(57)【要約】  本発明は、スフィンゴミエリンを有効成分とする、皮膚角層角化肥厚膜におけるロリクリンの減少抑制・改善剤、トランスグルタミナーゼ３の活性化剤およびに皮膚角層角化肥厚膜の形成促進・構造強化剤、組成物、および飲食品に関する。本発明によれば、皮膚角層角化肥厚膜におけるロリクリンの減少を抑制もしく改善することができ、また、皮膚角層角化肥厚膜におけるトランスグルタミナーゼ３の活性化を図ること出来、さらにそれらにより、皮膚角層角化肥厚膜の形成を促進し、構造強化を図ることができる。そしてこれらの作用により、皮膚のバリア機能の低下を、安全かつ簡易で、経済的に予防、抑制または改善することができる。
2016104665.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
スフィンゴミエリンを有効成分とする、皮膚角層角化肥厚膜におけるロリクリンの減少抑制・改善剤。
【請求項２】
スフィンゴミエリンを有効成分とする、皮膚角層角化肥厚膜におけるトランスグルタミナーゼ３の活性化剤。
【請求項３】
スフィンゴミエリンを有効成分とする、皮膚角層角化肥厚膜の形成促進・構造強化剤。
【請求項４】
角化肥厚膜の形成促進・構造強化が、スフィンゴミエリンによる皮膚角層角化肥厚膜におけるロリクリンの減少抑制・改善とトランスグルタミナーゼ３の活性化によるものである、請求項３に記載の角化肥厚膜の形成促進・構造強化剤。
【請求項５】
スフィンゴミエリンが、乳由来のスフィンゴミエリンである、請求項１〜４のいずれか一項に記載の減少抑制・改善剤、活性化剤または形成促進・構造強化剤。
【請求項６】
請求項１または５に記載のロリクリンの減少抑制・改善剤、請求項２または５に記載のトランスグルタミナーゼ３の活性化剤、または請求項３〜５のいずれか一項に記載の角化肥厚膜の形成促進・構造強化剤を含んでなる、経口摂取用または経腸投与用組成物。
【請求項７】
皮膚の状態の悪化の予防、抑制または改善のために用いられる、請求項６に記載の組成物。
【請求項８】
皮膚の状態の悪化が、皮膚のバリア機能の低下である、請求項７に記載の組成物。
【請求項９】
皮膚のバリア機能の低下が、紫外線の照射によるものである、請求項７または８に記載の組成物。
【請求項１０】
１日当たり０．５〜１５００ｍｇ摂取可能な量のスフィンゴミエリンを含む、請求項６〜９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１１】
請求項１または５に記載のロリクリンの減少抑制・改善剤、請求項２または５に記載のトランスグルタミナーゼ３の活性化剤、または請求項３〜５のいずれか一項に記載の角化肥厚膜の形成促進・構造強化剤を含んでなる、飲食品。
【請求項１２】
請求項６〜９のいずれか一項に記載の組成物を含んでなる、飲食品。
【請求項１３】
一包装形態当たり０．２〜４５０００ｍｇ摂取可能な量のスフィンゴミエリンを含む、請求項１１または１２に記載の飲食品。
【請求項１４】
機能性食品、健康栄養食品、サプリメント、特定保健用食品、機能性表示食品または疾病リスク低減表示付き食品である、請求項１１〜１３のいずれか一項に記載の飲食品。
【請求項１５】
スフィンゴミエリンを、皮膚角層角化肥厚膜におけるロリクリンの量が低下した対象に、経口摂取させるか、または経腸投与することを含む、ロリクリンの減少抑制・改善方法。
【請求項１６】
スフィンゴミエリンを、皮膚角層角化肥厚膜におけるトランスグルタミナーゼ３の活性が低下した対象に、経口摂取させるか、または経腸投与することを含む、皮膚角層角化肥厚膜におけるトランスグルタミナーゼ３の活性化方法。
【請求項１７】
スフィンゴミエリンを、皮膚角層における角化肥厚膜の形成促進・構造強化が望まれる対象に、経口摂取させるか、または経腸投与することによって、皮膚角層角化肥厚膜におけるロリクリンの減少抑制もしくは改善を行い、トランスグルタミナーゼ３を活性化することを含む、皮膚角層角化肥厚膜の形成促進・構造強化方法。
【発明の詳細な説明】
【関連出願の参照】
【０００１】
本願は、先行する日本国特許出願である特願２０１４−２６４５７８号（出願日：２０１４年１２月２６日）に基づくものであって、その優先権の利益を主張するものであり、その開示内容全体は参照することによりここに組み込まれる。
【技術分野】
【０００２】
本発明は、皮膚角層角化肥厚膜におけるロリクリンの減少抑制・改善剤、および皮膚角層角化肥厚膜におけるトランスグルタミナーゼ３の活性化剤に関する。また本発明は、皮膚角層角化肥厚膜の形成促進・構造強化剤に関する。これらは、皮膚の状態の悪化の予防、抑制または改善に有用である。
【背景技術】
【０００３】
表皮の角層は、表皮角化細胞（ケラチノサイト）が終末分化した角層細胞と、それをとりまく角層細胞間脂質から構成されている。細胞間脂質は、セラミド、コレステロール、脂肪酸などから構成され、脂質層と水分子層とによって、ラメラ構造を形成している。【０００４】
一方、角層細胞は、保湿に関連する成分のケラチン線維やアミノ酸などの天然保湿因子を含んでいる。そして、それは、角化肥厚膜（角質肥厚膜、またはコーニファイドエンベロープ（ＣＥ）とも呼ぶ）という様々なタンパク質の架橋によって、非常に強靭な不溶性の裏打ち構造に包まれており、物理的や化学的な刺激に対して、非常に安定的である。角化肥厚膜を構成するタンパク質のうち、特に顆粒層で形成されているロリクリンは、この裏打ち構造を強化する役割を担っている。この構造では、タンパク質架橋接着酵素のトランスグルタミナーゼ３が、ロリクリン以外のタンパク質の架橋反応で形成された未熟な角化肥厚膜に対して、ロリクリンを付着させ、角化肥厚膜の足場となる土台を形成することによって完成する。【０００５】
皮膚の紫外線による損傷（ダメージ）は、皮膚のターンオーバーの異常を誘発し、特に最外層の角層では、その影響を受け易い。角層細胞の損傷や不全角化によって、不完全な角化肥厚膜が形成されると、表皮角層のバリア機能を低下させ、角層中に保持された水分が失われることが知られている。【０００６】
コーニファイドエンベロープ（角化肥厚膜）の形成・成熟促進という観点からは、例えば、特開２００８−３０３１８５号公報に、特定のピロリドン誘導体の使用について開示されている。ここでは、未熟なコーニファイドエンベロープを成熟化させることが検討されている。しかしながら、本発明者らの知るかぎり、皮膚損傷などによるロリクリンの減少を抑制して、トランスグルタミナーゼ３を活性化することで、角化肥厚膜の形成を促進して、その構造を強化することについては、あまり検討が進んでいない。そして、本発明者らの知るかぎり、そのために、スフィンゴ脂質、その中でも、スフィンゴミエリンを経口摂取することについては、これまで知られていない。【０００７】
特開２００９−０８４２４４号公報には、炭素数１０〜３６の飽和遊離脂肪酸溶液の連続経口摂取によって、皮膚のバリア機能の改善効果、セラミド量の増加効果、ロリクリン遺伝子の発現増加効果が認められたことが開示されている。しかしながら、ここには、スフィンゴミエリンを経口摂取することについては、何ら記載も示唆もされていない。【０００８】
特開２００７−１１７７９３号公報には、スフィンゴミエリンを有効成分として含有する医薬および飲食品が開示されており、スフィンゴミエリンによるシアロムチン分泌促進作用、抗アレルギー作用、抗酸化作用等の種々の作用が開示されている。しかしながら、ここには、スフィンゴミエリンによるロリクリンの減少抑制作用や、トランスグルタミナーゼ３の活性化作用については、何ら記載も示唆もされていない。【０００９】
Hasegawaらの文献（Hasegawa T et al., “Dietary glucosylceramide enhances cornified envelope formation via transglutaminase expression and involucrin production”, Lipids (2011) 46, pp.529-535）には、こんにゃく由来のスフィンゴ脂質であるグルコシルセラミドをマウスに投与した際に、マウスの皮膚バリア機能の改善、トランスグルタミナーゼ１の発現上昇、インボルクリンの産生上昇、トランスグルタミナーゼ１および３の発現促進等の作用が観察されたことが報告されている。しかしながら、グルコシルセラミドでは、スフィンゴミエリンとは構造的に異なるものであり、また、スフィンゴミエリンの投与の場合とは作用の傾向が全く異なることが確認されている。すなわち、スフィンゴミエリンの投与の場合には、トランスグルタミナーゼ１およびインボルクリンの維持もしくは低下が実際に確認されており（本発明の実施例）、これは、グルコシルセラミドの投与の場合とは全く反対の結果である。【００１０】
このように、スフィンゴミエリンを経口摂取することによって、ロリクリンの減少が抑制され、トランスグルタミナーゼ３が活性化され、それにより、角化肥厚膜の形成が促進されて、その構造が強化されることについては、本発明者らの知るかぎり、これまで知られていない。
【発明の概要】
【００１１】
本発明者らは今般、スフィンゴ脂質、特にスフィンゴミエリンを経口摂取することによって、ロリクリンの減少が抑制され、トランスグルタミナーゼ３が活性化されることを予想外にも見出した。本発明者らは、ロリクリンの減少を抑制し、トランスグルタミナーゼ３を活性化することで、角化肥厚膜の形成が促進され、また未熟な状態の角化肥厚膜の構造が強化されることに着目した。さらに、これらによって、皮膚の悪化した状態が改善され、その中でも、紫外線の照射下における皮膚のバリア機能の低下を抑制できることも見出した。本発明は、これら知見に基づくものである。
【００１２】
よって、本発明は、皮膚角層角化肥厚膜におけるロリクリンの減少抑制・改善剤、および皮膚角層角化肥厚膜におけるトランスグルタミナーゼ３の活性化剤の提供をその目的とする。また、本発明は、皮膚角層角化肥厚膜の形成促進・構造強化剤の提供をその目的とする。さらに本発明は、紫外線の照射下などによる皮膚のバリア機能の低下を、安全かつ簡易で、経済的に予防、抑制または改善するための組成物、および飲食品の提供もその目的とする。
【００１３】
すなわち、本発明によれば、以下の発明が提供される。
【００１４】
＜１＞  スフィンゴミエリンを有効成分とする、皮膚角層角化肥厚膜におけるロリクリンの減少抑制・改善剤。
【００１５】
＜２＞  スフィンゴミエリンを有効成分とする、皮膚角層角化肥厚膜におけるトランスグルタミナーゼ３の活性化剤。
【００１６】
＜３＞  スフィンゴミエリンを有効成分とする、皮膚角層角化肥厚膜の形成促進・構造強化剤。
【００１７】
＜４＞  前記＜１＞の角化肥厚膜の形成促進・構造強化剤において、角化肥厚膜の形成促進・構造強化が、スフィンゴミエリンによる皮膚角層角化肥厚膜におけるロリクリンの減少抑制・改善とトランスグルタミナーゼ３の活性化によるものであるのがよい。
【００１８】
＜５＞  前記＜１＞〜＜４＞のいずれかの減少抑制・改善剤、活性化剤または形成促進・構造強化剤において、スフィンゴミエリンは、乳由来のスフィンゴミエリンであるのがよい。
【００１９】
＜６＞  前記＜１＞または＜５＞のロリクリンの減少抑制・改善剤、前記＜２＞または＜５＞のトランスグルタミナーゼ３の活性化剤、または前記＜３＞〜＜５＞のいずれかの角化肥厚膜の形成促進・構造強化剤を含んでなる、経口摂取用または経腸投与用組成物。
【００２０】
＜７＞  前記＜６＞の組成物において、皮膚の状態の悪化の予防、抑制または改善のために用いられるのがよい。
【００２１】
＜８＞  前記＜７＞の組成物において、皮膚の状態の悪化が、皮膚のバリア機能の低下であるのがよい。
【００２２】
＜９＞  前記＜７＞または＜８＞の組成物において、皮膚のバリア機能の低下が、紫外線の照射によるものであるのがよい。
【００２３】
＜１０＞  前記＜６＞〜＜９＞のいずれかの組成物において、１日当たり０．５〜１５００ｍｇ摂取可能な量のスフィンゴミエリンを含むのがよい。
【００２４】
＜１１＞  前記＜１＞または＜５＞のロリクリンの減少抑制・改善剤、前記＜２＞または＜５＞のトランスグルタミナーゼ３の活性化剤、または前記＜３＞〜＜５＞のいずれかの角化肥厚膜の形成促進・構造強化剤を含んでなる、飲食品。
【００２５】
＜１２＞  前記＜６＞〜＜９＞のいずれかの組成物を含んでなる、飲食品。
【００２６】
＜１３＞  前記＜１１＞または＜１２＞の飲食品において、一包装形態当たり０．２〜４５０００ｍｇ摂取可能な量のスフィンゴミエリンを含むのがよい。
【００２７】
＜１４＞  前記＜１１＞〜＜１３＞のいずれかの飲食品において、機能性食品、健康栄養食品、サプリメント、特定保健用食品、機能性表示食品または疾病リスク低減表示付き食品であるのがよい。
【００２８】
＜１５＞  スフィンゴミエリンを、皮膚角層角化肥厚膜におけるロリクリンの量が低下した対象に、経口摂取させるか、または経腸投与することを含む、ロリクリンの減少抑制・改善方法。
【００２９】
＜１６＞  スフィンゴミエリンを、皮膚角層角化肥厚膜におけるトランスグルタミナーゼ３の活性が低下した対象に、経口摂取させるか、または経腸投与することを含む、皮膚角層角化肥厚膜におけるトランスグルタミナーゼ３の活性化方法。
【００３０】
＜１７＞  スフィンゴミエリンを、皮膚角層における角化肥厚膜の形成促進・構造強化が望まれる対象に、経口摂取させるか、または経腸投与することによって、皮膚角層角化肥厚膜におけるロリクリンの減少抑制もしくは改善を行い、トランスグルタミナーゼ３を活性化することを含む、皮膚角層角化肥厚膜の形成促進・構造強化方法。
【発明の効果】
【００３１】
本発明によれば、皮膚角層角化肥厚膜におけるロリクリンの減少を抑制・改善することができ、また皮膚角層角化肥厚膜におけるトランスグルタミナーゼ３を活性化することができる。ロリクリンの減少を抑制し、トランスグルタミナーゼ３を活性化することで、角化肥厚膜の形成が促進され、また未熟な状態の角化肥厚膜の構造が強化されることとなる。特に、本発明の減少抑制・改善剤、活性化剤または形成促進・構造強化剤、および組成物は、紫外線の照射下における皮膚のバリア機能の低下の予防、抑制または改善を効果的に行うことができる。さらに、本発明の産生促進剤および組成物は、経口または経腸ルートで摂取するものであり、また、原料は従来食品として使用経験のあるものを由来とするため、安全かつ簡易であり、経済性にも優れたものである。
【図面の簡単な説明】
【００３２】
【図１】実施例の試験の流れを示す概念図である。
【図２】実施例におけるロリクリン遺伝子の発現量の推移とトランスグルタミナーゼ３遺伝子の発現量の推移を示したグラフである。このうち、図２（Ａ）は、ロリクリン遺伝子の発現量の推移を示し、図２（Ｂ）は、トランスグルタミナーゼ３遺伝子の発現量の推移を示す。また、図中、＊は、対照群に対して有意差あり（Ｐ＜０．０５）を示し、＃は、０日目に対して有意差あり（Ｐ＜０．０５）を示す。
【図３】実施例におけるトランスグルタミナーゼ１遺伝子の発現量の推移とインボルクリン遺伝子との発現量の推移を示したグラフである。このうち、図３（Ｃ）は、トランスグルタミナーゼ１遺伝子の発現量の推移を示し、図３（Ｄ）は、インボルクリン遺伝子の発現量の推移を示す。また、図中、＊は、対照群に対して有意差あり（Ｐ＜０．０５）を示し、＃は、０日目に対して有意差あり（Ｐ＜０．０５）を示す。
【発明を実施するための形態】
【００３３】
以下、本発明の実施形態について説明する。
【００３４】
皮膚角層角化肥厚膜におけるロリクリンの減少抑制・改善剤
本発明の皮膚角層角化肥厚膜におけるロリクリンの減少抑制・改善剤は、前記したように、スフィンゴミエリンを有効成分とするものである。
ここで、「有効成分とする」とは、本発明による減少抑制・改善剤が、ロリクリンの減少を抑制するか、または改善する作用を、生体内の皮膚角層角化肥厚膜において奏するのに充分な使用量（すなわち、有効量）のスフィンゴミエリンを含有することをいう。
【００３５】
また、ここで、「ロリクリンの減少抑制・改善」とは、皮膚角層角化肥厚膜におけるロリクリンの減少を抑制するか、または改善することを意味し、減少の進行を抑えるか、または遅延させること、減少を停止させ維持すること、減少を抑え増加に転じさせることのいずれの意味を含んでいても良い。さらに、「ロリクリンの減少抑制・改善」には、減少の予防も包含されていてもよい。
【００３６】
「ロリクリン」は、皮膚の角化肥厚膜の裏打ち構造の主要な構成タンパク質であり、例えば、後述する実施例に記載されているように、ロリクリン遺伝子の発現状態を指標にして、皮膚角層角化肥厚膜におけるロリクリンの減少状態を評価することができる。
【００３７】
トランスグルタミナーゼ３の活性化剤
本発明の皮膚角層角化肥厚膜におけるトランスグルタミナーゼ３の活性化剤は、前記したように、スフィンゴミエリンを有効成分とするものである。
ここで、「有効成分とする」とは、本発明による活性化剤が、トランスグルタミナーゼ３を活性化させる作用を、生体内の皮膚角層角化肥厚膜において奏するのに充分な使用量（すなわち、有効量）のスフィンゴミエリンを含有することをいう。
【００３８】
また、ここで、「トランスグルタミナーゼ３の活性化」とは、皮膚角層角化肥厚膜におけるトランスグルタミナーゼ３の酵素活性が活性化され、活性が低下していた状態から活性が高められること、活性が高い状態を維持することを包含する意味で使用される。
【００３９】
「トランスグルタミナーゼ３」は、角化肥厚膜にロリクリンを付着させ、角化肥厚膜の裏打ち構造を強化する働きを持つ酵素であり、例えば、後述する実施例に記載されているように、トランスグルタミナーゼ３遺伝子の発現状態を指標にして、皮膚角層角化肥厚膜におけるトランスグルタミナーゼ３の活性を評価することができる。
【００４０】
皮膚角層角化肥厚膜の形成促進・構造強化剤
本発明の皮膚角層角化肥厚膜の形成促進・構造強化剤は、前記したように、スフィンゴミエリンを有効成分とするものである。
ここで、「有効成分とする」とは、本発明による形成促進・構造強化剤が、皮膚角層角化肥厚膜の形成を促進し、および／または、その構造を強化する効果を示しうるのに充分な使用量（すなわち、有効量）のスフィンゴミエリンを含有することをいう。
【００４１】
また、ここで、「皮膚角層角化肥厚膜の形成促進・構造強化」とは、皮膚角層角化肥厚膜の形成を促進すること、未成熟の角化肥厚膜を成熟化させること、角化肥厚膜の構造を強化することを含む意味で使用される。
【００４２】
本発明の好ましい態様によれば、角化肥厚膜の形成促進・構造強化剤において、角化肥厚膜の形成促進・構造強化は、スフィンゴミエリンによる皮膚角層角化肥厚膜におけるロリクリンの減少抑制・改善とトランスグルタミナーゼ３の活性化によるものである。
【００４３】
スフィンゴミエリン
本明細書において、スフィンゴミエリンは、スフィンゴ脂質の一つである。ここで、スフィンゴ脂質は、天然由来のものであり、例えば、牛乳、ヤギ乳、羊乳、馬乳などの乳由来のもの、卵黄由来のもの、米、トウモロコシ、穀物由来のもの、コンニャク由来、ビート由来などが挙げられ、好ましくは、乳由来のものであり、より好ましくは牛乳由来のものである。したがって、本発明において使用可能なスフィンゴミエリンは、前記したスフィンゴ脂質と同様に、天然由来のものであり、好ましくは乳由来のものであり、より好ましくは牛乳由来のものである。スフィンゴミエリンは、天然原料より慣用の方法によって調製することもできるが、市販品を使用しても良い。
【００４４】
本発明の好ましい態様によれば、スフィンゴミエリンは、乳由来のスフィンゴミエリンである。
【００４５】
本発明で使用可能な乳由来のスフィンゴミエリンは、好ましくは、ミリルスチルスフィンゴシルホスホリルコリン（d18:1-C14:0）、トリコサニルスフィンゴシルホスホリルコリン（d18:1-C23:0）、パルミチルスフィンゴシルホスホリルコリン（d18:1-C16:0）、トリコセノイルスフィンゴシルホスホリルコリン（d18:1-C23:1）、ステアリルスフィンゴシルホスホリルコリン（d18:1-C18:0）、リグノセリルスフィンゴシルホスホリルコリン（d18:1-C24:0）、アラキジルスフィンゴシルホスホリルコリン（d18:1-C20:0）、ネルボニルスフィンゴシルホスホリルコリン（d18:1-C24:1）、ベヘニルスフィンゴシルホスホリルコリン（d18:1-C22:0）、およびセロチルスフィンゴシルホスホリルコリン（d18:1-C26:0）からなる群より選択される１以上の分子種を含むものである。前記乳由来のスフィンゴミエリンは、より好ましくは、前記した群から選択される３以上の分子種を含むものであり、さらにより好ましくは、前記した群から選択される５以上の分子種を含むものである。
【００４６】
本発明の減少抑制・改善剤、活性化剤または形成促進・構造強化剤は、好ましくは、経口摂取用（すなわち、経口摂取剤）または経腸投与用（すなわち、経腸投与剤）である。
【００４７】
本発明の減少抑制・改善剤、活性化剤または形成促進・構造強化剤は、好ましくは、状態の悪化した皮膚、バリア機能が低下した皮膚に用いられる。
【００４８】
後述する実施例で示されているように、本発明によれば、皮膚の角化肥厚膜のロリクリンが減少したような皮膚バリア機能の低下状態において、ロリクリンの減少抑制・改善することによって、皮膚バリア機能を保つか、または改善することができる。同様に、後述する実施例で示されているように、本発明によれば、皮膚の角化肥厚膜のトランスグルタミナーゼ３の活性が低下したような皮膚バリア機能の低下状態において、トランスグルタミナーゼ３を活性化することによって、皮膚バリア機能を保つか、または改善することができる。さらに、皮膚角層角化肥厚膜におけるロリクリンの減少抑制・改善とトランスグルタミナーゼ３の活性化により、角化肥厚膜の形成が促進・構造が強化され、それにより、状態の悪化した皮膚、バリア機能が低下した皮膚を改善することができる。
【００４９】
このため、本発明による減少抑制・改善剤、活性化剤または形成促進・構造強化剤は、より好ましくは、状態の悪化した皮膚、バリア機能が低下した皮膚に用いられる。
【００５０】
用途
本発明における有効成分であるスフィンゴミエリンは、皮膚角層角化肥厚膜におけるロリクリンの減少を抑制・改善することができ、また、皮膚角層角化肥厚膜におけるトランスグルタミナーゼ３を活性化することができる（後述する実施例）。これにより、角化肥厚膜の形成を促進し、また、未熟な状態の角化肥厚膜の構造を強化することができる。さらに、本発明における有効成分であるスフィンゴミエリンは、皮膚の状態の悪化の予防、抑制もしくは改善効果を有する。
【００５１】
ここで、皮膚の状態の悪化とは、例えば、皮膚のバリア機能の低下、皮膚の乾燥、皮膚のかさつき、角層の水分量の低下、アトピー性皮膚炎などが包含される。皮膚のバリア機能の低下には、バリア機能の維持も包含される。また、皮膚のバリア機能の低下は、好ましくは、紫外線の照射下における皮膚のバリア機能の低下である。
【００５２】
また、ここで、悪化した状態の「予防、抑制または改善」は、そのような状態の、調節、進行の遅延、緩和、発症予防、再発予防などを包含する意味で使用される。
【００５３】
本発明の別の態様によれば、ロリクリンの減少を抑制・改善、またはトランスグルタミナーゼ３の活性化により、治療、予防または改善しうる状態の治療、予防または改善を図ることができる。
【００５４】
本発明の好ましい別の一つの態様によれば、スフィンゴミエリンを、皮膚角層角化肥厚膜におけるロリクリンの量が低下した対象に、経口摂取させるか、または経腸投与することを含む、皮膚の状態の悪化の予防、抑制または改善方法が提供される。
【００５５】
また  本発明の好ましい別の一つの態様によれば、スフィンゴミエリンを、皮膚角層角化肥厚膜におけるトランスグルタミナーゼ３の活性が低下した対象に、経口摂取させるか、または経腸投与することを含む、皮膚の状態の悪化の予防、抑制または改善方法が提供される。
【００５６】
本発明の好ましいさらに別の一つの態様によれば、スフィンゴミエリンを、皮膚角層における角化肥厚膜の形成促進・構造強化が望まれる対象に、経口摂取させるか、または経腸投与することによって、皮膚角層角化肥厚膜におけるロリクリンの減少抑制もしくは改善を行い、トランスグルタミナーゼ３を活性化して、皮膚角層における角化肥厚膜の形成促進・構造強化することを含む、皮膚の状態の悪化の予防、抑制または改善方法が提供される。
【００５７】
本発明の別の態様によれば、皮膚角層角化肥厚膜におけるロリクリンの減少抑制または改善をするための、スフィンゴミエリンが提供される。
【００５８】
本発明の別の態様によれば、皮膚角層角化肥厚膜におけるトランスグルタミナーゼ３を活性化するための、スフィンゴミエリンが提供される。
【００５９】
本発明の別の態様によれば、皮膚角層角化肥厚膜の形成を促進するか、および／またはその構造を強化するための、スフィンゴミエリンが提供される。
【００６０】
本発明の好ましい別の一つの態様によれば、皮膚角層角化肥厚膜におけるロリクリンの減少抑制・改善のための、スフィンゴミエリンの使用が提供される。また本発明のさらに好ましい別の一つの態様によれば、皮膚角層角化肥厚膜におけるロリクリンの減少抑制・改善のための経口摂取用または経腸投与用組成物の製造における、スフィンゴミエリンの使用が提供される。ここで、前記の使用は、非治療的使用であることができる。
【００６１】
本発明の好ましい別の一つの態様によれば、皮膚角層角化肥厚膜におけるトランスグルタミナーゼ３の活性化のための、スフィンゴミエリンの使用が提供される。また本発明のさらに好ましい別の一つの態様によれば、皮膚角層角化肥厚膜におけるトランスグルタミナーゼ３の活性化のための経口摂取用または経腸投与用組成物の製造における、スフィンゴミエリンの使用が提供される。ここで、前記の使用は、非治療的使用であることができる。
【００６２】
本発明の好ましい別の一つの態様によれば、皮膚角層角化肥厚膜の形成を促進するか、および／またはその構造を強化するための、スフィンゴミエリンの使用が提供される。また本発明のさらに好ましい別の一つの態様によれば、皮膚角層角化肥厚膜の形成を促進するか、および／またはその構造を強化するための経口摂取用または経腸投与用組成物医薬の製造における、スフィンゴミエリンの使用が提供される。ここで、前記の使用は、非治療的使用であることができる。
【００６３】
組成物および飲食品
前記したように、本発明によれば、本発明の減少抑制・改善剤、活性化剤または形成促進・構造強化剤を含んでなる、経口摂取用または経腸投与用組成物が提供される。また、本発明によれば、本発明の減少抑制・改善剤、活性化剤または形成促進・構造強化剤を含んでなる、飲食品が提供される。
【００６４】
このような組成物および飲食品は、例えば、本発明による本発明の減少抑制・改善剤、活性化剤または形成促進・構造強化剤を、組成物および飲食品の材料成分に添加することを含んでなる製造方法によって製造することができる。
【００６５】
本発明の経口摂取用または経腸投与用組成物は、好ましくは、皮膚の状態の悪化の予防、抑制または改善のために用いられる。すなわち、本発明によれば、皮膚の状態の悪化の予防、抑制または改善用組成物が提供される。
【００６６】
本発明の皮膚の状態の悪化の予防、抑制または改善用組成物は、一つの好ましい態様としては、医薬組成物である。
【００６７】
本発明において、医薬組成物とは、製剤化のために許容されうる添加剤を併用して、常法に従い、経口製剤または非経口製剤として調製したものである。簡易性の点からは、経口製剤であることが好ましい。経口製剤の場合には、錠剤、散剤、細粒剤、顆粒剤、カプセル剤、丸剤、徐放剤などの固形製剤、溶液、懸濁液、乳濁液などの液状製剤の形態をとることができる。製剤化のために許容されうる添加剤としては、例えば、賦形剤、安定剤、防腐剤、湿潤剤、乳化剤、滑沢剤、甘味料、着色料、香料、緩衝剤、酸化防止剤、ｐＨ調整剤などが挙げられる。
【００６８】
本発明の飲食品には、必要に応じて、任意の成分を加えることができる。このような任意の添加可能な成分としては、特段の制限はないが、通常、飲食品に配合される成分、甘味料、酸味料、野菜や果物や種実の汁やそのエキス、ビタミン、ミネラル、アミノ酸などの栄養素、乳酸菌、ビフィズス菌、プロピオン酸菌などの有用な微生物やその培養物、オリゴ糖などの機能性をもつ糖類、ローヤルゼリー、コラーゲン、セラミド、グルコサミン、アスタキサンチン、ポリフェノールなどの既存の機能性素材、香料、ｐＨ調整剤、賦形剤、酸味料、着色料、乳化剤、保存料などを配合することができる。
【００６９】
本発明において、飲食品とは、医薬組成物以外のものであって、溶液、懸濁液、乳濁液、粉末、固体成形物など、経口摂取可能な形態であればよく特に限定されない。具体的には、例えば、乳飲料、ヨーグルト類、乳酸菌飲料、発酵乳、アイスクリーム類、クリーム類、チーズ類などの乳製品；清涼飲料、果汁飲料、野菜飲料、豆乳飲料、コーヒー飲料、茶飲料、ゼリー飲料、ココア、スムージーなどの粉末飲料やスポーツ粉末飲料、栄養強化の粉末飲料、美容用の粉末食品、粉末スープ、蒸しパンのもと、濃縮飲料、アルコール飲料などの飲料類；パン、パスタ、麺、ケーキミックス、唐揚げ粉、パン粉などの小麦粉製品；チョコレート、ガム、飴、クッキー、グミ、スナック、和菓子、ゼリー、プリンなどのデザート菓子などの菓子類；加工調味料、風味調味料、調理ミックスなどの調味料；カレー、バスタソース、ポトフ、シチュー、和風食品のレトルト食品；加工油脂、バター、マーガリン、スプレッド、マヨネーズなどの油脂類；フリーズドライ食品などの即席食品類；農産缶詰、ジャム・マーマレード類、漬け物、煮豆、シリアル、雑炊などの農産加工品；水産加工品；畜産加工品；ピッツア、ドリア、グラタン、惣菜、フライなど冷凍食品；流動食、さらには動物の飼料、タブレット、口腔内に使用する化粧品などが挙げられる。
【００７０】
本発明の一つの好ましい態様によれば、飲食品は、乳飲料（加工乳を含んでもよい）、発酵乳、清涼飲料、ゼリー飲料、タブレット、美容用の粉末食品、粉末飲料、流動食、液状の調製粉乳であり、より好ましい態様によれば、飲食品は、乳飲料、発酵乳、清涼飲料、ゼリー飲料、タブレット、美容用の粉末食品であり、さらに好ましい態様によれば、飲食品は、乳飲料（加工乳を含んでもよい）、発酵乳である。
【００７１】
また、飲食品には、機能性食品、健康栄養食品、サプリメント、健康食品、特定保健用食品、機能性表示食品、栄養機能食品、病者用食品、乳幼児用調製粉乳、妊産婦もしくは授乳婦用粉乳、または疾病リスク低減表示を付した飲食品のような分類のものも包含される。本発明の一つの好ましい態様によれば、飲食品は、機能性食品、健康栄養食品、サプリメント、特定保健用食品、機能性表示食品、または疾病リスク低減表示付き食品である。
【００７２】
なお、ここで、疾病リスク低減の表示とは、疾病リスクを低減する可能性のある飲食品の表示であって、ＦＡＯ／ＷＨＯ合同食品規格委員会（コーデックス委員会）の定める規格に基づいて、またはその規格を参考にして、定められた表示または認められた表示であることができる。
【００７３】
よって、本発明の飲食品は、例えば、皮膚状態の悪化の改善または緩和を期待する消費者に適した食品、皮膚の状態悪化の改善に適した食品、すなわち、所謂、特定保健用食品もしくは機能性表示食品として提供することができる。
【００７４】
本発明の別の態様によれば、皮膚の状態の悪化の予防、抑制または改善をする機能が表示された飲食品が提供されうる。
【００７５】
飲食品および組成物における有効成分の含有量は、組成物の種類、形態や、予防・改善の目的などによって変化させることができるため、一律に規定することは難しいが、本発明の組成物では、成人（体重：６０ｋｇ）が１日当たり、スフィンゴミエリンを、０．５〜１５００ｍｇ、好ましくは１〜１０００ｍｇ、より好ましくは５〜５００ｍｇで摂取可能な有効量に調整されたものであることができる。
【００７６】
スフィンゴミエリンの含量は、慣用の方法により測定することができるが、例えば、液体クロマトグラフィーを用い、カラムとして、ＡＱＵＡＳＩＬ  ＳＰ１００（４．６Ｘ２５０ｍｍ、センシュー科学社）を用いて測定することができる。
【００７７】
このとき、移動相として、例えば、０．５ｍＭリン酸−クエン酸緩衝液（ｐＨ３．０）とメタノールを５対９５の割合で混合させた溶液を用いるとよい。測定時間を２０分間に設定し、移動相の流速を０．６ｍＬ／分、カラム温度を４０℃に設定し、吸光度を２０５ｎｍとして検出することができる。標準物質として、例えば、スフィンゴミエリン（乳由来、長良サイエンス社製）を用いることができ、面積比により定量することができる。
【００７８】
本発明の別の態様では、飲食品および組成物における有効成分の含量は、一包装形態当たりで規定することもでき、例えば、飲食品の場合、スフィンゴミエリンの含量は５〜１５００ｍｇ、好ましくは６〜１０００ｍｇ、より好ましくは７〜５００ｍｇで含むものであり、また、組成物の場合、スフィンゴミエリンの含有量は０．５〜1５００ｍｇ、好ましくは１〜１０００ｍｇ、より好ましくは５〜５００ｍｇで含むものであることができる。また、一包装形態当たりの量（含量）は、１回の摂取量に限らず、複数回分または複数日分（例えば、３０日分）の摂取量を包括してもよく、例えば、飲食品の場合、スフィンゴミエリンの含量は５〜４５０００ｍｇ、好ましくは６〜３００００ｍｇ、より好ましくは７〜１５０００ｍｇで含むものであり、また、組成物の場合、スフィンゴミエリンの含量は０．５〜４５０００ｍｇ、好ましくは１〜３００００ｍｇ、より好ましくは５〜１５０００ｍｇで含むものであることができる。
【００７９】
従来の一般的な乳飲料、発酵乳では、脂質の１ｇ当たり、リン脂質が２０ｍｇで含まれるが、本発明の乳飲料、発酵乳では、脂質の１ｇ当たり、リン脂質が２５〜３０００ｍｇで含まれ、好ましくは３０〜２５００ｍｇ、より好ましくは４０〜２０００ｍｇ、さらに好ましくは、５０〜１５００ｍｇで含まれるものであることができる。また、従来の一般的な乳飲料、発酵乳では、脂質の１ｇ当たり、スフィンゴミエリンが６ｍｇで含まれるが、本発明の乳飲料、発酵乳では、脂質の１ｇ当たり、スフィンゴミエリンが７〜１５００ｍｇで含まれ、好ましくは８〜１２５０ｍｇ、より好ましくは９〜１０００ｍｇ、さらに好ましくは、１０〜７５０ｍｇで含まれるものであることができる。
【００８０】
すなわち、本発明の一つの好ましい態様において、スフィンゴミエリン含量が意図的に高められた乳飲料や発酵乳を使用することができる。
【００８１】
本発明の乳飲料、発酵乳では、脂質を通常量で含む（例えば、脂質を３重量％で含む）、スフィンゴミエリンが０．２〜６０ｍｇ／ｇで含まれ、好ましくは０．２５〜５０ｍｇ／ｇ、より好ましくは０．３〜４０ｍｇ／ｇ、さらに好ましくは、０．３５〜３０ｍｇ／ｇで含まれるものであることができる。
【００８２】
一方、本発明の乳飲料、発酵乳では、脂質を少量で含む（例えば、脂質を１重量％で含む低脂肪の）場合、スフィンゴミエリンが０．０５〜６０ｍｇ／ｇで含まれ、好ましくは０．１〜５０ｍｇ／ｇ、より好ましくは０．１５〜４０ｍｇ／ｇ、さらに好ましくは、０．２〜３０ｍｇ／ｇで含まれるものであることができる。
【００８３】
そして、本発明の乳飲料、発酵乳、清涼飲料、ゼリー飲料、タブレット、美容用の粉末食品では、脂質を殆ど含まない（無脂肪の）場合、スフィンゴミエリンが０．０２〜６０ｍｇ／ｇで含まれ、好ましくは０．０４〜５０ｍｇ／ｇ、より好ましくは０．０６〜４０ｍｇ／ｇ、さらに好ましくは、０．０８〜３０ｍｇ／ｇで含まれるものであることができる。
【００８４】
従って、本発明の一つのさらに好ましい態様によれば、追加的なスフィンゴミエリンを含む、乳飲料や発酵乳が提供され、さらに、このような乳飲料や発酵乳を含む組成物もしくは飲食品が提供される。このような組成物もしくは飲食品としては、例えば、ヨーグルトが挙げられる。
【００８５】
例えば、ヨーグルトの場合、追加的なスフィンゴミエリンを含むヨーグルトが提供されることができ、これは、ヨーグルトに本来的に含まれうるスフィンゴミエリンのみではなく、ヨーグルトに対してスフィンゴミエリンを別途加えて、意図的にスフィンゴミエリンの濃度を高めたヨーグルトを意味する。このとき、ここでいう「追加的なスフィンゴミエリン」とは、ヨーグルトに本来的に含まれうるスフィンゴミエリンではなく、意図的にスフィンゴミエリンの濃度を高めたヨーグルトを作る際に加えられる、別途加えるスフィンゴミエリンをいう。
【００８６】
よって、本発明の別の好ましい態様によれば、本発明によるロリクリンの減少抑制・改善剤、本発明によるトランスグルタミナーゼ３の活性化剤、または本発明による角化肥厚膜の形成促進・構造強化剤を含んでなる、ヨーグルトが提供される。
【００８７】
また本発明の別の一つの好ましい態様によれば、追加的なスフィンゴミエリンを含む、ロリクリンの減少抑制・改善作用を有するヨーグルトが提供される。
本発明の別の一つの好ましい態様によれば、追加的なスフィンゴミエリンを含む、トランスグルタミナーゼ３の活性化作用を有するヨーグルトが提供される。
本発明の別の一つの好ましい態様によれば、追加的なスフィンゴミエリンを含む、角化肥厚膜の形成促進・構造強化作用を有するヨーグルトが提供される。
【００８８】
本発明の別の態様によれば、スフィンゴミエリンを、皮膚角層角化肥厚膜におけるロリクリンの量が低下した対象に、経口摂取させるか、または経腸投与することを含む、ロリクリンの減少抑制・改善方法が提供される。
ここで、ロリクリンの量とは、皮膚角層角化肥厚膜におけるロリクリンの存在量を意味し、例えば、ロリクリン遺伝子の発現量で評価することができる。
【００８９】
本発明の別の態様によれば、スフィンゴミエリンを、皮膚角層角化肥厚膜におけるトランスグルタミナーゼ３の活性が低下した対象に、経口摂取させるか、または経腸投与することを含む、皮膚角層角化肥厚膜におけるトランスグルタミナーゼ３の活性化方法が提供される。
ここで、トランスグルタミナーゼ３の活性は、例えば、トランスグルタミナーゼ３遺伝子の発現量で評価することができる。
【００９０】
本発明の別の態様によれば、スフィンゴミエリンを、皮膚角層における角化肥厚膜の形成促進・構造強化が望まれる対象に、経口摂取させるか、または経腸投与することによって、皮膚角層角化肥厚膜におけるロリクリンの減少抑制および改善を行い、トランスグルタミナーゼ３を活性化することを含む、皮膚角層角化肥厚膜の形成促進・構造強化方法が提供される。
【００９１】
なお、ここで、好ましくは、前記方法は、医療用途を除いたものである。また、前記の対象とは、好ましくは、ヒト、またはヒト以外の哺乳類である。
【００９２】
そして、前記方法は、好ましくはスフィンゴミエリンを２日以上で継続して経口摂取させるか、または経腸投与する、皮膚角層角化肥厚膜におけるロリクリンの量が低下した対象のためのロリクリンの減少抑制・改善方法、皮膚角層角化肥厚膜におけるトランスグルタミナーゼ３の活性が低下した対象のための皮膚角層角化肥厚膜におけるトランスグルタミナーゼ３の活性化方法、または皮膚角層角化肥厚膜の形成促進・構造強化方法であることができる。
【実施例】
【００９３】
以下において、本発明を下記の実施例によって詳細に説明するが、本発明は、これらに限定されるものではない。【００９４】
試験：  紫外線の照射下における皮膚のバリア機能の悪化におけるスフィンゴミエリンの影響
ヘアレスマウスに、紫外線（ＧＬ２０ＳＥ、三共電気株式会社製）を照射して、皮膚のバリア機能を悪化させ、スフィンゴミエリンの連続経口摂取の影響を評価した。【００９５】
＜実験方法＞
（１）紫外線の照射による皮膚のバリア機能の悪化
ヘアレスマウス（Ｈｏｓ：ＨＲ−１、雌、８週齢）を群分けしてから、１週間後に、２０ｍＪ／ｃｍ２の条件で、紫外線（ＵＶ−Ｂ）を照射した。
試験では、各測定と皮膚の採取に個体が必要となるため、合計で４８匹のマウスを用い、各群のマウスを８匹ずつとし、群わけした。【００９６】
（２）群構成および試験手順
前記（１）で作成した紫外線照射モデル動物の試験系を用いて、スフィンゴミエリン（純度９８％、長良サイエンス社製）の経口摂取（経口投与）による皮膚の遺伝子発現への影響を評価した。【００９７】
試験に供した各群は、下記のような条件とした。
群分けの日から９日間で経口投与した。
(i)  対照０日目群
(ii)  対照１日目群
(iii)  対照２日目群
(iv)  スフィンゴミエリン摂取０日目群
(v)  スフィンゴミエリン摂取１日目群
(vi)  スフィンゴミエリン摂取２日目群【００９８】
対照０、１、２日目群では、通常飼料を摂取し、溶媒（エタノールの５％水溶液）を１０ｍＬ／ｋｇ−ＢＷ／ｄａｙで経口投与した。また、スフィンゴミエリン摂取０、１、２日目群では、スフィンゴミエリン（純度：９８％、長良サイエンス社）：１４６ｍｇ／１０ｍＬ−溶媒（エタノール５％水溶液）を１０ｍＬ／ｋｇ−ＢＷ／ｄａｙで経口投与した。【００９９】
試験は、具体的には、図１の流れに沿って、照射前（０日目）、照射１日目、および照射２日目に、所定の群について、ロリクリン遺伝子とトランスグルタミナーゼ３遺伝子の発現量を定量した。このとき、トランスグルタミナーゼ１遺伝子とインボルクリン遺伝子の発現量も定量した。【０１００】
（ロリクリン、トランスグルタミナーゼ３、トランスグルタミナーゼ１およびインボルクリンの各遺伝子の発現量の定量法）
各個体から採取した皮膚サンプルよりＲＮｅａｓｙ Ｆｉｂｉｒｏｕｓ Ｔｉｓｓｕｅ Ｍｉｎｉ ｋｉｔ（ＱＩＡＧＥＮ社）を用いて総ＲＮＡの抽出を行い、皮膚から抽出した１．５μｇ当量の総ＲＮＡから、ＲｉｖｅｒｔＡｉｄ Ｆｉｒｓｔ Ｓｔｒａｎｄ ｃＤＮＡ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ Ｋｉｔ（Ｔｈｅｒｍｏ ＳＣＩＥＮＴＩＦＩＣ社）を用いて、相補的ＤＮＡ（ｃＤＮＡ）合成と逆転写反応を行った。【０１０１】
合成したｃＤＮＡは、ＲＴ−ＰＣＲ法により、プライマーはＴａｑｍａｎＧｅｎｅ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  Ａｓｓａｙ（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ社）を用いて、７５００リアルタイムＰＣＲ Ｓｙｓｔｅｍ（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ社製）により、各サンプルのターゲット遺伝子であるロリクリン（Ｌｏｒｉｃｒｉｎ）(Ａｓｓａｙ  ＩＤ： Ｍｍ０１９６２６５０＿ｓ１)、トランスグルタミナーゼ３（Ｔｒａｎｓｇｌｕｔａｍｉｎａｓｅ  ３）(Ａｓｓａｙ  ＩＤ：Ｍｍ００４３６９９９＿ｍ１)、トランスグルタミナーゼ１（Ｔｒａｎｓｇｌｕｔａｍｉｎａｓｅ  １）(Ａｓｓａｙ  ＩＤ： Ｍｍ００４９８３７５＿ｍ１)、および、インボルクリン（Ｉｎｖｏｌｃｒｉｎ）(Ｍｍ００５１５２１９＿ｓ１)のｍＲＮＡ発現量の測定を行った。【０１０２】
同時に、内部標準として、グリセルアルデヒド−３−リン酸デヒドロゲナーゼ（ｇｌｙｃｅｒａｌｄｅｈｙｄｅ−３−ｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ（ＧＡＰＤＨ））(Ａｓｓａｙ  ＩＤ： Ｍｍ９９９９９９１５＿ｇ１)のｍＲＮＡ発現量の測定をした。【０１０３】
定量化はΔΔＣｔ法にて行い、各群の皮膚サンプルのターゲット遺伝子発現量を対照０日目群のターゲット遺伝子発現量に対する、各群のターゲット遺伝子発現量の比率を相対発現量として算出した。【０１０４】
具体的には、下記のような計算式を使用して、相対発現量を算出した。
ΔＣｔ＝（各個体サンプルのターゲット遺伝子のＣｔ値）―（各個体サンプルのＧＡＰＤＨ遺伝子のＣｔ値）
ΔΔＣｔ＝（各個体サンプルのターゲット遺伝子のΔＣｔ値）―（対照０日目群のΔＣｔ平均値）
遺伝子発現量＝２−ΔΔＣｔ
相対発現量＝（各個体サンプルのターゲット遺伝子の２−ΔΔＣｔ）／（対照０日目群の２−ΔΔＣｔ平均値）
【０１０５】
（３）試験結果
ロリクリン遺伝子とトランスグルタミナーゼ３遺伝子の発現量により、角化肥厚膜の形成の促進や構造の強化に関連した遺伝子の発現の変化を評価した。【０１０６】
ここで対照０、１、２日目群に比べて、スフィンゴミエリン摂取０、１、２日目群において、ロリクリン遺伝子の発現量が高値であれば、ロリクリンの発現の低下が抑制されたことを意味する。また、対照０、１、２日目群に比べて、スフィンゴミエリン摂取０、１、２日目群において、トランスグルタミナーゼ３遺伝子の発現量が高値であれば、トランスグルタミナーゼ３遺伝子の発現の上昇が促進されたことを意味する。【０１０７】
一方、トランスグルタミナーゼ１遺伝子の発現量は、対照０、１、２日目群に比べて、スフィンゴミエリン摂取０、１、２日目群において、トランスグルタミナーゼ１遺伝子の発現量が低値であれば、トランスグルタミナーゼ１遺伝子の発現の上昇が抑制されたことを意味する。また、対照０、１、２日目群に比べて、スフィンゴミエリン摂取０、１、２日目群において、インボルクリン遺伝子の発現量が低値であれば、インボルクリン遺伝子の発現の上昇が抑制されたことを意味する。【０１０８】
結果は、図２および３に示されたとおりであった。【０１０９】
図２（Ａ）から分かるとおり、対照１日目群（紫外線の照射１日後）に比べて、スフィンゴミエリン摂取１日目群において、ロリクリン遺伝子の発現量は高値であった。
図２（Ｂ）から分かるとおり、対照１日目群（紫外線の照射１日後）と  対照２日目群（紫外線の照射２日後）に比べて、スフィンゴミエリン群摂取１日目群と  スフィンゴミエリン群摂取２日目群において、トランスグルタミナーゼ３遺伝子の発現量は高値であった。【０１１０】
図３（Ａ）から分かるとおり、対照１・２・３日目群（control群）（紫外線の照射１・２・３日後）に比べて、スフィンゴミエリン摂取１・２・３日目群において、それぞれトランスグルタミナーゼ１遺伝子の発現量は低値であった。
図３（Ｂ）から分かるとおり、対照１・２・３日目群（ＳＭ群）（紫外線の照射１・２・３日後）に比べて、スフィンゴミエリン摂取１・２・３日目群において、それぞれインボルクリン遺伝子の発現量は低値であった。【０１１１】
これらの結果から、スフィンゴミエリンを経口摂取することにより、紫外線照射によるロリクリン遺伝子の発現の低下が抑制されると共に、トランスグルタミナーゼ３遺伝子の発現の上昇が促進され、角化肥厚膜の形成の促進や構造の強化がなされることが示唆された。【０１１２】
また、スフィンゴミエリンを経口摂取することにより、トランスグルタミナーゼ１遺伝子やインボルクリン遺伝子の発現の上昇は促進されなかったことから、スフィンゴミエリンの経口摂取が、角化肥厚膜の形成の促進や構造の強化に関連した特異的な遺伝子（ここではロリクリン遺伝子やトランスグルタミナーゼ３遺伝子）の発現促進に特異的に寄与することが示唆された。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【国際調査報告】
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