【事件の表示】
　特願２００１−３７６９９０「子宮頸部塗抹標本における腫瘍細胞およびそれらの前駆体の検出方法」拒絶査定不服審判事件〔平成１４年１０月　９日出願公開、特開２００２−２９６２７４〕について、次のとおり審決する。
【結　論】
　本件審判の請求は、成り立たない。
【理　由】
第１　手続の経緯
　本願は，平成１３年１２月１１日（パリ条約による優先権主張２０００年１２月１８日，ドイツ）の出願であって，平成１９年８月２４日付けで拒絶査定がなされ，これに対して，同年１２月３日に拒絶査定不服審判の請求がなされたものである。　
　
第２　本願発明
　本願の請求項１ないし６に係る発明は，平成１９年７月２３日付けの手続補正により補正された明細書の記載からみて，その特許請求の範囲の請求項１ないし６に記載された事項により特定されるものであると認められ，その請求項１に係る発明は次のとおりである。（以下「本願発明」という。）　
　　
「【請求項１】　細胞における標識試薬のカラー混合物からの少なくとも２種の分子マーカーを同時に検出することによって，子宮頸部塗抹標本における腫瘍細胞およびそれらの前駆体を検出する方法であって，ここで，細胞においては少なくとも２種のシグナルが存在すべきであり，他方，２種のマーカーのシグナルが各々の場合に個々の特定された強度または個々の特定された閾値を上回らねばならず，かつ，試薬が抗体または核酸であり，少なくとも２つの異なる蛍光波長における励起後に各々場合にカメラおよび対応する蛍光カラーフィルターを用いて一度写真撮影され，そして抗体または核酸プローブが変化する蛍光または発色性染色物質により直接または間接に読まれることを特徴とする，上記方法。」　
　　
第３　引用刊行物の記載事項　
　原査定の拒絶の理由に引用され，本願出願の優先権主張の日前に頒布された国際公開第００／０１８４５号（以下「刊行物１」という。）及び特表平１１−５０９９３０号公報（以下「刊行物２」という。）には，図面と共に次の事項が記載されている。
　ただし，刊行物１の記載事項は原文を日本語に翻訳したものであって，日本語翻訳はパンテントファミリーの特表２００２−５１９６８１号公報を用いた。また，下線は当審により付加されたものである。
　
＜刊行物１＞ 
 （１−ア）  
「【発明の詳細な説明】
　　　【０００１】
　本発明は，癌およびその前段階，特に上気道または肛門性器管の癌の早期診断方法に関する。
　　　【０００２】
　５０年代中頃以来，多くのさまざまな癌に対する予防計画が提案されている。
頸部癌に関しては，それらは，主に，子宮頸の細胞学的スミアの形態学的および細胞学的検査，いわゆるＰａｐテストに基づいており
　　　【０００３】
　あらゆる予防計画にもかかわらず，毎年４００，０００症例が新たに発生する頸部癌は，最もよく起こる癌であるが，女性に起こるものである。これは，とりわけ，Ｐａｐテストの結果の３０％までが偽陰性であるという事実による。
　　　【０００４】
　
したがって，本発明の目的は，頸部癌を早期に高い信頼度で診断することができる方法を提供することである。
　　　【０００５】
　本発明によれば，これは請求の範囲に規定された主題により達成される。
　　　【０００６】
　本発明は，
細胞周期調節タンパク質が多くの癌
特に頸部癌，およびこれらの癌の前段階のそれぞれにおいて過剰発現される
　　　【０００７】
　本発明によれば，出願人の見識は，癌およびその前段階の早期診断方法に使用され，該方法は，生体試料における細胞周期タンパク質の過剰発現を測定することを含む。
　　　【０００８】
　「癌およびその前段階」という表現は，任意の種類および起源の癌，ならびにその前段階のそれぞれを包含する。例えば，それらは，上気道の癌または肛門性器癌，特に頸部癌でありうる。後者に関連して，その前段階は，例えば頸部上皮内癌（ＣＩＮＩ−ＩＩＩ），上皮内癌（ＣＩＳ）などを特にあげるべきである。
　　　【０００９】
　「細胞周期調節タンパク質」という表現は，任意の種類および起源の細胞周期調節タンパク質を包含する。例えば，該タンパク質はサイクリンであってもよい。特に，それらは，サイクリンを調節するサイクリン依存性キナーゼでありうる。サイクリン依存性キナーゼの例は，タンパク質ｃｄｋ４およびｃｄｋ６である。より特別には，それらは，さらにサイクリン依存性キナーゼもまた調節するサイクリン依存性キナーゼインヒビターである。サイクリン依存性キナーゼインヒビターの例は，タンパク質ｐ１４，ｐ１５，ｐ１６，ｐ１８，ｐ１９，ｐ２１およびｐ２７であり，ｐ１６が好ましい。
　　　【００１０】
　
「生体試料」という表現は，細胞周期調節タンパク質が検出されうる任意の生体試料を包含する。かかる生体試料の例は
スミア
特に，肛門性器癌，例えば頸部癌の検出に関する場合には，スミアおよび生検材料を示す。
　「細胞周期調節タンパク質の過剰発現を検出すること」という表現は，細胞周期調節タンパク質，またはそれをコードするｍＲＮＡの発現および対応する遺伝子の増幅物のそれぞれの検出を包含する。過剰発現を測定するため，検査対象の生体試料を，健常人由来の対応する生体試料と比較することは明白なことである。かかる試料は，標準化された形態で存在しうる。
細胞周期調節タンパク質の（過剰）発現は，核酸レベルおよびタンパク質レベルのそれぞれで検出することができる。タンパク質レベルでの検出に関しては，例えば，細胞周期調節タンパク質に対する抗体を用いることが可能である。これらの抗体は，ウェスタンブロット，ＥＬＩＳＡまたは免疫沈降法などの多くのさまざまな方法に使用することができる。
　　　【００１２】
　本発明により，癌を早期に，すなわちその前段階で診断することが可能である。
　　　【００１３】
　
本発明のさらなる主題は，本発明の方法を行なうためのキットに関する。かかるキットは，ａ）　細胞周期調節タンパク質の発現を検出するための試薬，例えば，かかるタンパク質に対する抗体，またはかかるタンパク質およびその一部のそれぞれをコードする核酸，ｂ）　バッファー，担体，マーカーなどの従来の助剤，
ｃ）　対照反応のための薬剤，例えば，細胞周期調節タンパク質，かかるタンパク質およびその一部のそれぞれをコードする核酸，または細胞の調製物，例えば組織切片もしくはスライドに固定された細胞を含有する。
　　　【００１４】
　上述の記載は，キットの個々の構成要素に同様にあてはまる。さらに，個々の構成要素の１または複数個の代表物（Ｖｅｒｔｒｅｔｅｒ）が存在していてもよい。
　　　【００１５】
　本発明により，癌を早期に診断することが可能である。特に，癌の前段階を早期に検出することができる。また，前新生物の異形成が良性の炎症性変化または化生変化に関する区別化ができることを強調しなければならない。他の特徴は，本発明の方法によって得られる結果は主観的評価を受けないため，例えば，Ｐａｐテストまたは組織学的組織検査の偽陰性結果および偽陽性結果のそれぞれを回避することができる。また，本発明は，迅速で簡便な操作によって特徴づけられるため，広範なスクリーニング方法，特に第三世界の国々においても使用することができる。したがって，本発明は，今日の癌疾患の診断法に対する重要な貢献を提示する。」（１頁１行〜４頁下から５行）
　
（１−イ）
「【特許請求の範囲】
　　【請求項１】　
生体試料における細胞周期調節タンパク質の過剰発現を測定することを含む，癌およびその前段階（Ｖｏｒｓｔｕｆｅｎ）の早期診断方法。
　　【請求項３】　癌が肛門性器癌である請求項１記載の方法。
　　【請求項４】　
肛門性器癌が頸部癌
　　【請求項５】　細胞周期調節タンパク質がサイクリンである請求項１〜４いずれか記載の方法。
　　【請求項６】　細胞周期調節タンパク質がサイクリン依存性キナーゼである請求項１〜４いずれか記載の方法。
　　【請求項７】　サイクリン依存性キナーゼがｃｄｋ４またはｃｄｋ６である請求項６記載の方法。
　　【請求項８】　細胞周期調節タンパク質がサイクリン依存性キナーゼインヒビターである請求項１〜４いずれか記載の方法。
　　【請求項９】　サイクリン依存性キナーゼインヒビターが，タンパク質ｐ１４，ｐ１５，ｐ１６，ｐ１８，ｐ１９，ｐ２１またはｐ２７である請求項８記載の方法。
　　【請求項１０】　
生体試料が
スミア
　　【請求項１１】　過剰発現が核酸レベルで測定される請求項１〜１０いずれか記載の方法。
　　【請求項１２】　過剰発現がタンパク質レベルで測定される請求項１〜１０いずれか記載の方法。
　　【請求項１３】　測定が細胞周期調節タンパク質に対する抗体により行なわれる請求項１２記載の方法。
　　【請求項１４】　ａ）
細胞周期調節タンパク質の発現を検出するための試薬
マーカー
を含む，請求項１〜１３いずれか記載の方法を行なうためのキット。
　　【請求項１５】　
試薬が，細胞周期調節タンパク質に対する抗体
　　【請求項１６】　
試薬が，細胞周期調節タンパク質またはその一部をコードする核酸
　　【請求項１７】　薬剤が，細胞周期調節タンパク質，またはかかるタンパク質もしくはその一部をコードする核酸である請求項１４〜１６いずれか記載のキット。
　　【請求項１８】　薬剤が細胞調製物である請求項１４〜１６いずれか記載のキット。」（９頁２行〜１０頁下から１行）
　
　これらの記載事項と図面を総合すると，刊行物１には，以下の発明が記載されていると認められる。
 　
「子宮頸部のスミアにおける細胞周期調節タンパク質の過剰発現を，試薬として抗体または核酸を用い，マーカーを含む方法により測定する癌およびその前段階（Ｖｏｒｓｔｕｆｅｎ）の早期診断方法。」（以下「引用発明」という。） 
 　　 
 ＜刊行物２＞ 
（２−ア） 
「この方法の好ましい実施例では，細胞増殖のレベルがＫｉ−６７−Ａｇ等の細胞増殖抗原の発現を判定することによって測定される。Ｋｉ−６７−Ａｇ発現はＭＩＢ１抗体を用いて免疫細胞学的に判定されてもよい。細胞死阻害のレベルはＢＣＬ−２細胞膜タンパクの発現を判定することによって測定されてもよい。
　この発明は同じ細胞の母集団における両マーカの組合せを判定する。」（８頁下から５行〜９頁1行）
　
（２−イ）
「細胞増殖および細胞アポプトシス阻害マーカは免疫染色された組織のスライドガラスを用いて測定して細胞増殖の指標と細胞死阻害の指標とを同時に検出してもよい。
この発明の別の実施例では，組織のスミアが準備され免疫染色されて，細胞増殖の指標と細胞死阻害の指標とが細胞増殖の測定値および細胞死阻害の測定値として同時に検出される。
イメージングにより同時に測定
　
（２−ウ） 　
「この発明は
同じ細胞母集団における両マーカの組合わせを判定し，それによって比較分析を行って前悪性細胞の悪性化の可能性を判定する。
 　
（２−エ）
「この発明の以下の議論は
頸部上皮，ＣＩＮ病巣および頸癌における細胞増殖とアポプトシス阻害との判定にかかわるものである
　
第４　本願発明と引用発明との対比　
　その機能・構成からみて，引用発明の「子宮頸部のスミア」，「細胞周期調節タンパク質」，「試薬」，「癌およびその前段階」が，本願発明の「子宮頸部塗抹標本」，「分子マーカー」，「標識試薬」，「腫瘍細胞およびそれらの前駆体」に相当することは明らかである。
　
　そうすると，両者は，
（一致点）
「細胞における標識試薬からの分子マーカーを検出することによって，子宮頸部塗抹標本における腫瘍細胞およびそれらの前駆体を検出する方法であって，試薬が抗体または核酸である，上記方法。」
である点で一致し，以下の点で相違するといえる。
　
（相違点１） 
　腫瘍細胞およびそれらの前駆体の検出が，本願発明では「標識試薬のカラー混合物からの少なくとも２種の分子マーカーを同時に検出することによって」行われ，「細胞においては少なくとも２種のシグナルが存在すべきであり，他方，２種のマーカーのシグナルが各々の場合に個々の特定された強度または個々の特定された閾値を上回らねばなら」ないものであるのに対して，引用発明は単一の分子マーカーを検出している点。
　
（相違点２）
　本願発明は，「蛍光波長における励起後に，抗体または核酸プローブが変化する蛍光または発色性染色物質により直接または間接に読まれる」ものであり，「少なくとも２つの異なる蛍光波長における励起後に各々場合にカメラおよび対応する蛍光カラーフィルターを用いて一度写真撮影され」るのに対して，引用発明では，マーカーが蛍光または発色性染色物質であるのか不明であり，また，読み取り方法が明らかではない点。
 　 
第５　相違点についての当審の判断 
（相違点１）について
　上記（２−ア）ないし（２−エ）によると，刊行物２には，子宮頸部組織のスミアの細胞増殖及び細胞死阻害の両マーカをイメージングにより，つまり，画像化して同時に検出・比較分析をおこなって前悪性細胞の悪性化の可能性を判断する方法が記載されている。引用発明及び刊行物２は，いずれも子宮頸部癌の検出方法に関するものであるので，引用発明においても，細胞における複数の分子マーカを画像化して同時に検出・分析することで，より的確に悪性細胞を検出しようとすることは，当業者であれば容易に想到し得るというべきである。
　そして，複数の分子マーカを画像化して同時に検出するためには，分子マーカ毎のシグナルを検出する必要があり，そして，検出結果を判定するために，分子マーカのシグナル毎に閾値を決めることは，引用発明に刊行物２に記載されている事項を適用するに際して当然行うべき設計事項に過ぎないといえる。
　そうすると，引用発明に刊行物２に記載されている事項を適用し，相違点１に係る本願発明の構成とすることに格別な困難性はない。
　
（相違点２）について
　細胞内の分子マーカーに抗体または核酸が結合するか否かを，蛍光物質を用いて検出することは周知の技術であり，また，用いる蛍光物質の種類により蛍光波長が異なることは技術常識である。そうすると，複数の分子マーカーを検出する際，各々の分子マーカーを検出するために複数の蛍光物質を用い，それぞれに応じた波長で励起することは，当業者であれば当然行うべきことであり，また，画像化のための撮影手段として，蛍光波長に対応する蛍光カラーフィルターを用いて写真撮影することも，以下に例示するように当該技術分野においてよく用いられる検出手段であり，これを採用することに格別の困難性はない。
　例えば，本願出願の優先権主張の日前に頒布された国際公開第００／６５０９４号には，「【００３１】
画像の取得および処理
　また，国際公開第００／２６６６６号には，
「【００２１】本発明の目的は，単一の細胞調製物を特徴付ける方法に関し，この方法は，表面上へ細胞調製物を接着させる工程，この細胞調製物を固定液で固定化する工程，この固定化された細胞を含むこのような細胞調製物を，所望の細胞マーカーに対する複数のプローブと共にインキュベートする工程であって，ここで，この複数のプローブは，蛍光（これは，異なる波長で励起され得る）を発する能力を有する，工程，および各々の選択された細胞マーカーについて陽性の細胞を同定するために，これらの細胞を蛍光顕微鏡によって試験する工程を包含する。本発明の好ましい目的は，密度勾配遠心プロセス，そしてより好ましくは，二重密度勾配遠心プロセスによる，陰性選択プロトコルを使用して単離された循環癌細胞を特徴付けることである。
【００２２】本発明の別の目的は，この哺乳動物の複数のマーカーの特徴付けプロフィールを確立するために哺乳動物由来の単一の細胞環境を特徴付ける方法である。本発明の１つの好ましい目的は，疾患を有する個体，例えば，癌を有する個体または癌を有する疑いのある個体由来の単一の細胞を特徴付けて，癌の複数の特徴付けプロフィールを提供する方法である。
【００２３】本発明の別の目的は，蛍光化合物を結合体化したプローブを使用して，単一の細胞環境の細胞マーカーを特徴付けることであり，ここで，蛍光色素または蛍光化合物は，適切なスペクトルフィルターを備える蛍光顕微鏡を使用して，各蛍光標識プローブによって放出されている重複波長の光を排除することによって，これらのマーカー間を区別することを可能にするように選択され，ここで，各プローブは，大きな干渉を伴わずに画像化され得る。」（５頁８行〜６頁３行）及び
「【００２４】（発明の詳細な説明）本発明は，単一の細胞環境を特徴付ける方法に関し，この方法は，蛍光顕微鏡によって観察されるような蛍光プローブ介して，種々の細胞マーカーを同時に検出する工程を包含する。好ましくは，プローブ（これは，細胞マーカーに指向される）は，蛍光化合物に結合体化されてプローブ−蛍光団（ｆｌｕｏｒｏｐｈｏｒｅ）結合体を形成し，この結合体は，適切な蛍光フィルター（単数または複数）（例えば，光学フィルターセット）を備える顕微鏡によって選択的に検出され得る。」（６頁７〜１３行。記載事項は原文を日本語に翻訳したものであって，日本語翻訳はパンテントファミリーの特表２００２−５２９７０４号公報を用いた。）と記載されている。
　よって，引用発明に刊行物２に記載されている事項を適用し，相違点２に係る本願発明の構成とすることに格別な困難性はない。
　
　また，本願発明に係る効果も，引用発明及び刊行物２に記載された事項から予測し得る範囲内であり，格別顕著なものであるとはいえない。
　
　なお，審判請求人は，平成２０年４月１４日付け手続補正書の【請求の理由】において，「現時点では，本件請求人は明細書を補正する機会を逸しておりますが，本件発明をより明確にするために下記のごとく補正させていただきたく，お願いします。そうすれば，本件発明は，後述するとおり引用例に記載の発明から明確に識別できることがより明らかになります。
補正予定の請求項１に係る発明（以下，本件発明という）： 
「
単一
を含んでなり，前記
子宮頸部塗末標本における腫瘍細胞およびそれらの前駆体の検出
　しかしながら，審判請求人は自ら補正の機会を逸したものであるので，その主張を採用することはできない。仮に，審判請求人の主張を認め，「細胞」を「単一細胞」と補正することにより，引用発明及び刊行物２に記載されている事項との差異が明確になったとしても，「単一細胞」における複数のマーカーを同時に検出することは，以下に示すとおり本願出願の優先権主張の日前に周知の技術である。
　例えば，本願出願の優先権主張の日前に頒布された国際公開第００／６５０９４号には，「【００１２】
詳細な説明
　よって，審判請求人の主張は採用できない。
　
第６　むすび　
　以上のとおり，本願発明は，刊行物1，２に記載された発明及び周知の技術に基づいて，当業者が容易に発明をすることができたものであり，特許法第２９条第２項の規定により特許を受けることができない。
　したがって，本願は，他の請求項に係る発明について検討するまでもなく拒絶すべきものである。　
　よって，結論のとおり審決する。