(57)【要約】 【課題】ジフェニルスルフィド誘導体の新規な製造方法に関する技術を提供する。【解決手段】一般式（４）で表される化合物を、ブタ肝臓エステラーゼまたはウサギ肝臓エステラーゼを用いて不斉加水分解し、一般式（５）で表される化合物を製造する方法。及び当該不斉加水分解を含む化合物の製造方法。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（５）：
【化１】
2016013225.tif 000039
［式中、Ｒ１は、炭素数１〜６のアルコキシ基を示し；
Ｒ２は、水素原子、置換基を有してもよい炭素数１〜６のアルキル基、または置換基を有してもよいアラルキル基を示し；
Ｒ３は、水素原子またはハロゲン原子を示し；
Ｒ４は、炭素数１〜６のアルキル基を示し；
Ｒ５は、炭素数１〜６のアルキル基を示す。］で表される化合物の製造方法であって、
一般式（４）：
【化２】
2016013225.tif 000040
［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５は、前記定義と同じ。］で表される化合物を、ブタ肝臓エステラーゼまたはウサギ肝臓エステラーゼを用いて不斉加水分解することを含む、前記一般式（５）で表される化合物の製造方法。
【請求項２】
前記一般式（４）で表される化合物は、前記ブタ肝臓エステラーゼを用いて不斉加水分解され、
得られる前記一般式（５）で表される化合物の光学純度が９９％ｅｅ以上である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
一般式（５）：
【化３】
2016013225.tif 000041
［式中、Ｒ１は、炭素数１〜６のアルコキシ基を示し；
Ｒ２は、水素原子、置換基を有してもよい炭素数１〜６のアルキル基、または置換基を有してもよいアラルキル基を示し；
Ｒ３は、水素原子またはハロゲン原子を示し；
Ｒ４は、炭素数１〜６のアルキル基を示し；
Ｒ５は、炭素数１〜６のアルキル基を示す。］で表される化合物の製造方法であって、
一般式（１）：
【化４】
2016013225.tif 000042
［式中、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は、前記定義と同じ。］で表される化合物を変換することにより一般式（２）：
【化５】
2016013225.tif 000043
［式中、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は、前記定義と同じ。］で表される化合物を取得し、
前記一般式（２）で表される化合物を、一般式（３）：
【化６】
2016013225.tif 000044
［式中、Ｒ４及びＲ５は、前記定義と同じ。］で表される化合物と反応させ、一般式（４）：
【化７】
2016013225.tif 000045
［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５は、前記定義と同じ。］で表される化合物を取得し、
前記一般式（４）で表される化合物を、ブタ肝臓エステラーゼまたはウサギ肝臓エステラーゼを用いて不斉加水分解することを含む、前記一般式（５）で表される化合物の製造方法。
【請求項４】
一般式（９）：
【化８】
2016013225.tif 000046
［式中、Ｒ１は、炭素数１〜６のアルコキシ基を示し；
Ｒ２は、水素原子、置換基を有してもよい炭素数１〜６のアルキル基、または置換基を有してもよいアラルキル基を示し；
Ｒ３は、水素原子またはハロゲン原子を示し；
Ｒ４は、炭素数１〜６のアルキル基を示し；
Ｒ６は、炭素数１〜６のアルキル基を示す］で表される化合物の製造方法であって、
一般式（４）：
【化９】
2016013225.tif 000047
［式中、Ｒ５は、炭素数１〜６のアルキル基を示し、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４は、前記定義と同じ。］で表される化合物を、ブタ肝臓エステラーゼまたはウサギ肝臓エステラーゼを用いて不斉加水分解し、一般式（５）：
【化１０】
2016013225.tif 000048
［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５は、前記定義と同じ。］で表される化合物を取得し、
前記一般式（５）で表される化合物を転位反応に供することにより、一般式（７）：
【化１１】
2016013225.tif 000049
［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は、前記定義と同じ。］で表される化合物を取得し、
前記一般式（７）で表される化合物を還元することを含む、前記一般式（９）で表される化合物の製造方法。
【請求項５】
前記一般式（４）で表される化合物は、前記ブタ肝臓エステラーゼを用いて不斉加水分解され、
得られる前記一般式（９）で表される化合物の光学純度が９９．５％ｅｅ以上である、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
一般式（５）：
【化１２】
2016013225.tif 000050
［式中、Ｒ１は、炭素数１〜６のアルコキシ基を示し；
Ｒ２は、水素原子、置換基を有してもよい炭素数１〜６のアルキル基、または置換基を有してもよいアラルキル基を示し；
Ｒ３は、水素原子またはハロゲン原子を示し；
Ｒ４は、炭素数１〜６のアルキル基を示し；
Ｒ５は、炭素数１〜６のアルキル基を示す。］で表される化合物。
【請求項７】
一般式（４）：
【化１３】
2016013225.tif 000051
［式中、Ｒ１は、炭素数１〜６のアルコキシ基を示し；
Ｒ２は、水素原子、置換基を有してもよい炭素数１〜６のアルキル基、または置換基を有してもよいアラルキル基を示し；
Ｒ３は、水素原子またはハロゲン原子を示し；
Ｒ４は、炭素数１〜６のアルキル基を示し；
Ｒ５は、炭素数１〜６のアルキル基を示す。］で表される化合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ジフェニルスルフィド誘導体の製造方法及びその製造中間体として用いることができる化合物についての技術に関する。
【背景技術】
【０００２】
出願人により、優れたスフィンゴシン−１−リン酸レセプター３（Ｓ１Ｐ３）アンタゴニスト作用を示す以下の式（Ａ）で表されるジフェニルスルフィド誘導体が開示されている（例えば特許文献１）。【０００３】
【化１】
2016013225.tif 000002
【０００４】
式（Ａ）中、Ｒａは炭素数１〜６のアルコキシ基を示し、Ｒｂはプロピル基またはアリル基を示し、Ｚはハロゲン原子を示す。
当該一般式（Ａ）で表される化合物は、例えば特許文献１に記載された方法で製造することができる。特許文献１において開示された複数の合成経路のうちの１つを以下に示す。【０００５】
【化２】
2016013225.tif 000003
【０００６】
上記合成経路において、Ａｂはハロゲン原子、メタンスルホニルオキシ基、パラトルエンスルホニルオキシ基またはトリフルオロメタンスルホニルオキシ基等の一般的な脱離基を示し、Ａｃはハロゲン原子、メタンスルホニルオキシ基、パラトルエンスルホニルオキシ基またはトリフルオロメタンスルホニルオキシ基等の一般的な脱離基を示し、Ｒcは炭素数１〜６のアルキル基を示し、Ｒdは一般的なアミノ基の保護基を示し、Ｒeは水素原子またはフェノール性水酸基の一般的な保護基を示し、Ｒa、Ｒb及びＺは一般式（Ａ）における定義と同じである。【０００７】
一方、ブタ肝臓エステラーゼ等の酵素を用いて対称ジエステル誘導体を不斉加水分解し、得られた生成物を転位反応に供することで、４級不斉炭素を持つアミノ酸を構築する方法が知られている（非特許文献１）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】国際公開第２０１２／０８６１８４号
【非特許文献】
【０００９】
【非特許文献１】Ｖｉｏｌｅｔａ  Ｉｏｓｕｂ，ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．２０１０，７５，１６１２−１６１９．
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
本発明は、ジフェニルスルフィド誘導体の新規な製造方法に関する技術を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明者らは、上記の課題について鋭意検討した結果、特定の対称ジエステル誘導体を、ブタ肝臓エステラーゼまたはウサギ肝臓エステラーゼを用いて不斉加水分解することにより、式（Ａ）で表される化合物などを含むジフェニルスルフィド誘導体の製造方法において製造中間体として使用できる、一般式（５）で表される化合物が得られることを見出し、本発明を完成させた。【００１２】
本発明の要旨は以下の通りである。
〔１〕一般式（５）：
【化３】
2016013225.tif 000004
［式中、Ｒ１は、炭素数１〜６のアルコキシ基を示し；
Ｒ２は、水素原子、置換基を有してもよい炭素数１〜６のアルキル基、または置換基を有してもよいアラルキル基を示し；
Ｒ３は、水素原子またはハロゲン原子を示し；
Ｒ４は、炭素数１〜６のアルキル基を示し；
Ｒ５は、炭素数１〜６のアルキル基を示す。］で表される化合物の製造方法であって、
一般式（４）：
【化４】
2016013225.tif 000005
［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５は、前記定義と同じ。］で表される化合物を、ブタ肝臓エステラーゼまたはウサギ肝臓エステラーゼを用いて不斉加水分解することを含む、前記一般式（５）で表される化合物の製造方法。
〔２〕  前記一般式（４）で表される化合物は、前記ブタ肝臓エステラーゼを用いて不斉加水分解され、
得られる前記一般式（５）で表される化合物の光学純度が９９％ｅｅ以上である、〔１〕の方法。
〔３〕一般式（５）：
【化５】
2016013225.tif 000006
［式中、Ｒ１は、炭素数１〜６のアルコキシ基を示し；
Ｒ２は、水素原子、置換基を有してもよい炭素数１〜６のアルキル基、または置換基を有してもよいアラルキル基を示し；
Ｒ３は、水素原子またはハロゲン原子を示し；
Ｒ４は、炭素数１〜６のアルキル基を示し；
Ｒ５は、炭素数１〜６のアルキル基を示す。］で表される化合物の製造方法であって、
一般式（１）：
【化６】
2016013225.tif 000007
［式中、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は、前記定義と同じ。］で表される化合物を変換することにより一般式（２）：
【化７】
2016013225.tif 000008
［式中、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は、前記定義と同じ。］で表される化合物を取得し、
前記一般式（２）で表される化合物を、一般式（３）：
【化８】
2016013225.tif 000009
［式中、Ｒ４及びＲ５は、前記定義と同じ。］で表される化合物と反応させ、一般式（４）：
【化９】
2016013225.tif 000010
［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５は、前記定義と同じ。］で表される化合物を取得し、
前記一般式（４）で表される化合物を、ブタ肝臓エステラーゼまたはウサギ肝臓エステラーゼを用いて不斉加水分解することを含む、前記一般式（５）で表される化合物の製造方法。
〔４〕一般式（９）：
【化１０】
2016013225.tif 000011
［式中、Ｒ１は、炭素数１〜６のアルコキシ基を示し；
Ｒ２は、水素原子、置換基を有してもよい炭素数１〜６のアルキル基、または置換基を有してもよいアラルキル基を示し；
Ｒ３は、水素原子またはハロゲン原子を示し；
Ｒ４は、炭素数１〜６のアルキル基を示し；
Ｒ６は炭素数１〜６のアルキル基を示す］で表される化合物の製造方法であって、
一般式（４）：
【化１１】
2016013225.tif 000012
［式中、Ｒ５は、炭素数１〜６のアルキル基を示し、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ４は、前記定義と同じ。］で表される化合物を、ブタ肝臓エステラーゼまたはウサギ肝臓エステラーゼを用いて不斉加水分解し、一般式（５）：
【化１２】
2016013225.tif 000013
［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５は、前記定義と同じ。］で表される化合物を取得し、
前記一般式（５）で表される化合物を、転位反応に供することにより、一般式（７）：
【化１３】
2016013225.tif 000014
［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は、前記定義と同じ。］で表される化合物を取得し、
前記一般式（７）で表される化合物を還元することを含む、前記一般式（９）で表される化合物の製造方法。
〔５〕前記一般式（４）で表される化合物は、前記ブタ肝臓エステラーゼを用いて不斉加水分解され、
得られる前記一般式（９）で表される化合物の光学純度が９９．５％ｅｅ以上である、〔４〕に記載の方法。
〔６〕一般式（５）：
【化１４】
2016013225.tif 000015
［式中、Ｒ１は、炭素数１〜６のアルコキシ基を示し；
Ｒ２は、水素原子、置換基を有してもよい炭素数１〜６のアルキル基、または置換基を有してもよいアラルキル基を示し；
Ｒ３は、水素原子またはハロゲン原子を示し；
Ｒ４は、炭素数１〜６のアルキル基を示し；
Ｒ５は、炭素数１〜６のアルキル基を示す。］で表される化合物。
〔７〕一般式（４）：
【化１５】
2016013225.tif 000016
［式中、Ｒ１は、炭素数１〜６のアルコキシ基を示し；
Ｒ２は、水素原子、置換基を有してもよい炭素数１〜６のアルキル基、または置換基を有してもよいアラルキル基を示し；
Ｒ３は、水素原子またはハロゲン原子を示し；
Ｒ４は、炭素数１〜６のアルキル基を示し；
Ｒ５は、炭素数１〜６のアルキル基を示す。］で表される化合物。
【発明の効果】
【００１３】
本発明によれば、ジフェニルスルフィド誘導体の新規な製造方法に関する技術を提供することができる。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
以下、本発明の実施形態の１つについて詳細に説明する。
なお、以下において、一般式が有する官能基の定義については、すでに記載した定義を引用してその説明を省略することがある。引用している定義は、以下に記載する実施形態の説明中に記載した定義を指しており、先行技術についての記載において説明した官能基についての定義を引用するものではないことは、当然に理解できる。
【００１５】
本明細書において、「炭素数１〜６のアルキル基」とは、直鎖または分岐鎖状の炭素数１〜６のアルキル基である。炭素数１〜６のアルキル基としては、例えば、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、１−エチルプロピル基、２−エチルプロピル基、ヘキシル基などが挙げられる。
【００１６】
また、明示する場合、炭素数１〜６のアルキル基は置換基を有してもよい。当該置換基としては、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、シアノ基、炭素数１〜６のアルコキシ基、及び炭素数１〜６のアルコキシ基で置換されていてもよい炭素数１〜６のアルコキシ基、からなる群から選ばれた１〜５個の置換基などが挙げられる。
【００１７】
Ｒ４として表される炭素数１〜６のアルキル基として、好ましくはｎ−プロピル基が挙げられる。Ｒ５として表される炭素数１〜６のアルキル基として、好ましくはメチル基、エチル基またはｔｅｒｔ−ブチル基が挙げられ、特に好ましくはメチル基が挙げられる。Ｒ６として表される炭素数１〜６のアルキル基として、好ましくはｔｅｒｔ−ブチル基が挙げられる。
「置換基を有してもよい炭素数１〜６のアルキル基」として、好ましくは２−メトキシエトキシメチル基（ＭＥＭ基）またはメトキシメチル基（ＭＯＭ基）が挙げられ、より好ましくはメトキシメチル基が挙げられる。
【００１８】
また、「炭素数１〜６のアルコキシ基」とは、直鎖または分岐鎖状の炭素数１〜６のアルコキシ基である。炭素数１〜６のアルコキシ基としては、例えばメトキシ基、エトキシ基、ｎ−プロポキシ基、ｎ−ブトキシ基、イソプロポキシ基、ｔｅｒｔ−ブトキシ基またはヘキシルオキシ基などが挙げられる。Ｒ１として使用する「炭素数１〜６のアルコキシ基」として、好ましくはエトキシ基である。
また、「ハロゲン原子」とは、フッ素原子、塩素原子、臭素原子またはヨウ素原子を表し、好ましくは塩素原子である。
【００１９】
また、「アラルキル基」としては、ベンジル基、ジフェニルメチル基、フェネチル基、フェニルプロピル基などが挙げられる。また、明示する場合、アラルキル基は置換基を有してもよい。当該置換基としては、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、シアノ基、炭素数１〜６のアルコキシ基、及び炭素数１〜６のアルコキシ基で置換されていてもよい炭素数１〜６のアルコキシ基、からなる群から選ばれた１〜５個の置換基などが挙げられる。「置換基を有してもよいアラルキル基」として、例えばベンジル基またはｐ−メトキシベンジル基が挙げられ、好ましくはベンジル基が挙げられる。
【００２０】
Ｒ２としては、結晶性の向上という点で、置換基を有してもよいアラルキル基であることが好ましく、特に好ましいものとして、ベンジル基が挙げられる。
【００２１】
本明細書中において、「ブタ肝臓エステラーゼ」とは、遺伝子組み換え技術を利用して得られたエステラーゼを含み、ブタ由来のものに限られない。ブタ肝臓エステラーゼとしては、例えばＰＬＥ４３３（ＤＳＭ社）が挙げられる。
本明細書中において、「ウサギ肝臓エステラーゼ」とは、遺伝子組み換え技術を利用して得られたエステラーゼを含み、ウサギ由来のものに限られない。
本明細書において、光学純度（％ee）とは、ある化合物の、当該化合物及びその光学異性体の合計に対する割合をいう。具体的には、光学純度は、HPLCの測定結果における、ある化合物及びその光学異性体の面積百分率に基づき算出することができる。
本実施形態に係る製造方法を以下のスキーム１に示す。また、スキーム１に示す各工程を以下で詳細に説明する。
【００２２】
【化１６】
2016013225.tif 000017
【００２３】
当該反応経路において、Ｒ１は炭素数１〜６のアルコキシ基を示し、Ｒ２は水素原子、置換基を有してもよい炭素数１〜６のアルキル基、または置換基を有してもよいアラルキル基を示し、Ｒ３は水素原子またはハロゲン原子を示し、Ｒ４は炭素数１〜６のアルキル基を示し、Ｒ５は炭素数１〜６のアルキル基を示し、Ｒ６は炭素数１〜６のアルキル基を示す。
【００２４】
（工程１）
一般式（２）で表される化合物は、一般式（１）で表される化合物を一般式（２）で表される化合物に変換することにより得ることができる。
【００２５】
【化１７】
2016013225.tif 000018
【００２６】
式（１）中、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は、上記定義と同じである。
【００２７】
【化１８】
2016013225.tif 000019
【００２８】
式（２）中、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は、上記定義と同じである。
【００２９】
当該変換は、例えば、ウィッティヒ反応、ホーナー・エモンズ反応、ピーターソン反応、ＴｉＣｌ４−ＣＨ２Ｃｌ２−Ｚｎ系反応、テッベ反応に基づき行うことができる。このうち、一般式（２）で表される化合物が高温で分解する傾向があるため、比較的低い温度で反応が進行する、ピーターソン反応に基づき行うことが好ましい。ピーターソン反応は、例えば、テトラヒドロフラン等の反応溶媒中において、塩化トリメチルシリルメチルマグネシウム、臭化トリメチルシリルメチルマグネシウム等のピーターソン試薬を、一般式（１）で表される化合物に作用させ、次いで得られた化合物を酸または塩基で処理することにより行うことができる。塩化トリメチルシリルメチルマグネシウム等のピーターソン試薬は、一般式（１）で表される化合物に対して、例えば１当量以上５当量以下用いることが好ましい。より好ましくは１当量以上２当量以下、さらにより好ましくは１当量以上１．５当量以下が挙げられる。また、副生成物の生成を抑制するという点で、塩化トリメチルシリルメチルマグネシウム等のピーターソン試薬は、一般式（１）で表される化合物に対して、１．２当量以上を用いることが好ましい。従って、ピーターソン試薬の使用量として、特に好ましくは、一般式（１）で表される化合物に対して、１．２当量以上１．５当量以下が挙げられる。
【００３０】
反応温度は、通常−２０℃以上溶媒の沸点以下が挙げられ、好ましくは０℃以上７０℃以下が挙げられる。さらに、副生成物の生成が抑制されるという点で、反応温度は１０℃以上７０℃以下がより好ましく、さらにより好ましくは１５℃以上５０℃以下、特に好ましくは２０℃以上３５℃以下が挙げられる。
【００３１】
反応溶媒としては、例えば、テトラヒドロフラン、シクロペンチルメチルエーテル、ジオキサン、ジメトキシエタン、またはジグライム等のエーテル類、ベンゼン、トルエン、またはキシレン等の芳香族化合物類、ジクロロメタン等のハロゲン化炭化水素類、あるいはこれらの混合物が挙げられ、好ましくは、エーテル類、さらに好ましくはテトラヒドロフランが挙げられる。反応溶媒は、一般式（１）で表される化合物に対し、２倍量以上になる量を用いることが好ましい。反応溶媒の使用量として、より好ましくは、一般式（１）で表される化合物に対し、２倍量以上７倍量以下が挙げられ、特に好ましくは、一般式（１）で表される化合物に対し、３倍量以上５倍量以下が挙げられる。
本明細書中に示される「倍量」とは、溶媒の容積（ｍＬ）を化合物の重量（ｇ）で除した値である。
【００３２】
なお、一般式（１）で表される化合物は、例えば以下に示す反応経路に基づき得ることができる。
【００３３】
具体的には、５−アルコキシ−１，３−ベンゾキサチオール−２−オン等の一般式（ｐ１）で表される化合物について水酸化ナトリウム等の塩基を作用させた後、過酸化水素水等の酸化剤を作用させ、次に得られた生成物に必要に応じて臭化ベンジル等のハロゲン化アルキル、及び炭酸カリウム等の塩基を作用させ、一般式（ｐ２）で表される化合物を得る（工程Ｐ１）。塩基及び酸化剤を一般式（ｐ１）で表される化合物に順次作用させるとき、反応溶媒は、例えば水、メタノール、エタノール、またはこれらの混合物とすることができ、反応温度は例えば１０℃〜２５℃とすることができる。また、ハロゲン化アルキル及び塩基を用いた反応においては、反応溶媒は、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、テトラヒドロフラン、またはこれらの混合物とすることができ、また、反応温度は例えば２０℃〜３０℃とすることができる。
【００３４】
次に、得られた一般式（ｐ２）で表される化合物に、反応溶媒中、水素化ホウ素ナトリウム等の還元剤、もしくは塩酸や酢酸等の酸の存在下、金属亜鉛や亜鉛アマルガム、亜鉛−銅合金などを作用させ、次いで、反応溶媒中で一般式（ｐ３）で表される化合物と反応させることにより、一般式（１）で表される化合物を得る（工程Ｐ２）。金属亜鉛などを用いる反応において、反応溶媒は、例えば、トルエン、キシレン、ベンゼン、またはこれらの混合物を用いることができ、また反応温度は例えば５０℃〜６０℃とすることができる。また、一般式（ｐ３）で表される化合物を用いる反応において、反応溶媒は、例えば、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、テトラヒドロフランまたはそれらの混合物とすることができる。また、反応温度は、例えば２０℃〜６０℃とすることができる。
【００３５】
【化１９】
2016013225.tif 000020
【００３６】
工程Ｐ１及び工程Ｐ２に関する当該反応経路においてＸａはフルオロ基を示し、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は、上記定義と同じである。
【００３７】
（工程２）
一般式（４）で表される化合物は、一般式（２）で表される化合物と一般式（３）で表される化合物とを反応させることにより得ることができる。
【００３８】
【化２０】
2016013225.tif 000021
【００３９】
式（４）中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５は、上記定義と同じである。
【００４０】
【化２１】
2016013225.tif 000022
【００４１】
式（３）中、Ｒ４及びＲ５は、上記定義と同じである。
【００４２】
反応は、例えば、反応溶媒中、塩基の存在下、一般式（２）で表される化合物に一般式（３）で表される化合物を作用させることにより行うことができる。反応溶媒は、例えば、テトラヒドロフラン、シクロペンチルメチルエーテル、ジオキサン、ジメトキシエタン、またはジグライム等のエーテル類、ベンゼン、トルエン、またはキシレン等の芳香族化合物類、アセトニトリル、またはプロピオニトリル等のニトリル類、ジクロロメタン等のハロゲン化炭化水素類、メタノール、エタノール、２−プロパノール、tｅｒｔ−ブチルアルコール、エチレングリコール、またはジエチレングリコール等のアルコール類、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチルピロリドン、またはＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド等のアミド類、ジメチルスルホキシド等のスルホキシド類、スルホラン等のスルホン類、ギ酸エチル、ギ酸ｎ−ブチル、酢酸エチル、酢酸ｎ−プロピル、酢酸イソプロピル、酢酸ｎ−ブチル、酢酸イソブチル、酢酸ｓｅｃ−ヘキシル、酢酸２−エチルヘキシル、プロピオン酸エチル、プロピオン酸ｎ−ブチル、またはイソ吉草酸エチル等の脂肪族エステル類、アセトン等のケトン類、あるいはこれらの混合物が挙げられ、好ましくは、スルホキシド類、さらに好ましくはジメチルスルホキシドが挙げられる。反応基質の添加順序としては、副生成物の生成を抑えるという点で、一般式（３）で表される化合物の溶液に、一般式（２）で表される化合物の溶液を滴下することが好ましい。一般式（３）で表される化合物の溶液および一般式（２）で表される化合物の溶液の両方とも、溶媒量を、２倍量以上、より好ましくは２倍量以上７倍量以下、さらに好ましくは３倍量以上５倍量以下になるように調整するのが好ましい。
【００４３】
反応温度は、通常−７０℃から使用する溶媒の沸点までの範囲が挙げられるが、一般式（４）で表される化合物の収率を向上させることができるという点で、好ましくは、０℃以上１００℃以下、より好ましくは１０℃以上４５℃以下、特に好ましくは、２０℃以上４０℃以下が挙げられる。
【００４４】
また、塩基としては、例えば炭酸セシウム、炭酸カリウム等の無機塩基類、１，５−ジアザビシクロ［４．３．０］−５−ノネン、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］−７−ウンデセン、ピリジン等の有機塩基類、及びナトリウムエトキシド、カリウム ｔｅｒｔ−ブトキシド等のアルカリ金属アルコキシドのうち１種または２種以上を用いることができ、好ましくは、無機塩基類、さらに好ましくは炭酸セシウムが挙げられる。塩基の使用量は、一般式（２）で表される化合物に対し、１当量以上用いることができる。好ましくは１当量以上１０当量以下、より好ましくは１当量以上５当量以下、さらに好ましくは１．１当量以上２．８当量以下、特に好ましくは１．２当量以上１．８当量以下が挙げられる。
【００４５】
一般式（３）で表される化合物の使用量は、一般式（２）で表される化合物に対し、１当量以上１０当量以下用いることが好ましい。さらに好ましくは、１．６当量以上５当量以下、より好ましくは２当量以上４当量以下が用いられる。
【００４６】
工程１の粗生成物をさらなる精製をせずに、そのまま工程２に用いている場合は、一般式（１）で表される化合物が１００％の収率で一般式（２）で表される化合物に変換されたとみなし、一般式（１）で表される化合物の使用量を、一般式（２）で表される化合物の使用量とみなす。
【００４７】
（工程３）
一般式（５）で表される化合物は、一般式（４）で表される化合物とブタ肝臓エステラーゼまたはウサギ肝臓エステラーゼを反応させ、加水分解を行うことにより得ることができる（不斉加水分解）。
なお、本明細書において、不斉加水分解とは、ある４級炭素に結合している同一な２つのアルコキシカルボニル基のうちの一方を選択的に加水分解して、カルボキシ基へ変換することにより、光学異性体の関係にある化合物のうちの一方を優先的に生成することをいう。
【００４８】
【化２２】
2016013225.tif 000023
【００４９】
式（５）中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５は、上記定義と同じである。
【００５０】
当該反応では、ブタ肝臓エステラーゼまたはウサギ肝臓エステラーゼであれば使用することができ、特に限定されない。ブタ肝臓エステラーゼは、上述したように、遺伝子組み換え技術を利用して得られたブタ肝臓エステラーゼであってもよい。また、ウサギ肝臓エステラーゼも、上述したように、遺伝子組み換え技術を利用して得られたウサギ肝臓エステラーゼであってもよい。
【００５１】
ブタ肝臓エステラーゼを使用した場合、ウサギ肝臓エステラーゼを使用した場合に比べ、より高い光学純度の一般式（５）で表される化合物が得られ、一般式（５）で表される化合物の収率も向上する。よって、当該反応にはブタ肝臓エステラーゼの使用が好ましい。
なお、収率とは、実際に得られた目的の物質の量を理論的に得られると仮定した目的の物質の量で除した値である。
【００５２】
ブタ肝臓エステラーゼまたはウサギ肝臓エステラーゼは、一般式（４）で表される化合物に対し、好ましくは５０ｗｔ％以上５００ｗｔ％以下用いる。より好ましい使用量としては、６０ｗｔ％以上３００ｗｔ％以下が挙げられ、さらに好ましい使用量としては７０ｗｔ％以上１５０ｗｔ％以下が挙げられる。  
【００５３】
当該反応の好ましいｐＨは８．０以下である。反応速度をより速めることができるという観点から、より好ましいｐＨは３．０以上８．０以下であり、さらに好ましくは５．０以上７．５以下、特に好ましくは６．０以上７．０以下である。
【００５４】
反応温度は、通常−７０℃から使用する溶媒の沸点までの範囲が挙げられるが、反応温度が高いと酵素の失活が早く、収率が低下することがある。従って、好ましい反応温度としては５０℃以下、より好ましくは４５℃以下、さらに好ましくは３８℃以下が挙げられる。反応温度が下がるにつれ、反応速度も低下するため、反応温度は２０℃以上が好ましい。より好ましくは２５℃以上、特に好ましくは３０℃以上が挙げられる。従って、反応温度としては、好ましくは２０℃以上５０℃以下、より好ましくは２５℃以上４５℃以下、特に好ましくは３０℃以上３８℃以下が挙げられる。
【００５５】
当該酵素反応は、例えば溶媒を用いて行うことができる。溶媒として、例えば、テトラヒドロフラン、シクロペンチルメチルエーテル、ジオキサン、ジメトキシエタン、ジグライム等のエーテル類、ベンゼン、トルエン、キシレン等の芳香族化合物類、アセトニトリル、プロピオニトリル等のニトリル類、ジクロロメタン等のハロゲン化炭化水素類、メタノール、エタノール、２−プロパノール、tｅｒｔ−ブチルアルコール、エチレングリコール、ジエチレングリコール等のアルコール類、ホルムアミド、Ｎ−メチルピロリドン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド等のアミド類、ジメチルスルホキシド等のスルホキシド類、スルホラン等のスルホン類、アセトン等のケトン類、または水、あるいはこれらの混合物が挙げられる。なお、アセトニトリルを溶媒として用いると反応が進行しにくくなる場合がある。好ましい溶媒は、収率の向上という観点からスルホキシド類を挙げることができ、さらに好ましくはジメチルスルホキシドが挙げられる。
【００５６】
溶媒の使用量は、一般式（４）で表される化合物に対し、好ましくは２倍量以上３０倍量以下、より好ましくは５倍量以上２０倍量以下、さらに好ましくは７倍量以上１５倍量以下が挙げられる。
また、反応終了後、一般式（５）で表される化合物は公知の方法に従い反応に用いた酵素と分離することができる。具体的には、ろ過処理や溶媒抽出法に基づく処理を行うなどして酵素を除き、粗生成物として一般式（５）で表される化合物を得るようにしてもよい。また、晶析処理やHPLC法に基づく処理を行うなどして一般式（５）で表される化合物の粗生成物をさらに精製してもよい。
【００５７】
（工程４）
一般式（７）で表される化合物は、一般式（５）で表される化合物を転位反応に供することにより得ることができる。
【００５８】
【化２３】
2016013225.tif 000024
【００５９】
式（７）中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は、上記定義と同じである。
【００６０】
当該反応は、クルチウス転位、シュミット転位、ロッセン転位、ホフマン転位等に基づき行うことができるが、クルチウス転位に基づき行うことが好ましい。例えば、トリエチルアミン等の塩基存在下において、一般式（５）で表される化合物にビス（４−メチルフェニル）リン酸アジド、ビス（４−クロロフェニル）リン酸アジド、ジフェニルリン酸アジド等のアジド化試薬を作用させる。
【００６１】
アジド化試薬の使用量は、例えば一般式（５）で表される化合物に対して１当量以上とすることができ、好ましくは、１当量以上５当量以下用いられる。より好ましくは１当量以上３当量以下、さらにより好ましくは１当量以上１．５当量以下が挙げられる。工程３の粗生成物をさらなる精製をせずに、そのまま工程４に用いている場合は、一般式（４）で表される化合物が１００％の収率で、一般式（５）で表される化合物に変換されたとみなし、一般式（４）で表される化合物の使用量を、一般式（５）で表される化合物の使用量とみなす。
【００６２】
塩基としては、例えば、水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸セシウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウム等の無機塩基類、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、４−メチルモルホリン、４−エチルモルホリン、ピリジン、１−メチルイミダゾール、１，２−ジメチルイミダゾール、１，５−ジアザビシクロ［４．３．０］−５−ノネン、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］−７−ウンデセン等の有機塩基類等が挙げられる。このうち、有機塩基を用いることが好ましく、特に好ましくはトリエチルアミンが挙げられる。塩基の使用量は、一般式（５）で表される化合物に対し、１当量以上３当量以下用いることが好ましい。収率向上という観点から、さらに好ましくは１当量以上２当量以下、特に好ましくは１当量以上１．５当量以下が挙げられる。
【００６３】
当該反応は、例えば反応溶媒中において行うようにすることができる。反応溶媒は、例えば、テトラヒドロフラン、シクロペンチルメチルエーテル、ジオキサン、ジメトキシエタン、ジグライム等のエーテル類、ベンゼン、トルエン、キシレン等の芳香族化合物類、アセトニトリル、プロピオニトリル等のニトリル類、ジクロロメタン等のハロゲン化炭化水素類、ホルムアミド、Ｎ−メチルピロリドン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド等のアミド類、ジメチルスルホキシド等のスルホキシド類、スルホラン等のスルホン類、ギ酸エチル、ギ酸ｎ−ブチル、酢酸エチル、酢酸ｎ−プロピル、酢酸イソプロピル、酢酸ｎ−ブチル、酢酸イソブチル、酢酸ｓｅｃ−ヘキシル、酢酸２−エチルヘキシル、プロピオン酸エチル、プロピオン酸ｎ−ブチル、イソ吉草酸エチル等の脂肪族エステル類、アセトン等のケトン類、またはこれらの混合物が挙げられ、好ましくは、ベンゼン、トルエン、キシレン等の芳香族炭化水素系溶媒を用いることができ、より好ましくはトルエンが挙げられる。収率向上という観点から、一般式（５）で表される化合物にアジド化試薬を反応させ、アシルアジドを生成させる際には、溶媒量が少ないことが好ましい。溶媒は、一般式（５）で表される化合物に対し、２０倍量以下用いることが好ましい。より好ましくは１５倍量以下、より好ましくは１０倍量以下が挙げられる。アシルアジドが生成した後、好ましくは加熱しながら転位反応を進行させ、イソシアネートを生成させる。この際、アシルアジドの溶液を、別途加熱した溶媒に加えることで、反応速度を調節することができる。
【００６４】
反応温度は、アシルアジドの生成の際は、例えば、０℃以上６０℃以下が適当であり、好ましくは２０℃以上５５℃以下、より好ましくは３０℃以上５０℃以下が挙げられる。反応温度は、イソシアネートの生成の際は、例えば、６０℃以上１５０℃以下が適当であり、好ましくは７０℃以上１００℃以下、より好ましくは７５℃以上１００℃以下が挙げられる。
【００６５】
次に、得られた生成物に一般式（１３）で表されるアルカリ金属アルコキシド類などを作用させる。
【００６６】
【化２４】
2016013225.tif 000025
【００６７】
式（１３）中、Ｍはナトリウム原子またはカリウム原子を示し、Ｒ６は上記定義と同じである。一般式（１３）で表される化合物は、市販のものを使用することができるほか、例えば、水素化ナトリウムまたは金属ナトリウム等の化合物と、アルコールを反応させることにより、反応液中で調製して用いても良い。
【００６８】
ナトリウムアルコキシド等のアルカリ金属アルコキシド類は、一般式（５）で表される化合物に対して１当量以上５当量以下用いることが好ましい。収率向上という観点から、さらに好ましくは１．３当量以上３当量以下、特に好ましくは１．４当量以上１．８当量以下が挙げられる。
【００６９】
反応温度は、通常−７０℃から使用する溶媒の沸点までの範囲が挙げられるが、好ましくは、−１０℃から使用する溶媒の沸点までの範囲、特に好ましくは、０〜３０℃、さらに好ましくは１０〜３０℃の範囲が挙げられる。
【００７０】
（工程５）
一般式（９）で表される化合物は、一般式（７）で表される化合物を還元することにより得ることができる。
【００７１】
【化２５】
2016013225.tif 000026
【００７２】
式（９）中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４及びＲ６は、上記定義と同じである。
【００７３】
当該還元処理は、例えば、一般式（７）で表される化合物をテトラヒドロフラン等の反応溶媒に溶解し、得られた溶液を還元剤に加え、さらにエタノールやメタノール等のアルコールを加えて反応させることで行うことができる。
【００７４】
還元剤は、水素化リチウムアルニミウム、水素化ビス（２−メトキシエトキシ）アルミニウムナトリウム、水素化トリメトキシリチウムアルミニウム、水素化アルミニウム、水素化ジイソブチルアルミニウム等のアルミニウムハイドライド系、水素化トリエチルホウ素リチウム、水素化ホウ素ナトリウム、水素化ホウ素カリウム、水素化ホウ素リチウム、水素化トリ（ｓｅｃ−ブチル）ホウ素リチウム、水素化トリ（ｓｅｃ−ブチル）ホウ素カリウム等のホウ素ハイドライド系のうち１種または２種以上を用いることができる。より好ましくはホウ素ハイドライド系還元剤であり、さらに好ましくは、水素化ホウ素リチウムが挙げられる。還元剤は、一般式（７）で表される化合物に対して、例えば１当量以上１０当量以下であることが好ましい。より好ましくは２当量以上８当量以下、さらにより好ましく４当量以上７当量以下が挙げられる。
【００７５】
還元剤は、塩化リチウム、臭化リチウム、ヨウ化リチウム等のリチウム塩と、水素化ホウ素ナトリウム、水素化ホウ素カリウム等のホウ素ハイドライド系還元剤とを組み合わせて調製して用いるようにしてもよい。好ましくは、塩化リチウム存在下ホウ素ハイドライド系還元剤を用いる方法が挙げられる。より好ましくは、塩化リチウム存在下、水素化ホウ素カリウムを用いる方法が挙げられる。
【００７６】
リチウム塩とホウ素ハイドライド系還元剤とを組み合わせて還元剤を調製する場合、リチウム塩とホウ素ハイドライド系還元剤の好ましい使用量は、一般式（７）で表される化合物に対して、いずれも１当量以上１０当量以下である。より好ましくはいずれも２当量以上８当量以下、さらにより好ましくはいずれも４当量以上７当量以下が挙げられる。
【００７７】
反応温度は、通常−７０℃から使用する溶媒の沸点までの範囲が挙げられるが、収率向上という観点から、好ましくは０℃以上５５℃以下、より好ましくは２５℃以上５５℃以下が挙げられる。
【００７８】
反応は、例えば反応溶媒中において行うようにすることができる。反応溶媒としては、テトラヒドロフラン、シクロペンチルメチルエーテル、ジオキサン、ジメトキシエタン、ジグライム等のエーテル類、ベンゼン、トルエン、キシレン等の芳香族化合物類、または、ヘキサン、ヘプタン、シクロヘキサン等の炭化水素類、あるいはこれらの混合物が挙げられる。好ましくは、エーテル類が挙げられ、更に好ましくは、テトラヒドロフランが挙げられる。
【００７９】
アルコールの好ましい使用量は、一般式（７）で表される化合物に対して、例えば０．５倍量以上１０倍量以下が挙げられる。収率向上という観点から、より好ましくは０．７倍量以上２倍量以下、さらにより好ましくは０．８倍量以上１．２倍量以下が挙げられる。
【００８０】
得られた一般式（９）で表される化合物は、再結晶で精製することにより、精製困難な不純物を除去し化学純度を向上させることができる。さらに、当該再結晶により、光学純度をより高めることができる。再結晶で使用する溶媒としては、流動性及びろ過性に優れた結晶が収率よく得られるという点で、トルエン及びヘプタンを使用することが好ましい。特に好ましくはトルエン：ヘプタン＝１：２〜１：５の混合溶媒が挙げられる。
【００８１】
（工程６）
一般式（１１）で表される化合物は、特許文献１に記載の方法などを用いて、一般式（９）で表される化合物の水酸基をリン酸エステル化し、その後、Ｒ６及びＲ２の脱保護とリン酸エステル基の脱アルキル化を行うことにより得ることができる。
【００８２】
以上、説明したように、本実施形態においては、一般式（５）で表される化合物を、ブタ肝臓エステラーゼまたはウサギ肝臓エステラーゼを用いて製造することができる。一般式（５）で表される化合物は、例えば上述の式（Ａ）で表される化合物などを含むジフェニルスルフィド誘導体の製造方法において製造中間体として使用できる。よって、本実施形態によれば、ジフェニルスルフィド誘導体の新規な製造方法を提供することができる。特に、ブタ肝臓エステラーゼを用いることで、光学純度の高い一般式（５）で表される化合物を得ることができる。そのため、最終生成物であるジフェニルスルフィド誘導体についても高い光学純度で製造することが可能となる。
【実施例】
【００８３】
以下に実施例を示して本発明を更に詳細に説明するが、本発明はこれら実施例によって限定されるものではない。【００８４】
（参考例１）１，２−ビス（２−ベンジルオキシ−５−エトキシフェニル）ジスルフィドの合成【００８５】
【化２６】
2016013225.tif 000027
【００８６】
エタノール（２０ｍＬ）と水（５０ｍＬ）の混液に５−エトキシ−１，３−ベンゾキサチオール−２−オン（２０．００ｇ，１０２ｍｍｏｌ）を加えた。その混合液に内温１５〜２５℃で水酸化ナトリウム（１２．２３ｇ，３０６ｍｍｏｌ）の水（５０ｍＬ）溶液を加え、内温４０〜４７℃で１時間撹拌した。その反応液を冷却し、内温１２〜２０℃で３５％過酸化水素水（４．９５ｇ、５０．９ｍｍｏｌ）を加え、内温２０〜２４℃で１時間撹拌した。その反応液を冷却し、内温４〜１３℃で濃塩酸３０ｍＬを加え、酢酸エチル（３００ｍＬ）で抽出した。有機層を亜硫酸水素ナトリウム（２０．００ｇ）と水（２００ｍＬ）の混合液、飽和食塩水（２００ｍＬ）で順次洗浄した後、無水硫酸ナトリウムを用いて乾燥した。無水硫酸ナトリウムをろ過により除去した後、ろ液を減圧濃縮し、黄色オイル（１５．５ｇ）を得た。【００８７】
得られた黄色オイル（１５．５ｇ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１００ｍＬ）に溶解し、内温２１℃で炭酸カリウム（１６．９０ｇ，１２２ｍｍｏｌ）、内温２１〜２７℃で臭化ベンジル（１７．４３ｇ、１０２ｍｍｏｌ）を加え、内温２４〜２７℃で２．５時間撹拌した。その反応液に内温２４〜３３℃で水（１６０ｍＬ）を加え、内温２５〜３０℃で３０分間撹拌した。析出晶をろ取し、水（６０ｍＬ）、ジイソプロピルエーテル（６０ｍＬ）で洗浄した。当該析出晶を４０℃で減圧乾燥し、１，２−ビス（２−ベンジルオキシ−５−エトキシフェニル）ジスルフィド（１８．１９ｇ，６９％収率）を得た。【００８８】
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１．２９（６Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ），３．８７（４Ｈ，ｑ，Ｊ＝６．９Ｈｚ），５．１１（４Ｈ，ｓ），６．８１（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），７．１６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．１Ｈｚ），７．３０−７．３３（２Ｈ，ｍ），７．３７−７．４０（４Ｈ，ｍ），７．４８−７．５０（４Ｈ，ｍ）【００８９】
（参考例２）４−（２−ベンジルオキシ−５−エトキシフェニルチオ）−２−クロロベンズアルデヒドの合成【００９０】
【化２７】
2016013225.tif 000028
【００９１】
トルエン（８０ｍＬ）と濃塩酸（３２ｍＬ）の混合液に１，２−ビス（２−ベンジルオキシ−５−エトキシフェニル）ジスルフィド（１６．０ｇ，３０．８ｍｍｏｌ）を加え、加熱溶解した。その混合液に内温５０〜５７℃で亜鉛粉末（５．０４ｇ，７７．１ｍｍｏｌ）を加え、内温５４〜５７℃で１．５時間撹拌した。その反応液を冷却し、内温２０〜２５℃で水（４８ｍＬ）を加え、分液した。有機層を飽和食塩水（８０ｍＬ）洗浄した後、無水硫酸ナトリウムを用いて乾燥した。無水硫酸ナトリウムをろ過により除去した後、ろ液を減圧濃縮し、黄色オイル（１６．６ｇ）を得た。
得られた黄色オイル（８．０９ｇ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３９ｍＬ）に溶解し、内温２５〜２７℃で２−クロロ−４−フルオロベンズアルデヒド（４．７６ｇ，３０．０ｍｍｏｌ）、内温２５〜３０℃で炭酸カリウム（６．２２ｇ，４５．０ｍｍｏｌ）を加えた。その混合液を加熱し、内温５０〜５６℃で１時間撹拌した後、内温５４〜５８℃で水（３９ｍＬ）を加えた。その反応液を冷却し、内温０〜１０℃で０．５時間撹拌した。析出晶をろ取し、水（３９ｍＬ）で洗浄した。当該析出晶を５０℃で減圧乾燥し、褐色粉末（１１．３ｇ）を得た。エタノール（５７ｍＬ）を加え、内温５０〜５５℃で０．５時間加熱懸濁した。冷却し、内温０〜１０℃で０．５時間撹拌した。析出晶をろ取し、エタノール（３４ｍＬ）で洗浄した。析出晶を５０℃で減圧乾燥し、４−（２−ベンジルオキシ−５−エトキシフェニルチオ）−２−クロロベンズアルデヒド（１０．５ｇ、８８％収率）を得た。
ＭＳ（ＦＩ＋）：ｍ/ｚ ３９８ [Ｍ]＋【００９２】
（実施例１）２−ベンジルオキシ−５−エトキシフェニル  ３−クロロ−４−ビニルフェニルスルフィドの合成（工程１）【００９３】
【化２８】
2016013225.tif 000029
【００９４】
窒素雰囲気下、１．０ｍｏｌ／Ｌトリメチルシリルメチルマグネシウムクロリドテトラヒドロフラン溶液（１６３ｍＬ，１６３ｍｍｏｌ）に４−（２−ベンジルオキシ−５−エトキシフェニルチオ）−２−クロロベンズアルデヒド（５０ｇ，１２５ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（２００ｍＬ）溶液を撹拌下、内温２７〜２８℃で３２分間かけて加えた。その混合液を内温２５〜２７℃で１時間撹拌した後、冷却し、内温２〜１１℃で濃塩酸（４０ｍＬ）を１０分間かけて加えた。その反応液を内温８〜２１℃で１時間２０分撹拌した後、内温２１〜２６℃で水（１００ｍＬ）、酢酸イソプロピル（５００ｍＬ）、水（４００ｍＬ）を順次加えた。分液し、有機層を水（５００ｍＬ）、炭酸水素ナトリウム（２５．０ｇ）と水（５００ｍＬ）の混合液、食塩（５０．０ｇ）と水（５００ｍＬ）の混合液、食塩（５０．０ｇ）と水（５００ｍＬ）の混合液で順次洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウム（１２５ｇ）を用いて乾燥し、無水硫酸ナトリウムをろ過により除去した。ろ液に４−ｔｅｒｔ−ブチルピロカテコール（５００ｍｇ）を加え、溶解を確認後、外温３９℃で減圧濃縮した。酢酸イソプロピル（１００ｍＬ）を加え、外温３９℃で減圧濃縮し、茶褐色オイル（５３．９ｇ）を得た。得られた茶褐色オイルは、更なる精製を行わず、次の反応に用いた。【００９５】
（実施例２）２−｛２−［４−（２−ベンジルオキシ−５−エトキシフェニルチオ）−２−クロロフェニル］エチル｝−プロピルマロン酸ジメチルの合成（工程２）【００９６】
【化２９】
2016013225.tif 000030
【００９７】
実施例１で得られた茶褐色オイル（５３．９ｇ）にジメチルスルホキシド（２００ｍＬ）を加えて溶解した。
窒素雰囲気下、ジメチルスルホキシド（２００ｍＬ）に２−プロピルマロン酸ジメチル（４８．０ｇ，２７６ｍｍｏｌ）を溶解し、撹拌下、内温２９〜３２℃で炭酸セシウム（６１．３ｇ，１８８ｍｍｏｌ）を加えた。その混合液に、内温３１℃で、上述の、実施例１で得られた茶褐色オイル（５３．９ｇ）のジメチルスルホキシド（２００ｍＬ）溶液を１時間４分間かけて加え、内温２９〜３１℃で６時間撹拌した後、一晩静置した。その反応液を冷却し、内温１４〜１６℃でトルエン（１．００Ｌ）、水（１．００Ｌ）を加えた。分液し、有機層を食塩（１００ｇ）と水（１．００Ｌ）の混合液で洗浄し、無水硫酸ナトリウム（１００ｇ）を用いて乾燥した。無水硫酸ナトリウムをろ過により除去した後、ろ液を減圧濃縮し、茶色オイル（９６．７ｇ）を得た。
内温２５℃でジイソプロピルエーテル（１５０ｍＬ）を得られた茶色オイルに加えて、混合液とした。その混合液を加熱し、更にジイソプロピルエーテル（１００ｍＬ）を加えた後、内温５０〜５３℃で１０分間撹拌した。その混合液をろ過し、ジイソプロピルエーテル（２５．０ｍＬ）で洗浄した。ろ液と洗浄液を合一し、減圧濃縮した。得られた濃縮残渣にメタノール（２５０ｍＬ）を加え、加熱し、５０〜５１℃で３０分間撹拌した後、冷却し、内温２５〜３０℃で３０分間撹拌した。析出物をろ取し、メタノール（５０．０ｍＬ）で洗浄した。４０℃で減圧乾燥し、２−｛２−［４−（２−ベンジルオキシ−５−エトキシフェニルチオ）−２−クロロフェニル］エチル｝−２−プロピルマロン酸ジメチル（５７．０ｇ，８０％収率）を得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：ｍ/ｚ ５７１ [Ｍ＋Ｈ]＋【００９８】
（実施例３）（２Ｒ）−２−｛２−［４−（２−ベンジルオキシ−５−エトキシフェニルチオ）−２−クロロフェニル］エチル｝−２−メトキシカルボニルペンタン酸の合成（工程３）【００９９】
【化３０】
2016013225.tif 000031
【０１００】
（ＰＬＥ４３３）
Ｂａｔｃｈ  ＣＦＥ（１６００ｇ，６０Ｖ％  ＣＦＥ，ＰＬＥ（Porcine Liver Esterase）４３３含有，ＤＳＭ社提供）とＫｐｉバッファー（５００ｍＬ）の混合液に１ｍｏｌ／Ｌリン酸（４０ｇ）を加えて、ｐＨ６．５とした。当該混合液に内温３０〜３５℃で２−｛２−［４−（２−ベンジルオキシ−５−エトキシフェニルチオ）−２−クロロフェニル］エチル｝−２−プロピルマロン酸ジメチル（２６．７ｇ，４５．８ｍｍｏｌ）のジメチルスルホキシド（４５０ｍＬ）溶液を１５分で加え、ジメチルスルホキシド（５０ｍＬ）で洗いこみを行った。その混合液を３５℃で４７時間撹拌した。反応液に１ｍｏｌ／Ｌリン酸（３５０ｍＬ）を加え、ｐＨ３．４にし、酢酸イソプロピル（１．０Ｌ）を加えた。ダイカライト（５ｗｔ％）を用いて反応液をろ過し、ろ取した不溶物を酢酸イソプロピルで洗浄した。ろ取した不溶物と酢酸イソプロピルを混合した後、ろ過し、不溶物を酢酸イソプロピルと水で洗浄した。全てのろ液と洗浄液を合一し、分液した。有機層を水（５００ｍＬ）で４回洗浄した後、減圧濃縮し、赤茶色油状物（２９ｇ）を得た。得られた赤茶色油状物に酢酸イソプロピル（６ｇ）とヘプタン（３０ｇ）を加え、晶析を確認した後、ヘプタン（３００ｇ）を１時間で加えた。室温で１時間撹拌した後、析出物をろ取し、ヘプタンで洗浄した。減圧乾燥し、（２Ｒ）−２−｛２−［４−（２−ベンジルオキシ−５−エトキシフェニルチオ）−２−クロロフェニル］エチル｝−２−メトキシカルボニルペンタン酸（２２．１ｇ，８５％収率，９９．６％ｅｅ）を得た。【０１０１】
（ＰＬＥ）
２−｛２−［４−（２−ベンジルオキシ−５−エトキシフェニルチオ）−２−クロロフェニル］エチル｝−２−プロピルマロン酸ジメチル（４００ｍｇ）をジメチルスルホキシド（４．０ｍＬ）に溶解し、リン酸バッファー（ｐＨ７．０，４０ｍＬ）、ＰＬＥ（Porcine Liver Esterase, ４００ｍｇ，ＳＩＧＭＡ−ＡＬＤＲＩＣＨ）を室温で加えた後、外温設定４０℃で６日間攪拌した。反応液を、セライト（４．００ｇ）を用いてろ過し、酢酸エチル（８．０ｍＬ）で洗浄した。ろ液に１．０ｍｏｌ/Ｌ塩酸（２０ｍＬ）、酢酸エチル（２０ｍＬ）を加えて有機層を分取した。有機層を水（２０ｍＬ）、食塩（２．０ｇ）と水（２０ｍＬ）の混合液で順次洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムを用いて乾燥し、無水硫酸ナトリウムをろ過により除去し、ろ液を減圧濃縮した。得られた粗精製物（４２１．２ｍｇ）をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（Ｓｉ６０Ｎ，球状，４０−１００μｍ，８．０ｇ：溶出溶媒、ヘキサン：酢酸エチル=４：１→酢酸エチル)に付し、（２Ｒ）−２−｛２−［４−（２−ベンジルオキシ−５−エトキシフェニルチオ）−２−クロロフェニル］エチル｝−２−メトキシカルボニルペンタン酸（２２１ｍｇ，＞９９％ｅｅ）を得た。【０１０２】
実施例３において、得られた生成物の光学純度は、以下に示すＨＰＬＣ条件Ａでの測定において得られたＲ体及びＳ体の面積より、以下の式（ｅ１）に基づいて算出した。【０１０３】
光学純度（％ｅｅ）＝（Ｒ体の生成量―Ｓ体の生成量）／（Ｒ体の生成量＋Ｓ体の生成量）×１００              （ｅ１）【０１０４】
ここで、Ｒ体とは、（２Ｒ）−２−｛２−［４−（２−ベンジルオキシ−５−エトキシフェニルチオ）−２−クロロフェニル］エチル｝−２−メトキシカルボニルペンタン酸を意味する。Ｓ体とは、（２Ｓ）−２−｛２−［４−（２−ベンジルオキシ−５−エトキシフェニルチオ）−２−クロロフェニル］エチル｝−２−メトキシカルボニルペンタン酸を意味する。【０１０５】
ＨＰＬＣ条件Ａ
カラム：Ｋｒｏｍａｓｉｌ  ３−Ａｍｙｃｏａｔ（４．６ｍｍ×１５０ｍｍ，３μｍ）
移動相：エタノール／２−プロパノール／トリフルオロ酢酸＝９０／１０／０．０５
流速：１．５ｍＬ／ｍｉｎ．
温度：２０℃
検出波長：３０５ｎｍ
保持時間：(Ｒ)体；２．６１分, (Ｓ)体；４．６７分【０１０６】
（実施例４）（２Ｓ）−２−｛２−［４−（２−ベンジルオキシ−５−エトキシフェニルチオ）−２−クロロフェニル］エチル｝−２−（１，１−ジメチルエトキシカルボニルアミノ）ペンタン酸メチルの合成（工程４）【０１０７】
【化３１】
2016013225.tif 000032
【０１０８】
（２Ｒ）−２−｛２−［４−（２−ベンジルオキシ−５−エトキシフェニルチオ）−２−クロロフェニル］エチル｝−２−メトキシカルボニルペンタン酸（１０．０ｇ，１８．０ｍｍｏｌ）にトルエン（１００ｍＬ）を加え溶解させた後、トリエチルアミン（２．７５ｍＬ，１９．７ｍｍｏｌ）、次いでジフェニルリン酸アジド（４．２４ｍＬ，１９．７ｍｍｏｌ）を加えた。混合液を、内温４０℃で１．５時間撹拌した後、さらに加熱し内温８５℃で２時間撹拌した。反応液を室温へ冷却し、０．５ｍｏｌ／Ｌ塩酸（１００ｍＬ）を加え分液した。有機層を水（１００ｍＬ）、飽和炭酸水素ナトリウム溶液（１００ｍＬ）、飽和食塩水（１００ｍＬ）で順次洗浄した。有機層に無水硫酸ナトリウムを加え乾燥させた後、ろ過、減圧濃縮し、褐色油状物（１１．２ｇ）得た。
ｔｅｒｔ−ブタノール（１８．０ｍＬ）とトルエン（６０．０ｍＬ）の混合液に、ｔｅｒｔ−ブトキシナトリウム（２．５９ｇ，２７．０ｍｍｏｌ）を加えた。その混合液に、先に合成した褐色油状物（１１．２ｇ）のトルエン（２６．０ｍＬ）溶液を室温で５分間かけて滴下した。滴下後、混合液を室温で１時間撹拌した。反応液を氷冷し、飽和塩化アンモニウム溶液（１００ｍＬ）、水（２０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（１００ｍＬ）で抽出した。有機層を飽和食塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムを用いて乾燥した。無水硫酸ナトリウムをろ過により除去し、ろ液を減圧濃縮した。残渣にヘプタン（１４．０ｍＬ）、酢酸エチル（７ｍＬ）を加え溶解させた後、ショートカラムクロマトグラフィー（シリカゲルＳｉ６０Ｎ，６３−２１０μｍ，１０ｇ）を行い、淡黄色油状物（１１．０ｇ）を得た。得られた淡黄色油状物は、更なる精製を行わず、次の反応に用いた。【０１０９】
（実施例５）（２Ｓ）−２−｛２−［４−（２−ベンジルオキシ−５−エトキシフェニルチオ）−２−クロロフェニル］エチル｝−２−（１，１−ジメチルエトキシカルボニルアミノ）ペンタノールの合成（工程５）【０１１０】
【化３２】
2016013225.tif 000033
【０１１１】
水素化ホウ素カリウム（４．８５ｇ，９０．０ｍｍｏｌ）にテトラヒドロフラン（６０ｍＬ）を加え、室温で塩化リチウム（３．８２ｇ，９０．０ｍｍｏｌ）を加え、得られた混合液を内温４０℃で２２時間撹拌した。当該混合液に実施例４で合成した淡黄色油状物（１１．０ｇ）のテトラヒドロフラン（３０ｍＬ）溶液を５分間かけて滴下し、続いてエタノール（１０ｍＬ）を１時間かけて滴下した。混合液を１時間撹拌した後、氷冷し、１ｍｏｌ／Ｌ塩酸（９０ｍＬ）を１０分間かけて滴下した。反応液を、酢酸エチル（１００ｍＬ）で抽出し、有機層を１ｍｏｌ／Ｌ水酸化カリウム（１００ｍＬ）で２回、飽和食塩水（５０ｍＬ）で順次洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムを用いて乾燥した。無水硫酸ナトリウムをろ過により除去し、ろ液を減圧濃縮した。残渣にトルエン（３０ｍＬ）を加え加熱し、５５℃で１５分間撹拌した。熱時ろ過し、ろ液を５５℃で１５分間撹拌した後、ヘプタン（２４０ｍＬ）を加えた。ヘプタンが加えられたろ液を冷却し、３８℃で５分間撹拌した後、室温で３０分間撹拌した。析出物をろ取し、白色粉末（７．７９ｇ）を得た。トルエン（４６．７ｍＬ）を加え、白色粉末を溶解した後、溶液を加熱した。５５℃で溶液を３０分間撹拌した後、ヘプタン（１８．７ｍＬ）を滴下した。混合液を３０分間撹拌した後、冷却し、３８℃で３０分間撹拌した。析出物をろ取し、（２Ｓ）−２−｛２−［４−（２−ベンジルオキシ−５−エトキシフェニルチオ）−２−クロロフェニル］エチル｝−２−（１，１−ジメチルエトキシカルボニルアミノ）ペンタノール（６．９０ｇ，６４％収率，＞９９．９％ｅｅ）を得た。
旋光度：［α］Ｄ２４  −６．８１  （ｃ  ０．９８，  ＣＨＣｌ３）【０１１２】
実施例５において、トルエン及びヘプタンで再結晶することにより、流動性及びろ過性に優れた結晶が収率よく得られる。当該操作により、光学純度及び化学純度の向上した（２Ｓ）−２−｛２−［４−（２−ベンジルオキシ−５−エトキシフェニルチオ）−２−クロロフェニル］エチル｝−２−（１，１−ジメチルエトキシカルボニルアミノ）ペンタノールを得ることが可能である。【０１１３】
実施例５において、得られた生成物の光学純度は、以下に示すＨＰＬＣ条件Ｂでの測定において得られたＲ体及びＳ体の面積より、以下の式（ｅ２）に基づいて算出した。【０１１４】
光学純度（％ｅｅ）＝（Ｓ体の生成量―Ｒ体の生成量）／（Ｓ体の生成量＋Ｒ体の生成量）×１００              （ｅ２）【０１１５】
ここで、Ｒ体とは、（２Ｒ）−２−｛２−［４−（２−ベンジルオキシ−５−エトキシフェニルチオ）−２−クロロフェニル］エチル｝−２−（１，１−ジメチルエトキシカルボニルアミノ）ペンタノールを意味する。Ｓ体とは、（２Ｓ）−２−｛２−［４−（２−ベンジルオキシ−５−エトキシフェニルチオ）−２−クロロフェニル］エチル｝−２−（１，１−ジメチルエトキシカルボニルアミノ）ペンタノールを意味する。【０１１６】
ＨＰＬＣ条件Ｂ
カラム：ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ ＩＤ（４．６ｍｍ×２５０ｍｍ, ５μｍ）
移動相：アセトニトリル／薄めたリン酸溶液（１→１０００）＝６５／３５
流速：１．０ｍＬ／ｍｉｎ．
温度：４０℃
検出波長：２１０ｎｍ
保持時間：(Ｒ)体；１８．９ 分, (Ｓ)体；２０．２分【０１１７】
（参考例３）５−エトキシ−２−メトキシメトキシベンゼンチオールの合成【０１１８】
【化３３】
2016013225.tif 000034
【０１１９】
エタノール（１０ｍＬ）と水（５０ｍＬ）の混液に５−エトキシ−１，３−ベンゾキサチオール−２−オン（１０．００ｇ，５１．０ｍｍｏｌ）を加えた。当該混合液に、内温１２〜２８℃で水酸化ナトリウム（６．１２ｇ，１５３ｍｍｏｌ）を加えた。その混合液を内温４０〜４８℃で１．５時間撹拌した。反応液を冷却し、内温１０〜２８℃で３５％過酸化水素水（２．２５ｍＬ，２５．５ｍｍｏｌ）を加え、内温２０〜２８℃で２時間撹拌した。反応液を冷却し、内温１０〜１８℃で濃塩酸１５ｍＬを加え、酢酸エチル（１５０ｍＬ）で抽出した。有機層を１０％亜硫酸水素ナトリウム（１００ｍＬ）、飽和食塩水（１００ｍＬ）で順次洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムを用いて乾燥した。無水硫酸ナトリウムをろ過により除去し、ろ液を減圧濃縮し、茶色オイル（８．１８ｇ）を得た。
得られた茶色オイル（８．１８ｇ）をテトラヒドロフラン（３０ｍＬ）に溶解した。その混合液に内温２５℃でＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１６．５ｇ，１２７ｍｍｏｌ）、内温２５〜３７℃でクロロメチルメチルエーテル（７．７ｍＬ、１０１ｍｍｏｌ）を加えた。その混合液を内温５５〜６２℃で４時間撹拌した。反応液に内温１１〜２６℃で飽和塩化アンモニウム溶液（７５ｍＬ）、水（２５ｍＬ）を加えた。反応液を酢酸エチル（１００ｍＬ）、酢酸エチル（５０ｍＬ）で抽出した。有機層を合一し、飽和炭酸水素ナトリウム溶液（１００ｍＬ）、飽和食塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムを用いて乾燥した。無水硫酸ナトリウムをろ過により除去した後、ろ液を減圧濃縮し、茶色オイル（９．７４ｇ）を得た。
得られた茶色オイル（５．２７ｇ）にエタノール（５４．０ｍＬ）を加え、内温３０〜４０℃で水素化ホウ素ナトリウム（２．６１ｇ，６９．０ｍｍｏｌ）を加えた。混合液を、内温３０〜４０℃で１時間撹拌した。反応液を冷却し、内温１５〜２５℃で水（５３ｍＬ）、内温２０〜２５℃で塩化アンモニウム（１０．５ｇ）と水（５３ｍＬ）の混合液を加えた。ジイソプロピルエーテル（５３ｍＬ）で２回抽出した。有機層を合一し、水酸化ナトリウム（２．６４ｇ）と水（５４ｍＬ）の混合液、水酸化ナトリウム（１．３２ｇ）、水（２７ｍＬ）の混合液で抽出した。水層を合一し、内温１５〜２０℃で濃塩酸（８．４ｍＬ）を加えた。ジイソプロピルエーテル（５３ｍＬ）で抽出し、得られた抽出液を飽和食塩水（２６ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムを用いて乾燥した。無水硫酸ナトリウムをろ過により除去し、ろ液を減圧濃縮し、５−エトキシ−２−メトキシメトキシベンゼンチオール（４．８２ｇ，６９％収率）を得た。【０１２０】
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１．３８（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），３．５１（３Ｈ，ｓ），３．８３（１Ｈ，ｓ），３．９６（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），５．１６（２Ｈ，ｓ），６．６０−６．６２（１Ｈ，ｍ），６．８２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．１Ｈｚ），７．００（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ）【０１２１】
（参考例４）４−（５−エトキシ−２−メトキシメトキシフェニルチオ）−２−クロロベンズアルデヒドの合成【０１２２】
【化３４】
2016013225.tif 000035
【０１２３】
２−クロロ−４−フルオロベンズアルデヒド（１０．０ｇ，６３．１ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５０ｍＬ）に溶解し、炭酸カリウム（１３．１ｇ，９４．６ｍｍｏｌ）を加えた。その混合液を加熱し、内温５０〜６３℃で５−エトキシ−２−メトキシメトキシベンゼンチオール（１４．２ｇ，６６．２ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２０ｍＬ）溶液を滴下した。その混合液を内温５０〜５６℃で１時間撹拌した後、冷却し、内温３０〜３５℃で水（７０ｍＬ）を加えた。反応液を内温２０〜３０℃で０．５時間撹拌した後、更に冷却し、内温０〜１０℃で０．５時間撹拌した。析出物をろ取し、水（８０ｍＬ）で洗浄した。設定温度４０℃で減圧乾燥し、４−（５−エトキシ−２−メトキシメトキシフェニルチオ）−２−クロロベンズアルデヒド（２２．２ｇ，１００％収率）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１．４０（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ），３．３８（３Ｈ，ｓ），３．９９（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝６．９Ｈｚ），５．１０（２Ｈ，ｓ），６．９６−６．９９（１Ｈ，ｍ），７．０５−７．１０（３Ｈ，ｍ），７．１９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ），７．７６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ），１０．３５（１Ｈ，ｓ）【０１２４】
（実施例６）２−｛２−［４−（５−エトキシ−２−メトキシメトキシフェニルチオ）−２−クロロフェニル］エチル｝−２−プロピルマロン酸ジメチルの合成【０１２５】
【化３５】
2016013225.tif 000036
【０１２６】
４−（５−エトキシ−２−メトキシメトキシフェニルチオ）−２−クロロベンズアルデヒドを用いて、実施例１及び２と同様の操作で合成した。
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ０．９５（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），１．２３−１．２８（２Ｈ，ｍ），１．３５（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），１．９４−１．９８（２Ｈ，ｍ），２．０４−２．１５（２Ｈ，ｍ），２．５６−２．６０（２Ｈ，ｍ），３．４４（３Ｈ，ｓ），３．７３（６Ｈ，ｓ），３．９１（２Ｈ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），５．１１（２Ｈ，ｓ），６．７１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．１Ｈｚ），６．７５−６．７８（１Ｈ，ｍ），７．０６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ），７．１２−７．１７（２Ｈ，ｍ），７．３１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．５Ｈｚ）【０１２７】
（酵素に関する検討：工程３）
表１に、２−｛２−［４−（５−エトキシ−２−メトキシメトキシフェニルチオ）−２−クロロフェニル］エチル｝−２−プロピルマロン酸ジメチルの加水分解反応について、種々の酵素を用いた場合の比較結果を示す。【０１２８】
【化３６】
2016013225.tif 000037
【０１２９】
【表１】
2016013225.tif 000038
【０１３０】
表１に記載の「変換率」とは、以下に示すＨＰＣＬ条件Ｃで反応液を測定し、得られた原料と目的物の面積百分率（％）から以下の式（ｅ３）に基づき算出した値である。ここで目的物とは、式（１５）で表される化合物（Ｒ体）と式（１５）で表される化合物のエナンチオマー（Ｓ体）の両方を含む。【０１３１】
変換率（％）＝（目的物のＨＰＬＣ面積百分率）／（残存原料のＨＰＬＣ百分率＋目的物のＨＰＬＣ面積百分率）×１００（％）          （ｅ３）【０１３２】
表１に記載の「光学純度」は、以下に示すＨＰＬＣ条件Ｄで反応液を測定し、得られたＲ体とＳ体の面積より、以下の式（ｅ４）に基づいて算出した値である。【０１３３】
光学純度（％ｅｅ）＝（Ｒ体の生成量―Ｓ体の生成量）／（Ｒ体の生成量＋Ｓ体の生成量）×１００（％）      （ｅ４）【０１３４】
ＨＰＬＣ条件Ｃ（反応モニター)
プレカラム：Ｉｎｅｒｔｓｉｌ  ＯＤＳ−３（４．０ｍｍＩＤ×１０ｍｍ）
本カラム  ：Ｉｎｅｒｔｓｉｌ  ＯＤＳ−３（４．６ｍｍＩＤ×１５０ｍｍ，３μｍ）
移動相    ：アセトニトリル／薄めたリン酸（１→１０００）＝７０／３０→９５／５（０〜２５ｍｉｎ．）
温度      ：４０℃
流速      ：１．０ｍＬ／ｍｉｎ
測定波長  ：２１０ｎｍ
保持時間  ：目的物；１１．８４分，原料；１９．５５分【０１３５】
ＨＰＬＣ条件Ｄ（光学純度）
プレカラム：Ｉｎｅｒｔｓｉｌ  ＯＤＳ−３（４．０ｍｍＩＤ×１０ｍｍ）
本カラム  ：ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＡＤ−３Ｒ（４．６ｍｍＩＤ×１５０ｍｍ）
移動相    ：アセトニトリル／薄めたリン酸（１→１０００）＝５５／４５
温度      ：４０℃
流速      ：１．０ｍＬ／ｍｉｎ
検出波長  ：２１０ｎｍ
保持時間  ：(Ｒ)体；１１．８２分, (Ｓ)体；１６．０８分【０１３６】
（実施例７）
Ｅｓｔｅｒａｓｅ ｆｒｏｍ Ｐｏｒｃｉｎｅ ｌｉｖｅｒ（１０．０ｍｇ）とリン酸バッファー（ｐＨ７．０，１．０ｍＬ）の混合液に２−｛２−［４−（２−メトキシメトキシ−５−エトキシフェニルチオ）−２−クロロフェニル］エチル｝−２−プロピルマロン酸ジメチル（１０．０ｍｇ）のジメチルスルホキシド（１００μＬ）溶液を加えた。その混合液を設定温度４０℃で２４時間撹拌した。反応液を、ＨＰＬＣ条件Ｄで測定したところ、式（１５）で表される化合物の光学純度は９９．５％ｅｅであった。【０１３７】
（実施例８）
Ｅｓｔｅｒａｓｅ ｆｒｏｍ Ｒａｂｂｉｔ ｌｉｖｅｒを用いた以外の条件は、実施例７と同様の操作で行った。ＨＰＬＣ条件Ｄで測定を行ったところ、式（１５）で表される化合物の光学純度は６９．７％ｅｅであった。【０１３８】
（比較例１〜２６）
表１に記載の酵素をそれぞれ用いた以外は、実施例７と同様の操作で行った。比較例１〜２６では加水分解反応は進行しなかった。【０１３９】
表１に示す結果から理解できるように、ブタ肝臓エステラーゼであるＥｓｔｅｒａｓｅ  ｆｒｏｍ  Ｐｏｒｃｉｎｅ  ｌｉｖｅｒ、またはウサギ肝臓エステラーゼであるＥｓｔｅｒａｓｅ  ｆｒｏｍ  Ｒａｂｂｉｔ  ｌｉｖｅｒを用いた場合は、加水分解反応は進行するものの、それ以外の酵素を用いた場合は、反応が全く進行しない。特に、Ｅｓｔｅｒａｓｅ ｆｒｏｍ Ｐｏｒｃｉｎｅ ｌｉｖｅｒを用いた場合にはより高い光学純度で式（１５）で表される化合物が得られた。
【産業上の利用可能性】
【０１４０】
本実施形態によれば、特許文献１において開示された化合物を含むジフェニルスルフィド誘導体の新規な製造方法を提供することができる。本実施形態の製造方法は安価であり、光学純度の高い化合物を得ることができる。よって、本実施形態によれば、ジフェニルスルフィド誘導体を工業的に有利に製造することができ、高品質の医薬品を提供することが可能となる。
【国際調査報告】
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