(57)【要約】  記憶力や認知機能の向上などに有効な剤を提供する。剤を、ナリンゲニン、エリオジクチオール、５，７−ジヒドロキシクロモン、コーヒー酸、プロトカテク酸、これらの配糖体、及びこれらの塩から選択された少なくとも１種の成分（Ａ）、及びエゾウコギ成分（Ｂ）から選択された少なくとも１種の成分で構成する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ナリンゲニン、エリオジクチオール、５，７−ジヒドロキシクロモン、コーヒー酸、プロトカテク酸、これらの配糖体、及びこれらの塩から選択された少なくとも１種の成分（Ａ）又はエゾウコギ成分（Ｂ）を含み、下記の（１）、（２）及び（３）から選択された少なくとも１つの用途に使用するための剤。
（１）神経突起の修復及び／又は伸展
（２）記憶力及び／又は認知機能の向上又は改善
（３）神経疾患の予防及び／又は治療
（ただし、ナリンゲニンのみを有効成分として含み、アルツハイマー病の予防及び／又は治療のための剤を除く）
【請求項２】
成分（Ａ）が、ナリンゲニン、ナリンゲニンの配糖体、及びこれらの塩から選択された少なくとも１以上の成分を含む請求項１記載の剤。
【請求項３】
成分（Ａ）が、ナリンゲニン、ナリンギン、ナリンゲニングルクロニド、及びこれらの薬学的に許容される塩から選択された少なくとも１以上の成分を含む請求項１又は２記載の剤。
【請求項４】
成分（Ａ）を含有する成分として、骨砕補成分を含む請求項１〜３のいずれかに記載の剤。
【請求項５】
成分（Ａ）と成分（Ｂ）とを組み合わせて用いる請求項１〜４のいずれかに記載の剤。
【請求項６】
成分（Ａ）及び成分（Ｂ）を含む請求項１〜５のいずれかに記載の剤。
【請求項７】
成分（Ａ）として骨砕補エキスを含み、かつ成分（Ｂ）としてエゾウコギエキスを含み、骨砕補エキスとエゾウコギエキスとの割合が、前者／後者（重量比）＝１／０．０１〜１／１００である請求項５又は６記載の剤。
【請求項８】
さらに、ジオスゲニン類、ジヒドロキシビタミンＤ３、及びデソノミンから選択された少なくとも１つの成分（Ｃ）と組み合わせて用いる請求項１〜７のいずれかに記載の剤。
【請求項９】
成分（Ａ）及び／又は成分（Ｂ）と成分（Ｃ）との割合が、前者／後者（重量比）＝１／０．０１〜１／１００である請求項８記載の剤。
【請求項１０】
ナリンゲニン、エリオジクチオール、５，７−ジヒドロキシクロモン、コーヒー酸、プロトカテク酸、これらの配糖体、及びこれらの塩から選択された少なくとも１種の成分（Ａ）と、エゾウコギ成分（Ｂ）とを含む組成物。
【請求項１１】
成分（Ａ）が、ナリンゲニン、ナリンゲニンの配糖体、及びこれらの塩から選択された少なくとも１以上の成分を含む請求項１０記載の組成物。
【請求項１２】
成分（Ａ）が、ナリンゲニン、ナリンギン、ナリンゲニングルクロニド、及びこれらの塩から選択された少なくとも１以上の成分を含む請求項１０又は１１記載の組成物。
【請求項１３】
成分（Ａ）を含有する成分として、骨砕補成分を含む請求項１０〜１２のいずれかに記載の組成物。
【請求項１４】
成分（Ａ）として骨砕補エキスを含み、かつ成分（Ｂ）としてエゾウコギエキスを含み、骨砕補エキスとエゾウコギエキスとの割合が、前者／後者（重量比）＝１／０．０１〜１／１００である請求項１０〜１３のいずれかに記載の組成物。
【請求項１５】
さらに、ジオスゲニン類、ジヒドロキシビタミンＤ３、及びデソノミンから選択された少なくとも１つの成分（Ｃ）と組み合わせて用いる請求項１０〜１４のいずれかに記載の組成物。
【請求項１６】
成分（Ａ）及び／又は成分（Ｂ）と成分（Ｃ）との割合が、前者／後者（重量比）＝１／０．０１〜１／１００である請求項１５記載の組成物。
【請求項１７】
下記の（１）、（２）及び（３）から選択された少なくとも１つの用途に使用するための組成物である請求項１０〜１６のいずれかに記載の組成物。
（１）神経突起の修復及び／又は伸展
（２）記憶力及び／又は認知機能の向上又は改善
（３）神経疾患の予防及び／又は治療
【請求項１８】
請求項５〜１６のいずれかに記載の剤又は組成物を含有する飲食品。
【請求項１９】
サプリメント、健康食品、機能性表示食品、栄養機能食品又は特定保健用食品である請求項１８記載の飲食品。
【請求項２０】
骨砕補エキスを１〜９０重量％含む請求項１８又は１９記載の飲食品。
【請求項２１】
エゾウコギエキスを１〜９０重量％含む請求項１８〜２０のいずれかに記載の飲食品。
【請求項２２】
骨砕補エキスを１〜９０重量％、エゾウコギエキスを１〜９０重量％含み、骨砕補エキスとエゾウコギエキスとの割合が、前者／後者（重量比）＝１／０．０１〜１／１００である請求項１８〜２１のいずれに記載の飲食品。
【請求項２３】
さらに、ジオスゲニン類、ジヒドロキシビタミンＤ３、及びデソノミンから選択された少なくとも１つの成分（Ｃ）を含む請求項１８〜２２のいずれかに記載の飲食品。
【請求項２４】
成分（Ａ）及び／又は成分（Ｂ）と成分（Ｃ）との割合が、前者／後者（重量比）＝１／０．０１〜１／１００である請求項２３記載の飲食品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、神経疾患の治療、記憶力の向上、神経軸索の伸展などに有用な剤、組成物、及び食品に関する。
【背景技術】
【０００２】
ナリンゲニンは、グレープフルーツなどに含まれる成分であり、抗酸化作用などを有する成分であると考えられている。【０００３】
なお、近年、ナリンゲニンが、アルツハイマー病の治療に有効であるとの報告がなされたが（非特許文献１）、そのメカニズムや作用機序については明らかになっていない。【０００４】
また、生薬の骨砕補（コツサイホ）は、ウラボシ科ハカマウラボシの根茎であり、ナリンゲニンを含むことが知られているが、骨砕補の伝統的効能としては、接骨、止血、駆お血、消炎、筋骨の疼痛、耳鳴り、歯痛などが知られている（例えば、特許文献１）ものの、骨砕補やその有効成分と、神経回路との関係については全く知られていない。【０００５】
一方、エゾウコギは、北海道などに自生するウコギ科の植物であり、強壮作用などを有するものとして考えられている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】特開２００５−３３０２９０号公報
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】Neurochemistry International 61(2012) 1081-1093
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明の目的は、神経疾患の予防・治療、記憶力や認知機能の向上・改善などに有用な新規な剤、組成物、及び飲食品を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
アルツハイマー病、老年性痴呆、脳血管性痴呆、パーキンソン病などの神経変性疾患は、病因は異なるがいずれも神経回路網の破綻により、記憶・認知に障害を呈する症候を指す。これら有効な治療法の無い疾患に対し、既に神経回路網の障害が進行している状態からでも、神経機能を正常に近づけることのできる治療が、真に求められている。しかも患者の立場を考えると、手術を要する神経細胞移植や遺伝子治療よりは、負担の少ない投薬による治療法がより望ましい。そこで、神経細胞が障害を受けている時、あるいは受けた後からでも神経回路網を再生する薬物の開発が望まれる。【００１０】
また、筋萎縮性側索硬化症は、大脳皮質運動野の運動ニューロンと脊髄、脳幹の運動ニューロンが脱落することによって手足が動かなくなる難病であり、有効な治療法は存在しない。さらに、大脳皮質運動野の運動ニューロンは、脳出血、脳梗塞、脳腫瘍、脳外傷などによっても障害を受け、身体の麻痺に繋がる。また、外傷性の脊髄損傷では、脊髄の運動ニューロンが障害を受けることにより四肢麻痺が生じる。さらに、多発性脳梗塞は、自己免疫の異常活性化によっておこる中枢神経の脱髄疾患であるが、病態の進行に伴って軸索の脱落が生じ、それが神経回路網の不可逆的な機能不全につながる。いずれの場合も神経回路網の破綻による機能障害であるが、生き残った神経細胞を賦活化して再び神経回路網を形成させることが出来れば、機能の回復が期待できる。【００１１】
本発明者は、上記のような事情に鑑み、変性して機能不全になっている脳内の神経軸索の萎縮・変性を改善させる優れた活性を示す成分を生薬等に求め、その作用機序を探ることで、従来の神経変性疾患の病態解析からでは予想できないような、新たな組成物を見出すことができるという考えの下、研究を進めてきた。【００１２】
その結果、ナリンゲニン等の特定の成分［さらには、このような特定の成分を含む生薬成分（骨砕補成分など）］やエゾウコギ成分が、神経突起の修復作用や記憶障害の改善に有効であることを見出した。そして、このような機能は、神経疾患の予防・治療にもつながるため、これらのことから、前記特定の成分やエゾウコギ成分（特にこれらを組み合わせた成分）が、神経疾患の予防・治療用途、記憶力や認知機能の改善用途、神経突起の修復・伸展用途などに有効であるという知見を得、この知見をもとにさらなる検討を重ね、本発明を完成した。【００１３】
すなわち、本発明の剤は、ナリンゲニン、エリオジクチオール、５，７−ジヒドロキシクロモン、コーヒー酸、プロトカテク酸、これらの配糖体、及びこれらの塩から選択された少なくとも１種の成分（Ａ）又はエゾウコギ成分（Ｂ）を含む。【００１４】
このような本発明の剤は、特に、下記の（１）、（２）及び（３）から選択された少なくとも１つの用途に使用するための剤であってもよい。
（１）神経突起の修復及び／又は伸展（成長）
（２）記憶力及び／又は認知機能の向上又は改善
（３）神経疾患の予防及び／又は治療【００１５】
なお、このような本発明の剤には、通常、ナリンゲニンのみを有効成分として含み、アルツハイマー病の予防及び／又は治療のための剤を含まない場合が多い。【００１６】
本発明の剤において、成分（Ａ）は、例えば、ナリンゲニン、ナリンゲニンの配糖体（例えば、ナリンギン、ナリンゲニングルクロニド）、及びこれらの塩から選択された少なくとも１以上の成分を含んでいてもよい。【００１７】
また、本発明の剤は、成分（Ａ）を含有する成分として、骨砕補成分（骨砕補エキスなど）を含んでいてもよい。【００１８】
本発明の剤は、成分（Ａ）と成分（Ｂ）とを組み合わせて用いてもよく、特に、成分（Ａ）及び成分（Ｂ）を含んでいてもよい。【００１９】
このような組み合わせる態様において、本発明の剤は、成分（Ａ）として骨砕補エキスを含み、かつ成分（Ｂ）としてエゾウコギエキスを含み、骨砕補エキスとエゾウコギエキスとの割合が、前者／後者（重量比）＝１／０．０１〜１／１００程度である剤であってもよい。【００２０】
また、本発明の剤は、さらに、ジオスゲニン類（ジオスゲニン、ジオシンなど）、ジヒドロキシビタミンＤ３、及びデソノミンから選択された少なくとも１つの成分（Ｃ）を組み合わせてもよい。このような組み合わせる態様において、成分（Ｃ）は、成分（Ａ）と成分（Ｂ）と別の剤としてもよく、成分（Ａ）と成分（Ｂ）とを含む剤（合剤）としてもよい。
このような剤において、成分（Ａ）及び／又は成分（Ｂ）と成分（Ｃ）との割合は、前者／後者（重量比）＝１／０．０１〜１／１００程度であってもよい。【００２１】
本発明には、ナリンゲニン、エリオジクチオール、５，７−ジヒドロキシクロモン、コーヒー酸、プロトカテク酸、これらの配糖体、及びこれらの塩から選択された少なくとも１種の成分（Ａ）と、エゾウコギ成分（Ｂ）とを含む組成物も含まれる。このような組成物は、医薬組成物であってもよい。【００２２】
このような組成物において、成分（Ａ）は、例えば、ナリンゲニン、ナリンゲニンの配糖体（例えば、ナリンギン、ナリンゲニングルクロニド）、及びこれらの塩から選択された少なくとも１以上の成分を含んでいてもよい。【００２３】
また、本発明の組成物は、成分（Ａ）を含有する成分として、骨砕補成分（骨砕補エキスなど）を含んでいてもよい。代表的な本発明の組成物には、成分（Ａ）として骨砕補エキスを含み、かつ成分（Ｂ）としてエゾウコギエキスを含み、骨砕補エキスとエゾウコギエキスとの割合が、前者／後者（重量比）＝１／０．０１〜１／１００である組成物などが含まれる。【００２４】
また、本発明の組成物は、さらに、ジオスゲニン類（ジオスゲニン、ジオシンなど）、ジヒドロキシビタミンＤ３、及びデソノミンから選択された少なくとも１つの成分（Ｃ）を組み合わせてもよい。このような組み合わせる態様において、成分（Ｃ）は、成分（Ａ）と成分（Ｂ）と別の組成物としてもよく、成分（Ａ）と成分（Ｂ）とを含む組成物としてもよい。
このような組成物において、成分（Ａ）及び／又は成分（Ｂ）と成分（Ｃ）との割合は、前者／後者（重量比）＝１／０．０１〜１／１００程度であってもよい。【００２５】
本発明の組成物は、特に、下記の（１）、（２）及び（３）から選択された少なくとも１つの用途に使用するための組成物であってもよい。
（１）神経突起の修復及び／又は伸展（成長）
（２）記憶力及び／又は認知機能の向上又は改善
（３）神経疾患の予防及び／又は治療【００２６】
本発明には、前記剤（特に、成分（Ａ）と成分（Ｂ）とを組み合わせた剤）又は本発明の組成物を含有する飲食品も含まれる。【００２７】
このような飲食品は、サプリメント、健康食品、機能性表示食品、栄養機能食品又は特定保健用食品であってもよい。【００２８】
また、本発明の飲食品は、骨砕補エキスを１〜９０重量％含む飲食品であってもよく、エゾウコギエキスを１〜９０重量％含む飲食品であってもよい。【００２９】
代表的な本発明の飲食品には、骨砕補エキスを１〜９０重量％、エゾウコギエキスを１〜９０重量％含み、骨砕補エキスとエゾウコギエキスとの割合が、前者／後者（重量比）＝１／０．０１〜１／１００である飲食品などが含まれる。【００３０】
このような飲食品は、ジオスゲニン類（ジオスゲニン、ジオシンなど）、ジヒドロキシビタミンＤ３、及びデソノミンから選択された少なくとも１つの成分（Ｃ）を含んでいてもよい。このような飲食品において、成分（Ｃ）の割合は、例えば、１〜９０重量％程度であってもよい。
また、このような飲食品において、成分（Ａ）及び／又は成分（Ｂ）と成分（Ｃ）との割合は、前者／後者（重量比）＝１／０．０１〜１／１００程度であってもよい。
【発明の効果】
【００３１】
本発明によれば、神経回路網を再構築及び／又は賦活できる。このような再構築や賦活は、通常、神経突起（軸索、樹状突起など）の修復及び／又は伸長（伸展）を伴う場合が多い。そのため、本発明の剤や組成物は、認知記憶機能の向上又は改善（亢進）をはじめ、軸索や樹状突起の変性や萎縮等を要因とする種々の神経疾患の予防、治療又は改善に有効である。【００３２】
また、本発明の剤や組成物は、認知機能における記憶力の向上が認められることから、神経疾患にまで至っているか否かにかかわらず、記憶力の向上や改善を目的とした飲食品の配合成分などとしても有用である。
【図面の簡単な説明】
【００３３】
【図１】図１は、正常大脳皮質神経細胞に対する骨砕補エキスおよび骨砕補成分による軸索伸展作用を示す図である。
【図２】図２は、大脳皮質神経細胞におけるＡβ（２５−３５）誘発の軸索萎縮に対して、骨砕補成分を後から処置した場合の軸索再伸展作用を示す図である。
【図３】図３は、骨砕補エキスを３１日間投与した５ＸＦＡＤマウスの前頭前皮質におけるアミロイドプラークの面積を示す図である。
【図４】図４は、骨砕補エキスを３１日間投与した５ＸＦＡＤマウスの前頭前皮質における変性した軸索終末部の面積を示す図である。
【図５】図５は、骨砕補エキスを３１日間投与した５ＸＦＡＤマウスの嗅周囲皮質におけるアミロイドプラークの面積を示す図である。
【図６】図６は、骨砕補エキスを３１日間投与した５ＸＦＡＤマウスの嗅周囲皮質における変性した軸索終末部の面積を示す図である。
【図７】図７は、骨砕補エキスを３１日間投与した５ＸＦＡＤマウスの海馬ＣＡ１領域におけるアミロイドプラークの面積を示す図である。
【図８】図８は、骨砕補エキスを３１日間投与した５ＸＦＡＤマウスの海馬ＣＡ１領域における変性した軸索終末部の面積を示す図である。
【図９】図９は、骨砕補エキスを３１日間投与した５ＸＦＡＤマウスの海馬歯状回領域におけるアミロイドプラークの面積を示す図である。
【図１０】図１０は、骨砕補エキスを３１日間投与した５ＸＦＡＤマウスの海馬歯状回領域における変性した軸索終末部の面積を示す図である。
【図１１】図１１は、骨砕補エキスを２２日間投与した５ＸＦＡＤマウスの大脳皮質におけるＣＲＭＰ２の５１４番アミノ酸のスレオニンのリン酸化のレベルを示す図である。
【図１２】図１２は、大脳皮質神経細胞におけるＡβ（２５−３５）誘発の軸索萎縮に対して、骨砕補エキスの分画を後から処置した場合の軸索再伸展作用を示す図である。
【図１３】図１３は、骨砕補エキスのｎ−ブタノール画分のＬＣ−ＭＳのチャートを示す図である。
【図１４】図１４は、大脳皮質神経細胞におけるＡβ（２５−３５）誘発の軸索萎縮に対して、骨砕補エキスに含まれる化合物を後から処置した場合の軸索再伸展作用を示す図である。
【図１５】図１５は、骨砕補エキス、またはエゾウコギ葉エキス、または骨砕補エキスとエゾウコギ葉エキスの合剤を１５日間投与した５ＸＦＡＤマウスにおける物体認知記憶試験結果を示す図である。
【図１６】図１６は、エゾウコギ葉エキスを２７日間投与した正常マウスにおける物体認知記憶試験結果を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００３４】
＜剤・組成物＞
本発明の剤又は組成物は、特定の成分（Ａ）又はエゾウコギ成分（Ｂ）を含む。
【００３５】
このような本発明の剤又は組成物（さらには飲食品）は、神経回路網の再構築及び／又は賦活に有用である。
【００３６】
具体的には、本発明の剤又は組成物は、神経突起［特に萎縮又は欠損した神経突起（軸索や樹状突起）］の修復や伸展（伸長）機能を有する場合が多い。
また、本発明の剤又は組成物は、このような機能に付随してか、記憶力及び／又は認知機能の向上又は改善効果や、神経疾患の予防及び／又は治療効果を備えている場合が多い。
【００３７】
そのため、本発明の剤又は組成物は、下記（１）、（２）、及び（３）から選択された少なくとも１つの用途に好適に使用してもよい。
（１）神経突起の修復及び／又は伸展（成長）
（２）記憶力及び／又は認知機能［特に、神経突起（軸索や樹状突起）の萎縮又は欠損に伴って低下した記憶力及び／又は認知機能］の向上又は改善
（３）神経疾患［特に神経突起（軸索や樹状突起）の萎縮又は欠損に伴う神経疾患］の予防及び／又は治療
【００３８】
上記（３）において、神経疾患としては、外傷性神経疾患であっても、神経変性疾患であってもよく、例えば、アルツハイマー病、認知症（非アルツハイマー型認知症、例えば、老年性認知症、脳血管性認知症、ピック病、前頭側頭型認知症、レビー小体型認知症、血管性認知症など）、パーキンソン病、ハンチントン病、脳挫傷、脊髄損傷、筋萎縮性側索硬化症、多発性脳梗塞などが挙げられる。
【００３９】
本発明の剤又は組成物は、これらのうち、１又は２以上の神経疾患を予防又は治療してもよい。
【００４０】
［成分（Ａ）］
成分（Ａ）は、ナリンゲニン、エリオジクチオール、５，７−ジヒドロキシクロモン、コーヒー酸、プロトカテク酸、これらの配糖体［又はグリコシド（Ｏ−グリコシド）］、及びこれらの塩（特に薬学的に許容される塩）から選択された少なくとも１種である。
【００４１】
配糖体を構成する糖としては、特に限定されず、単糖類［例えば、グルコース、ガラクトース、アピオース、ラムノース、キシロース、ウロン酸（グルクロン酸など）など］、二糖類（例えば、ルチノース、ネオヘスペリドース、ゲンチオビオースなど）、これらの糖が結合した糖などが挙げられる。
【００４２】
配糖体は、１又は２以上の糖が結合していてもよい。
【００４３】
具体的な配糖体としては、例えば、ナリンゲニン配糖体［例えば、ナリンゲニングルコシド（例えば、ナリンゲニン−７−グルコシド、ナリンゲニン−４−グルコシドなど）、ナリンゲニングルクロニド（例えば、ナリンゲニン−４−グルクロニド、ナリンゲニン−４−グルクロニドなど）、ナリンゲニンルチノシド（例えば、ナリンギンなど）など］、エリオジクチオール配糖体［例えば、エリオジクチオールルチノシド（例えば、ネオエリオシトリンなど）など］、５，７−ジヒドロキシクロモン配糖体［例えば、５，７−ジヒドロキシクロモンネオヘスペリドシド（例えば、５，７−ジヒドロキシクロモン−７−ネオヘスペリドシドなど）など］、コーヒー酸配糖体［例えば、コーヒー酸グルコシド（例えば、コーヒー酸−４−グルコシドなど）など］、プロトカテク酸配糖体［例えば、プロトカテク酸グルコシド（例えば、プロトカテク酸−３−グルコシドなど）など］などが挙げられる。
【００４４】
塩としては、特に限定されず、例えば、金属塩［例えば、アルカリ金属塩（例えば、リチウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩など）、アルカリ土類金属塩（例えば、マグネシウム塩、カルシウム塩）、周期表第１３族金属塩（例えば、アルミニウム塩）、遷移金属塩（例えば、亜鉛などの塩）など］、アンモニウム塩、アミン塩［例えば、アルキルアミン塩（例えば、トリメチルアミン塩、トリエチルアミン塩のトリアルキルアミン塩）、アルカノールアミン塩（例えば、モノエタノールアミン塩、トリエタノールアミン塩）、環式アミン塩（例えば、ピリジン塩）］などが挙げられる。
【００４５】
成分（Ａ）は、１又は２以上の成分を含んでいてもよい。成分（Ａ）が、２以上の成分を含む場合、基本骨格において共通する成分を２以上含んでいてもよく（例えば、ナリンゲニンとナリンゲニン配糖体を含むなど）、基本骨格が異なる成分を組み合わせて２以上含んでいてもよい（例えば、ナリンゲニンやその配糖体と、エリオジクチオールやその配糖体とを組み合わせて有するなど）。
【００４６】
これらのうち、成分（Ａ）は、代表的には、ナリンゲニン、ナリンゲニンの配糖体（ナリンギン、ナリンゲニングルクロニドなど）、及びこれらの塩から選択された少なくとも１以上の成分（これらをまとめてナリンゲニン類ということがある）を少なくとも含んでいてもよい。
【００４７】
なお、成分（Ａ）は、合成したものを用いてもよく、天然物由来であってもよい。なお、合成方法は、慣用の手法を利用できる。
【００４８】
例えば、ナリンゲニンやナリンギンは、柑橘系植物（グレープフルーツ、はっさくなどのミカン科植物）などに含まれることが知られており、このような植物から成分（Ａ）を得てもよい。
【００４９】
特に、骨砕補（コツサイホ）には、ナリンゲニンなどに加えて、その他の成分（Ａ）を含んでいる場合が多く、これらを組み合わせて有することと相まってか、本発明の効果を有効に発現しやすい。
【００５０】
そのため、本発明の剤は、成分（Ａ）を含有する成分として、特に、骨砕補成分を含んでいてもよい。
【００５１】
骨砕補成分としては、骨砕補、骨砕補の抽出物（骨砕補エキス）などが挙げられ、これらを組み合わせてもよい。
【００５２】
骨砕補エキスは、市販品を利用してもよく、骨砕補を慣用の方法で抽出処理｛例えば、抽出溶媒［例えば、水、アルコール（メタノール、エタノールなど）、これらの混合物など］を用い、常温または加熱下で常法またはそれに準じた方法で抽出処理｝することで得ることもできる。
【００５３】
抽出物の中でも、特に、成分（Ａ）の含量や濃度が高い部分を分離又は分画して用いてもよい。例えば、骨砕補の水性溶媒抽出物（例えば、水、水とアルコールとの混合溶媒を抽出溶媒とする抽出物）を、さらに、アルコール［例えば、ｎ−ブタノールなどの炭素数３以上（例えば、炭素数４〜６程度）のアルコール］で抽出などにより分離又は分画処理して得られる処理物には、ナリンゲニンを含む成分（Ａ）が高含量で含まれている場合が多く、このような処理物を好適に使用してもよい。
【００５４】
抽出に際しては、骨砕補をそのまま又は粉砕（破砕）して供してもよい。また、抽出物は、さらに、濃縮や乾燥（常温乾燥、凍結乾燥など）に供してもよい。
【００５５】
骨砕補成分の形態は、特に限定されないが、例えば、粉状（又は粉粒状）であってもよい。
【００５６】
［エゾウコギ成分（Ｂ）］
エゾウコギ成分（Ｂ）としては、エゾウコギ、エゾウコギの抽出物（エゾウコギエキス）などが挙げられ、これらを組み合わせてもよい。
【００５７】
エゾウコギ［学名：Eleutherococcus senticosus，Acanthopanax senticosus (Rupr. et Maxim.) Harms］は、ウコギ科の植物で、根、茎、幹、樹皮、葉、花、果実、果皮、果穂、種子、種皮などの部分を使用してもよく、これらを組み合わせて使用してもよく、全草を使用してもよい。
【００５８】
特に、エゾウコギは、少なくとも葉を好適に使用してもよい。
【００５９】
エゾウコギエキスは、市販品を利用してもよく、エゾウコギを慣用の方法により抽出処理することで得ることもできる。
【００６０】
抽出溶媒としては、例えば、水、アルコール［例えば、アルカノール（例えば、メタノール、エタノール、イソプロパノール、ｎ−ブタノールなどのＣ１−４アルカノール）、ポリオール（例えば、エチレングリコール、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、グリセリンなど）、ケトン類（例えば、アセトン、メチルエチルケトンなど）、エーテル類（例えば、ジエチルエーテルなど）、エステル類（例えば、酢酸エチルなど）などが挙げられる。
抽出溶媒は、単独で又は２種以上組み合わせて用いてもよい。
代表的な抽出溶媒は、水、アルコール（エタノールなど）、これらの混合液などが挙げられる。
【００６１】
抽出温度や抽出時間は、特に限定されず、抽出溶媒や抽出方法などに応じて適宜選択できる。
【００６２】
なお、抽出に際しては、エゾウコギを、必要に応じて、適当な処理（粉砕処理、加熱処理、乾燥処理など）に供してもよい。また、抽出物は、さらに、濃縮や乾燥（常温乾燥、凍結乾燥など）に供してもよい。
【００６３】
エゾウコギ成分の形態は、特に限定されないが、粉状（又は粉粒状）であってもよい。
【００６４】
［成分（Ｃ）］
本発明の剤又は組成物において、成分（Ａ）及び／又は成分（Ｂ）は、ジオスゲニン類、ジヒドロキシビタミンＤ３、デソノミンなどと組み合わせてもよい。これらの成分（以下、これらを成分（Ｃ）ということがある）と組み合わせることで、本発明の効果をより一層効率よく実現できる場合がある。
【００６５】
これらの中でも、特に、ジオスニゲン類を好適に使用してよい。そのため、成分（Ｃ）は、少なくともジオスゲニン類で構成してもよい。
ジオスゲニン類としては、ジオスゲニン、ジオスゲニン誘導体、これらの塩などが挙げられる。
【００６６】
ジオスゲニン誘導体としては、ジオスゲニンのＣ３位の水酸基が置換された化合物、Ｃ２位に置換基を有する化合物（又はＣ２位の水素原子が置換された化合物）、Ｃ４位に置換基を有する化合物（又はＣ４位の水素原子が置換された化合物）、Ｃ６位に置換基を有する化合物（又はＣ６位の水素原子が置換された化合物）［例えば、Ｃ３位の水酸基のエステル誘導体（例えば、アミノ酸誘導体、アミノスルホン酸誘導体、カーバメイト誘導体）、Ｃ３位の水酸基のハロゲン化誘導体など］、これらの配糖体などが挙げられる。
【００６７】
具体的なジオスゲニン誘導体としては、例えば、下記式（Ｉ−１）で表される化合物、ジオスゲニン又は下記式（Ｉ−１）で表される化合物の配糖体などが挙げられる。
【化１】
2017030167.tif 000002
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４は、同一又は異なって水素原子又は置換基を示す。ただし、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４が水素原子であるとき、Ｒ１はヒドロキシル基でない。）
【００６８】
Ｒ１において、置換基としては、炭化水素基｛例えば、アルキル基[例えば、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、イソブチル基、ｓ−ブチル基、ｔ−ブチル基、ペンチル基などの直鎖又は分岐鎖アルキル基（例えば、Ｃ１−１２アルキル基、好ましくはＣ１−８アルキル基）]、シクロアルキル基（例えば、シクロペンチル基、シクロへキシル基、シクロヘプチル基、シクロオクチル基などのＣ４−１０シクロアルキル基、好ましくはＣ５−８シクロアルキル基）、アラルキル基（例えば、ベンジル基、フェネチル基などのＣ６−１０アリールＣ１−４アルキル基）、多環式脂肪族炭化水素基（例えば、デカリニル基、ノルボルニル基、アダマンチル基、ジメチルアダマンチル基など）などの飽和又は不飽和脂肪族炭化水素基；アリール基（例えば、フェニル基、トリル基、キシリル基などのＣ６−１０アリール基）などの芳香族炭化水素基｝、ヘテロ原子（窒素原子、酸素原子、硫黄原子、リン原子など）含有基｛例えば、酸素原子含有基[例えば、ヒドロキシル基、オキソ基（＝Ｏ）、基−ＯＲａ、基−Ｏ−ＣＯ−Ｒａ、基−Ｏ−ＣＯ−Ｎ（Ｒｂ）２、基−Ｏ−ＣＯ−Ｏ−Ｒａ、基−Ｏ−ＣＯ−Ｓ−Ｒａ、基−ＯＲｃ、基−Ｏ−ＳＯ２−ＯＨ、基−Ｏ−ＰＯ２−ＯＨ、基−（ＯＲｄ）ｋ−Ｒｅ、カルボキシル基、基−ＣＯ−Ｏ−Ｒａ、基−ＣＯ−Ｎ（Ｒｂ）２など]、窒素原子含有基[例えば、アミノ基、基−ＮＲａＲｂ、基−ＮＲｂ−ＣＯ−Ｏ−Ｒａ、基−ＮＲｂ−ＣＯ−Ｎ（Ｒｂ）２、窒素含有環基（例えば、ピリジン、ピロリン、ピロール、インドールなどに対応する基）など]、硫黄原子含有基[例えば、メルカプト基、基−ＳＲａ、基−Ｓ−Ｓ−Ｒａ、スルホ基（−ＳＯ３Ｈ）、基−ＳＯ２−Ｒｂ、基−Ｓ−ＣＯ−Ｎ（Ｒｂ）２など]、リン原子含有基[例えば、リン酸基（Ｈ２ＰＯ４−）、基−ＰＯ３Ｈなど]、アミノ酸基[又はアミノ酸の残基、例えば、ジオスゲニンを構成する３位（上記式においてＲ１の置換位置に対応）のヒドロキシル基と、アミノ酸（グリシン、アラニンなど）のカルボキシル基とのエステル結合により形成された基]など｝、ハロゲン原子（例えば、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子など）などが挙げられる。
【００６９】
なお、上記式において、Ｒａは炭化水素基（例えば、アルキル基などの前記例示の炭化水素基など）、Ｒｂは水素原子又は炭化水素基（例えば、アルキル基などの前記例示の炭化水素基）、Ｒｃは糖（又は糖鎖又は糖の残基）、Ｒｄはアルキレン基（例えば、エチレン基、プロピレン基、トリメチレン基などのＣ２−４アルキレン基）、Ｒｅは水素原子、ヒドロキシル基又は炭化水素基（例えば、アルキル基（メチル基など）などの前記例示の炭化水素基）、ｋは２以上の整数（例えば、２〜１０）を、それぞれ示し、Ｒａ及びＲｂは同一又は異なる基であってもよく、Ｒｂが複数であるとき、同一又は異なっていてもよい。
【００７０】
Ｒａ及びＲｂにおいて、炭化水素基（アルキル基など）は、さらに、置換基を有していてもよい。置換基としては、特に限定されないが、前記例示の置換基、例えば、酸素原子含有基（例えば、ヒドロキシル基、カルボキシル基、基−ＯＲａ、基−Ｏ−ＣＯ−Ｒａなど）、窒素原子含有基（例えば、アミノ基、基−ＮＲａＲｂ）、硫黄原子含有基（例えば、メルカプト基、基−ＳＲａ、スルホ基、基−ＳＯ２−Ｒｂなど）が挙げられる。
炭化水素基は、これらの置換基を単独で又は２種以上組み合わせて有していてもよい。
炭化水素基が置換基を有する場合、置換基の数は、１以上であればよく、例えば、１〜１０（例えば、１〜８）、好ましくは１〜６（例えば、１〜４）、さらに好ましくは１〜３程度であってもよい。
【００７１】
Ｒ１が置換基である場合、代表的なＲ１には、例えば、炭化水素基[例えば、アルキル基（例えば、基−（ＣＨ２）ｎ−ＣＨ３）、シクロアルキル基、アラルキル基など]、ヘテロ原子含有基｛例えば、酸素原子含有基[例えば、ヒドロキシル基、基−Ｏ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＨ３、基−Ｏ−（ＣＨ２）ｍ−ＮＨ２、基−Ｏ−（ＣＨ２）ｍ−ＣＯＯＨ、基−Ｏ−（ＣＨ２）ｍ−ＳＯ３Ｈ、基−Ｏ−ＣＯ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＨ３、基−Ｏ−ＣＯ−ＮＨ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＨ３、基−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＨ３、基−Ｏ−ＣＯ−ＮＨ−ＣＨ（Ｒｂ）−ＣＯＯＨ、基−Ｏ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯ−ＮＨ−ＡＤ（式中、ＡＤはアダマンチル基（１−アダマンチル基、２，６−ジメチルアダマンタン−１−イル基など）を示す）、基−Ｏ−ＣＯ−ＮＨ−（ＣＨ２）ｍ−ＳＯ３Ｈ、基−Ｏ−ＣＯ−ＮＨ−（ＣＨ２）ｍ−ＣＯＯＨ、基−Ｏ−ＣＯ−Ｏ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＨ３、基−Ｏ−ＣＯ−Ｓ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＨ３、基−Ｏ−ＳＵ（式中、ＳＵは、糖鎖を示す）、基−Ｏ−ＳＯ２−ＯＨ、基−Ｏ−ＰＯ２−ＯＨ、基−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｍ−ＣＨ３、基−（ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２）ｍ−ＣＨ３、カルボキシル基、基−ＣＯＯ（ＣＨ２）ｎＣＨ３、基−ＣＯ−ＮＨ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＨ３、基−ＳＯ３Ｈ、基−ＳＯ２−（ＣＨ２）ｎ−ＣＨ３、基−ＳＯ２−Ｐｈ（式中、Ｐｈはフェニル基を示す。）、基−ＣＯ−ＮＨ−ＣＨ（Ｒｂ）−ＣＯＯＨ、基−ＣＯ−ＮＨ−（ＣＨ２）ｎ−ＳＯ３Ｈなど]、窒素原子含有基[例えば、アミノ基、基−ＮＨ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＨ３、基−ＮＨ−（ＣＨ２）ｎ−ＮＨ２、基−ＮＨ−ＣＨ（Ｒｂ）−ＣＯＯＨ、基−ＮＨ−（ＣＨ２）ｍ−ＳＯ３Ｈ、基−ＮＨ−（ＣＨ２）ｍ−ＳＯ２Ｈ、基−ＮＨ−ＣＯ−Ｏ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＨ３、基−ＮＨ−ＣＯ−ＮＨ２、基−ＮＨ−ＣＯ−ＮＨ−ＡＤ（式中、ＡＤはアダマンチル基（１−アダマンチル基、２，６−ジメチルアダマンタン−１−イル基など）を示す）、基−ＮＨ−ＣＯ−ＮＨ−ＣＨ（Ｒｂ）−ＣＯＯＨ、基−ＮＨ−ＣＯ−ＮＨ−（ＣＨ２）ｍ−ＳＯ３Ｈ、基−ＮＨ−ＣＯ−ＮＨ−（ＣＨ２）ｍ−ＣＯＯＨなど]、硫黄原子含有基[例えば、メルカプト基、基−Ｓ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＨ３、基−Ｓ−（ＣＨ２）ｍ−ＣＯＯＨ、基−Ｓ−（ＣＨ２）ｍ−ＣＨ（ＮＨ２）−ＣＯＯＨ、基−Ｓ−ＣＯ−ＮＨ−ＡＤ（式中、ＡＤはアダマンチル基（１−アダマンチル基、２，６−ジメチルアダマンタン−１−イル基など）を示す）、基−Ｓ−Ｓ−（ＣＨ２）ｍ−ＣＨ（ＮＨ２）−ＣＯＯＨ、基−ＳＯ３Ｈなど]、リン原子含有基[例えば、基−ＰＯ３Ｈなど]、アミノ酸基（例えば、基−Ｏ−ＣＯ−ＣＨ２−ＮＨ２など）など｝、ハロゲン原子（例えば、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子など）などが挙げられる。
【００７２】
なお、上記式において、ｍは１以上の整数（例えば、１〜１０、好ましくは１〜４、さらに好ましくは１又は２）、ｎは０以上の整数（例えば、０〜１０、好ましくは０〜７）を示し、Ｒｂは前記と同じ[すなわち、水素原子又は炭化水素基（例えば、アルキル基など）]である。
【００７３】
Ｒ２、Ｒ３及びＲ４において、置換基としては、Ｒ１の項で例示の置換基と同様の置換基を挙げることができる。
Ｒ２及び／又はＲ４が置換基である場合、代表的な置換基としては、酸素原子含有基、窒素原子含有基、硫黄原子含有基、アミノ酸基、ハロゲン原子などが挙げられる。
また、Ｒ３が置換基である場合、代表的な置換基としては、ハロゲン原子などが挙げられる。
【００７４】
式（Ｉ−１）において、Ｒ１〜Ｒ４の組み合わせは、限定されず、すべての組み合わせが含まれる。代表的なＲ１〜Ｒ４の組み合わせには、例えば、以下の組み合わせなどが挙げられる。
（１）Ｒ１がヒドロキシル基以外の置換基、Ｒ２〜Ｒ４が水素原子である組み合わせ
（２）Ｒ１がヒドロキシル基以外の置換基、Ｒ２が置換基、Ｒ３及びＲ４が水素原子である組み合わせ
（３）Ｒ１がヒドロキシル基以外の置換基、Ｒ３が置換基、Ｒ２及びＲ４が水素原子である組み合わせ
（４）Ｒ１がヒドロキシル基以外の置換基、Ｒ２及びＲ３が置換基、Ｒ４が水素原子である組み合わせ
（５）Ｒ１がヒドロキシル基以外の置換基、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４が置換基である組み合わせ
（６）Ｒ１がヒドロキシル基以外の置換基、Ｒ２及びＲ３が水素原子、Ｒ４が置換基である組み合わせ
（７）Ｒ１がヒドロキシル基以外の置換基、Ｒ３が水素原子、Ｒ２及びＲ４が置換基である組み合わせ
（８）Ｒ１がヒドロキシル基以外の置換基、Ｒ２が水素原子、Ｒ３及びＲ４が置換基である組み合わせ
（９）Ｒ１がヒドロキシル基、Ｒ２が置換基、Ｒ３及びＲ４が水素原子である組み合わせ
（１０）Ｒ１がヒドロキシル基、Ｒ３が置換基、Ｒ２及びＲ４が水素原子である組み合わせ
（１１）Ｒ１がヒドロキシル基、Ｒ２及びＲ３が置換基、Ｒ４が水素原子である組み合わせ
（１２）Ｒ１がヒドロキシル基、Ｒ２〜Ｒ４が置換基である組み合わせ
（１３）Ｒ１がヒドロキシル基、Ｒ２及びＲ３が水素原子、Ｒ４が置換基である組み合わせ
（１４）Ｒ１がヒドロキシル基、Ｒ２が水素原子、Ｒ３及びＲ４が置換基である組み合わせ
（１５）Ｒ１がヒドロキシル基、Ｒ３が水素原子、Ｒ２及びＲ４が置換基である組み合わせ
【００７５】
代表的なジオスゲニン誘導体には、例えば、下記式（ＩＩ）
【化２】
2017030167.tif 000003
で表わされる（３β，２５Ｒ）−３−（２−アミノエタノイロキシ）−スピロスト−５−エン｛(3β, 25R)-3-(2-Aminoethanoyloxy)-spirost-5-ene｝、下記化学式（ＩＩＩ）
【化３】
2017030167.tif 000004
で表わされる（３β，２５Ｒ）−３−フルオロスピロスト−エン｛(3β, 25R)-3-Fluorospirost-5-ene｝、並びに、（３β，２５Ｒ）−３−（２−アミノエチルスルホニルオキシ）−スピロスト−５−エン｛(3β, 25R)-3-(2-Aminoethylsulfonyl-oxy)-spirost-5-ene｝、（３β，２５Ｒ）−３−（２−アミノプロピルスルホニルオキシ）−スピロスト−５−エン、（３β，２５Ｒ）−３−[Ｎ−（２，６−ジメチルアダマンタン−１−イル）カルバモイルオキシ]−スピロスト−５−エン、（３β，２５Ｒ）−３−｛［Ｎ−（２，６−ジメチルアダマンタン−１−イル）カルバモイル］アミノ｝−スピロスト−５−エン、（３β，２５Ｒ）−３−［Ｎ−（２，６−ジメチルアダマンタン−１−イル）カルバモイルチオ］−スピロスト−５−エン、（３β，２５Ｒ）−３−｛［Ｎ−（アダマンタン−１−イル）カルバモイル］アミノ｝−スピロスト−５−エン、（３β，２５Ｒ）−３−［Ｎ−（アダマンタン−１−イル）カルバモイルチオ］−スピロスト−５−エン、及び（３β，２５Ｒ）−３−［Ｎ−（アダマンタン−１−イル）カルバモイルオキシ］−スピロスト−５−エン[又は（３β，２５Ｒ）−３−（１−アダマンチル−アミノカルボニルオキシ）−スピロスト−５−エン｛(3β, 25R)-3-(1-adamantyl-aminocarbonyloxy)-spirost-5-ene｝]などが挙げられる。
【００７６】
配糖体としては、ジオスゲニン又は前記式（Ｉ−１）においてＲ１がヒドロキシル基である化合物において、ヒドロキシ基に糖（前記例示の糖など）が結合した化合物（例えば、ジオシン）などが挙げられる。
【００７７】
なお、塩（特に薬学的に許容される塩）としては、例えばハロゲン化水素酸塩（例えばフッ化水素酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩等）、無機酸塩（例えば硫酸塩、硝酸塩、過塩素酸塩、リン酸塩、炭酸塩、重炭酸塩等）、有機カルボン酸塩（例えば酢酸塩、シュウ酸塩、マレイン酸塩、酒石酸塩、フマル酸塩、クエン酸塩等）、有機スルホン酸塩（例えばメタンスルホン酸塩、トリフルオロメタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、トルエンスルホン酸塩、カンファースルホン酸塩等）、アミノ酸塩（例えばアスパラギン酸塩、グルタミン酸塩等）、有機アミン塩（例えば、トリメチルアミン、トリエチルアミン、ピリジン、ピコリン、ジシクロヘキシルアミン、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、アルギニン及びリジンなどの有機塩基との塩）、四級アミン塩、アルカリ金属塩（例えばナトリウム塩、カリウム塩等）、アルカリ土類金属塩（例えばマグネシウム塩、カルシウム塩等）などが挙げられる。
【００７８】
代表的なジオスゲニン類には、ジオスゲニン、前記式（Ｉ−１）で表される化合物、ジオシン、これらの塩などが挙げられる。特に好ましいジオスゲニン類には、ジオスゲニン、前記式（ＩＩ）で表される化合物、前記式（ＩＩＩ）で表される化合物、ジオシン、これらの塩が含まれる。
【００７９】
［形態・投与］
本発明の剤又は組成物は、成分（Ａ）及び成分（Ｂ）のいずれか一方を含んでいればよく、成分（Ａ）と成分（Ｂ）とを組み合わせてもよい。通常、本発明の組成物では、成分（Ａ）及び成分（Ｂ）を組み合わせてもよい。
成分（Ａ）と成分（Ｂ）とを組み合わせることで、より一層、記憶力改善効果などを得やすい。
【００８０】
成分（Ａ）と成分（Ｂ）とを組み合わせる場合、成分（Ａ）と成分（Ｂ）とは、別の剤又は組成物としてもよく、成分（Ａ）と成分（Ｂ）とを含む剤（合剤）又は組成物としてもよい。
【００８１】
なお、成分（Ｃ）についても同様である。
【００８２】
成分（Ａ）と成分（Ｂ）とを組み合わせる場合、これらの割合は、所望の効果などに応じて適宜選択できるが、例えば、成分（Ａ）と成分（Ｂ）との割合は、前者／後者（重量比）＝１／０．００１〜１／１０００、好ましくは１／０．０１〜１／１００、さらに好ましくは１／０．０２〜１／５０、特に１／０．１〜１／１０程度であってもよい。
【００８３】
特に、成分（Ａ）としての骨砕補エキスと、成分（Ｂ）としてのエゾウコギエキスとを組み合わせる場合、これらの割合は、前者／後者（重量比）＝１／０．００１〜１／１０００、好ましくは１／０．０１〜１／１００、さらに好ましくは１／０．０２〜１／５０、特に１／０．１〜１／１０程度であってもよい。
【００８４】
なお、骨砕補エキスやエゾウコギエキスが、溶媒成分などを含む場合、上記割合は、有効成分（又は固形分）換算の割合である。
【００８５】
また、成分（Ｃ）を組み合わせる場合、成分（Ａ）及び／又は成分（Ｂ）と成分（Ｃ）との割合は、前者／後者（重量比）＝１／０．００１〜１／１０００、好ましくは１／０．０１〜１／１００、さらに好ましくは１／０．０２〜１／５０、特に１／０．１〜１／１０程度であってもよい。
【００８６】
剤又は組成物の形態としては、特に限定されず、成分（Ａ）及び／成分（Ｂ）をそのまま剤（例えば、粉剤）又は組成物としてもよく、他の成分（担体、賦形剤など）とともに製剤化してもよい。
【００８７】
特に、製剤化には、例えば、賦形剤、結合剤、崩壊剤、コーティング剤、滑沢剤、着色剤、矯味矯臭剤や、必要により安定化剤、乳化剤、吸収促進剤、界面活性剤、ｐＨ調製剤、防腐剤、抗酸化剤などを使用することができ、一般に製剤の原料として用いられる成分を配合して常法により製剤化可能である。
【００８８】
製剤化に用いられる成分（担体）としては、特に限定されないが、例えば、大豆油、牛脂、合成グリセライドなどの動植物油；流動パラフィン、スクワラン、固形パラフィンなどの炭化水素；ミリスチン酸オクチルドデシル、ミリスチン酸イソプロピルなどのエステル油；セトステアリルアルコール、ベヘニルアルコールなどの高級アルコール；シリコン樹脂；シリコーンオイル；ポリオキシエチレン脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン硬化ひまし油、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンブロックコポリマーなどの界面活性剤；ヒドロキシエチルセルロース、ポリアクリル酸、カルボキシビニルポリマー、ポリエチレングリコール、ポリビニルピロリドン、メチルセルロースなどの水溶性高分子；エタノール、イソプロパノールなどの低級アルコール；グリセリン、プロピレングリコール、ジプロピレングリコール、ソルビトールなどの多価アルコール；グルコース、ショ糖などの糖；無水ケイ酸、ケイ酸アルミニウムマグネシウム、ケイ酸アルミニウムなどの無機粉体；精製水などが挙げられる。
【００８９】
賦形剤としては、例えば、乳糖、コーンスターチ、白糖、ブドウ糖、マンニトール、ソルビット、結晶セルロース、二酸化ケイ素などが挙げられる。
【００９０】
結合剤としては、例えば、ポリビニルアルコール、ゼラチン、メチルセルロース、エチルセルロース、アラビアゴム、トラガント、ゼラチン、シェラック、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアセタールジエチルアミノアセテート、トウモロコシデンプンなどが挙げられる。
【００９１】
崩壊剤としては、例えば、トウモロコシデンプン、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、クロスポビドン、結晶セルロース、沈降炭酸カルシウム、クロスカルメロースナトリウム、クエン酸カルシウム、デキストリン、ペクチン、カルボキシメチルセルロースカルシウムなどが挙げられる。
【００９２】
滑沢剤としては、例えば、ステアリン酸マグネシウム、タルク、ポリエチレングリコール、軽質無水ケイ酸、ショ糖脂肪酸エステルなどが挙げられ、矯味矯臭剤としては、ココア末、メントール、芳香散、ハッカ油、竜脳、桂皮末などが用いられる。
【００９３】
なお、本発明の剤又は組成物は、本発明の効果を阻害しない範囲であれば、さらに、神経疾患や記憶力の改善に有用な別の成分と組み合わせてもよい。組み合わせる態様としては、剤又は組成物に含有させる態様の他、剤又は組成物とは別に用いる態様が挙げられる。
【００９４】
本発明の剤又は組成物の形態（剤形）としては、例えば、錠剤、散剤、細粒剤、顆粒剤、ドライシロップ剤、被覆錠剤、口腔内崩壊錠、チュアブル錠、カプセル剤、ソフトカプセル剤、シロップ剤、経口液剤、トローチ剤、ゼリー剤、吸入剤、坐剤、注射剤、軟膏剤、点眼剤、眼軟膏剤、点鼻剤、点耳剤、パップ剤、ローション剤、外用液剤、スプレー剤、外用エアゾール剤、クリーム剤、ゲル剤、テープ剤、バッカル錠、舌下錠、膣坐剤、膣錠、直腸ソフトカプセル剤等が挙げられる。
【００９５】
本発明の剤又は組成物の投与（服用）形態は、特に限定されず、経口投与であっても、非経口投与であってもよい。非経口投与としては、例えば、直腸投与、経鼻投与、経肺投与、注射投与（例えば、静脈内投与、脊椎腔内投与、硬膜外腔内投与、筋肉内投与、皮下投与、腹腔内投与、動脈内投与、関節内投与、心臓内投与、嚢内投与、皮内投与、病巣内投与、眼内投与、胸腔内投与、くも膜下投与、子宮内投与、脳室内投与）などが挙げられる。
【００９６】
代表的な投与形態は経口投与である。
【００９７】
本発明の剤又は組成物に含まれる成分（Ａ）及び／又は成分（Ｂ）の量は、特に限定されず、所望の効果を得るのに十分な用量とすることが好ましい。
例えば、投与量は、例えば症状の程度、年齢、性別、体重、投与形態、塩の種類、疾患の具体的な種類等に応じて異なるが、通常、１日あたり、成分（Ａ）及び／又は成分（Ｂ）を、０．０１〜１００ｍｇ／ｋｇ、好ましくは０．１〜１０ｍｇ／ｋｇ、さらに好ましくは０．５〜５ｍｇ／ｋｇ程度であってもよい。
【００９８】
特に、成分（Ａ）の投与量（摂取量、服用量）は、１日あたり、０．０１〜１００ｍｇ／ｋｇ、好ましくは０．１〜１０ｍｇ／ｋｇ、さらに好ましくは０．５〜５ｍｇ／ｋｇ程度であってもよい。
【００９９】
なお、骨砕補エキスを投与する場合、骨砕補エキスの投与量（摂取量、服用量）は、１日あたり、１０〜２０００ｍｇ／ｋｇ、好ましくは２０〜１０００ｍｇ／ｋｇ、さらに好ましくは５０〜８００ｍｇ／ｋｇ（例えば、１００〜７００ｍｇ／ｋｇ）程度であってもよい。
【０１００】
また、成分（Ｂ）（エゾウコギエキスなど）の投与量（摂取量、服用量）は、１日あたり、１０〜２０００ｍｇ／ｋｇ、好ましくは２０〜１０００ｍｇ／ｋｇ、さらに好ましくは５０〜８００ｍｇ／ｋｇ（例えば、１００〜７００ｍｇ／ｋｇ）程度であってもよい。
【０１０１】
さらに、成分（Ｃ）を組み合わせて投与する場合、成分（Ｃ）の投与量（摂取量、服用量）は、１日あたり、０．０１〜１００ｍｇ／ｋｇ、好ましくは０．１〜１０ｍｇ／ｋｇ、さらに好ましくは０．５〜５ｍｇ／ｋｇ程度であってもよい。
【０１０２】
投与は、１回又は複数回に分けてもよい。
【０１０３】
なお、本発明の剤又は組成物は、所望により、キットの形態で提供することもできる。このようなキットは、例えば、成分（Ａ）及び／又は成分（Ｂ）を含有する１つ以上の単位剤形を含有することができるパック又はディスペンサー装置等の容器を備えたキットであってもよい。
【０１０４】
本発明では、別々の剤又は組成物をキット形に組み合わせることもできる。例えば、このようなキットは、成分（Ａ）を含む剤又は組成物を含む容器と、成分（Ｂ）を含む剤又は組成物とを含む容器とで構成してもよい。
【０１０５】
このようなキットは、通常、分割式ボトル又は分割式ホイルパケットのような、別々の剤又は組成物を含有するための容器を含むが、別々の組成物を単一の非分割式容器に含めることもできる。キット形は、別々の成分を異なる投与形で投与する場合や、別々の成分を異なる投与間隔で投与する場合、処方医師によって組み合わせた個々の成分を滴定する必要がある場合などに、特に有用である。
【０１０６】
パックは、例えば、金属もしくはプラスチックホイル、ブリスターパックなどを含むことができる。ブリスターパックはパッケージング業界において周知であり、製薬的単位投与形（錠剤、カプセル等）のパッケージングに広く用いられている。ブリスターパックは一般に、透明なプラスチック材料のホイルによって覆われた比較的硬質材料のシートから成るのが好ましい。パッケージング・プロセス中に、該プラスチックホイル中に凹みが形成される。これらの凹みは、パックされる個々の錠剤又はカプセルのサイズ及び形状に合わせてある。次に、錠剤又はカプセルを凹み中に入れて、凹みが形成された方向とは逆のホイル面において、比較的硬質材料のシートをプラスチックホイルに対してシールする。その結果、錠剤又はカプセルが該プラスチックホイルと該シートとの間の凹み中にシールされる。シートの強度は、凹みの場所においてシートに開口が形成されるように手で圧力を凹みに加えることによって、錠剤又はカプセルをブリスターパックから取り出すことができるような強度が好ましい。錠剤又はカプセルを前記開口によって取り出すことができる。
【０１０７】
パック又はディスペンサー装置には、投与のための添付文書、プロダクトインサート等を添付することができる。パック又はディスペンサー等の容器は、医薬の製造、使用又は販売を規制する政府機関、当局の通達に適応させることができる。
【０１０８】
＜飲食品＞
本発明には、成分（Ａ）と成分（Ｂ）と（さらには成分（Ｃ）などの他の成分と）含む飲食品（すなわち、前記剤又は組成物を含む飲食品）が含まれる。
なお、このような飲食品において、成分（Ａ）や成分（Ｂ）の好ましい態様、これらの割合などは、前記と同様である。
【０１０９】
飲食品としては、いわゆる健康食品を含む一般食品の他、厚生労働省の保健機能食品制度に規定された特定保健用食品や栄養機能食品などの保健機能食品をも含むものであり、さらに、サプリメント（栄養補助食品）、飼料、食品添加物なども本発明の飲食品に包含される。
【０１１０】
また、飲食品は、特定の対象者用［例えば、高齢者用、患者又は病者用（例えば、神経疾患（前記例示の神経疾患など）を有する患者用）など］の飲食品であってもよい。
【０１１１】
成分（Ａ）及び／又は成分（Ｂ）を飲食品に使用するには、そのまま、または種々の栄養成分等とともに加工肉、清涼飲料などの飲食品の原料に混ぜて飲食品を製造することができる。
【０１１２】
また、成分（Ａ）及び／又は（Ｂ）を、健康食品、栄養補助食品などとして使用する場合、例えば、慣用の手段を用いて、錠剤、カプセル（ソフトカプセル、ハードカプセルなど）、散剤、顆粒、液剤（懸濁剤、シロップ剤など）、乳剤、ゼリー、スティック状などの形態に調製することができる。また、錠剤には、崩壊錠（口腔内崩壊錠）も含まれる。
【０１１３】
飲食品は、骨砕補又は骨砕補の抽出物を含んでいる限り、食品添加剤（食品用添加剤）を含んでいてもよい。食品添加剤としては、特に限定されないが、例えば、賦形剤（例えば、コムギデンプン、トウモロコシデンプン、セルロース、乳糖、ショ糖、マンニトール、ソルビトール、キシリトール、アルファー化デンプン、カゼイン、ケイ酸アルミン酸マグネシウム、ケイ酸カルシウムなど）、結合剤（例えば、アルファー化デンプン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニルピロリドンなど）、崩壊剤（例えば、セルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、トウモロコシデンプンなど）、流動化剤（例えば、軽質無水ケイ酸、ショ糖脂肪酸エステルなど）、油（例えば、大豆油、ゴマ油、オリーブ油、亜麻仁油、エゴマ油、ナタネ油、ココナッツ油、トウモロコシ油などの植物油又は動物・魚由来の油）、栄養素（例えば、各種ミネラル、各種ビタミン、アミノ酸）、香料、甘味料、矯味剤、着色料、溶媒(エタノール)、塩類、界面活性剤、ｐＨ調節剤、緩衝剤、抗酸化剤、安定化剤、ゲル化剤、増粘剤、滑沢剤、カプセル化剤、懸濁剤、コーティング剤、防腐剤などが挙げられる。
【０１１４】
食品添加剤は、単独で又は２種以上組み合わせてもよく、特に２種以上用いてもよい。なお、２種以上の添加剤を用いる場合、同系統の添加剤から２以上の成分（例えば、賦形剤に分類される成分から２以上の成分）を選択してもよく、異種の添加剤を２以上組み合わせて（例えば、賦形剤と結合剤とを組み合わせて）もよく、これらの両方を選択してもよい。特に、添加剤は、異種の添加剤を組み合わせてもよい。
【０１１５】
また、錠剤などの形態の飲食品では、上記の中でも、特に、賦形剤、結合剤、及び崩壊剤から選択された少なくとも２以上の添加剤を少なくとも使用してもよい。
【０１１６】
成分（Ａ）及び／又は成分（Ｂ）を食品添加物として用いる場合、飲食品としては、特に原手入れないが、例えば、食品［例えば、麺類（そば、うどん、中華麺、即席麺など）、菓子類（飴、キャンディー、ガム、チョコレート、スナック菓子（ポテトチップなど）、ビスケット、クッキー、グミ、ゼリー、ジャム、バター、クリーム（シュークリームなど）、ケーキなど）、パン類、水産又は畜産加工食品（かまぼこ、ハム、ソーセージなど）、乳製品（加工乳、発酵乳など）、油脂および油脂加工食品（サラダ油、てんぷら油、マーガリン、マヨネーズ、ショートニング、ホイップクリーム、ドレッシングなど）、調味料（ソース、たれなど）、レトルト食品（カレー、シチュー、丼、お粥、雑炊など）、冷菓（アイスクリーム、シャーベット、かき氷など）、揚げ物（コロッケ、フライドポテト、フライドチキンなど）など］、飲料（茶飲料、清涼飲料、炭酸飲料、栄養飲料、果実飲料、乳酸飲料など）などが挙げられる。
【０１１７】
上記の飲食品における成分（Ａ）及び／又は成分（Ｂ）の配合量は、添加形態及び投与形態によっても異なり広い範囲から選択できるが、例えば、０．００１〜９０重量％、好ましくは０．００１〜８０重量％、さらに好ましくは０．１〜７０重量％（例えば、１〜５０重量％）、通常、０．０１〜５０重量％（例えば、０．１〜３０重量％）程度であってもよい。
【０１１８】
特に、本発明の飲食品が、骨砕補エキスを含む場合、骨砕補エキスの割合は、１〜９０重量％、好ましくは１０〜７０重量％、さらに好ましくは２０〜５０重量％程度であってもよい。
【０１１９】
また、本発明の飲食品が、特に、エゾウコギエキスを含む場合、エゾウコギエキスの割合は、例えば、１〜９０重量％、好ましくは１０〜７０重量％、さらに好ましくは２０〜５０重量％程度であってもよい。
【０１２０】
さらに、本発明の飲食品が、特に、成分（Ｃ）を含む場合、成分（Ｃ）の割合は、例えば、０．００１〜９０重量％、好ましくは０．００１〜８０重量％、さらに好ましくは０．１〜７０重量％（例えば、１〜５０重量％）、通常、０．０１〜５０重量％（例えば、０．１〜３０重量％）程度であってもよく、１〜９０重量％程度であってもよい。
【０１２１】
なお、飲食品において、成分（Ａ）及び／又は成分（Ｂ）（さらには成分（Ｃ））の投与量（又は摂取量又は服用量）は、前記と同様の範囲から選択できる。
【実施例】
【０１２２】
以下に、実施例を挙げて本発明をさらに具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例により何ら限定されるものではなく、多くの変形が本発明の技術的思想内で当分野において通常の知識を有する者により可能である。【０１２３】
なお、実施例において、骨砕補抽出物（骨砕補水エキス）は、以下のようにして得たものを用いた。【０１２４】
骨砕補（栃本天海堂、大阪）に２０倍量の水を加え、煎じ器（ウチダ和漢薬、東京）を用いて抽出を行った。生薬に加えた水が沸騰するまで強火で加熱し（１５〜２０分）、その後とろ火での加熱を１時間続けた。ろ液を濾した後、熱時綿栓濾過し、ろ液を室温で放冷後、液体窒素で凍結させた。さらに凍結乾燥器にて乾燥させ、粉末状の骨砕補の抽出物を得た（収率７．８％）。【０１２５】
また、実施例において、物体認知記憶試験は、次のようにして行った。
＜物体認知記憶試験＞
物体認知記憶試験とは、動物が新しいものに興味を示す習性を利用した試験である。すなわち、テスト段階において、トレーニング段階で見た物体を覚えているか否かを確認する試験である。試験は、文献（Int J Neurosci, 121, pp.181-190, 2011.、およびInt J Neurosci, 121, pp.641-648, 2011.）の記載にしたがって行った。具体的には、以下のように行った。【０１２６】
試験は比較的照明をおとした部屋（約100ルクス）にて行った。トレーニング段階とテスト段階の間の適切な時間間隔（インターバル）は、別のマウスのグループで予めテストして決めた。試験を行うオープンフィールドボックスの内側の壁には、一切の目印はない。トレーニング段階ではフィールド内に２つの同じ物体を置き10分間の探索行動をさせる。テストの段階では、物体の一つを新しい物体に置き換え、しかし置き場所は変えずに、10分間の探索行動をさせる。マウスが、置き換えた新しい物体に興味を示して探索行動する回数の増加を、物体記憶能力の指標とするものである。
実施例では、総探索時間に対する新たな物体への探索回数の割合（％）を探索指向指数（Preference index）として算出した。【０１２７】
（実施例１）
ナリンゲニン、ナリンゲニンの配糖体の一種であるナリンゲニン−７’−Ｏ−グルクロニドが神経細胞に対して活性を示すことを検討するために、これらをそれぞれ合成し、まず、正常大脳皮質神経細胞に対する突起伸展作用を検討した。初代培養したマウス大脳皮質神経細胞の培養３日目に、０．０１、０．１、１、１０μＭの濃度で各化合物を処置し、さらに４日後に細胞を固定した後、軸索（ｐＮＦ−Ｈ陽性）の細胞あたりの長さを免疫染色によって検討した。【０１２８】
なお、これら２つの化合物及び後述のナリンゲニン−４’−Ｏ−グルクロニドの構造を下記に示す。
【化４】
2017030167.tif 000005
【０１２９】
結果を図１に示す。なお、図１において、「Cont」はコントロール、「Naringenin」はナリンゲニン、「Naringenin-7-O」はナリンゲニン−７’−Ｏ−グルクロニドを示し、値はコントロールの値を１００とし、μｍ／ニューロンで換算したものである。【０１３０】
図１の結果から明らかなように、ナリンゲニン及びナリンゲニン−７’−Ｏ−グルクロニドのいずれについても、活性を示すことがわかった。【０１３１】
（実施例２）
実施例１において、合成したナリンゲニン及びナリンゲニン−７’−Ｏ−グルクロニドに加えて、ナリンゲニンの配糖体であるナリンゲニン−４’−Ｏ−グルクロニドを合成し、Ａβ（２５−３５）による軸索の伸展作用を以下のようにして調べた。【０１３２】
初代培養したマウス大脳皮質神経細胞の培養３日目に、１０μＭ  Ａβ（２５−３５）を処置し、その３日後に、０．０１、０．１、１，１０μＭの濃度でそれぞれの化合物を処置し、さらに４日後に細胞を固定した後、軸索（ｐＮＦ−Ｈ陽性）の細胞あたりの長さを免疫染色によって検討した。【０１３３】
結果を図２に示す。なお、図２において、「Cont」はコントロール（Ａβ（２５−３５）の処置なし）、「Veh」は溶媒のみ、「Naringenin」はナリンゲニン、「Naringenin-４’-O」はナリンゲニン−４’−Ｏ−グルクロニド、「Naringenin-7-O」はナリンゲニン−７’−Ｏ−グルクロニドを示し、値はコントロールの値を１００とし、μｍ／ニューロンで換算したものである。【０１３４】
図２の結果から明らかなように、Ａβ（２５−３５）による軸索萎縮に対して、ナリンゲニン、ナリンゲニン−４’−Ｏ−グルクロニド、ナリンゲニン−７’−Ｏ−グルクロニドのいずれにおいても再伸展活性が認められた。【０１３５】
以下の実施例では、ナリンゲニンを含有することが知られている骨砕補について調べた。【０１３６】
（実施例３）
新奇物体認識試験の後、各マウスを麻酔し、冷却した生理食塩水で経心臓灌流した。全脳を慎重に頭蓋骨から外し、４％パラホルムアルデヒドに１晩浸けたのち３０％スクロース−ＰＢＳに浸し、−３０℃で保存した。脳をクライオスタット（ＣＭ３０５０Ｓ、ライカ（Ｌｅｉｃａ）社、ハイデルベルク、ドイツ）を用いて２０μｍの連続した冠状切片に切り出した。【０１３７】
スライスは４％パラホルムアルデヒドで固定し、Ａβ（１−４０／４２）（１：３００）に対するポリクローナル抗体（ケミコン（Ｃｈｅｍｉｃｏｎ）、テメキュラ（Ｔｅｍｅｃｕｌａ）、カリフォルニア州、米国）、ｐＮＦ−Ｈ（１：３００）に対するモノクローナル抗体（コバンス（Ｃｏｖａｎｃｅ）、エメリーヴィル（Ｅｍｅｒｙｖｉｌｌｅ）、カリフォルニア州、米国）を用い、４℃で２０時間染色した。二次抗体として、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ４８８標識ヤギ抗ウサギＩｇＧ抗体（１：３００）とＡｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ５６８標識ヤギ抗マウス抗体（１：３００）（モレキュラープローブス（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ）社、ユージーン（Ｅｕｇｅｎｅ）、オレゴン州、米国）を用いた。【０１３８】
軸索及びＡβ（１−４０／４２）の蛍光画像は、蛍光顕微鏡（ＢＸ−６１）を使用して３２４μｍ×４３０μｍで撮影した。【０１３９】
細胞外アミロイド斑の面積は、画像解析ソフトウェアＩｍａｇｅＪ（ｈｔｔｐ：／／ｒｓｂｗｅｂ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／ｉｊ）を用いて測定した。ｐＮＦ−Ｈ陽性の肥大化して軸索終末部の面積は、すべてのアミロイド斑に対してＩｍａｇｅＪを用いて測定した。【０１４０】
なお、骨砕補水エキスは生理食塩水に溶解して投与量を５００ｍｇ／ｋｇ／日として１日１回、５ＸＦＡＤマウス（６−８か月齢、雄性及び雌性）に３１日間、経口投与した。経口投与する薬液の量は、１０ｍｌ／ｋｇ体重とした。【０１４１】
結果を図３〜１０に示す。なお、図３〜１０において、「Ｗｉｌｄ」は野生型マウス、「５ＸＦＡＤ」は「５ＸＦＡＤマウス」、「Ｖｅｈ」は溶媒のみ、「Ｅｘｔ５００」は骨砕補水エキスを５００ｍｇ／ｋｇの割合で投与した群（マウス）を示す。【０１４２】
図３〜１０の結果から明らかなように、前頭前皮質、嗅周囲皮質、海馬ＣＡ１、海馬歯状回のいずれの部位においても、アミロイドプラークは野生型マウスでは見られないのに対し、５ＸＦＡＤマウスでは増加していた。【０１４３】
一方、骨砕補水エキス５００ｍｇ／ｋｇ投与群では、有意にアミロイドプラーク面積が減少した。またアミロイドプラーク近傍に観察される肥大化した変性軸索終末部の面積を定量したところ、前頭前皮質、嗅周囲皮質、海馬ＣＡ１、海馬歯状回のいずれの部位においても、変性軸索は野生型マウスでは見られないのに対し、５ＸＦＡＤマウスでは増加していた。骨砕補水エキス５００ｍｇ／ｋｇ投与群では、これが減少する傾向が示された。【０１４４】
（実施例４）
骨砕補水エキスを、生理食塩水に溶解して、投与量を５００ｍｇ／ｋｇ／日として、１日１回、５ＸＦＡＤマウス（４５週齢、オス）に経口投与した。溶媒のみを投与した５ＸＦＡＤマウス群（４５週齢、オス）、および溶媒のみを投与した野生型マウス群（４５週齢、オス）も設けた。【０１４５】
経口投与する薬液の量は、１０ｍｌ／ｋｇ体重とした。投与期間は、２２日間とした。このマウスに対し、物体認知記憶試験を実施し、骨砕補水エキス投与群において記憶改善作用が認められることを確認した後、マウスの大脳皮質を還流脱血後に摘出しライセートを作製した。【０１４６】
骨砕補水エキスの直接結合タンパク質探索実験により、Ｃｏｌｌａｐｓｉｎ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｍｅｄｉａｔｏｒ  ｐｒｏｔｅｉｎ−２  （ＣＲＭＰ２、別名；ｄｉｈｙｄｒｏｐｙｒｉｍｉｄｉｎａｓｅ−ｒｅｌａｔｅｄ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ２、ＴＯＡＤ−６４）タンパク質の関与を本実施例に先立ち見出していた。【０１４７】
大脳皮質ライセートにおける、ＣＲＭＰ２リン酸化の程度をウェスタンブロッティング法により検討した。用いた抗体はＣＲＭＰ２の５１４番アミノ酸のスレオニン（ｔｈｒｅｏｎｉｎｅ）のリン酸化を検出する抗体を用いた。【０１４８】
結果を図１１に示す。なお、図１１において、「Ｗｉｌｄ」は野生型マウス、「５ＸＦＡＤ」は「５ＸＦＡＤマウス」、「Ｖｅｈ」は溶媒のみ、「Ｅｘｔ」は骨砕補水エキスを５００ｍｇ／ｋｇの割合で投与した群（マウス）を示す。【０１４９】
図１１から明らかなように、野生型マウスと比較して５ＸＦＡＤマウスの溶媒投与群では、ＣＲＭＰ２リン酸化が亢進し、一方、骨砕補水エキス投与した５ＸＦＡＤマウスではＣＲＭＰ２のリン酸化程度が有意に減少した。
ＣＲＭＰ２のリン酸化減少は、軸索伸展の促進につながるメカニズムとして既に認識されているため、骨砕補水エキス投与によるマウス脳内のＣＲＭＰ２リン酸化抑制が、骨砕補水エキスによる軸索伸長、ならびにそれによる記憶亢進の機序の一端であることは明らかである。【０１５０】
（実施例５）
骨砕補に含まれる成分を分析し、どの成分が軸索伸展に寄与しうるかについて、以下のように調べた。【０１５１】
まず、骨砕補水エキスを滅菌精製水に溶解した。マウス大脳皮質神経細胞は胎生１４日齢のｄｄＹマウスから作製した。【０１５２】
骨砕補水エキスを、さらに、石油エーテル画分、酢酸エチル画分、ｎ−ブタノール画分、水溶性画分に分画した。【０１５３】
初代培養したマウス大脳皮質神経細胞の培養３日目に、１０μＭＡβ（２５−３５）を処置し、その３日後に、１又は１０μｇ／ｍＬの濃度でそれぞれの画分を処置し、さらに４日後に細胞を固定した後、軸索（ｐＮＦ−Ｈ陽性）と樹状突起（ＭＡＰ２陽性）の細胞あたりの長さを免疫染色によって検討した。【０１５４】
結果を図１２に示す。図１２において、「Cont」はコントロール、「Veh」は溶媒のみ、「Ｐ．ｅ．」は石油画分、「ＥｔＯＡｃ」は酢酸エチル画分、「ＢｕＯＨ」はｎ−ブタノール画分、「Ｗａｔｅｒ」は水溶性画分を示し、値はコントロールの値を１００とし、μｍ／ニューロンで換算したものである。【０１５５】
図１２から明らかなように、Ａβ２５−３５未処置細胞と比較してＡβ２５−３５細胞では、軸索の密度が有意に減少していた。いずれの画分でも軸索伸展傾向が認められたが、特にｎ−ブタノール画分（１０μｇ／ｍＬ）の後処置によって、有意に軸索が伸展した。【０１５６】
（実施例６）
実施例４で得られたｎ−ブタノール画分を詳細に分析し、化合物レベルでどの成分が軸索伸展に寄与しうるかについて、以下のように調べた。【０１５７】
まず、（Ａ）ｎ−ブタノール画分をシリカゲルで細分して５つの化合物を単離し、これらが、ナリンゲニン（１）、ネオエリオシトリン（２）、５，７−ジヒドロキシクロモン−７−Ｏ−ネオヘスペリドシド（４）、及びプロトカテク酸（５）であることを、ＬＣ−ＭＳ質量解析の結果から同定した。【０１５８】
なお、ｎ−ブタノール画分のＬＣ−ＭＳのチャートを図１３に、同定した各化合物の構造を下記式に示す。
【化５】
2017030167.tif 000006
【０１５９】
そして、初代培養したマウス大脳皮質神経細胞の培養３日目に、１０μＭ  Ａβ（２５−３５）を処置し、その３日後に、１又は１０μＭの濃度で、それぞれ５つの化合物を処置し、さらに４日後に細胞を固定した後、軸索（ｐＮＦ−Ｈ陽性）と樹状突起（ＭＡＰ２陽性）の細胞あたりの長さを免疫染色によって検討した。【０１６０】
結果を図１４に示す。なお、図１４において、「Cont」はコントロール、「Veh」は溶媒のみ、「１」などの数字は各化合物を示し、値はコントロールの値を１００とし、μｍ／ニューロンで換算したものである。【０１６１】
図１４から明らかなように、Ａβ２５−３５未処置細胞と比較してＡβ２５−３５細胞では、軸索の密度が有意に減少していたが、化合物１〜５の処置によって、軸索が伸展した。特に、エリオジクチオールの配糖体であるネオエリオシトリン（化合物２）、コーヒー酸の配糖体である化合物４では、軸索伸展効果が顕著であった。【０１６２】
（実施例７）
骨砕補水エキスを生理食塩水に溶解して投与量を５００ｍｇ／ｋｇ／日として１日１回、あるいはエゾウコギ葉水エキスを生理食塩水に溶解して５００ｍｇ／ｋｇ／日として１日１回、あるいは骨砕補水エキス（５００ｍｇ／ｋｇ／日）とエゾウコギ葉水エキス（５０ｍｇ／ｋｇ／日）を同時に１日１回、５ＸＦＡＤマウスに経口投与した。【０１６３】
なお、エゾウコギ葉エキスは、ウコギ科のEleutherococcus senticosusの葉を８５度の水に３０分間浸潤し濾過したものを凍結乾燥して用いた。【０１６４】
５ＸＦＡＤマウスはメス、２７−５６週齢、対照群の野生型マウスはメス、５２週齢のものを用いた。経口投与する薬液の量は、１０ｍＬ／ｋｇ体重とした。投与期間は、１５日間とした。このマウスに対し、物体認知記憶試験を実施した。また、トレーニング段階とテスト段階のインターバルは１時間（テスト１）と２４時間（テスト２）の２条件にした。【０１６５】
結果を図１５に示す。なお、図１５において、「Ｗｉｌｄ」は野生型マウス、「５ＸＦＡＤ」は「５ＸＦＡＤマウス」、「Ｖｅｈ」は溶媒のみ、「Kotsusaiho」は骨砕補水エキスのみを投与した群、「Ezoukogi」はエゾウコギ葉水エキスのみを投与した群、「Kotsu/ Ezoukogi」は骨砕補水エキス及びエゾウコギ葉水エキスの双方を投与した群を示す。【０１６６】
図１５の結果から明らかなように、野生型マウスではテスト１でもテスト２でも物体認知記憶が維持されているのに対し、５ＸＦＡＤマウスの溶媒投与群では、記憶障害が生じた。【０１６７】
一方、骨砕補水エキス単独投与群、エゾウコギ葉水エキス単独投与群ではインターバル時間が１時間と短いときには記憶障害の改善が示されたが、インターバル時間が２４時間のテスト２では記憶改善効果が見られなくなった。一方、骨砕補水エキスとエゾウコギ葉水エキス同時投与群では、テスト１でもテスト２でも記憶障害改善作用が有意に認められた。【０１６８】
この結果は、骨砕補水エキス及びエゾウコギ葉水エキスは単独でも、記憶改善効果が得られるが、骨砕補水エキスとエゾウコギ葉水エキスとを併用することで、相乗的により強力な記憶改善効果が得られることを示している。【０１６９】
（実施例８）
エゾウコギ葉水エキスを、生理食塩水に溶解して、投与量を５００ｍｇ／ｋｇ／日として、１日１回、正常マウス（ｄｄＹ，雄性、７週齢）に経口投与した。経口投与する薬液の量は、１０ｍＬ／ｋｇ体重とした。投与期間は、２７日間とした。
なお、エゾウコギ葉水エキスは、ウコギ科のEleutherococcus senticosusの葉を８５度の水に３０分間浸潤し濾過したものを凍結乾燥して用いた。
このマウスに対し、物体認知記憶試験を実施した。トレーニングは投与２４日目、テストは投与２７日目に実施した。トレーニングとテストのインターバルは７２時間とした。
結果を図１６に示す。なお、図１６において、「Control」や溶媒のみを投与した対照群、「Extract」はエゾウコギ葉水エキス投与群、「Training」はトレーニング、「Test」はテストを示す。
図１６の結果から明らかなように、溶媒のみを投与した対照群と比較すると、エゾウコギ葉水エキス投与群では有意に、正常マウスの物体認知記憶が亢進した。
【産業上の利用可能性】
【０１７０】
本発明では、記憶力や認知機能の向上又は改善などに有用な剤や組成物を得ることができる。
【図１】
2017030167.tif 000007
【図２】
2017030167.tif 000008
【図３】
2017030167.tif 000009
【図４】
2017030167.tif 000010
【図５】
2017030167.tif 000011
【図６】
2017030167.tif 000012
【図７】
2017030167.tif 000013
【図８】
2017030167.tif 000014
【図９】
2017030167.tif 000015
【図１０】
2017030167.tif 000016
【図１１】
2017030167.tif 000017
【図１２】
2017030167.tif 000018
【図１３】
2017030167.tif 000019
【図１４】
2017030167.tif 000020
【図１５】
2017030167.tif 000021
【図１６】
2017030167.tif 000022
【手続補正書】
【提出日】平成29年1月19日(2017.1.19)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ナリンゲニン、エリオジクチオール、５，７−ジヒドロキシクロモン、コーヒー酸、プロトカテク酸、これらの配糖体、及びこれらの塩から選択された少なくとも１種の成分（Ａ）及びエゾウコギ成分（Ｂ）を含み、下記の（１）、（２）及び（３）から選択された少なくとも１つの用途に使用するための剤。
（１）神経突起の修復及び／又は伸展
（２）記憶力及び／又は認知機能の向上又は改善
（３）神経疾患の予防及び／又は治療
【請求項２】
ナリンゲニン、エリオジクチオール、５，７−ジヒドロキシクロモン、コーヒー酸、プロトカテク酸、これらの配糖体、及びこれらの塩から選択された少なくとも１種の成分（Ａ）と、エゾウコギ成分（Ｂ）とを含む組成物。
【請求項３】
下記の（１）、（２）及び（３）から選択された少なくとも１つの用途に使用するための組成物である請求項２記載の組成物。
（１）神経突起の修復及び／又は伸展
（２）記憶力及び／又は認知機能の向上又は改善
（３）神経疾患の予防及び／又は治療
【請求項４】
成分（Ａ）が、ナリンゲニン、ナリンゲニンの配糖体、及びこれらの塩から選択された少なくとも１以上の成分を含む請求項１〜３のいずれかに記載の剤又は組成物。
【請求項５】
成分（Ａ）が、ナリンゲニン、ナリンギン、ナリンゲニングルクロニド、及びこれらの薬学的に許容される塩から選択された少なくとも１以上の成分を含む請求項１〜４のいずれかに記載の剤又は組成物。
【請求項６】
成分（Ａ）を含有する成分として、骨砕補成分を含む請求項１〜５のいずれかに記載の剤又は組成物。
【請求項７】
成分（Ｂ）において、エゾウコギが少なくとも葉を含む請求項１〜６のいずれかに記載の剤又は組成物。
【請求項８】
成分（Ａ）として骨砕補エキスを含み、かつ成分（Ｂ）としてエゾウコギエキスを含み、骨砕補エキスとエゾウコギエキスとの割合が、前者／後者（重量比）＝１／０．０１〜１／１００である請求項１〜７のいずれかに記載の剤又は組成物。
【請求項９】
さらに、ジオスゲニン類、ジヒドロキシビタミンＤ３、及びデソノミンから選択された少なくとも１つの成分（Ｃ）と組み合わせて用いる請求項１〜８のいずれかに記載の剤又は組成物。
【請求項１０】
成分（Ａ）及び／又は成分（Ｂ）と成分（Ｃ）との割合が、前者／後者（重量比）＝１／０．０１〜１／１００である請求項９記載の剤又は組成物。
【請求項１１】
請求項１〜１０のいずれかに記載の剤又は組成物を含有する飲食品。
【請求項１２】
下記の（１）、（２）及び（３）から選択された少なくとも１つの用途に使用するための飲食品である請求項１１記載の飲食品。
（１）神経突起の修復及び／又は伸展
（２）記憶力及び／又は認知機能の向上又は改善
（３）神経疾患の予防及び／又は治療
【請求項１３】
サプリメント、健康食品、機能性表示食品、栄養機能食品又は特定保健用食品である請求項１１又は１２記載の飲食品。
【請求項１４】
骨砕補エキスを１〜９０重量％含む請求項１１〜１３のいずれかに記載の飲食品。
【請求項１５】
エゾウコギエキスを１〜９０重量％含む請求項１１〜１４のいずれかに記載の飲食品。
【請求項１６】
骨砕補エキスを１〜９０重量％、エゾウコギエキスを１〜９０重量％含み、骨砕補エキスとエゾウコギエキスとの割合が、前者／後者（重量比）＝１／０．０１〜１／１００である請求項１１〜１５のいずれかに記載の飲食品。
【手続補正書】
【提出日】平成29年5月18日(2017.5.18)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ナリンゲニン、ナリンゲニンの配糖体、及びこれらの塩から選択された少なくとも１種の成分（Ａ）及びエゾウコギ成分（Ｂ）を含み、成分（Ｂ）が、エゾウコギ、及びエゾウコギエキスから選択された少なくとも１種であり、前記エゾウコギ及び前記エゾウコギエキスにおけるエゾウコギが、少なくとも葉を含み、下記の（１）、（２）及び（３）から選択された少なくとも１つの用途に使用するための剤。
（１）神経突起の修復及び／又は伸展
（２）記憶力及び／又は認知機能の向上又は改善
（３）神経疾患の予防及び／又は治療
【請求項２】
ナリンゲニン、ナリンゲニンの配糖体、及びこれらの塩から選択された少なくとも１種の成分（Ａ）と、エゾウコギ成分（Ｂ）とを含み、成分（Ｂ）が、エゾウコギ、及びエゾウコギエキスから選択された少なくとも１種であり、前記エゾウコギ及び前記エゾウコギエキスにおけるエゾウコギが、少なくとも葉を含み、下記の（１）、（２）及び（３）から選択された少なくとも１つの用途に使用するための組成物。
（１）神経突起の修復及び／又は伸展
（２）記憶力及び／又は認知機能の向上又は改善
（３）神経疾患の予防及び／又は治療。
【請求項３】
成分（Ａ）が、ナリンゲニン、ナリンギン、ナリンゲニングルクロニド、及びこれらの薬学的に許容される塩から選択された少なくとも１以上の成分を含む請求項１又は２に記載の剤又は組成物。
【請求項４】
成分（Ａ）を含有する成分として、骨砕補成分を含む請求項１〜３のいずれかに記載の剤又は組成物。
【請求項５】
成分（Ａ）として骨砕補エキスを含み、かつ成分（Ｂ）としてエゾウコギエキスを含み、骨砕補エキスとエゾウコギエキスとの割合が、前者／後者（重量比）＝１／０．０１〜１／１００である請求項１〜４のいずれかに記載の剤又は組成物。
【請求項６】
さらに、ジオスゲニン類、ジヒドロキシビタミンＤ３、及びデノソミンから選択された少なくとも１つの成分（Ｃ）と組み合わせて用いる請求項１〜５のいずれかに記載の剤又は組成物。
【請求項７】
成分（Ａ）及び／又は成分（Ｂ）と成分（Ｃ）との割合が、前者／後者（重量比）＝１／０．０１〜１／１００である請求項６記載の剤又は組成物。
【請求項８】
請求項１〜７のいずれかに記載の剤又は組成物を含有し、下記の（１）、（２）及び（３）から選択された少なくとも１つの用途に使用するための飲食品。
（１）神経突起の修復及び／又は伸展
（２）記憶力及び／又は認知機能の向上又は改善
（３）神経疾患の予防及び／又は治療
【請求項９】
サプリメント、健康食品、機能性表示食品、栄養機能食品又は特定保健用食品である請求項８記載の飲食品。
【請求項１０】
骨砕補エキスを１〜９０重量％含む請求項８又は９記載の飲食品。
【請求項１１】
エゾウコギエキスを１〜９０重量％含む請求項８〜１０のいずれかに記載の飲食品。
【請求項１２】
骨砕補エキスを１〜９０重量％、エゾウコギエキスを１〜９０重量％含み、骨砕補エキスとエゾウコギエキスとの割合が、前者／後者（重量比）＝１／０．０１〜１／１００である請求項８〜１１のいずれかに記載の飲食品。
【国際調査報告】
2017030167.tif 000023
2017030167.tif 000024
2017030167.tif 000025
2017030167.tif 000026
2017030167.tif 000027
2017030167.tif 000028
2017030167.tif 000029
2017030167.tif 000030
2017030167.tif 000031
2017030167.tif 000032
2017030167.tif 000033
2017030167.tif 000034
2017030167.tif 000035
2017030167.tif 000036