【手続補正書】
【提出日】平成24年2月8日(2012.2.8)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ポリマー骨格と、蛍光活性化部位における酵素的切断によって分離可能な、該ポリマー骨格の蛍光発光抑制相互作用許容位置に共有結合した複数の近赤外蛍光色素とを含む、分子内発光抑制された蛍光画像形成プローブ。
【請求項２】
蛍光活性化部位がポリマー骨格内に位置する、請求項1記載のプローブ。
【請求項３】
各蛍光色素が、蛍光活性化部位を含むスペーサーによってポリマー骨格に連結されている、請求項1記載のプローブ。
【請求項４】
スペーサーがオリゴペプチドである、請求項3記載のプローブ。
【請求項５】
切断が酵素によって達成される、請求項1記載のプローブ。
【請求項６】
切断が標的組織中に存在する酵素によって達成される、請求項5記載のプローブ。
【請求項７】
切断がトリプシン、カテプシンもしくは前立腺特異的抗原（PSA）による切断によって達成される、請求項5記載のプローブ。
【請求項８】
ポリマー骨格がポリペプチドである、請求項1記載のプローブ。
【請求項９】
ポリペプチドがポリリジンである、請求項8記載のプローブ。
【請求項１０】
ポリマー骨格が、核酸、ポリエチレンアミン、ポリサッカライド、ポリアミドアミン、ポリアクリル酸、ポリアルコールおよび合成ポリマーからなる群より選択される、請求項1記載のプローブ。
【請求項１１】
合成ポリマーがポリグリコール酸、ポリ乳酸、ポリ（グリコール酸−コ乳酸）、ポリジオキサノン、ポリバレロラクトン、ポリ−ε−カプロラクトン、ポリ（3-ヒドロキシブチレート）、ポリ（3-ヒドロキシバレレート）ポリタルトロン酸、およびポリ（β−マロン酸）からなる群から選択される、請求項10記載のプローブ。
【請求項１２】
ポリマー骨格に共有結合した保護鎖をさらに含む、請求項1記載のプローブ。 
【請求項１３】
保護鎖が、ポリエチレングリコール（PEG）、メトキシポリエチレングリコール（MPEG）、ポリエチレングリコール二酸、PEGモノアミン、MPEGモノアミン、MPEGヒドラジド、MPEGイミダゾール、メトキシポリプロピレングリコール、ポリエチレングリコールとメトキシポリプロピレングリコールのコポリマー、デキストラン、およびポリ乳酸-ポリグリコール酸からなる群より選択される、請求項12記載のプローブ。
【請求項１４】
蛍光色素の少なくとも１つが、650nmおよび1300nmの間の励起波長および発光波長を有する、請求項1記載のプローブ。
【請求項１５】
蛍光色素がCy5.5、Cy5、IRD41、IRD700、NIR-1、およびLaJolla Blueからなる群より選択される、請求項1記載のプローブ。
【請求項１６】
蛍光発光抑制が、自己発光抑制が誘導される密度でポリマー骨格に蛍光色素を連結することによって達成される、請求項1記載のプローブ。
【請求項１７】
標的化部分をさらに含む、請求項1記載のプローブ。 
【請求項１８】
標的化部分が、共有結合または非共有結合のいずれかでプローブに結合されうる、請求項17記載のプローブ。
【請求項１９】
標的化部分が、抗体、抗体断片、受容体結合ポリペプチド、および受容体結合ポリサッカライドからなる群より選択される、請求項18記載のプローブ。
【請求項２０】
蛍光色素の少なくとも1つが近赤外蛍光色素であり、他の蛍光色素の少なくとも1つがエネルギーアクセプターである、請求項1記載のプローブ。
【請求項２１】
エネルギーアクセプターが発光抑制蛍光色素である、請求項20記載のプローブ。
【請求項２２】
蛍光色素結合部分と蛍光活性化部位における酵素的切断によって分離可能な、蛍光色素結合部分の蛍光発光抑制性相互作用許容位置に共有結合した複数の近赤外蛍光色素とを含み、該酵素的切断が標的組織中で優先的に生じる、分子内発光抑制された蛍光プローブであって、以下の段階を含むインビボにおける光学的画像形成方法に使用するための蛍光プローブ：
(a) 分子内発光抑制された蛍光プローブを生きている動物またはヒトに投与する段階；
(b) 標的組織が存在する場合、標的組織内の酵素が蛍光活性化部位における酵素的切断によってプローブを活性化するだけの時間をおく段階；
(c) 蛍光色素によって吸収可能な波長の近赤外光を標的組織に照射する工程；および
(d) 蛍光色素によって放射された蛍光を検出する工程。
【請求項２３】
蛍光色素結合部分がポリマー骨格である、請求項22記載の分子内発光抑制された蛍光プローブ。
【請求項２４】
インビボにおける光学的画像形成方法に使用するための、請求項1〜21のいずれか一項記載のプローブ。
【請求項２５】
インビボにおける光学的画像形成方法が以下の段階を含む、請求項24記載のプローブ：
(a) 請求項1〜21のいずれか一項記載のプローブを被験体に投与する段階であって、ここで該プローブが標的組織に優先的に蓄積する段階；
(b) (1)プローブが標的組織に優先的に蓄積し、(2)標的組織中の酵素が蛍光活性化部位での酵素的切断によりプローブを活性化するだけの時間をおく段階；
(c)蛍光色素によって吸収可能な波長の近赤外光を被験体に照射する工程；および
(d)蛍光色素によって放射された蛍光シグナルを検出する工程。
【請求項２６】
インビボにおける光学的画像形成方法の段階(d)で放射された蛍光シグナルが標的組織の画像形成に使用される、インビボにおける光学的画像形成方法に使用するための請求項25記載のプローブ。
【請求項２７】
プローブの活性化が標的組織中の酵素活性に基づく、インビボにおける光学的画像形成方法に使用するための請求項24〜26のいずれか一項記載のプローブ。
【請求項２８】
被験体が生きている動物である、インビボにおける光学的画像形成方法に使用するための請求項24〜27のいずれか一項記載のプローブ。
【請求項２９】
被験体がヒトである、インビボにおける光学的画像形成方法に使用するための請求項28記載のプローブ。
【請求項３０】
以下の段階を含むインビボにおける光学的画像形成方法に使用するための製剤の製造における請求項1〜21のいずれか一項記載のプローブの使用：
(a) 請求項1〜21のいずれか一項記載のプローブを被験体に投与する段階であって、ここで該プローブが標的組織に優先的に蓄積する段階；
(b) (1)プローブが標的組織に優先的に蓄積し、(2)標的組織中の酵素が蛍光活性化部位での酵素的切断によりプローブを活性化するだけの時間をおく段階；
(c)蛍光色素によって吸収可能な波長の近赤外光を被験体に照射する工程；および
(d)蛍光色素によって放射された蛍光シグナルを検出する工程。
【請求項３１】
以下の工程を含む、インビボ光学的画像形成法：
(a)ヒト以外の被験体に請求項1〜21のいずれか一項記載のプローブを投与する工程；
(b)プローブが標的組織において活性化されるように時間をおく工程；
(c)蛍光色素によって吸収可能な波長の近赤外光を被験体に照射する工程；および
(d)蛍光色素によって放射された蛍光シグナルを検出する工程。
【請求項３２】
工程(a)〜(d)が時間を経て繰り返される、請求項31記載の方法。
【請求項３３】
工程(d)から放射された蛍光シグナルが、画像を構成するために使用される、請求項31記載の方法。
【請求項３４】
工程(d)が、電荷結合素子（CCD）システムまたは写真フィルムからなる適切な光検出または画像記録成分を用いて行われる、請求項31記載の方法。
【請求項３５】
プローブ活性化の有無またはレベルが疾患状態を示す、請求項31記載の方法。
【請求項３６】
疾患状態が癌である、請求項35記載の方法。
【請求項３７】
被験体が動物生体である、請求項31記載の方法。