(57)【要約】  本発明は、ソホロリピッドと生理活性物質と油脂とを含有する組成物の経口投与において、当該生理活性物質の生体内利用率を向上させ得る組成物を提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ソホロリピッドと生理活性物質と油脂とを含有する組成物。
【請求項２】
上記生理活性物質の生体内利用率が改善されていることを特徴とする、請求項１記載の組成物。
【請求項３】
経口投与することにより摂取されることを特徴とする、請求項１または２記載の組成物。
【請求項４】
消化液による生理活性物質の分解が抑制されている、請求項１〜３のいずれかに記載の組成物。
【請求項５】
油脂が、スクワレン、大豆油、菜種油、綿実油、ごま油、サフラワー油、ひまわり油、とうもろこし油、米油、落花生油、カカオ油脂および炭素数８〜１０個の中鎖脂肪酸グリセリドからなる群より選択される少なくとも一種以上の油脂である、請求項１〜４のいずれかに記載の組成物。
【請求項６】
ソホロリピッドが、酸型ソホロリピッドおよび／またはラクトン型ソホロリピッドであることを特徴とする、請求項１〜５のいずれかに記載の組成物。
【請求項７】
生理活性物質が腸管吸収される生理活性物質である、請求項１〜６のいずれかに記載の組成物。
【請求項８】
腸管吸収される生理活性物質がラクトフェリンである、請求項７に記載の組成物。
【請求項９】
ラクトフェリンがモルヒネの鎮痛効果を増強することを特徴とする、請求項８に記載の組成物。
【請求項１０】
生理活性物質が、ビタミンA、ビタミンD、ビタミンE、ビタミンK、およびそれらの誘導体から選ばれるビタミン類、
ドコサヘキサエン酸、エイコサペンタエン酸、αリノレン酸、γ-リノレン酸、リノール酸、アラキドン酸から選ばれる多価不飽和脂肪酸、
コエンザイムQ10に例示されるイソプレノイド側鎖をもつユビキノン類、メナキノン類、フィロキノン類、
α-カロテン、β-カロテン、γ-カロテン、リコピン、β- クリプトサンチン、ルテイン、ゼアキサンチン、カンタキサンチン、及びアスタキサンチンから選ばれるカロテノイド類、
エルゴステロール及びスチグマステロールから選ばれるステロイド類、
クルクミン、ケルセチン及びケイヒ酸から選ばれる脂溶性ポリフェノール類、
イソフラボン、アントシアニジン及びヘスぺリジンから選ばれるフラボノイド類、
カテキン及びプロアントシアニジンから選ばれるタンニン類、
田七人参、高麗人参、大豆、キュウリ、ユッカ、アマチャヅル及びムクロジから選ばれる植物から得られるサポニン類、
セサミン及びセサミノールから選ばれるリグナン類、
ククルビタシン及びリモニンから選ばれるトリテルペン類、
及びα-リポ酸から選択される脂溶性生理活性物質
又は、
ビタミンB1、ビタミンB2、ナイアシン、パントテン酸、ビタミンB6、ビオチン、葉酸、ビタミンB12、ビタミンC及びそれらの誘導体から選ばれるビタミン、
グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファン、セリン、トレオニン、プロリン、ヒドロキシプロリン、システイン、メチオニン、アスパラギン酸、グルタミン酸、リジン、アルギニン、ヒスチジン及びカルニチンから選ばれるアミノ酸、
クロロゲン酸、タンニン、カテキン、フラボノイド、リグナン、リグニン、クマリン、テアフラビンから選ばれるポリフェノール類若しくはフラボノイド類の配糖体、
大豆ペプチド、イワシペプチド、マリンペプチド、カゼインホスホペプチド、ホエイペプチド、小麦ペプチド及びコーンペプチドから選ばれるペプチド、
羅漢果及びカンゾウから選ばれるトリテルペン配糖体、
カルシウム、マグネシウム、鉄、亜鉛、カリウム、ナトリウム、銅、バナジウム、マンガン、セレン、モリブデン及びコバルトから選ばれるミネラル類及びこれらのミネラルが結合した化合物から選択される水溶性生理活性物質である請求項１〜７のいずれかに記載の組成物。
【請求項１１】
医薬であることを特徴とする、請求項１〜１０のいずれかに記載の組成物。
【請求項１２】
食品であることを特徴とする、請求項１〜１０のいずれかに記載の組成物。
【請求項１３】
サプリメントであることを特徴とする、請求項１〜１０のいずれかに記載の組成物。
【請求項１４】
ソホロリピッドと生理活性物質と油脂とを混合することを特徴とする、請求項１記載の組成物の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、生理活性物質の生体内利用率が改善されている、ソホロリピッドを含有する生理活性組成物およびその製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
生物由来の界面活性剤であるバイオサーファクタントの一つとして知られるソホロリピッドは、酵母の発酵から得られる発酵産物である（非特許文献１）。前記ソホロリピッドは、例えば、グルコース等の糖類と植物油脂等の炭素源を含む液体培地に酵母を接種し、穏和な温度、圧力条件下で通気・攪拌するだけで容易に生産される。ソホロリピッドは、その生産性および安全性等の高さから、生理活性物質と共に使用され、洗剤、医薬品、化粧品および食品等、様々な分野での適用が試みられている（特許文献１）。【０００３】
しかしながら、生理活性物質はソホロリピッド共に使用されたとしても、例えば経口投与によって生理活性物質が投与される場合、例えば唾液、胃液または腸液等の消化液によって、生理活性物質がしばしば分解され、あるいは、生理活性物質が消化管からの吸収されることによる生体内利用率が必ずしも満足すべきものではなかった。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開２００９−６２２８８号公報
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】Gorin, Can. J Chem., 39, 846（1961）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明者らは、上記問題点を解決するために、多数のトライアンドエラーを繰り返し、様々な工夫を長期間の実験を継続して行なった結果、意外なことに、ソホロリピッドと生理活性物質と油脂とを含有する組成物が上記問題点を一挙に解決するという驚くべき効果が奏されることを見出し、さらに検討に加えて本発明を完成するに至った。【０００７】
すなわち、本発明は、以下の発明に関する。
［１］ソホロリピッドと生理活性物質と油脂とを含有する組成物。
［２］上記生理活性物質の生体内利用率が改善されていることを特徴とする、前記［１］記載の組成物。
［３］経口投与することにより摂取されることを特徴とする、前記［１］または［２］記載の組成物。
［４］消化液による生理活性物質の分解が抑制されている、前記［１］〜［３］のいずれかに記載の組成物。
［５］油脂が、スクワレン、大豆油、菜種油、綿実油、ごま油、サフラワー油、ひまわり油、とうもろこし油、米油、落花生油、カカオ油脂および炭素数８〜１０個の中鎖脂肪酸グリセリドからなる群より選択される少なくとも一種以上の油脂である、前記［１］〜［４］のいずれかに記載の組成物。
［６］ソホロリピッドが、酸型ソホロリピッドおよび／またはラクトン型ソホロリピッドであることを特徴とする、前記［１］〜［５］のいずれかに記載の組成物。
［７］生理活性物質が腸管吸収される生理活性物質である、前記［１］〜［６］のいずれかに記載の組成物。
［８］腸管吸収される生理活性物質がラクトフェリンである、前記［７］に記載の組成物。
［９］ラクトフェリンがモルヒネの鎮痛効果を増強することを特徴とする、前記［８］に記載の組成物。
［１０］生理活性物質が、ビタミンA、ビタミンD、ビタミンE、ビタミンK、およびそれらの誘導体から選ばれるビタミン類、
ドコサヘキサエン酸、エイコサペンタエン酸、αリノレン酸、γ-リノレン酸、リノール酸、アラキドン酸から選ばれる多価不飽和脂肪酸、
コエンザイムQ10に例示されるイソプレノイド側鎖をもつユビキノン類、メナキノン類、フィロキノン類、
α-カロテン、β-カロテン、γ-カロテン、リコピン、β- クリプトサンチン、ルテイン、ゼアキサンチン、カンタキサンチン、及びアスタキサンチンから選ばれるカロテノイド類、
エルゴステロール及びスチグマステロールから選ばれるステロイド類、
クルクミン、ケルセチン及びケイヒ酸から選ばれる脂溶性ポリフェノール類、
イソフラボン、アントシアニジン及びヘスぺリジンから選ばれるフラボノイド類、
カテキン及びプロアントシアニジンから選ばれるタンニン類、
田七人参、高麗人参、大豆、キュウリ、ユッカ、アマチャヅル及びムクロジから選ばれる植物から得られるサポニン類、
セサミン及びセサミノールから選ばれるリグナン類、
ククルビタシン及びリモニンから選ばれるトリテルペン類、
及びα-リポ酸から選択される脂溶性生理活性物質
又は、
ビタミンB1、ビタミンB2、ナイアシン、パントテン酸、ビタミンB6、ビオチン、葉酸、ビタミンB12、ビタミンC及びそれらの誘導体から選ばれるビタミン、
グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファン、セリン、トレオニン、プロリン、ヒドロキシプロリン、システイン、メチオニン、アスパラギン酸、グルタミン酸、リジン、アルギニン、ヒスチジン及びカルニチンから選ばれるアミノ酸、
クロロゲン酸、タンニン、カテキン、フラボノイド、リグナン、リグニン、クマリン、テアフラビンから選ばれるポリフェノール類若しくはフラボノイド類の配糖体、
大豆ペプチド、イワシペプチド、マリンペプチド、カゼインホスホペプチド、ホエイペプチド、小麦ペプチド及びコーンペプチドから選ばれるペプチド、
羅漢果及びカンゾウから選ばれるトリテルペン配糖体、
カルシウム、マグネシウム、鉄、亜鉛、カリウム、ナトリウム、銅、バナジウム、マンガン、セレン、モリブデン及びコバルトから選ばれるミネラル類及びこれらのミネラルが結合した化合物から選択される水溶性生理活性物質である前記［１］〜［７］のいずれかに記載の組成物。
［１１］医薬であることを特徴とする、前記［１］〜［１０］のいずれかに記載の組成物。
［１２］食品であることを特徴する、前記［１］〜［１０］のいずれかに記載の組成物。
［１３］サプリメントであることを特徴とする、前記［１］〜［１０］のいずれかに記載の組成物。
［１４］ソホロリピッドと生理活性物質と油脂とを混合することを特徴とする、前記［１］記載の組成物の製造方法。
なお、生理活性物質は生理活性を有する化合物であればどのようなものであってもよく、脂溶性と水溶性を併有する生理活性物質であってもよい。上記の例示化合物に限られず、上記の例示化合物に類似の化合物であってもよい。例えば、生理活性物質は、葉酸、GABA、カフェイン、セサミン、テオフィリン、テオブロミン、ロイシン、イソロイシン、バリン、グリシン、アンセリン、グルタチオン、クルクミン、グリチルリチン、タウリン等であってもよい。
【発明の効果】
【０００８】
本願発明によって提供される組成物は、
１．生理活性物質の生体内利用率が優れている、
２．特に、経口投与により、生理活性物質が生体内に効率よく摂取される、
３．消化液による生理活性物質の分解が抑制されている、
４．腸管からの生理活性物質の吸収が優れ、
５．ソホロリピッドの分解が抑制されている等の優れた諸性質を有する理想的な医薬、食品として有用である。
【発明を実施するための形態】
【０００９】
ソホロリピッドとは、ソホロースまたはヒドロキシル基が一部アセチル化したソホロースと、ヒドロキシル脂肪酸とからなる糖脂質である。なお、ソホロースとは、β１→２結合した２分子のブドウ糖からなる糖である。ヒドロキシル脂肪酸とは、ヒドロキシル基を有する脂肪酸である。また、ソホロリピッドは、例えば、ヒドロキシ脂肪酸のカルボキシル基が遊離した酸型ソホロリピッドと、分子内のソホロースが結合したラクトン型ソホロリピッド等がある。例えば、酸型ソホロリピッドとして代表的なものは下記一般式（１）であり、例えば、ラクトン型ソホロリピッドとして代表的なものは下記一般式（２）である。酵母の発酵によって得られる培養液に含まれるソホロリピッドは、一般式（１）と一般式（２）の混合物であり、脂肪酸鎖長（Ｒ３）が異なるもの、ソホロースの６’（Ｒ２）および６’’位（Ｒ１）がアセチル化あるいはプロトン化されたもの等、３０種以上の構造同族体の集合体として得られるものがある。
【００１０】
【化１】
2015137357.tif 000002
【００１１】
【化２】
2015137357.tif 000003
【００１２】
前記一般式（１）または（２）において、Ｒ０は水素あるいはメチル基のいずれかである。Ｒ１およびＲ２はそれぞれ独立して、水素またはアセチル基である。Ｒ３は飽和脂肪族炭化水素鎖または二重結合を少なくとも一個有する不飽和脂肪族炭化水素鎖であり、一以上の置換基を有していても良い。該置換基は、本発明の効果を妨げない限り特に限定されないが、例えば、ハロゲン、水酸基、低級（Ｃ１〜６）アルキル基、ハロ低級（Ｃ１〜６）アルキル基、ヒドロキシ低級（Ｃ１〜６）アルキル基、ハロ低級（Ｃ１〜６）アルコキシ基等が挙げられる。また、Ｒ３の炭素数は、通常１１〜２０、好ましくは１３〜１７、より好ましくは１４〜１６である。
【００１３】
本発明で使用されるソホロリピッドとしては、ヒドロキシ脂肪酸のカルボキシル基が遊離した酸型（一般式（１））と、分子内のソホロースが結合したラクトン型（一般式（２））を使用できる。
【００１４】
本発明で使用されるソホロリピッドは公知の方法によって製造され、例えば、酵母を用いる培養方法により製造されることが好ましい。
【００１５】
前記酵母発酵によって得られるソホロリピッド含有液としては、本発明の効果を妨げない限り特に限定されないが、天然型ソホロリピッド含有液でも良く、天然型ソホロリピッドからラクトン型のみを分離したものであっても良いが、コスト等の面からは、天然型ソホロリピッド含有液を用いることが好ましい。ここで、天然型ソホロリピッドとは、酵母を培養して得られた培養液からソホロリピッドを含む成分を分離したものを指し、通常、酸型ソホロリピッドおよびラクトン型ソホロリピッド等の混合物である。
【００１６】
前記酵母としては、例えば、Ｓｔａｒｍｅｒｅｌｌａ（Ｃａｎｄｉｄａ）  ｂｏｍｂｉｃｏｌａ、Ｃ．ａｐｉｃｏｌａ、Ｃ．ｐｅｔｒｏｐｈｉｌｕｍ、Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ（Ｃａｎｄｉａ）  ｂｏｇｏｒｉｅｎｓｉｓ、Ｃ．  ｂａｔｉｓｔａｅ、Ｃ．ｇｒｏｐｅｎｇｉｅｓｓｅｒｉ、Ｗｉｃｋｅｒｈａｍｉｅｌｌａ  ｄｏｍｅｒｃｑｉａｅ、Ｙａｒｒｏｗｉａ  ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ等が挙げられ、これらの酵母を公知の方法で培養することにより、ソホロリピッドが産生される。前記酵母は、保存機関から分譲された菌株またはその継代培養によって得られた菌株であっても良い。ここで、Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ（Ｃａｎｄｉａ）  ｂｏｇｏｒｉｅｎｓｉｓ  ＮＲＣＣ９８６２が生産するソホロリピッドは、１３−［（２’−Ｏ−β−Ｄ−ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ−β−Ｄ−ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ）ｏｘｙ］  ｄｏｃｏｓａｎｏｉｃ  ａｃｉｄ６’，  ６’’−ｄｉａｃｅｔａｔｅであり、アルキル基の中央のヒドロキシル基とソホロースがグリコシド結合している。このソホロリピッドは前記一般式（１）および（２）とは異なるが、ソホロースとヒドロキシル脂肪酸から構成される点では同じであり、本発明においてはそのような化合物もソホロリピッドに包含される。
【００１７】
ソホロリピッド産生のための酵母の培養方法としては、例えば、高濃度の糖と疎水性の油性基質を同時に与えて培養する方法等が好ましく挙げられる。または、これに限らず、本発明の効果を妨げない限り広く公知の方法を適用できる。前記公知の方法は、特開２００２−０４５１９５号公報等に記載されたものであっても良い。具体的には、糖としてグルコース、疎水性の油性基質として脂肪酸と植物油からなる炭素源を用いて、Ｓｔａｒｍｅｒｅｌｌａ（Ｃａｎａｄｉｄａ）ｂｏｍｂｉｃｏｌａを生産酵母として培養する手法であっても良い。
【００１８】
培地組成は、特に限定されないが、ソホロリピッドの脂肪酸部分は、与える疎水性基質の脂肪酸鎖長やその割合に依存することが知られており、ある程度の制御が可能である。疎水性基質としては、例えば、オレイン酸やオレイン酸を高い割合で含有する脂質等が好適である。そのような脂質としては、例えば、パーム油、米ぬか油、ナタネ油、オリーブ油、サフラワー油等の植物油、豚脂や牛脂等の動物油等が挙げられる。さらに、疎水性基質にトリグリセライドとオレイン酸の混合基質を用いれば、高い割合でオレイン酸を含むソホロリピッドを高い収量・収率で培養液から得ることが可能である。産業利用の観点からは、安定に高い収量・収率でソホロリピッドを発酵生産することが求められるが、この場合、炭素源として親水性の糖と疎水性の油脂を混合したものが好ましい。親水性基質としては、グルコースが多用される。なお、ソホロリピッド製造のための酵母培養における培養条件は従来充分確立されているから、本発明においてもそれらに従って良い。
【００１９】
得られた培養液から、例えば遠心分離、デカンテーション等の方法で分離後、水洗いすることにより、天然型ソホロリピッド含有液が回収される。前記培養液から天然型ソホロリピッド含有液を回収する方法は、本発明の効果を妨げない限り特に限定されず、公知の方法を用いることができる。そのような方法としては、例えば、特開２００３−９８９６号公報等に記載されたものであっても良い。具体的には、精製プロセスでは、培養終了液中で沈殿するソホロリピッドのｐＨを変更することで、その水への溶解性を制御し、有機溶剤を一切使用することなく、約５０Ｗｔ％含水物として天然型ソホロリピッド粗精製物を得ることができる。
【００２０】
本発明に用いるソホロリピッドは、上述の通り、酸型および／またはラクトン型ソホロリピッドを使用できるが、酸型ソホロリピッドの含有率が２０Ｗｔ％以上のものが好ましく、５０Ｗｔ％以上のものがより好ましく、７０Ｗｔ％以上のものがさらに好ましく、８０Ｗｔ％以上のものが特に好ましく、９０Ｗｔ%以上のものが最も好ましい。
【００２１】
天然型ソホロリピッド粗精製物中の酸型ソホロリピッドの含有率を向上させる方法として、本発明の効果を妨げない限り広く公知の方法を適用できる。例えば、上記方法により得られた天然型ソホロリピッド粗精製物と水酸化ナトリウム水溶液を混合して加熱することで加水分解を行い、ｐＨ調整剤を添加してｐＨを調整する方法が考えられる。
【００２２】
ｐＨ調整剤としては、例えば、炭酸水素ナトリウム、硫酸、塩酸、硝酸、燐酸、ホウ酸、フッ化水素酸等の無機酸；ギ酸、酢酸、リンゴ酸、クエン酸、シュウ酸、グルタミン酸、アスパラギン酸等の有機酸等が使用される。
【００２３】
また、本発明のソホロリピッドには、高純度酸型ソホロリピッドを用いることもできる。
【００２４】
高純度酸型ソホロリピッドの製造方法は、
（ｉ）酸型ソホロリピッド含有液のｐＨを酸性領域に調整する工程（以下、工程（ｉ）ともいう。）、及び
（ｉｉ）前記工程（ｉ）で得られた酸性の酸型ソホロリピッド含有液をクロマトグラフィー分離する工程（以下、工程（ｉｉ）ともいう。）
を有することを特徴とする。以下、各工程について詳細に説明する。
【００２５】
前記工程（ｉ）は、酸型ソホロリピッド含有液のｐＨを酸性領域に調整する工程である。前記酸性領域でカルボキシル基がプロトン化されることにより、安定かつ緻密な酸型ソホロリピッド超分子を形成することができる。
【００２６】
前記酸性領域としては、酸型ソホロリピッドが安定な超分子構造を形成でき、後の工程で発酵副産物等の不純物を効果的に除去できる、高純度酸型ソホロリピッドを高回収率で得られる等の点から、酸型ソホロリピッドのｐＫａ値であるｐＨ７未満程度であることが好ましく、ｐＨ１〜６程度がより好ましく、ｐＨ３〜５程度がさらに好ましい。ｐＨを前記範囲に調整することにより、酸型ソホロリピッドの分子配向性が単一化され、かつ超分子が形成されやすくなるため、より高純度で安定な酸型ソホロリピッドが得られる。
【００２７】
酸型ソホロリピッド含有液を前記酸性領域に調整する方法としては、本発明の効果を妨げない限り特に限定されず、広く公知の方法を使用できる。ｐＨ調整剤としては、例えば、炭酸水素ナトリウム、硫酸、塩酸、硝酸、燐酸、ホウ酸、フッ化水素酸等の無機酸；ギ酸、酢酸、リンゴ酸、クエン酸、シュウ酸、グルタミン酸、アスパラギン酸等の有機酸等が使用される。
【００２８】
工程（ｉｉ）は、工程（ｉ）で得られた酸性の酸型ソホロリピッド含有液をクロマトグラフィー分離する工程である。
【００２９】
前記クロマトグラフィー分離に供するソホロリピッド含有液は、分離効率の面から、粘度が約５〜５０ｍＰａ・Ｓであることが好ましく、約５〜２０ｍＰａ・Ｓであることがより好ましい。ソホロリピッド含有液の粘度が高い場合、前記範囲内に粘度を調節したものを用いることが好ましい。粘度の調整方法としては、本発明の効果を妨げない限り特に限定されないが、人体および環境等に対する悪影響が低減されることから、エタノールおよび精製水で希釈することが好ましい。
【００３０】
前記クロマトグラフィーにおいて、固定相として用いられる充填剤（吸着剤）には、例えば、当該分野で公知の任意のシリカゲル、オクタデシルシリカゲル（ＯＤＳ）樹脂、イオン交換樹脂、合成吸着剤等が用いられる。また、前記クロマトグラフィーは、溶離液（展開相）として、安全性の高いものを選択できる等の点から、逆相クロマトグラフィーであることが好ましい。前記クロマトグラフィーが逆相クロマトグラフィーである場合、充填剤としては、ＯＤＳ樹脂等を用いることがより好ましい。シリカゲル担体に疎水性オクタデシル基等が化学修飾されたＯＤＳ樹脂を用いることで、ソホロリピッドのアルキル側鎖との疎水性相互作用を利用して、より効率よく高純度ソホロリピッド含有液を得ることができる。逆相クロマトグラフィーの溶離液には、充填剤より極性の強い溶媒が用いられることが分離効率等の点から好ましい。このような溶離液としては、例えば、メタノール、エタノール等が好ましく挙げられ、安全性の面からはエタノール等が特に好ましく挙げられる。
このようにして得られるソホロリピッド含有溶出画分から、ソホロリピッドを通常粉末として取得できる。
【００３１】
ソホロリピッド含有液を粉末化させる方法としては、本発明の効果を妨げない限り特に限定されず、例えば、フリーズドライ法、再結晶法、スプレードライ法等の公知の方法が用いられ、特に、生産の効率性の面で、スプレードライ法が好ましく用いられる。前記スプレードライ法では、賦形剤を用いても用いなくても良い。前記スプレードライ法の条件は、本発明の効果を妨げない限り特に制限されないが、高温かつ高回転で処理することで（例えば、温度約１００℃以上、回転数約１２０００ｒｐｍ以上等）、流動性が高く、だまの少ないソホロリピッド粉末を得ることができる。
【００３２】
本発明のソホロリピッド粉末には、所望により、ソホロリピッド以外の成分が含まれていても良い。該成分としては、例えば、デキストリン等の炭水化物、脱脂粉乳等のタンパク質含有原料、粉末油脂原料、ビタミン、ミネラル、植物ステロール、乳酸菌粉末、その他食品として利用可能な粉末原料等が挙げられる。また、本発明のソホロリピッド粉末は、流動層造粒等、公知の方法により造粒されていることが好ましい。造粒には、転動流動コーティング装置を用いて行うことが、粉末の流動性が優れる点から特に好ましい。造粒後の粉末は、平均粒径が約３００μｍ以下であることが好ましく、約２００μｍ以下であることがより好ましい。本発明において、平均粒径とはふるい分け法によって測定した粒度分布の積算重量が５０重量％に到達する粒径で定義されるものとする。
【００３３】
ソホロリピッドの使用量は、一概には言えないが、例えば、組成物全体に対して、通常は０．０００１〜９９．９９９９Ｗｔ％、好ましくは０．０１〜２０Ｗｔ％、さらに好ましくは、０．１〜１０Ｗｔ％である。
【００３４】
本発明で使用される油脂としては、固体状油脂であっても良く、液体状油脂であっても良い。
【００３５】
本発明で「固体状油脂」というときは、特別な場合を除き、常温（25℃）で固体状である油脂をいう。本発明に用いることのできる固体状油脂としては、例えば、スクアレン、トリラウリン（グリセロールトリラウレート）、トリミリスチン（グリセロールトリミリステート）、トリパルミチン（グリセロールトリパルミテート）、トリステアリン（グリセロールトリステアレート）、牛脂硬化油、豚脂硬化油、水素添加魚油、菜種硬化油、大豆硬化油、パーム硬化油等を例示できる。
【００３６】
本発明で「液体状油脂」というときは、特別な場合を除き、常温（２５℃）で液体状である油脂をいう。本発明に用いることのできる液体状油脂の具体例としては、大豆油、とうもろこし油、綿実油、ヒマワリ油、ウォールナッツオイル（クルミオイル）、オリーブ油、キャスターオイル（ひまし油）、アーモンドオイル、サフラワー油（紅花油）、アプリコットカーネルオイル、アボガドオイル、月見草オイル、小麦胚芽油、ククイナッツオイル、グレープシードオイル、ココアバター、ココナッツオイル、菜種油、落花生油、米油、ごま油、パーム核油、パームオイル、ホホバオイル、マカダミアナッツオイル、シアバター、マンゴーバター、コクムバター、鯨油、イワシ油、イカ油等を例示できる。また上記液状油脂は精製されたもの、例えば、サラダ油等でも良く、または、精製されていなくても良い。
【００３７】
油脂の使用量は、一概には言えないが、例えば、組成物全体に対して、通常は０．０００１〜９９．９９９９Ｗｔ％、好ましくは０．０１〜２０Ｗｔ％、さらに好ましくは、０．１〜１０Ｗｔ％程度である。
【００３８】
本発明で使用される生理活性物質としては、特に限定されるものではないが、腸管吸収される生理活性物質が好ましく、例えば、ビタミンＡ，ビタミンＢ群、ビタミンＣ、ビタミンＤ、ビタミンＥ、ビタミンＫ、ペプチド、ＤＨＡやＥＰＡ等の多価不飽和脂肪酸、羅漢果配糖体等が挙げられるが、生体に好ましい生理活性を与えるものならばどのようなものでも良い。なお、生理活性物質がラクトフェリンである場合は、ラクトフェリンはモルヒネ等の鎮痛効果を有する薬剤の鎮痛効果を増強する生理作用を有する。この場合、ラクトフェリンと鎮痛作用物質の投与経路は同じであっても良いし、異なっていても良い。
【００３９】
生理活性物質の使用量は、一概には言えないが、例えば、組成物全体に対して、通常は０．００１〜９９．９９９Ｗｔ％、好ましくは０．０１〜２０Ｗｔ％、さらに好ましくは、０．１〜１０Ｗｔ％程度である。
【００４０】
本発明の組成物は、さらにシクロデキストリンを含有することができる。前記シクロデキストリンとしては、本発明の効果を妨げない限り特に限定されないが、例えば、α−シクロデキストリン、β−シクロデキストリン、γ−シクロデキストリンおよびこれらの誘導体から選ばれる１以上が用いられる。前記誘導体としては、例えば、分岐シクロデキストリン並びにメチル基、ヒドロキシプロピル基およびアセチル基等の置換基を有するシクロデキストリン等が挙げられる。前記シクロデキストリンのうち、特に、保存安定性の点から、α−シクロデキストリン、β−シクロデキストリンおよびγ−シクロデキストリン等が好ましく挙げられる。
【００４１】
本発明のソホロリピッドにおけるシクロデキストリンの含有量は特に限定されないが、苦味および酵母臭がマスキングされることに加え、ソホロリピッドの生理活性が有効に発揮されうる等の点から、約５０Ｗｔ％〜９９Ｗｔ％であることが好ましく、約８０Ｗｔ％〜９５Ｗｔ％であることがより好ましい。また、本発明のソホロリピッド粉末におけるソホロリピッドの含有量は、潮解が生じない等、保存安定性の点から、シクロデキストリン１００質量部に対し、約１質量部〜１２０質量部であることが好ましく、約１質量部〜８０質量部であることがより好ましく、約２０質量部〜８０質量部であることがさらに好ましい。
【００４２】
本発明では、乳化剤を使用することができる。本発明で「乳化剤」というときは、水と油等異なる性質の2つの物質が接する境界面（＝界面）に吸着または配列し、界面の性質を著しく変える働きを持つ物質をいう。本発明においては、食品上許容されるものであれば、このような作用を有する種々の物質を乳化剤として用いうる。
【００４３】
本発明において、乳化剤の例として、レシチン、モノアシルグリセロールおよび／またはジアシルグリセロールを例示できる。レシチンは、ＨＬＢ値が比較的低く、大豆等の天然物から製造可能であるとの観点からも、特に好ましい。
【００４４】
また、乳化剤としてモノアシルグリセロールまたはジアシルグリセロールを用いる場合、モノアシルグリセロールまたはジアシルグリセロールを構成する脂肪酸の好ましい例として、ステアリン酸、パルミチン酸、ミリスチン酸、ラウリン酸を例示でき、特に好ましいものとして、パルミチン酸を例示できる。
【００４５】
本願発明の製造方法は、油脂とソホロリピッドと生理活性物質を混合するという方法である。また、これらを混合する方法として、油相と水相とをそれぞれ混合させ、加熱して乳化させることによって作製することが好ましい。ここで言う油相とは、油脂以外にも、例えば、油溶性生理活性物質、乳化剤等を含有することができ、また、水相には、ソホロリピッド以外にも水溶性生理活性成分、ｐＨ調整剤、水等を含むことができる。
【００４６】
さらに、上記油相および水相をそれぞれ別々に加熱し、高速攪拌しながら油層中に水相を添加して乳化させることが好ましい。
【００４７】
また、生理活性物質は、油相中および／または水相中に添加することができ、油相と水相とを混合した乳化後に加えることもできる。
【００４８】
また、乳化温度は、生理活性物質の生体内利用率の観点から、０〜１００℃が好ましく、２０〜８０℃がさらに好ましく、４０〜６０℃が最も好ましい。
【００４９】
また、油相と水相とを混合し、乳化させる攪拌においては、特に限定されるべきものではないが、５００ｒｐｍ〜２００００ｒｐｍで攪拌することが好ましく、５０００〜１５０００ｒｐｍがより好ましく、８０００〜１２０００ｒｐｍが最も好ましい。
【００５０】
本発明における組成物は、医薬として用いられる場合は、以下のような態様で用いられることが好ましい。
【００５１】
全身的或いは局所的に、経口若しくは非経口で投与することができる。投与量は年齢、体重、症状、生理活性物質の種類等により異なるが、通常成人一人当たり、１回に０．１ｍｇ乃至１ｇの範囲で、１日１回乃至数回投与することができる。また、本発明化合物はヒトはもちろんのこと、ヒト以外の動物、特に哺乳類にも用いることができる。
本発明化合物は、経口投与のための固体組成物および液体組成物、若しくは非経口投与のための注射剤等の製剤とするために適当な希釈剤、分散剤、吸着剤、溶解剤等の添加剤を混合することができる。また、本発明の医薬組成物は、例えば、錠剤、丸剤、散剤、顆粒剤、坐剤、注射剤、点眼剤、液剤、カプセル剤、トローチ剤、エアゾール剤、エリキシル剤、懸濁剤、乳剤、シロップ剤等の公知の形態を有していて良い。
【００５２】
本発明の医薬組成物が、例えば錠剤、丸剤、散剤、顆粒剤等の固形製剤である場合、添加剤としては、例えば乳糖、マンニトール、ブドウ糖、ヒドロキシプロピルセルロース、微晶性セルロース、澱粉、ポリビニルヒドリン、メタケイ酸アルミン酸マグネシウム、無水ケイ酸末等が挙げられる。錠剤または丸剤に調製する場合は、必要により白糖、ゼラチン、ヒドロキシプロピルセルロースまたはヒドロキシメチルセルロースフタレート等の胃溶性あるいは腸溶性物質のフィルムで皮膜しても良いし、二以上の層からなる多層錠であっても良い。
【００５３】
本発明の医薬組成物等の組成物としては、本発明化合物を溶媒に溶解し、さらに添加剤を加えて得られる液状、半固形状または固形状の内容物を充填したカプセル剤も挙げられる。前記溶媒としては、水、精製水、エタノールまたは植物油等が挙げられ、中でもエタノール、水または精製水とエタノールの混合液を用いるのが好ましい。添加剤としては、カプセル剤製造の際に通常用いられる添加剤を特に制限なく用いることができる。前記添加剤としては、例えば、グリセリン；プロピレングリコール脂肪酸エステル類；ポリエチレングリコール２００〜６００等の低分子量ポリエチレングリコールやそのグリセリン脂肪酸エステル、中鎖脂肪酸トリグリセライド等；例えば、ステアリルアルコール、セタノール、ポリエチレングリコール、そのエステル体等のアルコール／多価アルコール類等；例えば、ゴマ油、大豆油、落花生油、コーン油、硬化油、パラフィン油、サラシミツロウ等の油脂類；例えば、クエン酸トリエチル、トリアセチン、ステアリン酸、パルミチン酸、ミリスチン酸等の脂肪酸およびその誘導体等を挙げることができ、液状または半固形状の内容物の作製に適したものである。本発明のカプセル剤においては、添加剤としてプロピレングリコール脂肪酸エステル類を用いることが好ましい。プロピレングリコール脂肪酸エステル類としては、例えば、プロピレングリコールモノカプリレート（Ｃａｐｍｕｌ  ＰＧ−８（商品名）、Ｓｅｆｏｌ２１８（商品名）、Ｃａｐｒｙｏｌ９０（商品名））、プロリレングリコールモノラウレート（Ｌａｕｒｏｇｌｙｃｏｌ  ＦＣＣ（商品名））、プロピレングリコールモノオレアート（Ｍｙｖｅｒｏｌ  Ｐ−Ｏ６（商品名））、プロピレングリコールミリステート、プロピレングリコールモノステアラート、プロピレングリコールリシノレート（Ｐｒｏｐｙｍｕｌｓ（商品名））、プロピレングリコールジカプリレート／ジカプラート（Ｃａｐｔｅｘ（登録商標）２００（商品名））、プロリレングリコールジラウレート、プロピレングリコールジステアラート、プロピレングリコールジオクタノエート（Ｃａｐｔｅｘ（登録商標）８００（商品名））等が挙げられる。本発明のカプセル剤を構成する素材は、特に限定されないが、例えば、寒天、アルギン酸塩、デンプン、キサンタンもしくはデキストラン等の天然由来の多糖類等；ゼラチンもしくはカゼイン等のタンパク；ヒドロキシデンプン、プルラン、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニルアルコールもしくはその誘導体、ポリアクリル誘導体、ポリビニルピロリドンもしくはその誘導体、またはポリエチレングリコール等の化学処理品等が挙げられる。
【００５４】
本発明の医薬組成物が、例えば薬剤的に許容される乳濁剤、溶解剤、懸濁剤、シロップ剤またはエリキシル剤等の経口投与のための液体製剤である場合、用いる希釈剤としては、例えば水、精製水、エタノール、植物油、乳化剤等が挙げられる。又、この液体製剤においては希釈剤以外に浸潤剤、懸濁剤、甘味剤、風味剤、芳香剤または防腐剤等のような補助剤を混合させても良い。
【００５５】
本発明における食品としては、例えば、加工品、調理食品等であっても良く、本発明の組成物を上記食品の原料または食品添加剤として使用することができる。
【００５６】
調理食品の具体例としては、上記素材等のフライ類、シューストリング類（フライドポテト等でも良い）、竜田揚げ類、てんぷら類、コロッケ類、カツ類、スティック類、蒲焼き類、照り焼き類、和洋風煮物類、スープ・ポタージュ類、酢豚・八宝菜・エビチリソースｓ等の中華惣菜類、グラタン類、カレーおよびシチュー類、ミートソース・あんかけ等のソース類、卵焼き・厚焼き卵・錦糸卵・オムレツ・茶碗蒸し等の卵製品、白飯・赤飯・おむすび・ちまき・釜飯・寿司・焼飯・ピラフ・チキンライス・ドライカレー・ドリア・雑炊・粥・餅・おはぎ等の米飯調理品類、ハンバーグ・ミートボール・餃子・シュウマイ・春巻・更に焼肉・照焼き・すき焼き・ジンギスカン・焼き鳥・ミートロール・フライドチキン・チキンナゲット等の肉調理品、水産練り製品およびこれらを用いたおでん等の調理品類、カツ丼・親子丼・中華丼・てんぷら丼等の丼物の素、うどん・そば・焼きそば・ラーメン・ワンタン等の麺類、マカロニ・スパゲッチイ等のパスタ類、パイ・ピザ・お好み焼き・たこやき・あんまん・肉まん・パン・ケーキ・ドーナッツ・ホットケーキ等の穀類加工品、豆腐・がんもどき・納豆・金時豆等の豆加工品、飴・ようかん・ゼリー・プリン・ババロア・チョコレート・ヨーグルト・生クリーム・ホイップクリーム・鯛焼き・クッキーの生地等の菓子類および果汁（ジュース）等、こんにゃく等が挙げられ、特に、チョコレート、アイスクリーム、ゼリー等に好ましく用いられる。
【実施例】
【００５７】
以下、本発明の組成物を具体的に説明するが、以下の実施例は、本発明を説明するためのものであり、本発明をなんら制限するものではない。【００５８】
なお、本願実施例において、特に記載がないときにおいて、％はＷｔ％を表す。【００５９】
（１）組成物の作製【００６０】
実施例１
油相に、スクワレン（マルハニチロ食品社製スクワレン）、大豆レシチン（辻製油社製SLP-ペースト）およびグリセリン（花王社製グリセリン）を混合し、水相においては、ソホロリピッド、ウシ由来ラクトフェリン（ｂＬＦ）（森永乳業社製MLF-1）、炭酸水素ナトリウム（旭硝子社製重炭酸ナトリウム）および水をそれぞれ混合した（下記表１参照）。その後、８０℃まで加熱し、高速攪拌機（アズワン社製ホモジナイザー  HG-200）を用いて高速攪拌（１００００ｒｐｍ）している油相中に水相を添加し、実施例１を作製した。なお、ソホロリピッドについては、既知の方法に基づいて作製し、精製したものを使用した（特開２００３−９８９６）。【００６１】
実施例２
油相においては、スクワレン、大豆レシチンおよびグリセリンを混合し、水相においては、ソホロリピッド、炭酸水素ナトリウムおよび水をそれぞれ混合した（下記表１参照）。その後、８０℃まで加熱し、高速攪拌している油相中に水相を添加した。油相と水相の混合物を１０分間攪拌して乳化させた後、自然冷却し、４０℃以下になってからウシ由来のラクトフェリン（ｂＬＦ）および水を加えて実施例２を作製した。【００６２】
実施例３
油相および水相の成分をそれぞれ表１実施例３記載に従った以外は、実施例２と同様の方法で実施例３を作製した。【００６３】
比較例１
油相および水相の成分をそれぞれ表１の比較例１の記載に従った以外は実施例１と同様の方法で比較例１を作製した。【００６４】
実施例１〜３および比較例１の成分を表１に示す。【００６５】
【表１】
2015137357.tif 000004
【００６６】
（２）実験１：鎮痛効果の評価
鎮痛効果の評価には、熱刺激を４８℃としてＴａｉｌ−ｆｌｉｃｋ  ｔｅｓｔを用いた。Ｔａｉｌ−ｆｌｉｃｋ  ｔｅｓｔとはマウスの尾に熱刺激をマウスの尾に熱刺激を与えて、尾を振り払うまでの時間を測定する。モルヒネ等の鎮痛薬を投与すると、この時間が延長されることにより、鎮痛効果の評価に用いられることが知られている。【００６７】
そこで、5週齢のＩＣＲマウスに対し、モルヒネ（３ｍｇ／ｋｇ） （第一三共社製塩酸モルヒネ（商品名等））を腹腔内投与すると同時に、実施例１〜３（ｂＬＦ換算で３００ｍｇ／ｋｇ）および比較例１（３００ｍｇ／ｋｇ）を経口投与することを５日間続け、５日目の投与後３０分および９０分に、Ｔａｉｌ−ｆｌｉｃｋ  ｔｅｓｔを行った。【００６８】
また、比較対照として、5週齢のＩＣＲマウスに対し、モルヒネ（３ｍｇ／ｋｇ）を腹腔内投与すると同時に、生理食塩水を経口投与することを５日間続け、上記と同様に、Ｔａｉｌ−ｆｌｉｃｋ  ｔｅｓｔを行った。【００６９】
なお、陰性対照には、生理食塩水を腹腔内投与すると同時に、生理食塩水を経口投与することを５日間続け、陽性対照には、5週齢のＩＣＲマウスに対し、モルヒネ（３ｍｇ／ｋｇ）を腹腔内投与すると同時に、ｂＬＦを経口投与することを５日間続け、上記と同様に、Ｔａｉｌ−ｆｌｉｃｋ  ｔｅｓｔを行った。【００７０】
上記実施例１〜３および比較例１の実験結果を表２に示す。
【表２】
2015137357.tif 000005
【００７１】
なお、表２記載の「−」は鎮痛効果を示さなかったものを表し、「±」は比較対照と同等の鎮痛効果を示したことを表し、「＋」は陽性対照と同等の鎮痛効果を示したことを表し、「＋＋」は陽性対照よりも高い鎮痛効果を示したことを表し、「＋＋＋」は、「＋＋」よりもさらに高い鎮痛効果を示したことを表す。【００７２】
比較対照と比べ、実施例１〜３は３０分後および９０分後において高い鎮痛効果を維持していた。比較例1はソホロリピッドの代わりにショ糖脂肪酸エステルを用いたものであるが、ソホロリピッドと比べると鎮痛効果が弱くなっており、鎮痛効果の増強にはソホロリピッドでの乳化物調製が重要であると考えられる。【００７３】
（３）組成物の作製
また、鎮痛効果が得られるための成分検討、乳化温度条件の検討を行った。【００７４】
実施例４
油相にはスクワレン、水相にはソホロリピッド、ウシ由来ラクトフェリン、炭酸水素ナトリウム及び水混合し、をそれぞれ表３実施例４記載に従った以外は、実施例１と同様に実施例４を作製した（下記表３参照）。その後、８０℃まで加熱し、高速攪拌機を用いて高速攪拌している油相中に水相を添加し、実施例４を作製した。【００７５】
実施例５
油相の油脂をスクワレンから大豆油に変更した以外は、実施例４と同様に実施例５を作製した。【００７６】
実施例６
乳化温度を６０℃とした以外は、実施例４と同様に実施例６を作製した。【００７７】
実施例７
乳化温度を６０℃とした以外は、実施例５と同様に実施例７を作製した。【００７８】
実施例８
油相および水相の成分をそれぞれ表３実施例８記載に従った以外は、実施例６と同様に実施例８を作製した。【００７９】
実施例９
油相および水相の成分をそれぞれ表３実施例９記載に従った以外は、実施例７と同様に実施例８を作製した。
【表３】
2015137357.tif 000006
【００８０】
（４）実験２：乳化温度の違いによる鎮痛効果の評価
実施例４〜実施例９において、実験１と同様に、Ｔａｉｌ−ｆｌｉｃｋ  ｔｅｓｔを行った結果を表４に示す。
【表４】
2015137357.tif 000007
【００８１】
鎮痛効果はレシチンやグリセリンが無くてもみられた（実施例４〜９）。また、スクワレンを大豆油に代えても、鎮痛効果はみられ、スクワレン以外の油を用いても効果が得られた。【００８２】
（５）組成物の作製
実施例１０
油相および水相の成分をそれぞれ表５実施例１０記載に従った以外は、実施例１と同様の方法で実施例１０を作製した。なお、綿実油はサミット製油社製綿実サラダ油を用いた。【００８３】
実施例１１
油相および水相の成分をそれぞれ表５実施例１０記載に従った以外は、実施例１と同様の方法で実施例１１を作製した。なお、カカオバターは大東カカオ社製TCココアバターを用いた。【００８４】
実施例１２
油相および水相の成分をそれぞれ表５実施例１０記載に従った以外は、実施例１と同様の方法で実施例１２を作製した。なお、中鎖脂肪酸グリセリドは日油社製パナセート810を用いた。【００８５】
【表５】
2015137357.tif 000008
【００８６】
（６）実験３：スクワレン、大豆油以外の油脂を用いた場合の鎮痛効果の評価
実施例１０〜実施例１２において、実施例１と同様にＴａｉｌ−ｆｌｉｃｋ  ｔｅｓｔを行った結果を表６に示す。【００８７】
実施例１０〜１２記載の実験結果を表６に示す。
【表６】
2015137357.tif 000009
【００８８】
スクワレンの代わりに綿実サラダ油、カカオバター、中鎖脂肪酸を用いても鎮痛効果はみられた。今回の乳化物については、種々の油を使用することができる。【００８９】
今回の乳化物の食品への適用例を示す。
１．プリン
【表７】
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ゼラチンに水を加え、膨潤させておいた。牛乳を加熱し、膨潤させたゼラチンを加えて溶かした。容器に卵と砂糖を入れよくほぐしてから、上記実施例１（ソホロリピッド乳化物）を混ぜた。加熱した牛乳を加え、香料を加えた。カップ容器２個に注ぎ、冷蔵庫で冷やし固めた。得られたプリンは1個約120gであった。【００９０】
２．チョコレート
【表８】
2015137357.tif 000011
実施例１（ソホロリピッド乳化物）とβシクロデキストリンを等量ずつ混合し、スプレードライヤーで粉末化し、ソホロリピッド乳化粉末を得た。ビターチョコレートを湯煎で50〜60℃になるように溶かし、チョコレート型に流し込んだ。すぐに流し込んだチョコレートを抜き出し、一旦冷蔵で固めチョコレートの型を作る。固まったチョコレートの型の中に溶かしたチョコレートとソホロリピッド乳化粉末を混合させたものを4.5g流し込み、その上から溶かしたチョコレートを流し込んで冷蔵で冷やし固めた（処方A）。得られたチョコレートは1個約10gであった。ソホロリピッド乳化粉末を配合することによる食感低下を防ぐため、ソホロリピッド乳化粉末とモルトパフや刻んだナッツ類、コーンフレーク等を混合して配合しても良い（処方B）。【００９１】
（７）実験４：本発明の組成物を用いた生理活性物質の腸管吸収促進効果の評価
本発明の組成物を用いた以下の実施例１３〜１６及び比較例２〜９において、ホスファチジルコリンをコーティングしたシリカビーズを用いて生理活性物質の腸管吸収促進効果を評価した。
消化管吸収に重要な消化管膜透過は受動拡散による細胞膜透過、細胞間隙透過、トランスポータによる能動輸送がある。細胞膜透過においては、リン脂質を主構成成分とする生体膜への親和性が重要となり、オクタノール分配係数やリポソーム分配係数が評価に用いられてきた。さらに最近はリン脂質を固定相リガンドとしたカラムを用いた保持力の違いによる評価も用いられ、リポソームへの分配係数との高い相関性が報告されている。
今回の評価ではリン脂質（ホスファチジルコリン）をコートしたシリカビーズへの結合性を比較した。結合性が強いと、細胞膜透過性が高く、消化管吸収性も高いと予測できる。【００９２】
A．実施の方法
水相はpH6になるよう、pH調整剤を用いて調整した。水相と油相をそれぞれ50-60℃に加熱し、油相に水相を添加した。ホモジナイザー（HG-200 アズワン（株））を用いて10000rpmで10分間高速攪拌を行い、これを乳化液とした。【００９３】
水溶性蛍光物質（フルオレセインNa）に対する実施例および比較例の成分を表９に示す。
【表９】
2015137357.tif 000012
【００９４】
フルオレセインNa塩は、水溶性蛍光物質であるが、上記した水溶性生理活性物質のモデル化合物として使用した実験結果から本発明によって水溶性生理活性物質が腸管から効率良く吸収されることが判る。【００９５】
ホスファチジルコリンをコーティングしたシリカビーズ（TRANSIL Intestinal Absorption Kit、SOVICELL社）に対する親和性を評価した。ビーズ含有PBS液（リン酸緩衝生理食塩水）を200μlずつ分注し、各組成物を20μl添加した。試験管ミキサーで12分間撹拌後、ビーズを沈降させ上清を10倍希釈して蛍光強度を分光光度計（日立  F-2700）を用いて測定した。（励起波長：494nm、蛍光波長：521nm）得られた結果より、ビーズに結合した蛍光物質の量についてフルオレセインNa水溶液（比較例3）の場合を１としたときの実施例13または比較例2の相対比を算出した。【００９６】
脂溶性色素（オイルレッド）に対する実施例および比較例を表10に示す。
【表１０】
2015137357.tif 000013
【００９７】
オイルレッドは、脂溶性蛍光物質であるが、上記した脂溶性生理活性物質のモデル化合物として使用した実験結果から本発明によって脂溶性生理活性物質が腸管から効率良く吸収されることが判る。【００９８】
ビーズ含有PBSを200μlずつ分注し、各組成物を20μl添加した。試験管ミキサーで12分間撹拌後、ビーズを沈降させ、上清を除去したビーズをPBSで洗浄し、メタノール200μlを加えてビーズからオイルレッドを溶出させた。このオイルレッド・メタノール液の510nmにおける吸光度を紫外分光光度計（島津UV-1200）で測定した。ビーズに結合した色素の量について、オイルレッド溶液（比較例5）の場合を１としたときの実施例14または比較例4の相対比を算出した。【００９９】
トコフェロールに対する実施例、比較例を表11に示す。
【表１１】
2015137357.tif 000014
【０１００】
ビーズ含有PBSを200μlずつ分注し、各組成物を20μl添加した。試験管ミキサーで12分間撹拌後、ビーズを沈降させ、上清を除去したビーズをPBSで洗浄し、メタノール200μlを加えてビーズからトコフェロールを溶出させた。HPLC（島津LC-10Aシリーズ）によってトコフェロール量を測定した。ビーズに結合したトコフェロール成分について、トコフェロール溶液（比較例7）の場合を１としたときの実施例15または比較例6の相対比を算出した。【０１０１】
ドコサヘキサエン酸（DHA）に対する実施例、比較例を表12に示す。
【表１２】
2015137357.tif 000015
【０１０２】
ビーズ含有PBSを200μlずつ分注し、各組成物を20μl添加した。試験管ミキサーで12分間撹拌後、ビーズを沈降させ、上清を除去したビーズをPBSで洗浄し、ヘキサン200μlを加えてビーズからDHAを溶出させた。ガスクロマトグラフィー（島津GC-2014シリーズ）によってDHA量を測定した。
ビーズに結合したDHA成分について、DHA溶液（比較例9）の場合を１としたときの実施例16または比較例8の相対比を算出した。【０１０３】
レチノール、エイコサペンタエン酸、リノール酸、コエンザイムQ10、β-カロテン、アスタキサンチン、リコピン、テアフラビン、イソフラボン、アントシアニジン、カテキン、プロアントシアニジン、大豆サポニン、ユッカエキス、ムクロジエキス、リボフラビン、チアミン、アスコルビン酸、羅漢果配糖体、アラニン、プロリン、グルタミン酸、マリンペプチド、大豆ペプチド、ホエイペプチド、グルコン酸亜鉛、グルコン酸銅、クエン酸鉄についてもソホロリピッドとショ糖脂肪酸エステルで乳化液を調製し、同様の試験を実施した。【０１０４】
レチノール、コエンザイムQ10、β―カロテン、アスタキサンチン、リコピン、テアフラビン、イソフラボン、カテキン、サポニンはHPLCを用いて分析を実施した。アントシアニジン、プロアントシアニジンは分光光度計、エイコサペンタエン酸、リノール酸はGC、チアミンおよびリボフラビンは蛍光分光光度計を用いた。羅漢果配糖体およびアミノ酸、ペプチドはLC-MSを用いた。グルコン酸亜鉛およびグルコン酸銅、クエン酸鉄は原子吸光光度計を用いて分析を実施した。【０１０５】
B．実施例の結果
実施例の結果を表13に示す。生理活性物質単独に対する実施例、比較例の相対比を◎、○、△で表記した。生理活性物質単独とショ糖脂肪酸エステルまたはソホロリピッドを用いて乳化した場合でのホスファチジルコリンをコーティングしたビーズとの親和性を比較した結果、ソホロリピッドを用いて乳化した場合のほうがビーズとの親和性が高く、腸管吸収性が向上する。【０１０６】
【表１３】
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【国際調査報告】
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