【事件の表示】
　平成　６年特許願第５０２６２９号「新規な悪性細胞型内部核マトリックスマーカー」拒絶査定不服審判事件〔平成　６年　１月　６日国際公開、ＷＯ９４／００５７３、平成　７年１０月２６日国内公表、特表平　７−５０９６０２〕について、次のとおり審決する。
【結　論】
　本件審判の請求は、成り立たない。
【理　由】
第１　出願の経緯及び本願発明
　本願は，１９９３年６月２１日（パリ条約による優先権主張１９９２年６月２２日　米国）を国際出願日とする出願であって，その請求項１ないし３０に係る発明は，平成１５年９月２９日付けの手続補正書によって補正された特許請求の範囲に記載されたとおりのものと認められるところ，その請求項９に係る発明（以下「本願発明」という。）は次のとおりである。
　
「９．以下のａ）−ｂ）の工程を含む，哺乳動物における悪性疾患を検出する方法。
ａ）血漿，血液，尿，膣分泌物，髄液，腹水，腹膜液，痰および乳滲出液よりなる群から選択される哺乳動物由来の体液試料を，配列表配列番号３のＤＮＡ，またはそのフラグメントによってコードされるアミノ酸配列よりなる蛋白質に特異的に結合することができる，抗体，抗体フラグメント，および生合成された抗体よりなる群から選択される結合蛋白質と接触させ，
ｂ）試料中の該結合蛋白質によって結合可能なマーカー蛋白質あるいはそのフラグメントの濃度を測定し，このとき，該マーカー蛋白質および該蛋白質フラグメントの濃度は，哺乳動物において悪性疾患の存在を示している。」
　　
　そして，本願発明について，本願明細書及び図面（以下，「本願明細書等」という。）には，以下の記載がある。　
　
ア．「ＭＴ１と同様に，
ＭＴ２発現レベルは，血清分析および組織培養上清分析の両方によって決定されたように，種々の悪性細胞型で顕著に増強される。
使用抗体は２種の異なる子宮頸癌細胞株（ME-180およびCaSki，ATCC，ロックビル，メリーランド）のＮＭ調製物に対して作製された。100シリーズの抗体はME-180に対して作製されたもので，300シリーズの抗体はCaSki−ＮＭ免疫原に対して作製されたものである。
107.7および307.33
302-18，302-22および302-29
イ．「
２種の抗体組み合せのドーズ・レスポンス評価の結果
死細胞から遊離される可溶性内部核マトリックス蛋白を定量できる
ウ．「次に，
内部核マトリックス蛋白定量実験を種々の壊死腫瘍組織の上清で調べた。
ＭＴ２抗原は壊死組織の各々から遊離され，腫瘍組織での死細胞の増加は，癌組織対正常組織として定量したとき，より高いＭＴ２平均抗原値として反映される。
エ．「図４は，
癌患者と正常血液供与者からの血清サンプルを用いて実施
癌患者の血清サンプルは，正常血液の血清サンプルで検出されたものと比べて，癌患者の血清サンプルで検出される計量可能なより高レベルのＭＴ２抗原によって示唆される
オ．「クローニング　ＭＴ１と同じ一般的な方法にしたがって，
選択的にＭＴ２に富む組成物をME-180細胞（子宮頸癌細胞，ATCC，ロックビル，メリーランド）から得，ＭＴ２特異的抗体を調製した。107.7抗体を用いて，ＭＴ１のようにラムダZAP発現ライブラリーをスクリーニング
完全なコード配列
ＭＴ２のヌクレオチド配列および予想アミノ酸配列は配列番号３
　
　上記ア．〜オ．によれば，本願発明の「配列表配列番号３のＤＮＡによってコードされるアミノ酸配列よりなる蛋白質」は，子宮頸癌細胞から調整された核マトリックス蛋白質であるＭＴ２であり（上記オ．を参照。），本願発明が，ＭＴ２をマーカー蛋白質とし，ＭＴ２に特異的に結合できる抗体等の結合蛋白質を用いて，哺乳動物において悪性疾患を検出できることは，該ＭＴ２を認識する抗体（107.7，307.33，302-18，302-22及び302-29（上記ア．を参照。））を用いて，組織培養上清中の核マトリックス蛋白質（ＭＴ２）及び血清中のＭＴ２を定量したところ，種々の死んだ細胞から該蛋白質が可溶性のものとして遊離し（上記イ．を参照。），その量が，正常組織のものと比べて，悪性細胞型で高いレベルであること，並びに，正常血液の血清サンプル中の該蛋白質の量と比べて，癌患者の血清サンプルのものが高いレベルにあることを見出したことに基づくといえる（上記ウ．及びエ．を参照。）。
　そうしてみると，本願発明の工程ｂ）において，「マーカー蛋白質および該蛋白質フラグメントの濃度は，哺乳動物において悪性疾患の存在を示している」とは，測定されたマーカー蛋白質および該蛋白質フラグメントの濃度が，正常な試料で測定された濃度と比べて，高いレベルであることが，悪性疾患の存在を示すことを意味すると認められる。
　
第２　特許法第２９条第２項違反について
１． 引用刊行物に記載された発明
　これに対し，本願優先日前に頒布されたCancer Res., Jan. 1992, Vol.52, p.422-7（以下，「引用例１」という。）には，次の事項が記載されている。
　
カ．「細胞核の形態特性は，病理学者によって，癌の臨床診断に用いられている。細胞の核マトリックスは，核内でのクロマチンの組織化する構造体であり，細胞や癌のタイプに関する形態特性を反映することが知られている。
抽出された核マトリックス蛋白質に対するモノクローナル抗体が開発された。これらの抗体は，２つの死細胞株及び１５の癌組織の上清中の可溶性核マトリックス蛋白質を検出するためのtwo-site 免疫アッセイに用いられた。
核マトリックス蛋白質は，正常な患者の血清に比べ，癌患者の血清中に高いレベルで検出された。
循環核マトリックス蛋白質の検出は，癌の診断とモニタリングにおける重要な臨床ツールとなり得るかもしれない。
キ．「この論文で，我々は，
核マトリックス蛋白質が死んだ細胞から，可溶性の形態で遊離するという予想外の発見
ク．「核マトリックスの単離　
核マトリックス蛋白質は，Penman and Fey (4)の手法に基づいて単離された。
ヒト子宮頸癌細胞株ME-180及びCaSki
核マトリックス蛋白質は，その上清から回収した。
ケ．「２つの抗核マトリックスモノクローナル抗体が，two-site 免疫アッセイの開発に用いられた。
アッセイ29-7は，抗ME-180核マトリックス抗体である107-7（捕獲抗体）及び抗CaSki抗体である302-29（トレーサー抗体）からなる。ME-180細胞株の死んだ培養物の上清がリガンド源として用いられ
コ．「
１５の異なる死んだ組織の上清について
CaSki抗体である302-18（固相抗体）及び302-22（トレーサー抗体）
正常組織の平均値と比べて，癌組織の平均値は高い。
サ．「
３６の正常血液供与者と３８の様々な癌患者の血清における循環核マトリックス蛋白質のレベル
癌サンプルは，より高いレベルの核マトリックス蛋白質の量を有した。
シ．「抗核マトリックスモノクローナル抗体が，これらの蛋白質が死んだ細胞株や組織から遊離されることを示すために用いられた。遊離した蛋白質の量は，two-site 免疫アッセイにより定量された。・・・リガンドの濃度は，死んだ細胞と核抽出物の上清において，同様であった。・・・該免疫応答は，
癌細胞の核マトリックス蛋白質が，細胞の死と同時に遊離され，循環される可能性を示す。
ス．「
核マトリックス蛋白質は
血清アッセイの癌マーカーとして使える
　
　上記カ．〜ス．によれば，引用例１には，子宮頸癌細胞株から単離した核マトリックス蛋白質に対する抗体（107-7，302-29，302-18及び302-22）を用いて，組織培養上清中の核マトリックス蛋白質及び血清中の該蛋白質を定量したところ，種々の死んだ細胞から該蛋白質が可溶性のものとして遊離し（上記キ．を参照。），その量が，正常組織のものと比べて，悪性細胞型で高いレベルであること，並びに，正常血液の血清サンプル中の該蛋白質の量と比べて，癌患者の血清サンプルのものが高いレベルにあることを見出したことが記載されているといえる（上記ク.〜サ．を参照。）。また，該抗体を用いて，血清中の循環核マトリックス蛋白質を検出することは，癌の診断とモニタリングにおける重要な臨床ツールとなり得，該蛋白質が血清アッセイの癌マーカーとして使える得ることが記載されているから（上記カ．及びス．を参照。），引用例１には，血清中の核マトリックス蛋白質を，該蛋白質に対する抗体を用いて定量し，該蛋白質をマーカーとして癌の診断及びモニタリングをする方法が記載されていると認められる。
　
２．対比
　本願発明と引用例１に記載された発明（以下，「引用発明」という。）を対比する。
　引用発明は，上述したとおり，血清中の核マトリックス蛋白質を，該蛋白質に対する抗体を用いて定量して，癌の診断及びモニタリングをする方法であるから，本願発明の「哺乳動物における悪性疾患を検出する方法」に相当する。
　また，引用発明の核マトリックス蛋白質に対する抗体（107-7，302-29，302-18及び302-22）は，引用例１が本願の発明者をその著者に含む本願に対応する報文であること，並びに，該抗体が子宮頸癌細胞株であるME-18及びCaSkiから単離された核マトリックス蛋白質に対する抗体であることを考慮すれば（上記ク．〜コ．を参照），本願明細書等に記載の抗体（107.7，302-18，302-22及び302-29）（上記ア．を参照），すなわち，本願発明の「配列表配列番号３のＤＮＡ，またはそのフラグメントによってコードされるアミノ酸配列よりなる蛋白質に特異的に結合することができる，抗体，抗体フラグメント，および生合成された抗体よりなる群から選択される結合蛋白質」に相当すると認められる。
　そして，引用発明において，血清中の核マトリックス蛋白質を，該蛋白質に対する抗体を用いて定量し，該蛋白質をマーカーとして癌の診断及びモニタリングをする際には，体液試料である血清を，該蛋白質に対する抗体と接触させ，マーカー蛋白質である該試料中の該抗体によって結合可能な該核マトリックス蛋白質の濃度を測定し，その濃度が正常な試料で測定された濃度と比べて，高いレベルであれば，悪性疾患が存在することにより，悪性疾患を検出しているといえる。
　そうしてみると，本願発明と引用発明とは，
「以下のａ）−ｂ）の工程を含む，哺乳動物における悪性疾患を検出する方法。
ａ）哺乳動物由来の体液試料を，配列表配列番号３のＤＮＡ，またはそのフラグメントによってコードされるアミノ酸配列よりなる蛋白質に特異的に結合することができる，抗体，抗体フラグメント，および生合成された抗体よりなる群から選択される結合蛋白質と接触させ，
ｂ）試料中の該結合蛋白質によって結合可能なマーカー蛋白質あるいはそのフラグメントの濃度を測定し，このとき，該マーカー蛋白質および該蛋白質フラグメントの濃度は，哺乳動物において悪性疾患の存在を示している。」
である点で一致し，検出に用いる哺乳動物由来の体液試料が，本願発明は，「血漿，血液，尿，膣分泌物，髄液，腹水，腹膜液，痰および乳滲出液よりなる群から選択される」ものであるのに対し，引用発明は，「血清」である点で相違するものである。
　
３．当審の判断
　上記相違点について検討する。
　引用例１には，マーカー蛋白質である核マトリックス蛋白質が，死んだ細胞から可溶性の形態で遊離することが見出され，遊離した該核マトリックス蛋白質が循環することにより，該蛋白質が血清中で検出できることが示されている（上記シ.及びス.）。
　ヒト体内において，該死んだ細胞から遊離された蛋白質が，血清中だけに限定して存在し，ほかの体液に含まれないと考える理由はなく，当業者であれば，死んだ細胞が接触する体液に，該核マトリックス蛋白質が存在すると考えるのが自然である。特に，血液は，血清をその一部とするものであり，当然に，検出対象の核マトリックス蛋白質を含み，また，本願出願時の技術常識を勘案しても，血清に血球，血液凝固因子等が加わることにより，該核マトリックス蛋白質が検出できなくなるとの特段の理由は知られていないから，検出に用いる体液試料を，血清以外の「血漿，血液，尿，膣分泌物，髄液，腹水，腹膜液，痰および乳滲出液よりなる群から選択される」体液試料とすることは，当業者が容易に想到し得たことと認められる。そして，血液等の体液は，通常，検出に用いられる試料であり，検出試料として用いることに何ら困難性があるとは認められない。さらに，本願明細書等をみても，血清以外の「血漿，血液，尿，膣分泌物，髄液，腹水，腹膜液，痰および乳滲出液よりなる群から選択される」体液試料を用いることにより，血清を体液試料に用いた方法と比べて，特に優れた点があるとも記載されておらず，本願発明において，血清以外の「血漿，血液，尿，膣分泌物，髄液，腹水，腹膜液，痰および乳滲出液よりなる群から選択される」体液試料を用いることが，格別顕著な効果を奏するものとは認められない。
　
４．請求人の主張について
　これに対し，審判請求人は，本件審判請求書についての平成１５年１１月５日付け手続補正書において，「引用例１には，ｉ)ＭＴ２が血清以外の体液中に存在すること，及びii）体液中に存在するＭＴ２存在量が癌の検出に使用できることは何の記載も示唆もされていません。　従って，引用例１の記載から体液中にＭＴ２が存在しこれを検出することができ，その存在量が癌の診断に利用できることは当業者が容易に発明をすることができたものではないと判断されます。・・・しかし，血清は，体液とは明らかに相違します。血清は，血液から血球，血液凝固因子等を取り除いた成分で体液とは明らかに相違します。・・・癌マーカーの検出に血清を使用できることが文献に記載されているとしても血清以外の体液が血清と同様に癌マーカーの検出に使用できるか否かは当業者が容易に予測できるものではないと考えます。」と主張している。
　しかしながら，上記３．で述べたとおり，検出の対象となる核マトリックス蛋白質が血清以外の体液中に存在し得ると考える方が自然であり，また，血清以外の体液で，検出することを阻害する特段の理由は見当たらないから，血清以外の「血漿，血液，尿，膣分泌物，髄液，腹水，腹膜液，痰および乳滲出液よりなる群から選択される」体液試料を検出に用いることは当業者が容易に想到し得ることと認められる。
　また，本願明細書等において，本願発明が，血清以外の体液が血清と同様に癌マーカーの検出に使用できるものであるとする根拠としているのは，核マトリックス蛋白質を認識する抗体を用いて，組織培養上清中及び血清中の該蛋白質を定量したところ，種々の死んだ細胞から該蛋白質が可溶性のものとして遊離し，その量が，正常組織のものと比べて，悪性細胞型で高いレベルであること，並びに，正常血液の血清サンプル中の該蛋白質の量と比べて，癌患者の血清サンプルのものが高いレベルにあることを見出したことであると認められるが（上記ア．〜オ．を参照。），このような知見は，すでに，引用発明において見出されており（上記カ．〜ス．を参照。），引用例１をみた当業者にとっては，血清以外の体液が血清と同様に癌マーカーの検出に使用できることは，予測の範囲を越えるものであるとはいえない。
　よって，上記審判請求人の主張は受け入れられない。
　なお，念のために付言すれば，本願発明は，抗核マトリックス蛋白質抗体である107-7抗体等が認識する抗原がＭＴ２であること，すなわち，そのアミノ酸配列が配列番号３で表されるものであることを見出したものであるが，本願発明の検出方法は，107-7抗体等が認識する抗原のアミノ酸配列が決定されたかどうかによらず，検出を実施することができるものであるから，その点をもって，本願発明が進歩性を有するとはいえない。また，抗体が作製される程度にまで抗原である核マトリックス蛋白質が単離されている状況において，該抗原タンパク質のアミノ酸配列を決定することは，当業者が通常行うことであり，また，本願発明において，該抗原蛋白質のアミノ酸配列を決定した手法は，当業者がごく一般に行う方法，すなわち，抗原蛋白質を単離した細胞と同じ由来の細胞（本願発明の場合は， ME-180細胞）から発現ライブラリーを作製し，抗体との結合性を指標にスクリーニングして，目的とするｃＤＮＡを得る方法であるから，抗原蛋白質のアミノ酸配列を決定したことをもって，本願発明が進歩性を有するとは認められない。
　
第３　むすび
　したがって，本願発明は，引用例１に記載された発明に基づいて当業者が容易に発明することができたものであるから，特許法第２９条第２項の規定により特許を受けることができないものであり，その余の本願の請求項に係る発明について検討するまでもなく，本特許出願は拒絶すべきものである。
　
　よって，結論のとおり審決する。