(57)【要約】  キノロン類に耐性を獲得した細菌に対して強い抗菌力を有する一般式(I)で表される化合物又はその塩、及び該化合物又はその塩を有効成分として含む感染症の予防及び/又は治療のための医薬、並びに該化合物又はその塩とキノロン類との組み合わせを含む感染症の予防及び/又は治療のための医薬。2014171527.tif 000054
2014171527.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式(I)： 
【化１】
2014171527.tif 000053
（式中、R1は置換基を有していてもよいC1-C6アルキル基、置換基を有していてもよいC1-C6アルケニル基、又は置換基を有していてもよいアリール基を示すが、R1はR6と互いに結合して1個又は2個以上の環構成ヘテロ原子を含む部分不飽和又は飽和のヘテロ環(該環は置換基を有していてもよい)を形成してもよく；R2は水素原子、カルボキシル基、又はアミノ基を示し；R3は水酸基又は置換基を有していてもよいC1-C6アルキル基を示し；R4は水素原子、ハロゲン原子、置換基を有していてもよいC1-C6アルキル基、又は置換基を有していてもよいC1-C6アルコキシ基を示すが、R4はR5と互いに結合して1個又は2個以上の環構成ヘテロ原子を含む部分不飽和又は飽和のヘテロ環(該環は置換基を有していてもよい)を形成してもよく；R5は置換基を有していてもよいC1-C6アルキル基、置換基を有していてもよいC1-C6アルコキシ基、置換基を有していてもよいアリール基、置換基を有していてもよいヘテロアリール基、又は置換基を有していてもよい部分飽和若しくは飽和のヘテロ環基を示すが、R5はR6と互いに結合して1個又は2個以上の環構成ヘテロ原子を含む部分不飽和又は飽和のヘテロ環(該環は置換基を有していてもよい)を形成してもよく；R6は水素原子、置換基を有していてもよいC1-C6アルキル基、置換基を有していてもよいC1-C6アルコキシ基、又はハロゲン原子を示す）
で表される化合物又はその塩。
【請求項２】
R1が置換基を有していてもよいC1-C6アルキル基を示し、ただしR1はR6と互いに結合して1個又は2個以上の環構成ヘテロ原子を含む飽和の5ないし7員環(該環は置換基を有していてもよい)を形成してもよく；R2が水素原子、カルボキシル基、又はアミノ基であり；R3が水酸基、C1-C6アルキル基、置換基を有していてもよいヒドロキシC1-C6アルキル基、又は置換基を有していてもよいアミノC1-C6アルキル基を示し；R4が水素原子、ハロゲン原子、又は置換基を有していてもよいC1-C6アルキル基を示し；R5が置換基を有していてもよいアリール基又は置換基を有していてもよい部分飽和若しくは飽和のヘテロ環基を示し、ただしR5はR6と互いに結合して1個又は2個以上の環構成ヘテロ原子を含む部分不飽和又は飽和の5ないし7員環(該環は置換基を有していてもよい)を形成してもよく；R6が水素原子、置換基を有していてもよいC1-C6アルキル基、置換基を有していてもよいC1-C6アルコキシ基、又はハロゲン原子を示す請求項１に記載の化合物又はその塩。
【請求項３】
R1が-CH3、-CH2CH3、若しくはシクロプロピル基のいずれかであるか、又はR6と結合して2個の環構成ヘテロ原子を含む飽和の5員又は6員のヘテロ環(該環は１個のC1-C6アルキル基を置換基として有していてもよい)を形成してもよく；R2が水素原子、カルボキシル基、又はアミノ基であり；R3が水酸基、-CH3、-CH2CH3、-C水H、-C水CH3、-CH2NH2、-C(O)NH2、-C水COCH3、-C水COCH2CH3、-C水COCH2COOH3、又は-C水COCH2CH2COOH、-C水CH3、又は-C水H窒素ガスのいずれかであり；R4が水素原子、フッ素原子、塩素原子、又は-CH3のいずれかであり、R5がフェニル基(該フェニル基は水酸基、アミノ基、C1-C6アルキル基、及びアミノメチル基からなる群から選ばれる置換基を1個又は2個有していてもよい)、ピリジル基(該ピリジル基は水酸基、アミノ基、C1-C6アルキル基、及びアミノメチル基からなる群から選ばれる置換基を1個又は2個有していてもよい)、ピペラジニル基(該ピペラジニル基は水酸基、アミノ基、C1-C6アルキル基、及びアミノメチル基からなる群から選ばれる置換基を1個又は2個有していてもよい)、ピペリジニル基(該ピペリジニル基は水酸基、アミノ基、C1-C6アルキル基、及びアミノメチル基からなる群から選ばれる置換基を1個又は2個有していてもよい)、又はイソインドリニル基(該イソインドリニル基は水酸基、アミノ基、C1-C6アルキル基、及びアミノメチル基からなる群から選ばれる置換基を1個又は2個有していてもよく、部分飽和であってもよい)のいずれかであるか、又はR6と結合して2個の環構成ヘテロ原子を含む飽和の5員又は6員のヘテロ環(該環は置換基を有していてもよいC1-C6アルキル基を置換基として有していてもよい)を形成していてもよく；R6が水素原子、ハロゲン原子、C1-C6アルキル基(該アルキル基はフッ素原子で置換されていてもよい)、又はC1-C6アルコキシ基(該アルコキシ基はフッ素原子で置換されていてもよい)である請求項１に記載の化合物又はその塩。
【請求項４】
請求項１ないし３のいずれか１項に記載の化合物又はその塩を有効成分として含む感染症の予防及び/又は治療のための医薬。
【請求項５】
キノロン類耐性菌による感染症の予防及び/又は治療のための請求項４に記載の医薬。
【請求項６】
請求項１ないし３のいずれか１項に記載の化合物又はその塩とキノロン類との組合せを含む感染症の予防及び/又は治療のための医薬。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、キノロン類耐性菌に対して強い抗菌作用を有する新規化合物又はその塩、及び該化合物又はその塩を有効成分として含むキノロン類耐性菌感染症の予防及び/又は治療のための医薬、並びに該化合物又はその塩とキノロン類との組合せを含む感染症の予防及び/又は治療のための医薬に関する。
【背景技術】
【０００２】
キノロン類は、DNAジャイレースの活性を阻害することでDNA鎖切断後の再結合を阻害し、DNA複製不全を起こして細菌のDNA合成を阻害する合成抗菌薬であり、医薬品や動物用医薬品として広く用いられている。【０００３】
一方、黄色ブドウ球菌ではβ-ラクタム抗菌剤に耐性を獲得したメチシリン耐性黄色ブドウ球菌(methicillin-resistant Staphイルococcus aureus: MRSA)に代表される多剤耐性菌(multiply antibiotic-resistant bacteria)が増加し続けている。MRSAの存在しない病院はないといっても過言ではなく、臨床的に非常に大きな問題となっている。キノロン類は黄色ブドウ球菌の感染治療に広く用いられているが、MRSAの多くはキノロン類に対しても耐性で、その他の抗菌薬も無効であることが多い。【０００４】
MRSAに対して、唯一有効性を長く保ってきた抗菌剤としてバンコマイシン(vancomycin)があったが、本発明者は、1996年にバンコマイシンによる治療が無効なバンコマイシン中間耐性黄色ブドウ球菌(vancomycin-intermeジate S. aureus: VISA)を発見した(例えば、非特許文献1参照)。その後、現在に至るまでに世界各国から該VISAが発見されている。さらに、2003年には米国で該バンコマイシンに高度耐性の該MRSAであるバンコマイシン耐性黄色ブドウ球菌(vancomycin-resistant S. aureus：VRSA)が発見された。VRSAは現在では米国、イラン、及びインドの3カ国から合計9株が報告されている(非特許文献2参照)。VISA及びVRSAの殆どにおいても該キノロン類は無効である(例えば、非特許文献3参照)。【０００５】
従って、MRSA、VISA、及びVRSAを含むキノロン類耐性黄色ブドウ球菌、並びにその他のキノロン類耐性グラム陽性菌に対して優れた抗菌活性を示す新たな抗菌剤の開発が強く望まれているのが現状である。【０００６】
キノロン類に対する耐性獲得は、キノロン類の標的酵素となるDNAジャイレースにおいて特定の数か所の位置に変異が導入され、それによりキノロン類のDNAジャイレース阻害作用が低下することにより生じるものと理解されている。そのような変異が導入されたDNAジャイレースに対して有効な抗菌剤としてニボマイシン(Nybomycin)が知られている(非特許文献3参照)。ニボマイシンは、キノロン類に感受性の細菌に対する抗菌力は弱いが、キノロン類に耐性化した細菌(Ser84Leuなどの変異DNAジャイレースを有する耐性菌)に対してニボマイシンは顕著に強い抗菌力を発揮する(非特許文献3参照)。さらに、ニボマイシンに耐性を獲得した細菌では、DNAジャイレースに復帰変異が生じてキノロン類に対して感受性となることが報告されている(非特許文献3参照)。そのため、該ニボマイシンのような性質を有する抗菌剤を新たに提供することができれば、キノロン類との組合せにより、キノロン類に耐性化した細菌を該新たな抗菌剤により有効に排除しつつ、さらに該新たな抗菌剤に対して耐性を獲得した細菌をキノロン類により排除することができるので、新たな耐性菌の出現を阻止しつつ、極めて有効な感染症治療を達成できるのもと期待される。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】J. Antimicrob. Chemother., 40(1), pp.135-136, 1997,
【非特許文献２】Antimicrob. Agents Chemother., 53(11), pp.4580-4587, 2009
【非特許文献３】Int. J. Antimicrob. Agents, 39(6), pp.478-485, 2012,
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明の課題は、キノロン類に耐性を獲得した細菌に対して強い抗菌力を有する新規化合物又はその塩を提供することにある。
より具体的には、本発明は、DNAジャイレースに変異が導入されることによりキノロン類に対して耐性を獲得した細菌に対して強い抗菌力を有する新規化合物又はその塩、及び該化合物又はその塩を有効成分として含む感染症の予防及び/又は治療のための医薬を提供することを課題としている。【０００９】
また、キノロン類耐性菌のDNAジャイレースに対する阻害作用を有する阻害剤を提供することも本発明の課題であり、キノロン類と組み合わせることにより耐性菌の出現を阻止することができる医薬を提供することも本発明の課題である。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
上記の課題を解決するための手段として、以下の発明が提供される。
＜1＞  下記一般式(I)で表される化合物又はその塩。
【化１】
2014171527.tif 000003
式中、R1は置換基を有していてもよいC1-C6アルキル基、置換基を有していてもよいC1-C6アルケニル基、又は置換基を有していてもよいアリール基を示すが、R1はR6と互いに結合して1個又は2個以上の環構成ヘテロ原子を含む部分不飽和又は飽和のヘテロ環(該環は置換基を有していてもよい)を形成してもよく；R2は水素原子、カルボキシル基、又はアミノ基を示し；R3は水酸基又は置換基を有していてもよいC1-C6アルキル基を示し；R4は水素原子、ハロゲン原子、置換基を有していてもよいC1-C6アルキル基、又は置換基を有していてもよいC1-C6アルコキシ基を示すが、R4はR5と互いに結合して1個又は2個以上の環構成ヘテロ原子を含む部分不飽和又は飽和のヘテロ環(該環は置換基を有していてもよい)を形成してもよく；R5は置換基を有していてもよいC1-C6アルキル基、置換基を有していてもよいC1-C6アルコキシ基、置換基を有していてもよいアリール基、置換基を有していてもよいヘテロアリール基、又は置換基を有していてもよい部分飽和若しくは飽和のヘテロ環基を示すが、R5はR6と互いに結合して1個又は2個以上の環構成ヘテロ原子を含む部分不飽和又は飽和のヘテロ環(該環は置換基を有していてもよい)を形成してもよく；R6は水素原子、置換基を有していてもよいC1-C6アルキル基、置換基を有していてもよいC1-C6アルコキシ基、又はハロゲン原子を示す。【００１１】
＜2＞  一般式(I)において、R1が置換基を有していてもよいC1-C6アルキル基を示し、ただしR1はR6と互いに結合して1個又は2個以上の環構成ヘテロ原子を含む飽和の5ないし7員環(該環は置換基を有していてもよい)を形成してもよく；R2が水素原子、カルボキシル基、又はアミノ基であり；R3が水酸基、C1-C6アルキル基、置換基を有していてもよいヒドロキシC1-C6アルキル基、又は置換基を有していてもよいアミノC1-C6アルキル基を示し；R4が水素原子、ハロゲン原子、又は置換基を有していてもよいC1-C6アルキル基を示し；R5が置換基を有していてもよいアリール基又は置換基を有していてもよい部分飽和若しくは飽和のヘテロ環基を示し、ただしR5はR6と互いに結合して1個又は2個以上の環構成ヘテロ原子を含む部分不飽和又は飽和の5ないし7員環(該環は置換基を有していてもよい)を形成してもよく；R6が水素原子、置換基を有していてもよいC1-C6アルキル基、置換基を有していてもよいC1-C6アルコキシ基、又はハロゲン原子を示す＜1＞に記載の化合物又はその塩。【００１２】
＜3＞  一般式(I)において、R1が-CH3、-CH2CH3、若しくはシクロプロピル基のいずれかであるか、又はR6と結合して2個の環構成ヘテロ原子を含む飽和の5員又は6員のヘテロ環(該環は１個のC1-C6アルキル基を置換基として有していてもよい)を形成してもよく；R2が水素原子、カルボキシル基、又はアミノ基であり；R3が水酸基、-CH3、-CH2CH3、-C水H、-C水CH3、-CH2NH2、-C(O)NH2、-C水COCH3、-C水COCH2CH3、-C水COCH2COOH3、又は-C水COCH2CH2COOH、-C水CH3、又は-C水H窒素ガスのいずれかであり；R4が水素原子、フッ素原子、塩素原子、又は-CH3のいずれかであり、R5がフェニル基(該フェニル基は水酸基、アミノ基、C1-C6アルキル基、及びアミノメチル基からなる群から選ばれる置換基を1個又は2個有していてもよい)、ピリジル基(該ピリジル基は水酸基、アミノ基、C1-C6アルキル基、及びアミノメチル基からなる群から選ばれる置換基を1個又は2個有していてもよい)、ピペラジニル基(該ピペラジニル基は水酸基、アミノ基、C1-C6アルキル基、及びアミノメチル基からなる群から選ばれる置換基を1個又は2個有していてもよい)、ピペリジニル基(該ピペリジニル基は水酸基、アミノ基、C1-C6アルキル基、及びアミノメチル基からなる群から選ばれる置換基を1個又は2個有していてもよい)、又はイソインドリニル基(該イソインドリニル基は水酸基、アミノ基、C1-C6アルキル基、及びアミノメチル基からなる群から選ばれる置換基を1個又は2個有していてもよく、部分飽和であってもよい)のいずれかであるか、又はR6と結合して2個の環構成ヘテロ原子を含む飽和の5員又は6員のヘテロ環(該環は置換基を有していてもよいC1-C6アルキル基を置換基として有していてもよい)を形成していてもよく；R6が水素原子、ハロゲン原子、C1-C6アルキル基(該アルキル基はフッ素原子で置換されていてもよい)、又はC1-C6アルコキシ基(該アルコキシ基はフッ素原子で置換されていてもよい)である＜1＞に記載の化合物又はその塩。【００１３】
＜4＞  上記＜1＞から＜3＞のいずれかに記載の化合物又はその塩を有効成分として含有するキノロン類耐性菌のDNAジャイレースに対する阻害剤。
＜5＞  上記＜1＞から＜3＞のいずれかに記載の化合物又はその塩を有効成分として含有する感染症の予防及び/又は治療のための医薬。
＜6＞  キノロン類耐性菌による感染症の予防及び/又は治療のための＜5＞に記載の医薬。
＜7＞  ＜1＞から＜3＞のいずれかに記載の化合物又はその塩を含有する抗菌剤。
＜8＞  上記＜1＞から＜3＞のいずれかに記載の化合物又はその塩とキノロン類との組合せを含む医薬。
＜9＞  上記＜5＞から＜8＞のいずれかに記載の医薬の製造のための＜1＞から＜3＞のいずれかに記載の化合物又はその塩の使用。
＜10＞  ヒトを含む哺乳類動物の感染症の予防及び/又は治療方法であって、＜1＞から＜3＞のいずれかに記載の化合物又はその塩の予防及び/又は治療有効量を哺乳類動物に投与する工程を含むことを特徴とする方法。
＜11＞  感染症がキノロン類耐性菌による感染である＜10＞に記載の方法。
＜12＞  ヒトを含む哺乳類動物の感染症の予防及び/又は治療方法であって、同時又は別々に＜1＞から＜3＞のいずれかに記載の化合物又はその塩の予防及び/又は治療有効量とキノロン類の予防及び/又は治療有効量とを哺乳類動物に投与する工程を含む方法。
【発明の効果】
【００１４】
本発明によれば、キノロン類耐性菌に対して強い抗菌力を発揮できる化合物又はその塩、及び該化合物又はその塩を含有するキノロン類耐性菌のDNAジャイレースに対する阻害剤が提供される。
本発明の化合物又はその塩の作用はニボマイシン作用に類似しており、キノロン類に感受性の細菌に対する抗菌力は弱いが、キノロン類に耐性化した細菌(Ser84Leuなどの変異DNAジャイレースを有する耐性菌)に対して顕著に強い抗菌力を発揮する。さらに、本発明の化合物又はその塩に対して耐性を獲得した細菌では、DNAジャイレースに復帰変異が生じてキノロン類に対して感受性となることから、キノロン類との組合せにより、キノロン類に耐性化した細菌を本発明の抗菌剤により有効に排除しつつ、さらに本発明の抗菌剤に対して耐性を獲得した細菌をキノロン類により排除することができるので、新たな耐性菌の出現を阻止しつつ、極めて有効な感染症の予防及び/又は治療を達成することができる。
従って、本発明の化合物又はその塩とキノロン類との組合せを含む本発明の医薬は、キノロン類感受性菌又はキノロン類耐性菌のいずれか、又は両方による感染症の予防及び/又は治療に有用であり、キノロン類耐性菌の出現を阻止しつつ、高い予防及び/又は治療効果を達成することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１５】
【図１】化合物J-131CPの非存在下又は存在下におけるGyrA(wt)及びGyrB(wt)によるDNA切断アッセイの結果を示す図である。「S」は、超螺旋構造を有する基質プラスミドDNAを示し、「L」は、該基質プラスミドDNAがDNAジャイレースによって切断され直鎖状になった2本鎖DNAを示し、「N」は、DNAジャイレースによって2本鎖の基質プラスミドDNAのうちの一方の鎖が切断された2本鎖DNAを示す。対照として、レボフロキサシン(LVX)を用いている。
【図２】化合物J-131CPの非存在下又は存在下におけるGyrA(S84L)及びGyrB(wt)によるDNA切断アッセイの結果を示す図である。「S」、「L」、及び「N」は図1の定義と同義である。対照としてレボフロキサシン(LVX)を用いた。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
本明細書において、「アルキル基」及び「アルキル部分を含む置換基(アルコキシ基など)」のアルキル部分は、直鎖状、分枝鎖状、環状、又はそれらの組合せのいずれであってもよい。C1-C6アルキル基としては、メチル基、エチル基、n-プロピル基、イソプロピル基、n-ブチル基、イソブチル基、sec-ブチル基、tert-ブチル基、n-ペンチル基、イソペンチル基、2-メチルブチル基、1-メチルブチル基、ネオペンチル基、1,2-ジメチルプロピル基、1-エチルプロピル基、n-ヘキシル基、4-メチルペンチル基、3-メチルペンチル基などのほか、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルのC3-C8のシクロアルキル基、あるいはシクロプロピルメチル基、シクロプロピルブチル基などが挙げられるが、これらに限定されることはない。
【００１７】
本明細書において、「アルケニル基」としては、1個又は2個以上の二重結合を含むアルキル基を用いることができる。例えば、ビニル基、プロパ-1-エン-1-イル基、アリル基、イソプロペニル基、ブタ-1-エン-1-イル基、ブタ-2-エン-1-イル基、ブタ-3-エン-1-イル基、2-メチルプロパ-2-エン-1-イル基、1-メチルプロパ-2-エン-1-イル基、ペンタ-1-エン-1-イル基、ペンタ-2-エン-1-イル基、ペンタ-3-エン-1-イル基、ペンタ-4-エン-1-イル基、3-メチルブタ-2-エン-1-イル基、3-メチルブタ-3-エン-1-イル基、ヘキサ-1-エン-1-イル基、ヘキサ-2-エン-1-イル基、ヘキサ-3-エン-1-イル基、ヘキサ-4-エン-1-イル基、ヘキサ-5-エン-1-イル基、2-シクロプロペン-1-イル基、2-シクロブテン-1-イル基、2-シクロペンテン-1-イル基、3-シクロペンテン-1-イル基、2-シクロヘキセン-1-イル基、3-シクロヘキセン-1-イル、1-シクロブテン-1-イル基、又は1-シクロペンテン-1-イル基などが挙げられるが、これらに限定されることはない。
【００１８】
本明細書において、「アリール基」としては、単環式又は縮合多環式芳香族炭化水素基が挙げられ、例えば、フェニル基、1-ナフチル基、2-ナフチル基、アントリル基、フェナントリル基、アセナフチレニル基などが挙げられる。
本明細書において、「ハロゲン原子」としては、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、又はヨウ素原子を用いることができる。
【００１９】
本明細書において、「ヘテロアリール基」は、単環性ヘテロアリール基又は縮合多環式ヘテロアリール基のいずれであってもよく、1個又は2個以上の環構成ヘテロ原子を含む芳香族基のいずれを用いてもよい。「ヘテロ原子」としては、酸素原子、硫黄原子、又は窒素原子などを用いることができる。
【００２０】
「単環式ヘテロアリール基」としては、例えば、2-フリル基、3-フリル基、2-チエニル基、3-チエニル基、1-ピロリル基、2-ピロリル基、3-ピロリル基、2-オキサゾリル基、4-オキサゾリル基、5-オキサゾリル基、3-イソオキサゾリル基、4-イソオキサゾリル基、5-イソオキサゾリル基、2-チアゾリル基、4-チアゾリル基、5-チアゾリル基、3-イソチアゾリル基、4-イソチアゾリル基、5-イソチアゾリル基、1-イミダゾリル基、2-イミダゾリル基、4-イミダゾリル基、5-イミダゾリル基、1-ピラゾリル基、3-ピラゾリル基、4-ピラゾリル基、5-ピラゾリル基、(1,2,3-オキサジアゾール)-4-イル基、(1,2,3-オキサジアゾール)-5-イル基、(1,2,4-オキサジアゾール)-3-イル基、(1,2,4-オキサジアゾール)-5-イル基、(1,2,5-オキサジアゾール)-3-イル基、(1,2,5-オキサジアゾール)-4-イル基、(1,3,4-オキサジアゾール)-2-イル基、(1,3,4-オキサジアゾール)-5-イル基、フラザニル基、(1,2,3-チアジアゾール)-4-イル基、(1,2,3-チアジアゾール)-5-イル基、(1,2,4-チアジアゾール)-3-イル基、(1,2,4-チアジアゾール)-5-イル基、(1,2,5-チアジアゾール)-3-イル基、(1,2,5-チアジアゾール)-4-イル基、(1,3,4-チアジアゾリル)-2-イル基、(1,3,4-チアジアゾリル)-5-イル基、(1H-1,2,3-トリアゾール)-1-イル基、(1H-1,2,3-トリアゾール)-4-イル基、(1H-1,2,3-トリアゾール)-5-イル基、(2H-1,2,3-トリアゾール)-2-イル基、(2H-1,2,3-トリアゾール)-4-イル基、(1H-1,2,4-トリアゾール)-1-イル基、(1H-1,2,4-トリアゾール)-3-イル基、(1H-1,2,4-トリアゾール)-5-イル基、(4H-1,2,4-トリアゾール)-3-イル基、(4H-1,2,4-トリアゾール)-4-イル基、(1H-テトラゾール)-1-イル基、(1H-テトラゾール)-5-イル基、(2H-テトラゾール)-2-イル基、(2H-テトラゾール)-5-イル基、2-ピリジル基、3-ピリジル基、4-ピリジル基、3-ピリダジニル基、4-ピリダジニル基、2-ピリミジニル基、4-ピリミジニル基、5-ピリミジニル基、2-ピラジニル基、(1,2,3-トリアジン)-4-イル基、(1,2,3-トリアジン)-5-イル基、(1,2,4-トリアジン)-3-イル基、(1,2,4-トリアジン)-5-イル基、(1,2,4-トリアジン)-6-イル基、(1,3,5-トリアジン)-2-イル基、1-アゼピニル基、1-アゼピニル基、2-アゼピニル基、3-アゼピニル基、4-アゼピニル基、(1,4-オキサゼピン)-2-イル基、(1,4-オキサゼピン)-3-イル基、(1,4-オキサゼピン)-5-イル基、(1,4-オキサゼピン)-6-イル基、(1,4-オキサゼピン)-7-イル基、(1,4-チアゼピン)-2-イル基、(1,4-チアゼピン)-3-イル基、(1,4-チアゼピン)-5-イル基、(1,4-チアゼピン)-6-イル基、(1,4-チアゼピン)-7-イル基などの5員ないし7員の単環式ヘテロアリール基が挙げられる。
【００２１】
「縮合多環式ヘテロアリール基」としては、例えば、2-ベンゾフラニル基、3-ベンゾフラニル基、4-ベンゾフラニル基、5-ベンゾフラニル基、6-ベンゾフラニル基、7-ベンゾフラニル基、1-イソベンゾフラニル基、4-イソベンゾフラニル基、5-イソベンゾフラニル基、2-ベンゾ[b]チエニル基、3-ベンゾ[b]チエニル基、4-ベンゾ[b]チエニル基、5-ベンゾ[b]チエニル基、6-ベンゾ[b]チエニル基、7-ベンゾ[b]チエニル基、1-ベンゾ[c]チエニル基、4-ベンゾ[c]チエニル基、5-ベンゾ[c]チエニル基、1-インドリル基、1-インドリル基、2-インドリル基、3-インドリル基、4-インドリル基、5-インドリル基、6-インドリル基、7-インドリル基、(2H-イソインドール)-1-イル基、(2H-イソインドール)-2-イル基、(2H-イソインドール)-4-イル基、(2H-イソインドール)-5-イル基、(1H-インダゾール)-1-イル基、(1H-インダゾール)-3-イル基、(1H-インダゾール)-4-イル基、(1H-インダゾール)-5-イル基、(1H-インダゾール)-6-イル基、(1H-インダゾール)-7-イル基、(2H-インダゾール)-1-イル基、(2H-インダゾール)-2-イル基、(2H-インダゾール)-4-イル基、(2H-インダゾール)-5-イル基、2-ベンゾオキサゾリル基、2-ベンゾオキサゾリル基、4-ベンゾオキサゾリル基、5-ベンゾオキサゾリル基、6-ベンゾオキサゾリル基、7-ベンゾオキサゾリル基、(1,2-ベンゾイソオキサゾール)-3-イル基、(1,2-ベンゾイソオキサゾール)-4-イル基、(1,2-ベンゾイソオキサゾール)-5-イル基、(1,2-ベンゾイソオキサゾール)-6-イル基、(1,2-ベンゾイソオキサゾール)-7-イル基、(2,1-ベンゾイソオキサゾール)-3-イル基、(2,1-ベンゾイソオキサゾール)-4-イル基、(2,1-ベンゾイソオキサゾール)-5-イル基、(2,1-ベンゾイソオキサゾール)-6-イル基、(2,1-ベンゾイソオキサゾール)-7-イル基、2-ベンゾチアゾリル基、4-ベンゾチアゾリル基、5-ベンゾチアゾリル基、6-ベンゾチアゾリル基、7-ベンゾチアゾリル基、(1,2-ベンゾイソチアゾール)-3-イル基、(1,2-ベンゾイソチアゾール)-4-イル基、(1,2-ベンゾイソチアゾール)-5-イル基、(1,2-ベンゾイソチアゾール)-6-イル基、(1,2-ベンゾイソチアゾール)-7-イル基、(2,1-ベンゾイソチアゾール)-3-イル基、(2,1-ベンゾイソチアゾール)-4-イル基、(2,1-ベンゾイソチアゾール)-5-イル基、(2,1-ベンゾイソチアゾール)-6-イル基、(2,1-ベンゾイソチアゾール)-7-イル基、(1,2,3-ベンゾオキサジアゾール)-4-イル基、(1,2,3-ベンゾオキサジアゾール)-5-イル基、(1,2,3-ベンゾオキサジアゾール)-6-イル基、(1,2,3-ベンゾオキサジアゾール)-7-イル基、(2,1,3-ベンゾオキサジアゾール)-4-イル基、(2,1,3-ベンゾオキサジアゾール)-5-イル基、(1,2,3-ベンゾチアジアゾール)-4-イル基、(1,2,3-ベンゾチアジアゾール)-5-イル基、(1,2,3-ベンゾチアジアゾール)-6-イル基、(1,2,3-ベンゾチアジアゾール)-7-イル基、(2,1,3-ベンゾチアジアゾール)-4-イル基、(2,1,3-ベンゾチアジアゾール)-5-イル基、(1H-ベンゾトリアゾール)-1-イル基、(1H-ベンゾトリアゾール)-4-イル基、(1H-ベンゾトリアゾール)-5-イル基、(1H-ベンゾトリアゾール)-6-イル基、(1H-ベンゾトリアゾール)-7-イル基、(2H-ベンゾトリアゾール)-2-イル基、(2H-ベンゾトリアゾール)-4-イル基、(2H-ベンゾトリアゾール)-5-イル基、2-キノリル基、3-キノリル基、4-キノリル基、5-キノリル基、6-キノリル基、7-キノリル基、8-キノリル基、1-イソキノリル基、3-イソキノリル基、4-イソキノリル基、5-イソキノリル基、6-イソキノリル基、7-イソキノリル基、8-イソキノリル基、3-シンノリニル基、4-シンノリニル基、5-シンノリニル基、6-シンノリニル基、7-シンノリニル基、8-シンノリニル基、2-キナゾリニル基、4-キナゾリニル基、5-キナゾリニル基、6-キナゾリニル基、7-キナゾリニル基、8-キナゾリニル基、2-キノキサリニル基、5-キノキサリニル基、6-キノキサリニル基、1-フタラジニル基、5-フタラジニル基、6-フタラジニル基、2-ナフチリジニル基、3-ナフチリジニル基、4-ナフチリジニル基、2-プリニル基、6-プリニル基、7-プリニル基、8-プリニル基、2-プテリジニル基、4-プテリジニル基、6-プテリジニル基、7-プテリジニル基、1-カルバゾリル基、2-カルバゾリル基、3-カルバゾリル基、4-カルバゾリル基、9-カルバゾリル基、2-(α-カルボリニル)基、3-(α-カルボリニル)基、4-(α-カルボリニル)基、5-(α-カルボリニル)基、6-(α-カルボリニル)基、7-(α-カルボリニル)基、8-(α-カルボリニル)基、9-(α-カルボリニル)基、1-(β-カルボニリル)基、3-(β-カルボニリル)基、4-(β-カルボニリル)基、5-(β-カルボニリル)基、6-(β-カルボニリル)基、7-(β-カルボニリル)基、8-(β-カルボニリル)基、9-(β-カルボニリル)基、1-(γ-カルボリニル)基、2-(γ-カルボリニル)基、4-(γ-カルボリニル)基、5-(γ-カルボリニル)基、6-(γ-カルボリニル)基、7-(γ-カルボリニル)基、8-(γ-カルボリニル)基、9-(γ-カルボリニル)基、1-アクリジニル基、2-アクリジニル基、3-アクリジニル基、4-アクリジニル基、9-アクリジニル基、1-フェノキサジニル基、2-フェノキサジニル基、3-フェノキサジニル基、4-フェノキサジニル基、10-フェノキサジニル基、1-フェノチアジニル基、2-フェノチアジニル基、3-フェノチアジニル基、4-フェノチアジニル基、10-フェノチアジニル基、1-フェナジニル基、2-フェナジニル基、1-フェナントリジニル基、2-フェナントリジニル基、3-フェナントリジニル基、4-フェナントリジニル基、6-フェナントリジニル基、7-フェナントリジニル基、8-フェナントリジニル基、9-フェナントリジニル基、10-フェナントリジニル基、2-フェナントロリニル基、3-フェナントロリニル基、4-フェナントロリニル基、5-フェナントロリニル基、6-フェナントロリニル基、7-フェナントロリニル基、8-フェナントロリニル基、9-フェナントロリニル基、10-フェナントロリニル基、1-チアントレニル基、2-チアントレニル基、1-インドリジニル基、2-インドリジニル基、3-インドリジニル基、5-インドリジニル基、6-インドリジニル基、7-インドリジニル基、8-インドリジニル基、1-フェノキサチイニル基、2-フェノキサチイニル基、3-フェノキサチイニル基、4-フェノキサチイニル基、チエノ[2,3-b]フリル基、ピロロ[1,2-b]ピリダジニル基、ピラゾロ[1,5-a]ピリジル基、イミダゾ[11,2-a]ピリジル基、イミダゾ[1,5-a]ピリジル基、イミダゾ[1,2-b]ピリダジニル基、イミダゾ[1,2-a]ピリミジニル基、1,2,4-トリアゾロ[4,3-a]ピリジル基、1,2,4-トリアゾロ[4,3-a]ピリダジニル基などの8員ないし14員の縮合多環式ヘテロアリール基が挙げられる。
【００２２】
1個又は2個以上の環構成ヘテロ原子を含む部分不飽和又は飽和のヘテロ環基としては、単環式の非芳香族ヘテロ環基又は縮合多環式の非芳香族ヘテロ環基のいずれであってもよい。環構成ヘテロ原子は上記と同様である。
【００２３】
「単環式非芳香族ヘテロ環基」としては、例えば、1-アジリジニル基、1-アゼチジニル基、1-ピロリジニル基、2-ピロリジニル基、3-ピロリジニル基、2-テトラヒドロフリル基、3-テトラヒドロフリル基、チオラニル基、1-イミダゾリジニル基、2-イミダゾリジニル基、4-イミダゾリジニル基、1-ピラゾリジニル基、3-ピラゾリジニル基、4-ピラゾリジニル基、1-(2-ピロリニル)基、1-(2-イミダゾリニル)基、2-(2-イミダゾリニル)基、1-(2-ピラゾリニル)基、3-(2-ピラゾリニル)基、ピペリジノ基、2-ピペリジニル基、3-ピペリジニル基、4-ピペリジニル基、1-ホモピペリジニル基、2-テトラヒドロピラニル基、モルホリノ基、(チオモルホリン)-4-イル基、1-ピペラジニル基、1-ホモピペラジニル基などの3員ないし7員の飽和若しくは不飽和の単環式非芳香族ヘテロ環基が挙げられる。
【００２４】
「縮合多環式非芳香族ヘテロ環基」としては、例えば、2-キヌクリジニル基、2-クロマニル基、3-クロマニル基、4-クロマニル基、5-クロマニル基、6-クロマニル基、7-クロマニル基、8-クロマニル基、1-イソクロマニル基、3-イソクロマニル基、4-イソクロマニル基、5-イソクロマニル基、6-イソクロマニル基、7-イソクロマニル基、8-イソクロマニル基、2-チオクロマニル基、3-チオクロマニル基、4-チオクロマニル基、5-チオクロマニル基、6-チオクロマニル基、7-チオクロマニル基、8-チオクロマニル基、1-イソチオクロマニル基、3-イソチオクロマニル基、4-イソチオクロマニル基、5-イソチオクロマニル基、6-イソチオクロマニル基、7-イソチオクロマニル基、8-イソチオクロマニル基、1-インドリニル基、2-インドリニル基、3-インドリニル基、4-インドリニル基、5-インドリニル基、6-インドリニル基、7-インドリニル基、1-イソインドリニル基、2-イソインドリニル基、4-イソインドリニル基、5-イソインドリニル基、2-(4H-クロメニル)基、3-(4H-クロメニル)基、4-(4H-クロメニル)基、5-(4H-クロメニル)基、6-(4H-クロメニル)基、7-(4H-クロメニル)基、8-(4H-クロメニル)基、1-イソクロメニル基、3-イソクロメニル基、4-イソクロメニル基、5-イソクロメニル基、6-イソクロメニル基、7-イソクロメニル基、8-イソクロメニル基、1-(1H-ピロリジニル)基、2-(1H-ピロリジニル)基、3-(1H-ピロリジニル)基、5-(1H-ピロリジニル)基、6-(1H-ピロリジニル)基、7-(1H-ピロリジニル)基などの8員ないし10員の飽和若しくは不飽和の縮合多環式非芳香族ヘテロ環基が挙げられる。
R1とR6とが互いに結合して形成される1個又は2個以上の環構成ヘテロ原子を含む部分不飽和又は飽和のヘテロ環、及びR5とR6とが互いに結合して形成される1個又は2個以上の環構成ヘテロ原子を含む部分不飽和又は飽和のヘテロ環としては、上記のヘテロ環基を構成するヘテロ環部分を例示することができる。
【００２５】
本明細書において、ある官能基について「置換基を有していてもよい」という場合には、特に言及する場合を除き、その官能基は無置換であるか、あるいは化学的に可能な位置に1個又は2個以上の「置換基」を有する場合があることを意味する。官能基に存在する置換基の種類、置換基の個数、及び置換位置は特に限定されず、2個以上の置換基が存在する場合には、それらは同一であっても異なっていてもよい。官能基に存在する「置換基」としては、例えば、ハロゲン原子、オキソ基、チオキソ基、ニトロ基、ニトロソ基、シアノ基、イソシアノ基、シアナト基、チオシアナト基、イソシアナト基、イソチオシアナト基、ヒドロキシ基、スルファニル基、カルボキシ基、スルファニルカルボニル基、オキサロ基、メソオキサロ基、チオカルボキシ基、ジチオカルボキシ基、カルバモイル基、チオカルバモイル基、スルホ基、スルファモイル基、スルフィノ基、スルフィナモイル基、スルフェノ基、スルフェナモイル基、ホスホノ基、ヒドロキシホスホニル基、炭化水素基、ヘテロ環基、炭化水素-オキシ基、ヘテロ環-オキシ基、炭化水素-スルファニル基、ヘテロ環-スルファニル基、アシル基、アミノ基、ヒドラジノ基、ヒドラゾノ基、ジアゼニル基、ウレイド基、チオウレイド基、グアニジノ基、カルバモイミドイル基(アミジノ基)、アジド基、イミノ基、ヒドロキシアミノ基、ヒドロキシイミノ基、アミノオキシ基、ジアゾ基、セミカルバジノ基、セミカルバゾノ基、アロファニル基、ヒダントイル基、ホスファノ基、ホスホロソ基、ホスホ基、ボリル基、シリル基、スタニル基、セラニル基、オキシド基などを挙げることができるが、これらに限定されることはない。
【００２６】
「置換基」が2個以上存在する場合、該2個以上の置換基は、それらが結合している原子と一緒になって環式基を形成してもよい。このような環式基には、環系を構成する原子(環原子)として、酸素原子、硫黄原子、及び窒素原子などから選択されたヘテロ原子1ないし3種が1個以上含有されていてもよく、該環上には1個以上の置換基が存在していてもよい。該環は、単環式又は縮合多環式のいずれであってもよく、芳香族又は非芳香族のいずれであってもよい。
【００２７】
また、上記の定義における「置換基」は、該置換基上の化学的に可能な位置で他の置換基によって置換されていてもよい。置換基の種類、置換基の個数、及び置換位置は特に限定されず、2個以上の置換基で置換される場合には、それらは同一であっても異なっていてもよい。そのような例として、例えば、ハロゲン化アルキル-カルボニル基(具体例：トリフルオロアセチルなどの基)、ハロゲン化アルキル-スルホニル基(具体例：トリフルオロメタンスルホニルなどの基)、アシル-オキシ基、アシル-スルファニル基、N-炭化水素基-アミノ基、N,N-ジ(炭化水素)-アミノ基、N-ヘテロ環-アミノ基、N-炭化水素-N-ヘテロ環-アミノ基、アシル-アミノ基、ジ(アシル)-アミノ基などの基が挙げられるが、これらに限定されることはない。
【００２８】
一般式(I)においてR1は置換基を有していてもよいC1-C6アルキル基、置換基を有していてもよいC1-C6アルケニル基、又は置換基を有していてもよいアリール基を示す。R1が示す置換基を有していてもよいC1-C6アルキル基としては、例えば、無置換のC1-C6アルキル基、1個又は2個以上のハロゲン原子、好ましくはフッ素原子により置換されたC1-C6アルキル基、ヒドロキシ基で置換されたヒドロキシC1-C6アルキル基などを挙げることができる。好ましくは、メチル基、エチル基、シクロプロピル基、フッ素原子で置換されたメチル基若しくはエチル基、又はフッ素原子で置換されたシクロプロピル基などである。  R1が示す置換基を有していてもよいC1-C6アルケニル基としては、無置換のC1-C6アルケニル基、例えばビニル基又はアリル基などを挙げることができる。R1が示す置換基を有していてもよいアリール基としては、例えば、フェニル基、1個又は2個以上のフッ素原子で置換されたフェニル基,例えば2,4-ジフルオロフェニル基などを挙げることができる。
R1としては、エチル基又はシクロプロピル基が特に好ましい。
【００２９】
R1はR6と互いに結合して1個又は2個以上の環構成ヘテロ原子を含む部分不飽和又は飽和のヘテロ環(該環は置換基を有していてもよい)を形成してもよく、R1がR6と互いに結合して1個又は2個以上の環構成ヘテロ原子を含む飽和の5ないし7員環(該環は置換基を有していてもよい)を形成することが好ましい。R1とR6とが互いに結合して1個又は2個以上の環構成ヘテロ原子を含む部分不飽和又は飽和のヘテロ環(該環は置換基を有していてもよい)を形成する場合の具体例としては、1個の酸素原子と1個の窒素原子を含む6員環が形成される場合(下記具体的化合物の構造式(21)で表される化合物など)、1個の酸素原子と1個の窒素原子を含む5員環が形成される場合(下記具体的化合物の構造式(4)で表される化合物など)を挙げることができる。、環上の置換基としては、例えばC1-C6アルキル基、好ましくはメチル基などを挙げることができる。環上のアルキル基、好ましくはメチル基は(S)配置又は(R)配置のいずれでもよいが、(S)配置が好ましい場合がある。
【００３０】
R1がメチル基、エチル基、若しくはシクロプロピル基のいずれかであるか(メチル基、エチル基、若しくはシクロプロピル基は1個又は2個以上のフッ素原子で置換されていてもよい)、又はR1がR6と結合して2個の環構成ヘテロ原子を含む飽和の5員又は6員のヘテロ環(該環は１個のC1-C6アルキル基、好ましくはメチル基を置換基として有していてもよい)を形成することが好ましい。2個の環構成ヘテロ原子のうちの1個は一般式(I)のキノリン環の窒素原子であり、もう1個の環構成ヘテロ原子は酸素原子であることが好ましい。
【００３１】
一般式(I)においてR2は水素原子、カルボキシル基、又はアミノ基を示すが、R2が水素原子であることが好ましい。
【００３２】
一般式(I)においてR3は水酸基又は置換基を有していてもよいC1-C6アルキル基を示す。
R3が示すC1-C6アルキル基としては、メチル基、エチル基、n-プロピル基、又はイソプロピル基などが好ましく、メチル基又はエチル基がより好ましい。R3が置換基を有しないC1-C6アルキル基である場合にはメチル基又はエチル基が好ましく、エチル基が特に好ましい。R3が置換基を有するC1-C6アルキル基である場合にはC1-C6アルキル基としてメチル基が好ましく、置換基としてヒドロキシ基、アミノ基、ハロゲン原子などが好ましい。C1-C6アルキル基上のヒドロキシ基又はアミノ基は置換基を有していてもよい。
【００３３】
R3としては、水酸基、無置換C1-C6アルキル基、置換基を有していてもよいヒドロキシC1-C6アルキル基、又は置換基を有していてもよいアミノC1-C6アルキル基が好ましい。置換基を有していてもよいヒドロキシC1-C6アルキル基としては、水酸基がC1-C6アルキルカルボニル基(該C1-C6アルキルカルボニル基のアルキル部分にはカルボキシル基が置換していてもよい)で置換されたヒドロキシC1-C6アルキル基や水酸基がC1-C6アルキル基で置換されたヒドロキシC1-C6アルキル基などを挙げることができ、置換基を有していてもよいアミノC1-C6アルキル基としてはカルバモイル置換C1-C6アルキル基などを挙げることができる。R3として、例えば、カルボキシ置換エチルカルボニルオキシC1-C6アルキル基、エチルカルボニルオキシC1-C6アルキル基、メチルカルボニルオキシC1-C6アルキル基(アセトキシC1-C6アルキル基)などを用いることもできる。R3としてより具体的には、水酸基、-CH3、-CH2CH3、-C水H、-C水CH3、-CH2NH2、-C(O)NH2、-C水COCH3、-C水COCH2CH3、-C水COCH2COOH3、又は-C水COCH2CH2COOH、-C水CH3、又は-C水H窒素ガスなどの基を例示することができるが、これらに限定されることはない。
【００３４】
一般式(I)においてR4は水素原子、ハロゲン原子、置換基を有していてもよいC1-C6アルキル基、又は置換基を有していてもよいC1-C6アルコキシ基を示すが、R4が水素原子、ハロゲン原子、又は置換基を有していてもよいC1-C6アルキル基であることが好ましい。R4が水素原子、フッ素原子、塩素原子、又はメチル基のいずれかであることがより好ましく、水素原子又はフッ素原子であることが特に好ましい
【００３５】
R4はR5と互いに結合して1個又は2個以上の環構成ヘテロ原子を含む部分不飽和又は飽和のヘテロ環(該環は置換基を有していてもよい)を形成してもよい。例えば、R4とR5とが互いに結合してメチレンジオキシ基を形成する場合などを挙げることができる。
【００３６】
R5は置換基を有していてもよいC1-C6アルキル基、置換基を有していてもよいC1-C6アルコキシ基、置換基を有していてもよいアリール基、置換基を有していてもよいヘテロアリール基、又は置換基を有していてもよい部分飽和若しくは飽和のヘテロ環基を示す。置換基を有していてもよいアリール基又は置換基を有していてもよい部分飽和若しくは飽和のヘテロ環基であることが好ましい。R5が示すC1-C6アルキル基としては、例えばメチル基、エチル基などが好ましく、R5が示すC1-C6アルコキシ基としては、例えばメトキシ基、エトキシ基などが好ましい。R5が示すアリール基としてはフェニル基が好ましく、フェニル基は1個又は2個以上の置換基を有することが好ましい。置換基としてヒドロキシ基、アミノ基、フッ素原子、又はアミノ基などの置換基を有していてもよいC1-C6アルキル基などを挙げることができるが、例えばパラ位にヒドロキシ基又はアミノ基を有するフェニル基、パラ位にアミノメチル基を有するフェニル基などが好ましい。特に好ましいのはp-ヒドロキシフェニル基である。R5が示すヘテロアリール基としては、例えば、ピリジニル基、イミダゾリル基などを挙げることができるが、これらに限定されることはない。部分飽和若しくは飽和のヘテロ環基としては、1個又は2個の環構成窒素原子を含む5員ないし7員の飽和ヘテロ環基が好ましく、例えば、ピペラジニル基、ピロリジニル基、ピペリジニル基などが好ましい。2環性のヘテロ環基としては、例えばイソインドリニル基などを挙げることができる。ヘテロ環基には置換基が存在していてもよいが、置換基としては、例えばメチル基などのC1-C6アルキル基、アミノ基、ヒドロキシ基などを用いることができる。R5が置換基を有するヘテロ環基である場合の例として、例えば、4-メチルピペラジニル基、3-メチル-1-ピペラジニル基、3-アミノ-1-ピロリジニル基、3-ヒドロキシ-1-ピロリジニル基、ホモピペラジニル基、4-ヒドロキシピペリジニル基、3-アミノ-1-ピペラジニル基、3-ヒドロキシアゼチジニル基などを挙げることができるが、これらに限定されることはない。
【００３７】
例えば、R5がフェニル基(該フェニル基は水酸基、アミノ基、C1-C6アルキル基、及びアミノメチル基からなる群から選ばれる置換基を1個又は2個有していてもよい)、ピリジル基(該ピリジル基は水酸基、アミノ基、C1-C6アルキル基、及びアミノメチル基からなる群から選ばれる置換基を1個又は2個有していてもよい)、ピペラジニル基(該ピペラジニル基は水酸基、アミノ基、C1-C6アルキル基、及びアミノメチル基からなる群から選ばれる置換基を1個又は2個有していてもよい)、ピペリジニル基(該ピペリジニル基は水酸基、アミノ基、C1-C6アルキル基、及びアミノメチル基からなる群から選ばれる置換基を1個又は2個有していてもよい)、又はイソインドリニル基(該イソインドリニル基は水酸基、アミノ基、C1-C6アルキル基、及びアミノメチル基からなる群から選ばれる置換基を1個又は2個有していてもよく、部分飽和であってもよい)のいずれかであることが好ましい。
【００３８】
R5はR6と互いに結合して1個又は2個以上の環構成ヘテロ原子を含む部分不飽和又は飽和のヘテロ環(該環は置換基を有していてもよい)を形成してもよく、好ましくは1個又は2個以上の環構成ヘテロ原子を含む部分不飽和又は飽和の5ないし7員環(該環は置換基を有していてもよい)を形成してもよい。R5はR6と結合して2個の環構成ヘテロ原子を含む飽和の5員又は6員のヘテロ環(該環は置換基を有していてもよいC1-C6アルキル基を置換基として有していてもよい)を形成することがさらに好ましい。例えば、R5とR6とが互いに結合してメチレンジオキシ基を形成する場合や環構成窒素原子及び環構成酸素原子をそれぞれ1個ずつ含む5員環を形成する場合などを例示することができる。これらの環上には置換基が存在していてもよいが、例えばメチル基などのC1-C6アルキル基、アミノ基、ヒドロキシ基、アセチル基などのC1-C6アルキルカルボニル基などを用いることができる。例えば、下記の構造式(2)又は(3)に示される5員又は6員のヘテロ環を形成することがより好ましく、ヘテロ環上の置換基がC1-C6アルキルカルボニル基であることがより好ましい。
【００３９】
R6は水素原子、置換基を有していてもよいC1-C6アルキル基、置換基を有していてもよいC1-C6アルコキシ基、又はハロゲン原子を示す。R6が水素原子、フッ素原子、塩素原子、C1-C6アルキル基(該アルキル基はフッ素原子で置換されていてもよい)、又はC1-C6アルコキシ基(該アルコキシ基はフッ素原子で置換されていてもよい)であることがより好ましく、R6が水素原子、フッ素原子、塩素原子、C1-C6アルキル基(該アルキル基はフッ素原子で置換されていてもよい)、又はC1-C6アルコキシ基であることがさらに好ましい。
【００４０】
一般式(I)で表される化合物のより具体的な化合物としては、以下の化合物を挙げることができるが、本発明の化合物はこれらの化合物に限定されることはない。
【００４１】
【化２】
2014171527.tif 000004
【化３】
2014171527.tif 000005
【００４２】
【化４】
2014171527.tif 000006
【化５】
2014171527.tif 000007
【００４３】
一般式(I)で表される化合物は、塩の状態であってもよい。塩としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、ナトリウム、カリウムなどとのアルカリ金属塩；カルシウム、マグネシウムなどとのアルカリ土類金属塩；メチルアミン、エチルアミン、ジエタノールアミンなどとの有機アミン塩など、あるいは塩酸塩、硫酸塩、硝酸塩などの鉱酸塩、p-トルエンスルホン酸塩やマレイン酸塩、酒石酸塩などの有機酸塩などが挙げられる。
【００４４】
一般式(I)で表される化合物又はその塩は、水和物又は溶媒和物の状態として存在していてもよい。溶媒和物を形成する溶媒の種類は特に限定されないが、例えば、エタノール、酢酸エチル、アセトンなどを例示することができる。一般式(I)で表される化合物は、置換基の種類に応じて光学異性体、ジアステレオ異性体、又は幾何異性体として存在する場合があるが、純粋な形態の任意の異性体のほか、任意の異性体の混合物も本発明の範囲に包含される。
【００４５】
一般式(I)で表される化合物又はその塩は、当業者に容易に入手可能な原料化合物から当業者に汎用されている一般的な化学反応を行うことにより容易に合成することができる。本発明の化合物の具体的な製造方法を本明細書の実施例に示した。当業者はそれらの合成方法を参照することにより、一般式(I)に包含される本発明の化合物を容易に製造することが可能である。
【００４６】
本発明の一般式(I)で表される化合物又はその塩は、細菌のDNAジャイレースを阻害する作用を有するが、特に、キノロン類に対して耐性を獲得した細菌における変異DNAジャイレースに対して強い阻害活性を有している。
【００４７】
該DNAジャイレースは、DNA複製中にDNAポリメラーゼが鋳型鎖に沿って進行する際、必然的に生じて複製の延伸を困難にさせる超螺旋構造を、DNA鎖の切断及び再結合を繰り返すことによって緩和し、該DNAポリメラーゼを滞りなく進行させる機能を持つDNA複製に必須の因子である。
【００４８】
一般式(I)で表される化合物又はその塩は、例えば、野生型の黄色ブドウ球菌のDNAジャイレースAサブユニットのアミノ末端側から84番目のセリン残基がロイシン残基に置換することによりキノロン類に対して耐性を獲得した変異型黄色ブドウ球菌のDNAジャイレースAサブユニットの活性を好適に阻害することができる。一般式(I)で表される化合物又はその塩を有効成分として含む医薬は、キロノン類に耐性を獲得した細菌に対して特異的に強い抗菌作用を発揮することができることから、キノロン類に耐性を獲得した細菌による感染症の予防及び/又は治療のために使用することができる。
【００４９】
該医薬における一般式(I)で表される化合物又はその塩の含有量は特に制限されず、目的に応じて適宜選択することができる。該医薬の有効成分としては一般式(I)で表される化合物又はその塩を単独で用いてもよく、必要に応じて2種以上を併用してもよい。一般式(I)で表される化合物又はその塩として、例えば上記構造式(1)〜(44)のいずれかで表される化合物が好ましく、DNAジャイレース阻害活性に優れる点で構造式(20)で表される化合物、構造式(17)で表される化合物、構造式(25)で表される化合物などがより好ましい。
【００５０】
上記医薬は一般的には当業界で汎用の製剤用添加物を1種又は2種以上用いて医薬組成物の形態で提供される。例えば、カプセル剤、錠剤、シロップ剤、散剤、顆粒剤、細粒剤、又は溶液剤などの経口投与用の医薬組成物や、静脈内投与用の注射剤又は点滴剤、筋肉内投与用又は皮下投与用の注射剤、吸入剤、点眼剤、点耳剤、又は経皮吸収製剤などの形態で提供することができ、製剤用添加物を医薬組成物の形態に応じて適宜選択して当業者に周知の方法で調製することができる。
【００５１】
上記医薬の投与方法、投与量、投与時期、及び投与対象は特に制限されず、目的に応じて適宜選択することができる。投与量は患者の年齢、体重、体質、及び症状や起炎菌の種類のほか、他の成分を有効成分とする医薬の投与の有無など、様々な要因を考慮して適宜選択することができる。
【００５２】
該投与対象としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、ヒト、サル、ブタ、ウシ、ヒツジ、ヤギ、イヌ、ネコ、マウス、ラット、トリなどが挙げられるが、これらの中でもヒトに好適に用いられる。
【００５３】
本発明の医薬は、キノロン類に対して耐性を獲得した細菌に対して特に強い抗菌作用を発揮することができる。本発明の医薬はDNAジャイレースに変異が導入されることによりキノロン類に対して耐性を獲得したグラム陽性細菌のいずれに対しても強い抗菌作用を発揮できるが、例えば、キノロン類に対して耐性を獲得した黄色ブドウ球菌に対して特に優れた抗菌活性を有する。本発明の医薬を用いた予防及び/又は治療の対象となる感染症の起炎菌の種類は特に限定されないが、本発明の医薬が優れた抗菌活性を有する観点から黄色ブドウ球菌が好ましく、キノロン類耐性黄色ブドウ球菌がより好ましい。
【００５４】
キノロン類耐性黄色ブドウ球菌は、DNAジャイレース(トポイソメラーゼII)及びトポイソメラーゼIVにアミノ酸変異が生じていることが知られている。該DNAジャイレースのサブユニットは、gyrA及びgyrBにコードされており、該トポイソメラーゼIVのサブユニットは、parC及びparEによりコードされている。キノロン類耐性黄色ブドウ球菌が、さらにメチシリン耐性黄色ブドウ球菌(MRSA)、バンコマイシン中間耐性黄色ブドウ球菌(VISA)、又はバンコマイシン耐性黄色ブドウ球菌(VRSA)となっている場合もあるが、このような場合においても本発明の医薬は変異DNAジャイレースを標的として作用することにより、強い抗菌作用を発揮することができる。本発明の医薬は、野生型の黄色ブドウ球菌のDNAジャイレースAサブユニットのアミノ末端側から84番目のセリン残基がロイシン残基に置換した変異型DNAジャイレースAサブユニットを有する黄色ブドウ球菌に対して、特に好適な抗菌活性を有する。
【００５５】
抗菌活性の測定方法は特に制限されず、当業者は目的に応じて適宜選択することができるが、最小発育阻止濃度(以下、「MIC」と称することがある。)を求める方法などが挙げられる。MICを求める方法としては公知の方法を適宜用いることができるが、微生物液体希釈法が好ましい。
【００５６】
本発明の医薬のキノロン類耐性菌に対するMICは、例えば4mg/L以下であるが好ましく、1mg/L以下であることがより好ましく、0.25mg/L以下であることがさらに好ましく、0.0625mg/L以下であることが特に好ましい。
【００５７】
本発明の医薬は、キノロン類に対して耐性を獲得した細菌に対して強い抗菌作用を有しているが、キノロン類耐性菌が該抗菌剤に対してさらに耐性を獲得すると、DNAジャイレースに導入された変異が復帰してキノロン類感受性菌が有する未変異のDNAジャイレースとなることから、本発明の医薬とともにキノロン類を組み合わせて用いることにより、キノロン類に対する耐性菌の出現を有効に阻止することができる。
【００５８】
従って、本発明の医薬の一態様として、上記一般式(I)で表される化合物又はその塩とキノロン類との組合せを少なくとも含む医薬が提供される。組み合わせて使用することができるキノロン類は特に限定されず、オールドキノロン類又はニューキノロン類のいずれを用いてもよい。該キノロン類は1種単独で使用してもよく、2種以上を併用してもよい。上記一般式(I)で表される化合物又はその塩と組み合わせるべきキノロン類の量は特に制限はなく、キノロン類の種類や感染症の種類などに応じて適宜選択することができる。
【００５９】
該オールドキノロン類は、グラム陰性細菌に抗菌活性を示すことから、尿路性器感染症、腸管感染症などに使用される。しかしながら、グラム陽性細菌には抗菌活性が低いため、一般的には肺炎球菌などによる呼吸器感染症などには用いることができない。オールドキノロン類の具体例としては、ナリジクス酸、ピロミド酸、又はピペミド酸などが挙げられる。
【００６０】
ニューキノロン類は、一般的にはキノロン環の6位にフッ素又は水素、7位に環状塩基性基を有し、グラム陰性細菌だけでなく、グラム陽性細菌に対しても抗菌活性が高いため、尿路性器感染症、腸管感染症などの他、肺炎球菌や連鎖球菌などによる感染症にも広く使用される。ニューキノロン類の具体例としては、ノルフロキサシン、レボフロキサシン、オフロキサシン、エノキサシン、塩化シプロフロキサシン、トシル酸トスフロキサシン、塩酸ロメフロキサシン、フレロキサシン、スパフロキサシン、ガチフロキシン、メシル酸パズフロキサシン、モキシフロキサシン、ガレノキサシンなどが挙げられるが、これらに限定されるわけではない。
【００６１】
本明細書において「組合せ」とは、上記一般式(I)で表される化合物又はその塩と該キノロン類の少なくとも1種とを併せて使用することを意味する(以下、「併用」と称することがある)。該併用のタイミングは特に制限されず、目的に応じて適宜選択することができ、該抗菌剤と該キノロン類の少なくとも1種とを同時に投与してもよく、本発明の効果を損なわない範囲で適宜選択した間隔をあけて投与してもよい。上記一般式(I)で表される化合物又はその塩とキノロン類の少なくとも1種とを同時に投与する場合、上記一般式(I)で表される化合物又はその塩とキノロン類の少なくとも1種とを別々の投与単位(投与剤形)として投与してもよく、あるいはこれらの有効成分を1つの製剤中に含む単剤(いわゆる合剤)として投与してもよい。
【００６２】
上記一般式(I)で表される化合物又はその塩を有効成分として含む医薬とキノロン類の少なくとも1種とを適宜の間隔をあけて投与する場合、本発明の医薬とキノロン類の少なくとも1種との投与順序は特に制限されず、目的に応じて適宜選択することができる。予防及び/又は治療の対象となる感染症は特に制限されず、キノロン類耐性菌による感染症、キノロン類感受性菌による感染症、又は両者による感染症などいずれの場合にも適用することができる。例えば、該キノロン類感受性黄色ブドウ球菌による感染症、該キノロン類耐性黄色ブドウ球菌による感染症、又は両者による複合感染症などが挙げられる。
【００６３】
このような組み合わせを含む医薬は該キノロン類耐性黄色ブドウ球菌に対しては本発明の医薬に含まれる有効成分である上記一般式(I)で表される化合物又はその塩が作用し、かつ、キノロン類感受性黄色ブドウ球菌に対してはキノロン類が主として作用するため、感染症の起因菌におけるキノロン類耐性の有無に関わらず抗菌活性を発揮できる点で有利であり、感染症の予防及び/又は治療に広く用いることができる。
【００６４】
また、本発明の医薬の一態様として、上記一般式(I)で表される化合物又はその塩と薬剤排出ポンプ阻害剤との組合せを少なくとも含む医薬が提供される。薬剤排出ポンプ及びその阻害剤については例えば特表2008-502720号公報及び該公報に引用された文献やXian-Zhi Li and Hiroshi Nidaidoによる総説(Drugs, 69, pp.1555-1623, 2009、特にTable 4)のほか、Antibiotics, 2, pp.28-45, 2013; Journal of Antimicrobial Chemotherapy, 59, pp.1223-1229, 2007; Bioorganic & Medicinal Chemistry, 19, pp.7679-7689, 2011; Antimicrobial Agents and Chemotherapy, 48, pp.4171-4176, 2004; Journal of Antimicrobial Chemotherapy, 59, pp.1247-1260, 2007; Antimicrobial Agents and Chemotherapy, 52, pp.3202-3209, 2008などを参照することができる。キノロン類と薬剤排出ポンプ阻害剤との関係については、例えば日本化学療法学会雑誌, 52(7), pp.355-360, 2004などを参照することができる。
【００６５】
本発明において組み合わせて使用することができる薬剤排出ポンプ阻害剤は特に限定されないが、例えばPhe-Arg-β-ナフチルアミン(PAβN: PLoS ONE, 8, e60666, 2013)などを用いることが好ましい場合がある。上記一般式(I)で表される化合物又はその塩と組み合わせるべき薬剤排出ポンプ阻害剤の量は特に制限はなく、その種類や感染症の種類などに応じて適宜選択することができる。さらに、上記一般式(I)で表される化合物又はその塩とキノロン類との組合せを少なくとも含む医薬にさらに薬剤排出ポンプ阻害剤を組合せてもよく、上記一般式(I)で表される化合物又はその塩、キノロン類、及び薬剤排出ポンプ阻害剤の組み合わせを含む医薬として提供されてもよい。上記の組み合わせを含む医薬は上記一般式(I)で表される化合物又はその塩、キノロン類、及び薬剤排出ポンプ阻害剤の3種類を含む合剤として提供されてもよく、又は任意の2種類を含む合剤と残りの一種類を含む単位投与形態を組み合わせて投与してもよい。あるいは、上記一般式(I)で表される化合物を含む医薬、キノロン類、及び薬剤排出ポンプ阻害剤をそれぞれ別々の単位投与形態として組み合わせて投与することもできる。
【実施例】
【００６６】
以下、実施例により本発明をさらに具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例に何ら限定されるものではない。【００６７】
例1：構造式(1)で表される化合物(化合物J-131CP)の合成
7-ブロモ-6-フルオロ-4-メチル-1,2-ジヒドロキノリン-2-オン(800mg、3.2mmol)、シクロプロピルボロン酸(550mg、6.4mmol)、2,2'-ビピリジン(BiPy、500mg、3.2mmol)、炭酸ナトリウム(678mg、6.4mmol)、酢酸銅(II)無水物(Cu(OAc)2；581mg、3.2mmol)、及び1,2-ジクロロエタン(DCE；24mL)を混合した混合液を、70℃で4時間撹拌した。【００６８】
撹拌終了後、混合液を室温まで冷却し、飽和塩化アンモニウム50mLを加えた後、ジクロロメタン各50mLで2回抽出した。得られた抽出液を2回、水50mLで洗浄し、次いで食塩水50mLで洗浄した。洗浄後の抽出液を無水硫酸ナトリウムを加えて乾燥後、ろ過し、ろ過液を減圧にて濃縮した。濃縮したろ過液をシリカゲルクロマトグラフィーに付し、酢酸エチル/石油エーテル(1/10〜1/2)で溶出し7-ブロモ-1-シクロプロピル-6-フルオロ-4-メチル-1,2-ジヒドロキノリン-2-オンを得た(330mg、収率34％)。【００６９】
得られた7-ブロモ-1-シクロプロピル-6-フルオロ-4-メチル-1,2-ジヒドロキノリン-2-オン(320mg、1.08mmol)、及び二酸化セレン(360mg、3.24mmol)をキシレン4mLに懸濁した混合液を、150℃で6時間撹拌した。さらに、撹拌後の混合液に二酸化セレン(360mg、3.24mmol)を追加し、140℃で16時間撹拌した。その後、混合液を室温まで冷却し、水30mLを加え、酢酸エチル30mLで2回抽出して抽出液を得た。得られた抽出液を食塩水(30mL)で洗浄した。洗浄後の抽出液に無水硫酸ナトリウムを加えて乾燥後、ろ過し、ろ過液を減圧にて濃縮した。濃縮して残った残留物を石油エーテルの中で粉砕し、7-ブロモ-1-シクロプロピル-6-フルオロ-2-オキソ-1,2-ジヒドロキノリン-4-カルボアルデヒドを得た(280mg、収率84％)。【００７０】
得られた-ブロモ-1-シクロプロピル-6-フルオロ-2-オキソ-1,2-ジヒドロキノリン-4-カルボアルデヒド(280mg、0.90mmol)をメタノール5mLに溶解し、氷冷した状態で、水素化ホウ素ナトリウム(69mg、1.81mmol)を少しずつ加えて混合液とした。混合液を25℃で30分間撹拌した。撹拌後の混合液に塩化アンモニウム30mLを加えた後、酢酸エチル30mLで2回抽出し、抽出液を得た。抽出液を食塩水30mLで洗浄し、無水硫酸ナトリウムを加えて乾燥後、ろ過し、ろ過液を減圧にて濃縮して7-ブロモ-1-シクロプロピル-6-フルオロ-4-(ヒドロキシメチル)-1,2-ジヒドロキノリン-2-オンを得た(270mg、収率96％)。【００７１】
得られた7-ブロモ-1-シクロプロピル-6-フルオロ-4-(ヒドロキシメチル)-1,2-ジヒドロキノリン-2-オン(260mg、0.833mmol)、4-ヒドロキシフェニルボロン酸(150mg、1.08mmoL)、1,1'-ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン-パラジウム(II)ジクロリド-ジクロロメタン錯体(PdCl2(dppf)；62mg、0.083mmol)、及び炭酸カリウム(172mg、1.25mmol)を、乾燥済みジオキサン10mL中で混合した混合液を80℃の窒素雰囲気下で6時間保持した。【００７２】
その後、混合液を室温まで冷却し、酢酸エチル50mL、及び10質量％塩化アンモニウム溶液50mLで希釈した。有機層を分離し、水層を酢酸エチル50mLで抽出して抽出液を得た。得られた抽出液と、分離した有機層を合わせたものを、水50mLで洗浄し、次いで食塩水50mLで洗浄し、硫酸マグネシウムを用いて乾燥した後、真空濃縮した。真空濃縮後、得られた黒い残留物をシリカゲルを通した後、さらに濃縮して化合物J-131CP：1-シクロプロピル-6-フルオロ-4-(ヒドロキシメチル)-7-(4-ヒドロキシフェニル)-1,2-ジヒドロキノリン-2-オンを灰色の固形物として得た(220mg、収率81％)。
1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)：
δ(ppm)：0.73-0.75(m,2H),1.25-1.27(m,2H),2.95-2.96(m,1H),4.69(m,2H),5.48(s,1H),6.53-6.56(m,1H),6.90(d,J=7.5Hz,2H),7.47(d,J=7.2Hz,2H),7.55(d,J=11.7Hz,1H),7.85(d,J=7.2Hz,1H),9.74(brs,1H)【００７３】
得られた化合物J-131CPについてLCMS解析を行った。LCMS解析には、Agilent社製の四重極質量分析計LC/MSD1200システム(カラム：ODS2000(50mm×4.6mm,5μm),ES(＋)又は(-)イオン化モードで運転；T＝30℃；流量＝1.5mL/min；検出波長：214nm)を用いた。
移動相：水 80質量％(0.05質量％のTFAを含む)及びアセトニトリル 20質量％からなる液→水 5質量％(0.05質量％のTFAを含む)及びアセトニトリル 95質量％からなる液
移動時間：6分間
移動後の保持時間：0.5分間
精製度  ：  ＞90％
Rt＝2.572分
MS Calcd.：325
MS Found：326([M＋H]＋)【００７４】
例2：構造式(13)で表される化合物(化合物J-131ACp)の合成
酢酸(10mL)中の化合物J-131CP：1-シクロプロピル-6-フルオロ-4-(ヒドロキシメチル)-7-(4-ヒドロキシフェニル)-1,2-ジヒドロキノリン-2-オン(100mg、0.154mmol)の溶液に、KF(26.8mg、0.412mmol)を添加した。95℃で一晩攪拌した後、混合物を溶媒留去し、分取用HPLCで精製して化合物J-131ACp；[1-シクロプロピル-6-フルオロ-7-(4-ヒドロキシフェニル)-2-オキソ-4-ヒドロキノリル]メチル・アセテートを白色固体として得た(28mg、収率24％)。
1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)：
δ(ppm)：0.75-0.77(m,2H),1.26-1.28(m,2H),2.13(s,3H),2.95-3.01(m,1H),5.30(s,1H),6.52(s,1H),6.91(d,J=6.6Hz,2H),7.48(d,J=6.6Hz,3H),7.62(d,J=11.7Hz,1H),7.89(d,J=6.9Hz,1H),9.80(s,1H)
MS Calcd.：367; MS Found：368([M＋1]＋)【００７５】
例3：構造式(2)で表される化合物(化合物J-103)の合成
【化６】
2014171527.tif 000008
【００７６】
トルエン(50mL)中の構造式(B-1)で表される化合物(5.0g, 36.5mmol)及び構造式(B-1A)で表される化合物(4.66g, 40.1mmol)の混合物を加熱還流し、一晩攪拌した。次いで、混合物を室温まで冷却し、トルエンを除去した。残留物をシリカゲルクロマトグラフィー(石油エーテル：酢酸エチル(以下、「酢酸エチル」と称することがある)＝100：0〜2：1)で精製して、構造式(B-2)で表される化合物；N-(2H-ベンゾ[d]1,3-ジオキソレン-4-イル)-3-オキソブタンアミド、1.08g, 収率13％)を赤色固体として得た。
1H-NMRスペクトル(300MHz,CDCl3)：
δ(ppm)：9.08(brs,1H),7.57-7.60(m,1H),6.78-6.84(m,1H),6.63-6.66(m,1H),6.01(s,2H),3.61(s,2H),2.33(s,3H)【００７７】
70％H2SO4(24mL)中のN-(2H-ベンゾ[d]1,3-ジオキソレン-4-イル)-3-オキソブタンアミド (1.08g, 4.89mmol)の溶液を90℃で1時間攪拌した。次いで、混合物を氷(60g)に注ぎ、ろ過し、固体を水で洗浄し、アセトニトリル10mLで粉砕して6-メチル-9-ヒドロ-2H-1,3-ジオキソレノ[4,5-h]キノリン-8-オン；780mg、収率79％)を褐色固体として得た。
1H-NMRスペクトル(300MHz,DMSO-d6)：
δ(ppm)：11.37(brs,1H),7.25(d,J=8.4Hz,1H),6.87(d,J=8.4Hz,1H),6.23(s,1H),6.16(s,2H),2.36(s,3H)【００７８】
N,N-ジメチルホルムアミド(DMF)10mL中の6-メチル-9-ヒドロ-2H-1,3-ジオキソレノ[4,5-h]キノリン-8-オン(780mg、3.8mmol)の溶液に60％NaH(231mg、5.8mmol)を室温で添加し、0.5時間攪拌し、ヨードメタン(MeI；1.091g, 7.7mmol)を添加し、0.5時間室温で攪拌した。次いで、混合物を水(60mL)に注ぎ、酢酸エチル(2×50mL)で抽出した。合わせた有機層を食塩水(50mL)で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮した。残留物を、酢酸エチル/石油エーテル(1：4)で溶出させるシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して6,9-ジメチル-9-ヒドロ-2H-1,3-ジオキソレノ[4,5-h]キノリン-8-オン；690mg、収率83％)を黄色固体として得た。
1H-NMRスペクトル(300MHz,CDCl3)：
δ(ppm)：7.23(d,J=8.4Hz,1H),6.81(d,J=8.4Hz,1H),6.43(s,1H),6.04(s,2H),3.87(s,3H),2.39(s,3H)【００７９】
キシレン(15mL)中の6,9-ジメチル-9-ヒドロ-2H-1,3-ジオキソレノ[4,5-h]キノリン-8-オン(690mg、3.18mmol)及びSeO2(2.12g, 19.1mmol)の懸濁物を150℃に加熱し、この温度で20時間攪拌した。室温まで冷却した後、ろ過と濃縮を行い、水(20mL)を添加し、得られた混合物を酢酸エチル(2×50mL)で抽出した。合わせた有機層を食塩水(50mL)で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮した。残留物を、酢酸エチル/石油エーテル(1：5)で溶出させるシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して9-メチル-8-オキソ-9-ヒドロ-2H-1,3-ジオキソレノ[4,5-h]キノリン-6-カルボアルデヒドを黄色固体として得た(723mg、収率98％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,CDCl3)：
δ(ppm)：10.05(s,1H),8.44(d,J=8.4Hz,1H),6.98(s,1H),6.89(d,J=9.0Hz,1H),6.08(s,2H),3.94(s,3H)【００８０】
メタノール20mL中の9-メチル-8-オキソ-9-ヒドロ-2H-1,3-ジオキソレノ[4,5-h]キノリン-6-カルボアルデヒド(723mg、3.1mmol)の氷冷溶液に、水素化ホウ素ナトリウム(238mg、6.26mmol)を少しずつ添加した。添加後、反応混合物を室温で30分間攪拌した。塩化アンモニウム(20mL)を添加し、得られた混合物を酢酸エチル(2×50mL)で抽出した。有機層を食塩水(50mL)で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮して化合物J-103；6-(ヒドロキシメチル)-9-メチル-9-ヒドロ-2H-1,3-ジオキソレノ[4,5-h]キノリン-8-オンを黄色固体として得た(311mg、収率43％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,DMSO-d6)：
δ(ppm)：7.27(d,J=8.4Hz,1H),6.94(d,J=8.4Hz,1H),6.51(s,1H),6.11(s,2H),5.47(t,J=6.6Hz,1H),4.66(d,J=6.6Hz,2H),3.74(s,3H)
MS Calcd.：233
MS Found：234([M＋H]＋)【００８１】
例4：構造式(3)で表される化合物(化合物J-125a)の合成
【化７】
2014171527.tif 000009
【００８２】
トルエン(150mL)中の構造式(C-1)で表される化合物(25g, 203mmol)とジケテン(20.5g, 24mmol)の混合物を120℃で一晩攪拌した。反応物を濃縮し、残留物をシリカクロマトグラフィー(石油エーテル(石油エーテル)/酢酸エチル)＝10/1〜2/1)で精製してN-(2-メトキシフェニル)-3-オキソ-ブチルアミドを黄色固体として得た(37.5g, 収率89％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,CDCl3)：
δ(ppm)：2.33(s,3H),3.59(s,2H),3.91(s,3H),6.87-6.97(m,2H),7.03-7.08(m,1H),8.32(dd,J=1.5,7.8Hz,1H),9.22(brs,1H)【００８３】
PPA 60mLにN-(2-メトキシフェニル)-3-オキソ-ブチルアミド(31.0g, 150mmol)を110℃で攪拌しながら添加した。反応物を115℃で一晩攪拌した。反応混合物を氷水に加熱しながらゆっくりと注いだ。混合物を15分間攪拌した後、ろ過した。ろ液をNaHCO3(固体)で中和してpHを7とし、ろ過により析出物を回収して、これを真空乾燥することにより8-メトキシ-4-メチル-1H-キノリン-2-オンを黄色固体として得た(21.8g, 収率76％)。
1H-NMRスペクトル(400MHz,DMSO-d6)：
δ(ppm)：2.39(s,3H),3.87(s,3H),6.40(s,1H),7.12-7.14(m,2H),7.25-7.28(m,1H),10.57(brs,1H)【００８４】
DMF(250mL)中の8-メトキシ-4-メチル-1H-キノリン-2-オン(21.8g, 15.3mmol)の溶液に、NaH(油中60％、13.8g, 346mmol)を室温で少しずつ添加し、同温で1時間攪拌した。次いで、混合物をオートクレーブに移し、CH3I(32.8g, 230.7mmol)を添加した。反応物をオートクレーブ中60℃で一晩攪拌し、室温まで冷却し、500mLの氷水に注いだ。混合物を酢酸エチル(EA)で抽出し、合わせた有機層を水、食塩水で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、ろ過した。溶媒を除去し、残留物をシリカクロマトグラフィー(石油エーテル/EA＝10/1〜2/1)で精製して8-メトキシ-1,4-ジメチル-1H-キノリン-2-オンを黄色固体として得た(15g, 収率63.8％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,DMSO-d6)：
δ(ppm)：2.38(s,3H),3.75(s,3H),3.87(s,3H),6.51(s,1H),7.19-7.29(m,2H),7.33-7.36(m,1H)【００８５】
ジオキサン(150mL)中の8-メトキシ-1,4-ジメチル-1H-キノリン-2-オン(15.0g, 73.5mmol)とSeO2(40.6g, 368mmol)の懸濁物を125℃で3日間攪拌した。反応物を冷却しセライトでろ過した。ろ液を真空下にて溶媒留去し8-メトキシ-1-メチル-2-オキソ-1,2-ジヒドロキノリン-4-カルボアルデヒドの粗生成物を得て(16.1g, 定量的)、次の反応に精製することなく用いた。【００８６】
メタノール150mL中の8-メトキシ-1-メチル-2-オキソ-1,2-ジヒドロキノリン-4-カルボアルデヒド(16.0g, 73.7mmol)の混合物に、NaBH4を室温で少しずつ添加した。反応物を30分間攪拌し、水(100mL)でクエンチし、真空下にて120mLまで濃縮した。混合物をジクロルメタンで抽出し、合わせた有機層を水、食塩水で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、ろ過した。溶媒を真空下にて溶媒留去し、4-ヒドロキシメチル-8-メトキシ-1-メチル-1H-キノリン-2-オンの粗生成物を黄色固体として得て(16.3g, 定量的)、次の反応に精製することなく用いた。【００８７】
HBr(40％、150mL)中の4-ヒドロキシメチル-8-メトキシ-1-メチル-1H-キノリン-2-オンの混合物を130℃で一晩攪拌した。反応物を冷却しろ過した。ケーキを水、ジエチルエーテルで洗浄した後、真空乾燥して4-ブロモメチル-8-ヒドロキシ-1-メチル-1H-キノリン-2-オンを得て(16g, 収率81％)、次の反応に精製することなく用いた。【００８８】
DMF(250mL)中の4-ブロモメチル-8-ヒドロキシ-1-メチル-1H-キノリン-2-オン(14g, 52mmol)と酢酸カリウム(KOAc；15.0g, 156mmol)の混合物を100℃で3時間攪拌した。反応物を水で希釈し酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を水、食塩水で洗浄し乾燥した。溶媒を真空下にて溶媒留去し、残留物を酢酸エチル/ジエチルエーテルで処理して8-ヒドロキシ-1-メチル-2-オキソ-4-ヒドロキノリル)メチル・アセテートをオフホワイトの固体として得た(5.7g, 収率44％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,DMSO-d6)：
δ(ppm)：2.15(s,3H),3.85(s,3H),5.29(s,2H),6.56(s,1H),7.09-7.15(m,3H),10.15(brs,1H)【００８９】
無水酢酸60mL中の8-ヒドロキシ-1-メチル-2-オキソ-4-ヒドロキノリル)メチル・アセテート(4.73g, 19.2mmol)の懸濁物に、HNO3(65％〜68％、1.17mL、0.9eq)と酢酸(3.52mL)の溶液を-3℃〜3℃で添加した。混合物を同温でさらに3時間攪拌した。反応物を氷水でクエンチし、酢酸エチルで抽出し、合わせた有機層を水、食塩水で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、ろ過し、溶媒を真空下で溶媒留去した。残留物をシリカカラムクロマトグラフィー(100％ジクロロメタン〜ジクロルメタン/メタノール＝200/1)で精製して固体を得た。得られた固体をジエチルエーテル/エタノールで処理してより高精製度の(8-ヒドロキシ-1-メチル-7-ニトロ-2-オキソ-4-ヒドロキノリル)メチル・アセテート；1.9g, 収率25％)を得た。
1H-NMRスペクトル(300MHz,DMSO-d6)：
δ(ppm)：2.15(s,3H),3.86(s,3H),5.33(s,2H),6.80(s,1H),7.35(d,J=9.0Hz,1H),7.81(d,J=9.0Hz,1H)【００９０】
エタノール/水(150mL/75mL)中の(8-ヒドロキシ-1-メチル-7-ニトロ-2-オキソ-4-ヒドロキノリル)メチル・アセテート(1.9g, 6.5mmol)の懸濁物に、Na2S2O4(2.26g, 13.0mmol)を室温で添加し、混合物を75℃で30分間攪拌した。反応物を冷却し、水で希釈し、酢酸エチル/メタノール(20/1)で抽出した。合わせた有機層を水、食塩水で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、ろ過した。溶媒を真空下にて溶媒留去し、残留物をエタノール/ジエチルエーテルで処理して(7-アミノ-8-ヒドロキシ-1-メチル-2-オキソ-4-ヒドロキノリル)メチル・アセテート；1.15g, 収率65％)を黄色固体として得た。
1H-NMRスペクトル(300MHz,DMSO-d6)：
δ(ppm)：2.14(s,3H),3.79(s,3H),5.22(s,2H),6.19(s,1H),6.67(d,J=9.0Hz,1H),7.06(d,J=9.0Hz,1H)【００９１】
水/DMF(35mL/130mL)の溶液中、(7-アミノ-8-ヒドロキシ-1-メチル-2-オキソ-4-ヒドロキノリル)メチル・アセテート(1.15g, 4.39mmol)と無水酢酸(1.8g, 17.6mmol)の混合物を室温で一晩攪拌した。反応物を水に注いだ。析出物をろ過により回収し、真空乾燥して[7-(アセチルアミノ)-8-アセチルオキシ-1-メチル-2-オキソ-4-ヒドロキノリル]メチル・アセテートを白色固体として得た(1.2g, 収率79％)。【００９２】
メタノール/水(50mL/5mL)の溶液中、[7-(アセチルアミノ)-8-アセチルオキシ-1-メチル-2-オキソ-4-ヒドロキノリル]メチル・アセテート(1.2g, 3.46mmol)の混合物を還流下2.5時間攪拌した。次いで、反応物を濃縮し、固体をろ過により回収し真空乾燥して[7-(アセチルアミノ)-8-ヒドロキシ-1-メチル-2-オキソ-4-ヒドロキノリル]メチル・アセテートを白色固体として得た(0.89g, 収率84.7％)。【００９３】
DMF(20mL)中の[7-(アセチルアミノ)-8-ヒドロキシ-1-メチル-2-オキソ-4-ヒドロキノリル]メチル・アセテート(500mg、1.64mmol)の溶液にCH2I2(440mg、16.5mmol)とCs2CO3(1.15g, 4.94mmol)を室温で添加した。反応物を40℃で3時間攪拌し、水でクエンチした。混合物を酢酸エチルで抽出し、合わせた有機層を水、食塩水で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、ろ過した。溶媒を真空下で溶媒留去し、残留物を酢酸エチル/ジエチルエーテルで処理して(3-アセチル-9-メチル-8-オキソ-9-ヒドロ-2H-1,3-オキサゾリノ[4,5-h]キノリン-6-イル)メチル・アセテートを褐色固体として得た(380mg、収率73％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,DMSO-d6)：
δ(ppm)：2.15s,3H),3.86(s,3H),5.33(s,2H),6.80(s,1H),7.35(d,J=9.0Hz,1H),7.81(d,J=9.0Hz,1H)【００９４】
テトラヒドロフラン/メタノール(38mL/38mL)中の(3-アセチル-9-メチル-8-オキソ-9-ヒドロ-2H-1,3-オキサゾリノ[4,5-h]キノリン-6-イル)メチル・アセテート(380mg、120mmol)の懸濁物に、塩化アセチル190μLを0℃〜5℃で添加した。反応物を室温で2日間攪拌し、次いで水で希釈した。混合物を40℃で濃縮し酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を食塩水で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、ろ過した。溶媒を真空下で溶媒留去し、残留物を分取用HPLCで精製して化合物J-125a；3-アセチル-6-(ヒドロキシメチル)-9-メチル-8-オキソ-9-ヒドロ-2H-1,3-オキサゾリノ[4,5-h]キノリンを得て(52mg、収率15％)、これを凍結乾燥により乾燥した(抹茶色粉末)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,CDCl3)：
δ(ppm)：2.14(s,3H),3.77(s,3H),4.67(d,J=4.5Hz,2H),5.48(t,J=5.7,1H),6.09(s,1H),6.55(s,1H),7.28(d,J=8.7Hz,1H),7.74(d,J=8.1Hz,1H)
MS Calcd.：274
MS Found：275([M＋1]＋)【００９５】
例5：構造式(5)で表される化合物(化合物J-2.1.1)の合成＞
8-ヒドロキシ-4-メチルキノリン-2(1H)-オン1.75g(10mmol)にクロロホルム40mLとメタノール10mLとを加えて0℃に冷却して撹拌した。この溶液に臭素0.56mL(11mmol)を滴下した。滴下終了後、氷冷下0℃〜5℃で2時間撹拌して反応を完結させた。この反応液を水  150mL中に注いで結晶を析出させた。結晶をろ過し、水洗して乾燥した。1.65gの7-ブロモ-8-ヒドロキシ-4-メチルキノリン-2(1H)-オンを得て、精製せずに次工程に使用した。【００９６】
7-ブロモ-8-ヒドロキシ-4-メチルキノリン-2(1H)-オ2.50g(10mmol)と炭酸カリウム6.9g(50mmol)に、ジメチルアセトアミド50mLを加えて55℃〜60℃に加熱して撹拌した。この分散液にジブロモメタン5.2g(30mmol)を添加した。添加終了後、3時間撹拌して反応を完結させた。反応終了後、反応液を水  200mL中に注ぎ、クロロホルム100mLで抽出した。クロロホルム溶液を飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。クロロホルムを減圧下で濃縮し、残留物をシリカゲルクロマトグラフィー(溶離液：クロロホルム/酢酸エチル＝20/1(体積比))で分離精製した。アモルファス状の9-ブロモ-6-メチルオキサゾロ[5,4,3-ij]キノリン-4(2H)-オンを1.32g得て、精製せずに次工程に使用した。【００９７】
9-ブロモ-6-メチルオキサゾロ[5,4,3-ij]キノリン-4(2H)-オン53.2mg(0.2mmol)、1-(4-ヒドロキシフェニル)-3,3,4,4-テトラメチルボロラン-2,5-ジオン52.8mg(0.24mmol)、リン酸カリウム  212.3mg(1.0mmol)、Pd(dba)3(0)9mg(0.01mmol)、及びトリフェニルホスフィン10.5mg(0.04mmol)にトルエン10mLを加えて、アルゴンガス気流下に65℃〜70℃に5時間加熱して撹拌して反応を完結させた。反応終了後、反応液をシリカゲルクロマトグラフィーにチャージした。溶離液を、クロロホルム単独から、クロロホルム/酢酸エチル＝10/1(体積比)、クロロホルム/酢酸エチル＝5/1(体積比)、クロロホルム/酢酸エチル＝2/1(体積比)に順次変更して分離精製した。目的物を含有する溶出液を減圧下に濃縮して残留物に酢酸エチル10mLを加えて結晶を析出させた。この結晶をろ過して乾燥して化合物J-2.1.1；9-(ヒドロキシフェニル)-6-メチルオキサゾロ[5,4,3-ij]キノリン-4(2H)-オンを白色粉末として得た(15mg、収率26.8％)。
1H-NMRスペクトル(400MHz,DMSO-d6)：
δ(ppm)：9.78(1H,s),7.71(2H,d),7.40(1H,d),7.28(1H,d),6.89(2H,d)6.42(1H,s),6.39(2H,s),2.44(3H,s)【００９８】
例6：構造式(4)で表される化合物(化合物J-2.1.2)の合成
9-ブロモ-6-メチルオキサゾロ[5,4,3-ij]キノリン-4(2H)-オン2.0g(7.5mmol)と酸化セレン  1.25g(11.3mmol)に、1,2-ジクロロベンゼン15mLを加えて145℃〜150℃に加熱して4時間撹拌して反応を完結させた。反応終了後、反応液にクロロホルム20mLを加えてシリカゲルクロマトグラフィーにチャージした。溶離液にクロロホルムを使用してカラムクロマトグラフィーで分離精製した。目的物を含有する溶出液を減圧下で濃縮して9-ブロモ-4-オキソ-2,4-ジヒドロオキサゾロ[5,4,3-ij]キノリン-6-カルボアルデヒドを結晶として得られ、この化合物を精製せずに次工程に使用した。【００９９】
9-ブロモ-4-オキソ-2,4-ジヒドロオキサゾロ[5,4,3-ij]キノリン-6-カルボアルデヒド0.84g(3.0mmol)にメタノール20mLを加えて分散させた。この分散液にNaBH4 340mgを室温で添加した。添加終了後、室温で2時間撹拌して反応を完結させてから水50mLを添加して結晶を析出させた。この結晶をろ過して水洗して乾燥し9-ブロモ-6-(ヒドロキシメチル)オキサゾロ[5,4,3-ij]キノリン-4(2H)-オンを得て、この化合物を精製せずに次工程に使用した。【０１００】
Pd(dba)3 8mg(0.0087mmol)、トリフェニルホスフィン5mg(0.19mmol)にジメチルエーテル10mLを加えてアルゴンガス気流下に60℃に加熱して30分間撹拌した。この溶液に、リン酸カリウム105mgと、1-(4-ヒドロキシフェニル)-3,3,4,4-テトラメチルボロラン-2,5-ジオン54mg(2.45mmol)と9-ブロモ-6-(ヒドロキシメチル)オキサゾロ[5,4,3-ij]キノリン-4(2H)-オン46mg(0.163mmol)とを順次添加した。添加終了後、95℃〜100℃に加熱して10時間撹拌して反応を完結させた。反応終了後、反応液を室温まで冷却してから水  50mL中に注ぎ、濃塩酸を添加してpH5〜6に調整し、結晶を析出させた。この結晶をシリカゲルクロマトグラフィー(溶離液：クロロホルム、次いで、クロロホルム/酢酸エチル＝2/1〜1/1(体積比))で分離精製した。目的物を含有する溶出液を減圧下で濃縮して残留物にメタノールを添加して結晶を析出させた。この結晶をろ過して乾燥し化合物J-2.1.2；6-(ヒドロキシメチル)-9-(4-ヒドロキシフェニル)オキサゾロ[5,4,3-ij]キノリン-4(2H)-オンをベージュ色の粉末として得た(16.7mg、収率34.7％)。
1H-NMRスペクトル(400MHz,DMSO-d6)：
δ(ppm)：9.78(1H,s),7.70(2H,d),7.34(1H,d),7.26(1H,d),6.55(1H,s)6.39(2H,s),5.63(1H,t),4.77(2H,d)【０１０１】
例7：構造式(8)で表される化合物(化合物J-146)の合成
3,4-ジフルオロアニリン(6.46g、0.05mol)にアセトニトリル20mLを加えて5℃〜10℃で撹拌した。この溶液にジケテン5.0g(0.05mol)を滴下した。滴下終了後、5℃で30分間撹拌した後、室温で1時間撹拌して反応を完結させた。反応終了後、反応液を水300mL中に注いで結晶を析出させた。この結晶をろ過し、水洗して乾燥しN-(3,4-ジフルオロフェニル)-3-オキソブタンアミドを得て(7.90g、収率74.1％)、精製せずに次工程に使用した。【０１０２】
N-(3,4-ジフルオロフェニル)-3-オキソブタンアミド5.5g(0.0258mol)に酢酸30mLを加えて室温で撹拌した。この溶液に臭素4.54g(0.0284mol)を滴下した。滴下終了後、室温で4時間撹拌して一晩放置した。この反応液にアセトン5mLを添加して室温で3時間撹拌した後、酢酸エチル200mLと水300mLとを加えて抽出した。この酢酸エチル溶液を飽和食塩水で洗浄し、次いで飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄した後、酢酸エチル溶液を無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧下で酢酸エチルを留去し、油状の4-ブロモ-N-(3,4-ジフルオロフェニル)-4-メチル-3-オキソペンタンアミドを得て(7.50g)、精製せずに次工程に使用した。
1H-NMRスペクトル(400MHz,CDCl3)：
δ(ppm)：8.85(0.72H,brS),7.64-7.58(1H,m),7.30(0.28H,brs),7.13-7.09(2H,m),5.29(0.28H,s),4.11(1.72H,s),3.86(0.28H,s),3.83(1.72H,s)【０１０３】
4-ブロモ-N-(3,4-ジフルオロフェニル)-4-メチル-3-オキソペンタンアミド7.50g(0.0257mol)に濃硫酸35mLを加えて75℃〜80℃に加熱して4時間撹拌した後、一晩放置した。この反応液に、さらに濃硫酸10mLを添加して75℃〜80℃に加熱して3時間撹拌し反応を完結させた。反応終了後、反応液を室温に冷却してから氷水300mL中に撹拌しながら注いで結晶を析出させた。この結晶をろ過して水洗し乾燥した。次いで、アセトニトリル  75mLを加えて室温で撹拌分散した。この結晶をろ過して乾燥して4-(ブロモメチル)-6,7-ジフルオロキノリン-2(1H)-オンを得て(5.0g、収率66.2％)、精製せずに次工程に使用した。【０１０４】
酢酸ナトリウム4.5gにDMSO 20mLを加えて室温で撹拌した。この分散液に4-(ブロモメチル)-6,7-ジフルオロキノリン-2(1H)-オン5.0g(18.2mmol)を添加した。この溶液を室温で2時間撹拌して反応を完結させた。反応終了後、反応液を水150mL中に注いで結晶を析出させた。この結晶をろ過して水洗した。ウエット状態の(6,7-ジフルオロ-2-オキソ-1,2-ジヒドロキノリン-4-イル)メチル・アセテートを得た。【０１０５】
ウエット状態の(6,7-ジフルオロ-2-オキソ-1,2-ジヒドロキノリン-4-イル)メチル・アセテートにメタノール35mLを加えて室温で撹拌した。この分散液に水酸化ナトリウム1.5gを水15mLに溶解させた水溶液を添加した。添加終了後、室温で2時間撹拌して反応を完結させた後、水100mLを添加して希釈した。この水溶液に濃塩酸を滴下してpH4〜5に調整して結晶を析出させた。この結晶をろ過して水洗し、次いでこの結晶をアセトニトリル50mLに分散させて洗浄し、ろ過して乾燥して6,7-ジフルオロ-4-(ヒドロキシメチル)キノリン-2(1H)-オンを得た(3.88g、2工程収率72.0％)。得られた化合物は精製せずに次工程に使用した。【０１０６】
6,7-ジフルオロ-4-(ヒドロキシメチル)キノリン-2(1H)-オン1.06g(5mmol)、1-メチルピペラジン2.0g(20mmol)にDMSO 10mLを加えて80℃〜85℃に加熱して20時間撹拌した。反応終了後、反応液に水25mLを滴下して結晶を析出させ、ろ過して水洗した。この結晶をアセトニトリル25mLと水50mLとの混合液に分散させて洗浄し、ろ過して乾燥して6-フルオロ-4-(ヒドロキシメチル)-7-(4-メチルピペラジン-1-イル)キノリン-2(1H)-オンを得た(1.10g、収率75.3％)。
1H-NMRスペクトル(400MHz,DMSO-d6)：
δ(ppm)：11.45(1H,s),7.41(1H,d),6.88(1H,d),6.40(1H,s),5.46(1H,t),4.64(2H,d),3.07-3.06(4H,brm),＊2.51-2.5(4H,br),2.23(3H,s)  ＊2.51-2.5付近は、DMSOのジメチル基プロトンと重なったため、積分値が確定しなかった。【０１０７】
シクロプロピルボロン酸水和物0.73g(7mmol)にベンゼン20mLを加えて窒素ガスを通じながら加熱してベンゼンを留去した。残留物に乾燥トルエン30mLを添加して撹拌した。この分散液に6-フルオロ-4-(ヒドロキシlメチル)-7-(4-メチルピペラジン-1-イル)キノリン-2(1H)-オン1.02g(3.5mmol)、ジメチルアミノピリジン1.28g(10.5mmol)、酢酸銅0.64g(3.5mmol)、及びナトリウムビス(トリメチルシリル)アミド(NaHMDS；1.9M/THF溶液)2.1mL(3.9mmol)を順次添加した。添加終了後、空気をバブリングしながら90℃〜100℃に加熱して2時間撹拌した。反応終了後、反応液を室温に冷却してからクロロホルム100mLと、メタノール5mLとを添加して撹拌した。セライトを使用して不溶解物を除去してから濾液を減圧下で濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(溶離液：クロロホルム、次いで、クロロホルム/メタノール＝20/1〜10/1(体積比))で分離精製した。目的物を含有する溶出液を減圧下で濃縮して残留物に酢酸エチルを添加して結晶を析出させた。この結晶をろ過して乾燥して化合物J-146；1-シクロプロピル-6-フルオロ-4-(ヒドロキシメチル)-7-(4-メチルピペラジン-1-イル)キノリン-2(1H)-オンを白色粉末として得た(130mg、収率11.0％)。なお、HPLC純度(254nm)は95.98％であった。
1H-NMRスペクトル(400MHz,CDCl3)：
δ(ppm)：7.33-7.28(2H,m),6.65(1H,s),4.79(2H,s),3.24(4H,t),2.91-2.83(1H,m),2.65(4H,t),2.38(3H,s),1.37-1.28(2H,m),0.87-0.83(2H,m)【０１０８】
例8：構造式(7)で表される化合物(化合物J-147)の合成
6,7-ジフルオロ-4-(ヒドロキシメチル)キノリン-2(1H)-オン2.11g(0.01mol)、4-ヒドロキシピペリジン2.0g(0.02mol)、及びジイソプロピルエチルアミン3.1gにDMSO 20mLを加えて85℃〜90℃に加熱して12時間撹拌した。反応終了後、反応液を水200mL中に撹拌しながら注いで結晶を析出させた。この結晶をろ過して水洗し乾燥した。この結晶をシリカゲルクロマトグラフィー(溶離液：クロロホルム、次いで、クロロホルム/メタノール＝20/1〜4/1(体積比))で分離精製した。目的物を含有する溶出液を減圧下で濃縮して残留物に酢酸エチルを添加して結晶を析出させた。この結晶をろ過して乾燥して6-フルオロ-4-(ヒドロキシメチル)-7-(4-ヒドロキシピペリジン-1-イル)キノリン-2(1H)-オンを得た(1.5g、収率51.3％)。なお、本合成で得られた目的物は出発原料の化合物を約10％程度含有するが、精製せずに次工程に使用した。【０１０９】
シクロプロピルボロン酸水和物0.84g(8.1mmol)にベンゼン  20mLを加えて窒素気流下で加熱してベンゼンを留去した。残留物にトルエン20mLを加えて室温で撹拌した。この分散液に6-フルオロ-4-(ヒドロキシメチル)-7-(4-ヒドロキシピペリジン-1-イル)キノリン-2(1H)-オン1.18g(4.04mmol)、ジメチルアミノピリジン1.48g(12.1mmol)と、酢酸銅0.72g(4.04mmol)、NaHMDS(1.9M/THF溶液)2.6mL(4.85mmol)を順次添加した。添加終了後、この反応液に空気をバブリングしながら95℃〜100℃に加熱して2時間撹拌した。反応終了後、反応液を室温に冷却してから水100mL中に撹拌しながら注いだ。析出した結晶をろ過して水洗し乾燥した。この結晶をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(溶離液：クロロホルム、次いで、クロロホルム/メタノール＝10/1)で分離精製した。目的物を含有する溶出液を減圧下で濃縮し、残留物に酢酸エチルを添加して結晶を析出させた。この結晶をろ過して乾燥して化合物J-147；1-シクロプロピル-6-フルオロ-4-(ヒドロキシメチル)-7-(4-ヒドロキシピペリジン-1-イル)キノリン-2(1H)-オンを薄黄色粉末として得た(430mg、収率32.1％)。なお、HPLC純度(254nm)は98.1％であった。
1H-NMRスペクトル(400MHz,DMSO-d6)：
δ(ppm)：7.42(1H,d),7.34(1H,d),6.42(1H,s),5.43(1H,t),4.78(1H,d),4.62(2H,d),3.71-3.66(1H,m),3.44-3.40(2H,m),2.96-2.88(3H,m),1.92-1.88(2H,m),1.62-1.53(2H,m),1.36-1.24(2H,m),0.78-0.65(2H,m)【０１１０】
例9：構造式(9)で表される化合物(化合物J-132)の合成
【化８】
2014171527.tif 000010
トルエン(70mL)中で構造式(I-1)で表される化合物(7.60g, 40mmol)及び構造式(I-1A)で表される化合物(5.56g, 47.9mmol)の混合物を加熱還流し、一晩攪拌した。室温まで冷却した後、混合物を加圧下で濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(石油エーテル/酢酸エチル＝100：0〜2：1)で精製して、N-(3-ブロモ-4-フルオロフェニル)-3-オキソブタンアミド(7.11g, 収率65％)を黄色固体として得た。
1H-NMRスペクトル(300MHz,CDCl3)：
δ(ppm)：2.33(s,3H),3.59(s,2H),7.04-7.10(m,1H),7.39-7.45(m,1H),7.85-7.88(m,1H), 9.27(brs,1H)【０１１１】
CF3SO3H(40mL)中のN-(3-ブロモ-4-フルオロフェニル)-3-オキソブタンアミド(5.46g, 19.9mmol)の溶液を室温で3日間攪拌した。次いで、混合物を氷(200g)に注ぎろ過した。固体を水で洗浄し、アセトニトリル(40mL)で粉砕して7-ブロモ-6-フルオロ-4-メチルヒドロキノリン-2-オンを白色固体として得た(2.98g, 収率58％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,DMSO-d6)：
δ(ppm)：2.39(s,3H),6.48(s,1H),7.56-7.58(m,1H),7.69-7.72(m,1H),11.68(brs,1H)【０１１２】
DMSO(4mL)中の7-ブロモ-6-フルオロ-4-メチルヒドロキノリン-2-オン(290mg、1.13mmol)及びK2CO3(234mg、1.70mmol)の溶液に、CH3I(209mg、1.47mmol)を添加し、混合物を60℃で15時間攪拌した。室温まで冷却した後、反応混合物を水(40mL)で希釈し、次いで酢酸エチル(80mL)で抽出した。有機層を水(40mL)、食塩水(40mL)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、ろ過し、濃縮した。残留物を石油エーテル/酢酸エチル＝20：1で粉砕して7-ブロモ-6-フルオロ-1,4-ジメチルヒドロキノリン-2-オンを黄色固体として得た(198mg、収率65％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,CDCl3)：
δ(ppm)：2.41(s,3H),3.67(s,3H),6.64(s,1H),7.41(d,J=9.3Hz,1H),7.56(d,J=5.7Hz,1H)【０１１３】
キシレン(4mL)中の7-ブロモ-6-フルオロ-1,4-ジメチルヒドロキノリン-2-オン(198mg、0.733mmol)及びSeO2(488mg、4.40mmol)の混合物を加熱還流し、2日間攪拌した。室温まで冷却した後、得られた混合物をろ過し、減圧下で濃縮した。残留物をTLC(ジクロルメタン/メタノール＝30：1)で精製して7-ブロモ-6-フルオロ-1-メチル-2-オキソヒドロキノリン-4-カルボアルデヒドを黄色固体として得た(135mg、収率65％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,CDCl3)：
δ(ppm)：3.75(s,3H),7.23(s,1H),7.63(d,J=6.0Hz,1H),8.71(d,J=9.6Hz,1H),10.07(s,1H)【０１１４】
メタノール(5mL)中の7-ブロモ-6-フルオロ-1-メチル-2-オキソヒドロキノリン-4-カルボアルデヒド(135mg、0.475mmol)の溶液にNaBH4(36mg、0.95mmol)を室温で添加し、次いで混合物を室温で0.5時間攪拌した。得られた混合物を酢酸エチル(50mL)、水(25mL)で希釈し、酢酸エチル(50mL)で抽出した。有機層を水(40mL)、食塩水(40mL)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、ろ過し、濃縮して7-ブロモ-6-フルオロ-4-(ヒドロキシメチル)-1-メチルヒドロキノリン-2-オンを白色固体として得た(131mg、収率94％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,CDCl3)：
δ(ppm)：2.40(brs,1H),3.66(s,3H),4.86(d,J=4.8Hz,2H),6.89(s,1H),7.47(d,J=9.0Hz,1H),7.56(d,J=6.0Hz,1H)【０１１５】
【化９】
2014171527.tif 000011
ジオキサン/水＝10/1(11mL)中の7-ブロモ-6-フルオロ-4-(ヒドロキシメチル)-1-メチルヒドロキノリン-2-オン(200mg、0.699mmol)、構造式(I-6A)で表される化合物(115mg、0.839mmol)、K2CO3(145mg、1.05mmol)及び1,1'-ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン-パラジウム(II)ジクロリド-ジクロロメタン錯体(Pd(dppf)Cl2；57mg、0.07mmol)の混合物を80℃に加熱し、窒素ガス雰囲気下で一晩攪拌した。室温まで冷却した後、混合物を減圧下で濃縮し、水を残留物に添加した。懸濁した固体をろ過で回収し、水で洗浄し、酢酸エチル及び酢酸エチル/メタノール＝2：1で粉砕して化合物J-132；7-(4-アミノフェニル)-6-フルオロ-4-(ヒドロキシメチル)-1-メチルヒドロキノリン-2-オンを褐色固体として得た(128mg、収率61％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,DMSO-d6)：
δ(ppm)：3.66(s,3H),4.73(d,J=5.4Hz,2H),5.45(s,2H),5.54(t,J=5.7Hz,1H),6.66-6.69(m,3H),7.39-7.46(m,3H),7.57(d,J=12.3Hz,1H)
MS Calcd.：298
MS Found：299([M＋H]＋)【０１１６】
例10：構造式(14)で表される化合物(化合物J-131)の合成
【化１０】
2014171527.tif 000012
【０１１７】
ジオキサン/水＝10/1(5.5mL)中の構造式(I-6)で表される-ブロモ-6-フルオロ-4-(ヒドロキシメチル)-1-メチルヒドロキノリン-2-オン(131mg、0.458mmol)、構造式(I-6B)で表される化合物(76mg、0.55mmol)、K2CO3(95mg、0.69mmol)、Pd(dppf)Cl2(37mg、0.05mmol)の混合物を80℃に加熱し、窒素ガス雰囲気下で一晩攪拌した。室温まで冷却した後、混合物を減圧下で濃縮し、水(50mL)を残留物に添加し、酢酸エチル(100mL)で抽出した。有機層を食塩水(50mL)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、ろ過し、濃縮した。残留物を薄層クロマトグラフィー(ジクロルメタン/メタノール＝15：1)で精製して、化合物J-131；6-フルオロ-4-(ヒドロキシメチル)-7-(4-ヒドロキシフェニル)-1-メチルヒドロキノリン-2-オンを褐色固体として得た(82mg、収率60％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,DMSO-d6)：
δ(ppm)：3.67(s,3H),4.74(d,J=5.4Hz,2H),5.53(t,J=5.4Hz,1H),6.68(s,1H),6.91(d,J=8.7Hz,2H),7.48-7.54(m,3H),7.61(d,J=12.3Hz,1H),9.75(s,1H)
MS Calcd.：299
MS Found：300([M＋1]＋)【０１１８】
例11：構造式(11)で表される化合物(化合物J-121)の合成
3-ブロモアニリン5.00g(29.1mmol)、K2CO3 12.1g(87.2mmol)、及びDMF 10mLの混合溶液にヨードメタン4.95g(34.9mmol)を加え60℃で2時間加熱攪拌した。その反応液に水30mLを加え酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄、硫酸ナトリウムで乾燥し溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(酢酸エチル：ヘキサン＝1：3)で精製(Rf値0.44)し、N-メチル-3-ブロモアニリンを2.45g(13.1mmol、収率45％)得た。
1H-NMRスペクトル(300MHz,CDCl3)：
δ(ppm)：2.82(3H,s),3.78(1H,br),6.51(1H,d,J=8.1Hz),6.73(1H,s),6.81(1H,d,J=8.1Hz),7.00(1H,t,J=8.1Hz)【０１１９】
【化１１】
2014171527.tif 000013
N-メチル-3-ブロモアニリン(K-2) 2.45g(13.1mmol)、ジケテン1.22g(14.5mmol)、トルエン10mLの混合物を、100℃で6時間加熱攪拌した。溶媒を減圧留去し得られた構造式(K-3)で表される化合物を100℃に加熱してあるポリリン酸10mL中に加え、5時間加熱攪拌した。反応溶液を室温に冷却し水100mLを加え、析出した固体を濾別しヘキサンで洗浄し、構造式(K-4)で表される化合物631mg(2.50mmol、収率19％)を得た。
1H-NMRスペクトル(300MHz,CDCl3)：
δ(ppm)：2.44(3H,s),3.67(3H,s),6.60(1H,s),7.37(1H,dd,J=8.1Hz,1.8Hz),7.53-7.56(2H,m)【０１２０】
【化１２】
2014171527.tif 000014
構造式(K-4)で表される化合物380mg(1.51mmol)、N-ブロモスクシイミド295mg(1.66mmol)、四塩化炭素35mL、及びアゾイソブチロニトリリルを触媒量加えた混合溶液を加熱還流させた。1時間毎にアゾイソブチロニトリリルを触媒量加え、さらに3時間毎にN-ブロモスクシイミドを402mg(0.75mmol)加えた。合計18時間加熱還流させたのちに、溶媒を減圧留去した。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(クロロホルム)で精製し構造式(K-5)で表される化合物220mg(0.665mmol、収率44％)を得た。
1H-NMRスペクトル(300MHz,CDCl3)：
δ(ppm)：3.69(3H,s),4.54(2H,s),6.81(1H,s),7.43(1H,dd,J=8.4Hz,1.8Hz),7.58(1H,d,J=1.8Hz),7.70(1H,d,J=8.4Hz)【０１２１】
【化１３】
2014171527.tif 000015
構造式(K-5)で表される化合物220mg(0.665mmol)とアセトン10mLの懸濁液に2M 炭酸ナトリウム水溶液10mLを加え80℃で10時間加熱攪拌した。反応液に2M HCl水溶液を加え、pH4にし、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄、硫酸ナトリウムで乾燥し溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物にクロロホルム1mLとヘキサン10mLを加え結晶化し、構造式(K-6)で表される化合物を170mg(0.634mmol、収率95％)得た。
1H-NMRスペクトル(300MHz,CDCl3)：
δ(ppm)：3.66(3H,s),4.91(2H,s),6.87(1H,s),7.37(1H,dd,J=8.4Hz,1.8Hz),7.54-7.58(2H,m), OHは同定できなかった。【０１２２】
【化１４】
2014171527.tif 000016
アルゴンガス雰囲気下の構造式(K-6)で表される化合物50mg(0.186mmol)、構造式(K-7)で表される化合物45mg(0.205mmol)、ジオキサン10mL、及び2M 炭酸ナトリウム水溶液1mLの混合溶液に1,1'-ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン-パラジウム(II)ジクロリド-ジクロロメタン錯体を触媒量加え100℃で4.5時間加熱攪拌した。反応液に2M 水酸化ナトリウム水溶液を加えpH10に調整した。セライトろ過し、濾液に2M HCl水溶液を加えpH3とした。その混合物に酢酸エチルを加え抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄、硫酸ナトリウムで乾燥し溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(クロロホルム：メタノール＝5：1)で精製(Rf値0.47)し、構造式(11)で表される化合物J-121を得た(25mg、収率48％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,DMSO-d6)：
δ(ppm)：3.70(3H,s),4.78(2H,d,J=5.7Hz),5.50(1H,t,J=5.7Hz),6.64(1H,s), 6.90(2H,d,J=8.7Hz),7.49(1H,dd,J=8.4Hz,1.8Hz),7.62-7.68(3H,m),7.75(1H,d,J=8.4Hz),9.68(1H,s)【０１２３】
例12：構造式(12)で表される化合物(化合物J-121Me)の合成
【化１５】
2014171527.tif 000017
アルゴンガス雰囲気下の構造式(K-4)で表される化合物250mg(0.992mmol)、構造式(K-7)で表される化合物  240mg(1.09mmol)、ジオキサン5mL、及び2M 炭酸ナトリウム水溶液1.5mLの混合溶液に1,1'-ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン-パラジウム(II)ジクロリド-ジクロロメタン錯体を触媒量加え100℃で2.5時間加熱攪拌した。その混合溶液をセライトろ過し、濾液に2N HCl水溶液を加えpH5に調整した。その混合溶液に酢酸エチルを加え抽出した。その有機層を飽和食塩水で洗浄、硫酸ナトリウムで乾燥し溶媒を減圧留去した。残留物を少量のメタノールで懸濁洗浄後、ろ過し構造式(12)で表される化合物J-121Meを得た(40mg、収率15％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,DMSO-d6)：
δ(ppm)：2.44(3H,s),3.68(3H,s),6.49(1H,s),6.90(2H,d,J=8.4Hz), 7.52(1H,dd,J=8.1Hz,1.5Hz),7.61(1H,s),7.67(2H,d,J=8.4Hz),7.80(1H,d,J=8.1Hz),9.69(1H,s)【０１２４】
例13：構造式(15)で表される化合物(化合物J-157)の合成
【化１６】
2014171527.tif 000018
アセトン(400mL)中の構造式(O-1)で表される化合物(19.6g, 90.0mmol)及び炭酸カリウム(24.9g, 180mmol)の混合物に、ヨードメタン(25.6g, 180mmol)を添加した。混合物を一晩還流した。冷却後、混合物をろ過し、酢酸エチル(100mL)で洗浄した。ろ液を真空下で濃縮した。残留物を酢酸エチルに溶解し、溶液を食塩水で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濃縮して、構造式(O-2)で表される1-ブロモ-2-メトキシ-3-ニトロベンゼンを黄色固体として得た(20.2g, 収率97％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,DMSO-d6)：
δ(ppm)：3.92(s,3H),7.32(d,1H,J=8.1Hz),7.94-8.03(m,2H)【０１２５】
酢酸/水(1：1、600mL)中の1-ブロモ-2-メトキシ-3-ニトロベンゼン(20.1g, 86.6mmol)及び鉄粉末(33.4g, 598mmol)の混合物を80℃で1.5時間加熱した。冷却しろ過した後、固体を酢酸エチル、水で洗浄した。有機層をNaHCO3飽和水溶液で洗浄し、乾燥し、濃縮した。残留物をカラム(石油エーテル：酢酸エチル＝20：1〜10：1)で精製して3-ブロモ-2-メトキシフェニルアミンを黄色固体として得た(17.4g, 収率99％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,DMSO-d6)：
δ(ppm)：3.66(s,3H),5.23(s,2H),6.64-6.76(m,3H)【０１２６】
トルエン中の3-ブロモ-2-メトキシフェニルアミン(16.8g, 83.2mmol)及び2-オキセタノン(8.40g, 99.8mmol)の溶液を140℃で6時間攪拌した。室温まで冷却し、一晩攪拌した。混合物を真空下で濃縮した。残留物をカラム(石油エーテル：酢酸エチル＝10：1〜3：1)で精製してN-(3-ブロモ-2-メトキシフェニル)-3-オキソブタンアミドを白色固体として得た(15.6g, 収率66％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,DMSO-d6)：
δ(ppm)：2.20(s,3H),3.72(s,2H),3.74(s,3H),7.05(d,1H,J=8.1Hz),7.35(dd,1H,J=8.1,1.5Hz),8.05(dd,1H,J=8.4,1.8Hz),9.77(s,1H)【０１２７】
ジクロルメタン(60mL)中のN-(3-ブロモ-2-メトキシフェニル)-3-オキソブタンアミド(5.72g, 20.0mmol)及びCF3SO3H(75.0g, 50.0mmol)の混合物を室温で一晩攪拌した。混合物を氷水に注ぎ、ろ過した。残留物をカラム(石油エーテル：酢酸エチル＝5：1)で精製して7-ブロモ-8-メトキシ-4-メチルヒドロキノリン-2-オンを白色固体として得た(4.13g, 収率77％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,DMSO-d6)：
δ(ppm)：2.40(d,3H,J=1.2Hz),3.81(s,3H),6.46(s,1H),7.37-7.44(m,2H),11.23(brs,1H)【０１２８】
7-ブロモ-8-メトキシ-4-メチルヒドロキノリン-2-オン(3.60g, 13.4mmol)、シクロプロピルボロン酸(2.31g, 26.9mmol)、無水酢酸第一銅(2.44g, 13.4mmol)、N,N-ジメチル-4-アミノピリジン(DMAP；4.92g, 40.3mmol)、リチウムビス(トリメチルシリル)アミドLiHMDS；20mL、1N)及びトルエン(100mL)を入れた。混合物を大気中95℃で一晩攪拌した。冷却後、混合物を真空下で濃縮した。残留物を酢酸エチル(3×50mL)で抽出し、食塩水で洗浄し、乾燥し、濃縮した。残留物をカラム(石油エーテル：酢酸エチル＝7：1)で精製して7-ブロモ-1-シクロプロピル-8-メトキシ-4-メチルヒドロキノリン-2-オンを白色固体として得た(418mg、収率10％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,CDCl3)：
δ(ppm)：0.56-0.58(m,2H),1.16-1.23(m,2H),2.37(s,3H),3.36-3.43(m,1H),3.72(s,3H),6.47(d,1H,J=1.2Hz),7.24-7.27(m,1H),8.09(d,1H,J=8.7Hz)【０１２９】
キシレン(20mL)中の7-ブロモ-1-シクロプロピル-8-メトキシ-4-メチルヒドロキノリン-2-オン(110mg、0.36mmol)及びSeO2(396mg、3.60mmol)の懸濁物を150℃で一晩攪拌した。次いでSeO2(396mg、3.60mmol)を反応物に添加し、150℃で一晩攪拌した。室温まで冷却した後、水(50mL)を添加し、混合物を酢酸エチル(3×50mL)で抽出した。合わせた有機層を食塩水で洗浄し、乾燥し、濃縮して7-ブロモ-1-シクロプロピル-8-メトキシ-2-オキソヒドロキノリン-4-カルボアルデヒドを褐色固体として得た(115mg、収率100％)。【０１３０】
メタノール(20mL)中の7-ブロモ-1-シクロプロピル-8-メトキシ-2-オキソヒドロキノリン-4-カルボアルデヒド(115mg、1.21mmol)の氷冷溶液に、水素化ホウ素ナトリウム(92mg、2.42mmol)を少しずつ添加した。添加後、反応混合物を室温で0.5時間攪拌した。濃縮し、酢酸エチルを用いた分取用TLCで精製して7-ブロモ-1-シクロプロピル-4-(ヒドロキシメチル)-8-メトキシヒドロキノリン-2-オンを黄色固体として得た(60mg、収率52％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,CDCl3)：
δ(ppm)：0.49-0.55(m,2H),1.15-1.25(m,2H),3.37-3.42(m,1H),3.72(s,3H),4.85(s,2H),6.78(s,1H,),7.24-7.27(m,1H),7.42(d,1H,J=8.7Hz)【０１３１】
ジオキサン/水(20mL/2mL)中の7-ブロモ-1-シクロプロピル-4-(ヒドロキシメチル)-8-メトキシヒドロキノリン-2-オン(145mg、0.45mmol)、4-ヒドロキシフェニルボロン酸(125mg、0.90mmol)、PdCl2(dppf)(45mg)及び炭酸カリウム(125mg、0.67mmol)の混合物を、窒素ガス雰囲気下80℃で一晩攪拌した。ろ過と濃縮を行った。残留物をカラム(ジクロロメタン〜ジクロロメタン/メタノール＝10：1)で精製して、化合物J-157；1-シクロプロピル-8-メトキシl-4-(ヒドロキシメチル)-7-(4-ヒドロキシフェニル)ヒドロ-キノリン-2-オンを黒色固体として得た(89mg、収率59％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,DMSO-d6)：
δ(ppm)：0.45-0.46(m,2H),1.07-1.15(m,2H),3.23(s,3H),3.29-3.33(s,1H),4.68(s,2H),5.46(brs,1H),6.50(s,1H),6.85(d,2H,J=8.7Hz),7.17(d,1H,J=8.1Hz),7.40-7.44(m,3H)
MS Calcd.：337
MS Found：338([M＋1])【０１３２】
例14：構造式(17)で表される化合物(化合物J-144)の合成
【化１７】
2014171527.tif 000019
水(18mL)及びイロプロパノール(18mL)中の構造式(Q-1)で表される化合物(5.0g, 25mmol)及びNaOH(2.0g, 50mmol)の混合物に構造式(Q-1A)で表される化合物(3.31g, 27.5mmol)を20℃で滴下し、同温で0.5時間攪拌した。次いで、10℃まで冷却し、水(50mL)を添加し、ろ過して、白色固体を得た。得られた固体をEA(150mL)に溶解し、食塩水(50mL)で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮して、N-[(4-ブロモフェニル)エチル]-2,2-ジメチルプロパンアミドを白色固体として得た(6.27g, 収率88％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,CDCl3)：
δ(ppm)：7.43-7.47(m,2H),7.14-7.19(m,2H),5.75(brs,1H),5.02-5.07(m,1H),1.40-1.46(m,3H),1.21(s,9H)【０１３３】
THF(10mL)中のN-[(4-ブロモフェニル)エチル]-2,2-ジメチルプロパンアミド(2.0g, 7.0mmol)の溶液に、フェニルリチウム(2.0Mブトキシブタン溶液、10.5mL、21.0mmol)を-5℃で滴下し、混合物をこの温度で窒素ガス雰囲気下4時間攪拌した。パラホルムアルデヒド(1.06g)を混合物に添加し、5℃で1時間攪拌した。次いで、水(20mL)を添加し、エトキシエタン(50mL)で抽出し、水(20mL)、食塩水(20mL)で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮した。残留物を、酢酸エチル/石油エーテル(0：100〜1：2)で溶出させるシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製してN-{[4-ブロモ-2-(ヒドロキシメチル)フェニル]エチル}-2,2-ジメチルプロパンアミドを黄色固体として得た(1.74g, 収率79％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,CDCl3)：
δ(ppm)：7.40-7.48(m,2H),7.10-7.12(m,1H),6.10(brs,1H),5.17-5.21(m,1H),4.92-4.97(m,1H),4.65-4.68(m,1H),4.38-4.43(m,1H),1.42-1.47(m,3H),1.16(s,9H)【０１３４】
ジクロルメタン(20mL)中のN-{[4-ブロモ-2-(ヒドロキシメチル)フェニル]エチル}-2,2-ジメチルプロパンアミド(1.74g, 5.54mmol)及びトリエチルアミン(TEA；672mg、6.60mmol)の溶液に、メタンスルホニルクロリド(MsCl；698mg、6.10mmol)を0℃で滴下し、1時間攪拌した。水(10mL)を添加し、pHを2M HCl(aq)で2.0に調整し、ジクロルメタン(20mL)で抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮して{2-[(2,2-ジメチプロパノイルアミノ)エチル]-5-ブロモフェニル}メチル・メチルスルホネートを褐色固体として得た(2.02g, 収率93％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,CDCl3)：
δ(ppm)：7.47-7.55(m,2H),7.19-7.21(m,1H),5.89(brs,1H),5.57-5.61(m,1H),5.23-5.30(m,1H),5.11-5.16(m,1H),3.04(s,3H),1.46-1.50(m,3H),1.18(s,9H)【０１３５】
ジエチレングリコールジメチルエーテル(20mL)中の{2-[(2,2-ジメチプロパノイルアミノ)エチル]-5-ブロモフェニル}メチル・メチルスルホネート(2.02g, 5.15mmol)の溶液に、ナトリウムtert-ブトキシド(t-BuONa；544mg、5.67mmol)を0℃で添加し、5℃で2時間攪拌した。水(20mL)を添加し、エトキシエタン(100mL)で抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮して、1-(5-ブロモ-1-メチルイソインドリン-2-イル)-2,2-ジメチルプロパン-1-オンを黄色固体として得た(1.52g, 収率100％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,CDCl3)：
δ(ppm)：7.38-7.44(m,2H),7.10-7.12(m,1H),5.37-5.40(m,1H),4.98-5.03(m,1H),4.84-4.89(m,1H),1.43-1.45(m,3H),1.33(s,9H)【０１３６】
6M HCl(aq、12mL)中の1-(5-ブロモ-1-メチルイソインドリン-2-イル)-2,2-ジメチルプロパン-1-オン(1.52g, 5.1mmol)の混合物を4時間加熱還流した。反応混合物を室温まで冷却し、5M NaOH(aq)を添加してpHを10とし、ジクロルメタン(60mL)で抽出して、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮して、5-ブロモ-1-メチルイソインドリンを赤色油状物として得た(870mg、収率80％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,CDCl3)：
δ(ppm)：7.33-7.36(m,2H),7.03-7.06(m,1H),4.37-4.39(m,1H),4.10-4.24(m,2H),1.99(brs,1H),1.40-1.44(m,3H)【０１３７】
ジクロルメタン(10mL)中の5-ブロモ-1-メチルイソインドリン(870mg、4.10mmol)、tert-ブチル(tert-ブトキシカルボニルオキシ)ホルメート(1.34g, 6.16mmol)及びTEA(829mg、8.20mmol)の混合物を室温で一晩攪拌した。反応混合物を濃縮し、残留物を、酢酸エチル/石油エーテル(0：100〜1：10)で溶出させるシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製してtert-ブチル 5-ブロモ-1-メチルイソインドリン-2-カルボキシレートを無色油状物として得た(1.19g, 収率93％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,CDCl3)：
δ(ppm)：7.35-7.41(m,2H),7.02-7.09(m,1H),4.95-5.04(m,1H),4.54-4.75(m,2H),1.52-1.59(m,12H)【０１３８】
【化１８】
2014171527.tif 000020
ジオキサン(10mL)中のtert-ブチル 5-ブロモ-1-メチルイソインドリン-2-カルボキシレート(250mg、0.8mmol)、構造式(Q-7A)で表される化合物(305mg、1.2mmol)、KOAc(235mg、2.4mmol)及びPd(dppf)Cl2(65mg、0.08mmol)を、窒素ガス雰囲気下80℃で1時間攪拌した。反応混合物を濃縮し、残留物を酢酸エチル(100mL)に溶解し、水(50mL)、食塩水(50mL)で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮してtert-ブチル 5-ブロモ-1-メチルイソインドリン-2-カルボキシレートを赤色油状物として得た(506mg、収率100％)。【０１３９】
【化１９】
2014171527.tif 000021
キシレン(40mL)中の構造式(Q-9)で表される化合物(1.94g, 6.57mmol)及びSeO2(4.37g, 39.4mmol)の懸濁物を150℃に加熱し、この温度で36時間攪拌した。室温まで冷却した後、ろ過と濃縮を行い、水(100mL)を添加し、混合物を酢酸エチル(200mL)で抽出した。合わせた有機層を食塩水(100mL)で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮した。残留物を、酢酸エチル/石油エーテル(1：4)〜ジクロロメタン/メタノール(50：1)で溶出させるシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して構造式(Q-10)で表される化合物を黄色固体として得た(1.97g, 収率97％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,CDCl3)：
δ(ppm)：10.03(s,1H),8.64(d,J=9.3Hz,1H),8.12(d,J=6.0Hz,1H),7.14(s,1H),2.96-3.00(m,1H),1.41-1.45(m,2H),0.91-0.96(m,2H)【０１４０】
【化２０】
2014171527.tif 000022
メタノール40mL中の構造式(Q-10)で表される化合物(1.97g, 6.35mmol)の氷冷溶液に、水素化ホウ素ナトリウム(483mg、12.71mmol)を少しずつ添加した。添加後、反応混合物を室温で30分間攪拌した。塩化アンモニウム(50mL)を添加し、混合物を酢酸エチル(200mL)で抽出した。有機層を食塩水(100mL)で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮して構造式(Q-11)で表される化合物を白色固体として得た(1.94g, 収率98％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,CDCl3)：
δ(ppm)：8.06(d,J=6.0Hz,1H),7.42(d,J=8.7Hz,1H),6.80(s,1H),4.82-4.84(m,2H),2.87-2.92(m,1H),2.41-2.45(m,1H),1.35-1.42(m,2H),0.86-0.92(m,2H)【０１４１】
【化２１】
2014171527.tif 000023
溶媒(ジオキサン/水＝10：1、11mL)中の構造式(Q-11)で表される化合物(200mg、0.64mmol)、構造式(Q-8)で表される化合物(287mg、0.80mmoL)、Pd(dppf)Cl2(52mg、0.06mmol)及び炭酸カリウム(132mg、0.96mmol)の混合物を窒素雰囲気下80℃に加熱し、一晩攪拌した。混合物を室温まで冷却し、酢酸エチル(50mL)、NH4Cl溶液(50mL)で希釈した。有機層を分離し、水層を酢酸エチル(50mL)で抽出した。合わせた有機層を水(50mL)、食塩水(50mL)で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、真空下で溶媒留去した。残留物を、酢酸エチル/石油エーテル(2：3)を用いたTLCで精製して、構造式(Q-12)で表される化合物を黄色固体として得た(183mg、収率62％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,CDCl3)：
δ(ppm)：7.90-7.92(m,1H),7.43-7.47(m,3H),7.26-7.28(m,1H),6.81(s,1H),5.10-5.14(m,1H),4.67-4.89(m,4H),2.90-2.97(m,1H),1.50-1.54(m,12H),1.37-1.40(m,3H),1.26-1.27(m,2H)【０１４２】
【化２２】
2014171527.tif 000024
酢酸エチル(2mL)中の構造式(Q-12)で表される化合物(183mg、0.39mmol)の溶液に、酢酸エチル(2mL、8.0mmol)中の4M HClを室温で添加し、1時間攪拌した。ろ過した後、固体をメタノール(5mL)に溶解し、NaOHを添加してpHを8とし、ろ過し、濃縮して、黄色固体を得た。これをHPLCで精製して、構造式(17)で表される化合物J-144；1-シクロプロピル-6-フルオロ-4-(ヒドロキシメチル)-7-(1-メチルイソインドリン-5-イル)ヒドロキノリン-2-オンを褐色固体として得た(43mg、収率30％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,CD3OD)：
δ(ppm)：8.06(d,J=6.9Hz,1H),7.52-7.61(m,3H),7.37-7.40(m,1H),6.79(s,1H),4.85-4.87(m,2H),4.49-4.51(m,1H),4.16-4.30(m,2H),3.04-3.09(m,1H),1.50(d,j＝6.6Hz,3H),1.35-1.42(m,2H),0.87-0.93(m,2H)
MS Calcd.：364
MS Found：365([M＋1]＋)【０１４３】
例15：構造式(18)で表される化合物(化合物J-131Eの合成
【化２３】
2014171527.tif 000025
DMF(15mL)中の構造式(R-1)で表される化合物(1.50g, 5.88mmol)の懸濁物にNaH(443mg、17.6mmol、60％)を0℃で添加し、40℃で1時間攪拌した。室温まで冷却した後、ヨードエタン(1.92g, 11.8mmol)を混合物に添加し、室温で0.5時間攪拌し、次いで60℃で一晩攪拌した。混合物を水に注ぎ、酢酸エチル(20mL×3)で抽出した。合わせた有機層を食塩水で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、真空下で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィー(石油エーテル：酢酸エチル＝5：1)で精製して、構造式(R-2)で表される7-ブロモ-1-エチル-6-フルオロ-4-メチルヒドロキノリン-2-オンを白色固体として得た(530mg、収率32％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,DMSO-d6)：
δ(ppm)：1.16(t,J=7.2Hz,3H),2.39(d,J=1.2Hz,3H),4.23(q,J=7.2Hz,2H),6.59(s,1H),7.74(d,J=9.9Hz,1H),7.89(d,J=5.7Hz,1H)【０１４４】
キシレン(15mL)中の7-ブロモ-1-エチル-6-フルオロ-4-メチルヒドロキノリン-2-オン(530mg、1.87mmol)及びSeO2(1.25g, 11.2mmol)の懸濁物を145℃で3日間攪拌した。室温まで冷却し、水(50mL)を反応混合物に添加し、酢酸エチル(50mL×3)で抽出した。合わせた有機層を食塩水で洗浄し、乾燥し、濃縮して7-ブロモ-1-エチル-6-フルオロ-2-オキソヒドロキノリン-4-カルボアルデヒドを褐色固体として得た(700mg、収率100％)。【０１４５】
メタノール(20mL)中の7-ブロモ-1-エチル-6-フルオロ-2-オキソヒドロキノリン-4-カルボアルデヒド(700mg、1.9mmol)の氷冷溶液に、水素化ホウ素ナトリウム(145mg、3.80mmol)を少しずつ添加した。添加後、反応混合物を室温で0.5時間攪拌した。ろ過を行うことにより7-ブロモ-1-エチル-6-フルオロ-4-(ヒドロキシメチル)ヒドロキノリン-2-オンを白色固体として得た(310mg、収率56％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,DMSO-d6)：
δ(ppm)：1.17(t,J=7.2Hz,3H),4.27(q,J=7.2Hz,2H),4.70(dd,J=5.7,1.2Hz,2H),5.56(t,J=5.7Hz,1H),6.71(s,1H),7.72(d,J=9.6Hz,1H),7.93(d,J=6.3Hz,1H)【０１４６】
ジオキサン/水(20mL/2mL)中の7-ブロモ-1-エチル-6-フルオロ-4-(ヒドロキシメチル)ヒドロキノリン-2-オン(300mg、1.01mmol)、4-ヒドロキシフェニルボロン酸(180mg、1.31mmol)、Pd(dppf)Cl2(85mg)及び炭酸カリウム(207mg、1.51mmol)の混合物を窒素ガス雰囲気下80℃で一晩攪拌した。ろ過と濃縮を行い、残留物を分取用HPLCで精製して化合物J-131E；1-エチル-6-フルオロ-4-(ヒドロキシメチル)-7-(4-ヒドロキシフェニル)ヒドロキノリン-2-オンを白色固体として得た(140mg、収率40％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,DMSO-d6)：
δ(ppm)：1.21(t,J=6.9Hz,3H),4.34(q,J=6.9Hz,2H),4.73(d,J=4.2Hz,2H),5.55(t,J=5.7Hz,1H),6.67(s,1H),6.91(d,J=6.6Hz,2H),7.51(d,J=6.6Hz,2H),7.63(d,J=11.7Hz,1H),9.79(s,1H)
MS Calcd.：313
MS Found：314([M＋1]＋)【０１４７】
例16：構造式(19)で表される化合物(化合物J-121Cpの合成
【化２４】
2014171527.tif 000026
構造式(S-1)で表される化合物(2.40g, 10.1mmol)、シクロプロピルボロン酸(1.72g, 23.9mmol)、2,2'-ビピリジン(1.56g, 0.01mol)、炭酸ナトリウム(2.12g, 0.02mol)、無水酢酸第一銅(1.72g, 0.01mol)及び1,2-ジクロロエタン(50mL)を入れた。混合物を70℃で大気中で一晩攪拌した。室温まで冷却した後、飽和塩化アンモニウム溶液(100mL)を添加し、ろ過した。ろ液をジクロロメタンで抽出した(3×100mL)。合わせた有機層を濃縮し、カラム(石油エーテル：酢酸エチル＝8：1〜ジクロロメタン：メタノール＝1：0〜200：1)で精製して7-ブロモ-1-シクロプロピル-4-メチル-1H-キノリン-2-オンを褐色固体として得た(950mg、収率34％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,CDCl3)：
δ(ppm)：0.86-0.93(m,2H),1.34-1.41(m,2H),2.4(s,3H),2.88-2.92(m,1H),6.50(d,1H,J=0.9Hz),7.32-7.36(m,1H),7.48-7.51(m,1H),8.01-8.02(m,1H)【０１４８】
キシレン(20mL)中の7-ブロモ-1-シクロプロピル-4-メチル-1H-キノリン-2-オン(950mg、3.42mmol)及びSeO2(1.14g, 10.2mmol)の懸濁物を150℃で4時間攪拌した。次いでSeO2(1.14g, 10.2mmol)を反応物に添加し、150℃で一晩攪拌した。室温まで冷却して、水(50mL)を反応混合物に添加し酢酸エチル(3×50mL)で抽出した。合わせた有機層を食塩水で洗浄し、乾燥し、濃縮して7-ブロモ-1-シクロプロピル-2-オキソ-1,2-ジヒドロキノリン-4-カルボアルデヒドを褐色固体として得た(1.17g, 収率100％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,CDCl3)：
δ(ppm)：0.89-0.95(m,2H),1.41-1.48(m,2H),2.95-2.99(m,1H),7.08(s,1H),7.41-7.44(m,1H),8.07(d,1H,J=2.1Hz),8.65(d,1H,J=8.7Hz),10.06(s,1H)【０１４９】
7-ブロモ-1-シクロプロピル-2-オキソ-1,2-ジヒドロキノリン-4-カルボアルデヒド(999mg、3.42mmol)のメタノール(20mL)氷冷溶液に、水素化ホウ素ナトリウム(261mg、6.88mmol)を少しずつ添加した。添加後、反応混合物を室温で0.5時間攪拌した。ろ過することにより7-ブロモ-1-シクロプロピル-4-ヒドロキシメチル-1H-キノリン-2-オンを桃色固体として得た(700mg、収率69％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,DMSO-d6)：
δ(ppm)：0.71-0.77(m,2H),1.24-1.32(m,2H),2.93-2.98(m,1H),4.71(dd,2H,J=1.2,4.2Hz),5.50(t,1H,J=5.7Hz),6.58(s,1H),7.40-7.44(m,1H),7.64(d,1H,J=8.4Hz),8.02(d,1H,J=1.2Hz)【０１５０】
ジオキサン/水(20mL/2mL)中の7-ブロモ-1-シクロプロピル-4-ヒドロキシメチル-1H-キノリン-2-オン(400mg、1.36mmol)、4-ヒドロキシフェニルボロン酸(244mg、1.77mmol)、PdCl2(dppf)(100mg)及び炭酸カリウム(282mg、2.04mmol)の混合物を窒素ガス雰囲気下80℃で一晩攪拌した。ろ過と濃縮を行い、残留物をカラム(ジクロロメタン：メタノール＝50：1〜20：1)で精製して化合物J-121Cp；1-シクロプロピル-4-ヒドロキシメチル-7-(4-ヒドロキシ-フェニル)-1H-キノリン-2-オンを白色固体として得た(300mg、収率72％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,DMSO-d6)：
δ(ppm)：0.75-0.80(m,2H),1.29-1.36(m,2H),2.99-3.04(m,1H),4.74(d,2H,J=5.4Hz),5.48(t,1H,J=5.7Hz),6.53(s,1H),6.90-6.94(m,2H),7.45-7.49(m,1H),7.61-7.63(m,2H),7.70-7.72(m,1H),8.02(d,1H,J=1.2Hz),9.71(s,1H)
MS Calcd.：307
MS Found：308([M＋H]＋)【０１５１】
例17：構造式(20)で表される化合物(化合物J-132CP)の合成
【化２５】
2014171527.tif 000027
構造式(T-1)で表される化合物(1.0g, 3.9mmol)、シクロプロピルボロン酸(672mg、7.80mmol)、2,2'-ビピリジン(609mg、3.90mmol)、炭酸ナトリウム(828mg、7.80mmol)、無水酢酸第一銅(709mg、3.90mmol)及びジオキサン(24mL)を入れた。混合物を70℃に加熱し、この温度で大気中で4時間攪拌した。室温に冷却した後、飽和塩化アンモニウム溶液(50mL)を添加し、得られた混合物をジクロロメタン(2×50mL)で抽出した。合わせた有機層を水(2×50mL)、食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧下で濃縮した。残留物を、酢酸エチル/石油エーテル(1：10〜1：2)で溶出させるシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して7-ブロモ-1-シクロプロピル-6-フルオロ-4-メチルヒドロキノリン-2-オンを黄色固体として得た(687mg、収率60％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,DMSO-d6)：
δ(ppm)：0.68-0.73(m,2H),1.22-1.29(m,2H),2.48(s,3H),2.89-2.94(m,1H),6.48(s,1H),7.70(d,J=9.3Hz,1H),8.06(d,J=6.0Hz,1H)【０１５２】
キシレン(10mL)中の7-ブロモ-1-シクロプロピル-6-フルオロ-4-メチルヒドロキノリン-2-オン(750mg、2.80mmol)及びSeO2(1.50g, 13.9mmol)の懸濁物を150℃に加熱し、この温度で36時間攪拌した。室温まで冷却した後、水(50mL)を添加し、得られた混合物を酢酸エチル(2×50mL)で抽出した。合わせた有機層を食塩水(100mL)で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧下で濃縮した。残留物を純粋な石油エーテル中で粉砕して7-ブロモ-1-シクロプロピル-6-フルオロ-2-オキソヒドロキノリン-4-カルボアルデヒドの粗化合物を黄色固体として得た(760mg)。【０１５３】
7-ブロモ-1-シクロプロピル-6-フルオロ-2-オキソヒドロキノリン-4-カルボアルデヒド(760mg、2.80mmol)のメタノール(40mL)氷冷溶液に、水素化ホウ素ナトリウム(158mg、4.20mmol)を少しずつ添加した。添加後、反応混合物を室温で30分間攪拌した。塩化アンモニウム(50mL)を添加し、得られた混合物を酢酸エチル(2×50mL)で抽出した。有機層を食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮して7-ブロモ-1-シクロプロピル-6-フルオロ-4-(ヒドロキシメチル)ヒドロキノリン-2-オンをオフホワイトの固体として得て(500mg、収率63％)、精製せずに次の工程に用いた。
1H-NMRスペクトル(300MHz,DMSO-d6)：
δ(ppm)：0.69-0.75(m,2H),1.23-1.29(m,2H),2.90-2.97(m,1H),4.65(d,J=4.8Hz,2H),5.52(t,J=5.4Hz,1H),6.60(s,1H),7.66(d,J=9.9Hz,1H),8.08(d,J=6.3Hz,1H)【０１５４】
溶媒(ジオキサン：水＝10：1、10mL)中の7-ブロモ-1-シクロプロピル-6-フルオロ-4-(ヒドロキシメチル)ヒドロキノリン-2-オン(100mg、0.32mmol)、4-ヒドロキシフェニルボロン酸(67mg、0.38mmoL)、Pd(dppf)Cl2(26mg、0.032mmol)及び炭酸カリウム(88mg、0.64mmol)の混合物を、窒素雰囲気下80℃で16時間加熱した。混合物を室温まで冷却し、酢酸エチル(50mL)、NH4Cl溶液(50mL)で希釈した。有機層を分離し、水層を酢酸エチル(50mL)で抽出した。合わせた有機層を水(50mL)、食塩水(50mL)で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、真空下で溶媒留去した。得られた暗色油状物を、シリカゲルのショートパッドを通してろ過し、ろ液を濃縮して化合物J-132CP；7-(4-アミノフェニル)-1-シクロプロピル-6-フルオロ-4-(ヒドロキシメチル)ヒドロキノリン-2-オンを黄色固体として得た(42mg、収率40％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,CD3OD)：
δ(ppm)：0.88-0.90(m,2H),1.35-1.40(m,2H),3.03-3.05(m,1H),4.83(s,2H),6.74(s,1H),6.79-6.82(m,2H),7.40-7.43(m,2H),7.49-7.53(m,1H),7.99-8.01(m,1H)
MS Calcd.：324
MS Found：325([M＋H]＋)【０１５５】
例18：構造式(10)で表される化合物(化合物J-135)の合成
溶媒(ジオキサン：水＝10：1、10mL)中の7-ブロモ-1-シクロプロピル-6-フルオロ-4-(ヒドロキシメチル)ヒドロキノリン-2-オン(100mg、0.320mmol)、4-ニトロフェニルボロン酸(67mg、0.40mmol)、Pd(dppf)Cl2(26mg、0.032mmol)及び炭酸カリウム(88mg、0.64mmol)の混合物を、窒素雰囲気下80℃で16時間加熱した。混合物を室温まで冷却し、酢酸エチル(50mL)、NH4Cl溶液(50mL)で希釈した。有機層を分離し、水層を酢酸エチル(50mL)で抽出した。合わせた有機層を水(50mL)、食塩水(50mL)で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、溶媒留去して1-シクロプロピル-6-フルオロ-4-(ヒドロキシメチル)-7-(4-ニトロフェニル)ヒドロキノリン-2-オンの粗化合物を黒色固体として得た(110mg、収率97％)。【０１５６】
DMF(5mL)中の1-シクロプロピル-6-フルオロ-4-(ヒドロキシメチル)-7-(4-ニトロフェニル)ヒドロキノリン-2-オン(50mg、0.14mmol)及びプロパン二酸(15mg、0.14mol)の混合物にDCC(35mg、0.17mmol)を添加し、次いで1時間攪拌した。混合物を溶媒留去し分取用TLC(ジクロルメタン：メタノール＝10：1)で精製して2-({[1-シクロプロピル-6-フルオロ-7-(4-ニトロフェニル)-2-オキソ-4-ヒドロキノリル]メチル}オキシカルボニル)酢酸を青色固体として得た(45mg、収率73％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,DMSO-d6)：
δ(ppm)：0.80-0.82(m,2H),1.28-1.31(m,2H),3.04-3.08(m,1H),3.11(s,2H),5.31(s,2H),6.85(s,1H),7.78-7.82(m,1H),7.95-8.03(m,3H),8.38-8.41(m,2H)【０１５７】
DMF(10mL)中の2-({[1-シクロプロピル-6-フルオロ-7-(4-ニトロフェニル)-2-オキソ-4-ヒドロキノリル]メチル}オキシカルボニル)酢酸(110mg、0.250mmol)及びラネーニッケル触媒(Raney-Ni；100mg)の混合物をH2雰囲気下室温で2時間攪拌した。混合物をろ過して溶媒留去し、残留物を分取用HPLCで精製して、化合物J-135；2-({[7-(4-アミノフェニル)-1-シクロプロピル-6-フルオロ-2-オキソ-4-ヒドロキノリル]メチル}オキシカルボニル)酢酸を黄色固体として得た（22mg、収率21％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,DMSO-d6)：
δ(ppm)：0.79(s,2H),1.24-1.31(m,2H),3.01-3.03(m,1H),3.56(s,2H),5.39(s,2H),6.59(s,1H),6.69-6.71(m,2H),7.36-7.38(m,2H),7.55-7.59(m,1H),7.86-7.88(m,1H)
MS Calcd.：410
MS Found：411([M＋H]＋)【０１５８】
例19：構造式(6)で表される化合物(化合物J-136)の合成
DMF(20mL)中の1-シクロプロピル-6-フルオロ-4-(ヒドロキシメチル)-7-(4-ニトロフェニル)ヒドロキノリン-2-オン(354mg、1.00mmol)及びブタン二酸(472mg、4.00mol)の混合物にN,N'-ジシクロヘキシルカルボジイミド(824mg、4.00mmol)を添加し、次いで1時間攪拌した。混合物を溶媒留去し、分取用TLC(ジクロルメタン：メタノール＝10：1)で精製して3-({[1-シクロプロピル-6-フルオロ-7-(4-ニトロフェニル)-2-オキソ-4-ヒドロキノリル]メチル}オキシカルボニル)プロパン酸を黄色固体として得た(110mg、収率24％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,DMSO-d6)：
δ(ppm)：0.79-0.84(m,2H),1.27-1.31(m,2H),2.52-2.56(m,2H),2.65-2.70(m,2H),3.03-3.05(m,1H),5.38(s,2H),6.65(s,1H),7.75-7.79(m,1H),7.95-8.05(m,3H),8.39-8.42(m,2H)【０１５９】
DMF(10mL)中の3-({[1-シクロプロピル-6-フルオロ-7-(4-ニトロフェニル)-2-オキソ-4-ヒドロキノリル]メチル}オキシカルボニル)プロパン酸(100mg、0.220mmol)及びRaney-Ni(100mg)の混合物を、H2雰囲気下室温で2時間攪拌した。混合物をろ過し溶媒留去し、残留物を分取用HPLCで精製して化合物J-136；3-({[7-(4-アミノフェニル)-1-シクロプロピル-6-フルオロ-2-オキソ-4-ヒドロキノリル]メチル}オキシカルボニル)プロパン酸を黄色固体として得た(21mg、収率23％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,CD3OD)：
δ(ppm)：0.88-0.94(m,2H),1.35-1.42(m,2H),2.63-2.67(m,2H),2.70-2.76(m,2H),3.04-3.09(m,1H),5.38-5.40(m,2H),6.71(s,1H),7.26-7.30(m,2H),7.58-7.63(m,1H),7.68-7.72(m,2H),8.05-8.08(m,1H)
MS Calcd.：424
MS Found：425([M＋H]＋)【０１６０】
例20：構造式(16)で表される化合物(化合物J-138)の合成
DMF(5mL)中の1-シクロプロピル-6-フルオロ-4-(ヒドロキシメチル)-7-(4-ニトロフェニル)ヒドロキノリン-2-オン(100mg、0.283mmol)及びTEA(86mg、0.85mmol)の溶液に、塩化プロパノイル(52mg、0.56mmol)を室温で添加し、次いで3時間攪拌した。混合物を溶媒留去して[1-シクロプロピル-6-フルオロ-7-(4-ニトロフェニル)-2-オキソ-4-ヒドロキノリル]メチルプロパノエートの粗化合物を黒色油状物として得た。【０１６１】
DMF(10mL)中の[1-シクロプロピル-6-フルオロ-7-(4-ニトロフェニル)-2-オキソ-4-ヒドロキノリル]メチルプロパノエート(100mg、0.244mmol)及びRaney-Ni(100mg)の混合物をH2雰囲気下室温で2時間攪拌した。混合物をろ過し、溶媒留去して、残留物を分取用HPLCで精製して化合物J-138；[7-(4-アミノフェニル)-1-シクロプロピル-6-フルオロ-2-オキソ-4-ヒドロキノリル]メチルプロパノエートを黄色固体として得た(40mg、収率37％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,CD3OD)：
δ(ppm)：0.95-1.01(m,2H),1.19-1.26(m,3H),1.39-1.46(m,2H),2.46-2.53(m,2H), 3.01-3.06(m,1H),5.30-5.31(m,2H),6.81-6.85(m,3H),7.34-7.37(m,1H),7.45-7.49(m,2H),7.96-7.98(m,1H)
MS Calcd.：380
MS Found：381([M＋H]＋)【０１６２】
例21：構造式(22)で表される化合物(化合物J-139)の合成
溶媒(CCl4：DMF＝1：4、5mL)中の7-ブロモ-1-シクロプロピル-6-フルオロ-4-(ヒドロキシメチル)ヒドロキノリン-2-オン(150mg、0.500mmol)、NaN3(39mg、0.60mmoL)及びトリフェニルホスフィン(PPh3；276mg、1.05mmol)の混合物を90℃で1時間攪拌した。混合物を室温まで冷却し、水(2.5mL)を添加して、2時間室温で攪拌した。ジクロルメタン(50mL)で抽出し、Na2SO4で乾燥し、溶媒留去して4-(アミノメチル)-7-ブロモ-1-シクロプロピル-6-フルオロヒドロキノリン-2-オンの粗化合物を黄色固体として得た(326mg、収率100％)。【０１６３】
溶媒(ジオキサン：水＝10：1、5.5mL)中の4-(アミノメチル)-7-ブロモ-1-シクロプロピル-6-フルオロヒドロキノリン-2-オン(156mg、0.501mmol)、4-ヒドロキシフェニルボロン酸(83mg、0.60mmoL)、Pd(dppf)Cl2(41mg、0.050mmol)及び炭酸カリウム(104mg、0.750mmol)の混合物を、窒素雰囲気下80℃で16時間加熱した。室温まで冷却した後、混合物に酢酸エチル(50mL)を添加し、水(50mL)、食塩水(50mL)で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、溶媒留去して粗生成物を得て、これを分取用HPLCで精製することにより化合物J-139；4-(アミノメチル)-1-シクロプロピル-6-フルオロ-7-(4-ヒドロキシフェニル)ヒドロキノリン-2-オンを白色固体として得た(28mg、収率17％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,DMSO-d6)：
δ(ppm)：0.76-0.77(m,2H),1.31-1.33(m,2H),3.06-3.09(m,1H),4.35(s,2H),6.64(s,1H), 6.92-6.95(m,2H),7.50-7.53(m,2H),7.74-7.78(m,1H),7.91-7.94(m,1H),8.36-8.38(m,2H),9.85(s,1H)
MS Calcd.：324
MS Found：325([M＋H]＋)【０１６４】
例22：構造式(21)で表される化合物(化合物J-149)の合成
濃H2SO4(52mL、98％)中の2-ブロモ-1,3-ジフルオロベンゼン(25.0g, 130mmol)の溶液を室温で激しく攪拌した。次いで、濃硝酸(9mL、70％)を滴下し、内温を55℃未満に維持した。添加後、混合物をさらに30分間攪拌し、氷中に注いだ。CH2Cl2(200mL×2)を添加して所望の化合物を抽出した。合わせた有機層を飽和Na2CO3、食塩水で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濃縮して、2-ブロモ-1,3-ジフルオロ-4-ニトロベンゼンを黄色固体として得た（23.0g, 収率74％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,CDCl3)：
δ(ppm)：7.10-7.16(m,1H),8.09-8.16(m,1H)【０１６５】
DMSO(80mL)中の2-ブロモ-1,3-ジフルオロ-4-ニトロベンゼン(10.5g, 44.1mmol)の溶液を室温で攪拌した。次いで、水22mL中のKOH(12.4g, 221mmol)の溶液を15分間滴下した。添加後、混合物30℃で一晩攪拌した。TLCから、反応が完了したことが示された。混合物を2N  HClで酸性化しpHを4にして、酢酸エチル(100mL×2)を添加して所望の化合物を抽出した。合わせた有機層を水、食塩水で洗浄して、Na2SO4で乾燥し、濃縮して2-ブロモ-3-フルオロ-6-ニトロフェノールを黄色固体として得た(10.5g, 収率＞100％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,CDCl3)：
δ(ppm)：6.82-6.86(m,1H),8.15-8.22(m,1H),11.41(brs,1H)【０１６６】
アセトン(150mL)中の2-ブロモ-3-フルオロ-6-ニトロフェノール(5.00g, 21.2mmol)、K2CO3(8.78g, 63.6mmol)及びNaI(1.59g, 10.6mmol)の混合物に、クロロアセトン(3.92g, 42.4mmol)を撹拌しながら添加した。次いで、混合物を加熱還流し一晩撹拌した。混合物を真空下で濃縮し、酢酸エチルを添加して所望の化合物を抽出した。有機溶液を水、食塩水で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濃縮した。残留物をカラム(石油エーテル：酢酸エチル＝20：1)で精製して1-(2-ブロモ-3-フルオロ-6-ニトロフェノキシ)アセトンを黄色固体として得た(5.3g, 収率85％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,CDCl3)：
δ(ppm)：2.38(s,3H),4.73(s,2H),7.11(dd,J=9.3,7.2Hz,1H),7.95(dd,J=9.3,7.2Hz,1H)【０１６７】
【化２６】
2014171527.tif 000028
エタノール(30mL)中の構造式(U-4)で表される化合物(5.30g, 18.1mmol)及びRaney-Ni(1g)の混合物をH2雰囲気下(50psi)室温で4時間攪拌した。混合物をろ過し、ろ液を濃縮した。残留物をカラム(石油エーテル：酢酸エチル＝8：1)で精製して、構造式(U-5)で表される化合物を褐色固体として得た(3.9g, 収率87％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,CDCl3)：
δ(ppm)：1.15(d,J=8.1Hz,3H),3.48-3.52(m,1H),3.79-3.86(m,1H),4.30-4.34(m,1H),6.45-6.50(m,1H),6.58(d,J=8.4Hz,3H)【０１６８】
【化２７】
2014171527.tif 000029
トルエン(50mL)中の構造式(U-5)で表される化合物(2.5g, 10.2mmol)及びジケテン(1.02g, 12.2mmol)の混合物を一晩還流した。混合物を濃縮し、残留物をカラム(石油エーテル：酢酸エチル＝15：1)で精製して構造式(U-6)で表される化合物を黄色固体として得た(2.2g, 収率65％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,CDCl3)：
δ(ppm)：1.05(d,J=5.7Hz,1H),1.97(s,1.2H),2.21(s,1.8H),3.74(s,2H),4.15-4.38(m,2H),4.88-5.37(m,1H),6.70-6.77(m,1H),6.92-7.36(m,1H)【０１６９】
【化２８】
2014171527.tif 000030
トルエン(20mL)中のPPA(15g)を攪拌しながら80℃に加熱した。次いで、構造式(U-6)で表される化合物(2.20g, 6.70mmol)を添加し、混合物を115℃で3時間攪拌した。冷却後、混合物を氷中に注いだ。酢酸エチル(100mL×2)を添加して所望の化合物を抽出した。合わせた有機層を水、食塩水で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濃縮した。残留物を石油エーテルと酢酸エチル(比率：2：3)を用いて再結晶して、構造式(U-7)で表される化合物を淡黄色固体として得た(0.82g, 収率41％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,CDCl3)：
δ(ppm)：1.39(d,J=6.6Hz,3H),2.42(s,3H),4.14-4.19(m,1H),4.53(dd,J=11.4,1.2Hz,1H),5.10-5.13(m,1H),6.62(s,1H),7.08(d,J=9.0Hz,1H)【０１７０】
【化２９】
2014171527.tif 000031
キシレン(20mL)中の構造式(U-7)で表される化合物(200mg、0.643mmol)及びSeO2(143mg、1.29mmol)の懸濁物を150℃で一晩攪拌した。次いで、混合物を室温まで冷却し、水(50mL)を添加し、混合物を酢酸エチル(3×50mL)で抽出した。合わせた有機層を食塩水で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濃縮して、構造式(U-8)で表される化合物を得て(204mg、収率98％)、精製することなく次の工程に用いた。【０１７１】
【化３０】
2014171527.tif 000032
メタノール(20mL)中の構造式(U-8)で表される化合物(204mg、0.630mmol)の氷冷溶液に、水素化ホウ素ナトリウム(49mg、1.3mmol)を少しずつ添加した。添加後、反応混合物を室温で1時間攪拌した。固体をろ過して構造式(U-9)で表される化合物を桃色固体として得た。
1H-NMRスペクトル(300MHz,DMSO-d6)：
δ(ppm)：1.21(d,J=6.9Hz,3H),4.20(dd,J=11.1,2.4Hz,1H),4.59(d,J=11.1Hz,1H),4.69(d,J=5.4Hz,2H),4.94(dd,J=6.6,1.2Hz,1H),5.58(t,J=5.7Hz,1H),6.73(s,1H),7.36(d,J=9.9Hz,1H)【０１７２】
【化３１】
2014171527.tif 000033
ジオキサン(20mL)及び水(2mL)中の構造式(U-9)で表される化合物(110mg、0.340mmol)、4-ヒドロキシフェニルボロン酸(61.0mg、0.440mmol)、PdCl2(dppf)(50mg)及び炭酸カリウム(94mg、0.68mmol)の混合物を窒素ガス雰囲気下80℃で一晩攪拌した。混合物をろ過し濃縮した。残留物を分取用HPLCで精製して、構造式(21)で表される化合物J-149；9-フルオロ-7-(ヒドロキシメチル)-10-(4-ヒドロキシフェニル)-3-メチル-2H-[1,4]オキサジノ[2,3,4-ij]キノリン-5(3H)-オンを白色固体として得た(72mg、収率62％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,DMSO-d6)：
δ(ppm)：1.23(d,J=6.6Hz,3H),4.20(d,J=10.2Hz,1H),4.37(d,J=11.4Hz,1H),4.71(d,J=4.2Hz,2H),4.89(dd,J=6.0,2.4Hz,1H),5.52-5.56(m,1H),6.69(s,1H),6.84(d,J=11.1Hz,2H),7.23-7.27(m,3H),9.62(s,1H)
MS Calcd.：341
MS Found：342([M＋1]＋)【０１７３】
例23：構造式(23)で表される化合物(化合物J-150)の合成
トルエン(15mL)中の3-ブロモ-4-フルオロアニリン(2.00g, 10.5mmol)の懸濁物に、メチル3-オキソペンタノエート(2.74g, 21.1mmol)を添加し、110℃で一晩攪拌した。室温まで冷却した後、混合物を真空下で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィー(石油エーテル：酢酸エチル＝4：1)で精製してN-(3-ブロモ-4-フルオロフェニル)-3-オキソペンタンアミドを白色固体として得た(1.6g, 収率54％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,CDCl3)：
δ(ppm)：1.09(t,J=7.2Hz,3H),2.60(d,J=7.2Hz,2H),3.56(s,2H),7.03(t,J=8.4Hz,1H),7.39-7.44(m,1H),7.85-7.88(m,1H),9.32(brs,1H)【０１７４】
濃硫酸(15mL)中のN-(3-ブロモ-4-フルオロフェニル)-3-オキソペンタンアミド(1.5g, 5.2mmol)の溶液を95℃に2時間加熱した。次いで、混合物を室温まで冷却し氷中に注いだ。固体をろ過し水で洗浄して7-ブロモ-4-エチル-6-フルオロヒドロキノリン-2-オンを白色固体として得た(720mg、収率48％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,CDCl3)：
δ(ppm)：1.16(t,J=7.5Hz,3H),2.74(q,J=12.0Hz,2H),6.41(s,1H),7.55(d,J=5.4Hz,1H),7.72(d,J=9.9Hz,1H),11.67(brs,1H)【０１７５】
7-ブロモ-4-エチル-6-フルオロヒドロキノリン-2-オン(720mg、2.67mmol)、シクロプロピルボロン酸(459mg、5.34mmol)、2,2'-ビピリジン(416mg、2.67mmol)、炭酸ナトリウム(566mg、5.34mmol)、無水酢酸第一銅(485mg、2.67mmol)及び1,2-ジクロロエタン(15mL)の混合物を70℃で一晩攪拌した。室温まで冷却した後、飽和塩化アンモニウム溶液(100mL)を添加し、混合物をろ過した。ろ液をジクロロメタンで抽出した(100mL×3)。合わせた有機層を濃縮し、クロマトグラフィー(石油エーテル：酢酸エチル＝8：1〜1：1)で精製して7-ブロモ-1-シクロプロピル-4-エチル-6-フルオロヒドロキノリン-2-オンを黄色固体として得た(260mg、収率31％)。【０１７６】
ジオキサン/水(15mL/1.5mL)中の7-ブロモ-1-シクロプロピル-4-エチル-6-フルオロヒドロキノリン-2-オン(260mg、0.840mmol)、4-ヒドロキシフェニルボロン酸(150mg、1.09mmol)、PdCl2(dppf)(70mg)及び炭酸カリウム(174mg、1.26mmol)の混合物を、窒素ガス雰囲気下80℃で一晩攪拌した。ろ過と濃縮と行った後、残留物を分取用HPLCで精製して化合物J-150；1-シクロプロピル-4-ethイル-6-フルオロ-7-(4-ヒドロキシフェニル)ヒドロキノリン-2-オンを白色固体として得た(35mg、収率13％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,DMSO-d6)：
δ(ppm)：0.72(m,2H),1.18-1.28(m,5H),2.74(q．J=12.0Hz,2H),2.93-2.94(m,1H),6.39(s,1H),6.88(d,J=8.4Hz,1H),7.46(d,J=7.2Hz,2H),7.62(d,J=12.0Hz,1H),7.84(d,J=7.5Hz,1H),9.76(brs,1H)
MS Calcd.：323
MS Found：324([M＋1]＋)【０１７７】
キシレン(50mL)中の3-ブロモ-4-メチルアニリン(5.00g, 26.9mmol)の溶液に、アセト酢酸メチル(6.20g, 53.8mmol)とピリジン(4.30g, 53.8mmol)を添加した。混合物を135℃に一晩加熱した。LCMSから、構造式(X-1)で表される化合物が消費されたことが示された。次いで、混合物を室温まで冷却し、水で希釈し、HCl水溶液を添加して、酢酸エチル(3×100mL)で抽出した。有機層を無水Na2SO4で乾燥し、濃縮し、フラッシュシリカゲルクロマトグラフィー(石油エーテル：酢酸エチル＝20：1〜5：1)で精製してN-(3-ブロモ-4-メチルフェニル)-3-オキソブタンアミドを白色固体として得た(4.10g, 収率56％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,CDCl3)：
δ(ppm)：2.33(s,3H),2.35(s,3H),3.58(s,2H),7.16(d,J=8.4Hz,1H),7.36(dd,J=8.4,2.1Hz,1H),7.81(d,J=2.1Hz,1H),9.14(br,1H)【０１７８】
濃硫酸(50mL)中のN-(3-ブロモ-4-メチルフェニル)-3-オキソブタンアミド(4.10g, 15.2mmol)の溶液を95℃に2時間加熱した。次いで、混合物を室温まで冷却し、氷中に注いだ。固体をろ過し、水で洗浄して7-ブロモ-4,6-ジメチルヒドロキノリン-2-オンを黄色固体として得た(3.60g, 収率95％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,DMSO-d6)：
δ(ppm)：2.33(s,6H),6.38(s,1H),7.50(s,1H),7.66(s,1H),11.54(brs,1H)【０１７９】
7-ブロモ-4,6-ジメチルヒドロキノリン-2-オン(2.00g, 7.94mmol)、シクロプロピルボロン酸(1.30g, 15.4mmol)、2,2'-ビピリジン(1.30g, 7.94mmol)、炭酸ナトリウム(1.60g, 15.38mmol)、無水酢酸第一銅(1.60g, 7.94mmol)及び1,2-ジクロロエタン(100mL)の混合物を大気雰囲気下70℃で一晩攪拌した。室温まで冷却した後、飽和塩化アンモニウム溶液(100mL)を添加し、ろ過し、ろ液をジクロロメタンで抽出した(100mL×3)。合わせた有機層を濃縮し、クロマトグラフィー(石油エーテル：酢酸エチル＝8：1〜ジクロロメタン：メタノール＝1：0〜200：1)で精製して7-ブロモ-1-シクロプロピル-4,6-ジメチルヒドロキノリン-2-オンを黄色固体として得た(179mg、収率8％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,DMSO-d6)：
δ(ppm)：0.67-0.73(m,2H),1.21-1.27(m,2H),2.35(s,3H),2.40(s,3H),2.87-2.92(m,1H),6.40(s,1H),7.68(s,1H),7.80(s,1H)【０１８０】
キシレン(20mL)中の7-ブロモ-1-シクロプロピル-4,6-ジメチルヒドロキノリン-2-オン (175mg、0.600mmol)及びSeO2(133mg、1.20mmol)の懸濁物を150℃で一晩攪拌した。室温まで冷却し、水(50mL)を反応混合物に添加し、酢酸エチル(50mL×3)で抽出した。合わせた有機層を食塩水で洗浄し、乾燥し、濃縮して7-ブロモ-1-シクロプロピル-6-メチル-2-オキソヒドロキノリン-4-カルボアルデヒドを得て、これをそのまま次の工程に用いた。【０１８１】
メタノール(20mL)中の7-ブロモ-1-シクロプロピル-6-メチル-2-オキソヒドロキノリン-4-カルボアルデヒド(180mg、0.590mmol)の氷冷溶液に、水素化ホウ素ナトリウム(45.0mg、1.18mmol)を少しずつ添加した。添加後、反応混合物を室温で0.5時間攪拌した。固体をろ過して7-ブロモ-1-シクロプロピル-4-(ヒドロキシメチル)-6-メチルヒドロキノリン-2-オンを桃色固体として得た(125mg、収率69％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,DMSO-d6)：
δ(ppm)：0.71-0.75(m,2H),1.23-1.30(m,2H),2.40(s,3H),2.92-2.94(m,1H),4.70(d,J=2.7Hz,2H),5.49(t,J=2.7Hz,1H),6.55(s,1H),7.65(s,1H),8.03(s,1H)【０１８２】
ジオキサン/水(30mL/3mL)中の7-ブロモ-1-シクロプロピル-4-(ヒドロキシメチル)-6-メチルヒドロキノリン-2-オン(125mg、0.405mmol)、4-ヒドロキシフェニルボロン酸(71.0mg、0.510mmol)、PdCl2(dppf)(50mg)及び炭酸カリウム(108mg、0.780mmol)の混合物を、窒素ガス雰囲気下80℃で一晩攪拌した。ろ過と濃縮を行い、残留物をクロマトグラフィー(ジクロロメタン：メタノール＝50：1〜20：1)で精製して化合物J-140；1-シクロプロピル-4-(ヒドロキシメチル)-7-(4-ヒドロキシフェニル)-6-メチルヒドロキノリン-2-オンを灰色固体として得た(85mg、収率68％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,DMSO-d6)：
δ(ppm)：0.71-0.77(m,2H),1.18-1.25(m,2H),2.28(s,3H),2.29-2.93(m,1H),4.74(d,J=4.2Hz,2H),5.45(t,J=4.2Hz,1H),6.52(s,1H),6.87(d,J=9.6Hz,2H),7.25(d,J=9.6Hz,2H),7.55(s,1H),7.63(s,1H),9.59(brs,1H)
MS Calcd.：321
MS Found：322([M＋1]＋)【０１８３】
例25：構造式(25)で表される化合物(化合物J-154)の合成
トルエン(1,000mL)中の3-ブロモ-2-フルオロ安息香酸(21.9g, 100mmol)、DPPA(33.0g, 120mmol)及びトリエチルアミン(17mL、120mmol)の混合物の懸濁物を120℃で攪拌した。2時間加熱還流した後、t-BuOHを添加し、混合物をさらに2時間加熱還流した。混合物を溶媒留去し、残留物を石油エーテルを用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製してtert-ブトキシ-N-(3-ブロモ-2-フルオロフェニル)カルボキサミドを無色油状物として得た(17.7g, 収率61％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,CDCl3)：
δ(ppm)：1.52(s,3H),6.72(brs,1H),6.93-6.99(m,1H),7.12-7.18(m,1H),8.04(t,J=7.5Hz,1H)【０１８４】
tert-ブトキシ-N-(3-ブロモ-2-フルオロフェニル)カルボキサミド(17.7g, 59.5mmol)の溶液を5N HCl/1,4-ジオキサン(500mL)中で18時間室温で攪拌した。混合物をろ過し、ろ過ケーキのpHを4M NaOHで8〜9に調整し、酢酸エチル(2×50mL)で抽出した。合わせた有機層をNa2SO4で乾燥し、真空下で濃縮して3-ブロモ-2-フルオロフェニルアミンを無色油状物として得た(10.4g, 収率94％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,DMSO-d6)：
δ(ppm)：6.83-6.70(m,3H),5.43(s,2H)【０１８５】
トルエン(100mL)中の3-ブロモ-2-フルオロフェニルアミン(10.5g, 55.5mmol)の懸濁物に、メチル3-オキソブタノエート(7.7g, 66.7mmol)を添加し、110℃で一晩攪拌した。室温まで冷却した後、混合物を真空下で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィー(石油エーテル：酢酸エチル＝12：1〜8：1〜3：1)で精製してN-(3-ブロモ-2-フルオロフェニル)-3-オキソブタンアミドを白色固体として得た(5.5g, 収率36％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,CDCl3)：
δ(ppm)：2.33(s,3H),3.63(s,2H),7.03(t,J=8.1Hz,1H),7.24-7.29(m,1H),8.22(t,J=8.1Hz,1H),9.52(brs,1H)【０１８６】
CF3SO3H(2.50g, 16.5mmol)中のN-(3-ブロモ-2-フルオロフェニル)-3-オキソブタンアミド(300mg、1.1mmol)の溶液を室温で一晩攪拌した。混合物を氷中に注いだ後、固体をろ過し、水で洗浄して7-ブロモ-8-フルオロ-4-メチルヒドロキノリン-2-オンを白色固体として得た(110mg、収率39％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,DMSO-d6)：
δ(ppm)：2.49(s,3H),6.49(s,1H),7.41-7.50(m,2H),11.7(brs,1H)【０１８７】
7-ブロモ-8-フルオロ-4-メチルヒドロキノリン-2-オン(150mg、0.59mmol)、シクロプロピルボロン酸(101mg、1.18mmol)、2,2'-ビピリジン(92mg、0.59mmol)、炭酸ナトリウム(125mg、1.18mmol)、無水酢酸第一銅(107mg、0.59mmol)及び1,2-ジクロロエタン(6mL)の混合物を70℃で一晩攪拌した。室温まで冷却した後、飽和塩化アンモニウム溶液(30mL)を添加し、次いでろ過し、ろ液をジクロロメタンで抽出した(3×30mL)。合わせた有機層を濃縮し、クロマトグラフィーで(石油エーテル：酢酸エチル＝10：1〜8：1〜5：1)で精製して7-ブロモ-1-シクロプロピル-8-フルオロ-4-メチルヒドロキノリン-2-オンを白色固体として得た(60mg、収率47％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,CDCl3)：
δ(ppm)：0.66-0.73(m,2H),1.20-1.27(m,2H),2.37(d,J=1.2Hz,3H),3.36-3.42(m,1H),6.49(s,1H),7.25-7.29(m,1H),7.35-7.40(m,1H)【０１８８】
キシレン(12mL)中の7-ブロモ-1-シクロプロピル-8-フルオロ-4-メチルヒドロキノリン-2-オン(310mg、1.05mmol)及びSeO2(1.17g, 10.5mmol)の懸濁物を145℃で3日間攪拌した。室温まで冷却した後、水(50mL)を反応混合物に添加し、酢酸エチル(50mL×3)で抽出した。合わせた有機層を食塩水で洗浄し、乾燥し、濃縮して7-ブロモ-1-シクロプロピル-8-フルオロ-2-オキソヒドロキノリン-4-カルボアルデヒドを褐色油状物として得た(350mg、収率100％)。【０１８９】
メタノール(8mL)中の7-ブロモ-1-シクロプロピル-8-フルオロ-2-オキソヒドロキノリン-4-カルボアルデヒド(350mg、1.13mmol)の氷冷溶液に、水素化ホウ素ナトリウム(127mg、3.39mmol)を少しずつ添加した。添加後、反応混合物を0.5時間室温で攪拌した。ろ過を行い7-ブロモ-1-シクロプロピル-8-フルオロ-4-(ヒドロキシメチル)ヒドロキノリン-2-オンを赤色固体として得た(182mg、収率56％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,CDCl3)：
δ(ppm)：0.66-0.72(m,2H),1.21-1.28(m,2H),2.20(t,J=6.3Hz,1H),3.36-3.42(m,1H),4.83(d,J=6.0Hz,2H),6.77(s,1H),7.24-7.29(m,1H),7.35-7.40(m,1H)【０１９０】
ジオキサン/水(10mL/1mL)中の7-ブロモ-1-シクロプロピル-8-フルオロ-4-(ヒドロキシメチル)ヒドロキノリン-2-オン(182mg、0.59mmol)、4-ヒドロキシフェニルボロン酸(106mg、0.77mmol)、Pd(dppf)Cl2(70mg)及び炭酸カリウム(122mg、0.90mmol)の混合物を、窒素ガス雰囲気下80℃で一晩攪拌した。ろ過と濃縮を行い、残留物を石油エーテル/酢酸エチル(10：1〜3：1〜1：1〜1：3)を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して化合物J-154；1-シクロプロピル-8-フルオロ-4-(ヒドロキシメチル)-7-(4-ヒドロキシフェニル)ヒドロ-キノリン-2-オンを黄色固体として得た(150mg、収率79％)。
1H-NMRスペクトル(300MHz,DMSO-d6)：
δ(ppm)：0.58(brs,2H),1.09-1.15(m,2H),3.27-3.33(m,1H),4.67(d,J=6.0Hz,2H),5.42(t,J=5.7Hz,1H),6.54(s,1H),6.86-6.89(m,2H),7.23-7.29(m,1H),7.40-7.50(m,3H),9.70(s,1H)
MS Calcd.：325
MS Found：326([M＋1]＋)【０１９１】
例26
例1〜例25と同様にして以下の化合物を合成した。
構造式(26)で表される化合物J-155
1H-NMR(DMSO-d6,300MHz):δ0.57-0.63(m,2H),1.04-1.10(m,2H),3.23-3.29(m,1H),4.60-4.66(m,2H),5.50-5.54(m,1H),6.59(s,1H),6.88-6.92(m,2H),7.28-7.32(m,2H),7.43-7.46(m,1H),9.79(brs,1H)
構造式(27)で表される化合物J-156
1H-NMR(300MHz,DMSO-d6):0.46-0.47(m,2H),1.04-1.06(m,2H),1.23-1.26(m,1H),3.24(s,3H),4.63-4.65(m,2H),5.50(t,1H,J=5.7Hz),6.55(s,1H),6.86-6.89(m,2H),7.26-7.34(m,3H),9.66(s,1H)
構造式(28)で表される化合物J-166
1H-NMR(CDCl3,300MHz)δ:0.76-0.80(m,2H),1.26-1.30(m,2H),2.98-3.02(m,1H),4.70(s,2H),5.50(s,1H),6.28(s,2H),6.57(s,2H),7.56-7.80(m,1H),7.66-7.71(m,1H),7.86-7.88(m,1H),8.22-8.23(m,1H)【０１９２】
構造式(29)で表される化合物J-173
1H-NMR(300MHz,DMSO-d6):δ8.22-8.20(m,1H),7.94-7.88(m,2H),7.70(d,J=11.4Hz,1H),7.55-7.45(m,2H),6.92-6.90(m,2H),6.62(s,1H),3.07-3.00(m,1H),1.31-1.24(m,2H),0.77-0.73(m,2H)
構造式(30)で表される化合物J-175
1H-NMR(300MHz,DMSO-d6):δ9.78(s,1H),7.88(d,J=7.2Hz,1H),7.58(d,J=7.2Hz,1H),7.49(dd,J=8.7,1.8Hz,2H),6.92(m,2H),6.55(s,1H),4.64(d,J=1.2Hz,2H),3.39(s,3H),3.03-2.98(m,1H),1.32-1.23(m,2H),0.82-0.76(m,2H)
構造式(31)で表される化合物J-131ACP
1H-NMR(DMSO-d6,300MHz):δ0.75-0.77(m,2H),1.26-1.28(m,2H),2.13(s,3H),2.95-3.01(m,1H),5.30(s,1H),6.52(s,1H),6.91(d,J=6.6Hz,2H),7.48(d,J=6.6Hz,3H),7.62(d,J=11.7Hz,1H),7.89(d,J=6.9Hz,1H),9.80(s,1H)【０１９３】
構造式(32)で表される化合物J-176
1H-NMR(300MHz,DMSO-d6):0.75(s,2H),1.26(d,2H,J=6.9Hz),4.68(s,2H),6.55(s,1H),6.83(d,1H,J=7.8Hz),6.91(d,1H,J=8.1Hz),7.04(s,1H),7.53(d,1H,J=9.0Hz),7.53(d,1H,J=9.0Hz),7.83(d,1H,J=6.9Hz)
構造式(33)で表される化合物J-149A
1H-NMR(300MHz,DMSO-d6):δ9.66(s,1H),7.6(m,3H),6.87(d,J=8.4Hz,2H),6.70(s,1H),5.58(m,1H),4.92(d,J=6.4Hz,1H),4.73(d,J=5.2Hz,1H),4.40(d,J=11.2Hz,1H),4.11(d,J=11.2Hz,1H),1.25(d,J=6.4Hz,3H)
構造式(34)で表される化合物J-149d
1H-NMR(300MHz,DMSO-d6):δ9.66(s,1H),7.32(d,J=8.4Hz,2H),6.87(d,J=8.4Hz,2H),6.59(s,1H),4.90(d,J=5.6Hz,1H),4.40(d,J=11.2Hz,1H),4.09(d,J=10Hz,1H),2.42(s,3H),1.24(d,J=6.8Hz,3H)【０１９４】
構造式(35)で表される化合物J-165
1H-NMR(300MHz,DMSO-d6):δ8.37(d,J=2.1Hz,1H),8.00(d,J=1.5Hz,1H),7.65-7.71(m,2H),7.47(dd,J=8.4,1.8Hz,1H),6.51(s,1H),6.22-6.24(m,1H),5.44(t,J=5.7Hz,1H),4.73-4.75(m,2H),2.98-3.02(m,1H),2.91(d,J=4.5Hz,3H),2.15(s,3H),1.31-1.35(m,2H),0.74-0.79(m,2H)
構造式(36)で表される化合物J-158
1H-NMR(300MHz,DMSO-d6):0.63-0.66(m,2H),1.25-1.31(m,2H),3.50-3.54(m,1H),4.86(s,2H),6.07(t,1H,J=74.7Hz),6.74(s,1H),6.90(d,2H,J=8.7Hz),7.36(d,1H,J=8.4Hz),7.46(d,2H,J=8.7Hz),7.67(d,1H,J=8.4Hz)
構造式(37)で表される化合物J-162
1H-NMR(CDCl3,300MHz)δ:0.74-0.79(m,2H),1.23-1.25(m,2H),2.95-2.97(m,1H),4.72-4.74(m,1H),5.52-5.55(m,1H),6.58(s,1H),6.88-6.92(m,2H),7.35-7.38(m,2H),7.79-7.82(m,2H),9.75(s,1H)【０１９５】
構造式(38)で表される化合物J-161
1H-NMR(CD3OD,300MHz)δ:7.52(d,J=9.6Hz,1H),7.21(d,J=7.8Hz,2H),6.91(dd,J=6.6,2.1Hz,2H),6.77(s,1H),4.79(s,2H),3.62(m,1H),1.25-1.23(m,2H),0.60-0.58(m,2H)
構造式(39)で表される化合物J-167
1H-NMR(300MHz,DMSO-d6):δ8.24(brs,2H),7.92(d,J=6.9Hz,1H),7.63-7.71(m,5H),6.62(s,1H),5.57(brs,1H),4.72(s,2H),4.09(s,2H),2.99-3.04(m,1H),1.26-1.28(m,2H),0.78-0.82(m,2H)
構造式(40)で表される化合物J-168
1H-NMR(300MHz,DMSO-d6):δ8.73-8.75(m,2H),8.01(d,J=6.9Hz,1H),7.57-7.72(m,3H),6.65(s,1H),5.54(t,J=5.4Hz,1H),4.72-4.74(m,2H),3.01-3.04(m,1H),1.26-1.31(m,2H),0.78-0.80(m,2H)【０１９６】
構造式(41)で表される化合物J-169
1H-NMR(300MHz,DMSO-d6):δ9.88(s,1H),7.78-7.70(m,2H),7.46-7.43(m,2H),6.89(d,J=5.4Hz,2H),4.55(s,2H),2.94-2.91(m,1H),1.28-1.23(m,2H),0.74-0.71(m,2H)
構造式(42)で表される化合物J-174
1H-NMR(300MHz,DMSO-d6):δ7.88(d,J=6.9Hz,1H),7.63(d,J=12.3Hz,1H),7.51-7.48(m,2H),6.96-6.91(m,2H),6.57(s,1H),6.34(s,2H),4.78(s,2H),3.04-2.97(m,1H),1.32-1.25(m,2H),0.81-0.75(m,2H)
構造式(43)で表される化合物J-179
1H-NMR(300MHz,DMSO-d6):7.77(d,J=7.2Hz,1H),7.49-7.41(m,3H),6.88(d,J=8.7Hz,2H),5.59(s,2H),4.96(s,1H),4.63(m,2H),3.10-3.06(m,1H),1.32-1.25(m,2H),0.79-0.74(m,2H)
構造式(44)で表される化合物J-144M
1H-NMR(300MHz,CD3OD):0.88-0.93(m,2H),1.36-1.39(m,2H),1.54(d,3H,J=6.6Hz),1.75(d,3H,J=6.6Hz),3.03-3.08(m,1H),3.34(s,1H),4.69-4.70(m,2H),5.09-5.12(m,1H),5.22-5.24(m,1H),6.83(s,1H),7.54(d,1H,J=6.3Hz),7.71-7.80(m,3H),8.08(d,1H,J=6.3Hz)【０１９７】
試験例1-1
構造式(1)で表される化合物(化合物J-131CP)の黄色ブドウ球菌に対する抗菌活性について、以下の方法で試験した。
＜化合物J-131CP及びキノロン類の調製＞
化合物J-131CPは、DMSOに溶解し、1,024mg/Lに調整した。次いで、MHB(ミュラーヒントン培地)に、CLSI(米国臨床検査標準協議会)に準じてマグネシウム及びカルシウムを添加したカチオン調整MHB(CAMHB)を調製し、CAMHBを用いて化合物J-131CPの溶液を4倍希釈し、256mg/Lに調整した。ここから2倍段階希釈を行い、0.125mg/Lまで11段階の希釈を行った。【０１９８】
キノロン類であるノルフロキサシン(norfloxacin：NOR、シグマアルドリッチ社製)、オフロキサシン(ofloxacin：OFX、シグマアルドリッチ社製)、レボフロキサシン(levofloxacin：LVX、LKT Laboratories,Inc．社製)、シプロフロキサシン(ciprofloxacin：CIP、MP Biomedicals,LLC社製)、トスフロキサシン(tosufloxacin：TSX、富山化学工業株式会社製)、及びスパルフロキサシン(sparfloxacin：SPX、大日本住友製薬株式会社製)は滅菌水又は滅菌した0.1M水酸化ナトリウム水溶液で、1,024mg/Lに調整した後、化合物J-131CPと同様にして0.125mg/Lまで希釈を行った。【０１９９】
＜黄色ブドウ球菌に対する化合物J-131CPのMICの測定＞
S. aureus Mu50(非特許文献1及び3参照)、S. aureus FDA209P(ATCC6538P)、及びS. aureus Mu50 NR1-1(非特許文献3参照)のそれぞれを、4mLのTBS(Tryptic Soy Broth、Becton Dickinson社製)で37℃にて一晩振盪培養した。培養終了後、集菌し、菌体を新しいTBSに懸濁し、578nmで0.3の吸光度となるように菌液を調製した。次いでCAMHBを用いて菌液を500倍希釈した。【０２００】
各濃度に調整した化合物J-131CP、又は各濃度に調整した各キノロン類を含むCAMHBを、それぞれ96ウェルプレートに50μL/ウェルとなるように添加し、500倍希釈した各菌液をそれぞれ50μL/ウェル添加し、37℃で一晩静置培養した。培養時の化合物J-131CP、又は各キノロン類の終濃度は128mg/L〜0.0625mg/Lである。
培養終了後、各ウェルを目視して菌の増殖の有無を濁度にて判定し、各菌株に対する化合物J-131CP、又は各キノロン類のMIC(mg/L)を求めた。結果を表1に示す。各化合物のS. aureus Mu50に対するMICとS. aureus FDA209P(ATCC6538P)に対するMICとの比(S. aureus Mu50に対するMIC/S. aureus FDA209P(ATCC6538P)に対するMIC)を表2に示す。【０２０１】
【表１】
2014171527.tif 000034
【０２０２】
【表２】
2014171527.tif 000035
【０２０３】
S. aureus FDA209P(ATCC6538P)はメチシリン感受性黄色ブドウ球菌(methicillin-sensitive S. aureus：MSSA)である。
S, aureus Mu50は、臨床から分離された(非特許文献1及び3参照)。S. aureus Mu50はキノロン類耐性決定領域(QRDR)に存在する2つの遺伝子ParC及びGyrAにアミノ酸置換変異、即ち、ParC遺伝子がコードするDNAトポイソメラーゼIVのサブユニットの第80番目のアミノ酸残基のセリンからフェニルアラニンへの変異(S80F)、及びGyrA遺伝子がコードするDNAジャイレースの第84番目のアミノ酸残基のセリンからロイシンへの変異(S84L)を有するキノロン類耐性のMRSAである(非特許文献1参照)。【０２０４】
S. aureus Mu50 NR1-1は、S. aureus Mu50を段階的にデオキシナイボマイシンで選択して取得した菌株である(J. Antimicrob. Agents., 39(6), pp.478-485, 2012参照)。S. aureus Mu50 NR1-1はキノロン類感受性が復活した変異株であり、復帰変異によりGyrAがコードするDNAジャイレースの第84番目のアミノ酸残基がセリンに戻っている(非特許文献3参照)。
表1の結果より、化合物J-131CPはS. aureus FDA209Pに対するMICが0.25mg/Lであり、優れた抗菌活性を示した。化合物J-131CPはS．aureus Mu50に対するMICが0.06mg/L以下であり、S. aureus FDA209Pに対するよりもさらに4倍以上高い抗菌活性を示した(表2)。化合物J-131CPはキノロン類感受性菌に比べてキノロン類耐性菌に対してより強い抗菌力を示す復帰抗生物質の特性を有することが示された。【０２０５】
S. aureus Mu50 NR1-1に対する化合物J-131CPのMICは0.25mg/Lであり、キノロン類感受性のS. aureus FDA209Pに対するMICと同じであった。
一方、キノロン類であるNOR、OFX、LVX、CIP、TSX、SPXは、キノロン類耐性のMRSAであるS. aureus Mu50に対してMICが8mg/L〜128mg/L以上であり、化合物J-131CPに比べて弱い抗菌活性しか示さなかった。【０２０６】
以上の結果より、化合物J-131CPが黄色ブドウ球菌、特に、キノロン類耐性黄色ブドウ球菌に対する抗菌剤として非常に有用であることが示唆された。また、化合物J-131CPのGyrAの復帰変異を有するS. aureus Mu50 NR1-1に対するMICがキノロン類感受性のS. aureus FDA209Pに対するMICと同じであったことから、化合物J-131CPの作用点がGyrAであることが示唆された。【０２０７】
試験例1-2
構造式(2)から(25)で表される化合物の黄色ブドウ球菌に対する抗菌活性を以下の方法で試験した。
試験例1-1の化合物J-131CPの調製と同様にして、構造式(2)から(25)で表される化合物のそれぞれを調製した。S. aureus Mu50及びS. aureus FDA209P(ATCC6538P)のそれぞれについて試験例1-1と同様にして調製した。化合物として構造式(2)から(25)で表される化合物を用い、菌液としてS. aureus Mu50、及びS. aureus FDA209P(ATCC6538P)を用いた以外は、試験例1-1と同様にしてMIC(mg/L)を求めた。結果をS. aureus Mu50に対するMICと、S. aureus FDA209P(ATCC6538P)に対するMICとの比(S. aureus Mu50に対するMIC/S. aureus  FDA209P(ATCC6538P)に対するMIC)とともに表3に示す。【０２０８】
【表３】
2014171527.tif 000036
【０２０９】
表3の結果から、構造式(1)で表される化合物と同様に、構造式(2)から(25)で表される化合物も黄色ブドウ球菌、特にキノロン類耐性黄色ブドウ球菌に対する抗菌剤として非常に有用であることが示唆された。
また、表2及び表3の結果から、構造式(1)から(4)、(6)、(9)、(11)から(14)、(18)、(23)、及び(24)で表される化合物は、キノロン類耐性のMRSAであるS. aureus Mu50に対するMICと、キノロン類感受性のS. aureus FDA209Pに対するMICの比が0.25以上であることから、復帰抗生物質(Reverse  Antibiotic)として、キノロン類と併用することにより、キノロン類耐性菌の出現を抑える効果がより期待できることが示唆された。【０２１０】
試験例1-1及び1-2の結果から、構造式(1)から(25)で表される化合物は、キノロン類耐性黄色ブドウ球菌に対し、キノロン類感受性黄色ブドウ球菌に対するのと同等、あるいはより強い抗菌活性を有することが示された。なお、キノロン類感受性黄色ブドウ球菌に対するのと同等の抗菌活性とは、キノロン類耐性黄色ブドウ球菌に対するMICと、キノロン類感受性黄色ブドウ球菌に対するMICとの比(キノロン類耐性黄色ブドウ球菌に対するMIC/キノロン類感受性黄色ブドウ球菌に対するMIC)が、1/2以上、2以下であることをいう。【０２１１】
試験例2
化合物J-131CPの作用点がGyrAであることをさらに調べるために、MRSAであるS. aureus MR5867、及びS. aureus MR5867のQRDRに変異を導入した段階変異株(1段階変異株〜3段階変異株)、並びに、MSSAであるS. aureus MS5952、及びS. aureus MS5952のQRDRに変異を導入した段階変異株(1段階変異株〜3段階変異株)(上記の各菌株はAntimicrob. Agents Chemother., 42(8), pp.1917-1922, 1988に記載されている)に対する抗菌活性について、以下の方法で試験した。本試験例に用いた菌株は本発明者より入手可能である。【０２１２】
化合物J-131CP及びキノロン類の調製は試験例1-1と同様に行った。
S. aureus MR5867、S. aureus MR5867のQRDRに変異を導入した段階変異株(1段階変異株〜3段階変異株)、S. aureus MS5952、及びS. aureus MS5952のQRDRに変異を導入した段階変異株(1段階変異株〜3段階変異株)のそれぞれを4mLのTBS(Becton Dickinson社製)で37℃にて一晩振盪培養した。培養終了後、集菌して、菌体を新しいTBSに懸濁し、578nmで0.3の吸光度となるように菌液を調製した。次いで、CAMHBを用いて菌液を500倍希釈した。【０２１３】
各濃度に調整した化合物J-131CP、又は各濃度に調整した各キノロン類を含むCAMHBをそれぞれ96ウェルプレートに50μL/ウェル添加し、ここへ試験例1-1と同様に500倍希釈した各菌液をそれぞれ50μL/ウェル添加し、37℃で一晩静置培養した。なお、培養時の化合物J-131CP又は各キノロン類の終濃度は128mg/L〜0.0625mg/Lである。培養終了後、各ウェルを目視して菌の増殖の有無を濁度にて判定し、各菌株に対する化合物J-131CP、又は各キノロン類のMIC(mg/L)を求めた。結果を表4及び表5に示す。【０２１４】
【表４】
2014171527.tif 000037
【０２１５】
【表５】
2014171527.tif 000038
【０２１６】
表4及び表5に示された結果から、キノロン類に関してはMRSAであるS. aureus MR5867、及びMSSAであるS. aureus MS5952のQRDRに変異を導入していくと、それら変異が導入された段階変異株に対するMICが上昇することが観察された。
一方、化合物J-131CPでは、それとは逆に、DNAジャイレースをコードするGyrA遺伝子に変異を導入した第2段階変異株に対してMICが低下した。従って、化合物J-131CPの標的タンパク質がDNAジャイレースであることが強く示唆された。【０２１７】
試験例3
黄色ブドウ球菌の5つのカテゴリー、即ち、MSSA、MRSA、市中感染型MRSA(CA-MRSA)、VISA、及びVRSAに属する黄色ブドウ球菌に対する化合物J-131CPの抗菌活性を調べた。
CA-MRSAは2000年代に出現し、病原性及び伝播力が強く、市中感染を起こす新しいMRSAクローンである(Clin. Microbiol., 40(11), pp.4289-4294, 2002)。本試験例に用いたMSSA、MRSA、CA-MRSA、VISA、及びVRSAに属する黄色ブドウ球菌は全てNational Collection of Type Cultures (NCTC)又は本発明者より入手可能である。【０２１８】
化合物J-131CP及びキノロン類の調製は試験例1-1と同様に行った。
試験例1-1のMICの測定において、黄色ブドウ球菌として表6に記載の菌株を用いたこと以外は、試験例1-1と同様の方法で各菌液を調製し、試験例1-1と同様の方法で、各菌株に対する化合物J-131CP、及び対照とするキノロン類のMICの測定を行った。結果を表7に示す。表6において、菌株のQRDRにおけるアミノ酸置換変異を下線で示す。【０２１９】
【表６】
2014171527.tif 000039
【０２２０】
【表７】
2014171527.tif 000040
【０２２１】
表7に示されるように、QRDRに変異を持ち、キノロン類に耐性の黄色ブドウ球菌株(USA300FPR、KSA36、BR2、MI、VRS1、VRS3a、及びVRS5)に対して化合物J-131CPのMICは＜0.06mg/Lであり、極めて強い抗菌活性を有することが示された。QRDRを有し、キノロン類に感受性の野生型黄色ブドウ球菌株(ATCC29213、NCTC8325、及びMW2)に対してもMICが0.125mg/L〜0.25mg/Lであり、キノロン類であるSPX、及びTSXにはやや劣るものの、NORよりも強く、OFX、LVX、及びCIPに匹敵する抗菌活性を示した。【０２２２】
試験例4-1
腸球菌(Enterococcus faecium及びEnterococcus faecalis)に対する化合物J-131CPの抗菌活性を以下の方法で試験した。
本試験例に用いたバンコマイシン耐性腸球菌(vancomycin-resistant Enterococcus：VRE)及びその他の腸球菌は全てNational Collection of Type Cultures (NCTC)又は本発明者より入手可能である。【０２２３】
化合物J-131CP及びキノロン類の調製は、試験例1-1と同様に行った。
試験例1-1のMICの測定において、黄色ブドウ球菌の代わりに表8に記載の腸球菌株を用いたこと以外は、試験例1-1と同様の方法で各菌液を調製し、試験例1-1と同様の方法で各菌株に対する化合物J-131CP、及び対照とするキノロン類のMICの測定を行った。結果を表9に示す。表8において、菌株のQRDRにおけるアミノ酸置換変異を下線で示す。【０２２４】
【表８】
2014171527.tif 000041
【０２２５】
【表９】
2014171527.tif 000042
【０２２６】
表9に示されるように、QRDRに変異のないE. faeciumに属するVRE株(NCTC12202、NCTC11104)、及びE．faecium株(RPR10)に対して化合物J-131CPの抗菌活性はキノロン類の抗菌活性を下回っていた。一方、GyrAに変異を有するE. faecium株(RPR2)に対しては、全てのキノロン類のMICが＞128mg/Lであるのに対して、化合物J-131CPはMICが4mg/Lであり、キノロン類よりも高い抗菌活性を示した。【０２２７】
E．faecalisに属する菌株に対して化合物J-131CPはTFXのNCTC12201に対するMIC、及びSPXのNCTC12203に対するMICを除き、キノロン類と同等又はより低いMICを示した。特に、化合物J-131CPは、GyrAに変異があり、キノロン類に対して高度耐性を示した36-15722(キノロン類のMICは≧64mg/L)について、1mg/Lという低いMICを示した。【０２２８】
試験例4-2
構造式(20)で表される化合物、構造式(22)で表される化合物、構造式(17)で表される化合物、構造式(21)で表される化合物、及び構造式(25)で表される化合物の腸球菌(Enterococcus faecium、及びEnterococcus faecalis)に対する抗菌活性を以下の方法で試験した。
試験例1-1の化合物J-131CPの調製と同様にして、構造式(20)で表される化合物、構造式(22)で表される化合物、構造式(17)で表される化合物、構造式(21)で表される化合物、及び構造式(25)で表される化合物のそれぞれを調製した。【０２２９】
試験例4-1のMICの測定において、構造式(20)で表される化合物、構造式(22)で表される化合物、構造式(17)で表される化合物、構造式(21)で表される化合物、及び構造式(25)で表される化合物を用い、下記表10に記載の菌株を用いたこと以外は、試験例4-1と同様の方法で各菌液を調製し、試験例4-1と同様の方法で各菌株に対する各化合物のMICの測定を行った。結果を表10に示す。表10には試験例4-1で測定したLVXのMICも併せて示す。【０２３０】
【表１０】
2014171527.tif 000043
【０２３１】
表10に示されるように、構造式(20)で表される化合物、構造式(22)で表される化合物、構造式(17)で表される化合物、構造式(21)で表される化合物、及び構造式(25)で表される化合物は、キノロン類感受性であるE. facium(NCTC12202)と比較して、キノロン類耐性であるE. faecium(RPR2)に対してより強い抗菌活性を示した。また、E. faecalis(NCTC12201及び36-15722)に対しては、キノロン類感受性又は耐性にかかわらず、良好な抗菌力を持つことが示された。【０２３２】
試験例5-1
化合物J-131CPの肺炎球菌(Streptpcoccus pneumoniae)に対する抗菌活性を以下の方法で試験した。本試験に用いたS. pneumoniae株は、ペニシリン感受性肺炎球菌(penicillin-susceptible Streptococcus pneumoniae：PSSP)、ペニリシン中間耐性肺炎球菌(penicillin-intermediate Streptococcus pneumoniae：PISP)、又はペニシリン耐性肺炎球菌(penicillin-resistant Streptococcus pneumoniae：PRSP)のいずれかのカテゴリーに属する。【０２３３】
PSSP、PISP、及びPRSPはそれぞれ、ペニシリンGのMICが0.063mg/L以下、0.063mg/Lより大きく1mg/L以下、及び2mg/L以上と定義されている。本試験例に用いたS. pneumoniae株は本発明者より入手できる(日本化学療法学会雑誌, 56(1), pp.16-20, 2008に記載されている)。【０２３４】
化合物J-131CP及びキノロン類の調製は、希釈にCAMHBの代わりに5質量％となるように馬溶血(lysed horse blood：LHB)を添加したCAMHBを用いた以外は、試験例1-1と同様に行った。馬溶血は、馬無菌脱繊血(株式会社日本生物材料センター製)に滅菌水を1：1の割合で加えて5回凍結解凍を行い。その後、10,000回転で20分間の遠心を2回行い、フィルターで濾過することで調製した。【０２３５】
表11に示す各S. pneumoniae株を血液寒天培地で37℃にて一晩、静置培養した。血液寒天培地は、ハートインフュージョン寒天培地(栄研化学株式会社製)に、緬羊無菌脱繊血(株式会社日本生物材料センター製)を5質量％加えて作製した。37℃にて一晩、静置培養した各S. pneumoniae株を新たな血液寒天培地に植え継ぎ、さらに、37℃にて一晩、静置培養した。培養終了後、各肺炎球菌を綿棒でかき取り、生理食塩水に懸濁し、吸光度計(アマシャム社製)を用いて625nmで0.08〜0.13の吸光度となるように生理食塩水で調整し、さらに5質量％となるようにLHBを添加したCAMHBで200倍希釈した。【０２３６】
各濃度に調整した化合物J-131CP、又は各濃度に調整した各キノロン類を含む5質量％となるようにLHBを添加したCAMHBを、それぞれ96ウェルプレートに50μL/ウェル添加し、ここへ200倍希釈した各菌液をそれぞれ50μL/ウェル添加し、37℃で一晩静置培養した。培養時の化合物J-131CP、又は各キノロン類の終濃度は、128mg/L〜0.0625mg/Lである。
培養終了後、各ウェルを目視して菌の増殖の有無を濁度にて判定し、各菌株に対する化合物J-131CP、又は各キノロン類のMIC(mg/L)を求めた。結果を表12に示す。表11において、菌株のQRDRにおけるアミノ酸置換変異を下線で示す。【０２３７】
【表１１】
2014171527.tif 000044
【０２３８】
【表１２】
2014171527.tif 000045
【０２３９】
表12に示されるように、本試験に用いたS．pneumoniaeに対する化合物J-131CPの抗菌活性は、QRDRに変異がない2株(KBSP04、KBSP11)についてはNORを除き本試験に用いたキノロン類の抗菌活性を下回った。一方、QRDRに変異がある3株(BCLSP16、JHSP11、BCLSP37)については、化合物J-131CPの抗菌活性は、本試験に用いた全てのキノロン類の抗菌活性を上回った。ペニシリンG感受性に基づく菌のカテゴリーとの相関は認められなかった。【０２４０】
試験例5-2
構造式(20)で表される化合物、構造式(22)で表される化合物、構造式(17)で表される化合物、構造式(21)で表される化合物、及び構造式(25)で表される化合物の、肺炎球菌(Streptpcoccus pneumoniae)に対する抗菌活性を調べた。
試験例5-1の化合物J-131CPの調製と同様にして、構造式(20)で表される化合物、構造式(22)で表される化合物、構造式(17)で表される化合物、構造式(21)で表される化合物、及び構造式(25)で表される化合物のそれぞれを調製した。【０２４１】
試験例5-1のMICの測定において、構造式(20)で表される化合物、構造式(22)で表される化合物、構造式(17)で表される化合物、構造式(21)で表される化合物、及び構造式(25)で表される化合物を用い、下記表5-3に記載の菌株を用いたこと以外は、試験例5-1と同様の方法で各菌液を調製し、試験例5-1と同様の方法で各菌株に対する各化合物のMICの測定を行った。結果を表13に示す。【０２４２】
【表１３】
2014171527.tif 000046
【０２４３】
表13に示されるように、構造式(20)で表される化合物、構造式(22)で表される化合物、構造式(17)で表される化合物、構造式(21)で表される化合物、及び構造式(25)で表される化合物は、キノロン類感受性菌(KBSP11)と比較して、キノロン類耐性菌(BCLSP37)に対して、より強い抗菌活性を有する傾向にあることがわかった。【０２４４】
試験例6
化合物J-131CPが変異DNAジャイレースを標的とすることを確認するため、化合物J-131CPを用いて、以下の方法によりDNAジャイレースによるDNA切断アッセイを行った(J. Antimicrob. Agents, 39(6), pp.478-485, 2012; Methods Mol., Med., 142, pp.11-23, 2008; 及びAntimicrob. Agents Chemother., 41, pp.2362-2366, 1997参照)。【０２４５】
配列番号1で表される黄色ブドウ球菌の野生型のGyrA(以下、「GyrA(wt)」と称することがある)をコードするDNAをプラスミドpMAL-c2(New Enland Biolabs社製)にクローニングした(以下、「pMAL-c2-gyrA」と称することがある)。
配列番号2で表される黄色ブドウ球菌の野生型のGyrB(以下、「GyrB(wt)」と称することがある)をコードするDNAを、プラスミドpMAL-c2(New England Biolabs社製)にクローニングした(以下、「pMAL-c2-gyrB」と称することがある)。【０２４６】
pMAL-c2-gyrA、pMAL-c2-gyrB、又はGyrA(wt)のアミノ末端側から84番目のセリン残基がロイシン残基に置換したアミノ酸配列をコードする変異gyrAを有するpMAL-c2-SAGAmut84(Int. J. Antimicrob. Agents, 39(6), pp.478-485, 2012)を用いて、E. coli BL21(DE3)(Invitrogen社製)を形質転換した。この形質転換した大腸菌の培養液に、1mMイソプロピル-β-チオガラクトピラノシド(和光純薬工業株式会社製)を添加して、マルトース結合GyrA(wt)、マルトース結合GyrB(wt)、又はマルトース結合変異型GyrA(S84L)の発現を誘導し、25℃で一晩培養した。培養終了後、菌体を回収し、緩衝液(20mMトリス塩酸(pH8.0)、200mM塩化ナトリウム、1mMエチレンジアミン四酢酸(EDTA)、1mMジチオトレイトール(DTT))に懸濁後、緩衝液の10分の1量のタンパク質抽出試薬(10×BugBuster(登録商標)、Novagen社製)と、緩衝液10mL当たり2.5μLのBenzonase(登録商標)nuclease(Novagen社製)を添加して25℃で30分間静置し、菌体を破砕及び溶解させることにより、マルトース結合GyrA(wt)、マルトース結合GyrB(wt)、又はマルトース結合変異型GyrA(S84L)含む菌破砕液を得た。【０２４７】
次いで、各菌破砕液を、マルトースを共有結合させたアミロースレジン(Novagen社製)を充填したカラムにそれぞれ添加した。ここへマルトース10mMを含む緩衝液(20mMトリス塩酸(pH8.0)、200mM塩化ナトリウム、1mM EDTA)を添加し、マルトース結合GyrA(wt)、マルトース結合GyrB(wt)、及びマルトース結合変異型GyrA(S84L)を溶出した。
次いで、溶出液1mL当たりにプロテアーゼ(Factor Xa、Amersham社製)を4ユニット添加し、25℃で3時間30分間静置し、マルトース結合GyrA(wt)、マルトース結合GyrB(wt)、及びマルトース結合変異型GyrA(S84L)から、マルトース結合タンパク質と、GyrA(wt)、GyrB(wt)、及び変異型GyrA(S84L)とを切り離した。【０２４８】
次に、限外濾過装置(YM-50フィルタユニット、Millipore社製)を用いて、GyrA(wt)、GyrB(wt)、及び変異型GyrA(S84L)を濃縮した。
濃縮したGyrA(wt)、GyrB(wt)、及び変異型GyrA(S84L)を、それぞれ緩衝液(35mMトリス塩酸(pH7.5)、24mM塩化カリウム、6mM塩化マグネシウム、1.8mMスペルミジン、0.36mg/mLウシ血清アルブミン、5mM  DTT、50体積％グリセリン)に懸濁し、GyrA(wt)を1μg/μL、GyrB(wt)を2μg/μL、変異型GyrA(S84L)を1μg/μLの濃度に調整した。【０２４９】
緩衝液(35mMトリス塩酸(pH7.5)、24mM塩化カリウム、6mM塩化マグネシウム、1.8mMスペルミジン、0.36mg/mLウシ血清アルブミン、5mM  DTT)中に、基質プラスミドDNAとしてのpTWV228(タカラバイオ株式会社製)0.4μgと、レボフロキサシン(LVX)又は化合物J-131CPとを添加し、ここへ、GyrA(wt)の酵素溶液0.15μL、及びGyrB(wt)の酵素溶液0.2μLを添加し、総量20μLとして反応溶液を調製した。レボフロキサシン(LVX)は、酵素活性指標の対照として用いるために、終濃度が16μg/mLとなるように添加した。化合物J-131CPは、終濃度0μg/mL、0.125μg/mL、0.25μg/mL、0.5μg/mL、1μg/mL、2μg/mL、又は4μg/mLとなるように添加した。【０２５０】
反応溶液を25℃で30分間静置し、反応させた。次いで、6質量％ラウリル硫酸ナトリウム溶液2μL、及び5mg/mL Proteinase K(和光純薬工業株式会社製)2μLを添加し、37℃で30分間静置し、DNAに結合したGyrA(wt)及びGyrB(wt)を失活処理した。
次いで、Proteinase Kで処理した反応溶液の全量を用いて、1質量％アガロースゲルにて電気泳動を行い、これを可視化した。結果を図1に示す。【０２５１】
図1に示す可視化した像から、各バンドの強度をソフトウェア(ImageJ v.10.2、National Institutes of Health；http://rsb.info.nih.gov/ij/)を用いて定量し、Antimicrob. Agents Chemother., 43(5), pp.1129-1136, 1999に記載された手法に基づき化合物J-131CPのIC50値を算出した。具体的には、レボフロキサシン(LVX)又は化合物J-131CPの各濃度における「S」、「L」、及び「N」のバンドの強度をソフトウェアでそれぞれ測定した。次に、各濃度における、「S」、「L」、及び「N」のバンドの強度の合計値を算出し、これを「全DNA量」とした(下記式1)。また、「L」及び「N」のバンドの強度の合計値を算出し、これを「切断DNA量」とした(下記式2)。次に、下記式3より、全DNA量に対する基質プラスミドDNAの割合(％)を、下記式4より、全DNA量に対する切断DNAの割合(％)をそれぞれ算出した。切断DNAの割合より、レボフロキサシン(LVX)又は化合物J-131CPのIC50値を求めた。結果を表14に示す。
全DNA量＝S＋L＋N・・・(式1)
切断DNA量＝L＋N・・・(式2)
基質プラスミドDNAの割合(％)＝S/(S＋L＋N)×100・・(式3)
切断DNA量の割合(％)＝(L＋N)/(S＋L＋N)×100・・(式4)【０２５２】
GyrA(wt)及びGyrB(wt)によるプラスミドDNAの切断において、GyrA(wt)の酵素溶液0.15μL及びGyrB(wt)の酵素溶液0.2μLを添加したことに代えて、変異型GyrA(S84L)の酵素溶液0.15μL及びGyrB(wt)の酵素溶液0.2μLを添加したこと以外は、GyrA(wt)及びGyrB(wt)によるプラスミドDNAの切断と同様の方法で変異型GyrA(S84L)及びGyrB(wt)によるプラスミドDNAの切断試験を行った。アガロースゲル電気泳動の結果を図2に示す。なお、図2において、「S」、「L」、及び「N」は、いずれも図1と同じ意味を示す。また、図1及び図2に示す可視化した像から、レボフロキサシン又は化合物J-131CPのIC50値を求めた。結果を表15に示す。【０２５３】
【表１４】
2014171527.tif 000047
【０２５４】
【表１５】
2014171527.tif 000048
【０２５５】
DNA切断アッセイ法は、DNAがDNAジャイレースによって切断され、再結合したか否かを検出することにより、薬剤によるDNAジャイレースの阻害作用を評価する手法である。化合物J-131CPによるDNAジャイレース阻害活性が観察される場合、化合物J-131CPの濃度依存的に、超螺旋構造を有する基質プラスミドDNA(図1及び図2では「S」で示す)が減少し、それに応じて2本鎖の基質プラスミドDNAのうちの一方の鎖が切断されたもの(図1及び図2では「N」で示す)及び2本鎖の基質プラスミドDNAの両方の鎖が切断され直鎖状になったもの(図1及び図2では「L」で示す)が占める割合が増す。【０２５６】
図1及び図2の結果より、レボフロキサシンは、野生型のDNAジャイレースに対して濃度16μg/mLで強い阻害活性を示したが(図1)、変異型のDNAジャイレース(GyrA(S84L))に対しては、殆ど阻害活性を示さなかった(図2)。一方、化合物J-131CPは、野生型のDNAジャイレースに対して、レボフロキサシンよりも低い濃度で、濃度依存的な阻害活性を示した(図1)。化合物J-131CPは、変異型のDNAジャイレース(GyrA(S84L))に対して、野生型のDNAジャイレースに対するよりも高い阻害活性を示した(図2)。【０２５７】
また、表14及び表15に示されるように、化合物J-131CPによる、DNAジャイレースと基質プラスミドDNAとの複合体を形成する際の結合親和性を示すIC50値は、酵素溶液としてGyrA(wt)及びGyrB(wt)を用いた場合、2μg/mL(6.2μM)であり、GyrA(S84L)及びGyrB(wt)を用いた場合、1μg/mL(3.1μM)であった。したがって、化合物J-131CPは、野生型DNAジャイレースに対して阻害活性を有するだけでなく、キノロン類の奏功しない変異型DNAジャイレース(GyrA(S84L))に対して、より強い阻害活性を有することが示された。【０２５８】
試験例7
上記の試験例1ないし5と同様にして、構造式(26)〜(44)で表される化合物について抗菌作用及び薬剤排出ポンプ阻害剤であるPAβNとの組み合わせについて評価した。結果を表16及び17に示す。表中の数値はMIC(mg/L)であり、Resは耐性菌、Susは感受性菌を意味する。大腸菌に対する抗菌活性の試験を行う際に、薬剤排出ポンプ阻害薬であるPhe-Arg-β-naphthylamide dihydrochloride(PAβN)と併用する場合は、1,024mg/Lに調整したフラボン類又はキノロン類を、前記CAMHBで２倍希釈し、512mg/Lに調製した。これをPAβN(シグマ・アルドリッチ社製)160mg/L含有CAMHBで2倍希釈して256mg/Lに調製し、ここから、PAβN 80mg/L含有CAMHBで2倍段階希釈を行い、0.125mg/Lまで11段階の希釈を行った。【０２５９】
【表１６】
2014171527.tif 000049
【０２６０】
【表１７】
2014171527.tif 000050
【０２６１】
試験例8：
表19に示される化合物について大腸菌に対する抗菌活性を以下の方法で試験した。
トポイソメラーゼIV及びDNAジャイレースのアミノ酸配列が表18に示す変異を有するようなトポイソメラーゼIVをコードする遺伝子parC及びDNAジャイレースをコードする遺伝子gyrAを有するE. coli 1708(株式会社ミロクメディカルラボラトリー、長野県佐久市印内659-2)、又はトポイソメラーゼIV及びDNAジャイレースのアミノ酸配列が標準菌株(K−12 MG1655)と同様のE. coli 1709(株式会社ミロクメディカルラボラトリー)を4mLのTBS(ディキンソン社製)で37℃にて一晩振盪培養した。培養終了後、新しいTBSに懸濁し、578nmで0.3の吸光度となるように菌液を調製した。次いで、試験例1で調整したCAMHBを用いて前記菌液を1,000倍希釈した。表18において、トポイソメラーゼIV又はDNAジャイレースのアミノ末端側から数えたアミノ酸の位置及びそのアミノ酸配列を示す。例えば、大腸菌の標準菌株であるK-12 MG1655のparCの「80Ser(AGT)」は、トポイソメラーゼIVのアミノ末端側から数えて80番目のアミノ酸がSer(AGT)であることを示す。【０２６２】
【表１８】
2014171527.tif 000051
【０２６３】
【表１９】
2014171527.tif 000052
【産業上の利用可能性】
【０２６４】
本発明の一般式(I)で表される化合物又はその塩は、各種の感染症、特にキノロン類耐性菌による感染症の予防及び/又は治療のための医薬の有効成分として有用である。一般式(I)で表される化合物又はその塩及びキノロン類の組み合わせを含む本発明の医薬は、キノロン類耐性菌に対しては一般式(I)で表される化合物又はそのが作用し、キノロン類感受性菌に対してはキノロン類が主として作用するため、感染症の原因となる細菌の種類によらずに抗菌活性を発揮でき、キノロン類に対する耐性菌の発現も抑制できる点で有利である。
【図１】
2014171527.tif 000055
【図２】
2014171527.tif 000056
【配列表】
2014171527000001.app
【国際調査報告】
2014171527.tif 000057
2014171527.tif 000058
2014171527.tif 000059
2014171527.tif 000060
2014171527.tif 000061
2014171527.tif 000062
2014171527.tif 000063
2014171527.tif 000064
2014171527.tif 000065