(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
栄養的に強化された酵母を調製する方法であって：
ａ）酵母を、少なくとも一つの発酵性の基質と共に、発酵を達成する上で適した条件下で培養すること；
ｂ）発酵後に酵母を単離すること；
ｃ）単離した酵母を、一つ以上のキレートミネラルならびにビタミン、アミノ酸、および抗酸化物質から選択される少なくとも一つの微量栄養素と組み合わせて、栄養的に強化された酵母を得ること；および
ｄ）栄養的に強化された酵母を低温殺菌し、乾燥させること
を含む方法。
【請求項２】
ビタミンがビタミンＡ、ビタミンＣ、ビタミンＤ、ビタミンＥ、ビタミンＢ１（チアミン）、ビタミンＢ２（リボフラビン）、ビタミンＢ３（ナイアシン）、ビタミンＢ５（パントテン酸）、ビタミンＢ６（ピリドキシン）、ビタミンＢ９（葉酸）、ビタミンＢ１２（コバラミン）、およびコリンから選択される少なくとも一種のビタミンを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
キレートミネラルのミネラル部分がカルシウム、カリウム、ナトリウム、マグネシウム、鉄、銅、マンガン、亜鉛、ヨウ素、コバルト、およびセレンから選択される少なくとも一種のミネラルを含む、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
アミノ酸がスレオニン、イソロイシン、リジン、メチオニン、シスチン、フェニルアラニン、チロシン、バリン、アルギニン、ヒスチジン、アラニンおよびアスパラギン酸から選択される少なくとも一種のアミノ酸を含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
抗酸化物質がタウリン、リポ酸、グルタチオン、Ｎ−アセチルシステイン、ビタミンＥ、ビタミンＣおよびβカロチンから選択される少なくとも一種の抗酸化物質を含む、請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
単離した酵母を、少なくとも一つの熱不安定なビタミンと組み合わせる、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
単離した酵母を、ビタミンＢ１（チアミン）および／またはビタミンＣと組み合わせる、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
単離した酵母を、鉄、亜鉛、銅、およびマンガンから選択される少なくとも一つのミネラルを含むキレートミネラルと組み合わせる、請求項１〜７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
単離した酵母が酵母クリームを含む、請求項１〜８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
酵母クリームが、１５重量％〜２５重量％の乾燥物を含む、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
単離した酵母を、少なくとも一つのビタミンと、単離した酵母の固形分総重量に対して０．５重量％〜３重量％のビタミン総重量で組み合わせる、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
単離した酵母を、少なくとも一つのビタミンと、単離した酵母の固形分総重量に対して１重量％〜１．５重量％のビタミン総重量で組み合わせる、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
単離した酵母を、少なくとも一つのキレートミネラルと、単離した酵母の固形分総重量に対して０．１重量％〜２重量％のミネラル総重量で組み合わせる、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
単離した酵母を、少なくとも一つのキレートミネラルと、単離した酵母の固形分総重量に対して０．５重量％〜１重量％のミネラル総重量で組み合わせる、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
単離した酵母を、少なくとも一つの微量栄養素と、３℃〜４５℃の温度で、０．５時間〜４８時間の間組み合わせる、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６】
酵母が遠心分離によって単離される、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７】
単離した酵母を、少なくとも一つの微量栄養素と組み合わせる前に、自己消化させる、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８】
自己消化酵母が１０重量％〜２５重量％の乾燥物を含む、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
栄養的に強化された酵母を６０℃〜１３５℃の温度まで加熱する、請求項１〜１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０】
栄養的に強化された酵母を１重量％〜１０重量％の水分含量まで乾燥させる、請求項１〜１９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１】
酵母を噴霧乾燥あるいは凍結乾燥によって乾燥させる、請求項１〜２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２】
発酵性の基質がエタノールを含む、請求項１〜２１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２３】
酵母がトルラ酵母（トルロプシス  ユーティリス（Torulopsis utilis）、トルラ  ユーティリス（Torula utilis）またはカンジダ  ユーティリス（Candida utilis））である、請求項１〜２２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２４】
単離した酵母を、少なくとも一つのビタミンおよびキレートミネラルと組み合わせる、請求項１に記載の方法。
【請求項２５】
単離した酵母を、ビタミン非存在下で、少なくとも一つのキレートミネラルと組み合わせる、請求項１に記載の方法。
【請求項２６】
キレート剤が、ペプチドまたは部分的に加水分解したペプチドを含む、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２７】
一つ以上のキレートミネラルが、カルシウム、カリウム、ナトリウム、マグネシウム、鉄、銅、マンガン、亜鉛、ヨウ素、コバルト、およびセレンのタンパク化合物から選択される、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
請求項１〜２７のいずれか一項に記載の方法によって得られる栄養的に強化された酵母の、嗜好性のエンハンサーとしての使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、栄養的に強化された酵母を調製する方法、栄養的に強化された酵母組成物および食品組成物に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
酵母は、食品製造業、特にペットフード製造業において、タンパク質源、栄養補助剤、食感改良剤、および香りのエンハンサーとして、しばしば利用される。さらに、酵母は内在性の遊離のグルタミン酸およびヌクレオチドを高濃度で有するために、嗜好性のエンハンサーとしてしばしば利用される。
【０００３】
食品産業で利用される酵母種は、広範囲に渡る。近年ペットフード産業で利用される最も一般的な酵母種には、サッカロマイセス  セレビシエ（Saccharomyces cerevisiae）（パン酵母またはビール酵母としても知られている）およびトルロプシス  ユーティリス（Torulopsis utilis）、トルラ  ユーティリス（Torula utilis）、またはカンジダ  ユーティリス（Candida utilis）（トルラ酵母としても知られている）が含まれる。
【０００４】
豊富なタンパク質源、グルタミン酸、およびヌクレオチドに加えて、酵母はビタミンＢ、カリウム、およびセレンのような微量栄養素を含んでおり、ペットの食餌の栄養補助剤として利用可能である。ペットフードの製造工程を単純化し、ペットの飼い主をくじけさせ得るようなペットフードの長い原材料表示を簡素化するために、微量栄養素をそれぞれペットフードに配合するよりも、酵母を微量栄養素源としてペットフードに利用する方が好ましい。
【０００５】
それゆえに、食餌に微量栄養素を補う上で効果的な手段として利用可能な、高レベルに栄養的に強化された酵母を調製する方法の提供が望まれているであろう。
【発明の概要】
【０００６】
本発明者は、発酵後に酵母と微量栄養素を組み合わせると、予想外に高レベルに微量栄養素が保持されることを見出した。
【０００７】
従って、第一の局面として、本発明は栄養的に強化された酵母を調製する方法を提供し、本方法は；
ａ）酵母を、少なくとも一つの発酵性の基質と共に、発酵を達成する上で適した条件下で培養すること；
ｂ）発酵後に酵母を単離すること；
ｃ）単離した酵母を、ビタミン、ミネラル、アミノ酸、抗酸化物質から選択される少なくとも一つの微量栄養素と組み合わせ、栄養的に強化された酵母を得ること；および
ｄ）栄養的に強化された酵母を乾燥させること
を含む。
【０００８】
単離した酵母を、少なくとも一つのビタミンおよび／またはミネラルと組み合わせてもよい。所望により、単離した酵母を、ミネラル非存在下で、少なくとも一つのビタミンと組み合わせる。あるいは、単離した酵母を、ビタミン非存在下で、少なくとも一つのミネラルと組み合わせてもよい。
【０００９】
所望により、単離した酵母を一つ以上のキレートミネラルと組み合わせる。好ましくは、キレート剤（chelant）はペプチドまたは部分的に加水分解したペプチドを含む。さらに好ましくは、一つ以上のキレートミネラルは、カルシウム、カリウム、ナトリウム、マグネシウム、鉄、銅、マンガン、亜鉛、ヨウ素、コバルトおよびセレンのタンパク化合物から選択される。
【００１０】
典型的には、本発明の方法において、ビタミンは、ビタミンＡ、ビタミンＣ、ビタミンＤ、ビタミンＥ、ビタミンＢ１（チアミン）、ビタミンＢ２（リボフラビン）、ビタミンＢ３（ナイアシン）、ビタミンＢ５（パントテン酸）、ビタミンＢ６（ピリドキシン）、ビタミンＢ９（葉酸）、ビタミンＢ１２（コバラミン）、およびコリンを含む。
【００１１】
所望により、単離した酵母を、ビタミン、アミノ酸、および抗酸化物質から選択される少なくとも一つの微量栄養素と、３℃〜４５℃で、３０分〜４８時間の間、組み合わせる。
【００１２】
典型的には、本発明の方法において、ミネラルは、カルシウム、カリウム、ナトリウム、マグネシウム、鉄、銅、マンガン、亜鉛、ヨウ素、コバルトおよびセレンを含む。所望により、ミネラルは上記で規定されるようにキレート化されている。
【００１３】
典型的には、本発明の方法において、アミノ酸は、スレオニン、イソロイシン、リジン、メチオニン、シスチン、フェニルアラニン、チロシン、バリン、アルギニン、ヒスチジン、アラニンおよびアスパラギン酸を含む。
【００１４】
典型的には、本発明の方法において、抗酸化物質は、タウリン、リポ酸、グルタチオン、Ｎ−アセチルシステイン、ビタミンＥ、ビタミンＣおよびβカロチンを含む。
【００１５】
所望により、単離した酵母を、少なくとも一つのビタミンおよび／またはミネラルと組み合わせる。さらに所望により、単離した酵母を、ビタミンＢ１（チアミン）および／またはビタミンＣのような熱不安定なビタミンと組み合わせる。さらにより所望により、単離した酵母を、鉄、亜鉛、銅、およびマンガンから選択される少なくとも一つのミネラルと組み合わせる。
【００１６】
典型的には、ｃ）のステップにおいて、単離した酵母は酵母クリームを含む。所望により、酵母クリームは１５重量％から２５重量％の乾燥物を含む。
【００１７】
好ましくは、単離した酵母を、単離した酵母の固形分の総重量に対し、０．１重量％〜２重量％のビタミン総量で、少なくとも一つのビタミンと組み合わせる。さらに好ましくは、単離した酵母を、単離した酵母の固形分の総重量に対し、１重量％〜１．５重量％のビタミン総量で、ビタミンと組み合わせる。
【００１８】
好ましくは、単離した酵母を、単離した酵母の固形分の総重量に対し、０．０１重量％〜２重量％のミネラル総量で、ミネラルと組み合わせる。さらに好ましくは、単離した酵母を、単離した酵母の固形分の総重量に対し、０．１重量％〜１重量％のミネラル総量で、ミネラルと組み合わせる。所望により、ミネラルは上記で規定されるようにキレート化されている。
【００１９】
典型的には、ｂ）のステップにおいて、酵母は遠心分離で単離される。好ましくは、単離した酵母を、少なくとも一つの微量栄養素と組み合わせる前に自己消化させる。さらに好ましくは、自己消化した酵母は１０〜２５重量％の乾燥物を含む。
【００２０】
典型的には、本発明の方法において、栄養的に強化された酵母は、６０℃〜１３５℃の温度まで加熱することによって滅菌される。所望により、栄養的に強化された酵母を、水分含量１重量％〜１０重量％まで乾燥させる。さらに所望により、酵母は噴霧乾燥または凍結乾燥によって乾燥させる。
【００２１】
典型的には、発酵性の基質は、エタノールを含む。所望により、酵母はトルロプシス  ユーティリス（Torulopsis utilis）、トルラ  ユーティリス（Torula utilis）またはカンジダ  ユーティリス（Candida utilis）である。
【００２２】
第二の局面として、本発明は、本明細書で規定される方法によって得られる栄養的に強化された酵母組成物を提供する。
【００２３】
第三の局面として、本発明は、本明細書で規定される方法によって得られる栄養的に強化された酵母と、少なくとも一つの食品成分とを含む、食品組成物を提供する。所望により、食品組成物は、栄養的に強化された酵母を最大２重量％の量で含む。
【００２４】
第四の局面として、本発明は、本明細書で規定される方法によって得られる栄養的に強化された酵母の、嗜好性のエンハンサーとしての使用を提供する。
【００２５】
本発明のさらなる適用の範囲は、後述される詳細な説明から明らかになるであろう。詳細な説明と具体的な実施例は、本発明の好ましい実施形態を示すものであるが、単に例示を目的とすることを意図したものであり、本発明の範囲を限定することを意図していないことは、理解されるべきである。
【発明を実施するための形態】
【００２６】
詳細な説明
次の好ましい実施形態の記述は、あくまで単に例示するものであり、本発明、その適用、または使用を限定することを意図したものでは全くない。
【００２７】
全体を通して使用されているように、範囲は、その範囲内のありとあらゆる値を指す省略表現として使用される。その範囲内のいずれの値もその範囲の終端として選択することができる。
【００２８】
さらに、本明細書に引用される全ての参考文献は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。本開示の定義と、引用文献の定義とに矛盾が生じた際は、本開示が優先される。
【００２９】
他に指定されない限り、本明細書の当該部分および他の部分で表されたパーセンテージおよび量は全て、重量パーセントのことを指すと理解されるべきである。所与の量は、物質の有効重量（active weight）に基づいている。
【００３０】
本明細書で用いられる場合、「食餌（food）」という用語は、全てではないがほとんどの栄養価を動物に対して通常提供する食品（food product）のみを指すのではなく、軽食、おやつ、および栄養補助食品のような品目もまた指してもよい。
【００３１】
ある実施形態において、本発明は、栄養的に強化された酵母を調製する方法であって：
ａ）酵母を、少なくとも一つの発酵性の基質と共に、発酵を達成する上で適した条件下で培養すること；
ｂ）発酵後に酵母を単離すること；
ｃ）単離した酵母を、ビタミン、ミネラル、アミノ酸、抗酸化物質から選択される少なくとも一つの微量栄養素と組み合わせ、栄養的に強化された酵母を得ること；および
ｄ）栄養的に強化された酵母を乾燥させること
を含む方法、を提供する。
【００３２】
酵母
本発明の方法において、様々な種の酵母を使用することができる。これらの酵母には、限定されないが、サッカロマイセス（Saccharomcyes）、クリベロマイセス（Kluyveromyces）、カンジダ（Candida）およびトルラスポラ（Torulaspora）が含まれる。ある実施形態において、酵母はサッカロマイセス  セレビシエ（Saccharomcyes cerevisiae）である。好ましい実施形態において、酵母はトルロプシス  ユーティリス（Torulopsis utilis）、トルラ  ユーティリス（Torula utilis）またはカンジダ  ユーティリス（Candida utilis）（トルラ酵母）である。トルラ酵母は、セレン（消費者に毒性をもたらし得る）のレベルがもともと低いために、本発明の方法の有力な候補である。
【００３３】
本発明の方法において、酵母は、当業者に知られているであろう標準的な方法に従い発酵させる。発酵性の基質には、デキストロース、グルコース、マルトース、フラクトース、およびスクロースが含まれる。ある実施形態において、発酵性の基質はエタノールである。エタノールは特に、トルラ酵母の発酵に適している。
【００３４】
典型的には、発酵後に、酵母を単離する。「単離」とは、大部分の発酵ブロスから酵母を分離することを意味する。酵母は、好ましくは遠心分離で単離される。遠心分離物は、単離した酵母を生じさせるために、洗浄して再度遠心分離してもよい。いくつかの実施形態において、単離した酵母は約１５重量％〜約２５重量％の固形分を有する酵母クリームである。好ましくは、酵母クリームの固形分は約１５重量％、１６重量％、１７重量％、または１８重量％〜約２２重量％である。
【００３５】
ある実施形態において、発酵ブロスから単離した酵母は、例えば、酵母クリームの形態で、以下に記載したように、酵母の栄養を強化するために一つ以上の微量栄養素と組み合わせる。別の実施形態において、単離した酵母から酵母エキスを調製してもよい。酵母エキスを調製する従来の方法は、食品製造業者には知られているであろう。典型的な方法は、細胞壁を除去し、細胞内物質を単離することを包含する。さらに別の実施形態において、単離した酵母を自己消化させる。酵母の自己消化は、細胞成分を分解するプロテアーゼ、ヌクレアーゼ、リパーゼ、およびグリカナーゼのような内在性の加水分解酵素が関与する、複雑かつ進みの遅い現象である。酵母エキスの調製とは異なり、自己消化において細胞壁成分は除去されない。自己消化を行う最適条件は、食品製造業者には知られているであろう。ある実施形態では、自己消化酵母の固形分（乾燥物）は１０重量％または１５重量％〜２５重量％である。しばしば、自己消化酵母の固形分（乾燥物）は約１５重量％、１６重量％、１７重量％または１８重量％〜約２２重量％である。自己消化酵母エキスは、続いて、以下に記載の通り、酵母の栄養を強化するために、一つ以上の微量栄養素と組み合わせてもよい。ある実施形態において、（自己消化していない）酵母クリームと自己消化酵母との混合物を、微量栄養素によって栄養強化させる。
【００３６】
微量栄養素
単離した酵母は、典型的には、ビタミン、ミネラル、アミノ酸、および抗酸化物質から選択される一つ以上の微量栄養素と組み合わせる。好ましくは、単離した酵母は、少なくとも一つのビタミンおよび／または少なくとも一つのミネラルと組み合わせる。
【００３７】
ビタミンは、限定されないが、ビタミンＡ、ビタミンＢ１（チアミン）、ビタミンＢ２（リボフラビン）、ビタミンＢ３（ナイアシン）、ビタミンＢ５（パントテン酸）、ビタミンＢ６（ピリドキシン）、ビタミンＢ９（葉酸）、ビタミンＢ１２（コバラミン）、ビオチン、コリン、ビタミンＣ、ビタミンＤおよびビタミンＥを含む。
【００３８】
いくつかの実施形態において、単離した酵母は、ビタミンＢ１（チアミン）および／またはビタミンＣのような熱不安定なビタミンと組み合わせる。本発明者は、高レベルな栄養強化が熱不安定なビタミンとの組み合わせでも観察されることを見出している。
【００３９】
一つ以上のビタミンは、単離した酵母の固形分（乾燥物）の総重量に対して、０．１重量％〜５重量％、または０．１重量％〜４重量％、または０．１重量％〜３重量％、または０．１重量％〜２重量％のビタミン総重量で、単離した酵母と組み合わせてもよい。さらに好ましい実施形態において、ビタミンの総重量は、単離した酵母の固形分（乾燥重量）の総重量に対して、０．５重量％〜３重量％、または０．５重量％〜２重量％、または０．５重量％〜１重量％、または１重量％〜３重量％、または１重量％〜２重量％である。
【００４０】
ミネラルは、限定されないが、カルシウム、カリウム、ナトリウム、マグネシウム、鉄、銅、マンガン、亜鉛、ヨウ素、コバルトおよびセレンを含む。ある実施形態において、単離した酵母は、鉄、亜鉛、銅、およびマンガンから選択される少なくとも一つのミネラルと組み合わせる。
【００４１】
一つ以上のミネラルは、単離した酵母の固形分（乾燥物）の総重量に対して、０．１重量％〜３重量％、または０．１重量％〜２重量％、または０．１重量％〜１重量％、または０．１重量％〜０．５重量％のミネラル総重量で、単離した酵母と組み合わせてもよい。
【００４２】
好ましい実施形態において、ミネラルがキレート化されている。従って、単離した酵母を一つ以上のキレートミネラルと組み合わせてもよい。ミネラルは、一つ以上のアミノ酸、部分的に加水分解したペプチド、またはペプチドとキレート化してもよい。本発明の方法で用いてもよいキレートミネラルは、限定されないが、カルシウム、リン、カリウム、ナトリウム、塩化物、マグネシウム、鉄、銅、マンガン、亜鉛、ヨウ素およびセレンのタンパク化合物を含む。キレートミネラルは、Alltech（登録商標）（Nicholasville KY）のような複数の供給元から市販されている。いくつかの実施形態において、少なくとも二つのミネラルが、複合体構築物として同一のキレート剤にキレート化されてもよい。このようなマルチミネラルキレート剤複合体の一例としては、Bioplex（登録商標）亜鉛／銅／マンガンがある。
【００４３】
本発明者は、通常の（キレート化されていない）ミネラルが本発明の方法で用いられる場合、ミネラルは酵母と凝集して沈殿する傾向があることを見出した。このことは、栄養強化レベルを著しく低下させる。このような凝集および沈殿はキレートミネラルでは見られず、栄養強化レベルもまたキレートミネラルに比例して増加する。
【００４４】
アミノ酸は、限定されないが、アスパラギン、グルタミン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、スレオニン、トリプトファン、アラニン、アルギニン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、チロシン、プロリン、バリンおよびセリンを含む。ある構成において、アミノ酸は、スレオニン、イソロイシン、リジン、メチオニン、シスチン、フェニルアラニン、チロシン、バリン、アルギニン、ヒスチジン、アラニン、およびアスパラギン酸から選択される。
【００４５】
一つ以上のアミノ酸を、単離した酵母の固形分（乾燥物）の総重量に対して１重量％以下の総量で、単離した酵母と組み合わせてもよい。いくつかの実施形態において、一つ以上のアミノ酸を、単離した酵母の固形分（乾燥物）の総重量に対して０．１重量％〜１重量％、または０．１重量％〜０．５重量％、または０．１重量％〜０．３重量％の総量で、単離した酵母と組み合わせる。他の実施形態において、一つ以上のアミノ酸を、単離した酵母の固形分（乾燥物）の総重量に対して０．３重量％〜１重量％、または０．５〜１重量％、または０．５重量％〜０．８重量％の総量で、単離した酵母と組み合わせる。
【００４６】
抗酸化物質は、限定されないが、タウリン、リポ酸、グルタチオン、Ｎ−アセチルシステイン、ビタミンＥ、ビタミンＣおよびβカロチンを含む。好ましくは、抗酸化物質はタウリンである。
【００４７】
一つ以上の抗酸化物質を、単離した酵母の固形分（乾燥物）の総重量に対して０．２％重量％以上の総量で、単離した酵母と組み合わせてもよい。ある実施形態において、一つ以上の抗酸化物質を、単離した酵母の固形分（乾燥物）の総重量に対して０．０１重量％〜０．２重量％、または０．０１重量％〜０．１重量％、または０．０１重量％〜０．０５重量％の総量で、単離した酵母と組み合わせる。別の実施形態において、一つ以上の抗酸化物質を、単離した酵母の固形分（乾燥物）の総重量に対して、０．０５重量％〜０．２重量％、または０．０５重量％〜０．１重量％、または０．０５重量％〜０．０８重量％の総量で、単離した酵母と組み合わせる。
【００４８】
典型的には、微量栄養素を、３℃〜４５℃の温度で、０．５時間〜４８時間、単離した酵母と組み合わせる。いくつかの実施形態において、微量栄養素を、５℃〜２５℃、または５℃〜１０℃の温度で単離した酵母と組み合わせる。他の実施形態において、微量栄養素を、２５℃〜４５℃、または１０℃〜２０℃の温度で、単離した酵母と組み合わせる。好ましくは、微量栄養素を、０．５時間、１時間、５時間、１０時間、または２０時間から最大３０時間まで、単離した酵母と組み合わせる。ある実施形態において、微量栄養素を、１０時間〜２０時間、単離した酵母と組み合わせる。上述した通り、単離した酵母は典型的には約１５重量％〜約２２重量％の固形分を有している。発酵培地が単離した酵母の残りの部分を構成する。いくつかの実施形態において、微量栄養素は、単離した酵母と直接組み合わせる。従って、微量栄養素は、あらかじめ液体にすることなく、固体の状態で単離した酵母と直接組み合わせてもよい。本明細書に記載のステップｃ）の間、酵母と微量栄養素とは、最適な栄養強化を確実に行うために、連続的に混合させてもよい。
【００４９】
理論に縛られるものではないが、微量栄養素は、酵母細胞成分に付着するか、あるいは酵母細胞成分によってカプセル化され、その結果酵母の栄養が強化されると考えられる。
【００５０】
発酵中に微量栄養素を発酵培地に配合すると、発酵プロセスを妨げる可能性があるために、酵母を発酵および単離した後に微量栄養素を組み合わせることは、有利である。
【００５１】
滅菌
栄養的に強化された酵母を形成するために微量栄養素を単離した酵母と組み合わせた後、栄養的に強化された酵母を滅菌および／または乾燥させてもよい。滅菌および乾燥の方法は食品製造業者には知られているであろう。典型的には、栄養的に強化された酵母は６０℃〜１３５℃、または８０℃〜１００℃、または９０℃〜９５℃の温度まで加熱される。栄養的に強化された酵母が加熱される時間は、５秒〜２００秒、または５秒〜１２０秒、または３０秒〜１２０分であってよい。
【００５２】
栄養的に強化された酵母は、噴霧乾燥または凍結乾燥のような従来の技術によって乾燥させてもよい。典型的には、栄養的に強化された酵母は、酵母の総重量に対して、０．５重量％〜１０重量％、または１重量％〜５重量％、または１重量％〜２重量％の水分含量に乾燥させる。
【００５３】
栄養的に強化された酵母の使用
本発明者は本発明の方法に従い栄養的に強化された酵母が、予想外に高レベルの微量栄養素を保持することを見出した。本明細書で用いられる「保持する」または「保持」という用語は、微量栄養素を酵母または酵母細胞成分と会合させること、あるいは組み合わせることを指す。それゆえに、本発明の方法によって得られる栄養的に強化された酵母は、食品組成物、とりわけペットフード組成物に配合する上で有用である。
【００５４】
従って、ある構成において、本発明は、本発明の方法に従って得られる栄養的に強化された酵母を含む食品組成物を提供する。本発明の方法により高レベルな微量栄養素の保持が達成されることを考慮すると、栄養的に強化された酵母は、４重量％、３重量％、または２重量％と同程度の少ない量で、食品による適切な微量栄養素の補給を達成するために、食品組成物に配合されてもよい。従って、いくつかの実施形態において、食品組成物は、本発明の方法によって得られる栄養的に強化された酵母を、食品組成物の総重量に対して４重量％以下、３重量％以下、２重量％以下の量で含む。他の実施形態において、食品組成物は、食品組成物の総重量に対して、１重量％〜３重量％、または１重量％〜２重量％の量で、本発明の方法によって得られる栄養的に強化された酵母を含む
【００５５】
本発明の食品組成物は、典型的には、栄養的に強化された酵母と少なくとも一つの食品成分とを含む。少なくとも一つの食品成分は、タンパク質（例えば、肉、肉副産物、乳製品、卵、小麦タンパク質、大豆タンパク質、およびジャガイモ濃縮物）、脂質（例えば、動物性脂肪、魚油、植物油、肉、および肉副産物）、および炭水化物（例えば、小麦、コーン、大麦、米のような穀物）から選択されてもよい。他の食品成分は、限定されないが、繊維（例えばセルロース、ビートパルプ、ピーナッツの殻、および大豆繊維）、ビタミン、ミネラル、および保存料を含む。食品成分は、本明細書で規定されるいずれの食品成分であってもよい。
【００５６】
いくつかの実施形態において、本発明の食品組成物は、本明細書で規定される方法によって得られる栄養的に強化された酵母と、タンパク質、脂質、および炭水化物から選択される少なくとも一つの食品成分とを含む。本発明に従い栄養的に強化された酵母が補充された食品組成物は、０．０１重量％〜０．２重量％のビタミンＣ、０．０１重量％〜０．２重量％のビタミンＥ、０．００５重量％〜０．０５重量％のチアミン、０．００５重量％〜０．２重量％の亜鉛および０．００２重量％〜０．１重量％の鉄を含んでもよい。
【００５７】
表１は、本発明の方法によって得られる栄養的に強化された酵母を含む食品組成物の、典型的な微量栄養素のプロファイルを示しており、これらの微量栄養素は栄養的に強化された酵母由来である。
【００５８】
【表１】
0006505127.tif 000002
【００５９】
本発明の食品組成物は、いかなる動物による消費にも適しているであろう。好ましくは、食品組成物は非ヒト動物による消費のためであって、非ヒト動物には、限定されないが、トリ、ウシ、イヌ、ウマ、ネコ、マウス、ひつじ、およびブタが含まれる。
【００６０】
さらに好ましくは、食品組成物はペットによる消費のためである。最も好ましくは、食品組成物はイヌまたはネコを含む、コンパニオンアニマルによる消費のためである。
【００６１】
本発明の食品組成物は従来のプロセスを用いることで、乾燥した形態または湿った形態で調製可能である。
【００６２】
本発明の方法が栄養的に強化された酵母での高レベルな微量栄養素の保持をもたらすことを考慮すると、いくつかの実施形態において、本明細書で規定される食品組成物は、追加で補充された、または他から配合された微量栄養素（例えば、ビタミンやミネラル）を有さない。「追加で補充された、または他から配合された微量栄養素」という用語は、食品組成物中の少なくとも一つの食品成分にも、栄養的に改変された酵母にも含まれない微量栄養素を指す。
【００６３】
さらに別の構成において、本発明の方法によって得られる栄養的に強化された酵母は、食品組成物の嗜好性を高めるために用いられてもよい。従って、本発明はさらに、本明細書で規定される方法によって獲得される栄養的に強化された酵母を含む嗜好性のエンハンサー、本明細書で規定される方法によって得られる栄養的に強化された酵母の食品組成物の嗜好性を高めるための使用、および食品組成物の嗜好性を高める方法であって、本明細書で規定される方法によって得られる栄養的に強化された酵母を食品組成物に配合することを含む方法、を提供する。
【００６４】
本発明は次の限定的ではない実施例によって、さらに例示される。
【実施例】
【００６５】
実施例１−チアミン（ビタミンＢ１）による酵母の栄養強化
【００６６】
本発明の方法に従った酵母による微量栄養素の保持を評価するために、トルラ酵母をエタノール存在下で発酵させた。発酵後に、酵母を１５％〜２２％固形分になるまで遠心分離し、冷却して、処理タンクに入れた。酵母の一部を処理タンクで自己消化させ、残りは（自己消化されていない）酵母クリームとして処理タンク内に留めた。自己消化プロセスが完了した際、酵母クリームと単離した酵母とを混合して、単離した酵母の混合物を形成した。続いて、単離した酵母の混合物を、表２に示すように他のビタミン中に４．３５重量％のチアミンを含む、４つの異なる量のビタミンブレンドと、組み合わせて、かつ混合させた。混合は、高速で、鋭利な（high sheer）攪拌機において、少なくとも３０分を超えて、２０℃〜３０℃の範囲の温度で、行った。続いて、栄養強化酵母を滅菌した。
【００６７】
続いて、栄養強化後の酵母で保持されるチアミン量を、酵母マトリックスからのチアミンの遊離を促進させるために酸加水分解を利用し、その後チアミンを分離および定量するためにＨＰＬＣ測定を行うことによって、測定した。続いて、チアミン定量値を、予想チアミン保持レベル（損失が無いと仮定）と比較した。チアミンは熱分解の影響を受けやすく、従って回収率の低下の影響をより受けやすいため、プロトタイプのビタミンとして選択した。結果は表２に示した。後述されるように、全ての計算は水分のばらつきを説明するために、乾燥物基準で行う。
【００６８】
【表２】
0006505127.tif 000003
*予想チアミン保持量（ppm；乾燥物基準；損失が無いと仮定）は次式を用いて計算した：
【数１】
0006505127.tif 000004
**測定チアミン量（ppm；乾燥物基準）は、次式を用いて計算する：
【数２】
0006505127.tif 000005
***チアミンの回収パーセンテージは、次式を用いて計算する：
【数３】
0006505127.tif 000006
【００６９】
表２から分かるように、試験したすべてのチアミン濃度において、おおよそ１００％の微量栄養素が保持された。上述したように、「保持」は、微量栄養素と、酵母または酵母細胞成分との、会合または組み合わせに関係する。従って、１００％の保持は、栄養強化のプロセスにおいて微量栄養素の損失が無いことを示す。（本実験において、１００％を超える値は実験誤差に起因し得る）。よって、栄養強化プロセスは非常に効果的であり、他のビタミンにも適しているであろう。
【００７０】
実施例２−ミネラルによる酵母の栄養強化
【００７１】
実施例１で示した方法を、表３で示したように、様々なミネラルにおいて繰り返した。ミネラルは、酵母と、単独であるいはビタミンプレミックスと一緒に、組み合わせた。栄養強化の間に保持されるミネラルの量は、酵母マトリックスの有機物を燃焼させることによって標的元素を灰化させ、その後誘導結合プラズマ装置（Inductively Coupled Plasma instrument）を用いて標的元素を定量することによって、測定した。
【００７２】
【表３】
0006505127.tif 000007
*＝予想回収量（損失が無いと仮定した場合）
**＝実際の回収量
***＝回収率％（保持）
【００７３】
表３から分かるように、保持値は、試験したミネラルによって、著しく異なった。マンガンおよび銅は、栄養強化プロセスの間、各々〜７８％および〜７９％の保持値で最も効果的に保持された。しかしながら、亜鉛および鉄の保持値は、著しく低かった（各々、〜４４％および〜１７％）。さらに、栄養強化の間、ミネラルの顕著な沈殿／凝集が見られた。このことによって、低い／変動的な保持率が説明できるであろう。
【００７４】
実施例３−ビタミンおよびキレートミネラルによる栄養強化
【００７５】
実施例１に示した方法を、チアミンおよびビタミンＣ（ビタミンブレンドではなく個々のビタミンとして）、および様々なキレートミネラルを用いて繰り返した。キレートミネラル（Bioplex（登録商標）亜鉛／マンガン／銅およびBioplex（登録商標）鉄）は、Alltech（登録商標）（Nicholasville KY）から購入した。栄養強化のプロセスは、ミネラル単独、ビタミン単独、およびビタミンかつミネラルの両方を用いて、行われた。ビタミンおよびミネラルの保持を、それぞれ実施例１および２に記載した通りに、定量した。
【００７６】
栄養強化プロセスで用いられたビタミン／キレートミネラルの量と、予想される保持値（上述の方程式を用いて算出される）が、表４に記載されている。本実験の結果は、表５および６に示されている。
【００７７】
【表４】
0006505127.tif 000008
【００７８】
【表５】
0006505127.tif 000009
【００７９】
【表６】
0006505127.tif 000010
*＝予想回収量（損失が無いと仮定した場合）
**＝実際の回収量
***＝回収率％（保持）
【００８０】
表５から分かるように、チアミンの保持値は実施例１で見られた値と一致した（すなわち、１００％の回収率であった）。（１００％を超える値は、おそらく実験誤差に起因し得るであろう。）ビタミンＣの保持値は、ビタミンＢ１と比べて低かった（おおよそ４０％）。しかしながら、ビタミンＣの低い保持値は、ビタミンＣによる他の栄養強化の方法でも典型的に見られる（例えば、押出成形後のビタミンＣの栄養強化など）。ビタミンの保持は、ミネラルの存在に影響されず、このことは互換性の問題がないことを示している。
【００８１】
表６から分かるように、キレートミネラルの保持値は、実施例２のキレート化されていない対応するミネラルの値よりも、非常に高い値である。例えば、ビタミン非存在下で、銅の保持は７９．１％から９７．５％に増加し、マンガンの保持は７７．５％から〜１００％に増加し、亜鉛の保持は４０％から１００％に増加し、鉄の保持は〜１６％から〜３７％に増加した。亜鉛、マンガン、および銅の保持は、ビタミン存在下では、許容範囲のレベルで影響はあったが、ほとんど影響を受けなかった（表６の「組み合わせ（Combo）」）。
【００８２】
本発明の特定の実施形態が例示および記載されているが、添付した請求項に規定される本発明の範囲から逸脱しなければ、様々な変更や改良を行ってもよいことは、当業者には明らかであろう。