(57)【要約】  本発明は、抗がん剤による末梢神経障害を、十分に、かつ、持続的に予防、治療、または軽減することを目的とする。本発明は、ＰＫＣ阻害剤、またはＭＥＫ／ＥＲＫ経路阻害剤を有効成分として含有する、抗がん剤による末梢神経障害の非局所投与用の予防、治療、または軽減剤を提供する。また、本発明は、ＭＥＫ阻害剤またはＥＲＫ阻害剤を有効成分として含有する、抗がん剤による末梢神経障害の予防、治療、または軽減剤を提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＰＫＣ阻害剤、またはＭＥＫ／ＥＲＫ経路阻害剤を有効成分として含有する、抗がん剤による末梢神経障害の非局所投与用の予防、治療、または軽減剤。
【請求項２】
ＭＥＫ阻害剤またはＥＲＫ阻害剤を有効成分として含有する、抗がん剤による末梢神経障害の予防、治療、または軽減剤。
【請求項３】
ＭＥＫ阻害剤またはＥＲＫ阻害剤が、抗がん剤である、請求項２に記載の予防、治療、または軽減剤。
【請求項４】
ＥＲＫ阻害剤が、ＥＲＫのリン酸化阻害剤である、請求項２または３に記載の予防、治療、または軽減剤。
【請求項５】
ＥＲＫ阻害剤が、ＥＲＫ１のＴｈｒ２０２、ＥＲＫ１のＴｙｒ２０４、ＥＲＫ２のＴｈｒ１８５、ＥＲＫ２のＴｙｒ１８７からなる群から選ばれるリン酸化部位のリン酸化阻害剤である、請求項２〜４のいずれか１項に記載の予防、治療、または軽減剤。
【請求項６】
末梢神経障害が白金製剤によるものである、請求項１〜５のいずれか１項に記載の予防、治療、または軽減剤。
【請求項７】
被験物によるＰＫＣ阻害またはＭＥＫ／ＥＲＫ経路阻害を評価する工程を含むことを特徴とする、抗がん剤による末梢神経障害の非局所投与用の予防、治療、または軽減剤の有効成分の選択方法。
【請求項８】
被験物によるＭＥＫ阻害またはＥＲＫ阻害を評価する工程を含むことを特徴とする、抗がん剤による末梢神経障害の予防、治療、または軽減剤の有効成分の選択方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、抗がん剤による末梢神経障害の予防、治療、または軽減剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
今日、がん（悪性腫瘍）の治療においては、外科手術、放射線照射、化学療法がそれぞれ単独または併用で適宜用いられている。このうち、化学療法で用いられる抗がん剤（抗悪性腫瘍剤）は、本来、細胞毒性または細胞障害性を有するものであり、がん（悪性腫瘍）細胞だけでなく人間の正常細胞をも傷害することによる副作用が発生するため、かかる副作用をできるだけ予防または軽減しつつ、十分な抗がん（抗悪性腫瘍）効果が発揮されるように患者に投与することが重要である。【０００３】
抗がん剤の投与に伴う副作用としては、血液障害、消化器障害、神経障害が挙げられるが、近年は、特に急性または慢性の神経障害が注目されている。これは、著しい抗がん効果を発揮する新しい抗がん剤による主な副作用が神経障害である場合が多いことや、最近の治療の中心となっている多剤併用療法による影響や、血液障害や消化器障害の副作用が改善傾向にあることなどが原因と考えられる。神経細胞は再生が困難であり、神経障害は、いったん発現すると有効な対策がなく、重篤な症状を呈したり、不可逆的障害になったりすることがあるため、治療上重要な問題となっている。【０００４】
抗がん剤の投与に伴う神経障害は、中枢神経系、自律神経系、末梢神経系のほかに、味覚等の感覚器にも認められる。このうち、発生頻度が比較的高く問題となっているのが、劇痛や焼けるような痛み等の疼痛、四肢末端のしびれ、灼熱感等の知覚異常、冷感刺激に対する過敏等の知覚過敏、感覚消失・感覚麻痺や違和感等の感覚異常、知覚性運動失調、筋力の低下等の末梢神経系の神経障害である。この抗がん剤の投与による末梢神経系の病変は、主として軸索の変性によると考えられている。軸索内にある微小管は、細胞分裂の際に紡錘体を形成したり、細胞内小器官の配置や物質輸送など、細胞の正常機能の維持に重要な役割を果たしているが、パクリタキセル、ドセタキセル等のタキサン系薬剤や、ビンクリスチン、ビンプラスチン、ビンデシン、ビノレルビン等のビンアルカロイド系薬剤は、軸索内にある微小管を標的として作用することにより、悪性腫瘍細胞の増殖を抑えるため、正常な神経細胞の微小管も傷害されて神経障害を起こすと考えられている。また、オキサリプラチン、カルボプラチン、シスプラチン、ネダプラチン等の白金製剤やポルテゾミブ等のプロテアソーム阻害剤は神経細胞を直接傷害する結果、二次的に軸索障害をきたすと考えられている。【０００５】
しかしながら、抗がん剤による神経障害は研究があまり進んでいない領域であり、神経障害の予防・対症方法は確立されていない。そのため、しびれ症状の緩和のためにはメコバラミン等のビタミン製剤や漢方薬の牛車腎気丸を用いたり、疼痛に対しては、抗うつ薬（塩酸アミトリプチン）、抗てんかん薬（カルバマゼピン）、抗不整脈薬（塩酸メキシレチン）や副腎皮質ステロイド等が使われたりしているが、現在のところ、根治または予防の方法は確立されておらず、薬剤投与を中止または減量することが神経障害を食い止める唯一の確実な方法である（ただし、投与中止後も神経障害は持続しまたは増悪することもある）。【０００６】
さらに昨今は、数種類の注射剤を組み合わせたがん化学療法が主流となっている。複数の抗がん剤を投与する上、さらに末梢神経障害治療薬を静注または点滴静注することは、患者の負担となり、投与タイミングを設計する上でも難しい。加えて、最近では在宅でがん化学療法を受ける患者も多く、末梢神経障害を軽減する薬剤は、自宅で簡単に服用できる薬剤が望ましい。このような状況を鑑み、有効かつ安全であり、簡単に服用できる、がん化学療法に起因する末梢神経障害の処置剤が望まれている。【０００７】
これまでに、ＰＫＣ阻害剤（カルホスチンＣ）の脳室内投与によって、白金系薬剤であるオキサリプラチンを投与したラットの末梢神経障害が改善されたことが報告されている（非特許文献ｌ）。また、ＭＥＫ／ＥＲＫ経路を阻害する化合物（ファルネシルチオサリチル酸、およびＧＷ５０７４）をくも膜下腔内に投与することによって、ピンアルカロイド系薬剤であるビンクリスチンを投与したラットの末梢神経障害が改善されたことが報告されている（非特許文献２）。しかしながら、これらの文献の方法によっても、投与から２〜３時間後には改善効果が減退しており、持続的な改善を行うことができていなかった。また、改善の程度も僅かであった。さらに、投与は、専門的な外科手術の手法によって行われており、日常的に簡便に行うことができない方法によって行われている。このように、抗がん剤の投与に起因する末梢神経障害の実用的な予防、治療、または軽減剤は、いまだ存在しない。【０００８】
なお、非特許文献１には、ＰＫＣだけでなくＥＲＫも言及されているが、ＥＲＫのリン酸化の傾向はＰＫＣのリン酸化の傾向とは異なることが実験結果によって示されており、ＥＲＫ阻害と末梢神経障害の軽減との関係については検討されていない。非特許文献２には、ファルネシルチオサリチル酸やＧＷ５０７４がＲａｓ／Ｒａｆ／ＭＥＫ／ＥＲＫ２シグナル経路の阻害剤であると記載されているが、これらはＲａｓおよびｃ−Ｒａｆ−１を阻害すると記載されており、ＭＥＫまたはＥＲＫの阻害と末梢神経障害の軽減との関係については、何ら言及されていない。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００９】
【非特許文献１】ペイン（Ｐａｉｎ）、１４６巻、１４１−１４７頁、２００９年
【非特許文献２】フード  アンド  ケミカル  トキシコロジー（Ｆｏｏｄ  ａｎｄ  ｃｈｅｍｉｃａｌ  ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙ）、５０巻、１２９５−１３０１頁、２０１２年
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
したがって、本発明は、抗がん剤による末梢神経障害を、十分に、かつ、持続的に予防、治療、または軽減することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明者らは、ＰＫＣ阻害剤またはＭＥＫ／ＥＲＫ経路阻害剤を非局所的に投与することによって、抗がん剤による末梢神経障害を、十分に、かつ、持続的に抑制することができることを見出した。従来技術では、ＰＫＣ阻害剤またはＭＥＫ／ＥＲＫ経路阻害剤が、脳室内、またはくも膜下腔内などへ局所的に投与され、改善効果は持続せず、しかも部分的であったので、この知見は画期的である。非局所的投与は、経口投与などの簡便な方法によって行うことができるため、自宅などの日常的な環境における簡易な方法による予防、治療、または軽減が可能になり、この点でも、この知見は画期的である。【００１２】
また、本発明者らは、ＰＫＣ阻害剤またはＭＥＫ／ＥＲＫ経路阻害剤において見出された十分かつ持続的な抑制効果は、ＭＥＫまたはＥＲＫを阻害することによるものであることを見出した。従来の先行技術文献においては、ＰＫＣの阻害やＭＥＫ／ＥＲＫ経路の阻害の記載はあるが、ＭＥＫまたはＥＲＫの阻害については何らの言及もなく、本発明者らの知見は新規である。【００１３】
さらに、本発明者らは、十分かつ持続的な抑制効果が認められたＰＫＣ阻害剤またはＭＥＫ／ＥＲＫ経路阻害剤が抗がん剤であることから、抗がん剤の投与による末梢神経障害の予防、治療、または軽減を、別の抗がん剤によって、十分、かつ持続的に行うことが可能であることを見出した。この知見は、抗がん剤の投与による末梢神経障害を、多剤併用療法における抗がん剤の組み合わせを工夫することによって、十分かつ持続的に予防、治療、または軽減するという画期的な思想を提供するものである。【００１４】
すなわち、本発明は、ＰＫＣ阻害剤、またはＭＥＫ／ＥＲＫ経路阻害剤を有効成分として含有する、抗がん剤による末梢神経障害の非局所投与用の予防、治療、または軽減剤を提供する。【００１５】
さらに、本発明は、ＭＥＫ阻害剤またはＥＲＫ阻害剤を有効成分として含有する、抗がん剤による末梢神経障害の予防、治療、または軽減剤を提供する。【００１６】
また、本発明は、ＭＥＫ阻害剤またはＥＲＫ阻害剤が、抗がん剤である、前記の予防、治療、または軽減剤を提供する。【００１７】
また、本発明は、ＥＲＫ阻害剤が、ＥＲＫのリン酸化阻害剤である、前記の予防、治療、または軽減剤を提供する。【００１８】
また、本発明は、ＥＲＫ阻害剤が、ＥＲＫ１のＴｈｒ２０２、ＥＲＫ１のＴｙｒ２０４、ＥＲＫ２のＴｈｒ１８５、およびＥＲＫ２のＴｙｒ１８７からなる群から選ばれるリン酸化部位のリン酸化阻害剤である、前記の予防、治療、または軽減剤を提供する。【００１９】
また、本発明は、末梢神経障害が白金製剤によるものである、前記の予防、治療、または軽減剤を提供する。【００２０】
さらに、本発明は、被験物によるＰＫＣ阻害またはＭＥＫ／ＥＲＫ経路阻害を評価する工程を含むことを特徴とする、抗がん剤による末梢神経障害の非局所投与用の予防、治療、または軽減剤の有効成分の選択方法を提供する。【００２１】
また、本発明は、被験物によるＭＥＫ阻害またはＥＲＫ阻害を評価する工程を含むことを特徴とする、抗がん剤による末梢神経障害の予防、治療、または軽減剤の有効成分の選択方法を提供する。【００２２】
さらに別の態様において、本発明は、ＰＫＣ阻害剤、またはＭＥＫ／ＥＲＫ経路阻害剤を非局所的に投与することを特徴とする、抗がん剤による末梢神経障害の予防、治療、または軽減方法を提供するものである。【００２３】
また、本発明は、ＭＥＫ阻害剤またはＥＲＫ阻害剤を投与することを特徴とする、抗がん剤による末梢神経障害の予防、治療、または軽減方法を提供するものである。【００２４】
さらに、本発明は、ＭＥＫ阻害剤またはＥＲＫ阻害剤が、抗がん剤である、上記の予防、治療、または軽減方法を提供するものである。【００２５】
さらに、本発明は、ＥＲＫ阻害剤が、ＥＲＫのリン酸化阻害剤である、上記の予防、治療、または軽減方法を提供するものである。【００２６】
さらに、本発明は、ＥＲＫ阻害剤が、ＥＲＫ１のＴｈｒ２０２、ＥＲＫ１のＴｙｒ２０４、ＥＲＫ２のＴｈｒ１８５、ＥＲＫ２のＴｙｒ１８７からなる群から選ばれるリン酸化部位のリン酸化阻害剤である、上記の予防、治療、または軽減方法を提供するものである。【００２７】
さらに、本発明は、末梢神経障害が白金製剤によるものである、上記の予防、治療、または軽減方法を提供するものである。【００２８】
また、別の態様において、本発明は、抗がん剤による末梢神経障害の非局所投与用の予防、治療、または軽減剤を製造するためのＰＫＣ阻害剤、またはＭＥＫ／ＥＲＫ経路阻害剤の使用を提供するものである。【００２９】
さらに、本発明は、抗がん剤による末梢神経障害の予防、治療、または軽減剤を製造するためのＭＥＫ阻害剤またはＥＲＫ阻害剤の使用を提供するものである。【００３０】
さらに、本発明は、ＭＥＫ阻害剤またはＥＲＫ阻害剤が、抗がん剤である、上記の使用を提供するものである。【００３１】
また、本発明は、ＥＲＫ阻害剤が、ＥＲＫのリン酸化阻害剤である、上記の使用を提供するものである。【００３２】
また、本発明は、ＥＲＫ阻害剤が、ＥＲＫ１のＴｈｒ２０２、ＥＲＫ１のＴｙｒ２０４、ＥＲＫ２のＴｈｒ１８５、ＥＲＫ２のＴｙｒ１８７からなる群から選ばれるリン酸化部位のリン酸化阻害剤である、上記の使用を提供するものである。【００３３】
また、本発明は、末梢神経障害が白金製剤によるものである、上記の使用を提供するものである。【００３４】
さらに、別の態様において、本発明は、抗がん剤による末梢神経障害の予防、治療、または軽減のための、ＰＫＣ阻害剤、またはＭＥＫ／ＥＲＫ経路阻害剤の非局所的使用を提供するものである。【００３５】
また、本発明は、抗がん剤による末梢神経障害の予防、治療、または軽減のための、ＭＥＫ阻害剤またはＥＲＫ阻害剤の使用を提供するものである。【００３６】
また、本発明は、ＭＥＫ阻害剤またはＥＲＫ阻害剤が、抗がん剤である、上記の使用を提供するものである。【００３７】
また、本発明は、ＥＲＫ阻害剤が、ＥＲＫのリン酸化阻害剤である、上記の使用を提供するものである。【００３８】
また、本発明は、ＥＲＫ阻害剤が、ＥＲＫ１のＴｈｒ２０２、ＥＲＫ１のＴｙｒ２０４、ＥＲＫ２のＴｈｒ１８５、ＥＲＫ２のＴｙｒ１８７からなる群から選ばれるリン酸化部位のリン酸化阻害剤である、上記の使用を提供するものである。【００３９】
また、本発明は、末梢神経障害が白金製剤によるものである、上記の使用を提供するものである。
【発明の効果】
【００４０】
本発明によれば、抗がん剤による末梢神経障害を、極めて高度に、しかも、持続的に、予防、治療、または軽減することができる。すなわち、本発明の予防、治療、または軽減剤を投与することによって、抗がん剤によって誘発される四肢のしびれ、四肢の痛み、深部腱反射の低下、筋力の低下、アロディニア、痛覚過敏、手指の巧緻機能障害、歩行障害、蹟き、転倒、屈曲障害（正座、あぐら、横座りまたは椅子座り等の困難または不能）、または四肢の麻痺等を予防、治療、または軽減することができる。これまでは、末梢神経障害に対処するためには、抗がん剤の減量やがん化学療法の中断が余儀なくされていたが、本発明の予防、治療、または軽減剤を用いれば適切ながん治療を継続することが可能となり、がんからの早期回復に繋がる。また、本発明の予防、治療、または軽減剤は、経口投与などによって非局所的に投与することができ、自宅などの日常的な環境で簡単に抗がん剤による末梢神経障害を予防、治療、または軽減することができる。これにより、在宅での抗がん剤治療を受ける患者の生活の質が向上する。また、末梢神経障害を引き起こす抗がん剤とは異なる抗がん剤を本発明の予防、治療、または軽減剤の有効成分に用いる場合には、末梢神経障害の予防、治療、または改善を、抗がん剤の多剤併用療法において簡易に行うことができる。さらに、抗がん剤であることを指標として有効成分を選択すれば、有効量、有効な投与方法、副作用などに関する既存の情報を用いることによって、長期の臨床試験を要することなく、多剤併用療法において臨床的に使用することができる末梢神経障害の予防、治療、または軽減剤を、容易かつ迅速に製造することができる。
【図面の簡単な説明】
【００４１】
【図１】図１は、オキサリプラチン投与によって生じる知覚過敏に対する被験薬の軽減作用をフォン・フライ試験において調べた結果である。
【図２】図２は、オキサリプラチン投与によって生じる知覚異常に対する被験薬の軽減作用をコールドプレート試験において調べた結果である。
【図３】図３は、オキサリプラチン投与後１４日目における脊髄でのリン酸化ＥＲＫおよびリン酸化ＰＫＣの発現増加に対する被験薬の抑制効果を調べた結果である。図は少なくとも３回の独立的な実験のうちの一つの代表的な実験の結果を示したものである。
【図４】図４は、オキサリプラチン投与によって生じる知覚過敏に対する被験薬の軽減作用をフォン・フライ試験において調べた結果である。
【図５】図５は、オキサリプラチン投与によって生じる知覚異常に対する被験薬の軽減作用をコールドプレート試験において調べた結果である。
【図６】図６は、オキサリプラチン投与後１４日目における脊髄でのリン酸化ＥＲＫおよびリン酸化ＰＫＣの発現増加に対する被験薬の抑制効果を調べた結果である。
【発明を実施するための形態】
【００４２】
ＰＫＣ阻害剤は、本発明の予防、治療、または軽減剤の有効成分である。ＰＫＣは、プロテインキナーゼＣともいわれる。ＰＫＣとしては、ＰＫＣ−α、ＰＫＣ−β１、ＰＫＣ−β２、ＰＫＣ−γ、ＰＫＣ−δ、ＰＫＣ−υ、ＰＫＣ−ν、ＰＫＣ−λ、ＰＫＣ−μ、ＰＫＣ−θ、およびＰＫＣ−ζが挙げられる。ＰＫＣ阻害剤は、ＰＫＣを阻害する作用を有する物質である。ＰＫＣを阻害する作用としては、ＰＫＣのリン酸化を阻害する作用が挙げられる。ＰＫＣのリン酸化を阻害する作用は、好ましくは、ＰＫＣの発現量を実質的に減少させずに、リン酸化ＰＫＣの発現量を減少させる作用である。ＰＫＣのリン酸化を阻害する作用を有する物質は、ＰＫＣのリン酸化阻害剤とよぶことができる。ＰＫＣのリン酸化部位としては、ＰＫＣ−αについては、Ｓｅｒ６３８が挙げられ、ＰＫＣ−δについては、Ｓｅｒ６４３、Ｔｈｒ５０５が挙げられる。ＰＫＣ阻害剤は、細胞透過性であってもよい。ＰＫＣ阻害剤は、無機化合物であっても、有機化合物であってもよく、有機化合物としては、炭素数１０〜１００の有機化合物などが挙げられる。
【００４３】
ＰＫＣ阻害剤としては、３，４−ビス（３−インドリル）マレイミド、ビスインドリルマレイミドＩ、ビスインドリルマレイミドＩＩ、ビスインドリルマレイミドＩＩＩ、ビスインドリルマレイミドＩＶ、ビスインドリルマレイミドＶ、ビスインドリルマレイミドＶＩ、ビスインドリルマレイミドＶＩＩ、ビスインドリルマレイミドＶＩＩＩ、ビスインドリルマレイミドＸ、カルフォスチンＣ、カルジオトキシン、ＣＧＰ４１２５１、ＣＧＰ５３３５３、塩化ケレリトリン、塩化デカリニウム、５−（２，５−ジヒドロキシベンジルアミノ）−２−ヒドロキシ安息香酸、エラグ酸、Ｇｏ  ６９７６、Ｇｏ  ６９８３、Ｇｏ  ７８７４、Ｈ−７、２，２’，３，３’，４，４’−ヘキサヒドロキシ−１，１’−ビフェニル−６，６’−ジメタノールジメチルエーテル、ヒスピジン、ヒペリシン、１−（５−イソキノリンスルホニル）−３−メチルピペラジン二塩酸塩、イソ−Ｈ−７、Ｋ−２５２ａ、Ｋ−２５２ｂ、Ｋ−２５２ｃ、ＫＮ−６２、ＫＮ−９３、ＫＴ５８２３、メリチン、ＮＧＩＣ−Ｉ、７−オキソスタウロスポリン、フロレチン、ピセアタノール、ＰＫＣ  ２０−２８、ポリミキシンＢ、Ｒｏ−３１−７５４９、Ｒｏ−３１−８２２０、Ｒｏ−３１−８４２５、Ｒｏ−３２−０４３２、ロットレリン、サフィンゴール、サンギバマイシン、スキトネミン、スタウロスポリン、ステレッタミドＡ、ＳＴＯ−６０９、タモキシフェン、（Ｚ）−４−ヒドロキシタモキシフェン、ＴＥＲ１４６８７、ＵＣＮ−０１、ＵＣＮ−０２、ビタミンＥコハク酸エステル、４−ヒドロキシタモキシフェン、エンドキシフェン、クロミフェン、トレミフェン、ならびにそれらの誘導体、薬学的に許容される塩、および類似物などが挙げられる。
【００４４】
ＭＥＫ／ＥＲＫ経路阻害剤は、本発明の予防、治療、または軽減剤の有効成分である。ＭＥＫは、マイトジェンアクチベイティッドプロテインキナーゼキナーゼともいわれる。ＥＲＫは、エクストラセルラーシグナルレギュレイティッドキナーゼともいわれる。ＭＥＫとしては、ＭＥＫ１、ＭＥＫ２が挙げられる。ＥＲＫとしては、ＥＲＫ１、ＥＲＫ２、ＥＲＫ１／２が挙げられる。ＥＲＫ１／２は、ＥＲＫ１およびＥＲＫ２からなる複合体である。ＭＥＫ／ＥＲＫ経路阻害剤は、ＭＥＫ／ＥＲＫ経路を阻害する作用を有する物質である。ＭＥＫ／ＥＲＫ経路は、ＭＥＫおよびＥＲＫが関与するシグナル伝達経路である。ＭＥＫ／ＥＲＫ経路阻害剤としては、ＭＥＫ１阻害剤、ＭＥＫ２阻害剤などのＭＥＫ阻害剤；ＥＲＫ１阻害剤、ＥＲＫ２阻害剤などのＥＲＫ阻害剤が挙げられる。ＥＲＫ１阻害剤、およびＥＲＫ２阻害剤は、ＥＲＫ１およびＥＲＫ２からなる複合体の阻害剤であるＥＲＫ１／２阻害剤であってもよい。ＭＥＫ／ＥＲＫ経路阻害剤は、細胞透過性であってもよい。ＭＥＫ／ＥＲＫ経路阻害剤は、無機化合物であっても、有機化合物であってもよく、有機化合物としては、炭素数１０〜１００の有機化合物などが挙げられる。
【００４５】
ＭＥＫ／ＥＲＫ経路阻害剤としては、ＡＧ  １２６、アピゲニン、ＦＲ１８０２０４、５−ヨードツベルシジン、５−ニトロ−２−（３−フェニルプロピルアミノ）安息香酸、ＰＤ９８０５９、Ｕ０１２５、Ｕ０１２６、ならびにそれらの誘導体、薬学的に許容される塩、および類似物が挙げられる。
【００４６】
ＭＥＫ阻害剤は、本発明の予防、治療、または軽減剤の有効成分である。ＭＥＫ阻害剤は、ＭＥＫを阻害する作用を有する物質である。ＭＥＫ阻害剤の例としては、ＡＴＰ競合的ＭＥＫ阻害剤、非ＡＴＰ競合的ＭＥＫ阻害剤、およびＡＴＰ非競合的ＭＥＫ阻害剤が挙げられる。ＭＥＫを阻害する作用としては、ＭＥＫのリン酸化を阻害する作用が挙げられる。ＭＥＫのリン酸化を阻害する作用は、好ましくは、ＭＥＫの発現量を実質的に減少させずに、リン酸化ＭＥＫの発現量を減少させる作用である。ＭＥＫのリン酸化を阻害する作用を有する物質は、ＭＥＫのリン酸化阻害剤とよぶことができる。ＭＥＫのリン酸化阻害剤が阻害するリン酸化部位は、１つでもよいし、複数でもよい。ＭＥＫ阻害剤としては、動物の脊髄におけるＭＥＫを阻害する物質が挙げられる。脊髄としては、腰部の脊髄が挙げられる。ＭＥＫ阻害剤は、より限定してＭＥＫ／ＥＲＫ経路を阻害することができ、その他のシグナル伝達経路に影響を及ぼさないため、副作用なども少ない点で、好ましい。また、ＭＥＫ阻害剤は、より末梢神経障害を抑制することができる点で、好ましい。
【００４７】
ＭＥＫ阻害剤としては、たとえば、ベンゾイミダゾール誘導体のＭＥＫ阻害剤、ベンズアミド誘導体のＭＥＫ阻害剤、ピリダジン誘導体のＭＥＫ阻害剤、ベンゾピラン誘導体のＭＥＫ阻害剤などが挙げられる。より具体的には、ＭＥＫ阻害剤としては、たとえば、トラメチニブ（Ｔｒａｍｅｔｉｎｉｂ）、セルメチニブ（Ｓｅｌｕｍｅｔｉｎｉｂ）、レファメティニブ（Ｒｅｆａｍｅｔｉｎｉｂ）、ピマセルチブ（Ｐｉｍａｓｅｒｔｉｂ）、ＭＥＫ１６２／ＡＲＲＹ−１６２、ＡＺＤ８３３０／ＡＲＲＹ−４２４７０４、ＧＤＣ−０９７３／ＲＧ７４２０、ＧＤＣ−０６２３／ＲＧ７４２１／ＸＬ５１８、ＣＩＦ／ＲＧ７１６７／ＲＯ４９８７６５５、ＣＫ１２７／ＲＧ７３０４／ＲＯ５１２６７６６、Ｅ６２０１、ＴＡＫ−７３３、ＰＤ−０３２５９０１、ＡＳ７０３９８８／ＭＳＣ２０１５１０３Ｂ、ＷＸ−５５４、ならびにそれらの誘導体、薬学的に許容される塩、および類似物などが挙げられる。
【００４８】
ＥＲＫ阻害剤は、本発明の予防、治療、または軽減剤の有効成分である。ＥＲＫ阻害剤は、ＥＲＫを阻害する作用を有する物質である。ＥＲＫを阻害する作用としては、ＥＲＫのリン酸化を阻害する作用が挙げられる。ＥＲＫのリン酸化を阻害する作用は、好ましくは、ＥＲＫの発現量を実質的に減少させずに、リン酸化ＥＲＫの発現量を減少させる作用である。ＥＲＫのリン酸化を阻害する作用を有する物質は、ＥＲＫのリン酸化阻害剤とよぶことができる。ＥＲＫのリン酸化阻害剤が阻害するリン酸化部位は、１つでもよいし、複数でもよい。ＥＲＫのリン酸化部位としては、ＥＲＫ１については、Ｔｈｒ２０２、Ｔｙｒ２０４が挙げられ、ＥＲＫ２については、Ｔｈｒ１８５、Ｔｙｒ１８７が挙げられる。ＥＲＫのリン酸化阻害剤としては、たとえば、ＥＲＫ１のＴｈｒ２０２、ＥＲＫ１のＴｙｒ２０４、ＥＲＫ２のＴｈｒ１８５、およびＥＲＫ２のＴｙｒ１８７からなる群から選ばれるリン酸化部位のリン酸化阻害剤が挙げられる。ＥＲＫ阻害剤としては、動物の脊髄におけるＥＲＫを阻害する物質が挙げられる。脊髄としては、腰部の脊髄が挙げられる。
【００４９】
ＰＫＣ阻害剤、ＭＥＫ／ＥＲＫ経路阻害剤、ＭＥＫ阻害剤、またはＥＲＫ阻害剤は、抗エストロゲン剤であってもよい。抗エストロゲン剤には、ステロイド系の抗エストロゲン剤、および非ステロイド系の抗エストロゲン剤が含まれる。抗エストロゲン剤は、エストロゲンレセプターに結合し、エストロゲンに対する拮抗作用を発揮する物質である。メピチオスタンは、ステロイド性の抗エストロゲン剤である。タモキシフェンは、非ステロイド系の抗エストロゲン剤である。
【００５０】
ＰＫＣ阻害剤、ＭＥＫ／ＥＲＫ経路阻害剤、ＭＥＫ阻害剤、またはＥＲＫ阻害剤は、タモキシフェンの類似物（タモキシフェン類縁化合物ともいう）であってもよい。タモキシフェン類縁化合物としては、クロミフェン、トレミフェンなどの非ステロイド系の抗エストロゲン剤；ラロキシフェン、バゼドキシフェン、アルゾキシフェン、ラソフォキシフェンなどの選択的エストロゲン調節薬；４−ヒドロキシタモキシフェン、エンドキシフェンなどのタモキシフェン活性代謝物が挙げられる。
【００５１】
ＰＫＣ阻害剤、ＭＥＫ／ＥＲＫ経路阻害剤、ＭＥＫ阻害剤、またはＥＲＫ阻害剤には、抗がん剤としての機能を有する薬剤が存在する。本発明の予防、治療、または軽減剤においては、有効成分として、抗がん剤であるＰＫＣ阻害剤、ＭＥＫ／ＥＲＫ経路阻害剤、ＭＥＫ阻害剤、またはＥＲＫ阻害剤を用いてもよい。その場合、抗がん剤を複数用いる多剤併用療法において、抗がん剤の組み合わせを工夫することによって、簡便に、抗がん剤による末梢神経障害を予防、治療、または軽減することができ、また、用いる抗がん剤について知られている副作用、投与量、投与方法、薬理試験データなどの情報を利用することによって、臨床的使用を迅速に開始することができる。
【００５２】
本発明の予防、治療、または軽減剤の有効成分は、１種のみのＰＫＣ阻害剤、ＭＥＫ／ＥＲＫ経路阻害剤、ＭＥＫ阻害剤、またはＥＲＫ阻害剤を含んでもよいし、２種以上のＰＫＣ阻害剤、ＭＥＫ／ＥＲＫ経路阻害剤、ＭＥＫ阻害剤、またはＥＲＫ阻害剤を含んでもよい。
【００５３】
後述の実施例において説明するように、ＰＫＣ阻害剤、もしくはＭＥＫ／ＥＲＫ経路阻害剤を非局所的に投与することによって、または、ＭＥＫもしくはＥＲＫを阻害することによって、抗がん剤の投与に伴う末梢神経障害が、高度に、かつ持続的に、抑制されることが見出された。したがって、ＰＫＣ阻害剤、ＭＥＫ／ＥＲＫ経路阻害剤、ＭＥＫ阻害剤、またはＥＲＫ阻害剤を有効成分として用いることによって、抗がん剤による末梢神経障害を予防、治療、または軽減することができる。
【００５４】
末梢神経障害を引き起こす抗がん剤としては、微小管に傷害を与えて末梢神経障害を引き起こす抗がん剤などの微小管阻害薬が挙げられる。このような抗がん剤としては、パクリタキセル、ドセタキセル等のタキサン系薬剤；ビンクリスチン、ビンプラスチン、ビンデシン、ビノレルビン等のビンアルカロイド系薬剤が挙げられる。また、末梢神経障害を引き起こす抗がん剤としては、神経細胞を傷害することによって軸索障害をきたすことにより末梢神経障害を引き起こす抗がん剤が挙げられる。このような抗がん剤としては、オキサリプラチン、カルボプラチン、シスプラチン、ネダプラチン等の白金製剤；ボルテゾミプ等のプロテアソーム阻害剤などが挙げられる。
【００５５】
これらの抗がん剤による末梢神経障害としては、知覚過敏、知覚異常、感覚異常、急性または慢性の疼痛などが挙げられる。知覚過敏としては、より具体的には、機械的刺激によるアロディニアなどの痛覚過敏が挙げられる。アロディニアは、通常痛みを引き起こさない触覚刺激で惹起される激痛を意味する。知覚異常としては、より具外的には、低温刺激における知覚異常、四肢末端のしびれ、灼熱感などが挙げられる。感覚異常としては、感覚消失、感覚麻痺、違和感などが挙げられる。感覚麻痺が生じる部位としては、四肢が挙げられる。急性または慢性の疼痛が生じる部位としては、四肢が挙げられる。疼痛には、劇痛、焼けるような痛みと称されるものも含まれる。これらの末梢神経障害によって、運動機能障害などの日常生活上の障害、深部腱反射の低下などが生じることがある。運動機能障害としては、筋力の低下、運動失調などが挙げられる。運動失調としては、手指の巧緻機能障害、屈曲障害、歩行障害などが挙げられる。手指の巧緻機能障害は、物がうまくつかめない、ボタンがかけにくい、といった障害を伴うことがある。屈曲障害としては、正座、あぐら、横座りまたは椅子座りなどが困難または不能である状態が挙げられる。歩行障害は、蹟き、転倒などを伴うことがある。
【００５６】
本発明において予防、治療、または軽減の対象となる抗がん剤による末梢神経障害は、一種類の抗がん剤を用いた単剤療法で生じるものだけでなく、作用機序の異なる複数の薬剤を組み合わせて投与する多剤併用療法において発生する末梢神経障害、およびバイオケミカル・モジュレーション（ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  ｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ）療法において発生する末梢神経障害をも包含する。バイオケミカル・モジュレーション療法は、作用機序の異なる薬剤が最大の有効性を発揮できるように、薬剤の組み合わせ、または薬剤の投与方法に工夫を行う療法である。また、ＦＯＬＦＯＸ療法において生じる末梢神経障害も、本発明における予防、治療、または軽減の対象に包含される。ＦＯＬＦＯＸ療法は、フルオロウラシル、フォリン酸、およびオキサリプラチンの３剤を併用するがん化学療法であり、大腸癌に対する化学療法の１つである。
【００５７】
本発明によって、これらの末梢神経障害の予防、治療、または軽減を行うことができるが、ここで、「予防」には、病態の発症を防ぐこと、抑制すること、および遅延させることが包含されるものとする。また、「治療」には、病態を完全に治癒させることのほか、完全に治癒しないものの症状の進展または悪化を抑制して病態の進行をとどめること、および病態の一部または全部を改善して治癒の方向へ導くことが包含されるものとする。さらに、「軽減」には、症状を緩解することが包含されるものとする。
【００５８】
本発明の予防、治療、または軽減剤には、有効成分のほか、賦形剤、結合剤、滑沢剤、崩壊剤、矯味剤、矯臭剤、界面活性剤、香料、着色剤、抗酸化剤、隠蔽剤、静電気防止剤、流動化剤、湿潤剤などの添加剤を含んでもよい。
【００５９】
賦形剤としては、たとえば、ブドウ糖、果糖、麦芽糖、乳糖、異性化乳糖、還元乳糖、ショ糖、Ｄ−マンニトール、エリスリトール、マルチトール、キシリトール、パラチノース、トレハロース、ソルビトール、トウモロコシデンプン、バレイショデンプン、コムギデンプン、コメデンプン、結晶セルロース、タルク、無水ケイ酸、無水リン酸カルシウム、沈降炭酸カルシウム、ケイ酸カルシウム、デキストラン（たとえば、デキストラン、デキストラン４０、デキストラン７０など）、プルラン、デキストリン、アルファー化デンプンなどが挙げられる。結合剤としては、たとえば、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポビドン、ポリビニルピロリドン、メチルセルロース、ポリビニルアルコール、カルボキシメチルセルロース、部分アルファー化デンプン、アルファー化デンプン、アルギン酸ナトリウム、プルラン、アラビアゴム末、ゼラチン、デキストリンなどが挙げられ、これらの１種または２種以上を適宜配合して用いてもよい。滑沢剤としては、たとえば、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、ショ糖脂肪酸エステル、フマル酸ステアリルナトリウム、ステアリン酸、タルク、ポリエチレングリコールなどが挙げられる。崩壊剤としては、たとえば、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、カルメロース、カルメロースカルシウム、カルボキシメチルスターチナトリウム、クロスカルメロースナトリウム、クロスポビドン、ヒドロキシプロピルスターチ、トウモロコシデンプンなどが挙げられる。矯味剤としては、たとえば、白糖、Ｄ−ソルビトール、キシリトール、クエン酸、アスコルビン酸、酒石酸、リンゴ酸、アスパルテーム、アセスルファムカリウム、ソーマチン、サッカリンナトリウム、グリチルリチン二カリウム、グルタミン酸ナトリウム、５’−イノシン酸ナトリウム、５’−グアニル酸ナトリウムなどが挙げられる。矯臭剤としては、たとえば、トレハロース、リンゴ酸、マルトース、グルコン酸カリウム、アニス精油、バニラ精油、カルダモン精油などが挙げられる。界面活性剤としては、たとえば、ポリソルベート（ポリソルベート８０など）、ポリオキシエチレン・ポリオキシプロピレン共重合物、ラウリル硫酸ナトリウムなどが挙げられる。香料としては、たとえば、レモン油、オレンジ油、メントール、はっか油などが挙げられる。着色剤としては、たとえば、酸化チタン、食用黄色５号、食用青色２号、三二酸化鉄、黄色三二酸化鉄などが挙げられる。抗酸化剤としては、たとえば、アスコルビン酸ナトリウム、Ｌ−システイン、亜硫酸ナトリウム、ビタミンＥなどが挙げられる。隠蔽剤としては、たとえば、酸化チタンなどが挙げられる。静電気防止剤としては、たとえば、タルク、酸化チタンなどが挙げられる。流動化剤としては、たとえば、軽質無水ケイ酸、タルク、含水二酸化ケイ素などが挙げられる。湿潤剤としては、たとえば、ポリソルベート８０、ラウリル酸硫酸ナトリウム、ショ糖脂肪酸エステル、マクロゴール、ヒドロキシプロピルセルロース（ＨＰＣ）などが挙げられる。
【００６０】
これらの添加剤は、目的とする製剤に通常用いられる割合で配合することができる。また、上記以外にも、公知の文献、例えば、薬事日報社２０００年刊「医薬品添加物辞典」日本医薬品添加剤協会編集）などに記載されているような添加剤を用いてもよい。
【００６１】
本発明の予防、治療、または軽減剤の剤型としては、固形製剤が挙げられるが、これに限定されず、たとえば、エアゾール剤、液剤、エキス剤、軟エキス剤、乾燥エキス剤、エリキシル剤、カプセル剤、硬カプセル剤、軟カプセル剤、顆粒剤、丸剤、眼軟膏剤、経皮吸収型製剤、懸濁剤、乳剤、坐剤、散剤、酒精剤、錠剤、シロップ剤、浸剤、煎剤、注射剤、貼付剤、チンキ剤、点眼剤、トローチ剤、軟膏剤、パップ剤、芳香水剤、リニメント剤、リモナーデ剤、流エキス剤、ローション剤が挙げられる。
【００６２】
本発明の予防、治療、または軽減剤は、公知の方法で製造することができる。たとえば、顆粒状の固形製剤は、転動造粒機、撹拌造粒機、流動造粒機、遠心転動造粒機、乾式造粒機などを用いて造粒することによって製造することができる。また、カプセル剤は、公知の方法で製造することができ、たとえば、前記顆粒に必要に応じて添加剤を添加したものを硬カプセル（例えば、ゼラチンカプセル、ヒドロキシプロビルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）カプセル、プルランカプセル、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）カプセルなど）にカプセル充填機を用いて充填することにより、製造することができる。また、錠剤も、公知の方法で製造することができる。たとえば、上記顆粒および必要に応じて添加剤を均等に混合し、回転式打錠機などによって圧縮成型して素錠を得て、該素錠をそのまま錠剤とすることにより、または必要に応じてさらにコーティング基剤を用いて被覆することにより、錠剤を製造することができる。また、造粒を行わずに薬物などを含有する混合末を調製し、それを回転式打錠機などによって錠剤化することによって、錠剤を製造することもできる。さらに、上記顆粒の代わりに、有効成分および賦形剤を溶媒（たとえば水、有機溶媒（たとえば、エタノール、アセトンなど）、またはそれらの混合溶媒など）に溶解し、常法に従って凍結乾燥した凍結乾燥品を用いて錠剤を製造してもよい。すなわち、有効成分を含有する凍結乾燥品を粉砕した後、必要に応じて添加剤を添加して混合し、打錠することによって錠剤を製造してもよい。
【００６３】
本発明の予防、治療、または軽減剤の有効成分の投与量は、投与を受ける患者の年齢、体重、病態、投与方法などによって異なるが、たとえば、投与を受ける患者において、１回あたり２０〜４０ｍｇであり、これを、たとえば、半日に１回〜２日に１回の頻度で投与してもよい。本発明の予防、治療、または軽減剤の投与頻度は、投与を受ける患者の年齢、体重、病態、投与方法などによって異なるが、たとえば、末梢神経障害を引き起こす抗がん剤の投与頻度の３〜１０倍である。また、本発明の予防、治療、または軽減剤の有効成分の投与量は、たとえば、投与を受ける患者の血中濃度が、１００ｎｇ／ｍＬ〜８００ｎｇ／ｍＬ、より限定的には、１００ｎｇ／ｍＬ〜２００ｎｇ／ｍＬとなる量である。
【００６４】
ＰＫＣ阻害剤、またはＭＥＫ／ＥＲＫ経路阻害剤を有効成分として含有する本発明の予防、治療、または軽減剤は、非局所的投与によって患者に投与される。非局所的投与において除外される局所的投与としては、脳室内投与、くも膜下腔内投与などの髄腔内投与が挙げられる。非局所的な投与は、経口投与、経管栄養、注腸投与などの経腸投与；静脈注射、点滴静脈注射などの経静脈投与；経動脈投与；筋肉内投与；皮下投与；吸入投与；経皮投与；経粘膜投与；骨内投与などであってもよい。このうち、経口投与、経皮投与などは、日常的環境において簡易に使用することができる点で、優れている。ＭＥＫ阻害剤またはＥＲＫ阻害剤を有効成分として含有する本発明の予防、治療、または軽減剤の投与経路としては、皮膚上投与、吸入投与、注腸投与、点耳、経鼻投与、膣内投与、経口投与、経管栄養、注腸投与、経静脈投与、経動脈投与、筋肉内投与、心臓内投与、皮下投与、骨内投与、皮内投与、くも膜下（腔）投与、腹腔内投与、膀胱内投与、経皮投与、経粘膜投与、硬膜外投与、硝子体内投与などが挙げられる。
【００６５】
本発明の予防、治療、または軽減剤が投与される患者としては、卵巣がん、非小細胞肺がん、乳がん、胃がん、子宮体がん、頭頚部がん、食道がん、白血病、悪性リンパ腫、小児腫瘍、多発性骨髄腫、悪性星細胞腫、神経膠腫、絨毛性疾患、胚細胞腫瘍、睾丸腫瘍、膀胱がん、腎盂腫瘍、尿管腫瘍、前立腺がん、子宮頚がん、神経芽細胞腫、小細胞肺がん、骨肉腫、悪性胸膜中皮腫、悪性骨腫瘍、および大腸がんからなる群から選択される１種または２種以上のがんを患ったがん患者が挙げられる。
【００６６】
後述の実施例において説明するように、抗がん剤による末梢神経障害の抑制の効果は、ＰＫＣ阻害剤、もしくはＭＥＫ／ＥＲＫ経路阻害剤を非局所的に投与すること、またはＭＥＫもしくはＥＲＫを阻害することによるものであることが見出された。したがって、被験物によるＰＫＣ阻害、もしくはＭＥＫ／ＥＲＫ経路阻害を評価する工程を行うことによって、または、被験物によるＭＥＫ阻害もしくはＥＲＫ阻害を評価する工程を行うことによって、抗がん剤による末梢神経障害の予防、治療、または軽減剤の有効成分を選択することができる。すなわち、本発明は、被験物によるＰＫＣ阻害、またはＭＥＫ／ＥＲＫ経路阻害を評価する工程を含むことを特徴とする、抗がん剤による末梢神経障害の非局所投与用の予防、治療、または軽減剤の有効成分の選択方法；および被験物によるＭＥＫ阻害またはＥＲＫ阻害を評価する工程を含むことを特徴とする、抗がん剤による末梢神経障害の予防、治療、または軽減剤の有効成分の選択方法も提供する。
【００６７】
被験物は、選択すべき有効成分の候補である物質である。被験物は、天然物由来の有機化合物または無機化合物であっても、合成による有機化合物または無機化合物であってもよい。
【００６８】
被験物によるＰＫＣ阻害、またはＭＥＫ／ＥＲＫ経路阻害を評価する工程、および被験物によるＭＥＫ阻害またはＥＲＫ阻害を評価する工程は、インビボの試験によって行ってもよいし、インビトロの試験によって行ってもよい。インビボの試験は、たとえば、モデル生物に被験物を投与する工程、およびモデル生物におけるＰＫＣ、ＭＥＫ、またはＥＲＫを被験物の投与の前後で比較する工程を含む試験によって行ってもよい。このうち、モデル生物におけるＰＫＣ、ＭＥＫ、またはＥＲＫを被験物の投与の前後で比較する工程は、被験物の投与前および投与後におけるモデル生物におけるＰＫＣ、ＭＥＫ、またはＥＲＫを測定する工程、ならびに測定された投与前および投与後のＰＫＣ、ＭＥＫ、またはＥＲＫを比較する工程によって、行ってもよい。測定されるモデル生物におけるＰＫＣ、ＭＥＫ、またはＥＲＫとしては、ＰＫＣ、ＭＥＫ、またはＥＲＫのタンパク質の発現量、ＰＫＣ、ＭＥＫ、またはＥＲＫのリン酸化の程度などが挙げられる。ＰＫＣ、ＭＥＫ、またはＥＲＫのリン酸化の程度は、リン酸化したＰＫＣ、ＭＥＫ、またはＥＲＫのタンパク質の発現量などをリン酸化特異的認識抗体を用いることなどによって測定することができる。測定するリン酸化したＰＫＣ、ＭＥＫ、またはＥＲＫのタンパク質としては、たとえば、Ｓｅｒ６３８がリン酸化したＰＫＣ−αタンパク質；Ｓｅｒ６４３、またはＴｈｒ５０５がリン酸化したＰＫＣ−δタンパク質；Ｔｈｒ２０２、またはＴｙｒ２０４の部位がリン酸化したＥＲＫ１タンパク質；Ｔｈｒ１８５、またはＴｙｒ１８７の部位がリン酸化したＥＲＫ２タンパク質；ＥＲＫ１タンパク質のＴｈｒ２０２、ＥＲＫ１タンパク質のＴｙｒ２０４、ＥＲＫ２タンパク質のＴｈｒ１８５、およびＥＲＫ２タンパク質のＴｙｒ１８７からなる群から選ばれるリン酸化部位がリン酸化したＥＲＫ１／２タンパク質などが挙げられる。測定するリン酸化したＰＫＣ、ＭＥＫ、またはＥＲＫタンパク質におけるリン酸化部位は、単独であっても、複数であってもよい。測定するモデル生物におけるＰＫＣ、ＭＥＫ、またはＥＲＫとしては、モデル生物の脊髄におけるＰＫＣ、ＭＥＫ、またはＥＲＫが挙げられ、特に、腰部の脊髄におけるＰＫＣ、ＭＥＫ、またはＥＲＫが挙げられる。試験に用いられるモデル生物としては、哺乳動物が挙げられ、哺乳動物としては、ヒトのほか、ラット、マウスなどの非ヒト哺乳動物が挙げられる。
【００６９】
本発明における有効成分の選択方法において、抗がん剤による末梢神経障害の予防、治療、または軽減剤の有効成分の選択は、被験物によるＰＫＣ阻害、ＭＥＫ／ＥＲＫ経路阻害、ＭＥＫ阻害、またはＥＲＫ阻害を評価した結果に基づいて行われる。予防、治療、または軽減剤の有効成分の選択は、被験物によるＰＫＣ阻害、ＭＥＫ／ＥＲＫ経路阻害、ＭＥＫ阻害、またはＥＲＫ阻害を評価した結果のみに基づくものであってもよいが、被験物によるＰＫＣ阻害、ＭＥＫ／ＥＲＫ経路阻害、ＭＥＫ阻害、またはＥＲＫ阻害を評価した結果と、被験物に関する他の情報とを組み合わせて行う評価に基づくものであってもよい。被験物に関する他の情報としては、被験物についての他のインビボまたはインビトロの試験結果が挙げられる。
【００７０】
本発明における有効成分の選択方法は、単独の被験物について行ってもよいし、複数の被験物を用いるハイコンテンツスクリーニング系において行ってもよい。
【実施例】
【００７１】
以下、実施例によって本発明を詳述するが、本発明はこれらに限定されるものではない。【００７２】
実施例１：オキサリプラチンによるマウス末梢神経障害に対する作用：
以下のようにして、被験薬をマウスに経口投与し、コールドプレート試験、およびフォン・フライ試験を行うことによって、抗がん剤のオキサリプラチンを投与した場合に生じる、機械的刺激によるアロディニア等の知覚過敏、および低温刺激における知覚異常に対する被験薬の効能を調べた。【００７３】
（１）被験薬の投与：
実験動物として６〜７週齢のＢａｌｂ／ｃ雄性マウスを用い、コントロール群、オキサリプラチン投与群、ならびにオキサリプラチンおよび被験薬投与群（以下、単にオキサリプラチン＋被験薬投与群とも称する）の３群に群構成した。オキサリプラチン投与群には、オキサリプラチンの週１回の静脈内投与を２週間継続して、計２回のオキサリプラチン投与を行った。オキサリプラチンの１回の投与量は、マウスの体重に対して６ｍｇ／ｋｇとした。オキサリプラチン＋被験薬投与群については、オキサリプラチン投与直後から２週間継続して連日、計１４回、被験薬としてタモキシフェンを経口投与した。タモキシフェンの１回の投与量は、マウスの体重に対して３０ｍｇ／ｋｇとした。コントロール群には、５％ブドウ糖液および生理食塩水を投与した。なお、オキサリプラチン投与群、およびオキサリプラチン＋被験薬投与群への投与に用いた溶媒も、５％ブドウ糖液および生理食塩水とした。【００７４】
（２）フォン・フライ試験（ｖｏｎ  Ｆｒｅｙ  ｔｅｓｔ）
オキサリプラチン＋被験薬投与群への被験薬の投与の約１２時間後に、底が金網になっているケージに、上記（１）の３群のマウスを入れ、１時間順化させた後、０．１６ｇの強度のフォン・フライ（ｖｏｎ  Ｆｒｅｙ）フィラメントを、後肢裏に対して垂直に、フィラメントが曲るまで押し付けて６秒間静止する処置を、左右の後肢について５回ずつ施行して、回避反応の回数を測定した。回避反応の測定は、オキサリプラチン投与開始から、１４日間連続して行った。測定した回避行動の結果を、Ｄｅｓｃｏｅｕｒら（ＥＭＢＯ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  ３，２６６−２７８，２０１１）の方法に従ってスコア化し、回避行動スコアを求めた。【００７５】
上記試験の結果を図１に示す。オキサリプラチン投与群ではコントロール群に比べて著しく回避行動スコアが上昇した。オキサリプラチンに被験薬を併用して投与したオキサリプラチン＋被験薬投与群では、コントロール群と同程度の回避行動スコアを示し、オキサリプラチン投与群と比較して有意に回避行動スコアの上昇を抑制した。また、オキサリプラチン＋被験薬投与群においては、被験薬の投与を終了した後も、疼痛閾値の低下の抑制を維持し続けることが認められた。以上の結果から、被験薬は、オキサリプラチンによる知覚過敏に対して、持続的に優れた予防、治療、または軽減作用を発揮することが明らかになった。【００７６】
（３）コールドプレート試験（Ｃｏｌｄ  ｐｌａｔｅ  ｔｅｓｔ）
オキサリプラチン投与開始日から１４日目まで連続してコールドプレート試験を行い、低温刺激における知覚異常に対する被験薬の効果を試験した。試験前日に上記（１）の３群のマウスをコールドプレート（Ｈｏｔ／Ｃｏｌｄ  ｐｌａｔｅ  Ｃａｔ，Ｎｏ．３５１００  Ｕｇｏ  Ｂａｓｉｌｅ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ａｐａｒａｔｕｓ社製）上に３０分間を置いて充分に順化させた。試験当日は１０℃に設定したコールドプレート上にラットをのせ、３０秒間マウスの行動を観察し、後足の回避までの反応時間（潜時）を測定した。潜時の測定は、オキサリプラチン＋被験薬投与群への被験薬の投与の約１２時間後に行った。なお、行動観察は試験実施者の先入観を排除するため、マウス各群の投与物が判らないように配慮して行った。試験は３回行って平均し、平均値、および標準誤差を算出した。多群間の比較は、一元配置分散分析（ｏｎｅ−ｗａｙ  ＡＮＯＶＡ）後、Ｔｕｋｅｙ−Ｋｒａｍｅｒ法の検定によって各群間を比較して行った。検定にはＳｔａｔ  Ｖｉｅｗ（ＡｂａｃｕｓＣｏｎｃｅｐｔｓ，Ｂｅｒｋｅｌｙ，ＣＡ，ＵＳＡ）を用いて、５％未満（ｐ＜０．０５）の危険率を有意差とみなした。【００７７】
上記試験の結果を図２に示す。上記試験の４日目には、コールドプレートにおける冷刺激に対して、オキサリプラチン投与群では著しく潜時が短縮されたが、オキサリプラチン＋被験薬投与群では、コントロール群とほぼ同程度に、かつ、持続的に潜時が回復した。以上の結果から、被験薬は、オキサリプラチンによる知覚異常（冷感刺激に対する過敏）に対して、持続的に優れた予防、治療、または軽減効果を発揮することが明らかになった。【００７８】
試験例１：ＥＲＫ阻害作用の測定：
実験開始後１４日目のマウスから採取した腰部脊髄サンプルについて、ウェスタンブロット分析を行い、サンプルにおけるＥＲＫタンパク質の発現量、およびリン酸化ＥＲＫタンパク質の発現量を調べた。リン酸化ＥＲＫタンパク質の試験は、ＥＲＫ１のＴｈｒ２０２、ＥＲＫ１のＴｙｒ２０４、ＥＲＫ２のＴｈｒ１８５、およびＥＲＫ２のＴｙｒ１８７からなる群から選ばれるリン酸化部位のリン酸化を認識する抗体（Ｐｈｏｓｐｈｏ−ｐ４４／４２ＭＡＰＫ（ＥＲＫ１／２）（Ｔｈｒ２０２／Ｔｙｒ２０４）Ａｎｔｉｂｏｄｙ；Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）を用いて行った。対照には、β−ａｃｔｉｎを用いた。【００７９】
上記試験の結果を図３に示す。図３に示すように、オキサリプラチン投与群のサンプルでは、神経過敏時に誘導されるリン酸化ＥＲＫの発現量が著しく増加していた。一方、オキサリプラチンに被験薬を併用して投与したオキサリプラチン＋被験薬投与群は、コントロール群と同程度のリン酸化ＥＲＫの発現量を示し、オキサリプラチン投与群と比較して有意にリン酸化ＥＲＫ発現量が抑制されていた。ＥＲＫの発現量については、両群において有意な差が認められなかった。このことから、被験薬は、ＥＲＫのリン酸化を阻害することによって、オキサリプラチンなどの抗がん剤による末梢神経障害を持続的に、かつ顕著に予防、治療、または軽減することが明らかになった。【００８０】
試験例２：ＰＫＣ阻害作用の測定：
試験例１と同様の試験を行い、胸部脊髄サンプルにおけるリン酸化ＰＫＣ−α（Ｓｅｒ６３８）、リン酸化ＰＫＣ−γ（Ｓｅｒ６４３）、およびリン酸化ＰＫＣ−γ（Ｔｈｒ５０５）の発現量を調べた。結果を図３にあわせて示す。図３に示すように、オキサリプラチンに被験薬を併用して投与したオキサリプラチン＋被験薬投与群は、オキサリプラチン投与群と比較して有意にリン酸化ＰＫＣの発現量が抑制されていた。このことから、ＰＫＣ阻害剤を非局所的に投与することによって、オキサリプラチンなどの抗がん剤による末梢神経障害を持続的に、かつ顕著に予防、治療、または軽減することができることが明らかになった。【００８１】
実施例２：ＭＥＫ阻害剤による効果：
ＰＤ０３２５９０１を被験薬として用いたほかは、実施例１と同様の方法によって、フォン・フライ試験およびコールドプレート試験を行った。ＰＤ０３２５９０１は、ＭＥＫに選択的に結合して、ＡＴＰ非競合的にＭＥＫを阻害するＭＥＫ阻害剤である。ＭＥＫは、ＭＥＫ／ＥＲＫ経路においてＥＲＫの上流に位置する。結果を、それぞれ、図４および５に示す。図４および図５に示すように、実施例１と同様に、被験薬による機械的刺激抑制効果、および冷刺激抑制効果が認められた。【００８２】
また、ＰＤ０３２５９０１を被験薬として用いたほかは、試験例１と同様の試験を行い、サンプルにおけるＥＲＫタンパク質の発現量、およびリン酸化ＥＲＫタンパク質の発現量を調べた。結果を図６に示す。図６に示すように、試験例１と同様に、被験薬によるリン酸化ＥＲＫ発現量の抑制効果が認められた。【００８３】
図１と図４との対比、図２と図５との対比、および図３と図６との対比から明らかなように、ＭＥＫ阻害剤を用いる実施例２の試験における機械的刺激抑制効果、冷刺激抑制効果、およびリン酸化ＥＲＫ発現量の抑制効果は、ＰＫＣ阻害剤を用いてＥＲＫを阻害した実施例１および試験例１の効果とほぼ同一であった。このことから、実施例１および実施例２で認められた末梢神経障害の持続的かつ顕著な予防、治療、または軽減効果は、ＭＥＫまたはＥＲＫを阻害して、ＭＥＫ／ＥＲＫ経路を阻害することによるものであり、ＭＥＫまたはＥＲＫを阻害することによって、持続的かつ顕著な末梢神経障害の予防、治療、または軽減効果が得られることが明らかになった。【００８４】
試験例３：安全性の測定：
実施例１の試験における３群および実施例２の試験における３群について、試験に用いたマウスの体重変化を経時的に測定した。その結果、いずれの群においても、体重変化に顕著な差は見られず、本発明の予防、治療、または軽減剤は、副作用が少なく、安全性が高いことが分かった。【００８５】
これらの薬理試験結果より明らかなように、被験薬は、オキサリプラチン等の抗がん剤の投与で生じる機械的刺激によるアロディニアなどの知覚過敏、および低温刺激における知覚異常を末梢神経障害の指標として実施したマウス経口投与試験において、末梢神経障害に対して持続的に優れた予防、治療、または軽減作用を有することが認められた。そして、ＰＫＣ阻害剤またはＭＥＫ阻害剤として知られているこれらの被験薬は、ＭＥＫ阻害を行い、または、ＥＲＫのリン酸化を阻害して、ＥＲＫ阻害を行い、ＭＥＫ／ＥＲＫ経路を阻害することによって、持続的に優れた予防、治療、または軽減作用を示すことが認められた。このことから、ＰＫＣ阻害剤またはＭＥＫ／ＥＲＫ経路阻害剤を非局所的に投与することによって、または、ＭＥＫもしくはＥＲＫを阻害することによって、オキサリプラチン等の抗がん剤の投与によって引き起こされる知覚過敏や知覚異常などの末梢神経障害を、持続的に顕著に予防、治療、または軽減することができることが示された。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【手続補正書】
【提出日】平成26年9月2日(2014.9.2)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＰＫＣ阻害剤、またはＭＥＫ／ＥＲＫ経路阻害剤を有効成分として含有する、抗がん剤による末梢神経障害の予防、治療、または軽減剤であって、経口投与される剤。
【請求項２】
タモキシフェンまたはその類縁化合物、それらの誘導体、薬学的に許容される塩、または類似物を有効成分として含有する、請求項１に記載の予防、治療、または軽減剤。
【請求項３】
ＭＥＫ阻害剤またはＥＲＫ阻害剤を有効成分として含有する、抗がん剤による末梢神経障害の予防、治療、または軽減剤であって、経口投与される剤。
【請求項４】
タモキシフェンまたはその類縁化合物、それらの誘導体、薬学的に許容される塩、または類似物、あるいはＰＤ−０３２５９０１またはその誘導体、薬学的に許容される塩、または類似物を有効成分として含有する、請求項３に記載の予防、治療、または軽減剤。
【請求項５】
ＭＥＫ阻害剤またはＥＲＫ阻害剤が、抗がん剤である、請求項３または４に記載の予防、治療、または軽減剤。
【請求項６】
ＥＲＫ阻害剤が、ＥＲＫのリン酸化阻害剤である、請求項３〜５のいずれか１項に記載の予防、治療、または軽減剤。
【請求項７】
ＥＲＫ阻害剤が、ＥＲＫ１のＴｈｒ２０２、ＥＲＫ１のＴｙｒ２０４、ＥＲＫ２のＴｈｒ１８５、ＥＲＫ２のＴｙｒ１８７からなる群から選ばれるリン酸化部位のリン酸化阻害剤である、請求項３〜６のいずれか１項に記載の予防、治療、または軽減剤。
【請求項８】
末梢神経障害が白金製剤によるものである、請求項１〜７のいずれか１項に記載の予防、治療、または軽減剤。
【請求項９】
末梢神経障害が、機械的刺激による知覚過敏または低温刺激における知覚異常である、請求項１〜８のいずれか１項に記載の予防、治療、または軽減剤。
【請求項１０】
被験物によるＰＫＣ阻害またはＭＥＫ／ＥＲＫ経路阻害を評価する工程を含むことを特徴とする、抗がん剤による末梢神経障害の非局所投与用の予防、治療、または軽減剤の有効成分の選択方法であって、被験物が非ヒト哺乳動物に経口投与される方法。
【請求項１１】
被験物によるＭＥＫ阻害またはＥＲＫ阻害を評価する工程を含むことを特徴とする、抗がん剤による末梢神経障害の予防、治療、または軽減剤の有効成分の選択方法であって、被験物が非ヒト哺乳動物に経口投与される方法。
【手続補正書】
【提出日】平成27年5月14日(2015.5.14)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＰＫＣ阻害剤、またはＭＥＫ／ＥＲＫ経路阻害剤を有効成分として含有する、抗がん剤による末梢神経障害の非局所投与用の予防、治療、または軽減剤。
【請求項２】
ＭＥＫ阻害剤またはＥＲＫ阻害剤を有効成分として含有する、抗がん剤による末梢神経障害の予防、治療、または軽減剤。
【請求項３】
ＭＥＫ阻害剤またはＥＲＫ阻害剤が、抗がん剤である、請求項２に記載の予防、治療、または軽減剤。
【請求項４】
ＥＲＫ阻害剤が、ＥＲＫのリン酸化阻害剤である、請求項２または３に記載の予防、治療、または軽減剤。
【請求項５】
ＥＲＫ阻害剤が、ＥＲＫ１のＴｈｒ２０２、ＥＲＫ１のＴｙｒ２０４、ＥＲＫ２のＴｈｒ１８５、ＥＲＫ２のＴｙｒ１８７からなる群から選ばれるリン酸化部位のリン酸化阻害剤である、請求項２〜４のいずれか１項に記載の予防、治療、または軽減剤。
【請求項６】
末梢神経障害が白金製剤によるものである、請求項１〜５のいずれか１項に記載の予防、治療、または軽減剤。
【請求項７】
被験物によるＰＫＣ阻害またはＭＥＫ／ＥＲＫ経路阻害を評価する工程を含むことを特徴とする、抗がん剤による末梢神経障害の非局所投与用の予防、治療、または軽減剤の有効成分の選択方法。
【請求項８】
被験物によるＭＥＫ阻害またはＥＲＫ阻害を評価する工程を含むことを特徴とする、抗がん剤による末梢神経障害の予防、治療、または軽減剤の有効成分の選択方法。
【手続補正書】
【提出日】平成28年7月28日(2016.7.28)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
タモキシフェン、またはＭＥＫ／ＥＲＫ経路阻害剤を有効成分として含有する、抗がん剤による末梢神経障害の非局所投与用の予防、治療、または軽減剤。
【請求項２】
ＭＥＫ阻害剤またはＥＲＫ阻害剤を有効成分として含有する、抗がん剤による末梢神経障害の予防、治療、または軽減剤。
【請求項３】
ＭＥＫ阻害剤またはＥＲＫ阻害剤が、抗がん剤である、請求項２に記載の予防、治療、または軽減剤。
【請求項４】
ＥＲＫ阻害剤が、ＥＲＫのリン酸化阻害剤である、請求項２または３に記載の予防、治療、または軽減剤。
【請求項５】
ＥＲＫ阻害剤が、ＥＲＫ１のＴｈｒ２０２、ＥＲＫ１のＴｙｒ２０４、ＥＲＫ２のＴｈｒ１８５、ＥＲＫ２のＴｙｒ１８７からなる群から選ばれるリン酸化部位のリン酸化阻害剤である、請求項２〜４のいずれか１項に記載の予防、治療、または軽減剤。
【請求項６】
末梢神経障害が白金製剤によるものである、請求項１〜５のいずれか１項に記載の予防、治療、または軽減剤。
【請求項７】
被験物によるＰＫＣ阻害またはＭＥＫ／ＥＲＫ経路阻害を評価する工程を含むことを特徴とする、抗がん剤による末梢神経障害の非局所投与用の予防、治療、または軽減剤の有効成分の選択方法。
【請求項８】
被験物によるＭＥＫ阻害またはＥＲＫ阻害を評価する工程を含むことを特徴とする、抗がん剤による末梢神経障害の予防、治療、または軽減剤の有効成分の選択方法。
【国際調査報告】
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