【手続補正書】
【提出日】平成23年9月28日(2011.9.28)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
後期糖化反応生成物レセプター（ＲＡＧＥ）様ポリペプチド−界面活性剤結合複合体であって、該ＲＡＧＥ様ポリペプチド−界面活性剤結合複合体は、
（Ｐ１）配列番号１２に示されるアミノ酸配列；
（Ｐ２）配列番号１２に示されるアミノ酸配列において、９２位および９５位以外のアミノ酸位置で１または数個の置換、付加および／または欠失を含む、天然型ＲＡＧＥの活性を示すアミノ酸配列；および
（Ｐ３）配列番号１１に示される核酸配列と相補的な核酸配列とストリンジェントな条件下でハイブリダイズする核酸配列によってコードされるアミノ酸配列であって、該コードされるアミノ酸配列において９２位および９５位のアミノ酸は、配列番号１２における対応するアミノ酸を保持している、アミノ酸配列；
（Ｑ１）配列番号１４に示されるアミノ酸配列；
（Ｑ２）配列番号１４に示されるアミノ酸配列において、９２位、９５位、２０６位および２５０位以外のアミノ酸位置で１または数個の置換、付加および／または欠失を含む、天然型ＲＡＧＥの活性を示すアミノ酸配列；および
（Ｑ３）配列番号１３に示される核酸配列と相補的な核酸配列とストリンジェントな条件下でハイブリダイズする核酸配列によってコードされるアミノ酸配列であって、該コードされるアミノ酸配列において９２位、９５位、２０６位および２５０位のアミノ酸は、配列番号１４における対応するアミノ酸を保持している、アミノ酸配列；
（Ｒ１）配列番号３７に示されるアミノ酸配列；
（Ｒ２）配列番号３７に示されるアミノ酸配列において、９２位、９５位および２０６位以外のアミノ酸位置で１または数個の置換、付加および／または欠失を含む、天然型ＲＡＧＥの活性を示すアミノ酸配列；および
（Ｒ３）配列番号３６に示される核酸配列と相補的な核酸配列とストリンジェントな条件下でハイブリダイズする核酸配列によってコードされるアミノ酸配列であって、該コードされるアミノ酸配列において９２位、９５位および２０６位のアミノ酸は、配列番号３７における対応するアミノ酸を保持している、アミノ酸配列；
（Ｓ１）配列番号３９に示されるアミノ酸配列；
（Ｓ２）配列番号３９に示されるアミノ酸配列において、９２位、９５位および２０６位以外のアミノ酸位置で１または数個の置換、付加および／または欠失を含む、天然型ＲＡＧＥの活性を示すアミノ酸配列；および
（Ｓ３）配列番号３８に示される核酸配列と相補的な核酸配列とストリンジェントな条件下でハイブリダイズする核酸配列によってコードされるアミノ酸配列であって、該コードされるアミノ酸配列において９２位、９５位および２０６位のアミノ酸は、配列番号３９における対応するアミノ酸を保持している、アミノ酸配列；
（Ｔ１）配列番号４１に示されるアミノ酸配列；
（Ｔ２）配列番号４１に示されるアミノ酸配列において、１４位、１７位、１２８位および１７２位以外のアミノ酸位置で１または数個の置換、付加および／または欠失を含む、天然型ＲＡＧＥの活性を示すアミノ酸配列；および
（Ｔ３）配列番号４０に示される核酸配列と相補的な核酸配列とストリンジェントな条件下でハイブリダイズする核酸配列によってコードされるアミノ酸配列であって、該コードされるアミノ酸配列において１４位、１７位、１２８位および１７２位のアミノ酸配列は、配列番号４１における対応するアミノ酸を保持している、アミノ酸配列；
（Ｕ１）配列番号４３に示されるアミノ酸配列；
（Ｕ２）配列番号４３に示されるアミノ酸配列において、９２位および９５位以外のアミノ酸位置で１または数個の置換、付加および／または欠失を含む、天然型ＲＡＧＥの活性を示すアミノ酸配列；および
（Ｕ３）配列番号４２に示される核酸配列と相補的な核酸配列とストリンジェントな条件下でハイブリダイズする核酸配列によってコードされるアミノ酸配列であって、該コードされるアミノ酸配列において９２位および９５位のアミノ酸は、配列番号４３における対応するアミノ酸を保持している、アミノ酸配列；
（Ｖ１）配列番号４５に示されるアミノ酸配列；
（Ｖ２）配列番号４５に示されるアミノ酸配列において、９２位および９５位以外のアミノ酸位置で１または数個の置換、付加および／または欠失を含む、天然型ＲＡＧＥの活性を示すアミノ酸配列；および
（Ｖ３）配列番号４４に示される核酸配列と相補的な核酸配列とストリンジェントな条件下でハイブリダイズする核酸配列によってコードされるアミノ酸配列であって、該コードされるアミノ酸配列において９２位および９５位のアミノ酸は、配列番号４５における対応するアミノ酸を保持している、アミノ酸配列；
（Ｗ１）配列番号４７に示されるアミノ酸配列；
（Ｗ２）配列番号４７に示されるアミノ酸配列において、９２位および９５位以外のアミノ酸位置で１または数個の置換、付加および／または欠失を含む、天然型ＲＡＧＥの活性を示すアミノ酸配列；および
（Ｗ３）配列番号４６に示される核酸配列と相補的な核酸配列とストリンジェントな条件下でハイブリダイズする核酸配列によってコードされるアミノ酸配列であって、該コードされるアミノ酸配列において９２位および９５位のアミノ酸は、配列番号４７における対応するアミノ酸を保持している、アミノ酸配列；
（Ｘ１）配列番号４９に示されるアミノ酸配列；
（Ｘ２）配列番号４９に示されるアミノ酸配列において、９２位および９５位以外のアミノ酸位置で１または数個の置換、付加および／または欠失を含む、天然型ＲＡＧＥの活性を示すアミノ酸配列；および
（Ｘ３）配列番号４８に示される核酸配列と相補的な核酸配列とストリンジェントな条件下でハイブリダイズする核酸配列によってコードされるアミノ酸配列であって、該コードされるアミノ酸配列において９２位および９５位のアミノ酸は、配列番号４９における対応するアミノ酸を保持している、アミノ酸配列；
からなる群より選択される配列を含む、ＲＡＧＥ様ポリペプチド−界面活性剤結合複合体。
【請求項２】
前記置換は、保存的置換である、請求項１に記載のＲＡＧＥ様ポリペプチド−界面活性剤結合複合体。
【請求項３】
前記（Ｐ１）〜（Ｘ３）に示されるアミノ酸配列において、配列番号１０のアミノ酸配列における３８位、９９位、１４４位、２０８位、２５９位および３０１位に対応するシステイン残基が保持されている、請求項１に記載のＲＡＧＥ様ポリペプチド−界面活性剤結合複合体。
【請求項４】
前記欠失は、配列番号１２、１４、３７、３９、４１、４３、４５、４７および４９において、配列番号１０の１位〜３７位に対応するアミノ酸配列におけるいずれかのアミノ酸の欠失である、請求項１に記載のＲＡＧＥ様ポリペプチド−界面活性剤結合複合体。
【請求項５】
前記付加は、配列番号１０の１位〜２２位から選択される任意の連続する１〜２２個のアミノ酸配列のＮ末端側への付加、配列番号１０の１２１位〜４０４位から選択される任意の連続する１〜２８４個のアミノ酸の付加、あるいはフレキシブルなリンカー配列もしくはその反復配列、またはＬＤＬ受容体関連タンパク質（ＬＲＰ）のＥＧＦ反復配列（上皮増殖因子受容体様システインリッチドメインを含む配列の付加である、請求項１に記載のポリペプチド−界面活性剤結合複合体。
【請求項６】
前記リンカー配列は、Gly-Gly-Ser、配列番号１５、配列番号１６に示されるアミノ酸配
列である、請求項５に記載のＲＡＧＥ様ポリペプチド−界面活性剤結合複合体。
【請求項７】
前記天然型ＲＡＧＥの活性は、ＡＧＥの認識能である、請求項１に記載のＲＡＧＥ様ポリペプチド−界面活性剤結合複合体。
【請求項８】
タグ配列をさらに有する、請求項１に記載のＲＡＧＥ様ポリペプチド−界面活性剤結合複合体。
【請求項９】
前記タグ配列は、配列番号１７、配列番号１８、または配列番号１９である、請求項８に記載のＲＡＧＥ様ポリペプチド−界面活性剤結合複合体。
【請求項１０】
請求項１に記載のＲＡＧＥ様ポリペプチド−界面活性剤結合複合体を含む、後期糖化反応生成物（ＡＧＥ）検出剤。
【請求項１１】
前記ＲＡＧＥ様ポリペプチド−界面活性剤結合複合体は乾燥形態のものである、請求項１０に記載の検出剤。
【請求項１２】
請求項１に記載のＲＡＧＥ様ポリペプチド−界面活性剤結合複合体および基材を含む、ＡＧＥ検出用デバイス。
【請求項１３】
前記ＲＡＧＥ様ポリペプチド−界面活性剤結合複合体は乾燥形態のものである、請求項１２に記載の検出用デバイス。
【請求項１４】
前記基材は、ビーズ、金粒子、プレート、試験管、チップ、磁性粒子、膜、繊維、スライドガラス、金属薄膜、フィルター、チューブ、ボール、ダイアモンド様炭素被膜ステンレスを含む、請求項１２に記載の検出用デバイス。
【請求項１５】
前記ビーズは、ポリスチレン樹脂、ポリカーボネート樹脂、シリコン樹脂、ナイロン樹脂、天然樹脂、プラスチック、ゼラチン、シリカゲル、金属、デキストラン、ポリビニルアルコール、ポリスチレン、アガロース、ポリアミノ酸、セルロース、ハイドロキシアパタイト、ポリエチレン、ポリスルフォン、ポリプロピレン、セルロースアセテート、ポリメチルメタクリレート、セルロースジアセテート、メチレンビニルアルコールから作製されるビーズを含む、請求項１４に記載の検出用デバイス。
【請求項１６】
ＡＧＥを検出する方法であって、該方法は、
（Ａ）被験体から単離されたサンプルを提供する工程；
（Ｂ）該サンプルと、以下：
（１）請求項１に記載のＲＡＧＥ様ポリペプチド−界面活性剤結合複合体；
（２）請求項１０に記載のＡＧＥ検出剤；または
（３）請求項１２に記載のＡＧＥ検出用デバイス、
のうちのいずれかとを接触させて、該ポリペプチドと該ＡＧＥとの複合体を形成させる工程；および
（Ｃ）該複合体を検出する工程、
を包含する、方法。
【請求項１７】
（Ｂ’）抗体と接触させて、３成分複合体を形成する工程をさらに包含する、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記抗体は、抗ＨｂＡ１ｃ抗体、抗ＡＧＥ抗体および抗カルボキシメチルリジン抗体からなる群より選択される、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記サンプルは、タンパク質を含む体液である、請求項１６に記載の方法。
【請求項２０】
前記タンパク質を含む体液は、血液、血清、血漿、髄液、漿膜腔液、関節液、肺胞洗浄液、涙液または尿を含む体液である、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記ＡＧＥは糖化タンパク質である、請求項１６に記載の方法。
【請求項２２】
前記複合体を検出する工程は、光学的に検出する工程、物理的に検出する工程または化学的に検出する工程を包含する、請求項１６に記載の方法。
【請求項２３】
請求項１に記載のＲＡＧＥ様ポリペプチド−界面活性剤結合複合体を含む、ＡＧＥ検出用キット。
【請求項２４】
請求項１に記載のＲＡＧＥ様ポリペプチド−界面活性剤結合複合体を含むＡＧＥ検出剤と該ＡＧＥ検出剤とＡＧＥとの複合体を検出するための手段とを備える、ＡＧＥ検出システム。
【請求項２５】
前記検出手段は、光学的検出手段、物理的検出手段または化学的検出手段を包含する、請求項２４に記載のシステム。
【請求項２６】
前記光学的検出手段は、分光光度計、ＦＡＣＳ、比色計、蛍光光度計、化学発光検出器、電気化学発光検出器、イメージアナライザー、または顕微鏡を包含する、請求項２５に記載のシステム。
【請求項２７】
前記物理的検出手段は、電気検出、表面プラズモン共鳴、水晶発振マイクロバランス、または熱測定を包含する、請求項２５に記載のシステム。
【請求項２８】
前記化学的検出手段は、質量分析、または高速液体クロマトグラフィーを包含する、請求項２５に記載のシステム。
【請求項２９】
請求項１に記載のＲＡＧＥ様ポリペプチド−界面活性剤結合複合体を含む、糖尿病性血管障害診断剤。
【請求項３０】
ＡＧＥにより引き起こされる疾患の診断を支援する方法であって、該方法は、
（Ａ）糖尿病性血管障害に罹患していると疑われる被験体から単離されたサンプルを提供する工程；
（Ｂ）糖尿病性血管障害に罹患していないコントロール被験体から単離されたサンプルを提供する工程；
（Ｃ）該サンプルと、以下：
（１）請求項１に記載のＲＡＧＥ様ポリペプチド−界面活性剤結合複合体；
（２）請求項１０に記載のＡＧＥ検出剤；
（３）請求項１２に記載のＡＧＥ検出用デバイス；または
（４）請求項２９に記載の糖尿病性血管障害診断剤、
のうちのいずれかとを接触させて、該ＲＡＧＥ様ポリペプチドと該ＡＧＥとの複合体を形成させる工程；および
（Ｄ）該複合体を検出する工程、
（Ｅ）該被験体から単離されたサンプル中の複合体の量と、該コントロール被験体から単離されたサンプル中の複合体の量とを比較して、該被験体中のＡＧＥの該コントロール被験体に対する相対値を算出する工程、
を包含する、方法。
【請求項３１】
（Ｃ’）抗体と接触させて、３成分複合体を形成する工程をさらに包含する、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
前記抗体は、抗ＨｂＡ１ｃ抗体、抗ＡＧＥ抗体および抗カルボキシメチルリジン抗体からなる群より選択される、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
前記ＡＧＥにより引き起こされる疾患は、糖尿病、糖尿病性血管障害、細小血管症、および大血管障害からなる群より選択される、請求項３０に記載の方法。
【請求項３４】
前記細小血管症は、腎症、網膜症、または神経症を含む、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
前記大血管障害は、虚血性心疾患、脳血管疾患、または閉塞性動脈硬化症を含む、請求項３３に記載の方法。
【請求項３６】
請求項１に記載のＲＡＧＥ様ポリペプチド−界面活性剤結合複合体質の、ＡＧＥにより引き起こされる疾患の診断剤の製造のための使用。
【請求項３７】
ＲＡＧＥ様ポリペプチド−界面活性剤結合複合体を製造する方法であって、
Ａ）ＲＡＧＥ様ポリペプチドを細菌宿主細胞で封入体として生産する工程；および
Ｂ）該封入体を界面活性剤とサイクロアミロースでリフォールディングして、ＲＡＧＥ様ポリペプチド−界面活性剤結合複合体を得る工程、
を包含する方法。