(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ
【化１】
0006595509.tif 000048
（式中、Ｒはヘテロアリール及びベンジルから選択される基であり、ここで、
当該ヘテロアリールは、任意に、ハロゲン、トリフルオロメチル、ニトロ、及びＣ1~6アルキルからなる群から選択される置換基によって一置換又は多置換（例えば、二置換若しくは三置換）されており；かつ
当該ベンジルは、ハロゲン、トリフルオロメチル、ニトロ、及びＣ1~6アルキルからなる群から選択される置換基によって一置換又は多置換（例えば、二置換若しくは三置換）されている）
のホモセリンラクトン誘導体、あるいはそのラセミ体若しくは光学異性体、薬学的に許容される塩、溶媒和物、又は水和物。
【請求項２】
Ｒがチエニル、フリル、ピロリル、ピリジル及びベンジルから選択される基であり、ここで、
当該チエニル、フリル、ピロリル、及びピリジルは、任意に、ハロゲン、トリフルオロメチル、ニトロ、及びＣ1~6アルキルからなる群から選択される置換基によって一置換又は多置換（例えば、二置換若しくは三置換）されており；かつ
当該ベンジルは、ハロゲン、トリフルオロメチル、ニトロ、及びＣ1~6アルキルからなる群から選択される置換基によって一置換又は多置換（例えば、二置換若しくは三置換）されている、
請求項１に記載のホモセリンラクトン誘導体、あるいはそのラセミ体若しくは光学異性体、薬学的に許容される塩、溶媒和物、又は水和物。
【請求項３】
Ｒが、チエニル、クロロチエニル、ブロモチエニル、ニトロチエニル、メチルチエニル、フリル、ニトロフリル、ブロモフリル、メチルフリル、ジブロモフリル、ピロリル、ピリジル、クロロピリジル、フルオロベンジル、クロロベンジル、ブロモベンジル、メチルベンジル、ニトロベンジル、トリフルオロメチルベンジル、及びジクロロベンジルからなる群から選択される、請求項１に記載のホモセリンラクトン誘導体、あるいはそのラセミ体若しくは光学異性体、薬学的に許容される塩、溶媒和物、又は水和物。
【請求項４】
前記ホモセリンラクトン誘導体が、以下：
（Ｓ）−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））チオフェン−２−カルボキサミド（化合物１）；
（Ｓ）−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））チオフェン−３−カルボキサミド（化合物２）；
（Ｓ）−５−クロロ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））チオフェン−２−カルボキサミド（化合物３）；
（Ｓ）−５−ブロモ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））チオフェン−２−カルボキサミド（化合物４）；
（Ｓ）−５−ニトロ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））チオフェン−２−カルボキサミド（化合物５）；
（Ｓ）−４−ブロモ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））チオフェン−２−カルボキサミド（化合物６）；
（Ｓ）−４−メチル−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））チオフェン−２−カルボキサミド（化合物７）；
（Ｓ）−３−メチル−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））チオフェン−２−カルボキサミド（化合物８）；
（Ｓ）−３−クロロ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））チオフェン−２−カルボキサミド（化合物９）；
（Ｓ）−３−ブロモ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））チオフェン−２−カルボキサミド（化合物１０）；
（Ｓ）−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））フラン−２−カルボキサミド（化合物１１）；
（Ｓ）−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））フラン−３−カルボキサミド（化合物１２）；
（Ｓ）−５−ニトロ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））フラン−２−カルボキサミド（化合物１３）；
（Ｓ）−５−ブロモ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））フラン−２−カルボキサミド（化合物１４）；
（Ｓ）−２−メチル−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））フラン−３−カルボキサミド（化合物１５）；
（Ｓ）−４，５−ジブロモ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））フラン−２−カルボキサミド（化合物１６）；
（Ｓ）−１Ｈ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））ピロール−２−カルボキサミド（化合物１７）；
（Ｓ）−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））ピリジン−４−カルボキサミド（化合物１８）；
（Ｓ）−６−クロロ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））ピリジン−３−カルボキサミド（化合物１９）；
（Ｓ）−４−フルオロ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））ベンゼンアセトアミド（化合物２０）；
（Ｓ）−４−クロロ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））ベンゼンアセトアミド（化合物２１）；
（Ｓ）−４−ブロモ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））ベンゼンアセトアミド（化合物２２）；
（Ｓ）−３−フルオロ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））ベンゼンアセトアミド（化合物２３）；
（Ｓ）−３−クロロ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））ベンゼンアセトアミド（化合物２４）；
（Ｓ）−３−メチル−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））ベンゼンアセトアミド（化合物２５）；
（Ｓ）−２−トリフルオロメチル−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））ベンゼンアセトアミド（化合物２６）；
（Ｓ）−２−フルオロ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））ベンゼンアセトアミド（化合物２７）；
（Ｓ）−２−クロロ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））ベンゼンアセトアミド（化合物２８）；
（Ｓ）−２−ブロモ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））ベンゼンアセトアミド（化合物２９）；
（Ｓ）−２−メチル−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））ベンゼンアセトアミド（化合物３０）；
（Ｓ）−２−ニトロ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））ベンゼンアセトアミド（化合物３１）；及び
（Ｓ）−２，３−ジクロロ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））ベンゼンアセトアミド（化合物３２）；
から選択される、請求項１に記載の式Ｉのホモセリンラクトン誘導体、あるいはそのラセミ体若しくは光学異性体、薬学的に許容される塩、溶媒和物、又は水和物。
【請求項５】
請求項１〜４のいずれか一項に記載の式Ｉのホモセリンラクトン誘導体、あるいはそのラセミ体若しくは光学異性体、薬学的に許容される塩、溶媒和物、又は水和物を調製するための方法であって、以下、式３
【化２】
0006595509.tif 000049
（式中、Ｒは請求項１〜４のいずれか一項に定義したとおりである。）
の中間体をＲＣＯＣｌで表されるアシルクロリドと反応させて、請求項１〜４のいずれか一項に記載のホモセリンラクトン誘導体、あるいはそのラセミ体若しくは光学異性体、薬学的に許容される塩、溶媒和物、又は水和物を得る、ステップを含む、方法。
【請求項６】
前記式３の中間体が、ホモセリンラクトン臭化水素酸塩をアセチルスルファニリルクロリド（ａｃｅｔｙｌｓｕｌｉａｎｉｌｙｌ  ｃｈｌｏｒｉｄｅ）と反応させることによって調製される、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
請求項１〜４のいずれか一項に記載のホモセリンラクトン誘導体、あるいはそのラセミ体若しくは光学異性体、薬学的に許容される塩、溶媒和物、又は水和物、及び、任意に１又は複数の薬学的に許容される担体又は賦形剤を含有する、医薬組成物。
【請求項８】
少なくとも１つの抗生物質をさらに含有する、請求項７に記載の医薬組成物。
【請求項９】
菌体密度感知制御剤（例えば、菌体密度感知阻害剤又はアゴニスト）としての使用のための、請求項１〜４のいずれか一項に記載のホモセリンラクトン誘導体、あるいはそのラセミ体若しくは光学異性体、薬学的に許容される塩、溶媒和物、又は水和物を含有する医薬組成物。
【請求項１０】
細菌の感染によって引き起こされる疾患の予防及び／又は治療における使用のための、請求項１〜４のいずれか一項に記載のホモセリンラクトン誘導体、あるいはそのラセミ体若しくは光学異性体、薬学的に許容される塩、溶媒和物、又は水和物を含有する医薬組成物。
【請求項１１】
前記細菌がグラム陽性細菌又はグラム陰性細菌である、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
前記細菌がグラム陰性細菌である、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
前記グラム陰性細菌が、大腸菌、バチルス・ニューモニエ、バチルス・プロテウス、赤痢菌、ブルセラ菌、インフルエンザ菌、パラインフルエンザ菌、モラクセラ・カタラーリス、アシネトバクター属、エルシニア属、パスツレラ属、赤痢菌属、百日咳菌、パラ百日咳菌、腸炎ビブリオ、レジオネラ・ニューモフィラ、及びコレラ菌からなる群から選択される、請求項１１又は１２に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
前記細菌の感染によって引き起こされる疾患が、心内膜炎、腹膜炎、胃腸炎、胆嚢炎、膀胱炎、下痢、膿胸、及び敗血症から選択される、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
菌体密度感知によって引き起こされる疾患の予防及び／又は治療における使用のための、請求項１〜４のいずれか一項に記載のホモセリンラクトン誘導体、あるいはそのラセミ体若しくは光学異性体、薬学的に許容される塩、溶媒和物、又は水和物を含有する医薬組成物。
【請求項１６】
前記菌体密度感知によって引き起こされる疾患が、グラム陰性細菌、例えば大腸菌、バチルス・ニューモニエ、バチルス・プロテウス、赤痢菌、ブルセラ菌、インフルエンザ菌、パラインフルエンザ菌、モラクセラ・カタラーリス、アシネトバクター属、エルシニア属、パスツレラ属、赤痢菌属、百日咳菌、パラ百日咳菌、腸炎ビブリオ、レジオネラ・ニューモフィラ、又はコレラ菌によって引き起こされる疾患である、請求項１５に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
前記グラム陰性細菌によって引き起こされる疾患が、心内膜炎、腹膜炎、胃腸炎、胆嚢炎、膀胱炎、下痢、膿胸、及び敗血症から選択される、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
前記疾患が、抗生物質に感受性でない細菌の薬剤耐性株によって引き起こされる疾患である、請求項１６又は１７に記載の医薬組成物。
【請求項１９】
イン・ビボ又はイン・ビトロで菌体密度感知制御機構を研究するためのツール薬としての使用のための、請求項１〜４のいずれか一項に記載のホモセリンラクトン誘導体、あるいはそのラセミ体若しくは光学異性体、薬学的に許容される塩、溶媒和物、又は水和物を含有する医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
技術分野
本発明は医薬及び化学工業分野に属し、特に、Ｎ−スルホニルホモセリンラクトン誘導体、その調製方法、並びにグラム陰性細菌によって引き起こされる疾患の予防及び／又は治療用の薬剤の製造におけるその使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
背景技術
菌体密度の増加の間に、細菌は化学シグナル伝達分子（自己誘導因子とも呼ばれる）を絶え間なく生成することができ、その後それらのシグナル伝達分子は細胞外環境に分泌される。シグナル伝達分子の濃度が閾値に達すると、細菌の関連遺伝子、例えば生物発光、バイオフィルムの形成及び病原性に関連する遺伝子の発現が、環境変化に適応するように調節又は活性化される。そのような調節システムは菌体密度感知（ｂａｃｔｅｒｉａｌ  ｑｕｏｒｕｍ  ｓｅｎｓｉｎｇ）（ＱＳ）システムとして知られている。
【０００３】
ＱＳシステムはＶ．フィシェリ（Ｖ．ｆｉｓｃｈｅｒｉ）で最初に観察された。細菌の密度が高い場合に、その細菌は食物を捕え、捕食者を避けるなどのために発光する。その機構を研究することによって、Ｖ．フィシェリにおいて、ＬｕｘＩタンパク質によって合成されたＮ−アシルホモセリンラクトン（ＡＨＬ）はＬｕｘＲによってコードされたＡＨＬ受容体タンパク質Ｎ末端に結合し、そして標的ＤＮＡ配列へのＡＨＬ受容体タンパク質のＣ末端の結合を可能にする特異的な立体配置を形成することができ、それによって発光遺伝子の転写及び発現を活性化するということが見出されている。同様の調節システムが多くのグラム陽性又はグラム陰性細菌において見出された。それらの機構は、細菌が低い集団密度である場合には、自己誘導因子はほとんど生産されず、その誘導因子は細胞外に拡散し、周辺環境ですぐに希釈されるという点にある。細菌の集団密度が徐々に上昇して閾値に達すると、シグナル伝達分子が細胞内に浸透し、そして対応する転写調節タンパク質に結合することになり、染色体中のシグナル伝達分子をコードする特定のＤＮＡ配列に結合することができ、かつ関連する標的遺伝子の発現を可能にする、転写調節タンパク質−シグナル伝達分子ポリマーを形成し、より多くのシグナル伝達分子の産生をもたらす。このような細菌間での情報の通信及び伝達は長い間提言されてきた。しかしながら、体系的な研究は最近１０年にしか行われていない。このような現象は、現在多くの細菌で実証されている。
【０００４】
１９７０年代後半に、科学者は、自然発生の又は人工的に合成された菌体密度感知制御剤（アゴニスト又は阻害剤を含む）がシグナル伝達システムの伝達を妨げ、細菌における病原性遺伝子の発現を調節し得ることを発見した。菌体密度感知制御剤は、イン・ビボ（ｉｎ  ｖｉｖｏ）での細胞の通常の生理学的機能に干渉することなく、その病原性遺伝子の発現を調節することによって病原性細菌から病原性能力を奪い、したがって抗菌剤の開発の新たな方向性と考えられる。菌体密度感知阻害剤は、抗生物質と組み合わせて使用して、薬物の治療効果を向上させるように病原性細菌の抗生物質に対する感受性を増強することができ、そして、グラム陰性細菌によって引き起こされる様々な疾患、例えば心内膜炎、腹膜炎、胃腸炎、胆嚢炎、膀胱炎、下痢、膿胸、及び敗血症を治療するために使用することができる。
【０００５】
本発明の目的はグラム陰性細菌によって引き起こされる疾患、特に薬剤耐性グラム陰性細菌によって引き起こされる疾患の予防及び／又は治療に使用するための新たな菌体密度感知制御剤を見出すことである。
【発明の概要】
【０００６】
発明の内容
第１の態様では、本発明は、式Ｉ
【０００７】
【化１】
0006595509.tif 000002
【０００８】
（式中、Ｒはヘテロアリール及びベンジルから選択される基であり、任意に、当該基はハロゲン、トリフルオロメチル、ニトロ、及びＣ1~6アルキルからなる群から選択される置換基によって一置換又は多置換（例えば、二置換若しくは三置換）されている）
のホモセリンラクトン誘導体、あるいはそのラセミ体若しくは光学異性体、薬学的に許容される塩、溶媒和物、又は水和物を提供する。
【０００９】
本発明の第１の態様に記載のホモセリンラクトン誘導体、あるいはそのラセミ体若しくは光学異性体、薬学的に許容される塩、溶媒和物、又は水和物のために、好ましくはＲがチエニル、フリル、ピロリル、ピリジル及びベンジルから選択される基であり、任意に、当該基はハロゲン、トリフルオロメチル、ニトロ、及びＣ1~6アルキルから選択される置換基によって一置換又は多置換（例えば、二置換若しくは三置換）されている。
【００１０】
本発明のいくつかの実施形態では、Ｒはチエニルであり、任意に当該チエニルはハロゲン、ニトロ、及びＣ1~6アルキルから選択される置換基によって一置換されている。
【００１１】
本発明のいくつかの実施形態では、Ｒはフリルであり、任意に当該フリル（ｆｕｒｙ）はハロゲン、ニトロ、及びＣ1~6アルキルから選択される置換基によって一置換されており、又はハロゲンによって二置換されている。
【００１２】
本発明のいくつかの実施形態では、Ｒはピロリルである。
【００１３】
本発明のいくつかの実施形態では、Ｒはピリジルである。
【００１４】
本発明のいくつかの実施形態では、Ｒはベンジルであり、任意に当該ベンジルはハロゲン、ニトロ、Ｃ1~6アルキル及びトリフルオロメチルから選択される置換基によって一置換されており、又はハロゲンによって二置換されている。
【００１５】
本発明の第１の態様に記載のホモセリンラクトン誘導体、あるいはそのラセミ体若しくは光学異性体、薬学的に許容される塩、溶媒和物、又は水和物のために、好ましくはＲが、チエニル、クロロチエニル、ブロモチエニル、ニトロチエニル、メチルチエニル、フリル、ニトロフリル、ブロモフリル、メチルフリル、ジブロモフリル、ピロリル、ピリジル、クロロピリジル、フルオロベンジル、クロロベンジル、ブロモベンジル、メチルベンジル、トリフルオロメチルベンジル、ニトロベンジル、及びジクロロベンジルからなる群から選択される。
【００１６】
本発明の第１の態様に記載のホモセリンラクトン誘導体、あるいはそのラセミ体若しくは光学異性体、薬学的に許容される塩、溶媒和物、又は水和物のために、好ましくは該ホモセリンラクトン誘導体が、以下：
（Ｓ）−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））チオフェン−２−カルボキサミド（化合物１）；
（Ｓ）−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））チオフェン−３−カルボキサミド（化合物２）；
（Ｓ）−５−クロロ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））チオフェン−２−カルボキサミド（化合物３）；
（Ｓ）−５−ブロモ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））チオフェン−２−カルボキサミド（化合物４）；
（Ｓ）−５−ニトロ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））チオフェン−２−カルボキサミド（化合物５）；
（Ｓ）−４−ブロモ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））チオフェン−２−カルボキサミド（化合物６）；
（Ｓ）−４−メチル−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））チオフェン−２−カルボキサミド（化合物７）；
（Ｓ）−３−メチル−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））チオフェン−２−カルボキサミド（化合物８）；
（Ｓ）−３−クロロ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））チオフェン−２−カルボキサミド（化合物９）；
（Ｓ）−３−ブロモ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））チオフェン−２−カルボキサミド（化合物１０）；
（Ｓ）−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））フラン−２−カルボキサミド（化合物１１）；
（Ｓ）−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））フラン−３−カルボキサミド（化合物１２）；
（Ｓ）−５−ニトロ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））フラン−２−カルボキサミド（化合物１３）；
（Ｓ）−５−ブロモ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））フラン−２−カルボキサミド（化合物１４）；
（Ｓ）−２−メチル−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））フラン−３−カルボキサミド（化合物１５）；
（Ｓ）−４，５−ジブロモ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））フラン−２−カルボキサミド（化合物１６）；
（Ｓ）−１Ｈ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））ピロール−２−カルボキサミド（化合物１７）；
（Ｓ）−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））ピリジン−４−カルボキサミド（化合物１８）；
（Ｓ）−６−クロロ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））ピリジン−３−カルボキサミド（化合物１９）；
（Ｓ）−４−フルオロ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））ベンゼンアセトアミド（化合物２０）；
（Ｓ）−４−クロロ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））ベンゼンアセトアミド（化合物２１）；
（Ｓ）−４−ブロモ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））ベンゼンアセトアミド（化合物２２）；
（Ｓ）−３−フルオロ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））ベンゼンアセトアミド（化合物２３）；
（Ｓ）−３−クロロ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））ベンゼンアセトアミド（化合物２４）；
（Ｓ）−３−メチル−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））ベンゼンアセトアミド（化合物２５）；
（Ｓ）−２−トリフルオロメチル−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））ベンゼンアセトアミド（化合物２６）；
（Ｓ）−２−フルオロ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））ベンゼンアセトアミド（化合物２７）；
（Ｓ）−２−クロロ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））ベンゼンアセトアミド（化合物２８）；
（Ｓ）−２−ブロモ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））ベンゼンアセトアミド（化合物２９）；
（Ｓ）−２−メチル−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））ベンゼンアセトアミド（化合物３０）；
（Ｓ）−２−ニトロ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））ベンゼンアセトアミド（化合物３１）；
（Ｓ）−２，３−ジクロロ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））ベンゼンアセトアミド（化合物３２）；及び
【００１７】
【化２】
0006595509.tif 000003
【００１８】
から選択される。
【００１９】
第２の態様では、本発明は、本発明の第１の態様に記載のホモセリンラクトン誘導体、あるいはそのラセミ体若しくは光学異性体、薬学的に許容される塩、溶媒和物、又は水和物を調製するための方法であって、以下、式３
【００２０】
【化３】
0006595509.tif 000004
【００２１】
（式中、Ｒは本発明の第１の態様に定義したとおりである。）
の中間体をＲＣＯＣｌで表されるアシルクロリドと反応させて、本発明の第１の態様に記載のホモセリンラクトン誘導体、あるいはそのラセミ体若しくは光学異性体、薬学的に許容される塩、溶媒和物、又は水和物を得る、ステップを含む、方法に関する。
【００２２】
本発明の第２の態様に記載の調製方法のために、該式３の中間体はホモセリンラクトン臭化水素酸塩をＮ−アセチルスルファニリルクロリド（ａｃｅｔｙｌｓｕｌｉａｎｉｌｙｌ  ｃｈｌｏｒｉｄｅ）と反応させることによって調製される。
【００２３】
本発明の一実施形態では、当該調製方法のスキームは以下、
【００２４】
【化４】
0006595509.tif 000005
【００２５】
（式中、Ｒは本発明の第１の態様に定義したとおりである。）
のとおりである。
【００２６】
第３の態様では、本発明は、本発明の第１の態様に記載のホモセリンラクトン誘導体、あるいはそのラセミ体若しくは光学異性体、薬学的に許容される塩、溶媒和物、又は水和物、及び、任意に１又は複数の薬学的に許容される担体又は賦形剤を含有する、医薬組成物に関する。
【００２７】
本発明の第３の態様に記載の医薬組成物は少なくとも１つの抗生物質をさらに含有する。
【００２８】
本発明の第３の態様に記載の医薬組成物のために、好ましくは該抗生物質には、これらに限定されるものではないが、β−ラクタム（例えば、メロペネム、セファレキシン、セフタジジム、セフピロムなど）、アミノグリコシド（例えば、アミカシン、ストレプトマイシン、トブラマイシン、イセパミシンなど）、糖ペプチド（例えばバンコマイシン、テイコプラニン、ポリミキシンなど）、マクロライド（例えばロキシスロマイシン、クラリスロマイシン、アジスロマイシンなど）、テトラサイクリン（例えばドキシサイクリン、ミノサイクリン、チゲサイクリンなど）、キノロン（例えば、ノルフロキサシン、シプロフロキサシン、ガチフロキサシン、パズフロキサシンなど）、などが含まれる。
【００２９】
第４の態様では、本発明は、菌体密度感知制御剤としての薬剤の製造における、本発明の第１の態様に記載のホモセリンラクトン誘導体、あるいはそのラセミ体若しくは光学異性体、薬学的に許容される塩、溶媒和物、又は水和物の使用に関する。
【００３０】
本発明の第４の態様に記載の使用のために、好ましくは該菌体密度感知制御剤が菌体密度感知アゴニスト又は菌体密度感知阻害剤であってもよい。
【００３１】
本発明のいくつかの実施形態では、化合物、あるいはそのラセミ体若しくは光学異性体、薬学的に許容される塩、溶媒和物、又は水和物は、菌体密度感知アゴニストとしての薬剤の製造に使用されてもよく、ここで、当該化合物は、以下：
（Ｓ）−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））フラン−２−カルボキサミド（化合物１１）；
（Ｓ）−２−フルオロ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））ベンゼンアセトアミド（化合物２７）；及び
【００３２】
【化５】
0006595509.tif 000006
【００３３】
からなる群から選択される。
【００３４】
本発明のいくつかの実施形態では、化合物、あるいはそのラセミ体若しくは光学異性体、薬学的に許容される塩、溶媒和物、又は水和物は、菌体密度感知阻害剤としての薬剤の製造に使用されてもよく、ここで、当該化合物は、以下：
（Ｓ）−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））チオフェン−２−カルボキサミド（化合物１）；
（Ｓ）−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））チオフェン−３−カルボキサミド（化合物２）；
（Ｓ）−５−クロロ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））チオフェン−２−カルボキサミド（化合物３）；
（Ｓ）−５−ブロモ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））チオフェン−２−カルボキサミド（化合物４）；
（Ｓ）−４−ブロモ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））チオフェン−２−カルボキサミド（化合物６）；
（Ｓ）−４−メチル−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））チオフェン−２−カルボキサミド（化合物７）；
（Ｓ）−３−メチル−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））チオフェン−２−カルボキサミド（化合物８）；
（Ｓ）−３−クロロ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））チオフェン−２−カルボキサミド（化合物９）；
（Ｓ）−３−ブロモ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））チオフェン−２−カルボキサミド（化合物１０）；
（Ｓ）−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））フラン−２−カルボキサミド（化合物１１）；
（Ｓ）−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））フラン−３−カルボキサミド（化合物１２）；
（Ｓ）−５−ニトロ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））フラン−２−カルボキサミド（化合物１３）；
（Ｓ）−２−メチル−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））フラン−３−カルボキサミド（化合物１５）；
（Ｓ）−１Ｈ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））ピロール−２−カルボキサミド（化合物１７）；
（Ｓ）−４−フルオロ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））ベンゼンアセトアミド（化合物２０）；及び
（Ｓ）−４−クロロ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））ベンゼンアセトアミド（化合物２１）、
からなる群から選択される。
【００３５】
第５の態様では、本発明は、細菌の感染によって引き起こされる疾患の予防及び／又は治療用の薬剤の製造における、本発明の第１の態様に記載のホモセリンラクトン誘導体、あるいはそのラセミ体若しくは光学異性体、薬学的に許容される塩、溶媒和物、又は水和物の使用に関する。
【００３６】
本発明の第５の態様に記載の使用のために、好ましくは該細菌がグラム陽性細菌又はグラム陰性細菌、好ましくはグラム陰性細菌である。
【００３７】
本発明の第５の態様に記載の使用のために、好ましくは該グラム陰性細菌（ｂａｃｔｒｉｕｍ）が、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）、バチルス・ニューモニエ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、バチルス・プロテウス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｒｏｔｅｕｓ）、赤痢菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｄｙｓｅｎｔｅｒｉａｅ）、ブルセラ菌（Ｂｒｕｃｅｌｌａ）、インフルエンザ菌（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）、パラインフルエンザ菌（Ｈｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｐａｒａｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）、モラクセラ・カタラーリス（Ｍｏｒａｘｅｌｌａ  ｃａｔａｒｒｈａｌｉｓ）、アシネトバクター属（Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐｐ．）、エルシニア属（Ｙｅｒｓｉｎｉａ  ｓｐｐ．）、パスツレラ属（Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ  ｓｐｐ．）、赤痢菌属（Ｓｈｉｇｅｌｌａ  ｓｐｐ．）、百日咳菌（Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ  ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ）、パラ百日咳菌（Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ  ｐａｒａｐｅｒｔｕｓｓｉｓ）、腸炎ビブリオ（Ｖｉｂｒｉｏ  Ｐａｒａｈｅｍｏｌｙｔｉｃｕｓ）、レジオネラ・ニューモフィラ（ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ  ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａ）、及びコレラ菌（Ｖｉｂｒｉｏ  ｃｈｏｌｅｒａ）からなる群から選択される。
【００３８】
本発明の第５の態様に記載の使用のために、好ましくは該細菌の感染によって引き起こされる疾患には、これらに限定されるものではないが、様々な疾患、例えば心内膜炎、腹膜炎、胃腸炎、胆嚢炎、膀胱炎、下痢、膿胸、及び敗血症、などが含まれ；好ましくは、当該疾患が抗生物質に感受性でない細菌の薬剤耐性株によって引き起こされる疾患である。
【００３９】
第６の態様では、本発明は、菌体密度感知によって引き起こされる疾患の予防及び／又は治療用の薬剤の製造における、本発明の第１の態様に記載のホモセリンラクトン誘導体、あるいはそのラセミ体若しくは光学異性体、薬学的に許容される塩、溶媒和物、又は水和物の使用に関する。
【００４０】
本発明の第６の態様に記載の使用のために、好ましくは該菌体密度感知によって引き起こされる疾患には、これらに限定されるものではないが、グラム陰性細菌、例えば大腸菌、バチルス・ニューモニエ、バチルス・プロテウス、赤痢菌、ブルセラ菌、インフルエンザ菌、パラインフルエンザ菌、モラクセラ・カタラーリス、アシネトバクター属、エルシニア属、パスツレラ属、赤痢菌属、百日咳菌、パラ百日咳菌、腸炎ビブリオ、レジオネラ・ニューモフィラ、及びコレラ菌によって引き起こされる様々な疾患が含まれ、ここで、当該グラム陰性細菌によって引き起こされる疾患には、これらに限定されるものではないが、心内膜炎、腹膜炎、胃腸炎、胆嚢炎、膀胱炎、下痢、膿胸、敗血症などが含まれ；好ましくは、当該疾患が抗生物質に感受性でない細菌の薬剤耐性株によって引き起こされる疾患である。
【００４１】
第７の態様では、本発明は、イン・ビボ又はイン・ビトロ（ｉｎ  ｖｉｔｒｏ）で菌体密度感知制御機構を研究するためのツール薬（ｔｏｏｌ  ｄｒｕｇ）としての、本発明の第１の態様に記載のホモセリンラクトン誘導体、あるいはそのラセミ体若しくは光学異性体、薬学的に許容される塩、溶媒和物、又は水和物の使用に関する。
【００４２】
第８の態様では、本発明は、細菌の感染によって引き起こされる疾患を予防し及び／又は治療するための方法であって、当該疾患の予防及び／又は治療を必要とする対象に、本発明の第１の態様に記載のホモセリンラクトン誘導体、あるいはそのラセミ体若しくは光学異性体、薬学的に許容される塩、溶媒和物、又は水和物の、予防的及び／又は治療上有効量を投与するステップを含む、方法に関する。
【００４３】
本発明の第８の態様に記載の方法のために、好ましくは該細菌がグラム陽性細菌又はグラム陰性細菌、好ましくはグラム陰性細菌である。
【００４４】
本発明の第８の態様に記載の方法のために、好ましくは該細菌によって引き起こされる疾患には、これらに限定されるものではないが、グラム陰性細菌、例えば大腸菌、バチルス・ニューモニエ、バチルス・プロテウス、赤痢菌、ブルセラ菌、インフルエンザ菌、パラインフルエンザ菌、モラクセラ・カタラーリス、アシネトバクター属、エルシニア属、パスツレラ属、赤痢菌属、百日咳菌、パラ百日咳菌、腸炎ビブリオ、レジオネラ・ニューモフィラ、及びコレラ菌によって引き起こされる様々な疾患が含まれ、ここで、当該グラム陰性細菌によって引き起こされる疾患には、これらに限定されるものではないが、心内膜炎、腹膜炎、胃腸炎、胆嚢炎、膀胱炎、下痢、膿胸、敗血症などが含まれ；好ましくは、当該疾患が抗生物質に感受性でない細菌の薬剤耐性株によって引き起こされる疾患である。
【００４５】
第９の態様では、本発明は、菌体密度感知によって引き起こされる疾患を予防し及び／又は治療するための方法であって、当該疾患の予防及び／又は治療を必要とする対象に、本発明の第１の態様に記載のホモセリンラクトン誘導体、あるいはそのラセミ体若しくは光学異性体、薬学的に許容される塩、溶媒和物、又は水和物の、予防的及び／又は治療上有効量を投与するステップを含む、方法に関する。
【００４６】
本発明の第９の態様に記載の方法のために、好ましくは該菌体密度感知によって引き起こされる疾患には、これらに限定されるものではないが、グラム陰性細菌、例えば大腸菌、バチルス・ニューモニエ、バチルス・プロテウス、赤痢菌、ブルセラ菌、インフルエンザ菌、パラインフルエンザ菌、モラクセラ・カタラーリス、アシネトバクター属、エルシニア属、パスツレラ属、赤痢菌属、百日咳菌、パラ百日咳菌、腸炎ビブリオ、レジオネラ・ニューモフィラ、及びコレラ菌によって引き起こされる様々な疾患が含まれ、ここで、当該グラム陰性細菌によって引き起こされる疾患には、これらに限定されるものではないが、心内膜炎、腹膜炎、胃腸炎、胆嚢炎、膀胱炎、下痢、膿胸、敗血症などが含まれ；好ましくは、当該疾患が抗生物質に感受性でない細菌の薬剤耐性株によって引き起こされる疾患である。
【００４７】
本発明はさらに、イン・ビボ又はイン・ビトロで菌体密度感知制御機構を研究するための方法であって、ツール薬として、本発明の第１の態様に記載のホモセリンラクトン誘導体、あるいはそのラセミ体若しくは光学異性体、薬学的に許容される塩、溶媒和物、又は水和物を使用するステップを含む、方法に関する。
【００４８】
本発明はさらに、菌体密度感知制御剤（例えば、菌体密度感知阻害剤又はアゴニスト）としての使用のための、本発明の第１の態様に記載のホモセリンラクトン誘導体、あるいはそのラセミ体若しくは光学異性体、薬学的に許容される塩、溶媒和物、又は水和物に関する。
【００４９】
本発明はさらに、細菌の感染によって引き起こされる疾患の予防及び／又は治療における使用のための、本発明の第１の態様に記載のホモセリンラクトン誘導体、あるいはそのラセミ体若しくは光学異性体、薬学的に許容される塩、溶媒和物、又は水和物に関する。
【００５０】
本発明のいくつかの実施形態では、好ましくは該細菌がグラム陽性細菌又はグラム陰性細菌、好ましくはグラム陰性細菌である。
【００５１】
本発明のいくつかの実施形態では、好ましくは該グラム陰性細菌（ｂａｃｔｒｉｕｍ）が、大腸菌、バチルス・ニューモニエ、バチルス・プロテウス、赤痢菌、ブルセラ菌、インフルエンザ菌、パラインフルエンザ菌、モラクセラ・カタラーリス、アシネトバクター属、エルシニア属、パスツレラ属、赤痢菌属、百日咳菌、パラ百日咳菌、腸炎ビブリオ、レジオネラ・ニューモフィラ、及びコレラ菌からなる群から選択される。
【００５２】
本発明のいくつかの実施形態では、好ましくは該細菌感染によって引き起こされる疾患には、これらに限定されるものではないが、心内膜炎、腹膜炎、胃腸炎、胆嚢炎、膀胱炎、下痢、膿胸、敗血症などが含まれる。
【００５３】
本発明はさらに、菌体密度感知によって引き起こされる疾患の予防及び／又は治療における使用のための、本発明の第１の態様に記載のホモセリンラクトン誘導体、あるいはそのラセミ体若しくは光学異性体、薬学的に許容される塩、溶媒和物、又は水和物に関する。
【００５４】
本発明のいくつかの実施形態では、好ましくは該菌体密度感知によって引き起こされる疾患には、これらに限定されるものではないが、グラム陰性細菌、例えば大腸菌、バチルス・ニューモニエ、バチルス・プロテウス、赤痢菌、ブルセラ菌、インフルエンザ菌、パラインフルエンザ菌、モラクセラ・カタラーリス、アシネトバクター属、エルシニア属、パスツレラ属、赤痢菌属、百日咳菌、パラ百日咳菌、腸炎ビブリオ、レジオネラ・ニューモフィラ、及びコレラ菌によって引き起こされる様々な疾患が含まれ、ここで、当該グラム陰性細菌によって引き起こされる疾患には、これらに限定されるものではないが、心内膜炎、腹膜炎、胃腸炎、胆嚢炎、膀胱炎、下痢、膿胸、敗血症などが含まれ；好ましくは、当該疾患が抗生物質に感受性でない細菌の薬剤耐性株によって引き起こされる疾患である。
【００５５】
本発明はさらに、イン・ビボ又はイン・ビトロで菌体密度感知制御機構を研究するためのツール薬としての使用のための、本発明の第１の態様に記載のホモセリンラクトン誘導体、あるいはそのラセミ体若しくは光学異性体、薬学的に許容される塩、溶媒和物、又は水和物に関する。
【発明を実施するための形態】
【００５６】
発明の詳細な内容
本発明で使用される用語及び語句は当業者に周知の一般的な意味を有するが、それらが本明細書で具体的に定義されている場合、本明細書に定義された意味が優先するものとする。
【００５７】
本明細書で使用される場合、用語「ヘテロアリール」は、単環式複素芳香族基及び、単環式芳香環を１又は複数の他の芳香環に縮合することによって形成される多環式複素芳香族基を含む、５〜１８員、好ましくは５〜１４員、及びより好ましくは５〜１０員を含む、複素芳香族基を指す。ヘテロアリールは、Ｎ、Ｏ及びＳからなる群から独立して選択される１又は複数個の環ヘテロ原子を有する。本明細書で使用される場合、用語「ヘテロアリール」はさらに、１又は複数個の非芳香環（脂環式環又は脂環式ヘテロ環（ａｌｉｃｙｃｌｉｃ  ｈｅｔｅｒｏ  ｒｉｎｇ））への芳香環の縮合から生じる基を含み、ここで、その結合基又は部位は芳香環上にある。「ヘテロアリール」の例には、これらに限定されるものではないが、ピリジル、ピロリル、フリル、チエニル、ピラゾリル、イミダゾリル、チアゾリル、オキサゾリル、イソキサゾリル、インドリル、ベンゾフラニル、ベンズイミダゾイル、カルバゾリル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、キノリル、イソキノリル、グアニン基、フェノチアジニル、フェノキサゾリル（ｐｈｅｎｏｘａｚｏｌｙｌ）などが含まれる。
【００５８】
本明細書で使用される場合、用語「ハロゲン」は当該技術分野で周知の一般的な意味を有し、一般的に、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ならびにそれらの同位体を含み、そして好ましくは本発明ではＦ、Ｃｌ又はＢｒである。
【００５９】
本明細書で使用される場合、用語「Ｃ1~6アルキル」は、１〜６個の炭素原子を有する直鎖、分岐、又は環状のアルキルを指し、これらに限定されるものではないが、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルなどを含む。
【００６０】
本明細書で使用される場合、以下の用語：チエニル、フリル、ピロリル、ピリジル、ベンジル、トリフルオロメチル、ニトロ、及びメチル、で表される基は、当該技術分野で周知の一般的な意味を有する。
【００６１】
本明細書で使用される場合、用語「ラセミ体」及び「光学異性体」は当該技術分野で周知の一般的な意味を有する。
【００６２】
本発明によれば、対象は哺乳動物、例えばウシ、ウマ、カプリド（ｃａｐｒｉｄ）、イノシシ科、イヌ科、ネコ科、げっ歯類および霊長類であり；ここで、特に好ましい対象はヒトである。
【００６３】
本発明によれば、本発明は、式Ｉの化合物又はその異性体の好適な薬学的に許容される塩又は水和物に関し、ここで、当該薬学的に許容される塩には、これらに限定されるものではないが、無機酸、例えば塩酸、硫酸、リン酸、亜リン酸、臭化水素酸、及び硝酸と、ならびに様々な有機酸、例えばマレイン酸、リンゴ酸、フマル酸、コハク酸、酒石酸、クエン酸、酢酸、乳酸、メタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、及びパルミチン酸と、式Ｉの化合物とから形成される塩が含まれる。本発明のいくつかの化合物は水又は種々の有機溶媒で結晶化又は再結晶化されてもよい。この場合、様々な溶媒和物が形成され得る。本発明は、水和物を含む化学量的溶媒和物、並びに低圧での昇華を用いる乾燥方法によって調製された可変量の水を含有する化合物を含む。
【００６４】
本発明によれば、式Ｉの化合物の異性体とは、本発明のいくつかの化合物が光学異性体又は互変異性体の形態で存在し得ることを意味する。本発明は既存の全ての形態で、特に純粋な異性体の形態で、それらを含む。異なる形態の異性体は様々な従来の手段によって他の形態の異性体から分離され又は分割されてもよく、あるいは、特定の異性体が様々な従来の合成方法、又は立体特異的若しくは不斉合成方法によって得られてもよい。式Ｉの化合物は医薬目的に使用されるので、当該化合物は最も好ましくは純粋な形態で、例えば、少なくとも６０％の純度、より好適には７５％の純度、より好ましくは８５％の純度、そして最も好ましくは少なくとも９８％の純度で提供されることが理解され得る（％は重量パーセントを意味する）。純粋でない化合物は医薬組成物におけるより純粋な形態での化合物の調製に適用することができる。純粋でない生成物は、式Ｉの化合物又はその薬学的に許容される誘導体を、少なくとも１％、より好適には５％、より好ましくは１０％含む。
【００６５】
本発明によれば、式Ｉの化合物は、以下のステップを含む以下の典型的かつ例示的な方法によって調製することができる。
【００６６】
１）メチオニンを水、２−イソプロパノール及び氷酢酸の混合溶液に添加し、均一に混合し、ブロモ酢酸の添加に続く。混合物を加熱して２時間還流する。室温まで冷却した後、混合物を濃縮して黄色の油状液体を得る。次いで、２−イソプロパノール及びトルエンの混合溶液（１：１Ｖ／Ｖ）を添加し、そして得られた混合物を減圧下で濃縮してオレンジ色の油状液体を得る。ジオキサン及び濃塩酸を当該油状液体に添加する。得られた混合物を５０℃で２０分間加熱し、次いでヒーターを除去する。室温で一晩攪拌した後、混合物を氷浴に入れる。黄色の固体を沈殿させ、吸引濾過に供する。濾過ケーキが白色になるまで２−イソプロパノールで洗浄して、中間体１を得る。
【００６７】
【化６】
0006595509.tif 000007
【００６８】
２）中間体１及びトリエタノールアミンをエタノール溶液に溶解する。０℃で、ｐ−アセトアミドベンゼンスルホニルクロリドを数回に分けて添加する。室温で一晩攪拌した後、反応物を氷水に注ぎ、１時間強攪拌に供する。沈殿した白色固体を濾過及び回収し、氷水で洗浄し、真空下で乾燥させ、そしてエタノールで再結晶して、白色固体（中間体２）を得る。
【００６９】
【化７】
0006595509.tif 000008
【００７０】
３）攪拌下で、６ＮのＨＣｌを中間体２のエタノール溶液に添加する。加熱して４時間還流した後、反応混合物を減圧下で濃縮する。残渣を水に溶解し、そしてｐＨをアンモニア水を用いて７〜８に調整する。１時間撹拌した後、沈澱した白色固体を濾過及び回収し、氷水で洗浄し、真空下で乾燥させ、そしてエタノールで再結晶して、白色固体（中間体３）を得る。
【００７１】
【化８】
0006595509.tif 000009
【００７２】
４）中間体３を三口フラスコに入れ、トリエタノールアミンを添加する。０℃の氷浴中で、アシルクロリド（ＲＣＯＣｌ）を１０分以内に滴下する。氷浴を除去し、混合物を室温で一晩撹拌する。反応系を翌日、減圧下で吸引濾過に供し、濾液を水で洗浄する。淡黄色の固体が有機相中に沈殿し、沈澱した固体を濾過及び回収し、そして真空下で乾燥させて、淡黄色の固体（式Ｉの化合物）を得る。
【００７３】
【化９】
0006595509.tif 000010
【００７４】
（式中、Ｒは本発明の第１の態様に定義されたとおりである。）
【００７５】
本発明はさらに、少なくとも１つの式Ｉの化合物及び少なくとも１つの薬学的に許容される担体又は賦形剤を含有する、医薬組成物に関する。式Ｉの化合物又はその薬学的に許容される塩は、医薬組成物の形態で、単独で、あるいは薬学的に許容される担体又は賦形剤と組み合わせて使用することができる。当該化合物が医薬組成物の形態で使用される場合、好適な投与形態又は剤形は、一般的に、本発明に係る式Ｉの化合物、又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物の有効量、及び１又は複数の薬学的に許容される担体又は賦形剤から調製される。当該工程は好適な手段によって成分を混合、造粒、圧縮又は溶解することを含む。
【００７６】
本発明に係る医薬組成物は以下の方法：経口投与、噴霧吸入、直腸投与、鼻腔内投与、膣内投与、局所投与、非経口投与、例えば皮下、静脈内、筋肉内、腹腔内、髄腔内、脳室内、胸骨内又は頭蓋内注射若しくは投入、あるいは移植リザーバに基づく投与、のいずれかによって投与されてもよく、ここで、経口投与、筋肉注射、腹腔内投与、又は脳室内投与が好ましい。
【００７７】
本発明の医薬組成物に含有される薬学的に許容される担体には、これらに限定されるものではないが、イオン交換体、酸化アルミニウム、ステアリン酸アルミニウム、レシチン、血清タンパク質、例えばヒト血清タンパク質；干渉物質、例えばリン酸塩、グリセロール、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、飽和植物脂肪酸の部分グリセリド混合物、水、塩、または電解質、例えば、硫酸プロタミン、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素カリウム、塩化ナトリウム、亜鉛塩、コロイドシリカ、三ケイ酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、セルロース系物質、ポリエチレングリコール、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリアクリル酸エステル、蜜蝋、ラノセリン（ｌａｎｏｃｅｒｉｎ）などが含まれる。医薬組成物中に、担体は１重量％〜９８重量％、一般に約８０重量％の量で存在する。使用の便宜のために、局所麻酔剤、保存剤、緩衝剤などが担体に直接溶解されてもよい。
【００７８】
経口製剤、例えば経口錠剤及びカプセル剤は、賦形剤、例えば結合剤、例えば、シロップ、アラビアゴム、ソルビトール、トラガント（Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｇｕｍｍｉｆｅｒ）、又はポリビニルピロリドン；充填剤、例えばラクトース、スクロース、トウモロコシデンプン、リン酸カルシウム、ソルビトール、及びアミノ酢酸；潤滑剤、例えばステアリン酸マグネシウム、タルク、ポリエチレングリコール、及びシリカ；崩壊剤、例えばジャガイモデンプン；又は許容される潤滑増強剤、例えばラウリル硫酸ナトリウムを含んでもよい。錠剤は薬剤学で良く知られている方法によってコーティングされてもよい。
【００７９】
経口液体形態での本発明の医薬組成物は、水及び油の懸濁液、溶液、エマルジョン、シロップ又はエリキシルへ、あるいは使用の前に水又はその他の好適な培体が補充される乾燥生成物へと調製されてもよい。液体製剤は従来の添加剤、例えば懸濁化剤、ソルビトール、メチルセルロース、グルコースシロップ、ゲル、ヒドロキシエチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ステアリン酸アルミニウムゲル、水素化食用脂肪（ｈｙｄｒｏｇｅｎａｔｅｄ  ｅｄｉｂｌｅ  ｆａｔ）、乳化剤、例えばレシチン、モノオレイン酸ソルビタン、アラビアゴム；又は非水性担体（食用油を含み得る）、例えばアーモンド油、脂肪、例えばグリセロール、エチレングリコール又はエタノール；保存剤、例えばメチル又はプロピルパラヒドロキシ安息香酸、ソルビン酸を含んでもよい。必要であれば、香味剤又は着色剤を添加してもよい。坐剤は従来の坐剤基剤、例えばココアバター又は他のグリセリドを含んでもよい。非経口投与のために、液体剤形は一般に化合物及び少なくとも１つの滅菌又は無菌の担体から調製される。最適な担体は水である。選択された担体、及び薬剤の濃度に応じて、化合物は担体に溶解され又は懸濁溶液に調製されてもよい。注射液を調製する場合、化合物を最初に水に溶解し、そして濾過及び滅菌後に密封ボトル又はアンプルにパッケージングする。皮膚に局所的に投与される場合、本発明の化合物は、活性成分が１又は複数の担体に懸濁され又は溶解される、軟膏、ローション又はクリームの好適な形態で調製されてもよい。軟膏製剤で使用するための担体には、これらに限定されるものではないが、鉱油、流動パラフィン、白色ワセリン、プロピレングリコール、ポリエチレンオキシド、ポリプロピレンオキシド、乳化ワックス及び水が含まれ；ローション及びクリームに使用するための担体には、これらに限定されるものではないが、鉱油、ソルビタンモノステアレート、ツイーン６０、ヘキサデシルエステル（ｈｅｘａｄｅｃｙｌｅｓｔｅｒ）ワックス、ヘキサデカン芳香族アルコール、２−オクチルドデカノール、ベンジルアルコール及び水が含まれる。投与経路に応じて、組成物は活性成分を０．１重量％、より好適には１０〜６０重量％含んでもよい。しかしながら、組成物が単位剤形である場合、各単位は最適には５０〜５００ｍｇの活性成分を含む。投与経路及び投与頻度に応じて、成人に適した治療用量は、例えば、１日あたり１００〜３０００ｍｇ、例えば１日あたり１５００ｍｇである。
【００８０】
式Ｉの化合物の最適な投与用量及び間隔は、疾患又は障害の重症度、化合物の性質、及び状態、例えば投与形態、経路及び部位、並びに治療されることになる特定の哺乳動物に依存するということを認識すべきである。最適な投与用量は臨床医師によって決定され得る。
【００８１】
発明の有益な技術的効果
本発明は、細胞の通常の生理学的機能に干渉することなく病原性細菌の病原性遺伝子の発現を調節することによって病原性細菌から病原性能力を奪い、したがって抗菌剤の開発の新たな方向性と考えられる、一連の新たな菌体密度感知制御剤を提供する。これらの中でも、菌体密度感知阻害剤は、グラム陰性細菌によって引き起こされる様々な疾患、例えば心内膜炎、腹膜炎、胃腸炎、胆嚢炎、膀胱炎、下痢、膿胸、及び敗血症を予防し及び／又は治療するために抗生物質と組み合わせて使用することができ；そして特に、既存の抗生物質に感受性でない薬剤耐性グラム陰性細菌によって引き起こされる疾患の予防及び／又は治療における使用に適している。
【００８２】
発明を実施するための特定の形態
本発明はさらに、以下の中間体及び実施例によって説明される。しかしながら、これらの中間体及び実施例は本発明をより詳細に説明するためだけに使用されると理解されるべきであり、いかなる方法によっても本発明を制限するものとして理解されるべきではない。
【００８３】
本発明は、一般的に及び／又は詳細に実験に使用した材料及び実験方法を説明する。本発明の目的を達成するために使用された多くの材料及び方法は当該技術分野でよく知られているが、本発明は可能な限り詳細にそれらをさらに説明する。当業者は、特に明記しない限り、本発明で使用された材料及び方法は当該技術分野でよく知られていることを知っている。
【実施例】
【００８４】
以下の実施例において、化合物の融点は温度が較正されていなかったＹＲＴ−４  ｔｙｐｅ融点装置によって測定した。特定の旋光をＯＡ  ＣｏｍｐａｎｙからのＰｏｌａａｒ  ３００５型のＡｃｃｕｒａｃｙ  Ａｕｔｏｍａｔｉｃ  Ｐｏｌａｒｉｍｅｔｅｒによって測定した。1Ｈ−ＮＭＲスペクトルをＢｒｕｋｅｒ  ＡＲＸ  ４００型のＮＭＲ分光計によって測定した。ＦＡＢ質量スペクトルをＺａｂｓｐｅｃｔ  Ｈｉｇｈ  Ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ質量分析計で測定した。
【００８５】
［中間体の調製］
［中間体１の調製］（Ｌ）−ホモセリンラクトン臭化水素酸塩
【００８６】
【化１０】
0006595509.tif 000011
【００８７】
２０．０ｇ（１３４ｍｍｏｌ）Ｌ−メチオニンを、８０ｍｌの水、８０ｍｌの２−イソプロパノール及び３２ｍｌの氷酢酸の混合溶液に添加し、均一に混合し、１８．８ｇ（１３４ｍｍｏｌ）のブロモ酢酸の添加に続いた。混合物を加熱して２時間還流した。室温まで冷却した後、混合物を濃縮して黄色の油状液体を得た。２−イソプロパノール及びトルエン（１：１  Ｖ／Ｖ、７０ｍｌ）の混合溶液を得られた液体に添加した。得られた混合物を混合し濃縮して、オレンジ色の油状液体を得た。５６ｍｌのジオキサン及び２８ｍｌの濃塩酸を油状液体に添加した。得られた混合物を５０℃で１５分間加熱し、次いでヒーターを除去した。室温で一晩攪拌した後、反応系を４時間氷浴中に置いた。淡黄色の固体を沈殿させ、吸引濾過を行った。濾過ケーキを白色になるまで２−イソプロパノールで洗浄して、１０．９ｇの生成物（中間体１）を、４５％の収率で得た。
1H-NMR(400MHz, D2O)δppm:8.76(s, 3H), 4.46(t, 1H, J=8.0 Hz,J=7.6Hz), 4.35-4.31(m,2H), 2.56-2.51(m,1H), 2.30-2.27(m,1H); EI-MS(m/z): 102.1 [M+H]+; m.p.220-224℃; [α]D25= -24.2(c = 0.1, H2O).
【００８８】
［中間体２の調製］
（ｓ）−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））アセトアミド
【００８９】
【化１１】
0006595509.tif 000012
【００９０】
１６．８ｇ（７２ｍｍｏｌ）のｐ−アセトアミドベンゼンスルホニルクロリドを、１０．９ｇ（６０ｍｍｏｌ）の（Ｌ）−ホモセリンラクトン臭化水素酸塩（中間体１）と２５．５ｍＬ（１２０ｍｍｏｌ）のトリエタノールアミンとの、１２０ｍＬのエタノール溶液に０℃で数回に分けて添加した。室温で一晩攪拌した後、反応物を翌日氷水（２００ｍＬ）に注ぎ、１時間撹拌した。沈澱した白色固体を濾過及び回収し、氷水で洗浄し、真空下で乾燥させ、そしてエタノールで再結晶して、１２ｇの白色固体（中間体２）を、６７％の収率で得た。
1H-NMR(400MHz, DMSO)δppm:10.33(s, 1H), 8.16(d, 1H, J=8.0 Hz), 7.75(s, 4H), 4.34-4.30(m, 1H), 4.21(m, 1H), 4.08(m, 1H), 2.08-2.06(m, 4H), 1.80(m, 1H); EI-MS(m/z): 299.34 [M+H]+ ; m.p.174-176℃.
【００９１】
［中間体３の調製］
（ｓ）−４−アミノ−Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）ベンゼンスルホンアミド
【００９２】
【化１２】
0006595509.tif 000013
【００９３】
攪拌下で、２０ｍＬの６ＮのＨＣｌを１０ｇ（３３ｍｍｏｌ）（ｓ）−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））アセトアミドの４０ｍＬのエタノール溶液に添加した。加熱して４時間還流した後、反応混合物を減圧下で濃縮した。残渣を水に溶解し、ｐＨを１Ｎのアンモニア水を用いて７〜８に調整した。１時間撹拌した後、沈澱した白色固体を濾過及び回収し、氷水で洗浄し、真空下で乾燥させ、そしてエタノールで再結晶して、５．２ｇの白色固体（中間体３）を、５７％の収率で得た。
1H-NMR(400MHz, DMSO)δppm:7.72(d, 1H, J=9.2 Hz), 7.45(d, 2H, J=8.4 Hz), 6.61(d, 2H, J=8.8 Hz), 5.95(m, 2H), 4.21(m, 2H), 4.09(m, 1H), 2.06(m, 1H), 1.78(m, 1H); EI-MS:m/z = 256.4 [M+H]+; m.p.162-165℃.
【００９４】
［実施例］
［実施例１］
（ｓ）−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））チオフェン−２−カルボキサミド（化合物１）
【００９５】
【化１３】
0006595509.tif 000014
【００９６】
０．５２ｇ（２．０３ｍｍｏｌ）の（ｓ）−４−アミノ−Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）ベンゼンスルホンアミド（中間体３）を１５ｍｌの無水ジクロロメタンを含む三口フラスコに入れ、０．４１ｇ（４．０６ｍｍｏｌ）のトリエタノールアミンを添加した。０℃の氷浴中で、０．３６ｇ（２．４４ｍｍｏｌ）のチオフェン−２−カルボニルクロリドを１０分以内にゆっくりと滴下する。氷浴を除去し、混合物を一晩室温で撹拌した。反応系を翌日減圧下で吸引濾過に供し、濾液を水で洗浄した。淡黄色の固体を有機相中に沈殿させ、沈澱した固体を減圧下で吸引濾過に供し、真空下で乾燥させて、０．４４ｇの淡黄色の固体（化合物１）を、６０％の収率で得た。
1H-NMR(400MHz, DMSO)δppm:10.57(s ,1H), 8.25(1H, d, J=8.0 Hz), 8.22(d, 1H, J=8.0 Hz), 8.07(d, 1H, J=8.0 Hz), 7.93(m, 3H), 7.82(d, 2H, J=8.0 Hz), 7.26(d, 1H, J=8.0 Hz), 4.37(m, 1H), 4.23(m, 1H), 4.11(m, 1H), 2.14(m, 1H), 1.84(m, 1H); EI-MS:m/z = 366.9 [M+H]+; m.p.114-119℃.
【００９７】
［実施例２］
（ｓ）−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））チオフェン−３−カルボキサミド（化合物２）
【００９８】
【化１４】
0006595509.tif 000015
【００９９】
中間体３及びチオフェン−３−カルボニルクロリドを原料として使用し、操作を実施例１に記載のように行って、カーキ色の固体生成物を得た（化合物２）。
1H-NMR(400MHz, DMSO)δppm:10.38(s ,1H), 8.42(1H, s), 8.20(d, 1H, J=8.0 Hz), 7.96(d, 2H, J=8.0 Hz), 7.82(m, 2H), 7.68(d, 2H, J=8.0 Hz), 4.37(m, 1H), 4.23(m, 1H), 4.11(m, 1H), 2.14(m, 1H), 1.83(m, 1H); EI-MS:m/z = 367.0 [M+H]+; m.p.212-216℃.
【０１００】
［実施例３］
（ｓ）−５−クロロ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））チオフェン−２−カルボキサミド（化合物３）
【０１０１】
【化１５】
0006595509.tif 000016
【０１０２】
中間体３及び５−クロロ−チオフェン−２−カルボニルクロリドを原料として使用し、操作を実施例１に記載のように行って、オレンジ色の固体生成物を得た（化合物３）。
1H-NMR(400MHz, DMSO)δppm:10.64(s ,1H), 8.21(d, 1H, J=8.0 Hz), 7.94(m, 3H), 7.82(d, 2H, J=8.0 Hz), 7.32(s, 1H), 4.37(m, 1H), 4.22(m, 1H), 4.10(m, 1H), 2.14(m, 1H), 1.83(m, 1H); EI-MS:m/z = 401.1 [M+H]+; m.p.243-249℃.
【０１０３】
［実施例４］
（ｓ）−５−ブロモ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））チオフェン−２−カルボキサミド（化合物４）
【０１０４】
【化１６】
0006595509.tif 000017
【０１０５】
中間体３及び５−ブロモ−チオフェン−２−カルボニルクロリドを原料として使用し、操作を実施例１に記載のように行って、オレンジ色の固体生成物を得た（化合物４）。
1H-NMR(400MHz, DMSO)δppm:10.63(s ,1H), 8.21(d, 1H, J=8.0 Hz), 7.91(m, 3H), 7.83(d, 2H, J=8.0 Hz), 7.40(s, 1H), 4.36(m, 1H), 4.22(m, 1H), 4.10(m, 1H), 2.13(m, 1H), 1.83(m, 1H); EI-MS:m/z = 445.0 [M+H]+; m.p.197-199℃.
【０１０６】
［実施例５］
（ｓ）−５−ニトロ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））チオフェン−２−カルボキサミド（化合物５）
【０１０７】
【化１７】
0006595509.tif 000018
【０１０８】
中間体３及び５−ニトロ−チオフェン−２−カルボニルクロリドを原料として使用し、操作を実施例１に記載のように行って、白色の固体生成物を得た（化合物５）。
1H-NMR(400MHz, DMSO)δppm:10.96(s ,1H), 8.23(d, 2H, J=8.0 Hz),8.10(d, 1H, J=8.0 Hz), 7.93(m, 4H), 4.36(m, 1H), 4.21(m, 1H), 4.09(m, 1H), 2.13(m, 1H), 1.83(m, 1H); EI-MS:m/z = 434.2 [M+Na]+; m.p.208-220℃.
【０１０９】
［実施例６］
（ｓ）−４−ブロモ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））チオフェン−２−カルボキサミド（化合物６）
【０１１０】
【化１８】
0006595509.tif 000019
【０１１１】
中間体３及び４−ブロモ−チオフェン−２−カルボニルクロリドを原料として使用し、操作を実施例１におけるように行って、オレンジ色の固体生成物を得た（化合物６）。
1H-NMR(400MHz, DMSO)δppm:10.66(s ,1H), 8.24(d, 1H, J=8.0 Hz), 8.12(d, 2H, J=8.0 Hz), 7.94(m, 2H), 7.86(m, 2H), 4.38(m, 1H), 4.23(m, 1H), 4.11(m, 1H), 2.14(m, 1H), 1.84(m, 1H); EI-MS:m/z = 445.0[M+H]+; m.p.197-203℃.
【０１１２】
［実施例７］
（ｓ）−４−メチル−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））チオフェン−２−カルボキサミド（化合物７）
【０１１３】
【化１９】
0006595509.tif 000020
【０１１４】
中間体３及び４−メチル−チオフェン−２−カルボニルクロリドを原料として使用し、操作を実施例１に記載のように行って、淡黄色の固体生成物を得た（化合物７）。
1H-NMR(400MHz, DMSO)δppm:10.50(s ,1H), 8.23(d, 1H, J=8.0 Hz), 7.94(m, 3H), 7.81(d, 2H, J=8.0 Hz),7.51(d, 1H, J=8.0 Hz), 4.37(m, 1H), 4.23(m, 1H), 4.11(m, 1H), 2.14(m, 1H), 1.83(m, 1H);EI-MS(m/z):381.1[M+H]+; m.p.187-188℃.
【０１１５】
［実施例８］
（ｓ）−３−メチル−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））チオフェン−２−カルボキサミド（化合物８）
【０１１６】
【化２０】
0006595509.tif 000021
【０１１７】
中間体３及び３−メチル−チオフェン−２−カルボニルクロリドを原料として使用し、操作を実施例１に記載のように行って、白色の固体生成物を得た（化合物８）。
1H-NMR(400MHz, DMSO)δppm:10.36(s ,1H), 8.23(d, 1H, J=8.0 Hz), 7.88(d, 2H, J=8.0 Hz), 7.79(d, 2H, J=8.0 Hz),7.72(m, 1H), 7.06(d, 1H, J=8.0 Hz), 4.36(m, 1H), 4.23(m, 1H), 4.11(m, 1H), 2.14(m, 1H), 1.83(m, 1H); EI-MS:m/z = 381.0[M+H]+; m.p.176-178℃.
【０１１８】
［実施例９］
（ｓ）−３−クロロ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））チオフェン−２−カルボキサミド（化合物９）
【０１１９】
【化２１】
0006595509.tif 000022
【０１２０】
中間体３及び３−クロロ−チオフェン−２−カルボニルクロリドを原料として使用し、操作を実施例１に記載のように行って、淡黄色の固体生成物を得た（化合物９）。
1H-NMR(400MHz, DMSO)δppm:10.63(s ,1H), 8.23(d, 1H, J=8.0 Hz), 7.96(m, 1H),7.87(d, 2H, J=8.0 Hz), 7.82(d, 2H, J=8.0 Hz), 7.24(d, 1H, J=8.0 Hz), 4.37(m, 1H), 4.23(m, 1H), 4.11(m, 1H), 2.13(m, 1H), 1.83(m, 1H); EI-MS:m/z = 401.3[M+H]+; m.p.219-221℃.
【０１２１】
［実施例１０］
（ｓ）−３−ブロモ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））チオフェン−２−カルボキサミド（化合物１０）
【０１２２】
【化２２】
0006595509.tif 000023
【０１２３】
中間体３及び３−クロロ−チオフェン−２−カルボニルクロリドを原料として使用し、操作を実施例１に記載のように行って、淡黄色の固体生成物を得た（化合物１０）。
1H-NMR(400MHz, DMSO)δppm:10.71(s ,1H), 8.24(d, 1H, J=8.0 Hz), 7.92(m, 1H),7.87(d, 2H, J=8.0 Hz), 7.83(d, 2H, J=8.0 Hz), 7.27(d, 1H, J=8.0 Hz), 4.37(m, 1H), 4.23(m, 1H), 4.11(m, 1H), 2.13(m, 1H), 1.83(m, 1H); EI-MS:m/z = 444.9[M+H]+; m.p.151-154℃.
【０１２４】
［実施例１１］
（ｓ）−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））フラン−２−カルボキサミド（化合物１１）
【０１２５】
【化２３】
0006595509.tif 000024
【０１２６】
中間体３及びフラン−２−カルボニルクロリドを原料として使用し、操作を実施例１に記載のように行って、オレンジ色の固体生成物を得た（化合物１１）。
1H-NMR(400MHz, DMSO)δppm:10.49(s ,1H), 8.18(d, 1H, J=8.0 Hz), 7.96(m, 3H),7.82(d, 2H, J=8.0 Hz), 7.40(d, 1H, J=8.0 Hz), 6.72(d, 1H, J=8.0 Hz), 4.36(m, 1H), 4.23(m, 1H), 4.11(m, 1H), 2.17(m, 1H), 1.86(m, 1H); EI-MS:m/z = 351.1[M+H]+; m.p.195-196℃.
【０１２７】
［実施例１２］
（ｓ）−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））フラン−３−カルボキサミド（化合物１２）
【０１２８】
【化２４】
0006595509.tif 000025
【０１２９】
中間体３及びフラン−３−カルボニルクロリドを原料として使用し、操作を実施例１に記載のように行って、淡黄色の固体生成物を得た（化合物１２）。
1H-NMR(400MHz, DMSO)δppm:10.28(s ,1H), 8.44(s, 1H), 8.21(d, 1H, J=8.0 Hz), 7.92(m, 5H), 7.02(d, 1H, J=8.0 Hz), 4.36(m, 1H), 4.23(m, 1H), 4.10(m, 1H), 2.13(m, 1H), 1.82(m, 1H); EI-MS:m/z = 351.1[M+H]+; m.p.202-209℃.
【０１３０】
［実施例１３］
（ｓ）−５−ニトロ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））フラン−２−カルボキサミド（化合物１３）
【０１３１】
【化２５】
0006595509.tif 000026
【０１３２】
中間体３及び５−ニトロ−フラン−２−カルボニルクロリドを原料として使用し、操作を実施例１に記載のように行って、淡黄色の固体生成物を得た（化合物１３）。
1H-NMR(400MHz, DMSO)δppm:10.97(s ,1H), 8.26(d, 1H, J=8.0 Hz), 7.95(d, 2H, J=8.0 Hz),7.85(m, 3H), 7.71(d, 1H, J=8.0 Hz), 4.37(m, 1H), 4.23(m, 1H), 4.10(m, 1H), 2.13(m, 1H), 1.86(m, 1H); EI-MS:m/z = 396.0[M+H]+; m.p.113-120℃.
【０１３３】
［実施例１４］
（ｓ）−５−ブロモ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））フラン−２−カルボキサミド（化合物１４）
【０１３４】
【化２６】
0006595509.tif 000027
【０１３５】
中間体３及び５−ブロモ−フラン−２−カルボニルクロリドを原料として使用し、操作を実施例１に記載のように行って、淡黄色の固体生成物を得た（化合物１４）。
1H-NMR(400MHz, DMSO)δppm:10.56(s ,1H), 8.24(d, 1H, J=8.0 Hz), 7.94(d, 2H, J=8.0 Hz), 7.81(d, 2H, J=8.0 Hz), 7.45(d, 1H, J=8.0 Hz), 6.87(d, 1H, J=8.0 Hz),4.36(m, 1H), 4.23(m, 1H), 4.10(m, 1H), 2.13(m, 1H), 1.83(m, 1H); EI-MS:m/z = 453.1[M+Na]+; m.p.190-196℃.
【０１３６】
［実施例１５］
（ｓ）−２−メチル−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））フラン−３−カルボキサミド（化合物１５）
【０１３７】
【化２７】
0006595509.tif 000028
【０１３８】
中間体３及び２−メチル−フラン−３−カルボニルクロリドを原料として使用し、操作を実施例１に記載のように行って、淡黄色の固体生成物を得た（化合物１５）。
1H-NMR(400MHz, DMSO)δppm:10.05(s ,1H), 8.21(d, 1H, J=8.0 Hz), 7.94(d, 2H, J=8.0 Hz), 7.79(d, 2H, J=8.0 Hz), 7.63(d, 1H, J=8.0 Hz), 7.09(d, 1H, J=8.0 Hz),4.36(m, 1H), 4.23(m, 1H), 4.11(m, 1H), 2.53(s, 3H), 2.13(m, 1H), 1.83(m, 1H); EI-MS:m/z = 365.0[M+H]+; m.p.185-187℃.
【０１３９】
［実施例１６］
（ｓ）−４，５−ジブロモ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））フラン−２−カルボキサミド（化合物１６）
【０１４０】
【化２８】
0006595509.tif 000029
【０１４１】
中間体３及び４，５−ジブロモ−フラン−２−カルボニルクロリドを原料として使用し、操作を実施例１に記載のように行って、淡黄色の固体生成物を得た（化合物１６）。
1H-NMR(400MHz, DMSO)δppm:10.66(s ,1H), 8.23(d, 1H, J=8.0 Hz), 7.94(d, 2H, J=8.0 Hz), 7.82(d, 2H, J=8.0 Hz), 7.69(d, 1H, J=8.0 Hz), 4.36(m, 1H), 4.23(m, 1H), 4.11(m, 1H), 2.14(m, 1H), 1.85(m, 1H); EI-MS:m/z = 529.0[M+Na]+; m.p.217-219℃.
【０１４２】
［実施例１７］
（ｓ）−１Ｈ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））ピロール−２−カルボキサミド（化合物１７）
【０１４３】
【化２９】
0006595509.tif 000030
【０１４４】
中間体３及びピロール−２−カルボニルクロリドを原料として使用し、操作を実施例１に記載のように行って、淡黄色の固体生成物を得た（化合物１７）。
1H-NMR(400MHz, DMSO)δppm:11.79(d ,1H, J=8.0 Hz), 10.10(s ,1H),8.17(d, 1H, J=8.0 Hz), 7.95(d, 2H, J=8.0 Hz), 7.80(d, 2H, J=8.0 Hz), 7.12(d, 1H, J=8.0 Hz), 7.02(d, 1H, J=8.0 Hz), 6.20(d, 1H, J=8.0 Hz),4.36(m, 1H), 4.23(m, 1H), 4.11(m, 1H), 2.13(m, 1H), 1.83(m, 1H); EI-MS:m/z = 365.0[M+H]+; m.p.170-174℃.
【０１４５】
［実施例１８］
（ｓ）−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））ピリジン−４−カルボキサミド（７−１９）（化合物１８）
【０１４６】
【化３０】
0006595509.tif 000031
【０１４７】
中間体３及びピリジン−４−カルボニルクロリドを原料として使用し、操作を実施例１に記載のように行って、白色の固体生成物を得た（化合物１８）。
1H-NMR(400MHz, DMSO)δppm:10.86(s ,1H), 8.81(m, 2H), 8.23(d, 1H, J=8.0 Hz), 7.97(d, 2H, J=8.0 Hz), 7.86(m, 4H), 4.36(m, 1H), 4.23(m, 1H), 4.11(m, 1H), 2.14(m, 1H), 1.83(m, 1H); EI-MS:m/z = 362.1[M+H]+; m.p.174-185℃.
【０１４８】
［実施例１９］
（ｓ）−６−クロロ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））ピリジン−３−カルボキサミド（化合物１９）
【０１４９】
【化３１】
0006595509.tif 000032
【０１５０】
中間体３及び６−クロロ−ピリジン−３−カルボニルクロリドを原料として使用し、操作を実施例１に記載のように行って、淡黄色の固体生成物を得た（化合物１９）。
1H-NMR(400MHz, DMSO)δppm:10.85(s ,1H), 8.96(d, 1H, J=8.0 Hz), 8.36(d, 1H, J=8.0 Hz), 8.25(d, 1H, J=8.0 Hz), 7.96(d, 2H, J=8.0 Hz), 7.85(d, 2H, J=8.0 Hz), 7.76(d, 1H, J=8.0 Hz), 4.38(m, 1H), 4.23(m, 1H), 4.09(m, 1H), 2.14(m, 1H), 1.83(m, 1H); EI-MS:m/z = 396.1[M+H]+; m.p.190-191℃.
【０１５１】
［実施例２０］
（Ｓ）−４−フルオロ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））ベンゼンアセトアミド（化合物２０）
【０１５２】
【化３２】
0006595509.tif 000033
【０１５３】
中間体３及び４−フルオロ−フェニルアセチルクロリドを原料として使用し、操作を実施例１に記載のように行って、淡黄色の固体生成物を得た（化合物２０）。
1H-NMR(400MHz, DMSO)δppm:10.58(s ,1H), 8.18(d, 1H, J=8.0 Hz), 7.77(m, 4H), 7.36(d, 2H, J=8.0 Hz), 7.17(dd, 2H, J=8.0 Hz), 4.34(m, 1H), 4.20(m, 1H), 4.09(m, 1H), 3.69(s, 2H),2.09(m, 1H), 1.80(m, 1H); EI-MS:m/z = 393.1[M+H]+ ; m.p.187-194℃.
【０１５４】
［実施例２１］
（Ｓ）−４−クロロ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））ベンゼンアセトアミド（化合物２１）
【０１５５】
【化３３】
0006595509.tif 000034
【０１５６】
中間体３及び４−クロロ−フェニルアセチルクロリドを原料として使用し、操作を実施例１に記載のように行って、白色の固体生成物を得た（化合物２１）。
1H-NMR(400MHz, DMSO)δppm:10.57(s ,1H), 8.16(d, 1H, J=8.0 Hz), 7.76(m, 4H), 7.37(m, 4H), 4.33(m, 1H), 4.21(m, 1H), 4.09(m, 1H), 3.70(s, 2H),2.10(m, 1H), 1.80(m, 1H); EI-MS:m/z = 409.2[M+H]+; m.p.169-180℃.
【０１５７】
［実施例２２］
（Ｓ）−４−ブロモ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））ベンゼンアセトアミド（化合物２２）
【０１５８】
【化３４】
0006595509.tif 000035
【０１５９】
中間体３及び４−ブロモ−フェニルアセチルクロリドを原料として使用し、操作を実施例１に記載のように行って、淡黄色の固体生成物を得た（化合物２２）。
1H-NMR(400MHz, DMSO)δppm:10.57(s ,1H), 8.16(d, 1H, J=8.0 Hz), 7.77(m, 4H), 7.52(d, 2H, J=8.0 Hz), 7.29(d, 2H, J=8.0 Hz), 4.33(m, 1H), 4.20(m, 1H), 4.09(m, 1H), 3.68(s, 2H), 2.10(m, 1H), 1.80(m, 1H); EI-MS:m/z = 453.3[M+H]+; m.p.184-186℃.
【０１６０】
［実施例２３］
（Ｓ）−３−フルオロ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））ベンゼンアセトアミド（化合物２３）
【０１６１】
【化３５】
0006595509.tif 000036
【０１６２】
中間体３及び３−フルオロ−フェニルアセチルクロリドを原料として使用し、操作を実施例１に記載のように行って、淡黄色の固体生成物を得た（化合物２３）。
1H-NMR(400MHz, DMSO)δppm:10.58(s ,1H), 8.16(d, 1H, J=8.0 Hz), 7.76(m, 4H), 7.37(m, 1H), 7.18(m, 3H), 4.32(m, 1H), 4.21(m, 1H), 4.09(m, 1H), 3.73(s, 2H),2.10(m, 1H), 1.80(m, 1H); EI-MS:m/z = 393.2[M+H]+; m.p.175-177℃.
【０１６３】
［実施例２４］
（Ｓ）−３−クロロ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））ベンゼンアセトアミド（化合物２４）
【０１６４】
【化３６】
0006595509.tif 000037
【０１６５】
中間体３及び３−クロロ−フェニルアセチルクロリドを原料として使用し、操作を実施例１に記載のように行って、白色の固体生成物を得た（化合物２４）。
1H-NMR(400MHz, DMSO)δppm:10.59(s ,1H), 8.18(d, 1H, J=8.0 Hz), 7.76(m, 4H), 7.37(m, 4H), 4.33(m, 1H), 4.21(m, 1H), 4.09(m, 1H), 3.73(s, 2H),2.10(m, 1H), 1.80(m, 1H); EI-MS:m/z = 409.1[M+H]+; m.p.188-190℃.
【０１６６】
［実施例２５］
（Ｓ）−３−メチル−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））ベンゼンアセトアミド（化合物２５）
【０１６７】
【化３７】
0006595509.tif 000038
【０１６８】
中間体３及び３−メチル−フェニルアセチルクロリドを原料として使用し、操作を実施例１に記載のように行って、白色の固体生成物を得た（化合物２５）。
1H-NMR(400MHz, DMSO)δppm:10.58(s ,1H), 8.18(d, 1H, J=8.0 Hz), 7.78(m, 4H), 7.16(m, 4H), 4.33(m, 1H), 4.20(m, 1H), 4.08(m, 1H), 3.73(s, 2H),2.11(m, 1H), 1.80(m, 1H); EI-MS:m/z = 389.1[M+H]+; m.p.191-193℃.
【０１６９】
［実施例２６］
（Ｓ）−２−トリフルオロメチル−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））ベンゼンアセトアミド（化合物２６）
【０１７０】
【化３８】
0006595509.tif 000039
【０１７１】
中間体３及び２−トリフルオロメチル−フェニルアセチルクロリドを原料として使用し、操作を実施例１に記載のように行って、白色の固体生成物を得た（化合物２６）。
1H-NMR(400MHz, DMSO)δppm:10.63(s ,1H), 8.18(d, 1H, J=8.0 Hz), 7.74(m, 6H), 7.53(m, 2H), 4.33(m, 1H), 4.22(m, 1H), 4.08(m, 1H), 3.98(s, 2H),2.10(m, 1H), 1.81(m, 1H); EI-MS:m/z = 443.3[M+H]+; m.p.197-198℃.
【０１７２】
［実施例２７］
（Ｓ）−２−フルオロ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））ベンゼンアセトアミド（化合物２７）
【０１７３】
【化３９】
0006595509.tif 000040
【０１７４】
中間体３及び２−フルオロ−フェニルアセチルクロリドを原料として使用し、操作を実施例１に記載のように行って、白色の固体生成物を得た（化合物２７）。
1H-NMR(400MHz, DMSO)δppm:10.62(s ,1H), 8.17(d, 1H, J=8.0 Hz), 7.76(m, 4H), 7.19(m, 4H), 4.32(m, 1H), 4.21(m, 1H), 4.06(m, 1H), 3.78(s, 2H), 2.11(m, 1H), 1.80(m, 1H); EI-MS:m/z = 393.3[M+H]+; m.p.185-186℃.
【０１７５】
［実施例２８］
（Ｓ）−２−クロロ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））ベンゼンアセトアミド（化合物２８）
【０１７６】
【化４０】
0006595509.tif 000041
【０１７７】
中間体３及び２−クロロ−フェニルアセチルクロリドを原料として使用し、操作を実施例１に記載のように行って、白色の固体生成物を得た（化合物２８）。
1H-NMR(400MHz, DMSO)δppm:10.64(s ,1H), 8.18(d, 1H, J=8.0 Hz), 7.78(m, 4H), 7.44(m, 4H), 4.33(m, 1H), 4.21(m, 1H), 4.08(m, 1H), 3.89(s, 2H), 2.11(m, 1H), 1.81(m, 1H); EI-MS:m/z = 409.2[M+H]+; m.p.223-228℃.
【０１７８】
［実施例２９］
（Ｓ）−２−ブロモ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））ベンゼンアセトアミド（化合物２９）
【０１７９】
【化４１】
0006595509.tif 000042
【０１８０】
中間体３及び２−ブロモ−フェニルアセチルクロリドを原料として使用し、操作を実施例１に記載のように行って、白色の固体生成物を得た（化合物２９）。
1H-NMR(400MHz, DMSO)δppm:10.65(s ,1H), 8.18(d, 1H, J=8.0 Hz), 7.79(m, 4H), 7.62(d, 1H, J=8.0 Hz), 7.42(m, 2H), 7.22(m, 1H), 4.34(m, 1H), 4.22(m, 1H), 4.08(m, 1H), 3.91(s, 2H), 2.13(m, 1H), 1.83(m, 1H); EI-MS:m/z = 475.2[M+Na]+; m.p.227-229℃.
【０１８１】
［実施例３０］
（Ｓ）−２−メチル−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））ベンゼンアセトアミド（化合物３０）
【０１８２】
【化４２】
0006595509.tif 000043
【０１８３】
中間体３及び２−メチル−フェニルアセチルクロリドを原料として使用し、操作を実施例１に記載のように行って、白色の固体生成物を得た（化合物３０）。
1H-NMR(400MHz, DMSO)δppm:10.56(s ,1H), 8.17(d, 1H, J=8.0 Hz), 7.78(m, 4H), 7.16(m, 4H), 4.35(m, 1H), 4.21(m, 1H), 4.08(m, 1H), 3.73(s, 2H), 2.10(m, 1H), 1.81(m, 1H); EI-MS:m/z = 389.2[M+H]+; m.p.208-210℃.
【０１８４】
［実施例３１］
（Ｓ）−２−ニトロ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））ベンゼンアセトアミド（化合物３１）
【０１８５】
【化４３】
0006595509.tif 000044
【０１８６】
中間体３及び２−ニトロ−フェニルアセチルクロリドを原料として使用し、操作を実施例１に記載のように行って、オレンジ色の固体生成物を得た（化合物３１）。
1H-NMR(400MHz, DMSO)δppm:10.66(s ,1H), 8.18(d, 1H, J=8.0 Hz), 8.08(d, 1H, J=8.0 Hz),7.75(m, 5H), 7.59(m, 2H), 4.34(m, 1H), 4.21(m, 1H), 4.18(s, 2H), 4.08(m, 1H), 2.11(m, 1H), 1.81(m, 1H); EI-MS:m/z = 420.4[M+H]+; m.p.216-219℃.
【０１８７】
［実施例３２］
（Ｓ）−２，３−ジクロロ−Ｎ−（４−（Ｎ−（２−オキソテトラヒドロフラン−３−イル）スルファモイル）フェニル））ベンゼンアセトアミド（化合物３２）
【０１８８】
【化４４】
0006595509.tif 000045
【０１８９】
中間体３及び２，３−ジクロロ−フェニルアセチルクロリドを原料として使用し、操作を実施例１に記載のように行って、淡黄色の固体生成物を得た（化合物３２）。
1H-NMR(400MHz, DMSO)δppm:10.67(s ,1H), 8.17(d, 1H, J=8.0 Hz), 7.77(m, 4H), 7.56(d, 1H, J=8.0 Hz),7.36(m, 2H), 4.34(m, 1H), 4.20(m, 1H), 4.08(m, 1H), 3.97(s, 2H), 2.11(m, 1H), 1.81(m, 1H); EI-MS:m/z = 443.3[M+H]+; m.p.230-237℃.
【０１９０】
［実験例］本発明の菌体密度感知制御剤の活性の評価
本発明の菌体密度感知制御剤の活性は以下の方法により測定することができる。
【０１９１】
１．予備スクリーニングのための方法
１．１  調製作業：試験すべき化合物（実施例１〜３２で調製された化合物１〜３２及び中間体１〜３）を秤量し、次いで２００μｌのＤＭＳＯ（ジメチルスルホキシド）に個別に溶解して、０．０６５Ｍの濃度で溶液を調製した。５．０ｍｇのインデューサーである、Ｎ−ヘキサノイルホモセリンラクトン（Ｃ6−ＨＳＬ、Ｓｉｇｍａ  Ｃｏｍｐａｎｙから購入した）を秤量し、２００μｌのＤＭＳＯに（０．１２５Ｍの濃度で）溶解し、化合物及びインデューサーをその後の使用のためにすべて４℃で保存した。Ｃ．ビオラセウム（Ｃ．ｖｉｏｌａｃｅｕｍ）ＣＶ０２６（テキサス州立大学のＭｃＬｅａｎ  Ｊ  Ｃ教授から提供された、細菌は野生型クロモバクテリウム・ビオラセウム（Ｃｈｒｏｍｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｖｉｏｌａｃｅｕｍ）ＡＴＣＣ３１５３２のＴｎ−５突然変異体である；Ｌａｔｉｆｉ、Ａ．ら、Ｍｏｌ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ、１７，３３３〜３４３（１９９５）及びＷｉｎｓｏｎ、Ｍ．Ｋ．ら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９２，９４２７〜９４３１（１９９５）を参照のこと）を３０℃、２００ｒｐｍでシェーカーで振とうしながら培養した。
【０１９２】
１．２  アゴニスト活性を有する化合物の予備スクリーニングのための方法：４００μｌのＣ．ビオラセウムＣＶ０２６を５ｍｌの融解した半固体のＬＢ培地（１％のトリプトン、１％のＮａＣｌ、及び０．５％の酵母エキス）に添加し、均一に混合した；混合された培地を固体ＬＢプレートに注いだ；混合培地がプレート上で固化したら；溶解した試験すべき化合物（実施例１〜３２の化合物１〜３２）の１μｌの試料をプレート上にスポットした；試料を空気中で乾燥させたら、プレートを上下逆さに３０℃のオーブンに入れて、１６〜１８時間培養した。化合物のアゴニスト活性を、ＬＢプレート上でＣ．ビオラセウムＣＶ０２６について紫色の株が誘導されたかどうか、ならびに紫色の株の密度に応じて決定した。
【０１９３】
１．３  阻害活性を有する化合物の予備スクリーニングのための方法：インデューサーＣ6−ＨＳＬを２倍希釈によって１０００倍まで段階的に希釈した；希釈したインデューサーの１５μｌ及び４００μｌの対数期におけるＣ．ビオラセウムＣＶ０２６を均一に混合し、次いで５ｍｌの融解した半固体のＬＢ培地に添加した；インデューサー、Ｃ．ビオラセウム、及び半固体ＬＢ培地の混合物を固体ＬＢプレート上に注いだ；混合物がプレート上で固化したら、溶解した試験すべき化合物（実施例１〜３２の化合物１〜３２及び中間体１〜３）の１μｌの試料をプレート上にスポットした；試料を空気中で乾燥させたら、プレートを上下逆さに３０℃のオーブンに入れて、１６〜１８時間培養した。化合物の阻害活性を、Ｃ．ビオラセウムＣＶ０２６がＬＢプレート上で阻害された後に現れる白色の円のサイズに応じて予備的に決定した。
【０１９４】
予備スクリーニング後に、本発明に係る１７個の化合物が菌体密度感知制御活性を有することを見出し、スクリーニング結果を表１に示した。
【０１９５】
２．Ｃ．ビオラセウム密度感知に対して阻害効果を有する化合物のＩＣ50の測定
２．１  １２ウェルプレートのウェルを、初期濃度群、２、４、８、１６、３２、６４、１２８、及び２５６倍希釈群、ＤＭＳＯ群、ならびにブランク対照群として、左から右へそして上から下へ、それぞれマークした。
【０１９６】
２．２  ＬＢ固体プレート上で増殖したモノクローナルＣ．ビオラセウムＣＶ０２６を５ｍｌの新鮮なＬＢ液体培地で対数期まで培養し、次いで５０μｌを５ｍｌのＬＢ培地に播種するために採取し、そして光学密度ＯＤ値が約１．０になるまで培養した。次いで培養物をＬＢ培地と１：９の比率で（約０．１５のＯＤで）均一に混合し、１２ウェルプレートに２ｍｌ／ウェルの量で添加した。
【０１９７】
２．３  予備スクリーニングにおいて密度感知阻害活性を有する化合物をＤＭＳＯに（０．０６５Ｍの濃度で）それぞれ溶解し、次いで１０μｌを２倍希釈などのために１０μｌのＤＭＳＯ溶液に入れた。各化合物を最高２５６倍まで段階的に希釈した（２、４、８、１６、３２、６４、１２８、２５６倍の段階希釈）。
【０１９８】
２．４  各ウェルに、１５μｌの１０００倍希釈したインデューサーＣ6−ＨＳＬ（０．１２５Ｍの初期濃度）及び８μｌの各希釈段階での化合物溶液を添加した；ＤＭＳＯ群には、８μｌのＤＭＳＯを添加した；ブランク対照群には、８μｌのＬＢ培地を添加した。最後に、１２ウェルプレートのそれぞれの２ｍｌの培養物が均一に混合されたことを確認した。
【０１９９】
２．５  １２ウェルプレートを３０℃のシェーカー中に１３０ｒｐｍで入れ、１０〜１２時間培養した。
【０２００】
２．６  培養が終了した後、１ｍｌの培養物を各ウェルから採取して、１．５ｍｌのＥＰチューブに入れ、次いで１２０００ｒｐｍで１０分間遠心分離した。培養物の上清を吸い出し、そして５００μｌのＤＭＳＯを各ＥＰチューブに添加して、培養物中の紫色の色素を溶解した。色素を完全に溶解した後、遠心分離を１２０００ｒｐｍで１０分間行った。２００μｌの上清色素を９６ウェル培養プレートに入れ、マイクロプレートリーダーにより５８５ｎｍで吸光度値を測定した。吸光度値及び対応する濃度をプロットして、ＩＣ50値を得た。具体的な結果を表２に示した。
【０２０１】
【表１】
0006595509.tif 000046
【０２０２】
表１において、「＋」は化合物が菌体密度感知アゴニスト活性を有することを表し、「−」は化合物が菌体密度感知阻害活性を有することを表し、そして「±」は化合物が菌体密度感知に対してアゴニスト活性及び阻害活性の両方を有することを表す。
【０２０３】
【表２】
0006595509.tif 000047
【０２０４】
本発明の実施形態は詳細に説明されているが、当業者は既に開示された全ての教示に従って、これらの詳細を改変し及び置換することができ、そしてこれらの変更はすべて本発明の保護範囲に入ることを理解するであろう。本発明の範囲は特許請求の範囲及びその任意の等価物によって定義される。