(57)【要約】  口腔内の細胞傷害抑制効果と口腔内細菌、特に歯周病原因菌であるポルフィロモナス  ジンジバリスに対する殺菌効果に優れ、歯周病の予防、治療に有効な、（Ａ）アスコルビン酸エステル又はその塩と（Ｂ）メチレンブルーとを含有してなることを特徴とする口腔用組成物を提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
（Ａ）アスコルビン酸エステル又はその塩と、（Ｂ）メチレンブルーとを含有してなることを特徴とする口腔用組成物。
【請求項２】
（Ａ）成分が、アスコルビン酸リン酸エステル、アスコルビン酸硫酸エステル及びその塩から選ばれる１種以上である請求項１記載の口腔用組成物。
【請求項３】
（Ａ）成分が、アスコルビン酸リン酸エステルマグネシウム及び／又はアスコルビン酸リン酸エステルナトリウムである請求項２記載の口腔用組成物。
【請求項４】
（Ａ）成分を０．１〜２質量％、（Ｂ）成分を０．００１〜０．２質量％含有する請求項１、２又は３記載の口腔用組成物。
【請求項５】
（Ｂ）／（Ａ）が、質量比として１／２，０００〜１／２である請求項１乃至４のいずれか１項記載の口腔用組成物。
【請求項６】
歯磨剤又は洗口剤である請求項１乃至５のいずれか１項記載の口腔用組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、細胞傷害抑制効果と口腔内細菌、特に歯周病原因菌であるポルフィロモナス  ジンジバリスに対する殺菌効果とが優れ、歯周病の予防、治療に有効な、アスコルビン酸エステル又はその塩含有の口腔用組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
歯周病は、ポルフィロモナス  ジンジバリス（Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ）等の嫌気性グラム陰性菌を主とした細菌による感染症であり、菌が産生する外毒素（ロイコトキシン等）や内毒素（リポ多糖等）によって炎症が誘発され、組織が損傷する。一方、生体では、好中球やリンパ球等が歯周ポケットや歯肉組織へ浸潤し、細菌を貪食するとともに、特異的な抗体を作ってこれら異物を排除する免疫応答が起こるものであるが、近年、貪食時に過剰に発生した活性酸素が、生体組織を更に損傷することが指摘されている。例えば、歯肉を構成する線維芽細胞が活性酸素によって傷害を受けると、コラーゲン繊維の破壊や細胞増殖能低下を招くため、歯肉が退縮して歯周病が進行する。【０００３】
従って、口腔内細菌、特に歯周病原因菌を殺菌すると共に、上記のような口腔内細胞の傷害を抑制することが、歯周炎等の歯周病の予防、治療には有効であると考えられる。このため、口腔内細菌殺菌効果及び細胞傷害抑制効果を同時に満たす口腔用組成物を与える技術の開発が望まれる。【０００４】
アスコルビン酸リン酸エステル等のアスコルビン酸エステル又はその塩は、アスコルビン酸塩に比べて安定性が高く、生体内に産生された過剰な活性酸素を消去して生体組織を酸化ストレス傷害から保護すると共に、炎症を抑制する効果が報告されている。このようなアスコルビン酸誘導体含有の口腔用組成物は、酸化ストレスを抑制することで細胞傷害性を低減し歯周病予防効果を発揮すると考えられ、アスコルビン酸誘導体とアラビトールを併用することで酸化ストレス抑制効果が向上し、更に長時間にわたって効果が持続することが特許文献１（特開２０１２−１８０３３０号公報）に提案されている。
しかしながら、アスコルビン酸エステル又はその塩の細胞傷害抑制効果は未だ改善の余地があるものであり、また、アスコルビン酸エステル又はその塩自身に口腔内細菌の殺菌作用はない。【０００５】
一方、染料や染色液などとして一般的に使用され、色素の一種として知られているメチレンブルーは、近年、酸化還元作用により殺菌消毒作用を示すと考えられ注目されている。また、特許文献２（特許第５０４１６１７号公報）には、亜鉛イオンを与える化合物とメチレンブルーとを併用すると、口腔内細菌に対する殺菌作用を持つことが提案されている。【０００６】
しかし、メチレンブルーは、口腔用組成物の配合成分として一般的ではなくほとんど使用されることがなく、殺菌消毒作用についても未だ研究途上である。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】特開２０１２−１８０３３０号公報
【特許文献２】特許第５０４１６１７号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明は、上記事情に鑑みなされたもので、口腔内の細胞傷害抑制効果と口腔内細菌、特に歯周病原因菌に対する殺菌効果とが優れ、歯周病の予防、治療に有効な口腔用組成物を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明者らは、上記目的を達成するため鋭意検討を行った結果、（Ａ）アスコルビン酸エステル又はその塩と、（Ｂ）メチレンブルーとを併用すると、口腔内の細胞傷害抑制効果と、口腔内細菌、特に歯周病原因菌であるポルフィロモナス  ジンジバリス（以下、Ｐ．ｇ．菌と略記する。）に対する殺菌効果とが、格段に向上することを見出した。【００１０】
即ち、本発明では、（Ａ）アスコルビン酸エステル又はその塩、特にアスコルビン酸リン酸エステル、アスコルビン酸硫酸エステル及びその塩から選ばれる１種以上と、（Ｂ）メチレンブルーとを併用すると、意外にも（Ａ）、（Ｂ）成分が特異的かつ相乗的に作用し、アスコルビン酸エステル又はその塩に由来する酸化ストレス抑制効果が高まり口腔内の細胞傷害抑制効果が増強すると共に、メチレンブルー由来と推測される口腔内細菌、特に上記歯周病原因菌殺菌効果が増強して発現する。これにより、上記併用系を口腔用組成物に配合することによって、優れた細胞傷害抑制効果及び口腔内細菌殺菌効果を同時に付与し、歯周病の予防、治療に有効な製剤を得ることができる。【００１１】
この場合、後述の比較例に示すように、アスコルビン酸エステル又はその塩は、細胞傷害抑制効果が低く改善の余地があり、口腔内細菌殺菌効果が認められず、また、メチレンブルーは、特に歯周病原因菌殺菌効果が低く、細胞傷害抑制効果が認められないにもかかわらず、実施例に示すように、本発明においては、（Ａ）及び（Ｂ）成分の併用系による特異的作用によって、（Ａ）又は（Ｂ）成分の単独配合系の相加効果を超える格段に高い口腔内細菌殺菌効果及び細胞傷害抑制効果を付与でき、格別顕著な作用効果を奏する。
なお、メチレンブルーは、酸化還元反応を示すことから酸化還元電位を高める作用を有することは知られており、殺菌消毒作用を示すと考えられているが、メチレンブルーが、アスコルビン酸エステル又はその塩に由来する細胞傷害抑制効果の向上に寄与し、口腔用組成物において、上記格別な作用効果を与えることは、本発明者らの新知見である。【００１２】
従って、本発明は、下記の口腔用組成物を提供する。
〔１〕
（Ａ）アスコルビン酸エステル又はその塩と、（Ｂ）メチレンブルーとを含有してなることを特徴とする口腔用組成物。
〔２〕
（Ａ）成分が、アスコルビン酸リン酸エステル、アスコルビン酸硫酸エステル及びその塩から選ばれる１種以上である〔１〕に記載の口腔用組成物。
〔３〕
（Ａ）成分が、アスコルビン酸リン酸エステルマグネシウム及び／又はアスコルビン酸リン酸エステルナトリウムである〔２〕に記載の口腔用組成物。
〔４〕
（Ａ）成分を０．１〜２質量％、（Ｂ）成分を０．００１〜０．２質量％含有する〔１〕、〔２〕又は〔３〕に記載の口腔用組成物。
〔５〕
（Ｂ）／（Ａ）が、質量比として１／２，０００〜１／２である請求項〔１〕〜〔４〕のいずれかに記載の口腔用組成物。
〔６〕
歯磨剤又は洗口剤である〔１〕〜〔５〕のいずれかに記載の口腔用組成物。
【発明の効果】
【００１３】
本発明によれば、口腔内の細胞傷害抑制効果と口腔内細菌、特に歯周病原因菌であるＰ．ｇ．菌に対する殺菌効果とが優れ、歯周病の予防、治療に有効な、アスコルビン酸エステル又はその塩含有の口腔用組成物を提供できる。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
以下、本発明につき更に詳述する。本発明の口腔用組成物は、（Ａ）アスコルビン酸エステル又はその塩と、（Ｂ）メチレンブルーとを含有することを特徴とする。
【００１５】
（Ａ）成分のアスコルビン酸エステルは、アスコルビン酸の２，３，５，６位のいずれかの水酸基の１つ又は２つ以上がリン酸、ポリリン酸、硫酸、脂肪酸、又はその他薬学上許容される化合物のエステルとなったものである。
アスコルビン酸エステル又はその塩としては、特にアスコルビン酸リン酸エステル又はその塩、アスコルビン酸硫酸エステル又はその塩が好ましい。アスコルビン酸リン酸エステル、アスコルビン酸硫酸エステルは、アスコルビン酸の２，３，５，６位のいずれかの水酸基の１つ又は２つ以上がリン酸、ポリリン酸等のリン酸化合物又は硫酸のエステルとなったものである。具体的には、アスコルビン酸−２−リン酸エステル、アスコルビン酸−３−リン酸エステル、アスコルビン酸−６−リン酸エステル、アスコルビン酸−２−ポリリン酸エステル、アスコルビン酸−２−硫酸エステルが挙げられる。その塩としては、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩等のアルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩が挙げられる。（Ａ）成分としては、これらから選ばれる１種又は２種以上を使用できるが、特に口腔用として用いるものであり、歯肉炎予防効果、とりわけ細胞傷害抑制効果の点から、アスコルビン酸リン酸エステルのマグネシウム塩、ナトリウム塩が好適に用いられる。
【００１６】
（Ａ）アスコルビン酸エステル又はその塩の配合量は、組成物全体の０．１〜２％（質量％、以下同様。）が好ましく、より好ましくは０．２〜１％である。配合量が多くなるにつれて細胞傷害抑制効果、口腔内細菌殺菌効果が向上し、０．１％以上配合することが細胞傷害抑制効果、口腔内細菌殺菌効果の向上には好適である。また、配合量が多すぎると、最早効果の向上が望めないだけでなく、異味が発現して使用感が低下する場合があり、２％以下であることが良好な使用感確保には好適である。
【００１７】
（Ｂ）メチレンブルーは、３，７−ビス（ジメチルアミノ）フェノチアジニウムクロリド（ＩＵＰＡＣ名）であり、（Ａ）成分と併用配合することで、（Ａ）成分由来の細胞傷害抑制効果を増強し、また、特に歯周病原因菌のＰ．ｇ．菌に対する高い殺菌作用を付与できる。なお、メチレンブルーは、市販品を使用できる。
【００１８】
（Ｂ）メチレンブルーの配合量は、組成物全体の０．００１〜０．２％が好ましく、より好ましくは０．００５〜０．２％である。配合量が多くなるにつれて細胞傷害抑制効果、口腔内細菌殺菌効果が向上し、０．００１％以上配合することが細胞傷害抑制効果、口腔内細菌殺菌効果の向上には好適である。また、配合量が多すぎると、最早効果向上が望めないだけでなく、異味が発現して使用感が低下する場合があり、０．２％以下であることが良好な使用感確保には好適である。
【００１９】
本発明においては、（Ａ）アスコルビン酸エステル又はその塩の量に対する（Ｂ）メチレンブルー量の割合（（Ｂ）／（Ａ））が質量比として１／２，０００以上、特に１／２，０００〜１／２であることが好ましく、より好ましくは１／５００〜１／２であり、さらに好ましくは１／２００〜１／２の範囲であり、このような割合でメチレンブルーを配合すると、本発明の効果がより向上する。（Ｂ）／（Ａ）が１／２，０００以上であると、細胞傷害抑制効果及び口腔内細菌殺菌効果が特に向上する。１／２以下であると、細胞傷害抑制効果が低下するのを防止できる。
【００２０】
本発明の口腔用組成物は、練歯磨、液体歯磨、液状歯磨、潤製歯磨等の歯磨剤、洗口剤などの様々な剤型に常法を採用して製造することが可能であるが、特に歯磨剤に好適である。この場合、組成物の目的、剤型等に応じて、上記成分以外にも適宜な公知成分を本発明の効果を妨げない範囲で配合できる。例えば練歯磨では、研磨剤、粘稠剤、粘結剤、界面活性剤、更に必要により香料、甘味料、着色剤、防腐剤、有効成分などが配合される。
【００２１】
研磨剤としては、シリカゲル、沈降シリカ、アルミノシリケート、ジルコノシリケート等のシリカ系研磨剤、第２リン酸カルシウム２水和物及び無水和物、第３リン酸カルシウム、第４リン酸カルシウム、ピロリン酸カルシウム、炭酸カルシウム、水酸化アルミニウム、アルミナ、炭酸マグネシウム、第３リン酸マグネシウム、ゼオライト、ハイドロキシアパタイト、合成樹脂系研磨剤などが挙げられる。研磨剤の配合量は、剤型により調整され、練歯磨では２〜４０％、特に１０〜３０％が好ましく、液体歯磨では０％である。
【００２２】
粘稠剤としては、ソルビット、キシリット、マルチット、ラクチット等の糖アルコール、グリセリン、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール等の多価アルコールが挙げられ、配合量は通常、５〜５０％、特に２０〜４５％が好ましい。
【００２３】
粘結剤としては、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース等のセルロース誘導体、キサンタンガム、アラビアガム等のガム類、カラゲナン、ポリビニルアルコール、ポリアクリル酸ナトリウムなどの有機粘結剤、ゲル化性シリカ、ゲル化性アルミニウムシリカ、ビーガム、ラポナイト等の無機粘結剤が挙げられる。配合量は、通常、練歯磨は０．１〜５％、液体歯磨や洗口剤では０〜５％である。
【００２４】
界面活性剤としては、アニオン性界面活性剤、ノニオン性界面活性剤、カチオン性界面活性剤、両性界面活性剤を配合できる。
アニオン性界面活性剤としては、ラウリル硫酸ナトリウム等のアルキル硫酸塩、Ｎ−ラウロイルサルコシンナトリウム、Ｎ−ミリストイルサルコシンナトリウム等のＮ−アシルサルコシン酸塩、Ｎ−パルミトイルグルタミン酸ナトリウム等のＮ−アシルグルタミン酸塩、Ｎ−メチル−Ｎ−アシルタウリンナトリウム、Ｎ−メチル−Ｎ−アシルアラニンナトリウム、α−オレフィンスルホン酸ナトリウムなどが挙げられる。
ノニオン性界面活性剤としては、ショ糖脂肪酸エステル、マルトース脂肪酸エステル等の糖脂肪酸エステル、マルチトール脂肪酸エステル、ラクチトール脂肪酸エステル等の糖アルコール脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル、モノラウリン酸ヘキサグリセリル、モノミリスチン酸ヘキサグリセリル、モノラウリン酸デカグリセリル、モノミリスチン酸デカグリセリル等のポリグリセリン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート、ポリオキシエチレンソルビタンモノステアレート等のポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油等のポリオキシエチレン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンラウリルエーテル等のポリオキシエチレン高級アルコールエーテル、ラウリン酸ジエタノールアミド等の脂肪酸アルカノールアミド、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレン共重合体、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレン脂肪酸エステルなどが挙げられる。
カチオン性界面活性剤としては、アルキルアンモニウム、アルキルベンジルアンモニウム塩など、両性界面活性剤としては、アルキルベタイン、脂肪酸アミドプロピルベタイン、アルキルイミダゾリニウムベタイン等のベタイン系などが挙げられる。
界面活性剤の配合量は、組成物全体の０．００１〜１０％、特に０．１〜５％が好ましい。
【００２５】
香料としては、ペパーミント油、スペアミント油、アニス油、ユーカリ油、ウィンターグリーン油、カシア油、クローブ油、タイム油、セージ油、レモン油、オレンジ油、ハッカ油、カルダモン油、コリアンダー油、マンダリン油、ライム油、ラベンダー油、ローズマリー油、ローレル油、カモミル油、キャラウェイ油、マジョラム油、ベイ油、レモングラス油、オリガナム油、パインニードル油、ネロリ油、ローズ油、ジャスミン油、グレープフルーツ油、スウィーティー油、柚油、イリスコンクリート、アブソリュートペパーミント、アブソリュートローズ、オレンジフラワー等の天然香料、及び、これら天然香料の加工処理（前溜部カット、後溜部カット、分留、液液抽出、エッセンス化、粉末香料化等）した香料、及び、メントール、カルボン、アネトール、シネオール、サリチル酸メチル、シンナミックアルデヒド、オイゲノール、３−ｌ−メントキシプロパン−１，２−ジオール、チモール、リナロール、リナリールアセテート、リモネン、メントン、メンチルアセテート、Ｎ−置換−パラメンタン−３−カルボキサミド、ピネン、オクチルアルデヒド、シトラール、プレゴン、カルビールアセテート、アニスアルデヒド、エチルアセテート、エチルブチレート、アリルシクロヘキサンプロピオネート、メチルアンスラニレート、エチルメチルフェニルグリシデート、バニリン、ウンデカラクトン、ヘキサナール、ブタノール、イソアミルアルコール、ヘキセノール、ジメチルサルファイド、シクロテン、フルフラール、トリメチルピラジン、エチルラクテート、エチルチオアセテート等の単品香料、更に、ストロベリーフレーバー、アップルフレーバー、バナナフレーバー、パイナップルフレーバー、グレープフレーバー、マンゴーフレーバー、バターフレーバー、ミルクフレーバー、フルーツミックスフレーバー、トロピカルフルーツフレーバー等の調合香料等、口腔用組成物に用いられる公知の香料素材を組み合わせて使用することができる。
また、配合量も特に限定されないが、上記の香料素材は、製剤組成中に０．０００００１〜１％使用するのが好ましい。また、上記香料素材を使用した賦香用香料としては、製剤組成中に０．１〜２％使用するのが好ましい。
【００２６】
甘味料としては、サッカリンナトリウム、ステビオサイド、パラメトキシシンナミックアルデヒド、ペリラルチン等が挙げられる。着色剤としては、青色１号、黄色４号、二酸化チタン等が挙げられる。
防腐剤としては、パラオキシ安息香酸エステル、安息香酸ナトリウム等の安息香酸又はその塩などが挙げられる。
【００２７】
有効成分としては、アスコルビン酸エステル及びその塩並びにメチレンブルー以外のもの、例えばイソプロピルメチルフェノール等の非イオン性殺菌剤、塩化セチルピリジニウム、塩酸クロルヘキシジン、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム等のカチオン性殺菌剤、トラネキサム酸、イプシロンアミノカプロン酸、アラントイン、グリチルレチン酸、グリチルリチン酸等の抗炎症剤、デキストラナーゼ、ムタナーゼ、アミラーゼ、プロテアーゼ等の酵素、フッ化ナトリウム、モノフルオロリン酸ナトリウム等のフッ化物、正リン酸のカリウム塩、ナトリウム塩等の水溶性リン酸化合物、グルコン酸銅、銅クロロフィリンナトリウム等の銅化合物、塩化ナトリウム、硝酸カリウム、乳酸アルミニウム、塩化亜鉛、クエン酸亜鉛、塩化ストロンチウムなどの無機塩類、酢酸トコフェロール等のビタミン類、ゼオライト、アズレン、ジヒドロコレステロール、クロロフィル、トウキ軟エキス、タイム、オウゴン、チョウジ、ハマメリス等の植物抽出物、歯石防止剤、歯垢防止剤などが挙げられる。これら有効成分は、本発明の効果を妨げない範囲で有効量配合できる。
【実施例】
【００２８】
以下、実施例及び比較例、処方例を示し、本発明を具体的に説明するが、本発明は下記の実施例に制限されるものではない。なお、下記の例において％は特に断らない限りいずれも質量％を示す。【００２９】
［実施例、比較例］
表１〜３に示す組成の試料溶液を常法により調製し、下記方法で細胞傷害抑制効果、口腔内細菌殺菌効果を評価した。結果を表に併記した。【００３０】
〈実験例１〉  細胞傷害抑制効果試験
市販の歯肉線維芽細胞Ｇｉｎ−１（ＤＳファーマバイオメディカル社製）を１０％牛胎児血清（ＦＢＳ）含有Ｄｕｌｌｂｅｃｃｏ’ｓ  Ｍｏｄｉｆｉｅｄ  Ｅａｇｌｅ  Ｍｅｄｉｕｍ（Ｄ−ＭＥＭ）中で、３７℃、５％ＣＯ2の条件下で前培養した。５×１０4ｃｅｌｌｓ／ｍＬに調製したＧｉｎ−１を４８ウェルプレートに４００μＬ播種し、さらに２４時間培養した。培養液を除去後、表に示した試料溶液をそれぞれ４００μＬ添加（１０％ＦＢＳ含有Ｄ−ＭＥＭで２０倍希釈）して４８時間、薬剤処置した。
処置終了後、試料溶液を除去し、１ｍＭの過酸化水素を含む溶液（１０％ＦＢＳ含有Ｄ−ＭＥＭ）を４００μＬ添加し、６０分間処置した。溶液を除去後、細胞活性試薬（Ｃａｌｃｅｉｎ  ＡＭ；インビトロジェン社製）を２００μＬ添加し、３７℃、５％ＣＯ2条件下で３０分間インキュベートした。その後、プレートリーダー（Ｆｌｕｏｒｏｓｋａｎ  Ａｓｃｅｎｔ；Ｌａｂｓｙｓｔｅｍｓ社製）を用いて、Ｅｘ／Ｅｍ＝４８５ｎｍ／５３８ｎｍの条件下で蛍光強度を測定した。
下記計算式（１）から算出した結果を細胞傷害抑制率とした。細胞傷害抑制試験はｎ＝１０で実施した。平均値を算出し、下記の評点基準で細胞傷害抑制効果を評価した。
細胞傷害抑制率（％）＝（試料溶液処置後に過酸化水素処置した場合の蛍光強度）／（試料溶液処置後に過酸化水素無処置の場合の蛍光強度）×１００  …（１）【００３１】
細胞傷害抑制効果の評点基準；
◎：細胞傷害抑制率が９０％以上
○：細胞傷害抑制率が７０％以上９０％未満
△：細胞傷害抑制率が５０％以上７０％未満
×：細胞傷害抑制率が５０％未満【００３２】
〈実験例２〉  口腔内細菌殺菌効果試験
ヘミン（和光純薬工業（株）製、５００μｇ／ｍＬ）、メナジオン（和光純薬工業（株）製、１００μｇ／ｍＬ）を添加したトッド・ヒューイット・ブロス（日本ベクトンディッキンソン社製）で前培養したポルフィロモナス  ジンジバリス  ＡＴＣＣ３３２７７株を、生理食塩水で１×１０9個／ｍＬになるように菌の浮遊液を調製した。当菌液と表に示した試料溶液を１：１（容量比）で混合し、３分間静置した。その後、生理食塩水で１０倍ずつ４段階希釈を行い、スパイラルプレーターにて血液寒天平板に塗抹した。対照として薬剤の代わりに生理食塩水と菌液を１：１（容量比）で混合したものを用いた。
血液平板を３７℃、嫌気条件（９５ｖｏｌ％窒素、５ｖｏｌ％二酸化炭素）下で５日間培養し、形成したコロニー数を計測した。この口腔内細菌殺菌試験はｎ＝５で実施した。平均値を算出し、対照溶液のコロニー数に対する試料溶液のコロニー数を生菌率として求め、下記基準に基づき口腔内細菌殺菌効果を評価した。【００３３】
口腔内細菌殺菌効果の評価基準；
◎：対照と比較して生菌率が１０％未満
○：対照と比較して生菌率が１０％以上４０％未満
△：対照と比較して生菌率が４０％以上８０％未満
×：対照と比較して生菌率が８０％以上【００３４】
使用原料の詳細を下記に示す。
（Ａ）アスコルビン酸−２−リン酸エステルマグネシウム（和光純薬工業（
株）製）
アスコルビン酸−２−リン酸エステルナトリウム（和光純薬工業（株
）製）
アスコルビン酸−２−硫酸エステルナトリウム（和光純薬工業（株）
製）
（Ｂ）メチレンブルー（和光純薬工業（株）製）【００３５】
【表１】
2014125975.tif 000002
【００３６】
【表２】
2014125975.tif 000003
【００３７】
【表３】
2014125975.tif 000004
【００３８】
以下、処方例を示す。下記例はいずれも優れた細胞傷害抑制効果及び口腔内細菌殺菌効果を有していた。【００３９】
［処方例１］  練歯磨
（Ａ）アスコルビン酸−２−リン酸エステルマグネシウム    ０．２％
（Ｂ）メチレンブルー                                    ０．０１
無水ケイ酸                                            ２０．０
ラウリル硫酸ナトリウム                                  １．０
プロピレングリコール                                    ３．０
ソルビット（１００％品）                              ３０．０
カルボキシメチルセルロースナトリウム                    １．０
サッカリンナトリウム                                    ０．１
香料                                                    １．０
精製水                                                バランス    
計                                                  １００％【００４０】
［処方例２］  練歯磨
（Ａ）アスコルビン酸−２−リン酸エステルナトリウム      ０．５％
（Ｂ）メチレンブルー                                    ０．００５
無水ケイ酸                                            ２０．０
ラウリル硫酸ナトリウム                                  １．０
プロピレングリコール                                    ３．０
ソルビット（１００％品）                              ３０．０
カルボキシメチルセルロースナトリウム                    １．０
サッカリンナトリウム                                    ０．１
香料                                                    １．０
精製水                                                バランス    
計                                                  １００％【００４１】
［処方例３］  練歯磨
（Ａ）アスコルビン酸−２−硫酸エステルナトリウム        ０．７％
（Ｂ）メチレンブルー                                    ０．０５
無水ケイ酸                                            ２０．０
ラウリル硫酸ナトリウム                                  １．０
プロピレングリコール                                    ３．０
ソルビット（１００％品）                              ３０．０
カルボキシメチルセルロースナトリウム                    １．０
サッカリンナトリウム                                    ０．１
香料                                                    １．０
精製水                                                バランス    
計                                                  １００％【００４２】
［処方例４］  液体歯磨
（Ａ）アスコルビン酸−２−リン酸エステルマグネシウム    ０．３％
（Ｂ）メチレンブルー                                    ０．００１
キシリトール                                            ３．０
グリセリン（１００％品）                                ５．０
ポリオキシエチレン（６０）硬化ヒマシ油                  ０．５
クエン酸ナトリウム                                      ０．３
プロピレングリコール                                    ３．０
香料                                                    ０．２
エタノール                                              ８．０
精製水                                                バランス    
計                                                  １００％【００４３】
［処方例５］  液体歯磨
（Ａ）アスコルビン酸−２−リン酸エステルマグネシウム    ０．３％
（Ｂ）メチレンブルー                                    ０．００１
キシリトール                                            ３．０
グリセリン（１００％品）                                ２．０
ポリオキシエチレン（６０）硬化ヒマシ油                  ０．５
クエン酸ナトリウム                                      ０．３
安息香酸ナトリウム                                      ０．３
安息香酸メチル                                          ０．１
プロピレングリコール                                    ３．０
サッカリンナトリウム                                    ０．００２
ポリエチレングリコール（４００）                        ５．０
香料                                                    ０．２
精製水                                                バランス    
計                                                  １００％
【国際調査報告】
2014125975.tif 000005
2014125975.tif 000006
2014125975.tif 000007
2014125975.tif 000008