(57)【要約】  本発明は、有機化合物および共結晶形成剤から構成され、湿式粉砕により解離しない共結晶を、数平均分子量が３，０００以上であるポリマーおよび数平均分子量が３，０００未満である界面活性剤を含有する水中で湿式粉砕して、平均粒子径が３００ｎｍ以下であるナノ共結晶、ポリマー、界面活性剤および水を含有する懸濁液を製造する方法を提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
有機化合物および共結晶形成剤から構成され、湿式粉砕により解離しない共結晶を、重量平均分子量が３，０００以上であるポリマーおよび重量平均分子量が３，０００未満である界面活性剤を含有する水中で湿式粉砕して、平均粒子径が３００ｎｍ以下であるナノ共結晶、ポリマー、界面活性剤および水を含有する懸濁液を製造する方法。
【請求項２】
共結晶形成剤の水溶解度（ｍｇ／ｍＬ）／有機化合物の水溶解度（ｍｇ／ｍＬ）の比が、１．０×１０５未満である請求項１に記載の方法。
【請求項３】
ポリマーが、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、ポリエチレングリコール、メタクリル酸コポリマーおよびＰｏｌｏｘａｍｅｒ  ４０７からなる群から選ばれる少なくとも一つである請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
界面活性剤が、ドデシル硫酸ナトリウム、臭化セチルトリメチルアンモニウム、ポリソルベート８０、およびナトリウム  ジオクチルスルホスクシネートからなる群から選ばれる少なくとも一つである請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
水中のポリマーの濃度が０．３〜２．５％（ｗ／ｖ）であり、界面活性剤の濃度が０．０２〜０．３０％（ｗ／ｖ）である請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法によって得られた懸濁液。
【請求項７】
有機化合物および共結晶形成剤から構成され、平均粒子径が３００ｎｍ以下であるナノ共結晶、重量平均分子量が３，０００以上であるポリマー、重量平均分子量が３，０００未満である界面活性剤および水を含有し、前記共結晶が湿式粉砕により解離しないものである懸濁液。
【請求項８】
共結晶形成剤の水溶解度（ｍｇ／ｍＬ）／有機化合物の水溶解度（ｍｇ／ｍＬ）の比が、１．０×１０５未満である請求項７に記載の懸濁液。
【請求項９】
請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法によって得られた懸濁液を乾燥して、平均粒子径が３００ｎｍ以下であるナノ共結晶、ポリマーおよび界面活性剤を含有する組成物を製造する方法。
【請求項１０】
請求項９に記載の方法によって得られた組成物。
【請求項１１】
有機化合物および共結晶形成剤から構成され、平均粒子径が３００ｎｍ以下であるナノ共結晶、重量平均分子量が３，０００以上であるポリマーおよび重量平均分子量が３，０００未満である界面活性剤を含有し、前記共結晶が湿式粉砕により解離しないものである組成物。
【請求項１２】
共結晶形成剤の水溶解度（ｍｇ／ｍＬ）／有機化合物の水溶解度（ｍｇ／ｍＬ）の比が、１．０×１０５未満である請求項１１に記載の組成物。
【請求項１３】
請求項６〜８のいずれか一項に記載の懸濁液または請求項１０〜１２のいずれか一項に記載の組成物を含有する医薬。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ナノ共結晶を含有する懸濁液または組成物およびこれらの製造方法に関する。【０００２】
（発明の背景）
難溶性薬物の溶出性を向上させることは、医薬品開発のために重要である。難溶性薬物の溶出性を向上させる技術としては、沈殿法または湿式粉砕等による難溶性薬物の微細化、或いは難溶性薬物の塩または共結晶の形成が知られている（特許文献１〜４および非特許文献１〜４）。ここで「共結晶」とは、一般に、該共結晶を構成する多成分がイオン結合以外の結合または相互作用で結びついている結晶を意味する。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】国際公開第２０１３／０５７１６９号
【特許文献２】国際公開第２０１１／１５４７５５号
【特許文献３】特表２０１２−５３０１２５号公報
【特許文献４】特表２００８−５４０６７６号公報
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】Lieselotte De Smet, et al., "Formulation of itraconazole nanococrystals and evaluation of their bioavailability in dogs", European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics 87 (2014) 107-113
【非特許文献２】John R. G. Sander, et al., "Pharmaceutical Nano-Cocrystals: Sonochemical Synthesis by Solvent Selection and Use of a Surfactant", Angew. Chem. Int. Ed. 2010, 49, 7284 -7288
【非特許文献３】Goud, N.R., et al., "Novel Furosemide Cocrystals and Selection of High Solubility Drug Forms", J. Pharm. Sci., Vol. 101, No. 2, 2012, 664-680
【非特許文献４】Kojima, T., et al., "High-throughput cocrystal slurry screening by use of in situ Raman microscopy and multi-well plate", Int. J. Pharm., 399, 2010. 52-59
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
上述のような従来技術（微細化または共結晶化）では、有機化合物（特に、難溶性薬物）の溶出性向上に不充分である場合があった。本発明はこのような事情に着目してなされたものであって、その目的は、従来技術よりも、有機化合物の溶出性を向上させることにある。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
上記目的を達成するために本発明者らが鋭意検討を重ねた結果、有機化合物および共結晶形成剤から構成される共結晶の湿式粉砕においてポリマーおよび界面活性剤を併用することによって、溶出性に優れた微細なナノ共結晶を製造し得ることを見出した。この知見に基づく本発明は以下の通りである。【０００７】
［１］  有機化合物および共結晶形成剤から構成され、湿式粉砕により解離しない共結晶を、重量平均分子量が３，０００以上であるポリマーおよび重量平均分子量が３，０００未満である界面活性剤を含有する水中で湿式粉砕して、平均粒子径が３００ｎｍ以下であるナノ共結晶、ポリマー、界面活性剤および水を含有する懸濁液を製造する方法。【０００８】
［２］  共結晶形成剤の水溶解度（ｍｇ／ｍＬ）／有機化合物の水溶解度（ｍｇ／ｍＬ）の比が、１．０×１０５未満である前記［１］に記載の方法。
［３］  共結晶形成剤の水溶解度（ｍｇ／ｍＬ）／有機化合物の水溶解度（ｍｇ／ｍＬ）の比が、５．０×１０４以下である前記［１］に記載の方法。
［４］  共結晶形成剤の水溶解度（ｍｇ／ｍＬ）／有機化合物の水溶解度（ｍｇ／ｍＬ）の比が、１．０×１０４以下である前記［１］に記載の方法。【０００９】
［５］  ポリマーが、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、ポリエチレングリコール、メタクリル酸コポリマーおよびＰｏｌｏｘａｍｅｒ  ４０７からなる群から選ばれる少なくとも一つである前記［１］〜［４］のいずれか一つに記載の方法。
［６］  ポリマーが、ヒドロキシプロピルメチルセルロースである前記［１］〜［４］のいずれか一つに記載の方法。【００１０】
［７］  ポリマーの重量平均分子量が、３，０００〜１，０００，０００である前記［１］〜［６］のいずれか一つに記載の方法。
［８］  ポリマーの重量平均分子量が、３，０００〜２００，０００である前記［１］〜［６］のいずれか一つに記載の方法。【００１１】
［９］  界面活性剤が、ドデシル硫酸ナトリウム、臭化セチルトリメチルアンモニウム、ポリソルベート８０、およびナトリウム  ジオクチルスルホスクシネートからなる群から選ばれる少なくとも一つである前記［１］〜［８］のいずれか一つに記載の方法。
［１０］  界面活性剤が、ドデシル硫酸ナトリウムである前記［１］〜［８］のいずれか一つに記載の方法。【００１２】
［１１］  水中のポリマーの濃度が０．３〜２．５％（ｗ／ｖ）である前記［１］〜［１０］のいずれか一つに記載の方法。
［１２］  水中のポリマーの濃度が０．３〜２．０％（ｗ／ｖ）である前記［１］〜［１０］のいずれか一つに記載の方法。
［１３］  水中のポリマーの濃度が０．３〜１．５％（ｗ／ｖ）である前記［１］〜［１０］のいずれか一つに記載の方法。【００１３】
［１４］  水中の界面活性剤の濃度が０．０２〜０．３０％（ｗ／ｖ）である前記［１］〜［１３］のいずれか一つに記載の方法。
［１５］  水中の界面活性剤の濃度が０．０３〜０．２０％（ｗ／ｖ）である前記［１］〜［１３］のいずれか一つに記載の方法。
［１６］  水中の界面活性剤の濃度が０．０４〜０．１５％（ｗ／ｖ）である前記［１］〜［１３］のいずれか一つに記載の方法。【００１４】
［１７］  水中のポリマーの濃度が０．３〜２．５％（ｗ／ｖ）であり、界面活性剤の濃度が０．０２〜０．３０％（ｗ／ｖ）である前記［１］〜［１０］のいずれか一つに記載の方法。
［１８］  水中のポリマーの濃度が０．３〜２．０％（ｗ／ｖ）であり、界面活性剤の濃度が０．０３〜０．２０％（ｗ／ｖ）である前記［１］〜［１０］のいずれか一つに記載の方法。
［１９］  水中のポリマーの濃度が０．３〜１．５％（ｗ／ｖ）であり、界面活性剤の濃度が０．０４〜０．１５％（ｗ／ｖ）である前記［１］〜［１０］のいずれか一つに記載の方法。【００１５】
［２０］  水中のナノ共結晶の濃度が０．１〜１００％（ｗ／ｖ）である前記［１］〜［１９］のいずれか一つに記載の方法。
［２１］  水中のナノ共結晶の濃度が０．５〜５０％（ｗ／ｖ）である前記［１］〜［１９］のいずれか一つに記載の方法。
［２２］  水中のナノ共結晶の濃度が１．０〜２０％（ｗ／ｖ）である前記［１］〜［１９］のいずれか一つに記載の方法。【００１６】
［２３］  有機化合物が、フロセミド、カルバマゼピンまたはインドメタシンである前記［１］〜［２２］のいずれか一つに記載の方法。【００１７】
［２４］  共結晶形成剤が、サッカリンまたはカフェインである前記［１］〜［２３］のいずれか一つに記載の方法。【００１８】
［２５］  前記［１］〜［２４］のいずれか一つに記載の方法によって得られた懸濁液。【００１９】
［２６］  有機化合物および共結晶形成剤から構成され、平均粒子径が３００ｎｍ以下であるナノ共結晶、重量平均分子量が３，０００以上であるポリマー、重量平均分子量が３，０００未満である界面活性剤および水を含有し、前記共結晶が湿式粉砕により解離しないものである懸濁液。【００２０】
［２７］  共結晶形成剤の水溶解度（ｍｇ／ｍＬ）／有機化合物の水溶解度（ｍｇ／ｍＬ）の比が、１．０×１０５未満である前記［２６］に記載の懸濁液。
［２８］  共結晶形成剤の水溶解度（ｍｇ／ｍＬ）／有機化合物の水溶解度（ｍｇ／ｍＬ）の比が、５．０×１０４以下である前記［２６］に記載の懸濁液。
［２９］  共結晶形成剤の水溶解度（ｍｇ／ｍＬ）／有機化合物の水溶解度（ｍｇ／ｍＬ）の比が、１．０×１０４以下である前記［２６］に記載の懸濁液。【００２１】
［３０］  ポリマーが、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、ポリエチレングリコール、メタクリル酸コポリマーおよびＰｏｌｏｘａｍｅｒ  ４０７からなる群から選ばれる少なくとも一つである前記［２６］〜［２９］のいずれか一つに記載の懸濁液。
［３１］  ポリマーが、ヒドロキシプロピルメチルセルロースである前記［２６］〜［２９］のいずれか一つに記載の懸濁液。【００２２】
［３２］  ポリマーの重量平均分子量が、３，０００〜１，０００，０００である前記［２６］〜［３１］のいずれか一つに記載の懸濁液。
［３３］  ポリマーの重量平均分子量が、３，０００〜２００，０００である前記［２６］〜［３１］のいずれか一つに記載の懸濁液。【００２３】
［３４］  界面活性剤が、ドデシル硫酸ナトリウム、臭化セチルトリメチルアンモニウム、ポリソルベート８０、およびナトリウム  ジオクチルスルホスクシネートからなる群から選ばれる少なくとも一つである前記［２６］〜［３３］のいずれか一つに記載の懸濁液。
［３５］  界面活性剤が、ドデシル硫酸ナトリウムである前記［２６］〜［３３］のいずれか一つに記載の懸濁液。【００２４】
［３６］  ポリマーの濃度が０．３〜２．５％（ｗ／ｖ）である前記［２６］〜［３５］のいずれか一つに記載の懸濁液。
［３７］  ポリマーの濃度が０．３〜２．０％（ｗ／ｖ）である前記［２６］〜［３５］のいずれか一つに記載の懸濁液。
［３８］  ポリマーの濃度が０．３〜１．５％（ｗ／ｖ）である前記［２６］〜［３５］のいずれか一つに記載の懸濁液。【００２５】
［３９］  界面活性剤の濃度が０．０２〜０．３０％（ｗ／ｖ）である前記［２６］〜［３８］のいずれか一つに記載の懸濁液。
［４０］  界面活性剤の濃度が０．０３〜０．２０％（ｗ／ｖ）である前記［２６］〜［３８］のいずれか一つに記載の懸濁液。
［４１］  界面活性剤の濃度が０．０４〜０．１５％（ｗ／ｖ）である前記［２６］〜［３８］のいずれか一つに記載の懸濁液。【００２６】
［４２］  ポリマーの濃度が０．３〜２．５％（ｗ／ｖ）であり、界面活性剤の濃度が０．０２〜０．３０％（ｗ／ｖ）である前記［２６］〜［３５］のいずれか一つに記載の懸濁液。
［４３］  ポリマーの濃度が０．３〜２．０％（ｗ／ｖ）であり、界面活性剤の濃度が０．０３〜０．２０％（ｗ／ｖ）である前記［２６］〜［３５］のいずれか一つに記載の懸濁液。
［４４］  ポリマーの濃度が０．３〜１．５％（ｗ／ｖ）であり、界面活性剤の濃度が０．０４〜０．１５％（ｗ／ｖ）である前記［２６］〜［３５］のいずれか一つに記載の懸濁液。【００２７】
［４５］  ナノ共結晶の濃度が０．１〜１００％（ｗ／ｖ）である前記［２６］〜［４４］のいずれか一つに記載の懸濁液。
［４６］  ナノ共結晶の濃度が０．５〜５０％（ｗ／ｖ）である前記［２６］〜［４４］のいずれか一つに記載の懸濁液。
［４７］  ナノ共結晶の濃度が１．０〜２０％（ｗ／ｖ）である前記［２６］〜［４４］のいずれか一つに記載の懸濁液。【００２８】
［４８］  有機化合物が、フロセミド、カルバマゼピンまたはインドメタシンである前記［２６］〜［４７］のいずれか一つに記載の懸濁液。【００２９】
［４９］  共結晶形成剤が、サッカリンまたはカフェインである前記［２６］〜［４８］のいずれか一つに記載の懸濁液。【００３０】
［５０］  前記［１］〜［２４］のいずれか一つに記載の方法によって得られた懸濁液を乾燥して、平均粒子径が３００ｎｍ以下であるナノ共結晶、ポリマーおよび界面活性剤を含有する組成物を製造する方法。【００３１】
［５１］  前記［５０］に記載の方法によって得られた組成物。【００３２】
［５２］  ポリマーの量が、ナノ共結晶１００重量部に対して１．５〜２５０重量部である前記［５１］に記載の組成物。
［５３］  ポリマーの量が、ナノ共結晶１００重量部に対して５〜１００重量部である前記［５１］に記載の組成物。【００３３】
［５４］  界面活性剤の量が、ナノ共結晶１００重量部に対して０．１〜３０重量部である前記［５１］〜［５３］のいずれか一つに記載の組成物。
［５５］  界面活性剤の量が、ナノ共結晶１００重量部に対して０．５〜１０重量部である前記［５１］〜［５３］のいずれか一つに記載の組成物。【００３４】
［５６］  有機化合物および共結晶形成剤から構成され、平均粒子径が３００ｎｍ以下であるナノ共結晶、重量平均分子量が３，０００以上であるポリマーおよび重量平均分子量が３，０００未満である界面活性剤を含有し、前記共結晶が湿式粉砕により解離しないものである組成物。【００３５】
［５７］  共結晶形成剤の水溶解度（ｍｇ／ｍＬ）／有機化合物の水溶解度（ｍｇ／ｍＬ）の比が、１．０×１０５未満である前記［５６］に記載の組成物。
［５８］  共結晶形成剤の水溶解度（ｍｇ／ｍＬ）／有機化合物の水溶解度（ｍｇ／ｍＬ）の比が、５．０×１０４以下である前記［５６］に記載の組成物。
［５９］  共結晶形成剤の水溶解度（ｍｇ／ｍＬ）／有機化合物の水溶解度（ｍｇ／ｍＬ）の比が、１．０×１０４以下である前記［５６］に記載の組成物。【００３６】
［６０］  ポリマーが、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、ポリエチレングリコール、メタクリル酸コポリマーおよびＰｏｌｏｘａｍｅｒ  ４０７からなる群から選ばれる少なくとも一つである前記［５６］〜［５９］のいずれか一つに記載の組成物。
［６１］  ポリマーが、ヒドロキシプロピルメチルセルロースである前記［５６］〜［５９］のいずれか一つに記載の組成物。【００３７】
［６２］  ポリマーの重量平均分子量が、３，０００〜１，０００，０００である前記［５６］〜［６１］のいずれか一つに記載の組成物。
［６３］  ポリマーの重量平均分子量が、３，０００〜２００，０００である前記［５６］〜［６１］のいずれか一つに記載の組成物。【００３８】
［６４］  界面活性剤が、ドデシル硫酸ナトリウム、臭化セチルトリメチルアンモニウム、ポリソルベート８０、およびナトリウム  ジオクチルスルホスクシネートからなる群から選ばれる少なくとも一つである前記［５６］〜［６３］のいずれか一つに記載の組成物。
［６５］  界面活性剤が、ドデシル硫酸ナトリウムである前記［５６］〜［６３］のいずれか一つに記載の組成物。【００３９】
［６６］  ポリマーの量が、ナノ共結晶１００重量部に対して１．５〜２５０重量部である前記［５６］〜［６５］のいずれか一つに記載の組成物。
［６７］  ポリマーの量が、ナノ共結晶１００重量部に対して５〜１００重量部である前記［５６］〜［６５］のいずれか一つに記載の組成物。【００４０】
［６８］  界面活性剤の量が、ナノ共結晶１００重量部に対して０．１〜３０重量部である前記［５６］〜［６７］のいずれか一つに記載の組成物。
［６９］  界面活性剤の量が、ナノ共結晶１００重量部に対して０．５〜１０重量部である前記［５６］〜［６７］のいずれか一つに記載の組成物。【００４１】
［７０］  有機化合物が、フロセミド、カルバマゼピンまたはインドメタシンである前記［５６］〜［６９］のいずれか一つに記載の組成物。【００４２】
［７１］  共結晶形成剤が、サッカリンまたはカフェインである前記［５６］〜［７０］のいずれか一つに記載の組成物。【００４３】
［７２］  前記［２５］〜［４９］のいずれか一つに記載の懸濁液または前記［５１］〜［７１］のいずれか一つに記載の組成物を含有する医薬。
【発明の効果】
【００４４】
本発明の製造方法によれば、溶出性に優れたナノ共結晶を含む懸濁液および組成物を得ることができる。
【図面の簡単な説明】
【００４５】
【図１】図１は、粉末Ｘ線回折法により得られた、湿式粉砕前の有機化合物および共結晶のＸ線回折パターン、並びに湿式粉砕後のナノ化有機化合物およびナノ共結晶のＸ線回折パターンである（（ａ）湿式粉砕前のＦＳＤ、（ｂ）湿式粉砕後のナノ化ＦＳＤ、（ｃ）湿式粉砕前のＦＳＤ−ＣＡＦ共結晶、（ｄ）湿式粉砕後のＦＳＤ−ＣＡＦナノ共結晶、（ｅ）湿式粉砕前のＦＳＤ−ＵＲＥＡ共結晶、（ｆ）湿式粉砕後のＦＳＤ−ＵＲＥＡ（解離）、（ｇ）湿式粉砕前のＦＳＤ−ＡＣＴ共結晶、（ｈ）湿式粉砕後のＦＳＤ−ＡＣＴ（解離）、（ｉ）湿式粉砕前のＦＳＤ−ＮＩＣ共結晶、（ｊ）湿式粉砕後のＦＳＤ−ＮＩＣ（解離））。なお、略号の意味は実施例に記載した通りである。
【図２】図２は、粉末Ｘ線回折法により得られた、湿式粉砕前の有機化合物および共結晶のＸ線回折パターン、並びに湿式粉砕後のナノ化有機化合物およびナノ共結晶のＸ線回折パターンである（図２（Ａ）：（ａ）湿式粉砕前のＣＢＺ、（ｂ）湿式粉砕後のナノ化ＣＢＺ、（ｃ）湿式粉砕前のＣＢＺ−ＳＡＣ共結晶、（ｄ）湿式粉砕後のＣＢＺ−ＳＡＣナノ共結晶；図２（Ｂ）：（ｅ）湿式粉砕前のＩＭＣ、（ｆ）湿式粉砕後のナノ化ＩＭＣ、（ｇ）湿式粉砕前のＩＭＣ−ＳＡＣ共結晶、（ｈ）湿式粉砕後のＩＭＣ−ＳＡＣナノ共結晶）。なお、略号の意味は実施例に記載した通りである。
【図３】図３は、有機化合物および共結晶の粉末のラマンスペクトル、並びにナノ化有機化合物およびナノ共結晶の懸濁液のラマンスペクトルである（図３（Ａ）：（ａ）ＣＢＺの粉末、（ｂ）ナノ化ＣＢＺの懸濁液、（ｃ）ＣＢＺ−ＳＡＣ共結晶の粉末、（ｄ）ＣＢＺ−ＳＡＣナノ共結晶の懸濁液；図３（Ｂ）：（ｅ）ＩＭＣの粉末、（ｆ）ナノ化ＩＭＣの懸濁液、（ｇ）ＩＭＣ−ＳＡＣ共結晶の粉末、（ｈ）ＩＭＣ−ＳＡＣナノ共結晶の懸濁液）。なお、略号の意味は実施例に記載した通りである。
【図４】図４は、ナノ化ＦＳＤの懸濁液、ＦＳＤ−ＣＡＦナノ共結晶の懸濁液、ＦＳＤ物理混合物、またはＦＳＤ−ＣＡＦ物理混合物を用いた日本薬局方溶出試験第１液（ｐＨ＝１．２）中の溶出濃度−時間の関係を示すグラフである。なお、略号の意味は実施例に記載した通りである。
【図５】図５は、ナノ化ＣＢＺの懸濁液、ＣＢＺ−ＳＡＣナノ共結晶の懸濁液、ＣＢＺ物理混合物、またはＣＢＺ−ＳＡＣ物理混合物の懸濁液を用いた日本薬局方溶出試験第１液（ｐＨ＝１．２）中の溶出濃度−時間の関係を示すグラフある。なお、略号の意味は実施例に記載した通りである。
【図６】図６は、湿式粉砕により得られたナノ化ＣＢＺおよびＣＢＺ−ＳＡＣナノ共結晶の希釈懸濁液（濃度：５ｍｇ／ｍＬ）の血漿中のＣＢＺ濃度−時間を示すグラフである。なお、略号の意味は実施例に記載した通りである。
【図７】図７は、ＩＭＣ−ＳＡＣナノ共結晶の懸濁液の固体１３Ｃ  ＮＭＲスペクトルである（（ａ）ＩＭＣの粉末、（ｂ）ＳＡＣの粉末、（ｃ）湿式粉砕前のＩＭＣ−ＳＡＣ共結晶の粉末、（ｄ）湿式粉砕後のＩＭＣ−ＳＡＣナノ共結晶の懸濁液、（ｅ）ＨＰＭＣの粉末、（ｆ）ＳＤＳの粉末）。なお、略号の意味は実施例に記載した通りである。
【図８】図８は、ＣＢＺ−ＳＡＣナノ共結晶の懸濁液等の溶液１Ｈ  ＮＭＲスペクトルである（（ａ）ＣＢＺ−ＳＡＣナノ共結晶の懸濁液（１％（ｗ／ｖ）のＨＰＭＣおよび０．０２％（ｗ／ｖ）のＳＤＳ）、（ｂ）ＣＢＺ−ＳＡＣナノ共結晶の懸濁液（１％（ｗ／ｖ）のＨＰＭＣおよび０．０５％（ｗ／ｖ）のＳＤＳ）、（ｃ）ＣＢＺ−ＳＡＣナノ共結晶の懸濁液（１％（ｗ／ｖ）のＨＰＭＣおよび０．１２％（ｗ／ｖ）のＳＤＳ）、（ｄ）ＳＡＣの重水溶液、（ｅ）０．５％（ｗ／ｖ）のＨＰＭＣおよび０．０２％（ｗ／ｖ）のＳＤＳを含有する重水溶液）。なお、略号の意味は実施例に記載した通りである。
【００４６】
（発明の詳細な説明）
本発明は、湿式粉砕により解離しない共結晶を、重量平均分子量が３，０００以上であるポリマー（以下、単に「ポリマー」と記載することがある。）および重量平均分子量が３，０００未満である界面活性剤（以下、単に「界面活性剤」と記載することがある。）を含有する水中で湿式粉砕することによって、平均粒子径が３００ｎｍ以下であるナノ共結晶を含有する懸濁液を製造する方法および該方法によって得られる懸濁液を提供する。【００４７】
本発明において「共結晶」とは、該共結晶を構成する有機化合物および共結晶形成剤が、イオン結合以外の結合または相互作用（例えば、水素結合、ファンデル・ワールス力、π―π結合等）で結びついている結晶を意味する。或る化合物が、共結晶であるか、または構成成分がイオン結合で結びついている塩であるかは、単結晶Ｘ線回折法または固体ＮＭＲで確認することができる。【００４８】
共結晶を構成する有機化合物および共結晶形成剤は、塩でないことが好ましい。但し、有機化合物および共結晶形成剤がイオン結合以外の結合または相互作用で結びついて、共結晶を形成できる場合、有機化合物が塩であってもよく、共結晶形成剤が塩であってもよい。【００４９】
「ナノ共結晶」とは、一般に、平均粒子径が５００ｎｍ未満である共結晶を意味する。本発明の製造方法は、平均粒子径が３００ｎｍ以下であるナノ共結晶を含有する懸濁液を製造することを特徴の一つとする。ナノ共結晶の平均粒子径は、好ましくは２５０ｎｍ以下、さらに好ましくは２００ｎｍ以下である。この平均粒子径は、動的散乱法によって測定される値である。【００５０】
本発明は、有機化合物そのものではなく、共結晶を湿式粉砕することを特徴の一つとする。有機化合物自体を湿式粉砕すると、有機化合物が水和することがある。一般に、水和物は、無水物に比べて水溶性が低い。この点、有機化合物および共結晶形成剤から共結晶を形成し、次いで該共結晶を湿式粉砕することで、湿式粉砕時の水和を防止することができる。また、下記表１２で示されるように、有機化合物を単に湿式粉砕させるよりも、有機化合物および共結晶形成剤から共結晶を形成し、次いで該共結晶を湿式粉砕することによって、吸収性を向上させることができる。【００５１】
本発明は、共結晶の湿式粉砕に、ポリマーおよび界面活性剤を併用することを特徴の一つとする。ポリマーおよび界面活性剤の両方を使用しない湿式粉砕、またはこれらの片方のみを使用する共結晶の湿式粉砕では、平均粒子径が３００ｎｍ以下であるナノ共結晶を含む懸濁液を製造することができない。【００５２】
ポリマーの重量平均分子量は、好ましくは３，０００〜１，０００，０００、より好ましくは３，０００〜２００，０００である。この重量平均分子量は、ゲル浸透クロマトグラフィーによって測定される値である。【００５３】
ポリマーは、好ましくは水溶性ポリマーである。水溶性ポリマーとしては、例えば、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、ポリエチレングリコール、メタクリル酸コポリマー、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ  ４０７等が挙げられる。メタクリル酸コポリマーとしては、例えば、メタクリル酸とメタクリル酸メチルとのコポリマー、メタクリル酸とアクリル酸エチルとのコポリマー等が挙げられる。メタクリル酸コポリマー中のメタクリル酸以外のモノマー単位の量は、メタクリル酸単位１モルに対して、好ましくは０．５〜４モル、より好ましくは１〜３モル、さらに好ましくは１〜２モルである。メタクリル酸コポリマーの市販品としては、例えば、Evonik Roehm GmbH 製のオイドラギットＬ１００（メタクリル酸単位：メタクリル酸メチル単位のモル比＝１：１）、オイドラギットＳ１００（メタクリル酸単位：メタクリル酸メチル単位のモル比＝１：２）、オイドラギットＬ３０Ｄ−５５（メタクリル酸単位：アクリル酸エチル単位のモル比＝１：１）、オイドラギットＬ１００−５５（メタクリル酸単位：アクリル酸エチル単位のモル比＝１：１）等が挙げられる。上述のポリマーの中で、ヒドロキシプロピルメチルセルロースが好ましい。【００５４】
ナノ共結晶の安定化のために、水中のポリマーの濃度は、好ましくは０．３〜２．５％（ｗ／ｖ）、より好ましくは０．３〜２．０％（ｗ／ｖ）、さらに好ましくは０．３〜１．５％（ｗ／ｖ）である。【００５５】
界面活性剤としては、例えば、ドデシル硫酸ナトリウム、臭化セチルトリメチルアンモニウム、ポリソルベート８０、ナトリウム  ジオクチルスルホスクシネート（別名：ジオクチルソジウムスルホサクシネート）等が挙げられる。これらの中で、ドデシル硫酸ナトリウムが好ましい。【００５６】
ナノ共結晶の安定化のために、水中の界面活性剤の濃度は、好ましくは０．０２〜０．３０％（ｗ／ｖ）、より好ましくは０．０３〜０．２０％（ｗ／ｖ）、さらに好ましくは０．０４〜０．１５％（ｗ／ｖ）である。【００５７】
難溶性薬物が中性の有機化合物である場合、溶出性向上のために、その塩を形成することができない。しかし、中性の有機化合物でも共結晶を形成させて、その溶出性を向上させることができる。そのため、共結晶を構成する有機化合物は、中性化合物、酸性化合物、塩基性化合物および両性化合物のいずれでもよい。ここで、両性化合物とは、酸性官能基および塩基性官能基の両方を有する化合物を意味する。【００５８】
中性化合物としては、例えば、カルバマゼピン、グリセオフルビン、プロゲステロン、フェノフィブラート、パクリタキセル等が挙げられる。酸性化合物としては、例えば、インドメタシン、イブプロフェン、ナプロキセン、ケトプロフェン、メフェナム酸等が挙げられる。塩基性化合物としては、例えば、イトラコナゾール、ケトコナゾール、オメプラゾール、シメチジン、ジアゼパム等が挙げられる。両性化合物としては、例えば、フロセミド、スルファメトキサゾール、ピロキシカム、メロキシカム、エノキサシン等が挙げられる。上述の有機化合物の中で、フロセミド、カルバマゼピンおよびインドメタシンが好ましい。【００５９】
共結晶を構成する共結晶形成剤としては、例えば、サッカリン、カフェイン、フマル酸、マレイン酸、酒石酸、コハク酸、リンゴ酸、シュウ酸、クエン酸、乳酸、グリコール酸、馬尿酸、桂皮酸、マロン酸、アジピン酸、マンデル酸、セバシン酸、アスコルビン酸、グルタミン酸、アスパラギン酸、グルタル酸、リシン、アルギニン、トリプトファン、安息香酸、ニコチン酸、サリチル酸、ゲンチシン酸、オロト酸、パモ酸、ラウリン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、尿素、ピペラジン、ヒドロキノン、チロシン、グリシン、アスパラギン、グルタミン、バリン、セリン、プロリン、アラニン、メチオニン、ヒスチジン、トレオニン、ロイシン、イソロイシン、フェニルアラニン、ニコチンアミド、アセトアミド、ベンズアミド、グリコールアミド、４−アミノ安息香酸、４−ヒドロキシ安息香酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、イミダゾール、キシリトール、トロメタミン、およびこれらの塩（例えば、サッカリンナトリウム）等が挙げられる。これらの中で、サッカリンおよびカフェインが好ましい。【００６０】
共結晶は、例えば非特許文献３および４に記載されているような公知の方法（例えば、粉砕法、スラリー熟成法等）によって、有機化合物および共結晶形成剤から製造することができる。【００６１】
本発明では、共結晶形成剤の水溶解度（ｍｇ／ｍＬ）／有機化合物の水溶解度（ｍｇ／ｍＬ）の比が１．０×１０５未満である共結晶を使用することが好ましい。有機化合物および共結晶形成剤の水溶解度に大きな違いがある場合、これらから得られる共結晶が不安定になり、湿式粉砕中に解離することがある。この比は、より好ましくは５．０×１０４以下、さらに好ましくは１．０×１０４以下である。なお、水溶解度は２５℃および１気圧における値である。【００６２】
ナノ共結晶の安定化のために、水中のナノ共結晶の濃度は、好ましくは１〜１０００ｍｇ／ｍＬ（即ち、０．１〜１００％（ｗ／ｖ））、より好ましくは５〜５００ｍｇ／ｍＬ（即ち、０．５〜５０％（ｗ／ｖ））、さらに好ましくは１０〜２００ｍｇ／ｍＬ（即ち、１．０〜２０％（ｗ／ｖ））である。【００６３】
湿式粉砕に使用する機器としては、例えば、遊星型ミル、ビーズミル、アトライタ等が挙げられる。これらの中で、粉砕媒体としてビーズを使用する遊星型ミルおよびビーズミルが好ましく、ビーズを使用する遊星型ミルがより好ましい。【００６４】
ビーズの材質としては、例えばジルコニア、アルミナ、ガラス、スチール等が挙げられる。これらの中でジルコニアが好ましい。ビーズの直径は、好ましくは０．０１〜５．０ｍｍ、より好ましくは０．０２〜１．０ｍｍである。ビーズの使用量は、遊星型ミルまたはビーズミル等の粉砕室の容積に対して、好ましくは１〜４０容積％、より好ましくは４〜１２容積％である。粉砕室を冷却しながら、湿式粉砕を行うことが好ましい。湿式粉砕の際の粉砕室の温度は、好ましくは−２０℃〜０℃、より好ましくは−１５℃〜−５℃である。【００６５】
遊星型ミルを使用する場合、粉砕室の自転の回転数は、好ましくは４００〜２０００ｒｐｍ、より好ましくは５００〜２０００ｒｐｍであり、公転の回転数は、４００〜２０００ｒｐｍ、より好ましくは５００〜２０００ｒｐｍである。また、遊星型ミルの粉砕室への懸濁液の供給量は、粉砕室の容積に対して、好ましくは１〜４０容積％、より好ましくは４〜１２容積％である。遊星型ミルでの湿式粉砕の１サイクルの時間は、好ましくは１〜１５分、より好ましくは１〜５分である。遊星型ミルでは、好ましくは１〜１０サイクル、より好ましくは３〜５サイクルで湿式粉砕が繰り返される。【００６６】
ビーズミルを使用する場合、ビーズミルの回転軸の回転数は、好ましくは５００〜５０００ｒｐｍ、より好ましくは１０００〜４０００ｒｐｍである。ビーズミルの粉砕室への懸濁液の供給量は、好ましくは１〜１２０ｋｇ／時間、より好ましくは６〜６０ｋｇ／時間である。所望の平均粒子径のナノ共結晶が得られるまで、懸濁液をビーズミルの粉砕室に繰り返し供給してもよい。【００６７】
精密ろ過膜または限外ろ過膜を用いて、上記製造方法によって得られた懸濁液から、平均粒子径が３００ｎｍ以下であるナノ共結晶をろ取してもよい。【００６８】
上記製造方法によって得られた懸濁液を乾燥して、平均粒子径が３００ｎｍ以下であるナノ共結晶、ポリマーおよび界面活性剤を含有する組成物を製造してもよい。この方法によって得られる組成物に含まれるナノ共結晶、ポリマーおよび界面活性剤の説明は上記の通りである。【００６９】
乾燥法としては、例えば、噴霧乾燥、加熱乾燥、減圧乾燥等が挙げられる。これらの中で、噴霧乾燥が好ましい。噴霧乾燥に用いる気体としては、例えば、窒素、空気等が挙げられる。噴霧乾燥に用いる気体の温度は、好ましくは２５〜１２０℃、より好ましくは５０〜１２０℃である。【００７０】
得られる組成物中のポリマーの量は、ナノ共結晶１００重量部に対して、好ましくは１．５〜２５０重量部、より好ましくは５〜１００重量部である。得られる組成物中の界面活性剤の量は、ナノ共結晶１００重量部に対して、好ましくは０．１〜３０重量部、より好ましくは０．５〜１０重量部である。【００７１】
本発明は、上述のようにして得られた懸濁液または組成物を含有する医薬も提供する。医薬は、液状製剤（例えば、注射剤等）でもよく、固形製剤（例えば、顆粒剤、細粒剤、カプセル剤等）でもよい。懸濁液に含まれるナノ共結晶が滅菌ろ過膜（２００ｎｍ程度）を通過し得る場合、例えば、懸濁液を注射用液に分散させた後、ろ過滅菌して、注射剤を製造することができる。また、例えば、懸濁液を噴霧した担体を製剤化して、顆粒剤を製造することができる。
【実施例】
【００７２】
以下、実施例を挙げて本発明をより具体的に説明するが、本発明は以下の実施例によって制限を受けるものではなく、上記・下記の趣旨に適合し得る範囲で適当に変更を加えて実施することも勿論可能であり、それらはいずれも本発明の技術的範囲に包含される。【００７３】
１．略号
以下の実施例等で使用する略号の意味は以下の通りである。
（１）有機化合物
ＦＳＤ：フロセミド
ＣＢＺ：カルバマゼピン
ＩＭＣ：インドメタシン
（２）共結晶形成剤
ＳＡＣ：サッカリン
ＣＡＦ：カフェイン
ＵＲＥＡ：尿素
ＡＣＴ：アセトアミド
ＮＩＣ：ニコチンアミド
（３）ポリマーおよび界面活性剤
ＨＰＭＣ：ヒドロキシプロピルメチルセルロース
ＳＤＳ：ドデシル硫酸ナトリウム
（４）その他
ＦＳＤ物理混合物：ＦＳＤ、ＨＰＭＣおよびＳＤＳを含有する懸濁液
ＦＳＤ−ＣＡＦ物理混合物：ＦＳＤ−ＣＡＦ共結晶、ＨＰＭＣおよびＳＤＳを含有する懸濁液
ＣＢＺ物理混合物：ＣＢＺ、ＨＰＭＣおよびＳＤＳを含有する懸濁液
ＣＢＺ−ＳＡＣ物理混合物：ＣＢＺ−ＳＡＣ共結晶、ＨＰＭＣおよびＳＤＳを含有する懸濁液【００７４】
２．材料
有機化合物として使用したフロセミド（両性化合物、分子量＝３３０．７４ｇ／ｍｏｌ、純度≧９９．０％、水溶解度＝０．００６ｍｇ／ｍＬ）は東京化成工業株式会社から購入し、無水カルバマゼピン（中性化合物、分子量＝２３６．２７ｇ／ｍｏｌ、純度≧９７．０％、水溶解度＝０．２２ｍｇ／ｍＬ）およびインドメタシン（酸性化合物、分子量＝３５７．７９ｇ／ｍｏｌ、純度≧９８．０％、水溶解度＝０．００９５ｍｇ／ｍＬ）は和光純薬工業株式会社から購入した。
共結晶形成剤として使用したサッカリン（水溶解度＝３．４ｍｇ／ｍＬ）、カフェイン（水溶解度＝２２ｍｇ／ｍＬ）、尿素（水溶解度＝１，０００ｍｇ／ｍＬ）、アセトアミド（水溶解度＝２，０００ｍｇ／ｍＬ）およびニコチンアミド（水溶解度＝１，０００ｍｇ／ｍＬ）は和光純薬工業株式会社から購入した。
ポリマーとして使用したヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＴＣ−５Ｅグレード、重量平均分子量＝１６，０００）は、信越化学工業株式会社から購入した。
界面活性剤として使用したドデシル硫酸ナトリウムは和光純薬工業株式会社から購入した。
共結晶の製造に使用した全ての有機溶媒は和光純薬工業株式会社から購入した。【００７５】
３．共結晶の製造
（１）ＦＳＤを含む共結晶の製造
ＦＳＤ−ＣＡＦ共結晶、ＦＳＤ−ＵＲＥＡ共結晶、ＦＳＤ−ＡＣＴ共結晶およびＦＳＤ−ＮＩＣ共結晶を、非特許文献３の記載に従い、数滴の有機溶媒を使用する粉砕法によって製造した。詳しくは、乳鉢に等モルのＦＳＤおよび共結晶形成剤を秤り取り、５〜６滴の有機溶媒（ＦＳＤ−ＣＡＦおよびＦＳＤ−ＡＣＴにはアセトニトリルを、ＦＳＤ−ＮＩＣはアセトンを使用）を加えて、これらを乳棒で２０分間粉砕した粉末を回収し、室温で真空乾燥させて、共結晶を得た。【００７６】
（２）ＣＢＺを含む共結晶の製造
ＣＢＺ−ＳＡＣ共結晶をスラリー熟成法により製造した。詳しくは、等モルのＣＢＺおよびＳＡＣをアセトニトリル中に分散させ、得られたスラリーを室温で一晩放置した。得られた沈殿物を真空ろ過で回収し、室温で真空乾燥させて、ＣＢＺ−ＳＡＣ共結晶を得た。【００７７】
（３）ＩＭＣを含む共結晶の製造
ＩＭＣ−ＳＡＣ共結晶を、非特許文献４の記載に従いスラリー熟成法により製造した。詳しくは、等モルのＩＭＣおよびＳＡＣをアセトニトリル中に分散させ、得られたスラリーを室温で３日間放置した。得られた沈殿物を真空ろ過で回収し、室温で真空乾燥させて、ＩＭＣ−ＳＡＣ共結晶を得た。【００７８】
４．湿式粉砕による懸濁液の製造
実施例１
０．５％（ｗ／ｖ）のＨＰＭＣおよび０．０２％（ｗ／ｖ）のＳＤＳを含有する蒸留水（以下「配合溶液」と記載する）中に、ＦＳＤ−ＣＡＦ共結晶（ＣＡＦの水溶解度／ＦＳＤの水溶解度＝３．７×１０３）を分散させた後、ジルコニアビーズを用いた自転・公転ナノ粉砕機ＮＰ−１００（株式会社シンキー製、遊星型ミル）によって湿式粉砕して、ＦＳＤ−ＣＡＦナノ共結晶を含有する懸濁液を製造した。詳しくは、ボルテックスミキサーＶＴＸ−３０００Ｌ（株式会社エル・エム・エス製）を使用して、ＦＳＤ−ＣＡＦ共結晶（１００ｍｇ）を配合溶液（５ｍＬ、粉砕室の容積に対して１７容積％）を含む粉砕室（容積３０ｍＬ）中に分散させ、ジルコニアビーズ（直径０．１ｍｍ、１０ｇ、粉砕室の容積に対して８容積％）を含む粉砕室に、得られた懸濁液を注いだ。自転および公転の回転数２０００ｒｐｍで２分間、および自転および公転の回転数５００ｒｐｍで２分間のサイクルを３回繰り返して、湿式粉砕を行った。湿式粉砕中、粉砕室を−１０℃に維持した。湿式粉砕後に得られたジルコニアビーズおよび懸濁液の混合物を、遠心フィルター／メッシュ室に移し、４００ｒｐｍで１分間回転させて、ジルコニアビーズを分離し、懸濁液を回収した（水中のＦＳＤ−ＣＡＦナノ共結晶の濃度＝２０ｍｇ／ｍＬ＝２％（ｗ／ｖ））。【００７９】
実施例２
ＦＳＤ−ＣＡＦ共結晶の代わりにＣＢＺ−ＳＡＣ共結晶（ＳＡＣの水溶解度／ＣＢＺの水溶解度＝１．５×１０）を用いたこと以外は実施例１と同様にして、ＣＢＺ−ＳＡＣナノ共結晶の懸濁液を製造した。【００８０】
実施例３
ＦＳＤ−ＣＡＦ共結晶の代わりにＩＭＣ−ＳＡＣ共結晶（ＳＡＣの水溶解度／ＩＭＣの水溶解度＝３．６×１０２）を用いたこと以外は実施例１と同様にして、ＩＭＣ−ＳＡＣナノ共結晶の懸濁液を製造した。【００８１】
比較例１
ＦＳＤ−ＣＡＦ共結晶の代わりにＦＳＤを用いたこと以外は実施例１と同様にして、ナノ化ＦＳＤの懸濁液を製造した。【００８２】
比較例２
ＦＳＤ−ＣＡＦ共結晶の代わりにＦＳＤ−ＵＲＥＡ共結晶（ＵＲＥＡの水溶解度／ＦＳＤの水溶解度＝１．７×１０５）を用いたこと以外は実施例１と同様にして、懸濁液を製造した。【００８３】
比較例３
ＦＳＤ−ＣＡＦ共結晶の代わりにＦＳＤ−ＡＣＴ共結晶（ＡＣＴの水溶解度／ＦＳＤの水溶解度＝３．３×１０５）を用いたこと以外は実施例１と同様にして、懸濁液を製造した。【００８４】
比較例４
ＦＳＤ−ＣＡＦ共結晶の代わりにＦＳＤ−ＮＩＣ共結晶（ＮＩＣの水溶解度／ＦＳＤの水溶解度＝１．７×１０５）を用いたこと以外は実施例１と同様にして、懸濁液を製造した。【００８５】
比較例５
ＦＳＤ−ＣＡＦ共結晶の代わりにＣＢＺを用いたこと以外は実施例１と同様にして、ナノ化ＣＢＺの懸濁液を製造した。【００８６】
比較例６
ＦＳＤ−ＣＡＦ共結晶の代わりにＩＭＣを用いたこと以外は実施例１と同様にして、ナノ化ＩＭＣの懸濁液を製造した。【００８７】
５．特性評価
（１）粉末Ｘ線回折法
加速電圧４０ｋＶ、管電流５０ｍＡおよびＣｕ  Ｋα線（λ＝０．１５４ｎｍ）の条件でＸ線回折装置 Ultima IV（株式会社リガク製）を用いる粉末Ｘ線回折法により、湿式粉砕前のＦＳＤ、ＦＳＤ−ＣＡＦ共結晶、ＦＳＤ−ＵＲＥＡ共結晶、ＦＳＤ−ＡＣＴ共結晶、ＦＳＤ−ＮＩＣ共結晶、ＣＢＺ、ＣＢＺ−ＳＡＣ共結晶、ＩＭＣおよびＩＭＣ−ＳＡＣ共結晶のＸ線回折パターン、並びに実施例１〜３および比較例１〜６の湿式粉砕で得られたナノ化ＦＳＤ、ＦＳＤ−ＣＡＦナノ共結晶、ＦＳＤ−ＵＲＥＡ（解離）、ＦＳＤ−ＡＣＴ（解離）、ＦＳＤ−ＮＩＣ（解離）、ナノ化ＣＢＺ、ＣＢＺ−ＳＡＣナノ共結晶、ナノ化ＩＭＣおよびＩＭＣ−ＳＡＣナノ共結晶のＸ線回折パターンを測定した。詳しくは、粉末試料（約２ｍｇ）をシリコン試料プレートに置き、２および３５度（２θ）間をスキャン速度６度／分でスキャンした。ナノ化ＦＳＤ等の粉末試料は、それらの懸濁液を冷却遠心機 Himac CR21G（日立工機株式会社製）により１９，０００ｒｐｍで１０分間遠心分離し、乾燥して、調製した。得られたＸ線回折パターンを図１および図２に示す。また、得られたＸ線回折パターンから、Hermans 法に従い、湿式粉砕前後における結晶化度を計算した。結果を表３〜表５に示す。【００８８】
（２）ラマンスペクトル
励起源としての発光ダイオードレーザー（７８５ｎｍ、４００ｍＷ）および空冷ＣＣＤ検出器を備えた RXN systems（Kaiser Optical Systems 製）を使用して、ＣＢＺ、ＣＢＺ−ＳＡＣ共結晶、ＩＭＣおよびＩＭＣ−ＳＡＣ共結晶の粉末のラマンスペクトル、並びに実施例２および３および比較例５および６の湿式粉砕で得られたナノ化ＣＢＺ、ＣＢＺ−ＳＡＣナノ共結晶、ナノ化ＩＭＣおよびＩＭＣ−ＳＡＣナノ共結晶の懸濁液のラマンスペクトルを測定した。なお、粉末はガラスプレート上に置いて測定し、懸濁液は２ｍＬ石英セルに入れて測定した。スペクトルを集めるために、プローブシステムを備えた１倍対物レンズを使用した。スペクトルは、４ｃｍ−１のスペクトル幅および１０秒の露光で取得した。得られたラマンスペクトルを図３に示す。【００８９】
（３）平均粒子径（動的散乱法）、多分散指数、ゼータ電位（電気泳動法）
Malvern zetasizer nano ZS（Malvern Instruments Ltd. 製）を使用して、実施例１〜３および比較例１、５および６の湿式粉砕で得られた懸濁液の粒子（ナノ化ＦＳＤ、ＦＳＤ−ＣＡＦナノ共結晶、ナノ化ＣＢＺ、ＣＢＺ−ＳＡＣナノ共結晶、ナノ化ＩＭＣおよびＩＭＣ−ＳＡＣナノ共結晶）の平均粒子径およびゼータ電位を測定した。平均粒子径およびゼータ電位の測定では、懸濁液をそれぞれ、蒸留水で１００倍および１５倍に希釈した。また、懸濁液の粒子の粒度分布を評価するため、多分散指数（ＰＤＩ）も測定した。結果を表３〜表５に示す。【００９０】
（４）懸濁液の安定性試験
実施例１〜３および比較例１、５および６の湿式粉砕で得られたナノ化ＦＳＤ、ＦＳＤ−ＣＡＦナノ共結晶、ナノ化ＣＢＺ、ＣＢＺ−ＳＡＣナノ共結晶、ナノ化ＩＭＣおよびＩＭＣ−ＳＡＣナノ共結晶の懸濁液の物理的安定性を評価するため、これらの保存開始時、５℃または２５℃で１ヶ月または３ヶ月保存後に、上記と同様にして平均粒子径およびゼータ電位を測定した。また保存３ヶ月後に、上記と同様にしてラマンスペクトルを測定した。また、保存開始時および５℃または２５℃で３ヶ月保存後に、ナノ化ＦＳＤ等の純度を下記条件のＨＰＬＣで測定した。なお、ＨＰＬＣ分析では、アセトニトリルおよび水（体積混合比３：２）の混合溶媒に懸濁液を溶解させて、１００倍に希釈した試料溶液を使用した。結果を表６〜表１１に示す。【００９１】
・ＨＰＬＣ条件
機器：Prominence UFLC（島津製作所製）
検出：２３０ｎｍ
カラム：YMC−Pack Pro C18、４．６ｍｍ ｉ．ｄ．×１５０ｍｍ、５μｍ
カラム温度：４０℃
流量：１．０ｍＬ／分
注入量：１０μＬ
実行時間：３０分
移動相Ａ：酢酸アンモニウム水溶液（濃度：５０ｍＭ）
移動相Ｂ：アセトニトリル
グラジエントプログラム：表１【００９２】
【表１】
2016140219.tif 000002
【００９３】
（５）溶出試験
日本薬局方のパドル法において、３７℃で、それぞれ２５０ｍＬの日本薬局方溶出試験第１液（ｐＨ＝１．２）を使用し、溶出試験装置NTR 6100A（富山産業株式会社製）のパドル回転速度を５０ｒｐｍに設定して、上記懸濁液を用いて溶出試験を行った。溶出した試料を所定の時点で回収し、０．０２μｍのポリエチレン製メンブレンフィルター（Entegris Inc. 製）でろ過し、ろ液を上記（４）と同じ条件でＨＰＬＣ測定し、実施例１および２並びに比較例１および５の湿式粉砕で得られたナノ化ＦＳＤ、ＦＳＤ−ＣＡＦナノ共結晶、ナノ化ＣＢＺおよびＣＢＺ−ＳＡＣナノ共結晶の溶出濃度を測定した。溶出試験は３回行った。
また、濃度が上記懸濁液と同じになるように調整し、各成分をボルテックスミキサーで混合することによって製造した、ＦＳＤ、ＨＰＭＣおよびＳＤＳを含有する懸濁液（ＦＳＤ物理混合物）、ＦＳＤ−ＣＡＦ共結晶、ＨＰＭＣおよびＳＤＳを含有する懸濁液（ＦＳＤ−ＣＡＦ物理混合物）、ＣＢＺ、ＨＰＭＣおよびＳＤＳを含有する懸濁液（ＣＢＺ物理混合物）、並びにＣＢＺ−ＳＡＣ共結晶、ＨＰＭＣおよびＳＤＳを含有する懸濁液（ＣＢＺ−ＳＡＣ物理混合物）を用いて、それぞれ、ＦＳＤ、ＦＳＤ−ＣＡＦ共結晶、ＣＢＺおよびＣＢＺ−ＳＡＣ共結晶の溶出濃度を上記と同様にして測定した。
結果（平均値）を図４および図５に示す。【００９４】
（６）ラットを用いた薬物動態試験
実施例２の湿式粉砕で得られたＣＢＺ−ＳＡＣナノ共結晶の懸濁液および比較例５の湿式粉砕で得られたナノ化ＣＢＺの懸濁液の濃度を蒸留水で５ｍｇ／ｍＬに希釈した。得られた各懸濁液を、絶食状態のＣｒｌ：ＣＤ（ＳＤ）ＩＧＳラット（８週齢、雄、日本チャールス・リバー株式会社）に経口投与した。投与用量をフリーのＣＢＺとして２５ｍｇ／５ｍＬ／ｋｇに設定し、各懸濁液で投与を３回行った。投与後１５および３０分、並びに１、２、４、８および２４時間に、血液サンプルを採取し、遠心分離して、血漿を得た。得られた血漿中のＣＢＺ濃度を、下記条件のＬＣ／ＭＳ／ＭＳで測定した。結果（平均値）を図６に示す。得られた濃度曲線より、薬物の最高血中濃度（Ｃｍａｘ）および最高血中濃度到達時間（Ｔｍａｘ）を実測した。また、モーメント解析により平均滞留時間（ＭＲＴ）を、トラペゾイダル法により、０〜２４時間の薬物血中濃度−時間曲線下面積（ＡＵＣ０−２４ｈ）を計算した。【００９５】
・ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ測定条件
機器：Prominence UFLC（島津製作所製）
検出：ＡＰＩ４０００−３（株式会社エービーサイエックス製）
イオン化モード：ターボイオンスプレー
イオンポラリティモード：ポジティブ
ターボプローブ温度：５５０℃
カラム：CAPCELL CORE C18（２．１ｍｍ×５０ｍｍ、２．７μｍ）
カラム温度：５０℃
流量：０．５ｍＬ／分
注入量：１μＬ
実行時間：７分
移動相Ａ：ギ酸アンモニウム（１０ｍｍｏｌ／Ｌ）およびギ酸（０．２体積％）の水溶液
移動相Ｂ：ギ酸（０．２体積％）のアセトニトリル溶液
グラジエントプログラム：表２【００９６】
【表２】
2016140219.tif 000003
【００９７】
前記ラットに、ジメチルアセトアミド／１，３−ブタンジオール混合溶媒（ジメチルアセトアミド：１，３−ブタンジオールの体積混合比＝１：１）に溶かしたＣＢＺ溶液を３ｍｇ／１ｍＬ／ｋｇの用量で静脈内投与した。この静脈内投与を３回行った。静脈内投与後５、１０、１５および３０分、並びに１、２、４、８および２４時間に、血液サンプルを採取し、経口投与時と同様に血漿中のＣＢＺ濃度を測定した。得られた濃度曲線より、ＡＵＣ０−２４ｈを計算した。経口投与および静脈内投与後のＡＵＣ０−２４ｈの平均値から、次式によりバイオアベイラビリティ（ＢＡ）を計算した。結果を表１２に示す。
ＢＡ（％）
＝１００×（ＡＵＣｐ．ｏ．×Ｄｏｓｅｉ．ｖ．）／（ＡＵＣｉ．ｖ．×Ｄｏｓｅｐ．ｏ．）
（式中、ＡＵＣｐ．ｏ．は経口投与でのＡＵＣを示し、ＡＵＣｉ．ｖ．は静脈内投与でのＡＵＣを示し、Ｄｏｓｅｐ．ｏ．は経口投与用量を示し、Ｄｏｓｅｉ．ｖ．は静脈内投与用量を示す。）【００９８】
【表３】
2016140219.tif 000004
【００９９】
【表４】
2016140219.tif 000005
【０１００】
【表５】
2016140219.tif 000006
【０１０１】
【表６】
2016140219.tif 000007
【０１０２】
【表７】
2016140219.tif 000008
【０１０３】
【表８】
2016140219.tif 000009
【０１０４】
【表９】
2016140219.tif 000010
【０１０５】
【表１０】
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【０１０６】
【表１１】
2016140219.tif 000012
【０１０７】
【表１２】
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【０１０８】
図１に示されるように、ＦＳＤおよびＦＳＤ−ＣＡＦ共結晶は、湿式粉砕の前後で回折パターンに大きな変更は観察されなかったが（図１の（ａ）〜（ｄ））、ＦＳＤ−ＵＲＥＡ共結晶、ＦＳＤ−ＡＣＴ共結晶およびＦＳＤ−ＮＩＣ共結晶の湿式粉砕後に得られた粉末の回折パターンには、純粋なＦＳＤの回折パターンが観察された（（図１の（ｆ）、（ｈ）および（ｊ）））。これらの結果から、ＦＳＤ−ＵＲＥＡ共結晶、ＦＳＤ−ＡＣＴ共結晶およびＦＳＤ−ＮＩＣ共結晶は湿式粉砕によって解離していることが分かる。ＦＳＤ−ＵＲＥＡ共結晶、ＦＳＤ−ＡＣＴ共結晶およびＦＳＤ−ＮＩＣ共結晶が湿式粉砕によって解離したのは、有機化合物であるＦＳＤと、共結晶形成剤であるＵＲＥＡ、ＡＣＴまたはＮＩＣとの水溶解度に大きな違いがあり（ＵＲＥＡの水溶解度／ＦＳＤの水溶解度＝１．７×１０５、ＡＣＴの水溶解度／ＦＳＤの水溶解度＝３．３×１０５、ＮＩＣの水溶解度／ＦＳＤの水溶解度＝１．７×１０５）、得られた共結晶が不安定であったためであると考えられる。また、表３に示されるように、ポリマー（ＨＰＭＣ）および界面活性剤（ＳＤＳ）を併用するＦＳＤ−ＣＡＦ共結晶の湿式粉砕によって、平均粒子径が２００ｎｍ未満であり、且つＰＤＩが小さいＦＳＤ−ＣＡＦナノ共結晶の懸濁液を得ることができる。【０１０９】
図２（Ａ）に示す回折パターンから、無水ＣＢＺの湿式粉砕ではＣＢＺの２水和物の形成が確認されたが（図２（Ａ）（ｂ））、ＣＢＺ−ＳＡＣ共結晶の湿式粉砕では、水和物の形成は確認されなかった（図２（Ａ）（ｄ））。このように、有機化合物を単に湿式粉砕するのではなく、まずＣＢＺを共結晶化し、次いで湿式粉砕することによって、湿式粉砕時の水和を防止することができる。また、表４に示されるように、ポリマー（ＨＰＭＣ）および界面活性剤（ＳＤＳ）を併用するＣＢＺ−ＳＡＣ共結晶の湿式粉砕によって、平均粒子径が３００ｎｍ未満であり、且つＰＤＩが小さいＣＢＺ−ＳＡＣナノ共結晶の懸濁液を得ることができる。【０１１０】
図２（Ｂ）および表５に示されるように、ポリマー（ＨＰＭＣ）および界面活性剤（ＳＤＳ）を併用するＩＭＣ−ＳＡＣ共結晶の湿式粉砕によって、平均粒子径が２００ｎｍ未満であり、且つＰＤＩが小さいＩＭＣ−ＳＡＣナノ共結晶の懸濁液を得ることができる。【０１１１】
表７、表９および表１１に示されるように、懸濁液中のＦＳＤ−ＣＡＦナノ共結晶、ＣＢＺ−ＳＡＣナノ共結晶およびＩＭＣ−ＳＡＣナノ共結晶の平均粒子径は、１ヶ月保存後に充分に小さいまま保持されていた。なお、工業上の実施において、１ヶ月を超える長期間、懸濁液を保存することは無いと考えられる。【０１１２】
図４に示されるように、共結晶化によって得られたＦＳＤ−ＣＡＦ共結晶（ＦＳＤ−ＣＡＦ物理混合物）および湿式粉砕して得られたナノ化ＦＳＤよりも、まず共結晶化し、次いで湿式粉砕して得られたＦＳＤ−ＣＡＦナノ共結晶が、日本薬局方溶出試験第１液中の溶出性に優れていた。
また、図５に示されるように、共結晶化によって得られたＣＢＺ−ＳＡＣ共結晶（ＣＢＺ−ＳＡＣ物理混合物）および湿式粉砕して得られたナノ化ＣＢＺよりも、まず共結晶化し、次いで湿式粉砕して得られたＣＢＺ−ＳＡＣナノ共結晶が、日本薬局方溶出試験第１液中の溶出性に優れていた。
以上のように、単なる共結晶化または湿式粉砕だけでなく、共結晶化および湿式粉砕を組み合わせることによって、有機化合物の溶出性をさらに向上させることができる。【０１１３】
表１２に示されるように、ＣＢＺ−ＳＡＣナノ共結晶は、ナノ化ＣＢＺよりも１．２倍のＡＵＣ０−２４ｈを示した。また、ナノ化ＣＢＺのバイオアベイラビリティ（ＢＡ）が７８．７％であるのに対して、ＣＢＺ−ＳＡＣナノ共結晶のバイオアベイラビリティは９６．０％であった。以上のように、まずＣＢＺを共結晶化し、次いで湿式粉砕して得られたＣＢＺ−ＳＡＣナノ共結晶は、単に湿式粉砕して得られたナノ化ＣＢＺに比べて吸収性に優れていた。【０１１４】
（７）固体１３Ｃ  ＮＭＲ測定
実施例３と同様にして、０．５％（ｗ／ｖ）のＨＰＭＣおよび０．０２％（ｗ／ｖ）のＳＤＳを含有した蒸留水中で湿式粉砕することによって製造したＩＭＣ−ＳＡＣナノ共結晶の懸濁液の固体１３Ｃ  ＮＭＲ測定を、ＪＥＯＬ  ＲＥＳＯＮＡＮＣＥ社製のＮＭＲ装置ＪＮＭ−ＥＣＸ５００ＩＩ（１１．７Ｔ）を用いて行った。同様に、ＩＭＣの粉末、ＳＡＣの粉末、湿式粉砕前のＩＭＣ−ＳＡＣ共結晶の粉末、ＨＰＭＣの粉末およびＳＤＳの粉末の固体１３Ｃ  ＮＭＲ測定を行った。詳しくは、３．２ｍｍＨＸ  ＭＡＳプローブで室温にて、交差分極マジック角回転（ＣＰ／ＭＡＳ）法を用いて、６ＫＨｚの試料回転数、外部標準物質としてヘキサメチルベンゼン（−ＣＨ３：１７．１７ｐｐｍ）を用いて、前記サンプルの固体１３Ｃ  ＮＭＲ測定を行った。得られた固体１３Ｃ  ＮＭＲスペクトルを図７に示す。【０１１５】
（８）溶液１Ｈ  ＮＭＲ測定
蒸留水の代わりに重水（Ｄ２Ｏ）を使用したこと以外は、後述する実施例７（１％（ｗ／ｖ）のＨＰＭＣおよび０．０２％（ｗ／ｖ）のＳＤＳ）、実施例８（１％（ｗ／ｖ）のＨＰＭＣおよび０．０５％（ｗ／ｖ）のＳＤＳ）および実施例１０（１％（ｗ／ｖ）のＨＰＭＣおよび０．１２％（ｗ／ｖ）のＳＤＳ）と同様にして湿式粉砕することによって製造したＣＢＺ−ＳＡＣナノ共結晶の懸濁液の１Ｈ  ＮＭＲ測定を、ＪＥＯＬ  ＲＥＳＯＮＡＮＣＥ社製のＮＭＲ装置ＪＮＭ−ＥＣＸ５００ＩＩ（１１．７Ｔ）を用いて行った。同様に、ＳＡＣの重水溶液、並びに０．５％（ｗ／ｖ）のＨＰＭＣおよび０．０２％（ｗ／ｖ）のＳＤＳを含有する重水溶液の１Ｈ  ＮＭＲ測定を行った。詳しくは、５ｍｍＡＴ／ＦＧプローブで温度２５℃にて、試料回転数１５Ｈｚ、化学シフト基準は測定溶媒である重水中のＨＤＯのピークを４．６７ｐｐｍとして、前記サンプルの１Ｈ  ＮＭＲ測定を行った。得られた１Ｈ  ＮＭＲスペクトルを図８に示す。【０１１６】
６．湿式粉砕におけるポリマーおよび界面活性剤の濃度の検討
実施例４〜１４および比較例７〜１０
水中のポリマー（ＨＰＭＣ）および界面活性剤（ＳＤＳ）の濃度を表１３に示すように変更したこと以外は実施例２と同様に湿式粉砕して、ＣＢＺ−ＳＡＣナノ共結晶の懸濁液を製造した。得られた懸濁液中のＣＢＺ−ＳＡＣナノ共結晶の平均粒子径およびＰＤＩを、上記と同様にして測定した。結果を表１３に示す。【０１１７】
【表１３】
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【０１１８】
表１３に示されるように、ポリマー（ＨＰＭＣ）および界面活性剤（ＳＤＳ）の片方のみを使用した比較例７〜１０では、平均粒子径が３００ｎｍ以下であるＣＢＺ−ＳＡＣナノ共結晶を含む懸濁液を製造することができなかった。【０１１９】
７．ナノ共結晶の懸濁液の乾燥および再懸濁
実施例３と同様にして製造したＩＭＣ−ＳＡＣナノ共結晶の懸濁液に、添加剤としてｄ−マンニトールを２．０％（ｗ／ｖ）添加し、上記と同様にして、得られた懸濁液中のＩＭＣ−ＳＡＣナノ共結晶の平均粒子径およびＰＤＩを測定した。次に、ナノスプレードライヤーＢ−９０（ＢＵＣＨＩ製）を用いた噴霧乾燥法（ポンプ速度１、噴霧速度２５％、温度１２０℃、および圧力３５ｍＰａ、空気気流下）にて、前記懸濁液の噴霧乾燥を行った。乾燥後、得られた乾燥粉末を回収し、蒸留水中に再懸濁させて、得られた懸濁液中のＩＭＣ−ＳＡＣナノ共結晶の平均粒子径およびＰＤＩを、上記と同様にして測定した。これらの結果を表１４に示す。【０１２０】
【表１４】
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【０１２１】
表１４に示すように、ナノ共結晶の懸濁液を噴霧乾燥法等で乾燥することで、平均粒子径が３００ｎｍ以下であるナノ共結晶、ポリマーおよび界面活性剤を含有する組成物を得ることができた。
【産業上の利用可能性】
【０１２２】
本発明の製造方法によれば、有機化合物および共結晶形成剤から構成され、且つ溶出性に優れたナノ共結晶を得ることができる。そのため、本発明は、有機化合物の溶出性向上、特に医薬品開発のための難溶性薬物の溶出性向上に有用である。【０１２３】
本願は、日本で出願された特願２０１５−０４０６４７号を基礎としており、その内容は本願明細書に全て包含される。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【国際調査報告】
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