(57)【要約】  アブシジン酸生産能を有する従来公知の微生物以外の微生物からアブシジン酸と同様の植物への乾燥耐性を向上させる代謝物を得ること及び当該代謝物を利用して植物への乾燥耐性を向上させる方法を提供すること。  コリモナス（Collimonas）属に属し、植物への乾燥耐性を向上させる代謝物生産能を有する微生物を培養し、当該培養によって得られた培養物から前記代謝物を抽出する微生物による乾燥耐性向上代謝物の製造方法。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
コリモナス（Collimonas）属に属し、植物への乾燥耐性を向上させる代謝物生産能を有する微生物を培養し、当該培養によって得られた培養物から前記代謝物を抽出する微生物による乾燥耐性向上代謝物の製造方法。
【請求項２】
コリモナス（Collimonas）属に属し、植物への乾燥耐性を向上させる代謝物生産能を有する微生物を培養し、当該培養によって得られた培養物を植物に使用して当該植物の乾燥耐性を向上させる方法。
【請求項３】
請求項１記載の方法によって抽出された乾燥耐性向上代謝物を植物に使用して当該植物の乾燥耐性を向上させる方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
この発明は、微生物の代謝機能を利用した植物への乾燥耐性付保の方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
アブシジン酸は植物ホルモンの一種として知られている。アブシジン酸の植物生理作用としては、気孔の閉鎖作用、乾燥耐性向上作用、種子の発達・成熟促進作用、種子休眠の誘導作用、等が知られている。【０００３】
アブシジン酸の製造方法としては、有機合成法や下記特許文献に開示されている微生物の代謝機能を利用した方法が知られている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開平６−１９７７７５号公報
【特許文献２】特開平６−２５３８６９号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
上記特許文献では、アブシジン酸生産能を有する微生物としてボトリチス（Botrytis）属、セルコスポラ（Cercospora）属に属する真菌が開示されているが、それ以外の微生物、特に細菌についてアブシジン酸、又はアブシジン酸による植物の生理作用として、特に乾燥耐性を向上させる代謝物の産生能を有するという知見は得られていない。【０００６】
そこで、この発明は、アブシジン酸生産能を有する従来公知の微生物以外の微生物からアブシジン酸と同様の植物への乾燥耐性を向上させる代謝物を得ること及び当該代謝物を利用して植物への乾燥耐性を向上させる方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
上記課題を解決するため、発明者らはコリモナス（Collimonas）属細菌に着目して鋭意研究し、当該微生物がアブシジン酸と同様の植物への乾燥耐性物質生産能力を有するとの知見を得て本発明に至った。【０００８】
請求項１の発明は、
コリモナス（Collimonas）属に属し、植物への乾燥耐性を向上させる代謝物生産能を有する微生物を培養し、当該培養によって得られた培養物から前記代謝物を抽出する微生物による乾燥耐性向上代謝物の製造方法である。【０００９】
請求項２の発明は、
コリモナス（Collimonas）属に属し、植物への乾燥耐性を向上させる代謝物生産能を有する微生物を培養し、当該培養によって得られた培養物を植物に使用して当該植物の乾燥耐性を向上させる方法である。【００１０】
請求項３の発明は、
請求項１記載の方法によって抽出された乾燥耐性向上代謝物を植物に使用して当該植物の乾燥耐性を向上させる方法である。
【発明の効果】
【００１１】
この発明によれば、アブシジン酸生産能を有する従来公知の微生物以外の微生物からアブシジン酸と同様の植物への乾燥耐性物質を得ること及び当該物質を利用して植物への乾燥耐性を向上させる方法を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】試験例におけるカイワレ種子の発芽と以降の生長過程における乾燥環境への耐性向上の様子を表す図であって、（ａ）から（ｃ）は、乾燥耐性向上代謝物産生菌体の抽出物を使用した場合、（ｄ）から（ｆ）は、アブシジン酸を使用した場合、（ｇ）コントロールとしてｄＨ２Ｏを使用した場合の図である。
【図２】試験例におけるカイワレ種子の乾燥耐性試験結果を表す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
以下、添付図面を参照して本発明の実施形態の一例を説明する。
【００１４】
（使用する微生物）
この発明の植物への乾燥耐性を向上させる代謝物を製造する方法に使用する微生物をコリモナス（Collimonas）属細菌とし、菌体の具体例として、コリモナス  ｓｐ．（Collimonas sp.）  ＮＩＴＥ  Ｐ−１１０４を採用した。当該微生物は平成２３年６月９日付で独立行政法人製品評価技術基盤機構特許微生物寄託センター（日本国千葉県木更津市かずさ鎌足２−５−８）に寄託されており、その菌学的性質は国際公開公報ＷＯ２０１４−１４１３６２Ａ１に開示されている。
【００１５】
以下、本明細書において、前記寄託番号ＮＩＴＥ  Ｐ−１１０４の菌体を乾燥耐性向上代謝物産生菌体と称する。
【００１６】
（乾燥耐性向上代謝物産生菌体の培養と乾燥耐性向上代謝物の抽出）
乾燥耐性向上代謝物産生菌体の培養と乾燥耐性向上代謝物の抽出方法は、いずれも従来知られている培養方法、有機化合物の精製法を使用することができる。
【００１７】
例えば、
・乾燥耐性向上代謝物産生菌体を液体培養で培養する。  
・当該培養によって得られた培養液をＨＣｌでｐＨ２．５に調製し、遠心分離を行う。  
・遠心分離後の培養液上清を分液漏斗に移し、酢酸エチルで抽出を行い、乾燥耐性向上耐性代謝物産生菌体の抽出物を得る。  
・抽出後、ろ過し、ロータリーエバポレーター及び遠心エバポレーターにて減圧乾固する。  
ことで、乾燥耐性向上代謝物を得ることができる。
【００１８】
（試験例）
コリモナス培養物、コリモナス培養物から抽出した乾燥耐性向上代謝物によるカイワレ乾燥試験
【００１９】
（１）−１．試験方法１
上記の方法で１０、１００、３００μｇ／ｍＬ・ａｇａｒとした乾燥耐性向上代謝物産生菌体の抽出物のサンプルＡ〜Ｃを準備する。当該サンプルそれぞれを試験管１０本に分注した。
【００２０】
標品として、アブシジン酸（ＡＢＡ）を１、１０、２０μｇ／ｍＬ・ａｇａｒとしたＡＢＡ標品サンプルＤ〜Ｆを準備する。当該サンプルをそれぞれ試験管１０本に分注した。
【００２１】
コントロールとして、ｄＨ２ＯのサンプルＧを準備し、試験管１０本に分注した。
【００２２】
各サンプルに培地を作成後、カイワレ種子を１粒ずつ試験管に入れ、試験管をアルミ箔で蓋をし、暗所で発芽させた。
【００２３】
（１）−２．試験結果
図１は、各サンプルの３日後におけるカイワレ種子の発芽の様子を表す。ＡＢＡ標品サンプルＤ〜Ｆでは強い発芽抑制が観察された。
【００２４】
乾燥耐性向上代謝物産生菌体の抽出物のサンプルＡ〜Ｃでは、サンプルＢ（１００μｇ／ｍＬ）で発芽後の成長の遅れ、サンプルＣ（３００μｇ／ｍＬ）で弱い発芽抑制が観察された。
【００２５】
（２）−１．試験方法２
上記試験方法１で準備したサンプルＡ〜Ｃ、Ｄ、Ｇについて、試験管からアルミ箔を外し、乾燥耐性試験を行った。
【００２６】
（２）−２．試験結果
図２は、各サンプルの乾燥耐性を表す図である。健全個体率は以下であった。
【００２７】
サンプルＡ：２０％
サンプルＢ：８０％
サンプルＣ：７０％
サンプルＤ：６６％
サンプルＧ：２７％
【００２８】
この結果から、乾燥耐性向上代謝物産生菌体の抽出物が１００μｇ／ｍＬ程度であれば、植物種子に乾燥耐性を付与させることができることが示唆された。
【００２９】
また、これらの結果から、コリモナス属細菌を培養し、当該培養によって得られた培養物には、少なくともＡＢＡと同様の植物への乾燥耐性を向上させる植物ホルモンが含有されていることが示唆された。
【図１】
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【図２】
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【国際調査報告】
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