【手続補正書】
【提出日】平成24年11月6日(2012.11.6)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項１】
被写体に照明光および励起光を照射する光源を備える照明部と、
該照明部からの励起光の照射により前記被写体において発生した蛍光を撮影し蛍光画像を取得する蛍光撮像部と、
前記照明部からの照明光の照射により前記被写体から戻る戻り光を撮影し参照画像を取得する戻り光撮像部と、
該戻り光撮像部により取得された前記参照画像の輝度値に基づいて露光時間を調節する露光時間調節部と、
該露光時間調節部により調節された前記露光時間に基づいて前記照明部からの照明光または励起光の少なくとも一方の強度を制御する照明制御部と、
前記参照画像または前記蛍光画像の少なくとも一方の輝度を前記露光時間で規格化する第１の規格化手段と、
前記参照画像または前記蛍光画像の少なくとも一方の輝度を、前記照明制御部により制御された前記照明光または前記励起光の少なくとも一方の強度で規格化する第２の規格化手段と、
前記第１の規格化手段および前記第２の規格化手段によって輝度が規格化された前記参照画像および前記蛍光画像の少なくとも一方を用いて、前記蛍光画像を前記参照画像によって補正する画像補正部と
を備える蛍光観察装置。
【手続補正２】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項４】
前記第２の規格化手段により前記参照画像または前記蛍光画像の少なくとも一方の輝度を規格化する前記照明光または前記励起光の少なくとも一方の強度を、その強度分布特性に基づき補正する強度補正手段を備える請求項１から請求項３のいずれか記載の蛍光観察装置。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００６】
上記課題を解決するために、本発明は以下の手段を採用する。
本発明は、被写体に照明光および励起光を照射する光源を備える照明部と、該照明部からの励起光の照射により前記被写体において発生した蛍光を撮影し蛍光画像を取得する蛍光撮像部と、前記照明部からの照明光の照射により前記被写体から戻る戻り光を撮影し参照画像を取得する戻り光撮像部と、該戻り光撮像部により取得された前記参照画像の輝度値に基づいて露光時間を調節する露光時間調節部と、該露光時間調節部により調節された前記露光時間に基づいて前記照明部からの照明光または励起光の少なくとも一方の強度を制御する照明制御部と、前記参照画像または前記蛍光画像の少なくとも一方の輝度を前記露光時間で規格化する第１の規格化手段と、前記参照画像または前記蛍光画像の少なくとも一方の輝度を、前記照明制御部により制御された前記照明光または前記励起光の少なくとも一方の強度で規格化する第２の規格化手段と、前記第１の規格化手段および前記第２の規格化手段によって輝度が規格化された前記参照画像および前記蛍光画像の少なくとも一方を用いて、前記蛍光画像を前記参照画像によって補正する画像補正部とを備える蛍光観察装置を提供する。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１２】
また、上記発明においては、前記第２の規格化手段により前記参照画像または前記蛍光画像の少なくとも一方の輝度を規格化する前記照明光または前記励起光の少なくとも一方の強度を、その強度分布特性に基づき補正する強度補正手段を備えることとしてもよい。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１５】
【図１】本発明の第１の実施形態に係る蛍光観察装置の概略構成を示すブロック図である。
【図２】図１の定量性制御部が備える制御モードの一例を示した図である。
【図３】図１の定量性制御部による通常モード状態からの定量性の制御手順を示すフローチャートである。
【図４】図１の定量性制御部による低励起光モード状態からの定量性の制御手順を示すフローチャートである。
【図５】図１の定量性制御部による低照射光モード状態からの定量性の制御手順を示すフローチャートである。
【図６】図１の定量性制御部の通常モードと低励起光モードとの切り替えおよび低励起光モードと低照射光モードとの切り替えの関係を示す図である。
【図７】本発明の第２の実施形態に係る蛍光観察装置の概略構成を示すブロック図である。
【図８】図７の定量性制御部が備える制御モードの一例を示した図である。
【図９】図７の定量性制御部による通常モード状態からの定量性の制御手順を示すフローチャートである。
【図１０】図７の定量性制御部による低照射光モード状態からの定量性の制御手順を示すフローチャートである。
【図１１】図７の定量性制御部の通常モードと低照射光モードとの切り替えの関係を示す図である。
【図１２】本発明の第２の実施形態の変形例に係る蛍光観察装置の概略構成を示すブロック図である。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４６】
通常モードＡの状態では（ステップＳ２「Ａ」）、図３に示されるように、まず、白色光撮像部４４の次フレームの露光時間が閾値ａｂより短いか長いか判断される（ステップＳＡ３）。次フレームの露光時間が閾値ａｂより長い場合は（ステップＳＡ３「ＮＯ」）、図６に示されるように、通常モードＡが維持される（エンド）。一方、次フレームの露光時間が閾値ａｂ以下の場合は（ステップＳＡ３「ＹＥＳ」）、制御モードが低励起光モードＢに変更される（ステップＳＡ４）。
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５２】
一方、白色光撮像部４４の次フレームの露光時間が閾値ａｂ以下の場合は（ステップＳＢ３「ＮＯ」）、その露光時間が閾値ｂｃより長いか短いか判断される（ステップＳＢ４）。次フレームの露光時間が閾値ｂｃより長い場合は（ステップＳＢ４「ＹＥＳ」）、図６に示されるように、低励起光モードＢが維持される（エンド）。一方、次フレームの露光時間が閾値ｂｃ以下の場合は（ステップＳＢ４「ＮＯ」）、制御モードが低照射光モードＣに変更される（ステップＳＢ４−１）。
【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５５】
次に、低照射光モードＣの状態では（ステップＳ２「Ｃ」）、図５に示されるように、白色光撮像部４４の露光時間が閾値ｃｂより短いか長いか判断される（ステップＳＣ３）。露光時間が閾値ｃｂ以下の場合は（ステップＳＣ３「ＹＥＳ」）、図６に示されるように、低照射光モードＣが維持される（エンド）。一方、露光時間が閾値ｃｂより長い場合は（ステップＳＣ３「ＮＯ」）、制御モードが低励起光モードＢに変更される（ステップＳＣ４）。
【手続補正９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６７】
露光時間が閾値ａｃより長い場合は（ステップＳＡ３´「ＮＯ」）、図１１に示されるように、通常モードＡが維持される（エンド）。一方、露光時間が閾値ａｃ以下の場合は（ステップＳＡ３´「ＹＥＳ」）、制御モードが低照射光モードＣに変更される（ステップＳＡ４´）。
【手続補正１０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００７０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００７０】
また、蛍光露光時間補正部６３および白色光露光時間補正部６８に低照射光モードＣに切り替わる制御信号を出力し、励起光の強度および照明光の強度が低くなった直後の蛍光画像および参照画像がそれぞれ暗くならないように、蛍光撮像部４２の露光時間および白色光撮像部４４の露光時間をそれぞれ長くする補正係数を設定する（ステップＳＡ７´）。これにより、蛍光露光時間制御部６４により設定される蛍光撮像部４２の次フレームの露光時間および白色光露光時間制御部６９により設定される白色光撮像部４４の次フレームの露光時間がそれぞれ補正され、蛍光画像および参照画像の明るさをそれぞれ略一定に保つことができる。
【手続補正１１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００７１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００７１】
次に、低照射光モードＣの状態では（ステップＳ２「Ｃ」）、図１０に示されるように、白色光撮像部４４の露光時間が閾値ｃａより短いか長いか判断される（ステップＳＣ３´）。露光時間が閾値ｃａ以下の場合は（ステップＳＣ３´「ＹＥＳ」）、図１１に示されるように、低照射光モードＣが維持される（エンド）。一方、露光時間が閾値ｃａより長い場合は（ステップＳＣ３´「ＮＯ」）、制御モードが通常モードＡに変更される（ステップＳＣ４´）。
【手続補正１２】
【補正対象書類名】図面
【補正対象項目名】図２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【図２】
2011110216.tif 000001
【手続補正１３】
【補正対象書類名】図面
【補正対象項目名】図３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【図３】
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【手続補正１４】
【補正対象書類名】図面
【補正対象項目名】図５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【図５】
2011110216.tif 000003
【手続補正１５】
【補正対象書類名】図面
【補正対象項目名】図６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【図６】
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【手続補正１６】
【補正対象書類名】図面
【補正対象項目名】図８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【図８】
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【手続補正１７】
【補正対象書類名】図面
【補正対象項目名】図９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【図９】
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【手続補正１８】
【補正対象書類名】図面
【補正対象項目名】図１０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【図１０】
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【手続補正１９】
【補正対象書類名】図面
【補正対象項目名】図１１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【図１１】
2011110216.tif 000008