(57)【要約】  本発明は、癌治療に有効な、ＡＬＫ阻害剤およびＶＥＧＦ阻害剤を組み合わせてなる、癌を治療または予防するための医薬、癌を治療または予防する方法、または腫瘍の増殖を抑制するための方法、に関する。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＡＬＫ阻害剤とＶＥＧＦ阻害剤とを組み合わせてなる、癌を治療または予防するための医薬。
【請求項２】
前記医薬が配合剤であることを特徴とする、請求項１に記載の医薬。
【請求項３】
ＡＬＫ阻害剤とＶＥＧＦ阻害剤とが別個に投与されることを特徴とする、請求項１に記載の医薬。
【請求項４】
ＡＬＫ阻害剤とＶＥＧＦ阻害剤が同時に又は順次に投与されることを特徴とする、請求項３に記載の医薬。
【請求項５】
ＡＬＫ阻害剤を有効成分として含む、ＶＥＧＦ阻害剤と併用して癌を治療または予防するための医薬。
【請求項６】
ＶＥＧＦ阻害剤と同時に投与されることを特徴とする、請求項５に記載の医薬。
【請求項７】
ＶＥＧＦ阻害剤の投与前または投与後に投与されることを特徴とする、請求項５に記載の医薬。
【請求項８】
ＶＥＧＦ阻害剤を有効成分として含む、ＡＬＫ阻害剤と併用して癌を治療または予防するための医薬。
【請求項９】
ＡＬＫ阻害剤と同時に投与されることを特徴とする、請求項８に記載の医薬。
【請求項１０】
ＡＬＫ阻害剤の投与前または投与後に投与されることを特徴とする、請求項８に記載の医薬。
【請求項１１】
ＡＬＫ阻害剤が、アレクチニブ、クリゾチニブ、およびセリチニブからなる群から選択される化合物、またはその塩であることを特徴とする、請求項１〜１０のいずれかに記載の医薬。
【請求項１２】
ＡＬＫ阻害剤が、アレクチニブまたはその塩であることを特徴とする、請求項１〜１１のいずれかに記載の医薬。
【請求項１３】
アレクチニブまたはその塩が、１日２回、１回につきフリー体に換算して２０ｍｇ、４０ｍｇ、６０ｍｇ、８０ｍｇ、１２０ｍｇ、１６０ｍｇ、２２０ｍｇ、２４０ｍｇ、３００ｍｇ、４６０ｍｇ、６００ｍｇ、７６０ｍｇ又は９００ｍｇ投与されることを特徴とする請求項１２に記載の医薬。
【請求項１４】
ＶＥＧＦ阻害剤が、ベバシズマブ、ソラフェニブ、およびスニチニブからなる群から選択されることを特徴とする、請求項１〜１３に記載の医薬。
【請求項１５】
ＶＥＧＦ阻害剤が、抗ＶＥＧＦ抗体である、請求項１〜１３のいずれかに記載の医薬。
【請求項１６】
抗ＶＥＧＦ抗体が、次のアミノ酸配列：
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧ ＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬ ＳＣＡＡＳＧＹＴＦＴ
ＮＹＧＭＮＷＶＲＱＡ ＰＧＫＧＬＥＷＶＧＷ ＩＮＴＹＴＧＥＰＴＹ
ＡＡＤＦＫＲＲＦＴＦ ＳＬＤＴＳＫＳＴＡＹ ＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤ
ＴＡＶＹＹＣＡＫＹＰ ＨＹＹＧＳＳＨＷＹＦ ＤＶＷＧＱＧＴＬＶＴ
ＶＳＳ（配列番号：１）
を含んでなる重鎖可変領域、及び次のアミノ酸配列：
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳ ＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴ ＩＴＣＳＡＳＱＤＩＳ
ＮＹＬＮＷＹＱＱＫＰ ＧＫＡＰＫＶＬＩＹＦ ＴＳＳＬＨＳＧＶＰＳ
ＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤ ＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰ ＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱ
ＹＳＴＶＰＷＴＦＧＱ ＧＴＫＶＥＩＫＲ（配列番号：２）
を含んでなる軽鎖可変領域を有する請求項１５に記載の医薬。
【請求項１７】
抗ＶＥＧＦ抗体が、1回につき、１μｇ／ｋｇから５０ｍｇ／ｋｇ投与されることを特徴とする請求項１６に記載の医薬。
【請求項１８】
抗ＶＥＧＦ抗体が、１回につき、５ｍｇ／ｋｇ、７．５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ又は１５ｍｇ／ｋｇ投与されることを特徴とする請求項１７に記載の医薬。
【請求項１９】
抗ＶＥＧＦ抗体が、毎週一回、２週毎、又は３週毎に投与される、請求項１６〜１８のいずれかに記載の医薬。
【請求項２０】
癌が、非ホジキンリンパ腫、神経芽細胞腫、炎症性筋繊維芽細胞腫、腎がんおよび肺癌からなる群より選択される、請求項１〜１９のいずれかに記載の医薬。
【請求項２１】
癌がＡＬＫ融合遺伝子陽性の癌である、請求項１〜２０のいずれかに記載の医薬。
【請求項２２】
対象に有効量のＡＬＫ阻害剤および有効量のＶＥＧＦ阻害剤を組み合わせて投与することを含む、癌を治療または予防する方法。
【請求項２３】
ＡＬＫ阻害剤とＶＥＧＦ阻害剤とが別個に投与されることを特徴とする請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
ＡＬＫ阻害剤とＶＥＧＦ阻害剤とが同時または順次に投与されることを特徴とする請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
対象に有効量のＶＥＧＦ阻害剤を投与することを含む、ＡＬＫ阻害剤による癌の治療の効果を増強させる方法。
【請求項２６】
ＡＬＫ阻害剤と同時に投与されることを特徴とする、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
ＡＬＫ阻害剤の投与前または投与後に投与されることを特徴とする請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
対象に有効量のＡＬＫ阻害剤および有効量のＶＥＧＦ阻害剤を組み合わせて投与することを含む、腫瘍の無増悪生存期間を延長させる方法。
【請求項２９】
ＡＬＫ阻害剤とＶＥＧＦ阻害剤とが別個に投与されることを特徴とする請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
ＡＬＫ阻害剤とＶＥＧＦ阻害剤とが同時または順次に投与されることを特徴とする請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
癌が、非ホジキンリンパ腫、神経芽細胞腫、炎症性筋繊維芽細胞腫、腎がんおよび肺癌からなる群より選択される、請求項２２〜３０のいずれかに記載の方法。
【請求項３２】
癌がＡＬＫ融合遺伝子陽性の癌である、請求項２２〜３０のいずれかに記載の方法。
【請求項３３】
対象に有効量のＡＬＫ阻害剤および有効量のＶＥＧＦ阻害剤を組み合わせて投与することを含む、腫瘍の増殖を抑制するための方法。
【請求項３４】
ＡＬＫ阻害剤とＶＥＧＦ阻害剤とが別個に投与されることを特徴とする請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
ＡＬＫ阻害剤とＶＥＧＦ阻害剤とが同時または順次に投与されることを特徴とする請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
腫瘍が、非ホジキンリンパ腫、神経芽細胞腫、炎症性筋繊維芽細胞腫、腎がんおよび肺癌からなる群より選択される、請求項３３〜３５のいずれかに記載の方法。
【請求項３７】
腫瘍が、ＡＬＫ融合遺伝子を有する腫瘍である、請求項３３〜３５のいずれかに記載の方法。
【請求項３８】
ＡＬＫ阻害剤が、式（Ｉ）〜（ＩＩＩ）から選択される化合物、又はその塩である、請求項２２〜３７のいずれかに記載の方法。
【化３】
2016114375.tif 000005
【請求項３９】
ＡＬＫ阻害剤が、アレクチニブ、クリゾチニブ、およびセリチニブからなる群から選択される化合物、またはその塩であることを特徴とする、請求項２２〜３７のいずれかに記載の方法。
【請求項４０】
ＡＬＫ阻害剤が、アレクチニブまたはその塩であることを特徴とする、請求項２２〜３７のいずれかに記載の方法。
【請求項４１】
アレクチニブまたはその塩が、１日２回、１回につきフリー体に換算して２０ｍｇ、４０ｍｇ、６０ｍｇ、８０ｍｇ、１２０ｍｇ、１６０ｍｇ、２２０ｍｇ、２４０ｍｇ、３００ｍｇ、４６０ｍｇ、６００ｍｇ、７６０ｍｇ又は９００ｍｇ投与されることを特徴とする請求項４０に記載の方法。
【請求項４２】
ＶＥＧＦ阻害剤が、ベバシズマブ、ソラフェニブ、またはスニチニブであることを特徴とする、請求項２２〜４１のいずれかに記載の方法。
【請求項４３】
ＶＥＧＦ阻害剤が、抗ＶＥＧＦ抗体である、請求項２２〜４１のいずれかに記載の方法。
【請求項４４】
抗ＶＥＧＦ抗体がヒト化抗体である、請求項４３に記載の方法。
【請求項４５】
抗ＶＥＧＦ抗体が、次のアミノ酸配列：
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧ ＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬ ＳＣＡＡＳＧＹＴＦＴ
ＮＹＧＭＮＷＶＲＱＡ ＰＧＫＧＬＥＷＶＧＷ ＩＮＴＹＴＧＥＰＴＹ
ＡＡＤＦＫＲＲＦＴＦ ＳＬＤＴＳＫＳＴＡＹ ＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤ
ＴＡＶＹＹＣＡＫＹＰ ＨＹＹＧＳＳＨＷＹＦ ＤＶＷＧＱＧＴＬＶＴ
ＶＳＳ（配列番号：１）
を含んでなる重鎖可変領域、及び次のアミノ酸配列：
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳ ＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴ ＩＴＣＳＡＳＱＤＩＳ
ＮＹＬＮＷＹＱＱＫＰ ＧＫＡＰＫＶＬＩＹＦ ＴＳＳＬＨＳＧＶＰＳ
ＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤ ＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰ ＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱ
ＹＳＴＶＰＷＴＦＧＱ ＧＴＫＶＥＩＫＲ（配列番号：２）
を含んでなる軽鎖可変領域を有する請求項４４に記載の方法。
【請求項４６】
抗ＶＥＧＦ抗体がベバシズマブであることを特徴とする、請求項４５に記載の方法。
【請求項４７】
抗ＶＥＧＦ抗体が、１μｇ／ｋｇから５０ｍｇ／ｋｇ投与されることを特徴とする請求項４２〜４６のいずれかに記載の方法。
【請求項４８】
抗ＶＥＧＦ抗体が、５ｍｇ／ｋｇ、７．５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ又は１５ｍｇ／ｋｇ投与されることを特徴とする請求項４７に記載の方法。
【請求項４９】
抗ＶＥＧＦ抗体が、毎週一回、２週毎、又は３週毎に投与される、請求項４７または４８に記載の方法。
【請求項５０】
（１）ＶＥＧＦ阻害剤を含有する製剤と、（２）容器、及び（３）癌を治療するために前記ＶＥＧＦ阻害剤と少なくとも一種のＡＬＫ阻害剤とを組み合わせて対象に投与することを示す指示書又はラベル、を含む製品。
【請求項５１】
（１）ＡＬＫ阻害剤を含有する製剤と、（２）容器、及び（３）癌を治療するために前記ＡＬＫ阻害剤と少なくとも一種のＶＥＧＦ阻害剤とを組み合わせて対象に投与することを示す指示書又はラベル、を含む製品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
技術分野
本発明は、癌の治療または予防に有用な、ＡＬＫ阻害剤及びＶＥＧＦ阻害剤を組み合わせてなる医薬および癌を治療または予防するための方法、ならびに製品等に関する。
【背景技術】
【０００２】
Ａｎａｐｌａｓｔｉｃ  Ｌｙｍｐｈｏｍａ  Ｋｉｎａｓｅ  （ＡＬＫ）  はインスリン受容体ファミリ−に属する受容体型チロシンキナーゼの一つである（非特許文献１、非特許文献２）。
ＡＬＫの遺伝子異常（転座、点変異および遺伝子増幅）の結果、他の遺伝子と融合した異常キナーゼの生成を引き起こし、癌化に関与することが報告されている。
日本もしくは海外にて承認を受けたＡＬＫ阻害剤として、アレセンサＴＭ（一般名：アレクチニブ塩酸塩、Ａｌｅｃｔｉｎｉｂ）、ザーコリＴＭ（一般名：クリゾチニブ、Ｃｒｉｚｏｔｉｎｉｂ）、ＺｙｋａｄｉａＴＭ（一般名：セリチニブ、Ｃｅｒｉｔｉｎｉｂ）が挙げられる。
一般的に、抗癌剤の使用において、効果の増強、適用可能な腫瘍の種類を広げるため、あるいは耐性化した癌への対応や予防のために、作用機序の異なる複数の抗癌剤を用いることが行われている。
ＡＬＫ阻害剤であるアレクチニブと他の分子標的薬との併用について報告がある。アレクチニブとエルロチニブ（ＥＧＦＲ（上皮成長因子受容体）のチロシンキナーゼ選択的阻害剤）又はクリゾチニブ（ＡＬＫ及びｃ−Ｍｅｔ（肝細胞増殖因子受容体）のチロシンキナーゼ阻害剤）とを併用した結果、アレクチニブ耐性の肺癌細胞株を移植したゼノグラフトモデルにおいて腫瘍の退縮効果が確認されたことが報告されている（非特許文献３：Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ  Ｏｃｔｏｂｅｒ  １，２０１４，７４；３７２０，ＡＡＣＲ  Ａｎｎｕａｌ  Ｍｅｅｔｉｎｇ  ２０１４；Ａｐｒｉｌ  ５−９，２０１４，Ａｂｓｔｒａｃｔ  ３７２０）。【０００３】
一方、Ｖａｓｃｕｌａｒ  ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ  ｇｒｏｗｔｈ  ｆａｃｔｏｒ（ＶＥＧＦ）は血管新生の主要な調節因子であり、ほとんどのヒト腫瘍において発現が亢進し、腫瘍の増殖・転移に関与している。ＶＥＧＦのシグナル伝達経路を遮断することで、ＶＥＧＦによる腫瘍組織での血管新生を抑制し、腫瘍の増殖を阻害する、脈管構造を正常化する、血管透過性を低下させ、腫瘍組織で亢進している間質圧を低減する、といった作用が確かめられているおり、ＶＥＧＦパスウェイ阻害剤として、アバスチンＴＭ（一般名：ベバシズマブ、ｂｅｖａｃｉｚｕｍａｂ）、ネクサバールＴＭ（一般名：ソラフェニブ、ｓｏｒａｆｅｎｉｂ）、ヴォトリエントＴＭ（一般名：パゾパニブ塩酸塩、ｐａｚｏｐａｎｉｂ  ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、スーテントＴＭ（一般名：スニチニブリンゴ酸塩、ｓｕｎｉｔｉｎｉｂ  ｍａｌａｔｅ）、インライタＴＭ（一般名：アキシチニブ、ａｘｉｔｉｎｉｂ）、スチバーガＴＭ（レゴラフェニブ水和物、ｒｅｇｏｒａｆｅｎｉｂ）、等があり、抗ガン剤として開発中のＶＥＧＦパスウェイ阻害剤は、一般名ラムシルマブ（ｒａｍｕｃｉｒｕｍａｂ）、一般名カボザンチニブマレイン酸塩（ｃａｂｏｚａｎｔｉｎｉｂ  Ｓ−ｍａｌａｔｅ）、一般名ニンテダニブエタンスルホン酸塩（ｎｉｎｔｅｄａｎｉｂ  ｅｓｙｌａｔｅ）等が抗ガン剤として販売されている。
アバスチン（ベバシズマブ）は、治癒切除不能な進行・再発の結腸・直腸癌、扁平上皮癌を除く切除不能な進行・再発の非小細胞肺癌、卵巣がん、手術不能又は再発乳癌について、特定の標準化学療法又は化学療法剤との併用を用法として、日本で承認を受けている。しかし、アバスチン（ベバシズマブ）は、ＶＥＧＦパスウェイ阻害剤以外の分子標的薬との併用については、現時点で承認を受けていないが、ＶＥＧＦパスウェイ阻害剤とＥＧＦＲのチロシンキナーゼ選択的阻害剤であるエルロチニブとの併用の効果や、ＶＥＧＦパスウェイとｃ−ＭｅｔやＨＧＦ／ｃ−Ｍｅｔパスウェイの両方を阻害することによる腫瘍の抑制効果が報告されている。（非特許文献４：Ｌａｎｃｅｔ  Ｏｎｃｏｌ  ２０１４；１５：１２３６−４４、非特許文献５：Ｃａｎｃｅｒ  Ｄｉｓｃｏｖ．２０１２  Ｍａｒｃｈ；２（３）：２７０−２８７、非特許文献６：Ｍｏｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒ．  ２０１５  Ｊａｎ；１４（１）：１０１−１１０，“Ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ  ｓｔｒａｔｅｇｙ  ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ＶＥＧＦ  ａｎｄ  ＨＧＦ／ｃ−ｍｅｔ  ｉｎ  ｈｕｍａｎ  ｒｅｎａｌ  ｃｅｌｌ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｍｏｄｅｌｓ”）。【０００４】
しかしながら、これまで、ＶＥＧＦパスウェイ阻害剤とＡＬＫ阻害剤との併用について報告する文献はない。そのうえ、ベバシズマブの投与が、併用する薬物の腫瘍への移行性を低下させる可能性が報告されており（非特許文献７：Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｌｌ  ２１，８２−９１，Ｊａｎｕａｒｙ  １７，２０１２、非特許文献８：Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．  ２０１３  Ｊｕｎ  １；７３（１１）：３３４７−５５  ”Ｂｅｖａｃｉｚｕｍａｂ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｎｏｒｍａｌｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｂｌｏｏｄ  ｖｅｓｓｅｌｓ  ｉｎ  ｔｕｍｏｒｓ  ｈａｍｐｅｒｓ  ａｎｔｉｂｏｄｙ  ｕｐｔａｋｅ．”）、血管新生の抑制が併用薬の効果を減弱する可能性がある。臨床では、ＥＧＦＲ１抗体のパニツムマブ、ベバシズマブ、化学療法剤を併用した臨床試験にて無増悪生存期間が短縮したことが報告されている（非特許文献９：Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，ｖｏｌｕｍｅ２７，ｎｏ．５，Ｆｅｂｒｕａｒｙ  １０，２００９，６７２−６８０）。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ、第１０１巻、第１３３０６−１３３１１頁、２００４年
【非特許文献２】Ｎａｔｕｒｅ、第４４８巻、第５６１−５６６頁、２００７年
【非特許文献３】Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ  Ｏｃｔｏｂｅｒ  １，２０１４，７４；３７２０，ＡＡＣＲ  Ａｎｎｕａｌ  Ｍｅｅｔｉｎｇ  ２０１４；Ａｐｒｉｌ  ５−９，２０１４，Ａｂｓｔｒａｃｔ  ３７２０
【非特許文献４】Ｌａｎｃｅｔ  Ｏｎｃｏｌ  ２０１４；１５：１２３６−４４
【非特許文献５】Ｃａｎｃｅｒ  Ｄｉｓｃｏｖ．２０１２  Ｍａｒｃｈ；２（３）：２７０−２８７
【非特許文献６】Ｍｏｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒ．  ２０１５  Ｊａｎ；１４（１）：１０１−１１０
【非特許文献７】Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｌｌ  ２１，８２−９１，Ｊａｎｕａｒｙ  １７，２０１２
【非特許文献８】Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．  ２０１３  Ｊｕｎ  １；７３（１１）：３３４７−３３５５
【非特許文献９】Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，ｖｏｌｕｍｅ２７，ｎｏ．５，Ｆｅｂｒｕａｒｙ  １０，２００９，６７２−６８０
【発明の概要】
【０００６】
このように、さらに癌の予防・治療に有用でありかつ優れた薬効を有する医薬の開発が望まれている。
本発明は、各種癌の治療や予防や、無増悪生存期間の延長に用いるため、複数の医薬を組み合わせてなる新規な医薬、及びそれを用いた癌の治療方法や製品等を提供することを課題とする。
【０００７】
本発明者等は、ＡＬＫの阻害剤とＶＥＧＦの阻害剤とを組み合わせて用いた結果、予想外にもこれらの薬剤の併用が、単剤投与よりも優れた腫瘍縮小効果を奏することを見出し、本発明を完成した。
即ち、本発明は以下の発明；
［１］
ＡＬＫ阻害剤とＶＥＧＦ阻害剤とを組み合わせてなる、癌を治療または予防するための医薬。
［２］
前記医薬が配合剤であることを特徴とする、［１］に記載の医薬。
［３］
ＡＬＫ阻害剤とＶＥＧＦ阻害剤とが別個に投与されることを特徴とする、［１］に記載の医薬。
［４］
ＡＬＫ阻害剤とＶＥＧＦ阻害剤が同時に又は順次に投与されることを特徴とする、［３］に記載の医薬。
［５］
ＡＬＫ阻害剤を有効成分として含む、ＶＥＧＦ阻害剤と併用して癌を治療または予防するための医薬。
［６］
ＶＥＧＦ阻害剤と同時に投与されることを特徴とする、［５］に記載の医薬。
［７］
ＶＥＧＦ阻害剤の投与前または投与後に投与されることを特徴とする、［５］に記載の医薬。
［８］
ＶＥＧＦ阻害剤を有効成分として含む、ＡＬＫ阻害剤と併用して癌を治療または予防するための医薬。
［９］
ＡＬＫ阻害剤と同時に投与されることを特徴とする、［８］に記載の医薬。
［１０］
ＡＬＫ阻害剤の投与前または投与後に投与されることを特徴とする、［８］に記載の医薬。
［１１］
ＡＬＫ阻害剤が、アレクチニブ、クリゾチニブ、およびセリチニブからなる群から選択される化合物、またはその塩であることを特徴とする、［１］〜［１０］のいずれかに記載の医薬。
［１２］
ＡＬＫ阻害剤が、アレクチニブまたはその塩であることを特徴とする、［１］〜［１１］のいずれかに記載の医薬。
［１３］
アレクチニブまたはその塩が、１日２回、１回につきフリー体に換算して２０ｍｇ、４０ｍｇ、６０ｍｇ、８０ｍｇ、１２０ｍｇ、１６０ｍｇ、２２０ｍｇ、２４０ｍｇ、３００ｍｇ、４６０ｍｇ、６００ｍｇ、７６０ｍｇ又は９００ｍｇ投与されることを特徴とする［１２］に記載の医薬。
［１４］
ＶＥＧＦ阻害剤が、ベバシズマブ、ソラフェニブ、およびスニチニブからなる群から選択されることを特徴とする、［１］〜［１３］に記載の医薬。
［１５］
ＶＥＧＦ阻害剤が、抗ＶＥＧＦ抗体である、［１］〜［１３］のいずれかに記載の医薬。
［１６］
抗ＶＥＧＦ抗体が、次のアミノ酸配列：
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧ ＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬ ＳＣＡＡＳＧＹＴＦＴ 
ＮＹＧＭＮＷＶＲＱＡ ＰＧＫＧＬＥＷＶＧＷ ＩＮＴＹＴＧＥＰＴＹ 
ＡＡＤＦＫＲＲＦＴＦ ＳＬＤＴＳＫＳＴＡＹ ＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤ 
ＴＡＶＹＹＣＡＫＹＰ ＨＹＹＧＳＳＨＷＹＦ ＤＶＷＧＱＧＴＬＶＴ 
ＶＳＳ（配列番号：１）
を含んでなる重鎖可変領域、及び次のアミノ酸配列：
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳ ＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴ ＩＴＣＳＡＳＱＤＩＳ 
ＮＹＬＮＷＹＱＱＫＰ ＧＫＡＰＫＶＬＩＹＦ ＴＳＳＬＨＳＧＶＰＳ 
ＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤ ＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰ ＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱ 
ＹＳＴＶＰＷＴＦＧＱ ＧＴＫＶＥＩＫＲ（配列番号：２）
を含んでなる軽鎖可変領域を有する［１５］に記載の医薬。
［１７］
抗ＶＥＧＦ抗体が、1回につき、１μｇ／ｋｇから５０ｍｇ／ｋｇ投与されることを特徴とする［１６］に記載の医薬。
［１８］
抗ＶＥＧＦ抗体が、1回につき、５ｍｇ／ｋｇ、７．５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ又は１５ｍｇ／ｋｇ投与されることを特徴とする［１７］に記載の医薬。
［１９］
抗ＶＥＧＦ抗体が、毎週一回、２週毎、又は３週毎に投与される、［１６］〜［１８］のいずれかに記載の医薬。
［２０］
癌が、非ホジキンリンパ腫、神経芽細胞腫、炎症性筋繊維芽細胞腫、腎がんおよび肺癌からなる群より選択される、［１］〜［１９］のいずれかに記載の医薬。
［２１］
癌がＡＬＫ融合遺伝子陽性の癌である、［１］〜［２０］のいずれかに記載の医薬。
［２２］
対象に有効量のＡＬＫ阻害剤および有効量のＶＥＧＦ阻害剤を組み合わせて投与することを含む、癌を治療または予防する方法。
［２３］
ＡＬＫ阻害剤とＶＥＧＦ阻害剤とが別個に投与されることを特徴とする［２２］に記載の方法。
［２４］
ＡＬＫ阻害剤とＶＥＧＦ阻害剤とが同時または順次に投与されることを特徴とする［２３］に記載の方法。
［２５］
対象に有効量のＶＥＧＦ阻害剤を投与することを含む、ＡＬＫ阻害剤による癌の治療の効果を増強させる方法。
［２６］
ＡＬＫ阻害剤と同時に投与されることを特徴とする、［２５］に記載の方法。
［２７］
ＡＬＫ阻害剤の投与前または投与後に投与されることを特徴とする［２６］に記載の方法。
［２８］
対象に有効量のＡＬＫ阻害剤および有効量のＶＥＧＦ阻害剤を組み合わせて投与することを含む、腫瘍の無増悪生存期間を延長させる方法。
［２９］
ＡＬＫ阻害剤とＶＥＧＦ阻害剤とが別個に投与されることを特徴とする［２８］に記載の方法。
［３０］
ＡＬＫ阻害剤とＶＥＧＦ阻害剤とが同時または順次に投与されることを特徴とする［２９］に記載の方法。
［３１］
癌が、非ホジキンリンパ腫、神経芽細胞腫、炎症性筋繊維芽細胞腫、腎がんおよび肺癌からなる群より選択される、［２２］〜［３０］のいずれかに記載の方法。
［３２］
癌がＡＬＫ融合遺伝子陽性の癌である、［２２］〜［３０］のいずれかに記載の方法。
［３３］
対象に有効量のＡＬＫ阻害剤および有効量のＶＥＧＦ阻害剤を組み合わせて投与することを含む、腫瘍の増殖を抑制するための方法。
［３４］
ＡＬＫ阻害剤とＶＥＧＦ阻害剤とが別個に投与されることを特徴とする［３３］に記載の方法。
［３５］
ＡＬＫ阻害剤とＶＥＧＦ阻害剤とが同時または順次に投与されることを特徴とする［３４］に記載の方法。
［３６］
腫瘍が、非ホジキンリンパ腫、神経芽細胞腫、炎症性筋繊維芽細胞腫、腎がんおよび肺癌からなる群より選択される、［３３］〜［３５］のいずれかに記載の方法。
［３７］
腫瘍が、ＡＬＫ融合遺伝子を有する腫瘍である、［３３］〜［３５］のいずれかに記載の方法。
［３８］
ＡＬＫ阻害剤が、式（Ｉ）〜（ＩＩＩ）から選択される化合物、又はその塩である、［２２］〜［３７］のいずれかに記載の方法。
【化１】
2016114375.tif 000003
［３９］
ＡＬＫ阻害剤が、アレクチニブ、クリゾチニブ、およびセリチニブからなる群から選択される化合物、またはその塩であることを特徴とする、［２２］〜［３７］のいずれかに記載の方法。
［４０］
ＡＬＫ阻害剤が、アレクチニブまたはその塩であることを特徴とする、［２２］〜［３７］に記載の方法。
［４１］
アレクチニブまたはその塩が、１日２回、１回につきフリー体に換算して２０ｍｇ、４０ｍｇ、６０ｍｇ、８０ｍｇ、１２０ｍｇ、１６０ｍｇ、２２０ｍｇ、２４０ｍｇ、３００ｍｇ、４６０ｍｇ、６００ｍｇ、７６０ｍｇ又は９００ｍｇ投与されることを特徴とする［４０］に記載の方法。
［４２］
ＶＥＧＦ阻害剤が、ベバシズマブ、ソラフェニブ、またはスニチニブであることを特徴とする、［２２］〜［４１］のいずれかに記載の方法。
［４３］
ＶＥＧＦ阻害剤が、抗ＶＥＧＦ抗体である、［２２］〜［４１］のいずれかに記載の方法。
［４４］
抗ＶＥＧＦ抗体がヒト化抗体である、［４３］に記載の方法。
［４５］
抗ＶＥＧＦ抗体が、次のアミノ酸配列：
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧ ＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬ ＳＣＡＡＳＧＹＴＦＴ 
ＮＹＧＭＮＷＶＲＱＡ ＰＧＫＧＬＥＷＶＧＷ ＩＮＴＹＴＧＥＰＴＹ 
ＡＡＤＦＫＲＲＦＴＦ ＳＬＤＴＳＫＳＴＡＹ ＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤ 
ＴＡＶＹＹＣＡＫＹＰ ＨＹＹＧＳＳＨＷＹＦ ＤＶＷＧＱＧＴＬＶＴ 
ＶＳＳ（配列番号：１）
を含んでなる重鎖可変領域、及び次のアミノ酸配列：
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳ ＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴ ＩＴＣＳＡＳＱＤＩＳ 
ＮＹＬＮＷＹＱＱＫＰ ＧＫＡＰＫＶＬＩＹＦ ＴＳＳＬＨＳＧＶＰＳ 
ＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤ ＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰ ＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱ 
ＹＳＴＶＰＷＴＦＧＱ ＧＴＫＶＥＩＫＲ（配列番号：２）
を含んでなる軽鎖可変領域を有する［４４］に記載の方法。
［４６］
抗ＶＥＧＦ抗体がベバシズマブであることを特徴とする、［４５］に記載の方法。
［４７］
抗ＶＥＧＦ抗体が、１μｇ／ｋｇから５０ｍｇ／ｋｇ投与されることを特徴とする［４２］〜［４６］のいずれかに記載の方法。
［４８］
抗ＶＥＧＦ抗体が、５ｍｇ／ｋｇ、７．５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ又は１５ｍｇ／ｋｇ投与されることを特徴とする［４７］に記載の方法。
［４９］
抗ＶＥＧＦ抗体が、毎週一回、２週毎、又は３週毎に投与される、［４７］または［４８］に記載の方法。
［５０］
（１）ＶＥＧＦ阻害剤を含有する製剤と、（２）容器、及び（３）癌を治療するために前記ＶＥＧＦ阻害剤と少なくとも一種のＡＬＫ阻害剤とを組み合わせて対象に投与することを示す指示書又はラベル、を含む製品。
［５１］
（１）ＡＬＫ阻害剤を含有する製剤と、（２）容器、及び（３）癌を治療するために前記ＡＬＫ阻害剤と少なくとも一種のＶＥＧＦ阻害剤とを組み合わせて対象に投与することを示す指示書又はラベル、を含む製品。
【図面の簡単な説明】
【０００８】
【図１】ヒトＡＬＫ融合遺伝子陽性非小細胞肺癌株ＮＣＩ−Ｈ２２２８に対する、アレクチニブと（Ａ）シスプラチン、（Ｂ）パクリタキセル、（Ｃ）ゲムシタビン、および（Ｄ）ベバシズマブの単独使用およびアレクチニブとの併用による腫瘍体積の変化を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【０００９】
本発明は、癌治療に有効な、ＡＬＫ阻害剤およびＶＥＧＦ阻害剤を組み合わせてなる、癌を治療または予防するための医薬、癌を治療または予防する方法、または腫瘍の増殖を抑制するための方法、に関する。
【００１０】
ＡＬＫ阻害剤
本発明に用いられるＡＬＫ阻害剤は、ＡＬＫの活性を直接的又は間接的に中和し、遮断し、阻害し、低減し又は妨害することが可能な物質を意味する。前記ＡＬＫの活性の例としてはチロシンキナーゼ活性が挙げられる。前記物質には、低分子化合物、抗体、アンチセンス、転写阻害剤、低分子干渉ＲＮＡ（ＳｉＲＮＡ）などが含まれる。
前記低分子化合物の例としては、ＷＯ２０１０／１４３６６４、ＷＯ２００４／０７６４１２、ＷＯ２００６／０２１８８１、ＷＯ２００８／０７３６８７に記載の化合物、またはその塩などが挙げられる。
更に具体的な例としては、アレクチニブ（化合物名：９−エチル−６，６−ジメチル−８−［４−（モルホリン−４−イル）−ピペリジン−１−イル］−１１−オキソ−６，１１−ジヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［ｂ］カルバゾール−３−カルボニトリル  一塩酸塩）、クリゾチニブ（化合物名：３−［（１Ｒ）−１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ］−５−［１−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−アミン）、およびセレチニブ（化合物名：５−クロロ−Ｎ２−（２−イソプロポキシ−５−メチル−４−ピペリジン−４−イル−フェニル）−Ｎ４−［２−（プロパン−２−スルホニル）−フェニル］−ピリミジン−２，４−ジアミンからなる群より選択される化合物またはその塩などが挙げられる。これらの化合物またはその塩は、ＷＯ２０１０／１４３６６４、ＷＯ２００４／０７６４１２、ＷＯ２００６／０２１８８１、ＷＯ２００８／０７３６８７等に記載の方法により、製造することができる。これらの化合物またはその塩には、水和物、製薬学的に許容可能な各種溶媒和物や結晶多形等も含まれる。
アレクチニブ、クリゾチニブおよびセレチニブの構造式を式（Ｉ）〜（ＩＩＩ）として以下に示す。
【化２】
2016114375.tif 000004
【００１１】
本発明で使用されるＡＬＫ阻害剤の投与経路は、経口または非経口のいずれでも好適に使用されるが、好ましくは経口投与が好適に使用される。経口投与のために使用される剤型としては、例えば、液剤、散剤、顆粒剤、錠剤、腸溶剤およびカプセル剤等の任意の剤型から適宜選択され得る。こうした剤型を有するＡＬＫ阻害剤は当業者に公知の方法で製剤化される。例えば、薬理学上許容される担体もしくは媒体、具体的には、滅菌水や生理食塩水、植物油、乳化剤、懸濁剤、界面活性剤、安定剤、香味剤、賦形剤、ベヒクル、防腐剤、結合剤などと適宜組み合わされ、一般に認められた製薬実施に要求される単位用量形態で混和された後に、凍結乾燥、打錠成型等の製剤化作業によって製剤化される。
ＡＬＫ阻害剤は、水もしくはそれ以外の薬学的に許容し得る液との無菌性溶液または懸濁液剤等の注射剤の形で、非経口的にも使用され得る。これら製剤における有効成分量は指示された範囲の適当な用量を投与し得るように適宜選択される。注射のための無菌組成物は注射用蒸留水のようなベヒクルを用いて通常の製剤実施に従って処方され得る。注射用の水溶液としては、例えば生理食塩水、ブドウ糖やその他の補助薬を含む等張液、例えばＤ−ソルビトール、Ｄ−マンノース、Ｄ−マンニトール、塩化ナトリウムが例示され、適当な溶解補助剤、例えばアルコール、具体的にはエタノール、ポリアルコール、例えばプロピレングリコール、ポリエチレングリコール、非イオン性界面活性剤、例えばポリソルベート８０（ＴＭ）、ＨＣＯ−５０と適宜併用され得る。油性液としてはゴマ油、大豆油が例示され、溶解補助剤として安息香酸ベンジル、ベンジルアルコールと併用してもよい。また、緩衝剤、例えばリン酸塩緩衝液、酢酸ナトリウム緩衝液、無痛化剤、例えば、塩酸プロカイン、安定剤、例えばベンジルアルコール、フェノール、酸化防止剤と好適に配合され得る。
本発明に係るＡＬＫ阻害剤の投与量としては、例えば、一回の投与につき体重１kgあたり０．０００１ｍｇから１０００ｍｇの範囲で投与量が選択され得る。あるいは、例えば、患者あたり０．００１ｍｇから１０００００ｍｇ／ｂｏｄｙの範囲で投与量が選択され得る。しかしながら、本発明のＡＬＫ阻害剤の投与量はこれらの投与量に制限されるものではない。
前記アレクチニブ、その塩、またはそれらの水和物のより具体的な投与量としては、１日２回、１回につきフリー体に換算して、２０ｍｇ、４０ｍｇ、６０ｍｇ、８０ｍｇ、１２０ｍｇ、１６０ｍｇ、２２０ｍｇ、２４０ｍｇ、３００ｍｇ、４６０ｍｇ、６００ｍｇ、７６０ｍｇ又は９００ｍｇがあげられる。
本発明のＡＬＫ阻害剤の投与期間は、適宜症状や副作用の程度に応じて決定され、癌が治療され又は所望の治療効果が達成されるまでの間投与することができる。具体的には、連続して７日から３年間にわたり投与してもよく、または、投与期間中に１〜１４日程度の休薬期間を設け、２日〜３ヶ月を１サイクルとして、１〜３６サイクルで投与する方法などがある。好ましくは、１４〜３０日間を１サイクルとして、３〜２４サイクルで投与する方法である。
【００１２】
ＶＥＧＦ阻害剤
本発明に用いられるＶＥＧＦ阻害剤は、ＶＥＧＦの活性を直接的に又は間接的に中和し、遮断し、阻害し、低減し又は妨害することが可能な物質を意味する。ＶＥＧＦ阻害剤は、一又は複数のＶＥＧＦレセプターへ結合することにより、ＶＥＧＦの活性を中和し、遮断し、阻害し、低減し又は妨害してもよい。ＶＥＧＦ阻害剤には、抗ＶＥＧＦ抗体とその抗原結合断片、レセプター分子及びＶＥＧＦに特異的に結合して一又は複数のレセプターへのその結合を隔絶する誘導体、抗ＶＥＧＦレセプター抗体及び抗ＶＥＧＦレセプターアンタゴニスト（例えばＶＥＧＦＲチロシンキナーゼの低分子阻害剤）が含まれる。低分子のＶＥＧＦ阻害剤の具体例としては、ソラフェニブ（ｓｏｒａｆｅｎｉｂ、化合物名：N-(4-Chloro-3-(trifluoromethyl)phenyl)-N'-(4-(2-(N-methylcarbamoyl)-4-pyridyloxy)phenyl)urea、特許文献：ＵＳ７２３５５７６）パゾパニブ（ｐａｚｏｐａｎｉｂ、化合物名：5-[[4-[(2,3-dimethyl-2H-indazol-6-yl)methylamino]pyrimidin-2-yl]amino]-2-methylbenzenesulfonamide）、スニチニブ（ｓｕｎｉｔｉｎｉｂ、化合物名：N-[2-(Diethylamino)ethyl]-5-[(Z)-(5-fluoro-2-oxo-1,2-dihydro-3H-indol-3-ylidene)methyl]-2,4-dimethyl-1H-pyrrole-3-carboxamide、特許文献：特許３６６３３８２、ＵＳ６５７３２９３、ＵＳ７１２５９０５）、アキシチニブ（ａｘｉｔｉｎｉｂ、化合物名：N-Methyl-2-({3-[(1E)-2-(pyridin-2-yl)ethen-1-yl]-1H-indazol-6-yl}sulfanyl)benzamide）、レゴラフェニブ（ｒｅｇｏｒａｆｅｎｉｂ、化合物名：4-(4-(((4-chloro-3-(trifluoromethyl)phenyl)carbamoyl}amino)-3-fluorophenoxy)-N-methylpyridine-2-carboxamide）、カボザンチニブ（ｃａｂｏｚａｎｔｉｎｉｂ、化合物名：1,1-Cyclopropanedicarboxamide, N'-[4-[(6,7-dimethoxy-4-quinolinyl)oxy]phenyl]-N-(4- fluorophenyl)-）、ニンテダニブ（ｎｉｎｔｅｄａｎｉｂ、化学名：(Z)-methyl 3-((4-(N-methyl-2-(4-methylpiperazin-1-yl)acetamido)phenylamino)(phenyl)methylene)-2-oxoindoline-6-carboxylate、ＷＯ０１／２７０８１参照）からなる群より選択される化合物、その塩、又はそれらの水和物、等があげられる。
【００１３】
本発明における「抗ＶＥＧＦ抗体」は十分な親和性と特異性をもってＶＥＧＦに結合する抗体をいう。選択される抗体は通常はＶＥＧＦに対して結合親和性を有しており、例えば抗体は１００ｎＭ−１ｐＭの間のＫｄ値でｈＶＥＧＦに結合しうる。抗体親和性は、表面プラズモン共鳴ベースアッセイ（例えばＷＯ２００５／０１２３５９に記載されたようなＢＩＡｃｏｒｅアッセイなど)；酵素結合免疫吸着アッセイ(ＥＬＩＳＡ)；及び競合アッセイ(例えばＲＩＡのもの)によって決定されうる。他の実施態様として、本発明の抗ＶＥＧＦ抗体は、ＶＥＧＦ活性が関与する疾患又は症状を標的とし、それを妨害する際の治療剤として使用することができる。また、例えば治療剤としてのその有効性を評価するために、抗体に他の生物学的な活性アッセイを施してもよい。このようなアッセイは当該分野で知られており、標的抗原と抗体の意図される用途に依存する。例として、ＨＵＶＥＣ阻害アッセイ；腫瘍細胞増殖阻害アッセイ(例えばＷＯ第８９／０６６９２号に記載のもの)；抗体依存性細胞傷害性(ＡＤＣＣ)及び補体媒介性細胞傷害性(ＣＤＣ)アッセイ(米国特許第５５００３６２号)；及びアゴニスト活性又は造血アッセイ(ＷＯ９５／２７０６２号を参照)などがある。
「抗体」なる用語は、最も広義に使用され、モノクローナル抗体（完全長又は無傷のモノクローナル抗体を含む）、ポリクローナル抗体、多価抗体、多重特異性抗体(例えば二重特異性抗体)、及びそれらが所望の生物活性を示す限り抗体断片（以下を参照）も含む。
【００１４】
本明細書において「Ｋｄ」又は「Ｋｄ値」は、一実施態様において、段階的な力価の非標識ＶＥＧＦの存在下で、最小濃度の(１２５Ｉ)-標識抗原にてＦａｂを平衡にして、抗Ｆａｂ抗体コートプレートと結合したＶＥＧＦを捕獲することによってＶＥＧＦに対するＦａｂの溶液結合親和性を測定する以下のアッセイで示されるような(Chen,等, (1999) J. Mol Biol 293:865-881)、抗体のＦａｂ型とＶＥＧＦ分子を用いて実行される放射性標識したＶＥＧＦ結合アッセイ(ＲＩＡ)で測定される。一例では、アッセイの条件を決めるために、マイクロタイタープレート(Dynex)を５μｇ／ｍｌの捕獲抗Ｆａｂ抗体(Cappel Labs)を含む５０ｍＭ炭酸ナトリウム(ｐＨ９．６)にて一晩コートし、その後２％(w/v)のウシ血清アルブミンを含むＰＢＳにて室温(およそ２３℃)で２から５時間、ブロックする。非吸着プレート(Nunc#269620)に、１００ｐＭ又は２６ｐＭの［１２５Ｉ］ＶＥＧＦ（１０９）を、段階希釈した興味あるＦａｂ、例えばＦａｂ−１２（Presta等, (1997) Cancer Res. 57: 4593-4599）と混合する。ついで、興味あるＦａｂを一晩インキュベートする；しかし、インキュベーションは確実に平衡状態に達するまで６５時間かかるかもしれない。その後、混合物を捕獲プレートに移し、室温で１時間インキュベートする。ついで、溶液を取り除き、プレートを０．１％のＴｗｅｅｎ２０を含むＰＢＳにて８回洗浄する。プレートが乾燥したら、１５０μｌ／ウェルの閃光物質(MicroScint-20; Packard)を加え、プレートをTopcountγ計測器(Packard)にて１０分間計測する。最大結合の２０％か又はそれ以下の濃度のＦａｂを選択してそれぞれ競合結合アッセイに用いる。他の実施態様によると、〜１０反応単位(ＲＵ)の固定したｈＶＥＧＦ（８−１０９）ＣＭ５チップを用いて２５℃のＢＩＡｃｏｒｅＴＭ−２０００又はＢＩＡｃｏｒｅＴＭ−３０００(BIAcore, Inc., Piscataway, NJ)にて表面プラズモン共鳴アッセイを使用してＫｄ又はＫｄ値を測定する。簡単に言うと、カルボキシメチル化デキストランバイオセンサーチップ(CM5, BIAcore Inc.)を、供給者の指示書に従ってＮ-エチル-Ｎ'-(３-ジメチルアミノプロピル)-カルボジイミド塩酸塩(ＥＤＣ)及びＮ-ヒドロキシスクシンイミド(ＮＨＳ)で活性化する。ヒトＶＥＧＦを１０ｍＭの酢酸ナトリウム(ｐＨ４．８)で５μｇ／ｍｌ(〜０．２ｕＭ)に希釈し、結合したタンパク質の反応単位(ＲＵ)がおよそ１０になるように５μｌ／分の流量で注入する。ヒトＶＥＧＦの注入後、反応していない群をブロックするために１Ｍのエタノールアミンを注入する。動態測定のために、２倍の段階希釈したＦａｂ(０．７８ｎＭから５００ｎＭ)を２５℃で、およそ２５μｌ／分の流量で０．０５％のＴｗｅｅｎ２０(ＰＢＳＴ)を含むＰＢＳに注入する。会合及び解離のセンサーグラムを同時にフィットさせることによる単純一対一ラングミュア結合モデル(simple one-to-one Langmuir binding model) (BIAcore Evaluationソフトウェアバージョン3.2)を用いて、会合速度(Ｋｏｎ)と解離速度(Ｋｏｆｆ)を算出した。平衡解離定数(Ｋｄ)をＫｏｆｆ／Ｋｏｎ比として算出した。例えば、Chen, Y.等 (1999) J. Mol Biol 293:865-881を参照。上記の表面プラスモン共鳴アッセイによる結合速度が１０６Ｍ−１Ｓ−１を上回る場合、分光計、例えば、ストップフローを備えた分光光度計(Aviv Instruments)又は撹拌キュ���ットを備えた8000シリーズSLM-Aminco分光光度計(ThermoSpectronic)で測定される、増加濃度のヒトＶＥＧＦショート型（８−１０９）又はマウスＶＥＧＦの存在下にて、ＰＢＳ(ｐＨ７．２)、２５℃の、２０ｎＭの抗ＶＥＧＦ抗体(Ｆａｂ型)の蛍光発光強度(励起＝２９５ｎｍ；発光＝３４０ｎｍ、帯域通過＝１６ｎｍ)における増加又は減少を測定する蛍光消光技術を用いて結合速度を測定することができる。
【００１５】
本発明において、抗ＶＥＧＦ抗体、又はその抗原結合断片は、モノクローナル抗体、キメラ抗体、完全なヒト抗体、又はヒト化抗体でありうる。また、抗ＶＥＧＦ抗体又はその抗原結合断片は、Ｆｃ部分、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆａｂ、又はＦｖ構造を欠く抗体でありうる。
本発明の一実施態様として、抗ＶＥＧＦ抗体は、限定しないが、ハイブリドーマＡＴＣＣ ＨＢ １０７０９により産生されるモノクローナル抗ＶＥＧＦ抗体 Ａ４．６．１と同じエピトープに結合するモノクローナル抗体；Presta等(1997) Cancer Res. 57:4593-4599 に従って産生された組換えヒト化抗ＶＥＧＦモノクローナル抗体が含まれる。別の実施態様では、抗ＶＥＧＦ抗体は、「ｒｈｕＭＡｂ ＶＥＧＦ」又は「アバスチン(登録商標)」としても知られている「ベバシズマブ(ＢＶ)」である。アバスチン(登録商標)は特定の国で市販されている。それは、そのレセプターへのヒトＶＥＧＦの結合をブロックするマウス抗ｈＶＥＧＦモノクローナル抗体Ａ．４．６．１からの、抗原結合相補性決定領域及び変異したヒトＩｇＧ１フレームワーク領域を含む。フレームワーク領域の殆どを含む、ベバシズマブのアミノ酸配列のおよそ９３％が、ヒトＩｇＧ１から誘導され、配列の約７％がマウス抗体Ａ４．６．１から誘導される。さらに、ここで使用される場合、「ベバシズマブ（BV）」なる用語は、米国、欧州及び日本から成る国の群から選択される国又は地域において同一又はバイオシミラー製品として販売承認を得るのに必要な要求を満たしている、全ての対応抗ＶＥＧＦ抗体又は抗ＶＥＧＦ抗体断片を包含する。
【００１６】
関心ある抗体が結合した抗原上のエピトープに結合する抗体をスクリーニングするために、常套的なクロスブロッキングアッセイ、例えばA Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory, Ed Harlow及びDavid Lane(1988)に記載されたものを実施することができる。
【００１７】
ベバシズマブ及び他のヒト化抗ＶＥＧＦ抗体は、２００５年２月２６日に発行された米国特許第６８８４８７９号に更に記載されている。また、ＷＯ２００５／０１２３５９号、ＷＯ２００５／０４４８５３号、及び米国特許出願第６０／９９１３０２号に記載されたような、Ｇ６又はＢ２０シリーズ抗体（例えば、Ｇ６-３１、Ｂ２０-４．１）も含まれる。このほか、米国特許第７０６０２６９号、同６５８２９５９号、同６７０３０２０号；同６０５４２９７号；ＷＯ９８／４５３３２号；ＷＯ９６／３００４６号；ＷＯ９４／１０２０２号；欧州特許第０６６６８６８Ｂ１号；米国特許出願公開第２００６００９３６０号、同２００５０１８６２０８号、同２００３０２０６８９９号、同２００３０１９０３１７号、同２００３０２０３４０９号、及び同２００５０１１２１２６号；及びPopkov等, Journal of Immunological Methods 288:149-164 (2004)に記載された抗体も含まれる。一実施態様として、上記抗体は、残基Ｆ１７、Ｍ１８、Ｄ１９、Ｙ２１、Ｙ２５、Ｑ８９、Ｉ９１、Ｋ１０１、Ｅ１０３、及びＣ１０４を含むか、又は残基Ｆ１７、Ｙ２１、Ｑ２２、Ｙ２５、Ｄ６３、Ｉ８３及びＱ８９を含む、ヒトＶＥＧＦ上の機能的エピトープに結合するものを含む。
【００１８】
前記「Ｇ６シリーズ抗体」は、ＷＯ２００５／０１２３５９の、図７、２４−２６、及び３４−３５の何れか一つのＧ６抗体又はＧ６−誘導抗体の配列から誘導された抗ＶＥＧＦ抗体である。更に、ＷＯ２００５／０４４８５３に記載の抗体も含まれる。一実施態様として、Ｇ６シリーズ抗体は、残基Ｆ１７、Ｙ２１、Ｑ２２、Ｙ２５、Ｄ６３、Ｉ８３及びＱ８９を含むヒトＶＥＧＦ上の機能的エピトープに結合する。
【００１９】
前記「Ｂ２０シリーズ抗体」は、ＷＯ２００５／０１２３５９の、図２７−２９の何れか一つのＢ２０抗体又はＢ２０誘導抗体の配列から誘導された抗ＶＥＧＦ抗体である。更に、ＷＯ２００５／０４４８５３及び米国特許出願第６０／９９１３０２号に記載の抗体も含まれる。一実施態様として、Ｂ２０シリーズ抗体は、残基Ｆ１７、Ｍ１８、Ｄ１９、Ｙ２１、Ｙ２５、Ｑ８９、Ｉ９１、Ｋ１０１、Ｅ１０３、及びＣ１０４を含むヒトＶＥＧＦ上の機能的エピトープに結合する。
【００２０】
前記「機能的エピトープ」は、抗体の結合性にエネルギー的に寄与する抗原のアミノ酸残基を意味する。抗原のエネルギー的に寄与する残基の任意の一つが変異することにより（例えば、アラニンによる野生型ＶＥＧＦの変異又はホモログ変異）、抗体の相対的親和性比（ＩＣ５０変異ＶＥＧＦ／ＩＣ５０野生型ＶＥＧＦ）が５より大となるように、抗体の結合性が乱れるであろう（ＷＯ２００５／０１２３５９号の実施例２を参照）。一実施態様では、相対的親和性比は、溶液結合性ファージディスプレイＥＬＩＳＡにより測定される。簡潔に述べると、９６-ウェルMaxisorp免疫プレート(NUNC)を、４℃で一晩、抗体のＦａｂ型で被覆し、ＰＢＳ中２μｇ／ｍｌの濃度で試験し、室温で２時間、ＰＢＳ、０．５％のＢＳＡ、及び０．０５％のトゥイーン２０(ＰＢＴ)でブロックする。ＰＢＴにおいて、ファージディスプレイｈＶＥＧＦアラニン点変異(残基８−１０９型)又は野生型ｈＶＥＧＦ(８−１０９)の連続希釈物を、室温で１５分、Ｆａｂ-コーティングされたプレート上で最初にインキュベートし、プレートをＰＢＳ、０．０５％のトゥイーン２０(ＰＢＳＴ)で洗浄する。結合したファージを、ＰＢＴにおいて１：５０００に希釈された抗Ｍ１３モノクローナル抗体西洋ワサビペルオキシダーゼ(Amersham Pharmacia)コンジュゲートで検出し、３,３',５,５'-テトラメチルベンジジン(TMB, Kirkegaard & Perry Labs, Gaithersburg, MD)基質で、約５分発現させ、１．０ＭのＨ３ＰＯ４でクエンチし、４５０ｎｍで分光光度的に読み取る。ＩＣ５０値の比率(ＩＣ５０,ａｌａ／ＩＣ５０,ｗｔ)は、結合親和性における低減倍数(相対的結合親和性)を表す。
【００２１】
非ヒト(例えばマウス)の抗体の「ヒト化」型は、非ヒト免疫グロブリンに由来する最小配列を含むキメラ抗体である。大部分において、ヒト化抗体は、レシピエントの高頻度可変領域の残基が、マウス、ラット、ウサギ又は所望の特異性、親和性及び能力を有する非ヒト霊長類のような非ヒト種(ドナー抗体)からの高頻度可変領域の残基によって置換されたヒト免疫グロブリン(レシピエント抗体)である。幾つかの例において、ヒト免疫グロブリンのフレームワーク領域(ＦＲ)残基は、対応する非ヒト残基によって置換される。更に、ヒト化抗体は、レシピエント抗体にも、もしくはドナー抗体にも見出されない残基を含んでいてもよい。これらの修飾は抗体の特性を更に洗練するために行われる。一般に、ヒト化抗体は、全てあるいは実質的に全ての高頻度可変ループが非ヒト免疫グロブリンのものに対応し、全てあるいは実質的に全てのＦＲが、ヒト免疫グロブリン配列のものである少なくとも一又は典型的には２つの可変ドメインの実質的に全てを含むであろう。また、ヒト化抗体は、場合によっては免疫グロブリン定常領域(Ｆｃ)の少なくとも一部、典型的にはヒト免疫グロブリンのものの少なくとも一部も含む。更なる詳細については、Jonesら, Nature 321:522-525(1986)；Riechmannら, Nature 332:323-329(1988)；及びPresta, Curr. Op. Struct. Biol. 2:593-596(1992)を参照。
【００２２】
その他のヒト化抗ＶＥＧＦ抗体の例として、ラムシルマブ（一般名：ｒａｍｃｉｒｕｍａｂ，販売名：ＣｙａｍｚａＴＭ、ＣＡＳ登録番号：９４７６８７−１３−０）があげられる。
【００２３】
本発明の別の実施態様では、抗ＶＥＧＦ抗体は、次のアミノ酸配列：
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧ  ＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬ  ＳＣＡＡＳＧＹＴＦＴ  
ＮＹＧＭＮＷＶＲＱＡ  ＰＧＫＧＬＥＷＶＧＷ  ＩＮＴＹＴＧＥＰＴＹ  
ＡＡＤＦＫＲＲＦＴＦ  ＳＬＤＴＳＫＳＴＡＹ  ＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤ  
ＴＡＶＹＹＣＡＫＹＰ  ＨＹＹＧＳＳＨＷＹＦ  ＤＶＷＧＱＧＴＬＶＴ  
ＶＳＳ（配列番号：１）
を含んでなる重鎖可変領域、及び次のアミノ酸配列：
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳ  ＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴ  ＩＴＣＳＡＳＱＤＩＳ  
ＮＹＬＮＷＹＱＱＫＰ  ＧＫＡＰＫＶＬＩＹＦ  ＴＳＳＬＨＳＧＶＰＳ  
ＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤ  ＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰ  ＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱ  
ＹＳＴＶＰＷＴＦＧＱ  ＧＴＫＶＥＩＫＲ（配列番号：２）
を含む軽鎖可変領域とを有する。
【００２４】
ＶＥＧＦ阻害剤は、常法に従って製剤化され（例えば、Remington's  Pharmaceutical  Science,  latest  edition,  Mack  Publishing  Company,  Easton,  U.S.A）、医薬的に許容される担体や添加物が共に含まれ得る。例えば界面活性剤、賦形剤、着色料、着香料、保存料、安定剤、緩衝剤、懸濁剤、等張化剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、流動性促進剤、矯味剤等が挙げられるが、これらに制限されず、その他常用の担体が適宜使用され得る。具体的には、トレハロース、軽質無水ケイ酸、乳糖、結晶セルロース、マンニトール、デンプン、カルメロースカルシウム、カルメロースナトリウム、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニルアセタールジエチルアミノアセテート、ポリビニルピロリドン、ゼラチン、中鎖脂肪酸トリグリセライド、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油60、白糖、カルボキシメチルセルロース、コーンスターチ、無機塩類、ポリソルベート等が好適に挙げられる。
【００２５】
医薬および治療・予防方法
本発明の１つの態様は、ＡＬＫ阻害剤及びＶＥＧＦ阻害剤を組み合わせてなる、癌を治療または予防するための医薬である。
上記態様における、「ＡＬＫ阻害剤とＶＥＧＦ阻害剤とを組み合わせてなる、癌を治療または予防するための医薬」とは、ＡＬＫ阻害剤およびＶＥＧＦ阻害剤を、癌の治療または予防において同時に、別個に、または、順次に投与するために組み合わせた医薬を意味する。本発明の医薬は、ＡＬＫ阻害剤およびＶＥＧＦ阻害剤を共に含有する配合剤の形で提供することもできる。また、ＡＬＫ阻害剤を含有する製剤とＶＥＧＦ阻害剤を含有する製剤とが別々に提供され、これらの製剤が、同時に、または順次に使用されてもよい。
本発明において、同時に投与するとは、ＡＬＫ阻害剤と、ＶＥＧＦ阻害剤とを同時期に投与して併用して用いることをいい、配合剤として投与してもよく、投与時に用時調整した混合物として投与してもよく、別形態の製剤を同時期に投与してもよい。同時に投与して用いる場合、別々の経路から投与してもよく、同一の経路から投与してもよく、投与剤型も同一であってもよく、別々であってもよい。
本発明において、ＡＬＫ阻害剤およびＶＥＧＦ阻害剤を別個に投与する場合、ＡＬＫ阻害剤とＶＥＧＦ阻害剤の投与の順番は、ＶＥＧＦ阻害剤の投与後にＡＬＫ阻害剤が投与され得るし、ＡＬＫ阻害剤とＶＥＧＦ阻害剤とが同時に投与され得るし、また、ＡＬＫ阻害剤の投与後にＶＥＧＦ阻害剤が投与され得る。
【００２６】
本発明に係るＡＬＫ阻害剤とＶＥＧＦ阻害剤が順次に投与されるとは、一方の薬剤の投与後に他方の薬剤を投与することを意味し、ＡＬＫ阻害剤とＶＥＧＦ阻害剤の投与間隔は特に限定されず、投与経路や剤型等の要因が考慮されて設定され得る。例えば、ＡＬＫ阻害剤とＶＥＧＦ阻害剤の投与間隔は０時間〜１６８時間であり、好ましくは０時間〜７２時間であり、また好ましくは０〜２４時間であり、さらに好ましくは０時間〜１２時間である。また、投与経路や剤型等の要因のほか、本発明に係るＡＬＫ阻害剤とＶＥＧＦ阻害剤の対象におけるそれぞれの残留濃度も参酌され得る。すなわち、ＶＥＧＦ阻害剤の投与前にＡＬＫ阻害剤が投与される場合には、ＶＥＧＦ阻害剤による所望の効果が得られるような、対象における当該ＡＬＫ阻害剤の残留濃度が検出される時点で、ＶＥＧＦ阻害剤が投与され得る。当該濃度は、対象から採取された試料を各種のクロマトグラフィー等の分離装置を用いた当業者において公知の分析方法で分析した結果に基づいて決定され得る。
これとは逆に、ＡＬＫ阻害剤の投与前にＶＥＧＦ阻害剤が投与される場合には、ＡＬＫ阻害剤による所望の効果が得られるような、対象におけるＶＥＧＦ阻害剤の残留濃度が検出される時点で、ＡＬＫ阻害剤が投与され得る。当該濃度は、対象から採取された試料を当業者において公知のＥＬＩＳＡ等の免疫的測定法で分析した結果に基づいて決定され得る。
【００２７】
上記の医薬において、ＡＬＫ阻害剤とＶＥＧＦ阻害剤とが別々の製剤に含有されて提供される場合には、これらの製剤の剤型は、同じ剤型であっても異なる剤型であってもよい。例えば、双方が経口剤、非経口製剤、注射剤、点滴剤、静脈内点滴剤のうちの一つであって互いに異なる剤型であってもよく、双方が経口剤、非経口製剤、注射剤、点滴剤、静脈内点滴剤のうちの一つであって同種の剤型であってもよい。また、上記の医薬には、さらに異なる一種以上の製剤を組み合わせてもよい。
【００２８】
別の観点においては、本発明は、ＡＬＫ阻害剤を有効成分として含む、ＶＥＧＦ阻害剤と併用して癌を治療または予防するための医薬を提供する。「ＡＬＫ阻害剤を有効成分として含む、ＶＥＧＦ阻害剤と併用して癌を治療または予防するための医薬」とは、ＶＥＧＦ阻害剤と併用することを条件に癌を治療または予防することに用いられる、ＡＬＫ阻害剤を有効成分として含む医薬を意味する。ＡＬＫ阻害剤を有効成分として含む本発明の医薬がＶＥＧＦ阻害剤と併用される際には、ＶＥＧＦ阻害剤と同時に投与され得るし、ＶＥＧＦ阻害剤の投与前または投与後に投与され得る。ＶＥＧＦ阻害剤の投与前または投与後にＡＬＫ阻害剤が投与される場合には、対象における当該ＶＥＧＦ阻害剤の残留濃度あるいは日本特許第4362225号などに例示されるVEGFアイソフォームの発現量を測定することにより、その投与時期が最適化され得る。当該濃度は、対象から採取された試料を当業者において公知の後述されるＥＬＩＳＡ等の免疫的測定法に基づいて決定され得る。
別の観点においては、本発明は、ＶＥＧＦ阻害剤を有効成分として含む、ＡＬＫ阻害剤と併用して癌を治療または予防するための医薬を提供する。本発明における、「ＶＥＧＦ阻害剤を有効成分として含む、ＡＬＫ阻害剤と併用して癌を治療または予防するための医薬」とは、ＡＬＫ阻害剤と併用することを条件に癌を治療または予防することに用いられる、ＶＥＧＦ阻害剤を有効成分として含む医薬を意味する。ＶＥＧＦ阻害剤を有効成分として含む医薬がＡＬＫ阻害剤と併用される際には、ＡＬＫ阻害剤と同時に投与され得るし、ＡＬＫ阻害剤の投与前または投与後に投与され得る。ＡＬＫ阻害剤の投与前または投与後にＶＥＧＦ阻害剤が投与される場合には、対象における当該ＡＬＫ阻害剤の残留濃度を測定することにより、その投与時期が最適化され得る。当該濃度は、対象から採取された試料を各種のクロマトグラフィー等の分離装置を用いた当業者において公知の分析方法に基づいて決定され得る。
上記発明は、ＡＬＫ阻害剤とＶＥＧＦ阻害剤とが共に投与または使用（以下、単に「投与」と指称される。）されることを意味するものであって、投与の順番や投与間隔等が限定されて解釈されるものでない。また、本発明のＡＬＫ阻害剤とＶＥＧＦ阻害剤とが組み合わされた製品としても使用され得る。さらに、本発明にしたがって、ＡＬＫ阻害剤とＶＥＧＦ阻害剤が併用される場合には、いずれか一方が単独で用いられる投与量よりも、所望により各々が少ない投与量で投与され得る。
【００２９】
癌腫
本発明の医薬は、白血病（急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、急性リンパ性白血病、慢性リンパ性白血病など）、悪性リンパ腫（ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫など）、脳腫瘍、神経芽細胞腫、神経膠種、甲状腺癌、骨髄異形成症候群、頭頸部癌、食道癌、胃癌、大腸癌、結腸直腸癌、乳癌、卵巣癌、肺癌、膵臓癌、肝臓癌、胆嚢癌、皮膚癌、悪性黒色種、腎癌、腎盂尿管癌、膀胱癌、子宮癌、精巣癌、前立腺癌のような種々の癌などの疾患の予防または治療に有用である。さらに本発明の化合物は、固形癌の浸潤・転移の予防または治療に有用である。
特に、本発明の医薬は、ＡＬＫ融合遺伝子陽性の癌の予防または治療に有用である。ＡＬＫ融合遺伝子陽性の癌の例としては、非ホジキンリンパ腫、神経芽細胞腫、炎症性筋繊維芽細胞腫、腎がんおよび肺癌などがあげられるが、これらに限定されない。
本発明において、「ＡＬＫ融合遺伝子陽性の」とは、ＡＬＫと他の遺伝子との融合遺伝子が存在していることをいう。前記他の融合遺伝子としては、ＥＭＬ４（echinoderm microtubule-associated protein like protein 4, GenBankＴＭアクセッション番号NM_019063）、ＴＦＧ（TRK-fused gene, GeneBank ＴＭ  アクセッション番号  NM_006070）などがあげられるが、これらに限定されない。
ＡＬＫ融合遺伝子陽性の癌を特定する方法は、ＷＯ２００８／１２７２４８、特開２００８−２９５４４４、「ＡＬＫ遺伝子検査の手引き」（日本肺癌学会バイオマーカー委員会）、等に記載されている。当該融合遺伝子を検出するためのキットとして、Vysis LSI ALK Break Apart Rearrangement Probe Kit TM（Abbott社）、ヒストファイン  ＡＬＫ  ｉＡＥＰＴＭキット（ニチレイ社）が販売されている。
【００３０】
本発明の別の態様においては、ＶＥＧＦ阻害剤を使用することにより、ＡＬＫ阻害剤による癌患者に対する治療に際して、当該ＡＬＫ阻害剤の治療効果を増強する方法が提供される。ここで、治療効果の増強とは、治療の奏功率が上昇すること、治療のために投与されるＡＬＫ阻害剤の量が低減すること、および／または、ＡＬＫ阻害剤による治療期間が短くなることをいう。また、本発明の別の態様においては、ＡＬＫ阻害剤および有効量のＶＥＧＦ阻害剤を組み合わせて投与することを含む、対象において無増悪生存期間を延長させる方法、が提供される。また、本発明の別の態様においては、ＡＬＫ阻害剤およびＶＥＧＦ阻害剤を有効成分として含む、癌を治療または予防するための医薬組成物を製造するためのＶＥＧＦ阻害剤の使用方法が提供される。
【００３１】
本発明において、ＡＬＫ阻害剤および／またはＶＥＧＦ阻害剤を有効成分として含むとは、ＡＬＫ阻害剤および／またはＶＥＧＦ阻害剤を主要な活性成分として含むという意味であって、ＡＬＫ阻害剤および／またはＶＥＧＦ阻害剤の含有率を制限するものではない。また、「治療」という用語は本発明に係る医薬が対象に投与されることによって、癌細胞が死滅またはその細胞数が減少すること、癌細胞の増殖が抑制されること、癌に起因する様々な症状が改善されることを意味するものである。また、「予防」という語は、減少した癌細胞が再度増殖することによるその数の増加を防止すること、増殖が抑制された癌細胞の再増殖を防止することを意味する。
【００３２】
本発明において、ＶＥＧＦ阻害剤の投与方法は、経口、非経口投与のいずれかによって実施され得る。特に好ましくは非経口投与による投与方法であり、係る投与方法としては具体的には、注射投与、経鼻投与、経肺投与、経皮投与などが好適に例示される。注射投与の例としては、例えば、静脈内注射、筋肉内注射、腹腔内注射、皮下注射などによって本発明の治療用抗体が全身または局部的に投与され得る。また、投与方法は、患者の年齢、症状により適宜選択され得る。投与量としては、例えば、一回の投与につき体重１kgあたり0.0001mgから1000mgの範囲で投与量が選択され得る。あるいは、例えば、患者あたり0.001から100000mg/bodyの範囲で投与量が選択され得る。しかしながら、本発明のＶＥＧＦ阻害剤の投与量はこれらの投与量に制限されるものではない。
疾患のタイプ及び重篤度に応じて、例えばベバシズマブのような抗ＶＥＧＦ抗体の好ましい用量は、限定されないが、５ｍｇ／ｋｇ、７．５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ又は１５ｍｇ／ｋｇを含む約１μｇ／ｋｇから約５０ｍｇ／ｋｇの範囲であり得、最も好ましくは約５ｍｇ／ｋｇから約１５ｍｇ／ｋｇの範囲であり得る。投与の頻度は疾患のタイプと重篤度に応じて変動する。数日又はそれ以上にわたる繰り返し投与では、症状に応じて、治療は、当該分野で知られている方法によって測定して、癌が治療され又は所望の治療効果が達成されるまで維持される。一例では、抗ＶＥＧＦ抗体は、毎週一回、２週毎、又は３週毎に、限定しないが、５ｍｇ／ｋｇ、７．５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ又は１５ｍｇ／ｋｇを含む約５ｍｇ／ｋｇから約１５ｍｇ／ｋｇの用量範囲で投与される。しかしながら、他の用量レジメンも有用であり得る。
ＶＥＧＦ阻害剤は、上記毎週毎、２週毎、又は３週毎の投与を１サイクルとして、癌が治療され又は所望の治療効果が達成されるまでの間投与することができる。具体的には１〜３６サイクルに渡り投与することができる。
【００３３】
本発明において、「無増悪生存期間(ＰＦＳ)」は、治療（又は無作為化）から最初の疾患進行又は死亡までの時間を指す。本発明の一態様では、ＰＦＳは固形腫瘍の治療効果判定基準（ＲＥＣＩＳＴ）によって評価することができる。本発明の一態様では、ＰＦＳは、進行の決定要因としてＣＡ-１２５レベルによって評価されることができる。
本発明において、「無増悪生存期間を延長させる」の具体例としては、ＡＬＫ阻害剤を単剤で投与した際の無増悪生存期間と比較して、無増悪生存期間が延長することが挙げられる。
本発明において、「対象」とは、限定しないが、本発明の医薬の投与対象となる、ヒト又は非ヒト哺乳動物、例えばウシ、ウマ、イヌ、ヒツジ、又はネコを含む哺乳動物を意味する。好ましくは、対象はヒトである。対象には患者（ヒト及び非ヒト哺乳動物を含む）が含まれる。
【００３４】
製品
本発明の別の態様として、製品が提供される。一実施態様では、製品は対象における癌を治療または予防するために提供され、（ａ）（１）ＶＥＧＦ阻害剤を含有する製剤、（２）容器、（３）対象における癌を治療するために前記ＶＥＧＦ阻害剤と少なくとも一種のＡＬＫ阻害剤とを組み合わせて対象に投与することを示す指示書又はラベル、または（ｂ）（１）ＡＬＫ阻害剤を含有する製剤、（２）容器、（３）対象における癌を治療するために前記ＡＬＫ阻害剤と少なくとも一種のＶＥＧＦ阻害剤とを組み合わせて対象に投与することを示す指示書又はラベル、を含む。
製品は、ＶＥＧＦ阻害剤またはＡＬＫ阻害剤を含有する製剤を含む容器を含む。
製品は、容器上または容器に付随したラベルまたは指示書をさらに含み得る。
本発明において「指示書」とは、製剤の使用に関する適応症、用法、投与量、投与、禁忌症および／または警告についての情報を含む、製剤の商業用パッケージ中に通常含まれる書類を意味する。「ラベル」とは、ＶＥＧＦ阻害剤またはＡＬＫ阻害剤を含有する製剤の製品名、用量、剤型、適応症等の表示を含むシート状の物品であり、容器に直接貼付されるものを意味する。
ラベルまたは指示書は、製剤の適応症、すなわち癌などの選択した疾患の治療に使用されることを示す。一実施態様では、ラベルまたは指示書は、製剤が癌を治療するために使用することができることを示す。ラベルまたは指示書はまた、製剤が他の障害を治療するために使用することができることを示し得る。
適切な容器には、例えば、ＰＴＰ、ビン、バイアル、シリンジ、ブリスターパックなどが挙げられる。容器は、ガラスまたはプラスチックなどの種々の材料から形成し得る。これらの容器が更に上記ラベルの内容等を印刷した紙製の外箱に梱包されていてもよい。
【００３５】
ＡＬＫ阻害剤とＶＥＧＦ阻害剤とを併用した場合における副作用の有無を周知の方法により確認することができる。ここで、「副作用」は、疾患の治療を受ける患者に観察される及び／又は測定される、臨床的、医学的、物理的、生理学的、及び／又は生化学的影響で、意図される治療結果の一部ではない影響を意味する。一般的に、前記影響は、治療される患者の健康状態及び／又は快適さ、治療される患者にとっての健康的危険性、及び／又は治療される患者に対する治療許容性に関して所望されるものではない。副作用の具体例としては、好中球減少、白血球減少、出血（消化管出血、肺出血、脳出血等）、高血圧、神経毒性、疲労・倦怠感、食欲減退、悪心、口内炎、脱毛症、血小板減少、尿蛋白陽性、ショック、アナフィラキシー、消化管穿孔、瘻孔、創傷治癒遅延、血栓塞栓症、高血圧性脳症、高血圧性クリーゼ、可逆性後白質脳症症候群、ネフローゼ症候群、骨髄抑制、感染症、うっ血性心不全、間質性肺炎、血栓性微小血管症、間質性肺疾患、肝機能障害、血中ビリルビン増加、味覚異常、発疹、血中クレアチニン増加、等があげられる。併用した場合において認められた副作用の頻度及びグレード等を単剤で投与した場合の頻度及びグレード等と比較することにより、併用した場合において副作用が低減されるか否かを確認することができる。
【実施例】
【００３６】
本明細書において明示的に引用される全ての特許および参考文献の内容は全て本明細書に参照として取り込まれる。
以下、本発明を実施例の記載によって具体的に説明するが本発明は当該記載によって限定して解釈されるものではない。【００３７】
実施例１
ヒトＡＬＫ融合遺伝子陽性非小細胞肺癌株ＮＣＩ−Ｈ２２２８を１匹あたり１×１０７細胞移植した重症複合型免疫不全（ＳＣＩＤ）マウスに対して、細胞を移植した後１７日目または２０日目にアレクチニブ（フリー体、３ｍｇ／ｋｇ、１日１回１５日間経口投与）をＤＮＡ架橋剤シスプラチン、微小管阻害剤パクリタキセル、ＤＮＡ合成阻害剤ゲムシタビン、および抗ヒトＶＥＧＦ抗体ベバシズマブから選択される抗癌剤と併用した。シスプラチン（５ｍｇ／ｋｇ）は週１回静脈内投与（Ｄａｙｓ１７、２４）、パクリタキセル（１２．５ｍｇ／ｋｇ）は週１回静脈内投与（Ｄａｙｓ２０，２７）、ゲムシタビン（６０ｍｇ／ｋｇ）は週２回腹腔内投与（Ｄａｙｓ１７、２１、２４、２７）、ベバシズマブ（５ｍｇ／ｋｇ）は週１回腹腔内投与（Ｄａｙｓ２０、２７）をそれぞれ行った。各投与群の腫瘍体積（平均値±標準偏差）と体重の変化率（平均値±標準偏差）を図１に示した。
なお、図１において、横軸は、細胞移植後の経過日数、縦軸は、腫瘍体積（Tumor volume）と体重の変化率（Body weight change rate）を示し、controlは溶媒投与対照群、comboは併用群を示す。
その結果、各併用群は、アレクチニブ単剤群と比較して高い抗腫瘍効果を示した。特に、血管新生を標的とするベバシズマブ単剤では投与中に腫瘍体積の増加が確認されたものの、アレクチニブとベバシズマブとの併用群では腫瘍の縮小が確認され、アレクチニブ単剤群と比較して統計学的に有意に高い抗腫瘍効果を示した（Ｐ＝０．００８）。細胞障害性抗がん剤シスプラチン、パクリタキセル、ゲムシタビン単剤では、投与中に腫瘍体積の大きな変動は認められなかった。
【図１】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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