【手続補正書】
【提出日】平成24年4月11日(2012.4.11)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
マメ科ゲンゲ属レンゲソウより得られる植物抽出物よりなるアドバンスド・グリケーション・エンドプロダクツ（AGEs：Advanced Glycation Endproducts）分解剤。
【請求項２】
前記アドバンスド・グリケーション・エンドプロダクツ分解作用が、皮膚の角層中に存在するアドバンスド・グリケーション・エンドプロダクツの分解作用であることを特徴とする、請求項１に記載のアドバンスド・グリケーション・エンドプロダクツ分解剤。
【請求項３】
請求項１又は２に記載のアドバンスド・グリケーション・エンドプロダクツ分解剤を含有することを特徴とする、皮膚老化防止又は改善用の皮膚外用剤。
【請求項４】
前記アドバンスド・グリケーション・エンドプロダクツ分解剤を、皮膚外用剤全量に対し、０．０００１質量％〜１０質量％含有することを特徴とする、請求項３に記載の皮膚老化防止又は改善用の皮膚外用剤。
【請求項５】
皮膚老化が、コラーゲン線維束構造の崩壊、シワの形成、たるみの形成、くすみの形成、表皮弾力性の低下、皮膚表面状態の変化であることを特徴とする、請求項３又は４に記載の皮膚外用剤。
【請求項６】
皮膚表面状態の変化が、肌理の変化であることを特徴とする、請求項５に記載の皮膚老化防止又は改善用の皮膚外用剤。
【請求項７】
化粧料（但し、医薬部外品を含む）であることを特徴とする、請求項３〜６の何れか一項に記載の皮膚老化防止又は改善用の皮膚外用剤。
【請求項８】
パネラーより採取された角層を、抗AGEs（アドバンスド・グリケーション・エンドプロダクツ）抗体で処理し、該抗AGEs抗体との反応部位を定量化し、該反応部位が平均値より多い場合、前記パネラーにその使用を勧められるべき皮膚外用剤であることを特徴とする、請求項３〜７の何れか一項に記載の皮膚老化防止用又は改善用の皮膚外用剤。
【請求項９】
マメ科ゲンゲ属レンゲソウの植物体を溶媒で抽出し、抽出物を得て、所望により、前記抽出物を分画、精製、溶媒除去した後、これを化粧料に含有させる場合において、前記抽出物と１−フェニル−１，２−プロパンジオンとをインキュベーションし、生成する安息香酸の量を確認し、しかる後に該抽出物を含有せしめることを特徴とする、化粧料の製造方法。
【請求項１０】
マメ科ゲンゲ属レンゲソウの植物体を溶媒で抽出し、抽出物を得て、所望により、前記抽出物を分画、精製、溶媒除去をした後、これを化粧料に含有させる場合において、前記抽出物とアドバンスド・グリケーション・エンドプロダクツ・牛血清アルブミン複合体を共にインキュベーションし、インキュベーション後にアドバンスド・グリケーション・エンドプロダクツ・牛血清アルブミン複合体を定量し、該定量値がマメ科ゲンゲ属レンゲソウの抽出物乃至はその分画精製物の非存在下に比して減少していることを確認した上で、化粧料に含有させることを特徴とする、化粧品の製造方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００８】
この様な状況に鑑みて、本発明者等は、角層中に存在するAGEs存在量を減少させる作用を有する新規AGEs分解剤を求めて、鋭意努力・研究を重ねた結果、マメ科ゲンゲ属に属する植物より得られる抽出物が、優れたAGEs分解作用を有することを見出し、発明を完成させるに至った。本発明は、以下に示す通りである。
＜１＞ マメ科ゲンゲ属レンゲソウに属する植物より得られる植物抽出物よりなるアドバンスド・グリケーション・エンドプロダクツ（AGEs：Advanced Glycation Endproducts）分解剤。
＜２＞ 前記アドバンスド・グリケーション・エンドプロダクツ分解作用が、皮膚の角層中に存在するアドバンスド・グリケーション・エンドプロダクツの分解作用であることを特徴とする、＜１＞に記載のアドバンスド・グリケーション・エンドプロダクツ産分解剤。
＜３＞ ＜１＞又は＜２＞に記載の前記アドバンスド・グリケーション・エンドプロダクツ分解剤を含有することを特徴とする、皮膚老化防止又は改善用の皮膚外用剤。
＜４＞ 前記アドバンスド・グリケーション・エンドプロダクツ分解剤を、皮膚外用剤全量に対し、０．０００１質量％〜１０質量％含有することを特徴とする、＜３＞に記載の皮膚老化防止又は改善用の皮膚外用剤。
＜５＞ 皮膚老化が、コラーゲン線維束構造の崩壊、シワの形成、たるみの形成、くすみの形成、表皮弾力性の低下、皮膚表面状態の変化であることを特徴とする、＜３＞又は＜４＞に記載の皮膚外用剤。
＜６＞ 皮膚表面状態の変化が、肌理の変化であることを特徴とする、＜５＞に記載の皮膚老化防止又は改善用の皮膚外用剤。
＜７＞ 化粧料（但し、医薬部外品を含む）であることを特徴とする、＜３＞〜＜６＞の何れか一項に記載の皮膚老化防止又は改善用の皮膚外用剤。
＜８＞ パネラーより採取された角層を、抗AGEs（アドバンスド・グリケーション・エンドプロダクツ）抗体で処理し、該抗AGEs抗体との反応部位を定量化し、該反応部位が平均値より多い場合、前記パネラーにその使用を勧められるべき皮膚外用剤であることを特徴とする、＜３＞〜＜７＞の何れか一項に記載の皮膚老化防止用又は改善用の皮膚外用剤。
＜９＞ マメ科ゲンゲ属の植物体を溶媒で抽出し、抽出物を得て、所望により、前記抽出物を分画、精製、溶媒除去した後、これを化粧料に含有させる場合において、前記抽出物と１−フェニル−１，２−プロパンジオンとをインキュベーションし、生成する安息香酸の量を確認し、しかる後に該抽出物を含有せしめることを特徴とする、化粧料の製造方法。
＜１０＞ マメ科ゲンゲ属の植物体を溶媒で抽出し、抽出物を得て、所望により、前記抽出物を分画、精製、溶媒除去をした後、これを化粧料に含有させる場合において、前記抽出物とアドバンスド・グリケーション・エンドプロダクツ・牛血清アルブミン複合体を共にインキュベーションし、インキュベーション後にアドバンスド・グリケーション・エンドプロダクツ・牛血清アルブミン複合体を定量し、該定量値がマメ科ゲンゲ属レンゲソウの抽出物乃至はその分画精製物の非存在下に比して減少していることを確認した上で、化粧料に含有させることを特徴とする、化粧品の製造方法。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１６】
＜試験例１： 本発明の角層中におけるAGEsの存在量のスコア化による定量化検討＞
以下の手順に従い、角層中におけるAGEsの存在量をスコア化した。
１）被験者
２００７年１０月に静岡県在住の健常成人女性４０名（２０〜５６歳、平均年齢３８．１歳）の顔頬部を対象に皮膚状態を評価した。
２）角層中におけるAGEsの免疫組織染色
頬部よりセロハンテープで採取した角層をスライドガラスに転写し、一次抗体（anti AGE monoclonal antibody, mouse、TransGenic社製）、二次抗体（Biotin-Rabbit Anti Mouse IgG conjugate、ZYMED社製）で反応後、ABC試薬（R．Ｔ．U VECTASTAIN社製）で反応させてAEC基質（DAKO社製）で発色させた。
３）角層中におけるAGEs存在量のスコア化検討
免疫組織染色した画像を用い、グレード１〜５までの角層AGEs標準標本を作製し、これらを基準にとして各角層AGEs標本の５段階によるスコア化を行った。角層AGEs標準標本におけるグレード１〜５は、標本中における角層AGEsの免疫組織染の色度合いを指標としてグレードを分類した（図１参照）。角層中におけるAGEs評価グレードを用い、４０名の角層中におけるAGEs含有量を評価した。
４）角層中におけるAGEs存在量のImage Jを用いた画像解析検討
顕微鏡にて２０〜５０倍に拡大された染色された角層AGEs標本の拡大画像をデジタル式のマイクロスコープ等を利用して、コンピュータに取り込み、汎用的な画像解析ソフトウエアを用いて、手動又は自動処理を行い、AGEsの存在量を定量化することが出来る。デジタル式のマイクロスコープとしては、例えば、（株）モリテックスのコスメテック用マイクロスコープ、汎用的画像解析のソフトウエアとしては、例えば、三谷商事（株）のWinRooF（登録商標）が好適に例示出来る。画像処理は、一般的な手法によって行えばよく、例えば、角層AGEs標本の拡大イメージ画像であるカラー画像をモノクロ濃淡画像に変換後、当該モノクロ画像に必要に応じてフィルターを処理後、二値化処理を行い、統計処理によって角層AGEsの存在割合に相関する染色部の総面積を算出した。