(57)【要約】次式Ｉ又はＩＩ：【化８】2015046627.tif 000010【化９】2015046627.tif 000011〔式Ｉ及びＩＩ中、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は、それぞれ独立して、Ｃ１−６アルキル基、Ｃ２−６アルケニル基、Ｃ２−６アルキニル基、Ｃ１−６アルコキシ基、Ｃ３−６シクロアルキル基、ハロゲン原子、水酸基、カルボキシル基、アミノ基又は−ＯＲ４（Ｒ４は、Ｃ２−６アルケニル基、Ｃ２−６アルキニル基又はＣ３−６シクロアルキル基を表す。）で示される基を表し、ｎ及びｍは、それぞれ独立して１〜４の整数を表す。〕で示されるカルバゾール化合物、その塩又はこれらの溶媒和物を含む、創傷治癒促進剤。
2015046627.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
次式Ｉ又はＩＩ：
【化６】
2015046627.tif 000008
【化７】
2015046627.tif 000009
〔式Ｉ及びＩＩ中、Ｒ１及びＲ２は、それぞれ独立して、Ｃ１−６アルキル基、Ｃ２−６アルケニル基、Ｃ２−６アルキニル基、Ｃ１−６アルコキシ基、Ｃ３−６シクロアルキル基、ハロゲン原子、水酸基、カルボキシル基、アミノ基又は−ＯＲ４（Ｒ４は、Ｃ２−６アルケニル基、Ｃ２−６アルキニル基又はＣ３−６シクロアルキル基を表す。）で示される基を表し、Ｒ３は、水素原子、Ｃ１−６アルキル基、Ｃ２−６アルケニル基、Ｃ２−６アルキニル基、Ｃ１−６アルコキシ基、Ｃ３−６シクロアルキル基、ハロゲン原子、水酸基、カルボキシル基、アミノ基又は−ＯＲ４（Ｒ４は前記と同様である。）で示される基を表し、ｎ及びｍは、それぞれ独立して０〜４の整数を表す。〕
で示されるカルバゾール化合物、その塩又はこれらの溶媒和物を含む、創傷治癒促進剤。
【請求項２】
式Ｉ又はＩＩで示されるカルバゾール化合物が、６−ホルミルインドロ［３，２−ｂ］カルバゾールである請求項１に記載の促進剤。
【請求項３】
皮膚潰瘍に対する創傷治癒のために使用される請求項１に記載の促
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、創傷治癒促進剤に関する。特に、本発明は、皮膚において細胞遊走を促進する創傷治癒促進剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
皮膚は、外界から生体を保護している人体最大の臓器である。皮膚は、表層から上皮細胞である表皮、結合組織である真皮、主に脂肪からなる皮下組織と皮膚付属器で構成されている。創傷とは、熱傷、裂傷、擦過傷、褥瘡、皮膚潰瘍、外科的切開などによる皮膚組織の欠損である。表皮のみの欠損（糜爛）では、皮膚は完全に再生し損傷の痕跡を残さないが、表皮を超える欠損（潰瘍）では線維芽細胞の増殖、結合組織の増生による欠損の充填に引き続き、表皮細胞の増殖による上皮化が起こり、治癒後に瘢痕を残す。潰瘍における創傷治癒が遷延するほど肥厚性瘢痕、ケロイドといった病的な瘢痕形成を来しやすく、また関節部における拘縮や露出部における醜形の原因となりｑｕａｌｉｔｙ  ｏｆ  ｌｉｆｅを大きく障害するため、創傷治癒を促進し速やかな創閉鎖を誘導する薬剤が望まれている。これまでに細胞の分化・増殖過程を刺激し創傷治癒を促進する薬剤として、タンパク質製剤（特許文献１）、植物抽出物（特許文献２）、菌糸体由来成分（特許文献３）等が報告されている。【０００３】
一方で、細胞遊走による生体の再生能を促進させる薬剤として、タンパク質製剤（特許文献４）、２−ベンズアゼピン誘導体および２−イソキノリン誘導体（特許文献５）等が報告されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開２０１２−１２３４４号公報
【特許文献２】特開２００９−２４２３４４号公報
【特許文献３】特開２００８−８８１２１号公報
【特許文献４】特表２０１３−５３０１６１号公報
【特許文献５】特開２００８−１２７３２３号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明は、細胞遊走による生体の再生能を促進させることにより、皮膚潰瘍に対して、有用な創傷治癒促進剤を提供することをその主な課題とする。また、安全性や実用性の面から考えて、内因性の分子に着目する。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者等は、上記課題を解決するために鋭意研究を行った結果、カルバゾール化合物、特に６−ホルミルインドロ［３，２−ｂ］カルバゾール（６−ｆｏｒｍｙｌｉｎｄｏｌｏ［３，２−ｂ］ｃａｒｂａｚｏｌｅ）（ＦＩＣＺ）が、皮膚潰瘍に対し創傷治癒促進効果を有することを見出し、本発明を完成するに至った。６−ｆｏｒｍｙｌｉｎｄｏｌｏ［３，２−ｂ］ｃａｒｂａｚｏｌｅ（ＦＩＣＺ）は生体内で合成および分解されるため、安全性や実用性も高いと考えられる。【０００７】
すなわち、本発明は、次式Ｉ又はＩＩ：
【化１】
2015046627.tif 000003
【化２】
2015046627.tif 000004
〔式Ｉ及びＩＩ中、Ｒ１及びＲ２は、それぞれ独立して、Ｃ１−６アルキル基、Ｃ２−６アルケニル基、Ｃ２−６アルキニル基、Ｃ１−６アルコキシ基、Ｃ３−６シクロアルキル基、ハロゲン原子、水酸基、カルボキシル基、アミノ基又は−ＯＲ４（Ｒ４は、Ｃ２−６アルケニル基、Ｃ２−６アルキニル基又はＣ３−６シクロアルキル基を表す。）で示される基を表し、Ｒ３は、水素原子、Ｃ１−６アルキル基、Ｃ２−６アルケニル基、Ｃ２−６アルキニル基、Ｃ１−６アルコキシ基、Ｃ３−６シクロアルキル基、ハロゲン原子、水酸基、カルボキシル基、アミノ基又は−ＯＲ４（Ｒ４は前記と同様である。）で示される基を表し、ｎ及びｍは、それぞれ独立して０〜４の整数を表す。〕
で示されるカルバゾール化合物、その塩又はこれらの溶媒和物を含む、創傷治癒促進剤である。
上記カルバゾール化合物としては、例えば６−ホルミルインドロ［３，２−ｂ］カルバゾールが挙げられる。
上記促進剤は、典型的には皮膚潰瘍に対する創傷治癒を目的として使用される。
【発明の効果】
【０００８】
本発明により、細胞遊走による生体の再生能を促進し、それにより創傷治癒を促進する効果を有する創傷治癒促進剤を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【０００９】
【図１】ＦＩＣＺの皮膚表皮細胞に対する創傷部位の縮小作用を示す図である。
【図２】ＦＩＣＺの生体での創傷治癒に対する作用を示す図である。
【図３】ＦＩＣＺの生体での創傷治癒に対する作用を示す図である。
【図４】ＦＩＣＺの生体での創傷治癒に対する作用を示す図である。
【図５】ＦＩＣＺの生体での創傷治癒に対する作用を示す図である。
【図６】ＦＩＣＺの生体での創傷治癒に対する作用を示す図である。
【図７】ＦＩＣＺの生体での創傷治癒に対する作用を示す図である。
【図８】ＦＩＣＺの生体での創傷治癒に対する作用を示す図である。
【図９】ＦＩＣＺの生体での創傷治癒に対する作用を示す図である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１０】
以下、本発明を詳細に説明する。
本発明は、式Ｉ又は式ＩＩで示されるカルバゾール化合物、その塩又はこれらの溶媒和物を含む創傷治癒促進剤又は創傷治癒用医薬組成物を提供する。【００１１】
式Ｉ：
【化３】
2015046627.tif 000005
式ＩＩ：
【化４】
2015046627.tif 000006
【００１２】
上記式Ｉ及び式ＩＩにおいて、Ｒ１及びＲ２は、それぞれ独立して、Ｃ１−６アルキル基、Ｃ２−６アルケニル基、Ｃ２−６アルキニル基、Ｃ１−６アルコキシ基、Ｃ３−６シクロアルキル基、ハロゲン原子、水酸基、カルボキシル基、アミノ基又は−ＯＲ４（Ｒ４は、Ｃ２−６アルケニル基、Ｃ２−６アルキニル基又はＣ３−６シクロアルキル基を表す。）で示される基を表し、Ｒ３は、水素原子、Ｃ１−６アルキル基、Ｃ２−６アルケニル基、Ｃ２−６アルキニル基、Ｃ１−６アルコキシ基、Ｃ３−６シクロアルキル基、ハロゲン原子、水酸基、カルボキシル基、アミノ基又は−ＯＲ４（Ｒ４は前記と同様である。）で示される基を表しす。ｎ及びｍは、それぞれ独立して０〜４の整数を表す。また、Ｒ４は、Ｃ２−６アルケニル基、Ｃ２−６アルキニル基又はＣ３−６シクロアルキル基を表す。【００１３】
「Ｃ１−６アルキル基」とは、炭素数が１〜６個の直鎖状又は分枝鎖状のアルキル基を意味し、例えば、メチル基、エチル基、１−プロピル基（ｎ−プロピル基）、２−プロピル基（ｉ−プロピル基）、２−メチル−１−プロピル基（ｉ−ブチル基）、２−メチル−２−プロピル基（ｔ−ブチル基）、１−ブチル基（ｎ−ブチル基）、２−ブチル基（ｓ−ブチル基）、１−ペンチル基、２−ペンチル基、３−ペンチル基、２−メチル−１−ブチル基、３−メチル−１−ブチル基、２−メチル−２−ブチル基、３−メチル−２−ブチル基、２，２−ジメチル−１−プロピル基、１−ヘキシル基、２−ヘキシル基、３−ヘキシル基、２−メチル−１−ペンチル基、３−メチル−１−ペンチル基、４−メチル−１−ペンチル基、２−メチル−２−ペンチル基、３−メチル−２−ペンチル基、４−メチル−２−ペンチル基、２−メチル−３−ペンチル基、３−メチル−３−ペンチル基、２，３−ジメチル−１−ブチル基、３，３−ジメチル−１−ブチル基、２，２−ジメチル−１−ブチル基、２−エチル−１−ブチル基、３，３−ジメチル−２−ブチル基、２，３−ジメチル−２−ブチル基などが挙げられる。【００１４】
「Ｃ１−６アルキル基」の好ましい例としては、メチル基、エチル基、１−プロピル基、２−プロピル基、２−メチル−１−プロピル基、２−メチル−２−プロピル基、１−ブチル基、２−ブチル基等を挙げることができる。【００１５】
「Ｃ２−６アルケニル基」とは、二重結合を１個有する、炭素数が２〜６個の直鎖状又は分枝鎖状のアルケニル基を意味し、例えば、エテニル基（ビニル基）、１−プロペニル基、２−プロペニル基（アリル基）、１−ブテニル基、２−ブテニル基、３−ブテニル基、ペンテニル基、ヘキセニル基などが挙げられ、エテニル基（ビニル基）、１−プロペニル基、２−プロペニル基（アリル基）などが好ましい。【００１６】
「Ｃ２−６アルキニル基」とは、三重結合を１個有する、炭素数が２〜６個の直鎖状又は分枝鎖状のアルキニル基を意味し、例えば、エチニル基、１−プロピニル基、２−プロピニル基、１−ブチニル基、２−ブチニル基、３−ブチニル基、ペンチニル基、ヘキシニル基などが挙げられ、エチニル基、１−プロピニル基、２−プロピニル基などが好ましい。【００１７】
「Ｃ１−６アルコキシ基」とは、「Ｃ１−６アルキル基」の末端に酸素原子が結合した基であり、例えば、メトキシ基、エトキシ基、１−プロポキシ基（ｎ−プロポキシ基）、２−プロポキシ基（ｉ−プロポキシ基）、２−メチル−１−プロポキシ基（ｉ−ブトキシ基）、２−メチル−２−プロポキシ基（ｔ−ブトキシ基）、１−ブトキシ基（ｎ−ブトキシ基）、２−ブトキシ基（ｓ−ブトキシ基）、１−ペンチルオキシ基、２−ペンチルオキシ基、３−ペンチルオキシ基、２−メチル−１−ブトキシ基、３−メチル−１−ブトキシ基、２−メチル−２−ブトキシ基、３−メチル−２−ブトキシ基、２，２−ジメチル−１−プロポキシ基、１−ヘキシルオキシ基、２−ヘキシルオキシ基、３−ヘキシルオキシ基、２−メチル−１−ペンチルオキシ基、３−メチル−１−ペンチルオキシ基、４−メチル−１−ペンチルオキシ基、２−メチル−２−ペンチルオキシ基、３−メチル−２−ペンチルオキシ基、４−メチル−２−ペンチルオキシ基、２−メチル−３−ペンチルオキシ基、３−メチル−３−ペンチルオキシ基、２，３−ジメチル−１−ブトキシ基、３，３−ジメチル−１−ブトキシ基、２，２−ジメチル−１−ブトキシ基、２−エチル−１−ブトキシ基、３，３−ジメチル−２−ブトキシ基、２，３−ジメチル−２−ブトキシ基などが挙げられる。
「Ｃ１−６アルコキシ基」の好ましい例としては、メトキシ基、エトキシ基、１−プロポキシ基、２−プロポキシ基、２−メチル−１−プロポキシ基、２−メチル−２−プロポキシ基、１−ブトキシ基、２−ブトキシ基などが挙げられる。【００１８】
「Ｃ３−６シクロアルキル基」とは、炭素数が３〜６個の飽和脂肪族炭化水素基を意味し、例えば、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロヘキシル基などが挙げられ、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基などが好ましい。【００１９】
「ハロゲン原子」とは、フッ素原子、塩素原子、臭素原子又はヨウ素原子を意味し、フッ素原子又は塩素原子が好ましい。【００２０】
本明細書において、ｎ及びｍはそれぞれ独立しており、０〜４の整数である。従って、ｎ及びｍがともに０の場合は、置換基の位置にはすべて水素原子が結合している。また、ｎ及びｍが１〜３の場合において前記Ｃ１−６アルキル基、Ｃ２−６アルケニル基、Ｃ２−６アルキニル基、Ｃ１−６アルコキシ基、Ｃ３−６シクロアルキル基、ハロゲン原子、水酸基、カルボキシル基、アミノ基又は−ＯＲ４（Ｒ４は前記と同様である。）で示される基により置換されているときは、他の置換基の位置には水素原子が結合している。
本発明においては、Ｒ１及びＲ２におけるｎ及びｍがいずれも０（すなわち置換基の位置にすべて水素原子が結合している化合物）であって、Ｒ３が水素原子である化合物、すなわち、６−ｆｏｒｍｙｌｉｎｄｏｌｏ［３，２−ｂ］ｃａｒｂａｚｏｌｅ（ＦＩＣＺ：式ＩＩＩに示す化合物）であることが好ましい。【００２１】
本発明において使用されるＦＩＣＺの構造を式（ＩＩＩ）に示す。
【化５】
2015046627.tif 000007
【００２２】
本明細書において、「創傷治癒」とは、表皮細胞や組織の再生機能を利用・促進して元の状態に戻すこと、あるいは、これに加えて免疫機能を刺激して、より積極的に創傷を治療することを意味する。この創傷治癒は、細胞遊走による生体の再生能を促進することで達成される。
従って、本発明の創傷治癒促進剤は、本発明の創傷治癒促進剤のみからなる薬剤だけでなく、創傷治癒用医薬組成物として使用することができ、さらには、その他の創傷治癒剤、創傷治癒促進剤、殺菌剤、表皮細胞増殖因子、抗炎症剤等を単独で又は適宜組み合わせて使用することができる。
ここで、「創傷」とは、外的又は内的要因によって起こる体組織（特に体表組織）の物理的損傷を意味し、切創、裂創、割創、擦過傷、挫滅創、挫創、挫傷、銃創、爆傷、刺創、咬創などあらゆる傷を意味するが、皮膚潰瘍、熱傷、褥瘡、凍傷、放射線潰瘍、医療関連機器圧迫創なども本発明における「創傷」に含まれる。【００２３】
本発明において使用される化合物は、公知の合成法、例えばトリプトファンに紫外線を照射することにより得ることができ、あるいは、ＦＩＣＺの場合は市販品（例えばエンゾ・ライフサイエンス社）として得ることができる。
本発明において使用される化合物は、通常の薬理学的に許容される酸又は塩基性化合物と塩を形成し得る。このような酸としては、例えば塩酸、臭化水素酸、硝酸、硫酸、リン酸等の無機酸、メタンスルホン酸、酢酸、クエン酸、酒石酸、マレイン酸、フマル酸、リンゴ酸、乳酸等の有機酸が挙げられる。また、塩基性化合物としては、例えば水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウム等を挙げることができる。
また、本発明においてカルバゾール化合物は無水物であってもよく、水和物などの溶媒和物を形成していてもよい。溶媒和物は水和物または非水和物のいずれであってもよいが、水和物が好ましい。溶媒は水、アルコール（例えば、メタノール、エタノール、ｎ−プロパノール）、ジメチルホルムアミドなどを使用することができる。
本発明において、カルバゾール化合物（例えばＦＩＣＺ）は、単独で、又は生理的若しくは薬剤学的に許容される通常の担体又は希釈剤と共に混合物として用いることができる。【００２４】
投与形態としては、経口投与、非経口投与の何れも可能であるが、経皮、経口、経胃又は経腸投与することが好ましい。
本発明の創傷治癒促進剤又は医薬組成物を非経口投与する場合は、クリーム剤、軟膏、その他の外用剤の形態とすることができる。
また、本発明の創傷治癒促進剤又は医薬組成物を経口投与する場合は、固形であっても液体であってもよく、例えば、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、丸剤、トローチ剤、内用水剤、懸濁剤、乳剤、シロップ剤等が挙げられる。
これらの各種製剤は、製剤上通常用いられる賦形剤、増量剤、結合剤、湿潤剤、崩壊剤、潤滑剤、界面活性剤、分散剤、緩衝剤、保存剤、溶解補助剤、防腐剤、矯味矯臭剤、無痛化剤、安定化剤、等張化剤等を適宜選択し、常法により製造することができる。【００２５】
上記製剤中に含有されるカルバゾール化合物の量は、特に限定されず適宜選択することができるが、通常、製剤中に０．０１〜１０μＭ、好ましくは０．１〜１μＭで含有させることが好ましい。
本発明の創傷治癒促進剤又は医薬組成物は、既存の創傷被覆剤、クリーム剤、軟膏などの外用剤等との併用も可能であり、キットの形態であってもよい。
また、本発明の創傷治癒促進剤又は医薬組成物は、前記創傷の治癒（例えば皮膚潰瘍に対する創傷治癒）のみならず、手術後の皮膚や臓器（胃、腸等）の傷口の治癒を目的として使用することもできる。また、糖尿病性潰瘍、血管炎（バージャー病等）、膠原病に伴う潰瘍、水疱症に伴う潰瘍、静脈瘤性潰瘍、血管閉塞・血管障害に伴う潰瘍などの疾患を対象とすることも可能である。
上記創傷治癒促進剤又は医薬組成物の投与量は、用法、患者の年齢、性別、疾患の程度、その他の条件に応じて適宜選択すればよく、通常、１日あたり創傷面積に対して０．００１〜１０ｎｇ／ｍｍ２、好ましくは０．０１〜１ｎｇ／ｍｍ２を１回〜数回に分けて投与される。
以下に、代表的な６−ｆｏｒｍｙｌｉｎｄｏｌｏ［３，２−ｂ］ｃａｒｂａｚｏｌｅ（ＦＩＣＺ）の創傷治癒促進作用についての実施例を示す。
【実施例１】
【００２６】
＜皮膚表皮細胞に対する創傷部位の縮小作用＞
ヒト皮膚表皮細胞株（ＨａＣａＴ）を用いて、以下の方法で表皮細胞に対する創傷部位の縮小促進効果を検討した。【００２７】
［方法］  ６穴プレートにＨａＣａＴ細胞を播き、全面を覆うまで１０％ＦＢＳを含むＤＭＥＭ培地で培養した。細胞用スクレーパーを用いて幅１ｃｍの無細胞領域を作成し、ＤＭＥＭ培地で洗浄後、被験化合物を含むＤＭＥＭ培地で３７ｏＣ・５％ＣＯ２の条件下で培養した。その後、２日おきに被験化合物を含むＤＭＥＭ培地を用いて培地交換を行った。被験化合物初回投与日を０日とし、１２日目の無細胞領域を測定した。コントロールとしては被験化合物を含まない溶媒添加ＤＭＥＭ培地で同様に培養したものを用いた。【００２８】
［被験化合物］  実験に用いた化合物は、６−ｆｏｒｍｙｌｉｎｄｏｌｏ［３，２−ｂ］ｃａｒｂａｚｏｌｅ（ＦＩＣＺ）である。濃度は１ｎＭ，１０ｎＭ，１００ｎＭを検討した。【００２９】
［結果］  結果を図１に示す。図１中の残存創傷面積は、コントロール細胞を基準（１００％）として算出した各３例の平均値および標準誤差である。＊はＰ＜０．０５、＊＊はＰ＜０．０１で統計学的に有意であることを示す（基準：コントロール）。図１に示すように、６−ｆｏｒｍｙｌｉｎｄｏｌｏ［３，２−ｂ］ｃａｒｂａｚｏｌｅ（ＦＩＣＺ）を含む培養液で培養すると、ＨａＣａＴ細胞の創傷部位の縮小促進効果が認められた。
【実施例２】
【００３０】
＜生体での創傷治癒に対する作用＞
Ｂａｌｂ／ｃ雌性マウスを用いて、以下の方法で皮膚潰瘍の治癒への影響を検討した。【００３１】
［方法］  マウスをセボフルラン吸入で麻酔させ背部の体毛をバリカンで剃毛した。６ｍｍ径の皮膚生検用トレパンを用いて背部皮膚に全層性の潰瘍を作成し、２８４．３ｎｇ／ｇの濃度で被験化合物をワセリンに混合したものを患部に塗布した。対照薬剤として、プロスタグランジンＥ１製剤（ＰＧＥ１）および塩基性線維芽細胞成長因子製剤（ｂＦＧＦ）を同様に塗布した。被験化合物塗布前にマウスの背部創傷を写真撮影しその面積を測定した。被験化合物塗布後の創傷面積を比較することにより皮膚創傷治癒効果を検討した。創傷面積の写真撮影は２日おきに行い、その都度、被験化合物配合ワセリン、または対照薬剤を塗布しなおした。コントロールとしては被験化合物を含まない溶媒添加ワセリンを患部に塗布した。【００３２】
［被験化合物］  実験に用いた化合物は、実施例１で用いた６−ｆｏｒｍｙｌｉｎｄｏｌｏ［３，２−ｂ］ｃａｒｂａｚｏｌｅ（ＦＩＣＺ）である。【００３３】
［結果］  各群のマウスにおける０日目と１０日目の創傷部位の写真を図２に示す。また、図３中の残存創傷面積は、創傷作成直後の面積を基準（１００％）として算出した創傷作成後２日ごとの各５匹の平均値±標準誤差である。図４は、創傷作成後１０日目の各５匹の平均値±標準誤差を抽出したものである。＊はＰ＜０．０５で統計学的に有意であることを示す（基準：Ｃｏｎｔｒｏｌ（ＣＯＮ））。図２〜図４に示すように、６−ｆｏｒｍｙｌｉｎｄｏｌｏ［３，２−ｂ］ｃａｒｂａｚｏｌｅ（ＦＩＣＺ）を塗布することにより、優れた皮膚創傷治癒促進効果が認められた。
【実施例３】
【００３４】
＜生体での創傷治癒に対する作用＞
ｄｂ／ｄｂ雌性マウスを用いて、以下の方法で皮膚潰瘍の治癒への影響を検討した。ｄｂ／ｄｂマウスは難治性の皮膚潰瘍モデルとして汎用されており、創傷治癒が遅延することが知られている。また、ｄｂ／＋マウスは表現型を示さないことから、対照群として同時に検討を行った。【００３５】
［方法］  マウスをセボフルラン吸入で麻酔させ背部の体毛をバリカンで剃毛した。６ｍｍ径の皮膚生検用トレパンを用いて背部皮膚に全層性の潰瘍を作成し、２８４．３ｎｇ／ｇの濃度で被験化合物をワセリンに混合したものを患部に塗布した。被験化合物塗布前にマウスの背部創傷を写真撮影しその面積を測定した。被験化合物塗布後の創傷面積を比較することにより皮膚創傷治癒効果を検討した。創傷面積の写真撮影は２日おきに行い、その都度、被験化合物配合ワセリンを塗布しなおした。コントロールとしては被験化合物を含まない溶媒添加ワセリンを患部に塗布した。【００３６】
［被験化合物］  実験に用いた化合物は、実施例１および２で用いた６−ｆｏｒｍｙｌｉｎｄｏｌｏ［３，２−ｂ］ｃａｒｂａｚｏｔｅ（ＦＩＣＺ）である。【００３７】
［結果］  図５（ｄｂ／ｄｂマウス）および図６（ｄｂ／＋マウス）に０日目と１０日目の創傷部位の写真を示す。また、図７（ｄｂ／ｄｂマウス）および図８（ｄｂ／＋マウス）中の残存創傷面積は、創傷作成直後の面積を基準（１００％）として算出した創傷作成後２日ごとの各５匹の平均値±標準誤差である。図９は、創傷作成後６日目の各５匹の平均値±標準誤差を抽出したものである。＊はＰ＜０．０５、＊＊はＰ＜０．０１、＊＊＊はＰ＜０．００１で統計学的に有意であることを示す。図５〜図９に示すように、６−ｆｏｒｍｙｌｉｎｄｏｌｏ［３，２−ｂ］ｃａｒｂａｚｏｌｅ（ＦＩＣＺ）を塗布することにより、難治性潰瘍モデルにおいても優れた皮膚創傷治癒促進効果が認められた。
【産業上の利用可能性】
【００３８】
本発明により、式Ｉ又はＩＩで示されるカルバゾール化合物を含む創傷治癒促進剤が提供される。本発明の促進剤は、創傷治癒促進のための治療用医薬組成物（特に外用剤）として有用である。
【図１】
2015046627.tif 000012
【図３】
2015046627.tif 000013
【図４】
2015046627.tif 000014
【図７】
2015046627.tif 000015
【図８】
2015046627.tif 000016
【図９】
2015046627.tif 000017
【図２】
2015046627.tif 000018
【図５】
2015046627.tif 000019
【図６】
2015046627.tif 000020
【手続補正書】
【提出日】平成27年3月5日(2015.3.5)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
次式Ｉ又はＩＩ：
【化６】
2015046627.tif 000021
【化７】
2015046627.tif 000022
〔式Ｉ及びＩＩ中、Ｒ１及びＲ２は、それぞれ独立して、Ｃ１−６アルキル基、Ｃ２−６アルケニル基、Ｃ２−６アルキニル基、Ｃ１−６アルコキシ基、Ｃ３−６シクロアルキル基、ハロゲン原子、水酸基、カルボキシル基、アミノ基又は−ＯＲ４（Ｒ４は、Ｃ２−６アルケニル基、Ｃ２−６アルキニル基又はＣ３−６シクロアルキル基を表す。）で示される基を表し、Ｒ３は、水素原子、Ｃ１−６アルキル基、Ｃ２−６アルケニル基、Ｃ２−６アルキニル基、Ｃ１−６アルコキシ基、Ｃ３−６シクロアルキル基、ハロゲン原子、水酸基、カルボキシル基、アミノ基又は−ＯＲ４（Ｒ４は前記と同様である。）で示される基を表し、ｎ及びｍは、それぞれ独立して０〜４の整数を表す。〕
で示されるカルバゾール化合物、その塩又はこれらの溶媒和物を含む、創傷治癒促進剤。
【請求項２】
式Ｉ又はＩＩで示されるカルバゾール化合物が、６−ホルミルインドロ［３，２−ｂ］カルバゾールである請求項１に記載の促進剤。
【請求項３】
皮膚潰瘍に対する創傷治癒のために使用される請求項１に記載の促進剤。
【請求項４】
次式ＩＩＩ：
【化８】
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で示される６−ホルミルインドロ［３，２−ｂ］カルバゾール、その塩又はこれらの溶媒和物を含む、皮膚潰瘍に対する創傷治癒促進剤であって、前記６−ホルミルインドロ［３，２−ｂ］カルバゾール、その塩又はこれらの溶媒和物を、１日あたり創傷面積に対して０．００１〜１０ｎｇ／ｍｍ２で投与されるように用いられることを特徴とする前記創傷治癒促進剤。
【請求項５】
前記６−フォルミルインドロ［３，２−ｂ］カルバゾール、その塩又はこれらの溶媒和物を、１日あたり創傷面積に対して０．０１〜１ｎｇ／ｍｍ２で投与されるように用いられることを特徴とする請求項４に記載の創傷治癒促進剤。
【請求項６】
皮膚潰瘍が難治性皮膚潰瘍である請求項４又は５に記載の創傷治癒促進剤。
【国際調査報告】
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