胞、またはマクロファージ）もまた、提供される。そのような細胞は、本明細書において、「抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲエフェクター細胞」、たとえば、「抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲ  Ｔ細胞」、「抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲ  ＮＫ細胞」、または「抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲマクロファージ」とも称される。
【０２２７】
一部の実施形態における抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲは、ａ）ＣＬＤＮ１８．２に特異的に結合する抗ＣＬＤＮ１８．２抗体部分を含む細胞外ドメイン、およびｂ）細胞内シグナル伝達ドメインを含む。膜貫通ドメインが、細胞外ドメインと細胞内ドメインとの間に存在してもよい。
【０２２８】
抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲの細胞外ドメインと膜貫通ドメインとの間、または抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲの細胞内ドメインと膜貫通ドメインとの間には、スペーサードメインが存在してもよい。スペーサードメインは、ポリペプチド鎖において、膜貫通ドメインを細胞外ドメインまたは細胞内ドメインに連結させるように機能する、任意のオリゴペプチドまたはポリペプチドであり得る。スペーサードメインは、たとえば、約１０〜約１００個、または約２５〜約５０個のアミノ酸を含む、最大で約３００個のアミノ酸を含み得る。
【０２２９】
膜貫通ドメインは、天然の供給源または合成の供給源のいずれに由来してもよい。供給源が天然である場合、このドメインは、任意の膜結合型タンパク質または膜貫通タンパク質に由来し得る。本発明において特に有用な膜貫通領域は、Ｔ細胞受容体のα鎖、β鎖、δ鎖、もしくはγ鎖、ＣＤ２８、ＣＤ３ε、ＣＤ３ζ、ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、またはＣＤ１５４に由来し得る（すなわち、少なくとも、これらの膜貫通領域を含む）。一部の実施形態では、膜貫通ドメインは、合成であってもよく、その場合、膜貫通ドメインは、主として、疎水性残基、たとえば、ロイシンおよびバリンを含み得る。一部の実施形態では、フェニルアラニン、トリプトファン、およびバリンのトリプレットが、合成の膜貫通ドメインのそれぞれの末端に見出されてもよい。一部の実施形態では、たとえば、約２〜約１０個（たとえば、約２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、または１０個のうちのいずれか）のアミノ酸長の長さを有する、短いオリゴ−（？）またはポリペプチドリンカーが、抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲの膜貫通ドメインと細胞内シグナル伝達ドメインとの間の連結を形成してもよい。一部の実施形態では、リンカーは、グリシン−セリンのダブレットである。
【０２３０】
一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲの細胞内ドメインにおける配列のうちのひとつと天然に会合している膜貫通ドメインが、使用される（たとえば、抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲ細胞内ドメインが、４−１ＢＢ共刺激配列を含む場合、この抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲの膜貫通ドメインは、４−１ＢＢ膜貫通ドメインに由来する）。
【０２３１】
抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲの細胞内シグナル伝達ドメインは、抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲが配置されている免疫細胞の正常なエフェクター機能のうちの少なくとも１つの活性化を担う。Ｔ細胞、ＮＫ細胞、またはマクロファージのエフェクター機能は、たとえば、細胞溶解活性、またはサイトカインの分泌を含むヘルパー活性であり得る。そのため、「細胞内シグナル伝達ドメイン」という用語は、エフェクター機能シグナルを伝達し、特化した機能を行うよう細胞に指示する、タンパク質の部分を指す。通常は細胞内シグナル伝達ドメイン全体が用いられ得るが、多くの場合には、鎖全体を使用する必要はない。細胞内シグナル伝達ドメインの短縮された部分が使用される範囲では、このような短縮された部分は、エフェクター機能シグナルを伝達する限り、インタクトな鎖の代わりに使用することができる。「細胞内シグナル伝達配列」という用語は、したがって、エフェクター機能シグナルを伝達するのに十分な、細胞内シグナル伝達ドメインの任意の短縮された部分を含むことを意味する。
【０２３２】
本発明の抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲにおいて使用するための細胞内シグナル伝達ドメインの例としては、抗原受容体の結合後にシグナル伝達を開始するように協調して作用するＴ細胞受容体（ＴＣＲ）および共受容体の細胞質配列、ならびにこれらの配列の任意の誘導体またはバリアント、および同じ機能能力を有する任意の合成配列が挙げられる。
【０２３３】
Ｔ細胞活性化は、以下の２つの異なるクラスの細胞内シグナル伝達配列によって媒介され得る：ＴＣＲを通じて抗原依存性の一次活性化を開始するもの（一次シグナル伝達配列）、および抗原非依存性様式で二次的なまたは共刺激性のシグナルを提供するように作用するもの（共刺激シグナル伝達配列）。本明細書に記載される抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲは、シグナル伝達配列のうちの一方または両方を含み得る。
【０２３４】
一次シグナル伝達配列は、ＴＣＲ複合体の一次活性化を、刺激様式または阻害様式のいずれかで調節する。刺激性様式で作用する一次シグナル伝達配列は、免疫受容体活性化チロシンモチーフ（ｉｍｍｕｎｏｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｔｙｒｏｓｉｎｅ−ｂａｓｅｄ  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｍｏｔｉｆ）またはＩＴＡＭとして公知のシグナル伝達モチーフを含み得る。一部の実施形態における抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲ構築物は、１つまたは複数のＩＴＡＭを含む。本発明において特に有用なＩＴＡＭを含む一次シグナル伝達配列の例としては、ＴＣＲζ、ＦｃＲγ、ＦｃＲβ、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＣＤ３ε、ＣＤ５、ＣＤ２２、ＣＤ７９ａ、ＣＤ７９ｂ、およびＣＤ６６ｄに由来するものが挙げられる。
【０２３５】
一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲは、ＣＤ３ζに由来する一次シグナル伝達配列を含む。たとえば、ＣＡＲの細胞内シグナル伝達ドメインは、それ自体がＣＤ３ζ細胞内シグナル伝達配列を含んでもよく、または本発明の抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲの文脈において有用な任意の他の所望される細胞内シグナル伝達配列（複数可）と組み合わされてもよい。
【０２３６】
本明細書に記載される（sescribed）共刺激シグナル伝達配列は、たとえば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４−１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＰＤ−１、ＩＣＯＳ、リンパ球機能関連抗原−１（ＬＦＡ−１）、ＣＤ２、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７−Ｈ３、ＣＤ８３に特異的に結合するリガンドなどを含む、共刺激分子の細胞内ドメインの一部分であり得る。
【０２３７】
一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲの細胞内シグナル伝達ドメインは、ＣＤ３ζの細胞内シグナル伝達配列およびＣＤ２８の細胞内シグナル伝達配列を含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲの細胞内シグナル伝達ドメインは、ＣＤ３ζの細胞内シグナル伝達配列および４−１ＢＢの細胞内シグナル伝達配列を含む。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲの細胞内シグナル伝達ドメインは、ＣＤ３ζの細胞内シグナル伝達配列ならびにＣＤ２８および４−１ＢＢまたは他の共刺激分子の細胞内シグナル伝達配列を含む。
【０２３８】
したがって、たとえば、一部の実施形態では、ａ）ＣＬＤＮ１８．２に特異的に結合する抗ＣＬＤＮ１８．２抗体部分（たとえば、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体またはその断片（たとえば、ｓｃＦｖ）のうちのいずれか１つ）を含む細胞外ドメイン、ｂ）膜貫通ドメイン、およびｃ）細胞内シグナル伝達ドメインを含む、抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲが、提供される。一部の実施形態では、細胞内シグナル伝達ドメインは、免疫細胞を活性化することができる。一部の実施形態では、細胞内シグナル伝達ドメインは、一次シグナル伝達配列および共刺激シグナル伝達配列を含む。一部の実施形態では、一次シグナル伝達配列は、ＣＤ３ζ細胞内シグナル伝達配列を含む。一部の実施形態では、共刺激シグナル伝達配列は、ＣＤ２８および／または４−１ＢＢ細胞内シグナル伝達配列を含む。一部の実施形態では、細胞内ドメインは、ＣＤ３ζ細胞内シグナル伝達配列、ならびにＣＤ２８および／または−１ＢＢ細胞内シグナル伝達配列を含む。一部の実施形態では、細胞内ドメインは、ＣＤ３ζ細胞内シグナル伝達配列、ならびにＣＤ２８および／または−１ＢＢ細胞内シグナル伝達配列、ならびに別個のサイトカイン導入遺伝子、たとえば、ＣＡＲ誘導性インターロイキン−１２（ｉＩＬ−１２）カセットを含む。
【０２３９】
抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲを発現するエフェクター細胞（たとえば、Ｔ細胞、ＮＫ細胞、および／またはマクロファージ）もまた、本明細書において提供される。
【０２４０】
抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲを発現するエフェクター細胞を産生する方法であって、抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲをコードする核酸をエフェクター細胞に導入するステップを含む、方法もまた、提供される。一部の実施形態では、この方法は、抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲをコードする核酸を含むベクターを、たとえば、形質導入、トランスフェクション、またはエレクトロポレーションによって、エフェクター細胞に導入するステップを含む。一部の実施形態では、この方法は、抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲをコードする核酸配列を含むベクターを、ウイルス形質導入によって導入するステップを含む。一部の実施形態では、この方法は、抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲをコードする核酸を含むベクターを、トランスポゾンによって導入するステップを含む。一部の実施形態では、この方法は、抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲをコードする核酸配列を含むベクターを、ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ９によって導入するステップを含む。一部の実施形態では、この方法は、抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲをコードする核酸配列を含むベクターを、非ウイルス移入、たとえば、プラスミドＤＮＡまたはｉｎ  ｖｉｔｒｏ転写ｍＲＮＡ（ＩＶＴ−ｍＲＮＡ）のエレクトロポレーションによって導入するステップを含む。ベクターまたはｍＲＮＡのエフェクター細胞への形質導入、トランスフェクション、またはエレクトロポレーションは、当該技術分野において公知の任意の方法を使用して実行することができる。
処置の方法
【０２４１】
本明細書に記載される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、たとえば、固形腫瘍またはがん（たとえば、胃がん、食道がん、胃食道接合部のがん、膵臓がん、胆管のがん、肺がん、卵巣がん、結腸がん、肝臓がん、頭頸部がん、胆嚢がんなど）を含む、異常なＣＬＤＮ１８．２活性または発現が関係する疾患または障害を処置するかまたはその進行を遅延させるために、対象（たとえば、哺乳動物、たとえば、ヒト）に投与することができる。ある特定の実施形態では、対象（たとえば、哺乳動物、たとえば、ヒト）における固形腫瘍またはがん（たとえば、胃がん、食道がん、胃食道接合部のがん、膵臓がん、胆管のがん、肺がん、卵巣がん、結腸がん、肝臓がん、頭頸部がん、胆嚢がんなど）の処置のための医薬の製造において使用するための、本明細書に記載される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）が、提供される。ある特定の実施形態では、対象（たとえば、哺乳動物、たとえば、ヒト）における固形腫瘍またはがん（たとえば、胃がん、食道がん、胃食道接合部のがん、膵臓がん、胆管のがん、肺がん、卵巣がん、結腸がん、肝臓がん、頭頸部がん、胆嚢がんなど）の処置において使用するための、本明細書に記載される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）が、提供される。ある特定の実施形態では、対象（たとえば、哺乳動物、たとえば、ヒト）における固形腫瘍またはがん（たとえば、胃がん、食道がん、胃食道接合部のがん、膵臓がん、胆管のがん、肺がん、卵巣がん、結腸がん、肝臓がん、頭頸部がん、胆嚢がんなど）の処置において使用するための、本明細書に記載される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）を含む医薬組成物が、提供される。一部の実施形態では、ＣＤＬＮ  １８．２を発現する腫瘍が、処置される。
【０２４２】
ある特定の実施形態では、処置しようとする対象は、哺乳動物（たとえば、ヒト、非ヒト霊長類、ラット、マウス、ウシ、ウマ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、イヌ、ネコなど）である。ある特定の実施形態では、対象は、ヒトである。ある特定の実施形態では、対象は、臨床患者、臨床試験志願者、実験動物などである。ある特定の実施形態では、対象は、ＣＤＬＮ  １８．２を発現する腫瘍（たとえば、固形腫瘍）またはがん（たとえば、胃がん、食道がん、胃食道接合部のがん、膵臓がん、胆管のがん、肺がん、卵巣がん、結腸がん、肝臓がん、頭頸部がん、胆嚢がんなど）を有することが疑われるか、または有する危険性がある。ある特定の実施形態では、対象は、ＣＤＬＮ  １８．２を発現する腫瘍（たとえば、固形腫瘍）もしくはがん（たとえば、胃がん、食道がん、胃食道接合部のがん、膵臓がん、胆管のがん、肺がん、卵巣がん、結腸がん、肝臓がん、頭頸部がん、胆嚢がんなど）、および／または異常なＣＬＤＮ１８．２発現もしくは活性と関連する疾患を有すると診断されている。ある特定の実施形態では、本明細書に記載される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）が投与される対象は、クローディキシマブ（ＩＭＡＢ３６２）またはそのバイオシミラーに対して耐性である。ある特定の実施形態では、本明細書に記載される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）が投与される対象は、クローディキシマブ（ＩＭＡＢ３６２）またはそのバイオシミラーの投与中に進行している。ある特定の実施形態では、本明細書に記載される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）が投与される対象は、クローディキシマブ（ＩＭＡＢ３６２）またはそのバイオシミラーに対して不応性である。
【０２４３】
ＣＤＬＮ  １８．２を発現する腫瘍（たとえば、固形腫瘍）もしくはがん（たとえば、胃がん、食道がん、胃食道接合部のがん、膵臓がん、胆管のがん、肺がん、卵巣がん、結腸がん、肝臓がん、頭頸部がん、胆嚢がんなど）、または異常なＣＬＤＮ１８．２活性と関連する他の疾患、およびそれらの疾患の臨床像の多数の診断方法が、当該技術分野において公知である。そのような方法としては、たとえば、免疫組織化学法、ＰＣＲ、蛍光ｉｎ  ｓｉｔｕハイブリダイゼーション（ＦＩＳＨ）が挙げられるが、これらに限定されない。異常なＣＬＤＮ１８．２活性または発現を評価するためのそのような診断方法に関するさらなる詳細は、たとえば、Gupta  et  al.  (2009)  Mod  Pathol.  22(1):  128-133、Lopez-Rios  et  al.  (2013)  J  Clin  Pathol.  66(5):  381-385、Ellison  et  al.  (2013)  J  Clin  Pathol  66(2):  79-89、およびGuha  et  al.  (2013)  PLoS  ONE  8(6):  e67782に記載されている。
【０２４４】
本明細書に記載される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、たとえば、静脈内、筋肉内、または皮下を含む、任意の好適な経路を使用して投与することができる。一部の実施形態では、本明細書において提供される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、異常なＣＬＤＮ１８．２活性と関連する疾患または障害を処置するために、第２、第３、または第４の薬剤（たとえば、抗新生物剤、成長阻害剤、細胞毒性剤、もしくは化学療法剤を含む）と組み合わせて投与される。そのような薬剤としては、たとえば、ドセタキセル、ゲフィチニブ、ＦＯＬＦＩＲＩ（イリノテカン、５−フルオロウラシル、およびロイコボリン）、イリノテカン、シスプラチン、カルボプラチン、パクリタキセル、ベバシズマブ（抗ＶＥＧＦ抗体）、ＦＯＬＦＯＸ−４（注入用フルオロウラシル、ロイコボリン、およびオキサリプラチン、アファチニブ、ゲムシタビン、カペシタビン、ペメトレキセド、チバンチニブ、エベロリムス、ＣｐＧ−ＯＤＮ、ラパマイシン、レナリドミド、ベムラフェニブ、エンドスタチン、ラパチニブ、ＰＸ−８６６、Ｉｍｐｒｉｍｅ  ＰＧＧ、およびイルロチニブ（irlotinibm）が挙げられるが、これらに限定されない。一部の実施形態では、本明細書において提供される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、抗新生物剤、成長阻害剤、細胞毒性剤、または化学療法剤にコンジュゲートされる。
【０２４５】
ある特定の実施形態では、本明細書において提供される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、１つまたは複数の追加の治療、たとえば、放射線療法、外科手術、化学療法、および／または標的化療法と組み合わせて投与される。ある特定の実施形態では、本明細書において提供される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、化学療法と組み合わせて投与される。ある特定の実施形態では、化学療法は、ＥＯＸ（すなわち、エピルビシン、オキサリプラチン、およびカペシタビン）を含む。ある特定の実施形態では、化学療法は、ゾレドロン酸およびインターロイキン−２を含む。
【０２４６】
処置しようとする適応症および当該技術分野における医師が認識しているであろう投与に関する因子に応じて、本明細書において提供される抗体は、その適応症の処置に有効であり、同時に毒性および副作用を最小化する投薬量で投与される。ＣＤＬＮ  １８．２を発現する腫瘍（たとえば、固形腫瘍）またはがん（たとえば、胃がん、食道がん、胃食道接合部のがん、膵臓がん、胆管のがん、肺がん、卵巣がん、結腸がん、肝臓がん、頭頸部がん、胆嚢がんなど）の処置に関して、典型的な用量は、たとえば、０．００１〜１０００μｇの範囲であってよいが、しかしながら、この例示的な範囲を下回るかまたは上回る用量は、本明細書に記載される処置の方法の範囲内である。用量は、約０．１μｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／総体重ｋｇ（たとえば、約５μｇ／ｋｇ、約１０μｇ／ｋｇ、約１００μｇ／ｋｇ、約５００μｇ／ｋｇ、約１ｍｇ／ｋｇ、約５０ｍｇ／ｋｇ、または前述の値のうちの任意の２つによって定められる範囲、前述の値の間の任意の範囲を含む）であり得る。一部の実施形態では、典型的な用量は、たとえば、１０ｍｇ／ｍ２〜１５００ｍｇ／ｍ２であり得るが、しかしながら、この例示的な範囲を下回るかまたは上回る用量は、本明細書に記載される処置の方法の範囲内に含まれる。用量は、約２５ｍｇ／ｍ２〜約１０００ｍｇ／ｍ２（たとえば、約２５ｍｇ／ｍ２、約１００ｍｇ／ｍ２、約２５０ｍｇ／ｍ２、約５００ｍｇ／ｍ２、約７５０ｍｇ／ｍ２、または前述の値のうちの任意の２つによって定められる範囲、前述の値の間の任意の範囲を含む）であり得る。一部の実施形態では、用量は、約３００ｍｇ／ｍ２、６００ｍｇ／ｍ２、８００ｍｇ／ｍ２、または１０００ｍｇ／ｍ２のうちのいずれか１つである。
【０２４７】
本明細書において提供される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、単一の日用量で投与されてもよく、または合計の日用量が、毎日２回、３回、もしくは４回の分割投薬量で投与されてもよい。あるいは、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、毎日よりも少ない頻度、たとえば、１週間に６回、１週間に５回、１週間に４回、１週間に３回、１週間に２回、１週間に１回、２週間ごとに１回、３週間ごとに１回、４週間ごとに１回、１カ月に１回、２カ月ごとに１回、３カ月ごとに１回、または６カ月ごとに１回、投与されてもよい。
【０２４８】
一部の実施形態では、本明細書において提供される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、第１のサイクルの間、８００ｍｇ／ｍ２の用量で１回投与され、続いて、その後、６００ｍｇ／ｍ２の用量で３週間または２１日ごとに１回投与される。一部の実施形態では、本明細書において提供される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、１０００ｍｇ／ｍ２の用量で、３週間ごとまたは２１日ごとに１回投与される。一部の実施形態では、本明細書において提供される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその抗原結合性断片）は、１サイクル目の１日目に８００ｍｇ／ｍ２の用量で投与され、続いて、他のすべての後続のサイクルの１日目に６００ｍｇ／ｍ２の用量で投与される。
【０２４９】
治療的または予防的な有効性は、処置を受ける対象の周期的な評価によってモニタリングすることができる。数日間またはそれよりも長きにわたる反復投与については、状態に応じて、処置は、所望される疾患症状の抑制が生じるまで反復される。しかしながら、他の投薬量レジメンが有用な場合もあり、本発明の範囲内に含まれる。所望される投薬量は、本明細書において提供される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（もしくはその抗原結合性断片）の単回ボーラス投与によって、本明細書において提供される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（もしくはその抗原結合性断片）の複数回のボーラス投与によって、または本明細書において提供される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（もしくはその抗原結合性断片）の連続的な注入投与によって、送達することができる。
【０２５０】
がんの処置は、たとえば、限定されないが、腫瘍退縮、腫瘍の重量もしくはサイズの縮小、進行までの時間、寛解率、生存期間、無増悪生存期間、全体的な応答率、全生存期間、応答期間、疾患制御率、臨床利益率、生活の質、ＣＬＤＮ１８．２発現の量もしくはレベル、および／またはＣＬＤＮ１８．２活性のレベルによって評価することができる。たとえば、例として、ＲＥＣＩＳＴ（Ｒｅｓｐｏｎｓｅ  Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｉｎ  Ｓｏｌｉｄ  Ｔｕｍｏｒｓ）基準による応答の測定を含む、治療法の有効性を決定するためのアプローチを、利用することができる（たとえば、Eisenhauer  et  al.  (2009)  "New  response  evaluation  in  solid  tumors:  Revised  RECIST  guideline  (version  1.1)."  Eur  J.  Cancer.  45:  228-247を参照されたい。
抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲエフェクター細胞療法
【０２５１】
本発明はまた、個体におけるＣＬＤＮ１８．２提示細胞を含む標的細胞集団または組織に対する、エフェクター細胞に媒介される応答（たとえば、Ｔ細胞、ＮＫ細胞、またはマクロファージに媒介される免疫応答）を刺激する方法であって、個体に、抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲを発現するエフェクター細胞（たとえば、Ｔ細胞）を投与するステップを含む、方法も提供する。一部の実施形態では、個体は、ヒト個体である。
【０２５２】
抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲを発現する抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲエフェクター細胞（たとえば、Ｔ細胞、ＮＫ細胞、および／またはマクロファージ）は、それを必要とするレシピエントに注入することができる。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲエフェクター細胞（たとえば、Ｔ細胞、ＮＫ細胞、および／またはマクロファージ）は、ｉｎ  ｖｉｖｏで複製することができるため、持続的な腫瘍制御に繋がり得る長期存続性をもたらす。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲエフェクター細胞は、強固なｉｎ  ｖｉｖｏ  Ｔ細胞増殖（expansion）を起こし、長い期間存続することができる。一部の実施形態では、本発明の抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲ  Ｔ細胞は、再活性化されて任意の追加の腫瘍形成または成長を阻害することができる、特異的メモリーＴ細胞へと発達する。
【０２５３】
ｅｘ  ｖｉｖｏ手順は、当該技術分野において周知である。簡単に述べると、細胞が、個体（たとえば、ヒト）から単離され、本明細書において開示される抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲを発現するベクターまたはｍＲＮＡで修飾される。抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲ細胞を、哺乳動物レシピエントに投与して、治療的利点を得ることができる。哺乳動物レシピエントは、ヒトであり得、抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲ細胞は、レシピエントに関して自家であり得る。代替として、細胞は、レシピエントに関して同種、同系、または異種であってもよい。
【０２５４】
造血幹細胞および造血前駆細胞のｅｘ  ｖｉｖｏ増殖の手順は、米国特許第５，１９９，９４２号に記載されており、これは、参照により本明細書に組み込まれ、この手順は、本発明の細胞に適用することができる。他の好適な方法は、当該技術分野において公知であり、したがって、本発明は、細胞のｅｘ  ｖｉｖｏ増殖を行う任意の特定の方法に限定されない。簡単に述べると、Ｔ細胞のｅｘ  ｖｉｖｏでの培養および増殖は、（１）哺乳動物由来のＣＤ３４＋造血幹細胞および造血前駆細胞を末梢血採取または骨髄外植により採取するステップ、ならびに（２）そのような細胞をｅｘ  ｖｉｖｏで増殖させるステップを含む。米国特許第５，１９９，９４２号に記載されている細胞成長因子に加えて、ｆｌｔ３−Ｌ、ＩＬ−１、ＩＬ−３、およびｃ−ｋｉｔリガンドなどの他の因子を、細胞の培養および増殖に使用することができる。
【０２５５】
本発明の抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲエフェクター細胞（たとえば、Ｔ細胞）は、単独でか、または希釈剤および／またはＩＬ−２もしくは他のサイトカインもしくは細胞集団などの他の成分と組み合わせた医薬組成物としてのいずれかで、投与され得る。簡単に述べると、本発明の医薬組成物は、１つまたは複数の薬学的または生理学的に許容される担体、希釈剤、または賦形剤と組み合わせた、抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲエフェクター細胞（たとえば、Ｔ細胞）を含み得る。そのような組成物は、緩衝液、たとえば、中性緩衝食塩水、リン酸緩衝食塩水など；炭水化物；たとえば、グルコース、マンノース、スクロース、またはデキストラン、マンニトール；タンパク質；ポリペプチドまたはアミノ酸、たとえば、グリシン；抗酸化剤；キレート剤、たとえば、ＥＤＴＡまたはグルタチオン；アジュバント（たとえば、水酸化アルミニウム）；ならびに保存剤を含み得る。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲエフェクター細胞（たとえば、Ｔ細胞）組成物は、静脈内投与用に製剤化される。
【０２５６】
投与しようとする本発明の抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲエフェクター細胞（たとえば、Ｔ細胞）組成物の正確な量は、年齢、体重、腫瘍サイズ、感染または転移の程度、および患者（対象）の状態における個々の相違を考慮して、医師によって決定され得る。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲエフェクター細胞（たとえば、Ｔ細胞）を含む医薬組成物は、約１０４〜約１０９個の細胞／体重ｋｇ、たとえば、約１０４〜約１０５個、約１０５〜約１０６個、約１０６〜約１０７個、約１０７〜約１０８個、または約１０８〜約１０９個の細胞／体重ｋｇの投薬量で投与され、これらの範囲内のすべての整数値が含まれる。抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲエフェクト細胞（たとえば、Ｔ細胞）組成物はまた、これらの投薬量で、複数回投与してもよい。細胞は、免疫療法において広く公知の注入技法を使用して投与することができる（たとえば、Rosenberg  et  al.,  New  Eng.  J.  of  Med.  319:1676,  1988を参照されたい）。特定の患者の最適な投薬量および処置レジメンは、疾患の徴候に関して患者をモニタリングし、それに応じて処置を調整することによって、医薬の分野の当業者によって容易に決定することができる。
【０２５７】
抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲエフェクター細胞（たとえば、Ｔ細胞）の投与は、エアロゾル吸入、注射、経口摂取、輸血、埋込み、または移植によるものを含む、任意の便利な様式で実行され得る。本明細書に記載される組成物は、皮下、皮内、腫瘍内、結節内、髄内、筋肉内、静脈内（ｉ．ｖ．）注射により、または腹腔内で、患者に投与され得る。一部の実施形態では、本発明の抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲエフェクター細胞（たとえば、Ｔ細胞）組成物は、皮内または皮下注射によって患者に投与される。一部の実施形態では、本発明の抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲエフェクター細胞（たとえば、Ｔ細胞）組成物は、静脈内注射によって投与される。抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲエフェクター細胞（たとえば、Ｔ細胞）の組成物は、腫瘍、リンパ節、または感染部位に直接的に注射してもよい。
【０２５８】
したがって、たとえば、一部の実施形態では、個体における疾患（たとえば、がん）を処置する方法であって、個体に、ａ）ＣＬＤＮ１８．２に特異的に結合する抗ＣＬＤＮ１８．２抗体部分を含む細胞外ドメイン、ｂ）膜貫通ドメイン、ならびにｃ）ＣＤ３ζ細胞内シグナル伝達配列および４−１ＢＢ細胞内シグナル伝達配列を含む細胞内シグナル伝達ドメインを含む、抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲを発現するエフェクター細胞（たとえば、Ｔ細胞）を含む、有効量の組成物を投与するステップを含む、方法が、提供される。一部の実施形態では、個体は、ＣＬＤＮ１８．２に関して陽性である。一部の実施形態では、個体は、患者集団における中等度のレベルと比較して、高いレベルのＣＬＮＤ１８．２を発現する。一部の実施形態では、投与は、静脈内、腹腔内、または腫瘍内の経路を介して行われる。一部の実施形態では、投与は、静脈内経路を介して行われる。一部の実施形態では、投与は、腫瘍内経路を介して行われる。一部の実施形態では、個体は、ヒトである。
【０２５９】
一部の実施形態では、個体におけるＴ細胞をプライミングする方法であって、個体に、上述の抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲのうちのいずれかによる抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲを発現するエフェクター細胞（たとえば、Ｔ細胞）を含む、有効量の組成物を投与するステップを含む、方法が提供される。一部の実施形態では、個体は、がんを有する。一部の実施形態では、投与は、静脈内、腹腔内、または腫瘍内の経路を介して行われる。一部の実施形態では、投与は、静脈内経路を介して行われる。一部の実施形態では、投与は、腫瘍内経路を介して行われる。一部の実施形態では、個体は、ヒトである。
医薬製剤
【０２６０】
本明細書において提供される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその断片）は、それを必要とする対象（たとえば、哺乳動物、たとえば、ヒト）への投与に好適となるように、薬学的に許容される担体または賦形剤を用いて製剤化され得る。抗体の好適な製剤は、所望される純度を有する抗体（またはその断片）を、凍結乾燥製剤または水性液剤の形態で、必要に応じた薬学的に許容される担体、賦形剤、または安定剤（Remington's  Pharmaceutical  Sciences  16th  edition,  Osol,  A.  Ed.  (1980)）と混合することによって得られる。薬学的に許容される担体、賦形剤、または安定剤は、用いられる投薬量および濃度で、レシピエントにとって非毒性であり、以下のものが挙げられる：緩衝剤、たとえば、リン酸塩、クエン酸塩、および他の有機酸；アスコルビン酸およびメチオニンを含む、抗酸化剤；保存剤（たとえば、オクタデシルジメチルベンジルアンモニウムクロリド；塩化ヘキサメトニウム；塩化ベンザルコニウム；塩化ベンゼトニウム；フェノール、ブチル、もしくはベンジルアルコール；アルキルパラベン、たとえば、メチルもしくはプロピルパラベン；カテコール；レゾルシノール；シクロヘキサノール；３−ペンタノール；およびｍ−クレゾール）；低分子量（約１０残基よりも少ない）ポリペプチド；タンパク質、たとえば、血清アルブミン、ゼラチン、もしくは免疫グロブリン；親水性ポリマー、たとえば、ポリビニルピロリドン（olyvinylpyrrolidone）；アミノ酸、たとえば、グリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニン、もしくはリシン；単糖類、二糖類、およびグルコース、マンノース、もしくはデキストリンを含む他の炭水化物；キレート剤、たとえば、ＥＤＴＡ；糖類、たとえば、スクロース、マンニトール、トレハロース、もしくはソルビトール；塩形成対イオン、たとえば、ナトリウム；金属錯体（たとえば、Ｚｎ−タンパク質錯体）；ならびに／または非イオン性界面活性剤、たとえば、ＴＷＥＥＮ（登録商標）、ＰＬＵＲＯＮＩＣＳ（登録商標）、もしくはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）。
【０２６１】
本明細書において開示される抗体は、イムノリポソームとして製剤化することもできる。抗体を含むリポソームは、当該技術分野において公知の方法、たとえば、Epstein  et  al.,  PNAS  USA,  82:  3688  (1985)、Hwang  et  al.,  PNAS  USA,  77:  4030  (1980)、ならびに米国特許第４，４８５，０４５号および同第４，５４４，５４５号に記載される方法によって、調製される。循環時間が増強されたリポソームは、米国特許第５，０１３，５５６号に開示されている。
【０２６２】
特に有用なリポソームは、ホスファチジルコリン、コレステロール、およびＰＥＧ誘導体化ホスファチジルエタノールアミン（ＰＥＧ−ＰＥ）を含む脂質組成物を用いて、逆相蒸発法によって生成することができる。リポソームは、所望される径を有するリポソームが得られるように定義された細孔サイズのフィルターを通して押し出される。本発明の抗体のＦａｂ’断片は、Martin  et  al.,  J.  Biol.  Chem.,  257:  286-288  (1982)に記載されるように、ジスルフィド交換反応を通じてリポソームにコンジュゲートされ得る。抗新生物剤、成長阻害剤、または化学療法剤（たとえば、ドキソルビシン）もまた、必要に応じて、リポソーム内に含まれる。Gabizon  et  al.,  J.  National  Cancer  Inst.,  81(19):  1484  (1989)を参照されたい。
【０２６３】
本明細書に記載される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体を含む医薬製剤はまた、処置されている特定の適応症について必要な場合、１つを上回る活性化合物、好ましくは、互いに有害に作用しない相補的な活性を有する活性化合物を含み得る。たとえば、本明細書に記載される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体に加えて、抗新生物剤、成長阻害剤、細胞毒性剤、または化学療法剤を提供することが望ましい場合がある。そのような分子は、意図される目的に有効な量で、組み合わせて存在することが好適である。そのような他の薬剤の有効量は、製剤中に存在する抗体の量、疾患または障害または処置の種類、および上記に考察される他の因子に依存する。そのような他の薬剤の有効量は、製剤中に存在する抗体の量、疾患または障害または処置の種類、および上記に考察される他の因子に依存する。これらは、一般に、本明細書に記載されるのと同じ投薬量および投与経路で、またはこれまでに利用されている投薬量の約１〜９９％で、使用される。
【０２６４】
一部の実施形態では、本開示の抗体は、凍結乾燥される。そのような凍結乾燥製剤は、好適な希釈剤で高いタンパク質濃度に復元することができ、復元された製剤を、哺乳動物（たとえば、ヒト）に投与することができる。
【０２６５】
ある特定の実施形態では、ｉｎ  ｖｉｖｏでの投与に使用しようとする医薬製剤は、滅菌である。これは、たとえば、本明細書に記載される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体を含む溶液を、滅菌濾過膜を通して濾過することによって、容易に達成される。
抗クローディン１８．２抗体を使用した診断およびイメージング方法
【０２６６】
ＣＬＤＮ１８．２ポリペプチドに特異的に結合する、標識抗ＣＬＤＮ１８．２抗体、その断片、ならびにその誘導体および類似体は、ＣＬＤＮ１８．２の発現、異常な発現、および／または活性と関連する疾患および／または障害を検出、診断、またはモニタリングするために、診断目的で使用することができる。たとえば、本明細書において提供される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその断片）は、ｉｎ  ｓｉｔｕ、ｉｎ  ｖｉｖｏ、ｅｘ  ｖｉｖｏ、およびｉｎ  ｖｉｔｒｏでの診断アッセイまたはイメージングアッセイにおいて使用することができる。ＣＬＤＮ１８．２ポリペプチドの発現を検出するための方法は、（ａ）本発明の１つまたは複数の抗体を使用して、個体の細胞（たとえば、組織）または体液におけるポリペプチドの発現をアッセイするステップと、（ｂ）遺伝子発現レベルを、標準的な遺伝子発現レベルと比較するステップであって、標準的な発現レベルと比較して、アッセイした遺伝子発現レベルにおける増加または減少が、異常な発現を示す、ステップとを含む。そのようなアッセイは、たとえば、患者から得られた試料を使用して、ｉｎ  ｖｉｖｏまたはｅｘ  ｖｉｖｏにおいて行うことができる。
【０２６７】
動物（たとえば、哺乳動物、たとえば、ヒト）におけるＣＬＤＮ１８．２の発現または異常な発現と関連する疾患または障害を診断する方法もまた、本明細書において提供される。一部の実施形態では、この方法は、哺乳動物におけるＣＬＤＮ１８．２ポリペプチドを検出するステップを含む。ある特定の実施形態では、診断は、（ａ）哺乳動物に、有効量の標識抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその断片）を投与するステップと、（ｂ）投与ステップの後に、標識抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその断片）が、ＣＬＤＮ１８．２が発現する対象内の部位に優先的に集中する（および／または未結合の標識分子がバックグラウンドレベルまで排除される）のを可能にするように、ある期間待機するステップと、（ｄ）対象における標識抗ＣＬＤＮ１８．２抗体の量またはレベルを検出するステップと、（ｅ）対象における標識抗ＣＬＤＮ１８．２抗体の量またはレベルを、健常な対照対象における抗ＣＬＤＮ１８．２抗体のレベルまたは量と比較するステップとを含む。対象における標識抗ＣＬＤＮ１８．２抗体の量またはレベルが、健常な対照対象における抗ＣＬＤＮ１８．２抗体の量またはレベルを上回る場合、これは、対象が、ＣＬＤＮ１８．２の発現または異常な発現と関連する疾患または障害を有することを示し得る。
【０２６８】
本明細書において提供される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその断片）は、当業者に公知の古典的な免疫組織学的方法を使用して、生物学的試料中のＣＬＤＮ１８．２の量またはレベルをアッセイするために使用することができる（たとえば、Jalkanen,  et  al.,  J.  Cell.  Biol.  101:976-985  (1985);  Jalkanen,  et  al.,  J.  Cell.  Biol.  105:3087-3096  (1987)を参照されたい）。ＣＬＤＮ１８．２発現を検出するのに有用な他の抗体に基づく方法としては、イムノアッセイ、たとえば、酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）および放射免疫測定法（ＲＩＡ）が挙げられる。好適な抗体アッセイ標識は、当該技術分野において公知であり、酵素標識、たとえば、グルコースオキシダーゼ；放射性同位体、たとえば、ヨウ素（１３１Ｉ、１２５Ｉ、１２３Ｉ、１２１Ｉ）、炭素（１４Ｃ）、硫黄３５Ｓ）、トリチウム（３Ｈ）、インジウム（１１５ｍＩｎ、１１３ｍＩｎ、１１２Ｉｎ、１１１Ｉｎ）、およびテクネチウム（９９Ｔｃ、９９ｍＴｃ）、タリウム２０１Ｔｉ）、ガリウム（６８Ｇａ、６７Ｇａ）、パラジウム（１０３Ｐｄ）、モリブデン（９９Ｍｏ）、キセノン（１３３Ｘｅ）、フッ素（１８Ｆ）、１５３Ｓｍ、１７７Ｌｕ、１５９Ｇｄ、１４９Ｐｍ、１４０Ｌａ、１７５Ｙｂ、１６６Ｈｏ、９０Ｙ、４７Ｓｃ、１８６Ｒｅ、１８８Ｒｅ、１４２Ｐｒ、１０５Ｒｈ、９７Ｒｕ；ルミノール；ならびに蛍光標識、たとえば、フルオレセインおよびローダミン、ならびにビオチンが挙げられる。
【０２６９】
当該技術分野において公知の技法が、本明細書において提供される標識抗体（またはその断片）に適用され得る。そのような技法としては、二官能性コンジュゲート剤の使用が挙げられるが、これに限定されない（たとえば、米国特許第５，７５６，０６５号、同第５，７１４，６３１号、同第５，６９６，２３９号、同第５，６５２，３６１号、同第５，５０５，９３１号、同第５，４８９，４２５号、同第５，４３５，９９０号、同第５，４２８，１３９号、同第５，３４２，６０４号、同第５，２７４，１１９号、同第４，９９４，５６０号、および同第５，８０８，００３号を参照されたい）。
【０２７０】
一部の実施形態では、ＣＬＤＮ１８．２の過剰発現は、たとえば、抗体に基づくアッセイを使用して、生体液、たとえば、血清中に流出した抗原の量を決定することによって、測定される（たとえば、１９９０年６月１２日に発行された米国特許第４，９３３，２９４号、１９９１年４月１８日に公開されたＷ０９１／０５２６４、１９９５年３月２８日に発行された米国特許第５，４０１，６３８号、およびSias  et  al.,  J.  Immunol.  Methods  132:73-80  (1990)もまた参照されたい）。上述のアッセイ以外にも、様々なｉｎ  ｖｉｖｏおよびｅｘ  ｖｉｖｏアッセイが、当業者に利用可能である。たとえば、哺乳動物の体内の細胞を、検出可能な標識、たとえば、放射性同位体で必要に応じて標識した抗体に曝露し、それへの抗体の結合を、たとえば、放射能を外部スキャニングすること、または事前に抗体に曝露した哺乳動物から採取した試料（たとえば、生検もしくは他の生物学的試料）を分析することによって、評価することができる。
ＣＡＲエフェクター細胞調製
【０２７１】
本発明は、一態様では、抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲを発現するエフェクター細胞（たとえば、Ｔ細胞、ＮＫ細胞、および／またはマクロファージ）を提供する。抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲを発現するエフェクター細胞（たとえば、Ｔ細胞、ＮＫ細胞、および／またはマクロファージ）（抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲエフェクター細胞、たとえば、抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲ  Ｔ細胞、抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲ  ＮＫ細胞、および／または抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲマクロファージ）を調製する例示的な方法が、本明細書において提供される。
【０２７２】
一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲエフェクター細胞（たとえば、Ｔ細胞、ＮＫ細胞、またはマクロファージ）は、抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲ（たとえば、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体部分、４−１ＢＢ共刺激配列、およびＣＤ３ζ一次シグナル伝達配列、またはＣＡＲ細胞の生存を延長させることができる他の配列、たとえば、ＩＬ−２、ＩＬ１５、もしくはＣＡＲ細胞を排除することができる配列を含む、ＣＡＲ）を含むベクター（たとえば、レンチウイルスベクターを含む）を、エフェクター細胞（たとえば、Ｔ細胞、ＮＫ細胞、またはマクロファージ）に導入することによって、生成することができる。一部の実施形態では、本発明の抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲエフェクター細胞（たとえば、Ｔ細胞、ＮＫ細胞、および／またはマクロファージ）は、ｉｎ  ｖｉｖｏで複製することができる。一部の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲエフェクター細胞（たとえば、Ｔ細胞、ＮＫ細胞、またはマクロファージ）は、抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲ（たとえば、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体部分、４−１ＢＢ共刺激配列、およびＣＤ３ζ一次シグナル伝達配列を含む、ＣＡＲ）をコードするｍＲＮＡを、エフェクター細胞（たとえば、Ｔ細胞、ＮＫ細胞、および／またはマクロファージ）に導入することによって、生成することができる。
【０２７３】
本発明の抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲ  Ｔ細胞は、強固なｉｎ  ｖｉｖｏ  Ｔ細胞増殖を起こし得、血液および骨髄において長期間にわたって高いレベルで持続するＣＬＤＮ１８．２特異的メモリー細胞を確立することができる。一部の実施形態では、患者に注入された本発明の抗ＣＬＤＮ１８．２  ＣＡＲ  Ｔ細胞は、疾患（たとえば、高いＣＬＤＮ１８．２発現によって特徴付けられる疾患）を有する患者において、ｉｎ  ｖｉｖｏで、ＣＬＤＮ１８．２を提示する細胞、たとえば、ＣＬＤＮ１８．２を提示するがん細胞を排除することができる。
【０２７４】
Ｔ細胞、ＮＫ細胞、またはマクロファージの増殖および遺伝子修飾の前に、Ｔ細胞、ＮＫ細胞、またはマクロファージの供給源が、対象から得られる。たとえば、Ｔ細胞は、末梢血単核細胞、骨髄、リンパ節組織、臍帯血、胸腺組織、感染部位由来の組織、腹水、胸水、脾臓組織、および腫瘍を含む、多数の供給源から得ることができる。本発明の一部の実施形態では、当該技術分野において入手可能な任意の数のＴ細胞、ＮＫ細胞、および／またはマクロファージ細胞株が、使用され得る。本発明の一部の実施形態では、Ｔ細胞は、当業者に公知の任意の数の技法、たとえば、Ｆｉｃｏｌｌ（商標）分離を使用して、対象から採取された血液単位から得ることができる。一部の実施形態では、個体の循環血液由来の細胞は、アフェレーシスによって得られる。アフェレーシス産物は、典型的に、リンパ球、たとえば、Ｔ細胞、単球、顆粒球、Ｂ細胞、他の有核白血球、赤血球、および血小板を含有する。一部の実施形態では、アフェレーシスによって採取された細胞を洗浄して、血漿画分を除去し、後続の処理ステップに適した緩衝液または培地に入れてもよい。一部の実施形態では、細胞を、リン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）で洗浄する。一部の実施形態では、洗浄溶液は、カルシウムを含まず、かつマグネシウム不含であり得るか、またはすべてではないものの多くの二価カチオン不含であり得る。当業者には容易に理解されるように、洗浄ステップは、当業者に公知の方法によって、たとえば、半自動化「フロースルー」遠心分離機（たとえば、Ｃｏｂｅ  ２９９１細胞処理装置、Ｂａｘｔｅｒ  ＣｙｔｏＭａｔｅ、またはＨａｅｍｏｎｅｔｉｃｓ  Ｃｅｌｌ  Ｓａｖｅｒ  ５）を製造業者の指示に従って使用することによって、達成され得る。洗浄した後、細胞を、様々な生体適合性緩衝液、たとえば、Ｃａ２＋不含、Ｍｇ２＋不含ＰＢＳ、ＰｌａｓｍａＬｙｔｅ  Ａ、または緩衝物質ありもしくはなしの他の食塩水中に、再懸濁させてもよい。あるいは、アフェレーシス試料の望ましくない成分を除去し、細胞を培養培地中に直接再懸濁してもよい。
【０２７５】
一部の実施形態では、Ｔ細胞は、赤血球を溶解させ、たとえば、ＰＥＲＣＯＬＬ（商標）密度勾配遠心分離または向流遠心分離溶出により単球を枯渇させることによって、末梢血リンパ球から単離される。Ｔ細胞の特定の部分集団、たとえば、ＣＤ３＋、ＣＤ２８＋、ＣＤ４＋、ＣＤ８＋、ＣＤ４５ＲＡ＋、およびＣＤ４５ＲＯ＋  Ｔ細胞を、陽性選択技法または陰性選択技法によってさらに単離してもよい。複数回の選択を使用してもよい。
【０２７６】
陰性選択によるＴ細胞集団のエンリッチメントは、陰性選択が行われる細胞に固有な表面マーカーに向けられた抗体の組合せを用いて達成することができる。１つの方法は、陰性選択が行われる細胞上に存在する細胞表面マーカーに対するモノクローナル抗体のカクテルを使用する、陰性磁気免疫付着またはフローサイトメトリーによる細胞の分取および／または選択である。
製品およびキット
【０２７７】
ＣＤＬＮ  １８．２を発現する腫瘍（たとえば、固形腫瘍）またはがん、たとえば、胃がん、食道がん、胃食道接合部のがん、膵臓がん、胆管のがん、肺がん、卵巣がん、結腸がん、肝臓がん、頭頸部がん、胆嚢がんなどの処置に有用な材料を含む、製品が、提供される。
【０２７８】
ある特定の実施形態では、製品またはキットは、本明細書に記載される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体または組成物のうちの１つまたは複数を含む、容器を含む。ある特定の実施形態では、製品またはキットは、本明細書に記載される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体または組成物のうちの１つ（または複数）をコードする核酸を含む、容器を含む。一部の実施形態では、キットは、本明細書に記載される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体を産生する細胞株の細胞を含む。一部の実施形態では、キットは、１つまたは複数の陽性対照、たとえば、ＣＬＤＮ１８．２（もしくはその断片）またはＣＬＤＮ１８．２＋細胞を含む。一部の実施形態では、キットは、陰性対照、たとえば、実質的にＣＬＤＮ１８．２を含まない表面または溶液を含む。
【０２７９】
ある特定の実施形態では、製品またはキットは、容器、ならびにその容器上または容器に付随するラベルまたは添付文書を含む。好適な容器としては、たとえば、ボトル、バイアル、シリンジ、ＩＶ溶液バッグなどが挙げられる。容器は、ガラスまたはプラスチックなど、様々な材料から形成することができる。容器は、組成物自体、またはＣＤＬＮ  １８．２を発現する腫瘍（たとえば、固形腫瘍）もしくはがん（たとえば、胃がん、食道がん、胃食道接合部のがん、膵臓がん、胆管のがん、肺がん、卵巣がん、結腸がん、肝臓がん、頭頸部がん、胆嚢がんなど）を処置、予防、および／もしくは診断するのに有効な別の組成物と組み合わされた組成物を保持し、滅菌のアクセスポートを有し得る（たとえば、容器は、静脈内溶液バッグまたは皮下注射針によって穿刺可能なストッパーを有するバイアルであり得る）。組成物中の少なくとも１つの薬剤が、本明細書に記載される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体である。ラベルまたは添付文書は、組成物が、ＣＤＬＮ  １８．２を発現する腫瘍（たとえば、固形腫瘍）またはがん（たとえば、胃がん、食道がん、胃食道接合部のがん、膵臓がん、胆管のがん、肺がん、卵巣がん、結腸がん、肝臓がん、頭頸部がん、胆嚢がんなど）を処置するために使用されることを示す。
【０２８０】
さらに、製品またはキットは、（ａ）本明細書に記載される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体を含む組成物が中に含まれる第１の容器、および（ｂ）さらなる細胞毒性剤またはそうでなければ治療剤を含む組成物が中に含まれる第２の容器を含み得る。一部の実施形態では、治療剤は、本明細書に記載される免疫治療剤である。加えて、製品は、薬学的に許容される緩衝液、たとえば、注射用静菌水（ＢＷＦＩ）、リン酸緩衝食塩水、リンガー溶液、およびデキストロース溶液を含む、追加の容器をさらに含み得る。これは、他の緩衝液、希釈剤、フィルター、ニードル、およびシリンジを含め、商業上およびユーザの観点から望ましい他の材料を、さらに含んでもよい。
【０２８１】
上述の製品またはキットのいずれも、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体の代わりに（またはそれに加えて）、本明細書に記載されるイムノコンジュゲートを含み得ることが理解される。
【０２８２】
必要に応じて製品と組み合わせて、様々な目的、たとえば、患者におけるＣＬＤＮ１８．２の単離または検出に有用なキットもまた、提供される。ＣＬＤＮ１８．２の単離および精製のために、キットは、ビーズ（たとえば、セファロースビーズ）に連結された本明細書において提供される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体（またはその断片）を含み得る。ｉｎ  ｖｉｔｒｏ、たとえば、ＥＬＩＳＡまたはウエスタンブロットにおけるＣＬＤＮ１８．２の検出および定量のための抗体（またはその断片）を含むキットが、提供され得る。製品と同様に、キットは、容器、ならびにその容器上または容器に付随するラベルまたは添付文書を含む。たとえば、容器は、少なくとも１つの本明細書において提供される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体を含む組成物を保持する。たとえば、希釈剤および緩衝液、対照抗体を含む、さらなる容器が、含まれてもよい。ラベルまたは添付文書は、組成物の説明、ならびに意図されるｉｎ  ｖｉｔｒｏまたは診断用途のための指示を提供し得る。
【実施例】
【０２８３】
（実施例１）
抗クローディン１８．２（ＣＬＤＮ１８．２）抗体の生成および特徴付け
２つの耐性破壊Ｔ細胞エピトープでタグ付けしたＣＬＤＮ１８．２を過剰発現するＵｂｅｒｃｅｌｌ（商標）を使用して、ＮＺＢ／Ｗ  Ｆ１マウスを免疫した。血漿力価を、ＨＥＫ２９３−ＣＬＤＮ１８．２安定細胞に対して、ＦＡＣＳにより分析した。最後の力価測定の後に、脾臓を採取し、プールし、骨髄腫細胞に融合して、ハイブリドーマを生成した。融合の１０日後に、ハイブリドーマ上清を、ＨＥＫ２９３−ＣＬＤＮ１８．２、ＨＥＫ２９３−ＣＬＤＮ１８．１、およびＨＥＫ２９３に対して、ＦＡＣＳによってスクリーニングした。ハイブリドーマは、ＣＬＤＮ１８．２に対して多様な結合親和性および選択性を示した。スクリーニングした１０２個のハイブリドーマ上清のうち、３３個が、ＣＬＤＮ１８．２に選択的に結合する抗体を含み、４６個が、ＣＬＤＮ１８．２およびＣＬＤＮ１８．１の両方に対してほぼ同等の親和性で結合する抗体を含み、９個が、ＣＬＤＮ１８．２との不良な相互作用を示す抗体を含んでいた。図１を参照されたい（ＭＦＩ＝平均蛍光強度）。図１に示されるデータを、以下の表５にも提供する。
【表５−１】
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【表５−２】
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【表５−３】
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【０２８４】
次に、ＣＬＤＮ１８．２に対する２０個のハイブリドーマクローン上清のＥＣ５０値を、ｉｎ−ｃｅｌｌ  ＥＬＩＳＡによって決定した。ＣＬＤＮ１８．１およびＣＬＤＮ１８．２の両方に結合する抗体を含む（図１を参照されたい）ハイブリドーマ５Ｋ４Ｂの上清を、陽性対照として使用した。ｉｎ−ｃｅｌｌ  ＥＬＩＳＡは、次のように行った：ポリ−Ｌ−リシンをコーティングした９６ウェルプレートに、１ウェルあたり５×１０３個のＨＥＫ２９３−ＣＬＤＮ１８．２細胞を播種した。プレートを、３７℃で５％  ＣＯ２において、２日間インキュベートした。インキュベーションの後に、培養培地をそれぞれのウェルから除去し、ＨＥＫ２９３−ＣＬＤＮ１８．２細胞を、室温で１時間、１ウェル当たり２００μｌのブロッキング緩衝液（３％  ＢＳＡ／ＰＢＳ（ｐＨ  ７．４））でブロッキングした。それぞれのハイブリドーマ上清を、細胞とともに、室温で１時間インキュベートした。細胞を、１ｍＭ  Ｃａ２＋および０．５ｍＭ  Ｍｇ２＋を含有する２００μｌのＰＢＳ（ｐＨ  ７．４）で、３回穏やかに洗浄した。次に、細胞を、１００μｌのＨＲＰコンジュゲートヤギ抗ヒトＩｇＧ（Ｈ＋Ｌ）抗体とともに、室温で１時間インキュベートした。インキュベーションの後に、細胞を、１ｍＭ  Ｃａ２＋および０．５ｍＭ  Ｍｇ２＋を含有する２００μｌのＰＢＳ（ｐＨ７．４）で、３回洗浄した。１００μｌの１−Ｓｔｅｐ（商標）Ｕｌｔｒａ  ＴＭＢ−ＥＬＩＳＡ基質を、それぞれのウェルに添加し、反応を、５０μｌの停止溶液の添加によって停止させた。ＯＤ４５０を、ＣＬＡＲＩＯＳｔａｒマイクロプレートリーダーを使用して測定した。ｉｎ−ｃｅｌｌ  ＥＬＩＳＡを、ＨＥＫ２９３−ＣＬＤＮ１８．１細胞を使用してそれぞれのクローンについて反復した。結果を、以下の表６に示す。
【表６】
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【０２８５】
ＣＬＤＮ１８．２に結合するがＣＬＤＮ１８．１には結合しない抗体、またはＣＬＤＮ１８．１よりもＣＬＤＮ１８．２に優先的に結合する抗体を産生するハイブリドーマを、クローニングに選択した。ＣＬＤＮ１８．２およびＣＬＤ１８．１の両方に対して強力な結合を示したハイブリドーマ５Ｋ４Ｂおよび２Ｆ１３Ａもまた、クローニングに選択した。簡単に述べると、表６において試験したそれぞれのハイブリドーマから１個の細胞、およびハイブリドーマ１Ｂ１３Ａを、３８４ウェルプレートにおいて、１ウェルあたり播種した。増殖したクローンから得られた上清を、ＦＡＣＳによってスクリーニングして、ＣＬＤＮ１８．２への結合を再確認した。ＣＬＤＮ１８．２に対する高い親和性を示すクローンハイブリドーマに由来する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）および軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）をコードするＤＮＡ断片を、５’  ＲＡＣＥによって増幅させ、ＴＯＰＯクローニングし、シーケンシングした。クローンのＶＨドメインのアミノ酸配列を、表７に示し、クローンのＶＬドメインのアミノ酸配列を、表８に示す（ＣＤＲを太字と下線で示す）。
【表７−１】
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【表７−２】
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【表８−１】
2021515583.tif 000019
【表８−２】
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【表８−３】
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【０２８６】
表７および８に示されるそれぞれのクローンのＶＨドメインおよびＶＬドメインをコードするＤＮＡ断片を、合成した。ＶＨドメインをコードするＤＮＡ断片を、それぞれ、ヒトＩｇＧ１定常領域とインフレームでｐｃＤＮＡ３．４にクローニングし、ＶＬドメインをコードするＤＮＡ断片を、それぞれ、ヒトＩｇカッパ定常領域とインフレームでｐｃＤＮＡ３．４にクローニングした。表７および８に示される抗体クローンのそれぞれの重鎖および軽鎖を発現するプラスミドを、次いで、無血清ＦｒｅｅＳｔｙｌｅ（商標）２９３発現培地において成長させた２９３−６Ｅ細胞にコトランスフェクトした。細胞培養上清を、６日目に回収し、Ｅｓｈｍｕｎｏ（登録商標）Ａクロマトグラフィーを使用して精製した。溶出したタンパク質画分をプールし、ＰＢＳ、ｐＨ７．２に緩衝液交換した。それぞれの溶出画分のタンパク質濃度を、Ａ２８０によって決定し、それぞれの画分の純度は、ＳＤＳ−ＰＡＧＥにより、９５％を上回ることが決定された。
【０２８７】
２０個の精製したキメラ抗体と、ＣＬＤＮ１８．２との相互作用を、ＨＥＫ２９３−ＣＬＤＮ１８．２細胞を使用して、ｉｎ−ｃｅｌｌ  ＥＬＩＳＡおよびＦＡＣＳによって評価した。ｉｎ−ｃｅｌｌ  ＥＬＩＳＡは、上述のように行った。ＦＡＣＳアッセイは、次のように行った：表７および８に示されるそれぞれの抗体クローンの連続希釈物を調製し、氷上で３０分間、１０μｇ／ｍｌ、３μｇ／ｍｌ、１μｇ／ｍｌ、０．３μｇ／ｍｌ、０．１μｇ／ｍｌ、０．０３μｇ／ｍｌ、０．０１μｇ／ｍｌ、および０μｇ／ｍｌの最終抗体濃度で、ＨＥＫ２９３−ＣＬＤＮ１８．２細胞で染色した。細胞を、染色緩衝液（ＰＢＳ＋２％ウシ胎児血清）で洗浄して、遊離抗体を除去し、氷上で３０分間、ＡｌｅｘＦｌｕｏｒ  ４８８コンジュゲート抗ヒトＩｇＧ抗体でさらに染色した。細胞を洗浄し、ＦＡＣＳによって分析した。キメラ抗体のＥＣ５０を、以下の表９に要約する。
【表９−１】
2021515583.tif 000022
【表９−２】
2021515583.tif 000023
【０２８８】
第２のセットのｉｎ−ｃｅｌｌ  ＥＬＩＳＡアッセイを行って、精製したキメラ抗体の、ＣＬＤＮタンパク質の異なるスプライスバリアントであるＣＬＤＮ１８．１への結合を評価した。アッセイは、１μｇ／ｍｌのそれぞれの抗体クローンおよびＨＥＫ２９３−ＣＬＤＮ１８．１細胞を使用して、上述のように行った。１μｇ／ｍｌのヒトＩｇＧ１を、陰性対照として使用した。ＣＬＤＮ１８．１およびＣＬＤＮ１８．２の両方に結合する抗体を含む（図１を参照されたい）ハイブリドーマ５Ｋ４Ｂの上清を、陽性対照として使用した。図２に示されるように、２−Ｄ２２−Ａ、９−Ａ１３−Ｂ、および１Ｈ１６−Ａは、ある程度のＣＬＤＮ１８．１との相互作用を示したが、その他のものは、ＣＬＤＮ１８．２だけに結合し、ＣＬＤＮ１８．１には結合しなかった。
（実施例２）
胃がん細胞株に結合するＣＬＤＮ１８．２特異的抗体
【０２８９】
ヒト胃癌細胞株ＫＡＴＯ−ＩＩＩ（ＡＴＣＣ  ＨＴＢ−１０３）およびＮＵＧＣ−４（ＪＣＲＢ０８３４）は、ＣＬＤＮ  １８の強固な内因性発現を示すことが見出されている。実施例１に記載される精製したキメラ抗体の、ＫＡＴＯ−ＩＩＩおよびＮＵＧＣ−４生細胞上に構成的に発現されるＣＬＤＮ１８．２への細胞表面結合を、ＦＡＣＳによって分析し、それぞれの抗体の結合ＥＣ５０値を、決定した。実施例１に記載される２０個の抗体のうちの１８個、すなわち、１０−Ｋ１２−Ａ、１−Ｂ１３−Ａ、１−Ｍ５−Ａ、２−Ｄ２２−Ａ、４−Ｎ１−Ａ、５−Ｊ２２−Ａ、６−Ｃ５−Ａ、６−Ｍ１１−Ａ、７−Ａ２１−Ａ、７−Ｂ１５−Ａ、７−Ｅ２０−Ａ、７−Ｇ１７−Ａ、９−Ｂ１１−Ａ、９−Ｃ６−Ａ、９−Ｍ７−Ａ、９−Ｎ１４−Ａ、１０−Ｊ１０−Ｂ、および１０−Ｐ１２−ＡのＥＣ５０は、抗ＣＬＤＮ１８．２参照抗体ＩＭＡＢ３６２のＥＣ５０値よりも低いＥＣ５０値を有する。これらの１８個の抗体はまた、ＩＭＡＢ３６２よりも高い最大結合値を有し、抗体１０−Ｋ１２−Ａ、１−Ｂ１３−Ａ、１−Ｍ５−Ａ、２−Ｄ２２−Ａ、４−Ｎ１−Ａ、５−Ｊ２２−Ａ、６−Ｃ５−Ａ、６−Ｍ１１−Ａ、７−Ａ２１−Ａ、７−Ｂ１５−Ａ、７−Ｅ２０−Ａ、７−Ｇ１７−Ａ、９−Ｂ１１−Ａ、９−Ｃ６−Ａ、９−Ｍ７−Ａ、９−Ｎ１４−Ａ、１０−Ｊ１０−Ｂ、１０−Ｐ１２−Ａが、ＣＬＤＮ１８．２に対して、参照抗体ＩＭＡＢ３６２よりも高い親和性を有することを示す。図３Ａ、３Ｂ、および３Ｃを参照されたい。
（実施例３）
ＩＭＡＢ３６２特異的ペプチドへの抗ＣＬＤＮ１８．２抗体の結合の評価
【０２９０】
ＩＭＡＢ３６２（ゾルベツキシマブまたはクローディキシマブとしても知られている）は、ＣＬＤＮ１８．２に特異的なキメラＩｇＧ１抗体である。２つの小さな環状ペプチド（すなわち、ペプチド２Ｃおよびペプチド３Ｃ）が、ファージディスプレイによってこれまでに開発されており、次いで、ペプチドマイクロアレイ技術によって、臨床組織試料におけるＥＬＩＳＡによる血清ＩＭＡＢ３６２の検出のために、ＩＭＡＢ３６２に結合するように最適化されている（Daneschdar  et  al.  (2014)  JPT  Peptide  Technologies,  Volmerstrasse  5,  12489を参照されたい）。Ｄａｎｅｓｃｈｄａｒおよび同僚らは、ＥＬＩＳＡによって、ＩＭＡＢ３６２が、ペプチド２Ｃおよびペプチド３Ｃに、ナノモル濃度以下の親和性で結合することを示した。実施例１に記載される抗体および参照抗体ＩＭＡＢ３６２を、ＥＬＩＳＡによって、ペプチド２Ｃおよびペプチド３Ｃに結合する能力について評価した。抗体１０−Ｋ１２Ａ、１−Ｂ１３−Ａ、６−Ｃ５−Ａ、７−Ｇ１７−Ａ、９−Ｂ１１−Ａ、９−Ｎ１４−Ａ、１０−Ｊ１０−Ｂ、７−Ａ２１−Ａ、および９−Ｍ７−Ａを、高いものから低いものまで代表的な親和性範囲で選択した。参照抗体ＩＭＡＢ３６２のみが、ペプチド２Ｃおよび３Ｃに結合することが見出され、一方で抗体１０−Ｋ１２Ａ、１−Ｂ１３−Ａ、６−Ｃ５−Ａ、７−Ａ２１−Ａ、７−Ｇ１７−Ａ、９−Ｂ１１−Ａ、９−Ｍ７−Ａ、９−Ｎ１４−Ａ、および１０−Ｊ１０−Ｂは、いずれのペプチドにも結合しなかった。このような結果により、抗体１０−Ｋ１２Ａ、１−Ｂ１３−Ａ、６−Ｃ５−Ａ、７−Ａ２１−Ａ、７−Ｇ１７−Ａ、９−Ｂ１１−Ａ、９−Ｍ７−Ａ、９−Ｎ１４−Ａ、および１０−Ｊ１０−Ｂが、ＩＭＡＢ３６２が結合するエピトープとは異なるＣＬＤＮ１８．２のエピトープに結合することが示される。
【０２９１】
ペプチド２Ｃおよび３Ｃを使用して、さらなる競合的実験を行って、これらのペプチドが、ＨＥＫ２９３−ＣＬＤＮ１８．２細胞の表面に結合する抗体１０−Ｋ１２−Ａ、１−Ｂ１３−Ａ、１−Ｍ５−Ａ、２−Ｄ２２−Ａ、４−Ｎ１−Ａ、５−Ｊ２２−Ａ、６−Ｃ５−Ａ、６−Ｍ１１−Ａ、７−Ａ２１−Ａ、７−Ｂ１５−Ａ、７−Ｅ２０−Ａ、７−Ｇ１７−Ａ、９−Ｂ１１−Ａ、９−Ｃ６−Ａ、９−Ｍ７−Ａ、９−Ｎ１４−Ａ、１０−Ｊ１０−Ｂ、１０−Ｐ１２−Ａの能力（実施例１に示されている）を妨害するかどうかを評価した。図５に示されるように、ペプチド２Ｃおよびペプチド３Ｃの両方が、ＨＥＫ２９３細胞の表面上に発現されるＣＬＤＮ１８．２への結合について、参照抗体（以下の図におけるＩＭＡＢ３６２）と効率的に競合した。いずれのペプチドも、ＨＥＫ２９３−ＣＬＤＮ１８．２細胞に結合する抗体１０−Ｋ１２−Ａ、１−Ｂ１３−Ａ、１−Ｍ５−Ａ、２−Ｄ２２−Ａ、４−Ｎ１−Ａ、５−Ｊ２２−Ａ、６−Ｃ５−Ａ、６−Ｍ１１−Ａ、７−Ａ２１−Ａ、７−Ｂ１５−Ａ、７−Ｅ２０−Ａ、７−Ｇ１７−Ａ、９−Ｂ１１−Ａ、９−Ｃ６−Ａ、９−Ｍ７−Ａ、９−Ｎ１４−Ａ、１０−Ｊ１０−Ｂ、１０−Ｐ１２−Ａの能力に影響を及ぼさなかった。
（実施例４）
マウスＰＤＸモデルにおける選択した抗体のｉｎ  ｖｉｖｏ有効性研究
【０２９２】
３つの抗体クローン１−Ｂ１３−Ａ、７−Ｇ１７−Ａ、および９−Ｍ７−Ａ、ならびに参照抗体ＩＭＡＢ３６２を、マウスＩｇＧ２ａに再フォーマットし、それらのｉｎ  ｖｉｖｏ抗腫瘍有効性を、患者由来胃腫瘍異種移植片（すなわち、患者由来異種移植片またはＰＤＸ）を使用して試験した。１−Ｂ１３−Ａ、７−Ｇ１７−Ａ、および９−Ｍ７−Ａは、高いものから低いものまで、胃がん細胞株に対する結合親和性によって選択した。１４０匹のＢＡＬＢ／ｃヌードマウス（雌性、６〜１０週齢、ＣｒｏｗｎＢｉｏ：ｗｗｗ（ｄｏｔ）ｃｒｏｗｎｂｉｏ（ｄｏｔ）ｃｏｍ／ｏｎｃｏｌｏｇｙ／ｉｎ−ｖｉｖｏ−ｓｅｒｖｉｃｅｓ／ｐａｔｉｅｎｔ−ｄｅｒｉｖｅｄ−ｘｅｎｏｇｒａｆｔ−ｐｄｘ−ｔｕｍｏｒ−ｍｏｄｅｌｓから入手）に、患者由来胃腫瘍（約２〜３ｍｍ３）を埋め込んだ。腫瘍サイズが、５０〜１００ｍｍ３に達したときに、マウスを６つの群（１群当たり８匹のマウス）にランダムに分類し、以下の表１０に列挙される投与スケジュールに従って投与した。
【表１０−１】
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【表１０−２】
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＊ＩＶ＝静脈内
＊＊ＢＩＷ＝週2回（1週間に2回）
【０２９３】
図６Ａに示されるように、９−Ｍ７−Ａで処置したマウスは、１−Ｂ１３−Ａ、７−Ｇ１７−Ａ、または参照抗体ＩＭＡＢ３６２で処置したマウスと比べて、有意に低減された腫瘍量を示した。これに対応して、図６Ｂは、９−Ｍ７−Ａでの処置により、マウスにおける腫瘍成長が５５％阻害され、一方で、参照抗体ＩＭＡＢ３６２での処置は、同じ研究において腫瘍成長を４０％のみ阻害したことを示す。
【０２９４】
前述の実施例は、例示目的で提供されるものにすぎず、決して本発明の範囲を制限することを意図するものではない。本明細書に示され、記載されたものに加えて、本発明の様々な修正形が、前述の説明から当業者には明らかであり、添付の特許請求の範囲内に含まれる。
【図１】
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【図２】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図３Ｃ】
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【図４Ａ】
2021515583.tif 000031
【図４Ｂ】
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【図５】
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【図６Ａ】
2021515583.tif 000034
【図６Ｂ】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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2021515583.tif 000037
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