【手続補正書】
【提出日】平成24年4月25日(2012.4.25)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
平均粒子核サイズが２０〜６０ｎｍ、平均粒子径が５０〜１２０ｎｍの範囲に含まれ、突起数が核１個につき４以上存在し、この突起部の長さは５〜５０ｎｍであることを特徴とする金ナノ粒子から構成されてなる青色金ナノ粒子。
【請求項２】
紫外可視吸収スペクトルの極大吸収波長が５７０〜８００ｎｍの範囲であることを特徴とする請求項１に記載の青色金ナノ粒子。
【請求項３】
粒子の形態がグラフト型、マルチポット型、または金平糖型の三次元突起部を有する金ナノ粒子であることを特徴とする請求項１または２に記載の青色金ナノ粒子。
【請求項４】
金ナノ粒子からなる核の外周を成長させることにより形成されてなる請求項１〜３のいずれかに記載の青色金ナノ粒子。
【請求項５】
請求項１に記載の青色金ナノ粒子、グッドバッファー成分のピペラジン環を有する有機酸、および還元性を有する有機酸からなり、コロイド溶液として分散されてなることを特徴とする青色金ナノ粒子のコロイド溶液。
【請求項６】
グッドバッファー成分のピペラジン環を有する有機酸と第一の金塩の溶液を反応させて核金ナノ粒子を形成させる核形成工程と、次いで該核金ナノ粒子の溶液に第二の金塩の溶液と還元性を有する有機酸を同時的に添加反応させて、核金ナノ粒子を成長させる成長工程の反応を行なうことを特徴とする青色金ナノ粒子の製造方法。
【請求項７】
成長工程の反応温度を１０℃以上４０℃未満で実施することを特徴とする請求項６に記載の青色金ナノ粒子の製造方法。
【請求項８】
成長工程における有機酸の濃度が０．０７５〜０．１５ｍＭであることを特徴とする請求項６または７に記載の青色金ナノ粒子の製造方法。
【請求項９】
グッドバッファー成分のピペラジン環を有する有機酸が、２−［４−（２−ヒドロキシュチル）−１−ピペラジニル］エタンスルホン酸、４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジンプロパンスルホン酸、４−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン−１−（２−ヒドロキシプロパン−３−スルホン酸）、ピペラジン−１
，４−ビス（２−エタンスルホン酸）、３−［４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジニル］プロパンスルホン酸及びピペラジン−１ ，４−ビス（2−ヒドロキシ−３−プロパンスルホン酸）からなる群から選ばれた１種又は２種以上であることを特徴とする請求項８に記載の青色金ナノ粒子の製造方法。
【請求項１０】
還元性を有する有機酸が、酒石酸、酒石酸塩、タンニン酸、タンニン酸塩、アスコルビン酸、アスコルビン酸塩、クエン酸及びクエン酸塩からなる群から選ばれた１種又は２種以上であることを特徴とする請求項６に記載の青色金ナノ粒子の製造方法。
【請求項１１】
成長工程において、 還元性を有する有機酸と共にグッドバッファー成分のピペラジン環を有する有機酸をさらに含むことを特徴とする請求項６に記載の青色金ナノ粒子の製造方法。
【請求項１２】
請求項１〜４のいずれかに記載の青色金ナノ粒子を含む免疫学的測定用標識物質。
【請求項１３】
形状の異なる少なくとも二種類の金ナノ粒子から構成されることを特徴とする請求項１２に記載の免疫学的測定用標識物質。
【請求項１４】
球状の金ナノ粒子とグラフト型、マルチポット型、または金平糖型の三次元突起を有する金ナノ粒子の少なくとも２種類から構成される請求項１３に記載の免疫学的測定用標識物質。
【請求項１５】
請求項１〜４のいずれかに記載の青色金ナノ粒子を標識物質として用いる免疫学的測定方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２２】
本発明によると、以下に記載の青色金ナノ粒子、その製造方法およびその使用方法が提供される。本発明の特に金ナノ粒子の特徴は以下のとおりである。
（ａ）本発明の第１の特徴は、平均粒子核サイズが２０〜６０ｎｍ、平均粒子径が５０〜１２０ｎｍの範囲に含まれ、突起数が核１個につき４以上存在し、この突起部の長さは５〜５０ｎｍであることを特徴とする金ナノ粒子から構成されてなる青色金ナノ粒子にある。
（ｂ）本発明の第２の特徴は、紫外可視吸収スペクトルの極大吸収波長が５７０〜８００ｎｍの範囲であることを特徴とする（ａ）に記載の青色金ナノ粒子にある。
（ｃ）本発明の第３の特徴は、粒子の形態がグラフト型、マルチポット型、または金平糖型の三次元突起部を有する金ナノ粒子であることを特徴とする（ａ）または（ｂ）に記載の青色金ナノ粒子にある。
（ｄ）本発明の第４の特徴は、金ナノ粒子からなる核の外周を成長させることにより形成されてなる（ａ）〜（ｃ）のいずれかに記載の青色金ナノ粒子にある。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２３】
本発明の金ナノ粒子が、水のような媒体中に分散してなるコロイドの特徴は、以下のとおりである。
（ｅ）本発明の第５の特徴は、（ａ）に記載の青色金ナノ粒子、グッドバッファー成分のピペラジン環を有する有機酸、および還元性を有する有機酸からなり、コロイド液として分散されてなることを特徴とする青色金ナノ粒子のコロイド液にある。

【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２４】
本発明の特に金ナノ粒子の製造方法の特徴としては以下のとおりである。
（ｆ）本発明の第６の特徴は、グッドバッファー成分のピペラジン環を有する有機酸と第一の金塩の溶液を反応させて核金ナノ粒子を形成させる核形成工程と、次いで該核金ナノ粒子の溶液に第二の金塩の溶液と還元性を有する有機酸を同時的に添加反応させて、核金ナノ粒子を成長させる成長工程の反応を行なうことを特徴とする青色金ナノ粒子の製造方法にある。
（ｇ）本発明の第７の特徴は、成長工程の反応温度を１０℃以上４０℃未満で実施することを特徴とする（ｆ）に記載の青色金ナノ粒子の製造方法にある。
（ｈ）本発明の第８の特徴は、成長工程における有機酸の濃度が０．０７５〜０．１５ｍＭであることを特徴とする（ｆ）または（ｇ）に記載の青色金ナノ粒子の製造方法にある。
（ｉ）本発明の第９の特徴は、グッドバッファー成分のピペラジン環を有する有機酸が、２−［４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジニル］エタンスルホン酸、４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジンプロパンスルホン酸、４−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン−１−（２−ヒドロキシプロパン−３−スルホン酸）、ピペラジン−１，４−ビス（２−エタンスルホン酸）、３−［４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジニル］プロパンスルホン酸及びピペラジン−１，４−ビス（２−ヒドロキシ−３−プロパンスルホン酸）からなる群から選ばれた１種又は２種以上であることを特徴とする（ｈ）に記載の青色金ナノ粒子の製造方法にある。
（ｊ）本発明の第１０の特徴は還元性を有する有機酸が、酒石酸、酒石酸塩、タンニン酸、タンニン酸塩、アスコルビン酸、アスコルビン酸塩、クエン酸及びクエン酸塩からなる群から選ばれた１種又は２種以上であることを特徴とする（ｆ）に記載の青色金ナノ粒子の製造方法にある。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２５】
（ｋ）本発明の第１１の特徴は、成長工程において、還元性を有する有機酸と共にグッドバッファー成分のピペラジン環を有する有機酸をさらに含むことを特徴とする（ｆ）に記載の青色金ナノ粒子の製造方法にある。
次に、本発明の特に免疫学的測定用標識物質としての特徴は、以下のとおりである。
（ｌ）本発明の第１２の特徴は、（ａ）〜（ｄ）のいずれかに記載の青色金ナノ粒子を含む免疫学的測定用標識物質にある。
（ｍ）本発明の第１３の特徴は、形状の異なる少なくとも二種類の金ナノ粒子から構成されることを特徴とする（ｌ）に記載の免疫学的測定用標識物質にある。
（ｎ）本発明の第１４の特徴は、球状の金ナノ粒子とグラフト型、マルチポット型、または金平糖型の三次元突起を有する金ナノ粒子の少なくとも２種類から構成される（ｍ）に記載の免疫学的測定用標識物質にある。
（ｏ）本発明の第１５の特徴は、（ａ）〜（ｄ）のいずれかに記載の青色金ナノ粒子を標識物質として用いる免疫学的測定方法にある。
以上の発明の構成を採ることにより、本発明の課題を解決することができた。