(57)【要約】  トランス−３−アミノ−１−メチル−３−（４−（３−フェニル−５Ｈ−イミダゾ［１，２−ｃ］ピリド［３，４−ｅ］［１，３］オキサジン−２−イル）フェニルシクロブタノールの安定性に優れ、製造及び製剤面で好ましい結晶を提供することを目的とする。本発明は、粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．１°）が、７．７°、９．５°、１０．３°、１２．３°、１４．５°、１５．６°、１６．３°、１７．８°、１８．３°、１９．３°、２０．９°、２２．８°、２４．２°、２５．７°、２６．８°、２７．７°、２９．０°及び３０．１°に特徴的なピークを有する結晶を提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．１°）が、７．７°、９．５°、１０．３°、１２．３°、１４．５°、１５．６°、１６．３°、１７．８°、１８．３°、１９．３°、２０．９°、２２．８°、２４．２°、２５．７°、２６．８°、２７．７°、２９．０°及び３０．１°から選択される少なくとも５つ以上のピークを有するトランス−３−アミノ−１−メチル−３−（４−（３−フェニル−５Ｈ−イミダゾ［１，２−ｃ］ピリド［３，４−ｅ］［１，３］オキサジン−２−イル）フェニル）シクロブタノールの結晶。
【請求項２】
粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．１°）が、７．７°、９．５°、１０．３°、１２．３°、１４．５°、１５．６°、１６．３°、１７．８°、１８．３°、１９．３°、２０．９°、２２．８°、２４．２°、２５．７°、２６．８°、２７．７°、２９．０°及び３０．１°にピークを有する請求項１に記載の結晶。
【請求項３】
示差走査熱量測定（ＤＳＣ）におけるピーク温度が２３０℃付近の吸熱ピークを有する請求項１に記載の結晶。
【請求項４】
請求項１〜３のいずれか１項に記載の結晶を含有する医薬組成物。
【請求項５】
請求項１〜３のいずれか１項に記載の結晶を含有する経口投与用の医薬組成物。
【請求項６】
（１）トランス−３−アミノ−１−メチル−３−（４−（３−フェニル−５Ｈ−イミダゾ［１，２−ｃ］ピリド［３，４−ｅ］［１，３］オキサジン−２−イル）フェニル）シクロブタノールを含水エタノール中で加熱懸濁して懸濁液を得る工程、
（２）上記（１）で得られた懸濁液から固体状のトランス−３−アミノ−１−メチル−３−（４−（３−フェニル−５Ｈ−イミダゾ［１，２−ｃ］ピリド［３，４−ｅ］［１，３］オキサジン−２−イル）フェニル）シクロブタノールを得る工程、
（３）上記（２）で得られたトランス−３−アミノ−１−メチル−３−（４−（３−フェニル−５Ｈ−イミダゾ［１，２−ｃ］ピリド［３，４−ｅ］［１，３］オキサジン−２−イル）フェニル）シクロブタノールの固体を熱水中で加熱懸濁する工程
を含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載の結晶の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、保存安定性に優れ、抗腫瘍剤として有用な新規イミダゾオキサジン化合物の結晶、当該結晶を含む医薬組成物、及び当該結晶の製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
一般的に、医薬品の有効活性成分として化合物が使用されるとき、品質を安定に保持するために及び／又は保管管理を容易にするために、化合物の化学的及び物理学的な安定性が必要である。このため、得られた化合物は安定形結晶であることが好ましく、通常、医薬品用の原薬としては最安定形結晶が選択される例が多い。また、ＩＣＨ（日米ＥＵ医薬品規制調和国際会議）ガイドラインにおける医薬品の残留溶媒ガイドラインでは、各種溶媒の使用可否及びその許容量が勧告されている。医薬品の製造に用いられる溶媒は毒性を有していることがあり、安全性の観点から、製造工程で残留してしまう溶媒はできるだけ少ないことが望ましい。【０００３】
現在、抗腫瘍剤として複数のＡＫＴ阻害剤が報告されており、特許文献１には、優れたＡＫＴ阻害作用を有し、抗腫瘍活性を示す化合物として、下記式（１）【０００４】
【化１】
2016136928.tif 000002
【０００５】
で表されるイミダゾオキサジン化合物（化学名：トランス−３−アミノ−１−メチル−３−（４−（３−フェニル−５Ｈ−イミダゾ［１，２−ｃ］ピリド［３，４−ｅ］［１，３］オキサジン−２−イル）フェニルシクロブタノール（以下、「化合物（１）」ともいう）が記載されている。しかしながら、本化合物の結晶形については全く知られておらず、高純度なイミダゾオキサジン化合物の安定形結晶を再現性よく得る方法は現在のところ知られていない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】国際公開第２０１２／１３７８７０号
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は、抗腫瘍剤として有用な化合物（１）の安定性に優れ、製造及び製剤面で好ましい結晶を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは、上記の課題を解決すべく鋭意研究を行ったところ、式（１）で表されるイミダゾオキサジン化合物を含水エタノール中で懸濁加熱させて得られる結晶ＩＩを見出した。さらに結晶ＩＩを熱水中懸濁する手法により安定性に優れ、医薬品として製造及び製剤面で好ましい化合物（１）の結晶Ｉを得ることに成功し、本発明を完成させた。【０００９】
より詳細には、医薬品の工業的生産においては、ＩＣＨのガイドライン等に示されるように、原薬中の不純物量のみならず、残留溶媒量、原薬自体の安定性等、種々の品質が求められる。かかる観点から、本発明者は化合物（１）を医薬品原薬として開発するための最終結晶形の検討を行ってきた。後述の参考例に記載するが、特許文献１に開示されている製造方法に準じて得られた化合物（１）の粗体には、ＮＭＲ分析によりアセトニトリルの残留が認められた。かかる粗体から医薬品を製造する際にはアセトニトリルを除去することが望ましいため、化合物（１）の粗体を含水エタノール中、懸濁加熱することにより残留アセトニトリルの除去を行ったが、この際に得られた結晶ＩＩは、エタノールを包含しやすい性質があり、製造においてＩＣＨガイドラインの規制値を超えるエタノールが残留してしまう恐れがあった。そこで得られた結晶ＩＩをさらに熱水中で加熱懸濁処理することにより、残留溶媒を含まない結晶Ｉを得ることに成功し、本発明を完成するに至った。【００１０】
すなわち、本発明は以下を提供するものである。【００１１】
項１．粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．１°）が、７．７°、９．５°、１０．３°、１２．３°、１４．５°、１５．６°、１６．３°、１７．８°、１８．３°、１９．３°、２０．９°、２２．８°、２４．２°、２５．７°、２６．８°、２７．７°、２９．０°及び３０．１°から選択される少なくとも５つ以上のピークを有するトランス−３−アミノ−１−メチル−３−（４−（３−フェニル−５Ｈ−イミダゾ［１，２−ｃ］ピリド［３，４−ｅ］［１，３］オキサジン−２−イル）フェニル）シクロブタノールの結晶。【００１２】
項２．粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．１°）が、７．７°、９．５°、１０．３°、１２．３°、１４．５°、１５．６°、１６．３°、１７．８°、１８．３°、１９．３°、２０．９°、２２．８°、２４．２°、２５．７°、２６．８°、２７．７°、２９．０°及び３０．１°にピークを有する項１に記載の結晶。【００１３】
項３．示差走査熱量測定（ＤＳＣ）におけるピーク温度が２３０℃付近の吸熱ピークを有する項１又は２に記載の結晶。【００１４】
項４．項１〜３のいずれか１項に記載の結晶を含有する医薬組成物。【００１５】
項５．項１〜３のいずれか１項に記載の結晶を含有する経口投与用の医薬組成物。【００１６】
項６．（１）トランス−３−アミノ−１−メチル−３−（４−（３−フェニル−５Ｈ−イミダゾ［１，２−ｃ］ピリド［３，４−ｅ］［１，３］オキサジン−２−イル）フェニル）シクロブタノールを含水エタノール中で加熱懸濁して懸濁液を得る工程、
（２）上記（１）で得られた懸濁液から固体状のトランス−３−アミノ−１−メチル−３−（４−（３−フェニル−５Ｈ−イミダゾ［１，２−ｃ］ピリド［３，４−ｅ］［１，３］オキサジン−２−イル）フェニル）シクロブタノールを得る工程、
（３）上記（２）で得られたトランス−３−アミノ−１−メチル−３−（４−（３−フェニル−５Ｈ−イミダゾ［１，２−ｃ］ピリド［３，４−ｅ］［１，３］オキサジン−２−イル）フェニル）シクロブタノールの固体を熱水中で加熱懸濁する工程
を含む、項１〜３のいずれか一項に記載の結晶の製造方法。
【発明の効果】
【００１７】
本発明のイミダゾオキサジン化合物の結晶Ｉは、優れた保存安定性を有しているので、例えば純度、取り扱い性（より低い吸湿性）、流動性、粉砕性及び／又は品質管理性等の観点から、他の結晶状態と比較して優れており、医薬品として製剤化に適した結晶として有用である。【００１８】
また、本発明の結晶Ｉは残留溶媒がＩＣＨガイドラインにおける医薬品の残留溶媒ガイドラインで定められた基準値以下であり医薬品として安全である。
【図面の簡単な説明】
【００１９】
【図１】実施例１で得られた化合物（１）の結晶ＩＩの粉末Ｘ線回折スペクトルを示す（縦軸は強度（ｃｐｓ）、横軸は回折角（２θ）を表す）。
【図２】実施例１で得られた化合物（１）の結晶ＩＩの示差走査熱量（ＤＳＣ）曲線を示す。
【図３】実施例１で得られた化合物（１）の結晶Ｉの粉末Ｘ線回折スペクトルを示す（縦軸は強度（ｃｐｓ）、横軸は回折角（２θ）を表す）。
【図４】実施例１で得られた化合物（１）の結晶Ｉの示差走査熱量（ＤＳＣ）曲線を示す。
【図５】安定性試験における類縁物質増加量を分析したＨＰＬＣデータを示す。
【発明を実施するための形態】
【００２０】
本明細書中で単に「化合物（１）」と記載した場合は、トランス−３−アミノ−１−メチル−３−（４−（３−フェニル−５Ｈ−イミダゾ［１，２−ｃ］ピリド［３，４−ｅ］［１，３］オキサジン−２−イル）フェニルシクロブタノールを意味し、「非晶質体」、「結晶」のいずれをも含む意味で用いられる。
【００２１】
本明細書中、「結晶」、「非晶質体」なる語は、通常の意味で用いられる。
【００２２】
尚、粉末Ｘ線回折パターンは、データの性質上、結晶の同一性を認定する際は、回折角及び全体的なパターンが重要である。粉末Ｘ線回折パターンの相対強度は結晶成長の方向、粒子の大きさ、測定条件によって多少変動し得るものであるから、厳密に解されるべきではない。
【００２３】
各種パターンから得られる数値は、その結晶成長の方向、粒子の大きさ、測定条件等によって多少の誤差が生じる場合がある。したがって、本明細書中、粉末Ｘ線回折パターンにおける回折角（２θ）の数値は、±０．１°程度の範囲で測定誤差を有し得る。
【００２４】
また、示差走査熱量（ＤＳＣ）曲線における吸熱ピークは、１分あたりの昇温の幅、試料の純度等により測定温度が変化することがある。本明細書において「付近」という用語は±５．０℃を意味する。
【００２５】
化合物（１）の結晶Ｉは、図３に示される粉末Ｘ線回折スペクトル及び／又は図４に示される示差走査熱量（ＤＳＣ）曲線を有することが好ましい。
【００２６】
ここで、化合物（１）の結晶Ｉの粉末Ｘ線回折スペクトルにおける特徴的なピークは、回折角（２θ±０．１°）として、７．７°、９．５°、１０．３°、１２．３°、１４．５°、１５．６°、１６．３°、１７．８°、１８．３°、１９．３°、２０．９°、２２．８°、２４．２°、２５．７°、２６．８°、２７．７°、２９．０°及び３０．１°を挙げることができる。
【００２７】
本発明にかかる化合物（１）の結晶Ｉは、上記ピークから選択される少なくとも５つ以上のピークを有する結晶であり、好ましくは、上記ピークから選択される少なくとも８つ以上のピークを有する結晶であり、特に好ましくは、上記ピークのいずれもを有する結晶である。
【００２８】
また、化合物（１）の結晶Ｉの示差走査熱量（ＤＳＣ）曲線における吸熱ピークは２２８℃〜２３２℃付近、好ましくは２３０℃付近を挙げることができる。
【００２９】
化合物（１）は、例えば後述の参考例に従って合成することができる。化合物（１）の合成法は、後述の参考例に限定されるものではない。
【００３０】
本発明に係る化合物（１）の結晶Ｉは、例えば、前記式（１）で表わされるイミダゾオキサジン化合物を含水エタノール中にて加熱懸濁し、さらに熱水中で加熱懸濁することを特徴とする方法により製造することができる。
【００３１】
すなわち、化合物（１）を１〜１００倍量、好ましくは１〜５０倍量のエタノールと、１〜１００倍量、好ましくは１〜５０倍量の水の混合液中に懸濁させ、１〜１００時間、好ましくは１〜２４時間加熱攪拌後、冷却し、濾取、乾燥して結晶ＩＩを得る。水−エタノールの混合液の混合比は適宜選択できるが、好ましくは水：エタノール（ｖ／ｖ）が１：０．１〜１０、より好ましくは１：０．５〜２、特に好ましくは１：１である。その際の加熱温度は、適宜設定できるが、好ましくは４０℃以上であり、より好ましくは４０〜６０℃である。
【００３２】
引き続き、得られた結晶ＩＩを、１〜１００倍量、好ましくは１０〜５０倍量の水に懸濁させ、１〜１２０時間、好ましくは１２〜４８時間加熱還流後、冷却し、濾取、乾燥して結晶Ｉを白色粉末として得ることができる。その際の加熱温度は、適宜設定できるが、好ましくは７０℃以上であり、より好ましくは７０〜９０℃である。
【００３３】
結晶Ｉの晶析を促すために種晶として適当量の化合物（１）の結晶Ｉ又は結晶Ｉを含む混合結晶を加えてもよい。加える種晶は、溶媒量の０．０１〜５（ｗ／ｖ）％であり、好ましくは０．０３〜１（ｗ／ｖ）％である。また、晶析時間の短縮と粒子径のコントロールのために攪拌しながら晶析させてもよい。
【００３４】
本発明において「冷却」とは、溶液の温度を４０℃以下に保つことであり、好ましくは室温以下に保つことを意味する。好ましい冷却時間は、０．５時間以上であり、より好ましくは１時間以上である。
【００３５】
析出した結晶は、例えば、ろ過、水による洗浄、減圧乾燥等の公知の分離精製手段によって、前記結晶の溶解溶液、混合溶液等から単離精製することができる。
【００３６】
本発明にかかる化合物（１）の結晶Ｉは、固体安定性（保存安定性等）に優れる。医薬品の開発候補化合物が固体安定性を備えることは、工業上の操作においても、品質を保つ上でも重要である。また、本発明にかかる化合物（１）の結晶Ｉは、残留溶媒をＩＣＨガイドラインの規制値以上含まない。残留溶媒が認められないことは、医薬品としての安全性面で大変重要である。したがって、本発明にかかる化合物（１）の結晶Ｉは、医薬品又は医薬品原薬として必要とされる優れた性質を有する。
【００３７】
本発明にかかる化合物（１）の結晶は、優れたＡＫＴ阻害活性を有し、例えば癌及び腫瘍の治療剤として有用である。また、ＡＫＴに対する非常に優れた選択性を有しており、他のキナーゼも阻害してしまうことによる副作用が少ないという利点を有する。
【００３８】
本発明にかかる化合物（１）の結晶は、優れたＡＫＴ阻害活性を有する。本明細書において「ＡＫＴ」とは、ヒトまたは非ヒト哺乳動物のＡＫＴを含み、好ましくはヒトＡＫＴである。また、「ＡＫＴ」の語にはアイソフォームが含まれる。
【００３９】
また、本発明にかかる化合物（１）の結晶は、その優れたＡＫＴ阻害活性により、ＡＫＴが関与する疾患、例えば癌の予防剤及び／治療剤として有用である。
【００４０】
本発明化合物（１）の結晶を予防剤及び／治療剤として用いるにあたっては、当該結晶を粉砕するか又は粉砕することなく、予防又は治療目的に応じて各種の投与形態を採用可能であり、該形態としては、例えば、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、細粒剤、散剤、ドライシロップ剤等の経口剤、坐剤、吸入剤、点鼻剤、軟膏剤、貼付剤、注射剤等のいずれでもよく、経口剤に利用することが好ましい。これらの医薬組成物は、薬学的に許容される担体を用いて、当業者に公知慣用の製剤方法により製造できる。
【００４１】
薬学的担体としては、製剤素材として慣用の各種有機或いは無機担体物質が用いられ、固形製剤における賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、着色剤、液状製剤における溶剤、溶解補助剤、懸濁化剤、等張化剤、緩衝剤、無痛化剤等として配合される。また、必要に応じて防腐剤、抗酸化剤、着色剤、甘味剤、安定化剤等の製剤添加物を用いることもできる。
【００４２】
経口用固形製剤を調製する場合は、本発明化合物に賦形剤、必要に応じて賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、着色剤、矯味・矯臭剤等を加えた後、常法により錠剤、被覆錠剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤等を製造することができる。
【００４３】
賦形剤としては、乳糖、白糖、Ｄ−マンニトール、ブドウ糖、デンプン、炭酸カルシウム、カオリン、微結晶セルロース、無水ケイ酸等が挙げられる。
【００４４】
結合剤としては、水、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、単シロップ、ブドウ糖液、α―デンプン液、ゼラチン液、Ｄ−マンニトール、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルスターチ、メチルセルロース、エチルセルロース、シェラック、リン酸カルシウム、ポリビニルピロリドン等が挙げられる。
【００４５】
崩壊剤としては、乾燥デンプン、アルギン酸ナトリウム、カンテン末、炭酸水素ナトリウム、炭酸カルシウム、ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリン酸モノグリセリド、乳糖等が挙げられる。
【００４６】
滑沢剤としては、精製タルク、ステアリン酸塩ナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、ホウ砂、ポリエチレングリコール等が挙げられる。
【００４７】
着色剤としては、酸化チタン、酸化鉄等が挙げられる。
【００４８】
矯味・矯臭剤としては白糖、橙皮、クエン酸、酒石酸等が挙げられる。
【００４９】
坐剤を調製する場合は、本発明化合物に当業界において公知の製剤用担体、例えば、ポリエチレングリコール、ラノリン、カカオ脂、脂肪酸トリグリセリド等を、さらに必要に応じてＴｗｅｅｎ８０(登録商標)のような界面活性剤等を加えた後、常法により製造することができる。
【００５０】
軟膏剤を調製する場合は、本発明化合物に通常使用される基剤、安定剤、湿潤剤、保存剤等が必要に応じて配合され、常法により混合、製剤化される。基剤としては、流動パラフィン、白色ワセリン、サラシミツロウ、オクチルドデシルアルコール、パラフィン等が挙げられる。保存剤としては、パラオキシ安息香酸メチル、パラオキシ安息香酸エチル、パラオキシ安息香酸プロピル等が挙げられる。
【００５１】
貼付剤を調製する場合は、通常の支持体に前記軟膏、クリーム、ゲル、ペースト等を常法により塗布すればよい。支持体としては、綿、スフ、化学繊維からなる織布又は不織布；軟質塩化ビニル、ポリエチレン、ポリウレタン等のフィルム又は発泡体シート等が適当である。
【００５２】
注射剤を調製する場合は、本発明化合物にｐＨ調節剤、緩衝剤、安定化剤、等張化剤、局所麻酔剤等を添加し、常法により皮下、筋肉内及び静脈内用注射剤を製造することができる。この場合のｐＨ調節剤及び緩衝剤としては、クエン酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、リン酸ナトリウム等が挙げられる。安定化剤としては、ピロ亜硫酸ナトリウム、ＥＤＴＡ、チオグリコール酸、チオ乳酸等が挙げられる。局所麻酔剤としては、塩酸プロカイン、塩酸リドカイン等が挙げられる。等張化剤としては、塩化ナトリウム、ブドウ糖、Ｄ−マンニトール、グリセリン等が挙げられる。
【００５３】
上記の各投与単位形態中に配合されるべき化合物（１）の結晶Ｉの量は、これを適用すべき患者の症状により、或いはその剤形等により一定ではないが、一般に投与単位形態あたり、経口剤では約０．０５〜１０００ｍｇ、注射剤では薬０．１〜５００ｍｇ、坐剤又は外用剤では約１〜１０００ｍｇとするのが望ましい。
【００５４】
また、上記投与形態を有する薬剤の結晶Ｉの１日あたりの投与量は、患者の症状、体重、年齢、性別等によって異なり一概には決定できないが、通常成人（体重５０ｋｇ）１日あたり約０．０５〜５０００ｍｇ、好ましくは０．１〜１０００ｍｇとすればよく、これを１日１回又は２〜３回程度に分けて投与するのが好ましい。
【００５５】
また、前述のように、結晶Ｉは、例えば、式（１）で表されるイミダゾオキサジン化合物を含水エタノール中で加熱懸濁して結晶ＩＩを得、次いで、当該結晶ＩＩを熱水中懸濁すること等により得ることができる。従って、本発明においては、化合物（１）の結晶ＩＩも、結晶Ｉを製造する際の中間体として有用である。従って、本発明は化合物（１）の結晶ＩＩも提供する。
【００５６】
ここで、化合物（１）の結晶ＩＩの粉末Ｘ線回折スペクトルにおける特徴的なピークは、回折角（２θ±０．１°）として、６．６°、７．８°、９．３°、１２．８°、１３．６°、１４．４°、１７．８°、１８．８°、１９．５°、２１．４°、２２．５°、２３．０°、２４．８°、２７．８°及び２９．０°を挙げることができる。
【００５７】
本発明にかかる化合物（１）の結晶ＩＩは、上記ピークから選択される少なくとも５つ以上のピークを有する結晶であり、好ましくは、上記ピークから選択される少なくとも８つ以上のピークを有する結晶であり、特に好ましくは、上記ピークのいずれをも有する結晶である。
【実施例】
【００５８】
以下、実施例を挙げて本発明を更に具体的に説明するが、本発明はこれらによって何ら限定されるものではない。本発明は実施例により十分に説明されているが、当業者により種々の変更及び／又は修飾が可能であろうことは理解される。したがって、そのような変更及び／又は修飾が本発明の範囲を逸脱するものでない限り、それらは本発明に包含される。【００５９】
実施例で用いた各種試薬は、特に記載の無い限り市販品を使用した。ＮＭＲスペクトルは、ＡＬ４００（４００ＭＨｚ；日本電子（ＪＥＯＬ））を使用し、重溶媒中にテトラメチルシランを含む場合は内部基準としてテトラメチルシランを用い、それ以外の場合には内部基準として、ＮＭＲ溶媒に残存する非重水素化プロトンピークを用いて測定し、全δ値をｐｐｍで示した。【００６０】
略号の意味を以下に示す。
ｓ：シングレット
ｄ：ダブレット
ｔ：トリプレット
ｄｄ：ダブル  ダブレット
ｍ：マルチプレット
ｂｒｓ：ブロードシングレット
ＤＭＳＯ−ｄ6：重ジメチルスルホキシド
ＣＤＣｌ3：重クロロホルム
粉末Ｘ線回折測定
粉末Ｘ線回折は、試験物質適量を必要に応じてメノウ製乳鉢で軽く粉砕した後、次の試験条件に従って測定した。【００６１】
装置：リガク  ＭｉｎｉＦｌｅｘＩＩ
ターゲット：Ｃｕ
Ｘ線出力設定：１５ｍＡ，３０ｋＶ
走査範囲：２．０〜４０．０°
ステップサイズ：０．０１０°     
スキャンスピード：５．００℃／ｍｉｎ．
発散スリット：１．２５°
散乱スリット：開放
受光スリット：開放
データ処理を含む装置の取り扱いは、各装置で指示された方法及び手順にしたがった。【００６２】
なお、各種スペクトルから得られる数値は、その結晶成長の方向、粒子の大きさ、測定条件等によって多少変動する場合がある。したがって、それらの数値は厳密に解されるべきではない。【００６３】
熱分析測定  （示差走査熱量測定（ＤＳＣ測定））
ＤＳＣ測定は、次の試験条件に従って測定した。【００６４】
装置：ＴＡインスツルメント  Ｑ１０００
試料：およそ１ｍｇ
試料容器：アルミニウム製
昇温速度：２５０℃まで５℃／分で昇温
雰囲気ガス：窒素
窒素ガス流量：５０ｍＬ／ｍｉｎ．
データ処理を含む装置の取り扱いは、各装置で指示された方法及び手順にしたがった。【００６５】
参考例１  トランス−３−アミノ−１−メチル−３−（４−（３−フェニル−５Ｈ−イミダゾ［１，２−ｃ］ピリド［３，４−ｅ］［１，３］オキサジン−２−イル）フェニルシクロブタノール（化合物（１））の合成
国際公開第２０１２／１３７８７０号公報に記載された方法により合成した、ｔｅｒｔ−ブチル  （トランス−３−ヒドロキシ−３−メチル−１−（４−（３−フェニル−５Ｈ−イミダゾ［１，２−ｃ］ピリド［３，４−ｅ］［１，３］オキサジン−２−イル）フェニル）シクロブチル）カルバメート（２７．３ｇ）をアセトニトリル（５５０ｍＬ）に懸濁させ、室温でメタンスルホン酸（２２ｍＬ）を加えた。室温で１時間撹拌した後、１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（３４０ｍＬ）を加えて反応を停止させた。反応系が２層に分離するため、さらに水（３４０ｍＬ）を加えて均一溶液にした後、５５℃において溶媒８３０ｍＬを減圧留去し、室温に戻してから生じた固体を濾取した。濾取した固体を水で洗浄後、７０℃で乾燥して表題化合物（化合物（１））の粗体（１６．７ｇ）を淡黄色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ  ９．２６（１Ｈ，ｓ），８．４９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．６  Ｈｚ），７．５７−７．５２（２Ｈ，ｍ），７．５２−７．４３（３Ｈ，ｍ），７．３９−７．３２（２Ｈ，ｍ），７．２８−７．２１（２Ｈ，ｍ），６．９９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝５．６，０．５  Ｈｚ），５．７６（２Ｈ，ｓ），２．６５−２．５７（２Ｈ，ｍ），２．３９−２．３１（２Ｈ，ｍ），１．６４（３Ｈ，ｓ）．
[残留アセトニトリルピーク：δ  ２．０１（３Ｈ，ｓ）．ＮＭＲのピーク面積から算出した残留アセトニトリル量は、約６００ｐｐｍであった。]【００６６】
実施例１
トランス−３−アミノ−１−メチル−３−（４−（３−フェニル−５Ｈ−イミダゾ［１，２−ｃ］ピリド［３，４−ｅ］［１，３］オキサジン−２−イル）フェニルシクロブタノール（化合物（１））の結晶ＩＩの製造
参考例１で得られた化合物（１）の粗体（４８０ｍｇ）をエタノール（２ｍＬ）と水（２ｍＬ）の混合溶媒に懸濁させ、５０℃で３時間攪拌後、室温まで冷却した。固体を濾取し、水で洗浄後、４０℃で乾燥し、表題化合物の結晶ＩＩ（４３８ｍｇ）を白色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  ９．０１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝０．５  Ｈｚ），８．４８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．４  Ｈｚ），７．５６−７．４６（３Ｈ，ｍ），７．４５−７．３７（４Ｈ，ｍ），７．３２−７．２８（２Ｈ，ｍ），７．２１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝５．４，０．５  Ｈｚ），５．９３（２Ｈ，ｓ），４．７４（１Ｈ，ｓ），３．３２（１Ｈ，ｓ），２．３９−２．２８（２Ｈ，ｍ），２．１８−２．０７（２Ｈ，ｍ），１．９５（２Ｈ，ｂｒｓ），１．４９（３Ｈ，ｓ）．
[残留エタノールピーク：δ  ４．３４（１Ｈ，ｍ），３．４３（２Ｈ，ｍ），１．０４（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．３  Ｈｚ）．ＮＭＲのピーク面積から算出した残留エタノール量は、約１４０００ｐｐｍであった。]
粉末Ｘ線回折スペクトル：図１に示した。
特徴的な回折角（２θ±０．１°）：６．６°、７．８°、９．３°、１２．８°、１３．６°、１４．４°、１７．８°、１８．８°、１９．５°、２１．４°、２２．５°、２３．０°、２４．８°、２７．８°及び２９．０°。
示差走査熱量（ＤＳＣ）曲線：図２に示した。
示差走査熱量（ＤＳＣ）曲線における吸熱ピーク：２２８℃〜２３２℃付近。【００６７】
トランス−３−アミノ−１−メチル−３−（４−（３−フェニル−５Ｈ−イミダゾ［１，２−ｃ］ピリド［３，４−ｅ］［１，３］オキサジン−２−イル）フェニルシクロブタノール（化合物（１））の結晶Ｉの製造
上記で得られた結晶ＩＩ（１６．１６ｇ）を水（１６０ｍＬ）に懸濁させ、８０℃で３１時間加熱攪拌後、室温まで冷却した。固体を濾取し、水で洗浄後、８０℃で乾燥し、表題化合物の結晶Ｉ（１５．９８ｇ）を白色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ  ９．２６（１Ｈ，ｓ），８．４９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．６  Ｈｚ），７．５７−７．５２（２Ｈ，ｍ），７．５２−７．４３（３Ｈ，ｍ），７．３９−７．３２（２Ｈ，ｍ），７．２８−７．２１（２Ｈ，ｍ），６．９９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝５．６，０．５  Ｈｚ），５．７６（２Ｈ，ｓ），２．６５−２．５７（２Ｈ，ｍ），２．３９−２．３１（２Ｈ，ｍ），１．６４（３Ｈ，ｓ）．
[残留溶媒ピークは認められなかった。]
粉末Ｘ線回折スペクトル：図３に示した。
特徴的な回折角（２θ±０．１°）：７．７°、９．５°、１０．３°、１２．３°、１４．５°、１５．６°、１６．３°、１７．８°、１８．３°、１９．３°、２０．９°、２２．８°、２４．２°、２５．７°、２６．８°、２７．７°、２９．０°及び３０．１°。
示差走査熱量（ＤＳＣ）曲線：図４に示した。
示差走査熱量（ＤＳＣ）曲線における吸熱ピーク：２２８℃〜２３２℃付近。【００６８】
実施例２  固体安定性試験
実施例１に従って得られたイミダゾオキサジン化合物の結晶Ｉの保存安定性を４０℃、６ヶ月保存により試験した。
保存条件：４０℃（密閉）
測定ポイント：６ヶ月
保存量：約３０ｍｇ
保存容器：褐色ガラス瓶
保存後の試料の粉末Ｘ線回折測定は前述の方法で測定した。類縁物質量の変化は、以下の方法でＨＰＬＣにて分析を行った。【００６９】
試料溶液の調製法：試料の濃度が、０．５ｍｇ／ｍＬとなるように５０％アセトニトリルに溶解させた。
カラム：Ａｃｅｎｔｉｓ  ｅｘｐｒｅｓｓ  Ｃ１８，４．６×１５０ｍｍ，２．７μｍカラム温度：４０℃
カラム流速：１．５ｍＬ／ｍｉｎ
移動相：Ａ；０．１％リン酸、Ｂ；アセトニトリル
検出ＵＶ：２１０ｎｍ
グラディエント：
Ｔｉｍｅ（ｍｉｎ）          Ａ              Ｂ
０〜４                ９５％→７０％    ５％→３０％
４〜７                ７０％→１０％    ３０％→９０％
７〜８                １０％            ９０％
その結果、結晶Ｉでは、粉末Ｘ線回折パターンの変化は認められず、極めて安定な結晶であることが判明した。また、結晶Ｉは類縁物質量が少なく、４０℃、６ヶ月経過後も類縁物質量の増加は認められなかった。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【国際調査報告】
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