【誤訳訂正書】
【提出日】平成24年9月14日(2012.9.14)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００１１
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００１１】
本発明のもう一つの態様は、ハイドロキシアパタイトセラミックス材料を調製する方法に関するものである。本発明の態様に係る方法は、10μm以上の平均気孔直径を有する気孔を含む、多孔性のハイドロキシアパタイトセラミックスを調製するステップ及び前記の多孔性のハイドロキシアパタイトセラミックスの気孔の中に生物分解性ポリマーを形成するステップを含む。前記の多孔性のハイドロキシアパタイトセラミックスは、選択された溶媒にハイドロキシアパタイトファイバー及び熱分解性粒子を懸濁させたスラリーを調製するステップ、前記のスラリーをペースト状にするために濾過するステップ、前記のペーストを使用して塊に成形するステップ、生成形体を調製するために前記の成形された塊を圧縮するステップ、及び多孔性のハイドロキシアパタイトセラミックス構造を調製するために少なくとも1000℃で前記の生成形体を加熱するステップにより調製される。
【誤訳訂正２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００１３
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００１３】
【図１】図1は、骨の陥没を図解する脊椎における従来のハイドロキシアパタイトインプラントを示す。
【図２】図2は、多孔性のハイドロキシアパタイトセラミックスを本発明の一つの態様に従って調製するための方法を図解するフローチャートを示す。
【図３Ａ】図3Aは、カーボンビーズの包含物を使用することなく調製された多孔性のHApセラミックスを示す。
【図３Ｂ】図3Bは、150μmの直径を有するカーボンビーズの包含物を使用して本発明の一つの態様に従って調製された多孔性のHApセラミックスを示す。
【図４】図4a-4dは、異なる直径の様々なカーボンビーズを使用して調製されたHApセラミックスの気孔のサイズの分布を示す。
【図５】図5は、多孔性のHApセラミックスの気孔の中にポリマーを本発明の一つの態様に従って形成する方法を図解するフローチャートを示す。
【図６】図6は、本発明の一つの態様に従うHAp及びPLLAハイブリッド材料の微細構造を示す。
【図７】図7は、本発明の一つの態様に従う、様々なHAp及びPLLAハイブリッド材料の気孔率を示す。
【図８】図8は、本発明の様々なHAp-PLLAハイブリッド材料の曲げ強さ及びヤング率を示す。
【図９】図9は、本発明の一つの態様に従う、前記のHAp-PLLAハイブリッド材料上で7日間培養された細胞の形態を示す。なお、ポジティブコントロールとして高密度のHApセラミクスを使用し、そしてコントロールとして細胞培養プレート用のポリスチレンを使用した。
【図１０】図10(A)-10(D)は、Apaceram（登録商標）と称される多孔性のセラミック    ス（図10(A)及び図10(C)）及び本発明の二極化した多孔質構造を持つHApセラミックス（図10(B)及び図10(D)）をウサギの頸骨に4週間（図10(A)及び図10(B)）及び24週間（図10(B)及び図10(D)）インプラントした場合における骨細胞の成長を示す。
【誤訳訂正３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００２１
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００２１】
例えば、HApファイバーを、Ca(NO3)2 (0.167 mol・dm-3), (NH4)2HPO4(0.1 mol・dm-3), (NH2)2CO (0.5mol・dm-3),及びHNO3 (0.1 mol・dm-3)を含む水性溶液における沈殿により調製することができる。この溶液にはCa/Pが1.67の割合で含まれる。この溶液を80°Cで24時間加熱し、ついで90°Cで72時間加熱することにより、約60-100 μmの長軸径をもつアパタイトファイバーを調製する。これらのファイバーを、例えば濾過により集める。懸濁液を調製するために、前記のアパタイトファイバーを適当な濃度（例えば、約1重量％）で水に懸濁する。
【誤訳訂正４】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００２２
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００２２】
前記のスラリー中の前記のカーボンビーズは、あらゆる熱分解性粒子で置換されている。前記の熱分解性材料（例えば、カーボンビーズ又はプラスチックビーズ）は前記のファイバーの間に空間を作り出すであろう。熱処理後、これらの材料は、セラミックスの内部で消失及び気孔の背後に移るであろう。記載を明確にするために、前記の分解性材料の例としてカーボンビーズの使用について以下に説明するであろう。しかしながら、当業者ならば、前記のセラミックスの内部で気孔から消失することができる、他の同様な分解性材料（例えば、プラスチックビーズ等）もまた使用することを理解しているであろう。カーボンビーズは市販されている。たとえば、Nikabeads（登録商標）は、様々な直径（5、20又は150μm）でNippon Carbon Co., Ltd.（Yokohama, Japan）から入手できる。
【誤訳訂正５】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００２３
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００２３】
Kawata論文の示されているように、前記のカーボンビーズのサイズは、最終的に前記のセラミックスの気孔のサイズに影響する。本発明の態様についての使用では、平均直径が約10-500μmであり、好ましくは約100-200μmであり、最も好ましくは約150μmである、カーボンビーズ（又は熱分解性材料ビーズ）を使用することができる。
【誤訳訂正６】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００３１
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００３１】
例えば、約150μmの直径を有するカーボンビーズを使用した場合には、前記のHApセラミックスには約100μm又はそれより大きい気孔が検出される。これらの気孔に加えて、生じたHApセラミックスはまた、前記のカーボンビーズを含まない前記のHApファイバーの間の隙間から生じる約1-5μmの直径のより小さい気孔を含む。すなわち、これらの多孔性HApセラミックスは、約数マイクロメーターの大きさの小さな気孔の一つのグループ、及び100μmよりも大きいサイズの気孔のもう一つのグループである二つの異なるサイズの分布を有する気孔を実際に有する。これは、二極化した多孔質構造をもつHApセラミックスと称される。
【誤訳訂正７】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００３２
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００３２】
図3の左側のパネル（A）に示したように、HApセラミックスは、カーボンビーズを添加することなくして調製された。結果として、前記の気孔は、数μm（例えば、1-5μm）の範囲の小さいサイズである。図3右側のパネル（B）に示したように、カーボンビーズ（150μmの直径）を添加して調製された前記のHApセラミックスは、前記の小さな気孔（1-5μm）に加えて、より大きな気孔（100μm又はそれより大きい気孔まで）を有する。これらの気孔は、図3ではそれぞれマクロ気孔及びミクロ気孔と言及されている。
【誤訳訂正８】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００３６
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００３６】
図４は、様々なサイズのカーボンビーズにより調製されたHApセラミックスの気孔サイズの分布及び気孔量を示す。図４、パネル（a）に示したように、カーボンビーズが含まれていない場合、調製されたセラミックスは最も小さい気孔（気孔がファイバー間の隙間から生ずるので、気孔の直径の中央値は1.2μmである。）を有する。カーボンビーズ（5μm）が含まれている場合、前記の調製されたセラミックスは、二種類のサイズの気孔（パネルb：気孔の直径の中央値は2.5μmである。）カーボンビーズ（20μm）が含まれている場合、前記の調製されたセラミックスは、より大きな気孔サイズの気孔（パネルb：気孔の直径の中央値は2.6μmである。）図4、パネル（d）は、150μmの直径のカーボンビーズを使用して調製された前記のセラミックスが5.4μmの中間直径の気孔を有することを示す。しかしながら、これらのセラミックスは、2種類の気孔サイズを有し、その内の一方は10μm未満の気孔を有し、他方は、明らかに10〜100μmの間の気孔直径の分布を示す。
【誤訳訂正９】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００３７
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００３７】
前に特記したように、カーボンビーズ（例えば、直径150μm）を含ませることにより調製された前記の多孔性HApセラミックスは、〜100μmオーダーの直径の大きな気孔を有する。前記の大きなサイズの気孔は、前記の多孔性HApセラミックスにおいて多くの連通孔を生ずる。以下に記載した本発明の態様によれば、前記の連通孔が望ましい。なぜならば、前記の連通孔は前記のセラミックスに生分解性ポリマーを含ませるのを促進するからである。さらに、これらの連通孔もまた、前記のデバイスが患者に埋入された後に前記のセラミックスの内部における骨組織の形成を助成する。
【誤訳訂正１０】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００４７
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００４７】
HApの中に含まれる生分解性ポリマー（例えば、ポリ-L-乳酸（PLLA））を有する前記の多孔性HApは、前記のHApセラミックス部分及び前記の生分解性材料（例えばPLLA）部分を含むハイブリッド材料である。図６及び図７に示すように、PLLAは前記のHApセラミックスの気孔を満たすので、前記の生じたハイブリッドの断面図は、多孔性の形態から緻密な構造に変化した。これらの図において、PHA（−）は、調製過程でカーボンビーズが加えられていないHApセラミックスを意味し、PHA（150）は、平均直径が150μmのカーボンビーズが加えられたことを意味する。加えて、PLLA（x%）はPLLAの重合において使用されたリパーゼのx%（100％としてラクチドにおける乳酸の量に比例して）を意味する。
【誤訳訂正１１】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００４８
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００４８】
図6は、様々なセラミックス（PLLAを有しない）及びハイブリッド（PLLAを有しする）の走査電子顕微鏡（scanning EM）の写真を示す。図6の左のパネルに示したように、カーボンビーズを加えずに調製されたHApセラミックスであるPHA（−）は、小さな気孔（HApファイバーの絡み合わせから生ずる）のみを含む（図3も参照されたい。）。これに対して、HApファイバーにカーボンビーズ（直径150μm）を加えて調製されたHApセラミックスであるPHA（150）は、大きな気孔（約100μmのサイズ）及び小さい気孔（約数μmの直径）の両者を有する。
【誤訳訂正１２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００５０
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００５０】
図7は、前記のセラミックスの気孔におけるPLLAによる充填状態の定量結果を示すグラフを示す。前記のチャートから、カーボンビーズを添加せずに調製された前記のHApセラミックスは約38％の全気孔率であるのに対し、150μmのカーボンビーズを添加して調製されたものは約70％の気孔率であることが明らかになった。前記の気孔中にPLLAの形成後、すべての前記のハイブリッド材料には、約5-7%の気孔が残存している。この結果から、前記の5-7%の残存する気孔は、それらが調製された方法に関係なくすべてのセラミックスに共通していることが示唆された。さらに、この結果から、PHA（150）セラミックスもまた5-7%の残存する気孔のみを有しているので、前記のPHA（150）セラミックスのすべての大きな気孔は完全にPLLAにより満たされていることが示唆される。図7に示された結果からも、前記の重合反応を1%又は3%リパーゼで実施したとしても大きな差異はないことが示唆される。
【誤訳訂正１３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００５４
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００５４】
図8に示すように、すべてのケース（大きな気孔を有するHApセラミックス又は小さな気孔を有するHApセラミックス）において、PLLAを導入すると、前記のセラミックス材料の機械的な強度（例えば、曲げ強さ及びヤング率）が、二つ以上の要因により増加する。これらの結果は、HApセラミックス材料の機械特性を変化させるために生分解性材料を使用するというコンセプトを実証する。さらに、これら結果から、気孔のサイズ及び／又はバイオポリマー形成の程度を制御することにより、性状の望ましい結合を成し遂げることができる。例えば、前記の生体骨の物理的性状に前記のHAp-PLLAハイブリッド材料の機械特性を保ちながら、例えば、より小さいカーボンビーズ（例えば、20、50又は100μmの直径）を使用して骨の進入に十分な大きさである、より小さい気孔を有する多孔性セラミックスを調製してもよい。
【誤訳訂正１４】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００５９
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００５９】
埋設後4週間経過時の結果である図10（A）（Apaceram（登録商標））及び図10（B）（150μmのカーボンビーズであるPHA（150）により調製された本発明の二極化した多孔質構造をもつHApセラミックス）に示されているように、トルイジンによるダークブルー染色に立証されるように、両セラミックスとも新たな骨の形成の兆候を示している。図10（C）（Apaceram（登録商標））及び図10（D）（本発明の二方式の多孔性のHAp）は24週間経過時の結果である。これらの結果から、骨形成の促進性、すなわち本発明の二極化した多孔質構造をもつHApの大きな気孔中における新たな骨の形成を促進する性質において、本発明の二極化した多孔質構造をもつHApは、既存の市販されている生体適合性セラミックス（Apaceram（登録商標））に比べて同等か又は優れていることが示されている。
【誤訳訂正１５】
【訂正対象書類名】特許請求の範囲
【訂正対象項目名】請求項５
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【請求項５】
前記気孔が、一方が10μm以上の平均サイズを有する二種類の気孔サイズ分布を含む、請求項1に記載のハイドロキシアパタイトセラミックスハイブリッド材料。
【誤訳訂正１６】
【訂正対象書類名】特許請求の範囲
【訂正対象項目名】請求項７
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【請求項７】
ハイドロキシアパタイトセラミックス−ポリマーハイブリッド材料を調製する方法であって、
10μm以上の平均気孔直径を有する気孔を含む多孔性ハイドロキシアパタイトセラミックスを調製するステップ、及び
前記ハイドロキシアパタイトセラミックスの気孔中に生分解性ポリマーを形成するステップを含む、方法。
【誤訳訂正１７】
【訂正対象書類名】特許請求の範囲
【訂正対象項目名】請求項８
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【請求項８】
前記多孔性ハイドロキシアパタイトセラミックスが、一つのグループが5μm以下の平均気孔サイズであり、そして他のグループが10μm以上の平均気孔サイズである、二つのグループの気孔を含む、請求項７に記載の方法。
【誤訳訂正１８】
【訂正対象書類名】特許請求の範囲
【訂正対象項目名】請求項１９
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【請求項１９】
前記カーボンビーズが約150μmの平均直径を有する、請求項13記載の方法。