(57)【要約】本発明は、これまで未知であった黄色花、白色花、二重、覆輪、かすりの形質の遺伝型を含む、トルコギキョウの遺伝様式を解明し、さらに多様な花色および／または花形のトルコギキョウの新品種を作出する方法を提供することを課題とする。  トルコギキョウの花色形質および／または花形形質に対応する遺伝子型を用いるトルコギキョウの新品種作出方法であって、該遺伝子型が、  （ａ）フラボノイド生合成の色素前駆物質のＢ環の水酸化を制御し、トルコギキョウの主要アントシアニジン色素であるペラルゴニジン（Ｐｇｎ）、シアニジン（Ｃｙｎ）、またはデルフィニジン（Ｄｐｎ）の合成に関与する複対立遺伝子の遺伝子型ＨＸＨＸ（ここで、ＨＸは、ＨＴ、ＨＦ、ＨＤ、ＨＺ、ＨＯ、またはＨＥで表わされる複対立遺伝子を示す。）；  （ｂ）トルコギキョウの主要アントシアニジン色素であるペラルゴニジン（Ｐｇｎ）、シアニジン（Ｃｙｎ）、またはデルフィニジン（Ｄｐｎ）の遺伝子型Ｐｇ／ｐｇ・Ｃｙ／ｃｙ・Ｄｐ／ｄｐ；および  （ｃ）有色花／白色花の遺伝子型Ａｎｓ／ａｎｓ；からなるＡｎｓ／ａｎｓ・ＨＸＨＸ・Ｐｇ／ｐｇ・Ｃｙ／ｃｙ・Ｄｐ／ｄｐであるか、または、Ａｎｓ／ａｎｓ・ＨＸＨＸ・Ｐｇ／ｐｇ・Ｃｙ／ｃｙ・Ｄｐ／ｄｐに、黄色花および白色花の組み合わせを決定する遺伝子型ＹＸＹＸ、八重型、二重型、および一重型の組み合わせを決定する遺伝子型ＤＸＤＸ、覆輪花／全色花の遺伝子型Ｅ／ｅ、または全色花／かすり花の遺伝子型Ｂ／ｂのいずれか１種以上を組み合わせた遺伝子型である、上記方法。【特許請求の範囲】
【請求項１】
トルコギキョウの花色形質および／または花形形質に対応する遺伝子型を用いるトルコギキョウの新品種作出方法であって、該遺伝子型が、
（ａ）フラボノイド生合成の色素前駆物質のＢ環の水酸化を制御し、トルコギキョウの主要アントシアニジン色素であるペラルゴニジン（Ｐｇｎ）、シアニジン（Ｃｙｎ）、またはデルフィニジン（Ｄｐｎ）の合成に関与する複対立遺伝子の遺伝子型ＨＸＨＸ（ここで、ＨＸは、ＨＴ、ＨＦ、ＨＤ、ＨＺ、ＨＯ、またはＨＥで表わされる複対立遺伝子を示す。）；
（ｂ）トルコギキョウの主要アントシアニジン色素であるペラルゴニジン（Ｐｇｎ）、シアニジン（Ｃｙｎ）、またはデルフィニジン（Ｄｐｎ）の遺伝子型Ｐｇ／ｐｇ・Ｃｙ／ｃｙ・Ｄｐ／ｄｐ；および
（ｃ）有色花／白色花の遺伝子型Ａｎｓ／ａｎｓ；
からなるＡｎｓ／ａｎｓ・ＨＸＨＸ・Ｐｇ／ｐｇ・Ｃｙ／ｃｙ・Ｄｐ／ｄｐである、上記方法。
【請求項２】
前記遺伝子型が、さらに下記の遺伝子型：
（ｄ）黄色花および白色花の組み合わせを決定する遺伝子型ＹＸＹＸ（ここで、ＹＸはＹＣ、ＹＳ、ＹＷで示される複対立遺伝子であって、ＹＣＹＣは黄色花のホモ型、ＹＣＹＳ（またはＹＳＹＣ）は黄色花のヘテロ型、ＹＣＹＷ（またはＹＷＹＣ）は黄色花のヘテロ型、ＹＷＹＷは白色花のホモ型を示す。）；
（ｅ）八重型、二重型、および一重型の組み合わせを決定する遺伝子型ＤＸＤＸ（ここで、ＤＸはＤＤ、ＤＳ、ＤＷで示される複対立遺伝子であって、ＤＤＤＤは八重花のホモ型、ＤＤＤＳ（またはＤＳＤＤ）は八重花のヘテロ型、ＤＳＤＳは一重花のホモ型、ＤＤＤＷ（またはＤＷＤＤ）は二重花のヘテロ型、ＤＷＤＳ（またはＤＳＤＷ）は一重花のヘテロ型、ＤＷＤＷは一重花のホモ型（野生型）を示す。）；
（ｆ）覆輪花／全色花の遺伝子型Ｅ／ｅ；および
（ｇ）全色花／かすり花の遺伝子型Ｂ／ｂ；
からなる群から選ばれる少なくとも１種の遺伝子型を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記遺伝子型が、Ｂ／ｂ・Ａｎｓ／ａｎｓ・ＨＸＨＸ・Ｐｇ／ｐｇ・Ｃｙ／ｃｙ・Ｄｐ／ｄｐ・ＹＸＹＸである、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記遺伝子型が、ＤＸＤＸ・Ｅ／ｅ・Ｂ／ｂ・Ａｎｓ／ａｎｓ・ＨＸＨＸ・Ｐｇ／ｐｇ・Ｃｙ／ｃｙ・Ｄｐ／ｄｐ・ＹＸＹＸである、請求項２に記載の方法。
【請求項５】
前記遺伝子型Ａｎｓ／ａｎｓ・ＨＸＨＸ・Ｐｇ／ｐｇ・Ｃｙ／ｃｙ・Ｄｐ／ｄｐが下記経路式で表される反応系に関与し、遺伝するものである、請求項１〜４のいずれかに記載の方法。
【化１】
2016052760.tif 000018
（ここで、ＨＴ、ＨＦ、ＨＤ、ＨＺ、ＨＯ、ＨＥは、フラボノイド生合成の色素前駆物質のＢ環の水酸化を制御する複対立遺伝子型を示す。ＨＴ、ＨＦ、ＨＤ、ＨＺ、ＨＯ、ＨＥの６つの複対立遺伝子は、それぞれフラボノイド３’−ヒドロキシラーゼとフラボノイド３’，５’−ヒドロキシラーゼによるＢ環の３’，４’位の水酸化、４’位の水酸化、３’，４’，５’位の水酸化、３’，４’，５’位の水酸化、３’，４’位と３’，４’，５’位の水酸化、および３’，４’，５’位の水酸化を制御する。Ｐｇ／ｐｇ、Ｃｙ／ｃｙおよびＤｐ／ｄｐは、Ｐｇｎ、Ｃｙｎ、Ｄｐｎの生合成に関与するジヒドロフラボノールリダクターゼ（ＤＦＲ）の発現に対立する遺伝子座がそれぞれに存在することを示す。Ａｎｓ／ａｎｓは、Ｐｇｎ、Ｃｙｎ、Ｄｐｎの生合成に関与するアントシアニジンシンターゼ（ＡＮＳ）の発現に対立する遺伝子座が存在することを示す。）
【請求項６】
トルコギキョウのＦ１品種、またはＦ１品種を作出するためのトルコギキョウの種子親系統およびトルコギキョウの花粉親系統を作出するための、請求項１〜５のいずれかに記載の方法。
【請求項７】
花粉親の配偶子を行とし、種子親の配偶子を列とする下記の早見表Ａまたは早見表Ｂに基づいて複対立遺伝子の組み合わせを決定し、目的とする花色のトルコギキョウを作出する、請求項１〜６のいずれかに記載の方法。
【表１】
2016052760.tif 000019
【請求項８】
花粉親の配偶子を行とし、種子親の配偶子を列とする下記の早見表Ｃ〜Ｆのいずれか１種以上の表に基づいて複対立遺伝子の組み合わせを決定し、目的とする花色および／または花形のトルコギキョウを作出する、請求項１〜６のいずれかに記載の方法。
【表２】
2016052760.tif 000020
2016052760.tif 000021
2016052760.tif 000022
2016052760.tif 000023
2016052760.tif 000024
【請求項９】
請求項１〜７のいずれかに記載の方法によって作出されたトルコギキョウのＦ１品種、またはＦ１品種を作出するためのトルコギキョウの種子親系統およびトルコギキョウの花粉親系統。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、トルコギキョウの花色形質および／または花形形質に対応する遺伝子型を用いてトルコギキョウの新品種を作出する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
アントシアニン類はフラボノイド化合物の一種であり、植物の花、果実、葉などに広く分布する、赤、紫、青などの呈色に関係する色素配糖体である。アントシアニン類を塩酸で加水分解すると、糖類とアグリコン部であるアントシアニジンに分解される（非特許文献１）。また、フラボノイド化合物の一種であるフラボノール配糖体類を塩酸で加水分解すると、同様に、糖類とアグリコン部であるフラボノールに分解される（非特許文献２）。
アントシアニジン類は、植物の花において、フラバノンであるナリンゲニンを出発物質として生合成される。ナリンゲニンに、フラボノイド３’−ヒドロキシラーゼ（Ｆ３’Ｈ）またはフラボノイド３’，５’−ヒドロキシラーゼ（Ｆ３’，５’Ｈ）が作用することによってＢ環の３’位がヒドロキシル化されたエリオディクチオール、Ｂ環の３’位と５’位の両方がヒドロキシル化されたペンタヒドロキシフラバノンが生成される。また、ナリンゲニン、エリオディクチオール、ペンタヒドロキシフラバノンは、フラボノイド３−ヒドロキシラーゼ（Ｆ３Ｈ）の作用によりＣ環の３位がヒドロキシル化され、それぞれジヒドロケンフェロール、ジヒドロケルセチン、ジヒドロミリセチンが生成される。次に、これらがジヒドロフラボノールリダクターゼ（ＤＦＲ）およびアントシアニジンシンターゼ（ＡＮＳ）の作用を受けて、ペラルゴニジン（Ｐｇｎ）、シアニジン（Ｃｙｎ）、デルフィニジン（Ｄｐｎ）が生成される（非特許文献２）。
アントシアニジン類は、Ｂ環の水酸基が異なることでその呈色が決定される。例えば、一般にアントシアニジン類の化学構造中、Ｂ環の４’位に水酸基が１個有るものはペラルゴニジン（Ｐｇｎ）でオレンジ色〜朱赤色を呈し、Ｂ環の３’，４’位に水酸基が２個有るものはシアニジン（Ｃｙｎ）で赤色〜深紅色を呈し、Ｂ環の３’，４’，５’位に水酸基が３個有るものはデルフィニジン（Ｄｐｎ）で赤紫色〜紫色を呈し、これらが共存することによって様々な花色を発現する（非特許文献３）。
これまでトルコギキョウなどの花卉の花色の遺伝に着目し、その遺伝子型に基づいて、自由に花色を創出する花色育種法が検討されている。例えば、特許文献１には、トルコギキョウの主要花色色素であるペラルゴニジン（Ｐｇｎ）、シアニジン（Ｃｙｎ）、デルフィニジン（Ｄｐｎ）の遺伝の分離から、ペラルゴニジン（Ｐｇｎ）の生合成に関与するジヒドロフラボノールリダクターゼ（ＤＦＲ）とロイコアントシアニジンジオキシゲナーゼ（ＬＤＯＸ）またはアントシアニジンシンターゼ（ＡＮＳ）の酵素反応系の遺伝がＰｇ／ｐｇの優性／劣性の遺伝子によって制御されていること、また、色素前駆体のＢ環の水酸化に関与するフラボノイド３’−ヒドロキシラーゼ（Ｆ３’Ｈ）やフラボノイド３’，５’−ヒドロキシラーゼ（Ｆ３’，５’Ｈ）の遺伝の分離が、ＨＴ、ＨＦ、ＨＤ、ＨＯの４つの複対立遺伝子によって制御されているという新しい法則を見出したことが記載されている。そして、これらの知見に基づき、遺伝子組み換えや照射などによって突然変異を起こす方法ではなく、トルコギキョウの色素遺伝型（ＨＸＨＸ・Ｐｇ／ｐｇ）を用いて新花色を作出する「トルコギキョウの花色遺伝型交配法」が確立されている。
また、特許文献２には、主要アントシアニン色素表現型ＰｇｎＣｙｎＤｐｎ、ＣｙｎＤｐｎ、Ｄｐｎ、ＰｇｎＣｙｎ、Ｃｙｎ、Ｐｇｎ、Ｎｏｎｅに対応する色素遺伝型として、上記のＨＴ、ＨＦ、ＨＤ、ＨＯの４つの複対立遺伝子にＨＺを加えた５つの複対立遺伝子と、Ｐｇ／ｐｇ・Ｃｙ／ｃｙ・Ｄｐ／ｄｐの両方を用いた色素遺伝型（ＨＸＨＸ・Ｐｇ／ｐｇ・Ｃｙ／ｃｙ・Ｄｐ／ｄｐ）に基づいて作出したい花色を予測し、予測した花色に基づいて交配する花き植物の花粉親と種子親とを選択し、選択した花粉親と種子親を交配することによって予測した花色と合致した花色を有する花き植物を作出する方法が報告されている。また、特許文献２には、上記の色素遺伝型に加えて、八重の花冠形質（Ｄ／ｄ）、覆輪の花冠形質（Ｅ／ｅ）の遺伝型も用いて花き植物の花形を予測することが記載されている。
また、特許文献３には、花粉親配偶子及び種子親配偶子由来の上記５つの複対立遺伝子（ＨＴ、ＨＦ、ＨＺ、ＨＤ、ＨＯ）の組み合わせを、各複対立遺伝子に対応するフラボノイド３’，５’−ヒドロキシラーゼ遺伝子のサイズに基づいて開花前の花卉組織から決定し、色素遺伝型（ＨＸＨＸ・Ｐｇ／ｐｇ・Ｃｙ／ｃｙ・Ｄｐ／ｄｐ）について花粉親配偶子及び種子親配偶子間の複対立遺伝子の組み合わせと花色との相関に基づいて開花前の花卉の花色を予測する方法が報告されている。
また、特許文献４には、アントシアニジンシンターゼ（ＡＮＳ）遺伝子中の白色花関連マーカー又は有色花関連マーカーを用いて開花前に又は有色品種から白色花を生じるトルコギキョウを選別する方法が記載されている。
さらに、特許文献５には、トルコギキョウ由来のフラボノイド３’−ヒドロキシラーゼ遺伝子（ＥｇＦ３’Ｈ）を新たに同定し、該遺伝子を用いてアサガオの品種‘バイオレット’を形質転換したところ、アサガオの品種‘バイオレット’には認められなかった赤色系色素のシアニジンを蓄積させることができたことから、当該遺伝子が種々の花卉類の花色を赤色に変換させることのできる機能を有した遺伝子として利用可能であることが記載されている。
このように、これまでトルコギキョウの花色や花形の遺伝様式について幾つかの知見があるが、その全容が解明されているわけではない。例えば、白色花および／または黄色花の遺伝様式については不明な点が多く、白色花と黄色花を交配すると、後代花色が白色花となる場合と黄色花になる場合との二通りがあって、白色花と黄色花を確実に遺伝させＦ１品種を１００％作出する方法がない。また、かすり花の遺伝様式については不明な点が多く、また、かすり花と白色花と黄色花の３者の関係についても全く不明である。
さらに、花形に関する八重や一重の花冠形質の遺伝様式は解明されていたが、二重の花冠形質の遺伝様式については不明な点が多く、二重花を有するトルコギキョウを確実に遺伝させＦ１品種を１００％作出する方法がない。また、トルコギキョウの覆輪花の遺伝の存在は知られていたが、二重花との関係は明らかではない。
トルコギキョウは現在年間１億本もの切り花が生産されており、この１５年間１本あたり１００円と安定した価格で取引されており、今後もこの傾向が続くと予想されるため、国内はもとより海外での生産の伸びと市場の安定性が期待される。よって、観賞用としてさらに魅力的かつ多様な花色や花形を有するトルコギキョウの新品種を作出することが期待される。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】特開２００４−２３６５１６号「トルコギキョウの花色遺伝型交配法」
【特許文献２】特許第４３１４２４１号「花き植物の作出方法」
【特許文献３】特許第５０３９９６７号「花色の予測方法」
【特許文献４】ＷＯ２０１０／１４３７４９「白色花を生じるトルコギキョウを選別する方法」
【特許文献５】特開２０１１−１９４３２「トルコギキョウ由来のフラボノイド３’−ヒドロキシラーゼとその利用」
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】村上孝夫、「アントシアニン誘導体」、天然物の構造と化学、廣川書店、１９８４年９月、Ｐ．１７０−１７２
【非特許文献２】村上孝夫、「フラボノイド」、天然物の構造と化学、廣川書店、１９８４年９月、Ｐ．１５５−１８５
【非特許文献３】本多利雄と斉藤規夫、「花の色の科学」、現代化学、東京化学同人、１９９８年５月、Ｐ．２５−３２
【発明の概要】
【０００５】
本発明は、これまで未知であった黄色花、白色花、二重、覆輪、かすりの形質の遺伝型を含む、トルコギキョウの遺伝様式を解明し、さらに多様な花色および／または花形のトルコギキョウの新品種を作出する方法を提供することにある。
本発明者らは、上記の課題を解決するために、トルコギキョウの主要アントシアニジン色素であるペラルゴニジン（Ｐｇｎ）、シアニジン（Ｃｙｎ）、またはデルフィニジン（Ｄｐｎ）の遺伝に関し、これまで解明されていなかった黄色花、白色花、二重、覆輪、かすりの形質に着目し、それらの形質遺伝と対応する遺伝子型との関係を明らかにするために、トルコギキョウの自殖や正逆交雑を繰り返し行い、その遺伝の分離を調べた結果、以下の知見を得た。
（ｉ）ペラルゴニジン（Ｐｇｎ）、シアニジン（Ｃｙｎ）、またはデルフィニジン（Ｄｐｎ）の遺伝が、従来知られていた５つの複対立遺伝子（ＨＴ、ＨＦ、ＨＤ、ＨＺ、ＨＯ）に加えてもう一つの新たな複対立遺伝子ＨＥによって制御されていること；
（ｉｉ）全色花／かすり花の遺伝子型Ｂ／ｂおよび有色花／白色花の遺伝子型Ａｎｓ／ａｎｓが劣性ホモ型の遺伝子型（ｂｂａｎｓａｎｓ）を有する個体の場合、黄色花はＹＳＹＳまたはＹＳＹＷの遺伝子型を有する個体（すなわち、ｂｂａｎｓａｎｓＹＳＹＳまたはｂｂａｎｓａｎｓＹＳＹＷの遺伝子型を有する個体）で発現し、白色花はＹＷＹＷの遺伝子型を有する個体（すなわち、ｂｂａｎｓａｎｓＹＷＹＷの遺伝子型を有する個体）で発現すること；
（ｉｉｉ）黄色花がＹＣ、ＹＳ、ＹＷの３つの対立する遺伝子型の組み合わせによる複対立遺伝の法則で制御され、全色花／かすり花の遺伝子型Ｂ／ｂおよび有色花／白色花の遺伝子型Ａｎｓ／ａｎｓの優劣性に関わらず、黄色花がＹＣＹＣ、ＹＣＹＳ、またはＹＣＹＷの遺伝子型を有する個体で発現すること；
（ｉｖ）白色花がＡｎｓ−ＨＦＨＦｐｇｐｇ、ａｎｓａｎｓＢ−ＨＸＨＸ、またはａｎｓａｎｓｂｂＨＸＨＸＹＷＹＷの遺伝子型を有する個体で発現すること；
（ｖ）かすり花がＡｎｓ−Ｂ−の遺伝子型で制御され、Ａｎｓ−ｂｂの遺伝子型を有する個体で発現すること；
（ｖｉ）八重花、二重花、一重花の遺伝がＤＤ、ＤＷ、ＤＳの３つの対立する遺伝子型の組み合わせによる複対立遺伝の法則で制御され、二重花がＤＤＤＷまたはＤＷＤＤの遺伝子型を有する個体で発現すること；
（ｖｉｉ）覆輪の遺伝がＥ／ｅの遺伝子型で制御され、覆輪花がＥＥおよびＥｅの遺伝子型を有する個体で発現すること。
本発明は上記の知見により完成されたものである。
すなわち、本発明は以下の発明を包含する。
（１）トルコギキョウの花色形質および／または花形形質に対応する遺伝子型を用いるトルコギキョウの新品種作出方法であって、該遺伝子型が、
（ａ）フラボノイド生合成の色素前駆物質のＢ環の水酸化を制御し、トルコギキョウの主要アントシアニジン色素であるペラルゴニジン（Ｐｇｎ）、シアニジン（Ｃｙｎ）、またはデルフィニジン（Ｄｐｎ）の合成に関与する複対立遺伝子の遺伝子型ＨＸＨＸ（ここで、ＨＸは、ＨＴ、ＨＦ、ＨＤ、ＨＺ、ＨＯ、またはＨＥで表わされる複対立遺伝子を示す。）；
（ｂ）トルコギキョウの主要アントシアニジン色素であるペラルゴニジン（Ｐｇｎ）、シアニジン（Ｃｙｎ）、またはデルフィニジン（Ｄｐｎ）の遺伝子型Ｐｇ／ｐｇ・Ｃｙ／ｃｙ・Ｄｐ／ｄｐ；および
（ｃ）有色花／白色花の遺伝子型Ａｎｓ／ａｎｓ；
からなるＡｎｓ／ａｎｓ・ＨＸＨＸ・Ｐｇ／ｐｇ・Ｃｙ／ｃｙ・Ｄｐ／ｄｐである、上記方法。
（２）  前記遺伝子型が、さらに下記の遺伝子型：
（ｄ）黄色花および白色花の組み合わせを決定する遺伝子型ＹＸＹＸ（ここで、ＹＸはＹＣ、ＹＳ、ＹＷで示される複対立遺伝子であって、ＹＣＹＣは黄色花のホモ型、ＹＣＹＳ（またはＹＳＹＣ）は黄色花のヘテロ型、ＹＣＹＷ（またはＹＷＹＣ）は黄色花のヘテロ型、ＹＷＹＷは白色花のホモ型を示す。）；
（ｅ）八重型、二重型、および一重型の組み合わせを決定する遺伝子型ＤＸＤＸ（ここで、ＤＸはＤＤ、ＤＳ、ＤＷで示される複対立遺伝子であって、ＤＤＤＤは八重花のホモ型、ＤＤＤＳ（またはＤＳＤＤ）は八重花のヘテロ型、ＤＳＤＳは一重花のホモ型、ＤＤＤＷ（またはＤＷＤＤ）は二重花のヘテロ型、ＤＷＤＳ（またはＤＳＤＷ）は一重花のヘテロ型、ＤＷＤＷは一重花のホモ型（野生型）を示す。）；
（ｆ）覆輪花／全色花の遺伝子型Ｅ／ｅ；および
（ｇ）全色花／かすり花の遺伝子型Ｂ／ｂ；
からなる群から選ばれる少なくとも１種の遺伝子型を含む、（１）に記載の方法。
（３）  前記遺伝子型が、Ｂ／ｂ・Ａｎｓ／ａｎｓ・ＨＸＨＸ・Ｐｇ／ｐｇ・Ｃｙ／ｃｙ・Ｄｐ／ｄｐ・ＹＸＹＸである、（２）に記載の方法。
（４）  前記遺伝子型が、ＤＸＤＸ・Ｅ／ｅ・Ｂ／ｂ・Ａｎｓ／ａｎｓ・ＨＸＨＸ・Ｐｇ／ｐｇ・Ｃｙ／ｃｙ・Ｄｐ／ｄｐ・ＹＸＹＸである、（２）に記載の方法。
（５）  前記遺伝子型Ａｎｓ／ａｎｓ・ＨＸＨＸ・Ｐｇ／ｐｇ・Ｃｙ／ｃｙ・Ｄｐ／ｄｐが下記経路式で表される反応系に関与し、遺伝するものである、（１）〜（４）のいずれかに記載の方法。
【化１】
2016052760.tif 000002
（ここで、ＨＴ、ＨＦ、ＨＤ、ＨＺ、ＨＯ、ＨＥは、フラボノイド生合成の色素前駆物質のＢ環の水酸化を制御する複対立遺伝子型を示す。ＨＴ、ＨＦ、ＨＤ、ＨＺ、ＨＯ、ＨＥの６つの複対立遺伝子は、それぞれフラボノイド３’−ヒドロキシラーゼとフラボノイド３’，５’−ヒドロキシラーゼによるＢ環の３’，４’位の水酸化、４’位の水酸化、３’，４’，５’位の水酸化、３’，４’，５’位の水酸化、３’，４’位と３’，４’，５’位の水酸化、および３’，４’，５’位の水酸化を制御する。Ｐｇ／ｐｇ、Ｃｙ／ｃｙおよびＤｐ／ｄｐは、Ｐｇｎ、Ｃｙｎ、Ｄｐｎの生合成に関与するジヒドロフラボノールリダクターゼ（ＤＦＲ）の発現に対立する遺伝子座がそれぞれに存在することを示す。Ａｎｓ／ａｎｓは、Ｐｇｎ、Ｃｙｎ、Ｄｐｎの生合成に関与するアントシアニジンシンターゼ（ＡＮＳ）の発現に対立する遺伝子座が存在することを示す。）
（６）トルコギキョウのＦ１品種、またはＦ１品種を作出するためのトルコギキョウの種子親系統およびトルコギキョウの花粉親系統を作出するための、（１）〜（５）のいずれかに記載の方法。
（７）花粉親の配偶子を行とし、種子親の配偶子を列とする下記の早見表Ａまたは早見表Ｂに基づいて複対立遺伝子の組み合わせを決定し、目的とする花色のトルコギキョウを作出する、（１）〜（６）のいずれかに記載の方法。
【表１】
2016052760.tif 000003
2016052760.tif 000004
（８）花粉親の配偶子を行とし、種子親の配偶子を列とする下記の早見表Ｃ〜Ｆのいずれか１種以上の表に基づいて複対立遺伝子の組み合わせを決定し、目的とする花色および／または花形のトルコギキョウを作出する、（１）〜（６）のいずれかに記載の方法。
【表２】
2016052760.tif 000005
2016052760.tif 000006
2016052760.tif 000007
2016052760.tif 000008
2016052760.tif 000009
（９）（１）〜（７）のいずれかに記載の方法によって作出されたトルコギキョウのＦ１品種、またはＦ１品種を作出するためのトルコギキョウの種子親系統およびトルコギキョウの花粉親系統。
発明の効果
本発明によれば、これまで未知であった黄色花、白色花、二重、覆輪、かすりの形質の遺伝型を含む、トルコギキョウの花色形質および／または花形形質に対応する遺伝子型を用いるトルコギキョウの新品種作出方法が提供される。本発明の方法を用いることにより、観賞用としてさらに魅力的かつ多様な花色および／または花形のトルコギキョウを作出することができる。
本願は、２０１４年１０月３日に出願された日本国特許出願２０１４−２０４６９５号の優先権を主張するものであり、該特許出願の明細書に記載される内容を包含する。
【図面の簡単な説明】
【０００６】
【図１】図１Ａは一重花、図１Ｂは二重花、図１Ｃは八重花を示す。
【図２】図２Ａは八重花系統（ＤＤＤＤ）、図２Ｂは一重花系統（ＤＷＤＷ）、図２Ｃは、これらの両系統を交配させた二重花のＦ１系統（ＤＤＤＷ）を示す。
【図３】図３Ａは八重花系統（ＤＤＤＤ）、図３Ｂは一重花野生種系統（ＤＷＤＷ）、図３Ｃは、これらの両系統を交配させた二重花のＦ１系統（ＤＤＤＷ）を示す。
【図４】図４Ａは一重花系統（ＤＳＤＳ）、図４Ｂは八重花系統（ＤＤＤＤ）、図４Ｃはこれらの両系統を交配させた八重花のＦ１系統（ＤＤＤＳ）を示す。
【図５】図５Ａは、ＤＤＤＤの遺伝子型を有する八重花系統の自殖後代の八重花（ＤＤＤＤ）、図５Ｂは、ＤＳＤＳの遺伝子型を有する一重花系統の自殖後代の一重花（ＤＳＤＳ）、図５Ｃは、野生種（ＤＷＤＷ）の遺伝子型を有する一重花の系統）の自殖後代の一重花（ＤＷＤＷ）を示す。
【図６】図６Ａは、ＤＤＤＷの遺伝子型を有するＦ１二重花系統の自殖後代の分離を示す（八重：二重：一重）。図６Ｂは、ＤＤＤＳの遺伝子型を有するＦ１八重花系統の自殖後代の分離（八重：一重）を示す。図６Ｃは、ＤＳＤＷのヘテロ遺伝子型を有するＦ１一重花系統の自殖後代の分離（一重）を示す。
【図７】図７Ａは、ＢＢＡｎｓＡｎｓの遺伝子型を有する全色花系統の自殖後代の全色花（ＢＢＡｎｓＡｎｓ）、図７ＢはｂｂＡｎｓＡｎｓの遺伝子型を有するかすり花系統の自殖後代のかすり花（ｂｂＡｎｓＡｎｓ）、図７Ｃは、ＢＢａｎｓａｎｓの遺伝子型を有する白色花系統の自殖後代の白色花（ＢＢａｎｓａｎｓ）、図７Ｄはｂｂａｎｓａｎｓの遺伝子型を有する白色花系統の自殖後代の白色花（ｂｂａｎｓａｎｓ）を示す。
【図８】図８Ａは全色花系統（ＢＢＡｎｓＡｎｓ）、図８Ｂはかすり花系統（ｂｂＡｎｓＡｎｓ）、図８Ｃは、これらの両系統を交配させた全色花のＦ１系統（ＢｂＡｎｓＡｎｓ）、図８Ｄは全色花のＦ１系統の自殖後代の分離（全色花：かすり花）を示す。
【図９】図９Ａは有色花系統（ＢＢＡｎｓＡｎｓ）、図９Ｂは白色花系統（ＢＢａｎｓａｎｓ）、図９Ｃは、これらの両系統を交配させた有色花のＦ１系統（ＢＢＡｎｓａｎｓ）、図９Ｄは有色花のＦ１系統の自殖後代の分離（有色花：白色花）を示す。
【図１０−１】図１０−１のＡはかすり花系統（ｂｂＡｎｓＡｎｓ）、図１０−１のＢは白色花系統（ｂｂａｎｓａｎｓ）、図１０−１のＣは、これらの両系統を交配させたかすり花のＦ１系統（ｂｂＡｎｓａｎｓ）を示す。
【図１０−２】図１０−２のＤは、図１０−１のＣに示すかすり花のＦ１系統（ｂｂＡｎｓａｎｓ）の自殖後代の分離（かすり花：白色）を示す。
【図１１】図１１は、完全ヘテロ遺伝子型を有する全色花系統（ＢｂＡｎｓａｎｓ）の自殖後代の分離（全色花：かすり花：黄色花）を示す。
【図１２】図１２Ａは、ｂｂａｎｓａｎｓＹＳＹＳの遺伝子型を有する黄色花系統の自殖後代の黄色花（ｂｂａｎｓａｎｓＹＳＹＳ）、図１２Ｂはｂｂａｎｓａｎｓの遺伝子型を有する白色花系統の自殖後代の白色花（ｂｂａｎｓａｎｓＹＷＹＷ）を示す。
【図１３】図１３Ａは黄色花系統（ｂｂａｎｓａｎｓＹＳＹＳ）、図１３Ｂは白色花系統（ｂｂａｎｓａｎｓＹＷＹＷ）、図１３Ｃは、これらの両系統を交配させた黄色花のＦ１系統（ｂｂａｎｓａｎｓＹＳＹＷ）を示す。
【図１４】図１４Ａは黄色花系統（ｂｂａｎｓａｎｓＹＳＹＳ）、図１４Ｂは白色花系統（ＢＢａｎｓａｎｓＹＷＹＷ）、図１４Ｃは、これらの両系統を交配させた白色花のＦ１系統（ＢｂａｎｓａｎｓＹＳＹＷ）を示す。
【図１５】図１５Ａは、ＢＢａｎｓａｎｓＹＣＹＣの遺伝子型を有する黄色花系統の自殖後代の黄色花（ＢＢａｎｓａｎｓＹＣＹＣ）、図１５Ｂは、ＢＢＡｎｓａｎｓＨＴＨＴＰｇＰｇＹＣＹＣの遺伝子型を有する黄色地桃色花（オレンジ色花）系統の自殖後代の分離（黄色地桃色花（オレンジ色花）：黄色花）を示す。図１５ＣはＢｂＡｎｓａｎｓＹＣＹＣの遺伝子型を有する黄色地桃色全色花（オレンジ色全色花）系統の自殖後代の分離（黄色地桃色全色花（オレンジ色全色花）：黄色地桃色かすり花（オレンジ色かすり花）：黄色花）を示す。
【図１６】図１６Ａは、ＡｎｓＡｎｓＨＤＨＤの遺伝子型を有する紫色花系統の自殖後代の紫色花（ＡｎｓＡｎｓＨＤＨＤ）、図１６Ｂは、ａｎｓａｎｓＨＤＨＤの遺伝子型を有する白色花系統の自殖後代の白色花（ａｎｓａｎｓＨＤＨＤ）、図１６Ｃは、ＥＥＡｎｓａｎｓＨＤＨＤのヘテロ遺伝子型を有する紫色花系統の自殖後代の分離（紫色花（覆輪）：白色花（覆輪））を示す。
【図１７】図１７Ａは、ＡｎｓＡｎｓＨＯＨＯ遺伝子型を有する藤色花系統の自殖後代の藤色花（ＡｎｓＡｎｓＨＯＨＯ）、図１７Ｂは、ａｎｓａｎｓＨＯＨＯ遺伝子型を有する白色花系統の自殖後代の白色花（ａｎｓａｎｓＨＯＨＯ）、図１７Ｃは、ＡｎｓａｎｓＨＯＨＯのヘテロ遺伝子型を有する藤色花系統の自殖後代の分離（藤色花：白色花）を示す。
【図１８】図１８Ａは、ＡｎｓＡｎｓＨＴＨＴの遺伝子型を有する赤色花系統の自殖後代の赤色花（ＡｎｓＡｎｓＨＴＨＴ）、図１８Ｂは、ＡｎｓａｎｓＨＴＨＴのヘテロ遺伝子型を有する赤色花系統の自殖後代の分離（赤色花：白色花）を示す。
【図１９】図１９Ａは、ＡｎｓＡｎｓＨＦＨＦＰｇＰｇの遺伝子型を有する桃色花系統の自殖後代の桃色花（ＡｎｓＡｎｓＨＦＨＦＰｇＰｇ）、図１９Ｂは、ａｎｓａｎｓＨＦＨＦの遺伝子型を有する白色花系統の自殖後代の白色花（ａｎｓａｎｓＨＦＨＦ）、図１９Ｃは、ＡｎｓａｎｓＨＦＨＦＰｇＰｇのヘテロ遺伝子型を有する桃色花系統の自殖後代の分離（桃色花：白色花）を示す。
【図２０】図２０は、ＡｎｓＡｎｓＨＥＨＥの遺伝子型を有する野生種紫色花系統の自殖後代の紫色花（ＡｎｓＡｎｓＨＥＨＥ）を示す。
【図２１】図２１Ａは、紫色花系統（ＡｎｓＡｎｓＨＤＨＤ）、図２１Ｂは、野生種紫色花系統（ＡｎｓＡｎｓＨＥＨＥ）、図２１Ｃは、これらの両系統を交配させた紫色花のＦ１系統（ＡｎｓＡｎｓＨＥＨＤ）を示す。
【図２２】図２２は、紫色花系統（ＥｇＨｆ２ホモ）、野生種紫色花の２系統（ＥｇＨｆ１ホモ）、これらの両系統を交配させた紫色花のＦ１２系統（ＥｇＨｆ１，２ヘテロ）の電気泳動図を示す。
【図２３】図２３Ａは、藤色花系統（ＡｎｓＡｎｓＨＯＨＯ）、図２３Ｂは、野生種紫色花系統（ＡｎｓＡｎｓＨＥＨＥ）、図２３Ｃは、これらの両系統を交配させた紫色花のＦ１系統（ＡｎｓＡｎｓＨＥＨＯ）を示す。
【図２４】図２４は、藤色花系統（ＥｇＨｆ１ホモ）、野生種紫色花の２系統（ＥｇＨｆ１ホモ）、これらの両系統を交配させた紫色花のＦ１２系統（ＥｇＨｆ１ホモ）の電気泳動図を示す。
【図２５】図２５Ａは、白色花系統（ａｎｓａｎｓＨＦＨＦ）、図２５Ｂは、野生種紫色花系統（ＡｎｓＡｎｓＨＥＨＥ）、図２５Ｃは、これらの両系統を交配させた紫色花のＦ１系統（ＡｎｓａｎｓＨＥＨＦ）を示す。
【図２６】図２６は、白色花系統（ＥｇＨｆ３ホモ）、野生種紫色花系統（ＥｇＨｆ１ホモ）、これらの両系統を交配させた紫色花のＦ１系統（ＥｇＨｆ１，３ヘテロ）の電気泳動図を示す。
【図２７】図２７Ａは、赤色花系統（ＡｎｓＡｎｓＨＴＨＴ）、図２７Ｂは、野生種紫色花系統（ＡｎｓＡｎｓＨＥＨＥ）、図２７Ｃは、これらの両系統を交配させた紫色花のＦ１系統（ＡｎｓＡｎｓＨＥＨＴ）を示す。
【図２８】図２８は、赤色花系統（ＥｇＨｆ３ホモ）、野生種紫色花の２系統（ＥｇＨｆ１ホモ）、これらの両系統を交配させた紫色花のＦ１２系統（ＥｇＨｆ１，３ヘテロ）の電気泳動図を示す。
【図２９】図２９Ａは、ＡｎｓＡｎｓＨＯＨＯ遺伝子型を有する藤色花の系統、図２９Ｂは、ＡｎｓＡｎｓＨＤＨＤ遺伝子型を有する紫色花の系統、図２９Ｃは、これらの両系統を交配させた紫色のＦ１系統（ＡｎｓＡｎｓＨＤＨＯ）、図２９Ｄは、このＦ１系統の次世代のＦ２世代に分離した紫色の花色を示す個体、図２９Ｅは、同じくＦ２世代に分離した藤色の花色を示す個体である。
【図３０】図３０は、ＡｎｓＡｎｓＨＯＨＯ遺伝子型を有する藤色花の系統とＡｎｓＡｎｓＨＤＨＤ遺伝子型を有する紫色花の系統を交配させたＦ２世代のＦ３’５’Ｈ遺伝子のＥｇＨｆ１とＥｇＨｆ２の分離の電気泳動写真である。
【図３１】図３１Ａは、一重の赤色かすり花（ＤＳＤＳｅｅｂｂＡｎｓＡｎｓＨＴＨＴＰｇＰｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＷＹＷ）、図３１Ｂは、八重の黄色花（ＤＤＤＤｅｅｂｂａｎｓａｎｓＨＴＨＴＰｇＰｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＳＹＳ）、図３１Ｃは、これらを交配させたＦ１桃色かすり花（ＤＳＤＤｅｅｂｂＡｎｓａｎｓＨＴＨＴＰｇＰｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＷＹＳ）を示す。
【図３２】図３２Ａは、一重の白色花（ＤＳＤＳｅｅＢＢａｎｓａｎｓＨＤＨＤｐｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＷＹＷ）、図３２Ｂは、八重の赤色全色花（ＤＤＤＤｅｅＢＢＡｎｓＡｎｓＨＴＨＴＰｇＰｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＷＹＷ）、図３２Ｃは、これらを交配させたＦ１八重の紫色全色花（ＤＤＤＳｅｅＢＢＡｎｓａｎｓＨＤＨＴＰｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＷＹＷ）を示す。
【図３３】図３３Ａは、一重の白色花（ＤＳＤＳｅｅＢＢＡｎｓＡｎｓＨＦＨＦｐｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＷＹＷ）、図３３Ｂは、八重の黄色花（ＤＤＤＤｅｅｂｂａｎｓａｎｓＨＯＨＯｐｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＳＹＳ）、図３３Ｃは、これらを交配させたＦ１八重の赤紫色全色花（ＤＤＤＳｅｅＢｂＡｎｓａｎｓＨＯＨＦｐｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＳＹＷ）を示す。
【図３４】図３４Ａは、一重の赤色全色花（ＤＳＤＳｅｅＢＢＡｎｓＡｎｓＨＴＨＴＰｇＰｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＷＹＷ）、図３４Ｂは、八重の白色花（ＤＤＤＤｅｅｂｂａｎｓａｎｓＨＯＨＯｐｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＷＹＷ）、図３４Ｃは、これらを交配させたＦ１八重の赤紫色全色花（ＤＤＤＳｅｅＢｂＡｎｓａｎｓＨＯＨＴＰｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＷＹＷ）を示す。
【図３５】図３５Ａは、一重の白色花（ＤＳＤＳＥＥＢＢＡｎｓＡｎｓＨＦＨＦｐｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＷＹＷ）、図３５Ｂは、八重の黄色花（ＤＤＤＤｅｅｂｂａｎｓａｎｓＨＴＨＴＰｇＰｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＳＹＳ）、図３５Ｃは、これらを交配させたＦ１八重の桃色覆輪花（ＤＤＤＳＥｅＢｂＡｎｓａｎｓＨＦＨＴＰｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＷＹＳ）を示す。
【図３６】図３６Ａは、八重の桃色花（ＤＤＤＤｅｅＢＢＡｎｓＡｎｓＨＴＨＴＰｇＰｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＷＹＷ）、図３６Ｂは、一重の白色花（ＤＳＤＳｅｅｂｂａｎｓａｎｓＨＤＨＤｐｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＷＹＷ）、図３６Ｃは、これらを交配させたＦ１八重の紫色全色花（ＤＤＤＳｅｅＢｂＡｎｓａｎｓＨＤＨＴＰｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＷＹＷ）を示す。
【図３７】図３７Ａは、一重の白色花（ＤＷＤＷｅｅＢＢａｎｓａｎｓＨＦＨＦＰｇＰｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＷＹＷ）、図３７Ｂは、八重の黄色花（ＤＤＤＤｅｅｂｂａｎｓａｎｓＨＴＨＴＰｇＰｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＳＹＳ）、図３７Ｃは、これらを交配させたＦ１二重の白色花（ＤＷＤＤｅｅＢｂａｎｓａｎｓＨＦＨＴＰｇＰｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＷＹＳ）を示す。
【図３８】図３８Ａは、一重の赤色かすり花（ＤＳＤＳｅｅｂｂＡｎｓＡｎｓＨＴＨＴＰｇＰｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＷＹＷ）、図３８Ｂは、八重の白色花（ＤＤＤＤｅｅｂｂａｎｓａｎｓＨＯＨＯｐｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＷＹＷ）、図３８Ｃは、これらを交配させたＦ１八重の赤紫色かすり花（ＤＤＤＳｅｅｂｂＡｎｓａｎｓＨＯＨＴＰｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＷＹＷ）を示す。
【図３９】は、図３９Ａは、八重の白色花（ＤＤＤＤｅｅｂｂａｎｓａｎｓＨＯＨＯｐｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＷＹＷ）、図３９Ｂは、一重の紫色花（ＤＷＤＷｅｅＢＢＡｎｓＡｎｓＨＥＨＥｐｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＷＹＷ）、図３９Ｃは、これらを交配させたＦ１二重の紫色全色花（ＤＤＤＷｅｅＢｂＡｎｓａｎｓＨＯＨＥｐｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＷＹＷ）を示す。
【図４０】は、図４０Ａは、一重の黄色花（ＤＳＤＳＥＥｂｂａｎｓａｎｓＨＦＨＦｐｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＳＹＳ）、図４０Ｂは、一重の赤色かすり花（ＤＳＤＳｅｅｂｂＡｎｓＡｎｓＨＴＨＴＰｇＰｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＷＹＷ）、図４０Ｃは、これらを交配させたＦ１一重の赤色かすり覆輪花（ＤＳＤＳＥｅｂｂＡｎｓａｎｓＨＴＨＦＰｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＳＹＷ）を示す。
【図４１】図４１Ａは、八重の黄色花（ＤＤＤＤｅｅｂｂａｎｓａｎｓＨＤＨＤｐｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＳＹＳ）、図４１Ｂは、一重の黄色地紫色かすり花（ＤＳＤＳｅｅｂｂＡｎｓＡｎｓＨＤＨＤＰｇＰｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＣＹＣ）、図４１Ｃは、これらを交配させたＦ１八重の黄色地紫色かすり花（ＤＤＤＳｅｅｂｂＡｎｓａｎｓＨＤＨＤＰｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＣＹＳ）を示す。
【図４２】図４２Ａは、一重の桃色かすり覆輪花（ＤＳＤＳＥＥｂｂＡｎｓＡｎｓＨＦＨＦＰｇＰｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＷＹＷ）、図４２Ｂは、八重の黄色花（ＤＤＤＤｅｅｂｂａｎｓａｎｓＨＦＨＦｐｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＳＹＳ）、図４２Ｃは、これらを交配させたＦ１八重の桃色かすり覆輪花のＦ１系統（ＤＤＤＳＥｅｂｂＡｎｓａｎｓＨＦＨＦＰｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＳＹＷ）を示す。
【図４３】図４３Ａは、八重の黄色花（ＤＤＤＤｅｅｂｂａｎｓａｎｓＨＦＨＦｐｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＳＹＳ）、図４３Ｂは、一重の藤色花（ＤＷＤＷｅｅＢＢＡｎｓＡｎｓＨＯＨＯＰｇＰｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＷＹＷ）、図４３Ｃは、これらを交配させたＦ１二重の赤紫色全色花（ＤＤＤＷｅｅＢｂＡｎｓａｎｓＨＯＨＦＰｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＳＹＷ）を示す。
【図４４】図４４Ａは、八重の黄色花（ＤＤＤＤｅｅｂｂａｎｓａｎｓＨＦＨＦｐｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＳＹＳ）、図４４Ｂは、一重の桃色全色花（ＤＷＤＷｅｅＢＢＡｎｓＡｎｓＨＦＨＦＰｇＰｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＷＹＷ）、図４４Ｃは、これらを交配させたＦ１二重の桃色全色花（ＤＤＤＷｅｅＢｂＡｎｓａｎｓＨＦＨＦＰｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＳＹＷ）を示す。
【図４５】図４５Ａは、一重白色花（ＤＳＤＳｅｅｂｂａｎｓａｎｓＨＤＨＤｐｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＷＹＷ）（系統番号Ｖ８５）、図４５Ｂは、八重桃色かすり花（ＤＤＤＤｅｅｂｂＡｎｓＡｎｓＨＦＨＦＰｇＰｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＷＹＷ）（系統番号Ｖ９０）、図４５Ｃは、これらを交配させたＦ１八重紫色かすり花（ＤＳＤＤｅｅｂＢａｎｓＡｎｓＨＤＨＦｐｇＰｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＷＹＷ）（系統番号ＳＡＩ７）を示す。
【図４６】図４６Ａは、一重白色花（ＤＳＤＳｅｅｂｂａｎｓａｎｓＨＤＨＤｐｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＷＹＷ）（系統番号Ｖ８５）、図４６Ｂは、八重黄色花（ＤＤＤＤｅｅｂｂａｎｓａｎｓＨＤＨＤｐｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＳＹＳ）（系統番号Ｖ２３１）、図４６Ｃは、これらを交配させたＦ１八重の黄色花（ＤＳＤＤｅｅｂｂａｎｓａｎｓＨＤＨＤｐｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＷＹＳ）（系統番号ＳＡＩ４０）を示す。
【発明を実施するための形態】
【０００７】
本発明のトルコギキョウの新品種作出方法は、トルコギキョウの花色形質および／または花形形質に対応する遺伝子型を用いることを特徴とする。
１．定義
本発明において用いる用語や記号の意味を説明する。
（トルコギキョウおよび系統）
本発明のトルコギキョウとは、フラボノイドを含む花弁、萼片、苞、花被、果皮、種皮、葉柄などのトルコギキョウの部分、およびトルコギキョウの全体をいう。「系統」とは、トルコギキョウのＦ１品種、およびＦ１品種を作出するためのトルコギキョウの種子親系統並びにトルコギキョウの花粉親系統の個体を含む。
（ＨＸＨＸ）
ＨＸＨＸは、下記の経路式に示される６つの複対立遺伝子、すなわちＨＴ、ＨＦ、ＨＤ、ＨＺ、ＨＯ、およびＨＥからなる群から選択され、組み合されたホモまたはヘテロの遺伝子型を意味する。この６つの複対立遺伝子の表記方法は、例えば、Ｔ、Ｆ、Ｄ、Ｚ、Ｏ、Ｅなど他の表記法でもよい。
【化２】
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トルコギキョウのアントシアニジン生合成の前駆化合物には、ナリンゲニン、エリオディクチオール、ペンタヒドロキシフラバノン、ジヒドロケンフェロール、ジヒドロクエルセチン、ジヒドロミリセチンが含まれる。
ＨＴの対立遺伝子は、ナリンゲニンからエリオディクチオール、およびジヒドロケンフェロールからジヒドロクエルセチンへの生化学的変換を制御する。
ＨＦの対立遺伝子は、ナリンゲニンおよびジヒドロケンフェロールを生成するので、Ｂ環の水酸化には関与していない。
ＨＤの対立遺伝子は、ナリンゲニンからペンタヒドロキシフラバノン、およびジヒドロケンフェロールからジヒドロミリセチンへの生化学的変換を制御し、基質を完全にペンタヒドロキシフラバノンまたはジヒドロミリセチンへ変換することを特徴する。
ＨＺの対立遺伝子は、ナリンゲニンからペンタヒドロキシフラバノン、およびジヒドロケンフェロールからジヒドロミリセチンへの生化学的変換を制御する。この対立遺伝子は、一旦基質を完全にエリオディクチオールとジヒドロクエルセチンへ変換し、更にこれらをペンタヒドロキシフラバノンとジヒドロミリセチンへ変換することを特徴とする。従って、ＨＺの対立遺伝子がＨＦの対立遺伝子と対を組んだＨＺＨＦヘテロ遺伝型の場合、中間体であるエリオディクチオールとジヒドロクエルセチンが基質として奪われ、結果としてＢ環の水酸基を２〜３個有する４種の前駆化合物（エリオディクチオール、ペンタヒドロキシフラバノン、ジヒドロクエルセチン、ジヒドロミリセチン）を生成する。
ＨＯの対立遺伝子は、ナリンゲニンからエリオディクチオールとペンタヒドロキシフラバノン、およびジヒドロケンフェロールからジヒドロクエルセチンとジヒドロミリセチンへの全ての生化学的変換を制御する。
ＨＥの対立遺伝子は野生種由来であって、ナリンゲニンからペンタヒドロキシフラバノン、およびジヒドロケンフェロールからジヒドロミリセチンへの生化学的変換を制御し、基質を完全にペンタヒドロキシフラバノンまたはジヒドロミリセチンへ変換することを特徴とする。
（ＥｇＨｆ１、ＥｇＨｆ２、ＥｇＨｆ３）
上記６つの複対立遺伝子ＨＴ、ＨＦ、ＨＤ、ＨＺ、ＨＯ、およびＨＥは、該複対立遺伝子によって制御される３つのフラボノイド３’，５’−ヒドロキシラーゼ（Ｆ３’，５’Ｈ）遺伝子群に基づいて、（ｉ）ＨＴとＨＦ、（ｉｉ）ＨＤとＨＺ、および（ｉｉｉ）ＨＯとＨＥに分類できる。ＨＴまたはＨＦによって制御されるＦ３’，５’遺伝子はＥｇＨｆ３、ＨＤまたはＨＺによって制御されるＦ３’，５’遺伝子はＥｇＨｆ２、ＨＯまたはＨＥによって制御されるＦ３’，５’遺伝子はＥｇＨｆ１と称する。
（Ｐｇ／ｐｇ、Ｃｙ／ｃｙ、Ｄｐ／ｄｐ）
Ｐｇ／ｐｇ、Ｃｙ／ｃｙ、Ｄｐ／ｄｐは、上記経路式において、主要アントシアニジン色素のペラルゴニジン（Ｐｇｎ）、シアニジン（Ｃｙｎ）、デルフィニジン（Ｄｐｎ）の生合成に関与するジヒドロフラボノールリダクターゼ（ＤＦＲ）の発現に対立する遺伝子座がそれぞれ存在することを意味する。
（Ａｎｓ／ａｎｓ）
Ａｎｓ／ａｎｓは、有色花／白色花の遺伝子型であり、有色花が優性型Ａｎｓ、白色花が劣性型ａｎｓに対応する。有色花とは、アントシアニン色素の発現によって色がつく花をいい、白色花とは、アントシアニン色素の非発現によって色がつかず白色または黄色になる花をいう。ＡｎｓＡｎｓ（優性ホモ型）は有色花、Ａｎｓａｎｓ（優性ヘテロ型）は有色花、ａｎｓａｎｓ（劣性ホモ型）は白色花の形質を有する系統であることを示す。遺伝子型がＡｎｓＡｎｓ（優性ホモ型）またはＡｎｓａｎｓ（優性ヘテロ型）の場合、この２種類の遺伝子型をまとめてＡｎｓ−と表記する。
（ＤＸＤＸ）
ＤＸＤＸは花形の八重型、二重型、一重型の組み合わせを決定する遺伝子型であり、ＤＤ、ＤＷ、ＤＳの３つの対立する遺伝子型の組み合わせによって八重型、二重型、一重型の形質が対応する。ＤＤＤＤは八重花のホモ型、ＤＤＤＳ（またはＤＳＤＤ）は八重花のヘテロ型、ＤＳＤＳは一重花のホモ型、ＤＤＤＷ（またはＤＷＤＤ）は二重花のヘテロ型、ＤＷＤＳ（またはＤＳＤＷ）は一重花のヘテロ型、ＤＷＤＷは一重花のホモ型（野生型）を示す。
（Ｅ／ｅ）
Ｅ／ｅは、覆輪花／全色花の遺伝子型であり、覆輪花が優性型Ｅ、全色花が劣性型ｅに対応する。覆輪花とは花弁の縁部分が地と異なる色で縁取られた花をいい、全色花とは、花弁に覆輪が存在せず一色の花をいう。ＥＥ（優性ホモ型）は覆輪花、Ｅｅ（優性ヘテロ型）は覆輪花、ｅｅ（劣性ホモ型）は全色花の形質を有する系統であることを示す。
（Ｂ／ｂ）
Ｂ／ｂは、全色花／かすり花の遺伝子型であり、全色花が優性型Ｂ、かすり花が劣性型ｂに対応する。全色花とは、花弁上の色の柄がほぼ均一の載りとなる花をいい、かすり花とは、霧吹きで振り掛けたあとのようなかすれた色の柄の載りとなる花をいう。ＢＢ（優性ホモ型）は全色花、Ｂｂ（優性ヘテロ型）は全色花、ｂｂ（劣性ホモ型）はかすり花の形質を有する系統であることを示す。
（ＹＸＹＸ）
ＹＸＹＸは、黄色花および白色花の組み合わせを決定する遺伝子型であり、ＹＣ、ＹＳ、ＹＷの３つの対立するトルコギキョウのカロテノイド色素の生合成にかかる複対立遺伝子の遺伝子型の組み合わせによって黄色花および白色花の形質が対応する。ＹＣＹＣは黄色花のホモ型、ＹＣＹＳ（またはＹＳＹＣ）は黄色花のヘテロ型、ＹＣＹＷ（またはＹＷＹＣ）は黄色花のヘテロ型、ＹＷＹＷは白色花のホモ型の形質を有する系統であることを示す。
（色素表現型）
本発明において、トルコギキョウのアントシアニジン生合成の前駆化合物生成に関するアントシアニジンシンターゼに係る遺伝子型の組み合わせがＡｎｓＡｎｓ（優性ホモ型）またはＡｎｓａｎｓ（優性ヘテロ型）の場合（この２種類の遺伝子型をまとめてＡｎｓ−と表記する）、トルコギキョウ花弁の色素表現型と得られる花色の関係を以下に示す。
ＰｇｎＣｙｎＤｐｎ型：赤紫色、赤色、紫赤色、淡赤色、ピンク色
ＰｇｎＣｙｎ型：赤色、深赤色、淡赤色、ピンク色
ＣｙｎＤｐｎ型：淡紫色、紫赤色、紫色、青紫色
Ｐｇｎ型：赤色、淡赤色、ピンク色、白赤色、クリーム色、白色
Ｃｙｎ型：赤色、淡赤色、ピンク色、白赤色
Ｄｐｎ型：紫色
Ｎｏｎｅ型：白色
なお、本発明においてＰｇｎＤｐｎ型の系統は得られない。
Ｄｐｎ型色素表現型にはメチル化アントシアニジンであるマルヴィジン（Ｍｖ）とペチュニジン（Ｐｔ）を含む。Ｃｙｎ型色素表現型にはメチル化アントシアニジンであるペオニジン（Ｐｎ）を含む。
（“−”および“−−”）
本発明において、“−”と表記されている遺伝子型は、その一つ前に表記された遺伝子型に優性的に支配されていることを意味し、“−−”と表記されている遺伝子型は、対象形質をつかさどる優性・優劣性遺伝子型または複対立遺伝子型のいずれの遺伝子型も用いることができることを意味する。
２．トルコギキョウの新品種作出方法
２−１．遺伝子型Ａｎｓ／ａｎｓ・ＨＸＨＸ・Ｐｇ／ｐｇ・Ｃｙ／ｃｙ・Ｄｐ／ｄｐを用いる方法（主要アントシアジン色素の遺伝）
トルコギキョウのアントシアニジン生合成の前駆化合物生成に関与するアントシアニジンシンターゼ（ＡＮＳ）の遺伝子型の組み合わせがＡｎｓＡｎｓ（優性ホモ型）またはＡｎｓａｎｓ（優性ヘテロ型）（以下、ＡｎｓＡｎｓとＡｎｓａｎｓの２種類の遺伝子型をまとめてＡｎｓ−と表記する）であって、かつ、複対立遺伝子のＨＸＨＸ遺伝子型の組み合わせが、
ＨＴＨＤ、ＨＴＨＥ、ＨＴＨＺとＨＯ−（ＨＯ−とは、ＨＯＨＴ、ＨＯＨＦ、ＨＯＨＤ、ＨＯＨＥ、ＨＯＨＺ、ＨＯＨＯの６種類の組み合わせを示す）の場合、Ｂ環に水酸基が１〜３個有する６種の前駆化合物（ナリンゲニン、エリオディクチオール、ペンタヒドロキシフラバノン、ジヒドロケンフェロール、ジヒドロクエルセチン、ジヒドロミリセチン）を生成し；
ＨＴＨＦ、ＨＴＨＴの場合、Ｂ環に水酸基が１個と２個を有する４種の前駆化合物（ナリンゲニエリオディクチオール、ジヒドロケンフェロール、ジヒドロクエルセチン）を生成し；
ＨＦＨＦの場合、Ｂ環に水酸基を１個有する２種の前駆化合物（ナリンゲニン、ジヒドロケンフェロール）を生成し；
ＨＤＨＦ、ＨＤＨＤ、ＨＤＨＺ、ＨＥＨＦ、ＨＥＨＥ、ＨＥＨＺ、ＨＥＨＤとＨＺＨＺの場合、Ｂ環に水酸基を３個有する２種の前駆化合物（ペンタヒドロキシフラバノン、ジヒドロミリセチン）を生成し；
ＨＺＨＦの場合、Ｂ環に水酸基を２〜３個有する４種の前駆化合物（エリオディクチオール、ペンタヒドロキシフラバノン、ジヒドロクエルセチン、ジヒドロミリセチン）を生成する。
また、ジヒドロフラボノールリダクターゼ（ＤＦＲ）酵素レベルにあるＰｇ／ｐｇの遺伝子座が存在するため、上記のアントシアニジン生合成の前駆化合物が形成され、かつ、劣性ホモ型（ｐｇｐｇ）を形成した場合には、前駆化合物としてナリンゲニンおよびジヒドロケンフェロールが生成されてもＰｇｎが生合成されない。
また、Ａｎｓ−であって、かつ、複対立遺伝子の組合せが、ＨＤＨＤ型、ＨＤＨＦ型、ＨＤＨＺ型、ＨＺＨＦ型、ＨＺＨＺ型、ＨＥＨＴ型、ＨＥＨＦ型、ＨＥＨＤ型、ＨＥＨＺ型、ＨＥＨＯ型、ＨＥＨＥ型の場合、Ｐｇ／ｐｇが優性型（ＰｇＰｇまたはＰｇｐｇ）である遺伝子型であっても、Ｐｇｎは生合成されない。
以上から、Ａｎｓ−とトルコギキョウ花弁の色素遺伝子型であるＨＸＨＸ・Ｐｇ／ｐｇ・Ｃｙ／ｙ・Ｄｐ／ｄｐを含む遺伝子型の種類と対応する色素表現型の関係は下表のとおりであり、各色素表現型に応じて前述の花色のトルコギキョウが得られる。
【表３】
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２−２．遺伝子型Ｂ／ｂ・Ａｎｓ／ａｎｓ・ＨＸＨＸ・Ｐｇ／ｐｇ・Ｃｙ／ｃｙ・Ｄｐ／ｄｐ・ＹＸＹＸを用いる方法（白色花、黄色花、かすりの遺伝）
＜Ｂ−ａｎｓａｎｓ・ＨＸＨＸ・Ｐｇ／ｐｇ・Ｃｙ／ｃｙ・Ｄｐ／ｄｐ＞
Ａｎｓ−の遺伝子型を有する系統はすべてアントシアニン色素に基づく有色系統となるが、Ａｎｓ−の遺伝子型を有する系統のうち、遺伝子型がＡｎｓ−ＨＦＨＦｐｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐである場合だけ、白色系統の花となる。
また、かすり形質をＢ／ｂで示した場合、Ｂ／ｂ・Ａｎｓ／ａｎｓ・ＨＸＨＸ・Ｐｇ／ｐｇ・Ｃｙ／ｃｙ・Ｄｐ／ｄｐの遺伝子型を有する系統のうち、アントシアニジン生合成の前駆化合物生成に関与するアントシアニジンシンターゼ（ＡＮＳ）の遺伝子型の組み合わせがａｎｓａｎｓ（劣性ホモ型）である場合、すなわち、Ｂ−ａｎｓａｎｓ・ＨＸＨＸ・Ｐｇ／ｐｇ・Ｃｙ／ｃｙ・Ｄｐ／ｄｐの遺伝子型を有する場合、ジヒドロフラボノールリダクターゼ（ＤＦＲ）酵素レベルにあるＰｇ／ｐｇ・Ｃｙ／ｃｙ・Ｄｐ／ｄｐの遺伝子型の優劣性に関わらず、かつ、ＨＸＨＸ遺伝子型の組み合わせが６つのＨＴ、ＨＦ、ＨＤ、ＨＺ、ＨＯ、ＨＥ遺伝子型のいずれにも関わらず、すべてアントシアニン色素が生合成されない白色系統の花となる。
＜ｂｂａｎｓａｎｓＹＳＹＳ、ｂｂａｎｓａｎｓＹＳＹＷ、ｂｂａｎｓａｎｓＹＷＹＷ＞
アントシアニジン生合成の前駆化合物生成に関与するアントシアニジンシンターゼ（ＡＮＳ）の遺伝子型の組み合わせがａｎｓａｎｓ（劣性ホモ型）であって、かつ、かすり形質に係る遺伝子型がｂｂ（劣性ホモ型）である場合、すなわちｂｂａｎｓａｎｓの遺伝子型を有する場合、カロテノイド系色素の発現によって色がつく黄色花、または、カロテノイド系色素が発現しないことによって色がつかない白色花の花弁形質に対応する黄色花／白色花の遺伝子型（優性型ＹＳ／劣性型ＹＷ）の組み合わせにより、ｂｂａｎｓａｎｓＹＳＹＳの遺伝子型を有する系統は黄色花、ｂｂａｎｓａｎｓＹＳＹＷの遺伝子型を有する系統は黄色花、ｂｂａｎｓａｎｓＹＷＹＷの遺伝子型を有する系統は白色花となる。
＜−−ＹＣＹＣ、−−ＹＣＹＳ、−−ＹＣＹＷ＞
全色花／かすり花の遺伝子型Ｂ／ｂおよび有色花／白色花の遺伝子型Ａｎｓ／ａｎｓの優劣性にかかわらず、ＹＣの遺伝子型は優先的に黄色花を発現する遺伝子を有する系統である。よって、−−ＹＣＹＣは黄色花のホモ型、−−ＹＣＹＳは黄色花のヘテロ型、−−ＹＣＹＷは黄色花のヘテロ型の形質を示す。
上記の白色系統の花の遺伝様式から、白色系統の花（Ｎｏｎｅ色素表現型）は、Ａｎｓ−ＨＦＨＦｐｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐの遺伝子型、Ｂ−ａｎｓａｎｓＨＸＨＸ−−ＣｙＣｙＤｐＤｐの遺伝子型、ｂｂａｎｓａｎｓＨＸＨＸ−−ＣｙＣｙＤｐＤｐＹＷＹＷの遺伝子型の３種のいずれかの遺伝子型を有することになる。
＜Ｂ−Ａｎｓ−ＨＸＨＸ−−ＣｙＣｙＤｐＤｐＹＣ−＞
トルコギキョウのカロテノイド色素表現型の系統であって、アントシアニン色素が生合成される有色系統の花は、Ｂ−Ａｎｓ−ＨＸＨＸ−−ＣｙＣｙＤｐＤｐＹＣＹＣ、Ｂ−Ａｎｓ−ＨＸＨＸ−−ＣｙＣｙＤｐＤｐＹＣＹＳ、Ｂ−Ａｎｓ−ＨＸＨＸ−ＣｙＣｙＤｐＤｐＹＣＹＷの３種のいずれかの遺伝子型（これらの３種の遺伝子型をまとめてＢ−Ａｎｓ−ＨＸＨＸ−−ＣｙＣｙＤｐＤｐＹＣ−と表記する）を有し、黄色花となる。
また、遺伝子型Ｂ−Ａｎｓ−ＨＸＨＸ−−ＣｙＣｙＤｐＤｐＹＣ−において、アントシアニン生合成に係る複対立遺伝子型“ＨＸＨＸ−−”の部分遺伝子型が、ＨＯＰｇ−を含む場合は赤紫と黄色の複色（２色）系統の（赤黄紫色）花、ＨＤ、ＨＺ、ＨＥを含む場合は紫と黄色の複色（２色）系統の（黄紫色）花、ＨＴの場合は赤と黄色の複色（２色）系統の（赤黄［オレンジ］色）花、ＨＦＰｇ−の場合は赤と黄色の複色（２色）系統の（赤黄［オレンジ］色）花となる。
＜ｂｂａｎｓａｎｓＨＸＨＸ−−ＣｙＣｙＤｐＤｐＹＳ−＞
トルコギキョウのカロテノイド色素表現型の系統であって、アントシアニン色素が生合成されない系統の花は、ｂｂａｎｓａｎｓＨＸＨＸ−−ＣｙＣｙＤｐＤｐＹＳＹＳ、ｂｂａｎｓａｎｓＨＸＨＸ−−ＣｙＣｙＤｐＤｐＹＳＹＷの２種のいずれかの遺伝子型（これらの２種の遺伝子型をまとめてｂｂａｎｓａｎｓＨＸＨＸ−−ＣｙＣｙＤｐＤｐＹＳ−と表記する）を有し、黄色花となる。
２−３．遺伝子型ＤＸＤＸ・Ｅ／ｅ・Ｂ／ｂ・Ａｎｓ／ａｎｓ・ＨＸＨＸ・Ｐｇ／ｐｇ・Ｃｙ／ｃｙ・Ｄｐ／ｄｐ・ＹＸＹＸを用いる方法（八重、二重、一重、覆輪を伴う遺伝）
遺伝子型ＤＤＤＤＥｅｂｂＡｎｓａｎｓＨＤＨＤＰｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＣＹＷを有する系統は、覆輪八重花であって、覆輪の先端部の色がついた部分は紫色となり、かつ、覆輪部以外の花弁部は黄色地となる。
遺伝子型ＤＤＤＷｅｅＢｂＡｎｓａｎｓＨＴＨＦＰｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＣＹＷを有する系統は、全色二重花であって、花色は赤色と黄色が混合したオレンジ色花となる。
遺伝子型ＤＤＤＳＥＥｂｂａｎｓａｎｓＨＯＨＯＰｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＳＹＷを有する系統は、覆輪八重花であって、花色は黄色花となる。この系統は、覆輪の遺伝子型ＥＥの優性ホモ型を有する系統であるが、アントシアニンによる着色がないため、見かけ上、覆輪形質を観察することができない。
３．トルコギキョウの新品種作出方法に用いる早見表
本発明のトルコギキョウの新品種作出方法は、トルコギキョウのＦ１品種、およびＦ１品種を作出するためのトルコギキョウの種子親系統およびトルコギキョウの花粉親系統を作出するために用いることができる。
本発明のトルコギキョウの新品種作出方法に用いる下記の早見表Ａおよび早見表Ｂ（表４）は、花色を作出する遺伝型交配の組み合わせを決定するものであって、花粉親の配偶子を行とし、種子親の配偶子を列とし、前記の複対立遺伝子の組み合わせ、複対立遺伝子の組合せに対応する色素表現型および花色をも表示するものである。
早見表Ａは、Ｐｇ／ｐｇ、Ｃｙ／ｃｙおよびＤｐ／ｄｐで示される遺伝子座がＰｇＰｇＣｙＣｙＤｐＤｐまたはＰｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐで表される場合の組合せ表であり、早見表Ｂは、Ｐｇ／ｐｇ、Ｃｙ／ｃｙおよびＤｐ／ｄｐで示される遺伝子座がｐｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐで表される場合の組合せ表である。例えば、遺伝子座がＰｇＰｇＣｙＣｙＤｐＤｐであり、一つの複対立遺伝子ＨＥともう一つの複対立遺伝子ＨＥが受精し、その組合せがＨＥＨＥとなった場合は、早見表Ａからその色素表現型がＤｐｎであることが、速やかに知ることができる。
【表４】
2016052760.tif 000012
また、本発明のトルコギキョウの新品種作出方法に用いる下記の早見表Ｃ〜Ｆ（表５）は、花色および／または花形を作出する遺伝型交配の組み合わせを決定するものであって、花粉親の配偶子を行とし、種子親の配偶子を列とし、前記の複対立遺伝子を含む遺伝子型（ＹＸＹＸ＋Ａｎｓ／ａｎｓ＋Ｂ／ｂまたはＤＸＤＸ＋Ａｎｓ／ａｎｓ＋Ｅ／ｅ）の組み合わせ、遺伝子型の組合せに対応する花色および／または花形を表示するものである。
早見表ＣおよびＥは、ＨＸＨＸおよびＰｇ／ｐｇＣｙ／ｃｙＤｐ／ｄｐで示される遺伝子座がＨＸＨＸＰｇＰｇＣｙＣｙＤｐＤｐまたはＨＸＨＸＰｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐで表される場合の組合せ表であり、早見表ＤおよびＦは、ＨＸＨＸおよびＰｇ／ｐｇＣｙ／ｃｙＤｐ／ｄｐで示される遺伝子座がＨＦＨＦｐｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐで表される場合の組合せ表である。例えば、遺伝子座がＨＦＨＦｐｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐであり、一つの遺伝子型がＹＣＡｎｓ  Ｂともう一つの遺伝子型がＹＳＡｎｓ  ｂが受精し、その組合せがＹＣＹＳＡｎｓＡｎｓ  Ｂｂとなった場合は、早見表Ｄからその花色表現型が黄色であることが、速やかに知ることができる。
【表５】
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本発明のトルコギキョウの新品種作出方法は、トルコギキョウの花弁または萼片、花被、苞、果皮などの有色部分から、５０％酢酸水溶液、または５０％酢酸メタノールを用いてアントシアニンを抽出し（酢酸の濃度は１０〜５０％でも可能で、酢酸の代わりに０．５〜２規定塩酸を用いても良い）、これを塩酸加水分解して、アントシアニジンを含む加水分解物を高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）などを用いて各種アントシアニジンを分析する。自殖や交雑を繰り返して得られた後代の遺伝子型について、優性ホモ型、優性ヘテロ型、劣性ホモ型を決定し、その遺伝子型より様々な花色および／または花形を自由自在に作出することができる。
以下、本発明を実施例により具体的に説明するが、本発明は、これらの実施例に限定されるものではない。
（参考例）遺伝子型の決定方法
トルコギキョウの花弁を採集し、全色系または覆輪系（二重花、八重花を含む）の花弁の着色した部分を切除し、精秤後、試験管中にて０．５〜２規定塩酸水溶液などの酸性溶媒を加え、アントシアニン色素を抽出した。抽出は、文献記載の方法（Ｕｄｄｉｎ，ｅｔ  ａｌ．：Ｊ．Ｊａｐａｎ．Ｓｏｃ．Ｈｏｒｔ．Ｓｃｉ．，７１：４０−４７，２００２；Ｗａｎｇ，ｅｔ  ａｌ．：Ｊ．Ｐｌａｎｔ  Ｒｅｓ．，１１４：２１３−２２１，２００１；松添直隆、ほか５名：園学雑、６８：１３８−１４５，１９９９）を用いた。抽出液を綿栓濾過後、濾液について９５〜１００℃で加熱し加水分解を行い、１〜６種のアントシアニジンを含む溶液を得た。加水分解は、文献記載の方法（Ｕｄｄｉｎ，ｅｔ  ａｌ．：Ｊ．Ｊａｐａｎ．Ｓｏｃ．Ｈｏｒｔ．Ｓｃｉ．，７１：４０−４７，２００２）を用いた。反応後、溶液をメンブランフィルターで濾過後、濾液についてＨＰＬＣ装置にて分析した。ＨＰＬＣの分析条件および分析装置は、文献記載の方法（Ｕｄｄｉｎ，ｅｔ  ａｌ．：Ｊ．Ｊａｐａｎ．Ｓｏｃ．Ｈｏｒｔ．Ｓｃｉ．，７１：４０−４７，２００２）を用いた。
ＨＰＬＣクロマトチャートから、３種のアントシアニジン、すなわち、ペラルゴニジン（Ｐｇｎ）、シアニジン（Ｃｙｎ）、デルフィニジン（Ｄｐｎ）それぞれのアントシアニジンのピークを占有面積として算出し、ペラルゴニジン（Ｐｇｎ）、シアニジン（Ｃｙｎ）、デルフィニジン（Ｄｐｎ）の全ピーク面積を１００％とした。得られた固有ピークからアントシアニジンについて、その花の色素遺伝子型を決定した。
【実施例１】
【０００８】
一重花、二重花および八重花の遺伝様式
トルコギキョウにおける一重花、二重花および八重花の花冠形質の存在を確認した。その写真を図１に示す。
トルコギキョウの花弁は合弁であるが、切れ込んだ弁数を数えたところ、一重花は５．３±１．１枚［５２花の平均値］（図１Ａ）、二重花は１０．１±２．３枚［７９花の平均値］（図１Ｂ）、八重花は１９．８±４．９枚［２５花の平均値］（図１Ｃ）であった。この結果、トルコギキョウに表現型として一重花、二重花、八重花が存在することがわかる。
トルコギキョウの花冠形質の一つである八重と一重の形質について、従来は八重型が優性型であり、その関係をＤ／ｄの遺伝子型として帰属していた（特許第４３１４２４１号）。しかし、二重花が存在することからこの遺伝子型の想定では説明が付かない。また、不完全優性型の考え方も適用できないことから、複対立するという新しい遺伝様式として、八重の遺伝子型をＤＤ型、従来の一重の遺伝子型をＤＳ型、二重形質発現に関わる一重の遺伝子型をＤＷ型と想定した。即ち、ＤＤＤＤのホモ型は八重、ＤＳＤＳのホモ型は一重、ＤＷＤＷのホモ型は一重とし、そして、ＤＤＤＳのヘテロ型は八重、ＤＤＤＷのヘテロ型は二重、ＤＳＤＷのヘテロ型は一重と想定した。
まずＤＤＤＤのホモ型系統（系統番号Ｅ９９）（図２Ａ）とＤＷＤＷのホモ型系統（系統番号Ｅ９４）（図２Ｂ）とを交配し、Ｆ１を作出した。その結果、Ｆ１は全て二重形質を有する個体（系統番号Ｈ１０；想定遺伝子型はＤＤＤＷ）（図２Ｃ）であった。この結果から、トルコギキョウのＦ１二重花の作出が可能であることがわかる。
トルコギキョウの八重花系統（系統番号Ｗ５８、Ｗ２８；遺伝子型ＤＤＤＤ）（図３Ａ）と一重花野生種（学名Ｅｕｓｔｏｍａ  ｅｘａｌｔａｔｕｍ）（系統番号Ｗｉ１５、Ｗｉ１８；遺伝子型ＤＷＤＷ）（図３Ｂ）とを交配し、Ｆ１を作出した。その結果、Ｆ１は全て二重形質を有する個体（系統番号Ｕ４３を４２個体、Ｕ５７を４２個体；想定遺伝子型はＤＤＤＷ）（図３Ｃ）であった。この結果から、トルコギキョウのＦ１二重花にかかる遺伝子型ＤＷが野生種由来の形質であることがわかる。また、遺伝子型ＤＷＤＷを有するトルコギキョウが一重花であることもわかる。
トルコギキョウの一重花（系統番号Ｗ１０、Ｗ１９；遺伝子型ＤＳＤＳ）（図４Ａ）と八重花系統（系統番号Ｗ２８、ＷＷ１７；遺伝子型ＤＤＤＤ）（図４Ｂ）とを交配し、Ｆ１を作出した。その結果、Ｆ１は全て八重花形質を有する個体（系統番号Ｕ５０を６個体、Ｕ８を４個体；想定遺伝子型はＤＤＤＳ）（図４Ｃ）であった。
単一形質を確認するため、ＤＤＤＤの遺伝子型を有する八重花の系統群（系統番号Ｖ５１、Ｖ１６０、Ｖ１６１、Ｐ１６）の自殖を行った。その結果、自殖後代６７個体は全て八重の花（ＤＤＤＤ）（図５Ａ：Ｖ５１）であった。また、ＤＳＤＳの遺伝子型を有する一重花の系統群（系統番号Ｖ３１、Ｖ６２、Ｖ８０）の自殖を行った。その結果、自殖後代３０個体は全て一重の花（ＤＳＤＳ）（図５Ｂ：Ｖ３１）であった。また、野生種（ＤＷＤＷの遺伝子型を有する一重花の系統群（系統番号ＢＣ１、ＢＣ２、ＢＣ２５３４））の自殖を行った。その結果、自殖後代４０個体は全て一重の花（ＤＷＤＷ）（図５Ｃ：ＢＣ１）であった。
共分離を確詔するため、あらかじめＦ１として作出したＤＤＤＷの遺伝子型を有する二重花の系統群（系統番号Ｖ１０９、Ｈ１０、ＳＡＩ７、ＳＡＩ６０、ＹＵＵ１４、ＹＵＵ３０）の自殖を行った。その結果、八重：二重：一重の分離個体数は、系統番号Ｖ１０９は５：９：４個体数、Ｈ１０は１１：１８：１１個体数、ＳＡＩ７は３：５：１個体数、ＳＡＩ６０は３：７：５個体数、ＹＵＵ１４は４：９：５個体数、ＹＵＵ３０は６：１０：３個体数であった（図６Ａ：Ｖ１０９）。これら系統のすべての個体数を合計したところ、３２：５８：２９であったことから、その想定された八重（ＤＤＤＤ）：二重（ＤＤＤＷ）：一重（ＤＷＤＷ）の分離比１：２：１の理論値よりχ２検定を行った結果、χ２値＝０．２２７で８９．３％の適合確率を与えた。以上の結果より、トルコギキョウの花冠形質は複対立するという新しい遺伝様式で八重花、二重花、一重花の形質が遺伝されることがわかる。
あらかじめＦ１として作出したＤＤＤＳの遺伝子型を有する八重花の系統群（系統番号Ｖ９、Ｖ１０１、Ｖ１１６、Ｖ１１８、Ｖ１２４、Ｖ１２９、Ｖ１３１）の自殖を行った。その結果、八重：一重の分離個体数は、系統番号Ｖ９は４４：１２個体数、Ｖ１０１は３７：１０個体数、Ｖ１１６は１７：７個体数、Ｖ１１８は３１：８個体数、Ｖ１２４は１９：４個体数、Ｖ１２９は３５：１１個体数、Ｖ１３１は２８：１２個体数であった（図６Ｂ：Ｖ１３１）。これら系統のすべての個体数を合計したところ、２１１：６４であったことから、その想定された八重（ＤＤＤＤおよびＤＤＤＳ）：一重（ＤＳＤＳ）の分離比３：１の理論値よりχ２検定を行った結果、χ２値＝０．４３８で５０．８％の適合確率を与えた。以上の結果より、トルコギキョウの花冠形質は複対立するという新しい遺伝様式で八重花、一重花の形質が遺伝されることがわかる。
あらかじめＦ１として作出したＤＳＤＷのヘテロ遺伝子型を有する一重花の系統（系統番号Ｖ１３０）の自殖を行った。一重（ＤＳＤＳ）：一重（ＤＳＤＷ）：一重（ＤＷＤＷ）＝１：２：１の分離は見かけ上、全ての個体で一重と想定され、その結果、自殖後代５５個体は全て一重の花（図６Ｃ）であった。
【実施例２】
【０００９】
全色花とかすり花の遺伝様式
トルコギキョウのホモ型形質を確認するため、ＢＢＡｎｓＡｎｓの遺伝子型を有する全色花の系統群（系統番号Ｐ１６、Ｐ２６）の自殖を行った。その結果、自殖後代４３個体は全て全色花（ＢＢＡｎｓＡｎｓ）（図７Ａ：Ｐ１６）であった。また、ｂｂＡｎｓＡｎｓの遺伝子型を有するかすり花の系統群（系統番号Ｖ２９、Ｖ２５０）の自殖を行った。その結果、自殖後代１９個体は全てかすりの花（ｂｂＡｎｓＡｎｓ）（図７Ｂ：Ｖ２５０）であった。ＢＢａｎｓａｎｓの遺伝子型を有する白色花の系統群（系統番号Ｅ９６、Ｖ７７、Ｖ８５、Ｖ１６１）の自殖を行った。その結果、自殖後代４６個体は全て白色花（ＢＢａｎｓａｎｓ）（図７Ｃ：Ｖ１６１）であった。ｂｂａｎｓａｎｓの遺伝子型を有する白色花の系統群（系統番号Ｖ３１、Ｖ５１、Ｖ６２、Ｖ７９、Ｖ８０、Ｖ１６０）の自殖を行った。その結果、自殖後代６７個体は全て白色花（ｂｂａｎｓａｎｓ）（図７Ｄ：Ｖ３１）であり、これらは、白色花でありながらかすり形質を有する系統群である。
ＢＢＡｎｓＡｎｓの遺伝子型を有する全色花の系統（系統番号Ｅ１４４）（図８Ａ）およびｂｂＡｎｓＡｎｓの遺伝子型を有するかすり花の系統（系統番号Ｅ５４）（図８Ｂ）を交配し、ＢｂＡｎｓＡｎｓの遺伝子型を有する全色花のＦ１系統（系統番号Ｈ４２）（図８Ｃ）を得た。この全色花のＦ１系統（系統番号Ｈ４２）を自殖した結果、後代個体（系統番号Ｖ９８）（図８Ｄ）は全色花およびかすり花の形質に分離し、その分離個体数は、１８：４であったことから、その想定された全色花（ＢＢＡｎｓＡｎｓおよびＢｂＡｎｓＡｎｓ）：かすり花（ｂｂＡｎｓＡｎｓ）の分離比３：１の理論値に基づきχ２検定を行った結果、χ２値＝０．５４５で４６．０％の適合確率を与えた。以上の結果より、トルコギキョウのかすり花形質は劣性ホモの遺伝子型ｂｂで発現することがわかる。
ＢＢＡｎｓＡｎｓの遺伝子型を有する有色花の系統（系統番号Ｅ９４）（図９Ａ）およびＢＢａｎｓａｎｓの遺伝子型を有する白色花の系統（系統番号Ｅ１１７）（図９Ｂ）を交配し、ＢＢＡｎｓａｎｓの遺伝子型を有する有色花のＦ１系統（系統番号Ｈ８４）（図９Ｃ）を得た。この有色花のＦ１系統（系統番号Ｈ８４）を自殖した結果、後代個体（系統番号Ｖ１３７）（図９Ｄ）は有色花および白色花の形質に分離し、その分離個体数は、１７：５であったことから、その想定された有色花（ＢＢＡｎｓＡｎｓおよびＢＢＡｎｓａｎｓ）：白色花（ＢＢａｎｓａｎｓ）の分離比３：１の理論値によりχ２検定を行った結果、χ２値＝０．０６１で８０．６％の適合確率を与えた。以上の結果より、トルコギキョウの白色花形質はアントシアニジンシンターゼ酵素レベルでの劣性ホモの遺伝子型ＢＢａｎｓａｎｓで発現することがわかる。
ｂｂＡｎｓＡｎｓの遺伝子型を有するかすり花の系統（系統番号Ｅ５４、Ｅ１２４）（図１０Ａ）およびｂｂａｎｓａｎｓの遺伝子型を有する白色花の系統（系統番号Ｅ９９、ＭＡ８２）（図１０Ｂ）を交配し、ｂｂＡｎｓａｎｓの遺伝子型を有するかすり花のＦ１系統（系統番号Ｈ１、Ｈ７６）（図１０Ｃ）を得た。このかすり花のＦ１系統（系統番号Ｈ１、Ｈ７６）を自殖した結果、後代個体（系統番号Ｖ９３、Ｖ１３１）（図１０Ｄ）はかすり花および白色花の形質に分離し、その分離個体数は、系統番号Ｖ９３は４２：１３個体数、Ｖ１３１は３３：８個体数であった。これらの系統のすべての個体数を合計したところ、７５：２１であったことから、その想定されたかすり花（ｂｂＡｎｓＡｎｓおよびｂｂＡｎｓａｎｓ）：白色花（ｂｂａｎｓａｎｓ）の分離比３：１の理論値によりχ２検定を行った結果、χ２値＝０．５００で４８．０％の適合確率を与えた。以上の結果より、トルコギキョウの白色花形質はアントシアニジンシンターゼ酵素レベルでの劣性ホモの遺伝子型ＢＢａｎｓａｎｓに加えてかすり花の形質である遺伝子型ｂｂａｎｓａｎｓでも発現することがわかる。
共分離を確認するため、あらかじめ作出したＢｂＡｎｓａｎｓの完全ヘテロ遺伝子型を有する全色花の系統（系統番号Ｖ１４４）の自殖を行った。その結果、全色花、かすり花および黄色花の３つの形質に分離し（図１１）、その分離個体数は、１４：６：７であったことから、その想定された全色花（Ｂ−Ａｎｓ−）：かすり花（ｂｂＡｎｓ−）：黄色花（−−ａｎｓａｎｓ）の分離比９：３：４の理論値によりχ２検定を行った結果、χ２値＝０．２７６で８７．１％の適合確率を与えた。なお、ここで言う、‘−’の符号は、遺伝子型がＢまたはｂ、Ａｎｓまたはａｎｓを表すものである。以上の結果より、トルコギキョウの白色花形質はアントシアニジンシンターゼ酵素レベルでの遺伝子座（Ａｎｓ／ａｎｓ）ならびに全色花とかすり花を制御する遺伝子座（Ｂ／ｂ）が独立して発現することがわかる。
【実施例３】
【００１０】
黄色花と白色花の遺伝様式
トルコギキョウのホモ型形質を確認するため、ｂｂａｎｓａｎｓＹＳＹＳの遺伝子型を有する黄色花の系統群（系統番号Ｖ３４、Ｖ１０３、Ｖ１０４、Ｖ１７４、Ｖ２３５、Ｖ２３９、Ｖ２４９、ＭＡ５２）の自殖を行った。その結果、自殖後代７２個体は全て黄色花（ｂｂａｎｓａｎｓＹＳＹＳ）（図１２Ａ：Ｖ１０３）であった。また、ｂｂａｎｓａｎｓＹＷＹＷの遺伝子型を有する白色花の系統群（系統番号Ｅ５、Ｖ８）の自殖を行った。その結果、自殖後代４３個体は全て白色花（ｂｂａｎｓａｎｓＹＷＹＷ）（図１２Ｂ：Ｅ５）であった。
共分離を確認するため、黄色花の系統（系統番号Ｅ４；遺伝子型ｂｂａｎｓａｎｓＹＳＹＳ）（図１３Ａ）と白色花の系統（系統番号ＭＡ８２；遺伝子型ｂｂａｎｓａｎｓＹＷＹＷ）（図１３Ｂ）とを交配し、Ｆ１を作出した。その結果、Ｆ１は全て黄色花形質を有する個体（系統番号Ｈ５；想定遺伝子型はｂｂａｎｓａｎｓＹＳＹＷ）（図１３Ｃ）を得た。
黄色花の系統（系統番号Ｅ４；遺伝子型ｂｂａｎｓａｎｓＹＳＹＳ）（図１４Ａ）と白色花の系統（系統番号Ｅ７１；遺伝子型ＢＢａｎｓａｎｓＹＷＹＷ）（図１４Ｂ）とを交配し、Ｆ１を作出した。その結果、Ｆ１は全て白色花形質を有する個体（系統番号Ｈ９；想定遺伝子型はＢｂａｎｓａｎｓＹＳＹＷ）（図１４Ｃ）を得た。以上の結果より、トルコギキョウの全色花とかすり花を制御する遺伝子座（Ｂ／ｂ）がｂｂの劣性ホモ型の場合、遺伝子型ＹＳと遺伝子型ＹＷで黄色花と白色花が制御されていることがわかる。
トルコギキョウのホモ型形質を確認するため、ＢＢａｎｓａｎｓＹＣＹＣの遺伝子型を有する黄色花の系統（系統番号Ｖ１４５）の自殖を行った。その結果、自殖後代３０個体は全て黄色花（ＢＢａｎｓａｎｓＹＣＹＣ）（図１５Ａ）であった。
共分離を確認するため、あらかじめ作出したＢＢＡｎｓａｎｓＨＴＨＴＰｇＰｇＹＣＹＣの遺伝子型を有する黄色地桃色花（オレンジ色花）の系統（系統番号Ｐ２４）の自殖を行った。その結果、黄色地桃色花（オレンジ色花）および黄色花の２つの形質に分離し（図１５Ｂ）、その分離個体数は８：３であったことから、その想定された黄色地桃色花（オレンジ色花）（ＢＢＡｎｓ−ＨＴＨＴＰｇＰｇＹＣＹＣ）：黄色花（ＢＢａｎｓａｎｓＨＴＨＴＰｇＰｇＹＣＹＣ）の分離比３：１の理論値によりχ２検定を行った結果、χ２値＝０．０３０で８６．２％の適合確率を与えた。
あらかじめ作出したＢｂＡｎｓａｎｓＹＣＹＣの遺伝子型を有する黄色地桃色全色花（オレンジ色全色花）の系統（系統番号Ｖ１４４）の自殖を行った。その結果、黄色地桃色全色花（オレンジ色全色花）、黄色地桃色かすり花（オレンジ色かすり花）および黄色花の３つの形質に分離し（図１５Ｃ）、その分離個体数は１４：６：７であったことから、その想定された黄色地桃色全色花（オレンジ色全色花）（Ｂ−Ａｎｓ−ＹＣＹＣ）：黄色地桃色かすり花（オレンジ色かすり花）（ｂｂＡｎｓ−ＹＣＹＣ）：黄色花（−−ａｎｓａｎｓＹＣＹＣ）の分離比９：３：４の理論値に基づきχ２検定を行った結果、χ２値＝０．２７６で８７．１％の適合確率を与えた。なお、ここで言う、‘−’の符号は、遺伝子型がＢまたはｂ、Ａｎｓまたはａｎｓを表すものである。以上の結果より、トルコギキョウの全色花とかすり花を制御する遺伝子座（Ｂ／ｂ）がＢ−の優性型の場合、遺伝子型ＹＣで黄色花が制御されていることがわかる。
【実施例４】
【００１１】
ＡＮＳ劣性ホモによる白色花の遺伝様式
トルコギキョウのホモ型形質を確認するため、ＡｎｓＡｎｓＨＤＨＤ遺伝子型を有する紫色花の系統（系統番号ＲＶ）の自殖を行った。その結果、自殖後代５０個体は全て紫色花（ＡｎｓＡｎｓＨＤＨＤ）（図１６Ａ）であった。また、ａｎｓａｎｓＨＤＨＤ遺伝子型を有する白色花の系統群（系統番号Ｖ８５、Ｖ７９、Ｅ１１２、Ｅ１２５）の自殖を行った。その結果、自殖後代３６個体は全て白色花（ａｎｓａｎｓＨＤＨＤ）（図１６Ｂ：Ｅ１２５）であった。
共分離を確認するため、あらかじめ作出したＥＥＡｎｓａｎｓＨＤＨＤのヘテロ遺伝子型を有する紫色花の系統群（系統番号Ｗ３、ＷＷ５０）の自殖を行った。その結果、紫色花（覆輪花）：白色花（覆輪花）の分離個体数は、系統番号Ｗ３は２７：１４個体数、ＷＷ５０は２３：６個体数に分離した（図１６Ｃ：Ｗ３）。これら系統のすべての個体数を合計したところ、５０：２０であったことから、その想定された紫色花（ＥＥＡｎｓＡｎｓＨＤＨＤおよびＥＥＡｎｓａｎｓＨＤＨＤ）：白色花（ＥＥａｎｓａｎｓＨＤＨＤ）の分離比３：１の理論値よりχ２検定を行った結果、χ２値＝０．４７６で４９．０％の適合確率を与えた。以上の結果より、トルコギキョウの花弁色素に関連するフラボノイド水酸化酵素の制御に係る遺伝子型ＨＤが存在しても、その下流を制御するアントシアニジンシンターゼ酵素レベルでの遺伝子座（Ａｎｓ／ａｎｓ）がａｎｓａｎｓの劣性ホモ型の場合は、紫色花にはならず白色花になることがわかる。なお、白色花（ＥＥａｎｓａｎｓＨＤＨＤ）には覆輪の遺伝子型が入っているが、白色花であることから見かけ上、確認することはできない。
トルコギキョウのホモ型形質を確認するため、ＡｎｓＡｎｓＨＯＨＯ遺伝子型を有する藤色花の系統（系統番号ＭＥ）の自殖を行った。その結果、自殖後代５０個体は全て藤色花（ＡｎｓＡｎｓＨＯＨＯ）（図１７Ａ）であった。また、ａｎｓａｎｓＨＯＨＯ遺伝子型を有する白色花の系統群（系統番号Ｖ５３、Ｖ１５８、Ｅ１１７）の自殖を行った。その結果、自殖後代４１個体は全て白色花（ａｎｓａｎｓＨＯＨＯ）（図１７Ｂ：Ｖ５３）であった。
共分離を確認するため、あらかじめ作出したＡｎｓａｎｓＨＯＨＯのヘテロ遺伝子型を有する藤色花の系統群（系統番号Ｗ５１、ＷＷ４２）の自殖を行った。その結果、藤色花：白色花の分離個体数は、系統番号Ｗ５１は２６：１２個体数、ＷＷ４２は１８：４個体数に分離した（図１７Ｃ：Ｗ５１）。これら系統のすべての個体数を合計したところ、４４：１６であったことから、その想定された藤色花（ＡｎｓＡｎｓＨＯＨＯおよびＡｎｓａｎｓＨＯＨＯ）：白色花（ａｎｓａｎｓＨＯＨＯ）の分離比３：１の理論値によりχ２検定を行った結果、χ２値＝０．０８９で７６．６％の適合確率を与えた。以上の結果より、トルコギキョウの花弁色素に関連するフラボノイド水酸化酵素の制御に係る遺伝子型ＨＯが存在しても、その下流を制御するアントシアニジンシンターゼ酵素レベルでの遺伝子座（Ａｎｓ／ａｎｓ）がａｎｓａｎｓの劣性ホモ型の場合は、藤色花にはならず白色花になることがわかる。
トルコギキョウのホモ型形質を確認するため、ＡｎｓＡｎｓＨＴＨＴ遺伝子型を有する赤色花の系統（系統番号ＡＫ）の自殖を行った。その結果、自殖後代５０個体は全て赤色花（ＡｎｓＡｎｓＨＴＨＴ）（図１８Ａ）であった。
共分離を確認するため、あらかじめ作出したＡｎｓａｎｓＨＴＨＴのヘテロ遺伝子型を有する赤色花の系統群（系統番号ＷＷ８５、ＷＷ８６）の自殖を行った。その結果、赤色花：白色花の分離個体数は、系統番号ＷＷ８５は１６：６個体数、ＷＷ８６は１０：５個体数に分離した（図１８Ｂ：ＷＷ８６）。これら系統のすべての個体数を合計したところ、２６：１１であったことから、その想定された赤色花（ＡｎｓＡｎｓＨＴＨＴおよびＡｎｓａｎｓＨＴＨＴ）：白色花（ａｎｓａｎｓＨＴＨＴ）の分離比３：１の理論値によりχ２検定を行った結果、χ２値＝０．４４１で５０．６％の適合確率を与えた。以上の結果より、トルコギキョウの花弁色素に関連するフラボノイド水酸化酵素の制御に係る遺伝子型ＨＴが存在しても、その下流を制御するアントシアニジンシンターゼ酵素レベルでの遺伝子座（Ａｎｓ／ａｎｓ）がａｎｓａｎｓの劣性ホモ型の場合は、赤色花にはならず白色花になることがわかる。
トルコギキョウのホモ型形質を確認するため、ＡｎｓＡｎｓＨＦＨＦＰｇＰｇ遺伝子型を有する桃色花の系統（系統番号Ｐ１６）の自殖を行った。その結果、自殖後代４０個体は全て桃色花（ＡｎｓＡｎｓＨＦＨＦＰｇＰｇ）（図１９Ａ）であった。また、ａｎｓａｎｓＨＦＨＦ遺伝子型を有する白色花の系統（系統番号Ｖ３１、Ｖ５１、Ｖ１６０）の自殖を行った。その結果、自殖後代３８個体は全て白色花（ａｎｓａｎｓＨＦＨＦ）（図１９Ｂ：Ｖ３１）であった。
共分離を確認するため、あらかじめ作出したＡｎｓａｎｓＨＦＨＦＰｇＰｇのヘテロ遺伝子型を有する桃色花の系統群（系統番号Ｗ３１、Ｗ３３、ＷＷ７０、ＷＷ７２）の自殖を行った。その結果、桃色花：白色花の分離個体数は、系統番号Ｗ３１は３９：１２個体数、Ｗ３３は１３：４個体数、ＷＷ７０は７：３個体数、ＷＷ７２は７：３個体数に分離した（図１９Ｃ：Ｗ３１）。これら系統のすべての個体数を合計したところ、６６：２２であったことから、その想定された桃色花（ＡｎｓＡｎｓＨＦＨＦＰｇＰｇおよびＡｎｓａｎｓＨＦＨＦＰｇＰｇ）：白色花（ａｎｓａｎｓＨＦＨＦＰｇＰｇ）の分離比３：１の理論値に基づきχ２検定を行った結果、χ２値＝０．０００で１００．０％の適合確率を与えた。以上の結果より、トルコギキョウの花弁色素に関連するフラボノイド水酸化酵素の制御に係る遺伝子型ＨＦＨＦＰｇＰｇが存在しても、その下流を制御するアントシアニジンシンターゼ酵素レベルでの遺伝子座（Ａｎｓ／ａｎｓ）がａｎｓａｎｓの劣性ホモ型の場合は、桃色花にはならず白色花になることがわかる。
【実施例５】
【００１２】
新たな複対立遺伝子ＨＥ
野生種トルコギキョウのホモ型形質を確認するため、ＡｎｓＡｎｓＨＥＨＥ遺伝子型を有する野生種紫色花系統群（系統番号ＢＣ１、ＢＣ２、ＢＣ２５３４、ＢＣＦＷ、ＩＲＰＣＣ、ＲＰＣＣ、ＭＩＣＣ、ＰＩＣＣ、ＰＩＳＰＩ、ＬＶＳＰＩ、ＢＯＣＶ、ＦＳＰ、ＦＭＺＡＰ、ＲＧＶＨＳ、ＢＡＬ、Ｂｌａｋｅ、ＢＣＦＷ、ＢＣ２）の自殖を行った。その結果、自殖後代３７２個体は全て紫色花（ＡｎｓＡｎｓＨＥＨＥ）（図２０：ＦＳＰ、ＢＯＣＶ）であった。これらの系統のアントシアニジン色素を調査したところ、Ｄｐｎ色素のみの組成であった。
これら野生種トルコギキョウ（ＡｎｓＡｎｓＨＥＨＥ遺伝子型）の系統群（系統番号ＢＣ１、ＢＣ２、ＢＣ２５３４、ＢＣＦＷ、ＩＲＰＣＣ、ＲＰＣＣ、ＭＩＣＣ、ＰＩＣＣ、ＰＩＳＰＩ、ＬＶＳＰＩ、ＢＯＣＶ、ＦＳＰ、ＦＭＺＡＰ、ＲＧＶＨＳ、ＢＡＬ、Ｂｌａｋｅ、ＢＣＦＷ、ＢＣ２）のフラボノイド３’５’水酸化酵素（Ｆ３’５’Ｈ遺伝子）を特許第５０３９９６７号に記載の方法で調査したところ、全てＥｇＨｆ１遺伝子であった。色素組成がＤｐｎであって、かつ、ＥｇＨｆ１遺伝子を有する遺伝子型は過去に報告例はないため、この遺伝子型ＨＥは野生種由来の新しい遺伝子型であることがわかる。なお、ＨＥは、野生種の学名Ｅｕｓｔｏｍａ  ｅｘａｌｔａｔｕｍの‘ｅｘａｌｔａｔｕｍ’の頭文字‘Ｅ’をとって、‘ＨＥ’と表記した。
共分離を確認するため、ＡｎｓＡｎｓＨＤＨＤの遺伝子型を有する紫色花の系統（系統番号ＲＶ）（図２１Ａ）およびＡｎｓＡｎｓＨＥＨＥ遺伝子型を有する野生種紫色花の系統（系統番号Ｗｉ５、Ｗｉ１８）（図２１Ｂ）を交配し、ＡｎｓＡｎｓＨＥＨＤのヘテロ遺伝子型を有する紫色花のＦ１系統（系統番号Ｕ３３、Ｕ５９）（図２１Ｃ）を得た。この紫色花のＦ１系統（系統番号Ｕ３３、Ｕ５９）の色素を調査したところ、すべてＤｐｎ色素表現型であった。また、フラボノイド３’，５’水酸化酵素遺伝子（Ｆ３’，５’Ｈ遺伝子）を特許第５０３９９６７号に記載の方法で調査したところ、ＥｇＨｆ１遺伝子およびＥｇＨｆ２遺伝子の両者を保有していた（図２２）。以上の結果より、対立する遺伝子型ＨＥおよびＨＤは、フラボノイド３’，５’水酸化酵素遺伝子（Ｆ３’，５’Ｈ遺伝子）のＥｇＨｆ１およびＥｇＨｆ２にそれぞれ対応することが分かり、共分離することは明らかである。
共分離を確認するため、ＡｎｓＡｎｓＨＯＨＯの遺伝子型を有する藤色花の系統（系統番号ＭＥ）（図２３Ａ）およびＡｎｓＡｎｓＨＥＨＥ遺伝子型を有する野生種紫色花の系統（系統番号Ｗｉ５、Ｗｉ１８）（図２３Ｂ）を交配し、ＡｎｓＡｎｓＨＥＨＯのヘテロ遺伝子型を有する紫色花のＦ１系統（系統番号Ｕ３４、Ｕ６０）（図２３Ｃ）を得た。この紫色花のＦ１系統（系統番号Ｕ３４、Ｕ６０）の色素を調査したところ、すべてＣｙｎＤｐｎ色素表現型であった。また、フラボノイド３’，５’水酸化酵素遺伝子（Ｆ３’，５’Ｈ遺伝子）を特許第５０３９９６７号に記載の方法で調査したところ、ＥｇＨｆ１遺伝子のみを保有していた（図２４）。以上の結果より、対立する遺伝子型ＨＥおよびＨＯは、フラボノイド３’５’水酸化酵素（Ｆ３’５’Ｈ遺伝子）のＥｇＨｆ１に対応することが分かり、共分離することは明らかである。
共分離を確認するため、ａｎｓａｎｓＨＦＨＦの遺伝子型を有する白色花の系統（系統番号Ｗ６）（図２５Ａ）およびＡｎｓＡｎｓＨＥＨＥ遺伝子型を有する野生種紫色花の系統（系統番号Ｗｉ１０）（図２５Ｂ）を交配し、ＡｎｓａｎｓＨＥＨＦのヘテロ遺伝子型を有する紫色花のＦ１系統（系統番号Ｕ４０）（図２５Ｃ）を得た。この紫色花のＦ１系統（系統番号Ｕ４０）の色素を調査したところ、すべてＤｐｎ色素表現型であった。また、フラボノイド３’，５’水酸化酵素遺伝子（Ｆ３’，５’Ｈ遺伝子）を特許第５０３９９６７号に記載の方法で調査したところ、ＥｇＨｆ１遺伝子およびＥｇＨｆ３遺伝子の両者を保有していた（図２６）。以上の結果より、対立する遺伝子型ＨＥおよびＨＦは、フラボノイド３’，５’水酸化酵素遺伝子（Ｆ３’，５’Ｈ遺伝子）のＥｇＨｆ１およびＥｇＨｆ３にそれぞれ対応することがわかり、共分離することは明らかである。
共分離を確認するため、ＡｎｓＡｎｓＨＴＨＴの遺伝子型を有する赤色花の系統（系統番号ＡＫ）（図２７Ａ）およびＡｎｓＡｎｓＨＥＨＥ遺伝子型を有する野生種紫色花の系統（系統番号Ｗｉ５、Ｗｉ１８）（図２７Ｂ）を交配し、ＡｎｓＡｎｓＨＥＨＴのヘテロ遺伝子型を有する紫色花のＦ１系統（系統番号Ｕ３２、Ｕ５８）（図２７Ｃ）を得た。この紫色花のＦ１系統（系統番号Ｕ３２、Ｕ５８）の色素を調査したところ、すべてＣｙｎＤｐｎ色素表現型であった。また、フラボノイド３’，５’水酸化酵素遺伝子（Ｆ３’，５’Ｈ遺伝子）を特許第５０３９９６７号に記載の方法で調査したところ、ＥｇＨｆ１遺伝子およびＥｇＨｆ３遺伝子の両者を保有していた（図２８）。以上の結果より、対立する遺伝子型ＨＥおよびＨＴは、フラボノイド３’，５’水酸化酵素遺伝子（Ｆ３’，５’Ｈ遺伝子）のＥｇＨｆ１およびＥｇＨｆ３にそれぞれ対応することがわかり、共分離することは明らかである。
【実施例６】
【００１３】
複対立遺伝子のＦ２世代における遺伝子型と表現型の共分離の実証
共分離を確認するため、ＡｎｓＡｎｓＨＯＨＯ遺伝子型を有する藤色花の系統（系統番号ＭＥ）（図２９Ａ）およびＡｎｓＡｎｓＨＤＨＤ遺伝子型を有する紫色花の系統（系統番号ＲＶ）（図２９Ｂ）を交配し、ＡｎｓＡｎｓＨＤＨＯのヘテロ遺伝子型を有する紫色花のＦ１系統（図２９Ｃ）を得た。この紫色花のＦ１系統の色素を調査したところ、すべてＤｐｎ色素表現型であった。さらに、このＦ１系統を自殖しＦ２世代を２１個体育成し、フラボノイド３’，５’水酸化酵素遺伝子（Ｆ３’，５’Ｈ遺伝子）を特許第５０３９９６７号に記載の方法で調査し、さらにこのＦ２集団の中でＥｇＨｆ１とＥｇＨｆ２をヘテロで持つ個体を自殖して得たＦ３集団１１個体を調査した。その結果、Ｆ２及びＦ３世代３２個体におけるＦ３’５’Ｈ遺伝子型の分離比はＥｇＨｆ１／ＥｇＨｆ２ヘテロ：ＥｇＨｆ２ホモ：ＥｇＨｆ１ホモが１５：８：９となり（図３０）、ほぼ２：１：１に分離した。また、図３０の電気泳動の結果においてＥｇＨｆ１遺伝子のみを保有することを示した個体は全て図２９ＥのようなＣｙ優勢型の表現型の藤色の花色を示し、ＥｇＨｆ１／ＥｇＨｆ２ヘテロおよびＥｇＨｆ２ホモの個体は全て図２９ＤのようなＤｐｎ優勢色素表現型の紫色の花色を示した。以上の結果より、対立する遺伝子型ＨＯおよびＨＤは、それぞれＦ３’５’Ｈ遺伝子のＥｇＨｆ１およびＥｇＨｆ２に対応することが分かり、色素表現型とＦ３’５’Ｈ遺伝子型が共分離することがＦ２世代の分離からも確かめられた。
【実施例７】
【００１４】
トルコギキョウＦ１種子の交配作出
以下、トルコギキョウＦ１種子の交配作出法を具体的に説明する。
＜例１＞
一重の赤色かすり花（ＤＳＤＳｅｅｂｂＡｎｓＡｎｓＨＴＨＴＰｇＰｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＷＹＷ遺伝子型、ホモ型、系統番号Ｅ５４）（図３１Ａ）と八重の黄色花（ＤＤＤＤｅｅｂｂａｎｓａｎｓＨＴＨＴＰｇＰｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＳＹＳ遺伝子型、ホモ型、系統番号Ｅ９９）（図３１Ｂ）を交配し、Ｆ１八重の桃色かすり花（ＤＳＤＤｅｅｂｂＡｎｓａｎｓＨＴＨＴＰｇＰｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＷＹＳ遺伝子型、ヘテロ型、系統番号Ｈ１）（図３１Ｃ）を得た。
＜例２＞
一重の白色花（ＤＳＤＳｅｅＢＢａｎｓａｎｓＨＤＨＤｐｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＷＹＷ遺伝子型、ホモ型、系統番号Ｅ５８）（図３２Ａ）と八重の赤色全色花（ＤＤＤＤｅｅＢＢＡｎｓＡｎｓＨＴＨＴＰｇＰｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＷＹＷ遺伝子型、ホモ型、系統番号Ｅ１０７）（図３２Ｂ）を交配し、Ｆ１八重の紫色全色花（ＤＤＤＳｅｅＢＢＡｎｓａｎｓＨＤＨＴＰｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＷＹＷ遺伝子型、ヘテロ型、系統番号Ｈ７）（図３２Ｃ）を得た。
＜例３＞
一重の白色花（ＤＳＤＳｅｅＢＢＡｎｓＡｎｓＨＦＨＦｐｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＷＹＷ遺伝子型、ホモ型、系統番号Ｅ７７）（図３３Ａ）と八重の黄色花（ＤＤＤＤｅｅｂｂａｎｓａｎｓＨＯＨＯｐｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＳＹＳ遺伝子型、ホモ型、系統番号Ｅ１００）（図３３Ｂ）を交配し、Ｆ１八重の赤紫色全色花（ＤＤＤＳｅｅＢｂＡｎｓａｎｓＨＯＨＦｐｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＳＹＷ遺伝子型、ヘテロ型、系統番号Ｈ２８）（図３３Ｃ）を得た。
＜例４＞
一重の赤色全色花（ＤＳＤＳｅｅＢＢＡｎｓＡｎｓＨＴＨＴＰｇＰｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＷＹＷ遺伝子型、ホモ型、系統番号Ｅ５６）（図３４Ａ）と八重の白色花（ＤＤＤＤｅｅｂｂａｎｓａｎｓＨＯＨＯｐｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＷＹＷ遺伝子型、ホモ型、系統番号Ｅ７１）（図３４Ｂ）を交配し、Ｆ１八重の赤紫色全色花（ＤＤＤＳｅｅＢｂＡｎｓａｎｓＨＯＨＴＰｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＷＹＷ遺伝子型、ヘテロ型、系統番号Ｈ２３）（図３４Ｃ）を得た。
＜例５＞
一重の白色花（ＤＳＤＳＥＥＢＢＡｎｓＡｎｓＨＦＨＦｐｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＷＹＷ遺伝子型、ホモ型、系統番号Ｅ９６）（図３５Ａ）と八重の黄色花（ＤＤＤＤｅｅｂｂａｎｓａｎｓＨＴＨＴＰｇＰｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＳＹＳ遺伝子型、ホモ型、系統番号Ｅ９９）（図３５Ｂ）を交配し、Ｆ１八重の桃色覆輪花（ＤＤＤＳＥｅＢｂＡｎｓａｎｓＨＦＨＴＰｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＷＹＳ遺伝子型、ヘテロ型、系統番号Ｈ３２）（図３５Ｃ）を得た。
＜例６＞
八重の桃色花（ＤＤＤＤｅｅＢＢＡｎｓＡｎｓＨＴＨＴＰｇＰｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＷＹＷ遺伝子型、ホモ型、系統番号Ｅ１５５）（図３６Ａ）と一重の白色花（ＤＳＤＳｅｅｂｂａｎｓａｎｓＨＤＨＤｐｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＷＹＷ遺伝子型、ホモ型、系統番号Ｅ１５７）（図３６Ｂ）を交配し、Ｆ１八重の紫色全色花（ＤＤＤＳｅｅＢｂＡｎｓａｎｓＨＤＨＴＰｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＷＹＷ遺伝子型、ヘテロ型、系統番号Ｈ４８）（図３６Ｃ）を得た。
＜例７＞
一重の白色花（ＤＷＤＷｅｅＢＢａｎｓａｎｓＨＦＨＦＰｇＰｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＷＹＷ遺伝子型、ホモ型、系統番号Ｅ１４０）（図３７Ａ）と八重の黄色花（ＤＤＤＤｅｅｂｂａｎｓａｎｓＨＴＨＴＰｇＰｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＳＹＳ遺伝子型、ホモ型、系統番号Ｅ９９）（図３７Ｂ）を交配し、Ｆ１二重の白色花（ＤＷＤＤｅｅＢｂａｎｓａｎｓＨＦＨＴＰｇＰｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＷＹＳ遺伝子型、ヘテロ型、系統番号Ｈ８２）（図３７Ｃ）を得た。
＜例８＞
一重の赤色かすり花（ＤＳＤＳｅｅｂｂＡｎｓＡｎｓＨＴＨＴＰｇＰｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＷＹＷ遺伝子型、ホモ型、系統番号Ｗ１０）（図３８Ａ）と八重の白色花（ＤＤＤＤｅｅｂｂａｎｓａｎｓＨＯＨＯｐｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＷＹＷ遺伝子型、ホモ型、系統番号Ｗ２８）（図３８Ｂ）を交配し、Ｆ１八重の赤紫色かすり花（ＤＤＤＳｅｅｂｂＡｎｓａｎｓＨＯＨＴＰｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＷＹＷ遺伝子型、ヘテロ型、系統番号Ｕ５０）（図３８Ｃ）を得た。
＜例９＞
八重の白色花（ＤＤＤＤｅｅｂｂａｎｓａｎｓＨＯＨＯｐｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＷＹＷ遺伝子型、ホモ型、系統番号Ｗ２８）（図３９Ａ）と一重の紫色花（ＤＷＤＷｅｅＢＢＡｎｓＡｎｓＨＥＨＥｐｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＷＹＷ遺伝子型、ホモ型、系統番号Ｗｉ１３）（図３９Ｂ）を交配し、Ｆ１二重の紫色全花（ＤＤＤＷｅｅＢｂＡｎｓａｎｓＨＯＨＥｐｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＷＹＷ遺伝子型、ヘテロ型、系統番号Ｕ５１）（図３９Ｃ）を得た。
＜例１０＞
一重の黄色花（ＤＳＤＳＥＥｂｂａｎｓａｎｓＨＦＨＦｐｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＳＹＳ遺伝子型、ホモ型、系統番号Ｗ１）（図４０Ａ）と一重の赤色かすり花（ＤＳＤＳｅｅｂｂＡｎｓＡｎｓＨＴＨＴＰｇＰｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＷＹＷ遺伝子型、ホモ型、系統番号Ｗ１０）（図４０Ｂ）を交配し、Ｆ１一重の赤色かすり覆輪花（ＤＳＤＳＥｅｂｂＡｎｓａｎｓＨＴＨＦＰｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＳＹＷ遺伝子型、ヘテロ型、系統番号Ｕ４２）（図４０Ｃ）を得た。
＜例１１＞
八重の黄色花（ＤＤＤＤｅｅｂｂａｎｓａｎｓＨＤＨＤｐｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＳＹＳ遺伝子型、ホモ型、系統番号Ｒ５７）（図４１Ａ）と一重の黄色地紫色かすり花（ＤＳＤＳｅｅｂｂＡｎｓＡｎｓＨＤＨＤＰｇＰｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＣＹＣ遺伝子型、ホモ型、系統番号Ｒ６５）（図４１Ｂ）を交配し、Ｆ１八重の黄色地紫色かすり花（ＤＤＤＳｅｅｂｂＡｎｓａｎｓＨＤＨＤＰｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＣＹＳ遺伝子型、ヘテロ型、系統番号Ｐ６）（図４１Ｃ）を得た。
＜例１２＞
一重の桃色かすり覆輪花（ＤＳＤＳＥＥｂｂＡｎｓＡｎｓＨＦＨＦＰｇＰｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＷＹＷ遺伝子型、ホモ型、系統番号Ｒ６８）（図４２Ａ）と八重の黄色花（ＤＤＤＤｅｅｂｂａｎｓａｎｓＨＦＨＦｐｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＳＹＳ遺伝子型、ホモ型、系統番号Ｒ５８）（図４２Ｂ）を交配し、Ｆ１八重の桃色かすり覆輪花（ＤＤＤＳＥｅｂｂＡｎｓａｎｓＨＦＨＦＰｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＳＹＷ遺伝子型、ヘテロ型、系統番号Ｐ８）（図４２Ｃ）を得た。
＜例１３＞
八重の黄色花（ＤＤＤＤｅｅｂｂａｎｓａｎｓＨＦＨＦｐｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＳＹＳ遺伝子型、ホモ型、系統番号Ｒ５８）（図４３Ａ）と一重の藤色花（ＤＷＤＷｅｅＢＢＡｎｓＡｎｓＨＯＨＯＰｇＰｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＷＹＷ遺伝子型、ホモ型、系統番号Ｒ６１）（図４３Ｂ）を交配し、Ｆ１二重の赤紫色全色花（ＤＤＤＷｅｅＢｂＡｎｓａｎｓＨＯＨＦＰｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＳＹＷ遺伝子型、ヘテロ型、系統番号Ｐ１）（図４３Ｃ）を得た。
＜例１４＞
八重の黄色花（ＤＤＤＤｅｅｂｂａｎｓａｎｓＨＦＨＦｐｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＳＹＳ遺伝子型、ホモ型、系統番号Ｒ５８）（図４４Ａ）と一重の桃色全色花（ＤＷＤＷｅｅＢＢＡｎｓＡｎｓＨＦＨＦＰｇＰｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＷＹＷ遺伝子型、ホモ型、系統番号Ｒ６３）（図４４Ｂ）を交配し、Ｆ１二重の桃色全色花（ＤＤＤＷｅｅＢｂＡｎｓａｎｓＨＦＨＦＰｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＳＹＷ遺伝子型、ヘテロ型、系統番号Ｐ３）（図４４Ｃ）を得た。
＜例１５＞
一重の白色花（ＤＳＤＳｅｅｂｂａｎｓａｎｓＨＤＨＤｐｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＷＹＷ遺伝子型、ホモ型、系統番号Ｖ８５）（図４５Ａ）と八重の桃色かすり花（ＤＤＤＤｅｅｂｂＡｎｓＡｎｓＨＦＨＦＰｇＰｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＷＹＷ遺伝子型、ホモ型、系統番号Ｖ９０）（図４５Ｂ）を交配し、Ｆ１八重の紫色かすり花（ＤＳＤＤｅｅｂｂａｎｓＡｎｓＨＤＨＦｐｇＰｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＷＹＷ遺伝子型、ヘテロ型、系統番号ＳＡＩ７）（図４５Ｃ）を得た。
＜例１６＞
一重の白色花（ＤＳＤＳｅｅｂｂａｎｓａｎｓＨＤＨＤｐｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＷＹＷ遺伝子型、ホモ型、系統番号Ｖ８５）（図４６Ａ）と八重黄色花（ＤＤＤＤｅｅｂｂａｎｓａｎｓＨＤＨＤｐｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＳＹＳ遺伝子型、ホモ型、系統番号Ｖ２３１）、（図４６Ｂ）を交配し、Ｆ１八重の黄色花（ＤＳＤＤｅｅｂｂａｎｓａｎｓＨＤＨＤｐｇｐｇＣｙＣｙＤｐＤｐＹＷＹＳ遺伝子型、ヘテロ型、系統番号ＳＡＩ４０）（図４６Ｃ）を得た。
以上の実施例から、本発明のトルコギキョウの花色形質および／または花形形質に対応する遺伝子型を用いるトルコギキョウの新品種作出方法は、優れた育種・品種改良技術であることは明らかである。
【産業上の利用可能性】
【００１５】
本発明によれば、多様な花色および／または花形のトルコギキョウを作出することできるので、トルコギキョウの鑑賞性を大いに高めることできる。よって、本発明は、園芸分野、農業分野、アグリビジネスの分野において利用可能である。
本明細書で引用した全ての刊行物、特許及び特許出願をそのまま参考として本明細書に組み入れるものとする。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０−１】
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【図１０−２】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
2016052760.tif 000045
【図２１】
2016052760.tif 000046
【図２２】
2016052760.tif 000047
【図２３】
2016052760.tif 000048
【図２４】
2016052760.tif 000049
【図２５】
2016052760.tif 000050
【図２６】
2016052760.tif 000051
【図２７】
2016052760.tif 000052
【図２８】
2016052760.tif 000053
【図２９】
2016052760.tif 000054
【図３０】
2016052760.tif 000055
【図３１】
2016052760.tif 000056
【図３２】
2016052760.tif 000057
【図３３】
2016052760.tif 000058
【図３４】
2016052760.tif 000059
【図３５】
2016052760.tif 000060
【図３６】
2016052760.tif 000061
【図３７】
2016052760.tif 000062
【図３８】
2016052760.tif 000063
【図３９】
2016052760.tif 000064
【図４０】
2016052760.tif 000065
【図４１】
2016052760.tif 000066
【図４２】
2016052760.tif 000067
【図４３】
2016052760.tif 000068
【図４４】
2016052760.tif 000069
【図４５】
2016052760.tif 000070
【図４６】
2016052760.tif 000071
【手続補正書】
【提出日】平成29年3月27日(2017.3.27)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
トルコギキョウの花色形質および／または花形形質に対応する遺伝子型を用いるトルコギキョウの新品種作出方法であって、該遺伝子型が、
(a) フラボノイド生合成の色素前駆物質のＢ環の水酸化を制御し、トルコギキョウの主要アントシアニジン色素であるペラルゴニジン（Pgn）、シアニジン（Cyn）、またはデルフィニジン（Dpn）の合成に関与する複対立遺伝子の遺伝子型HXHX（ここで、HXは、HT、HF、HD、HZ、HO、またはHEで表わされる複対立遺伝子を示す。）；
(b) トルコギキョウの主要アントシアニジン色素であるペラルゴニジン（Pgn）、シアニジン（Cyn）、またはデルフィニジン（Dpn）の遺伝子型Pg/pg・Cy/cy・Dp/dp；および
(c) 有色花／白色花の遺伝子型Ans/ans；
からなるAns/ans・HXHX・Pg/pg・Cy/cy・Dp/dpである、上記方法。
【請求項２】
前記遺伝子型が、さらに下記の遺伝子型：
(d) 黄色花および白色花の組み合わせを決定する遺伝子型YXYX（ここで、YXはYC、YS、YWで示される複対立遺伝子であって、YCYCは黄色花のホモ型、YCYS（またはYSYC）は黄色花のヘテロ型、YCYW（またはYWYC）は黄色花のヘテロ型、YWYWは白色花のホモ型を示す。）;
(e) 八重型、二重型、および一重型の組み合わせを決定する遺伝子型DXDX
（ここで、DXはDD、DS、DWで示される複対立遺伝子であって、DDDDは八重花のホモ型、DDDS（またはDSDD）は八重花のヘテロ型、DSDSは一重花のホモ型、DDDW（またはDWDD）は二重花のヘテロ型、DWDS（またはDSDW）は一重花のヘテロ型、DWDWは一重花のホモ型（野生型）を示す。）；
(f) 覆輪花／全色花の遺伝子型E/e；および
(g) 全色花／かすり花の遺伝子型B/b；
からなる群から選ばれる少なくとも１種の遺伝子型を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記遺伝子型が、B/b・Ans/ans・HXHX・Pg/pg・Cy/cy・Dp/dp・YXYXである、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記遺伝子型が、DXDX・E/e・B/b・Ans/ans・HXHX・Pg/pg・Cy/cy・Dp/dp・YXYXである、請求項２に記載の方法。
【請求項５】
前記遺伝子型Ans/ans・HXHX・Pg/pg・Cy/cy・Dp/dpが下記経路式で表される反応系に関与し、遺伝するものである、請求項１〜４のいずれかに記載の方法。
【化１】
2016052760.tif 000072
（ここで、HT、HF、HD、HZ、HO、HEは、フラボノイド生合成の色素前駆物質のＢ環の水酸化を制御する複対立遺伝子型を示す。HT、HF、HD、HZ、HO、HEの6つの複対立遺伝子は、それぞれフラボノイド3’-ヒドロキシラーゼとフラボノイド3’,5’-ヒドロキシラーゼによるＢ環の3’,4’位の水酸化、4’位の水酸化、3’,4’,5’位の水酸化、3’,4’,5’位の水酸化、3’,4’位と3’,4’,5’位の水酸化、および3’,4’,5’位の水酸化を制御する。Pg/pg、Cy/cyおよびDp/dpは、Pgn、Cyn、Dpnの生合成に関与するジヒドロフラボノールリダクターゼ（DFR）の発現に対立する遺伝子座がそれぞれに存在することを示す。Ans/ansは、Pgn、Cyn、Dpnの生合成に関与するアントシアニジンシンターゼ（ANS）の発現に対立する遺伝子座が存在することを示す。）
【請求項６】
トルコギキョウのF1品種、またはF1品種を作出するためのトルコギキョウの種子親系統およびトルコギキョウの花粉親系統を作出するための、請求項１〜５のいずれかに記載の方法。
【請求項７】
花粉親の配偶子を行とし、種子親の配偶子を列とする下記の早見表Ａまたは早見表Ｂに基づいて複対立遺伝子の組み合わせを決定し、目的とする花色のトルコギキョウを作出する、請求項１〜６のいずれかに記載の方法。
【表１】
2016052760.tif 000073
【請求項８】
花粉親の配偶子を行とし、種子親の配偶子を列とする下記の早見表Ｃ〜Ｆのいずれか１種以上の表に基づいて複対立遺伝子の組み合わせを決定し、目的とする花色および／または花形のトルコギキョウを作出する、請求項１〜６のいずれかに記載の方法。
【表２】
2016052760.tif 000074
2016052760.tif 000075
2016052760.tif 000076
2016052760.tif 000077
【請求項９】
請求項１〜８のいずれかに記載の方法によって作出されたトルコギキョウのF1品種、または当該F1品種を作出するためのトルコギキョウの種子親系統およびトルコギキョウの花粉親系統。
【請求項１０】
トルコギキョウの花色形質および／または花形形質に対応する遺伝子型を有する、トルコギキョウのF1品種、または当該F1品種を作出するためのトルコギキョウの種子親系統およびトルコギキョウの花粉親系統であって、該遺伝子型が、
(a) フラボノイド生合成の色素前駆物質のＢ環の水酸化を制御し、トルコギキョウの主要アントシアニジン色素であるペラルゴニジン（Pgn）、シアニジン（Cyn）、またはデルフィニジン（Dpn）の合成に関与する複対立遺伝子の遺伝子型HXHX（ここで、HXは、HT、HF、HD、HZ、HO、またはHEで表わされる複対立遺伝子を示す。）；
(b) トルコギキョウの主要アントシアニジン色素であるペラルゴニジン（Pgn）、シアニジン（Cyn）、またはデルフィニジン（Dpn）の遺伝子型Pg/pg・Cy/cy・Dp/dp；および
(c) 有色花／白色花の遺伝子型Ans/ans；
からなるAns/ans・HXHX・Pg/pg・Cy/cy・Dp/dpである、上記トルコギキョウのF1品種、または当該F1品種を作出するためのトルコギキョウの種子親系統およびトルコギキョウの花粉親系統。
【請求項１１】
さらに下記の遺伝子型：
(d) 黄色花および白色花の組み合わせを決定する遺伝子型YXYX（ここで、YXはYC、YS、YWで示される複対立遺伝子であって、YCYCは黄色花のホモ型、YCYS（またはYSYC）は黄色花のヘテロ型、YCYW（またはYWYC）は黄色花のヘテロ型、YWYWは白色花のホモ型を示す。）;
(e) 八重型、二重型、および一重型の組み合わせを決定する遺伝子型DXDX
（ここで、DXはDD、DS、DWで示される複対立遺伝子であって、DDDDは八重花のホモ型、DDDS（またはDSDD）は八重花のヘテロ型、DSDSは一重花のホモ型、DDDW（またはDWDD）は二重花のヘテロ型、DWDS（またはDSDW）は一重花のヘテロ型、DWDWは一重花のホモ型（野生型）を示す。）；
(f) 覆輪花／全色花の遺伝子型E/e；および
(g) 全色花／かすり花の遺伝子型B/b；
からなる群から選ばれる少なくとも１種の遺伝子型を有する、請求項１０に記載のトルコギキョウのF1品種、または当該F1品種を作出するためのトルコギキョウの種子親系統およびトルコギキョウの花粉親系統。
【国際調査報告】
2016052760.tif 000078
2016052760.tif 000079
2016052760.tif 000080
2016052760.tif 000081