(57)【要約】  イノシトールリン脂質化合物、特に１，２−Ｏ−ｂｉｓ−［８−｛２−（２−ペンチル−シクロプロピルメチル）−シクロプロピル｝−オクタノイル］−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジル−イノシトールを有効成分として含有する抗癌剤及び癌細胞死誘導剤。
2014196621.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
イノシトールリン脂質化合物を有効成分として含有する抗癌剤。
【請求項２】
イノシトールリン脂質化合物を構成する脂肪酸が不飽和脂肪酸である、請求項１記載の剤。
【請求項３】
不飽和脂肪酸がオレイン酸である、請求項２記載の剤。
【請求項４】
イノシトールリン脂質化合物を構成する脂肪酸が、二重結合がシクロプロパン環に変換されている不飽和脂肪酸である、請求項１記載の剤。
【請求項５】
不飽和脂肪酸が８−［２−（２−ペンチル−シクロプロピルメチル）−シクロプロピル］−オクタン酸（ＤＣＰ−ＬＡ）である、請求項４記載の剤。
【請求項６】
イノシトールリン脂質化合物を構成する脂肪酸が飽和脂肪酸である、請求項１記載の剤。
【請求項７】
飽和脂肪酸がパルミチン酸である、請求項６記載の剤。
【請求項８】
イノシトールリン脂質化合物が、
１，２−Ｏ−ｂｉｓ−［８−｛２−（２−ペンチル−シクロプロピルメチル）−シクロプロピル｝−オクタノイル］−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジル−Ｄ−イノシトール（ｄｉＤＣＰ−ＬＡ−ＰＩ）、
１，２−Ｏ−ｂｉｓ−［８−｛２−（２−ペンチル−シクロプロピルメチル）−シクロプロピル｝−オクタノイル］−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジル−Ｌ−１−イノシトール（ｄｉＤＣＰ−ＬＡ−ＰＩｅ）、
１，２−ジオレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホ−（１’−ミオ−イノシトール）（ＤＯ−ＰＩ）、又は
１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホ−（１’−ミオ−イノシトール）（ＤＰ−ＰＩ）
である、請求項１記載の剤。
【請求項９】
治療対象となる癌が、悪性胸膜中皮腫、肺癌、胃癌及び乳癌からなる群から選択される少なくとも１種である、請求項１〜８のいずれか１項に記載の剤。
【請求項１０】
イノシトールリン脂質化合物を有効成分として含有する癌細胞死誘導剤。
【請求項１１】
イノシトールリン脂質化合物を構成する脂肪酸が不飽和脂肪酸である、請求項１０記載の剤。
【請求項１２】
不飽和脂肪酸がオレイン酸である、請求項１１記載の剤。
【請求項１３】
イノシトールリン脂質化合物を構成する脂肪酸が、二重結合がシクロプロパン環に変換されている不飽和脂肪酸である、請求項１０記載の剤。
【請求項１４】
不飽和脂肪酸が８−［２−（２−ペンチル−シクロプロピルメチル）−シクロプロピル］−オクタン酸（ＤＣＰ−ＬＡ）である、請求項１３記載の剤。
【請求項１５】
イノシトールリン脂質化合物を構成する脂肪酸が飽和脂肪酸である、請求項１０記載の剤。
【請求項１６】
飽和脂肪酸がパルミチン酸である、請求項１５記載の剤。
【請求項１７】
イノシトールリン脂質化合物が、
１，２−Ｏ−ｂｉｓ−［８−｛２−（２−ペンチル−シクロプロピルメチル）−シクロプロピル｝−オクタノイル］−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジル−Ｄ−イノシトール（ｄｉＤＣＰ−ＬＡ−ＰＩ）、
１，２−Ｏ−ｂｉｓ−［８−｛２−（２−ペンチル−シクロプロピルメチル）−シクロプロピル｝−オクタノイル］−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジル−Ｌ−１−イノシトール（ｄｉＤＣＰ−ＬＡ−ＰＩｅ）、
１，２−ジオレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホ−（１’−ミオ−イノシトール）（ＤＯ−ＰＩ）、又は
１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホ−（１’−ミオ−イノシトール）（ＤＰ−ＰＩ）
である、請求項１０記載の剤。
【請求項１８】
癌細胞が、悪性胸膜中皮腫、肺癌、胃癌及び乳癌からなる群から選択される少なくとも１種の癌の細胞である、請求項１０〜１７のいずれか１項に記載の剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、癌細胞増殖抑制作用を有するイノシトールリン脂質化合物、特に不飽和脂肪酸誘導体を含むイノシトールリン脂質化合物を有効成分として含有する抗癌剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
現在癌は死亡原因のトップを占める疾病であり、その根本的な治療方法が求められている。そのため、ブレオマイシン、シスプラチン、ネオカルチノスタチン等の多くの抗癌剤が開発されてきた。しかしながら、これらの抗癌剤は毒性が高い上に癌への配向性が低いため、充分な抗癌効果を得ることができなかった。このことから、これら抗癌剤をより多く癌に配向せしめる試みが各種為されており、その一貫として抗癌剤をリポソーム内部に包含させて投与するリポソーム製剤が開発されている。リポソーム製剤とはリン脂質によって形成される二重膜構造からなる粒子の内部に薬物を内包せしめた製剤であり、癌細胞への標的化については詳細な解析が為されつつある。【０００３】
Ａｋｔは抗癌剤の標的分子の一つであり、その活性化にイノシトールリン脂質の代謝が関与している。すなわち、ＰＩ３キナーゼは、ホスファチジルイノシトール４，５−二リン酸をリン酸化してホスファチジルイノシトール３，４，５−三リン酸（ＰＩＰ３）を産生し、ＰＩＰ３が３−ホスホイノシチド依存性プロテインキナーゼ（ＰＤＫ）に結合することによりＰＤＫを活性化し、さらにＰＤＫはＡｋｔをリン酸化することにより活性化することが分かっている。ＰＩＰ３等のイノシトールリン脂質の合成を抑制することによりＡｋｔの機能を間接的に制御しようとする試みがあるが、イノシトールリン脂質自体が有する抗癌作用は殆ど知られていない。【０００４】
リン脂質は、生体膜系を構成する主要な脂質で、グリセロール骨格を持つグリセロリン脂質と、スフィンゴシン骨格を持つスフィンゴリン脂質とに分類される。さらにグリセロリン脂質は親水性部分の種類によりホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルイノシトール、ホスファチジルグリセロール、カルジオリピン、ホスファチジン酸等のリン脂質クラスに分類される。【０００５】
リン脂質の機能としては、細胞や細胞小器官を区分けする膜構成成分としての役割の他に、ホスホリパーゼＣによる細胞内情報伝達経路や蛋白質の膜へのアンカーとしての役割が知られているイノシトールリン脂質、血液凝固系蛋白質やプロテインキナーゼＣ等の活性調節を行なっているホスファチジルセリン、プロテインキナーゼＣの活性調節や細胞のアポトーシスに関与するスフィンゴミエリン経路、炎症性メディエーターであるアラキドン酸の保持やホスホリパーゼＤによる情報伝達経路に関与するホスファチジルコリン経路、血小板活性化、血管透過性、白血球遊走活性を持つアルキルエーテルリン脂質である血小板活性化因子等が報告され、そのクラスによって提供される機能は種々多様である。【０００６】
例えば１，２−ジリノレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリンや１−パルミトイル−２−オレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリンが、スコポラミンによって誘導された空間学習障害及び記憶障害、あるいは軽度の認知障害や痴呆を改善することが報告されている（非特許文献１、２）。【０００７】
また、ホスファチジルエタノールアミンは、生体膜の主要成分の１つであるリン脂質であり、ホスファチジルセリン等とともに健康食品として市販されているが、ホスファチジルエタノールアミンの中でも、特にジリノレオイル・ホスファチジルエタノールアミン（脂肪酸として２つのリノール酸を含む）が、細胞死誘導抑制活性、特に小胞体ストレス抑制活性を有すること、当該活性により、ジリノレオイル・ホスファチジルエタノールアミンが医薬用途、特に神経変性疾患の予防および／または治療のために使用され得ることが報告されている（特許文献１）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】特開２００５−２４７７２８号公報
【非特許文献】
【０００９】
【非特許文献１】Yaguchi T, Nagata T, Nishizaki T. Dilinoleoylphosphatidylcholine ameliorates scopolamine-induced impairment of spatial learning and memory by targeting alpha-7 nicotinic ACh receptors. Life Sci 2009;84:263-6
【非特許文献２】Yaguchi T, Nagata T, Nishizaki T. 1-Palmitoyl-2-oleoyl-sn-glycero-3-phosphocholine improves cognitive decline by enhancing long-term depression. Behav Brain Res 2009;204:129-32
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
本発明は、新規な作用機序を有する抗癌剤の提供を目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明者らは、上記目的を達成すべく鋭意検討した結果、イノシトールリン脂質（ホスファチジルイノシトール）が優れた癌細胞増殖抑制作用を有することを見出した。さらに脂肪酸として不飽和脂肪酸、特にシクロプロパン環を有する不飽和脂肪酸を有するイノシトールリン脂質の優れた抗癌作用を確認して本発明を完成するに至った。即ち、本発明は、以下の通りである。
［１］イノシトールリン脂質化合物を有効成分として含有する抗癌剤。
［２］イノシトールリン脂質化合物を構成する脂肪酸が不飽和脂肪酸である、上記［１］記載の剤。
［３］不飽和脂肪酸がオレイン酸である、上記［２］記載の剤。
［４］イノシトールリン脂質化合物を構成する脂肪酸が、二重結合がシクロプロパン環に変換されている不飽和脂肪酸である、上記［１］記載の剤。
［５］不飽和脂肪酸が８−［２−（２−ペンチル−シクロプロピルメチル）−シクロプロピル］−オクタン酸（ＤＣＰ−ＬＡ）である、上記［４］記載の剤。
［６］イノシトールリン脂質化合物を構成する脂肪酸が飽和脂肪酸である、上記［１］記載の剤。
［７］飽和脂肪酸がパルミチン酸である、上記［６］記載の剤。
［８］イノシトールリン脂質化合物が、
１，２−Ｏ−ｂｉｓ−［８−｛２−（２−ペンチル−シクロプロピルメチル）−シクロプロピル｝−オクタノイル］−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジル−Ｄ−イノシトール（ｄｉＤＣＰ−ＬＡ−ＰＩ）、
１，２−Ｏ−ｂｉｓ−［８−｛２−（２−ペンチル−シクロプロピルメチル）−シクロプロピル｝−オクタノイル］−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジル−Ｌ−１−イノシトール（ｄｉＤＣＰ−ＬＡ−ＰＩｅ）、
１，２−ジオレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホ−（１’−ミオ−イノシトール）（ＤＯ−ＰＩ）、又は
１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホ−（１’−ミオ−イノシトール）（ＤＰ−ＰＩ）
である、上記［１］記載の剤。
［９］治療対象となる癌が、悪性胸膜中皮腫、肺癌、胃癌及び乳癌からなる群から選択される少なくとも１種である、上記［１］〜［８］のいずれかに記載の剤。
［１０］イノシトールリン脂質化合物を有効成分として含有する癌細胞死誘導剤。
［１１］イノシトールリン脂質化合物を構成する脂肪酸が不飽和脂肪酸である、上記［１０］記載の剤。
［１２］不飽和脂肪酸がオレイン酸である、上記［１１］記載の剤。
［１３］イノシトールリン脂質化合物を構成する脂肪酸が、二重結合がシクロプロパン環に変換されている不飽和脂肪酸である、上記［１０］記載の剤。
［１４］不飽和脂肪酸が８−［２−（２−ペンチル−シクロプロピルメチル）−シクロプロピル］−オクタン酸（ＤＣＰ−ＬＡ）である、上記［１３］記載の剤。
［１５］イノシトールリン脂質化合物を構成する脂肪酸が飽和脂肪酸である、上記［１０］記載の剤。
［１６］飽和脂肪酸がパルミチン酸である、上記［１５］記載の剤。
［１７］イノシトールリン脂質化合物が、
１，２−Ｏ−ｂｉｓ−［８−｛２−（２−ペンチル−シクロプロピルメチル）−シクロプロピル｝−オクタノイル］−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジル−Ｄ−イノシトール（ｄｉＤＣＰ−ＬＡ−ＰＩ）、
１，２−Ｏ−ｂｉｓ−［８−｛２−（２−ペンチル−シクロプロピルメチル）−シクロプロピル｝−オクタノイル］−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジル−Ｌ−１−イノシトール（ｄｉＤＣＰ−ＬＡ−ＰＩｅ）、
１，２−ジオレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホ−（１’−ミオ−イノシトール）（ＤＯ−ＰＩ）、又は
１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホ−（１’−ミオ−イノシトール）（ＤＰ−ＰＩ）
である、上記［１０］記載の剤。
［１８］癌細胞が、悪性胸膜中皮腫、肺癌、胃癌及び乳癌からなる群から選択される少なくとも１種の癌の細胞である、上記［１０］〜［１７］のいずれかに記載の剤。
［１９］研究用試薬である、上記［１０］〜［１８］のいずれかに記載の剤。
［２０］有効量のイノシトールリン脂質化合物を、それを必要とする対象に投与することを含む、癌の予防及び／又は治療方法。
［２１］イノシトールリン脂質化合物を構成する脂肪酸が不飽和脂肪酸である、上記［２０］記載の方法。
［２２］不飽和脂肪酸がオレイン酸である、上記［２１］記載の方法。
［２３］イノシトールリン脂質化合物を構成する脂肪酸が、二重結合がシクロプロパン環に変換されている不飽和脂肪酸である、上記［２０］記載の方法。
［２４］不飽和脂肪酸が８−［２−（２−ペンチル−シクロプロピルメチル）−シクロプロピル］−オクタン酸（ＤＣＰ−ＬＡ）である、上記［２３］記載の方法。
［２５］イノシトールリン脂質化合物を構成する脂肪酸が飽和脂肪酸である、上記［２０］記載の方法。
［２６］飽和脂肪酸がパルミチン酸である、上記［２５］記載の方法。
［２７］イノシトールリン脂質化合物が、
１，２−Ｏ−ｂｉｓ−［８−｛２−（２−ペンチル−シクロプロピルメチル）−シクロプロピル｝−オクタノイル］−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジル−Ｄ−イノシトール（ｄｉＤＣＰ−ＬＡ−ＰＩ）、
１，２−Ｏ−ｂｉｓ−［８−｛２−（２−ペンチル−シクロプロピルメチル）−シクロプロピル｝−オクタノイル］−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジル−Ｌ−１−イノシトール（ｄｉＤＣＰ−ＬＡ−ＰＩｅ）、
１，２−ジオレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホ−（１’−ミオ−イノシトール）（ＤＯ−ＰＩ）、又は
１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホ−（１’−ミオ−イノシトール）（ＤＰ−ＰＩ）
である、上記［２０］記載の方法。
［２８］治療対象となる癌が、悪性胸膜中皮腫、肺癌、胃癌及び乳癌からなる群から選択される少なくとも１種である、上記［２０］〜［２７］のいずれかに記載の方法。
［２９］イノシトールリン脂質化合物で、癌細胞を処理することを特徴とする、癌細胞の細胞死を誘導する方法。
［３０］イノシトールリン脂質化合物を構成する脂肪酸が不飽和脂肪酸である、上記［２９］記載の方法。
［３１］不飽和脂肪酸がオレイン酸である、上記［３０］記載の方法。
［３２］イノシトールリン脂質化合物を構成する脂肪酸が、二重結合がシクロプロパン環に変換されている不飽和脂肪酸である、上記［２９］記載の方法。
［３３］不飽和脂肪酸が８−［２−（２−ペンチル−シクロプロピルメチル）−シクロプロピル］−オクタン酸（ＤＣＰ−ＬＡ）である、上記［３２］記載の方法。
［３４］イノシトールリン脂質化合物を構成する脂肪酸が飽和脂肪酸である、上記［２９］記載の方法。
［３５］飽和脂肪酸がパルミチン酸である、上記［３４］記載の方法。
［３６］イノシトールリン脂質化合物が、
１，２−Ｏ−ｂｉｓ−［８−｛２−（２−ペンチル−シクロプロピルメチル）−シクロプロピル｝−オクタノイル］−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジル−Ｄ−イノシトール（ｄｉＤＣＰ−ＬＡ−ＰＩ）、
１，２−Ｏ−ｂｉｓ−［８−｛２−（２−ペンチル−シクロプロピルメチル）−シクロプロピル｝−オクタノイル］−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジル−Ｌ−１−イノシトール（ｄｉＤＣＰ−ＬＡ−ＰＩｅ）、
１，２−ジオレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホ−（１’−ミオ−イノシトール）（ＤＯ−ＰＩ）、又は
１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホ−（１’−ミオ−イノシトール）（ＤＰ−ＰＩ）
である、上記［２９］記載の方法。
［３７］癌細胞が、悪性胸膜中皮腫、肺癌、胃癌及び乳癌からなる群から選択される少なくとも１種の癌の細胞である、上記［２９］〜［３６］のいずれかに記載の方法。
【発明の効果】
【００１２】
イノシトールリン脂質化合物、特に構成脂肪酸として不飽和脂肪酸、特に二重結合がシクロプロパン環に置き換えられた脂肪酸を有するイノシトールリン脂質化合物は、優れた癌細胞死誘導作用を有する。また、リン脂質化合物は本来生体に存在するものである。従って、本願発明は、より安全性に優れた抗癌剤を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】図１は、本発明において有効成分として含められるイノシトールリン脂質化合物の構造を示す。ｄｉＤＣＰ−ＬＡ−ＰＩ：１，２−Ｏ−ｂｉｓ−［８−｛２−（２−ペンチル−シクロプロピルメチル）−シクロプロピル｝−オクタノイル］−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジル−Ｄ−イノシトール、ｄｉＤＣＰ−ＬＡ−ＰＩｅ：１，２−Ｏ−ｂｉｓ−［８−｛２−（２−ペンチル−シクロプロピルメチル）−シクロプロピル｝−オクタノイル］−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジル−Ｌ−１−イノシトール、ＤＯ−ＰＩ：１，２−ジオレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホ−（１’−ミオ−イノシトール）、ＤＰ−ＰＩ：１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホ−（１’−ミオ−イノシトール）
【図２】図２は、ｄｉＤＣＰ−ＬＡ−ＰＩ及びｄｉＤＣＰ−ＬＡ−ＰＩｅが濃度依存的にヒト悪性胸膜中皮腫細胞死を誘導することを示したグラフである。細胞を所定の濃度のｄｉＤＣＰ−ＬＡ−ＰＩ又はｄｉＤＣＰ−ＬＡ−ＰＩｅで４８時間処理し、次いでＭＴＴアッセイを行った。グラフ中、各ポイントは薬物処理していない細胞のＭＴＴ強度に対するパーセンテージの平均値（±SD）を表している（各実験においてｎ＝４）。
【図３】図３は、ＤＯ−ＰＩ及びＤＰ−ＰＩが濃度依存的に同程度のヒト悪性胸膜中皮腫細胞死を誘導することを示したグラフである。細胞を所定の濃度のＤＯ−ＰＩ又はＤＰ−ＰＩで４８時間処理し、次いでＭＴＴアッセイを行った。グラフ中、各ポイントは薬物処理していない細胞のＭＴＴ強度に対するパーセンテージの平均値（±SD）を表している（各実験においてｎ＝４）。
【図４】図４は、ｄｉＤＣＰ−ＬＡ−ＰＩ及びｄｉＤＣＰ−ＬＡ−ＰＩｅが濃度依存的に（Ａ）ヒト肺癌細胞（Ｌｕ６５）、（Ｂ）胃癌細胞（ＭＫＮ２８）、（Ｃ）乳癌細胞（ＭＣＦ−７）の細胞死を誘導することを示したグラフである。細胞を所定の濃度のｄｉＤＣＰ−ＬＡ−ＰＩ又はｄｉＤＣＰ−ＬＡ−ＰＩｅで４８時間処理し、次いでＭＴＴアッセイを行った。グラフ中、各ポイントは薬物処理していない細胞のＭＴＴ強度に対するパーセンテージの平均値（±SD）を表している（各実験においてｎ＝４）。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
以下、本発明について詳細に説明する。
本発明はイノシトールリン脂質化合物を有効成分として含有する抗癌剤（以下、本発明の医薬とも称する）を提供する。該イノシトールリン脂質化合物は、以下、本発明のリン脂質化合物とも称する。
【００１５】
リン脂質は、大別するとグリセリンを骨格とするグリセロリン脂質とスフィンゴシンを骨格とするスフィンゴリン脂質の２つが存在する。グリセリンやスフィンゴシンを中心骨格として脂肪酸とリン酸が結合し、さらにリン酸にアルコールがエステル結合した構造を有する。本発明のリン脂質化合物はグリセロリン脂質及びスフィンゴリン脂質のいずれであってもよいが、好ましくはグリセロリン脂質である。グリセリンのＣ１、Ｃ２位に脂肪酸が、Ｃ３位にリン酸がそれぞれエステル結合した分子をホスファチジン酸と称する。
【００１６】
本発明のリン脂質化合物において、リン酸にエステル結合するアルコールはイノシトールである。
【００１７】
本発明のリン脂質化合物を構成する脂肪酸としては、飽和脂肪酸及び不飽和脂肪酸のいずれであってもよい。飽和脂肪酸としては、具体的には、ラウリン酸、ミリスチン酸、ペンタデシル酸、パルミチン酸、マルガリン酸、ステアリン酸が挙げられる。なかでも、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸が好ましく、パルミチン酸がより好ましい。不飽和脂肪酸としては、分子内に少なくとも１つ以上の２重結合を有する脂肪酸であれば特に限定されるものではないが、一価不飽和脂肪酸、多価不飽和脂肪酸、cis型不飽和脂肪酸、trans型不飽和脂肪酸のいずれのものであってもよい。
一価不飽和脂肪酸の例としては、オレイン酸、パルミトレイン酸、ペトロセリン酸、エルカ酸、ブラシジン酸、オブツシル酸、カプレイン酸、ウンデシレン酸、リンデル酸、ツズ酸、フィゼテリン酸、ミリストレイン酸、パルミトレイン酸、エライジン酸、アスクレピン酸、バクセン酸、ガドレイン酸、ゴンドイン酸、セトレイン酸及びｃｉｓ-６-ヘキサデセン酸等が挙げられる。
多価不飽和脂肪酸の例としては、リノール酸、リノレン酸、γ-リノレン酸、リシノール酸、α-エレオステアリン酸、β-エレオステアリン酸、ブニカ酸、ｔｒａｎｓ−１０−オクタデカジエン酸及びｔｒａｎｓ−１２−オクタデカジエン酸等が挙げられる。
好ましくはリノール酸（ｃｉｓ，ｃｉｓ−９，１２−オクタジエン酸）及びオレイン酸（ｃｉｓ−９−オクタデセン酸）であり、より好ましくはリノール酸である。
当該不飽和脂肪酸は、その二重結合がシクロプロパン環に変換されていてもよく、かかる態様も本願発明の好適なものとして例示される。多価不飽和脂肪酸の場合、全ての二重結合がシクロプロパン環に変換されていてもよいし、一部の二重結合がシクロプロパン環に変換されていてもよい。
本発明において二重結合がシクロプロパン環に変換されている不飽和脂肪酸として好ましくは、リノール酸の２重結合がシクロプロパン環に変換された、８−［２−（２−ペンチル−シクロプロピルメチル）−シクロプロピル］−オクタン酸（ＤＣＰ−ＬＡ）である。
【００１８】
本発明のリン脂質化合物は、不斉炭素原子や二重結合に起因する１以上の立体異性体（例えば、光学異性体、幾何異性体）を含んでいてもよいことに注意されるべきであり、このような異性体及びそれらの混合物の全てが本発明の範囲に含まれる。
【００１９】
本発明のリン脂質化合物は、通常のイノシトールリン脂質の合成方法（例えば、「日本化学会編  第５版実験化学講座１６  有機化合物の合成（協）；カルボン酸・アミノ酸・ペプチド  ３章  リン酸エステル」に記載の方法）に準じて合成することができる。より詳細には実施例に記載の方法に準じて合成することができる。
二重結合がシクロプロパン環に変換されている不飽和脂肪酸は、例えば、国際公開第０２／５００１３号公報で示される方法あるいはそれに準じた方法によって製造できる。あるいは、天然物から抽出されたものであってもよい。ＤＣＰ−ＬＡの製造方法は国際公開第０２／５００１３号公報に記載されている。
【００２０】
本発明において有効成分として含められるイノシトールリン脂質化合物は、
１，２−Ｏ−ｂｉｓ−［８−｛２−（２−ペンチル−シクロプロピルメチル）−シクロプロピル｝−オクタノイル］−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジル−Ｄ−イノシトール（ｄｉＤＣＰ−ＬＡ−ＰＩ）、
１，２−Ｏ−ｂｉｓ−［８−｛２−（２−ペンチル−シクロプロピルメチル）−シクロプロピル｝−オクタノイル］−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジル−Ｌ−１−イノシトール（ｄｉＤＣＰ−ＬＡ−ＰＩｅ）、
１，２−ジオレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホ−（１’−ミオ−イノシトール）（ＤＯ−ＰＩ）、及び
１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホ−（１’−ミオ−イノシトール）（ＤＰ−ＰＩ）であり、
より好ましくはｄｉＤＣＰ−ＬＡ−ＰＩｅである。ｄｉＤＣＰ−ＬＡ−ＰＩｅは、ｄｉＤＣＰ−ＬＡ−ＰＩの非天然型の光学異性体である。
各リン脂質化合物の構造を図１に示す。
【００２１】
本発明のリン脂質化合物はまた、その塩として用いられてもよい。かかる塩は、特に限定されないが、医薬又は食品として許容され得る塩が好ましく、例えば無機塩基（例、ナトリウム、カリウムなどのアルカリ金属；カルシウム、マグネシウムなどのアルカリ土類金属；アルミニウム、アンモニウム）、有機塩基（例、トリメチルアミン、トリエチルアミン、ピリジン、ピコリン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、ジシクロヘキシルアミン、Ｎ，Ｎ−ジベンジルエチレンジアミン）、無機酸（例、塩酸、臭化水素酸、硝酸、硫酸、リン酸）、有機酸（例、ギ酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、フマル酸、シュウ酸、酒石酸、マレイン酸、クエン酸、コハク酸、リンゴ酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸）、塩基性アミノ酸（例、アルギニン、リジン、オルニチン）又は酸性アミノ酸（例、アスパラギン酸、グルタミン酸）との塩などが挙げられる。
【００２２】
本発明のリン脂質化合物は、実施例にてデータで示されるように、各種の癌細胞に対し細胞死を誘導し細胞増殖を抑制する作用を有する。かかる薬理作用は、本発明のリン脂質化合物が、癌細胞死誘導剤（以下、単に本発明の剤と称する場合がある）として有用であり、ひいては抗癌剤や癌の予防・治療薬（以下、単に本発明の医薬とも称する場合がある）として有用である。また、抗癌剤や癌の予防・治療薬の開発に有用なツールとなり得る研究用試薬としても有用であることを示唆している。
また、本発明のリン脂質化合物のかかる薬理作用により、本発明は、癌細胞の細胞死を誘導する方法、並びに癌の予防及び／又は治療方法（以下、単に本発明の方法とも称する）を提供することができる。
【００２３】
本明細書中で用いられる場合、被験体（対象）は哺乳動物であり得る。このような哺乳動物としては、例えば、霊長類（例、ヒト、サル、チンパンジー）、げっ歯類（例、マウス、ラット、モルモット）、ペット（例、イヌ、ネコ、ウサギ）、使役動物又は家畜（例、ウシ、ウマ、ブタ、ヒツジ、ヤギ）が挙げられるが、ヒトが好ましい。
【００２４】
本発明の剤や医薬、方法が適用される癌（癌細胞）は、特に制限はなく、具体的には、神経膠芽腫、髄芽腫、舌癌、咽頭癌、喉頭癌、食道癌、胃癌、大腸癌、肝臓癌、胆嚢癌、胆管癌、膵臓癌、腎臓癌、副腎癌、膀胱癌、前立腺癌、陰茎癌、子宮癌、卵巣癌、外陰癌、膣癌、乳癌、甲状腺癌、肺癌、悪性胸膜中皮腫、皮膚癌、悪性黒色腫、悪性骨腫瘍、軟部肉腫、悪性リンパ腫、白血病、多発性骨髄腫などが挙げられ、好ましくは悪性胸膜中皮腫、肺癌、胃癌及び乳癌に適用される。
【００２５】
同様に、本明細書中で用いられる場合、本発明のリン脂質化合物で処理する対象となる癌細胞は、上記本発明の医薬が適用される各種癌細胞であり、好ましくは、悪性胸膜中皮腫、肺癌、胃癌及び乳癌の細胞である。ここで「処理」とは、上記細胞と本発明のリン脂質化合物とを必要十分な時間接触させることであり、その時間は所望される効果や用いる細胞の種類によっても異なるが、通常０．５〜７６時間、好ましくは０．５〜４８時間程度である。又、より短い時間、例えば０．５〜２４時間、好ましくは０．５〜１２時間程度の処理であってもよい。簡便には、本発明のリン脂質化合物を含有する培養液中で培養することによって実施される。
【００２６】
本発明の剤または医薬は、投与対象の癌の種類、その重篤度、投与対象となる動物種、投与対象の薬物受容性、体重、年齢等、投与されるイノシトールリン脂質化合物の種類によって異なるが、静脈内投与の場合には、有効成分である本発明のリン脂質化合物の１日用量として成人で５〜５０ｍｇ、好ましくは５〜２５ｍｇが、筋肉内投与の場合には、該化合物の１日用量として成人で５０〜５００ｍｇ、好ましく５０〜２５０ｍｇが、経口投与の場合には、該化合物の１日用量として成人で０．５〜５ｇ、好ましくは０．５〜２．５ｇが、癌の予防及び／又は治療のために一般的に与えられる。
【００２７】
本発明の医薬は、有効成分である本発明のリン脂質化合物以外に、任意の添加物、例えば医薬上許容され得る担体を含むことができる。医薬上許容され得る担体としては、例えば、ショ糖、デンプン、マンニット、ソルビット、乳糖、グルコース、セルロース、タルク、リン酸カルシウム、炭酸カルシウム等の賦形剤、セルロース、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ポリプロピルピロリドン、ゼラチン、アラビアゴム、ポリエチレングリコール、ショ糖、デンプン等の結合剤、デンプン、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルスターチ、ナトリウム−グリコール−スターチ、炭酸水素ナトリウム、リン酸カルシウム、クエン酸カルシウム等の崩壊剤、ステアリン酸マグネシウム、エアロジル、タルク、ラウリル硫酸ナトリウム等の滑剤、クエン酸、メントール、グリシルリシン・アンモニウム塩、グリシン、オレンジ粉等の芳香剤、安息香酸ナトリウム、亜硫酸水素ナトリウム、メチルパラベン、プロピルパラベン等の保存剤、クエン酸、クエン酸ナトリウム、酢酸等の安定剤、メチルセルロース、ポリビニルピロリドン、ステアリン酸アルミニウム等の懸濁剤、界面活性剤等の分散剤、水、生理食塩水、オレンジジュース等の希釈剤、カカオ脂、ポリエチレングリコール、白灯油等のベースワックスなどが挙げられるが、それらに限定されない。
【００２８】
一つの実施態様において、本発明の医薬は経口投与に好適な製剤として処方され得る。経口投与に好適な製剤は、水、生理食塩水のような希釈液に有効量の物質を溶解させた液剤、有効量の物質を固体や顆粒として含んでいるカプセル剤、顆粒剤、散剤又は錠剤、適当な分散媒中に有効量の物質を懸濁させた懸濁液剤、有効量の物質を溶解させた溶液を適当な分散媒中に分散させ乳化させた乳剤等である。
【００２９】
別の実施態様において、本発明の医薬は非経口的な投与に好適な製剤として処方され得る。非経口的な投与（例、静脈内注射、皮下注射、筋肉注射、局所注入など）に好適な製剤としては、水性および非水性の等張無菌の注射液剤があり、これには抗酸化剤、緩衝液、制菌剤、等張化剤等が含まれていてもよい。また、水性および非水性の無菌の懸濁液剤が挙げられ、これには懸濁剤、可溶化剤、増粘剤、安定化剤、防腐剤等が含まれていてもよい。当該製剤は、アンプルやバイアルのように単位投与量あるいは複数回投与量ずつ容器に封入することができる。また、有効成分および医薬上許容され得る担体を凍結乾燥し、使用直前に適当な無菌のビヒクルに溶解又は懸濁すればよい状態で保存することもできる。
【００３０】
本発明の医薬は、該医薬の単位摂取量又はその分割量が個別に包装又は充填されたもの、あるいは多数の単位摂取量又はその分割量が包括的に包装又は充填されたものであり得る。
本発明の医薬が、単一の製剤として提供される場合には、該医薬の単位摂取量又はその分割量は、本発明のリン脂質化合物全体の単位摂取量又はその分割量である。
【００３１】
単位摂取量又はその分割量が個別に包装又は充填された医薬としては、例えば、単位摂取量又はその分割量を、通常の包装物（例えば、ＰＴＰ（press through packing）シート、紙容器、フィルム（例、プラスチックフィルム）容器、ガラス容器、プラスチック容器）中に別々に包装又は充填したものが挙げられる。このように個別に包装又は充填された医薬は、さらに組み合わされて、１つの容器（例えば、紙容器、フィルム（例、プラスチックフィルム）容器、ガラス容器、プラスチック容器）中に一緒に包装又は充填されていてもよい。多数の単位摂取量又はその分割量が包括的に包装又は充填された医薬としては、例えば、多数の錠剤又はカプセル剤が区分されることなく１つの容器（例えば、紙容器、フィルム（例、プラスチックフィルム）容器、ガラス容器、プラスチック容器）中に包装又は充填されたものが挙げられる。本発明の医薬はまた、単位摂取量又はその分割量を、長期間の摂取に十分な数で含み得るが、例えば食品の場合であれば３日以上、好ましくは７日、１０日、１４日又は２１日以上あるいは１ヶ月、２ヶ月、３ヶ月以上の摂取に十分な数で含み得る。
【００３２】
本発明の医薬には、必須の有効成分である本発明のリン脂質化合物に加え、１種類以上の他の抗癌剤を含めてもよい。他の抗癌剤としては、例えば、代謝拮抗剤（例、メソトレキセート、５−フルオロウラシル等）、アルキル化剤（例、サイクロフォスファミド、イフォスファミド等）、白金系抗癌剤（例、シスプラチン、カルボプラチン等）、トポイソメラーゼ阻害剤（例、エトポシド等）、抗癌性抗生物質（例、マイトマイシン、アドリアマイシン等）、植物由来抗癌剤（例、ビンクリスチン、ビンデシン、タキソール等）、チロシンキナーゼ阻害剤（例、ゲフィニチブ、イマニチブ等）、ヒト化抗体（例、ハーセプチン等）等が挙げられる。
【００３３】
本明細書中で挙げられた特許及び特許出願明細書を含む全ての刊行物に記載された内容は、本明細書での引用により、その全てが明示されたと同程度に本明細書に組み込まれるものである。
【００３４】
以下に実施例を挙げ、本発明を更に詳しく説明するが、本発明は下記実施例等に何ら制限されるものではない。
【実施例】
【００３５】
（解析方法）
1Ｈ−ＮＭＲスペクトルはJEOL JNM-ECX400スペクトロメータで記録した（400 MHz）。1Ｈ−ＮＭＲについて、化学シフトはＴＭＳ（δ＝０．００）又はＣＨＣｌ3（δ＝７．２６）からダウンフィールドした値で表した。
ＥＳＩ−ＭＳスペクトルはBruker micro TOF-Qマススペクトロメータで測定した。
カラムクロマトグラフィーはシリカゲル６０（４０−５０μｍ及び４０−１００μ）上で行なった（関東化学より購入）。
０．２５ｍｍシリカゲルプレート６０Ｆ２５４（Merck, Darmstadt, Germany）上で、ＵＶ光、ヨウ素及びｍ−ブロモクレゾールグリーン又は５％（ｗ／ｖ）リンモリブデン酸エタノール溶液及び熱を発色剤として用い全ての反応をモニタリングした。
ＤＯ−ＰＩ及びＤＰ−ＰＩはAvanti Polar Lipids, Inc. (Alabaster, AL, USA)から購入した。【００３６】
実施例１：ｄｉＤＣＰ−ＬＡ−Ｄ−ＰＩの合成
１，２−Ｏ−ビス−［８−｛２−（２−ペンチル−シクロプロピルメチル）−シクロプロピル｝−オクタノイル］−ｓｎ−グリセロール（0.080 g, 0.12 mmol）及びトリエチルアミン（0.033 ml, 0.24 mmol）のＣＨ2Ｃｌ2（2 ml）溶液にＮ，Ｎ−ジイソプロピルアミドクロリド亜リン酸メチル（0.028 ml, 0.14 mmol）を氷冷下で添加した。室温で１０分間撹拌した後、混合物に（−）−２，３，４，５，６−ペンタ−Ｏ−ベンジル−Ｄ−１−イノシトール（0.11 g, 0.18 mmol）及び１Ｈ−テトラゾール（0.033 g, 0.48 mmol）を添加し、ｔｅｒｔ−ブチルペルオキシド（0.16 ml, 1.2 mmol）の７０％（ｖ／ｖ）水溶液をさらに添加し、同じ温度で２０分間撹拌した。１０％（ｗ／ｖ）Ｎａ2Ｓ2Ｏ3水溶液を添加した後、得られた水層をＣＨ2Ｃｌ2で抽出した。併せた有機層を無水ＭｇＳＯ4で乾燥し、減圧濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝１：１）で精製してＯ−（１，２−Ｏ−ビス−［８−｛２−（２−ペンチル−シクロプロピルメチル）−シクロプロピル｝−オクタノイル］−ｓｎ−３−グリセリル）  Ｏ−メチル  Ｏ−（２’，３’，４’，５’，６’−ペンタ−Ｏ−ベンジル−Ｄ−１’−イノシトール）ホスフェート（30 mg, 17%）を白色固体として得た。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ -0.33- -0.21 (m, 4H), 0.52-0.85 (m, 12H), 0.87-0.95 (m, 6H), 0.96-1.70 (m, 44H), 2.24 (t, J = 7.3 Hz, 2H), 2.26 (t, J = 7.3 Hz, 2H), 3.46-3.54 (m, 2H), 3.67 (d, J = 11.4 Hz, 3H), 3.88 (dd, J = 11.9 and 6.0 Hz, 1H), 3.94 (ddd, J = 6.8, 6.4 and 5.0 Hz, 1H), 4.00-4.15 (m, 4H), 4.24 (ddd, J = 7.7, 7.4 and 2.1 Hz, 1H), 4.34 (t, J = 2.1 Hz, 1H), 4.67 (d, J = 11.4 Hz, 1H), 4.73 (d, J = 11.4 Hz, 1H), 4.75-4.85 (m, 4H), 4.85-4.95 (m, 3H), 4.95 (d, J = 11.4 Hz, 1H), 5.00-5.07 (m, 1H).
Ｏ−（１，２−Ｏ−ビス−［８−｛２−（２−ペンチル−シクロプロピルメチル）−シクロプロピル｝−オクタノイル］−ｓｎ−３−グリセリル）  Ｏ−メチル  Ｏ−（２’，３’，４’，５’，６’−ペンタ−Ｏ−ベンジル−Ｄ−１’−イノシトール）ホスフェート（30 mg, 0.020 mmol）の２−ブタノン（2 ml）溶液にＮａＩ（0.017 g, 0.11 mmol）を添加した。８０℃で２時間撹拌した後、２Ｎ  ＨＣｌを反応混合物に添加し、水層をクロロホルムで抽出した。有機層をＨ2Ｏ及び食塩水で洗浄し、あわせた有機層を無水ＭｇＳＯ4で乾燥し減圧濃縮して、Ｏ−（１，２−Ｏ−ビス−［８−｛２−（２−ペンチル−シクロプロピルメチル）−シクロプロピル｝−オクタノイル］−ｓｎ−３’−グリセリル）  Ｏ−メチル  Ｏ−（２’，３’，４’，５’，６’−ペンタ−Ｏ−ベンジル−Ｄ−１’−イノシトール）ホスフェートを得た。Ｏ−（１，２−Ｏ−ビス−［８−｛２−（２−ペンチル−シクロプロピルメチル）−シクロプロピル｝−オクタノイル］−ｓｎ−３’−グリセリル）  Ｏ−メチル  Ｏ−（２’，３’，４’，５’，６’−ペンタ−Ｏ−ベンジル−Ｄ−１’−イノシトール）ホスフェートのエタノール（3 ml）溶液に１０％（ｗ／ｖ）パラジウム活性炭素（21 mg）を添加した。得られた懸濁液を水素雰囲気下（1 atm）、室温で２時間撹拌した。触媒をセライトパッドにより除去し、酢酸エチルでリンスし、減圧濃縮した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝１０：１）で精製して１，２−Ｏ−ビス−［８−｛２−（２−ペンチル−シクロプロピルメチル）−シクロプロピル｝−オクタノイル］−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジル−Ｄ−１−イノシトール（10 mg, 55%）を白色固体として得た。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ -0.33- -0.20 (m, 4H), 0.55-0.85 (m, 12H), 0.87-0.95 (m, 6H), 0.96-1.70 (m, 44H), 2.20-2.43 (m, 4H), 3.80-4.51 (m, 5H), 5.18-5.32 (m, 1H); ESI-HRMS (negative ion, sodium formate) calculated for C49H86O13P ([M-H]-) 913.5811; found 913.5806.【００３７】
実施例２：ｄｉＤＣＰ−ＬＡ−Ｌ−ＰＩｅの合成
１，２−Ｏ−ビス−［８−｛２−（２−ペンチル−シクロプロピルメチル）−シクロプロピル｝−オクタノイル］−ｓｎ−グリセロール（0.175 g, 0.26 mmol）及びトリエチルアミン（0.072 ml, 0.52 mmol）のＣＨ2Ｃｌ2（5 ml）溶液にＮ，Ｎ−ジイソプロピルアミドクロリド亜リン酸メチル（0.061 ml, 0.31 mmol）を氷冷下で添加した。室温で１０分間撹拌した後、混合物に（＋）−２，３，４，５，６−ペンタ−Ｏ−ベンジル−Ｌ−１−イノシトール（0.25 g, 0.39 mmol）及び１Ｈ−テトラゾール（0.073 g, 1.04 mmol）を添加し、ｔｅｒｔ−ブチルペルオキシド（0.34 ml, 2.6 mmol）の７０％（ｖ／ｖ）水溶液をさらに添加し、同じ温度で２０分間撹拌した。１０％（ｗ／ｖ）Ｎａ2Ｓ2Ｏ3水溶液を添加した後、得られた水層をＣＨ2Ｃｌ2で抽出した。併せた有機層を無水ＭｇＳＯ4で乾燥し、減圧濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（トルエン：酢酸エチル＝６：１）で精製してＯ−（１，２−Ｏ−ビス−［８−｛２−（２−ペンチル−シクロプロピルメチル）−シクロプロピル｝−オクタノイル］−ｓｎ−３−グリセリル）  Ｏ−メチル  Ｏ−（２’，３’，４’，５’，６’−ペンタ−Ｏ−ベンジル−Ｌ−１’−イノシトール）ホスフェート（90 mg, 25%）を白色固体として得た。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ -0.33- -0.21 (m, 4H), 0.52-0.85 (m, 12H), 0.87-0.95 (m, 6H), 0.96-1.70 (m, 44H), 2.25 (t, J = 7.3 Hz, 2H), 2.26 (t, J = 7.3 Hz, 2H), 3.46-3.54 (m, 2H), 3.61 (d, J = 11.4 Hz, 3H), 3.94 (dd, J = 11.9 and 6.0 Hz, 1H), 4.00-4.32 (m, 7H), 4.68 (d, J = 11.9 Hz, 1H), 4.72 (d, J = 11.9 Hz, 1H), 4.73-4.85 (m, 8H), 5.15-5.25 (m, 1H).
Ｏ−（１，２−Ｏ−ビス−［８−｛２−（２−ペンチル−シクロプロピルメチル）−シクロプロピル｝−オクタノイル］−ｓｎ−３−グリセリル）  Ｏ−メチル  Ｏ−（２’，３’，４’，５’，６’−ペンタ−Ｏ−ベンジル−Ｌ−１−イノシトール）ホスフェート（90 mg, 0.070 mmol）の２−ブタノン（2 ml）溶液にＮａＩ（50 mg, 0.33 mmol）を添加した。８０℃で３時間撹拌した後、２Ｎ  ＨＣｌを反応混合物に添加し、水層をクロロホルムで抽出した。有機層をＨ2Ｏ及び食塩水で洗浄し、あわせた有機層を無水ＭｇＳＯ4で乾燥し減圧濃縮して、Ｏ−（１，２−Ｏ−ビス−［８−｛２−（２−ペンチル−シクロプロピルメチル）−シクロプロピル｝−オクタノイル］−ｓｎ−３−グリセリル）  Ｏ−メチル  Ｏ−（２’，３’，４’，５’，６’−ペンタ−Ｏ−ベンジル−Ｌ−１−イノシトール）ホスフェートを得た。Ｏ−（１，２−Ｏ−ビス−［８−｛２−（２−ペンチル−シクロプロピルメチル）−シクロプロピル｝−オクタノイル］−ｓｎ−３−グリセリル）  Ｏ−メチル  Ｏ−（２’，３’，４’，５’，６’−ペンタ−Ｏ−ベンジル−Ｌ−１−イノシトール）ホスフェートのエタノール（5 ml）溶液に１０％（ｗ／ｖ）パラジウム活性炭素（70 mg）を添加した。得られた懸濁液を水素雰囲気下（1 atm）、室温で２時間撹拌した。触媒をセライトパッドにより除去し、酢酸エチルでリンスし、減圧濃縮した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝１０：１）で精製して１，２−Ｏ−ビス−［８−｛２−（２−ペンチル−シクロプロピルメチル）−シクロプロピル｝−オクタノイル］−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジル−Ｌ−１−イノシトール（20 mg, 43%）を白色固体として得た。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ -0.33- -0.20 (m, 4H), 0.55-0.85 (m, 12H), 0.87-0.95 (m, 6H), 0.96-1.70 (m, 44H), 2.20-2.43 (m, 4H), 3.50-4.51 (m, 5H), 5.10-5.42 (m, 1H); ESI-HRMS (negative ion, sodium formate) calculated for C49H86O13P ([M-H]- ) 913.5811; found 913.5811.【００３８】
試験例１：癌細胞増殖抑制作用（癌細胞死誘導作用）
（材料と方法）
１．細胞培養
ヒト悪性胸膜中皮腫の細胞株である、NCI-H28、NCI-H2052、NCI-H2452、及びMSTO-211Hを用いた。これらの細胞はAmerican Type Culture Collection (Manassas, VA, USA)から購入した。０．００３％（ｗ／ｖ）Ｌ−グルタミンを添加したRoswell Park Memorial Institute (RPMI)-1640培地で細胞を培養した。
Lu-65ヒト肺癌細胞株は、Health Science Research Resources Bank (Osaka, Japan)から購入し、RPMI-1640培地で培養した。
MKN28ヒト胃癌細胞株はDr. Tatematsu (Nagoya University, Japan)より供与され、RPMI-1640培地で培養した。
MCF-7ヒト乳癌細胞株はRIKEN cell bank (Ibaraki, Japan)より入手し、Dulbecco’s modified Eagle’s medium (DMEM)で培養した。
全ての細胞培養について、培地には１０％（ｖ／ｖ）の熱非働化したウシ血清、ペニシリン(最終濃度, 100 U/ml)及びストレプトマイシン(最終濃度, 0.1 mg/ml)を添加し、５％ＣＯ2及び９５％空気の湿雰囲気下、３７℃でインキュベートした。【００３９】
２．細胞生存度のアッセイ
細胞生存度は３−（４，５−ジメチル−２−チアゾリル）−２，５−ジフェニル−２Ｈ−テトラゾリウムブロミド（ＭＴＴ）を用いた確立された方法によって評価した。【００４０】
（結果）
１．ヒト悪性胸膜中皮腫細胞株に及ぼす本発明のリン脂質化合物の影響（１）
ｄｉＤＣＰ−ＬＡ−ＰＩ及びｄｉＤＣＰ−ＬＡ−ＰＩｅを用いて調べた。結果を図２に示す。
本結果は、ｄｉＤＣＰ−ＬＡ−ＰＩとｄｉＤＣＰ−ＬＡ−ＰＩｅが濃度依存性にヒト悪性胸膜中皮腫細胞の細胞死を誘導することを示している。さらに、ｄｉＤＣＰ−ＬＡ−ＰＩｅの方がより有効であることが示された。【００４１】
２．ヒト悪性胸膜中皮腫細胞株に及ぼす本発明のリン脂質化合物の影響（２）
ＤＯ−ＰＩとＤＰ−ＰＩを用いて調べた。結果を図３に示す。
本結果は、ＤＯ−ＰＩとＤＰ−ＰＩが濃度依存性に同程度のヒト悪性胸膜中皮腫細胞の細胞死を誘導することを示している。【００４２】
３．ヒト肺癌・胃癌・乳癌細胞株に及ぼす本発明のリン脂質化合物の影響
ｄｉＤＣＰ−ＬＡ−ＰＩ及びｄｉＤＣＰ−ＬＡ−ＰＩｅを用いて調べた。結果を図４に示す。
本結果は、ｄｉＤＣＰ−ＬＡ−ＰＩとｄｉＤＣＰ−ＬＡ−ＰＩｅが濃度依存的にヒト肺癌、胃癌、乳癌の細胞株の細胞死を誘導することを示している。この効果もｄｉＤＣＰ−ＬＡ−ＰＩｅの方が有効であることを示している。
【産業上の利用可能性】
【００４３】
本発明のリン脂質化合物（イノシトールリン脂質化合物、特に構成脂肪酸として不飽和脂肪酸、特に二重結合がシクロプロパン環に置き換えられた脂肪酸を有するイノシトールリン脂質化合物）は、優れた癌細胞死誘導作用を有する。リン脂質化合物は本来生体に存在するものであることから、本願発明は、より安全性に優れた抗癌剤を提供することができる。【００４４】
本出願は、日本で出願された特願２０１３−１２１１４２（出願日２０１３年６月７日）を基礎としておりその内容は本明細書に全て包含されるものである。
【図１】
2014196621.tif 000003
【図２】
2014196621.tif 000004
【図３】
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【図４】
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【国際調査報告】
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