(57)【要約】  本発明は、葉酸と併用するための、動脈硬化の治療または予防用のアスピリンを含む医薬組成物；アスピリンと併用するための、動脈硬化の治療または予防用の葉酸を含む医薬組成物；動脈硬化の治療または予防用の、アスピリンと葉酸とを含む医薬組成物；および、動脈硬化の治療または予防用のキットであって、アスピリンを含む医薬組成物と、葉酸を含む医薬組成物とを含むキットを提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
葉酸と併用するための、動脈硬化の治療または予防用のアスピリンを含む医薬組成物。
【請求項２】
アスピリンが１日あたり50〜200mgで投与される、請求項１記載の医薬組成物
【請求項３】
葉酸が１日あたり5〜20mgで投与される、請求項１または２記載の医薬組成物
【請求項４】
２型糖尿病患者に投与される、請求項１〜３のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項５】
アスピリンと併用するための、動脈硬化の治療または予防用の葉酸を含む医薬組成物。
【請求項６】
動脈硬化の治療または予防用の、アスピリンと葉酸とを含む医薬組成物。
【請求項７】
50〜200mgのアスピリンおよび5〜20mgの葉酸を含む、請求項６記載の医薬組成物。
【請求項８】
動脈硬化の治療または予防用のキットであって、アスピリンを含む医薬組成物と、葉酸を含む医薬組成物とを含むキット。
【請求項９】
動脈硬化を治療または予防するための方法であって、アスピリンおよび葉酸を患者に投与することを含む方法。
【請求項１０】
アスピリンと葉酸が別の製剤に含まれる、請求項９記載の方法。
【請求項１１】
アスピリンと葉酸が同じ製剤に含まれる、請求項９記載の方法。
【請求項１２】
アスピリンと葉酸が同時に投与される、請求項９記載の方法。
【請求項１３】
アスピリンと葉酸が別々に投与される、請求項９記載の方法。
【請求項１４】
１日あたり50〜200mgのアスピリンおよび１日あたり5〜20mgの葉酸が投与される、請求項９記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、動脈硬化の治療または予防のためのアスピリンおよび葉酸の併用に関する。
【背景技術】
【０００２】
動脈硬化症は、心筋梗塞、脳梗塞などの心血管疾患や、末梢動脈閉塞による足壊疽など、重篤な疾患の原因となる。動脈硬化症予防の方策としては、その悪化要因となる高血圧、脂質異常症および糖尿病の管理を除くと、低用量アスピリンの投与が推奨されている。しかしながら、アスピリンの動脈硬化予防作用は比較的弱く、心血管疾患や末梢動脈閉塞の発症予防に関しても効果は限定的である。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
本発明は、動脈硬化の治療および予防に有効な医薬を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００４】
本発明は、葉酸と併用するための、動脈硬化の治療または予防用のアスピリンを含む医薬組成物を提供する。【０００５】
本発明は、アスピリンと併用するための、動脈硬化の治療または予防用の葉酸を含む医薬組成物を提供する。【０００６】
本発明は、動脈硬化の治療または予防用の、アスピリンと葉酸とを含む医薬組成物を提供する。【０００７】
本発明は、動脈硬化の治療または予防用のキットであって、アスピリンを含む医薬組成物と、葉酸を含む医薬組成物とを含むキットを提供する。
【発明の効果】
【０００８】
本発明により、新規かつ有効な動脈硬化の治療および予防薬が提供される。
【図面の簡単な説明】
【０００９】
【図１】試験計画。矢印はFMD測定および採血の時点を示す。
【図２】群A（A）および群B（B）の対象における2週間の試験期間後のFMDの変化、および群C（C)の対象における1週間の試験期間後のFMDの変化。データは平均±S.D.を示す。*P<0.01、**P<0.001 （vs. 基準時の値）。P = 0.02 (A)およびP = 0.004 (B) は、併用療法後の値とアスピリン単独療法後の値との比較におけるP値を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
本発明は、動脈硬化の治療または予防のためのアスピリンおよび葉酸の併用に関する。
【００１１】
アスピリンは、高用量では解熱、鎮痛、および抗炎症作用を示し、低用量では血小板凝集抑制作用を示す。本発明において、アスピリンは、血栓・塞栓形成の抑制のための低用量アスピリン療法において一般に用いられる量で投与される。アスピリンの投与量は、対象の年齢、性別、体重、および症状、並びに投与方法、投与時期、投与間隔、剤型等によって相違し、特に限定されないが、通常、成人１日あたり10〜400mg、好ましくは50〜325mg、より好ましくは50〜200mgの範囲である。１日の投与回数は、特に限定されないが、通常１〜３回、好ましくは１回である。
【００１２】
葉酸の投与量は、対象の年齢、性別、体重、および症状、並びに投与方法、投与時期、投与間隔、剤型等によって相違し、特に限定されないが、通常、成人１日あたり0.4〜40mg、好ましくは5〜20mgの範囲である。１日の投与回数は、特に限定されないが、通常１〜３回、好ましくは１回である。
【００１３】
本発明において、アスピリンおよび葉酸は、それぞれ別の製剤に含まれていても、単一の製剤に含まれていてもよい。すなわち、本発明の医薬組成物は、葉酸と併用するためのアスピリンを含む医薬組成物、アスピリンと併用するための葉酸を含む医薬組成物、またはアスピリンと葉酸とを含む医薬組成物でありうる。本発明の医薬組成物は、キットとして提供することもでき、例えば本発明のキットは、アスピリンを含む医薬組成物と葉酸を含む医薬組成物とを含む。本発明の医薬組成物およびキットは、アスピリンと葉酸の併用における用法・用量等を記載した添付文書、包装容器、取扱説明書等とともに提供されうる。
【００１４】
本発明において、アスピリンと葉酸は、同時に投与しても、別々に投与してもよい。本発明において「同時に投与する」とは、アスピリンと葉酸を同一の投与スケジュールで投与することを意味し、アスピリンと葉酸は単一の製剤に含まれていても、別の製剤に含まれていてもよい。「別々に投与する」とは、アスピリンと葉酸を異なる投与スケジュールで投与することを意味し、一方を投与した後、一定の間隔をおいて他方を投与するが、いずれを先に投与してもよく、その間隔も任意である。アスピリンと葉酸の投与回数は、同じであっても異なっていてもよく、例えば、一方を１日１回投与し、他方を１日２回以上投与してもよい。
【００１５】
本発明の医薬組成物およびキットは、動脈硬化を発症している、または発症する恐れのある対象に投与される。対象には、糖尿病、高血圧症、脂質異常症、メタボリックシンドロームの患者が含まれる。好ましくは、対象は、２型糖尿病患者である。
【００１６】
本発明の医薬組成物は、一般的な経口もしくは非経口的な方法（静脈内、筋肉内、皮下、経皮、経鼻、その他経粘膜、経腸など）により投与することができる。本発明の医薬組成物の剤形は、特に限定されず、例えば、錠剤、顆粒剤、カプセル剤、散剤、溶液、懸濁液、乳液、注射剤、点滴剤等とすることができる。本発明の医薬組成物は、アスピリンおよび／または葉酸に加えて、賦形剤、安定剤、保存剤、緩衝剤、矯味剤、懸濁化剤、乳化剤、着香剤、溶解補助剤、着色剤、粘ちょう剤などの適切な添加剤を含むことができる。本発明の医薬組成物が注射剤または点滴剤である場合、注射用蒸留水、生理的食塩水、ブドウ糖水溶液などを含みうる。
【００１７】
アスピリンは、バイアスピリン（登録商標）錠（バイエル株式会社）、バファリン配合錠Ａ８１（エーザイ株式会社）など、葉酸は、フォリアミン（登録商標）錠（日本製薬株式会社）、フォリアミン（登録商標）散（日本製薬株式会社）などとして市販されている。
【００１８】
動脈硬化の治療または予防効果は、例えば、血流依存性血管拡張反応検査（FMD (Flow-mediated dilatation)検査）により調べることができる。
【００１９】
ある態様において、本発明は、動脈硬化を治療または予防するための方法であって、アスピリンおよび葉酸を患者に投与することを含む方法を提供する。
【００２０】
別の態様において、本発明は、葉酸と併用される動脈硬化の治療または予防用の医薬の製造のための、アスピリンの使用；アスピリンと併用される動脈硬化の治療または予防用の医薬の製造のための、葉酸の使用；および、アスピリンおよび葉酸を含む動脈硬化の治療または予防用の医薬の製造のための、アスピリンまたは葉酸の使用、を提供する。
【００２１】
以下、本発明を実施例によりさらに説明するが、本発明は如何なる意味においても本実施例に限定されない。
【実施例１】
【００２２】
1. 方法
1.1. 対象
2010年12月から2012年12月の間、血糖管理のため久留米大学病院に入院中の2型糖尿病患者32人が試験に参加した。9人の患者がスルホニル尿素、5人がメトホルミン、4人がピオグリタゾン、9人がDPP-4阻害剤、3人がインスリンによる治療を受けていた（表１）。除外基準には、HbA1c>11.0%、抗血小板薬の使用、妊娠および授乳、慢性炎症性疾患、近時の急性感染、血清クレアチニンレベル>88.4 μmol/L、肝機能障害 (AST>40 IU/L またはALT>40 IU/L)、既知の悪性疾患、喫煙、アスピリンアレルギー、脳血管障害歴、増殖性糖尿病網膜症、尿中アルブミンレベル>300 mg/日として規定される顕性アルブミン尿（macro-albuminuria）、および有痛性糖尿病性多発神経障害が含まれた。
試験期間中、適切な食事管理を継続した。対象には、激しい運動を避けるよう指示した。全ての対象から書面による同意書を得た。試験計画は、久留米大学医学部の倫理委員会の承認を受け、ヘルシンキ宣言の指針に沿って実施した。
【表１】
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【００２３】
1.2. 試験計画および薬剤
血糖、血圧、脂質などの代謝パラメーターの安定化期間（7±2日(平均±S.D.)）の後、対象を無作為に群Aおよび群Bに分けた（図１）。群Aの対象には、第一週に葉酸(フォリアミン（登録商標）錠、日本製薬株式会社) 20 mg＋アスピリン(バイアスピリン（登録商標）錠、バイエル株式会社) 100 mgを1日1回投与し、次いで第二週にアスピリンのみを投与した。群Bの対象には、第一週にアスピリンを投与し、第二週に併用療法を施した。一晩絶食後、血流依存性血管拡張反応（Flow-mediated dilatation, FMD）、体重、および血圧を測定し、血液を基準時および各週の最後に採取した。【００２４】
1.3. 内皮機能の評価
内皮機能の代理マーカーである上腕動脈FMDを、国際ガイドライン[21]にしたがい、朝食前に静かな部屋で仰臥位にて、エッジトラッキングシステムおよびパルスドップラー流速計を備えた血管超音波システム (株式会社ユネクス) にて測定した[20]。説明すると、安静時の上腕動脈の直径を測定した後、カフを200 mmHgまで膨張させ5分間維持した。その後、カフを迅速に収縮させ、動脈の直径を継続的にモニターした。FMDレベルは、以下の式にしたがい計算した: FMD (%) = (最大直径 - 安静時直径) × 100/安静時直径。【００２５】
1.4. 採血および測定
血液試料は、肘正中静脈から得た。グルコース、HbA1c、トリグリセリド (TG)、低密度リポタンパクコレステロール (LDL-C)、および高密度リポタンパクコレステロール (HDL-C) は、標準的プロトコールにしたがい測定した。葉酸およびインターロイキン-6 (IL-6) のレベルは、化学発光酵素免疫測定法により測定した。ホモシステイン（Hcy） レベルは、HPLC (株式会社日立ハイテクノロジーズ)により測定した。【００２６】
1.5. 統計学的解析
統計学的解析は、JMPソフトウェア バージョン10 (SAS Institute Inc, Cary, NC, USA)を用いて実施した。各群における基準時のパラメーターの比較では、Student's t-testを連続型変数について使用し、Chi-square testをカテゴリー変数について使用した。各期間のデータの比較では、One-way, repeated-measures analysis of variance (ANOVA) with post-hoc Bonferroni testを使用した。いずれのデータも、平均±S.D.で表し、0.05未満のP値を統計学的に有意と判断した。【００２７】
2. 結果
2.1. アスピリンおよび葉酸の内皮機能に対する効果
群Aでは、1週間のアスピリンの葉酸の併用療法の結果、FMDレベルが3.8±2.0%から7.2±3.1%へ有意に増加し、続いてアスピリン単独療法により5.9±2.8%まで低下した（図２）。群Bでは、1週間のアスピリン単独療法の結果、FMDレベルが5.1±2.2%から6.8±2.9%へ有意に増加し、さらに併用療法後には9.0±3.6%まで増加した。【００２８】
2.2. 葉酸、ホモシステイン、高感度CRP、およびIL-6の血清濃度の変化
群Aの患者は、併用療法後に血清葉酸濃度が顕著に増加し、続いてアスピリン単独療法により減少した。予想どおり、群Bの患者の血清葉酸濃度は、アスピリン単独療法によっては変化しなかったが、併用療法の結果増加した（表２）。
一方、群Aの血清Hcy濃度は、アスピリン+葉酸の投与の結果有意に減少し、葉酸の中止後1週間抑制されたままであった。しかしながら、群Bの患者では、血清Hcy濃度はアスピリン単独療法により減少せず、葉酸の追加により有意に抑制された（表２）。
血清高感度CRP (hsCRP) のレベルは、両群において、アスピリン単独療法後も併用療法後も有意に減少した。血清IL-6レベルは、両群において、アスピリン単独療法後も併用療法後も減少する傾向にあったが、この減少は、群Bの併用療法後の値を除き、統計学的に有意ではなかった（表２）。【００２９】
2.3. 他の代謝パラメーターの変化
絶食時血漿グルコース、LDL-C、hsCRP、およびBMIのレベルは、両群において、基準時よりも各期間の終わりの方が有意に低かった。収縮期血圧は、アスピリン単独療法後に有意に減少した。いずれの時点でも、群Aおよび群Bの間で、BMI、血圧、絶食時血漿グルコース、LDL-C、HDL-C、またはTGに有意な差はみられなかった（表２）。【００３０】
【表２】
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【実施例２】
【００３１】
1. 方法
実施例１と同様にして、実施例１で解析した患者に加えて、葉酸単独療法を受けた患者（群C）について解析した。解析対象は、血糖管理のため久留米大学病院に入院中の2型糖尿病患者で、群A〜群Cで全46人であり、15人の患者がスルホニル尿素、11人がメトホルミン、4人がピオグリタゾン、14人がDPP-4阻害剤、4人がインスリンによる治療を受けていた（表３）。群Cの対象には、葉酸20 mgを7日間（1週間）投与した（図１）。
【表３】
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【００３２】
2. 結果
2.1. アスピリンおよび葉酸の内皮機能に対する効果
群Cにおいて、FMDレベルは5.2±3.3%から6.9±3.8%まで増加した。第一週のFMDの増加は、統計学的に有意な差ではなかったものの、アスピリン（群B）または葉酸（群C）を投与された患者と比較して、アスピリンと葉酸の両方を投与された患者（群A）の方が高かった（図２）。アスピリンと葉酸の併用療法は、アスピリンまたは葉酸の単独療法と比較して、内皮機能の改善に有効であることが示された。【００３３】
2.2. 葉酸、ホモシステイン、高感度CRP、およびIL-6の血清濃度の変化
群Cの臨床パラメーターの変化を、群Aおよび群Bの結果とともに表４に示す。群Cの患者において、葉酸単独療法後、血清葉酸濃度の上昇が見られた。血清Hcy濃度は、群Cにおいても有意に減少し、群A〜群Cの全てで葉酸の投与後に有意な減少がみられた。hsCRPのレベルは、アスピリン単独療法後または併用療法後に有意に減少したが、群Cの葉酸単独療法では減少しなかった。
【表４】
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【００３４】
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【図１】
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【図２】
2015012338.tif 000007
【国際調査報告】
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