(57)【要約】【課題】うなぎの非可食部分（主に頭部）から安価に高効率でコラーゲン及びヒト型セラミド成分を含んだ粉末を製造すること。【解決手段】（１）うなぎ頭部をジェット水流にて洗浄する工程；（２）うなぎ頭部を水中にて加熱すると共に粉砕する工程；（３）前記（２）の工程の温度より冷却した後、酵素を添加し酵素反応させる工程；（４）前記（３）の工程の冷却温度よりさらに加熱して酵素反応を停止させる工程；（５）前記（４）で得られた反応物をフィルターでろ過してろ液と固形物を分離する工程；（６）前記（５）で得られたろ液を遠心分離器にかけて分離し、コラーゲン及びセラミド成分を含んだ組成物を回収する工程；を有する、うなぎ由来のコラーゲン及びヒト型セラミド成分を含んだ組成物の製造方法。【選択図】図１
2015118695.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（１）うなぎ頭部をジェット水流にて洗浄する工程；
（２）うなぎ頭部を水中にて加熱すると共に粉砕する工程；
（３）前記（２）の工程の温度より冷却した後、酵素を添加し酵素反応させる工程；
（４）前記（３）の工程の冷却温度よりさらに加熱して酵素反応を停止させる工程；
（５）前記（４）で得られた反応物をフィルターでろ過してろ液と固形物を分離する工程；
（６）前記（５）で得られたろ液を遠心分離器にかけて分離し、コラーゲン及びセラミド成分を含んだ組成物を回収する工程；
を有する、うなぎ由来のコラーゲン及びヒト型セラミド成分を含んだ組成物の製造方法。
【請求項２】
含有されるコラーゲン又はセラミドの合計量のうち、分子量分布において分子量１０００以上の物質が５０％以上であることを特徴とする、請求項１に記載のうなぎ由来のコラーゲン及びヒト型セラミド成分を含んだ組成物の製造方法。
【請求項３】
前記組成物にデキストリンを添加するとともにスプレードライヤ装置にて粉末化することを特徴とする、請求項１又は２に記載の、うなぎ由来のコラーゲン及びヒト型セラミド成分を含んだ組成物の製造方法。
【請求項４】
請求項１〜３何れかの製造方法を用いて製造された、うなぎ由来のコラーゲン及びヒト型セラミド成分を含んだ粉末。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、うなぎ由来のコラーゲン及びヒト型セラミド成分を含んだ組成物、粉末及びその製造方法に関するもの
である。
【背景技術】
【０００２】
近年、食用生物一個体のうち食用に具せず廃棄していた部分に含まれるサプリメントなどに利用できる有用な化合物を探索して、実用化につなげる試みが注目されている。
中でも、うなぎの頭部は、非可食部分として食用に供されることがなく大量の廃棄物になっていた。
一方、セラミドは、ヒトにおいて皮膚の角質層に存在し適度な水分を含有して皮膚に柔軟性を持たせる保湿機能や、体内の水分保持機能、外部からの異物侵入阻止機能などを有することが知られている。
コラーゲンは、保湿効果が高いタンパク質として知られている。コラーゲン分子は3残基ごとに繰り返すグリシン以外の残基がすべて分子表面に露出しており周囲に多くの水分子を保持できる。
セラミドは、牛由来のものが調整されていたが、近年ＢＳＥなどの問題により、他の原料から調整する研究が進められている。例えば、植物由来のセラミドなどが提案されている。
また、従来廃棄されていたアコヤガイ等の軟体部からスフィンゴ脂質を収率よく製造する方法が提案されている（特許文献１）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】特許第３４０８９５８号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
しかし、植物由来のセラミドは、抽出、生成に手間とコストがかかる。
また、特許文献１に記載のスフィンゴ脂質の製造方法は、腹足類、斧足類、頭足類のいずれかに属する水圏生物の１ 種以上の軟体部を有機溶媒で抽出し、クロマトグラフィー処理し、有機溶媒によって分画してスフィンゴ脂質画分を採取する方法であるので、極めて時間がかかる。
コラーゲンは従来肉又は魚由来のものが知られているが、コラーゲン自体の分子量が大きいことより、コラーゲン単独でサプリメント或いは化粧品に含有させた場合の保湿等の効果を疑問視する声もある。
本発明は、うなぎの非可食部分、すなわち主に頭部より、安価に高効率でコラーゲン及びセラミド成分を含んだ組成物や粉末を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明は以下の特徴を有する。
［１］うなぎ由来のコラーゲン及びヒト型セラミド成分を含んだ組成物の製造方法において、
（１）うなぎ頭部をジェット水流にて洗浄する工程；
（２）うなぎ頭部を水中にて加熱すると共に粉砕する工程；
（３）前記（２）の工程の温度より冷却した後、酵素を添加し酵素反応させる工程；
（４）前記（３）の工程の冷却温度よりさらに加熱して酵素反応を停止させる工程；
（５）前記（４）で得られた反応物をフィルターでろ過してろ液と固形物を分離する工程；
（６）前記（５）で得られたろ液を遠心分離器にかけて分離し、コラーゲン及びセラミド成分を含んだ組成物を回収する工程；
を有する、うなぎ由来のコラーゲン及びヒト型セラミド成分を含んだ組成物の製造方法。
［２］含有されるコラーゲン又はセラミドの合計量のうち、分子量分布において分子量１０００以上の物質が５０％以上であることを特徴とする、［１］に記載のうなぎ由来のコラーゲン及びヒト型セラミド成分を含んだ組成物の製造方法。
［３］前記組成物にデキストリンを添加するとともにスプレードライヤ装置にて粉末化することを特徴とする、［１］又は［２］に記載の、うなぎ由来のコラーゲン及びヒト型セラミド成分を含んだ組成物の製造方法。
［４］［１］〜［３］何れかの製造方法を用いて製造された、うなぎ由来のコラーゲン及びヒト型セラミド成分を含んだ粉末。
【発明の効果】
【０００６】
本発明によれば、うなぎの頭部より、安価に高効率でコラーゲン及びセラミド成分を含んだ組成物、粉末を提供することが可能である。
【図面の簡単な説明】
【０００７】
【図１】本発明の実施例のうなぎ由来のコラーゲン及びセラミド成分を含んだ粉末の製造方法を示すフローチャートである。
【図２】セラミドの化学構造（矢印はタンデム質量分析の際の開裂部位を示す）である。
【図３】試料から抽出したセラミドの質量分析結果を示すグラフである。
【図４】セラミドの分子種組成（組織グラム当たりの含量）を示すグラフである。
【図５】Ｓ１，Ｓ２試料ＧａｌＣｅｒのマススペクトルを示すグラフである。
【図６】Ｓ１，Ｓ２試料に含まれるＨｅｘＣｅｒの分子種組成を示すグラフである。
【図７】Ｓ１，Ｓ２試料に含まれるスフィンゴミエリンのマススペクトル示すグラフである。
【図８】コラーゲンを含むことを示す試料分析結果である。
【図９】試料に含まれるコラーゲン及びセラミドのうち、分子量の大きいもの（例えば１０００以上）が５０％以上であることを示す試料分析結果である。
【図１０】図９及び図１１の試料分析方法を示す図である。
【図１１】試料に含まれるコラーゲン及びセラミドのうち、分子量の大きいもの（例えば１０００以上）が５０％以上であることを示す資料試料分析結果である。
【発明を実施するための形態】
【０００８】
以下、本発明の実施形態を詳細に説明する。
本発明の工程を有するうなぎ由来のコラーゲン及びセラミド成分を含んだ組成物は、以下の行程を有して製造される。
（１）うなぎ頭部をジェット水流にて洗浄する工程；
（２）うなぎ頭部を水中にて加熱すると共に粉砕する工程；
（３）前記（２）の工程の温度より冷却した後、酵素を添加し酵素反応させる工程；
（４）前記（３）の工程の冷却温度よりさらに加熱して酵素反応を停止させる工程；
（５）前記（４）で得られた反応物をフィルターでろ過してろ液と固形物を分離する工程；
（６）前記（５）で得られたろ液を遠心分離器にかけて分離し、コラーゲン及びセラミド成分を含んだ組成物を回収する。
また、この組成物にデキストリンを添加するとともにスプレードライヤ装置にて粉末化してコラーゲン及びセラミド成分を含んだ粉末を製造することもできる。
【０００９】
本発明において、原料とするうなぎは、一般的に食用に供されるうなぎであり、うなぎ科 Anguillidae はうなぎ属 Anguilla に属する種類を使用することができる。
例えば、オオうなぎ、ヨーロッパうなぎ、アメリカうなぎを使用することができる。
また、その他、上記の種類には属さないが、一般的にうなぎと呼ばれている種類、例えば、フウセンうなぎ、デンキうなぎ、タうなぎ、ヤツメうなぎ、ヌタうなぎ等を使用することも可能である。
【００１０】
本発明は、上記のうなぎにおいてその頭部を使用する。
本発明においては、従来廃棄されていた頭部を用いて、高効率でコラーゲン及びセラミド成分を含んだ組成物を製造する。
例えば、うなぎの蒲焼きを調理する際には、非可食部分である頭部は通常廃棄処分される。
上記頭部は、調理過程で食用に供される身の部分を取り除いたものであるが、当然、骨部分や頭部に身が付いた状態のものでも差し支えない。
また、これに限定されるものではなく、例えば、内臓、鱗、鰭、皮、血液、等が含まれていても構わない。
【００１１】
＜頭部の前処理＞
以下、図１を参照して、本発明のコラーゲン及びセラミド成分を含む組成物の製造方法を述べる。
なお、うなぎ頭部が有する臭気成分を除去するため、
予め作製した食塩水（例えば１〜１０％程度の濃度）に浸漬処理し、アンモニアやトリメチルアミン等を食塩水中に溶出させることも好ましい。
本実施形態においては、このような食塩水中に浸漬処理したうなぎ頭部にジェット水流を噴射して、うなぎ頭部外表面に付着しているよごれや雑菌を除去する。
ジェット水流とは、水流の圧力を上げて排出する水流の状態をいい、水流を勢いよくうなぎ頭部に吹き付けることをいう。
【００１２】
次に、この洗浄したうなぎ頭部を、水とともにタンクに投入して加熱する。
加える水の量は、例えば、投入するうなぎ頭部質量の２〜４倍程度とすることが好ましい。
例えば、うなぎの頭部２００ｋｇに、水８００ｋｇを加えてタンクに投入して加熱し、粉砕する。
上記加熱・粉砕処理は、うなぎ頭部を軟化させ、次工程である酵素反応を容易にすることを目的とするものである。
【００１３】
上記タンクに投入する段階においては、うなぎ頭部は、生の状態でも良いが、冷凍状態であっても構わない。
うなぎ頭部を水中で加熱するにあたって、加熱手段としては煮沸等の一般的な加熱手段で良い。
本実施形態において、うなぎ頭部が冷凍されている場合には、蒸気加熱（スチーム加熱）を行えば、急速解凍によりうなぎ頭部の変質を抑えることができるため好ましい。
うなぎ頭部が冷凍状態の場合、この段階における加熱温度及び加熱時間は、うなぎ頭部が解凍できれば特に限定されない。
例えば、８０〜１００℃で３０〜１２０分間加熱した場合、全体的に解凍状態となるので好ましい。
うなぎ頭部が冷凍状態でない場合でも、同様に８０〜１００℃で３０〜１２０分間程度加熱処理することで粉砕が容易になるので好ましい。
１００℃以上、あるいは１２０分間以上の加熱処理を施した場合、含有されるコラーゲン及びセラミドが変性する可能性があるため好ましくない。
【００１４】
次に、上記うなぎ頭部は、加熱されたお湯の中で粉砕される。
粉砕の手段としては、通常使用される手段を使用することができる。
例えば、ボールミル、エッジミル、ジェットミル等を使用することができる。
この段階で原料を大まかに粉砕しておくことにより、次工程の酵素反応において反応時間を短縮することが可能となる。
粉砕は２段階に分けて行っても良い。
例えば、第１粉砕処理として、汎用のミキサーを用いて粗粉砕（粒径１〜２ｍｍ程度）を行い、続いて第２粉砕処理として、専用の粉砕機（例えば、オリエント粉砕機株式会社製を用いて更に細かい微粉砕（粒径２００μｍ以下）を行うこととしても良い。
【００１５】
その後、粉砕したうなぎ頭部に酵素を添加して、酵素反応によって溶解する。
溶解に使用する酵素としては、通常使用されるタンパク質を分解するための酵素（ペプチド結合加水分解酵素）であれば特に限定されず、例えば、プロテアーゼを含む酵素が挙げられる。
本実施形態において、プロテアーゼを含む酵素は、動物系たんぱく質を分解する酵素であり、プロテアーゼ類を含む酵素であれば特に制限はない。
プロテアーゼとしては、例えば、パパイン、ブロメライン、ファイシン、エンドプロティーゼ、エンドペプチダーゼなどが挙げられる。
【００１６】
酵素反応においては、粉砕したうなぎ頭部の温度を、使用する酵素の種類に適した温度に調整する必要がある。
例えば、３０℃〜６５℃等の温度において、使用する酵素の適した温度に制御した状態で、所定の時間（例えば３０〜９０分間）維持し、うなぎ頭部の溶解反応を進行させる。
この酵素反応においては、最適なＰＨに調整されていることが好ましいが、本実施形態においては、例えばｐＨ６前後に調整することが好ましい。
【００１７】
次いで、酵素反応を停止させるために、タンク内の溶解物を加熱する。
加熱温度及び加熱時間は、使用した酵素が失活する温度及び時間を適宜選択することができるが、例えば、９０℃以上で２０〜４０分間（本実施例では９０℃×３０分）維持することにより、酵素を失活させて、酵素反応を停止させる。
また、９０℃以上で２０〜４０分間維持することにより、うなぎ血液中に含まれるサルモネラ菌を死滅させることもできる。
【００１８】
続いて、酵素反応で得られた反応物（溶解されてどろどろ状態の液体）をフィルターでろ過し、上記酵素反応で未溶解の固形物とろ液とを分離する。
この工程において、分離された固形物は主にうなぎ骨部分である。
未溶解の骨部分は、必要に応じて後の工程で乾燥粉砕してカルシウム原料とすることも可能である。
【００１９】
次に、ろ液から脂質を分離して水溶液（組成物）を得る。
脂質の分離方法としては、例えば、遠心分離器を用いることができる。
あるいは、ろ液を静置して、比重により上層に分離した脂質と、下層に沈殿する水溶液（組成物）を分離回収することも可能である。
得られた水溶液（組成物）は、そのまま保存する、濃縮する、乾燥して粉末にする、等が可能である。
【００２０】
次に、この水溶液（組成物）を用いて、うなぎ由来のコラーゲン及びセラミド成分を含んだ粉末の製造方法を説明する。
得られたうなぎ由来のコラーゲン及びセラミド成分を含んだ水溶液の粘度を調整し粉末化するために、デキストリンを添加する。
デキストリンは通常液体の粉末化に際して使用される量を添加すれば良い。
例えば、質量比で、組成物：デキストリン＝１：２〜３となるように添加することが可能である。
その後、スプレードライ装置などを使用して組成物を粉末化することにより、本実施形態のうなぎ由来のコラーゲン及びセラミド成分を含んだ粉末を得ることができる。
【実施例】
【００２１】
次に、本発明の実施例を図面を用いて詳細に説明する。
図１は、本発明の実施例のうなぎ由来のコラーゲン及びセラミド成分を含んだ粉末の製造方法を示すフローチャートである。
図１に示すように、
まず、タンク中に冷凍状態のうなぎの頭（２００ｋｇ）＋水（８００ｋｇ）、合計１０００ｋｇを投入し、９０℃で４０分、タンクのお湯の中で回転羽根によりうなぎの頭を粉砕
した。
粉砕は、最初は周速５０ｍ／秒で１０秒間粗粉砕し、その後２００メッシュ程度となるまで粉砕を継続した。
次に、粉砕した液体全体を５５℃に冷却し、分解酵素としてプロテアーゼを添加し、２０分間攪拌しながら酵素反応を進行させた。
その後、溶解物を９０℃に再加熱して３０分維持し、酵素反応を停止した。
この段階で、うなぎ頭部はほぼ溶解し、どろどろの状態となった。
次いで、このどろどろの状態の溶解物をフィルターでろ過し、溶解しなかった骨などの固形物を排除した。
得られたろ液を遠心分離器にかけ、脂質を分離して水溶液（組成物）を得た。
上記水溶液（組成物）にデキストリン２０ｋｇを添加し混合した。
その後、スプレードライヤ装置で粉末化（ＳＤ粉末）し、うなぎ頭由来のコラーゲン及びセラミド成分を含む粉末を得た。得られた粉末量は約２８ｋｇであった。【００２２】
次に、本発明において得られたうなぎ由来のコラーゲン及びセラミド成分の存在を以下のようにして検証した。
得られた試料（スプレードライヤ装置によって粉末化した粉末）に含まれているセラミド成分（セラミド、モノヘキソシルセラミド）を以下のようにして調査した。
図２はセラミドの化学構造（矢印はタンデム質量分析の際の開裂部位を示す）である。
図２に示すように、
セラミドは、スフィンゴシン（Ｓ）と脂肪酸（Ｎ）あるいはα−ヒドロキシ脂肪酸（Ａ）が縮合した構造を持つ。
ヒトを含め、動物組織では、前者（スフィンゴシン（Ｓ））が最も量が多くどの臓器にもあるセラミド（Ｃｅｒ）であり、Ｃｅｒ（ＮＳ）と略して示す。
後者（脂肪酸（Ｎ）あるいはα−ヒドロキシ脂肪酸（Ａ））も、脳、皮膚、腎臓などには多く存在しＣｅｒ（ＡＳ）と略して示す。【００２３】
＜試料からスフィンゴ脂質抽出処理（前処理）＞
試料を２つに分けて、それぞれ２０７ｍｇずつをガラス試験管に採取し、Ｓ１，Ｓ２とした。
まず、抽出効率のばらつきなどを除き定量をより正確に行うために、
試料Ｓ１，Ｓ２に、内部標準脂質（セラミドＣｅｒ（ＮＳ）１８：１、０．２４ｎｍｏｌ、グリコシルセラミドＧｌｃＣｅｒ（ＮＳ）１２：０、０．１２ｎｍｏｌ）を添加し、その試料を脂質抽出処理をした。
スフィンゴ脂質に注目して分析をするため、弱アルカリ加水分解処理でリン脂質を除去した。【００２４】
図３は試料から抽出したセラミドの質量分析結果を示すグラフである。
＊印のピークは未同定の混入物か環境由来物質を示し、
ＩＳは内部標準物質を示す。
図４はセラミドの分子種組成（組織グラム当たりの含量）を示すグラフである。
横軸はセラミドを構成するスフィンゴシンと脂肪酸の炭素数の和を示し、縦軸はＳ１とＳ２の測定の平均値を示す。
図３に示すように、
Ｓ１とＳ２中のセラミドのマススペクトルは、質量分析で構造を調べると、ヒト型のスフィンゴシンが主であるＣｅｒ（ＮＳ）型が存在し、量的には長さ（炭素数）１６のものが多いが、ヒトで最も多い１８のものもかなりの量存在していた。【００２５】
図２のように、セラミドはスフィンゴシンと脂肪酸が縮合した構造を持つ。
ＭＳ／ＭＳ分析の結果から、
Ｃ３２とＣ３４のピークは、脂肪酸の鎖長が１６でスフィンゴシンの鎖長がそれぞれ１６と１８のセラミドに対応し、
Ｃ４０とＣ４２のピークは、鎖長が２４で二重結合を１個もつ脂肪酸とスフィンゴシンの鎖長がそれぞれ１６と１８のセラミドに対応していた。
うなぎセラミドにほとんど含まれないＣｅｒ（ＮＳ）１８：１の０．２４ｎｍｏｌを、
試料に添加して（図３のＩＳ）、セラミド組成と含量を算出した（図４）。
これらの結果から、総炭素数が同一であるがスフィンゴシン骨格の鎖長が異なる各分子種の異性体の微量成分を無視すると、
鎖長１６と１８のスフィンゴシン骨格を持つセラミドの概略の比率は３：２程度になる。【００２６】
＜試料Ｓ１，Ｓ２のヘキソシルセラミドの比較＞
次に、ヘキソシルセラミド（ＨｅｘＣｅｒ）の組成と含量について調査した。
ＨｅｘＣｅｒに結合した単糖は一般にグルコースかガラクトースであり、その順相クロマトグラフィーの溶出位置から含有する単糖を推定できる。
グルコシルセラミド（ＧｌｃＣｅｒ）のうち、
ＧｌｃＣｅｒ（ＮＳ）は、添加した内部標準ＧｌｃＣｅｒ（ＮＳ）１２：０より早く溶出され、
ガラクトシルセラミドＧａｌＣｅｒは、内部標準ＧｌｃＣｅｒ（ＮＳ）１２：０と同じか遅れて溶出される。
これに準拠すると、Ｓ１，Ｓ２試料ＨｅｘＣｅｒでは両者が検出されているが、ＧａｌＣｅｒが圧倒的に多い。【００２７】
図２に示すように、セラミドに結合している脂肪酸には、
水酸基（−ＯＨ）を含有しないもの（Ｎ）と、それが２（α）位に結合するもの（Ａ）とがある。【００２８】
図５は、Ｓ１，Ｓ２試料ＧａｌＣｅｒのマススペクトルを示すグラフである。
図５の左側はＧａｌＣｅｒ（ＮＳ）の、右側はＧａｌＣｅｒ（ＡＳ）のスペクトルであり、それぞれ、試料Ｓ１，Ｓ２から抽出した脂質のデータを示す。
また、ピーク上部のラベル上段は、
ＧａｌＣｅｒに含まれる総炭素数：スフィンゴ塩基としてスフィンゴシンを含有するとしたときの脂肪酸に含まれる二重結合数を表し、
ラベル下段は、ピークのｍ／ｚ値を示す。
＊印は、ＧａｌＣｅｒ（ＡＳ）の溶出位置にピークテーリングのために混在するＧａｌＣｅｒ（ＮＳ）のピークを示す。
図５に示すように、Ｓ１，Ｓ２試料には、ＨｅｘＣｅｒ（ＮＳ）とＨｅｘＣｅｒ（ＡＳ）がともに存在することが分かる。
タンデム質量分析で得られたプロダクトイオンスペクトルにおいて、
ＨｅｘＣｅｒの特徴は、鎖長１８のヒト型スフィンゴシンを含有するＣ４８，Ｃ５０，Ｃ５２（それぞれ脂肪酸の鎖長は２４，２６，２８）といった長鎖側の分子種組成比がセラミドよりも高いことである。【００２９】
図６は試料Ｓ１，Ｓ２に含まれるＨｅｘＣｅｒの分子種組成を示すグラフである。
横軸は、総炭素数：スフィンゴ塩基としてスフィンゴシンを含有するとしたときの脂肪酸に含まれる二重結合数を表す。
縦軸は、試料（Ｓ１，Ｓ２）１ｇあたりのＨｅｘＣｅｒ分子種に含まれるセラミド部分の質量（μｇ）を示す。
図６に、加水分解前に添加した天然にはほとんど存在しないＧｌｃＣｅｒ（ＮＳ）１２：０（ｍ／ｚ＝６４４）を内部標準として、
ＨｅｘＣｅｒの分子種組成を検討した結果を示している。【００３０】
ＧａｌＣｅｒ（ＮＳ）では、セラミドでもっとも含量の高いＣ４０：１（鎖長１６のスフィンゴシンと脂肪酸Ｃ２４：１を主に含む）に対応するＣ４６（糖の炭素数６だけ大きい）とそれより鎖長が２だけ長いＣ４８：１（鎖長１８のスフィンゴシンと脂肪酸Ｃ２４：１を主に含む）が多い特徴がある（後述する図７（ａ）及び図５）。【００３１】
なお、このＧａｌＣｅｒ（ＮＳ）Ｃ４８は、ヒトのＧａｌＣｅｒ（ＮＳ）の一般的な主成分と構造が同一であることが分かった。
ＧａｌＣｅｒ（ＡＳ）は、主にＣ４４からＣ５０の長鎖分子種で構成されており、
セラミド分子種のうち最も含量の高いＣ４０を骨格として持つＣ４６分子種の含量が最も高いことが分かった。
以上の結果から、ＧａｌＣｅｒでは長鎖の分子種が多く、ヒト型セ鎖長１８のセラミドは、セラミド自身よりも多く含まれていることが分かった。
ＧｌｃＣｅｒはＧａｌＣｅｒと比べ微量成分であり、分子種分布は類似する傾向にあった。【００３２】
＜試料（Ｓ１，Ｓ２）に含まれるセラミド、ＨｅｘＣｅｒの含量＞
表１に、図４と図６データから、試料１ｇ当たりに含まれるセラミドの質量（μｇ）を算出した結果を示す。
表１から分かるように、ＨｅｘＣｅｒはセラミドより約４倍セラミドを多く含有することが分かった。【００３３】
【表１】
2015118695.tif 000003
＜考察＞
以上の結果から、うなぎ頭部から製造された粉末には、試料１ｇあたり６μｇ程度のセラミド成分を含有することが分かった。
図７は、試料に含まれるスフィンゴミエリンのマススペクトル示すグラフであり、ラベルは総炭素数（対応するセラミドより５だけ大きい）：スフィンゴ塩基としてスフィンゴシンを含有するとしたときの脂肪酸に含まれる二重結合数を表す。  
セラミド、ＨｅｘＣｅｒよりも多量成分スフィンゴミエリンも試料に含まれるが、
スフィンゴミエリンは今回使用したタンデム質量分析法では開裂し難く、
現在のところ、スフィンゴミエリンのセラミド骨格の構造の情報を十分に得られていないが、
図７に示すように、セラミドと非常に類似したピーク強度分布を示し、Ｃ４５：１トラベルしたピークはセラミドのＣ４０に対応する。
スフィンゴミエリンに由来するセラミドを含めると、さらに多量のセラミドが試料に存在することになる。
鎖長１８と１６の総スフィンゴシンの含量の正確な比率は、スフィンゴ脂質を分解して得たスフィンゴシンを定量することにより可能である。  【００３４】
今回の調査で、試料中のセラミドのスフィンゴシン骨格には、鎖長１８のヒト型が約４０％含まれていることが分かった。
セラミド等のスフィンゴ脂質はサプリメントとして注目されているが、ヒト型のセラミドを含む素材は乏しい。
最近の研究では、非ヒト型セラミドは消化され小腸上皮に吸収はされるが、
吸収された非ヒト型スフィンゴイド塩基は、特異的トランスポータにより管腔側に排泄されてしまうという報告もあり、ヒト型セラミドを含有する素材の開発は重要である。
本発明のうなぎ由来のセラミド成分を含む粉末はその意味でも工業上の利用可能性が極めて高い。【００３５】
＜試料（スプレードライヤ装置によって粉末化した粉末）の分析＞
また、スプレードライヤ装置によって粉末化した粉末の分析を、外部機関に依頼した結果を以下に示す。
図８は、財団法人浜松薬剤師会の検査結果である。
この試験検査成績書によると、試料１００ｇ中に１９６０ｍｇのヒドロキシプロリンが含まれているという結果が報告されている。
ヒドロキシプロリンはコラーゲンの主要な成分であり、プロリンとともにコラーゲンの安定性を担っている。
コラーゲンはアミノ酸が鎖状につながった分子量約１０万のポリペプチド分子が3本集まったらせん構造を有しており，これが繊維状あるいは膜状の構造体を形成するものである。
現状では，特定のたんぱく質を定量することが困難であることに加えて，コラーゲンは起源などにより構造が異なるため，コラーゲンそのものを測定することはできない。
一方で，コラーゲンを構成するアミノ酸の種類と数は極めて特徴的で，その特徴の一つとして，一般的なタンパク質を構成する20種類の基本アミノ酸には含まれないヒドロキシプロリンやヒドロキシリジンといったアミノ酸を含む。
これらのアミノ酸はコラーゲンとその近縁の限られたタンパク質にしか含まれない特殊なアミノ酸であり，特にヒドロキシプロリンはコラーゲン中の全アミノ酸の約10％を占めている。このため，ヒドロキシプロリンがコラーゲン量の目安と考えることができるものである。
本願においては、上記試料の分析結果においてヒドロキシプロリンが含まれているという結果となっており、このことから，コラーゲンの存在を確認することができるものである。【００３６】
また、図９〜図１１は、同じ試料に対する一般財団法人日本食品分析センターの検査結果である。
この分析試験成績書によると、試料を分子量範囲に分けてそれぞれの分子量分布を測定した結果が報告されている（図９）。
すなわち、図１０に示すように、予め想定した６種類の標準溶液を分析試料に加えて、高速液体クロマトグラフによる溶出時間を測定した（図１１）。
この結果から、試料には、分子量の大きいもの（例えば１０００以上）が５７％あり、分子量の小さいもの（例えば１０００未満）が４３％あることがわかる。
分子量の大きいものは、図８の結果からコラーゲンであると推察され、
分子量の小さいものは、図３〜図７の結果からセラミドであると推察される。
よって、本発明のうなぎ由来の粉末には、コラーゲン及びヒト型セラミドが含まれていることが分かる。【００３７】
本発明のうなぎ由来の粉末には、同じうなぎ由来のコラーゲン及びヒト型セラミドが両方含まれており、サプリメントや化粧品に使用することができる。本発明のうなぎ由来の粉末を使用した場合、コラーゲン及びヒト型セラミドを同時に摂取することができ好ましい。
【産業上の利用可能性】
【００３８】
うなぎ頭部及び骨部の処理は廃棄物処理としても重要な手段であり、本発明は、未使用資源の有効利用にもなる重要な技術である。本発明はまた、安価に高効率でコラーゲン及びセラミド成分を含んだ粉末を製造すること、及び得られたコラーゲン及びセラミド成分を含んだ粉末を有効に使用する方法を提供するものであり、産業上の利用可能性が高い。
【図５】
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【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【国際調査報告】
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