(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
標的化剤抗体抱合体であって：
式ＸＩの化合物と；
【化１】
0006501270.tif 000072
細胞傷害性エフェクター細胞上の抗原を結合する抗体または抗体フラグメントと；
を含む、ことを特徴とする標的化剤抗体抱合体。
【請求項２】
抗体又は抗体フラグメントは１つ以上の非天然アミノ酸を含む、ことを特徴とする請求項１に記載の標的化剤抗体抱合体。
【請求項３】
式ＸＩの化合物は、抗体または抗体フラグメントの１つ以上の非天然アミノ酸に対して部位特異的に連結される、ことを特徴とする請求項２に記載の標的化剤抗体抱合体。
【請求項４】
抗体の少なくとも一部分は、ヒトの、ヒト化された、ヒトの操作された、または完全にヒトの抗体に基づくか又は由来する、ことを特徴とする請求項１に記載の標的化剤抗体抱合体。
【請求項５】
抗体はキメラ抗体であることを特徴とする請求項１に記載の標的化剤抗体抱合体。
【請求項６】
細胞傷害性エフェクター細胞は、免疫応答を開始することが可能であることを特徴とする、請求項１に記載の標的化剤抗体抱合体。
【請求項７】
抗原はＴ細胞受容体（ＴＣＲ）であることを特徴とする、請求項１に記載の標的化剤抗体抱合体。
【請求項８】
抗原はＴ細胞共受容体を含むことを特徴とする、請求項１に記載の標的化剤抗体抱合体。
【請求項９】
共受容体はＣＤ３  Ｔ細胞共受容体である請求項８に記載の標的化剤抗体抱合体。
【請求項１０】
細胞傷害性エフェクター細胞は造血細胞である、ことを特徴とする請求項１に記載の標的化剤抗体抱合体。
【請求項１１】
造血細胞は、マクロファージ、好中球、好酸球、ナチュラルキラー細胞、Ｂ細胞、およびＴ細胞から選択される、ことを特徴とする請求項１０に記載の標的化剤抗体抱合体。
【請求項１２】
細胞傷害性エフェクター細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞である、ことを特徴とする請求項１に記載の標的化剤抗体抱合体。
【請求項１３】
抗体または抗体フラグメントは抗ＣＤ３Ｆａｂフラグメントを含む、ことを特徴とする請求項１に記載の標的化剤抗体抱合体。
【請求項１４】
式ＸＩの化合物は前立腺特異的膜抗原を結合する、ことを特徴とする請求項１に記載の標的化剤抗体抱合体。
【請求項１５】
標的化剤抗体抱合体は、腫瘍に浸透するのに十分小さい、ことを特徴とする請求項１に記載の標的化剤抗体抱合体。
【請求項１６】
式ＸＩの化合物は標的細胞に結合し、該標的細胞は癌細胞であることを特徴とする請求項１に記載の標的化剤抗体抱合体。
【請求項１７】
癌細胞は、前立腺癌に由来することを特徴とする請求項１６に記載の標的化剤抗体抱合体。
【請求項１８】
抗体または抗体フラグメントはオキシムによって式ＸＩの化合物に結合される、ことを特徴とする請求項１に記載の標的化剤抗体抱合体。
【請求項１９】
抗体または抗体フラグメントの１以上の非天然アミノ酸は、Ｐアセチルフェニルアラニン（ｐＡｃＦ）を含む、ことを特徴とする請求項２又は３に記載の標的化剤抗体抱合体。
【請求項２０】
抗体または抗体フラグメントの１以上の非天然アミノ酸は、セレノシステインを含む、ことを特徴とする請求項２又は３に記載の標的化剤抗体抱合体。
【請求項２１】
請求項１乃至２０の標的化剤抗体抱合体を含む、医薬組成物。
【請求項２２】
被験体に対して抱合体または組成物を投与することを含む、被験体の疾患または疾病を処置する製剤の製造における、請求項１−２０の標的化剤抗体抱合体または請求項２１に記載の医薬組成物の使用。
【請求項２３】
疾患または疾病は癌であることを特徴とする、請求項２２に記載の使用。
【請求項２４】
癌は前立腺癌であることを特徴とする、請求項２３に記載の使用。
【請求項２５】
癌は、上皮癌、腎臓癌、肺癌、結腸癌、結腸直腸癌、胃癌、脳癌、神経膠芽腫、膵臓癌、骨髄性白血病、子宮頸癌、甲状腺髄様癌、乳癌、卵巣癌、星細胞腫、子宮内膜癌、神経内分泌癌、胃腸すい管の腫瘍、非ホジキンリンパ腫、外分泌膵臓癌、ユーイング肉腫、および皮膚癌から選択される、ことを特徴とする請求項２３に記載の使用。
【請求項２６】
製剤はマイクロニードルデバイスを使用して投与可能である、ことを特徴とする請求項２２に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、２０１３年３月１４日出願の米国仮特許出願第６１／７８３，４２６号、及び２０１３年６月２５日出願の米国仮特許出願第６１／８３９，３３０号の利益を主張するものである。これらは、その全体が本明細書に参照によって組み入れられる。
【０００２】
＜連邦政府による資金提供を受けた研究の記載＞
本発明は、国立衛生研究所（ＮＩＨ）による契約番号ＧＭ０６２１５９の下で米国政府の支援によってなされたものである。政府は本発明に一定の権利を有している。
【０００３】
＜発明の分野＞
本明細書には、１種以上の非天然アミノ酸を含む標的化剤抗体抱合体と、こうした構築物、医薬組成物、およびこうした構築物を含む薬剤を使用する方法と、及び、疾患または疾病を被検体において防ぎ、阻害し、および／または処置するための、こうした構築物および組成物の使用方法とが記載される。
【背景技術】
【０００４】
抗体は、脊柱をもつ免疫系が主として感染に対する防御のため夾雑物（抗原）に応じて形成する天然のタンパク質である。１世紀以上の間、抗体は、人工条件下で動物に誘発され、疾患状態の治療又は診断における使用、或いは生物学的研究のために採取されてきた。個々の各抗体産生細胞は、化学的に定義された組成物を有する単一型の抗体を生成するが、抗原接種に応じて動物血清から直接得た抗体は、個々の抗体産生細胞の集合から作られる、異なる分子（例えば、多クローン性抗体）の集合を実際に含む。
【０００５】
二重特異性抗体（ｂｉｓｐｅｃｉｆｉｃ  ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ）などのいくつかの抗体抱合体は、２つ以上の異なる抗原に結合することができる。多数の組換え戦略が、二重特異性抗体を合成するために開発されており、これは二重特異性抗体（ｄｉａｂｏｄｉｅｓ）、直列型の二重特異性抗体、ＢｉＴｅ（二重特異性Ｔ細胞誘導）およびＤＡＲＴ（二重親和性再標的化（Ｄｕａｌ  Ａｆｆｉｎｉｔｙ  Ｒｅ−Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ））などの形式に由来する単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）、ならびに免疫グロブリンＧ（ＩｇＧ）ベースの形式  Ｔｒｉｏｍａｂ、ＤＶＤ−Ｉｇ（デュアル可変ドメイン（Ｄｕａｌ  Ｖａｒｉａｂｌｅ  Ｄｏｍａｉｎ）抗体）、およびｔｗｏ−ｉｎ−ｏｎｅ抗体などを含む。しかし、二重特異性抗体については、免疫原性および製造の課題など、薬物動態および物理的特性についての知見が乏しい。したがって、このような既存の技術の改良や代替が必要とされている。さらに、ジオメトリ（ｇｅｏｍｅｔｒｙ）は結合親和性および特異性を変化させることができるので、こうした標的部分のジオメトリを正確に制御することが望ましい。本明細書には、標的化剤抗体抱合体、及び、標的化剤に対する抗体または抗体フラグメントの部位特異的な結合によって、最適な治療効果および標的特異性のための特定のジオメトリを備えるこうした抱合体を製造するための方法が提供される。
【発明の概要】
【０００６】
本明細書中には標的化剤抗体抱合体が開示され、該標的化剤抗体抱合体は、抗体または抗体フラグメントではない、標的細胞に結合する標的化剤；標的細胞に対して結合しない抗体または抗体フラグメント；および１つ以上のリンカーを含み、ここで抗体または抗体フラグメントは1つ以上のリンカーによって標的化剤に連結され、ここで抗体または抗体フラグメントは細胞傷害性エフェクター細胞上の抗原を結合する。
【０００７】
標的化剤抗体抱合体は式Ｉ：Ｘ−Ｌ１−Ｙ又は式ＩＡ：Ｙ−Ｌ１−Ｘであってもよく：式中Ｘは抗体または抗体フラグメントを含み；Ｌは１つ以上のリンカーを含み；およびＹは標的化剤を含む。
【０００８】
抗体の少なくとも一部分は、ヒトの、ヒト化された、ヒトの操作された、または完全にヒトの抗体に由来し得る。抗体はキメラ抗体であり得る。抗体または抗体フラグメントは、細胞傷害性エフェクター細胞上の抗原に結合し得、標的化剤は細胞表面タンパク質または標的細胞上の細胞表面マーカに結合する。細胞傷害性エフェクター細胞は、免疫応答を開始することが可能であり得る。抗体または抗体フラグメントの少なくとも一部分は、細胞傷害性エフェクター細胞上の受容体の少なくとも一部分に結合し得る。抗体または抗体フラグメントの少なくとも一部分は、細胞傷害性エフェクター細胞上の共受容体の少なくとも一部分に結合し得る。受容体は、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）であり得る。共受容体はＴ細胞共受容体を含み得る。共受容体はＣＤ３  Ｔ細胞共受容体で有り得る。細胞傷害性エフェクター細胞は、造血細胞であり得る。造血細胞は、マクロファージ、好中球、好酸球、ナチュラルキラー細胞、Ｂ細胞、またはＴ細胞から選択することができる。細胞傷害性エフェクター細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞であり得る。抗体フラグメントは、Ｆａｂフラグメントを含みうる。  Ｆａｂフラグメントは抗ＣＤ３  Ｆａｂフラグメントを含み得る。抗ＣＤ３  ＦａｂフラグメントはＵＣＨＴ１であり得る。抗体フラグメントは、配列番号：１および２から選択される配列によってコード化され得る。
【０００９】
標的化剤は、小分子、細胞標的分子、リガンド、タンパク質、ペプチド、ペプトイド、ＤＮＡアプタマー、ペプチド核酸、ビタミン基質または基質アナログから選択され得る。  標的化剤は、抗体または抗体フラグメントを含まなくてもよい。細胞表面タンパク質または細胞表面マーカは、抗原、受容体、共受容体、膜貫通タンパク質または標的細胞上の細胞マーカから選択され得る。細胞表面タンパク質は、コレシストキニンＢ受容体、ゴナドトロピン放出ホルモン受容体、ソマトスタチン受容体２、ａｖｂ３インテグリン、ガストリン放出ペプチド受容体、ニューロキニン１受容体、メラノコルチン１受容体、ニューロテンシン受容体、ニューロペプチドＹ受容体およびＣ型レクチン様分子１から選択され得る。抗原は、前立腺特異的膜抗原を含み得る。  標的化剤は、オクトレオチドを含み得る。  標的化剤は、オクトレオタート（ｏｃｔｒｅｏｔａｔｅ）を含み得る。  標的化剤は、ソマトスタチンアナログを含み得る。標的化剤は、ＣＤ３８  ＮＡＤ＋グリコヒドロラーゼ阻害剤を含み得る。標的化剤は、ペンタガストリンを含み得る。標的化剤は、ゴナドトロピン放出ホルモンを含み得る。標的化剤は、ＣＣＫＢアンタゴニストを含み得る。標的化剤は、ｃＲＧＤを含み得る。標的化剤は、ボンベシンを含み得る。標的化剤は、２−［３−（１，３−ジカルボキシプロピ）ウレイドル）ペンタン二酸（ＤＵＰＡ）を含み得る。標的化剤は、腫瘍に浸透するのに十分小さいものであり得る。標的化剤は、配列番号：３−４０から選択される配列によってコード化され得る。標的化剤抗体抱合体は、第二の標的化剤を含み得る。  標的化剤抗体抱合体は、１、２、３、４、またはより多くの標的化剤を含み得る。
【００１０】
抗体または抗体フラグメントは、細胞傷害性エフェクター細胞上の抗原に結合し得、標的化剤は細胞表面タンパク質または標的細胞上の細胞表面マーカに結合し得る。標的細胞は癌細胞であり得る。癌細胞は、前立腺癌に由来し得る。癌細胞は、上皮癌に由来し得る。癌細胞は、乳癌に由来し得る。癌細胞は、腎臓癌に由来し得る。癌細胞は、肺癌に由来し得る。癌細胞は、結腸癌に由来し得る。癌細胞は、結腸直腸癌に由来し得る。癌細胞は、胃癌に由来し得る。癌細胞は、脳癌に由来し得る。癌細胞は、神経膠芽腫に由来し得る。癌細胞は、膵臓癌に由来し得る。癌細胞は、骨髄性白血病に由来し得る。癌細胞は、子宮頸癌に由来し得る。癌細胞は、甲状腺髄様癌に由来し得る。癌細胞は、間質性卵巣癌に由来し得る。癌細胞は、星細胞腫に由来し得る。癌細胞は、子宮内膜癌に由来し得る。癌細胞は、神経内分泌癌（ｎｅｕｒｏｅｎｄｏｃｒｉｎｅ  ｃａｎｃｅｒ）に由来し得る。  癌細胞は、胃腸すい管の腫瘍（ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｐａｎｃｒｅａｔｉｃ  ｔｕｍｏｒ）に由来し得る。  癌細胞は、非ホジキンリンパ腫に由来してもよい。癌細胞は、外分泌膵臓癌（ｅｘｏｃｒｉｎｅ  ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ  ｃａｎｃｅｒ）に由来し得る。癌細胞は、ユーイング肉腫に由来し得る。癌細胞は、皮膚癌に由来し得る。皮膚がんは、黒色腫であり得る。皮膚癌は血管新生皮膚癌（ｎｅｏａｎｇｉｏｇｅｎｉｃ  ｓｋｉｎ  ｃａｎｃｅｒ）であり得る。肺癌は、小細胞肺癌であり得る。ＸはＬ１に結合され得る。ＹはＬ１に結合され得る。ＸはオキシムによってＬ１に結合され得る。ＹはオキシムによってＬ１に結合され得る。Ｘは、共有結合、イオン結合、または非共有結合により、Ｌ１に結合され得る。Ｙは、共有結合、イオン結合、または非共有結合により、Ｌ１に結合され得る。Ｌ１は、ＸとＹの間に約１０乃至約１００オングストローム（Å）の距離を提供し得る。Ｌ１は、ＸとＹの間に約５０オングストローム（Å）以下の距離を提供し得る。Ｌ１は、ＸとＹの間に約４５オングストローム（Å）以下の距離を提供し得る。Ｌ１は、ＸとＹの間に約４０オングストローム（Å）以下の距離を提供し得る。Ｌ１は、ＸとＹの間に約３０オングストローム（Å）以下の距離を提供し得る。Ｌ１は、ＸとＹの間に約５オングストローム（Å）以上の距離を提供し得る。Ｌ１は、ＸとＹの間に約１０オングストローム（Å）以上の距離を提供し得る。Ｌ１は、ＸとＹの間に約１５オングストローム（Å）以上の距離を提供し得る。Ｌ１は、ＸとＹの間に約２０オングストローム（Å）以上の距離を提供し得る。Ｌ１は、ＸとＹの間に約１０乃至約１００オングストローム（Å）の距離を提供し得る。
【００１１】
抗体または抗体フラグメントの１種以上の非天然アミノ酸は、Ｐアセチルフェニルアラニン（ｐＡｃＦ）を含む。抗体または抗体フラグメントの１種以上の非天然アミノ酸は、セレノシステインを含む。１以上の非天然アミノ酸は、以下を含み得る、（ａ）Ｏ−メチル−Ｌ−チロシン、ｐ−アミノ−Ｌ−フェニルアラニン、３−ニトロ−Ｌ−チロシン、Ｐニトロ−Ｌ−フェニルアラニン、ｍ−メトキシ−Ｌ−フェニルアラニン、及びｐ−イソプロピル−Ｌ−フェニルアラニンなどの、様々な置換されたチロシンおよびフェニルアラニンのアナログ、（ｂ）光架橋され得るアリールアジド及びベンゾフェノン基を有するアミノ酸、（ｃ）アセチル−Ｌ−フェニルアラニン及びｍ−アセチル−Ｌ−フェニルアラニン、Ｏ−アリル−Ｌ−チロシン、Ｏ−（２−プロピニル）−Ｌ−チロシン、Ｐ−エチルチオカルボニル−Ｌ−フェニルアラニン、およびＰ−（３−オキソブタノイル）−Ｌ−フェニルアラニンを含む、固有の化学反応性を有するアミノ酸、（ｄ）ｐ−ヨードおよびｐ−ブロモ−Ｌ−フェニルアラニンを含む、Ｘ線結晶解析においてフェージングのための重原子を含むアミノ酸；（Ｅ）酸化還元活性のあるアミノ酸であるジヒドロキシ−Ｌ−フェニルアラニン；（ｆ）ｂ−Ｎ−アセチルグルコサミン−Ｏ−セリンおよびａ−Ｎ−アセチルガラクトサミン−Ｏ−スレオニンを含むグリコシル化アミノ酸、（ｇ）ナフチル、ダンシル、及び７−アミノクマリン側鎖を有する蛍光性アミノ酸、（ｈ）アゾベンゼンおよびニトロベンジルシステイン、セリン、およびチロシンの側鎖を備える光分解性で光異性化可能なアミノ酸、（ｉ）ホスホチロシン・ミメティックであるＰ−カルボキシメチル−Ｌ−フェニルアラニン、（Ｊ）グルタミンホモログホモグルタミン、（Ｋ）２アミノオクタン酸、（Ｌ）又は（Ａ）−  （Ｋ）の組み合わせ。１つ以上の非天然アミノ酸は、少なくとも一つのオキシム、カルボニル、ジカルボニル、ヒドロキシルアミン、シクロオクチン、アリール／アルキルアジド、ノルボルネン、シクロプロペン、トランス−シクロオクテン、およびテトラジン基を含み得る。１以上の非天然アミノ酸は、遺伝的にコード化され得る。一つ以上の非天然アミノ酸は、抗体または抗体フラグメントに組み込まれ得る。１つ以上の非天然アミノ酸は、抗体または抗体フラグメントに部位特異的に組み込まれ得る。標的化剤抗体抱合体は、２つ以上の非天然アミノ酸を含み得る。標的化剤抗体抱合体は、３つ以上の非天然アミノ酸を含み得る。標的化剤抗体抱合体は、４つ以上の非天然アミノ酸を含み得る。１つ以上の非天然アミノ酸は、抗体または抗体フラグメント中の１つ以上のアミノ酸残基を置換し得る。１つ以上の非天然アミノ酸は、抗体または抗体フラグメントの重鎖中のアミノ酸残基を置換し得る。抗体または抗体フラグメントの１つ以上の非天然アミノ酸は、抗体または抗体フラグメントの軽鎖中のアミノ酸残基を置換し得る。  抗体または抗体フラグメントの１つ以上の非天然アミノ酸は、抗体または抗体フラグメントの軽鎖中の可変部中のアミノ酸残基を置換し得る。
【００１２】
さらに、本明細書では標的化剤抗体抱合体を含む医薬組成物が開示され、該標的化剤抗体抱合体は、抗体または抗体フラグメント；抗体または抗体フラグメントではない標的化剤；および１つ以上のリンカーを含み、ここで抗体または抗体フラグメントは１つ以上のリンカーによって標的化剤に連結される。抗体または抗体フラグメントおよび標的化剤は、部位特異的に連結され得る。抗体又は抗体フラグメントは１つ以上の非天然アミノ酸を含み得る。医薬組成物は薬学的に許容可能な希釈剤をさらに含み得る。医薬組成物は薬学的に許容可能な賦形剤をさらに含み得る。医薬組成物は薬学的に許容可能な担体をさらに含み得る。
【００１３】
本明細書では、被験体における疾病または疾患を処置するための方法が開示され、該方法は、標的化剤抗体抱合体を投与する工程を含み、前記標的化剤抗体抱合体は、抗体または抗体フラグメント；抗体または抗体フラグメントではない標的化剤；および１つ以上のリンカーを含み、ここで抗体または抗体フラグメントは１つ以上のリンカーによって標的化剤に連結される。抗体または抗体フラグメントおよび標的化剤は、部位特異的に連結され得る。抗体又は抗体フラグメントは１つ以上の非天然アミノ酸を含み得る。疾病または疾患は病原性の感染症であり得る。病原性の感染症は細菌感染であり得る。病原性の感染症はウイルス感染であり得る。疾病または疾患は炎症性疾患であり得る。疾病または疾患は自己免疫疾患であり得る。自己免疫疾患は糖尿病であり得る。疾病または疾患は癌であり得る。疾病または疾患は前立腺癌であり得る。疾病または疾患は上皮癌であり得る。疾病または疾患は腎臓癌であり得る。疾病または疾患は肺癌であり得る。疾病または疾患は結腸癌であり得る。疾病または疾患は結腸直腸癌であり得る。疾病または疾患は胃癌であり得る。疾病または疾患は脳腫瘍であり得る。疾病または疾患は神経膠芽腫であり得る。疾病または疾患は膵臓癌であり得る。疾病または疾患は骨髄性白血病であり得る。疾病または疾患は子宮頚癌であり得る。疾病または疾患は甲状腺髄様癌であり得る。疾病または疾患は乳癌であり得る。疾病または疾患は卵巣癌であり得る。疾病または疾患は星細胞腫であり得る。疾病または疾患は子宮内膜癌であり得る。疾病または疾患は神経内分泌癌であり得る。疾病または疾患は胃腸すい管の腫瘍であり得る。疾病または疾患は非ホジキンリンパ腫であり得る。疾病または疾患は外分泌膵臓癌であり得る。疾病または疾患はユーイング肉腫であり得る。疾病または疾患は皮膚癌であり得る。皮膚癌は黒色腫であり得る。皮膚癌は血管新生皮膚癌であり得る。肺癌は小細胞肺癌であり得る。標的化剤抗体抱合体または医薬組成物の投与は、静脈内投与、皮下投与、腹腔内投与、筋肉内投与、血管内投与、髄腔内投与、硝子体内投与、局所投与または注入を含み得る。投与は経口投与を含み得る。投与は鼻腔内投与を含み得る。投与はマイクロニードルデバイスの使用を含み得る。
【００１４】
さらに、本明細書には標的化剤抗体抱合体が開示され、標的化剤抗体抱合体は、抗体または抗体フラグメント；１つ以上のＤＵＰＡ分子；および１つ以上のリンカーを含み、ここで抗体または抗体フラグメントは１つ以上のリンカーによって１つ以上のＤＵＰＡ分子に対して連結される。抗体または抗体フラグメントは１つ以上のリンカーによって１つ以上のＤＵＰＡ分子に対して部位特異的に連結され得る。抗体又は抗体フラグメントは１つ以上の非天然アミノ酸を含み得る。抗体または抗体フラグメントは１つ以上のリンカーによって１つ以上の非天然アミノ酸に対して部位特異的に連結され得る。抗体または抗体フラグメントは１つ以上のリンカーによって１つ以上の非天然アミノ酸に対して代替的に連結され得る。抗体または抗体フラグメントは抗ＣＤ３Ｆａｂフラグメントを含み得る。
【００１５】
本明細書には標的化剤抗体抱合体が開示され、該標的化剤抗体抱合体は、抗ＣＤ３Ｆａｂ；１つの以上のＤＵＰＡ分子；および１つ以上のリンカーを含み、ここで抗ＣＤ３Ｆａｂは１つ以上のリンカーによって１つ以上のＤＵＰＡ分子に対して連結される。抗ＣＤ３Ｆａｂは１つ以上の非天然アミノ酸を含み得る。１つ以上の非天然アミノ酸は、抗ＣＤ３Ｆａｂの天然アミノ酸を置換し得る。１つ以上の非天然アミノ酸は、抗ＣＤ３Ｆａｂの天然アミノ酸を置換することができ、ここで天然アミノ酸は、抗ＣＤ３Ｆａｂの重鎖のリジン１３８  （Ｌｙｓ  １３８）、抗ＣＤ３Ｆａｂの重鎖のアラニン１２３  （Ａｌａ  １２３）、抗ＣＤ３Ｆａｂの重鎖のスレオニン１０９  （Ｔｈｒ  １０９）  、及び抗ＣＤ３Ｆａｂの重鎖のセリン２０２  （Ｓｅｒ  ２０２）から選択される。      第１のＤＵＰＡ分子と第２のＤＵＰＡ分子は、第１のリンカーおよび第２のリンカーである抗ＣＤ３Ｆａｂの第１の非天然アミノ酸および第２の非天然アミノ酸に対して結合され得る。標的化剤抗体抱合体は式Ｉ：Ｘ−Ｌ−Ｙ又は式ＩＡ：Ｙ−Ｌ−Ｘであってもよく：式中：Ｘは抗ＣＤ３Ｆａｂを含み；Ｌは１つ以上のリンカーを含み；およびＹは１つ以上のＤＵＰＡ分子を含む。
【００１６】
標的化剤抗体抱合体は、式Ｖ、式ＶＩ、式ＶＩＩまたは式ＶＩＩＩから選択される化合物を含むことがでる。
【００１７】
【化１】
0006501270.tif 000002
【００１８】
標的化剤抗体抱合体は、式ＩＸの化合物を含み得る：
【００１９】
【化２】
0006501270.tif 000003
【００２０】
標的化剤抗体抱合体は、式Ｘの化合物を含み得る：
【００２１】
【化３】
0006501270.tif 000004
【００２２】
標的化剤抗体抱合体は、式ＸＩの化合物を含み得る：
【００２３】
【化４】
0006501270.tif 000005
【００２４】
別の態様において、本明細書には、式ＸＩＩの化合物又はその立体異性体が提供され：
【００２５】
【化５】
0006501270.tif 000006
式中：Ｙは前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）のリガンドであり；
Ｌは
【００２６】
【化６】
0006501270.tif 000007
であり；
Ａ１は、アリール、５乃至６員環ヘテロアリール、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｎ（Ｒ１）−、−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１）−、−Ｎ（Ｒ１）Ｃ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）１，２Ｎ（Ｒ１）−、および−Ｎ（Ｒ１）Ｓ（Ｏ）１，２−からなる群から選択され；
Ｌ１は
【００２７】
【化７】
0006501270.tif 000008
であり；
Ａ２は、単結合、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｎ（Ｒ１）−、−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１）−、−Ｎ（Ｒ１）Ｃ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）１，２Ｎ（Ｒ１）−、および−Ｎ（Ｒ１）Ｓ（Ｏ）１，２−からなる群から選択され；
Ｌ２は
【００２８】
【化８】
0006501270.tif 000009
であり；
Ａ３は単結合、
【００２９】
【化９】
0006501270.tif 000010
であり；
Ｌ３は
【００３０】
【化１０】
0006501270.tif 000011
であり；
Ｘ２は、アミノ酸と反応する官能基に結合されたリンカー、または修飾されたアミノ酸に結合されたリンカーであり、ここで、修飾されたアミノ酸はＸの一部であり、ここでＸは修飾された治療用ペプチド、タンパク質、または抗体であり；
各々のＲ１は、Ｈ、アルキル、又はハロアルキルから独立して、選択され；
各々のＲ２、Ｒ２１、Ｒ２２、及びＲ２３は、独立して、Ｈ、ハロ、−ＯＲ１、−ＣＮ、−ＳＲ１、アルキル、シクロアルキル、ハロアルキル、アリールアルキル、またはヘテロアリールアルキルから選択され；
各々のＲ３は、ハロ、−ＯＲ１、−ＣＮ、−ＳＲ１、アルキル、シクロアルキル、ハロアルキル、アリールアルキルまたはヘテロアリールアルキル、−ＮＯ２、およびＮＲ１Ｒ１から独立して選択され；
各々のＧ１およびＧ２は、単結合、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｎ（Ｒ１）−、−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１）−、−Ｎ（Ｒ１）Ｃ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）１，２Ｎ（Ｒ１）−、および−Ｎ（Ｒ１）Ｓ（Ｏ）１，２−から成る群から独立して選択され；
各々Ｚ、Ｚ１、Ｚ２、およびＺ３は、単結合、−Ｏ−−Ｎ（Ｒ１）−、からなる群から独立して選択され；
ｋ、ｋ１、ｋ２、及びｋ３は、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、及び１０からそれぞれ独立して選択され；
ｍ１、ｍ２およびｍ３は、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、及び１０からそれぞれ独立して選択され；
ｐは０、１、２、３、又は４である。
【００３１】
式ＸＩＩの化合物の上記又は下記に記載される幾つかの実施形態において、化合物は以下の式ＸＩＩａであって、
【００３２】
【化１１】
0006501270.tif 000012
式中：Ｑは
【００３３】
【化１２】
0006501270.tif 000013
から成る群から選択され：およびＥは
【００３４】
【化１３】
0006501270.tif 000014
から成る群から選択される。
【００３５】
式ＸＩＩの化合物の上記又は下記に記載される幾つかの実施形態において、化合物は以下の式ＸＩＩｂである。
【００３６】
【化１４】
0006501270.tif 000015
式ＸＩＩの化合物の上記又は下記に記載されるさらなる実施形態において、化合物は以下の式ＸＩＩｃである。
【００３７】
【化１５】
0006501270.tif 000016
【００３８】
式ＸＩＩの化合物の上記又は下記に記載される幾つかの実施形態において、化合物は以下の式ＸＩＩｄである。
【００３９】
【化１６】
0006501270.tif 000017
式ＸＩＩの化合物の上記又は下記に記載される更なる実施形態において、化合物は以下の式ＸＩＩｅである。
【００４０】
【化１７】
0006501270.tif 000018
式ＸＩＩの化合物の上記又は下記に記載される、なお更なる実施形態において、化合物は以下の式ＸＩＩｆであって、
【００４１】
【化１８】
0006501270.tif 000019
【００４２】
式ＸＩＩの化合物の上記又は下記に記載される幾つかの実施形態において、Ａ１は−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｈ）−である。式ＸＩＩの化合物の上記又は下記に記載されるいくつかの実施形態において、Ａ１は
【００４３】
【化１９】
0006501270.tif 000020
である。
【００４４】
式ＸＩＩの化合物の上記又は下記に記載されるいくつかの実施形態において、Ａ３は
【００４５】
【化２０】
0006501270.tif 000021
である。式ＸＩＩの化合物の上記又は下記に記載される更なる実施形態において、Ａ３は
【００４６】
【化２１】
0006501270.tif 000022
である。
【００４７】
式ＸＩＩの化合物の上記又は下記に記載される幾つかの実施形態において、各々のＲ２、Ｒ２１、Ｒ２２、Ｒ２３およびＲ２４は、Ｈ、Ｆ、ＣＨ３またはＣＦ３から独立して選択される。式ＸＩＩの化合物の上記又は下記に記載される幾つかの実施形態において、各々のＲ２、Ｒ２１、Ｒ２２、Ｒ２３およびＲ２４は、Ｈである。
【００４８】
式ＸＩＩの化合物の上記又は下記に記載される幾つかの実施形態において、Ｘ２は
【００４９】
【化２２】
0006501270.tif 000023
であり；式中：
Ａ４は、単結合、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｎ（Ｒ１）−、−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１）−、−Ｎ（Ｒ１）Ｃ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）１，２Ｎ（Ｒ１）−、および−Ｎ（Ｒ１）Ｓ（Ｏ）１，２−  からなる群から選択され；
各々のＲ２４は、Ｈ、ハロ、−ＯＲ１、−ＣＮ、−ＳＲ１、アルキル、シクロアルキル、ハロアルキル、アリールアルキル、またはヘテロアリールアルキルから独立して選択され；
ｋ４は、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、及び１０から選択され；
Ｚ４は、単結合、アリールおよび５乃至６員環ヘテロアリールから選択され；および、Ｘ１は
【００５０】
【化２３】
0006501270.tif 000024
である。
【００５１】
式ＸＩＩの化合物の上記又は下記に記載される幾つかの実施形態において、Ｘ２は
【００５２】
【化２４】
0006501270.tif 000025
である。式ＸＩＩの化合物の上記又は下記に記載される更なる実施形態において、Ｘ２は
【００５３】
【化２５】
0006501270.tif 000026
である。
【００５４】
式ＸＩＩの化合物の上記又は下記に記載される幾つかの実施形態において、化合物は、
【００５５】
【化２６】
0006501270.tif 000027
又はそれらの立体異性体から選択される。
【００５６】
式ＸＩＩの化合物の上記又は下記に記載される幾つかの実施形態において、Ｘ２は
【００５７】
【化２７】
0006501270.tif 000028
であり；式中：
Ａ４は、単結合、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｎ（Ｒ１）−、−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１）−、−Ｎ（Ｒ１）Ｃ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）１，２Ｎ（Ｒ１）−、および−Ｎ（Ｒ１）Ｓ（Ｏ）１，２−  からなる群から選択され；
各々のＲ２４は、Ｈ、ハロ、−ＯＲ１、−ＣＮ、−ＳＲ１、アルキル、シクロアルキル、ハロアルキル、アリールアルキル、またはヘテロアリールアルキルから独立して選択され；
ｋ４は、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、及び１０から選択され；
Ｚ４は、単結合、アリールおよび５乃至６員環ヘテロアリールから選択され；また、
Ｘ３は
【００５８】
【化２８】
0006501270.tif 000029
であり；
Ｘは修飾された治療用のペプチド、タンパク質または抗体であり；
Ｌ４は、修飾されたアミノ酸に直接付けられた単結合、または修飾されたアミノ酸に結合されたリンカーであり、ここで、修飾されたアミノ酸はＸの一部である。式ＸＩＩの化合物の上記又は下記に記載されるいくつかの実施形態において、アミノ酸は非天然アミノ酸である。
【００５９】
式ＸＩＩの化合物の上記又は下記に記載される幾つかの実施形態において、ｋは１、２、または３であり；及び、ｚは単結合である。
【００６０】
式ＸＩＩの化合物の上記又は下記に記載される幾つかの実施形態において、Ａ１は−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１）−，６員環アリール、または５員環ヘテロアリールである。
【００６１】
式ＸＩＩの化合物の上記又は下記に記載される幾つかの実施形態において、ｍ１は０であり；ｋ１は６又は７であり；また、Ｚ１は単結合である。
【００６２】
式ＸＩＩの化合物の上記又は下記に記載される幾つかの実施形態において、Ａ２は単結合であり；ｍ２およびｋ２は０である；およびＺ２は単結合である。
【００６３】
式ＸＩＩの化合物の上記又は下記に記載される幾つかの実施形態において、Ａ２は−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｈ）−であり、ｍ２は２であり；ｋ２は２であり；およびＺ２は単結合である。式ＸＩＩの化合物の上記又は下記に記載される幾つかの実施形態において、Ａ２は−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｈ）−であり；ｍ２は３であり；ｋ２は２であり；およびＺ２は単結合である。式ＸＩＩの化合物の上記又は下記に記載される幾つかの実施形態において、Ａ２は−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｈ）−であり；ｍ２は１０であり；ｋ２は２であり；およびＺ２は単結合である。
【００６４】
式ＸＩＩの化合物の上記又は下記に記載される幾つかの実施形態において、Ｒ３は−ＮＯ２であり；及び、ｐは２である。
【００６５】
式ＸＩＩの化合物の上記又は下記に記載される幾つかの実施形態において、各々のＧＸ１およびＧＸ２は−Ｎ（Ｈ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｈ）−および−Ｎ（Ｈ）Ｃ（Ｏ）−から成る群から独立して選択される。
【００６６】
式ＸＩＩの化合物の上記又は下記に記載される幾つかの実施形態において、ｍ３は３であり；ｋ３は２であり；およびＺ３は単結合である。式ＸＩＩの化合物の上記又は下記に記載されるいくつかの実施形態において、ｍ３は２であり；ｋ３は２であり；およびＺ３は単結合である。
【００６７】
式ＸＩＩの化合物の上記又は下記に記載される幾つかの実施形態において、Ａ３は単結合であり；ｍ３およびｋ３は０であり；また、Ｚ３は単結合である。
【００６８】
本明細書には標的化剤抗体抱合体を含む組成物がさらに開示され、該標的化剤抗体抱合体は、抗体および抗体フラグメント；１つ以上のリンカー；および標的化剤を含み、ここで、標的化剤抗体抱合体または化合物の純度は少なくとも９０％である。標的化剤抗体構築物は、非天然アミノ酸を含み得る。抗体または抗体フラグメントおよび標的化剤は、部位特異的に連結され得る。
【００６９】
本明細書には、式ＸＩＩまたは第ＸＩＩａ−Ｆから選択される式を含む化合物がさらに開示され、ここで化合物の純度は少なくとも９０％である。
【００７０】
本明細書には標的化剤抗体抱合体が開示され、該標的化剤抗体抱合体は、抗体または抗体フラグメント；１つ以上のリンカー；および標的化剤を含み、ここで抗体または抗体フラグメントは、第１の細胞上の受容体、共受容体、抗原、または細胞マーカに対して結合するか又は相互作用し、および標的化剤は、第２の細胞上の受容体、共受容体、抗原、または細胞マーカに対して結合する。
【００７１】
本明細書には標的化剤抗体抱合体がさらに開示され、該標的化剤抗体抱合体は、抗体および抗体フラグメント；１つ以上のリンカー；および標的化剤を含み、ここで抗体または抗体フラグメントは、第１の細胞上の受容体、共受容体、抗原、または細胞マーカに対して結合するか又は相互作用し；標的化剤は、第２の細胞上の受容体、共受容体、抗原、または細胞マーカに対して結合し；および１つ以上のリンカーは抗体又は抗体フラグメントと標的化剤抗体抱合体とを部位特異的に連結する。
【図面の簡単な説明】
【００７２】
本開示の以下の詳細な説明と同様に、前述の概要は、添付の図面と合わせて読まれた時により良く理解されるであろう。本開示を説明するために、図に示されるのは、現在好ましい実施形態である。しかし、本開示は、示される正確な配置、例、及び手段に限定されないことを理解されたい。
【００７３】
添付の図面と併せて読めば、本発明は、以下の詳細な説明から最も良く理解されるであろう。一般的な慣行に従って、図面の様々な特徴は規模ではないことが強調される。それどころか、様々な特徴の寸法は、明確性のために任意に拡大または縮小される。以下の図は、図面に含まれる。
【００７４】
【図１】図１は、ＰＳＭＡ結合の標的化剤−リンカー化合物を合成するための模式図を示す。
【図２】図２は、ＵＣＨＩＴＩ−Ｆａｂフラグメントのリボン図を示す。
【図３Ａ】図３Ａは、リンカーが抱合されたＦａｂフラグメントに対して、ＰＳＭＡ結合の標的化剤−リンカー化合物を連結するためのスキームを示す。
【図３Ｂ】図３Ｂは、リンカーの例を示す。
【図３Ｃ】図３Ｃは、リンカーの例を示す。
【図３Ｄ】図３Ｄは、リンカーの例を示す。
【図３Ｅ】図３Ｅは、リンカーの例を示す。
【図４Ａ】図４Ａは、リンカーの抱合の前後の、ＦａｂフラグメントのＥＳＩ−ＭＳ分析を示す。
【図４Ｃ】図４Ｃは、リンカーの抱合の前後の、ＦａｂフラグメントのＥＳＩ−ＭＳ分析を示す。
【図４Ｂ】図４Ｂは、リンカーの抱合前後のＦａｂフラグメントのデコンボリューションした質量スペクトルを示す。
【図４Ｄ】図４Ｄは、リンカーの抱合前後のＦａｂフラグメントのデコンボリューションした質量スペクトルを示す。
【図５Ａ】図５Ａは、標的化剤抗体抱合体とインキュベートしたＪｕｒｋａｔ細胞のフローサイトメトリー分析を示す。
【図５Ａ】図５Ｂは、標的化剤抗体抱合体とインキュベートしたＣ４−２細胞のフローサイトメトリー分析を示す。
【図５Ｃ】図５Ｃは、Ｃ４−２細胞に対する、異なるＦａｂのＦＡＣＳに基づく結合アッセイを示す。
【図６Ａ】図６Ａは、Ｃ４−２細胞において、抱合および非抱合のＦａｂの異なる濃度で処理されたＣ４−２細胞の相対的蛍光を示す。
【図６Ｂ】図６Ｂは、ダブルフタルまたは混合物とインキュベートされたＣ４−２またはＤＵ１４５細胞の、細胞毒性パーセントを示す。
【図６Ｃ】図６Ｃは、細胞傷害性アッセイからの上清中の炎症性サイトカインＴＮＦ−αのレベルを示す。用量依存性のＴＮＦ−αシグナルは、ＥＬＩＳＡアッセイ（Ｒ＆Ｄシステム）によって、ＰＳＭＡ陽性Ｃ４−２細胞の存在下で検出された。
【図７Ａ】図７Ａは、ｉｎ  ｖｉｖｏ異種移植モデル実験の概略を示す。
【図７Ｂ】図７Ｂは、ＰＢＳ、抱合されたＦａｂおよびＰＢＭＣ、または抱合されたＦａｂ（ＰＢＭＣなし）で処置したマウスに移植された、Ｃ４−２細胞の腫瘍体積を示す。
【図８】図８は、ｐ−アセチルフェニルアラニンの構造を示す。
【図９】図９は、様々な濃度のＰＳＭＡ陽性Ｃ４−２細胞に対する、異なるＰ−抗ＣＤ３抱合体の結合のハイスループットＦＡＣＳ分析を示す。Ｐ−フタルダブル抱合体は、対応する単量体抱合体と比較して有意に改善された親和性を示す。
【図１０】図１０は、新たに精製された不活性型のｈＰＢＭＣ（Ｔ：Ｅ＝１：１０）の存在下での、標的細胞のインビトロの細胞毒性を示す。非抱合の混合物は全く活性を示さないのに対し、抱合体は、異なるＥＣ５０値でＰＭＡ陽性Ｃ４−２細胞に用量依存的活性を示す。
【図１１】図１１は１００ｐＭのウェルの顕微鏡画像を示し、ここで、細胞クラスターはＰ−標的化剤抗体抱合体の存在下のＣ４−２細胞上でのみ観察され得る。非抱合の抗ＣＤ３およびＰ−フタル混合物は、細胞クラスターに影響を及ぼさなかった。
【図１２】図１２は、Ｐ−標的化剤抗体抱合体のインビボでの有効性試験を示す。予防的モデルでは、ｌｘｌＯ６のＣ４−２細胞がマトリゲル中の２ｘｌ０６ＰＢＭＣと混合された（１：２比率）。Ｐ−標的化剤抗体抱合体、非抱合のＦａｂ、またはＰＢＳ（Ｎ＝６）を、４日目に開始し、ＩＶで１０日間、２ｍｇ／ｋｇで毎日投与した。腫瘍は、６週間一定間隔で、外部キャリパー測定によってモニターした。対照群が急速に腫瘍を発達させた一方で、Ｐ−標的化剤抗体抱合体は、腫瘍成長を抑制した（Ｐ＜０．０００１）。＊大きな腫瘍（＞１０００ｍｍ）を持つマウスは、これらの日の前に屠殺したことを示す。
【図１３】図１３は化合物Ｐ−Ｔｒｉａを標的とする第二世代のＰＳＭＡの設計を示す。Ｐ−フタルにおけるＣ−９位でのアミド基は、ＰＳＭＡ酵素活性部位の近くの疎水性ポケットとの親和性を増加させるため、トリアゾール基に変更された。結晶構造中の第一および第二の疎水性結合ポケット間（〜１１Ａ）の距離に基づいて、より短い炭化水素リンカーがフタルイミド基の前に導入された。
【図１４】図１４は、Ｐ−Ｔｅｔ、Ｐ−Ｕｎｄ、およびＰ−ＤＮＰの化学構造を示す。
【図１５Ａ】図１５Ａは、（Ｓ）−２−（３−（（Ｓ）−５−（４−（６−（４−（１−（アミノオキシ）−２−オキソ−６，９，１２−トリオキサ−３−アザテトラデカン−１４−イルカルバモイル）ベンズアミド）ヘキシル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）−１−カルボキシペンチル）ウレイド）ペンタン二酸（Ｐ−トリア）の合成についての反応模式図を示す。
【図１５Ｂ】図１５Ｂは、（Ｓ）−２−（３−（（Ｓ）−５−（４−（６−（４−（１−（アミノオキシ）−２−オキソ−６，９，１２−トリオキサ−３−アザテトラデカン−１４−イルカルバモイル）ベンズアミド）ヘキシル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）−１−カルボキシペンチル）ウレイド）ペンタン二酸（Ｐ−トリア）の合成についての反応模式図を示す。
【図１５Ｃ】図１５Ｃは、（Ｓ）−２−（３−（（Ｓ）−５−（４−（６−（４−（１−（アミノオキシ）−２−オキソ−６，９，１２−トリオキサ−３−アザテトラデカン−１４−イルカルバモイル）ベンズアミド）ヘキシル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）−１−カルボキシペンチル）ウレイド）ペンタン二酸（Ｐ−トリア）の合成についての反応模式図を示す。
【図１５Ｄ】図１５Ｄは、（Ｓ）−２−（３−（（Ｓ）−５−（４−（６−（４−（１−（アミノオキシ）−２−オキソ−６，９，１２−トリオキサ−３−アザテトラデカン−１４−イルカルバモイル）ベンズアミド）ヘキシル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）−１−カルボキシペンチル）ウレイド）ペンタン二酸（Ｐ−トリア）の合成についての反応模式図を示す。
【図１５Ｅ】図１５Ｅは、（Ｓ）−２−（３−（（Ｓ）−５−（４−（６−（４−（１−（アミノオキシ）−２−オキソ−６，９，１２−トリオキサ−３−アザテトラデカン−１４−イルカルバモイル）ベンズアミド）ヘキシル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）−１−カルボキシペンチル）ウレイド）ペンタン二酸（Ｐ−トリア）の合成についての反応模式図を示す。
【図１５Ｆ】図１５Ｆは、（Ｓ）−２−（３−（（Ｓ）−５−（４−（６−（４−（１−（アミノオキシ）−２−オキソ−６，９，１２−トリオキサ−３−アザテトラデカン−１４−イルカルバモイル）ベンズアミド）ヘキシル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）−１−カルボキシペンチル）ウレイド）ペンタン二酸（Ｐ−トリア）の合成についての反応模式図を示す。
【図１５Ｇ】図１５Ｇは、（Ｓ）−２−（３−（（Ｓ）−５−（４−（６−（４−（１−（アミノオキシ）−２−オキソ−６，９，１２−トリオキサ−３−アザテトラデカン−１４−イルカルバモイル）ベンズアミド）ヘキシル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）−１−カルボキシペンチル）ウレイド）ペンタン二酸（Ｐ−トリア）の合成についての反応模式図を示す。
【図１５Ｈ】図１５Ｈは、（Ｓ）−２−（３−（（Ｓ）−５−（４−（６−（４−（１−（アミノオキシ）−２−オキソ−６，９，１２−トリオキサ−３−アザテトラデカン−１４−イルカルバモイル）ベンズアミド）ヘキシル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）−１−カルボキシペンチル）ウレイド）ペンタン二酸（Ｐ−トリア）の合成についての反応模式図を示す。
【図１５Ｉ】図１５Ｉは、（Ｓ）−２−（３−（（Ｓ）−５−（４−（６−（４−（１−（アミノオキシ）−２−オキソ−６，９，１２−トリオキサ−３−アザテトラデカン−１４−イルカルバモイル）ベンズアミド）ヘキシル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）−１−カルボキシペンチル）ウレイド）ペンタン二酸（Ｐ−トリア）の合成についての反応模式図を示す。
【図１５Ｊ】図１５Ｊは、（Ｓ）−２−（３−（（Ｓ）−５−（４−（６−（４−（１−（アミノオキシ）−２−オキソ−６，９，１２−トリオキサ−３−アザテトラデカン−１４−イルカルバモイル）ベンズアミド）ヘキシル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）−１−カルボキシペンチル）ウレイド）ペンタン二酸（Ｐ−トリア）の合成についての反応模式図を示す。
【図１５Ｋ】図１５Ｋは、抗ＣＤ３Ｆａｂに対して抱合されるＰ−ＴｒｉＡのＥＳＩ−ＭＳ解析を示す。
【図１５Ｌ】図１５Ｌは、抗ＣＤ３のＦａｂに抱合されたＰ−ＴｒｉＡの、デコンボリューションした質量スペクトルを示す。
【図１６Ａ】ＰＳＭＡ阻害アッセイの結果を示す。図１６（Ａ）は異なる阻害剤による代表的なＰＳＭＡ阻害曲線を示す。
【図１６Ｂ】ＰＳＭＡ阻害アッセイの結果を示す。図１６（Ｂ）はＰＳＭＡ阻害アッセイから得られたＫｍ曲線を示す。
【図１７Ａ】図１７Ａは、２４時間後の、Ｃ４−２細胞におけるインビトロ細胞毒性アッセイの結果を示す。
【図１７Ｂ】図１７Ｂは、４８時間後の、Ｃ４−２細胞におけるインビトロ細胞毒性アッセイの結果を示す。
【図１８Ａ】図１８Ａは、例示的な標的化剤の構造を示す。
【図１８Ｂ】図１８Ｂは、例示的な標的化剤の構造を示す。
【図１８Ｃ】図１８Ｃは、例示的な標的化剤の構造を示す。
【図１８Ｄ】図１８Ｄは、例示的な標的化剤の構造を示す。
【図１８Ｅ】図１８Ｅは、例示的な標的化剤の構造を示す。
【図１８Ｆ】図１８Ｆは、例示的な標的化剤の構造を示す。
【発明を実施するための形態】
【００７５】
本発明の方法および組成物が記載される前に、本発明は、記載される特定の方法または組成物限定されず、したがって当然変化し得る、ということは理解されよう。本明細書で使用される用語は、特定の実施形態のみを記載する目的のためであり、限定することを意図するものではないこともまた、理解されよう。実施例は、本発明を作製し使用するための方法の完全な開示および記載を当業者に提供するために出され、実施例はまた、本発明者らが本発明とみなすものの範囲を限定することを意図せず、下記の実験が、行われたすべてのまたは唯一の実験であることを表すことを意図するものでもない。使用される数（例えば、量、温度等）に関する正確さを確認する努力がなされてきたが、幾つかの実験的な誤差及び偏差が、説明されねばならない。他に示されない限り、部分は重量部であり、分子量は重量平均分子量であり、温度は摂氏度にあり、圧力は大気圧（ａｔｍｏｓｐｈｅｒｉｃ）である又はそれに近い。
【００７６】
値の範囲が提供される場合、それぞれの間の値（ｅａｃｈ  ｉｎｔｅｒｖｅｎｉｎｇ  ｖａｌｕｅ）は、文脈で明記されていない限り下限の単位の１０分の１まで、さもなければ、その範囲の上限と下限との間において、具体的に開示される、ということが理解される。任意の明言された値または明言された範囲の介在する値と、任意の他の明言された値またはその明言された介在する値との間のより小さな範囲は各々、本発明に包含される。これらのより小さな範囲の上限下限は、独立して、その範囲に含まれることもあり除外されることもあり、明言された範囲内の任意の明確に除外された極限を前提として、どちらかの極限がより小さな範囲に含まれている、どちらの極限もより小さな範囲に含まれていない、または両方の極限がより小さな範囲に含まれている場合、各範囲も、本発明内に包含される。明言された範囲が１つの制限又は両方の制限を含む場合、それら含まれた制限の何れか又は両方を除く範囲もまた、本発明に含まれる。
【００７７】
特段定めのない限り、本明細書で使用されるすべての技術用語と科学用語は、本発明が属する技術分野において当業者によって一般に理解されるのと同じ意味を有する。本明細書に記載されるものと同様の、又はそれらと同等の任意の方法及び題材が、本発明を実施する又は試験する際に使用され得るが、いくらかの可能性のある、および好ましい方法と材料がここで記載される。本明細書で言及される全ての刊行物は、該刊行物が引用されるものに関連する方法及び／又は題材を開示及び記載するために、引用により本明細書に組み込まれる。本開示は、矛盾がある程度まで組み込まれた刊行物の開示に優先する、ということが理解される。
【００７８】
本発明の読み取り後に当業者に明らかとなるように、本明細書に記載及び説明される個々の実施形態の各々は、本発明の範囲又は精神から逸脱することなく他の様々な実施形態の何れかの特徴から容易に分離又はそれと組み合わせられ得る、個別の構成要素及び特徴を有する。任意の列挙された方法は、列挙された事象の順序で、又は理論上可能な任意の他の順序で実行され得る。
【００７９】
本明細書及び添付の請求項において使用されるように、単数形「ａ」、「ａｎ」及び「ｔｈｅ」は、文脈が明確に別段の規定をしていない限り、複数の指示対象を含む、ということに留意しなければならない。故に、例えば、「細胞（ａ  ｃｅｌｌ）」への言及は、複数のそのような細胞を含み、「ペプチド（ｔｈｅ  ｐｅｐｔｉｄｅ）」への言及は、１以上のペプチド、又は、例えばポリペプチドといった当業者に既知のその同等物などへの言及を含む。
【００８０】
本明細書で論じられる刊行物は、本出願の出願日の前にもっぱらそれらの開示について提供される。本明細書におけるいずれも、本発明が、先行発明によるそのような刊行物に先立つ権利がないことの承認として解釈されない。さらに、提供される刊行物の日付は、独立して確認される必要があることがある実際の刊行日とは異なることがある。
【００８１】
本明細書には標的化剤抗体抱合体が開示され、該標的化剤抗体抱合体は、抗体または抗体フラグメントではない、標的細胞に結合する標的化剤；標的細胞に対して結合しない抗体または抗体フラグメント；および１つ以上のリンカーを含み、ここで抗体または抗体フラグメントは１つ以上のリンカーによって標的化剤に連結され、ここで抗体または抗体フラグメントは細胞傷害性エフェクター細胞上の抗原に結合する。抗体又は抗体フラグメントは１つ以上の非天然アミノ酸を含み得る。標的化剤は、抗体または抗体フラグメントの１つ以上の非天然アミノ酸に対して１つ以上のリンカーによって部位特異的に連結され得る。
【００８２】
本明細書には標的化剤抗体抱合体が更に開示される。標的化剤抗体抱合体は式Ｉ：Ｘ−Ｌ１−Ｙ又は式ＩＡ：Ｙ−Ｌ１−Ｘであってもよく：式中、（ａ）Ｘは、抗体又は抗体フラグメントの少なくとも一部分を含み；（ｂ）Ｌ１は１つの以上のリンカーを含み；および（ｃ）Ｙは標的化剤を含み、ここで抗体または抗体フラグメントは１つ以上のリンカーによって標的化剤に連結される。抗体または抗体フラグメントおよび標的化剤は、部位特異的に連結され得る。一般的に、Ｘは細胞傷害性エフェクター細胞に結合し、Ｙは標的細胞に結合する。例えば、Ｘは細胞傷害性Ｔ細胞上の抗原に結合することができ、Ｙは癌細胞上の受容体または細胞表面マーカに結合することができる。別の例において、細胞傷害性エフェクター細胞がマクロファージであってもよく、標的細胞は病原体であってもよい。
【００８３】
本明細書には標的化剤抗体抱合体が開示される。標的化剤抗体抱合体は式Ｉ：Ｘ−Ｌ１−Ｙ又は式ＩＡ：Ｙ−Ｌ１−Ｘであってもよく：式中、（ａ）Ｘは、抗体又は抗体フラグメントの少なくとも一部分を含み；（ｂ）Ｌ１は１つの以上のリンカーを含み；および（ｃ）Ｙは標的化剤を含み、ここで抗体または抗体フラグメントは１つ以上のリンカーによって標的化剤に連結され、ここで抗体または抗体フラグメントおよび標的化剤は部位特異的に連結される。一般的に、標的化剤抗体抱合体は、１つ以上の非天然アミノ酸を含む。一般的に、抗体または抗体フラグメントは、１つ以上の非天然アミノ酸を含む。
【００８４】
本明細書には式Ｉ：Ｘ−Ｌ１−Ｙ又は式ＩＡ：Ｙ−Ｌ１−Ｘの標的化抗体抱合体が更に開示され、：式中、Ｘは１より多い抗体または抗体フラグメントを含む。Ｘは１、２、３、４、またはそれより多い抗体または抗体フラグメントを含み得る。Ｘは、２つの抗体または抗体フラグメントを含みうる。２つ以上の抗体または抗体フラグメントは、ペプチドによって連結され得る。ペプチドは、長さ約２、３、４、５、６、７、８、９、または１０のアミノ酸で有り得る。ペプチドは、長さが約５アミノ酸であってもよい。Ｘは、１つ以上の一本鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）を含み得る。Ｘは、２つの抗体または抗体フラグメントを含みうる。Ｘは１、２、３、４、またはそれより多いｓｃＦｖを含み得る。Ｘは１、２、３、４、またはそれより多いＦａを含み得る。Ｘは一価Ｆａｂを含み得る。Ｘは二価のＦａｂを含み得る。Ｘは三価Ｆａｂを含み得る。Ｘは四価Ｆａｂを含み得る。Ｘは一価のｓｃＦｖを含み得る。Ｘは二価のｓｃＦｖを含み得る。Ｘは三価のｓｃＦｖを含み得る。Ｘは四価のｓｃＦｖを含み得る。１以上のＦａｂは同じであり得る。１以上のＦａｂは異なり得る。１以上のｓｃＦｖｓは同じであり得る。１以上のｓｃＦｖｓは異なり得る。
【００８５】
本明細書には式Ｉ：Ｘ−Ｌ１−Ｙ又は式ＩＡ：Ｙ−Ｌ１−Ｘの標的化抗体抱合体が更に開示され、：式中、Ｘは１つより多い抗体または抗体フラグメントを含み、Ｙは、１つ以上の標的化剤を含む。Ｙは１、２、３、４、またはそれより多い標的化剤を含み得る。１以上の標的化剤は同じであり得る。１以上の標的化剤は異なり得る。標的化抗体抱合体は第２のリンカーを含むことがあり、ここで、第１のリンカーは第１の抗体または抗体フラグメントに対して１つの標的化剤を連結し、第２のリンカーは第２の抗体または抗体フラグメントに対して第２の標的化剤を連結する。標的化剤は、２、３、４またはそれより多いリンカーを含むことがあり、ここで各リンカーは標的化抗体抱合体の抗体または抗体フラグメントに対して各標的化剤を連結する。
【００８６】
本明細書には式Ｉ：Ｘ−Ｌ１−Ｙ又は式ＩＡ：Ｙ−Ｌ１−Ｘの標的化抗体抱合体が更に開示され、：式中、Ｘは１つより多い抗体または抗体フラグメントを含み、Ｙは１つ以上の標的化剤を含む。Ｙは１、２、３、４、５、６またはそれより多い標的化剤を含み得る。１以上の標的化剤は同じであり得る。１以上の標的化剤は異なり得る。標的化抗体抱合体は、１、２、３、４、５、６またはそれより多いリンカーを含み得、ここで、各リンカーは抗体または抗体フラグメントに対して標的化剤を連結する。
【００８７】
標的化抗体抱合体の有効性は、標的化剤のリンカー構造、リンカーの長さ、相対的な結合の配向性、およびストイキオメトリを変更することによって、最適化され得る。  抗原結合部分を連結するリシンまたはシステインの化学的性質（ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）を使用する従来の化学的アプローチは、免疫学的シナプス形成のために生産的なジオメトリを適応させる能力においておそらく異なる、異種混合の産物を生成する傾向があり、および／またはインビボでの安定性または半減期を低下させてきた。これらの課題を回避するために、本明細書には、リンカー部分の配置の正確な制御、ゆえに標的化剤抗体抱合体のジオメトリに対する正確な制御、並びに標的化剤抗体抱合体の均質なプールの生成など、を可能にする非天然アミノ酸を組み入れる標的化抗体抱合体が開示される
【００８８】
本明細書には標的化剤抗体抱合体が開示され、該標的化剤抗体抱合体は、抗ＣＤ３の抗体または抗体フラグメント；１以上のリンカー；および前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）に結合する標的化剤を含む。標的化剤は、ボンベシンを含み得る。抗体または抗体フラグメントは抗ＣＤ３Ｆａｂであり得る。抗ＣＤ３ＦａｂはＵＣＨＴ１であり得る。リンカーはｐＴｒｉＡリンカーであり得る。リンカーはｐＵｎｄリンカーであり得る。リンカーはＰ−Ｔｅｔリンカーであり得る。リンカーはｐフタルリンカーであり得る。リンカーはＰ−ＤＮＰリンカーであり得る。標的化剤抗体抱合体は、第二の抗ＣＤ３Ｆａｂを含み得る。標的化剤抗体抱合体はさらに、前立腺特異的膜抗原に結合する第２、第３、または第４の標的化剤を含み得る。前立腺特異的膜抗原に結合する第２、第３、または第４の標的化剤はＤＵＰＡを含み得る。標的化剤抗体抱合体は、第二価のの抗ＣＤ３Ｆａｂおよび４つのＤＵＰＡを含んでもよく、ここで、第１および第２のＤＵＰＡは、抗ＣＤ３Ｆａｂの第１のＦａｂに対して第１のリンカー及び第２のリンカーによって連結され、第３および第４  ＤＵＰＡは、抗ＣＤ３Ｆａｂの第２のＦａｂに対して第３のリンカーおよび第４のリンカーによって連結される。抗ＣＤ３の抗体又は抗体フラグメントは１つ以上の非天然アミノ酸を含み得る。抗ＣＤ３抗体又は抗体フラグメントは一つ以上の非天然アミノ酸を含んでもよく、ここで、非天然アミノ酸は部位特異的に組み込まれる。抗ＣＤ３の抗体又は抗体フラグメントは、ＤＵＰＡに対して部位特異的に連結され得る。  ＤＵＰＡは、抗ＣＤ３の抗体または抗体フラグメントの非天然アミノ酸にて、抗ＣＤ３抗体または抗体フラグメントに対して部位特異的に連結し得る。
【００８９】
本明細書には標的化剤抗体抱合体が開示され、該標的化剤抗体抱合体は、抗ＣＤ３の抗体または抗体フラグメント；１以上のリンカー；およびＣ型レクチン様分子に結合する標的化剤を含む。抗ＣＤ３の抗体又は抗体フラグメントは１つ以上の非天然アミノ酸を含み得る。抗ＣＤ３抗体又は抗体フラグメントは一つ以上の非天然アミノ酸を含んでもよく、ここで、非天然アミノ酸は部位特異的に組み込まれる。抗ＣＤ３の抗体又は抗体フラグメントは、Ｃ型レクチン様分子に結合する標的化剤に対して部位特異的に連結され得る。Ｃ型レクチン様分子に結合する標的化剤は、抗ＣＤ３の抗体または抗体フラグメントの非天然アミノ酸にて、抗ＣＤ３抗体または抗体フラグメントに対して部位特異的に連結し得る。
【００９０】
本明細書には標的化剤抗体抱合体が開示され、該標的化剤抗体抱合体は、抗ＣＤ３の抗体または抗体フラグメント；１以上のリンカー；およびコレシストキニンＢ受容体（ＣＣＫＢＲ）に結合する標的化剤を含む。コレシストキニンＢ受容体に結合する標的化剤は、ペンタガストリンを含み得る。コレシストキニンＢ受容体に結合する標的化剤は、ＣＣＫＢＲアンタゴニストを含み得る。抗ＣＤ３の抗体又は抗体フラグメントは１つ以上の非天然アミノ酸を含み得る。抗ＣＤ３抗体又は抗体フラグメントは一つ以上の非天然アミノ酸を含んでもよく、ここで、非天然アミノ酸は部位特異的に組み込まれる。抗ＣＤ３の抗体又は抗体フラグメントは、ペンタガストリンに対して部位特異的に連結され得る。抗ＣＤ３の抗体又は抗体フラグメントは、ＣＣＫＢＲアンタゴニストに対して部位特異的に連結され得る。ＣＣＫＢＲアンタゴニストは、抗ＣＤ３の抗体または抗体フラグメントの非天然アミノ酸にて、抗ＣＤ３抗体または抗体フラグメントに対して部位特異的に連結し得る。ペンタガストリンは、抗ＣＤ３の抗体または抗体フラグメントの非天然アミノ酸にて、抗ＣＤ３抗体または抗体フラグメントに対して部位特異的に連結し得る。
【００９１】
本明細書には標的化剤抗体抱合体が開示され、該標的化剤抗体抱合体は、抗ＣＤ３の抗体または抗体フラグメント；１以上のリンカー；およびゴナドトロピン放出ホルモン受容体（ＧｎＲＨＲ）に結合する標的化剤を含む。ＧｎＲＨＲに結合する標的化剤は、ゴナドトロピン放出ホルモン（ＧｎＲＨ）を含みうる。抗ＣＤ３の抗体又は抗体フラグメントは１つ以上の非天然アミノ酸を含み得る。抗ＣＤ３抗体又は抗体フラグメントは一つ以上の非天然アミノ酸を含んでもよく、ここで、非天然アミノ酸は部位特異的に組み込まれる。抗ＣＤ３の抗体又は抗体フラグメントは、ＧｎＲＨに対して部位特異的に連結され得る。ＧｎＲＨは、抗ＣＤ３の抗体または抗体フラグメントの非天然アミノ酸にて、抗ＣＤ３抗体または抗体フラグメントに対して部位特異的に連結し得る。
【００９２】
本明細書には標的化剤抗体抱合体が開示され、該標的化剤抗体抱合体は、抗ＣＤ３の抗体または抗体フラグメント；１以上のリンカー；およびソマトスタチン受容体２（ＳＳＴ２）に結合する標的化剤を含む。ソマトスタチン受容体２に結合する標的化剤は、オクトレオチドを含み得る。ソマトスタチン受容体２に結合する標的化剤は、オクトレオタートを含み得る。ソマトスタチン受容体２に結合する標的化剤は、ソマトスタチンのアナログを含み得る。抗ＣＤ３の抗体又は抗体フラグメントは１つ以上の非天然アミノ酸を含み得る。抗ＣＤ３抗体又は抗体フラグメントは一つ以上の非天然アミノ酸を含んでもよく、ここで、非天然アミノ酸は部位特異的に組み込まれる。抗ＣＤ３の抗体又は抗体フラグメントは、オクトレオチド、オクトレオタート、又はソマトスタチンのアナログに対して部位特異的に連結され得る。オクトレオチド、オクトレオタート、又はソマトスタチンのアナログは、抗ＣＤ３の抗体または抗体フラグメントの非天然アミノ酸にて、抗ＣＤ３抗体または抗体フラグメントに対して部位特異的に連結し得る。
【００９３】
本明細書には標的化剤抗体抱合体が開示され、該標的化剤抗体抱合体は、抗ＣＤ３の抗体または抗体フラグメント；１以上のリンカー；およびａｖｂ３インテグリンを結合する標的化剤を含む。ａｖｂ３インテグリンを結合する標的化剤は、環状のアルギニン−グリシン−アスパラギン酸のペプチド（ｃＲＧＤ）を含み得る。抗ＣＤ３の抗体又は抗体フラグメントは１つ以上の非天然アミノ酸を含み得る。抗ＣＤ３抗体又は抗体フラグメントは一つ以上の非天然アミノ酸を含んでもよく、ここで、非天然アミノ酸は部位特異的に組み込まれる。抗ＣＤ３の抗体又は抗体フラグメントは、ｃＲＧＤに対して部位特異的に連結され得る。ｃＲＧＤは、抗ＣＤ３の抗体または抗体フラグメントの非天然アミノ酸にて、抗ＣＤ３抗体または抗体フラグメントに対して部位特異的に連結し得る。
【００９４】
本明細書には標的化剤抗体抱合体が開示され、該標的化剤抗体抱合体は、抗ＣＤ３の抗体または抗体フラグメント；１以上のリンカー；およびガストリン放出ペプチド受容体を結合する標的化剤を含む。ガストリン放出ペプチド受容体を結合する標的化剤は、ボンベシンを含み得る。抗ＣＤ３の抗体又は抗体フラグメントは１つ以上の非天然アミノ酸を含み得る。抗ＣＤ３抗体又は抗体フラグメントは一つ以上の非天然アミノ酸を含んでもよく、ここで、非天然アミノ酸は部位特異的に組み込まれる。抗ＣＤ３の抗体又は抗体フラグメントは、ボンベシンに対して部位特異的に連結され得る。ボンベシンは、抗ＣＤ３の抗体または抗体フラグメントの非天然アミノ酸にて、抗ＣＤ３抗体または抗体フラグメントに対して部位特異的に連結し得る。
【００９５】
本明細書には標的化剤抗体抱合体が開示され、該標的化剤抗体抱合体は、抗ＣＤ３の抗体または抗体フラグメント；１以上のリンカー；およびニューロキニン１受容体を結合する標的化剤を含む。抗ＣＤ３の抗体又は抗体フラグメントは１つ以上の非天然アミノ酸を含み得る。抗ＣＤ３抗体又は抗体フラグメントは一つ以上の非天然アミノ酸を含んでもよく、ここで、非天然アミノ酸は部位特異的に組み込まれる。抗ＣＤ３の抗体又は抗体フラグメントは、ニューロキニン１受容体を結合する標的化剤に対して部位特異的に連結され得る。ニューロキニン１受容体を結合する標的化剤は、抗ＣＤ３の抗体または抗体フラグメントの非天然アミノ酸にて、抗ＣＤ３抗体または抗体フラグメントに対して部位特異的に連結し得る。
【００９６】
本明細書には標的化剤抗体抱合体が開示され、該標的化剤抗体抱合体は、抗ＣＤ３の抗体または抗体フラグメント；１以上のリンカー；およびメラノコルチン１受容体を結合する標的化剤を含む。抗ＣＤ３の抗体又は抗体フラグメントは１つ以上の非天然アミノ酸を含み得る。抗ＣＤ３抗体又は抗体フラグメントは一つ以上の非天然アミノ酸を含んでもよく、ここで、非天然アミノ酸は部位特異的に組み込まれる。抗ＣＤ３の抗体又は抗体フラグメントは、メラノコルチン１受容体を結合する標的化剤に対して部位特異的に連結され得る。メラノコルチン１受容体を結合する標的化剤は、抗ＣＤ３の抗体または抗体フラグメントの非天然アミノ酸にて、抗ＣＤ３抗体または抗体フラグメントに対して部位特異的に連結し得る。
【００９７】
本明細書には標的化剤抗体抱合体が開示され、該標的化剤抗体抱合体は、抗ＣＤ３の抗体または抗体フラグメント；１以上のリンカー；およびニューロテンシン受容体を結合する標的化剤を含む。抗ＣＤ３の抗体又は抗体フラグメントは１つ以上の非天然アミノ酸を含み得る。抗ＣＤ３抗体又は抗体フラグメントは一つ以上の非天然アミノ酸を含んでもよく、ここで、非天然アミノ酸は部位特異的に組み込まれる。抗ＣＤ３の抗体又は抗体フラグメントは、ニューロテンシン受容体を結合する標的化剤に対して部位特異的に連結され得る。ニューロテンシン受容体を結合する標的化剤は、抗ＣＤ３の抗体または抗体フラグメントの非天然アミノ酸にて、抗ＣＤ３抗体または抗体フラグメントに対して部位特異的に連結し得る。
【００９８】
本明細書には標的化剤抗体抱合体が開示され、該標的化剤抗体抱合体は、抗ＣＤ３の抗体または抗体フラグメント；１以上のリンカー；およびニューロペプチドＹを結合する標的化剤を含む。抗ＣＤ３の抗体又は抗体フラグメントは１つ以上の非天然アミノ酸を含み得る。抗ＣＤ３抗体又は抗体フラグメントは一つ以上の非天然アミノ酸を含んでもよく、ここで、非天然アミノ酸は部位特異的に組み込まれる。抗ＣＤ３の抗体又は抗体フラグメントは、ニューロペプチドＹ受容体を結合する標的化剤に対して部位特異的連結され得る。ニューロペプチドＹ受容体を結合する標的化剤は、抗ＣＤ３の抗体または抗体フラグメントの非天然アミノ酸にて、抗ＣＤ３抗体または抗体フラグメントに対して部位特異的に連結し得る。
【００９９】
同様の結合標的を有する二重特異性抗体に対して、本明細書に開示される標的化剤抗体抱合体は、改善された血清の半減期、選択性、および効力を示し得る。
【０１００】
本明細書には標的化剤抗体抱合体を製造する方法が更に開示される。これらの方法によって、異なる相対的ジオメトリを有する様々な標的化剤抗体抱合体の容易な作成が可能となる。
【０１０１】
＜Ｉ．抗体、抗体フラグメント、および標的化剤標的化剤抗体＞
抱合体は、Ｉｇ−標的化剤構築物（Ｉｇ−ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ａｇｅｎｔ  ｃｏｎｓｔｒｕｃｔ）を含んでいてよもよく、ここで、Ｘは免疫グロブリンを含み、Ｙは標的化剤を含む。標的化剤抗体抱合体は、Ｆａｂ−標的化剤構築物（Ｆａｂ−  ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ａｇｅｎｔ  ｃｏｎｓｔｒｕｃｔ）を含んでいてもよく、ここで、ＸはＦａｂフラグメントを含み、Ｙは標的化剤を含む。ＸおよびＹは１つの以上のリンカー（例えばＬ１、Ｌ２）で連結され得る。本明細書で使用されるように、用語「抗体フラグメント」は、全長の形態以外の抗体の任意の形態を指す。本明細書中で、抗体フラグメントは、全長の抗体内に存在する、より小さな構成要素である抗体、および操作された抗体を含む。抗体フラグメントは、限定されないが、Ｆｖは、Ｆｃ、Ｆａｂ、および（Ｆａｂ’）２、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）、二重特異性抗体  三重特異性抗体（ｔｒｉａｂｏｄｉｅｓ）、四重特異性抗体（ｔｅｔｒａｂｏｄｉｅｓ）、二機能性のハイブリッド抗体、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、ＣＤＲ３、ＣＤＲの組み合わせ、可変領域、フレームワーク領域、定常部、重鎖、軽鎖、代替的な足場の非抗体分子（ａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅ  ｓｃａｆｆｏｌｄ  ｎｏｎ−ａｎｔｉｂｏｄｙ  ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ）、および二重特異性抗体を含む。特に他に記載のない限り、用語「抗体（ａｎｔｉｂｏｄｙ）」または「抗体（ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ）」を使用する明細書の記載及び特許請求の範囲は、「抗体フラグメント（ａｎｔｉｂｏｄｙ  ｆｒａｇｍｅｎｔ）」および「抗体フラグメント（ａｎｔｉｂｏｄｙ  ｆｒａｇｍｅｎｔｓ．）」を特に含み得る。
【０１０２】
本明細書に開示される抗体は、ヒトの、完全にヒトの、ヒト化の、操作されたヒトの、非ヒトの、および／またはキメラ抗体であリ得る。例えば、式Ｉの抗体は、ヒト化抗体であり得る。別の例では、式Ｉの抗体はキメラ抗体である。本明細書に開示される抗体は、ヒトの、完全にヒトの、ヒト化の、操作されたヒトの、非ヒトの、および／またはキメラ抗体に基づくか又は由来し得る。例えば、式ＩＡのＸは操作されたヒトの抗体に基づくか又は由来し得る。代替的に、式ＩＡのＸは非ヒトの抗体に基づくか又は由来し得る。非ヒト抗体は、ヒトに対する免疫原性を減らすためにヒト化され得るが、親の非ヒト抗体の特異性及び親和性を保持する。一般的に、ヒト化抗体は、ＣＤＲ（又はその一部）が非ヒト抗体に由来し、ＦＲ（又はその一部）がヒト抗体配列に由来する、１つ以上の可変ドメインを含む。ヒト化抗体はまた、随意に、ヒト定常部の少なくとも一部も含む。幾つかの実施形態において、ヒト化抗体における幾つかのＦＲ残基は、例えば、抗体の特異性又は親和性を回復する或いは改良するために、非ヒト抗体（例えば、ＣＤＲ残基が由来する抗体）の対応する残基により置換される。
【０１０３】
ヒト化抗体およびそれらの作製する方法は、例えば、Ａｌｍａｇｒｏ ａｎｄ Ｆｒａｎｓｓｏｎ，Ｆｒｏｎｔ．Ｂｉｏｓｃｉ．１３：１６１９−１６３３（２００８）などにおいて検討されており、および、例えば、Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．， Ｎａｔｕｒｅ ３３２：３２３−３２９ （１９８８）；Ｑｕｅｅｎ ｅｔ ａｌ．， Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． ＵＳＡ ８６：１００２９−１００３３ （１９８９）； 米国特許第５，８２１，３３７号， ７，５２７，７９１号， ６，９８２，３２１号， 及び７，０８７，４０９号；Ｋａｓｈｍｉｒｉ ｅｔ ａｌ．， Ｍｅｔｈｏｄｓ ３６：２５−３４ （２００５） （ＳＤＲ （ａ−ＣＤＲ） 移植について記載）；Ｐａｄｌａｎ， Ｍｏｌ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． ２８：４８９−４９８ （１９９１） （”ｒｅｓｕｒｆａｃｉｎｇ”について記載）； Ｄａｌｌ’Ａｃｑｕａ ｅｔ ａｌ．， Ｍｅｔｈｏｄｓ ３６：４３−６０ （２００５） （”ＦＲシャッフリング”について記載）； および Ｏｓｂｏｕｒｎ ｅｔ ａｌ．， Ｍｅｔｈｏｄｓ ３６：６１−６８ （２００５）；Ｋｌｉｍｋａ ｅｔ ａｌ．， Ｂｒ． Ｊ． Ｃａｎｃｅｒ， ８３：２５２−２６０ （２０００） （ ＦＲシャッフリングへ「誘導選択」するアプローチについて記載）； および Ｓｔｕｄｎｉｃｋａ ｅｔ ａｌ．， 米国特許第５，７６６，８８６号などにさらに記載されている。
【０１０４】
キメラ抗体は、もともと別々の抗体についてコード化する２つ以上の抗体遺伝子の連結を介して作成される抗体を指すことができる。キメラ抗体は、第１の抗体からの少なくとも１つのアミノ酸、および第２の抗体からの少なくとも１つのアミノ酸を含んでもよく、ここで、第１および第２の抗体は異なる。Ｘ（例えば式Ｉ、ＩＡ、ＩＩの抗体）はキメラ抗体であり得る。少なくとも、抗体または抗体フラグメントの部分は、ウシ科、ヒト科、又はネズミ科からのものであり得る。抗体または抗体フラグメントの少なくとも一部分は、牛由来であり得る。少なくとも、抗体または抗体フラグメントの部分は、ラット、ヤギ、モルモットまたはウサギからのものであり得る。抗体または抗体フラグメントの少なくとも一部分は、ヒト由来であり得る。抗体または抗体フラグメントの少なくとも一部分は、カニクイザル由来であり得る。
【０１０５】
本明細書に開示される抗体は、哺乳動物、鳥類、魚類、両生類、爬虫類の抗体または抗体フラグメントに基づくか又は由来し得る。哺乳動物は、限定されないが、肉食動物、げっ歯類、ゾウ、有袋類、ウサギ、コウモリ、霊長類、アザラシ、アリクイ、鯨類、奇蹄類、および偶蹄類を含む。哺乳動物は、ヒト、非ヒト霊長類、マウス、ヒツジ、ネコ、イヌ、ウシ、ウマ、ヤギ、またはブタであってもよい。
【０１０６】
鳥類は、限定されないが、アホウドリ、ハチドリ、ワシ、ダチョウ、紅冠鳥、キウイ、およびペンギンを含む。魚類は、軟骨魚類、条鰭類、または総鰭類（ｌｏｂｅ−ｆｉｎｅｄ  ｆｉｓｈｅｓ）であってもよい。両生類は、限定されないが、イモリ、サンショウウオ、カエル（ｆｒｏｇｓ）、およびヒキガエル（ｔｏａｄｓ）を含む。爬虫類の例としては、限定されないが、カメ、有鱗類（ｓｑｕａｍａｔｅｓ）、ワニ、およびムシトカゲ（ｔｕａｔａｒａｓ）を含む。有鱗類はミミズトカゲ、トカゲおよびヘビを含んでもよい。
【０１０７】
本明細書に開示される抗体は、異種間で反応性であり得る。例えば、抗体は、ヒト抗原およびカニクイザル（ｃｙｎｏｍｏｇｏｌｕｓ  ｍｏｎｋｅｙ）の抗原を認識し得る（例えば、ヒト／カニクイザル抗体）。
【０１０８】
抗体または抗体フラグメントは、配列番号１−２から選択される配列の少なくとも一部分を含み得る。抗体または抗体フラグメントは、配列番号１−２から選択される配列と少なくとも５０％同一である配列を含み得る。抗体または抗体フラグメントは、配列番号１−２から選択される配列と少なくとも６０％同一である配列を含み得る。抗体または抗体フラグメントは、配列番号１−２から選択される配列と少なくとも７０％同一である配列を含み得る。抗体または抗体フラグメントは、配列番号１−２から選択される配列と少なくとも８０％同一である配列を含み得る。抗体または抗体フラグメントは、配列番号１−２から選択される配列と少なくとも５０％同一である配列を含み得る。抗体または抗体フラグメントは、配列番号１−２から選択される配列と少なくとも８５％同一である配列を含み得る。抗体または抗体フラグメントは、配列番号１−２から選択される配列と少なくとも９０％同一である配列を含み得る。抗体または抗体フラグメントは、配列番号１−２から選択される配列と少なくとも９５％同一である配列を含み得る。抗体または抗体フラグメントは、配列番号１−２から選択される配列と少なくとも９７％同一である配列を含み得る。
【０１０９】
抗体または抗体フラグメントは、配列番号１−２から選択される配列に基づくか又は由来する、５またはそれより多いアミノ酸を含有する配列を含み得る。抗体または抗体フラグメントは、配列番号１−２から選択される配列に基づくか又は由来する、６、７、８、９、１０またはそれより多いアミノ酸を含有する配列を含み得る。抗体または抗体フラグメントは、配列番号１−２から選択される配列に基づくか又は由来する、１５、１６、１７、１８、１９、２０またはそれより多いアミノ酸を含有する配列を含み得る。抗体または抗体フラグメントは、配列番号１−２から選択される配列に基づくか又は由来する、２５、３０、３５、４０、４５、５０またはそれより多いアミノ酸を含有する配列を含み得る。抗体または抗体フラグメントは、配列番号１−２から選択される配列に基づくか又は由来する、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００またはそれより多いアミノ酸を含有する配列を含み得る。アミノ酸は連続していてもよい。アミノ酸は不連続であってもよい。
【０１１０】
＜ＩＡ．Ｘの抗体または抗体フラグメント＞
本明細書に開示される抗体はＸを含んでいてもよく、ここで、Ｘは抗体または抗体フラグメントの少なくとも一部分を含む。抗体又は抗体フラグメントは１つ以上の非天然アミノ酸を含み得る。Ｘは、完全な抗体を含み得る。Ｘは、抗体の少なくとも一部分を含み得る。Ｘは、モノクローナル抗体の少なくとも一部を含み得る。Ｘは、ポリクローナル抗体の少なくとも一部を含み得る。Ｘは、多価抗体の少なくとも一部を含み得る。
【０１１１】
Ｘは、少なくとも抗体の一部分を含み得る。抗体の部分は抗体フラグメントを含み得る。抗体の部分は免疫グロブリン（Ｉｇ）であり得る。免疫グロブリンは、ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、そのフラグメント、またはその改変から選択され得る。免疫グロブリンはＩｇＧであり得る。ＩｇＧはＩｇＧ１であり得る。ＩｇＧはＩｇＧ２であり得る。ＩｇＧは、ＦｃＲ結合を減少させるためのＦｃ変異を有してもよい。ＩｇＧ１におけるＦｃ変異はＬ２３４ＡおよびＬ２３５Ａであり得る。ＩｇＧ１におけるＦｃ変異はＬ２３４ＡおよびＬ２３５Ｅであり得る。ＩｇＧ１におけるＦｃ変異はＮ２９７Ａであり得る。ＩｇＧ２におけるＦｃ変異はＶ２３４ＡおよびＶ２３７Ａであり得る。抗体フラグメントは、限定されないが、Ｆｖは、Ｆｃ、Ｆａｂ、および（Ｆａｂ’）２、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）、二重特異性抗体、三重特異性抗体、四重特異性抗体、二機能性のハイブリッド抗体、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、ＣＤＲ３、ＣＤＲの組み合わせ、可変領域、フレームワーク領域、定常部、重鎖、軽鎖、代替的な足場の非抗体分子、および二重特異性抗体を含む。ＸはＦａｂフラグメントを含み得る。Ｘは、抗体の重鎖（ＨＣ）の少なくとも一部分を含み得る。Ｘは、抗体の軽鎖（ＬＣ）の少なくとも一部分を含み得る。Ｘは、抗体の可変領域の少なくとも一部分を含み得る。Ｘは、抗体の定常部の少なくとも一部分を含み得る。
【０１１２】
Ｘは、配列番号１−２から選択される配列の少なくとも一部分を含み得る。Ｘは、配列番号１−２から選択される配列と少なくとも５０％同一である配列を含み得る。Ｘは、配列番号１−２から選択される配列と少なくとも６０％同一である配列を含み得る。Ｘは、配列番号１−２から選択される配列と少なくとも７０％同一である配列を含み得る。Ｘは、配列番号１−２から選択される配列と少なくとも８０％同一である配列を含み得る。Ｘは、配列番号１−２から選択される配列と少なくとも５０％同一である配列を含み得る。Ｘは、配列番号１−２から選択される配列と少なくとも８５％同一である配列を含み得る。Ｘは、配列番号１−２から選択される配列と少なくとも９０％同一である配列を含み得る。Ｘは、配列番号１−２から選択される配列と少なくとも９５％同一である配列を含み得る。Ｘは、配列番号１−２から選択される配列と少なくとも９７％同一である配列を含み得る。
【０１１３】
Ｘは、配列番号１−２から選択される配列に基づくか又は由来する、５またはそれより多いアミノ酸を含有する配列を含み得る。Ｘは、配列番号１−２から選択される配列に基づくか又は由来する、６、７、８、９、１０またはそれより多いアミノ酸を含有する配列を含み得る。Ｘは、配列番号１−２から選択される配列に基づくか又は由来する１５、１６、１７、１８、１９、２０またはそれより多いアミノ酸を含有する配列を含み得る。Ｘは、配列番号１−２から選択される配列に基づくか又は由来する、２５、３０、、３５、４０、４５、５０またはそれより多いアミノ酸を含有する配列を含み得る。Ｘは、配列番号１−２から選択される配列に基づくか又は由来する、５５、６０、、６５、７０、７５、８０、８５またはそれより多いアミノ酸を含有する配列を含み得る。アミノ酸は連続していてもよい。アミノ酸は不連続であってもよい。
【０１１４】
Ｘは、細胞上で受容体の少なくとも一部分に対して結合する抗体または抗体フラグメントを含み得る。Ｘは、細胞上で共受容体の少なくとも一部分に対して結合する抗体または抗体フラグメントを含み得る。Ｘは、細胞上で抗原又は細胞表面マーカの少なくとも一部分に対して結合する抗体または抗体フラグメントを含み得る。細胞は造血細胞であり得る。造血細胞は骨髄性細胞であり得る。骨髄性細胞は、赤血球、血小板、単球、好酸球、好塩基性細胞、またはマスト細胞であり得る。造血細胞はリンパ球系細胞であり得る。造血細胞はマクロファージであり得る。造血細胞は好中球であり得る。リンパ系細胞はＢ細胞、Ｔ細胞またはＮＫ細胞であり得る。造血細胞は白血球であり得る。造血細胞はリンパ球であり得る。Ｔ細胞は、細胞障害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、調節性Ｔ細胞、メモリーＴ細胞またはナチュラルキラーＴ細胞であり得る。Ｔ細胞は細胞障害性Ｔ細胞であり得る。Ｔ細胞はキラーＴ細胞であり得る。Ｘは、抗Ｔ細胞受容体抗体の少なくとも一部分を含み得る。Ｘは、抗Ｔ細胞共受容体抗体の少なくとも一部分を含み得る。Ｘは、Ｔ細胞上で抗原に対して結合する抗体の少なくとも一部分を含み得る。Ｘは、Ｔ細胞上で細胞表面タンパク質に対して結合する抗体の少なくとも一部分を含み得る。Ｘは、Ｔ細胞上で細胞表面マーカに対して結合する抗体の少なくとも一部分を含み得る。Ｘは、Ｔ細胞上で分化タンパク質のクラスターに対して結合する抗体の少なくとも一部分を含み得る。Ｘは、抗ＣＤ３抗体の少なくとも一部分を含み得る。Ｘは抗ＣＤ３抗体を含み得る。抗ＣＤ３抗体はＵＣＨＴ１であり得る。Ｘは、Ｆａｂフラグメントの少なくとも一部分を含み得る。Ｘは、抗ＣＤ３抗体の抗体フラグメントを含み得る。Ｘはヒト／カニクイザルで交差反応する抗ＣＤ３Ｆａｂ（例えばＳＰ３４）を含みうる。
【０１１５】
Ｘは、細胞上で共受容体の少なくとも一部分に対して結合する抗体または抗体フラグメントを含み得る。Ｘは、細胞上で共受容体の少なくとも一部分に対して結合する抗体または抗体フラグメントを含み得る。Ｘは、細胞上で抗原又は細胞表面マーカの少なくとも一部分に対して結合する抗体または抗体フラグメントを含み得る。細胞は免疫細胞であり得る。細胞は造血細胞であり得る。造血細胞は骨髄性細胞であり得る。骨髄性細胞は、赤血球、血小板、好中球、単球、マクロファージ、好酸球、好塩基球、またはマスト細胞であり得る。造血細胞はリンパ球系細胞であり得る。リンパ系細胞はＢ細胞、Ｔ細胞またはＮＫ細胞であり得る。造血細胞は白血球であり得る。造血細胞はリンパ球であり得る。細胞は遺伝的に改変された細胞であり得る。細胞は、細胞傷害活性を有するように遺伝的に改変され得る。細胞は、増強された細胞傷害活性を有するように遺伝的に改変され得る。細胞は、細胞傷害活性を低下するように改変され得る。
【０１１６】
Ｘは、Ｔ細胞上で受容体の少なくとも一部分に対して結合する抗体または抗体フラグメントを含み得る。受容体は、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）であり得る。ＴＣＲは、ＴＣＲアルファ、ＴＣＲベータ、ＴＣＲガンマおよび／またはＴＣＲデルタを含み得る。受容体は、Ｔ細胞受容体のゼータであり得る。
【０１１７】
Ｘは、リンパ球、Ｂ細胞、マクロファージ、単球、好中球および／またはＮＫ細胞の上で、受容体の少なくとも一部分に対して結合する抗体または抗体フラグメントを含み得る。受容体はＦｃ受容体であり得る。Ｆｃ受容体は、Ｆｃガンマ受容体は、Ｆｃ−α受容体および／またはＦｃイプシロン受容体であり得る。Ｆｃガンマ受容体は、限定されないが、ＦｃγＲＩの（ＣＤ６４）、ＦｃγＲＩＩＡ（ＣＤ３２）、ＦｃγＲＩＩＢ（ＣＤ３２）、ＦｃγＲＩＩＩＡ（ＣＤ１６Ａ）およびＦｃγＲＩＩＩＢ（ＣＤ１６Ｂ）を含む。ＦＣ−α受容体は、限定されないが、ＦｃαＲＩを含む。Ｆｃイプシロン受容体は、限定されないが、ＦｃεＲＩおよびＦＣεＲＩＩを含む。受容体は、ＣＤ８９（ＩｇＡ受容体またはＦＣＡＲのＦｃ断片）であり得る。標的化剤抗体抱合体がＦｃ受容体に結合する抗体を含む場合、標的化剤抗体抱合体は、病原性の細菌または真菌に特異的に結合し得る。
【０１１８】
Ｘは、Ｔ細胞上で共受容体の少なくとも一部分に対して結合する抗体または抗体フラグメントを含み得る。共受容体はＣＤ３、ＣＤ４および／またはＣＤ８であり得る。Ｘは、ＣＤ３共受容体に結合する抗体フラグメントを含み得る。ＣＤ３共受容体は、ＣＤ３ガンマ、ＣＤ３デルタ、および／またはＣＤ３イプシロンを含み得る。ＣＤ８は、ＣＤ８−アルファおよび／またはＣＤ８−ベータの鎖を含み得る。
【０１１９】
Ｘは、ヒト、完全ヒト、ヒト化、操作されたヒト、非ヒト、またはキメラ抗体である、抗体または抗体の少なくとも一部分を含み得る。Ｘは、哺乳動物の抗体である、抗体または抗体の少なくとも一部分を含み得る。Ｘは、非哺乳動物の抗体である、抗体または抗体の少なくとも一部分を含み得る。
【０１２０】
Ｘは、１つ以上の抗体および／または抗体フラグメントの配列に基づくか又は由来する配列を含み得る。Ｘは、１つ以上の抗体および／または抗体フラグメントに基づくか又は由来する配列に対して、約５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％またはそれより多く相同である配列を含み得る。Ｘは、１つ以上の抗体および／または抗体フラグメントに基づくか又は由来する配列に対して、約７０％またはそれより多く相同である配列を含み得る。Ｘは、１つ以上の抗体および／または抗体フラグメントに基づくか又は由来する配列に対して、約８０％またはそれより多く相同である配列を含み得る。Ｘは、１つ以上の抗体および／または抗体フラグメントに基づくか又は由来する配列に対して、約９０％またはそれより多く相同である配列を含み得る。Ｘは、１つ以上の抗体および／または抗体フラグメントに基づくか又は由来する配列に対して、約９５％またはそれより多く相同である配列を含み得る。配列はペプチド配列であり得る。代替的に、配列はヌクレオチド配列である。
【０１２１】
Ｘは、１つ以上の抗体および／または抗体フラグメントに基づくか又は由来するペプチド配列から、約２０、１７、１５、１２、１０、８、６、５、４以下のアミノ酸だけ異なるペプチド配列を含み得る。Ｘは、１つ以上の抗体および／または抗体フラグメントに基づくか又は由来するペプチド配列から、約４以下のアミノ酸だけ異なるペプチド配列を含み得る。Ｘは、１つ以上の抗体および／または抗体フラグメントに基づくか又は由来するペプチド配列から、約３以下のアミノ酸だけ異なるペプチド配列を含み得る。Ｘは、１つ以上の抗体および／または抗体フラグメントに基づくか又は由来するペプチド配列から、約２以下のアミノ酸だけ異なるペプチド配列を含み得る。Ｘは、１つ以上の抗体および／または抗体フラグメントに基づくか又は由来するペプチド配列から、約１以下のアミノ酸だけ異なるペプチド配列を含み得る。アミノ酸は、連続、不連続、又はまたはその組み合わせであってもよい。Ｘは、１つ以上の抗体および／または抗体フラグメントに基づくか又は由来するペプチド配列から、約３以下の連続するアミノ酸だけ異なるペプチド配列を含み得る。代替的に、または付加的に、Ｘは、１つ以上の抗体および／または抗体フラグメントに基づくか又は由来するペプチド配列から、約２以下の不連続のアミノ酸だけ異なるペプチド配列を含み得る。別の例において、Ｘは、１つ以上の抗体および／または抗体フラグメントに基づくか又は由来するペプチド配列から、約５以下のアミノ酸だけ異なるペプチド配列を含んでもよく、ここで、２つのアミノ酸は連続であり、２つのアミノ酸は不連続である。
【０１２２】
Ｘは、１つ以上の抗体および／または抗体フラグメントに基づくか又は由来するヌクレオチド配列から、約３０、２５、２０、１９、１８、１７、１６、１５、１４、１３、１２、１１、１０、９、８、７、６、５、４以下のヌクレオチドまたは塩基対だけ異なるヌクレオチド配列を含み得る。Ｘは、１つ以上の抗体および／または抗体フラグメントに基づくか又は由来するヌクレオチド配列から、約１５以下のヌクレオチドまたは塩基対だけ異なるヌクレオチド配列を含み得る。Ｘは、１つ以上の抗体および／または抗体フラグメントに基づくか又は由来するヌクレオチド配列から、約１２以下のヌクレオチドまたは塩基対だけ異なるヌクレオチド配列を含み得る。Ｘは、１つ以上の抗体および／または抗体フラグメントに基づくか又は由来するヌクレオチド配列から、約９以下のヌクレオチドまたは塩基対だけ異なるヌクレオチド配列を含み得る。Ｘは、１つ以上の抗体および／または抗体フラグメントに基づくか又は由来するヌクレオチド配列から、約６以下のヌクレオチドまたは塩基対だけ異なるヌクレオチド配列を含み得る。Ｘは、１つ以上の抗体および／または抗体フラグメントに基づくか又は由来するヌクレオチド配列から、約４以下のヌクレオチドまたは塩基対だけ異なるヌクレオチド配列を含み得る。Ｘは、１つ以上の抗体および／または抗体フラグメントに基づくか又は由来するヌクレオチド配列から、約３以下のヌクレオチドまたは塩基対だけ異なるヌクレオチド配列を含み得る。Ｘは、１つ以上の抗体および／または抗体フラグメントに基づくか又は由来するヌクレオチド配列から、約２以下のヌクレオチドまたは塩基対だけ異なるヌクレオチド配列を含み得る。Ｘは、１つ以上の抗体および／または抗体フラグメントに基づくか又は由来するヌクレオチド配列から、約１以下のヌクレオチドまたは塩基対だけ異なるヌクレオチド配列を含み得る。ヌクレオチドまたは塩基対は、連続、不連続、又はまたはその組み合わせであってもよい。例えば、Ｘは、１つ以上の抗体および／または抗体フラグメントに基づくか又は由来するヌクレオチド配列から、約３以下のヌクレオチドまたは塩基対だけ異なるヌクレオチド配列を含み得る。代替的に、または付加的に、Ｘは、１つ以上の抗体および／または抗体フラグメントに基づくか又は由来するヌクレオチド配列から、約２以下の不連続のヌクレオチドまたは塩基対だけ異なるヌクレオチド配列を含み得る。別の例において、Ｘは、１つ以上の抗体および／または抗体フラグメントに基づくか又は由来するヌクレオチド配列から、約５ヌクレオチド又は塩基対以下のアミノ酸まで異なるペプチド配列を含んでもよく、ここで、２つのヌクレオチド又は塩基は連続であり、２つのヌクレオチド又は塩基は不連続である。
【０１２３】
Ｘのペプチド配列は、それが基づくか又は由来する抗体または抗体フラグメントのペプチド配列から、１つ以上のアミノ酸置換で異なっていてもよい。Ｘのペプチド配列は、それが基づくか又は由来する抗体または抗体フラグメントのペプチド配列から、２つ以上のアミノ酸置換で異なっていてもよい。Ｘのペプチド配列は、それが基づくか又は由来する抗体または抗体フラグメントのペプチド配列から、３つ以上のアミノ酸置換で異なっていてもよい。Ｘのペプチド配列は、それが基づくか又は由来する抗体または抗体フラグメントのペプチド配列から、４つ以上のアミノ酸置換で異なっていてもよい。Ｘのペプチド配列は、それが基づくか又は由来する抗体または抗体フラグメントのペプチド配列から、５つ以上のアミノ酸置換で異なっていてもよい。Ｘのペプチド配列は、それが基づくか又は由来する抗体または抗体フラグメントのペプチド配列から、６つ以上のアミノ酸置換で異なっていてもよい。Ｘのペプチド配列は、それが基づくか又は由来する抗体または抗体フラグメントのペプチド配列から、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１２、１４、１５、１７、２０、２５以上のアミノ酸置換で異なっていてもよい。
【０１２４】
Ｘのヌクレオチド配列は、それが基づくか又は由来する抗体または抗体フラグメントのヌクレオチド配列から、１つ以上のヌクレオチドおよび／または塩基の置換で異なっていてもよい。Ｘのヌクレオチド配列は、それが基づくか又は由来する抗体または抗体フラグメントのヌクレオチド配列から、２つ以上のヌクレオチドおよび／または塩基の置換で異なっていてもよい。Ｘのヌクレオチド配列は、それが基づくか又は由来する抗体または抗体フラグメントのヌクレオチド配列から、３つ以上のヌクレオチドおよび／または塩基の置換で異なっていてもよい。Ｘのヌクレオチド配列は、それが基づくか又は由来する抗体または抗体フラグメントのヌクレオチド配列から、４つ以上のヌクレオチドおよび／または塩基の置換で異なっていてもよい。Ｘのヌクレオチド配列は、それが基づくか又は由来する抗体または抗体フラグメントのヌクレオチド配列から、５つ以上のヌクレオチドおよび／または塩基の置換で異なっていてもよい。Ｘのヌクレオチド配列は、それが基づくか又は由来する抗体または抗体フラグメントのヌクレオチド配列から、６つ以上のヌクレオチドおよび／または塩基の置換で異なっていてもよい。Ｘのヌクレオチド配列は、それが基づくか又は由来する抗体または抗体フラグメントのヌクレオチド配列から、９つ以上のヌクレオチドおよび／または塩基の置換で異なっていてもよい。Ｘのヌクレオチド配列は、それが基づくか又は由来する抗体または抗体フラグメントのヌクレオチド配列から、１２つ以上のヌクレオチドおよび／または塩基の置換で異なっていてもよい。Ｘのヌクレオチド配列は、それが基づくか又は由来する抗体または抗体フラグメントのヌクレオチド配列から、１５つ以上のヌクレオチドおよび／または塩基の置換で異なっていてもよい。Ｘのヌクレオチド配列は、それが基づくか又は由来する抗体または抗体フラグメントのヌクレオチド配列から、１８つ以上のヌクレオチドおよび／または塩基の置換で異なっていてもよい。Ｘのヌクレオチド配列は、それが基づくか又は由来する抗体または抗体フラグメントのヌクレオチド配列から、２０、２２、２４、２５、２７、３０以上のヌクレオチドおよび／または塩基の置換で異なっていてもよい。
【０１２５】
Ｘは１つ以上の非天然アミノ酸を含み得る。Ｘは２つ以上の非天然アミノ酸を含み得る。Ｘは３つ以上の非天然アミノ酸を含み得る。Ｘは４つ以上の非天然アミノ酸を含み得る。Ｘは５、６、７、８、９、１０またはそれより多いアミノ酸を含み得る。Ｘは１つ以上の抗体又は抗体フラグメントを含み、ここで、１つ以上の抗体または抗体フラグメントは、１以上の非天然アミノ酸を含み得る。Ｘは１つ以上の非天然アミノ酸を含み、ここで、１つのアミノ酸が抗体または抗体フラグメントの重鎖のリシン１３８を置換する。Ｘは、抗体または抗体フラグメントの抗原結合部位から遠位において１以上の非天然アミノ酸を含み得る。Ｘは、抗体または抗体フラグメントの抗原結合部位の近くにおいて１以上の非天然アミノ酸を含み得る。Ｘは、抗体または抗体フラグメントの抗原結合部位中において１以上の非天然アミノ酸を含み得る。
【０１２６】
Ｘは１つの以上のリンカーに結合される。Ｘは１つ以上のリンカーによってＹに連結され得る。Ｘは２つ以上のリンカーによってＹに連結され得る。Ｘは３つ以上のリンカーによってＹに連結され得る。ＩＢ．Ｙの標的化剤
【０１２７】
Ｙは標的化剤を含み得る。Ｙは抗体または抗体フラグメントでなくてもよい。Ｙは、小分子、細胞標的分子、リガンド、タンパク質、ペプチド、ペプトイド、ＤＮＡアプタマー、ペプチド核酸（ＰＮＡ）、ビタミン基質または基質アナログから選択され得る。ペプチドは、環状ペプチドまたは直鎖上のペプチドを含み得る。Ｙはリガンドを含み得る。Ｙは、リガンドの少なくとも一部分を含み得る。リガンドは、化学的なリガンドで有り得る。リガンドは、ホルモンリガンドで有り得る。リガンドは、ペプチドリガンドで有り得る。リガンドは、タンパク質のリガンドで有り得る。化学上Ｙを修正することがある。Ｙを誘導することがある（例えば自然発生のタンパク質あるいはペプチドで）。Ｙは小分子であり得る。Ｙは、組織に浸透するのに十分小さいものであり得る。Ｙは、腫瘍に浸透するのに十分小さいものであり得る。Ｙは、小分子を含み、ゆえにＸに抱合される際、小分子抗体共役（ＳＭＡＣ）を生成する。ＳＭＡＣは、組織に浸透するのに十分小さいものであり得る。ＳＭＡＣは、腫瘍に浸透するのに十分小さいものであり得る。小分子は広範囲な化学修飾を受け入れてもよい。小分子は、タンパク質を含む他の分子で容易に誘導され得る。
【０１２８】
標的化剤は、標的細胞に結合し得る。標的化剤は、細胞上の細胞表面タンパク質または細胞表面マーカに結合し得る。標的化剤は、タンパク質、ペプチド、または生体分子を結合してもよく、ここで、タンパク質、ペプチド、または生体分子は細胞に結合しない。タンパク質、ペプチドまたは生体分子は、血流中を循環し得る。タンパク質、ペプチドまたは生体分子は、細胞外マトリックスの成分で有り得る。タンパク質は酵素であり得る。酵素には酵素活性があるかもしれない。生体分子は、非限定の例によって、繊維、バイオポリマー（例えば、コラーゲン）、グリカン、プロテオグリカン、脂質、ステロール、炭水化物、核酸および細胞のフラグメントから選択され得る。
【０１２９】
標的化剤抗体抱合体の標的化剤は、標的細胞の近傍に細胞傷害性エフェクター細胞を運ぶので、治療効果を有し得る。標的化剤抗体構築物の意図された適応症に対する治療効果は、標的細胞に対して細胞障害性エフェクター細胞を補充する標的化剤抗体抱合体に起因していてもよい。標的化剤抗体構築物の意図された適応症に対する治療効果は、標的細胞に対して細胞障害性エフェクター細胞を補充する標的化剤抗体抱合体に、全面的に起因していてもよい。標的化剤抗体構築物の意図された適応症に対する治療効果は、標的細胞に対して細胞障害性エフェクター細胞を補充する標的化剤抗体抱合体に、主に起因していてもよい。
【０１３０】
意図された適応症の治療効果は、標的細胞に対してタンパク質、ペプチド、または生体分子を補充する標的化剤抗体抱合体に起因していてもよい。意図された適応症の治療効果は、標的細胞に対してタンパク質、ペプチド、または生体分子を補充する標的化剤抗体抱合体に、全面的に起因していてもよい。意図された適応症に対する治療効果は、標的細胞に対してタンパク質、ペプチド、または生体分子を補充する標的化剤抗体抱合体に、少なくとも部分的に起因していてもよい。
【０１３１】
標的化剤単独では治療効果を持たないことがある。標的化剤単独では、標的化剤抗体抱合体の意図される適応症に向けた任意の治療効果を有さないことがある。標的化剤は、抗ＣＤ３抗体または抗体フラグメントに抱合されることなく、標的化剤抗体抱合体の意図された適応症に向けた治療効果を有さないことがある。治療効果を提供するために標的化剤抗体抱合体の一部として投与される場合、治療剤の容量は、治療剤がその用量で単独で投与される際、治療効果を有さないことがある。標的化剤抗体抱合体の標的化剤は、標的細胞に対する細胞傷害性エフェクター細胞の補充の他に、任意の治療効果を有することは意図されないことがある標的化剤抗体抱合体の標的化剤は、標的細胞に対する治療効果を有してもよく、ここで治療効果は、標的細胞に対する細胞障害性エフェクター細胞、タンパク質、ペプチド、又は生体分子の補充の治療効果に対して、些少である。標的化剤抗体抱合体の標的化剤は、標的細胞に対する治療効果を有してもよく、ここで治療効果は、標的細胞に対する細胞障害性エフェクター細胞、タンパク質、ペプチド、又は生体分子の補充の治療効果より小さい。標的細胞に対する標的化剤の結合は、標的細胞からの意図的でない応答を誘導し得る。標的細胞に対する標的化剤の結合は、標的細胞に対する細胞障害性エフェクター細胞、タンパク質、ペプチド、又は生体分子の補充の治療効果に加えて、意図的でない効果を誘導し得る。
【０１３２】
標的化剤は、約０．１ｋＤａと約６０ｋＤａの間の量を有していてもよい。標的化剤は、約０．１ｋＤａと約５５ｋＤａの間の量を有していてもよい。標的化剤は、約０．１ｋＤａと約５０ｋＤａの間の量を有していてもよい。標的化剤は、約０．３ｋＤａと約５０ｋＤａの間の量を有していてもよい。標的化剤は、約０．２ｋＤａ、約０．３ｋＤａ、約０．４ｋＤａ、約０．５ｋＤａ、約０．６ｋＤａ、約０．７ｋＤａ、約０．８ｋＤａ、約、０．９ｋＤａ、または約１ｋＤａの量を有していてもよい。標的化剤は、約２０ｋＤａ、約２５ｋＤａ、約３０ｋＤａ、約３５ｋＤａ、約４０ｋＤａ、約４５ｋＤａ、約５０ｋＤａ、または約５５ｋＤａの量を含みうる。
【０１３３】
小分子の標的化剤は、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）の阻害剤を含み得る。ＰＳＭＡはまた、グルタミン酸カルボキシペプチダーゼＩＩおよびＮ−アセチル−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−グルタメートペプチダーゼＩとしても知られている。ＰＳＭＡ阻害剤は、２−［３−（１，３−ジカルボキシプロピ）ウレイドル）ペンタン二酸（ＤＵＰＡ）又はその誘導体であってもよい。標的化剤抗体抱合体は、抗ＣＤ３Ｆａｂおよび２つのＤＵＰＡを含んでもよく、ここで、２つのＤＵＰＡのうち第１のものは、抗ＣＤ３Ｆａｂに対して第１のリンカーによって連結され、２つのＤＵＰＡのうち第２のものは、抗ＣＤ３Ｆａｂに対して第２のリンカーによって連結される。
【０１３４】
Ｙは、細胞上で受容体の少なくとも一部分に対して結合するリガンドを含み得る。Ｙは、細胞上で共受容体の少なくとも一部分に対して結合するリガンドを含み得る。Ｙは、細胞上で抗原又は細胞表面マーカの少なくとも一部分に対して結合するリガンドを含み得る。細胞は造血細胞であり得る。造血細胞は骨髄性細胞であり得る。骨髄性細胞は、赤血球、血小板、好中球、単球、マクロファージ、好酸球、好塩基球、またはマスト細胞であり得る。造血細胞はリンパ球系細胞であり得る。リンパ系細胞はＢ細胞、Ｔ細胞またはＮＫ細胞であり得る。造血細胞は白血球であり得る。造血細胞はリンパ球であり得る。細胞は、前立腺細胞であってもよい。細胞は、乳房細胞であってもよい。細胞は、肝細胞、腎細胞、肺細胞、心臓細胞、筋細胞、神経細胞（ｎｅｒｖｅ  ｃｅｌｌ）、神経細胞（ｎｅｕｒｏｎ）、脳細胞、上皮細胞、食道細胞であってもよい。  細胞は腫瘍細胞であってもよい。細胞は、非腫瘍細胞であってもよい。細胞は、炎症性細胞であってもよい。炎症性細胞は、マクロファージであってもよい。マクロファージは、炎症誘発性であってもよい。マクロファージは、抗炎症性であってもよい。細胞は、サイトカインを生成し得る。細胞は、ケモカインを生成し得る。
【０１３５】
細胞は癌細胞であり得る。癌細胞は、前立腺、乳房、卵巣、子宮頸部、肺、腎臓、大腸、直腸、脳、甲状腺、膵臓、胃腸管または胃に由来し得る。癌細胞は、上皮組織、間質組織又は子宮内膜組織に由来し得る。
【０１３６】
Ｙは、細胞上で受容体の少なくとも一部分に対して結合するリガンドを含み得る。受容体は、Ｇタンパク質共役受容体（ＧＰＣＲ）、チロシンキナーゼ受容体、サイトカイン受容体またはインテグリンであり得る。受容体は成長因子受容体であり得る。成長因子受容体は、上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）、血小板由来増殖因子受容体（ＰＤＧＦＲ）または線維芽細胞増殖因子受容体（ＦＧＦＲ）であり得る。ＥＧＦＲはＥＧＦＲ１であってもよい。ＥＧＦＲはＨｅｒ２であってもよい。受容体はコレシストキニンＢ受容体であり得る。受容体はゴナドトロピン放出ホルモン受容体であってもよい。受容体はソマトスタチン受容体であり得る。受容体はソマトスタチン受容体２であり得る。受容体はガストリン放出ペプチド受容体であり得る。受容体はニューロキニン受容体であり得る。その、タキキニン１受容体として知られているニューロキニン１受容体であり得る。受容体はメラノコルチン受容体であり得る。受容体はメラノコルチン１受容体であり得る。受容体はニューロテンシン受容体であり得る。受容体はニューロペプチドＹ受容体であり得る。ニューロペプチドＹ受容体（ＮＰＹＲ）はＮＰＹ１Ｒ、ＮＰＹ２Ｒ、ＰＰＹＲ１およびＮＰＹ５Ｒから選択され得る。
【０１３７】
Ｙは、細胞上で抗原又は細胞表面マーカを結合し得る。表面のマーカが含み得る抗原または細胞表面マーカは、分化タンパク質のクラスターを含みうる。分化タンパク質はＣＤ３８を含み得る。
【０１３８】
Ｙは接着分子を結合してもよい。接着分子はＣＬＬ−１であり得る。
【０１３９】
Ｙはインテグリンを結合することがある。インテグリンは、ａｖインテグリンであり得る。インテグリンはａｖＢ３インテグリンであり得る。
【０１４０】
Ｙは、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）を結合し得る。ＹはＤＵＰＡを含み得る。Ｙは、基本的にＤＵＰＡから成っていてもよい。
【０１４１】
Ｙは、Ｇタンパク質共役受容体アゴニストで有り得る。Ｙは、Ｇタンパク質共役受容体アンタゴニストで有り得る。Ｙはコレシストキニン（ＣＣＫ）受容体アゴニストで有り得る。Ｙはコレシストキニン（ＣＣＫ）受容体アンタゴニストで有り得る。ＹはコレシストキニンＡ受容体アゴニストで有り得る。ＹはコレシストキニンＡ受容体アンタゴニストで有り得る。ＹはコレシストキニンＢ受容体アゴニストで有り得る。ＹはコレシストキニンＢ受容体アンタゴニストで有り得る。コレシストキニンＢ受容体アンタゴニストはペンタガストリンで有り得る。
【０１４２】
Ｙはホルモンを含み得る。Ｙはホルモンのリガンドを含み得る。Ｙはホルモン受容体アゴニストを含み得る。Ｙはホルモン受容体アンタゴニストを含み得る。Ｙはゴナドトロピン放出ホルモンを含み得る。Ｙはメラノコルチン受容体リガンドで有り得る。Ｙは、αメラノサイト刺激ホルモン、アファメラノタイド（ａｆａｍｅｌａｎｏｔｉｄｅ）、ＢＭＳ−４７０５３９、ブレメラノチド（ｂｒｅｍｅｌａｎｏｔｉｄｅ）、メラノタンＩＩまたはアグーチシグナル伝達ペプチド（ａｇｏｕｔｉ  ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  ｐｅｐｔｉｄｅ）を含み得る。
【０１４３】
Ｙはニューロペプチドを含み得る。Ｙはタキキニンを含み得る。Ｙはニューロキニン受容体リガンドを含み得る。Ｙは、サブスタンスＰを含み得る。Ｙはニューロキニンを含み得る。ニューロキニンはニューロキニンＡであり得る。ニューロペプチドは、ニューロペプチドＹを含み得る。Ｙは、ニューロペプチドＹ受容体アゴニストまたはニューロペプチドＹ受容体アンタゴニストを含み得る。ニューロペプチドＹ受容体アゴニストは、ペプチドＹＹ及び膵臓ポリペプチドから選択され得る。ニューロペプチドＹ受容体アンタゴニストは、ＢＩＢＰ−３２２６、Ｌｕ  ＡＡ−３３８１０、ＢＩＩＥ−０２４６およびＵＲ−ＡＫ４９から選択され得る。ニューロペプチドは、ニューロテンシン受容体リガンドを含むことができる。ニューロテンシン受容体リガンドは、ニューロテンシン受容体アゴニストであり得る。ニューロテンシン受容体アゴニストは、ベータｌａｃｔｏｔｅｎｓｉｎ、ニューロテンシン、ニューロメジンＮ、ＪＭＶ−４４９、ＰＤ−１４９、１６３、および、ＳＲ−４８６９２から誘導される非ペプチドの部分アゴニストから選択され得る。  ニューロテンシン受容体リガンドはニューロテンシン受容体アンタゴニストを含みうる。ニューロテンシン受容体アンタゴニストは、レボカバスチン（ＮＴＳ２選択、またＨ１ヒスタミンアンタゴニスト）、ＳＲ−４８６９２（ＮＴＳ１選択）、またはＳＲ−１４２９４８から選択され得る。
【０１４４】
Ｙは、ペプチドホルモンを含むことができる。ペプチドホルモンは、ソマトスタチンであってもよいし、または成長ホルモンはホルモンの阻害またはソマトトロピン放出抑制ホルモンソマトトロピン因子を阻害する、または放出する。Ｙは、ソマトスタチン類似体を含むことができる。Ｙはオクトレオチドを含んでもよい。Ｙはオクトレオタートを含み得る。オクトレオタートは、６８Ｇａ  ＰＥＴイメージングおよび１７７Ｌｕ放射線治療のために標識化されたＤＯＴＡのために標識化され得る。
【０１４５】
Ｙは、ペプチドホルモンを含み得る。Ｙは、小さなペプチドを含み得る。Ｙは、小さなペプチドリガンドを含み得る。Ｙは、環状ペプチドを含み得る。Ｙは、アルギニン−グリシン−アスパラ銀酸（ＲＧＤ）配列を含み得る。Ｙは、インテグリンのためのＲＧＤ含有リガンドを含み得る。Ｙは、ｃＲＧＤを含み得る。Ｙは、シレンジチドを含み得る。小さなペプチドは、ガストリン放出ペプチド受容体のリガンドを含み得る。小さなペプチドはＢＢＲ１、ＢＢＲ２およびＢＢＲ３から選択されるボンベシン受容体のためのリガンドを含み得る。ガストリン放出ペプチド受容体のリガンドは、ボンベシン、ニューロメジンＢ、ガストリン放出ペプチドを含み得る。ガストリン放出ペプチド受容体のリガンドは、ボンベシンを含み得る。
【０１４６】
標的化剤抗体抱合体は、放射性標識された同位体を含み得る：標的化剤抗体抱合体は、放射性標識された同位体のためのキレート剤を含みうる。標的化剤は、放射性標識された同位体を含みうる。標的化剤は、放射性標識された同位体のためのキレート剤を含みうる。Ｙは、放射性標識された同位体のためのキレート剤を含みうる。Ｙは（１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸）ＤＯＴＡを含み得る。放射性標識された同位体は、イットリウムを含み得る。放射性標識された同位体は、９０Ｙを含み得る。ＤＯＴＡはＤＯＴＡＴＯＣを含み得る。ＤＯＴＡはＤＯＴＡ−ＴＡＴＥを含み得る。
【０１４７】
Ｙは、配列番号３−４０から選択される配列の少なくとも一部分を含み得る。Ｙは、配列番号３−４０から選択される配列と少なくとも５０％同一である配列を含み得る。Ｙは、配列番号３−４０から選択される配列と少なくとも６０％同一である配列を含み得る。Ｙは、配列番号３−４０から選択される配列と少なくとも７０％同一である配列を含み得る。Ｙは、配列番号３−４０から選択される配列と少なくとも８０％同一である配列を含み得る。Ｙは、配列番号３−４０から選択される配列と少なくとも５０％同一である配列を含み得る。Ｙは、配列番号３−４０から選択される配列と少なくとも８５％同一である配列を含み得る。Ｙは、配列番号３−４０から選択される配列と少なくとも９０％同一である配列を含み得る。Ｙは、配列番号３−４０から選択される配列と少なくとも９５％同一である配列を含み得る。Ｙは、配列番号３−４０から選択される配列と少なくとも９７％同一である配列を含み得る。
【０１４８】
Ｙは、配列番号３−４０から選択される配列に基づくか又は由来する、５またはそれより多いアミノ酸を含有する配列を含み得る。Ｙは、配列番号３−４０から選択される配列に基づくか又は由来する、６、７、８、９、１０またはそれより多いアミノ酸を含有する配列を含み得る。Ｙは、配列番号３−４０から選択される配列に基づくか又は由来する、１５、１６、１７、１８、１９、２０  またはそれより多いアミノ酸を含有する配列を含み得る。Ｙは、配列番号３−４０から選択される配列に基づくか又は由来する２５、３０、３５、４０、４５、５０またはそれより多いアミノ酸を含有する配列を含み得る。Ｙは、配列番号３−４０から選択される配列に基づくか又は由来する５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００  またはそれより多いアミノ酸を含有する配列を含み得る。アミノ酸は連続していてもよい。アミノ酸は不連続であってもよい。
【０１４９】
Ｙは、１つ以上の標的化剤に基づくか又は由来するペプチド配列から、約２０、１７、１５、１２、１０、８、６、５、４以下のアミノ酸だけ異なるペプチド配列を含み得る。Ｙは、１つ以上の標的化剤に基づくか又は由来するペプチド配列から、約４以下のアミノ酸だけ異なるペプチド配列を含み得る。Ｙは、１つ以上の標的化剤に基づくか又は由来するペプチド配列から、約３以下のアミノ酸だけ異なるペプチド配列を含み得る。Ｙは、１つ以上の標的化剤に基づくか又は由来するペプチド配列から、約２以下のアミノ酸だけ異なるペプチド配列を含み得る。Ｙは、１つ以上の標的化剤に基づくか又は由来するペプチド配列から、約１以下のアミノ酸だけ異なるペプチド配列を含み得る。アミノ酸は、連続、不連続、又はまたはその組み合わせであってもよい。例えば、Ｙは、１つ以上の標的化剤に基づくか又は由来するペプチド配列から、約３未満の連続したアミノ酸だけ異なるペプチド配列を含み得る。代替的に、または付加的に、Ｙは、１つ以上の標的化剤に基づくか又は由来するペプチド配列から、約２未満の連続したアミノ酸だけ異なるペプチド配列を含み得る。べつの例において、Ｙは、１つ以上の標的化剤に基づくか又は由来するペプチド配列から、約５未満の連続したアミノ酸だけ異なるペプチド配列を含んでもよく、ここで、２アミノ酸は連続しており、および２アミノ酸は不連続である。
【０１５０】
Ｙは、１つ以上の標的化剤に基づくか又は由来するヌクレオチド配列から、約３０、２５、２０、１９、１８、１７、１６、１５、１４、１３、１２、１１、１０、９、８、７、６、５、４以下のヌクレオチド又は塩基対だけ異なるヌクレオチド配列を含み得る。Ｙは、１つ以上の標的化剤に基づくか又は由来するヌクレオチド配列から、約１５以下のヌクレオチド又は塩基対だけ異なるヌクレオチド配列を含み得る。Ｙは、１つ以上の標的化剤に基づくか又は由来するヌクレオチド配列から、約１２以下のヌクレオチド又は塩基対だけ異なるヌクレオチド配列を含み得る。Ｙは、１つ以上の標的化剤に基づくか又は由来するヌクレオチド配列から、約９以下のヌクレオチド又は塩基対だけ異なるヌクレオチド配列を含み得る。Ｙは、１つ以上の標的化剤に基づくか又は由来するヌクレオチド配列から、約６以下のヌクレオチド又は塩基対だけ異なるヌクレオチド配列を含み得る。Ｙは、１つ以上の標的化剤に基づくか又は由来するヌクレオチド配列から、約４以下のヌクレオチド又は塩基対だけ異なるヌクレオチド配列を含み得る。Ｙは、１つ以上の標的化剤に基づくか又は由来するヌクレオチド配列から、約３以下のヌクレオチド又は塩基対だけ異なるヌクレオチド配列を含み得る。Ｙは、１つ以上の標的化剤に基づくか又は由来するヌクレオチド配列から、約２以下のヌクレオチド又は塩基対だけ異なるヌクレオチド配列を含み得る。Ｙは、１つ以上の標的化剤に基づくか又は由来するヌクレオチド配列から、約１以下のヌクレオチド又は塩基対だけ異なるヌクレオチド配列を含み得る。ヌクレオチド又は塩基対は、連続、不連続、又はまたはその組み合わせであってもよい。例えば、Ｙは、１つ以上の標的化剤に基づくか又は由来するヌクレオチド配列から、約３未満の連続するヌクレオチド又は塩基対だけ異なるヌクレオチド配列を含み得る。代替的に、又は付加的に、Ｙは、１つ以上の標的化剤に基づくか又は由来するヌクレオチド配列から、約２未満の不連続のヌクレオチド又は塩基対だけ異なるヌクレオチド配列を含み得る。別の例において、Ｙは、１つ以上の標的化剤に基づくか又は由来するヌクレオチド配列から、約５未満の連続したアミノ酸だけ異なるヌクレオチド配列に基づくタンパク質又はペプチドを含んでもよく、ここで、２つのクレオチド又は塩基は連続しており、および２つのクレオチド又は塩基は不連続である。
【０１５１】
Ｙのペプチド配列は、それが基づくか又は由来する標的化剤のペプチド配列から、１つ以上のアミノ酸置換で異なっていてもよい。Ｙのペプチド配列は、それが基づくか又は由来する標的化剤のペプチド配列から、２つ以上のアミノ酸置換で異なっていてもよい。Ｙのペプチド配列は、それが基づくか又は由来する標的化剤のペプチド配列から、３つ以上のアミノ酸置換で異なっていてもよい。Ｙのペプチド配列は、それが基づくか又は由来する標的化剤のペプチド配列から、４つ以上のアミノ酸置換で異なっていてもよい。Ｙのペプチド配列は、それが基づくか又は由来する標的化剤のペプチド配列から、５つ以上のアミノ酸置換で異なっていてもよい。Ｙのペプチド配列は、それが基づくか又は由来する標的化剤のペプチド配列から、６つ以上のアミノ酸置換で異なっていてもよい。Ｙのペプチド配列は、それが基づくか又は由来する標的化剤のペプチド配列から、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１２、１４、１５、１７、２０、２５以上のアミノ酸置換で異なっていてもよい。
【０１５２】
Ｙのヌクレオチド配列は、それが基づくか又は由来する標的化剤のヌクレオチド配列から、１つ以上のヌクレオチドおよび／または塩基対の置換で異なっていてもよい。Ｙのヌクレオチド配列は、それが基づくか又は由来する標的化剤のヌクレオチド配列から、２つ以上のヌクレオチドおよび／または塩基対の置換で異なっていてもよい。Ｙのヌクレオチド配列は、それが基づくか又は由来する標的化剤のヌクレオチド配列から、３つ以上のヌクレオチドおよび／または塩基対の置換で異なっていてもよい。Ｙのヌクレオチド配列は、それが基づくか又は由来する標的化剤のヌクレオチド配列から、４つ以上のヌクレオチドおよび／または塩基対の置換で異なっていてもよい。Ｙのヌクレオチド配列は、それが基づくか又は由来する標的化剤のヌクレオチド配列から、５つ以上のヌクレオチドおよび／または塩基対の置換で異なっていてもよい。Ｙのヌクレオチド配列は、それが基づくか又は由来する標的化剤のヌクレオチド配列から、６つ以上のヌクレオチドおよび／または塩基対の置換で異なっていてもよい。Ｙのヌクレオチド配列は、それが基づくか又は由来する標的化剤のヌクレオチド配列から、９つ以上のヌクレオチドおよび／または塩基対の置換で異なっていてもよい。Ｙのヌクレオチド配列は、それが基づくか又は由来する標的化剤のヌクレオチド配列から、１２つ以上のヌクレオチドおよび／または塩基対の置換で異なっていてもよい。Ｙのヌクレオチド配列は、それが基づくか又は由来する標的化剤のヌクレオチド配列から、１５つ以上のヌクレオチドおよび／または塩基対の置換で異なっていてもよい。Ｙのヌクレオチド配列は、それが基づくか又は由来する標的化剤のヌクレオチド配列から、１８つ以上のヌクレオチドおよび／または塩基対の置換で異なっていてもよい。Ｙのヌクレオチド配列は、それが基づくか又は由来する標的化剤のヌクレオチド配列から、２０、２２、２４、２５、２７、３０以上のヌクレオチドおよび／または塩基対の置換で異なっていてもよい。
【０１５３】
Ｙは１つ以上の非天然アミノ酸を含み得る。Ｙは２つ以上のアミノ酸を含み得る。Ｙは３つ以上のアミノ酸を含み得る。Ｙは４つ以上のアミノ酸を含み得る。Ｙは５、６、７、８、９、１０以上のアミノ酸を含み得る。
【０１５４】
Ｙは１つの以上のリンカーに結合される。Ｙは１つ以上のリンカーによってＸに連結され得る。Ｙは２つ以上のリンカーによってＸに連結され得る。Ｙは３つ以上のリンカーによってＸに連結され得る。
【０１５５】
ＸとＹの間の距離は、約１オングストローム（Ａ）乃至約１２０オングストローム（Ａ）であり得る。ＸとＹの間の距離は、約５オングストローム（Ａ）乃至約１０５オングストローム（Ａ）であり得る。ＸとＹの間の距離は、約１０オングストローム（Ａ）乃至約１００オングストローム（Ａ）であり得る。ＸとＹの間の距離は、約１０オングストローム（Ａ）乃至約９０オングストローム（Ａ）であり得る。ＸとＹの間の距離は、約１０オングストローム（Ａ）乃至約８０オングストローム（Ａ）であり得る。ＸとＹの間の距離は、約１０オングストローム（Ａ）乃至約７０オングストローム（Ａ）であり得る。ＸとＹの間の距離は、約１５オングストローム（Ａ）乃至約４５オングストローム（Ａ）であり得る。ＸとＹの間の距離は、約４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２５、２７、３０オングストローム以上であり得る。ＸとＹの間の距離は、約１０オングストローム以上であり得る。ＸとＹの間の距離は、約１５オングストローム以上であり得る。ＸとＹの間の距離は、約２０オングストローム以上であり得る。ＸとＹの間の距離は、約１１０、１００、９０、８５、８０、７５、７０、６５、６０、５５、５０、４５、４３、４２、４１、４０、３９、３８、３７、３６、３５、３４、３３、３２、３１、３０オングストローム以下であり得る。ＸとＹの間の距離は、約１００オングストローム以下であり得る。ＸとＹの間の距離は、約８０オングストローム以下であり得る。ＸとＹの間の距離は、約６０オングストローム以下であり得る。ＸとＹの間の距離は、約４０オングストローム以下であり得る。
【０１５６】
＜ＩＩ．リンカー＞
本明細書で開示される標的化剤抗体抱合体は、１つ以上のリンカー（例えば、Ｌ１、Ｌ２）を含み得る。本明細書で開示される標的化剤抗体抱合体は、２つ以上のリンカーを含み得る。本明細書で開示される標的化剤抗体抱合体は、３つ以上のリンカーを含み得る。本明細書で開示される標的化剤抗体抱合体は、４、５、６、７つ以上のリンカーを含み得る。
【０１５７】
リンカーは化学結合を含み得る。リンカーは官能基を含み得る。リンカーはアミノ酸を含み得る。リンカーはペプチドを含み得る。リンカーはポリマーを含み得る。ポリマーはポリエチレングリコールを含み得る。
【０１５８】
一つ以上のリンカーは、結合パートナー上の相補的反応性官能基と反応し得る１つ以上の反応性官能基を含み得る。リンカーは、二官能性であり得る。二官能性リンカーは、ヘテロ二官能性であり得る。リンカーは、エチレングリコールを含み得る。リンカーは、二官能エチレングリコールリンカーであり得る。
【０１５９】
１つ以上のリンカーは、既にＹに付けられたリンカーとＸ上のアミノ酸との反応によって形成され得る。１つ以上のリンカーは、既にＸに付けられたリンカーと、Ｙ上のアミノ酸又は他の反応性官能基との反応によって形成され得る。１つ以上のリンカーは、既にＸに付けられたリンカーと既にＹに付けられた別のリンカーとの反応によって形成され得る。すでにＸまたはＹに付けられたリンカーを形成するために、２つの直交性の反応性官能基を有する二官能性リンカーは、残りの１つの反応性官能基がその後の結合のために利用可能であるように、ＸまたはＹに結合され得る。
【０１６０】
リンカーはＫｉｍ ｅｔ ａｌ．， Ｃｕｒｒ Ｏｐｉｎ Ｃｈｅｍ Ｂｉｏ １７：４１２−４１９ （２０１３）に概説されている非限定的な例のような、生体の直交性の反応（ｂｉｏｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｒｅａｃｔｉｏｎ）の生成物であってもよい。リンカーは、オキシム、テトラゾール、ディールス・アルダー付加物、ヘテロ・ディールス・アルダー付加物、芳香族置換反応生成物、求核置換反応生成物、エステル、アミド、カルバメート、エーテル、チオエーテル、またはマイケル反応の生成物を含み得る。リンカーは、付加環化生成物、メタセシス反応生成物、金属媒介クロスカップリング反応の生成物、ラジカル重合生成物、酸化カップリング生成物、アシル転移反応生成物、またはフォトクリック反応（ｐｈｏｔｏ  ｃｌｉｃｋ  ｒｅａｃｔｉｏｎ）生成物であり得る。環化付加は、  ヒュスゲン環化付加反応であってもよい。環化付加は、銅を含まない［３＋２］ヒュスゲン環化付加反応であってもよい。環化付加は、ディールス・アルダー反応であってもよい。環は、ヘテロディールス・アルダー反応であってもよい。リンカーは酵素を媒介とした反応の生成物であってもよい。リンカーは、Ｌｉｎ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ａｍ．Ｃｈｅｍ． Ｓｏｃ． １２８：４５４２−４５４３ （２００６）および国際公開第２０１３／０９３８０９号に概説されている非限定的な例のような、トランスグルタミナーゼにより媒介される反応の生成物であってもよい。リンカーは、ＰｏｌｙＴｈｅｒｉｃｓによるＴｈｉｏＢｒｉｄｇｅ（商標）技術などの、２つのシステイン残基を接続するジスルフィド架橋を含み得る。リンカーは、２つのアミノ酸残基を接続するマレイミド架橋を含み得る。リンカーは、２つのシステイン残基を連結するマレイミド架橋を含み得る。
【０１６１】
一つ以上のリンカーの各々は、１つ以上のエチレングリコールを含み得る。１つ以上のリンカーの各々は、アルコキシ‐アミン、ヒドラジン、アリール／アルキルアジド、アルキン、アルケン、テトラジン、ジクロロトリアジン、トレシレート、スクシンイミジルカルボナート、ベンゾトリアゾールカルボナート、ニトロフェニルカルボナート、トリクロロフェニルカルボナート、カルボニルイミダゾール、スクシンイミジルスクシネート、マレイミド、ビニルスルホン、ハロアセトアミド、およびジスルフィドから選択される少なくとも１つの反応性官能基を含み得る。アルケンは、ノルボルネン、トランス−シクロオクテン、およびシクロプロペンから選択され得る。１つ以上のリンカーの各々は少なくとも１つのアルコキシアミンを含み得る。１つ以上のリンカーの各々は少なくとも１つのアジドを含み得る。１つ以上のリンカーの各々は少なくとも１つのシクロオクチンを含み得る。１つ以上のリンカーの各々は少なくとも１つのテトラジンを含み得る。
【０１６２】
リンカーはＸ又はＹ上で１つ以上の天然アミノ酸と結合し得る。リンカーはＸ又はＹ上で１つ以上の非天然アミノ酸と結合し得る。リンカーは、部位特異的変異の生成物であるアミノ酸と結合し得る。リンカーは、部位特異的変異の生成物であるシステインと結合し得る。リンカー（例えば、置換マレイミド）は、部位特異的変異の生成物であるシステインと、天然のシステイン残基と同様に結合し得る。それぞれ相補的な反応性官能基を伴う２つのリンカーは、互いに結合する。
【０１６３】
１つ以上のリンカーは、切断可能なリンカーを含み得る。１つ以上のリンカーは、切断不可能なリンカーを含み得る。１つ以上のリンカーは、可動性のリンカーを含み得る。１つ以上のリンカーは、可動性のないリンカーを含み得る。エチレングリコールリンカーは、約１、約２、約３、約４、約５、約６、約７、約８、約９、約１０、約１１、約１２、約１３、約１４、約１５、約１６、約１７、約１８、約１９、又は約２０のエチレングリコールサブユニットを含み得る。１つ以上のリンカーは１，４−ジカルキシルの部分（１，４−ｄｉｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ  ｍｏｉｅｔｙ）を含み得る。１つ以上のリンカーは１，３−ジニトロ置換フェニルの部分（１，３−ｄｉｎｉｔｒｏ  ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄ  ｐｈｅｎｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ）を含み得る。１つ以上のリンカーは含み得る。
【０１６４】
１つ以上のリンカーは、１つ以上の末端にて、アルコキシアミン（又はアミノオキシ）基、アジド基及び／又はシクロオクチン基を含み得る。１つ以上のリンカーは、１つの末端にてアルコキシ‐アミンを含み、他方の末端にてアジド基を含んでもよい。１つ以上のリンカーは、１つの末端にてアルコキシ‐アミンを含み、他方の末端にてシクロオクタン（ｃｙｃｌｏｏｃｔｙｎｅ）基を含んでもよい。アルコキシ‐アミンは、アミノ酸上でケトン基を有する安定したオキシムを形成し得る。アルコキシ‐アミンは、非天然のアミノ酸上でケトン基を有する安定したオキシムを形成し得る。ケトン基はｐ−アセチルフェニルアラニン（ｐＡｃＦ）上にあってもよい。
【０１６５】
１つ以上のリンカーはＸ、Ｙまたはその組み合わせに結合され得る。１つ以上のリンカーは、式ＩＩＩ：Ｌ１−Ｘ、式ＩＩＩＡ：Ｘ−Ｌ１、式ＩＶ：Ｌ１−Ｙ、または式ＩＶＡ：Ｙ−Ｌ１の１つ以上の中間体を形成するように、Ｘおよび／またはＹに結合され得る。１つ以上のリンカーはオキシムによってＸ及び／又はＹに結合され得る。１つ以上のリンカーは、シクロオクチン、シクロプロペン、アリール／アルキルアジド、トランス−シクロオクテン、ノルボルネン、テトラジン、またはそれらの組合せによって、Ｘおよび／またはＹに結合され得る。１つ以上のリンカーは、共有結合、非共有結合、イオン結合、またはそれらの組合せによってＸおよび／またはＹに結合され得る。
【０１６６】
２つ以上のリンカーは連結され得る。２つ以上のリンカーは、１つ以上の銅を含まない反応（ｃｏｐｐｅｒ−ｆｒｅｅ  ｒｅａｃｔｉｏｎｓ）を介して連結され得る。２つ以上のリンカーは、１つ以上の環化付加を介して連結され得る。２つ以上のリンカーは、１つ以上の  ヒュスゲン環化付加反応を介して連結され得る。２つ以上のリンカーは、１つ以上の銅を含まない［３＋２］ヒュスゲン環化付加反応を介して連結され得る。２つ以上のリンカーは、１つ以上の銅を含む反応を介して連結され得る。２つ以上のリンカーは、１つ以上のディールス・アルダー反応を介して連結され得る。２つ以上のリンカーは、１つ以上のヘテロ・ディールス・アルダー反応を介して連結され得る。
【０１６７】
標的化剤抗体抱合体は、リンカーの長さを調整することによって最適化され得る。リンカーは比較的短くてもよい。リンカーは比較的長くてもよい。１つ以上のリンカーは、約１オングストローム（Ａ）乃至約１２０オングストローム（Ａ）の長さであり得る。１つ以上のリンカーは、約５オングストローム（Ａ）乃至約１０５オングストローム（Ａ）の長さであり得る。１つ以上のリンカーは、約１０オングストローム（Ａ）乃至約１００オングストローム（Ａ）の長さであり得る。１つ以上のリンカーは、約１０オングストローム（Ａ）乃至約９０オングストローム（Ａ）の長さであり得る。１つ以上のリンカーは、約１０オングストローム（Ａ）乃至約８０オングストローム（Ａ）の長さであり得る。１つ以上のリンカーは、約１０オングストローム（Ａ）乃至約７０オングストローム（Ａ）の長さであり得る。１つ以上のリンカーは、約１５オングストローム（Ａ）乃至約４５オングストローム（Ａ）の長さであり得る。１つ以上のリンカーは、約４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２５、２７、３０オングストローム以上の長さであり得る。１つ以上のリンカーは、約１０オングストローム以上の長さであり得る。１つ以上のリンカーは、約１５オングストローム以上の長さであり得る。１つ以上のリンカーは、約２０オングストローム以上の長さであり得る。１つ以上のリンカーは、約１１０、１００、９０、８５、８０、７５、７０、６５、６０、５５、５０、４５、４３、４２、４１、４０、３９、３８、３７、３６、３５、３４、３３、３２、３１、３０オングストローム以下の長さであり得る。１つ以上のリンカーは、約１００オングストローム以下の長さであり得る。１つ以上のリンカーは、約８０オングストローム以下の長さであり得る。１つ以上のリンカーは、約６０オングストローム以下の長さであり得る。１つ以上のリンカーは、約４０オングストローム以下の長さであり得る。
【０１６８】
リンカーの全長は、約１オングストローム（Ａ）乃至約１２０オングストローム（Ａ）であり得る。リンカーの全長は、約５オングストローム（Ａ）乃至約１０５オングストローム（Ａ）であり得る。リンカーの全長は、約１０オングストローム（Ａ）乃至約１００オングストローム（Ａ）であり得る。リンカーの全長は、約１０オングストローム（Ａ）乃至約９０オングストローム（Ａ）であり得る。リンカーの全長は、約１０オングストローム（Ａ）乃至約８０オングストローム（Ａ）であり得る。リンカーの全長は、約１０オングストローム（Ａ）乃至約７０オングストローム（Ａ）であり得る。リンカーの全長は、約１５オングストローム（Ａ）乃至約４５オングストローム（Ａ）であり得る。リンカーの全長は、約４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２５、２７、３０オングストローム以上であり得る。リンカーの全長は、約１０オングストローム以上であり得る。リンカーの全長は、約１５オングストローム以上であり得る。リンカーの全長は、約２０オングストローム以上であり得る。リンカーの全長は、約１１０、１００、９０、８５、８０、７５、７０、６５、６０、５５、５０、４５、４３、４２、４１、４０、３９、３８、３７、３６、３５、３４、３３、３２、３１、３０オングストローム以下であり得る。リンカーの全長は、約１００オングストローム以上であり得る。リンカーの全長は、約８０オングストローム以上であり得る。リンカーの全長は、約６０オングストローム以上であり得る。リンカーの全長は、約４０オングストローム以上であり得る。前立腺特異的膜抗原結合小分子抗体抱合体（ＰＳＭＡＣ）
【０１６９】
標的化剤抗体抱合体は、抗ＣＤ３Ｆａｂ；１つ以上のＤＵＰＡ分子；および１つ以上のリンカーを含み、ここで抗体または抗体フラグメントは１つ以上のリンカーによって１つ以上の標的化剤に対して連結される。抗ＣＤ３Ｆａｂは１つ以上の非天然アミノ酸を含み得る。第１の非天然アミノ酸および第２の非天然アミノ酸は、抗ＣＤ３Ｆａｂの天然アミノ酸を置換し得る。第１のＤＵＰＡ分子および第２のＤＵＰＡ分子は、抗ＣＤ３Ｆａｂの第１の非天然アミノ酸および第２の非天然アミノ酸に対して部位特異的に連結され得る。天然アミノ酸は、Ｘおよび／またはＹのアラニン（Ａｌａ）、リジン（Ｌｙｓ）、セリン（Ｓｅｒ）及び／又はスレオニン（Ｔｈｒ）の残基から選択され得る。置換される非天然アミノ酸は、抗ＣＤ３Ｆａｂの重鎖のリジン１３８（Ｌｙｓ１３８）、抗ＣＤ３Ｆａｂの重鎖のアラニン１２３（Ａｌａ１２３）、抗ＣＤ３Ｆａｂの重鎖のスレオニン１０９（Ｔｈｒ１０９）、及び抗ＣＤ３Ｆａｂの重鎖のセリン２０２（Ｓｅｒ２０２）から選択され得る。標的化剤抗体抱合体は式Ｉ：Ｘ−Ｌ１−Ｙ又は式ＩＡ：Ｙ−Ｌ１−Ｘであってもよく：式中：Ｘは抗ＣＤ３Ｆａｂを含み；Ｌ１は１つ以上のリンカーを含み；およびＹは１つ以上のＤＵＰＡ分子を含む。標的化剤抗体抱合体は、式Ｖ、式ＶＩ、式ＶＩＩまたは式ＶＩＩＩの化合物から選択される化合物を含み得る。
【０１７０】
【化２９】
0006501270.tif 000030
【０１７１】
標的化剤抗体抱合体は、式ＩＸの化合物を含み得る：
【０１７２】
【化３０】
0006501270.tif 000031
【０１７３】
標的化剤抗体抱合体は、式Ｘの化合物を含み得る：
【０１７４】
【化３１】
0006501270.tif 000032
【０１７５】
標的化剤抗体抱合体は、式ＸＩの化合物を含み得る：
【０１７６】
【化３２】
0006501270.tif 000033
【０１７７】
別の態様において、本明細書には、式ＸＩＩの化合物又はその立体異性体が提供され：
【０１７８】
【化３３】
0006501270.tif 000034
式中：Ｙは前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）のリガンドであり；
Ｌは
【０１７９】
【化３４】
0006501270.tif 000035
であり；
Ａ１は、アリール、５乃至６員環ヘテロアリール、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｎ（Ｒ１）−、−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１）−、−Ｎ（Ｒ１）Ｃ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）１，２Ｎ（Ｒ１）−、および−Ｎ（Ｒ１）Ｓ（Ｏ）１，２−からなる群から選択され；
Ｌ１は
【０１８０】
【化３５】
0006501270.tif 000036
であり；
Ａ２は、単結合、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｎ（Ｒ１）−、−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１）−、−Ｎ（Ｒ１）Ｃ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）１，２Ｎ（Ｒ１）−、および−Ｎ（Ｒ１）Ｓ（Ｏ）１，２−からなる群から選択され；
Ｌ２は
【０１８１】
【化３６】
0006501270.tif 000037
であり；
Ａ３は単結合、
【０１８２】
【化３７】
0006501270.tif 000038
であり；
Ｌ３は
【０１８３】
【化３８】
0006501270.tif 000039
であり；
Ｘ２は、アミノ酸と反応する官能基に結合されたリンカー、または修飾されたアミノ酸に結合されたリンカーであり、ここで、修飾されたアミノ酸はＸの一部であり、ここでＸは治療用ペプチド、タンパク質、または抗体であり；
各々のＲ１は、Ｈ、アルキル、又はハロアルキルから独立して、選択され；
各々のＲ２、Ｒ２１、Ｒ２２、及びＲ２３は、独立して、Ｈ、ハロ、−ＯＲ１、−ＣＮ、−ＳＲ１、アルキル、シクロアルキル、ハロアルキル、アリールアルキル、またはヘテロアリールアルキルから選択され；
各々のＲ３は、ハロ、−ＯＲ１、−ＣＮ、−ＳＲ１、アルキル、シクロアルキル、ハロアルキル、アリールアルキル、またはヘテロアリールアルキル、−ＮＯ２、およびＮＲ１Ｒ１から独立して選択され；
各々のＧ１およびＧ２は、単結合、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｎ（Ｒ１）−、−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１）−、−Ｎ（Ｒ１）Ｃ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）１，２Ｎ（Ｒ１）−、および−Ｎ（Ｒ１）Ｓ（Ｏ）１，２−から成る群から独立して選択され；
各々のＺ、Ｚ１、Ｚ２、およびＺ３は、単結合、−Ｏ−、および−Ｎ（Ｒ１）−、からなる群から独立して選択され；
ｋ、ｋ１、ｋ２、及びｋ３は、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、及び１０からそれぞれ独立して選択され；
ｍ１、ｍ２およびｍ３は、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、及び１０からそれぞれ独立して選択され；
ｐは０、１、２、３、又は４である。
【０１８４】
式ＸＩＩの化合物の上記又は下記に記載される幾つかの実施形態において、化合物は以下の式ＸＩＩａであって、
【０１８５】
【化３９】
0006501270.tif 000040
式中：Ｑは
【０１８６】
【化４０】
0006501270.tif 000041
から成る群から選択され：およびＥは
【０１８７】
【化４１】
0006501270.tif 000042
から成る群から選択される。
【０１８８】
式ＸＩＩの化合物の上記又は下記に記載される幾つかの実施形態において、化合物は以下の式ＸＩＩｂである。
【０１８９】
【化４２】
0006501270.tif 000043
式ＸＩＩの化合物の上記又は下記に記載されるさらなる実施形態において、化合物は以下の式ＸＩＩｃである。
【０１９０】
【化４３】
0006501270.tif 000044
【０１９１】
式ＸＩＩの化合物の上記又は下記に記載される幾つかの実施形態において、化合物は以下の式ＸＩＩｄである。
【０１９２】
【化４４】
0006501270.tif 000045
式ＸＩＩの化合物の上記又は下記に記載される更なる実施形態において、化合物は以下の式ＸＩＩｅである。
【０１９３】
【化４５】
0006501270.tif 000046
式ＸＩＩの化合物の上記又は下記に記載される、なお更なる実施形態において、化合物は以下の式ＸＩＩｆであって、
【０１９４】
【化４６】
0006501270.tif 000047
【０１９５】
式ＸＩＩの化合物の上記又は下記に記載される幾つかの実施形態において、Ａ１は−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｈ）−である。式ＸＩＩの化合物の上記又は下記に記載されるいくつかの実施形態において、Ａ１は
【０１９６】
【化４７】
0006501270.tif 000048
である。
【０１９７】
式ＸＩＩの化合物の上記又は下記に記載されるいくつかの実施形態において、Ａ３は
【０１９８】
【化４８】
0006501270.tif 000049
である。式ＸＩＩの化合物の上記又は下記に記載される更なる実施形態において、Ａ３は
【０１９９】
【化４９】
0006501270.tif 000050
である。
【０２００】
式ＸＩＩの化合物の上記又は下記に記載される幾つかの実施形態において、各々のＲ２、Ｒ２１、Ｒ２２、Ｒ２３およびＲ２４は、Ｈ、Ｆ、ＣＨ３またはＣＦ３から独立して選択される。式ＸＩＩの化合物の上記又は下記に記載される幾つかの実施形態において、各々のＲ２、Ｒ２１、Ｒ２２、Ｒ２３およびＲ２４は、Ｈである。
【０２０１】
式ＸＩＩの化合物の上記又は下記に記載される幾つかの実施形態において、
Ｘ２は
【０２０２】
【化５０】
0006501270.tif 000051
であり；式中：
Ａ４は、単結合、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｎ（Ｒ１）−、−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１）−、−Ｎ（Ｒ１）Ｃ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）１，２Ｎ（Ｒ１）−、および−Ｎ（Ｒ１）Ｓ（Ｏ）１，２−からなる群から選択され；
各々のＲ２４は、Ｈ、ハロ、−ＯＲ１、−ＣＮ、−ＳＲ１、アルキル、シクロアルキル、ハロアルキル、アリールアルキル、またはヘテロアリールアルキルから独立して選択され；
ｋ４は、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、及び１０から選択され；
Ｚ４は、単結合、アリールおよび５乃至６員環ヘテロアリールから選択され；および、
Ｘ１は、
【０２０３】
【化５１】
0006501270.tif 000052
である。
【０２０４】
式ＸＩＩの化合物の上記又は下記に記載される幾つかの実施形態において、Ｘ２は
【０２０５】
【化５２】
0006501270.tif 000053
である。式ＸＩＩの化合物の上記又は下記に記載される更なる実施形態において、Ｘ２は
【０２０６】
【化５３】
0006501270.tif 000054
である。
【０２０７】
式ＸＩＩの化合物の上記又は下記に記載される幾つかの実施形態において、化合物は、
【０２０８】
【化５４】
0006501270.tif 000055
又はそれらの立体異性体から選択される。
【０２０９】
式ＸＩＩの化合物の上記又は下記に記載される幾つかの実施形態において、Ｘ２は
【０２１０】
【化５５】
0006501270.tif 000056
であり；式中：
Ａ４は、単結合、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｎ（Ｒ１）−、−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１）−、−Ｎ（Ｒ１）Ｃ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）１，２Ｎ（Ｒ１）−、および−Ｎ（Ｒ１）Ｓ（Ｏ）１，２−  からなる群から選択され；
各々のＲ２４は、Ｈ、ハロ、−ＯＲ１、−ＣＮ、−ＳＲ１、アルキル、シクロアルキル、ハロアルキル、アリールアルキル、またはヘテロアリールアルキルから独立して選択され；
ｋ４は、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、及び１０から選択され；
Ｚ４は、単結合、アリールおよび５乃至６員環ヘテロアリールから選択され；また、
Ｘ３は
【０２１１】
【化５６】
0006501270.tif 000057
であり；
Ｘは修飾された治療用のペプチド、タンパク質または抗体であり；Ｌ４は、修飾されたアミノ酸に直接付けられた単結合、または修飾されたアミノ酸に結合されたリンカーであり、ここで、修飾されたアミノ酸はＸの一部である。式ＸＩＩの化合物の上記又は下記に記載されるいくつかの実施形態において、アミノ酸は非天然アミノ酸である。
【０２１２】
式ＸＩＩの化合物の上記又は下記に記載される幾つかの実施形態において、ｋは１、２、または３であり；及び、ｚは単結合である。
【０２１３】
式ＸＩＩの化合物の上記又は下記に記載される幾つかの実施形態において、Ａ１は−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１）−，６員環アリール、または５員環ヘテロアリールである。
【０２１４】
式ＸＩＩの化合物の上記又は下記に記載される幾つかの実施形態において、ｍ１は０であり；ｋ１は６又は７であり；また、Ｚ１は単結合である。
【０２１５】
式ＸＩＩの化合物の上記又は下記に記載される幾つかの実施形態において、Ａ２は単結合であり；ｍ２およびｋ２は０である；およびＺ２は単結合である。
【０２１６】
式ＸＩＩの化合物の上記又は下記に記載される幾つかの実施形態において、Ａ２は−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｈ）−である。ｍ２は２であり；ｋ２は２であり；およびＺ２は単結合である。式ＸＩＩの化合物の上記又は下記に記載される幾つかの実施形態において、Ａ２は−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｈ）−であり；ｍ２は３であり；ｋ２は２であり；およびＺ２は単結合である。式ＸＩＩの化合物の上記又は下記に記載される幾つかの実施形態において、Ａ２は−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｈ）−であり；ｍ２は１０であり；ｋ２は２であり；およびＺ２は単結合である。
【０２１７】
式ＸＩＩの化合物の上記又は下記に記載される幾つかの実施形態において、Ｒ３は−ＮＯ２であり；及び、ｐは２である。
【０２１８】
式ＸＩＩの化合物の上記又は下記に記載される幾つかの実施形態において、各々のＧＸ１およびＧＸ２は−Ｎ（Ｈ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｈ）−および−Ｎ（Ｈ）Ｃ（Ｏ）−から成る群から独立して選択される。
【０２１９】
式ＸＩＩの化合物の上記又は下記に記載される幾つかの実施形態において、ｍ３は３であり；ｋ３は２であり；また、Ｚ３は単結合である。式ＸＩＩの化合物の上記又は下記に記載されるいくつかの実施形態において、ｍ３は２であり；ｋ３は２であり；また、Ｚ３は単結合である。
【０２２０】
式ＸＩＩの化合物の上記又は下記に記載される幾つかの実施形態において、Ａ３は単結合であり；ｍ３およびｋ３は０であり；また、Ｚ３は単結合である。
【０２２１】
＜ＩＩＩ．非天然アミノ酸＞
本明細書中に記載される標的化剤抗体抱合体は、１つ以上の非天然アミノ酸を含み得る。本明細書で使用されるように、「非天然アミノ酸（ｕｎｎａｔｕｒａｌ  ａｍｉｎｏ  ａｃｉｄ）」、「非天然アミノ酸（ｎｏｎ−ｎａｔｕｒａｌ  ａｍｉｎｏ  ａｃｉｄ）」という用語は、自然に生じるか、化学的に合成される非タンパク新生の（ｎｏｎ−ｐｒｏｔｅｉｎｏｇｅｎｉｃ）アミノ酸を指す。本明細書に開示される標的化剤抗体抱合体はＸを含み得るが、ここで、Ｘは１つ以上の非天然アミノ酸を含む。本明細書に開示される標的化剤抗体抱合体はＹを含み得るが、ここで、Ｙは１つ以上の非天然アミノ酸を含む。本明細書に開示される抗体は２、３、４、５、６、７、８、９、１０またはそれより多い非天然アミノ酸を含み得る。非天然アミノ酸は、化学結合を生成するためにリンカーと反応し得る。
【０２２２】
１種以上の非天然アミノ酸は、抗体（例えば、式Ｉ、ＩＡ、ＩＩおよびＩＩＡの抗体）；中間体（例えば、式ＩＩＩ、ＩＩＩＡ、ＩＶ、ＩＶＡの中間体）；Ｘの抗体または抗体フラグメント；Ｙ（例えば、ペプチド）；又はそれらの組み合わせに組み込まれ得る。１以上の非天然アミノ酸は、抗体（例えば、式Ｉ、ＩＡ、ＩＩおよびＩＩＡの抗体）；中間体（例えば、式ＩＩＩ、ＩＩＩＡ、ＩＶ、ＩＶＡの中間体）；Ｘの抗体または抗体フラグメント；Ｙのペプチド；又はそれらの組み合わせを、部位特異的に含み得る。
【０２２３】
１以上の非天然アミノ酸は、抗体（例えば、式Ｉ、ＩＡ、ＩＩおよびＩＩＡの抗体）のフラグメント；中間体（例えば、式ＩＩＩ、ＩＩＩＡ、ＩＶ、ＩＶＡの中間体）；Ｘの抗体または抗体フラグメント；Ｙのペプチド；又はそれらの組み合わせを含み得る。
【０２２４】
１以上の非天然アミノ酸は、抗体（例えば、式Ｉ、ＩＡ、ＩＩおよびＩＩＡの抗体）の重鎖、軽鎖、可変領域、定常部、Ｆａｂフラグメント；中間体（例えば、式ＩＩＩ、ＩＩＩＡ、ＩＶ、ＩＶＡの中間体）；Ｘの抗体または抗体フラグメント；Ｙのペプチド；又はそれらの組み合わせを含み得る。
【０２２５】
１つ以上の非天然アミノ酸は、抗体または抗体フラグメント中の２つの自然発生のアミノ酸の間に挿入され得る。１つ以上の非天然アミノ酸は、抗体または抗体フラグメント中の１つ以上の自然発生のアミノ酸を置換する。１つ以上の非天然アミノ酸は、抗体または抗体フラグメントのＮ末端に取り込まれ得る。１つ以上の非天然アミノ酸は、抗体または抗体フラグメントのＣ末端に取り込まれ得る。非天然アミノ酸は、抗体または抗体フラグメントの結合ドメインの遠位に取り込まれ得る。非天然アミノ酸は、抗体または抗体フラグメントの結合ドメインの近位に取り込まれ得る。非天然アミノ酸は、抗体または抗体フラグメントの結合ドメイン中に取り込まれ得る。
【０２２６】
１つ以上の非天然アミノ酸は、標的化剤中の２つの自然発生のアミノ酸の間に挿入され得る。１つ以上の非天然アミノ酸は、標的化剤中の１つ以上の自然発生のアミノ酸を置換する。１つ以上の非天然アミノ酸は、標的化剤のＮ末端に取り込まれ得る。１つ以上の非天然アミノ酸は、標的化剤のＣ末端に取り込まれ得る。非天然アミノ酸は、標的化剤の結合ドメインの遠位に取り込まれ得る。非天然アミノ酸は、標的化剤の結合ドメインの近位に取り込まれ得る。非天然アミノ酸は、標的化剤の結合ドメイン中に取り込まれ得る。
【０２２７】
１種以上の非天然アミノ酸は、２０種の天然アミノ酸のうち１つをコードしないコドンによってコード化され得る。１以上の非天然アミノ酸はナンセンスコドン（終止コドン）によってコード化され得る。終止コドンは、アンバーコドンであり得る。アンバーコドンはＵＡＧ配列を含みうる。終止コドンがオーカーコドンであり得る。オーカーコドンはＵＡＡの配列を含みうる。終止コドンはアンバーコドン又はオパールであり得る。オパールまたはアンバーコドンはＵＧＡ配列を含みうる。１種以上の非天然アミノ酸は、４塩基コドンによってコード化され得る。
【０２２８】
１つ以上の非天然アミノ酸は、ｐ−アセチルフェニルアラニン（ＰＡＣＦまたはｐＡｃＰｈｅ）であってもよい。１つ以上の非天然アミノ酸は、セレノシステインであってもよい。１つ以上の非天然アミノ酸は、ｐ−フルオロフェニルアラニン（ｐＦＰｈｅ）であってもよい。１つ以上の非天然アミノ酸は、ｐ−アジドフェニルアラニン（ｐＡｚＦ）、ｐ−ベンゾイルフェニルアラニン（ｐＢｐＦ）、ｐ‐プロパルギルオキシフェニルアラニン（ｐ−ｐｒｏｐａｒｇｙｌｏｘｙｐｈｅｎｙｌａｌａｎｉｎｅ）（ｐＰｒＦ）、ｐ‐ヨードフェニルアラニン（ＰＩＦ）、ｐ−シアノフェニルアラニン（ｐＣＮＦ）、ｐ−カルボキシメチルフェニルアラニン（ｐＣｍＦ）、３−（２−ナフチル）アラニン（ＮａｐＡ）、ｐ−ボロノフェニルアラニン（ｐＢｏＦ）、ｏ−ニトロフェニルアラニン（ｏＮｉＦ）、（８−ヒドロキシキノリン−３−イル）アラニン（ＨＱＡ）、セレノシステイン、および（２，２’−ビピリジン−５−イル）アラニン（ＢｉｐｙＡ）を含む群から選択され得る。
【０２２９】
１つ以上の非天然アミノ酸は、βアミノ酸（β３およびβ２）、ホモ−アミノ酸、プロリンおよびピルビン酸の誘導体、３−置換アラニン誘導体、グリシン誘導体、環置換フェニルアラニンおよびチロシン誘導体、線形コアアミノ酸、ジアミノ酸、Ｄ−アミノ酸、Ｎメチルアミノ酸、またはそれらの組み合わせであり得る。
【０２３０】
非天然アミノ酸の付加的な例は、限定されないが、１）Ｏ−メチル−Ｌ−チロシン、ｐ−アミノ−Ｌ−フェニルアラニン、３−ニトロ−Ｌ−チロシン、Ｐニトロ−Ｌ−フェニルアラニン、ｍ−メトキシ−Ｌ−フェニルアラニン、及びｐ−イソプロピル−Ｌ−フェニルアラニンなどの、様々な置換されたチロシンおよびフェニルアラニンのアナログ；２）光架橋され得るアリールアジド及びベンゾフェノン基を有するアミノ酸、３）アセチル−Ｌ−フェニルアラニン及びｍ−アセチル−Ｌ−フェニルアラニン、Ｏ−アリル−Ｌ−チロシン、Ｏ−（２−プロピニル）−Ｌ−チロシン、Ｐ−エチルチオカルボニル−Ｌ−フェニルアラニン、およびＰ−（３−オキソブタノイル）−Ｌ−フェニルアラニンを含む、固有の化学反応性を有するアミノ酸、４）ｐ−ヨードおよびｐ−ブロモ−Ｌ−フェニルアラニンを含む、Ｘ線結晶解析においてフェージングのための重原子を含むアミノ酸；５）酸化還元活性のあるアミノ酸であるジヒドロキシ−Ｌ−フェニルアラニン；６）ｂ−Ｎ−アセチルグルコサミン−Ｏ−セリンおよびａ−Ｎ−アセチルガラクトサミン−Ｏ−スレオニンを含む、グリコシル化アミノ酸；７）ナフチル、ダンシル、及び７−アミノクマリン側鎖を有する蛍光性アミノ酸；８）アゾベンゼンおよびニトロベンジルシステイン、セリン、およびチロシンの側鎖を備える光分解性で光異性化可能なアミノ酸；９）ホスホチロシン・ミメティックであるＰ−カルボキシメチル−Ｌ−フェニルアラニン；１０）グルタミンホモログホモグルタミン；および１１）２−アミノオクタン酸。非天然アミノ酸は、化学基を組み込むために修飾され得る。非天然アミノ酸は、ケトン基を組み込むために修飾され得る。
【０２３１】
１つの以上の非天然アミノ酸は、少なくとも１つのオキシム、カルボニル、ジカルボニル、ヒドロキシルアミンの基、またはその組み合わせを含み得る。１つ以上の非天然アミノ酸は、少なくとも１個のカルボニル、ジカルボニル、アルコキシ‐アミン、ヒドラジン、非環式アルケン、非環式アルキン、シクロオクチン、アリール／アルキルアジド、ノルボルネン、シクロプロペン、トランス−シクロオクテン、又はテトラジン官能基またはそれらの組み合わせを含み得る。
【０２３２】
１つ以上の非天然アミノ酸は、当該技術分野で既知の方法によって、Ｘおよび／またはＹへと組み込まれ得る。細胞系または無細胞系は、Ｘおよび／またはＹの遺伝子配列を改変するために使用されてもよく、それによって１種以上の非天然アミノ酸を備えるＸおよび／またはＹを生成する。栄養要求性株は、操作されたｔＲＮＡおよびシンテターゼの代わりに使用することができる。一つ以上の非天然アミノ酸は、一つ以上の天然アミノ酸を選択的に反応させて生成することができる。選択的反応は、１つ以上の酵素によって媒介され得る。１つの非限定的な例において、ホルミルグリシン生成酵素（ＦＧＥ）による１つ以上のシステインの選択的反応は、Ｒａｂｕｋａ ｅｔ ａｌ．， Ｎａｔｕｒｅ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ７：１０５２−１０６７ （２０１２）に記載されるように、１つ以上のホルミルグリシンを生成する。
【０２３３】
１つ以上の非天然アミノ酸は、リンカーを形成するための化学反応に関与し得る。  リンカーを形成するための化学反応は、生体の直交性の反応であってもよい。  リンカーを形成するための化学反応は、クリックケミストリー（ｃｌｉｃｋ  ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）であってもよい。
【０２３４】
付加的な非天然アミノ酸は、Ｌｉｕら（Ａｎｎｕ  Ｒｅｖ  Ｂｉｏｃｈｅｍ、  ７９：４１３−４４、  ２０１０）、Ｗａｎｇら  （Ａｎｇｅｗ  Ｃｈｅｍ  Ｉｎｔ  Ｅｄ、  ４４：３４−６６、  ２００５）  およびＰＣＴ出願番号ＰＣＴ／ＵＳ２０１２／０３９４７２、  ＰＣＴ／ＵＳ２０１２／０３９４６８、ＰＣＴ／ＵＳ２００７／０８８００９、  ＰＣＴ／ＵＳ２００９／０５８６６８、ＰＣＴ／ＵＳ２００７／０８９１４２、ＰＣＴ／ＵＳ２００７／０８８０１１、ＰＣＴ／ＵＳ２００７／００１４８５、ＰＣＴ／ＵＳ２００６／０４９３９７、ＰＣＴ／ＵＳ２００６／０４７８２２およびＰＣＴ／ＵＳ２００６／０４４６８２に記載されており、これらのすべてはその全体が引用によって組み入れられる。
【０２３５】
＜ＩＶ．標的化剤抗体抱合体組成物＞
本明細書には、本明細書中に開示される１つ以上の標的化剤抗体抱合体を含む組成物が開示される。組成物は標的化剤抗体抱合体を含んでいてもよく、該標的化剤抗体抱合体は、（ａ）１以上の非天然アミノ酸を含む抗体または抗体フラグメント；（ｂ）１種以上のリンカー；及び（ｃ）標的化剤を含み、ここで一つ以上のリンカーは標的化剤に対して抗体または抗体フラグメントを連結する。１つ以上のリンカーは標的化剤に対して抗体又は抗体フラグメントを部位特異的に連結する。抗体又は抗体フラグメントは１つ以上の非天然アミノ酸を含み得る。標的化剤抗は、１以上の非天然アミノ酸を含み得る。組成物は薬学的に１つ以上の薬学的に許容可能な賦形剤をさらに含み得る。組成物は１以上の溶媒及び希釈剤をさらに含み得る。組成物は１以上の薬学的な担体をさらに含み得る。
【０２３６】
組成物は、式Ｉ：Ｘ−Ｌ１−Ｙの標的化剤抗体抱合体を含んでいてもよく、式中、（ｉ）Ｘは抗体又は抗体フラグメントを含み；（ｉｉ）Ｌ１は１つ以上のリンカーを含み；および（ｉｉｉ）Ｙは標的化剤を含む。抗体または抗体フラグメントおよび標的化剤は、１以上のリンカーによって部位特異的に連結され得る。抗体又は抗体フラグメントおよび／または標的化剤は、１以上の非天然アミノ酸を含み得る。抗体または抗体フラグメントおよび標的化剤は、１以上の非天然アミノ酸の部位にて、連結され得る。組成物は薬学的に１つ以上の薬学的に許容可能な賦形剤をさらに含み得る。組成物は１以上の溶媒及び希釈剤をさらに含み得る。組成物は１以上の薬学的な担体をさらに含み得る。
【０２３７】
組成物は、式Ｉ：Ｙ−Ｌ１−Ｘの標的化剤抗体抱合体を含んでいてもよく、式中、（ｉ）Ｘは抗体又は抗体フラグメントを含み；（ｉｉ）Ｌ１は１つ以上のリンカーを含み；および（ｉｉｉ）Ｙは標的化剤を含む。抗体または抗体フラグメントおよび標的化剤は、１以上のリンカーによって部位特異的に連結され得る。抗体又は抗体フラグメントおよび／または標的化剤は、１以上の非天然アミノ酸を含み得る。抗体または抗体フラグメントおよび標的化剤は、１以上の非天然アミノ酸の部位にて、連結され得る。組成物は薬学的に１つ以上の薬学的に許容可能な賦形剤をさらに含み得る。組成物は１以上の溶媒及び希釈剤をさらに含み得る。組成物は１以上の薬学的な担体をさらに含み得る。
【０２３８】
組成物は、式ＩＩ：Ｘ−Ｌ１−Ｌ２−Ｙの標的化剤抗体抱合体を含んでいてもよく、式中、（ｉ）Ｘは抗体又は抗体フラグメントを含み；（ｂ）Ｌ１およびＬ２は１つの以上のリンカーを含み；および（ｉｉｉ）Ｙは標的化剤を含む。抗体または抗体フラグメントおよび標的化剤は、１以上のリンカーによって部位特異的に連結され得る。抗体又は抗体フラグメントおよび／または標的化剤は、１以上の非天然アミノ酸を含み得る。抗体または抗体フラグメントおよび標的化剤は、１以上の非天然アミノ酸の部位にて、連結され得る。組成物は薬学的に１つ以上の薬学的に許容可能な賦形剤をさらに含み得る。組成物は１以上の溶媒及び希釈剤をさらに含み得る。組成物は１以上の薬学的な担体をさらに含み得る。
【０２３９】
組成物は、式ＩＩＡ：Ｙ−Ｌ２−Ｌ１−Ｘの標的化剤抗体抱合体を含んでいてもよく、式中、（ｉ）Ｘは抗体又は抗体フラグメントを含み；（ｉｉ）Ｌ１およびＬ２は１つ以上のリンカーを含み；および（ｉｉｉ）Ｙは標的化剤を含む。抗体または抗体フラグメントおよび標的化剤は、１以上のリンカーによって部位特異的に連結され得る。抗体又は抗体フラグメントおよび／または標的化剤は、１以上の非天然アミノ酸を含み得る。抗体または抗体フラグメントおよび標的化剤は、１以上の非天然アミノ酸の部位にて、連結され得る。組成物は薬学的に１つ以上の薬学的に許容可能な賦形剤をさらに含み得る。組成物は１以上の溶媒及び希釈剤をさらに含み得る。組成物は１以上の薬学的な担体をさらに含み得る。
【０２４０】
本明細書で使用されるように、用語「薬学的に許容可能な」は、本明細書に記載される薬剤の生物学的な活性又は特性を抑止せず、且つ、比較的無毒である（即ち、物質の毒性が、物質の効果を著しく上回る）物質を指す。幾つかの例において、薬学的に許容可能な物質は、あまり望ましくない生物学的作用を引き起こさずに、又はその中に含まれる組成物の構成成分の何れかと有害な方法で相互作用せずに、個体に投与され得る。
【０２４１】
本明細書の医薬組成物は、活性薬剤を医薬的に使用される製剤（ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓ）へと処理するのを促進する賦形剤及び助剤を含む、１以上の生理学的に許容可能な担体を使用して、調剤され得る。適切な製剤は、選択される投与経路に依存する。本明細書に記載されている医薬組成物の要約は、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎの、文献「Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ， Ｎｉｎｅｔｅｅｎｔｈ Ｅｄ （Ｅａｓｔｏｎ， Ｐａ．： Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ， １９９５）」、文献「Ｈｏｏｖｅｒ， Ｊｏｈｎ Ｅ．， Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ， Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．， Ｅａｓｔｏｎ， Ｐｅｎｎｓｙｌｖａｎｉａ １９７５」、文献「Ｌｉｂｅｒｍａｎ， Ｈ．Ａ． ａｎｄ Ｌａｃｈｍａｎ， Ｌ．， Ｅｄｓ．， Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｄｏｓａｇｅ Ｆｏｒｍｓ， Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｃｋｅｒ， Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ， Ｎ．Ｙ．， １９８０」、及び文献「Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｄｏｓａｇｅ Ｆｏｒｍｓ ａｎｄ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍｓ， Ｓｅｖｅｎｔｈ Ｅｄ． （Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｋｉｎｓ， １９９９）」に見られる。
【０２４２】
特定の実施形態において、本明細書に開示される医薬組成物葉、薬学的に許容可能な希釈剤（複数可）、賦形剤（複数可）、又は担体（複数可）を更に含む。いくつかの実施形態において、医薬組成物は、他の医療薬剤または医薬品、担体、アジュバント、例えば、防腐剤、安定化剤、湿潤剤または乳化剤、溶解促進剤、浸透圧を調節するための塩、および／または緩衝液を含む。加えて、医薬組成物は、他の治療上価値のある物も含む。
【０２４３】
本明細書に開示される医薬組成物は、限定されないが、非経口（静脈内、皮下、腹腔内、筋肉内、血管内、脊髄腔内、硝子体内、点滴、又は局所）の、局所の、経口の、または経鼻の投与を含む任意の適切な投与経路によって、被験体に投与され得る。適切な投与経路はマイクロニードルデバイスを含み得る。
【０２４４】
筋肉内、皮下、腫瘍周囲、又は静脈内の注入に適切な製剤は、生理学的に許容可能な無菌の水性又は非水性の溶液、分散液、懸濁液又は乳剤、及び無菌の注入可能な溶液又は分散液への再構成のための無菌の粉末剤を含む。適切な水性及び非水性の担体、希釈剤、溶媒、又はビヒクルの例は、水、エタノール、ポリオール、（プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、グリセロール、ｃｒｅｍｏｐｈｏｒなど）、それらの適切な混合物、植物油（オリーブ油など）、及びオレイン酸エチルなどの有機エステルを含む。適切な流動性は、例えば、レシチンなどのコーティングの使用、分散の場合に必要とされた粒径の維持、及び界面活性剤の使用によって、維持される。皮下注射に適した製剤は、保存料、湿潤剤、乳化剤、及び分配剤（ｄｉｓｐｅｎｓｉｎｇ  ａｇｅｎｔ）などの随意の添加剤も含む。
【０２４５】
静脈内注射のために、活性剤は、水溶液中で、好ましくは、ハンクス溶液、リンゲル溶液、または生理食塩水溶液などの生理学的に適合性の緩衝液中で、随意に処方され得る。
【０２４６】
非経口注入は、ボーラス注入又は連続注入を随意に含む。注入用製剤は、ユニット投薬形態（例えば、アンプル）において、又は追加の保存料を伴う複数回用量容器において随意に提供される。本明細書に記載される医薬組成物は、油性又は水性のビヒクル内で無菌の懸濁液、溶液、又はエマルジョンなど、非経口注入に適した形態であり、懸濁剤、安定化剤、及び／又は分散剤などの調合剤（ｆｏｒｍｕｌａｔｏｒｙ  ａｇｅｎｔｓ）を含み得る。非経口投与のための医薬製剤は、水溶性形態の活性薬剤の水溶液を含む。加えて、懸濁液は、適切な油の注入懸濁液として随意に調製される。
【０２４７】
本明細書に記載される医薬組成物は、正確な用量の単回投与に適した単位剤形（ｕｎｉｔ  ｄｏｓａｇｅ  ｆｏｒｍ）であってもよい。単位剤形において、製剤は、本明細書に開示される活性薬剤の適量を含む単位用量に分割される。ユニット投与は、製剤の離散量を含むパッケージの形態にある。制限のない例は、包装された錠剤又はカプセル剤、及びバイアル又はアンプルの中にある粉末剤である。水性懸濁液組成物は、単回用量の再密閉できない容器に包装され得る。あるいは、複数回用量用の再密閉できる容器が使用され、この場合は、組成物中に保存剤を含むことが一般的である。ほんの一例ではあるが、非経口注入用の製剤は、添加保存料を備えた、単位剤形（アンプルを含むが、これに限定されない）、又は複数回用量容器に入れて提供される。
【０２４８】
医薬組成物は、約０．１ｍｇ／ｋｇ、０．２ｍｇ／ｋｇ、０．３ｍｇ／ｋｇ、０．４ｍｇ／ｋｇ、０．５ｍｇｋｇ、０．６ｍｇ／ｋｇ、０．７ｍｇ／ｋｇ、０．８ｍｇ／ｋｇ、０．９ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、１．１ｍｇ／ｋｇ、１．２ｍｇ／ｋｇ、１．３ｍｇ／ｋｇ、１．４ｍｇ／ｋｇ、約１．５ｍｇ／ｋｇ、１．６ｍｇ／ｋｇ、１．７ｍｇ／ｋｇ、１．８ｍｇ／ｋｇ、１．９ｍｇ／ｋｇ、２．０ｍｇ／ｋｇ、２．１ｍｇ／ｋｇ、２．２ｍｇ／ｋｇ、２．３ｍｇ／ｋｇ、２．４ｍｇ／ｋｇ、２．５ｍｇ／ｋｇ、２．６ｍｇ／ｋｇ、２．７ｍｇ／ｋｇ、２．８ｍｇ／ｋｇ、２．９ｍｇ／ｋｇ、または約３．０ｍｇ／ｋｇの用量で投与され得る。医薬組成物は、約３．５ｍｇ／ｋｇ、４．０ｍｇ／ｋｇ、４．５ｍｇ／ｋｇ、５．０ｍｇ／ｋｇ、６．０ｍｇ／ｋｇ、７．０ｍｇ／ｋｇ、８．０ｍｇ／ｋｇ、９．０ｍｇ／ｋｇ、又は約１０ｍｇ／ｋｇの用量で投与され得る。
【０２４９】
医薬組成物は、一日一回、一日二回、一日三回、又はそれより多く投与することができる。医薬組成物は、一週間に一回、一週間に二回、一週間に三回、又はそれより多く投与することができる。医薬組成物は、隔週で投与され得る。医薬組成物は、毎月投与され得る。医薬組成物は、必要に応じて投与され得る。
【０２５０】
医薬組成物は、治療的処置と共に共投与することができる。治療的処置は、抗炎症処置を含み得る。抗炎症処置は、ステロイドを含み得る。抗炎症処置は、非ステロイドを含み得る。治療的処置は、抗生物質を含み得る。治療的処置は、抗ウイルス薬を含み得る。治療的処置は、化学療法を含み得る。治療的処置は、放射線照射を含み得る。治療的処置は、二重特異性抗体を含み得る。治療的処置は、付加的な標的化剤抗体抱合体を含み得る。Ｖ．標的化剤抗体抱合体の製造方法本明細書には、式Ｉ：Ｘ−Ｌ１−Ｙ又は式ＩＡ：Ｙ−Ｌ１−Ｘの標的化剤抗体抱合体を製造する方法が開示される。方法は、Ｙに１以上のリンカーを結合する工程であって、Ｙは中間体Ｙ−Ｌ１又はＬ１−Ｙを製造するために標的化剤を包含する、工程；および、中間体をＸに抱合する工程であって、Ｘは抗体または抗体フラグメントの少なくとも一部分を包含し、それによって標的化剤抗体抱合体を産生する、工程、を含む。方法は、Ｘおよび／またはＹに対して中間体を部位特異的に抱合する工程をさらに含み得る。方法は、Ｘおよび／またはＹへと１以上の非天然アミノ酸を取り込む工程をさらに含みうる。代替的に、方法は、中間体Ｘ−Ｌ１またはＬ１Ｘを産生するために抗体または抗体フラグメントに対して１つ以上のリンカーを結合する工程、および、Ｙに対して中間体を抱合する工程であって、Ｙは標的化剤を包含し、それによって標的化剤抗体抱合体を産生する、工程、を含む。標的化剤に対する中間体Ｘ−Ｌ１またはＬ１Ｘの抱合は、オキシムを形成する工程を含んでもよい。オキシムの形成は、酸性条件を必要としてもよい。方法は、Ｘおよび／またはＹに対して中間体を部位特異的に抱合する工程をさらに含み得る。方法は、Ｘおよび／またはＹへと１以上の非天然アミノ酸を取り込む工程をさらに含みうる。
【０２５１】
本明細書には、式ＩＩ：Ｘ−Ｌ１−Ｌ２−Ｙの標的化剤抗体抱合体を製造する方法が開示されており、該方法は、（ａ）Ｘおよび／またはＹへと１以上の非天然アミノ酸を取り込む工程であって、（ｉ）Ｘは抗体または抗体フラグメントの少なくとも一部分を包含し；および（ｉｉ）Ｙはペプチドまたはタンパク質の少なくとも一部分を包含する、工程；（ｂ）式ＩＩＩ：Ｘ−Ｌ１の第１の中間体を産生するためにＸにＬＬ１Ｘを結合する工程、および式ＩＶ：Ｌ２−Ｙの第２の中間体を産生するためにＹにＬ２を結合する工程；および（ｃ）式ＩＶの第２の中間体に対して式ＩＩＩの第１の中間体を結合する工程であって、それにより式ＩＩの標的化剤抗体抱合体を産生する工程、を含む。
【０２５２】
標的化剤抗体抱合体の産生方法は、抗体または抗体フラグメントをコード化する核酸を操作する工程をさらに含み得る。方法は、核酸へとナンセンスコドンを組み込む工程を、さらに含み得る。ナンセンスコドンは、アンバーコドンであってもよい。方法は、核酸へと非天然アミノ酸を部位特異的に組み込む工程をさらに含み得る。方法はさらに、ナンセンスコドンにて核酸へと非天然アミノ酸を組み込む工程を、さらに含み得る。方法はさらに、細胞内で核酸を発現する工程を含み得る。方法はさらに、共発現備えることができる直交性のｔＲＮＡ／チロシル‐ｔＲＮＡシンテターゼの対を共発現する工程を、さらに含みうる。直交性のｔＲＮＡ／チロシル‐ｔＲＮＡシンテターゼの対は、ナンセンスコドンに応答して、非天然アミノ酸を選択的に組み込むことができる。ＶＡ．非天然アミノ酸の組込み
【０２５３】
抗体または抗体フラグメントへの１以上の非天然アミノ酸の組み込みは、抗体または抗体フラグメント中の１以上のアミノ酸残基の改変を含み得る。抗体または抗体フラグメント中の１以上のアミノ酸残基の変更は、標的化剤をコード化するヌクレオチド配列中の１以上のヌクレオチドの変異導入を含み得る。標的化剤をコード化するヌクレオチド配列中の１以上のヌクレオチドの変異導入は、アミノ酸をコードするコドンのナンセンスコドンへの変更を含みうる。
【０２５４】
抗体または抗体フラグメントへの１以上の非天然アミノ酸の組み込みは、抗体または抗体フラグメント中に１つ以上のアンバーコドンを産生するために、抗体または抗体フラグメント中の１以上のアミノ酸残基の改変を含み得る。。
【０２５５】
一つ以上の非天然アミノ酸は、アンバーコドンに応答して、抗体または抗体フラグメントに組み込まれ得る。１つ以上の非天然アミノ酸は、抗体または抗体フラグメントへと部位特異的に組み込まれ得る。
【０２５６】
抗体または抗体フラグメントへの１以上の非天然アミノ酸の組み込みは、標的化剤を部位特異的に変更するために、古典的な２０アミノ酸に対して直交性の化学反応性を有する、１以上の遺伝的にコード化された非天然アミノ酸の使用を含み得る。１以上の非天然アミノ酸の組み込みは、１以上のアンバーナンセンスコドンに応答して、標的化剤中の定められた部位で１以上の非天然アミノ酸を部位特異的に組み込むための、発展したｔＲＮＡ／アミノアシルｔＲＮＡシンテターゼ対の使用を含む。
【０２５７】
標的化剤への１以上の非天然アミノ酸の組み込みは、標的化剤中の１以上のアミノ酸残基の改変を含み得る。標的化剤中の１以上のアミノ酸残基の変更は、標的化剤をコード化するヌクレオチド配列中の１以上のヌクレオチドの変異導入を含み得る。標的化剤をコード化するヌクレオチド配列中の１以上のヌクレオチドの変異導入は、アミノ酸をコードするコドンのナンセンスコドンへの変更を含みうる。
【０２５８】
標的化剤への１以上の非天然アミノ酸の組み込みは、標的化剤中に１つ以上のアンバーコドンを産生するための、標的化剤中の１以上のアミノ酸残基の改変を含み得る。
【０２５９】
一つ以上の非天然アミノ酸は、アンバーコドンに応答して、標的化剤中に組み込まれ得る。１つ以上の非天然アミノ酸は、標的化剤へと部位特異的に組み込まれ得る。
【０２６０】
標的化剤への１以上の非天然アミノ酸の組み込みは、標的化剤を部位特異的に変更するために、古典的な２０アミノ酸に対して直交性の化学反応性を有する、１以上の遺伝的にコード化された非天然アミノ酸の使用を含み得る。１以上の非天然アミノ酸の組み込みは、１以上のアンバーナンセンスコドンに応答して、標的化剤中の定められた部位で１以上の非天然アミノ酸を部位特異的に組み込むための、発展したｔＲＮＡ／アミノアシルｔＲＮＡシンテターゼ対の使用を含む。
【０２６１】
非天然アミノ酸を組み込むための付加的な方法は、限定されないが、Ｃｈａｔｔｅｒｊｅｅ ｅｔ ａｌ． （Ａ Ｖｅｒｓａｔｉｌｅ Ｐｌａｔｆｏｒｍ ｆｏｒ Ｓｉｎｇｌｅ− ａｎｄ Ｍｕｌｔｉｐｌｅ−Ｕｎｎａｔｕｒａｌ Ａｍｉｎｏ Ａｃｉｄ Ｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓ ｉｎ Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ， Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ， ２０１３）， Ｋａｚａｎｅ ｅｔ ａｌ． （Ｊ Ａｍ Ｃｈｅｍ Ｓｏｃ， １３５（１）：３４０−６， ２０１３）， Ｋｉｍ ｅｔ ａｌ． （Ｊ Ａｍ Ｃｈｅｍ Ｓｏｃ， １３４（２４）：９９１８−２１， ２０１２）， Ｊｏｈｎｓｏｎ ｅｔ ａｌ． （Ｎａｔ Ｃｈｅｍ Ｂｉｏｌ，７（１１）：７７９−８６， ２０１１） および Ｈｕｔｃｈｉｎｓ ｅｔ ａｌ． （Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ， ４０６（４）：５９５−６０３， ２０１１）． に開示される方法を含む。
ＶＢ．  リンカーの結合
【０２６２】
本明細書に開示される方法は、１つ以上の抗体、抗体フラグメント、標的化剤、またはこれらの組み合わせに対し１以上のリンカーを結合して、抗体−リンカーの中間体、抗体フラグメント−リンカーの中間体、および／または標的化剤抗体抱合体−リンカーの中間体などの１つ以上の中間体を産生する工程を含み得る。方法は、抗体または抗体フラグメント対し第１のリンカーを結合して、抗体−リンカーの中間体または抗体フラグメント−リンカーの中間体を産生する工程を含み得る。方法は、標的化剤に対しリンカーを結合して、標的化剤−リンカーの中間体を産生する工程を含み得る。
【０２６３】
抗体、抗体フラグメント、または標的化剤に対する１つ以上のリンカーの結合は、同時に生じ得る。抗体、抗体フラグメント、または標的分子に対する１つ以上のリンカーの結合は、順次、生じ得る。抗体、抗体フラグメント、または標的分子に対する１つ以上のリンカーの結合は、単一反応の容量で生じ得る。抗体、抗体フラグメント、または標的分子に対する１つ以上のリンカーの結合は、２以上の反応の容量で生じ得る。
【０２６４】
抗体、抗体フラグメントおよび／または標的分子に対する１つ以上のリンカーの結合は、リンカーと、抗体、抗体フラグメント、または標的分子との間の１つ以上のオキシムを形成する工程を含み得る。抗体、抗体フラグメントおよび／または標的化剤に対する１つ以上のリンカーの結合は、リンカーと、抗体、抗体フラグメント、または標的化剤との間の１つ以上の安定な結合を形成する工程を含み得る。抗体、抗体フラグメントおよび／または標的化剤に対する１つ以上のリンカーの結合は、リンカーと、抗体、抗体フラグメント、または標的化剤との間の１つ以上の共有結合を形成する工程を含み得る。抗体、抗体フラグメントおよび／または標的化剤に対する１つ以上のリンカーの結合は、リンカーと、抗体、抗体フラグメント、または標的化剤との間の１つ以上の非共有結合を形成する工程を含み得る。抗体、抗体フラグメントおよび／またはリガンドに対する１つ以上のリンカーの結合は、リンカーと、抗体、抗体フラグメント、または標的化剤との間の１つ以上のイオン結合を形成する工程を含み得る。
【０２６５】
抗体または抗体フラグメントに対する１つ以上のリンカーの結合は、抗体または抗体フラグメントに対して１つ以上のリンカーを部位特異的に結合する工程を含み得る。部位特異的な結合は、抗体または抗体フラグメントの非天然アミノ酸に対して１つ以上のリンカーを連結する工程を含み得る。抗体または抗体フラグメントの非天然アミノ酸に対する１つ以上のリンカーの連結は、オキシムの形成を含み得る。抗体または抗体フラグメントの非天然アミノ酸に対する１つ以上のリンカーの連結は、１つ以上のリンカーのヒドロキシルアミンをアミノ酸のアルデヒドまたはケトンと反応させる工程を、非限定的な例によって含み得る。リンカーは非天然アミノ酸であり得る。
【０２６６】
＜ＶＣ．抗体、抗体フラグメント、および／または標的化剤の連結＞
方法は、標的化剤抗体抱合体を産生するために、抗体、抗体フラグメント、又はその中間体を連結する工程を含んでいてもよく、前記標的化剤抗体抱合体は、（ａ）抗体又は抗体フラグメント；（ｂ）１以上のリンカー；及び（ｃ）標的化剤を含み、ここで一つ以上のリンカーは標的化剤に対して第１の抗体または抗体フラグメントを連結する。方法は、標的化剤−リンカーの中間体（Ｙ−Ｌ１またはＬ１−Ｙ）を産生するために標的化剤に対して１つ以上のリンカーを結合させる工程、及び、抗体または抗体フラグメントに対して標的化剤−リンカー中間体を結合させる工程をさらに含み得る。方法は、標的化剤−リンカーの中間体または抗体フラグメント−リンカーの中間体（Ｘ−Ｌ１またはＬ１−Ｘ）を産生するために、抗体または抗体リンカーに対して１つ以上のリンカーを結合させる工程、及び、標的化剤に対して抗体−リンカーの中間体および抗体フラグメント−リンカーの中間体を結合させる工程を、さらに含み得る。抗体、抗体フラグメント、または標的化剤に対する中間体の結合は、オキシムを形成する工程を含み得る。抗体、抗体フラグメント、または標的化剤に対する中間体の結合は、酸性溶液中のオキシムを形成する工程を含み得る。抗体、抗体フラグメント、または標的化剤に対する中間体の結合は、わずかに酸性の溶液中のオキシムを形成する工程を含み得る。抗体、抗体フラグメント、または標的化剤に対する中間体の結合は、わずかに中性の溶液中に形成する工程を含み得る。抗体又は抗体フラグメントは非天然アミノ酸を含み得る。標的化剤−リンカーの中間体に対する抗体または抗体フラグメントの連結は、非天然アミノ酸と標的化剤−リンカーの中間体との間に、オキシムを形成する工程を含み得る。標的化剤は、非天然アミノ酸を含み得る。抗体−リンカーの中間体または抗体フラグメント−リンカーの中間体に対する、標的化剤の連結は、非天然アミノ酸と、抗体−リンカーの中間体又は抗体フラグメント−リンカーの中間体との間に、オキシムを形成する工程、を含み得る。標的化剤抗体抱合体を産生する方法は、（ａ）抗体−リンカー中間体または抗体フラグメント−リンカー中間体（Ｘ−Ｌ１またはＬ１−Ｘ）を産生するために、抗体または抗体フラグメントに対して第１のリンカー（Ｌ１）を結合させる工程；（ｂ）標的化剤−リンカー抱合体（Ｙ−Ｌ２またはＬ２−Ｙ）を産生するために、標的化剤に対して第２のリンカー（Ｌ２）を抱合させる工程；および（ｃ）標的化剤抗体抱合体、Ｘ−Ｌ１−Ｌ２−ＹまたはＹ−Ｌ２−Ｌ−Ｘを産生するために２つの中間体を共に連結させる工程、を含み得る。抗体、抗体フラグメント、又は標的化剤に対するリンカーの抱合は、リンカーと、抗体、抗体フラグメント、又は標的化剤との間に、イオン結合、共有結合、非共有結合またはこれらの組み合わせを産生する工程を含み得る。抗体に対するリンカー、抗体フラグメント、又は標的化剤の抱合は、Ｒｏｂｅｒｔｓ ｅｔ ａｌ．， Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｒｅｖｉｅｗｓ ５４：４５９−４７６ （２００２）に記載されるように実行され得る。Ｌ１および／またはＬ２は、二官能性リンカー、切断可能なリンカー、非切断可能なリンカー、エチレングリコール���ンカー、二官能エチレングリコールリンカー、可動性のリンカー、または可動性のないリンカーから選択されるリンカーを含み得る。Ｌ１および／またはＬ２は  シクロオクチン、シクロプロペン、アリール／アルキルアジド、トランス−シクロオクテン、ノルボルネン、およびテトラジンからなる群から選択されるリンカーを含み得る。Ｌ１の末端および／またはＬ２の末端は、アルコキシ−アミンを含み得る。Ｌ１の末端および／またはＬ２の末端は、アジドまたはシクロオクテンの基を含み得る。Ｘは、シクロオクチン、シクロプロペン、アリール／アルキルアジド、トランス−シクロオクテン、ノルボルネン、およびテトラジンからなる群から選択される化学基によって、Ｌ１に結合され得る。抗体−リンカーの中間体または抗体フラグメント−リンカーの中間体（Ｘ−Ｌ１またはＬ１−Ｘ）、および標的化剤−リンカーの中間体（Ｙ−  Ｌ２またはＬ２−Ｙ）を連結し、１以上の銅を含まない反応を行う工程を含み得る。抗体−リンカーの中間体または抗体フラグメント−リンカーの中間体（Ｘ−Ｌ１またはＬ１−Ｘ）、および標的化剤−リンカーの中間体（Ｙ−Ｌ２またはＬ２−Ｙ）を連結し、１以上の銅を含む反応を行う工程を含み得る。抗体−リンカーの中間体または抗体フラグメント−リンカーの中間体（Ｘ−Ｌ１またはＬ１−Ｘ）、および標的化剤−リンカーの中間体（Ｙ−Ｌ２またはＬ２−Ｙ）を連結し、１以上の付加環化を含み得る。抗体−リンカーの中間体または抗体フラグメント−リンカーの中間体（Ｘ−Ｌ１またはＬ１−Ｘ）、および標的化剤−リンカーの中間体（Ｙ−  Ｌ２またはＬ２−Ｙ）を連結し、１以上のヒュスゲン環化付加反応を含み得る。抗体−リンカーの中間体または抗体フラグメント−リンカーの中間体（Ｘ−Ｌ１またはＬ１−Ｘ）、および標的化剤−リンカーの中間体（Ｙ−Ｌ２またはＬ２−Ｙ）を連結し、１以上のディールス・アルダー反応を含み得る。抗体−リンカーの中間体または抗体フラグメント−リンカーの中間体（Ｘ−Ｌ１またはＬ１−Ｘ）、および標的化剤−リンカーの中間体（Ｙ−Ｌ２またはＬ２−Ｙ）を連結し、１以上のヘテロ・ディールス・アルダー反応を含み得る。
【０２６７】
＜ＶＤ．抗体の精製＞
方法は標的化剤抗体抱合体を生成する工程をさらに含んでいてもよく、該標的化剤抗体抱合体は、（ａ）１以上の非天然アミノ酸を含む抗体または抗体フラグメント；（ｂ）標的化剤；及び（ｃ）１つ以上のリンカーを含み、ここで一つ以上のリンカーは標的化剤に対して抗体または抗体フラグメントを連結する。方法は、抗体、抗体フラグメントまたは標的化剤の１つ以上の中間体（例えば、抗体−リンカー、抗体フラグメント−リンカー、またはリガンド−リンカーの分子）を精製する工程をさらに含んでいてもよい。抗体または中間体の精製は、過剰のリンカー、非連結抗体、非連結抗体フラグメントまたは非連結リガンドの除去を含み得る。  抗体または中間体の精製は、１以上のコンセントレーターカラム（ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｏｒ  ｃｏｌｕｍｎｓ）、電気泳動、濾過、遠心分離、クロマトグラフィー、またはそれらの組み合わせの使用を含み得る。クロマトグラフィーは分子ふるいクロマトグラフィーを含んでもよい。付加的なクロマトグラフィー法は、限定されないが、疎水性相互作用クロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、アフィニティークロマトグラフィー、金属結合、イムノアフィニティークロマトグラフィー、および高速液体クロマトグラフィーまたは高圧液体クロマトグラフィーを含み得る。電気泳動は変性電気泳動または非変性電気泳動を含み得る。
【０２６８】
抗体、抗体フラグメント、標的化剤または中間体は１つ以上のタグを含み得る。リンカーは１以上のタグを含みうる。タグは、抗体、抗体フラグメント、標的化剤、または中間体を精製するために使用され得る。１つ以上のタグは１つ以上のプロテアーゼによって切断され得る。タグの例は、限定されないが、ポリヒスチジン、ＦＬＡＧ、ＨＡ、ｃ−ｍｙｃ、Ｖ５、キチン結合蛋白質（ＣＢＰ）、マルトース結合蛋白質（ＭＢＰ）およびグルタチオン−Ｓ−転移酵素（ＧＳＴ）を含む。
【０２６９】
方法は、抗体、抗体フラグメント、標的化剤、または中間体の、凍結乾燥または超遠心分離をさらに含み得る。
【０２７０】
抗体または抗体フラグメントの純度は、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又はそれ以上であり得る。抗体の純度は、８５％以上であり得る。抗体の抗体フラグメントの純度は、９０％以上であり得る。抗体の抗体フラグメントの純度は、９５％以上であり得る。抗体の抗体フラグメントの純度は、９７％以上であり得る。
【０２７１】
中間体（例えば抗体−リンカー、抗体フラグメント−リンカー、標的化剤−リンカー）の純度は、は、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又はそれ以上であり得る。中間体の純度は８５％以上であり得る。中間体の純度は９０％以上であり得る。中間体の純度は９５％以上であり得る。中間体の純度は９７％以上であり得る。
【０２７２】
標的化剤の純度は、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又はそれ以上であり得る。標的化剤の純度は８５％以上であり得る。標的化剤の純度は９０％以上であり得る。標的化剤の純度は９５％以上であり得る。標的化剤の純度は９７％以上であり得る。
【０２７３】
抗体または抗体フラグメントの均一性は、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又はそれ以上であり得る。抗体または抗体フラグメントの均一性は８５％以上であり得る。抗体または抗体フラグメントの均一性は９０％以上であり得る。抗体または抗体フラグメントの均一性は９５％以上であり得る。抗体または抗体フラグメントの均一性は９７％以上であり得る。
【０２７４】
中間体（例えば抗体−リンカー、抗体フラグメント−リンカー、標的化剤−リンカー）の均一性は、は、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又はそれ以上であり得る。抗体の均一性は、８５％以上であり得る。抗体の均一性は、９０％以上であり得る。抗体の均一性は、９５％以上であり得る。抗体の均一性は、９７％以上であり得る。
【０２７５】
標的化剤の均一性は、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又はそれ以上であり得る。標的化剤の均一性は８５％以上であり得る。標的化剤の均一性は８５％以上であり得る。標的化剤の均一性は８５％以上であり得る。標的化剤の均一性は８５％以上であり得る。
【０２７６】
＜ＶＩ．細胞＞
本明細書で開示される標的化剤抗体抱合体は、１以上の細胞上で１以上の受容体、共受容体、抗原、または細胞マーカに結合し得る。本明細書で開示される標的化剤抗体抱合体は、（ａ）抗体または抗体フラグメント及び（ｂ）標的化剤を含んでいてもよく、ここで、（ｉ）抗体または抗体フラグメントは、第１の細胞上で受容体、共受容体、抗原、または細胞マーカに対して結合するか又は相互作用し；（ｉｉ）標的化剤は、第２の細胞上の受容体、共受容体、抗原、または細胞マーカに対して結合するか又は相互作用し；または（ｉｉｉ）（ｉ）および（ｉｉ）の組み合わせ、およびここで、（ｉｖ）抗体または抗体フラグメントは１以上の非天然アミノ酸を含み；（ｖ）標的化剤抗は、１以上の非天然アミノ酸を含んでもよく、又は（ｖｉ） （ｉｖ）および（ｖ）の組み合わせ。第１の細胞は、細胞傷害性細胞であり得る。第２の細胞は、標的細胞であり得る。一般的に、標的化剤抗体構築物に対する細胞傷害性エフェクター細胞と標的細胞との結合は、細胞傷害性エフェクター細胞の活性が標的細胞上に影響を与えるのに十分に近い細胞傷害性エフェクター細胞の近傍に、標的細胞を運ぶ。例えば、細胞障害性エフェクター細胞および標的細胞が標的化剤抗体抱合体に結合する際、細胞傷害性エフェクター細胞は、標的細胞上のサイトカイン受容体に結合するサイトカインを放出し得る。
【０２７７】
細胞障害性エフェクター細胞は細胞傷害性細胞であり得る。細胞障害性エフェクター細胞は造血細胞であり得る。造血細胞は、マクロファージ、好中球、好酸球、ＮＫ細胞、Ｂ細胞またはＴ細胞であり得る。造血細胞はＴ細胞であり得る。Ｔ細胞は細胞障害性Ｔ細胞であり得る。Ｔ細胞はナチュラルキラーＴ細胞であり得る。
【０２７８】
標的細胞は癌細胞であり得る。標的細胞は腫瘍細胞であり得る。標的細胞は白血病細胞であり得る。標的細胞はリンパ腫細胞（ｌｙｍｐｈｏｍｉｃ  ｃｅｌｌ）であり得る。標的細胞は転移性の細胞であり得る。標的細胞は遺伝的に改変され得る。標的細胞は遺伝的変異を含み得る。遺伝的変異は発癌性の変異を含み得る。遺伝的変異はがん抑制遺伝子の変異であり得る。遺伝的変異は癌原遺伝子の変異であり得る。標的細胞は炎症細胞であり得る。標的細胞は感染細胞であり得る。標的細胞は病原性の細胞であり得る。。
【０２７９】
第１の細胞と第２の細胞は同じタイプの細胞であり得る。第１の細胞と第２の細胞は異なる細胞型であり得る。あるいは、第１の細胞と第２の細胞は同じ細胞であり得る。標的化剤抗体抱合体は、受容体、共受容体、抗原または２より多い異なる細胞型上の細胞マーカに対して、結合するかまたは相互作用し得る。抗体または抗体フラグメントは、受容体、共受容体、抗原または２以上の異なる細胞型上の細胞マーカに対して、結合するかまたは相互作用し得る。標的化剤は、受容体、共受容体、抗原または２以上の異なる細胞型上の細胞マーカに対して、結合するかまたは相互作用し得る。異なる細胞型は細胞系譜によって異なり得る。異なる細胞型はそれらの機能によって異なり得る。異なる細胞型は１つ以上のタンパク質の発現によって異なり得る。異なる細胞型はそれらの形態によって異なり得る。異なる細胞型はそれらの位置によって異なり得る。異なる細胞型はそれらの遺伝子型によって異なり得る。異なる細胞型は単一の遺伝的な変異によって異なり得る。異なる細胞型は、１より多い遺伝的な変異によって異なり得る。
【０２８０】
１個以上の細胞は、造血細胞を含み得る。造血細胞は制限されないが、好塩基骨髄球、好塩基性細胞、Ｂ細胞、赤芽球バースト形成細胞（ＢＦＵ−Ｅ）、バースト形成単位巨核球（ＢＦＵ−Ｍｋ）、コロニー形成単位好塩基性細胞（ＣＦＵ−Ｂａｓ）、コロニー形成単位赤血球（ＣＦＵ−Ｅ）、コロニー形成単位好酸球（ＣＦＵ−Ｅｏ）、コロニー形成単位顆粒球（ＣＦＵ−Ｇ）、コロニー形成単位顆粒球赤血球単球マクロファージ（ＣＦＵ−ＧＥＭＭ）、
コロニー形成単位顆粒球マクロファージ（ＣＦＵ−ＧＭ）、コロニー形成単位巨核球（ＣＦＵ−Ｍｋ，  ＣＦＵ−ＭＥＧ）、共通性の樹状前駆細胞、共通性のリンパ前駆細胞、共通性の骨髄赤血球前駆細胞、共通性の骨髄前駆細胞、共通性の骨髄リンパ前駆細胞、ダブルネガティブ１（ＤＮ１）細胞、ＤＮ２細胞、ＤＮ３細胞、ＤＮ４細胞、ダブルポジティブ（ＤＰ細胞）、好酸骨髄球、好酸球、赤血球、リンパ系幹細胞、リンパ関連樹状細胞、マクロファージ、マスト細胞、巨核球、記憶Ｂ細胞、記憶細胞、記憶Ｔ細胞、単芽球、単球、骨髄芽球、骨髄幹細胞、骨髄関連樹状細胞、好中骨髄球、好中性、ナチュラルキラー細胞（ＮＫ細胞）、ナチュラルキラーＴ細胞（ＮＫＴ細胞）、血小板、プロ−Ｂ１細胞、プロ−Ｂ−２−細胞、Ｂ細胞、前赤芽球、前単核細胞、調節性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇｓ）、Ｔ細胞、Ｔ−ヘルパー（Ｔｈ）細胞、Ｔｈ０細胞、Ｔｈ１細胞、Ｔｈ２細胞、Ｔｈ３細胞、Ｔｈ１７細胞を含む。ＢＦＵ−ＥまたはＣＦＵ−Ｅは、赤血球に分化し得る赤血球前駆細胞を指し得る。ＣＦＵ−Ｅ細胞は、ＢＦＵ−Ｅ細胞より発達していてもよい。ＣＦＵ−ＥＯは、好酸球に発達し得る造血細胞の発達のタイプを指し得る。ＣＦＵ−Ｇは、顆粒球の前駆体であり得る造血細胞の発達のタイプを指し得る。ＣＦＵ−ＧＥＭＭは顆粒球、赤血球、単球および／またはマクロファージに分化し得る造血細胞の系譜中の、前駆細胞の多能性のタイプを指し得る。ＣＦＵ−ＧＭは、顆粒球および／またはマクロファージに分化し得る造血細胞の系譜中の、前駆細胞の多能性のタイプを指し得る。ＢＦＵ−Ｍｋ、ＣＦＵ−Ｍｋ、ＣＦＵ−ＭＥＧは、赤血球に分化し得る前駆細胞を指し得る。ＣＦＵ−Ｍｋ細胞またはＣＦＵ−ＭＥＧ細胞は、ＢＦＵ−Ｍｋ細胞より発達していてもよい。
【０２８１】
１つ以上の細胞は、臓器あるいは組織からであってもよい。臓器は腺器官（ｇｌａｎｄ  ｏｒｇａｎ）であってもよい。臓器は消化器系または内分泌系の臓器であってもよい。臓器は内分泌腺および消化器官の両方であってもよい。臓器は内胚葉、外胚葉、原始内胚葉または中胚葉からであってもよい。臓器は、副腎であってもよい。いくつかの場合には、副腎はクロム親和性細胞または神経節細胞を含む。あるいは、臓器は虫垂、膀胱または脳である。いくつかの場合には、脳が神経細胞（例えば神経細胞）またはグリア細胞を含む。グリア細胞は、限定されないが、アストロサイト、オリゴデンドロサイト、および上衣細胞を含む。いくつかの例において、臓器は耳、食道、眼、または胆嚢である。胆嚢は  胆嚢炎（ｃｈｏｌｅｃｙｓｔｏｃｙｔｅｓ）を含む。臓器は腎臓であってもよい。腎臓は腎臓糸球体傍細胞、腎臓糸球体有足細胞、腎臓近位尿細管刷子縁細胞、ヘンレ係蹄の薄いセグメント細胞（Ｌｏｏｐ  ｏｆ  Ｈｅｎｌｅ  ｔｈｉｎ  ｓｅｇｍｅｎｔ  ｃｅｌｌ）、厚い上行脚細胞（ｔｈｉｃｋ  ａｓｃｅｎｄｉｎｇ  ｌｉｍｂ  ｃｅｌｌ）、腎臓遠位尿細管細胞、導管細胞又は間質性の腎臓細胞を含みうる。いくつかの例では、臓器は大腸を含んでもよく、大腸は、腸細胞、杯細胞、カベオラ房細胞、腸内分泌細胞、または神経節ニューロンを含んでもよい。臓器は肝臓であってもよい。肝臓は柔組織的あるいは非実質細胞を含むことがある。実質細胞の例は肝細胞を含む。非実質細胞は限定されないが、類洞内皮細胞、クッパー細胞および肝星細胞を含む。いくつかの例において、臓器は、肺、口、鼻、副甲状腺、松果腺、脳下垂体、皮膚、小腸、胃、脾臓、胸腺、甲状腺、気管、子宮または虫垂である。幾つかの例において、臓器は心臓であってもよい。幾つかの例において、心臓は心筋細胞を含む。幾つかの例において、臓器は筋肉（例えば心筋、骨格筋、平滑筋、等）である。筋肉は筋細胞を含んでいてもよい。
【０２８２】
幾つかの実施形態において、細胞は、組織に由来する。組織は、結合組織、上皮組織、筋組織、又は神経組織でもよい。代替的に、組織は、骨、腱（両方とも、筋骨格移植片と称される）、角膜、皮膚、心臓弁、又は静脈である。
【０２８３】
結合組織は線維組織であってもよく、身体の全体にわたってしばしば見られてもよい。結合組織の例は限定されないが、結合組織、脂肪組織、高密度繊維組織（ｄｅｎｓｅ  ｆｉｂｒｏｕｓ  ｔｉｓｓｕｅ）、軟骨、骨、血液およびリンパを含む。一般的に、結合組織には３つの主成分：細胞、繊維および細胞外マトリックスがあり、それは体液において埋まっていてもよい）繊維芽細胞はしばしば結合組織の産生の原因である細胞である。繊維、細胞外マトリックスおよび水の相互作用は、一緒に、全体として柔軟な結合組織を形成し得る。結合組織は、腱および筋肉中の繊維の結合フレームワーク、関節の周りのカプセル及び靭帯、軟骨、骨、脂肪組織、血液、およびリンパ組織を含む物理的構造の多様性を作り上げる。結合組織（ＣＴ）は３つのサブタイプ：胚のＣＴ、本来の（ｐｒｏｐｅｒ）ＣＴおよび特殊なＣＴに分類され得る。本来のＣＴサブタイプは高密度の通常のＣＴ、高密度の不規則なＣＴおよび緩い（ｌｏｏｓｅ）ＣＴを含んでいてもよい。特殊なＣＴのサブタイプは軟骨、骨、脂肪組織、血液、造血組織およびリンパ組織を含んでいてもよい。
【０２８４】
しばしば、結合組織は異なる機能、特徴および組成物を有する。結合組織の機能は、エネルギー蓄積、臓器の保護、身体の為の構造フレームワークの提供、および身体組織の接続を含んでいてもよい。結合組織は、細胞外液を通って広がる細胞によって特徴づけられてもよい。幾つかの例において、結合組織は基底質を含み、それはしばしば、グリコサミノグリカンおよびプロテオグリカンを包含する、透明で、無色の、および粘性の流体である。基底質は、細胞間隙において、生体水（ｂｏｄｙｗａｔｅｒ）およびコラーゲン繊維を固着させ得る。基底質は、また病原体の広がりを遅らせ得る。
【０２８５】
結合組織は繊維であってもよく、繊維組織は異なる組成物を含んでいてもよく、身体の特定領域に局在化され得る。例えば、コラーゲン繊維はしばしば、アルファ・ポリペプチド鎖を含んでおり、腱、靭帯、皮膚、角膜、軟骨、骨、血管、腸管および椎間板に主として局在化され得る。別の例において、弾性線維は、弾性のミクロフィブリル（ｍｉｃｒｏｆｉｂｒｉｌｌ）およびエラスチンを含んでいてもよく、細胞外マトリックスに主として局在化され得る。細網繊維は繊維組織の別の例であり、肝臓、骨髄またはリンパ器官局在化され得る。
【０２８６】
しかし、結合組織のすべてのタイプが繊維だとは限らない。非線維性結合組織の例は脂肪組織および血液である。脂肪組織は我々の身体に「機械的なクッション材」を提供し得る。脂肪組織においてはしばしば密なコラーゲン・ネットワークがないが、脂肪細胞の群は、きまった場所（例えば足の底部）での圧迫下で脂肪組織を保つために、コラーゲン繊維およびコラーゲン・シートによってまとめられてもよい。
【０２８７】
上皮は、細胞間物質を介在させずに、密接に並置された細胞から成る組織である。上皮は大抵無血管であるが、上皮は血管結合組織の下位層の上で「成長し」得る。結合組織および上皮は、基底膜によって分離されてもよい。上皮は、身体の自由表面をすべて覆うことができる。上皮はまた、広大な内部の体腔を裏打ちしてもよく、それは中皮と称される。更に、血液およびリンパ管の内側面は、ここでは内皮と呼ばれる上皮によって、  裏打ちされ得る。上皮はしばしば、細胞層の数、および表層における細胞の形状に基づいて分類される。上皮において細胞層が１つだけの場合、単層（ｓｉｍｐｌｅ）と呼ばれる。上皮において細胞層が２以上の場合、重層（ｓｔｒａｔｉｆｉｅｄ）と称される。表面層中の細胞は、扁平（鱗状または板状）、立方体又は円柱としての高さに応じて記載されてもよい。
【０２８８】
異なるタイプの上皮組織は、身体内の機能および位置を特定化したものであってもよい。例えば、偽重層円柱上皮（ｐｓｅｕｄｏｓｔｒａｔｉｆｉｅｄ  ｃｏｌｕｍｎａｒ）は、  気道からダストおよび粒子を除去するように機能してもよく、繊毛を有していてもよい。偽重層円柱上皮は、呼吸器の通過路（ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ  ｐａｓｓａｇｅｗａｙｓ）を裏打ちしていてもよい。単純な偽重層円柱上皮は吸収に関与し、しばしば子宮、および消化管のほとんどの臓器を裏打してもよい。単層の立方体上皮（ｓｉｍｐｌｅ  ｃｕｂｏｉｄａｌ）は、分泌および吸収に関与していてもよく、腺、尿細管、および卵巣に局在化されてもよい。  単層扁平上皮（ｓｉｍｐｌｅ  ｓｑｕａｍｏｕｓ）は、拡散および濾過において役割を果たしてもよく、肺、毛細管および血管の壁に局在化されてもよい。重層扁平上皮（ｓｔｒａｔｉｆｉｅｄ  ｓｑｕａｍｏｕｓ）は、下層にある細胞を保護することができ、皮膚、喉、膣、口にしばしば局在化される。重層立方体上皮（ｓｔｒａｔｉｆｉｅｄ  ｃｕｂｏｉｄａｌ）は保護に関与してもよく、乳腺、汗腺、および膵臓の管を裏打ちしてもよい。重層立方体上皮は、保護および分泌に関与することができ、男性の尿道と輸精管および咽頭の部分に局在化されてもよい。
【０２８９】
筋組織はしばしば収縮性のある組織であり、胚性生殖細胞の中胚葉の層に由来し得る。筋肉細胞は、互いを通り越し、細胞の大きさを変化させる収縮性のフィラメントを含み得る。それらは骨格筋、心筋、または平滑筋として分類される。骨格筋または「随意筋」は、骨に対して腱によって（あるいは少数の場所では腱膜によって）係留されてもよく、移動などの骨格の運動に、および姿勢の維持において作用するために使用され得る。平滑筋または「不随意筋」は、しばしば、食道、胃、腸、気管支、子宮、尿道、膀胱、血管、および皮膚の立筋線毛（体毛の勃起を制御する）などの、臓器および構造の壁の内に見みられる。心筋はまた「不随意筋」であるが、骨格筋に、より機構的に類似してもよく、頻繁に心臓において見られる。
【０２９０】
心臓および骨格筋は、それらが筋節を含んでおり、非常に規則的な束の配列に詰め込まれているという点で、噴大抵「横紋され（ｓｔｒｉａｔｅｄ）」ている。骨格筋が通常、並列の束状に配され得る一方で、心筋は大抵、分岐する不規則な角度で接続される（介在板と呼ばれる）。横紋筋は、短く強いバーストで収縮し弛緩し得るが、一方、平滑筋はより長いか、又はほぼ永久的な収縮を維持し得る。
【０２９１】
骨格筋はいくつかのサブタイプに分けられる。タイプＩ（酸化が遅く、単収縮が遅く、または「赤い」）の筋肉は大抵、毛細血管が密集し、筋肉組織にその特徴的な赤色を与えるミトコンドリアやミオグロビンが豊富であてもよい。それはより多くの酸素を運び、好気性の活性を維持し得る。タイプＩＩ（単収縮が速い筋肉）は３つの主要な種類、タイプＩＩａ、タイプＩＩｘ、およびタイプＩＩｂを有する。タイプＩＩａは大抵好気性であり、ミトコンドリアと毛細血管中に富んでいてもよく、赤く見えてもよい。タイプＩＩｘ（タイプＩＩｄとしても知られている）には大抵、ミトコンドリアとミオグロビンがさほど密集していない。タイプＩＩｂは嫌気性で、グリコリシスで、「白い」筋肉であってもよく、大抵ミトコンドリアとミオグロビンはさほど密集していない。
【０２９２】
神経組織は、組織の４つの主要なクラスのうちの１つである。神経組織は、大抵神経系、脳、脊髄および神経の主成分であり、身体機能を調節し制御し得る。神経組織は、大抵ニューロンと神経膠細胞からなる。ニューロンは刺激を伝達し得る。神経膠細胞は、神経刺激の伝搬を支援し、並びにニューロンに栄養素を提供し得る。神経組織は、大抵多くの種類の神経細胞で作られており、それらすべては、隣の細胞に活動電位信号を送る細胞の、軸索または長い軸状部分（ｌｏｎｇ  ｓｔｅｍ  ｌｉｋｅ  ｐａｒｔ）によって、明確に特徴づけられてもよい。
【０２９３】
神経系の機能は、感覚性入力、統合、筋肉と腺の制御、恒常性、および精神活動を含んでいてもよい。神経組織は刺激に反応してもよく、大抵刺激に対する応答をもたらす、身体の多様な臓器に対する刺激を処理してもよい。神経組織は大抵、（脳、脊髄、および身体全体にわたって分岐する末梢神経でのように）、神経細胞と呼ばれる特殊化された神経細胞から作られる。ニューロンは容易に刺激され、刺激を非常に速く伝達する。神経は、大抵、結合組織によって束ねられる多くの神経細胞繊維（ニューロン）を含む。強靭結合組織の鞘、神経鞘は、神経を取り巻いていてもよい。この鞘は、神経繊維の束を取り巻く神経周膜を形成するために神経に浸透する。様々な大きさの血管が神経鞘において見られてもよい。神経内膜（それは疎性結合組織の薄層から成る）は、個々の神経繊維を取り巻く。
【０２９４】
細胞体は細胞（血漿）膜によって囲まれてもよく、中心核があってもよい。ニッスル小体と呼ばれる果粒は、大抵細胞体の細胞質において見られる。細胞体内では、非常に細かい神経原繊維が樹状突起から軸索へと広がっていてもよい。軸索は、大抵ミエリン鞘に取り巻かれ、それは軸索のまわりの白っぽく、非細胞性の脂肪層を形成する。ミエリン鞘の外部は、神経鞘またはシュワン細胞の鞘と呼ばれる細胞層であってもよい。神経鞘と一緒のミエリン鞘もまた、髄鞘として知られている。この髄鞘は、ランビエ絞輪によって一定間隔で割り込まれていてもよい。
【０２９５】
ニューロンは、構造上または機能的に分類され得る。構造的な分類は、それらの細胞体から広がる突起の数に従ってニューロンをグループかし得る。３つの主要なニューロングループが大抵この分類を構築する：多極性（極性＝末端、極）、双極性および単極性のニューロン。多極性ニューロンは大抵３つ以上のプロセスを有する。これらは、ヒトにおいて最も一般的なニューロン・タイプ（ニューロンの９９％以上がこのクラスに属する）、および、ＣＮＳにおける主要なニューロン・タイプである。双極性ニューロンは大抵、１つの末端に樹状突起を、他方に軸索を備えたスピンドル型をしている。一例は、目の光を感知する網膜において見つけられてもよい。単極性ニューロンは大抵感覚ニューロンを含む。感覚性ニューロンは通常、細胞体のすぐ近くで単一の突起または繊維に分割する、２本の主要な分岐（軸索と樹状突起）を有する。
【０２９６】
細胞は、毛包、有毛細胞、耳の有毛細胞、耳の毛幹細胞、または蝸牛の細胞を含むことができる。有毛細胞は、多くの場合、聴覚系と前庭系の両方の感覚受容器である。聴覚有毛細胞は、内耳の蝸牛における薄い基底膜上のコルチ器官内に配置されてもよい。  蝸牛有毛細胞には、２つの解剖学的および機能的に異なる種類：外側及び内側の有毛細胞があってもよい。
【０２９７】
１つ以上の細胞は、病原性細胞であってもよい。  病原性細胞は、限定されないが、細菌、ウイルス、真菌、および原生動物を含む。病原体の例は、限定されないが、本明細書に開示される細菌、ウイルス、真菌、および原生動物を含んでいてもよい。
【０２９８】
＜ＶＩＩ．受容体、共受容体、抗原および細胞マーカ＞
本明細書で開示される標的化剤抗体抱合体は、１以上の細胞上で１以上の受容体、共受容体、抗原、または細胞マーカに結合し得る。本明細書で開示される標的化剤抗体抱合体は、（ａ）抗体または抗体フラグメント及び（ｂ）標的化剤を含んでいてもよく、ここで、（ｉ）抗体または抗体フラグメントは、第１の細胞上で受容体、共受容体、抗原、または細胞マーカに対して結合するか又は相互作用し；（ｉｉ）標的化剤は、第２の細胞上の受容体、共受容体、抗原、または細胞マーカに対して結合するか又は相互作用し；または（ｉｉｉ）（ｉ）および（ｉｉ）の組み合わせ、およびここで、（ｉｖ）抗体または抗体フラグメントは１以上の非天然アミノ酸を含み；（ｖ）標的化剤抗は、１以上の非天然アミノ酸を含んでもよく、又は（ｖｉ）（ｉｖ）および（ｖ）の組み合わせ。第１の細胞と第２の細胞は同じタイプの細胞であってもよい。第１の細胞と第２の細胞は異なる細胞タイプであってもよい。あるいは、第１の細胞と第２の細胞は同じ細胞であってもよい。
【０２９９】
例えば、式Ｉ、ＩＡ、ＩＩ、および／またはＩＩＡの標的化剤抗体抱合体について、Ｘは、受容体、共受容体、抗原、膜貫通タンパク質または細胞マーカに対して結合し得る抗体または抗体フラグメントを含む。さらに、又は加えて、式Ｉ、ＩＡ、ＩＩ、および／またはＩＩＡの標的化剤抗体抱合体について、Ｙは、受容体、共受容体、抗原、膜貫通タンパク質または細胞マーカに対して結合し得る標的化剤を含む。
【０３００】
受容体、共受容体、抗原または細胞マーカの例は、限定されないが、受容体、共受容体、造血細胞上の抗原または細胞マーカ、組織細胞、上皮細胞、中皮細胞、真皮細胞、内皮細胞、樹状細胞、血管細胞、間質細胞、ニューロン、癌細胞、細菌、真菌またはウィルス上を含み得る。受容体、共受容体、抗原または細胞マーカは、ＭＵＣ１６、ＧＰＮＭＢ、Ｃｒｉｐｔｏ、ＥＤ−８、ＴＭＥＦＦ２、ＥｐｈＢ２、ＥｐｈＡ２、ＦＡＰ、ｍｅｓｏｔｈｅｌｉｎ、ＴＡＧ−７２、ＧＤ２、ＣＡＩＸ、および５Ｔ４を含む群から選択され得る。
【０３０１】
受容体、共受容体、抗原または細胞マーカは前立腺癌細胞上で過剰発現され得る。受容体、共受容体、抗原または細胞マーカはエンドセリンを含み得る。受容体、共受容体、抗原または細胞マーカはＰＳＭＡであり得る。
【０３０２】
受容体はＧタンパク質共役受容体（ＧＰＣＲ）であり得る。受容体はチロシン・キナーゼ受容体であり得る。受容体はサイトカイン受容体であり得る。受容体はケモカインレセプターであり得る。受容体は成長因子受容体であり得る。成長因子受容体は、上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）、血小板由来増殖因子受容体（ＰＤＧＦＲ）または線維芽細胞増殖因子受容体（ＦＧＦＲ）であり得る。ＥＧＦＲはＥＧＦＲ１であってもよい。ＥＧＦＲはＨｅｒ２であってもよい。受容体はコレシストキニンＢ受容体であり得る。受容体はゴナドトロピン放出ホルモン受容体であってもよい。受容体はソマトスタチン受容体であり得る。受容体はソマトスタチン受容体２であり得る。受容体はガストリン放出ペプチド受容体であり得る。受容体はニューロキニン受容体であり得る。その、タキキニン１受容体として知られているニューロキニン１受容体であり得る。受容体はメラノコルチン受容体であり得る。受容体はメラノコルチン１受容体であり得る。受容体はニューロテンシン受容体であり得る。受容体はニューロペプチドＹ受容体であり得る。受容体は、インテグリンであり得る。インテグリンは、ａｖインテグリンであり得る。インテグリンはａｖＢ３インテグリンであり得る。
【０３０３】
受容体、共受容体、抗原または細胞表面マーカは、分化タンパク質のクラスターを含み得る。分化タンパク質のクラスターは、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ２５、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＣＤ５６、ＣＤ６４、ＣＤ７０、ＣＤ７４、ＣＤ７９、ＣＤ１０５、ＣＤ１３８、ＣＤ１７４、ＣＤ２０５、ＣＤ２２７、ＣＤ３２６、ＣＤ３４０から選択されてもよく、分化タンパク質はＣＤ３８を含んでいてもよい。
【０３０４】
膜貫通タンパク質は、糖タンパク質を含んでもよい。糖タンパク質はＣ型レクチン様分子−１（ＣＬＬ−１）であってもよい。
【０３０５】
受容体、共受容体、抗原、膜貫通タンパク質または細胞マーカは、細胞接着分子であってもよい。細胞接着分子は細胞を結合し得る。細胞接着分子は細胞間マトリックスを結合し得る。受容体、共受容体、抗原または細胞表面マーカは、ギャップ結合タンパク質を含み得る。
【０３０６】
抗原は、１つ以上の抗体の産生を引き起こし得る。抗原は、主要組織適合性複合体（ＭＨＣ）によって結合され得、且つ、Ｔ細胞受容体に提示され得る、分子または分子フラグメントを指し得る。用語「抗原」はまた免疫原を指し得る。被験体に独力で注入される場合、免疫原は適応的免疫応答を誘発し得る。免疫原は免疫応答を単独で誘導し得る。抗原はまたハプテンも指し得る。ハプテンは標的化剤であってもよい。一般的に、タンパク質などより大きな担体分子に付けられた時、ハプテンは免疫応答を誘導し得る。抗原はタンパク質またはポリサッカリドであってもよい。抗原は、細菌、ウィルスおよび他の微生物の部分（例えば被膜、カプセル、細胞壁、鞭毛、線毛（ｆｉｍｂｒａｅ）および毒素）を含み得る。タンパク質およびポリサッカリドと結合した時、脂質と核酸は抗原性であってもよい。抗原は超抗原、胸腺依存性抗原およびＴ細胞依存性抗原を含み得る。
【０３０７】
抗原は外来性抗原か又は内在性抗原であってもよい。外来性抗原は、典型的には、例えば吸入、食物摂取または注射によって、外部から身体へ入った抗原である。いくつかの抗原は、外来性抗原としてスタートし、その後、内在性（例えば細胞内のウィルス）になってもよい。細胞内抗原は、感染細胞の破壊に際して、血行に再び放出され得る。内因性の抗原は、正常な細胞代謝の結果、またはウイルスのまたは細胞内の細菌感染のために、以前に正常細胞内に生じた抗原であってもよい。
【０３０８】
抗原はまた自己抗原を含み得る。自己抗原は、特定の自己免疫疾患に苦しむ患者の免疫系によって認識される、正常なタンパク質または蛋白質複合体（時にはＤＮＡまたはＲＮＡ）であってもよい。これらの抗原は、正常な条件下では免疫系の標的であってはならないが、遺伝的要因と環境要因により、こうした抗原正常に関する免疫寛容はこれらの患者では失われた。
【０３０９】
抗原は腫瘍抗原を含み得る。腫瘍抗原または新生抗原は、腫瘍細胞の表面上のＭＨＣＩまたはＭＨＣＩＩ分子によって提示される抗原であり得る。これらの抗原は、時に腫瘍細胞によって提示され得るが、正常のものによっては決して提示されない。この場合、それらは腫瘍特異性抗原（ＴＳＡ）と呼ばれ、一般的に、腫瘍特異的な変異に起因する。より一般的なのは腫瘍細胞と正常細胞によって提示される抗原であって、それらは腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）と呼ばれる。増殖するか転移する前に、これらの抗原を認識する細胞毒性Ｔリンパ球は腫瘍細胞を破壊できてもよい。腫瘍抗原は、また例えば変異型受容体の形をしている突起の表面上にあってもよく、その場合には、それらはＢ細胞によって認識されてもよい。
【０３１０】
＜ＶＩＩＩ．適応症＞
本明細書で開示される標的化剤抗体抱合体および組成物は、必要がある被験体における１つ以上の疾病または疾患を処置するために使用され得る。方法は、必要性のある被験体へと標的化剤抗体抱合体を投与する工程を含み得る。標的化剤抗体抱合体は、（ａ）第１の細胞上の表面マーカと相互作用する抗体または抗体フラグメントを含む第１の領域；および（ｂ）第２の細胞上の表面マーカと相互作用する非抗体領域を含む第２の領域、を含み得る。抗体または抗体フラグメントは抗ＣＤ３フラグメントを含み得る。非抗体領域は、第２の細胞上のＰＳＭＡと相互作用し得る。非抗体領域はＤＵＰＡを含み得る。標的化剤抗体抱合体は、１つ以上のリンカーをさらに含み得る。１つ以上のリンカーは、第１の領域と第２の領域とを接続し得る。１つ以上の疾病または疾患は、癌、病原性の感染症、自己免疫疾患、炎症性疾患または遺伝病であり得る。
【０３１１】
いくつかの例において、１つ以上の疾患は癌を含む。癌は再発性及び／又は抵抗性の癌を含み得る。癌の例は、限定されないが、肉腫、癌腫、リンパ腫及び白血病を含む。
【０３１２】
癌は神経内分泌の癌を含み得る。癌は、膵臓癌を含み得る。癌は外分泌腺の膵臓癌を含み得る。癌は、甲状腺癌を含み得る。甲状腺癌は髄様甲状腺癌を含み得る。
【０３１３】
癌は前立腺癌を含み得る。前立腺癌はＰＳＭＡ陽性の前立腺癌であってもよい。ＰＳＭＡ発現は大きくアップレギュレートされてもよく、前立腺癌の一部の又はすべてのステージにおける癌細胞に制限されてもよい。癌は  ホルモン不応性前立腺癌であってもよい。
【０３１４】
癌は上皮癌を含み得る。癌は、乳癌を含み得る。癌は子宮内膜癌を含み得る。癌は卵巣癌を含み得る。卵巣癌は間質の卵巣癌を含み得る。癌は、子宮頸癌を含み得る。
【０３１５】
癌は皮膚癌を含み得る。皮膚癌は新血管形成の皮膚癌（ｎｅｏ−ａｎｇｉｏｇｅｎｉｃ  ｓｋｉｎ  ｃａｎｃｅｒ）を含み得る。皮膚癌は黒色腫を含み得る。
【０３１６】
癌は腎臓癌を含み得る。
【０３１７】
癌は肺癌を含み得る。肺癌は肺小細胞癌を含み得る。肺癌は非小細胞肺癌を含み得る。
【０３１８】
癌は結腸直腸癌を含み得る。癌は、胃癌を含み得る。癌は、結腸癌を含み得る。
【０３１９】
癌は脳腫瘍を含み得る。脳腫瘍は脳腫瘍を含み得る。癌は、哺乳動物を含み得る。癌は星細胞腫を含み得る。
【０３２０】
癌は白血病を含み得る。白血病は白血病を含み得る。白血病は、骨髄性白血病を含み得る。癌は、リンパ腫を含み得る。リンパ腫は非ホジキンリンパ腫を含み得る。
【０３２１】
癌は肉腫を含み得る。肉腫はユーイング肉腫を含み得る。
【０３２２】
肉腫は、硬骨、軟骨、脂肪、筋肉、血管または他の結合組織または支持組織の癌である。肉腫は、限定されないが、骨癌、線維肉腫、軟骨肉腫、ユーイング肉腫、悪性血管内皮腫、悪性シュワン腫、両側性前庭神経鞘腫、骨肉腫、軟部組織肉腫（例えば胞状軟部肉種、血管肉腫、葉状肉腫、皮幹線維肉腫、類腱腫、類上皮肉腫、骨外性骨肉腫、繊維肉腫、血管周囲細胞腫、血管肉腫、カポジ肉腫、平滑筋肉腫、脂肪肉腫、リンパ管肉腫、リンパ肉腫、悪性線維性組織球腫、神経線維肉腫、横紋筋肉腫および滑膜肉腫）を含む。
【０３２３】
癌腫は上皮細胞において始まる癌であり、これは身体の表面を覆い、ホルモンを生成し、腺を構築する細胞である。非限定的な例として、癌腫は乳癌、膵癌、肺癌、結腸癌、結腸直腸癌、直腸癌、腎臓癌、膀胱癌、胃癌、前立腺癌、肝臓癌、卵巣癌、脳腫瘍、膣癌、外陰癌、子宮癌、口腔癌、陰茎癌、精巣癌、食道癌、皮膚癌、卵管の癌と頭頚部癌、消化管間質癌、腺癌、皮膚または眼球内の黒色腫、肛門部の癌、小腸癌、内分泌系の癌、甲状腺癌、副甲状腺の癌、副腎の癌、尿道の癌、じん盤の癌、尿管の癌、子宮内膜の癌、子宮頚の癌、脳下垂体の癌、中枢神経系（ＣＮＳ）の新生物、原発性のＣＮＳリンパ腫、脳幹神経膠腫および脊髄の軸の腫瘍を含む。いくつかの例において、癌は、基底細胞癌、扁平上皮癌、黒色腫、非黒色腫または化学線（ソーラー性）角化症（ａｃｔｉｎｉｃ  （ｓｏｌａｒ）  ｋｅｒａｔｏｓｉｓ）などの皮膚癌である。
【０３２４】
いくつかの実施形態において、癌は肺癌である。肺癌は、肺（気管支）または肺（肺胞）の小さな気嚢を供給するために気管から分岐する気道においてスタートし得る。肺癌は非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、小細胞肺癌および中皮腫（ｍｅｓｏｔｈｅｌｉｏｍｉａ）を含む。ＮＳＣＬＣの例は、扁平上皮癌、腺癌および大細胞癌を含む。中皮腫は、肺と胸腔の裏打ち（胸膜）の、または腹部の裏打ち（腹膜）の癌性腫瘍であってもよい。中皮腫はアスベスト曝露によるものであってもよい。癌は、神経膠芽腫のような脳の癌であってもよい。
【０３２５】
あるいは、癌は中枢神経系（ＣＮＳ）腫瘍であってもよい。ＣＮＳ腫瘍は神経膠腫または非神経膠腫として分類され得る。神経膠腫は悪性神経膠腫、高度の神経膠腫、びまん性の内因性の橋膠腫であってもよい。神経膠腫の例は星状細胞腫、希突起神経膠腫（あるいは希突起神経膠腫と星状細胞腫の要素の混合）および脳室上衣細胞腫を含む。星状細胞腫は限定されないが、低悪性度星状細胞腫、未分化星細胞腫、多形性神経膠芽腫、毛様細胞性星状細胞腫、多形黄色星細胞腫および上衣下巨細胞神経膠星状細胞腫を含む。希突起神経膠腫は低級な希突起神経膠腫（あるいは乏突起星細胞腫）および未分化の乏突起神経膠腫を含む。非神経膠腫は髄膜腫、脳下垂体の腺腫、原発性のＣＮＳリンパ腫および髄芽腫を含む。幾つかの例において、癌は脳膜腫である。
【０３２６】
白血病は、急性リンパ性白血病、急性骨髄球性白血病、慢性リンパ性白血病または慢性骨髄性白血病であってもよい。付加的なタイプの白血病は有毛細胞白血病、慢性骨髄単球性白血病および若年性骨髄単球性白血病を含む。
【０３２７】
リンパ腫はリンパ球の癌であり、ＢまたはＴリンパ球のいずれかから発展してもよい。リンパ腫の２つの主要型式は、前にホジキン病として知られているホジキンリンパ腫と、非ホジキンリンパ腫である。ホジキンリンパ腫は、リード−スターンバーグ細胞の存在によって特色付けられる。非ホジキンリンパ腫は、ホジキンリンパ腫でない全てのリンパ腫である。非ホジキンリンパ腫は、低悪性度リンパ腫と中悪性度リンパ腫であってもよい。非ホジキンリンパ腫は、限定されないが、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、粘膜関連リンパ組織リンパ腫（ＭＡＬＴ）、小リンパ球性リンパ腫、マントル細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫、縦隔大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、節性辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫（ＮＭＺＬ）、脾臓周辺帯リンパ腫（ＳＭＺＬ）、節外性辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、血管内大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、原発性体腔性リンパ腫およびリンパ腫様肉芽腫症、を含む。
【０３２８】
１つ以上の疾患または疾病は病原性の感染症であってもよい。病原性の感染症は１つの以上の病原体で引き起こされることがある。いくつかの例において、病原体は、細菌、真菌、ウイルス、または原生動物である。
【０３２９】
典型的な病原微生物は、限定されるものではないが、以下のものを含む：Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ、Ｂｒｕｃｅｌｌａ、Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ、Ｃｈｌａｍｙｄｏｐｈｉｌａ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ、Ｆｒａｎｃｉｓｅｌｌａ、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ、Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ、Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ、Ｌｅｐｔｏｓｐｉｒａ、Ｌｉｓｔｅｒｉａ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ、Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ、Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ、Ｓｈｉｇｅｌｌａ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ、Ｔｒｅｐｏｎｅｍａ、Ｖｉｂｒｉｏ、またはＹｅｒｓｉｎｉａ。いくつかの場合において、病原体によって引き起こされる疾患または疾病は結核であり、不均一サンプルは、細菌Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓに由来する外来分子、および被験体に由来するおよび分子を含む。いくつかの例では、細菌によって引き起こされる疾病または疾患は、（連鎖球菌およびシュードモナスなどの細菌によって引き起され得る）結核、肺炎、（赤痢菌、カンピロバクター及びサルモネラなどの細菌によって引き起こされ得る）食中毒、および、（破傷風、腸チフス、ジフテリア、梅毒およびハンセン病などの）感染症である。  疾病または疾患は、細菌性腟症（自然発生の細菌フローラの不均衡によって引き起こされた膣の疾患）であってもよい。あるいは、疾病または疾患は、細菌性髄膜炎（髄膜（例えば脳と脊髄を覆う保護膜）の細菌性炎症）である。細菌によって引き起こされる他の疾患または疾病は、限定されないが、細菌性肺炎、尿路感染症、細菌性の胃腸炎および細菌性皮膚感染症を含む。細菌性皮膚感染症の例は、限定されないが、黄色ブドウ球菌または化膿連鎖球菌によって引き起こされ得る膿痂疹；リンパの広がりを伴う深い上皮の連鎖球菌細菌感染によって引き起こされ得る丹毒；および正常な皮膚のフローラ、または外因性の細菌によって引き起こされ得る蜂巣炎、を含む。
【０３３０】
病原体は、Ｃａｎｄｉｄａ，  Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ，  Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ，  Ｈｉｓｔｏｐｌａｓｍａ，  Ｐｎｅｕｍｏｃｙｓｔｉｓ，  ａｎｄ  Ｓｔａｃｈｙｂｏｔｒｙｓなどの菌であってもよい。真菌によって引き起こされる疾病または疾患の例は、限定されないが、いんきんたむし、酵母菌感染症、白癬、及び水虫を含む。
【０３３１】
病原体はウィルスであってもよい。ウィルスの例は限定されないが、アデノウイルス、コクサッキーウイルス、エプスタイン−バーウイルス、肝炎ウイルス（例えばＡ型肝炎、ＢおよびＣ）、単純性疱疹ウィルス（タイプ１と２）、サイトメガロウイルス、ヘルペスウィルス、ＨＩＶ、インフルエンザウィルス、麻疹ウィルス、おたふくかぜウィルス、乳頭腫ウィルス、パラインフルエンザウイルス、ポリオウイルス、ＲＳウィルス、風疹ウィルスおよび水痘帯状ヘルペスウィルスを含む。ウィルスによって引き起こされる疾患または疾病の例は、限定されないが、風邪、インフルエンザ、肝炎、ＡＩＤＳ、水疱瘡、風疹、耳下腺炎、嚢尾虫、疣贅およびポリオを含む。
【０３３２】
病原体は、アカントアメーバ属（例えばＡ．ａｓｔｒｏｎｙｘｉｓ、Ａ．ｃａｓｔｅｌｌａｎｉｉ、Ａ．ｃｕｌｂｅｒｔｓｏｎｉ、Ａ．ｈａｔｃｈｅｔｔｉ、Ａ．ｐｏｌｙｐｈａｇａ、Ａ．ｒｈｙｓｏｄｅｓ、Ａ．ｈｅａｌｙｉ、Ａ．ｄｉｖｉｏｎｅｎｓｉｓ）とＢｒａｃｈｉｏｌａ属（例えばＢ  ｃｏｎｎｏｒｉ（Ｂ．ｖｅｓｉｃｕｌａｒｕｍ））、クリプトスポリジウム属（例えばＣ．ｐａｒｖｕｍ）、シクロスポラ属（例えばＣ．ｃａｙｅｔａｎｅｎｓｉｓ）、脳炎性胞子虫属（例えばＥ．  ｃｕｎｉｃｕｌｉ、Ｅ．ｈｅｌｌｅｍ、Ｅ．ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｉｓ）、体内寄生性アメーバ（例えばＥ．ｈｉｓｔｏｌｙｔｉｃａ）、  エンテロシトゾーン属（例えばＥ．ｂｉｅｎｅｕｓｉ）、ギアリダ属（例えばＧ．ｌａｍｂｌｉａ）、イソスポラ属（例えばＩ．ｂｅｌｌｉ）、微胞子虫亜綱（例えばＭ．ａｆｒｉｃａｎｕｍ、Ｍ．ｃｅｙｌｏｎｅｎｓｉｓ）、ネグレリア属（例えばＮ．ｆｏｗｌｅｒｉ）、疾病（例えばＮ．ａｌｇｅｒａｅ、Ｎ．ｏｃｕｌａｒｕｍ）、プレイストフォラ属、Ｔｒａｃｈｉｐｌｅｉｓｔｏｐｈｏｒａ属（例えばＴ．ａｎｔｈｒｏｐｏｐｈｔｈｅｒａ、Ｔ．ｈｏｍｉｎｉｓ）およびヴィタフォルマ属（例えばＶ．ｃｏｒｎｅａｅ）などの原生動物であってもよい。  
【０３３３】
疾病または疾患は自己免疫疾患または自己免疫性関連疾患であってもよい。自己免疫疾患は、身体にそれ自身の組織を攻撃させる、身体の免疫系の機能不全であり得る。自己免疫疾患と自己免疫性の関連疾患の例は、限定されないが、アジソン病、円形脱毛症、強直性脊椎炎、抗リン脂質抗体症候群（ＡＰＳ）、自己免疫性の再生不良性貧血、自己免疫溶血性貧血、自己免疫性肝炎、自己免疫性心筋炎、ベーチェット病、セリアック病、クローン病、皮膚筋炎、好酸球性筋膜炎、結節性紅斑、巨細胞性動脈炎（側頭動脈炎）、グッドパスチャー症候群、グレーブス病、橋本病、特発性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、ＩｇＡ腎症、若年性関節炎、糖尿病、若年型糖尿病、川崎症候群、ランバート−イートン症候群、ループス（ＳＬＥ）、混合性結合組織病（ＭＣＴＤ）、多発性硬化症、重症筋無力症、天疱瘡、結節性多発動脈炎、タイプ、Ｉ、ＩＩ、およびＩＩＩの自己免疫性多腺性症候群（ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ  ｐｏｌｙｇｌａｎｄｕｌａｒ  ｓｙｎｄｒｏｍｅｓ）、リウマチ性多発性筋痛、多発性筋炎、乾癬、乾癬性関節炎、ライター症候群、再発性多発性軟骨炎、関節リウマチ、サルコイドーシス、強皮症、シェーグレン症候群、精子および睾丸の自己免疫病、全身硬直症候群、高安動脈炎、側頭動脈炎／巨細胞性動脈炎、潰瘍性大腸炎、ブドウ膜炎、血管炎、尋常性白斑およびヴェグナー肉芽腫症を含む。
【０３３４】
疾患又は疾病は炎症性疾患であってもよい。炎症性疾患の例は限定されないが、歯槽骨炎とアミロイドーシス、血管炎、強直性脊椎炎、乏血壊死、バセドウ病、ベル麻痺、滑液包炎、手根管症候群、セリアック病、胆管炎、軟骨軟化症膝蓋骨、慢性活動性肝炎、慢性疲労症候群、コーガン症候群、先天的股異形成、肋軟骨炎、クローン病、嚢胞性繊維症、Ｄｅ  Ｑｕｅｒｖａｉｎの腱炎、糖尿病関連関節炎、汎発性特発性骨増殖症、円板状ループス、エーラース‐ダンロス症候群、家族性地中海熱、筋膜炎、結合組織炎／結合組織炎、凍結肩、ガングリオン嚢胞、巨細胞性動脈炎、痛風、グレーブス病、ＨＩＶ関連のリウマチ性疾患症候群、副甲状腺機能亢進関連関節炎、感染性関節炎、炎症性の腸症候群／過敏性腸症候群、若年性慢性関節リウマチ、ライム病、マルファン症候群、ミクリッツ氏病、混合性結合組織病、多発性硬化症、筋筋膜疼痛症候群、変形性関節炎、骨軟化、骨粗鬆症およびコルチコステロイド誘発の骨粗鬆症、パジェット病、回帰性リウマチ、パーキンソン病、プランマー病、リウマチ性多発性筋痛、多発性筋炎、偽痛風、乾癬性関節炎、指虚血現象／症候群、ライター症候群、リウマチ熱、関節リウマチ、サルコイドーシス、坐骨神経痛（腰髄神経根障害）、強皮症、壊血病、かま状赤血球関節炎、シェーグレン症候群、脊椎管狭窄症、脊椎すべり症、スチル病、全身性エリテマトーデス、高安の（脈欠損）疾患、腱炎、テニス肘／ゴルフ肘、甲状の関連する関節炎、バネ指、潰瘍性大腸炎、ヴェグナー肉芽腫症およびウィップル病を含む。
【０３３５】
本明細書には、疾患または疾病を治療するために本明細書に開示される標的化剤抗体抱合体の使用が開示される。本明細書には、被験体の癌を処置するための標的化剤抗体抱合体の使用が開示され、ここで標的化剤抗体抱合体は、（ａ）免疫細胞と相互作用する抗体または抗体フラグメントを含む第１の領域；および（ｂ）標的細胞と相互作用する非抗体部分を含む第２の領域、を含む。標的化剤抗体抱合体は、１つ以上のリンカーをさらに含み得る。１つ以上のリンカーは、標的化剤抗体抱合体の、第１の領域と第２の領域とを接続し得る。非抗体部分は、標的細胞上のＰＳＭＡと相互作用し得る。非抗体部分はＤＵＰＡを含み得る。抗体または抗体フラグメントは抗ＣＤ３フラグメントを含み得る。癌は、前立腺癌を含み得る。
【０３３６】
＜ＩＸ．免疫調節＞
本明細書に開示される標的化剤抗体抱合体は免疫応答を調節するために使用されてもよい。免疫応答の調節は、免疫応答を刺激するか、活性化するか、増加させるか、強めるか、アップレギュレートさせることを含み得る。免疫応答の調節は、免疫応答を抑止するか、阻害するか、妨げるか、減少させるか、ダウンレギュレートさせることを含み得る。例えば、抗体は、第１の細胞に結合し得る抗体または抗体フラグメントと、第２の細胞に結合し得る標的化剤を含み得る。第１および第２の細胞に対する抗体の結合は、免疫応答の修飾を結果として生じてもよい。第１の細胞は免疫細胞であり得る。免疫細胞は造血細胞であり得る。第２の細胞は免疫細胞、健康な細胞、癌細胞、細菌、またはウイルスで感染したものであってもよい。
【０３３７】
免疫応答を調節する方法は、（ａ）免疫細胞を標的化剤抗体抱合体と接触させて、免疫細胞−標的化剤抗体抱合体コンプレックスを産生する工程；および、（ｂ）標的細胞を免疫細胞−標的化剤抗体抱合体コンプレックスと接触させ、それによって免疫細胞からの免疫応答を調節する工程、を含み得る。
【０３３８】
あるいは方法は、（ａ）標的細胞を標的化剤抗体抱合体と接触させて、標的細胞−標的化剤抗体抱合体コンプレックスを産生する工程；および、（ｂ）免疫細胞を標的細胞−標的化剤抗体抱合体コンプレックスと接触させ、それによって免疫細胞からの免疫応答を調節する工程、を含み得る。免疫細胞による細胞表面マーカと対話するターゲットとする薬剤抗体共役は、抗体を含むか、またはそれについてばらばらになることがある。免疫のものの上の細胞表面マーカはレセプターあるいは共受容体であることがある。共受容体はＣＤ３  Ｔ細胞共受容体で有り得る。免疫細胞による細胞表面マーカはタンパク質、糖タンパク質またはステロイドであることがある。造血細胞はＴ細胞であり得る。標的化剤抗体抱合体は、標的細胞上の細胞表面マーカと相互作用する非抗体部分を含んでいてもよい。標的化剤抗体抱合体は、標的細胞に対して免疫細胞を接続し得る。標的細胞は癌細胞であり得る。標的細胞はウイルス感染した細胞であり得る。標的細胞は免疫細胞であり得る。免疫細胞はＴ細胞であり得る。免疫細胞はマクロファージであり得る。免疫細胞はＢ細胞かもしれない。標的細胞上の細胞表面マーカは、受容体、共受容体、表面タンパク質、糖タンパク質、またはステロイドであり得る。標的化剤抗体抱合体の非抗体部分は、リガンド、サイトカイン、毒素、又は小分子を含みうる。免疫応答を調節する方法は、被検体に対して１つ以上の付加的な標的化剤抗体抱合体を投与する工程を含み得る。１つ以上の付加的な標的化剤抗体抱合体は、１つ以上の付加的な免疫細胞と相互作用し得る。１つ以上の付加的な免疫細胞は、前の免疫細胞と同じタイプの免疫細胞であり得る。例えば、第１の標的化剤抗体抱合体は、Ｔ細胞と相互作用することができ、第２の標的化剤抗体抱合体もまたＴ細胞と相互作用することができる。あるいは、またはさらに、１以上の付加的な免疫細胞は、以前の免疫細胞とは異なるタイプの免疫細胞であり得る。例えば、第１の標的化剤抗体抱合体は、抗原提示細胞と相互作用することができ、第２の標的化剤抗体抱合体はＴ細胞と相互作用することができる。１つ以上の付加的な標的化剤抗体抱合体は、１つ以上の付加的な細胞と相互作用し得る。１つ以上の付加的な細胞は、免疫細胞あるいは標的細胞と同じ細胞型であってもよい。例えば、第１の標的化剤抗体抱合体は、ウイルス感染した細胞と相互作用することができ、第２の標的化剤抗体抱合体はウイルス感染した細胞と相互作用することができる。代替的に、又は付加的に、１個以上の付加的な細胞は、免疫細胞または標的細胞とは異なっていてもよい。例えば、第１の標的化剤抗体抱合体は、細菌細胞と相互作用することができ、第２の標的化剤抗体抱合体はウイルス感染した細胞相互作用することができる。
【０３３９】
別の選択肢において、方法は、（ａ）標的化剤抗体抱合体に対して、標的細胞および免疫細胞を含有するサンプルを接触させる工程；および、（ｂ）標的化剤抗体抱合体コンプレックスを介して標的細胞と免疫細胞を接続し、それによって免疫細胞からの免疫応答を調節する工程、を含み得る。免疫細胞による細胞表面マーカと対話するターゲットとする薬剤抗体共役は、抗体を含むか、またはそれについてばらばらになることがある。免疫のものの上の細胞表面マーカはレセプターあるいは共受容体であることがある。共受容体はＣＤ３  Ｔ細胞共受容体で有り得る。免疫細胞による細胞表面マーカはタンパク質、糖タンパク質またはステロイドであることがある。免疫細胞はＴ細胞であってもよい。標的化剤抗体抱合体は、標的細胞上の細胞表面マーカと相互作用する非抗体部分を含んでいてもよい。標的化剤抗体抱合体は、標的細胞に対して免疫細胞を接続し得る。標的細胞は癌細胞であり得る。標的細胞はウイルス感染した細胞であり得る。標的細胞は免疫細胞であり得る。免疫細胞はＴ細胞であり得る。免疫細胞はマクロファージであり得る。免疫細胞はＢ細胞かもしれない。標的細胞上の細胞表面マーカは、受容体、共受容体、表面タンパク質、糖タンパク質、またはステロイドであり得る。標的化剤抗体抱合体の非抗体部分は、リガンド、サイトカイン、毒素、又は小分子を含みうる。免疫応答を調節する方法は、被検体に対して１つ以上の付加的な標的化剤抗体抱合体を投与する工程を含み得る。１つ以上の付加的な標的化剤抗体抱合体は、１つ以上の付加的な免疫細胞と相互作用し得る。１つ以上の付加的免疫細胞は、前の免疫細胞と同じタイプの免疫細胞であり得る。例えば、第１の標的化剤抗体抱合体は、Ｔ細胞と相互作用することができ、第２の標的化剤抗体抱合体もまたＴ細胞と相互作用することができる。代替的に、または付加的に、１つ以上の付加的免疫細胞は、前の免疫細胞と異なるタイプの免疫細胞であり得る。例えば、第１の標的化剤抗体抱合体は、抗原提示細胞と相互作用することができ、第２の標的化剤抗体抱合体はＴ細胞と相互作用することができる。１つ以上の付加的な標的化剤抗体抱合体は、１つ以上の付加的な細胞と相互作用し得る。１つ以上の付加的免疫細胞は、免疫細胞および標的細胞と同じタイプの細胞であり得る。例えば、第１の標的化剤抗体抱合体は、ウイルス感染した細胞と相互作用することができ、第２の標的化剤抗体抱合体はウイルス感染した細胞と相互作用することができる。代替的に、又は付加的に、１個以上の付加的な細胞は、免疫細胞または標的細胞とは異なっていてもよい。例えば、第１の標的化剤抗体抱合体は、細菌細胞と相互作用することができ、第２の標的化剤抗体抱合体はウイルス感染した細胞と相互作用することができる。
【０３４０】
免疫応答を調節する方法は、被検体に対する標的化剤抗体抱合体を含有する組成物を投与する工程を含み、ここで的化剤抗体抱合体は、免疫細胞上で細胞表面マーカと相互作用する抗体または抗体フラグメントを含む。免疫のものの上の細胞表面マーカはレセプターあるいは共受容体であることがある。共受容体はＣＤ３  Ｔ細胞共受容体で有り得る。免疫細胞による細胞表面マーカはタンパク質、糖タンパク質またはステロイドであることがある。免疫細胞はＴ細胞であり得る。標的化剤抗体抱合体は、第２の細胞上の細胞表面マーカと相互作用する非抗体部分を含んでいてもよい。標的化剤抗体抱合体は、第２の細胞に対して免疫細胞を接続し得る。第２の細胞は癌細胞であり得る。第２の細胞はウイルス感染した細胞であり得る。第２の細胞は免疫細胞であり得る。免疫細胞はＴ細胞であり得る。免疫細胞はマクロファージであり得る。免疫細胞はＢ細胞かもしれない。第２の細胞上の細胞表面マーカは、受容体、共受容体、表面タンパク質、糖タンパク質、またはステロイドであり得る。標的化剤抗体抱合体の非抗体部分は、リガンド、サイトカイン、毒素、又は小分子を含みうる。免疫応答を調節する方法は、被検体に対して１つ以上の付加的な標的化剤抗体抱合体を投与する工程を含み得る。１つ以上の付加的な標的化剤抗体抱合体は、１つ以上の付加的な免疫細胞と相互作用し得る。１つ以上の付加的免疫細胞は、前の免疫細胞と同じタイプの免疫細胞であり得る。例えば、第１の標的化剤抗体抱合体は、Ｔ細胞と相互作用することができ、第２の標的化剤抗体抱合体もまたＴ細胞と相互作用することができる。代替的に、または付加的に、１つ以上の付加的免疫細胞は、前の免疫細胞と異なるタイプの免疫細胞であり得る。例えば、第１の標的化剤抗体抱合体は、抗原提示細胞と相互作用することができ、第２の標的化剤抗体抱合体はＴ細胞と相互作用することができる。１つ以上の付加的な標的化剤抗体抱合体は、１つ以上の付加的な細胞と相互作用し得る。１つ以上の付加的免疫細胞は、免疫細胞又は第２の細胞と同じタイプの細胞であり得る。例えば、第１の標的化剤抗体抱合体は、ウイルス感染した細胞と相互作用することができ、第２の標的化剤抗体抱合体はウイルス感染した細胞と相互作用することができる。代替的に、又は付加的に、１個以上の付加的な細胞は、免疫細胞または第２の細胞とは異なっていてもよい。例えば、第１の標的化剤抗体抱合体は、細菌細胞と相互作用することができ、第２の標的化剤抗体抱合体はウイルス感染した細胞と相互作用することができる。
【０３４１】
＜Ｘ．付加的な適用＞
本明細書には２個以上の細胞を接続する方法がさらに開示される。方法は、標的化剤抗体抱合体を有する２個以上の細胞を含むサンプルを接続する工程を含み得る。標的化剤抗体抱合体は、（ａ）抗体または抗体フラグメントを含む第１の領域；及び（ｄ）非抗体部分を含有する第２の領域、を含みうる。抗体または抗体フラグメントは、第１の細胞上の表面マーカと相互作用し得る。非抗体部分は、第２の細胞上の表面マーカと相互作用し得る。第１および第２の細胞は同じタイプの細胞であってもよい。第１および第２の細胞は異なるタイプの細胞であってもよい。表面マーカは、受容体、共受容体、タンパク質、糖タンパク質、抗原、ポリサッカリドまたはステロイドであってもよい。方法は、１つ以上の付加的な標的化剤抗体抱合体と、サンプルを接触させる工程を含む。１つ以上の付加的な標的化剤抗体抱合体は、（ａ）抗体または抗体フラグメントを含む第１の領域；及び（ｄ）非抗体部分を含有する第２の領域、を含みうる。１つ以上の付加的な標的化剤抗体抱合体の、抗体または抗体フラグメントは、第１の細胞、第２の細胞、または第３の細胞上の表面のマーカと相互作用し得る。１つ以上の付加的な標的化剤抗体抱合体の、非抗体部分は、第１の細胞、第２の細胞、または第４の細胞上の表面のマーカと相互作用し得る。１番目、第２、第３および／または第４の細胞は、同じ細胞タイプであってもよい。１番目、第２、第３および／または第４の細胞は、異なる細胞タイプであってもよい。
【０３４２】
本明細書に開示される標的化剤抗体抱合体は、複数細胞を接続するために使用されてもよい。このような、多細胞複合体は、細胞に対する標的化剤抗体抱合体の付着によって形成され得る。細胞骨格および／または細胞マトリックスは、細胞に対する標的化剤抗体抱合体の付着によって形成され得る。
【０３４３】
この標的化剤抗体抱合体の第１の領域と第２の領域は、１つ以上のリンカーによって接続され得る。リンカーは、生分解性であり得る。リンカーは、切断可能であり得る。そのため、一時的な細胞-細胞複合体、足場、またはマトリックスは、標的化剤抗体抱合体の使用によって形成されてもよく、該標的化剤抗体抱合体は、2つ以上の細胞を接続するための、生分解性で、切断可能な、またはそうでなければ分解性のリンカーを含む。代替的に、または付加的に、リンカーは、切断または分解に抵抗し得る。そのため、恒久的又は半恒久的な細胞-細胞複合体、足場またはマトリックスは、標的化剤抗体抱合体の使用によって形成されてもよく、該標的化剤抗体抱合体は、２つ以上の細胞を接続するための、切断または分解に抵抗性のリンカーを含む。標的化剤抗体抱合体は、可動性の細胞−細胞抱複合体を作成するための、分解性及び非分解性リンカーの混合物を含み得る。
【０３４４】
標的化剤抗体抱合体の使用は、細胞間相互作用とシグナル伝達経路の解析を可能にし得る。細胞はさらに単離されてもよく、細胞の発現プロファイリングが実行されてもよい。これらの解析のタイプは、診断、予後、および／または、必要としている被検体における疾患または疾病の処置で使用され得る。
【実施例】
【０３４５】
＜実施例１：フローサイトメトリー解析：ＤＵＰＡ−フタル−ダブル−ＣＤ３のＣ４−２細胞への結合＞
本実施例では、二価リガンドが、高い結合活性を備えるＰＳＭＡホモダイマーの各サブユニットに同時に結合し得るように、抗ＣＤ３Ｆａｂに２つのＤＵＰＡリガンドを抱合させた。二価のＦａｂを合成するために、我々は２つの異なる位置（軽鎖のＳ２０２及び重鎖のＫ１３８）にＴＡＧコドンを導入し、上記のように二重変異体を発現させ、精製した。特に、発現レベルは、以前に発現された他の単一変異体および野生型抗体に匹敵した。二重変異体抗体を、上記のようにＰ−フタル酸（３）またはＰ−ＤＮＰ（４）と抱合させ；ＬＣ−ＭＳ分析は、４８時間以内に反応が完了し（＞９５％の効率）、二価抱合体であるＰ−フタル−ダブル−ａＣＤ３（１２）およびＰ−ＤＮＰ−ダブル−ａＣＤ３（１３）を産生した、ということを明らかにした。精製後、構造を、ＳＤＳ−ＰＡＧＥおよびＬＣ−ＭＳ（精製後の反応収率は＞９０％である）により確認した。Ｃ４−２細胞への二価抱合体の結合を、フローサイトメトリー（図９、表１）を用いて（一価の抱合体で共に）評価した。１価のＰ−フタル−ＨＫ１３８−ａＣＤ３（７）と比較された２価のＰ−フタル−ダブル−ａＣＤ３（１２）について、結合親和性において有意な改善が観察された（＞６０倍）。興味深いことに、Ｐ−ＤＮＰ−ダブルａＣＤ３（１３）は、すでに高い親和性を有していた一価の同等のＰ−ＤＮＰ−ＨＫ−１３８ａＣＤ３（８）以上の有意な改善を示さなかった。ＤＮＰ基の高い親和性にもかかわらず、その既知の高い免疫原性によりそのインビボでの使用が制限されるかもしれないので、Ｐ−フタル−ダブル−ａＣＤ３（１２）の強化された結合親和性は特に有望であった。
【０３４６】
【表１】
0006501270.tif 000058
【０３４７】
＜実施例２：実施例２：ＤＵＰＡ／抗ＣＤ３抱合体のインビトロでの細胞毒性＞
次に我々は、様々なＤＵＰＡ／ａＣＤ３抱合体のインビトロでの細胞毒性を比較した。新たに精製したヒト末梢血単核細胞（ｈＰＢＭＣｓ）を、Ｃ４−２（ＰＳＭＡ＋）細胞と、１０：１の比で（それぞれ１００，０００および１０，０００細胞）混合し、２４時間各抱合体とインキュベートした。野生型ＵＣＨＴ１ＦａｂおよびＤＵＰＡ−リンカー抱合体（Ｐ−ＤＮＰ、４）の１：１混合物を陰性対照として使用した。細胞毒性は、溶解した標的細胞から放出されるラクトースデヒドロゲナーゼ（ＬＤＨ）を測定することによって決定した。図１０および表２に示されるように、抱合体のそれぞれは、前のアッセイにおいてＣ４−２細胞に不十分に結合したＰ−フタルイミド−ＨＣ−１２３−ａＣＤ３（１１）を除いて、用量依存性の細胞毒性を示した。Ｐ−フタル−ＬＣ−１０９−ａＣＤ３（９）は、Ｐ−フタルイ−ＬＣ−２０２−ａＣＤ３（１０、ＥＣ５０  ０．４ｎＭ）およびＰ−フタル−ＨＣ−１３８−ａＣＤ３（７、ＥＣ５０  ０．５ｎＭ）に比べて、低減された細胞毒性（ＥＣ５０−４．１ｎＭ）を示したが、これらはすべて結合試験で同様の親和性を有していた。最後に、Ｐ−フタルイミド−ｄｏｕｂｌｅａ−ＣＤ３（１２）は、一価の構築物と比較して最も高い細胞傷害性（ＥＣ５０＊０．１ｎＭ）を示した。細胞毒性は、抱合されていないＤＵＰＡ−リンカーとＵＣＨＴ１Ｆａｂの混合物で測定された最高濃度でも、認められなかった。まとめると、これらの結果は、親和性だけでなく二重特異性（ｂｉｓｐｅｃｉｆｉｃ）のジオメトリが、大幅に細胞毒性に影響を与えることを示す。結合の、およびインビトロ細胞毒性のアッセイに基づいて、我々は、さらなる特徴付けのためにＰ−フタル−ダブルａＣＤ３（１２）抱合体（ＰＳＭＡ−標的低分子抗体抱合体、Ｐ−標的化剤抗体抱合体とも呼ばれる）を選択した。
【０３４８】
【表２】
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【０３４９】
最後に、シナプス形成の際に明らかであるロゼット形態は、Ｃ４−２細胞のＰ−標的化剤抗体抱合体の存在下でのみ明らかに観察された（図１１）。
【０３５０】
＜実施例３：インビボのＰＫおよび抗腫瘍活性＞
我々はまず、第１のＰ−標的化剤抗体抱合体の薬物動態を評価した。雄のスプラーグドーリーラットラット（Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ）に対し、Ｐ−標的化剤抗体抱合体について１および５ｍｇ／ｋｇ、または非抱合のＵＣＨＴ１Ｆａｂについて０．５ミリグラム／キログラムを、ゼロ時点にて（ａｔ  ｔｉｍｅ  ｚｅｒｏ）静脈内注射した。血液は、３２時間まで定期的に採取し、サンドイッチＥＬＩＳＡを用いて薬物濃度を測定するために処理した。興味深いことに、Ｐ−標的化剤抗体抱合体は、おそらく抱合後ＤＵＰＡ−リンカー部分全体の疎水性が増加したために、非抱合のＦａｂ（〜１時間）に比べて有意に改善された半減期（〜５−６時間）を示した。特に、Ｐ−標的化剤抗体抱合体は、それらの類似した分子量（〜５０，０００Ｄａ）にもかかわらず、ＢｉＴＥ（二重特異性Ｔ細胞エンゲージ、ヒトにおいて〜２時間の半減期）などの小さな二重特異性ｓｃＦｖに対して、改善された血清半減期を示した。Ｐ−標的化剤抗体抱合体の増強された血清半減期は、≧１ｘ／日投与のヒトの半減期に変換される。また、Ｐ−標的化剤抗体抱合体のサイズを小さくすると、固形腫瘍の浸透に有利であり得る。
【０３５１】
次に我々は、Ｐ−標的化剤抗体抱合体のインビボでの有効性を評価するために、マウス異種移植モデルを確立した。免疫不全ＮＯＤ／ＳＣＩＤマウスの皮下に、マトリゲル（ＢＤバイオサイエンス）中の１ｘ１０６Ｃ４−２細胞および２ｘ１０６  ｈＰＢＭＣｓの混合物を注射した。４日後、尾静脈を介して２ｍｇ／ｋｇの薬物を注入することにより処置を開始し、１０日間継続させた（ｎ＝６）。対照群では、マウスに、Ｐ−フタル（３）およびＵＣＨＴ１野生型のＦａｂの非抱合の混合物を注入し、マウスの別の群には、ビヒクルのみを注入した（ｎ＝６）。腫瘍の成長を、外部キャリパー（ｃａｌｉｐｅｒ）の測定によりモニターした。混合物およびビヒクルの群は、移植後およそ２週間で、腫瘍の成長を示した。しかし、治療群は、６週間（このとき他の２群のマウス全てを腫瘍の大きなサイズのために屠殺せねばならなかった）まで、任意の明白な腫瘍を生じなかった（図１２、表３）。組織学的検査により、対照群（ＰＢＳおよび混合物の群）のマウスにおいて固形腫瘍の形成が確認された一方で、治療群ではいかなる固形腫瘍も検出されなかった。Ｐ−標的化剤抗体抱合体の予防効果を確認した後、我々は、触知可能な腫瘍の形成を観察するまで治療を遅らせる異種移植モデルを導入した。この処置研究では、ヒト由来の細胞を用いた免疫再構築のためにより適切であることが知られている、ＮＯＤ／ｓｃｉｄガンマ（ＮＳＧ，  Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ）のマウスを使用する。０日目において、マトリゲル中の１ｘ１０６  Ｃ４−２細胞を皮下に注入し、３日後に、２０ｘ１０６  ｈＰＢＭＣｓを別途、腹腔内に注入した。このｈＰＢＭＣｓの別個の注入によって、周囲から腫瘍部位へとＴ細胞を向け直すための、Ｐ−標的化剤抗体抱合体の能力を評価することができる。触診可能な固形腫瘍（〜約１５０ｍｍ３）は、腫瘍移植後約２週間のマウスで形成され（ｎ＝７）、この時点で我々は、１０日間に１ｍｇ／ｋｇのＰ−標的化剤抗体抱合体での尾静脈注射を介して、処置を開始した。治療の１日目および第４日目に、我々はより多くの細胞傷害性エフェクター細胞を補充するために、すべての群に尾静脈を介して、同じドナーからのエキソビボで増やされた１０ｘ１０６個のＴ細胞を、注入した。治療が開始された後、腫瘍の急速な縮小が処置群観察された一方で、ビヒクル群（Ｎ＝７）は再び急速な腫瘍成長を示した。
【０３５２】
【表３−１】
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【０３５３】
【表３−２】
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【０３５４】
＜実施例４：第二世代Ｐ−リンカー化合物の合成＞
本実施例において、我々は第二世代Ｐ−リンカー化合物を合成し、これはＰＳＭＡ酵素阻害アッセイにおいて、第一世代のＰ−リンカーと比較して有意に改善された活性を示した。第二世代Ｐ−リンカー化合物のｉｎ  ｖｉｔｒｏおよびｉｎ  ｖｉｖｏでの有効性およびＰＫは、上述のように評価される。
【０３５５】
免疫不全マウス（ＮＯＤ／  ＳＣＩＤガンマ）における同所性前立腺癌異種移植モデルによって、我々は  移行し、養子移入されたヒトＴ細胞の、前立腺腫瘍への移動および侵入をモニターすることができる。免疫適格マウスにおける同系移植片前立腺癌モデルはまた、標的化剤抗体抱合体のインビボ活性および安全性をさらに調べるために利用される。その目的ために、マウスの前立腺癌細胞株ＲＭ−１−ｈＰＳＭＡ（Ｂ６マウスと同系である）が使用される。マウスＴ細胞を補充するために、マウス特異的なαＣＤ３のＦａｂ（２Ｃ１１）を、Ｐ−リンカーと上述のように抱合させる。重要なことは、ｍＰＳＭＡは、マウスにおける有効性および安全性の評価を可能にするＤＵＰＡ（Ｐ−リンカーの親酵素阻害剤）を強く結合する。Ｐ−標的化剤抗体抱合体の薬物動態および安全性は、非ヒト霊長類、カニクイザル（マカク属（ｃｙｎｏ））モデルで評価されている。以前の報告では、ｃｙｎｏＰＳＭＡのグルタミン酸カルボキシペプチダーゼ活性は、酵素アナログ阻害剤（ＤＵＰＡなど）によって効率的阻害され、故に我々のＤＵＰＡリンカーに対して高い親和性を有するはずである。カニクイザル／ヒトで交差反応性の標的化剤抗体抱合体は、高親和性でヒト／カニクイザル交差反応性のαＣＤ３Ｆａｂ（ＳＰ３４）に対するＤＵＰＡリンカーの抱合により調製される。  これらの研究の目的は、ヒトにおいてフェーズＩの用量漸増研究を導くために必要な情報を提供することである。
【０３５６】
＜実施例５：最適な標的化剤抗体抱合体の候補を決定するための、完全な構造活性相関の研究＞
我々は、Ｐ−リンカー化合物の親和性が、結果として得られるＰ−標的化剤抗体抱合体標的細胞の結合に有意に影響し、次に細胞ベースのアッセイにおいてそれらの細胞傷害活性に影響を与える、ということを見出した。さらに、Ｐ−リンカーの親和性を向上させるために、我々は、以前の構造活性相関（ＳＡＲ）データおよびＰＳＭＡ阻害剤複合体の共結晶構造（ｃｏ−ｃｒｙｓｔａｌ  ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ）を再検討した。分析に基づいて、我々は、第二世代Ｐリンカーの候補であるＰ−ＴｒｉＡ（図１５Ｊ化合物１４）を設計し、ここでＰ−フタルにおけるＣ−９のアミド基はトリアゾール結合で置換されており、短い直線状の炭化水素は２つの疎水性芳香族基、トリアゾール、及びフタルイミドの基（図１３）を接続するために使用された。
【０３５７】
ＰＳＭＡの阻害アッセイ
【０３５８】
４０ｍＭのＮａＯＨ中のＮ−アセチル−アスパルチル−グルタミン酸（ＮＡＡＧ）の１０  ｍＭ溶液を、反応バッファー（０．１Ｍトリス塩酸、ｐＨ値＝７．５）中に４０μＭまで希釈し、溶液を３８４ウェルプレートに添加した（ウェルあたり１０μＬ）。ＫＭ測定およびＫＭ陰性対照（ＰＳＭＡなし）のために、ＮＡＡＧ溶液を２倍ずつ連続希釈して、４０μＬ−３１２．５  ｎＭの範囲の最終ＮＡＡＧ濃度を得た。ＩＣ５０測定のために、４０μＭのＮＡＡＧ溶液を含む反応緩衝液中の標的化剤ＰＳＭＡ阻害剤を、５倍ずつ連続希釈して、１００μＬ−５１．２ｐＭの範囲の最終阻害剤濃度を得た。反応を開始するために、１０μＬのｒｈＰＳＭＡ（反応バッファー中に２０μＭ、Ｒ＆Ｄ  ｒｅｓｅａｒｃｈ）を各ウェルに添加した。反応緩衝液（１０μＬ）を、一連のＫＭ対照に加えた。  プレートを３０分間３７℃でインキュベートし、３分間、９５℃まで加熱した。グルタミン酸のレベルを、ＡｍｐｌｅｘＲ  Ｒｅｄグルタミン酸／グルタミン酸オキシダーゼアッセイキット（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を用いて定量した。蛍光強度を、それぞれ５４５および５９０  ｎｍの励起および発光フィルターで、ＳｐｅｃｔｒａＭａｘ Ｇｅｍｉｎｉ ＥＭマイクロプレートリーダー（ＧＭＩ）を用いて測定した。Ｋｉ値は、ＩＣ ５０およびＫＭ値からＣｈｅｎｇ−Ｐｒｕｓｏｆｆ式を用いて計算し、これらの値はＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍソフトウェアを用いて計算した。ＫＭ値（０．２８８μＭ）は、文献で報告されたものと一致している（Ｈｕｍｂｌｅｔ， Ｖ．； Ｍｉｓｒａ， Ｐ．； Ｂｈｕｓｈａｎ， Ｋ． Ｒ．； Ｎａｓｒ， Ｋ．； Ｋｏ， Ｙ．−Ｓ．； Ｔｓｕｋａｍｏｔｏ， Ｔ．； Ｐａｎｎｉｅｒ， Ｎ．； Ｆｒａｎｇｉｏｎｉ， Ｊ． Ｖ．； Ｍａｉｓｏｎ， Ｗ． Ｊ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ． ２００９， ５２， ５４４−５５０）。すべての報告されたデータは、３回の実験の平均を表す。
【０３５９】
図１６Ａおよび表４は、異なる阻害剤（Ｐ−Ｐｔｈａｌ、Ｐ−ＤＮＰおよびＰ−ＴｒｉＡ）による代表的なＰＳＭＡ阻害曲線を表す。既知のＰＳＭＡ阻害剤ＰＭＰＡは、対照として実験に使用された。
【０３６０】
【表４】
0006501270.tif 000062
【０３６１】
図１６Ｂおよび表５は、図１６Ａおよび表４に記載したのと同じ実験で得られたＫＭカーブを表す。
【０３６２】
【表５】
0006501270.tif 000063
【０３６３】
表６に示されるように、酵素ベースの抑制アッセイによって、Ｐ−ＴｒｉＡ（平均Ｋｉ＝４．８ｐＭ）がＰ−フタル（平均Ｋｉ＝２ｎＭ）と比較して４００倍以上の増強された親和性を示すことが明らかになった。
【０３６４】
【表６】
0006501270.tif 000064
【０３６５】
インビトロの細胞毒性アッセイ
【０３６６】
通常のフィコール−ハイパック比重遠心法によって、新鮮な健康ヒトドナー血液から、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を精製した。精製されたＰＢＭＣを洗浄し、１０％ＦＢＳを伴うＲＰＭＩ培地中のフラスコにおいて１時間インキュベートして、任意の付着細胞を除去した。Ｃ４−２（ＰＳＭＡ＋）細胞（標的細胞）を、０．０５％のトリプシン／ＥＤＴＡ溶液（ＨｙＣｌｏｎｅ）で分離し、１０％ＦＢＳを伴うＲＰＭＩで洗浄した。１ｘ１０４個の標的細胞を、１００ｍＬ中に１：１０比率でＰＢＭＣと混合して、異なる濃度の抱合及び非抱合Ｆａｂ（ＰＢＳ中の１０ｍＬ）と共に、３７°Ｃで２４および４８時間インキュベートした。各ウェルの細胞毒性を、Ｃｙｔｏｔｏｘ−９６非放射性細胞毒性アッセイキット（Ｐｒｏｍｅｇａ）を使用して、上清においてＬＤＨ（乳酸デヒドロゲナーゼ）のレベルに関して測定した。溶解液（１０ｍＬ、同キットにおいて提供される）を標的細胞のみを伴うウェルに加えて、最大限細胞を死滅させ、自発的な死滅を、エフェクターとビヒクル（１０ｍＬＰＢＳ）で処理された標的細胞とを備えるウェルから測定した。４９０ｎｍの吸光度を、ＳｐｅｃｔｒａＭａｘ２５０プレートリーダー（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ  Ｃｏｒｐ）を使用して記録した。パーセント細胞毒性は：％細胞毒性（吸光度ｅｘｐｔ―吸光度自発的な平均）／（吸光度最大 死滅 平均）―吸光度自発的な平均）ｘ１００によって計算される。
【０３６７】
図１７Ａ−Ｂは、２４時間４８時間で細胞毒性をそれぞれ示す。表７は、図１７Ａ−Ｂにおいて表されたグラフの数値を示す。
【０３６８】
【表７】
0006501270.tif 000065
【０３６９】
別の実験では、Ｐ−ＴｒｉＡをαＣＤＦａｂの抱合体に抱合させて、第二世代のＰ−標的化剤抗体抱合体を生成する。第二世代のＰ−標的化剤抗体抱合体のインビトロでの活性およびインビボでのＰＫ及び有効性を、第１世代のＰ−標的化剤抗体抱合体と比較する。２２ＲＶ１およびＰＣ−３−ｈｕＰＳＭＡ含む他のヒトＰＳＭＡ陽性前立腺癌細胞株を用いて、標的化剤抗体抱合体のインビトロでの有効性も評価する。さらに、標的化剤抗体抱合体の活性は、患者由来の前立腺癌組織でも試験される。対応するフルオレセインイソチオシアネート（ＦＩＴＣ）抱合体、および凍結組織マイクロアレイ（Ａｓｔｅｒａｎｄ）を用いて、Ｐ−リンカー部分の公表されている組織特異性は確認され得る。  上述した皮下異種移植モデルに加えて、前立腺の特定の腫瘍微小環境をより厳密に模倣する同所性前立腺癌モデルにおける、最適なＰ−標的化剤抗体抱合体構築物も、決定し得る。最適なＰ−標的化剤抗体抱合体構築物を決定するために、  ルシフェラーゼをつけた前立腺癌細胞株（ＬＮＣａＰ−Ｌｕｃ）を用いて、生物発光イメージングによる腫瘍の成長および退縮をモニターする。０日目において、癌細胞（１．０×１０６細胞）を、６週齢のＮＳＧマウスにおいて尾側の前立腺ローブ（ｐｏｓｔｅｒｉｏｒ  ｐｒｏｓｔａｔｉｃ  ｌｏｂｅ）において注入する。２週後に、新鮮な精製されたｈＰＢＭＣｓを腹腔内に注入する。腫瘍成長は１週当たり２度モニターされ、腫瘍の生物発光の増加は、腫瘍移植後約４週間で観察されると予想される。処置を開始する前に、マウスを採血し、適切な免疫再構築を、ＦＡＣＳを用いて周辺部のヒトＴ細胞を検出することによって評価する。治療中に、０．２〜１  ｍｇ／ｋｇのＰ−標的化剤抗体を、１０日間まで毎日、静脈内に投与する。腫瘍成長は８週までモニターされる。ＩＨＣの研究を行って、前立腺に浸潤したＴ細胞を検知する。
【０３７０】
＜実施例６：免疫適格のマウスにおける安全性と効果の研究＞
正確に薬物を評価し、かつ処置プロトコールを最適化するために、マウスＴ細胞を認識するＰ−標的化剤抗体抱合体を産生する。マウスＣＤ３に特異的に結合するハムスターモノクローナル１４５−２Ｃ１１（ＵＣＨＴ１がそうであるように、この抗体もイプシロンサブユニットを結合する）は、マウス・サロゲート標的化剤抗体抱合体の生成に使用される。１４５−２Ｃ１１の可変領域配列を文献から得て、合成遺伝子をｐＢＡＤ発現ベクターにクローニングして、Ｆａｂを含むｐＡｃＦを大腸菌で発現させる。我々はＦＡＣＳを使用してｍ−Ｐ−標的化剤抗体抱合体の結合を確認し、そのインビトロ活性を、精製されたｍＰＢＭＣｓを用いて測定する。我々のＰ−リンカー部分は、マウス、ラット、イヌ、およびサルを含む異なる起源からの様々なＰＳＭＡに対して同様の活性を示す、ｈＰＳＭＡ酵素阻害剤に基づいている。したがって、以前の研究で我々が開発した最適化ＤＵＰＡ  −リンカー化合物は、抗ｍ−ＣＤ３抗体に抱合されてもよく、それによりＰ−標的化剤抗体抱合体のマウス代用バージョン（ｍＰ標的化剤抗体抱合体）が素早く生成される。しかし、ヒトとは異なり、正常なマウス前立腺組織におけるｍＰＳＭＡの発現レベルは非常に低く、既知のマウス前立腺癌細胞株における過剰発現については、議論がある。したがってヒトのＰＳＭＡ発現レベルを模倣するために、我々は、ヒトＰＳＭＡ（ＲＭ−１−ｈＰＳＭＡ）が安定して形質導入されたマウスの前立腺癌細胞株ＲＭ−１を使用している。親ＲＭ−１細胞株は、ＭＨＣ−１欠損であり、且つＣ５７ＢＬ  ／６（Ｂ６）マウスと同系であって、ＲＭ−１−ｈＰＳＭＡも免疫適格Ｂ６マウスでよく成長することが知られている。我々はまず、ｍＰＢＭＣｓの存在下で、ＲＭ−１−ｈＰＳＭＡに対するｍＰ−標的化剤抗体抱合体のインビトロ活性を確認してもよい。我々は次に薬物動態パラメータを測定し、これはインビトロの活性実験を伴って、有効性研究のための投薬パラダイムを決定する。インビボでの研究のために、我々はＢ６マウスに０．５ｘ１０６  のＲＭ−１−ｈＰＳＭＡ細胞を同所性に注入している。１０日目までで、腫瘍が〜２００  ｍｍ３に達する場合、ｍＰ−標的化剤抗体抱合体を静脈内に注入することによって、マウスを処置する。我々は最小の効果的な用量、最適な投薬頻度および最大耐用量を決定する。我々はまた、多様な臓器（例えば脳、肝臓、心臓、腎臓、脾臓、肺、等）において、Ｂ６マウスでｍＰ−標的化剤抗体抱合体の免疫毒性を評価する。直接の比較が行われていないが、注目すべきは、いくつかの報告が、マウスの腎臓にはヒトと比べて相当量のｍＰＳＭＡが存在することを示唆しており、このことは腎毒性の評価の際に考慮されるべきである。    体重、上昇したサイトカインレベル（ＴＮＦ−α、ＩＦＮ−γ、ＩＬ−６、ＩＬ−２など）、およびＴ細胞の活性状態（ＣＤ６９およびＣＤ２５陽性）を処置の間に測定して、マウスにおけるサイトカイン放出症候群などの用量に関連する副作用をモニターする。  我々は、この研究において決定された最大耐用量および薬物動態パラメータを伴う用量依存的な効果のデータが、非ヒト霊長類研究における安全な開始用量のためのガイダンス、並びに男性における効果的な用量のよりよい推定を、提供すると信じている。
【０３７１】
＜実施例７：ヒト／カニクイザル交差反応性Ｐ−標的化剤抗体抱合体の生成および非ヒト霊長類における安全性の研究＞
我々は、非ヒト霊長類、カニクイザル（マカク属（ｃｙｎｏ））モデルにおけるＰ−標的化剤抗体抱合体の薬物動態および安全性を評価する。残念ながら、ＵＣＨＴ１はＮＨＰ中で安全性評価を可能にするのに十分なほどには、カニクイザルと交差反応しないことを同定した。したがって、ヒト／カニクイザル交差反応性のＰ−標的化剤抗体抱合体（ｃｙＰ−標的化剤抗体抱合体）を、ヒト／カニクイザル交差反応性のαＣＤ３Ｆａｂ（ＳＰ３４）に対するＰ−リンカーの連結によって調製し、これは高い親和性（Ｋｄ＝４ｎＭ）を備えるＣＤ３イプシロン鎖も結合する。ＳＰ３４がもともとマウス由来であるので、我々はＳＰ３４のキメラまたはヒト化バージョンを作っている。上述したように、我々のＰ−リンカー化合物は、ｃｙｎｏ−ＰＳＭＡと同様の親和性をするはずである。我々はｃｙｎｏＰＳＭＡでトランスフェクトされたＣＨＯ細胞との結合を確認する。Ｃ４−２細胞に対するインビトロ細胞毒性を、ｃｙＰＢＭＣの存在下で測定する。我々はまた、精製されたヒトおよびｃｙｎｏＴ細胞を用いるインビトロ細胞毒性アッセイにおいて同様のことを行い、それらの応答（標的細胞の溶解、効能、Ｔ細胞活性化状態、およびサイトカイン放出の、大きさ）を比較する。我々はまた、げっ歯類Ｃ４−２異種移植片モデルにおいて、二重特異性の有効性を評価し、上記のようにＰＫ、用量増加および用量頻度の研究を実行する。
【０３７２】
インビボでのＮＨＰ  ＰＫ研究のために、オスのカニクイザルは、ビヒクル対照又はｃｙＰ−標的化剤抗体抱合体を静脈内に受ける。血液サンプルは、ＰＫパラメータを決定するために、規則的な時点で収集される。私たちは、漸増投与のカニクイザルの安全性試験を設計するために、げっ歯類のＰＫ、安全性、および有効性試験データとともにカニクイザルＰＫデータを使用しており、ここで、オスの３匹のカニクイザルのグループは、ｃｙＰ−  標的化剤抗体抱合体の異なる量を、静脈内に３週間まで受る（チャールズリバー、ＳＮＢＬ、またはＣｏｖａｎｃｅによる）。安全試験中に動物は、死亡率または瀕死について、ならびに処置に対する臨床的症状または反応について、観察される。他の解析は、体温、眼科、体重、食料消費、循環器機能、血液学、血塊、血液生化学検査、検尿、リンパ球サブタイプの分類（ＦＡＣＳ）、サイトカイン放出および毒物動態を含めて行われる。血清もまた、ｃｙＰ−標的化剤抗体抱合体の血清濃度レベルの測定および免疫原性評価のために調製される。処置の後、動物からの組織と臓器は、徹底的な肉眼的評価、並びに病理組織検査にさらされる。これらの研究およびげっ歯類研究の目的は、ヒトにおいてフェーズＩの用量漸増研究に関する必要なデータを提供することである。
【０３７３】
＜実施例８：標的化剤抗体抱合体の産生の最適化、安定性試験、および生物学的分析法の開発＞
本実施例において我々は、本明細書中に記載の研究について十分な素材を提供するために、Ｐ−標的化剤抗体抱合体の産生を最適化するプロトコルを開発している。ヒト化ＳＰ３４配列を、発酵ベクター（ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ  ｖｅｃｔｏｒｓ）の異なるタイプにサブクローニングして、最適な誘導系をスクリーニングする。我々はまた、他の発酵パラメーターと同様に大腸菌細胞株も最適化し、発現系の安定性を判定する。発酵バッチからの抗体を、以前の小さなバッチの発現からの１つと比較して、それらの純度と活性を確認する。標的化剤の抱合条件（温度、ｐＨ、濃度およびリガンド−抗体の比）を、大規模反応物のために最適化する。代替の精製法は、大規模な抱合の後に過剰な標的化剤を容易に除去するために試験される。我々は、無菌条件下の３７℃で、プールされたヒト血清中でインキュベートすることにより、Ｐ−標的化剤抗体抱合体の血清安定性を試験する。アリコートは、ＬＳ−ＭＳによって、未変化のＰ−標的化剤抗体抱合体および分解産物（例えば遊離したＤＵＰＡ−リンカー）の濃度について、一定の時間間隔で分析される。インビトロの細胞毒性も、血清中のＰ−標的化剤抗体抱合体の濃度を決定するために実行される。熱安定性プロファイルは、親ＳＰ３４と比較してＰ−標的化剤抗体抱合体のＴｍを決定するために、示差走査熱量測定（ＤＳＣ）によって評価される。長期安定性は、様々な事前処方物（ｐｒｅ−ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ）バッファー中の異なる濃度（１−５０ｍｇ／ｍｌ）で、少なくとも２か月にわたって４°Ｃで試験される。我々はまた、Ｐ−標的化剤抗体抱合体の薬物動態パラメータをより正確に決定するための、生物学的分析法を開発している。薬物動態研究において、機能的に未反応のＰ−標的化剤抗体抱合体を単に検出するために、ｈｕＰＳＭＡをコートされたＥＬＩＳＡプレート用いて血清中のＰ−標的化剤抗体抱合体を捕捉し、続いてヘキサヒスチジンタグ（Ｈｉｓ−ｔａｇ）（配列番号：４１）を備える精製されたＣＤ３イプシロン鎖でインキュベートした。西洋わさびペルオキシダーゼが抱合された二次的なαＨｉｓタグ抗体でインキュベートした後、シグナルを化学発光キットを使用して視覚化する。免疫原性研究について、Ｐ−標的化剤抗体抱合体は、センサチップに対して共有結合で固定され、Ｐ−標的化剤抗体抱合体に対する血清抗体反応は、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）検出によって解析される。血清試料中で観察される、Ｐ−標的化剤抗体抱合体に対する結合の特異性は、遊離したＰ−標的化剤抗体抱合体を使用した競合実験によって確認される。
【０３７４】
＜実施例９：（Ｓ）−２−（３−（（Ｓ）−５−（４−（６−（４−（１−（アミノオキシ）−２−オキソ−６，９，１２−トリオキサ−３−アザテトラデカン−１４−イルカルバモイル）ベンズアミド）ヘキシル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）−１−カルボキシペンチル）ウレイド）ペンタン二酸（Ｐ−ＴｒｉＡ）の合成＞
【０３７５】
（１０Ｓ，１４Ｓ）−トリ−ｔｅｒｔ−ブチル（２，２−ジメチル−４，１２−ジオキソ−３−オキサ−５，１１，１３−トリアザヘキサデカン−１０，１４，１６−トリカルボキシラート）の合成
【０３７６】
図１５Ａ中に表される反応模式図で示されるように、 ＣＨ２ＣＬ２（１５０ｍＬ）中の１（５．８３ｇ、１９．７ｍｍｏｌ）の溶液に、トリホスゲン（２．９２ｇ、９．８５ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を−７８°Ｃまで冷却し、Ｅｔ３Ｎ（２７．５ｍＬ、０．１９７ｍｏｌ）をゆっくりと加えた。反応混合物を周囲温度で１時間撹拌した後、 ＣＨ２ＣＬ２ （１０ ｍＬ）中の溶液２（Ｍａｉｎｄｒｏｎ， Ｎ．； Ｐｏｕｐａｒｔ， Ｓ．； Ｈａｍｏｎ， Ｍ．； Ｌａｎｇｌｏｉｓ， Ｊ．−Ｂ．； Ｐｌｅ， Ｎ．； Ｊｅａｎ， Ｌ．； Ｒｏｍｉｅｕ， Ａ．； Ｒｅｎａｒｄ， Ｐ．−Ｙ． Ｏｒｇ． Ｂｉｏｍｏｌ． Ｃｈｅｍ．， ２０１１， ９， ２３５７−２３７０） を加えた。周囲温度で１４時間撹拌した後、飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液で反応混合物をクエンチした。 ＣＨ２ＣＬ２で水層を抽出し、混ぜ合わせた有機質層をＭｇＳＯ４で乾燥させて、真空で濃縮した。残留物をシリカゲル（ＥｔＯＡｃ：ｎ−ヘキサン＝１：３）上のフラッシュカラム・クロマトグラフィーで精製して、浅黄色の油として、１１．２ｇ（９７％）の３を産出した。Ｒｆ ０．５ （ＥｔＯＡｃ ： ｎ−ヘキサン ＝ １ ： ２）；１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ５．５０ （ｄ， １Ｈ， Ｊ ＝ ８．３ Ｈｚ）， ５．４６ （ｄ， １Ｈ， Ｊ ＝ ８．０ Ｈｚ）， ５．０１ （ｓ， １Ｈ）， ４．３１ （ｍ， ２Ｈ）， ３．０４ （ｍ， ２Ｈ）， ２．２６ （ｍ， ２Ｈ）， ２．０３ （ｍ， １Ｈ）， １．８３ （ｍ， １Ｈ）， １．７０ （ｍ， １Ｈ），１．５８ （ｍ， １Ｈ）， １．４１ （ｓ， ９Ｈ）， １．４０ （ｓ， ９Ｈ）， １．３９ （ｓ， ９Ｈ）， １．３８ （ｓ， ９Ｈ）， １．３２ （ｍ， ４Ｈ）； ＬＲ−ＭＳ （ＥＳＩ＋） ｍ／ｚ ５８８ （Ｍ ＋ Ｈ＋）．
【０３７７】
（Ｓ）−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル２−（３−（（Ｓ）−６−アミノ−１−ｔｅｒｔ−ブトキシ−１−オキソヘキサン−２−イル）ウレイド）ペンタンジオアートの合成
【０３７８】
図１５Ｂ中に表される反応模式図で示されるように、 ＣＨ２ＣＬ２（１５０ｍＬ）中の３（１０．８ｇ、１８．４ｍｍｏｌ）の溶液に、２，６−ルチジン（４．２９ｍＬ，３６．８ｍｍｏｌ）およびＴＭＳＯＴｆ（５．００ｍＬ、２７．６ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。周囲温度で３０分撹拌した後、ＭｅＯＨで反応混合物をクエンチし、真空で濃縮した。残留物をシリカゲル（ＥｔＯＡｃ：ｎ−ヘキサン ＝ ３ ： １ から ＭｅＯＨ ： ＥｔＯＡｃ ＝ １ ： １０）上のフラッシュカラム・クロマトグラフィーで精製して、黄色の油として、８．０９ ｇ （９０％）の４を産出した。Ｒｆ ０．４ （ＭｅＯＨ ： ＥｔＯＡｃ ＝ １ ： １０）；ＬＲ−ＭＳ （ＥＳＩ＋） ｍ／ｚ ４８８ （Ｍ ＋ Ｈ＋）．
【０３７９】
（Ｓ）−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル２−（３−（（Ｓ）−６−ａｚｉｄｏ−１−ターシャリ−ブトキシ−１−オキソヘキサン−２−イル）ウレイド）ペンタンジオアートの合成
【０３８０】
図１５Ｃ中に表される反応模式図で示されるように、ＣＨ３ＣＮ（３０ｍＬ）中のアジカナトリウム（１．５５ｇ、２３．８ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｔｆ２Ｏ（３．２０ｍＬ、１９．０ｍｍｏｌ）を０℃にて滴下で加えた。１時間後、ＣＨ３ＣＮ（ｍＬ）中の４（５．８０ｇ，１１．９ｍｍｏｌ）、Ｅｔ３Ｎ（４．９８ｍＬ，３５．７ｍＬ）およびＣｕＳＯ４  （３８．０ｍｇ，０．２３８ｍｍｏｌ）の溶液に、上のトリフリン酸アジド（ｔｒｉｆｌｉｃ  ａｚｉｄｅ）を０℃で滴下で加えた。周囲温度で１４時間撹拌した後、飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液で反応混合物をクエンチした。ＥｔＯＡｃで水層を抽出し、混ぜ合わせた有機質層をＭｇＳＯ４で乾燥させて、真空で濃縮した。残留物をシリカゲル（ＥｔＯＡｃ：ｎ−ヘキサン＝１：３）上のフラッシュカラム・クロマトグラフィーで精製して、白色固形物として、３．２０ ｇ （５２％）の５を産出した。Ｒｆ ０．３ （ＥｔＯＡｃ ： ｎ−ヘキサン ＝ １ ： ２）；１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ６．３３ （ｓ， ２Ｈ）， ５．２２ （ｍ， ２Ｈ）， ４．２８ （ｍ， ２Ｈ）， ３．２６ （ｔ， ２Ｈ， Ｊ ＝ ６．８ Ｈｚ）， ２．２８ （ｍ， ２Ｈ）， ２．０２ （ｍ， １Ｈ）， １．８６ （ｍ， １Ｈ）， １．７７ （ｍ， １Ｈ）， １．６１ （ｍ， ３Ｈ）， １．４６ （ｓ， １８Ｈ）， １．４３ （ｓ， ９Ｈ）； ＬＲ−ＭＳ （ＥＳＩ＋） ｍ／ｚ ５１４ （Ｍ ＋ Ｈ＋）．
【０３８１】
ｔｅｒｔ−ブチル  オクタ−７−イニルカルバマートの合成
【０３８２】
図１５Ｄ中に表される反応模式図で示されるように、ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ （４／４ ｍＬ） 中の６ （Ｃｏｕｔｒｏｔ， Ｆ．； Ｒｏｍｕａｌｄ， Ｃ．； Ｂｕｓｓｅｒｏｎ， Ｅ． Ｏｒｇ． Ｌｅｔｔ．， ２００８， １０， ３７４１−３７４４ ） （１０１ ｍｇ， ０．８０７ ｍｍｏｌ） の溶液に、ＮａＨＣＯ３ （１０２ ｍｇ， １．２１ ｍｍｏｌ）およびＢｏｃ２Ｏ （０．２１０ ｍＬ， ０．９６８ ｍｍｏｌ） を加えた。周囲温度で１４時間撹拌した後、飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液で反応混合物をクエンチした。ＥｔＯＡｃで水層を抽出し、混ぜ合わせた有機質層をＭｇＳＯ４で乾燥させて、真空で濃縮した。残留物をシリカゲル（ＥｔＯＡｃ ： ｎ−ヘキサン ＝ １ ： ７） 上のフラッシュカラム・クロマトグラフィーで精製して、浅黄色の油として、１４４ ｍｇ （７９％）の７を産出した。Ｒｆ ０．５ （ＥｔＯＡｃ ： ｎ−ヘキサン ＝ １ ： ７）；ＬＲ−ＭＳ （ＥＳＩ＋） ｍ／ｚ ２２６ （Ｍ ＋ Ｈ＋）．
【０３８３】
（Ｓ）−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル２−（３−（（Ｓ）−１−ｔｅｒｔ−ブトキシ−６−（４−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）ヘキシル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）−１−オキソヘキサン−２−イル）ウレイド）ペンタンジオアートの合成
【０３８４】
図１５Ｅ中に表される反応模式図で示されるように、ＴＨＦ （２０ ｍＬ）中の５ （７７０ ｍｇ， １．２５ ｍｍｏｌ）， ７ （３０９ ｍｇ， １．３７ ｍｍｏｌ） および アスコルビン酸ナトリウム（９９．１ ｍｇ， ０．５００ ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｈ２Ｏ （３．２ ｍＬ）中ＣｕＳＯ・Ｈ２Ｏ（６２．４ ｍｇ， ０．２５０ ｍｍｏｌ）の溶液を加えた。周囲温度で３０分間撹拌した後、ＥｔＯＡｃで水層を抽出し、混ぜ合わせた有機質層をＭｇＳＯ４で乾燥させて、真空で濃縮した。残留物をシリカゲル（ＥｔＯＡｃ：ｎ−ヘキサン＝２：１）上のフラッシュカラム・クロマトグラフィーで精製して、白色固形物として、６４４ ｍｇ （７０％）の８を産出した。Ｒｆ ０．３ （ＥｔＯＡｃ ： ｎ−ヘキサン ＝ ２ ： １）；１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ５．２８ （ｍ， ２Ｈ）， ４．５７ （ｓ， １Ｈ）， ４．３０ （ｍ， ４Ｈ）， ３．０８ （ｍ， ２Ｈ）， ２．６７ （ｔ， ２Ｈ， Ｊ ＝ ７．７ Ｈｚ）， ２．３０ （ｍ， ２Ｈ）， ２．０４ （ｍ， ２Ｈ）， １．８９ （ｍ， ２Ｈ）， １．７８ （ｍ， ２Ｈ）， １．６４ （ｍ， ３Ｈ）， １．４４ （ｓ， ９Ｈ）， １．４１ （ｓ， ２７Ｈ）， １．３７ （ｍ， ８Ｈ）； ＬＲ−ＭＳ （ＥＳＩ＋） ｍ／ｚ ７３９ （Ｍ ＋ Ｈ＋）．
【０３８５】
（Ｓ）−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（２−（３−（（Ｓ）−６−（４−（６−アミノヘキシル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）−１−ターシャリ−ブトキシ−１−オキソヘキサン−２−イル）ウレイド）ペンタンジオアート）の合成
【０３８６】
図１５Ｆ中に表される反応模式図で示されるように、 ＣＨ２ＣＬ２（１０ｍＬ）中の８（６４４ｍｇ，０．８７２ｍｍｏｌ）の溶液に、２，６−ルチジン（０．２００ｍＬ，１．７４ｍｍｏｌ）およびＴＭＳＯＴｆ（０．２４０ｍＬ，１．３１ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。周囲温度で３０分撹拌した後、ＭｅＯＨで反応混合物をクエンチし、真空で濃縮した。残留物をシリカゲル（ＥｔＯＡｃ：ｎ−ヘキサン＝３：１からＭｅＯＨ：ＥｔＯＡｃ＝１：１０）上のフラッシュカラム・クロマトグラフィーで精製して、黄色の油として、３５１ ｍｇ （６３％）の９を産出した。Ｒｆ ０．２ （ＭｅＯＨ ： ＥｔＯＡｃ ＝ １ ： １０）；ＬＲ−ＭＳ （ＥＳＩ＋） ｍ／ｚ ６３９ （Ｍ ＋ Ｈ＋）．
【０３８７】
メチル４−（２，２−ジメチル−４，８−ジオキソ−３，６，１２，１５，１８−ペンタオキサ−５，９−ジアザイコサン−２０−イルカルバモイル）ベンゾアートの合成
【０３８８】
図１５Ｇ中に表される反応模式図で示されるように、 ＣＨ２ＣＬ２（５ｍＬ）中の１０（Ｈａｇｅｍｅｙｅｒ，Ｃ；Ｐｅｔｅｒ，Ｋ．；Ｊｏｈｎｓｔｏｎ，Ａ．Ｐ．Ｒ．；Ｏｗｅｎ，Ｄ．ＰＣＴ国際出願．国際公開第２０１２１４２６５９Ａ１，２０１２）（７４．５ｍｇ，０．２０９ｍｍｏｌ）の溶液に、ｉ−ＰｒＮＥｔ（５４．７μＬ，０．３１４ｍｍｏｌ）および４−（クロロカルボニル）安息香酸メチルエステル（１２５ｍｇ、０．６２７ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。周囲温度で１２時間撹拌した後、飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液で反応混合物をクエンチした。 ＣＨ２ＣＬ２で水層を抽出し、混ぜ合わせた有機質層をＭｇＳＯ４で乾燥させて、真空で濃縮した。残留物をシリカゲル（ＭｅＯＨ ： ＥｔＯＡｃ ＝ １ ： ２０）上のフラッシュカラム・クロマトグラフィーで精製して、浅黄色の油として、９８．１ ｍｇ （８９％） の１１を産出した。Ｒｆ ０．４ （ＭｅＯＨ ： ＥｔＯＡｃ ＝ １ ： １０）；ＬＲ−ＭＳ （ＥＳＩ＋） ｍ／ｚ ５５０ （Ｍ ＋ Ｎａ＋）．
【０３８９】
４−（２，２−ジメチル−４，８−ジオキソ−３，６，１２，１５，１８−ペンタオキサ−５，９−ジアザイコサン−２０−イルカルバモイル）安息香酸の合成
【０３９０】
図１５Ｈ中に表される反応模式図で示されるように、ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（５／５ｍＬ）中の１１（２００ｍｇ，０．３７９ｍｍｏｌ）の溶液に、ＬｉＯＨ・Ｈ２Ｏ（２３．９ｍｇ，０．５６９ｍｍｏｌ）を加えた。周囲温度で４時間撹拌した後、２ＮＨＣｌで反応混合物を酸性化した。ＥｔＯＡｃで水層を抽出し、混ぜ合わせた有機質層をＭｇＳＯ４で乾燥させて、真空で濃縮した。残留物をシリカゲル（ＭｅＯＨ ： ＥｔＯＡｃ ＝ １ ： ７）上のフラッシュカラム・クロマトグラフィーで精製して、浅黄色の油として、１１８ ｍｇ （７４％） の１２を産出した。Ｒｆ ０．２ （ＭｅＯＨ ： ＥｔＯＡｃ ＝ １ ： ７）；ＬＲ−ＭＳ （ＥＳＩ＋） ｍ／ｚ ５３６ （Ｍ ＋ Ｎａ＋）．
【０３９１】
（Ｓ）−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル２−（３−（（Ｓ）−１−ｔｅｒｔ−ブトキシ−６−（４−（６−（４−（２，２−ジメチル−４，８−ジオキソ−３，６，１２，１５，１８−ペンタオキサ−５，９−ジアザイコサン−２０−イルカルバモイル）ベンズアミド）ヘキシル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）−１−オキソヘキサン−２−イル）ウレイド）ペンタンジオアートの合成
【０３９２】
図１５Ｉ中に表される反応模式図で示されるように、ＤＭＦ（５ｍＬ）中の９（４５．８ｍｇ，７１．７μｍｏｌ）および１２（４３．８ｍｇ，７１．７μｍｏｌ）の溶液に、ＥＤＣＩ（４１．２ｍｇ，０．２１５ｍｍｏｌ），ＨＯＢｔ（２９．１ｍｇ，０．２１５ｍｍｏｌ）およびＥｔ３Ｎ（３０．０μＬ，０．２１５ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。周囲温度で１４時間撹拌した後、飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液で反応混合物をクエンチした。ＥｔＯＡｃで水層を抽出し、混ぜ合わせた有機質層をＭｇＳＯ４で乾燥させて、真空で濃縮した。残留物をシリカゲル（ＭｅＯＨ：ＥｔＯＡｃ＝１：１５）上のフラッシュカラム・クロマトグラフィーで精製して、浅黄色の油として、２２．０ｍｇ（２７％）の１３を産出した。ＬＲ−ＭＳ （ＥＳＩ＋） ｍ／ｚ １１３４ （Ｍ ＋ Ｈ＋）．
【０３９３】
（Ｓ）−２−（３−（（Ｓ）−５−（４−（６−（４−（１−（アミノオキシ）−２−オキソ−６，９，１２−トリオキサ−３−アザテトラデカン−１４−イルカルバモイル）ベンズアミド）ヘキシル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）−１−カルボキシペンチル）ウレイド）ペンタン２酸（Ｐ−ＴｒｉＡ）の合成
【０３９４】
図１５Ｊ中に表される反応模式図で示されるように、 ＣＨ２ＣＬ２（１．５ｍＬ）中の１３（２６．６ｍｇ，２３．４μｍｏｌ）の溶液に、ＴＦＡ（１．５ｍＬ）を加えた。周囲温度で１４分撹拌した後、ＭｅＯＨで反応混合物をクエンチし、真空で濃縮した。残留物をシリカゲル（ＭｅＯＨ：ＥｔＯＡｃ＝１：１５）上のフラッシュカラム・クロマトグラフィーで精製して、浅黄色の油として２０．１ｍｇ（９９％）の１４を産出した。ＬＲ−ＭＳ（ＥＳＩ＋）ｍ／ｚ ８６６（Ｍ＋Ｈ＋）。ＥＳＩ−ＭＳ分析と、およびデコンボリューションされた（ｄｅｃｏｎｖｏｌｕｔｅｄ）、抗ＣＤ３Ｆａｂ（ＵＣＨＴ１）のｐＡＣＦ変異体（ＬＣ−２０２Ｘ／ ＨＣ−１３８Ｘ）に抱合されたＰ−ＴｒｉａＡ（化合物１４）のマススペクトルが、図１５Ｋおよび１５Ｌにそれぞれ示される。
【０３９５】
【表８−１】
0006501270.tif 000066
【０３９６】
【表８−２】
0006501270.tif 000067
【０３９７】
【表８−３】
0006501270.tif 000068
【０３９８】
【表８−４】
0006501270.tif 000069
【０３９９】
【表８−５】
0006501270.tif 000070
【０４００】
【表８−６】
0006501270.tif 000071
【０４０１】
前述のものは、単に本発明の原理を示す。当業者は本発明の様々な改変を考案することができ、その改変は本明細書に明確には記載されずまたは示されないが、本発明の原理を包含し、およびその精神および範囲内に包含される、ということは認識されよう。さらに、本明細書に記載のすべての例及び条件付きの用語は、本発明の原理、および当該技術分野を発展させるために発明者が与えた概念を理解する上で、読者を助けることを意図し、そのような具体的に記載された例および条件に限定されないものと解釈されよう。さらに、本明細書の原理、態様、および実施形態、ならびにその具体例を列挙するすべての文は、その構造的および機能的等価物の両方を包含することが意図される。さらに、そのような等価物は、現在知られている等価物および、将来開発される等価物、すなわち構造に関わらず、同じ機能を実行する任意の要素の両方を含むことが意図される。従って、本発明の範囲は、本明細書に示されおよび記載される例示的実施形態に限定されるようには意図されない。むしろ、本発明の範囲及び精神は、添付の特許請求の範囲によって具現化される。
【０４０２】
本発明の好ましい実施形態が、本明細書に示され記載されている一方で、このような実施形態が、ほんの一例として提供されることは当業者に明白であろう。多数の変形、変化、及び置換は、本発明から逸脱することなく、当業者によって現在想到される。本明細書に記載される本発明の実施形態の様々な代案が、本発明の実施において利用され得ることを理解されたい。以下の特許請求の範囲が本発明の範囲を定義するものであり、この特許請求の範囲及びそれらの同等物の範囲内の方法及び構成がそれによって包含されることが、意図される。
【図１】
0006501270.tif 000073
【図２】
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【図３Ａ】
0006501270.tif 000075
【図３Ｂ】
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【図３Ｃ】
0006501270.tif 000077
【図３Ｄ】
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【図３Ｅ】
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【図４Ａ】
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【図４Ｂ】
0006501270.tif 000081
【図４Ｃ】
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【図４Ｄ】
0006501270.tif 000083
【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【図５Ｃ】
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【図６Ａ】
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【図６Ｂ】
0006501270.tif 000088
【図６Ｃ】
0006501270.tif 000089
【図７Ａ】
0006501270.tif 000090
【図７Ｂ】
0006501270.tif 000091
【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
0006501270.tif 000098
【図１５Ａ】
0006501270.tif 000099
【図１５Ｂ】
0006501270.tif 000100
【図１５Ｃ】
0006501270.tif 000101
【図１５Ｄ】
0006501270.tif 000102
【図１５Ｅ】
0006501270.tif 000103
【図１５Ｆ】
0006501270.tif 000104
【図１５Ｇ】
0006501270.tif 000105
【図１５Ｈ】
0006501270.tif 000106
【図１５Ｉ】
0006501270.tif 000107
【図１５Ｊ】
0006501270.tif 000108
【図１５Ｋ】
0006501270.tif 000109
【図１５Ｌ】
0006501270.tif 000110
【図１６Ａ】
0006501270.tif 000111
【図１６Ｂ】
0006501270.tif 000112
【図１７Ａ】
0006501270.tif 000113
【図１７Ｂ】
0006501270.tif 000114
【図１８Ａ】
0006501270.tif 000115
【図１８Ｂ】
0006501270.tif 000116
【図１８Ｃ】
0006501270.tif 000117
【図１８Ｄ】
0006501270.tif 000118
【図１８Ｅ】
0006501270.tif 000119
【図１８Ｆ】
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【配列表】
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