(57)【要約】  有効量のフェンレチニド化合物（フェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはその薬学的に許容される塩）および／または亜鉛の投与または使用に基づいて、細胞内のイオン輸送体の活性を増強するための方法、および／または対象におけるチャネル病を治療するための方法が記載される。本方法は、変異または欠陥のある嚢胞性線維症膜コンダクタンス調節因子（ＣＦＴＲ）等のイオン輸送体の細胞表面発現を修復または増加させるのに有用である。フェンレチニド化合物および／または亜鉛は、イオン輸送体の細胞表面発現および活性をさらに増強させるために、イオン輸送体調節物質、例えばＣＦＴＲ調節物質と組み合わせて使用され得る。
2021522177.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
細胞内のイオン輸送体の活性を増強するための方法であって、前記細胞を、有効量の（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体、もしくはその塩、（ｉｉ）亜鉛、または（ｉｉｉ）（ｉ）および（ｉｉ）の組み合わせと接触させることを含む、方法。
【請求項２】
前記イオン輸送体が、対応する天然イオン輸送体と比較して、低減した細胞表面発現および／または活性を有する変異または欠陥イオン輸送体である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記イオン輸送体が、嚢胞性線維症膜コンダクタンス調節因子（ＣＦＴＲ）ではない、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
前記イオン輸送体が、嚢胞性線維症膜コンダクタンス調節因子（ＣＦＴＲ）であり、前記方法が、前記細胞を、有効量の（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはその塩、および（ｉｉ）亜鉛の組み合わせと接触させることを含む、請求項１または２に記載の方法。
【請求項５】
前記ＣＦＴＲが、変異ＣＦＴＲである、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
前記変異ＣＦＴＲが、前記ＣＦＴＲタンパク質の５０８位に変異を含む、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記ＣＦＴＲタンパク質の５０８位における前記変異が、欠失である、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
対象におけるチャネル病を治療するための方法であって、前記対象に、有効量の（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体、もしくはその薬学的に許容される塩、（ｉｉ）生理学的に許容される同化可能な亜鉛源、または（ｉｉｉ）（ｉ）および（ｉｉ）の組み合わせを投与することを含む、方法。
【請求項９】
前記チャネル病が、対応する天然イオン輸送体と比較して、低減した細胞表面発現および／または活性を有する、変異または欠陥イオン輸送体によって引き起こされる、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
前記イオン輸送体が、嚢胞性線維症膜コンダクタンス調節因子（ＣＦＴＲ）ではない、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記イオン輸送体が、嚢胞性線維症膜コンダクタンス調節因子（ＣＦＴＲ）である、請求項９に記載の方法。
【請求項１２】
前記チャネル病が、嚢胞性線維症（ＣＦ）、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、喘息、特発性膵炎、鼻副鼻腔炎、気管支拡張症、または精管の先天性両側欠損である、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記チャネル病が、ＣＯＰＤ、喘息、特発性膵炎、鼻副鼻腔炎、気管支拡張症、または精管の先天性両側欠損である、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記チャネル病が、呼吸器系チャネル病である、請求項８〜１３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
前記チャネル病が、ＣＦである、請求項１２または１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記ＣＦＴＲが、変異ＣＦＴＲである、請求項１２〜１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７】
前記変異ＣＦＴＲが、ＣＦＴＲタンパク質の５０８位にフェニルアラニン残基の変異を含む、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記ＣＦＴＲタンパク質の５０８位における前記変異が、欠失（ΔＦ５０８）である、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記変異が、ホモ接合変異である、請求項９〜１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０】
前記対象が、亜鉛欠乏症に罹患している、請求項８〜１９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１】
前記方法が、有効量の（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはその薬学的に許容される塩、および（ｉｉ）生理学的に許容される同化可能な亜鉛源の組み合わせを投与することを含む、請求項８〜２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２】
前記方法が、有効量のフェンレチニドを投与することを含む、請求項８〜２１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２３】
前記生理学的に許容される同化可能な亜鉛源が、酸化亜鉛または薬学的に許容される亜鉛塩である、請求項８〜２２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２４】
前記薬学的に許容される亜鉛塩が、硫酸亜鉛である、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
投与される前記フェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはその塩の有効量が、前記対象において、約０．５μＭ〜約６μＭ、好ましくは約１μＭ〜約２．５または３μＭの前記フェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはその塩の血漿中濃度を提供する、請求項８〜２４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２６】
前記投与されるフェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはその塩の有効量が、約１ｍｇ〜約５００ｍｇ、好ましくは約１０ｍｇ〜２５０ｍｇである、請求項８〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２７】
投与される前記生理学的に許容される同化可能な亜鉛源の有効量が、前記対象において約１０μＭ〜約１５μＭの亜鉛の血漿中濃度を提供する、請求項８〜２６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２８】
前記投与される生理学的に許容される同化可能な亜鉛源の有効量が、約１ｍｇ〜約２００ｍｇの元素亜鉛、好ましくは約５ｍｇ〜約５０ｍｇの元素亜鉛を含む、請求項８〜２７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２９】
前記（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはその塩が、マトリックスポリマーを含む固体分散体中の非晶質形態で存在する、請求項８〜２８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３０】
前記マトリックスポリマーが、ポリビニルピロリドンポリマー、好ましくは、商品名Ｐｌａｓｄｏｎｅ（登録商標）（ポビドン）、ポリビニルピロリドンＫ１２、ポリビニルピロリドンＫ１７、ポリビニルピロリドンＫ２５、ポリビニルピロリドンＫ３０、ポリビニルピロリドンＫ９０、またはこれらの任意の組み合わせで販売されているポリビニルピロリドンポリマーである、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
前記（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはその塩、および（ｉｉ）生理学的に許容される同化可能な亜鉛源が、同じ組成物に製剤化される、請求項８〜３０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３２】
前記方法が、有効量のイオン輸送体修飾物質を投与することをさらに含む、請求項８〜３１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３３】
前記イオン輸送体修飾物質が、ＣＦＴＲ修飾物質である、請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
前記ＣＦＴＲ調節物質が、アイバカフトール（ＩＶＡ、ＶＸ−７７０）、ＧＬＰＧ２４５１、ＧＬＰＧ１８３７、ルマカフトール（ＬＵＭ、ＶＸ−８０９）、テザカフトール（ＶＸ−６６１）、ＶＸ−４４０、ＶＸ−１５２、ＧＬＰＧ２２２２、またはこれらの任意の組み合わせである、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
前記ＣＦＴＲ調節物質が、アイバカフトールおよびルマカフトール、またはテザカフトールおよびアイバカフトールの組み合わせを含む、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
前記組み合わせが、ＶＸ−４４０またはＶＸ−１５２をさらに含む、請求項３５に記載の方法。
【請求項３７】
細胞内のイオン輸送体の活性を増強するための、（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体、もしくはそれらの塩、（ｉｉ）亜鉛、または（ｉｉｉ）（ｉ）および（ｉｉ）の組み合わせの使用。
【請求項３８】
細胞内のイオン輸送体の活性を増強するための医薬品の製造のための、（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体、もしくはそれらの塩、（ｉｉ）亜鉛、または（ｉｉｉ）（ｉ）および（ｉｉ）の組み合わせの使用。
【請求項３９】
細胞内のイオン輸送体の活性の増強に使用するための薬剤であって、（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体、もしくはその塩、（ｉｉ）亜鉛、または（ｉｉｉ）（ｉ）および（ｉｉ）の組み合わせである、薬剤。
【請求項４０】
細胞内のイオン輸送体の活性の増強に使用するための組み合わせであって、（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはその塩、および（ｉｉ）亜鉛を含む、組み合わせ。
【請求項４１】
前記イオン輸送体が、対応する天然イオン輸送体と比較して、低減した細胞表面発現および／または活性を有する変異または欠陥イオン輸送体である、請求項３７〜４０に記載のいずれか一項に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【請求項４２】
前記イオン輸送体が、嚢胞性線維症膜コンダクタンス調節因子（ＣＦＴＲ）ではない、請求項３７〜４１のいずれか一項に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【請求項４３】
前記イオン輸送体が、嚢胞性線維症膜コンダクタンス調節因子（ＣＦＴＲ）であり、前記方法が、前記細胞を、有効量の（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはその塩、および（ｉｉ）亜鉛の組み合わせと接触させることを含む、請求項３７〜４１のいずれか一項に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【請求項４４】
前記ＣＦＴＲが、変異ＣＦＴＲである、請求項４３に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【請求項４５】
前記変異ＣＦＴＲが、ＣＦＴＲタンパク質の５０８位に変異を含む、請求項４４に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【請求項４６】
前記ＣＦＴＲタンパク質の５０８位における前記変異が、欠失である、請求項４５に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【請求項４７】
対象におけるチャネル病を治療するための、（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはその薬学的に許容される塩、（ｉｉ）生理学的に許容される同化可能な亜鉛源、または（ｉｉｉ）（ｉ）および（ｉｉ）の組み合わせの使用。
【請求項４８】
対象におけるチャネル病を治療するための医薬品の製造のための、（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体、もしくはその薬学的に許容される塩、（ｉｉ）生理学的に許容される同化可能な亜鉛源、または（ｉｉｉ）（ｉ）および（ｉｉ）の組み合わせの使用。
【請求項４９】
対象におけるチャネル病の治療の使用のための薬剤であって、（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体、もしくはその薬学的に許容される塩、（ｉｉ）生理学的に許容される同化可能な亜鉛源、または（ｉｉｉ）（ｉ）および（ｉｉ）の組み合わせである、薬剤。
【請求項５０】
対象におけるチャネル病の治療の使用のための組み合わせであって、（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体、もしくはその薬学的に許容される塩、および（ｉｉ）生理学的に許容される同化可能な亜鉛源を含む、組み合わせ。
【請求項５１】
前記チャネル病が、前記対応する天然イオン輸送体と比較して、低減した細胞表面発現および／または活性を有する、変異または欠陥イオン輸送体によって引き起こされる、請求項４７〜５０のいずれか一項に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【請求項５２】
前記イオン輸送体が、嚢胞性線維症膜コンダクタンス調節因子（ＣＦＴＲ）ではない、請求項５１に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【請求項５３】
前記イオン輸送体が、嚢胞性線維症膜コンダクタンス調節因子（ＣＦＴＲ）である、請求項５１に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【請求項５４】
前記チャネル病が、嚢胞性線維症（ＣＦ）、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、喘息、特発性膵炎、鼻副鼻腔炎、気管支拡張症、または精管の先天性両側欠損である、請求項５３に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【請求項５５】
前記チャネル病が、ＣＯＰＤ、喘息、特発性膵炎、鼻副鼻腔炎、気管支拡張症、または精管の先天性両側欠損である、請求項５４に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【請求項５６】
前記チャネル病が、呼吸器系チャネル病である、請求項４７〜５５のいずれか一項に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【請求項５７】
前記チャネル病が、ＣＦである、請求項５４または５６に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【請求項５８】
前記ＣＦＴＲが、変異ＣＦＴＲである、請求項５４〜５６のいずれ一項に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【請求項５９】
前記変異ＣＦＴＲが、ＣＦＴＲタンパク質の５０８位にフェニルアラニン残基の変異を含む、請求項５８に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【請求項６０】
前記ＣＦＴＲタンパク質の５０８位における前記変異が、欠失（ΔＦ５０８）である、請求項５９に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【請求項６１】
前記変異が、ホモ接合変異である、請求項５１〜６０のいずれか一項に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【請求項６２】
前記対象が、亜鉛欠乏症に罹患している、請求項４７〜６１のいずれか一項に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【請求項６３】
（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはその薬学的に許容される塩、および（ｉｉ）生理学的に許容される同化可能な亜鉛源の組み合わせが使用される、請求項４７〜６２のいずれか一項に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【請求項６４】
フェンレチニドが使用される、請求項４７〜６３のいずれか一項に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【請求項６５】
前記生理学的に許容される同化可能な亜鉛源が、酸化亜鉛または薬学的に許容される亜鉛塩である、請求項４７〜６４のいずれか一項に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【請求項６６】
前記薬学的に許容される亜鉛塩が、硫酸亜鉛である、請求項６５に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【請求項６７】
使用される前記フェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはその塩の量が、前記対象において、約０．５μＭ〜約６μＭ、好ましくは約１μＭ〜約２．５または３μＭの前記フェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはその塩の血漿中濃度を提供する、請求項４７〜６６のいずれか一項に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【請求項６８】
前記使用されるフェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはその塩の量が、約１ｍｇ〜約５００ｍｇ、好ましくは約１０ｍｇ〜２５０ｍｇである、請求項４７〜６７のいずれか一項に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【請求項６９】
前記使用される前記生理学的に許容される同化可能な亜鉛源の量が、前記対象において約１０μＭ〜約１５μＭの亜鉛の血漿中濃度を提供する、請求項４７〜６８のいずれか一項に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【請求項７０】
前記使用される生理学的に許容される同化可能な亜鉛源の量が、約１ｍｇ〜約２００ｍｇの元素亜鉛、好ましくは約５ｍｇ〜約５０ｍｇの元素亜鉛を含む、請求項４７〜６９のいずれか一項に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【請求項７１】
前記（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはその塩が、マトリックスポリマーを含む固体分散体中の非晶質形態で存在する、請求項４７〜７０のいずれか一項に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【請求項７２】
前記マトリックスポリマーが、ポリビニルピロリドンポリマー、好ましくは、商品名Ｐｌａｓｄｏｎｅ（登録商標）（ポビドン）、ポリビニルピロリドンＫ１２、ポリビニルピロリドンＫ１７、ポリビニルピロリドンＫ２５、ポリビニルピロリドンＫ３０、ポリビニルピロリドンＫ９０、またはこれらの任意の組み合わせで販売されているポリビニルピロリドンポリマーである、請求項７１に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【請求項７３】
前記（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはその塩、および（ｉｉ）生理学的に許容される同化可能な亜鉛源が、同じ組成物に製剤化される、請求項４７〜７２のいずれか一項に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【請求項７４】
イオン輸送体調節物質の使用をさらに含む、請求項４７〜７３のいずれか一項に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【請求項７５】
前記イオン輸送体調節物質が、ＣＦＴＲ調節物質である、請求項７４に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【請求項７６】
前記ＣＦＴＲ調節物質が、アイバカフトール（ＩＶＡ、ＶＸ−７７０）、ＧＬＰＧ  ２４５１、ＧＬＰＧ１８３７、ルマカフトール（ＬＵＭ、ＶＸ−８０９）、テザカフトール（ＶＸ−６６１）、ＶＸ−４４０、ＶＸ−１５２、ＧＬＰＧ  ２２２２、またはこれらの任意の組み合わせである、請求項７５に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【請求項７７】
前記ＣＦＴＲ調節物質が、アイバカフトールおよびルマカフトール、またはテザカフトールおよびアイバカフトールの組み合わせを含む、請求項７６に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【請求項７８】
前記組み合わせが、ＶＸ−４４０またはＶＸ−１５２をさらに含む、請求項７７に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１８年４月１６日に出願された米国仮出願第６２／６５８，００１号の優先権を主張し、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０００２】
本発明は概して、イオン輸送体活性の増強に関し、より具体的には欠陥イオン輸送体機能に関連する疾患の治療に関する。
【背景技術】
【０００３】
イオン輸送体またはイオンチャネルは、生物学的膜を横断するイオンの受動的拡散のための孔を提供する。それらはしばしば、特定のイオン種に対して高度に選択的であり、ナトリウム（Ｎａ＋）、カリウム（Ｋ＋）、カルシウム（Ｃａ２＋）、塩化物（Ｃｌ−）、および非特異的カチオンチャネルへの分類につながる。電流と関連する正味イオン輸送の方向は、関連するイオン種の電気化学勾配に依存する。これらの勾配は、能動ポンプ、共輸送体、およびイオンチャネルの相互作用によって確立される。イオンチャネルは、ゲーティングと呼ばれるプロセスにおいて開閉し得る。これにより、多くの種類の調節が可能になる。したがって、リガンド依存性チャネル（例えば、シナプス後ＧＡＢＡまたはグルタミン酸受容体チャネル）、電位依存性、膨張、もしくはストレッチ活性化、ならびに熱もしくは冷活性化チャネルが存在する。加えて、チャネルは、例えば、カルシウム、ｐＨ、リン酸化、および脂質によって調節され得る。
【０００４】
電流を生成する際のイオンチャネルの役割（ニューロンシグナル伝達の基礎）はおそらく最もよく知られているが、チャネルには他の多くの機能がある。例えば、イオンチャネルは、細胞体積およびｐＨの調節、細胞内小器官の酸性化、および化学シグナル伝達（特にＣａ２＋チャネルの場合）のための、塩および水の経上皮輸送に関与する。したがって、多くのイオンチャネル疾患（場合によってはチャネル病と称される）は、神経筋系に影響を及ぼし、てんかん、失調症、筋緊張症、および心不整脈などの疾患を引き起こすが、それらは他の多くの臓器に影響を及ぼし得る。経上皮輸送の欠陥は、例えば、嚢胞性線維症（ＣＦ）およびいくつかの形態のバーター症候群の根底にあり、ＡＴＰ感受性Ｋ＋チャネルにおける変異は、インスリン分泌に深刻な影響を及ぼし、エンドソームおよびリソソームＣｌ−チャネルにおける変異は、それぞれ、腎結石および大理石骨病を引き起こし得る。
【０００５】
嚢胞性線維症膜コンダクタンス調節因子（ＣＦＴＲ）は、気道中のｃＡＭＰ刺激塩化物および重炭酸塩分泌を媒介するイオンチャネルである。Ｃｆｔｒ遺伝子における機能喪失変異はＣＦを引き起こすが、ＣＦＴＲの後天性欠損は、慢性気管支炎を伴うＣＯＰＤ（Ｒａｊｕら、２０１６）、喘息を含む粘液クリアランスの他の疾患において、ならびに特発性膵炎、呼吸器状態、例えば鼻副鼻腔炎および気管支拡張症、ならびに精管の先天性両側欠損においても生じる。
【０００６】
チャネル開放の可能性を増加させるチャネル増強薬アイバカフトール（ＩＶＡ、ＶＸ−７７０）、ＧＬＰＧ２４５１、およびＧＬＰＧ１８３７、ならびに補正薬（ｃｏｒｒｅｃｔｏｒ）ルマカフトール（ＬＵＭ、ＶＸ−８０９）、テザカフトール（ＶＸ−６６１）、およびＧＬＰＧ２２２２等のＣＦＴＲ調節物質は全て、Ｆ５０８ｄｅｌに対してホモ接合であるＣＦを有する個体、ならびに第２の非ゲーティング変異を有する個体に希望をもたらす。ＣＦＴＲ調節物質は、ＣＦＴＲ機能を改善し、ＣＦ患者の罹患および死亡の主な原因であるＣＦ肺疾患の進行を低減することが期待される（Ｒｏｗｅら、２０１７）。しかしながら、これらの化合物を用いた臨床試験からの予備的な結果は、これまでのＣＦＴＲ調節物質が、ＣＦＴＲ療法に応答せず、各増悪後に減少し続けるＦＥＶ１％（努力呼気量１秒と努力肺活量との比率）を有するホモ接合ＣＦＴＲ  Ｆ５０８ｄｅｌ患者のかなりの割合に対して無効であることを示唆している。
【０００７】
したがって、ＣＦ等のＣＦＴＲ変異に関連する疾患を含むチャネル病の治療のための新規アプローチの開発が必要である。
【０００８】
本説明は、いくつかの文書を指し、その内容は、参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】米国仮出願第６２／６５８，００１号
【発明の概要】
【００１０】
態様において、本開示は、以下の項目１〜７８を提供する。
１．細胞内のイオン輸送体の活性を増強するための方法であって、前記細胞を、有効量の（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体、もしくはその塩、（ｉｉ）亜鉛、または（ｉｉｉ）（ｉ）および（ｉｉ）の組み合わせと接触させることを含む、方法。
【００１１】
２．前記イオン輸送体が、対応する天然イオン輸送体と比較して、低減した細胞表面発現および／または活性を有する変異または欠陥イオン輸送体である、項目１に記載の方法。
【００１２】
３．前記イオン輸送体が、嚢胞性線維症膜コンダクタンス調節因子（ＣＦＴＲ）ではない、項目１または２に記載の方法。
【００１３】
４．前記イオン輸送体が、嚢胞性線維症膜コンダクタンス調節因子（ＣＦＴＲ）であり、前記方法が、前記細胞を、有効量の（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはその塩、および（ｉｉ）亜鉛の組み合わせと接触させることを含む、項目１または２に記載の方法。
【００１４】
５．前記ＣＦＴＲが、変異ＣＦＴＲである、項目４に記載の方法。
【００１５】
６．前記変異ＣＦＴＲが、前記ＣＦＴＲタンパク質の５０８位に変異を含む、項目５に記載の方法。
【００１６】
７．前記ＣＦＴＲタンパク質の５０８位における前記変異が、欠失である、項目６に記載の方法。
【００１７】
８．対象におけるチャネル病を治療するための方法であって、前記対象に、有効量の（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体、もしくはその薬学的に許容される塩、（ｉｉ）生理学的に許容される同化可能な亜鉛源、または（ｉｉｉ）（ｉ）および（ｉｉ）の組み合わせを投与することを含む、方法。
【００１８】
９．前記チャネル病が、対応する天然イオン輸送体と比較して、低減した細胞表面発現および／または活性を有する、変異または欠陥イオン輸送体によって引き起こされる、項目８に記載の方法。
【００１９】
１０．前記イオン輸送体が、嚢胞性線維症膜コンダクタンス調節因子（ＣＦＴＲ）ではない、項目９に記載の方法。
【００２０】
１１．前記イオン輸送体が、嚢胞性線維症膜コンダクタンス調節因子（ＣＦＴＲ）である、項目９に記載の方法。
【００２１】
１２．前記チャネル病が、嚢胞性線維症（ＣＦ）、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、喘息、特発性膵炎、鼻副鼻腔炎、気管支拡張症、または精管の先天性両側欠損である、項目１１に記載の方法。
【００２２】
１３．前記チャネル病が、ＣＯＰＤ、喘息、特発性膵炎、鼻副鼻腔炎、気管支拡張症、または精管の先天性両側欠損である、項目１２に記載の方法。
【００２３】
１４．前記チャネル病が、呼吸器系チャネル病である、項目８〜１３のいずれか一項目に記載の方法。
【００２４】
１５．前記チャネル病が、ＣＦである、項目１２または１４に記載の方法。
【００２５】
１６．前記ＣＦＴＲが、変異ＣＦＴＲである、項目１２〜１４のいずれか一項目に記載の方法。
【００２６】
１７．前記変異ＣＦＴＲが、ＣＦＴＲタンパク質の５０８位にフェニルアラニン残基の変異を含む、項目１６に記載の方法。
【００２７】
１８．前記ＣＦＴＲタンパク質の５０８位における前記変異が、欠失（ΔＦ５０８）である、項目１７に記載の方法。
【００２８】
１９．前記変異が、ホモ接合変異である、項目９〜１８のいずれか一項目に記載の方法。
【００２９】
２０．前記対象が、亜鉛欠乏症に罹患している、項目８〜１９のいずれか一項目に記載の方法。
【００３０】
２１．前記方法が、有効量の（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはその薬学的に許容される塩、および（ｉｉ）生理学的に許容される同化可能な亜鉛源の組み合わせを投与することを含む、項目８〜２０のいずれか一項目に記載の方法。
【００３１】
２２．前記方法が、有効量のフェンレチニドを投与することを含む、項目８〜２１のいずれか一項目に記載の方法。
【００３２】
２３．前記生理学的に許容される同化可能な亜鉛源が、酸化亜鉛または薬学的に許容される亜鉛塩である、項目８〜２２のいずれか一項目に記載の方法。
【００３３】
２４．前記薬学的に許容される亜鉛塩が、硫酸亜鉛である、項目２３に記載の方法。
【００３４】
２５．投与される前記フェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはその塩の有効量が、前記対象において、約０．５μＭ〜約６μＭ、好ましくは約１μＭ〜約２．５または３μＭの前記フェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはその塩の血漿中濃度を提供する、項目８〜２４のいずれか一項目に記載の方法。
【００３５】
２６．前記投与されるフェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはその塩の有効量が、約１ｍｇ〜約５００ｍｇ、好ましくは約１０ｍｇ〜２５０ｍｇである、項目８〜２５のいずれか一項目に記載の方法。
【００３６】
２７．投与される前記生理学的に許容される同化可能な亜鉛源の有効量が、前記対象において約１０μＭ〜約１５μＭの亜鉛の血漿中濃度を提供する、項目８〜２６のいずれか一項目に記載の方法。
【００３７】
２８．前記投与される生理学的に許容される同化可能な亜鉛源の有効量が、約１ｍｇ〜約２００ｍｇの元素亜鉛、好ましくは約５ｍｇ〜約５０ｍｇの元素亜鉛を含む、項目８〜２７のいずれか一項目に記載の方法。
【００３８】
２９．前記（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはその塩が、マトリックスポリマーを含む固体分散体中の非晶質形態で存在する、項目８〜２８のいずれか一項目に記載の方法。
【００３９】
３０．前記マトリックスポリマーが、ポリビニルピロリドンポリマー、好ましくは、商品名Ｐｌａｓｄｏｎｅ（登録商標）（ポビドン）、ポリビニルピロリドンＫ１２、ポリビニルピロリドンＫ１７、ポリビニルピロリドンＫ２５、ポリビニルピロリドンＫ３０、ポリビニルピロリドンＫ９０、またはこれらの任意の組み合わせで販売されているポリビニルピロリドンポリマーである、項目２９に記載の方法。
【００４０】
３１．前記（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはその塩、および（ｉｉ）生理学的に許容される同化可能な亜鉛源が、同じ組成物に製剤化される、項目８〜３０のいずれか一項目に記載の方法。
【００４１】
３２．前記方法が、有効量のイオン輸送体修飾物質を投与することをさらに含む、項目８〜３１のいずれか一項目に記載の方法。
【００４２】
３３．前記イオン輸送体修飾物質が、ＣＦＴＲ修飾物質である、項目３２に記載の方法。
【００４３】
３４．前記ＣＦＴＲ調節物質が、アイバカフトール（ＩＶＡ、ＶＸ−７７０）、ＧＬＰＧ２４５１、ＧＬＰＧ１８３７、ルマカフトール（ＬＵＭ、ＶＸ−８０９）、テザカフトール（ＶＸ−６６１）、ＶＸ−４４０、ＶＸ−１５２、ＧＬＰＧ２２２２、またはこれらの任意の組み合わせである、項目３３に記載の方法。
【００４４】
３５．前記ＣＦＴＲ調節物質が、アイバカフトールおよびルマカフトール、またはテザカフトールおよびアイバカフトールの組み合わせを含む、項目３４に記載の方法。
【００４５】
３６．前記組み合わせが、ＶＸ−４４０またはＶＸ−１５２をさらに含む、項目３５に記載の方法。
【００４６】
３７．細胞内のイオン輸送体の活性を増強するための、（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体、もしくはそれらの塩、（ｉｉ）亜鉛、または（ｉｉｉ）（ｉ）および（ｉｉ）の組み合わせの使用。
【００４７】
３８．細胞内のイオン輸送体の活性を増強するための医薬品の製造のための、（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体、もしくはそれらの塩、（ｉｉ）亜鉛、または（ｉｉｉ）（ｉ）および（ｉｉ）の組み合わせの使用。
【００４８】
３９．細胞内のイオン輸送体の活性の増強に使用するための薬剤であって、（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体、もしくはその塩、（ｉｉ）亜鉛、または（ｉｉｉ）（ｉ）および（ｉｉ）の組み合わせである、薬剤。
【００４９】
４０．細胞内のイオン輸送体の活性の増強に使用するための組み合わせであって、（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはその塩、および（ｉｉ）亜鉛を含む、組み合わせ。
【００５０】
４１．前記イオン輸送体が、対応する天然イオン輸送体と比較して、低減した細胞表面発現および／または活性を有する変異または欠陥イオン輸送体である、項目３７〜４０に記載のいずれか一項目に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【００５１】
４２．前記イオン輸送体が、嚢胞性線維症膜コンダクタンス調節因子（ＣＦＴＲ）ではない、項目３７〜４１のいずれか一項目に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【００５２】
４３．前記イオン輸送体が、嚢胞性線維症膜コンダクタンス調節因子（ＣＦＴＲ）であり、前記方法が、前記細胞を、有効量の（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはその塩、および（ｉｉ）亜鉛の組み合わせと接触させることを含む、項目３７〜４１のいずれか一項目に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【００５３】
４４．前記ＣＦＴＲが、変異ＣＦＴＲである、項目４３に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【００５４】
４５．前記変異ＣＦＴＲが、ＣＦＴＲタンパク質の５０８位に変異を含む、項目４４に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【００５５】
４６．前記ＣＦＴＲタンパク質の５０８位における前記変異が、欠失である、項目４５に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【００５６】
４７．対象におけるチャネル病を治療するための、（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはその薬学的に許容される塩、（ｉｉ）生理学的に許容される同化可能な亜鉛源、または（ｉｉｉ）（ｉ）および（ｉｉ）の組み合わせの使用。
【００５７】
４８．対象におけるチャネル病を治療するための医薬品の製造のための、（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体、もしくはその薬学的に許容される塩、（ｉｉ）生理学的に許容される同化可能な亜鉛源、または（ｉｉｉ）（ｉ）および（ｉｉ）の組み合わせの使用。
【００５８】
４９．対象におけるチャネル病の治療の使用のための薬剤であって、（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体、もしくはその薬学的に許容される塩、（ｉｉ）生理学的に許容される同化可能な亜鉛源、または（ｉｉｉ）（ｉ）および（ｉｉ）の組み合わせである、薬剤。
【００５９】
５０．対象におけるチャネル病の治療の使用のための組み合わせであって、（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体、もしくはその薬学的に許容される塩、および（ｉｉ）生理学的に許容される同化可能な亜鉛源を含む、組み合わせ。
【００６０】
５１．前記チャネル病が、前記対応する天然イオン輸送体と比較して、低減した細胞表面発現および／または活性を有する、変異または欠陥イオン輸送体によって引き起こされる、項目４７〜５０のいずれか一項目に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【００６１】
５２．前記イオン輸送体が、嚢胞性線維症膜コンダクタンス調節因子（ＣＦＴＲ）ではない、項目５１に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【００６２】
５３．前記イオン輸送体が、嚢胞性線維症膜コンダクタンス調節因子（ＣＦＴＲ）である、項目５１に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【００６３】
５４．前記チャネル病が、嚢胞性線維症（ＣＦ）、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、喘息、特発性膵炎、鼻副鼻腔炎、気管支拡張症、または精管の先天性両側欠損である、項目５３に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【００６４】
５５．前記チャネル病が、ＣＯＰＤ、喘息、特発性膵炎、鼻副鼻腔炎、気管支拡張症、または精管の先天性両側欠損である、項目５４に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【００６５】
５６．前記チャネル病が、呼吸器系チャネル病である、項目４７〜５５のいずれか一項目に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【００６６】
５７．前記チャネル病が、ＣＦである、項目５４または５６に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【００６７】
５８．前記ＣＦＴＲが、変異ＣＦＴＲである、項目５４〜５６のいずれ一項目に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【００６８】
５９．前記変異ＣＦＴＲが、ＣＦＴＲタンパク質の５０８位にフェニルアラニン残基の変異を含む、項目５８に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【００６９】
６０．前記ＣＦＴＲタンパク質の５０８位における前記変異が、欠失（ΔＦ５０８）である、項目５９に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【００７０】
６１．前記変異が、ホモ接合変異である、項目５１〜６０のいずれか一項に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【００７１】
６２．前記対象が、亜鉛欠乏症に罹患している、項目４７〜６１のいずれか一項目に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【００７２】
６３．（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはその薬学的に許容される塩、および（ｉｉ）生理学的に許容される同化可能な亜鉛源の組み合わせが使用される、項目４７〜６２のいずれか一項目に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【００７３】
６４．フェンレチニドが使用される、項目４７〜６３のいずれか一項目に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【００７４】
６５．前記生理学的に許容される同化可能な亜鉛源が、酸化亜鉛または薬学的に許容される亜鉛塩である、項目４７〜６４のいずれか一項目に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【００７５】
６６．前記薬学的に許容される亜鉛塩が、硫酸亜鉛である、項目６５に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【００７６】
６７．使用される前記フェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはその塩の量が、前記対象において、約０．５μＭ〜約６μＭ、好ましくは約１μＭ〜約２．５または３μＭの前記フェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはその塩の血漿中濃度を提供する、項目４７〜６６のいずれか一項目に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【００７７】
６８．前記使用されるフェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはその塩の量が、約１ｍｇ〜約５００ｍｇ、好ましくは約１０ｍｇ〜２５０ｍｇである、項目４７〜６７のいずれか一項目に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【００７８】
６９．使用される前記生理学的に許容される同化可能な亜鉛源の量が、前記対象において約１０μＭ〜約１５μＭの亜鉛の血漿中濃度を提供する、項目４７〜６８のいずれか一項目に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【００７９】
７０．前記使用される生理学的に許容される同化可能な亜鉛源の量が、約１ｍｇ〜約２００ｍｇの元素亜鉛、好ましくは約５ｍｇ〜約５０ｍｇの元素亜鉛を含む、項目４７〜６９のいずれか一項目に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【００８０】
７１．前記（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはその塩が、マトリックスポリマーを含む固体分散体中の非晶質形態で存在する、項目４７〜７０のいずれか一項目に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【００８１】
７２．前記マトリックスポリマーが、ポリビニルピロリドンポリマー、好ましくは、商品名Ｐｌａｓｄｏｎｅ（登録商標）（ポビドン）、ポリビニルピロリドンＫ１２、ポリビニルピロリドンＫ１７、ポリビニルピロリドンＫ２５、ポリビニルピロリドンＫ３０、ポリビニルピロリドンＫ９０、またはこれらの任意の組み合わせで販売されているポリビニルピロリドンポリマーである、項目７１に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【００８２】
７３．前記（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはその塩、および（ｉｉ）生理学的に許容される同化可能な亜鉛源が、同じ組成物に製剤化される、項目４７〜７２のいずれか一項目に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【００８３】
７４．イオン輸送体調節物質の使用をさらに含む、項目４７〜７３のいずれか一項目に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【００８４】
７５．前記イオン輸送体調節物質が、ＣＦＴＲ調節物質である、項目７４に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【００８５】
７６．前記ＣＦＴＲ調節物質が、アイバカフトール（ＩＶＡ、ＶＸ−７７０）、ＧＬＰＧ２４５１、ＧＬＰＧ１８３７、ルマカフトール（ＬＵＭ、ＶＸ−８０９）、テザカフトール（ＶＸ−６６１）、ＶＸ−４４０、ＶＸ−１５２、ＧＬＰＧ２２２２、またはこれらの任意の組み合わせである、項目７５に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【００８６】
７７．前記ＣＦＴＲ調節物質が、アイバカフトールおよびルマカフトール、またはテザカフトールおよびアイバカフトールの組み合わせを含む、項目７６に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【００８７】
７８．前記組み合わせが、ＶＸ−４４０またはＶＸ−１５２をさらに含む、項目７７に記載の使用、使用のための薬剤、または使用のための組み合わせ。
【００８８】
本発明の他の目的、利点、および特徴は、添付の図面を参照して例としてのみ与えられる、本発明の特定の実施形態の以下の非限定的な説明を読むことにより、より明らかになるであろう。
【図面の簡単な説明】
【００８９】
【図１】細胞質ホスホリパーゼ（ｃＰＬＡ２）の活性に対するフェンレチニドおよびＺｎ２＋治療の効果を示すグラフである。肺上皮細胞を、１．２５μＭのフェンレチニド（Ｆｅｎ）および／または１２．５μＭの硫酸亜鉛（Ｚｎ２＋）で１２、２４、４８、または７２時間処理し、ＰＬＡ２の活性を、市販のＥＬＩＳＡキット（Ａｂｃａｍ、カタログ番号ａｂ１３３０９０）を使用して評価した。全ての統計分析を、ＧｒａｐｈＰａｄ（商標）ソフトウェア（ＧｒａｐｈＰａｄ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ，ＵＳＡ）を使用して行った。差異の統計的有意性は、ウェルチの補正を用いた独立ｔ検定を使用して評価した。データは、平均±ＳＤとして表される（＊ｐ≦０．０５、＊＊ｐ≦０．０１、＊＊＊ｐ≦０．００１、＊＊＊＊ｐ≦０．０００１）。全ての実験は、三重で行われた（ｎ＝３）。
【図２Ａ】ＣＦＴＲ（ＣＦＴＲ−ｄｅｌＦ５０８）または天然ＣＦＴＲ（ｗｔ  ＣＦＴＲ）の変異型を過剰発現する肺上皮細胞におけるＤＨＡ（図２Ａ）、ＡＡ（図２Ｂ）、およびそれらの比率（図２Ｃ）のレベルに対するフェンレチニド、Ｚｎ２＋処理の効果を示すグラフである。８０％コンフルエント単層として成長した肺上皮細胞を、１．２５μＭのフェンレチニドおよび／または１２．５μＭの硫酸亜鉛で７２時間処理した。ＡＡおよびＤＨＡのレベルは、Ｇｕｉｌｂａｕｌｔ  ら、２００８、２００９に以前に記載されているように評価した。全ての統計分析を、ＧｒａｐｈＰａｄ（商標）ソフトウェア（ＧｒａｐｈＰａｄ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ，ＵＳＡ）を使用して行った。差異の統計的有意性は、ウェルチの補正を用いた独立ｔ検定を使用して評価した。データは、平均±ＳＤとして表される（＊ｐ≦０．０５、＊＊ｐ≦０．０１、＊＊＊ｐ≦０．００１、＊＊＊＊ｐ≦０．０００１）。全ての実験は、三重で行われた（ｎ＝３）。
【図２Ｂ】ＣＦＴＲ（ＣＦＴＲ−ｄｅｌＦ５０８）または天然ＣＦＴＲ（ｗｔ  ＣＦＴＲ）の変異型を過剰発現する肺上皮細胞におけるＤＨＡ（図２Ａ）、ＡＡ（図２Ｂ）、およびそれらの比率（図２Ｃ）のレベルに対するフェンレチニド、Ｚｎ２＋処理の効果を示すグラフである。８０％コンフルエント単層として成長した肺上皮細胞を、１．２５μＭのフェンレチニドおよび／または１２．５μＭの硫酸亜鉛で７２時間処理した。ＡＡおよびＤＨＡのレベルは、Ｇｕｉｌｂａｕｌｔ  ら、２００８、２００９に以前に記載されているように評価した。全ての統計分析を、ＧｒａｐｈＰａｄ（商標）ソフトウェア（ＧｒａｐｈＰａｄ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ，ＵＳＡ）を使用して行った。差異の統計的有意性は、ウェルチの補正を用いた独立ｔ検定を使用して評価した。データは、平均±ＳＤとして表される（＊ｐ≦０．０５、＊＊ｐ≦０．０１、＊＊＊ｐ≦０．００１、＊＊＊＊ｐ≦０．０００１）。全ての実験は、三重で行われた（ｎ＝３）。
【図２Ｃ】ＣＦＴＲ（ＣＦＴＲ−ｄｅｌＦ５０８）または天然ＣＦＴＲ（ｗｔ  ＣＦＴＲ）の変異型を過剰発現する肺上皮細胞におけるＤＨＡ（図２Ａ）、ＡＡ（図２Ｂ）、およびそれらの比率（図２Ｃ）のレベルに対するフェンレチニド、Ｚｎ２＋処理の効果を示すグラフである。８０％コンフルエント単層として成長した肺上皮細胞を、１．２５μＭのフェンレチニドおよび／または１２．５μＭの硫酸亜鉛で７２時間処理した。ＡＡおよびＤＨＡのレベルは、Ｇｕｉｌｂａｕｌｔ  ら、２００８、２００９に以前に記載されているように評価した。全ての統計分析を、ＧｒａｐｈＰａｄ（商標）ソフトウェア（ＧｒａｐｈＰａｄ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ，ＵＳＡ）を使用して行った。差異の統計的有意性は、ウェルチの補正を用いた独立ｔ検定を使用して評価した。データは、平均±ＳＤとして表される（＊ｐ≦０．０５、＊＊ｐ≦０．０１、＊＊＊ｐ≦０．００１、＊＊＊＊ｐ≦０．０００１）。全ての実験は、三重で行われた（ｎ＝３）。
【図３Ａ】対照条件下（Ｃｔｒ）（図３Ａ）、２μＭのタプシガルジンでの１０〜２０分の処理後（図３Ｂ）、１．２５μＭのフェンレチニドでの処理後（図３Ｃ）、１．２５μＭのフェンレチニドおよびサプシガルジンでの処理後（上記と同じ条件）（図３Ｄ）、または１．２５μＭのフェンレチニド＋サプシガルジン（上記と同じ条件）＋アミトリプチリン（４０分間１３μＭ）での処理後（図３Ｅ）の、ｐＨＢＥ細胞の形質膜で発現されるＧＦＰ−ｗｔ−ＣＦＴＲの共焦点画像である。
【図３Ｂ】対照条件下（Ｃｔｒ）（図３Ａ）、２μＭのタプシガルジンでの１０〜２０分の処理後（図３Ｂ）、１．２５μＭのフェンレチニドでの処理後（図３Ｃ）、１．２５μＭのフェンレチニドおよびサプシガルジンでの処理後（上記と同じ条件）（図３Ｄ）、または１．２５μＭのフェンレチニド＋サプシガルジン（上記と同じ条件）＋アミトリプチリン（４０分間１３μＭ）での処理後（図３Ｅ）の、ｐＨＢＥ細胞の形質膜で発現されるＧＦＰ−ｗｔ−ＣＦＴＲの共焦点画像である。
【図３Ｃ】対照条件下（Ｃｔｒ）（図３Ａ）、２μＭのタプシガルジンでの１０〜２０分の処理後（図３Ｂ）、１．２５μＭのフェンレチニドでの処理後（図３Ｃ）、１．２５μＭのフェンレチニドおよびサプシガルジンでの処理後（上記と同じ条件）（図３Ｄ）、または１．２５μＭのフェンレチニド＋サプシガルジン（上記と同じ条件）＋アミトリプチリン（４０分間１３μＭ）での処理後（図３Ｅ）の、ｐＨＢＥ細胞の形質膜で発現されるＧＦＰ−ｗｔ−ＣＦＴＲの共焦点画像である。
【図３Ｄ】対照条件下（Ｃｔｒ）（図３Ａ）、２μＭのタプシガルジンでの１０〜２０分の処理後（図３Ｂ）、１．２５μＭのフェンレチニドでの処理後（図３Ｃ）、１．２５μＭのフェンレチニドおよびサプシガルジンでの処理後（上記と同じ条件）（図３Ｄ）、または１．２５μＭのフェンレチニド＋サプシガルジン（上記と同じ条件）＋アミトリプチリン（４０分間１３μＭ）での処理後（図３Ｅ）の、ｐＨＢＥ細胞の形質膜で発現されるＧＦＰ−ｗｔ−ＣＦＴＲの共焦点画像である。
【図３Ｅ】対照条件下（Ｃｔｒ）（図３Ａ）、２μＭのタプシガルジンでの１０〜２０分の処理後（図３Ｂ）、１．２５μＭのフェンレチニドでの処理後（図３Ｃ）、１．２５μＭのフェンレチニドおよびサプシガルジンでの処理後（上記と同じ条件）（図３Ｄ）、または１．２５μＭのフェンレチニド＋サプシガルジン（上記と同じ条件）＋アミトリプチリン（４０分間１３μＭ）での処理後（図３Ｅ）の、ｐＨＢＥ細胞の形質膜で発現されるＧＦＰ−ｗｔ−ＣＦＴＲの共焦点画像である。
【図３Ｆ】対照条件下（Ｃｔｒ）、サプシガルジン（Ｔｈａｐｓ）での処理後、フェンレチニド（Ｆｅｎ）での処理後、ならびにフェンレチニドおよびサプシガルジン（Ｆｅｎ＋Ｔｈａｐｓ）での処理後の、細胞表面におけるＣＦＴＲの凝集および蓄積の定量化を示すグラフである。
【図４Ａ】ＣＦＴＲ媒介性分泌に対する亜鉛および／またはフェンレチニド処理の効果を示すグラフである。Ｕｓｓｉｎｇチャンバーを使用して、フォルスコリン（ＦＳＫ）に応答する極性気管支上皮細胞を横断する短絡電流としてのＦ５０８ｄｅｌ−ＣＦＴＲ（図４Ａ）およびｗｔ−ＣＦＴＲ（図４Ｂ）機能発現を測定した。処理：細胞を、基底的に１．２５μＭのフェンレチニド（Ｆｅｎ）、１２．５μＭの亜鉛（Ｚｎ）、もしくは１．２５μＭのフェンレチニドと１２．５μＭの亜鉛（Ｆｅｎ＋Ｚｎ）との組み合わせで、またはそれらなしで３日間、最後の２４においては両方をＶＸ−８０９で処理した。独立スチューデントｔ検定を統計分析に使用した。
【図４Ｂ】ＣＦＴＲ媒介性分泌に対する亜鉛および／またはフェンレチニド処理の効果を示すグラフである。Ｕｓｓｉｎｇチャンバーを使用して、フォルスコリン（ＦＳＫ）に応答する極性気管支上皮細胞を横断する短絡電流としてのＦ５０８ｄｅｌ−ＣＦＴＲ（図４Ａ）およびｗｔ−ＣＦＴＲ（図４Ｂ）機能発現を測定した。処理：細胞を、基底的に１．２５μＭのフェンレチニド（Ｆｅｎ）、１２．５μＭの亜鉛（Ｚｎ）、もしくは１．２５μＭのフェンレチニドと１２．５μＭの亜鉛（Ｆｅｎ＋Ｚｎ）との組み合わせで、またはそれらなしで３日間、最後の２４においては両方をＶＸ−８０９で処理した。独立スチューデントｔ検定を統計分析に使用した。
【図５】５０μＭの増強剤ゲニステイン（ＶＸ７７０と同様に作用する）の不在および存在下でのＶＸ−８０９（８０９）による部分救出後のＦ５０８ｄｅｌ−ＣＦＴＲ機能に対する亜鉛および／またはフェンレチニド処理の効果を示すグラフである。Ｕｓｓｉｎｇチャンバーを使用して、フォルスコリン（ＦＳＫ）またはフォルスコリン＋ゲニステイン（ＦＳＫ＋Ｇｅｎ）に応答する、基底的に透過性の極性細胞を横断する短絡電流を測定することによって、Ｆ５０８ｄｅｌ−ＣＦＴＲコンダクタンスを測定した。処理：細胞を、基底的に１．２５μＭのフェンレチニド（Ｆｅｎ）もしくは１．２５μＭのフェンレチニドと１２．５μＭの亜鉛（ＦｅｎＺｎ）との組み合わせ組み合わせで、またはそれらなしで３日間処理した。最後の２４時間に、１μＭのＶＸ−８０９を双方に添加した。独立スチューデントｔ検定を統計分析に使用した。
【図６】ＶＸ−８０９の不在下でのＦ５０８ｄｅｌ−ＣＦＴＲ媒介性分泌に対する亜鉛および／またはフェンレチニド処理の効果を示すグラフである。Ｕｓｓｉｎｇチャンバーを使用して、フォルスコリン（ＦＳＫ）またはフォルスコリン＋ゲニステイン（ＦＳＫ＋Ｇｅｎ）に応答する、極性および基底的に透過性の気管支上皮細胞を横断する短絡電流としてのＦ５０８ｄｅｌ−ＣＦＴＲ機能発現を測定した。細胞を、基底的に１．２５μＭのフェンレチニド（Ｆｅｎ）および／もしくは１２．５μＭの亜鉛（Ｚｎ）で、またはそれらなしで３日間処理した。
【図７Ａ】神経系に影響を及ぼす代表的なチャネル病、および関連する欠陥遺伝子／タンパク質のリスト（Ｊｕｎｅ−Ｂｕｍ  Ｋｉｍ，Ｋｏｒｅａｎ  Ｊ  Ｐｅｄｉａｔｒ．２０１４  Ｊａｎ；５７（１）：１−１８から）を示す。
【図７Ｂ】神経系に影響を及ぼす代表的なチャネル病、および関連する欠陥遺伝子／タンパク質のリスト（Ｊｕｎｅ−Ｂｕｍ  Ｋｉｍ，Ｋｏｒｅａｎ  Ｊ  Ｐｅｄｉａｔｒ．２０１４  Ｊａｎ；５７（１）：１−１８から）を示す。
【図７Ｃ】神経系に影響を及ぼす代表的なチャネル病、および関連する欠陥遺伝子／タンパク質のリスト（Ｊｕｎｅ−Ｂｕｍ  Ｋｉｍ，Ｋｏｒｅａｎ  Ｊ  Ｐｅｄｉａｔｒ．２０１４  Ｊａｎ；５７（１）：１−１８から）を示す。
【図７Ｄ】神経系に影響を及ぼす代表的なチャネル病、および関連する欠陥遺伝子／タンパク質のリスト（Ｊｕｎｅ−Ｂｕｍ  Ｋｉｍ，Ｋｏｒｅａｎ  Ｊ  Ｐｅｄｉａｔｒ．２０１４  Ｊａｎ；５７（１）：１−１８から）を示す。
【図７Ｅ】神経系に影響を及ぼす代表的なチャネル病、および関連する欠陥遺伝子／タンパク質のリスト（Ｊｕｎｅ−Ｂｕｍ  Ｋｉｍ，Ｋｏｒｅａｎ  Ｊ  Ｐｅｄｉａｔｒ．２０１４  Ｊａｎ；５７（１）：１−１８から）を示す。
【図８Ａ】心血管系に影響を及ぼす代表的なチャネル病、および関連する機能不全遺伝子／タンパク質のリスト（Ｊｕｎｅ−Ｂｕｍ  Ｋｉｍ，Ｋｏｒｅａｎ  Ｊ  Ｐｅｄｉａｔｒ．２０１４  Ｊａｎ；５７（１）：１−１８から）を示す。
【図８Ｂ】心血管系に影響を及ぼす代表的なチャネル病、および関連する機能不全遺伝子／タンパク質のリスト（Ｊｕｎｅ−Ｂｕｍ  Ｋｉｍ，Ｋｏｒｅａｎ  Ｊ  Ｐｅｄｉａｔｒ．２０１４  Ｊａｎ；５７（１）：１−１８から）を示す。
【図８Ｃ】心血管系に影響を及ぼす代表的なチャネル病、および関連する機能不全遺伝子／タンパク質のリスト（Ｊｕｎｅ−Ｂｕｍ  Ｋｉｍ，Ｋｏｒｅａｎ  Ｊ  Ｐｅｄｉａｔｒ．２０１４  Ｊａｎ；５７（１）：１−１８から）を示す。
【図９】内分泌系に影響を及ぼす代表的なチャネル病、および関連する機能不全遺伝子／タンパク質のリスト（Ｊｕｎｅ−Ｂｕｍ  Ｋｉｍ，Ｋｏｒｅａｎ  Ｊ  Ｐｅｄｉａｔｒ．２０１４  Ｊａｎ；５７（１）：１−１８から）を示す。
【図１０】泌尿器系に影響を及ぼす代表的なチャネル病（すなわち、腎チャネル病）、および関連する機能不全遺伝子／タンパク質のリスト（Ｊｕｎｅ−Ｂｕｍ  Ｋｉｍ，Ｋｏｒａｎ  Ｊ  Ｐｅｄｉａｔｒ．２０１４  Ｊａｎ；５７（１）：１−１８から）を示す。
【発明を実施するための形態】
【００９０】
本発明の開示
本明細書に記載される研究において、本発明者らは、フェンレチニド、亜鉛、および／またはそれらの組み合わせが、ＣＦＴＲイオンチャネル、特に、ＣＦ患者において一般的に見られる欠陥Ｆ５０８ｄｅｌ−ＣＦＴＲの機能細胞表面発現を増加させることができることを示している。これらの化合物が、それ自体、すなわち他のＣＦＴＲ増強剤の不在下でＣＦＴＲ機能増強を示すが、ルマカフトール（ＶＸ−８０９）およびゲニステイン等の既知のＣＦＴＲ増強剤の効果も増強することを示す。これらの結果は、フェンレチニドおよび／または亜鉛が、イオン輸送体等の受容体の活性を増加させる能力を有し、したがって、受容体（例えば、イオン輸送体）機能不全に関連する疾患の治療に有用であり得るというエビデンスを提供する。
【００９１】
したがって、第１の態様において、本開示は、細胞内のイオン輸送体等の受容体の活性を増強するための方法を提供し、本方法は、細胞を、有効量の（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体、もしくはその塩、（ｉｉ）亜鉛、または（ｉｉｉ）（ｉ）および（ｉｉ）の組み合わせと接触させることを含む。別の態様において、本開示は、細胞内のイオン輸送体等の受容体の活性を増強するための、（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体、もしくはそれらの塩、（ｉｉ）亜鉛、または（ｉｉｉ）（ｉ）および（ｉｉ）の組み合わせの使用を提供する。別の態様において、本開示は、細胞内のイオン輸送体等の受容体の活性を増強するための医薬品の製造のための、（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体、もしくはそれらの塩、（ｉｉ）亜鉛、または（ｉｉｉ）（ｉ）および（ｉｉ）の組み合わせの使用を提供する。別の態様において、本開示は、細胞内のイオン輸送体等の受容体の活性を増強するための薬剤を提供し、薬剤は、（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体、もしくはそれらの塩、（ｉｉ）亜鉛、または（ｉｉｉ）（ｉ）および（ｉｉ）の組み合わせである。
【００９２】
ある実施形態において、本方法／使用は、細胞を、有効量の亜鉛およびフェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはそれらの塩の組み合わせと接触させることを含む。ある実施形態において、受容体（例えば、イオン輸送体）は、対応する天然受容体（例えば、イオン輸送体）と比較して、低減した細胞表面発現および／または活性を有する変異または欠陥受容体（例えば、イオン輸送体）である。
【００９３】
ある実施形態において、上述の上の方法／使用は、細胞における変異または欠陥受容体（例えば、イオン輸送体）の活性を増強するためのものであり、本方法／使用は、細胞を、有効量の（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体もしくはその塩、または（ｉｉ）亜鉛と接触させることを含み、受容体／イオン輸送体は、嚢胞性線維症膜コンダクタンス調節因子（ＣＦＴＲ）ではない。
【００９４】
用語「受容体」（または「細胞表面受容体」）は、本明細書で使用する場合、細胞膜に包埋されるタンパク質を指す。受容体クラスの例としては、Ｇタンパク質結合受容体（ＧＰＣＲ）、酵素結合受容体（例えば受容体チロシンキナーゼ）、およびイオン輸送体（またはイオンチャネル）が挙げられる。
【００９５】
ある実施形態において、受容体はイオン輸送体（またはイオンチャネル）である。イオンチャネルは、電気化学的勾配に従って、細胞または細胞小器官の内側と外側の両方のイオンの流れを可能にする膜貫通タンパク質である。膜を横断するイオンの流動が電流をもたらすため、イオンチャネルは、シグナル伝達、神経伝達物質放出、筋肉収縮、ホルモン分泌、容積調節、成長、運動、およびアポトーシス等の多様な細胞活性における膜電位および機能を生成する上で重要な役割を果たす。イオンチャネルは、輸送されるイオンの種類に基づいて分類され得、例えば、塩化物チャネル、カリウムチャネル、カルシウムチャネル、ナトリウムチャネル、プロトンチャネル、および非選択的カチオンチャネルを含む。ある実施形態において、イオンチャネルは塩化物チャネルである。塩化物チャネルには、塩化物チャネルのＣＬＣファミリー（例えばＣＬＣＮ１）、上皮塩化物チャネル（Ｅ−ＣｌＣ）ファミリー、塩化物細胞内イオンチャネル（ＣＬＩＣ）ファミリー、ならびにＣＦＴＲ等のある特定のＡＴＰ結合カセット輸送体（ＡＢＣ輸送体）が含まれる。
【００９６】
別の態様において、本開示は、対象におけるチャネル病を治療するための方法を提供し、本方法は、該対象に、有効量の（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体、もしくはその薬学的に許容される塩、（ｉｉ）亜鉛、または（ｉｉｉ）（ｉ）および（ｉｉ）の組み合わせを投与することを含む。別の態様において、本開示は、対象におけるチャネル病を治療するための、（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体、もしくはその薬学的に許容される塩、（ｉｉ）亜鉛、または（ｉｉｉ）（ｉ）および（ｉｉ）の組み合わせの使用を提供する。別の態様において、本開示は、対象におけるチャネル病を治療するための薬剤の製造のための、（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体、もしくはその薬学的に許容される塩、（ｉｉ）亜鉛、または（ｉｉｉ）（ｉ）および（ｉｉ）の組み合わせの使用を提供する。別の態様において、本開示は、対象におけるチャネル病を治療するための薬剤を提供し、薬剤は、（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体、もしくはその薬学的に許容される塩、（ｉｉ）亜鉛、または（ｉｉｉ）（ｉ）および（ｉｉ）の組み合わせである。ある実施形態において、（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはその薬学的に許容される塩、および（ｉｉ）亜鉛の組み合わせが、使用または投与される。
【００９７】
別の態様において、本開示は、対象におけるチャネル病を治療するための方法を提供し、本方法は、該対象に、有効量の（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体、もしくはその薬学的に許容される塩、または（ｉｉ）亜鉛を投与することを含み、チャネル病はＣＦではない。別の態様において、本開示は、対象におけるチャネル病を治療するための、（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体、もしくはその薬学的に許容される塩、または（ｉｉ）亜鉛の使用を提供し、チャネル病はＣＦではない。別の態様において、本開示は、対象におけるチャネル病を治療するための薬剤の製造のための、（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体、もしくはその薬学的に許容される塩、または（ｉｉ）亜鉛の使用を提供し、チャネル病はＣＦではない。別の態様において、本開示は、対象におけるチャネル病を治療するための薬剤を提供し、薬剤は、（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体、もしくはその薬学的に許容される塩、または（ｉｉ）亜鉛であり、チャネル病はＣＦではない。
【００９８】
本明細書に記載される研究において、フェンレチニドおよび／または亜鉛が、ＣＦＴＲ調節物質ルマカフトール（ＶＸ−８０９）およびゲニステインによって誘導されるＣＦＴＲチャネル機能の増強をさらに増加させることができることを示す。したがって、ある実施形態において、本方法または使用は、少なくとも１つの追加のイオン輸送体調節物質、例えばＣＦＴＲ調節物質の投与または使用をさらに含む。さらなる実施形態において、本方法または使用は、２つまたは３つの追加のイオン輸送体調節物質、例えばＣＦＴＲ調節物質の投与または使用をさらに含む。ある実施形態において、（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体、もしくはその薬学的に許容される塩、および／または（ｉｉ）亜鉛が投与される対象は、以前にまたは現在、イオン輸送体調節物質、例えばＣＦＴＲ調節物質（またはその組み合わせ）で治療されている患者である。
【００９９】
別の態様において、本開示は、対象におけるイオンチャネル調節物質（例えばＣＦＴＲ調節物質）のイオンチャネル増強活性を改善するための方法を提供し、本方法は、該イオンチャネル調節物質を、（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体、もしくはその薬学的に許容される塩、および／または（ｉｉ）亜鉛と組み合わせて投与することを含む。本開示は、対象におけるイオンチャネル調節物質（例えばＣＦＴＲ調節物質）のイオンチャネル増強活性を改善するための、（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体、もしくはその薬学的に許容される塩、および／または（ｉｉ）亜鉛の使用も提供する。本開示はまた、対象におけるイオンチャネル調節物質（例えばＣＦＴＲ調節物質）のイオンチャネル増強活性を改善するための薬剤の製造のための、（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体、もしくはその薬学的に許容される塩、および／または（ｉｉ）亜鉛の使用も提供する。本開示はまた、対象におけるイオンチャネル調節物質（例えばＣＦＴＲ調節物質）のイオンチャネル増強活性を改善するための薬剤も提供し、薬剤は、（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体、もしくはその薬学的に許容される塩、および／または（ｉｉ）亜鉛である。
【０１００】
用語「チャネル病」は、本明細書で使用する場合、イオンチャネル（またはイオン輸送体）の機能不全または欠陥によって引き起こされる疾患または状態を指す。イオンチャネルの欠陥は、遺伝的または後天的要因のいずれかによって引き起こされ得るが、チャネル機能障害を有する変異イオンチャネルをもたらすイオンチャネルをコードする遺伝子の変異は、チャネル病の最も一般的な原因である。したがって、ある実施形態において、チャネル病は、対応する天然イオンチャネル（例えば機能喪失変異）と比較して、低減したレベル（例えば、細胞表面において）および／または活性を有する変異イオンチャネルと関連付けられるか、またはそれによって引き起こされる。さらなる実施形態において、チャネル病は、適切に折り畳まれない、および／または細胞表面に適切に輸送されない、もしくは局在しない変異イオンチャネルと関連付けられるか、またはそれによって引き起こされる。別の実施形態において、チャネル病は、形質膜において発現される変異イオンチャネルと関連付けられるか、またはそれによって引き起こされる。ある実施形態において、変異はヘテロ接合変異である（対象は遺伝子の欠陥対立遺伝子を１つのみ有する）。ある実施形態において、変異はホモ接合変異である（対象は遺伝子の欠陥対立遺伝子を２つ有する）。
【０１０１】
炎症は、イオン輸送体の発現／活性に影響を及ぼすことが示されている（例えば、Ｍｉｃｈａｅｌ  Ｅｉｓｅｎｈｕｔ，Ｊ  Ｉｎｆｌａｍｍ（Ｌｏｎｄ）２００６；３：５を参照されたい）。したがって、ある実施形態において、イオン輸送体の機能不全または欠陥は炎症と関連付けられる。
【０１０２】
チャネル病は、１つ以上の系、例えば、神経系（例えば、全般てんかん熱性痙攣プラス、家族性片麻痺性片頭痛、周期性失調症、ならびに高カリウム血性および低カリウム血性周期性四肢麻痺）、心血管系（例えば、ＱＴ延長症候群、ＱＴ短縮症候群、およびブルガダ症候群）、呼吸器系（例えば、嚢胞性線維症）、内分泌系（例えば、新生児糖尿病、家族性高インスリン血性低血糖症、甲状腺毒性低カリウム血性周期性四肢麻痺、および家族性高アルドステロン症）、ならびに泌尿器系（例えば、バーター症候群、腎性尿崩症、常染色体優性多発性嚢胞腎、および二次低カルシウム血症を伴う低マグネシウム血症）に影響を及ぼし得る（例えば、Ｊｕｎｅ−Ｂｕｍ  Ｋｉｍ，Ｋｏｒｅａｎ  Ｊ  Ｐｅｄｉａｔｒ．２０１４  Ｊａｎ；５７（１）：１−１８を参照されたい）。
【０１０３】
ある実施形態において、チャネル病は、神経系チャネル病である。図７Ａ〜７Ｅは、神経系に影響を及ぼす代表的なチャネル病、および関連する欠陥遺伝子／タンパク質のリストを提供する。したがって、さらなる実施形態において、神経系チャネル病は、図７Ａ〜図７Ｅに列挙される疾患である。ある実施形態において、神経系チャネル病は、筋緊張症、筋麻痺、トムゼン病、またはベッカー病などの骨格筋障害である。ある実施形態において、神経系チャネル病は、ニューロンに影響を及ぼし、てんかん、失調症、片頭痛、過剰驚愕症、失明、聴覚消失、または末梢疼痛症候群（ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ  ｐａｉｎ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ）である。
【０１０４】
別の実施形態において、チャネル病は、心血管系チャネル病である。図８Ａ〜８Ｃは、心血管系に影響を及ぼす代表的なチャネル病、および関連する機能不全遺伝子／タンパク質のリストを提供する。したがって、さらなる実施形態において、心血管系チャネル病は、図８Ａ〜８Ｃに列挙される疾患のうちの１つである。ある実施形態において、心血管系チャネル病は、ＱＴ延長症候群（ＬＱＴＳ）、徐脈、ブルガダ症候群、または頻脈性不整脈である。
【０１０５】
別の実施形態において、チャネル病は、呼吸器系チャネル病である。ある実施形態において、呼吸器系チャネル病は、喘息またはＣＦである。いくつかの一過性受容体電位（ＴＲＰ）チャネルは、気管支高応答性および気道リモデリングと関連付けられている。小胞体（ＥＲ）媒介性カルシウムホメオスタシスを調節するＥＲタンパク質をコードする遺伝子であるＯＲＭＤＬ３は、小児喘息と関連付けられており、筋／小胞体Ｃａ２＋−ＡＴＰａｓｅ２（ＳＥＲＣＡ２）の発現の低減は、喘息における気道平滑筋（ＡＳＭ）の異常な分泌および過剰増殖表現型の根底にあることが実証されている。
【０１０６】
ある実施形態において、呼吸器系チャネル病は、ＣＦである。さらなる実施形態において、ＣＦは、ＣＦＴＲにおける変異によって引き起こされる。さらなる実施形態において、変異は、細胞表面におけるＣＦＴＲタンパク質折り畳みおよび／または輸送に影響を及ぼすか、またはそれらを破壊する（多くの場合、クラスＩＩ変異と称される−ＭａｃＤｏｎａｌｄ  ＫＤ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐａｅｄｉａｔｒ  Ｄｒｕｇｓ  ２００７；９：１−１０，Ｗｅｌｓｈ  ＭＪ  ｅｔ  ａｌ．Ｃｙｓｔｉｃ  ｆｉｂｒｏｓｉｓ．Ｖａｌｌｅ  Ｄ  ｅｔ  ａｌ．（Ｅｄｓ）．ＯＭＭＢＩＤ．Ｔｈｅ  ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ  Ｃｏｍｐａｎｉｅｓ  Ｉｎｃ．Ｐａｒｔ  ２１，ｃｈａｐｔｅｒ．２０１，２００４）。細胞表面におけるＣＦＴＲタンパク質の折り畳みおよび／または輸送に影響を及ぼすか、またはそれらを破壊する変異の例は、ＣＦＴＲタンパク質の５０８位または１３０３位における変異である。ある実施形態において、ＣＦＴＲタンパク質の１３０３位における変異。さらなる実施形態において、１３０３位における変異は、置換、例えば、アスパラギンからリジンへの置換（Ｎ１３０３Ｋと称される）である。ある実施形態において、ＣＦＴＲタンパク質の５０８位における変異。またさらなる実施形態において、変異は、５０８位におけるフェニルアラニン残基の欠失（ｐｈｅ５０８ｄｅｌまたはΔＦ５０８と称される）である。別の実施形態において、変異は、細胞表面におけるＣＦＴＲタンパク質の安定性または代謝回転に影響を及ぼす（多くの場合、クラスＶＩ変異と称される）。細胞表面におけるＣＦＴＲタンパク質の安定性または代謝回転に影響を与える変異の例は、１２０ｄｅｌ２３、Ｎ２８７Ｙ、４３２６ｄｅｌＩＴＣ、および４２７９ｉｎｓＡである。別の実施形態において、ＣＦＴＲ変異は、７１１＋３Ａ→Ｇ、Ａ４５５Ｅ、Ｄ５７９Ｇ、Ｅ１９３Ｋ、Ｋ１０６０Ｔ、Ｒ１１７Ｃ、Ｓ９４５Ｌ、２７８９＋５Ｇ→Ａ、Ａ１０６７Ｔ、Ｄ１１５２Ｈ、Ｅ８３１Ｘ、Ｌ２０６Ｗ、Ｒ３４７Ｈ、Ｓ９７７Ｆ、３２７２−２６Ａ→Ｇ、Ｄ１１０Ｅ、Ｄ１２７０Ｎ、Ｆ１０５２Ｖ、Ｐ６７Ｌ、Ｒ３５２Ｑ  ３８４９＋１０ｋｂＣ→Ｔ、Ｄ１１０Ｈ、Ｅ５６Ｋ、Ｆ１０７４Ｌ、Ｒ７４Ｗ、またはＲ１０７０Ｗである。
【０１０７】
ある実施形態において、チャネル病は、内分泌系チャネル病である。図９は、内分泌系に影響を及ぼす代表的なチャネル病、および関連する機能不全遺伝子／タンパク質のリストを提供する。したがって、さらなる実施形態において、内分泌系チャネル病は、図９に列挙される疾患のうちの１つである。ある実施形態において、内分泌系チャネル病は、インスリン分泌障害（例えば高インスリン血性低血糖症）、甲状腺毒性周期性四肢麻痺（ＴＰＰ）、または骨疾患（例えば大理石骨病）である。
【０１０８】
ある実施形態において、チャネル病は、泌尿器系チャネル病である。図１０は、泌尿器系に影響を及ぼす代表的なチャネル病（すなわち、腎チャネル病）、および関連する機能不全遺伝子／タンパク質のリストを提供する。したがって、さらなる実施形態において、泌尿器系チャネル病は、図１０に列挙される疾患のうちの１つである。ある実施形態において、泌尿器系チャネル病は、常染色体劣性偽性低アルドステロン症１型、腎性尿崩症（ＮＤＩ）、バーター症候群、または二次性低カルシウム血症を伴う家族性低マグネシウム血症（ＨＳＨ）である。
【０１０９】
ある実施形態において、チャネル病は、ＣＦＴＲ機能不全／変異、例えば機能喪失ＣＦＴＲ変異に関連する。ＣＦに加えて、ＣＦＴＲ変異は、慢性気管支炎を伴うＣＯＰＤ（Ｒａｊｕら、２０１６）、喘息を含む粘液クリアランスの他の疾患において、ならびに特発性膵炎、呼吸器状態、例えば、鼻副鼻腔炎、気管支拡張症、およびアレルギー性気管支肺アスペルギルス、ならびに精管の先天性両側欠損においても報告されている（Ｃｏｈｎ  ＪＡ．Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ．２００５，３９（４  Ｓｕｐｐｌ  ２）：Ｓ７０−７、Ｎｏｏｎｅ  ＰＧ，Ｋｎｏｗｌｅｓ  ＭＲ．Ｒｅｓｐｉｒ  Ｒｅｓ．２００１，２（６）：３２８−３２．Ｅｐｕｂ  ２００１  Ａｕｇ  ９、Ｒａｔｂｉ  Ｉ，ｅｔ  ａｌ．Ｈｕｍ  Ｒｅｐｒｏｄ．２００７，２２（５）：１２８５−９１．Ｅｐｕｂ  ２００７  Ｆｅｂ  ２８）。ある実施形態において、ＣＦＴＲ機能不全に関連するチャネル病は、慢性気管支炎を伴うＣＯＰＤ、喘息、特発性膵炎、呼吸器状態（例えば、鼻副鼻腔炎、気管支拡張症）、または精管の先天性両側欠損である。
【０１１０】
本明細書で使用する場合、用語「対象」または「患者」は、哺乳動物、例えば、ネコ、イヌ、マウス、モルモット、ウマ、ウシ属のウシ、ヒツジ、およびヒト等の温血動物を意味するとみなされる。ある実施形態において、対象は、哺乳動物である。さらなる実施形態において、上記対象は、ヒトである。ある実施形態において、対象は、小児である。別の実施形態において、対象は、青少年である。別の実施形態において、対象は、成人である。
【０１１１】
ある実施形態において、治療される対象は、亜鉛欠乏症に罹患している。亜鉛血漿レベルの正常基準範囲は、約１０〜１７μｍｏｌ／ｌ（血漿）である。したがって、亜鉛欠乏症に罹患している対象は、約１０μｍｏｌ／ｌ未満、例えば、約９．５、９、８．５、８、７．５、または７μｍｏｌ／ｌ未満の亜鉛レベルを有する。
【０１１２】
フェンレチニドおよびその類似体
ＣＡＳ登録番号６５６４６−６８−６を有するフェンレチニド（オール−トランス−Ｎ−（４−ヒドロキシフェニル）レチンアミド（４−ＨＰＲ、レチノイン酸ｐ−ヒドロキシアニドとも称される）は、以下の式の合成レチノイドである：
【化１】
2021522177.tif 000003
【０１１３】
フェンレチニドの機能的類似体（および／または代謝産物）（すなわち、フェンレチニドと同じ生物学的活性を示す）もまた、本開示に従って使用してもよい。本明細書で使用する場合、「フェンレチニド類似体」とは、ある特定の化学構造特徴をフェンレチニドと共有するが、同時に、それに１つ以上の修飾を含み、フェンレチニドと同様の生物学的活性を示す（ただし、そのような活性を異なる程度で示し得る）化合物を指す。使用され得るフェンレチニドの類似体の例としては、限定されないが、４−オキソ−Ｎ−（４−ヒドロキシフェニル）レチナミド（４−オキソ−４−ＨＰＲ）、Ｎ−（４−メトキシフェニル）レチナミド（４−ＭＰＲ）、４−ヒドロキシベンジルレチノン、Ｎ−（４−ヒドロキシフェニル）レチナミド−Ｏ−グルクロニドのＣ−グリコシドおよびアリールアミド類似体（限定されないが、４−（レチナミド）フェニル−Ｃ−グルクロニド、４−（レチナミド）フェニル−Ｃ−グルコシド、４−（レチナミド）ベンジル−Ｃ−キシロシドを含む）、ならびに例えば、１−（β−Ｄ−グルコピラノシル）レチナミド、１−（Ｄ−グルコピラノシルウロノシル）レチナミド、およびベキサロテン等のレチノイルβ−グルクロニド類似体が挙げられ、これらは、ＷＯ０７／１３６６３６、米国特許出願第２００６／０２６４５１４号、米国特許第５，５１６，７９２号、同第５，６６３，３７７号、同第５，５９９，９５３号、同第５，５７４，１７７号、Ａｎｄｉｎｇ  ｅｔ  ａｌ．（２００７）Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．６７：６２７０−６２７７およびＢｈａｔｎａｇａｒ  ｅｔ  ａｌ．（１９９１）Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．４１：１４７１−７に記載されている。ある実施形態において、フェンレチニド／フェンレチニド類似体は、式Ｉ：
【化２】
2021522177.tif 000004
によって表され、Ｒは、ＯＨ、ＣＯＯＨ、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、またはＣＨ２ＣＯＯＨであり、
炭素ａ〜ｄおよびｆ〜ｉは、任意選択的に、ＣＨ３、ＯＨ、ＣＯＯＨ、（ＣＨ３）２、およびＣＨ２ＯＨ、またはこれらの任意の組み合わせから選択される１つ以上の基で置換され、
炭素ｅは、任意選択的に、ＣＨ３および／またはＯＨで任意選択的に置換されるＣ１〜Ｃ３アルキル基で置換されている。
【０１１４】
フェンレチニドまたはフェンレチニド類似体の任意の塩も、本明細書に記載される方法または使用において使用され得る。
【０１１５】
ある実施形態において、上述の方法または使用は、フェンレチニドまたはその薬学的に許容される塩の投与または使用を含む。さらなる実施形態において、上述の方法または使用は、フェンレチニドの投与または使用を含む。
【０１１６】
亜鉛
本明細書に記載される方法および使用において使用される亜鉛は、生理学的に許容され、同化可能な形態でなければならない。生理学的に許容される同化可能な亜鉛源は、典型的には、酸化亜鉛、または有機もしくは無機酸（塩）を有する亜鉛の塩である。有機酸を有する好適な生理学的に許容される亜鉛の塩としては、オロト酸、アスパラギン酸、グルコン酸、酒石酸、クエン酸、乳酸、酢酸、フマル酸、マレイン酸、リンゴ酸、アスコルビン酸、コハク酸、安息香酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、およびアミノ酸、例えば、グリシン、グルタミン、またはシステインを有する塩が挙げられる。無機酸を有する好適な生理学的に許容される上記金属の塩としては、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、リン酸、二リン酸、硝酸、または硫酸、好ましくは塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、リン酸、または硫酸を有する塩が挙げられる。そのような塩は、市販されているか、または必要に応じて既知の方法によって調製され得る。ある実施形態において、薬学的に許容される亜鉛塩は、酢酸亜鉛、アスコルビン酸亜鉛、アスパラギン酸亜鉛、オロト酸亜鉛、硫酸亜鉛、ピコリン酸亜鉛、グリシン酸亜鉛、グルコン酸亜鉛、塩化亜鉛、またはクエン酸亜鉛、好ましくは硫酸亜鉛である。
【０１１７】
イオン輸送体調節物質
用語「イオン輸送体調節物質」は、例えば、チャネル開放の可能性または細胞表面（例えばシャペロン）における受容体の輸送を増加させることによって、イオン輸送体の活性を増加させる薬剤を指す。イオン輸送体調節物質の種類としては、イオン輸送体「増強剤」（チャネル内のイオン流を改善する）、イオン輸送体「補正剤」（イオン輸送体の折り畳みおよび／または輸送を改善する）、およびイオン輸送体「増幅剤」または「産生補正剤」（細胞によって産生されるイオン輸送体の量を増加させる）が挙げられる。ある実施形態において、イオン輸送体調節物質は、ＣＦＴＲ調節物質である。ＣＦＴＲ調節物質の例としては、チャネル増強剤アイバカフトール（ＩＶＡ、ＶＸ−７７０）、ＧＬＰＧ２４５１、およびＧＬＰＧ１８３７、ならびにＣＦＴＲ補正剤ルマカフトール（ＬＵＭ、ＶＸ−８０９）、テザカフトール（ＶＸ−６６１）、ＶＸ−４４０、ＶＸ−１５２、およびＧＬＰＧ２２２２が挙げられる。単一の、または２つもしくは３つのイオン輸送体（例えばＣＦＴＲ）調節物質の組み合わせを使用してもよい。ある実施形態において、ＣＦＴＲ調節物質またはそれらの組み合わせは、アイバカフトールを含む。別の実施形態において、ＣＦＴＲ調節物質またはそれらの組み合わせは、テザカフトールを含む。さらなる実施形態において、ＣＦＴＲ調節物質の組み合わせは、アイバカフトールおよびルマカフトール（Ｏｒｋａｍｂｉ（登録商標））、またはテザカフトールおよびアイバカフトール（Ｓｙｍｄｅｋｏ（登録商標））を含む。ある実施形態において、組み合わせは、第２世代ＣＦＴＲ補正剤、例えば、ＶＸ−４４０またはＶＸ−１５２をさらに含む。
【０１１８】
投薬量
フェンレチニド、フェンレチニド類似体、もしくはその塩、亜鉛、および／またはイオン輸送体調節物質の任意の好適な量が対象に投与され得る。投薬量は、投与様式を含む多くの要因に依存する。典型的には、単回用量内に含まれるフェンレチニド、フェンレチニド類似体、もしくはその塩、亜鉛、および／またはイオン輸送体調節物質の量は、著しい毒性を誘発することなくチャネル病を効果的に予防、遅延、または治療する量である。
【０１１９】
所与の疾患または状態（例えばチャネル病）の予防、治療、またはその重症度の低減のために、化合物／組成物の適切な投薬量は、治療される疾患または状態の種類、疾患または状態の重症度および経過、化合物／組成物が予防目的または治療目的のために投与されるかどうか、以前の療法、患者の病歴および化合物／組成物に対する応答、ならびに主治医の裁量に依存するであろう。フェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはその塩、亜鉛、および／またはイオン輸送体調節物質は、患者に、１回または一連の治療にわたって好適に投与される。好ましくは、ヒトにおける試験の前に、用量応答曲線を、インビトロで、次いで有用な動物モデルで決定することが望ましい。本発明は、それらを含む化合物および組成物の投薬量を提供する。例えば、疾患の種類および重症度に応じて、１日当たり約１μｇ／ｋｇ〜体重のｋｇ当たり１０００ｍｇ（ｍｇ／ｋｇ）である。さらに、有効量は、０．５ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇ、２０ｍｇ／ｋｇ／２５ｍｇ／ｋｇ、３０ｍｇ／ｋｇ、３５ｍｇ／ｋｇ、４０ｍｇ／ｋｇ、４５ｍｇ／ｋｇ、５０ｍｇ／ｋｇ、５５ｍｇ／ｋｇ、６０ｍｇ／ｋｇ、７０ｍｇ／ｋｇ、７５ｍｇ／ｋｇ、８０ｍｇ／ｋｇ、９０ｍｇ／ｋｇ、１００ｍｇ／ｋｇ、１２５ｍｇ／ｋｇ、１５０ｍｇ／ｋｇ、１７５ｍｇ／ｋｇ、２００ｍｇ／ｋｇであってもよく、２５ｍｇ／ｋｇ増量で最大１０００ｍｇ／ｋｇまで増加され得るか、または前述の値のうちのいずれか２つの間の範囲であり得る。典型的な１日の投薬量は、上述の要因に応じて、約１μｇ／ｋｇ〜１００ｍｇ／ｋｇ以上の範囲であり得る。数日以上にわたる繰り返し投与については、状態に応じて、疾患症状の所望の抑制が生じるまで治療を維持する。しかしながら、他の投薬レジメンが有用であり得る。この療法の進行は、従来の技法およびアッセイによって容易に監視される。
【０１２０】
実際の用量は、各患者に固有の臨床要因に基づいて主治医によって、または栄養士によって慎重に選択され、滴定されなければならないため、これらは単にガイドラインである。最適な１日量は、当該技術分野で既知の方法によって決定され、患者の年齢等の要因および他の臨床的に関連する要因によって影響される。加えて、患者は、他の疾患または状態のために薬を服用している場合がある。他の薬は、フェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはその塩、亜鉛、および／またはイオン輸送体調節物質が患者に与えられる間継続してもよいが、そのような場合には、有害な副作用が経験されるかどうかを決定するために低用量から開始することが特に望ましい。
【０１２１】
ある実施形態において、投与または使用されるフェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはその塩の量は、対象において（定常状態で）、約０．５μＭ〜約６μＭ、例えば約１μＭ〜約２．５または３μＭの血漿中濃度を提供するように調整される。ある実施形態において、投与または使用されるフェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはその塩の量は、約１ｍｇ〜約５００ｍｇ、例えば、約５、１０、１５、または２０ｍｇ〜約５０、７５、１００、１５０、２００、または２５０ｍｇである。
【０１２２】
ある実施形態において、投与または使用される亜鉛の量は、対象において（定常状態で）、約１０μＭ〜約１５μＭの亜鉛の血漿中濃度を提供するように調整される。ある実施形態において、投与または使用される亜鉛の量は、約１、１．５、または２ｍｇ〜約１００、１５０、または２００ｍｇの元素亜鉛、例えば、約２、２．５、または３ｍｇ〜約５０、７５、１００、１５０ｍｇの元素亜鉛、好ましくは、約２、３、４、５、６、７、８、９、または１０ｍｇ〜約２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、または１５０ｍｇの元素亜鉛である。
【０１２３】
ある実施形態において、チャネル病の治療もしくは細胞内のイオン輸送体の活性を増強するために投与または使用される亜鉛は、マルチビタミン／ミネラル栄養補助食品に組み込まれない。
【０１２４】
組成物
フェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはその塩、亜鉛、および／またはイオン輸送体調節物質は、１つ以上の任意選択の担体または賦形剤と組み合わせて、化合物（複数可）を、錠剤、カプセル（例えば硬質ゼラチンカプセル）、カプレット、懸濁液、懸濁液用粉末等の好適な投薬製剤に製剤化され得る。そのような組成物は、所望の純度を有する活性成分（例えばフェンレチニドおよび／または亜鉛）を、薬学的技術分野で周知の様式で、１つ以上の任意選択の薬学的に許容される担体、賦形剤、および／または安定剤と混合することによって調製され得る。補足的な活性化合物もまた、組成物中に組み込むことができる。担体／賦形剤は、例えば、経口、静脈内、非経口、皮下、筋肉内、鼻腔内、または肺（例えばエアロゾル）投与に好適であり得る（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，ｂｙ  Ｌｏｙｄ  Ｖ  Ａｌｌｅｎ，Ｊｒ，２０１２，２２ｎｄ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｓｓ、Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ，ｂｙ  Ｒｏｗｅ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２，７ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｓｓを参照されたい）。治療製剤は、当該技術分野において既知の標準的な方法を使用して調製される。
【０１２５】
「賦形剤」は、本明細書で使用する場合、当該技術分野においてその通常の意味を有し、活性成分（薬物）自体ではない任意の成分である。賦形剤としては、例えば、結合剤、滑沢剤、希釈剤、充填剤、増粘剤、崩壊剤、可塑剤、コーティング、バリア層製剤、滑沢剤、安定化剤、放出遅延剤、および他の成分が挙げられる。「薬学的に許容される賦形剤」は、本明細書で使用する場合、活性成分の生物学的活性の有効性を妨げず、対象に対して毒性がない、すなわち、賦形剤の種類であり、かつ／または対象に対して毒性がない量で使用するための任意の賦形剤を指す。賦形剤は、当該技術分野では周知であり、本系は、これらの点に関して限定されない。ある特定の実施形態において、組成物は、賦形剤を含み、例えば、および限定されないが、１つ以上の結合剤（ｂｉｎｄｅｒ）（結合剤（ｂｉｎｄｉｎｇ  ａｇｅｎｔ））、増粘剤、界面活性剤、希釈剤、放出遅延剤、着色剤、香味剤、充填剤、崩壊剤／溶解促進剤、滑沢剤、可塑剤、シリカフローコンディショナー（ｓｉｌｉｃａ  ｆｌｏｗ  ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｅｒ）、流動促進剤、固化防止剤、粘着防止剤、安定化剤、帯電防止剤、腫脹剤、およびこれらの任意の組み合わせを含む。当業者が認識するように、単一の賦形剤は、一度に３つ以上の機能を果たすことができ、例えば、結合剤および増粘剤の両方として機能することができる。当業者も認識するように、これらの用語は必ずしも相互排他的ではない。
【０１２６】
マトリックス材料、充填剤、または希釈剤の例としては、限定されないが、ラクトース、マンニトール、キシリトール、微結晶セルロース、リン酸水素カルシウム（無水および二水和物）、デンプン、およびそれらの任意の組み合わせが挙げられる。
【０１２７】
崩壊剤の例としては、限定されないが、デンプングリコール酸ナトリウム、アルギン酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、およびクロスカルメロースナトリウム、ならびにＣＲＯＳＰＯＶＩＤＯＮＥ（登録商標）（ＢＡＳＦ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎから入手可能）の商品名で販売されるもの等のポリビニルピロリドンの架橋形態、ならびにそれらの任意の組み合わせが挙げられる。
【０１２８】
結合剤の例としては、限定されないが、メチルセルロース、微結晶セルロース、デンプン、およびグアーガム、トラガカントなどのガム、ならびにこれらの任意の組み合わせが挙げられる。
【０１２９】
滑沢剤の例としては、限定されないが、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸、およびこれらの任意の組み合わせが挙げられる。
【０１３０】
流動促進剤の例としては、限定されないが、金属ケイ酸塩、二酸化ケイ素、より高い脂肪酸金属塩、金属酸化物、アルカリ土類金属塩、および金属水酸化物が挙げられる。保存剤の例としては、限定されないが、亜硫酸塩（酸化防止剤）、塩化ベンザルコニウム、メチルパラベン、プロピルパラベン、ベンジルアルコール、安息香酸ナトリウム、およびこれらの任意の組み合わせが挙げられる。
【０１３１】
懸濁剤または増粘剤の例としては、限定されないが、キサンタンガム、デンプン、グアーガム、アルギン酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリアクリル酸、シリカゲル、ケイ酸アルミニウム、ケイ酸マグネシウム、二酸化チタン、およびこれらの任意の組み合わせが挙げられる。
【０１３２】
固化防止剤または充填剤の例としては、限定されないが、酸化ケイ素、ラクトース、およびそれらの任意の組み合わせが挙げられる。
【０１３３】
可溶化剤の例としては、限定されないが、エタノール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、およびこれらの任意の組み合わせが挙げられる。
【０１３４】
酸化防止剤の例としては、限定されないが、ブチル化ヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、ブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、ｔｅｒｔ−ブチル−ヒドロキノン（ＴＢＨＱ）、４−ヒドロキシメチル−２，６−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルフェノール（ＨＭＢＰ）、２，４，５−トリヒドロキシ−ブチロフェノン（ＴＨＢＰ）、没食子酸プロピル（ＰＧ）、没食子酸トリアミル、没食子酸（ＧＡ）、α−トコフェロール（ビタミンＥ）、酢酸トコフェロール等のフェノール系酸化防止剤、Ｌ−アスコルビン酸（ビタミンＣ）、パルミチン酸Ｌ−アスコルビル、ステアリン酸Ｌ−アスコルビル、チオグリコール酸（ＴＧＡ）、パルミチン酸アスコルビル（ＡＳＰ）等の還元剤、硫酸ナトリウム、メタ重亜硫酸ナトリウム、亜硫酸水素ナトリウム、およびチオグリセロール等の亜硫酸系酸化防止剤、ならびにエチレンジアミン四酢酸二ナトリウム（ＥＤＴＡ）、ピロリン酸ナトリウム、メタリン酸ナトリウム、メタチオニン、エリソルビン酸、およびレシチン等の他の薬剤、ならびにこれらの任意の組み合わせが挙げられる。ある実施形態において、本製剤は、酸化防止剤の組み合わせを含む。ある実施形態において、本製剤は、ＢＨＡおよびＢＨＴの組み合わせを含む。ある実施形態において、本製剤は、アスコルビン酸を含む。
【０１３５】
賦形剤の別のクラスは、任意選択的に、約０〜約１０重量％で存在する界面活性剤である。好適な界面活性剤としては、限定されないが、脂肪酸およびアルキルスルホン酸塩、市販の界面活性剤、例えば、塩化ベンザルコニウム（ＨＹＡＭＩＮＥ（登録商標）１６２２、Ｌｏｎｚａ，Ｉｎｃ．，Ｆａｉｒｌａｗｎ，Ｎ．Ｊ．から入手可能）、スルホコハク酸ジオクチルナトリウム（ＤＯＣＵＳＡＴＥ  ＳＯＤＩＵＭ、Ｍａｌｌｉｎｃｋｒｏｄｔ  Ｓｐｅｃ．Ｃｈｅｍ．，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，Ｍｏ．から入手可能）、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル（ＴＷＥＥＮ（登録商標）、ＩＣＩ  Ａｍｅｒｉｃａｓ  Ｉｎｃ．，Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ，Ｄｅｌ．、ＬＩＰＯＳＯＲＢ（登録商標）Ｏ−２０、Ｌｉｐｏｃｈｅｍ  Ｉｎｃ．，Ｐａｔｔｅｒｓｏｎ  Ｎ．Ｊ．、ＣＡＰＭＵＬ．（商標）ＰＯＥ−０、Ａｂｉｔｅｃ  Ｃｏｒｐ．，Ｊａｎｅｓｖｉｌｌｅ，Ｗｉｓ．から入手可能）、ならびに天然界面活性剤、例えばタウロコール酸ナトリウム、１−パルミトイル−２−オレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン、レシチン、ならびに他のリン脂質、ならびにモノおよびジグリセリド、ならびにそれらの任意の組み合わせが挙げられる。それらの材料を用いて、例えば、湿潤を促進することによって溶解速度を増加させるか、またはさもなければ、剤形からの薬物放出速度を増加させることができる。
【０１３６】
色素、滑沢剤、香味剤、保湿剤、溶液遅延剤、吸収促進剤、湿潤剤、吸収剤、および当技術分野で周知の他のものを含む他の従来の賦形剤を、本発明の組成物に用いてもよい。例えば、色素、滑沢剤、香味剤等の賦形剤は、組成物の特性に悪影響を及ぼすことなく、慣習的な目的のために、および典型的な量で使用され得る。
【０１３７】
医薬組成物に一般的に添加される他の成分としては、例えば、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化カルシウム、リン酸ナトリウム、リン酸カリウム、重炭酸ナトリウム等の無機塩、およびクエン酸ナトリウム、クエン酸カリウム、酢酸ナトリウム等の有機塩が挙げられる。
【０１３８】
ある実施形態において、フェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはその塩は、参照によりその全体が組み込まれる米国特許公開第２０１７／０１８９３５６  Ａ１号に記載される非晶質固体分散体として組成物中に存在する。
【０１３９】
「非晶質固体分散体」とは、分散体中のフェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはその塩の少なくとも大部分（すなわち、５０％超）が非晶質形態である分散体を指す。「非晶質」とは、フェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはその塩が非結晶状態にあることを意味する。実施形態では、分散体中の少なくとも５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０％、または９５％のフェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはそれらの塩（重量％）は、非晶質形態である。
【０１４０】
「固体分散体」とは、薬物（例えばフェンレチニド）が固体マトリックスポリマー中に分散される固体材料を指す。そのような固体分散体は、当該技術分野において、ポリマー中の薬物の「分子分散体」または「固体溶液」とも称される。固体分散体は、様々な技法、例えば、高速蒸発、噴霧乾燥、沈殿、または溶融押出（例えば、ホットメルト押出、ＨＭＥ）によって得られ得る。ある実施形態において、固体分散体は、噴霧乾燥によって得られる（噴霧乾燥固体分散体）。
【０１４１】
本発明での使用に好適であり得る「マトリックスポリマー」（当該分野において、「濃度増大ポリマー」または「分散ポリマー」とも称される）の例は、例えば、米国特許第７，７８０，９８８号および同第７，８８７，８４０号に詳細に説明されている。マトリックスポリマーは、フェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはその塩と共処理すると、フェンレチニド／フェンレチニド類似体を非晶質形態で維持するように機能する、任意の薬学的に許容されるポリマーであり得る。
【０１４２】
本発明との使用に好適であり得るポリマーの例としては、非イオン性（中性）非セルロース性ポリマーが挙げられる。例示的なポリマーとしては、ヒドロキシル、アルキルアシルロキシ、および環状アミドから選択される少なくとも１つの置換基を有するビニルポリマーおよびコポリマー；非加水分解（酢酸ビニル）形態でそれらの反復単位の少なくとも一部を有するポリビニルアルコール；ポリビニルアルコールポリ酢酸ビニルコポリマー；ポリビニルピロリドン；およびポリエチレンポリビニルアルコールコポリマー；ならびにポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレンコポリマーが挙げられる。
【０１４３】
本発明との使用に好適であり得るポリマーの他の例としては、イオン化可能な非セルロース性ポリマーが挙げられる。例示的なポリマーとしては、カルボン酸官能化ビニルポリマー、例えば、カルボン酸官能化ポリメタクリレートおよびＥＵＤＲＡＧＩＴ（登録商標）シリーズ等のカルボン酸官能化ポリアクリレート、アミン官能化ポリアクリレートおよびポリメタクリレート；ゼラチンおよびアルブミン等のタンパク質；ならびにグリコール酸デンプン等のカルボン酸官能化デンプンが挙げられる。
【０１４４】
本発明との使用に好適であり得る他の例示的なポリマーとしては、ポリマーとして使用され得る非イオン化性セルロースポリマーが挙げられ、酢酸ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、ヒドロキシプロピルセルロース、メチルセルロース、ヒドロキシエチルメチルセルロース、酢酸ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース等を含む。
【０１４５】
特定のポリマーは、本発明によって形成可能な分散体における使用に好適であると論じられているが、そのようなポリマーのブレンドもまた好適であり得る。したがって、用語「マトリックスポリマー」は、単一種のポリマーに加えてポリマーのブレンドを含むことが意図される。
【０１４６】
ある実施形態において、マトリックスポリマーは、ポリビニルピロリドンを含む。別の実施形態において、マトリックスポリマーは、ポリビニルピロリドン、例えば、商品名Ｐｌａｓｄｏｎｅ（登録商標）（ポビドン）、ポリビニルピロリドンＫ１２、ポリビニルピロリドンＫ１７、ポリビニルピロリドンＫ２５、ポリビニルピロリドンＫ３０、またはポリビニルピロリドンＫ９０で販売されているポリマーである。
【０１４７】
ある実施形態において、フェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはその塩／マトリックスポリマーの比率は、重量で約１：５〜約５：１、さらなる実施形態においては約１：４〜約４：１、約１：３〜約３：１、約１：２〜約２：１、または約１．５：１〜約１：１．５である。ある実施形態において、固体分散体は、フェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはその塩の約３０〜約５０％、およびマトリックスポリマーの約５０〜約７０％を含む。別の実施形態において、固体分散体は、フェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはその塩の約４０重量％〜マトリックスポリマーの約６０重量％を含む。
【０１４８】
ある実施形態において、固体分散体は、１つ以上の添加剤を含む。本発明との使用に好適であり得る添加剤は、酸化防止剤を含む。例示的な酸化防止剤としては、Ｌ−アスコルビン酸（ビタミンＣ）、没食子酸プロピル、亜硫酸ナトリウム、メタ重亜硫酸ナトリウム、チオグリセロール、チオグリコール酸、トコフェロールおよびトコトリエノール、ブチル化ヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、ブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、またはこれらの任意の組み合わせが挙げられる。ある実施形態において、マトリックスポリマーまたは固体分散体は、酸化防止剤（複数可）としてＢＨＡおよび／またはＢＨＴを含む。ある実施形態において、マトリックスポリマーまたは固体分散体は、酸化防止剤としてＢＨＡおよびＢＨＴを含む。ある実施形態において、マトリックスポリマーは、酸化防止剤としてＬ−アスコルビン酸を含む。ある実施形態において、酸化防止剤（複数可）は、約０．０１％〜約５％の量、さらなる実施形態において、約０．１％〜約５％、約０．２％〜約４％、０．５％〜約３％、または０．５％〜約２％の量で存在する。
【０１４９】
フェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはその塩の非晶質固体分散体は、上述の１つ以上の任意選択の賦形剤と組み合わされ得る。
【０１５０】
ある実施形態において、フェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはその塩の非晶質固体分散体は、崩壊剤、例えば架橋カルボキシメチルセルロースナトリウム、例えばクロスカルメロース（Ｓｏｌｕｔａｂ（登録商標））と組み合わされる。崩壊剤の他の例としては、トウモロコシデンプン、ジャガイモデンプン、カルボキシメチルセルロースナトリウム、グリコール酸デンプンナトリウム、クロスカルメロースナトリウム、クロスポビドン、およびこれらの任意の組み合わせが挙げられる。ある実施形態において、崩壊剤は、約２〜約１０重量％、例えば約３〜約８重量％または約４〜約６重量％の量で存在する。
【０１５１】
ある実施形態において、フェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはその塩の非晶質固体分散体は、滑沢剤、例えばステアリン酸マグネシウムと組み合わされる。滑沢剤の他の例としては、タルク、二酸化ケイ素、ステアリン酸、およびフマル酸ステアリルナトリウムが挙げられる。ある実施形態において、滑沢剤は、約０．５〜約２重量％、例えば約０．８〜約１．２重量％または約１重量％の量で存在する。
【０１５２】
ある実施形態において、フェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはそれらの塩の非晶質固体分散体は、充填剤または希釈剤、例えば、微結晶セルロース（Ａｖｉｃｅｌ（登録商標）ＰＨ−１０２等のＡｖｉｃｅｌ（登録商標））および／またはリン酸水素カルシウム脱水物（Ｅｎｃｏｍｐｒｅｓｓ（登録商標））と組み合わされる。充填剤または希釈剤の他の例としては、結晶セルロース、セルロース誘導体、アカシア、トウモロコシデンプン、ラクトース、マンニトール、糖、リン酸カルシウム、炭酸カルシウム、ゼラチン、およびそれらの任意の組み合わせが挙げられる。ある実施形態において、充填剤または希釈剤は、約２０重量％〜約４５重量％、例えば約３０重量％〜約４０重量％、例えば約３５重量％の量で存在する。
【０１５３】
ある実施形態において、フェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはその塩の非晶質固体分散体は、１つ以上の酸化防止剤、例えば、ブチル化ヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、ブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、クエン酸、メタ重亜硫酸水素ナトリウム、α−トコフェロール、および／またはＬ−アスコルビン酸と組み合わされる。
【０１５４】
ある特定の実施形態において、本明細書に開示される非晶質固体分散体は、経口投薬製剤として製剤化される。経口投与に好適な製剤は、それぞれ所定量の活性成分を含有する、カプセル、カシェ剤、丸薬、錠剤、トローチ剤（風味ベース、通常はスクロースおよびアカシアまたはトラガカントを使用）、粉末、顆粒の形態で、または水性もしくは非水性液体中の溶液もしくは懸濁液として、またはエリキシルもしくはシロップとして、またはパスチル（ゼラチンおよびグリセリン、またはスクロースおよびアカシアなどの不活性マトリックスを使用）としてなどであってもよい。組成物はまた、ボーラス、なめ薬、またはペーストとして投与されてもよい。
【０１５５】
ある実施形態において、経口投薬製剤は錠剤である。錠剤は、任意選択的に１つ以上の補助成分を用いて、圧縮または成形によって作製され得る。圧縮錠剤は、結合剤、滑沢剤、不活性希釈剤、保存剤、崩壊剤、表面活性剤、または分散剤を使用して調製され得る。成形錠剤は、不活性液体希釈剤で湿らせた粉末阻害剤（複数可）の混合物を好適な機械で成形することによって作製され得る。
【０１５６】
本明細書に開示される経口投薬製剤のいくつかの実施形態では、非晶質固体分散体は、約１０重量％〜約９０重量％、約２０重量％〜約８０重量％、約３０重量％〜約６０重量％、または約４５重量％〜約５５重量％の量、または本明細書に提供される値内の別の範囲で存在する。
【０１５７】
ある実施形態において、成分の組み合わせに基づいて本明細書に記載される方法または使用において、（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはそれらの塩、（ｉｉ）亜鉛、および／または（ｉｉｉ）イオン輸送体調節物質は、別個の組成物に製剤化される、すなわち、別個に投与／使用される。薬剤および／または組成物の組み合わせは、任意の従来の剤形で（例えば、連続的に、同時に、異なる時間に）投与または共投与され得る。本発明の文脈における共投与とは、改善された臨床転帰を達成するために、調整された治療の過程で２つ以上の治療薬を投与することを指す。そのような共投与はまた、同延であってもよい、すなわち、重複した期間中に生じる。例えば、第１の薬剤（例えば、フェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはその塩）は、第２の活性剤（例えば亜鉛）が投与される前、同時、前後、または後に患者に投与され得る。同様に、イオン輸送体調節物質は、第１および／または第２の活性剤（複数可）の前、同時、前後、または後に患者に投与され得る。
【０１５８】
別の実施形態において、（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはその塩、および（ｉｉ）亜鉛は、同じ組成物に製剤化され、したがって同時に投与／使用される。ある実施形態において、本明細書に開示されるフェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはその塩の非晶質固体分散体を含む組成物。ある実施形態において、イオン輸送体調節物質は、（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはその塩、および（ｉｉ）亜鉛と同じ組成物に製剤化される。別の実施形態において、イオン輸送体調節物質は、（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはその塩、および（ｉｉ）亜鉛とは異なる組成物に製剤化される。
【０１５９】
ある実施形態において、本明細書に記載される方法および使用において使用／投与される（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはその塩、（ｉｉ）亜鉛、および／または（ｉｉｉ）イオン輸送体調節物質の用量は、最適以下の用量である。「最適以下の用量」は、本明細書で使用する場合、本明細書に記載される組み合わせの化合物のうちの１つの用量を指し、この用量は、組み合わせの化合物の不在下で使用する場合、５０％以下、ある実施形態では４０％以下、さらなる実施形態では３０％以下、さらなる実施形態では２０％以下、さらなる実施形態では１０％以下の生物学的効果をもたらす。したがって、本明細書に記載される化合物の組み合わせの使用（その組み合わせ中の１つ以上の化合物が最適以下の用量で使用される）は、同等の最適以下の用量で、他の化合物（複数可）の不在下での化合物（複数可）の使用と比較して、増加した有効性／生物学的効果を達成し得る。
【０１６０】
ある実施形態において、（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはその塩、（ｉｉ）亜鉛、および／または（ｉｉｉ）イオン輸送体調節物質は、相乗効果を示す。組み合わせた薬剤の生物学的効果が、他の薬剤の不在下での各薬剤の効果の理論的な合計よりも大きい場合、相乗効果が達成される。相乗効果を有する併用療法の１つの潜在的な利点は、低毒性で高い治療活性を達成するために、低投薬量（例えば最適以下の用量）の薬剤または療法のうちの１つ以上を使用することができることである。ある実施形態において、併用療法は、薬剤の予測される理論的相加効果と比較して、少なくとも５％の効果の増加をもたらす。さらなる実施形態において、併用療法は、薬剤の予測される理論的相加効果と比較して、少なくとも１０％の効果の増加をもたらす。さらなる実施形態において、併用療法は、薬剤の予測される理論的相加効果と比較して、少なくとも２０％の効果の増加をもたらす。さらなる実施形態において、併用療法は、薬剤の予測される理論的相加効果と比較して、少なくとも３０％の効果の増加をもたらす。薬物を組み合わせて使用するさらなる利点は、いずれかの薬剤のみが有意な効果を有さない状況で有効性が達成され得ることである。
【０１６１】
キットおよびパッケージ
本開示はまた、（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはその塩、（ｉｉ）亜鉛、および／または（ｉｉｉ）ＣＦＴＲ調節物質等のイオン輸送体調節物質のうちの１つ以上を含むキットまたはパッケージにも関する。ある実施形態において、キットまたはパッケージは、上記で定義される項目（ｉ）〜（ｉｉｉ）のうちの少なくとも２つを含む。ある実施形態において、キットは、（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはその塩、および（ｉｉ）亜鉛を含む。別の実施形態において、キットは、（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはその塩、および（ｉｉｉ）イオン輸送体調節物質を含む。別の実施形態において、キットは、（ｉ）フェンレチニド、フェンレチニド類似体、またはその塩、（ｉｉ）亜鉛、および（ｉｉ）イオン輸送体調節物質を含む。別の実施形態において、キットは、（ｉ）亜鉛、および（ｉｉ）イオン輸送体調節物質を含む。別の実施形態において、キットは、少なくとも２つのイオン輸送体調節物質、例えば少なくとも２つのＣＦＴＲ調節物質（例えば、アイバカフトール（ＩＶＡ、ＶＸ−７７０）、ＧＬＰＧ２４５１、ＧＬＰＧ１８３７、ルマカフトール（ＬＵＭ、ＶＸ−８０９）、テザカフトール（ＶＸ−６６１）、ＶＸ−４４０、ＶＸ−１５２、またはＧＬＰＧ２２２２）を含む。ある実施形態において、ＣＦＴＲ調節物質または少なくとも２つのＣＦＴＲ調節物質は、アイバカフトールを含む。別の実施形態において、ＣＦＴＲ調節物質または少なくとも２つのＣＦＴＲ調節物質は、テザカフトールを含む。さらなる実施形態において、少なくとも２つのＣＦＴＲ調節物質は、アイバカフトールおよびテザカフトールを含む。
【０１６２】
キットまたはパッケージは、１つ以上の容器、生理学的に許容される希釈剤、薬剤を投与するためのデバイス等をさらに含み得る。キットまたはパッケージはまた、説明書および／または情報資料も含み得る。キットに含まれる情報資料は、本明細書に記載される方法／使用に関する説明、指示、マーケティング、または他の資料であり得る。例えば、キットまたはパッケージの情報資料は、連絡先情報、例えば、実際の住所、電子メールアドレス、ウェブサイト、または電話番号を含み得、キットまたはパッケージのユーザは、キットまたはパッケージに含まれる薬剤に関する実質的な情報、薬剤の投与に関する情報などを得ることができる。
【０１６３】
ある実施形態において、キットまたはパッケージは、細胞における変異または欠陥イオン輸送体の活性を増強するため、対象におけるチャネル病を治療するため、および／または対象におけるイオンチャネル調節物質（例えばＣＦＴＲ調節物質）のイオンチャネル増強活性を改善するためのものである。
【０１６４】
本発明を実施するための方法（複数可）
本発明は、以下の非限定的実施例によってさらに詳細に例証される。
【実施例】
【０１６５】
実施例１：肺上皮細胞における脂肪酸レベルおよびｃＰＬＡ２活性に対するフェンレチニドおよび亜鉛処理の効果
ヒト気道上皮細胞における脂質代謝に対するフェンレチニド（Ｆｅｎ）および／または亜鉛（Ｚｎ２＋）イオンの効果は、細胞質ホスホリパーゼ（ｃＰＬＡ２）活性の調節を評価された。比色アッセイによって評価されるように、ｃＰＬＡ２活性は、フェンレチニド処理後、処理の２４時間後から、時間依存的様式で減少した（図１）。また、亜鉛は、２４時間および４８時間でフェンレチニドの効果を増強し、フェンレチニドの不在下で７２時間でｃＰＬＡ２活性を著しく増加させることが示された。
【０１６６】
次に、フェンレチニドおよび亜鉛が、ＣＦＴＲのｄｅｌＦ５０８変異形態（ｄｅｌＦ５０８／ｄｅｌＦ５０８）または天然ＣＦＴＲ（ｗｔ  ＣＦＴＲ）を過剰発現する気道上皮細胞におけるオメガ−３（ドコサヘキサエン酸、ＤＨＡ）およびオメガ−６（アラキドン酸、ＡＡ）脂肪酸のレベルを調節するかどうかを評価した。図２Ａに示される結果は、フェンレチニド単独、亜鉛単独、およびフェンレチニドと亜鉛との組み合わせが、ｄｅｌＦ５０８ＣＦＴＲを過剰発現する細胞において（未処理細胞と比較して）ＤＨＡレベルの有意な増加を誘導する一方で、フェンレチニド＋亜鉛の組み合わせによる処理のみが、天然ＣＦＴＲを過剰発現する細胞においてそれを行うことができたことを示す。ＡＡレベルについて、全ての処理は、ｄｅｌＦ５０８ＣＦＴＲ発現細胞において（未処理細胞と比較して）ＡＡレベルの有意な減少につながったが、天然ＣＦＴＲ発現細胞においては減少しなかった。興味深いことに、フェンレチニド＋亜鉛で処理された天然ＣＦＴＲ発現細胞は、フェンレチニド単独で処理された対応する細胞と比較して有意に低いＡＡレベルを有した（図２Ｂ）。ＤＨＡおよびＡＡレベルについて得られた結果と一致して、フェンレチニド単独、亜鉛単独、およびフェンレチニドと亜鉛との組み合わせは、ｄｅｌＦ５０８ＣＦＴＲを過剰発現する細胞において（未処理細胞と比較して）ＤＨＡ／ＡＡ比の有意な増加を誘導するが、天然ＣＦＴＲを過剰発現する細胞においては誘導しない。
【０１６７】
実施例２：ＣＦＴＲ機能発現に対するフェンレチニドおよび亜鉛処理の効果
次に、フェンレチニドおよび／または亜鉛が、天然ＣＦＴＲ発現上皮細胞が塩化物を輸送する能力に対して効果を有し得るかどうかを試験した。ＣＦＴＲは、ウイルス感染中に比較的安定したプラットフォームに局在化することが知られている（Ａｂｕ−Ａｒｉｓｈら、２０１５）。ＣＦＴＲを発現するそのようなプラットフォームの形成を、フェンレチニドで処理した後に測定した。画像相関分光法技法を使用して、原発性ヒト気管支上皮細胞の形質膜におけるＧＦＰ−ｗｔ−ＣＦＴＲの凝集度を測定した。凝集度は、クラスタまたはプラットフォーム当たりのＣＦＴＲチャネルの平均数に比例する。対照（Ｃｔｒ）、サプシガルジン（Ｔｈａｐｓ）、フェンレチニド（Ｆｅｎ）、またはＦｅｎ＋Ｔｈａｐｓの組み合わせ下での分析のために、血漿膜におけるＣＦＴＲの共焦点画像を収集した。細胞は、撮像前に２４時間、１．２５μＭのフェンレチニドで前処理されたか、または前処理されなかったが、Ｔｈａｐｓ（２μＭ）曝露は急性であった（１０〜２０分）。図３Ａ〜３Ｆに示されるように、フェンレチニド単独はＣＦＴＲクラスタリングには影響を及ぼさないが（図３Ｃ、３Ｆ）、サプシガルジン自体（細胞質カルシウムを増加させ、小胞体ストレス応答（ｕｎｆｏｌｄｅｄ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ）中に生じるようにＥＲストレスを誘導することが知られている）は、いくつかのＣＦＴＲプラットフォーム（図３Ｂ、３Ｆ）を誘導し、サプシガルジン処理の前にフェンレチニドで初代気管支上皮細胞を前処理すると、これらのプラットフォームの数およびサイズが有意に増加した（図３Ｄ、３Ｆ）。フェンレチニド＋サプシガルジンによるプラットフォーム形成の誘導は、酸スフィンゴミエリナーゼ阻害剤アミトリプチリン（Ａｍｉ）の存在下で阻害され（図３Ｅ）、ＣＦＴＲプラットフォームの形成に対するフェンレチニド＋サプシガルジンの効果がセラミド依存性であることが示された。
【０１６８】
頂端部形質膜におけるＣＦＴＲタンパク質の凝集と、ＣＦＴＲ塩化物チャネル機能の機能改善との間の関連性を試験した。そのために、Ｕｓｓｉｎｇチャンバーを使用して、フォルスコリン（ＦＳＫ）に応答する極性気管支上皮細胞を横断する短絡電流としてのＦ５０８ｄｅｌ−ＣＦＴＲおよびｗｔ−ＣＦＴＲ機能発現を測定した。図４Ａ〜４Ｂに示されるように、Ｆｅｎ＋Ｚｎの組み合わせは、Ｆ５０８ｄｅｌ−ＣＦＴＲおよびｗｔ−ＣＦＴＲチャネル媒介電流を、それぞれ５７％（ｐ＜０．００５、４実験、ｎ＝１２〜１４フィルタ／条件）および３３％（ｐ＜０．００１、５実験、ｎ＝１５フィルタ／条件）増加させた。
【０１６９】
次に、フェンレチニドおよび／または亜鉛が、既知のＣＦＴＲ調節物質、すなわち、タンパク質折り畳み中にシャペロンとして機能し、細胞表面に輸送されるＣＦＴＲタンパク質の数を増加させることが知られているルマカフトール（ＶＸ−８０９）、ならびにゲニステイン（その活性がＣＦＴＲ増強因子アイバカフトール（ＶＸ−７７０）と類似している別のＣＦＴＲ増強物質）の効果を増強することができるかどうかを試験した。図５に示される結果は、Ｆｅｎ＋Ｚｎの組み合わせが、ＦＳＫおよびＦＳＫ＋Ｇｅｎに応答して、Ｆ５０８ｄｅｌ−ＣＦＴＲチャネルコンダクタンスを、それぞれ、ＶＸ−８０９単独による補正を上回って６０％および５２％（ｐ＜０．０００５、６実験、ｎ＝２２〜３２フィルタ／条件）増加させたことを実証する。さらに、Ｆｅｎ単独での処理は、Ｆ５０８ｄｅｌ−ＣＦＴＲチャネル機能の有意な増加（ｐ＜０．０２）をもたらした。
【０１７０】
ＣＦＴＲ増強剤ＶＸ−８０９で処理されていない細胞で行われた追加の実験は、Ｆｅｎ＋Ｚｎの組み合わせが、ＦＳＫおよびＦＳＫ＋Ｇｅｎに応答するＦ５０８ｄｅｌ−ＣＦＴＲの有意な増加をもたらしたことを示した（それぞれ、５２％および６３％；ｐ＜０．０５、２実験、ｎ＝４〜６フィルタ／条件）（図６）。したがって、既知のＣＦＴＲ増強剤の効果を増強することに加えて、Ｆｅｎ＋Ｚｎの組み合わせはまた、他のＣＦＴＲ増強剤の不在下でＣＦＴＲ機能を増強することを示す。
【０１７１】
本発明は、その特定の実施形態により上文に説明されてきたが、添付の特許請求の範囲に定義される本発明の趣旨および性質から逸脱することなく、修正することができる。特許請求の範囲において、用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｓｉｎｇ）」は、「含むが、〜に限定されない」という語句に実質的に等しい、非限定用語として使用される。単数形の「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」は、文脈が明確に別様に規定しない限り、対応する複数の参照を含む。
【図１】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図２Ｃ】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図３Ｃ】
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【図３Ｄ】
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【図３Ｅ】
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【図３Ｆ】
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【図４Ａ】
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【図４Ｂ】
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【図５】
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【図６】
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【図７Ａ】
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【図７Ｂ】
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【図７Ｃ】
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【図７Ｄ】
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【図７Ｅ】
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【図８Ａ】
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【図８Ｂ】
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【図８Ｃ】
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【図９】
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【図１０】
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【国際調査報告】
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