【手続補正書】
【提出日】平成23年11月15日(2011.11.15)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
脂質生成の阻害に有効な量のFGF-1シグナル経路およびFGF-2シグナル経路から選択されるFGFシグナル経路をアンタゴナイズする薬剤、および任意で薬学的に許容される担体および／または希釈剤を、治療を必要とする患者に投与する段階を含む、肥満症または脂質生成における局所的に増加した状態を治療または予防する方法。
【請求項２】
薬剤が前脂肪細胞（preadipocyte）の分化能力および／または増殖を減少させるためにFGFシグナル経路をアンタゴナイズする、請求項1記載の方法。
【請求項３】
薬剤が遺伝子の発現または遺伝子の発現産物のレベルもしくは機能活性を調節し、遺伝子がFgf遺伝子、Fgfr遺伝子、Hspg遺伝子、SHC/FRS2-RAF/MAPKKK-MAPKK-MAPK経路に属する遺伝子、PLCγ-PKC-Ca2＋経路に属する遺伝子、FGF-1核移行経路に属する遺伝子、およびFGFの細胞内結合パートナーをコードする遺伝子からなる群より選択される、請求項1記載の方法。
【請求項４】
薬剤が遺伝子の発現または遺伝子の発現産物のレベルもしくは機能活性を調節し、遺伝子がFgf-1およびFgf-2から選択されるFgf遺伝子ならびにFgf遺伝子と同一の調節経路もしくは生合成経路に属する遺伝子から選択される、請求項1記載の方法。
【請求項５】
薬剤を微小血管内皮細胞またはその前駆体に接触させる、請求項4記載の方法。
【請求項６】
Fgf遺伝子と同一の調節経路または生合成経路に属する遺伝子がP34およびFIFから選択される、請求項4記載の方法。
【請求項７】
薬剤が遺伝子の発現または遺伝子の発現産物のレベルもしくは機能活性を調節し、遺伝子がFgfr遺伝子、Fgfr遺伝子と同一の調節経路もしくは生合成経路に属する遺伝子、その発現がFgf-1およびFgf-2から選択されるFgf遺伝子の発現産物によって直接的もしくは間接的に調節される遺伝子、またはFGF-1およびFGF-2から選択されるFGFが相互作用するFGFRの機能をアゴナイズ（agonise）もしくはアンタゴナイズ（antagonise）する遺伝子からなる群より選択される、請求項1記載の方法。
【請求項８】
Fgfr遺伝子がFgfr-1、Fgfr-3、およびFgfr-4からなる群より選択される、請求項7記載の方法。
【請求項９】
Fgfr遺伝子と同一の調節経路もしくは生合成経路に属する遺伝子がシンデカン-1、シンデカン-2、シンデカン-3、シンデカン-4、グリピカン-1、グリピカン-2、グリピカン-3、グリピカン-4、グリピカン-5、グリピカン-6、パールカン、βグリカン、CFR、SHC、Crk、FRS2、Src、FAK、Nck、Shb、SHP2、GRB-2、SOS、80K-H、pp66、Gab1、P38 MAPK、PI3K、AKT、PKB、RAS、RAF、ERK1,2、MAPKKK、MAPKK、MAPK、Jun、Fos、FPPS、PLC、Fes、PIP2、DAG、Ca2＋チャンネル、IP3、CaMキナーゼ、PKC、PKA、cAMP、CREB、およびCBPからなる群より選択されるポリペプチドをコードする、請求項7記載の方法。
【請求項１０】
その発現がFgf遺伝子の発現産物によって直接的または間接的に調節される遺伝子がPparγ、Igfbp-3、Igfbp-6、Igf-2、Irs-2、Pi3キナーゼ、およびPkcθからなる群より選択される、請求項7記載の方法。
【請求項１１】
薬剤を前脂肪細胞または前脂肪細胞の前駆体に接触させる、請求項7記載の方法。
【請求項１２】
薬剤が前脂肪細胞のFGFシグナル経路をアンタゴナイズする、請求項1記載の方法。
【請求項１３】
薬剤が遺伝子の発現またはその遺伝子の発現産物のレベルもしくは機能活性を減少させ、遺伝子がFgfr-1、Fgfr-2、Pparγ、C/Ebpα、Plcγ2、Igfbp-3、およびIgfbp-6からなる群より選択される、請求項12記載の方法。
【請求項１４】
薬剤が遺伝子の発現または遺伝子の発現産物のレベルもしくは機能活性を増加させ、遺伝子がFgf-l、Fgfr-3、Igf-2、Irs-2、Pi3キナーゼ、およびPkcθからなる群より選択される、請求項12記載の方法。
【請求項１５】
薬剤がFGFRの機能をアンタゴナイズする、またはFGFRとFGF-1およびFGF-2から選択されるFGFとの相互作用を妨害する、請求項12記載の方法。
【請求項１６】
脂質生成の阻害に有効な量のFGF-1シグナル経路およびFGF-2シグナル経路から選択されるFGFシグナル経路をアゴナイズする薬剤、ならびに任意で薬学的に許容される担体および／または希釈剤を、治療を必要とする患者に投与する段階を含む、悪液質または脂肪症における局所性欠乏症（localised deficiency）の状態を治療または予防する方法。
【請求項１７】
薬剤が前脂肪細胞の分化能力および/または増殖を増加させるためにFGFシグナル経路をアゴナイズする、請求項16記載の方法。
【請求項１８】
薬剤が遺伝子の発現または遺伝子の発現産物のレベルもしくは機能活性を減少させ、遺伝子がFgf-l、Fgfr-3、Igf-2、Irs-2、Pi3キナーゼ、およびPkcθからなる群より選択される、請求項17記載の方法。
【請求項１９】
薬剤が遺伝子の発現または遺伝子の発現産物のレベルもしくは機能活性を増加させ、遺伝子がFgfr-1、Fgfr-2、Pparγ、C/Ebpα、Plcγ2、Igfbp-3、およびIgfbp-6からなる群より選択される、請求項17記載の方法。
【請求項２０】
薬剤がFGFRの機能をアゴナイズする、またはFGFRとFGFとの相互作用を強化する、促進する、さもなければ可能にする、請求項17記載の方法。
【請求項２１】
薬剤が遺伝子の発現およびその遺伝子の発現産物のレベルまたは機能活性を、その薬剤の非存在下における発現、レベル、または機能活性と比較して少なくとも10％増加または減少させる、請求項1または16記載の方法。
【請求項２２】
（i）FGF-1シグナル経路およびFGF-2シグナル経路から選択されるFGFシグナル経路のポリペプチド成分の少なくとも生物活性フラグメント、もしくはその変異体もしくは誘導体に対応するアミノ酸配列を含むポリペプチド；または（ii）レポーター遺伝子に機能的に連結している成分を調節する遺伝子配列の少なくとも一部分を含むポリヌクレオチドを含む調製物と、試験薬剤とを接触させる段階；ならびに試験薬剤の非存在下における正常もしくは基準のレベルおよび/または機能活性と比較した、変化によって薬剤がFGFシグナル経路をアンタゴナイズすることが示唆されるポリペプチド成分またはレポーター遺伝子の発現産物のレベルおよび/または機能活性における変化を検出する段階を含む、肥満症または脂質生成の局所的に増加した状態を治療または予防するために有益な薬剤を同定する方法。
【請求項２３】
FGFRを発現する細胞の第1サンプルとFGF-1およびFGF-2から選択されるFGFとを接触させて少なくとも1つのマーカーを測定する段階；FGFRを発現する細胞の第2サンプルと薬剤およびFGFとを接触させてマーカーを測定する段階；ならびに細胞の第1サンプルのマーカーと細胞の第2サンプルのマーカーとを比較する段階を含む、肥満症または脂質生成の局所的に増加した状態を治療または予防するために有益な薬剤を同定する方法であって、ここで比較の結果から薬剤がFGFシグナル経路をアンタゴナイズすることが示唆される方法。
【請求項２４】
マーカーが、グリセロール-3-リン酸デヒドロゲナーゼ、FGF経路の細胞内成分、およびそれらの組み合わせからなる群より選択される、請求項23記載の方法。
【請求項２５】
肥満症または脂質生成の局所的に増加した状態を治療または予防するための薬物の製造における薬剤の使用であって、薬剤が、脂質生成を阻害する、さもなければ減少させるためにFGF-1シグナル経路およびFGF-2シグナル経路から選択されるFGFシグナル経路をアンタゴナイズする使用。
【請求項２６】
FGFもしくはFGFRポリペプチドまたはその生物活性フラグメント、またはこれらの変異体もしくは誘導体、またはFgfもしくはFgfr遺伝子の発現を調節する遺伝子配列を含む調製物を接触させる段階；およびFGFもしくはFGFRポリペプチドまたはその生物活性フラグメント、または変異体もしくは誘導体、またはその遺伝子配列から発現した産物のレベルもしくは機能活性の減少を検出する段階によって決定されるように、脂質生成を阻害する、さもなければ減少させる薬剤が、FGFもしくはFGFRに、またはFgfもしくはFgfr遺伝子の発現を調節する遺伝子配列に結合し、FGFがFGF-1およびFGF-2から選択され、Fgf遺伝子がFgf-1およびFgf-2から選択される、請求項25記載の使用。
【請求項２７】
FGFRならびにFGF-1およびFGF-2から選択されるFGFと薬剤とを接触させてFGFRとFGFとの結合を測定する段階であって、FGFRとFGFとの結合を減少させた、または排除した場合に薬剤の試験結果が陽性となる段階によって決定されるように、脂質生成を阻害する、さもなければ減少させる薬剤が、FGFシグナル経路をアンタゴナイズする、請求項25記載の使用。
【請求項２８】
薬剤がFGFまたはFGFRに特異的な拮抗性の抗原結合分子である、請求項27記載の使用。
【請求項２９】
FGFRおよびHSPGと薬剤とを接触させてFGFRとHSPGとの結合を測定する段階であって、FGFRとHSPGとの結合を減少させたまたは排除した場合に薬剤の試験結果が陽性となる段階によって決定されるように、脂質生成を阻害する、さもなければ減少させる薬剤がFGFシグナル経路をアンタゴナイズする、請求項25記載の使用。
【請求項３０】
薬剤がHSPGまたはFGFRに特異的な拮抗性の抗原結合分子である、請求項29記載の使用。
【請求項３１】
FGF-1およびFGF-2から選択されるFGFならびにCFRと薬剤とを接触させてFGFとCFRとの結合を測定する段階であって、FGFとCFRとの結合を減少させたまたは阻止した場合に薬剤の試験結果が陽性となる段階によって決定されるように、脂質生成を阻害する、さもなければ減少させる薬剤がFGFシグナル経路をアンタゴナイズする、請求項25記載の使用。
【請求項３２】
薬剤がFGFまたはCFRに特異的な拮抗性の抗原結合分子である、請求項31記載の使用。
【請求項３３】
前脂肪細胞もしくはそれらの前駆体から選択される細胞の第1サンプルとFGF-1およびFGF-2から選択されるFGFとを接触させて細胞の分化および/または増殖を測定する段階；前脂肪細胞もしくはそれらの前駆体から選択される細胞の第2サンプルと薬剤およびFGFとを接触させて細胞の分化および/または増殖を測定する段階；細胞の第1サンプルの分化および/または増殖と細胞の第2サンプルの分化および/または増殖とを比較する段階であって、細胞の分化および/または増殖を増加させた場合に薬剤の試験結果が陽性となる段階によって決定されるように、脂質生成を阻害する、さもなければ減少させる薬剤がFGFシグナル経路をアンタゴナイズする、請求項25記載の使用。
【請求項３４】
FGF-1およびFGF-2から選択されるFGFとFGFRとの結合を妨害すること、FGFRのリン酸化を妨害すること、FGF/FGFR相互作用の上流もしくは下流のシグナル経路の成分を妨害すること、FGFRとHSPGとの結合を妨害すること、FGFとCFRとの結合を妨害すること、またはFGFRの二量体化を妨害することにより、薬剤がFGFシグナル経路をアンタゴナイズする、請求項25記載の使用。
【請求項３５】
FGFシグナル経路をアンタゴナイズする薬剤が、TGF、IGF-1、およびWNTシグナル経路から選択されるシグナル経路を妨害する、請求項25記載の使用。
【請求項３６】
動物モデルまたはヒトにシグナル経路をアンタゴナイズする薬剤を投与して薬剤に対する動物の応答性を測定する段階であって、動物における脂質生成を阻害したもしくは減少させた場合に薬剤の試験結果が陽性となる段階によって決定されるように、脂質生成を阻害する、さもなければ減少させる薬剤がFGFシグナル経路をアンタゴナイズする、請求項25記載の使用。
【請求項３７】
悪液質または脂肪症における局所性欠乏症の状態を治療または予防する薬物の製造における薬剤の使用であって、薬剤が脂質生成を刺激するためにFGF-1シグナル経路およびFGF-2シグナル経路から選択されるFGFシグナル経路をアゴナイズする使用。
【請求項３８】
FGFRポリペプチドまたはその生物活性フラグメント、またはこれらの変異体もしくは誘導体、またはFgfr遺伝子の発現を調節する遺伝子配列を含む調製物を接触させる段階；およびFGFRポリペプチドまたはその生物活性フラグメント、または変異体もしくは誘導体、または遺伝子配列から発現した産物のレベルもしくは機能活性の増加を検出する段階によって決定されるように、脂質生成を刺激する薬剤がFGFRまたはFgfr遺伝子の発現を調節する遺伝子配列に結合する、請求項37記載の使用。
【請求項３９】
FGFRならびにFGF-1およびFGF-2から選択されるFGFと薬剤とを接触させてFGFRとFGFとの結合を測定する段階であって、FGFRとFGFとの相互作用を刺激した場合に薬剤の試験結果が陽性となる段階によって決定されるように、脂質生成を刺激する薬剤がFGFシグナル経路をアゴナイズする、請求項37記載の使用。
【請求項４０】
薬剤がFGFまたはFGFRに特異的なアゴニストの抗原結合分子である、請求項39記載の使用。
【請求項４１】
FGFRおよびHSPGと薬剤とを接触させてFGFRとHSPGとの結合を測定する段階であって、FGFRとHSPGとの相互作用を刺激した場合に薬剤の試験結果が陽性となる段階によって決定されるように、脂質生成を刺激する薬剤がFGFシグナル経路をアゴナイズする、請求項37記載の使用。
【請求項４２】
薬剤がHSPGまたはFGFRに特異的なアゴニストの抗原結合分子である、請求項41記載の使用。
【請求項４３】
FGF-1およびFGF-2から選択されるFGFならびにCFRと薬剤とを接触させてFGFとCFRとの結合を測定する段階であって、CFRとFGFとの相互作用を刺激した場合に薬剤の試験結果が陽性となる段階によって決定されるように、脂質生成を刺激する薬剤がFGFシグナル経路をアゴナイズする、請求項37記載の使用。
【請求項４４】
薬剤がFGFまたはCFRに特異的なアゴニストの抗原結合分子である、請求項43記載の使用。
【請求項４５】
前脂肪細胞またはそれらの前駆体から選択される細胞の第1サンプルとFGF-1およびFGF-2から選択されるFGFとを接触させて細胞の分化および/または増殖を測定する段階；前脂肪細胞もしくはそれらの前駆体から選択される細胞の第2サンプルと薬剤およびFGFとを接触させて細胞の分化および/または増殖を測定する段階；細胞の第1サンプルの分化および/または増殖と細胞の第2サンプルの分化および/または増殖とを比較する段階であって、細胞の分化および/または増殖を刺激した場合に薬剤の試験結果が陽性となる段階によって決定されるように、脂質生成を強化する薬剤がFGFシグナル経路をアゴナイズする、請求項37記載の使用。
【請求項４６】
FGFとFGFRとの結合を刺激すること、FGFRのリン酸化を刺激すること、FGFRとHSPGとの結合を刺激すること、FGFとCFRとの結合を刺激すること、FGFRの二量体化を刺激すること、またはFGF/FGFR相互作用の上流もしくは下流のシグナル経路を刺激することにより、薬剤がFGFシグナル経路をアゴナイズする、請求項45記載の使用。
【請求項４７】
動物モデルまたはヒトにシグナル経路をアゴナイズする薬剤を投与してその薬剤に対する動物の応答性を測定する段階であって、動物における脂質生成を刺激した場合に薬剤の試験結果が陽性となる段階によって決定されるように、脂質生成を刺激する薬剤がFGFシグナル経路をアゴナイズする、請求項37記載の使用。
【請求項４８】
FGF-1シグナル経路およびFGF-2シグナル経路から選択されるFGFシグナル経路をアンタゴナイズすることが疑われる薬剤を試験する段階；ならびに拮抗作用に関する試験結果が陽性となることに基づいて薬剤を合成する段階を含む、肥満症または脂質生成の局所的に増加した状態を治療する薬剤を製造する方法。
【請求項４９】
FGF-1シグナル経路およびFGF-2シグナル経路から選択されるFGFシグナル経路をアゴナイズすることが疑われる薬剤を試験する段階；ならびに作動性（agonism）に関する試験結果が陽性となることに基づいて薬剤を合成する段階を含む、悪液質または脂肪症における局所性欠乏症の状態を治療または予防する薬剤を製造する方法。
【請求項５０】
薬剤を誘導体化する段階、ならびに任意で薬学的に許容される担体および/または希釈剤を用いて誘導体化薬剤を製剤する段階をさらに含む、請求項48または49記載の方法。
【請求項５１】
患者から得た生物学的サンプル中のFGF-1シグナル経路およびFGF-2シグナル経路から選択されるFGFシグナル経路に関係する異常な遺伝子、またはFGFシグナル経路に関係する遺伝子の異常な発現産物の存在を決定する段階を含む、患者における脂肪症関連状態の存在を検出する、またはそのリスクを診断するための方法であって、異常な遺伝子または異常な発現産物がFGFシグナル経路をアゴナイズまたは刺激する方法。
【請求項５２】
異常な遺伝子が、異常なFgf-1および異常なFgf-2から選択される異常なFgf遺伝子ならびに異常なFgfr遺伝子から選択される、請求項51記載の方法。
【請求項５３】
異常な発現産物が、異常なFgf-1発現産物および異常なFgf-2発現産物から選択される異常なFgf発現産物ならびに異常なFgfr発現産物から選択される、請求項51記載の方法。
【請求項５４】
患者から得た生物学的サンプル中のFGF-1シグナル経路およびFGF-2シグナル経路から選択されるFGFシグナル経路に関係する異常な遺伝子、またはFGFシグナル経路に関係する遺伝子の異常な発現産物の存在を決定する段階を含む、患者における異常に増加した脂肪症関連状態の存在を検出する、またはそのリスクを診断するための方法であって、異常な遺伝子または異常な発現産物がFGFシグナル経路をアゴナイズまたは刺激する方法。
【請求項５５】
状態が、肥満症および脂質生成における局所性で異常に増加した状態からなる群より選択される、請求項54記載の方法。
【請求項５６】
脂質生成における局所性で異常に増加した状態が、脂肪腫および脂肪腫症からなる群より選択される、請求項54記載の方法。
【請求項５７】
発現産物の正常な基準レベルまたは機能活性とは相違するFGF-1シグナル経路およびFGF-2シグナル経路から選択されるFGFシグナル経路に関係する遺伝子の発現産物のレベルまたは機能活性を細胞中で決定する段階を含む、患者における異常に増加した脂肪症関連状態の存在を検出する、またはそのリスクを診断するための方法。
【請求項５８】
Fgfr-1、Fgfr-2、Pparγ、C/Ebpα、Plcγ2、Igfbp-3およびIgfbp-6からなる群より選択される遺伝子の発現産物のレベルまたは機能活性の増加または上昇を決定する段階を含む方法であって、細胞が前脂肪細胞またはその前駆体である、請求項57記載の方法。
【請求項５９】
Fgf-l、Fgfr-3、Igf-2、Irs-2、Pi3キナーゼ、Pkcθからなる群より選択される遺伝子の発現産物のレベルまたは機能活性の減少を決定する段階を含む方法であって、細胞が前脂肪細胞またはその前駆体である、請求項57記載の方法。
【請求項６０】
Fgf-1およびFgf-2から選択される遺伝子の発現産物のレベルまたは機能活性の増加または上昇を決定する段階を含む方法であって、細胞が微小血管内皮細胞である、請求項57記載の方法。