(57)【要約】  本開示は、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）、免疫エフェクター細胞関連神経毒性症候群（ＩＣＡＮＳ）、癌関連認知障害、輸注反応症候群（ＩＲＳ）、毛細血管漏出症候群（ＣＬＳ）、腫瘍崩壊症候群（ＴＬＳ）、マクロファージ活性化症候群（ＭＡＳ）、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、免疫再構築炎症反応症候群（ＩＲＩＳ）、移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）、急性呼吸促拍症候群（ＡＲＤＳ）、敗血症、エボラ、トリインフルエンザ、天然痘、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）および免疫関連有害事象症候群（ＩｒＡＥＳ）から選択される少なくとも１つの症状を処置することを必要とする対象における前記少なくとも１つの症状を処置する方法であって、肥満細胞安定剤または式Ｉもしくは式ＩＩの化合物：【化１】2021535181.tif 000018  式中、Ｒ１は、ハロゲン、ＯＨもしくは−ＯＣ（Ｏ）Ｃ１〜５アルキルであり；Ｒ２およびＲ３は、それぞれ、ＣＯ２Ｒ４もしくはＣＨ２ＯＲ５から独立して選択され；Ｒ４は、Ｌｉ、Ｎａ、Ｋ、Ｈ、Ｃ１〜５アルキルもしくは−ＣＨ２ＣＯ（Ｃ１〜５アルキル）であり；Ｒ５は、Ｈもしくは−Ｃ（Ｏ）（Ｃ１〜５アルキル）である、もしくは薬学的に許容されるこれらの塩を投与することを含む、方法に関する。
2021535181.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも１つの症状を処置する方法であって、前記症状が、処置を必要とする対象におけるサイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）、免疫エフェクター細胞関連神経毒性症候群（ＩＣＡＮＳ）、癌関連認知障害、輸注反応症候群（ＩＲＳ）、毛細血管漏出症候群（ＣＬＳ）、腫瘍崩壊症候群（ＴＬＳ）、マクロファージ活性化症候群（ＭＡＳ）、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、免疫再構築炎症反応症候群（ＩＲＩＳ）、移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）、急性呼吸促拍症候群（ＡＲＤＳ）、敗血症、エボラ、トリインフルエンザ、天然痘、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）および免疫関連有害事象症候群（ＩｒＡＥＳ）から選択され、式Ｉもしくは式ＩＩの化合物：
【化１】
2021535181.tif 000015
式中、
Ｒ１は、ハロゲン、ＯＨもしくは−ＯＣ（Ｏ）Ｃ１〜５アルキルであり、
Ｒ２およびＲ３は、それぞれ、ＣＯ２Ｒ４もしくはＣＨ２ＯＲ５から独立して選択され、
Ｒ４は、Ｌｉ、Ｎａ、Ｋ、Ｈ、Ｃ１〜５アルキルもしくは−ＣＨ２ＣＯ（Ｃ１〜５アルキル）であり、
Ｒ５は、Ｈもしくは−Ｃ（Ｏ）（Ｃ１〜５アルキル）である、
または薬学的に許容されるこれらの塩を投与することを含む、方法。
【請求項２】
Ｒ１がＦである、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
Ｒ１がＯＨである、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
Ｒ１が−ＯＣ（Ｏ）Ｃ１〜４アルキルである、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
Ｒ１が−ＯＣ（Ｏ）Ｍｅである、請求項１または４に記載の方法。
【請求項６】
Ｒ２およびＲ３がそれぞれ独立して−ＣＯ２Ｒ４である、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
Ｒ４がＬｉ、Ｎａ、ＫまたはＮＨ４である、請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
Ｒ４がＮａである、請求項１〜７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
Ｒ４がＨである、請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
Ｒ４がＣ１〜５アルキルである、請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
Ｒ４が−ＣＨ２ＣＯ（Ｃ１〜５アルキル）である、請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
Ｒ２およびＲ３がそれぞれ独立して−ＣＨ２ＯＲ５である、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
Ｒ５がＨである、請求項１〜５および１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
Ｒ５が−Ｃ（Ｏ）（Ｃ１〜５アルキル）である、請求項１〜５および１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
前記Ｃ１〜５アルキルがメチル、エチルまたはｔ−ブチルである、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６】
前記式Ｉの化合物が、以下：
【化２】
2021535181.tif 000016
から選択される、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７】
前記症状がＩｒＡＥＳ、癌関連認知障害、ＣＲＳまたはＩＣＡＮＳである、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８】
前記症状がＣＲＳである、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９】
前記症状がＩＣＡＮＳである、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０】
前記症状が癌関連認知障害である、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１】
１つまたは複数のバイオ医薬品を投与することをさらに含む、請求項１〜２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２】
前記バイオ医薬品が、ワクチン、全血、血液成分、アレルギー誘発性物質、体細胞、遺伝子療法、組織、臓器移植、クローン化されたタンパク質、組換えＤＮＡの産物、ＤＮＡ遺伝子療法、ｍｉＲＮＡ、ｓｉＲＮＡ、薬物調製物であってヌクレオチドまたはアミノ酸を含む薬物調製物、モノクローナル抗体（ｍＡｂ）、ｍＡｂ断片、ペプチド、融合タンパク質、組換え治療用タンパク質、糖タンパク質および細胞治療において使用される生細胞から選択される、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
前記バイオ医薬品が、ワクチン、体細胞、遺伝子療法、モノクローナル抗体（ｍＡｂ）、ｍＡｂ断片および細胞治療において使用される生細胞から選択される、請求項２１または２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記バイオ医薬品が、二重特異性Ｔ細胞誘導物質、一本鎖抗体構築物および免疫エフェクター細胞から選択される、請求項２１〜２３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２５】
前記バイオ医薬品がＣＡＲ−Ｔ細胞である、請求項２１〜２４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２６】
前記バイオ医薬品が、ＩＦＮγ、ＴＮＦα、ムロモナブ−ＣＤ３、アレムツズマブ、リツキシマブ、ソリトマブ、セラリズマブおよびブリナツモマブから選択される、請求項２１に記載の方法。
【請求項２７】
前記バイオ医薬品が、式Ｉまたは式ＩＩの化合物と共同して投与される、請求項２１〜２６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２８】
前記バイオ医薬品が、前記式Ｉまたは式ＩＩの化合物の投与の前に投与される、請求項２１〜２７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２９】
前記バイオ医薬品が、前記式Ｉまたは式ＩＩの化合物と同時に投与される、請求項２１〜２７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３０】
前記バイオ医薬品が、前記式Ｉの化合物の後に投与される、請求項２１〜２７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３１】
前記バイオ医薬品が、前記式ＩＩの化合物の後に投与される、請求項２１〜２７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３２】
前記バイオ医薬品および前記式Ｉまたは式ＩＩの化合物が、それぞれ独立して、吸入、筋肉内、静脈内、腹腔内または皮下によって投与される、請求項２１〜３１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３３】
免疫抑制薬を投与することをさらに含む、請求項１〜３２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３４】
前記免疫抑制薬がコルチコステロイドである、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
前記免疫抑制薬が、トシリズマブ、シルツキシマブ、インフリキシマブ、アバタセプトおよびアナキンラ（ａｎａｋｉｒｎａ）から選択される、請求項３３に記載の方法。
【請求項３６】
前記免疫抑制薬がトシリズマブである、請求項３３または３５に記載の方法。
【請求項３７】
昇圧剤を投与することをさらに含む、請求項１〜３６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３８】
前記昇圧剤が、エピネフリン、ノルエピネフリン、フェニレフリン、エフェドリンおよびドーパミンから選択される、請求項３７に記載の方法。
【請求項３９】
ＴＮＦ阻害剤を投与することをさらに含む、請求項１〜３８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４０】
前記ＴＮＦ阻害剤が、エタネルセプト、インフリキシマブ、アダリムマブ、セルトリズマブペゴル、ゴリムマブ、サリドマイド、レナリドマイド、ポマリドマイド、ペントキシフィリンおよびブプロピオンから選択される、請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】
薬学的に許容される賦形剤をさらに含む薬学的組成物の形態の前記式Ｉもしくは式ＩＩの化合物または薬学的に許容されるこれらの塩を投与することを含む、請求項１〜４０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４２】
少なくとも１つの症状を処置する方法であって、前記症状が、処置を必要とする対象におけるサイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）、免疫エフェクター細胞関連神経毒性症候群（ＩＣＡＮＳ）、癌関連認知障害、輸注反応症候群（ＩＲＳ）、毛細血管漏出症候群（ＣＬＳ）、腫瘍崩壊症候群（ＴＬＳ）、マクロファージ活性化症候群（ＭＡＳ）、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、免疫再構築炎症反応症候群（ＩＲＩＳ）、移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）、急性呼吸促拍症候群（ＡＲＤＳ）、敗血症、エボラ、トリインフルエンザ、天然痘、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）および免疫関連有害事象症候群（ＩｒＡＥＳ）から選択され、肥満細胞安定剤を投与することを含む、方法。
【請求項４３】
前記肥満細胞安定剤が、ネドクロミル、ケトチフェン、ケルセチン、オマリズマブ、オロパタジン、アゼラスチン、メポリズマブ、メチルキサンチンおよびβ２アドレナリン作動性アゴニストから選択される、請求項４２に記載の方法。
【請求項４４】
少なくとも１つの症状を処置する方法であって、前記症状が、処置を必要とする対象におけるサイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）、免疫エフェクター細胞関連神経毒性症候群（ＩＣＡＮＳ）、癌関連認知障害、輸注反応症候群（ＩＲＳ）、毛細血管漏出症候群（ＣＬＳ）、腫瘍崩壊症候群（ＴＬＳ）、マクロファージ活性化症候群（ＭＡＳ）、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、免疫再構築炎症反応症候群（ＩＲＩＳ）、移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）、急性呼吸促拍症候群（ＡＲＤＳ）、敗血症、エボラ、トリインフルエンザ、天然痘、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）および免疫関連有害事象症候群（ＩｒＡＥＳ）から選択され、式ＩＩＩ、式ＩＶ、式Ｖ、式ＶＩ、式ＶＩＩ、式ＶＩＩＩ、式ＩＸ、式Ｘ、式ＸＩ、式ＸＩＩ、式ＸＩＩＩおよび式ＸＩＶの化合物：
【化３】
2021535181.tif 000017
から選択される化合物を投与することを含む、方法。
【請求項４５】
少なくとも１つの症状を処置する方法であって、前記症状が、処置を必要とする対象におけるサイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）、免疫エフェクター細胞関連神経毒性症候群（ＩＣＡＮＳ）、癌関連認知障害、輸注反応症候群（ＩＲＳ）、毛細血管漏出症候群（ＣＬＳ）、腫瘍崩壊症候群（ＴＬＳ）、マクロファージ活性化症候群（ＭＡＳ）、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、免疫再構築炎症反応症候群（ＩＲＩＳ）、移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）、急性呼吸促拍症候群（ＡＲＤＳ）、敗血症、エボラ、トリインフルエンザ、天然痘、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）および免疫関連有害事象症候群（ＩｒＡＥＳ）から選択され、抗炎症性遺伝子タンパク質から切断された抗炎症性小分子ペプチドを投与することを含む、方法。
【請求項４６】
前記抗炎症性遺伝子タンパク質がＴＲＥＭ２である、請求項４５に記載の方法。
【請求項４７】
前記症状が、ＩｒＡＥＳ、癌関連認知障害、ＣＲＳまたはＩＣＡＮＳである、請求項４２〜４６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４８】
前記症状がＣＲＳである、請求項４２〜４７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４９】
前記症状がＩＣＡＮＳである、請求項４２〜４７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５０】
前記症状が癌関連認知障害である、請求項４２〜４７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５１】
前記症状がＩｒＡＥＳである、請求項４２〜４７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５２】
１つまたは複数のバイオ医薬品を投与することをさらに含む、請求項４２〜５１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５３】
前記バイオ医薬品が、ワクチン、全血、血液成分、アレルギー誘発性物質、体細胞、遺伝子療法、組織、臓器移植、クローン化されたタンパク質、組換えＤＮＡの産物、ＤＮＡ遺伝子療法、ｍｉＲＮＡ、ｓｉＲＮＡ、薬物調製物であってヌクレオチドまたはアミノ酸を含む薬物調製物、モノクローナル抗体（ｍＡｂ）、ｍＡｂ断片、ペプチド、融合タンパク質、組換え治療用タンパク質、糖タンパク質および細胞治療において使用される生細胞から選択される、請求項５２に記載の方法。
【請求項５４】
前記バイオ医薬品が、ワクチン、体細胞、遺伝子療法、モノクローナル抗体（ｍＡｂ）、ｍＡｂ断片および細胞治療において使用される生細胞から選択される、請求項５２または５３に記載の方法。
【請求項５５】
前記バイオ医薬品が、二重特異性Ｔ細胞誘導物質、一本鎖抗体構築物および免疫エフェクター細胞から選択される、請求項５２〜５４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５６】
前記バイオ医薬品がＣＡＲ−Ｔ細胞である、請求項５２〜５５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５７】
前記バイオ医薬品が、ＩＦＮγ、ＴＮＦα、ムロモナブ−ＣＤ３、アレムツズマブ、リツキシマブ、ソリトマブ、セラリズマブおよびブリナツモマブから選択される、請求項５２または５３に記載の方法。
【請求項５８】
前記バイオ医薬品が、肥満細胞安定剤、式ＩＩＩ、式ＩＶ、式Ｖ、式ＶＩ、式ＶＩＩ、式ＶＩＩＩ、式ＩＸ、式Ｘ、式ＸＩ、式ＸＩＩ、式ＸＩＩＩもしくは式ＸＩＶの化合物または抗炎症性遺伝子タンパク質から切断された抗炎症性小分子ペプチドと共同して投与される、請求項５２〜５７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５９】
前記バイオ医薬品が、前記肥満細胞安定剤、前記式ＩＩＩ、式ＩＶ、式Ｖ、式ＶＩ、式ＶＩＩ、式ＶＩＩＩ、式ＩＸ、式Ｘ、式ＸＩ、式ＸＩＩ、式ＸＩＩＩもしくは式ＸＩＶの化合物または前記抗炎症性遺伝子タンパク質から切断された抗炎症性小分子ペプチドの前に投与される、請求項５２〜５８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６０】
前記バイオ医薬品が、前記肥満細胞安定剤、前記式ＩＩＩ、式ＩＶ、式Ｖ、式ＶＩ、式ＶＩＩ、式ＶＩＩＩ、式ＩＸ、式Ｘ、式ＸＩ、式ＸＩＩ、式ＸＩＩＩもしくは式ＸＩＶの化合物または前記抗炎症性遺伝子タンパク質から切断された抗炎症性小分子ペプチドと同時に投与される、請求項５２〜５８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６１】
前記バイオ医薬品が、前記肥満細胞安定剤、前記式ＩＩＩ、式ＩＶ、式Ｖ、式ＶＩ、式ＶＩＩ、式ＶＩＩＩ、式ＩＸ、式Ｘ、式ＸＩ、式ＸＩＩ、式ＸＩＩＩもしくは式ＸＩＶの化合物または前記抗炎症性遺伝子タンパク質から切断された抗炎症性小分子ペプチドの後に投与される、請求項５２〜５８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６２】
前記バイオ医薬品および前記肥満細胞安定剤、前記式ＩＩＩ、式ＩＶ、式Ｖ、式ＶＩ、式ＶＩＩ、式ＶＩＩＩ、式ＩＸ、式Ｘ、式ＸＩ、式ＸＩＩ、式ＸＩＩＩもしくは式ＸＩＶの化合物または前記抗炎症性遺伝子タンパク質から切断された抗炎症性小分子ペプチドが、それぞれ独立して、吸入、筋肉内、静脈内、腹腔内または皮下によって投与される、請求項５２〜５８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６３】
免疫抑制薬を投与することをさらに含む、請求項４２〜６２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６４】
前記免疫抑制薬がコルチコステロイドである、請求項６３に記載の方法。
【請求項６５】
前記免疫抑制薬が、トシリズマブ、シルツキシマブ、インフリキシマブ、アバタセプトおよびアナキンラ（ａｎａｋｉｒｎａ）から選択される、請求項６３に記載の方法。
【請求項６６】
前記免疫抑制薬がトシリズマブである、請求項６３または６５に記載の方法。
【請求項６７】
昇圧剤を投与することをさらに含む、請求項４２〜６６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６８】
前記昇圧剤が、エピネフリン、ノルエピネフリン、フェニレフリン、エフェドリンおよびドーパミンから選択される、請求項６７に記載の方法。
【請求項６９】
ＴＮＦ阻害剤を投与することをさらに含む、請求項４２〜６８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７０】
前記ＴＮＦ阻害剤が、エタネルセプト、インフリキシマブ、アダリムマブ、セルトリズマブペゴル、ゴリムマブ、サリドマイド、レナリドマイド、ポマリドマイド、ペントキシフィリンおよびブプロピオンから選択される、請求項６９に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１８年９月５日に出願された米国仮特許出願第６２／７２７，１７７号の優先権を主張し、その内容全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【背景技術】
【０００２】
免疫ベースのバイオ医薬品は、癌およびその他の疾患の処置に影響を与えている標的療法である。これらの処置は、自己免疫疾患および炎症性疾患の他、いくつかの腫瘍の種類に対して化学療法より効果的である。しかしながら、これらの処置は、ほとんどの場合、薬物関連有害事象（ＤＲＡＥ）として知られる複雑な毒性関連の副作用を伴う。これらの処置は、細胞のメッセージ伝達信号を活性化または阻害する全身性の反応を誘発し、免疫抑制、細胞の活動亢進および細胞破壊を引き起こす。これらの副作用または症候群は、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）、免疫エフェクター細胞関連神経毒性症候群（ＩＣＡＮＳ）、癌関連認知障害、輸注反応症候群（ＩＲＳ）、毛細血管漏出症候群（ＣＬＳ）、腫瘍崩壊症候群（ＴＬＳ）、マクロファージ活性化症候群（ＭＡＳ）、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、免疫再構築炎症反応症候群（ＩＲＩＳ）、移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）および免疫関連有害事象症候群（ＩｒＡＥＳ）などの異なる臨床名によって呼ばれてきた。これらの症状のいくつかは、バイオ医薬品による処置中または処置後に観察される副作用を表す。これらの症候群は、関連する投与の様式または作用機序によって分類することができる。残念なことに、これらの副作用のいくつかは深刻であり、致命的であり得る。全身毒性を低下させるには、補助的処置が必要とされる。
【０００３】
生物医学薬またはバイオ医薬品は、クローン化されたタンパク質、組換えＤＮＡの産物、ＤＮＡ遺伝子療法、バイオ製造製品およびヌクレオチドまたはアミノ酸から作られた合成医薬品など、生物によって産生される薬物である。いくつかの一般的なバイオ医薬品は、モノクローナル抗体（ｍＡｂ）およびその断片、ペプチド、融合タンパク質ならびにワクチンである。この成長している治療剤のクラスには、腫瘍学、遺伝的疾患および自己免疫疾患における様々な適応症を処置するための化合物が含まれる。ほとんどのバイオ医薬品は、慢性的または投与の経路、すなわち、吸入、静脈内（ＩＶ）、皮下（ＳＱ）および筋肉内（ＩＭ）注射からの有害事象を伴う。薬物投与は、分子サイズ、これらのバイオ医薬品の物理的特性（バイオ医薬品の胃吸収を妨げる親油性および胃分解など）などの多くの要因に依存する。いくつかの事例では、いくつかのバイオ医薬品について、乾燥粉末およびエアロゾル製剤が承認されている。
【０００４】
二重特異性Ｔ細胞誘導（ＢｉＴＥ）一本鎖抗体構築物ならびにキメラ抗原受容体適応性Ｔ細胞（ＣＡＲ−Ｔ）を発現するように遺伝子操作された、Ｔ細胞およびナチュラルキラー細胞などの免疫エフェクター細胞（ＩＥＣ）などのバイオ医薬品は、単独でまたは化学療法および放射線と組み合わせて、特定の癌と戦うための最も近代的な兵器の一部である。これらの処置は大きな効果を発揮する。残念なことに、これらの処置は、その注入および処置からの有毒な副作用および免疫原性を伴う。多くの事例では、全身毒性は処置され、克服することができる。しかしながら、時には、副作用は深刻であり、大規模な緊急処置を必要とする。ＣＲＳおよびＩＣＡＮＳは、バイオ医薬品による処置の潜在的副作用の１つであり、ＣＲＳおよびＩＣＡＮＳの症候は、注入直後または注入の数時間後に出現し得る。いくつかの例では、これらの処置様式は脳に影響を及ぼし、「ケモブレイン」としても知られる癌関連認知障害を引き起こし得る。
【０００５】
ＣＡＲ−Ｔ処置の研究は、毒性がインターロイキン（ＩＬ）−６、ＩＬ−１、ＩＬ−５、ＩＬ−１３、可溶性ＩＬ−６受容体、可溶性インターフェロンγ（ＩＮＦγ）および腫瘍壊死因子α（ＴＮＦα）を含む多くの炎症誘発性サイトカインの出現に関連していることを示している。ムロモナブ−ＣＤ３、抗ＣＤ５２（アレムツズマブ）、抗ＣＤ２０（リツキシマブ）およびＣＤ２８スーパーアゴニストであるセラリズマブなどのＣＡＲ−Ｔ−ｍＡｂは、Ｂ細胞、Ｔ細胞（リンパ球）、マクロファージ、樹状細胞および単球（骨髄性）の活性化および炎症誘発性サイトカインの放出を引き起こす。したがって、サイトカインの放出を低減し、ＣＲＳおよびＩＣＡＮＳ症候の重症度を緩和する抗炎症状態（例えば、サイトカインおよび毒素を除去する貪食性マクロファージ）へこれらの活性化された細胞を転換する薬物を開発することが重要である。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本開示は、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）、免疫エフェクター細胞関連神経毒性症候群（ＩＣＡＮＳ）、癌関連認知障害、輸注反応症候群（ＩＲＳ）、毛細血管漏出症候群（ＣＬＳ）、腫瘍崩壊症候群（ＴＬＳ）、マクロファージ活性化症候群（ＭＡＳ）、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、免疫再構築炎症反応症候群（ＩＲＩＳ）、移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）、急性呼吸促拍症候群（ＡＲＤＳ）、敗血症、エボラ、トリインフルエンザ、天然痘、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）および免疫関連有害事象症候群（ＩｒＡＥＳ）から選択される少なくとも１つの症状を処置することを必要とする対象における前記少なくとも１つの症状を処置する方法であって、式Ｉもしくは式ＩＩの化合物：
【化１】
2021535181.tif 000003
式中、
Ｒ１は、ハロゲン、ＯＨもしくは−ＯＣ（Ｏ）Ｃ１〜５アルキルであり；
Ｒ２およびＲ３は、それぞれ、ＣＯ２Ｒ４もしくはＣＨ２ＯＲ５から独立して選択され；
Ｒ４は、Ｌｉ、Ｎａ、Ｋ、Ｈ、Ｃ１〜５アルキルもしくは−ＣＨ２ＣＯ（Ｃ１〜５アルキル）であり；
Ｒ５は、Ｈもしくは−Ｃ（Ｏ）（Ｃ１〜５アルキル）である、
または薬学的に許容されるこれらの塩を投与することを含む、方法に関する。
【０００７】
本開示は、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）、免疫エフェクター細胞関連神経毒性症候群（ＩＣＡＮＳ）、癌関連認知障害、輸注反応症候群（ＩＲＳ）、毛細血管漏出症候群（ＣＬＳ）、腫瘍崩壊症候群（ＴＬＳ）、マクロファージ活性化症候群（ＭＡＳ）、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、免疫再構築炎症反応症候群（ＩＲＩＳ）、移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）、急性呼吸促拍症候群（ＡＲＤＳ）、敗血症、エボラ、トリインフルエンザ、天然痘、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）および免疫関連有害事象症候群（ＩｒＡＥＳ）から選択される少なくとも１つの症状を処置することを必要とする対象における前記少なくとも１つの症状を処置する方法であって、肥満細胞安定剤を投与することを含む、方法にも関する。
【０００８】
本開示は、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）、免疫エフェクター細胞関連神経毒性症候群（ＩＣＡＮＳ）、癌関連認知障害、輸注反応症候群（ＩＲＳ）、毛細血管漏出症候群（ＣＬＳ）、腫瘍崩壊症候群（ＴＬＳ）、マクロファージ活性化症候群（ＭＡＳ）、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、免疫再構築炎症反応症候群（ＩＲＩＳ）、移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）、急性呼吸促拍症候群（ＡＲＤＳ）、敗血症、エボラ、トリインフルエンザ、天然痘、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）および免疫関連有害事象症候群（ＩｒＡＥＳ）から選択される少なくとも１つの症状を処置することを必要とする対象における前記少なくとも１つの症状を処置する方法であって、式ＩＩＩ、式ＩＶ、式Ｖ、式ＶＩ、式ＶＩＩ、式ＶＩＩＩ、式ＩＸ、式Ｘ、式ＸＩ、式ＸＩＩ、式ＸＩＩＩおよび式ＸＩＶの化合物：
【化２】
2021535181.tif 000004
から選択される化合物を投与することを含む、方法にも関する。
【０００９】
本開示は、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）、免疫エフェクター細胞関連神経毒性症候群（ＩＣＡＮＳ）、癌関連認知障害、輸注反応症候群（ＩＲＳ）、毛細血管漏出症候群（ＣＬＳ）、腫瘍崩壊症候群（ＴＬＳ）、マクロファージ活性化症候群（ＭＡＳ）、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、免疫再構築炎症反応症候群（ＩＲＩＳ）、移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）、急性呼吸促拍症候群（ＡＲＤＳ）、敗血症、エボラ、トリインフルエンザ、天然痘、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）および免疫関連有害事象症候群（ＩｒＡＥＳ）から選択される少なくとも１つの症状を処置することを必要とする対象における前記少なくとも１つの症状を処置する方法であって、抗炎症性遺伝子タンパク質から切断された抗炎症性小分子ペプチドを投与することを含む、方法にも関する。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１Ａ−Ｂ】図１Ａ〜１Ｂは、クロモリン処置がＴｇＳＯＤ１マウスの脊髄中の炎症誘発性サイトカインのレベルを減少させたことを示すグラフである。図１Ａ：ＩＬ−１β。図１Ｂ：ＩＬ−５。＊は、ＴｇＳＯＤ１−ビヒクルとＴｇ−ＳＯＤ１−クロモリンとの差を表す。＾は、ＴｇＳＯＤ１−ビヒクルとＷｔＳＯＤ１−ビヒクルとの差を表す。＃は、ＴｇＳＯＤ１−ビヒクルとＷｔＳＯＤ１−クロモリンとの差を表す。＠は、ＴｇＳＯＤ１−クロモリンとＷｔＳＯＤ１−ビヒクルとの差を表す。％は、ＴｇＳＯＤ１−クロモリンとＷｔＳＯＤ１−クロモリンとの差を表す。＊ｐ＜０．０５；＊＊ｐ＜０．０１；＊＊＊ｐ＜０．００１；＊＊＊ｐ＜０．０００１、各記号に、同一の統計的有意性が与えられる。データは中央値と四分位範囲として表されている。
【図１Ｃ−Ｄ】図１Ｃ〜１Ｄは、クロモリン処置がＴｇＳＯＤ１マウスの脊髄中の炎症誘発性サイトカインのレベルを減少させたことを示すグラフである。図１Ｃ：ＩＬ−６図１Ｄ：ＴＮＦα。＊は、ＴｇＳＯＤ１−ビヒクルとＴｇ−ＳＯＤ１−クロモリンとの差を表す。＾は、ＴｇＳＯＤ１−ビヒクルとＷｔＳＯＤ１−ビヒクルとの差を表す。＃は、ＴｇＳＯＤ１−ビヒクルとＷｔＳＯＤ１−クロモリンとの差を表す。＠は、ＴｇＳＯＤ１−クロモリンとＷｔＳＯＤ１−ビヒクルとの差を表す。％は、ＴｇＳＯＤ１−クロモリンとＷｔＳＯＤ１−クロモリンとの差を表す。＊ｐ＜０．０５；＊＊ｐ＜０．０１；＊＊＊ｐ＜０．００１；＊＊＊ｐ＜０．０００１、各記号に、同一の統計的有意性が与えられる。データは中央値と四分位範囲として表されている。
【図２Ａ−Ｂ】図２Ａ〜２Ｂは、クロモリン処置がＴｇＳＯＤ１マウスの血漿中の炎症誘発性サイトカインのレベルを減少させたことを示すグラフである。図２Ａ：ＩＬ−１β。図２Ｂ：ＩＬ−２。＊は、ＴｇＳＯＤ１−ビヒクルとＴｇ−ＳＯＤ１−クロモリンとの差を表す。＾は、ＴｇＳＯＤ１−ビヒクルとＷｔＳＯＤ１−ビヒクルとの差を表す。＃は、ＴｇＳＯＤ１−ビヒクルとＷｔＳＯＤ１−クロモリンとの差を表す。＠は、ＴｇＳＯＤ１−クロモリンとＷｔＳＯＤ１−ビヒクルとの差を表す。％は、ＴｇＳＯＤ１−クロモリンとＷｔＳＯＤ１−クロモリンとの差を表す。＊ｐ＜０．０５；＊＊ｐ＜０．０１；＊＊＊ｐ＜０．００１；＊＊＊ｐ＜０．０００１、各記号に、同一の統計的有意性が与えられる。データは中央値と四分位範囲として表されている。
【図２Ｃ−Ｄ】図２Ｃ〜２Ｄは、クロモリン処置がＴｇＳＯＤ１マウスの血漿中の炎症誘発性サイトカインのレベルを減少させたことを示すグラフである。図２Ｃ：ＩＬ−５。図２Ｄ：ＩＬ−６。＊は、ＴｇＳＯＤ１−ビヒクルとＴｇ−ＳＯＤ１−クロモリンとの差を表す。＾は、ＴｇＳＯＤ１−ビヒクルとＷｔＳＯＤ１−ビヒクルとの差を表す。＃は、ＴｇＳＯＤ１−ビヒクルとＷｔＳＯＤ１−クロモリンとの差を表す。＠は、ＴｇＳＯＤ１−クロモリンとＷｔＳＯＤ１−ビヒクルとの差を表す。％は、ＴｇＳＯＤ１−クロモリンとＷｔＳＯＤ１−クロモリンとの差を表す。＊ｐ＜０．０５；＊＊ｐ＜０．０１；＊＊＊ｐ＜０．００１；＊＊＊ｐ＜０．０００１、各記号に、同一の統計的有意性が与えられる。データは中央値と四分位範囲として表されている。
【図２Ｅ−Ｆ】図２Ｅ〜２Ｆは、クロモリン処置がＴｇＳＯＤ１マウスの血漿中の炎症誘発性サイトカインのレベルを減少させたことを示すグラフである。図２Ｅ：ＩＬ−１０。図２Ｆ：ＴＮＦα。＊は、ＴｇＳＯＤ１−ビヒクルとＴｇ−ＳＯＤ１−クロモリンとの差を表す。＾は、ＴｇＳＯＤ１−ビヒクルとＷｔＳＯＤ１−ビヒクルとの差を表す。＃は、ＴｇＳＯＤ１−ビヒクルとＷｔＳＯＤ１−クロモリンとの差を表す。＠は、ＴｇＳＯＤ１−クロモリンとＷｔＳＯＤ１−ビヒクルとの差を表す。％は、ＴｇＳＯＤ１−クロモリンとＷｔＳＯＤ１−クロモリンとの差を表す。＊ｐ＜０．０５；＊＊ｐ＜０．０１；＊＊＊ｐ＜０．００１；＊＊＊ｐ＜０．０００１、各記号に、同一の統計的有意性が与えられる。データは中央値と四分位範囲として表されている。
【図３】図３Ａ〜３Ｆは、クロモリンがＡＰＰ／ＰＳ１マウスにおけるＭｌ−小膠細胞の活性化段階の炎症誘発性ＣＤ３３によって媒介される阻害を逆転させることを実証する画像およびグラフである。３Ａ〜３Ｄ：蛍光標識されたＡβ４２（赤）、細胞膜色素（ＰＭ、緑）およびＤＭＳＯ（対照）またはＤＭＳＯ中のクロモリンナトリウムのいずれかで処理されたＢＶ２小膠細胞の共焦点顕微鏡写真。３Ａ：ＤＭＳＯ＋ＰＭ＋Ａβ４２。３Ｂ：ＤＭＳＯ＋Ａβ４２。３Ｃ：クロモリンナトリウム＋ＰＭ＋Ａβ４２。３Ｄ：クロモリンナトリウム＋Ａβ４２。３Ｅ：異なる濃度のクロモリンナトリウムで処理されたＢＶ２小膠細胞によるＡβ４２取り込みのＥＬＩＳＡ分析。３Ｆ：異なる濃度のクロモリンナトリウムで処理されたＢＶ２−ＣＤ３３ＷＴ小膠細胞によるＡβ４２取り込みのＥＬＩＳＡ分析。
【図４】図４Ａ〜４Ｂは、ＬＰＳで刺激され、異なる濃度のクロモリンで処理されたＮ９小膠細胞株中でのＩＬ−１β（図４Ａ）およびＩＬ−６（図４Ｂ）の遺伝子発現を実証するグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
概要
バイオ医薬品による処置後に、炎症および免疫の変化は、相互作用に関与するサイトカインおよび細胞の種類に応じて、損傷を悪化させ、または保護的な役割を果たすことがあり得る。炎症の保護的側面には、脳内の小膠細胞による壊死組織片の除去が含まれ、これは、Ｔ細胞の修復と相互作用において重要である。脳に存在するマクロファージである小膠細胞の特性の変化は、その微小環境中の様々な刺激（例えば、サイトカイン）に対するその応答に依存し、多様な表現型をもたらすことが知られている。サイトカイン、受容体およびその他のマーカーの発現の変化に基づいて、単球およびマクロファージの状態は、以下のように、古典的活性化（Ｍ１）、代替活性化（Ｍ２ａ）、ＩＩ型代替活性化（Ｍ２ｂ）および後天性非活性化（Ｍ２ｃ）として定義されている。
【００１２】
Ｍ１活性化された小膠細胞は、活性酸素種を産生し、ＴＮＦαおよびＩＬ−１などの炎症誘発性サイトカインの増加された産生をもたらすことができる。
【００１３】
マクロファージＭ２活性化は、抗炎症作用と細胞外マトリックスの再編成に寄与することが知られているメディエーターと関連する。Ｍ２ａ表現型を有する小膠細胞は、増加された食作用を有し、インスリン様成長因子−１などの成長因子およびＩＬ−１０などの抗炎症性サイトカインを産生する。ＩＬ−４および／またはＩＬ−１３によるマクロファージの刺激は、創傷治癒マクロファージと呼ばれることもあるＭ２ａ状態をもたらし、一般に炎症誘発性サイトカイン（ＩＬ−１、ＴＮＦおよびＩＬ−６）の産生が低いことを特徴とする。ＩＬ−４は、Ｍ２ａ小膠細胞活性化の重要な調節物質であることが知られている。Ｍ２ａ応答は、主にアレルギー応答、細胞外マトリックス沈着およびリモデリングにおいて観察される。
【００１４】
Ｍ２ｂマクロファージは、Ｍ１活性化の特徴である高レベルの炎症誘発性サイトカインを発現するだけでなく、高レベルの抗炎症性サイトカインＩＬ−１０も発現するという点で独特である。
【００１５】
最後に、Ｍ２ｃマクロファージ状態はＩＬ−１０によって刺激され、制御性マクロファージと呼ばれることがある。Ｍ２ｃマクロファージは、古典的な炎症誘発性応答なしに、細胞破片の食作用において役割を果たす抗炎症活性を有する。これらの細胞は、トランスフォーミング増殖因子−β（ＴＧＦ−β）および高ＩＬ−１０ならびにマトリックスタンパク質を発現する。ＩＬ−１０は、膠細胞の活性化および炎症誘発性サイトカインの産生を減少させるなど、抗炎症性応答を媒介する。
【００１６】
炎症誘発性サイトカインの毒性作用を和らげるための抗炎症剤の研究；および小膠細胞をこのＭ１状態から、毒性効果が低減され、小膠細胞の食作用活性が増強されるＭ２状態へと転化させることに焦点を当てた研究という、２つの道筋の研究が長年にわたって行われてきた。単球および小膠細胞の活性化は、神経変性を悪化させる可能性のある炎症誘発性サイトカインの分泌を誘発することなく単球および小膠細胞の固有の食作用能力を高めるために免疫応答を調節することによって、神経変性の進行を減速させる可能性を有すると一般に認められている。最近の研究は、クロモリンが有意なＭ２小膠細胞の活性化、脳小膠細胞による損傷修復の食細胞段階を示すことを実証する。
【００１７】
本発明は、１つには、バイオ医薬品の投与に関連するサイトカイン放出を弱めるためのアジュバントとして機能するための、クロモリンおよびその誘導体を含む一連の化合物ならびにそれらの組み合わせに関する。いくつかの実施形態において、薬物は、バイオ医薬品による処置を受けている患者を保護するように設計される。特定の実施形態において、アジュバントは、前処置として、処置の一部として、および／または後処置として適用される。いくつかの実施形態において、アジュバントは、特定のバイオ医薬品の投与に関連する炎症誘発性毒性を弱める。アジュバントと生物治療剤との相互作用が存在しないいくつかの実施形態において、バイオ医薬品とアジュバントは同時投与される。いくつかの実施形態において、提案されたアジュバントは、バイオ医薬品と同じ送達様式（すなわち、注入として）によって、または他の様式（すなわち、注入＋ＩＰまたは皮下）によって同時投与され得る。いくつかの実施形態において、ＣＲＳは、アジュバントによって促進される効果的な貪食性小膠細胞活性化のために弱められ、バイオ医薬品投与によって誘発されたサイトカインおよび毒素の除去を可能にする。特定の実施形態において、ＣＲＳ誘導物質としての、モノクローナル抗体、ＣＡＲ−Ｔ細胞治療、遺伝子治療、ｍｉＲＮＡ、ｓｉＲＮＡ、ＣＲＩＳＰＲまたはそれらの組み合わせなどの特異的な標的化された薬物が、アジュバント処置の対象となる。いくつかの実施形態において、アジュバントは、「ケモブレイン」毒性としても知られる、癌関連認知障害に関連する標的化された脳癌処置とともに使用される。いくつかの実施形態において、全身毒性を弱めまたは阻止するための多くの様式でのアジュバント療法を提供する。
【００１８】
本発明は、１つには、モノクローナル抗体、ＣＡＲ−Ｔ細胞治療、遺伝子治療、ｍｉＲＮＡ、ｓｉＲＮＡおよび将来開発されるＣＲＩＳＰＲ薬を含む、癌および免疫調節分子処置の有害な影響を減少させまたは排除するアジュバントのファミリーに関する。いくつかの実施形態において、アジュバントは、生物学的薬物療法後のＣＲＳの影響を低減または排除するために、単独でまたは他の薬物と組み合わせて作用し得る。
【００１９】
いくつかの実施形態において、アジュバントは、コルチコステロイド、ドーパミン、ノルエピネフリンおよびエタネルセプトなどの他の免疫抑制薬またはＣＲＳを低下させる他の薬物と組み合わせることができる。
【００２０】
特定の実施形態において、これらの薬物は、「ケモブレイン」としても知られる癌関連認知障害の症候を予防、軽減または排除するように特異的に作用する。特定の実施形態において、これらの症候群は、コルチコステロイド、ドーパミンおよびノルエピネフリン、エタネルセプトありまたはなしに、低減または排除される。
【００２１】
定義
別段の定義がない限り、本明細書で使用されるすべての技術用語および科学用語は、当業者によって一般的に理解される意味を有する。以下の参考文献は、本開示中で使用される用語の多くの一般的な定義を当業者に提供する。Ｓｉｎｇｌｅｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ  ｏｆ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ（２ｎｄ  ｅｄ．１９９４）；Ｔｈｅ  Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ  Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ  ｏｆ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ（Ｗａｌｋｅｒ  ｅｄ．，１９８８）；Ｔｈｅ  Ｇｌｏｓｓａｒｙ  ｏｆ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ，５ｔｈ  Ｅｄ．，Ｒ．Ｒｉｅｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（ｅｄｓ．），Ｓｐｒｉｎｇｅｒ  Ｖｅｒｌａｇ（１９９１）；およびＨａｌｅ＆Ｍａｒｈａｍ，Ｔｈｅ  Ｈａｒｐｅｒ  Ｃｏｌｌｉｎｓ  Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ  ｏｆ  Ｂｉｏｌｏｇｙ（１９９１）。本明細書で使用される場合、以下の用語は、特に明記しない限り、以下でそれらに付与された意味を有する。
【００２２】
本開示において、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」、「含んでいる（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」、「含有する（ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ）」および「有する（ｈａｖｉｎｇ）」などは、米国特許法においてそれらに付与された意味を有することができ、「含む（ｉｎｃｌｕｄｅｓ）」、「含んでいる（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」などを意味することができる。同様に、「から本質的になっている（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ  ｏｆ）」または「から本質的になる（ｃｏｎｓｉｓｔｓ  ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ）」は、米国特許法において付与された意味を有し、本用語は非限定的であり、記載されているものの基本的なまたは新規な特徴が、記載されていないものの存在によって変更されず、ただし、従来技術の実施形態を除外する限り、記載されていないものの存在を許容する。
【００２３】
任意の変数（例えば、アリール、ヘテロシクリル、Ｒ２、Ｒａなど）が化合物中に１回より多く出現する場合、各出現でのその定義はいずれの他の出現とも無関係である。
【００２４】
本明細書において使用される場合、具体的に述べられていないか、または文脈から明らかでない限り、「または」という用語は包括的であると理解される。本明細書で使用される場合、具体的に述べられていないか、または文脈から明らかでない限り、「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」という用語は、単数形または複数形であると理解される。
【００２５】
「アルキル」基または「アルカン」は、完全に飽和している直鎖または分岐の非芳香族炭化水素である。典型的には、直鎖または分岐アルキル基は、別段の定義がなければ、１〜約２０個の炭素原子、好ましくは１〜約１０個の炭素原子を有する。直鎖および分岐アルキル基の例には、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、ヘキシル、ペンチルおよびオクチルが含まれる。Ｃ１〜Ｃ６直鎖または分岐アルキル基は、「低級アルキル」基とも呼ばれる。
【００２６】
さらに、本明細書、実施例および特許請求の範囲を通じて使用される「アルキル」（または「低級アルキル」）という用語は、「置換されていないアルキル」および「置換されたアルキル」の両方を含むものとし、後者は、炭化水素骨格の１つまたは複数の炭素上の水素を置換している置換基を有するアルキル部分を表す。このような置換基としては、別段の指定がなければ、例えば、ハロゲン、ヒドロキシル、カルボニル（カルボキシル、アルコキシカルボニル、ホルミルまたはアシルなど）、チオカルボニル（チオエステル、チオアセタートまたはチオホルマートなど）、アルコキシ、ホスホリル、ホスファート、ホスホナート、ホスフィナート、アミノ、アミド、アミジン、イミン、シアノ、ニトロ、アジド、スルフヒドリル、アルキルチオ、サルファート、スルホナート、スルファモイル、スルホンアミド、スルホニル、ヘテロシクリル、アラルキル、または芳香族もしくはヘテロ芳香族部分を挙げることができる炭化水素鎖上で置換された部分は、適切な場合、それ自体置換され得ることが当業者によって理解されるであろう。例えば、置換されたアルキルの置換基には、アミノ、アジド、イミノ、アミド、ホスホリル（ホスホナートおよびホスフィナートを含む）、スルホニル（サルファート、スルホンアミド、スルファモイルおよびスルホナートを含む）およびシリル基の置換されたおよび置換されていない形態、ならびにエーテル、アルキルチオ、カルボニル（ケトン、アルデヒド、カルボキシラートおよびエステルを含む）、−ＣＦ３、−ＣＮなどが含まれ得る。例示的な置換されたアルキルを以下に記載する。シクロアルキルは、アルキル、アルケニル、アルコキシ、アルキルチオ、アミノアルキル、カルボニル置換されたアルキル、−ＣＦ３、−ＣＮなどでさらに置換することができる。
【００２７】
「Ｃｘ〜ｙ」という用語は、アルキルなどの化学的部分と組み合わせて使用される場合、鎖の中にｘ〜ｙ個の炭素を含有する基を含むことを意味する。例えば、「Ｃｘ〜ｙアルキル」という用語は、鎖中にｘ〜ｙ個の炭素を含有する直鎖アルキル基または分岐鎖アルキル基を含む置換されたまたは置換されていない飽和炭化水素基を表し、トリフルオロメチルおよび２，２，２−トリフルオロエチルなどのハロアルキル基を含む。
【００２８】
本明細書で使用される「ハロ」および「ハロゲン」という用語は、ハロゲンを意味し、クロロ、フルオロ、ブロモおよびヨードを含む。
【００２９】
「置換された」という用語は、骨格の１つまたは複数の炭素上の水素を置換している置換基を有する部分を表す。「置換」または「で置換された」は、そのような置換が置換された原子および置換基の許容される原子価に従っているという、およびその置換が、例えば、転位、環化、脱離などによる変換を自発的に受けない安定な化合物をもたらすという黙示の条件を含むことが理解されるであろう。本明細書で使用される場合、「置換された」という用語は、有機化合物のすべての許容される置換基を含むことが想定される。広い態様において、許容される置換基には、有機化合物の非環式および環式、分岐および非分岐、炭素環式および複素環式、芳香族および非芳香族置換基が含まれる。許容される置換基は、適切な有機化合物に対して、１つまたは複数であり得、同一であってもまたは異なっていてもよい。適宜、置換基自体を置換することができることが当業者には理解されるであろう。特に「置換されていない」と記載されていなければ、本明細書中に言及されている化学的部分は、置換された変異形を含むことが理解される。例えば、「アルキル」基または部分という表記は、置換された変異形と置換されていない変異形の両方を黙示的に包含する。
【００３０】
本発明の化合物は、薬学的に許容される塩の形態で存在し得る。医薬中で使用する場合、本発明の化合物の塩は、非毒性の「薬学的に許容される塩」を指す。薬学的に許容される塩の形態には、薬学的に許容される酸性／陰イオン性または塩基性／陽イオン性の塩が含まれる。
【００３１】
薬学的に許容される酸性／陰イオン性塩には、酢酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、重炭酸塩、重酒石酸塩、臭化物、エデト酸カルシウム、カンシル酸塩、炭酸塩、塩化物、クエン酸塩、二塩酸塩、エデト酸塩、エジシル酸塩、エストル酸塩、エシル酸塩、フマル酸塩、グリセプタート（ｇｌｙｃｅｐｔａｔｅ）、グルコン酸塩、グルタミン酸塩、グリコリルアルサニル酸塩、ヘキシルレゾルシン酸塩、臭化水素酸塩、塩酸塩、ヒドロキシナフトエ酸塩、ヨウ化物、イセチオン酸塩、乳酸塩、ラクトビオン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マンデル酸塩、メシル酸塩、メチル硫酸塩、粘液酸塩、ナプシル酸塩、硝酸塩、パモ酸塩、パントテン酸塩、リン酸塩／二リン酸塩、ポリガラクツロン酸塩、サリチル酸塩、ステアリン酸塩、塩基性酢酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、タンニン酸塩、酒石酸塩、テオクル酸塩、トシル酸塩およびトリエチオダイド塩が含まれる。
【００３２】
カルボン酸または他の酸性官能基を含有する開示された化合物の塩は、適切な塩基と反応することによって調製することができる。このような薬学的に許容される塩は、薬学的に許容される陽イオンを与える塩基を用いて作製され得、アルカリ金属塩（特にナトリウムおよびカリウム）、アルカリ土類金属塩（特にカルシウムおよびマグネシウム）、アルミニウム塩、アンモニウム塩の他、トリメチルアミン、トリエチルアミン、モルホリン、ピリジン、ピペリジン、ピコリン、ジシクロヘキシルアミン、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、２−ヒドロキシエチルアミン、ビス−（２−ヒドロキシエチル）アミン、トリ−（２−ヒドロキシエチル）アミン、プロカイン、ジベンジルピペリジン、デヒドロアビエチルアミン、Ｎ，Ｎ’−ビスデヒドロアビエチルアミン、グルカミン、Ｎ−メチルグルカミン、コリジン、キニン、キノリンならびにリジンおよびアルギニンなどの塩基性アミノ酸などの生理的に許容される有機塩基から作製された塩が含まれる。
【００３３】
本発明は、様々な異性体およびそれらの混合物も含む。「異性体」は、同じ組成および分子量を有するが、物理的および／または化学的特性が異なる化合物を指す。構造の差は、構成の差（幾何異性体）または偏光面を回転させる能力の差（立体異性体）であり得る。
【００３４】
「幾何異性体」とは、炭素−炭素二重結合、シクロアルキル環または架橋された二環系に関して置換基原子の配向が異なる異性体を意味する。炭素−炭素二重結合のそれぞれの側の原子（Ｈ以外）は、Ｅ（置換基が炭素−炭素二重結合の反対側にある）またはＺ（置換基が同じ側に配向されている）配置であり得る。
【００３５】
炭素環に結合した原子（Ｈ以外）は、シスまたはトランス配置であり得る。「シス」配置では、置換基は環の平面に関して同じ側にあり、「トランス」配置では、置換基は環の平面に関して反対側にある。「シス」種と「トランス」種の混合物は、「シス／トランス」と表記される。
【００３６】
本発明の化合物は、異性体特異的合成によって個々の異性体として調製され得、または異性体混合物から分割することができる。従来の分割技術には、光学的に活性な酸を使用して異性体対の各異性体の遊離塩基の塩を形成すること（その後、遊離塩基の分別結晶化および再生）、光学的に活性なアミンを使用して異性体対の各異性体の酸形態の塩を形成すること（その後、遊離酸の分別結晶化および再生）、光学的に純粋な酸、アミンまたはアルコールを使用して異性体対の異性体の各々のエステルまたはアミドを形成すること（その後、クロマトグラフィーによる分離およびキラル補助剤の除去）、または様々な周知のクロマトグラフィー法を使用して、出発材料または最終生成物のいずれかの異性体混合物を分割することが含まれる。
【００３７】
開示された化合物の立体化学が構造によって命名または図示されている場合、命名または図示された立体異性体は、他の立体異性体と比較して少なくとも６０重量％、７０重量％、８０重量％、９０重量％、９９重量％または９９．９重量％純粋である。開示された化合物の配置が構造によって命名または図示されている場合、命名または図示された幾何異性体は、他の幾何異性体と比較して少なくとも６０重量％、７０重量％、８０重量％、９０重量％、９９重量％または９９．９重量％純粋である。
【００３８】
投与が企図される「対象」という用語には、ヒト（すなわち、任意の年齢群の男性または女性、例えば、小児対象（例えば、乳幼児、子供、青年）または成人対象（例えば、若年成人、中年成人または高齢成人））および／または他の霊長類（例えば、カニクイザル、アカゲザル）；ウシ、ブタ、ウマ、ヒツジ、ヤギ、ネコおよび／またはイヌなどの商業的に関連する哺乳動物を含む哺乳動物、ならびに／またはニワトリ、アヒル、ガチョウ、ウズラおよび／またはシチメンチョウなどの商業的に関連する鳥を含む鳥が含まれるが、これらに限定されない。好ましい対象はヒトである。
【００３９】
本明細書で使用される場合、障害または症状を「予防する」治療剤は、統計的標本において、非処置対照標本と比較して、処置された標本における障害または症状の発生を減少させ、または非処置対照標本と比較して、障害もしくは症状の１つもしくは複数の症候の発症を遅らせもしくはその重症度を低減させる化合物を指す。
【００４０】
「処置する」という用語は、疾患（例えば、本明細書に記載の疾患または障害）の発症または進行を減少、抑制、減弱、低下、阻止もしくは安定化すること、疾患の重症度を軽減すること、または疾患に関連する症候を改善することを意味する。処置には、疾患、障害または症状の症候を処置することが含まれる。
【００４１】
本明細書で使用される場合、「バイオ医薬品」という用語は、生物学的供給源中で製造された、生物学的供給源から抽出されたまたは半合成された医薬品を指す。バイオ医薬品は、ヒト、動物、微生物、真菌もしくは植物など、様々な天然源から単離され、または組換えＤＮＡによって製造することができる。バイオ医薬品には、ワクチン、全血、血液成分、アレルギー誘発性物質、体細胞、遺伝子療法、組織、臓器移植、クローン化されたタンパク質、組換えＤＮＡの産物、ＤＮＡ遺伝子療法、ｍｉＲＮＡ、ｓｉＲＮＡ、ヌクレオチドまたはアミノ酸を含む薬物調製物、モノクローナル抗体（ｍＡｂ）およびその断片、ペプチド、融合タンパク質、組換え治療用タンパク質、糖タンパク質ならびに細胞治療において使用される生細胞が含まれるが、これらに限定されない。例えば、「バイオ医薬品」という用語は、インスリン、エリスロポエチンまたは成長刺激ホルモンなどのホルモン、モノクローナル抗体（ｍＡｂ）、または融合タンパク質などの受容体構築物を指す。さらに、「バイオ医薬品」という用語は、リンパ球、マクロファージ、樹状細胞、ナチュラルキラー細胞、細胞傷害性Ｔリンパ球（ＣＴＬ）、およびＣＡＲ−Ｔ細胞などのＩＥＣを含む免疫療法剤を指す。
【００４２】
本明細書で使用される場合、「細胞治療」という用語は、疾患を軽減または治癒するのを補助するために、細胞材料が患者の中に注入され、移植され、または植え込まれる療法を指す。細胞治療は、生細胞の移植を伴う。細胞は、患者（自家細胞）またはドナー（同種異系細胞）に由来し得る。細胞治療は、造血幹細胞、ＣＡＲ−Ｔ細胞、その他の遺伝的に改変されたＴ細胞、ワクチンおよびナチュラルキラー細胞の移植を伴う療法を指すことができる。
【００４３】
本明細書で使用される場合、「遺伝子治療」という用語は、疾患を処置するための薬物としての、患者の細胞中への核酸の治療的送達を指す。遺伝子治療は、タンパク質の病因となる型のレベルを減少させ、病気と戦うタンパク質の産生を増加させ、または新たな／改変されたタンパク質を産生させるために使用することができる。遺伝子治療には、遺伝子の追加、遺伝子の修正、遺伝子の発現抑制、再プログラミングおよび細胞の除去など、いくつかの種類の遺伝子修飾が含まれる。
【００４４】
本明細書で使用される「治療有効量」は、所望の治療効果を達成するのに十分な量を指す。例えば、治療有効量は、本明細書に開示された疾患または症状の少なくとも１つの徴候または症候を改善するのに十分な量を指すことができる。
【００４５】
薬学的組成物
特定の実施形態において、本発明は、式Ｉ、式ＩＩ、式ＩＩＩ、式ＩＶ、式Ｖ、式ＶＩ、式ＶＩＩ、式ＶＩＩＩ、式ＩＸ、式Ｘ、式ＸＩ、ＸＩＩ、式ＸＩＩＩもしくは式ＸＩＶの化合物、肥満細胞安定剤または抗炎症性遺伝子タンパク質から切断された抗炎症性小分子ペプチドと、および薬学的に許容される賦形剤とを含む薬学的組成物を提供する。
【００４６】
本発明の組成物および方法は、それを必要とする対象を処置するために利用され得る。特定の実施形態において、対象は、ヒトなどの哺乳動物、または非ヒト哺乳動物である。ヒトなどの対象に投与される場合、組成物または化合物は、好ましくは、例えば、本発明の化合物と薬学的に許容される担体とを含む薬学的組成物として投与される。薬学的に許容される担体は当技術分野において周知であり、例えば、水または生理学的に緩衝された生理食塩水などの水溶液またはグリコール、グリセロールなどの他の溶媒もしくはビヒクル、オリーブ油などの油、または注射可能な有機エステルが含まれる。好ましい実施形態において、このような薬学的組成物がヒト投与用、特に侵襲的投与経路（すなわち、上皮バリアを通した輸送または拡散を回避する注射または移植などの経路）用である場合、水溶液は、発熱物質を含まないまたは発熱物質を実質的に含まない。賦形剤は、例えば、薬剤の遅延放出をもたらすために、または１つもしくは複数の細胞、組織もしくは器官を選択的に標的化するために選択することができる。薬学的組成物は、錠剤、カプセル（スプリンクルカプセルおよびゼラチンカプセルを含む）、顆粒、再構成用の凍結乾燥物、粉末、溶液、シロップ、坐剤、注射などの単位剤形であり得る。組成物は、経皮送達系、例えば、皮膚パッチ中に存在することもできる。組成物は、点眼薬などの局所投与に適した溶液中に存在することもできる。
【００４７】
薬学的に許容される担体は、例えば、本発明の化合物などの化合物を安定化させ、その溶解度を増加させ、またはその吸収を増加させるように作用する生理学的に許容される因子を含有することができる。このような生理学的に許容される因子には、例えば、グルコース、スクロースまたはデキストランなどの炭水化物、アスコルビン酸またはグルタチオンなどの抗酸化剤、キレート剤、低分子量タンパク質または他の安定剤または賦形剤が含まれる。生理学的に許容される因子を含む、薬学的に許容される担体の選択は、例えば、組成物の投与経路に依存する。調製物または薬学的組成物は、自己乳化型薬物送達系または自己微小乳化型薬物送達系であり得る。薬学的組成物（調製物）は、例えば、本発明の化合物をその中に組み込むことができる、リポソームまたは他のポリマーマトリックスでもあり得る。例えば、リン脂質または他の脂質を含むリポソームは、製造および投与が比較的簡易である毒性がなく、生理学的に許容され、代謝可能な担体である。
【００４８】
「薬学的に許容される」という用語は、健全な医学的判断の範囲内で、過度な毒性、刺激、アレルギー反応またはその他の問題もしくは合併症なしに、対象の組織と接触して使用するのに適しており、合理的な利益／リスク比に見合っている、化合物、材料、組成物および／または剤形を指すために本明細書において使用される。
【００４９】
本明細書で使用される「薬学的に許容される担体」という用語は、液体または固体の充填剤、希釈剤、賦形剤、溶媒またはカプセル化材料などの薬学的に許容される材料、組成物またはビヒクルを意味する。各担体は、製剤の他の成分と適合性があり、対象に有害ではないという意味で「許容可能」でなければならない。薬学的に許容される担体としての役割を果たすことができる材料のいくつかの例としては、（１）ラクトース、グルコースおよびスクロースなどの糖；（２）コーンスターチおよびイモデンプンなどのデンプン；（３）カルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロースおよび酢酸セルロースなどのセルロースおよびその誘導体；（４）粉末化されたトラガカント；（５）麦芽；（６）ゼラチン；（７）タルク；（８）カカオバターおよび坐剤ワックスなどの賦形剤；（９）ピーナッツ油、綿実油、紅花油、ゴマ油、オリーブ油、コーン油および大豆油などの油；（１０）プロピレングリコールなどのグリコール；（１１）グリセリン、ソルビトール、マンニトールおよびポリエチレングリコールなどのポリオール；（１２）オレイン酸エチルおよびラウリン酸エチルなどのエステル；（１３）寒天；（１４）水酸化マグネシウムおよび水酸化アルミニウムなどの緩衝剤；（１５）アルギン酸；（１６）発熱物質を含まない水；（１７）等張食塩水；（１８）リンゲル液；（１９）エチルアルコール；（２０）リン酸緩衝液；ならびに（２１）薬学的製剤中で使用される他の非毒性適合性物質が挙げられる。
【００５０】
薬学的組成物（調製物）は、例えば、経口（例えば、水性または非水性溶液または懸濁液中の水薬、錠剤、カプセル（スプリンクルカプセルおよびゼラチンカプセルを含む）、ボーラス、粉末、顆粒、舌に塗布するためのペースト）；口腔粘膜を通じた吸収（例えば、舌下）；肛門、直腸または膣（例えば、ペッサリー、クリームまたは泡として）；非経口的に（例えば、無菌溶液または懸濁液として、筋肉内、静脈内、皮下または髄腔内を含む）；経鼻的に；腹腔内；皮下；経皮的に（例えば、皮膚に塗布されるパッチとして）；および局所的に（例えば、皮膚に塗布されるクリーム、軟膏もしくはスプレーとして、または点眼薬として）を含む多数の投与経路のいずれによっても対象に投与することができる。化合物は、吸入用にも製剤化され得る。特定の実施形態において、化合物は、単に滅菌水中に溶解または懸濁され得る。適切な投与経路およびそれに適した組成物の詳細は、例えば、その内容の全体が参照により本明細書に組み込まれる、米国特許第６，１１０，９７３号、同第５，７６３，４９３号、同第５，７３１，０００号、同第５，５４１，２３１号、同第５，４２７，７９８号、同第５，３５８，９７０号および同第４，１７２，８９６号ならびにこれらの中に引用されている特許中に記載されている。
【００５１】
製剤は、単位剤形で都合よく提示され得、薬学の分野で周知の任意の方法によって調製され得る。単一の剤形を生成するために担体材料と組み合わせることができる有効成分の量は、処置されている対象、具体的な投与様式に応じて変動する。単一の剤形を生成するために担体材料と組み合わせることができる有効成分の量は、一般に、治療効果をもたらす化合物のその量である。一般に、１００パーセントのうち、この量は、有効成分の約１パーセント〜約９９パーセント、好ましくは約５パーセント〜約７０パーセント、最も好ましくは約１０パーセント〜約３０パーセントの範囲である。
【００５２】
これらの製剤または組成物を調製する方法は、本発明の化合物などの活性化合物を、担体、および任意選択で１つまたは複数の副成分と合わせる工程を含む。一般に、製剤は、本発明の化合物を液体担体、または細かく分割された固体担体、またはその両方と均一かつ密接に合わせ、次いで、必要に応じて生成物を成形することによって調製される。
【００５３】
経口投与に適した本発明の製剤は、カプセル（スプリンクルカプセルおよびゼラチンカプセルを含む）、カシェ、丸剤、錠剤、薬用ドロップ（着香された主成分、通常はスクロースおよびアラビアゴムまたはトラガカントを使用）、凍結乾燥物、粉末、顆粒の形態であり得、または水性もしくは非水性液体中の溶液または懸濁液として、または水中油もしくは油中水液体エマルジョンとして、またはエリキシルもしくはシロップとして、またはトローチとして（ゼラチンおよびグリセリン、またはスクロースおよびアラビアゴムなどの不活性基剤を使用して）および／または口内洗浄剤などとして、それぞれが本発明の化合物の所定量を有効成分として含有し得る。組成物または化合物は、ボーラス、舐剤またはペーストとしても投与され得る。
【００５４】
経口投与用の固体剤形（カプセル（スプリンクルカプセルおよびゼラチンカプセルを含む）、錠剤、丸剤、糖衣錠、粉末、顆粒など）を調製するために、有効成分は、クエン酸ナトリウムもしくはリン酸二カルシウムなどの１つもしくは複数の薬学的に許容される担体ならびに／または以下のいずれか：（１）充填剤もしくは増量剤、例えば、デンプン、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトールおよび／もしくはケイ酸など、（２）例えば、カルボキシメチルセルロース、アルギナート、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、スクロースおよび／もしくはアラビアゴムなどの結合剤、（３）グリセロールなどの保湿剤、（４）寒天、炭酸カルシウム、イモもしくはタピオカデンプン、アルギン酸、特定のシリカートおよび炭酸ナトリウムなどの崩壊剤、（５）パラフィンなどの溶解遅延剤、（６）第四級アンモニウム化合物などの吸収促進剤、（７）例えば、セチルアルコールおよびグリセロールモノステアラートなどの湿潤剤、（８）カオリンおよびベントナイト粘土などの吸収剤、（９）タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウムおよびこれらの混合物などの潤滑剤、（１０）修飾されたおよび修飾されていないシクロデキストリンなどの錯化剤、および（１１）着色剤と混合される。カプセル（スプリンクルカプセルおよびゼラチンカプセルを含む）、錠剤および丸薬の場合、薬学的組成物は、緩衝剤を含み得る。同様のタイプの固体組成物は、ラクトースまたは乳糖および高分子量ポリエチレングリコールなどのような賦形剤を使用して、軟質および硬質充填ゼラチンカプセル中で充填剤としても使用され得る。
【００５５】
錠剤は、任意選択で１つまたは複数の付属成分とともに、圧縮または成形によって製造され得る。圧縮された錠剤は、結合剤（例えば、ゼラチンまたはヒドロキシプロピルメチルセルロース）、潤滑剤、不活性希釈剤、防腐剤、崩壊剤（例えば、デンプングリコール酸ナトリウムまたは架橋されたカルボキシメチルセルロースナトリウム）、界面活性剤または分散剤を使用して調製され得る。成形された錠剤は、不活性液体希釈剤で湿らせた粉末化合物の混合物を適切な機械中で成形することによって作製され得る。
【００５６】
錠剤、ならびに糖衣錠、カプセル（スプリンクルカプセルおよびゼラチンカプセルを含む）、丸薬および顆粒などの薬学的組成物の他の固形剤形は、任意選択で、刻み目をつけてもよく、または医薬製剤分野において周知の腸溶コーティングおよびその他のコーティングなどのコーティングおよび殻を用いて調製してもよい。これらは、例えば、所望の放出プロファイルを与えるための様々な比率でのヒドロキシプロピルメチルセルロース、その他のポリマーマトリックス、リポソームおよび／または小球体を使用して、その中の有効成分の徐放または制御放出を与えるようにも製剤化され得る。これらは、例えば、細菌保持フィルターによる濾過によって、または使用直前に滅菌水または他の何らかの滅菌注射溶媒中に溶解することができる滅菌固体組成物の形態の滅菌剤を組み込むことによって滅菌され得る。これらの組成物は、任意選択で乳白剤（ｏｐａｃｉｆｙｉｎｇ  ａｇｅｎｔｓ）も含有し得、任意選択で遅延した様式で、胃腸管の特定の部分中のみでまたは胃腸管の特定の部分中で優先的に有効成分を放出する組成物であり得る。使用することが可能な包埋組成物の例には、ポリマー性物質およびワックスが含まれる。有効成分は、適切な場合、上記の賦形剤の１つまたは複数とともにマイクロカプセル化された形態でもあり得る。
【００５７】
経口投与に有用な液体剤形には、薬学的に許容されるエマルジョン、再構成のための凍結乾燥物、ミクロエマルジョン、溶液、懸濁液、シロップおよびエリキシル剤が含まれる。有効成分の他に、液体剤形は、例えば、水またはその他の溶媒、シクロデキストリンおよびその誘導体などの当技術分野で一般的に使用される不活性希釈剤、可溶化剤ならびに乳化剤、例えば、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、油（特に、綿実油、落花生油、トウモロコシ油、胚芽油、オリーブ油、ヒマシ油およびゴマ油）、グリセロール、テトラヒドロフリルアルコール、ポリエチレングリコールおよびソルビタンの脂肪酸エステルならびにこれらの混合物を含有し得る。
【００５８】
不活性希釈剤に加えて、経口組成物は、湿潤剤、乳化剤および懸濁剤、甘味料、香味料、着色剤、芳香剤および防腐剤などの補助剤も含むことができる。
【００５９】
懸濁液は、活性化合物に加えて、例えば、エトキシル化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビトールおよびソルビタンエステル、微結晶性セルロース、アルミニウムメタヒドロキシド、ベントナイト、寒天およびトラガカントならびにこれらの混合物などの懸濁剤を含有し得る。
【００６０】
直腸、膣または尿道投与用の薬学的組成物の製剤は、１つまたは複数の活性化合物を、例えば、カカオバター、ポリエチレングリコール、坐剤ワックスまたはサリチラートを含む１つまたは複数の適切な非刺激性賦形剤または担体と混合することによって調製され得、室温では固体であるが、体温では液体であり、したがって、直腸または膣腔中で溶融し、活性化合物を放出する坐剤として提示され得る。
【００６１】
口に投与するための薬学的組成物の製剤は、うがい薬、または経口スプレー、または経口軟膏として提示され得る。
【００６２】
これに代えてまたはこれに加えて、組成物は、カテーテル、ステント、ワイヤーまたは他の管腔内装置を介した送達のために製剤化することができる。このような装置を介した送達は、膀胱、尿道、尿管、直腸または腸への送達に特に有用であり得る。
【００６３】
膣投与に適した製剤には、当技術分野において適切であることが知られているような担体を含有する、ペッサリー、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト、フォームまたはスプレー製剤も含まれる。
【００６４】
局所投与または経皮投与用の剤形には、粉末、スプレー、軟膏、ペースト、クリーム、ローション、ゲル、溶液、パッチおよび吸入剤が含まれる。活性化合物は、無菌条件下で、薬学的に許容される担体、および必要とされ得る任意の防腐剤、緩衝剤または噴射剤と混合され得る。
【００６５】
軟膏、ペースト、クリームおよびゲルは、活性化合物に加えて、動物および植物性脂肪、油、ワックス、パラフィン、デンプン、トラガカント、セルロース誘導体、ポリエチレングリコール、シリコーン、ベントナイト、ケイ酸、タルクおよび酸化亜鉛またはこれらの混合物などの賦形剤を含有し得る。
【００６６】
粉末およびスプレーは、活性化合物に加えて、ラクトース、タルク、ケイ酸、水酸化アルミニウム、ケイ酸カルシウムおよびポリアミド粉末またはこれらの物質の混合物などの賦形剤を含有することができる。スプレーは、クロロフルオロ炭化水素などの通常の噴射剤ならびにブタンおよびプロパンなどの揮発性の非置換炭化水素をさらに含有することができる。
【００６７】
経皮パッチは、本発明の化合物の身体への制御された送達を与えるという追加の利点を有する。このような剤形は、活性化合物を適切な培体中に溶解または分散させることによって作製することができる。皮膚を横切る化合物の流れを増加させるために、吸収促進剤を使用することもできる。このような流れの速度は、速度制御膜を与えることによって、またはポリマーマトリックスもしくはゲル中に化合物を分散させることによって制御することができる。
【００６８】
眼科用製剤、眼軟膏、粉末、溶液なども、本発明の範囲内にあることが想定される。例示的な眼科用製剤は、米国特許出願公開第２００５／００８００５６号、同第２００５／００５９７４４号、同第２００５／００３１６９７号および同第２００５／００４０７４号ならびに米国特許第６，５８３，１２４号に記載されており、これらの内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。所望であれば、液体眼科用製剤は、涙液、房水または硝子体液と同様の特性を有するか、またはこのような液体と適合性がある。好ましい投与経路は、局所投与（例えば、点眼薬などの局所投与、またはインプラントを介した投与）である。
【００６９】
本明細書で使用される「非経口投与」および「非経口的に投与された」という用語は、通常は注射による経腸および局所投与以外の投与様式を意味し、静脈内、筋肉内、動脈内、髄腔内、嚢内（ｉｎｔｒａｃａｐｓｕｌａｒ）、眼窩内、心臓内、皮内、腹腔内、経気管、皮下、表皮下、関節内、嚢下、くも膜下、脊髄内および胸骨内の注射および注入を含むが、これらに限定されない。
【００７０】
非経口投与に適した薬学的組成物は、抗酸化剤、緩衝剤、静菌剤、製剤を予定されるレシピエントの血液と等張にする溶質または懸濁剤または増粘剤を含有し得る、１つまたは複数の薬学的に許容される、滅菌等張水性もしくは非水性溶液、分散液、懸濁液またはエマルジョン、または使用直前に滅菌注射可能溶液もしくは分散液中に再構成され得る滅菌粉末と組み合わされて、１つまたは複数の活性化合物を含む。
【００７１】
本発明の薬学的組成物中で使用され得る適切な水性および非水性担体の例には、水、エタノール、ポリオール（グリセロール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコールなど）およびこれらの適切な混合物、オリーブ油などの植物油ならびにオレイン酸エチルなどの注射可能な有機エステルが含まれる。適切な流動性は、例えば、レシチンなどのコーティング材料の使用によって、分散液の場合には必要とされる粒径の維持によって、および界面活性剤の使用によって維持することができる。
【００７２】
これらの組成物は、防腐剤、湿潤剤、乳化剤および分散剤などの補助剤も含有し得る。微生物の作用の防止は、様々な抗菌剤および抗真菌剤、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノールソルビン酸などを含めることによって確実にされ得る。糖、塩化ナトリウムなどの等張剤を組成物中に含めることも望ましい場合がある。さらに、注射可能な薬学的形態の長期吸収は、モノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチンなどの吸収を遅らせる因子を含めることによってもたらされ得る。
【００７３】
いくつかの事例では、薬物の効果を延長するために、皮下または筋肉内注射からの薬物の吸収を遅くすることが望ましい。これは、低い水溶性を有する結晶性または非晶質材料の液体懸濁液を使用することによって達成され得る。その場合、薬物の吸収速度はその溶解速度に依存し、溶解速度、は次に、結晶サイズおよび結晶形態に依存し得る。あるいは、非経口的に投与された剤形の遅延吸収は、薬物を油性ビヒクル中に溶解または懸濁することによって達成される。
【００７４】
注射可能なデポ形態は、ポリラクチド−ポリグリコリドなどの生分解性ポリマー中に対象化合物のマイクロカプセル化されたマトリックスを形成することによって作製される。薬物とポリマーの比率、および使用する特定のポリマーの性質に応じて、薬物放出の速度を制御することができる。他の生分解性ポリマーの例には、ポリ（オルトエステル）およびポリ（無水物）が含まれる。デポ注射可能な製剤は、身体組織と適合性のあるリポソームまたはマイクロエマルジョン中に薬物を封入することによっても調製される。
【００７５】
本発明の方法で使用するために、活性化合物は、それ自体で、または例えば、薬学的に許容される担体と組み合わせて０．１〜９９．５％（より好ましくは０．５〜９０％）の有効成分を含有する薬学的組成物として与えることができる。
【００７６】
導入の方法は、再充電可能または生分解性の装置によっても提供され得る。近年、タンパク質性のバイオ医薬品を含む薬物の制御された送達のために、様々な徐放性ポリマー性装置が開発され、インビボで試験されてきた。特定の標的部位での化合物の持続放出のためのインプラントを形成するために、生分解性ポリマーと非分解性ポリマーの両方を含む、様々な生体適合性ポリマー（ヒドロゲルを含む）を使用することができる。
【００７７】
薬学的組成物中の有効成分の実際の投与量レベルは、患者への毒性なしに、特定の患者、組成物および投与様式に対して所望の治療応答を達成するのに有効な有効成分の量を得るために変化させ得る。
【００７８】
選択される投与量レベルは、使用される特定の化合物または化合物の組み合わせ、またはそのエステル、塩もしくはアミドの活性、投与経路、投与時間、使用されている特定の化合物の排泄速度、処置の期間、使用されている特定の化合物と組み合わせて使用される他の薬物、化合物および／または材料、処置されている対象の年齢、性別、体重、状態、一般的な健康状態および既往歴および医療分野において周知の同様の要因を含む様々な要因に依存するであろう。
【００７９】
当技術分野における通常の技術を有する医師または獣医師は、必要とされる薬学的組成物の治療有効量を容易に決定および処方することができる。例えば、医師または獣医は、所望の治療効果を達成するために必要とされるレベルよりも低いレベルで薬学的組成物または化合物の用量を開始し、所望の効果が達成されるまで用量を徐々に増加させることができる。「治療有効量」とは、所望の治療効果を引き出すのに十分な化合物の濃度を意味する。化合物の有効量は、対象の体重、性別、年齢および病歴によって異なることが一般的に理解されている。有効量に影響を与える他の要因には、対象の症状の重篤度、処置されている障害、化合物の安定性、および所望であれば、本発明の化合物とともに投与されている別の種類の治療剤が含まれ得るが、これらに限定されない。薬剤の複数回投与により、より多くの総用量を送達することができる。有効性および投与量を決定する方法は、当業者に公知である（Ｉｓｓｅｌｂａｃｈｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（１９９６）Ｈａｒｒｉｓｏｎ’ｓ  Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｏｆ  Ｉｎｔｅｒｎａｌ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  １３  ｅｄ．，１８１４−１８８２、参照により本明細書に組み入れられる）。
【００８０】
一般に、本発明の組成物および方法において使用される活性化合物の適切な１日用量は、治療効果を生み出すのに有効な最低の用量である化合物の量である。このような有効量は、一般に、上記の要因に依存する。
【００８１】
所望であれば、活性化合物の有効な１日用量は、１日を通して適切な間隔で、任意選択で単位剤形にて、別々に投与される１、２、３、４、５、６またはそれより多くの部分用量（ｓｕｂ−ｄｏｓｅ）として投与され得る。本発明の特定の実施形態において、活性化合物は、１日２回または３回投与され得る。好ましい実施形態において、活性化合物は１日１回投与される。
【００８２】
本発明は、本発明の組成物および方法における本発明の化合物の薬学的に許容される塩の使用を含む。特定の実施形態において、本発明の企図される塩には、アルキル、ジアルキル、トリアルキルまたはテトラアルキルアンモニウム塩が含まれるが、これらに限定されない。特定の実施形態において、本発明の企図される塩には、Ｌ−アルギニン、ベネタミン（ｂｅｎｅｎｔｈａｍｉｎｅ）、ベンザチン、ベタイン、水酸化カルシウム、コリン、デアノール、ジエタノールアミン、ジエチルアミン、２−（ジエチルアミノ）エタノール、エタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ−メチルグルカミン、ヒドラバミン、１Ｈ−イミダゾール、リチウム、Ｌ−リジン、マグネシウム、４−（２−ヒドロキシエチル）モルホリン、ピペラジン、カリウム、１−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジン、ナトリウム、トリエタノールアミン、トロメタミンおよび亜鉛塩が含まれるが、これらに限定されない。特定の実施形態において、本発明の企図される塩には、Ｎａ、Ｃａ、Ｋ、Ｍｇ、Ｚｎまたは他の金属塩が含まれるが、これらに限定されない。
【００８３】
薬学的に許容される酸付加塩は、水、メタノール、エタノール、ジメチルホルムアミドなどとの様々な溶媒和物としても存在することができる。このような溶媒和物の混合物も調製することができる。このような溶媒和物の供給源は、結晶化の溶媒から得られるもの、調製もしくは結晶化の溶媒に固有のもの、またはこのような溶媒に対して外来性のものであり得る。
【００８４】
ラウリル硫酸ナトリウムおよびステアリン酸マグネシウムなどの湿潤剤、乳化剤および潤滑剤、ならびに着色剤、放出剤（release agent）、コーティング剤、甘味料、香味剤および芳香剤、防腐剤および抗酸化剤も、組成物中に存在することができる。
【００８５】
薬学的に許容される抗酸化剤の例には、（１）アスコルビン酸、塩酸システイン、重硫酸ナトリウム、メタ重亜硫酸ナトリウム、亜硫酸ナトリウムなどの水溶性抗酸化剤、（２）パルミチン酸アスコルビル、ブチル化ヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、ブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、レシチン、没食子酸プロピル、α−トコフェロールなどの油溶性抗酸化剤、および（３）クエン酸、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、ソルビトール、酒石酸、リン酸などの金属キレート剤以下が含まれる。
【００８６】
処置の方法
特定の実施形態において、本発明の化合物および薬学的に許容されるその塩または溶媒和物は、治療有効量の別の治療剤と組み合わせて投与される。
【００８７】
特定の実施形態において、本発明の化合物は、単独でまたは別の種類の治療剤と共同して投与され得る。本明細書で使用される場合、「共同投与（ｃｏｎｊｏｉｎｔ  ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）」という用語は、以前に投与された治療化合物が体内でなお有効である間に、または以前に投与された治療化合物の副作用が体内でなお明らかである間に（例えば、２つの化合物は、対象中で同時に有効であり、これには、２つの化合物の相乗効果が含まれ得る）、第二の化合物が投与されるような、２つ以上の異なる治療化合物の投与の任意の形態を指す。例えば、異なる治療化合物は、同じ製剤中でまたは別個の製剤中で、同時にまたは逐次に投与することができる。特定の実施形態において、異なる治療化合物は、互いに１時間、１２時間、２４時間、３６時間、４８時間、７２時間、または１週間以内に投与することができる。したがって、そのような処置を受ける対象は、異なる治療化合物の複合効果から利益を得ることができる。
【００８８】
特定の実施形態において、１つまたは複数の追加の治療剤（例えば、１つまたは複数の追加の化学療法剤）との本発明の化合物の共同投与は、本発明の化合物（例えば、式ＩまたはＩＩの化合物）または１つもしくは複数の追加の治療剤のそれぞれの個別の投与と比べて改善された有効性を与える。特定のこのような実施形態において、共同投与は相加効果を与え、ここで、相加効果とは、本発明の化合物および１つまたは複数の追加の治療剤の個別の投与の効果のそれぞれの合計を指す。他の実施形態において、本発明の化合物の共同投与は、追加の治療剤の副作用を低減または軽減する。
【００８９】
治療剤は、本発明の化合物と同時に投与され得る。あるいは、治療剤は、本発明の化合物を投与する前に投与され得る。あるいは、さらに、治療剤は、本発明の化合物の投与後に投与され得る。
【００９０】
「併用療法」という用語は、それぞれの共同作用（ｃｏ−ａｃｔｉｏｎ）から有益な効果を与えることを目的とした特定の処置レジメンの一部としての、式Ｉの化合物および追加の治療剤の投与を包含する。組み合わせとして投与される場合、乏突起膠細胞前駆細胞分化誘導化合物（式Ｉの化合物）および追加の治療剤は、別個の組成物として処方され得る。組み合わされたこれらの治療剤の投与は、通例、定められた期間（通常、選択された組み合わせに応じて、数分、数時間、数日または数週間）にわたって実施される。
【００９１】
「併用療法」は、これらの治療剤（式Ｉまたは式ＩＩの化合物および追加の治療剤）の逐次的態様での投与、すなわち、各治療剤が異なる時間に投与されること、およびこれらの治療剤、すなわち治療剤の少なくとも２つの実質的に同時の態様での投与を包含することが意図される。実質的に同時の投与は、例えば、各治療剤の固定された比率を有する単一のカプセルを、または治療剤の各々に対する単一のカプセル複数を対象に投与することによって達成することができる。各治療剤の逐次的または実質的に同時の投与は、経口経路、静脈内経路、筋肉内経路および粘膜組織を通じた直接的吸収を含むがこれらに限定されない任意の適切な経路によって実施することができる。治療剤は、同じ経路によってまたは異なる経路によって投与することができる。例えば、選択された組み合わせの第１の治療剤は、静脈内注射によって投与され得、一方、組み合わせの他の治療剤は、経口投与され得る。あるいは、例えば、すべての治療剤が経口投与され得、またはすべての治療剤が静脈内注射によって投与され得る。治療剤が投与される順序は、極めて重大で狭く限定されるわけではない。「併用療法」は、他の生物学的有効成分（第２の異なる治療剤などであるがこれに限定されない）および非薬物療法（例えば、外科手術）とさらに組み合わされた、上記の治療剤の投与も包含することができる。
【００９２】
投与方法は、治療中の異なる時点で、または組み合わせ形態で同時に、本発明の化合物または組成物の有効量を投与することを含む。本発明の方法は、すべての公知の治療的処置レジメンを含む。特定の実施形態において、化合物または薬学的組成物は、静脈内、髄腔内、皮下、筋肉内、鼻腔内または経口で投与される。
【００９３】
特定の実施形態において、本発明の化合物は、ＨＣｌ塩として投与される。
【００９４】
「代謝産物」は、本発明の化合物（またはその塩）の代謝誘導体の薬学的に許容される形態を意味し、ここで、誘導体とは、インビボで利用可能になった後に治療活性に寄与する活性化合物である。
【００９５】
「有効量」とは、対象において所望の生物学的応答を誘発する活性化合物剤の量を意味する。このような応答には、処置されている疾患または障害の症候の緩和が含まれる。このような治療方法における本発明の化合物の有効量は、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日〜約１０００ｍｇ／ｋｇ／日、約０．１ｍｇ／ｋｇ／日〜約１００ｍｇ／ｋｇ／日〜約０．５ｍｇ／ｋｇ／日〜約５０ｍｇ／ｋｇ／日または約１ｍｇ／ｋｇ／日〜１０ｍｇ／ｋｇ／日である。
【００９６】
「薬学的に許容される担体」とは、本発明の組成物の調合において使用するのに十分な純度および品質であり、動物またはヒトに適切に投与された場合に有害な反応を生じない化合物および組成物を意味する。
【００９７】
調製の方法
本発明の化合物は、以下に記載される合成手順に従って調製され得る。以下に記載されている式Ｉの合成中間体および最終生成物が、所望の反応を妨害し得る潜在的に反応性の官能基、例えばアミノ、ヒドロキシ、チオールおよびカルボン酸基を含む場合には、中間体の保護された形態を利用することが有利であり得る。保護基の選択、導入およびその後の除去のための方法は、当業者に周知である。（Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ  ａｎｄ  Ｐ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ“Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ”Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ  １９９９）。このような保護基の操作は、以下の考察では前提とされており、通常、明示的には記載されていない。一般に、反応スキーム中の試薬は等モル量で使用されるが、場合によっては、反応を完了させるために１つの試薬を過剰に使用することが望ましいことがあり得る。これは、特に、蒸発または抽出によって過剰な試薬を容易に除去できる場合に当てはまる。反応混合物中のＨＣｌを中和するために使用される塩基は、一般に、わずか過剰〜大幅な過剰で使用される（１．０５〜５当量）。
【００９８】
本発明の化合物は、容易に入手可能な試薬および出発材料を利用する従来の方法を使用して調製することができる。本発明の化合物の調製において使用される試薬は、商業的に入手することができ、または文献に記載されている標準的な手順によって調製することができる。本発明の化合物は、本明細書中に提供される一般的および例示的なスキームに従って作製され得る。
【００９９】
例示的な組成物および方法
本開示は、少なくとも１つの症状を処置または予防する方法であって、前記症状が、処置または予防を必要とする対象における、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）、免疫エフェクター細胞関連神経毒性症候群（ＩＣＡＮＳ）、癌関連認知障害、輸注反応症候群（ＩＲＳ）、毛細血管漏出症候群（ＣＬＳ）、腫瘍崩壊症候群（ＴＬＳ）、マクロファージ活性化症候群（ＭＡＳ）、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、免疫再構築炎症反応症候群（ＩＲＩＳ）、移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）、急性呼吸促拍症候群（ＡＲＤＳ）、敗血症、エボラ、トリインフルエンザ、天然痘、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）および免疫関連有害事象症候群（ＩｒＡＥＳ）から選択され、式Ｉもしくは式ＩＩの化合物：
【化３】
2021535181.tif 000005
式中、
Ｒ１は、ハロゲン、ＯＨもしくは−ＯＣ（Ｏ）Ｃ１〜５アルキルであり；
Ｒ２およびＲ３は、それぞれ、ＣＯ２Ｒ４もしくはＣＨ２ＯＲ５から独立して選択され；
Ｒ４は、Ｌｉ、Ｎａ、Ｋ、Ｈ、Ｃ１〜５アルキルもしくは−ＣＨ２ＣＯ（Ｃ１〜５アルキル）であり；
Ｒ５は、Ｈもしくは−Ｃ（Ｏ）（Ｃ１〜５アルキル）である、
または薬学的に許容されるこれらの塩を投与することを含む、方法に関する。
【０１００】
いくつかの実施形態では、Ｒ１はハロゲンであり、例えば、Ｒ１はＦである。特定の実施形態では、Ｒ１はＯＨである。いくつかの実施形態では、Ｒ１は、−ＯＣ（Ｏ）Ｍｅなどの−ＯＣ（Ｏ）Ｃ１〜４アルキルである。
【０１０１】
特定の実施形態では、Ｒ２およびＲ３は、それぞれ独立して−ＣＯ２Ｒ４である。いくつかの実施形態では、Ｒ４は、Ｌｉ、Ｎａ、ＫまたはＮＨ４であり、例えば、Ｒ４は、Ｎａである。特定の実施形態では、Ｒ４はＨである。いくつかの実施形態では、Ｒ４はＣ１〜５アルキルである。特定の実施形態において、Ｒ４は、−ＣＨ２ＣＯ（Ｃ１〜５アルキル）である。
【０１０２】
特定の実施形態では、Ｒ２およびＲ３は、それぞれ独立して、−ＣＨ２ＯＲ５である。いくつかの実施形態では、Ｒ５はＨである。特定の実施形態では、Ｒ５は−Ｃ（Ｏ）（Ｃ１〜５アルキル）である。
【０１０３】
いくつかの実施形態において、Ｃ１〜５アルキルは、メチル、エチルまたはｔ−ブチルである。
【０１０４】
特定の実施形態において、式Ｉの化合物は、
【化４】
2021535181.tif 000006
から選択される。
【０１０５】
特定の実施形態において、式Ｉの化合物は、
【化５】
2021535181.tif 000007
である。
【０１０６】
特定の実施形態において、式Ｉの化合物は
【化６】
2021535181.tif 000008
である。
【０１０７】
特定の実施形態において、式Ｉの化合物は
【化７】
2021535181.tif 000009
である。
【０１０８】
特定の実施形態では、症状は、ＩｒＡＥＳ、癌関連認知障害、ＣＲＳ、またはＩＣＡＮＳであり、式Ｉの化合物は
【化８】
2021535181.tif 000010
である。例えば、症状はＣＲＳであり、式Ｉの化合物は
【化９】
2021535181.tif 000011
である。または、症状はＩＣＡＮＳであり、式Ｉの化合物は
【化１０】
2021535181.tif 000012
である。いくつかの実施形態では、症状は癌関連認知障害であり、式Ｉの化合物は
【化１１】
2021535181.tif 000013
である。
【０１０９】
本開示は、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）、免疫エフェクター細胞関連神経毒性症候群（ＩＣＡＮＳ）、癌関連認知障害、輸注反応症候群（ＩＲＳ）、毛細血管漏出症候群（ＣＬＳ）、腫瘍崩壊症候群（ＴＬＳ）、マクロファージ活性化症候群（ＭＡＳ）、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、免疫再構築炎症反応症候群（ＩＲＩＳ）、移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）、急性呼吸促拍症候群（ＡＲＤＳ）、敗血症、エボラ、トリインフルエンザ、天然痘、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）および免疫関連有害事象症候群（ＩｒＡＥＳ）から選択される少なくとも１つの症状を処置または予防することを必要とする対象における前記少なくとも１つの症状を処置または予防する方法であって、肥満細胞安定剤を投与することを含む、方法にも関する。
【０１１０】
いくつかの実施形態では、肥満細胞安定剤は、ネドクロミル、ケトチフェン、ケルセチン、オマリズマブ、オロパタジン、アゼラスチン、メポリズマブ、メチルキサンチンおよびβ２アドレナリン作動性アゴニストから選択される。
【０１１１】
本開示は、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）、免疫エフェクター細胞関連神経毒性症候群（ＩＣＡＮＳ）、癌関連認知障害、輸注反応症候群（ＩＲＳ）、毛細血管漏出症候群（ＣＬＳ）、腫瘍崩壊症候群（ＴＬＳ）、マクロファージ活性化症候群（ＭＡＳ）、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、免疫再構築炎症反応症候群（ＩＲＩＳ）、移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）、急性呼吸促拍症候群（ＡＲＤＳ）、敗血症、エボラ、トリインフルエンザ、天然痘、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）および免疫関連有害事象症候群（ＩｒＡＥＳ）から選択される少なくとも１つの症状を処置または予防することを必要とする対象における前記少なくとも１つの症状を処置または予防する方法であって、式ＩＩＩ、式ＩＶ、式Ｖ、式ＶＩ、式ＶＩＩ、式ＶＩＩＩ、式ＩＸ、式Ｘ、式ＸＩ、式ＸＩＩ、式ＸＩＩＩおよび式ＸＩＶの化合物：
【化１２】
2021535181.tif 000014
から選択される化合物を投与することを含む、方法にも関する。
【０１１２】
本開示は、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）、免疫エフェクター細胞関連神経毒性症候群（ＩＣＡＮＳ）、癌関連認知障害、輸注反応症候群（ＩＲＳ）、毛細血管漏出症候群（ＣＬＳ）、腫瘍崩壊症候群（ＴＬＳ）、マクロファージ活性化症候群（ＭＡＳ）、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、免疫再構築炎症反応症候群（ＩＲＩＳ）、移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）、急性呼吸促拍症候群（ＡＲＤＳ）、敗血症、エボラ、トリインフルエンザ、天然痘、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）および免疫関連有害事象症候群（ＩｒＡＥＳ）から選択される少なくとも１つの症状を処置または予防することを必要とする対象における前記少なくとも１つの症状を処置または予防する方法であって、抗炎症性遺伝子タンパク質から切断された抗炎症性小分子ペプチドを投与することを含む、方法にも関する。いくつかの実施形態において、抗炎症性遺伝子タンパク質は、ＴＲＥＭ２である。
【０１１３】
特定の実施形態では、症状は、ＩｒＡＥＳ、癌関連認知障害、ＣＲＳまたはＩＣＡＮＳである。例えば、症状はＣＲＳである。または、症状はＩＣＡＮＳである。いくつかの実施形態において、症状は、癌関連認知障害である。
【０１１４】
特定の実施形態では、この方法は、１つまたは複数のバイオ医薬品を投与することをさらに含む。いくつかの実施形態において、バイオ医薬品は、ワクチン、全血、血液成分、アレルギー誘発性物質、体細胞、遺伝子療法、組織、臓器移植、クローン化されたタンパク質、組換えＤＮＡの産物、ＤＮＡ遺伝子療法、ｍｉＲＮＡ、ｓｉＲＮＡ、薬物調製物であってヌクレオチドまたはアミノ酸を含む薬物調製物、モノクローナル抗体（ｍＡｂ）、ｍＡｂ断片、ペプチド、融合タンパク質、組換え治療用タンパク質、糖タンパク質および細胞治療において使用される生細胞から選択される。例えば、バイオ医薬品は、ワクチン、体細胞、遺伝子療法、モノクローナル抗体（ｍＡｂ）、ｍＡｂ断片および細胞治療において使用される生細胞から選択される。いくつかの実施形態において、バイオ医薬品は、二重特異性Ｔ細胞誘導物質、一本鎖抗体構築物およびＣＡＲ−Ｔ細胞などの免疫エフェクター細胞から選択される。あるいは、バイオ医薬品は、ＩＦＮγ、ＴＮＦα、ムロモナブ−ＣＤ３、アレムツズマブ、リツキシマブ、ソリトマブ、セラリズマブおよびブリナツモマブから選択される。
【０１１５】
特定の実施形態において、バイオ医薬品は、式Ｉまたは式ＩＩの化合物と共同して投与される。例えば、バイオ医薬品は、式Ｉまたは式ＩＩの化合物の前に投与される。あるいは、バイオ医薬品は、式Ｉまたは式ＩＩの化合物と同時に投与される。いくつかの実施形態において、バイオ医薬品は、式Ｉの化合物の後に投与される。特定の実施形態において、バイオ医薬品は、式ＩＩの化合物の後に投与される。
【０１１６】
いくつかの実施形態において、バイオ医薬品および式Ｉまたは式ＩＩの化合物は、吸入、筋肉内、静脈内、腹腔内または皮下によって、それぞれ独立して投与される。いくつかの実施形態において、バイオ医薬品および式Ｉまたは式ＩＩの化合物は、それぞれ静脈内投与される。
【０１１７】
特定の実施形態では、この方法は、免疫抑制薬、例えば、コルチコステロイドを投与することをさらに含む。いくつかの実施形態において、免疫抑制薬は、トシリズマブ、シルツキシマブ、インフリキシマブ、アバタセプトおよびアナキンラ（ａｎａｋｉｒｎａ）から選択される。特定の実施形態では、免疫抑制薬はトシリズマブである。
【０１１８】
特定の実施形態では、この方法は、エピネフリン、ノルエピネフリン、フェニレフリン、エフェドリンまたはドーパミンなどの昇圧剤を投与することをさらに含む。
【０１１９】
特定の実施形態では、この方法は、ＴＮＦ阻害剤、例えば、エタネルセプト、インフリキシマブ、アダリムマブ、セルトリズマブペゴル、ゴリムマブ、サリドマイド、レナリドマイド、ポマリドマイド、ペントキシフィリンまたはブプロピオンを投与することをさらに含む。
【０１２０】
いくつかの実施形態では、この方法は、薬学的に許容される賦形剤をさらに含む薬学的組成物の形態の式Ｉもしくは式ＩＩの化合物または薬学的に許容されるこれらの塩を投与することを含む。
【０１２１】
いくつかの実施形態において、バイオ医薬品は、肥満細胞安定剤、式ＩＩＩ、式ＩＶ、式Ｖ、式ＶＩ、式ＶＩＩ、式ＶＩＩＩ、式ＩＸ、式Ｘ、式ＸＩ、式ＸＩＩ、式ＸＩＩＩもしくは式ＸＩＶの化合物または抗炎症性遺伝子タンパク質から切断された抗炎症性小分子ペプチドと共同して投与される。例えば、バイオ医薬品は、肥満細胞安定剤、式ＩＩＩ〜ＸＩＶの化合物または抗抗炎症性遺伝子タンパク質から切断された抗炎症性小分子ペプチドの前に投与される。あるいは、バイオ医薬品は、肥満細胞安定剤、式ＩＩＩ、式ＩＶ、式Ｖ、式ＶＩ、式ＶＩＩ、式ＶＩＩＩ、式ＩＸ、式Ｘ、式ＸＩ、式ＸＩＩ、式ＸＩＩＩもしくは式ＸＩＶの化合物または抗炎症性遺伝子タンパク質から切断された抗炎症性小分子ペプチドと共同して投与される。特定の実施形態において、バイオ医薬品は、肥満細胞安定剤、式ＩＩＩ〜ＸＩＶの化合物または抗炎症性遺伝子タンパク質から切断された抗炎症性小分子ペプチドの後に投与される。いくつかの実施形態では、バイオ医薬品および肥満細胞安定剤、式ＩＩＩ、式ＩＶ、式Ｖ、式ＶＩ、式ＶＩＩ、式ＶＩＩＩ、式ＩＸ、式Ｘ、式ＸＩ、式ＸＩＩ、式ＸＩＩＩもしくは式ＸＩＶの化合物または抗炎症性遺伝子タンパク質から切断された抗炎症性小分子ペプチドは、吸入、筋肉内、静脈内、腹腔内または皮下によって、それぞれ独立して投与される。
【０１２２】
特定の実施形態において、有効量の化合物が投与され、それにより、症状を処置または予防する。
【実施例】
【０１２３】
［実施例１］
クロモリン処置は、ＴｇＳＯＤ１マウスの血漿中の炎症誘発性サイトカインのレベルを低下させる。
【０１２４】
化学物質
クロモリンナトリウムはＡＺＴｈｅｒａｐｉｅｓによって提供され、ＰＢＳ中に溶解された。インビボ実験には１００ｍＭ溶液を使用した。ダルベッコのＰＢＳを使用して、腹腔内注射用の溶液を６．３ｍｇ／ｋｇの最終用量に希釈した。
【０１２５】
動物
年齢と同産群を合致させた１４９匹の雌雄のトランスジェニックＴｇＳＯＤ１Ｇ９３Ａおよび野生型ＷｔＳＯＤ１Ｇ９３Ａマウスを、以下の内訳で使用した：雌（ＷｔＳＯＤ１−ビヒクル１９匹、ＷｔＳＯＤ１−クロモリン１７匹、ＴｇＳＯＤ１−ビヒクル１９匹およびＴｇＳＯＤ１−クロモリン１７匹）および雄（ＷｔＳＯＤ１−ビヒクル１８匹、ＷｔＳＯＤ１−クロモリン２１匹、ＴｇＳＯＤ１−ビヒクル２１匹、ＴｇＳＯＤ１−クロモリン１７匹）。Ｐ６０で開始し安楽死まで、週に５日、ビヒクルまたはクロモリンナトリウム（６．３ｍｇ／ｋｇ、９６ｉ．ｐ．）のいずれかを、マウスに１日１回注射した。
【０１２６】
すべての動物の世話、飼育および実験は、マサチューセッツ総合病院の実験動物小委員会によって設定されたガイドラインに従って実施された。これらの実験は、マサチューセッツ総合病院の施設内動物実験委員会（２０１４Ｎ００００１８）によって承認された。すべてのマウスは、餌と水を自由に摂取できるようにした。
【０１２７】
ＳＯＤ１Ｇ９３Ａマウス：
Ｂ６ＳＪＬ−Ｔｇ（ＳＯＤ１  Ｇ９３Ａ）１Ｇｕｒ／Ｊトランスジェニック雄マウスをジャクソン研究所から入手し、Ｃ５７ＢＬ／６雌マウスと交配させて、野生型ＷｔＳＯＤ１および変異型トランスジェニックＴｇＳＯＤ１Ｇ９３Ａ発現マウスを得た。マウスの遺伝子型を決定するために、生後２８〜４０日目に取得した尾部生検からＲＮＡ抽出および相補的ＤＮＡ（ｃＤＮＡ）合成を行った後、変異型Ｇ９３Ａ  ＳＯＤ１遺伝子に対するプライマー（ＧＧＧＡＡＧＣＴＧＴＴＧＴＣＣＣＡＡＧおよびＣＡＡＧＧＧＧＡＧＧＴＡＡＡＡＧＡＧＡＧＣ）を使用した定量的リアルタイムＰＣＲ（ｑＲＴ−ＰＣＲ）を行った。以下に記載されているように、すべての研究に対して、年齢と同産群を合致させたＷｔＳＯＤ１およびＴｇＳＯＤ１の雄および雌のマウスを使用した。
【０１２８】
Ｍｅｓｏ  Ｓｃａｌｅ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙマルチスポットサイトカインアッセイ
脊髄凍結組織を、プロテアーゼ阻害剤カクテル（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、＃７８４３０）が補充された氷冷ＲＩＰＡ緩衝液（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、＃８９９０）中でホモジナイズした。Ｏｐｔｉｍａ  ＴＬ超遠心分離機とＴＬＡ１２０．２ローター（Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｃｏｕｌｔｅｒ）を使用して、４５，０００ｇで、４℃で３０分間、試料を遠心分離した。電気化学発光をベースとしたマルチアレイ法およびＭＥＳＯ  Ｑｕｉｃｋｐｌｅｘ  ＳＱ  １２０システム（ＭＳＤ、Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ、ＭＤ、ＵＳＡ）を使用して、脊髄組織に由来する上清中または血漿中でサイトカインの発現レベルを評価した。９６ウェルＶ−ＰＬＥＸ  Ｐｒｏｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  Ｍｏｕｓｅ  １  Ｋｉｔ（Ｍｅｓｏ  Ｓｃａｌｅ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ、＃Ｋ１５０４８Ｄ）を使用して、製造元の指示に従って、ＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−１０およびＴＮＦαを同時に測定した。簡単に説明すると、試料をキャリブレーター中で希釈し、サイトカイン捕捉抗体のアレイで被覆されたプレートに加えた。室温で振とうしながら２時間、プレート中で試料をインキュベートした後、キットに含まれている洗浄緩衝液で洗浄した。検出抗体溶液を各ウェルに加え、プレートを２時間インキュベートした。プレートを洗浄緩衝液で洗浄し、２×Ｒｅａｄ  Ｂｕｆｆｅｒ  Ｔを加えた。ＭＥＳＯ  ＱｕｉｃｋＰｌｅｘ  ＳＱ  １２０機器で信号を直ちに測定し、ＤＩＳＣＯＶＥＲＹ  ＷＯＲＫＢＥＮＣＨ  ４．０ソフトウェア（Ｍｅｓｏ  Ｓｃａｌｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ、ＬＬＣ．，Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ、ＭＤ、ＵＳＡ）を用いて分析した。上清または血漿試料中のタンパク質濃度は、Ｐｉｅｒｃｅ  ＢＣＡタンパク質アッセイキット（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を使用して測定した。グラフ中の値は、対応するタンパク質濃度に対して標準化されたサイトカインのレベルを表す。
【０１２９】
統計
データは中央値として表されている。母集団データを図式的に表示するためにボックスプロットが使用され、中央の線は中央値を表し、端は四分位範囲を表し、ひげは１０〜９０パーセンタイルを表す。データは、中央値±四分位範囲またはパーセント値としても表されている。標本サイズは図の説明文中に含まれている。関連のない標本の比較は、二元配置分散分析とそれに続くテューキーまたはシダックの多重比較検定、または一元配置分散分析検定とそれに続く０．０５の有意水準（α）でのテューキーの多重比較事後検定を用いて行った。ｐ＜０．０５および＞０．００００１の場合、正確なＰ値（両側）が報告されている。
【０１３０】
結果
マウスの脊髄可溶化液中の炎症誘発性サイトカインのレベルは、Ｍｅｓｏ  Ｓｃａｌｅ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙのマルチスポットアッセイシステムを使用することによって測定した。ＩＬ−１β、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−１０、ＴＮＦαのレベルが測定された。一元配置分散分析とテューキーの事後分析により、両方の野生型群と比較して、ＴｇＳＯＤ１−ビヒクルおよびＴｇＳＯＤ１−クロモリン群の両方の脊髄中で、ＩＬ−１β［Ｆ（３，１３０）＝６６．３１、ｐ＜０．０００１］、ＩＬ−５［Ｆ（３，１２９）＝１２９．９、ｐ＜０．０００１］、ＩＬ−６［Ｆ（３，１３５）＝４３．４１、ｐ＜０．０００１］およびＴＮＦα［Ｆ（３，６４）＝２７．９４、ｐ＜０．０００１］のレベルに有意な差があることが明らかになった（図１Ａ、１Ｂ、１Ｃおよび１Ｄ）。Ｔｇ群とＷｔ群の間で、ＩＬ−６（ｐ＜０．０００１）およびＩＬ−５（ｐ＜０．０００１）レベルの有意な減少が存在した。重要なことに、ＴｇＳＯＤ１−ビヒクル群と比較してＴｇＳＯＤ１−クロモリン群中でＴＮＦα（ｐ＝０．０２７３）レベルが有意に減少し（図１Ｄ）、クロモリン処置が処置されたトランスジェニックマウスの脊髄中での炎症誘発性サイトカインおよびケモカインの発現を減少させたことを示唆する。
【０１３１】
クロモリン処置は、ＴｇＳＯＤ１マウスの血漿中の炎症誘発性サイトカインのレベルを減少させた。
【０１３２】
さらに、ＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−１０およびＴＮＦαのレベルを、マウスの部分集団の血漿中で評価した（雌：ＷｔＳＯＤ１−ビヒクル１３匹、ＷｔＳＯＤ１−クロモリン１５匹、ＴｇＳＯＤ１−ビヒクル６匹およびＴｇＳＯＤ１−クロモリン６匹；ならびに雄：ＷｔＳＯＤ１−ビヒクル１４匹、ＷｔＳＯＤ１−クロモリン１０匹、ＴｇＳＯＤ１−ビヒクル６匹、ＴｇＳＯＤ１−クロモリン３匹）。一元配置分散分析とテューキーの事後分析により、ＷｔＳＯＤ１−ビヒクルおよびＷｔＳＯＤ１−クロモリン群の両方と比較して、ＴｇＳＯＤ１−ビヒクルの血漿中のＩＬ−２［Ｆ（３，６５）＝７．７３１、ｐ＜０．０００２］、ＩＬ−６［Ｆ（３，６３）＝６．３３２、ｐ＜０．０００８］およびＩＬ−１０［Ｆ（３，６５）＝７．１９５、ｐ＜０．０００３］レベルの有意な増加が明らかになった（図２Ｂ、２Ｄ、および２Ｅ）。ＴＮＦαレベルの有意な増加も存在し［Ｆ（４，６７）＝１２．４６、ｐ＜０．００６］、事後分析により、ＷｔＳＯＤ１−クロモリンと比較してＴｇＳＯＤ１−ビヒクル群でのＴＮＦαの有意な増加が明らかになった（ｐ＝０．００４３）（図２Ｆ）。群間でＩＬ−１βおよびＩＬ−５レベルに統計的に有意な差は存在しなかった（図２Ａおよび２Ｃ）。重要なことに、ＩＬ−２（ｐ＝０．０２１１）、ＩＬ−６（ｐ＝０．０２７３）およびＩＬ−１０（ｐ＝０．００９５）のレベルは、ＴｇＳＯＤ１−ビヒクル群と比較して、ＴｇＳＯＤ１−クロモリン群において有意に減少した（図２Ｂ、２Ｄおよび２Ｅ）。最後に、ＴｇＳＯＤ１−ビヒクル群と比較してＴｇＳＯＤ１−クロモリンマウスでは、ＴＮＦαレベルが減少する傾向が存在した（ｐ＝０．１１０）（図２Ｆ）。これらの結果は、クロモリン処置がＴｇＳＯＤ１マウスの血漿中のサイトカインのレベルを減少させたことを実証する。
【０１３３】
［実施例２］
クロモリンは、ＡＰＰ／ＰＳ１マウス中での炎症誘発性ＣＤ３３を介したＭｌ小膠細胞の活性化段階の阻害を逆転させる。
【０１３４】
手順
ナイーブＢＶ２小膠細胞をＤＭＳＯ（対照）またはクロモリン（５００μＭ）で１６時間処理した。その後、蛍光標識されたＡ１３４２（赤）およびＤＭＳＯまたはクロモリンとともに細胞を２時間インキュベートした。インキュベーション後、細胞膜色素（ＰＭ、緑色）で細胞を標識し、画像化した。ＢＶ２小膠細胞またはＣＤ３３を安定して発現するＢＶ２細胞（ＢＶ２−ＣＤ３３ｗＴ）をＤＭＳＯまたは異なる濃度のクロモリンで１６時間処理した。次に、タグが付加されていない可溶性Ａβ４２およびＤＭＳＯまたはクロモリンとともに細胞を２時間インキュベートし、ＥＬＩＳＡ分析のために収集した。クロモリンで処理されたナイーブＢＶ２およびＢＶ２−ＣＤ３３ｗＴ小膠細胞はいずれも、ビヒクル（ＤＭＳＯ）で処理された細胞と比較して、増加したＡβ４２取り込みレベルを示した。
【０１３５】
結果
小膠細胞の線維性アミロイド−βペプチド（Ａβ）との相互作用は、その表現型の活性化をもたらし、最近、神経保護において役割を果たしていることが示唆された。膠細胞は、その形態学的特徴を変化させ、多数の細胞表面受容体を発現し、病変を取り囲むことにより、病理学的病変（プラークおよび濃縮体）の存在に応答することが、マウスおよびヒトの両方において、多くの研究で示されている。他方、脳内の細胞破片に応答したマクロファージと小膠細胞の活性化、および炎症誘発性サイトカインのその後の放出は、加速された神経変性をもたらす。これは、次いで、より多くの細胞破片を作製し、疾患の進行を加速する。細胞外に沈着したＡβによって活性化された小膠細胞は、抗炎症性／神経栄養性のＭ２活性化を引き起こし、食作用を介してＡβを除去することによって神経細胞を保護することが一般的に認められている。
【０１３６】
細胞外に沈着したＡβによる小膠細胞の活性化は、Ｔ細胞または抗原提示細胞からのＩＦＮγ、ＴＮＦαの存在に応答した小膠細胞の活性化と類似する。データは、凝集しやすいＡβのレベルを低下させ、神経炎症促進状態と対比して、Ａβ食作用を好む神経保護的小膠細胞活性化状態を誘発する上でのクロモリンの強固な効果を明らかにしている。この小膠細胞の活性化は、ＣＲＳおよびＩＣＡＮＳにおける保護作用を目的とする。細胞外に沈着したＡβについて得られたデータは、ＣＲＳおよびＩＣＡＮＳの治療における潜在的な薬物としてのクロモリンの使用を裏付ける。
【０１３７】
クロモリンは、アミロイド斑の周りの小膠細胞の動員の増加をもたらし、これは、その後のＡβ食作用およびプラークの除去をもたらす。さらに、クロモリンは培養された小膠細胞におけるＡβの取り込みおよび除去を促進し、プラークの除去ももたらす。
【０１３８】
さらに、共焦点顕微鏡法および酵素結合免疫吸着法（ＥＬＩＳＡ）アッセイは、図３Ａ〜３Ｄに示すように、ＢＶ２小膠細胞と炎症誘発性ヒトＣＤ３３を発現するＢＶ２細胞（ＢＶ２−ＣＤ３３ｗｒ）の両方におけるＡβ４２取り込みに対するクロモリンの効果を実証する。これらのデータは、クロモリンが炎症誘発性ＣＤ３３を介したＭ１−小膠細胞の活性化段階の阻害を逆転させ、ナイーブＢＶ２小膠細胞におけるＡβ４２の増加した取り込みをもたらすことを示す。クロモリン処理は、ＥＬＩＳＡによって得られた免疫蛍光結果によって確認されたように、ナイーブＢＶ２小膠細胞における増加したＡβ４２取り込みをもたらす（図３Ｅ）。クロモリンは、ＢＶ２−ＣＤ３３ｗＴ細胞における内部移行されたＡβ４２のレベルの増加をもたらし（図３Ｆ）、小膠細胞におけるＡβ４２取り込みのＣＤ３３媒介性阻害を逆転させた。クロモリンで処理されたナイーブＢＶ２およびＢＶ２−ＣＤ３３ｗＴ小膠細胞はいずれも、ビヒクル（ＤＭＳＯ）で処理された細胞と比較して、増加したＡβ４２取り込みレベルを示した。これらのデータは、クロモリンによる処理が、ナイーブＢＶ２およびＢＶ２−ＣＤ３３ｗＴ細胞株におけるＡβ４２取り込みレベルの調節において用量依存的効果を示し、したがってＭ１−小膠細胞活性化段階を阻害し、神経保護的な小膠細胞の活性化を促進することを実証する。
【０１３９】
［実施例３］
ＬＰＳで刺激され、クロモリンで処理されたＮ９小膠細胞株におけるＩＬ−１βおよびＩＬ−６の遺伝子発現。
【０１４０】
Ｎ９小膠細胞を様々な濃度のクロモリン（１５μｇ／ｍｌ、３０μｇ／ｍｌおよび６０μｇ／ｍｌ）で６時間前処理した後、クロモリンの存在下において、５００ｎｇ／ｍｌリポ多糖（ＬＰＳ、小膠細胞に対して最も一般的に使用される炎症誘発性刺激）で８時間刺激した。細胞を採集し、ＴＲＩＺＯＬ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）でＲＮＡを単離し、２μｇのＲＮＡとＨｉｇｈ−Ｃａｐａｃｉｔｙ  Ｒｅｖｅｒｓｅ  Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔａｓｅ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を使用して第１鎖ｃＤＮＡを合成した。ＲＴ−ＰＣＲは、Ｂｉｏ−Ｒａｄ検出システム上で、ＳＹＢＲ  Ｇｒｅｅｎ  ＰＣＲ試薬を用いて実行した。ＧＡＰＤＨのレベルに対してＲＮＡレベルを標準化し、デルタ−デルタ閾値サイクル（ΔΔＣＴ）として計算した。ＲＴ−ＰＣＲのために使用されたプライマーは、以下に列記されているとおりである。ＧＡＰＤＨ−Ｆｏｒ：ＡＧＣＣＡＣＡＴＣＧＣＴＣＡＧＡＣＡＣ、ＧＡＰＤＨ−Ｒｅｖ：ＧＣＣＣＡＡＴＡＣＧＡＣＣＡＡＡＴＣＣ；ＩＬ−１β−Ｆｏｒ：ＣＧＣＴＣＡＧＧＧＴＣＡＣＡＡＧＡＡＡＣ、ＩＬ−１β−Ｒｅｖ：ＧＡＧＧＣＡＡＧＧＡＧＧＡＡＡＡＣＡＣＡ；ＩＬ−６−Ｆｏｒ：ＴＴＣＣＡＴＣＣＡＧＴＴＧＣＣＴＴＣＴＴ、ＩＬ−６−Ｒｅｖ：ＡＴＴＴＣＣＡＣＧＡＴＴＴＣＣＣＡＧＡＧ。研究の結果が図４Ａおよび４Ｂに示されている。
【０１４１】
参照による援用
本明細書中で言及されているすべての刊行物および特許は、あたかも個々の刊行物または特許が参照により組み込まれることが具体的かつ個別に示されているかのように、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる。矛盾する場合は、本明細書の任意の定義を含め、本出願が優先する。
【０１４２】
均等物
本発明の特定の実施形態が論述されてきたが、上記の明細書は例示的なものであり、限定的なものではない。本明細書および以下の特許請求の範囲を検討すると、本発明の多くの変形が当業者に明らかになるであろう。本発明の全範囲は、均等物の全範囲とともに特許請求の範囲を、およびこのような変形とともに明細書を参照することによって決定されるべきである。
【図１Ａ−Ｂ】
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【図１Ｃ−Ｄ】
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【図２Ａ−Ｂ】
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【図２Ｃ−Ｄ】
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【図２Ｅ−Ｆ】
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【図３】
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【図４】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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