(57)【要約】  ヒトＩＬ−２２および哺乳動物ＩＬ−２２の両方に結合する抗ＩＬ−２２抗体または抗体断片および、改変された抗ＩＬ−２２抗体および抗体断片である。抗体または抗体断片を含む医薬組成物およびキットも提供される。また、種々のＩＬ−２２媒介症状および疾患の治療のための方法も提供される。
2021527122.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＳＡＳＳＳＶＳＸ1ＭＨ（配列番号１）から選択されるアミノ酸配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、Ｘ2ＴＸ3ＫＬＸ4Ｓ（配列番号２）から選択されるアミノ酸配列を有する軽鎖ＣＤＲ２、およびＱＱＷＳＳＮＰＹＩＴ（配列番号３）のアミノ酸配列を有する軽鎖ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、ならびに
ＧＹＩＦＸ5ＳＹＷＩＨ（配列番号４）から選択されるアミノ酸配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＲＩＹＰＧＴＧＸ6ＴＹＹＮＸ7ＫＦＫＧ（配列番号５）から選択されるアミノ酸配列を有する重鎖ＣＤＲ２、およびＳＹＸ8Ｘ9ＳＶＸ10Ｙ（配列番号６）から選択されるアミノ酸配列を有する重鎖ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域を含み、
Ｘ1はＹまたはＫであり、Ｘ2はＥまたはＫであり、Ｘ3はＳまたはＲであり、Ｘ4はＡまたはＬであり、Ｘ5はＴまたはＲであり、Ｘ6はＮまたはＲであり、Ｘ7はＥまたはＲであり、Ｘ8はＤまたはＭであり、Ｘ9はＳまたはＹであり、Ｘ10はＡまたはＧである、
抗ＩＬ−２２抗体または抗体断片。
【請求項２】
軽鎖可変領域が配列番号７〜１２から選択されるアミノ酸配列を有し、重鎖可変領域が配列番号１３〜１８から選択されるアミノ酸配列を有する、請求項１に記載の抗ＩＬ−２２抗体または抗体断片。
【請求項３】
抗体または抗体断片が以下から選択される、請求項２に記載の抗ＩＬ−２２抗体または抗体断片：
配列番号７のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域および配列番号１３のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域を含む抗体または抗体断片；
配列番号１０のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域および配列番号１３のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域を含む抗体または抗体断片；
配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域および配列番号１４のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域を含む抗体または抗体断片；
配列番号８のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域および配列番号１５のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域を含む抗体または抗体断片；
配列番号９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域および配列番号１５のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域を含む抗体または抗体断片；
配列番号１０のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域および配列番号１５のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域を含む抗体または抗体断片；
配列番号８のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域および配列番号１６のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域を含む抗体または抗体断片；
配列番号７のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域および配列番号１７のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域を含む抗体または抗体断片；
配列番号８のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域および配列番号１７のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域を含む抗体または抗体断片；ならびに
配列番号１２のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域および配列番号１８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域を含む抗体または抗体断片。
【請求項４】
抗体または抗体断片がヒトＩＬ−２２および哺乳動物非ヒトＩＬ−２２に結合する、請求項１〜３のいずれか一項に記載の抗ＩＬ−２２抗体または抗体断片。
【請求項５】
哺乳動物ＩＬ−２２がマウスＩＬ−２２である、請求項４に記載の抗ＩＬ−２２抗体または抗体断片。
【請求項６】
抗体または抗体断片が、互いの±２０％、±１５％、±１０％または±５％以内の親和性でヒトＩＬ−２２および哺乳動物ＩＬ−２２に結合する、請求項４〜５のいずれか一項に記載の抗ＩＬ−２２抗体または抗体断片。
【請求項７】
抗体または抗体断片がＳｔａｔ３のリン酸化を阻害することができる、請求項１〜６のいずれか一項に記載の抗ＩＬ−２２抗体または抗体断片。
【請求項８】
抗体または抗体断片がＩＬ−２２誘導性サイトカイン産生を阻害することができる、請求項１〜７のいずれか一項に記載の抗ＩＬ−２２抗体または抗体断片。
【請求項９】
抗体または抗体断片が、少なくとも１つの動物またはヒトにおける免疫応答を阻害することが可能である、請求項１〜８のいずれか一項に記載の抗ＩＬ−２２抗体または抗体断片。
【請求項１０】
少なくとも１つの動物が哺乳動物を含む、請求項９に記載の抗ＩＬ−２２抗体または抗体断片。
【請求項１１】
哺乳動物がマウスである、請求項９〜１０のいずれか一項に記載の抗ＩＬ−２２抗体または抗体断片。
【請求項１２】
抗ＩＬ−２２抗体または抗体断片がヒト化される、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の抗ＩＬ−２２抗体または抗体断片。
【請求項１３】
抗ＩＬ−２２抗体または抗体断片が改変されたＦｃ領域を含む、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の抗ＩＬ−２２抗体または抗体断片。
【請求項１４】
請求項１〜１３のいずれか１つの抗ＩＬ−２２抗体または抗体断片、およびオリゴ糖、非タンパク質性部分、治療薬、予防薬および診断薬から選択される少なくとも１つの部分を含む改変された抗ＩＬ−２２抗体または抗体断片。
【請求項１５】
少なくとも１つの部分がオリゴ糖である、請求項１４に記載の改変された抗ＩＬ−２２抗体または抗体断片。
【請求項１６】
少なくとも１つの部分が少なくとも１つの非タンパク質性部分である、請求項１４に記載の改変された抗ＩＬ−２２抗体または抗体断片。
【請求項１７】
少なくとも１つの非タンパク質性部分が、水溶性ポリマーから選択される、請求項１５に記載の改変された抗ＩＬ−２２抗体または抗体断片。
【請求項１８】
少なくとも１つの部分が治療薬、予防薬および診断薬から選択される、請求項１４に記載の改変された抗ＩＬ−２２抗体または抗体断片。
【請求項１９】
治療薬、予防薬または診断薬が抗ＩＬ−２２抗体または抗体断片に結合され、化学療法薬、放射性原子、検出可能な標識、プロドラッグ活性化酵素、細胞増殖抑制薬および細胞毒性剤から選択される、請求項１８に記載の改変された抗ＩＬ−２２抗体または抗体断片。
【請求項２０】
治療薬、予防薬および診断薬から選択される２つの薬剤を含む、請求項１８〜１９のいずれか一項に記載の改変された抗ＩＬ−２２抗体または抗体断片。
【請求項２１】
抗体または抗体断片および治療薬、予防薬または診断薬がリンカー分子に共有結合されている、請求項１８〜２０のいずれか一項に記載の改変された抗ＩＬ−２２抗体または抗体断片。
【請求項２２】
請求項１〜１３のいずれか一項に記載の抗体または抗体断片、または請求項１４〜２１のいずれか一項に記載の改変された抗ＩＬ−２２抗体または抗体断片；および薬学的に許容される担体を含む医薬組成物。
【請求項２３】
さらに少なくとも１つの追加の賦形剤を含む、請求項２２に記載の医薬組成物。
【請求項２４】
少なくとも１つの追加治療薬をさらに含む、請求項２２〜２３のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項２５】
免疫関連疾患または癌を治療する方法であって、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の抗体または抗体断片、請求項１４〜２１のいずれか一項に記載の改変された抗ＩＬ−２２抗体または抗体断片、または請求項２２〜２４のいずれか一項に記載の医薬組成物を対象に投与する工程を含む方法。
【請求項２６】
請求項１〜１３のいずれか一項に記載の抗体もしくは抗体断片、請求項１４〜２１のいずれか一項に記載の改変された抗ＩＬ−２２抗体もしくは抗体断片、または請求項２２〜２４のいずれか一項に記載の医薬組成物；および抗体もしくは抗体断片、改変された抗体もしくは抗体断片、または医薬組成物を診断もしくは治療のために使用するための使用説明書を含む診断または治療のためのキット。
【請求項２７】
配列番号７〜１２のアミノ酸配列の１つと９０％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域；
配列番号１３〜１８のアミノ酸配列のうちの１つと９０％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する重鎖可変領域
を含む抗体または抗体断片。
【請求項２８】
前記軽鎖可変領域が、配列番号７−１２から選択されるアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域の相補性決定領域と同一の３つの相補性決定領域を有する、請求項２７に記載の抗体または抗体断片。
【請求項２９】
前記重鎖可変領域が、配列番号１３〜１８から選択されるアミノ酸配列を有する重鎖可変領域の相補性決定領域と同一である３つの相補性決定領域を有する、請求項２７〜２８のいずれか一項に記載の抗体または抗体断片。
【請求項３０】
軽鎖および重鎖が、少なくとも９５％の配列同一性、少なくとも９８％の配列同一性、または少なくとも９９％の配列同一性を有する、請求項２７〜２９のいずれか一項に記載の抗体または抗体断片。
【請求項３１】
薬学的に許容可能な防腐剤をさらに含む、請求項２２〜２４に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本開示は、抗ＩＬ２２抗体、抗体断片、バリアントならびにそのような抗体および抗体断片の免疫コンジュゲートならびに診断および治療方法における抗体、抗体断片、バリアントおよび免疫コンジュゲートの使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
インターロイキン−１０関連Ｔ細胞由来誘導因子（ＩＬ−ＴＩＦ）としても知られるインターロイキン−２２（ＩＬ−２２）は糖タンパク質である。ＩＬ−２２は主に胸腺、脳、活性化Ｔ細胞と肥満細胞、レクチン刺激脾臓細胞、インターロイキン−２／インターロイキン−１２刺激ＮＫ細胞、及び腸、肝臓、胃、腎臓、肺、心臓、胸腺、及び脾臓を含むリポ多糖類（ＬＰＳ）刺激時の多くの臓器と組織に発現する。ヒトＩＬ−２２のｍＲＮＡは末梢Ｔ細胞と抗ＣＤ３抗体またはＣｏｎＡによって活性化されたＴ細胞に高発現しているため、Ｔ細胞はヒトＩＬ−２２の主な供給源である。活性化Ｔ細胞はほとんどがＣＤ４＋細胞である。
【０００３】
ＩＬ−２２前駆体は１７９アミノ酸残基を有し、成熟ＩＬ−２２タンパク質は１４６アミノ酸残基を有する。Ｄｕｍｏｕｔｉｅｒらは、マウスおよびヒトのＩＬ−２２遺伝子をクローニングし（Ｄｕｍｏｕｔｉｅｒ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．，  ｖｏｌ．  １６４，  ｐｐ．  １８１４−１８１９，  ２０００）、ＩＬ−２２に関連する２つの特許、米国特許第６，３５９，１１７  および６，２７４，７１０号を取得した。ＩＬ−２２は、ＩＬ−２２Ｒ１受容体およびＩＬ−１０Ｒ２受容体に結合することにより、その生物学的機能を達成する。ＩＬ−２２Ｒ１はＩＬ−２２に特異的な受容体であり、皮膚、腎臓、消化器系（膵臓、小腸、肝臓、大腸及び結腸）、呼吸器系（肺及び気管支）に発現している。
【０００４】
ＩＬ−２２は粘膜免疫において重要な役割を果たし、細菌性病原体の攻撃や退縮に対する初期宿主防御を媒介する。Ｚｈｅｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎａｔ．  Ｍｅｄ．，  ｖｏｌ．１４，  ｐｐ．  ２８２−２８９，  ２００８を参照。ＩＬ−２２は、上皮細胞からの抗菌ペプチドおよび炎症誘発性サイトカインの産生を促進する。また、腸管内の結腸上皮細胞の増殖と遊走を刺激する。Ｋｕｍａｒ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｃａｎｃｅｒ，  ｖｏｌ．４，  ｐｐ．５７−６５，  ２０１３を参照のこと。細菌感染時に、ＩＬ−２２ノックアウトマウスは消化管上皮再生障害、高い細菌量、および死亡率の増加を示した（Ｋｕｍａｒら、上掲）。同様に、ＩＬ−２２ノックアウトマウスにインフルエンザウイルスを感染させると、重度の体重減少と気管および気管支上皮細胞の再生障害が生じた。このように、ＩＬ−２２は、炎症反応における上皮再生における抗炎症保護的役割と同様に、微生物感染の抑制において炎症誘発的役割を果たす。
【０００５】
ＩＬ−２２は炎症反応における役割に加えて、癌とも関連づけられている（Ｈａｒｒｉｓｏｎ，  「ＩＬ−２２：  ｌｉｎｋｉｎｇ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｃａｎｃｅｒ」，  Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ，  ｖｏｌ．  １２，  ｐｐ．  ５０４−５０５，  ２０１３）。具体的には、ＬｉｍおよびＳａｖａｎ（「Ｔｈｅ  ｒｏｌｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  ＩＬ−２２／ＩＬ−２２Ｒ１  ａｘｉｓ  ｉｎ  ｃａｎｃｅｒ」  Ｃｙｔｏｋｉｎｅ  Ｇｒｏｗｔｈ  Ｆａｃｔｏｒ  Ｒｅｖ．，  ｖｏｌ．  ２５，  ｐｐ．  ２５７−２７１，  ２０１４）は、ＩＬ−２２シグナル伝達経路が生存促進シグナル伝達、細胞遊走、異形成および血管新生を含む多面的作用を介して粘膜免疫防御および組織再生を調整することを開示している。これらの機能は、侵攻性の癌によってハイジャックされて腫瘍増殖および転移を増強することができる。このように、ＩＬ−２２の癌における役割は複雑で状況特異的であり、腸、皮膚、肺臓、肝臓などの多くの一般的な癌を有する患者において、ＩＬ−２２の発現およびシグナル伝達の調節不全によって証明されている。
【０００６】
Ｌａｎｆｒａｎｃａ  ｅｔ  ａｌ．  （「ＩＬ−２２  ｐｒｏｍｏｔｅｓ  ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ  ｃａｎｃｅｒ  ｔｕｍｏｒｉｇｅｎｅｓｉｓ  ｔｈｒｏｕｇｈ  ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｓｔｅｍｎｅｓｓ  ａｎｄ  ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ  ｔｏ  ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ  ｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ」  Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．，  ｖｏｌ．  １９８，  １  Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ，  ６６．２２，  ２０１７）は、ＩＬ−２２が膵臓癌の開始、進行および確立に不可欠であることを開示している。Ｆｕｋｕｉ  ｅｔ  ａｌ．  （Ｂｒｉｔｉｓｈ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃａｎｃｅｒ，  ｖｏｌ．  １１１，  ｐｐ．  ７６３−７７１，  ２０１４）  は、癌関連線維芽細胞が産生するＩＬ−２２がＳＴＡＴ３およびＥＲＫシグナル伝達を介して胃癌細胞の浸潤を促進することを見出している。Ｋｏｂｏｌｄ  ｅｔ  ａｌ．  （Ｊ  Ｔｈｏｒａｃｉｃ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，  ｖｏｌ．  ８，  ｐｐ．  １０３２−１０４２，  ２０１３）は、ＩＬ−２２が小細胞および大細胞肺癌において優先的に発現されることを発見した。化学療法難治性肺癌細胞株におけるＩＬ−２２−Ｒ１発現およびシグナル伝達の増強は、ＩＬ−２２の腫瘍形成促進機能を示しており、より侵攻性の癌表現型に寄与している可能性がある。
【０００７】
ＩＬ−２２はヒト膵疾患の治療に報告されている。（例えば、米国特許第６，５５１，７９９号参照）。血清中の中性脂肪を減少させ、肥満を治療する際のＩＬ−２２の使用も報告されている。例えば、ＷＯ２００６／０７３５０８およびＣＮ１６７９９１８を参照のこと。抗ＩＬ−２２抗体は、炎症関連疾患の治療のために開発されている。米国特許第７，９０１，６８４号は、ヒトＩＬ−２２に特異的に結合するヒト抗体およびその抗原結合断片を開示している。抗体は、それらのＶHおよびＶLドメインの特異的アミノ酸配列によって定義される。抗体は、ＩＬ−２２活性のアンタゴニストとして作用し、それにより、炎症性障害、自己免疫疾患、アレルギー、敗血症性ショック、感染性障害、移植拒絶、癌、および他の免疫系障害を治療するための免疫反応を調節すると言われている。
【０００８】
米国特許第７，８１１，５６７号は、ヒトＩＬ−２２に特異的に結合する抗体またはその抗原結合断片を投与することによってＩＬ−２２関連障害を治療する手法を開示している。この抗体は、配列番号６０２、６０３、および６０４の特異的アミノ酸配列を有する３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）を含むＶHドメイン、ならびに配列番号６０５、６０６、および６０７の特異的アミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含むＶLドメインを有する。
【０００９】
米国特許第７，７３７，２５９号は、炎症性障害および自己免疫障害の診断および治療のための組成物を開示している。組成物は、ヒトＩＬ−２２に特異的に結合する抗体を含む。抗体は、（ａ）  ３Ｆ１１．３（ＡＴＣＣ  Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  Ｎｏ．  ＰＴＡ−７３１２）、ハイブリドーマ１１Ｈ４．４（ＡＴＣＣ  Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  Ｎｏ．  ＰＴＡ−７３１５）、およびハイブリドーマ８Ｅ１１．９（ＡＴＣＣ  Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  Ｎｏ．  ＰＴＡ−７３１９）から選択されたハイブリドーマによって生成された抗体、（ｂ）  （ａ）の抗体の親和性成熟形態、（ｃ）  （ａ）または（ｂ）の抗体の抗原結合断片、または（ｄ）  （ａ）、（ｂ）または（ｃ）の抗体のヒト化形態である。
【００１０】
ＷＯ  ２００５／０００８９７は、ＩＬ−２２に特異的に結合する単離された抗体およびその抗原結合断片を開示している。抗体または断片は、ＩＬ−２２レセプター（ＩＬ−２２Ｒ）およびインターロイキン−１０レセプター２（ＩＬ−１０Ｒ２）を含む複合体へのＩＬ−２２の結合を減少させることができる。抗体またはその抗原結合断片はまた、ＩＬ−２２とＩＬ−２２受容体との間の直接的な相互作用を減少させ得る。
【００１１】
これらの抗体は、ヒトにおける疾患または障害の治療のためのヒトＩＬ−２２への結合のために開発された。しかし、マウスＩＬ−２２のような非ヒト哺乳類ＩＬ−２２へのそれらの結合は、測定または研究されなかった。ヒトＩＬ−２２に結合するためにヒトで使用されることを意図した抗体は、その安全性と有効性を評価するために、まず動物で試験されなければならない。動物試験がヒトにおける安全性と有効性を予測できることを保証するために、抗体は理想的には、ヒトＩＬ−２２と少なくとも被験動物のＩＬ−２２の両方に対して同様の高い結合親和性を有するべきである。
【００１２】
本発明は、高結合親和性でヒトおよびマウスＩＬ−２２の両方に結合することができ、かつヒトおよびマウスの両方の生物学的系において同じ下流の生物学的効果を引き起こすために使用され得る抗ＩＬ−２２抗体およびそれらの断片を提供する。
【００１３】
（開示の概要）
一態様において、本発明は、
ＳＡＳＳＳＶＳＸ1ＭＨ（配列番号１）から選択されるアミノ酸配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、Ｘ2ＴＸ3ＫＬＸ4Ｓ（配列番号２）から選択されるアミノ酸配列を有する軽鎖ＣＤＲ２、およびＱＱＷＳＳＮＰＹＩＴ（配列番号３）のアミノ酸配列を有する軽鎖ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、ならびに
ＧＹＩＦＸ5ＳＹＷＩＨ（配列番号４）から選択されるアミノ酸配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＲＩＹＰＧＴＧＸ6ＴＹＹＮＸ7ＫＦＫＧ（配列番号５）から選択されるアミノ酸配列を有する重鎖ＣＤＲ２、およびＳＹＸ8Ｘ9ＳＶＸ10Ｙ（配列番号６）から選択されるアミノ酸配列を有する重鎖ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域を含み、
Ｘ1はＹまたはＫであり、Ｘ2はＥまたはＫであり、Ｘ3はＳまたはＲであり、Ｘ4はＡまたはＬであり、Ｘ5はＴまたはＲであり、Ｘ6はＮまたはＲであり、Ｘ7はＥまたはＲであり、Ｘ8はＤまたはＭであり、Ｘ9はＳまたはＹであり、Ｘ10はＡまたはＧである、
抗ＩＬ−２２抗体又は抗体断片を提供する。
【００１４】
前記の実施態様において、軽鎖可変領域が配列番号７〜１２から選択されるアミノ酸配列を有してもよく、重鎖可変領域が配列番号１３〜１８から選択されるアミノ酸配列を有する。
【００１５】
前記の実施態様のいずれか１つにおいて、抗体または抗体断片が以下から選択され得る：
配列番号７のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域および配列番号１３のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域を含む抗体または抗体断片；
配列番号１０のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域および配列番号１３のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域を含む抗体または抗体断片；
配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域および配列番号１４のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域を含む抗体または抗体断片；
配列番号８のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域および配列番号１５のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域を含む抗体または抗体断片；
配列番号９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域および配列番号１５のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域を含む抗体または抗体断片；
配列番号１０のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域および配列番号１５のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域を含む抗体または抗体断片；
配列番号８のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域および配列番号１６のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域を含む抗体または抗体断片；
配列番号７のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域および配列番号１７のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域を含む抗体または抗体断片；
配列番号８のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域および配列番号１７のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域を含む抗体または抗体断片；ならびに
配列番号１２のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域および配列番号１８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域を含む抗体または抗体断片。
【００１６】
前記の実施態様のいずれか１つにおいて、抗体または抗体断片がヒトＩＬ−２２および哺乳動物非ヒトＩＬ−２２に結合することができる。
【００１７】
前記の実施態様において、哺乳動物ＩＬ−２２がマウスＩＬ−２２であってもよい。
【００１８】
前２つの実施態様のいずれか１つにおいて、抗体または抗体断片が、互いの±２０％、±１５％、±１０％または±５％以内の親和性でヒトＩＬ−２２および哺乳動物ＩＬ−２２に結合してもよい。
【００１９】
前記の実施態様のいずれか１つにおいて、抗体または抗体断片がＳｔａｔ３のリン酸化を阻害することができる。
【００２０】
前記の実施態様のいずれか１つにおいて、抗体または抗体断片がＩＬ−２２誘導性サイトカイン産生を阻害することができる。
【００２１】
前記の実施態様のいずれか１つにおいて、抗体または抗体断片が、少なくとも１つの動物またはヒトにおける免疫応答を阻害することが可能である。
【００２２】
ひとつの前の実施態様において、少なくとも１つの動物が哺乳動物を含む。
【００２３】
前の２つの実施態様のいずれか１つにおいて、哺乳動物がマウスであり得る。
【００２４】
前記の実施態様のいずれか１つにおいて、抗ＩＬ−２２抗体または抗体断片がヒト化され得る。
【００２５】
前記の実施態様のいずれか１つにおいて、抗ＩＬ−２２抗体または抗体断片が改変されたＦｃ領域を含み得る。
【００２６】
別の態様において、本発明は、前記実施態様のいずれか１つの抗ＩＬ−２２抗体または抗体断片、およびオリゴ糖、非タンパク質性部分、治療薬、予防薬および診断薬から選択される少なくとも１つの部分を含む改変された抗ＩＬ−２２抗体または抗体断片を提供する。
【００２７】
ひとつの前の実施態様において、少なくとも１つの部分がオリゴ糖、少なくとも１つの非タンパク質性部分、治療薬、予防薬および診断薬から選択され得る。
【００２８】
ひとつの前の実施態様において、少なくとも１つの非タンパク質性部分が、水溶性ポリマーから選択され得る。
【００２９】
前の２つの実施態様のいずれか１つにおいて、改変された抗ＩＬ−２２抗体または抗体断片が、治療薬、予防薬および診断薬から選択される２つの薬剤を含み得る。
【００３０】
前の３つの実施態様のいずれか１つにおいて、抗体または抗体断片および治療薬、予防薬または診断薬がリンカー分子に共有結合され得る。
【００３１】
別の態様において、本発明は、前記の実施態様のいずれか１つの抗体または抗体断片、または改変された抗ＩＬ−２２抗体または抗体断片および薬学的に許容可能な担体を含む医薬組成物を提供する。
【００３２】
前の実施態様において、医薬組成物が、さらに少なくとも１つの追加の賦形剤を含み得る。
【００３３】
前の２つの実施態様のいずれか１つにおいて、医薬組成物が、少なくとも１つの追加治療薬、および／または薬学的に許容可能な防腐剤をさらに含み得る。
【００３４】
別の態様において、本発明は、免疫関連疾患または癌を治療する方法であって、前記の実施態様のいずれか１つの抗体または抗体断片、改変された抗ＩＬ−２２抗体または抗体断片、または医薬組成物を対象に投与する工程を含む方法を提供する。
【００３５】
別の態様において、本発明は、前記の実施態様のいずれか１つの抗体もしくは抗体断片、改変された抗ＩＬ−２２抗体もしくは抗体断片、または医薬組成物；および抗体もしくは抗体断片、改変された抗体もしくは抗体断片、または医薬組成物を診断もしくは治療のために使用するための使用説明書を含む診断または治療のためのキットを提供する。
【００３６】
別の態様において、本発明は、配列番号７〜１２のアミノ酸配列の１つと９０％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域；および  配列番号１３〜１８のアミノ酸配列のうちの１つと９０％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する重鎖可変領域を含む抗体または抗体断片を提供する。
【００３７】
前の実施態様において、前記軽鎖可変領域は、配列番号７−１２から選択されるアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域の相補性決定領域と同一の３つの相補性決定領域を有することができる。
【００３８】
前の２つの実施態様のいずれか１つにおいて、重鎖可変領域が、配列番号１３〜１８から選択されるアミノ酸配列を有する重鎖可変領域の相補性決定領域と同一である３つの相補性決定領域を有することができる。
【００３９】
前の３つの実施態様のいずれか１つにおいて、軽鎖および重鎖が、少なくとも９５％の配列同一性、少なくとも９８％の配列同一性、または少なくとも９９％の配列同一性を有することができる。
【図面の簡単な説明】
【００４０】
【図１】図１は、本発明の抗体を進化させるための親抗体として使用されたヒトＩＬ−２２（ｈｕｍ１０）に対するヒト化モノクローナル抗体の軽鎖および重鎖の構造を示す。ＣＤＲは、軽鎖及び重鎖の開始位置および終了位置を標識した図において、より厚い部分として示されている。本発明の抗体を提供するために親抗体になされたＣＤＲ中の変異およびそれらの位置のいくつかは、ＣＤＲ内で表示される。
【図２】図２Ａ〜２Ｂは、本発明のｈｕｍ１０および抗体の軽鎖の配列アラインメントを示す。
【図３】図３Ａ〜３Ｂは、本発明のｈｕｍ１０および抗体の重鎖の配列アラインメントを示す。
【図４】図４は、ドデシル硫酸ナトリウムポリアクリルアミドゲル電気泳動（ＳＤＳ−ＰＡＧＥ）ゲル上のある種の精製抗体を、非還元条件下（左側）では単一バンドとして、還元条件下（右側）では重バンドと軽鎖バンドの２本をそれぞれ示しており、抗体の純度が実証されている。
【図５】図５Ａ〜５Ｃは、精製された抗体（ＣＰＳ０２およびＣＰＳ０９）のサイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）分析によって得られた単一ピークを、対照標準ヒトＩｇＧ抗体のＳＥＣ分析と比較して示す。
【図６】図６は、ヒトおよびマウスＩＬ−２２、ならびにその他関連抗原に対する、本発明の抗体の特異性を示す。
【図７Ａ】図７Ａは、本発明の抗体を用いて、ＨｅｐＧ２細胞におけるヒトＩＬ−２２の抑制によって引き起こされるＳｔａｔ３タンパク質の低下したレベルリン酸化を示す。
【図７Ｂ】図７Ｂは、本発明の抗体を用いて、ＨｅｐＧ２細胞におけるマウスＩＬ−２２の抑制によって引き起こされるＳｔａｔ３タンパク質の低下したレベルリン酸化を示す。
【図８】図８は、本発明の抗体によるＨＴ２９細胞中のＣＸＣＬ１タンパク質発現の抑制を示す。
【図９】図９Ａ〜９Ｂは、様々な注射用量後の経時的なマウスにおける抗体ＣＰＳ０２の血漿中濃度を示す。
【図１０】図１０Ａ〜１０Ｂは、様々な注射用量後の経時的なマウスにおける抗体ＣＰＳ０９の血漿中濃度を示す。
【図１１】図１１は、本発明の抗体によるマウスにおけるＩＬ−２２誘導急性期反応の阻害を示す。
【図１２】図１２は、イミキモドによって誘導されたマウス乾癬モデルを治療するための研究デザインを示す。
【図１３】図１３は、図１２に示される研究デザインに従う投与期間中の投与マウスの体重の変化を示す。
【図１４】図１４は、図１２に示される研究デザインに従う投与期間中の投与マウスの耳の厚さの変化を示す。
【図１５】図１５は、図１２に示される研究デザインに従う投与期間中の投与マウスの皮膚紅斑スコアの変化を示す。
【図１６】図１６は、図１２に示される研究デザインに従う投与期間中の投与マウスの皮膚鱗屑スコアの変化を示す。
【図１７】図１７は、図１２に示される研究デザインに従う投与期間中の投与マウスの皮膚厚スコアの変化を示す。
【図１８】図１８は、図１２に示される研究デザインに従う投与期間中の投与マウスの総皮膚スコア（全体的な皮膚状態）の変化を示す。
【００４１】
定義
本明細書において提供される実施例の理解を容易にするため、いくつかの高頻度に使用される用語を本明細書において定義する。
【００４２】
計測される量との関連で、本明細書において使用される用語「約」は、計測を行い、計測の目的および使用される計測装置の精度に見合うあるレベルのケアを実行する当業者により予測されるその計測される量の通常の変動を指す。特に示されない限り、「約」は、提供される値の＋／−１０％の変動を指す。
【００４３】
本明細書において使用される用語「親和性」または「結合親和性」は、分子（例えば、抗体）と、その結合パートナー（例えば、抗原）との間の非共有結合相互作用の総計の強度を指す。特に示されない限り、本明細書において使用される「結合親和性」は、結合ペア（例えば、抗体および抗原）のメンバー間の１：１の相互作用を反映する固有の結合親和性を指す。分子ＸのそのパートナーＹについての親和性は、一般に、解離定数（Ｋｄ）により表すことができる。親和性は、当分野において公知の一般的方法、例として、本明細書に記載のものにより計測することができる。
【００４４】
本明細書において使用される用語「アミノ酸」は、アミノ基（−ＮＨ2）およびカルボキシル基（−ＣＯＯＨ）を遊離基として、あるいは縮合後にペプチド結合の一部として含有する任意の有機化合物を指す。「２０個の天然に存在するアミノ酸」は当分野において理解され、天然タンパク質のブロックを構成する、アラニン（ａｌａまたはＡ）、アルギニン（ａｒｇまたはＲ）、アスパラギン（ａｓｎまたはＮ）、アスパラギン酸（ａｓｐまたはＤ）、システイン（ｃｙｓまたはＣ）、グルタミン酸（ｇｌｕまたはＥ）、グルタミン（ｇｉｎまたはＱ）、グリシン（ｇｌｙまたはＧ）、ヒスチジン（ｈｉｓまたはＨ）、イソロイシン（ｉｌｅまたはＩ）、ロイシン（ｌｅｕまたはＬ）、リジン（ｌｙｓまたはＫ）、メチオニン（ｍｅｔまたはＭ）、フェニルアラニン（ｐｈｅまたはＦ）、プロリン（ｐｒｏまたはＰ）、セリン（ｓｅｒまたはＳ）、スレオニン（ｔｈｒまたはＴ）、トリプトファン（ｔｉｐまたはＷ）、チロシン（ｔｙｒまたはＹ）、およびバリン（ｖａｌまたはＶ）を指す。
【００４５】
本明細書において使用される用語「抗体」は、インタクト免疫グロブリン分子、およびＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）2、Ｆｖ、および一本鎖抗体（ＳＣＡまたはｓｃＦｖ）断片のような免疫グロブリン分子の断片であって、抗原のエピトープに結合可能なものを指す。由来する抗体の抗原（例えば、ポリペプチド抗原）に選択的に結合するいくらかの能力を保持するこれらの抗体断片は、当分野において周知の方法を使用して、更に下記するように作製することができる。本発明の実施に有用な抗体はＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＭ、ＩｇＡ１、ＩｇＡ２、ｓＩｇＡ、ＩｇＤまたはＩｇＥであってもよい。抗体は、分取量の抗原を免疫親和性クロマトグラフィーにより単離するために使用することができる。このような抗体の種々の他の使用は、疾患（例えば、新生物形成）を診断および／または病期分類するため、ならびに疾患、例えば、新生物形成、自己免疫疾患、ＡＩＤＳ、心血管疾患、感染症などを治療するための治療用途のためのものである。キメラヒト様ヒト化または完全ヒト抗体は、ヒト患者への投与に特に有用である。
【００４６】
Ｆａｂ断片は、抗体分子の一価抗原結合断片からなり、酵素パパインによる完全抗体分子の消化により、インタクト軽鎖および重鎖の一部からなる断片を生じさせて産生することができる。
【００４７】
抗体分子のＦａｂ’断片は、完全抗体分子をペプシンにより処理し、次いで還元してインタクト軽鎖および重鎖の一部からなる分子を生じさせることにより得ることができる。２つのＦａｂ’断片は、この様式で処理される抗体分子ごとに得られる。
【００４８】
抗体の（Ｆａｂ’）２断片は、完全抗体分子を酵素ペプシンにより後続の還元なしで処理することにより得ることができる。（Ｆａｂ’）2断片は、２つのジスルフィド結合により一緒に保持される２つのＦａｂ’断片の二量体である。
【００４９】
Ｆｖ断片は、２つの鎖として発現される軽鎖の可変領域および重鎖の可変領域を含有する遺伝子操作された断片として定義される。
【００５０】
一本鎖抗体（「ＳＣＡ」またはｓｃＦｖ）は、軽鎖の可変領域および重鎖の可変領域を含み、適切な可撓性のあるポリペプチドライナーによって連結され、アミノ酸および／またはカルボキシル末端にさらなるアミノ酸配列を含み得る遺伝子操作された一本鎖分子である。例えば、単一鎖抗体は、コードするポリヌクレオチドに連結するためのテザーセグメントを含み得る。機能的な一本鎖抗体は、一般に、特異的標的分子またはエピトープへの結合のために全長抗体の特性を保持するように、軽鎖の可変領域の充分な部分と、重鎖の可変領域の充分な領域と、を含む。
【００５１】
本明細書において使用される用語「抗体断片」は、インタクト抗体が結合する抗原に結合するインタクト抗体の一部を含むインタクト抗体以外の分子を指す。抗体断片の例としては、限定されるものではないが、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆａｂ’−ＳＨ、Ｆ（ａｂ’）2；ダイアボディ；直鎖抗体；一価抗体；一本鎖抗体分子（例えば、ｓｃＦｖ）が挙げられる。由来する抗体の抗原（例えば、ポリペプチド抗原）に選択的に結合するいくらかの能力を保持するこれらの抗体断片は、当分野において周知の方法を使用して作製することができる。
【００５２】
本明細書において用語「抗ＩＬ−２２抗体」、抗ＩＬ−２２抗体断片および「ＩＬ−２２に結合する抗体または抗体断片」は交換可能に使用され、抗体または抗体断片がＩＬ−２２の標的化における診断、予防および／または治療薬として有用であるように十分な親和性でＩＬ−２２タンパク質の少なくとも１つのエピトープに結合し得る抗体または抗体断片を指す。一実施形態において、非関連非ＩＬ−２２タンパク質への抗ＩＬ−２２抗体または抗体断片の結合の程度は、ＥＬＩＳＡにより計測してＩＬ−２２への抗体または抗体断片の結合の約５％未満、または約１０％未満、または約２０％未満、または約５０％未満である。ある実施形態において、ＩＬ−２２に結合する抗体または抗体断片は、≦１μＭ、または≦１００ｎＭ、または≦１０ｎＭ、または≦１ｎＭ、または≦０．１ｎＭ、または≦０．０１ｎＭ、または≦０．００１ｎＭ（例えば、１０-8Ｍ以下、または１０-8Ｍ〜１０-13Ｍ、または１０-9Ｍ〜１０-13Ｍ）の解離定数（Ｋｄ）を有する。ある実施形態において、抗ＩＬ−２２抗体または抗体断片は、様々な種に由来するＩＬ−２２間で保存されるＩＬ−２２のエピトープに結合する。
【００５３】
本明細書中で使用される「関節炎」という用語は、関節の炎症を意味し、限定されるわけではないが、変形性関節症、痛風、感染関連関節炎、ライター症候群関節炎、およびリウマチ関節炎、乾癬関節炎、エリテマトーデス関連関節炎、脊椎関節炎、および強皮症関連関節炎などの自己免疫疾患に関連する関節炎を含む。「関節炎性炎症」という言葉は、関節炎に関連する炎症を意味する。
【００５４】
本明細書中で使用される用語「自己免疫障害」または「自己免疫」は、体自身の組織に対して体液性または細胞媒介性免疫応答が高まる任意の状態を意味する。「ＩＬ−２２媒介自己免疫障害」は、ＩＬ−２２活性によって引き起こされる、維持される、または増悪するあらゆる自己免疫障害である。用語「自己免疫性炎症」とは、自己免疫疾患に関連する炎症を意味する。
【００５５】
本明細書において使用される用語「結合」は、抗体の可変領域またはＦｖと、抗原との相互作用を指し、その相互作用は抗原上の特定の構造（例えば、抗原決定基またはエピトープ）の存在に依存する。例えば、抗体可変領域またはＦｖは、タンパク質全般ではなく特異的タンパク質構造を認識し、それに結合する。本明細書において使用される「特異的に結合すること（ｓｐｅｃｉｆｉｃａｌｌｙ  ｂｉｎｄｉｎｇ）」または「特異的に結合すること（ｂｉｎｄｉｎｇ  ｓｐｅｃｉｆｉｃａｌｌｙ）」は、抗体可変領域またはＦｖが、特定の抗原に、他のタンパク質よりも高頻度で急速に長い持続時間および／または大きな親和性で結合し、または会合することを意味する。例えば、抗体可変領域またはＦｖは、その抗原に、他の抗原に結合するよりも大きな親和性で、急速に、および／または長い持続時間、特異的に結合する。別の例では、抗体可変領域またはＦｖは、細胞表面タンパク質（抗原）に、それが関連タンパク質もしくは他の細胞表面タンパク質に、または多反応性天然抗体により（すなわち、ヒトにおいて天然に見出される種々の抗原に結合することが公知の天然存在抗体により）一般に認識される抗原に結合するよりもかなり大きな親和性で結合する。しかしながら、「特異的に結合する」は、必ずしも排他的結合または別の抗原の非検出結合を要求せず、これは、用語「選択的結合」を意味する。一例において、抗原への抗体可変領域またはＦｖ（または他の結合領域）の「特異的結合」は、抗体可変領域またはＦｖが、１００ｎＭ以下、例えば、５０ｎＭ以下、例えば、２０ｎＭ以下、１５ｎＭ以下、または１０ｎＭ以下、または５ｎＭ以下、２ｎＭ以下、または１ｎＭ以下の平衡定数（ＫＤ）で抗原に結合することを意味する。
【００５６】
本明細書において使用される用語「癌」および「癌性」は、典型的には、無秩序な細胞成長／増殖を特徴とする哺乳動物における生理学的病態を指し、または説明する。癌の例としては、限定されるものではないが、癌腫、リンパ腫（例えば、ホジキンおよび非ホジキンリンパ腫）、芽細胞腫、肉腫、および白血病が挙げられる。このような癌のより特定の例としては、扁平上皮癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、肺腺癌、肺扁平上皮癌、腹膜癌、肝細胞癌、消化管癌、膵臓癌、膠芽細胞腫、子宮頸癌、卵巣癌、肝臓癌、膀胱癌、ヘパトーマ、乳癌、結腸癌、結腸直腸癌、子宮内膜癌または子宮癌、唾液腺癌、腎臓癌、肝臓癌、前立腺癌、外陰癌、甲状腺癌、肝細胞腫、白血病および他のリンパ球増殖性疾患、ならびに種々のタイプの頭頸部癌が挙げられる。
【００５７】
本明細書において使用される用語「細胞増殖性障害」および「増殖性障害」は、ある程度の異常細胞増殖に関連する障害を指す。一実施形態において、細胞増殖性障害は、癌である。
【００５８】
本明細書において使用される用語「化学療法剤」は、癌の治療において有用な化合物を指す。化学療法剤の例としては、アルキル化剤、例えば、チオテパおよびシクロホスファミド（ＣＹＴＯＸＡＮ（登録商標））；スルホン酸アルキル、例えば、ブスルファン、イムプロスルファンおよびピポスルファン；アジリジン、例えば、ベンゾドパ、カルボクオン、メツレドパ（ｍｅｔｕｒｅｄｏｐａ）、およびウレドパ（ｕｒｅｄｏｐａ）；エチレンイミンおよびメチルアメラミン（ｍｅｔｈｙｌａｍｅｌａｍｉｎｅ）、例として、アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホラミド、トリエチレンチオホスホラミドおよびトリメチロメラミン（ｔｒｉｍｅｔｈｙｌｏｍｅｌａｍｉｎｅ）；アセトゲニン（特に、ブラタシンおよびブラタシノン）；デルタ−９−テトラヒドロカンナビノール（ドロナビノール、ＭＡＲＩＮＯＬ（登録商標））；ベータ−ラパコン；ラパコール；コルヒチン；ベツリン酸；カンプトテシン（例として、合成類似体トポテカン（ＨＹＣＡＭＴＩＮ（登録商標））、ＣＰＴ−１１（イリノテカン、ＣＡＭＰＴＯＳＡＲ（登録商標））、アセチルカンプトテシン、スコポレクチン（ｓｃｏｐｏｌｅｃｔｉｎ）、および９−アミノカンプトテシン）；ブリオスタチン；カリスタチン；ＣＣ−１０６５（そのアドゼレシン、カルゼレシンおよびビゼレシン合成類似体を含む）；ポドフィロトキシン；ポドフィリン酸；テニポシド；クリプトフィシン（特に、クリプトフィシン１およびクリプトフィシン８）；ドラスタチン；デュオカルマイシン（合成類似体のＫＷ−２１８９およびＣＢ１−ＴＭ１を含む）；エレウテロビン；パンクラチスタチン；サルコジクチイン；スポンギスタチン；ナイトロジェンマスタード、例えば、クロラムブシル、クロルナファジン、クロロホスファミド、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、メクロレタミンオキシド塩酸塩、メルファラン、ノブエンビキン、フェネステリン、プレドニムスチン、トロホスファミド、ウラシルマスタード；ニトロソウレア、例えば、カルムスチン、クロロゾトシン、ホテムスチン、ロムスチン、ニムスチン、およびラニムヌスチン（ｒａｎｉｍｎｕｓｔｉｎｅ）；抗生物質、例えば、エンジイン抗生物質（例えば、カリケアマイシン、特に、カリケアマイシンガンマＩＩおよびカリケアマイシンオメガＩＩ（例えば、Ｎｉｃｏｌａｏｕ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔｌ．Ｅｄ．Ｅｎｇｌ．，３３：１８３−１８６（１９９４）参照）；ＣＤＰ３２３、経口アルファ−４インテグリン阻害剤；ジネマイシン、例として、ジネマイシンＡ；エスペラマイシン；ならびにネオカルジノスタチン発色団および関連する色素タンパク質エンジイン抗生物質発色団）、アクラシノマイシン、アクチノマイシン、アウスラマイシン（ａｕｔｈｒａｍｙｃｉｎ）、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カラビシン（ｃａｒａｂｉｃｉｎ）、カミノマイシン（ｃａｍｉｎｏｍｙｃｉｎ）、カルジノフィリン、クロモマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン、６−ジアゾ−５−オキソ−Ｌ−ノルロイシン、ドキソルビシン（例として、ＡＤＲＩＡＭＹＣＩＮ（登録商標）、モルホリノ−ド��ソルビシン、シアノモルホリノ−ドキソルビシン、２−ピロリノ−ドキソルビシン、ドキソルビシンＨＣ１リポソーム注射剤（ＤＯＸＩＬ（登録商標）、リポソームドキソルビシンＴＬＣ  Ｄ−９９（ＭＹＯＣＥＴ（登録商標））、ｐｅｇ化リポソームドキソルビシン（ＣＡＥＬＹＸ（登録商標））、およびデオキシドキソルビシン）、エピルビシン、エソルビシン、イダルビシン、マルセロマイシン、マイトマイシン、例えば、マイトマイシンＣ、ミコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン、ペプロマイシン、ポルフィロマイシン、ピューロマイシン、クエラマイシン（ｑｕｅｌａｍｙｃｉｎ）、ロドルビシン（ｒｏｄｏｒｕｂｉｃｉｎ）、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメックス、ジノスタチン、ゾルビシン；代謝拮抗物質、例えば、メトトレキサート、ゲムシタビン（ＧＥＭＺＡＲ（登録商標））、テガフル（ＵＦＴＯＲＡＬ（登録商標））、カペシタビン（ＸＥＬＯＤＡ（登録商標））、エポチロン、および５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）；葉酸類似体、例えば、デノプテリン、メトトレキサート、プテロプテリン、トリメトレキサート；プリン類似体、例えば、フルダラビン、６−メルカプトプリン、チアミプリン、チオグアニン；ピリミジン類似体、例えば、アンシタビン、アザシチジン、６−アザウリジン、カルモフル、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロクスウリジン；アンドロゲン、例えば、カルステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトン；抗副腎剤、例えば、アミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタン；葉酸補給剤、例えば、フロリン酸（ｆｒｏｌｉｎｉｃ  ａｃｉｄ）；アセグラトン；アルドホスファミドグリコシド；アミノレブリン酸；エニルウラシル；アムサクリン；ベストラブシル；ビサントレン；エダトラキサート；デフォファミン；デメコルシン；ジアジクオン；エルフォルミチン（ｅｌｆｏｒｍｉｔｈｉｎｅ）；酢酸エリプチニウム；エポチロン；エトグルシド；硝酸ガリウム；ヒドロキシウレア；レンチナン；ロニダイニン；メイタンシノイド、例えば、メイタンシンおよびアンサミトシン；ミトグアゾン；ミトキサントロン；モピダンモール；ニトラエリン；ペントスタチン；フェナメット；ピラルビシン；ロソキサントロン；２−エチルヒドラジド；プロカルバジン；ＰＳＫ（登録商標）多糖複合体（ＪＨＳ  Ｎａｔｕｒａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ，Ｅｕｇｅｎｅ，Ｏｒｅｇ．）；ラゾキサン；リゾキシン；シゾフィラン；スピロゲルマニウム；テヌアゾン酸；トリアジクオン；２，２’，２’’−トリクロロトリエチルアミン；トリコテセン（特に、Ｔ−２毒素、ベラクリンＡ、ロリジンＡおよびアングイジン）；ウレタン；ビンデシン（ＥＬＤＩＳＩＮＥ（登録商標）、ＦＩＬＤＥＳＩＮ（登録商標））；ダカルバジン；マンノムスチン；ミトブロニトール；ミトラクトール；ピポブロマン；ガシトシン；アラビノシド（「Ａｒａ−Ｃ」）；チオテパ；タキソイド、例えば、パクリタキセル（ＴＡＸＯＬ（登録商標））、パクリタキセルのアルブミンエンジニアリングナノ粒子配合物（ＡＢＲＡＸＡＮＥ（商標））、およびドセタキセル（ＴＡＸＯＴＥＲＥ（登録商標））；クロランブシル（ｃｈｌｏｒａｎｂｕｃｉｌ）；６−チオグアニン；メルカプトプリン；メトトレキサート；白金類似体、例えば、シスプラチン、オキサリプラチン（例えば、ＥＬＯＸＡＴＩＮ（登録商標））、およびカルボプラチン；チューブリン重合の微小管形成を妨害するビンカ、例として、ビンブラスチン（ＶＥＬＢＡＮ（登録商標））、ビンクリスチン（ＯＮＣＯＶＩＮ（登録商標））、ビンデシン（ＥＬＤＩＳＩＮＥ（登録商標）、ＦＩＬＤＥＳＩＮ（登録商標））、およびビノレルビン（ＮＡＶＥＬＢＩＮＥ（登録商標））；エトポシド（ＶＰ−１６）；イホスファミド；ミトキサントロン；ロイコボリン；ノバントロン；エダトレキサート；ダウノマイシン；アミノプテリン；イバンドロネート；トポイソメラーゼ阻害剤ＲＦＳ２０００；ジフルオロメチルオルニチン（ＤＭＦ（登録商標））；レチノイド、例えば、レチノイン酸、例として、ベキサロテン（ＴＡＲＧＲＥＴＩＮ（登録商標））；；ビスホスホネート、例えば、クロドロネート（例えば、ＢＯＮＥＦＯＳ（登録商標）またはＯＳＴＡＣ（登録商標））、エチドロネート（ＤＩＤＲＯＣＡＬ（登録商標））、ＮＥ−５８０９５、ゾレドロン酸／ゾレドロネート（ＺＯＭＥＴＡ（登録商標））、アレンドロネート（ＦＯＳＡＭＡＸ（登録商標））、パミドロネート（ＡＲＥＤＩＡ（登録商標））、チルドロネート（ＳＫＥＬＩＤ（登録商標））、またはリセドロネート（ＡＣＴＯＮＥＬ（登録商標））；トロキサシタビン（１，３−ジオキソランヌクレオシドシトシン類似体）；アンチセンスオリゴヌクレオチド、特に、異常な細胞増殖に関与するシグナリング経路における遺伝子、例えば、ＰＫＣ−アルファ、Ｒａｆ、Ｈ−Ｒａｓ、および上皮成長因子受容体（ＥＧＦ−Ｒ）などの発現を阻害するもの；ワクチン、例えば、ＴＨＥＲＡＴＯＰＥ（登録商標）ワクチンおよび遺伝子療法ワクチン、例えば、ＡＬＬＯＶＥＣＴＩＮ（登録商標）ワクチン、ＬＥＵＶＥＣＴＩＮ（登録商標）ワクチン、およびＶＡＸＩＤ（登録商標）ワクチン；トポイソメラーゼ１阻害剤（例えば、ＬＵＲＴＯＴＥＣＡＮ（登録商標））；ｒｍＲＨ（例えば、ＡＢＡＲＥＬＩＸ（登録商標））；ＢＡＹ４３９００６（ソラフェニブ；Ｂａｙｅｒ）；ＳＵ−１１２４８（スニチニブ、ＳＵＴＥＮＴ（登録商標）、Ｐｆｉｚｅｒ）；ペリフォシン、ＣＯＸ−２阻害剤（例えば、セレコキシブまたはエトリコキシブ）、プロテオソーム阻害剤（例えば、ＰＳ３４１）；ボルテゾミブ（ＶＥＬＣＡＤＥ（登録商標））；ＣＣＩ−７７９；チピファルニブ（Ｒ１１５７７）；オラフェニブ、ＡＢＴ５１０；Ｂｃｌ−２阻害剤、例えば、オブリメルセンナトリウム（ＧＥＮＡＳＥＮＳＥ（登録商標））；ピキサントロン；ＥＧＦＲ阻害剤（以下の定義参照）；チロシンキナーゼ阻害剤（以下の定義参照）；セリン−トレオニンキナーゼ阻害剤、例えば、ラパマイシン（シロリムス、ＲＡＰＡＭＵＮＥ（登録商標））；ファルネシルトランスフェラーゼ阻害剤、例えば、ロナファルニブ（ＳＣＨ６６３６、ＳＡＲＡＳＡＲ（商標））；ならびに上記のいずれかの薬学的に許容可能な塩、酸または誘導体；ならびに上記の２つ以上の組合せ、例えば、シクロホスファミド、ドキソルビシン、ビンクリスチン、およびプレドニゾロンの併用療法の省略形であるＣＨＯＰ；および５−ＦＵおよびロイコボリンと組み合わせたオキサリプラチン（ＥＬＯＸＡＴＩＮ（商標））を用いる治療レジメンの省略形であるＦＯＬＦＯＸなどが挙げられる。
【００５９】
本明細書において使用される用語「キメラ」抗体は、重鎖および／または軽鎖の一部が特定の資源または種に由来する一方、重鎖および／または軽鎖の残部が異なる資源または種に由来する抗体を指す。
【００６０】
本明細書中で使用される用語「長期（ｃｈｒｏｎｉｃ）」投与とは、初期治療効果を長期間維持するように、急性モードとは対照的に、連続モードでの薬剤の投与を意味する。「間欠」投与は、中断なしで連続的に行われるのではなく、むしろ本来は周期的である治療である。
【００６１】
本明細書中で使用される用語「慢性炎症」とは、炎症の原因が持続し、除去することが困難または不可能である炎症をいう。
【００６２】
本明細書において使用される用語「構成的」は、例えば、ＩＬ−２２活性に適用される場合、リガンドの存在にも他の活性化分子の存在にも依存的でない連続的なシグナリング活性を指す。ＩＬ−２２活性のいくつかは構成的であり得、または活性は、他の分子（例えば、リガンド）の結合によりさらに活性化され得る。ＩＬ−２２活性の活性化をもたらす細胞イベントは、当業者の間で周知である。例えば、活性化としては、より高次の受容体複合体へのオリゴマー化、例えば、二量体化、三量体化などを挙げることができる。複合体は、単一種のタンパク質、すなわち、ホモ複合体を含み得る。あるいは、複合体は、少なくとも２つの異なるタンパク質種、すなわち、ヘテロ複合体を含み得る。複合体形成は、例えば、細胞の表面上の受容体の正常または突然変異形態の過剰発現により引き起こされ得る。複合体形成は、受容体中の１つ以上の特異的突然変異によっても引き起こされ得る。
【００６３】
本明細書において使用される用語「検出可能に標識する」は、物理的または化学的手段による直接または間接的のいずれかの検出または計測が試料中のＩＬ−２２の存在を示す任意の物質を指す。検出可能な標識は、それ自体で検出可能であり得（例えば、放射性同位元素標識または蛍光標識）、または酵素標識の場合、基質化合物または組成物の化学的変化を触媒し、検出可能な生成物をもたらし得る。有用な検出可能標識の代表的な例としては、限定されるものではないが、以下のもの：光吸収、蛍光、反射、光散乱、燐光、または発光特性に基づき直接または間接的に検出可能な分子またはイオン；放射性により検出可能な分子またはイオン；核磁気共鳴または常磁性により検出可能な分子またはイオンが挙げられる。光吸収または蛍光に基づき間接的に検出可能な分子の群には、例えば、非光吸収から光吸収分子への、または非蛍光から蛍光分子への適切な基質の変換を引き起こす種々の酵素が含まれる。
【００６４】
本明細書中で使用される用語「ダイアボディ」は、２つの抗原結合部位を有する小抗体断片を指し、それら断片は同じポリペプチド鎖（ＶH−ＶL）中の軽鎖可変領域（ＶL）に連結された重鎖可変領域（ＶH）を含む。同一鎖上の２つのドメイン間の対合を許容し得ないほど短鎖のリンカーを使用することにより、ドメインを別の鎖の相補的ドメインと強制的に対合させ、それが２つの抗原結合部位を作出する。ダイアボディは二価または二重特異的であり得る。ダイアボディは、例えば、ＥＰ  ４０４，０９７；  ＷＯ  １９９３／００１１６１；  Ｈｕｄｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．  Ｎａｔ．  Ｍｅｄ．，  ｖｏｌ．９，  ｐｐ．１２９−１３４，  ２００３；  およびＨｏｌｌｉｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  ＵＳＡ  ｖｏｌ．  ９０，  ｐｐ．  ６４４４−６４４８  １９９３においてより完全に記載されている。トリアボディとテトラボディもＨｕｄｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．  Ｎａｔ．  Ｍｅｄ．，  ｖｏｌ．９，  ｐｐ．  １２９−１３４，  ２００３に記載されている。
【００６５】
本明細書において使用される用語「診断」は、疾患または障害に対する対象の感受性の測定、対象が疾患または障害を現在罹患しているか否かに関する決定、疾患または障害を罹患している対象の予後診断（例えば、前転移または転移癌性状態、癌の病期、または治療法に対する癌の応答性の同定）、および治療方針（例えば、治療法の効果または効力に関する情報を提供するための対象病態のモニタリング）を指す。一部の実施形態において、本発明の診断方法は、早期癌の検出において特に有用である。
【００６６】
本明細書において使用される用語「診断剤」は、直接または間接的に検出することができ、診断目的のために使用される分子を指す。診断剤は、対象または試料に投与することができる。診断剤は、それ自体で提供することができ、またはビヒクル、例えば、条件的に活性な抗体にコンジュゲートさせることができる。
【００６７】
本明細書中で使用される抗ＩＬ−２２抗体または抗体断片の用語「有効量」とは、任意の医学的処置に適用可能な妥当な利益／リスク比率で、疾患または病気を治療するための抗体または抗体断片の充分な量を意味する。しかしながら、本発明の抗体または抗体断片および組成物の総１日使用量は、正当な医学的判断の範囲内で担当医により決定されることが理解される。任意の特定の患者に対する特異的な治療的有効量投与レベルは、治療される障害および障害の重症度；使用される特異的抗体または抗体断片の活性；使用される特異的組成、患者の年齢、体重、全身の健康状態、性別および食事；投与時刻、投与経路、および使用される特異的抗体または抗体断片の排出速度；治療期間；使用される特異的抗体に使用される薬物、または使用される特異的抗体と併用してまたは付随して使用される薬物；医学分野において周知の因子などを含む様々な因子に依存するであろう。例えば、所望の治療効果を達成するために要求されるよりも低いレベルにおいて化合物の用量を開始すること、および所望の効果が達成されるまで投与量を徐々に増加させることは当分野の技能の範囲内で周知である。
【００６８】
本明細書において使用される用語「エフェクター機能」は、抗体のＦｃ領域に起因し、抗体アイソタイプにより変動する生物学的活性を指す。抗体エフェクター機能の例としては、Ｃ１ｑ結合および補体依存性細胞毒性（ＣＤＣ）；Ｆｃ受容体結合；抗体依存性細胞媒介性細胞毒性（ＡＤＣＣ）、食作用、細胞表面受容体（例えば、Ｂ細胞受容体）の下方調節；ならびにＢ細胞活性化が挙げられる。
【００６９】
本明細書において使用される用語「Ｆｃ領域」は、定常領域の少なくとも一部を含有する免疫グロブリン重鎖のＣ末端領域を定義するために使用される。この用語は、天然配列Ｆｃ領域およびバリアントＦｃ領域を含む。一実施形態において、ヒトＩｇＧ重鎖Ｆｃ領域は、Ｃｙｓ２２６から、またはＰｒｏ２３０から重鎖のカルボキシル末端へと伸長する。しかしながら、Ｆｃ領域のＣ末端リジン（Ｌｙｓ４４７）は、存在していてもしていなくてもよい。本明細書において特に規定されない限り、Ｆｃ領域または定常領域中のアミノ酸残基の番号付けは、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ  Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．，１９９１に記載のとおりＥＵインデックスとも呼ばれるＥＵ番号付け系に従う。
【００７０】
本明細書において使用される用語「フレームワーク領域」または「ＦＲ」は、ＣＤＲ中の残基以外の可変領域残基を指す。可変領域のＦＲは、一般に、４つのＦＲドメイン：ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、およびＦＲ４からなる。したがって、ＣＤＲおよびＦＲ配列は、一般に、可変領域中の以下の配列：ＦＲ１−ＣＤＲ１−ＦＲ２−ＣＤＲ２−ＦＲ３−ＣＤＲ３−ＦＲ４に出現する。
【００７１】
用語「全長抗体」、「インタクト抗体」、または「完全抗体」は、抗原結合可変領域（ＶHまたはＶL）ならびに軽鎖定常ドメイン（ＣＬ）および重鎖定常ドメインＣＨ１、ＣＨ２およびＣＨ３を含む抗体を指す。定常ドメインは、天然配列定常ドメイン（例えば、ヒト天然配列定常ドメイン）またはそのアミノ酸配列バリアントであり得る。重鎖の定常ドメインのアミノ酸配列に応じて、全長抗体は、異なる「クラス」に割り当てることができる。全長抗体の５つの主要なクラス：ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、およびＩｇＭが存在し、それらのいくつかは、「サブクラス」（アイソタイプ）、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ、およびＩｇＡ２にさらに分類することができる。抗体の異なるクラスに対応する重鎖定常ドメインは、それぞれ、アルファ、デルタ、イプシロン、ガンマ、およびミューと呼ばれる。免疫グロブリンの異なるクラスのサブユニットおよび三次元立体配置は周知である。
【００７２】
本明細書において使用される用語「宿主細胞」、「宿主細胞系」、および「宿主細胞培養物」は互換的に使用され、外因性核酸が導入された細胞を指し、そのような細胞の子孫を含む。宿主細胞としては、「形質転換体」および「形質転換細胞」が挙げられ、それらとしては一次形質転換細胞および継代数に関係なくそれに由来する子孫が挙げられる。子孫は、核酸含有量が親細胞と完全に同一でなくてよく、突然変異を含有し得る。元の形質転換細胞においてスクリーニングまたは選択されたものと同一の機能または生物学的活性を有する突然変異体子孫が、本明細書に含まれる。
【００７３】
本明細書において使用される用語「ヒト化」抗体は、非ヒトＣＤＲからのアミノ酸残基およびヒトフレームワーク領域からのアミノ酸残基を含むキメラ抗体を指す。ある実施形態において、ヒト化抗体は、少なくとも１つ、典型的には２つの可変領域の実質的に全てを含み、その領域中ではＣＤＲの全てまたは実質的に全てが非ヒト抗体のものに対応し、ＦＲの全てまたは実質的に全てがヒト抗体のものに対応する。ヒト化抗体は、場合により、ヒト抗体に由来する抗体定常領域の少なくとも一部を含み得る。本明細書において使用される用語「ヒトコンセンサスフレームワーク」は、ヒト免疫グロブリンＶLまたはＶHフレームワーク配列の選択において、最も一般に生じるアミノ酸残基を表すフレームワークである。一般に、ヒト免疫グロブリンＶLまたはＶH配列の選択は、可変ドメイン配列のサブグループからのものである。一般に、配列のサブグループは、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，Ｆｉｆｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，ＮＩＨ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ  ９１−３２４２，Ｂｅｔｈｅｓｄａ  Ｍｄ．（１９９１），ｖｏｌｓ．１−３におけるようなサブグループである。一実施形態において、ＶLについてのサブグループは、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．、前掲におけるようなサブグループカッパＩである。一実施形態において、ＶHについてのサブグループは、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．、前掲におけるようなサブグループＩＩＩである。さらなる詳細に関しては、Ｊｏｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ３２１：５２２−５２５  （１９８６）；  Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ３３２：３２３−３２９  （１９８８）；  ａｎｄ  Ｐｒｅｓｔａ，Ｃｕｒｒ．  Ｏｐ．  Ｓｔｒｕｃｔ．  Ｂｉｏｌ．２：５９３−５９６  （１９９２）を参照されたい。さらに下記のレビュー論文およびそれらの参考文献を参照されたい：  Ｖａｓｗａｎｉ  ａｎｄ  Ｈａｍｉｌｔｏｎ，Ａｎｎ．  Ａｌｌｅｒｇｙ，  Ａｓｔｈｍａ＆Ｉｍｍｕｎｏｌ．１：１０５−１１５  （１９９８）；  Ｈａｒｒｉｓ，Ｂｉｏｃｈｅｍ．  Ｓｏｃ．  Ｔｒａｎｓａｃｔｉｏｎｓ２３：１０３５−１０３８  （１９９５）；  Ｈｕｒｌｅ  ａｎｄ  Ｇｒｏｓｓ，Ｃｕｒｒ．  Ｏｐ．  Ｂｉｏｔｅｃｈ．５：４２８−４３３  （１９９４）。
【００７４】
本明細書中で使用される用語「ＩＬ−２２」は、特に明記しない限り、霊長類（例えば、ヒト）およびげっ歯類（例えば、マウスおよびラット）などの哺乳類を含む任意の脊椎動物源由来の任意の天然ＩＬ−２２を指す。この用語は、「完全長」、プロセシングされていない前駆体ＩＬ−２２、ならびにヒトまたは動物体におけるプロセシングから生じる任意の形態のＩＬ−２２を包含する。この用語はまた、ＩＬ−２２の天然に存在するバリアント、例えばスプライスバリアントまたはアレリックバリアントを包含する。ヒトＩＬ−２２のアミノ酸配列は、当該技術分野において周知であり、ＧｅｎＢａｎｋなどの公開データベースから入手可能である。
【００７５】
本明細書中で使用される「ＩＬ−２２関連活性」という用語は、ＩＬ−２２の生物学的活性の１つ以上を意味し、以下を含むが、これらに限定されない。（１）例えば、ＩＬ−２２レセプター（例えば、ＩＬ−２２ＲまたはＩＬ−１０Ｒ２またはその複合体、例えば、哺乳動物、例えば、マウスまたはヒト由来）との結合などの相互作用；（２）一つまたは複数のシグナル伝達分子と結合すること；（３）タンパク質キナーゼ、例えばＪＡＫ／ＳＴＡＴ３、ＥＲＫ、およびＭＡＰＫのリン酸化および／または活性化を刺激すること；（４）例えば、ＩＬ−２２応答性細胞（例えば、腎臓、肝臓、結腸、小腸、甲状腺、膵臓、皮膚由来の上皮細胞）の刺激、減少、増殖、分化、エフェクター細胞機能、細胞溶解活性、サイトカインまたはケモカイン分泌、および／または生存を調節すること；（５）急性期反応の少なくとも１つのパラメータ、例えば、代謝性、肝性、造血性（例えば、貧血、血小板増加）または神経内分泌性変化、または変化（例えば、急性期タンパク質の増加または減少、例えば、フィブリノゲンおよび／または血清アミロイドＡの増加、またはアルブミンの減少）を調節すること；および／または（６）炎症状態の少なくとも１つのパラメータを調節すること、例えば、サイトカイン媒介炎症誘発作用を調節すること（例えば、発熱、および／またはプロスタグランジン合成、例えば、ＰＧＥ２合成）、細胞性免疫応答を調節すること、サイトカイン、ケモカイン（例えば、ＧＲＯ１）、またはリンホカイン産生および／または分泌を調節すること（例えば、炎症誘発性サイトカインの産生および／または分泌）。
【００７６】
本明細書中で使用される用語「免疫関連疾患」とは、哺乳動物の免疫系の成分が哺乳動物の病的状態を引き起こす、媒介する、またはそうでなければ寄与する疾患を意味する。また、免疫応答の刺激または治療が疾患の進行に対して改善効果を有する疾患も含まれる。この用語の中に含まれるのは、免疫介在性炎症性疾患、非免疫介在性炎症性疾患、感染性疾患、免疫不全疾患、および新生物である。
【００７７】
本明細書において使用される用語「免疫コンジュゲート」は、（１つ以上の）異種分子、例として、限定されるものではないが、細胞毒性剤にコンジュゲートしている抗体である。
【００７８】
本明細書において使用される用語「個体」または「対象」は、哺乳動物を指す。哺乳動物としては、限定されるものではないが、家畜動物（例えば、ウシ、ヒツジ、ネコ、イヌ、およびウマ）、霊長類（例えば、ヒトおよび非ヒト霊長類、例えば、サル）、ウサギ、およびげっ歯類（例えば、マウスおよびラット）が挙げられる。ある実施形態において、個体または対象は、ヒトである。
【００７９】
本明細書中で使用される用語「炎症」とは、損傷または感染部位における白血球の蓄積および血管の拡張を意味し、典型的には、疼痛、腫脹、および発赤を引き起こす。
【００８０】
本明細書中で使用される用語「炎症性腸疾患」または「ＩＢＤ」は、消化管の炎症を特徴とする慢性疾患を意味する。ＩＢＤは、大腸および／または直腸を冒す潰瘍性大腸炎、およびクローン病を包含し、これらは、胃腸系全体を冒し得るが、より一般的には小腸（回腸）およびことによると大腸を冒す。
【００８１】
本明細書中で使用される用語「細胞の成長または増殖を阻害する」とは、細胞の成長または増殖を少なくとも１０％、または少なくとも２０％、または少なくとも３０％、または少なくとも４０％、または少なくとも５０％、または少なくとも６０％、または少なくとも７０％、または少なくとも８０％、または少なくとも８５％、または少なくとも９０％、または少なくとも９５％、または少なくとも９８％、または少なくとも９９％または１００％減少させることを意味し、細胞死を誘導することを含む。
【００８２】
本明細書で使用される「単離された」または「精製された」抗体という用語は、同定され、その天然環境の成分から分離および／または回収された抗体を指す。その天然環境の混入成分は、抗体の診断的、予防的または治療的使用を妨げる材料であり、酵素、ホルモン、および他のタンパク質性または非タンパク質性溶質を含み得る。いくつかの実施形態において、抗体は（１）  Ｌｏｗｒｙ法で測定したとき抗体の９５重量％超、または９９重量％超まで、（２）スピニングカップシーケネーターの使用によってＮ末端または内部アミノ酸配列の少なくとも１５残基を得るのに十分な程度まで、または（３）  Ｃｏｏｍａｓｓｉｅ  ｂｌｕｅまたは銀染色を用いた還元条件下または非還元条件下でＳＤＳ−ＰＡＧＥゲルにより均質となるまで精製されるだろう。単離された抗体とは、その抗体の天然環境の少なくとも１つの成分が存在しないので組換え細胞中でｉｎ  ｓｉｔｕで存在する抗体を包含する。しかしながら、通常、単離された抗体は、少なくとも１つの精製工程によって調製されるであろう。
【００８３】
本明細書中で使用される用語「リポソーム」は、ヒト、霊長類またはマウスのような哺乳動物への薬物（核酸、ポリペプチド、抗体、アゴニストまたはアンタゴニストのようである）の送達に有用な、様々な種類の脂質、リン脂質および／または界面活性剤からなる小胞である。リポソームの成分は生体膜の脂質配置に似た、二相形成にて通常は配置される。
【００８４】
本明細書において使用される用語「添付文書」は、治療用製品の商品包装に通例含まれる説明書を指すために使用され、適応症、使用法、投与量、投与、併用療法、禁忌および／またはそのような治療用製品の使用に関する注意事項についての情報を含有する。
【００８５】
本明細書において使用される用語、参照ポリペプチド配列に関する「パーセント（％）アミノ酸配列同一性」は、配列をアラインし、最大のパーセント配列同一性を達成するために必要であればギャップを導入した後の、いかなる保存的置換も配列同一性の一部として考慮しない、参照ポリペプチド配列中のアミノ酸残基と同一である候補配列中のアミノ酸残基の割合として定義される。パーセントアミノ酸配列同一性決定の目的のためのアラインメントは、当分野の技能の範囲内である種々の手法で、例えば、公的に利用可能なコンピュータソフトウェア、例えば、ＢＬＡＳＴ、ＢＬＡＳＴ−２、ＡＬＩＧＮまたはＭｅｇａｌｉｇｎ（ＤＮＡＳＴＡＲ）ソフトウェアを使用して達成することができる。当業者は、配列をアラインするための適切なパラメータ、例として、比較される配列の全長にわたり最大のアラインメントを達成するのに必要な任意のアルゴリズムを決定することができる。しかしながら、本明細書における目的のため、％アミノ酸配列同一性値は、配列比較コンピュータプログラムＡＬＩＧＮ−２を使用して生成される。ＡＬＩＧＮ−２配列比較コンピュータプログラムは、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．により著作され、ソースコードは、Ｕ．Ｓ．Ｃｏｐｙｒｉｇｈｔ  Ｏｆｆｉｃｅ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ  Ｄ．Ｃ．，２０５５９に利用者向け文書とともに申請されており、米国著作権登録番号ＴＸＵ５１００８７のもと登録されている。ＡＬＩＧＮ−２プログラムは、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．，Ｓｏｕｔｈ  Ｓａｎ  Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ，Ｃａｌｉｆ．から公的に利用可能であり、またはソースコードからコンパイルすることができる。ＡＬＩＧＮ−２プログラムは、ＵＮＩＸオペレーティングシステム、例として、デジタルＵＮＩＸＶ４．０Ｄ上での使用のためにコンパイルすべきである。全ての配列比較パラメータはＡＬＩＧＮ−２プログラムにより設定され、変動しない。
【００８６】
アミノ酸配列比較にＡＬＩＧＮ−２を用いる状況において、所与のアミノ酸配列Ａの、所与のアミノ酸配列Ｂへの、所与のアミノ酸配列Ｂとの、または所与のアミノ酸配列Ｂに対する％アミノ酸配列同一性（これは、所与のアミノ酸配列Ｂへの、所与のアミノ酸配列Ｂとの、または所与のアミノ酸配列Ｂに対する、ある％アミノ酸配列同一性を有し、または含む所与のアミノ酸配列Ａと代替表現することもできる）は、以下のとおり算出される：
１００*（Ｘ／Ｙ）
（式中、Ｘは、配列アラインメントプログラムＡＬＩＧＮ−２によりＡおよびＢのそのプログラムのアラインメントにおいて同一マッチとしてスコアリングされたアミノ酸残基の数であり、Ｙは、Ｂ中のアミノ酸残基の総数である）。アミノ酸配列Ａの長さがアミノ酸配列Ｂの長さと等しくない場合、ＡのＢに対する％アミノ酸配列同一性は、ＢのＡに対する％アミノ酸配列同一性と等しくないことが認識される。特に具体的に記述されない限り、本明細書において使用される全ての％アミノ酸配列同一性値は、ＡＬＩＧＮ−２コンピュータプログラムを使用して直前の段落に記載のとおりに得られる。
【００８７】
本明細書において使用される用語「医薬組成物」は、その中に含有される抗ＩＬ−２２抗体の生物学的活性の有効性を許容するような形態であり、組成物が投与される対象に許容不可能な毒性を示す追加の構成成分を含有しない製剤を指す。
【００８８】
本明細書において使用される用語「薬学的に許容可能な担体」は、使用される用量および濃度にさらされる対象に対して非毒性である、活性成分以外の医薬組成物中の成分を指す。薬学的に許容可能な担体としては、限定されるものではないが、緩衝剤、賦形剤、安定剤、または保存剤が挙げられる。
【００８９】
薬学的に許容可能な担体の例としては、リン酸、クエン酸、および他の有機酸などの緩衝液；アスコルビン酸を含む抗酸化剤；低分子量（約１０残基未満）ポリペプチド；血清アルブミン、ゼラチン、または免疫グロブリンなどのタンパク質；ポリビニルピロリドンなどの親水性ポリマー；グリジン、グルタミン、グルタミン、アスパラギン、アルギニンまたはリジンなどのアミノ酸；グルコース、マンノース、またはデキストリンなどの単糖類、二糖類、および他の炭水化物；ＥＤＴＡなどのキレート化剤；マンニトールまたはソルビトールなどの糖アルコール；ナトリウムなどの塩形成対イオン；および／またはＴＷＥＥＮ（登録商標）、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、およびＰＬＵＲＯＮＩＣＳ（登録商標）などのノニオン系界面活性剤が挙げられる。
【００９０】
本明細書中で使用される「乾癬」という言葉は、肘、ひざ、頭皮または体幹に顕著に現れる限局性、離散性および融合性、赤みを帯びた、銀色の鱗屑を伴う大丘疹の発疹を特徴とする条件を指す。
【００９１】
本明細書において使用される用語「組換え抗体」は、抗体をコードする核酸を含む組換え宿主細胞により発現される抗体（例えば、キメラ、ヒト化、またはヒト抗体またはそれらの抗原結合性断片）を指す。組換え抗体を産生するための「宿主細胞」の例としては：（１）哺乳動物細胞、例えば、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、ＣＯＳ、骨髄腫細胞（例として、Ｙ０およびＮＳ０細胞）、ベビーハムスター腎臓（ＢＨＫ）細胞、ＨｅｌａおよびＶｅｒｏ細胞；（２）昆虫細胞、例えばｓｆ９、ｓｆ２１およびＴｎ５；（３）植物細胞、例えば、タバコ属（Ｎｉｃｏｔｉａｎａ）に属する植物（例えば、タバコ（Ｎｉｃｏｔｉａｎａ  ｔａｂａｃｕｍ））；（４）酵母細胞、例えば、サッカロミセス属（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）（例えば、出芽酵母（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ））またはアスペルギルス属（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）（例えば、クロコウジカビ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｎｉｇｅｒ））に属するもの；（５）細菌細胞、例えば、大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ．ｃｏｌｉ）細胞または枯草菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ）細胞などが挙げられる。
【００９２】
本明細書において使用される用語「一本鎖Ｆｖ」（「ｓｃＦｖ」）は、通常、ペプチドコードリンカーにより結合しているＶHおよびＶLコード遺伝子を含む遺伝子融合物から発現される共有結合しているＶH：：ＶLヘテロ二量体である。「ｄｓＦｖ」は、ジスルフィド結合により安定化されるＶH：：ＶLヘテロ二量体である。二価および多価抗体断片は、一価ｓｃＦｖの会合により自然に形成し得、またはペプチドリンカーにより一価ｓｃＦｖをカップリングさせることにより生成することができる（例えば、二価ｓｃ（Ｆｖ）２）。
【００９３】
本明細書において使用される用語「治療」、「治療する」または「治療すること」などは、治療される個体の自然経過を変更する試行の臨床的介入を指し、予防のため、または臨床的病変の経過において実施することができる。治療の望ましい効果としては、限定されるものではないが、疾患の発症または再発の予防、症状の緩和、疾患の直接的または間接的な任意の病理学的帰結の縮小、転移の予防、疾患進行速度の減少、疾患状態の改善または軽減、および寛解または予後の改善が挙げられる。一部の実施形態において、本発明の抗体または抗体断片は、疾患の発生を遅延させ、または疾患の進行を減速させるために使用される。
【００９４】
本明細書において使用される用語「腫瘍」は、悪性であるか良性であるかに関わらない、全ての新生物性の細胞成長および増殖、ならびに全ての前癌性および癌性の細胞および組織を指す。用語「癌」、「癌性」、「細胞増殖性疾患」、「増殖性疾患」および「腫瘍」は、本明細書において相互に排他的に言及されるわけではない。
【００９５】
本明細書において使用される用語抗体の「可変領域」または「可変ドメイン」は、交換可能に、抗体の重鎖または軽鎖のアミノ末端ドメインを指す。重鎖の可変領域は「ＶH」として記載され得る。軽鎖の可変領域は「ＶL」として記載され得る。これらの可変領域は一般に抗体の最も可変的部分であり、抗原結合部位を含む。重鎖および軽鎖の可変領域（それぞれ、ＶHおよびＶL）は一般に、それぞれのドメインが４つの保存されたフレームワーク領域（ＦＲ）および３つのＣＤＲを含む類似の構造を有する（例えば、Ｋｉｎｄｔ  ｅｔ  ａｌ．Ｋｕｂｙ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，６ｔｈ  ｅｄ．，Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ  ａｎｄ  Ｃｏ．，ｐａｇｅ  ９１（２００７）参照）。単一のＶHまたはＶL領域は、抗原結合特異性を付与するのに十分であり得る。さらに、特定の抗原に結合する抗体または抗体断片は、その抗原に結合する抗体からのＶHまたはＶL領域を使用して単離してそれぞれ相補的なＶLまたはＶH領域のライブラリーをスクリーニングすることができる。例えば、Ｐｏｒｔｏｌａｎｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，ｖｏｌ．１５０，ｐｐ．８８０−８８７，１９９３；Ｃｌａｒｋｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，ｖｏｌ．３５２，ｐｐ．６２４−６２８，１９９１参照。
【００９６】
本明細書において使用される用語「ベクター」は、結合している別の核酸を伝播し得る核酸分子を指す。この用語は、自己複製核酸構造としてのベクター、および導入された宿主細胞のゲノム中に取り込まれるベクターを含む。あるベクターは、それらが作動可能に結合している核酸の発現を指向し得る。このようなベクターは、本明細書において「発現ベクター」と称される。
【００９７】
（詳細な記載）
例示を目的として、種々の例示的実施形態を参照して本発明の原理を説明する。本発明のある実施形態が本明細書において具体的に説明されるが、当業者は、同一原理が他の系および方法において同様に適用可能であり、用いることができることを容易に認識する。本発明の開示される実施形態を詳細に説明する前に、本発明は、示される任意の特定の実施形態の詳細にその適用が限定されないことを理解すべきである。さらに、本明細書において使用される用語は説明を目的とするものであり、限定を目的とするものではない。さらに、ある方法は本明細書においてある順序で提示されるステップを参照して記載されるが、多くの場合、当業者が理解し得るとおり、これらのステップは任意の順序で実施することができ；したがって、新規方法は、本明細書に開示の特定のステップの順に限定されるものではない。
【００９８】
本明細書および添付の特許請求の範囲において使用される単数形「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」は、文脈が明示しない限り、複数形の参照物を含むことに留意しなければならない。さらに、用語「ａ」（または「ａｎ」）、「１つ以上」および「少なくとも１つ」は、本明細書において互換的に使用することができる。用語「〜を含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」、「〜を含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」、「〜を有する」および「〜から構築される」も、互換的に使用することができる。
【００９９】
特に示されない限り、本明細書および特許請求の範囲において使用される、成分の量、特性、例えば分子量、パーセント、比、反応条件などを表す全ての数字は、全ての場合において、用語「約」により、その用語「約」の有無にかかわらず修飾されるものとして理解すべきである。したがって、逆の指示がない限り、本明細書および特許請求の範囲に記載の数値パラメータは近似値であり、その近似値は、本開示により得ることができる求められる所望の特性に応じて変動し得る。少なくとも、および特許請求の範囲に対する均等論の適用を制限する企図としてではなく、それぞれの数値パラメータは、報告された有効数字に照らし、通常の四捨五入法を適用することにより少なくとも解釈すべきである。本開示の広い範囲を記載する数値範囲およびパラメータは近似値であるが、具体例において記載されている数値は、可能な限り正確に報告される。しかしながら、いずれの数値も、それぞれの試験測定値において見出される標準偏差から必然的に生じる、ある誤差を本質的に含有する。
【０１００】
本明細書に開示のそれぞれの構成成分、化合物、置換基、またはパラメータは、単独で、または本明細書に開示のそれぞれのおよび他のあらゆる構成成分、化合物、置換基、もしくはパラメータの１つ以上との組合せでの使用について開示されているとして解釈すべきであることを理解すべきである。
【０１０１】
本明細書に開示のそれぞれの構成成分、化合物、置換基、またはパラメータについてのそれぞれの量／値または量／値の範囲は、本明細書に開示の他のあらゆる構成成分、化合物、置換基、またはパラメータについて開示されているそれぞれの量／値、または量／値の範囲との組合せでも開示されているとして解釈すべきであること、および、したがって本明細書に開示の２つ以上の構成成分、化合物、置換基、またはパラメータの量／値、または量／値の範囲の任意の組合せも、本詳細な説明の目的のために互いとの組合せでも開示されていることも理解すべきである。
【０１０２】
本明細書に開示のそれぞれの範囲のそれぞれの下限値は、同一の構成成分、化合物、置換基、またはパラメータについて本明細書に開示のそれぞれの範囲のそれぞれの上限値との組合せで開示されているものとして解釈すべきであることがさらに理解される。したがって、２つの範囲の開示は、それぞれの範囲のそれぞれの下限値を、それぞれの範囲のそれぞれの上限値と組み合わせることにより導かれる４つの範囲の開示として解釈すべきである。３つの範囲の開示は、それぞれの範囲のそれぞれの下限値を、それぞれの範囲のそれぞれの上限値と組み合わせることにより導かれる９つの範囲の開示などとして解釈すべきである。さらに、本明細書または実施例に開示の構成成分、化合物、置換基、またはパラメータの具体的な量／値は、範囲の下限値または上限値のいずれかの開示として解釈するべきであり、したがって、本出願の他箇所に開示の同一の構成成分、化合物、置換基、またはパラメータについての範囲の他の任意の下限値もしくは上限値または具体的な量／値と組み合わせてその構成成分、化合物、置換基、またはパラメータの範囲を形成し得る。
【０１０３】
Ａ．抗ＩＬ−２２抗体または抗体断片
１つの態様において、本発明は、
ＳＡＳＳＳＶＳＸ1ＭＨ（配列番号１）から選択されるアミノ酸配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、Ｘ2ＴＸ3ＫＬＸ4Ｓ（配列番号２）から選択されるアミノ酸配列を有する軽鎖ＣＤＲ２、およびＱＱＷＳＳＮＰＹＩＴ（配列番号３）のアミノ酸配列を有する軽鎖ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、ならびに
ＧＹＩＦＸ5ＳＹＷＩＨ（配列番号４）から選択されるアミノ酸配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＲＩＹＰＧＴＧＸ6ＴＹＹＮＸ7ＫＦＫＧ（配列番号５）から選択されるアミノ酸配列を有する重鎖ＣＤＲ２、およびＳＹＸ8Ｘ9ＳＶＸ10Ｙ（配列番号６）から選択されるアミノ酸配列を有する重鎖ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域を含み、
Ｘ1はＹまたはＫであり、Ｘ2はＥまたはＫであり、Ｘ3はＳまたはＲであり、Ｘ4はＡまたはＬであり、Ｘ5はＴまたはＲであり、Ｘ6はＮまたはＲであり、Ｘ7はＥまたはＲであり、Ｘ8はＤまたはＭであり、Ｘ9はＳまたはＹであり、Ｘ10はＡまたはＧである、
抗ＩＬ−２２抗体または抗体断片を提供する。
【０１０４】
別の態様において、本発明の抗ＩＬ−２２抗体または抗体断片は、配列番号７−１２から選択されるアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域、および配列番号１３−１８から選択されるアミノ酸配列を有する重鎖可変領域を含む。
【０１０５】
さらに別の態様において、本発明の抗ＩＬ−２２抗体または抗体断片は、以下から選択される：
（１）  配列番号７のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域および配列番号１３のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域を含む抗体または抗体断片；
（２）  配列番号１０のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域および配列番号１３のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域を含む抗体または抗体断片；
（３）  配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域および配列番号１４のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域を含む抗体または抗体断片；
（４）  配列番号８のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域および配列番号１５のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域を含む抗体または抗体断片；
（５）  配列番号９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域および配列番号１５のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域を含む抗体または抗体断片；
（６）  配列番号１０のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域および配列番号１５のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域を含む抗体または抗体断片；
（７）  配列番号８のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域および配列番号１６のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域を含む抗体または抗体断片；
（８）  配列番号７のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域および配列番号１７のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域を含む抗体または抗体断片；
（９）  配列番号８のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域および配列番号１７のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域を含む抗体または抗体断片；
（１０）  配列番号１２のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域および配列番号１８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域を含む抗体または抗体断片。
【０１０６】
本発明の抗ＩＬ−２２抗体または抗体断片は、本明細書ではｈｕｍ１０と称するヒトＩＬ−２２に結合する親抗体に由来し、親抗体は配列番号１９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域および配列番号２０のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域を有する。親抗体ｈｕｍ１０は、ヒトＩＬ−２２（ｈＩＬ−２２）でマウスを免疫することにより機能性ハイブリドーマクローン３Ｃ３から作製したヒト化モノクローナル抗体（ｍＡｂ）である。マウスモノクローナル抗体３Ｃ３のｈＩＬ−２２に対する結合親和性は約１００ｐＭである（ＳＰＲ分析による測定）。しかし、３Ｃ３ｍＡｂはマウスＩＬ−２２（ｍＩＬ−２２）に結合できない。３Ｃ３ｍＡｂは、ＨｅｐＧ２細胞においてｈＩＬ２によるＳｔａｔ３リン酸化の誘導を阻止することができる。３Ｃ３ｍＡｂをヒト化し、ヒト化抗体ｈｕｍ１０とした。
【０１０７】
親抗体ｈｕｍ１０は、ヒトＩＬ−２２およびマウスＩＬ−２２の両方に高い親和性で結合することができる抗ＩＬ−２２抗体を含む変異体抗体を生成するために改変されている。ヒトとマウスのＩＬ−２２は完全に保存されている領域をいくつかもっている。ＣＰＥ（商標登録）ライブラリーは、ｈｕｍ１０の６つのＣＤＲ全ての各位置のアミノ酸残基を少なくとも１５の他のアミノ酸で置換することによって、親抗体ｈｕｍ１０から構築された。置換のいくつかの例を図１に示し、ここでＣＤＲは概略図のより太い部分によって表される。ＣＰＥ（商標登録）ライブラリーには、軽鎖ＣＤＲに変異を有する変異体４７２個と、重鎖ＣＤＲに変異を有する変異体５９６個の合計１０６８個のＣＰＥ抗体変異体が含まれている。
【０１０８】
変異体抗体はＣＨＯ細胞のような真核細胞宿主で発現した。各々の変異体抗体の配列を検証し、変異体抗体を９６ウェルフォーマットにアレイ化した。
【０１０９】
マウスＩＬ−２２とヒトＩＬ−２２の両方に高い親和性で結合する変異体抗体について、ＣＰＥ（商標登録）ライブラリーをスクリーニングした。選択基準を満たす１０種類の抗体が同定され、以下の表１に示す。
【表１】
2021527122.tif 000003
【０１１０】
表１に挙げた１０種類の変異体抗体の中には、６種類の異なる軽鎖がある。これら６つの異なる軽鎖とｈｕｍ１０の軽鎖とのアラインメントを図２Ａ〜２Ｂに示す。表１に挙げた１０種類の変異体抗体のなかには、６つの異なる重鎖がある。これら６つの異なる重鎖とｈｕｍ１０の重鎖とのアラインメントを図３Ａ〜３Ｂに示す。１０種類の変異体抗体のアミノ酸置換はＣＤＲのいくつかの特定の位置に起こることが観察される。
【０１１１】
表１の１０種類の抗体を同じ真核細胞宿主中で発現させて、さらなる試験、臨床試験、および／または治療的、予防的または診断的使用のための抗体を産生させた。真核細胞宿主は、３Ｔ３マウス線維芽細胞；ＢＨＫ２１シリアンハムスター線維芽細胞；ＭＤＣＫ、イヌ上皮細胞；ＨｅＩａヒト上皮細胞；ＰｔＫｌラットカンガルー上皮細胞；ＳＰ２／０マウス形質細胞；およびＮＳＯマウス形質細胞；ＨＥＫ２９３ヒト胚腎細胞；ＣＯＳサル腎臓細胞；ＣＨＯ、チャイニーズハムスター卵巣細胞；Ｒｌマウス胚細胞；Ｅ１４．１マウス胚細胞；Ｈｌヒト胚細胞；Ｈ９ヒト胚細胞；ＰＥＲ．６、ヒト胚細胞；Ｓ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ酵母細胞；またはピキア酵母細胞から選択され得る。特定の実施形態では、哺乳動物系はＣＨＯまたはＨＥＫ２９３である。
【０１１２】
発現した抗体を真核宿主細胞培養の上清から精製した。抗体の純度を検証するために、精製変異体抗体を１０％  ＳＤＳ  ＰＡＧＥゲルを用いて分析した。抗体は非還元条件下で単一バンドを示した（図４、左半分）。還元条件下では、抗体は軽鎖と重鎖に分離され、それぞれのレーンに２本のバンドとして示される（図４、右半分）。精製された抗体はＳＥＣ分析によっても分析され、図５Ａ〜５Ｃに示すように単一のピークを生じ、このことは、抗体が高純度で得られることを示している。
【０１１３】
表１の１０種類の抗体の特異性を、ヒトおよびマウスＩＬ−２２の両方、ならびに関連抗原（ヒトＩＬ１９、ヒトＩＬ２０、ヒトＩＬ２４、ヒトＩＬ２６、ＩＮＦアルファＡ、ＩＮＦ−γ、ＩＮＦ−λ１、ＩＮＦ−２および非特異的抗原）を用いてアッセイした。表１の１０種類の変異体抗体は、同等の親和性でヒトおよびマウスＩＬ−２２の両方に結合することが見出されたが、これらの変異体抗体は、図６から分かるように関連抗原に対して非常に低い親和性を示した。これにより、表１の１０種類の変異体抗体は、他の関連抗原との親和性が低いため、ヒトとマウスのＩＬ−２２に特異的であることが確認される。
【０１１４】
１つの実施形態において、本発明の抗体は、ヒトおよび哺乳動物のＩＬ−２２（例えば、マウスＩＬ−２２）と同等の親和性を有し、例えば、互いの±２０％、±１５％、±１０％または±５％以内である。すなわち、両親和性の差がいずれか一方の親和性の２０％未満、又は１５％未満、又は１０％未満、又は５％未満である。
【０１１５】
表１の１０種類の抗体の親和性を、ＰＢＳ緩衝液中での捕捉アッセイを用いてＳｕｒｆａｃｅ  Ｐｌａｓｍａ  Ｒｅｓｏｎａｎｃｅ（ＳＰＲ）により測定し、４種類の種々の濃度の各抗体（０．０５、０．１、０．５、１．０μｇ／ｍｌ）で結合曲線を作成した。変異体抗体のＫａ、ＫｄおよびＫDを各抗体の曲線から計算した。
【０１１６】
１つの実施形態において、Ｋｄは、カルボキシメチル化デキストランバイオセンサチップ（ＣＭ５、ＢＩＡＣＯＲＥ、Ｉｎｃ．）に固定化された抗原を用いて、２５°ＣでＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）−２０００又はＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）−３０００装置（ＢＩＡｃｏｒｅ、Ｉｎｃ．、Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ、Ｎ．Ｊ．）を用いて測定される。ＣＭ５チップは、供給者の指示に従って、Ｎ−エチル−Ｎ′−（３−ジメチルアミノプロピル）−カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ）及びＮ−ヒドロキシコハク酸イミド（ＮＨＳ）で活性化される。抗原を１０ｍＭの酢酸ナトリウム（ｐＨ４．８）により５μｇ／ｍｌ（〜０．２μＭ）まで希釈してから、約１０の応答単位（ＲＵ）の結合タンパク質を達成するように５μｌ／分の流速において注入する。抗原の注入後、１Ｍのエタノールアミンを注入して未反応基をブロッキングする。動態測定のために、抗体（０．７８ｎＭ〜５００ｎＭ）の２倍連続希釈液を、約２５μｌ／分の流速で２５℃で０．０５％ポリソルベート２０（ＴＷＥＥＮ−２０（登録商標））界面活性剤（ＰＢＳＴ）と共にＰＢＳ中に注射する。
【０１１７】
会合速度（ｋon）および解離速度（ｋoff）を、単純１対１ラングミュア結合モデル（ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）評価ソフトウェアバージョン３．２）を使用して、会合および解離センサーグラムを同時にフィッティングすることにより算出した。平衡解離定数（Ｋｄ）を、ｋoff／ｋon比として算出する。例えば、Ｃｈｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，  ｖｏｌ．２９３，  ｐｐ．  ８６５−８８１，  １９９９．上記の表面プラズモン共鳴アッセイによりオン速度が１０6 Ｍ-1 ｓ-1 を超える場合、ｐＨ７．２のＰＢＳ中の抗抗体２０  ｎＭ溶液の２５℃での蛍光発光強度の増減（励起＝２９５ｎｍ；発光＝３４０ｎｍ、１６ｎｍバンドパス）を測定する蛍光消光技術を用いて、ストップフローを備えた分光光度計（Ａｖｉｖ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）または攪拌キュベットを備えた８０００シリーズＳＬＭ−ＡＭＩＮＣＯ（登録商標）分光光度計（ＴｈｅｒｍｏＳｐｅｃｔｒｏｎｉｃ）のようなペクトロメーター中で抗原濃度の上昇の存在を測定することにより、オン速度を決定することができる。
【０１１８】
いくつかの代表的な抗体を表２に示す。２つの抗体ＣＰＳ０２とＣＰＳ０９は、ヒトとマウスのＩＬ−２２の両方に最も高い親和性を示す。ＬＣ−Ｅ０４９Ｋ（ＣＰＥ（登録商標）ライブラリーの変異体抗体の１つ）を対照として用いる。
【表２】
2021527122.tif 000004
【０１１９】
ＩＬ−２２の直接的な機能の１つは、ＩＬ−２２のシグナル伝達経路のタンパク質であるＳｔａｔ３のリン酸化を誘導することである。表１の１０種類の抗体を、ＨｅｐＧ２細胞におけるヒトまたはマウスＩＬ−２２を介するＳｔａｔ３のＩＬ−２２依存性リン酸化を遮断するための細胞ベースのアッセイにおいて試験した。対照として抗体ｈｕｍ１０と変異体ＣＰＥ−ＬＣ−Ｅ０４９Ｋを用いた。各抗体は０．１１μｇ／ｍＬ、０．３３μｇ／ｍＬ、１μｇ／ｍＬ、３μｇ／ｍＬの４濃度を用いた。
【０１２０】
ヒトＩＬ−２２（ｈＩＬ−２２）への結合を介するＳｔａｔ３リン酸化の阻害を図７Ａに示し、マウスＩＬ−２２（ｍＩＬ−２２）への結合を介するＳｔａｔ３リン酸化の阻害を図７Ｂに示す。Ｓｔａｔ３リン酸化の阻害は、変異体抗体の濃度が高くなると用量依存的であり、Ｓｔａｔ３リン酸化の阻害レベルが高くなることがわかった。このことは、本発明の変異体抗体が、ヒト及びマウスＩＬ−２２への結合を介して、ヒト及びマウスの両方の生物学的系においてＩＬ−２２誘導Ｓｔａｔ３リン酸化を阻害する原因的役割を有することを示す。
【０１２１】
ＨＴ２９細胞は上皮形態を有するヒト結腸直腸腺癌細胞株である。この細胞は、広範囲のサイトカインを発現することができ、これには、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、ＣＣＬ５、ＣＸＣＬ８、ＣＸＣＬ１、ＣＣＬ２０、およびＩκＢが含まれる。サイトカイン分泌は免疫応答の徴候であり、典型的には動物体に炎症を引き起こす。ＨＴ２９細胞におけるＩＬ−２２誘導ＣＸＣＬ１産生の阻害における抗ＩＬ−２２抗体の機能は、免疫応答および炎症を抑制する抗体の能力の指標である。ＨＴ２９細胞を種々の濃度の抗ＩＬ−２２変異体抗体で処理し、ＣＸＣＬ１の産生を測定する（図８）。変異体抗体によるＣＸＣＬ１産生の抑制は用量依存性であり、ＩＬ−２２活性と免疫応答／炎症の抑制における変異体抗体の因果的な役割を示した。
【０１２２】
表１の変異体抗体の薬物動態をマウスで解析した。抗体は０．３ｍｇ／ｋｇと１０ｍｇ／ｋｇの２用量で静脈内注射によりマウスに注射された。血漿中の注射抗体の濃度を固相ＥＬＩＳＡで測定した。抗体は、図９Ａ〜９Ｂおよび図１０Ａ〜１０Ｂに示すように、マウスにおいて長い半減期を有することがわかった。マウスにおけるＣＰＳ０２の半減期は１０ｍｇ／ｋｇ注射後約１８時間であることがわかった。ＣＰＳ０９の半減期は１０ｍｇ／ｋｇ注射後約１６時間であることが分かった。
【０１２３】
ＩＬ−２２はマウスやヒトなどの動物に急性期反応を誘発する。本発明の変異体抗体は、ＩＬ−２２によって誘導される急性期反応を阻害することができる。この急性期反応は、図１１に示すように、動物の血液中の血清アミロイド（ＳＡＡ）の濃度によって示される。マウスの血液中のＳＡＡ濃度をＩＬ−２２および／または変異体抗体によりマウスの処置の２４時間後に測定した。ＩＬ−２２のみを用いた場合、ＳＡＡ濃度は高かった。抗ＩＬ−２２抗体を加えると、マウスの血液中のＳＡＡ濃度は有意に低く、本発明の抗体がマウスの急性期反応を効果的に阻害できることを示した。
【０１２４】
抗ＩＬ−２２抗体の特性は、ＣＰＳ０２およびＣＰＳ０９によって例示され、表３に要約される。
【表３】
2021527122.tif 000005
【０１２５】
本発明の抗ＩＬ−２２抗体または抗体断片は、ヒトおよびマウスＩＬ−２２の両方に対して高結合親和性を有する。さらに、抗ＩＬ−２２抗体または抗体断片は、Ｓｔａｔ３リン酸化およびサイトカイン産生（例えば、ＣＸＣＬ１産生）の阻害、急性免疫応答の阻害を含む、ヒトおよびマウスにおいて同様の生物作用を引き起こすことができ、変異体抗体はマウスにおいても同様に、かなり長い半減期を有することが示された。
【０１２６】
本発明はまた、抗ＩＬ−２２抗体または表１の１０種類の選択された抗体からの軽鎖可変領域および重鎖可変領域を含む抗体断片にも及ぶ。特に、本発明の抗ＩＬ−２２抗体または抗体断片は、配列番号７−１２のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域から選択される軽鎖可変領域、および配列番号１３−１８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域から選択される重鎖可変領域を含む。
【０１２７】
本発明はまた、配列番号７−１２のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域のＣＤＲを有する軽鎖可変領域、および配列番号１３−１８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域のＣＤＲを有する重鎖可変領域を含む抗ＩＬ−２２抗体または抗体断片を含む。
【０１２８】
表１の抗体、とりわけヒトおよびマウスＩＬ−２２の両方に結合することができるこれらの抗体の断片も、本発明の範囲内である。これらの抗体断片は、タンパク質分解消化を介して全長抗体から産生され得る  （参照、例えば，  Ｍｏｒｉｍｏｔｏ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ，  ｖｏｌ．  ２４，  ｐｐ．  １０７−１１７，  １９９２；  ａｎｄ  Ｂｒｅｎｎａｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｓｃｉｅｎｃｅ，  ｖｏｌ．  ２２９，  ｐｐ．  ８１，  １９８５）．これらの抗体断片は、組換え宿主細胞によって直接的に産生され得る。Ｆａｂ、Ｆｖ、ｓｃＦｖ抗体断片は大腸菌で発現させ、分泌させることができるので、これらの断片の大量を容易につくることができる。抗体断片は上記のファージライブラリーから単離することができる。代わりに、Ｆａｂ′−ＳＨ断片を大腸菌から直接的に回収し、化学的に結合してＦ（ａｂ’）2 断片を形成することができる（Ｃａｒｔｅｒら、Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，  ｖｏｌ．１０，  ｐｐ．１６３−１６７，１９９２）。別のアプローチによれば、Ｆ（ａｂ’）2 断片は、組換え宿主細胞培養から直接的に隔離することができる。サルベージ受容体結合エピトープ残基を含むｉｎ  ｖｉｖｏ半減期が増加したＦａｂおよびＦ（ａｂ’′）2 断片は、米国特許第５，８６９，０４６号に記載されている。抗体断片の製造のための他の技術は、熟練した実務者に明らかであろう。
【０１２９】
特定の実施形態では、抗体は一本鎖のＦｖ断片（ｓｃＦｖ）である。ＷＯ  ９３／１６１８５および米国特許第５，５７１，８９４；および５，５８７，４５８を参照のこと。ＦｖとｓｃＦｖは、インタクト結合部位をもつ唯一の種であり、定常領域をもたない。したがって、ｉｎ  ｖｉｖｏ使用時の非特異的結合の減少に適しているかもしれない。ｓｃＦｖ融合タンパク質を構築して、ｓｃＦｖのアミノ末端またはカルボキシ末端のいずれかにおけるエフェクタータンパク質の融合を得ることができる。参照、Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，  ｅｄ．  Ｂｏｒｒｅｂａｅｃｋ，  Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ，  １９９５。抗体断片は、例えば米国特許第５，６４１，８７０号に記載されているように、「線状抗体」であってもよい。このような線状抗体は単一特異性または二重特異的であり得る。
【０１３０】
いくつかの実施形態において、本発明の抗体はダイアボディである。ダイアボディは、二価のものもあれば、二重特異的のものもある。例えば、ダイアボディの例については、ＥＰ  ４０４，０９７；  ＷＯ  １９９３／０１１６１；  Ｈｕｄｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎａｔ．ｖｏｌ．  ９，  ｐｐ．  １２９−１３４，  ２００３；  およびＨｏｌｌｉｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  ＵＳＡ，  ｖｏｌ．  ９０，  ｐｐ．  ６４４４−６４４８，  １９９３参照。トリアボディおよびテトラボディの例も、Ｈｕｄｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎａｔ．  Ｍｅｄ．，  ｖｏｌ．  ９，  ｐｐ．  １２９−１３４，  ２００３に記載されている。
【０１３１】
いくつかの実施形態において、本発明の抗体は、抗体の重鎖可変領域の全てもしくは一部、または軽鎖可変領域の全てもしくは一部を含む単一ドメイン抗体断片である。特定の実施形態に、単一ドメイン抗体はヒト単一ドメイン抗体である（例えば、米国特許第６，２４８，５１６号参照）。
【０１３２】
Ｂ．抗体バリアント
いくつかの実施形態において、本発明は、上記のような抗体または抗体断片のバリアントを提供する。これらのバリアントを導くにあたり、当業者は本明細書に記載されているようなプロセスによって導かれる。これらの抗体または抗体断片をコードするヌクレオチド配列に適切な改変を導入することによって、またはペプチドを合成することによって、これらの抗体または抗体断片のバリアントを作成することができる。このような改変としては、例えば、抗体または抗体断片のアミノ酸配列内の残基からの欠失、および／またはそれらの残基への挿入、および／またはそれらの残基の置換が挙げられる。欠失、挿入、および置換の任意の組合せをバリアントに到達させることができるが、これは、バリアントが、所望特性（例えばヒトおよびマウスＩＬ−２２の両方への結合）の少なくとも１つを有することを条件とする。
【０１３３】
１．配列バリアント
特定の実施形態すれば、本発明は、上述の変異体抗体または抗体断片と比べて、１つ以上のアミノ酸置換、欠失および／または挿入を有する抗体または抗体断片バリアントを提供する。置換変異誘発のための目的部位としては、ＣＤＲおよびフレームワーク領域（ＦＲ）が挙げられる。保存的置換を表４の「好ましい置換」の項目に示し、より実質的な変化を表４の「例示的置換」の項目に示し、さらに、共通の側鎖特性によって決定されるアミノ酸側鎖基を参照して以下に記載する。アミノ酸置換は、目的の抗体または抗体断片、および所望の活性、例えばヒトおよびマウスＩＬ−２２の両方への結合、および／または免疫原性の減少についてスクリーニングされた生成物に導入され得る。
【表４】
2021527122.tif 000006
【０１３４】
アミノ酸は、共通の側鎖特性に従ってグループ分けすることができる：
（１）疎水性：ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ；
（２）中性の親水性：Ｃｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ；
（３）酸性：Ａｓｐ、Ｇｌｕ；
（４）塩基性：Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ；
（５）鎖配向に影響を与える残基：Ｇｌｙ、Ｐｒｏ；
（６）芳香族：Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ。
【０１３５】
非保存的置換は、これらのクラスのうち１つのメンバーを別のクラスのものに交換することを伴う。
【０１３６】
アミノ酸配列中の変化の作製において、アミノ酸のハイドロパシー指数を考慮することができる。タンパク質に対する相互作用的な生物学的機能の付与におけるハイドロパシーアミノ酸指数の重要性は、一般に当分野において理解されている。アミノ酸の相対的ハイドロパシー特徴が得られるタンパク質の二次構造に寄与し、次いでそれがタンパク質と他の分子、例えば、酵素、基質、受容体、ＤＮＡ、抗体、抗原などとの相互作用を定めることが受け入れられる。それぞれのアミノ酸には、それらの疎水性および電荷の特徴に基づきハイドロパシー指数が割り当てられており、それらは、イソロイシン（＋４．５）；バリン（＋４．２）；ロイシン（＋３．８）；フェニルアラニン（＋２．８）；システイン／シスチン（＋２．５）；メチオニン（＋１．９）；アラニン（＋１．８）；グリシン（−０．４）；トレオニン（−０．７）；セリン（−０．８）；トリプトファン（−０．９）；チロシン（−１．３）；プロリン（−１．６）；ヒスチジン（−３．２）；グルタミン酸（−３．５）；グルタミン（−３．５）；アスパラギン酸（−３．５）；アスパラギン（−３．５）；リジン（−３．９）；およびアルギニン（−４．５）である。
【０１３７】
１つのタイプの置換バリアントは、親抗体（例えば、ヒト化抗体またはヒト抗体）の１つ以上のＣＤＲの置換を含む。一般に、さらなる試験のために選択されて得られるバリアントは、親抗体に対してある生物学的特性の改変（例えば、改善）（例えば、親和性の増加、免疫原性の減少）を有し、および／または親抗体のある生物学的特性を実質的に保持する。例示的な置換バリアントは親和性成熟抗体であり、例えば、ファージディスプレイベースの親和性成熟技術、例えば、本明細書に記載のものを使用して簡便に生成することができる。例えば、１つ以上のＣＤＲ残基を突然変異させ、バリアント抗体をファージ上でディスプレイさせ、特定の生物学的活性（例えば、結合親和性）についてスクリーニングすることができる。
【０１３８】
配列改変（例えば、置換）は、例えば、抗体親和性を改善するためにＣＤＲ中で作製することができる。このような変更は、ＣＤＲの「ホットスポット」、すなわち、体細胞成熟プロセスの間に高頻度で突然変異を受けるコドンによりコードされる残基（例えば、Ｃｈｏｗｄｈｕｒｙ，Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，ｖｏｌ．２０７，ｐｐ．１７９−１９６，２００８参照）中で作製することができ、得られるバリアントＶHまたはＶLを結合親和性について試験する。ライブラリーの構築および二次ライブラリーからの選択による親和性成熟は、例えば、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ  ｅｔ  ａｌ．ｉｎ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，ｖｏｌ．１７８，ｐｐ．１−３７，２００１）に記載されている。親和性成熟の一部の実施形態において、種々の方法（例えば、エラープローンＰＣＲ、鎖シャフリング、またはオリゴヌクレオチド指向変異誘発）のいずれかにより、成熟について選択された可変遺伝子中に多様性を導入する。次いで、バリアントを有するライブラリーを作出する。次いで、ライブラリーをスクリーニングして所望の親和性を有する抗体バリアントを同定する。多様性を導入する別の方法はＣＤＲ指向アプローチを含み、そのアプローチでは、いくつかのＣＤＲ残基（例えば、１回に４〜６残基）をランダム化する。例えば、アラニンスキャニング突然変異誘発またはモデリングを使用して抗原結合に関与するＣＤＲ残基を具体的に同定することができる。特にＬＣ−ＣＤＲ３およびＨＣ−ＣＤＲ３を標的化することが多い。
【０１３９】
ある実施形態において、置換、挿入、または欠失は、このような変更がＩＬ−２２に結合する抗体または抗体断片の能力を実質的に低減させない限り、１つ以上のＣＤＲ内に生じてよい。例えば、結合親和性を実質的に低減させない保存的変更（例えば、本明細書で提供されるような保存的置換）をＣＤＲ中で作製することができる。このような変更は、ＣＤＲの「ホットスポット」の外側であってよい。バリアントＶHおよびＶL領域のある実施形態において、それぞれのＣＤＲは不変であり、または１つ、２つ、もしくは３つ以下のアミノ酸置換を含有する。
【０１４０】
いくつかの実施形態では、改変は、抗体の非ＣＤＲ領域に導入される。言い換えれば、配列番号７〜１２のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域および配列番号１３〜１８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域の相補性決定領域（ＣＤＲ）は無傷のそのままである。この改変は、代わりに、ＦＲまたは定数領域に導入されてもよい。
【０１４１】
突然変異誘発のために標的化することができる抗体のアミノ酸残基または領域を同定する有用な方法は、Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍ  ａｎｄ  Ｗｅｌｌｓ，Ｓｃｉｅｎｃｅ，ｖｏｌ．２４４，ｐｐ．１０８１−１０８５，１９８９により記載されるとおり「アラニンスキャニング変異誘発」である。この方法において、標的残基の残基または群（例えば、荷電残基、例えば、ａｒｇ、ａｓｐ、ｈｉｓ、ｌｙｓ、およびｇｌｕ）を同定し、中性または負荷電アミノ酸（例えば、アラニンまたはポリアラニン）により置き換えて抗体または抗体断片と抗原との相互作用が影響されるか否かを決定する。さらなる置換を、最初の置換に対して機能的感受性を実証するアミノ酸位置において導入することができる。あるいは、またはさらに、抗体または抗体断片と抗原との間の接触点を同定するための抗原−抗体複合体の結晶構造を使用することができる。このような接触残基および隣接残基を置換の候補として標的化し、または排除することができる。バリアントをスクリーニングしてそれらが所望の特性を含有するか否かを決定することができる。
【０１４２】
アミノ酸配列挿入としては、１残基から多数の残基を含有する領域の長さの範囲であるアミノおよび／またはカルボキシル末端融合、ならびに単一または複数のアミノ酸残基の配列内挿入が挙げられる。末端挿入の例としては、Ｎ末端メチオニル残基を有する抗体が挙げられる。抗体分子の他の挿入バリアントとしては、抗体のＮまたはＣ末端と酵素との融合（例えば、ＡＤＥＰＴのための）または抗体の血清半減期を増加させるポリペプチドとの融合が挙げられる。
【０１４３】
本明細書に記載の抗体のアミノ酸配列改変は、抗体の結合親和性および／または他の生物学的特性を改善し得る。
【０１４４】
本発明のさらなる態様は、抗体または抗体断片の機能保存的バリアントを包含する。機能保存バリアントとは、抗体の全体的なコンホメーションおよび機能を変化させることなく抗体中の所与のアミノ酸残基が変化したものであり、例えば極性、水素結合電位、酸性、塩基性、疎水性、芳香族などのような類似の特性を有するアミノ酸との置換を含むが、これらに限定されるものではない。保存されていると示されているもの以外のアミノ酸は、類似の機能を有する任意の２つのタンパク質間の％タンパク質またはアミノ酸配列の類似性が変化し得るようにタンパク質が異なる可能性があり、例えば、クラスター法のようなアラインメントスキームに従って決定される７０％〜９９％であってよく、ここで類似性はＭＥＧＡＬＩＧＮアルゴリズムに基づく。「機能保存的バリアント」はまた、ＢＬＡＳＴもしくはＦＡＳＴＡアルゴリズムによって決定される少なくとも６０％のアミノ酸同一性、または親抗体もしくは抗体断片と少なくとも７５％、もしくは少なくとも８５％、もしくは少なくとも９０％、もしくは少なくとも９１％、もしくは少なくとも９２％、もしくは少なくとも９３％、もしくは少なくとも９４％、もしくは少なくとも９５％、もしくは少なくとも９６％、もしくは少なくとも９７％、もしくは少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％の同一性を有し、本発明によって同定される抗体もしくは抗体断片と同一もしくは実質的に類似の特性もしくは機能、特にヒトおよびマウスＩＬ−２２の両方に対する良好な結合親和性を有する抗体を含む。
【０１４５】
２．ヒト化抗体または抗体断片
いくつかの実施形態において、本発明はヒト化抗体を提供する。典型的には、非ヒト抗体は、親の非ヒト抗体の特異性および親和性を保持しながら、ヒトに対する免疫原性を低下させるためにヒト化される。一般に、ヒト化抗体は、ＣＤＲ（またはその部分）が非ヒト抗体に由来し、ＦＲ（またはその部分）がヒト抗体に由来する１つ以上の可変領域を含む。ヒト化抗体は、場合によりヒト定常領域の少なくとも一部も含み得る。一部の実施形態において、ヒト化抗体中の一部のＦＲ残基は、例えば、抗体の特異性または親和性を回復させ、または改善するために非ヒト抗体（例えば、ＣＤＲ残基が由来する抗体）からの対応する残基により置換される。
【０１４６】
非ヒト抗体をヒト化するための種々の方法が当技術分野で知られている。例えば、ヒト化抗体は、非ヒトである供給源から導入された１以上のアミノ酸残基を有することができる。これらの非ヒトアミノ酸残基は「インポート」残基と呼ばれることが多く、典型的には「インポート」可変ドメインから取られたものである。ヒト化は、ヒト抗体の対応する配列のために超可変領域配列を置換することにより、Ｗｉｎｔｅｒらの方法（Ｊｏｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．  （１９８６）  Ｎａｔｕｒｅ，  ｖｏｌ．  ３２１，  ｐｐ．  ５２２−５２５；  Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．  （１９８８）  Ｎａｔｕｒｅ，  ｖｏｌ．  ３３２，  ｐｐ．  ３２３−３２７；  Ｖｅｒｈｏｅｙｅｎ  ｅｔ  ａｌ．  （１９８８）  Ｓｃｉｅｎｃｅ，  ｖｏｌ．  ２３９，  ｐｐ．  １５３４−１５３６）に従い、基本的に行うことができる。したがって、このような「ヒト化」抗体は、キメラ抗体（米国特許第４，８１６，５６７号）であり、無傷のヒト可変領域よりも実質的に少ない領域が、非ヒト種からの対応する配列によって置換されている。実際、ヒト化抗体は通常は、いくつかのＣＤＲ残基と可能性のあるいくつかのＦＲ残基とが齧歯類抗体の中の同様の部位に由来する残基で置換されているヒト抗体である。
【０１４７】
ヒト化抗体を作製する際に使用するヒト可変領域の選択は、重鎖軽鎖ともに、抗原性を低下させるために重要であり得る。いわゆる「最良適合」方法によれば、げっ歯類抗体の可変領域の配列を、既知のヒト可変ドメイン配列の全ライブラリーに対してスクリーニングする。次いで、齧歯類のものに最も近いヒト配列が、ヒト化抗体のヒトフレームワークとして認められる  （Ｓｉｍｓ  ｅｔ  ａｌ．  （１９９３）  Ｊ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．，  ｖｏｌ．１５１，  ｐｐ．  ２２９６；  Ｃｈｏｔｈｉａ  ｅｔ  ａｌ．  （１９８７）  Ｊ．  Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，  ｖｏｌ．１９６，  ｐ．  ９０１。もう一つの方法は、軽鎖又は重鎖の特定のサブグループの全てのヒト抗体のコンセンサス配列から誘導される特定のフレームワークを使用するものである。同じフレームワークを、いくつかの異なるヒト化抗体に使用することができる（Ｃａｒｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．  （１９９２）  Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，  ｖｏｌ．８９，  ｐ．  ４２８５；  Ｐｒｅｓｔａ  ｅｔ  ａｌ．  （１９９３）  Ｊ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．，  ｖｏｌ．１５１，  ｐ．  ２６２３。
【０１４８】
さらに一般的には、抗体は、抗原に対する高い親和性および他の好ましい生物学的特性の保持を伴ってヒト化されることが望ましい。この目的を達成するために、１つの方法によれば、親配列およびヒト化配列の三次元モデルを用いて、親配列および種々の概念的ヒト化産物の分析のプロセスによって、ヒト化抗体を調製する。三次元免疫グロブリンモデルは通常入手でき、当業者が精通している。選択された候補免疫グロブリン配列の三次元立体配座構造の蓋然性を例示し表示するコンピュータプログラムが利用可能である。これらの表示の精査は、候補免疫グロブリン配列の機能化における残基のありそうな役割の分析、すなわち、その抗原に結合する候補免疫グロブリンの能力に影響する残基の分析を可能とする。このようにして、ＦＲ残基をレシピエントから選択し組み合わせて、配列をインポートし、標的抗原に対する増加した親和性のような所望の抗体特性が達成されるようにすることができる。一般に、ＣＤＲ残基は、抗原結合に影響を及ぼすのに直接的かつ最も実質的に関与する。
【０１４９】
ヒト化抗体およびその作製方法は、例えば、Ａｌｍａｇｒｏ  ａｎｄ  Ｆｒａｎｓｓｏｎ，Ｆｒｏｎｔ．Ｂｉｏｓｃｉ．，ｖｏｌ．１３，ｐｐ．１６１９−１６３３，２００８に概説されており、さらに例えば、Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，ｖｏｌ．３３２，ｐｐ．３２３−３２９，１９８８；Ｑｕｅｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ  Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，ｖｏｌ．８６，ｐｐ．１００２９−１００３３，１９８９；米国特許第５，８２１，３３７号明細書、同第７，５２７，７９１号明細書、同第６，９８２，３２１号明細書、および同第７，０８７，４０９号明細書、Ｋａｓｈｍｉｒｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ，ｖｏｌ．３６，ｐｐ．２５−３４，２００５（ＳＤＲ（ａ−ＣＤＲ）グラフト化について記載）；Ｐａｄｌａｎ，Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，ｖｏｌ．２８，ｐｐ．４８９−４９８，１９９１（「リサーフェイシング」について記載）；Ｄａｌｌ’Ａｃｑｕａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ，ｖｏｌ．３６，ｐｐ．４３−６０，２００５（「ＦＲシャフリング」について記載）；ならびにＯｓｂｏｕｒｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ，ｖｏｌ．３６，ｐｐ．６１−６８，２００５およびＫｌｉｍｋａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ，ｖｏｌ．８３，ｐｐ．２５２−２６０，２０００（ＦＲシャフリングに対する「誘導選択」アプローチについて記載）に記載されている。
【０１５０】
ヒト化に使用することができるヒトフレームワーク領域としては、限定されるものではないが、「ベストフィット」法（例えば、Ｓｉｍｓ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，ｖｏｌ．１５１，ｐ．２２９６，１９９３参照）を使用して選択されるフレームワーク領域；軽鎖または重鎖可変領域の特定のサブグループにおけるヒト抗体のコンセンサス配列に由来するフレームワーク領域（例えば、Ｃａｒｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，ｖｏｌ．８９，ｐ．４２８５，１９９２；およびＰｒｅｓｔａ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，ｖｏｌ．１５１，ｐ．２６２３，１９９３参照）、ヒト成熟（体細胞変異）フレームワーク領域またはヒト生殖細胞系列フレームワーク領域（例えば、Ａｌｍａｇｒｏ  ａｎｄ  Ｆｒａｎｓｓｏｎ，Ｆｒｏｎｔ．Ｂｉｏｓｃｉ．，ｖｏｌ．１３，ｐｐ．１６１９−１６３３，２００８参照）；ならびにＦＲライブラリーのスクリーニングに由来するフレームワーク領域（例えば、Ｂａｃａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，ｖｏｌ．２７２，ｐｐ．１０６７８−１０６８４，１９９７およびＲｏｓｏｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，ｖｏｌ．２７１，ｐｐ．２２６１１−２２６１８，１９９６参照）が挙げられる。
【０１５１】
非ヒト動物に由来する抗体のＶHおよびＶL中のＣＤＲのみをヒト抗体のＶHおよびＶLのＦＲ中に簡易にグラフト化することによりヒト化抗体を産生する場合、抗体結合親和性は、非ヒト動物に由来する元の抗体のものと比較して低減することが公知である。非ヒト抗体のＶHおよびＶLのいくつかのアミノ酸残基は、ＣＤＲ中だけでなく、ＦＲ中のものも抗体結合親和性に直接または間接的に関連することが考慮される。したがって、ヒト抗体のＶHおよびＶLのＦＲに由来する異なるアミノ酸残基によるこれらのアミノ酸残基の置換は、結合親和性を低減させ得る。この問題を解消するため、ヒトＦＲがグラフト化される抗体において、ヒト抗体のＶHおよびＶLのＦＲのアミノ酸配列のうち、抗体への結合に直接関連し、またはＣＤＲのアミノ酸残基と相互作用し、または抗体の三次元構造を維持し、抗原への結合に直接関連するアミノ酸残基を同定することを試行しなければならない。低減した抗原結合親和性は、同定されたアミノ酸を非ヒト動物に由来する元の抗体のアミノ酸残基により置き換えることにより改良させることができる。
【０１５２】
３．グリコシル化バリアント
特定の実施形態に、本明細書に提供される抗体またはその断片は、抗体が１つ以上のオリゴ糖を付加することによって修飾され、したがってグリコシル化抗体になる程度を増加または減少するように改変される。改変は、１つ以上のグリコシル化部位にオリゴ糖を付加することによって行われる。抗体へのグリコシル化部位の付加または欠失は、１つ以上のグリコシル化部位が作出または除去されるようにアミノ酸配列を変更することにより便宜的に達成することができる。
【０１５３】
抗体がＦｃ領域を含む場合、それに付着している炭水化物を変更することができる。哺乳動物細胞により産生される天然抗体は、典型的には、一般にＦｃ領域のＣＨ２ドメインのＡｓｎ２９７へのＮ結合により付着している分岐した二分岐オリゴ糖を含む。例えば、Ｗｒｉｇｈｔ  ｅｔ  ａｌ．ＴＩＢＴＥＣＨ，ｖｏｌ．１５，ｐｐ．２６−３２，１９９７参照。オリゴ糖としては、種々の炭水化物、例えば、マンノース、Ｎ−アセチルグルコサミン（ＧｌｃＮＡｃ）、ガラクトース、およびシアル酸、ならびに二分岐オリゴ糖構造の「幹」におけるＧｌｃＮＡｃに付着しているフコースを挙げることができる。一部の実施形態において、本発明の抗体中のオリゴ糖の改変は、ある改善された特性を有する抗体バリアントを作出するために作製することができる。
【０１５４】
一実施形態において、Ｆｃ領域に（直接的または間接的に）付着しているフコースを欠く炭水化物構造を有する抗体バリアントが提供される。例えば、このような抗体中のフコース量は、１％〜８０％、１％〜６５％、５％〜６５％または２０％〜４０％であり得る。フコース量は、例えば、国際公開第２００８／０７７５４６号パンフレットに記載のとおりＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ質量分析法により計測してＡｓｎ２９７に付着している全ての糖構造（例えば、複合体、ハイブリッドおよび高マンノース構造）の合計と比較してＡｓｎ２９７における糖鎖内のフコースの平均量を算出することにより決定される。Ａｓｎ２９７は、Ｆｃ領域中の２９７位あたり（Ｆｃ領域残基のＥＵ番号付け）に位置するアスパラギン残基を指し；しかしながら、Ａｓｎ２９７は、抗体中の軽微な配列変動に起因して２９７位の約±３アミノ酸上流または下流、すなわち、２９４位〜３００位の間にも位置し得る。このようなフコシル化バリアントは、改善されたＡＤＣＣ機能を有し得る。例えば、米国特許出願公開第２００３／０１５７１０８号明細書（Ｐｒｅｓｔａ，Ｌ．）；米国特許出願公開第２００４／００９３６２１号明細書（Ｋｙｏｗａ  Ｈａｋｋｏ  Ｋｏｇｙｏ  Ｃｏ．，Ｌｔｄ）参照。「脱フコシル化」または「フコース欠損」抗体バリアントに関連する刊行物の例としては、米国特許出願公開第２００３／０１５７１０８号明細書；国際公開第２０００／６１７３９号パンフレット；国際公開第２００１／２９２４６号パンフレット；米国特許出願公開第２００３／０１１５６１４号明細書；米国特許出願公開第２００２／０１６４３２８号明細書；米国特許出願公開第２００４／００９３６２１号明細書；米国特許出願公開第２００４／０１３２１４０号明細書；米国特許出願公開第２００４／０１１０７０４号明細書；米国特許出願公開第２００４／０１１０２８２号明細書；米国特許出願公開第２００４／０１０９８６５号明細書；国際公開第２００３／０８５１１９号パンフレット；国際公開第２００３／０８４５７０号パンフレット；国際公開第２００５／０３５５８６号パンフレット；国際公開第２００５／０３５７７８号パンフレット；国際公開第２００５／０５３７４２号パンフレット；国際公開第２００２／０３１１４０号パンフレット；Ｏｋａｚａｋｉ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，ｖｏｌ．３３６，ｐｐ．１２３９−１２４９，２００４；Ｙａｍａｎｅ−Ｏｈｎｕｋｉ  ｅｔ  ａｌ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．Ｂｉｏｅｎｇ．，ｖｏｌ．８７，ｐｐ．６１４−６２２，２００４が挙げられる。脱フコシル化抗体を産生し得る細胞系の例としては、タンパク質フコシル化を欠損するＬｅｃ１３ＣＨＯ細胞（Ｒｉｐｋａ  ｅｔ  ａｌ．Ａｒｃｈ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．，ｖｏｌ．２４９，ｐｐ．５３３−５４５，１９８６；米国特許出願第２００３／０１５７１０８Ａ号明細書；および国際公開第２００４／０５６３１２Ａ１号パンフレット、特に実施例１１）、ならびにノックアウト細胞系、例えば、アルファ−１，６−フコシルトランスフェラーゼ遺伝子、ＦＵＴ８ノックアウトＣＨＯ細胞（例えば、Ｙａｍａｎｅ−Ｏｈｎｕｋｉ  ｅｔ  ａｌ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．Ｂｉｏｅｎｇ．，ｖｏｌ．８７，ｐｐ．６１４−６２２，２００４；Ｋａｎｄａ，Ｙ．ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｂｉｏｅｎｇ．，ｖｏｌ．９４，ｐｐ．６８０−６８８，２００６；および国際公開第２００３／０８５１０７号パンフレット参照）が挙げられる。
【０１５５】
例えば、抗体のＦｃ領域に付着している二分岐オリゴ糖がＧｌｃＮＡｃにより二分されている二分オリゴ糖を有する抗体バリアントがさらに提供される。このような抗体バリアントは、低減したフコシル化および／または改善されたＡＤＣＣ機能を有し得る。このような抗体バリアントの例は、例えば、国際公開第２００３／０１１８７８号パンフレット；米国特許第６，６０２，６８４号明細書；および米国特許出願公開第２００５／０１２３５４６号明細書に記載されている。Ｆｃ領域に付着しているオリゴ糖中の少なくとも１つのガラクトース残基を有する抗体バリアントも提供される。このような抗体バリアントは、改善したＣＤＣ機能を有し得る。このような抗体バリアントは、例えば、国際公開第１９９７／３００８７号パンフレット；国際公開第１９９８／５８９６４号パンフレット；および国際公開第１９９９／２２７６４号パンフレットに記載されている。
【０１５６】
４．Ｆｃ領域バリアント
ある実施形態において、１つ以上のアミノ酸改変を本明細書において提供される抗体のＦｃ領域中に導入し、それによりＦｃ領域バリアントを生成することができる。Ｆｃ領域バリアントは、１つ以上のアミノ酸位置におけるアミノ酸改変（例えば、置換）を含むヒトＦｃ領域配列（例えば、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３またはＩｇＧ４Ｆｃ領域）を含み得る。
【０１５７】
ある実施形態において、本発明は、全てではないが一部のエフェクター機能を保有するＦｃ領域バリアントを抗体バリアントに提供し、これらは、ｉｎ  ｖｉｖｏにおける抗体の半減期が重要であり、あるエフェクター機能（例えば、ＡＤＣＣ）が不要または有害である用途に関して望ましい候補となる。インビトロおよび／またはｉｎ  ｖｉｖｏの細胞毒性アッセイを実施してＣＤＣおよび／またはＡＤＣＣ活性の低減／枯渇を確認することができる。例えば、Ｆｃ受容体（ＦｃＲ）結合アッセイを実施して抗体がＦｃγＲ結合を欠く（したがって、ＡＤＣＣ活性を欠く可能性が高い）が、ＦｃＲｎ結合能を保持することを確保することができる。ＡＤＣＣを媒介する一次細胞であるＮＫ細胞はＦｃγＲＩＩＩのみを発現する一方、単球はＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩおよびＦｃγＲＩＩＩを発現する。造血細胞上でのＦｃＲ発現は、Ｒａｖｅｔｃｈ  ａｎｄ  Ｋｉｎｅｔ，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，ｖｏｌ．９，ｐｐ．４５７−４９２，１９９１の４６４頁の表５にまとめられている。目的の分子のＡＤＣＣ活性を評価するためのインビトロアッセイの非限定的な例は、米国特許第５，５００，３６２号明細書（例えば、Ｈｅｌｌｓｔｒｏｍ  ｅｔ  ａｌ．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ  Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，ｖｏｌ．８３，ｐｐ．７０５９−７０６３，１９８６も参照）およびＨｅｌｌｓｔｒｏｍ，Ｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ  Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，ｖｏｌ．８２，ｐｐ．１４９９−１５０２，１９８５；米国特許第５，８２１，３３７号明細書（Ｂｒｕｇｇｅｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．，ｖｏｌ．１６６，ｐｐ．１３５１−１３６１，１９８７も参照）に記載されている。あるいは、非放射性アッセイ法を用いることができる（例えば、フローサイトメトリーのためのＡＣＴＩ（商標）非放射性細胞毒性アッセイ（ＣｅｌｌＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｉｎｃ．Ｍｏｕｎｔａｉｎ  Ｖｉｅｗ，Ｃａｌｉｆ．；およびＣｙｔｏＴｏｘ  ９６（登録商標）非放射性細胞毒性アッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ，Ｍａｄｉｓｏｎ，Ｗｉｓ．）参照。このようなアッセイに有用なエフェクター細胞としては、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）およびナチュラルキラー（ＮＫ）細胞が挙げられる。あるいは、またはさらに、目的の分子のＡＤＣＣ活性を、例えば、動物モデル、例えば、Ｃｌｙｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ  Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，ｖｏｌ．９５，ｐｐ．６５２−６５６，１９９８に開示のものにおいてｉｎ  ｖｉｖｏで評価することができる。Ｃ１ｑ結合アッセイを実施して、抗体がＣ１ｑに結合し得ず、したがってＣＤＣ活性を欠くことを確認することもできる。例えば、国際公開第２００６／０２９８７９号パンフレットおよび国際公開第２００５／１００４０２号パンフレットにおけるＣ１ｑおよびＣ３ｃ結合ＥＬＩＳＡ参照。補体活性化を評価するため、ＣＤＣアッセイを実施することができる（例えば、Ｇａｚｚａｎｏ−Ｓａｎｔｏｒｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ，ｖｏｌ．２０２，ｐｐ．１６３−１７１，１９９６；Ｃｒａｇｇ，Ｍ．Ｓ．ｅｔ  ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ，ｖｏｌ．１０１，ｐｐ．１０４５−１０５２，２００３；およびＣｒ��ｇｇ，Ｍ．Ｓ，ａｎｄ  Ｍ．Ｊ．Ｇｌｅｎｎｉｅ，Ｂｌｏｏｄ，ｖｏｌ．１０３，ｐｐ．２７３８−２７４３，２００４参照）。ＦｃＲｎ結合およびｉｎ  ｖｉｖｏクリアランス／半減期の決定も、当分野において公知の方法を使用して実施することができる（例えば、Ｐｅｔｋｏｖａ，Ｓ．Ｂ．ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｔ’ｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，ｖｏｌ．１８，ｐｐ．１７５９−１７６９，２００６参照）。
【０１５８】
減少したエフェクター機能を有する抗体としては、Ｆｃ領域残基２３８、２６５、２６９、２７０、２９７、３２７および３２９の１つ以上の置換を有するもの（米国特許第６，７３７，０５６号明細書）が挙げられる。このようなＦｃ突然変異体は、アミノ酸２６５、２６９、２７０、２９７および３２７位の２つ以上における置換を含み、残基２６５および２９７のアラニン置換を有する、いわゆる「ＤＡＮＡ」Ｆｃ突然変異体（米国特許第７，３３２，５８１号明細書）が挙げられる。
【０１５９】
ＦｃＲに対する改善または縮小した結合を有するある抗体バリアントが記載されている（例えば、米国特許第６，７３７，０５６号明細書、国際公開第２００４／０５６３１２号パンフレット、およびＳｈｉｅｌｄｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，ｖｏｌ．９，ｐｐ．６５９１−６６０４，２００１参照）。
【０１６０】
ある実施形態において、抗体バリアントは、ＡＤＣＣを改善する１つ以上のアミノ酸置換、例えば、Ｆｃ領域の２９８、３３３、および／または３３４位（残基のＥＵ番号付け）における置換を有するＦｃ領域を含む。
【０１６１】
一部の実施形態において、変更された（すなわち、改善され、または縮小した）Ｃ１ｑ結合および／または補体依存性細胞毒性（ＣＤＣ）をもたらす変更、例えば、米国特許第６，１９４，５５１号明細書、国際公開第９９／５１６４２号パンフレット、およびＩｄｕｓｏｇｉｅ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，ｖｏｌ．１６４，ｐｐ．４１７８−４１８４，２０００に記載のものが、Ｆｃ領域中で作製される。
【０１６２】
増加した半減期を有し、胎児への母体ＩｇＧの移動を担う（Ｇｕｙｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，ｖｏｌ．１１７，ｐｐ．５８７−５９３，１９７６およびＫｉｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，ｖｏｌ．２４，ｐ．２４９，１９９４）新生児Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）への改善された結合を有する抗体が、米国特許出願公開第２００５／００１４９３４号明細書に記載されている。それらの抗体は、その中にＦｃ領域のＦｃＲｎへの結合を改善する１つ以上の置換を有するＦｃ領域を含む。このようなＦｃバリアントとしては、Ｆｃ領域残基：２３８、２５６、２６５、２７２、２８６、３０３、３０５、３０７、３１１、３１２、３１７、３４０、３５６、３６０、３６２、３７６、３７８、３８０、３８２、４１３、４２４または４３４の１つ以上における置換、例えば、Ｆｃ領域残基４３４の置換（米国特許第７，３７１，８２６号明細書）を有するものが挙げられる。Ｆｃ領域バリアントの他の例としては、Ｄｕｎｃａｎ  ＆  Ｗｉｎｔｅｒ，Ｎａｔｕｒｅ，ｖｏｌ．３２２，ｐｐ．７３８−７４０，１９８８；米国特許第５，６４８，２６０号明細書；米国特許第５，６２４，８２１号明細書；および国際公開第９４／２９３５１号パンフレットも参照。
【０１６３】
５．システインエンジニアリング抗体バリアント
ある実施形態において、抗体の１つ以上の残基がシステイン残基により置換されているシステインエンジニアリング抗体、例えば、「ｔｈｉｏＭＡｂ」を作出することが望ましい場合がある。特定の実施形態において、置換残基は抗体のアクセス可能な部位に生じる。それらの残基をシステインにより置換することにより、反応性チオール基は、それにより抗体のアクセス可能な部位に位置され、それを使用して抗体を他の部分、例えば、薬物部分またはリンカー−薬物部分とコンジュゲートさせて本明細書においてさらに記載されるとおり免疫コンジュゲートを作出することができる。ある実施形態において、以下の残基のいずれか１つ以上をシステインにより置換することができる：軽鎖のＶ２０５（Ｋａｂａｔ番号付け）、重鎖のＡ１１８（ＥＵ番号付け）；および重鎖Ｆｃ領域の５４００（ＥＵ番号付け）。システインエンジニアリング抗体は、例えば、米国特許第７，５２１，５４１号明細書に記載のとおり生成することができる。
【０１６４】
６．抗体誘導体
ある実施形態において、本明細書において提供される抗体または抗体断片は、当分野において公知の容易に利用可能な追加の非タンパク質部分を含有する改変された抗体または抗体断片であってもよい。抗体または抗体断片の誘導体化に好適な部分としては、限定されるものではないが、水溶性ポリマーが挙げられる。水溶性ポリマーの非限定的な例としては、限定されるものではないが、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、エチレングリコール／プロピレングリコールのコポリマー、カルボキシメチルセルロース、デキストラン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ポリ−１，３−ジオキソラン、ポリ−１，３，６−トリオキサン、エチレン／無水マレイン酸コポリマー、ポリアミノ酸（ホモポリマーまたはランダムコポリマーのいずれか）、およびデキストランまたはポリ（ｎ−ビニルピロリドン）ポリエチレングリコール、プロピレングリコールホモポリマー、ポリプロピレンオキシド／エチレンオキシドコポリマー、ポリオキシエチル化ポリオール（例えば、グリセロール）、ポリビニルアルコール、ならびにそれらの混合物が挙げられる。ポリエチレングリコールプロピオンアルデヒドは、水中でのその安定性に起因して製造上の利点を有し得る。
【０１６５】
ポリマーは、任意の分子量のものであり得、分岐でも非分岐でもよい。抗体または抗体断片に付着しているポリマーの数は変動し得、２つ以上のポリマーが付着している場合、それらは同一または異なる分子であり得る。一般に、抗体誘導体化に使用されるポリマーの数および／またはタイプは、検討事項、例として、限定されるものではないが、改善すべき抗体または抗体断片の特定の特性または機能、その誘導体が規定の条件下で治療法において使用されるか否かなどに基づき決定することができる。
【０１６６】
ある実施形態において、抗体または抗体断片と非タンパク質部分は、放射線への曝露により選択的に加熱を使用して結合され得る。一実施形態において、非タンパク質部分は、カーボンナノチューブである（Ｋａｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，ｖｏｌ．１０２，ｐｐ．１１６００−１１６０５，２００５）。放射線は任意の波長のものであり得、それとしては、限定されるものではないが、通常の細胞を害することはないが、抗体−非タンパク質部分の近位の細胞が殺滅される温度まで非タンパク質部分を加熱する波長が挙げられる。
【０１６７】
本発明の抗ＩＬ−２２抗体は、キメラ抗体であり得る。あるキメラ抗体は、例えば、米国特許第４，８１６，５６７号明細書；およびＭｏｒｒｉｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，ｖｏｌ．８１，ｐｐ．６８５１−６８５５，１９８４）に記載されている。一例において、キメラ抗体は、非ヒト可変領域（例えば、マウス、ラット、ハムスター、ウサギ、または非ヒト霊長類、例えば、サルに由来する可変領域）およびヒト定常領域を含む。さらなる例において、キメラ抗体は、抗体のクラスまたはサブクラスが親抗体のクラスまたはサブクラスに対して変化している「クラススイッチ」抗体である。キメラ抗体は、それらの抗原結合断片を含む。
【０１６８】
一部の実施形態において、本発明の抗ＩＬ−２２抗体は、多重特異的抗体、例えば、二重特異的抗体である。多重特異的抗体は、少なくとも２つの異なる部位についての結合特異性を有するモノクローナル抗体である。ある実施形態において、結合特異性のあるものはＩＬ−２２についてのものであり、他方は別の抗原についてのものである。ある実施形態において、二重特異的抗体は、ＩＬ−２２の２つの異なるエピトープに結合し得る。二重特異的抗体は、ＩＬ−２２を発現する細胞に対して細胞毒性剤を局在化させるために使用することもできる。二重特異的抗体は、全長抗体または抗体断片として調製することができる。
【０１６９】
多重特異的抗体を作製する技術としては、限定されるものではないが、異なる特異性を有する２つの免疫グロブリン重鎖−軽鎖ペアの組換え共発現（Ｍｉｌｓｔｅｉｎ  ａｎｄ  Ｃｕｅｌｌｏ，Ｎａｔｕｒｅ，ｖｏｌ．３０５，ｐｐ．５３７−５４０，１９８３）、国際公開第９３／０８８２９号パンフレット、およびＴｒａｕｎｅｃｋｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，ＥＭＢＯ  Ｊ．ｖｏｌ．１０，ｐｐ．３６５５−３６５９，１９９１参照）、ならびに「ノブインホール（ｋｎｏｂ−ｉｎ−ｈｏｌｅ）」エンジニアリング（例えば、米国特許第５，７３１，１６８号明細書参照）が挙げられる。多重特異的抗体は、抗体Ｆｃヘテロ二量体分子を作製するために静電ステアリング（ｅｌｅｃｔｒｏｓｔａｔｉｃ  ｓｔｅｅｒｉｎｇ）効果をエンジニアリングすること（国際公開第２００９／０８９００４Ａ１号パンフレット）；２つ以上の抗体または断片を架橋すること（例えば、米国特許第４，６７６，９８０号明細書、およびＢｒｅｎｎａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，ｖｏｌ．２２９，ｐｐ．８１−８３，１９８５参照）；二重特異的抗体を産生するためにロイシンジッパーを使用すること（例えば、Ｋｏｓｔｅｌｎｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，ｖｏｌ．１４８，ｐｐ．１５４７−１５５３，１９９２参照）；二重特異的抗体断片を作製するために「ダイアボディ」技術を使用すること（例えば、Ｈｏｌｌｉｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，ｖｏｌ．９０，ｐｐ．６４４４−６４４８，１９９３参照）；ならびに一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）二量体を使用すること（例えば、Ｇｒｕｂｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，ｖｏｌ．１５２，ｐｐ．５３６８−５３７４，１９９４参照）；ならびに例えば、Ｔｕｔｔ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，ｖｏｌ．１４７，ｐｐ．６０−６９，１９９１に記載のとおり三重特異的抗体を調製することにより作製することもできる。
【０１７０】
３つ以上の機能的抗原結合部位を有するエンジニアリング抗体、例として「オクトパス抗体」も本明細書に含まれる（例えば、米国特許出願公開第２００６／００２５５７６Ａ１号明細書参照）。
【０１７１】
抗体または抗体断片としては、ＩＬ−２２および別の異なる抗原に結合する抗原結合部位を含む「二重作用Ｆａｂ」または「ＤＡＦ」も挙げられる（例えば、米国特許出願公開第２００８／００６９８２０号明細書参照）。
【０１７２】
Ｃ．免疫コンジュゲート
別の態様では、本発明はまた、１つ以上の治療薬、予防薬、診断薬、検出可能な標識、キレート剤および造影剤への結合によって改変される本明細書に記載される抗ＩＬ−２２抗体または抗体断片を含む免疫コンジュゲートを提供する。一実施形態において、免疫コンジュゲートは、抗体が１つ以上の薬物にコンジュゲートしている抗体−薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）であり、その薬物としては、限定されるものではないが、メイタンシノイド（米国特許第５，２０８，０２０号明細書、同第５，４１６，０６４号明細書および欧州特許第０４２５２３５Ｂ１号明細書参照）；アウリスタチン、例えば、モノメチルアウリスタチン薬物部分ＤＥおよびＤＦ（ＭＭＡＥおよびＭＭＡＦ）（米国特許第５，６３５，４８３号明細書および同第５，７８０，５８８号明細書、および同第７，４９８，２９８号明細書参照）；ドラスタチン；カリケアマイシンまたはその誘導体（米国特許第５，７１２，３７４号明細書、同第５，７１４，５８６号明細書、同第５，７３９，１１６号明細書、同第５，７６７，２８５号明細書、同第５，７７０，７０１号明細書、同第５，７７０，７１０号明細書、同第５，７７３，００１号明細書、および同第５，８７７，２９６号明細書参照；Ｈｉｎｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．，ｖｏｌ．５３，ｐｐ．３３３６−３３４２，１９９３；およびＬｏｄｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．，ｖｏｌ．５８，ｐｐ．２９２５−２９２８，１９９８）；アントラサイクリン、例えば、ダウノマイシンまたはドキソルビシン（Ｋｒａｔｚ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，ｖｏｌ．１３，ｐｐ．４７７−５２３，２００６；Ｊｅｆｆｒｅｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ＆Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔｅｒｓ，ｖｏｌ．１６，ｐｐ．３５８−３６２，２００６；Ｔｏｒｇｏｖ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｏｎｊ．Ｃｈｅｍ．，ｖｏｌ．１６，ｐｐ．７１７−７２１，２００５；Ｎａｇｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，ｖｏｌ．９７，ｐｐ．８２９−８３４，２０００；Ｄｕｂｏｗｃｈｉｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｏｒｇ．＆Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔｅｒｓ，ｖｏｌ．１２，ｖｏｌ．１５２９−１５３２，２００２；Ｋｉｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，ｖｏｌ．４５，ｐｐ．４３３６−４３４３，２００２；ならびに米国特許第６，６３０，５７９号明細書参照）；メトトレキサート；ビンデシン；タキサン、例えば、デセタキセル、パクリタキセル、ラロタキセル、テセタキセル、およびオルタタキセル；トリコテセン；およびＣＣ１０６５が挙げられる。
【０１７３】
１つの実施形態において、結合剤は、化学療法剤または薬物、増殖阻害剤、毒素（例えば、タンパク質毒素、細菌、真菌、植物、または動物起源の酵素活性毒素、またはその断片）、または放射性同位体などの細胞毒性剤から選択されるである。
【０１７４】
別の実施形態において、結合剤は、例として、限定されるものではないが、ジフテリアＡ鎖、ジフテリア毒素の非結合活性断片、外毒素Ａ鎖（緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）からのもの）、リシンＡ鎖、アブリンＡ鎖、モデシンＡ鎖、アルファ−サルシン、シナアブラギリ（Ａｌｅｕｒｉｔｅｓ  ｆｏｒｄｉｉ）タンパク質、ジアンチン（ｄｉａｎｔｈｉｎ）タンパク質、ヨウシュアヤマゴボウ（Ｐｈｙｔｏｌａｃａ  ａｍｅｒｉｃａｎａ）タンパク質（ＰＡＰＩ、ＰＡＰＩＩ、およびＰＡＰ−Ｓ）、ツルレイシ（ｍｏｍｏｒｄｉｃａ  ｃｈａｒａｎｔｉａ）阻害剤、またはクルシン、クロチン、サボンソウ（ｓａｐａｏｎａｒｉａ  ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ）阻害剤、ゲロニン、ミトゲリン、レストリクトシン、フェノマイシン、エノマイシン、およびトリコテセンを含む酵素活性毒素またはその断片である。
【０１７５】
別の実施形態において、コンジュゲートは、Ａｔ211、Ｉ131、Ｉ125、Ｙ90、Ｒｅ186、Ｒｅ188、Ｓｍ153、Ｂｉ212、Ｐ32、Ｐｂ212およびＬｕの放射性同位体を含む放射性原子を含む。放射性コンジュゲートを検出に使用する場合、それは、シンチグラフィー試験のための放射性原子、例えば、ｔｃ９９ｍもしくはＩ123、または核磁気共鳴（ＮＭＲ）イメージング（磁気共鳴イメージング、ｍｒｉとしても公知）用のスピン標識、例えば、ヨウ素−１２３、さらにヨウ素−１３１、インジウム−１１１、フッ素−１９、炭素−１３、窒素−１５、酸素−１７、ガドリニウム、マンガンを含み得る。
【０１７６】
抗体および細胞毒性剤の免疫コンジュゲートは、種々の二官能性タンパク質カップリング剤、例えば、Ｎ−スクシンイミジル−３−（２−ピリジルジチオ）プロピオネート（ＳＰＤＰ）、スクシンイミジル−４−（Ｎ−マレイミドメチル）シクロヘキサン−１−カルボキシレート（ＳＭＣＣ）、イミノチオラン（ＩＴ）、イミドエステルの二官能性誘導体（例えば、ジメチルアジプイミデートＨＣｌ）、活性エステル（例えば、スベリン酸ジスクシンイミジル）、アルデヒド（例えば、グルタルアルデヒド）、ビス−アジド化合物（例えば、ビス（ｐ−アジドベンゾイル）ヘキサンジアミン）、ビス−ジアゾニウム誘導体（例えば、ビス−（ｐ−ジアゾニウムベンゾイル）−エチレンジアミン）、ジイソシアネート（例えば、トルエン２，６−ジイソシアネート）、およびビス活性フッ素化合物（例えば、１，５−ジフルオロ−２，４−ジニトロベンゼン）を使用して作製することができる。例えば、リシン免疫毒素は、Ｖｉｔｅｔｔａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，ｖｏｌ．２３８，ｐ．１０９８，１９８７に記載のとおり調製することができる。炭素−１４により標識された１−イソチオシアナトベンジル−３−メチルジエチレントリアミンペンタ酢酸（ＭＸ−ＤＴＰＡ）は、放射性ヌクレオチドの抗体へのコンジュゲーションのための例示的なキレート剤またはキレーターである。国際公開第１９９４／１１０２６号パンフレット参照。リンカーは、細胞中で細胞毒性薬の放出を容易にする「開裂可能リンカー」であり得る。例えば、酸不安定性リンカー、ペプチダーゼ感受性リンカー、光不安定性リンカー、ジメチルリンカーまたはジスルフィド含有リンカー（Ｃｈａｒｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．，ｖｏｌ．５２，ｐｐ．１２７−１３１，１９９２；米国特許第５，２０８，０２０号明細書）を使用することができる。
【０１７７】
免疫コンジュゲートは、限定されるものではないが、ＢＭＰＳ、ＥＭＣＳ、ＧＭＢＳ、ＨＢＶＳ、ＬＣ−ＳＭＣＣ、ＭＢＳ、ＭＰＢＨ、ＳＢＡＰ、ＳＩＡ、ＳＩＡＢ、ＳＭＣＣ、ＳＭＰＢ、ＳＭＰＨ、スルホ−ＥＭＣＳ、スルホ−ＧＭＢＳ、スルホ−ＫＭＵＳ、スルホ−ＭＢＳ、スルホ−ＳＩＡＢ、スルホ−ＳＭＣＣ、およびスルホ−ＳＭＰＢ、ならびに（例えば、Ｐｉｅｒｃｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｉｎｃ．，Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，Ｉｌｌ．，Ｕ．Ｓ．Ａから）市販されているＳＶＳＢ（スクシンイミジル−（４−ビニルスルホン）ベンゾエート）を含む架橋試薬を用いて調製され得る。
【０１７８】
ＡＤＣの例示的な実施形態は、腫瘍細胞を標的化する抗体（Ａｂ）、薬物部分（Ｄ）、およびＡｂをＤに付着させるリンカー部分（Ｌ）を含む。一部の実施形態において、抗体は、１つ以上のアミノ酸残基、例えば、リジンおよび／またはシステインを介してリンカー部分（Ｌ）に付着している。ＡＤＣは、式Ａｂ−（Ｌ−Ｄ）p（式中ｐは１から約２０である）を有し得る。
【０１７９】
一部の実施形態において、抗体にコンジュゲートされ得る薬物部分の数は、遊離システイン残基の数により限定される。一部の実施形態において、遊離システイン残基は、本明細書に記載の方法により抗体アミノ酸配列中に導入される。例示的なＡＤＣとしては、限定されるものではないが、１、２、３、または４つのエンジニアリングされたシステインアミノ酸を有する抗体が挙げられる（Ｌｙｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍ．，ｖｏｌ．５０２，ｐｐ．１２３−１３８，２０１２）。一部の実施形態において、１つ以上の遊離システイン残基が、エンジニアリングを使用することなく抗体中で既に存在し、その場合、既存の遊離システイン残基を使用して抗体を薬物にコンジュゲートさせることができる。一部の実施形態において、抗体は、１つ以上の遊離システイン残基を生成するために抗体のコンジュゲーション前に還元条件に曝露される。
【０１８０】
リンカーを用いて、部分を抗体に結合させて、ＡＤＣのような免疫コンジュゲートを形成する。適当なリンカーはＷＯ２０１７／１８０８４２に記載されている。
【０１８１】
抗体に結合され得るいくつかの薬物部分は、ＷＯ２０１７／１８０８４２に記載されている。
【０１８２】
薬物部分としては、核酸分解活性を有する化合物（例えば、リボヌクレアーゼまたはＤＮＡエンドヌクレアーゼ）も挙げられる。
【０１８３】
ある実施形態において、免疫コンジュゲートは、核磁気共鳴（ＮＭＲ）イメージング用のスピン標識、例えば、ジルコニウム−８９、ヨウ素−１２３、ヨウ素−１３１、インジウム−１１１、フッ素−１９、炭素−１３、窒素−１５、酸素−１７、ガドリニウム、マンガンまたは鉄を含み得る。例えば、ＰＥＴイメージングのためにジルコニウム−８９を種々の金属キレート剤に錯化させ、抗体にコンジュゲートさせることができる（国際公開第２０１１／０５６９８３号パンフレット）。
【０１８４】
放射標識または他の標識は、公知の手法で免疫コンジュゲートに取り込むことができる。例えば、抗体または断片は、例えば、１つ以上のフッ素−１９原子を１つ以上の水素の代わりに含む好適なアミノ酸前駆体を使用して生合成または化学合成することができる。一部の実施形態において、標識、例えば、Ｔｃ99、Ｉ123、Ｒｅ186、Ｒｅ188、およびＩｎ111を、抗体中のシステイン残基を介して付着させることができる。一部の実施形態において、イットリウム−９０は、抗体のリジン残基を介して付着させることができる。一部の実施形態において、ＩＯＤＯＧＥＮ法（Ｆｒａｋｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．，ｖｏｌ．８０，ｐｐ．４９−５７，１９７８）を使用してヨウ素−１２３を取り込むことができる。「Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｓｃｉｎｔｉｇｒａｐｈｙ」（Ｃｈａｔａｌ，ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ  １９８９）は、ある他の方法を記載している。
【０１８５】
ある実施形態において、免疫コンジュゲートは、プロドラッグ活性化酵素にコンジュゲートしている抗体を含み得る。プロドラッグ活性化酵素は、プロドラッグ（例えば、ペプチジル化学療法剤、国際公開第８１／０１１４５号パンフレット参照）を活性薬物、例えば、抗癌薬に変換できる。このような免疫コンジュゲートは、抗体依存的酵素媒介性プロドラッグ療法（「ＡＤＥＰＴ」）において有用である。抗体にコンジュゲートさせることができる酵素としては、限定されるものではないが、ホスフェート含有プロドラッグを遊離薬物に変換するために有用なアルカリホスファターゼ；スルフェート含有プロドラッグを遊離薬物に変換するために有用なアリールスルファターゼ；非毒性５−フルオロシトシンを抗癌薬５−フルオロウラシルに変換するために有用なシトシンデアミナーゼ；ペプチド含有プロドラッグを遊離薬物に変換するために有用なプロテアーゼ、例えば、セラチアプロテアーゼ、テルモリシン、サブチリシン、カルボキシペプチダーゼ、およびカテプシン（例えば、カテプシンＢおよびＬ）；Ｄ−アミノ酸置換基を含有するプロドラッグを変換するために有用なＤ−アラニルカルボキシペプチダーゼ；グリコシル化プロドラッグを遊離薬物に変換するために有用な炭水化物開裂酵素、例えば、β−ガラクトシダーゼおよびノイラミニダーゼ；β−ラクタムにより誘導体化されている薬物を遊離薬物に変換するために有用なβ−ラクタマーゼ；ならびにアミン窒素においてフェノキシアセチルまたはフェニルアセチル基によりそれぞれ誘導体化されている薬物を遊離薬物に変換するために有用なペニシリンアミダーゼ、例えば、ペニシリンＶアミダーゼおよびペニシリンＧアミダーゼが挙げられる。一部の実施形態において、酵素は、当分野において周知の組換えＤＮＡ技術により抗体に共有結合させることができる。例えば、Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，ｖｏｌ．３１２，ｐｐ．６０４−６０８，１９８４参照。
【０１８６】
Ｄ．医薬組成物
いくつかの実施形態において、本発明は、抗ＩＬ−２２抗体、抗体断片、バリアント、誘導体またはその免疫コンジュゲートを含む医薬組成物を提供する。抗ＩＬ−２２抗体または抗体断片は抗炎症活性を有する。さらに、ＩＬ−２２が癌の開始または進行に関与することが知られている。したがって、抗ＩＬ−２２抗体、抗体断片、バリアント、誘導体またはそれらの免疫コンジュゲートは、ＩＬ−２２発現に関連する免疫関連疾患または増殖性疾患を治療するための医薬組成物において使用され得る。抗体、断片、バリアント、誘導体または免疫コンジュゲートは、医薬組成物中で唯一の活性剤として、または任意の好適な薬剤もしくは他の従来の処置と組合せて使用され得る。
【０１８７】
抗体または抗体断片は、約０．０００１〜１０．０ミリグラム、または約０．００１〜５ミリグラム、または約０．００１〜１ミリグラム、または約０．００１〜０．１ミリグラム、または約０．１〜１．０もしくは約１０ミリグラムの抗体または抗体断片を送達するために、医薬組成物中に処方され得る。選択された時間間隔で複数回投与が可能である。
【０１８８】
免疫疾患の治療または重症度の軽減のために、本発明の組成物の適切な用量は、治療される疾患の種類、疾患の重症度および経過、組成物が予防または治療目的で投与されるかどうか、以前の治療、患者の臨床履歴および化合物に対する反応、ならびに主治医の裁量に依存するであろう。
【０１８９】
例えば、疾病の型および重症度に応じて、抗体または抗体断片の約１μｇ／ｋｇ〜約１５ｍｇ／ｋｇ（例えば、０．１〜２０ｍｇ／ｋｇ）は、例えば、１回以上の別々の投与によるものであろうと、または連続注入によるものであろうと、患者への投与のための最初の候補用量である。典型的な１日用量は、上記の因子に応じて、約１μｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇまたはそれ以上の抗体または抗体断片であり得る。数日間以上にわたる反復投与については、病態に応じて、治療は  疾患症状の所望の抑制が生じるまで持続され得る。この治療法の進歩は、従来の技術およびアッセイによってモニターすることができる。
【０１９０】
抗ＩＬ−２２抗体、抗体断片または免疫コンジュゲートを含む医薬組成物は、所望の純度を有する抗体または抗体断片を、凍結乾燥製剤または水溶液の形態で、１つ以上の任意の薬学的に許容可能な担体（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，  １６ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，  Ｏｓｏｌ，  Ａ．  Ｅｄ．  （１９８０））と混合することによって、医薬組成物を調製するための公知の方法に従って製剤化することができる。
【０１９１】
薬学的に許容可能な担体は、レシピエントに対して一般的に毒性がない用量および濃度が採用され、限定されないが、以下のものを含む：リン酸、クエン酸および他の有機酸などの緩衝液；アスコルビン酸およびメチオニンを含む抗酸化剤；保存剤（オクタデシルジメチルベンジルアンモニウムクロリド；ヘキサメトニウムクロリド；ベンザルコニウムクロリド；ベンゼトニウムクロリド；フェノール、ブチルまたはベンジルアルコール；メチルまたはプロピルパラベンなどのアルキルパラベン；カテコール；レゾルシノール；シクロヘキサノール；  ３−ペンタノール；およびｍ−クレゾールなど）；低分子量（約１０残基未満）のポリペプチド；血清アルブミン、ゼラチン、免疫グロブリンなどのタンパク質；ポリビニルピロリドンなどの親水性ポリマー；グリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニン、またはリジンなどのアミノ酸；単糖、二糖、およびグルコース、マンノース、またはデキストリンを含む他の炭水化物；  ＥＤＴＡなどのキレート剤；  ショ糖、マンニトール、トレハロースまたはソルビトールなどの糖；  ナトリウムなどの塩形成対イオン；  金属錯体（例：Ｚｎ−タンパク質複合体）；  および／またはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）などの非イオン性界面活性剤。
【０１９２】
薬学的に許容可能な担体は、例えば、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、および液体ポリエチレングリコールなど）、それらの好適な混合物、および植物油を含有する溶媒または分散媒体であってもよい。適切な流動性は、例えば、コーティング、例えば、レシチンの使用により、分散液の場合には要求される粒径の維持により、および界面活性剤の使用により維持することができる。微生物の作用の防止は、種々の抗細菌剤および抗真菌剤、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸、チメロサールなどによりもたらすことができる。多くの場合、等張化剤、例えば糖または塩化ナトリウムを含めることが好ましい。注射組成物の吸収延長は、その組成物中に吸収を遅延させる薬剤、例えば、モノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチンを使用することによりもたらすことができる。
【０１９３】
いくつかの実施形態では、医薬組成物は、注射され得る配合物のために薬学的に許容可能なビヒクルを含有する。これらは、特定の等張無菌生理食塩水溶液（リン酸一ナトリウムもしくは二ナトリウム、塩化ナトリウム、カリウム、カルシウムもしくはマグネシウムなどまたはそのような塩の混合物）、または例えば、無菌水もしくは生理食塩水の添加時に注射液の構成を可能とする乾燥、特に凍結乾燥組成物中で存在し得る。
【０１９４】
一部の実施形態において、「安定剤」として公知であることもある、薬学的に許容可能な等張化剤は、組成物中の液体の等張性を調整または維持するために存在する。大型荷電生体分子、例えば、タンパク質および抗体とともに使用される場合、それらは、アミノ酸側鎖の荷電基と相互作用し、それにより分子間および分子内相互作用の潜在性を減少させ得るため「安定剤」と称されることが多い。等張化剤は、医薬組成物の０．１重量％〜２５重量％、または１〜５％の任意の量で存在し得る。例示的等張化剤としては、多価糖アルコール、例えば三価またはより高級の糖アルコール、例えば、グリセリン、エリトリトール、アラビトール、キシリトール、ソルビトールおよびマンニトールが挙げられる。
【０１９５】
医薬組成物に含有することができる追加の、薬学的に許容可能な賦形剤としては、以下の１つ以上として機能し得る薬剤が挙げられる：（１）増量剤、（２）溶解度向上剤、（３）安定剤、および（４）変性または容器壁への接着を防止する薬剤。賦形剤としては、多価糖アルコール（上記列挙）；アミノ酸、例えば、アラニン、グリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニン、リジン、オルニチン、ロイシン、２−フェニルアラニン、グルタミン酸、トレオニンなど；有機糖または糖アルコール、例えば、スクロース、ラクトース、ラクチトール、トレハロース、スタキオース、マンノース、ソルボース、キシロース、リボース、リビトール、ミオイニシトース（ｍｙｏｉｎｉｓｉｔｏｓｅ）、ミオイニシトール（ｍｙｏｉｎｉｓｉｔｏｌ）、ガラクトース、ガラクチトール、グリセロール、シクリトール（例えばイノシトール）、ポリエチレングリコール；硫黄含有還元剤、例えば、尿素、グルタチオン、チオクト酸、チオグリコール酸ナトリウム、チオグリセロール、α−モノチオグリセロールおよびチオ硫酸ナトリウム；低分子量タンパク質、例えば、ヒト血清アルブミン、ウシ血清アルブミン、ゼラチンまたは他の免疫グロブリン；親水性ポリマー、例えば、ポリビニルピロリドン；単糖（例えば、キシロース、マンノース、フルクトース、グルコース）；二糖（例えば、ラクトース、マルトース、スクロース）；三糖（例えば、ラフィノース）；ならびに多糖（例えば、デキストリンまたはデキストラン）を挙げることができる。
【０１９６】
医薬組成物は、薬学的に許容可能な非イオン性界面活性剤または洗浄剤（「湿潤剤」としても公知）を、抗体または抗体断片を溶解させるのに役立ち、および撹拌誘導性凝集から抗体または抗体断片を保護するために含むことができ、さらにそれにより、抗体または抗体断片の変性を引き起こさずに剪断表面応力への組成物の曝露を可能とする。非イオン性界面活性剤は、約０．０５ｍｇ／ｍｌ〜約１．０ｍｇ／ｍｌ、または約０．０７ｍｇ／ｍｌ〜約０．２ｍｇ／ｍｌの濃度範囲で存在し得る。
【０１９７】
好適な非イオン性界面活性剤としては、ポリソルベート（２０、４０、６０、６５、８０など）、ポリオキサマー（１８４、１８８など）、ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）ポリオール、ＴＲＩＴＯＮ（登録商標）、ポリオキシエチレンソルビタンモノエーテル（ＴＷＥＥＮ（登録商標）−２０、ＴＷＥＥＮ（登録商標）−８０など）、ラウロマクロゴール４００、ポリオキシル４０ステアレート、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油１０、５０および６０、モノステアリン酸グリセロール、スクロース脂肪酸エステル、メチルセルロースおよびカルボキシメチルセルロースが挙げられる。使用することができる陰イオン性洗浄剤としては、ラウリル硫酸ナトリウム、スルホコハク酸ジオクチルナトリウムおよびスルホン酸ジオクチルナトリウムが挙げられる。陽イオン性洗浄剤としては、塩化ベンザルコニウムまたは塩化ベンゼトニウムが挙げられる。
【０１９８】
抗体または抗体断片は、中性または塩形態の医薬組成物に配合することができる。薬学的に許容可能な塩としては、酸付加塩（タンパク質の遊離アミノ基を用いて形成される）が挙げられ、それは無機酸、例えば、塩酸もしくはリン酸、または例えば、酢酸、シュウ酸、酒石酸、マンデル酸などのような有機酸を用いて形成される。遊離カルボキシル基を用いて形成される塩も、無機塩基、例えば、水酸化カリウム、アンモニウム、カルシウムまたは鉄、および例えば、イソプロピルアミン、トリメチルアミン、ヒスチジン、プロカインなどのような有機塩基から誘導することができる。
【０１９９】
いくつかの実施形態において、医薬組成物は、少なくとも１つの抗ＩＬ−２２抗体または抗体断片と、併用療法において投与される少なくとも１つの他の治療薬または予防薬との組合せを含む。他の治療薬または予防薬は、サイトカイン阻害剤、増殖因子阻害剤、免疫抑制剤、抗炎症剤、代謝阻害剤、酵素阻害剤、細胞毒性剤、および細胞増殖抑制剤であり得、これは以下により詳しく記載される。１つの実施形態において、もう１つの治療薬は、関節炎のための標準治療であり、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）；プレドニゾロン、プレドニゾン、コルチゾン、およびトリアムシノロンを含むコルチコステロイド；ならびにメトトレキサート、ヒドロキシクロロキン（プラケニル）およびスルファサラジン、レフルノミド（アラバ）などの疾患修飾性抗リウマチ薬（ＤＭＡＲＤ）；エタネルセプト（エンブレル）、インフリキシマブ（レミケード）（メトトレキサートを伴うまたは伴わない）、およびアダリムマブ（ヒュミラ）を含む腫瘍壊死因子阻害剤、抗ＣＤ２０抗体（リツキサンなど）、アナキンラ（キネレット）などの可溶性インターロイキン−１受容体、金、ミノサイクリン（ミノシン）、ペニシラミン、およびアザチオプリン、シクロホスファミド、およびシクロスポリンを含む細胞毒性剤を含むが、これらに限定されない。このような併用療法は、投与された治療薬のより低い用量を有利に利用することができ、したがって、様々な単独可能なに関連する考えられる毒性または併発症を回避することができる。さらに、本明細書に開示されている他の治療薬は、ＩＬ−２２／ＩＬ−２２Ｒ／ＩＬ−１０Ｒ２経路に加えてまたは異なる経路に作用することができ、したがって、抗ＩＬ−２２抗体の効果を増強および／または相乗作用することが期待される。
【０２００】
いくつかの実施形態において、抗ＩＬ−２２抗体または断片と組合せて使用される他の治療薬または予防薬は、自己免疫反応およびその後の炎症反応の様々な段階を妨害する治療薬であり得る。１つの実施形態において、本明細書に記載される少なくとも１つの抗ＩＬ−２２抗体は、少なくとも１つのサイトカインおよび／または増殖因子アンタゴニストと共に製剤化および／または併用投与され得る。アンタゴニストは、可溶性受容体、ペプチド阻害剤、小分子、リガンド融合、抗体およびその結合断片（サイトカインまたは増殖因子またはその受容体または他の細胞表面分子と結合する）、および「抗炎症性サイトカイン」およびそのアゴニストを含み得る。
【０２０１】
これらの治療薬または予防薬の非限定的な例としては、少なくとも１つのインターロイキン（例えば、ＩＬ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−１２（またはそのサブユニットｐ３５もしくはｐ４０の１つ）、ＩＬ−１３、ＩＬ−１５、ＩＬ−１６、ＩＬ−１７Ａ−Ｆ  （例えば、ＩＬ−１７Ａ／ＩＬ−１７Ｆヘテロダイマーを含む）、ＩＬ−１８、ＩＬ−１９、ＩＬ−２０、ＩＬ−２１、およびＩＬ−２３（またはそのサブユニットｐ１９もしくはｐ４０の１つ））；サイトカイン（例えば、ＴＮＦα、ＬＴ、ＥＭＡＰ−ＩＩ、およびＧＭ−ＣＳＦ）；ならびに増殖因子（例えば、ＦＧＦおよびＰＤＧＦ）のアンタゴニストが挙げられる。治療薬はまた、インターロイキン、サイトカイン、および増殖因子に対する少なくとも１つの受容体のアンタゴニストを含むが、これらに限定されない。抗ＩＬ−２２抗体は、さらに、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ２０（例えば、リツキサン）、ＣＤ２５、ＣＤ２８、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＣＤ４５、ＣＤ６９、ＣＤ８０（Ｂ７．１）、ＣＤ８６（Ｂ７．２）、ＣＤ９０、またはそれらのリガンド（例えば、ＣＤ１５４（ｇｐ３９、ＣＤ４０Ｌ））、またはＬＦＡ−１／ＩＣＡＭ−１およびＶＬＡ−４／ＶＣＡＭ−１（Ｙｕｓｕｆ−Ｍａｋａｇｉａｎｓａｒ  ｅｔ  ａｌ．  （２００２）  Ｍｅｄ  Ｒｅｓ  Ｒｅｖ  ２２（２）：１４６−６７））などの細胞表面分子に対する阻害剤（例えば、抗体またはその結合断片）と併用することができる。
【０２０２】
特定の実施形態において、本明細書に記載される抗ＩＬ−２２抗体と組合せて使用することができるアンタゴニストは、ＩＬ−１、ＩＬ−１２（またはそのサブユニットｐ３５もしくはｐ４０の１つ）、ＴＮＦα、ＩＬ−１５、ＩＬ−１７Ａ−Ｆ  （それらのヘテロダイマー、例えばＩＬ−１７Ａ／ＩＬ−１７Ｆヘテロダイマーを含む）、ＩＬ−１８、ＩＬ−１９、ＩＬ−２０、ＩＬ−２１、およびＩＬ−２３（またはそのサブユニットｐ１９もしくはｐ４０の１つ）、ならびにそれらの受容体のアンタゴニストを含み得る。
【０２０３】
１つの実施形態において、他の治療薬または予防薬は、ＩＬ−１２アンタゴニスト（ＩＬ−１２（例えば、ＷＯ  ００／５６７７２を参照）またはそのサブユニットｐ３５もしくはｐ４０の１つに結合する抗体など）；  ＩＬ−１２受容体阻害剤（ＩＬ−１２受容体に対する抗体など）；および可溶性ＩＬ−１２受容体およびその断片から選択される。１つの実施形態において、他の治療薬は、ＩＬ−１５アンタゴニスト、例えば、ＩＬ−１５またはその受容体、ＩＬ−１５受容体の可溶性断片、およびＩＬ−１５結合タンパク質から選択される。
１つの実施形態において、他の治療薬は、ＩＬ−１８に対する抗体、ＩＬ−１８受容体の可溶性断片、およびＩＬ−１８結合タンパク質  （ＩＬ−１８ＢＰ，  Ｍａｌｌｅｔ  ｅｔ  ａｌ．  （２００１）  Ｃｉｒｃ．Ｒｅｓ．２８）などのＩＬ−１２アンタゴニストから選択される。１つの実施形態において、他の治療薬は、ＩＬ−１アンタゴニスト、例えばインターロイキン−１変換酵素（ＩＣＥ）阻害剤（例えば、Ｖｘ７４０）、ＩＬ−１アンタゴニスト（例えば、ＩＬ−１ＲＡ  （ＡＮＩＫＩＮＲＡ、ＡＭＧＥＮ））、ｓＩＬ−１ＲＩＩ  （Ｉｍｍｕｎｅｘ）、および抗ＩＬ−１受容体抗体から選択される。
【０２０４】
１つの実施形態において、他の治療薬または予防薬は、ＴＮＦに対する抗体（例えば、ヒトＴＮＦα）、例えばＤ２Ｅ７（ヒト抗ＴＮＦα抗体、米国特許第６，２５８，５６２号、Ｈｕｍｉｒａ（登録商標）；  ＣＤＰ−５７１／ＣＤＰ−８７０／ＢＡＹ−１０−３３５６（ヒト化抗ＴＮＦα抗体、セルテック／ファルマシア）；  ｃＡ２（キメラ抗ＴＮＦα抗体、Ｒｅｍｉｃａｄｅ（登録商標）、Ｃｅｎｔｏｃｏｒ）；および抗ＴＮＦ抗体断片（例えば、ＣＰＤ８７０）から選択される。他の例は、可溶性ＴＮＦ受容体（例えば、ヒトｐ５５またはｐ７５）断片および誘導体、例えばｐ５５  ｋｄＴＮＦＲ−ＩｇＧ  （５５  ｋＤ  ＴＮＦ受容体−ＩｇＧ融合タンパク質、Ｌｅｎｅｒｃｅｐｔ（登録商標）および７５  ｋｄＴＮＦＲ−ＩｇＧ  （７５  ｋＤ  ＴＮＦ受容体−ＩｇＧ融合タンパク質、Ｅｎｂｒｅｌ（登録商標）、Ｉｍｍｕｎｅｘ、参照、例えば  Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  ＆  Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ  （１９９４）  Ｖｏｌ．  ３７，  Ｓ２９５；  Ｊ．  Ｉｎｖｅｓｔ．Ｍｅｄ．（１９９６）  Ｖｏｌ．４４，  ２３５Ａ）を含む。さらなる例は、酵素アンタゴニスト（例えば、ＴＮＦα変換酵素阻害剤、例えば、α−スルホニルヒドロキサム酸誘導体（ＷＯ  ０１／５５１１２）またはＮ−ヒドロキシホルムアミド阻害剤（ＧＷ  ３３３３、−００５、または−０２２）およびＴＮＦ−ｂｐ／ｓ−ＴＮＦＲ  （可溶性ＴＮＦ結合タンパク質、参照、例えばｓｅｅ  ｅ．ｇ．，  Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  ＆  Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ  （１９９６）  Ｖｏｌ．３９，  Ｎｏ．  ９  （ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ），  Ｓ２８４；  およびＡｍ．Ｊ．  Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｈｅａｒｔ  Ｃｉｒｃ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．（１９９５）  Ｖｏｌ．  ２６８，  ｐｐ．  ３７−４２）を含む。ＴＮＦアンタゴニストは、可溶性ＴＮＦレセプター（例えば、ヒトｐ５５またはｐ７５）断片および７５  ｋｄＴＮＦＲ−ＩｇＧのような誘導体；およびＴＮＦα変換酵素（ＴＡＣＥ）阻害剤であり得る。
【０２０５】
１つの実施形態において、他の治療薬または予防薬は、可溶性ＩＬ−１３受容体および／または抗ＩＬ−１３抗体などのＩＬ−１３アンタゴニスト；およびＩＬ−２融合タンパク質（例えば、ＤＡＢ  ４８６−ＩＬ−２および／またはＤＡＢ  ３８９−ＩＬ−２、セラジェン（参照、Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  ＆  Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ  （１９９３）  Ｖｏｌ．３６，  １２２３）および抗ＩＬ−２Ｒ抗体（例えば、抗Ｔａｃ  （ヒト化抗体、Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｄｅｓｉｇｎ  Ｌａｂｓ，  ｓｅｅ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．  １９９０  Ｍａｒ．  １；  ５０（５）：１４９５−５０２））などのＩＬ−２アンタゴニストから選択される。
【０２０６】
１つの実施形態において、他の治療薬または予防薬は、ＩＤＥＣ−ＣＥ９．１／ＳＢ  ２１０３９６（抗ＣＤ４抗体、ＩＤＥＣ／ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）などの非除去性抗ＣＤ４阻害剤から選択される。１つの実施形態において、他の治療薬は、ＣＤ８０（Ｂ７．１）およびＣＤ８６（Ｂ７．２）；  ＩＣＯＳＬ、ＩＣＯＳ、ＣＤ２８、およびＣＴＬＡ４（例えばＣＴＬＡ４−１ｇ）；  Ｐ−セレクチン糖タンパク質リガンド（ＰＳＧＬ）；およびその抗炎症性サイトカインおよびアゴニスト（例えば抗体）などの共刺激分子のアンタゴニスト（抗体、可溶性受容体、またはアンタゴニストなど）から選択される。抗炎症性サイトカインは、ＩＬ−４（ＤＮＡＸ／Ｓｃｈｅｒｉｎｇ）；  ＩＬ−１０（ＳＣＨ  ５２０００、組換えＩＬ−１０、ＤＮＡＸ／Ｓｃｈｅｒｉｎｇ）；  ＩＬ−１３；およびＴＧＦを含み得る。
【０２０７】
１つの実施形態において、他の治療薬または予防薬は、抗炎症薬、免疫抑制薬、代謝阻害剤、および酵素阻害剤から選択される。本明細書に記載されているＩＬ−２２アンタゴニストと組み合わせて使用できる薬剤または阻害剤の非限定的な例には、非限定的に以下の少なくとも１つを含む：非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）  （例えばｉｂｕｐｒｏｆｅｎ，  Ｔｅｎｉｄａｐ  （参照、例えば  Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  ＆  Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ  （１９９６）  Ｖｏｌ．３９，  Ｎｏ．  ９  （ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ），  Ｓ２８０））、ナプロキセン（例えば、Ｎｅｕｒｏ  Ｒｅｐｏｒｔ  （１９９６）  Ｖｏｌ．７、ｐｐ．１２０９−１２１３）、メロキシカム、ピロキシカム、ジクロフェナク、およびインドメタシン）；スルファサラジン（例えば、Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  ＆  Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ  （１９９６）  Ｖｏｌ．３９、Ｎｏ．  ９  （ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ），  Ｓ２８１）を参照）、コルチコステロイド（プレドニゾロンなど）、サイトカイン抑制性抗炎症薬（ＣＳＡＩＤ）、ヌクレオチド生合成の阻害剤（プリン生合成の阻害剤（例えば、メトトレキサートなどの葉酸拮抗薬）など）およびピリミジン生合成阻害薬（レフルノミド等のジヒドロオロト酸デヒドロゲナーゼ（ＤＨＯＤＨ）  阻害薬（参照、例えば，  Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  ＆  Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ，  ｖｏｌ．  ３９，  Ｎｏ．  ９  （ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ），  Ｓ１３１，  １９９６；  Ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，  ｖｏｌ．４５，  ｐｐ．  １０３−１０７，  １９９６））。
【０２０８】
抗体に結合させる他の治療薬または予防薬は、以下に記載する少なくとも１つである：コルチコステロイド（経口、吸入および局所注射）；免疫抑制薬（シクロスポリンおよびタクロリムス（ＦＫ−５０６）など）；ｍＴＯＲ阻害薬（シロリムス（ラパマイシン）またはラパマイシン誘導体（ＣＣＩ−７７９などのエステルラパマイシン誘導体（Ｅｌｉｔ．  Ｌ．  （２００２）  Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎｉｏｎ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇ．Ｄｒｕｇｓ  ３（８）：１２４９−５３；  Ｈｕａｎｇ，  Ｓ．  ｅｔ  ａｌ．  （２００２）  Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎｉｏｎ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇ．Ｄｒｕｇｓ  ３（２）：２９５−３０４））；ＴＮＦαおよびＩＬ−１（例えば、ＩＲＡＫ、ＩＫＫ、ｐ３８またはＭＡＰキナーゼ阻害剤）；ＣＯＸ２阻害剤（例えば、ｃｅｌｅｃｏｘｉｂおよびそのバリアント  （ＭＫ−９６６）Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  ＆  Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ，  ｖｏｌ．３９，  Ｎｏ．  ９  （ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ），  Ｓ８１  １９９６を参照）；ホスホジエステラーゼ阻害剤（例えば、Ｒ９７３４０１、Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  ＆  Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ，  ｖｏｌ．  ３９，  Ｎｏ．  ９  （ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ），  Ｓ２８２  １９９６を参照）；トリフルオロメチルケトン類似体などのホスホリパーゼ阻害剤（例えば、ｃＰＬＡ２）特許第６，３５０，８９２号）；血管内皮細胞増殖因子（ＶＥＧＦ）の阻害剤；ならびに血管新生の阻害剤。
【０２０９】
医薬組成物は、対象への注射に適していてもよい。そのような組成物は、ゴマ油、ピーナッツ油または水性プロピレングリコールを含む無菌の水溶液または分散物；および滅菌注射液または分散物の即時調製のための無菌粉末であり得る。組成物は無菌でなければならず、容易な注射針通過性が存在する程度に流体でなければならない。それらは、製造及び保管の条件下で安定でなければならず、細菌及び真菌のような微生物の混入を防がなければならない。
【０２１０】
無菌注射液は、要求量の抗体を適切な溶媒中に、必要であれば上記に議論された他の成分の１つ以上とともに取り込み、次いで滅菌濾過することにより調製される。一般に、分散液は、種々の滅菌された抗体溶液を、基礎分散媒体および上記に列挙されるものから要求される他の成分を含有する無菌ビヒクル中に取り込むことにより調製される。無菌注射液の調製のための無菌粉末の場合、例示的調製法は、活性成分と任意の追加の所望の成分の粉末を予め滅菌濾過されたその溶液から生じさせる真空乾燥および凍結乾燥技術である。
【０２１１】
医薬組成物は、宿主細胞中への抗体または抗体断片の導入のためにリポソームおよび／またはナノ粒子の形態であってもよい。リポソームおよび／またはナノ粒子の形成および使用は、当業者に公知である。リポソームは、水性媒体中で分散するリン脂質から形成され、多重膜同心円状二層小胞（多層膜ベシクル（ＭＬＶ）とも称される）を自発的に形成する。ＭＬＶは、一般に２５ｎｍ〜４μｍの直径を有する。ＭＬＶの超音波処理は、コア中で水溶液を含有する２００〜５００Åの範囲の直径を有する小さな一枚膜ベシクル（ＳＵＶ）の形成をもたらす。リポソームの物理的特徴は、ｐＨ、イオン強度および二価陽イオンの存在に依存する。
【０２１２】
抗ＩＬ−２２抗体、抗体断片または免疫コンジュゲートは、例えば、コアセルベーション技術または界面重合によって調製されたマイクロカプセルにカプセル化され得る。例えば、それぞれ、コロイド状薬物送達系（例えば、リポソーム、アルブミンマイクロスフェア、マイクロエマルション、ナノ粒子およびナノカプセル）中またはマクロエマルション中の、ヒドロキシメチルセルロースまたはゼラチン−マイクロカプセルおよびポリ−（メチルメタクリレート）マイクロカプセルを用いることができる。このような技術は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  １６ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｏｓｏｌ，Ａ．Ｅｄ．（１９８０）に開示される。ナノカプセル剤は、一般に、安定した再現性のある手法で化合物を捕捉し得る。細胞内へのポリマーの過剰負荷に起因する副作用を回避するため、このような超微細粒子（サイズは約０．１μｍ）が、インビボで分解し得るポリマーを使用して一般に設計される。これらの要件を満たす生分解性ポリアルキル−シアノアクリレートナノ粒子が本発明における使用のために企図され、このような粒子は容易に作製することができる。徐放性製剤を調製することができる。
【０２１３】
徐放性製剤の好適な例としては、抗体または抗体断片を含有する固体疎水性ポリマーの半透性マトリックスが挙げられ、そのマトリクスは、成形品、例えば、フィルム、またはマイクロカプセルの形態であり得る。
【０２１４】
製剤化に際して、医薬組成物は、用量製剤と適合する様式で、および治療効果があるようなそのような量で投与されるであろう。組成物は、上述の注射用溶液の型のような種々の用量形態で容易に投与されるが、薬物放出カプセルなども使用することができる。
【０２１５】
Ｅ．治療法と予防法
１つの態様において、本発明は、抗ＩＬ−２２抗体、抗体断片、バリアント、誘導体、免疫コンジュゲート、または任意の上記医薬組成物を用いる治療法および予防法を提供する。このような方法には、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ、エクスビボ、およびｉｎ  ｖｉｖｏの治療法および予防法が含まれる。１つの実施形態において、ＩＬ−２２媒介シグナル伝達経路を阻害する方法が提供される。ＴｈＩＬ−１７細胞機能を刺激または阻害する方法を提供する。炎症性および／または自己免疫障害を治療する方法も提供される。ＩＬ−２２シグナリングに関連する障害を治療する方法をさらに提供する。ＴｈＩＬ−１７媒介障害を治療する方法も提供される。
【０２１６】
１つの実施形態において、生物系においてＩＬ−２２媒介シグナル伝達経路を阻害する方法が提供される。本方法は、抗ＩＬ−２２抗体、抗体断片、バリアント、誘導体、免疫コンジュゲート、または任意の上記医薬組成物を生物系に提供することを含む。
【０２１７】
別の実施形態では、ＴｈＩＬ−１７細胞機能を阻害する方法が提供される。本方法は、ＴｈＩＬ−１７細胞を抗ＩＬ−２２抗体、抗体断片、バリアント、誘導体、免疫コンジュゲート、または任意の上記医薬組成物に曝露することを含む。例示的なＴｈＩＬ−１７細胞機能は、限定されるわけではないが、細胞媒介免疫の刺激（遅延型過敏症）；炎症部位への骨髄細胞（例えば、単球および好中球）のような自然免疫細胞の動員；および組織への炎症細胞浸潤の刺激を含む。
【０２１８】
抗ＩＬ−２２抗体、抗体断片、バリアント、誘導体、免疫コンジュゲート、または任意の上記医薬組成物を用いて、免疫関連疾患、血栓性疾患（血栓症およびアテローム血栓症）、および心血管疾患を治療することができる。免疫疾患には、関節炎、自己免疫疾患、慢性炎症、炎症、炎症性腸疾患、乾癬、Ｔ細胞仲介疾患がある。抗ＩＬ−２２抗体または抗体断片は、ＩＬ−２２に対するアンタゴニストとして作用して、固体組織中の上皮細胞に作用し下流の免疫応答を間接的に調節するような、例えばＴH１７Ｔ細胞を含むＴ細胞サブセットの拡大をブロックするような、少なくとも１つのＩＬ−２２媒介免疫応答を調節することができる。１つの実施形態において、抗体、抗体断片、バリアント、誘導体、免疫コンジュゲート、または任意の上記医薬組成物が、免疫反応を調節するための手法において使用される。
この方法は、ＩＬ−２２を本発明の抗体、抗体断片、バリアント、誘導体、免疫コンジュゲート、または任意の上記医薬組成物と接触させ、それによって免疫反応を調節することを含む。１つの実施形態において、免疫反応は、細胞増殖、細胞溶解活性、サイトカイン分泌、またはケモカイン分泌を含む。
【０２１９】
したがって、本発明の抗体、抗体断片、バリアント、誘導体、免疫コンジュゲート、または任意の上記医薬組成物を用いて、免疫細胞または造血細胞（例えば、骨髄系、リンパ系、または赤血球系の細胞、またはその前駆細胞）の活性（例えば、増殖、分化、および／または生存）を直接的または間接的に阻害することができ、したがって、様々な免疫障害および過剰増殖性障害を治療するための手法に用いることができる。治療可能な免疫障害の非限定的な例としては、例えば、関節炎（関節リウマチ、若年性関節リウマチ、変形性関節症、ループス関連関節炎または強直性脊椎炎を含む）、強皮症、全身性エリテマトーデス、ＨＩＶ、シェーグレン症候群、脈管炎、多発性硬化症、自己免疫性甲状腺炎、皮膚炎（アトピー性皮膚炎および湿疹性皮膚炎を含む）、重症筋無力症、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、クローン病、大腸炎、糖尿病（Ｉ型）；皮膚（例えば、乾癬）、心血管系（例えば、アテローム性動脈硬化症）、神経系（例えば、アルツハイマー病）、肝臓（例えば、肝炎）、腎臓（例えば、腎炎）および膵臓（例えば、膵炎）；心血管障害、例えば、コレステロール代謝障害、酸素フリーラジカル損傷、虚血；創傷治癒に関連する障害  ；呼吸器障害、例えば、喘息およびＣＯＰＤ  （例えば、のう胞性線維症）；急性炎症状態（例えば、エンドトキシン血症、敗血症（ｓｅｐｓｉｓ）および敗血症（ｓｅｐｔｉｃａｅｍｉａ）、トキシックショック症候群および感染症）；移植拒絶反応およびアレルギーを含むがこれらに限定されない。１つの実施形態において、ＩＬ−２２関連障害は、関節炎性障害、例えば、関節リウマチ、若年性関節リウマチ、変形性関節症、乾癬性関節炎、または強直性脊椎炎の１つ以上から選択される障害；呼吸障害、例えば、喘息、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）；または、皮膚（例えば、乾癬）、心臓血管系（例えば、アテローム性動脈硬化症）、神経系（例えば、アルツハイマー病）、肝臓（例えば、肝炎）、腎臓（例えば、腎炎）、膵臓（例えば、膵炎）、および胃腸器官、例えば、大腸炎、クローン病およびＩＢＤ；急性炎症状態、例えば、エンドトキシン血症、敗血症（ｓｅｐｓｉｓ）および敗血症（ｓｅｐｔｉｃａｅｍｉａ）、トキシックショック症候群および感染症、多臓器不全、呼吸器疾患（ＡＲＤ）、アミロイドーシス、糸球体硬化症、膜性腎症、腎動脈硬化症、糸球体腎炎、腎の線維増殖性疾患などの腎障害、並びにその他の腎機能障害および腎腫瘍である。ＩＬ−２２は上皮に作用するので、抗ＩＬ−２２抗体は、上皮癌、例えば癌腫、黒色腫その他の治療に使用することができる。これら及び他の疾患におけるＩＬ−２２阻害の理論的根拠の説明については、ＷＯ  ２００３／０８３０６２（ｐ．５８−７５）を参照されたい。
【０２２０】
さらに別の実施形態では、自己免疫障害を治療する方法が提供される。この方法は、このような処置を必要とする哺乳動物に、有効量の抗ＩＬ−２２抗体、抗体断片、バリアント、誘導体、免疫コンジュゲートまたは任意の上記医薬組成物を投与することを含む。自己免疫疾患には、結合組織疾患、多発性硬化症、全身性エリテマトーデス、炎症性関節炎（例えば、リウマチ関節炎）、自己免疫性肺炎症、ギラン−バレー症候群、自己免疫性甲状腺炎、インスリン依存性糖尿病、ブドウ膜炎、重症筋無力症、移植片対宿主病、自己免疫性炎症性眼疾患、乾癬、自己免疫に関連する関節炎（例えば、リウマチ関節炎）、脳の自己免疫性炎症、および炎症性腸疾患が含まれるが、これらに限定されない。１つの実施形態において、自己免疫障害はＩＬ−２３媒介自己免疫障害である。
【０２２１】
一実施形態では、乾癬症状を特徴とする乾癬および／または障害の治療方法が提供される。乾癬は、免疫系のＴ細胞が皮膚のタンパク質を認識し、タンパク質が見つかった領域を攻撃し、新たな皮膚細胞の急速すぎる増殖および痛みを伴う隆起した鱗状の病変を引き起こす自己免疫疾患と考えられる。これらの病変は、ケラチノサイトの過剰増殖および乾癬病変の表皮における活性化Ｔ細胞の蓄積を特徴とする。最初の分子的原因は不明であるが、遺伝子の連関は少なくとも７つの乾癬の感受性ローカス（Ｐｓｏｒ１：６ｐ２１．３、Ｐｓｏｒ２：１７ｑ、Ｐｓｏｒ３：４ｑ、Ｐｓｏｒ４：１ｃｅｎｔ−ｑ２１、Ｐｓｏｒ５：３ｑ２１、Ｐｓｏｒ６：１９ｐ１３、Ｐｓｏｒ７：１ｐ）にマッピングされている。これらの遺伝子座のいくつかは、リウマチ関節炎、アトピー性皮膚炎、および炎症性腸疾患（ＩＢＤ）を含む他の自己免疫／炎症性疾患と関連している。乾癬の治療に対する現行のアプローチは、ＩＬ−１２またはＴＮＦ−αアンタゴニストの投与を含む。例えば、Ｎｉｃｋｏｌｏｆｆ  ｅｔ  ａｌ．  （２００４）  Ｊ．  Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．，  ｖｏｌ．１１３，  ｐｐ．  １６６４−１６７５；  Ｂｏｗｃｏｃｋ  ｅｔ  ａｌ．  （２００５）  Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，  ｖｏｌ．５，  ｐｐ．  ６９９−７１１；  Ｋａｕｆｆｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．  （２００４）  Ｊ．  Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．，  ｖｏｌ．１２３，  ｐｐ．  １０３７−１０４４を参照のこと。乾癬の病因には、異なるＩＬ−２３／ＩＬ−２２シグナル伝達経路が関与していることが知られている。したがって、このシグナル伝達経路を調節する治療薬は、乾癬治療の他の手法に代わるものを提供するか、または補完する可能性がある。
【０２２２】
１つの実施形態において、乾癬を治療する方法は、患者に抗ＩＬ−２２抗体、抗体断片，バリアント，誘導体、免疫コンジュゲートまたは任意の上記医薬組成物の有効量を投与することを含む。様々な実施形態において、本方法は、さらに、（同一の医薬組成物または別個の医薬組成物のいずれかにおいて）少なくとも１つの追加の治療薬を投与することを含む。１つのそのような実施形態において、追加の治療薬は、ＩＬ−１９、ＩＬ−２０、およびＩＬ−２４から選択されるサイトカインの少なくとも１つのアンタゴニストである。このようなアンタゴニストには、ＩＬ−１９、ＩＬ−２０、ＩＬ−２４、ＩＬ−２０Ｒａ、ＩＬ−２０Ｒｂ、またはＩＬ−１０Ｒ２と結合する抗体が含まれるが、これらに限定されない。任意の数のそのような抗体は、任意の組合せにおいて選択され得る。別の実施形態では、追加の治療薬は乾癬の治療に効果的であることが知られている薬剤である。そのような治療薬の特定については、例えばＮｉｃｋｏｌｏｆｆ  ｅｔ  ａｌ．  （２００４）  Ｊ．  Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．１１３：１６６４−１６７５；  Ｂｏｗｃｏｃｋ  ｅｔ  ａｌ．  （２００５）  Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．５：６９９−７１１；  ｏｙｏｂｉ  Ｋａｕｆｆｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．  （２００４）  Ｊ．  Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．１２３：１０３７−１０４４に記載されている。そのような治療薬としては、Ｔ細胞を標的とする治療薬、例えばエファリズマブおよび／またはアレファセプト；ＩＬ−１２のアンタゴニスト、例えばＩＬ−１２またはその受容体に結合する遮断抗体；およびＴＮＦ−αのアンタゴニスト、例えばＴＮＦ−αまたはその受容体に結合する遮断抗体が挙げられるが、これらに限定されない。
【０２２３】
１つの実施形態において、多発性硬化症を治療する方法が提供される。本方法は、抗ＩＬ−２２抗体、抗体断片、バリアント、誘導体、免疫コンジュゲート、または任意の上記医薬組成物の有効量物を患者に投与することを含む。多発性硬化症は、炎症およびミエリン鞘（神経を隔離し、適切な神経機能のために必要とされる脂肪物質）の喪失を特徴とする中枢神経系疾患である。
【０２２４】
１つの実施形態において、関節炎を治療する方法は、患者に抗ＩＬ−２２抗体、抗体断片、バリアント、誘導体、免疫コンジュゲート、または任意の上記医薬組成物の有効量を投与することを含む。関節炎は関節の炎症を特徴とする病気である。リウマチ関節炎は関節炎の中で最も頻度が高く、結合組織と滑膜（関節を覆う膜）の炎症を伴う。炎症を起こした滑膜はしばしば関節に浸潤し、関節軟骨や骨を損傷する。ＩＬ−２２およびＩＬ−２２Ｒタンパク質および／または転写物は、両方のヒト疾患と関連している。ＲＡ滑膜生検では、ＩＬ−２２タンパク質はビメンチン+滑膜線維芽細胞および一部のＣＤ６８+マクロファージで検出され、ＩＬ−２２Ｒは滑膜線維芽細胞で検出される。滑膜線維芽細胞をＩＬ−２２で処理すると、単球走化性タンパク質−１、ＭＣＰ−１の産生、ならびに全身代謝活性が誘導される（Ｉｋｅｕｃｈｉ，  Ｈ．，  ｅｔ  ａｌ．，  （２００５）  Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  Ｒｈｅｕｍ．，  ｖｏｌ．５２，  ｐｐ．  １０３７−４６）．。ＩＬ−２２の阻害剤は、リウマチ関節炎の症状を改善する（ＷＯ  ２００５／０００８９７  Ａ２；米国特許第６，９３９，５４５号）。炎症性サイトカインおよびケモカインの分泌増加、さらに重要なことに、ＩＬ−２２に依存する免疫応答に起因する疾患の増加は、本発明の方法によって治療され得る。同様に、本発明の方法は、ヒトにおけるＲＡまたは他の関節炎疾患の治療に使用され得る。
【０２２５】
１つの実施形態において、移植拒絶反応を治療する方法は、患者に抗ＩＬ−２２抗体、抗体断片、バリアント、誘導体、免疫コンジュゲート、または任意の上記医薬組成物の有効量を投与することを含む。移植拒絶反応とは、ドナー由来の組織が宿主の免疫細胞に特異的に「攻撃」される免疫学的現象であり、「攻撃」するのはＴ細胞であり、そのＴ細胞レセプターはドナーのＭＨＣ分子を「異物」として認識する。この認識によりＴ細胞が活性化され、増殖して様々なサイトカインや細胞溶解タンパク質を分泌し、最終的に移植片を破壊する。混合リンパ球反応（ＭＬＲ）および移植モデルは、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，  Ｓｅｃｏｎｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，  Ｃｏｌｉｇａｎら編、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，１９９４；  Ｋａｓａｉａｎら（Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  （２００２）１６：  ５５９−５６９）；  Ｆｕｌｍｅｒら（Ａｍ．  Ｊ．  Ａｎａｔ．  （１９６３）１１３：  ２７３−２８５）；およびＬｅｎｓｃｈｏｗら（Ｓｃｉｅｎｃｅ  （１９９２）２５７：  ７８９−７９２）によって記載されている。本発明の方法は、ＭＬＲを減少させ、ＩＬ−２２に依存するヒトにおける移植拒絶および関連疾患（例えば、移植片対宿主病）を治療するために使用され得る。
【０２２６】
１つの実施形態において、本発明は、ＩＬ−２２応答性細胞およびＩＬ−２２Ｒ／ＩＬ−１０Ｒ２応答性細胞の異常な活性に関連する過剰増殖性障害を治療する方法を提供する。この方法は、対象においてＩＬ−２２および／またはＩＬ−２２Ｒおよび／またはＩＬ−１０Ｒ２応答性細胞の過剰増殖を阻害または減少させるために、抗ＩＬ−２２抗体、抗体断片、バリアント、誘導体、免疫コンジュゲート、または任意の上記医薬組成物を投与することを含む。ＩＬ−２２およびＩＬ−２２Ｒ発現は、限定されるわけではないが、膵臓、肺臓、皮膚、腸、肝臓、腎臓を含む多数の組織の上皮細胞で構成的である（Ｋｏｔｅｎｋｏ，  Ｓ．  Ｖ．  ｅｔ  ａｌ．  （２００１）  Ｊ．  Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，  ｖｏｌ．２７６，  ｐｐ．  ２７２５−３２；  Ｘｉｅ，  Ｍ．  Ｈ．  ｅｔ  ａｌ．  （２０００）  Ｊ．  Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，  ｖｏｌ．２７５，  ｐｐ．  ３１３３５−９；  Ｗｏｌｋ，  Ｋ．  ｅｔ  ａｌ．  （２００４）  Ｉｍｍｕｎｉｔｙ，  ｖｏｌ．２１，  ｐｐ．  ２４１−５４）。さらに、ＩＬ−２２受容体複合体はまた、罹患した関節および正常腸由来の線維芽細胞の表面上で発現される（Ｉｋｅｕｃｈｉ，  Ｈ．  ｅｔ  ａｌ．  （２００５）  Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  Ｒｈｅｕｍ．，  ｖｏｌ．５２，  ｐｐ．  １０３７−４６；  Ａｎｄｏｈ，  Ａ．  ｅｔ  ａｌ．  （２００５）  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ，  ｖｏｌ．１２９，  ｐｐ．  ９６９−８４）。これらの細胞型の腫瘍性誘導体は、ＩＬ−２２に対して過剰反応性であり、これらの細胞の生体内での生存能力を調節する。従って、本発明の方法は、以下に記載のような新生物の進行を阻害するために使用され得る：扁平上皮がん、基底細胞癌、移行上皮乳頭腫および移行上皮がん、腺腫、腺癌、形成性胃組織炎、インスリノーマ、グルカゴノーマ、ガストリノーマ、ビポーマ、肝内胆管癌、肝細胞癌、アデノイド、  虫垂のカルチノイド腫瘍、プロラクチノーマ、膨大細胞腫、ヒュルトレ細胞腺腫、腎細胞癌、Ｇｒａｗｉｔｚ腫瘍、多発性内分泌腺腫、子宮内膜性腫瘍、付属器および皮膚付属器新生物、粘膜表皮の新生物、のう胞性、粘液性および漿液性新生物、のう胞腺腫、腹膜偽粘液腫、管、小葉および髄様新生物、腺房細胞新生物、複合体上皮新生物、Ｗａｒｔｈｉｎ腫瘍、胸腺腫、特殊な性腺腫瘍、性索間質性腫瘍、莢膜細胞腫、顆粒膜腫、卵巣男性胚腫、セルトリ−ライディッヒ細胞腫、傍神経節腫、褐色細胞腫、グロムス腫瘍、メラノサイト系母斑、悪性黒色腫、黒色腫、結節性黒色腫、異形成母斑、悪性黒色腫、表在拡大型黒色腫、または末端部黒子様黒色腫。
【０２２７】
さらに別の実施形態では、腫瘍進行を阻害する方法が提供される。該方法は、有効量の抗ＩＬ−２２抗体、抗体断片、バリアント、誘導体、免疫コンジュゲートまたは任意の上記医薬組成物を哺乳動物に投与することを含む。
【０２２８】
別の実施形態では、本発明は、対象における急性期反応を減少、阻害または減少させる方法を提供する。本法は、対象に、抗ＩＬ−２２抗体、抗体断片、バリアント、誘導体、免疫コンジュゲート、または任意の上記医薬組成物を、対象における急性期反応を減少、阻害または減少させるのに充分な量で投与することを含む。１つの実施形態において、対象は、例えば、呼吸障害、炎症性障害および自己免疫障害を含む、本明細書に記載されるＩＬ−２２関連障害を患っている哺乳動物、例えばヒトである。１つの実施形態において、ＩＬ−２２結合剤は、局所的に、例えば、局所的に、皮下的に、または全身循環しない他の投与を行う。
【０２２９】
別の実施形態では、本発明は、ＣＤ２０、ＣＤ１１ａ、ＣＤ１８、ＥｒｂＢ２、ＥＧＦＲ、ＥｒｂＢ３、ＥｒｂＢ４、または血管内皮因子（ＶＥＧＦ）に結合する抗体などの他の免疫疾患関連抗原または腫瘍関連抗原に対する抗体と、抗ＩＬ−２２抗体、抗体断片、バリアント、誘導体、免疫コンジュゲート、または任意の上記医薬組成物を同時にまたは連続的に投与する方法を提供する。代わりに、または加えて、本明細書に開示されている同一または２以上の異なった抗原を結合する２以上の抗体を患者に同時投与してもよい。特定の実施形態に、患者に１種以上のサイトカインを投与することも有益であろう。特定の実施形態に、本発明の抗ＩＬ−２２抗体、抗体断片、バリアント、誘導体、免疫コンジュゲート、または任意の上記医薬組成物を、増殖阻害剤と同時投与する。例えば、成長阻害剤は、組成物の投与の前、後、または同時に投与することができる。増殖抑制剤に適した用量は、現在使用されているものであり、増殖抑制剤とその組成物の併用作用（相乗作用）により低下する可能性がある。
【０２３０】
上記の各および全ての方法では、本発明の抗体、抗体断片、バリアント、誘導体、または任意の上記医薬組成物は治療において、単独で、免疫コンジュゲートとして、又は他の薬剤との併用で使用することができる。例えば、本発明の抗体、抗体断片、バリアント、誘導体、または任意の上記医薬組成物は、単独で、免疫コンジュゲートとして、または他の薬剤との組合せで治療法において使用することができる。例えば、本発明の抗体は、少なくとも１つの追加の治療薬と同時投与することができる。ある実施形態において、追加の治療薬は、抗血管新生剤である。ある実施形態において、追加の治療薬は、ＶＥＧＦアンタゴニスト（一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）である。ある実施形態において、追加の治療薬は、ＥＧＦＲアンタゴニスト（一部の実施形態において、エルロチニブ）である。ある実施形態において、追加の治療薬は、化学療法剤および／または細胞増殖抑制剤である。ある実施形態において、追加の治療薬は、タキソイド（例えば、パクリタキセル）および／または白金剤（例えば、カルボ白金（ｃａｒｂｏｐｌａｔｉｎｕｍ））である。ある実施形態において、追加の治療薬は、患者の免疫または免疫系を向上させる薬剤である。
【０２３１】
上記のこのような併用療法は、併用投与（同一または別個の配合物中に２つ以上の治療薬が含まれる）、および別個の投与を包含し、別個の投与の場合、抗体、抗体断片、バリアント、誘導体、免疫コンジュゲート、または任意の上記医薬組成物の投与は、追加の治療薬および／またはアジュバントの投与前、投与と同時に、および／または投与後に行うことができる。抗体、抗体断片、バリアント、誘導体、免疫コンジュゲート、または任意の上記医薬組成物は、放射線療法との組合せで使用することもできる。
【０２３２】
Ｆ．診断方法
いくつかの実施形態において、本明細書に提供される抗ＩＬ−２２抗体、抗体断片、バリアント、誘導体、免疫コンジュゲート、または任意の上記医薬組成物は、生物学的試料におけるＩＬ−２２の存在を定量的または定性的に検出するために使用することができる。ある実施形態において、生物学的試料は、細胞または組織、例えば、乳房、膵臓、食道、肺および／または脳細胞または組織を含む。
【０２３３】
例示的実施形態において、本発明の抗体、抗体断片、バリアント、誘導体、免疫コンジュゲートまたは任意の上記医薬組成物は、検出可能な分子または物質、例えば、上記の蛍光分子、放射性分子または当分野において公知の任意の他の標識により標識することができる。例えば、本発明の抗体は、放射性分子により標識することができる。好適な放射性分子としては、限定されるものではないが、シンチグラフィー試験に使用される放射性原子、例えば、123Ｉ、124Ｉ、111Ｉｎ、186Ｒｅ、および188Ｒｅが挙げられる。あるいは、本発明の抗体または抗体断片は、核磁気共鳴（ＮＭＲ）イメージング用のスピン標識、例えば、ヨウ素−１２３、ヨウ素−１３１、インジウム−１１１、フッ素−１９、炭素−１３、窒素−１５、酸素−１７、ガドリニウム、マンガンまたは鉄により標識することもできる。抗体の投与後、患者内の放射性標識抗体の分布を検出する。任意の好適な公知の方法を使用することができる。一部の非限定的な例としては、コンピュータ断層撮影（ＣＴ）、ポジトロン放出断層撮影（ＰＥＴ）、磁気共鳴イメージング（ＭＲＩ）、蛍光、化学発光および超音波診断が挙げられる。
【０２３４】
ある実施形態において、標識は、直接検出される標識または部分（例えば、蛍光標識、発色団、高電子密度、化学発光、および放射性標識）、および間接的に、例えば、酵素反応または分子相互作用を介して検出される酵素またはリガンドのような部分が挙げられる。例示的な標識としては、限定されるものではないが、放射性同位体32Ｐ、14Ｃ、125Ｉ、3Ｈ、および131Ｉ、フルオロフォア、例えば希土類キレートまたはフルオレセインおよびその誘導体、ローダミンおよびその誘導体、ダンシル、ウンベリフェロン、ルシフェラーゼ、例えば、ホタルルシフェラーゼおよび細菌ルシフェラーゼ（米国特許第４，７３７，４５６号明細書）、ルシフェリン、２，３−ジヒドロフタラジンジオン、セイヨウワサビペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）、アルカリホスファターゼ、β−ガラクトシダーゼ、グルコアミラーゼ、リゾチーム、サッカリドオキシダーゼ、例えば、グルコースオキシダーゼ、ガラクトースオキシダーゼ、およびグルコース−６−リン酸デヒドロゲナーゼ、過酸化水素を用いて色素前駆体を酸化する酵素、例えば、ＨＲＰ、ラクトペルオキシダーゼ、またはミクロペルオキシダーゼとカップリングしている複素環オキシダーゼ、例えば、ウリカーゼおよびキサンチンオキシダーゼ、ビオチン／アビジン、スピン標識、バクテリオファージ標識、安定フリーラジカルなどが挙げられる。
【０２３５】
１つの実施形態において、哺乳動物における乾癬を診断する方法が提供され、方法は、哺乳動物から得られた組織細胞の試験試料におけるＩＬ−２２またはＩＬ−２２Ｒポリペプチドをコードする遺伝子の発現レベルを検出することを含み、対照試料（例えば、同じ細胞型の既知の正常組織細胞の試料）と比較して、試験試料におけるより高い発現レベルが、試験試料が得られた哺乳動物における乾癬の存在を示す、方法が提供される。検出は定性的であっても定量的であってもよい。１つの実施形態において、試験試料は血液または血清を含む。１つの実施形態において、ＩＬ−２２またはＩＬ−２２Ｒポリペプチドをコードする遺伝子の発現レベルを検出することは、（ａ）抗ＩＬ−２２抗体または抗ＩＬ−２２Ｒ抗体、抗体断片と哺乳動物から得られた試験試料とを接触させること、および（ｂ）抗体と試験試料中のＩＬ−２２またはＩＬ−２２Ｒポリペプチドとの間の複合体の形成を検出することを含む。抗体は、検出可能な標識に連結され得る。複合体形成は、例えば、光学顕微鏡検査、フローサイトメトリー、蛍光測定法、または当該技術分野で公知の他の技術によって監視することができる。乾癬の疑いのある個体から試験試料を得ることができる。
【０２３６】
本発明の本発明の抗体、抗体断片、バリアント、誘導体、免疫コンジュゲート、または任意の上記医薬組成物は、ＩＬ−２２過剰発現に関連する癌および疾患の診断および病期分類に有用であり得る。ＩＬ−２２過剰発現に関連する癌としては、扁平上皮癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、胃癌、膵臓癌、グリア細胞腫瘍、例えば、膠芽細胞腫および神経線維腫症、子宮頸癌、卵巣癌、肝臓癌、膀胱癌、ヘパトーマ、乳癌、結腸癌、黒色腫、結腸直腸癌、子宮内膜癌、唾液腺癌、腎臓癌（ｋｉｄｎｅｙ  ｃａｎｃｅｒ）、腎臓癌（ｒｅｎａｌ  ｃａｎｃｅｒ）、前立腺癌、外陰癌、甲状腺癌、肝細胞腫、肉腫、血液癌（白血病）、星状細胞腫、種々のタイプの頭頸部癌、および他のＩＬ−２２発現または過剰発現の過剰増殖性疾患を挙げることができる。
【０２３７】
本発明の抗体、抗体断片、バリアント、誘導体、免疫コンジュゲート、または任意の上記医薬組成物が、ＩＬ−２２過剰発現に関連する癌および疾患の診断および病期分類のための方法において使用され得る。本発明の抗体、抗体断片、バリアント、誘導体、免疫コンジュゲート、または任意の上記医薬組成物を、ＩＬ−２２発現が増加または減少している免疫系の疾患を診断するための方法に使用することができる。特定の実施態様において、本発明は、ＩＬ−２２の発現または過剰発現に関連する疾患を診断する方法を提供する。このような疾患の例としては、免疫関連疾患、血栓性疾患（血栓症およびアテローム血栓症）、および心血管疾患が挙げられる。免疫関連疾患には、関節炎、自己免疫疾患、慢性的炎症、炎症、炎症性腸疾患、乾癬、Ｔ細胞介在疾患などがある。
【０２３８】
１つの実施形態において、診断方法または検出方法に用いるための抗ＩＬ−２２抗体、抗体断片、バリアント、誘導体、免疫コンジュゲート、または任意の上記の医薬組成物が提供される。さらなる態様において、生体試料中のＩＬ−２２の存在を検出する方法が提供される。さらなる態様において、生体試料中のＩＬ−２２の量を定量する方法が提供される。特定の実施形態に、この方法は、ＩＬ−２２への結合を許容する条件下で、本明細書に記載される抗ＩＬ−２２抗体、抗体断片、バリアント、誘導体、免疫コンジュゲートまたは任意の上記医薬組成物と生物学的試料を接触させ、複合体が形成されるか否かを検出することを含む。このような方法は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏまたはｉｎ  ｖｉｖｏで実施することができる。１つの実施形態において、抗ＩＬ−２２抗体、抗体断片、バリアント、誘導体、免疫コンジュゲートまたは任意の上記医薬組成物は、治療に適格な対象を選択するために使用される。いくつかの実施形態において、治療は、抗ＩＬ−２２抗体、抗体断片、バリアント、誘導体、免疫コンジュゲート、または任意の上記の医薬組成物の対象への投与を含むであろう。
【０２３９】
別の実施形態では、本発明は、適当なパッケージング中に抗ＩＬ−２２抗体、抗体断片、バリアント、誘導体、免疫コンジュゲートまたは任意の上記医薬組成物を含む診断キットに関する。キットには、ＩＬ−２２またはＩＬ−２２Ｒポリペプチドを検出するために組成物を使用するための説明書が含まれていてもよい。一態様では、診断キットは乾癬の診断キットである。
【０２４０】
Ｇ．製品およびキット
本発明の別の態様において、上記障害の治療、予防および／または診断に有用な抗ＩＬ−２２抗体、抗体断片、バリアント、誘導体、免疫コンジュゲートまたは任意の上記医薬組成物を含有する製品が提供される。製品は、容器および容器上または容器に伴うラベルまたは添付文書を含む。好適な容器としては、例えば、瓶、バイアル、注射器、ＩＶ溶液バッグなどが挙げられる。容器は、種々の材料、例えばガラスまたはプラスチックから形成することができる。容器は、組成物それ自体、または病態の治療、予防、および／もしくは診断に有効な別の組成物との組合せである組成物を保持し、無菌アクセスポートを有し得る（例えば、容器は、静脈内溶液バッグまたは皮下注射針により貫通可能な栓を有するバイアルであり得る）。組成物中の少なくとも１つの活性剤は、抗ＩＬ−２２抗体、抗体断片、バリアント、誘導体、免疫コンジュゲートまたは任意の上記医薬組成物である。ラベルまたは添付文書は、組成物が選択される病態の治療に使用されることを示す。さらに、製品は、（ａ）抗ＩＬ−２２抗体、抗体断片、バリアント、誘導体、免疫コンジュゲートまたは任意の上記医薬組成物を含む組成物を中に含有する第１の容器；および（ｂ）さらなる細胞毒性剤または他の治療薬を含む組成物を中に含有する第２の容器を含み得る。本発明のこの実施形態における製品は、組成物を特定の病態を治療するために使用することができることを示す添付文書をさらに含み得る。あるいは、またはさらに、製品は、薬学的に許容可能な緩衝液、例えば、注射用の静菌水（ＢＷＦＩ）、リン酸緩衝生理食塩水、リンガー液およびデキストロース溶液を含む第２（または第３）の容器をさらに含み得る。これは、商業的および使用者の見地から望ましい他の材料、例として、他の緩衝液、希釈剤、フィルタ、針および注射器をさらに含み得る。
【０２４１】
上記製品のいずれも、１つ以上の抗ＩＬ−２２抗体、抗体断片、バリアント、誘導体、免疫コンジュゲートまたは任意の上記医薬組成物を含み得ることが理解される。
【０２４２】
最後に、本発明はまた、少なくとも１つの本発明の抗ＩＬ−２２抗体、抗体断片、バリアント、誘導体、免疫コンジュゲートまたは任意の上記医薬組成物を含むキットを提供する。キットは、ＩＬ−２２発現（増加または減少）の検出において、または治療もしくは診断アッセイにおいて使用され得る。本発明のキットは、固体担体、例えば、組織培養プレートまたはビーズ（例えば、ｓｅｐｈａｒｏｓｅビーズ）にカップリングしている抗ＩＬ−２２抗体、抗体断片、バリアント、誘導体、免疫コンジュゲートまたは任意の上記医薬組成物を含有し得る。例えば、ＥＬＩＳＡまたはウェスタンブロットにおける、インビトロでのＩＬ−２２の検出および定量のための抗体を含有するキットを提供することができる。検出に有用なこのような抗体は、標識、例えば、蛍光または放射標識とともに提供することができる。
【０２４３】
キットは、その使用に関する説明書をさらに含有する。一部の実施形態において、説明書は、Ｕ．Ｓ．Ｆｏｏｄ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎによりインビトロ診断キットに要求される説明書を含む。一部の実施形態において、キットは、試料中の脳脊髄液の存在または不存在を、前記試料中のＩＬ−２２の存在または不存在に基づき診断するための説明書をさらに含む。他の実施形態において、キットは、１つ以上の酵素、酵素阻害剤または酵素活性化剤をさらに含む。さらに他の実施形態において、キットは、１つ以上のクロマトグラフィー化合物をさらに含む。さらに他の実施形態において、キットは、分光光度アッセイ用の試料を調製するために使用される１つ以上の化合物をさらに含む。さらなる実施形態において、キットは、指示薬の強度、色スペクトル、または他の物理的属性に従ってＩＬ−２２の存在または不存在を解釈するための比較参照材料をさらに含む。
【０２４４】
以下の実施例は、限定されるものではないが、本開示のＩＬ−２２抗体の説明のためのものである。当分野において通常見出され、当業者に明らかである種々の条件およびパラメータの他の好適な改変および適合が本開示の範囲内である。
【実施例】
【０２４５】
実施例１：抗ＩＬ−２２抗体
マウスをヒトＩＬ−２２で免疫し、ヒトＩＬ−２２（ｈＩＬ−２２）に結合するマウスモノクローナル抗体（３Ｃ３  ｍＡｂ）を発現する機能性ハイブリドーマクローン３Ｃ３を作製した。３Ｃ３  ｍＡｂのｈＩＬ−２２に対する結合親和性は約１００ｐＭである（ＳＰＲ分析測定）。しかし、３Ｃ３  ｍＡｂはマウスＩＬ−２２（ｍＩＬ−２２）に結合できなかった。３Ｃ３  ｍＡｂは、ＨｅｐＧ２細胞においてｈＩＬ２によるＳｔａｔ３リン酸化の誘導を阻止することができる。３Ｃ３  ｍＡｂをヒト化し、ヒト化抗体ｈｕｍ１０を作製した。
【０２４６】
Ｈｕｍ１０を包括的位置進化（ＣＰＥ（登録商標））のために選択してＨｕｍ１０バリアントを含むＣＰＥ（登録商標）ライブラリーを作成した。ｈｕｍ１０の６つのＣＤＲにおける各位置を少なくとも１５アミノ酸で置換し、抗体バリアントを作成した。ｈｕｍ１０中のＣＤＲの位置を図１に示し、いくつかの例示的な置換を示す。６つのＣＤＲには合計６３の位置がある。ＣＰＥ（登録商標）ライブラリーには、全部で１０６８の抗体バリアント（軽鎖ＣＤＲに変異を有する４７２の変異体と重鎖ＣＤＲに変異を有する５９６の変異体）が含まれていた。各抗体バリアントは配列決定により検証した。ＣＰＥ（登録商標）バリアントを９６ウェルフォーマットでＣＨＯ細胞にトランスフェクトし、上清をトランスフェクション後４８時間で採取した。上清中のＣＰＥ（登録商標）バリアントの発現量は、市販の精製ヒトＩｇＧを基準とした定量ＥＬＩＳＡ法で測定した。
【０２４７】
ＣＰＥ（登録商標）ライブラリーは、ヒトＩＬ−２２とマウスＩＬ−２２の両者に高親和性で結合できる抗体についてスクリーニングした。具体的には、ＣＰＥ（登録商標）バリアントを、マウスＩＬ−２２（ｍＩＬ−２２）結合親和性についてアフィニティーＥＬＩＳＡによりスクリーニングした。対照としてｈｕｍ１０を親和性ＥＬＩＳＡプレートごとに含めた。ｈｕｍ１０と比較してｍＩＬ−２２への結合親和性が増加したＣＰＥ（登録商標）バリアントを、一次ＣＰＥ（登録商標）ヒットとしてスコア化した。一次ＣＰＥ（登録商標）のヒットを再アレイ化し、再トランスフェクトし、親和性ＥＬＩＳＡによって再度スクリーニングし、またｍＩＬ−２２とｈＩＬ−２２の両方に結合する抗体についてｍＩＬ−２２とヒトＩＬ−２２（ｈＩＬ−２２）の両方を用いた滴定ＥＬＩＳＡによってもスクリーニングした。スクリーニングにより、表１に示す１０種類の変異体抗体が同定された。これらの１０種類の変異体抗体は、ＥＬＩＳＡデータおよび配列の多様性、スケールアップおよび精製の能力に基づいて選択した。
【０２４８】
実施例２：精製抗ＩＬ−２２抗体
選択した抗ＩＬ−２２抗体をＣＨＯ細胞で発現させ、発現した抗体を精製してさらなる試験を行った。抗体の純度を確認するために、それらを１０％  ＳＤＳ  ＰＡＧＥゲル中に装填した。抗体は、非還元条件下で単一バンドを示し（図４、左半分）、対になった軽鎖および重鎖を有する完全な抗体を示した。還元条件下では、抗体はＬ鎖と重鎖に分離され、各レーンで２本のバンドとして示された（図４、右半分）。レーンＭはゲル上にマークされた各バンドについてｋＤａでの分子量マーカーを示した。
【０２４９】
精製された抗体はまた、流速：０．３ｍｌ／分のＳｕｐｅｒｄｅｘ２００  ５／１５０  ＧＬカラム上でサイズ排除クロマトグラフィー分析によって分析された。洗浄緩衝液は１ｘ  ＰＢＳ緩衝液とした。全部で５０μｌの抗体をカラムに注入した。ＳＥＣ分析は単一のピークを生じ（図５Ａ−５Ｃ）、抗体が高純度であることを示した。図５ＡはＣＰＳ０２の純度を示し、図５ＢはＣＰＳ０９の純度を示す。市販のヒトＩｇＧ標準品を対照として使用し、その結果を図５Ｃに示す。単一ピークは、精製された抗体が十分に純粋であり、試験条件下で凝集体を形成しないことを示した。
【０２５０】
実施例３：抗ＩＬ−２２抗体の特異性
表１の１０種類の抗体の特異性を、ヒトおよびマウスＩＬ−２２の両方、ならびに関連抗原（ヒトＩＬ１９、ヒトＩＬ２０、ヒトＩＬ２４、ヒトＩＬ２６、ＩＮＦアルファＡ、ＩＮＦ−γ、ＩＮＦ−λ１、ＩＮＦ−２および非特異的抗原）を用いてＥＬＩＳＡでアッセイした。プレートは１μｇ／ｍｌの濃度で１００μｌの抗原で被覆した。このプレートを１００ｎｇ／ｍｌの濃度で抗体に曝露した。ＥＬＩＳＡアッセイにより抗ｈＩｇＧ−ＨＲＰで結合抗体を検出した。
【０２５１】
表１の１０種類の抗体は、同等の親和性でヒトおよびマウスのＩＬ−２２に結合できることが見出されたが、それらは関連抗原に対して非常に低い親和性を示した（図６）。このことは、１０種類の抗体がヒトおよびマウスのＩＬ−２２に特異的であり、他の関連抗原にはほとんど親和性がないことを示している。
【０２５２】
実施例４：抗ＩＬ−２２抗体のｍＩＬ−２２及びｈＩＬ−２２に対する結合親和性
表１の１０種類の抗体の親和性は、ＳＰＲ−２装置（シエラセンシオルズ、ハンブルク、ドイツ）での捕捉アッセイを用いて、表面プラズマ共鳴（ＳＰＲ）により測定した。抗原ｈＩＬ−２２とｍＩＬ−２２をチップ上に固相化した。アッセイ用のランニング緩衝液はｐＨ７．４、５００ｍＭ  ＮａＣｌ、および０．０５％  ＴＷＥＥＮ（登録商標）２０の１０ｍＭ  ＨＥＰＥＳを含んでいた。緩衝液はアッセイ中２５μｌ／分の流速であった。ｏｆｆ−ｒａｔｅは６分間測定した。結合定数は曲線適合ソフトウェアＡｎａｌｙｚｅｒ２（Ｓｉｅｒｒａ  Ｓｅｎｓｏｒｓ）を用いて計算した。センサーグラムは機器固有ソフトウェアおよびＢＩＡ評価４．１ソフトウェアで分析した。結合データは、Ｌａｎｇｍｕｉｒ  １：１モデル（ヒトＩＬ−２２）または不均一リガンドモデル（マウスＩＬ−２２０）を用いて分析した。
【０２５３】
各抗体の４つの種々の濃度で抗体を試験した：ｈＩＬ−２２については０．３３ｎＭ、０．６７ｎＭ、３．３ｎＭ、６．７ｎＭ；ｍＩＬ−２２については１、２、１０、２０ｎＭ。対照として、抗体ＣＰＥ−ＬＣ−Ｅ０４９Ｋを用いた。結合曲線を作成し、表２に示す抗体のＫａ、ＫｄおよびＫDを算出するために用いた。
【０２５４】
実施例５：Ｓｔａｔ３のリン酸化の誘導
３０，０００ヒトＨｅｐＧ２細胞を９６ウェルプレートに播種し、一晩血清飢餓状態にした。０．１１μｇ／ｍＬ、０．３３μｇ／ｍＬ、１μｇ／ｍＬ、及び３μｇ／ｍＬの濃度の抗ＩＬ−２２抗体及び対照ｈｕｍ１０抗体の３倍希釈液を、２００ｎｇ／ｍＬのｈＩＬ−２２又はｍＩＬ−２２と３７℃で１時間インキュベートした後、血清飢餓ヒトＨｅｐＧ２細胞に添加した。ＨｅｐＧ２細胞を抗体−ＩＬ−２２混合物と３７℃で２０分間インキュベートした。インキュベーション後、ＨｅｐＧ２細胞をＰＢＳで洗浄し、溶解した。細胞溶解物の半分を用いて、ベンダーのプロトコルに従ってＣｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  ｋｉｔ  ＃７３００を用いてリン酸化Ｓｔａｔ３のレベルを測定し、他の半分の細胞溶解物を用いて、ヒトＳｔａｔ３に対するＳａｎｔａ  Ｃｒｕｚウサギポリクローナル抗体（Ｓｃ−７１７９）を用いたウエスタンブロット分析により、総Ｓｔａｔ３のレベルを測定した。
【０２５５】
ヒトＩＬ−２２への結合を介する抗ＩＬ−２２抗体によるＳｔａｔ３リン酸化の阻害を図７Ａに示し、マウスＩＬ−２２への結合を介するＳｔａｔ３リン酸化の阻害を図７Ｂに示す。陰性対照ヒトＩｇＧ抗体はＳｔａｔ３リン酸化の阻害を示さなかった。選択された抗ＩＬ−２２抗体はＳｔａｔ３リン酸化の用量依存的阻害を示した（図７Ａ−７Ｂ）。
【０２５６】
実施例６：ＣＸＣＬ１産生の抑制
種々の濃度の抗ＩＬ−２２抗体を、通常サイトカインＣＸＣＬ１を産生するＨＴ２９細胞とインキュベートした。ＨＴ２９細胞によるＣＸＣＬ１の産生を経時的に測定し、その結果を図８に示す。抗体によるＣＸＣＬ１産生の阻害は用量依存性であり、サイトカイン産生の阻害における抗体の役割を示した。
【０２５７】
実施例７：マウスにおける抗ＩＬ−２２抗体の薬物動態
２種類の抗ＩＬ−２２抗体ＣＰＳ０２とＣＰＳ０９をＮＯＤ  ＳＣＩＤマウスで試験した。抗体を０．３ｍｇ／ｋｇと１０ｍｇ／ｋｇの２用量で静脈注射した。各用量群に３匹のマウスを用いた。血液標本を、静脈注射後１０分、１時間、３時間、７時間、２４時間、４８時間、９６時間、１６８時間、２４０時間および３３６時間で、マウスから回収した。血液試料中の注射抗体の濃度を固相ＥＬＩＳＡで測定した。
【０２５８】
抗体の半減期は、ＣＰＳ０２については図９Ａ−９Ｂ、ＣＰＳ０９については図１０Ａ−１０Ｂに示されるように、マウスにおいて長かった。マウスにおけるＣＰＳ０２の半減期は１０ｍｇ／ｋｇ注射後約１８時間であった。マウスにおけるＣＰＳ０９の半減期は１０ｍｇ／ｋｇ注射後約１６時間であった。
【０２５９】
実施例８：ＩＬ−２２による急性期反応の抑制
５μｇのｍＩＬ−２２を用いて、マウスにおける急性期反応を刺激した。急性期反応はマウスの血液中の血清アミロイド（ＳＡＡ）濃度で測定した。抗ＩＬ−２２抗体を２つの異なった用量で投与し、ＩＬ−２２誘導急性期反応：５μｇと５０μｇを阻害した。各用量群に５匹のマウスを用いた。ＳＡＡ濃度を、ＩＬ−２２および／または抗体の注射後２４時間で測定し、結果を図１１に示す。
【０２６０】
ｍＩＬ−２２のみをマウスに注射すると、マウスは高レベルのＳＡＡを産生した。抗ＩＬ−２２抗体のみをマウスに注射した場合、マウスにおけるＳＡＡ濃度は、刺激の欠如のために低かった（ｍＩＬ−２２、図１１の右パネル）。ｍＩＬ−２２および抗ＩＬ−２２抗体の両方をマウスに注射した場合、マウスのＳＡＡ濃度はｍＩＬ−２２のみを用いた場合よりも有意に低く、抗ＩＬ−２２抗体がマウスの急性期反応を効果的に阻害したことを示している（図１１の左パネル）。
【０２６１】
実施例９：マウスにおけるイミキモド誘発乾癬の処置
本発明の２つの抗ＩＬ−２２抗体、ＣＰＳ０２およびＣＰＳ０９を、マウスにおけるイミキモド（ＩＭＱ）誘発乾癬の処置に使用した（図１２）。マウスは、雄ＢＡＬＢ／ｃマウスであり、これは、ハウスマウスのアルビノ、実験室で繁殖させた系統であった。体重１８〜２０ｇの計７０匹のマウスを７日間馴化した後、乾癬を誘発した。
【０２６２】
７０匹のマウスを７群（各群１０匹）に無作為に割り付けた。１群（第１群）を陰性対照として用い、イミキモドをマウスに投与せず、代わりにワセリンに置き換えた。したがって、この陰性対照群は乾癬を誘発しなかった。他の６群（第２〜７群）には、０日目から７日目までイミキモドを８２．５ｍｇ／マウス  （５％クリーム）を１日１回（ｑｄ）８日間連続して局所投与（左耳２０ｍｇ、剃毛背部６２．５ｍｇ）し、乾癬を誘発した。背面のスキンは、２ｘ３ｃｍ2の領域を露出するようにシェービングされた。ワセリン対照群については、０日目から７日目まで８２．５ｍｇ／マウス１日１回（ｑｄ）、８日間連続でワセリンを塗布した（左耳２０ｍｇ、剃毛背部６２．５ｍｇ）。
【０２６３】
第３群〜第７群のマウスにのみ乾癬処置を施したため、第１群〜第２群は表５に示すように無処置とした。２群は、未処置で対照群として役立つ乾癬誘導マウスの群であった。第３群〜第７群は、表５に示すような様々な処置レジメンで処置した。投与期間はイミキモド塗布期間（０日目〜７日目）と完全に重複していた。第２群については、８日間（０日目〜７日目）の各日に、マウスにイミキモドとデキサメタゾンの両方を投与した。静脈内（Ｉ．Ｖ．）注射を受けた群については、０日目と３日目にＩ．Ｖ．注射後１時間以内にイミキモドを適用した。
【表５】
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【０２６４】
第３群は、乾癬に用いられる現行の治療的処置であるステロイドデキサメサゾンで処置した。デキサメタゾンは８日間、１日２回（ＢＩＤ）局所適用された。第４群はリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で処置し、これを陰性対照とした。第５群には、陰性対照としても働くアイソタイプ対照抗体を投与した。第６群〜第７群には、それぞれ抗ＩＬ−２２抗体ＣＰＳ０２（Ａ）およびＣＰＳ０９（Ｂ）を投与した。第４群〜第７群の処置は、０日目と３日目各単回静脈内（Ｉ．Ｖ．）注射により投与した。第６群の３匹のマウスは第０日に死亡し、２匹は第１日に死亡した。３日目に、この群のＩ．Ｖ．注射用量は１０ｍｇ／ｋｇに減少した。
【０２６５】
８日間の投与期間中、０、３、５および７日目に耳厚を測定した。体重と種々の皮膚スコアを毎日記録した。０日目、３日目、５日目および７日目に乾癬部位の写真を撮影した。１日目と４日目に、約６０μｌの血液を２４時間にわたって後眼窩出血を介して採取し、エチレンジアミン四酢酸二カリウム（Ｋ2ＥＤＴＡ）でコーティングしたＢＤマイクロテイナー（登録商標）チューブに入れた。その後、血漿を採取し（少なくとも２０μｌの血漿を得るため）、−８０℃で保存した。これらの試料をさらに分析し、結果を図１２に示す。
【０２６６】
紅斑、鱗屑および厚さの皮膚スコアは、確立された等級付けシステムに従って毎日測定した。紅斑、鱗屑および厚さは、０〜４：０（なし）、１（軽度）、２（中等度）、３（著明）、４（非常に著明）の評価でそれぞれ独立してスコア化した。累積（総）皮膚スコアも算出した。
【０２６７】
処置終了時（７日目）に、以下のエンドポイントを収集した：
・  脾臓指数（脾臓重量／体重）
・  採血し、−８０℃で分離保存した血清
・  背部および左耳から採取した罹患皮膚（１）各マウスについて、背部皮膚用スライド１枚、左耳用スライド１枚、（２）代表的な写真１枚／群
・  背部皮膚試料のリアルタイムＰＣＲを実施した。罹患した背部皮膚から全ｍＲＮＡを抽出し、ＩＬ−２３、ＩＬ−２２、ＣＣＬ３、ＣＸＣＬ３、ＮＰＧ、ＩＬ−１７Ａ、Ｓ１００Ａ７およびロリクリン（対照としてβ−ａｃｔｉｎ）の発現を決定するために、リアルタイムＰＣＲにかけた。
【０２６８】
処置の効果は、二元配置分散分析（ＡＮＯＶＡ、Ｂｏｎｆｅｒｒｏｎｉポストテスト）または一元配置ＡＮＯＶＡ分析を用いて統計学的に分析した。処置群と対照群との比較については、図１３−１８にｐ値が０．０５未満の場合は（＊）、０．０１未満の場合は（＊＊）、または０．００１未満の場合は（＊＊＊）として示す。
【０２６９】
デキサメタゾンを処置したマウスと比較して、抗ＩＬ−２２抗体ＣＰＳ０２（Ａ）およびＣＰＳ０９（Ｂ）は、処置したマウスの体重減少を少なくすることが観察された。実際、抗ＩＬ−２２抗体ＣＳＰ０９（Ｂ）は、ＰＢＳ緩衝液陰性対照と同様の体重減少をもたらした。これは、本発明の抗ＩＬ−２２抗体が、デキサメタゾンによる既知の処置と比較した場合に、少なくとも１つの有害な副作用を減少させたという明確な指摘である。図１３参照。
【０２７０】
乾癬の症状は、皮膚の厚さ、紅斑および鱗屑を観察して測定する。より薄い皮膚の厚さは、より成功した処置の指標である。抗ＩＬ−２２抗体ＣＳＰ０２（Ａ）およびＣＳＰ０９（Ｂ）で処置したマウスでは、陰性対照、アイソタイプ一致抗体、ＰＢＳおよびビヒクル処置で処置したマウスよりも耳皮膚厚が薄かった。デキサメタゾンで処置したマウスの耳の厚さは、イミキモド誘導を受けなかったマウスのそれと同様であった。図１４参照。
【０２７１】
抗ＩＬ２２抗体ＣＳＰ０２（Ａ）とＣＳＰ０９（Ｂ）で処置したマウスの皮膚紅斑スコアも、陰性対照、アイソタイプ一致抗体、ＰＢＳとビヒクル処置で処置したマウスで観察された皮膚紅斑スコアより低かった。この場合も、デキサメタゾンを投与したマウスの皮膚紅斑スコアは、イミキモドを投与しなかったマウスと同程度であった。図１５参照。
【０２７２】
抗ＩＬ−２２抗体ＣＳＰ０２（Ａ）およびＣＳＰ０９（Ｂ）で処置したマウスの皮膚鱗屑スコアも、陰性対照、アイソタイプ一致抗体、ＰＢＳおよびビヒクル処置で処置したマウスの皮膚鱗屑スコアより低かった。ここでも、デキサメタゾンで処置したマウスの皮膚鱗屑スコアは、イミキモド誘導を受けなかったマウスの皮膚鱗屑スコアと同様であった。図１６参照。
【０２７３】
抗ＩＬ−２２抗体ＣＳＰ０２（Ａ）およびＣＳＰ０９（Ｂ）で処置したマウスの皮膚厚も、陰性対照、アイソタイプ一致抗体、ＰＢＳおよびビヒクル処置したマウスの皮膚厚よりも低かった。この場合も、デキサメタゾンを投与したマウスの皮膚の厚さは、イミキモドを誘発しなかったマウスの皮膚の厚さと同程度であった。図１７参照。
【０２７４】
最後に、皮膚の全体的な状態を、投与マウスの総皮膚スコアとして評価した。抗ＩＬ−２２抗体ＣＳＰ０２（Ａ）とＣＳＰ０９（Ｂ）で処置したマウスの総皮膚スコアも、陰性対照、アイソタイプ一致抗体、ＰＢＳとビヒクル処置で処置したマウスの総皮膚スコアより低かった。抗ＩＬ−２２抗体ＣＳＰ０９（Ｂ）を投与したマウスは特に総皮膚スコアが良好であった。この場合も、デキサメタゾンを投与したマウスの総皮膚スコアは、イミキモド誘発を受けなかったマウスの総皮膚スコアと同程度であった。図１８参照。
【０２７５】
以上より、抗ＩＬ−２２抗体は、皮膚の厚さ、紅斑、鱗屑の乾癬症状を改善することにより、マウスモデルにおける乾癬の処置に効果的であることが示された。同時に、条件的に活性な抗ＩＬ−２２抗体は、乾癬に対する既知の処置に比べて副作用の減少を示した。抗ＩＬ−２２抗体ＣＳＰ０９（ｂ）はとくに乾癬の処置に効果があり、副作用も軽微であった。
【０２７６】
しかし、本発明の数多くの特徴および利点が、本発明の構造および機能の詳細と共に前述の記載に示されていても、本開示は例示に過ぎず、添付の特許請求の範囲で表された用語の広義で示される全ての程度で、特に本発明の原理内で部品の形状、寸法、および配置に関して、変更が詳細に施され得ることが、理解されなければならない。
【０２７７】
本明細書に挙げられる全ての文献は、参照により全体として、少なくとも特に依拠する開示を提供するために本明細書に援用される。本出願人らは、任意の開示実施形態を公的に提供する意図はなく、任意の開示の改変または変更が特許請求の範囲の範囲内に文字通り収まり得ない程度で、それらは、均等論のもと、その一部とみなされる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【図５Ｃ】
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【図６】
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【図７Ａ】
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【図７Ｂ】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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