(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
２つの疎水鎖の各々にラジカル重合性基を有する２鎖２親水基型界面活性剤（Ａ）と、この２鎖２親水基型界面活性剤とは対称の電荷を有する界面活性剤（Ｂ）とを含有する外殻を有する中空形状であり、平均粒径１μｍ以上であるベシクル。
【請求項２】
重合性基を有する２鎖２親水基型界面活性剤（Ａ）は、次式（Ｉ）：
【化１】
0006619592.tif 000021
（式中、Ｒ１は水素原子又はメチル基を示し、Ｘは酸素原子、アミノ基（ＮＨ）、又はアミノメチル基（ＮＣＨ３）を示し、ｍは２〜８の整数を示し、ｎは８〜１０の整数を示し、ｐは２〜６の整数を示す。）で表わされる２鎖２親水基型陰イオン界面活性剤であり、界面活性剤（Ｂ）は、重合性基であるアクリロキシ基又はメタクリロキシ基で置換されていてもよい炭素数８〜１４の直鎖アルキル基を有するアルキルアンモニウム塩、又は炭素数８〜１４の直鎖アルケニル基を有するアルケニルアンモニウム塩である、請求項１に記載のベシクル。
【請求項３】
２鎖２親水基型界面活性剤（Ａ）は、次式（ＩＩ）：
【化２】
0006619592.tif 000022
（式中、Ｒ２は水素原子又はメチル基を示し、ｑは２〜１２の整数を示し、ｒは８〜２０の整数を示す。Ｙはハロゲンイオンを示す。）で表わされる２鎖２親水基型界面活性剤であり、界面活性剤（Ｂ）は、炭素数８〜１４の直鎖アルキル基を有するアルキル硫酸塩、炭素数８〜１４の直鎖アルケニル基を有するアルケニル硫酸塩、又は炭素数８〜１４の直鎖アルケニル基を有するポリオキシアルキレンアルケニルエーテル硫酸塩である、請求項１に記載のベシクル。
【請求項４】
さらに形成助剤を含有する、請求項１から３のいずれかに記載のベシクル。
【請求項５】
請求項１から４のいずれかに記載のベシクルの２鎖２親水基型界面活性剤（Ａ）を重合して得られるマイクロカプセル。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、界面活性剤を含むベシクルとそれを用いたマイクロカプセルに関する。
【背景技術】
【０００２】
マイクロカプセルは、通常はその大きさが、直径数μｍから数百μｍ程度である。このマイクロカプセルは、様々な機能、例えば、芯物質の徐放性、環境に対する安全性、反応性物質の隔離、毒性の軽減、液体の固体化、臭気及び味のマスキングなどを付与することができる。
【０００３】
ナノマイクロカプセルには、様々な製造方法があり、多くの研究があり実用化されている（非特許文献１）。中でもベシクルを構成する両親媒性物質は多数検討されているが、特に、生体に由来したリン脂質からなるベシクルはリポソームと呼ばれ、生体への安全性の面から様々な検討がなされている。
【０００４】
例えば、このリン脂質と特定のカチオン性界面活性剤を組み合わせてベシクル分散物を形成させた化粧料が提案されている（特許文献１）。また、ベシクルを構成する別の両親媒性物質として、合成界面活性剤についての報告も多数ある。
【０００５】
また、ジェミニ型界面活性剤と１鎖型界面活性剤との混合でベシクルを形成することも報告されている（非特許文献２）。そして近年では、多鎖多親水基型界面活性剤を用いたベシクル組成物の検討が行われている（特許文献２）。
【０００６】
従来の多鎖多親水基型界面活性剤を用いたベシクル組成物は、形成するための助剤が必要であり、重合するわけではないため膜厚は２分子膜であり、膜の強度もそこまで高くない。
【０００７】
また、少なくとも１つのブロックが疎水性であり、少なくとも１つのブロックが親水性である両親媒性ジブロック及びマルチブロックコポリマーを両親媒性物質としたベシクルは「ポリマーソーム」と呼ばれ、ポリマーソームは、リポソームに共通した多くの技術によって、安定的に調製され得る。しかも、フィルム再水和、超音波処理、及び放出などにより、安全性、使用感触、特にべたつき感がなく、みずみずしさが良好で、且つ基剤安定性に優れたポリマーソームなども提案されている（特許文献３）。
【０００８】
一方でポリマーソームは安定性が高く膜厚もあるが、ブロックコポリマーの化学的構造、数平均分子量、親水性から疎水性積分率、及び様々な調合方法を介するかを選択する必要があり、汎用性が乏しい。
【０００９】
また、１鎖型の重合性界面活性剤と１鎖型の界面活性剤を用いてベシクルを形成させ、中空粒子を製造する方法も検討されている（特許文献４、非特許文献３）。１鎖型の重合性界面活性剤を用いた場合、架橋剤が必要であり、かつ２分子膜であるため、空隙率が高いものの、疎水性物質の保持容量が小さく、膜の強度が弱い。
【００１０】
そして従来のベシクルの製法では、サイズがばらつくことが多く、粒径の揃ったマイクロカプセルを調製できる方法が望まれていた。
【００１１】
本発明者らは、重合性基を有する２鎖２親水基型界面活性剤（特許文献５、６）について、ベシクルへの応用に関する検討を進めてきた（非特許文献４、５）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１２】
【特許文献１】特開２００６−１９３４６１号公報
【特許文献２】特開２００６−２９０８９４号公報
【特許文献３】特表２０１１−０６５０５６号公報
【特許文献４】特開２００６−２５７３００号公報
【特許文献５】特開２００７−１４６１０８号公報
【特許文献６】特開２００６−２４９０５９号公報
【非特許文献】
【００１３】
【非特許文献１】マイクロ／ナノ系カプセル・微粒子の応用展開（シーエムシー出版）
【非特許文献２】J. Phys. Chem. B 2013, 117, 433-440
【非特許文献３】J. Jpn. Soc. Colour Mater., 79 (6), 237-242 (2006)
【非特許文献４】日本油化学会フレッシュマンサミットＴＯＫＹＯ２０１２（２０１２年１１月２８日）講演要旨
【非特許文献５】２０１２年度材料技術討論会（２０１２年１２月７日）講演要旨
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１４】
これらの検討においては、重合性基を有する２鎖２親水基型界面活性剤と、これと対称の電荷を有する界面活性剤との組み合わせによっては白色沈殿がみられ会合体は形成しなかったが、重合性基を有する２鎖２親水基型界面活性剤の(2-Propenoic acid, 2-methyl-, 1,1'-[1,2-ethanediylbis[[(3-sulfopropyl)imino](12-oxo-12,1-dodecanediyl)]] amide, sodium salt (1:2))とカチオン性界面活性剤の１１−メタクリロキシウンデシルトリメチルアンモニウムブロマイド（ＰＣ−１１）とを用いた場合に、粒径２００〜５００ｎｍ程度のベシクル形成を確認するに至った。このベシクルについて光重合を試み、重合が進行したことを確認したが、詳細な特性については検討されていなかった。
【００１５】
すなわち、マイクロカプセルを調製可能な粒径の大きいものは得られていなかった。またベシクルの膜厚に関する知見も得られていなかった。
【００１６】
本発明は、以上の通りの事情に鑑みてなされたものであり、サイズ（粒径）の揃ったマイクロカプセルを調製できる新規なベシクルとそれを用いたマイクロカプセルを提供することを課題としている。
【課題を解決するための手段】
【００１７】
本発明者らは、重合性基を有する２鎖２親水基型界面活性剤として2-Propenoic acid, 2-methyl-, 1,1'-[1,2-ethanediylbis[[(3-sulfopropyl)imino](11-oxo-11,1-undecanediyl)]] amide, sodium salt (1:2)（ＰＧＡ−１１０２）等を用いた検討において、従来確認されたものとは著しく異なる粒径の大きいベシクルが得られ、更にそのベシクルの膜構造や光重合の実験結果による各種の知見から、本発明を完成するに至った。
【００１８】
すなわち本発明のベシクルは、２つの疎水鎖の各々にラジカル重合性基を有する２鎖２親水基型界面活性剤（Ａ）と、この２鎖２親水基型界面活性剤とは対称の電荷を有する界面活性剤（Ｂ）とを含有する外殻を有する中空形状であり、平均粒径１μｍ以上であることを特徴としている。
【００１９】
本発明のマイクロカプセルは、前記ベシクルの２鎖２親水基型界面活性剤（Ａ）を重合して得られる。
【発明の効果】
【００２０】
本発明によれば、２種類の薬剤を混合するだけで、サイズ（粒径）の揃った、マイクロカプセルが調製可能な大粒径で、かつ放出制御が可能で安定なベシクル及びマイクロカプセルを簡便な方法で得ることができる。
【図面の簡単な説明】
【００２１】
【図１】実施例１で調製した液体サンプルの光学顕微鏡像である。
【図２】実施例２で調製した液体サンプルの光学顕微鏡像である。
【図３】実施例３で調製した液体サンプルの光学顕微鏡像である。
【図４】実施例４で調製した液体サンプルの光学顕微鏡像である。
【図５】実施例５で調製した液体サンプルの光学顕微鏡像である。
【図６】実施例６で調製した液体サンプルの光学顕微鏡像である。
【図７】実施例７で調製した液体サンプルの光学顕微鏡像である。
【図８】実施例８で調製した液体サンプルの光学顕微鏡像である。
【図９】実施例１で調製した液体サンプルのＣｒｙｏ−ＳＥＭ像である。
【図１０】実施例１で調製した油溶性色素（ナイルレッド）を含有する沈降液の共焦点レーザー顕微鏡像である。
【図１１】実施例１で調製した水溶性色素（ローダミンＢ）を含有する沈降液の共焦点レーザー顕微鏡像である。
【図１２】比較例１で調製した液体サンプルの光学顕微鏡像である。
【図１３】実施例１で調製した光重合後の水溶液サンプルの光学顕微鏡像である（偏光）。
【図１４】実施例１で調製した光重合後の凍結乾燥サンプルのＳＥＭ観察像である。
【図１５】実施例１で調製した光重合後の凍結乾燥サンプルのＳＥＭ観察像である。
【図１６】実施例１で調製した光重合後の凍結乾燥サンプルのＳＥＭ観察像である。
【図１７】実施例２で調製した光重合後の水溶液サンプルの光学顕微鏡像である（偏光）。
【図１８】実施例２で調製した光重合後の凍結乾燥サンプルのＳＥＭ観察像である。
【図１９】実施例３で調製した光重合後の水溶液サンプルの光学顕微鏡像である（偏光）。
【図２０】実施例３で調製した光重合後の凍結乾燥サンプルのＳＥＭ観察像である。
【図２１】実施例４で調製した光重合後の水溶液サンプルの光学顕微鏡像である（偏光）。
【図２２】実施例４で調製した光重合後の凍結乾燥サンプルのＳＥＭ観察像である。
【図２３】実施例５で調製した光重合後の水溶液サンプルの光学顕微鏡像である（偏光）。
【図２４】実施例５で調製した光重合後の凍結乾燥サンプルのＳＥＭ観察像である。
【図２５】実施例６で調製した光重合後の水溶液サンプルの光学顕微鏡像である（偏光）。
【図２６】実施例６で調製した光重合後の凍結乾燥サンプルのＳＥＭ観察像である。
【図２７】実施例７で調製した光重合後の水溶液サンプルの光学顕微鏡像である（偏光）。
【図２８】実施例７で調製した光重合後の凍結乾燥サンプルのＳＥＭ観察像である。
【図２９】実施例８で調製した光重合後の水溶液サンプルの光学顕微鏡像である（偏光）。
【図３０】実施例８で調製した光重合後の凍結乾燥サンプルのＳＥＭ観察像である。
【図３１】比較例１で調製した光重合後の水溶液サンプルの光学顕微鏡像である（偏光）。
【図３２】比較例１で調製した光重合後の凍結乾燥サンプルのＳＥＭ観察像である。
【図３３】実施例１で調製した液体サンプル中のベシクルの粒子径を動的光散乱法（ＤＬＳ）によって測定した結果を示すチャートである。
【図３４】実施例１に大豆レシチンを添加して調製した液体サンプルの光学顕微鏡像である。
【図３５】実施例１に大豆レシチンを添加して調製した液体サンプルの光学顕微鏡像である（偏光）。
【図３６】実施例１に大豆レシチンを添加して調製した光重合後の水溶液サンプルの光学顕微鏡像である（偏光）。
【図３７】実施例１に大豆レシチンを添加して調製した光重合後の凍結乾燥サンプルのＳＥＭ観察像である。
【発明を実施するための形態】
【００２２】
以下に、本発明を詳細に説明する。
【００２３】
本発明のベシクルは、その外殻に、２つの疎水鎖の各々にラジカル重合性基を有する２鎖２親水基型界面活性剤（Ａ）と、この２鎖２親水基型界面活性剤とは対称の電荷を有する界面活性剤（Ｂ）とを含有する。
【００２４】
重合性基を有する２鎖２親水基型界面活性剤（Ａ）としては、２鎖２親水基含有陰イオン界面活性剤（Ａ１）を用いることができる。
【００２５】
この２鎖２親水基含有陰イオン界面活性剤（Ａ１）としては、次式（Ｉ）で表わされる化合物を用いることができる。
【００２６】
【化１】
0006619592.tif 000002
（式中、Ｒ１は水素原子又はメチル基を示し、Ｘは酸素原子、アミノ基（ＮＨ）、又はアミノメチル基（ＮＣＨ３）を示し、ｍは２〜８の整数を示し、ｎは８〜２０、好ましくは８〜１０の整数を示し、ｐは２〜６の整数を示す。）
この式（Ｉ）で表わされる２鎖２親水基含有陰イオン界面活性剤（Ａ１）は後述の実施例のように、ヒドロキシアルキルカルボン酸又はアミノアルキルカルボン酸と（メタ）アクリル酸のハロゲン化物とから合成される前駆体化合物と、ビスタウリン・２Ｎａとを脱水縮合剤の存在下に反応させることで合成することができる。また、特許文献５を参照して合成することができる。
【００２７】
２鎖２親水基含有陰イオン界面活性剤（Ａ１）としては、次式（Ｉ’）で表わされる化合物を使用することもできる。
【００２８】
【化２】
0006619592.tif 000003
（式中、Ｒ１１は不飽和脂肪酸の残基を示し、ｍは２〜８の整数を示し、ｐは２〜６の整数を示す。）
この式（Ｉ’）で表わされる２鎖２親水基含有陰イオン界面活性剤（Ａ１）は後述の実施例のように、不飽和脂肪酸と、ビスタウリン・２Ｎａとを脱水縮合剤の存在下に反応させることで合成することができる。
【００２９】
Ｒ１１の不飽和脂肪酸の残基としては、例えば、炭素数が好ましくは８〜１８、より好ましくは１０〜１７の直鎖で、かつ二重結合部位が１〜２個のアルケニル基等が挙げられる。
【００３０】
２鎖２親水基含有陰イオン界面活性剤（Ａ１）と共に使用される界面活性剤（Ｂ）としては、重合性基であるアクリロキシ基又はメタクリロキシ基で置換されていてもよい炭素数８〜１４の直鎖アルキル基を有するアルキルアンモニウム塩、炭素数８〜１４の直鎖アルケニル基を有するアルケニルアンモニウム塩等が挙げられる。これらのアルキルアンモニウム塩及びアルケニルアンモニウム塩において窒素原子に結合する他の３つの基は、２鎖２親水基含有陰イオン界面活性剤（Ａ１）との分子集合体中における混合状態が密にパッキングを形成すること等を考慮し適宜のものであってよいが、炭素数１〜３のもの、例えばメチル基等の炭素数１〜３のアルキル基や、グリセリル基等が考慮される。
【００３１】
重合性基であるアクリロキシ基又はメタクリロキシ基で置換されていてもよい炭素数８〜１４の直鎖アルキル基を有するアルキルアンモニウム塩としては、例えば、アルキルトリアルキルアンモニウム塩、アルキルモノグリセリルジアルキルアンモニウム塩、アクリロキシ又はメタクリロキシアルキルトリアルキルアンモニウム塩等が挙げられる。より具体的には、例えば、ドデシルトリメチルアンモニウムブロマイド（ＤＴＡＢ）、デシルトリメチルアンモニウムクロライド（ＤＴＡＣ）、オクチルトリメチルアンモニウムブロマイド（ＯＴＡＢ）、ドデシルモノグリセリルジメチルアンモニウムクロライド（ＤＭＧＤＡＣ）、１１−メタクリロキシウンデシルトリメチルアンモニウムブロマイド（ＰＣ−１１）等が挙げられる。
【００３２】
炭素数８〜１４の直鎖アルケニル基を有するアルケニルアンモニウム塩としては、例えば、アルケニルトリアルキルアンモニウム塩等が挙げられる。より具体的には、例えば、ミリストレイルトリメチルアンモニウムクロライド等が挙げられる。
【００３３】
また、重合性基を有する２鎖２親水基型界面活性剤（Ａ）としては、２鎖２親水基含有陽イオン界面活性剤（Ａ２）を用いることができる。
【００３４】
この２鎖２親水基含有陽イオン界面活性剤（Ａ２）としては、次式（ＩＩ）で表わされる化合物を用いることができる。
【００３５】
【化３】
0006619592.tif 000004
（式中、Ｒ２は水素原子又はメチル基を示し、ｑは２〜１２の整数を示し、ｒは８〜２０の整数を示す。Ｙはハロゲンイオンを示す。）
式（ＩＩ）で表わされる２鎖２親水基含有陰イオン界面活性剤（Ａ２）は、特許文献６を参照して合成することができる。例えば、高級アルコールのハロゲン化物と（メタ）アクリル酸のハロゲン化物を反応させて（メタ）アクリル酸高級アルコールエステルのハロゲン化物とし、次いでジアミンを反応させて４級塩化して合成される。
【００３６】
２鎖２親水基含有陽イオン界面活性剤（Ａ２）と共に使用される界面活性剤（Ｂ）としては、炭素数８〜１４の直鎖アルキル基を有するアルキル硫酸塩、炭素数８〜１４の直鎖アルケニル基を有するアルケニル硫酸塩、炭素数８〜１４の直鎖アルケニル基を有するポリオキシアルキレンアルケニルエーテル硫酸塩等が挙げられる。
【００３７】
炭素数８〜１４の直鎖アルキル基を有するアルキル硫酸塩としては、例えば、オクチル硫酸ナトリウム（ＳＯＳ）、ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）等が挙げられる。
【００３８】
炭素数８〜１４の直鎖アルケニル基を有するアルケニル硫酸塩としては、例えば、ミリストレイル硫酸ナトリウム等が挙げられる。
【００３９】
炭素数８〜１４の直鎖アルケニル基を有するポリオキシアルキレンアルケニルエーテル硫酸塩としては、例えば、ポリオキシアルキレンアルケニルエーテル硫酸アンモニウム等が挙げられる。
【００４０】
以上に説明したような、２つの疎水鎖の各々にラジカル重合性基を有する２鎖２親水基型界面活性剤（Ａ）と、この２鎖２親水基型界面活性剤とは対称の電荷を有する界面活性剤（Ｂ）とを用いて、ベシクルを水溶液中で調製する。
【００４１】
ベシクルは、２鎖２親水基型界面活性剤（Ａ）及び界面活性剤（Ｂ）を水中で混合することによって調製される。２鎖２親水基型界面活性剤（Ａ）及び界面活性剤（Ｂ）は、モル比で１：２程度となるように添加することが好ましい。これらの他に、構造が壊れなければ、形成助剤、安定化剤、バインダー等の他の成分を含んでもよい。また、（Ｂ）に重合性基を有する界面活性剤を用いることにより、より強固な膜となり得る。
【００４２】
形成助剤は、２鎖２親水基型界面活性剤（Ａ）及び／又は界面活性剤（Ｂ）と親和性を有し、静電的相互作用や疎水性相互作用によってベシクルに含有される。形成されたベシクルの電荷は、形成助剤を付加することによって制御され、ベシクルの安定性向上に寄与すると考えられる。さらに形成助剤を含有させることにより、得られたマイクロカプセルの内包率や徐放性は向上し得る。
【００４３】
形成助剤としては、特に限定されず、リン脂質、モノグリセリド、ジグリセリド、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ステロール類、ポリオキシアルキレンステロール類、ステロール類の脂肪酸エステル、脂肪酸、ポリオキシアルキリレン硬化ひまし油、ポリオキシアルキレンひまし油等が挙げられる。
【００４４】
リン脂質としては、天然系リン脂質でも、改質系リン脂質でも良い。例えば、天然系リン脂質としては、大豆レシチン、菜種レシチン、卵黄レシチン等が挙げられる。また、改質系リン脂質は、天然系から得られるリゾレシチンや分別レシチン等のレシチンや合成レシチン、ＰＥＧ修飾をしてさらに安定性を高めたＰＥＧ修飾レシチンが挙げられる。モノグリセリドとしては、ステアリン酸モノグリセリド、オレイン酸モノグリセリド、パルミチン酸モノグリセリド、ラウリン酸モノグリセリド等が挙げられる。ジグリセリドとしては、１、２−ジグリセリド、１，３−ジグリセリドがあり、１、２位、もしくは、１，３位の脂肪酸は、ステアリン酸、オレイン酸、リノール酸、パルミチン酸などの各種油脂組成による脂肪酸で形成されているものが挙げられる。ポリグリセリン脂肪酸エステルとしては、ジグリセリンモノステアリン酸エステル、ジグリセリンモノオレイン酸エステル、ジグリセリンジオレイン酸エステル、ジグリセリンモノイソステアリン酸エステル、テトラグリセリンモノステアリン酸エステル、テトラグリセリントリステアリン酸エステル、ヘキサグリセリンモノラウリン酸エステル、デカグリセリン酸ジステアリン酸エステル等が挙げられる。ステロール類としては、コレステロール、ステグマステロール、ラノステロール、エルゴステロール、フィトステロール等が挙げられる。ポリオキシアルキレンステロール類としては、ポリオキシエチレン（１０）コレステリルエーテル、ポリオキシエチレン（２０）コレステリルエーテル、ポリオキシエチレン（２０）コレスタリルエーテル、ポリオキシエチレン（３０）コレステリルエーテル、ポリオキシエチレン（１０）フィトステロールエーテル、ポリオキシエチレン（２０）フィトステロールエーテル、ポリオキシエチレン（２０）フィトスタロールエーテル、ポリオキシエチレン（３０）フィトステロールエーテル等が挙げられる。ステロール類の脂肪酸エステルとしては、ラウリン酸コレステロール、パルミチン酸コレステロール、ステアリン酸コレステロール、オレイン酸コレステロール、ラウリン酸フィトステロール、パルミチン酸フィトステロール、ステアリン酸フィトステロール、オレイン酸フィトステロール等が挙げられる。脂肪酸としては、ラウリン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、オレイン酸、イソステアリン酸等の飽和または不飽和の直鎖または分岐鎖を持つものが挙げられる。ポリオキシアルキリレン硬化ひまし油としては、ポリオキシエチレン（１０）硬化ひまし油、ポリオキシエチレン（２０）硬化ひまし油、ポリオキシエチレン（３０）硬化ひまし油等が挙げられる。ポリオキシアルキレンひまし油としては、ポリオキシエチレン（４）ひまし油、ポリオキシエチレン（１０）ひまし油、ポリオキシエチレン（２０）ひまし油、ポリオキシエチレン（３０）ひまし油等が挙げられる。
【００４５】
これらの形成助剤は、それぞれ単独で又は２種以上を混合して用いることができる。
形成助剤の含有量は、２鎖２親水基型界面活性剤（Ａ）と界面活性剤（Ｂ）の合計質量に対する質量比で、（Ａ）と（Ｂ）の合計質量：形成助剤の質量＝１：０．０１〜１：１００、好ましくは１：０．１〜１：１０、より好ましくは１：１〜１：５である。
【００４６】
安定化剤としては、アクリル系高分子、ビニル系高分子、ポリオキシアルキレン等の合成高分子、セルロース誘導体、加工澱粉、リグニン誘導体等の半合成高分子、天然高分子等が挙げられる。安定化剤は主に水に添加され、粘性等を高めることで、分散媒体中のベシクル及びマイクロカプセルの保存安定性を向上させる効果がある。
【００４７】
これらの安定化剤は、それぞれ単独で又は２種以上を混合して用いることができる。
安定化剤の含有量は、２鎖２親水基型界面活性剤（Ａ）と界面活性剤（Ｂ）の合計質量に対する質量比で、（Ａ）と（Ｂ）の合計質量：安定化剤の質量＝１：０．０１〜１：１００、好ましくは１：０．１〜１：１０、より好ましくは１：１〜１：５である。
【００４８】
アクリル系高分子としては、ポリアクリル酸ナトリウム、ポリメタクリル酸ナトリウム等が挙げられ、ビニル系高分子としては、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、酢酸ビニル共重合体等が挙げられ、ポリオキシアルキレンとしては、ポリオキシエチレン、ポリオキシプロピレン等が挙げられ、セルロース誘導体としては、カルボキシメチルセルロースナトリウム、デキストリン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセルロース、メチルエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース等が挙げられ、加工澱粉としては、変性澱粉、カルボキシメチルデンプン、可溶性澱粉等が挙げられ、リグニン誘導体としては、リグニンスルホン酸ナトリウム等が挙げられ、天然高分子としては、寒天やアラビアガム、ザンサンガム、トラガントガム、グアーガム、カラギーナン、アルギン酸、アルギン酸ナトリウム等の多糖類、カゼイン、カゼイン石灰、ゼラチン、コラーゲン等の蛋白質類等が挙げられる。
【００４９】
これらの形成助剤は、それぞれ単独で又は２種以上を混合して用いることができる。
【００５０】
形成助剤の含有量は、２鎖２親水基型界面活性剤（Ａ）と界面活性剤（Ｂ）の合計質量に対する質量比で、（Ａ）と（Ｂ）の合計質量：形成助剤の質量＝１：０．０１〜１：１００、好ましくは１：０．１〜１：１０、より好ましくは１：１〜１：５である。
【００５１】
その後、遠心分離を行うことで、濃縮したベシクルを分離形成することもできる。これらのベシクル溶液又は濃縮したベシクルは、超音波ホモジナイザーや撹拌ホモジナイザーによる高速攪拌分散処理、ジェットミルによる分散処理、高剪断撹拌による分散処理等でサイズの制御を行うことができる。
【００５２】
このようにして得られるベシクルは、平均粒径１μｍ以上のものであり、これを用いてマイクロカプセルを得ることができる。なお、ここで平均粒径は、市販のレーザー回折・動的光散乱式粒度分布測定装置を用いて、レーザー回折・動的光散乱法による粒度分布の測定値から、平均径（重量（体積）基準分布の平均径）として求めることができる。
【００５３】
このベシクルの膜を重合する際には、ベシクルを含む水溶液に水溶性重合開始剤を添加し、加熱又は紫外線照射によって２鎖２親水基型界面活性剤（Ａ）を重合させることにより行うことができる。重合開始剤に有効な条件下に置くと、容易に重合反応が進む。必要に応じて窒素やアルゴン等の不活性ガスによる脱気を行ってもよい。重合反応が終了すると、中空のポリマー粒子であるマイクロカプセルを得ることができる。
【００５４】
水溶性重合開始剤としては、特に限定されず、アルキルフェノン系等の公知のラジカル型光重合開始剤等を用いることができる。熱重合を行う際は、過硫酸カリウム、過硫酸アンモニウムやアゾ系の水溶性熱重合開始剤を用いることができる。
【００５５】
重合を行うことで、大粒径で、更に粒径が揃った、放出制御が可能で安定なマイクロカプセルを調製することができる。
【００５６】
調製された中空ポリマー粒子のマイクロカプセルは、水溶液のままでも使用できるが、ろ過や乾燥等により固体として取り出して使用することもできる。また、固体化した中空ポリマーを再び溶媒に分散して使用することもできる。
【００５７】
本発明のマイクロカプセルは、疎水部にも親水部にも多量の薬剤を内包できるため、香料、農薬、ドラッグデリバリー、化粧品、医薬品、インク等に応用することができる。
【実施例】
【００５８】
以下に、実施例により本発明を更に詳しく説明するが、本発明はこれらの実施例に何ら限定されるものではない。
＜２鎖２親水基型界面活性剤（Ａ）の合成＞
（合成例１）2-Propenoic acid, 2-methyl-, 1,1'-[1,2-ethanediylbis[[(3-sulfopropyl)imino](11-oxo-11,1-undecanediyl)]] amide, sodium salt (1:2)(ＰＧＡ−１１０２)の合成（式（Ｉ）で表わされるR1=CH3, X=NH, m=2, n=10, p=3）
11-Methacrylamidoundecanic acid （ＰＡ−１１）の合成
ＰＧＡ−１１０２の反応中間体であるＰＡ−１１を合成した。まず５００ｍＬ三口フラスコに11-Aminoundecanoic acid（３２．０ｇ，０．１６ｍｏｌ）、アセトン（超脱水）（３００ｍＬ）、炭酸水素ナトリウム（１６．０ｇ，０．１９ｍｏｌ）、及び重合禁止剤である2,5-Bis(1,1,3,3-tetfamethylbutyI) hydroquinone（０．２７ｇ，０．０００８ｍｏｌ）を加えスターラーで撹拌した。そこにMethacryloyl chloride（２４．０ｇ，０．２３ｍｏｌ）を徐々に滴下し、窒素雰囲気下で還流（４５℃，４ｈ）を行った。還流後、氷冷した水（４００ｍＬ）に反応液を投入し、２０分間撹拌した。その後、１２時間以上冷蔵庫で冷却し、析出した結晶をろ過した。この結晶を再び水で洗浄（撹拌）後、酢酸エチルで２回再結晶を行いＰＡ−１１の白色結晶を得た。収率は６０．７％であった。１Ｈ−ＮＭＲで構造を確認した。
【００５９】
【化４】
0006619592.tif 000005
3,3'-(ethane-1,2-diylbis(azanediyl))dipropane-1-sulfonic acid（ビスタウリン（ｍ＝２））の合成
ＰＧＡ−１１０２の反応中間体となるビスタウリン（ｍ＝２）を合成した。まず、１ＬナスフラスコにEthylenediamine（６．０ｇ，０．１０ｍｏｌ）とメタノール（１５０ｍＬ）を加え、氷冷下で1,3-Propanesultone（２５．０ｇ，０．２０ｍｏｌ）を徐々に滴下した。１時間撹拌した後に氷浴を外し、更に１．５時間室温で撹拌した。続いて、水（２５ｍＬ）、エタノール（４０ｍＬ）を加え、１２時間以上冷蔵庫で冷却すると白色結晶が析出した。この結晶を水で再結晶し、更に減圧乾燥により溶媒を留去するとビスタウリン（ｍ＝２）の白色結晶が得られた。収率は５５．６％であった。
【００６０】
【化５】
0006619592.tif 000006
実際にＰＧＡ−１１０２の合成に用いる場合は予め水酸化ナトリウムでＮａ塩としたSodium 3,3'-(ethane-1,2-diylbis(azanediyl))dipropane-1-sulfonate（以後、ビスタウリン（ｍ＝２）・２Ｎａ）を用いる。まずビスタウリン（ｍ＝２）（１０．０ｇ，０．０３ｍｏｌ）をメタノール（５０ｍＬ）に分散させ、水酸化ナトリウム（３．０ｇ，０．０８ｍｏｌ）を加えて３０分間撹拌した。続いてエタノール（１００ｍＬ）を加えると結晶が析出しはじめ、冷蔵庫で１２時間以上冷却した後に結晶をろ過した。最後に減圧乾燥で溶媒を留去し、目的の白色結晶を得た。
ＰＧＡ−１１０２の合成
重合性基を有する２鎖２親水基含有陰イオン界面活性剤ＰＧＡ−１１０２を合成した。まず、上記で合成したＰＡ−１１（２５．０ｇ，０．０９ｍｏｌ）を５００ｍＬ三口フラスコに加え、ＴＨＦ（４００ｍＬ）に溶解させた。続いて、脱水縮合剤であるＤＩＰＣ（１２．３ｇ，０．１０ｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（１３．２ｇ，０．１０ｍｏｌ）及び重合禁止剤である2,5-Bis(1,1,3,3-tetramethylbutyl)hydroquinone（０．１５ｇ，０．０００４５ｍｏｌ）をそれぞれ加え、窒素雰囲気で１時間還流した。そこに上記で合成したビスタウリン（ｍ＝２）・２Ｎａ（９．７ｇ，０．０２８ｍｏｌ）を加え、更に１２時間、４５℃で還流した。反応終了後、１２時間以上冷却するとシャーベット状の結晶が得られた。この結晶を１３０ｍＬのアセトンで２回（各１０ｍｉｎ）、１２５ｍＬのメタノールで２回（各１０ｍｉｎ）、１００ｍＬの水で１回（３０ｍｉｎ）洗浄（スターラーで撹拌後にろ過）した。この時、アセトンでは残渣を、メタノール・水では渡液を回収し、メタノールの場合はエバポレーターで、水の場合は凍結乾燥で溶媒を留去した。
【００６１】
ここで得られた結晶を再度３０ｍＬのアセトンで６回（各３０ｍｉｎ）洗浄し、ろ過した残渣を回収することで目的の白色結晶を得た。収率は２９．４％であった。１Ｈ−ＮＭＲ及びＦＡＢ−ＭＡＳＳ及び元素分析にて構造・純度を確認した。
【００６２】
【化６】
0006619592.tif 000007
（合成例２）2-Propenoic acid, 2-methyl-, 1,1'-[1,4-buthanediylbis[[(3-sulfopropyl)imino](11-oxo-11,1-undecanediyl)]] amide, sodium salt (1:2)（ＰＧＡ−１１０４）の合成（式（Ｉ）で表わされるR1=CH3, X=NH, m=4, n=10, p=3）
ＰＡ−１１の合成は合成例１と同様に行った。
3,3'-(buthane-1,2-diylbis(azanediyl))dipropane-1-sulfonic acid（ビスタウリン（ｍ＝４））の合成
ＰＧＡ−１１０４の反応中間体となるビスタウリン（ｍ＝４）を合成した。まず、５００ｍＬ四つ口フラスコに１、４−ジアミノブタン（１１．１ｇ，０．１２６ｍｏｌ）とメタノール１５０ｍＬを加え、０〜５℃で1,3-Propanesultone（２５．０ｇ，０．２０ｍｏｌ）を１時間かけて滴下した。その後氷浴を外し室温で３時間反応した後、更に３５℃まで昇温し１５時間攪拌した。ＴＬＣで原料アミンのスポットの消失を確認した後、室温で結晶をろ過して、更に減圧乾燥により溶媒を留去するとビスタウリン（ｍ＝４）の３５ｇの白色結晶が得られた。収率は８７．５％であった。
【００６３】
【化７】
0006619592.tif 000008
ＰＧＡ−１１０４の合成に用いるため、予め水酸化ナトリウムでＮａ塩としたSodium 3,3'-(buthane-1,2-diylbis(azanediyl))dipropane-1-sulfonate（以後、ビスタウリン（ｍ＝４）・２Ｎａ）を用いる。まずビスタウリン（ｍ＝４）（３５ｇ，０．１１ｍｏｌ）をメタノール１００ｍＬに分散させ、水酸化ナトリウム（９．２ｇ，０．２３ｍｏｌ）を加えて室温で３時間撹拌した。続いてエタノール（１００ｍＬ）を加えると結晶が析出しはじめ、冷蔵庫で１２時間以上冷却した後に結晶をろ過した。最後に減圧乾燥で溶媒を留去し、目的の白色結晶を２８．５ｇ（収率６５．８％）を得た。
ＰＧＡ−１１０４の合成
重合性基を有する２鎖２親水基含有陰イオン界面活性剤ＰＧＡ−１１０４を合成した。まず、合成例１で合成したＰＡ−１１（２２．９ｇ，０．０８５ｍｏｌ）を５００ｍＬ四口フラスコに加え、ＭＥＫ４５０ｍＬに溶解させた。続いて、脱水縮合剤であるＤＣＣ（１８．４ｇ，０．０８９ｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（１２．０ｇ，０．０８９ｍｏｌ）及び重合禁止剤である2,5-Bis(1,1,3,3-tetramethylbutyl)hydroquinone（０．４ｇ，０．０００１１９ｍｏｌ）をそれぞれ加え、窒素雰囲気で１時間還流した。そこに上記で合成したビスタウリン（ｍ＝４）２Ｎａ（１３．４ｇ，０．０３４ｍｏｌ）を加え、更に４時間還流して反応した。反応終了後、冷却してろ過すると結晶が得られた。この結晶を冷メタノールで２回洗浄して、ろ液をエバポレーター濃縮し、クロロホルム：メタノール＝７：３でカラムクロマトグラフィー精製を行い、ＭＰ−Ｃａｒｏｂｏｎａｔｅの樹脂で精製後にメタノール：アセトン（２：５）で再沈殿を行い、目的の白色結晶を１．８ｇ得た。収率は６．０％であった。１Ｈ−ＮＭＲ及び元素分析にて構造・純度を確認した。
【００６４】
【化８】
0006619592.tif 000009
（合成例３）2-Propenoic acid, 2-methyl-, 1,1'-[1,2-ethanediylbis[[(3-sulfopropyl)imino](12-oxo-12,1-dodecanediyl)]] ester, sodium salt (1:2)(ＰＧ−１２０２)の合成（式（Ｉ）で表わされるR1=CH3, X=O, m=2, n=11, p=3）
ビスタウリン（ｍ＝２）の合成は合成例１と同様に行った。
【００６５】
12-Methacryloxy dodecanoic acid （ＰＥ−１２）の合成
２００ｍＬ三口フラスコに、１２-ヒドロキシラウリン酸(２５ｇ，０．１１ｍｏｌ)、ピリジン (１０．１ｇ，０．１３ｍｏｌ)、及び重合禁止剤である2,5-Bis(1,1,3,3-tetfamethylbutyI) hydroquinone(０．１６ｇ，０．０００４８ｍｏｌ)を加え、ＴＨＦ１００ｍＬで溶解させた。氷冷下で、Methacryloyl chloride(１３．３ｇ，０．１３ｍｏｌ)をゆっくり滴下し、滴下終了後室温にて５時間反応させた。ピリジンは反応過程において発生する塩化水素を、塩酸塩にして取り除くために使用した。
【００６６】
反応後、生成したピリジン塩酸塩をろ過して除き、エバポレーターでＴＨＦを留去した。ピリジンを完全に取り除くために、５％塩酸溶液、ジエチルエーテルを加え、分液操作を行い、有機層を得た。エバポレーターにより、ジエチルエーテルを留去し、得られた溶液をカラムクロマトグラフィーにより精製した。カラムクロマトグラフィーの充填剤には、シリカゲル（Ｃ−１００）を、溶離液にはヘキサン：酢酸エチル（２：１）混合溶媒を用いた。精製後、溶媒を留去し、白黄色の粘性溶液を得た。収率は７０％であった。
12-Methacryloxy dodecanoic chloride （ＰＥＣｌ−１２）の合成
ＰＧ−１２０２の合成に用いるため、予めオキサリルクロリドでＰＥ−１２を酸クロライドとした。まず、２００ｍＬナス型フラスコに、上記で合成したＰＥ−１２ (２３．５ｇ，０．０８３ｍｏｌ)を加え、氷冷下において、滴下ロートでオキサリルクロリド (４１．２ｇ，０．３３ｍｏｌ)をゆっくり滴下した。滴下終了後は常温にて３時間反応させた。未反応のオキサリルクロリドを除去するため、エバポレーターで減圧留去した。収率は７０％であった。
ＰＧ−１２０２の合成
重合性基を有する２鎖２親水基含有陰イオン界面活性剤ＰＧ−１２０２を合成した。
【００６７】
まず、３００ｍＬ三口フラスコに、ビスタウリン（ｍ＝２）（１０ｇ，０．０３３ｍｏｌ）、及び重合禁止剤である2,5-Bis(1,1,3,3-tetfamethylbutyI) hydroquinone(０．１６ｇ，０．０００４８ｍｏｌ)を加え、水：アセトン（７：３）混合溶媒２００ｍＬで溶解させた。水酸化ナトリウム水溶液を滴下ロートで滴下し、溶液のｐＨを９〜１０に調整させた後、氷浴中で０℃以下にした。次に滴下ロートで、上記で合成したＰＥＣｌ−１２(２２．１ｇ，０．０６６ｍｏｌ)をゆっくり滴下させた。このとき、溶液をｐＨ７．５〜１０に保つように、随時水酸化ナトリウムを滴下し反応を行った。滴下終了後、２４時間反応させ、凍結乾燥により溶媒を除去し、黄白色の結晶を得た。得られた結晶は、カラムクロマトグラフィーによって精製した。カラムクロマトグラフィーの充填剤には、シリカゲル（Ｃ−１００）を、溶離液にはヘキサン：酢酸エチル（２：１）混合溶媒、クロロホルム：メタノール（５：２）混合溶媒を用いた。精製後、溶媒を留去し、白色の結晶を得た。収率は１５％であった。
【００６８】
【化９】
0006619592.tif 000010
（合成例４）1-Propanesulfonic acid, 3,3'-[1,2-ethanediylbis[(1-oxo(ω-Hendecenoyl))imino]]bis-, sodium salt (1:2)（Ｐ−Ｕ−０２）の合成（式（Ｉ’）で表わされるR11=C10H19, m=2, p=3）
ビスタウリン（ｍ＝２）（ビスタウリン（ｍ＝２）・２Ｎａ）の合成は合成例１と同様に行った。
Ｐ−Ｕ−０２の合成
重合性基を有する２鎖２親水基含有陰イオン界面活性剤Ｐ−Ｕ−０２を合成した。まず、ウンデセン酸（２５．０ｇ，０．１４ｍｏｌ）を５００ｍＬ四口フラスコに加え、ＴＨＦ（４２０ｍＬ）に溶解させた。続いて、脱水縮合剤であるＤＩＰＣ（１７．９ｇ，０．１４ｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（１９．２ｇ，０．１４ｍｏｌ）及び重合禁止剤である2,5-Bis(1,1,3,3-tetramethylbutyl)hydroquinone（０．６０ｇ，０．００１８ｍｏｌ）をそれぞれ加え、窒素雰囲気で１時間還流した。そこに上記で合成したビスタウリン（ｍ＝２）・２Ｎａ（１４．９ｇ，０．０４３ｍｏｌ）を加え、更に４時間、６５℃で還流した。反応終了後、１２時間以上冷却するとシャーベット状の結晶が得られた。この結晶を１４０ｍＬのアセトンで２回（各１０ｍｉｎ）洗浄（スターラーで撹拌後にろ過）した。得られた残渣を冷メタノールで２回洗浄して、ろ液をエバポレーター濃縮し、クロロホルム：メタノール（７：３）混合溶媒でカラムクロマトグラフィー精製を行い、得られた結晶を２回水洗（各５０ｍｌ）し、ろ液から溶媒をエバポレーターで留去することで目的の白色結晶を得た。収率は９．４％であった。１Ｈ−ＮＭＲ及び元素分析にて構造・純度を確認した。
【００６９】
【化１０】
0006619592.tif 000011
（合成例５）1-Propanesulfonic acid, 3,3'-[1,2-ethanediylbis[(1-oxo(9-cis,12-cis-Octadecenoyl))imino]]bis-, sodium salt (1:2)（Ｐ−Ｌ−０２）の合成（式（Ｉ’）で表わされるR11=C17H31, m=2,  p=3）
ビスタウリン（ｍ＝２）（ビスタウリン（ｍ＝２）・２Ｎａ）の合成は合成例１と同様に行った。
Ｐ−Ｌ−０２の合成
重合性基を有する２鎖２親水基含有陰イオン界面活性剤Ｐ−Ｌ−０２を合成した。まず、リノール酸（２５．０ｇ，０．０８ｍｏｌ）を５００ｍＬ四口フラスコに加え、ＴＨＦ（５７０ｍＬ）に溶解させた。続いて、脱水縮合剤であるＤＩＰＣ（１１．５ｇ，０．０９ｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（１２．３ｇ，０．０９ｍｏｌ）及び重合禁止剤である2,5-Bis(1,1,3,3-tetramethylbutyl)hydroquinone（０．５０ｇ，０．００１５ｍｏｌ）をそれぞれ加え、窒素雰囲気で１時間還流した。そこに上記で合成したビスタウリン（ｍ＝２）・２Ｎａ（１４．９ｇ，４．３×１０−２ｍｏｌ）を加え、更に５時間、６５℃で還流した。反応終了後、冷却してろ過すると結晶が得られた。この結晶を２５０ｍＬのアセトンで２回（各１０ｍｉｎ）洗浄し、ろ過して得られた残渣を６０ｍＬのメタノールで３０℃に加熱して溶解させた。この溶液に２００ｍｌのアセトンを加えて３時間冷蔵し、析出した結晶をろ別した。このろ液をエバポレーターで濃縮後、クロロホルム：メタノール（７：３）混合溶媒でカラムクロマトグラフィー精製を行い、溶媒をエバポレーターで留去することで目的の白色結晶を得た。収率は１７．７％であった。１Ｈ−ＮＭＲ及び元素分析にて構造・純度を確認した。
【００７０】
【化１１】
0006619592.tif 000012
（合成例６）Hexanediyl-1,6-bis(dimethyl(11-methacryloyloxy)undecylammonium bromide)（ＰＣ１１−６−１１）の合成（式（II）で表わされるR2=CH3, q=6, r=11, Y=Br）
Bromoundecyl methacrylateの合成
１０００ｍｌ三口フラスコに11-Bromo-1-undecanol（８０ｇ，０．３２ｍｏｌ）、ピリジン（２９．２ｇ，０．３７ｍｏｌ）、4-methoxyphenol（０．２８ｇ）を加え、ＴＨＦ（３００ｍｌ）で溶解させた。室温、窒素雰囲気下でMethacryloyl chloride（３８ｇ，０．３６ｍｏｌ）を滴下ロートにより少しずつ加え、５時間、11-Bromo-1-undecanolと反応させた。ピリジンは反応過程において、発生する塩化水素を塩酸塩にして除くために、4-methoxyphenolは反応中の重合を防ぐために使用した。反応後、生成したピリジン塩酸塩をろ過して除き、エバポレーターにより、THFを除去した。次に得られた溶液をカラムクロマトグラフィーにより精製した。カラムクロマトグラフィーの充填剤にはシリカゲル(Ｃ−１００)を、溶離液にはヘキサン：酢酸エチル（２：１）混合溶媒を用いた。精製後、溶媒を飛ばすと、うす黄色味がかった透明な溶液が得られた。得られた11-Bromoundecyl methacrylateは常温では不安定なため、４℃で保存した。１Ｈ−ＮＭＲより目的物を確認した。
【００７１】
【化１２】
0006619592.tif 000013
ＰＣ１１−６−１１の合成
重合性２鎖２親水基含有陽イオン界面活性剤ＰＣ１１−６−１１を合成した。まず、３００ｍｌナス型フラスコに11-Bromoundecyl methacrylate （２５ｇ，０．０７６ｍｏｌ）、N,N,N',N'-Tetramethyl-1,6-hexanediamine（６．５ｇ，０．０４２ｍｏｌ）、4-methoxyphenol（０．２１ｇ）を加え、脱水エタノール１５０ｍｌにより溶解させた。反応は８０℃、４８時間の条件で行った。反応後、得られた生成物をアセトン・メタノール混合溶媒で再結晶した。再結晶は５回繰り返し、減圧乾燥により目的の結晶を得た。収率は７２％であった。１Ｈ−ＮＭＲ，ＦＡＢ−ＭＡＳＳ、元素分析より目的物の構造と純度を確認した。
【００７２】
【化１３】
0006619592.tif 000014
＜実験と評価＞
１．ベシクル形成確認（目視、光学顕微鏡、ＤＬＳ、Ｃｒｙｏ−ＳＥＭ、色素法）
合成例１〜６の化合物を用いて重合性２鎖２親水基型界面活性剤：１鎖型界面活性剤（モル比１：２）の１質量％水溶液を実施例３及び実施例８は５０℃で加熱攪拌して調製し、そのほかは室温で攪拌して調製し、白濁した液体の目視観察、光学顕微鏡観察（カールツァイス製、Axio Imager.A2m）、Ｃｒｙｏ−ＳＥＭ（日立ハイテクノロジー製、S-3400N）、観察を行い、ベシクルの形成を確認した。
【００７３】
比較例１は、非特許文献３を参考とした。詳細には、ＶＢＴＡＣ（Vinylbenzyltrimethylammonium chloride、Aldrich）０．１２８０ｇ、ＳＤＳ（Sodium dodecyl Sufate、ナカライテスク株式会社）０．１１５４ｇ、ＤＶＢ（divinylbenzene、東京化成）０．０４３６ｇ（モル比ＶＢＴＡＣ:ＳＤＳ:ＤＶＢ＝６０:４０:３０）を１０ｍｌのメスフラスコに入れ、超純水で１０ｍｌまでメスアップを行い、水溶液を調製し、上記と同様の方法でベシクルの形成を確認した。
【００７４】
目視観察の結果、実施例１〜８の水溶液は白濁することが確認され、経時又は遠心分離で沈降し、２層分離することが確認された。また、ボルテックスミキサーや超音波分散等の処理を行うことで再分散し、光学顕微鏡観察（１００〜４００倍）でベシクルと考えられる球状の会合体が観察された（図１〜８）。実施例１〜８の水溶液は、動的光散乱（ＤＬＳ、ゼータ電位粒径測定システム、大塚電子製、ELS-Z2又は粒径測定システム、Particle Sizing System製、NICOMP380-ZLS）による粒子径測定においても１μｍ以上の均一の粒子径を持った粒子が観察された（図３３、表１）。さらに実施例１の水溶液はＣｒｙｏ−ＳＥＭ観察より数μｍ程度の球状の会合体であることが確認された（図９）。
【００７５】
比較例１は、目視観察より均一な白濁液体となり、光学顕微鏡観察（図１２）、動的光散乱による粒子径測定（表２）により、１μｍ以下の球状の会合体であることが観察された。
蛍光色素法
実施例１で得られた会合体がベシクルであることを確認するため、実施例１で得た水溶液にそれぞれナイルレッド（油溶性蛍光色素：蛍光波長５８０ｎｍ）又はローダミンＢ（水溶性蛍光色素：蛍光波長６３７ｎｍ）を０．０１ｍｇ／Ｌとなるように加えて、攪拌し、遠心分離（３５００ｒｐｍ、２０ｍｉｎ）を行い沈降液について共焦点レーザー顕微鏡（OLYMPUS, FV1000IX81）を用いて各波長で観察を行った。その結果を図１０、１１に示す。
【００７６】
図１０、１１の結果より、油溶性色素であるナイルレッドは、膜の内部に浸透し、水溶性蛍光色素であるローダミンＢは膜の内部や外部に存在することが判明し、実施例１の水溶液は、目視、光学顕微鏡、ＤＬＳ、Ｃｒｙｏ−ＳＥＭ観察で観察された結果も併せてベシクルであることが確認された。
【００７７】
実施例２〜８については、蛍光色素法の代替法として、色素法によるベシクル確認を行った。
色素法
油溶性色素確認：１質量％水溶液５ｍｌにオイルオレンジＳＳ ０．５ｍｇを溶解させ、攪拌する。経時で、ベシクルが集合し、沈降したベシクルが赤色であれば、油溶性色素が膜内に保持していると考えられる。
【００７８】
水溶性色素確認：１質量％水溶液５ｍｌにメチレンブルー０．５ｍｇを溶解させ、攪拌する。経時で、ベシクルが集合し、沈降したベシクルが青色に呈していれば、水溶性色素がベシクルの内水相に保持されていると考えられる。つまり油溶性色素が膜の内部に浸透し、水溶性色素が内水相に保持されていることが確認されれば、ベシクル形成していると結論付けられる。
【００７９】
実施例２〜８は経時でベシクルが集合し、沈降したものが着色していたため、目視、光学顕微鏡、ＤＬＳの結果も併せてベシクルであることが確認された。実施例５と比較例１は、均一溶液なので沈降はなかったが、どちらの色素もきれいに可溶化していたため、ベシクル形成していると考えられる。
これらの結果は表１、２にまとめて結果を示した。
【００８０】
【表１】
0006619592.tif 000015
【００８１】
【表２】
0006619592.tif 000016
２．重合（目視、ＮＭＲ、偏光顕微鏡、ＳＥＭ）
実施例１は、スクリューキャップ付石英セルに、ＤＴＡＢ（２．９０×１０−２ｇ）、ＰＧＡ−１１０２（２．１０×１０−２ｇ）、ＩＲＧＡＣＵＲＥ２９５９（ラジカル型光重合開始剤：1-[4-(2-ヒドロキシエトキシ)-フェニル]-2-ヒドロキシ-2-メチル-1-プロパン-1-オン）（５．０×１０−４ｇ）、脱気水（４．９５ｍＬ）を加え、ボルテックスミキサーで撹拌し、ベシクル水溶液を得た。溶媒となる水は、窒素バブリングを行い、超音波脱気を行った脱気水を用いた。
【００８２】
このベシクル水溶液に、窒素雰囲気下、Ｈｇ−Ｘｅランプ（三永電機製作所 UVF-204S）を光源に用いて透過光の波長が３６５ｎｍ換算で、ＵＶ照度が５ｍＷ／ｃｍ２となるよう調製し、１５ｍｉｎの条件で紫外線照射した。実施例２〜８については、項目１で調製したベシクル水溶液３ｍｌを用いてＩＲＧＡＣＵＲＥ２９５９（３．０×１０−４ｇ）を加え、超音波で１分分散し、得られた重合ベシクル水溶液の凍結乾燥を行い、このベシクル水溶液にＬＥＤランプ（LUMEN DYNAMICS社製、OminiCure LX400、３６５ｎｍＬＥＤヘッド）を光源に用いてＵＶ照度と紫外線照射時間を表３に示した値となるよう調製し紫外線照射した。
【００８３】
重合は、得られた重合後のベシクル水溶液を凍結乾燥し、重合基由来のプロトンに起因する１Ｈ−ＮＭＲのピークの減少又は消失により確認した。また、凍結乾燥後のサンプルをエタノールに再分散させて、光学顕微鏡の偏光で観察した。同様にエタノールで分散した少量サンプルをグリッドに載せ、減圧乾燥後に金で蒸着を行い、走査型電子顕微鏡（ＳＥＭ）（日立製作所 S-510又は日立製作所 TM3000）を用いてＳＥＭ観察を行った。重合条件及び重合の確認結果を表３及び４に示した。
【００８４】
【表３】
0006619592.tif 000017
【００８５】
【表４】
0006619592.tif 000018
その結果、目視観察により、重合が進行することを確認した。また、１Ｈ−ＮＭＲより重合基由来のプロトンに起因するピークの消失が確認され、重合が進行していることが観察された。また、凍結乾燥後のサンプルをエタノールに再分散させて、光学顕微鏡の偏光で観察したところ、膜の部分の偏光が確認され、重合していることが判明した（図１３、１７、１９、２１、２３、２５、２７、２９、３１）。また、ＳＥＭ観察より、マイクロカプセルの生成が確認された（図１４〜１６、１８、２０、２２、２４、２６、２８、３０、３２）。図２０に示すように界面活性剤（Ｂ）として重合性基を有する界面活性剤を用いることにより、強固な膜となり得ることがわかった。
３．内包率及び徐放性（色素法）
項目１の実施例１で得られたマイクロカプセル１質量％水溶液３ｍｌにオイルオレンジＳＳ ０．３ｍｇを加え、溶け残ったオイルオレンジＳＳを除くために０．８μｍのフィルターでろ過し、ろ液を１０ｍＷ ３０分で光重合を行った。重合後に１３５００ｒｐｍ、２０分で遠心分離を行い、オイルオレンジＳＳが可溶化した上澄み水溶液を取り除き、さらに水を３ｍｌ加え、再度遠心分離を行って、上澄みを取り除いた後、凍結乾燥でサンプルを得た。その後、ＥｔＯＨ６ｍｌを加えてオイルオレンジＳＳの抽出を行い直後の抽出液の４８０ｎｍの吸光度をＵＶ−Ｖｉｓ吸光光度計（JASCO製 VA‐055）で測定した。徐放性を確認するため、超音波を１分間当てた後の抽出液の吸光度（振とう機（ヤマト科学製 BT‐100）で２５℃、２０ｒｐｍ、２４時間処理後の吸光度）を測定し、オイルオレンジＳＳの濃度を測定した。
【００８６】
比較例として、実施例と同様に濃度が１質量％となるようＶＢＴＡＣ ０．４５１７ｇ（２．１３ｍｍｏｌ）、ＳＤＳ ０．４１０８ｇ（１．４２ｍｍｏｌ）、ＤＶＢ ０．１３８３ｇ（１．０６ｍｍｏｌ）、ＶＡ−０４４（低温型水溶性アゾ系重合開始剤、2,2'-Azobis[2-(2-imidazolin-2-yl)propane］dihydrochloride）０．０６０８ｇ、オイルオレンジＳＳ １０．０ｍｇを１００ｍｌのメスフラスコに入れ、超純水でメスアップしてよく攪拌した。そのうち１０ｍｌを溶け残ったオイルオレンジＳＳを除くために０．８μｍのフィルターでろ過し、ろ液を５０℃１時間で攪拌しながら熱重合を行った。そのうち重合ベシクル溶液３ｍｌを採取し、その後は実施例１の重合後の操作と同様の操作で、吸光度を測定して比較した。結果を表５及び６に示した。
【００８７】
【表５】
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【００８８】
【表６】
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その結果、実施例１及び比較例１の重合後の粒子はどちらもオレンジ色の粒子であったが、実施例１のＥｔＯＨ抽出液の吸光度から算出された濃度は、２．０ｐｐｍであり（抽出率４％）、比較例１のＥｔＯＨ抽出液の濃度は１３．９５ｐｐｍ（抽出率２７．９％）であった。このことから、比較例１の重合カプセルは粒子が小さくかつ多くの凝集体があるため、すぐに溶出してしまったのに対し、実施例１の重合カプセルは、オイルオレンジＳＳを取り込んで重合したために容易に溶出せず、カプセル内に保持していることが考えられ、抽出率が低い、言い換えると内包率が高いことが確認された。また超音波１分後の実施例１のＥｔＯＨ抽出液の濃度は、３．１８ｐｐｍ（抽出率６．４％）まで上昇し、エネルギーをかけることで徐放性が確認されたのに対し、比較例１は、１４．１６ｐｐｍ（抽出率２８．３％）とわずかな上昇に留まり、ほぼ最初にオイルオレンジＳＳが抽出されてしまったと考えられ、徐放性はほとんどないと考えられる。
【００８９】
※抽出率＝１００×（ＥｔＯＨ抽出液の濃度）／（重合前に仕込んだオイルオレンジＳＳをエタノール溶解させた時の濃度＝５０ｐｐｍ）
４．形成助剤として大豆レシチンを使用したベシクル形成及びマイクロカプセルの調製
実施例１のＰＧＡ−１１０２：ＤＴＡＢ（モル比１：２）の１質量％水溶液１０ｍｌを超音波脱気を行った脱気水を用いて調製し、そこに形成助剤として、ＰＧＡ−１１０２（Ａ）とＤＴＡＢ（Ｂ）との合計質量に対して、大豆レシチン（和光試薬）を、ＰＧＡ−１１０２とＤＴＡＢの合計質量：大豆レシチンの質量＝１：１となるように添加し、５０℃で加熱しながら攪拌してベシクルを調製した。このベシクルを光学顕微鏡と光学顕微鏡の偏光で観察した結果を図３４、３５に示す。次にこのベシクル溶液を２．５ｍｌ取り、ＩＲＧＡＣＵＲＥ２９５９（ラジカル型光重合開始剤：1-[4-(2-ヒドロキシエトキシ)-フェニル]-2-ヒドロキシ-2-メチル-1-プロパン-1-オン）（２．５×１０−４ｇ）を加え窒素雰囲気下、このベシクル水溶液にＬＥＤランプ（LUMEN DYNAMICS社製、OminiCure LX400、３６５ｎｍＬＥＤヘッド）を光源に用いてＵＶ照度１００ｍＷ／ｃｍ２で１５分間紫外線照射した。重合後は、重合後のベシクル水溶液を遠心分離で上澄みを数回洗浄して、光学顕微鏡の偏光で観察した結果を図３６に示した。少量を取って凍結乾燥を行い、凍結乾燥後のサンプルの１Ｈ−ＮＭＲを測定し、重合基由来のプロトンに起因する１Ｈ−ＮＭＲのピークの減少又は消失により重合を確認した。また、沈降した重合後のベシクルの少量サンプルをグリッドに載せ、減圧乾燥後に金で蒸着を行い、走査型電子顕微鏡（ＳＥＭ）（日立製作所 TM3000）を用いてＳＥＭ観察を行った。結果を図３７に示す。
【００９０】
ＰＧＡ−１１０２（Ａ）とＤＴＡＢ（Ｂ）の合計質量：大豆レシチンの質量＝１：１において、図３４に示すように光学顕微鏡観察結果よりベシクル形成が確認された。図３５に示すように偏光顕微鏡観察においてもマルターゼクロスといわれるベシクルに特徴的な構造が観察された。
【００９１】
その結果、重合によってマイクロカプセルの偏光顕微鏡観察を行ったところ、図３６に示すように重合後にマイクロカプセルが固定化されていることが判明し、ＮＭＲにより重合が完了していることも確認できた。図３７に示したＳＥＭ観察により、マイクロカプセルの形状が確認された。
５．オイルオレンジＳＳ内包率（大豆レシチン使用）
項目４で得られた大豆レシチンを形成助剤として使用したベシクル水溶液２．５ｍｌにオイルオレンジＳＳ ０．２５ｍｇを加え、さらにＩＲＧＡＣＵＲＥ２９５９（ラジカル型光重合開始剤：1-[4-(2-ヒドロキシエトキシ)-フェニル]-2-ヒドロキシ-2-メチル-1-プロパン-1-オン）２．５×１０−４ｇを加え、ＵＶ照度１００ｍＷ／ｃｍ２ １５分で光重合を行った。重合後、２ｍｌを取り出し、１３５００ｒｐｍ、１０分で遠心分離を行い、オイルオレンジＳＳが可溶化した上澄み水溶液を取り除き、さらに水を２ｍｌ加え、再度遠心分離を行って、上澄みを取り除く操作を2回繰り返した後、凍結乾燥でサンプルを得た。その後、ＥｔＯＨ４ｍｌを加えてオイルオレンジの抽出を行い直後の抽出液の４８０ｎｍの吸光度をＵＶ−Ｖｉｓ吸光光度計（JASCO製 VA‐055）で測定した。内包率を確認するため、超音波を１分間当てた後の抽出液の吸光度（振とう機（ヤマト科学製 BT‐100）で２５℃、４０ｒｐｍ、２４時間処理後の吸光度）を測定し、オイルオレンジＳＳの濃度を測定した。
【００９２】
その結果、重合後の粒子は形成助剤の有無に関わらずどちらもオレンジ色の粒子であった。ＥｔＯＨ抽出液を観察すると、実施例１はほとんどマイクロカプセルが着色したまま残っていたのに対して、大豆レシチンを添加したマイクロカプセルは脱色していた。吸光度から算出された濃度は、５０ｐｐｍであり（抽出率１００％）、実施例１のＥｔＯＨ抽出液の濃度は３．１８ｐｐｍ（抽出率６．４％）であったこのことから、大豆レシチンを形成助剤として用いることで内包率が劇的に向上していることがわかった。
【００９３】
※抽出率＝１００×（ＥｔＯＨ抽出液の濃度）／（重合前に仕込んだオイルオレンジＳＳをエタノール溶解させた時の濃度＝５０ｐｐｍ）
６．メチレンブルー徐放性（大豆レシチン使用）
項目４で得られた大豆レシチンを形成助剤として使用したベシクル水溶液２．５ｍｌにメチレンブルー ０．２５ｍｇを加え、さらにＩＲＧＡＣＵＲＥ２９５９（ラジカル型光重合開始剤：1-[4-(2-ヒドロキシエトキシ)-フェニル]-2-ヒドロキシ-2-メチル-1-プロパン-1-オン２．５×１０−４ｇを加え、ＵＶ照度１００ｍＷ／ｃｍ２ １５分で光重合を行った。重合後、２ｍｌを取り出し、１３５００ｒｐｍ、１０分で遠心分離を行い、メチレンブルーが可溶化した上澄み水溶液を取り除き、さらに水を２ｍｌ加え、再度遠心分離を行って、上澄みを取り除く操作を2回繰り返し、ベシクルに含有されていないメチレンブルーの洗浄を行った。
【００９４】
その後、水を２ｍｌ入れて激しく1分攪拌を行い、１３５００ｒｐｍ、１０分で遠心分離を行って上澄みを採取する操作を３回行い、メチレンブルーの徐放性を確認した。得られた１〜３回目の上澄み液の６６４ｎｍの吸光度をＵＶ−Ｖｉｓ吸光光度計（JASCO製 VA‐055）で測定した。メチレンブルーの濃度を算出した。
【００９５】
その結果、重合後の粒子は青色の粒子であった。上澄みの吸光度から算出された濃度は、１回目が、１．０９μmol/Lであり、2回目が１．２５μmol/Lであり、3回目が１．４８μmol/Lであり、外力を加えることでコンスタントにメチレンブルーが徐放していることが確認された。この重合カプセルは、大豆レシチンを取り込んで重合したために容易に溶出せず、カプセル内に保持していることが考えられる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５】
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【図２６】
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【図２７】
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【図２８】
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【図２９】
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【図３０】
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【図３１】
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【図３２】
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【図３３】
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【図３４】
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【図３５】
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【図３６】
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【図３７】
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