(57)【要約】シークワーシャー抽出物、好ましくはシークワーシャーの果実又は葉の水及び／又は有機溶媒抽出物、シークワーシャーの果実又は葉の超臨界抽出物、又は、シークワーシャーの果実又は葉の亜臨界抽出物であって、固形物換算で０．３質量％以上のポリメトキシフラボノイドを含有するシークワーシャー抽出物、例えば固形物換算で０．２質量％以上のノビレチン及び／又は０．１質量％以上のタンゲレチンを含むシークワーシャー抽出物、またはポリメトキシフラボノイド、例えばノビレチン、またはタンゲレチンを、IGF-1産生促進剤の有効成分とする。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ポリメトキシフラボノイドを有効成分として含有するＩＧＦ−１産生促進剤。
【請求項２】
前記ポリメトキシフラボノイドが、ノビレチン及び／又はタンゲレチンである、請求項１に記載のＩＧＦ−１産生促進剤。
【請求項３】
固形物換算で０．３質量％以上のポリメトキシフラボノイドを含むシークワーシャー抽出物を有効成分として含有する、ＩＧＦ−１産生促進剤。
【請求項４】
さらに、ポリメトキシフラボノイドを水可溶化する包接剤を含む、請求項３に記載のＩＧＦ−１産生促進剤。
【請求項５】
前記包接剤がシクロデキストリンであり、その含有量が、シークワーシャー抽出物の固形物とシクロデキストリンの合計量に対して０．１〜９５質量％である、請求項４に記載のＩＧＦ−１産生促進剤。
【請求項６】
固形物換算で０．２質量％以上のノビレチン及び／又は０．１質量％以上のタンゲレチンを含むシークワーシャー抽出物を有効成分として含有する、請求項３〜５のいずれか一項に記載のＩＧＦ−１産生促進剤。
【請求項７】
たんぱく質合成促進のために用いられる請求項１〜６のいずれか一項に記載のＩＧＦ−１産生促進剤。
【請求項８】
請求項１〜７のいずれか一項に記載のＩＧＦ−１産生促進剤を、ポリメトキシフラボノイドの含有量として固形物換算で０．３質量％以上含む飲食品。
【請求項９】
請求項２又は６に記載のＩＧＦ−１産生促進剤を、ノビレチンの含有量として固形物換算で０．２質量％以上及び／又はタンゲレチンの含有量として固形物換算で０．１質量％以上含む飲食品。
【請求項１０】
ＩＧＦ−１産生促進剤の製造におけるポリメトキシフラボノイドの使用。
【請求項１１】
前記ポリメトキシフラボノイドが、ノビレチン及び／又はタンゲレチンである、請求項１０に記載の使用。
【請求項１２】
ＩＧＦ−１産生促進剤の製造における、固形物換算で０．３質量％以上のポリメトキシフラボノイドを含むシークワーシャー抽出物の使用。
【請求項１３】
ポリメトキシフラボノイドを水可溶化する包接剤とともに使用される、請求項１２に記載の使用。
【請求項１４】
前記包接剤がシクロデキストリンであり、その含有量が、シークワーシャー抽出物の固形物とシクロデキストリンの合計量に対して０．１〜９５質量％である、請求項１３に記載の使用。
【請求項１５】
ＩＧＦ−１産生促進剤の製造における、固形物換算で０．２質量％以上のノビレチン及び／又は０．１質量％以上のタンゲレチンを含むシークワーシャー抽出物の使用。
【請求項１６】
ＩＧＦ−１産生促進剤がたんぱく質合成促進のために用いられる請求項１０〜１５のいずれか一項に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＩＧＦ−１産生促進剤に関する。ＩＧＦ−１産生促進剤は、医薬、及び食品、飼料として利用することができる。
【背景技術】
【０００２】
たんぱく質合成は、食品の摂取、運動、睡眠など生理的な変化の刺激を受ける。これらの刺激により脳下垂体より分泌される成長ホルモンによって、標的器官は直接あるいは間接的に働きかけられる。成長ホルモンが間接的に働く場合、成長ホルモンの刺激を受けた肝臓から分泌されるインスリン様成長因子-1（IGF-1）が、血液を介して全身に輸送されて標的器官に働きかける。人体の殆どの細胞、特に筋肉、骨、肝臓、腎臓、神経、皮膚及び肺の細胞はIGF-1の影響を受けることが知られている。【０００３】
例えば、IGF-1が標的器官、組織の各細胞の受容体に結合すると、細胞内でシグナル伝達が開始される。このシグナル伝達の下流には哺乳動物のラパマイシン標的たんぱく質（mTOR）がある。mTORを介したシグナル伝達系は、哺乳動物において細胞環境中のアミノ酸バランスのセンサーとして働き、たんぱく質の翻訳に関与する２つの重要な調節因子であるS6キナーゼ1（S6K1）及びイニシエーション因子4E結合たんぱく質（4E-BP1）（非特許文献１及び非特許文献２）の活性を調節することで、たんぱく質合成に関与することが知られている（特許文献１、非特許文献３及び非特許文献４）。また、S6K1及び4E-BP1は、リン酸化されることで活性化されることが知られている（非特許文献５）。
したがって、IGF-1濃度、S6K1及び4E-BP1の活性状態（リン酸化）が、たんぱく質合成の指標としてよく用いられる。【０００４】
たんぱく質合成促進に関する特許としては、ホエータンパク質加水分解物（特許文献２）、魚類の卵巣膜(特許文献３)、11β-ヒドロキシ-4-アンドロステン-3,17-ジオン(特許文献４)、発芽玄米由来のステロール配糖体（特許文献５）等が報告されている。【０００５】
上記のように、たんぱく質合成促進作用を有する成分がいくつか知られているが、シークワーシャー抽出物、又はノビレチンおよびタンゲレチン等のポリメトキシフラボノイドがたんぱく質合成促進作用を有することは知られていない。【０００６】
また、IGF-1産生促進作用に関する特許としては、ゲンチオピクリン（特許文献６）、スウェルチアマリン（特許文献７）、アシタバ抽出物及び／又はルテオリン−７−Ｏ−グルコシド（特許文献８）、免疫グロブリンGのFc領域を含む分子種（特許文献９）、発芽玄米由来のステロール配糖体（特許文献５）、ε−ビニフェリン（特許文献１０）、シャクヤクの抽出物（特許文献１１）等が報告されている。【０００７】
上記のようにIGF-1産生促進作用を有する成分がいくつか知られているが、シークワーシャー抽出物、又はノビレチンおよびタンゲレチン等のポリメトキシフラボノイドがIGF-1産生促進作用を示すことは知られていない。【０００８】
一方、植物由来の健康食品原料として、シークワーシャー抽出物が注目されている。シークワーシャー抽出物に含まれるノビレチンおよびタンゲレチン等のポリメトキシフラボノイドは、これまで種々の効能が見出されている。例えば、ノビレチンは、抗高血圧、抗ガン作用（特許文献１２）、心疾患予防治療作用（特許文献１３）、及び、抗潰瘍作用（特許文献１４）等の作用を有することが報告されている。また、タンゲレチン及びノビレチン等のポリメトキシフラボノイドは血管新生抑制作用（特許文献１５）を有することが報告されている。さらに、シークワーシャー等の柑橘類に含まれるフラボノイドが、血圧上昇抑制作用を有すること（特許文献１６）が知られている。【０００９】
さらに、ノビレチン及びタンゲレチンが神経突起伸長作用を有するとの報告があるが（特許文献１７）、神経突起の伸長には新たなたんぱく質の合成は必要でないことが知られている（非特許文献６）。また、特許文献１７では、筋萎縮変性側索硬化症のような神経性末梢機能障害の治療の可能性も示されているが、これは神経突起伸長による病態の改善に限られたものであって、筋萎縮の抑制や筋たんぱく質合成を示唆するものではない。【００１０】
上記のように、シークワーシャー抽出物、又はノビレチンおよびタンゲレチン等のポリメトキシフラボノイドには各種の効能が報告されているが、これらの抽出物又は物質がIGF-1産生促進作用、又はたんぱく質合成促進作用を有することは知られていない。【００１１】
また、リンゴ等のバラ科植物の果実に含まれるプロシアニジンのようなポリフェノールを有効成分とする筋繊維タイプ移行抑制剤が知られている（特許文献１８）。しかしながら、この筋繊維タイプ移行抑制剤の有効成分である果実由来ポリフェノールは、バラ科果実に限定されており、バラ科果実由来のポリフェノールはポリメトキシフラボノイド含有量が低い。【００１２】
前記のようなポリメトキシフラボノイドは果汁中にはほとんど含まれず、果皮に多く含まれていることから、単に果実を搾汁するだけでは、これらポリメトキシフラボノイドの含有量は少ない。
ポリメトキシフラボノイドは、フェノール水酸基が複数メチル化された特殊な構造を持つフラボノイドの一種であり、主として柑橘類に含まれる。ノビレチン、またはタンゲレチンのようなポリメトキシフラボノイドは、摂取後、肝臓において代謝される。例えば、ノビレチンはラット肝の代謝により、メトキシ基が水酸基に置換され、4'-OH、7-OH、6-OH、3',4'-diOH、または6,7-diOHノビレチン等が代謝産物として生成される。また、タンゲレチンからは、4'-OH、3',4'-diOH、7,4'-diOH、または6,7-diOHタンゲレチン等が代謝産物として生成されることが報告されている（非特許文献７）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１３】
【特許文献１】特開２００７−２０４３７９号
【特許文献２】特開２０１１−１６０７５７号
【特許文献３】特許第３９４６２３８号
【特許文献４】特開２０００−１６９３７４号
【特許文献５】特開２０１１−１５７３４５号
【特許文献６】特開２００９−１９６９８９号
【特許文献７】特開２００９−２６３２６２号
【特許文献８】特開２０１０−１５０１７７号
【特許文献９】国際公開２００９−０３５０５５号
【特許文献１０】特開２０１１−２４１１６２号
【特許文献１１】特開２０１２−１２１８５６号
【特許文献１２】国際公開２００６／４９２７３４号
【特許文献１３】特開２０１１−３７７９８号
【特許文献１４】特開平６−７２８７０号
【特許文献１５】特開２００４−８３４１７号
【特許文献１６】特開２００１−２４０５３９号
【特許文献１７】特開２００２−６０３４０号
【特許文献１８】特開２００６−３２８０３１号
【非特許文献】
【００１４】
【非特許文献１】Burnett, P.E. et al., PNAS, 95, 1432-1437 (1998)
【非特許文献２】Isotani, S. et al., J. Biol. Chem., 274, 33493-34498 (1999)
【非特許文献３】Gingras, A-C. et al., Genes & Dev., 15, 807-826 (2001)
【非特許文献４】Fingar, D.C. and Blenis, J., Oncogene, 23, 3151-3171 (2004)
【非特許文献５】Exp Cell Res., 253(1), 100-109 (1999)
【非特許文献６】Partlow, L.M. and Larrabee, M.G., J. Neurochem., 18, 2101-2118 (1971)
【非特許文献７】Koga, N. et al., Biol. Pharm. Bull. 30(12), 2317-2312 (2007)
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１５】
本発明は、安全に摂取できるIGF-1産生促進剤、及びそれを含む飲食品を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【００１６】
本発明者らは、上記の課題を解決すべく鋭意研究を行った結果、シークワーシャー抽出物、又はその成分であるポリメトキシフラボノイドに、優れたIGF-1産生促進作用を有することを見出し、本発明を完成するに至った。【００１７】
すなわち、本発明は、ポリメトキシフラボノイドを有効成分として含有するIGF-1産生促進剤を提供する。
本発明のIGF-1産生促進剤は、前記ポリメトキシフラボノイドがノビレチン及び／又はタンゲレチンであることを好ましい態様としている。【００１８】
また、本発明は、固形物換算で０．３質量％以上のポリメトキシフラボノイドを含むシークワーシャー抽出物を有効成分として含有する、IGF-1産生促進剤を提供する。
本発明のIGF-1産生促進剤は、さらに、ポリメトキシフラボノイドを水可溶化する包接剤を含むことを好ましい態様としている。
本発明のIGF-1産生促進剤は、前記包接剤がシクロデキストリンであり、その含有量が、シークワーシャー抽出物の固形物とシクロデキストリンの合計量に対して０．１〜９５質量％であることを好ましい態様としている。
また、本発明のIGF-1産生促進剤は、固形物換算で０．２質量％以上のノビレチン及び／又は０．１質量％以上のタンゲレチンを含むシークワーシャー抽出物を有効成分として含有することを好ましい態様としている。
また、本発明のIGF-1産生促進剤は、たんぱく質合成促進のために用いられることを好ましい態様としている。【００１９】
本発明はさらに、前記IGF-1産生促進剤を、ポリメトキシフラボノイドの含有量として固形物換算で０．３質量％以上含む飲食品を提供する。
また、本発明は、前記ノビレチンを含有するIGF-1産生促進剤を、ノビレチン含有量として固形物換算で０．２質量％以上含む飲食品を提供する。
また、本発明は、前記タンゲレチンを含有するIGF-1産生促進剤を、タンゲレチン含有量として固形物換算で０．１質量％以上含む飲食品を提供する。
また、本発明は、前記ノビレチン及びタンゲレチンを含有するIGF-1産生促進剤を、ノビレチンの含有量として固形物換算で０．２質量％以上及びタンゲレチンの含有量として固形物換算で０．１質量％以上含む飲食品を提供する。【００２０】
本発明はまた、IGF-1産生促進剤の製造におけるポリメトキシフラボノイドの使用を提供する。
本発明の使用は、前記ポリメトキシフラボノイドが、ノビレチン及び／又はタンゲレチンであることを好ましい態様としている。【００２１】
また本発明は、IGF-1産生促進剤の製造における、固形物換算で０．３質量％以上のポリメトキシフラボノイドを含むシークワーシャー抽出物の使用を提供する。
本発明の使用は、ポリメトキシフラボノイドを水可溶化する包接剤とともに使用されることを好ましい態様としている。
また本発明の使用は、前記包接剤がシクロデキストリンであり、その含有量が、シークワーシャー抽出物の固形物とシクロデキストリンの合計量に対して０．１〜９５質量％であることを好ましい態様としている。【００２２】
また本発明は、IGF-1産生促進剤の製造における、固形物換算で０．２質量％以上のノビレチン及び／又は０．１質量％以上のタンゲレチンを含むシークワーシャー抽出物の使用を提供する。
本発明の使用は、IGF-1産生促進剤がたんぱく質合成促進のために用いられることを好ましい態様としている。
【発明を実施するための形態】
【００２３】
次に、本発明の好ましい実施形態について詳細に説明する。ただし、本発明は以下の好ましい実施形態に限定されず、本発明の範囲内で自由に変更することができるものである。
本発明のIGF-1産生促進剤は、ポリメトキシフラボノイドを有効成分として含有する。本発明のIGF-1産生促進剤の他の形態は、シークワーシャー抽出物、特に、固形物換算で０．３質量％以上のポリメトキシフラボノイドを含むシークワーシャー抽出物を有効成分として含有する。
【００２４】
シークワーシャー又はその抽出物に含まれるポリメトキシフラボノイドは、主に下記式で表される構造を有し、具体的には、ノビレチン、タンゲレチン、5-デメチルノビレチン、8-デメトキシノビレチン（シネンセチン）、6-デメトキシタンゲレチン、6-デメトキシノビレチン、シトロミチン、5,6,7,8,4-ペンタメトキシフラバノン等が挙げられる。これらの中では、ノビレチン及びタンゲレチンが好ましい。
下記化学式において、R、R1、R2、R3、及びR4は、各々ノビレチンでは、R=OMe、R1=OMe、R2=H、R3=Me、R4=OMeであり、タンゲレチンでは、R=OMe、R1=H、R2=H、R3=Me、R4=OMeである（ただし、Meはメチル基、OMeはメトキシ基、Hは水素原子を表す）。
ポリメトキシフラボノイドは、一種でもよく、任意の２種以上の混合物であってもよい。
【００２５】
【化１】
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【００２６】
ポリメトキシフラボノイドは、柑橘類、その他前記物質を含有する植物の果実、葉、根、茎等から抽出しても良く、化学合成により製造しても良い。
【００２７】
シークワーシャー抽出物は、例えば、シークワーシャーの果実及び／又は葉から、水及び／又は有機溶媒を用いて抽出することにより製造することができる。有機溶媒は含水物であってもよい。シークワーシャー(Citrus depressa)は、ミカン科の柑橘類の一種である。
【００２８】
前記果実及び／又は葉は、果実及び／葉の全体であってもよく、その一部であってもよい。例えば、果実は、果肉又は果皮であってもよい。さらに、果実及び／又は葉は、そのまま用いてもよく、破砕物、例えば、果実及び／又は葉をナノメートルオーダーまで微細化したものであってもよい。また、果実及び／又は葉は、果実及び／又は葉、もしくはそれらの一部の搾汁残渣であってもよい。以下、これらの果実及び／又は葉、その一部、それらの破砕物、及び、それらの搾汁残渣を、「シークワーシャー果実及び／又は葉等」と記載することがある。
【００２９】
また、有機溶媒としては、メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、ブタノール等のアルコール類、酢酸エチル等のエステル類、アセトン、ヘキサン、クロロホルム、ジエチルエーテル、アセトニトリルもしくはこれらの有機溶媒の含水物、又はこれらの有機溶媒及びその含水物のいずれかを組み合わせたもの等が挙げられるが、これらの中ではエタノールが好ましい。有機溶媒の含水率は、特に制限されないが、好ましくは０〜９０質量％、より好ましくは０〜４０質量％である。
【００３０】
有機溶媒抽出において、シークワーシャー果実及び／又は葉等に対する有機溶媒の量は、特に制限されないが、シークワーシャー果実及び／又は葉等:有機溶媒の比(重量比)は好ましくは１：０．５〜１：１００、より好ましくは１：１〜１：２０である。
【００３１】
抽出の方法は特に制限されないが、例えば、シークワーシャー果実及び/又は葉等に有機溶媒を加えて、好ましくは５分〜３時間撹拌抽出した後、濾過又は遠心分離等の固液分離手段により液層を採取する方法が挙げられる。
【００３２】
また、抽出後、又は乾燥工程の前に、ポリメトキシフラボノイドを水可溶化する包接剤を添加することが好ましい。このような包接剤は、水可溶化性の向上、消化吸収性の向上、又は風味改善の効果が期待される。また、包接剤としては、例えば、シクロデキストリン等の包接化合物を用いることが好ましい。包接剤の量は、シクロデキストリンの場合は、得られるシークワーシャー抽出物の固形物とシクロデキストリンの合計量に対して好ましくは０．１〜９５質量％、より好ましくは１〜９０質量％である。
【００３３】
本発明のシークワーシャー抽出物は、超臨界抽出法によって製造することも可能である。具体的には、例えば、シークワーシャーの果実及び／又は葉部分を冷凍後に破砕したもの、又はシークワーシャーの果実及び／又は葉部分を凍結乾燥又は熱風乾燥して粉末状にしたものを、以下の（ａ）〜（ｄ）の条件に基づいて、超臨界抽出法によって製造することができる。
【００３４】
（ａ）抽出溶媒が二酸化炭素（炭酸ガス）であること、
（ｂ）抽出温度が３１．１〜１２０℃、好ましくは４０〜１００℃、特に好ましくは６０〜８０℃であること、
（ｃ）圧力が７．３８〜６０ＭＰａ、好ましくは２０〜４０ＭＰａ、特に好ましくは２５〜３５ＭＰａであること、
（ｄ）抽出時間が５〜７０分、好ましくは１０〜５０分、特に好ましくは２０〜３０分であること。
【００３５】
なお、前記抽出流体としては、シークワーシャー果実及び／又は葉等の抽出効率を改善する観点からは、超臨界プロパン、超臨界エチレン、超臨界1,1,1,2-テトラフルオロエタンなどを使用することも可能であるが、飲食品としての安全性を向上させる観点からは、二酸化炭素（炭酸ガス）を使用することが好ましい。また、抽出温度としては、３１．１℃〜１２０℃の温度範囲で適宜選択することが可能であるが、抽出効率を改善し、かつポリメトキシフラボノイド、特にノビレチン及び／又はタンゲレチンの含有量を高めるためには、４０〜１００℃の範囲が好ましく、６０〜８０℃の範囲がさらに好ましい。また、圧力としては、７．３８〜６０ＭＰａの範囲が好ましく、２０〜４０ＭＰａの範囲がさらに好ましい。また、本発明においては、抽出効率を改善する観点からは、エタノール、水等をエントレーナーとして使用しても良い。
【００３６】
抽出時間は、温度や圧力によって適宜設定すればよいが、好ましくは１０〜５０分、さらに好ましくは２０〜３０分の範囲が挙げられる。
抽出操作は、市販の装置を用いて行うことができる。
【００３７】
本発明のシークワーシャー抽出物は、亜臨界抽出法によって製造することも可能である。具体的には、例えば、シークワーシャーの果実又は葉部分を冷凍後に破砕したもの、又はシークワーシャーの果実又は葉部分を凍結乾燥又は熱風乾燥して粉末状にしたものを、以下の（ａ）〜（ｄ）の条件に基づいて、亜臨界抽出法によって製造することができる。
【００３８】
（ａ）抽出溶媒が水であること、
（ｂ）抽出温度が１４０〜３７４℃、好ましくは１４０〜１８０℃であること、
（ｃ）圧力が３〜２２ＭＰａ、好ましくは３〜１０ＭＰａであること、
（ｄ）抽出時間が０〜１０分、好ましくは０〜５分であること。
【００３９】
なお、抽出時間０分とは、抽出開始から目的の抽出温度まで上げた直後に、冷却して温度を抽出開始温度に下げることを意味する。
【００４０】
亜臨界抽出法で用いる流体としては、例えば、水、二酸化炭素が挙げられるが、飲食品としての安全性を向上させる観点からは、水を使用することが好ましい。
【００４１】
抽出温度は、抽出流体として水を用いる場合は、１４０〜３７４℃の温度範囲で適宜選択することが可能であるが、抽出効率を改善し、かつポリメトキシフラボノイド、特にノビレチン及び／又はタンゲレチンの含有量を高めるためには、１４０〜１８０℃の範囲が好ましい。また、圧力は、抽出流体として水を用いる場合は、３〜１０ＭＰａの範囲が好ましい。
【００４２】
抽出時間は、温度や圧力によって適宜設定すればよいが、好ましくは０〜１０分、さらに好ましくは０〜５分の範囲が挙げられる。
抽出操作は、市販の装置を用いて行うことができる。
【００４３】
上記のようにして、水、有機溶媒、又は有機溶媒の含水物を用いた抽出法、又は超臨界抽出法もしくは亜臨界抽出法により得られる抽出物のノビレチン、及びタンゲレチンの収量は、シークワーシャー果実及び又は葉等の重量に対し、各々、通常約０．００１質量％から約３質量％、及び約０．０００１質量％から約２質量％である。
【００４４】
上記のようにして得られるシークワーシャー抽出物は、固形物換算で０．１質量％以上、好ましくは０．３質量％以上、より好ましくは０．６質量％以上、さらに好ましくは１質量％以上、さらに好ましくは３質量％以上、特に好ましくは１０質量％以上のポリメトキシフラボノイドを含有する。また、このようなシークワーシャー抽出物は、固形物換算０．０７質量％以上で、好ましくは０．２質量％以上、より好ましくは０．４質量％以上、更に好ましくは０．７質量％以上、更に好ましくは２質量％以上、特に好ましくは６質量％以上のノビレチン、及び／又は、固形分換算で０．０４質量％以上、好ましくは０．１質量％以上、好ましくは０．２質量％以上、更に好ましくは０．４質量％以上、更に好ましくは１質量％以上、特に好ましくは３質量％以上のタンゲレチンを含む。
「固形物換算で」とは、「固形物（固形分）の量として」と同義である。また、薬剤又は食品等が、シークワーシャー抽出物、ポリメトキシフラボノイド、ノビレチン、又はタンゲレチンを、「固形物換算でＸ％以上含む」との文言は、薬剤又は食品の固形物に対するシークワーシャー抽出物中の固形物、ポリメトキシフラボノイド、ノビレチン、又はタンゲレチンの量がＸ％であることを意味する。
【００４５】
抽出物は、そのまま又は濃縮したものを使用してもよく、溶媒を一部又は完全に除去してもよい。なお、濃縮や溶媒の除去については、各種クロマトグラフィー法、蒸留、乾固、再結晶等の方法により実施することができる。特に、医薬品又は飲食品に含まれることが好ましくない有機溶媒、例えばメタノール、プロパノール、ブタノール、酢酸エチル、アセトン、ヘキサン、クロロホルム、ジエチルエーテル等は、除去することが好ましい。また、ポリメトキシフラボノイド、特にノビレチン及び／又はタンゲレチンの含有量が高くなるように、抽出物を分画してもよい。ノビレチン及び／又はタンゲレチン等のポリメトキシフラボノイドの含有量は、ＨＰＬＣ等により測定することができる。
【００４６】
上記のようなシークワーシャー抽出物、又はポリメトキシフラボノイドは、そのままIGF-1産生促進剤（以下、「本発明の薬剤」とも記載する）、または飲食品もしくは飼料の有効成分として利用することが可能である。シークワーシャー抽出物、又はポリメトキシフラボノイドは、溶液であってもよく、常法により凍結乾燥または噴霧乾燥して粉末として保存、使用することもできる。
【００４７】
本発明の薬剤は、一態様として、医薬又はその有効成分として利用することができる。本発明の薬剤は、シークワーシャー抽出物をそのまま、又はポリメトキシフラボノイド、又はノビレチン、及び／又はタンゲレチン、若しくはこれらを製剤学的に許容される製剤担体と組み合わせて、経口的にヒトを含む哺乳動物に投与することができる。
【００４８】
本発明の薬剤の製剤形態は特に限定されず、錠剤（糖衣錠、腸溶性コーティング錠、バッカル錠を含む）、散剤、カプセル剤（腸溶性カプセル、ソフトカプセルを含む。）、顆粒剤（コーティングしたものを含む。）、丸剤、トローチ剤、封入リポソーム剤、液剤、又はこれらの製剤学的に許容され得る徐放製剤等を例示することができる。製剤化にあたっては製剤成分として通常の経口薬剤に汎用される、担体、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、安定剤、矯味矯臭剤、希釈剤、界面活性剤、溶剤等の添加剤を使用できる。
【００４９】
また、本発明の効果を損なわない限り、シークワーシャー抽出物、又はポリメトキシフラボノイドと、公知の、もしくは将来的に見出されるIGF-1産生促進作用、又はたんぱく質合成促進作用を有する薬剤、又は医薬組成物、公知の、もしくは将来的に見出される筋萎縮抑制効果を有する薬剤、又は医薬組成物とを併用してもよい。併用する医薬組成物は、本発明の薬剤中に有効成分の一つとして含有させてもよいし、本発明の薬剤中には含有させずに別個の薬剤として組み合わせて商品化してもよい。
【００５０】
上記の製剤に用いる担体及び賦形剤としては、乳糖、ブドウ糖、白糖、マンニトール、馬鈴薯澱粉、トウモロコシ澱粉、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、硫酸カルシウム、結晶セルロース、カンゾウ末、ゲンチアナ末等を、結合剤としては例えば澱粉、ゼラチン、シロップ、ポリビニルアルコール、ポリビニルエーテル、ポリビニルピロリドン、ヒドロキシプロピルセルロース、エチルセルロース、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース等を、それぞれ例示することができる。
【００５１】
また、崩壊剤としては、澱粉、寒天、ゼラチン末、カルボキシメチルセルロースナトリウム、カルボキシメチルセルロースカルシウム、結晶セルロース、炭酸カルシウム、炭酸水素ナトリウム、及びアルギン酸ナトリウム等を例示することができる。
【００５２】
更に、滑沢剤としては、ステアリン酸マグネシウム、水素添加植物油、及びマクロゴール等、着色剤としては医薬品に添加することが許容されている赤色２号、黄色４号、及び青色１号等を例示することができる。
【００５３】
錠剤及び顆粒剤は、必要に応じ、白糖、ヒドロキシプロピルセルロース、精製セラック、ゼラチン、ソルビトール、グリセリン、エチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニルピロリドン、フタル酸セルロースアセテート、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、メチルメタクリレート、及びメタアクリル酸重合体等により被膜することもできる。
【００５４】
本発明の一態様は、IGF-1産生促進用の医薬の製造における、ポリメトキシフラボノイド、又はポリメトキシフラボノイドを含むシークワーシャー抽出物の使用である。また、本発明の他の態様は、IGF-1産生促進に用いられるポリメトキシフラボノイド、又はポリメトキシフラボノイドを含むシークワーシャー抽出物である。また、本発明の他の態様は、ポリメトキシフラボノイド、又はポリメトキシフラボノイドを含むシークワーシャー抽出物を動物に投与する、IGF-1産生促進法である。これらの態様において、シークワーシャー抽出物は、０．３質量％以上のポリメトキシフラボノイドを含むシークワーシャー抽出物である。
【００５５】
本発明の薬剤中に含まれるポリメトキシフラボノイド、又はポリメトキシフラボノイドを含むシークワーシャー抽出物の量は、特に限定されず適宜選択すればよいが、例えば、ポリメトキシフラボノイドを含むシークワーシャー抽出物を用いる場合は、シークワーシャー抽出物中の固形物の量として、好ましくは０．０１質量％以上、より好ましくは０．１質量％以上、さらに好ましくは１質量％以上、特に好ましくは１０質量％以上とするのがよい。あるいは、薬剤中に含まれるシークワーシャー抽出物の量は、ポリメトキシフラボノイド含有量として、好ましくは固形分換算で０．１質量％以上、好ましくは０．３質量％以上、より好ましくは０．６質量％以上、さらに好ましくは１質量％以上、さらに好ましくは３質量％以上、特に好ましくは１０質量％以上とするのがよい。シークワーシャー抽出物の含有量の上限は特に制限されないが、シークワーシャー抽出物中の固形物の量として、例えば９５質量％以下、９０質量％以下、又は５０質量％以下、あるいは、ポリメトキシフラボノイドの量として、例えば９５質量％以下、８０質量％以下、６０質量％以下、又は４０質量％以下であってよい。
【００５６】
また、ポリメトキシフラボノイドを用いる場合は、薬剤中に含まれるポリメトキシフラボノイドの量は、固形物換算で０．００１質量％以上、好ましくは０．０１質量％以上、より好ましくは０．１質量％以上、より好ましくは０．３質量％以上、より好ましくは０．６質量％以上、更に好ましくは１質量％以上、更に好ましくは３質量％以上、特に好ましくは１０質量％以上とするのがよい。ポリメトキシフラボノイドの含有量の上限は特に制限されないが、例えば９５質量％以下、８０質量％以下、６０質量％以下、４０質量％以下、又は３０質量％以下であってよい。
【００５７】
また、ポリメトキシフラボノイドとしてノビレチンを用いる場合は、薬剤中に含まれるノビレチンの量は、固形物換算で０．０００７質量％以上、好ましくは０．０７質量％以上、より好ましくは０．２質量％以上、より好ましくは０．４質量％以上、更に好ましくは２質量%以上、特に好ましくは５質量％以上とするのがよい。ノビレチンの含有量の上限は特に制限されないが、例えば９５質量％以下、７０質量％以下、５０質量％以下、３０質量％以下、又は１０質量％以下であってよい。
【００５８】
また、ポリメトキシフラボノイドとしてタンゲレチンを用いる場合は、薬剤中に含まれるタンゲレチンの量は、固形物換算で０．０００４質量％以上、好ましくは０．０４質量％以上、より好ましくは０．１質量％以上、より好ましくは０．２質量％以上、更に好ましくは１質量％以上、特に好ましくは２質量％以上とするのがよい。タンゲレチンの含有量の上限は特に制限されないが、例えば９５質量％以下、７０質量％以下、５０質量％以下、３０質量％以下、又は１０質量％以下であってよい。
【００５９】
ノビレチン、タンゲレチン、又は他のポリメトキシフラボノイド等、複数種のポリメトキシフラボノイドを用いる場合は、薬剤中の含有量は、上記範囲に応じて適宜設定すればよい。例えば、ポリメトキシフラボノイドとしてノビレチン及びタンゲレチンの両方を用いる場合は、薬剤中に含まれるこれらの化合物の量は、少なくとも一方が上記範囲を満たしていればよいが、両方の化合物が上記範囲を満たしていることが好ましい。
【００６０】
本発明の薬剤は、IGF-1産生促進作用を有する。IGF-1は中枢神経疾患（アルツハイマー病などの認知症など）、心血管系疾患（心筋梗塞、脳梗塞、高血圧など）、代謝異常疾患（肥満、糖尿病、脂質異常症など）、消化器、内臓疾患（潰瘍、肝機能低下など）、運動器疾患（関節リウマチ、関節炎など）、皮膚化領域疾患（皮膚老化、脱毛など）、免疫賦活作用（NK細胞活性化など）など、多岐に亘り関与することが知られている（特開２０１１−１５７３４５号）。
【００６１】
本発明の薬剤により、成人の成長ホルモン分泌不全症、成長ホルモン分泌不全性低身長症、中枢神経疾患（アルツハイマー病などの認知症など）（Cell Mol Neurobiol. 2010 Apr; 30(3): 347-60、Brain Res. 2009 Dec 15; 1303: 179-94）、心血管系疾患（心筋梗塞、脳梗塞、高血圧など）（Clin Endocrinol (Oxf). 2005; 63: 470-476、Circulation. 2004; 110: 2260-2265）、代謝異常疾患（肥満、糖尿病、脂質異常症など）（Brain Res. 2009 Dec 15; 1303: 179-94）、消化器、内臓疾患（潰瘍、肝機能低下など）（J. Surg. Res., 2008; 145: 279-286）、運動器疾患（関節リウマチ、関節炎、サルコペニアなど）（Int J Biochem Cell Biol. 2005 Oct; 37(10): 1974-84）、皮膚化領域疾患（皮膚老化、脱毛など）（Ann Dermatol. 2012 Feb; 24(1): 26-31）などの改善、及び、免疫賦活（NK細胞活性化など）等に使用できる。例えば、IGF-1のレベル上昇による内臓脂肪の低下、抗老化や疾病予防、治療などへの応用としての利用が考えられる。
【００６２】
また、本発明の薬剤は、IGF-1産生促進作用を介して、たんぱく質合成促進作用を有する。本発明のIGF-1産生促進剤は、好ましい形態では、たんぱく質合成促進のために用いられる。したがって、本明細書において、「IGF-1産生促進作用」、及び「IGF-1産生促進剤」は、各々「たんぱく質合成促進作用」、及び「たんぱく質合成促進剤」と読み替えることができる。
【００６３】
本発明の薬剤は、たんぱく質合成促進作用により、スポーツパフォーマンスの向上、成長促進、ボディビル等による体格強化、新陳代謝の促進、筋肉の増強、筋萎縮からの回復等への利用が考えられる。
本発明のIGF-1産生促進剤、特にたんぱく質合成促進のために用いられるIGF-1産生促進剤は、筋萎縮抑制剤としての用途を除くものであることが好ましい。なお、前記の筋萎縮とは、筋線維数の減少および筋線維の容積の減少により筋量が減少する状態を指すものである。
【００６４】
本発明の薬剤の投与時期は特に限定されず、投与対象の状態に応じて適宜選択することが可能である。
【００６５】
本発明の薬剤の投与量は、投与対象の年齢、性別、状態、その他の条件等により適宜選択される。シークワーシャー抽出物中の固形物の量（ｍｇ）として、１日あたり体重１ｋｇあたりで、好ましくは０．０１〜５００（ｍｇ／ｋｇ／日）、より好ましくは、１〜２５０（ｍｇ／ｋｇ／日）での範囲となる量を目安とするのが良い。
【００６６】
なお、シークワーシャー抽出物中の固形物に含まれるポリメトキシフラボノイド換算量（ｍｇ）として、１日あたり体重１ｋｇあたり、０．０３（ｍｇ／ｋｇ／日）以上、好ましくは０．３（ｍｇ／ｋｇ／日）以上、より好ましくは３（ｍｇ／ｋｇ／日）以上、特に好ましくは３０（ｍｇ／ｋｇ／日）以上となる量を目安として投与することがよい。この場合、上限は１５０（ｍｇ／ｋｇ／日）以下、好ましくは１２０（ｍｇ／ｋｇ／日）以下、より好ましくは９０（ｍｇ／ｋｇ／日）以下、特に好ましくは６０（ｍｇ／ｋｇ／日）以下とするのがよい。
【００６７】
また、本発明の薬剤の投与量は、ポリメトキシフラボノイドの量（ｍｇ）として、１日あたり体重１ｋｇあたり、０．０３（ｍｇ／ｋｇ／日）以上、好ましくは０．３（ｍｇ／ｋｇ／日）以上、より好ましくは３（ｍｇ／ｋｇ／日）以上、特に好ましくは３０（ｍｇ／ｋｇ／日）以上となる量を目安とするのが良い。投与量の上限は１５０（ｍｇ／ｋｇ／日）以下、好ましくは１２０（ｍｇ／ｋｇ／日）以下、より好ましくは９０（ｍｇ／ｋｇ／日）以下、特に好ましくは６０（ｍｇ／ｋｇ／日）以下とするのがよい。
【００６８】
またノビレチンの量（ｍｇ）としては、１日あたり体重１ｋｇあたり、０．０２（ｍｇ／ｋｇ／日）以上、好ましくは０．２（ｍｇ／ｋｇ／日）以上、より好ましくは２（ｍｇ／ｋｇ／日）以上、特に好ましくは２０（ｍｇ／ｋｇ／日）以上となる量を目安とするのが良い。投与量の上限は９０（ｍｇ／ｋｇ／日）以下、好ましくは７２（ｍｇ／ｋｇ／日）以下、より好ましくは５４（ｍｇ／ｋｇ／日）以下、特に好ましくは３６（ｍｇ／ｋｇ／日）以下とするのがよい。
【００６９】
またタンゲレチンの量（ｍｇ）としては、１日あたり体重１ｋｇあたり、０．０１（ｍｇ／ｋｇ／日）以上、好ましくは０．１（ｍｇ／ｋｇ／日）以上、より好ましくは１（ｍｇ／ｋｇ／日）以上、特に好ましくは１０（ｍｇ／ｋｇ／日）以上となる量を目安とするのが良い。投与量の上限は６０（ｍｇ／ｋｇ／日）以下、好ましくは４８（ｍｇ／ｋｇ／日）以下、より好ましくは３６（ｍｇ／ｋｇ／日）以下、特に好ましくは２４（ｍｇ／ｋｇ／日）以下とするのがよい。
【００７０】
また、投与期間が長い場合、例えば１ヶ月から数ヶ月、又はそれ以上の場合は、薬剤の投与量は上記範囲の１／１０〜１／１００程度でも効果が期待できる。
投与期間にかかわらず、薬剤は１日１回又は複数回に分けて投与することができる。
【００７１】
本発明の薬剤、又はその有効成分であるシークワーシャー抽出物、若しくはポリメトキシフラボノイドは、飲食品（飲料又は食品）に含有させることもできる。
【００７２】
また、ポリメトキシフラボノイド、若しくはポリメトキシフラボノイドを含むシークワーシャー抽出物、又は本発明の薬剤を有効成分として飲食品に含有させ、IGF-1産生促進剤の一態様として、IGF-1産生促進作用を有する飲食品として加工することも可能である。
【００７３】
飲食品としては、ポリメトキシフラボノイド、又はシークワーシャー抽出物の効果を損なわず、経口摂取できるものであれば形態や性状は特に制限されず、ポリメトキシフラボノイド、又はシークワーシャー抽出物を含有させること以外は、通常飲食品に用いられる原料を用いて通常の方法によって製造することができる。
【００７４】
上記のような食品としては、液状、ペースト状、ゲル状固体、粉末等の形態を問わず、錠菓、流動食等のほか、例えば、パン、マカロニ、スパゲッティ、めん類、ケーキミックス、から揚げ粉、パン粉等の小麦粉製品；即席めん、カップめん、レトルト・調理食品、調理缶詰め、電子レンジ食品、即席スープ・シチュー、即席みそ汁・吸い物、スープ缶詰め、フリーズ・ドライ食品、その他の即席食品等の即席食品類； 農産缶詰め、果実缶詰め、ジャム・マーマレード類、漬物、煮豆類、農産乾物類、シリアル（穀物加工品）等の農産加工品； 水産缶詰め、魚肉ハム・ソーセージ、水産練り製品、水産珍味類、つくだ煮類等の水産加工品；畜産缶詰め・ペースト類、畜肉ハム・ソーセージ等の畜産加工品；加工乳、乳飲料、ヨーグルト類、乳酸菌飲料類、チーズ、アイスクリーム類、調製粉乳類、クリーム、その他の乳製品等の乳・乳製品；バター、マーガリン類、植物油等の油脂類；しょうゆ、みそ、ソース類、トマト加工調味料、みりん類、食酢類等の基礎調味料；調理ミックス、カレーの素類、たれ類、ドレッシング類、めんつゆ類、スパイス類、その他の複合調味料等の複合調味料・食品類；素材冷凍食品、半調理冷凍食品、調理済冷凍食品等の冷凍食品；キャラメル、キャンディー、チューインガム、チョコレート、クッキー、ビスケット、ケーキ、パイ、スナック、クラッカー、和菓子、米菓子、豆菓子、デザート菓子、ゼリー、その他の菓子などの菓子類；炭酸飲料、天然果汁、果汁飲料、果汁入り清涼飲料、果肉飲料、果粒入り果実飲料、野菜系飲料、豆乳、豆乳飲料、コーヒー飲料、お茶飲料、粉末飲料、濃縮飲料、スポーツ飲料、栄養飲料、アルコール飲料、その他の嗜好飲料等の嗜好飲料類、ベビーフード、ふりかけ、お茶潰けのり等のその他の市販食品等；育児用調製粉乳；経腸栄養食；機能性食品（特定保健用食品、栄養機能食品）等が挙げられる。
【００７５】
さらに、ポリメトキシフラボノイド、若しくはポリメトキシフラボノイドを含むシークワーシャー抽出物、又は本発明の薬剤を有効成分として飼料中に含有させ、IGF-1産生促進剤の一態様として、IGF-1産生促進作用を有する飼料として加工することも可能である。
飼料の形態としては特に制限されず、例えば、トウモロコシ、小麦、大麦、ライ麦、マイロ等の穀類；大豆油粕、ナタネ油粕、ヤシ油粕、アマニ油粕等の植物性油粕類；フスマ、麦糠、米糠、脱脂米糠等の糠類；コーングルテンミール、コーンジャムミール等の製造粕類；魚粉、脱脂粉乳、ホエイ、イエローグリース、タロー等の動物性飼料類；トルラ酵母、ビール酵母等の酵母類；第三リン酸カルシウム、炭酸カルシウム等の鉱物質飼料；油脂類；単体アミノ酸；糖類等を配合することにより製造できる。飼料の形態としては、例えば、ペットフード、家畜飼料、養魚飼料等が挙げられる。
【００７６】
本発明の飲食品（飼料を含む）中に含まれるポリメトキシフラボノイド、又はシークワーシャー抽出物の量は、特に限定されず適宜選択すればよいが、例えば、ポリメトキシフラボノイドを含むシークワーシャー抽出物を用いる場合は、シークワーシャー抽出物中の固形物の量として、１質量％以上とするのがよい。
あるいは、飲食品中に含まれるシークワーシャー抽出物の量は、ポリメトキシフラボノイド含有量として０．３質量％以上、好ましくは０．６質量％以上、より好ましくは３質量％以上、特に好ましくは１０質量％以上とするのが良い。シークワーシャー抽出物の含有量の上限は特に制限されないが、シークワーシャー抽出物中の固形物の量として、例えば９５質量％以下、５０質量％以下、３０質量％以下、２０質量％以下、又は１０質量％以下、あるいは、ポリメトキシフラボノイドの量として、例えば９５質量％以下、７０質量％以下、６０質量％以下、５０質量％以下、又は４０質量％以下であってよい。
【００７７】
また、ポリメトキシフラボノイドを用いる場合は、飲食品中に含まれるポリメトキシフラボノイドの量は、固形物換算で、０．３質量％以上、好ましくは０．６質量％以上、更に好ましくは３質量％以上、特に好ましくは１０質量％以上とするのが良い。ポリメトキシフラボノイドの含有量の上限は特に制限されないが、例えば９５質量％以下、７０質量％以下、６０質量％以下、５０質量％以下、又は４０質量％以下であってよい。
【００７８】
また、ノビレチンを用いる場合は、飲食品中に含まれるノビレチンの量は、固形物換算で、好ましくは０．２質量％以上、より好ましくは０．４質量％以上、更に好ましくは２質量％以上、特に好ましくは５質量％以上とするのが良い。ノビレチンの含有量の上限は特に制限されないが、例えば９５質量％以下、７０質量％以下、５０質量％以下、３０質量％以下、又は１０質量％以下であってよい。
【００７９】
また、タンゲレチンを用いる場合は、飲食品中に含まれるタンゲレチンの量は、固形物換算で、好ましくは０．１質量％以上、より好ましくは０．２質量％以上、より好ましくは１質量％以上、特に好ましくは２質量％以上とするのが良い。タンゲレチンの含有量の上限は特に制限されないが、例えば９５質量％以下、７０質量％以下、５０質量％以下、３０質量％以下、又は１０質量％以下であってよい。
【００８０】
また、本発明の飲食品とともに、乳たんぱく質（カゼイン）、乳清たんぱく質（ホエイ）、大豆たんぱく質、乳清ペプチド、分岐鎖アミノ酸（バリン、ロイシン、イソロイシン）、HMB、グルタミン、アルギニン、オルニチン、シトルリン、クレアチン、カルニチン、核酸（DNA、RNA）、ビタミンB6、ビタミンC、ビタミンD、ビタミンE、亜鉛、マグネシウム、各種ポリメトキシフラボノイド、各種ポリフェノール等の成分を摂取すると、より高いIGF-1産生促進効果が得られることが期待される。これらの成分は、本発明の飲食品に配合してもよい。
【００８１】
また、本発明の飲食品（飼料を含む）は、単回摂取あたり、シークワーシャー抽出物を、固形物換算で５ｍｇ以上、好ましくは１８ｍｇ以上、より好ましくは１８０ｍｇ以上含むことが望ましい。
【００８２】
また、本発明の飲食品（飼料を含む）は、単回摂取あたり、ポリメトキシフラボノイドを、固形物換算で１．８ｍｇ以上、好ましくは１８ｍｇ以上、より好ましくは１８０ｍｇ以上含むことが望ましい。
【００８３】
また、本発明の飲食品（飼料を含む）は、単回摂取あたり、ノビレチンを、固形物換算で１．２ｍｇ以上、好ましくは１２ｍｇ以上、より好ましくは１２０ｍｇ以上含むことが望ましい。
【００８４】
また、本発明の飲食品（飼料を含む）は、単回摂取あたり、タンゲレチンを、固形物換算で０．６ｍｇ以上、好ましくは６ｍｇ以上、より好ましくは６０ｍｇ以上含むことが望ましい。
【実施例】
【００８５】
以下に、実施例を用いて本発明をさらに具体的に説明するが、本発明はこれら実施例に限定されるものではない。【００８６】
〔実施例１〕
運動負荷条件下のマウスにおいて、シークワーシャー抽出物による、IGF-1産生促進の効果を評価した。
使用したシークワーシャー抽出物（市販品、アークレイ社製）は、シークワーシャー果実の絞りかすから含水エタノールで抽出した抽出物に包接剤としてシクロデキストリンを添加したものであり、通常の仕様では以下の組成を有する。【００８７】
固形物                      ９２質量％以上
シクロデキストリン          ５０質量％
ポリメトキシフラボノイド    １０質量％以上【００８８】
下記実験に用いたシークワーシャー抽出物（シクロデキストリンを含む）中のノビレチン含有量は６．９質量％、タンゲレチン含有量は３．４質量％であった。【００８９】
雄性C57BL/6Jマウス(10週齢)を１週間予備飼育し、３群（対照群；Cont、運動群；Run、運動＋シークワーシャー抽出物投与群；Run+SE）に群分けした(Cont群、Run+SE群 n=8、Run群 n=7)。【００９０】
Run群、Run+SE群には、２週間のトレッドミル運動馴化期間（頻度：3日/週、段階的に運動負荷増加：勾配5→20％、速度5→20m/分、時間30→60分/日）を設定し、その後、10週間の運動負荷（勾配20％、20m/分、60分/日、5日/週）を実施した。【００９１】
同時に、Cont群、Run群のマウスには、標準餌AIN-93M（日本クレア株式会社製）を、Run+SE群にはAIN-93Mにシークワーシャー抽出物を１質量％の割合で添加した飼料を、運動馴化期間を含め、12週間給餌（経口自由摂取）した。【００９２】
飼料変更後から12週後にマウスを解剖に供し、肝臓、および血清の採取を行った。肝臓中のIGF-1 mRNAの発現量、及び、血清中のIGF-1の濃度を、各々リアルタイムPCR、及びELISA法により測定した。【００９３】
採取した肝臓組織をRNA later（Ambion社製、組織用RNA安定化溶液）に浸漬し、4℃で一晩静置、その後-20℃にて保管を行った。肝臓組織からQIAGEN社のRNeasy kitを用いてmRNA抽出を行い、Applied Biosystems社製のサーマルサイキュラー(Verti)及びHigh Capacity cDNA Reverse Transcription Kit(Applied Biosystems社製)を用いて逆転写を行いcDNAを得た。このcDNAを、IGF-1 cDNAを増幅するためのプライマー(Assay ID Mm004395960_ml：Applied Biosystems社製)と、Applied Biosystems社製のリアルタイムPCR装置（7500 Fast Real-Time PCR system）及びTaqMan Gene Expression Assay(Applied Biosystems社製)を用いてリアルタイムPCRを行うことにより、IGF-1 mRNA発現量の測定を行った。
各kitに添付されているプロトコル及び各装置に登録されている一般的な条件を用いて測定を実施した。遺伝子発現量は、Cont群を１として、相対的に定量解析した。統計処理は、いずれも、Tukey検定又はTukey-kramer検定を用いて統計学的な有意差を検定した。
また、血清IGF-1濃度の測定は、RSD社製のIGF-1 ELISA kitを用い、プロトコルに従って行った。【００９４】
運動負荷条件下のマウスにおけるシークワーシャー抽出物投与による肝臓IGF-1 mRNA発現量（AU）の変動を示す結果を表１、運動負荷条件下のマウスにおけるシークワーシャー抽出物投与による血清IGF-1濃度の変動を示す結果を表２にそれぞれ示す。
表１および表２におけるContは対照群、Runは運動群、Run+SEは運動＋シークワーシャー抽出物投与群をそれぞれ表す。【００９５】
肝臓中のIGF-1mRNA発現量は、Cont群は１．００±０．２７であるのに対し、Run群では１．２３±０．３０、Run+SE群では１．６７±０．１７であり、Run+SE群はRun群に比べて１３５．７％にまで増加した（ｐ＜０．０５。ただし、S.D.は標準偏差を表す。）。このことから、ポリメトキシフラボノイドを含むシークワーシャー抽出物の摂取により、肝臓においてIGF-1 mRNAの発現が促進されることが確認された。【００９６】
【表１】
2014103410.tif 000003
【００９７】
また、血清中のIGF-1濃度は、Cont群は１０１±５６ｎｇ／ｍＬであるのに対し、Run群では９７±３８ｎｇ／ｍＬ、Run+SE群では１７９±４０ｎｇ／ｍＬであり、Run+SE群はRun群に比べて１８４％にまで増加した（ｐ＝０．０９。ただし、S.E.は標準誤差を表す。）。
以上より、ポリメトキシフラボノイドを含むシークワーシャー抽出物を摂取することにより、全身のIGF-1産生が促進されることが確認された。【００９８】
【表２】
2014103410.tif 000004
【００９９】
〔実施例２〕
２週間の尾懸垂により筋萎縮を誘導したマウスに対して、萎縮後の回復時におけるシークワーシャー抽出物、ポリメトキシフラボノイド、ノビレチン、タンゲレチンの摂取によるたんぱく質合成促進の効果を評価した。【０１００】
下記実験に用いたシークワーシャー抽出物は実施例１と同じものである。ポリメトキシフラボノイドはノビレチン６７質量％、タンゲレチン３３質量％の混合物を用いた。【０１０１】
雄性C57BL/6Jマウス(10週齢)を１週間予備飼育し、６群（対照群；Cont、尾懸垂後標準餌投与群；Fix、尾懸垂後シークワーシャー抽出物投与群；Fix+SE、尾懸垂後ポリメトキシフラボノイド投与群；Fix+PMF、尾懸垂後ノビレチン投与群；Fix+NOB、尾懸垂後タンゲレチン投与群；Fix+TAN）に群分けした（Cont群、Fix群、Fix+SE群、Fix+PMF群、Fix+NOB群、Fix+TAN群 n=8）。【０１０２】
予備飼育後、Fix群、Fix+SE群には、２週間の尾懸垂による筋萎縮誘導を行った。この期間は、３群とも標準餌AIN-93M（日本クレア株式会社製）を経口自由摂取させた。【０１０３】
尾懸垂期間終了後、Cont群、Fix群にはAIN-93Mを、Fix+SE群にはAIN-93Mにシークワーシャー抽出物を１質量％の割合で添加した飼料を、Fix+PMF群にはAIN-93Mにポリメトキシフラボノイド（ノビレチン６７質量％、タンゲレチン３３質量％の割合で混合したもの。ノビレチン、タンゲレチンはいずれも東京化成工業社製）を０．１質量％の割合で添加した飼料を、Fix+NOB群にはAIN-93Mにノビレチン（東京化成工業社製）を０．０７質量％の割合で添加した飼料、Fix+TAN群にはAIN-93Mにタンゲレチン（東京化成工業社製）を０．０４質量％の割合で添加した飼料を、それぞれ３日間給餌（経口自由摂取）した。【０１０４】
飼料変更後４日目にマウスを解剖に供し、血清IGF-1濃度、腓腹筋中のフォリスタチンmRNA発現量、腓腹筋中のIGF-1 mRNA発現量、及び腓腹筋中のp70S6K1のリン酸化（β＋γ）割合を評価した。
フォリスタチンは、TGF-βファミリー（TGF-β、アクチビン、ミオスタチン等）に結合し、その活性を調節・抑制することが知られている。特にTGF-βには細胞増殖抑制作用、アクチビンには成長ホルモンの分泌抑制作用、ミオスタチンには幹細胞から脂肪細胞への分化に作用することが報告されており、フォリスタチンがこれらの作用を阻害することにより、たんぱく質合成を促進することが考えられる。したがって、フォリスタチンmRNA発現量は、たんぱく質合成のマーカーとなる。
また、p70S6K1のリン酸化割合は、たんぱく質合成のマーカーとなる。【０１０５】
血清IGF-1濃度は実施例１と同様にして測定した。腓腹筋フォリスタチンmRNA発現量の測定は、ラットから後肢腓腹筋を摘出し、プライマーとしてAssay ID Mm00514982_ml：Applied Biosystems社製を使用した以外は実施例１と同様にして測定した。p70S6K1のリン酸化の測定は、SDS-PAGE後に、PVDF膜に転写し、一次抗体（p70S6 kinase α（C-18）：Santa Cruz Biotechnology社製）、二次抗体（ECL Anti-Rabbit IgG）を結合させて、ECL Western blotting Analysis System（GE Healthcare Life Science社製）を用いた化学発光法により測定を行った。【０１０６】
各測定結果を表３〜６に示す。
表３は、尾懸垂により筋萎縮を誘導したマウスにおける、筋萎縮回復時のシークワーシャー抽出物投与による血清IGF-1濃度の変動を示しており、表中のContは対照群、Fixは尾懸垂後、筋萎縮回復時の標準餌投与群、Fix+SEは尾懸垂後、筋萎縮回復時のシークワーシャー抽出物投与群をそれぞれ表す。
表４は、尾懸垂により筋萎縮を誘導したマウスにおける、筋萎縮回復時のポリメトキシフラボノイド投与によるフォリスタチンmRNA発現量の変動を示しており、Contは対照群、Fixは尾懸垂後、筋萎縮回復時の標準餌投与群、Fix+PMFは尾懸垂後、筋萎縮回復時のポリメトキシフラボノイド投与群をそれぞれ表す。
表５は、尾懸垂により筋萎縮を誘導したマウスにおける、筋萎縮回復時のノビレチン投与による腓腹筋中のIGF-1 mRNA発現量の変動を示しており、Contは対照群、Fixは尾懸垂後、筋萎縮回復時の標準餌投与群、Fix+NOBは尾懸垂後、筋萎縮回復時のノビレチン投与群をそれぞれ表す。
表６は、尾懸垂により筋萎縮を誘導したマウスにおける、筋萎縮回復時のタンゲレチン投与による腓腹筋中のp70S6K1のリン酸化割合の変動を示しており、Contは対照群、Fixは尾懸垂後、筋萎縮回復時の標準餌投与群、Fix+TAN：尾懸垂後、筋萎縮回復時のタンゲレチン投与群をそれぞれ表す。【０１０７】
血清中のIGF-1濃度は、Cont群は２５２±７８ｎｇ／ｍＬであるのに対し、Fix群では２９４±４２ｎｇ／ｍＬ、Fix+SE群では３２５±３４ｎｇ／ｍＬであり、Fix+SE群はFix群に比べて１１０．５％にまで増加した（表３）。このことから、萎縮からの回復過程では平常時よりもIGF-1濃度に増加がみられるが、シークワーシャー抽出物を摂取することにより、更にIGF-1濃度が上昇することが確認された。本試験では３日間の摂取であるため、Fix群とFix+SE群との間には有意差は得られなかったが、長期間の摂取を行うことにより、シークワーシャー抽出物がIGF-1産生促進作用、及びたんぱく質合成促進作用を示すことが出来ると考えられる。【０１０８】
【表３】
2014103410.tif 000005
【０１０９】
また、フォリスタチンmRNA発現量の測定結果は、Cont群は１．００±０．２７であるのに対し、Fix群は１．１０±０．２０、Fix+PMF群は１．３０±０．２１であり、Fix+PMF群のフォリスタチンmRNA発現量は、Fix群に対し１１８％にまで増加していた（表４）。このことから、萎縮からの回復過程では平常時よりもフォリスタチンmRNA発現量に増加がみられるが、ポリメトキシフラボノイドを摂取することにより、更にフォリスタチンmRNA発現量が上昇することが確認された。本試験では３日間の摂取であるため、Fix群とFix+PMF群との間には有意差は得られなかったが、長期間の摂取を行うことにより、ポリメトキシフラボノイドがフォリスタチンmRNA発現促進作用、及びたんぱく質合成促進作用を示すことが出来ると考えられる。【０１１０】
【表４】
2014103410.tif 000006
【０１１１】
腓腹筋中のIGF-1 mRNA発現量の測定結果は、Cont群は１．００±０．１３であるのに対し、Fix群は１．６４±０．１５、Fix+NOB群は１．７５±０．４０であり（表５）、Fix+NOB群のIGF-1 mRNA発現量は、Fix群に対し１０７％に増加していた。このことから、萎縮からの回復過程では平常時よりもIGF-1 mRNA発現量に増加がみられるが、ノビレチンを摂取することにより、更にIGF-1 mRNA発現量が上昇することが確認された。本試験では３日間の摂取であるため、Fix群とFix+NOB群との間には有意差は得られなかったが、長期間の摂取を行うことにより、ノビレチンがIGF-1産生促進作用、及びたんぱく質合成促進作用を示すことが出来ると考えられる。【０１１２】
【表５】
2014103410.tif 000007
【０１１３】
腓腹筋中のp70S6K1のリン酸化割合の測定結果は、Cont群は２６．４±４．８であるのに対し、Fix群は４２．８±１０．２、Fix+TAN群は４７．８±１１．８であり（表６）、Fix+TAN群のp70S6K1リン酸化割合は、Fix群に対し１１２％に増加していた。このことから、萎縮からの回復過程では平常時よりもp70S6K1リン酸化割合に増加がみられるが、タンゲレチンを摂取することにより、更にp70S6K1リン酸化割合が上昇することが確認された。本試験では３日間の摂取であるため有意差は得られなかったが、長期間の摂取を行うことにより、タンゲレチンが、たんぱく質合成促進作用を示すことが出来ると考えられる。【０１１４】
【表６】
2014103410.tif 000008
【０１１５】
〔実施例３〕
２週間のギプス固定により筋萎縮を誘導したラットにおいて、シークワーシャー抽出物摂取によるたんぱく質合成促進の効果を評価した。
下記実験に用いたシークワーシャー抽出物は実施例１と同じものである。【０１１６】
雄性SDラット(18ヵ月齢)を１週間予備飼育し、３群（対照群；Cont、後肢固定＋標準餌投与群；Fix、後肢固定＋シークワーシャー抽出物投与群；Fix+SE）に群分けした(Cont群、Fix群 n=7、Fix+SE群n=6)。【０１１７】
Cont群、Fix群のラットには、標準餌AIN-93M（日本クレア株式会社製）を、Fix+SE群にはAIN-93Mにシークワーシャー抽出物を１質量％の割合で添加した飼料を、14日間給餌（経口自由摂取）した。【０１１８】
14日間給餌後、それぞれの餌の摂取を継続し、Fix群、Fix+SE群には7日間のギプス固定処置を行い、筋萎縮を誘導した。【０１１９】
ギプス固定開始後８日目にラットを解剖に供し、右後肢腓腹筋を摘出し、p70S6K1のリン酸化割合を実施例２と同様にして測定した。【０１２０】
後肢固定により筋萎縮を誘導したラットにおけるシークワーシャー抽出物投与によるp70S6K1のリン酸化割合の変動を示す結果を表７に示す。表７におけるContは対照群、Fixは後肢固定＋標準餌投与群、Fix+SEは後肢固定＋シークワーシャー抽出物投与群をそれぞれ表す。【０１２１】
腓腹筋中のp70S6K1のリン酸化の割合は、Cont群は２６．３±１．９％であるのに対し、Fix群では２３．３±０．８％、Fix+SE群では２９．０±２．５％であり、Fix+SE群はFix群に比べて１２４．４％にまで増加した（ｐ＜０．０５）。以上より、p70S6K1のリン酸化割合によっても、シークワーシャー抽出物に、たんぱく質合成の促進作用を有することが確認された。【０１２２】
【表７】
2014103410.tif 000009
【０１２３】
〔実施例４〕ゼリー食品
以下の原料を全て水に溶解、混合した後、シクロデキストリンで包接処理したノビレチンを溶解した。溶解液を、常法に従い殺菌、充填し、以下の配合のゼリー食品(１個１００ｇ)を製造した。得られたゼリー食品１個分のノビレチンの含有量は７０ｍｇである。本食品を１日に２個、長期間摂取することで、IGF-1産生促進作用を介したたんぱく質合成促進作用が示唆される結果が得られた。【０１２４】
デキストリン（松谷化学工業社製）                  ２５．０質量％
ホエイタンパク質（森永乳業社製）                  １２．５質量％
ゲル化剤（三栄源エフ・エフ・アイ社製）            ０．３質量％
クエン酸（三栄源エフ・エフ・アイ社製）            ０．２質量％
アスコルビン酸Ｎａ（DSMニュートリション社製）     ０．１質量％
ノビレチン（東京化成工業社製）                    ０．０７質量％
シクロデキストリン（三栄源エフ・エフ・アイ社製）  ０．０７質量％
香料（三栄源エフ・エフ・アイ社製）                ０．０２質量％
ビタミンＤ（三栄源エフ・エフ・アイ社製）          ５．０×１０−７質量％
水                                                ６１．７４質量％【０１２５】
〔実施例５〕飲料
以下の原料を全て水に溶解、混合した後、シクロデキストリンで包接処理したタンゲレチンを溶解した。溶解液を、常法に従い殺菌、充填し、以下の配合の飲料（１本３５０ｍｌ）を製造した。得られた飲料1本分のタンゲレチンの含有量は２８ｍｇである。本食品を１日に２本、長期間摂取することで、IGF-1産生促進作用を介したたんぱく質合成促進作用が示唆される結果が得られた。【０１２６】
デキストリン（松谷化学工業社製）                  ７．０質量％
タンパク質加水分解物（森永乳業社製）              ０．５質量％
クエン酸（三栄源エフ・エフ・アイ社製）            ０．２質量％
アスコルビン酸Ｎａ（DSMニュートリション社製）     ０．２質量％
香料（三栄源エフ・エフ・アイ社製）                ０．０２質量％
甘味料（三栄源エフ・エフ・アイ社製）              ０．０１質量％
タンゲレチン（東京化成工業社製）                  ０．００８質量％
シクロデキストリン（三栄源エフ・エフ・アイ社製）  ０．００８質量％
水                                                ９２．０５４質量％【０１２７】
〔実施例６〕錠菓
以下の配合の錠菓を常法により打錠して、１粒２５０ｍｇの錠菓を製造した。得られた錠菓１ｇ中のシークワーシャー抽出物含有量は、６０ｍｇである。本原料に使用したシークワーシャー抽出物のポリメトキシフラボノイド含有量は１０％以上であることから、ポリメトキシフラボノイド含有量としては、錠菓１ｇあたり６ｍｇ程度である。本食品を１日１６粒、長期間摂取することで、IGF-1産生促進作用を介したたんぱく質合成促進作用が示唆される結果が得られた。【０１２８】
粉あめ（昭和産業社製）                        ８６．０質量％
シークワーシャー抽出物（アークレイ社製）      ６．０質量％
クエン酸（三栄源エフ・エフ・アイ社製）        ４．０質量％
香料（三栄源エフ・エフ・アイ社製）            ２．０質量％
乳化剤（花王社製）                            ２．０質量％【０１２９】
〔実施例７〕チュアブル錠
以下の配合のチュアブル錠を常法に従って製造して、１粒２５０ｍｇのチュアブル錠を製造した。得られたチュアブル錠１ｇ中のシークワーシャー抽出物含有量は、２００ｍｇである。本原料に使用したシークワーシャー抽出物のポリメトキシフラボノイド含有量は１０％以上であることから、ポリメトキシフラボノイド含有量としては、チュアブル錠１ｇあたり２０ｍｇ程度である。本食品を１日４粒、長期間摂取することで、IGF-1産生促進作用を介したたんぱく質合成促進作用が示唆される結果が得られた。【０１３０】
エリスリトール（三菱化学フーズ社製）          ６８．０質量％
シークワーシャー抽出物（アークレイ社製）      ２０．０質量％
クエン酸（三栄源エフ・エフ・アイ社製）        ７．０質量％
タルク（三栄源エフ・エフ・アイ社製）          ３．０質量％
香料（三栄源エフ・エフ・アイ社製）            ２．０質量％【０１３１】
〔実施例８〕経腸栄養剤（濃厚流動食）
カゼイン、難消化性デキストリンを温湯にて溶解した後、デキストリン、ミネラル混合物、ビタミン混合物、シクロデキストリンで包接したノビレチンを混合し、乳化剤とともに大豆油を加え、均質化した。溶液は、常法に従い殺菌、充填し、以下の配合の経腸栄養剤を製造した。なお、下記のミネラル混合物、ビタミン混合物は表８に示した量を混合した。得られた経腸栄養剤１０００ｍｌあたりのノビレチン含有量は４６ｍｇである。本食品を１日１０００ｍｌ、長期間摂取することで、IGF-1産生促進作用を介したたんぱく質合成促進作用が示唆される結果が得られた。【０１３２】
デキストリン（松谷化学工業社製）                    １５．０質量％
カゼインナトリウム（森永乳業社製）                  ４．０質量％
大豆油（太陽油脂社製）                              ３．０質量％
難消化性デキストリン（松谷化学工業社製）            １．０質量％
ミネラル混合物                                      ０．３質量％
乳化剤（三栄源エフ・エフ・アイ社製）                ０．０５質量％
ビタミン混合物                                      ０．０２質量％
香料（三栄源エフ・エフ・アイ社製）                  ０．０１質量％
ノビレチン（東京化成工業社製）                      ０．００４６質量％
シクロデキストリン  （三栄源エフ・エフ・アイ社製）  ０．００４６質量％
水                                                  ７６．６１０８質量％【０１３３】
【表８】
2014103410.tif 000010
【０１３４】
〔実施例９〕焼成菓子
以下の配合の焼成菓子を常法に従って製造した。得られた食品一食分(５０ｇ)のポリメトキシフラボノイドの含有量は５５ｍｇである。本食品の摂取によりたんぱく質合成促進効果が見られた。本食品を１日一食分を長期間摂取することで、IGF-1産生促進作用を介したたんぱく質合成促進作用が示唆される結果が得られた。【０１３５】
グラニュー糖（日新製糖社製）                  ３０．０質量％
小麦粉（三栄源エフ・エフ・アイ社製）          ３０．０質量％
バター（森永乳業社製）                        １５．０質量％
全卵ソース（太陽化学社製）                    １０．０質量％
ホエイペプチド（森永乳業社製）                ９．０質量％
カゼインナトリウム（タツア・ジャパン社製）    ４．５質量％
シークワーシャー抽出物（アークレイ社製）      １．１質量％
ビタミンミックス（理研ビタミン社製）          ０．２質量％
グルコン酸亜鉛（オリエンタル酵母社製）        ０．１質量％
グルコン酸銅（オリエンタル酵母社製）          ０．０９質量％
香料（長岡香料社製）                          ０．０１質量％
ビタミンＤ（理研ビタミン社製）                ５．０×１０−６質量％
【産業上の利用可能性】
【０１３６】
本発明によれば、IGF-1産生促進剤が提供される。本発明のIGF-1産生促進剤は、医薬として利用することができる。また、本発明のIGF-1産生促進剤は、シークワーシャー中に含まれる成分を有効成分としているため、安全性が高く飲食品等にも用いることができる。
【手続補正書】
【提出日】平成28年2月16日(2016.2.16)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ポリメトキシフラボノイドを有効成分として含有する、成長ホルモン分泌不全症、成長ホルモン分泌不全性低身長症、心筋梗塞、脳梗塞、潰瘍、肝機能低下、関節炎、皮膚老化、若しくは脱毛の予防及び／又は治療、並びに免疫賦活に用いられるＩＧＦ−１産生促進剤。
【請求項２】
前記ポリメトキシフラボノイドが、ノビレチン及び／又はタンゲレチンである、請求項１に記載のＩＧＦ−１産生促進剤。
【請求項３】
固形物換算で０．３質量％以上のポリメトキシフラボノイドを含むシークワーシャー抽出物を有効成分として含有する、成長ホルモン分泌不全症、成長ホルモン分泌不全性低身長症、心筋梗塞、脳梗塞、潰瘍、肝機能低下、関節炎、皮膚老化、若しくは脱毛の予防及び／又は治療、並びに免疫賦活に用いられるＩＧＦ−１産生促進剤。
【請求項４】
さらに、ポリメトキシフラボノイドを水可溶化する包接剤を含む、請求項３に記載のＩＧＦ−１産生促進剤。
【請求項５】
前記包接剤がシクロデキストリンであり、その含有量が、シークワーシャー抽出物の固形物とシクロデキストリンの合計量に対して０．１〜９５質量％である、請求項４に記載のＩＧＦ−１産生促進剤。
【請求項６】
固形物換算で０．２質量％以上のノビレチン及び／又は０．１質量％以上のタンゲレチンを含むシークワーシャー抽出物を有効成分として含有する、請求項３〜５のいずれか一項に記載のＩＧＦ−１産生促進剤。
【請求項７】
ＩＧＦ−１産生促進作用を介したたんぱく質合成促進のために用いられる請求項１〜６のいずれか一項に記載のＩＧＦ−１産生促進剤。
【請求項８】
請求項１〜７のいずれか一項に記載のＩＧＦ−１産生促進剤を、ポリメトキシフラボノイドの含有量として固形物換算で０．３質量％以上含む飲食品。
【請求項９】
請求項２又は６に記載のＩＧＦ−１産生促進剤を、ノビレチンの含有量として固形物換算で０．２質量％以上及び／又はタンゲレチンの含有量として固形物換算で０．１質量％以上含む飲食品。
【請求項１０】
成長ホルモン分泌不全症、成長ホルモン分泌不全性低身長症、心筋梗塞、脳梗塞、潰瘍、肝機能低下、関節炎、皮膚老化、若しくは脱毛の予防及び／又は治療、並びに免疫賦活に用いられるＩＧＦ−１産生促進剤の製造におけるポリメトキシフラボノイドの使用。
【請求項１１】
前記ポリメトキシフラボノイドが、ノビレチン及び／又はタンゲレチンである、請求項１０に記載の使用。
【請求項１２】
成長ホルモン分泌不全症、成長ホルモン分泌不全性低身長症、心筋梗塞、脳梗塞、潰瘍、肝機能低下、関節炎、皮膚老化、若しくは脱毛の予防及び／又は治療、並びに免疫賦活に用いられるＩＧＦ−１産生促進剤の製造における、固形物換算で０．３質量％以上のポリメトキシフラボノイドを含むシークワーシャー抽出物の使用。
【請求項１３】
ポリメトキシフラボノイドを水可溶化する包接剤とともに使用される、請求項１２に記載の使用。
【請求項１４】
前記包接剤がシクロデキストリンであり、その含有量が、シークワーシャー抽出物の固形物とシクロデキストリンの合計量に対して０．１〜９５質量％である、請求項１３に記載の使用。
【請求項１５】
成長ホルモン分泌不全症、成長ホルモン分泌不全性低身長症、心筋梗塞、脳梗塞、潰瘍、肝機能低下、関節炎、皮膚老化、若しくは脱毛の予防及び／又は治療、並びに免疫賦活に用いられるＩＧＦ−１産生促進剤の製造における、固形物換算で０．２質量％以上のノビレチン及び／又は０．１質量％以上のタンゲレチンを含むシークワーシャー抽出物の使用。
【請求項１６】
ＩＧＦ−１産生促進剤がＩＧＦ−１産生促進作用を介したたんぱく質合成促進のために用いられる請求項１０〜１５のいずれか一項に記載の使用。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１３】
【特許文献１】特開２００７−２０４３７９号
【特許文献２】特開２０１１−１６０７５７号
【特許文献３】特許第３９４６２３８号
【特許文献４】特開２０００−１６９３７４号
【特許文献５】特開２０１１−１５７３４５号
【特許文献６】特開２００９−１９６９８９号
【特許文献７】特開２００９−２６３２６２号
【特許文献８】特開２０１０−１５０１７７号
【特許文献９】国際公開２００９−０３５０５５号
【特許文献１０】特開２０１１−２４１１６２号
【特許文献１１】特開２０１２−１２１８５６号
【特許文献１２】国際公開２００６／４９２３４号
【特許文献１３】特開２０１１−３７７９８号
【特許文献１４】特開平６−７２８７０号
【特許文献１５】特開２００４−８３４１７号
【特許文献１６】特開２００１−２４０５３９号
【特許文献１７】特開２００２−６０３４０号
【特許文献１８】特開２００６−３２８０３１号
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１４】
【非特許文献１】Burnett, P.E. et al., PNAS, 95, 1432-1437(1998)
【非特許文献２】Isotani, S. et al., J. Biol. Chem., 274, 34493-34498(1999)
【非特許文献３】Gingras, A-C. et al., Genes & Dev., 15, 807-826(2001)
【非特許文献４】Fingar, D.C. and Blenis, J., Oncogene, 23, 3151-3171(2004)
【非特許文献５】Exp Cell Res., 253(1), 100-109(1999)
【非特許文献６】Partlow, L.M. and Larrabee, M.G., J. Neurochem., 18, 2101-2118(1971)
【非特許文献７】Koga, N. et al., Biol. Pharm. Bull. 30(12), 2317-2323(2007)
【国際調査報告】
2014103410.tif 000011
2014103410.tif 000012
2014103410.tif 000013
2014103410.tif 000014