(57)【要約】  微量な血液を血液希釈緩衝液によって希釈された試料の血漿の分離方法を提供する。  20〜100μLの微量な血液に血液希釈緩衝液を加えて、希釈血漿中の生体成分を測定するとき、希釈血球成分と希釈血漿成分を分けて保存して輸送する必要がある。血液希釈緩衝液を入れた容器に既存の血漿分離用高分子ゲルを入れておくことで、希釈された血球と血漿であっても血漿分離用高分子ゲル化剤は希釈血漿を分離できることを見いだした。希釈血球は当該高分子ゲル化剤の下部、また希釈血漿が当該ゲル化剤上部に分離される。微量の血液で血液中の生体成分を測定することで健康状態や疾病早期発見や未病の検出に利用することができる。採血の時と場所を選ばない利点がある。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
採取された微量な血液を希釈して生成される生体分析試料を収容するための血液分析用構造体であって、
前記採取された血液中の血漿を希釈するための希釈緩衝液と、
該希釈された血漿を前記採取された血液中の血球と分離するための血漿分離用高分子ゲルと、
前記希釈緩衝液と血漿分離用高分子ゲルを収容するとともに、前記採取された血液を導入して収容し、保存するための血液希釈保存容器と、
前記血液希釈保存容器の上部開口部から導入される前記血液を前記希釈緩衝液と血漿分離用高分子ゲルとともに前記血液希釈保存容器に封入するための密閉蓋とを備え、
前記希釈緩衝液と血漿分離用高分子ゲルとが前記血液希釈保存容器の内部空間内で上下方向にそれぞれ独立した層を形成するようになっており、
前記採取された血液が前記上部開口から導入され、前記血液希釈保存容器に対して上方から下方に向かって作用する遠心力を付加することによって、希釈された前記採取された血液の血漿を含む希釈緩衝液の血漿層と前記血漿分離用高分子ゲルの層と前記血球の層とがそれぞれ独立した層として前記血液希釈保存容器内に形成されるように構成された血液分析用構造体。
【請求項２】
前記血漿分離用高分子ゲルの比重が前記血球よりも小さく、前記血漿層、前記血漿分離用高分子ゲルの層の比重よりは大きいことを特徴とする請求項１に記載の血液分析構造体。
【請求項３】
前記希釈緩衝液の比重が、前記血漿の比重よりも小さくなっている請求項１または２のいずれかに記載の血液分析用構造体。
【請求項４】
採取された血液において希釈された血漿の前記血漿層の比重がほぼ1.012〜1.014である請求項１または２のいずれかに記載の血液分析用構造体。
【請求項５】
前記希釈緩衝液が前記血液とほぼ等張の285mOsm/Lの浸透圧を有し、比重がほぼ1.0106である請求項１に記載の血液分析用構造体。
【請求項６】
前記希釈緩衝液が前記血液よりも高いほぼ500mOsm/Lの浸透圧を有し、比重がほぼ1.011である請求項１に記載の血液分析用構造体。
【請求項７】
前記遠心力1300Gで10分間付加されることによって前記独立した前記血漿層、前記血漿分離用高分子ゲルの層及び血球の層が形成されるように構成された請求項１または２のいずれかに記載の血液分析構造体。
【請求項８】
前記血液希釈保存容器が透明なプラスチックで形成されている請求項１ないし７のいずれかの請求項に記載の血液分析構造体。
【請求項９】
前記血液希釈保存容器には、所定量の血液が入ったことを示すための目印が形成されている請求項１に記載の血液分析構造体。
【請求項１０】
前記血液希釈保存容器が、前記上端開口部を密閉可能なスクリュー式の蓋備えている請求項１ないし９のいずれかの請求項に記載の血液分析構造体。
【請求項１１】
前記血液希釈保存容器の底部が、開閉可能または脱着可能である請求項１ないし１０のいずれかの請求項に記載の血液分析構造体。
【請求項１２】
前記血液希釈保存容器は、外径がほぼ１４ｍｍ、高さがほぼ７５ｍｍの円筒形状であり、
前記血液希釈保存容器の底部は、外径がほぼ１４ｍｍ、高さがほぼ２５ｍｍの脱着可能な底蓋が形成されている請求項１１に記載の血液分析構造体。
【請求項１３】
前記血液希釈保存容器の内面の形状が、
上端部の内径がほぼ１０ｍｍ、下端部の内径がほぼ５ｍｍであり、
前記上端部から前記下端部の深さがほぼ３０ｍｍであり、
前記上端部から前記下端部にかけて内径が漸減する形状を成している請求項１から７のいずれか１項に記載の血液採血容器。
【請求項１４】
採取された微量な血液を希釈して生成される生体分析試料を収容し、希釈された血漿と血球とを分離する希釈血液の分離方法であって、
前記採取された血液中の血漿を希釈するための希釈緩衝液を用意し、
該希釈された血漿を前記採取された血液中の血球と分離するための血漿分離用高分子ゲルを用意し、
前記希釈緩衝液と血漿分離用高分子ゲルを収容するとともに、前記採取された血液を導入して収容し、保存するための血液希釈保存容器を用意し、
前記血液希釈保存容器の上部開口部から導入される前記血液を前記希釈緩衝液と血漿分離用高分子ゲルとともに前記血液希釈保存容器に封入するための密閉蓋を用意し、
前記希釈緩衝液と血漿分離用高分子ゲルとが前記血液希釈保存容器の内部空間内で上下方向にそれぞれ独立した層を形成するように前記血液希釈保存容器に導入し、
前記採取された血液が前記上部開口から導入され、前記血液希釈保存容器に対して上方から下方に向かって作用する遠心力を付加し、
希釈された前記採取された血液の血漿を含む希釈緩衝液の血漿層と前記血漿分離用高分子ゲルの層と前記血球の層とがそれぞれ独立した層として前記血液希釈保存容器内に形成する段階を備えた、ことを特徴とする希釈血液の分離方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、微量の血液を血液希釈緩衝液によって希釈された血液試料からの血漿の分離方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
採取した血液を血球と血漿に分離することは従来から知られている（例えば、特開平７−２９４５１６号（特許文献１）。【０００３】
この血液の分離操作に用いられる分離剤としては、シリコーンオイル、塩素化ポリブテン、ポリイソブテン、アクリル系重合体、炭素数が６−２０のα−オレフィンとマレイン酸ジメチルエステルとの共重合体、スチレン・マレイン酸ジメチルエステル共重合体等の分離層形成高分子化合物（ａ）を主成分とし、これにチキソトロピー性付与剤（ｂ）を配合したものが知られ、かつ、実用化されている。【０００４】
チキソトロピー性付与剤としては、比重、粘度調整用としてシリカ、粘土等の無機微粒子や、ソルビトールとベンズアルデヒドとの縮合物（ジベンジリデンソルビトール）、水添ヒマシ油、１２-ヒドロキシステアリン酸、水溶性蛋白のニトロフミン酸付加物、グルタミン酸アミド、ジメタノールオクタヒドロナフタレン系共重合体等の有機ゲル化剤が知られている。【０００５】
また、従来から、採取した血液を試料として血液希釈緩衝液の入った容器に収容し、容器内の試料血液中の生体成分を測定する方法が知られている。
採取した血液試料を収容した容器内の微量の血液を用いて血液中の生体成分を測定することにより、健康状態や疾病早期発見や未病の検出に利用することができる。【０００６】
この手法では、血液検査用の血液を採取するための時間と場所を自由に設定できるという利点がある。【０００７】
この場合、採取した血液試料を収容した容器を採取した場所から試料分析を行う場所に輸送する必要がある。すなわち、本件発明の血液試料を容器に収容して保存することが必要となり、採取血液試料の正確な分析結果を得るためには希釈緩衝容器に保存期間中における血液試料の状態変化を最小に止めることが肝要となる。【０００８】
試料血液を保存するための手法として、血液を内部標準入りの血液希釈緩衝液で希釈して、希釈血球成分と希釈血漿成分をフィルター（濾過手段）で分離して容器中に保存する方法が知られている。（例えば、特許文献２参照）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】特開平７−２９４５１６号
【特許文献２】特開２００１−２５５３２３号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
しかし、フィルターによる血球の分離は物理的な圧力がかかるため、血球が物理的圧力で溶血して希釈血漿成分を正確に測定することができない場合もある。
微量の血液から生体成分を測定するには血液を内部標準入りの血液希釈緩衝液で５〜１０倍に希釈して、希釈血球成分をフィルターで分離する必要があった。フィルターによる血球の分離は物理的な圧力がかかるため、血球が物理的圧力で溶血して、血漿の希釈倍数上昇や測定時のヘモグロビンの干渉など希釈血漿成分の測定において正確に測定することができないことがある。またフィルター内に希釈血漿が残存して希釈血漿量の回収量が低下し、再希釈などにより精度の低下などの問題があった。【００１１】
フィルターによる希釈血漿成分の分離では、ろ過時の物理的な圧力で血球が破裂して溶血を起こすため、血液希釈緩衝液の浸透圧を高くして血球を収縮させて溶血を防ぐ必要があった。このため、血球内の水分が血漿中に遊出するため生体成分の測定に誤差が生じることから、検査項目毎に測定係数を必要するなどの問題があった。【００１２】
従来の血液試料を高分子ゲルで遠心分離により血球と血漿との分離方法では、血球と血漿との比重の差があまり大きくないために必ずしも分離効率が良くなかった。一部の赤血球が血漿中に残存し、保存により溶血を来して測定時に影響を及ぼす。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
本件発明者は上記のような事情を踏まえ20〜100μL程度の微量の採取された血液に血液希釈緩衝液を加えて、血球成分と血漿成分とを分けて保存する場合において、血液希釈緩衝液を入れた容器に血漿分離用高分子ゲルにより、容器内の血球と希釈された血漿とを効果的に分離する手法を見いだした。この場合希釈血球は当該高分子ゲル化剤の下部側の領域に、希釈血漿は当該ゲル化剤上部側の領域に分離される。【００１４】
本件発明によれば微量な血液を希釈緩衝液で希釈した試料について、その希釈血漿分離に血漿分離用高分子ゲルを用いて遠心分離する方法と血漿分離用高分子ゲルを内蔵した微量血液希釈保存容器が提供される。【００１５】
本件発明によれば、遠心分離により血球と希釈血漿とを分離するのに使用する血液希釈保存容器が用意される。【００１６】
この容器には血液中の血漿を希釈するための希釈緩衝液と、採取した血液を注入される。【００１７】
さらに該容器には比重が、前記血球と前記希釈血漿の中間である所定量の高分子ゲルが導入される。すなわち、容器中には、前記希釈緩衝液と、前記高分子ゲルとが収容される。【００１８】
この場合、血液希釈緩衝液を入れた容器には血漿分離用高分子ゲル化剤を両者が直接接触する態様で共に容器内で共存することとなるが両者が混在する状況は生じることない。すなわち血液希釈緩衝液と血漿分離用高分子ゲル化剤は分離した状態で別々の領域を占有した状態で容器内に存在する。【００１９】
容器内の内容物は、１つの態様では上部開口端の密封蓋の下側に希釈緩衝液の層があり、その下側に血漿分離用高分子ゲル化剤の層が形成される。【００２０】
別の態様では上部開口端側に血漿分離用高分子ゲル化剤の層が形成され、その下側に希釈緩衝液の層が形成される。【００２１】
そして、両者が収容されている容器に対して、採取された血液試料が容器の開口端側から容器に導入される。容器には上方から下方に向かって力がかかるように遠心力が付加される。これによって希釈緩衝液によって希釈された血球と希釈された血漿とに分離される。この場合、容器に付加される遠心力は約1300Gで約10分間、付加される。【００２２】
好ましい態様では、希釈緩衝液の比重は、血漿の比重よりも小さい。希釈緩衝液によって希釈された希釈血漿の比重は約1.012〜1.014であり、血球と希釈血漿の比重差が大きくなり、血球（比重約1.095）と血漿（比重約1.027）の分離よりも希釈された血球と希釈された血漿との分離の方が容易となる。使用された希釈液は血液と等張性を有する浸透圧が約285mOsm/Lの液体であり、その比重は約1.0106であり、高い浸透圧を有する希釈緩衝液の場場合、その浸透圧は約500mOsm/L程度であり、その比重は約1.011である。好ましくは、血液試料を収容する容器は透明なプラスチックで形成される。【００２３】
そして容器には、所定量の血液が入ったことを示すための目印が形成されるのが好ましい。この場合、血液希釈緩衝液の容器の外周には20〜100μLの範囲内で、例えば65μL程度の血液が入ったことを示す印を付けることで所定の血液量の採取を目視で確認できるようにすることが好ましい。好ましくは、容器は密閉可能の蓋、例えばスクリュー式の蓋を用いて密封性を高めつつ、容器上端の開口部を開閉することができる。また、容器の底部が、開閉可能または脱着可能にすることもできる。このようにすることにより血液希釈緩衝液の容器に対して遠心力が付加され、血球が容器の下部に沈降し底部に付着した血球を取り出して、血球を用いる糖尿病などの糖化ヘモグロビンの検査に利用できる。  底蓋は血球を希釈できる容器を構成した形状となっているので希釈溶血液の容器としても利用することできる。したがって糖化ヘモグロビンの検査について血液分析用構造体をそのまま変更を加えることなく適用することが可能となる。【００２４】
例えば容器は、外径１４±２ｍｍ、高さ７５±５ｍｍの円筒形状とし、容器の底部には、外径１４±２ｍｍ、高さ２５±２ｍｍの脱着可能な円筒形底蓋を取り付けた構造を持つ。容器の内面の形状ついては、最上部の内径が１０ｍｍ、最底部の内径が５ｍｍであり、最上部から前記最低部の深さが３０ｍｍであり、最上部から前記最低部にかけて先細り形状とすることができる。
この場合、血液採取容器内腔の上部内径は10mmの円形で深さは30mmで底の内径は5mmであり、底に向かって逆円錐形で細くなる構造を有する。【００２５】
血漿分離用高分子ゲル組成はシクロペンタジエン系樹脂、ジベンジリデンソルビトール、シリカ及びフタル酸（２−エチルヘキシル）を混練して得られたチキソトロピー性ゲル状分離剤（特許文献１）などを利用する。その他、類似するチキソトロピー性ゲル状分離剤でも良い。【００２６】
血漿分離用高分子ゲルの物理学的特性はHLB値として4.02〜9.0、比重は25℃で1.02〜1.08であり、分子量 GPC法による分子量分布は700〜850である。【００２７】
ゲル状分離剤の特性は希釈血漿を分離条件である遠心力と遠心時間は1,300G、10分間で希釈血漿と血球を分離できる。
【発明の効果】
【００２８】
本発明においては、試料の比重が原血漿よりも軽い希釈された血漿を分離するので、血球の分離効率が向上する。また、血球を破壊することがないため採取された血液を正確に検査することができる。
【図面の簡単な説明】
【００２９】
【図１】希釈緩衝液と血漿分離用ゲル化剤の層とが形成された本発明にかかる血液分析用構造体で血液希釈保存容器に採取された血液を収容した状態の断面構造を示す概略図である。
【図２】図２は、上記図１と同様に概略図であるが、図２は、血漿分離用ゲル化剤が希釈緩衝液の下側に収容された場合の血液分析用構造体（血漿分離ゲル化剤底封入タイプ）の遠心力の付加の前後の状態を示す概略図である。
【図３】図３は、上記図１と同様に概略図であるが、図３は、血漿分離用ゲル化剤が希釈緩衝液の上側に収容された場合の血液分析用構造体（血漿分離ゲル化剤希釈液上面封入タイプ）の遠心力の付加の前後の状態を示す概略図である。
【図４】図４は、血液希釈緩衝液の容器で遠心により血球が沈降した底の部分をスクリュー式の底蓋を開閉するできる構造を持ち、血球を利用した検査用試料として利用できる構造を有する血液分析用構造体を構成する血液希釈保存容器の断面構造を示す概略図である。
【図５】図５は血漿分離ゲル化剤底封入タイプ(y)と静脈血漿(x)との相関図である。
【図６】図６は血漿分離ゲル化剤希釈液上面封入タイプ(y)と静脈血漿（x）との相関図である。
【発明を実施するための形態】
【００３０】
本件発明者らは上記のような事情を踏まえ20〜100μL程度の微量の採取された血液に血液希釈緩衝液を加えて、血球成分と血漿成分とを分けて保存し、血液希釈緩衝液を入れた血液希釈保存容器に血漿分離用高分子ゲル化剤により、容器内の血球と希釈された血漿とを効果的に分離する手法を見いだした。
【００３１】
図１及び図２を参照すると、本件発明の好ましい実施形態によれば、血液希釈保存容器１が用意される。そして該容器１の中には、所定量の希釈緩衝液２と血漿分離用高分子ゲル化剤３とが収容され、血液分析用構造体を構成する。
【００３２】
該希釈緩衝液２は採取された血液４の中の血漿を希釈するものである。
【００３３】
上記血漿分離用高分子ゲル化剤３の比重は、血液４中の血球５と前記希釈緩衝液２によって希釈された血漿の間の値を有するように構成される。
【００３４】
この場合、血液希釈緩衝液２を入れた容器１には血漿分離用高分子ゲル化剤３を両者が直接接触する態様で共に容器１内で共存することとなるが両者が混在する状況は生じることない。すなわち希釈緩衝液２と血漿分離用高分子ゲル化剤３は分離した状態で独立した別々の領域を占有した状態で容器１内に存在する。
【００３５】
容器１内の内容物は、一つの態様では上部開口６の密封蓋７の下側に希釈緩衝液２の層があり、その下側に血漿分離用高分子ゲル化剤３の層が形成される。
【００３６】
別の態様では上部開口端側に血漿分離用高分子ゲル化剤３の層が形成され、その下側に希釈緩衝液２の層が形成される。
【００３７】
容器内の内容物は、１つの態様では図２に示すように上部開口６の下方に希釈緩衝液２の層があり、その下側に血漿分離用高分子ゲル化剤３の層が形成される。
【００３８】
別の態様では図３に示すように上部開口側に血漿分離用高分子ゲル化剤３の層が形成され、その下側に希釈緩衝液の層が形成される。
【００３９】
そして、両者が収容されている容器１に対して、採取された血液試料が容器の開口６側から容器１に導入される。容器１には上方から下方に向かって力がかかるように遠心力が付加される。これによって希釈緩衝液２によって希釈された血球５の層と希釈された血漿層８とに分離される。この場合、容器１に付加される遠心力は約1300Gで約10分間、付加される。この場合、遠心力を与えるためにポータブル遠心器（図示せず）に希釈緩衝液２、血漿分離用高分子ゲル化剤３及び採取され血液試料を容器１に収容した状態で容器１を、容器１の上部から下部の方向に作用力が生じるように遠心する。
【００４０】
好ましい態様では、希釈緩衝液２の比重は、血漿の比重よりも小さい。希釈緩衝液２によって希釈された希釈血漿８の比重は約1.012〜1.014であり、血球と希釈血漿の比重差が大きくなり、血球５（比重約1.095）と血漿（比重約1.027）の分離よりも希釈された血球と希釈された血漿との分離の方が容易となる。使用された希釈液は血液と等張性を有する浸透圧が約285mOsm/Lの液体であり、その比重は約1.0106であり、高い浸透圧を有する希釈緩衝液の場合、その浸透圧は約500mOsm/L程度であり、その比重は約1.011である。好ましくは、血液試料を収容する容器は透明なプラスチックで形成される。
【００４１】
そして容器１には、所定量の血液が入ったことを示すための目印９が形成されるのが好ましい。この場合、血液希釈緩衝液の容器の外周には20~100μLの範囲内で、例えば65μL程度の血液が入ったことを示す印を付けることで所定の血液量の採取を目視で確認できるようにすることが好ましい。
【００４２】
図４に示すように、好ましくは、容器は密閉可能の蓋、例えばスクリュー式上蓋１０を用いて密封性を高めつつ、容器上端の開口部を開閉することができる。また、容器１の底部に同様のスクリュー式の蓋１１を用いて開閉可能または脱着可能にすることもできる。このようにすることにより血液希釈緩衝液の容器に対して遠心力を付加して、容器１の下部に沈降し底部に付着した血球５を取り出して、検査することができるという利便性が生じる。
【００４３】
例えば容器１は、外径１４±２ｍｍ、高さ７５±５ｍｍの円筒形状とし、容器１の下端部には、外径１４±２ｍｍ、高さ２５±２ｍｍの脱着可能な円筒形スクリュー式底蓋１１を取り付けた構造を持つ。容器１の内面の形状については、上端部の内径が１０ｍｍ、下端部の内径が５ｍｍであり、最上部から前記下端部の深さが３０ｍｍであり、上端部から下端部にかけて先細り形状とすることができる。
この場合、血液採取容器内腔の上部内径は10mmの円形で深さは30mmで底の内径は5mmであり、底に向かって逆円錐形で細くなる構造を有する。
【００４４】
血漿分離用高分子ゲル組成はシクロペンタジエン系樹脂、ジベンジリデンソルビトール、シリカ及びフタル酸（２−エチルヘキシル）を混練して得られたチキソトロピー性ゲル〔公開番号〕特許公開平７−２９４５１６）などを利用する。その他、類似するチキソトロピー性ゲル状分離剤を用いて構成することもできる。
【００４５】
血漿分離用高分子ゲルの物理学的特性はHLB値として4.02〜9.0、比重は25℃で1.02〜1.08であり、分子量 GPC法による分子量分布は700〜850である。
【００４６】
好ましい態様では、ゲル状分離剤の特性は希釈血漿を分離条件である遠心力と遠心時間は1,300G、10分間で希釈血漿と血球を分離する。
【００４７】
また、本件発明によれば微量な血液を希釈緩衝液で希釈した試料について、その希釈血漿分離に血漿分離用高分子ゲルを用いて遠心分離する方法が提供される。
【実施例】
【００４８】
血漿分離ゲル化剤入り血液希釈保存容器を用いた生化学検査での実施例を示す。【００４９】
EDTA添加上腕静脈血を試料として遠心分離で得た血漿とこの血液の希釈された血漿測定値に希釈倍数を乗じて求めた各検査項目との相関データを示す。
表１は血漿分離ゲル化剤の層が希釈緩衝液の層の下側に位置している血漿分離ゲル化剤底封入タイプ(y)と血漿(x)との相関統計データ、図５はその相関図を示す。
表１  血漿分離ゲル化剤底封入タイプ
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【００５０】
表２は血漿分離ゲル化剤の層が希釈緩衝液の層の上側に位置している血漿分離ゲル化剤希釈液上面封入タイプ(y)と静脈血漿（x）との相関統計データ、図６はその相関図を示す。
表２  血漿分離ゲル化剤希釈液上面封入タイプ
2015189961.tif 000004
【００５１】
表１と表２に示すように、血漿との相関性は非常に良い結果で、この血漿分離ゲル化剤入り血液希釈保存容器による希釈血漿分離法は血漿を試料とした測定値と遜色のない結果を得ることが可能である。
【産業上の利用可能性】
【００５２】
この微量血液採取方法は血液採取の時間と場所に制限がないため、医療機関に出向く時間がない場合、災害時、遠隔医療、健康管理などに応用でき、未病の人を早期発見できるなど、医療費の節減にも貢献できる。
【符号の説明】
【００５３】
１  血液希釈保存容器
２  希釈緩衝液
３  血漿分離用高分子ゲル化剤
４  試料血液
５  血球
６  上部開口
７  密封蓋
８  希釈血漿
９  目印  
１０  スクリュー式上蓋
１１  スクリュー式底蓋
【図１】
2015189961.tif 000005
【図２】
2015189961.tif 000006
【図３】
2015189961.tif 000007
【図４】
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【図５】
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【図６】
2015189961.tif 000010
【手続補正書】
【提出日】平成28年4月11日(2016.4.11)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（削除）
【請求項２】
（削除）
【請求項３】
（削除）
【請求項４】
（削除）
【請求項５】
（削除）
【請求項６】
（削除）
【請求項７】
（削除）
【請求項８】
（削除）
【請求項９】
（削除）
【請求項１０】
（削除）
【請求項１１】
（削除）
【請求項１２】
（削除）
【請求項１３】
（削除）
【請求項１４】
（削除）
【請求項１５】
採取された微量な血液を希釈して生成される生体分析試料を収容するための血液分析用構造体であって、
前記採取された血液中の血漿を希釈するための希釈緩衝液と、
該希釈された血漿を前記採取された血液中の血球と分離するための血漿分離用高分子ゲルと、
前記希釈緩衝液と血漿分離用高分子ゲルを収容するとともに、前記採取された血液を導入して収容し、保存するための血液希釈保存容器と、
前記血液希釈保存容器の上部開口部から導入される前記血液を前記希釈緩衝液と血漿分離用高分子ゲルとともに前記血液希釈保存容器に封入するための密閉蓋とを備え、
前記希釈緩衝液と血漿分離用高分子ゲルとが前記血液希釈保存容器の内部空間内で上下方向にそれぞれ独立した層を形成するようになっており、
前記採取された血液が前記上部開口から導入され、前記血液希釈保存容器に対して上方から下方に向かって作用する遠心力を付加することによって、希釈された前記採取された血液の血漿を含む希釈緩衝液の血漿層と前記血漿分離用高分子ゲルの層と前記血球の層とがそれぞれ独立した層として前記血液希釈保存容器内に形成されるように構成され、
採取された血液において希釈された血漿の前記血漿層の比重がほぼ１．０１２〜１．０１４である、血液分析用構造体。
【請求項１６】
採取された微量な血液を希釈して生成される生体分析試料を収容するための血液分析用構造体であって、
前記採取された血液中の血漿を希釈するための、内部標準入りの希釈緩衝液と、
該希釈された血漿を前記採取された血液中の血球と分離するための血漿分離用高分子ゲルと、
前記希釈緩衝液と血漿分離用高分子ゲルを収容するとともに、前記採取された血液を導入して収容し、保存するための血液希釈保存容器と、
前記血液希釈保存容器の上部開口部から導入される前記血液を前記希釈緩衝液と血漿分離用高分子ゲルとともに前記血液希釈保存容器に封入するための密閉蓋とを備え、
前記希釈緩衝液と血漿分離用高分子ゲルとが前記血液希釈保存容器の内部空間内で上下方向にそれぞれ独立した層を形成するようになっており、
前記採取された血液が前記上部開口から導入され、前記血液希釈保存容器に対して上方から下方に向かって作用する遠心力を付加することによって、希釈された前記採取された血液の血漿を含む希釈緩衝液の血漿層と前記血漿分離用高分子ゲルの層と前記血球の層とがそれぞれ独立した層として前記血液希釈保存容器内に形成されるように構成された血液分析用構造体。
【請求項１７】
前記血漿分離用高分子ゲルの比重が前記血球よりも小さく、前記血漿層の比重よりは大きいことを特徴とする請求項１５または１６に記載の血液分析構造体。
【請求項１８】
前記希釈緩衝液の比重が、前記血漿の比重よりも小さくなっている請求項１５から１７のいずれか１項に記載の血液分析用構造体。
【請求項１９】
前記希釈緩衝液が前記血液とほぼ等張の２８５ｍＯｓｍ／Ｌの浸透圧を有し、比重がほぼ１．０１０６である請求項１５または１６に記載の血液分析用構造体。
【請求項２０】
前記希釈緩衝液が前記血液よりも高いほぼ５００ｍＯｓｍ／Ｌの浸透圧を有し、比重がほぼ１．０１１である請求項１５または１６に記載の血液分析用構造体。
【請求項２１】
上部開口端の密封蓋の下側に希釈緩衝液の層があり、その下側に血漿分離用高分子ゲル化剤の層が形成される、請求項１５〜２０のいずれか１項に記載の血液分析用構造体。
【請求項２２】
上部開口端側に血漿分離用高分子ゲル化剤の層が形成され、その下側に希釈緩衝液の層が形成される、請求項１５〜２０のいずれか１項に記載の血液分析用構造体。
【請求項２３】
前記血液希釈保存容器が透明なプラスチックで形成されている請求項１５から２２のいずれか１項に記載の血液分析構造体。
【請求項２４】
前記血液希釈保存容器には、所定量の血液が入ったことを示すための目印が形成されている請求項１５または１６に記載の血液分析構造体。
【請求項２５】
前記血液希釈保存容器が、前記上端開口部を密閉可能なスクリュー式の蓋を備えている請求項１５から２４のいずれか１項に記載の血液分析構造体。
【請求項２６】
前記血液希釈保存容器の底部が、開閉可能または脱着可能である請求項１５から２５のいずれか１項に記載の血液分析構造体。
【請求項２７】
前記血液希釈保存容器は、外径がほぼ１４ｍｍ、高さがほぼ７５ｍｍの円筒形状であり、
前記血液希釈保存容器の底部は、外径がほぼ１４ｍｍ、高さがほぼ２５ｍｍの脱着可能な底蓋が形成されている請求項２６に記載の血液分析構造体。
【請求項２８】
前記血液希釈保存容器の内面の形状が、
上端部の内径がほぼ１０ｍｍ、下端部の内径がほぼ５ｍｍであり、
前記上端部から前記下端部の深さがほぼ３０ｍｍであり、
前記上端部から前記下端部にかけて内径が漸減する形状を成している請求項１５から２２のいずれか１項に記載の血液分析構造体。
【請求項２９】
採取された微量な血液を希釈して生成される生体分析試料を収容し、希釈された血漿と血球とを分離する希釈血液の分離方法であって、
前記採取された血液中の血漿を希釈するための希釈緩衝液を用意し、
該希釈された血漿を前記採取された血液中の血球と分離するための血漿分離用高分子ゲルを用意し、
前記希釈緩衝液と血漿分離用高分子ゲルを収容するとともに、前記採取された血液を導入して収容し、保存するための血液希釈保存容器を用意し、
前記血液希釈保存容器の上部開口部から導入される前記血液を前記希釈緩衝液と血漿分離用高分子ゲルとともに前記血液希釈保存容器に封入するための密閉蓋を用意し、
前記希釈緩衝液と血漿分離用高分子ゲルとが前記血液希釈保存容器の内部空間内で上下方向にそれぞれ独立した層を形成するように前記血液希釈保存容器に導入し、
前記採取された血液が前記上部開口から導入され、前記血液希釈保存容器に対して上方から下方に向かって作用する遠心力を付加し、
希釈された前記採取された血液の血漿を含む希釈緩衝液の血漿層と前記血漿分離用高分子ゲルの層と前記血球の層とがそれぞれ独立した層として前記血液希釈保存容器内に形成する段階を備え、採取された血液において希釈された血漿の前記血漿層の比重がほぼ１．０１２〜１．０１４になることを特徴とする希釈血液の分離方法。
【請求項３０】
採取された微量な血液を希釈して生成される生体分析試料を収容し、希釈された血漿と血球とを分離する希釈血液の分離方法であって、
前記採取された血液中の血漿を希釈するための、内部標準入りの希釈緩衝液を用意し、
該希釈された血漿を前記採取された血液中の血球と分離するための血漿分離用高分子ゲルを用意し、
前記希釈緩衝液と血漿分離用高分子ゲルを収容するとともに、前記採取された血液を導入して収容し、保存するための血液希釈保存容器を用意し、
前記血液希釈保存容器の上部開口部から導入される前記血液を前記希釈緩衝液と血漿分離用高分子ゲルとともに前記血液希釈保存容器に封入するための密閉蓋を用意し、
前記希釈緩衝液と血漿分離用高分子ゲルとが前記血液希釈保存容器の内部空間内で上下方向にそれぞれ独立した層を形成するように前記血液希釈保存容器に導入し、
前記採取された血液が前記上部開口から導入され、前記血液希釈保存容器に対して上方から下方に向かって作用する遠心力を付加し、
希釈された前記採取された血液の血漿を含む希釈緩衝液の血漿層と前記血漿分離用高分子ゲルの層と前記血球の層とがそれぞれ独立した層として前記血液希釈保存容器内に形成する段階を備えた、ことを特徴とする希釈血液の分離方法。
【手続補正書】
【提出日】平成28年11月30日(2016.11.30)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
採取された微量な血液を希釈して生成される生体分析試料を収容するための血液分析用構造体であって、
前記採取された血液中の血漿を希釈するための希釈緩衝液と、
該希釈された血漿を前記採取された血液中の血球と分離するための血漿分離用高分子ゲルと、
前記希釈緩衝液と血漿分離用高分子ゲルを収容するとともに、前記採取された血液を導入して収容し、保存するための血液希釈保存容器と、
前記血液希釈保存容器の上部開口部から導入される前記血液を前記希釈緩衝液と血漿分離用高分子ゲルとともに前記血液希釈保存容器に封入するための密閉蓋とを備え、
前記希釈緩衝液と血漿分離用高分子ゲルとが前記血液希釈保存容器の内部空間内で上下方向にそれぞれ独立した層を形成するようになっており、
前記採取された血液が前記上部開口部から導入され、前記血液希釈保存容器に対して上方から下方に向かって作用する遠心力を付加することによって、希釈された前記採取された血液の血漿を含む希釈緩衝液の血漿層と前記血漿分離用高分子ゲルの層と前記血球の層とがそれぞれ独立した層として前記血液希釈保存容器内に形成されるように構成され、
採取された血液において希釈された血漿の前記血漿層の比重がほぼ1.012〜1.014である、血液分析用構造体。
【請求項２】
採取された微量な血液を希釈して生成される生体分析試料を収容するための血液分析用構造体であって、
前記採取された血液中の血漿を希釈するための、内部標準入りの希釈緩衝液と、
該希釈された血漿を前記採取された血液中の血球と分離するための血漿分離用高分子ゲルと、
前記希釈緩衝液と血漿分離用高分子ゲルを収容するとともに、前記採取された血液を導入して収容し、保存するための血液希釈保存容器と、
前記血液希釈保存容器の上部開口部から導入される前記血液を前記希釈緩衝液と血漿分離用高分子ゲルとともに前記血液希釈保存容器に封入するための密閉蓋とを備え、
前記希釈緩衝液と血漿分離用高分子ゲルとが前記血液希釈保存容器の内部空間内で上下方向にそれぞれ独立した層を形成するようになっており、
前記採取された血液が前記上部開口部から導入され、前記血液希釈保存容器に対して上方から下方に向かって作用する遠心力を付加することによって、希釈された前記採取された血液の血漿を含む希釈緩衝液の血漿層と前記血漿分離用高分子ゲルの層と前記血球の層とがそれぞれ独立した層として前記血液希釈保存容器内に形成されるように構成された血液分析用構造体。
【請求項３】
前記血漿分離用高分子ゲルの比重が前記血球よりも小さく、前記血漿層の比重よりは大きいことを特徴とする請求項１または２に記載の血液分析構造体。
【請求項４】
前記希釈緩衝液の比重が、前記血漿の比重よりも小さくなっている請求項１〜３のいずれか１項に記載の血液分析用構造体。
【請求項５】
前記希釈緩衝液が前記血液とほぼ等張の285mOsm/Lの浸透圧を有し、比重がほぼ1.0106である請求項１または２に記載の血液分析用構造体。
【請求項６】
前記希釈緩衝液が前記血液よりも高いほぼ500mOsm/Lの浸透圧を有し、比重がほぼ1.011である請求項１または２に記載の血液分析用構造体。
【請求項７】
上部開口端の密封蓋の下側に希釈緩衝液の層があり、その下側に血漿分離用高分子ゲル化剤の層が形成される、請求項１〜６のいずれか１項に記載の血液分析用構造体。
【請求項８】
上部開口端側に血漿分離用高分子ゲル化剤の層が形成され、その下側に希釈緩衝液の層が形成される、請求項１〜６のいずれか１項に記載の血液分析用構造体。
【請求項９】
前記血液希釈保存容器が透明なプラスチックで形成されている請求項１〜８のいずれか１項に記載の血液分析構造体。
【請求項１０】
前記血液希釈保存容器には、所定量の血液が入ったことを示すための目印が形成されている請求項１または２に記載の血液分析構造体。
【請求項１１】
前記血液希釈保存容器が、前記上部開口部を密閉可能なスクリュー式の蓋を備えている請求項１〜１０のいずれか１項に記載の血液分析構造体。
【請求項１２】
前記血液希釈保存容器の底部が、開閉可能または脱着可能である請求項１〜１１のいずれか１項に記載の血液分析構造体。
【請求項１３】
前記血液希釈保存容器は、外径がほぼ１４ｍｍ、高さがほぼ７５ｍｍの円筒形状であり、
前記血液希釈保存容器の底部は、外径がほぼ１４ｍｍ、高さがほぼ２５ｍｍの脱着可能な底蓋が形成されている請求項１２に記載の血液分析構造体。
【請求項１４】
前記血液希釈保存容器の内面の形状が、
上端部の内径がほぼ１０ｍｍ、下端部の内径がほぼ５ｍｍであり、
前記上端部から前記下端部の深さがほぼ３０ｍｍであり、
前記上端部から前記下端部にかけて内径が漸減する形状を成している請求項１〜８のいずれか１項に記載の血液分析構造体。
【請求項１５】
採取された微量な血液を希釈して生成される生体分析試料を収容し、希釈された血漿と血球とを分離する希釈血液の分離方法であって、
前記採取された血液中の血漿を希釈するための希釈緩衝液を用意し、
該希釈された血漿を前記採取された血液中の血球と分離するための血漿分離用高分子ゲルを用意し、
前記希釈緩衝液と血漿分離用高分子ゲルを収容するとともに、前記採取された血液を導入して収容し、保存するための血液希釈保存容器を用意し、
前記血液希釈保存容器の上部開口部から導入される前記血液を前記希釈緩衝液と血漿分離用高分子ゲルとともに前記血液希釈保存容器に封入するための密閉蓋を用意し、
前記希釈緩衝液と血漿分離用高分子ゲルとが前記血液希釈保存容器の内部空間内で上下方向にそれぞれ独立した層を形成するように前記血液希釈保存容器に導入し、
前記採取された血液が前記上部開口部から導入され、前記血液希釈保存容器に対して上方から下方に向かって作用する遠心力を付加し、
希釈された前記採取された血液の血漿を含む希釈緩衝液の血漿層と前記血漿分離用高分子ゲルの層と前記血球の層とがそれぞれ独立した層として前記血液希釈保存容器内に形成する段階を備え、採取された血液において希釈された血漿の前記血漿層の比重がほぼ1.012〜1.014になることを特徴とする希釈血液の分離方法。
【請求項１６】
採取された微量な血液を希釈して生成される生体分析試料を収容し、希釈された血漿と血球とを分離する希釈血液の分離方法であって、
前記採取された血液中の血漿を希釈するための、内部標準入りの希釈緩衝液を用意し、
該希釈された血漿を前記採取された血液中の血球と分離するための血漿分離用高分子ゲルを用意し、
前記希釈緩衝液と血漿分離用高分子ゲルを収容するとともに、前記採取された血液を導入して収容し、保存するための血液希釈保存容器を用意し、
前記血液希釈保存容器の上部開口部から導入される前記血液を前記希釈緩衝液と血漿分離用高分子ゲルとともに前記血液希釈保存容器に封入するための密閉蓋を用意し、
前記希釈緩衝液と血漿分離用高分子ゲルとが前記血液希釈保存容器の内部空間内で上下方向にそれぞれ独立した層を形成するように前記血液希釈保存容器に導入し、
前記採取された血液が前記上部開口部から導入され、前記血液希釈保存容器に対して上方から下方に向かって作用する遠心力を付加し、
希釈された前記採取された血液の血漿を含む希釈緩衝液の血漿層と前記血漿分離用高分子ゲルの層と前記血球の層とがそれぞれ独立した層として前記血液希釈保存容器内に形成する段階を備えた、ことを特徴とする希釈血液の分離方法。
【国際調査報告】
2015189961.tif 000011
2015189961.tif 000012
2015189961.tif 000013
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