(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
皮膚細胞に対する活性酸素の影響を緩和して皮膚の外観を改善するための美容的組成物を製造するためのナイアシンアミドとニコチンアミドリボシドの組み合わせの使用であって、
前記皮膚細胞の少なくとも一部を、前記美容組成物中の有効量のナイアシンアミドとニコチンアミドリボシドとの組み合わせと、皮膚細胞内の抗酸化剤応答配列（ＡＲＥ）により活性化される遺伝子転写を増加させるのに充分な処置期間にわたって接触させて、皮膚細胞内のＡＲＥにより活性化される遺伝子転写を増加させることにより、前記美容的組成物が、皮膚細胞に対する活性酸素の影響を緩和して皮膚の外観を改善する、前記使用。
【請求項２】
ＡＲＥにより活性化される遺伝子転写が、少なくとも約１０％増加する、請求項１に記載の使用。
【請求項３】
前記有効量のナイアシンアミド及びニコチンアミドリボシドが、ＡＲＥにより活性化される遺伝子転写を、相加作用よりも少なくとも５％相乗的に増加させる、請求項１又は２に記載の使用。
【請求項４】
前記有効量のナイアシンアミド及びニコチンアミドリボシドが、活性酸素（ＲＯＳ）によって引き起こされるＡＴＰ欠乏を低減させる、請求項１〜３のいずれか一項に記載の使用。
【請求項５】
前記有効量のナイアシンアミド及びニコチンアミドリボシドが、前記ＲＯＳによって引き起こされるＡＴＰ欠乏を相乗的に低減させる、請求項４に記載の使用。
【請求項６】
前記ＡＴＰ欠乏の相乗的な低減が、相加作用よりも少なくとも５％大きい、請求項５に記載の使用。
【請求項７】
前記有効量のナイアシンアミド及びニコチンアミドリボシドが、ＲＯＳにより低減した解糖系のＡＴＰ産生速度を、相加作用よりも少なくとも５％相乗的に回復させる、請求項１〜６のいずれか一項に記載の使用。
【請求項８】
前記皮膚の標的部分が、顔の皮膚を含む、請求項１〜７のいずれか一項に記載の使用。
【請求項９】
前記処置期間が、少なくとも２週間である、請求項１〜８のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１０】
前記処置期間が、少なくとも４週間であり、前記有効量のナイアシンアミド及びニコチンアミドリボシドが、経表皮水分損失の相乗的改善を提供する、請求項８に記載の使用。
【請求項１１】
前記有効量のナイアシンアミド及びニコチンアミドリボシドが、局所塗布及び経口摂取の少なくとも一方によって前記標的皮膚部分と接触させられる、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１２】
前記ニコチンアミドリボシド及びナイアシンアミドが、約１：４〜約４：１のニコチンアミドリボシド：ナイアシンアミドの比で提供される、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１３】
前記ニコチンアミドリボシド及びナイアシンアミドが、皮膚科学的に許容されるキャリアを含む美容組成物で提供される、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本開示は、概してナイアシンアミド及びニコチンアミドリボシドの相乗的組み合わせを用いて細胞機能に対する活性酸素の影響を緩和して、皮膚の外観を改善するための美容的方法及び組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
紫外線放射、熱、スモッグ、及びタバコの煙などの様々な環境ストレス因子の影響が、皮膚細胞に酸化ストレスを引き起こすことが知られている。一部の理論によると、これらの環境ストレス因子は、様々な細胞小器官、構造膜、脂質、タンパク質、及び核酸を損傷する、反応性の高い分子（例えば、フリーラジカル及び外因性の活性酸素（ＲＯＳ））を皮膚細胞内に発生させる。水酸ラジカルなどの活性酸素は、極めて反応性が高く、近くにある実質上あらゆる分子から電子を引き抜いてその分子をフリーラジカルに変えることで連鎖反応を進行させる。しかしながら、水酸ラジカルよりも一般的に反応性が低い過酸化水素などの一部のＲＯＳは、過酸化水素のより低い反応性が、ＤＮＡを損傷することができる細胞の核内に分子が移動するのに充分な時間を与えるため、水酸ラジカルよりも実際にはＤＮＡに対してより大きな損傷を与えうる。外因性のＲＯＳは酸化的ストレスを引き起こすことで悪名高いが、細胞代謝のような天然に存在する生物学的プロセスですら内因性のＲＯＳを生成することが知られている。幸いなことに、大部分の皮膚細胞には、内因性及び外因性のＲＯＳを中和するためのグルタチオン及びニコチンアミドアデニンジヌクレオチド（ＮＡＤ）のような様々な酸化還元調節物質を与えることで、細胞内の還元的環境を維持しようとする抗酸化防御システムが備わっている。
【０００３】
健康な抗酸化防御システムは、細胞代謝及び他の天然に存在する細胞機能から発生するＲＯＳ（すなわち内因性ＲＯＳ）の悪影響に対処するうえで通常は適当である。ところが、皮膚細胞が熱又は紫外線放射などの外部ストレス因子に曝露されると、ＲＯＳ濃度が劇的に増加しうる。酸化ストレスは、経時的にＲＯＳによって引き起こされる累積的な損傷から生じ、最終的には組織損傷及び／又は臓器機能不全につながりうる。例えば、皮膚細胞は、蓄積した酸化ストレスを皮膚の構造及び形態の著明な変化（例えば、色素沈着過度、黄ばみ、皺、小皺、皮膚の厚みの減少、弾性の喪失）として、より極端な程度としては皮膚がんとして発現しうる。場合によっては、ミトコンドリアなどの細胞小器官に蓄積した酸化ストレスは、ＡＴＰ及び／又はＮＡＤの濃度の低減につながる場合があり、これにより皮膚の早期の加齢につながりうる。
【０００４】
大部分の細胞の抗酸化防御システムは、抗酸化剤応答配列（ＡＲＥ）と呼ばれるマスタースイッチによって通常は制御されている。ＡＲＥは、抗酸化剤及び解毒化遺伝子の調節領域に位置するシス作用性エンハンサ配列であり、酸化還元サイクリングフェノール類及び親電子性物質によって活性化される。いくつかの研究により、他の多くの転写因子がＡＲＥ配列に結合するものの、ＤＮＡ結合タンパク質である核因子関連因子２（Nuclear Factor-Like 2）（Ｎｒｆ２）がＡＲＥ活性化に必要な主な転写因子であることが示唆されている。ＡＲＥが酸化ストレスに応じて活性化されると、対応する遺伝子が、還元／酸化調節因子及び／又はＲＯＳクエンチングタンパク質及び酵素の産生を開始するように細胞にシグナリングする。酸化還元調節因子及びＲＯＳクエンチング化合物の産生の調節以外に、ＡＲＥは、細胞に修復を開始するようにシグナリングもする。ヒトのＡＲＥに関連した生化学的経路の一部のものはよく解明されているが、未だ解明されていないものもある。したがって、皮膚への酸化ストレスによって引き起こされる損傷を低減するために皮膚細胞のＡＲＥを調節することが望ましい。
【０００５】
米国特許第８，１０６，１８４号（「Ｓａｕｖｅ」）は、細胞及び組織中のニコチンアミドアデニンジヌクレオチド（ＮＡＤ＋）の細胞内濃度を増加させるためのニコチニルリボシド及びニコチンアミドリボシドの使用に関するものである。Ｓａｕｖｅは、皮膚又は上皮細胞を、細胞内ＮＡＤ＋の濃度を高めるニコチニルリボシド又は誘導体化合物で処理することにより加齢（例えば発達する皺、弾性の喪失など）から皮膚を保護することができることを開示している。Ｓａｕｖｅはまた、その方法によって治療可能な皮膚の障害又は皮膚の状態の例として、炎症、日光による損傷、又は自然の加齢にともなう、又はそれらによって引き起こされた疾患又は疾病が挙げられることも開示している。しかしながら、Ｓａｕｖｅは、他の生物学的経路を除いて、ＮＡＤ＋の代謝経路に対するニコチニルリボシドの作用についてのみ論じている。したがって、細胞の健康及び代謝に対する環境ストレス因子の悪影響を低減するために利用することが可能な、酸化ストレスに関連する他の生物学的経路が更に存在する可能性がある。
【０００６】
米国特許出願公開第２００５／０２６７０２３号（「Ｓｉｎｃｌａｉｒ」）は、細胞の寿命又はストレスに対する細胞の耐性を調節するための方法及び組成物であって、ＮＰＴ１、ＰＮＣ１、ＮＭＡ１及びＮＭＡ２からなる群から選択されるタンパク質の濃度又は活性を増加させることを含みうる、細胞内のＮＡＤ＋サルベージ経路を介したフラックスを調節することを含む、方法及び組成物に関するものである。Ｓｉｎｃｌａｉｒは、ニコチンアミド（ナイアシンアミドとしても知られる）の量及び／又は活性を低減させる実施形態を開示している。Ｓｉｎｃｌａｉｒは、細胞を、ニコチンアミドリボシド又は生物学的活性を有するその類似体及び／又はプロドラッグと接触させることにより細胞内のＮＡＤ＋サルベージ経路を刺激する実施形態も開示している。細胞の寿命又はストレスに対する細胞の耐性を増加させることは、細胞及び／又は組織の全体的な健康にとって重要であるが、細胞に対する酸化ストレスの影響を低減するための有効な方法及び活性成分を特定することが依然、求められている。
【０００７】
米国特許出願公開第２０１１／０２６２５７０号（「Ｆｉｎｌａｙ」）は、加齢にともなう皮膚の酸化的損傷に関連した遺伝子及び遺伝子産物を含む遺伝子パネル、マイクロアレイ、及びバイオマーカーパネル、並びに皮膚の酸化的損傷を予防、逆転、又は低減するための美容物質の特定及び評価のための転写プロファイリングに基づいた方法に関するものである。詳細には、Ｆｉｎｌａｙは、ｎｒｆ２によって媒介される抗酸化剤応答配列の活性化を誘導して第２相酵素の発現を増加させることが可能な美容物質の特定及び／又は評価を行おうとしている。Ｆｉｎｌａｙは、化粧品産業では、直接的なスカベンジング以外の機構によって作用する抗酸化物質及び抗酸化物質を含む美容配合物が求められていることを開示している。Ｆｉｎｌａｙは、ｎｒｆ２によって媒介される抗酸化剤応答配列の活性化を誘導することが可能でありうる一般的な物質群のいくつかの例、及びいくつかの具体的な例を開示している。しかしながら、ＡＲＥを単独で、又は他の物質と組み合わせて活性化することが可能なスキンケア剤を特定することが依然求められている。
【０００８】
米国特許出願公開公報第２０１１／０２６２０２５号（「Ｊａｒｒｏｌｄ」）は、外因性及び／又は内因性の加齢条件に応じたヒトの皮膚の角質層中の脂質生成に関連した遺伝子パネル、バイオマーカーパネル、及びマイクロアレイに関するものである。Ｊａｒｒｏｌｄは、加齢の原因となる生化学的プロセスのより深い理解が、化粧品産業を活気づけ、抗酸化物質、抗炎症性物質、及びフリーラジカルスカベンジャーであるとうたわれる新たな部類の化粧品有効成分の台頭をもたらしたと開示している。Ｊａｒｒｏｌｄは、ガラクトマイセス発酵物の濾液が、ヒトの皮膚細胞のＡＲＥ関連遺伝子の活性化及び上皮細胞におけるヒアルロナン産生の誘導によって皮膚に対する抗酸化作用を有することが示されたと開示している。
【０００９】
国際公開第２０１５／００９８７９号（「Ｐｉ」）は、Ｎｒｆ２活性、より詳細にはＮｒｆ２−ＡＲＥ活性を阻害することができる化合物に関するものである。Ｐｉは、かかる化合物を含有する医薬組成物にも関する。Ｐｉは、ＡＲＥのＮｒｆ２活性化を阻害することにより、肝炎及び癌などの特定の疾患がＡＲＥのＮｒｆ２活性化によって与えられる抗酸化剤防御から恩恵を受けることを防止することが望ましいことを開示している。Ｐｉは、イソニコチンアミド（ナイアシンアミドの異性体）及び２−アミノ−イソニコチンアミドを含む、Ｎｒｆ２−ＡＲＥ活性を阻害するための例示的な活性物質のリストを開示している。しかしながら、Ｐｉの活性物質は、美容組成物、特にＡＲＥ活性を阻害するのではなく促進することを目的とした組成物では適当ではないと考えられる。
【００１０】
国際公開第２０１４／１５１８９１号（「Ｗａｌｌｅｙ」）は、酸化ストレスを低減するうえで、また、対象の皮膚、毛髪及び／又は爪などの硬質表面の酸化ストレスにともなう状態を改善するうえで有効な複数のＮｒｆ２活性化物質を含む局所製品に関するものである。Ｗａｌｌｅｙは、様々な物質の例を開示しており、その多くは植物からの抽出物である。しかしながら、皮膚細胞への酸化ストレスによって引き起こされる損傷を低減する改良された活性物質を特定することが依然求められている。
【００１１】
米国特許出願第１４／０５０１８３号（「Ｏｂｌｏｎｇ」）は、特定のストレス因子に関連した、特定の種類の皮膚細胞に対する望ましくない酸化ストレスを低減、予防及び／又は逆転する活性物質を特定及び／又は評価することに関するものである。詳細には、Ｏｂｌｏｎｇは、スキンケア活性物質及び皮膚細胞への関心を表している。Ｏｂｌｏｎｇは、皮膚細胞に対する酸化ストレスの望ましくない代謝作用を低減、予防及び／又は逆転させる、皮膚科学的に許容される溶媒とスキンケア活性物質とを含みうる美容組成物を開示している。Ｏｂｌｏｎｇは、ナイアシンアミドは解糖系代謝には影響を及ぼさないが、線維芽細胞の解糖系代謝に対する過酸化水素の悪影響を低減することを開示している。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１２】
【特許文献１】米国特許第８，１０６，１８４号
【特許文献２】米国特許出願公開第２００５／０２６７０２３号
【特許文献３】米国特許出願公開第２０１１／０２６２５７０号
【特許文献４】米国特許出願公開公報第２０１１／０２６２０２５号
【特許文献５】国際公開第２０１５／００９８７９号
【特許文献６】国際公開第２０１４／１５１８９１号
【特許文献７】米国特許出願第１４／０５０１８３号
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１３】
したがって、改善されたＡＲＥ活性化能を与える美容スキンケア活性物質が特定されることが望ましい。また、相乗的ＡＲＥ活性化能を与える美容スキンケア活性物質の組み合わせが特定されることも望ましい。更に、細胞代謝に対するＲＯＳの悪影響を低減する美容スキンケア活性物質が特定されることが望ましい。なお更に、細胞代謝に対するＲＯＳの悪影響を相乗的に低減する美容スキンケア活性物質の組み合わせが特定されることが望ましい。
【課題を解決するための手段】
【００１４】
本開示は、皮膚細胞の抗酸化剤応答配列（ＡＲＥ）を通じた遺伝子転写を活性化する美容的方法であって、ＡＲＥにより活性化される遺伝子転写の増加が所望され、かつ／又は必要とされる皮膚細胞を含む皮膚の標的部分を特定することと、皮膚細胞の少なくとも一部を、有効量のナイアシンアミドとニコチンアミドリボシドとの組み合わせと、ナイアシンアミドとニコチンアミドリボシドとの組み合わせが、接触させられた皮膚細胞の少なくとも一部のＡＲＥにより活性化される遺伝子転写を増加させるのに充分な処置期間にわたって接触させることと、を含む方法に関する。また、皮膚細胞内においてＲＯＳによって引き起こされるアデノシン三リン酸（ＡＴＰ）の欠乏を相乗的に低減させる美容的方法であって、ＲＯＳによって引き起こされるＡＴＰ欠乏の低減が望ましい、かつ又は必要とされる皮膚細胞を含む皮膚の標的部分を特定することと、皮膚細胞の少なくとも一部を、有効量のナイアシンアミドとニコチンアミドリボシドとの組み合わせと、接触させられた皮膚細胞の少なくとも一部において有効量のナイアシンアミド及びニコチンアミドリボシドがＡＴＰ欠乏を相乗的に低減させるのに充分な処置期間にわたって接触させることと、を含む方法も開示される。更に、ＲＯＳにより誘発される酸化ストレスの結果として低減した皮膚細胞内における解糖系のＡＴＰ産生速度を回復させる美容的方法であって、ＲＯＳにより誘発される酸化ストレスの結果として低減した解糖系のＡＴＰ産生速度の回復が望ましい、かつ／又は必要とされる皮膚細胞を含む皮膚の標的部分を特定することと、皮膚細胞の少なくとも一部を、有効量のナイアシンアミドとニコチンアミドリボシドとの組み合わせと、接触させられた皮膚細胞の少なくとも一部において有効量のナイアシンアミド及びニコチンアミドリボシドが解糖系のＡＴＰ産生速度を相乗的に回復させるのに充分な処置期間にわたって接触させることと、を含む方法も提供される。
【図面の簡単な説明】
【００１５】
【図１】解糖系の代謝経路を示す。
【図２】ＮＡＤ＋経路の一部を示す。
【図３】ナイアシンアミド及びニコチンアミドリボシドによるＡＲＥ活性化を示すグラフである。
【図４】ＥＣＡＲアッセイによって測定される解糖系のＡＴＰ濃度を示すグラフである。
【図５】過酸化水素によって引き起こされる解糖系のＡＴＰ欠乏を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
ヒトの加齢にともない、身体の細胞に対する外的及び内的ストレス因子による酸化的損傷が蓄積され、組織及び臓器の効率及び機能の減少につながりうる（すなわち酸化ストレス）。酸化的ストレスが、細胞がエネルギーを産生する能力の低減として、かつ／又は細胞の機能の変化として発現することは希なことではない。本発明以前には、ニコチンアミドリボシド及び／又はナイアシンアミドが、ＡＲＥにより活性化される遺伝子の転写を増加させることについては知られていなかった。また、ニコチンアミドリボシドが、図１に示される解糖系代謝経路になんらかの作用を有すること、又はＲＯＳにより誘発される酸化ストレスにともなうＡＴＰの枯渇を低減することが可能であることについても知られていなかった。
【００１７】
今では、ニコチンアミドリボシドが、ＡＲＥにより活性化される遺伝子転写を増加させ、解糖系によるＡＴＰ産生速度を回復させることが可能であることが見出されている。驚くべきことに、ナイアシンアミドとニコチンアミドリボシドは、併用された場合、ＡＲＥにより活性化される遺伝子転写を相乗的に増加させ、ＲＯＳにより誘発される酸化ストレスによって低減した解糖系のＡＴＰ産生速度を相乗的に回復させ、ＲＯＳによって引き起こされるＡＴＰの枯渇を相乗的に低減することも見出された。ナイアシンアミド及びニコチンアミドリボシドは、いずれもＮＡＤ＋前駆体であり、したがって、図２に示されるような既知の生物学的経路を介してＮＡＤ＋濃度を増加させることが可能であることが知られているが、これら２つの物質が併用される場合に見られる相乗作用は、これらの物質が未知の生物学的経路を介しても作用しうる可能性を示唆しており、このことは予想し得なかったことである。
【００１８】
ニコチンアミドリボシド及びナイアシンアミドによって与えられる向上した細胞機能は、皮膚の色合いの改善（より明るく、かつ又は更なる改善）、色素沈着過度の低減、黄ばみの低減、皮膚のバリア機能の改善（例えば、経表皮水分損失の減少）、小皺及び皺の減少、及び肌理の改善（例えばより小さな毛穴）といった、皮膚の様々な健康全体の改善をもたらしうる。
【００１９】
全ての成分の百分率は、特に指定されない限り、対応する組成物の重量を基準とする。特に明記しない限り、全ての比は重量比である。全ての数値範囲は、より狭い範囲を含む。区切られた上下の範囲限界は互換性があり、明示的に区切られていない更なる範囲を作る。有効数字の数は、指示されている量を限定するものでもなく、測定の精度を限定するものでもない。全ての測定は、約２５℃かつ周囲条件で行われるものとして理解され、その場合、「周囲条件」とは、約１気圧及び相対湿度約５０％の条件を意味する。
【００２０】
定義
「相加作用」とは、ナイアシンアミドとニコチンアミドリボシドとの組み合わせによってもたらされる作用が、それらの個々の作用の総和に等しいか又は概ね等しいことを意味する。例えば、相加作用は、ニコチンアミドリボシドが単独で使用される場合に、ＡＲＥにより活性化される遺伝子転写の１０％の増加をもたらし、ナイアシンアミドが単独で使用される場合に、ＡＲＥにより活性化される遺伝子転写の２０％の増加をもたらし、これらが併用される場合にＡＲＥにより活性化される遺伝子転写の約３０％（例えば２８％〜３２％）の増加をもたらす場合に示されるものである。この例における「相加作用よりも高い作用」（すなわち相乗作用）とは、ニコチンアミドリボシドとナイアシンアミドとの組み合わせが、ＡＲＥにより活性化される遺伝子転写に３０％よりも高い（例えば３５％、４０％、４５％、５０％、又はそれ以上の）向上率をもたらす場合に示されるものである。
【００２１】
組成物に関連して使用される「塗布する」又は「塗布」とは、ヒトの皮膚表面上に本発明の組成物を塗布又は塗り広げることを意味する。
【００２２】
「美容」とは、人体の所定領域に所望の視覚的効果を与えることを意味する。視覚的な美容効果は、一時的、半永久的、又は永久的なものでありうる。
【００２３】
「美容物質」とは、美容効果をもたらすために哺乳動物の身体又はその任意の部分に擦り込まれる、注がれる、振りかけられる、噴霧される、導入される、又は他の方法で塗布することを目的とした任意の物質及びその任意の成分を意味する。美容物質は、アメリカ食品医薬品局によって「一般的に安全と認められる」（Generally Recognized as Safe）（ＧＲＡＳ）物質及び食品添加物を含みうる。
【００２４】
「配置される」とは、別の要素に対して特定の場所に位置付けされることを意味する。
【００２５】
「有効量」とは、処置期間にわたって所望の効果（例えば、ＡＲＥにより活性化される遺伝子転写の増加、ＲＯＳにより誘発される酸化ストレスによって低減した解糖系のＡＴＰ産生速度の回復、ＲＯＳによって引き起こされるＡＴＰ欠乏の低減）をもたらすうえで充分なニコチンアミドリボシドとナイアシンアミドの組み合わせの量を意味する。
【００２６】
「経口組成物」とは、ヒトの胃に投与されることを目的とした任意の形態のあらゆる組成物を意味する。例えば、経口組成物は、錠剤（チュアブル錠剤を含む）、丸剤、カプセル剤、ロゼンジ剤、トローチ剤、カシェ剤、ペレット剤、液剤、シロップ剤、散剤などの形態で与えることができる。
【００２７】
「ストレス因子」とは、細胞内で活性酸素の生成を引き起こす環境要因を意味する。ストレス因子の非限定的な例としては、紫外線、たばこの煙、オゾン、エンジン排気、ディーゼル排気、スモッグ、界面活性剤、及びコンピュータのモニタ又はテレビからの放射が挙げられる。
【００２８】
「安全有効量」とは、正当な医学的判断の範囲内で深刻な副作用を避けるうえで充分に低いニコチンアミドリボシドとナイアシンアミドの組み合わせの有効量を意味する。
【００２９】
「皮膚」は、角化細胞、線維芽細胞及びメラニン産生細胞などの皮膚細胞から構成され、哺乳類の最外保護被覆を意味する。皮膚は、外側の表皮層及びその下の真皮層を含む。
【００３０】
「スキンケア」は、皮膚の状態の制御及び／又は改善を意味する。いくつかの非限定的な例としては、より滑らかで、より均一な外観及び／若しくは感触を提供することによって皮膚の外観及び／又は感触を改善すること；皮膚の１つ又は２つ以上の層の厚さを増加させること；皮膚の弾性又は弾力性を改善すること；皮膚のハリを改善すること；皮膚の脂っぽい、てかてかした、かつ／若しくはくすんだ外観を低減し、皮膚の水和状態若しくは保湿を改善し、小皺及び／若しくは皺の外観を改善し、皮膚剥脱若しくは落屑を改善し、皮膚を膨化させ、皮膚バリア特性を改善し、皮膚の色合いを改善し、赤み若しくは皮膚のシミの外観を低減させ、かつ／又は皮膚の明るさ、つや、若しくは透明感を改善することが挙げられる。「スキンケア製品」のいくつかの非限定例としては、肌用クリーム、保湿剤、ローション剤、及びボディウォッシュが挙げられる。
【００３１】
「スキンケア組成物」は、皮膚の状態を制御及び／又は改善する組成物を意味する。
【００３２】
「スキンケア有効成分」は、皮膚に適用した場合に、即時的及び／又は持続的な効果を、皮膚又は一般に皮膚において見られる細胞型にもたらす化合物又は２つ以上の化合物の組み合わせを意味する。スキンケア活性物質は、皮膚又は皮膚関連細胞を調節及び／又は改善することができる（例えば、皮膚の弾力性の改善、皮膚水和度の改善、皮膚状態の改善、及び細胞代謝の改善）。
【００３３】
「相乗作用」及びその変化形は、それらの物質で予想される相加作用よりも高い作用を有する２種以上の物質（例えば、ナイアシンアミドとニコチンアミドリボシド）によってもたらされる作用を意味する。例えば、相乗作用は、（ｉ）ナイアシンアミドとニコチンアミドリボシドとの組み合わせによってもたらされる、ＡＲＥにより活性化される遺伝子発現が、それらの計算上の相加作用を上回るか、（ｉｉ）ナイアシンアミドとニコチンアミドリボシドとの組み合わせによってもたらされる、細胞の解糖系のＡＴＰ産生速度の回復が、それらの計算上の相加作用を上回るか、かつ／又は（ｉｉｉ）ナイアシンアミドとニコチンアミドリボシドとの組み合わせによってもたらされる、ＲＯＳによって引き起こされる酸化ストレスにともなうＡＴＰ欠乏の低減が、それらの計算上の相加作用を上回る場合に示されうる。ＡＲＥにより活性化される遺伝子転写、並びに細胞代謝及びＡＴＰ欠乏に対するＲＯＳの影響は、下記により詳細に述べられる方法にしたがって測定することができる。
【００３４】
本明細書で使用するところの「処置期間」とは、物質又は組成物が標的皮膚表面に塗布される時間の長さ及び／又は頻度を意味する。
【００３５】
本明細書の方法及び組成物は、下式を有するニコチンアミドリボシド（ＣＡＳ番号１３４１−２３−７）の安全有効量を含む。すなわち、
【００３６】
【化１】
0006611099.tif 000002
【００３７】
ニコチンアミドリボシド及びその製造方法の例については、米国特許第８，１０６，１８４号に記載されている。本明細書の方法及び組成物はまた、下式を有するナイアシンアミド（ＣＡＳ番号９８−９２−０）の安全有効量も含む。すなわち、
【００３８】
【化２】
0006611099.tif 000003
【００３９】
本明細書の組成物は、ニコチンアミドリボシド及びナイアシンアミドを、非処理の細胞と比較して、かつ／又は本明細書に述べられる試験方法の１つにしたがって、ＡＲＥにより活性化される遺伝子発現を増加させ、ＲＯＳにより誘発される酸化ストレスによって低減した解糖系のＡＴＰ産生速度を回復させ、ＲＯＳによって引き起こされるＡＴＰ欠乏を低減するのに充分な量で含むものである。したがって、本明細書の組成物は、ＡＲＥにより活性化される遺伝子発現を、後述するＡＲＥアッセイにしたがって少なくとも５０正味ルミネセンス（例えば、１００〜１００００、２００〜７５００、３００〜５０００、又はこれらの範囲内の任意の値）だけ増加させる量のニコチンアミドリボシド及びナイアシンアミドを含むように配合することが望ましい場合がある。これに加えるか又はこれに代えて、組成物は、ニコチンアミドリボシドとナイアシンアミドとの組み合わせが、ＲＯＳにより誘発される酸化ストレスによって低減した解糖系のＡＴＰ産生速度を、後述するＥＣＡＲ法にしたがって少なくとも１０％（例えば１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％  ５０％、５５５、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、又は更には１００％）だけ回復させるように配合することが望ましい場合がある。組成物は、ニコチンアミドリボシドとナイアシンアミドとの組み合わせが、ＲＯＳによって引き起こされるＡＴＰ欠乏を、後述するＡＴＰアッセイにしたがって少なくとも１０％（例えば１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％  ５０％、５５５、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、又は更には１００％）だけ低減するように配合することが更に望ましい場合がある。
【００４０】
所望の美容効果を与えるうえで最小レベルのＡＲＥ活性化及び代謝安定性を与えることが重要でありうるが、本明細書の組成物は、これらの効果について相乗作用を与える量のナイアシンアミド及びニコチンアミドリボシドを含むように配合することも可能である。例えば、ナイアシンアミド及びニコチンアミドリボシドの量は、ＡＲＥにより活性化される遺伝子発現を、これらの成分の相加作用と比較して少なくとも５％（例えば１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％又は更には５０％）だけ増加させるように選択することができる。これに加えるか又はこれに代えて、ナイアシンアミド及びニコチンアミドリボシドの量は、ＲＯＳにより誘発される酸化ストレスによって低減した解糖系のＡＴＰ産生速度を、解糖系のＡＴＰ回復に対するこれらの成分の相加作用と比較して、少なくとも５％（例えば１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％又は更には５０％）だけ回復させるように選択することができる。場合によっては、ナイアシンアミド及びニコチンアミドリボシドの量は、ＲＯＳによって引き起こされるＡＴＰ欠乏を、ＡＴＰ欠乏を低減するうえでのこれらの成分の相加作用と比較して、少なくとも５％（例えば１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％又は更には５０％）だけ低減させるように選択することができる。
【００４１】
理論によって束縛されることを意図するものではないが、ニコチンアミドリボシドとナイアシンアミドとを、ＡＲＥを調節するそれらの能力について個別に試験した結果によって示唆されるように、ＡＲＥにより活性化される遺伝子発現の増加は、主としてニコチンアミドリボシドによってもたらされるものと考えられる。したがって、皮膚細胞に適当なレベルのＡＲＥ活性化を相乗的にもたらすためには、ニコチンアミドリボシドとナイアシンアミドとを特定のＮＲ：Ｎの比（例えば、１：４〜４：１、１：３〜３：１、１：２〜２：１、２：３〜３：２、又は更には１：１）で本組成物中に含有させることが望ましいと考えられる。
【００４２】
局所美容組成物
場合によっては、本方法に基づく局所美容組成物を使用することが望ましい場合がある。本明細書の局所美容組成物は、例えば、溶液、懸濁液、ローション、クリーム、ゲル、トナー、スティック、スプレー、エアロゾル、軟膏、クレンジングリキッド洗浄液及び固形バー、ペースト、フォーム、ムース、シェービングクリーム、拭き取り用品、ストリップ、パッチ、電動式パッチ、ヒドロゲル、フィルム形成製品、フェイシャル及びスキンマスク（不溶性シートを有するもの、及び有さないもの）；ファンデーション、アイライナー及びアイシャドウなどのメークアップなどを含む様々な製品形態で提供することができる。美容組成物の形態は、選択された皮膚科学的に許容される特定のキャリアにしたがいうる。
【００４３】
本明細書における使用に適した局所組成物は、有効量のナイアシンアミド及びニコチンアミドリボシドを、皮膚科学的に許容されるキャリアと、かかる組成物を製造するための周知の方法を用いて加え合わせることによって形成することができる。本組成物中のニコチンアミドリボシドの量は、どの程度の特定の効果が望ましいかに応じて異なりうる点は認識されるべきである。場合によっては、ニコチンアミドリボシド及びナイアシンアミドはそれぞれ、使用時及び／又は製造時（すなわち配合時に添加される）において、局所組成物中に組成物の重量に対して約０．００１重量％〜１０重量％（例えば、０．００５重量％〜９重量％、０．０１重量％〜８重量％、０．１重量％〜７重量％、０．５重量％〜６重量％、１重量％〜５重量％、２重量％〜４重量％、又はこれらの範囲内の任意の値）で存在してよい。
【００４４】
ニコチンアミドリボシドは、温度及び溶液中での時間に応じて水性環境中で加水分解してナイアシンアミドとリボースを生成しうることが知られている。これは、比較的長期間（例えば１〜３週間、又は更には１〜６ヶ月）にわたって異なる温度で保管される（例えば、倉庫内、出荷時、又は商品棚で）美容組成物では特に問題となりうる。美容組成物の一般的な保管温度は、５℃〜４５℃の範囲でありうる。したがって、水性組成物（すなわち水分を含む組成物）中で有効量のニコチンアミドリボシドを与えるには、配合時に添加されるニコチンアミドリボシドの量を、ニコチンアミドリボシドと水の既知の反応速度論に基づいて決めることが重要である。ニコチンアミドリボシドと水との反応速度論についての考察は、Ｆｅｒｒａｚらによる表題「Ｋｉｎｅｔｉｃ  α−Ｄｅｕｔｅｒｉｕｍ  Ｉｓｏｔｏｐｅ  Ｅｆｆｅｃｔｓ  ｆｏｒ  Ｅｎｚｙｍａｔｉｃ  ａｎｄ  Ｎｏｎｅｎｚｙｍａｔｉｃ  Ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ  ｏｆ  Ｎｉｃｏｔｉｎａｍｉｄｅ−β−Ｒｉｂｏｓｉｄｅ」の論文（Ａｒｃｈｉｖｅｓ  ｏｆ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃｓ誌、１９１巻、２号、１２月、４３１〜４３６頁（１９７８年））に見られる。したがって、本明細書に開示される量のニコチンアミドリボシドが、所望の効果の所望のレベルに応じて、製造時（すなわち配合時）及び／又は使用時に存在してよい。
【００４５】
皮膚科学的に許容されるキャリア
本明細書の局所美容組成物は、組成物用の皮膚科学的に許容可能なキャリア（「キャリア」と呼ばれる場合もある）を含む。「皮膚科学的に許容可能なキャリア」なる語句は、キャリアがケラチン性組織への局所塗布に適当であり、良好な審美特性を有し、組成物中の活性物質と相溶性を有し、安全性又は毒性について不当な問題をいっさい生じないことを意味する。一実施形態において、キャリアは、組成物の約５０重量％〜約９９重量％、約６０重量％〜約９８重量％、約７０重量％〜約９８重量％、又は代替的に約８０重量％〜約９５重量％の濃度で存在する。
【００４６】
キャリアは、様々な形態であってよい。場合によっては、各成分の溶解性又は分散性が、キャリアの形態及び特性を決定しうる。非限定的な例としては、単純な溶液（例えば水溶液又は無水溶液）、分散液、エマルション、及び固体形態（例えば、ゲル、スティック、流動性固体、又は非晶質材料）が挙げられる。特定の実施形態では、皮膚科学的に許容可能なキャリアは、エマルションの形態である。エマルションは、連続水相（例えば、水中油型及び水中油中水型）、又は連続油相（例えば、油中水型又は水中油型）を有するものとして大きく分類される。本発明の油相は、シリコーン油、非シリコーン油（炭化水素油、エステル、エーテルなど）、及びこれらの混合物を含んでよい。水性相は、典型的には、水並びに水溶性成分（例えば、水溶性保湿剤、コンディショニング剤、抗菌剤、湿潤剤、及び／又は他のスキンケア活性成分）を含む。しかしながら、場合によっては、水相は、水溶性保湿剤、コンディショニング剤、抗菌剤、湿潤剤、及び／又は他の水溶性スキンケア活性物質が挙げられるが、これらに限定されない水以外の構成成分を含みうる。場合によっては、組成物の非水構成成分は、グリセリン及び／又は他のポリオール（複数可）等の湿潤剤を含む。エマルションは、キャリアの重量に基づいて、約１重量％〜約１０重量％、又は約２重量％〜約５重量％の乳化剤を更に含有してもよい。乳化剤は、非イオン性であっても、アニオン性であっても、カチオン性であってもよい。乳化剤のいくつかの非限定的な例が、ディッカート（Dickert）らに付与された米国特許第３，７５５，５６０号、ディクソン（Dixon）らに付与された米国特許第４，４２１，７６９号、ＭｃＣｕｔｃｈｅｏｎ’ｓ  Ｄｅｔｅｒｇｅｎｔｓ  ａｎｄ  Ｅｍｕｌｓｉｆｉｅｒｓ、Ｎｏｒｔｈ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｅｄｉｔｉｏｎ、３１７〜３２４ページ（１９８６年）に開示されている。
【００４７】
キャリアは、１つ又は２つ以上の皮膚科学的に許容可能な親水性希釈剤を含有してよい。本発明で使用するところの「希釈剤」とは、ニコチンアミドリボシド及び／又はナイアシンアミドを、分散、溶解、又は他の形で添加することができる物質を含む。親水性希釈剤には、水と、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール（例えば、分子量２００〜６００ｇ／モル）、ポリプロピレングリコール（例えば、分子量４２５〜２０２５ｇ／モル）、グリセロール、ブチレングリコール、１，２，４−ブタントリオール、ソルビトールエステル、１、２、６−ヘキサントリオール、エタノール、イソプロパノール、ソルビトールエステル、ブタンジオール、エーテルプロパノール、エトキシル化エーテル、プロポキシル化エーテル、及びこれらの組み合わせなどの、低級一価アルコール（例えば、Ｃ１〜Ｃ４）並びに低分子量グリコール及びポリオールなどの有機親水性希釈剤と、が挙げられる。
【００４８】
追加の任意成分
本明細書の美容組成物は、追加の成分が組成物によって与えられる抗酸化剤効果を不要に変化させないものとして、提供される特定の美容組成物中に一般的に含まれる種類の１以上の任意成分（例えば、着色剤、皮膚色調剤、皮膚アンチエイジング剤、抗炎症剤、日焼け止め剤、これらの組み合わせなど）を含んでもよい。存在する場合、任意の成分は、組成物の０．０００１重量％〜５０重量％、０．００１重量％〜２０重量％、又は更に０．０１重量％〜１０重量％（例えば、５０重量％、４０重量％、３０重量％、２０重量％、１０重量％、５重量％、４重量％、３重量％、２重量％、１重量％含まれていてよい。組成物中に配合される場合、追加の成分は、過度の毒性、不適合性、不安定性、アレルギー反応などを示すことなく、ヒトの皮膚組織に接触させて用いるのに好適でなければならない。本明細書における使用に適当でありうる追加成分のいくつかの非限定的な例が、米国特許出願公開第２００２／００２２０４０号、同第２００３／００４９２１２号、同第２００４／０１７５３４７号、同第２００６／０２７５２３７号、同第２００７／０１９６３４４号、同第２００８／０１８１９５６号、同第２０１０／０００９２４０８号、同第２００８／０２０６３７３号、同第２０１０／０２３９５１０号、同第２０１０／０１８９６６９号、同第２０１１／０２６２０２５号、同第２０１１／００９７２８６号、同第２０１２／０１９７０１６号、同第２０１２／０１２８６８３号、同第２０１２／０１４８５１５号、同第２０１２／０１５６１４６号、及び同第２０１３／００２２５５７号、並びに米国特許第５，９３９，０８２号、同第５，８７２，１１２号、同第６，４９２，３２６号、同第６，６９６，０４９号、同第６，５２４，５９８号、同第５，９７２，３５９号、及び同第６，１７４，５３３号に記載されている。
【００４９】
本明細書の局所美容組成物は、かかる組成物を製造するための当該技術分野では周知の従来の方法にしたがって一般的に調製することができる。かかる方法では、加熱、冷却、真空の適用などを用いるか又はそれらを用いずに、１以上の工程で各成分を比較的均一な状態になるまで混合することを通常行う。例えば、エマルションは、最初に水相の材料を脂肪相の材料とは別に混合し、その後、２つの相を適宜組み合わせて所望の連続層を得ることにより調製することができる。特定の実施形態では、組成物を調製し、好適な安定性（物理的安定性、化学的安定性、光安定性等）及び／又は活性物質の送達を提供してよい。本組成物は、処置期間に対して充分な量の組成物を保管するようなサイズのパッケージで与えることができる。
【００５０】
局所組成物の使用方法
本明細書の方法は、有効量のナイアシンアミド及びニコチンアミドリボシドを皮膚の標的部分に、処置期間にわたって皮膚細胞の少なくとも一部又は全てにおいてＡＲＥにより活性化される遺伝子転写を増加又は相乗的に増加させ、ＲＯＳにより誘発される酸化ストレスによって低減した解糖系のＡＴＰ産生速度を回復又は相乗的に回復させ、かつ／又はＲＯＳによって引き起こされるＡＴＰ欠乏を低減又は相乗的に低減させるうえで充分な量と頻度で塗布することを含む。皮膚の標的部分は、例えば視覚的評価方法及び／又はデジタルイメージング装置を使用して消費者によって（例えば自己診断）、かつ／又はスキンケアの専門家によって特定することができる。皮膚の標的部分は特に限定されず、環境ストレス因子に曝される、ＡＲＥにより活性化される遺伝子転写の増加及び／又はＲＯＳによって引き起こされるＡＴＰ欠乏の低減が必要であるかかつ／又は望ましい皮膚のあらゆる部分を含みうる。そのような皮膚の部分は、衣服によって通常は覆われていない部分である傾向がある（例えば顔の皮膚表面、手及び腕の皮膚表面、足及び脚の皮膚表面、並びに首及び胸の皮膚表面）。場合によっては、皮膚の標的部分は、皮膚の健康及び／又は皮膚細胞の機能不全（例えば色素過剰斑、小皺、皺、毛穴の拡大、望ましくない肌理、まだらな皮膚の色合い、黄ばみ、乾燥、皮膚の厚みの減少、弾力の喪失）からなる、皮膚の加齢の１以上の兆候を呈することによって識別することができる。場合によっては、皮膚の標的部分は、皮膚の健康及び／又は皮膚細胞の機能不全からなる、皮膚の加齢の１以上の兆候を呈さない場合があるが、使用者（例えば比較的若い使用者）は、その部分がこうした問題が一般的に生じる部分である場合には、皮膚のその部分を標的とすることをやはり望む場合もある。このように、本方法及び組成物は、予防的措置として用いられる場合もある。
【００５１】
有効量のニコチンアミドリボシド及びナイアシンアミドを、本明細書に述べられるような単一の局所美容組成物中に添加することができる。これに加えるか又はこれに代えて、ニコチンアミドリボシド及び／又はナイアシンアミドを含む２以上の局所美容組成物を、皮膚の標的部分に塗布される際に有効量のニコチンアミドリボシド及びナイアシンアミドを与えるレジメンの一部として用いることもできる。例えば、ニコチンアミドリボシドを含む第１の組成物を標的皮膚表面に塗布した後、ナイアシンアミドを含む第２の組成物を標的皮膚表面に塗布するか、又はその逆を行うことができる。この例では、２つの組成物は、各組成物の連続的な塗布によって皮膚の標的部分に有効量のニコチンアミドリボシド及びナイアシンアミドが与えられるように配合されなければならない。
【００５２】
処置期間は、ニコチンアミドリボシドとナイアシンアミドとの組み合わせが、ＡＲＥにより活性化される遺伝子転写の相乗的増加、ＲＯＳにより誘発される酸化ストレスによって低減した解糖系のＡＴＰ産生速度の相乗的回復、及び／又はＲＯＳによって引き起こされるＡＴＰ欠乏の相乗的低減をもたらすうえで充分な時間であることが理想的である。処置期間は、少なくとも１週間（例えば、約２週間、４週間、８週間、又は更には１２週間）続く。場合によっては、処置期間は、数ヶ月（すなわち３〜１２ヶ月）又は数年間続いてもよい。場合によっては、少なくとも２週間、４週間、８週間、又は１２週間の処置期間中に、週の大半の日数（例えば、少なくとも週に４日間、５日間又は６日間）にわたって、少なくとも１日に１回、又は更には１日に２回組成物を塗布しうる。
【００５３】
本明細書の組成物は、局所的又は全体的に塗布することができる。組成物の塗布に関連して「局所的な」、「局所」、又は「局所的に」なる用語は、処置が望まれない皮膚の部分への供給を最小限に抑えつつ、皮膚の標的部分に組成物が供給されることを意味する。本組成物は、ある皮膚区域に塗布し、軽くマッサージしながら擦り込むことができる。組成物又は皮膚科学的に許容可能なキャリアの形態は、局所的塗布が容易となるように選択されるべきである。本明細書におけるある実施形態は、組成物をある区域に局所的に塗布することを想到しているが、本明細書における組成物は、１つ又は２つ以上の皮膚表面に更に広く又は広範に塗布され得ることが理解されよう。ある実施形態において、本明細書における組成物は、多段階式美容法の一部として使用される場合があり、この多段階式美容法では本組成物を１種又は２種以上の他の組成物の前及び／又は後に塗布され得る。
【００５４】
経口組成物
場合によっては、本方法にしたがって有効量のニコチンアミドリボシド及びナイアシンアミドを含む経口摂取可能な組成物を使用することが望ましい場合がある。経口組成物の単位用量は、ニコチンアミドリボシド及びナイアシンアミドをそれぞれ、１００ｍｇ、又は２００ｍｇ、又は３００ｍｇ、又は４００ｍｇ、又は５００ｍｇよりも多い量で含むことができる。場合によっては、消費者は、１００ｍｇ、又は２００ｍｇ、又は３００ｍｇ、又は４００ｍｇ、又は５００ｍｇ、又は６００ｍｇよりも多いが、通常は１０００ｍｇ、又は８００ｍｇよりも少ないニコチンアミドリボシド及び／又はナイアシンアミドの日用量を摂取することができる。経口組成物の１以上の単位剤形を毎日摂取することによって、処置期間にわたって所望の１日有効量を実現することができる。本組成物中に含まれるニコチンアミドリボシド及び／又はナイアシンアミドの量は、どの程度のＡＲＥ活性化及び／又はＡＴＰ回復が望ましいかに応じて変わりうる点は認識されるべきである。
【００５５】
他の任意材料
本経口組成物は、経口組成物に一般的に含まれる広範な任意材料を含むことができる。例えば、経口組成物は、口腔内での感触を改善し、外観を改善し、かつ／又はバリアとして機能するように経口組成物の単位用量の全体又は一部に塗布されるコーティングを有することができる。本明細書の経口組成物に塗布される場合、コーティングは、コーティング材料の１５重量％〜４０重量％のポリエチレングリコール又はポリプロピレングリコールなどの可塑剤を含むことができる。場合によっては、経口組成物は、５重量％未満、又は更には１重量％未満の量の潤滑剤（例えば、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸、硬化植物油、ポリエチレングリコール、安息香酸ナトリウム、塩化ナトリウム、ロイシン、ラウリル硫酸ナトリウム、及びラウリル硫酸マグネシウムなど）を含むことができる。経口組成物は、香味剤及び／又は甘味料（例えば、天然及び人工香味剤並びに甘味料、スプレー乾燥した香味剤、カプセル化された香味剤、水溶性甘味料、非水溶性甘味料、高甘味度甘味料、並びにこれらの組み合わせなど）を含むことができる。含まれる場合、香味剤及び／又は甘味料の量は、香味の種類及び望ましい香味又は甘味の強さといった因子に左右される好みの問題として異なる。ヒトによる摂取に適した顔料、染料、着色剤、及びこれらの対応するレーキを加えることによって、経口組成物の外観を改変し、製品の美観を改善することができる。経口組成物は、１以上の栄養素（例えばミネラル、ビタミン、経口栄養補助成分、経腸栄養補助成分、ハーブ類、及びこれらの混合物）を含むことができる。場合によっては、経口組成物は、結合剤（例えば、デンプン；ゼラチン；微結晶セルロース；ポリビニルピロリドン；メチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、エチルセルロース、及びヒドロキシエチルセルロースなどのセルロース誘導体；カルボキシメチルセルロース、アカシア、アルギン酸ナトリウム、及びビーガムなどの他の天然及び合成ゴム類；並びにこれらの混合物など）を含むことができる。
【００５６】
経口組成物の使用方法
本方法は、ＡＲＥにより活性化される遺伝子転写の増加又は相乗的な増加、ＲＯＳにより誘発される酸化ストレスによって低減した解糖系のＡＴＰ産生速度の回復又は相乗的な回復、及び／又は、ＲＯＳによって引き起こされるＡＴＰ欠乏の低減又は相乗的な低減が望ましいか、かつ／又は必要とされる皮膚の標的部分を特定することと、安全有効量のナイアシンアミドとニコチンアミドリボシドとの組み合わせを、処置期間にわたって必要かつ／又は所望される効果（複数可）を与えるのに充分な量と頻度で経口摂取することと、を含む。皮膚の標的部分は、例えば視覚的評価方法及び／又はデジタルイメージング装置を使用して消費者によって（例えば自己診断）、かつ／又はスキンケアの専門家によって特定することができる。皮膚の標的部分は特に限定されず、環境ストレス因子に曝され、かつ／又はＡＲＥにより活性化される遺伝子転写の増加及び／又はＲＯＳによって引き起こされるＡＴＰ欠乏の低減が望ましいかかつ／又は必要とされる皮膚のあらゆる部分を含みうる。そのような皮膚の部分は、衣服によって通常は覆われていない身体の領域上にある傾向がある（例えば顔の皮膚表面、手及び腕の皮膚表面、足及び脚の皮膚表面、並びに首及び胸の皮膚表面）。場合によっては、皮膚の標的部分は、皮膚の健康及び／又は皮膚細胞の機能不全（例えば色素過剰斑、小皺、皺、毛穴の拡大、望ましくない肌理、まだらな皮膚の色合い、黄ばみ、乾燥、皮膚の厚みの減少、弾力の喪失）からなる、皮膚の加齢の１以上の兆候を呈することによって識別することができる。場合によっては、皮膚の標的部分は、皮膚の健康及び／又は皮膚細胞の機能不全からなる、皮膚の加齢の１以上の兆候を呈さない場合があるが、使用者（例えば比較的若い使用者）は、その部分がこうした問題が一般的に生じる部分である場合には、皮膚のその部分を標的とすることをやはり望む場合もある。このように、本方法は、皮膚の健康障害の予防的措置として用いられる場合もある。
【００５７】
有効量のニコチンアミドリボシド及びナイアシンアミドを、本明細書に述べられるような単一の経口組成物中に添加することができる。これに加えるか又はこれに代えて、ニコチンアミドリボシド及び／又はナイアシンアミドを含む２以上の経口組成物を、摂取される際に有効量のニコチンアミドリボシド及びナイアシンアミドを与えるレジメンの一部として用いることもできる。例えば、ニコチンアミドリボシドを含む第１の経口組成物を摂取した後、ナイアシンアミドを含む第２の経口組成物を経口摂取するか、その逆を行うことができる。この例では、２つの組成物の連続した経口摂取によって有効量のニコチンアミドリボシド及びナイアシンアミドが与えられなければならない。場合によっては、経口組成物を、有効量のニコチンアミドリボシド及びナイアシンアミドを含む局所組成物と組み合わせて、かつ／又はそれに代えて使用することができる。
【００５８】
経口組成物は、処置期間の間、１日１回、１日２回、１日３回（例えば毎食時）、１日４回以上、摂取することができる。ニコチンアミドリボシドの日用量は、１００ｍｇ超、２５０ｍｇ超、３００ｍｇ超、又は更には４００ｍｇ又は５００ｍｇ超とすることができる。週用量は、２１００ｍｇ／週、２８００ｍｇ／週、又は３５００ｍｇ／週超とすることができる。日用量は、１個の単位剤形（例えば１個の丸剤、カプセル剤、又は錠剤）で与えるか、又は経口組成物が１日１回よりも多い回数で服用されることを意図している場合にはより小さい単位剤形で与えることができる。
【００５９】
処置期間は、ニコチンアミドリボシドとナイアシンアミドとの組み合わせが、ＡＲＥにより活性化される遺伝子転写の相乗的増加、及び／又はＲＯＳによって引き起こされるＡＴＰ欠乏の相乗的低減をもたらすうえで充分な時間であることが理想的である。例えば、処置期間は、少なくとも３週間、４週間、６週間又は更には８週間続きうる。場合によっては、処置期間は、何ヶ月（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、１０、１２ヶ月又はそれ以上）又は何年（例えば１、２、３、４、５年又はそれ以上）にもわたりうる。理論によって束縛されることを意図するものではないが、処置期間の休止後、２週間以内に、本明細書の組成物及び方法によってもたらされる効果の１つ以上がベースラインに戻りうると考えられる。したがって、日用量は処置期間の間、中断しないか、又は中断期間を２週間未満、又は１週間未満、又は５日未満、又は３日未満とすることが望ましい場合もある。
【実施例】
【００６０】
実施例１  抗酸化剤応答配列の相乗的活性化作用
この実施例では、有効量のナイアシンアミドとニコチンアミドリボシドとの組み合わせが、ＡＲＥを相乗的に活性化する能力について実証する。ＡＲＥの活性化は、下記のＡＲＥアッセイで述べるように、シー・エックス・アール・バイオサイエンシーズ社（CXR-Biosciences）から入手したＡＲＥ−３２レポーター細胞株を使用して定量した。
【００６１】
ＡＲＥアッセイ
ＡＲＥ−３２は、ｐＧＬ８ｘ−ＡＲＥ（ルシフェラーゼ遺伝子にラットＧＳＴ  ＡＲＥのコピーを８個連結したもの）と、ネオマイシン選択マーカーを有するｐＣＤＮＡ３．１とを含む安定的なＭＣＦ７細胞株である。Ｇ４１８の存在下で選択を行い、耐性クローンを単離した。クローンを、ｔＢＨＱに対するルシフェラーゼの誘導についてスクリーニングした。
【００６２】
本実施例で使用した試薬及び器具を以下に示す。
ダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ）（Ｇｉｂｃｏ、カタログ番号１１０５４−０２０、ロット番号１３６１２４２）
加熱不活性化ウシ胎児血清（ＦＢＳ）（Ｇｉｂｃｏ、カタログ番号１６１４０−０６３、ロット番号１３４５７６４）
ゲネチシンＧ４１８硫酸塩（Ｇ４１８）（Ｇｉｂｃｏ、カタログ番号１１８１１−０３１）
Ｓｔｅａｄｙ  Ｇｌｏ  Ｓｙｓｔｅｍ（Ｐｒｏｍｅｇａ、カタログ番号Ｅ２５１０）
９６ウェルプレート（Ｃｏｓｔａｒ、カタログ番号３９１７）
ペニシリン−ストレプトマイシン（Ｇｉｂｃｏ、カタログ番号１５０７０−０６３、ロット番号１０９７３３）
Ｔｅｒｔ−ブチルヒドロキノン（ｔＢＨＱ）（Ａｌｄｒｉｃｈ、カタログ番号１１，２９４−１）
Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ  Ｅｎｖｉｓｉｏｎリーダー
【００６３】
同等の試薬及び器具を、上記に示したものに置き換えることが、そのような置き換えがアッセイの結果に影響しないと予想される限りにおいて可能である点は認識されるべきである。
【００６４】
ＡＲＥ−３２細胞の維持
ＡＲＥ−３２細胞は、１０％  ＦＢＳ、５０単位／ｍＬのペニシリン及び５０μｇ／ｍＬのストレプトマイシン、０．８ｍｇ／ｍＬのＧ４１８を含んだＤＭＥＭ（フェノールレッドを含まないもの）中で常法にしたがって維持する。細胞を３〜４日ごとに継代培養する。細胞を、９０％  ＦＢＳ及び１０％  ＤＭＳＯを含む培地中で凍結した。
【００６５】
各処理によるルシフェラーゼの誘導及び陽性対照としてのｔＢＨＱ
９６ウェルプレートに、５０単位／ｍＬのペニシリン、５０μｇ／ｍＬのストレプトマイシン、０．８ｍｇ／ｍＬのＧ４１８、及び１０％のＦＢＳを含む１００μＬのＤＭＥＭ中、１×１０４細胞／ウェルを播種する。次いで、細胞を、５％  ＣＯ２インキュベーター中、３７℃で２４時間インキュベートした後、培地を１００μｌの新鮮な培地に交換する。ウェル当たり２μｌの各試験化合物で処理し、２５μＭのＴＢＨＱを陽性対照とした。（ＤＭＳＯ中で新しく調製した１０ｍＭのｔＢＨＱのストック溶液）。処理後に１００μｌの培地を加えて２００μＬの最終アッセイ体積とする。細胞をＣＯ２インキュベーター中、３７℃で更に２４時間インキュベートする。商品名ＳＴＥＡＤＹ−ＧＬＯのアッセイシステムを製造者の指示にしたがって使用してルシフェラーゼ活性についてアッセイする。ＡＲＥからの転写を促進する物質を特定するうえでＡＲＥレポーターアッセイがどのように機能するかを説明した一般的な概略図が米国特許出願公開第２０１１／０２６２５７０号に記載されている。
【００６６】
試験の結果を表１及び図３に示す。ニコチンアミドリボシド（ＮＲ）、ナイアシンアミド（Ｎ）、及びニコチンアミドリボシドとナイアシンアミドとの組み合わせのＡＲＥ活性を表１に正味ルミネセンスとして示す。ある試験試料の正味ルミネセンスは、その試験試料のルミネセンス値から対照のルミネセンス値を引くことによって求められる。ＮＲ＋Ｒの正味ルミネセンスの計算値は、ＮＲ及びＮについて個別に測定されたルミネセンス値の合計である。
【００６７】
表１に示されるように、ニコチンアミドリボシドはナイアシンアミドよりも高いルミネセンスを示し、このことは、ナイアシンアミドとニコチンアミドリボシドとは異なる生物学的経路を介して機能しており、ナイアシンアミド単独ではＡＲＥ活性化因子としての使用に適さない可能性を示唆するものである。しかしながら、驚くべきこととして、ナイアシンアミドとニコチンアミドリボシドとの組み合わせは、ＡＲＥにより活性化される遺伝子転写を相乗的に増加させるようである。
【００６８】
【表１】
0006611099.tif 000004
【００６９】
実施例２  ＥＣＡＲ法を用いた、ＲＯＳにより誘発される酸化ストレスによって低減した解糖系のＡＴＰ産生速度の相乗的回復作用
この実施例では、ニコチンアミドリボシドとナイアシンアミドとの組み合わせが、ＲＯＳにより誘発される酸化ストレスによって低減した解糖系のＡＴＰ産生速度を相乗的に回復させる能力を実証する。過酸化水素に曝露された線維芽細胞による解糖系ＡＴＰ産生量を、シーホース・バイオサイエンス社（Seahorse Bioscience）（マサチューセッツ州）より販売される商品名ＸＦ  Ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｆｌｕｘの分析装置を使用して測定した。分析装置によって、解糖系のＡＴＰ産生量と相関する細胞外酸性化速度（extracellular acidification rate）（ＥＣＡＲ）をリアルタイムで測定した。
【００７０】
ＥＣＡＲ法
この試験で使用した細胞は、ＡＴＣＣ（メリーランド州ベセスダ）より市販されるＢＪ細胞株から得たヒト皮膚線維芽細胞を凍結したものである。線維芽細胞は、イーグル最小必須培地（ＥＭＥＭ）に１０％ウシ胎児血清（ＦＢＳ）及びゲンタマイシン／アンホテリシンＢｘ５００溶液を添加した培地中で７０〜８０％コンフルエンスに達するまで増殖させた（ＥＭＥＭ及びＦＢＳはＡＴＣＣより入手可能であり、ゲンタマイシン／アンホテリシンＢｘ５００溶液はインビトロジェン社（Invitrogen）より入手可能である）。線維芽細胞を、試験の２４時間前にゼラチンコーティングプレートにウェル当たり８ｘ１０４細胞となるように播種した。各ウェルには、１００Ｌの上記に述べた培地を入れた。
【００７１】
ゼラチンコーティングプレートは、マルチウェルプレート（例えば、（シーホース・バイオサイエンシーズ社（Seahorse Biosciences）（マサチューセッツ州）より入手可能な２４ウェル又は９６ウェルプレート）の各ウェルを、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で希釈した０．２％ゼラチン（シグマ社（Sigma）より入手可能なタンパク質溶液）でコーティングすることにより調製する。ゼラチンを、３７℃の滅菌ＰＢＳ中、１：１０で０．２％にまで希釈した後、５０ｕＬの希釈ゼラチン溶液を各ウェルに加えて室温で３０分間インキュベートする。ウェルに触れないようにして過剰な液体を吸引除去し、表面を少なくとも２時間乾燥させる。
【００７２】
過酸化水素はよく知られたＲＯＳであり、この実施例において、試験される線維芽細胞に対する酸化ストレス源として使用する。過酸化水素のストレス因子溶液を、上記の線維芽細胞試験培地中、使用濃度の１０倍で調製した。試験物質（すなわちニコチンアミドリボシド、ナイアシンアミド、及びニコチンアミドリボシド＋ナイアシンアミド）を、線維芽細胞試験培地中、最終使用濃度の１０倍で調製して試験物質溶液とした。このストレス因子溶液及び試験物質溶液を３７℃に加温し、ｐＨを７．４に調整した。線維芽細胞試験培地を、ダルベッコ改変イーグル培地（シーホース・バイオサイエンシーズ社（Seahorse Biosciences）より入手可能）、２５ｍＭグルコース及び１ｍＭピルビン酸から調製した。線維芽細胞試験培地を３７℃に加温し、ｐＨを７．４に調整した。細胞を増殖させ、３７℃、５％  ＣＯ２空気中で播種した。測定を行う１時間前に、各ウェル中の培地を線維芽細胞試験培地に交換した。各ウェルは、約８×１０４個の細胞、及び３７℃、ｐＨ７．４の線維芽細胞試験培地６００μＬ（すなわちＤＭＥＭ、２５ｍＭグルコース及び１ｍＭピルビン酸）を含んでいた。
【００７３】
各試料の入ったプレートを分析装置に装填し、製造者の指示にしたがって平衡化した。試験物質溶液及びストレス因子溶液をそれぞれ、ＸＦカートリッジプレートの自動注入ポートに置いた。分析装置は、２分間の混合サイクル、２分間の待機サイクル、及び３分間の測定サイクルを順次、少なくとも８８分間にわたって継続的に実施するようにプログラムした。分析装置によってデータポイントを収集、記録した。ストレス因子溶液又は試験物質溶液を添加する前に分析装置により３回のサイクルを完了し、基底ＥＣＡＲ値を得た。３回目のサイクルの完了後（すなわち検出開始から約２１分後）、分析装置により適切な注入ポートから試験溶液及び／又はストレス因子溶液を各ウェルに加えた。ウェル中に１．５ｍＭ過酸化水素を与えるのに充分な量のストレス因子溶液をウェルに加えた。ウェル中に２５０μＭ又は５００μＭのナイアシンアミド又はニコチンアミドリボシドを与えるのに充分な量の試験物質溶液を加えた。
【００７４】
試験の結果を表２及び図４に示すが、ニコチンアミドリボシド（ＮＲ）とナイアシンアミド（Ｎ）は、過酸化水素の存在下で解糖の速度変化に対してほぼ同じレベルの防御作用をもたらすと考えられる。したがって、それぞれを個別に試験した濃度の半分の濃度のＮＲとＮとの組み合わせを試験することで、同等の効果が得られることが予想された。別の言い方をすれば、２５０μＭのＮ＋２５０μＭのＮＲは、個別に与えられた５００μＭのＮ及び５００μＭのＮＲと同じ効果を与えるはずである。しかしながら、驚くべきこととして、ナイアシンアミドとニコチンアミドリボシドとの組み合わせは、解糖系によるＡＴＰ産生を相乗的に回復させるようである。表２に示されるように、ニコチンアミドリボシドとナイアシンアミドとの組み合わせによって回復した解糖系によるＡＴＰ産生は、予想された個々の作用の相加的な量（すなわち計算された量）と比較して３０％以上高かった。
【００７５】
【表２】
0006611099.tif 000005
【００７６】
実施例３  ＡＴＰアッセイを用いた、ＲＯＳによって引き起こされるＡＴＰ欠乏の相乗的低減作用
この実施例では、様々な細胞機能（例えば代謝）に対するＲＯＳ及び酸化ストレスの影響を分析する目的で一般的に使用されているよく知られたＲＯＳである過酸化水素によって引き起こされるＡＴＰ欠乏を相乗的に低減させるナイアシンアミドとニコチンアミドリボシドとの組み合わせの能力を実証する。この試験では、過酸化水素、ニコチンアミドリボシド及び／又はナイアシンアミドの異なる組み合わせにケラチノサイトを曝露することによって、過酸化水素によって引き起こされるＡＴＰ欠乏に対するナイアシンアミド及びニコチンアミドリボシドの効果を観察した。
【００７７】
ＡＴＰアッセイ
商品名ＥＰＩＬＩＦＥの培地（ペニシリン／ストレプトマイシン及びケラチノサイト増殖補助因子を添加した、カルシウム非含有、フェノールレッド非含有のもの。インビトロジェン社（Invitrogen）カタログ番号ＭＥＰＩＣＦＰＲＦ５００）を使用してＴ１５０フラスコ中でケラチノサイトを培養した。次いで、ケラチノサイトを２４ウェルプレートに４０，０００細胞／ウェルとなるように１ｍＬの培地とともに播種した。２４時間後に、ケラチノサイトを、５００μＭの過酸化水素のみ、４００μＭのナイアシンアミド、４００μｍのニコチンアミドリボシド、又はナイアシンアミドとニコチンアミドリボシドとの組み合わせ（それぞれ４００μＭ）によって１時間、処理した。非処理のケラチノサイトを対照として用いた（すなわち培地中のケラチノサイト）。ケラチノサイトをＰＢＳ中で洗浄し、プロメガ社（Promega）（ウィスコンシン州マディソン）よりカタログ番号Ｇ７５７１／２／３として入手可能な商品名Ｃｅｌｌ  Ｔｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（登録商標）ＡＴＰアッセイを製造者の指示にしたがって使用してＡＴＰ濃度を測定した。商品名ＳＰＥＣＴＲＡＭＡＸ  Ｍ３のマイクロプレートリーダー（モレキュラー・デバイシーズ社（Molecular Devices）（カリフォルニア州サニーベ−ル））でルミネセンスを測定した。ある試験試料の正味ルミネセンスは、その試験試料のルミネセンスの実測値から対照のルミネセンスの実測値を引くことによって計算される。
【００７８】
試験の結果を表３及び図５に示す。表３及び図５に示すように、過酸化水素は、ＡＴＰの約９７．５％の欠乏を引き起こした。ナイアシンアミド及びニコチンアミドリボシドを過酸化水素とともに加えることによって、ＡＰＴの欠乏率は低下した（それぞれ約８９．７％及び９６．９％）。驚くべきこととして、ナイアシンアミドとニコチンアミドとの組み合わせを過酸化水素に加えた場合には、ＡＴＰの欠乏率は、それらの相加作用によって予想される量の約２倍低減した（すなわち、正味ルミネセンスの予測値８５１０．５に対して正味ルミネセンスの実測値１５５２５）。
【００７９】
【表３】
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【００８０】
組み合わせ／実施例
１．皮膚細胞内の抗酸化剤応答配列（ＡＲＥ）を通じた遺伝子転写を活性化することにより、皮膚に抗酸化剤効果を提供する美容的方法であって、
ｉ．抗酸化剤効果が所望される皮膚細胞を含む皮膚の標的部分を特定することと、
ｉｉ．皮膚細胞の少なくとも一部を、有効量のナイアシンアミドとニコチンアミドリボシドとの組み合わせを含む美容組成物と、接触させられた皮膚細胞の少なくとも一部においてＡＲＥにより活性化される遺伝子転写を増加させるのに充分な処置期間にわたって接触させることと、を含む、方法。
２．ＡＲＥにより活性化される遺伝子転写が、少なくとも約１０％、好ましくは少なくとも約２０％、より好ましくは少なくとも約３０％、最も好ましくは少なくとも約５０％増加する、段落Ａに記載の方法。
３．有効量のナイアシンアミド及びニコチンアミドリボシドが、ＡＲＥにより活性化される遺伝子転写を、相加作用よりも少なくとも５％、好ましくは少なくとも１０％、より好ましくは少なくとも２０％、最も好ましくは少なくとも３０％相乗的に増加させる、段落Ａ又はＢに記載の方法。
４．有効量のナイアシンアミド及びニコチンアミドリボシドが、活性酸素（ＲＯＳ）によって引き起こされるＡＴＰ欠乏を低減させる、上記の段落のいずれかに記載の方法。
５．有効量のナイアシンアミド及びニコチンアミドリボシドが、ＲＯＳによって引き起こされるＡＴＰ欠乏を相乗的に低減させる、段落Ｄに記載の方法。
６．皮膚の標的部分が、顔の皮膚を含む、上記の段落のいずれかに記載の方法。
７．処置期間が、少なくとも２週間、好ましくは少なくとも４週間、より好ましくは少なくとも８週間である、上記の段落のいずれかに記載の方法。
８．処置期間が少なくとも４週間であり、有効量のナイアシンアミド及びニコチンアミドリボシドが、経表皮水分損失の相乗的改善を提供する、段落Ｇに記載の方法。
９．有効量のナイアシンアミド及びニコチンアミドリボシドが、局所塗布及び経口摂取の少なくとも一方によって標的皮膚部分と接触させられる、上記の段落のいずれかに記載の方法。
１０．ニコチンアミドリボシド及びナイアシンアミドが、約１：４〜約４：１のニコチンアミドリボシド：ナイアシンアミドの比で提供される、上記の段落のいずれかに記載の方法。
１１．ニコチンアミドリボシド及びナイアシンアミドが、皮膚科学的に許容されるキャリアを含む美容組成物において提供される、上記の段落のいずれかに記載の方法。
１２．皮膚の標的部分が、皮膚の加齢、皮膚の健康障害、及び／又は皮膚細胞の機能不全の兆候を含む、上記の段落のいずれかに記載の方法。
１３．有効量のナイアシンアミド及びニコチンアミドリボシドが、処置期間において、皮膚の色合いの改善、色素沈着過度の低減、黄ばみの低下、皮膚のバリア機能の改善、小皺及び皺の減少、肌理の改善、及びこれらの組み合わせから選択される皮膚健康効果を与える、上記の段落のいずれかに記載の方法。
１４．皮膚細胞内においてＲＯＳによって引き起こされるアデノシン三リン酸（ＡＴＰ）の欠乏を相乗的に低減させる美容的方法であって、
ｉ．ＲＯＳによって引き起こされるＡＴＰ欠乏の低減が望ましい皮膚細胞を含む皮膚の標的部分を特定することと、
ｉｉ．皮膚細胞の少なくとも一部を、有効量のナイアシンアミドとニコチンアミドリボシドとの組み合わせと、接触させられた皮膚細胞の少なくとも一部において有効量のナイアシンアミド及びニコチンアミドリボシドがＡＴＰ欠乏を相乗的に低減させるのに充分な処置期間にわたって接触させることと、を含む方法。
１５．ＡＴＰ欠乏の相乗的な低減が、相加作用よりも少なくとも５％、好ましくは少なくとも１０％、より好ましくは少なくとも２０％、最も好ましくは少なくとも３０％大きい、段落Ｎに記載の方法。
１６．ニコチンアミドリボシドとナイアシンアミドとが、約１：４〜約４：１のニコチンアミドリボシド：ナイアシンアミドの比で与えられる、段落Ｎ又はＯに記載の方法。
１７．有効量のナイアシンアミド及びニコチンアミドリボシドが、局所塗布及び経口摂取の少なくとも一方によって標的皮膚部分と接触させられる、上記の段落のいずれかに記載の方法。
１８．ＲＯＳにより誘発される酸化ストレスの結果として低減した皮膚細胞内における解糖系のＡＴＰ産生速度を回復させる美容的方法であって、
ｉ．ＲＯＳにより誘発される酸化ストレスの結果として低減した解糖系のＡＴＰ産生速度の回復が望ましい皮膚細胞を含む皮膚の標的部分を特定することと、
ｉｉ．皮膚細胞の少なくとも一部を、有効量のナイアシンアミドとニコチンアミドリボシドとの組み合わせと、接触させられた皮膚細胞の少なくとも一部において有効量のナイアシンアミド及びニコチンアミドリボシドが解糖系のＡＴＰ産生速度を相乗的に回復させるのに充分な処置期間にわたって接触させることと、を含む方法。
１９．解糖系のＡＴＰ産生速度の相乗的な回復が、相加作用よりも少なくとも５％、好ましくは少なくとも１０％、より好ましくは少なくとも２０％、最も好ましくは少なくとも３０％大きい、段落Ｒに記載の方法。
２０．有効量のナイアシンアミド及びニコチンアミドニコチンアミドリボシドが、局所塗布及び経口摂取の少なくとも一方によって標的皮膚部分と接触させられる、段落Ｒ又はＳに記載の方法。
【００８１】
本明細書に開示した寸法及び値は、記載された正確な数値に厳密に限定されるものと理解されるべきではない。むしろ、特に断らない限り、そのような各寸法は、記載された値及びその値の周辺の機能的に同等の範囲の両方を意味するものとする。例えば、「４０ｍｍ」として開示される寸法は、「約４０ｍｍ」を意味することを意図したものである。更に、本明細書に記載される特性は１以上の範囲の値を含みうる。これらの範囲は、その範囲内の個々の値が明確には開示されていない場合もあるが、その範囲内の全ての値を包含する点は理解されるべきである。
【００８２】
「発明を実施するための形態」の中で引用された全ての文献は、関連部分において本明細書に参照により援用されている。いかなる文書の引用も、それが本発明に対する先行技術であることを認めるものとして解釈されるべきではない。本文書における用語のいずれかの意味又は定義が、参照により組み込まれた文書における同一の用語のいずれかの意味又は定義と相反する限りにおいては、本文献においてその用語に与えられた意味又は定義が優先するものとする。
【００８３】
本発明の特定の実施形態を例示及び説明してきたが、本発明の趣旨及び範囲から逸脱せずに、他の様々な変更及び修正を行うことができることは当業者には明白であろう。したがって、本発明の範囲内に含まれるそのような全ての変更及び修正は、添付の特許請求の範囲にて網羅することを意図したものである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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