(57)【要約】  血液凝固時間基準試料と試薬との混合反応に応じて時間変化する血液凝固時間に関わるシグナル値（透過光量、散乱光量、蛍光光量、濁度）と、シグナル基準値Ｓとの比較結果に基づいて測定された血液凝固時間基準試料の血液凝固反応時間Ｔが、血液凝固時間基準試料に対応して予め定められた血液凝固反応時間の期待値Ｔｅに相当するシグナル基準値ＳＬｏｃａｌを設定する。これにより、血液凝固時間基準試料を用いて試薬状態を把握し、試薬容器毎に固有のシグナル基準値を設定することにより、測定結果の信頼性を向上することができる。
2015098473.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
分析対象の試料を収容した試料容器を設置する試料容器設置部と、
前記試料の測定に用いる試薬を収容した試薬容器を設置する試薬容器設置部と、
前記試薬と前記試料とを混合反応させる反応容器と、
前記試料容器から前記反応容器に前記試料を分注する試料分注機構と、
前記試薬容器から前記反応容器に前記試薬を分注する試薬分注機構と、
前記試料と前記試薬との混合反応の程度に応じた時間の経過とともに変化する血液凝固時間に関わるシグナル値を検出する検出器と、
当該検出の結果に基づいて、前記試料を分析する制御部とを備え、
前記制御部は、
既知の血液凝固時間を有する血液凝固時間基準試料と前記試薬との混合反応に応じて時間変化するシグナル値から得られる反応曲線を作成し、当該作成された反応曲線において、前記血液凝固時間基準試料に対応して予め定められた血液凝固時間の期待値に相当するシグナル基準値を設定するシグナル基準値設定部と、
当該設定されたシグナル基準値、及び前記試薬に予め設定された識別情報とを対応させて記憶する記憶部と、
当該記憶されたシグナル基準値を用いて、前記試料の血液凝固時間を求める処理部と
を有することを特徴とする自動分析装置。
【請求項２】
請求項１に記載の自動分析装置において、
前記シグナル値は、透過光量、散乱光量、蛍光光量、濁度の何れかであることを特徴とする自動分析装置。
【請求項３】
請求項１に記載の自動分析装置において、
前記制御部は、前記シグナル基準値を試薬容器毎に設定することを特徴とする自動分析装置。
【請求項４】
請求項３に記載の自動分析装置において、
前記制御部は、当該試薬容器毎のシグナル基準値の設定状況を表示部に表示し、未設定の場合には警告を表示することを特徴とする自動分析装置。
【請求項５】
請求項１に記載の自動分析装置において、
前記制御部は、シグナル基準値の設定可能な範囲を項目毎に設定することを特徴とする自動分析装置。
【請求項６】
請求項５に記載の自動分析装置において、
前記シグナル基準値設定部は、
予め定められた反応時間の期待値が、当該シグナル基準値の設定可能な範囲内か否かを判定し、
当該シグナル基準値の設定可能な範囲外の場合には、システムアラームを発行することを特徴とする自動分析装置。
【請求項７】
請求項１に記載の自動分析装置において、
前記シグナル基準値設定部は、一濃度の前記血液凝固時間基準試料の反応曲線に基づいて、前記試料の濃度に依らず一定のシグナル基準値を求めることを特徴とする自動分析装置。
【請求項８】
請求項１に記載の自動分析装置において、
前記シグナル基準値設定部は、複数濃度の前記血液凝固時間基準試料の反応曲線に基づいて、前記試料の濃度に依らず一定のシグナル基準値を設定することを特徴とする自動分析装置。
【請求項９】
請求項１に記載の自動分析装置において、
前記シグナル基準値設定部は、複数濃度の既知濃度の試料の反応曲線に基づいて複数のシグナル基準値を設定し、当該設定された複数のシグナル基準値と前記血液凝固時間の関係から近似式を求め、前記試料の濃度に応じて異なるシグナル基準値関数を設定することを特徴とする自動分析装置。
【請求項１０】
請求項９に記載の自動分析装置において、
前記近似式は、線形近似、多項式近似、対数近似、指数近似のいずれかの方法により作成されることを特徴とする自動分析装置。
【請求項１１】
請求項１に記載の自動分析装置において、
前記制御部は、前記処理部において算出された血液凝固時間基準試料の血液凝固時間から検量線を作成し、当該作成された検量線に基づいて、前記試料の濃度を求めることを特徴とする自動分析装置。
【請求項１２】
請求項１１に記載の自動分析装置において、
前記制御部は、当該記憶されたシグナル基準値と、前記血液凝固時間基準試料の反応曲線とに基づいて、前記試料の血液凝固時間を求めることを特徴とする自動分析装置。
【請求項１３】
請求項１に記載の自動分析装置において、
前記シグナル基準値設定部は、前記血液凝固基準試料の測定結果が予め定めた範囲外となった場合に、前記シグナル基準値設定処理を再び実施することを特徴とする自動分析装置。
【請求項１４】
請求項１３に記載の自動分析装置において、
前記シグナル基準値設定部は、前記シグナル基準値設定処理を実施するかどうかを設定することを特徴とする自動分析装置。
【請求項１５】
分析対象の試料を収容した試料容器を設置する試料容器設置部と、
前記試料の測定に用いる試薬を収容した試薬容器を設置する試薬容器設置部と、
前記試薬と前記試料とを混合反応させる反応容器と、
前記試料容器から前記反応容器に前記試料を分注する試料分注機構と、
前記試薬容器から前記反応容器に前記試薬を分注する試薬分注機構と、
前記試料と前記試薬との混合反応の程度に応じた時間の経過とともに変化する血液凝固時間に関わるシグナル値を検出する検出器と、
当該検出の結果に基づいて、前記試料を分析する制御部とを備えた自動分析装置を用いた試料の分析方法であって、
前記制御部は、
既知の血液凝固時間を有する血液凝固時間基準試料と前記試薬との混合反応に応じて時間変化するシグナル値から得られる反応曲線を作成し、当該作成された反応曲線において、前記血液凝固時間基準試料に対応して予め定められた血液凝固時間の期待値に相当するシグナル基準値を設定するシグナル基準値設定部と、
当該設定されたシグナル基準値、及び前記試薬に予め設定された識別情報とを対応させて記憶する記憶部と、
当該記憶されたシグナル基準値を用いて、前記試料の血液凝固時間を求める処理部と
を有することを特徴とする試料の分析方法。
【請求項１６】
分析対象の試料を収容した試料容器を設置する試料容器設置部と、
前記試料の測定に用いる試薬を収容した試薬容器を設置する試薬容器設置部と、
前記試薬と前記試料とを混合反応させる反応容器と、
前記試料容器から前記反応容器に前記試料を分注する試料分注機構と、
前記試薬容器から前記反応容器に前記試薬を分注する試薬分注機構と、
前記試料と前記試薬との混合反応の程度に応じた時間の経過とともに変化する反応サイクル数に関わるシグナル値を検出する検出器と、
当該検出の結果に基づいて、前記試料を分析する制御部とを備え、
前記制御部は、既知の反応サイクル数を有する反応サイクル数基準試料と前記試薬との混合反応に応じて時間変化するシグナル値から得られる反応曲線を作成し、当該作成された反応曲線において、前記反応サイクル数基準試料に対応して予め定められた反応サイクル数の期待値に相当するシグナル基準値を設定するシグナル基準値設定部と、
当該設定されたシグナル基準値、及び前記試薬に予め設定された識別情報とを対応させて記憶する記憶部と、
当該記憶されたシグナル基準値を用いて、前記試料の血液凝固時間を求める処理部と
を有することを特徴とする自動分析装置。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、血液や尿等の生体試料の分析を行う自動分析装置及び分析方法に関し、特に、血液凝固時間の測定や、核酸増幅に伴うサイクル時間を計測する装置及び方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
自動分析装置には、生化学検査や血液学検査の分野等で血液や尿等の生体試料の成分濃度の定量・定性分析を行う生化学自動分析装置等と、血液凝固時間を測定する血液凝固時間自動分析装置（以下、血液凝固時間測定装置ということがある。）等や核酸増幅に伴うサイクル時間を計測する核酸増幅検査装置等がある。【０００３】
前者の生化学自動分析装置等では、１日の分析開始時や、試薬切れによってロット番号の異なる試薬容器に試薬が変更された場合等に、標準試料を測定して検量線を作成し、精度管理試料を測定することで、オペレータが分析結果に基づく測定値の妥当性を確認する。その後、被検試料（検査オーダーのあった患者検体等の未知濃度の試料のことをいう。以下、未知濃度の試料という。）の分析を行う。未知濃度の試料の分析では、標準試料を用いて予め検量線を作成し、その検量線を用いて濃度を算出する。それによって装置状態及び試薬状態を反映して、施設間差や試薬ロット間差のない分析結果を得ている。【０００４】
しかし、血液凝固検査におけるフィブリン析出による血液凝固時間の測定には主に、電気抵抗検出方式、光学的検出方式、力学的方式などが用いられており、主流は処理能力に優れた光学的検出方式（透過光検出、散乱光検出）、力学的方式（粘凋度検出）である。このように、測定方式が異なるため、同じ検体に対する同じ項目の分析であっても血液凝固時間の測定結果は異なる。また、血液凝固時間の検査試薬においては、生体由来の成分を含むためロット毎に反応性が異なり、血液凝固時間の測定値がばらつく。【０００５】
試料測定の精度管理に関する従来技術として、例えば、特許文献１（特許第５１２３４９６号）には、予め決められた標準血液凝固時間と試験系で測定した校正物質の血液凝固時間とを割当てることでプロットした基準曲線を用いて、検体の測定された血液凝固時間を標準化血液凝固時間へと変換する方法が提案されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】特許第５１２３４９６号
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
上述の通り、生化学自動分析装置等では、成分濃度の測定に際して、校正した検量線を用いて装置状態や試薬のロット等の差異を吸収するような標準化が一般的に行われている。【０００８】
しかしながら、血液凝固時間測定装置等では、例えば、ＡＰＴＴ(ａｃｔｉｖａｔｅｄ ｐａｒｔｉａｌ ｔｈｒｏｍｂｏｐｌａｓｔｉｎ ｔｉｍｅ)の測定等では、測定結果を血液凝固時間（秒）で報告しているため、上述のような標準試料を用いた検量線の取り直しによる試薬状態の反映が実行できなかった。そのため、精度管理試料による試薬状態の把握がより重要である。また、血液凝固検査試薬のいくつかの項目において用いられる凍結乾燥試薬は、ユーザーによって試薬の溶解が行われるため、同一ロットの試薬でも溶解状態のばらつきによって試薬状態が異なってしまう。つまり、試薬の溶解状態によって測定結果に差が生じることがあるので、このような場合にも精度管理試料による試薬の状態把握がより重要である。また、核酸増幅検査装置等においても、検量線を作成せず、測定結果を反応のサイクル数で報告する項目があるため、同様の課題が存在する。【０００９】
本発明は上記に鑑みてなされたものであり、既知の血液凝固時間を有する試料(以下、血液凝固時間基準試料という)を用いて試薬状態や装置状態を把握し、測定条件を調整することにより、測定結果の信頼性を向上することができる自動分析装置及び分析方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
上記目的を達成するために、本発明は、分析対象の試料を収容した試料容器を設置する試料容器設置部と、前記試料の測定に用いる試薬を収容した試薬容器を設置する試薬容器設置部と、前記試薬と前記試料とを混合反応させる反応容器と、前記試料容器から前記反応容器に前記試料を分注する試料分注機構と、前記試薬容器から前記反応容器に前記試薬を分注する試薬分注機構と、前記試料と前記試薬との混合反応の程度に応じて時間の経過とともに変化する血液凝固時間に関わるシグナル値を検出する検出器と、当該検出の結果に基づいて、前記試料を分析する制御部と、を備え、前記制御部は、血液凝固時間基準試料と前記試薬との混合反応に応じて時間変化するシグナル値から得られる反応曲線を作成し、当該作成された反応曲線において、前記血液凝固時間基準試料に対応して予め定められた血液凝固時間の期待値に相当するシグナル基準値を設定するシグナル基準値設定部と、当該設定されたシグナル基準値、及び前記試薬に予め設定された識別情報とを対応させて記憶する記憶部と、当該記憶されたシグナル基準値を用いて、前記試料の血液凝固時間を求める処理部とを有することを特徴とする自動分析装置を提供する。
【発明の効果】
【００１１】
本発明によれば、血液凝固時間基準試料を用いて試薬状態を把握し、試薬容器毎に適切なシグナル基準値を設定することにより、測定結果の信頼性を向上することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】第１の実施の形態に係る自動分析装置の全体構成を概略的に示す図である。
【図２】試料と試薬の混合反応において検出ユニットで検出される散乱光量の時間変化の一例を示す図である。
【図３】試料と試薬の混合反応において血液凝固反応曲線から血液凝固時間を算出する場合を説明する図である。
【図４】シグナル基準値設定処理の処理手順の概要を示すフローチャートである。
【図５】シグナル基準値設定処理の手順の一部について血液凝固反応曲線を用いてより詳細に説明する図である。
【図６】シグナル基準値設定処理の手順の一部について血液凝固反応曲線を用いてより詳細に説明する図である。
【図７】複数の試薬容器に対応するシグナル基準値の一覧表示の一例を示す図である。
【図８】本実施の形態を適用していない血液凝固測定装置等において、定期的に精度管理試料を測定した例を示す図であり、血液凝固時間がシフトしている様子を示す図である。
【図９】生化学自動分析装置等において、定期的に精度管理試料を測定した例を示す図である。
【図１０】第１の実施の形態の本変形例における試料と試薬の混合反応において検出ユニットで検出される透過光量の時間変化の一例を示す図である。
【図１１】第１の実施の形態の変形例においてリアルタイムＰＣＲ法における蛍光量の時間変化からＣｔ値を算出する場合を説明する図である。
【図１２】第１の実施の形態の変形例においてロットの異なる試薬におけるＰＣＲ反応曲線とＣｔ値の関係を説明する図である。
【図１３】第１の実施の形態の変形例において、ロットの異なる試薬におけるＰＣＲ反応曲線のシグナル基準値を設定する方法を説明する図である。
【図１４】高濃度及び低濃度の試料と試薬のそれぞれの混合反応において検出ユニットで検出される散乱光量の時間変化の一例を示す図である。
【図１５】２濃度の試料におけるそれぞれの血液凝固時間の期待値に対応する散乱光量の値の平均から、濃度に依らず一定のシグナル基準値を設定する方法を説明する図である。
【図１６】複数濃度の試料を用いて濃度ごとに異なるシグナル基準値を設定する際に使用する近似式の例を示す表である。
【図１７Ａ】複数濃度の試料におけるぞれぞれの血液凝固時間の期待値に対応する散乱光量の値に対し、近似式を用いてシグナル基準値を設定する具体例である。
【図１７Ｂ】複数濃度の試料におけるぞれぞれの血液凝固時間の期待値に対応する散乱光量の値に対し、近似式を用いてシグナル基準値を設定する具体例である。
【図１７Ｃ】複数濃度の試料におけるぞれぞれの血液凝固時間の期待値に対応する散乱光量の値に対し、近似式を用いてシグナル基準値を設定する具体例である。
【図１７Ｄ】複数濃度の試料におけるぞれぞれの血液凝固時間の期待値に対応する散乱光量の値に対し、近似式を用いてシグナル基準値を設定する具体例である。
【図１７Ｅ】複数濃度の試料におけるぞれぞれの血液凝固時間の期待値に対応する散乱光量の値に対し、近似式を用いてシグナル基準値を設定する具体例である。
【図１８Ａ】２濃度の試料におけるそれぞれの血液凝固時間の期待値に対応する散乱光量を一次関数に近似した場合におけるシグナル基準値を設定する手順を説明する図である。
【図１８Ｂ】２濃度の試料におけるそれぞれの血液凝固時間の期待値に対応する散乱光量を一次関数に近似した場合におけるシグナル基準値を設定する手順を説明する図である。
【図１９】未知濃度の試料の反応曲線から血液凝固時間を算出する手順を説明する図である。
【図２０】血液凝固反応曲線におけるシグナル基準値許容範囲を設定することによって測定の異常を判定する方法を説明するフローチャートである。
【図２１】血液凝固反応曲線においてシグナル基準値の設定が可能な例を説明する図である。
【図２２】血液凝固反応曲線においてシグナル基準値の設定が不可能な例を説明する図である。
【図２３Ａ】第２の実施の形態において、血液凝固時間基準試料および未知濃度の試料の血液凝固時間を算出する方法を説明する図である。
【図２３Ｂ】第２の実施の形態において、血液凝固時間基準試料および未知濃度の試料の血液凝固時間を算出する方法を説明する図である。
【図２４Ａ】第２の実施の形態において、血液凝固時間基準試料の血液凝固時間と濃度の関係から検量線を作成し、未知濃度の試料の濃度換算を行う方法を説明する図である。
【図２４Ｂ】第２の実施の形態において、血液凝固時間基準試料の血液凝固時間と濃度の関係から検量線を作成し、未知濃度の試料の濃度換算を行う方法を説明する図である。
【図２５Ａ】第２の実施の形態において、シグナル基準値設定により検量線を作成し直し、未知濃度の試料の濃度換算を行う方法を説明する図である。
【図２５Ｂ】第２の実施の形態において、シグナル基準値設定により検量線を作成し直し、未知濃度の試料の濃度換算を行う方法を説明する図である。
【図２５Ｃ】第２の実施の形態において、シグナル基準値設定により検量線を作成し直し、未知濃度の試料の濃度換算を行う方法を説明する図である。
【図２５Ｄ】第２の実施の形態において、シグナル基準値設定により検量線を作成し直し、未知濃度の試料の濃度換算を行う方法を説明する図である。
【図２５Ｅ】第２の実施の形態において、シグナル基準値設定により検量線を作成し直し、未知濃度の試料の濃度換算を行う方法を説明する図である。
【図２６】第３の実施の形態において、精度管理試料の日内/日差変動を説明する図である。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
＜第１の実施の形態＞
本発明の第１の実施の形態を図面を参照しつつ説明する。
【００１４】
本実施の形態では、自動分析装置の一例として、血液や尿等の生体試料（以下、単に試料と称する）及び試薬を混合してからフィブリンが析出するまでの時間を光学変化の変化量に応じて血液凝固時間として測定する血液凝固時間測定装置を例にとって説明する。
【００１５】
図１は、本実施の形態に係る自動分析装置の全体構成を概略的に示す図である。
【００１６】
図１において、自動分析装置１００は、サンプル分注プローブ（試料分注機構）１０１、サンプルディスク１０２、試薬分注プローブ（試薬分注機構）１０６、試薬ディスク１０７、反応容器ストック部１１１、反応容器搬送機構１１２、検出ユニット１１３、反応容器廃棄部１１７、操作部１１８、記憶部１１９及び制御部１２０から概略構成されている。
【００１７】
サンプル分注プローブ１０１は、時計回り及び反時計回りに回転するサンプルディスク１０２に配置されたサンプル容器（試料容器）１０３に収容されたサンプル（試料）や血液凝固時間基準試料を吸引し、反応容器１０４へ吐出する。サンプル分注プローブ１０１は、制御部１２０によって制御されるサンプル用シリンジポンプ１０５の動作によりサンプルの吸引動作、及び吐出動作を実行する。
【００１８】
試薬分注プローブ１０６は、試薬ディスク１０７に配置された試薬容器１０８に収容された試薬を吸引し、反応容器１０４へ吐出する。試薬分注プローブ１０６は、制御部１２０によって制御される試薬用シリンジポンプ１１０の動作により試薬の吸引動作、及び吐出動作を実行する。
【００１９】
試薬分注プローブ１０６の内部には、試薬昇温機構１０９が内蔵されており、試薬分注プローブ１０６によって吸引された試薬の温度は、制御部１２０により制御される試薬昇温機構１０９によって適温（所定の温度）へ昇温される。
【００２０】
反応容器搬送機構１１２は、反応容器１０４の搬送及び設置を行うものである。反応容器搬送機構１１２は、反応容器１０４を把持して水平方向に回動することにより、反応容器１０４を反応容器ストック部１１１から検出ユニット１１３の反応容器設置部１１４へ搬送及び設置する。
【００２１】
検出ユニット１１３は、反応容器１０４を載置するための１つ以上（本実施の形態では、一例として１つの場合を示している）の反応容器設置部１１４を有しており、反応容器設置部１１４に挿入した反応容器１０４の光強度の測定を行う。なお、本実施の形態においては、検出ユニット１１３を１つ配置した場合を示したがこれに限られず、複数の検出ユニット１１３を有するように構成してもよい。検出ユニット１１３の光源１１５は、反応容器１０４へ光を照射する。光源１１５から照射された光は、反応容器１０４内の反応溶液で散乱される。検出部（光センサ）１１６は、フォトダイオードなどから構成されている。検出部１１６は、反応容器１０４内の反応溶液で散乱された散乱光を受光し、光／電流変換を行うことによって、受光した散乱光の強度を示す測光信号をＡ／Ｄ変換器１２１に出力する。Ａ／Ｄ変換器１２１でＡ／Ｄ変換された散乱光の測定信号は、インタフェース１２２を介して制御部１２０に入力される。検出ユニット１１３の動作は、制御用コンピュータ１２０により制御される。
【００２２】
反応容器搬送機構１１２は、測定が終了した反応容器１０４を把持し、反応容器廃棄部１１７へ廃棄する。
【００２３】
自動分析装置１００で分析される試料の分析項目は、入力手段としてのキーボード１１８ｂや表示部１１８ｃに表示された操作画面を介して操作部１１８から制御部１２０へ入力される。なお、表示部１１８ｃに表示された分析項目をマウス１１８ａによりポインタ等で操作することによって分析項目を入力するＧＵＩ(Ｇｒａｐｈｉｃａｌ Ｕｓｅｒ Ｉｎｔｅｒｆａｃｅ)を用いるように構成してもよい。
【００２４】
制御部１２０は、全体制御部１２０ａ、測定制御部１２０ｂ、及び、シグナル基準値設定部１２０ｃを有している。
【００２５】
全体制御部１２０ａは、試料や試薬の分注、反応容器１０４の移設、反応容器１０４の廃棄などの自動分析装置の動作を制御する。
【００２６】
測定制御部１２０ｂは、試料と試薬との混合反応の程度に応じて時間変化する光強度（シグナル値）と予め定めたシグナル基準値との比較結果に基づいて、試料の反応時間を測定する測定処理を実施するものである。なお、本実施の形態におけるシグナル値は、散乱光強度であり、検出ユニット１１３からの測光信号に基づいて試料の血液凝固時間を算出する。算出された血液凝固時間は、表示部１１８ｃに出力されるとともに、記憶部１１９に記憶される。なお、算出結果としての凝固時間をインタフェース１２２を介してプリンタ１２３に印字出力してもよい。
【００２７】
シグナル基準値設定部１２０ｃは、血液凝固時間基準試料等と、試薬との混合反応に応じて時間変化するシグナル値（散乱光強度）とシグナル基準値との比較結果に基づいて測定された血液凝固時間が、これに対応して予め定められた血液凝固時間の期待値に相当するシグナル基準値を設定するシグナル基準値設定処理（後述）を実施するものである。ここで、血液凝固時間の算出におけるシグナル基準値とは、反応開始を光量０、反応終了までの光学変化を１００として正規化した場合に、血液凝固を判定する割合のことである。すなわち、光量があらかじめ定められた割合（シグナル基準値）を超えるときの血液凝固時間と判定する。シグナル基準値設定部１２０ｃで設定した判定シグナル基準値と試薬に予め設定された識別情報とは、対応する情報として記憶部１１９に記憶される。
【００２８】
ここで、本実施の形態の測定処理における血液凝固時間の算出方法について説明する。
【００２９】
図２は、試料と試薬の混合反応において検出ユニット１１３で検出される散乱光量の時間変化の一例を示す図である。
【００３０】
本実施の形態では、検出部で経時的に測定されるシグナル値の血液凝固反応曲線から血液凝固時間を算出する。血液凝固反応では、試薬分注プローブ１０６によって反応容器設置部１１４に載置された反応容器１０４に試料及び所定の試薬が吐出されると、混合反応として血液凝固反応がはじまる。すなわち、試薬分注プローブ１０６による試薬の吐出動作を起点として血液凝固反応が開始される（時刻ｔ＝ｔ０）。
【００３１】
図２に示す血液凝固反応曲線は、測定開始（時刻ｔ＝ｔ０）から時刻ｔ＝ｔ１までの間においては、散乱光強度Ｅは、一定の最小値Ｅｂとなり、時刻ｔ＝ｔ１から時刻ｔ＝ｔ２までは、散乱光強度Ｅが増加し、時刻ｔ＝ｔ２以降においては、散乱強度Ｅは、一定の最大値Ｅｐとなる。
【００３２】
このような血液凝固反応曲線において、散乱光強度Ｅが一定の最小値Ｅｂとなる領域をベースライン領域といい、散乱光強度Ｅが一定の最大値Ｅｐとなる領域をプラトー領域という。
【００３３】
血液凝固反応の測定処理では、時刻ｔ＝ｔ１から時刻ｔ＝ｔ２の間における散乱光量の変化に関して、ベースライン領域での散乱光強度を０％、プラトー領域での散乱光強度を１００％として正規化したときに、予め定めた割合（シグナル基準値Ｓ）を超えたときの時間を血液凝固時間Ｔとする。
【００３４】
次に、図３を用いてロットＡの試薬を測定した場合の血液凝固時間Ｔa、およびロットＢの試薬を測定した場合の血液凝固時間Ｔｂの算出方法について説明する。血液凝固反応曲線を、ベースライン領域での散乱光強度を０％、プラトー領域での散乱光強度を１００％として正規化し、シグナル基準値Ｓ＝５０％に設定した時の血液凝固時間はＴａ＝３１．５秒となる。ここで、試薬のロットが変わると、反応性が異なるため、同一の試料を測定した場合でも、血液凝固反応曲線は必ずしも重ならない。例えば、図３においてロットＢの試薬を測定した場合に、血液凝固反応曲線から算出される血液凝固時間Ｔｂ＝３２．０秒となる。このことは、同一試料を測定した場合にも試薬ロットによって測定結果の差異が生じることを示しており、本実施の形態では、その差異を最小化することによって測定値のばらつきを小さくする手法について説明する。
【００３５】
次に、本実施の形態のシグナル基準値設定処理におけるシグナル基準値の設定方法について説明する。
【００３６】
図４は、シグナル基準値設定処理の処理手順の概要を示すフローチャートである。また、図５及び図６は、シグナル基準値設定処理の一部の手順について血液凝固反応曲線を用いてより詳細に説明する図である。
【００３７】
図４において、測定前に装置、試薬の状態が、良好であるかどうかを確認する必要がある。装置や試薬状態の確認方法としては例えば、検出器や昇温機能付き試薬プローブの温度を確認した上で(Ｓ４０１)、精度管理試料による測定を実施する(Ｓ４０２)。装置、試薬のいずれか、または両方の状態が良好でない場合には装置のメンテナンスを実行するか試薬を交換し、良好な状態へ改善する必要がある（Ｓ４０３）。一方、Ｓ４０１、Ｓ４０２の確認の結果、これらのいずれも状態が良好であった場合には、ステップ４０４にて、予め設定した初期値である現在のシグナル基準値ＳＬｏｃａｌを用いて算出される血液凝固時間基準試料の測定値が、所定の範囲内であるかどうかを判断する(Ｓ４０４)。所定の範囲内であった場合、ステップ４０５にて、現在のシグナル基準値ＳＬｏｃａｌを継続使用するように設定する(Ｓ４０５)。一方、所定の範囲外である場合には、ステップ４０６にて、シグナル基準値設定部１２０ｃは、基準となる血液凝固時間測定装置において、シグナル基準値設定処理に用いる試薬を用いて血液凝固時間基準試料を測定した場合の血液凝固時間の変動幅、及び、期待値Ｔｅを読み込む（ステップＳ４０６）。
【００３８】
ここでＳ４０４において現在のシグナル基準値ＳＬｏｃａｌを用いて求めた血液凝固時間基準試料の測定値が許容範囲であった場合にはシグナル基準値の再設定の必要はない。
【００３９】
次に、ステップ４０７にて、シグナル基準値設定処理の対象となる血液凝固時間測定装置において、シグナル基準値設定の対象となる試薬を用いて血液凝固時間基準試料の測定を行い、血液凝固反応曲線（図５参照）を得る（ステップＳ４０７）。
【００４０】
次に、ステップ４０８では、Ｓ４０７で得られた血液凝固反応曲線（図５参照）に対して、血液凝固時間の期待値Ｔｅを適用することにより算出される血液凝固時間が、期待値Ｔｅに相当するシグナル基準値ＳＬｏｃａｌを設定する（図６参照、Ｓ４０８）。
【００４１】
そして、ステップ４０９では、Ｓ４０８で得られたシグナル基準値ＳＬｏｃａｌを、シグナル基準値設定処理で用いた試薬と対応する情報として記憶部１１９に記憶する（Ｓ４０９）。
【００４２】
以降の未知濃度の試料の測定において、シグナル基準値設定処理に用いた試薬と同一ロットの試薬を使用する場合には記憶部１１９のシグナル基準値ＳＬｏｃａｌを読み出して用いる。なお、本実施の形態においては、同一ロットの試薬については同一のシグナル基準値ＳＬｏｃａｌを用いるようにしているが、各試薬容器に対してシグナル基準値設定処理を実施して対応するシグナル基準値ＳＬｏｃａｌをそれぞれ求めるようにしても良く、この場合には、さらに測定結果の信頼性を向上することができる。試薬容器毎のシグナル基準値管理方法については後述する。
【００４３】
なお、基準となる血液凝固時間測定装置において、シグナル基準値設定処理で用いる血液凝固時間基準試料を測定した場合の血液凝固時間の変動幅、及び、期待値Ｔｅの算出は、同様の測定を複数回測定することによって、特定の試薬と血液凝固時間基準試料の組み合わせにおいて算出した血液凝固時間の平均値、または中央値等を期待値Ｔｅとし、その標準偏差または分散などを変動幅として与える。なお、この測定における期待値Ｔｅ及び変動幅の算出には、日内、日差の変動を考慮して算出されることが望ましい。さらに基準となる血液凝固時間測定装置は、定められた機種における機差を考慮し、複数台の装置で繰り返し測定されるか、各施設の精度管理状況をネットワークによって管理し、複数施設の装置の測定結果を集計し、反映することが好ましい。
【００４４】
以上のような手順により、検量線を作成せず、算出された血液凝固時間をそのまま測定結果として扱う項目（例えば、ＡＰＴＴ：ａｃｔｉｖａｔｅｄ ｐａｒｔｉａｌ ｔｈｒｏｍｂｏｐｌａｓｔｉｎ ｔｉｍｅ）の装置間差の補正を行う。
【００４５】
一般的に、血液検査の分野では同一ロットの試薬と試料の組み合わせにより値づけがなされる。特に血液凝固検査においては、試薬に生体由来の成分を含む試料を用いることがあり、その場合にはロット間差が大きいこと、薬剤に関する感受性が試薬毎に大きく異なることなどから、標準化に至っていない。しかし、そのような項目であっても、同一ロットの試薬と試料の組み合わせであれば、定められた装置で測定された結果の期待値は一意に決定できる。すなわち、出荷時に十分に検査された試薬及び血液凝固時間基準試料は、各種試薬と試料の組み合わせによる血液凝固時間の期待値及び変動幅を規定することができる。
【００４６】
ここで、試薬容器毎のシグナル基準値ＳＬｏｃａｌの管理について説明する。
【００４７】
図７は、複数の試薬容器に対応するシグナル基準値の一覧表示の一例を示す図である。
【００４８】
図７においては、試薬ディスク１０７の各ポジションに設置された試薬容器１０８に対し、項目、試薬ロット番号、血液凝固時間基準試料のロット番号を記載し、試薬容器毎に固有のシグナル基準値を対応させた場合を示している。同一項目に対して複数の試薬容器を設置している場合には個別にシグナル基準値を表示する。未測定の項目に関しては、操作画面上で識別できるようにする。好ましくは、測定の依頼が入ると、依頼数と残テスト数を確認し、シグナル基準値未設定の試薬ボトルを使用する予定の場合には制御部１２０からシグナル基準値未設定の警告を発する。さらに、シグナル基準値未設定の場合にも、オペレータが許可した場合には別の試薬容器のシグナル基準値と同じシグナル基準値を設定することも考えられる。ポジション１，ポジション２のＡＰＴＴ試薬では試薬容器は異なるが、ロットが共にＡ００００１であるため、ロット毎に共通のシグナル基準値を設定することができる。ポジション４，ポジション５のＰＴ試薬ではロットがＢ００００１とＢ００００２で異なるため、異なるシグナル基準値を設定する。ただし、ロットが同じでも異なるシグナル基準値を設定したい場合には試薬容器にシグナル基準値を設定可能である。例えばポジション５，ポジション６の試薬はロットが同じであるが、試薬容器毎に別のシグナル基準値を設定した例を示している。同一ロットの試薬であったとしても、試薬の保管状況等によって反応性が異なる場合があるため、試薬容器毎にシグナル基準値を管理することが有効だからである。また、ポジション３、ポジション８はシグナル基準値設定が未実施の例を示している。
【００４９】
以上のように構成した本実施の形態における動作を説明する。
【００５０】
本実施の形態に係る自動分析装置である血液凝固時間測定装置におけるシグナル基準値設定処理においては、まず、血液凝固時間の期待値Ｔe及び変動幅を、試薬に付されたバーコード、ネットワーク、試薬能書の中に記載するなどの方法によってオペレータが入手する（図４のステップＳ４０６）。好適には、試薬に付されたバーコード等の識別情報を読み取り、ネットワークを介してその試薬に対応する情報を入手することにより、シグナル基準値設定処理の対象となる血液凝固時間測定装置の記憶部１１９に直接取り込まれることが望ましいが、直接の取り込みが不可能な場合はオペレータが操作部１１８から手入力できるものとする。
【００５１】
ここで、臨床検査における測定結果の誤りは誤診断につながることから、測定結果の妥当性を確認することは必須の要件である。自動分析装置等においては、試薬ロットの変更時の他、定期的に精度管理試料を用いた測定を行い、測定結果の妥当性を確認するのが通例である。生化学自動分析装置等における精度管理試料を用いた変動は、例えば図９のように管理される。図９は、定期的に、精度管理試料を測定した例を示す。ここで、Ｍｅａｎは機種毎に定められた平均値を期待値とした場合を示し、Ｍｅａｎに対する変動幅を±３ＳＤを許容範囲としている。ここでのＭｅａｎ及びＳＤは、好適には複数の基準装置によって算出された結果または、複数施設の測定結果を集計したものである。
【００５２】
ところで、ＡＰＴＴ（ａｃｔｉｖａｔｅｄ ｐａｒｔｉａｌ ｔｈｒｏｍｂｏｐｌａｓｔｉｎ ｔｉｍｅ）の測定などの、検量線を作成せず、測定結果を血液凝固時間（秒）で報告する項目では、キャリブレーションによっては装置間差が補正されないため、同一機種であっても装置間差が生じ、血液凝固時間は必ずしも機種毎に定められた平均値と一致しない。図８は、本実施の形態を適用していない血液凝固時間測定装置等において、精度管理試料を定期的に測定した例を示す。そのような場合には、機種毎に定められた平均値を±３ＳＤとすることは適切ではないため、平均値の装置間差補正が必要となる。
【００５３】
装置間差の補正は、施設毎、試薬容器毎に、血液凝固反応曲線における血液凝固時間を算出するためのシグナル基準値を設定することによって実行できる。
【００５４】
また、シグナル基準値設定処理のタイミングは、好適には新しい試薬容器の設置時に、血液凝固時間基準試料が測定された時に項目毎に実施される。この時、シグナル基準値ＳＬｏｃａｌが設定される（図４のステップＳ４０７，Ｓ４０８）。
【００５５】
続いて、オペレータが未知濃度の試料の分析を実行すると、制御部１２０では、測定の内容を確認し、使用する試料、試薬、測定するポジションを割りつける。得られた測定結果から光強度変化がＳＬｏｃａｌを超える時間を血液凝固時間として算出する。
【００５６】
以上のように構成した本実施の形態における効果を説明する。
【００５７】
上述の通り、例えば、ＡＰＴＴ（ａｃｔｉｖａｔｅｄ ｐａｒｔｉａｌ ｔｈｒｏｍｂｏｐｌａｓｔｉｎ ｔｉｍｅ）の測定では、検量線の取り直しによる試薬状態の反映が実行できないため、血液凝固時間基準試料による試薬状態の把握がより重要となる。また、血液凝固検査試薬のいくつかの項目において用いられる凍結乾燥試薬は、ユーザーによって試薬の溶解が行われるため、同一ロットの試薬でも溶解状態のばらつきによって試薬状態が異なってしまう。つまり、試薬の溶解状態によって測定結果に差が生じることがあるので試薬容器毎の精度管理試料による試薬の状態把握がより重要となる。
【００５８】
これに対して、本実施の形態においては、血液凝固時間基準試料と試薬との混合反応に応じて時間変化する血液凝固反応曲線を用いて、血液凝固時間基準試料に対応して予め定められた血液凝固時間の期待値に相当するシグナル基準値の設定を実施して装置間差を校正するように構成しているので、血液凝固時間基準試料を用いて試薬状態をより把握しやすくし、測定結果の信頼性を向上することができる。
【００５９】
＜第１の実施の形態の変形例＞
本発明の第１の実施の形態の変形例について説明する。
【００６０】
第１の実施の形態においては、散乱光強度の変化を血液凝固反応曲線として例示したが、本変形例においては、透過光強度の変化を血液凝固反応曲線として用いる場合を示している。
【００６１】
図１０は、本変形例における試料と試薬の混合反応において検出ユニット１１３で検出される透過光量の時間変化の一例を示す図である。
【００６２】
本実施の変形例では、検出部で経時的に測定される血液凝固反応曲線から血液凝固時間を算出する。血液凝固反応では、試薬分注プローブ１０６によって反応容器設置部１１４に載置された反応容器１０４に試料及び所定の試薬が吐出されると、混合反応として血液凝固反応がはじまる。すなわち、試薬分注プローブ１０６による試薬の吐出動作を起点として血液凝固反応が開始される（時刻ｔ＝ｔ０）。
【００６３】
図１０に示す血液凝固反応曲線は、測定開始（ｔ＝ｔ０）から時刻ｔ＝ｔ１までの間においては、透過光強度Ｅは、一定の最大値Ｅｓとなり、時刻ｔ＝ｔ１から時刻ｔ＝ｔ２までは、透過光強度Ｅが減少し、時刻ｔ＝ｔ２以降においては、透過光強度Ｅは、一定の最小値Ｅｅとなる。
【００６４】
この血液凝固反応の測定処理では、時刻ｔ＝ｔ１から時刻ｔ＝ｔ２の間における散乱光量の変化を１００％としたときに、予め定めた割合（シグナル基準値Ｓ）を超えたときの時刻を血液凝固時間Ｔとする。
【００６５】
その他の構成は第１の実施の形態と同様である。
【００６６】
以上のように構成した本変形例においても、第１の実施の形態と同様の効果を得る事ができる。
【００６７】
なお、リアルタイムＰＣＲに代表される遺伝子検査装置においても第１の実施の形態や本変形例と基本的な構造は同じであり、経時的に測定される光強度を蛍光強度に置き換え、横軸にはサイクルを示すことで、本技術を適用することができる。
【００６８】
すなわち、遺伝子検査の分野では、核酸増幅法により、微量のウィルスや細菌を増幅し、検出可能にすることにより疾患の判定を行う。核酸増幅法の最も一般的な例はＰＣＲ (Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ Ｃｈａｉｎ Ｒｅａｃｔｉｏｎ）法である。一般的なＰＣＲ法は、熱変性、アニーリング、伸長の３つのステップを１サイクルとして温度を変化させることでＤＮＡを２倍に増幅する。熱変性のステップで二本鎖のＤＮＡが一本鎖となると、アニーリングのステップで標的核酸に相補的な配列を持つプライマーが標的核酸に結合できる。続く伸長のステップでＤＮＡ合成酵素の働きにより二本鎖のｃＤＮＡが合成される。このサイクルを繰り返すことによって標的ＤＮＡが指数関数的に増幅する。
【００６９】
近年では、ＰＣＲ法の中でも簡便で精度の良いリアルタイムＰＣＲ法が普及している。リアルタイムＰＣＲ法とは、ＰＣＲを行う際に蛍光色素が付加されたプローブなどを用いて蛍光強度を測定することによってＤＮＡを増幅させながら検出する方法であり、ＤＮＡの増幅に伴って蛍光強度が増強される。ここで、リアルタイムＰＣＲ法における増幅の判定は、定められたシグナル基準値を超えたサイクル（Ｔｈｒｅｓｈｏｌｄ Ｃｙｃｌｅ Ｖａｌｕｅ：Ｃｔ値）を算出することによって行う。特に定量検査においては、既知の濃度の試料、例えば標準試料においてＣｔ値と濃度の関係から検量線を作成し、未知濃度サンプルの定量を行うものである。
【００７０】
しかし、リアルタイムＰＣＲ法では、定量測定の他に型判定、定性分析などがあり、それらの項目では、検量線の作成を実施せず、Ｃｔ値をそのまま測定結果に反映する。
【００７１】
図１１はリアルタイムＰＣＲ法においてＣｔ値を算出する方法を説明する図であり、６０サイクルで測定を終了した場合の、ＰＣＲ反応曲線の例を示している。図１１では、測定開始を１サイクル目、測定終了を６０サイクル目とし、測定開始時点を０％、終了までの蛍光量の変化を１００％として正規化した時に、予め定めた割合（シグナル基準値Ｓ）を超えたときのサイクル数をＣｔ値と定義する。
【００７２】
図１２はロットＡの試薬におけるＣｔ値であるＣｔａ、およびロットＢの試薬におけるＣｔ値であるＣｔbを算出する方法について説明する図である。ＰＣＲ反応曲線のベースライン領域での蛍光強度を０％、プラトー領域での蛍光強度を１００％として正規化し、シグナル基準値Ｓ＝２０に設定したときのＣｔａは２８．０となる。ここで、試薬のロットが変わると、反応性が異なるため、同一の試料を測定した場合でも、ＰＣＲ反応曲線は必ずしも重ならない。例えば、図１２においてロットＢの試薬を測定した場合にＰＣＲ反応曲線から算出されるＣｔｂは２９．８となる。このような場合に、あらかじめ定義された期待Ｃｔ値（Ｃｔｅ）を用いればロットによる測定値のばらつきを軽減できる。具体的には図４に示すフローチャートと同様であるので詳細な説明は割愛するが、図４の血液凝固時間の期待値であるＴｅ値を、ＰＣＲ反応における期待値であるＣｔｅ値に置き換えることで適用できる。図１３の例では、Ｃｔｅが２７．５であった場合には、ロットＡ，Ｂの試薬のＰＣＲ反応曲線から得られたシグナル基準値ＳＬｏｃａｌ_ａ、ＳＬｏｃａｌ_bはそれぞれ１２．５％、７．５％と設定することができる。ところで、核酸増幅法の別の例として、ＰＣＲ法のように積極的な温度変化することなく、一定温度で反応を進行させるものがある。例えば、ＬＡＭＰ(ｌｏｏｐ−ｍｅｄｉａｔｅｄ ｉｓｏｔｈｅｒｍａｌ ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ)法、ＴＲＣ(Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ−ｒｅｖｅｒｓｅ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｃｏｎｃｅｒｔｅｄ)法などの恒温増幅法である。恒温増幅法における増幅は、リアルタイムＰＣＲと同様に増幅と同時に一定間隔で蛍光強度または濁度測定することによって検出できる。検出には標的核酸に結合するプライマーや特異的配列を有する蛍光色素、ＤＮＡに直接インターカレートする蛍光色素などを添加し、蛍光検出するものが一般的であるが、ＬＡＭＰ法のように核酸増幅に伴い生成される副産物を濁度または蛍光で検出するものもある。恒温増幅法には定性分析により結果を算出することが多く、この場合には検量線を作成しないことがある。一定の濁度または蛍光強度を超える時間ＴをＣｔ値の代わりに使用するので、図１３のサイクル数を増幅開始時間Ｔに置き換えることによってシグナル基準値の設定が可能である。
【００７３】
このように、測定したシグナル値（透過光量、散乱光量、蛍光光量、濁度）の変化量からシグナル基準値を超えた時間またはサイクル数を測定結果として算出する分析項目においても第１の実施の形態と同様に本発明を適用することができる。
【００７４】
＜第１の実施の形態のその他の変形例＞
本発明の第１の実施の形態のその他の変形例について説明する。
【００７５】
第１の実施の形態においては、１濃度の血液凝固基準試料によるシグナル基準値設定方法を示したが、本変形例では、反応性の異なる高濃度試料と低濃度試料のような複数の血液凝固時間基準試料を用いて測定する場合を示している。
【００７６】
図１４は、高濃度及び低濃度の試料と試薬のそれぞれの混合反応において検出ユニット１１３で検出される散乱光量の時間変化の一例を示す図である。
【００７７】
図１４において、高濃度試料における血液凝固時間の期待値をＴ１、低濃度試料における血液凝固時間の期待値をＴ２とすると、血液凝固時間を測定する自動分析装置において得られた血液凝固反応曲線から期待値Ｔ１に合致するシグナル基準値（ＳＬｏｃａｌ＿Ｈｉｇｈ）、及び期待値Ｔ２に合致するシグナル基準値（ＳＬｏｃａｌ＿Ｌｏｗ）が求められる。このとき、血液凝固時間の算出に用いるシグナル基準値ＳＬｏｃａｌの値は、各シグナル基準値の平均として用いる(図１５)。
【００７８】
また、さらに複雑な例としては複数の血液凝固時間基準試料の反応曲線から得られる、複数のシグナル基準値と血液凝固時間について近似直線を作成し、濃度毎に異なるシグナル基準値を設定することもできる。
【００７９】
近似式の例としては、複数算出されるシグナル基準値を線形近似、多項式近似、対数近似、指数近似することで得られる式などがある（図１６、図１７Ａ〜図１７Ｄ）。また、複数算出されたシグナル基準値を折れ線でつなぎ、それぞれを一次関数で近似する方法もある(図１７Ｅ）。ここでは、一次関数Ｙ＝ａＴ＋ｂを用いて近似する方法について図１８を用いて詳細に説明する。
【００８０】
図１８Ａにおいて高濃度試料における血液凝固時間の期待値Ｔ１＝３０秒と、低濃度試料における血液凝固時間の期待値Ｔ２＝５０秒について、それぞれの血液凝固反応曲線との交点はそれぞれ６８％、６０％となる。このとき図１８Ｂに示すように、上記の２つの交点を結んでできる直線から、傾きａ、切片ｂを求め、ＳＬｏｃａｌ＝０．４Ｔ＋４８を導くことができる。
【００８１】
図１９は、このときの未知試料の濃度を算出する方法を説明する図である。すなわち、未知試料を測定して得られる反応曲線(図１９中の反応曲線（ａ）)と、図１８で算出したＳＬｏｃａｌ＝０．４Ｔ＋４８との交点ＡのＸ軸の値が血液凝固時間Ｔである。
【００８２】
以上のように、各施設の装置で測定を行う際には、十分に検査された試薬と血液凝固時間基準試料の組み合わせにおいて、試薬容器毎に固有のシグナル基準値ＳＬｏｃａｌを設定することによって、装置間差と試薬容器間差なく、正確な血液凝固時間を算出することができる。
【００８３】
ところで、本実施の形態におけるシグナル基準値の許容範囲は、光量に変化がある範囲（光量０％から１００％の範囲）に限定され、さらに好適には５％〜９５％の範囲に限定される。本実施の形態によれば、シグナル基準値ＳＬｏｃａｌの許容範囲、および血液凝固時間基準試料の許容範囲を項目ごとにあらかじめ設定しておくことによって、血液凝固時間基準試料の測定結果が許容範囲内にあるか否かを判断することができ、許容範囲を大きく超える場合にはシステムアラームを発生し、再検を提案するか、または当該試薬の使用を不可能とすることができる。
【００８４】
システムアラームの発生の手順を図２０のフローチャートに示す。まず、ステップ２００１にて、血液凝固時間の期待値Ｔe及び変動幅を、試薬に付されたバーコード、ネットワーク、試薬能書の記載を読み込む等の方法によって入手する（Ｓ２００１）。次に、ステップ２００２にて血液凝固時間基準試料を測定することによって、血液凝固反応曲線を得る（Ｓ２００２）。ここで、ステップ２００３ではあらかじめ設定したシグナル基準値許容上限/下限における血液凝固時間Ｔｍａｘ/Ｔｍｉｎを算出し（Ｓ２００３）、ステップ２００４にて血液凝固時間の期待値Ｔｅに関してＴｍｉｎ ＜ Ｔｅ ＜ Ｔｍａｘを満たすかどうかを判定する（Ｓ２００４）。ここで、当該範囲の条件を満たす場合には、ステップ２００５にて、血液凝固時間がＴｅとなるシグナル基準値ＳＬｏｃａｌを設定し（Ｓ２００５）、ステップ２００６にてシグナル基準値ＳＬｏｃａｌを記憶部に記憶（Ｓ２００６）することによって未知濃度の試料の血液凝固時間の算出に用いる。
【００８５】
一方、血液凝固時間の期待値Ｔｅに関してＴｍｉｎ ＜ Ｔｅ ＜ Ｔｍａｘを満たしていない場合には、ステップ２００７にてシグナル基準値設定不能のシステムアラームを発行する（Ｓ２００７）。
【００８６】
具体例を図２１、図２２に図示した。図２１はシグナル基準値設定が可能である例について示している。ここで、シグナル基準値下限を３０％、シグナル基準値上限を７０％、期待値Ｔｅ＝３１．５秒とすると、シグナル基準値が３０％、７０％における血液凝固時間はＴｍｉｎ＝２９．０秒、Ｔｍａｘ＝３４．５秒である。これは期待値Ｔｍｉｎ＜ Ｔｅ ＜ Ｔｍａｘを満足するため、血液凝固時間Ｔｅとなるシグナル基準値を算出することができ、シグナル基準値ＳＬｏｃａｌ＝４９％となる。
【００８７】
図２２はシグナル基準値設定が失敗する例について示している。ここで、シグナル基準値下限を３０％、シグナル基準値上限を７０％、期待値Ｔｅ＝３１．５秒とする。シグナル基準値が３０％、７０％における血液凝固時間がＴｍｉｎ＝３２．５秒、Ｔｍａｘ＝３７．０秒であるのでＴｅ ＜ Ｔｍｉｎとなり、Ｓ２００４を満足しない。したがって、血液凝固時間Ｔｅとなるシグナル基準値を算出することができない。この場合には、血液凝固時間基準試料の反応曲線において、変動可能なシグナル基準値範囲を外れており、血液凝固時間基準試料、試薬、装置のいずれかに不具合がある可能性があるため、システムアラームを発行し異常を知らせる。
【００８８】
このように、あらかじめ許容可能なシグナル基準値範囲を設定しておくことにより、測定の異常を知らせることができる。
【００８９】
＜第２の実施の形態＞
本発明の第２の実施の形態を図面を参照しつつ説明する。
【００９０】
本実施の形態は、第１の実施の形態を凍結乾燥試薬における試薬調製の妥当性確認に適用するものである。
【００９１】
例えば、プロトロンビン時間(以下、ＰＴという)の測定試薬には動物由来の組織トロンボプラスチンが含まれており、安定性を保つために凍結乾燥試薬を用いるのが通例となっている。凍結乾燥試薬の溶解は、従来、検査技師の手によって行われるため、調製誤差による測定値の変動を装置内で管理できないという問題があった。一方で、試薬調製の機能を装置に実装するためには溶解液分注するための機構、溶解液を撹拌するための機構が必要となり、装置の大型化と価格の上昇を招くことが問題であった。そこで、同一ロット間でも、上記のような試薬容器毎にシグナル基準値ＳLｏｃａｌを設定することによって、同じ手法で調製された試薬に関して標準試料の測定を行うことなく試薬容器毎にシグナル基準値を設定することによって、検量線の作成なしに測定結果を得ることができる。
【００９２】
ここでは、ロットＡの試薬、ロットＢの血液凝固時間基準試料を用いて試薬容器１で測定したキャリブレーション結果を試薬容器２に継承する際の手順について説明する。図２３Ａは、分析項目がＰＴの場合に予め設定したシグナル基準値から血液凝固時間基準試料の血液凝固時間を算出する方法を示す図であり、図２４Ａは、算出した血液凝固時間から検量線を作成する方法を示した説明図である。
【００９３】
まず、ロットＡの試薬、ロットＢの血液凝固時間基準試料の測定結果に関して、試薬バーコード、ネットワーク、試薬能書から、血液凝固時間の期待値Ｔe及び変動幅の情報を読み込んで取得する。続いて、ロットＡ、試薬容器１の試薬を用いて、ロットＢの血液凝固時間基準試料を測定し、シグナル基準値ＳＬｏｃａｌ＿１を設定する（図６参照）。続いて試薬容器１において３濃度の血液凝固時間基準試料を測定し、血液凝固反応曲線及び、シグナル基準値ＳＬｏｃａｌ＿１を用いて算出した血液凝固時間Ｔ１〜Ｔ３を得る（図２３Ａ参照）。得られたＴ１〜Ｔ３を用いてグラフにプロットし、検量線を作成する（図２４Ａ参照）。
【００９４】
試薬容器１で未知濃度の試料を測定した場合には、シグナル基準値ＳＬｏｃａｌ＿１を用いて血液凝固時間Ｔｘを算出し（図２３Ｂ）、Ｔｘを検量線にあてはめて、未知濃度の試料濃度Ｃｘを算出する（図２４Ｂ）。次に、試薬容器１内の未知濃度の試料の残量が少なくなり、同一ロット（ロットＡ）の試薬容器２に切り替えて分析することを考慮する。
【００９５】
従来は、キャリブレーションを再度実施する手間とコストを考慮した場合に試料の測定結果が許容範囲内であった場合には、キャリブレーションを実施せずに、試薬容器１のキャリブレーション結果を継承していた。しかし、試薬容器２では、凍結乾燥試薬の溶解水量の差や保管安定性の違いにより厳密には試薬容器１と反応性が異なることから、わずかな値の差異が生じることがある。
【００９６】
本実施の形態によれば、キャリブレーションを実施しなくても、血液凝固時間基準試料の測定結果から試薬容器毎に異なるシグナル基準値を設定し、より正確な測定結果を得ることができる。この場合にも、シグナル基準値の変動範囲は、これを用いて算出した血液凝固時間基準試料の測定値が許容可能な所定の範囲であることが前提となるため、この所定の範囲を外れるものに関してシグナル基準値ＳＬｏｃａｌの設定を行うべきではない。このような場合には、図２０のフローチャートに従い、システムアラームを発行することが望ましい。
【００９７】
本実施の形態によれば、ＳＬｏｃａｌの許容範囲を項目ごとにあらかじめ設定しておくことによって血液凝固時間基準試料の測定結果が許容範囲内にあるか否かを判断することができ、許容範囲を外れる場合にはアラームを発生し、試薬状態、装置状態の確認を提案することができる。
【００９８】
ここでは、血液凝固時間基準試料の血液凝固反応曲線から得られるシグナル基準値が変動許容範囲であったの場合を想定し、試薬容器２における検量線の作成と未知濃度の試料の濃度算出について図２５〜図２６を用いて説明する。まず、ロットＡ、試薬容器２の試薬を用いてロットＢの血液凝固時間基準試料を測定し、試薬容器２におけるシグナル基準値ＳＬｏｃａｌ＿２を設定する（図２５Ａ）。続いて図２３Ａに示すように、３濃度の血液凝固時間基準試料の反応曲線においてＳＬｏｃａｌ＿２を適用し血液凝固時間Ｔ１’、 Ｔ２’、 Ｔ３’を算出する（図２５Ｂ）。次に、標準試料の濃度と、得られたＴ１’、 Ｔ２’、 Ｔ３’をプロットし、試薬容器２の検量線を作成する（図２５Ｃ）。ここで、未知濃度の試料の血液凝固反応曲線が図２５Ｄにおける血液凝固反応曲線（ａ）として得られるとき、ＳＬｏｃａｌ＿２を用いて求められる血液凝固時間Ｔｘを図２５Ｃで作成した検量線にあてはめて未知濃度の試料の濃度Ｃｘを算出する（図２５Ｅ参照）。
【００９９】
すなわち、試薬容器１と試薬容器２それぞれに固有のシグナル基準値を設定することによって試薬容器間差は補正されているので、試薬容器２では新たなキャリブレーションを実施することなく検量線を作成し、未知濃度の試料の定量において、より正確な結果を提供できる。
【０１００】
なお、ＰＴの分析における検量線の作成にあたり、施設毎に検量線を作成して使用するのではなく、ネットワーク、バーコードなどを介し、試薬メーカーが提供する検量線結果を取得して使用する場合がある。試薬メーカーが提供する検量線とは、十分に検査された試薬及び既知濃度の試料で測定した結果によって作成された検量線のことで、施設内でのキャリブレーションを実施する必要がないため、検査者の負担とランニングコストを低減できる一方、装置間差に由来する誤差が測定結果の誤差につながることがしばしば発生することも考えられる。しかし、この場合にも、図２５〜図２６の手順に従ってシグナル基準値を設定し、装置間差を低減することによって施設での検量線を新たに作成することなく正確な測定結果を得ることができる。
【０１０１】
＜第３の実施の形態＞
本発明の第３の実施の形態を図面を参照しつつ説明する。
【０１０２】
本実施の形態は、第１の実施の形態におけるシグナル基準値設定処理を、試薬の劣化状況や装置の状態（光量変化等）を反映して実施するものである。
【０１０３】
図２６は、分析項目がＰＴの場合に、精度管理試料の測定結果の日差変動を示す説明図である。
【０１０４】
自動分析装置では、定期的な既知濃度の試料、例えば精度管理試料を用いた測定を行い、特定のロット及び試料を用いて決定した期待値の変動幅を外れた場合には、キャリブレーションを行うことによって補正する方法が一般的である。例えば、図２６に示すように、ＰＴの精度管理に関して、定期的に精度管理を行い、試薬の状態をチェックする。測定結果が変動幅３ＳＤを外れた場合には、キャリブレーションを実施する。しかし、この操作に伴い試薬・標準試料・消耗品に費やす費用が増加する。そこで、血液凝固時間算出のためのシグナル基準値を再設定することにより、実際に標準試料を測定しなくても、キャリブレーションを実施したのと同様の効果が得られる。この場合に使用する試薬は凍結乾燥品、液状試薬を問わない。
【０１０５】
そして、血液凝固時間基準試料の血液凝固反応曲線において、血液凝固時間の期待値Ｔｅに合致するようにシグナル基準値を再設定する。ただし、この場合にも血液凝固反応曲線におけるシグナル基準値の変動が可能な範囲、すなわち光強度が０％より大きく１００％より小さい範囲、すなわち、上述したベースライン領域、プラトー領域を除く範囲に限定され、算出された血液凝固時間が許容範囲を大きく外れた場合には、アラームを出力する。また、このシグナル基準値の再設定は自動で実施することもできるし、操作者にシグナル基準値の再設定を行うか否かを判断させることもできる。このようにして、標準試料の測定を実施しなくても検量線の再作成することと同等の効果を得ることができ、検査にかかるランニングコストの低減に貢献し、信頼性のある結果を提供できる。
【符号の説明】
【０１０６】
１００  自動分析装置
１０１  サンプル分注プローブ（試料分注機構）
１０２  サンプルディスク
１０３  サンプル容器（試料容器）
１０４  反応容器
１０５  サンプル用シリンジポンプ
１０６  試薬分注プローブ（試薬分注機構）
１０７  試薬ディスク
１０８  試薬容器
１０９  試薬昇温機構
１１０  試薬用シリンジポンプ
１１１  反応容器ストック部
１１２  反応容器搬送機構
１１３  検出ユニット
１１４  反応容器設置部
１１５  光源
１１６  検出部（光センサ）
１１７  反応容器廃棄部
１１８  操作部
１１９  記憶部
１２０  制御部
１２０ａ  全体制御部
１２０ｂ  測定制御部
１２０ｃ  シグナル基準値設定制御部
１２１  Ａ／Ｄ変換器
１２２  インタフェース
１２３  プリンタ
【図１】
2015098473.tif 000003
【図２】
2015098473.tif 000004
【図３】
2015098473.tif 000005
【図４】
2015098473.tif 000006
【図５】
2015098473.tif 000007
【図６】
2015098473.tif 000008
【図７】
2015098473.tif 000009
【図８】
2015098473.tif 000010
【図９】
2015098473.tif 000011
【図１０】
2015098473.tif 000012
【図１１】
2015098473.tif 000013
【図１２】
2015098473.tif 000014
【図１３】
2015098473.tif 000015
【図１４】
2015098473.tif 000016
【図１５】
2015098473.tif 000017
【図１６】
2015098473.tif 000018
【図１７Ａ】
2015098473.tif 000019
【図１７Ｂ】
2015098473.tif 000020
【図１７Ｃ】
2015098473.tif 000021
【図１７Ｄ】
2015098473.tif 000022
【図１７Ｅ】
2015098473.tif 000023
【図１８Ａ】
2015098473.tif 000024
【図１８Ｂ】
2015098473.tif 000025
【図１９】
2015098473.tif 000026
【図２０】
2015098473.tif 000027
【図２１】
2015098473.tif 000028
【図２２】
2015098473.tif 000029
【図２３Ａ】
2015098473.tif 000030
【図２３Ｂ】
2015098473.tif 000031
【図２４Ａ】
2015098473.tif 000032
【図２４Ｂ】
2015098473.tif 000033
【図２５Ａ】
2015098473.tif 000034
【図２５Ｂ】
2015098473.tif 000035
【図２５Ｃ】
2015098473.tif 000036
【図２５Ｄ】
2015098473.tif 000037
【図２５Ｅ】
2015098473.tif 000038
【図２６】
2015098473.tif 000039
【手続補正書】
【提出日】平成27年7月16日(2015.7.16)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
分析対象の試料を収容した試料容器を設置する試料容器設置部と、
前記試料の測定に用いる試薬を収容した試薬容器を設置する試薬容器設置部と、
前記試薬と前記試料とを混合反応させる反応容器と、
前記試料容器から前記反応容器に前記試料を分注する試料分注機構と、
前記試薬容器から前記反応容器に前記試薬を分注する試薬分注機構と、
前記試料と前記試薬との混合反応の程度に応じて時間の経過とともに変化するシグナル値を検出する検出器と、
当該検出の結果に基づいて、前記試料を分析する制御部とを備え、
前記制御部は、
既知の血液凝固時間を有する血液凝固時間基準試料と前記試薬との混合反応によって反応曲線を作成し、当該作成された反応曲線に基づいて、予め定められた期待値である血液凝固時間に相当するシグナル基準値を設定するシグナル基準値設定部と、
当該設定されたシグナル基準値と、前記試薬に予め設定された識別情報とを対応させて記憶する記憶部と、
当該記憶されたシグナル基準値を用いて、前記試料または標準試料の血液凝固時間を求める処理部と、を有し、
前記シグナル基準値設定部は、前記血液凝固時間基準試料ごとに単一の反応曲線を作成することを特徴とする自動分析装置。
【請求項２】
請求項１に記載の自動分析装置において、
前記シグナル値は、透過光量、散乱光量、蛍光光量、濁度の何れかであることを特徴とする自動分析装置。
【請求項３】
請求項１に記載の自動分析装置において、
前記シグナル基準値設定部は、
前記シグナル基準値を試薬容器毎に設定することを特徴とする自動分析装置。
【請求項４】
請求項３に記載の自動分析装置において、
前記制御部は、
当該試薬容器毎におけるシグナル基準値の設定状況を表示部に表示し、当該シグナル基準値が設定されていない場合にはアラームを表示することを特徴とする自動分析装置。
【請求項５】
請求項１に記載の自動分析装置において、
前記シグナル基準値設定部は、
前記シグナル基準値を設定可能な範囲を分析の項目に応じて設定することを特徴とする自動分析装置。
【請求項６】
請求項５に記載の自動分析装置において、
前記シグナル基準値設定部は、
予め定められた期待値である血液凝固時間が、当該シグナル基準値を設定可能な範囲内にあるか否かを判定し、
当該シグナル基準値を設定可能な範囲内にない場合には、アラームを発行することを特徴とする自動分析装置。
【請求項７】
請求項１に記載の自動分析装置において、
前記シグナル基準値設定部は、
当該作成された反応曲線に基づいて、単一のシグナル基準値を設定し、
前記処理部は、当該設定された単一のシグナル基準値に基づいて、前記試料または前記標準試料の血液凝固時間を求めることを特徴とする自動分析装置。
【請求項８】
請求項１に記載の自動分析装置において、
前記シグナル基準値設定部は、
複数の前記血液凝固時間基準試料のそれぞれについて一つずつ作成された複数の反応曲線に基づいて、単一のシグナル基準値を設定し、
前記処理部は、当該設定された単一のシグナル基準値を用いて、前記試料または前記標準試料の血液凝固時間を求めることを特徴とする自動分析装置。
【請求項９】
請求項１に記載の自動分析装置において、
前記シグナル基準値設定部は、
複数の前記試料または前記標準試料のそれぞれについて一つずつ作成された複数の反応曲線に基づいて、複数の第一のシグナル基準値を設定し、
当該設定された複数の第一のシグナル基準値に基づいて近似式を求め、
当該求めた近似式に基づいて、単一の第二のシグナル基準値を設定し、
前記処理部は、
当該設定された第二のシグナル基準値を用いて、前記試料または前記標準試料の血液凝固時間を求めることを特徴とする自動分析装置。
【請求項１０】
請求項９に記載の自動分析装置において、
前記近似式は、線形近似、多項式近似、対数近似、指数近似のいずれかの方法により作成されることを特徴とする自動分析装置。
【請求項１１】
請求項１に記載の自動分析装置において、
前記処理部は、
当該記憶されたシグナル基準値を用いて、複数の前記標準試料について複数の血液凝固時間を求め、
当該求められた複数の血液凝固時間に基づいて、検量線を作成することを特徴とする自動分析装置。
【請求項１２】
請求項１に記載の自動分析装置において、
前記制御部は、
当該期待値である血液凝固時間が、予め定めた範囲外となったときに、アラームを発することを特徴とする自動分析装置。
【請求項１３】
請求項１に記載の自動分析装置において、
前記シグナル基準値設定部は、
当該期待値である血液凝固時間が、予め定めた範囲を外れるかどうかの判断結果に基づいて、当該シグナル基準値設定処理を行うことを特徴とする自動分析装置。
【請求項１４】
請求項１３に記載の自動分析装置において、
前記シグナル基準値設定部は、当該判断の結果、当該期待値である血液凝固時間が、予め定めた範囲を外れた場合には、当該シグナル基準値設定処理を行うことを特徴とする自動分析装置。
【請求項１５】
請求項１に記載の自動分析装置において、
前記処理部は、
当該記憶されたシグナル基準値を用いて、複数の前記標準試料について複数の血液凝固時間を求め、
当該複数の標準試料の濃度と、当該求めた複数の血液凝固時間との関係に基づいて、検量線を作成し、
当該作成された検量線と、当該記憶されたシグナル基準値を用いて求められた前記試料の血液凝固時間との関係に基づいて、
前記試料の濃度を求めることを特徴とする自動分析装置。
【請求項１６】
分析対象の試料を収容した試料容器を設置する試料容器設置部と、
前記試料の測定に用いる試薬を収容した試薬容器を設置する試薬容器設置部と、
前記試薬と前記試料とを混合反応させる反応容器と、
前記試料容器から前記反応容器に前記試料を分注する試料分注機構と、
前記試薬容器から前記反応容器に前記試薬を分注する試薬分注機構と、
前記試薬と前記試料との混合反応の程度に応じて時間の経過とともに変化するシグナル値を検出する検出器と、
当該検出の結果に基づいて、前記試料を分析する制御部とを備えた自動分析装置を用いた試料の分析方法であって、
前記制御部は、
既知の血液凝固時間を有する血液凝固時間基準試料と前記試薬との混合反応によって反応曲線を作成し、当該作成された反応曲線に基づいて、予め定められた期待値である血液凝固時間に相当するシグナル基準値を設定するシグナル基準値設定部と、
当該設定されたシグナル基準値と、前記試薬に予め設定された識別情報とを対応させて記憶する記憶部と、
当該記憶されたシグナル基準値を用いて、前記試料または標準試料の血液凝固時間を求める処理部と、を有し、
前記シグナル基準値設定部は、前記血液凝固時間基準試料ごとに単一の反応曲線を作成することを特徴とする試料の分析方法。
【請求項１７】
分析対象の試料を収容した試料容器を設置する試料容器設置部と、
前記試料の測定に用いる試薬を収容した試薬容器を設置する試薬容器設置部と、
前記試薬と前記試料とを混合反応させる反応容器と、
前記試料容器から前記反応容器に前記試料を分注する試料分注機構と、
前記試薬容器から前記反応容器に前記試薬を分注する試薬分注機構と、
前記試薬と前記試料との混合反応の程度に応じて時間の経過とともに変化するシグナル値を検出する検出器と、
当該検出の結果に基づいて、前記試料を分析する制御部と、を備え
前記制御部は、
既知の反応サイクル数を有する反応サイクル数基準試料と前記試薬との混合反応によって反応曲線を作成し、当該作成された反応曲線に基づいて、予め定められた期待値である反応サイクル数の期待値に相当するシグナル基準値を設定するシグナル基準値設定部と、
当該設定されたシグナル基準値と、前記試薬に予め設定された識別情報とを対応させて記憶する記憶部と、
当該記憶されたシグナル基準値を用いて、前記試料または標準試料の反応サイクル数を求める処理部と、を有し、
前記シグナル基準値設定部は、前記反応サイクル数基準試料ごとに単一の反応曲線を作成することを特徴とする自動分析装置。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００３】
試料（以下、血液凝固時間基準試料という）を用いて試薬状態や装置状態を把握し、測定条件を調整することにより、測定結果の信頼性を向上することができる自動分析装置及び分析方法を提供することを目的とする。
課題を解決するための手段
［００１０］
上記目的を達成するために、本発明は、分析対象の試料を収容した試料容器を設置する試料容器設置部と、前記試料の測定に用いる試薬を収容した試薬容器を設置する試薬容器設置部と、前記試薬と前記試料とを混合反応させる反応容器と、前記試料容器から前記反応容器に前記試料を分注する試料分注機構と、前記試薬容器から前記反応容器に前記試薬を分注する試薬分注機構と、前記試料と前記試薬との混合反応の程度に応じて時間の経過とともに変化するシグナル値を検出する検出器と、当該検出の結果に基づいて、前記試料を分析する制御部とを備え、前記制御部は、既知の血液凝固時間を有する血液凝固時間基準試料と前記試薬との混合反応によって反応曲線を作成し、当該作成された反応曲線に基づいて、予め定められた期待値である血液凝固時間に相当するシグナル基準値を設定するシグナル基準値設定部と、当該設定されたシグナル基準値と、前記試薬に予め設定された識別情報とを対応させて記憶する記憶部と、当該記憶されたシグナル基準値を用いて、前記試料または標準試料の血液凝固時間を求める処理部と、を有し、前記シグナル基準値設定部は、前記血液凝固時間基準試料ごとに単一の反応曲線を作成するものとする。
発明の効果
［００１１］
本発明によれば、血液凝固時間基準試料を用いて試薬状態を把握し、試薬容器毎に適切なシグナル基準値を設定することにより、測定結果の信頼性を向上することができる。
図面の簡単な説明
［００１２］
［図１］第１の実施の形態に係る自動分析装置の全体構成を概略的に示す図である。
［図２］試料と試薬の混合反応において検出ユニットで検出される散乱光量の時
【国際調査報告】
2015098473.tif 000040
2015098473.tif 000041
2015098473.tif 000042
2015098473.tif 000043