(57)【要約】  被測定液が通流するフローセル１００に対し、予め定めた主波長（例えば４１５ｎｍ）の光をパルス出力可能な主波長ＬＥＤ１０５と、前記主波長とは異なる副波長（例えば５００ｎｍ）の光を前記主波長とは異なるタイミングでパルス出力可能な副波長ＬＥＤ１０６とを設ける。また、主波長ＬＥＤ１０５及び副波長ＬＥＤ１０６から出力されてフローセル１００を透過した各波長の透過光量をそれぞれ検出可能なフォトダイオード１１２、１１４を設ける。そして、前記主波長の透過光量と前記副波長の透過光量との差に基づいて、吸光度を算出する。
2014157282.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
フロー式分析用吸光度検出装置であって、
被測定液が通流するフローセルと、
前記フローセルに対し、予め定めた主波長の光をパルス出力可能な主波長ＬＥＤと、
前記フローセルに対し、前記主波長とは異なる副波長の光を前記主波長とは異なるタイミングでパルス出力可能な副波長ＬＥＤと、
前記主波長ＬＥＤ及び前記副波長ＬＥＤから異なるタイミングで出力されて前記フローセルを透過した各波長の透過光量をそれぞれ検出可能な受光器と、
前記主波長の透過光量と前記副波長の透過光量との差に基づいて、吸光度を算出する演算部と、
を含んで構成される、フロー式分析用吸光度検出装置。
【請求項２】
前記主波長ＬＥＤと前記副波長ＬＥＤとは、１つのチップに内蔵されて、前記フローセルに対し同一光路に配置されることを特徴とする、請求項１記載のフロー式分析用吸光度検出装置。
【請求項３】
前記主波長ＬＥＤと前記副波長ＬＥＤとは、別チップとして構成されて、前記フローセルに対し異なる光路に配置され、
前記主波長ＬＥＤ及び前記副波長ＬＥＤと前記フローセルとの間に、前記主波長ＬＥＤ及び前記副波長ＬＥＤからの光を前記フローセルに向かわせる光学系が設けられることを特徴とする、請求項１記載のフロー式分析用吸光度検出装置。
【請求項４】
前記ＬＥＤのチップに内蔵されて、前記ＬＥＤの光量を検出する受光器を更に含んで構成されることを特徴とする、請求項１記載のフロー式分析用吸光度検出装置。
【請求項５】
前記主波長ＬＥＤ及び副波長ＬＥＤからの光の各一部を前記フローセルに入光する前に分光して同一光路上に集光する光学系と、該光学系による集光光路上に配置される受光器とを更に含んで構成されることを特徴とする、請求項３記載のフロー式分析用吸光度検出装置。
【請求項６】
前記主波長ＬＥＤ及び副波長ＬＥＤは、交互にパルス点灯されることを特徴とする、請求項１記載のフロー式分析用吸光度検出装置。
【請求項７】
キャリア液の流路に試料を注入する試料注入装置と、
この試料注入装置より下流側のキャリア液の流路に配置されて試料中の成分を検出する、請求項１記載の吸光度検出装置と、
を含んで構成される、フロー式分析装置。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、液体クロマトグラフィー、ＦＩＡ（Flow Injection Analysis ）、他フロー式分析用の吸光度検出装置、及びこれを用いたフロー式分析装置に関する。
【背景技術】
【０００２】
有機化学、生化学、医学、食品、環境などの分野において、試料中の成分の分離、分析、分取に液体クロマトグラフィー、ＦＩＡ、他フロー式分析が汎用されている。【０００３】
液体クロマトグラフィーでは、キャリア液の流路に試料が注入され、その下流側でカラム装置により試料中の成分が分離される。そして、分離された各成分について、吸光度検出装置により吸光度を測定することで、成分の検出がなされ、その結果はクロマトグラムとして表される。【０００４】
ここで、吸光度検出については、液性ノイズの低減のため、特許文献１に示される手法（２波長方式）が採用されている。【０００５】
これは、例えば、血液中の糖化ヘモグロビン、特にヘモグロビンＡ１ｃの検出に際し、ヘモグロビンＡ１ｃなどのヘモグロビン類の検出に適した主波長（例えば４１５ｎｍ）の光を照射した場合の透過光量と、ヘモグロビンＡ１ｃなどのヘモグロビン類を検出しない副波長（例えば５００ｎｍ）の光を照射した場合の透過光量とを測定し、主波長の透過光量と副波長の透過光量との差に基づいて、吸光度を算出することで、液性ノイズをキャンセルしている。【０００６】
具体的には、従来の２波長方式では、光源として、発光波長帯域の広いハロゲンランプを用い、その光をコリメートレンズにより平行光としてフローセルに入射し、このフローセルから出た光をビームスプリッタにより分岐している。そして、分岐した一方の光は主波長（例えば４１５ｎｍ）のバンドパスフィルタを通し、フォトダイオードで受光することで、主波長の透過光量を測定し、他方の光は副波長（例えば５００ｎｍ）のバンドパスフィルタを通し、別のフォトダイオードで受光することで、副波長の透過光量を測定している。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】日本国公開特許公報：特開２００７−３１５９４２号
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
しかしながら、従来のように、光源としてハロゲンランプを用いる場合、ランプを点灯する電源容量が２０Ｗ位必要になり、また、ランプの発熱もあり、ランプ冷却が必要となる。これにより小型化が困難となる。【０００９】
そこで、ＬＥＤ（発光ダイオード）を光源とすることが考えられる。しかし、ＬＥＤを光源とした場合、その発光波長帯域が狭いため、１つのＬＥＤでは光量の多い中心波長付近を主波長及び副波長に用いることができず、主波長及び副波長が光量の少ない発光波長帯域の両端付近となる。このため、フォトダイオードでの主波長及び副波長の検出光量が少なくなることから、光電流変換での増幅率を大きくしなければならず、ノイズが増大する。【００１０】
本発明は、このような実状に鑑み、光源としてＬＥＤを使用して小型化を実現する一方、ノイズを増大させることのないフロー式分析用吸光度検出装置を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
上記の課題を解決するために、本発明に係るフロー式分析用吸光度検出装置は、被測定液が通流するフローセルと、前記フローセルに対し、予め定めた主波長の光をパルス出力可能な主波長ＬＥＤと、前記フローセルに対し、前記主波長とは異なる副波長の光を前記主波長とは異なるタイミングでパルス出力可能な副波長ＬＥＤと、前記主波長ＬＥＤ及び副波長ＬＥＤから異なるタイミングで出力されて前記フローセルを透過した各波長の透過光量をそれぞれ検出可能な受光器と、前記主波長の透過光量と前記副波長の透過光量との差に基づいて、吸光度を算出する演算部と、を含んで構成される。
【発明の効果】
【００１２】
本発明によれば、光源としてＬＥＤを用いることで、小型化を達成することができる。また、主波長及び副波長の光を別々のＬＥＤから異なるタイミングで出力させることにより、各波長の光量を大きくすることができ、光電流変換の増幅率を小さくして、ノイズ低減を図ることができる。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】本発明の適用対象である液体クロマトグラフィー装置の一実施形態を示す概略図
【図２】本発明に係る吸光度検出装置の第１実施形態を示す概略図
【図３】主波長ＬＥＤ及び副波長ＬＥＤの波長特性を示す図
【図４】主波長ＬＥＤ及び副波長ＬＥＤのパルス点灯について示す図
【図５】演算処理内容を示すフローチャート
【図６】本発明に係る吸光度検出装置の第２実施形態を示す概略図
【図７】本発明に係る吸光度検出装置の第３実施形態を示す概略図
【発明を実施するための形態】
【００１４】
以下、本発明の実施の形態について、詳細に説明する。
図１は本発明の適用対象である液体クロマトグラフィー装置の一実施形態を示す概略図である。
【００１５】
図１の液体クロマトグラフィー装置は、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）の原理を用いたフロー式生化学分析装置であり、例えば、血液を試料として、血液中のヘモグロビンＡ１ｃをはじめとするヘモグロビン各成分を分析するために用いられる。
【００１６】
図１のフロー式生化学分析装置は、キャリア液の貯留タンク１と、貯留タンク１からキャリア液を連続的に送給する送液ポンプ２と、送液ポンプ２によって送液されるキャリア液の流路３と、キャリア液の流路３に配置されて試料を注入する試料注入装置４と、試料注入装置４の下流側に配置されて試料中の成分を分離するカラム装置５と、カラム装置５の下流側に配置されて前記分離された成分を吸光度により検出する吸光度検出装置６と、を含んで構成される。
【００１７】
尚、試料注入装置４での試料の注入は、ニードル（図示せず）により試料容器（図示せず）から試料を吸引、採取した後、試料注入装置４内に注入することにより行われる。検出装置６を通過した試料を含むキャリア液は排液タンク７に回収される。
【００１８】
吸光度検出装置６について、以下に詳細に説明する。
図２は本発明に係る吸光度検出装置の第１実施形態を示す概略図である。
【００１９】
フローセル１００は、液入口１０１と液出口１０２とを有し、カラム装置５（図１）により分離された成分を含む被測定液が通流する。フローセル１００はまた、被測定液の通流部を挟んで、入射面１００ａと出射面１００ｂとを有している。
【００２０】
フローセル１００の入射面１００ａ側には、２波長光源１０３とコリメートレンズ１０８とが配置される。
【００２１】
２波長光源１０３は、１つのチップ１０４に内蔵された主波長ＬＥＤ１０５と副波長ＬＥＤ１０６とにより構成される。また、このチップ１０４には、更にフォトダイオード１０７が内蔵されている。
【００２２】
主波長ＬＥＤ１０５は、被測定液中の検出成分であるヘモグロビンＡ１ｃなどのヘモグロビン類により吸収される、例えば４１５ｎｍの波長の光を発するＬＥＤである。
副波長ＬＥＤ１０６は、被測定液中の検出成分であるヘモグロビンＡ１ｃなどのヘモグロビン類の吸収範囲外で、例えば５００ｎｍの波長の光を発するＬＥＤである。
これら主波長ＬＥＤ１０５及び副波長ＬＥＤ１０６は、それぞれ別のＯＮ信号により通電されるように構成されており、それぞれ異なるタイミングでパルス出力可能である。
【００２３】
尚、図３に主波長ＬＥＤ１０５及び副波長ＬＥＤ１０６の波長特性を示している。図３中の点線は従来例のように２波長方式を１つのＬＥＤで実現する場合の当該ＬＥＤの波長特性である。
【００２４】
フォトダイオード１０７は、主波長ＬＥＤ１０５及び副波長ＬＥＤ１０６の光量を検出可能に配置されている。
【００２５】
コリメートレンズ１０８は、２波長光源１０３を構成する主波長ＬＥＤ１０５及び副波長ＬＥＤ１０６からの光を平行光にして、フローセル１００の入射面１００ａに入光させる。
【００２６】
フローセル１００の出射面１００ｂ側には、ビームスプリッタ１１０が配置される。
ビームスプリッタ１１０は、フローセル１００からの出射光を分岐する。
【００２７】
分岐光路の一方には、主波長（例えば４１５ｎｍ）のバンドパスフィルタ１１１と、このバンドパスフィルタ１１１を通過した光を受光するフォトダイオード１１２とが配置される。
分岐光路の他方には、副波長（例えば５００ｎｍ）のバンドパスフィルタ１１３と、このバンドパスフィルタ１１３を通過した光を受光するフォトダイオード１１４とが配置される。
尚、本実施形態では、受光器として、フォトダイオード１１２、１１４、１０７を用いたが、この他、光電子増倍管やフォトトランジスタなどを例示できる。小型化の観点からは、受光器としてフォトダイオード又はフォトトランジスタを用いるのが好ましい。
【００２８】
本実施形態の動作について説明する。
２波長光源１０３の主波長ＬＥＤ１０５と副波長ＬＥＤ１０６とについて、図４に示すように、別々のタイミングで、交互にパルス点灯を行わせる。
【００２９】
４１５ｎｍの主波長ＬＥＤ１０５を点灯した場合は、フォトダイオード１１２により、４１５ｎｍの透過光量を測定し、同時に、フォトダイオード１０７により、主波長ＬＥＤ１０５の光量（光源光量）をモニターする。
そして、演算により、４１５ｎｍの透過光量を光源光量で補正することにより、ＬＥＤ光量のドリフトやゆらぎを補正する。
【００３０】
５００ｎｍの副波長ＬＥＤ１０６を点灯した場合は、フォトダイオード１１４により、５００ｎｍの透過光量を測定し、同時に、フォトダイオード１０７により、副波長ＬＥＤ１０６の光量（光源光量）をモニターする。
そして、演算により、５００ｎｍの透過光量を光源光量で補正することにより、ＬＥＤ光量のドリフトやゆらぎを補正する。
【００３１】
これらの後、補正後の４１５ｎｍの透過光量から、補正後の５００ｎｍの透過光量を減算し、これらの差に基づいて、吸光度を算出する。このような処理により、フローセル１００内の汚れや液の脈流によるゆらぎが取り除かれた安定した４１５ｎｍの吸収特性が得られることになる。
【００３２】
図５は本実施形態の演算処理内容を示すフローチャートである。
Ｓ１では、４１５ｎｍの主波長ＬＥＤ１０５をパルス点灯させる。
Ｓ２では、４１５ｎｍの主波長ＬＥＤ１０５をパルス点灯中に、フォトダイオード１１２からの信号を読込み、４１５ｎｍの透過光量を検出する。同時に、フォトダイオード１０７からの信号を読込み、主波長ＬＥＤ１０５の光量を検出する。
Ｓ３では、４１５ｎｍの透過光量をＬＥＤ光量で補正する。
【００３３】
Ｓ４では、５００ｎｍの副波長ＬＥＤ１０６をパルス点灯させる。
Ｓ５では、５００ｎｍの副波長ＬＥＤ１０６をパルス点灯中に、フォトダイオード１１４からの信号を読込み、５００ｎｍの透過光量を検出する。同時に、フォトダイオード１０７からの信号を読込み、副波長ＬＥＤ１０６の光量を検出する。
Ｓ６では、５００ｎｍの透過光量をＬＥＤ光量で補正する。
【００３４】
Ｓ７では、Ｓ３で求めた補正後の４１５ｎｍの透過光量から、Ｓ６で求めた補正後の５００ｎｍの透過光量を減算し、吸光度相当値を求める。この部分が吸光度の演算部に相当する。
【００３５】
実際には、吸光度検出装置の検出信号はデータ処理装置（図示せず）に送られ、データ処理装置でのデータ処理結果が分析結果として出力される。尚、Ｓ１〜Ｓ６の処理を繰り返し実行した後にＳ７の処理へ移行するようにしてもよいし、Ｓ１〜Ｓ７の処理を繰り返し実行するようにしてもよい。
【００３６】
本実施形態の液体クロマトグラフィー用吸光度検出装置は、被測定液が通流するフローセル１００と、前記フローセル１００に対し、予め定めた主波長の光をパルス出力可能な主波長ＬＥＤ１０５と、前記フローセル１００に対し、前記主波長とは異なる副波長の光を前記主波長とは異なるタイミングでパルス出力可能な副波長ＬＥＤ１０６と、前記主波長ＬＥＤ１０５及び前記副波長ＬＥＤ１０６から異なるタイミングで出力されて前記フローセル１００を透過した各波長の透過光量をそれぞれ検出可能な受光器（フォトダイオード１１２、１１４）と、前記主波長の透過光量と前記副波長の透過光量との差に基づいて、吸光度を算出する演算部（Ｓ７）と、を含んで構成されるため、次のような効果が得られる。光源としてＬＥＤを用いることで、小型化を達成することができる。また、主波長及び副波長の光を別々のＬＥＤから異なるタイミングで出力させることにより、各波長の光量を大きくすることができ、光電流変換の増幅率を小さくして、ノイズ低減を図ることができる。言い換えれば、２波長に特化したＬＥＤを２素子使用することにより、エネルギー強度が高い光源を得ることができ、ノイズを減少させることができる。
【００３７】
また、本実施形態によれば、主波長ＬＥＤ１０５と副波長ＬＥＤ１０６とは、１つのチップ１０４に内蔵されて、フローセル１００に対し同一光路に配置されることにより、フローセル１００の入射側の構成を簡素化し、装置の小型化を図ることができる。
【００３８】
また、本実施形態によれば、主波長ＬＥＤ１０５及び副波長ＬＥＤ１０６のチップ１０４に内蔵されて、主波長ＬＥＤ１０５及び副波長ＬＥＤ１０６の光量を検出するフォトダイオード１０７を備えるため、光源光量を検出し、光源由来のノイズやドリフトを取り除くことが容易となる。特に本実施形態では、２つのＬＥＤ１０５、１０６に対し、１つのフォトダイオード１０７を追加するだけで済み、簡便に実施できる。
【００３９】
また、本実施形態によれば、主波長ＬＥＤ１０５及び副波長ＬＥＤ１０６を交互にパルス点灯させることにより、交互に２波長の吸収特性を得ることができる。
【００４０】
また、本実施形態の液体クロマトグラフィー装置（フロー式生化学分析装置）は、キャリア液の流路３に試料を注入する試料注入装置４と、この試料注入装置４より下流側のキャリア液の流路に配置されて試料中の成分を分離するカラム装置５と、このカラム装置５より下流側のキャリア液の流路に配置されて試料中の成分を検出する上記構成の吸光度検出装置６と、を含んで構成されるため、吸光度検出装置の検出精度向上及び小型化により、液体クロマトグラフィー装置の性能向上及び小型化を達成することができる。
【００４１】
図６は本発明に係る吸光度検出装置の第２実施形態を示す概略図である。
本実施形態では、主波長ＬＥＤと副波長ＬＥＤとは、別チップとして構成されて、フローセルに対し異なる経路に配置される。
【００４２】
フローセル１００の入射面１００ａ側には、ビームスプリッタ１２０が配置される。
ビームスプリッタ１２０は、第１光路からの光と第２光路からの光とをフローセル１００の入射面１００ａに向かわせることができる。
【００４３】
第１光路には、第１光源１２１と、コリメートレンズ１２５と、バンドパスフィルタ１２６とが配置される。
第１光源１２１は、１つのチップ１２２に内蔵された主波長ＬＥＤ１２３により構成される。また、このチップ１２２には、更にフォトダイオード１２４が内蔵されている。
【００４４】
主波長ＬＥＤ１２３は、被測定液中の検出成分であるヘモグロビンＡ１ｃなどのヘモグロビン類により吸収される、例えば４１５ｎｍの波長の光を発するＬＥＤである。
フォトダイオード１２４は、主波長ＬＥＤ１２３の光量を検出可能に配置されている。
【００４５】
コリメートレンズ１２５は、第１光源１２１を構成する主波長ＬＥＤ１２３からの光を平行光にして、ビームスプリッタ１２０に向かわせる。
バンドパスフィルタ１２６は、主波長（４１５ｎｍ）の光を通過させて、ビームスプリッタ１２０に入光させる。
【００４６】
第２光路には、第２光源１２７と、コリメートレンズ１３１と、バンドパスフィルタ１３２とが配置される。
第２光源１２７は、１つのチップ１２８に内蔵された副波長ＬＥＤ１２９により構成される。また、このチップ１２８には、更にフォトダイオード１３０が内蔵されている。
【００４７】
副波長ＬＥＤ１２９は、被測定液中の検出成分であるヘモグロビンＡ１ｃなどのヘモグロビン類の吸収範囲外で、例えば５００ｎｍの波長の光を発するＬＥＤである。
フォトダイオード１３０は、副波長ＬＥＤ１２９の光量を検出可能に配置されている。
【００４８】
コリメートレンズ１３１は、第２光源１２７を構成する副波長ＬＥＤ１２９からの光を平行光にして、ビームスプリッタ１２０に向かわせる。
バンドパスフィルタ１３２は、副波長（５００ｎｍ）の光を通過させて、ビームスプリッタ１２０に入光させる。
【００４９】
フローセル１００の出射面１００ｂ側にはフォトダイオード１３３が配置されている。
フォトダイオード１３３は、フローセル１００の出射面１００ｂからの光を受光し、受光量に対応した信号を出力する。
【００５０】
本実施形態の動作について説明する。
第１光源１２１の主波長ＬＥＤ１２３と第２光源１２７の副波長ＬＥＤ１２９とについて、別々のタイミングで、交互にパルス点灯を行わせる。
【００５１】
４１５ｎｍの主波長ＬＥＤ１２３を点灯した場合は、フォトダイオード１３３により、４１５ｎｍの透過光量を測定し、同時に、フォトダイオード１２４により、主波長ＬＥＤ１２３の光量（光源光量）をモニターする。
そして、演算により、４１５ｎｍの透過光量を光源光量で補正することにより、ＬＥＤ光量のドリフトやゆらぎを補正する。
【００５２】
５００ｎｍの副波長ＬＥＤ１２９を点灯した場合は、フォトダイオード１３３により、５００ｎｍの透過光量を測定し、同時に、フォトダイオード１３０により、副波長ＬＥＤ１２３の光量（光源光量）をモニターする。
そして、演算により、５００ｎｍの透過光量を光源光量で補正することにより、ＬＥＤ光量のドリフトやゆらぎを補正する。
【００５３】
これらの後、補正後の４１５ｎｍの透過光量から、補正後の５００ｎｍの透過光量を減算し、これらの差に基づいて、吸光度を算出する。このような処理により、フローセル１００内の汚れや液の脈流によるゆらぎが取り除かれた安定した４１５ｎｍの吸収特性が得られることになる。
【００５４】
本実施形態によれば、主波長ＬＥＤ１２３と副波長ＬＥＤ１２９とは、別チップとして構成されて、フローセル１００に対し異なる光路に配置される。そして、主波長ＬＥＤ１２３及び副波長ＬＥＤ１２９と、フローセル１００との間に、主波長ＬＥＤ１２３及び副波長ＬＥＤ１２９からの光をフローセル１００に向かわせる光学系（ビームスプリッタ１２０）が設けられる。このような構成であっても、光源としてＬＥＤを用いることで、小型化を達成することができる。また、主波長及び副波長の光を別々のＬＥＤから異なるタイミングで出力させることにより、各波長の光量を大きくすることができ、光電流変換の増幅率を小さくして、ノイズ低減を図ることができる。
【００５５】
また、本実施形態によれば、主波長ＬＥＤ１２３と副波長ＬＥＤ１２９とを別チップにすることで、フローセル１００の入射側にビームスプリッタ１２０が必要となるが、バンドパスフィルタ１２６、１３２を入射側に配置することで、フローセル１００の出射側の構成を簡素化できる。すなわち、フローセル１００の出射側には受光器としてのフォトダイオード１３３のみを配置すればよく、出射側の構成を簡素化できる。
【００５６】
また、本実施形態によれば、主波長ＬＥＤ１２３及び副波長ＬＥＤ１２９の各チップに内蔵されて、各ＬＥＤの光量を検出するフォトダイオード１２４、１３０を備えるため、光源光量を検出し、光源由来のノイズやドリフトを取り除くことが容易となる。
【００５７】
図７は本発明に係る吸光度検出装置の第３実施形態を示す概略図である。
第３実施形態は、第２実施形態の変形例で、第１光源１２１及び第２光源１２７内にフォトダイオード（図６の１２４、１３０）を内蔵させていない。その代わりに、ビームスプリッタ１２０にて、第１光源１２１（主波長ＬＥＤ１２３）からの光の一部を反射させ、また第２光源１２７（副波長ＬＥＤ１２９）からの光の一部を透過させて、同じ光路に導き、その光路上に受光器としてのフォトダイオード１３５を配置してある。
【００５８】
第１光源１２１の主波長ＬＥＤ１２３と第２光源１２７の副波長ＬＥＤ１２９とについて、別々のタイミングで、交互にパルス点灯を行わせる。
【００５９】
４１５ｎｍの主波長ＬＥＤ１２３を点灯した場合は、フォトダイオード１３３により、４１５ｎｍの透過光量を測定し、同時に、フォトダイオード１３５により、フローセル１００入光前の光量をモニターする。
そして、演算により、４１５ｎｍの透過光量を入光前光量で補正することにより、ＬＥＤ光量のドリフトやゆらぎを補正する。
【００６０】
５００ｎｍの副波長ＬＥＤ１２９を点灯した場合は、フォトダイオード１３３により、５００ｎｍの透過光量を測定し、同時に、フォトダイオード１３５により、フローセル１００入光前の光量をモニターする。
そして、演算により、５００ｎｍの透過光量を入光前光量で補正することにより、ＬＥＤ光量のドリフトやゆらぎを補正する。
【００６１】
これらの後、補正後の４１５ｎｍの透過光量から、補正後の５００ｎｍの透過光量を減算し、これらの差に基づいて、吸光度を算出する。このような処理により、フローセル１００内の汚れや液の脈流によるゆらぎが取り除かれた安定した４１５ｎｍの吸収特性が得られることになる。
【００６２】
本実施形態によれば、主波長ＬＥＤ１２３及び副波長ＬＥＤ１２９からの光の各一部をフローセル１００に入光する前に分光して同一光路上に集光する光学系（ビームスプリッタ１２０）と、該光学系（ビームスプリッタ１２０）による集光光路上に配置される受光器（フォトダイオード１３５）とを備える。このような構成であっても、光源光量を間接的に検出し、光源由来のノイズやドリフトを取り除くことが容易となる。
【００６３】
尚、上記第１〜第３実施形態では、フォトダイオード１０７（図２）、フォトダイオード１２４、１３０（図６）、フォトダイオード１３５（図７）の検出信号に基づき、演算により、光源のドリフトやゆらぎを補正しているが、ハード的に帰還をかけて、光源の光量が一定になるようにしてもよい。
【００６４】
これを第１実施形態（図２）で説明すると、主波長ＬＥＤ１０５のパルス点灯時は、その光源光量をフォトダイオード１０７によりモニターし、一定光量になるように、主波長ＬＥＤ１０５への印加電流を調整することにより、ＬＥＤ光量のドリフトやゆらぎを補正する。また、副波長ＬＥＤ１０６のパルス点灯時は、その光源光量をフォトダイオード１０７によりモニターし、一定光量になるように、副波長ＬＥＤ１０６への印加電流を調整することにより、ＬＥＤ光量のドリフトやゆらぎを補正する。
【００６５】
また、主波長及び副波長については、ヘモグロビンＡ１ｃなどのヘモグロビン類を念頭に、４１５ｎｍ、５００ｎｍの例で説明したが、これは一例であり、これに限るものではないことは言うまでもない。
【００６６】
また、検出例については、血液中の成分を検出する例で説明したが、これに限るものでなく、液体クロマトグラフィー、ＦＩＡ、他フロー式分析一般に適用することができる。
【００６７】
また、図示の実施形態はあくまで本発明を例示するものであり、本発明は、説明した実施形態により直接的に示されるものに加え、特許請求の範囲内で当業者によりなされる各種の改良・変更を包含するものであることは言うまでもない。
【産業上の利用可能性】
【００６８】
本発明に係る液体クロマトグラフィー、ＦＩＡ、他フロー式分析用の吸光度検出装置、及びこれを用いた液体クロマトグラフィー装置、ＦＩＡ装置、他フロー式分析装置は、各種試料中の成分の分離、分析、分取に好適に用いることができると共に、医療検査装置などの小型化、高精度化に寄与でき、産業上の利用可能性は大である。
【符号の説明】
【００６９】
１  キャリア液の貯留タンク
２  送液ポンプ
３  キャリア液の流路
４  試料注入装置
５  カラム装置
６  吸光度検出装置
７  排液タンク
１００  フローセル
１００ａ  入射面
１００ｂ  出射面
１０１  液入口
１０２  液出口
１０３  ２波長光源
１０４  チップ
１０５  主波長ＬＥＤ
１０６  副波長ＬＥＤ
１０７  フォトダイオード
１０８  コリメートレンズ
１１０  ビームスプリッタ
１１１  主波長のバンドパスフィルタ
１１２  フォトダイオード
１１３  副波長のバンドパスフィルタ
１１４  フォトダイオード
１２０  ビームスプリッタ
１２１  第１光源
１２２  チップ
１２３  主波長ＬＥＤ
１２４  フォトダイオード
１２５  コリメートレンズ
１２６  主波長のバンドパスフィルタ
１２７  第２光源
１２８  チップ
１２９  副波長ＬＥＤ
１３０  フォトダイオード
１３１  コリメートレンズ
１３２  副波長のバンドパスフィルタ
１３３  フォトダイオード
１３５  フォトダイオード
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【国際調査報告】
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