(57)【要約】【解決課題】  新規なＰＩＭ−３阻害剤、新規ながん治療薬、特に膵臓癌の治療薬を提供すること。【解決手段】  以下の一般式（Ｉ）： 2015122504.tif 000055で表される化合物又はその薬理学的に許容される塩、水和物、若しくは溶媒和物を含むＰＩＭ−３キナーゼ阻害剤。【選択図】なし
2015122504.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の一般式（Ｉ）： 
2015122504.tif 000047
（式中、
Ｒ１は、水素原子、又はピリジン環上に置換する１個ないし３個の同一又は異なる置換基を示し；
Ｒ２は、水素原子、ハロゲン、水酸基、Ｃ１−６アルコキシ基、ハロゲン置換Ｃ１−６アルコキシ基、アリール置換Ｃ１−６アルコキシ基、アリールオキシ置換Ｃ１−６アルコキシ基、ヒドロキシ置換Ｃ１−６アルコキシ基、又はＣ１−６アルコキシ置換Ｃ１−６アルコキシ基を示し；
Ｒ３は、水素原子、又はベンゼン環上に置換する１個ないし２個の同一又は異なる置換基を示し；
Ｘは、メチレン基又はエチレン基であり、該メチレン基又はエチレン基は、１個ないし４個のＣ１−４アルキル基又はＣ１−４アルキレン基で置換されていてもよく；
Ｙは、置換又は無置換のヘテロ環基を示す）
で表される化合物又はその薬理学的に許容される塩、水和物、若しくは溶媒和物を含むＰＩＭ−３キナーゼ阻害剤。
【請求項２】
Ｙが、置換又は無置換のピペリジン環基、ピペラジン環基、モルホリン環基又はピロリジン環基である、請求項１に記載のＰＩＭ−３キナーゼ阻害剤。
【請求項３】
Ｙが、ハロゲン、水酸基、Ｃ１−６アルキル基、アミノ基及びアミノ置換Ｃ１−６アルキル基からなる群から選択される少なくとも１つの置換基で置換されたヘテロ環基であり、ここで、該へテロ環基が２以上のＣ１−６アルキル基で置換されている場合は、これらアルキル基の一部は互いに結合して環を形成してもよい、請求項１又は２に記載のＰＩＭ−３キナーゼ阻害剤。
【請求項４】
Ｒ２は、水素原子、ハロゲン、水酸基、Ｃ１−６アルコキシ基、ハロゲン置換Ｃ１−６アルコキシ基、ヒドロキシ置換Ｃ１−６アルコキシ基又はＣ１−６アルコキシ置換Ｃ１−６アルコキシ基から選択される、請求項１〜３のいずれか１項に記載のＰＩＭ−３キナーゼ阻害剤。
【請求項５】
以下の一般式（Ｉ）： 
2015122504.tif 000048
（式中、
Ｒ１は、水素原子、又はピリジン環上に置換する１個ないし３個の同一又は異なる置換基を示し；
Ｒ２は、水素原子、ハロゲン、水酸基、Ｃ１−６アルコキシ基、ハロゲン置換Ｃ１−６アルコキシ基、アリール置換Ｃ１−６アルコキシ基、アリールオキシ置換Ｃ１−６アルコキシ基、ヒドロキシ置換Ｃ１−６アルコキシ基、又はＣ１−６アルコキシ置換Ｃ１−６アルコキシ基を示し；
Ｒ３は、水素原子、又はベンゼン環上に置換する１個ないし２個の同一又は異なる置換基を示し；
Ｘは、メチレン基又はエチレン基であり、該メチレン基又はエチレン基は、１個ないし４個のＣ１−４アルキル基又はＣ１−４アルキレン基で置換されていてもよく；
Ｙは、置換又は無置換のヘテロ環基を示す）
で表される化合物又はその薬理学的に許容される塩、水和物、若しくは溶媒和物を含む、内胚葉由来臓器癌を治療又は予防するための医薬組成物。
【請求項６】
前記内胚葉由来臓器癌が膵臓癌である、請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項７】
以下の一般式（Ｉ）： 
2015122504.tif 000049
（式中、
Ｒ１は、水素原子、又はピリジン環上に置換する１個ないし３個の同一又は異なる置換基を示し；
Ｒ２は、水素原子、ハロゲン、水酸基、Ｃ１−６アルコキシ基、ハロゲン置換Ｃ１−６アルコキシ基、アリール置換Ｃ１−６アルコキシ基、アリールオキシ置換Ｃ１−６アルコキシ基、ヒドロキシ置換Ｃ１−６アルコキシ基、又はＣ１−６アルコキシ置換Ｃ１−６アルコキシ基を示し； 
Ｒ３は、水素原子、又はベンゼン環上に置換する１個ないし２個の同一又は異なる置換基を示し；
Ｘは、メチレン基又はエチレン基であり、該メチレン基又はエチレン基は、１個ないし４個のＣ１−４アルキル基又はＣ１−４アルキレン基で置換されていてもよく；
Ｙは、置換又は無置換のヘテロ環基を示す）
で表される化合物又はその塩（但し、以下の化合物は除く）。
2015122504.tif 000050
【請求項８】
Ｙが、置換又は無置換のピペリジン環基、ピペラジン環基、モルホリン環基又はピロリジン環基である、請求項７に記載の化合物。
【請求項９】
Ｙが、ハロゲン、水酸基、Ｃ１−６アルキル基、アミノ基及びアミノ置換Ｃ１−６アルキル基からなる群から選択される少なくとも１つの置換基で置換されたヘテロ環基であり、ここで、該へテロ環基が２以上のＣ１−６アルキル基で置換されている場合は、これらアルキル基の一部は互いに結合して環を形成してもよい、請求項７又は８に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｙが、以下の式（１）、（２）又は（３）：
2015122504.tif 000051
（式中、Ｒ４は、水素原子、又は六員環上に置換する１個ないし９個の同一又は異なる置換基を示し；Ｚは炭素、又は窒素を示す）
2015122504.tif 000052
（式中、Ｒ５は、水素原子、又はピロリジン環上に置換する１個ないし８個の同一又は異なる置換基を示す）
2015122504.tif 000053
（３）
（式中、Ｒ６は、水素原子、又はピペリジン環上に置換する１個ないし１０個の同一又は異なる置換基を示す）
で表される、請求項７に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｒ４は、水素原子、ハロゲン、Ｃ１−６アルキル基、アミノ基及びアミノ置換Ｃ１−６アルキル基からなる群から選択され、ここで、Ｒ４が２以上のＣ１−６アルキル基である場合は、これらアルキル基の一部は互いに結合して環を形成してもよい、請求項１０に記載の化合物。
【請求項１２】
Ｒ５は、水素原子、ハロゲン、Ｃ１−６アルキル基、アミノ基及びアミノ置換Ｃ１−６アルキル基からなる群から選択され、ここで、Ｒ５が２以上のＣ１−６アルキル基である場合は、これらアルキル基の一部は互いに結合して環を形成してもよく、但し、Ｒ５の少なくとも１つはアミノ基及びアミノ置換Ｃ１−６アルキル基である、請求項１０に記載の化合物。
【請求項１３】
Ｒ６は、水素原子、ハロゲン、Ｃ１−６アルキル基、アミノ基及びアミノ置換Ｃ１−６アルキル基からなる群から選択され、ここで、Ｒ６が２以上のＣ１−６アルキル基である場合は、これらアルキル基の一部は互いに結合して環を形成してもよい、請求項１０に記載の化合物。
【請求項１４】
Ｒ２は、水素原子、ハロゲン、水酸基、Ｃ１−６アルコキシ基、ハロゲン置換Ｃ１−６アルコキシ基、ヒドロキシ置換Ｃ１−６アルコキシ基又はＣ１−６アルコキシ置換Ｃ１−６アルコキシ基から選択される、請求項７〜１３のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１５】
膵臓癌を治療又は予防するための医薬を製造するための、以下の一般式（Ｉ）で表される化合物の使用。 
2015122504.tif 000054
（式中、
Ｒ１は、水素原子、又はピリジン環上に置換する１個ないし３個の同一又は異なる置換基を示し；
Ｒ２は、水素原子、ハロゲン、水酸基、Ｃ１−６アルコキシ基、ハロゲン置換Ｃ１−６アルコキシ基、アリール置換Ｃ１−６アルコキシ基、アリールオキシ置換Ｃ１−６アルコキシ基、ヒドロキシ置換Ｃ１−６アルコキシ基、又はＣ１−６アルコキシ置換Ｃ１−６アルコキシ基を示し； 
Ｒ３は、水素原子、又はベンゼン環上に置換する１個ないし２個の同一又は異なる置換基を示し；
Ｘは、メチレン基又はエチレン基であり、該メチレン基又はエチレン基は、１個ないし４個のＣ１−４アルキル基又はＣ１−４アルキレン基で置換されていてもよく；
Ｙは、置換又は無置換のヘテロ環基を示す。）
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はＰＩＭ−３キナーゼに対して強力な阻害作用を有するピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン化合物又は薬学的に許容されるその塩を有効成分として含む抗がん剤に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
ＰＩＭ−３は、ＰＩＭキナーゼファミリーの一つである、セリン／スレオニンキナーゼである。ＰＩＭキナーゼファミリーはＰＩＭ−１、−２、及び−３からなり、アポトーシスや細胞周期制御に関連するタンパク質をリン酸化し、細胞のがん化やがん細胞の増殖を促進する（非特許文献１）。ＰＩＭ−３に関しても、アポトーシス促進性タンパク質であるＢａｄをリン酸化し細胞のアポトーシスを抑制することが報告されている（非特許文献２）。ＰＩＭ−１および−２はある種の白血病と前立腺癌で発現が亢進するが、ＰＩＭ−３は膵臓がん、肝臓がん、大腸がん、胃がんといった内胚葉由来臓器がんでその発現が亢進することが特徴である（非特許文献２）。これらの報告例から、ＰＩＭ−３阻害剤はがん治療薬、特に内胚葉由来臓器がん治療薬として、有用性が期待される。【０００３】
近年いくつかのＰＩＭ−３阻害剤が報告されており（非特許文献１）、例えばフェナントレン化合物があげられる（特許文献１、非特許文献３）。その他、顕著なＰＩＭ−３阻害作用を有する化合物としてはアストラゼネカ社のＡＺＤ−１２０８があげられる（特許文献２、非特許文献４）。このようにＰＩＭ−３阻害剤の開発が進められているものの、未だ上市されたものはなく、優れた活性を有する新規薬剤の開発が求められている。【０００４】
ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン化合物のＰＩＭ−１阻害活性は国際公開２０１１／１３６３１９に記載されているが、ＰＩＭ−３阻害活性については報告されていない。またがん細胞増殖阻害活性については白血病由来のがん細胞に対する増殖阻害活性が報告されているが、膵臓がんなどの固形癌に対する作用については報告されていない（特許文献３）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】国際公開２０１２／１６４９６９
【特許文献２】国際公開２０１０／００１１６９
【特許文献３】国際公開２０１１／１３６３１９
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Medicinal Research Reviews, 34, pp. 136-159, 2014.
【非特許文献２】Cancer Science, 102, pp. 1437-1442, 2011.
【非特許文献３】Cancer Science, 103, pp. 107-115, 2012.
【非特許文献４】Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 22, pp. 4599-4604, 2012.
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は、新規なＰＩＭ−３阻害剤、新規な内胚葉由来臓器癌の治療薬、特に膵臓癌の治療薬を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは、上記の課題を解決するため鋭意検討したところ、ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン化合物の中でも特定の構造を有する化合物がＰＩＭ−３キナーゼに対して強力な阻害作用を有することを見出し、本発明を完成した。【０００９】
即ち、本発明は、
［１］以下の一般式（Ｉ）： 
2015122504.tif 000003
（式中、
Ｒ１は、水素原子、又はピリジン環上に置換する１個ないし３個の同一又は異なる置換基を示し；
Ｒ２は、水素原子、ハロゲン、水酸基、Ｃ１−６アルコキシ基、ハロゲン置換Ｃ１−６アルコキシ基、アリール置換Ｃ１−６アルコキシ基、アリールオキシ置換Ｃ１−６アルコキシ基、ヒドロキシ置換Ｃ１−６アルコキシ基、又はＣ１−６アルコキシ置換Ｃ１−６アルコキシ基を示し；
Ｒ３は、水素原子、又はベンゼン環上に置換する１個ないし２個の同一又は異なる置換基を示し；
Ｘは、メチレン基又はエチレン基であり、該メチレン基又はエチレン基は、１個ないし４個のＣ１−４アルキル基又はＣ１−４アルキレン基で置換されていてもよく；
Ｙは、置換又は無置換のヘテロ環基を示す）
で表される化合物又はその薬理学的に許容される塩、水和物、若しくは溶媒和物を含むＰＩＭ−３キナーゼ阻害剤。
［２］Ｙが、置換又は無置換のピペリジン環基、ピペラジン環基、モルホリン環基又はピロリジン環基である、［１］に記載のＰＩＭ−３キナーゼ阻害剤。
［３］Ｙが、ハロゲン、水酸基、Ｃ１−６アルキル基、アミノ基及びアミノ置換Ｃ１−６アルキル基からなる群から選択される少なくとも１つの置換基で置換されたヘテロ環基であり、ここで、該へテロ環基が２以上のＣ１−６アルキル基で置換されている場合は、これらアルキル基の一部は互いに結合して環を形成してもよい、［１］又は［２］に記載のＰＩＭ−３キナーゼ阻害剤。
［４］Ｒ２は、水素原子、ハロゲン、水酸基、Ｃ１−６アルコキシ基、ヒドロキシ置換Ｃ１−６アルコキシ基又はＣ１−６アルコキシ置換Ｃ１−６アルコキシ基から選択される、［１］〜［３］のいずれか１項に記載のＰＩＭ−３キナーゼ阻害剤。
［４］以下の一般式（Ｉ）： 
2015122504.tif 000004
（式中、
Ｒ１は、水素原子、又はピリジン環上に置換する１個ないし３個の同一又は異なる置換基を示し；
Ｒ２は、水素原子、ハロゲン、水酸基、Ｃ１−６アルコキシ基、アリール置換Ｃ１−６アルコキシ基、アリールオキシ置換Ｃ１−６アルコキシ基、ヒドロキシ置換Ｃ１−６アルコキシ基、又はＣ１−６アルコキシ置換Ｃ１−６アルコキシ基を示し；
Ｒ３は、水素原子、又はベンゼン環上に置換する１個ないし２個の同一又は異なる置換基を示し；
Ｘは、メチレン基又はエチレン基であり、該メチレン基又はエチレン基は、１個ないし４個のＣ１−４アルキル基又はＣ１−４アルキレン基で置換されていてもよく；
Ｙは、置換又は無置換のヘテロ環基を示す）
で表される化合物又はその薬理学的に許容される塩、水和物、若しくは溶媒和物を含む、内胚葉由来臓器癌を治療又は予防するための医薬組成物。
［６］前記内胚葉由来臓器癌が膵臓癌である、［５］に記載の医薬組成物。
［７］以下の一般式（Ｉ）： 
2015122504.tif 000005
（式中、
Ｒ１は、水素原子、又はピリジン環上に置換する１個ないし３個の同一又は異なる置換基を示し；
Ｒ２は、水素原子、ハロゲン、水酸基、Ｃ１−６アルコキシ基、ハロゲン置換Ｃ１−６アルコキシ基、アリール置換Ｃ１−６アルコキシ基、アリールオキシ置換Ｃ１−６アルコキシ基、ヒドロキシ置換Ｃ１−６アルコキシ基、又はＣ１−６アルコキシ置換Ｃ１−６アルコキシ基を示し； 
Ｒ３は、水素原子、又はベンゼン環上に置換する１個ないし２個の同一又は異なる置換基を示し；
Ｘは、メチレン基又はエチレン基であり、該メチレン基又はエチレン基は、１個ないし４個のＣ１−４アルキル基又はＣ１−４アルキレン基で置換されていてもよく；
Ｙは、置換又は無置換のヘテロ環基を示す）
で表される化合物又はその塩（但し、以下の化合物は除く）。
2015122504.tif 000006
［８］Ｙが、置換又は無置換のピペリジン環基、ピペラジン環基、モルホリン環基又はピロリジン環基である、［７］に記載の化合物。
［９］Ｙが、ハロゲン、水酸基、Ｃ１−６アルキル基、アミノ基及びアミノ置換Ｃ１−６アルキル基からなる群から選択される少なくとも１つの置換基で置換されたヘテロ環基であり、ここで、該へテロ環基が２以上のＣ１−６アルキル基で置換されている場合は、これらアルキル基の一部は互いに結合して環を形成してもよい、［７］又は［８］に記載の化合物。
［１０］Ｙが、以下の式（１）、（２）又は（３）：
2015122504.tif 000007
（式中、Ｒ４は、水素原子、又は六員環上に置換する１個ないし９個の同一又は異なる置換基を示し；Ｚは炭素、又は窒素を示す）
2015122504.tif 000008
（式中、Ｒ５は、水素原子、又はピロリジン環上に置換する１個ないし８個の同一又は異なる置換基を示す）
2015122504.tif 000009
（３）
（式中、Ｒ６は、水素原子、又はピペリジン環上に置換する１個ないし１０個の同一又は異なる置換基を示す）
で表される、［７］に記載の化合物。
［１１］Ｒ４は、水素原子、ハロゲン、Ｃ１−６アルキル基、アミノ基及びアミノ置換Ｃ１−６アルキル基からなる群から選択され、ここで、Ｒ４が２以上のＣ１−６アルキル基である場合は、これらアルキル基の一部は互いに結合して環を形成してもよい、［１０］に記載の化合物。
［１２］Ｒ５は、水素原子、ハロゲン、Ｃ１−６アルキル基、アミノ基及びアミノ置換Ｃ１−６アルキル基からなる群から選択され、ここで、Ｒ５が２以上のＣ１−６アルキル基である場合は、これらアルキル基の一部は互いに結合して環を形成してもよく、但し、Ｒ５の少なくとも１つはアミノ基及びアミノ置換Ｃ１−６アルキル基である、［１０］に記載の化合物。
［１３］Ｒ６は、水素原子、ハロゲン、Ｃ１−６アルキル基、アミノ基及びアミノ置換Ｃ１−６アルキル基からなる群から選択され、ここで、Ｒ６が２以上のＣ１−６アルキル基である場合は、これらアルキル基の一部は互いに結合して環を形成してもよい、［１０］に記載の化合物。
［１４］Ｒ２は、水素原子、ハロゲン、水酸基、Ｃ１−６アルコキシ基、ハロゲン置換Ｃ１−６アルコキシ基、ヒドロキシ置換Ｃ１−６アルコキシ基又はＣ１−６アルコキシ置換Ｃ１−６アルコキシ基から選択される、［７］〜［１３］のいずれか１項に記載の化合物。
［１５］膵臓癌を治療又は予防するための医薬を製造するための、以下の一般式（Ｉ）で表される化合物の使用。 
2015122504.tif 000010
（式中、
Ｒ１は、水素原子、又はピリジン環上に置換する１個ないし３個の同一又は異なる置換基を示し；
Ｒ２は、水素原子、ハロゲン、水酸基、Ｃ１−６アルコキシ基、ハロゲン置換Ｃ１−６アルコキシ基、アリール置換Ｃ１−６アルコキシ基、アリールオキシ置換Ｃ１−６アルコキシ基、ヒドロキシ置換Ｃ１−６アルコキシ基、又はＣ１−６アルコキシ置換Ｃ１−６アルコキシ基を示し； 
Ｒ３は、水素原子、又はベンゼン環上に置換する１個ないし２個の同一又は異なる置換基を示し；
Ｘは、メチレン基又はエチレン基であり、該メチレン基又はエチレン基は、１個ないし４個のＣ１−４アルキル基又はＣ１−４アルキレン基で置換されていてもよく；
Ｙは、置換又は無置換のヘテロ環基を示す。）
を、提供するものである。
【発明の効果】
【００１０】
本発明の化合物群は、ＰＩＭ−３キナーゼに対して強力な阻害作用を有するものであり、膵臓癌細胞の増殖を阻害ないし抑制することが認められた。これにより、本発明の化合物群は、膵臓癌の有効な治療薬となることが期待される。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】本発明の化合物６の動物試験の結果を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
以下、本発明の実施形態について説明する。本発明の範囲はこれらの説明に拘束されることはなく、以下の例示以外についても、本発明の趣旨を損なわない範囲で適宜変更し実施することができる。
【００１３】
１．定義
本明細書中において、「ハロゲン原子」とは、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、又はヨウ素原子を意味する。
【００１４】
本明細書中において、「アルキル」は直鎖状、分枝鎖状、環状、又はそれらの組み合わせからなる脂肪族炭化水素基のいずれであってもよい。アルキル基の炭素数は特に限定されないが、例えば炭素数１〜２０個（Ｃ１〜２０）である。炭素数を指定した場合は、その数の範囲の炭素数を有する「アルキル」を意味する。例えば、Ｃ１〜８アルキルには、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、イソペンチル、ｎｅｏ−ペンチル、ｎ−ヘキシル、イソヘキシル、ｎ−ヘプチル、ｎ−オクチル等が含まれる。本明細書において、アルキル基は任意の置換基を１個以上有していてもよい。該置換基としては、例えば、アルコキシ基、ハロゲン原子、アミノ基、モノ若しくはジ置換アミノ基、置換シリル基、又はアシルなどを挙げることができるが、これらに限定されることはない。アルキル基が２個以上の置換基を有する場合には、それらは同一でも異なっていてもよい。アルキル部分を含む他の置換基（例えばアルコシ基、アリールアルキル基など）のアルキル部分についても同様である。
【００１５】
本明細書中において、「アルケニル」は、少なくとも１つの炭素−炭素二重結合を有している直鎖又は分枝鎖の炭化水素基をいう。例えば、ビニル、アリル、１−プロペニル、イソプロペニル、１−ブテニル、２−ブテニル、３−ブテニル、１，３−ブタンジエニル、１−ペンテニル、２−ペンテニル、３−ペンテニル、４−ペンテニル、１，３−ペンタンジエニル、１−ヘキセニル、２−ヘキセニル、３−ヘキセニル、４−ヘキセニル、５−ヘキセニル及び１，４−ヘキサンジエニル）を含む。二重結合についてシス配座またはトランス配座のいずれであってもよい。
【００１６】
本明細書中において、「アリール」は単環式又は縮合多環式の芳香族炭化水素基のいずれであってもよく、環構成原子としてヘテロ原子（例えば、酸素原子、窒素原子、又は硫黄原子など）を１個以上含む芳香族複素環であってもよい。この場合、これを「ヘテロアリール」または「ヘテロ芳香族」と呼ぶ場合もある。アリールが単環および縮合環のいずれである場合も、すべての可能な位置で結合しうる。単環式のアリールの非限定的な例としては、フェニル基、チエニル基（２−又は３−チエニル基）、ピリジル基、フリル基、チアゾリル基、オキサゾリル基、ピラゾリル基、２−ピラジニル基、ピリミジニル基、ピロリル基、イミダゾリル基、ピリダジニル基、３−イソチアゾリル基、３−イソオキサゾリル基、１，２，４−オキサジアゾール−５−イル基又は１，２，４−オキサジアゾール−３−イル基等が挙げられる。縮合多環式のアリールの非限定的な例としては、１−ナフチル基、２−ナフチル基、１−インデニル基、２−インデニル基、２，３−ジヒドロインデン−１−イル基、２，３−ジヒドロインデン−２−イル基、２−アンスリル基、インダゾリル基、キノリル基、イソキノリル基、１，２−ジヒドロイソキノリル基、１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリル基、インドリル基、イソインドリル基、フタラジニル基、キノキサリニル基、ベンゾフラニル基、２，３−ジヒドロベンゾフラン−１−イル基、２，３−ジヒドロベンゾフラン−２−イル基、２，３−ジヒドロベンゾチオフェン−１−イル基、２，３−ジヒドロベンゾチオフェン−２−イル基、ベンゾチアゾリル基、ベンズイミダゾリル基、フルオレニル基又はチオキサンテニル基等が挙げられる。本明細書において、アリール基はその環上に任意の置換基を１個以上有していてもよい。該置換基としては、例えば、アルコキシ基、ハロゲン原子、アミノ基、モノ若しくはジ置換アミノ基、置換シリル基、又はアシルなどを挙げることができるが、これらに限定されることはない。アリール基が２個以上の置換基を有する場合には、それらは同一でも異なっていてもよい。アリール部分を含む他の置換基（例えばアリール置換アルコキシ基やアリールオキシ置換アルコキシ基など）のアリール部分についても同様である。
【００１７】
本明細書中において、「アリールアルキル」は、上記アリールで置換されたアルキルを表す。アリールアルキルは、任意の置換基を１個以上有していてもよい。該置換基としては、例えば、アルコキシ基、ハロゲン原子、アミノ基、モノ若しくはジ置換アミノ基、置換シリル基、又はアシル基などを挙げることができるが、これらに限定されることはない。アシル基が２個以上の置換基を有する場合には、それらは同一でも異なっていてもよい。アリールアルキルの非限定的な例としては、ベンジル基、２−チエニルメチル基、３−チエニルメチル基、２−ピリジルメチル基、３−ピリジルメチル基、４−ピリジルメチル基、２−フリルメチル基、３−フリルメチル基、２−チアゾリルメチル基、４−チアゾリルメチル基、５−チアゾリルメチル基、２−オキサゾリルメチル基、４−オキサゾリルメチル基、５−オキサゾリルメチル基、１−ピラゾリルメチル基、３−ピラゾリルメチル基、４−ピラゾリルメチル基、２−ピラジニルメチル基、２−ピリミジニルメチル基、４−ピリミジニルメチル基、５−ピリミジニルメチル基、１−ピロリルメチル基、２−ピロリルメチル基、３−ピロリルメチル基、１−イミダゾリルメチル基、２−イミダゾリルメチル基、４−イミダゾリルメチル基、３−ピリダジニルメチル基、４−ピリダジニルメチル基、３−イソチアゾリルメチル基、３−イソオキサゾリルメチル基、１，２，４−オキサジアゾール−５−イルメチル基又は１，２，４−オキサジアゾール−３−イルメチル基等が挙げられる。
【００１８】
同様に、本明細書中において、「アリールアルケニル」は、上記アリールで置換されたアルケニルを表す。
【００１９】
本明細書中において、「アルコキシ基」とは、前記アルキル基が酸素原子に結合した構造であり、例えば直鎖状、分枝状、環状又はそれらの組み合わせである飽和アルコキシ基が挙げられる。例えば、メトキシ基、エトキシ基、ｎ−プロポキシ基、イソプロポキシ基、シクロプロポキシ基、ｎ−ブトキシ基、イソブトキシ基、ｓ−ブトキシ基、ｔ−ブトキシ基、シクロブトキシ基、シクロプロピルメトキシ基、ｎ−ペンチルオキシ基、シクロペンチルオキシ基、シクロプロピルエチルオキシ基、シクロブチルメチルオキシ基、ｎ−ヘキシルオキシ基、シクロヘキシルオキシ基、シクロプロピルプロピルオキシ基、シクロブチルエチルオキシ基又はシクロペンチルメチルオキシ基等が好適な例として挙げられる。
【００２０】
本明細書中において、「アリールオキシ基」とは、前記アリール基が酸素原子を介して結合する基である。アリールオキシ基としては、例えば、フェノキシ基、２−チエニルオキシ基、３−チエニルオキシ基、２−ピリジルオキシ基、３−ピリジルオキシ基、４−ピリジルオキシ基、２−フリルオキシ基、３−フリルオキシ基、２−チアゾリルオキシ基、４−チアゾリルオキシ基、５−チアゾリルオキシ基、２−オキサゾリルオキシ基、４−オキサゾリルオキシ基、５−オキサゾリルオキシ基、１−ピラゾリルオキシ基、３−ピラゾリルオキシ基、４−ピラゾリルオキシ基、２−ピラジニルオキシ基、２−ピリミジニルオキシ基、４−ピリミジニルオキシ基、５−ピリミジニルオキシ基、１−ピロリルオキシ基、２−ピロリルオキシ基、３−ピロリルオキシ基、１−イミダゾリルオキシ基、２−イミダゾリルオキシ基、４−イミダゾリルオキシ基、３−ピリダジニルオキシ基、４−ピリダジニルオキシ基、３−イソチアゾリルオキシ基、３−イソオキサゾリルオキシ基、１，２，４−オキサジアゾール−５−イルオキシ基、又は１，２，４−オキサジアゾール−３−イルオキシ基等が例示される。
【００２１】
本明細書中において、「アルキレン」とは、直鎖状または分枝状の炭化水素からなる二価の基であり、−ＣｎＨ２ｎ−もしくは＝ＣｎＨ２ｎで表される。アルキレンとしては、例えば、メチレン（二重結合を有するものをメチリデンとも言う）、１−メチルメチレン、１，１−ジメチルメチレン、エチレン（二重結合を有するものをエチリデンとも言う）、１−メチルエチレン、１−エチルエチレン、１，１−ジメチルエチレン、１，２−ジメチルエチレン、１，１−ジエチルエチレン、１，２−ジエチルエチレン、１−エチル−２−メチルエチレン、トリメチレン、１−メチルトリメチレン、２−メチルトリメチレン、１，１−ジメチルトリメチレン、１，２−ジメチルトリメチレン、２，２−ジメチルトリメチレン、１−エチルトリメチレン、２−エチルトリメチレン、１，１−ジエチルトリメチレン、１，２−ジエチルトリメチレン、２，２−ジエチルトリメチレン、２−エチル−２−メチルトリメチレン、テトラメチレン、１−メチルテトラメチレン、２−メチルテトラメチレン、１，１−ジメチルテトラメチレン、１，２−ジメチルテトラメチレン、２，２−ジメチルテトラメチレン、２，２−ジ−ｎ−プロピルトリメチレン等が挙げられる。
【００２２】
本明細書中において、「アルケニレン」とは、直鎖状または分枝状の少なくとも１つの炭素−炭素二重結合を有している不飽和炭化水素からなる二価の基であり、例えば、エテニレン、１−メチルエテニレン、１−エチルエテニレン、１，２−ジメチルエテニレン、１，２−ジエチルエテニレン、１−エチル−２−メチルエテニレン、プロペニレン、１−メチル−２−プロペニレン、２−メチル−２−プロペニレン、１，１−ジメチル−２−プロペニレン、１，２−ジメチル−２−プロペニレン、１−エチル−２−プロペニレン、２−エチル−２−プロペニレン、１，１−ジエチル−２−プロペニレン、１，２−ジエチル−２−プロペニレン、１−ブテニレン、２−ブテニレン、１−メチル−２−ブテニレン、２−メチル−２−ブテニレン、１，１−ジメチル−２−ブテニレン、１，２−ジメチル−２−ブテニレン等が挙げられる。
【００２３】
本明細書中において、「アリーレン」及び「アリールアルキレン」は、それぞれ上記「アリール」及び「アリールアルキル」に基づく二価の基を意味する。同様に、「オキシアルキレン」及び「アリーレンオキシ」は、それぞれ上記「アルコキシ」及び「アリールオキシ」に基づく二価の基を意味する。
【００２４】
本明細書中において、「アルキルアミノ」及び「アリールアミノ」は、−ＮＨ２基の水素原子が上記アルキル又はアリールの１又は２で置換されたアミノ基を意味する。例えば、メチルアミノ、ジメチルアミノ、エチルアミノ、ジエチルアミノ、エチルメチルアミノ、ベンジルアミノ等が挙げられる。同様に、「アルキルチオ」及び「アリールチオ」は、−ＳＨ基の水素原子が上記アルキル又はアリールで置換された基を意味する。例えば、メチルチオ、エチルチオ、ベンジルチオ等が挙げられる。
【００２５】
本明細書中において、「環構造」という用語は、二つの置換基の組み合わせによって形成される場合、複素環または炭素環基を意味し、そのような基は飽和、不飽和、または芳香族であることができる。例えば、シクロアルキル、フェニル、ナフチル、モルホリニル、ピペルジニル、イミダゾリル、ピロリジニル、およびピリジルなどが挙げられる。本明細書中において、置換基は、別の置換基と環構造を形成することができ、そのような置換基同士が結合する場合、当業者であれば、特定の置換、例えば水素への結合が形成されることを理解できる。従って、特定の置換基が共に環構造を形成すると記載されている場合、当業者であれば、当該環構造は通常の化学反応によって形成することができ、また容易に生成することを理解できる。かかる環構造およびそれらの形成過程はいずれも、当業者の認識範囲内である。
【００２６】
２．本発明の化合物
本発明の１つの態様は、以下の一般式（Ｉ）： 
2015122504.tif 000011
で表される化合物又はその塩である（但し、以下の化合物は除く）。
2015122504.tif 000012
【００２７】
式（Ｉ）において、Ｒ１は、水素原子、又はピリジン環上に置換する１個ないし３個の置換基を示す。該置換基は、好ましくは、ハロゲン原子、Ｃ１−６アルキル基、Ｃ２−６アルケニル基、Ｃ２−６アルキニル基、ハロゲン置換Ｃ１−６アルキル基、ヒドロキシ置換Ｃ１−６アルキル基、アミノ置換Ｃ１−６アルキル基、水酸基、Ｃ１−６アルコキシ基、ハロゲン置換Ｃ１−６アルコキシ基、Ｃ１−６アルコキシカルボニル基、アミノ基、ニトロ基、アリール基、アラルキルオキシ基、ヘテロ環基、及びヘテロ環基置換Ｃ１−６アルコキシ基からなる群から選択される。
ピリジン環上に存在するＲ１の各々は同一でも異なっていてもよい。
【００２８】
式（Ｉ）において、Ｒ２は、水素原子、ハロゲン、水酸基、Ｃ１−６アルコキシ基、ハロゲン置換Ｃ１−６アルコキシ基、アリール置換Ｃ１−６アルコキシ基、アリールオキシ置換Ｃ１−６アルコキシ基、ヒドロキシ置換Ｃ１−６アルコキシ基、又はＣ１−６アルコキシ置換Ｃ１−６アルコキシ基を示す。
【００２９】
式（Ｉ）において、Ｒ３は、水素原子、又はベンゼン環上に置換する１個ないし２個の置換基を示す。該置換基は、好ましくは、ハロゲン原子、Ｃ１−６アルキル基、Ｃ１−６アルコキシ基、アリール基、アミノ基、水酸基又はヘテロ環基から選択される。
ベンゼン環上に存在するＲ３の各々は同一でも異なっていてもよい
【００３０】
式（Ｉ）において、Ｘは、メチレン基又はエチレン基を示す。該メチレン基又はエチレン基は、１個ないし４個のＣ１−４アルキル基又はＣ１−４アルキレン基（＝ＣｎＨ２ｎで表される（ｎは１〜４の整数））で置換されていてもよい。Ｃ１−４アルキル基又はＣ１−４アルキレン基として、好ましくは、メチル基、メチレン基（＝ＣＨ２基）である。
【００３１】
式（Ｉ）において、Ｙは、置換又は無置換のヘテロ環基を示す。置換又は無置換のヘテロ環基としては、好ましくは、置換又は無置換のピペリジン環基、ピペラジン環基、モルホリン環基又はピロリジン環基である。
【００３２】
本発明の１つの好ましい態様において、式（Ｉ）におけるＹは、ハロゲン、Ｃ１−６アルキル基、アミノ基及びアミノ置換Ｃ１−６アルキル基からなる群から選択される少なくとも１つの置換基で置換されたヘテロ環基であり、ここで、該へテロ環基が２以上のＣ１−６アルキル基で置換されている場合は、これらアルキル基の一部（好ましくは、２つのＣ１−６アルキル基）は互いに結合して環を形成してもよい。
【００３３】
本発明の１つの側面において、式（Ｉ）におけるＹは、以下の式（１）、（２）又は（３）：
2015122504.tif 000013
（式中、Ｒ４は、水素原子、又は六員環上に置換する１個ないし８個（Ｚが窒素の場合）又は１個ないし９個（Ｚが炭素の場合）の同一又は異なる置換基を示し；Ｚは炭素、又は窒素を示す）
2015122504.tif 000014
（式中、Ｒ５は、水素原子、又はピロリジン環上に置換する１個ないし８個の同一又は異なる置換基を示す）
2015122504.tif 000015
（３）
（式中、Ｒ６は、水素原子、又はピペリジン環上に置換する１個ないし１０個の同一又は異なる置換基を示す）
で表される。
【００３４】
また、本発明の１つの好ましい側面において、式（１）におけるＲ４は、水素原子、ハロゲン、Ｃ１−６アルキル基、アミノ基及びアミノ置換Ｃ１−６アルキル基からなる群から選択され、ここで、Ｒ４が２以上のＣ１−６アルキル基である場合は、これらアルキル基の一部（好ましくは、２つのＣ１−６アルキル基）は互いに結合して環を形成してもよい。Ｒ４として、好ましくは、水素原子、ハロゲン又はＣ１−６アルキル基から選択され、特に好ましくは、水素原子、メチル基、フッ素である。
本発明の１つの好ましい実施形態において、Ｚが炭素で、Ｒ４のうち８つは水素原子であり、１つはフッ素である。
【００３５】
また、本発明の１つの好ましい側面において、式（２）におけるＲ５は、水素原子、ハロゲン、Ｃ１−６アルキル基、アミノ基及びアミノ置換Ｃ１−６アルキル基からなる群から選択され、ここで、Ｒ５が２以上のＣ１−６アルキル基である場合は、これらアルキル基の一部（好ましくは、２つのＣ１−６アルキル基）は互いに結合して環を形成してもよい。好ましくは、Ｒ５の少なくとも１つはアミノ基又はアミノ置換Ｃ１−６アルキル基から選択される。
本発明の１つの好ましい実施形態において、Ｒ５の少なくとも１つはアミノ基又はアミノ置換Ｃ１−６アルキル基であり、残りは水素原子である。
【００３６】
また、本発明の１つの好ましい側面において、式（３）におけるＲ６は、水素原子、ハロゲン、Ｃ１−６アルキル基、アミノ基及びアミノ置換Ｃ１−６アルキル基からなる群から選択され、ここで、Ｒ６が２以上のＣ１−６アルキル基である場合は、これらアルキル基の一部（好ましくは、２つのＣ１−６アルキル基）は互いに結合して環を形成してもよい。好ましくは、Ｒ６の少なくとも１つはアミノ基又はアミノ置換Ｃ１−６アルキル基から選択される。
本発明の１つの好ましい実施形態において、Ｒ６の少なくとも１つはアミノ基又はアミノ置換Ｃ１−６アルキル基であり、残りは水素原子である。
【００３７】
本発明の化合物は、特に断らない限り、その互変異性体、幾何異性体（例えば、Ｅ体、Ｚ体など）、鏡像異性体等の立体異性体も含まれる。すなわち、式（１）で表される化合物中に、１個又は２個以上の不斉炭素が含まれる場合、不斉炭素の立体化学については、それぞれ独立して（Ｒ）体又は（Ｓ）体のいずれかをとることができ、該誘導体の鏡像異性体又はジアステレオ異性体などの立体異性体として存在することがある。
【００３８】
式（Ｉ）で表される化合物の非限定的な具体例としては、以下の化合物が挙げられる。
（Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−メトキシ−７−［１−（ピペラジン−１−イル）エチル］ベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（化合物６）
（Ｚ）−６−メトキシ−２−［（６−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−７−（ピペラジン−１−イルメチル）ベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（化合物７）
（Ｒ，Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−メトキシ−７−［（２−メチルピペラジン−１−イル）メチル］ベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（化合物８）
（Ｓ，Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−メトキシ−７−［（２−メチルピペラジン−１−イル）メチル］ベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（化合物９）
（Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−７−［（シス−３，５−ジメチルピペラジン−１−イル）メチル］−６−メトキシベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（化合物１０）
（Ｓ，Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−メトキシ−７−［（３−メチルピペラジン−１−イル）メチル］ベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（化合物１１）
（Ｒ，Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−メトキシ−７−［（３−メチルピペラジン−１−イル）メチル］ベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（化合物１２）
（Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−７−［（シス−２，６−ジメチルピペラジン−１−イル）メチル］−６−メトキシベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（化合物１３）
（Ｓ，Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−７−［（３−アミノピロリジン−１−イル）メチル］−６−メトキシベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（化合物１４）
（Ｒ，Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−７−［（３−アミノピロリジン−１−イル）メチル］−６−メトキシベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（化合物１５）
（Ｚ）−６−メトキシ−２−［（６−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−７−（ピペリジン−４−イルメチル）ベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（化合物１６）
（Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−（ジフルオロメトキシ）−７−（ピペリジン−４−イルメチル）ベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（化合物１７）
（Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−７−［（３−フルオロピペリジン−４−イル）メチル］−６−メトキシベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（シス異性体）（化合物１８）
（Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−７−［（３−フルオロピペリジン−４−イル）メチル］−６−メトキシベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（トランス異性体）（化合物１９）
（Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−（２−メトキシエトキシ）−７−［１−（ピペラジン−１−イル）エチル］ベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（化合物２０）
（Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−（２−ヒドロキシエトキシ）−７−［１−（ピペラジン−１−イル）エチル］ベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（化合物２１）
（Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−エトキシ−７−［１−（ピペラジン−１−イル）エチル］ベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（化合物２２）
（Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−（シクロプロピルメトキシ）−７−［１−（ピペラジン−１−イル）エチル］ベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（化合物２３）
（Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−メトキシ−７−［３−（ピペラジン−１−イル）プロパ−１−エン−２−イル］ベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（化合物２４）
（Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−７−［（３，８−ジアザビシクロ［３.２.１］オクタン−３−イル）メチル］−６−メトキシベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（化合物２５）
（Ｓ，Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−メトキシ−７−｛［３−（メチルアミノ）ピロリジン−１−イル］メチル｝ベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（化合物２６）
（Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−メトキシ−７−［１−（ピペラジン−１−イル）プロパン−２−イル］ベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（化合物２７）
（Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−クロロ−７−（ピペリジン−４−イルメチル）ベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（化合物２８）
（Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−フルオロ−７−（ピペリジン−４−イルメチル）ベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（化合物２９）
（Ｒ，Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−７−｛［２−（アミノメチル）ピロリジン−１−イル］メチル｝−６−メトキシベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（化合物３１）
（Ｓ，Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−７−［（３−アミノピペリジン−１−イル）メチル］−６−メトキシベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン）（化合物３２）
【００３９】
2015122504.tif 000016
2015122504.tif 000017
2015122504.tif 000018
2015122504.tif 000019
【００４０】
３．ＰＩＭ−３キナーゼ阻害剤
本発明のもう１つの態様は、以下の一般式（Ｉ）： 
2015122504.tif 000020
で表される化合物又はその薬理学的に許容される塩、水和物、若しくは溶媒和物を含むＰＩＭ３キナーゼ阻害剤である。
【００４１】
一般式（Ｉ）における、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｘ、Ｙは、上記の本発明の化合物の記載において説明したとおりである。
【００４２】
本発明の１つの好ましい態様において、式（Ｉ）におけるＹは、ハロゲン、Ｃ１−６アルキル基、アミノ基、アミノ置換Ｃ１−６アルキル基で置換されたヘテロ環基であり、ここで、該へテロ環基が２以上のＣ１−６アルキル基で置換されている場合は、これらアルキル基の一部は互いに結合して環を形成してもよい。
【００４３】
また、本発明の１つの側面において、式（Ｉ）におけるＹは、以下の式（１）、（２）又は（３）：
2015122504.tif 000021
2015122504.tif 000022
（３）
【００４４】
式（１）、（２）、（３）における、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６は、上記の本発明の化合物の記載において説明したとおりである。
【００４５】
本発明のＰＩＭ−３キナーゼ阻害剤は、上記式(Ｉ)で表される化合物のみならず、その塩又はそれらの溶媒和物若しくは水和物を含むものであってもよい。塩としては、薬学的に許容される塩であれば特に限定されないが、例えば、塩基付加塩、酸付加塩、アミノ酸塩などを挙げることができる。塩基付加塩としては、例えば、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩などのアルカリ土類金属塩、アンモニウム塩、又はトリエチルアミン塩、ピペリジン塩、モルホリン塩などの有機アミン塩を挙げることができ、酸付加塩としては、例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩などの鉱酸塩；メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、パラトルエンスルホン酸、酢酸、プロピオン酸塩、酒石酸、フマル酸、マレイン酸、リンゴ酸、シュウ酸、コハク酸、クエン酸、安息香酸、マンデル酸、ケイ皮酸、乳酸、グリコール酸、グルクロン酸、アスコルビン酸、ニコチン酸、サリチル酸などの有機酸塩を挙げることができる。アミノ酸塩としてはグリシン塩、アスパラギン酸塩、グルタミン酸塩などを例示することができる。また、アルミニウム塩等の金属塩であってもよい。
【００４６】
溶媒和物を形成する溶媒の種類は特に限定されないが、例えば、エタノール、アセトン、イソプロパノールなどの溶媒を例示することができる。
【００４７】
また、上記式(Ｉ)で表される化合物は、特に断らない限り、その互変異性体、幾何異性体（例えば、Ｅ体、Ｚ体など）、鏡像異性体等の立体異性体も含まれる。すなわち、式（Ｉ）で表される化合物中に、１個又は２個以上の不斉炭素が含まれる場合、不斉炭素の立体化学については、それぞれ独立して（Ｒ）体又は（Ｓ）体のいずれかをとることができ、該誘導体の鏡像異性体又はジアステレオ異性体などの立体異性体として存在することがある。従って、本発明のＰＩＭ−３キナーゼ阻害剤の有効成分としては、純粋な形態の任意の立体異性体、立体異性体の任意の混合物、ラセミ体などを用いることが可能であり、いずれも本発明の範囲に包含される。
【００４８】
本発明は、有効成分として式（Ｉ）で表される化合物又はその薬学上許容される塩、水和物、若しくは溶媒和物を含むＰＩＭ−３キナーゼ阻害剤に加えて、ＰＩＭ−３により発現が亢進する膵臓がん、肝臓がん、大腸がん、胃がんといった内胚葉由来臓器がん、特に膵臓癌を治療又は予防するための医薬組成物にも関する（以下、まとめて「本発明の医薬」という）。
【００４９】
本発明の医薬は、有効成分である一般式（Ｉ）で表される化合物又はその薬学上許容される塩、水和物、若しくは溶媒和物自体を投与してもよいが、一般的には、有効成分である上記物質と１又は２以上の製剤用添加物とを含む医薬組成物の形態で投与することが望ましい。医薬組成物におけるような用語「組成物」は、活性成分と、担体を構成する不活性成分（医薬的に許容される賦形剤）とを含む生成物ばかりでなく、任意の２つ以上の成分の会合、複合体化もしくは凝集の結果として、または１つ以上の成分の解離の結果として、または１つ以上の成分の別のタイプの反応もしくは相互作用の結果として、直接もしくは間接的に生ずる任意の生成物も包含する。
【００５０】
本発明の医薬の有効成分としては、上記化合物の２種以上を組み合わせて用いることができ、或いは、ＰＩＭ−３により発現が亢進する疾患を予防又は治療のための他の既知の有効成分を配合することも可能である。
【００５１】
また、本発明の医薬は、有効成分である一般式（Ｉ）で表される化合物又はその薬学上許容される塩、水和物、若しくは溶媒和物と、既存の抗癌剤と併用した組み合わせ医薬とすることも可能である。既存の抗癌剤としては、当該技術分野において公知のものを用いることができるが、例えば、ゲムシタビン、フルオロウラシル、オキサリプラチン、エルロチニブ等を挙げることができる。
【００５２】
医薬組成物の種類は特に限定されず、剤型としては、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、シロップ剤、懸濁剤、座剤、軟膏、クリーム剤、ゲル剤、貼付剤、吸入剤、注射剤等が挙げられる。これらの製剤は常法に従って調製される。なお、液体製剤にあっては、用時、水又は他の適当な溶媒に溶解又は懸濁する形であってもよい。また錠剤、顆粒剤は周知の方法でコーティングしてもよい。注射剤の場合には、本発明の化合物を水に溶解させて調製されるが、必要に応じて生理食塩水あるいはブドウ糖溶液に溶解させてもよく、また緩衝剤や保存剤を添加してもよい。経口投与用又は非経口投与用の任意の製剤形態で提供される。例えば、顆粒剤、細粒剤、散剤、硬カプセル剤、軟カプセル剤、シロップ剤、乳剤、懸濁剤又は液剤等の形態の経口投与用医薬組成物、静脈内投与用、筋肉内投与用、若しくは皮下投与用などの注射剤、点滴剤、経皮吸収剤、経粘膜吸収剤、点鼻剤、吸入剤、坐剤などの形態の非経口投与用医薬組成物として調製することができる。注射剤や点滴剤などは、凍結乾燥形態などの粉末状の剤形として調製し、用時に生理食塩水などの適宜の水性媒体に溶解して用いることもできる。また、高分子などで被覆した徐放製剤を脳内に直接投与することも可能である。
【００５３】
医薬組成物の製造に用いられる製剤用添加物の種類、有効成分に対する製剤用添加物の割合、又は医薬組成物の製造方法は、組成物の形態に応じて当業者が適宜選択することが可能である。製剤用添加物としては無機又は有機物質あるいは固体又は液体の物質を用いることができ、一般的には、有効成分重量に対して１重量％から９０重量％の間で配合することができる。具体的には、その様な物質の例として乳糖、ブドウ糖、マンニット、デキストリン、シクロデキストリン、デンプン、蔗糖、メタケイ酸アルミン酸マグネシウム、合成ケイ酸アルミニウム、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ヒドロキシプロピルデンプン、カルボキシメチルセルロースカルシウム、イオン交換樹脂、メチルセルロース、ゼラチン、アラビアゴム、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、軽質無水ケイ酸、ステアリン酸マグネシウム、タルク、トラガント、ベントナイト、ビーガム、酸化チタン、ソルビタン脂肪酸エステル、ラウリル硫酸ナトリウム、グリセリン、脂肪酸グリセリンエステル、精製ラノリン、グリセロゼラチン、ポリソルベート、マクロゴール、植物油、ロウ、流動パラフィン、白色ワセリン、フルオロカーボン、非イオン性界面活性剤、プロピレングルコール、水等が挙げられる。
【００５４】
経口投与用の固形製剤を製造するには、有効成分と賦形剤成分例えば乳糖、澱粉、結晶セルロース、乳酸カルシウム、無水ケイ酸などと混合して散剤とするか、さらに必要に応じて白糖、ヒドロキシプロピルセルロース、ポリビニルピロリドンなどの結合剤、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウムなどの崩壊剤などを加えて湿式又は乾式造粒して顆粒剤とする。錠剤を製造するには、これらの散剤及び顆粒剤をそのまま或いはステアリン酸マグネシウム、タルクなどの滑沢剤を加えて打錠すればよい。これらの顆粒又は錠剤はヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、メタクリル酸−メタクリル酸メチルポリマーなどの腸溶剤基剤で被覆して腸溶剤製剤あるいはエチルセルロース、カルナウバロウ、硬化油などで被覆して持続性製剤とすることもできる。また、カプセル剤を製造するには、散剤又は顆粒剤を硬カプセルに充填するか、有効成分をそのまま或いはグリセリン、ポリエチレングリコール、ゴマ油、オリーブ油などに溶解した後ゼラチン膜で被覆し軟カプセルとすることができる。
【００５５】
注射剤を製造するには、有効成分を必要に応じて塩酸、水酸化ナトリウム、乳糖、乳酸、ナトリウム、リン酸一水素ナトリウム、リン酸二水素ナトリウムなどのｐＨ調整剤、塩化ナトリウム、ブドウ糖などの等張化剤と共に注射用蒸留水に溶解し、無菌濾過してアンプルに充填するか、更にマンニトール、デキストリン、シクロデキストリン、ゼラチンなどを加えて真空凍結乾燥し、用事溶解型の注射剤としてもよい。また、有効成分にレチシン、ポリソルベート８０ 、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油などを加えて水中で乳化せしめ注射剤用乳剤とすることもできる。
【００５６】
本発明の医薬の投与量及び投与回数は特に限定されず、治療対象疾患の悪化・進展の防止及び／又は治療の目的、疾患の種類、患者の体重や年齢、疾患の重篤度などの条件に応じて、医師の判断により適宜選択することが可能である。一般的には、経口投与における成人一日あたりの投与量は０．０１〜１０００ｍｇ（有効成分重量）程度であり、一日１回又は数回に分けて、或いは数日ごとに投与することができる。注射剤として用いる場合には、成人に対して一日量０．００１〜１００ｍｇ（有効成分重量）を連続投与又は間欠投与することが望ましい。
【００５７】
一般式（Ｉ）で表される化合物の製造方法は特に限定されないが、一般式（Ｉ）に包含される代表的化合物のうち新規化合物についての合成方法を本明細書の実施例に具体的に示した。当業者は本明細書の実施例及び下記のスキームを参照しつつ、必要に応じて出発原料、反応試薬、反応条件などを適宜改変ないし修飾することにより、一般式（Ｉ）に包含される化合物を製造することができる。
【実施例】
【００５８】
以下、実施例により本発明をさらに詳細に説明するが、本発明はこれらによって限定されるものではない。特に言及する場合を除き、反応は不活性ガス（窒素あるいはアルゴン）雰囲気下で実施した。
また、実施例で示す合成スキーム中、Ｍｅはメチル基、Ｅｔはエチル基、Ｐｒはプロピル基、ｃ−Pｒはシクロプロピル基、Ｂｕはブチル基、Ａｃはアセチル基、Ｂｏｃはｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基、Ｐｈはフェニル基、ＴＦＡはトリフルオロ酢酸、ＴＭＳはトリメチルシリル基、９−ＢＢＮは９−ボラビシクロ［３．３．１］ノナン、ＴＨＦはテトラヒドロフラン、ＤＭＦはジメチルホルムアミド、ＤＭＳＯはジメチルスルホキシド、ＤＩＢＡＬ−Ｈは水素化ジイソブチルアルミニウム、ＤＥＡＤはアゾジカルボン酸ジエチル、ＮＢＳはＮ−ブロモスクシンイミド、ＢＰＯは過酸化ベンゾイル、ｒｔは室温を示す。【００５９】
１．合成
本発明の有効成分である種々の式（Ｉ）の化合物の合成を以下のとおり行った。【００６０】
［合成実施例１］
化合物６（（Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−メトキシ−７−［１−（ピペラジン−１−イル）エチル］ベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン））の合成
以下の合成スキーム１により、化合物６を合成した。【００６１】
スキーム１
2015122504.tif 000023
【００６２】
（ａ）工程１.
公知の文献［ＷＯ２０１１／１３６３１９］に記載の４−［１−（６−メトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル）エチル］ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．１００ｇ、０．２６６ｍｍｏｌ）のメタノール１ｍＬ溶液に、これも［ＷＯ２０１１／１３６３１９］に記載の１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−カルバルデヒド（０．０３９１ｇ、０．２６６ｍｍｏｌ）を加えた。ピペリジン（０．０１８１ｇ、０．２１３ｍｍｏｌ）を加えたのち、６０ｏＣで２時間攪拌し、反応溶液を室温まで冷却した。析出した固体をろ取し、目的とする（Ｚ）−４−（１−｛２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−メトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル｝エチル）ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．０６０２ｇ、４４％）を得た。
1H NMR (300MHz, DMSO-d6) δ 1.34 (s, 9H), 1.55 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 2.36-2.39 (m, 2H), 3.31-3.35 (m, 6H), 3.97 (s, 3H), 4.13 (q, J = 6.6 Hz, 1H), 7.06-7.08 (m, 2H), 7.36 (dd, J = 4.4, 8.0 Hz, 1H), 7.78 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 8.64 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 9.31 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 14.30 (brs, 1H).【００６３】
（ｂ）工程２.
（Ｚ）−４−（１−｛２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−メトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル｝エチル）ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．０４５２ｇ、０．０８９４ｍｍｏｌ）の塩化メチレン２ｍＬ溶液にトリフルオロ酢酸１ｍＬを室温で加え、室温で１２時間攪拌した。溶媒留去後に得られた残渣に飽和炭酸水素ナトリウム溶液を加えて溶液を塩基性にしたのち、クロロホルムで５回抽出した。無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を留去して、（Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−メトキシ−７−［１−（ピペラジン−１−イル）エチル］ベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（０．０１４２ｇ、３９％）を得た。
1H NMR (300MHz, DMSO-d6) δ 1.51 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 2.34-2.40 (m, 2H), 2.59-2.65 (m, 2H), 2.75-2.78 (m, 4H), 3.97 (s, 3H), 4.08 (q, J = 6.6 Hz, 1H), 7.05 (s, 1H), 7.07 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.34 (dd, J = 4.4, 8.0 Hz, 1H), 7.77 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 8.64 (d, J = 1.4, 4.4 Hz, 1H), 9.39 (d, J = 8.0 Hz, 1H).【００６４】
［合成実施例２］
化合物７（（Ｚ）−６−メトキシ−２−［（６−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−７−（ピペラジン−１−イルメチル）ベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン）の合成
以下の合成スキーム２により、化合物７を合成した。【００６５】
スキーム２
2015122504.tif 000024
【００６６】
工程１
６−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−カルボニトリル（４５．０ｇ、３３５ｍｍｏｌ）をオキシ塩化リン（６５２ｇ、４２５０ｍｍｏｌ）に加え、１３０ｏＣで２時間攪拌した。反応溶液を濃縮して得られた残渣を塩化メチレンに溶解させ、ｐＨが８になるまで４Ｍ水酸化ナトリウム水溶液を加えた。有機層を分離し、飽和食塩水で洗浄後に無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。減圧下で溶媒を留去して、２−クロロ−６−メチルニコチノニトリル（５１．０ｇ、９９％）を得た。
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 2.65 (s, 3H), 7.24 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.89 (d, J = 8.0 Hz, 1H).【００６７】
工程２
２−クロロ−６−メチルニコチノニトリル（３５．０ｇ、２３０ｍｍｏｌ）のトルエン３００ｍＬ溶液に水素化ジイソブチルアルミニウム（１Ｍトルエン溶液、２４２ｍＬ、２４２ｍｍｏｌ）を−６０ｏＣで１時間かけて加えた。−６０ｏＣで３０分攪拌後、室温で１．５時間攪拌した。−５０ｏＣまで冷却した反応液に、２Ｍ硫酸水溶液３５０ｍＬとテトラヒドロフラン２００ｍＬの混合液を１時間かけて滴下した。滴下終了後室温で１８時間攪拌したのち、酢酸エチル２００ｍＬを加えた。分離した有機層を飽和食塩水で洗浄後、硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を留去して、粗生成物を得た。【００６８】
工程３
２−クロロ−６−メチルニコチノニトリル（１８．７ｇ、１２３ｍｍｏｌ）のトルエン２００ｍＬ溶液に水素化ジイソブチルアルミニウム（１Ｍトルエン溶液、１２９ｍＬ、１２９ｍｍｏｌ）を−６０ｏＣで１時間かけて加えた。−６０ｏＣで３０分攪拌後、室温で１．５時間攪拌した。−５０ｏＣまで冷却した反応液に、２Ｍ硫酸水溶液２００ｍＬとテトラヒドロフラン１００ｍＬの混合液を１時間かけて滴下した。滴下終了後室温で１８時間攪拌したのち、酢酸エチル２００ｍＬを加えた。分離した有機層を飽和食塩水で洗浄後、硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を留去して、粗生成物を得た。【００６９】
工程４
工程２と工程３で得られた粗生成物をまとめてシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／石油エーテル）に付し、２−クロロ−６−メチルニコチノアルデヒド（４２．０ｇ、７８％）を得た。
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 2.62 (s, 3H), 7.24 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 8.11 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 10.39 (s, 1H).【００７０】
工程５
２−クロロ−６−メチルニコチノアルデヒド（２２．０ｇ、１４２ｍｍｏｌ）の水６００ｍＬ溶液にヒドラジン一水和物（８５％水溶液、１６７ｇ、２８４０ｍｍｏｌ）を加え、４日間加熱還流させた。減圧下で溶媒を留去して得られた約３００ｍＬの懸濁液をろ過し、得られた固体を水で洗浄して、目的とする６−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン（９．２０ｇ）を得た。さらに、ろ液を塩化メチレン／メタノール（ｖ／ｖ＝１０／１、１００ｍＬ）で３回抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を留去して得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／石油エーテル）に付し、６−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン（４．９０ｇ）を得た。合計して目的とする６−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン（１４．１ｇ、７５％）を得た。
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 2.80 (s, 3H), 7.08 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 8.04 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 8.07 (s, 1H), 12.55 (brs, 1H).【００７１】
工程６
６−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン（１０．０ｇ、３８．０ｍｍｏｌ）のジメチルホルムアミド２００ｍＬ溶液にヨウ素（３８．０ｇ、１５０ｍｍｏｌ）と水酸化カリウム（１７．０ｇ、３０３ｍｍｏｌ）を０ｏＣで３０分かけて加えた。反応溶液を０ｏＣで１時間、室温で２時間攪拌させたのち、０ｏＣに冷却し、飽和ピロ亜硫酸ナトリウム水溶液１００ｍＬを加えた。さらに酢酸エチル２００ｍＬと水３００ｍＬを加え、得られた懸濁液をろ過した。固体を水、アセトニトリルで順次洗浄し、３−ヨード−６−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン（９．５０ｇ）を得た。さらにろ液を酢酸エチルで３回抽出し、有機層を水で３回洗浄したのち、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を留去して得られた粗生成物を酢酸エチルから再結晶させて、３−ヨード−６−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン（６．９０ｇ）を得た。合計して目的とする３−ヨード−６−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン（１６．４ｇ、８４％）を得た。
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 2.79 (s, 3H), 7.10 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.76 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 12.86 (brs, 1H).【００７２】
工程７
３−ヨード−６−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン（１６．０ｇ、６１．８ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン２００ｍＬ溶液を０ｏＣに冷却し、イソプロピルマグネシウムクロリド（２．０Ｍテトラヒドロフラン溶液、７０．０ｍＬ、１４０ｍｍｏｌ）を３０分かけて滴下した。滴下終了後、０ｏＣで１時間攪拌を続け、無水ジメチルホルムアミド（１８．０ｇ、２４６ｍｍｏｌ）を１０分かけて滴下した。反応溶液を室温で１８時間攪拌し、水を加えて反応を停止させた。ｐＨが７になるまで２Ｍ塩酸を加え、酢酸エチル／メタノール（ｖ／ｖ＝１０／１）混合溶媒で３回抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させて得られた粗生成物を酢酸エチル／メタノール（ｖ／ｖ＝３／１）混合溶媒１００ｍＬで洗浄後にろ取して、目的とする６−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−カルバルデヒド（１．９０ｇ）を得た。ろ液は工程８で再利用した。【００７３】
工程８
３−ヨード−６−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン（１６．０ｇ、６１．８ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン２２０ｍＬ溶液を０ｏＣに冷却し、イソプロピルマグネシウムクロリド（２．０Ｍテトラヒドロフラン溶液、７０．０ｍＬ、１４０ｍｍｏｌ）を３０分かけて滴下した。滴下終了後、０ｏＣで１時間攪拌を続け、無水ジメチルホルムアミド（１８．０ｇ、２４７ｍｍｏｌ）を１０分かけて滴下した。反応溶液を室温で１８時間攪拌し、水を加えて反応を停止させた。ｐＨが７になるまで２Ｍ塩酸を加え、酢酸エチル／メタノール（ｖ／ｖ＝１０／１）混合溶媒で３回抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。工程７のろ液を加えてから溶媒を留去し、得られた粗生成物を酢酸エチル／テトラヒドロフラン（ｖ／ｖ＝１／１）  混合溶媒２００ｍＬで洗浄後にろ過して、目的とする６−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−カルバルデヒド（３．４０ｇ）を得た。工程７と合計して、目的とする６−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−カルバルデヒド（５．３０ｇ、２７％）を得た。
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 2.64 (s, 3H), 7.32 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 8.39 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 10.12 (s, 1H), 14.51 (brs, 1H).【００７４】
工程９．
［ＷＯ２０１１／１３６３１９］に記載の４−［（６−メトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル）メチル］ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチル（０．２１３ｇ、０．５８８ｍｍｏｌ）  のメタノール２．５ｍＬ溶液に、工程８で得られた６−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−カルバルデヒド（０．０９４８ｇ、０．５８８ｍｍｏｌ）とピペリジン（０．０４００ｇ、０．４７０ｍｍｏｌ）を加えて６０ｏＣで２時間攪拌した。室温に冷却後、析出した固体をろ取して、目的とする（Ｚ）−４−（｛６−メトキシ−２−［（６−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル｝メチル）ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチル（０．１８３ｇ、６２％）を得た。
1H NMR (300MHz, DMSO-d6) δ 1.37 (s, 9H), 2.44 (t, J = 4.5 Hz, 4H), 2.63 (s, 3H), 3.28-3.31 (m, 4H), 3.71 (s, 2H), 3.97 (s, 3H), 6.97 (s, 1H), 7.06 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.19 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.78 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.83 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 14.15 (brs, 1H).【００７５】
工程１０．
（Ｚ）−４−（｛６−メトキシ−２−［（６−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル｝メチル）ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチル（０．１７７ｇ、０．３５０ｍｍｏｌ）の塩化メチレン４ｍＬ溶液にトリフルオロ酢酸４ｍＬを室温で加えた。室温で１６時間攪拌後、減圧下で溶媒を留去した。得られた残渣に、塩基性になるまで飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、析出した固体をろ取した。固体を水で洗浄し、減圧下で乾燥させて、目的とする（Ｚ）−６−メトキシ−２−［（６−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−７−（ピペラジン−１−イルメチル）ベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（０．０６９４ｇ、４９％）を得た。
1H NMR (300MHz, DMSO-d6) δ 2.59-2.65 (m, 7H), 2.97-3.01 (m, 4H), 3.76 (s, 2H), 3.98 (s, 3H), 7.00 (s, 1H), 7.08 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.22 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.81 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.82 (d, J = 8.1 Hz, 1H).【００７６】
［合成実施例３］
化合物８（（Ｒ，Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−メトキシ−７−［（２−メチルピペラジン−１−イル）メチル］ベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン）の合成
以下の合成スキーム３により、化合物８を合成した。【００７７】
スキーム３
2015122504.tif 000025
【００７８】
（ａ）工程１
（Ｒ）−３−メチルピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチル（２．００ｇ、１０．０ｍｍｏｌ）のエタノール１０ｍＬ溶液にパラホルムアルデヒド（０．３００ｇ、１０．０ｍｍｏｌ）と６−ヒドロキシベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（１．５０ｇ、１０．０ｍｍｏｌ）を加え、７時間加熱還流させた。反応溶液を濃縮して得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）に付し、２．００ｇの粗生成物を得た。粗生成物を塩化メチレンで洗浄し、目的とする（Ｒ）−４−［（６−ヒドロキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル）メチル］−３−メチルピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチル（１．５８ｇ、４４％）を得た。
1H NMR (300MHz, DMSO-d6) δ 1.10 (d, J = 6.0 Hz, 3H), 1.39 (s, 9H), 2.22-2.30 (m, 1H), 2.54-2.61 (m, 1H), 2.70-2.77 (m, 1H), 2.87-3.02 (m, 1H), 3.09-3.17 (m, 1H), 3.44-3.51 (m, 2H), 3.56 (d, J = 13.9 Hz, 1H), 4.01 (d, J = 13.9 Hz, 1H), 4.73 (s, 2H), 6.56 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.39 (d, J = 8.8 Hz, 1H).【００７９】
（ｂ）工程２
（Ｒ）−４−［（６−ヒドロキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル）メチル］−３−メチルピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチル（１．５５ｇ、４．２８ｍｍｏｌ）のトルエン１７ｍＬ溶液にトリフェニルホスフィン（１．６８ｇ、６．４２ｍｍｏｌ）、メタノール（０．２０８ｍＬ、５．１４ｍｍｏｌ）およびアゾジカルボン酸ジエチル（４０％トルエン溶液、２．８０ｇ、６．４２ｍｍｏｌ）を加え、１１０ｏＣで５時間攪拌した。反応溶液を濃縮して得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル／クロロホルム）に付して得られた粗生成物をさらにシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して、（Ｒ）−４−［（６−メトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル）メチル］−３−メチルピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチル（０．９００ｇ、５６％）を得た。
1H NMR (300MHz, CDCl3) δ 1.23 (d, J = 6.0 Hz, 3H), 1.45 (s, 9H), 2.17-2.24 (m, 1H), 2.37-2.48 (m, 1H), 2.73-2.80 (m, 2H), 2.97-3.06 (m, 1H), 3.41 (d, J = 12.6 Hz, 1H), 3.68-3.73 (m, 2H), 3.93 (s, 3H), 4.00 (d, J = 12.6 Hz, 1H), 4.64 (s, 2H), 6.70 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.62 (d, J = 8.7 Hz, 1H).【００８０】
（ｃ）工程３
（Ｒ）−４−［（６−メトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル）メチル］−３−メチルピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチル（０．２２６ｇ、０．６２４ｍｍｏｌ）のメタノール２．５ｍＬ溶液に、［ＷＯ２０１１／１３６３１９］に記載の１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−カルバルデヒド（０．０９１８ｇ、０．６２４ｍｍｏｌ）を加えた。ピペリジン（０．０４２５ｇ、０．４９９ｍｍｏｌ）を加えたのち、６０ｏＣで２時間攪拌し、反応溶液を室温まで冷却した。析出した固体をろ取し、（Ｒ，Ｚ）−４−（｛２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−メトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル｝メチル）−３−メチルピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチル（０．１９５ｇ、６２％）を得た。
1H NMR (300MHz, DMSO-d6) δ 1.15 (d, J = 5.7 Hz, 3H), 1.35 (s, 9H), 2.13-2.19 (m, 1H), 2.52-2.68 (m, 2H), 2.88-3.10 (m, 2H), 3.28 (m, 1H), 3.44-3.48 (m, 1H), 3.52 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 3.97 (s, 3H), 4.04 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 7.04-7.07 (m, 2H), 7.33 (dd, J = 4.5, 8.1 Hz, 1H), 7.79 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 8.63 (dd, J = 1.5, 4.5 Hz, 1H), 8.94 (dd, J = 1.5, 8.1 Hz, 1H), 14.36 (brs, 1H).【００８１】
（ｄ）工程４
（Ｒ，Ｚ）−４−（｛２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−メトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル｝メチル）−３−メチルピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチル（０．１９０ｇ、０．３７６ｍｍｏｌ）の塩化メチレン２ｍＬ溶液にトリフルオロ酢酸２ｍＬを加え、室温で１８時間攪拌した。反応溶液を濃縮して得られた残渣に飽和炭酸水素ナトリウム８  ｍＬを加え、析出した固体をろ取した。固体を水で洗浄後、減圧下で乾燥させて目的とする（Ｒ，Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−メトキシ−７−［（２−メチルピペラジン−１−イル）メチル］ベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（０．０９０９ｇ、６０％）を得た。
1H NMR (300MHz, DMSO-d6) δ 1.22 (d, J = 5.1 Hz, 3H), 2.22-2.30 (m, 1H), 2.54-2.61 (m, 2H), 2.65-2.76 (m, 2H), 2.84-2.88 (m, 1H), 2.94-3.03 (m, 1H), 3.48 (d, J = 12.6 Hz, 1H), 3.98 (s, 3H), 4.12 (d, J = 12.6 Hz, 1H), 7.06 (s, 1H), 7.07 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.37 (dd, J = 4.5, 8.1 Hz, 1H), 7.81 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.65 (dd, J = 1.5, 4.5 Hz, 1H), 8.92 (dd, J = 1.5, 8.1 Hz, 1H).【００８２】
［合成実施例４］
化合物９（（Ｓ，Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−メトキシ−７−［（２−メチルピペラジン−１−イル）メチル］ベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン）の合成
前記スキーム３により、化合物９を合成した。【００８３】
（ａ）工程１
（Ｓ）−３−メチルピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチル（２．００ｇ、１０．０ｍｍｏｌ）のエタノール１０ｍＬ溶液にパラホルムアルデヒド（０．３００ｇ、１０．０ｍｍｏｌ）と６−ヒドロキシベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（１．５０ｇ、１０．０ｍｍｏｌ）を加え、７時間加熱還流させた。反応溶液を濃縮して得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）に付し、２．２０ｇの粗生成物を得た。粗生成物をクロロホルムで洗浄し、目的とする（Ｓ）−４−［（６−ヒドロキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル）メチル］−３−メチルピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチル（１．７８ｇ、４９％）を得た。
1H NMR (300MHz, DMSO-d6) δ 1.10 (d, J = 6.0 Hz, 3H), 1.39 (s, 9H), 2.22-2.30 (m, 1H), 2.54-2.61 (m, 1H), 2.70-2.77 (m, 1H), 2.87-3.02 (m, 1H), 3.09-3.17 (m, 1H), 3.44-3.51 (m, 2H), 3.56 (d, J = 13.9 Hz, 1H), 4.01 (d, J = 13.9 Hz, 1H), 4.73 (s, 2H), 6.56 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.39 (d, J = 8.8 Hz, 1H).【００８４】
（ｂ）工程２
（Ｓ）−４−［（６−ヒドロキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル）メチル］−３−メチルピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチル（１．７２ｇ、４．７５ｍｍｏｌ）のトルエン１９ｍＬ溶液にトリフェニルホスフィン（１．８７ｇ、７．１３ｍｍｏｌ）、メタノール（０．２３１ｍＬ、５．７０ｍｍｏｌ）およびアゾジカルボン酸ジエチル（４０％トルエン溶液、３．１０ｇ、７．１３ｍｍｏｌ）を加え、１１０ｏＣで５時間攪拌した。反応溶液を濃縮して得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル／クロロホルム）に付した。得られた粗生成物をさらにシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して、（Ｓ）−４−［（６−メトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル）メチル］−３−メチルピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチル（０．９６８ｇ、５６％）を得た。
1H NMR (300MHz, CDCl3) δ 1.23 (d, J = 6.0 Hz, 3H), 1.45 (s, 9H), 2.17-2.24 (m, 1H), 2.37-2.48 (m, 1H), 2.73-2.80 (m, 2H), 2.97-3.06 (m, 1H), 3.41 (d, J = 12.6 Hz, 1H), 3.68-3.73 (m, 2H), 3.93 (s, 3H), 4.00 (d, J = 12.6 Hz, 1H), 4.64 (s, 2H), 6.70 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.62 (d, J = 8.7 Hz, 1H).【００８５】
（ｃ）工程３
（Ｓ）−４−［（６−メトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル）メチル］−３−メチルピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチル（０．２０８ｇ、０．５７４ｍｍｏｌ）のメタノール２．３ｍＬ溶液に、［ＷＯ２０１１／１３６３１９］に記載の１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−カルバルデヒド（０．０８４５ｇ、０．５７４ｍｍｏｌ）を加えた。ピペリジン（０．０３９１ｇ、０．４５９ｍｍｏｌ）を加えたのち、６０ｏＣで２時間攪拌し、反応溶液を室温まで冷却した。析出した固体をろ取し、（Ｓ，Ｚ）−４−（｛２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−メトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル｝メチル）−３−メチルピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチル（０．１９７ｇ、６８％）を得た。
1H NMR (300MHz, DMSO-d6) δ 1.15 (d, J = 5.7 Hz, 3H), 1.35 (s, 9H), 2.13-2.19 (m, 1H), 2.52-2.68 (m, 2H), 2.88-3.10 (m, 2H), 3.28 (m, 1H), 3.44-3.48 (m, 1H), 3.52 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 3.97 (s, 3H), 4.04 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 7.04-7.07 (m, 2H), 7.33 (dd, J = 4.5, 8.1 Hz, 1H), 7.79 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 8.63 (dd, J = 1.5, 4.5 Hz, 1H), 8.94 (dd, J = 1.5, 8.1 Hz, 1H), 14.36 (brs, 1H).【００８６】
（ｄ）工程４
（Ｓ，Ｚ）−４−（｛２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−メトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル｝メチル）−３−メチルピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチル（０．１８３ｇ、０．３６２ｍｍｏｌ）の塩化メチレン２ｍＬ溶液にトリフルオロ酢酸２ｍＬを加え、室温で１８時間攪拌した。反応溶液を濃縮して得られた残渣に飽和炭酸水素ナトリウム１０ｍＬを加え、析出した固体をろ取した。固体を水で洗浄後、減圧下で乾燥させて目的とする、（Ｓ，Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−メトキシ−７−［（２−メチルピペラジン−１−イル）メチル］ベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（０．１０３ｇ、７０％）を得た。
1H NMR (300MHz, DMSO-d6) δ 1.22 (d, J = 5.1 Hz, 3H), 2.22-2.30 (m, 1H), 2.54-2.61 (m, 2H), 2.65-2.76 (m, 2H), 2.84-2.88 (m, 1H), 2.94-3.03 (m, 1H), 3.48 (d, J = 12.6 Hz, 1H), 3.98 (s, 3H), 4.12 (d, J = 12.6 Hz, 1H), 7.06 (s, 1H), 7.07 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.37 (dd, J = 4.5, 8.1 Hz, 1H), 7.81 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.65 (dd, J = 1.5, 4.5 Hz, 1H), 8.92 (dd, J = 1.5, 8.1 Hz, 1H).【００８７】
［合成実施例５］
化合物１０（（Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−７−［（シス−３，５−ジメチルピペラジン−１−イル）メチル］−６−メトキシベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン）の合成
以下の合成スキーム４により、化合物１０を合成した。【００８８】
スキーム４
2015122504.tif 000026
【００８９】
（ａ）工程１
シス−２，６−ジメチルピペラジン（０．１１４ｍｍｏｌ、１．００ｍｍｏｌ）と炭酸カリウム（０．０６９１ｇ、０．５００ｍｍｏｌ）を塩化メチレン４ｍＬに加え、室温で攪拌した。［ＷＯ２０１１／１３６３１９］に記載の７−（ブロモメチル）−６−メトキシベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（０．１２９ｇ、０．５００ｍｍｏｌ）の塩化メチレン４ｍＬ溶液を滴下し、室温で１２時間、攪拌を続けた。反応溶液をろ過し、ろ液を濃縮して得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（メタノール／クロロホルム）で精製して、７−［（シス−３，５−ジメチルピペラジン−１−イル）メチル］−６−メトキシベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（０．１３１ｇ、９０％）を得た。
1H NMR (300MHz, CDCl3) δ 1.03 (d, J = 6.6 Hz, 6H), 1.73 (t, J = 11.1 Hz, 2H), 2.82 (dd, J = 2.1, 11.1 Hz, 2H), 2.87-2.98 (m, 2H), 3.67 (s, 2H), 3.93 (s, 3H), 4.64 (s, 2H), 6.70 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.62 (d, J = 9.0 Hz, 1H).【００９０】
（ｂ）工程２
７−［（シス−３，５−ジメチルピペラジン−１−イル）メチル］−６−メトキシベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（０．０７６７ｇ、０．２６４ｍｍｏｌ）のメタノール１ｍＬ溶液に、［ＷＯ２０１１／１３６３１９］に記載の１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−カルバルデヒド（０．０３８８ｇ、０．２６４ｍｍｏｌ）を加えた。ピペリジン（０．０１８０ｇ、０．２１１ｍｍｏｌ）を加えたのち、６０ｏＣで２時間攪拌し、反応溶液を室温まで冷却した。析出した固体をろ取し、目的とする（Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−７−［（シス−３，５−ジメチルピペラジン−１−イル）メチル］−６−メトキシベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（０．０６７３ｇ、６１％）を得た。
1H NMR (300MHz, CDCl3) δ 0.89 (d, J = 6.6 Hz, 6H), 1.64 (t, J = 10.2 Hz, 2H), 2.64-2.76 (m, 4H), 3.66 (s, 2H), 3.97 (s, 3H), 7.01 (s, 1H), 7.06 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.25 (dd, J = 4.5, 8.1 Hz, 1H), 7.79 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.65 (dd, J = 1.5, 4.5 Hz, 1H), 9.02 (dd, J = 1.5, 8.1 Hz, 1H).【００９１】
［合成実施例６］
化合物１１（（Ｓ，Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−メトキシ−７−［（３−メチルピペラジン−１−イル）メチル］ベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン）の合成
以下の合成スキーム５により、化合物１１を合成した。【００９２】
2015122504.tif 000027
【００９３】
（ａ）工程１
［ＷＯ２０１１／１３６３１９］に記載の７−（ブロモメチル）−６−メトキシベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（０．５１４ｇ、２．００ｍｍｏｌ）と炭酸カリウム（０．２７６ｇ、２．００ｍｍｏｌ）を塩化メチレン８ｍＬに加え、室温で攪拌した。（Ｓ）−２−メチルピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチル（０．４０１ｇ、２．００ｍｍｏｌ）の塩化メチレン２ｍＬ溶液を滴下し、室温で２４時間、攪拌を続けた。反応溶液をろ過し、ろ液を濃縮して得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して、（Ｓ）−４−［（６−メトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル）メチル］−２−メチルピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチル（０．５３１ｇ、７０％）を得た。
1H NMR (300MHz, CDCl3) δ 1.12 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 1.36 (s, 9H), 1.98 (dt, J = 0.6, 11.7 Hz, 1H), 2.17 (dd, J = 4.2, 10.8 Hz, 1H), 2.57 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 2.72 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 2.97 (dt, J = 3.9, 12.3 Hz, 1H), 3.60 (d, J = 2.4 Hz, 2H), 3.69 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 3.85 (s, 3H), 4.09-4.14 (m, 1H), 4.55 (s, 2H), 6.62 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.54 (d, J = 8.7 Hz, 1H).【００９４】
（ｂ）工程２
（Ｓ）−４−［（６−メトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル）メチル］−２−メチルピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチル（０．０９４１ｇ、０．２５０ｍｍｏｌ）のメタノール１ｍＬ溶液に、［ＷＯ２０１１／１３６３１９］に記載の１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−カルバルデヒド（０．０３６８ｇ、０．２５０ｍｍｏｌ）を加えた。ピペリジン（０．０１７０ｇ、０．２００ｍｍｏｌ）を加えたのち、６０ｏＣで２時間攪拌し、反応溶液を室温まで冷却した。析出した固体をろ取し、（Ｓ，Ｚ）−４−（｛２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−メトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル｝メチル）−２−メチルピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチル（０．０４４２ｇ、３５％）を得た。
1H NMR (300MHz, DMSO-d6) δ 0.92 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 1.35 (s, 9H), 1.97-2.06 (m, 1H), 2.15 (dd, J = 3.6, 11.1 Hz, 1H), 2.66 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 2.84-2.92 (m, 2H), 3.65-3.70 (m, 1H), 3.75 (s, 2H), 3.98 (s, 3H), 4.02-4.08 (m, 1H), 7.03 (s, 1H), 7.07 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.40 (dd, J = 4.5, 8.1 Hz, 1H), 7.81 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.64 (dd, J = 1.5, 4.5 Hz, 1H), 9.02 (dd, J = 1.5, 8.1 Hz, 1H), 14.07 (brs, 1H).【００９５】
（ｃ）工程３
（Ｓ，Ｚ）−４−（｛２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−メトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル｝メチル）−２−メチルピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチル（０．０４２４ｇ、０．０８３９ｍｍｏｌ）の塩化メチレン２ｍＬ溶液にトリフルオロ酢酸２ｍＬを加え、室温で１８時間攪拌した。反応溶液を濃縮して得られた残渣に飽和炭酸水素ナトリウム４ｍＬを加え、析出した固体をろ取した。固体を水で洗浄後、減圧下で乾燥させて目的とする（Ｓ，Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−メトキシ−７−［（３−メチルピペラジン−１−イル）メチル］ベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（０．０１５４ｇ、４５％）を得た。
1H NMR (300MHz, DMSO-d6) δ 0.96 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 1.85 (t, J = 10.8 Hz, 1H), 2.12 (dt, J = 2.1, 10.8 Hz, 1H), 2.66-2.93 (m, 5H), 3.72 (s, 2H), 3.98 (s, 3H), 7.03 (s, 1H), 7.08 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.31 (dd, J = 4.5, 8.1 Hz, 1H), 7.81 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.65 (dd, J = 1.5, 4.5 Hz, 1H), 9.01 (dd, J = 1.5, 8.7 Hz, 1H).【００９６】
［合成実施例７］
化合物１２（（Ｒ，Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−メトキシ−７−［（３−メチルピペラジン−１−イル）メチル］ベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン）の合成
前記合成スキーム５により、化合物１２を合成した。【００９７】
（ａ）工程１．
［ＷＯ２０１１／１３６３１９］に記載の７−（ブロモメチル）−６−メトキシベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（０．５１４ｇ、２．００ｍｍｏｌ）と炭酸カリウム（０．２７６ｇ、２．００ｍｍｏｌ）を塩化メチレン８ｍＬに加え、室温で攪拌した。（Ｒ）−２−メチルピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチル（０．４０１ｇ、２．００ｍｍｏｌ）の塩化メチレン２ｍＬ溶液を滴下し、室温で２４時間、攪拌を続けた。反応溶液をろ過し、ろ液を濃縮して得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して、（Ｒ）−４−［（６−メトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル）メチル］−２−メチルピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチル（０．３１４ｇ、４２％）を得た。
1H NMR (300MHz, CDCl3) δ 1.12 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 1.36 (s, 9H), 1.98 (dt, J = 0.6, 11.7 Hz, 1H), 2.17 (dd, J = 4.2, 10.8 Hz, 1H), 2.57 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 2.72 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 2.97 (dt, J = 3.9, 12.3 Hz, 1H), 3.60 (d, J = 2.4 Hz, 2H), 3.69 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 3.85 (s, 3H), 4.09-4.14 (m, 1H), 4.55 (s, 2H), 6.62 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.54 (d, J = 8.7 Hz, 1H).【００９８】
（ｂ）工程２
（Ｒ）−４−［（６−メトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル）メチル］−２−メチルピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチル（０．１５３ｇ、０．４０６ｍｍｏｌ）のメタノール１．６ｍＬ溶液に、［ＷＯ２０１１／１３６３１９］に記載の１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−カルバルデヒド（０．０５９７ｇ、０．４０６ｍｍｏｌ）を加えた。ピペリジン（０．０２７７ｇ、０．３２５ｍｍｏｌ）を加えたのち、６０ｏＣで２時間攪拌し、反応溶液を濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（メタノール／クロロホルム）で精製して、（Ｒ，Ｚ）−４−（｛２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−メトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル｝メチル）−２−メチルピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチル（０．１１９ｇ、５８％）を得た。
1H NMR (300MHz, DMSO-d6) δ 0.92 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 1.35 (s, 9H), 1.97-2.06 (m, 1H), 2.15 (dd, J = 3.6, 11.1 Hz, 1H), 2.66 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 2.84-2.92 (m, 2H), 3.65-3.70 (m, 1H), 3.75 (s, 2H), 3.98 (s, 3H), 4.02-4.08 (m, 1H), 7.03 (s, 1H), 7.07 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.40 (dd, J = 4.5, 8.1 Hz, 1H), 7.81 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.64 (dd, J = 1.5, 4.5 Hz, 1H), 9.02 (dd, J = 1.5, 8.1 Hz, 1H), 14.07 (brs, 1H).【００９９】
（ｃ）工程３
（Ｒ，Ｚ）−４−（｛２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−メトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル｝メチル）−２−メチルピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチル（０．１０８ｇ、０．２１４ｍｍｏｌ）の塩化メチレン４ｍＬ溶液にトリフルオロ酢酸４ｍＬを加え、室温で１６時間攪拌した。反応溶液を濃縮して得られた残渣に飽和炭酸水素ナトリウム６ｍＬを加え、析出した固体をろ取した。固体を水で洗浄後、減圧下で乾燥させて目的とする（Ｒ，Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−メトキシ−７−［（３−メチルピペラジン−１−イル）メチル］ベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（０．０５３３ｇ、６１％）を得た。
1H NMR (300MHz, DMSO-d6) δ 0.96 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 1.85 (t, J = 10.8 Hz, 1H), 2.12 (dt, J = 2.1, 10.8 Hz, 1H), 2.66-2.93 (m, 5H), 3.72 (s, 2H), 3.98 (s, 3H), 7.03 (s, 1H), 7.08 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.31 (dd, J = 4.5, 8.1 Hz, 1H), 7.81 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.65 (dd, J = 1.5, 4.5 Hz, 1H), 9.01 (dd, J = 1.5, 8.7 Hz, 1H).【０１００】
［合成実施例８］
化合物１３（（Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−７−［（シス−２，６−ジメチルピペラジン−１−イル）メチル］−６−メトキシベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン）の合成
前記合成スキーム５により、化合物１３を合成した。【０１０１】
（ａ）工程１
［ＷＯ２０１１／１３６３１９］に記載の７−（ブロモメチル）−６−メトキシベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（０．５１４ｇ、２．００ｍｍｏｌ）、シス−３，５−ジメチルピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチル（０．４２９ｇ、２．００ｍｍｏｌ）、および炭酸カリウム（０．３４６ｇ、２．５０ｍｍｏｌ）を塩化メチレン８ｍＬに加え１５時間、加熱還流させた。反応溶液をろ過し、ろ液を濃縮して得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して、シス−４−［（６−メトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル）メチル］−３，５−ジメチルピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチル（０．４５９ｇ、５９％）を得た。
1H NMR (300MHz, CDCl3) δ 1.18 (d, J = 5.7 Hz, 6H), 1.44 (s, 9H), 2.60-2.70 (m, 2H), 2.83-2.90 (m, 2H), 3.60-3.63 (m, 2H), 3.92 (s, 3H), 3.93 (s, 2H), 4.63 (s, 2H), 6.69 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.60 (d, J = 9.0 Hz, 1H).【０１０２】
（ｂ）工程２
シス−４−［（６−メトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル）メチル］−３，５−ジメチルピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチル（０．１９２ｇ、０．４９２ｍｍｏｌ）のメタノール２ｍＬ溶液に、［ＷＯ２０１１／１３６３１９］に記載の１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−カルバルデヒド（０．０７２４ｇ、０．４９２ｍｍｏｌ）を加えた。ピペリジン（０．０３３５ｇ、０．３９４ｍｍｏｌ）を加えたのち、６０ｏＣで２時間攪拌し、反応溶液を室温まで冷却した。析出した固体をろ取して、シス−４−（｛（Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−メトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル｝メチル）−３，５−ジメチルピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチル（０．１６５ｇ、６５％）を得た。
1H NMR (300MHz, DMSO-d6) δ 1.05 (d, J = 5.7 Hz, 6H), 1.36 (s, 9H), 2.73-2.80 (m, 2H), 3.17 (d, J = 4.2 Hz, 4H), 3.97 (s, 5H), 7.05 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.08 (s, 1H), 7.35 (dd, J = 4.5, 8.1 Hz, 1H), 7.78 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 8.63 (dd, J = 1.5, 4.5 Hz, 1H), 8.85 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 14.36 (brs, 1H).【０１０３】
（ｃ）工程３
シス−４−（｛（Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−メトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル｝メチル）−３，５−ジメチルピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチル（０．１６４ｇ、０．３１６ｍｍｏｌ）の塩化メチレン６ｍＬ溶液にトリフルオロ酢酸６ｍＬを加え、室温で１４時間攪拌した。反応溶液を濃縮して得られた残渣に飽和炭酸水素ナトリウム８ｍＬを加え、析出した固体をろ取した。固体を水で洗浄後、減圧下で乾燥させて目的とする（Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−７−［（シス−２，６−ジメチルピペラジン−１−イル）メチル］−６−メトキシベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（０．１０８ｇ、８１％）を得た。
1H NMR (300MHz, CD3OD) δ 1.15 (d, J = 5.7 Hz, 6H), 2.44-2.52 (m, 2H), 2.58-2.68 (m, 2H), 2.77-2.82 (m, 2H), 3.99 (s, 3H), 4.12 (s, 2H), 6.98 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.10 (s, 1H), 7.37 (dd, J = 4.5, 8.1 Hz, 1H), 7.73 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.58 (dd, J = 1.5, 4.5 Hz, 1H), 8.76 (dd, J = 1.5, 8.1 Hz, 1H).【０１０４】
［合成実施例９］
化合物１４（（Ｓ，Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−７−［（３−アミノピロリジン−１−イル）メチル］−６−メトキシベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン）の合成
以下の合成スキーム６により、化合物１４を合成した。【０１０５】
スキーム６
2015122504.tif 000028
【０１０６】
（ａ）工程１
公知の文献［ＷＯ２０１１／１３６３１９］に記載の７−（ブロモメチル）−６−メトキシベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（０．５１４ｇ、２．００ｍｍｏｌ）と炭酸カリウム（０．２７６ｇ、２．００ｍｍｏｌ）を塩化メチレン８ｍＬに加え、室温で攪拌した。（Ｓ）−ピロリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔブチル（０．３７３ｇ、２．００ｍｍｏｌ）の塩化メチレン４ｍＬ溶液を滴下し、室温で１５時間攪拌を続けた。反応溶液をろ過し、ろ液を濃縮して得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（メタノール／クロロホルム）で精製して、（Ｓ）−｛１−［（６−メトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル）メチル］ピロリジン−３−イル｝カルバミン酸ｔｅｒｔブチル（０．３８８ｇ、５４％）を得た。
1H NMR (300MHz, DMSO-d6) δ 1.35 (s, 9H), 1.43-1.56 (m, 1H), 1.90-2.02 (m, 1H), 2.22-2.27 (m, 1H), 2.45-2.47 (m, 1H), 2.55 (m, 1H), 2.70-2.75 (m, 1H), 3.60 (s, 2H), 3.79-3.87 (m, 1H), 3.90 (s, 3H), 4.77 (s, 2H), 6.87-6.90 (m, 2H), 7.58 (d, J = 8.7 Hz, 1H).【０１０７】
（ｂ）工程２
（Ｓ）−｛１−［（６−メトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル）メチル］ピロリジン−３−イル｝カルバミン酸ｔｅｒｔブチル（０．１７９ｇ、０．４９４ｍｍｏｌ）のメタノール２ｍＬ溶液に、［ＷＯ２０１１／１３６３１９］に記載の１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−カルバルデヒド（０．０７２７ｇ、０．４９４ｍｍｏｌ）を加えた。ピペリジン（０．０３３６ｇ、０．３９５ｍｍｏｌ）を加えたのち、６０ｏＣで２時間攪拌した。反応溶液を濃縮して得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（メタノール／クロロホルム）で精製して、（Ｓ，Ｚ）−［１−（｛２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−メトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル｝メチル）ピロリジン−３−イル］カルバミン酸ｔｅｒｔブチル（０．１５０ｇ、６２％）を得た。
1H NMR (300MHz, DMSO-d6) δ 1.31-1.39 (m, 1H), 1.36 (s, 9H), 1.51-1.61 (m, 1H), 1.95-2.07 (m, 1H), 2.34-2.39 (m, 1H), 2.58-2.62 (m, 1H), 2.83-2.88 (m, 1H), 3.81 (s, 2H), 3.85-3.91 (m, 1H), 3.98 (s, 3H), 6.92 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 7.02 (s, 1H), 7.07 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.39 (dd, J = 4.5, 8.1 Hz, 1H), 7.80 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.62-8.63 (m, 1H), 9.04 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 14.39 (brs, 1H).【０１０８】
（ｃ）工程３
（Ｓ，Ｚ）−［１−（｛２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−メトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル｝メチル）ピロリジン−３−イル］カルバミン酸ｔｅｒｔブチル（０．１４８ｇ、０．３０１ｍｍｏｌ）の塩化メチレン８ｍＬ溶液にトリフルオロ酢酸２ｍＬを加え、室温で１５時間攪拌した。反応溶液を濃縮して得られた残渣に飽和炭酸水素ナトリウム８ｍＬを加え、クロロホルムで５回抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させたのち溶媒を留去し目的とする、（Ｓ，Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−７−［（３−アミノピロリジン−１−イル）メチル］−６−メトキシベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（０．０７５１ｇ、６４％）を得た。
1H NMR (300MHz, DMSO-d6) δ 1.32-1.42 (m, 1H), 1.95-2.07 (m, 1H), 2.24-2.29 (m, 1H), 2.59-2.68 (m, 2H), 2.78-2.83 (m, 1H), 3.31-3.39 (m, 1H), 3.83 (s, 2H), 3.98 (s, 3H), 7.04 (s, 1H), 7.07 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.37 (dd, J = 5.1, 8.1 Hz, 1H), 7.79 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.62 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 9.05 (dd, J = 1.5, 8.1 Hz, 1H).【０１０９】
［合成実施例１０］
化合物１５（（Ｒ，Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−７−［（３−アミノピロリジン−１−イル）メチル］−６−メトキシベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン）の合成
前記合成スキーム６により、化合物１５を合成した。【０１１０】
（ａ）工程１
［ＷＯ２０１１／１３６３１９］に記載の７−（ブロモメチル）−６−メトキシベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（０．５１４ｇ、２．００ｍｍｏｌ）と炭酸カリウム（０．２７６ｇ、２．００ｍｍｏｌ）を塩化メチレン８ｍＬに加え、室温で攪拌した。（Ｒ）−ピロリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔブチル（０．３７３ｇ、２．００ｍｍｏｌ）の塩化メチレン４ｍＬ溶液を滴下し、室温で１０時間攪拌を続けた。反応溶液をろ過し、ろ液を濃縮して得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（メタノール／クロロホルム）で精製して、（Ｒ）−｛１−［（６−メトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル）メチル］ピロリジン−３−イル｝カルバミン酸ｔｅｒｔブチル（０．２７５ｇ、３８％）を得た。
1H NMR (300MHz, DMSO-d6) δ 1.35 (s, 9H), 1.43-1.56 (m, 1H), 1.90-2.02 (m, 1H), 2.22-2.27 (m, 1H), 2.45-2.47 (m, 1H), 2.55 (m, 1H), 2.70-2.75 (m, 1H), 3.60 (s, 2H), 3.79-3.87 (m, 1H), 3.90 (s, 3H), 4.77 (s, 2H), 6.87-6.90 (m, 2H), 7.58 (d, J = 8.7 Hz, 1H).【０１１１】
（ｂ）工程２
（Ｒ）−｛１−［（６−メトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル）メチル］ピロリジン−３−イル｝カルバミン酸ｔｅｒｔブチル（０．１２６ｇ、０．３４８ｍｍｏｌ）のメタノール１．４ｍＬ溶液に、［ＷＯ２０１１／１３６３１９］に記載の１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−カルバルデヒド（０．０５１２ｇ、０．３４８ｍｍｏｌ）を加えた。ピペリジン（０．０２３７ｇ、０．２７８ｍｍｏｌ）を加えたのち、６０ｏＣで２時間攪拌した。反応溶液を濃縮して得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（メタノール／クロロホルム）で精製して、（Ｒ，Ｚ）−［１−（｛２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−メトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル｝メチル）ピロリジン−３−イル］カルバミン酸ｔｅｒｔブチル（０．１１３ｇ、６６％）を得た。
1H NMR (300MHz, DMSO-d6) δ 1.31-1.39 (m, 1H), 1.36 (s, 9H), 1.51-1.61 (m, 1H), 1.95-2.07 (m, 1H), 2.34-2.39 (m, 1H), 2.58-2.62 (m, 1H), 2.83-2.88 (m, 1H), 3.81 (s, 2H), 3.85-3.91 (m, 1H), 3.98 (s, 3H), 6.92 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 7.02 (s, 1H), 7.07 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.39 (dd, J = 4.5, 8.1 Hz, 1H), 7.80 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.62-8.63 (m, 1H), 9.04 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 14.39 (brs, 1H).【０１１２】
（ｃ）工程３
（Ｒ，Ｚ）−［１−（｛２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−メトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル｝メチル）ピロリジン−３−イル］カルバミン酸ｔｅｒｔブチル（０．１１１ｇ、０．２２６ｍｍｏｌ）の塩化メチレン８ｍＬ溶液にトリフルオロ酢酸２ｍＬを加え、室温で１５時間攪拌した。反応溶液を濃縮して得られた残渣に飽和炭酸水素ナトリウムを加えて塩基性とし、クロロホルムで５回抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させたのち溶媒を留去し目的とする、（Ｒ，Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−７−［（３−アミノピロリジン−１−イル）メチル］−６−メトキシベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（０．０４８４ｇ、５５％）を得た。
1H NMR (300MHz, DMSO-d6) δ 1.32-1.42 (m, 1H), 1.95-2.07 (m, 1H), 2.24-2.29 (m, 1H), 2.59-2.68 (m, 2H), 2.78-2.83 (m, 1H), 3.31-3.39 (m, 1H), 3.83 (s, 2H), 3.98 (s, 3H), 7.04 (s, 1H), 7.07 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.37 (dd, J = 5.1, 8.1 Hz, 1H), 7.79 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.62 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 9.05 (dd, J = 1.5, 8.1 Hz, 1H).【０１１３】
［合成実施例１１］
化合物１６（（Ｚ）−６−メトキシ−２−［（６−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−７−（ピペリジン−４−イルメチル）ベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン）の合成
以下の合成スキーム７により、化合物１６を合成した。【０１１４】
スキーム７
2015122504.tif 000029
【０１１５】
（ａ）工程１
［ＷＯ２０１１／１３６３１９］に記載の４−［（６−メトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル）メチル］ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチル（０．３６１ｇ、１．００ｍｍｏｌ）のメタノール４ｍＬ溶液に、６−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−カルバルデヒド（０．１６１ｇ、１．００ｍｍｏｌ）を加えた。ピペリジン（０．０６８１ｇ、０．８００ｍｍｏｌ）を加えたのち、６０ｏＣで２時間攪拌した。反応溶液を室温まで冷却し、析出した固体をろ取して、（Ｚ）−４−（｛６−メトキシ−２−［（６−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル｝メチル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチル（０．４５２ｇ、９０％）を得た。
1H NMR (300MHz, DMSO-d6) δ 1.07-1.20 (m, 2H), 1.33 (s, 9H), 1.58-1.62 (m, 2H), 1.78-1.90 (m, 1H), 2.56-2.66 (m, 2H), 2.61 (s, 3H), 2.74 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 3.87-3.92 (m, 2H), 3.97 (s, 3H), 6.95 (s, 1H), 7.03 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.18 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.71 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 8.73 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 13.99 (brs, 1H).【０１１６】
（ｂ）工程２
（Ｚ）−４−（｛６−メトキシ−２−［（６−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル｝メチル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチル（０．４４９ｇ、０．８９０ｍｍｏｌ）の塩化メチレン８ｍＬ溶液にトリフルオロ酢酸８ｍＬを加え、室温で１６時間攪拌した。反応溶液を濃縮して得られた残渣に飽和炭酸水素ナトリウムを加えて塩基性とし、析出した固体をろ取した。固体を水で洗浄後、減圧下で乾燥させて目的とする、（Ｚ）−６−メトキシ−２−［（６−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−７−（ピペリジン−４−イルメチル）ベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（０．３６０ｇ、定量的）を得た。
1H NMR (300MHz, DMSO-d6) δ 1.32-1.46 (m, 2H), 1.71-1.76 (m, 2H), 1.90-1.99 (m, 1H), 2.64 (s, 3H), 2.68-2.79 (m, 4H), 3.17-3.21 (m, 2H), 3.97 (s, 3H), 6.99 (s, 1H), 7.06 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.27 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.74 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.73 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 13.99 (brs, 1H).【０１１７】
［合成実施例１２］
化合物１７（（Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−（ジフルオロメトキシ）−７−（ピペリジン−４−イルメチル）ベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン）の合成
以下の合成スキーム８により、化合物１７を合成した。【０１１８】
スキーム８
2015122504.tif 000030
【０１１９】
（ａ）工程１
４−メチレンピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチル（２．１２ｇ、１０．８ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン５ｍＬ溶液に９−ＢＢＮ（０．５Ｍテトラヒドロフラン溶液、２６．０ｍＬ、１３．０ｍｍｏｌ）を加え、６０ｏＣで３時間攪拌した。【０１２０】
（ｂ）工程２
反応溶液を室温まで冷却後、［ＷＯ２０１１／１３６３１９］に記載の６−ヒドロキシ−７−ヨードベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（３．００ｇ、１０．９ｍｍｏｌ）、炭酸セシウム（７．０４ｇ、２１．６ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＰｔＢｕ３）２（０．２７７ｇ、０．５４２ｍｍｏｌ）、および水（１５ｍＬ）を加え、６０ｏＣで５時間攪拌した。室温まで冷却後、水（３０ｍＬ）を加えて反応溶液を希釈し、酢酸エチルで３回抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させて、溶媒を留去した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル／石油エーテル）で精製して、４−［（６−ヒドロキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル）メチル］ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチル（２．５０ｇ、６６％）を得た。
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 1.22-1.32 (m, 2H), 1.42-1.50 (m, 10H), 1.72-1.85 (m, 2H), 2.60-2.82 (m, 4H), 3.97-4.07 (m, 2H), 4.64 (s, 2H), 6.69 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.41 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 9.33 (brs, 1H).【０１２１】
（ｃ）工程３
４−［（６−ヒドロキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル）メチル］ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチル（１．５０ｇ、４．３２ｍｍｏｌ）と炭酸ナトリウム（０．５５０ｇ、５．１９ｍｍｏｌ）のジメチルホルムアミド１５ｍＬ溶液にＣＨＦ２Ｃｌを１３０ｏＣで２時間吹き込んだ。室温まで冷却後、水（５０ｍＬ）を加えて反応溶液を希釈し、酢酸エチルで３回抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を留去した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル／石油エーテル）で精製して、４−｛［６−（ジフルオロメトキシ）−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル］メチル｝ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチル（０．７００ｇ、４１％）を得た。
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 1.20-1.25 (m, 2H), 1.45 (s, 9H), 1.58-1.62 (m, 2H), 1.70-1.80 (m, 1H), 2.58-2.68 (m, 4H), 4.00-4.13 (m, 2H), 4.67 (s, 2H), 6.61 (t, J = 72.8 Hz, 1H), 6.83 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.55 (d, J = 8.8 Hz, 1H).【０１２２】
（ｄ）工程４
４−｛［６−（ジフルオロメトキシ）−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル］メチル｝ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチル（０．３３２ｇ、０．８３６ｍｍｏｌ）のメタノール５ｍＬ溶液に、［ＷＯ２０１１／１３６３１９］に記載の１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−カルバルデヒド（０．１２９ｇ、０．８７８ｍｍｏｌ）とピペリジン（０．０５７０ｇ、０．６６９ｍｍｏｌ）を加え、合成実施例１の工程１と同様の操作で、（Ｚ）−４−（｛２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−（ジフルオロメトキシ）−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル｝メチル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチル（０．１７６ｇ、４０％）を得た。
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 1.30-1.40 (m, 2H), 1.45 (s, 9H), 1.69-1.76 (m, 2H), 1.89-2.02 (m, 1H), 2.68 (t, J = 12.0 Hz, 2H), 2.93 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 3.98-4.25 (m, 2H), 6.70 (t, J = 72.8 Hz, 1H), 7.04 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.27-7.35 (m, 2H), 7.78 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.70 (dd, J = 1.2, 4.4 Hz, 1H), 8.89 (dd, J = 1.2, 8.0 Hz, 1H), 11.82 (brs, 1H).【０１２３】
（ｅ）工程５
（Ｚ）−４−（｛２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−（ジフルオロメトキシ）−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル｝メチル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチル（０．１６６ｇ、０．３１５ｍｍｏｌ）の塩化メチレン１０ｍＬ溶液にトリフルオロ酢酸１ｍＬを加え、合成実施例２の工程１０と同様にして、（Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−（ジフルオロメトキシ）−７−（ピペリジン−４−イルメチル）ベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（０．１３０ｇ、９７％）を得た。
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 1.32-1.46 (m, 2H), 1.70-1.76 (m, 2H), 1.90-2.00 (m, 1H), 2.69 (t, J = 12.4 Hz, 2H), 2.82 (d, J = 6.8 Hz, 2H), 3.17 (d, J = 12.4 Hz, 2H), 7.11-7.15 (m, 2H), 7.40 (dd, J = 4.4, 8.0 Hz, 1H), 7.49 (t, J = 73.2 Hz, 1H), 7.81 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.64 (dd, J = 1.6, 4.8 Hz, 1H), 8.84 (dd, J = 1.6, 8.4 Hz, 1H).【０１２４】
［合成実施例１３］
化合物１８（（Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−７−［（３−フルオロピペリジン−４−イル）メチル］−６−メトキシベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（シス異性体））の合成
以下の合成スキーム９により、化合物１８を合成した。【０１２５】
2015122504.tif 000031
【０１２６】
（ａ）工程１
公知の文献［ヨーロピアン・ジャーナル・オブ・メディシナル・ケミストリー（Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）、５３巻、４０８−４１５頁、２０１２年］に記載の３−フルオロ−４−メチレンピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチル（５．００ｇ、２３．２ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン２０ｍＬ溶液に９−ＢＢＮ（０．５Ｍテトラヒドロフラン溶液、４６．４ｍＬ、２３．２ｍｍｏｌ）を加えて室温で３時間攪拌した。【０１２７】
（ｂ）工程２
［ＷＯ２０１１／１３６３１９］に記載の６−メトキシ−７−ヨードベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（６．７４ｇ、２３．２ｍｍｏｌ）とフッ化カリウム（４．０３ｇ、６９．４ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン／水混合溶媒（４０ｍＬ／５０ｍＬ）に溶かし、上記の反応溶液に加えた。次いでＰｄ（ＰｔＢｕ３）２（０．５９０ｇ、１．１５ｍｍｏｌ）を加え、１８時間加熱還流させた。室温まで冷却後、水（１００ｍＬ）を加えて反応溶液を希釈し、酢酸エチル（１００ｍＬ）で３回抽出した。有機層を飽和食塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させて、溶媒を留去した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル／石油エーテル）で精製して、３−フルオロ−４−［（６−メトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル）メチル］ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチルのシス異性体（Ｃ）（２．２０ｇ、２５％）とトランス異性体（Ｄ）（２．９０ｇ、３３％）を得た。
２次元ＮＭＲにより、Ｄがトランス異性体であることを確認した。
1H NMR (シス異性体) (400MHz, CD3CN) δ 1.30-1.40 (m, 1H), 1.44 (s, 9H), 1.52-1.62 (m, 1H), 1.80-1.83 (m, 1H), 2.60-2.90 (m, 4H), 3.93 (s, 3H), 4.02-4.10 (m, 1H), 4.25-4.38 (m, 1H), 4.50-4.67 (m, 3H), 6.83 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.53 (d, J = 8.4 Hz, 1H).
1H NMR (トランス異性体) (400MHz, CD3CN) δ 1.20-1.30 (m, 1H), 1.45 (s, 9H), 1.55-1.65 (m, 1H), 2.00-2.10 (m, 1H), 2.60-2.68 (m, 1H), 2.70-2.80 (m, 1H), 2.95-3.10 (m, 2H), 3.70-3.78 (m, 1H), 3.93 (s, 3H), 4.02-4.12 (m, 1H), 4.21-4.40 (m, 1H), 4.63 (s, 2H), 6.82 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.54 (d, J = 8.8 Hz, 1H).【０１２８】
（ｃ）工程３
３−フルオロ−４−［（６−メトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル）メチル］ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチル（シス異性体）（０．６００ｇ、１．５８ｍｍｏｌ）のメタノール１０ｍＬ溶液に、［ＷＯ２０１１／１３６３１９］に記載の１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−カルバルデヒド（０．２５６ｇ、１．７４ｍｍｏｌ）とピペリジン（０．１０８ｇ、１．２７ｍｍｏｌ）を加え、合成実施例１の工程１と同様の操作を行い、４−（｛（Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−メトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル｝メチル）−３−フルオロピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチル（シス異性体）（０．６６０ｇ、８２％）を得た。
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 1.45 (s, 10H), 1.70-1.90 (m, 1H), 2.00-2.20 (m, 1H), 2.60-3.12 (m, 4H), 4.02 (s, 3H), 4.04-4.80 (m, 3H), 6.85 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.34 (m, 1H), 7.79 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.65 (dd, J = 1.2, 4.4 Hz, 1H), 9.05 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 11.59 (brs, 1H).【０１２９】
（ｄ）工程４
４−（｛（Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−メトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル｝メチル）−３−フルオロピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチル（シス異性体）（０．６６０ｇ、１．３０ｍｍｏｌ）の塩化メチレン１５ｍＬ溶液にトリフルオロ酢酸１ｍＬを加え、合成実施例２の工程１０と同様の操作を行い目的とする、（Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−７−［（３−フルオロピペリジン−４−イル）メチル］−６−メトキシベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（シス異性体）（０．３２５ｇ、６１％）を得た。
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 1.25-1.32 (m, 1H), 1.44-1.57 (m, 1H), 1.95-2.12 (m, 1H), 2.37-2.41 (m, 1H), 2.55-2.70 (m, 1H), 2.82-2.98 (m, 3H), 3.08-3.14 (m, 1H), 3.98 (s, 3H), 4.54 (d, J = 48.4 Hz, 1H), 7.02 (s, 1H), 7.06 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.36 (dd, J = 4.4, 8.4 Hz, 1H), 7.75 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 8.64 (dd, J = 1.6, 4.4 Hz, 1H), 8.98 (dd, J = 1.2, 8.0 Hz, 1H).【０１３０】
［合成実施例１４］
化合物１９（（Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−７−［（３−フルオロピペリジン−４−イル）メチル］−６−メトキシベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（トランス異性体））の合成【０１３１】
（ｃ）工程３
合成実施例１３の工程２で得られた３−フルオロ−４−［（６−メトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル）メチル］ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチル（トランス異性体）（０．７００ｇ、１．８４ｍｍｏｌ）のメタノール１６ｍＬ溶液に、［ＷＯ２０１１／１３６３１９］に記載の１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−カルバルデヒド（０．２９４ｇ、２．００ｍｍｏｌ）とピペリジン（０．１２５ｇ、１．４７ｍｍｏｌ）を加え、合成実施例１の工程１と同様の操作を行い、４−（｛（Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−メトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル｝メチル）−３−フルオロピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチル（トランス異性体）（０．５４０ｇ、５７％）を得た。
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 1.00-1.70 (m, 12H), 2.05-2.20 (m, 1H), 2.66 (t, J = 12.0 Hz, 1H), 2.70-2.95 (m, 2H), 3.38 (dd, J = 4.8, 13.6 Hz, 1H), 3.98 (s, 3H), 4.25-4.50 (m, 2H), 6.82 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.27 (s, 1H), 7.35 (dd, J = 4.4, 8.0 Hz, 1H), 7.75 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.68 (dd, J = 1.2, 4.4 Hz, 1H), 8.90-9.00 (m, 1H), 12.55 (brs, 1H).【０１３２】
（ｄ）工程４
４−（｛（Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−メトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル｝メチル）−３−フルオロピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチル（トランス異性体）（０．５４０ｇ、１．０６ｍｍｏｌ）の塩化メチレン２０ｍＬ溶液にトリフルオロ酢酸２ｍＬを加え合成実施例２の工程１０と同様の操作を行い目的とする、（Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−７−［（３−フルオロピペリジン−４−イル）メチル］−６−メトキシベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（トランス異性体）（０．３７０ｇ、８５％）を得た。
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 1.10-1.25 (m, 1H), 1.40-1.50 (m, 1H), 1.90-2.00 (m, 1H),2.15-2.25 (m, 1H), 2.30-2.40 (m, 1H), 2.65-2.80 (m, 2H), 3.10-3.30 (m, 2H), 3.96 (s, 3H), 4.20-4.40 (m, 1H), 7.02 (s, 1H), 7.05 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.36 (dd, J = 4.4, 8.0 Hz, 1H), 7.72 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 8.68 (dd, J = 1.2, 4.4 Hz, 1H), 8.92 (dd, J = 1.2, 8.0 Hz, 1H).【０１３３】
［合成実施例１５］
化合物２２（（Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−エトキシ−７−［１−（ピペラジン−１−イル）エチル］ベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン）の合成
下記合成スキーム１０により、化合物２２を合成した。【０１３４】
スキーム１０
2015122504.tif 000032
【０１３５】
（ａ）工程１
［ＷＯ２０１１／１３６３１９］に記載の４−［１−（６−ヒドロキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル）エチル］ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．９０６ｇ、２．５０ｍｍｏｌ）のトルエン１０ｍＬ溶液にエタノール（１３８ｍｇ、３．００ｍｍｏｌ）、トリフェニルホスフィン（０．９８４ｇ、３．７５ｍｍｏｌ）、及び４０％アゾジカルボン酸ジエチル／トルエン溶液（１．６３ｇ、３．７５ｍｍｏｌ）を加えて１１０℃で５時間攪拌した。反応溶液を濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル／クロロホルム）に付して得られた粗生成物をさらにシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して、４−［１−（６−エトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル）エチル］ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチル（０．６０８ｇ、６２％）を得た。
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 1.42 (s, 9H), 1.46 (t, J = 6.6 Hz, 3H), 1.57 (d, J = 7.2 Hz, 3H), 2.39-2.46 (m, 4H), 3.37-3.47 (m, 4H), 4.13 (m, 2H), 4.34 (q, J = 7.2 Hz, 1H), 4.61 (s, 2H), 6.67 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.57 (d, J = 8.1 Hz, 1H).【０１３６】
（ｂ）工程２
４−［１−（６−エトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル）エチル］ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．２２２ｇ、０．５６９ｍｍｏｌ）のメタノール２．５ｍＬ溶液に［ＷＯ２０１１／１３６３１９］に記載の１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−カルバルデヒド（０．０８３７ｇ、０．５６９ｍｍｏｌ）とピペリジン（０．０３８７ｇ、０．４５５ｍｍｏｌ）を加え、６０℃で２時間攪拌した。反応溶液を室温まで冷却し、析出した固体をろ取して、（Ｚ）−４−（１−｛２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−エトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル｝エチル）ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチル（０．２１５ｇ、７２％）を得た。
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 1.34 (s, 9H), 1.40 (t, J = 6.6 Hz, 3H), 1.57 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 2.38-2.59 (m, 4H), 3.29-3.32 (m, 4H), 4.18 (q, J = 6.6 Hz, 2H), 4.24 (q, J = 6.6 Hz, 1H), 7.04 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.07 (s, 1H), 7.36 (dd, J = 4.5, 8.1 Hz, 1H), 7.75 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.64 (dd, J = 1.5, 4.5 Hz, 1H), 9.26 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 14.35 (brs, 1H).【０１３７】
（ｃ）工程３
（Ｚ）−４−（１−｛２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−エトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル｝エチル）ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．１７９ｇ、０．３４５ｍｍｏｌ）の塩化メチレン６ｍＬ溶液にトリフルオロ酢酸６ｍＬを室温で加え、室温で１４時間攪拌した。溶媒留去後に得られた残渣に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液６ｍＬを加えて塩基性とし、析出した固体をろ取した。得られた固体を水で洗浄し、減圧下で乾燥させて、目的とする（Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−エトキシ−７−［１−（ピペラジン−１−イル）エチル］ベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（０．１４０ｇ、９６％）を得た。
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 1.40 (t, J = 6.6 Hz, 3H), 1.55 (d, J = 7.2 Hz, 3H), 2.45 (m, 2H), 2.62 (m, 2H), 2.85 (m, 4H), 4.16 (q, J = 7.2 Hz, 1H), 4.24 (q, J = 6.6 Hz, 2H), 7.05 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.07 (s, 1H), 7.34 (dd, J = 4.5, 8.1 Hz, 1H), 7.76 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.64 (dd, J = 1.5, 4.5 Hz, 1H), 9.29 (d, J = 8.1 Hz, 1H).【０１３８】
［合成実施例１６］
化合物２３（（Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−（シクロプロピルメトキシ）−７−［１−（ピペラジン−１−イル）エチル］ベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン）の合成
下記合成スキーム１１により、化合物２３を合成した。【０１３９】
スキーム１１
2015122504.tif 000033
【０１４０】
（ａ）工程１
［ＷＯ２０１１／１３６３１９］に記載の４−［１−（６−ヒドロキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル）エチル］ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．９０６ｇ、２．５０ｍｍｏｌ）のトルエン１０ｍＬ溶液にシクロプロピルメタノール（２１６ｍｇ、３．００ｍｍｏｌ）、トリフェニルホスフィン（０．９８４ｇ、３．７５ｍｍｏｌ）、及び４０％アゾジカルボン酸ジエチル／トルエン溶液（１．６３ｇ、３．７５ｍｍｏｌ）を加えて１１０℃で５時間攪拌した。反応溶液を濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル／クロロホルム）に付して得られた粗生成物をさらにシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して、４−｛１−［６−（シクロプロピルメトキシ）−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル］エチル｝ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．５７６ｇ、５５％）を得た。
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 0.33-0.38 (m, 2H), 0.64-0.70 (m, 2H), 1.28 (m, 1H), 1.42 (s, 9H), 1.59 (d, J = 7.2 Hz, 3H), 4.08 (m, 4H), 3.41 (m, 4H), 3.90 (m, 2H), 4.38 (q, J = 7.2 Hz, 1H), 4.61 (s, 2H), 6.62 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.56 (d, J = 8.7 Hz, 1H).【０１４１】
（ｂ）工程２
４−｛１−［６−（シクロプロピルメトキシ）−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル］エチル｝ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．２８４ｇ、０．６８２ｍｍｏｌ）のメタノール３ｍＬ溶液に［ＷＯ２０１１／１３６３１９］に記載の１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−カルバルデヒド（０．１００ｇ、０．６８２ｍｍｏｌ）とピペリジン（０．０４６５ｇ、０．５４６ｍｍｏｌ）を加え、６０℃で２時間攪拌した。反応溶液を室温まで冷却し、析出した固体をろ取して、（Ｚ）−４−（１−｛２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−（シクロプロピルメトキシ）−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル｝エチル）ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチル（０．２１５ｇ、５７％）を得た。
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 0.35-0.40 (m, 2H), 0.58-0.64 (m, 2H), 1.34 (m, 10H), 1.59 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 2.40-2.46 (m, 2H), 2.54-2.60 (m, 2H), 3.31 (m, 4H), 4.01 (dd, J = 6.6, 10.2 Hz, 1H), 4.10 (dd, J = 6.6, 10.2 Hz, 1H), 4.22 (q, J = 6.6 Hz, 1H), 7.02 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.07 (s, 1H), 7.35 (dd, J = 4.5, 8.1 Hz, 1H), 7.73 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.63 (dd, J = 1.5, 4.5 Hz, 1H), 9.24 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 14.37 (brs, 1H).【０１４２】
（ｃ）工程３
（Ｚ）−４−（１−｛２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−（シクロプロピルメトキシ）−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル｝エチル）ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．１８８ｇ、０．３４５ｍｍｏｌ）の塩化メチレン６ｍＬ溶液にトリフルオロ酢酸６ｍＬを室温で加え、室温で１４時間攪拌した。溶媒留去後に得られた残渣に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液６ｍＬを加えて塩基性とし、析出した固体をろ取した。得られた固体を水で洗浄し、減圧下で乾燥させて、目的とする（Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−（シクロプロピルメトキシ）−７−［１−（ピペラジン−１−イル）エチル］ベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（０．１５０ｇ、９８％）を得た。
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 0.37-0.41 (m, 2H), 0.61-0.64 (m, 2H), 1.30 (m, 1H), 1.59 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 2.55-2.59 (m, 2H), 2.66-2.74 (m, 2H), 2.94 (m, 4H), 4.02 (dd, J = 6.6, 10.5 Hz, 1H), 4.10 (dd, J = 6.6, 10.5 Hz, 1H), 4.24 (q, J = 6.6 Hz, 1H), 7.03 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.09 (s, 1H), 7.36 (dd, J = 4.2, 8.1 Hz, 1H), 7.75 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.64 (dd, J = 1.5, 4.2 Hz, 1H), 9.22 (d, J = 8.1 Hz, 1H).【０１４３】
［合成実施例１７］
化合物２４（（Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−メトキシ−７−［３−（ピペラジン−１−イル）プロパ−１−エン−２−イル］ベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン）の合成
以下の合成スキーム１２により、化合物２４を合成した。【０１４４】
スキーム１２
2015122504.tif 000034
【０１４５】
（ａ）工程１
［ＷＯ２０１１／１３６３１９］に記載の７−ヨード−６−メトキシベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（１．１６ｇ、４．００ｍｍｏｌ）を１，４−ジオキサン１２ｍＬに加えた。さらに２Ｍ炭酸ナトリウム水溶液４ｍＬ、４，４，５，５−テトラメチル−２−（プロパ−１−エン−２−イル）−１，３，２−ジオキサボロラン（１．０１ｇ、６．００ｍｍｏｌ）、および［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）（０．２９３ｇ、０．４００ｍｍｏｌ）を加え、マイクロウェーブ照射器（バイオタージ社製Ｉｎｉｔｉａｔｏｒ）で１４０℃で１０分間加熱した。反応溶液を水２０ｍＬに注ぎ、さらに飽和食塩水２０ｍＬを加えた。酢酸エチルで３回抽出し、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させた。溶媒を留去して得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して、６−メトキシ−７−（プロパ−１−エン−２−イル）ベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（０．４０１ｇ、４９％）を得た。
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 2.09 (s, 3H), 3.93 (s, 3H), 4.63 (s, 2H), 5.09 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 5.43 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 6.71 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.60 (d, J = 8.7 Hz, 1H).【０１４６】
（ｂ）工程２
メトキシ−７−（プロパ−１−エン−２−イル）ベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（０．１０２ｇ、０．５００ｍｍｏｌ）の四塩化炭素５ｍＬ溶液にＮ−ブロモスクシンイミド（ＮＢＳ）（０．０９７９ｇ、０．５５０ｍｍｏｌ）と過酸化ベンゾイル（ＢＰＯ）（０．００６０８ｇ、０．０２５０ｍｍｏｌ）を加え、４時間加熱還流させた。反応溶液をセライト濾過し、ろ液を濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して、７−（３−ブロモプロパ−１−エン−２−イル）−６−メトキシベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（０．０４９０ｇ、３４％）を得た。
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 3.95 (s, 3H), 4.39 (s, 2H), 4.66 (s, 2H), 5.39 (s, 1H), 5.78 (s, 1H), 6.74 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.66 (d, J = 8.7 Hz, 1H).【０１４７】
（ｃ）工程３
７−（３−ブロモプロパ−１−エン−２−イル）−６−メトキシベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（０．０４４８ｇ、０．１５８ｍｍｏｌ）の塩化メチレン２ｍＬ溶液にＮ−Ｂｏｃ−ピペラジン（０．０６１８ｇ、０．３３２ｍｍｏｌ）を加え、室温で３日間攪拌した。溶媒を留去して得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して、４−［２−（６−メトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル）アリル］ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．０５１８ｇ、８４％）を得た。
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 1.45 (s, 9H), 2.42 (t, J = 5.1 Hz, 4H), 3.27 (s, 2H), 3.34 (t, J = 5.1 Hz, 4H), 3.90 (s, 3H), 4.60 (s, 2H), 5.26 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 5.62 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 6.70 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.60 (d, J = 8.7 Hz, 1H).【０１４８】
（ｄ）工程４
４−［２−（６−メトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル）アリル］ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．０１９４ｇ、０．０４９９ｍｍｏｌ）のメタノール１ｍＬ溶液に［ＷＯ２０１１／１３６３１９］に記載の１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−カルバルデヒド（０．００７３４ｇ、０．０４９９ｍｍｏｌ）とピペリジン（０．００３４０ｇ、０．０３９９ｍｍｏｌ）を加え、６０℃で２時間攪拌した。溶媒を留去して得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（メタノール／クロロホルム）で精製して、（Ｚ）−４−（２−｛２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−メトキシ−３−オキソ−２，３ジヒドロベンゾフラン−７−イル｝アリル）ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．０２４０ｇ、９２％）を得た。
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 1.40 (s, 9H), 2.45 (m, 4H), 3.27 (m, 4H), 3.35 (s, 2H), 3.96 (s, 3H), 5.47 (s, 1H), 5.87 (s, 1H), 6.83 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.22 (dd, J = 4.5, 8.1 Hz, 1H), 7.23 (s, 1H), 7.78 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.63 (dd, J = 1.5, 4.5 Hz, 1H), 8.95 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 11.50 (brs, 1H).【０１４９】
（ｅ）工程５
（Ｚ）−４−（２−｛２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−メトキシ−３−オキソ−２，３ジヒドロベンゾフラン−７−イル｝アリル）ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．０２４０ｇ、０．０４６４ｍｍｏｌ）の塩化メチレン１ｍＬ溶液にトリフルオロ酢酸１ｍＬを加え、室温で１４時間攪拌した。反応溶液を濃縮して得られた残渣に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えて塩基性とし、析出した固体をろ取した。ろ取した固体を水で洗浄し、減圧下で乾燥させて、目的とする（Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−メトキシ−７−［３−（ピペラジン−１−イル）プロパ−１−エン−２−イル］ベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（０．００９２０ｇ、４７％）を得た。
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 2.32 (m, 4H), 2.46 (m, 4H), 3.25 (s, 2H), 3.94 (s, 3H), 5.43 (s, 1H), 5.82 (s, 1H), 7.03 (s, 1H), 7.06 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.28 (dd, J = 4.2, 8.7 Hz, 1H), 7.79 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.61 (d, J = 4.2 Hz, 1H), 8.92 (d, J = 8.7 Hz, 1H).【０１５０】
［合成実施例１８］
化合物２５（（Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−７−［（３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−３−イル）メチル］−６−メトキシベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン）の合成
以下の合成スキーム１３により、化合物２５を合成した。【０１５１】
スキーム１３
2015122504.tif 000035
【０１５２】
（ａ）工程１
［ＷＯ２０１１／１３６３１９］に記載の７−（ブロモメチル）−６−メトキシベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（０．３０３ｇ，１．１８ｍｍｏｌ）の塩化メチレン５ｍＬ溶液に炭酸カリウム（０．１６３ｇ、１．１８ｍｍｏｌ）を加えた。反応溶液に８−Ｂｏｃ−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン（０．２５０ｇ、１．１８ｍｍｏｌ）の塩化メチレン２ｍＬ溶液を滴下し、室温で１５時間攪拌を続けた。反応溶液をろ過し、ろ液を濃縮して得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して、３−［（６−メトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル）メチル］−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．１８２ｇ、３９％）を得た。
1H NMR (300MHz, CDCl3) δ 1.43 (s, 9H), 1.77 (m, 4H), 2.37 (m, 2H), 2.60 (dd, J = 2.1, 11.1 Hz, 2H), 3.65 (s, 2H), 3.91 (s, 3H), 4.08-4.16 (m, 2H), 4.61 (s, 2H), 6.68 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.59 (d, J = 9.0 Hz, 1H).【０１５３】
（ｂ）工程２
３−［（６−メトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル）メチル］−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．０８００ｇ、０．２０６ｍｍｏｌ）のメタノール０．８ｍＬ溶液に［ＷＯ２０１１／１３６３１９］に記載の１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−カルバルデヒド（０．０３０３ｇ、０．２０６ｍｍｏｌ）とピペリジン（０．０１４０ｇ、０．１６４ｍｍｏｌ）を加え、６０℃で２時間攪拌した。反応溶液を室温まで冷却し、析出した固体をろ取して、（Ｚ）−３−（｛２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−メトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル｝メチル）−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．０６１３ｇ、５７％）を得た。
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 1.34 (s, 9H), 1.56 (m, 4H), 2.28 (d, J = 10.2 Hz, 2H), 2.63-2.67 (m, 2H), 3.75 (s, 2H), 3.98 (s, 5H), 7.03 (s, 1H), 7.07 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.39 (dd, J = 4.2, 8.1 Hz, 1H), 7.80 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.63 (dd, J = 1.5, 4.2 Hz, 1H), 8.95 (dd, J = 1.5, 8.1 Hz, 1H), 14.38 (brs, 1H).【０１５４】
（ｃ）工程３
（Ｚ）−３−（｛２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−メトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル｝メチル）−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−カルボン酸ｔｅｒｔブチル（０．０５９６ｇ、０．１１５ｍｍｏｌ）の塩化メチレン４ｍＬ溶液にトリフルオロ酢酸２ｍＬを加え、室温で１６時間攪拌した。反応溶液を濃縮して得られた残渣に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液６ｍＬを加えて塩基性とし、析出した固体をろ取した。ろ取した固体を水で洗浄し、減圧下で乾燥させて、目的とする（Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−７−［（３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−３−イル）メチル］−６−メトキシベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（０．０２７０ｇ、５６％）を得た。
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 1.51-1.63 (m, 4H), 2.40 (d, J = 11.7 Hz, 2H), 2.66-2.70 (m, 2H), 3.55 (m, 2H), 3.79 (s, 2H), 3.97 (s, 3H), 7.05 (s, 1H), 7.08 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.40 (dd, J = 4.5, 8.7 Hz, 1H), 7.81 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.65 (dd, J = 1.5, 4.5 Hz, 1H), 8.95 (dd, J = 1.5, 8.1 Hz, 1H).【０１５５】
［合成実施例１９］
化合物２６（（Ｓ，Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−メトキシ−７−｛［３−（メチルアミノ）ピロリジン−１−イル］メチル｝ベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン）の合成
下記合成スキーム１４により、化合物２６を合成した。【０１５６】
スキーム１４
2015122504.tif 000036
【０１５７】
（ａ）工程１
［ＷＯ２０１１／１３６３１９］に記載の７−（ブロモメチル）−６−メトキシベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（０．５１４ｇ、２．００ｍｍｏｌ）の塩化メチレン８ｍＬ溶液に炭酸カリウム（０．２７６ｇ、２．００ｍｍｏｌ）と（Ｓ）−メチル（ピロリジン−３−イル）カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．４０１ｇ、２．００ｍｍｏｌ）を加え、室温で１６時間攪拌を続けた。反応溶液をろ過し、ろ液を濃縮して得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（メタノール／クロロホルム）で精製して、（Ｓ）−｛１−［（６−メトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル）メチル］ピロリジン−３−イル｝（メチル）カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．２４６ｇ、３２％）を得た。
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 1.43 (s, 9H), 1.67-1.76 (m, 1H), 2.03-2.14 (m, 1H), 2.51-2.56 (m, 2H), 2.69-2.76 (m, 2H), 2.78 (s, 3H), 3.72 (s, 2H), 3.93 (s, 3H), 4.63 (s, 2H), 4.73 (m, 1H), 6.70 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.61 (d, J = 8.1 Hz, 1H).【０１５８】
（ｂ）工程２
（Ｓ）−｛１−［（６−メトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル）メチル］ピロリジン−３−イル｝（メチル）カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．１００ｇ、０．２６６ｍｍｏｌ）のメタノール１ｍＬ溶液に［ＷＯ２０１１／１３６３１９］に記載の１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−カルバルデヒド（０．０３９１ｇ、０．２６６ｍｍｏｌ）とピペリジン（０．０１８１ｇ、０．２１３ｍｍｏｌ）を加え、６０℃で２時間攪拌した。反応溶液を濃縮して得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（メタノール／クロロホルム）で精製して、（Ｓ，Ｚ）−［１−（｛２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−メトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル｝メチル）ピロリジン−３−イル］（メチル）カルバミン酸ｔｅｒｔブチル（０．０９６２ｇ、７１％）を得た。
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 1.31 (s, 9H), 1.59-1.65 (m, 1H), 1.94-2.06 (m, 1H), 2.54 (s, 3H), 2.59-2.82 (m, 4H), 3.81 (d, J = 12.6, 1H), 3.87 (d, J = 12.6, 1H), 3.98 (s, 3H), 4.57 (m, 1H), 7.02 (s, 1H), 7.08 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.39 (dd, J = 4.5, 8.7 Hz, 1H), 7.80 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.64 (dd, J = 1.5, 4.5 Hz, 1H), 9.06 (dd, J = 1.5, 8.7 Hz, 1H), 14.40 (brs, 1H).【０１５９】
（ｃ）工程３
（Ｓ，Ｚ）−［１−（｛２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−メトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル｝メチル）ピロリジン−３−イル］（メチル）カルバミン酸ｔｅｒｔブチル（０．０９０２ｇ、０．１７８ｍｍｏｌ）の塩化メチレン８ｍＬ溶液にトリフルオロ酢酸４ｍＬを加え、室温で１６時間攪拌した。反応溶液を濃縮して得られた残渣に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液８ｍＬを加えて塩基性とし、クロロホルムで５回抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を留去した。得られた固体をアセトニトリルで洗浄後、減圧下で乾燥させて、目的とする（Ｓ，Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−メトキシ−７−｛［３−（メチルアミノ）ピロリジン−１−イル］メチル｝ベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（０．０３７６ｇ、５２％）を得た。
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 1.39-1.49 (m, 1H), 1.85-1.97 (m, 1H), 2.16 (s, 3H), 2.31 (dd, J = 5.7, 9.6 Hz, 1H), 2.60 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 2.81-2.87 (m, 1H), 3.06 (m, 1H), 3.82 (s, 2H), 3.98 (s, 3H), 7.03 (s, 1H), 7.07 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.37 (dd, J = 4.5, 8.1 Hz, 1H), 7.79 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.63 (dd, J = 1.5, 4.5 Hz, 1H), 9.05 (d, J = 8.1 Hz, 1H).【０１６０】
［合成実施例２０］
化合物２７（（Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−メトキシ−７−［１−（ピペラジン−１−イル）プロパ−２−イル］ベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン）の合成
下記合成スキーム１５により、化合物２７を合成した。【０１６１】
スキーム１５
2015122504.tif 000037
【０１６２】
（ａ）工程１
合成実施例１７の工程１、２、及び３と同様の操作で合成した４−［２−（６−メトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル）アリル］ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（２．６ｇ、６．７ｍｍｏｌ）とクロロトリス（トリフェニルホスフィン）ロジウム（Ｉ）（１．２ｇ、１．３ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン２００ｍＬに加え、水素雰囲気下（５０Ｐｓｉ、５０℃）で１６時間攪拌した。反応溶液を濃縮したのち、酢酸エチル５０ｍＬとメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル２００ｍＬで希釈した。希釈液をセライト濾過し、ろ液を濃縮して得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル／石油エーテル）で精製して、４−［２−（６−メトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル）プロピル］ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１．５ｇ、５８％）を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1.29 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.44 (s, 9H), 2.25-2.45 (m, 4H), 2.55-2.75 (m, 2H), 3.25-3.40 (m, 4H), 3.45-3.65 (m, 1H), 3.90 (s, 3H), 4.60 (s, 2H), 6.66 (d, J = 8.8 Ha, 1H), 7.52 (d, J = 8.8 Ha, 1H).【０１６３】
（ｂ）工程２
４−［２−（６−メトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル）プロピル］ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．１９５ｇ、０．５００ｍｍｏｌ）のメタノール２ｍＬ溶液に［ＷＯ２０１１／１３６３１９］に記載の１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−カルバルデヒド（０．０７３６ｇ、０．５００ｍｍｏｌ）とピペリジン（０．０３４１ｇ、０．４００ｍｍｏｌ）を加え、６０℃で２時間攪拌した。反応溶液を室温まで冷却し、析出した固体をろ取して、（Ｚ）−４−（２−｛２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−メトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル｝プロピル）ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．１９１ｇ、７３％）を得た。
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 1.34 (s, 9H), 1.38 (d, J = 7.3 Hz, 3H), 2.27-2.40 (m, 4H), 2.68-2.81 (m, 2H), 3.16-3.20 (m, 4H), 3.62-3.69 (m, 1H), 3.96 (s, 3H), 7.02 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.13 (s, 1H), 7.33 (dd, J = 4.4, 8.1 Hz, 1H), 7.71 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 8.63 (dd, J = 1.5, 4.4 Hz, 1H), 8.77 (dd, J = 1.5, 8.1 Hz, 1H), 14.31 (brs, 1H).【０１６４】
（ｃ）工程３
（Ｚ）−４−（２−｛２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−メトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル｝プロピル）ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．１８８ｇ、０．３６２ｍｍｏｌ）の塩化メチレン１２ｍＬ溶液にトリフルオロ酢酸６ｍＬを加え、室温で１８時間攪拌した。反応溶液を濃縮して得られた残渣に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液１５ｍＬを加えて塩基性とし、析出した固体をろ取した。ろ取した固体を水で洗浄し、減圧下で乾燥させて、目的とする（Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−メトキシ−７−［１−（ピペラジン−１−イル）プロパ−２−イル］ベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（０．１３５ｇ、８９％）を得た。
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 1.38 (d, J = 7.2 Hz, 3H), 2.30 (m, 4H), 2.58-2.73 (m, 4H), 3.21 (m, 2H), 3.63-3.70 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 7.02 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.12 (s, 1H), 7.27 (dd, J = 4.5, 8.1 Hz, 1H), 7.70 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.59 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 8.78 (d, J = 8.1 Hz, 1H).【０１６５】
［合成実施例２１］
化合物２８（（Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−クロロ−７−（ピペリジン−４−イルメチル）ベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン）の合成
下記合成スキーム１６により、化合物２８を合成した。【０１６６】
スキーム１６
2015122504.tif 000038
【０１６７】
（ａ）工程１
３−クロロフェノール（６０．０ｇ、４６８ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン６００ｍＬ溶液に０℃で６０％水素化ナトリウム（２２．５ｇ、５６２ｍｍｏｌ）を３０分かけて加えた。反応溶液を１５℃で１時間攪拌し、ジエチルカルバミン酸クロリド（７６．１ｇ、５６１ｍｍｏｌ）を加え、反応溶液を１５℃で３時間攪拌した。反応溶液を氷水８００ｍＬに注ぎ、酢酸エチルで２回抽出し、まとめた有機層を水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を留去して得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル／石油エーテル）で精製して、Ｎ，Ｎ−ジエチルカルバミン酸３−クロロフェニル（９８．０ｇ、９２％）を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1.21-1.29 (m, 6H), 3.39-3.45 (m, 4H), 7.04-7.07 (m, 1H), 7.18-7.21 (m, 2H), 7.28-7.32 (m, 1H).【０１６８】
（ｂ）工程２
Ｎ，Ｎ−ジエチルカルバミン酸３−クロロフェニル（５９．０ｇ、０．２５９ｍｏｌ）とＮ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルエチレンジアミン（ＴＭＥＤＡ）（３６．２ｇ、３１２ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン溶液６００ｍＬに−６０℃でｓｅｃ−ブチルリチウム（２６０ｍＬ、３３８ｍｍｏｌ、１．３Ｍヘキサン溶液）を１時間かけて滴下した。−６０℃で２時間攪拌したのち、ヨウ素（８５．６ｇ、３３８ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン１５０ｍＬ溶液を−６０℃で３０分間かけて滴下した。滴下終了後、反応溶液を１時間かけて２０℃まで昇温させた。飽和チオ硫酸水素ナトリウム水溶液８００ｍＬを加えて反応を終了させ、酢酸エチルで２回抽出し、有機層を２Ｎ塩酸、ついで飽和食塩水で洗浄した。無水硫酸ナトリウムで乾燥させたのち、溶媒を留去して得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル／石油エーテル）で精製して、Ｎ，Ｎ−ジエチルカルバミン酸３−クロロ−２−ヨードフェニル（５７．０ｇ、６２％）を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1.25 (t, J = 7.2 Hz, 3H), 1.35 (t, J = 7.2 Hz, 3H), 3.43 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.56 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 7.08 (dd, J = 2.0, 7.2 Hz, 1H), 7.28-7.34 (m, 2H).【０１６９】
（ｃ）工程３
Ｎ，Ｎ−ジエチルカルバミン酸３−クロロ−２−ヨードフェニル（５７．０ｇ、１６１ｍｍｏｌ）のエタノール４００ｍＬ溶液に水酸化ナトリウム（３２．０ｇ、８００ｍｍｏｌ）を２５℃で加え、反応溶液を２時間加熱還流させた。減圧下でエタノールを留去し、残渣を水４００ｍＬに溶解させ、石油エーテルで抽出した。水層を２Ｎ塩酸で中和し、酢酸エチルで抽出した。まとめた有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で溶媒を留去して、３−クロロ−２−ヨードフェノール（４１．０ｇ、定量的）を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 5.58 (brs, 1H), 6.90 (dd, J = 1.2, 8.4 Hz, 1H), 7.06 (dd, J = 1.2, 8.0 Hz, 1H), 7.21 (t, J = 8.0 Hz, 1H).【０１７０】
（ｄ）工程４
３−クロロ−２−ヨードフェノール（４１．０ｇ、１６１ｍｍｏｌ）のアセトン４００ｍＬ溶液に、炭酸カリウム（２６．７ｇ、１９４ｍｍｏｌ）とブロモ酢酸ｔｅｒｔ−ブチル（３４．６ｇ、１７７ｍｍｏｌ）を加え、５時間加熱還流した。反応溶液を濾過し、濾液を濃縮して得られた粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル／石油エーテル）で精製して、２−（３−クロロ−２−ヨードフェノキシ）酢酸ｔｅｒｔ−ブチル（５８．０ｇ、９７％）を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1.50 (s, 9H), 4.61 (s, 2H), 6.58 (dd, J = 1.2, 8.0 Hz, 1H), 7.15 (dd, J = 1.2, 8.0 Hz, 1H), 7.23 (t, J = 8.0 Hz, 1H).【０１７１】
（ｅ）工程５
２−（３−クロロ−２−ヨードフェノキシ）酢酸ｔｅｒｔ−ブチル（５５．０ｇ、１４９ｍｍｏｌ）の塩化メチレン１００ｍＬ溶液にトリフルオロ酢酸５０ｍＬを添加し、２０℃で４時間攪拌した。減圧下で反応溶液を濃縮して、２−（３−クロロ−２−ヨードフェノキシ）酢酸（４５．７ｇ、９８％）を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.78 (s, 2H), 6.64 (dd, J = 1.2, 8.0 Hz, 1H), 7.19 (dd, J = 1.2, 8.0 Hz, 1H), 7.28 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 8.83 (brs, 1H).【０１７２】
（ｆ）工程６
２−（３−クロロ−２−ヨードフェノキシ）酢酸（４１．０ｇ、１３１ｍｍｏｌ）の塩化メチレン４００ｍＬ溶液に０℃で塩化オキサリル（３３．４ｇ、２６３ｍｍｏｌ）を加え、続いてＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５滴）を加え、１５℃で２時間攪拌した。反応溶液を減圧下で濃縮して得られた酸塩化物（４３．５ｇ、定量的）を、これ以上精製せずに次の反応に使用した。【０１７３】
（ｇ）工程７
工程６で得られた酸塩化物（５０．９ｇ、１５４ｍｍｏｌ）の塩化メチレン８００ｍＬ溶液に、０℃で塩化アルミニウム（４０．０ｇ、３００ｍｍｏｌ）を２０分間かけて加え、反応溶液を２０℃で１．５時間攪拌した。反応溶液を氷水に注ぎ、２Ｎ塩酸で２回洗浄し、酢酸エチルで２回抽出した。まとめた有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させたのち、減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル／石油エーテル）に付し、得られた粗生成物をメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルで懸濁洗浄することにより、６−クロロ−７−ヨードベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（７．８ｇ、１７％）を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.81 (s, 2H), 7.59 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.26 (d, J = 8.4 Hz, 1H).【０１７４】
（ｈ）工程８
［ＷＯ２０１１／１３６３１９］に記載の４−メチレンピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（３．０ｇ、１５ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン８０ｍＬ溶液に９−ＢＢＮ（３０ｍＬ、１５ｍｍｏｌ、０．５Ｍテトラヒドロフラン溶液）を滴下した。３時間加熱還流させた後、室温まで冷却した。【０１７５】
（ｉ）工程９
工程８で調製したテトラヒドロフラン溶液に、工程７で合成した６−クロロ−７−ヨードベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（２．９４ｇ、１０ｍｍｏｌ）、フッ化セシウム（４．５６ｇ、３０ｍｍｏｌ）、および水（３２ｍＬ）を加えた。ついでビス（トリ−ｔｅｒｔ−ブチルホスフィン）パラジウム（０）（０．２６０ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）を添加し、１２時間還流させた。酢酸エチルで２回抽出し、まとめた有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を留去して得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル／石油エーテル）に付し、得られた１．８ｇの粗生成物を逆相クロマトグラフィー（水／アセトニトリル）で精製して、４−［（６−クロロ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル）メチル］ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１．０ｇ、２７％）を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1.27-1.37 (m, 2H), 1.48 (s, 9H), 1.62 (d, J = 12.0 Hz, 2H), 1.83-1.92 (m, 1H), 2.62-2.71 (m, 2H), 2.79 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 4.11 (brs, 2H), 4.70 (s, 2H), 7.13 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.48 (d, J = 8.4 Hz, 1H).【０１７６】
（ｊ）工程１０
４−［（６−クロロ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル）メチル］ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．１８３ｇ、０．５００ｍｍｏｌ）のメタノール２ｍＬ溶液に［ＷＯ２０１１／１３６３１９］に記載の１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−カルバルデヒド（０．０７３６ｇ、０．５００ｍｍｏｌ）とピペリジン（０．０３４１ｇ、０．４００ｍｍｏｌ）を加え、６０℃で２時間攪拌した。反応溶液を室温まで冷却し、析出した固体をろ取して、（Ｚ）−４−（｛２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−クロロ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル｝メチル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．１９１ｇ、７７％）を得た。
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 1.11-1.23 (m, 2H), 1.32 (s, 9H), 1.62-1.66 (m, 2H), 1.90-2.04 (m, 1H), 2.59-2.69 (m, 2H), 2.96 (d, J = 7.3 Hz, 2H), 3.88-3.92 (m, 2H), 7.18 (s, 1H), 7.38 (dd, J = 5.1, 8.0 Hz, 1H), 7.44 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.73 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 8.65 (dd, J = 1.5, 5.1 Hz, 1H), 8.88 (dd, 1.5, 8.0 Hz, 1H), 14.49 (brs, 1H).【０１７７】
（ｋ）工程１１
（Ｚ）−４−（｛２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−クロロ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル｝メチル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．１８８ｇ、０．３８０ｍｍｏｌ）の塩化メチレン８ｍＬ溶液にトリフルオロ酢酸４ｍＬを加え、室温で２０時間攪拌した。反応溶液を濃縮して得られた残渣に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液１０ｍＬを加えて塩基性とし、析出した固体をろ取した。ろ取した固体を水で洗浄し、減圧下で乾燥させて、目的とする（Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−クロロ−７−（ピペリジン−４−イルメチル）ベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（０．１２１ｇ、８１％）を得た。
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 1.42-1.55 (m, 2H), 1.80 (d, J = 13.2 Hz, 2H), 2.05-2.12 (m, 1H), 2.74-2.83 (m, 2H), 2.99 (d, J = 7.3 Hz, 2H), 3.24 (d, J = 12.5 Hz, 2H), 7.21 (s, 1H), 7.45 (dd, J = 4.4, 8.1 Hz, 1H), 7.47 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.76 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 8.68 (dd, J = 1.5, 4.4 Hz, 1H), 8.88 (dd, 1.5, 8.1 Hz, 1H).【０１７８】
［合成実施例２２］
化合物２９（（Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−フルオロ−７−（ピペリジン−４−イルメチル）ベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン）の合成
前記合成スキーム１６により、化合物２９を合成した。【０１７９】
（ａ）工程１
３−フルオロフェノール（１３０ｇ、１．１６ｍｏｌ）のテトラヒドロフラン６００ｍＬ溶液に０℃で６０％水素化ナトリウム（５５．６ｇ、１．３９ｍｏｌ）を３０分かけて加えた。反応溶液を１５℃で１時間攪拌し、ジエチルカルバミン酸クロリド（１８８ｇ、１．３９ｍｏｌ）を加え、反応溶液を１５℃で３時間攪拌した。反応溶液を氷水２０００ｍＬに注ぎ、酢酸エチルで３回抽出し、まとめた有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を留去して得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル／石油エーテル）で精製して、Ｎ，Ｎ−ジエチルカルバミン酸３−フルオロフェニル（１４４ｇ、５９％）を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1.18-1.33 (m, 6H), 3.36-3.54 (m, 4H), 6.88-6.98 (m, 3H), 7.29-7.36 (m, 1H).【０１８０】
（ｂ）工程２
Ｎ，Ｎ−ジエチルカルバミン酸３−フルオロフェニル（１００ｇ、４７４ｍｍｏｌ）とＮ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルエチレンジアミン（６６ｇ、５６９ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン溶液１５００ｍＬに−６０℃でｓｅｃ−ブチルリチウム（４７３ｍＬ、６１５ｍｍｏｌ、１．３Ｍヘキサン溶液）を１時間かけて滴下した。−６０℃で２時間攪拌したのち、ヨウ素（１５６ｇ、６１６ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン２００ｍＬ溶液を−６０℃で３０分間かけて滴下した。滴下終了後、反応溶液を１時間かけて２０℃まで昇温させた。飽和チオ硫酸水素ナトリウム水溶液８００ｍＬを加えて反応を終了させ、酢酸エチルで３回抽出し、有機層を２Ｎ塩酸、ついで飽和食塩水で洗浄した。無水硫酸ナトリウムで乾燥させたのち、溶媒を留去して得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル／石油エーテル）で精製して、Ｎ，Ｎ−ジエチルカルバミン酸３−フルオロ−２−ヨードフェニル（１１０ｇ、６９％）を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1.26 (t, J = 7.2 Hz, 3H), 1.36 (t, J = 7.2 Hz, 3H), 3.43 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.56 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 6.92-6.98 (m, 1H), 7.03 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.34 (m, 1H).【０１８１】
（ｃ）工程３
Ｎ，Ｎ−ジエチルカルバミン酸３−フルオロ−２−ヨードフェニル（１５３ｇ、４５４ｍｍｏｌ）のエタノール１５００ｍＬ溶液に水酸化ナトリウム（９０．０ｇ、２２５０ｍｍｏｌ）を２５℃で加え、反応溶液を２時間加熱還流させた。減圧下でエタノールを留去し、残渣を水１０００ｍＬに溶解させ、石油エーテルで抽出した。水層を２Ｎ塩酸で中和し、酢酸エチルで３回抽出した。まとめた有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で溶媒を留去して、３−フルオロ−２−ヨードフェノールの粗生成物（１０７ｇ）を得た。【０１８２】
（ｄ）工程４
工程３で得られた３−フルオロ−２−ヨードフェノールの粗生成物（１０７ｇ）をアセトン１０００ｍＬに溶解させた。炭酸カリウム（７４．４ｇ、５３９ｍｍｏｌ）とブロモ酢酸ｔｅｒｔ−ブチル（９５．９ｇ、４９５ｍｍｏｌ）を加え、５時間加熱還流した。反応溶液を濾過し、濾液を濃縮して得られた粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル／石油エーテル）で精製して、２−（３−フルオロ−２−ヨードフェノキシ）酢酸ｔｅｒｔ−ブチル（１５６ｇ、９８％）を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1.47-1.52 (m, 9H), 4.63 (s, 2H), 6.50 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.74-6.79 (m, 1H), 7.22-7.28 (m, 1H).【０１８３】
（ｅ）工程５
２−（３−フルオロ−２−ヨードフェノキシ）酢酸ｔｅｒｔ−ブチル（１５６ｇ、４４３ｍｍｏｌ）の塩化メチレン３００ｍＬ溶液にトリフルオロ酢酸１２０ｍＬを添加し、２０℃で４時間攪拌した。減圧下で反応溶液を濃縮して、２−（３−フルオロ−２−ヨードフェノキシ）酢酸（１１２ｇ、８５％）を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.79 (s, 2H), 6.56 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.79-6.83 (m, 1H), 7.23-7.31 (m, 1H), 9.56 (brs, 1H).【０１８４】
（ｆ）工程６
２−（３−フルオロ−２−ヨードフェノキシ）酢酸（１１２ｇ、３７８ｍｍｏｌ）の塩化メチレン１０００ｍＬ溶液に０℃で塩化オキサリル（９６．９ｇ、７５７ｍｍｏｌ）を加え、続いてＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５滴）を加え、１５℃で２時間攪拌した。反応溶液を減圧下で濃縮して得られた酸塩化物（１１９ｇ、定量的）を、これ以上精製せずに次の反応に使用した。【０１８５】
（ｇ）工程７
工程６で得られた酸塩化物（１１９ｇ、３７８ｍｍｏｌ）の塩化メチレン１５００ｍＬ溶液に、０℃で塩化アルミニウム（１０１ｇ、７５７ｍｍｏｌ）を２０分間かけて加え、反応溶液を２０℃で１．５時間攪拌した。反応溶液を氷水に注ぎ、２Ｎ塩酸で２回洗浄し、酢酸エチルで２回抽出した。まとめた有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させたのち、減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル／石油エーテル）で精製して、６−フルオロ−７−ヨードベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（９ｇ、９％）を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.81 (s, 2H), 6.88 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.65-7.75 (m, 1H).【０１８６】
（ｈ）工程８
［ＷＯ２０１１／１３６３１９］に記載の４−メチレンピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（３．０ｇ、１５ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン８０ｍＬ溶液に９−ＢＢＮ（３０ｍＬ、１５ｍｍｏｌ、０．５Ｍテトラヒドロフラン溶液）を滴下した。３時間加熱還流させた後、室温まで冷却した。【０１８７】
（ｉ）工程９
工程８で調製したテトラヒドロフラン溶液に、工程７で合成した６−フルオロ−７−ヨードベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（２．７８ｇ、１０ｍｍｏｌ）、フッ化セシウム（４．５６ｇ、３０ｍｍｏｌ）、および水（３２ｍＬ）を加えた。ついでビス（トリ−ｔｅｒｔ−ブチルホスフィン）パラジウム（０）（０．５００ｍｇ、０．９８ｍｍｏｌ）を添加し、１２時間還流させた。酢酸エチルで２回抽出し、まとめた有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を留去して得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル／石油エーテル）で精製して、４−［（６−フルオロ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル）メチル］ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１．２ｇ、３４％）を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1.19-1.32 (m, 2H), 1.47 (s, 9H), 1.65 (brs, 1H), 1.73-1.92 (m, 2H), 2.66 (m, 4H), 4.01-4.20 (m, 2H), 4.70 (s, 2H), 6.80-6.85 (m, 1H), 7.56 (dd, J = 5.6, 8.4 Hz, 1H).【０１８８】
（ｊ）工程１０
４−［（６−フルオロ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル）メチル］ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．０５４６ｇ、０．１５６ｍｍｏｌ）のメタノール１ｍＬ溶液に［ＷＯ２０１１／１３６３１９］に記載の１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−カルバルデヒド（０．０２３０ｇ、０．１５６ｍｍｏｌ）とピペリジン（０．０１０６ｇ、０．１２５ｍｍｏｌ）を加え、６０℃で２時間攪拌した。反応溶液を室温まで冷却し、析出した固体をろ取して、（Ｚ）−４−（｛２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−フルオロ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル｝メチル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．０４２５ｇ、５７％）を得た。
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 1.10-1.23 (m, 2H), 1.35 (s, 9H), 1.64-1.69 (m, 2H), 1.83-1.95 (m, 1H), 2.57-2.73 (m, 2H), 2.83 (d, J = 7.3 Hz, 2H), 3.89-3.93 (m, 2H), 7.15 (s, 1H), 7.19-7.25 (m, 1H), 7.38 (dd, J = 4.4, 8.0 Hz, 1H), 7.80 (dd, J = 5.9, 8.8 Hz, 1H), 8.65 (dd, J = 1.5, 4.4 Hz, 1H), 8.88 (dd, 1.5, 8.0 Hz, 1H), 14.49 (brs, 1H).【０１８９】
（ｋ）工程１１
（Ｚ）−４−（｛２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−フルオロ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル｝メチル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．０４１２ｇ、０．０８６０ｍｍｏｌ）の塩化メチレン４ｍＬ溶液にトリフルオロ酢酸２ｍＬを加え、室温で１６時間攪拌した。反応溶液を濃縮して得られた残渣に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液８ｍＬを加えて塩基性とし、析出した固体をろ取した。ろ取した固体を水で洗浄し、減圧下で乾燥させて、目的とする（Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−フルオロ−７−（ピペリジン−４−イルメチル）ベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（０．０２５１ｇ、７７％）を得た。
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 1.32-1.45 (m, 2H), 1.76-1.80 (m, 2H), 1.91-2.04 (m, 1H), 2.68-2.77 (m, 2H), 2.85 (d, J = 7.3 Hz, 2H), 3.19 (d, J = 12.5 Hz, 2H), 7.18 (s, 1H), 7.21-7.27 (m, 1H), 7.43 (dd, J = 4.4, 8.1 Hz, 1H), 7.82 (dd, J = 5.1, 8.1 Hz, 1H), 8.67 (dd, J = 1.5, 4.4 Hz, 1H), 8.88 (dd, 1.5, 8.1 Hz, 1H).【０１９０】
［合成実施例２３］
化合物３１（（Ｒ，Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−７−［（２−（アミノメチル）ピロリジン−１−イル）メチル］−６−メトキシベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン）の合成
下記合成スキーム１７により、化合物３１を合成した。【０１９１】
スキーム１７
2015122504.tif 000039
【０１９２】
（ａ）工程１
［ＷＯ２０１１／１３６３１９］に記載の７−（ブロモメチル）−６−メトキシベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（０．５１４ｇ、２．００ｍｍｏｌ）の塩化メチレン８ｍＬ溶液に炭酸カリウム（０．２７６ｇ、２．００ｍｍｏｌ）と（Ｒ）−（ピロリジン−２−イルメチル）カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．４０１ｇ、２．００ｍｍｏｌ）を加え、室温で１６時間攪拌を続けた。反応溶液をろ過し、ろ液を濃縮して得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（メタノール／クロロホルム）で精製して、（Ｒ）−（｛１−［（６−メトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル）メチル］ピロリジン−２−イル｝メチル）カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．２１２ｇ、２８％）を得た。
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 1.39 (s, 9H), 1.47-1.56 (m, 3H), 1.71-1.80 (m, 1H), 2.24-2.33 (m, 1H), 2.54-2.59 (m, 1H), 2.73-2.78 (m, 1H), 2.84-2.92 (m, 1H), 3.17-3.25 (m, 1H), 3.47 (d, J = 12.5 Hz, 1H), 3.82 (d, J = 12.5 Hz, 1H), 3.92 (s, 3H), 4.77 (s, 2H), 6.32 (t, J = 5.1 Hz, 1H), 6.89 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.58 (d, J = 8.8 Hz, 1H).【０１９３】
（ｂ）工程２
（Ｒ）−（｛１−［（６−メトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル）メチル］ピロリジン−２−イル｝メチル）カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．０９３５ｇ、０．２４８ｍｍｏｌ）のメタノール１ｍＬ溶液に［ＷＯ２０１１／１３６３１９］に記載の１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−カルバルデヒド（０．０３６５ｇ、０．２４８ｍｍｏｌ）とピペリジン（０．０１６９ｇ、０．１９８ｍｍｏｌ）を加え、６０℃で２時間攪拌した。反応溶液を濃縮して得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（メタノール／クロロホルム）で精製して、（Ｒ，Ｚ）−｛［１−（｛２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−メトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル｝メチル）ピロリジン−２−イル］メチル｝カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．０８１０ｇ、６４％）を得た。
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 1.32 (s, 9H), 1.47-1.56 (m, 3H), 1.72-1.83 (m, 1H), 2.34-2.42 (m, 1H), 2.64-2.70 (m, 1H), 2.78-2.89 (m, 2H), 3.12-3.19 (m, 1H), 3.73 (d, J = 12.5 Hz, 1H), 4.00 (s, 3H), 4.04 (d, J = 12.5 Hz, 1H), 6.28 (t, J = 5.1 Hz, 1H), 7.06-7.08 (m, 2H), 7.39 (dd, J = 4.4, 8.1 Hz, 1H), 7.81 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 8.63 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 8.98 (dd, J = 1.5, 8.1 Hz, 1H).【０１９４】
（ｃ）工程３
（Ｒ，Ｚ）−｛［１−（｛２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−メトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル｝メチル）ピロリジン−２−イル］メチル｝カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．０７７７ｇ、０．１５４ｍｍｏｌ）の塩化メチレン２ｍＬ溶液にトリフルオロ酢酸１ｍＬを加え、室温で１８時間攪拌した。反応溶液を濃縮して得られた残渣に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液６ｍＬを加えて塩基性とし、析出した固体をろ取した。得られた固体を水で洗浄後、減圧下で乾燥させて、目的とする（Ｒ，Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−７−｛［２−（アミノメチル）ピロリジン−１−イル］メチル｝−６−メトキシベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（０．０３５８ｇ、５７％）を得た。
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 1.46-1.65 (m, 3H), 1.74-1.84 (m, 1H), 2.27-2.42 (m, 2H), 2.66-2.82 (m, 3H), 3.67 (d, J = 12.6 Hz, 1H), 3.97 (s, 3H), 4.06 (d, J = 12.6 Hz, 1H), 7.05 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.12 (s, 1H), 7.29 (dd, J = 4.4, 8.1 Hz, 1H), 7.78 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 8.56 (dd, J = 1.5, 4.4 Hz, 1H), 8.85 (d, J = 8.1 Hz, 1H).【０１９５】
［合成実施例２４］
化合物３２（（Ｓ，Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−７−［（３−アミノピペリジン−１−イル）メチル］−６−メトキシベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン）の合成
下記合成スキーム１８により、化合物３２を合成した。【０１９６】
スキーム１８
2015122504.tif 000040
【０１９７】
（ａ）工程１
［ＷＯ２０１１／１３６３１９］に記載の７−（ブロモメチル）−６−メトキシベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（０．５１４ｇ、２．００ｍｍｏｌ）の塩化メチレン８ｍＬ溶液にトリエチルアミン（０．２２３ｇ、２．２０ｍｍｏｌ）と（Ｓ）−ピペリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．４４１ｇ、２．２０ｍｍｏｌ）を加え、室温で１４時間攪拌を続けた。反応溶液を濃縮して得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（メタノール／クロロホルム）で精製して、（Ｓ）−｛１−［（６−メトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル）メチル］ピペリジン−３−イル｝カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．４９９ｇ、６７％）を得た。
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ1.43 (s, 9H), 1.47-1.54 (m, 4H), 2.30-2.54 (m, 4H), 3.62 (s, 2H), 3.68-3.73 (m, 1H), 3.93 (s, 3H), 4.64 (s, 2H), 5.16 (m, 1H), 6.70 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.62 (d, J = 8.8 Hz, 1H).【０１９８】
（ｂ）工程２
（Ｓ）−｛１−［（６−メトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル）メチル］ピペリジン−３−イル｝カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．２２８ｇ、０．６０６ｍｍｏｌ）のメタノール３ｍＬ溶液に［ＷＯ２０１１／１３６３１９］に記載の１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−カルバルデヒド（０．０８９２ｇ、０．６０６ｍｍｏｌ）とピペリジン（０．０４１３ｇ、０．４８５ｍｍｏｌ）を加え、６０℃で２時間攪拌した。反応溶液を室温まで冷却し、析出した固体をろ取して、（Ｓ，Ｚ）−［１−（｛２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−メトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル｝メチル）ピペリジン−３−イル］カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．２３２ｇ、７６％）を得た。
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ1.09-1.17 (m, 2H), 1.31 (s, 9H), 1.58-1.69 (m, 2H), 1.88-2.06 (m, 2H), 2.73-2.80 (m, 1H), 2.86-2.91 (m, 1H), 3.35-3.43 (m, 1H), 3.72 (s, 2H), 3.97 (s, 3H), 6.63-6.66 (m, 1H), 7.03 (s, 1H), 7.08 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.41 (dd, J = 4.4, 8.1 Hz, 1H), 7.81 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 8.60 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 9.01 (dd, J = 1.5, 8.1 Hz, 1H), 14.39 (brs, 1H).【０１９９】
（ｃ）工程３
（Ｓ，Ｚ）−［１−（｛２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−６−メトキシ−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル｝メチル）ピペリジン−３−イル］カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．２３０ｇ、０．４５５ｍｍｏｌ）の塩化メチレン８ｍＬ溶液にトリフルオロ酢酸４ｍＬを加え、室温で２４時間攪拌した。反応溶液を濃縮して得られた残渣に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えて塩基性とし、クロロホルムで３回抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で溶媒を留去して、目的とする（Ｓ，Ｚ）−２−［（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）メチレン］−７−［（３−アミノピペリジン−１−イル）メチル］−６−メトキシベンゾフラン−３（２Ｈ）−オン（０．０７５９ｇ、４１％）を得た。
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ0.94-1.06 (m, 1H), 1.35-1.46 (m, 1H), 1.60-1.73 (m, 2H), 1.80-1.87 (m, 1H), 2.02-2.09 (m, 1H), 2.62-2.69 (m, 1H), 2.76-2.80 (m, 1H), 2.85-2.89 (m, 1H), 3.70 (s, 2H), 3.97 (s, 3H), 7.03 (s, 1H), 7.08 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.38 (dd, J = 4.4, 8.1 Hz, 1H), 7.80 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 8.63 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 9.02 (d, J = 8.8 Hz, 1H).【０２００】
［実施例１］
ＰＩＭ−３キナーゼ阻害活性の測定
１．５μＭ蛍光基質ペプチド（ＦＡＭ−ＡＫＲＲＲＬＳＳＬＲＡ−ＣＯＯＨ）、３０μＭのＡＴＰ、０．０８３３ｎｇ／μＬのＰＩＭ−３キナーゼを化合物と室温、２時間インキュベーションし、Ｐｉｍ−３キナーゼの阻害活性を測定した。反応は基質とリン酸化反応物をその電荷の違いにより、キャピラリー電気泳動（パーキンエルマー社、ＥＺ  ｒｅａｄｅｒ  ＩＩ使用）で分離することにより定量した。結果を下記の表１及び表２に示す。【０２０１】
【表１】
2015122504.tif 000041
【０２０２】
【表２】
2015122504.tif 000042
【０２０３】
［実施例２］
ヒト膵臓癌細胞株の増殖阻害活性の測定
９６穴マイクロタイタープレートの各穴に、培地量１００μＬでヒト膵臓癌細胞株（Ｌ３．６ｐｌ、ＭｉａＰａｃａ−２、ＰＡＮＣ−１、ＰＣＩ３５、ＰＣＩ６６）を２０００個播種した。１８時間後に培地を除き、被検化合物を含む培地を１００μＬ／穴で加えた。７２時間あるいは９６時間培養を続け、被検化合物含有培地を除き、１０％ＷＳＴ−８（同仁化学Ｃｅｌｌ  Ｃｏｕｎｔｉｎｇ  ｋｉｔ−８）含有培地を１００μＬ／穴で加えた。１時間培養後、ＯＤ４５０ｎｍの吸光度を測定し、細胞増殖阻害活性を算出した。なお、培地としてはＲＰＭＩ−１６４０培地（ＳＩＧＭＡ）を用い、１０％仔牛血清（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）、５０Ｕ／ｍＬペニシリンＧ（ＳＩＧＭＡ）、５０μｇ／ｍＬストレプトマイシン（ＳＩＧＭＡ）を加えたうえで使用した。細胞株は３７ｏＣ、二酸化炭素濃度５％の炭酸ガス培養装置内で培養した。
９６時間培養した場合の化合物評価結果を表３と表４に、７２時間培養した場合の化合物評価結果を表５に示す。【０２０４】
【表３】
2015122504.tif 000043
【０２０５】
【表４】
2015122504.tif 000044
【０２０６】
【表５】
2015122504.tif 000045
【０２０７】
［実施例３］
動物試験
ヒト膵臓癌細胞であるＰＣＩ６６細胞を２ｘ１０７細胞／ｍＬの濃度でハンクス平衡塩溶液に懸濁し、細胞懸濁液１００μＬをＢＡＬＢ／ｃ  ｎｕ／ｎｕマウス（ＳＬＣ、日本国静岡県）の背に皮下注射した。腫瘍注射の１４日後から薬剤の投与を開始した。薬剤は５日間１日１度腹腔内投与し、続いて２日間休薬した。このサイクルを３回繰り返した。腫瘍量は以下の式に従って算出した。
腫瘍量（ｃｍ３）＝［最大径］（ｃｍ）ｘ［最小径］２（ｃｍ）／２【０２０８】
化合物６を３０ｍｇ／ｋｇ腹腔内投与した結果を図１に示す。
図１の左側は薬剤の投与後の腫瘍量を、右側は薬剤の投与後の体重の変化を示す。化合物６の投与により腫瘍量の増大を抑制する効果が認められる。【０２０９】
［実施例４］
ヒト膵臓癌細胞株の増殖阻害活性の測定
９６穴マイクロタイタープレートの各穴に、培地量９０μＬでヒト膵臓癌細胞株（Ｌ３．６ｐｌ、ＭｉａＰａｃａ−２、ＰＡＮＣ−１、ＰＣＩ３５、ＰＣＩ６６）を３０００個播種した。２４時間後に被検化合物を含む培地を１０μＬ／穴で加えた。７２時間培養を続け、ＷＳＴ−８（同仁化学・Ｃｅｌｌ  Ｃｏｕｎｔｉｎｇ  ｋｉｔ−８）を１０μＬ／穴で加えた。２時間培養後、ＯＤ４５０ｎｍの吸光度を測定し、細胞増殖阻害活性を算出した。細胞株は３７℃、二酸化炭素濃度５％の炭酸ガス培養装置内で培養した。
結果を表５に示す。【０２１０】
【表６】
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【図１】
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【国際調査報告】
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