(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）の化合物又はその塩：
【化１】
0006595003.tif 000016
式中、
Ｒ１は、（Ｃ１−４）アルキル、（Ｃ１−２）アルコキシ−（Ｃ１−２）アルキル、ヒドロキシ−（Ｃ１−４）アルキル又は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２；を表し；
Ｒ２は、（Ｃ３−６）シクロアルキル、（Ｃ１−４）アルコキシ、（Ｃ３−６）シクロアルコキシ又は（Ｃ１−２）フルオロアルキルを表す。
【請求項２】
Ｒ１が、（Ｃ１−４）アルキル、（Ｃ１−２）アルコキシ−（Ｃ１−２）アルキル又はヒドロキシ−（Ｃ１−４）アルキルを表し；
Ｒ２が、（Ｃ３−６）シクロアルキル、（Ｃ１−４）アルコキシ又は（Ｃ１−２）フルオロアルキルを表す；
請求項１に記載の化合物又はその塩。
【請求項３】
Ｒ１が、エチル、ｎ−プロピル、イソ−プロピル、ｔｅｒｔ．−ブチル、メトキシ−メチル又は１−ヒドロキシ−エチルを表し；
Ｒ２が、シクロプロピル、エトキシ又はトリフルオロメチルを表す；
請求項１に記載の化合物又はその塩。
【請求項４】
Ｒ１が、（Ｃ１−４）アルキル、（Ｃ１−２）アルコキシ−（Ｃ１−２）アルキル、ヒドロキシ−（Ｃ１−４）アルキル又は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２を表し；
Ｒ２が（Ｃ１−２）フルオロアルキルを表す；
請求項１に記載の化合物又はその塩。
【請求項５】
Ｒ１が（Ｃ１−４）アルキルを表す；
請求項１、２又は４のいずれか１項に記載の化合物又はその塩。
【請求項６】
Ｒ１が、エチル、ｎ−プロピル、イソ−プロピル又はｔｅｒｔ．−ブチルを表す；
請求項１〜４のいずれか１項に記載の化合物又はその塩。
【請求項７】
Ｒ２が（Ｃ３−６）シクロアルキルを表す；
請求項１、２、５又は６のいずれか１項に記載の化合物又はその塩。
【請求項８】
Ｒ２が（Ｃ１−４）アルコキシを表す；
請求項１、２、５又は６のいずれか１項に記載の化合物又はその塩。
【請求項９】
Ｒ２が（Ｃ１−２）フルオロアルキルを表す；
請求項１、２、５又は６のいずれか１項に記載の化合物又はその塩。
【請求項１０】
下記からなる群より選択される、請求項１に記載の化合物又はその塩：
１−｛（Ｒ）−４−［４−（２−エトキシ−ピリミジン−５−イル）−２−トリフルオロメチル−チアゾール−５−イル］−２−メチル−ピペラジン−１−イル｝−２−（３−イソプロピル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−エタノン；
１−｛（Ｒ）−４−［４−（２−エトキシ−ピリミジン−５−イル）−２−トリフルオロメチル−チアゾール−５−イル］−２−メチル−ピペラジン−１−イル｝−２−（３−エチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−エタノン；
２−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−１−｛（Ｒ）−４−［４−（２−エトキシ−ピリミジン−５−イル）−２−トリフルオロメチル−チアゾール−５−イル］−２−メチル−ピペラジン−１−イル｝−エタノン；
１−｛（Ｒ）−４−［４−（２−エトキシ−ピリミジン−５−イル）−２−トリフルオロメチル−チアゾール−５−イル］−２−メチル−ピペラジン−１−イル｝−２−（３−メトキシメチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−エタノン；
１−（２−｛（Ｒ）−２−メチル−４−［２−トリフルオロメチル−４−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−５−イル）−チアゾール−５−イル］−ピペラジン−１−イル｝−２−オキソ−エチル）−１Ｈ−［１，２，４］トリアゾール−３−カルボン酸  アミド；
２−（３−エチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−１−｛（Ｒ）−２−メチル−４−［２−トリフルオロメチル−４−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−５−イル）−チアゾール−５−イル］−ピペラジン−１−イル｝−エタノン；
２−（３−イソプロピル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−１−｛（Ｒ）−２−メチル−４−［２−トリフルオロメチル−４−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−５−イル）−チアゾール−５−イル］−ピペラジン−１−イル｝−エタノン；
２−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−１−｛（Ｒ）−２−メチル−４−［２−トリフルオロメチル−４−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−５−イル）−チアゾール−５−イル］−ピペラジン−１−イル｝−エタノン；
２−（３−メトキシメチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−１−｛（Ｒ）−２−メチル−４−［２−トリフルオロメチル−４−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−５−イル）−チアゾール−５−イル］−ピペラジン−１−イル｝−エタノン；
２−（３−ヒドロキシメチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−１−｛（Ｒ）−２−メチル−４−［２−トリフルオロメチル−４−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−５−イル）−チアゾール−５−イル］−ピペラジン−１−イル｝−エタノン；
１−｛（Ｒ）−２−メチル−４−［２−トリフルオロメチル−４−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−５−イル）−チアゾール−５−イル］−ピペラジン−１−イル｝−２−（３−プロピル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−エタノン；
２−［３−（１−ヒドロキシ−エチル）−［１，２，４］トリアゾール−１−イル］−１−｛（Ｒ）−２−メチル−４−［２−トリフルオロメチル−４−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−５−イル）−チアゾール−５−イル］−ピペラジン−１−イル｝−エタノン；
２−［３−（１−ヒドロキシ−１−メチル−エチル）−［１，２，４］トリアゾール−１−イル］−１−｛（Ｒ）−２−メチル−４−［２−トリフルオロメチル−４−（２−トリ
フルオロメチル−ピリミジン−５−イル）−チアゾール−５−イル］−ピペラジン−１−イル｝−エタノン；
１−｛（Ｒ）−４−［４−（２−シクロブトキシ−ピリミジン−５−イル）−２−トリフルオロメチル−チアゾール−５−イル］−２−メチル−ピペラジン−１−イル｝−２−（３−イソプロピル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−エタノン；
１−｛（Ｒ）−４−［４−（２−シクロプロピル−ピリミジン−５−イル）−２−トリフルオロメチル−チアゾール−５−イル］−２−メチル−ピペラジン−１−イル｝−２−（３−エチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−エタノン；
１−｛（Ｒ）−４−［４−（２−シクロプロピル−ピリミジン−５−イル）−２−トリフルオロメチル−チアゾール−５−イル］−２−メチル−ピペラジン−１−イル｝−２−（３−イソプロピル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−エタノン；
２−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−１−｛（Ｒ）−４−［４−（２−シクロプロピル−ピリミジン−５−イル）−２−トリフルオロメチル−チアゾール−５−イル］−２−メチル−ピペラジン−１−イル｝−エタノン；
１−｛（Ｒ）−４−［４−（２−シクロプロピル−ピリミジン−５−イル）−２−トリフルオロメチル−チアゾール−５−イル］−２−メチル−ピペラジン−１−イル｝−２−（３−メトキシメチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−エタノン；
１−｛（Ｒ）−４−［４−（２−エトキシ−ピリミジン−５−イル）−２−トリフルオロメチル−チアゾール−５−イル］−２−メチル−ピペラジン−１−イル｝−２−（３−メチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−エタノン；
２−（３−メチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−１−｛（Ｒ）−２−メチル−４−［２−トリフルオロメチル−４−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−５−イル）−チアゾール−５−イル］−ピペラジン−１−イル｝−エタノン；及び
１−｛（Ｒ）−４−［４−（２−シクロプロピル−ピリミジン−５−イル）−２−トリフルオロメチル−チアゾール−５−イル］−２−メチル−ピペラジン−１−イル｝−２−（３−メチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−エタノン。
【請求項１１】
有効成分としての請求項１〜１０のいずれか１項に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩と、少なくとも１種の治療上不活性な賦型剤とを有する医薬組成物。
【請求項１２】
医薬として使用するための、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩。
【請求項１３】
自己免疫異常、炎症性疾患，感染症、移植拒絶、線維症、神経変性障害及び癌からなる群より選択される疾患の予防又は治療において使用するための、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩。
【請求項１４】
自己免疫異常、炎症性疾患，感染症、移植拒絶、線維症、神経変性障害及び癌からなる群より選択される疾患の予防又は治療のための医薬の製造のための、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、式（Ｉ）の新規な（Ｒ）−２−メチル−ピペラジン誘導体、及び医薬としてのそれらの使用に関する。本発明はまた、本化合物の製造方法、式（Ｉ）の化合物を１又は２種以上含有する医薬組成物、特にＣＸＣＲ３受容体調節剤としてのそれらの使用を含む、関連した側面に関する。
【背景技術】
【０００２】
ケモカイン受容体は、ペプチド性のケモカインリガンドに高い親和性で結合するＧタンパク質共役受容体（ＧＰＣＲｓ）の一群である。ケモカイン受容体の主な機能は、安静時及び炎症時において、白血球のリンパ器官及び組織への輸送をガイドすることであるが、ある種のケモカイン受容体は、非造血系細胞及びその前駆細胞に対する役割を持つことが知られている。
【０００３】
ケモカイン受容体ＣＸＣＲ３は、炎症性ケモカインＣＸＣＬ９（当初はＭＩＧ、インターフェロン−γ［ＩＮＦ−γ］誘発性モノカインと呼ばれていた）、ＣＸＣＬ１０（ＩＰ−１０、ＩＮＦ−γ−誘発性タンパク質１０）及びＣＸＣＬ１１（Ｉ−ＴＡＣ、ＩＮＦ−γ−誘発性Ｔ細胞α走化性因子）に結合するＧタンパク質共役受容体である。ＣＸＣＲ３は、主に活性化したＴヘルパー１型（Ｔｈ１）リンパ球で発現するが、ナチュラルキラー細胞、マクロファージ、樹状細胞及びＢリンパ球サブセットにも存在している。３種のＣＸＣＲ３リガンドは、主に炎症状態において発現しており、健常組織での発現は非常に低い。例えば、インターフェロン−γ又はＴＮＦ−α等の炎症性サイトカインへの暴露後にＣＸＣＲ３リガンドを発現できる細胞としては、内皮細胞、線維芽細胞、上皮細胞、ケラチノサイト等の種々の間質細胞が挙げられるが、その他にマクロファージ及び単球等の造血性細胞も挙げられる。ＣＸＣＲ３とそのリガンドの相互作用（以後、ＣＸＣＲ３系（ａｘｉｓ）と称する）は、受容体を持つ細胞の、身体の特定部位、特に炎症、免疫障害及び免疫機能障害部位へのガイドに関わっており、また、組織障害、アポトーシス誘導、細胞成長及び血管新生抑制（アンギオスタシス）にも関連している。ＣＸＣＲ３及びそのリガンドは、自己免疫異常、炎症、感染症、移植拒絶、線維症、神経変性及び癌を含む種々の病的状態において、上方制御されて強く発現している。
【０００４】
自己免疫異常におけるＣＸＣＲ３系の役割は、幾つかの前臨床及び臨床観察により裏付けられている。患者における血清レベル及び炎症性病変の組織学的解析により、ＣＸＣＲ３リガンドレベルの上昇又はＣＸＣＲ３陽性細胞数の増加が明らかとなった自己免疫異常としては、関節リウマチ（ＲＡ）、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、ループス腎炎、多発性硬化症（ＭＳ）、炎症性腸疾患（ＩＢＤ；クローン及び潰瘍性大腸炎を含む）及びＩ型糖尿病が挙げられる（Ｇｒｏｏｍ，Ｊ．Ｒ．＆Ｌｕｓｔｅｒ，Ａ．Ｄ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ  ２０１１，８９，２０７；Ｇｒｏｏｍ，Ｊ．Ｒ．＆Ｌｕｓｔｅｒ，Ａ．Ｄ．Ｅｘｐ  Ｃｅｌｌ  Ｒｅｓ  ２０１１，３１７，６２０；Ｌａｃｏｔｔｅ，Ｓ．，Ｂｒｕｎ，Ｓ．，Ｍｕｌｌｅｒ，Ｓ．＆Ｄｕｍｏｒｔｉｅｒ，Ｈ．Ａｎｎ  Ｎ  Ｙ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ２００９，１１７３，３１０）。健常組織ではＣＸＣＲ３リガンドの発現が非常に低いため、上記の相関する証拠から、ヒトの自己免疫疾患におけるＣＸＣＲ３の役割が強く推測される。
【０００５】
ＣＸＣＲ３欠損マウス、ＣＸＣＲ３リガンドの１つが欠損しているマウス又はＣＸＣＲ３若しくはそのリガンドの１つを遮断する抗体を用いた前臨床疾病モデルにより、免疫病理におけるＣＸＣＲ３系の役割がさらに裏付けられている。例えば、ＣＸＣＲ３又はＣＸＣＲ３リガンドＣＸＣＬ９のいずれかの欠損マウスでは、ループス腎炎モデルにおいて症
状が低減することが示されている（Ｍｅｎｋｅ，Ｊ．ら、Ｊ  Ａｍ  Ｓｏｃ  Ｎｅｐｈｒｏｌ  ２００８，１９，１１７７）。その他の腎炎、間質性膀胱炎の動物モデルでは、ＣＸＣＬ１０機能を遮断する抗体の投与により、シクロフォスファミド誘発性膀胱炎の症状の低減が見られた（Ｓａｋｔｈｉｖｅｌ，Ｓ．Ｋ．ら、Ｊ  Ｉｍｍｕｎｅ  Ｂａｓｅｄ  Ｔｈｅｒ  Ｖａｃｃｉｎｅｓ  ２００８，６，６）。同様に、ラットの関節リウマチモデルでは、抗体によりＣＸＣＬ１０を遮断すると、症状が低減した（Ｍｏｈａｎ，Ｋ．＆Ｉｓｓｅｋｕｔｚ，Ｔ．Ｂ．Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ２００７，１７９，８４６３）。同様に、マウスの炎症性腸疾患モデルでは、ＣＸＣＬ１０遮断抗体により、治療設定における症状を防止することができた（Ｓｉｎｇｈ，Ｕ．Ｐ．ら、Ｊ  Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  Ｃｙｔｏｋｉｎｅ  Ｒｅｓ  ２００８，２８，３１）。また、ＣＸＣＲ３欠損マウスの組織を用いた実験により、セリアック病及びその他の自己免疫性障害におけるＣＸＣＲ３の役割が推測されている（Ｌａｍｍｅｒｓ，Ｋ．Ｍ．ら、Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ  ２００８，１３５，１９４）。
【０００６】
ＣＸＣＲ３系の発現の増加を伴う炎症性疾患としては、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、喘息、サルコイドーシス、アテローム性動脈硬化及び心筋炎が挙げられる（Ｇｒｏｏｍ，Ｊ．Ｒ．＆Ｌｕｓｔｅｒ，Ａ．Ｄ．Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ  ２０１１，８９，２０７；Ｇｒｏｏｍ，Ｊ．Ｒ．＆Ｌｕｓｔｅｒ，Ａ．Ｄ．Ｅｘｐ  Ｃｅｌｌ  Ｒｅｓ  ２０１１，３１７，６２０）。
【０００７】
ある研究では、ＣＯＰＤを伴う喫煙者の肺では、ＣＸＣＲ３陽性細胞が、健常者と比較して増加しており、また、ＣＸＣＲ３−リガンドＣＸＣＬ１０に対する免疫応答性は、ＣＯＰＤを伴う喫煙者の細気管支上皮には見られるが、喫煙する及び喫煙しない対照被験者の細気管支上皮には見られないことが示されている（Ｓａｅｔｔａ，Ｍ．ら、Ａｍ  Ｊ  Ｒｅｓｐｉｒ  Ｃｒｉｔ  Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ  ２００２，１６５，１４０４）。これらの知見から、ＣＸＣＲ３系が、ＣＯＰＤを伴う喫煙者の末梢気道で起こる免疫細胞の動員と関連している可能性が推測される。これらの知見と一致して、ＣＸＣＲ３欠損マウスでは、たばこの煙により誘発される急性肺炎が減弱することが、ＣＯＰＤの前臨床研究により明らかとなった（Ｎｉｅ，Ｌ．ら、Ｒｅｓｐｉｒ  Ｒｅｓ  ２００８，９，８２）。
【０００８】
アテローム性動脈硬化の調査の１つでは、ヒトの動脈硬化病変におけるすべてのＴ細胞で、ＣＸＣＲ３の発現が見られた。ＣＸＣＲ３リガンドであるＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０及びＣＸＣＬ１１は、これらの部位に関連する内皮及び平滑筋細胞のすべてにおいて見られたことから、これらが、ＣＸＣＲ３陽性細胞、特にアテローム発生において血管壁中に観察される活性Ｔリンパ球の動員及び保持に関連していると推測される（Ｍａｃｈ，Ｆ．ら、Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｉｎｖｅｓｔ  １９９９，１０４，１０４１）。
【０００９】
前臨床研究においても、ＣＸＣＲ３がアテローム性動脈硬化の発生において役割を果たすことがさらに支持されている。ＡｐｏＥ欠損マウスにおいてＣＸＣＲ３遺伝子を欠損させると、腹大動脈における動脈硬化性病変の発生が有意に低減する（Ｖｅｉｌｌａｒｄ，Ｎ．Ｒ．ら、Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ  ２００５，１１２，８７０）。
【００１０】
ＣＸＣＲ３系は、臓器移植及び骨髄移植後の拒絶反応に関連する毒性においても中心的役割を果たすことが推測されている（Ｇｒｏｏｍ，Ｊ．Ｒ．＆Ｌｕｓｔｅｒ，Ａ．Ｄ．Ｅｘｐ  Ｃｅｌｌ  Ｒｅｓ  ２０１１，３１７，６２０）。前臨床的には、ＣＸＣＲ３欠損マウスは、同種移植片拒絶に対して有意な耐性を示す（Ｈａｎｃｏｃｋ，Ｗ．Ｗ．ら、Ｊ
Ｅｘｐ  Ｍｅｄ  ２０００，１９２，１５１５）。
【００１１】
ＣＸＣＲ３リガンドの血漿濃度は、ヒトにおける肝硬変及び線維症を含む、種々の肝臓症状とも正に相関している（Ｔａｃｋｅ，Ｆ．，ら、Ｌｉｖｅｒ  Ｉｎｔ  ２０１１，３
１，８４０）。
【００１２】
腫瘍学分野では、癌細胞が転移により拡散するのを制限する助けとして、ＣＸＣＲ３系を遮断することが提案されている。例えば、小分子のＣＸＣＲ３受容体アンタゴニストであるＡＭＧ４８７の投与により、腫瘍細胞の肺への転移を制限することができた（Ｐｒａｄｅｌｌｉ，Ｅ．ら、Ｉｎｔ  Ｊ  Ｃａｎｃｅｒ  ２００９，１２５，２５８６）。Ｂ細胞慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）の抑制におけるＣＸＣＲ３の役割についての機能的証明が、Ｔｒｅｎｔｉｎ及びその共同研究者らにより報告された（Ｔｒｅｎｔｉｎ，Ｌ．ら、Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｉｎｖｅｓｔ  １９９９，１０４，１１５）。
【００１３】
中枢神経系では、ＣＸＣＲ３系の遮断には有益な効果があり、神経変性を防止する可能性がある。ＣＮＳにおけるＣＸＣＬ１０の発現の増加が、虚血、アルツハイマー病、多発性硬化症（ＭＳ）及びヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）−脳炎で証明されている。例えば、ＣＸＣＲ３又はＣＸＣＬ１０のいずれかの欠損マウス由来の組織では、野生型マウス由来の組織と比較して、神経毒性のＮＭＤＡ処理後の神経細胞死が減少することが、生体外実験により示されている（ｖａｎ  Ｗｅｅｒｉｎｇ，Ｈ．Ｒ．ら、Ｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ  ２０１１，２１，２２０）。ハンチントン病モデルにおいて、ＨＴＴ断片により誘発される神経変性に対する神経保護作用を備える薬らしい分子の同定を目的とした研究では、２種のＣＸＣＲ３受容体アンタゴニストが同定された（Ｒｅｉｎｈａｒｔ，Ｐ．Ｈ．ら、Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ  Ｄｉｓ  ２０１１，４３，２４８）。
【００１４】
ＣＸＣＲ３受容体調節剤としての４−チアゾリル−ピペリジン誘導体が、ＷＯ２００７／０６４５５３及びＷＯ２００７／０７０４３３に開示されている。
【００１５】
ＣＸＣＲ３受容体調節剤としての異なる１−（ピペラジン−１−イル）−２−ヘテロアリール−エタノン誘導体が、ＷＯ２００７／１００６１０、ＷＯ２０１０／１２６８１１、ＷＯ２０１３／１１４３３２、ＷＯ２０１５／０１１０９９、ＷＯ２０１５／１４５３２２及びポスター発表（Ａ．Ｐｒｏｋｏｐｏｗｉｃｚら、Ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａ  ｂｉａｒｙｌ  ｓｅｒｉｅｓ  ｏｆ  ＣＸＣＲ３  ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ、２４４ｔｈ  ＡＣＳ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｍｅｅｔｉｎｇ、Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ、ＵＳ、Ａｕｇｕｓｔ  １９−２３、２０１２）において開示されている。
【発明の概要】
【００１６】
式（Ｉ）の（Ｒ）−２−メチル−ピペラジン誘導体が、ｈＥＲＧ  Ｑ−ＰａｔｃｈアッセイにおいてＱＴ延長のリスクの軽減を示す、驚くほど改善されたプロファイルを有する有力なＣＸＣＲ３調節剤であることが、ここに見出された。これらの誘導体は、自己免疫疾患（例えば、関節リウマチ、多発性硬化症、炎症性腸疾患、全身性エリテマトーデス、ループス腎炎、間質性膀胱炎、セリアック病）、炎症性障害（例えば、喘息、ＣＯＰＤ、アテローム性動脈硬化、心筋炎、サルコイドーシス）、移植拒絶、線維症（例えば、肝硬変）、神経変性及び神経細胞死を伴う状態（例えば、アルツハイマー病、ハンチントン舞踏病）並びに癌を含む、ＣＸＣＲ３系を介してもたらされ又は持続する疾患の治療に有用かもしれない。
【００１７】
１）  第１の態様において、本発明は式（Ｉ）の化合物及びそのような化合物の塩（特に薬学的に許容される塩）に関する：
【化１】
0006595003.tif 000002
式中、
Ｒ１は、（Ｃ１−４）アルキル、（Ｃ１−２）アルコキシ−（Ｃ１−２）アルキル、ヒドロキシ−（Ｃ１−４）アルキル又は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２を表し；
Ｒ２は、（Ｃ３−６）シクロアルキル、（Ｃ１−４）アルコキシ、（Ｃ３−６）シクロアルコキシ又は（Ｃ１−２）フルオロアルキルを表す。
【００１８】
いかなる疑義をも避けるために、式（Ｉ）の化合物は、ピペラジン環の不斉炭素原子において（Ｒ）−配置である。
【００１９】
ここに記載される定義は、態様１）〜２３）のいずれか１つに定義されるような式（Ｉ）の化合物に対して一律に適用されるものであり、特段の定義によってより広い又はより狭い定義が与えられない限り本明細書及び請求項を通じて準用される。当然ながら、ある用語の定義又は好ましい定義が、ここに定義されるいずれか又は他のすべての用語のいずれか又は好ましい定義におけるそれぞれの用語を、独立して（及びそれらと共に）定義し置き換えるものであってよい。
【００２０】
態様１）〜２３）のいずれか１つに定義する式（Ｉ）の化合物は、１又は２以上の不斉炭素原子などの、１又は２以上のキラル又は不斉中心を含んでいてもよい。従って、式（Ｉ）の化合物は、立体異性体の混合物として、又は立体異性体が富化されている状態又は好ましくは純粋な立体異性体として存在してもよい。立体異性体の混合物は当業者に知られた方法で分離してもよい。
【００２１】
「富化（ｅｎｒｉｃｈｅｄ）」という用語は、例えば、エナンチオマーに関連して使用される場合、本発明に関しては特に、それぞれのエナンチオマーが、それぞれ他のエナンチオマーに対する比（適宜、純度に準用）で、少なくとも７０：３０、特に少なくとも９０：１０（適宜、７０％／９０％の純度に準用）で存在することを意味するものと解される。好ましくは、この用語は、本質的に純粋な各エナンチオマーを意味する。「本質的に」という用語は、例えば「本質的に純粋な」等の用語中で使用される場合、本発明に関しては特に、それぞれの立体異性体／組成物／化合物等の少なくとも９０、特に少なくとも９５、そしてとりわけ少なくとも９９重量パーセントが、それぞれ、純粋な立体異性体／組成物／化合物等であることを意味するものと解される。
【００２２】
「アルキル」という用語は、単独で使用される場合も、組み合わせて使用される場合も、１〜４個の炭素原子を含む、直鎖又は分枝鎖の飽和炭化水素鎖を意味する。「（Ｃｘ−ｙ）アルキル」（ｘ及びｙは、それぞれ整数である。）という用語は、ｘ〜ｙ個の炭素原子を含む、前記部分で定義したアルキル基を意味する。例えば、（Ｃ１−４）アルキル基は、１〜４個の炭素原子を含む。（Ｃ１−４）アルキル基の例は、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ．−ブチル及びｔｅｒｔ．−ブチルである。（Ｃ１−２）アルキル基の例は、メチル及びエチルである。「Ｒ１」が「（Ｃ１−４）アルキル」を表す場合には、この用語は、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソ−プロピル、ｎ−ブチル、イソ−ブチル、ｓｅｃ．−ブチル及びｔｅｒｔ．−ブチル；好ましくはメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソ−プロピル及びｔｅｒｔ．−ブチル；より好ましくはエチル及びイソ−プロピルを表す。
【００２３】
「アルコキシ」という用語は、単独で使用される場合も、組み合わせて使用される場合も、アルキル基が前記部分で定義した通りである、アルキル−Ｏ−基を意味する。「（Ｃｘ−ｙ）アルコキシ」（ｘ及びｙは、それぞれ整数である。）という用語は、ｘ〜ｙ個の炭素原子を含む、前記部分で定義したアルコキシ基を意味する。例えば、（Ｃ１−４）アルコキシ基は、「（Ｃ１−４）アルキル」という用語が前記の意味を有する、式（Ｃ１−４）アルキル−Ｏ−の基を意味する。（Ｃ１−４）アルコキシ基の例は、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキシ、ｎ−ブトキシ、イソブトキシ、ｓｅｃ．−ブトキシ及びｔｅｒｔ．−ブトキシである。（Ｃ１−２）アルコキシ基の例は、メトキシ及びエトキシである。Ｒ２が「（Ｃ１−４）アルコキシ」を表す場合には、この用語は、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソ−プロポキシ、ｎ−ブトキシ、イソ−ブトキシ、ｓｅｃ．−ブトキシ及びｔｅｒｔ．−ブトキシ、好ましくはエトキシを表す。
【００２４】
「ヒドロキシ−（Ｃ１−Ｃ４）アルキル」という用語は、単独で使用される場合も、又は組み合わせて使用される場合も、１〜４個の炭素原子を含み、１個の水素原子がヒドロキシで置換された、前記部分で定義したアルキル基を意味する。当該基の例は、ヒドロキシ−メチル、１−ヒドロキシ−エチル、２−ヒドロキシ−エチル、１−ヒドロキシ−プロパ−１−イル、２−ヒドロキシ−プロパ−１−イル、３−ヒドロキシ−プロパ−１−イル、１−ヒドロキシ−プロパ−２−イル、２−ヒドロキシ−プロパ−２−イル、１−ヒドロキシ−ブタ−１−イル、２−ヒドロキシ−ブタ−１−イル、３−ヒドロキシ−ブタ−１−イル、４−ヒドロキシ−ブタ−１−イル、１−ヒドロキシ−ブタ−２−イル、２−ヒドロキシ−ブタ−２−イル、３−ヒドロキシ−ブタ−２−イル、４−ヒドロキシ−ブタ−２−イル、１−ヒドロキシ−２−メチル−プロパ−１−イル、２−ヒドロキシ−２−メチル−プロパ−１−イル、３−ヒドロキシ−２−メチル−プロパ−１−イル及び２−ヒドロキシ−１，１−ジメチル−エタ−１−イルである。「Ｒ１」が「ヒドロキシ−（Ｃ１−４）アルキル」を表す場合には、この用語は、ヒドロキシ−メチル、１−ヒドロキシ−エチル、２−ヒドロキシ−エチル、１−ヒドロキシ−プロパー１−イル、２−ヒドロキシ−プロパー１−イル、３−ヒドロキシ−プロパー１−イル、１−ヒドロキシ−プロパー２−イル、２−ヒドロキシ−プロパー２−イル、１−ヒドロキシ−ブタ−１−イル、２−ヒドロキシ−ブタ−１−イル、３−ヒドロキシ−ブタ−１−イル、４−ヒドロキシ−ブタ−１−イル、１−ヒドロキシ−ブタ−２−イル、２−ヒドロキシ−ブタ−２−イル、３−ヒドロキシ−ブタ−２−イル、４−ヒドロキシ−ブタ−２−イル、１−ヒドロキシ−２−メチル−プロパー１−イル、２−ヒドロキシ−２−メチル−プロパー１−イル、３−ヒドロキシ−２−メチル−プロパー１−イル及び２−ヒドロキシ−１，１−ジメチル−エタ−１−イルを表す。好ましくは、ヒドロキシ−メチル、１−ヒドロキシ−エチル及び２−ヒドロキシ−プロパー２−イルであり、より好ましくは１−ヒドロキシ−エチルである。
【００２５】
「（Ｃｘａ−ｙａ）アルコキシ−（Ｃｘ−ｙ）アルキル」（ｘ、ｘａ、ｙ及びｙａは、それぞれ整数である。）という用語は、ｘ〜ｙ個の炭素原子を含む、前記部分で定義した
アルキル基であって、１個の水素原子が、ｘａ〜ｙａ個の炭素原子を含む、前記部分で定義した（Ｃｘａ−ｙａ）アルコキシ基に置き換えられている、上記アルキル基を意味する。例えば、「（Ｃ１−２）アルコキシ−（Ｃ１−２）アルキル基」は、１又は２個の炭素原子を含む、前記部分で定義した（Ｃ１−２）アルキル基であって、１個の水素原子が、１又は２個の炭素原子を含む、前記部分で定義した（Ｃ１−２）アルコキシに置き換えられている、上記（Ｃ１−２）アルキル基を意味する。（Ｃ１−２）アルコキシ−（Ｃ１−２）アルキル基の例は、メトキシ−メチル、１−メトキシ−エチル、２−メトキシ−エチル、エトキシ−メチル、１−エトキシ−エチル及び２−エトキシ−エチルである。「Ｒ１」が「（Ｃ１−２）アルコキシ−（Ｃ１−２）アルキル」を表す場合には、この用語は、メトキシ−メチル、１−メトキシ−エチル、２−メトキシ−エチル、エトキシ−メチル、１−エトキシ−エチル及び２−エトキシ−エチル、好ましくはメトキシ−メチルを意味する。
【００２６】
「フルオロアルキル」という用語は、１又は２以上の（場合によってはすべての）水素原子がフッ素で置き換えられた、１又は２個の炭素原子を含む、前記部分で定義したアルキル基を意味する。「（Ｃｘ−ｙ）フルオロアルキル」（ｘ及びｙは、それぞれ整数である。）という用語は、ｘ〜ｙ個の炭素原子を含む、前記部分で定義したフルオロアルキル基を意味する。例えば、（Ｃ１−２）フルオロアルキル基は、１又は２個の炭素原子を含み、１〜５個の水素原子がフッ素で置き換えられている。（Ｃ１−２）フルオロアルキル基の代表的な例としては、フルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、１−フルオロエチル、１，１−ジフルオロエチル、２−フルオロエチル、２，２−ジフルオロエチル及び２，２，２−トリフルオロエチルが挙げられる。Ｒ２が「（Ｃ１−２）フルオロアルキル」を表す場合には、この用語は、好ましくはフルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、１−フルオロエチル、１，１−ジフルオロエチル、２−フルオロエチル、２，２−ジフルオロエチル及び２，２，２−トリフルオロエチル、より好ましくはトリフルオロメチルを表す。
【００２７】
「シクロアルキル」という用語は、単独で使用される場合も、組み合わせて使用される場合も、３から６個の炭素原子を含む飽和炭素環を意味する。「（Ｃｘ−ｙ）シクロアルキル」（ｘ及びｙはそれぞれ整数である。）という用語は、ｘ〜ｙ個の炭素原子を含む、前記部分で定義したシクロアルキル基を意味する。例えば、（Ｃ３−６）シクロアルキル基は、３〜６個の炭素原子を含む。（Ｃ３−６）シクロアルキル基の例は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル及びシクロヘキシルである。「Ｒ２」が「（Ｃ３−６）シクロアルキル」を表す場合には、この用語は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル及びシクロヘキシル、好ましくはシクロプロピルを表す。
【００２８】
「シクロアルコキシ」という用語は、単独で使用される場合も、組み合わせて使用される場合も、シクロアルキル基が前記部分で定義した通りである、シクロアルキル−Ｏ−基を意味する。「（Ｃｘ−ｙ）シクロアルコキシ」（ｘ及びｙは、それぞれ整数である。）という用語は、ｘ〜ｙ個の炭素原子を含む、前記部分で定義したシクロアルコキシ基を意味する。例えば、（Ｃ３−６）シクロアルコキシ基は、「（Ｃ３−６）シクロアルキル」という用語が前記の意味を有する、式（Ｃ３−６）シクロアルキル−Ｏ−の基を意味する。（Ｃ３−６）シクロアルコキシ基の例は、シクロプロピルオキシ、シクロブチルオキシ、シクロペンチルオキシ及びシクロヘキシルオキシである。Ｒ２が「（Ｃ３−６）シクロアルコキシ」を表す場合には、この用語は、シクロプロピルオキシ、シクロブチルオキシ、シクロペンチルオキシ及びシクロヘキシルオキシ、好ましくはシクロブチルオキシを表す。
【００２９】
２）  本発明のさらなる態様は、
Ｒ１が、（Ｃ１−４）アルキル、（Ｃ１−２）アルコキシ−（Ｃ１−２）アルキル又はヒ
ドロキシ−（Ｃ１−４）アルキルを表し；
Ｒ２が、（Ｃ３−６）シクロアルキル、（Ｃ１−４）アルコキシ又は（Ｃ１−２）フルオロアルキルを表す；
態様１）に従う式（Ｉ）の化合物及びそのような化合物の塩（特に、薬学的に許容される塩）に関する。
【００３０】
３）  本発明のさらなる態様は、
Ｒ１が（Ｃ１−４）アルキルを表し；
Ｒ２が、（Ｃ３−６）シクロアルキル、（Ｃ１−４）アルコキシ又は（Ｃ１−２）フルオロアルキルを表す；
態様１）に従う式（Ｉ）の化合物及びそのような化合物の塩（特に、薬学的に許容される塩）に関する。
【００３１】
４）  本発明のさらなる態様は、
Ｒ１が、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソ−プロピル、ｔｅｒｔ．−ブチル、メトキシ−メチル、ヒドロキシ−メチル、１−ヒドロキシ−エチル、２−ヒドロキシ−プロパー２−イル又は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２を表し；
Ｒ２が、シクロプロピル、エトキシ、シクロブチルオキシ又はトリフルオロメチルを表す；
態様１）に従う式（Ｉ）の化合物及びそのような化合物の塩（特に、薬学的に許容される塩）に関する。
【００３２】
５）  本発明のさらなる態様は、
Ｒ１が、エチル、ｎ−プロピル、イソ−プロピル、ｔｅｒｔ．−ブチル、メトキシ−メチル又は１−ヒドロキシ−エチルを表し；
Ｒ２が、シクロプロピル、エトキシ又はトリフルオロメチルを表す；
態様１）に従う式（Ｉ）の化合物及びそのような化合物の塩（特に、薬学的に許容される塩）に関する。
【００３３】
６）  本発明のさらなる態様は、
Ｒ１が、エチル、ｎ−プロピル、イソ−プロピル又はｔｅｒｔ．−ブチルを表し；
Ｒ２が、シクロプロピル、エトキシ又はトリフルオロメチルを表す；
態様１）に従う式（Ｉ）の化合物及びそのような化合物の塩（特に、薬学的に許容される塩）に関する。
【００３４】
７）  本発明のさらなる態様は、
Ｒ１が、（Ｃ１−４）アルキル又は（Ｃ１−２）アルコキシ−（Ｃ１−２）アルキルを表し；
Ｒ２が（Ｃ３−６）シクロアルキルを表す；
態様１）に従う式（Ｉ）の化合物及びそのような化合物の塩（特に、薬学的に許容される塩）に関する。
【００３５】
８）  本発明のさらなる態様は、
Ｒ１が、エチル、イソ−プロピル又はｔｅｒｔ．−ブチルを表し；
Ｒ２がシクロプロピルを表す；
態様１）に従う式（Ｉ）の化合物及びそのような化合物の塩（特に、薬学的に許容される塩）に関する。
【００３６】
９）  本発明のさらなる態様は、
Ｒ１が、（Ｃ１−４）アルキル又は（Ｃ１−２）アルコキシ−（Ｃ１−２）アルキルを表
し；
Ｒ２が（Ｃ１−４）アルコキシを表す；
態様１）に従う式（Ｉ）の化合物及びそのような化合物の塩（特に、薬学的に許容される塩）に関する。
【００３７】
１０）  本発明のさらなる態様は、
Ｒ１が、エチル、イソ−プロピル又はｔｅｒｔ．−ブチルを表し；
Ｒ２がエトキシを表す；
態様１）に従う式（Ｉ）の化合物及びそのような化合物の塩（特に、薬学的に許容される塩）に関する。
【００３８】
１１）  本発明のさらなる態様は、
Ｒ１が、（Ｃ１−４）アルキル、（Ｃ１−２）アルコキシ−（Ｃ１−２）アルキル、ヒドロキシ−（Ｃ１−４）アルキル又は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２を表し；
Ｒ２が（Ｃ１−２）フルオロアルキルを表す；
態様１）に従う式（Ｉ）の化合物及びそのような化合物の塩（特に、薬学的に許容される塩）に関する。
【００３９】
１２）  本発明のさらなる態様は、
Ｒ１が、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソ−プロピル、ｔｅｒｔ．−ブチル、メトキシ−メチル、ヒドロキシ−メチル、１−ヒドロキシ−エチル、２−ヒドロキシ−プロパー２−イル又は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２を表し；
Ｒ２がトリフルオロメチルを表す；
態様１）に従う式（Ｉ）の化合物及びそのような化合物の塩（特に、薬学的に許容される塩）に関する。
【００４０】
１３）  本発明のさらなる態様は、
Ｒ１が、エチル、ｎ−プロピル、イソ−プロピル、ｔｅｒｔ．−ブチル、メトキシ−メチル又は１−ヒドロキシ−エチルを表し；
Ｒ２がトリフルオロメチルを表す；
態様１）に従う式（Ｉ）の化合物及びそのような化合物の塩（特に、薬学的に許容される塩）に関する。
【００４１】
１４）  本発明のさらなる態様は、
Ｒ１が（Ｃ１−４）アルキルを表す；
態様１）、２）、７）、９）又は１１）のいずれか１つに従う式（Ｉ）の化合物及びそのような化合物の塩（特に、薬学的に許容される塩）に関する。
【００４２】
１５）  本発明のさらなる態様は、
Ｒ１が、エチル、ｎ−プロピル、イソ−プロピル又はｔｅｒｔ．−ブチルを表す；
態様１）〜５）、７）、９）又は１１）〜１３）のいずれか１つに従う式（Ｉ）の化合物及びそのような化合物の塩（特に、薬学的に許容される塩）に関する。
【００４３】
１６）  本発明のさらなる態様は、
Ｒ１が（Ｃ１−２）アルコキシ−（Ｃ１−２）アルキルを表す；
態様１）、２）、７）、９）又は１１）のいずれか１つに従う式（Ｉ）の化合物及びそのような化合物の塩（特に、薬学的に許容される塩）に関する。
【００４４】
１７）  本発明のさらなる態様は、
Ｒ１がヒドロキシ−（Ｃ１−４）アルキルを表す；
態様１）、２）又は１１）のいずれか１つに従う式（Ｉ）の化合物及びそのような化合物の塩（特に、薬学的に許容される塩）に関する。
【００４５】
１８）  本発明のさらなる態様は、
Ｒ２が（Ｃ３−６）シクロアルキルを表す；
態様１）、２）、３）又は１４）〜１７）のいずれか１つに従う式（Ｉ）の化合物及びそのような化合物の塩（特に、薬学的に許容される塩）に関する。
【００４６】
１９）  本発明のさらなる態様は、
Ｒ２が（Ｃ１−４）アルコキシを表す；
態様１）、２）、３）又は１４）〜１７）のいずれか１つに従う式（Ｉ）の化合物及びそのような化合物の塩（特に、薬学的に許容される塩）に関する。
【００４７】
２０）  本発明のさらなる態様は、
Ｒ２が（Ｃ３−６）シクロアルコキシを表す；
態様１）又は１４）〜１７）のいずれか１つに従う式（Ｉ）の化合物及びそのような化合物の塩（特に、薬学的に許容される塩）に関する。
【００４８】
２１）  本発明のさらなる態様は、
Ｒ２が（Ｃ１−２）フルオロアルキルを表す；
態様１）、２）、３）又は１４）〜１７）のいずれか１つに従う式（Ｉ）の化合物及びそのような化合物の塩（特に、薬学的に許容される塩）に関する。
【００４９】
２２）  態様１）に定義する式（Ｉ）の化合物の例は、下記の化合物からなる群より選択される：
１−｛（Ｒ）−４−［４−（２−エトキシ−ピリミジン−５−イル）−２−トリフルオロメチル−チアゾール−５−イル］−２−メチル−ピペラジン−１−イル｝−２−（３−イソプロピル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−エタノン；
１−｛（Ｒ）−４−［４−（２−エトキシ−ピリミジン−５−イル）−２−トリフルオロメチル−チアゾール−５−イル］−２−メチル−ピペラジン−１−イル｝−２−（３−エチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−エタノン；
２−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−１−｛（Ｒ）−４−［４−（２−エトキシ−ピリミジン−５−イル）−２−トリフルオロメチル−チアゾール−５−イル］−２−メチル−ピペラジン−１−イル｝−エタノン；
１−｛（Ｒ）−４−［４−（２−エトキシ−ピリミジン−５−イル）−２−トリフルオロメチル−チアゾール−５−イル］−２−メチル−ピペラジン−１−イル｝−２−（３−メトキシメチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−エタノン；
１−（２−｛（Ｒ）−２−メチル−４−［２−トリフルオロメチル−４−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−５−イル）−チアゾール−５−イル］−ピペラジン−１−イル｝−２−オキソ−エチル）−１Ｈ−［１，２，４］トリアゾール−３−カルボン酸  アミド；
２−（３−エチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−１−｛（Ｒ）−２−メチル−４−［２−トリフルオロメチル−４−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−５−イル）−チアゾール−５−イル］−ピペラジン−１−イル｝−エタノン；
２−（３−イソプロピル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−１−｛（Ｒ）−２−メチル−４−［２−トリフルオロメチル−４−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−５−イル）−チアゾール−５−イル］−ピペラジン−１−イル｝−エタノン；
２−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−１−｛（Ｒ）−２−メチル−４−［２−トリフルオロメチル−４−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−５−イル）−チアゾール−５−イル］−ピペラジン−１−イル｝−エタノン；
２−（３−メトキシメチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−１−｛（Ｒ）−２−メチル−４−［２−トリフルオロメチル−４−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−５−イル）−チアゾール−５−イル］−ピペラジン−１−イル｝−エタノン；
２−（３−ヒドロキシメチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−１−｛（Ｒ）−２−メチル−４−［２−トリフルオロメチル−４−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−５−イル）−チアゾール−５−イル］−ピペラジン−１−イル｝−エタノン；
１−｛（Ｒ）−２−メチル−４−［２−トリフルオロメチル−４−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−５−イル）−チアゾール−５−イル］−ピペラジン−１−イル｝−２−（３−プロピル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−エタノン；
２−［３−（１−ヒドロキシ−エチル）−［１，２，４］トリアゾール−１−イル］−１−｛（Ｒ）−２−メチル−４−［２−トリフルオロメチル−４−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−５−イル）−チアゾール−５−イル］−ピペラジン−１−イル｝−エタノン；
２−［３−（１−ヒドロキシ−１−メチル−エチル）−［１，２，４］トリアゾール−１−イル］−１−｛（Ｒ）−２−メチル−４−［２−トリフルオロメチル−４−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−５−イル）−チアゾール−５−イル］−ピペラジン−１−イル｝−エタノン；
１−｛（Ｒ）−４−［４−（２−シクロブトキシ−ピリミジン−５−イル）−２−トリフルオロメチル−チアゾール−５−イル］−２−メチル−ピペラジン−１−イル｝−２−（３−イソプロピル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−エタノン；
１−｛（Ｒ）−４−［４−（２−シクロプロピル−ピリミジン−５−イル）−２−トリフルオロメチル−チアゾール−５−イル］−２−メチル−ピペラジン−１−イル｝−２−（３−エチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−エタノン；
１−｛（Ｒ）−４−［４−（２−シクロプロピル−ピリミジン−５−イル）−２−トリフルオロメチル−チアゾール−５−イル］−２−メチル−ピペラジン−１−イル｝−２−（３−イソプロピル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−エタノン；
２−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−１−｛（Ｒ）−４−［４−（２−シクロプロピル−ピリミジン−５−イル）−２−トリフルオロメチル−チアゾール−５−イル］−２−メチル−ピペラジン−１−イル｝−エタノン；
１−｛（Ｒ）−４−［４−（２−シクロプロピル−ピリミジン−５−イル）−２−トリフルオロメチル−チアゾール−５−イル］−２−メチル−ピペラジン−１−イル｝−２−（３−メトキシメチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−エタノン；
１−｛（Ｒ）−４−［４−（２−エトキシ−ピリミジン−５−イル）−２−トリフルオロメチル−チアゾール−５−イル］−２−メチル−ピペラジン−１−イル｝−２−（３−メチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−エタノン；
２−（３−メチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−１−｛（Ｒ）−２−メチル−４−［２−トリフルオロメチル−４−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−５−イル）−チアゾール−５−イル］−ピペラジン−１−イル｝−エタノン；及び
１−｛（Ｒ）−４−［４−（２−シクロプロピル−ピリミジン−５−イル）−２−トリフルオロメチル−チアゾール−５−イル］−２−メチル−ピペラジン−１−イル｝−２−（３−メチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−エタノン；
又はそのような化合物の塩（特に、薬学的に許容される塩）。
【００５０】
２３）  従って、本発明は、態様１）に定義する式（Ｉ）の化合物及びそのような化合物であって、それぞれの従属関係に従って態様２）〜２２）のいずれか１つの特徴によってさらに限定される化合物；それらの薬学的に許容される塩；並びに、特に、自己免疫異常、炎症性疾患、感染症、移植拒絶、線維症、神経変性障害及び癌等の、特にＣＸＣＲ３受容体の機能不全又はＣＸＣＲ３を介してシグナル伝達するリガンドの機能不全に関連する障害の治療における、医薬としてのそのような化合物の使用に関する。式（Ｉ）の化合物に関して特に下記の態様が可能であり、意図されており、そして個々の形態としてここ
に具体的に開示される：
１、２＋１、３＋１、４＋１、５＋１、６＋１、７＋１、８＋１、９＋１、１０＋１、１１＋１、１２＋１、１３＋１、１４＋１、１４＋２＋１、１４＋７＋１、１４＋９＋１、１４＋１１＋１、１５＋１、１５＋２＋１、１５＋３＋１、１５＋４＋１、１５＋５＋１、１５＋７＋１、１５＋９＋１、１５＋１１＋１、１５＋１２＋１、１５＋１３＋１、１６＋１、１６＋２＋１、１６＋７＋１、１６＋９＋１、１６＋１１＋１、１７＋１、１７＋２＋１、１７＋１１＋１、１８＋１、１８＋２＋１、１８＋３＋１、１８＋１４＋１、１８＋１４＋２＋１、１８＋１４＋７＋１、１８＋１４＋９＋１、１８＋１４＋１１＋１、１８＋１５＋１、１８＋１５＋２＋１、１８＋１５＋３＋１、１８＋１５＋４＋１、１８＋１５＋５＋１、１８＋１５＋７＋１、１８＋１５＋９＋１、１８＋１５＋１１＋１、１８＋１５＋１２＋１、１８＋１５＋１３＋１、１８＋１６＋１、１８＋１６＋２＋１、１８＋１６＋７＋１、１８＋１６＋９＋１、１８＋１６＋１１＋１、１８＋１７＋１、１８＋１７＋２＋１、１８＋１７＋１１＋１、１９＋１、１９＋２＋１、１９＋３＋１、１９＋１４＋１、１９＋１４＋２＋１、１９＋１４＋７＋１、１９＋１４＋９＋１、１９＋１４＋１１＋１、１９＋１５＋１、１９＋１５＋２＋１、１９＋１５＋３＋１、１９＋１５＋４＋１、１９＋１５＋５＋１、１９＋１５＋７＋１、１９＋１５＋９＋１、１９＋１５＋１１＋１、１９＋１５＋１２＋１、１９＋１５＋１３＋１、１９＋１６＋１、１９＋１６＋２＋１、１９＋１６＋７＋１、１９＋１６＋９＋１、１９＋１６＋１１＋１、１９＋１７＋１、１９＋１７＋２＋１、１９＋１７＋１１＋１、２０＋１、２０＋１４＋１、２０＋１４＋２＋１、２０＋１４＋７＋１、２０＋１４＋９＋１、２０＋１４＋１１＋１、２０＋１５＋１、２０＋１５＋２＋１、２０＋１５＋３＋１、２０＋１５＋４＋１、２０＋１５＋５＋１、２０＋１５＋７＋１、２０＋１５＋９＋１、２０＋１５＋１１＋１、２０＋１５＋１２＋１、２０＋１５＋１３＋１、２０＋１６＋１、２０＋１６＋２＋１、２０＋１６＋７＋１、２０＋１６＋９＋１、２０＋１６＋１１＋１、２０＋１７＋１、２０＋１７＋２＋１、２０＋１７＋１１＋１、２１＋１、２１＋２＋１、２１＋３＋１、２１＋１４＋１、２１＋１４＋２＋１、２１＋１４＋７＋１、２１＋１４＋９＋１、２１＋１４＋１１＋１、２１＋１５＋１、２１＋１５＋２＋１、２１＋１５＋３＋１、２１＋１５＋４＋１、２１＋１５＋５＋１、２１＋１５＋７＋１、２１＋１５＋９＋１、２１＋１５＋１１＋１、２１＋１５＋１２＋１、２１＋１５＋１３＋１、２１＋１６＋１、２１＋１６＋２＋１、２１＋１６＋７＋１、２１＋１６＋９＋１、２１＋１６＋１１＋１、２１＋１７＋１、２１＋１７＋２＋１、２１＋１７＋１１＋１、２２＋１及び２３＋１；
上記の表中、数字は上記の番号に応じた態様を意味し、「＋」は他の態様への従属関係を表す。種々の態様は読点により個々に分けられている。換言すると、例えば「１４＋２＋１」は、態様１４）であって、態様２）に従属し、態様１）に従属することを意味し、すなわち、態様「１４＋２＋１」は、態様２）及び１４）の特徴によりさらに限定された態様１）の化合物に相当する。
【００５１】
化合物、塩、医薬組成物、疾患等について複数形が使用される場合は、単数の化合物、塩、医薬組成物、疾患等をも意味することが意図されている。
【００５２】
態様１）〜２３）のいずれか１つに定義する式（Ｉ）の化合物に対するいかなる言及も、適切かつ好都合なように、そのような化合物の塩（そして特に薬学的に許容される塩）をも指すものと解される。
【００５３】
「薬学的に許容される塩」という用語は、対象化合物の所望の生物活性を保持し、かつ最小の望ましくない毒性作用を示す塩を意味する。そのよう塩としては、対象化合物中の塩基性基及び／又は酸性基の存在に応じた、無機又は有機の酸及び／又は塩基付加塩が挙げられる。参考としては、例えば、「Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ．Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ、Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｕｓｅ．」、Ｐ．Ｈｅｉｎｒｉｃｈ  Ｓｔａｈｌ、Ｃａｍｉｌｌｅ  Ｇ．Ｗｅｒｍｕｔｈ（Ｅｄｓ．
）、Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ、２００８；及び「Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ
ａｎｄ  Ｃｏ−ｃｒｙｓｔａｌｓ」、Ｊｏｈａｎ  Ｗｏｕｔｅｒｓ  ａｎｄ  Ｌｕｃ  Ｑｕｅｒｅ（Ｅｄｓ．）、ＲＳＣ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ、２０１２を参照されたい。
【００５４】
本発明はまた、同位体標識された、特に２Ｈ（デューテリウム）標識された式（Ｉ）の化合物をも含み、当該同位体標識された化合物は、１又は２以上の原子が、同じ原子番号を有するが、自然において通常見出される原子量と異なる原子量を有する原子によってそれぞれ置き換えられていることを除いては、式（Ｉ）の化合物と同一である。同位体標識された、特に２Ｈ（デューテリウム）標識された式（Ｉ）の化合物、及びその塩は、本発明の範囲に含まれる。水素をより重い同位体２Ｈ（デューテリウム）に置換することにより代謝安定性が増大するため、例えば、ｉｎ−ｖｉｖｏでの半減期が長くなり、あるいは、必要用量を減らすことができ、又は、チトクロームＰ４５０酵素の阻害が軽減され得るため、例えば、安全性プロファイルが改善される。本発明の１つの態様においては、式（Ｉ）の化合物は同位体標識されていないか、又は、それらは１若しくは２以上のデューテリウム原子によってのみ標識されている。副態様においては、式（Ｉ）の化合物は全く同位体標識されていない。同位体標識された式（Ｉ）の化合物は、適切な試薬又は出発物質の適宜な同位体種を用いることを除いては、下記の方法と同様に製造してもよい。
【００５５】
数値範囲を記述するために「間」という単語が使用される場合は常に、示された範囲の末端の点は明示的にその範囲に含まれると解される。これは、例えば、温度範囲が４０℃から８０℃の間であると記述される場合、末端の点である４０℃と８０℃はその範囲に含まれることを意味し、あるいは、可変数が１から４の間の整数であると定義される場合、可変数は整数の１、２、３又は４であることを意味する。
【００５６】
温度に関して使用されていない場合には、数値「Ｘ」の前に置かれる「約」（あるいは「付近」）という用語は、本出願において、Ｘ−１０％ＸからＸ＋１０％Ｘの間、好ましくはＸ−５％ＸからＸ＋５％Ｘの間を表す。温度の場合には、温度「Ｙ」の前に置かれる「約」（あるいは「付近」）という用語は、この出願において、Ｙ−１０℃からＹ＋１０℃の間、好ましくはＹ−５℃からＹ＋５℃の間を表す。さらに、本明細書で使用される「室温」という用語は、約２５℃の温度を表す。
態様１）〜２３）のいずれか１つに定義する式（Ｉ）の化合物及びこれらの薬学的に許容される塩は、医薬として、例えば、（特に経口等の）経腸又は（局所的適用又は吸入を含む）非経口投与のための医薬組成物の形態で使用することができる。
【００５７】
医薬組成物の製造は、いずれの当業者にもよく知られた様式で（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ、Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ、２１ｓｔ  Ｅｄｉｔｉｏｎ（２００５）、Ｐａｒｔ５、「Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｍａｎｕｆａｃｔｕ環」［Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｉｌｋｉｎｓにより出版］参照。）、既述の式（Ｉ）の化合物又はこれらの薬学的に許容される塩を、任意にその他の治療的に有益な物質と組み合わせて、適切な無毒の不活性な治療上許容される固体又は液体の担体材料及び必要に応じて、通常の薬学的アジュバントと共に、製剤投与形態とすることにより遂行することができる。
【００５８】
本発明はまた、薬学的に活性な量の態様１）〜２３）のいずれか１つに定義する式（Ｉ）の化合物を対象に投与することを含む、本明細書に記載した疾患又は障害の予防又は治療方法にも関する。
【００５９】
本発明の好ましい態様において、投与量は、１ｍｇから１０００ｍｇ／日の間、特に５ｍｇから５００ｍｇ／日の間、さらに２５ｍｇから４００ｍｇ／日の間、とりわけ５０ｍｇから２００ｍｇ／日の間に含まれる。
【００６０】
いかなる疑義をも避けるために、化合物がある疾患の予防又は治療について有用であると記載されている場合には、そのような化合物は、同様に当該疾患の予防又は治療のための医薬の製造における使用に適している。
【００６１】
本発明の別の側面は、薬学的に活性な量の、態様１）〜２３）の１つに定義する式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩を患者に投与することを含む、患者における下記の疾患又は障害の予防又は治療方法に関する。
【００６２】
態様１）〜２３）のいずれか１つに定義する式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩は、ＣＸＣＲ３受容体の機能不全又はＣＸＣＲ３を介してシグナル伝達するリガンドの機能不全に関連する障害の予防又は治療に有用である。
【００６３】
ＣＸＣＲ３受容体又はそのリガンドの機能不全に関連するそのような障害は、ヒトＣＸＣＲ３受容体の調節剤が必要とされる疾患又は障害である。上記の障害は特に、自己免疫異常、炎症性疾患、感染症、移植拒絶、線維症、神経変性障害及び癌を含むものと定義してもよい。
【００６４】
自己免疫異常は、関節リウマチ（ＲＡ）；多発性硬化症（ＭＳ）；炎症性腸疾患（ＩＢＤ；クローン病及び潰瘍性大腸炎を含む。）；全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）；乾癬；乾癬性関節炎；ループス腎炎；間質性膀胱炎；セリアック病；抗リン脂質抗体症候群；橋本甲状腺炎等の甲状腺炎；リンパ球性甲状腺炎；重症筋無力症；Ｉ型糖尿病；ブドウ膜炎；上強膜炎；強膜炎；川崎病、網膜ブドウ膜炎；後部ブドウ膜炎；ベーチェット病関連ブドウ膜炎；ブドウ膜髄膜炎症候群；アレルギー性脳脊髄炎；鼻炎、結膜炎、皮膚炎等のアトピー性疾患；並びにリウマチ熱及び感染後糸球体腎炎を含む感染後自己免疫疾患を含むものと定義してもよい。
【００６５】
炎症性疾患は、喘息；ＣＯＰＤ；アテローム性動脈硬化；心筋炎；眼球乾燥症候群（シェーグレン眼球乾燥症候群を含む。）；ミオパチー（炎症性ミオパチーを含む。）；サルコイドーシス；特にサルコイドーシスに伴う肺動脈性肺高血圧症；及び肥満を含むものと定義してもよい。
【００６６】
感染症は、マラリア、脳マラリア、らい病、結核、インフルエンザ、トキソプラズマ、デング熱、Ｂ及びＣ型肝炎、単純ヘルペス、リーシュマニア、クラミジア・トラコマチス、ライム病、ウエストナイルウイルス等の様々な感染因子によって引き起こされる疾患及びその合併症を含むものと定義してもよい。
【００６７】
移植拒絶は、腎臓、肝臓、心臓、肺、膵臓、角膜及び皮膚等の移植された器官の拒絶；移植片対宿主病；及び慢性同種移植片血管症を含むものと定義してもよい。
【００６８】
線維症は、肝硬変（原発性胆汁性肝硬変（ＰＢＣ）及び自己免疫性肝炎を含む。）、特発性肺線維症、腎線維症、心内膜心筋線維症、全身性硬化症及び関節線維症を含むものと定義してもよい。
【００６９】
神経変性障害は、多発性硬化症（再発寛解型多発性硬化症及び進行性多発性硬化症を含む。）、アルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン舞踏病、ＨＩＶ関連認知症、プリオン介在神経変性、てんかん、卒中、脳虚血、脳性麻痺、視神経脊髄炎、臨床的に孤発した症候群（ｃｌｉｎｉｃａｌｌｙ  ｉｓｏｌａｔｅｄ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ）、アルパース病、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、老年認知症、レビー小体型認知症、レット症候群、脊髄外傷、外傷性脳損傷、三叉神経痛、慢性炎症性脱髄性多発ニューロパチー、ギラ
ン−バレー症候群、ナルコレプシー、舌咽神経痛、軽度の認知機能低下、認知機能低下、脊髄性筋萎縮症及び脳マラリア等の神経変性及び神経細胞死が関与する状態を含むものと定義してもよい。
【００７０】
癌は、大腸癌、直腸癌、乳癌、肺癌、非小細胞性肺癌、前立腺癌、食道癌、胃癌、肝臓癌、胆管癌、脾臓癌、腎臓癌、膀胱癌、子宮癌、卵巣癌、子宮頚部癌、精巣癌、甲状腺癌、膵臓癌、脳腫瘍、血腫、塩基好性腺腫、プロラクチノーマ、高プロラクチン血症、腺腫、子宮体癌、結腸癌；慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）等のすべての種類の癌；及び特にこれらの癌の転移拡散を含むものと定義してもよい。
【００７１】
特に、態様１）〜２３）のいずれか１つに従う式（Ｉ）の化合物、又はその薬学的に許容される塩は、疾患及び障害の下記の群の１つ、幾つか又はすべてから選択される疾患の予防又は治療に適している；
１）  関節リウマチ（ＲＡ）；多発性硬化症（ＭＳ）；炎症性腸疾患（ＩＢＤ；クローン病及び潰瘍性大腸炎を含む）；全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）；乾癬；ループス腎炎；及びＩ型糖尿病から選択される自己免疫異常；
２）  ＣＯＰＤ；眼球乾燥疾患（シェーグレン眼球乾燥症候群を含む。）；ミオパチー（炎症性ミオパチーを含む。）；及びサルコイドーシスから選択される炎症性疾患；
３）  移植片対宿主病から選択される移植拒絶；
４）  肝硬変（原発性胆汁性肝硬変（ＰＢＣ）及び自己免疫性肝炎を含む。）から選択される線維症；及び
５）  ギラン−バレー症候群から選択される神経変性障害。
【００７２】
式（Ｉ）の化合物の製造
本発明のさらなる側面は、式（Ｉ）の化合物の製造方法である。本発明の式（Ｉ）の化合物は、市販の又は周知の出発物質から、実験の部に記載された方法により；それに類似する方法により、又は以下に概説した一般的反応シークエンスに従って製造することができ、Ｒ１及びＲ２は、式（Ｉ）について定義した通りである。本明細書で使用される他の略語は、明示的に定義されるか、又は実験の部において定義される通りである。場合によっては、包括的な基、Ｒ１及びＲ２は、下記のスキームに図示した製法に適合しないため、保護基（ＰＧ）の使用が必要となるだろう。保護基の使用は、当技術分野において周知である（例えば、「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ、Ｐ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ、Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ、１９９９参照）。この目的のために、そのような保護基が必要に応じて適切に導入されているものと仮定する。得られた化合物は、それ自体知られた方法により、その塩、特に薬学的に許容される塩に変換してもよい。
【００７３】
一般的製造ルート：
【化２】
0006595003.tif 000003
式（Ｉ）の化合物は中間体（１）から製造することができ、中間体（１）は標準的条件下（例えば、ＭｅＯＨ中のａｑ．ＮａＯＨ）でけん化され、構造（２）の化合物を与える（スキーム１）。構造（２）の化合物のカルボン酸基は、ＴＨＦ中、ＲＴにて、（ジアセトキシヨード）ベンゼン及びＬｉＢｒを用いて、対応するブロミン（３）に変換される。Ｒが水素又は（Ｃ１−４）アルキルを表す構造（４）のカップリングパートナーを用い、Ｎａ２ＣＯ３等の適宜な塩基、Ｐｄ（ＰＰｈ３）２Ｃｌ２等の適宜なパラジウム触媒及びＭｅＣＮ等の適宜な溶媒を用いるなどのＳｕｚｕｋｉ反応の標準的条件を用い、好ましくは８０℃付近の温度にて加熱して、Ｓｕｚｕｋｉカップリングを行うことができる。次いで、得られた中間体（５）のＢｏｃ保護基は、酸性条件下、好ましくはＨＣｌを用いて、ジオキサン等の適宜な溶媒中、約ＲＴの温度にて、開裂することができ、構造（６）の化合物を与える。式（Ｉ）の化合物は、ＤＩＰＥＡ又はＮＥｔ３等の適宜な塩基の存在下、ＤＣＭ又はＤＭＦ等の適宜な溶媒中、好ましくは約ＲＴの温度にて、ＨＡＴＵ等の標準的なペプチドカップリング法を用いて、カルボン酸誘導体（７）とのアミドカップリングにより、最終工程において得ることができる。
【００７４】
【化３】
0006595003.tif 000004
構造（１）の化合物は、スキーム２に概略する反応シークエンスに従って合成することができる。市販の２−（トリフルオロメチル）チアゾール−４−カルボン酸を、ＴＨＦ中、−７８℃付近の温度にて、ｎ−ブチルリチウム及び臭素で処理する。得られた臭化化合物は、ＭｅＯＨ中、濃硫酸を用い、７０℃付近の温度にて加熱して、エステル化することができる。ＤＩＰＥＡ等の適宜な塩基の存在下、ＭｅＣＮ等の適宜な溶媒中、８０℃付近の温度にて、市販のピペラジン誘導体（８）を用いた求核芳香族置換により、構造（１）の化合物が得られる。
【００７５】
式（７）の化合物は、市販されているか、又はスキーム３に示す経路に従って合成することができる。
【００７６】
【化４】
0006595003.tif 000005
構造（９）のトリアゾールは、Ｃｓ２ＣＯ３等の塩基の存在下、ＭｅＣＮ等の適宜な溶媒中、ＲＴ付近の温度にて、Ｘが臭素等の脱離基であり、ＰＧが、酸官能基に適切な保護基（例えばベンジル）である式Ｘ−ＣＨ２−ＣＯＯ（ＰＧ）の酢酸誘導体を用いてアルキル化することができる。
【００７７】
中間体（１０）の脱保護、例えば、Ｐｄ／Ｃを触媒として、ＥｔＯＨを溶媒として用いた、ＲＴ付近の温度における、Ｈ２下でのベンジル脱保護により、構造（７）の化合物が得られる。その他の適宜な酸官能基保護基並びに保護及び脱保護の方法は、当業者に周知である（特に、「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  ｏｒｇａｎｉｃ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」、Ｇｒｅｅｎｅ  Ｔ．Ｗ．及びＷｕｔｓ  Ｐ．Ｇ．Ｍ．、Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ、１９９９を参照。）。
【００７８】
構造（４）の化合物は、市販されているか、又は、各５−ブロモ−ピリミジン誘導体を、−７８℃付近の温度にて、ＴＨＦ及びトルエン中、トリイソプロピルボレート及びｎ−ＢｕＬｉと反応させる等、当業者に既知の方法と同様に製造することができる。
【００７９】
式（Ｉ）の化合物は、Ｒ１−位の置換基を別の置換基Ｒ１に相互変換することにより、他の式（Ｉ）の化合物又はそれらの類似体から得てもよい。例えば、Ｒ１が臭素を表す式（Ｉ）の類似体は、（ｉ）  Ｐｄ（ＰＰｈ３）２Ｃｌ２等のパラジウム触媒の存在下、各（Ｃ２−４）アルケニルボロン酸エステル誘導体（例えば、イソプロペニルボロン酸ピナコールエステル）を用いたＳｕｚｕｋｉ反応、及び（ｉｉ）  例えば、ＭｅＯＨ等の溶媒中、Ｐｄ／Ｃの存在下、水素を用いた水素化により、Ｒ１が（Ｃ２−４）アルキルを表す式（Ｉ）の化合物に変換してもよい。Ｒ１が−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２を表す式（Ｉ）の化合物は、ＤＣＭ等の溶媒中、ｃｏｎｃ．Ｈ２ＳＯ４を用いて、各ニトリルの加水分解により製造してもよい。さらに、Ｒ１がヒドロキシ−（Ｃ１−４）アルキルを表す式（Ｉ）の化合物は、Ｒ１がメトキシ−（Ｃ１−４）アルキルを表す各化合物から、ＤＣＭ等の溶媒中、Ｂ
Ｂｒ３を用いて脱メチル化することにより、又は、Ｒ１が−Ｃ（Ｏ）−（Ｃ１−３）アルキルを表す各ケトンから、ＮａＢＨ４を用いた還元により得てもよい。
【００８０】
式（Ｉ）の化合物がエナンチオマーの混合物の形態で得られる場合には常に、エナンチオマーを、当業者に知られた方法、例えばジアステレオマー塩の形成及び分離、又はＤａｉｃｅｌ  ＣｈｉｒａｌＰａｋ  ＩＣ（５μｍ）カラム等のキラル固定相上のＨＰＬＣを用いて分離することができる。キラルＨＰＬＣの典型的な条件は、０．８から１６ｍＬ／分の流速における、溶出液Ａ（ＥｔＯＨ又はｉＰｒＯＨ。ＮＥｔ３又はＤＥＡ等のアミンの存在下又は非存在下）及び溶出液Ｂ（ヘキサン又はＭｅＣＮ）の無勾配混合物である。
【００８１】
実験の部
（この項において、及び明細書の上記の部分において使用される）略語：
ａｑ．                      水溶液
Ｂｏｃ                      ｔｅｒｔ．−ブチルオキシカルボニル
ＢＳＡ                      ウシ血清アルブミン
Ｂｕ                        ブチル
ＣＣ                        シリカゲルカラムクロマトグラフィー
ＣＨＯ                      チャイニーズハムスター卵巣
ＣＶ                        カラム容積
ＤＣＭ                      ジクロロメタン
ＤＥＡ                      ジエチルアミン
ＤＩＰＥＡ                  Ｎ−エチルジイソプロピルアミン
ＤＭＦ                      ジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯ                    ジメチルスルフォキシド
ＥＡ                        酢酸エチル
ＥＤＴＡ                    エチレンジアミン四酢酸
ＥＧＴＡ                    エチレングリコール四酢酸
Ｅｔ                        エチル
ＦＢＳ                      ウシ胎児血清
ＦＬＩＰＲ                  蛍光イメージングプレートリーダー
Ｆｌｕｏ−４−ＡＭ          ２−｛［２−（２−｛５−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］−２−メチルフェノキシ｝エトキシ）−４−（２，７−ジフルオロ−６−ヒドロキシ−３−オキソ−３Ｈ−キサンテン−９−イル）フェニル］（カルボキシメチル）アミノ｝酢酸
Ｇ４１８                  （２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−５−アミノ−６−［（１Ｒ，２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，６Ｓ）−４，６−ジアミノ−３−［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，５−ジヒドロキシ−５−メチル−４−メチルアミノキサン−２−イル］オキシ−２−ヒドロキシシクロヘキシル］オキシ−２−（１−ヒドロキシエチル）オキサン−３，４−ジオール
ｈ                          時間
ＨＡＴＵ                    ２−（７−アザ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウム
Ｈｅｐ                      ヘプタン
ＨＥＰＥＳ                  ４−（２−ヒドロキシエチル）−ピペラジン−１−エタンスルホン酸
ＨＶ                        高真空
ＨＰＬＣ                    高速液体クロマトグラフィー
ｉＰｒ                      イソプロピル
ＬＣ                        液体クロマトグラフィー
ｍ                          多重項
Ｍ                          モル濃度［ｍｏｌ  Ｌ−１］
Ｍｅ                        メチル
ＭＳ                        質量分析法
ｍｉｎ                      分
ＮＭＲ                      核磁気共鳴分光法
ｏｒｇ．                    有機
ＰＢＳ                      リン酸緩衝生理食塩水
Ｐｄ／Ｃ                    パラジウム炭素
ＰＧ                        保護基
Ｐｈ                        フェニル
Ｐｒｅｐ                    分取用
ｒｐｍ                      分当たりの回転数
ＲＴ                        室温
ｓ                          一重項
Ｓａｔ．                    飽和
ＴＦＡ                      トリフルオロ酢酸
ＴＨＦ                      テトラヒドロフラン
ＴＬＣ                      薄層クロマトグラフィー
ｔＲ                        保持時間
ＵＰＬＣ                    超高速液体クロマトグラフィー
【００８２】
Ｉ−化学
以下の実施例は、本発明の生物学的に活性な化合物の製造を説明するが、その範囲を限定するものではまったくない。
【００８３】
全般：すべての温度は摂氏温度（℃）で示す。別段の記載が無い限り、反応は、アルゴン雰囲気下、ＲＴで起こり、マグネティックスターラーを備えた、火炎乾燥した丸底スラスコ中にて行われる。
【００８４】
使用した定性分析法
ＬＣ−ＭＳの保持時間は、下記の溶出条件を用いて得た：
Ｉ）  ＬＣ−ＭＳ（Ａ）：
Ｚｏｒｂａｘ  ＳＢ−Ａｑ、３．５μｍ、４．６ｘ５０ｍｍカラム、４０℃に温度制御。２種類の溶出溶媒は下記の通りであった：溶媒Ａ＝水＋０．０４％ＴＦＡ；溶媒Ｂ＝ＭｅＣＮ。溶出液の流速は４．５ｍｌ／ｍｉｎであり、溶出混合液の混合割合の特徴を、溶出の開始からの時間ｔの関数として、下記の表に要約する（２つの連続した時点の間では直線的勾配を採用する）：
【表１】
0006595003.tif 000006
【００８５】
ＩＩ）  ＬＣ−ＭＳ（Ｂ）：
Ａｃｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣ  Ｃｏｌｕｍｎ  Ｍａｎａｇｅｒ内にて温度制御された（６０℃）、ＷａｔｅｒｓのＡｃｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣ  ＣＳＨ  Ｃ１８  １．７μｍ、２．１ｘ５０ｍｍ  ＩＤカラムを使用した。２種類の溶出溶媒は下記の通りであった：溶媒Ａ＝水＋０．０５％ギ酸；溶媒Ｂ＝ＭｅＣＮ＋０．０４５％ギ酸。溶出液の流速は１ｍｌ／ｍ
ｉｎであり、溶出混合液の混合割合の特徴を、溶出の開始からの時間ｔの関数として、下記の表に要約する（２つの連続した時点の間では直線的勾配を採用する）：
【表２】
0006595003.tif 000007
【００８６】
化合物の純度と特徴は、ＮＭＲ分光法（Ｂｒｕｋｅｒ  Ａｖａｎｃｅ  ＩＩ  ４００ＭＨｚ  Ｕｌｔｒａｓｈｉｅｌｄ（登録商標）又はＢｒｕｋｅｒ  Ａｓｃｅｎｄ（登録商標）  ５００（５ｍｍ  ＤＣＨ  ｃｒｙｏｐｒｏｂｅを装着））、１Ｈ（４００ＭＨｚ又は５００ＭＨｚ）、１９Ｆ（３７６ＭＨｚ）によりさらに確認した。化学シフトは、テトラメチルシラン（ＴＭＳ）又はトリクロロフルオロメタンに対するｐｐｍ（百万分の一部）で報告し、多重度はｓ（一重項）又はｍ（多重項）として示す。
【００８７】
分取用ＬＣ−ＭＳによる精製は、下記の条件を用いて行った。
【００８８】
Ｉ）  分取用ＬＣ−ＭＳ（Ｉ）：
Ｘ−Ｂｒｉｄｇｅカラム（Ｗａｔｅｒｓ  Ｃ１８、１０μｍ  ＯＢＤ、３０ｘ７５ｍｍ）を使用した。２種類の溶出溶媒は下記の通りであった：溶媒Ａ＝水＋０．５％ＮＨ４ＯＨ（２５％）；溶媒Ｂ＝ＭｅＣＮ。溶出液の流速は７５ｍｌ／ｍｉｎであり、溶出混合液の混合割合の特徴を、溶出の開始からの時間ｔの関数として、下記の表に要約する（２つの連続した時点の間では直線的勾配を採用する）：
【表３】
0006595003.tif 000008
【００８９】
ＩＩ）  分取用ＬＣ−ＭＳ（ＩＩ）：
Ｘ−Ｂｒｉｄｇｅカラム（Ｗａｔｅｒｓ  Ｃ１８、１０μｍ  ＯＢＤ、３０ｘ７５ｍｍ）を使用した。２種類の溶出溶媒は下記の通りであった：溶媒Ａ＝水＋０．５％ＮＨ４ＯＨ（２５％）；溶媒Ｂ＝ＭｅＣＮ。溶出液の流速は７５ｍｌ／ｍｉｎであり、溶出混合液の混合割合の特徴を、溶出の開始からの時間ｔの関数として、下記の表に要約する（２つの連続した時点の間では直線的勾配を採用する）：
【表４】
0006595003.tif 000009
【００９０】
ＩＩＩ）  分取用ＬＣ−ＭＳ（ＩＩＩ）：
Ｘ−Ｂｒｉｄｇｅカラム（Ｗａｔｅｒｓ  Ｃ１８、１０μｍ  ＯＢＤ、３０ｘ７５ｍｍ）を使用した。２種類の溶出溶媒は下記の通りであった：溶媒Ａ＝水＋０．５％ギ酸；溶媒
Ｂ＝ＭｅＣＮ。溶出液の流速は７５ｍｌ／ｍｉｎであり、溶出混合液の混合割合の特徴を、溶出の開始からの時間ｔの関数として、下記の表に要約する（２つの連続した時点の間では直線的勾配を採用する）：
【表５】
0006595003.tif 000010
【００９１】
ＩＶ）  分取用ＬＣ−ＭＳ（ＩＶ）：
Ａｔｌａｎｔｉｓカラム（Ｗａｔｅｒｓ  Ｔ３、１０μｍ  ＯＢＤ、３０ｘ７５ｍｍ）を使用した。２種類の溶出溶媒は下記の通りであった：溶媒Ａ＝水＋０．５％ギ酸；溶媒Ｂ＝ＭｅＣＮ。溶出液の流速は７５ｍｌ／ｍｉｎであり、溶出混合液の混合割合の特徴を、溶出の開始からの時間ｔの関数として、下記の表に要約する（２つの連続した時点の間では直線的勾配を採用する）：
【表６】
0006595003.tif 000011
【００９２】
Ｖ）  分取用ＬＣ−ＭＳ（Ｖ）：
Ｘ−Ｂｒｉｄｇｅカラム（Ｗａｔｅｒｓ  Ｃ１８、１０μｍ  ＯＢＤ、３０ｘ７５ｍｍ）を使用した。２種類の溶出溶媒は下記の通りであった：溶媒Ａ＝水＋０．５％ＮＨ４ＯＨ（２５％）；溶媒Ｂ＝ＭｅＣＮ。溶出液の流速は７５ｍｌ／ｍｉｎであり、溶出混合液の混合割合の特徴を、溶出の開始からの時間ｔの関数として、下記の表に要約する（２つの連続した時点の間では直線的勾配を採用する）：
【表７】
0006595003.tif 000012
【００９３】
使用した分取用キラルＨＰＬＣ法：
分取用キラルＨＰＬＣによる精製は、下記の条件を用いて行った。
【００９４】
Ｉ）  分取用キラルＨＰＬＣ（Ｉ）：
ＣｈｉｒａｌＰａｋ  ＩＢカラム（５μｍ、２０ｘ２５０ｍｍ）を使用した。溶出溶媒は、Ｈｅｐ／ＥｔＯＨ  ６０／４０とし、９ｍｉｎ、４０ｍＬ／ｍｉｎの流速にて運転した。
【００９５】
ＩＩ）  分取用キラルＨＰＬＣ（ＩＩ）：
（Ｒ，Ｒ）  Ｗｈｅｌｋ−０１カラム（１０μｍ、５０ｘ２５０ｍｍ）を使用した。溶出溶媒は、Ｈｅｐ／ＥｔＯＨ  ７０／３０とし、１６．３ｍｉｎ、１００ｍＬ／ｍｉｎの流速にて運転した。
【００９６】
ＩＩＩ）  分取用キラルＨＰＬＣ（ＩＩＩ）：
ＣｈｉｒａｌＰａｋ  ＩＢカラム（５μｍ、３０ｘ２５０ｍｍ）を使用した。溶出溶媒は、Ｈｅｐ／ＥｔＯＨ  ５０／５０とし、８ｍｉｎ、３４ｍＬ／ｍｉｎの流速にて運転した。
【００９７】
ＩＶ）  分取用キラルＨＰＬＣ（ＩＶ）：
ＣｈｉｒａｌＰａｋ  ＩＢカラム（５μｍ、２０ｘ２５０ｍｍ）を使用した。溶出溶媒は、Ｈｅｐ／ＥｔＯＨ  ５０／５０、０．１％ＤＥＡとし、１８．７ｍｉｎ、１６ｍＬ／ｍｉｎの流速にて運転した。
【００９８】
Ｖ）  分取用キラルＨＰＬＣ（Ｖ）：
ＣｈｉｒａｌＰａｋ  ＩＢカラム（５μｍ、３０ｘ２５０ｍｍ）を使用した。溶出溶媒は、Ｈｅｐ／ＥｔＯＨ  ７０／３０とし、１１．８ｍｉｎ、３４ｍＬ／ｍｉｎの流速にて運転した。
【００９９】
ＶＩ）  分取用キラルＨＰＬＣ（ＶＩ）：
ＣｈｉｒａｌＰａｋ  ＯＺ−Ｈカラム（５μｍ、２０ｘ２５０ｍｍ）を使用した。溶出溶媒は、Ｈｅｐ／ＥｔＯＨ  ５０／５０、０．１％ＤＥＡとし、１１ｍｉｎ、１９ｍＬ／ｍｉｎの流速にて運転した。
【０１００】
実施例１：１−｛（Ｒ）−４−［４−（２−エトキシ−ピリミジン−５−イル）−２−トリフルオロメチル−チアゾール−５−イル］−２−メチル−ピペラジン−１−イル｝−２−（３−イソプロピル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−エタノン
１．１．    ５−ブロモ−２−トリフルオロメチル−チアゾール−４−カルボン酸
２−（トリフルオロメチル）チアゾール−４−カルボン酸（３．２ｇ）を無水ＴＨＦ（６０ｍＬ）中に溶解した−７８℃に冷却した溶液に、アルゴン下で、ｎ−ブチルリチウム（ヘキサン中１．６Ｍ、２１．３ｍＬ）を、内部温度が−６０℃を超えて上昇しないように、１５分に渡って滴下により添加した。次いで、Ｂｒ２（０．９２ｍＬ）をシクロヘキサン（８ｍＬ）中に溶解したものを、内部温度が−６０℃未満に保たれるよう滴下により添加した。得られた混合物を−７８℃にて２ｈ撹拌し、水（５０ｍＬ）を添加して注意深くクエンチした。クエン酸（１０％）をｐＨ＝２となるまで添加し、混合物をＥＡで抽出した。有機層を塩水（ｂｒｉｎｅ）で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、蒸発乾固させ、４．１５ｇの褐色の固体を得、これをさらに精製すること無く用いた。ＬＣ−ＭＳ（Ａ）：ｔＲ＝０．６７ｍｉｎ。Ｆ−ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）：−６３．５７ｐｐｍ（ｓ）。
【０１０１】
１．２．    ５−ブロモ−２−トリフルオロメチル−チアゾール−４−カルボン酸  メチルエステル
中間体１．１（１２ｇ）をＭｅＯＨ（１３０ｍＬ）中に溶解したものに、Ｈ２ＳＯ４（９６％、６．５ｍＬ）を添加し、混合物を７０℃にて３ｈ撹拌した。冷却後、反応混合物を飽和Ｎａ２ＣＯ３水溶液でクエンチし、溶媒の一部を蒸発させた。残渣をＤＣＭで希釈し、飽和Ｎａ２ＣＯ３水溶液（１ｘ）、水（１ｘ）及び塩水（１ｘ）で洗浄し、水相をＤＣＭ（２ｘ）で抽出した。有機層を合わせたものをＭｇＳＯ４上で乾燥し、ろ過し、蒸発させ、ＨＶ下で乾燥して、１２ｇの褐色の樹脂を得た。ＬＣ−ＭＳ（Ａ）：ｔＲ＝０．８３ｍｉｎ。Ｆ−ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）：−６３．５９ｐｐｍ（ｓ）。
【０１０２】
１．３．    （Ｒ）−４−（４−メトキシカルボニル−２−トリフルオロメチル−チアゾール−５−イル）−２−メチル−ピペラジン−１−カルボン酸  ｔｅｒｔ−ブチルエステル
中間体１．２（１０ｇ）をＭｅＣＮ（２５０ｍＬ）中に溶解したものに、（Ｒ）−１−Ｎ
−Ｂｏｃ−２−メチルピペラジン（７．１９ｇ）及びＤＩＰＥＡ（８．８５ｍＬ）を、ＲＴにて添加した。反応混合物を８０℃にて４３ｈ撹拌した。冷却後、反応混合物をＥＡで希釈し、水及び塩水で洗浄した。水層をＥＡで抽出した。有機層を合わせたものをＭｇＳＯ４上で乾燥し、ろ過し、蒸発乾固した。粗製物をＣＣ（Ｂｉｏｔａｇｅ、ＳＮＡＰ  ３４０ｇ、溶媒Ａ：Ｈｅｐ；溶媒Ｂ：ＥＡ；勾配（％Ｂ）：５ＣＶに渡って１０、５ＣＶに渡って１０から３０、５ＣＶに渡って３０）で精製して、９．１４ｇの黄色の樹脂を得た。ＬＣ−ＭＳ（Ａ）：ｔＲ＝０．９７ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：４１０．０。
【０１０３】
１．４．    （Ｒ）−４−（４−カルボキシ−２−トリフルオロメチル−チアゾール−５−イル）−２−メチル−ピペラジン−１−カルボン酸  ｔｅｒｔ−ブチルエステル
中間体１．３（４．２５ｇ）をＥｔＯＨ（４０ｍＬ）中に溶解したものに、１Ｍ  ＮａＯＨ（４０ｍＬ）をＲＴにて添加し、反応混合物を１ｈ２０撹拌した。溶媒を蒸発させ、残渣をクエン酸水溶液（１０％）の添加によりｐＨ＝２に酸性化した。水層をＤＣＭ（３ｘ）で抽出し、有機層を合わせたものをＮａ２ＳＯ４上で乾燥し、濃縮乾固し、４．１ｇをオレンジ色の固体として得た。ＬＣ−ＭＳ（Ａ）：ｔＲ＝０．８８ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：３９５．９。
【０１０４】
１．５．    （Ｒ）−４−（４−ブロモ−２−トリフルオロメチル−チアゾール−５−イル）−２−メチル−ピペラジン−１−カルボン酸  ｔｅｒｔ−ブチルエステル
中間体１．４（１０．１７ｇ）をＴＨＦ（２１０ｍＬ）中に溶解したものに、ＲＴにて、ＬｉＢｒ（２．２６ｇ）及び（ジアセトキシヨード）ベンゼン（８．４５ｇ）を添加した。得られた懸濁液をＲＴにて１ｈ３０撹拌した。反応混合物をＨ２Ｏで希釈し、ＤＣＭ（３ｘ）で抽出した。有機層を合わせたものをＭｇＳＯ４上で乾燥し、ろ過し、蒸発乾固した。粗製物をＣＣ（Ｂｉｏｔａｇｅ、ＳＮＡＰ  ３４０ｇカートリッジ、溶媒Ａ：Ｈｅｐ、溶媒Ｂ：ＥＡ；勾配（％Ｂ）：５ＣＶの間５、３ＣＶに渡って５から１０）で精製して、９．６３ｇを黄色の固体として得た。ＬＣ−ＭＳ（Ａ）：ｔＲ＝１．０４ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：４２９．２。
【０１０５】
１．６．    （Ｒ）−４−［４−（２−エトキシ−ピリミジン−５−イル）−２−トリフルオロメチル−チアゾール−５−イル］−２−メチル−ピペラジン−１−カルボン酸  ｔｅｒｔ−ブチルエステル
中間体１．５（１．６３ｇ）、２−エトキシピリミジン−５−ボロン酸（７７８ｍｇ）、Ｐｄ（ＰＰｈ３）２Ｃｌ２（１５２ｍｇ）、１Ｍ  Ｎａ２ＣＯ３（１２ｍＬ）をＭｅＣＮ（１２ｍＬ）中に混合したものを、アルゴン下、８０℃にて一晩激しく撹拌した。反応混合物をＲＴに冷却し、Ｈ２Ｏで希釈し、ＤＣＭ（３ｘ）で抽出した。有機層を合わせたものをＭｇＳＯ４上で乾燥し、ろ過し、蒸発乾固した。粗製物をＣＣ（Ｂｉｏｔａｇｅ、ＳＮＡＰ  ５０ｇカートリッジ、溶媒Ａ：Ｈｅｐ；溶媒Ｂ：ＥＡ；勾配（％Ｂ）：５ＣＶの間１０、５ＣＶに渡って１０から３０、３ＣＶの間３０）で精製して、１．３５ｇを薄黄色の樹脂として得た。ＬＣ−ＭＳ（Ａ）：ｔＲ＝１．０４ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：４７３．９。
【０１０６】
１．７．    ２−エトキシ−５−［５−（（Ｒ）−３−メチル−ピペラジン−１−イル）−２−トリフルオロメチル−チアゾール−４−イル］−ピリミジン
中間体１．６（１．３２ｇ）をＤＣＭ（４５ｍＬ）中に溶解したものに、ＴＦＡ（４．２８ｍＬ）を、ＲＴにて添加した。得られた混合物をＲＴにて一晩撹拌した。反応混合物を１Ｍ  ＮａＯＨで処理してｐＨ＝１４にし、ＤＣＭ（３ｘ）で抽出した。有機層を合わせたものをＭｇＳＯ４上で乾燥し、ろ過し、蒸発させ、ＨＶにて乾燥して、１．０１ｇをベージュ色の固体として得た。ＬＣ−ＭＳ（Ａ）：ｔＲ＝０．６４ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：３７４．０。
【０１０７】
１．８．    （３−ブロモ−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−アセテート、リチウム塩
エチル（３−ブロモ−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）アセテート（２００ｍｇ）をＴＨＦ（０．７５ｍＬ）及びＥｔＯＨ（０．７５ｍＬ）中に溶解したものに、Ｈ２Ｏ（０．５ｍＬ）、次いで、２Ｍ  ＬｉＯＨ（０．４７ｍＬ）を添加した。反応混合物をＲＴにて一晩撹拌し、蒸発させ、残渣をＨＶにて乾燥して、２０１ｍｇを白色の固体として得た。ＬＣ−ＭＳ（Ａ）：ｔＲ＝０．２９ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：２０５．９。
【０１０８】
１．９．    ２−（３−ブロモ−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−１−｛（Ｒ）−４−［４−（２−エトキシ−ピリミジン−５−イル）−２−トリフルオロメチル−チアゾール−５−イル］−２−メチル−ピペラジン−１−イル｝−エタノン
中間体１．７（１２０ｍｇ）、中間体１．８（７６ｍｇ）、ＨＡＴＵ（１５９ｍｇ）及びＤＩＰＥＡ（８２μＬ）をＤＣＭ（４ｍＬ）及びＤＭＦ（１ｍＬ）中に混合したものを、ＲＴにて一晩撹拌した。ＤＣＭを蒸発により除いて、粗製物を分取用ＬＣ−ＭＳ（ＩＶ）で精製して、１０２ｍｇを白色の固体として得た。ＬＣ−ＭＳ（Ａ）：ｔＲ＝０．９ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：５６１．０。
【０１０９】
１．１０．    １−｛（Ｒ）−４−［４−（２−エトキシ−ピリミジン−５−イル）−２−トリフルオロメチル−チアゾール−５−イル］−２−メチル−ピペラジン−１−イル｝−２−（３−イソプロペニル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−エタノン
中間体１．９（４０ｍｇ）、イソプロペニルボロン酸  ピナコールエステル（１５．１ｍｇ）、Ｐｄ（ＰＰｈ３）２Ｃｌ２（２．８ｍｇ）、１Ｍ  Ｎａ２ＣＯ３（１ｍＬ）をＭｅＣＮ（１ｍＬ）中に混合したものを、アルゴン下、８０℃にて、２ｈ激しく撹拌した。反応混合物をＲＴに冷却し、蒸発乾固した。粗製物を分取用ＬＣ−ＭＳ（Ｉ）で精製した。ＬＣ−ＭＳ（Ａ）：ｔＲ＝０．９ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：５２３．２。
【０１１０】
１．１１．    １−｛（Ｒ）−４−［４−（２−エトキシ−ピリミジン−５−イル）−２−トリフルオロメチル−チアゾール−５−イル］−２−メチル−ピペラジン−１−イル｝−２−（３−イソプロピル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−エタノン
中間体１．１０（ｇ）、ＭｅＯＨ（１ｍＬ）中Ｐｄ／Ｃ（１．５ｍｇ）を入れたフラスコを、アルゴンで３回、脱気／再充填し、次いで、水素で３回、脱気／再充填し、反応混合物をＲＴにて一晩撹拌した。反応混合物をシリンジフィルター上でろ過し、ろ液を蒸発乾固した。粗製物を分取用ＬＣ−ＭＳ（ＩＶ）で精製して、７ｍｇを白色の固体として得た。ＬＣ−ＭＳ（Ｂ）：ｔＲ＝１．１１ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：５２５．２。
【０１１１】
実施例２：１−｛（Ｒ）−４−［４−（２−エトキシ−ピリミジン−５−イル）−２−トリフルオロメチル−チアゾール−５−イル］−２−メチル−ピペラジン−１−イル｝−２−（３−エチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−エタノン
２．１．    （３−エチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−酢酸  ベンジルエステル
３−エチル−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール（２ｇ）をＭｅＣＮ（１２５ｍＬ）中に溶解したものに、Ｃｓ２ＣＯ３（６．３７ｇ）、次いで、ブロモ酢酸ベンジル（３．２３ｍＬ）を添加した。反応混合物をＲＴにて一晩撹拌し、蒸発乾固した。残渣をＥＡ中に取り、水で洗浄した。水層をＥＡ（２ｘ）で抽出し、有機層を合わせたものをＮａ２ＳＯ４上で乾燥し、ろ過し、蒸発乾固した。残渣をＣＣ（Ｂｉｏｔａｇｅ、ＳＮＡＰ  １００ｇカートリッジ、溶媒Ａ：ＤＣＭ；溶媒Ｂ：ＤＣＭ／ＭｅＯＨ  ８：２；勾配（％Ｂ）：４ＣＶの間１５、４ＣＶに渡って１５から１００、１ＣＶの間１００）で精製して、３．８９ｇを最初の溶出画分（２種のトリアゾール位置異性体の混合物）として、及び３０９ｍｇを２番目の溶出画分（（３−エチル−［１，２，４］トリアゾール−４−イル）−酢酸  ベンジルエステル）として得た。位置異性体の混合物を、分取用キラルＨＰＬＣ（Ｉ）で
精製した。最初の溶出画分：（５−エチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−酢酸  ベンジルエステル：１．３９ｇの黄色のオイル。ＬＣ−ＭＳ（Ａ）：ｔＲ＝０．７２ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：２４６．２。Ｒｏｅｓｙのシグナルは、ＣＨ２ＣＨ３の２．７２ｐｐｍとＣＨ２ＣＯ２の４．９３ｐｐｍとの間に見られた。
【０１１２】
２番目の溶出画分：（３−エチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−酢酸  ベンジルエステル：２．０８ｇの黄色の固体。ＬＣ−ＭＳ（Ａ）：ｔＲ＝０．７１ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：２４６．２。Ｒｏｅｓｙのシグナルは、ＣＨの８．０８ｐｐｍ（トリアゾール）とＣＨ２ＣＯ２の４．９６ｐｐｍとの間に見られた。
【０１１３】
２．２．    （３−エチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−酢酸
工程２．１の（３−エチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−酢酸  ベンジルエステル（２．０６ｇ）、ＥｔＯＨ（２０ｍＬ）中Ｐｄ／Ｃ（４４５ｍｇ）を入れたフラスコを、アルゴンで３回、脱気／再充填し、次いで、Ｈ２で３回、脱気／再充填し、反応混合物をＲＴにて９ｈ撹拌した。反応混合物をセライトのプラグ上でろ過し、ろ液を蒸発乾固し、１．２７ｇを白色の固体として得た。ＬＣ−ＭＳ（Ａ）：ｔＲ＝０．２５ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：１５６．２。
【０１１４】
２．３．    １−｛（Ｒ）−４−［４−（２−エトキシ−ピリミジン−５−イル）−２−トリフルオロメチル−チアゾール−５−イル］−２−メチル−ピペラジン−１−イル｝−２−（３−エチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−エタノン
中間体１．７（５０ｍｇ）、中間体２．２（２１ｍｇ）、ＨＡＴＵ（６６ｍｇ）及びＮＥｔ３（２８μＬ）をＤＣＭ（１．５ｍＬ）中に混合したものを、ＲＴにて一晩撹拌した。反応混合物を蒸発乾固し、粗製物を分取用ＬＣ−ＭＳ（Ｉ）で精製して、１５ｍｇを白色の固体として得た。ＬＣ−ＭＳ（Ｂ）：ｔＲ＝１．０５ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：５１１．２。
【０１１５】
実施例３：２−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−１−｛（Ｒ）−４−［４−（２−エトキシ−ピリミジン−５−イル）−２−トリフルオロメチル−チアゾール−５−イル］−２−メチル−ピペラジン−１−イル｝−エタノン
３．１．    （３−ｔｅｒｔ−ブチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−酢酸
ベンジルエステル
３−エチル−１Ｈ−１，２，４−トリアゾールを３−ｔｅｒｔ−ブチル−１Ｈ−１，２，４−トリアゾールで置き換えて、本化合物を、実施例２、工程２．１と同様の方法を用いて製造した。所望の化合物をＣＣの後に、単一の位置異性体として得た。ＬＣ−ＭＳ（Ａ）：ｔＲ＝０．７３ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：２７４．１。
【０１１６】
３．２．    （３−ｔｅｒｔ−ブチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−酢酸
（３−エチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−酢酸  ベンジルエステルを中間体３．１で置き換えて、本化合物を、実施例２、工程２．２と同様の方法を用いて製造した。ＬＣ−ＭＳ（Ａ）：ｔＲ＝０．３６ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：１８４．３。
【０１１７】
３．３．    ２−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−１−｛（Ｒ）−４−［４−（２−エトキシ−ピリミジン−５−イル）−２−トリフルオロメチル−チアゾール−５−イル］−２−メチル−ピペラジン−１−イル｝−エタノン
中間体２．２を中間体３．２で置き換えて、本化合物を、実施例２、工程２．３と同様の方法を用いて製造した。所望の化合物を分取用ＬＣ−ＭＳ（ＩＶ）で精製した。ＬＣ−ＭＳ（Ａ）：ｔＲ＝０．８４ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：５３９．１。
【０１１８】
実施例４：１−｛（Ｒ）−４−［４−（２−エトキシ−ピリミジン−５−イル）−２−トリフルオロメチル−チアゾール−５−イル］−２−メチル−ピペラジン−１−イル｝−２−（３−メトキシメチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−エタノン
４．１．    （３−メトキシメチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−酢酸  ベンジルエステル
３−エチル−１Ｈ−１，２，４−トリアゾールを３−（メトキシメチル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾールで置き換えて、本化合物を、実施例２、工程２．１と同様の方法を用いて製造した。粗製物を２種のＣＣ（１．  Ｂｉｏｔａｇｅ、ＳＮＡＰ  １０ｇカートリッジ、溶媒Ａ：ＤＣＭ；溶媒Ｂ：ＤＣＭ／ＭｅＯＨ  ８：２；勾配（％Ｂ）：７ＣＶの間５、３ＣＶに渡って５から１５、３ＣＶの間１５。２．  Ｂｉｏｔａｇｅ、ＳＮＡＰ  １０ｇカートリッジ、溶媒Ａ：ＤＣＭ；溶媒Ｂ：ＤＣＭ／ＭｅＯＨ  ８：２；勾配（％Ｂ）：５ＣＶの間５、３ＣＶに渡って５から１０、３ＣＶの間１０、３ＣＶに渡って１０から１５）で精製して、２種の位置異性体を得た。：
最初の溶出画分：（５−メトキシメチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−酢酸  ベンジルエステル：無色のオイル。ＬＣ−ＭＳ（Ａ）：ｔＲ＝０．７１ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：２６２．２。
【０１１９】
２番目の溶出画分：（３−メトキシメチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−酢酸  ベンジルエステル：無色のオイル。ＬＣ−ＭＳ（Ａ）：ｔＲ＝０．６７ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：２６２．１。Ｒｏｅｓｙのシグナルは、ＣＨ（トリアゾール）の８．１７ｐｐｍとＮＣＨ２ＣＯ２の５．０１ｐｐｍとの間に見られた。
【０１２０】
４．２．    （３−メトキシメチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−酢酸（３−エチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−酢酸  ベンジルエステルを工程４．１の（３−メトキシメチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−酢酸  ベンジルエステルで置き換えて、本化合物を、実施例２、工程２．２と同様の方法を用いて製造した。ＬＣ−ＭＳ（Ａ）：ｔＲ＝０．２４ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：１７２．０。
【０１２１】
４．３．    １−｛（Ｒ）−４−［４−（２−エトキシ−ピリミジン−５−イル）−２−トリフルオロメチル−チアゾール−５−イル］−２−メチル−ピペラジン−１−イル｝−２−（３−メトキシメチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−エタノン
中間体２．２を中間体４．２で置き換えて、本化合物を、実施例２、工程２．３と同様の方法を用いて製造した。所望の化合物を分取用ＬＣ−ＭＳ（ＩＶ）で精製した。ＬＣ−ＭＳ（Ｂ）：ｔＲ＝１．０２ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：５２７．２。
【０１２２】
実施例５：１−（２−｛（Ｒ）−２−メチル−４−［２−トリフルオロメチル−４−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−５−イル）−チアゾール−５−イル］−ピペラジン−１−イル｝−２−オキソ−エチル）−１Ｈ−［１，２，４］トリアゾール−３−カルボン酸  アミド
５．１．    （Ｒ）−２−メチル−４−［２−トリフルオロメチル−４−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−５−イル）−チアゾール−５−イル］−ピペラジン−１−カルボン酸  ｔｅｒｔ−ブチルエステル
２−エトキシピリミジン−５−ボロン酸を２−（トリフルオロメチル）ピリミジン−５−イル−ボロン酸で置き換えて、本化合物を、実施例１、工程１．６と同様の方法を用いて製造した。ＬＣ−ＭＳ（Ａ）：ｔＲ＝１．０６ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：４９７．９。
【０１２３】
５．２．    ５−［５−（（Ｒ）−３−メチル−ピペラジン−１−イル）−２−トリフルオロメチル−チアゾール−４−イル］−２−トリフルオロメチル−ピリミジン、塩酸塩として
中間体５．１（２．３ｇ）をＨＣｌ（１０．２ｍＬ、ジオキサン中４Ｍ）中に混合したも
のを、ＲＴにて３ｈ撹拌した。白色の懸濁液をろ過し、ろ液をＥｔ２Ｏで洗浄し、ＨＶ下で乾燥して、１．６ｇを白色の固体として得た。ＬＣ−ＭＳ（Ａ）：ｔＲ＝０．７２ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ＋＋ＣＨ３ＣＮ］＋：４３８．９。
【０１２４】
５．３．    １−（２−｛（Ｒ）−２−メチル−４−［２−トリフルオロメチル−４−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−５−イル）−チアゾール−５−イル］−ピペラジン−１−イル｝−２−オキソ−エチル）−１Ｈ−［１，２，４］トリアゾール−３−カルボニトリル
中間体２．２を２−（３−シアノ−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）酢酸で置き換えて、そして中間体１．７を中間体５．２で置き換えて、本化合物を、実施例２、工程２．３と同様の方法を用いて製造した。所望の化合物を分取用ＬＣ−ＭＳ（ＩＶ）で精製した。ＬＣ−ＭＳ（Ｂ）：ｔＲ＝１．１９ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：５３２．１。
【０１２５】
５．４．    １−（２−｛（Ｒ）−２−メチル−４−［２−トリフルオロメチル−４−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−５−イル）−チアゾール−５−イル］−ピペラジン−１−イル｝−２−オキソ−エチル）−１Ｈ−［１，２，４］トリアゾール−３−カルボン酸  アミド
中間体５．３（１８ｍｇ）をＤＣＭ（０．１ｍＬ）中に溶解したものに、濃Ｈ２ＳＯ４（０．１ｍＬ）を添加し、得られた乳液を４ｈ１５激しく撹拌した。反応混合物をＮＨ４ＯＨ（２５％）及び氷の混合物に少しずつ添加し、水層をＤＣＭ（５ｘ）で抽出した。有機層を合わせたものを塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥し、蒸発させ、ＨＶにて乾燥した。分取用ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ  ９５：５）による精製により、９ｍｇを白色の固体として得た。ＬＣ−ＭＳ（Ａ）：ｔＲ＝０．８２ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：５５０．０。
【０１２６】
実施例６：２−（３−エチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−１−｛（Ｒ）−２−メチル−４−［２−トリフルオロメチル−４−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−５−イル）−チアゾール−５−イル］−ピペラジン−１−イル｝−エタノン
中間体１．７を中間体５．２で置き換えて、本化合物を、実施例２、工程２．３と同様の方法を用いて製造した。所望の化合物を分取用ＬＣ−ＭＳ（ＩＶ）で精製した。ＬＣ−ＭＳ（Ａ）：ｔＲ＝０．８９ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：５３５．０。
【０１２７】
実施例７：２−（３−イソプロピル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−１−｛（Ｒ）−２−メチル−４−［２−トリフルオロメチル−４−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−５−イル）−チアゾール−５−イル］−ピペラジン−１−イル｝−エタノン
７．１．    （３−イソプロピル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−酢酸  ベンジルエステル及び（５−イソプロピル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−酢酸  ベンジルエステル
３−エチル−１Ｈ−１，２，４−トリアゾールを３−イソプロピル−１Ｈ−１，２，４−トリアゾールで置き換えて、本化合物を、実施例３、工程３．１と同様の方法を用いて製造した。位置異性体の混合物を分取用キラルＨＰＬＣ（ＩＩ）で精製した。最初の溶出画分：（３−イソプロピル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−酢酸  ベンジルエステル。ＬＣ−ＭＳ（Ａ）：ｔＲ＝０．７６ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：２６０．２。Ｒｏｅｓｙのシグナルは、ＣＨ２の４．９６ｐｐｍとＣＨ（トリアゾール）の８．０８ｐｐｍとの間に見られた。
【０１２８】
２番目の溶出画分：（５−イソプロピル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−酢酸  ベンジルエステル。ＬＣ−ＭＳ（Ａ）：ｔＲ＝０．７６ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：２６０．２。Ｒｏｅｓｙのシグナルは、ＣＨ２の４．９６ｐｐｍとＣＨ（イソプロピル）の２．９７ｐｐｍとの間に見られた。
【０１２９】
７．２．    （３−イソプロピル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−酢酸及び（５−イソプロピル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−酢酸
中間体２．１を工程７．１の（３−イソプロピル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−酢酸  ベンジルエステルで置き換えて、（３−イソプロピル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−酢酸を、実施例２、工程２．２と同様の方法を用いて製造した。ＬＣ−ＭＳ（Ａ）：ｔＲ＝０．３０ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：１７０．２。
【０１３０】
あるいは、工程７．１の位置異性体の混合物を用いて、（３−イソプロピル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−酢酸及び（５−イソプロピル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−酢酸の混合物を得た。
【０１３１】
７．３．    ２−（３−イソプロピル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−１−｛（Ｒ）−２−メチル−４−［２−トリフルオロメチル−４−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−５−イル）−チアゾール−５−イル］−ピペラジン−１−イル｝−エタノン
中間体１．７を中間体５．２で置き換えて、そして中間体２．２を工程７．２の位置異性体の混合物で置き換えて、本化合物を、実施例２、工程２．３と同様の方法を用いて製造した。所望の化合物を分取用ＬＣ−ＭＳ（ＩＶ）、次いで、分取用キラルＨＰＬＣ（ＶＩ）で精製した。分取用キラルＨＰＬＣの最初の溶出画分：２−（３−イソプロピル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−１−｛（Ｒ）−２−メチル−４−［２−トリフルオロメチル−４−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−５−イル）−チアゾール−５−イル］−ピペラジン−１−イル｝−エタノン。ＬＣ−ＭＳ（Ｂ）：ｔＲ＝１．１７ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：５４９．２。
【０１３２】
実施例８：２−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−１−｛（Ｒ）−２−メチル−４−［２−トリフルオロメチル−４−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−５−イル）−チアゾール−５−イル］−ピペラジン−１−イル｝−エタノン
中間体１．７を中間体５．２で置き換えて、そして中間体２．２を中間体３．２で置き換えて、本化合物を、実施例２、工程２．３と同様の方法を用いて製造した。所望の化合物を分取用ＬＣ−ＭＳ（ＩＩ）で精製した。ＬＣ−ＭＳ（Ｂ）：ｔＲ＝１．２３ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：５６３．２。
【０１３３】
実施例９：２−（３−メトキシメチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−１−｛（Ｒ）−２−メチル−４−［２−トリフルオロメチル−４−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−５−イル）−チアゾール−５−イル］−ピペラジン−１−イル｝−エタノン
中間体１．７を中間体５．２で置き換えて、そして中間体２．２を中間体４．２で置き換えて、本化合物を、実施例２、工程２．３と同様の方法を用いて製造した。所望の化合物を分取用ＬＣ−ＭＳ（Ｉ）で精製した。ＬＣ−ＭＳ（Ｂ）：ｔＲ＝１．０９ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：５５１．２。
【０１３４】
実施例１０：２−（３−ヒドロキシメチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−１−｛（Ｒ）−２−メチル−４−［２−トリフルオロメチル−４−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−５−イル）−チアゾール−５−イル］−ピペラジン−１−イル｝−エタノン
実施例９（２５ｍｇ）をＤＣＭ（１ｍＬ）中に溶解したものに、−３０℃にて、アルゴン下、ＢＢｒ３（５８μＬ；ＤＣＭ中１Ｍ）を添加し、得られた懸濁液を０℃にて３ｈ撹拌した。反応混合物をＨ２Ｏでクエンチし、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で希釈し、ＥＡ（３ｘ
）で抽出した。有機層を合わせたものを塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥し、ろ過し、蒸発乾固した。分取用ＬＣ−ＭＳ（ＩＶ）により、５ｍｇを白色の粉末として得た。ＬＣ−ＭＳ（Ａ）：ｔＲ＝０．８１ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：５３７．１。
【０１３５】
実施例１１：１−｛（Ｒ）−２−メチル−４−［２−トリフルオロメチル−４−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−５−イル）−チアゾール−５−イル］−ピペラジン−１−イル｝−２−（３−プロピル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−エタノン１１．１．    （３−プロピル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−酢酸  ベンジルエステル
３−エチル−１Ｈ−１，２，４−トリアゾールを３−プロピル−１Ｈ−１，２，４−トリアゾールで置き換えて、本化合物を、実施例２、工程２．１と同様の方法を用いて製造した。位置異性体の混合物を分取用キラルＨＰＬＣ（ＩＩＩ）で精製した。最初の溶出画分：（５−プロピル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−酢酸  ベンジルエステル。ＬＣ−ＭＳ（Ａ）：ｔＲ＝０．７７ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：２６０．１。Ｒｏｅｓｙのシグナルは、ＣＨ２ＣＯ２の４．９５ｐｐｍとＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３の２．６５ｐｐｍとの間に見られた。
【０１３６】
２番目の溶出画分：（３−プロピル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−酢酸
ベンジルエステル。ＬＣ−ＭＳ（Ａ）：ｔＲ＝０．７６ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：２６０．１。Ｒｏｅｓｙのシグナルは、ＣＨ２ＣＯ２の４．９６ｐｐｍとＣＨ（トリアゾール）の８．０８ｐｐｍとの間に見られた。
【０１３７】
１１．２．    （３−プロピル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−酢酸
中間体２．１を工程１１．１の（３−プロピル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−酢酸  ベンジルエステルで置き換えて、本化合物を、実施例２、工程２．２と同様の方法を用いて製造した。ＬＣ−ＭＳ（Ａ）：ｔＲ＝０．３５ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：１７０．４。
【０１３８】
１１．３．    １−｛（Ｒ）−２−メチル−４−［２−トリフルオロメチル−４−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−５−イル）−チアゾール−５−イル］−ピペラジン−１−イル｝−２−（３−プロピル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−エタノン
中間体１．７を中間体５．２で置き換えて、そして中間体２．２を中間体１１．２で置き換えて、本化合物を、実施例２、工程２．３と同様の方法を用いて製造した。所望の化合物を分取用ＬＣ−ＭＳ（Ｉ）で精製した。ＬＣ−ＭＳ（Ｂ）：ｔＲ＝１．１７ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：５４８．９。
【０１３９】
実施例１２：２−［３−（１−ヒドロキシ−エチル）−［１，２，４］トリアゾール−１−イル］−１−｛（Ｒ）−２−メチル−４−［２−トリフルオロメチル−４−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−５−イル）−チアゾール−５−イル］−ピペラジン−１−イル｝−エタノン
１２．１．    （３−アセチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−酢酸  ベンジルエステル
３−エチル−１Ｈ−１，２，４−トリアゾールを１−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル）エタノンで置き換えて、本化合物を、実施例２、工程２．１と同様の方法を用いて製造した。粗製物をＣＣ（Ｂｉｏｔａｇｅ、ＳＮＡＰ  １０ｇカートリッジ、溶媒Ａ：Ｈｅｐ；溶媒Ｂ：ＥＡ；勾配（％Ｂ）：４ＣＶの間３０、４ＣＶに渡って３０から７０、２ＣＶの間７０、２ＣＶに渡って７０から１００、２ＣＶの間１００）で精製して、所望のトリアゾール位置異性体を２番目の画分として得た。ＬＣ−ＭＳ（Ａ）：ｔＲ＝０．７ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：２６０．１。Ｒｏｅｓｙのシグナルは、ＣＨ（トリアゾール
）の８．２８ｐｐｍとＣＨ２の５．１ｐｐｍとの間に見られた。
【０１４０】
１２．２．    （３−アセチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−酢酸
中間体２．１を中間体１２．１で置き換えて、本化合物を、実施例２、工程２．２と同様の方法を用いて製造した。ＬＣ−ＭＳ（Ａ）：ｔＲ＝０．２５ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：１７０．０。
【０１４１】
１２．３．    ２−（３−アセチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−１−｛（Ｒ）−２−メチル−４−［２−トリフルオロメチル−４−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−５−イル）−チアゾール−５−イル］−ピペラジン−１−イル｝−エタノン
中間体１．７を中間体５．２で置き換えて、そして中間体２．２を中間体１２．２で置き換えて、本化合物を、実施例２、工程２．３と同様の方法を用いて製造した。所望の化合物を分取用ＬＣ−ＭＳ（Ｉ）で精製した。ＬＣ−ＭＳ（Ａ）：ｔＲ＝０．８９ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：５４９．０。
【０１４２】
１２．４．    ２−［３−（１−ヒドロキシ−エチル）−［１，２，４］トリアゾール−１−イル］−１−｛（Ｒ）−２−メチル−４−［２−トリフルオロメチル−４−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−５−イル）−チアゾール−５−イル］−ピペラジン−１−イル｝−エタノン
中間体１２．３（４０ｍｇ）をＴＨＦ（０．７５ｍＬ）及びＥｔＯＨ（０．２５ｍＬ）に溶解した淡黄色の溶液に、０℃にて、アルゴン下、ＮａＢＨ４（１．４ｍｇ）を添加し、反応混合物を０℃にて１ｈ３０撹拌した。次いで、ＮａＢＨ４の第２バッチ（０．７ｍｇ）を添加し、混合物をさらに２ｈ２０撹拌した。反応混合物を蒸発乾固した。残渣をＥＡに懸濁させ、飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液を添加し、ＲＴにて３０ｍｉｎ攪拌した。層を分離し、有機層を塩水（１ｘ）で洗浄した。水層をＥＡ（２ｘ）で再抽出した。有機層を合わせたものをＭｇＳＯ４上で乾燥し、ろ過し、蒸発乾固した。分取用ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ  ９５／５）による精製により、１０ｍｇを白色の固体として得た。ＬＣ−ＭＳ（Ａ）：ｔＲ＝０．８２ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：５５１．１。
【０１４３】
実施例１３：２−［３−（１−ヒドロキシ−１−メチル−エチル）−［１，２，４］トリアゾール−１−イル］−１−｛（Ｒ）−２−メチル−４−［２−トリフルオロメチル−４−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−５−イル）−チアゾール−５−イル］−ピペラジン−１−イル｝−エタノン
中間体１２．３（４０ｍｇ）をＥｔ２Ｏ（０．７５ｍＬ）中に懸濁したものに、−２０℃にて、ＭｅＭｇＢｒ（４８μＬ；Ｅｔ２Ｏ中３Ｍ）を添加し、得られた懸濁液をＲＴにて１ｈ３０撹拌した。反応混合物を飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液を加えてクエンチし、水層をＥＡ（３ｘ）で抽出した。有機層を合わせたものをＭｇＳＯ４上で乾燥し、ろ過し、蒸発乾固した。分取用ＬＣ−ＭＳ（ＩＶ）による精製により、７ｍｇを白色の粉末として得た。ＬＣ−ＭＳ（Ａ）：ｔＲ＝０．８４ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：５６５．１。
【０１４４】
実施例１４：１−｛（Ｒ）−４−［４−（２−シクロブトキシ−ピリミジン−５−イル）−２−トリフルオロメチル−チアゾール−５−イル］−２−メチル−ピペラジン−１−イル｝−２−（３−イソプロピル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−エタノン１４．１．    （Ｒ）−４−［４−（２−シクロブトキシ−ピリミジン−５−イル）−２−トリフルオロメチル−チアゾール−５−イル］−２−メチル−ピペラジン−１−カルボン酸  ｔｅｒｔ−ブチルエステル
２−エトキシピリミジン−５−ボロン酸を２−（シクロブトキシ）ピリミジン−５−ボロン酸で置き換えて、本化合物を、実施例１、工程１．６と同様の方法を用いて製造した。粗製物をＣＣの代わりに分取用ＬＣ−ＭＳ（ＩＩ）で精製した。ＬＣ−ＭＳ（Ａ）：ｔＲ
＝１．０８ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：５００．１。
【０１４５】
１４．２．    ２−シクロブトキシ−５−［５−（（Ｒ）−３−メチル−ピペラジン−１−イル）−２−トリフルオロメチル−チアゾール−４−イル］−ピリミジン、塩酸塩として
中間体５．１を中間体１４．１で置き換えて、本化合物を、実施例５、工程５．２と同様の方法を用いて製造した。ＬＣ−ＭＳ（Ａ）：ｔＲ＝０．７１ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：４００．１。
【０１４６】
１４．３．    １−｛（Ｒ）−４−［４−（２−シクロブトキシ−ピリミジン−５−イル）−２−トリフルオロメチル−チアゾール−５−イル］−２−メチル−ピペラジン−１−イル｝−２−（３−イソプロピル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−エタノン
中間体１．７を中間体１４．２で置き換えて、そして中間体２．２を工程７．２の位置異性体混合物で置き換えて、本化合物を、実施例２、工程２．３と同様の方法を用いて製造した。粗製物をＣＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ  ９７：３）、次いで、分取用ＬＣ−ＭＳ（Ｉ）及び分取用キラルＨＰＬＣ（ＩＶ）で精製した。
【０１４７】
２番目の溶出画分（分取用キラルＨＰＬＣ）：１−｛（Ｒ）−４−［４−（２−シクロブトキシ−ピリミジン−５−イル）−２−トリフルオロメチル−チアゾール−５−イル］−２−メチル−ピペラジン−１−イル｝−２−（３−イソプロピル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−エタノン：ＬＣ−ＭＳ（Ｂ）：ｔＲ＝１．２１ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：５５１．３。Ｒｏｅｓｙのシグナルは、ＣＨ２の５．１４−５．３７ｐｐｍとＣＨ（トリアゾール）の８．３６ｐｐｍとの間に見られた。
【０１４８】
実施例１５：１−｛（Ｒ）−４−［４−（２−シクロプロピル−ピリミジン−５−イル）−２−トリフルオロメチル−チアゾール−５−イル］−２−メチル−ピペラジン−１−イル｝−２−（３−エチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−エタノン
１５．１．    （Ｒ）−４−［４−（２−シクロプロピル−ピリミジン−５−イル）−２−トリフルオロメチル−チアゾール−５−イル］−２−メチル−ピペラジン−１−カルボン酸  ｔｅｒｔ−ブチルエステル
２−エトキシピリミジン−５−ボロン酸を２−シクロプロピル−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ピリミジンで置き換えて、本化合物を、実施例１、工程１．６と同様の方法を用いて製造した。ＬＣ−ＭＳ（Ａ）：ｔＲ＝１．０６ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：４７０．３。
【０１４９】
１５．２．    ２−シクロプロピル−５−［５−（（Ｒ）−３−メチル−ピペラジン−１−イル）−２−トリフルオロメチル−チアゾール−４−イル］−ピリミジン、塩酸塩として
中間体５．１を中間体１５．１で置き換えて、本化合物を、実施例５、工程５．２と同様の方法を用いて製造した。ＬＣ−ＭＳ（Ａ）：ｔＲ＝０．６ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：３７０．１。
【０１５０】
１５．３．    １−｛（Ｒ）−４−［４−（２−シクロプロピル−ピリミジン−５−イル）−２−トリフルオロメチル−チアゾール−５−イル］−２−メチル−ピペラジン−１−イル｝−２−（３−エチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−エタノン
中間体１．７を中間体１５．２で置き換えて、本化合物を、実施例２、工程２．３と同様の方法を用いて製造した。粗製物を分取用ＬＣ−ＭＳ（ＩＶ）で精製した。ＬＣ−ＭＳ（Ｂ）：ｔＲ＝１．０７ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：５０７．２。
【０１５１】
実施例１６：１−｛（Ｒ）−４−［４−（２−シクロプロピル−ピリミジン−５−イル）−２−トリフルオロメチル−チアゾール−５−イル］−２−メチル−ピペラジン−１−イル｝−２−（３−イソプロピル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−エタノン中間体１．７を中間体１５．２で置き換えて、そして中間体２．２を工程７．２の（３−イソプロピル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−酢酸で置き換えて、本化合物を、実施例２、工程２．３と同様の方法を用いて製造した。粗製物を分取用ＬＣ−ＭＳ（ＩＶ）で精製した。ＬＣ−ＭＳ（Ａ）：ｔＲ＝０．８ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：５２１．２。
【０１５２】
実施例１７：２−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−１−｛（Ｒ）−４−［４−（２−シクロプロピル−ピリミジン−５−イル）−２−トリフルオロメチル−チアゾール−５−イル］−２−メチル−ピペラジン−１−イル｝−エタノン
中間体１．７を中間体１５．２で置き換えて、そして中間体２．２を中間体３．２で置き換えて、本化合物を、実施例２、工程２．３と同様の方法を用いて製造した。粗製物を分取用ＬＣ−ＭＳ（ＩＶ）で精製した。ＬＣ−ＭＳ（Ｂ）：ｔＲ＝１．１８ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：５３５．２。
【０１５３】
実施例１８：１−｛（Ｒ）−４−［４−（２−シクロプロピル−ピリミジン−５−イル）−２−トリフルオロメチル−チアゾール−５−イル］−２−メチル−ピペラジン−１−イル｝−２−（３−メトキシメチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−エタノン
中間体１．７を中間体１５．２で置き換えて、そして中間体２．２を中間体４．２で置き換えて、本化合物を、実施例２、工程２．３と同様の方法を用いて製造した。粗製物を分取用ＬＣ−ＭＳ（ＩＶ）で精製した。ＬＣ−ＭＳ（Ａ）：ｔＲ＝０．７５ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：５２３．２。
【０１５４】
実施例１９：１−｛（Ｒ）−４−［４−（２−エトキシ−ピリミジン−５−イル）−２−トリフルオロメチル−チアゾール−５−イル］−２−メチル−ピペラジン−１−イル｝−２−（３−メチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−エタノン
１９．１．    （３−メチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−酢酸  ベンジルエステル
３−エチル−１Ｈ−１，２，４−トリアゾールを３−メチル−１Ｈ−１，２，４−トリアゾールで置き換えて、本化合物を、実施例２、工程２．１と同様の方法を用いて製造した。位置異性体の混合物を分取用キラルＨＰＬＣ（Ｖ）で精製した。最初の溶出画分：（５−メチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−酢酸  ベンジルエステル。ＬＣ−ＭＳ（Ａ）：ｔＲ＝０．６８ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：２３２．１６。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：７．８３（ｓ、１Ｈ）；７．４０−７．３３（ｍ、５Ｈ）；５．２３（ｓ、２Ｈ）；４．９３（ｓ、２Ｈ）；２．４３（ｓ、３Ｈ）。Ｒｏｅｓｙのシグナルは、ＣＨ２ＣＯ２の４．９３ｐｐｍとＣＨ３の２．４３ｐｐｍとの間に見られた。
【０１５５】
２番目の溶出画分：（３−メチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−酢酸  ベンジルエステル。ＬＣ−ＭＳ（Ａ）：ｔＲ＝０．６７ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：２３２．１６。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：８．０５（ｓ、１Ｈ）；７．４０−７．３０（ｍ、５Ｈ）；５．２３（ｓ、０．９５Ｈ、ＣＨ２）；４．９３−４．８８（３ｓ、２Ｈ）；２．４２（ｓ、３Ｈ）。Ｒｏｅｓｙのシグナルは、ＣＨ（トリアゾール）の８．０５ｐｐｍとＣＨ２ＣＯ２の４．９３−４．８８ｐｐｍとの間に見られた。
【０１５６】
１９．２．    （３−メチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−酢酸
中間体２．１を工程１９．１の（３−メチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）
−酢酸  ベンジルエステルで置き換えて、本化合物を、実施例２、工程２．２と同様の方法を用いて製造した。ＬＣ−ＭＳ（Ａ）：ｔＲ＝０．１８ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：１４２．２２。
【０１５７】
１９．３．    １−｛（Ｒ）−４−［４−（２−エトキシ−ピリミジン−５−イル）−２−トリフルオロメチル−チアゾール−５−イル］−２−メチル−ピペラジン−１−イル｝−２−（３−メチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−エタノン
中間体２．２を中間体１９．２で置き換えて、本化合物を、実施例２、工程２．３と同様の方法を用いて製造した。粗製物を分取用ＬＣ−ＭＳ（Ｖ）で精製した。ＬＣ−ＭＳ（Ａ）：ｔＲ＝０．８１ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：４９７．１。
【０１５８】
実施例２０：２−（３−メチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−１−｛（Ｒ）−２−メチル−４−［２−トリフルオロメチル−４−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−５−イル）−チアゾール−５−イル］−ピペラジン−１−イル｝−エタノン
中間体１．７を中間体５．２で置き換えて、そして中間体２．２を中間体１９．２で置き換えて、本化合物を、実施例２、工程２．３と同様の方法を用いて製造した。ＮＥｔ３の代わりにＤＩＰＥＡを用いた。粗製物を分取用ＬＣ−ＭＳ（ＩＩＩ）で精製した。ＬＣ−ＭＳ（Ａ）：ｔＲ＝０．８７ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：５２１．０。
【０１５９】
実施例２１：１−｛（Ｒ）−４−［４−（２−シクロプロピル−ピリミジン−５−イル）−２−トリフルオロメチル−チアゾール−５−イル］−２−メチル−ピペラジン−１−イル｝−２−（３−メチル−［１，２，４］トリアゾール−１−イル）−エタノン
中間体１．７を中間体１５．２で置き換えて、そして中間体２．２を中間体１９．２で置き換えて、本化合物を、実施例２、工程２．３と同様の方法を用いて製造した。粗製物を分取用ＬＣ−ＭＳ（Ｖ）で精製した。ＬＣ−ＭＳ（Ａ）：ｔＲ＝０．８１ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：４９３．１。
【０１６０】
ＩＩ．  生物学的アッセイ
Ａ）  ＦＬＩＰＲアッセイ：  化合物の生物活性を、Ｇタンパク質（Ｇアルファ（１６））に結合したヒトＣＸＣＲ３Ａ（ＧｅｎＢａｎｋ：ＡＹ２４２１２８）を発現する改変ＣＨＯ−Ｋ１細胞を用いて、蛍光イメージングプレートリーダー（ＦＬＩＰＲ：Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ）にて試験する。バイオアッセイの前日に、細胞を、１０％ＦＢＳ並びに組換え体に対する選択性を維持するためのＧ４１８及びハイグロマイシンを追加したＦ１２培地に播種する。バイオアッセイの当日に、細胞を洗浄し、５ｍＭのプロベネシドを含み、ｐＨ７．４の２０ｍＭ  Ｈｅｐｅｓ及び重炭酸ナトリウム（０．０３８％）でバッファーとした、Ｈａｎｋｓ平衡塩類溶液（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）中にて、Ｆｌｕｏ−４−ＡＭ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）で１時間染色する。色素を含まないがプロベネシドを２．５ｍＭの濃度で含む同じバッファーを、洗浄工程（洗浄バッファー）でも用い、また、色素もプロベネシドも含まないが、ＢＳＡを０．１％追加したものを、希釈工程（希釈バッファー）で用いる。細胞を洗浄して余分な色素を除き、６０マイクロリットルの洗浄バッファーを加える。試験化合物の原液を、ＤＭＳＯにて１０ｍＭの濃度に調製し、これを希釈バッファーで、阻害−用量反応曲線に必要な濃度に段階希釈する。３７℃で１０分のインキュベーション時間の後、ＦＬＩＰＲ装置にて、メーカーの使用説明書に従い、１０マイクロリットルの各化合物希釈液を、化合物のプレートから組換え細胞を含むプレートへと移す。基準読み取りの後、再度ＦＬＩＰＲ装置を用いて、濃度２０ｎＭのＣＸＣＬ１０アゴニスト（Ｐｅｐｒｏｔｅｃｈ製）を１０マイクロリットル添加する。試験化合物の添加前及び添加後の蛍光の変化をモニターする。ＣＸＣＬ１０添加後の基準レベルを超える発光ピーク値を、ベースライン減算後にエクスポートする。
【０１６１】
Ｂ）  受容体の内在化アッセイ（ＲＩＡ）：  試験化合物の原液を、ＤＭＳＯにて１０
ｍＭの濃度に調製し、これをＢＳＡを０．５％含むＰＢＳで、阻害−用量反応曲線に必要な濃度に段階希釈する。次いで、希釈した化合物を、ＰＢＳで希釈した同体積のＣＸＣＬ１０（Ｐｅｐｒｏｔｅｃｈ）と混合する。抗凝固処理したヒトの静脈全血を混合物に加え、これを３７℃のＣＯ２インキュベーターにてインキュベートして、リガンドにより仲介される受容体の内在化を起こさせる（最終ＣＸＣＬ１０濃度は９ｎＭ）。３０分後、血液を蛍光標識したＣＸＣＲ３及びＣＤ４特異抗体（Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）と混合し、氷上で１０分インキュベートする。次いで、赤血球細胞を除去するために、試料をＢＤ  ＦＡＣＳ  Ｌｙｓｉｎｇ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ（Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）と混合する。細胞を０．５％ＢＳＡを含むＰＢＳで洗浄した後、試料をフローサイトメーター（ＦＡＣＳ  Ｃａｎｔｏ  ＩＩ、Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）で分析する。データ解析にＦＡＣＳＤｉｖａソフトウェア（Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）を使用して、ＣＤ４陽性細胞におけるＣＸＣＲ３の細胞表面発現に対応する平均蛍光を求める。
【０１６２】
算出されるＩＣ５０値は、各日のアッセイ操作により変動する。この種の変動は、当業者に既知である。同一の化合物についてＩＣ５０値を数回求めた場合は、平均値を示す。ＦＬＩＰＲアッセイのデータを表１に示し、受容体の内在化アッセイ（ＲＩＡ）のデータを表２に示す。
【０１６３】
【表８】
0006595003.tif 000013
【０１６４】
【表９】
0006595003.tif 000014
【０１６５】
Ｃ）  ｈＥＲＧ  Ｑ−Ｐａｔｃｈアッセイ：ｈＥＲＧ遺伝子を安定的に発現しているＣＨＯ細胞（受入番号Ｕ０４２７０、ｂＳｙｓ、Ｗｉｔｔｅｒｓｗｉｌ、スイス）及び室温での単一細胞モードのＱＰａｔｃｈロボットプラットフォーム（Ｓｏｐｈｉｏｎ、Ｂａｌｌｅｒｕｐ、デンマーク）を用い、ｈＥＲＧ  Ｋチャネルの遮断について化合物を評価した。細胞は、９％（ｖ／ｖ）ウシ胎仔血清、０．９％ペニシリン／ストレプトマイシン（１０，０００Ｕ／ｍＬ、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ１５１４０１４８）、１００μｇ／ｍＬハイグロマイシンＢ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ１０６８７０１０）を加えた培地（Ｈａｍ’ｓ
Ｆ−１２  Ｎｕｔｒｉｅｎｔ  Ｍｉｘｔｕｒｅ、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ２１７６５−０２９）中、３７℃、５％ＣＯ２にて、培養びんにて増殖させる。細胞は、〜８０％コンフルエントになった時点（２〜３日毎）で、分割してさらに培養するか、又は電気生理実験に用いる。さらなる培養には、細胞を０．２５％トリプシンＥＤＴＡ溶液（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ２５２００−０５６）で剥がし、細胞の一部（１０〜３０％）を培地に再播種する。電気生理実験には、実験日に、細胞を０．２５％トリプシンＥＤＴＡ溶液で剥がし、すべての細胞を２０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ及び０．０４ｍｇ／ｍＬトリプシン阻害剤を加えた懸濁培地（２９３ＳＦＭ  ＩＩ、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ１１６８６−０２９）に懸濁させる。細胞は、使用するまでは、ＱＰａｔｃｈロボット内にて、３２〜３５℃の懸濁培地中に保持し、使用に際しては、一定分量を、ＤＭＳＯを０．３％ｖ／ｖ含む細胞外溶液（単位はｍＭ：ＮａＣｌ  １５０；ＫＣｌ  ４；ＣａＣｌ２  １．２；ＭｇＣｌ２  １；ＨＥＰＥＳ  １０；ＮａＯＨによりｐＨ７．４）に移し、試験プレートに加える。Ｋ＋電流は、内部溶液（単位はｍＭ：ＫＣｌ、１４０；ＮａＣｌ、１０；ＭｇＣｌ２、１；ＨＥＰＥＳ、１０；ＥＧＴＡ、５；ＫＯＨによりｐＨ＝７．２）を用い、ホールセル構成にて、パッチ電圧クランプ法により測定する。電流は、ＱＰａｔｃｈロボットの内部Ｂｅｓｓｅｌフィルターを用いて２ｋＨｚのカットオフ周波数にて低域フィルタリングし、１０ｋＨｚでデジタル化する。Ｋ＋テール電流は、＋２０ｍＶへの５００ｍｓの脱分極とそれに続く−４０ｍＶへの５００ｍｓの再分極により、−８０ｍＶの保持電圧から生成させ；テール電流の振幅を、−４０ｍＶへの再分極の終了時に測定する。このパルスパターンを実験中
１０秒毎に繰り返し、ベースラインＫ＋電流を３分後に細胞外溶液中にて測定し、次いで化合物を含む試験溶液を加え、化合物存在下でのＫ＋電流を細胞への添加の３分後に測定する。各試験溶液は、（１）試験化合物を純ＤＭＳＯに溶解し、（２）このＤＭＳＯ溶液を細胞外溶液で希釈し、（３）さらにＤＭＳＯを添加することにより、最終的な試験溶液が、試験化合物濃度が３００ｎＭ又は３０００ｎＭであり、かつ０．３％ｖ／ｖのＤＭＳＯを含むように調製する。化合物の効果は、化合物の存在下での電流をベースライン電流で除算することにより、遮断％として定量化し；各化合物につき２又は３回の実験を行い、各実験の結果の平均を最終値として示す。
【表１０】
0006595003.tif 000015