【手続補正書】
【提出日】平成24年2月8日(2012.2.8)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００４】
（２）薬浴法
薬浴法は、過酸化ピロリン酸ナトリウム、過炭酸ナトリウム、過酸化リン酸二ナトリウム、ホルマリン、氷酢酸等の薬剤の作用を利用して、寄生虫を魚体より駆除しようとするものである。しかしながら、薬剤は、周辺海水を汚染するという問題がある。薬浴法としては、従来、次のような方法が行われている。
特許文献１には、フェルラ酸と乳酸により、ハダムシ等の寄生虫に感染した魚から寄生虫を駆虫しうることが開示されている。
特許文献２には、カカオ豆組成物を有効成分とする寄生虫抑制剤を投与することにより、海産養殖魚の寄生虫症を抑制及び予防する方法が開示されている。
特許文献３には、δ−アミノレブリン酸を飼料又は水槽に添加し、病原性微生物及び寄生虫に感染した魚類を治療する方法が開示されている。
特許文献４には、トラフグに寄生するエラムシの駆除剤及び駆除方法として、ベンゾイミダゾール系薬剤を有効成分として用いることが開示されている。
特許文献５には、魚類のスクーチカ症を、安定化二酸化塩素又は亜塩素酸塩、有機カルボン酸及び過酸化水素を用いて治療及び予防する方法が開示されている。スクーチカ繊毛虫は、魚体内に深く浸入するため、他の寄生虫病と異なり薬浴による駆虫は期待できない。従来、慣用的に使用されてきたホルマリンは、養殖魚に使用することが全面的に禁止された。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００６】
（４）その他の方法
その他の方法としては、特許文献１０、１１には、イオン類を含有する水溶液に紫外線を光触媒体に照射して生じた活性酸素種を拡散することにより、水に活性酸素種の機能を付与し、この水による酸化反応を利用した微生物の除菌、寄生虫の駆虫、原虫類の駆除を行うことのできる光触媒反応水生成装置が開示されている。但し、紫外線により寄生虫を死滅させるために、高出力が必要となり、養殖場での利用には不向きである。
特許文献１２には、養殖魚の寄生虫症による斃死の発生を抑制するために、魚類の免疫を賦活化させる方法、特に魚類寄生虫症に対する免疫を賦活させる方法として、魚類用ワクチンが開示されているが、研究段階であり、未だ実用性に乏しい。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００７】
（５）オゾン水による方法
非特許文献１には、酸化剤であるオゾンの魚類病原微生物に対する殺菌効果が記載されている。
非特許文献２には、オゾン水は、飼育用水、用具の処理にも適しており、濃度０．３−０．５ｐｐｍにおいて５−１０分で効果がある。但し、飼育槽では、海水中の臭化物との反応による臭素酸の養殖魚への影響を避けるために、濃度を１００分の１まで低減させる必要のあることが開示されている。
非特許文献３には、オゾン水では、０．３ｐｐｍで５分間の処理でセラトミキサ症、ミキソゾーマ属寄生虫感染症を防止できた実例が報告されている。
尚、海水中に臭化物イオンが存在する場合、オゾンと反応し残留性、有害性のある臭素酸イオンを生成するため、これを予め除去することが好ましい。
しかるに、従来、前記オゾン水による方法においては、本発明で対象としている養殖魚に寄生する外部寄生虫の駆除方法として、特に、トラフグのような外皮の厚い魚類に寄生するエラムシ、ハダムシのような外部寄生虫の駆除に関しては、知られていなかった。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００９】
オゾン水は、従来から放電型のオゾンガス発生器を用いて製造することが一般的であり、数ｐｐｍのオゾン水を容易に製造でき、浄水処理、食品洗浄分野で利用されている。しかしながら、放電型のオゾンガス発生器は、以下の理由により使用分野に制限があった。
（ａ）原料として乾燥空気を用いると、ＮＯxが副生する。高濃度ガスを得るためには純酸素原料を用いなければならない。
（ｂ）オゾンをいったんガスとして発生させ、その後、水に溶解させる２つの工程を必要とすること。
（ｃ）後述する電解法に比較して濃度が低いため、溶解させることが困難である。
（ｄ）発生電源が高電圧・高周波のため、小型化しにくい。
（ｅ）放電によるオゾン水生成装置では、オゾンガス発生能力が安定するまで時間（数分間の待機時間）を要し、瞬時に一定濃度のオゾン水を調製することが困難である。
このため、放電型のオゾンガス発生器は、養殖場、特に海岸での利用に適さないことを示唆している。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１０】
オゾン水の製法としては、上記の放電法の他に、電解法によるオゾン水の製法が知られており、この電解法は、放電法に比較して電力原単位は劣るが、高濃度のオゾンガス及び水が容易に得られる特徴により、電子部品洗浄などの特殊分野で汎用されている。原理的に直流低圧電源を用いるため、瞬時応答性、安全性に優れており、小型のオゾンガス、オゾン水発生器としての利用が期待されている。
オゾンガスを効率よく発生させるには、適切な触媒と電解質を選択することが不可欠である。電極材料として、白金などの貴金属、α−二酸化鉛、β−二酸化鉛、フルオロカーボンを含浸させたグラッシーカーボン、ダイヤモンドが知られている。電解質としては、硫酸、リン酸、フッ素基含有などの水溶液が利用されてきたが、取り扱いが不便であり広まってはいない。これに対して、非特許文献５に記載されているように、固体高分子電解質を隔膜として用い、水を原料とする水電解セルは、管理がしやすく、汎用されている。従来からの触媒である二酸化鉛を使用すると、１２重量％以上の高濃度なオゾンガスが得られる。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１１】
固体高分子電解質を隔膜として用い、原料水を原料とする水電解セルにおいて、特許文献１３では、導電性ダイヤモンドが機能水（オゾン水含む）用電極として有用であることが開示されている。
また、特許文献１４では、電極近傍の溶液に十分な流速を与えることで、ガス化する前にオゾン水として取り出す方法が開示されている。
特許文献１５では、オゾンを溶解する電解水の噴霧装置、特に得られた電解水を霧状に噴霧する小型スプレー装置が提案されている。
特許文献１６では、生成されるオゾン水を殺菌洗浄槽へ導入すると共に超音波作用とオゾン水の殺菌作用との組合せによって殺菌・脱臭を奏させる殺菌浄化装置を提供する。
更に、非特許文献６に記載されているように、近年、ナノバブル、マイクロバブルと呼ばれる微細気泡に関する基礎的研究や実用化の検討が行われている。最近の展開については、微細気泡の最新技術に記載されている。
特許文献１７、１８では、酸素などのガスを主体とするナノバブル、マイクロバブル化したオゾン含有気泡は、洗浄効果があることが開示されている。同技術では、かき体内のノロウィルスの不活化に効果のあることが報告された。
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１５】
従来、前記のように、寄生虫の駆除方法としてさまざまな検討がなされてきたが、いずれの方法においても、十分に解決されたとはいえない。養殖魚の駆除方法としては、
（ａ）寄生虫、特にハダムシ、エラムシの駆除が短時間に行えること
（ｂ）調製保管の手間がかからずオンサイトにより、作業が安全に行えること
（ｃ）そのまま処理水を海に廃棄できること
（ｄ）養殖魚の生態に影響を与えないで駆除効果を発揮すること
が好ましい。漁業者が実施し得る実効ある現業的方法を提供することが重要である。
【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３１】
更に、電解式オゾン発生装置１の近くに電解式過酸化水素発生装置を設置し、前記電解オゾン水タンク４内に電解式過酸化水素発生装置により生成した電解過酸化水素水を投入し、前記電解オゾン水と前記電解過酸化水素水との混合水を用いて、外皮の厚い魚類の養殖魚に寄生する外部寄生虫を駆除すると、効果的な駆除を行うことができる。上記のように電解オゾン水と電解過酸化水素水との混合水を用いると、これらの物質および促進酸化により生成する活性酸素種により寄生虫の表面が酸化され、正常な生命活動が阻害され、寄生部位からの脱落、駆除が誘発されるものと考えられる。オゾンと過酸化水素の混合水を用いると、促進酸化処理により活性酸素が生成しやすい。このときの濃度比オゾン：過酸化水素は、１：０．１〜１：１０の範囲が好ましい。過酸化水素がこれより少ないと、促進酸化処理効果が期待できない。またこれより多いとオゾンの分解が速くなり、過酸化水素の効果しか得られない。
【手続補正９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３２】
図２は、本発明による、養殖魚に寄生するエラムシまたハダムシ等の外部寄生虫の駆除方法の他の実施態様を示したものであり、沿岸から離れた海上養殖場に養殖用生簀５を設け、船６の船上に電解式オゾン発生装置１を設け、船上もしくは船６の近くの海上に電解式オゾン水タンク４を設けたものである。
養殖生簀５から隔離された別の区画に電解式オゾン水タンク４を設け、このタンク４内にオゾン水を注入し、養殖生簀中の魚を該区画に移送し、処理した後、魚を元の生簀５中に放流する。処理区画としては、オゾン水を合成、運搬に使用した容器でもよい。オゾン水からのオゾンガスの放出を防止するために、蓋を有する区画、容器であることが好ましい。海水と分離区画された区画の水量は、魚数と重量に依存するが、１〜１０ｍ3程度である。上記駆除方法は、何回か繰り返すことが効果的である。
オゾン水は、船上にて、あるいはまた漁港において、原料水を満たした容器から原料水を電解セルに送り、オゾン水を合成する。
【手続補正１０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３３】
本発明に使用する電解式オゾン発生装置の一例について詳述する。
（１）電解式オゾン発生装置
電解式オゾン発生セルの一例を図３に示した。図３において、７は陽極、８は陰極、９はイオン交換膜であり、電解式オゾン発生セルは、イオン交換膜９により陽極７を含む陽極室と陰極８を含む陰極室に分けられている。
電極間距離は０．１ｍｍ〜５０ｍｍが好ましい。これより近いと接触により短絡が発生しやすく、これより遠いとセル電圧の増加を招く。電極間距離は０．１ｍｍから２ｍｍ程度がより好適である。各電極室には、原料水の供給口と排出口、生成ガスの排出口が設けられている。合成した電解オゾン水は、電極室内に保存することも可能であるが、別途の容器に保存することが好ましい。タンク材質は電解水により侵されない材料を選択する。特に問題がなければＰＥ樹脂などでよい。
【手続補正１１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３５】
（３）陽極材料
陽極７の陽極基材としてはチタン、ニオブなどの弁金属、その合金、シリコンに限定される。触媒としては、白金、ダイヤモンド、二酸化鉛が利用可能である。
ダイヤモンドはドーピングにより電気伝導性の制御も可能であることから、電極材料として有望とされている。ダイヤモンド電極は水の分解反応に対しては不活性であり、酸化反応では酸素以外にオゾン、過酸化水素の生成が報告されている。触媒は陽極の一部に存在すればよく、前記基材の一部が露出していても支障ない。代表的な熱フィラメントＣＶＤ法について以下に説明する。炭素源となるメタンＣＨ4など炭化水素ガス、或いはアルコールなどの有機物を用い、ＣＶＤチャンバー内に水素ガスと共に送り込み、還元雰囲気に保ちながら、フィラメントを熱し、炭素ラジカルが生成する温度１８００−２４００℃にする。このときダイヤモンドが析出する温度（７５０−９５０℃）領域に電極基材を設置する。水素に対する炭化水素ガス濃度は０．１−１０ｖｏｌ％、圧力は２０ｈＰａ〜１０１３ｈＰａ（１気圧）である。
ダイヤモンドが良好な導電性を得るために、原子価の異なる元素を微量添加することは不可欠である。ホウ素ＢやリンＰの好ましい含有率は１〜１０００００ｐｐｍであり、更に好ましくは１００〜１００００ｐｐｍである。原料化合物にはトリメチルボロン（ＣＨ3）3Ｂを用いるが、毒性の少ない酸化ホウ素Ｂ2Ｏ3、５酸化２燐Ｐ2Ｏ5などの利用も好ましい。電極基材の形状としては、粒子、繊維、板、穴明き板、棒などが可能である。
【手続補正１２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４２】
［比較例１］
実施例１で使用した体長１５ｃｍのトラフグの鰓より切除されたエラムシを、過酸化水素水（６００ｐｐｍ）で処理したころ、エラムシが死滅するまで、５分間を要した。尚、この過酸化水素水（６００ｐｐｍ）でトラフグの鰓部位に寄生した状態のエラムシおよび鰓肉片を処理したところ、エラムシおよび鰓肉片は、２０分でも死滅できなかった。エラムシが寄生したフグは体力が回復しなかった。解剖したところ、エラムシの生存が確認された。
上記の実施例においては、トラフグ等の外皮の厚い養殖魚について記載したが、本発明は、これらに限定されることなく、その他の養殖魚にも適用することができる。また、外部寄生虫としては、エラムシ、ハダムシ以外の外部寄生虫にも適用することができる。