(57)【要約】Ｘ線吸収性のある金属の微粒子を体内の任意の部位に、放射線治療の種類、および、治療標的部位に適した任意の量で留置することが可能であり、かつ放射線治療装置で留置部位を特定できる、放射線治療用の病変識別マーカーを提供する。リン酸カルシウム系骨補強材含有物と金属粒子との混合物を含む放射線治療用の病変識別マーカーである。または、リン酸カルシウム系骨補強材含有物と粒子幅０．５ｍｍ以下の金属粒子との混合物であって、前記金属粒子と前記リン酸カルシウム系骨補強材含有物との重量比が１：４以上である混合物を含む放射線治療用の病変識別マーカーである。
2016137013.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
リン酸カルシウム系骨補強材含有物と金属粒子との混合物、または、リン酸カルシウム系骨補強材含有物と金属粒子と練和液との混合物を含むことを特徴とする放射線治療用の病変識別マーカー。
【請求項２】
リン酸カルシウム系骨補強材含有物と粒子幅０．５ｍｍ以下の金属粒子との混合物、または、リン酸カルシウム系骨補強材含有物と粒子幅０．５ｍｍ以下の金属粒子と練和液との混合物であって、前記金属粒子と前記リン酸カルシウム系骨補強材含有物との重量比が１：４以上である混合物を含むことを特徴とする放射線治療用の病変識別マーカー。
【請求項３】
請求項１または２に記載の放射線治療用の病変識別マーカーであって、
前記混合物における前記金属粒子と前記リン酸カルシウム系骨補強材含有物との重量比が約１：２以上であることを特徴とする放射線治療用の病変識別マーカー。
【請求項４】
請求項１〜３のいずれか１項に記載の放射線治療用の病変識別マーカーであって、
前記金属粒子を約５ｍｇ以上含むことを特徴とする放射線治療用の病変識別マーカー。
【請求項５】
請求項１〜４のいずれか１項に記載の放射線治療用の病変識別マーカーであって、
前記金属粒子が、金粒子であることを特徴とする放射線治療用の病変識別マーカー。
【請求項６】
請求項５に記載の放射線治療用の病変識別マーカーであって、
前記金粒子が、純度９９重量％以上の純金粒子であることを特徴とする放射線治療用の病変識別マーカー。
【請求項７】
請求項１〜６のいずれか１項に記載の放射線治療用の病変識別マーカーであって、
前記リン酸カルシウム系骨補強材含有物と前記金属粒子との混合物、または、前記リン酸カルシウム系骨補強材含有物と金属粒子と練和液との混合物の２０℃における粘度が、１０４〜１０６ｍＰａ・ｓの範囲であることを特徴とする放射線治療用の病変識別マーカー。
【請求項８】
請求項１〜７のいずれか１項に記載の放射線治療用の病変識別マーカーであって、
前記リン酸カルシウム系骨補強材含有物は、α型リン酸三カルシウム、リン酸四カルシウム、リン酸水素カルシウム（無水物または水和物）、およびβ型リン酸三カルシウムのうちの少なくとも１つを含むことを特徴とする放射線治療用の病変識別マーカー。
【請求項９】
請求項１〜８のいずれか１項に記載の放射線治療用の病変識別マーカーであって、
前記練和液は、コンドロイチン硫酸エステルナトリウム、コハク酸二ナトリウム無水物、亜硫酸水素ナトリウム、および水を含む練和液、ならびに、デキストラン硫酸エステルナトリウム  イオウ５、および水を含む練和液のうちの少なくとも１つであることを特徴とする放射線治療用の病変識別マーカー。
【請求項１０】
金属粒子およびリン酸カルシウム系骨補強材含有物、または、金属粒子、リン酸カルシウム系骨補強材含有物および練和液を含むことを特徴とする放射線治療用の病変識別マーカーキット。
【請求項１１】
粒子幅０．５ｍｍ以下の金属粒子、およびリン酸カルシウム系骨補強材含有物、または、粒子幅０．５ｍｍ以下の金属粒子、リン酸カルシウム系骨補強材含有物および練和液を含むことを特徴とする放射線治療用の病変識別マーカーキット。
【請求項１２】
請求項１０または１１に記載の放射線治療用の病変識別マーカーキットであって、
前記金属粒子が、金粒子であることを特徴とする放射線治療用の病変識別マーカーキット。
【請求項１３】
請求項１２に記載の放射線治療用の病変識別マーカーキットであって、
前記金粒子が、純度９９重量％以上の純金粒子であることを特徴とする放射線治療用の病変識別マーカーキット。
【請求項１４】
請求項１０〜１３のいずれか１項に記載の放射線治療用の病変識別マーカーキットであって、
前記リン酸カルシウム系骨補強材含有物は、α型リン酸三カルシウム、リン酸四カルシウム、リン酸水素カルシウム（無水物または水和物）、およびβ型リン酸三カルシウムのうちの少なくとも１つを含むことを特徴とする放射線治療用の病変識別マーカーキット。
【請求項１５】
請求項１０〜１４のいずれか１項に記載の放射線治療用の病変識別マーカーキットであって、
前記練和液は、コンドロイチン硫酸エステルナトリウム、コハク酸二ナトリウム無水物、亜硫酸水素ナトリウム、および水を含む練和液、ならびに、デキストラン硫酸エステルナトリウム  イオウ５、および水を含む練和液のうちの少なくとも１つであることを特徴とする放射線治療用の病変識別マーカーキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、放射線治療用の病変識別マーカーおよび放射線治療用の病変識別マーカーキットに関する。
【背景技術】
【０００２】
強度変調放射線治療（Ｉｎｔｅｎｓｉｔｙ  Ｍｏｄｕｌａｔｅｄ  Ｒａｄｉａｔｉｏｎ  Ｔｈｅｒａｐｙ（ＩＭＲＴ））、画像誘導放射線治療（Ｉｍａｇｅ  Ｇｕｉｄｅｄ  Ｒａｄｉａｔｉｏｎ  Ｔｈｅｒａｐｙ（ＩＧＲＴ））、動体追跡放射線治療（Ｒｅａｌ−ｔｉｍｅ  Ｔｕｍｏｒ−Ｔｒａｃｋｉｎｇ  Ｒａｄｉａｔｉｏｎ  Ｔｈｅｒａｐｙ（ＲＴＲＴ））等の技術開発により、肺、前立腺、肝、副腎といった様々な臓器で高精度の放射線治療が可能になった（非特許文献１参照）。
本治療では、Ｘ線透視で正確な標的病変の位置情報を得るため、臓器に病変識別のための金属マーカーを埋設する（非特許文献１，２参照）。金属マーカーはＸ線透視画像で腫瘍の位置を示す指標となり、正常組織を可能な限り避け、効率的に病変へ放射線を照射することが可能になる。これによって、治療効果を高めるとともに、周囲の正常組織への放射線照射量を低減し、有害事象の発生のリスクを軽減することができる。
現在、本邦で承認されている放射線治療用マーカーとしては、ｉＧｏｌｄ（登録商標）（メディキット）、ＶＩＳＩＣＯＩＬ（セティメディカルラボ）等がある。
前者は純金製の２ｍｍ径の球体で、Ｘ線透視での視認性が高く、あらゆる方向から同じ形状で認識可能で、正確な位置情報の把握に優れ、また気管内や消化管、膀胱粘膜への留置も可能である（非特許文献２，３，４，５および６参照）。しかし、経皮的留置の場合は２．５５ｍｍ径のシースイントロデューサー（筒）を穿刺する必要があり、部位や臓器によっては安全な穿刺経路の確保ができない場合がある。
後者は細径（０．３５〜１．１０ｍｍ）、長さ１０〜３０ｍｍのコイルで、１９Ｇ（１．１０ｍｍ）〜１７Ｇ（１．２５ｍｍ）の針で留置が可能であり、穿刺経路の選択は比較的容易である（非特許文献７参照）。しかし、細径のコイルであるため、方向によっては（特に正接方向）Ｘ線透視で認識できず、複数個のコイルを留置しなければ位置情報が得られない場合がある。複数回の穿刺は出血や臓器損傷などのリスクが高まるため、避けるべきである。
また、非特許文献８にも、金のナノ粒子を用いたＸ線マーカーの記載があるが、金粒子の量が少なく視認性が不十分であり、骨がある箇所での視認性も不十分である。
一方、リン酸カルシウムと放射線不透過材料との混合物を用いた技術として、リン酸カルシウムに金粉を約２重量％混合した事例が開示されているが（特許文献１参照）、放射線治療用の病変識別マーカーとしての目的のためには視認性が不十分であり、使用に耐えない。
特許文献２〜４、非特許文献９，１０には、各種のリン酸カルシウム系の組成物の記載がある。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】特表２００６−５２４０５８号公報
【特許文献２】特開昭６４−０３７４４５号公報
【特許文献３】特開２００２−２５５６０３号公報
【特許文献４】特開２００２−２９１８６６号公報
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】Ｄａｗｓｏｎ  ＬＡ，Ｓｈａｒｐｅ  ＭＢ．Ｉｍａｇｅ−ｇｕｉｄｅｄ  ｒａｄｉｏｔｈｅｒａｐｙ：ｒａｔｉｏｎａｌｅ，ｂｅｎｅｆｉｔｓ，ａｎｄ  ｌｉｍｉｔａｔｉｏｎｓ．Ｔｈｅ  ｌａｎｃｅｔ  ｏｎｃｏｌｏｇｙ．２００６；７（１０）：８４８−５８．
【非特許文献２】Ｓｈｉｒａｔｏ  Ｈ，Ｓｈｉｍｉｚｕ  Ｓ，Ｋｕｎｉｅｄａ  Ｔ，ｅｔ  ａｌ．Ｐｈｙｓｉｃａｌ  ａｓｐｅｃｔｓ  ｏｆ  ａ  ｒｅａｌ−ｔｉｍｅ  ｔｕｍｏｒ−ｔｒａｃｋｉｎｇ  ｓｙｓｔｅｍ  ｆｏｒ  ｇａｔｅｄ  ｒａｄｉｏｔｈｅｒａｐｙ．Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｒａｄｉａｔｉｏｎ  ｏｎｃｏｌｏｇｙ，ｂｉｏｌｏｇｙ，ｐｈｙｓｉｃｓ．２０００；４８（４）：１１８７−９５．
【非特許文献３】Ｓｈｉｍｉｚｕ  Ｓ，Ｓｈｉｒａｔｏ  Ｈ，Ｏｇｕｒａ  Ｓ，ｅｔ  ａｌ．Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｌｕｎｇ  ｔｕｍｏｒ  ｍｏｖｅｍｅｎｔ  ｉｎ  ｒｅａｌ−ｔｉｍｅ  ｔｕｍｏｒ−ｔｒａｃｋｉｎｇ  ｒａｄｉｏｔｈｅｒａｐｙ．Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｒａｄｉａｔｉｏｎ  ｏｎｃｏｌｏｇｙ，ｂｉｏｌｏｇｙ，ｐｈｙｓｉｃｓ．２００１；５１（２）：３０４−１０．
【非特許文献４】Ｋｉｔａｍｕｒａ  Ｋ，Ｓｈｉｒａｔｏ  Ｈ，Ｓｅｐｐｅｎｗｏｏｌｄｅ  Ｙ，ｅｔ  ａｌ．Ｔｈｒｅｅ−ｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌ  ｉｎｔｒａｆｒａｃｔｉｏｎａｌ  ｍｏｖｅｍｅｎｔ  ｏｆ  ｐｒｏｓｔａｔｅ  ｍｅａｓｕｒｅｄ  ｄｕｒｉｎｇ  ｒｅａｌ−ｔｉｍｅ  ｔｕｍｏｒ−ｔｒａｃｋｉｎｇ  ｒａｄｉｏｔｈｅｒａｐｙ  ｉｎ  ｓｕｐｉｎｅ  ａｎｄ  ｐｒｏｎｅ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｐｏｓｉｔｉｏｎｓ．Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｒａｄｉａｔｉｏｎ  ｏｎｃｏｌｏｇｙ，ｂｉｏｌｏｇｙ，ｐｈｙｓｉｃｓ．２００２；５３（５）：１１１７−２３．
【非特許文献５】Ｔａｇｕｃｈｉ  Ｈ，Ｓａｋｕｈａｒａ  Ｙ，Ｈｉｇｅ  Ｓ，ｅｔ  ａｌ．Ｉｎｔｅｒｃｅｐｔｉｎｇ  ｒａｄｉｏｔｈｅｒａｐｙ  ｕｓｉｎｇ  ａ  ｒｅａｌ−ｔｉｍｅ  ｔｕｍｏｒ−ｔｒａｃｋｉｎｇ  ｒａｄｉｏｔｈｅｒａｐｙ  ｓｙｓｔｅｍ  ｆｏｒ  ｈｉｇｈｌｙ  ｓｅｌｅｃｔｅｄ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｕｎｒｅｓｅｃｔａｂｌｅ  ｗｉｔｈ  ｏｔｈｅｒ  ｍｏｄａｌｉｔｉｅｓ．Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｒａｄｉａｔｉｏｎ  ｏｎｃｏｌｏｇｙ，ｂｉｏｌｏｇｙ，ｐｈｙｓｉｃｓ．２００７；６９（２）：３７６−８０．
【非特許文献６】Ｋａｔｏｈ  Ｎ，Ｏｎｉｍａｒｕ  Ｒ，Ｓａｋｕｈａｒａ  Ｙ，ｅｔ  ａｌ．Ｒｅａｌ−ｔｉｍｅ  ｔｕｍｏｒ−ｔｒａｃｋｉｎｇ  ｒａｄｉｏｔｈｅｒａｐｙ  ｆｏｒ  ａｄｒｅｎａｌ  ｔｕｍｏｒｓ．Ｒａｄｉｏｔｈｅｒａｐｙ  ａｎｄ  ｏｎｃｏｌｏｇｙ：ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  ｆｏｒ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  Ｒａｄｉｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ．２００８；８７（３）：４１８−２４．
【非特許文献７】Ｋｉｍ  ＪＨ，Ｈｏｎｇ  ＳＳ，Ｋｉｍ  ＪＨ，ｅｔ  ａｌ．Ｓａｆｅｔｙ  ａｎｄ  ｅｆｆｉｃａｃｙ  ｏｆ  ｕｌｔｒａｓｏｕｎｄ−ｇｕｉｄｅｄ  ｆｉｄｕｃｉａｌ  ｍａｒｋｅｒ  ｉｍｐｌａｎｔａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  ＣｙｂｅｒＫｎｉｆｅ  ｒａｄｉａｔｉｏｎ  ｔｈｅｒａｐｙ．Ｋｏｒｅａｎ  ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｒａｄｉｏｌｏｇｙ：ｏｆｆｉｃｉａｌ  ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｋｏｒｅａｎ  Ｒａｄｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｓｏｃｉｅｔｙ．２０１２；１３（３）：３０７−１３．
【非特許文献８】Ａｄｖ．Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  Ｍａｔｅｒ．，２０１５，４，ｐ．８５６−８６３
【非特許文献９】窯業協会誌、Ｖｏｌ．８４（４），１９７６，ｐ．２０９−２１３
【非特許文献１０】Ｊ．Ｓｏｃ．Ｉｎｏｒｇａｎｉｃ  Ｍａｔ．Ｊａｐ．，Ｖｏｌ．１２，ｐ．２６２−２６９（２００５）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明の目的は、Ｘ線吸収性のある金属の微粒子を体内の任意の部位に、放射線治療の種類、および、治療標的部位に適した任意の量で留置することが可能であり、かつ放射線治療装置で留置部位を特定できる、放射線治療用の病変識別マーカーおよび放射線治療用の病変識別マーカーキットを提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明は、リン酸カルシウム系骨補強材含有物と金属粒子との混合物を含む放射線治療用の病変識別マーカーである。また、本発明は、リン酸カルシウム系骨補強材含有物と金属粒子と練和液との混合物を含む放射線治療用の病変識別マーカーである。
本発明は、リン酸カルシウム系骨補強材含有物と粒子幅０．５ｍｍ以下の金属粒子との混合物であって、前記金属粒子と前記リン酸カルシウム系骨補強材含有物との重量比が１：４以上である混合物を含む放射線治療用の病変識別マーカーである。また、本発明は、リン酸カルシウム系骨補強材含有物と粒子幅０．５ｍｍ以下の金属粒子と練和液との混合物であって、前記金属粒子と前記リン酸カルシウム系骨補強材含有物との重量比が１：４以上である混合物を含む放射線治療用の病変識別マーカーである。
前記放射線治療用の病変識別マーカーにおいて、前記混合物における前記金属粒子と前記リン酸カルシウム系骨補強材含有物との重量比が約１：２以上であることが好ましい。
前記放射線治療用の病変識別マーカーにおいて、前記金属粒子を約５ｍｇ以上含むことが好ましい。
前記放射線治療用の病変識別マーカーにおいて、前記金属粒子が、金粒子であることが好ましい。
前記放射線治療用の病変識別マーカーにおいて、前記金粒子が、純度９９重量％以上の純金粒子であることが好ましい。
前記放射線治療用の病変識別マーカーにおいて、前記リン酸カルシウム系骨補強材含有物と前記金属粒子と練和液との混合物の２０℃における粘度が、１０４〜１０６ｍＰａ・ｓの範囲であることが好ましい。
前記放射線治療用の病変識別マーカーにおいて、前記リン酸カルシウム系骨補強材含有物は、α型リン酸三カルシウム、リン酸四カルシウム、リン酸水素カルシウム（無水物または水和物）、およびβ型リン酸三カルシウムのうちの少なくとも１つを含むことが好ましい。
前記放射線治療用の病変識別マーカーにおいて、前記練和液は、コンドロイチン硫酸エステルナトリウム、コハク酸二ナトリウム無水物、亜硫酸水素ナトリウム、および水を含む練和液、ならびに、デキストラン硫酸エステルナトリウム  イオウ５、および水を含む練和液のうちの少なくとも１つであることが好ましい。
本発明は、金属粒子およびリン酸カルシウム系骨補強材含有物を含む放射線治療用の病変識別マーカーキットである。また、本発明は、金属粒子、リン酸カルシウム系骨補強材含有物、および練和液を含む放射線治療用の病変識別マーカーキットである。
本発明は、粒子幅０．５ｍｍ以下の金属粒子、およびリン酸カルシウム系骨補強材含有物を含む放射線治療用の病変識別マーカーキットである。また、本発明は、粒子幅０．５ｍｍ以下の金属粒子、リン酸カルシウム系骨補強材含有物、および練和液を含む放射線治療用の病変識別マーカーキットである。
前記放射線治療用の病変識別マーカーキットにおいて、前記金属粒子が、金粒子であることが好ましい。
前記放射線治療用の病変識別マーカーキットにおいて、前記金粒子が、純度９９重量％以上の純金粒子であることが好ましい。
前記放射線治療用の病変識別マーカーキットにおいて、前記リン酸カルシウム系骨補強材含有物は、α型リン酸三カルシウム、リン酸四カルシウム、リン酸水素カルシウム（無水物または水和物）、およびβ型リン酸三カルシウムのうちの少なくとも１つを含むことが好ましい。
前記放射線治療用の病変識別マーカーキットにおいて、前記練和液は、コンドロイチン硫酸エステルナトリウム、コハク酸二ナトリウム無水物、亜硫酸水素ナトリウム、および水を含む練和液、ならびに、デキストラン硫酸エステルナトリウム  イオウ５、および水を含む練和液のうちの少なくとも１つであることが好ましい。
【発明の効果】
【０００７】
本発明では、Ｘ線吸収性のある金属の微粒子を体内の任意の部位に、放射線治療の種類、および、治療標的部位に適した任意の量で留置することが可能であり、かつ放射線治療装置で留置部位を特定できる、放射線治療用の病変識別マーカーおよび放射線治療用の病変識別マーカーキットを提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【０００８】
図１は、純金粒子単独でブタ肝に注入した実験（実施例１）のＸ線透視画像（Ａ，Ｂ，Ｃ）およびＣＴ画像（Ｄ）である。Ａは、粒子幅約０．４±０．１ｍｍの純金粒子約２０ｍｇのＸ線透視写真であり、Ｂは、粒子幅約０．４±０．１ｍｍの純金粒子約８０ｍｇのＸ線透視写真であり、Ｃは、粒子幅約０．７±０．１ｍｍの純金粒子約８０ｍｇのＸ線透視写真であり、Ｄは、粒子幅約０．４±０．１ｍｍの純金粒子約８０ｍｇのコンピューター断層画像（ＣＴ）である。
図２は、リン酸カルシウム系骨補強材含有物、専用練和液、および純金粒子を混合した場合（実施例２）のＸ線透視画像（Ａ，Ｂ）である。Ａは、リン酸カルシウム系骨補強材含有物と専用練和液との練和物（リン酸カルシウム系骨補強材練和物）を単独で注入した場合、Ｂは、リン酸カルシウム系骨補強材含有物４ｇと純金粒子１ｇと専用練和液との混合物を注入した場合である。
図３は、リン酸カルシウム系骨補強材含有物、専用練和液、および純金粒子を混合した場合のＸ線吸収値の比較（実施例２）を示す図である。
図４は、リン酸カルシウム系骨補強材含有物、専用練和液、および純金粒子を混合した場合（実施例３）のＸ線透視画像である。Ａは、リン酸カルシウム系骨補強材含有物２ｇと純金粒子１ｇと専用練和液との混合物を注入した場合、Ｂは、リン酸カルシウム系骨補強材含有物１．８ｇと純金粒子１．８ｇと専用練和液との混合物を注入した場合である。
図５は、リン酸カルシウム系骨補強材含有物と純金粒子を混合した場合のＸ線吸収値の比較（実施例３）を示す図である。
図６は、実施例４における、アクリル板厚さ１０ｃｍの場合のＸ線透視画像である。
図７は、実施例５における、胸部ファンム上でのＸ線透視画像の一例である。
図８は、実施例８における、ブタ肝臓に注入した純金粒子マーカーの胸部ファンム上でのＸ線透視画像である。
図９は、実施例９における、ブタ肝臓に注入した純金粒子マーカーの胸部ファントム上でのＸ線透視画像である。
図１０は、実施例１１における、粒子幅３２μｍ以下の純金粒子／ＣＰＣ練和物の粘度推移を示す図である。
図１１は、実施例１１における、粒子幅３３−５３μｍの純金粒子／ＣＰＣ練和物の粘度推移を示す図である。
図１２は、実施例１１における、粒子幅５４−７５μｍの純金粒子／ＣＰＣ練和物の粘度推移を示す図である。
図１３は、実施例１１における、粒子幅７６−１５０μｍの純金粒子／ＣＰＣ練和物の粘度推移を示す図である。
図１４は、実施例１１における、純金粒子を含まないＣＰＣ練和物の２０℃と５℃における粘度推移を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【０００９】
本発明の実施の形態について以下説明する。本実施形態は本発明を実施する一例であって、本発明は本実施形態に限定されるものではない。
＜放射線治療用の病変識別マーカー＞
本発明の実施形態に係る放射線治療用の病変識別マーカーは、リン酸カルシウム系骨補強材含有物と金属粒子との混合物、または、リン酸カルシウム系骨補強材含有物と金属粒子と練和液との混合物を含む。本発明の実施形態に係る放射線治療用の病変識別マーカーは、リン酸カルシウム系骨補強材含有物と粒子幅０．５ｍｍ以下の金属粒子との混合物であって、前記金属粒子と前記リン酸カルシウム系骨補強材含有物との重量比が１：４以上である混合物を含む。また、本発明の実施形態に係る放射線治療用の病変識別マーカーは、リン酸カルシウム系骨補強材含有物と粒子幅０．５ｍｍ以下の金属粒子と練和液との混合物であって、前記金属粒子と前記リン酸カルシウム系骨補強材含有物との重量比が１：４以上である混合物を含む。
本実施形態に係る放射線治療用の病変識別マーカーは、リン酸カルシウム系骨補強材含有物と金属粒子とを混合したもの、またはリン酸カルシウム系骨補強材含有物と金属粒子と練和液とを混合したものを、穿刺針等によって体内の任意の部位に留置、埋設することができるものである。
本実施形態に係る放射線治療用の病変識別マーカーにより、Ｘ線吸収性のある金属の微粒子を体内の任意の部位に、放射線治療の種類、および、治療標的部位に適した任意の量で留置することが可能であり、かつ放射線治療装置で留置部位を特定することができる。従来は使用不可能だったデリバリーシステムによる留置が可能で、従来の２ｍｍ径の純金マーカーに匹敵するまたはそれ以上の視認性を有する。体内のあらゆる部位に安全に留置できる病変識別マーカーとして、高精度放射線治療の適応をさらに拡大し、新たな癌治療への道を開拓することができる。本実施形態に係る放射線治療用の病変識別マーカーにより、従来よりも非常に細い穿刺器具で留置できるため、留置のときの穿刺による出血のリスクが低く、臓器への障害も極めて少ない。また、カテーテルのような細い管から留置することができるため、内視鏡を用いた消化管や気管、気管支内からの留置、尿道を経由した膀胱内への留置、膣を経由した子宮内への留置等も可能であり、侵襲性の面でも従来法より明らかに優れている。
本発明の実施形態に係る病変識別マーカーを体内の任意の部位に留置する方法としては、例えば、留置針の先端にコラーゲンスポンジ等の多孔質体を着装し、金属粒子をそこに充填したものを準備し、リン酸カルシウム系骨補強材含有物および練和液を混合した練和物（リン酸カルシウム系骨補強材練和物）を適量充填したシリンジを着装し、リン酸カルシウム系骨補強材練和物で金属粒子塊を臓器内に押し出す方法や、リン酸カルシウム系骨補強材含有物、金属粒子および練和液を混合して金属粒子含有リン酸カルシウム系骨補強材練和物を作製し、それをシリンジに移し、針を着装して、リン酸カルシウム系骨補強材含有物と金属粒子とを含む病変識別マーカーを臓器内に注入する方法等が挙げられる。
リン酸カルシウム系骨補強材練和物等を用いて金属粒子塊を押し出す方法は、少量の金属粒子で高い視認性を示すこと、およびリン酸カルシウム系骨補強材練和物と金属粒子との混合操作が不要という利点がある。
金属粒子含有リン酸カルシウム系骨補強材練和物を使用する方法は、注入のときにペースト状であるため、針だけではなくカテーテル等からも注入可能であり、カテーテルを経由して消化管粘膜、膵臓、膀胱等へリン酸カルシウム系骨補強材含有物と金属粒子とを含む病変識別マーカーを留置することも可能である。
金属粒子としては、例えば、金粒子、プラチナ粒子、ニッケル粒子、銀粒子、チタン粒子、タンタル粒子、タングステン粒子、および酸化鉄粒子等の金属含有粒子、ナイチノール粒子等の金属合金含有粒子等が挙げられ、生体適合性が高い、視認性が良好等の点から、金粒子が好ましく、純度９５重量％以上の純金粒子がより好ましく、純度９９重量％以上の純金粒子、純度９９．９重量％以上の純金粒子、純度９９．９９重量％以上の純金粒子が特に好ましい。
金属粒子は、球形状または異形状等を有しており、その粒子幅は、小さければ小さいほどよいが、例えば、１ｍｍ以下であり、好ましくは０．８ｍｍ以下であり、より好ましくは０．５ｍｍ以下であり、さらに好ましくは０．１５ｍｍ以下である。金属の微粒子を含む放射線マーカーにおいては、原理的に当該金属粒子の下限はないと考えられるが、強いてあげると、より好ましくは約０．１μｍより大きく約０．１５ｍｍ以下の範囲であり、さらに好ましくは数μｍ以上（例えば、１μｍ以上）で約０．１５ｍｍ以下の範囲である。金属微粒子の粒子幅が視認性に大幅に影響することはほとんどないと考えられるが、金属粒子の粒子幅が１ｍｍを超えると、１８Ｇ（内径：約０．９ｍｍ）前後の注射針やカテーテル内で詰まりやすくなる場合がある。２２Ｇ（内径：約０．４８ｍｍ）前後の注射針やカテーテルを使用するのであれば、粒子幅は０．５ｍｍを超えると詰まりやすくなる場合がある。なお、本明細書において、ニラコ社製（品番：ＡＵ−１７４０１５）以外の純金粒子は、例えば、下記の方法で調製したものを使用した。金属粒子の粒子幅は、下記（Ａ），（Ｃ）に示すように、所定の目開き（ＪＩＳ  Ｚ  ８８０１）のフルイの通過および不通過によって決定したものである。
（Ａ）［粒子幅約０．３〜約０．５ｍｍの純金粒子］
（１）純金インゴットを例えば１１５０℃で加熱溶融する。
（２）カーボンノズルおよび石英ノズルのφ０．１ｍｍ孔から噴射させて回転、急冷して純金粒子を作製する。
（３）作製した純金粒子を目開き（ＪＩＳ  Ｚ  ８８０１）０．５ｍｍのフルイにかける。
（４）目開き０．５ｍｍのフルイを通過した純金粒子を目開き０．３ｍｍのフルイにかける。
（５）目開き０．５ｍｍのフルイを通過し、目開き０．３ｍｍのフルイで止まった純金粒子を本明細書では粒子幅約０．４±０．１ｍｍの純金粒子と呼ぶ。
（Ｂ）［粒子幅約０．６〜約０．８ｍｍの純金粒子］
（１）純金インゴットを１０００〜１２００℃で熔解する。
（２）伸線加工にてφ０．５〜０．６ｍｍの線材に加工する。
（３）直径０．７±０．１ｍｍの球状粒子の重量になるように切断する。
（４）切断した金粒子をカーボン鋳型に整列させ、真空加熱炉にて例えば１１５０℃で加熱し、その後例えば１００℃に冷却して約０．７±０．１ｍｍの粒子にし、この得られた純金粒子を本明細書では粒子幅約０．７±０．１ｍｍの純金粒子と呼ぶ。
（Ｃ）［粒子幅１５０〜７６μｍ、７５〜５４μｍ、５３〜３３μｍ、および３２μｍ以下の純金粒子］
（１）上記（Ａ）とほぼ同じように、カーボンノズルおよび石英ノズルを有するアトマイザーから純金の加熱溶融物を噴霧、急冷して純金粒子を作製する。
（２）目開き（ＪＩＳ  Ｚ  ８８０１）１５０μｍ、７５μｍ、５３μｍ、および３２μｍのフルイをもちいて順に篩い分け、それぞれ１５０〜７６μｍ、７５〜５４μｍ、５３〜３３μｍ、および３２μｍ以下の純金粒子を得る。
リン酸カルシウム系骨補強材含有物と金属粒子との混合物、または、リン酸カルシウム系骨補強材含有物と金属粒子と練和液との混合物を病変識別マーカーとして体内の任意の部位に留置する場合、Ｘ線のマーカーとしては、約５ｍｇ以上の重量の金属粒子を含むことが好ましく、２０ｍｇ以上の重量の金属粒子を含むことがより好ましく、４０ｍｇ以上の重量の金属粒子を含むことがさらに好ましく、８０ｍｇ以上の重量の金属粒子を含むことが特に好ましい。
リン酸カルシウム系骨補強材含有物は、リン酸カルシウム系組成物であり、α型リン酸三カルシウム（例えば、特開２００２−２５５６０３号公報参照）、リン酸四カルシウム（例えば、特開２００２−２９１８６６号公報参照）、リン酸水素カルシウム（例えば、特開昭６４−０３７４４５号公報参照）、もしくはβ型リン酸三カルシウム（例えば、特開２０１０−０７５２４７号公報参照）を主要成分として含むもの等が知られており、これらリン酸カルシウム系骨補強材は、生体内ではハイドロキシアパタイトに変換すると言われており、その化学式は、Ｃａ１０（ＰＯ４）６（ＯＨ）２で示される。
リン酸カルシウム系骨補強材もＸ線透視下で視認可能だが、放射線治療の際に必要なＸ線透視下での視認性を確保することが困難であるため、生体適合性の高い純金粒子等の金属粒子の十分量をリン酸カルシウム系骨補強材含有物にできるだけ均等に混合した病変識別マーカーを用いることにより、Ｘ線透視下での視認性を十分に確保することができる。
リン酸カルシウム系骨補強材含有物は、例えば、α型リン酸三カルシウム、リン酸四カルシウム、リン酸水素カルシウム（無水物または水和物）、およびβ型リン酸三カルシウムのうちの少なくとも１つを含み、その他に、ハイドロキシアパタイト、リン酸マグネシウム、非晶質リン酸カルシウム、およびリン酸カルシウム系ガラス等のリン酸化合物、さらには、多糖、コラーゲン、リン酸カルシウム／コラーゲン複合体、骨形成タンパク質（ＢＭＰ）、およびインシュリン様因子（ＩＧＦ）等のうちから選択される少なくとも１つを含んでもよい。
リン酸カルシウム系骨補強材含有物は、例えば、粉末形態である。リン酸カルシウム系骨補強材含有物としては、例えば、α型リン酸三カルシウム（７５重量％）、リン酸四カルシウム（１８重量％）、リン酸水素カルシウム（５重量％）、水酸アパタイト（２重量％）、およびリン酸マグネシウムを含有するバイオペックス−Ｒ（ＨＯＹＡ  Ｔｅｃｈｎｏｓｕｒｇｉｃａｌ社製）や、リン酸四カルシウム、および無水リン酸水素カルシウムの混合組成物であるセラペースト（日本特殊陶業社製）等を用いることができる。
リン酸カルシウム系骨補強材含有物の練和物（リン酸カルシウム系骨補強材練和物）を作製するための練和液として、または、リン酸カルシウム系骨補強材含有物と金属粒子とを練和して金属粒子含有リン酸カルシウム系骨補強材練和物を作製するための練和液として、リン酸カルシウム系の骨補強材の練和液として用いられるものであればよく、特に制限はないが、例えば、易水溶性のハロゲン化物、硫酸塩、有機酸塩の単独または２種以上の混合液に水と酸（例えば、塩酸、硫酸、リン酸、ギ酸、酢酸、コハク酸、乳酸等）を使用する練和液（特開昭５９−８８３５１号公報参照）、不飽和カルボン酸（例えば、アクリル酸、マレイン酸、フマル酸、イタコン酸）の単重合体または共重合体を含有する酸性溶液を用いる練和液（特開昭６０−２５３４５４号公報参照）、抗菌剤（例えば、プロピレングリコール、エチレングリコール等）および水溶性高分子（例えば、キチン、キトサン、溶性デンプン、コンドロイチン硫酸およびこれらの塩、カルボキシメチルセルロース等）を含有する練和液（特開平３−２６７０６７号公報参照）、コハク酸ナトリウム等の水溶性ナトリウム塩類を含有する練和液（特開平４−１２０４４号公報参照）等が挙げられる。好ましくは、上記を組み合わせたコンドロイチン硫酸エステルナトリウム（コンドロイチン硫酸ナトリウム）、コハク酸二ナトリウム無水物、亜硫酸水素ナトリウム、注射用水（日本薬局方）等の水等を含む練和液（特開２００２−２５５６０３号公報参照）、デキストラン硫酸エステルナトリウム  イオウ５（デキストラン硫酸ナトリウム  イオウ５）、注射用水等の水等を含む練和液（特開２００２−２９１８６６号公報参照）、注射用水等の水からなる練和液等を用いればよい。練和液としては、例えば、コハク酸二ナトリウム無水物（１２重量％）、コンドロイチン硫酸エステルナトリウム（５重量％）、亜硫酸水素ナトリウム、および、注射用水（８３重量％）を含有する、バイオペックス−Ｒの専用練和液（ＨＯＹＡ  Ｔｅｃｈｎｏｓｕｒｇｉｃａｌ社製）や、セラペーストの硬化液（組成：デキストラン硫酸エステルナトリウム  イオウ５、注射用水）等を用いることができる。また、これら市販の練和液を適当量の注射用水で希釈して使用することもできるが、注射用水のみを練和液として使用すると、練和物の注入の際にシリンジ等の閉塞が起こる場合や、練和物の固化に時間が掛かりすぎる場合もある。
金属粒子とリン酸カルシウム系骨補強材含有物の練和物（リン酸カルシウム系骨補強材練和物）を作製するために使用する練和液の液量としては、当該リン酸カルシウム系骨補強材含有物で推奨されている使用量の１倍（容量比）から３倍（容量比）の範囲が好ましく、１．２５倍（容量比）から２．５倍（容量比）の範囲がより好ましく、１．４倍（容量比）から約２倍（容量比）の範囲がさらに好ましい。例えば、バイオペックス−Ｒ粉末の３０重量％〜５０重量％の純金粒子を混合、練和する際にバイオペックス−Ｒの専用練和液を使用する場合は、バイオペックス−Ｒ粉末６ｇに対して専用練和液１．６ｍＬ（推奨使用量）〜４．８ｍＬ（約０．２７ｍＬ／ｇ〜０．８ｍＬ／ｇ）の範囲の量が好ましく、２．０ｍＬ〜４．０ｍＬ（約０．３３ｍＬ／ｇ〜約０．６７ｍＬ／ｇ）の範囲の量がより好ましく、約２．２ｍＬ〜３．２ｍＬ（約０．３７ｍＬ／ｇ〜約０．５３ｍＬ／ｇ）の範囲の量が特に好ましい。なお、これらの専用練和液の使用範囲（例えば推奨されている使用量の１倍（容量比）から３倍（容量比））で混合したバイオペックス−Ｒ練和物、もしくは金属粒子／バイオペックス−Ｒ練和物は、水分含量が８０重量％以上であるグルコマンナンを含むゲル状組成物（商品名：蒟蒻畑、株式会社マンナンライフ製）の中に注入した場合、３５〜３７℃で約１時間以内にいずれも固化することを確認しており、上記範囲の金属粒子を含むリン酸カルシウム系骨補強材含有物と練和液との混合物は、同様に体内でも容易に固化するものと考えられる。
リン酸カルシウム系骨補強材含有物と金属粒子とを練和した金属粒子含有リン酸カルシウム系骨補強材練和物を病変識別マーカーとして用いることにより、留置前はペースト状で、穿刺針で注入可能であり、体内注入後にリン酸カルシウム系骨補強材含有物と金属粒子とを含む病変識別マーカーを球状等の固体として組織内等の体内に留まらせることができる。
リン酸カルシウム系骨補強材含有物と金属粒子とを練和した金属粒子含有リン酸カルシウム系骨補強材練和物を病変識別マーカーとして使用する場合、金属粒子とリン酸カルシウム系骨補強材含有物（粉末）との重量比は、１：４（金属粒子濃度：２０重量％）以上の高濃度で金属粒子が含まれる練和物が好ましく、金属粒子とリン酸カルシウム系骨補強材含有物との重量比は、１：４（金属粒子濃度：２０重量％）から１：１（金属濃度：５０重量％）の範囲のいずれかの濃度で金属粒子が含まれる練和物がより好ましく、約１：２（金属粒子濃度：３０重量％）から１：１（金属濃度：５０重量％）の範囲のいずれかの濃度で金属粒子が含まれる練和物がさらに好ましい。
リン酸カルシウム系骨補強材含有物と金属粒子とを練和して得られる混合物である金属粒子含有リン酸カルシウム系骨補強材練和物の細い注射針からの排出性は、当該ペーストの粘度に関連する可能性がある。ちなみに、バイオペックス−Ｒの専用練和液を約１．５倍（容量比）使用した純金粒子／バイオペックス−Ｒ練和物を室温（約２０℃）で取り扱った場合、練和開始後１０〜３０分後には２２Ｇ前後の細い注射針から排出困難になるケースが多発していた。当該練和物を２０℃で保持して粘度の推移を調べると、練和開始後１０〜２０分後には粘度が１０７〜１０９ｍＰａ・ｓに達していた。用いた金属粒子／バイオペックス−Ｒ練和物の室温（約２０℃）で細い注射針から排出可能な時間帯における使用の際に粘度の測定値から判断して、例えば１８Ｇ（内径：約０．９ｍｍ、外径：約１．２０ｍｍ）〜２２Ｇ（内径：約０．４８ｍｍ、外径：約０．７０ｍｍ）の針で金属粒子含有リン酸カルシウム系骨補強材練和物を測定対象に注入するときに注入可能な粘度としては、１０４〜１０６ｍＰａ・ｓの範囲であり、好ましくは、１×１０４〜２×１０５ｍＰａ・ｓの範囲であり、より好ましくは、１．０×１０４〜１．５×１０５ｍＰａ・ｓの範囲である。当該練和物の粘度は、練和物の保持温度で粘度推移をコントロール可能であり、同一練和物でもより低温に保持することにより練和開始後の粘度を低く維持（約１０４ｍＰａ・ｓオーダー）し、排出可能時間を長くすることが可能である。なお、２０℃、練和開始約５分後の粘度が１０４ｍＰａ・ｓ未満である練和物は、練和物の硬化に時間がかかる場合や、均一な金属粒子の練和物が得難かったりする場合があり、一方、２０℃、練和開始約５分後の練和物の粘度が１０７〜１０８ｍＰａ・ｓを超えると、測定対象への注入の際にシリンジ等の閉塞が起こる場合がある。これらの点から、２０℃、練和開始約５分後の練和物の粘度が、１０４〜１０６ｍＰａ・ｓの範囲であることが好ましい。なお、粘度の測定方法は、実施例で示す通りであるが、実施例での粘度は、リン酸カルシウム系骨補強材含有物と金属粒子と練和液とを混合して２０℃で保持した場合の、２分後からの経時的な値である。
＜放射線治療用の病変識別マーカーキット＞
本発明の実施形態に係る放射線治療用の病変識別マーカーキットは、金属粒子およびリン酸カルシウム系骨補強材含有物を含む。また、本発明の実施形態に係る放射線治療用の病変識別マーカーキットは、粒子幅０．５ｍｍ以下の金属粒子、およびリン酸カルシウム系骨補強材含有物を含む。本実施形態に係る放射線治療用の病変識別マーカーキットは、必要に応じて、リン酸カルシウム系骨補強材含有物の練和物を作製するための、または、リン酸カルシウム系骨補強材含有物と金属粒子とを練和して金属粒子含有リン酸カルシウム系骨補強材練和物を作製するための練和液をさらに含んでもよい。
体内の任意の部位への病変識別マーカーである金属粒子の留置に際して、キットに含まれるリン酸カルシウム系骨補強材含有物と練和液とを混合して、リン酸カルシウム系骨補強材練和物を作製すればよい。または、体内の任意の部位への病変識別マーカーである金属粒子とリン酸カルシウム系骨補強材含有物との練和物（金属粒子含有リン酸カルシウム系骨補強材練和物）の留置に際して、キットに含まれる金属粒子とリン酸カルシウム系骨補強材含有物と練和液とを混合して、金属粒子含有リン酸カルシウム系骨補強材練和物を作製すればよい。または、キットに含まれる金属粒子とリン酸カルシウム系骨補強材含有物との混合物とキットに含まれる練和液を、体内の任意の部位へ留置する直前に混合して金属粒子含有リン酸カルシウム系骨補強材練和物を作製してもよい。
本発明の実施形態に係る放射線治療用の病変識別マーカーキットは、さらに、注入用シリンジ、穿刺針、カテーテル、ワイヤー、注入装置等を含んでもよい。
【実施例】
【００１０】
以下、実施例および比較例を挙げ、本発明をより具体的に詳細に説明するが、本発明は、以下の実施例に限定されるものではない。
＜実施例１＞
［純金粒子単独での留置］
（１）実験方法
三方コックに１０ｍＬ容シリンジを２個着装し、それを用いてバイオペックス−Ｒ（スタンダードタイプ）（ＨＯＹＡ社）のリン酸カルシウム系骨補強材含有物（α型リン酸三カルシウム（約７０重量％）、リン酸四カルシウム（約１８重量％）、リン酸水素カルシウム（約５重量％）、ハイドロキシアパタイト、およびリン酸マグネシウムを含有する粉末）６ｇと、専用練和液（コンドロイチン硫酸エステルナトリウム、コハク酸二ナトリウム無水物、亜硫酸水素ナトリウム、および注射用水を含有）約１．７ｍＬとを混合することによりリン酸カルシウム系骨補強材練和物を作製し、使用直前まで氷塊中で冷却した。プラスチック製留置針（１８ゲージ）の先端にコラーゲンスポンジを着装し、それぞれに表１に記載の重量の純金粒子（純度９９．９９重量％以上）を充填したものを準備した。それぞれに上記リン酸カルシウム系骨補強材練和物を適量充填した１ｍＬ容シリンジを着装し、上記リン酸カルシウム系骨補強材練和物で純金粒子塊を後押しする方法でブタ肝臓に注入した。ただし、特に粒子幅約０．７±０．１ｍｍの純金粒子では、注入途中で純金粒子が詰まり、注入できなかったものもあり、それらに関してはプラスチック留置針の純金粒子塊の部分をハサミで切り取り、ブタ肝臓に埋設した。それらの純金粒子マーカーの留置を行ったブタ肝臓をヒトＸ線ファントムに載せてＸ線透視装置（シーメンス社製、Ａｒｔｉｓ  ｚｅｅ）を用いてＸ線透視を行った。さらに、コンピューター断層画像（ＣＴ）装置（シーメンス社製、ＳＯＭＡＴＯＭ  Ｄｅｆｉｎｉｔｉｏｎ  ＡＳ）を用いてコンピューター断層画像（ＣＴ）を撮像し、純金粒子の留置重量の違いに由来するＸ線吸収値（ＣＴ値）を測定し、純金粒子塊の視認性を客観的に評価した。純金粒子塊の粒子径およびＸ線吸収値（ＣＴ値）は、ＤＩＣＯＭ（Ｄｉｇｉｔａｌ  Ｉｍａｇｉｎｇ  ａｎｄ  Ｃｏｍｍｎｉｃａｔｉｏｎ  ｉｎ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ）規格コンピューター断層画像（ＣＴ）データを用い、画像診断ワークステーション装置（ジェイマック社製、ＶＯＸＢＡＳＥ  ＩＩ）の長さ測定機能、Ｘ線吸収値（ＣＴ値）測定機能を用いて測定した。
図１にＸ線透視画像（Ａ，Ｂ，Ｃ）およびＣＴ画像（Ｄ）を示す。Ａは、粒子幅約０．４±０．１ｍｍの純金粒子約２０ｍｇのＸ線透視写真であり、Ｂは、粒子幅約０．４±０．１ｍｍの純金粒子約８０ｍｇのＸ線透視写真であり、Ｃは、粒子幅約０．７±０．１ｍｍの純金粒子約８０ｍｇのＸ線透視写真であり、Ｄは、粒子幅約０．４±０．１ｍｍの純金粒子約８０ｍｇのコンピューター断層画像（ＣＴ）である。
【表１】
2016137013.tif 000003
（２）結果
純金粒子（粒子幅約０．４±０．１ｍｍ）約２０ｍｇを注入した場合、純金粒子塊の径が小さく、金属密度も低いため、放射線治療用マーカーとして使用する際に視認できない可能性があった（図１Ａ）。純金粒子（粒子幅約０．４±０．１ｍｍ）約８０ｍｇを注入した場合、同約２０ｍｇを注入した場合と比較して、純金粒子塊の径が大きく金属密度も高いため、良好な視認性が確保できた（図１Ｂ）。また、純金粒子（粒子幅約０．７±０．１ｍｍ）約８０ｍｇを注入した場合も、良好な視認性が確保できた（図１Ｃ）。純金粒子（粒子幅約０．４±０．１ｍｍ）約８０ｍｇを注入した部分のＣＴ画像では、高いＸ線吸収値（２８６１±４１９ＨＵ）を有する小結節をブタ肝の内部に認めた（図１Ｄ）。
すなわち、本方法で十分な視認性を確保するためには、約２０ｍｇ以下の純金粒子では不十分な可能性があり、好ましくは約２０ｍｇ超、より好ましくは約４０ｍｇ以上の純金粒子、さらに好ましくは、約８０ｍｇ以上の純金粒子が必要であることが示された。また、本方法では、小さな純金粒子塊でも視認性に問題ないことが判った（図１Ｃ）。粒子幅約０．４±０．１ｍｍの純金粒子と粒子幅約０．７±０．１ｍｍの純金粒子とで、同重量の純金粒子を使用した場合、視認性にはほとんど差異がなかった。ただし、特に粒子幅が大きい純金粒子に関しては、デリバリーの方法や、粒子径を安定させる方法については、今後の検討課題である。
＜実施例２＞
［リン酸カルシウム系骨補強材含有物と純金粒子の練和物の留置（その１）］
（１）実験方法
三方コックに１０ｍＬ容シリンジを２個着装し、それぞれに表２に記載したようにリン酸カルシウム系骨補強材含有物（バイオペックス−Ｒ（スタンダードタイプ）、ＨＯＹＡ社）と粒子幅約０．４±０．１ｍｍの純金粒子（純度９９．９９重量％以上）を挿入し、さらに専用練和液（コンドロイチン硫酸エステルナトリウム、コハク酸二ナトリウム無水物、亜硫酸水素ナトリウム、および注射用水を含有）を表２に示した量を添加後、十分に混合した。混合終了後、１ｍＬ容のシリンジに金属粒子含有リン酸カルシウム系骨補強材練和物を移し、１８ゲージの針を着装した。それをブタ肝臓の任意の部位に約０．１〜０．２ｍＬ注入した。それらの純金粒子マーカーの留置を行ったブタ肝臓をヒトＸ線ファントムに載せてＸ線透視を行った。さらに、コンピューター断層画像（ＣＴ）を撮像し、リン酸カルシウム系骨補強材含有物と専用練和液との練和物（リン酸カルシウム系骨補強材練和物）単独のマーカーと、リン酸カルシウム系骨補強材含有物と純金粒子と専用練和液とを混合して得られた金属粒子含有リン酸カルシウム系骨補強材練和物のマーカーのＸ線吸収値（ＣＴ値）を測定し、純金粒子の混合による視認性の向上を客観的に評価した。
図２に、Ｘ線透視画像（Ａ，Ｂ）を示す。Ａは、リン酸カルシウム系骨補強材含有物と専用練和液との練和物（リン酸カルシウム系骨補強材練和物）単独で注入した場合、Ｂは、リン酸カルシウム系骨補強材含有物４ｇと純金粒子１ｇと専用練和液約１．２ｍＬとの混合物（金属粒子含有リン酸カルシウム系骨補強材練和物）を注入した場合である。図３に、リン酸カルシウム系骨補強材含有物と専用練和液との練和物（リン酸カルシウム系骨補強材練和物）単独と、リン酸カルシウム系骨補強材と純金粒子と専用練和液とを混合した場合（金属粒子含有リン酸カルシウム系骨補強材練和物）のＸ線吸収値の比較をそれぞれ示す。
【表２】
2016137013.tif 000004
（２）結果
リン酸カルシウム系骨補強材含有物と専用練和液との練和物単独で注入した場合のＸ線透視では、視認性が極めて低く、放射線治療用マーカーとしては使用できないことが判った（図２Ａ）。一方、リン酸カルシウム系骨補強材含有物４ｇと純金粒子（粒子幅約０．４±０．１ｍｍ）１ｇと専用練和液との混合物を注入した場合、Ｘ線視認性が向上することが示された（図２Ｂ）。リン酸カルシウム系骨補強材含有物４ｇと純金粒子１ｇと専用練和液との混合物を注入した場合、およびリン酸カルシウム系骨補強材含有物２ｇと純金粒子１ｇと専用練和液との混合物を注入した場合のＣＴによるＸ線吸収値では、リン酸カルシウム系骨補強材含有物と専用練和液との練和物単独の場合と比較し、視認性が明らかに向上し、放射線治療でのマーカーとして使用が可能であることが判った（図３）。
＜実施例３＞
［リン酸カルシウム系骨補強材含有物と純金粒子の練和物の留置（その２）］
（１）実験方法
二方コックに１０ｍＬ容シリンジを２個着装し、シリンジの一方に表３に記載したようにリン酸カルシウム系骨補強材含有物（バイオペックス−Ｒ（スタンダードタイプ）、ＨＯＹＡ社）と粒子幅約０．４±０．１ｍｍの純金粒子（純度９９．９９重量％以上）または粒子幅約０．７±０．１ｍｍの純金粒子（純度９９．９９重量％以上）を入れ、十分に混合した後、専用練和液を表３に示した量を添加し、再度十分に練和した。練和終了後、１ｍＬ容のシリンジに金属粒子含有リン酸カルシウム系骨補強材練和物を移し、１８ゲージの針を着装した。それをブタ肝臓の任意の部位に約０．２ｍＬ注入した。それらの純金粒子マーカーの留置を行ったブタ肝臓をヒトＸ線ファントムに載せてＸ線透視を行った。さらに、コンピューター断層画像（ＣＴ）を撮像し、リン酸カルシウム系骨補強材含有物と専用練和液との練和物単独（リン酸カルシウム系骨補強材練和物）のマーカーと、リン酸カルシウム系骨補強材含有物と純金粒子と専用練和液とを混合して得られた金属粒子含有リン酸カルシウム系骨補強材練和物のマーカーのＸ線吸収値（ＣＴ値）を測定し、純金粒子の混合による視認性の向上を客観的に評価した。
図４に、Ｘ線透視画像を示す。Ａは、リン酸カルシウム系骨補強材含有物２ｇと純金粒子１ｇと専用練和液との混合物を注入した場合、Ｂは、リン酸カルシウム系骨補強材含有物１．８ｇと純金粒子１．８ｇと専用練和液との混合物を注入した場合である。図５に、表３に示した各種比率でリン酸カルシウム系骨補強材含有物と純金粒子を混合した場合のＸ線吸収値の比較をそれぞれ示す。
（２）結果
全般的に、コントロール群（リン酸カルシウム系骨補強材単独群）と比較し、純金粒子混合群では優位に高いＸ線吸収量が認められた（図５）。ただし、リン酸カルシウム系骨補強材含有物４ｇと純金粒子１ｇの群（試験番号１０）では、視認性が優れないものもあった（図５）。一方、リン酸カルシウム系骨補強材含有物２ｇと純金粒子（粒子幅約０．４±０．１ｍｍ）１ｇの混合物を注入した場合（試験番号１１）、Ｘ線透視での視認性は非常に良好で、ほぼ均等に純金粒子が分布する結節が作製されており、放射線治療用マーカーとして使用可能であった（図４Ａ）。さらに、リン酸カルシウム系骨補強材含有物１．８ｇと純金粒子（粒子幅約０．４±０．１ｍｍ）１．８ｇと専用練和液との混合物を注入した場合（試験番号１２）は、試験番号１１と同様にＸ線透視での視認性は非常に良好で、ほぼ均等に純金粒子が分布する結節が作製されており、放射線治療用マーカーとして使用可能であることが示された（図４Ｂ）。すなわち、Ｘ線マーカーとしての用途としては、リン酸カルシウム系骨補強材含有物２ｇと純金粒子１ｇの比率で混和した場合が、より好ましいと言える。また、粒子幅約０．４±０．１ｍｍの純金粒子でも粒子幅約０．７±０．１ｍｍの純金粒子を用いた場合でもリン酸カルシウム系骨補強材含有物２ｇと純金粒子１ｇの比率で混和した場合、ほぼ同等のＸ線吸収が認められ（試験番号１１および１３）、粒子幅約０．４±０．１〜約０．７ｍｍ±０．１の純金粒子で十分な目的が達せられることが示された（表３，図４）。
【表３】
2016137013.tif 000005
（まとめ）
以上の結果より、以下のことがわかった。
・純金粒子担体単独で臓器内に留置する場合、Ｘ線のマーカーとしては、約２０ｍｇ以下では不十分な可能性があった。約２０ｍｇより多いのが好ましく、約４０ｍｇ以上がより好ましいが、約８０ｍｇ以上の純金粒子を使用するのがさらに好ましいことがわかった。
・バイオペックス−Ｒ（スタンダードタイプ、ＨＯＹＡ社）のようなリン酸カルシウム系骨補強材含有物と純金粒子との練和物を約０．２ｍＬ臓器内に留置してＸ線マーカーとして使用する場合、純金粒子とリン酸カルシウム系骨補強材含有物との重量比は、１：４以上の高濃度で純金粒子が含まれる練和物が好ましく、純金粒子とリン酸カルシウム系骨補強材含有物との重量比は、１：２以上の高濃度で純金粒子が含まれる練和物がより好ましいことがわかった。
・本実験で実施したような方法で、１８ゲージ径の穿刺針で臓器内へ留置可能であることが確認でき、この方法は、現行の２ｍｍφの金粒子を留置する方法（２．５５ｍｍ径のシースイントロデューサー（筒）を穿刺）と比較して、低侵襲性であった。
・特に、純金粒子とリン酸カルシウム系骨補強材含有物との練和物である金属粒子含有リン酸カルシウム系骨補強材練和物を使用する方法は、これらマーカーは注入のときにペースト状であるため、針だけではなくカテーテルからも注入可能である。針だけではなくカテーテルからも注入可能であるため、カテーテルを経由して消化管粘膜、膵臓、膀胱等へ留置することが可能である。
・ただし、純金粒子担体単独で臓器内に留置する場合には、それをデリバリーする方法に関して、更なる検討が求められる。
＜実施例４＞
［画像認識性能確保に必要な純金粒子／ＣＰＣ混合物中の純金濃度（重量％）と純金粒子量（ｍｇ）（その１）］
純金の微粒子を用いた純金粒子／ＣＰＣ混合物のＸ線マーカーとしての画像認識性能を調べた。
（１）実験方法
１）純金粒子／ＣＰＣ練和物の調製
バイオペックス−Ｒ（ロングタイプ）（ＨＯＹＡ  Ｔｅｃｈｎｏｓｕｒｇｉｃａｌ社；医療機器承認番号：２１３００ＢＺＺ００２７４０００）のリン酸カルシウム系骨補強材含有物（以下、ＣＰＣと称す。）約３ｇと、種々の重量の粉末金粒子（ニラコ社：粒径；１〜２μｍ、純度：９９．９９％（品番：ＡＵ−１７４０１５））、およびバイオペックス−Ｒの専用練和液約１ｍＬとを付属のすり鉢にて混合することにより、ペースト状のリン酸カルシウム系骨補強材練和物を作製した。調製した練和物は、表４に示すように、用いた純金粒子重量（ｇ）とバイオペックス−Ｒの粉末重量（ｇ）との比率の異なる４種の練和物［純金粒子重量（ｇ）：バイオペックス−Ｒ粉末重量（ｇ）＝０：１（純金粒子濃度：０重量％）、１：４（純金粒子濃度：２０重量％）、１：２（純金粒子濃度：３３重量％）、もしくは、１：１（純金粒子濃度：５０重量％）］である。それらをマイクロピペットで、ほぼ一定容量（１０、３０、または１００μＬ）をｎ＝３〜４で９６穴マイクロプレート（丸底）に注入した。それら金粒子／ＣＰＣ練和物の各注入サンプル当たりの純金粒子の重量を算出するために、金粒子を練和したペーストについては、全ての注入サンプル毎に注入重量（ｍｇ）を計測し、当該注入箇所の純金粒子重量（ｍｇ）を算出した（表５参照）。なお、上記練和物調製に使用した専用練和液の重量（ｇ）は、使用した液量（ｍＬ）に本実験時に求めた当該液の比重（１．１０８５）を乗じて算出した（表４参照）。上記のようにして調製したサンプルを、以下の画像認識性能試験に供した。
【表４】
2016137013.tif 000006
【表５】
2016137013.tif 000007
なお、バイオペックス−Ｒの粉末組成は、α型リン酸三カルシウム（７５重量％）、リン酸四カルシウム（１８重量％）、リン酸水素カルシウム（５重量％）、水酸アパタイト（２重量％）、およびリン酸マグネシウムを含有すること、また、その専用練和液は、コハク酸二ナトリウム無水物（１２重量％）、コンドロイチン硫酸エステルナトリウム（５重量％）、亜硫酸水素ナトリウム、および、注射用水（８３重量％）を含有することが報告されている（Ｊ．Ｓｏｃ．Ｉｎｏｒｇａｎｉｃ  Ｍａｔ．Ｊａｐ．，Ｖｏｌ．１２，ｐ．２６２（２００５））。
２）画像認識性能の評価
上記の純金粒子／ＣＰＣ混合物を注入、固化させた９６穴プレートをアクリルファントムに載せ、Ｘ線透視装置（Ｘ線発生装置：島津製作所社製、ＵＤ１５０Ｂ−４０、Ｘ線画像取得用フラットパネルディテクタ：バリアンメディカルシステムズ社製、ＰａｘＳｃａｎ３０３０）によりＸ線透視画像を取得した。９６穴プレートの各穴に充填した試料の純金粒子の重量および濃度を表６に示した。陽性コントロールとして、現在臨床で用いられている直径１．５ｍｍおよび２．０ｍｍの純金球形マーカー（ｉＧｏｌｄ）を留置した。アクリル板の厚さを１ｃｍから２５ｃｍまで段階的に変化させ、Ｘ線発生装置の管電圧を１１０ｋＶ、曝射時間を３ｍｓｅｃで固定とし、管電流は状況に応じて５０ｍＡ，８０ｍＡ，１６０ｍＡから選択し、各条件においてＸ線透視画像を１００枚程度取得した。各条件で得られた純金粒子マーカーを含む９６穴プレートのＸ線透視画像から、マーカーの視認性を客観的に評価した。また、各条件において、複数の画像のうちの１枚から評価対象とする純金粒子マーカーの画像を切り出してテンプレート画像を作成し、その他の画像に対して、あらかじめ作成したテンプレート画像との正規化相互相関によるテンプレートパターンマッチングを実施し、約１００枚の画像に対するテンプレートパターンマッチングから得られる相関係数の平均値が０．３を超えている場合は画像認識可（○）、それ以下の場合には画像認識不可（×）と判定した。画像の階調処理とパターンマッチングには、画像処理ライブラリ（Ｍａｔｒｏｘ社製、Ｍａｔｒｏｘ  Ｉｍａｇｉｎｇ  Ｌｉｂｒａｒｙ  ９）を利用した。
（２）結果
アクリル板厚さ１０ｃｍの場合のＸ線透視画像を図６に示した。純金粒子（粒径：１−２μｍ）とＣＰＣの重量での混合比が１：２（純金濃度：３３重量％）以上で、ペースト注入量３０〜１００μＬの場合、陽性コントロールの直径２ｍｍまたは直径１．５ｍｍの純金球形マーカーと同等もしくはそれ以上の視認性が認められた。また、その他の評価条件（アクリル厚さ、Ｘ線管電流）においても、その傾向は同様であった。言い換えると、純金粒子量が約２０ｍｇ以上の場合は、陽性コントロールの直径２ｍｍまたは直径１．５ｍｍの純金球形マーカーと同等もしくはそれ以上の視認性が認められた。また、テンプレートパターンマッチングによる評価においても、純金粒子量が約２０ｍｇ以上の場合は、直径２ｍｍまたは直径１．５ｍｍの純金球形マーカーと同等もしくはそれ以上の画像認識性能を示した（表６参照）。
また、純金粒子含量を５．５ｍｇ、５．２ｍｇ、および５．７ｍｇ含む練和物（試験練和物の番号：Ｐ０３）においては、アクリル板の厚さが１５ｃｍ以下であれば、Ｘ線管電流が５０ｍＡおよび８０ｍＡのいずれの場合も画像認識性能を有することが示された（表６参照）。また、データの詳細を特に示さないが、試験練和物の番号がＰ０２やＰ０４の場合も同様に、純金粒子含量が約５ｍｇ以上で２０ｍｇ未満の場合は、アクリル板の厚さが１５ｃｍ以下であれば、Ｘ線画像認識性能を有することがわかった。
【表６】
2016137013.tif 000008
＜実施例５＞
［純金粒子／ＣＰＣ混合物の画像認識による追跡性能検証］
（１）実験方法
実施例４にて調製した純金粒子／ＣＰＣ混合物を含む９６穴プレートを１次元駆動制御が可能な可動テーブルの上に載せ、胸部ファントム（京都科学社製、ＬＵＮＧＭＡＮ）の上で呼吸運動を模擬して動作させ、Ｘ線透視装置（Ｘ線発生装置：島津製作所社製、ＵＤ１５０Ｂ−４０、Ｘ線画像取得用フラットパネルディテクタ：バリアンメディカルシステムズ社製、ＰａｘＳｃａｎ３０３０）によりＸ線透視画像を取得した。これにより、呼吸などにより肺の中で動く純金粒子マーカーの状況を再現した。Ｘ線発生装置の管電圧を１１０ｋＶ、曝射時間を３ｍｓｅｃ、撮像の繰り返し１５回／秒、管電流を８０ｍＡとし、Ｘ線透視画像を４００枚程度取得した。複数の画像のうちの１枚から評価対象とする純金粒子マーカーの画像を切り出してテンプレート画像を作成し、取得した約４００枚の一連の画像に対して、あらかじめ作成したテンプレート画像との正規化相互相関によるテンプレートパターンマッチングを実施し、画像内で動く純金粒子マーカーを画像認識により追跡できるかどうかを確認した。画像の階調処理とパターンマッチングには、画像処理ライブラリ（Ｍａｔｒｏｘ社製、Ｍａｔｒｏｘ  Ｉｍａｇｉｎｇ  Ｌｉｂｒａｒｙ  ９）を利用した。
（２）結果
Ｘ線透視画像の一例を図７に示した。実際の人体のＸ線透視のように不均質な画像においても、純金粒子（粒径：１−２μｍ）とＣＰＣの重量での混合比が１：２（純金濃度：３３重量％）以上で、ペースト注入量３０〜１００μＬの場合、陽性コントロールの直径２ｍｍまたは直径１．５ｍｍの純金球形マーカーと同等もしくはそれ以上の視認性が認められた。また、動的な追跡性能検証の結果、純金が約２０ｍｇ以上含まれる純金粒子マーカーは、陽性コントロールの直径２ｍｍまたは直径１．５ｍｍの球状純金マーカーと同様に、動きに追従して追跡できるだけの追跡性能を有することを示した。
＜実施例６＞
［画像認識性能確保に必要な純金粒子／ＣＰＣ混合物中の純金濃度（重量％）と純金粒子量（ｍｇ）（その２）］
金粒子濃度が３０重量％、３３重量％、または４０重量％間で画像認識性能に有意な差があるか否かを調べた。また、金粒子の粒子幅の差異が画像認識性能に有意な差が有るか否かを調べた。
（１）実験方法
１）金粒子濃度の異なる金粒子／ＣＰＣ練和物の調製
バイオペックス−Ｒ（ロングタイプ）（ＨＯＹＡ  Ｔｅｃｈｎｏｓｕｒｇｉｃａｌ社）の粉末約３ｇと、ニラコ社の純金粒子（粒径：１〜２μｍ）およびバイオペックス−Ｒの専用練和液約１ｍＬとを付属のすり鉢にて混合することにより、表７に示したように純金粒子含有比率の異なる３種の練和物（金粒子濃度：３０重量％、３３重量％、もしくは、４０重量％）を調製した。それらをマイクロピペットで、ほぼ一定容量（３０μＬ、または、１００μＬ）をｎ＝３で９６穴マイクロプレート（丸底）に注入するとともに、実施例４と同様に当該注入箇所の金粒子含量（ｍｇ）を算出した（表８参照）。
【表７】
2016137013.tif 000009
【表８】
2016137013.tif 000010
２）金粒子幅の異なる金粒子／ＣＰＣ練和物の調製
バイオペックス−Ｒ（ロングタイプ）（ＨＯＹＡ  Ｔｅｃｈｎｏｓｕｒｇｉｃａｌ社）の粉末約２ｇと４種の粒子幅の異なる純金粒子（粒子幅３２μｍ以下、３３−５３μｍ、５４−７５μｍ、および７６−１５０μｍ）各約１ｇおよびバイオペックス−Ｒの専用練和液０．８ｍＬとを付属のすり鉢にて混合することにより、表９に示したような４種のペースト状の練和物を調製した。それらをマイクロピペットで、ほぼ一定容量（３０μＬ、または、１００μＬ）をｎ＝３で９６穴マイクロプレート（丸底）に注入するとともに、実施例４と同様に当該注入箇所の金粒子含量を算出した（表１０参照）。なお、用いた３２μｍ以下、３３−５３μｍ、５４−７５μｍ、および７６−１５０μｍの純金粒子は、いずれも純度９９．９９重量％以上であり、加熱溶融させた純金をアトマイザーで噴霧させ得られた純金の微粒子を篩を用いて分画したものである。
【表９】
2016137013.tif 000011
【表１０】
2016137013.tif 000012
３）画像認識性能の評価
上記の純金粒子／ＣＰＣ混合物を含む９６穴プレートをアクリルファントムに載せ、Ｘ線透視装置（Ｘ線発生装置：島津製作所社製、ＵＤ１５０Ｂ−４０、Ｘ線画像取得用フラットパネルディテクタ：バリアンメディカルシステムズ社製、ＰａｘＳｃａｎ３０３０）によりＸ線透視画像を取得した。９６穴プレートの各穴に充填した試料の純金粒子（純度９９．９９重量％以上）の重量および濃度を表８および表１０に示した。陽性コントロールとして、現在臨床で用いられている直径１．５ｍｍおよび２．０ｍｍの純金球形マーカー（ｉＧｏｌｄ）を留置した。アクリル板の厚さを１ｃｍから２５ｃｍまで段階的に変化させ、Ｘ線発生装置の管電圧を１１０ｋＶ、曝射時間を３ｍｓｅｃで固定とし、管電流は状況に応じて５０ｍＡ，８０ｍＡ，１６０ｍＡから選択し、各条件においてＸ線透視画像を１００枚程度取得した。各条件において、複数の画像のうちの１枚から評価対象とする純金粒子マーカーの画像を切り出してテンプレート画像を作成し、その他の画像に対して、あらかじめ作成したテンプレート画像との正規化相互相関によるテンプレートパターンマッチングを実施し、約１００枚の画像に対するテンプレートパターンマッチングから得られる相関係数の平均値が０．３を超えている場合は画像認識可（○）、それ以下の場合には画像認識不可（×）と判定した。画像の階調処理とパターンマッチングには、画像処理ライブラリ（Ｍａｔｒｏｘ社製、Ｍａｔｒｏｘ  Ｉｍａｇｉｎｇ  Ｌｉｂｒａｒｙ  ９）を利用した。
（２）結果
ニラコ社製（粒径：１〜２μｍ）の純金粒子を使用した純金濃度３０重量％、３３重量％、４０重量％の混合物に対する画像認識の可／不可の評価の結果（それぞれ表１１，１２，１３参照）、純金濃度３０−４０重量％で、有意な差は認められなかった。粒子幅３２μｍ以下、３３−５３μｍ、５４−７５μｍ、または７６−１５０μｍの純金粒子の混合物に対する画像認識の可／不可の評価の結果（それぞれ表１４，１５，１６，１７参照）、純金の粒子幅（１５０μｍ以下）による有意差は見られなかった。また、ニラコ社製（粒径：１〜２μｍ）および、粒子幅３２μｍ以下、３３−５３μｍ、５４−７５μｍ、または７６−１５０μｍのいずれの純金粒子においても、陽性コントロールの直径２ｍｍまたは直径１．５ｍｍの純金球形マーカーと同等もしくはそれ以上の画像認識性能が認められており、金粒子の粒径による画像認識性能の有意差は見られなかった。なお、表１１〜表１７中の球形マーカーは、直径１．５ｍｍの純金球形マーカーの画像認識性能を示している。
【表１１】
2016137013.tif 000013
【表１２】
2016137013.tif 000014
【表１３】
2016137013.tif 000015
【表１４】
2016137013.tif 000016
【表１５】
2016137013.tif 000017
【表１６】
2016137013.tif 000018
【表１７】
2016137013.tif 000019
（３）まとめ
以上の結果より、以下のことがわかった。
・ニラコ社製金粒子（粒径：１〜２μｍ）サンプルでの評価の結果、金粒子の濃度（３０重量％−４０重量％）による画像認識性能の大きな変化は見られなかった。
・金粒子の粒子幅（３２μｍ以下、３３−５３μｍ、５４−７４μｍ、および７５−１５０μｍ）による画像認識性能の大きな変化は見られなかった。
・各サンプル群において、金の含有量が多いほうが、少ないものと比較して、高い画像認識性能を示した。
・ただし、金の含有量が少ないサンプルにおいても、金の含有量が多いサンプルおよび陽性コントロール用の球形金マーカーと同等以上の画像認識性能を示すものがあった。
・これは、マーカーの形状によりＸ線の透過長が大きくなり、そのためＸ線の吸収が大きくなった結果、マーカー部と周辺部の画像のコントラストが高くなったことが１つの原因と考えられる。
・別途、Ｘ線画像のピクセル値からＸ線吸収の簡易評価を行った結果、球形金マーカーと同等の画像認識性能を示すものは、球形金マーカーと同等のＸ線吸収の程度を示していた。
・以上の結果、金濃度３０−５０重量％の純金／ＣＰＣペーストを、金含量にして約２０ｍｇ以上注入し、好ましくは球形に近い塊とすれば、Ｘ線マーカーとして現在市販されているｉＧｏｌｄと同等の性能を有すると考えられる。
＜実施例７＞
［異なるＣＰＣを用いた金粒子／ＣＰＣ練和物をブタ肝臓へ注入した場合の視認性（その１）］
（１）試料の調製法
バイオペックス−Ｒのエクセレントタイプまたはロングタイプの粉末各約１ｇと、金粒子（ニラコ社製（粒径：１〜２μｍ）、または、粒子幅：７６−１５０μｍ）各約０．５ｇを付属のすり鉢にて混合し、バイオペックス−Ｒの専用練和液約０．４−０．６ｍＬとを混合することによって、リン酸カルシウム系骨補強材練和物を３種作製した（表１８参照）。これら練和物を適量充填した１ｍＬ容シリンジを着装し、１８Ｇ金属針を用いてブタ肝臓に注入した。それらの金粒子マーカーの留置を行ったブタ肝臓をヒトＸ線ファントムに載せてＸ線透視装置（シーメンス社製、Ａｒｔｉｓ  Ｚｅｅ  Ｃｅｌｌｉｎｇ）を用いてＸ線透視を行った。さらに、コンピューター断層画像（ＣＴ）装置（シーメンス社製、ＳＯＭＡＴＯＭ  Ｄｅｆｉｎｉｔｉｏｎ  ＡＳ６４）を用いてコンピューター断層画像（ＣＴ）を撮像し、純金粒子の留置重量の違いに由来するＸ線吸収値（ＣＴ値）を測定し、純金粒子／ＣＰＣ混合物塊の視認性を評価した。Ｘ線吸収値（ＣＴ値）は、ＤＩＣＯＭ（Ｄｉｇｉｔａｌ  Ｉｍａｇｉｎｇ  ａｎｄ  Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎ  ｉｎ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ）規格コンピューター断層画像（ＣＴ）データを用いて測定した。
【表１８】
2016137013.tif 000020
（２）結果
結果を表１９に示す。
【表１９】
2016137013.tif 000021
＜実施例８＞
［異なるＣＰＣを用いた純金粒子／ＣＰＣ練和物をブタ肝臓へ注入した場合の視認性（その２）］
（１）試料の調製法
バイオペックス−Ｒ（ロングタイプ）の粉末、またはセラペーストの粉末（組成：リン酸四カルシウム、無水リン酸水素カルシウム）各約１ｇと、純金粒子（粒子幅：３３−５３μｍ）約０．５ｇを付属のすり鉢にて混合し、それぞれの専用練和液と混合することにより純金粒子／ＣＰＣ練和物を２種作製した（表２０参照）。なお、専用練和液としては、ＣＰＣ粉末としてバイオペックス−Ｒを使用した場合は、バイオペックス−Ｒの専用練和液を０．４ｍＬ、ＣＰＣ粉末としてセラペースト（日本特殊陶業株式会社；医療機器承認番号：２１７００ＢＺＺ００２３１０００）を使用した場合は、セラペーストの硬化液（組成：デキストラン硫酸エステルナトリウム  イオウ５、注射用水）０．３ｍＬと粘度調整水（組成：注射用水）０．２ｍＬを使用した。調製したこれら練和物を適量充填した１ｍＬ容シリンジに２１Ｇ金属針を着装し、ブタ肝臓に注入した。それらの金粒子マーカーの留置を行ったブタ肝臓をヒトＸ線ファントムに載せてＸ線透視装置（シーメンス社製、Ａｒｔｉｓ  Ｚｅｅ  Ｃｅｌｌｉｎｇ）を用いてＸ線透視を行った（図８参照）。さらに、コンピューター断層画像（ＣＴ）装置（シーメンス社製、ＳＯＭＡＴＯＭ  Ｄｅｆｉｎｉｔｉｏｎ  ＡＳ６４）を用いてコンピューター断層画像（ＣＴ）を撮像しＸ線吸収値（ＣＴ値）を測定、純金粒子／ＣＰＣ混合物塊の視認性を評価した。Ｘ線吸収値（ＣＴ値）は、ＤＩＣＯＭ（Ｄｉｇｉｔａｌ  Ｉｍａｇｉｎｇ  ａｎｄ  Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎ  ｉｎ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ）規格コンピューター断層画像（ＣＴ）データを用いて、画像診断ワークステーション装置（ＯＳＩＲＩＸ）の長さ測定機能、Ｘ線吸収値（ＣＴ値）測定機能を用いて測定した。
【表２０】
2016137013.tif 000022
（２）結果
結果を表２１および図８に示す。
【表２１】
2016137013.tif 000023
（３）まとめ
・約４０ｍｇ以上の純金粒子を含む純金粒子／ＣＰＣ練和物のマーカーは、リン酸カルシウム系骨補強材（ＣＰＣ）の種類によらず、もしくは、純金粒子の粒度によらず、ブタ肝臓内においても同様なＸ線視認性を示した。
＜実施例９＞
［純金粒子／ＣＰＣ練和物をブタ肝臓へ少量注入した場合の視認性］
（１）試料の調製法
バイオペックス−Ｒ（ロングタイプ）の粉末約３ｇと、純金粒子（粒子幅：３３−５３μｍ）約１．５ｇを付属のすり鉢にて混合後、バイオペックス−Ｒの専用練和液１．２ｍＬと練和することにより純金粒子／ＣＰＣ練和物を調製した（表２２参照）。調製したこれら練和物を適量充填した１ｍＬ容シリンジに２１Ｇ金属針を着装しブタ肝臓に注入した。それらの金粒子マーカーの留置を行ったブタ肝臓を実施例７と同様にヒトＸ線ファントムに載せてＸ線透視装置（シーメンス社製、Ａｒｔｉｓ  Ｚｅｅ  Ｃｅｌｌｉｎｇ）を用いてＸ線透視を行った（図９参照）。さらに、コンピューター断層画像装置（シーメンス社製、ＳＯＭＡＴＯＭ  Ｄｅｆｉｎｉｔｉｏｎ  ＡＳ６４）を用いてコンピューター断層画像を撮像、Ｘ線吸収値（ＣＴ値）を測定、視認性を評価した。
【表２２】
2016137013.tif 000024
（２）結果
結果を表２３および図９に示す。
【表２３】
2016137013.tif 000025
（３）まとめ
・純金粒子を４．４ｍｇ以上含む純金粒子／ＣＰＣマーカーは、約３０００ＨＵのＣＴ値を示した。
・純金粒子を約２０ｍｇ以上含む純金粒子／ＣＰＣマーカーは、ヒトＸ線ファントム上のいずれの部位においても十分な視認性が認められた。また、Ｘ線の透視を妨げる骨等がない部位においては、純金粒子を４．４ｍｇ以上含む純金粒子／ＣＰＣマーカーにおいても視認性が認められた（図９）。
・実施例１のように純金粒子を単独で留置した場合では、約２０ｍｇの純金粒子を留置した場合でも視認性が十分でなかったが、純金粒子をＣＰＣとの練和物を留置する方法では、約５ｍｇ以上の純金粒子を含有する純金粒子／ＣＰＣマーカーは、十分な視認性を有することが確認された。
・なお、注入物Ｎｏ．５は、純金粒子／ＣＰＣ練和物が脈管内に注入、拡散したために、視認性が低下したと考えられる。
＜実施例１０＞
［細い注射針からの排出性試験］
暫定的に、練和開始から注射針から目的部位への注入時間を約５分以内と想定して、室温（約２０℃）で練和開始から約５分以内の細い注射針からの排出性を調べた。
（１）試料の調製法
バイオペックス−Ｒ（ロングタイプ）の粉末約２ｇと純金粒子（粒子幅：３２μｍ以下、３３−５３μｍ、５４−７５μｍ、または７６−１５０μｍ）各約１ｇを付属のすり鉢にて混合し、バイオペックスの専用練和液と混合することにより、もしくは、セラペーストの粉末約１ｇ、純金粒子（粒子幅：３２μｍ以下）約０．５ｇ、およびセラペーストの硬化液等を混合することにより純金粒子／ＣＰＣ練和物を５種作製した（表２４参照）。なお、専用練和液としては、ＣＰＣ粉末としてバイオペックス−Ｒを使用した場合は、バイオペックス−Ｒの専用練和液を０．８ｍＬ、ＣＰＣ粉末としてセラペーストを使用した場合は、セラペーストの硬化液０．３ｍＬと粘度調整水（注射用水）０．２ｍＬを使用した。調製したこれら練和物を適量充填した１ｍＬ容シリンジに２２Ｇ金属針（針長：約４ｃｍ）を着装し、室温（約２０℃）で練和後約５分以内での当該注射針からの排出性を調査した。
【表２４】
2016137013.tif 000026
（２）結果
・上記の５種のペースト状練和物は、いずれも問題なく２２Ｇ注射針から排出された。しかし、２５Ｇでは排出不可能であった。バイオペックス−Ｒのロングタイプと３３重量％の比率で混合された１５０μｍ以下の粒子幅の純金粒子とを専用練和液でペースト状にした練和物は、２２Ｇの注射針から排出可能と言える。
・データの詳細を特に示さないが、ニラコ製の金粒子（粒径：１〜２μｍ、純品番：ＡＵ−１７４０１５）を、上記と同様にバイオペックス−Ｒ（ロングタイプ）との練和物を調製した場合、２２Ｇ注射針からの排出が出来なかった。ただし、当該金粒子をメノー製乳鉢で再粉砕後、同様に練和物を調製し、２２Ｇ注射針からの排出性を調べると、問題なく排出された。本実施例で使用したニラコ社製品（品番：ＡＵ−１７４０１５；粒径１−２μｍ）の乳鉢粉砕品の粒度分布をレーザー回折・散乱法を用いて測定したところ、粒子径約１μｍ前後の金粒子も含まれていたが、最小粒径の微粒子としては約０．１μｍの粒子が認められた。また、当該乳鉢粉砕品においては、約１０〜２００μｍの範囲にも約５０％もの金粒子が存在していた。これらのことはニラコ社製の微小な金属粒子の場合、凝集塊が発生し易いことを示唆している。このような金属の微粒子は、取り扱いが難しく、少なくても数μｍ以上（例えば、１μｍ以上）の金属粒子が好ましいと考えられる。
＜実施例１１＞
［純金粒子／ＣＰＣ練和物の粘度］
（１）試験方法
実施例１０で細い注射針からの排出性が確認された４種の純金粒子（粒子幅：３２μｍ以下、３３−５３μｍ、５４−７５μｍ、または７６−１５０μｍ）／ＣＰＣ練和物について、それらの練和物の約０．６ｍＬを用いて２０℃での練和物の粘度を経時的に別途測定した。表２５に記載の粉液比で３０秒間練和（２４℃）後、約０．６ｍＬ分取し、練和開始から２分経過後に粘度の測定を開始した（図１０、１１、１２および１３のグラフ中の０ｍｉｎは練和開始から２分経過後を示す）。測定中、レオメータの試料チャンバー温度は２０℃に保持しながら粘度の測定を行った。試験数は試験条件ごと２検体とした。なお、粘度の測定には、Ｈａａｋｅ社製、ＲＳ−６００レオストレスを使用した。
【表２５】
2016137013.tif 000027
（２）結果
・表２４に示す比率で純金粒子、バイオペックス−Ｒ（ロングタイプ）の粉末および専用練和液を混合、調製したペーストの２０℃での粘度推移を、図１０、図１１、図１２および図１３に示す。いずれの場合も練和開始約５分後の粘度は、約６×１０４〜１２×１０４ｍＰａ・ｓであったが、練和開始後、約１０分後（２０℃）では、いずれも約１０７〜１０９ｍＰａ・ｓに上昇していた。
・２２Ｇの注射針からの排出困難が発生した事例（専用練和液の量が推薦容量の約１．２６倍）の場合は、練和開始後５分の時点で、既に１×１０８ｍＰａ・ｓを超す粘度であった。
・参考までに、金粒子を含まないバイオペックス−Ｒ（ロングタイプ）と専用練和液を上記の表と同様の容量比（バイオペックス−Ｒ：６ｇ、専用練和液：２．４ｍＬ）で練和したものも、２０℃で保持した場合、練和開始５分後、および１０−１２分後の粘度は、それぞれ約８×１０４ｍＰａ・ｓ、および１０８〜１０９ｍＰａ・ｓと、金粒子を含む場合（図１０、１１、１２および１３）と同様な粘度推移を示した。一方、当該練和物を５℃で保持した場合は、練和開始２分後から約１２分後までの粘度は、約３〜５×１０４ｍＰａ・ｓの間で大幅な変化はなく、その後、急激な上昇が認められた（図１４）。すなわち、バイオペックス−Ｒ練和物をより低温で保持した場合、練和物の粘度を低い状態で維持できる時間を長くすることができる。
・また、詳細データは特に示さないが、練和水を推薦容量の約１倍（容量比）の場合や約２倍（容量比）の場合においても、金粒子の有無による粘度推移の差異は、ほとんど認められなかった。
・さらに、金粒子を含まないバイオペックス−Ｒ（ロングタイプ）と専用練和液の練和物で、専用練和液の使用量が推薦容量の２．５倍（容量比）の場合の練和開始約５分後の２０℃での粘度は、約１×１０４ｍＰａ・ｓであった。
【図１】
2016137013.tif 000028
【図２】
2016137013.tif 000029
【図３】
2016137013.tif 000030
【図４】
2016137013.tif 000031
【図５】
2016137013.tif 000032
【図６】
2016137013.tif 000033
【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【手続補正書】
【提出日】平成28年12月26日(2016.12.26)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（削除）
【請求項２】
リン酸カルシウム系骨補強材含有物と粒子幅０．５ｍｍ以下の金属粒子との混合物、または、リン酸カルシウム系骨補強材含有物と粒子幅０．５ｍｍ以下の金属粒子と練和液との混合物であって、前記金属粒子と前記リン酸カルシウム系骨補強材含有物との重量比が１：４以上である混合物を含むことを特徴とする放射線治療用の病変識別マーカー。
【請求項３】
請求項２に記載の放射線治療用の病変識別マーカーであって、
前記混合物における前記金属粒子と前記リン酸カルシウム系骨補強材含有物との重量比が約１：２以上であることを特徴とする放射線治療用の病変識別マーカー。
【請求項４】
請求項２または３に記載の放射線治療用の病変識別マーカーであって、
前記金属粒子を約５ｍｇ以上含むことを特徴とする放射線治療用の病変識別マーカー。
【請求項５】
請求項２〜４のいずれか１項に記載の放射線治療用の病変識別マーカーであって、
前記金属粒子が、金粒子であることを特徴とする放射線治療用の病変識別マーカー。
【請求項６】
請求項５に記載の放射線治療用の病変識別マーカーであって、
前記金粒子が、純度９９重量％以上の純金粒子であることを特徴とする放射線治療用の病変識別マーカー。
【請求項７】
請求項２〜６のいずれか１項に記載の放射線治療用の病変識別マーカーであって、
前記リン酸カルシウム系骨補強材含有物と前記金属粒子との混合物、または、前記リン酸カルシウム系骨補強材含有物と金属粒子と練和液との混合物の２０℃における粘度が、１０４〜１０６ｍＰａ・ｓの範囲であることを特徴とする放射線治療用の病変識別マーカー。
【請求項８】
請求項２〜７のいずれか１項に記載の放射線治療用の病変識別マーカーであって、
前記リン酸カルシウム系骨補強材含有物は、α型リン酸三カルシウム、リン酸四カルシウム、リン酸水素カルシウム（無水物または水和物）、およびβ型リン酸三カルシウムのうちの少なくとも１つを含むことを特徴とする放射線治療用の病変識別マーカー。
【請求項９】
請求項２〜８のいずれか１項に記載の放射線治療用の病変識別マーカーであって、
前記練和液は、コンドロイチン硫酸エステルナトリウム、コハク酸二ナトリウム無水物、亜硫酸水素ナトリウム、および水を含む練和液、ならびに、デキストラン硫酸エステルナトリウム  イオウ５、および水を含む練和液のうちの少なくとも１つであることを特徴とする放射線治療用の病変識別マーカー。
【請求項１０】
（削除）
【請求項１１】
粒子幅０．５ｍｍ以下の金属粒子、およびリン酸カルシウム系骨補強材含有物、または、粒子幅０．５ｍｍ以下の金属粒子、リン酸カルシウム系骨補強材含有物および練和液を含むことを特徴とする放射線治療用の病変識別マーカーキット。
【請求項１２】
請求項１１に記載の放射線治療用の病変識別マーカーキットであって、
前記金属粒子が、金粒子であることを特徴とする放射線治療用の病変識別マーカーキット。
【請求項１３】
請求項１２に記載の放射線治療用の病変識別マーカーキットであって、
前記金粒子が、純度９９重量％以上の純金粒子であることを特徴とする放射線治療用の病変識別マーカーキット。
【請求項１４】
請求項１１〜１３のいずれか１項に記載の放射線治療用の病変識別マーカーキットであって、
前記リン酸カルシウム系骨補強材含有物は、α型リン酸三カルシウム、リン酸四カルシウム、リン酸水素カルシウム（無水物または水和物）、およびβ型リン酸三カルシウムのうちの少なくとも１つを含むことを特徴とする放射線治療用の病変識別マーカーキット。
【請求項１５】
請求項１１〜１４のいずれか１項に記載の放射線治療用の病変識別マーカーキットであって、
前記練和液は、コンドロイチン硫酸エステルナトリウム、コハク酸二ナトリウム無水物、亜硫酸水素ナトリウム、および水を含む練和液、ならびに、デキストラン硫酸エステルナトリウム  イオウ５、および水を含む練和液のうちの少なくとも１つであることを特徴とする放射線治療用の病変識別マーカーキット。
【請求項１６】
請求項２〜９のいずれか１項に記載の放射線治療用の病変識別マーカーであって、
前記混合物において使用される前記リン酸カルシウム系骨補強材含有物の重量に対する前記練和液の液量（容量）が約０．３３ｍＬ／ｇ〜約０．６７ｍＬ／ｇの範囲であることを特徴とする放射線治療用の病変識別マーカー。
【国際調査報告】
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