(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒドロゲルを圧縮するための装置であって、
−周囲フレーム部材（５０２）および前記フレーム部材（５０２）に接続されている底部メンブレン（５０１）を備える別個のグラフトフレーム（５００）であって、前記グラフトフレーム（５００）は、前記底部メンブレン（５０１）を覆ってヒドロゲル層（Ｈ）が形成されるべく、前記ヒドロゲル（Ｈ）を受けるように設計されている、前記グラフトフレーム（５００）と、
−圧縮方向（Ｃ）に沿って延在する複数のガイドロッド（１０４）を有するガイドフレーム（１００）と、
−フィルタプレート（３００）と、
−複数の開口（２０４）を有する基部（２０１）を備える第１コンポーネント（２００）であって、前記複数の開口は、特に前記基部（２０１）の縁領域（２０２）に形成され、各開口（２０４）は、前記ガイドロッド（１０４）の１つと関連付けられ、前記第１コンポーネント（２００）は、各ガイドロッド（１０４）がその関連付けられている開口（２０４）を通って延在するべく前記装置の動作モードにおいて前記ガイドフレーム（１００）の上に配置されるように設計され、前記第１コンポーネント（２００）は、前記第１コンポーネント（２００）の前記基部（２０１）から突き出ている周囲壁（２０３）をさらに備え、その結果、前記第１コンポーネント（２００）は、前記フィルタプレート（３００）が、容器（２２０）の底（２３０）と前記グラフトフレーム（５００）の前記底部メンブレン（５０１）との間に配置されるべく、前記動作モードにおいて前記フィルタプレート（３００）および前記グラフトフレーム（５００）を受けるように設計されている前記容器（２２０）を形成する、前記第１コンポーネントと、
−複数の開口（４０４）を有する基部（４０１）を備える第２コンポーネント（４００）であって、前記複数の開口は、特に前記第２コンポーネント（４００）の前記基部（４０１）の縁領域（４０３）に形成され、各開口（４０４）は、前記ガイドロッド（１０４）の１つと関連付けられ、前記第２コンポーネント（４００）は、前記第１コンポーネント（２００）のその関連付けられている開口（２０４）を通って延在する各ガイドロッド（１０４）が前記第２コンポーネント（４００）のその関連付けられている開口（４０４）にも挿入され、その結果前記第２コンポーネントが、前記ロッド（１０４）によって前記圧縮方向（Ｃ）に沿ってガイドされるべく、前記動作モードにおいて前記第１コンポーネント（２００）の上に配置されるように設計されている、前記第２コンポーネントと、
−前記装置の前記動作モードにおいて前記第２コンポーネント（４００）に取り外し可能に、特にラッチ接続を用いて、接続されるように設計されている別個のピストン（６００）であって、前記動作モードにおいて前記第２コンポーネント（４００）は、前記ヒドロゲル層（Ｈ）を前記ピストン（６００）と前記底部メンブレン（５０１）との間で圧縮するべく、前記グラフトフレーム（５００）の前記底部メンブレン（５０１）の上にある前記ヒドロゲル層（Ｈ）に対して前記ピストン（６００）を前記圧縮方向（Ｃ）に沿って押圧するように設計されている、前記ピストンと、
を備える装置。
【請求項２】
前記グラフトフレーム（５００）および／または前記ピストン（６００）は、使い捨て品として設計されていることを特徴とする、請求項１に記載の装置。
【請求項３】
前記ピストン（６００）は、前記ヒドロゲル層（Ｈ）に対して押圧するための接触面を形成する第１の側（６０１ａ）を有するピストン基部（６０１）を備え、特に、前記ピストン（６００）は、前記ピストン（６００）の接触面（６０１ａ）を用いて前記ヒドロゲル層（Ｈ）に対して押圧するとき前記接触面（６０１ａ）を前方にして前記グラフトフレーム（５００）に挿入されるように設計され、特に、前記ピストン基部（６０１）は、前記ヒドロゲル層（Ｈ）に対して押圧するとき前記グラフトフレーム（５００）の前記フレーム部材（５０２）と接触するように設計されている周囲縁領域（６０２）を備えることを特徴とする、請求項１または２に記載の装置。
【請求項４】
前記ピストン（６００）は、特に、前記接触面を形成する前記第１の側（６０１ａ）に向いていない前記ピストン基部（６０１）の第２の側（６０１ｂ）において、前記ピストン基部（６０１）の前記周囲縁領域（６０２）から突き出ている２つのラッチ要素（６０３）を備えることを特徴とする、請求項３に記載の装置。
【請求項５】
前記第２コンポーネント（４００）は、前記ピストン（６００）のための支持体（４０２）を備え、前記支持体（４０２）は、前記装置の前記動作モードにおいて前記第２コンポーネント（４００）の前記基部（４０１）の第１の側（４０１ａ）から前記底部メンブレン（５０１）へ向かって突き出ており、特に、前記ラッチ要素（６０３）は、前記ピストン（６００）を前記支持体（４０２）に取り外し可能に接続するために前記支持体（４０２）と係合するように設計されていることを特徴とする、請求項４に記載の装置。
【請求項６】
前記第２コンポーネント（４００）の前記基部（４０１）は、各々のラッチ要素（６０３）のための穴（４２０）を備え、前記それぞれのラッチ要素（６０３）は、前記第２コンポーネント（４００）の前記基部（４０１）の前記第１の側（４０１ａ）に向いていない前記第２コンポーネント（４００）の前記基部（４０１）の第２の側（４０１ｂ）から前記穴（４２０）を介してアクセスすることができ、その結果、特に、前記ラッチ要素（６０３）は、前記穴（４２０）を介して手動で前記支持体（４０２）から取り外され得ることを特徴とする、請求項５に記載の装置。
【請求項７】
前記ピストン（６００）は、前記接触面（６０１ａ）に向いていない前記ピストン基部（６０１）の前記第２の側（６０１ｂ）において、前記ピストン基部（６０１）の前記周囲縁領域（６０２）から突き出ているガイド要素（６０４）を備え、前記ガイド要素（６０４）は、前記ラッチ要素（６０３）を前記支持体（４０２）と係合する際に、前記支持体（４０２）に対して前記ピストン（６００）をガイドするために前記支持体（４０２）に沿って滑るように設計されていることを特徴とする、請求項５または６に記載の装置。
【請求項８】
前記第２コンポーネントは、前記圧縮方向（Ｃ）に沿った前記グラフトフレーム（５００）への前記ピストン（６００）の進入深さを調節するための調節手段を備え、特に、前記調節手段は、前記支持体（４０２）に隣接して前記基部（４０１）の前記第１の側（４０１ａ）に形成されている雌ネジにネジ止めされる２本のネジ（４１０）を備え、その結果、前記基部（４０１）の前記第１の側（４０１a）に対する前記ネジ（４１０）のネジ頭の高さは、前記それぞれのネジ（４１０）を時計回りまたは反時計回りに回転することによって調節可能であり、ネジ頭（４１０）は、前記進入深さを制限するべく、前記装置の前記動作モードにおいて前記フレーム部材（５０２）の上に載るように設計されていることを特徴とする、請求項５から７のいずれか１項に記載の装置。
【請求項９】
前記第２コンポーネント（４００）の前記基部（４０１）は、前記第２コンポーネント（４００）の重量を調節するべく、少なくとも１つの重り要素（８００）を受けるための受け部（４３０）を備え、それによって前記第２コンポーネント（４００）は、前記装置の前記動作モードにおいて前記ヒドロゲル層（Ｈ）を圧縮し、特に、前記受け部（４３０）は、前記支持体（４０２）によって形成され、特に、前記受け部（４３０）は、前記第２コンポーネント（４００）の前記基部（４０１）の前記第２の側（４０１ｂ）において開口を備え、前記少なくとも１つの重り要素（８００）は、前記開口を介して前記受け部（４３０）の中に配置され得ることを特徴とする、請求項６から８のいずれか１項に記載の装置。
【請求項１０】
前記容器（２２０）の前記周囲壁（２０３）は、前記フィルタプレート（３００）を支えるための段（２０５）を備えることを特徴とする、請求項１から９のいずれか１項に記載の装置。
【請求項１１】
前記グラフトフレーム（５００）は、前記装置の前記動作モードにおいて前記フレーム部材（５０２）の周囲縁領域（５０３）で前記容器（２２０）の前記壁（２０３）の上縁（２０６）に載るように設計されており、特に、前記壁（２０３）の前記上縁（２０６）は、前記グラフトフレーム（５００）の前記フレーム部材（５０２）の領域（５０４）を形状嵌合式で受けるための少なくとも１つのくぼみ（２０７）を備えることを特徴とする、請求項１から１０のいずれか１項に記載の装置。
【請求項１２】
前記壁（２０３）は、前記容器（２２０）から前記フィルタプレート（３００）および／または前記グラフトフレーム（５００）を取り出すためのふくらみ（２０８）を備えることを特徴とする、請求項１から１１のいずれか１項に記載の装置。
【請求項１３】
請求項１から１２のいずれか１項に記載の装置を備えるシステムであって、前記システムは、前記圧縮されたヒドロゲル層（Ｈ）の培養のためのフラスコ（７００）をさらに備え、前記フラスコ（７００）は、前記グラフトフレーム（５００）の中にある前記圧縮されたヒドロゲル層（Ｈ）とともに前記グラフトフレーム（５００）を受けるように設計され、特に、前記フラスコ（７００）は、開口（７０４）を備え、前記グラフトフレーム（５００）は、前記開口（７０４）を介して前記フラスコ（７００）の内部に配置され得、特に、前記フラスコ（７００）は、前記開口（７０４）を閉じるための蓋（７１０）を備え、特に、前記システムは、前記フラスコ（７００）の底部（７０１）において前記フラスコ（７００）の前記内部に配置されて、前記グラフトフレーム（５００）を支持するように設計されている支持フレーム（７０６）を備え、前記蓋（７１０）は、前記蓋（７１０）が前記フラスコ（７００）の前記開口（７０４）を閉じるときに、前記支持フレーム（７０６）に対して前記グラフトフレーム（５００）を押圧するように設計され、前記フラスコ（７００）は、前記フラスコ（７００）に液体、特に細胞培養培地を満たすための別の開口を備え、特に、前記別の開口を閉じるためのネジ蓋（７０５）が設けられ、特に、前記フラスコ（７００）は、少なくとも部分的に透明であり、特に、前記フラスコ（７００）および／または前記支持フレーム（７０６）は、使い捨て品として設計されていることを特徴とするシステム。
【請求項１４】
少なくともグラフトフレーム（５００）を備えるシステムであって、前記グラフトフレーム（５００）は、周囲フレーム部材（５０２）および前記フレーム部材（５０２）に接続されている底部メンブレン（５０１）を備え、前記グラフトフレーム（５００）は、前記底部メンブレン（５０１）を覆ってヒドロゲル層（Ｈ）が形成されるべく、ヒドロゲル（Ｈ）を受けるように設計され、特に、前記底部メンブレン（５０１）は、前記フレーム部材（５０２）に一体的に接続され、特に、前記グラフトフレーム（５００）は、使い捨て品として設計され、特に、前記グラフトフレーム（５００）は、前記底部メンブレン（５０１）の上にあるヒドロゲル層（Ｈ）を圧縮するための装置の容器（２２０）に挿入されるように設計され、特に、前記装置は、請求項１から１２のいずれか１項に記載の装置であり、特に、前記システムは、前記底部メンブレン（５０１）の上の前記グラフトフレーム（５００）の中にある前記圧縮されたヒドロゲル層（Ｈ）の培養のためのフラスコ（７００）をさらに備え、特に、前記フラスコ（７００）は、前記底部メンブレン（５０１）の上の前記グラフトフレーム（５００）の中にある前記圧縮されたヒドロゲル層（Ｈ）とともに前記グラフトフレーム（５００）を受けるように設計され、特に、前記フラスコ（７００）は、開口（７０４）を備え、前記グラフトフレーム（５００）は、前記開口（７０４）を介して前記フラスコ（７００）の内部に配置され得、特に、前記フラスコ（７００）は、前記開口（７０４）を閉じるための蓋（７１０）を備え、特に、前記システムは、前記フラスコ（７００）の底部（７０１）において前記フラスコ（７００）の前記内部に配置されて前記グラフトフレーム（５００）を支持するように設計されている別個の支持フレーム（７０６）を備え、前記蓋（７１０）は、前記蓋（７１０）が前記フラスコ（７００）の前記開口（７０４）を閉じるときに、前記支持フレーム（７０６）に対して前記グラフトフレーム（５００）を押圧するように設計され、前記フラスコ（７００）は、前記フラスコ（７００）に液体、特に細胞培養培地を満たすための別の開口を備え、特に、前記別の開口を閉じるためにネジ蓋（７０５）が設けられ、特に、前記フラスコ（７００）は、少なくとも部分的に透明であり、特に、前記フラスコ（７００）および／または前記支持フレーム（７０６）は、使い捨て品として設計されているシステム。
【請求項１５】
請求項１から１２のいずれか１項に記載の装置または請求項１３に記載のシステムを用いてヒドロゲル層を圧縮するための、特に人工皮膚グラフトを生成させるための方法であって、
−特に線維芽細胞を含有するヒドロゲル（Ｈ）を前記グラフトフレーム（５００）に満たし、それによって前記ヒドロゲル（Ｈ）が、前記底部メンブレン（５０１）を覆ってヒドロゲル層（Ｈ）を、特に前記グラフトフレーム（５００）の中にある前記ヒドロゲル層（Ｈ）を培養して、形成するステップと、
−前記フィルタプレート（３００）を前記第１コンポーネント（２００）の前記容器（２２０）の中に配置するステップと、
−前記ヒドロゲル層（Ｈ）を備える前記グラフトフレーム（５００）を前記フィルタプレート（３００）の上の前記容器（２２０）の中に配置するステップと、
−前記ガイドロッド（１０４）がそれらのそれぞれの前記第１コンポーネント（２００）の開口（２０４）を通って延在するように、前記第１コンポーネント（２００）を前記ガイドフレーム（１００）の上に配置するステップと、
−前記ガイドロッド（１０４）がそれらのそれぞれの前記第２コンポーネント（４００）の開口（４０４）に挿入されるように、前記第２コンポーネント（４００）を前記第１コンポーネント（２００）の上に配置するステップと、
−前記第２コンポーネント（４００）に前記ピストン（６００）を用いて前記ヒドロゲル層（Ｈ）を前記圧縮方向（Ｃ）に沿って押圧させることによって、前記底部メンブレン（５０１）と前記第２コンポーネント（４００）に接続されている前記ピストン（６００）との間で前記ヒドロゲル層（Ｈ）を圧縮するステップであって、前記第２コンポーネント（４００）は、前記ガイドロッド（１０４）によって前記圧縮方向（Ｃ）に沿ってガイドされるステップと、
−特に前記ヒドロゲル層（Ｈ）を圧縮した後に前記グラフトフレーム（５００）を前記第１コンポーネント（２００）および前記第２コンポーネント（４００）から取り出すステップと、
−特に前記圧縮されたヒドロゲル層（Ｈ）とともに前記グラフトフレーム（５００）をフラスコ（７００）の開口（７０４）を介して、前記フラスコ（７００）の底部（７０１）に配置された支持フレーム（７０６）の上の前記フラスコ（７００）の内部に配置するステップと、
−特に蓋（７１０）を用いて前記フラスコ（７００）の前記開口（７０４）を閉じ、それによって、前記グラフトフレーム（５００）を前記フラスコ（７００）の中に固定するように、前記蓋（７１０）を用いて前記グラフトフレーム（５００）の前記フレーム部材（５０２）を前記支持フレーム（７０６）に対して押圧するステップと、
−特に前記フラスコ（７００）に細胞培養培地を満たすステップと、
−特に前記圧縮されたヒドロゲル層（Ｈ）を培養するステップと、
−特に前記ヒドロゲル（Ｈ）の上面にケラチン生成細胞を加えるステップであって、前記上面は、前記底部メンブレン（５０１）に向いていないステップと、
を含む方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、請求項１に記載のヒドロゲルを圧縮するための装置（または装置）、ならびに請求項１５に記載のそのようなヒドロゲルを圧縮するための方法、ならびに請求項１３および１４に記載のシステムに関する。
【背景技術】
【０００２】
人体においては、通常、３次元（３Ｄ：ｔｈｒｅｅ−ｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌ）高分子ネットワーク、いわゆるＥＣＭの中に細胞がある。細胞培養において３Ｄ環境を真似るためには、ヒドロゲルを用いることができる。
【０００３】
これに関して、ヒドロゲルは、天然または合成の、特に水に溶けず、特に９９％を超える水を吸収することができる重合体鎖のネットワークである。ネットワークの親水性は、重合体主鎖または側鎖内にある化学残基の存在に由来する［非特許文献１，２］。
【０００４】
ヒドロゲルは、天然の組織に似た生体適合性および柔軟性を備えているため、角膜［非特許文献３］、皮膚［非特許文献４］、軟骨［非特許文献５］、腱［非特許文献６］または血管組織の組織再生工学の分野に応用されるのは当然のことである。ヒドロゲルの別の大きな利点は、３Ｄマトリックス内に生細胞を容易に集積化する可能性である。真皮−表皮の代用皮膚を作り出すには、皮膚線維芽細胞をＩ型コラーゲンヒドロゲルの中に入れることになる。ヒドロゲルは、ゲル化の際にこれらの細胞を３次元で「捕捉する」。Ｉ型コラーゲンは、これらの細胞に対して天然のマトリックスを提供し、これらの細胞の増殖、移動および分化を理想的に支援する。重要なことは、これらの線維芽細胞は、ゲル（線維芽細胞を含有する）が調製された６日後に、ヒドロゲルの平らな上面に加えられるケラチン生成細胞のための、必要な因子（６日以内に）、ひいては微細な支援環境を提供することである。
【０００５】
ヒドロゲルは、たるみのある粘度を有するので、生物的な性質を向上させるだけでなく物理的な堅牢さも増加させるには、ヒドロゲルを塑性圧縮することが必要であり、そうすれば外科医は、圧縮されたヒドロゲルから作られた最終的なゲル／皮膚グラフトを便利かつ確実に取り扱うことができる。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】ディエジ（Ｄｉｅｚｉ）、ミルコ（Ｍｉｒｃｏ）、「表皮層化をインヴィトロ調節する条件の決定：代用上皮の３段階操作（Ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇ  ｔｈｅ  ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ  ｔｈａｔ  ｒｅｇｕｌａｔｅ  ｅｐｉｄｅｒｍａｌ  ｓｔｒａｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｖｉｔｒｏ：Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  ａｎ  ｅｐｉｄｅｒｍａｌ  ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅ  ｉｎ  ３  ｓｔｅｐｓ）」、人間生物学修士論文（Ｍａｓｔｅｒ  Ｔｈｅｓｉｓ  ｉｎ  Ｈｕｍａｎ  Ｂｉｏｌｏｇｙ）、組織生物学研究ユニット（Ｔｉｓｓｕｅ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｕｎｉｔ）、チューリッヒ大学（Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｚｕｒｉｃｈ）、２００９年２月
【非特許文献２】バローリ（Ｂａｒｏｌｉ），Ｂ．、「組織誘導物質の組織再生工学および送達のためのヒドロゲル（Ｈｙｄｒｏｇｅｌｓ  ｆｏｒ  ｔｉｓｓｕｅ  ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  ａｎｄ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｏｆ  ｔｉｓｓｕｅ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ  ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ）」、ジャーナル・オブ・ファーマスーティカル・サイエンセズ（Ｊ  Ｐｈａｒｍ  Ｓｃｉ）、２００７年９６巻９号：ｐ．２１９７−２２３
【非特許文献３】ミムラ（Ｍｉｍｕｒａ），Ｔ．ら、「ウサギ線維芽細胞前駆体およびゼラチンヒドロゲルによる角膜基質の組織工学（Ｔｉｓｓｕｅ  ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  ｏｆ  ｃｏｒｎｅａｌ  ｓｔｒｏｍａ  ｗｉｔｈ  ｒａｂｂｉｔ  ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ  ｐｒｅｃｕｒｓｏｒｓ  ａｎｄ  ｇｅｌａｔｉｎ  ｈｙｄｒｏｇｅｌｓ）」、モレキュラー・ヴィジョン（Ｍｏｌ  Ｖｉｓ）、２００８年１４巻ｐ．１８１９−２８
【非特許文献４】スターク（Ｓｔａｒｋ），Ｈ．Ｊ．ら、「正常表皮形態発生および分化を有する限定培地中の器官型ケラチン生成細胞共培養（Ｏｒｇａｎｏｔｙｐｉｃ  ｋｅｒａｔｉｎｏｃｙｔｅ  ｃｏｃｕｌｔｕｒｅｓ  ｉｎ  ｄｅｆｉｎｅｄ  ｍｅｄｉｕｍ  ｗｉｔｈ  ｒｅｇｕｌａｒ  ｅｐｉｄｅｒｍａｌ  ｍｏｒｐｈｏｇｅｎｅｓｉｓ  ａｎｄ  ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ）」、ジャーナル・オブ・インヴェスティゲーティヴ・ダーマトロジー（Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｖｅ  Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｙ）、１９９９年１１２巻５号：ｐ．６８１−６９１
【非特許文献５】ヤマオカ（Ｙａｍａｏｋａ），Ｈ．ら、「種々のヒドロゲル材料に埋め込んだヒト耳介軟骨細胞を用いる軟骨組織工学（Ｃａｒｔｉｌａｇｅ  ｔｉｓｓｕｅ  ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  ｕｓｉｎｇ  ｈｕｍａｎ  ａｕｒｉｃｕｌａｒ  ｃｈｏｎｄｒｏｃｙｔｅｓ  ｅｍｂｅｄｄｅｄ  ｉｎ  ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ  ｈｙｄｒｏｇｅｌ  ｍａｔｅｒｉａｌｓ）」、ジャーナル・オブ・バイオメディカル・マテリアルズ・リサーチ・パートＡ（Ｊ  Ｂｉｏｍｅｄ  Ｍａｔｅｒ  Ｒｅｓ  Ａ）、２００６年７８巻１号：ｐ．１−１１
【非特許文献６】ファーガソン（Ｆｅｒｇｕｓｏｎ），Ｒ．Ｅ．およびＢ．リンカー（Ｒｉｎｋｅｒ）、「癒着形成を防ぐ屈筋腱へのヒドロゲル封止剤の使用（Ｔｈｅ  ｕｓｅ  ｏｆ  ａ  ｈｙｄｒｏｇｅｌ  ｓｅａｌａｎｔ  ｏｎ  ｆｌｅｘｏｒ  ｔｅｎｄｏｎ  ｒｅｐａｉｒｓ  ｔｏ  ｐｒｅｖｅｎｔ  ａｄｈｅｓｉｏｎ  ｆｏｒｍａｔｉｏｎ）」、アナールズ・オブ・プラスティック・サージュリー（Ａｎｎ  Ｐｌａｓｔ  Ｓｕｒｇ）、２００６年５６巻１号：ｐ．５４−８
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
したがって、上記に鑑みると、本発明の根底にある課題は、そのようなヒドロゲルを圧縮するための装置、システムならびに方法を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
この課題は、請求項１の特徴を有する装置、ならびに請求項１５の特徴を有する方法、ならびに請求項１３および１４の特徴を有するシステムによって解決される。
【０００９】
請求項１によれば、本発明による装置は、周囲フレーム部材および前記フレーム部材に接続されている透過性の底部メンブレンを備える別個のグラフトフレームであって、グラフトフレームは、前記底部メンブレンを覆ってヒドロゲル層が形成されるべく（すなわちグラフトフレーム中のヒドロゲルは底部メンブレンに沿って延在し、底部メンブレンに沿うその寸法は底部メンブレンに垂直なヒドロゲルの厚さより大きい）、前記ヒドロゲルを受けるように設計されている、グラフトフレームと、圧縮方向に沿って延在する複数のガイドロッドを有するガイドフレームと、フィルタプレートと、複数の開口を有する基部を備える第１（たとえば下部）コンポーネントであって、前記複数の開口は、特に前記基部の外縁領域に形成され、各開口は、ガイドロッドの１つと関連付けられ、第１コンポーネントは、各ガイドロッドがその関連付けられている開口を通って延在するべく、装置の動作モードにおいてガイドフレームの上に配置されるように設計され、第１コンポーネントは、第１コンポーネントの基部から突き出ている周囲壁をさらに備え、その結果、第１コンポーネントは、フィルタプレートが、第１コンポーネントの前記容器の底とグラフトフレームの底部メンブレンとの間に配置されるべく、前記動作モードにおいてフィルタプレートおよびグラフトフレームを受けるように設計されている容器を形成する、第１コンポーネントと、複数の開口を有する基部を備える第２（たとえば上部）コンポーネントであって、前記複数の開口は、特に第２コンポーネントの前記基部の外縁領域に形成され、各開口は、ガイドロッドの１つと関連付けられ、第２コンポーネントは、第１コンポーネントのその関連付けられている開口を通って延在する各ガイドロッドが第２コンポーネントのその関連付けられている開口にも挿入され、その結果、第２コンポーネントは、前記ロッドによって滑り可能に圧縮方向に沿ってガイドされるべく、前記動作モードにおいて前記第１コンポーネントの上に配置されるように設計されている、第２コンポーネントと、装置の前記動作モードにおいて前記第２コンポーネントに取り外し可能に、特にラッチ接続を用いて、接続されるように設計されている別個のピストンであって、装置の前記動作モードにおいて第２コンポーネントは、ヒドロゲル層をピストンと底部メンブレンとの間で圧縮するべく、グラフトフレームの底部メンブレンの上にある前記ヒドロゲル層に対してピストンを圧縮方向に沿って押圧するように設計されている、ピストンと、を備える。
【００１０】
好ましくは、そのようなヒドロゲル層は、患者に移植することができる人工皮膚グラフトを生成させるために用いられる。
【００１１】
好ましくは、ヒドロゲルは、医療グレードのウシＩ型コラーゲンからなる。特に、ヒドロゲルの中にヒト自家皮膚線維芽細胞が含有され、ヒドロゲルの上に、すなわちヒドロゲルが載っている前記底部メンブレンに向いていないヒドロゲル層の上面にヒト自家ケラチン生成細胞が配置される。前記メンブレンまたは底部メンブレンは、圧縮時に層から搾り出される水ならびに細胞培養培地に対して透過性であり、それによって後者は上と下との両方からヒドロゲルに到達することができる。
【００１２】
好ましくは、底部メンブレンは、好ましくはＰＥＴからなり、好ましくは厚さ１８マイクロメートルかつ微多孔質であり、好ましくは３マイクロメートルの細孔径を有する。
【００１３】
本発明の好ましい実施形態によれば、グラフトフレームおよび／またはピストンは、使い捨て品として設計されている（すなわち１回の使用後に取り替えるように設計されている）。したがって、使用する前にこれらの物品を毎回オートクレーブ処理する必要はない。
【００１４】
さらに、本発明の好ましい実施形態によれば、ピストンは、ヒドロゲル層に対して押圧するための接触面を形成する第１の側を有するたとえばプレート状のピストン基部を備える。好ましくは、ピストンは、その接触面を用いてヒドロゲル層に対して押圧するとき前記接触面を前方にしてグラフトフレームに挿入されるように設計されている。さらに、特に、ピストン基部は、ヒドロゲル層に対して押圧するときグラフトフレームのフレーム部材と接触するように設計されている周囲縁領域を備え、ヒドロゲル層を圧縮してもヒドロゲルがピストンとフレーム部材との間の隙間を通ってグラフトフレームから流れ出ないようにする。
【００１５】
本発明の別の好ましい実施形態によれば、ピストンは、特に、前記接触面を形成する前記第１の側に向いていないピストン基部の第２の側において、ピストン基部の前記縁領域から突き出ている２つのラッチ要素を備える。これは、第２コンポーネントへのピストンの手動による容易な取り付けならびに第２コンポーネントとの手動の脱係合による第２コンポーネントからのピストンの取り外しを可能にする。
【００１６】
好ましくは、第２コンポーネントは、ピストンを保持するための支持体を備え、支持体は、装置の前記動作モードにおいて第２コンポーネントの基部の第１の側から底部メンブレンへ向かって突き出ている。好ましくは、前記ラッチ要素は、ピストンを支持体に取り外し可能に接続するために前記支持体と係合するように設計されている。
【００１７】
さらに、本発明の好ましい実施形態によれば、第２コンポーネントの基部は、各々のラッチ要素のための穴を備え、各々の要素は、基部の前記第１の側に向いていない第２コンポーネントの基部の第２の側からこの穴を介して、たとえば手動でまたは道具を用いて接触することができ、その結果、ラッチ要素は、たとえば支持体から曲げ離して支持体との係合を解除することによって、前記穴を介して支持体から外され得る。
【００１８】
さらに、本発明の好ましい実施形態によれば、ピストンは、前記接触面に向いていないピストン基部の前記第２の側において、ピストン基部の前記縁領域から突き出ているガイド要素を備え、前記ガイド要素は、ピストンが支持体に接続されているとき支持体に対してピストンをガイドするために前記支持体に沿って滑るように設計されている。
【００１９】
さらに、本発明の好ましい実施形態によれば、第２コンポーネントは、圧縮方向に沿ったグラフトフレームへのピストンの進入深さを調節するための、すなわち圧縮後のヒドロゲル層の厚さを調節するための調節手段を備え、特に、前記調節手段は、支持体に隣接して基部の第１の側に形成されている雌ネジにネジ止めされる２本のネジを、基部の前記第１の側に対する前記ネジのネジ頭の高さが、各々のネジを時計回りまたは反時計回りに回転することによって調節され得るように、備えている。好ましくは、ネジ頭は、前記進入深さを制限するべく、装置の動作モードにおいて前記フレーム部材に当接するように設計されている。好ましくは、各ネジは、支持体の隅の領域と隣接するように配置され、支持体の前記隅の領域は、互いに対角で対面している。
【００２０】
さらに、本発明の好ましい実施形態によれば、第２コンポーネントの基部は、第２コンポーネントの重量を調節するべく、少なくとも１つの重り、好ましくは複数の重りを受けるための受け部を備え、それによって第２コンポーネントは、装置の前記動作モードにおいて前記ヒドロゲル層を圧縮し、特に、前記受け部は、前記支持体によって形成される。好ましくは、前記受け部は、第２コンポーネントの基部の第２の側において開口を備え、前記少なくとも１つの重りまたは前記複数の重りは、前記開口を介して前記受け部の中に配置され得る。
【００２１】
好ましくは、前記フィルタプレートを支持するために、容器の周囲壁は、好ましくは、フィルタプレートが、フィルタプレートの縁領域で載ることができる段を備える。
【００２２】
さらに、前記グラフトフレームは、好ましくは、装置の前記動作モードにおいてフレーム部材の周囲縁領域で容器の壁の上縁に載るように設計されている。容器内のグラフトフレームの位置をさらに安定化するために、壁の前記上縁は、好ましくはフレーム部材の領域を形状嵌合式で受けるための少なくとも１つのくぼみを備える。
【００２３】
さらに、グラフトフレームおよび／または前記フィルタプレートを第１コンポーネントの容器から容易に取り出すことができるために、容器の前記壁は、好ましくは、フィルタプレートおよび／またはグラフトフレームを容器から取り出すためのふくらみを備える。好ましくは、前記ふくらみは、使用者の指または適当な道具の先端を前記ふくらみによって範囲が定められる容器の内部領域に挿入することができ、それによってグラフトフレームおよび／またはフィルタプレートを指または道具の前記先端を用いて容器から持ち上げ、取り出すことができるように形成されている。
【００２４】
さらに、本発明の別の態様によれば、請求項１３に記載のシステムが提供され、このシステムは、本発明による装置ならびに圧縮されたヒドロゲル層の培養のためのフラスコを備える。好ましくは、前記フラスコは、前記グラフトフレームの中にある圧縮されたヒドロゲル層とともにグラフトフレームを受けるように設計されている。このために、フラスコは、好ましくは開口を備え、グラフトフレームは、開口を介してフラスコの内部に配置され得る。さらに、前記フラスコは、フラスコの前記内部のフラスコの底に配置されてグラフトフレームを支持するように設計されている支持フレームを備える。前記開口を適切に閉じるために、好ましくはフラスコの蓋が提供され、特に、蓋がフラスコの前記開口を閉じると、蓋は、支持フレームに対してグラフトフレームを押圧するように設計されている（グラフトフレームと蓋との間に配置され、蓋が前記開口を閉じると、蓋はこの要素に対して押圧し、要素が今度はグラフトフレームに対して押圧し、グラフトフレームが次に支持フレームに対して押圧されるように設計されている別個の要素もあってよい）。さらに、フラスコは、日常的な細胞培養条件において細胞培養培地または細胞を満たすためのまたは吸い出すための別の開口を備えてよく、特に、前記別の開口を閉じるためにネジ蓋が提供される。フラスコは、より良好なヒドロゲル（または細胞）の視察のために好ましくは透明に設計される。最後に、前記フラスコならびに前記支持フレームは、好ましくは使い捨て品として設計される。
【００２５】
さらに、本発明の別の態様によれば、請求項１４に記載のグラフトフレームが提供される。これによると、グラフトフレームは、周囲フレーム部材および前記フレーム部材に接続されている底部メンブレン（たとえば上記も参照）を備え、グラフトフレームは、前記底部メンブレンを覆ってヒドロゲル層が形成されるべく、ヒドロゲルを受けるように設計されている（たとえば上記も参照）。
【００２６】
特に、底部メンブレンは、フレーム部材に一体的に接続されている。
【００２７】
特に、グラフトフレームは、使い捨て品として設計されている（すなわち１回の使用後に取り替えるように設計されている）。
【００２８】
特に、グラフトフレームは、底部メンブレンの上にあるヒドロゲル層を圧縮するための装置の容器に挿入されるように設計されている。好ましくは、前記装置は、本発明による装置である。
【００２９】
さらに、特に、請求項１４に記載の前記システムは、グラフトフレームの中の底部メンブレンの上にある圧縮されたヒドロゲル層の培養のためのフラスコをさらに備える。
【００３０】
特に、前記フラスコは、前記グラフトフレームの中の底部メンブレンの上にある圧縮されたヒドロゲル層とともにグラフトフレームを受けるように設計され、すなわち、グラフトフレームの用い方が２通りあれば好ましい。最初に、グラフトフレームは、圧縮されるヒドロゲルを保持するための手段として、その次に培養ならびに患者への輸送の間に圧縮されたヒドロゲル層を保持するための手段として使用される。
【００３１】
特に、フラスコは開口を備え、グラフトフレームは、開口を介してフラスコの内部に配置され得る。
【００３２】
特に、フラスコは、前記開口を閉じるための蓋を備える。
【００３３】
特に、請求項１４に記載の前記システムは、フラスコの前記内部のフラスコの底に配置されてグラフトフレームを支持するように設計されている別個の支持フレームをさらに備える。
【００３４】
特に、蓋は、蓋がフラスコの前記開口を閉じると、支持フレームに対してグラフトフレームを押圧するように設計されている（グラフトフレームと蓋との間に配置されている別個の要素であって、蓋が前記開口を閉じると、蓋がこの要素に対して押圧し、要素が今度はグラフトフレームに対して押圧し、次にグラフトフレームが支持フレームに対して押圧するように設計されている、別個の要素もあってよい）。
【００３５】
特に、フラスコは、液体、特に細胞培養培地をフラスコに満たすための別の開口を備える。
【００３６】
さらに、特に、前記別の開口を閉じるためにネジ蓋が提供される。
【００３７】
さらに、特に、前記フラスコは、少なくとも部分的に透明である。
【００３８】
特に、前記フラスコおよび／またはフレーム支持体は、使い捨て品として設計されている（すなわち１回の使用後に取り替えられるように設計されている）。さらに、本発明に記載の問題は、請求項１５に記載のヒドロゲル層を圧縮するための、特に、本発明による装置を用いて（最終的には前記フラスコと併用して）人工皮膚グラフトを生成させるための方法であって、ヒドロゲルをグラフトフレームに満たし、それによって前記ヒドロゲルは、前記底部メンブレンを覆って層を、特にグラフトフレームの中のヒドロゲル層を培養して、形成するステップと、フィルタプレートを第１コンポーネントの前記容器の中に配置するステップと、ヒドロゲル層を備える前記グラフトフレームを前記容器の中のフィルタプレートの上に配置するステップと、ガイドロッドがそれらのそれぞれの第１コンポーネントの開口を通って延在するよう、第１コンポーネントをガイドフレームの上に配置するステップと、前記ガイドロッドがそれらのそれぞれの第２コンポーネントの開口に挿入されるよう、第２コンポーネントを第１コンポーネントの上に配置するステップと、第２コンポーネントにピストンを用いてヒドロゲル層を圧縮方向に沿って押圧させることによって、底部メンブレンと第２コンポーネントに接続されているピストンとの間でヒドロゲル層を圧縮するステップであって、第２コンポーネントは、前記ガイドロッドによって圧縮方向に沿ってガイドされるステップと、特に、ヒドロゲル層を圧縮した後にグラフトフレームを装置から取り出すステップと、特に、圧縮されたヒドロゲル層とともにグラフトフレームをフラスコの開口を介してフラスコの内部のフラスコの底に配置された支持フレームの上に配置するステップと、特に、蓋を用いてフラスコを閉じ、それによってグラフトフレームをフラスコの中に固定するよう、蓋を用いてグラフトフレームのフレーム部材をフレーム支持体に対して押圧するステップと、特に、圧縮されたヒドロゲル層を培養して、前記圧縮されたヒドロゲル層から人工皮膚グラフトを生成させるステップと、を含む方法によって解決される。
【００３９】
本発明の実施形態によれば、前記ヒドロゲルは、次のように生成される。Ｉ型コラーゲンは、酸性溶液に溶解した形で購入することができる。このコラーゲンをゲル化させるには、塩基性緩衝液によって中和しなければならない。次に、完全ゲル化は、細胞培養装置の中で、たとえば３７℃でたとえば１２０分間行われる。その後、ヒドロゲルは、圧縮することができる。
【００４０】
さらに、ヒドロゲルを圧縮した後に、圧縮されたヒドロゲルは、好ましくは次のように処理される。線維芽細胞を含有する圧縮されたヒドロゲルは、線維芽細胞が生物的に妥当な細胞数へ増殖するまでたとえば６日間培養される。その後、ゲルの平らな上面にケラチン生成細胞が加えられる。たとえば、さらに６日（合計１２日）後、ケラチン生成細胞は、層化した上皮（表皮）を形成している。したがって、１２日後に今や真皮−表皮の皮膚グラフトとなった「ヒドロゲル」は、患者に移植することができる。
【００４１】
本発明の別の特徴および利点は、図面を参照する実施形態の詳細な説明を用いて記載される。
【図面の簡単な説明】
【００４２】
【図１】本発明による装置のガイドフレームの斜視図を示す。
【図２】図１に示したガイドフレームならびにフィルタプレートと、ヒドロゲル層があるグラフトフレームとを受けるための容器を備える本発明による装置の第１下部コンポーネントの斜視図を示す。
【図３】前記容器の中に配置されようとしているフィルタプレートと、ガイドフレームの上に配置されている第１コンポーネントとの斜視図を示す。
【図４】ヒドロゲル層を圧縮するための本発明による装置の第２上部コンポーネントの斜視図を示す。
【図５】前記容器の中のフィルタプレートの上にグラフトフレームを配置する斜視図を示す。
【図６】第２コンポーネントへのピストンの取り付けならびにフィルタプレートおよびグラフトフレームを保持している前記第１コンポーネントを示す。
【図７】第２コンポーネントとそれに接続されたピストンとの詳細の斜視図を示す。
【図８】第２コンポーネントの詳細の別の斜視図を示す。
【図９】第１コンポーネントおよびガイドフレームの上に配置された第２コンポーネントの斜視図を示す。
【図１０】動作モードにおける本発明による装置の断面を示す。
【図１１】図１０に示した断面の詳細を示す。
【図１２】グラフトフレームの中のヒドロゲル層から持ち上げられたピストンの斜視図を示す。
【図１３】圧縮されたヒドロゲル層を培養するためのフラスコの斜視図を示す。
【図１４】圧縮されたヒドロゲル層を培養するためのフラスコの斜視図を示す。
【図１５】圧縮されたヒドロゲル層を培養するためのフラスコの斜視図を示す。
【図１６】圧縮されたヒドロゲル層を培養するためのフラスコの斜視図を示す。
【発明を実施するための形態】
【００４３】
図１から図１６は、ヒドロゲルＨを圧縮するための装置を示す。装置は、装置の第１および第２コンポーネント２００、４００を互いに対して保持／ガイドするために設計されているガイドフレーム１００を備え、それによって第２コンポーネント４００は、第１コンポーネント２００の上に位置するグラフトフレーム５００の中に配置されたヒドロゲル層Ｈに対してピストン６００を用いて圧縮方向Ｃに沿ってガイドを受けながら押圧することができる。
【００４４】
図１に示すように、前記ガイドフレーム１００は、長方形のフレーム部材１０３を備え、フレーム部材１０３は、フレーム部材１０３の４つの隅の領域において互いに接続されている４つの辺から形成され、前記フレーム部材１０３は、装置またはガイドフレーム１００が動作モードにあるとき、水平面に沿って下敷きの上に延在するかまたは位置し、フレーム部材１０３の各々の隅の領域からガイドロッド１０４が、前記水平面に垂直な方向である前記圧縮方向Ｃと反対向きにフレーム部材１０３から突き出ている。
【００４５】
図２に示すように、前記第１コンポーネント２００は、周囲縁領域２０２を備える長方形の基部２０１を備え、周囲縁領域２０２に４つの、すなわち第１コンポーネント２００の基部２０１の各々の隅の領域に１つの、開口２０４が形成されている。各々の開口は、ガイドフレームのガイドロッド１０４の１つを受け、それによって前記ガイドロッド１０４は、第１コンポーネントが図３に示すようにガイドフレーム１００の上に配置されると、第１コンポーネントの基部２０１の各々の開口２０４を通って延在するように設計されている。さらに、図２に示するように、ガイドフレーム１００は、ガイドフレーム１００のフレーム部材１０３の対向する辺から突き出ている２つのハンドル１０２を備える。これらのハンドル１０２は、ガイドフレーム１００を、特にその上に配置された第１および第２コンポーネント２００、４００とともに移動するかまたは搬送するために使用される。
【００４６】
第１コンポーネント２００の基部２０１は、第１の側または上側２０１ａをさらに備え、第１の側または上側２０１ａから周囲壁２０３が突き出て、それによって基部２０１の中央部分、たとえば底２３０は、前記壁２０３とともに図３、図５および図６に示すようにフィルタプレート３００とフィルタプレートの上のグラフトフレーム５００とを受けるための容器２２０を形成する。
【００４７】
たとえば図５に示すグラフトフレーム５００は、周囲（たとえば長方形の）フレーム部材５０２と前記フレーム部材５０２に接続された底部メンブレン５０１（すなわちメンブレンを形成する底部）を備え、グラフトフレーム５００は、前記底部メンブレン５０１を覆ってヒドロゲル層Ｈが形成されるべく、ヒドロゲルを受けるように設計されている。メンブレンは、好ましくはＰＥＴからなり、厚さ１８マイクロメートルかつ微多孔質であり、好ましくは３マイクロメートルの細孔径を有する。
【００４８】
ヒドロゲルを圧縮するために、ならびに圧縮後、たとえば培養時にヒドロゲルを保持するためのキャリアとして底部メンブレン５０１を有するグラフトフレームを用いることができれば好ましい。培養時に、細胞培養培地が下から（底部メンブレンを通って）も上からもヒドロゲル層と接触することができれば好ましい。
【００４９】
さらに、グラフトフレーム５００のフレーム部材５０２は、上部周囲縁領域５０３、ならびにフレーム部材５０２の４つの辺の各々から突き出ている領域５０４を備える。
【００５０】
フィルタプレート３００は、長方形の外側輪郭を有し、フィルタプレートの周囲縁が図３および図５に示すように容器２２０の壁２０３の段２０５の上に載るように、第１コンポーネント２００の容器２２０の中に配置される。グラフトフレーム５００は、フィルタプレート３００の上に置かれ、それによってグラフトフレーム５００の底部メンブレン５０１は、フィルタプレート３００の上に載り、これによってグラフトフレーム５００の上部周囲縁領域５０３は、グラフトフレームの壁２０３の上縁２０６の上に載り、グラフトフレーム５００の前記突き出ている領域５０４は、容器２２０の壁２０３の前記上縁２０６に形成された対応するくぼみ２０７と形状嵌合式で係合する。
【００５１】
下記に記載されるヒドロゲル層Ｈの圧縮をすると、押圧により余剰の水Ｗがグラフトフレームの底部メンブレン５０１を通過し、底部メンブレン５０１を支持する前記フィルタプレート３００を通って容器２２０に流れ込み、たとえば図１０に示すように、容器２２０の底２３０に溜まる。
【００５２】
容器２２０からグラフトフレームならびにフィルタプレートを取り出すために、容器の壁２０３は、図２に示すように、容器２２０からグラフトフレーム５００ならびにフィルタプレート３００を手動で、たとえば指を用いて取り出すことを可能にするふくらみ２０８を備える。
【００５３】
グラフトフレーム５００が目的どおりに容器２２０の中に配置される（図６参照）と、第２コンポーネント４００は、図１０に示すように圧縮方向Ｃに沿ってヒドロゲル層Ｈを圧縮するために用いられる。
【００５４】
図４に例示するように、第２コンポーネント４００は、周囲縁領域４０３を備える基部４０１を備え、周囲縁領域４０３には４つの開口４０４が、すなわち第２コンポーネント４００の基部４０１の隅の領域各々に１つの開口４０４が、形成されている。これらの開口４０４の各々は、第２コンポーネント４００が第１コンポーネント２００の上に配置されると関連付けられているガイドロッド１０４を受け（図９参照）、それによって第１コンポーネント１００の方への第２コンポーネント４００の動きが正確に圧縮方向Ｃに行われる。
【００５５】
第２コンポーネント４００を第１コンポーネント２００の上に配置する前に、第２コンポーネント４００の支持体４０２の上に別個のピストン６００が配置される。支持体４０２は、第２コンポーネント４００の基部４０１の第１の側または下側４０１ａから圧縮方向Ｃに沿って突き出し、本発明による装置の動作モードにおいてヒドロゲル層Ｈに面する第１の側または下側４０２ａを備え、前記第１の側４０２ａは、圧縮方向Ｃに垂直に延在する。
【００５６】
ピストン６００は、圧縮方向Ｃに垂直に延在する第１の側または下側６０１ａを有するプレート状の（たとえば長方形の）ピストン基部６０１を備え、前記第１の側６０１ａは、ヒドロゲル層Ｈに対して押圧するためのピストン６００の接触面を形成すると同時に、接触面６０１ａがヒドロゲル層Ｈに対して押圧するとき内側から封止するように容器２２０の壁２０３と接触し、それによってヒドロゲルＨが容器２２０の内部にとどまり、ピストン６００を通り抜けることができないようにするための周囲縁領域６０２も形成する。
【００５７】
ピストン６００を第２コンポーネント４００の支持体４０２と接続するために、ピストン６００は、周囲縁領域６０２ならびに前記接触面６０１ａに向いていないピストン基部６０１の第２の側６０１ｂから突き出ている２つのラッチ要素６０３および複数のガイド要素６０４を備え、前記ラッチ要素６０３は、支持体４０２と係合してピストン６００を支持体４０２に取り外し可能に取り付けるように設計されており、前記ガイド要素６０４は、ラッチ要素６０３を支持体４０２と係合すると、ピストン６００を支持体４０２に対してガイドするように設計されている（図６参照）。ラッチ要素６０４を用いてピストン６００が支持体４０２に取り付けられると、ピストン基部６０１の第２の側６０１ｂは、支持体４０２の第１の側４０２ａに沿って延在するかまたは支持体４０２の第１の側４０２ａに当接する（図７および図１０参照）。
【００５８】
圧縮方向Ｃに沿ったグラフトフレーム５００へのピストン６００の進入深さ、すなわち圧縮後のヒドロゲル層Ｈの厚さを調節するために、第２コンポーネントは、図４に示す２本のネジを備え、これらの２本のネジは、支持体４０２の隅の領域に隣接して第２コンポーネント４００の基部の第１の側４０１ａに形成されている雌ネジにネジ止めされ、前記隅の領域は、互いに対角線上で対向する。
【００５９】
図１０および図１１から分るように、これらのネジ４１０のネジ頭は、第２コンポーネント４００に接続されたピストン６００の接触面６０１ａがガイドロッド１０４のガイドを受けてグラフトフレーム５００の底部メンブレン５０１の上にあるヒドロゲル層Ｈに対して押圧すると、グラフトフレーム５００のフレーム部材５０２の上縁領域５０３に載る（図１１の位置Ａ参照）。したがって、これらのネジ頭が第２コンポーネントの基部４０１の第１の側４０１ａから突き出ているほど、圧縮後のヒドロゲル層Ｈの厚さは増す（図１１の位置Ｔ参照）。
【００６０】
ヒドロゲル層を圧縮するための力は、第２コンポーネントおよびそれに取り付けられている部品（たとえばピストン６００）の重量によって提供される。
【００６１】
前記重量を調節するために、第２コンポーネント４００は、前記第１の側４０１ａに向いていない基部４０１の第２の側４０１ｂに受け部４３０を備え、受け部４３０は、ピストン６００を支持するための前記支持体４０２によって形成されるかまたは範囲を定められる。前記受け部４３０は、１つまたはいくつかの重り要素８００を受けるように設計され、重り要素８００を用いてピストン６００を含む第２コンポーネント４００の全重量を調節することができる（図９および図１０参照）。
【００６２】
本発明による装置を用いて目的どおりにヒドロゲル層Ｈを圧縮した後、第２コンポーネント４００は、第１コンポーネント２００およびガイドフレーム１００から取り外される。このために、第２コンポーネント４００の基部４０１は、穴４２０を備え、穴４２０を介して基部の第２の側４０１ｂからラッチ要素６０３にたとえば指を用いて接触することができ、それによって前記ラッチ要素６０３は、第２コンポーネント４００の支持体４０２との係合を解除することができる（図８および図９参照）。
【００６３】
次に、ピストン６００を第２コンポーネント４００から取り外すが、ピストン６００は、通常、グラフトフレーム５００の中のヒドロゲル層Ｈに粘着する。次に、ピストン６００は、図１２に示すように手動でグラフトフレーム５００から持ち上げられる。
【００６４】
本発明の実施形態によれば、グラフトフレーム５００の内側の底部メンブレン５０１ならびにピストン６００の前記接触面６０１ａは、各々６ｃｍ×７ｃｍの面積を含む。他のサイズも可能である。したがって、最終的な圧縮されたヒドロゲル層は、たとえば６ｃｍ×７ｃｍの対応する面積とネジ４１０によって定められる厚さ（上記参照）とを備える。
【００６５】
圧縮されたヒドロゲル層Ｈのその後の処理のために、圧縮されたヒドロゲル層Ｈの培養のためのフラスコ７００が準備される（図１３から図１６参照）。フラスコ７００は、グラフトフレーム５００の中にある圧縮されたヒドロゲル層Ｈとともに前記グラフトフレーム５００を受けるように設計されている。このために、フラスコ７００は、フラスコ７００の上部７０３にある開口７０４を備え、グラフトフレーム５００は、図１４に示すように開口７０４を介してフラスコ７００の内部に配置される。事前に、図１３に示すように、グラフトフレーム５００を支持するために支持フレーム７０６がフラスコの開口７０４を介してフラスコ７００の底７０２に配置される。支持フレーム７０６は、グラフトフレーム５００のフレーム部材５０２の前記部分５０４を受けるために支持フレーム７０６の上縁に形成されているくぼみ７０７を備え、グラフトフレーム５００は、その上縁領域５０３で支持フレーム７０６の前記上縁に載るように設計されている。特に、支持フレーム７０６は、４つのスタンド７０９を用いて前記底に載る。さらに、支持フレーム７０６は、フラスコ７００の内部からフラスコ７００の壁７０２と接触するための、相反する方向に突き出ている２つの領域７０８を備え、それによって支持フレーム７０６は、フラスコ７００の内側で横方向に動くことができない（図１４および図１５参照）。
【００６６】
グラフトフレーム５００がフラスコ７００の内側の支持フレーム７０６に適正に置かれると、フラスコの開口７０４は、蓋７１０を用いて閉じられ、次に蓋７１０がグラフトフレームを支持フレーム７０６に押圧し、それによってグラフトフレームは、蓋７１０と支持フレーム７０６との間でフラスコの底７０１に垂直な方向に沿って固定される。蓋７１０を用いてグラフトフレームを支持フレーム７０６に対して押圧するために、前記蓋７１０とグラフトフレーム５００との間に追加の要素を配置することも可能である。
【００６７】
ネジ蓋によって閉じることができる別の開口を介してフラスコに細胞培養培地が満たされ得る。細胞培養培地は、ヒドロゲル層の中および上における細胞の培養と、ヒドロゲル層から作られた真皮−表皮グラフトの輸送との両方のために必要である。
【００６８】
好ましくは、ガイドフレーム１００は、ステンレス鋼から作られる。
【００６９】
さらに、第１コンポーネント２００は、好ましくはＰＥＥＫ（ポリエーテルエーテルケトン：Ｐｏｌｙｅｔｈｅｒ  ｅｔｈｅｒ  ｋｅｔｏｎｅ）から作られる。
【００７０】
さらに、第２コンポーネント４００は、好ましくはＰＥＥＫ（ポリエーテルエーテルケトン）から作られる。
【００７１】
さらに、グラフトフレーム５００の底部メンブレン５０１は、好ましくはＰＥＴ（たとえばＩＳＯ１３４８５準拠）から作られる。
【００７２】
さらに、ピストン６００は、好ましくはポリプロピレンから作られる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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