(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
基質からピロガロールを産生するラクトバチルス・ペントーサス（Lactobacillus pentosus）ＯＬＬ２０３９６９株（受託番号ＮＩＴＥ  ＢＰ−０１９８６）、ラクトバチルス・ペントーサス（Lactobacillus pentosus）ＯＬＬ２０３９８２株（受託番号ＮＩＴＥ  ＢＰ−０１９８７）またはラクトバチルス・ペントーサス（Lactobacillus pentosus）ＯＬＬ２０３９８４株（受託番号ＮＩＴＥ−ＢＰ−０１９８８）の乳酸菌。
【請求項２】
食品素材に、請求項１に記載の乳酸菌を接種して発酵させることによって産生される、発酵産生物。
【請求項３】
ラクトバチルス・ペントーサス（Lactobacillus pentosus）ＯＬＬ２０３９６９株（受託番号ＮＩＴＥ  ＢＰ−０１９８６）、ラクトバチルス・ペントーサス（Lactobacillus pentosus）ＯＬＬ２０３９８２株（受託番号ＮＩＴＥ  ＢＰ−０１９８７）およびラクトバチルス・ペントーサス（Lactobacillus pentosus）ＯＬＬ２０３９８４株（受託番号ＮＩＴＥ  ＢＰ−０１９８８）の少なくとも１種の乳酸菌に基質を与えることによってピロガロールを産生させる、ピロガロール産生方法。
【請求項４】
前記基質は、阿波番茶の原料茶葉に含有される成分である
請求項３に記載のピロガロール産生方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、基質からピロガロールを産生する乳酸菌に関する。また、本発明は、その乳酸菌から産生される発酵産生物にも関する。また、本発明は、その乳酸菌を利用したピロガロール産生方法にも関する。
【背景技術】
【０００２】
過去に「阿波番茶の熱水抽出成分と桑茶の熱水抽出成分とを含む抗アレルギー組成物」が提案されている（例えば、特開２０１２−１５３６１３号公報等参照）。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００３】
【特許文献１】特開２０１２−１５３６１３号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
ところで、上述の抗アレルギー組成物を調製するためには、阿波番茶や桑茶の茶葉を熱水中に投入して保持する必要があり、熱エネルギーを比較的大きく消費することが必然となる。
【０００５】
また、上述のような茶葉の熱水抽出成分には、抗アレルギーの有効成分以外の成分が多く含まれている。このため、服用者は、規定量の有効成分を服用しようとすると、その抗アレルギー組成物を比較的に多く服用する必要がある。このため、上述のような抗アレルギー組成物では、服用者の服用の負担が比較的に大きくなっていると共に、外出時などの携帯性を損ねている。
【０００６】
本発明の課題は、熱エネルギーを不要とするか、あるいは熱エネルギーを比較的に少なくして調製することができ、服用者の服用の負担を比較的小さく抑えて、かつ、外出時などの携帯性に優れる抗アレルギー剤を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明の第１局面に係る乳酸菌は、基質からピロガロール（以下の化式（Ｉ）参照）を産生するラクトバチルス・ペントーサス（Lactobacillus pentosus）ＯＬＬ２０３９６９株（受託番号  ＮＩＴＥ  ＢＰ−０１９８６）、ラクトバチルス・ペントーサス（Lactobacillus pentosus）ＯＬＬ２０３９８２株（受託番号  ＮＩＴＥ  ＢＰ−０１９８７）またはラクトバチルス・ペントーサス（Lactobacillus pentosus）ＯＬＬ２０３９８４株（受託番号  ＮＩＴＥ  ＢＰ−０１９８８）の乳酸菌である。なお、基質とは、例えば、阿波番茶やその原料茶葉（阿波番茶の発酵前の茶葉）もしくはその加工品またはその抽出成分などである。また、ここにいう「阿波番茶」は、徳島県の山間部を中心とする極限られた地域で生産されている後発酵茶であって、最近、「阿波晩茶」とも称されている。この阿波番茶は、茹でた原料茶葉を木桶に漬け込んで１０日から半月程度、乳酸発酵させた後に、天日乾燥させることによって製造される。また、ピロガロールは、ベンゼン−１,２,３−トリオール、１,２,３−トリヒドロキシベンゼン、１,２,３−ベンゼントリオール、３−ヒドロキシピロカテコール、トリヒドロキシベンゼン、ピロ没食子酸、焦性没食子酸とも称されている。
【０００８】
この乳酸菌では、室温（約２０℃）から３０℃程度の温度下で、基質から高効率な抗アレルギーの有効成分であるピロガロールが産生される。このため、この乳酸菌を用いることによって、熱エネルギーを使用（消費）しないか、あるいは熱エネルギーを比較的に少なく抑えて、抗アレルギーの有効成分を得ることができる。また、この乳酸菌の発酵産生物には、ピロガロールが比較的に多く含有される。このため、この乳酸菌を用いることによって、服用者の服用の負担を比較的に小さく抑えて、かつ外出時などの携帯性に優れる抗アレルギー剤を高効率で製造（産生）することができる。したがって、この乳酸菌を利用することによって、熱エネルギーを不要とするか、あるいは熱エネルギーを比較的に少なく抑えてピロガロールを調製することができると共に、服用者の服用の負担を比較的に小さく抑えて、かつ外出時などの携帯性に優れる抗アレルギー剤を提供することができる。
【化１】
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【０００９】
本発明の第２局面に係る発酵産生物は、食品素材に、本発明の第１局面に係る乳酸菌を接種して発酵させることによって産生される。なお、ここにいう「食品素材」とは、阿波番茶やその原料茶葉（阿波番茶の発酵前の茶葉）もしくはその加工品またはその抽出成分（特に、熱湯抽出成分）等であることが好ましい。また、この発酵産生物は、本発明の第１局面に係る乳酸菌のみを接種して発酵させることによって産生されることが好ましい。
【００１０】
上述の発酵産生物には、高効率な抗アレルギーの有効成分であるピロガロールが含有される。また、ピロガロールを含有するこの発酵産生物は、室温から３０℃程度の温度下で産生される。このため、この発酵産生物を用いることによって、熱エネルギーを使用（消費）しないか、あるいは熱エネルギーを比較的に少なく抑えて、抗アレルギーの有効成分を得ることができる。また、この発酵産生物には、ピロガロールが比較的に多く含有される。このため、この発酵産生物を用いることによって、服用者の服用の負担を比較的に小さく抑えて、かつ外出時などの携帯性に優れる抗アレルギー剤を高効率で製造（調製）することができる。したがって、この発酵産生物を用いることによって、熱エネルギーを不要とするか、あるいは熱エネルギーを比較的少なく抑えて抗アレルギー剤を調製することができると共に、服用者の服用の負担を比較的に小さく抑えて、かつ外出時などの携帯性に優れる抗アレルギー剤を提供することができる。
【００１１】
本発明の第３局面に係るピロガロール産生方法は、ラクトバチルス・ペントーサス（Lactobacillus pentosus）ＯＬＬ２０３９６９株、ラクトバチルス・ペントーサス（Lactobacillus pentosus）ＯＬＬ２０３９８２株およびラクトバチルス・ペントーサス（Lactobacillus pentosus）ＯＬＬ２０３９８４株の少なくとも１種の乳酸菌に基質を与えて、所定温度の嫌気性の環境下において、上述の乳酸菌を所定期間で培養することによって実行することができる。なお、ここにいう「基質」とは、阿波番茶等の発酵茶やその原料茶葉（阿波番茶の発酵前の茶葉）もしくはその加工品またはその抽出成分（特に、熱湯抽出成分）などに含有される成分であることが好ましい。
【００１２】
このピロガロール産生方法では、室温から３０℃程度の温度下で、基質から高効率な抗アレルギーの有効成分であるピロガロールが産生される。このため、このピロガロール産生方法を用いることによって、熱エネルギーを使用（消費）しないか、あるいは熱エネルギーを比較的に少なく抑えて、抗アレルギーの有効成分を得ることができる。また、上述の乳酸菌の発酵産生物には、ピロガロールが比較的に多く含有される。このため、このピロガロール産生方法を用いることによって、服用者の服用の負担を比較的に小さく抑えて、かつ外出時などの携帯性に優れる抗アレルギー剤を高効率で製造（産生）することができる。したがって、このピロガロール産生方法を用いることによって、熱エネルギーを不要とするか、あるいは熱エネルギーを比較的に少なく抑えて抗アレルギー剤を調製することができると共に、服用者の服用の負担を比較的に小さく抑えて、かつ外出時などの携帯性に優れる抗アレルギー剤を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】実施例１のピロガロールのインターロイキン４のｍＲＮＡ発現抑制作用を示すグラフ図である。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
本発明の乳酸菌は、好ましくは、阿波番茶およびその原料茶葉の少なくとも一方またはその抽出成分（例えば、阿波番茶の茶葉（４〜６枚分）の熱湯抽出物（９０〜１００℃、３〜５分間）と阿波番茶の茶葉（４〜６枚分）の粉砕物の混合物）である基質からピロガロールを１０μｇ／ｍＬ以上で産生し、より好ましくは、ピロガロールを３０μｇ／ｍＬ以上で産生し、さらに好ましくは、ピロガロールを５０μｇ／ｍＬ以上で産生し、さらに好ましくは、ピロガロールを１００μｇ／ｍＬ以上で産生し、さらに好ましくは、ピロガロールを１３０μｇ／ｍＬ以上で産生し、さらに好ましくは、ピロガロールを１５０μｇ／ｍＬ以上で産生し、とくに好ましくは、ピロガロールを１７０μｇ／ｍＬ以上で産生する。
【００１５】
本発明の乳酸菌は、好ましくは、ラクトバチルス・ペントーサス（Lactobacillus pentosus）ＯＬＬ２０３９６９株、ラクトバチルス・ペントーサス（Lactobacillus pentosus）ＯＬＬ２０３９８２株およびラクトバチルス・ペントーサス（Lactobacillus pentosus）ＯＬＬ２０３９８４株の少なくとも１種の乳酸菌である。
【００１６】
本発明のピロガロール産生方法では、阿波番茶およびその原料茶葉の少なくとも一方またはその抽出成分（例えば、阿波番茶の茶葉（４〜６枚分）の熱湯抽出物（９０〜１００℃、３〜５分間）と阿波番茶の茶葉（４〜６枚分）の粉砕物の混合物）である基質を、本発明の乳酸菌に与えて、所定温度の嫌気性の環境下において、上述の乳酸菌を所定期間、培養する。なお、ここにいう「所定温度」とは、例えば、２５〜４５℃、好ましくは２６〜４０℃、より好ましくは２７〜３５℃、さらに好ましくは２８〜３２℃、とくに好ましくは３０℃である。また、ここにいう「所定期間」とは、例えば、１〜２０日間、好ましくは３〜１５日間、より好ましくは５〜１０日間、さらに好ましくは６〜８日間、とくに好ましくは７日間である。
【００１７】
本発明のピロガロール産生の乳酸菌の選抜方法では、阿波番茶およびその原料茶葉の少なくとも一方またはその抽出成分が、本発明の乳酸菌に与えられて、所定温度の嫌気性の環境下において、乳酸菌が所定期間、培養されてから、乳酸菌のピロガロール産生量が測定され、ピロガロール産生量に基づいて、乳酸菌が選抜される。なお、ここにいう「所定温度」とは、例えば、２５〜４５℃、好ましくは２６〜４０℃、より好ましくは２７〜３５℃、さらに好ましくは２８〜３２℃、とくに好ましくは３０℃である。また、ここにいう「所定期間」とは、例えば、１〜２０日間、好ましくは３〜１５日間、より好ましくは５〜１０日間、さらに好ましくは６〜８日間、とくに好ましくは７日間である。
【実施例】
【００１８】
以下、実施例を示して本発明をより詳細に説明する。なお、以下に示される実施例は、例示に過ぎず、本発明を限定するものではない。
【００１９】
＜ピロガロール産生の乳酸菌の選抜＞
先ず、ピロガロール産生の乳酸菌の候補として、表１に列記される３０種類の乳酸菌（ヒト由来の乳酸菌や阿波番茶由来の乳酸菌が含まれている。）を準備した。次いで、ＭＲＳ培地を用いて、各種の乳酸菌を２回、賦活培養した。そして、乳酸菌を含む培地をサンプル管に入れて遠心分離機に供した。続いて、そのサンプル管から上清を捨てた後、その上清と等量の生理食塩水を、そのサンプル管に投入して、各種の乳酸菌の懸濁液を調製した。
【００２０】
【表１】
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【００２１】
一方、蒸留水に阿波番茶の茶葉を数枚入れた後、その茶葉入り蒸留水を１００℃で３分間、煮沸した。そして、煮沸後の茶葉を乳鉢で軽く磨り潰して、茶葉片を調製した。
【００２２】
茶葉の煮汁（４ｍＬ）に上述の茶葉片（約５枚分）を入れ、さらに、そこに各種の乳酸菌の懸濁液（８０μＬ）を接種した。そして、３０℃の嫌気性の環境下において、その乳酸菌を７日間、培養した。その後、その培養液を高速液体クロマトグラフに供して、ピロガロールの産生量を測定した。なお、ピロガロールは、以下の条件の高速液体クロマトグラフにおいて、１４．０１５分の時点で溶出する。
【００２３】
・カラム：ＣＯＳＭＯＳＩＬ（登録商標）  ５Ｃ１８−ＭＳ  ＩＩ（直径：  ４．６ｍｍ、  長さ：  ２５０ｍｍ）（ナカライテスク株式会社製）
・移動層：  溶媒Ａ（水：酢酸＝９９：１），溶媒Ｂ（メタノール：アセトン：酢酸＝９５：４：１）
・溶出条件：
０−１５分：  溶媒Ａ        ９５質量％／溶媒Ｂ            ５質量％
１５−３０分：  溶媒Ａ  ４５−５０質量％／溶媒Ｂ    ５５−５０質量％
３０−４０分：  溶媒Ａ    ５０−０質量％／溶媒Ｂ  ５０−１００質量％
４０−５０分：  溶媒Ａ          ０質量％／溶媒Ｂ        １００質量％
４５−５５分：  溶媒Ａ    ０−９５質量％／溶媒Ｂ    １００−５質量％
・カラム温度：  室温
・測定波長：  ２７０ｎｍ
サンプル注入量：  １０μＬ
・流速：  ０．５ｍＬ／分
【００２４】
表１には、各種の乳酸菌のピロガロールの産生量が示されている。この結果から、乳酸菌の種類によって、ピロガロールの産生能が異なることが明らかとなった。そして、表１の乳酸菌の中でも、ラクトバチルス・ペントーサスのピロガロールの産生能が高く、それらの中でも特に、ＯＬＬ２０３９６９、ＯＬＬ２０３９８２およびＯＬＬ２０３９８４の菌株番号のピロガロール産生能が顕著であることが明らかとなった。
【受託番号】
【００２５】
ＮＩＴＥ  ＢＰ−０１９８６
ＮＩＴＥ  ＢＰ−０１９８７
ＮＩＴＥ  ＢＰ−０１９８８
【図１】
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