(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
創傷治癒の刺激に使用するための、寄託番号ＬＭＧ  Ｐ−２８２０２のＢａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ種の株の発酵エキスを含む組成物であって、該発酵エキスは、７０００Ｄａ未満の分子量を有するペプチド性の糖質材料を含有する、組成物。
【請求項２】
抗炎症剤として使用するための、寄託番号ＬＭＧ  Ｐ−２８２０２のＢａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ種の株の発酵エキスを含む組成物であって、該発酵エキスは、７０００Ｄａ未満の分子量を有するペプチド性の糖質材料を含有する、組成物。
【請求項３】
脂肪細胞のアディポネクチンレベルの化粧的非治療的増加、皮膚のコラーゲン合成の化粧的非治療的刺激、皮膚老化の化粧的非治療的処置および／もしくは防止、皮膚皺の化粧的非治療的処置および／もしくは防止、皮膚硬化の化粧的非治療的処置、ならびに／または皮膚の張りの喪失の化粧的非治療的防止のための、７０００Ｄａ未満の分子量を有するペプチド性の糖質材料を含有する、寄託番号ＬＭＧ  Ｐ−２８２０２のＢａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ種の株の発酵エキスを含む組成物。
【請求項４】
筋肉のミトコンドリア活性の化粧的非治療的増加、および／または筋持久力の増加のための、寄託番号ＬＭＧ  Ｐ−２８２０２のＢａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ種の株の発酵エキスを含む組成物であって、該発酵エキスは、７０００Ｄａ未満の分子量を有するペプチド性の糖質材料を含有する、組成物。
【請求項５】
筋肉のミトコンドリア活性の前記増加が、筋肉のＡＴＰのレベルおよび／またはクエン酸シンターゼ活性の増加である、請求項４に記載の組成物。
【請求項６】
筋持久力の前記増加が、有酸素持久力の増加である、請求項４に記載の組成物。
【請求項７】
有酸素持久力の前記増加が、筋肉におけるＩ型線維の割合の増加である、請求項６に記載の組成物。
【請求項８】
皮膚の上皮再形成の化粧的非治療的刺激のための、寄託番号ＬＭＧ  Ｐ−２８２０２のＢａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ種の株の発酵エキスを含む組成物であって、該発酵エキスは、７０００Ｄａ未満の分子量を有するペプチド性の糖質材料を含有する、組成物。
【請求項９】
脂肪蓄積の化粧的非治療的低減のための、寄託番号ＬＭＧ  Ｐ−２８２０２のＢａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ種の株の発酵エキスを含む組成物であって、該発酵エキスは、７０００Ｄａ未満の分子量を有するペプチド性の糖質材料を含有する、組成物。
【請求項１０】
肥満度指数（ＢＭＩ）の化粧的非治療的低減のための、寄託番号ＬＭＧ  Ｐ−２８２０２のＢａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ種の株の発酵エキスを含む組成物であって、該発酵エキスは、７０００Ｄａ未満の分子量を有するペプチド性の糖質材料を含有する、組成物。
【請求項１１】
筋線維の強度および緊張の化粧的非治療的増加のための、寄託番号ＬＭＧ  Ｐ−２８２０２のＢａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ種の株の発酵エキスを含む組成物であって、該発酵エキスは、７０００Ｄａ未満の分子量を有するペプチド性の糖質材料を含有する、組成物。
【請求項１２】
化粧品的または薬学的に有効な量の寄託番号ＬＭＧ  Ｐ−２８２０２のＢａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ種の株の発酵エキス、ならびに少なくとも１種の化粧品的および／または皮膚医薬的に許容される賦形剤および／または成分を含み、該発酵エキスは、７０００Ｄａ未満の分子量を有するペプチド性の糖質材料を含有する、化粧品組成物または皮膚医薬組成物。
【請求項１３】
前記発酵エキスが、化粧品または皮膚医薬の送達系および／もしくは徐放系に組み込まれるか、または固体有機ポリマーもしくは固体無機支持体上に吸着される、請求項１２に記載の化粧品組成物または皮膚医薬組成物。
【請求項１４】
クリーム、多重エマルション、溶液、液晶、無水組成物、水性分散液、油、乳液、バルサム、泡状物質、ローション、ジェル、クリームジェル、ハイドロアルコール溶液、ハイドログリコール溶液、ヒドロゲル、リニメント、美容液、石けん、シャンプー、コンディショナー、セラム、多糖類膜、軟膏、ムース、ポマード、パウダー、棒状物質、ペンシル、スプレーまたはエアロゾルによって形成される群から選択される製剤で提示される、請求項１２または１３のいずれかに記載の化粧品組成物または皮膚医薬組成物。
【請求項１５】
織物、不織布または医療デバイスに組み込まれる、請求項１２または１３のいずれかに記載の化粧品組成物または皮膚医薬組成物。
【請求項１６】
前記化粧品的および／または皮膚医薬的に許容される賦形剤および／または成分が、脂肪細胞のアディポネクチンのレベルを増加させる薬剤、ミトコンドリア活性を増加させる薬剤、筋肉のＡＴＰレベルを増加させる薬剤、治癒を刺激する他の薬剤、コアジュバント治癒剤、上皮再形成を刺激する薬剤、コアジュバント上皮再形成剤、脂肪細胞のトリグリセリド含量を低減する薬剤、脂肪細胞分化を遅延させる薬剤、ノクターニンの量を低減する薬剤、ノクターニンの発現を阻害する薬剤、脂肪分解剤もしくは脂肪分解を刺激する薬剤、静脈強壮剤、ＰＧＣ−１α発現をモジュレートする薬剤、ＰＰＡＲγの活性を阻害する薬剤、抗セルライト剤、皮脂生成を減少させる薬剤、真皮もしくは上皮の高分子の合成を刺激する、かつ／またはそれらの分解を阻害もしくは防止することができる薬剤、コラーゲン合成刺激剤、エラスチン合成刺激剤、デコリン合成刺激剤、ラミニン合成刺激剤、デフェンシン合成刺激剤、シャペロン合成刺激剤、ｃＡＭＰ合成刺激剤、ＡＱＰ−３をモジュレートする薬剤、アクアポリン合成をモジュレートする薬剤、アクアポリンファミリー由来のタンパク質、ヒアルロン酸合成刺激剤、グリコサミノグリカン合成刺激剤、フィブロネクチン合成刺激剤、サーチュイン合成刺激剤、熱ショックタンパク質、熱ショックタンパク質合成刺激剤、神経細胞の開口分泌を阻害する薬剤、抗コリン作用剤、筋収縮を阻害する薬剤、アンチエイジング剤、皺取り剤、制汗剤、抗炎症剤および／もしくは鎮痛剤、抗そう痒剤、鎮静剤、麻酔薬、アセチルコリン受容体のクラスター形成の阻害剤、アセチルコリンエステラーゼを阻害する薬剤、皮膚弛緩剤、メラニン合成の刺激剤もしくは阻害剤、白色化剤もしくは脱色剤、顔料沈着促進剤、セルフタンニング剤、ＮＯシンターゼ阻害剤、５α還元酵素阻害剤、リシルおよび／もしくはプロリルヒドロキシラーゼ阻害剤、抗酸化剤、フリーラジカルスカベンジャーおよび／もしくは抗大気汚染剤、反応性カルボニル種スカベンジャー、抗糖化剤、抗ヒスタミン剤、抗ウイルス剤、駆虫剤、乳化剤、皮膚軟化剤、有機溶媒、液体噴霧剤、皮膚コンディショナー、保湿剤、保湿物質、アルファヒドロキシ酸、ベータヒドロキシ酸、加湿剤、上皮加水分解酵素、ビタミン、アミノ酸、タンパク質、顔料もしくは着色剤、色素、バイオポリマー、ゲル化ポリマー、増粘剤、界面活性剤、柔軟剤、結合剤、保存剤、目の下の隈を低減もしくは処置することができる薬剤、落屑剤、角質溶解剤、剥離剤、抗微生物剤、抗真菌剤、静真菌剤、殺菌剤、静菌剤、角質層構成成分の合成を刺激する薬剤、セラミド、脂肪酸、コラーゲン分解を阻害する薬剤、マトリックスメタロプロテイナーゼを阻害する薬剤、エラスチン分解を阻害する薬剤、セリンプロテアーゼを阻害する薬剤、線維芽細胞増殖を刺激する薬剤、ケラチノサイト増殖を刺激する薬剤、メラニン細胞増殖を刺激する薬剤、ケラチノサイト分化を刺激する薬剤、抗過角化症剤、面皰溶解剤、抗乾癬剤、ＤＮＡ修復剤、ＤＮＡ保護剤、幹細胞保護剤、安定剤、敏感肌の処置および／もしくはケアのための薬剤、引締め剤、抗ストレッチマーク剤、収斂剤、ＰＡＲ−２の活性を阻害する薬剤、サイトカイン、成長因子、毛細血管循環および／もしくは微小循環に作用する薬剤、血管新生を刺激する薬剤、血管透過性を阻害する薬剤、細胞代謝に作用する薬剤、真皮−上皮接合部を改善する薬剤、育毛誘導剤、育毛阻害剤もしくは育毛遅延剤、抜け毛遅延剤、保存剤、芳香剤、化粧品用および／もしくは吸収性および／もしくは体臭マスキング用のデオドラント、キレート剤、植物エキス、エッセンシャルオイル、海産物エキス、生物工学的プロセスから得られた薬剤、ミネラル塩、細胞エキス、日焼け止めならびに紫外Ａおよび／もしくはＢ線および／もしくは赤外Ａ線に対して活性な有機もしくは無機光防護剤、またはそれらの混合物によって形成される群から選択される、請求項１２または１３のいずれかに記載の化粧品組成物または皮膚医薬組成物。
【請求項１７】
アディポネクチンレベルを増加させる、筋肉のミトコンドリア活性を増加させる、筋持久力および／もしくは皮膚の上皮再形成を増加させる、コラーゲン合成および／もしくはヒアルロン酸合成を刺激する、皮膚硬化を処置する、かつ／または皮膚の張りの喪失を防止するための非治療的組成物であって、化粧品的に有効な量の寄託番号ＬＭＧ  Ｐ−２８２０２のＢａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ種の株の発酵エキスを含み、該発酵エキスは、７０００Ｄａ未満の分子量を有するペプチド性の糖質材料を含有する、非治療的組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
開示されている技術は、アディポネクチンレベルを増加させる細菌起源の発酵エキスに関する。前記発酵エキスは、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ種の株によって分泌される。本発明はまた、前記発酵エキスを含有する化粧品組成物または皮膚医薬組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
皮膚、粘膜、毛髪および／または爪は、生物とその環境の間に身体的バリアを構成する。皮膚は、上皮および真皮の２種の組織から構成される。脂肪細胞は、真皮のより深い層である皮下組織に見られ、血管、神経およびリンパ節を含有する結合組織の中隔によって分離された小葉に組織化される。脂肪細胞の主な機能は、液胞にトリグリセリドとして脂肪を保存することである。
【０００３】
脂肪組織は、全身脂肪酸の恒常性の調節において極めて重要な役割を果たす。脂肪組織は、カロリー豊富な期間には、遊離脂肪酸（ＦＦＡ）をグリセロールにエステル化することによってトリグリセリドの形態で保存し、エネルギー不足の際には循環へとそれらを放出して戻す。また脂肪組織は、アディポカインまたは脂肪組織由来タンパク質と呼ばれるサイトカインを分泌することができる内分泌器官として作用する。
【０００４】
加齢および適切な身体活動の欠如と共に、身体の異なる部分における脂肪組織の沈着および筋肉量の低下が生じる。定期的な運動は、脂肪蓄積を低減し、筋持久力を増大し、それによっていくつかの肉体領域の様相がより引き締まり、より良好な身体的外観が得られる。運動の有益な効果は、アディポカインプロファイルの変化によって、すなわちアディポネクチンなどの抗炎症性サイトカインのレベルの増加によって、部分的に媒介されると考えられている［Golbidi  S.およびLaher  I.「Exercise  Induced  Adipokine  Changes  and  the  Metabolic  Syndrome」、J.  Diabetes  Res.、２０１４年；ＤＯＩ２０１４：７２６８６１；Petersen  A.  M.およびPedersen  B.  K.、「The  anti-inflammatory  effect  of  exercise」、J.  Appl.  Physiol.、２００５年、９８巻（４号）、１１５４〜１１６２頁；LaMonte  M.  J.ら、「Physical  activity  and  diabetes  prevention」、J.  Appl.  Physiol.、２００５年、９９巻、１２０５〜１２１３頁；Bruunsgaard  H.、「Physical  activity  and  modulation  of  systemic  low-level  inflammation」、J.  Leukoc.  Biol.、２００５年、７８巻（４号）、８１９〜８３５頁］。運動の効果は、遺伝子発現、タンパク質リガンド、および受容体結合のレベルにおいて記載されている［Moldoveanu  A.  I.ら、「The  cytokine  response  to  physical  activity  and  training」、Sports  Med.、２００１年、３１巻（２号）、１１５〜１４４頁］。
【０００５】
アディポネクチン（ＡｄｉｐｏＱ、ＡＣＤＣ、Ａｃｒｐ３０、ａｐＭ−１、ＡＰＭ１、ＧＢＰ２８、ＡＤＰＮおよびＡＤＩＰＱＴＬ１としても公知）は、脂肪細胞分化中に、脂肪組織によって分泌されるサイトカインである。ヒトアディポネクチンは、２４４のアミノ酸からなり、コラーゲン様および球状Ｃ１ｑ様のドメインを含む特徴的なドメイン構造を有しており、血中、少なくとも３つのホモマー複合体、すなわち、三量体、六量体およびそれより高次の多量体で循環する。血漿アディポネクチンレベルは、肥満度指数（ＢＭＩ）および腹腔内脂肪と逆相関し、さらに、血漿アディポネクチンレベルは、有酸素運動訓練によって増加する［Golbidi  S.およびLaher  I.「Exercise  Induced  Adipokine  Changes  and  the  Metabolic  Syndrome」、J.  Diabetes  Res.、２０１４年；ＤＯＩ２０１年：７２６８６１］。
【０００６】
アディポネクチンは、アディポネクチン受容体１（ＡｄｉｐｏＲ１）およびアディポネクチン受容体２（ＡｄｉｐｏＲ２）の２種の受容体の活性化によって、その機能を発揮する。アディポネクチンは、骨格筋細胞においてＡｄｉｐｏＲ１と結合し、リン酸化によって５’ＡＭＰ−活性化タンパク質キナーゼ（ＡＭＰＫ）経路を活性化して、分子の一連の応答を惹起し、それによって、最終的にグルコースの取込み、脂肪酸の酸化、ＡＴＰの生成およびミトコンドリアの生合成を刺激する［Kadowaki  T.およびYamauchi  T.「Adiponectin  and  adiponectin  receptors」、Endocr.  Rev.  ２００５年、２６巻：４３９〜４５１頁；Golbidi  S.およびLaher  I.「Exercise  Induced  Adipokine  Changes  and  the  Metabolic  Syndrome」、J.  Diabetes  Res.、２０１４年、２０１４：７２６８６１］。さらに、ヒト筋管をアディポネクチンで処置すると、ミトコンドリアの生合成、パルミテートの酸化およびクエン酸シンターゼ活性が誘導され［Civitarese  A.  E.ら、「Role  of  adiponectin  in  human  skeletal  muscle  bioenergetics.」  Cell  Metab.、２００６年、４巻（１号）：７５〜８７頁］、したがって、筋線維の強度および緊張の、身体的運動によって達成される強度および緊張と類似した増加が誘導されることが開示されている。
【０００７】
骨格筋は、筋肉線維（筋線維）を形成する筋細胞から構成される。筋線維は、筋形成として公知のプロセスにおいて、発達筋芽細胞（あるタイプの胚性前駆細胞）の融合から形成される。筋肉線維には、それらのミオシン重鎖（ＭｙＨＣ）イソ型およびそれらの酵素的能力が異なる２つの主なタイプがある。筋肉は、異なるタイプの筋肉線維の混合物によって構成されている。Ｉ型線維（遅筋）は、ミトコンドリア含量が高いことに起因して、高い酸化能の有酸素活動を有しており（脂肪酸を酸化する酵素を発現する）、ミオグロビンが豊富であり赤色の外観を伴い、Ｉ型線維に特異的なタンパク質マーカーであるミオシン重鎖７（ＭｙＨ７）を発現する［Couturier  A.ら「Carnitine  supplementation  to  obese  Zucker  rats  prevents  obesity-induced  type  II  to  type  I  muscle  fiber  transition  and  favors  an  oxidative  phenotype  of  skeletal  muscle」Nutrition  &  Metabolism、２０１３年、１０巻：４８頁］。ＩＩ型線維（速筋）は、ミトコンドリア含量が低いことに起因して、低い酸化能の無酸素活動を有しており、解糖代謝に応じてＡＴＰ（アデノシン三リン酸）を産生する。Ｉ型線維とＩＩ型線維の割合は、筋肉の作用に応じて決まる。Ｉ型線維は、主に無酸素運動に関与するＩＩ型線維と比較して、主に有酸素運動に関与し、すなわちＩ型線維の数が多いほど、筋持久力が高い。骨格筋の毛細血管密度が高い個体およびＩ型線維の割合が高い個体は、高い循環アディポネクチン濃度を示す［Ingelsson  E.ら、「Associations  of  Serum  Adiponectin  with  Skeletal  Muscle  Morphology  and  Insulin  Sensitivity」、J  Clin  Endocrinol  Metab、２００９年、９４巻（３号）：９５３〜９５７頁］。したがって、循環アディポネクチンのレベルの増加は、Ｉ型線維の割合および筋持久力を増加させると期待される。
さらに、アディポネクチンは、ケラチノサイトの増殖および遊走を促進することによって、皮膚創傷の治癒プロセス［欧州特許１６５１１６１Ｂ１］を誘導または加速することが報告されている［Shibata  S.ら「Adiponectin  regulates  cutaneous  wound  healing  by  promoting  keratinocyte  proliferation  and  migration  via  the  ERK  signaling  pathway」、J.  Immunol.、２０１２年、１８９巻（６号）：３２３１〜４１頁］。また、アディポネクチンは、コラーゲン合成を増大し、ヒアルロン酸シンターゼ２遺伝子発現を上方調節し、それによってヒアルロン酸の合成を増大することが報告されている［Ezure  T.ら「Adiponectin  and  leptin  up-regulate  extracellular  matrix  production  by  dermal  fibroblasts」、Biofactors.  ２００７年、３１巻（３〜４号）：２２９〜３６頁；Yamane  T.ら「Adiponectin  promotes  hyaluronan  synthesis  along  with  increases  in  hyaluronan  synthase  2  transcripts  through  an  AMP-activated  protein  kinase/peroxisome  proliferator-activated  receptor-α-dependent  pathway  in  human  dermal  fibroblasts」、Biochem.  and  Biophys.  Res.  Comm.  ２０１１年、４１５巻、２３５〜２３８頁］。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】Golbidi  S.およびLaher  I.「Exercise  Induced  Adipokine  Changes  and  the  Metabolic  Syndrome」、J.  Diabetes  Res.、２０１４年；ＤＯＩ２０１４：７２６８６１
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
驚くべきことに、本発明の発明者らは、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ種の株由来の発酵エキスが、アディポネクチンレベル、筋肉のミトコンドリア活性、筋肉のＡＴＰレベル、および筋持久力を増加させることを見出した。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
開示されている技術は、脂肪細胞におけるアディポネクチンのレベル、および筋肉のミトコンドリア活性を、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ種の株の発酵エキスによって増大するという解決策を提供する。
例えば、本発明は以下の項目を提供する。
（項目１）
アディポネクチンのレベルの増加、筋肉のミトコンドリア活性の増加、筋持久力の増加、創傷治癒の刺激および／または皮膚の上皮再形成に使用するための、Ｂａｃｉｌｌｕｓ
ｐｕｍｉｌｕｓ種の株の発酵エキス。
（項目２）
筋肉のミトコンドリア活性の前記増加が、筋肉のＡＴＰのレベルおよび／またはクエン酸シンターゼ活性の増加である、項目１に記載の発酵エキス。
（項目３）
筋持久力の前記増加が、有酸素持久力の増加である、項目１に記載の発酵エキス。
（項目４）
有酸素持久力の前記増加が、筋肉におけるＩ型線維の割合の増加である、項目３に記載の発酵エキス。
（項目５）
前記Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ種の株が、寄託番号ＬＭＧ  Ｐ−２８２０２のＢａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ種の株である、項目１から４のいずれかに記載の発酵エキス。
（項目６）
脂肪細胞のアディポネクチンレベルの化粧的非治療的増加、皮膚のコラーゲン合成の化粧的非治療的刺激、皮膚老化の化粧的非治療的処置および／もしくは防止、皮膚皺の化粧的非治療的処置および／もしくは防止、皮膚硬化の化粧的非治療的処置、ならびに／または皮膚の張りの喪失の化粧的非治療的防止のための、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ種の株の発酵エキスの使用。
（項目７）
前記Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ種の株が、寄託番号ＬＭＧ  Ｐ−２８２０２のＢａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ種の株である、項目６に記載の使用。
（項目８）
化粧品的または薬学的に有効な量のＢａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ種の株の発酵エキス、ならびに少なくとも１種の化粧品的および／または皮膚医薬的に許容される賦形剤および／または成分を含む、化粧品組成物または皮膚医薬組成物。
（項目９）
前記発酵エキスが、化粧品または皮膚医薬の送達系および／もしくは徐放系に組み込まれるか、または固体有機ポリマーもしくは固体無機支持体上に吸着される、項目８に記載の化粧品組成物または皮膚医薬組成物。
（項目１０）
クリーム、多重エマルション、溶液、液晶、無水組成物、水性分散液、油、乳液、バルサム、泡状物質、ローション、ジェル、クリームジェル、ハイドロアルコール溶液、ハイドログリコール溶液、ヒドロゲル、リニメント、美容液、石けん、シャンプー、コンディショナー、セラム、多糖類膜、軟膏、ムース、ポマード、パウダー、棒状物質、ペンシル、スプレーまたはエアロゾルによって形成される群から選択される製剤で提示される、項目８または９のいずれかに記載の化粧品組成物または皮膚医薬組成物。
（項目１１）
織物、不織布または医療デバイスに組み込まれる、項目８または９のいずれかに記載の化粧品組成物または皮膚医薬組成物。
（項目１２）
前記化粧品的および／または皮膚医薬的に許容される賦形剤および／または成分が、脂肪細胞のアディポネクチンのレベルを増加させる薬剤、ミトコンドリア活性を増加させる薬剤、筋肉のＡＴＰレベルを増加させる薬剤、治癒を刺激する他の薬剤、コアジュバント治癒剤、上皮再形成を刺激する薬剤、コアジュバント上皮再形成剤、脂肪細胞のトリグリセリド含量を低減する薬剤、脂肪細胞分化を遅延させる薬剤、ノクターニンの量を低減する薬剤、ノクターニンの発現を阻害する薬剤、脂肪分解剤もしくは脂肪分解を刺激する薬剤、静脈強壮剤、ＰＧＣ−１α発現をモジュレートする薬剤、ＰＰＡＲγの活性を阻害する薬剤、抗セルライト剤、皮脂生成を減少させる薬剤、真皮もしくは上皮の高分子の合成を刺激する、かつ／またはそれらの分解を阻害もしくは防止することができる薬剤、コラーゲン合成刺激剤、エラスチン合成刺激剤、デコリン合成刺激剤、ラミニン合成刺激剤、デフェンシン合成刺激剤、シャペロン合成刺激剤、ｃＡＭＰ合成刺激剤、ＡＱＰ−３をモジュレートする薬剤、アクアポリン合成をモジュレートする薬剤、アクアポリンファミリー由来のタンパク質、ヒアルロン酸合成刺激剤、グリコサミノグリカン合成刺激剤、フィブロネクチン合成刺激剤、サーチュイン合成刺激剤、熱ショックタンパク質、熱ショックタンパク質合成刺激剤、神経細胞の開口分泌を阻害する薬剤、抗コリン作用剤、筋収縮を阻害する薬剤、アンチエイジング剤、皺取り剤、制汗剤、抗炎症剤および／もしくは鎮痛剤、抗そう痒剤、鎮静剤、麻酔薬、アセチルコリン受容体のクラスター形成の阻害剤、アセチルコリンエステラーゼを阻害する薬剤、皮膚弛緩剤、メラニン合成の刺激剤もしくは阻害剤、白色化剤もしくは脱色剤、顔料沈着促進剤、セルフタンニング剤、ＮＯシンターゼ阻害剤、５α還元酵素阻害剤、リシルおよび／もしくはプロリルヒドロキシラーゼ阻害剤、抗酸化剤、フリーラジカルスカベンジャーおよび／もしくは抗大気汚染剤、反応性カルボニル種スカベンジャー、抗糖化剤、抗ヒスタミン剤、抗ウイルス剤、駆虫剤、乳化剤、皮膚軟化剤、有機溶媒、液体噴霧剤、皮膚コンディショナー、保湿剤、保湿物質、アルファヒドロキシ酸、ベータヒドロキシ酸、加湿剤、上皮加水分解酵素、ビタミン、アミノ酸、タンパク質、顔料もしくは着色剤、色素、バイオポリマー、ゲル化ポリマー、増粘剤、界面活性剤、柔軟剤、結合剤、保存剤、目の下の隈を低減もしくは処置することができる薬剤、落屑剤、角質溶解剤、剥離剤、抗微生物剤、抗真菌剤、静真菌剤、殺菌剤、静菌剤、角質層構成成分の合成を刺激する薬剤、セラミド、脂肪酸、コラーゲン分解を阻害する薬剤、マトリックスメタロプロテイナーゼを阻害する薬剤、エラスチン分解を阻害する薬剤、セリンプロテアーゼを阻害する薬剤、線維芽細胞増殖を刺激する薬剤、ケラチノサイト増殖を刺激する薬剤、メラニン細胞増殖を刺激する薬剤、ケラチノサイト分化を刺激する薬剤、抗過角化症剤、面皰溶解剤、抗乾癬剤、ＤＮＡ修復剤、ＤＮＡ保護剤、幹細胞保護剤、安定剤、敏感肌の処置および／もしくはケアのための薬剤、引締め剤、抗ストレッチマーク剤、収斂剤、ＰＡＲ−２の活性を阻害する薬剤、サイトカイン、成長因子、毛細血管循環および／もしくは微小循環に作用する薬剤、血管新生を刺激する薬剤、血管透過性を阻害する薬剤、細胞代謝に作用する薬剤、真皮−上皮接合部を改善する薬剤、育毛誘導剤、育毛阻害剤もしくは育毛遅延剤、抜け毛遅延剤、保存剤、芳香剤、化粧品用および／もしくは吸収性および／もしくは体臭マスキング用のデオドラント、キレート剤、植物エキス、エッセンシャルオイル、海産物エキス、生物工学的プロセスから得られた薬剤、ミネラル塩、細胞エキス、日焼け止めならびに紫外Ａおよび／もしくはＢ線および／もしくは赤外Ａ線に対して活性な有機もしくは無機光防護剤、またはそれらの混合物によって形成される群から選択される、項目８または９のいずれかに記載の化粧品組成物または皮膚医薬組成物。
（項目１３）
化粧品的または薬学的に有効な量のＢａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ種の株の発酵エキスを投与することを含む、アディポネクチンレベルを増加させる、筋肉のミトコンドリア活性を増加させる、筋持久力を増加させる、創傷治癒および／もしくは皮膚の上皮再形成を刺激する、コラーゲン合成および／もしくはヒアルロン酸合成を刺激する、皮膚老化を処置および／もしくは防止する、皮膚皺を処置および／もしくは防止する、皮膚硬化を処置する、かつ／または皮膚の張りの喪失を防止する方法。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
本発明は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ種の株の発酵エキス、アディポネクチンレベルを増加させるのに使用するためのその発酵エキス、およびその発酵エキスを含む化粧品組成物または皮膚医薬組成物に関する。驚くべきことに、本発明の発明者らは、上記の発酵エキスが、筋肉のミトコンドリア活性、筋持久力を増加させることも見出した。
【００１２】
定義
【００１３】
本発明の理解を容易にするために、本発明の文脈で使用されるいくつかの用語および表現の意味を挙げる。
【００１４】
本明細書で使用される場合、移行句「含む（comprising）」は、「含む（including）」、「含有する（containing）」または「によって特徴付けられる」と同義であり、包括的であり、または制限がなく、記載されていない追加の要素または方法ステップを除外しない。しかし、本明細書の「含む（comprising）」の各記載において、この用語は、代替実施形態として、句「から本質的になる」および「からなる」を包含することも企図し、ここで「からなる」は、特定されていない任意の要素またはステップを除外し、「から本質的になる」は、考慮される組成物または方法の必須のまたは基本的な、新規な特徴に実質的に影響を及ぼさない、記載されていない追加の要素またはステップを包含することができる。
【００１５】
本発明の文脈では、「皮膚」は、最上層または角質層から、最下層または皮下組織まで、その両方を含み皮膚を含む層であると理解される。これらの層は、中でもケラチノサイト、線維芽細胞、メラニン細胞および／または脂肪細胞などの異なるタイプの細胞から構成される。本発明の文脈では、用語「皮膚」は頭皮を含む。
【００１６】
用語「処置」は、「化粧的非治療的」という但し書きを伴わずに本明細書の文脈で使用される場合、疾患もしくは障害を軽減もしくは排除し、またはこの疾患もしくは障害と関連する１つもしくは複数の症状を低減もしくは排除するために本発明による化合物を投与することを意味する。また、用語「処置」は、疾患または障害の生理的な結果を軽減または排除する能力を含む。
【００１７】
用語「処置」は、「化粧的非治療的」という但し書きが伴う場合、限定されるものではないが、中でも皮膚の水和レベル、弾性、張り、艶、緊張または質感などの皮膚の化粧品上の質を改善する目的で、化合物を皮膚に適用することを指す。本発明の用語「ケア」は、皮膚の質の維持を指し、身体および／または毛髪の衛生を含む。これらの質は、健康な被験体、ならびに限定されるものではないが、中でも皮膚の潰瘍および病変、乾癬、皮膚炎、座瘡または酒さなどの皮膚の疾患および／または障害を呈する被験体の両方における皮膚の化粧上の処置および／またはケアによって改善され、維持される。
【００１８】
用語「防止」は、本発明で使用される場合、疾患または障害の出現または発生を、その出現前に防止し、遅延させ、または妨害する、本発明の化合物の能力を指す。
【００１９】
本発明の文脈では、用語「老化」は、老化（経年老化（chronoaging））を伴うか、または日光（光老化）もしくは環境物質、例えばたばこの煙、気候による極度の低温、高温もしくは風条件、化学的な汚染物質または汚濁物質に曝露されることによって皮膚が経験する変化を指し、それには、すべての目に見えるおよび／または触って知覚できる外観の変化、例えば限定されるものではないが、中でも皮膚の欠陥、例えば皺、小皺、深い皺、凸凹または荒れ、穴の大きさの拡大、弾性の喪失、張りの喪失、滑らかさの喪失、変形から回復する能力の喪失、頬のたるみなどの皮膚のたるみの発生が含まれる。
【００２０】
したがって、本発明の第１の態様は、アディポネクチンのレベルの増加、筋肉のミトコンドリア活性の増加、筋持久力の増加、創傷治癒の刺激および／または皮膚の上皮再形成において使用するための、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ種の株の発酵エキスに関する。一実施形態では、筋肉のミトコンドリア活性の増加は、筋肉のＡＴＰおよび／またはクエン酸シンターゼ活性レベルの増加である。他の実施形態では、アディポネクチンのレベルは、循環アディポネクチンのレベルである。他の実施形態では、筋持久力の増加は、有酸素持久力の増加である。別の実施形態では、有酸素持久力の増加は、筋肉におけるＩ型線維の割合の増加である。
【００２１】
別の態様では、本発明は、脂肪細胞のアディポネクチンレベルの化粧的非治療的増加、皮膚のコラーゲン合成および／もしくはヒアルロン酸合成の化粧的非治療的刺激、皮膚老化の化粧的非治療的処置および／もしくは防止、皮膚皺の化粧的非治療的処置および／もしくは防止、皮膚硬化の化粧的非治療的処置、ならびに／または皮膚の張りの喪失の化粧的非治療的防止のための、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ種の株の発酵エキスの使用に関する。
【００２２】
一実施形態では、皮膚の処置は、局所または経皮適用によって行われる。
【００２３】
他の実施形態では、筋肉のミトコンドリア活性の増加、筋持久力の増加、創傷治癒の刺激および／または皮膚の上皮再形成は、アディポネクチンのレベルの増加した結果である。
【００２４】
別の実施形態では、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ種の株は、寄託番号ＬＭＧ  Ｐ−２８２０２のＢａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ種の株である。前記株は、１９７７年４月２８日の微生物寄託の国際認識に関するブダペスト条約に従って、前記目的について法的に認められている機関としての、Ｂｅｌｇｉａｎ  Ｃｏｏｒｄｉｎａｔｅｄ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｓ（ＢＣＣＭ）／Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｕｍ  ｖｏｏｒ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｉｅ−Ｂａｃｔｅｒｉｅｖｅｒｚａｍｅｌｉｎｇ（ＬＭＧ）（ＢＣＣＭ／ＬＭＧ）（Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｇｈｅｎｔ、Ｋ．Ｌ．Ｌｅｄｅｇａｎｃｋｓｔｒａａｔ  ３５、Ｂ−９０００  Ｇｈｅｎｔ、Ｂｅｌｇｉｕｍ）において、２０１４年３月１１日に寄託されたものである。
【００２５】
他の実施形態では、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ種の株の発酵エキスは、分子量が７０００Ｄａ未満、または５０００Ｄａ未満のペプチド性の糖質材料を含有する。別の実施形態では、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ種の株の発酵エキスは、第二級アミンを含有していない。別の実施形態では、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ種の株の発酵エキスは、フェノール化合物を含有していない。
【００２６】
別の実施形態では、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ種の株の発酵エキスは、クロマトグラフィー分析の高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）において、クロマトグラフィーカラムＴＳＫＧｅｌ  Ｇ２０００ＳＷＸＬ、５ｍ、１２５Å、７．８ｍｍ×３０ｍｍ（ＴＯＳＯＨ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）および０．１Ｍの水、ｐＨ＝６．７０＋０．１Ｍリン酸緩衝液＋０．１Ｍ硫酸ナトリウムを溶出液として用いて、滞留時間が９〜２０分、１０〜１５分である。
【００２７】
別の実施形態では、エキスは、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ種の株を、慣習的に、前記生成物を合成し、培養培地に分泌するために撹拌し曝気した適切な培養培地中で発酵させた後、精製を行うことによって得られる。本発明のエキスを生成するための発酵は、温度１０℃〜４０℃、または２０℃〜３５℃で撹拌し曝気した培地中で行うことができ、この培地は、ｐＨ６．５〜９または約７．０を有するが、ｐＨは発酵中に必要に応じて調整される。発酵時間は、１２〜１２０時間、または２４〜７２時間である。
【００２８】
Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ種の株の発酵における培養培地は、窒素および／または炭素供給源、例えば酵母エキス、麦芽エキスおよび／またはペプトンを含み、これらの構成成分のそれぞれ１種の濃度は、０．１〜２０ｇ／Ｌ、または０．５〜１０ｇ／Ｌである。また、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ種の株の発酵における培養培地は、５〜４０ｇ／Ｌまたは２５〜３５ｇ／Ｌの濃度の海塩を含有する。
【００２９】
別の実施形態では、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ種の株の発酵における培養培地は、外部からの糖、例えば限定されるものではないが、ガラクトース、グルコース、マンノース、アミグダリン、セロビオース、マルトース、デンプン、グリコーゲン、ラクトース、それらの混合物を含み、かつ／またはこれらの糖の混合物を含有するエキスを、発酵培養培地における追加の炭素供給源として使用することができる。一実施形態では、外部からの０．５〜４０ｇ／Ｌ、または５〜２５ｇ／Ｌのグルコース供給が、発酵培養培地に提供される。他の実施形態では、発酵培養培地は、追加の窒素供給源または炭素供給源を含まない。
【００３０】
別の実施形態では、海塩に加えて、追加のミネラル塩も、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ種の株の発酵培養培地に提供される。これらの塩は、イオンであるＮａ＋、Ｋ＋、ＮＨ４＋、Ｃａ２＋、Ｍｇ２＋、ＰＯ４３−、ＳＯ４２−、Ｃｌ−、Ｆ−、Ｉ−、ＣＯ３２−、ＮＯ３−、シトレート、または微量元素、例えばＣｕ、Ｍｎ、Ｍｏ、Ｆｅ、Ｓｒ、Ｂ、Ｂｒ、Ｓｉ、Ａｌ、Ｌｉ、およびＺｎを提供する塩の中から選択される。
【００３１】
他の実施形態では、発酵エキスの単離および精製の方法は、遠心分離および濾過などの当業者に公知の方法によって行われる。一実施形態では、遠心分離および濾過ステップは、発酵エキスが見出される上清から、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ種の株を分離することを対象とする。一実施形態では、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ種の株は、寄託番号ＬＭＧ  Ｐ−２８２０２のＢａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ種の株である。
【００３２】
本発明の別の態様は、化粧品または皮膚医薬として有効な量のＢａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ種の株の発酵エキス、ならびに少なくとも１種の化粧品的および／または皮膚医薬的に許容される賦形剤および／または成分を含むことによって特徴付けられる、化粧品組成物または皮膚医薬組成物に関する。一実施形態では、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ種の株は、寄託番号ＬＭＧ  Ｐ−２８２０２のＢａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ種の株である。前記組成物は、当業者に公知の従来の方法によって調製される［「Harry's  Cosmeticology」、第７版、（１９８２年）、Wilkinson  J.B.、Moore  R.J.編、Longman  House、Essex、GB］。
【００３３】
投与される本発明の組成物におけるＢａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ種の株の発酵エキスの化粧品または皮膚医薬として有効な量、およびその投与量は、患者の年齢、状態、処置および／またはケアされる状態または障害の性質または重症度、投与の経路および頻度、ならびに使用される発酵エキスの性質を含めた数々の要因に応じて決まる。
【００３４】
「化粧品または皮膚医薬として有効な量」は、非毒性であり、所望の効果をもたらすのに十分な成分の量と理解される。例えば、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ種の株の発酵エキスは、所望の効果を達成するための化粧品または皮膚医薬としての濃度で使用され、すなわち組成物の総重量に対して、０．０００００００００１％（重量）〜２０％（重量）、０．０００００００１％（重量）〜１０％（重量）、０．０００００１％（重量）〜５％（重量）または０．０００１％（重量）〜５％（重量）で使用される。
【００３５】
一実施形態では、本発明の発酵エキスは、化粧品または皮膚医薬の送達系および／または徐放系に組み込むこともできる。
【００３６】
用語「送達系」は、本発明の発酵エキスと共に投与される希釈剤、アジュバント、賦形剤、ビヒクルまたは添加剤に関する。これらの化粧品用または皮膚医薬用の担体は、液体、例えば水、油または界面活性剤であってよく、これらには、石油、動物、植物または合成起源のもの、例えば限定されるものではないが、ピーナッツ油、ダイズ油、鉱油、ゴマ油、ヒマシ油、ポリソルベート、ソルビタンエステル、エーテル硫酸塩、硫酸塩、ベタイン、グリコシド、マルトシド、脂肪アルコール、ノノキシノール、ポロキサマー、ポリオキシエチレン、ポリエチレングリコール、デキストロース、グリセロール、ジギトニンおよび類似のものが含まれる。当業者には、本発明の化合物を投与できる異なる送達系で使用され得る希釈剤、アジュバントまたは賦形剤が公知である。
【００３７】
用語「徐放」は、ある期間にわたってこの化合物を徐々に放出する、化合物の送達系に関する従来の意味で使用される。一実施形態では、徐々に放出することによって、ある期間にわたって化合物の比較的一定な放出レベルがもたらされる。
【００３８】
送達系または徐放系の例として、本発明の発酵エキスのより高い浸透を達成するために添加され得る、リポソーム、混合リポソーム、オレオソーム、ニオソーム、エトソーム、ミリ粒子（milliparticle）、微粒子、ナノ粒子および固体脂質ナノ粒子、ナノ構造の脂質支持体、スポンジ、シクロデキストリン、小胞、ミセル、界面活性剤の混合ミセル、界面活性剤−リン脂質の混合ミセル、ミリスフェア、ミクロスフェアおよびナノスフェア、リポスフェア、ミリカプセル、マイクロカプセルおよびナノカプセル、ならびにマイクロエマルションおよびナノエマルションが挙げられるが、これらに限定されない。一実施形態では、送達系または徐放系は、リポソーム、界面活性剤−リン脂質の混合ミセル、マイクロエマルション、内部逆ミセル構造を有する油中水マイクロエマルション、およびマイクロエマルションを含有するナノカプセルである。一実施形態では、送達系または徐放系は、リポソーム、マイクロエマルション、またはマイクロエマルションを含有するリポソームである。
【００３９】
徐放系は、従来技術で公知の方法によって調製することができ、それらを含有する組成物は、例えば、接着パッチ、非接着パッチ、閉塞パッチおよび微小電気パッチ（microelectric  patch）を含めた局所投与もしくは経皮投与によって、あるいは全身投与によって、例えば限定されるものではないが、経口、あるいは経鼻、直腸もしくは皮下移植もしくは注射、または特定の身体部分への直接移植もしくは注射を含めた非経口経路によって投与することができる。一実施形態では、放出によって、ある期間にわたって相対的に一定の化合物放出レベルがもたらされる。徐放系に含有されている発酵エキスの量は、例えば、組成物が投与される場所、本発明の発酵エキスの反応速度および放出期間、ならびに処置および／またはケアされる状態および／または障害の性質に応じて決まる。
【００４０】
一実施形態では、本発明の発酵エキスを含有する組成物は、固体有機ポリマーまたは固体無機支持体、例えば限定されるものではないが、中でもタルク、ベントナイト、シリカ、デンプンまたはマルトデキストリン上に吸着される。
【００４１】
一実施形態では、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ種の株の発酵エキスを含有する組成物は、皮膚に直接接触する織物、不織布または医療デバイスに組み込まれ、したがって本発明の発酵エキスを、織物、不織布もしくは医療デバイスとの結合系の生分解によって、またはそれらと身体との摩擦に起因して、身体の水分、皮膚のｐＨもしくは体温に起因して本発明の発酵エキスを放出する。他の実施形態では、本発明の発酵エキスは、身体に直接接触する衣類の製造に使用される織物および不織布に組み込まれる。一実施形態では、本発明の発酵エキスを含有する織物、不織布および医療デバイスは、アディポネクチンレベルの増加、ミトコンドリア活性の増加、創傷治癒の刺激および／もしくは皮膚の上皮再形成によって、またはコラーゲン合成の刺激によって改善または防止される状態および／または障害の処置および／またはケアのために使用される。
【００４２】
上記の送達系および／または徐放系が含まれる、織物、不織布、衣類、医療デバイスおよびそれらに化合物を固定化するための手段の例は、文献に見出すことができ、従来技術で公知である［Schaab  C.K.（１９８６年）HAPPI  １９８６年５月；Nelson  G.、「Application  of  microencapsulation  in  textiles」、（２００２年）、Int.  J.  Pharm.、２４２巻（１〜２号）、５５〜６２頁；「Biofunctional  Textiles  and  the  Skin」（２００６年）  Curr.  Probl.  Dermatol.  ３３巻、Hipler  U.C.およびElsner  P.、編S.  Karger  AG、Basel、Switzerland；Malcolm  R.K.ら、「Controlled  release  of  a  model  antibacterial  drug  from  a  novel  self-lubricating  silicone  biomaterial」、（２００４年）、J.  Cont.  Release、９７巻（２号）、３１３〜３２０頁］。一実施形態では、織物、不織布、衣類および医療デバイスは、包帯、ガーゼ、Ｔシャツ、ソックス、タイツ、下着、ガードル、手袋、おむつ、生理用ナプキン、包帯剤、ベッドカバー、拭き取り材、接着パッチ、非接着パッチ、閉塞パッチ、微小電気パッチおよび／またはフェイスマスクである。
【００４３】
本発明の発酵エキスを含有する化粧品組成物または皮膚医薬組成物は、任意選択で所望の投与形態を製剤化するのに必要な、化粧品的および／または皮膚医薬的に許容される賦形剤を含む、局所または経皮適用の異なるタイプの組成物に使用することができる。
【００４４】
一実施形態では、局所または経皮適用の組成物は、任意の固体、液体または半固体製剤に、例えば限定されるものではないが、リーブオン製剤およびリンスオフ製剤を含めた、クリーム、多重エマルション、例えば限定されるものではないが、水中油および／または水中シリコーンエマルション、油中水および／またはシリコーン中水エマルション、水／油／水または水／シリコーン／水タイプのエマルション、および油／水／油またはシリコーン／水／シリコーンタイプのエマルション、液晶、無水組成物、水性分散液、油、乳液、バルサム、泡状物質、ローション、ジェル、クリームジェル、ハイドロアルコール溶液、ハイドログリコール溶液、ヒドロゲル、リニメント、美容液（sera）、石けん、シャンプー、コンディショナー、セラム、多糖類膜、軟膏、ムース、ポマード、パウダー、棒状物質、ペンシル、ならびにスプレーまたはエアロゾル（スプレー）に生成される。他の実施形態では、これらの局所または経皮適用製剤は、当業者に公知の技法を使用して、異なるタイプの固体付属品に、例えば限定されるものではないが、中でも包帯、ガーゼ、Ｔシャツ、ソックス、タイツ、下着、ガードル、手袋、おむつ、生理用ナプキン、包帯剤、ベッドカバー、拭き取り材、接着パッチ、非接着パッチ、閉塞パッチ、微小電気パッチもしくはフェイスマスクに組み込まれ、または異なるメーキャップ製品に、例えばメーキャップファンデーション、例えばリキッドファンデーションおよびコンパクトファンデーション、メーキャップ除去ローション、メーキャップ除去乳液、目の下用のコンシーラー、アイシャドウ、リップスティック、リッププロテクター、リップグロス、ならびにパウダーに組み込まれる。
【００４５】
他の実施形態では、本発明の化粧品組成物または皮膚医薬組成物には、本発明の発酵エキスの経皮吸収を増大する作用物質、例えば限定されるものではないが、中でもジメチルスルホキシド、ジメチルアセトアミド、ジメチルホルムアミド、界面活性剤、アゾン（１−ドデシルアザシクロヘプタン−２−オン）、アルコール、尿素、エトキシジグリコール、アセトン、プロピレングリコールまたはポリエチレングリコールが含まれる。他の実施形態では、本発明の化粧品組成物または皮膚医薬組成物は、本発明の発酵エキスのより高い浸透を達成するために、イオン導入、ソノフォレーシス、エレクトロポレーション、微小電気パッチ、機械的圧力、浸透圧勾配、閉塞性硬化（occlusive  cure）、マイクロインジェクションもしくは圧力を用いる無針注射、例えば酸素圧による注射、またはそれらの任意の組合せを用いることによって、処置される局所領域に適用される。適用領域は、処置および／またはケアされる状態および／または障害の性質によって決定される。
【００４６】
本発明に記載の化粧品組成物または皮膚医薬組成物に含有される、化粧品または皮膚医薬として許容される賦形剤および／または成分には、化粧品組成物または皮膚医薬組成物に一般に使用される追加の成分が含まれ、例えば限定されるものではないが、脂肪細胞のアディポネクチンのレベルを増加させる他の薬剤、ミトコンドリア活性を増加させる他の薬剤、筋肉のＡＴＰレベルを増加させる他の薬剤、治癒を刺激する他の薬剤、他のコアジュバント治癒剤、上皮再形成を刺激する他の薬剤、他のコアジュバント上皮再形成剤、脂肪細胞のトリグリセリド含量を低減する薬剤、脂肪細胞分化を遅延させる薬剤、ノクターニンの量を低減する薬剤、ノクターニンの発現を阻害する薬剤、脂肪分解剤もしくは脂肪分解を刺激する薬剤、静脈強壮（venotonic）剤、ＰＧＣ−１α発現をモジュレートする薬剤、ＰＰＡＲγの活性を阻害する薬剤、抗セルライト剤、皮脂生成を減少させる薬剤、真皮もしくは上皮の高分子の合成を刺激する、かつ／またはそれらの分解を阻害もしくは防止することができる薬剤、コラーゲン合成刺激剤、エラスチン合成刺激剤、デコリン合成刺激剤、ラミニン合成刺激剤、デフェンシン合成刺激剤、シャペロン合成刺激剤、ｃＡＭＰ合成刺激剤、ＡＱＰ−３をモジュレートする薬剤、アクアポリン合成をモジュレートする薬剤、アクアポリンファミリー由来のタンパク質、ヒアルロン酸合成刺激剤、グリコサミノグリカン合成刺激剤、フィブロネクチン合成刺激剤、サーチュイン合成刺激剤、熱ショックタンパク質、熱ショックタンパク質合成刺激剤、神経細胞の開口分泌を阻害する薬剤、抗コリン作用剤、筋収縮を阻害する薬剤、アンチエイジング剤、皺取り剤、制汗剤、抗炎症剤および／もしくは鎮痛剤、抗そう痒剤、鎮静剤、麻酔薬、アセチルコリン受容体のクラスター形成の阻害剤、アセチルコリンエステラーゼを阻害する薬剤、皮膚弛緩剤、メラニン合成の刺激剤もしくは阻害剤、白色化剤もしくは脱色剤、顔料沈着促進剤（propigmenting  agent）、セルフタンニング剤、ＮＯシンターゼ阻害剤、５α還元酵素阻害剤、リシルおよび／もしくはプロリルヒドロキシラーゼ阻害剤、抗酸化剤、フリーラジカルスカベンジャーおよび／もしくは抗大気汚染剤、反応性カルボニル種スカベンジャー、抗糖化剤、抗ヒスタミン剤、抗ウイルス剤、駆虫剤、乳化剤、皮膚軟化剤、有機溶媒、液体噴霧剤、皮膚コンディショナー、保湿剤、保湿物質、アルファヒドロキシ酸、ベータヒドロキシ酸、加湿剤、上皮加水分解酵素、ビタミン、アミノ酸、タンパク質、顔料もしくは着色剤、色素、バイオポリマー、ゲル化ポリマー、増粘剤、界面活性剤、柔軟剤、結合剤、保存剤、目の下の隈を低減もしくは処置することができる薬剤、落屑剤、角質溶解剤、剥離剤、抗微生物剤、抗真菌剤、静真菌剤、殺菌剤、静菌剤、角質層構成成分の合成を刺激する薬剤、セラミド、脂肪酸、コラーゲン分解を阻害する薬剤、マトリックスメタロプロテイナーゼを阻害する薬剤、エラスチン分解を阻害する薬剤、セリンプロテアーゼ、例えばカリクレイン、白血球エラスターゼもしくはカテプシンＧを阻害する薬剤、線維芽細胞増殖を刺激する薬剤、ケラチノサイト増殖を刺激する薬剤、メラニン細胞増殖を刺激する薬剤、ケラチノサイト���化を刺激する薬剤、抗過角化症剤、面皰溶解剤、抗乾癬剤、ＤＮＡ修復剤、ＤＮＡ保護剤、幹細胞保護剤、安定剤、敏感肌の処置および／もしくはケアのための薬剤、引締め剤、抗ストレッチマーク剤、収斂剤、ＰＡＲ−２の活性を阻害する薬剤、サイトカイン、成長因子、毛細血管循環および／もしくは微小循環に作用する薬剤、血管新生を刺激する薬剤、血管透過性を阻害する薬剤、細胞代謝に作用する薬剤、真皮−上皮接合部を改善する薬剤、育毛誘導剤、育毛阻害剤もしくは育毛遅延剤、抜け毛遅延剤、保存剤、芳香剤、化粧品用および／もしくは吸収性および／もしくは体臭マスキング用のデオドラント、キレート剤、植物エキス、エッセンシャルオイル、海産物エキス、生物工学的プロセスから得られた薬剤、ミネラル塩、細胞エキス、日焼け止めならびに紫外Ａおよび／もしくはＢ線および／もしくは赤外Ａ線に対して活性な有機もしくは無機光防護剤、またはそれらの混合物が含まれ、ただしこれらは、組成物の構成成分の残りおよびＢａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ種の株によって生成される発酵エキスと、物理的かつ化学的に適合性があることを条件とする。同様に、これらの追加の成分の性質は、本発明の発酵エキスの利益を容認しがたく変えるべきではない。これらの追加の成分の性質は、合成であってよく、もしくは植物エキスなどのように天然であってよく、または生物工学的手順から得ることができ、または合成手順と生物工学的手順の組合せから得ることができる。さらなる例は、CTFA  International  Cosmetic  Ingredient  Dictionary  &  Handbook、第１２版（２００８年）に見出すことができる。本発明の文脈では、生物工学的手順は、生物またはその一部において活性成分またはその一部を生成するための任意の手順であると理解される。
【００４７】
一実施形態では、脂肪細胞のトリグリセリド含量を低減する薬剤、脂肪細胞分化を遅延させる薬剤、抗セルライト剤、脂肪分解剤、静脈強壮剤、ＰＧＣ−１α発現を阻害する薬剤、またはＰＰＡＲγの活性を阻害する薬剤が選択され、例えば限定されるものではないが、中でもＡｌｃｈｅｍｉｌｌａ  ｖｕｌｇａｒｉｓ、Ａｎｇｅｌｉｃａ  ｓｉｎｅｎｓｉｓ、Ａｒｍｅｎｉａｃｅａ  ｓｐ．、Ａｒｎｉｃａ  ｍｏｎｔａｎａ  Ｌ、Ａｔｒａｃｔｙｌｏｄｉｓ  ｐｌａｔｉｃｏｄｏｎ、竹、Ｂｅｔｕｌａ  ａｌｂａ、Ｂｕｐｌｅｕｒｕｍ  ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ、Ｃａｌｅｎｄｕｌａ  ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ、ソウジュツ、Ｃｅｃｒｏｐｉａ  ｏｂｔｕｓｉｆｏｌｉａ、Ｃｅｌｏｓｉａ  ｃｒｉｓｔａｔａ、Ｃｅｎｔｅｌｌａ  ａｓｉａｔｉｃａ、Ｃｈｅｎｏｐｏｄｉｕｍ  ｑｕｉｎｏａ、Ｃｈｒｙｓａｎｔｈｅｌｌｕｍ  ｉｎｄｉｃｕｍ、Ｃｉｍｉｆｕｇａ  ｒａｃｅｍｏｓａ、Ｃｉｔｒｕｓ  ａｕｒａｎｔｉｕｍ  ａｍａｒａ、Ｃｎｉｃｕｓ  ｂｅｎｅｄｉｃｔｕｓ、Ｃｏｆｆｅａ  ａｒａｂｉｃａ、Ｃｏｌａ  ｎｉｐｉｄａ、Ｃｏｌｅｕｓ  ｂａｒｂａｔｕｓ、Ｃｏｌｅｕｓ  ｂｌｕｍｅｉ、Ｃｏｌｅｕｓ  ｅｓｑｕｉｒｏｌｉｉ、Ｃｏｌｅｕｓ  ｆｏｒｓｋｏｈｌｉｉ、Ｃｏｌｅｕｓ  ｓｃｕｔｅｌｌａｒｏｉｄｅｓ、Ｃｏｌｅｕｓ  ｓｐ．、Ｃｏｌｅｕｓ  ｘａｎｔｈａｎｔｕｓ、Ｃｏｍｍｉｐｈｏｒａ  ｍｙｒｒｈａ、Ｃｒｉｔｈｍｕｍ  ｍａｒｉｔｉｍｕｍ、Ｃｕｍｉｎｕｍ  ｃｙｍｉｎｕｍ、Ｄｉｏｓｃｏｒｅａ  ｃｏｌｅｔｔｉｉ、Ｄｉｏｓｃｏｒｅａ  ｖｉｌｌｏｓａ、Ｅｕｇｅｎｉａ  ｃａｒｙｏｐｈｙｌｌｕｓ、Ｆｉｌｉｐｅｎｄｕｌａ  ｕｌｍａｒｉａ  Ｌ、Ｆｏｅｎｉｃｕｌｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅ、Ｆｕｃｕｓ  ｖｅｓｉｃｕｌｏｓｕｓ、Ｇｅｌｉｄｉｕｍ  Ｃａｒｔｉｌａｇｉｎｅｕｍ、Ｇｉｎｋｇｏ  ｂｉｌｏｂａ、ｇｉｎｋｇｏ  ｂｉｌｏｂａ、Ｇｌｙｃｉｎｅ  ｍａｘ、Ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚａ  ｇｌａｂｒａ、Ｈｅｄｅｒａ  ｈｅｌｉｘ（ツタエキス）、Ｈｉｂｉｓｃｕｓ  ｓａｂｄａｒｉｆｆａ、Ｈｏｒｄｅｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅ、Ｈｕｍｕｌｕｓ  ｌｕｐｕｌｕｓ、Ｈｙｐｅｒｙｃｕｍ  ｐｅｒｆｏｒａｔｕｍ、Ｉｌｅｘ  ｐａｒａｇｕａｒｉｅｎｓｉｓ、Ｋｉｇｅｌｉａ  ａｆｒｉｃａｎａ、Ｌａｍｉｎａｒｉａ  ｄｉｇｉｔａｔａ、Ｌｕｐｉｎｕｓ  ｐｅｒｅｎｎｉｓ、Ｎｅｌｕｍｂｉｕｍ  ｓｐｅｃｉｏｓｕｍ、Ｏｒｔｈｏｓｉｐｈｏｎ  ｓｔａｍｉｎｃｕｓ  ｂｅｎｔｈ、Ｐａｎａｘ  ｇｉｎｓｅｎｇ、Ｐａｕｌｌｉｎｉａ  ｃｕｐａｎａ、Ｐｅｕｍｕｓ  ｂｏｌｄｕｓ、Ｐｈｙｌｌａｃａｎｔｈａ  ｆｉｂｒｏｓａ、Ｐｉｐｅｒ  ｍｅｔｈｙｓｔｉｃｕｍ、Ｐｉｐｅｒ  ｎｉｇｒｕｍ、Ｐｒｕｎｅｌｌａ  ｖｕｌｇａｒｉｓ、Ｐｒｕｎｕｓ  ａｍｙｇｄａｌｕｓ  ｄｕｌｃｉｓ、Ｒｏｓｍａｒｉｎｕｓ  ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ、Ｒｕｂｕｓ  ｉｄａｅｕｓ、Ｒｕｓｃｕｓ  ａｃｕｌｅａｔｕｓ（ナギイカダエキス）、Ｓａｌｖｉａ  ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ  Ｌ、Ｓａｍｂｕｃｕｓ  ｎｉｇｒａ、Ｓｅｒｅｎｏａ  ｒｅｐｅｎｓ、Ｓｍｉｌａｘ  ａｒｉｓｔｏｌｏｃｈｉａｅｆｏｌｉａ、Ｓｐｉｒｕｌｉｎａ  ｐｌａｔｅｎｓｉｓ藻類、Ｔａｒａｘａｃｕｍ  ｅｒｙｔｈｒｏｓｐｅｒｍｕｍ、Ｔａｒａｘａｃｕｍ  ｏｆｆｉｃｉｎ���ｌｅ、緑茶、Ｕｌｍｕｓ  ｒｕｂｒａ、Ｕｎｃａｒｉａ  ｔｏｍｅｎｔｏｓａ、Ｖｅｒｂｅｎａ  ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ、Ｖｉｔｅｘ  ａｇｎｕｓ−ｃａｓｔｕｓ、Ｄｙｓｍｏｒｐｈｏｃｏｃｃｕｓ  ｇｌｏｂｏｓｕｓのエキスもしくは加水分解エキス、中でもアルベリン（alverin）、クエン酸アルベリン、ジヒドロミリセチン、補酵素Ａ、リパーゼ、セルレニン、ルチン、グラウシン、エスクリン、ビスナジン、カフェイン、テオフィリン、テオブロミン、アミノフィリン、キサンチン、カルニチン、フォルスコリン、エスシン、ルスコゲニン、ヘデリン、トリエタノールアミンヨウ化物、ＡＭＰｃ合成誘導剤、Ｌａｎａｃｈｒｙｓ（登録商標）［ＩＮＣＩ：Ｃｈｒｙｓａｎｔｈｅｌｌｕｍ  Ｉｎｄｉｃｕｍエキス］（Ａｔｒｉｕｍ／Ｕｎｉｐｅｘによって販売）、Ｓｌｉｍ−Ｅｘｃｅｓｓ（商標）［ＩＮＣＩ：水、ブチレングリコール、塩化ナトリウム、加水分解カラギーナン、キサンタンガム］、Ｓｖｅｌｔｉｎｅ（商標）［ＩＮＣＩ：水、ブチレングリコール、カルニチン、レシチン、カフェイン、カルボマー、サリチル酸、アテロコラーゲン、ツボクサエキス、エスクリン、コンドロイチン硫酸ナトリウム］、Ｐｅｒｕ  Ｌｉａｎａ［ＩＮＣＩ：Ｕｎｃａｒｉａ  Ｔｏｍｅｎｔｏｓａエキス］もしくはＦｌａｖｅｎｇｅｒ（商標）［ＩＮＣＩ：カプリル酸／カプリン酸トリグリセリド、ジメチルシリル化シリカ、オレイン酸グリセリル、カプリル酸クェルセチン］（ＢＡＳＦによって販売）、Ｓｃｏｐａｒｉａｎｅ［ＩＮＣＩ：Ｓｐｈａｃｅｌａｒｉａ  Ｓｃｏｐａｒｉａ］、Ｐｈｙｃｏ  Ｒ７５［ＩＮＣＩ：Ｌａｍｉｎａｒｉａ  Ｄｉｇｉｔａｔａ］、Ｐｈｅｏｓｌｉｍ［ＩＮＣＩ：Ｐｈｙｌｌａｃａｎｔｈａ  Ｆｉｂｒｏｓａエキス］、Ｂｕｃｋｗｈｅａｔ  Ｗａｘ［ＩＮＣＩ：Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍ  ｆａｇｏｐｙｒｕｍ］もしくはＡｒｅａｕｍａｔ  Ｓａｍｐｈｉｒａ［ＩＮＣＩ：Ｃｒｉｔｈｍｕｍ  Ｍａｒｉｔｉｍｕｍエキス］、Ａｃｔｉｐｏｒｉｎｅ  ８．Ｇ［グリセリン、アクア、Ｊａｎｉａ  ｒｕｂｅｎｓエキス］（Ｃｏｄｉｆによって販売）、Ｓｌｉｍｍｉｎｇ  Ｆａｃｔｏｒ  Ｋａｒｋａｄｅ（商標）［ＩＮＣＩ：Ｈｉｂｉｓｃｕｓ  Ｓａｂｄａｒｉｆｆａ］（Ｃｏｓｍｅｔｏｃｈｅｍによって販売）、Ｌｉｐｏｓｕｃｔｉｏｎｉｎｅ［提唱ＩＮＣＩ：アセチルヘキサペプチド］（Ｉｎｆｉｎｉｔｅｃ  Ａｃｔｉｖｏｓによって販売）、Ｘａｎｔａｌｇｏｓｉｌ  Ｃ（登録商標）［ＩＮＣＩ：マンヌロン酸アセフィリンメチルシラノール］、Ｔｈｅｏｐｈｙｌｌｉｓｉｌａｎｅ  Ｃ（登録商標）［ＩＮＣＩ：アルギン酸メチルシラノールカルボキシメチルテオフィリン］、Ｇｌｕｔｒａｐｅｐｔｉｄｅ（登録商標）［ＩＮＣＩ：ピログルタミルアミドエチルインドール］もしくはＣａｆｅｉｓｉｌａｎｅ  Ｃ［ＩＮＣＩ：アルギン酸シロキサントリオール、カフェイン、ブチレングリコール］（Ｅｘｓｙｍｏｌによって販売）、Ｔｉｍｉｌｉｎｅ（登録商標）［ＩＮＣＩ：ポリグルクロン酸］（Ｇｒｅｅｎｔｅｃｈによって販売）、Ｖｉｓｎａｄｉｎｅ［ＩＮＣＩ：ビスナジン］もしくはＧｉｎｋｇｏ  Ｂｉｌｏｂａ  Ｄｉｍｅｒｉｃ  Ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ  Ｐｈｙｔｏｓｏｍｅ［ＩＮＣＩ：リン脂質、Ｇｉｎｋｇｏ  Ｂｉｌｏｂａ葉エキス］（Ｉｎｄｅｎａによって販売）、Ｓｌｉｍｆｉｔ（登録商標）ＬＳ  ９５０９［ＩＮＣＩ：Ｃｅｃｒｏｐｉａ  Ｏｂｔｕｓｉｆｏｌｉａ樹皮エキス］（Ｌａｂｏｒａｔｏｉｒｅｓ  Ｓｅｒｏｂｉｏｌｏｇｉｑｕｅｓ／Ｃｏｇｎｉｓ／ＢＡＳＦによって販売）、Ｓｉｌｕｓｙｎｅ（商標）［ＩＮＣＩ：ダイズ（Ｇｌｙｃｉｎｅ  ｓｏｊａ）油、セスキオレイン酸ソルビタン、イソヘキサデカン、ヒアルロン酸ナトリウム、ラウリルジモニウムヒドロキシプロピル加水分解ダイズタンパク質、アセチルヘキサペプチド−３９］もしくはＬｉｐｏｒｅｄｕｃｔｙｌ（登録商標）［ＩＮＣＩ：水、グリセリン、レシチン、カフェイン、ナギイカダ（Ｒｕｓｃｕｓ  Ａｃｕｌｅａｔｕｓ）根エキス、マルトデキストリン、シリカ、ヨウ化水素Ｔｅａ、プロピレングリコール、ツタ（Ｈｅｄｅｒａ  Ｈｅｌｉｘ）エキス、カルニチン、エスシン、トリペプチド−１、キサンタンガム、カラギーナン（Ｃｈｏｎｄｒｕｓ  Ｃｒｉｓｐｕｓ）、ＥＤＴＡ二ナトリウム］（Ｌｉｐｏｔｅｃ／Ｌｕｂｒｉｚｏｌによって販売）、Ｉｓｏ−Ｓｌｉｍ  Ｃｏｍｐｌｅｘ［ＩＮＣＩ：ダイズイソフラボン、カフェイン、カルニチン、スピルリナプラテンシスエキス、ポリソルベート８０、アルコール、フェノキシエタノール、アクア］、Ｈａｐｐｙｂｅｌｌｅ−ＰＥ［ＩＮＣＩ：レシチン、Ｖｉｔｅｘ  Ａｇｎｕｓ  Ｃａｓｔｕｓエキス、グリセリン、テトラヘキシルデカン酸アスコルビル、トコフェロール、カプリル酸／カプリン酸トリグリセリド、シクロデキストリン、アルコール、水］もしくはＡｍａｒａＳｈａｐｅ［ＩＮＣＩ：レシチン、カフェイン、Ｃｉｔｒｕｓ  Ａｕｒａｎｔｉｕｍ  Ａｍａｒａエキス、ペンチレングリコール、アルコール、水］（Ｍｉｂｅｌｌｅ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙによって販売）、Ｒｅｇｕ（登録商標）−Ｓｌｉｍ［ＩＮＣＩ：マルトデキストリン、カフェイン、Ｐａｕｌｌｉｎｉａ  Ｃｕｐａｎａ種子エキス、カルニチン、微結晶セルロース、システイン酸、パンテテインスルホネート（Pantheine  Sulfonate）］もしくはＲｅｇｕ（登録商標）−Ｓｈａｐｅ［ＩＮＣＩ：異性化リノール酸、レシチン、グリセリン、ポリソルベート８０］（Ｐｅｎｔａｐｈａｒｍ／ＤＳＭによって販売）、Ｐｒｏｖｉｓｌｉｍ（商標）［ＩＮＣＩ：プロパンジオール、水（アクア）、フィセチン、ラズベリーケトン］、Ｍｙｒｉｃｅｌｉｎｅ［ＩＮＣＩ：ジヒドロミリセチン］もしくはＤｒｅｎａｌｉｐ［ＩＮＣＩ：Ｒｕｓｃｕｓ  Ａｃｕｌｅａｔｕｓ根エキス、Ｃｉｔｒｕｓ  Ｍｅｄｉｃａ  Ｌｉｍｏｎｕｍ果皮エキス、Ｓｏｌｉｄａｇｏ  Ｖｉｒｇａｕｒｅａエキス、Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  Ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ根エキス］（Ｐｒｏｖｉｔａｌによって販売）、Ａｃｔｉｓｃｕｌｐｔ［ＩＮＣＩ：Ｃｏｍｍｉｐｈｏｒａ  Ｍｙｒｒｈａエキス、Ｃｏｌｅｕｓ  Ｆｏｒｓｋｏｈｌｉｉ根エキス］（Ｇｉｖａｕｄａｎによって販売）、Ｐｅｒｆｅｌｉｎｅ（登録商標）［ＩＮＣＩ：水、カルニチン、カフェイン、Ｒｕｓｃｕｓ  Ａｃｕｌｅａｔｕｓエキス］もしくはＣｅｌｌＡｃｔｉｖｅ（登録商標）Ｓｈａｐｅ［ＩＮＣＩ：Ｃｈｌｏｒｅｌｌａ  Ｖｕｌｇａｒｉｓ／Ｌｕｐｉｎｕｓ  Ａｌｂｕｓタンパク発酵物、Ｃｏｌｅｕｓ  Ｆｏｒｓｋｏｈｌｉｉ、カフェイン］（Ｒａｈｎによって販売）、ＰｒｏＣｏｎｔｏｕｒ（商標）［ＩＮＣＩ：水、アルコール、レシチン、カフェイン、カルニチン、Ｃｅｎｔｅｌｌａ  Ａｓｉａｔｉｃａ葉エキス、リン酸カリウム、Ｃｏｌｅｕｓ  Ｆｏｒｓｋｏｈｌｉｉ根エキス］（Ｒｏｖｉ  Ｃｏｓｍｅｔｉｃｓによって販売）、Ｕｎｉｓｌｉｍ（商標）［ＩＮＣＩ：Ｉｌｅｘ  Ｐａｒａｇｕａｒｉｅｎｓｉｓ（葉）エキス、水、ブチレングリコール、Ｃｏｆｆｅａ  Ａｒａｂｉｃａ（コーヒー）種子エキス（マメ）、ＰＥＧ−６０アーモンドグリセリド、グリセリン、セチルヒドロキシエチルセルロース］、Ｒｅｄｕｌｉｔｅ（商標）［ＩＮＣＩ：グリセリン、アクア、エトキシジグリコール、Ｓａｍｂｕｃｕｓ  Ｎｉｇｒａ、ポリアクリル酸ナトリウム］、Ｐｌｅｕｒｉｍｉｎｃｙｌ（商標）［ＩＮＣＩ：カフェイン、Ｂｕｐｌｅｕｒｕｍ  Ｃｈｉｎｅｎｓｉｓエキス］、Ｐｈｙｔｏｔａｌ（商標）ＳＬ［ＩＮＣＩ：グリセリン、Ｖｅｒｂｅｎａ  Ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓエキス、ブチレングリコール、Ｓａｍｂｕｃｕｓ  Ｎｉｇｒａ花エキス、Ｅｕｇｅｎｉａ  Ｃａｒｙｏｐｈｙｌｌｕｓ（クローブ）花エキス、レシチン］、Ｐｈｙｔｏｓｏｎｉｃ（商標）［ＩＮＣＩ：アクア、Ｅｕｇｌｅｎａ  Ｇｒａｃｉｌｉｓエキス、カフェイン、Ｇｌａｕｃｉｕｍ  Ｆｌａｖｕｍ葉エキス］、Ｏｖａｌｉｓｓ（商標）［ＩＮＣＩ：グリセリン、アクア、ヤシ油アルキルグルコシド、カプリリルグリコール、アルコール、グラウシン］、Ｌｉｐｏｃａｒｅ（商標）［ＩＮＣＩ：カフェイン、補酵素（Coenzym）Ａ、Ｂｕｐｌｅｕｒｕｍ  Ｃｈｉｎｅｎｓｉｓエキス］、Ｃｙｃｌｏｌｉｐａｓｅ（商標）［ＩＮＣＩ：ポリメタクリル酸グリセリル、水、カフェイン、リパーゼ、アデノシンリン酸］、Ｃｏａｘｅｌ（商標）［ＩＮＣＩ：カフェイン、補酵素Ａ、カルニチン、水、グリセリン］、Ｂｏｄｙｆｉｔ（商標）［ＩＮＣＩ：グリセリン、アクア（水）、ヤシ油アルキルグルコシド、カプリリルグリコール、アルコール、グラウシン］もしくはＶｅｘｅｌ［ＩＮＣＩ：アクア、プロピレングリコール、レシチン、カフェイン、パルミトイルカルニチン］（Ｓｅｄｅｒｍａ／Ｃｒｏｄａによって販売）、Ｖｏｌｕｆｏｒｍ［ＩＮＣＩ：パルミトイルイソロイシン］、Ａｄｉ
ｐｏｌｅｓｓ［ＩＮＣＩ：ブチレングリコール、Ｃｈｅｎｏｐｏｄｉｕｍ  Ｑｕｉｎｏａ種子エキス］（Ｓｅｐｐｉｃによって販売）、Ｓｌｉｍａｃｔｉｖｅ（登録商標）［ＩＮＣＩ：Ｐｅｕｍｕｓ  Ｂｏｌｄｕｓ葉エキス］、Ｒｅｍｏｄｕｌｉｎｅ（登録商標）［ＩＮＣＩ：Ｃｉｔｒｕｓ  Ａｕｒａｎｔｉｕｍ  Ａｍａｒａ花エキス］、Ｐｒｏ−Ｓｖｅｌｔｙｌ［ＩＮＣＩ：Ｎｅｌｕｍｂｉｕｍ  Ｓｐｅｃｉｏｓｕｍエキス］、Ｂｉｏｓｃｕｌｐｔｉｎｅ（登録商標）［ＩＮＣＩ：加水分解Ｃｅｌｏｓｉａ  Ｃｒｉｓｔａｔａ花／種子エキス、加水分解Ｐｒｕｎｅｌｌａ  Ｖｕｌｇａｒｉｓエキス］、Ａｆｆｉｎｅｓｓ（登録商標）［ＩＮＣＩ：加水分解Ｃｏｒｉａｎｄｒｕｍ  Ｓａｔｉｖｕｍ果実エキス、Ｃｉｔｒｕｓ  Ａｕｒａｎｔｉｕｍ  Ｄｕｌｃｉｓ（オレンジ）果実エキス］もしくはＳｔｅｍｓｖｅｌｔ［ＩＮＣＩ：水、ブチレングリコール、Ｓｉｌｙｂｕｍ  ｍａｒｉｎｕｍエキス］（Ｓｉｌａｂによって販売）、Ｄｅｌｉｐｉｄｏｌ［ＩＮＣＩ：Ｔｙｒｏｓｙｌ  Ｐｕｎｉｃａｔｅ］、Ｇｕａｒａｓｌｉｍ（登録商標）［ＩＮＣＩ：ブチレングリコール、水、カフェイン、Ｐａｕｌｌｉｎｉａ  Ｃｕｐａｎａ種子エキス、Ｐｔｙｃｈｏｐｅｔａｌｕｍ  Ｏｌａｃｏｉｄｅｓ樹皮エキス］もしくはＣａｏｂｒｏｍｉｎｅ（登録商標）［ＩＮＣＩ：Ｔｈｅｏｂｒｏｍａ  Ｃｏｃｏａ外皮エキス］（Ｓｏｌａｂｉａによって販売）、Ａｂｄｏｌｉａｎｃｅ［ＩＮＣＩ：パルミチン酸スクロース、ポリソルベート２０、リノレン酸グリセリル、Ｐａｕｌｌｉｎｉａ  Ｃｕｐａｎａ種子エキス、マルトデキストリン、Ｐｒｕｎｕｓ  Ａｍｙｇｄａｌｕｓ  Ｄｕｌｃｉｓ（スイートアーモンド）油、レシチン、水、Ｃｉｔｒｕｓ  Ａｕｒａｎｔｉｕｍ  Ａｍａｒａ（ビターオレンジ）果皮エキス、フェノキシエタノール、トコフェロール］、Ｂｅｔａｐｈｒｏｌｉｎｅ［ＩＮＣＩ：Ｔｅｐｈｒｏｓｉａ  Ｐｕｒｐｕｒｅａ種子エキス］もしくはＰＲＯ−ＤＧ［ＩＮＣＩ：水、プランクトンエキス］（Ｓｏｌｉａｎｃｅによって販売）、ＵＣＰｅｐｔｉｄｅ（商標）Ｖ［ＩＮＣＩ：水、ブチレングリコール、ペンタペプチド］もしくはＡＴＰｅｐｔｉｄｅ（商標）ＩＳ［ＩＮＣＩ：トリペプチド−３］（Ｖｉｎｃｉｅｎｃｅ／ＩＳＰによって販売）、またはそれらの混合物が選択される。
【００４８】
一実施形態では、引締め剤および／または再高密度化（redensifying）剤および／または再構成剤は、例えば限定されるものではないが、中でもＭａｌｐｉｇｈｉａ  ｐｕｎｉｃｉｔｏｌｉａ、Ｃｙｎａｒａ  ｓｃｏｌｙｍｕｓ、Ｇｏｓｓｙｐｉｕｍ  ｈｅｒｂａｃｅｕｍ、Ａｌｏｅ  Ｂａｒｂａｄｅｎｓｉｓ、Ｐａｎｉｃｕｍ  ｍｉｌｉａｃｅｕｍ、Ｍｏｒｕｓ  ｎｉｇｒａ、Ｓｅｓａｍｕｍ  ｉｎｄｉｃｕｍ、Ｇｌｙｃｉｎｅ  ｓｏｊａ、Ｔｒｉｔｉｃｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅのエキス、Ｐｒｏｎａｌｅｎ（登録商標）Ｒｅｆｉｒｍｉｎｇ  ＨＳＣ［ＩＮＣＩ：Ｔｒｉｔｉｃｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅ、Ｓｉｌｙｂｕｍ  ｍａｒｉａｎｕｍ、ダイズグリシン、Ｅｑｕｉｓｅｔｕｍ  ａｒｖｅｎｓｅ、Ａｌｃｈｅｍｉｌｌａ  Ｖｕｌｇａｒｉｓ、Ｍｅｄｉｃａｇｏ  Ｓａｔｉｖａ、Ｒａｐｈａｎｕｓ  Ｓａｔｉｖｕｓ］もしくはＰｏｌｙｐｌａｎｔ（登録商標）Ｒｅｆｉｒｍｉｎｇ［ＩＮＣＩ：コーンフラワー、ツボクサ（Ａｓｉａｔｉｃ  Ｃｅｎｔｅｌｌａ）、ヒバマタ、フェヌグリーク］（Ｐｒｏｖｉｔａｌによって販売）、Ｌａｎａｂｌｕｅ（登録商標）［ＩＮＣＩ：ソルビトール、藻類エキス］（Ａｔｒｉｕｍ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ／Ｕｎｉｐｅｘ  Ｉｎｎｏｖａｔｉｏｎｓによって販売）、Ｐｅｐｈａ（登録商標）−Ｎｕｔｒｉｘ［ＩＮＣＩ：天然栄養因子］（Ｐｅｎｔａｐｈａｒｍ／ＤＳＭによって販売）、イソフラボンを含有する植物エキス、Ｂｉｏｐｅｐｔｉｄｅ  ＥＬ（商標）［ＩＮＣＩ：パルミトイルオリゴペプチド］、Ｂｉｏｐｅｐｔｉｄｅ  ＣＬ（商標）［ＩＮＣＩ：パルミトイルオリゴペプチド］、Ｖｅｘｅｌ（登録商標）［ＩＮＣＩ：水（アクア）、プロピレングリコール、レシチン、カフェイン、パルミトイルカルニチン］、Ｍａｔｒｉｘｙｌ（登録商標）［ＩＮＣＩ：パルミトイルペンタペプチド−３］、Ｍａｔｒｉｘｙｌ（登録商標）３０００［ＩＮＣＩ：パルミトイルテトラペプチド−３、パルミトイルオリゴペプチド］もしくはＢｉｏ−Ｂｕｓｔｙｌ（商標）［ＩＮＣＩ：ポリメタクリル酸グリセリル、ラネラダイズタンパク質発酵物、水（アクア）、プロピレングリコール、グリセリン、ＰＥＧ−８、パルミトイルオリゴペプチド］（Ｓｅｄｅｒｍａ／Ｃｒｏｄａによって販売）、Ｄｅｒｍｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ（登録商標）ＨＣ［ＩＮＣＩ：グリセリン、水（アクア）、グリコサミノグリカン、グリコーゲン］、Ａｇｌｙｃａｌ（登録商標）［ＩＮＣＩ：マンニトール、シクロデキストリン、グリコーゲン、Ａｒａｔｏｓｔａｐｈｙｌｏｓ  Ｕｖａ  Ｕｒｓｉ葉エキス］、Ｃｙｔｏｋｉｎｏｌ（登録商標）ＬＳ［ＩＮＣＩ：加水分解カゼイン、加水分解酵母タンパク質、リシンＨＣｌ］もしくはＦｉｒｍｉｄｅｒｍ（登録商標）ＬＳ９１２０［ＩＮＣＩ：Ｔｅｒｍｉｎａｌｉａ  Ｃａｔａｐｐａ葉エキス、Ｓａｍｂｕｃｕｓ  Ｎｅｇｒａ花エキス、ＰＶＰ、タンニン酸］（Ｌａｂｏｒａｔｏｉｒｅｓ  Ｓｅｒｏｂｉｏｌｏｇｉｑｕｅｓ／Ｃｏｇｎｉｓ／ＢＡＳＦによって販売）、Ｌｉｆｔｌｉｎｅ（登録商標）［ＩＮＣＩ：加水分解コムギタンパク質］、Ｒａｆｆｅｒｍｉｎｅ（登録商標）［ＩＮＣＩ：加水分解ダイズ粉］もしくはＲｉｄｕｌｉｓｓｅ  Ｃ（登録商標）［加水分解ダイズタンパク質］（Ｓｉｌａｂによって販売）、Ｓｅｒｉｌｅｓｉｎｅ（登録商標）［ＩＮＣＩ：ヘキサペプチド−１０］、Ｄｅｃｏｒｉｎｙｌ（商標）［ＩＮＣＩ：トリペプチド−１０シトルリン］、Ｔｒｙｌａｇｅｎ（登録商標）［ＩＮＣＩ：シュードアルテロモナス発酵エキス、加水分解コムギタンパク質、加水分解ダイズタンパク質、トリペプチド−１０シトルリン、トリペプチド−１］、Ｓｉｌｕｓｙｎｅ（商標）［ＩＮＣＩ：ダイズ（Ｇｌｙｃｉｎｅ  ｓｏｊａ）油、セスキオレイン酸ソルビタン、イソヘキサデカン、ヒアルロン酸ナトリウム、ラウリルジモニウムヒドロキシプロピル加水分解ダイズタンパク質、アセチルヘキサペプチド−３９］、Ｕｐｌｅｖｉｔｙ（商標）［ＩＮＣＩ：アセチルテトラペプチド−２］もしくはＡｄｉｆｙｌｉｎｅ（商標）［ＩＮＣＩ：アセチルヘキサペプチド−３８］（Ｌｉｐｏｔｅｃ／Ｌｕｂｒｉｚｏｌによって販売）、Ｕｒｓｏｌｉｓｏｍｅ（登録商標）［ＩＮＣＩ：レシチン、ウルソール酸、アテロコラーゲン、キサンタンガム、コンドロイチン硫酸ナトリウム］もしくはＣｏｌｌａｌｉｆｔ（登録商標）［ＩＮＣＩ：加水分解麦芽エキス］（Ｃｏｌｅｔｉｃａ／Ｅｎｇｅｌｈａｒｄ／ＢＡＳＦによって販売）、Ｓｙｎ（登録商標）−Ｃｏｌｌ［ＩＮＣＩ：パルミトイルトリペプチド−５］（Ｐｅｎｔａｐｈａｒｍ／ＤＳＭによって販売）、Ｈｙｄｒｉａｍｅ（登録商標）［ＩＮＣＩ：水（アクア）、グリコサミノグリカン、スクレロチウムガム］（Ａｔｒｉｕｍ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ／Ｕｎｉｐｅｘ  Ｉｎｎｏｖａｔｉｏｎｓによって販売）、またはＩＰ２０００［ＩＮＣＩ：デキストラン、トリフルオロアセチルトリペプチド−２］（Ｉｎｓｔｉｔｕｔ  Ｅｕｒｏｐｅｅｎ  ｄｅ  Ｂｉｏｌｏｇｉｅ  Ｃｅｌｌｕｌａｉｒｅ／Ｕｎｉｐｅｘ  Ｉｎｎｏｖａｔｉｏｎｓによって販売）によって形成される群から選択される。
【００４９】
一実施形態では、真皮または上皮高分子の合成を刺激する薬剤は、例えば限定されるものではないが、中でもコラーゲン合成刺激剤、エラスチン合成刺激剤、デコリン合成刺激剤、ラミニン合成刺激剤、シャペロン合成刺激剤、サーチュイン合成刺激剤、サーチュイン活性化剤、アクアポリン合成をモジュレートする薬剤、フィブロネクチン合成刺激剤、コラーゲン分解を阻害する薬剤、エラスチン分解を阻害する薬剤、セリンプロテアーゼ、例えばカリクレイン、白血球エラスターゼもしくはカテプシンＧを阻害する薬剤、線維芽細胞増殖を刺激する薬剤、ならびにＤＮＡ修復剤および／もしくはＤＮＡ保護剤、例えば限定されるものではないが、Ｃｅｎｔｅｌｌａ  ａｓｉａｔｉｃａ、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｉｖｉｓｉａｅ、Ｓｏｌａｎｕｍ  ｔｕｂｅｒｏｓｕｍ、Ｒｏｓｍａｒｉｎｕｓ  ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ、Ｖａｃｃｉｎｉｕｍ  ａｎｇｕｓｔｉｆｏｌｉｕｍのエキス、藻類Ｍａｃｒｏｃｙｓｔｉｓ  ｐｙｒｉｆｅｒａ、Ｐａｄｉｎａ  ｐａｖｏｎｉｃａのエキス、ダイズ、麦芽、亜麻、セージ、レッドクローバー、葛根、白色ルピナス植物のエキス、ヘーゼルナッツエキス、トウモロコシエキス、酵母エキス、ブナノキ（beech  shoot）エキス、マメ科種子エキス、植物ホルモンエキス、例えばジベレリン、オーキシンもしくはサイトカイニン、または中でも動物プランクトンＳａｌｉｎａのエキス、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  Ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓを含む乳の発酵生成物、アシアチコシドおよびそれらの誘導体、ビタミンＣおよびその誘導体、ケイ皮酸およびその誘導体、Ｍａｔｒｉｘｙｌ（登録商標）［ＩＮＣＩ：パルミトイルペンタペプチド−３］、Ｍａｔｒｉｘｙｌ（登録商標）３０００［ＩＮＣＩ：パルミトイルテトラペプチド−３、パルミトイルオリゴペプチド］もしくはＢｉｏｐｅｐｔｉｄｅ  ＣＬ（商標）［ＩＮＣＩ：ポリメタクリル酸グリセリル、プロピレングリコール、パルミトイルオリゴペプチド］（Ｓｅｄｅｒｍａ／Ｃｒｏｄａによって販売）、Ａｎｔａｒｃｔｉｃｉｎｅ（登録商標）［ＩＮＣＩ：シュードアルテロモナス発酵エキス］、Ｄｅｃｏｒｉｎｙｌ（登録商標）［ＩＮＣＩ：トリペプチド−１０シトルリン］、Ｓｅｒｉｌｅｓｉｎｅ（登録商標）［ＩＮＣＩ：ヘキサペプチド−１０］、Ｌｉｐｅｐｔｉｄｅ［ＩＮＣＩ：加水分解野菜タンパク質］、Ａｌｄｅｎｉｎｅ（登録商標）［ＩＮＣＩ：加水分解コムギタンパク質、加水分解ダイズタンパク質、トリペプチド−１］、Ｒｅｌｉｓｔａｓｅ（商標）［ＩＮＣＩ：アセチルアルギニルトリプトフィルジフェニルグリシン］、Ｔｈｅｒｍｏｓｔｒｅｓｓｉｎｅ（商標）［ＩＮＣＩ：アセチルテトラペプチド−２２］、Ｐｅｐｔｉｄｅ  ＡＣ２９［ＩＮＣＩ：アセチルトリペプチド−３０シトルリン］、Ｄｉｆｆｕｐｏｒｉｎｅ（商標）［ＩＮＣＩ：アセチルヘキサペプチド−３７］、Ｓｉｌｕｓｙｎｅ（商標）［ＩＮＣＩ：ダイズ（Ｇｌｙｃｉｎｅ  ｓｏｊａ）油、セスキオレイン酸ソルビタン、イソヘキサデカン、ヒアルロン酸ナトリウム、ラウリルジモニウムヒドロキシプロピル加水分解ダイズタンパク質、アセチルヘキサペプチド−３９］、Ｕｐｌｅｖｉｔｙ（商標）［ＩＮＣＩ：アセチルテトラペプチド−２］もし��はＡｄｉｆｙｌｉｎｅ（商標）［ＩＮＣＩ：アセチルヘキサペプチド−３８］（Ｌｉｐｏｔｅｃ／Ｌｕｂｒｉｚｏｌによって販売）、Ｄｒｉｅｌｉｎｅ（登録商標）ＰＦ［ＩＮＣＩ：酵母ベータグルカン］（Ａｌｂａｎ  Ｍｕｌｌｅｒによって販売）、Ｐｈｙｔｏｖｉｔｙｌ  Ｃ（登録商標）［ＩＮＣＩ：アクア、Ｚｅａ  ｍａｙｓエキス］（Ｓｏｌａｂｉａによって販売）、Ｃｏｌｌａｌｉｆｔ（登録商標）［ＩＮＣＩ：加水分解麦芽エキス］（Ｃｏｌｅｔｉｃａ／Ｅｎｇｅｌｈａｒｄ／ＢＡＳＦによって販売）、Ｐｈｙｔｏｃｏｈｅｓｉｎｅ  ＰＳＰ（商標）［ＩＮＣＩ：ベータシトステロール硫酸ナトリウム］（Ｖｉｎｃｉｅｎｃｅ／ＩＳＰ／Ａｓｈｌａｎｄによって販売）、ミネラル、例えばカルシウム、中でもレチノイドおよびそれらの誘導体、イソフラボノイド、カロテノイド、特にリコペン、シュードジペプチド、レチノイドおよびそれらの誘導体、例えばレチノールまたはパルミチン酸レチニル、または中でもヘパリノイドによって形成される群から選択される。
【００５０】
一実施形態では、皺取り剤および／もしくは老化防止剤は、例えば限定されるものではないが、中でもＶｉｔｉｓ  ｖｉｎｉｆｅｒａ、Ｒｏｓａ  ｃａｎｉｎａ、Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａ、Ｔｈｅｏｂｒｏｍａ  ｃａｃａｏ、Ｇｉｎｋｇｏ  ｂｉｌｏｂａ、Ｌｅｏｎｔｏｐｏｄｉｕｍ  ａｌｐｉｎｕｍまたはＤｕｎａｌｉｅｌｌａ  ｓａｌｉｎａのエキスもしくは加水分解エキス、Ｍａｔｒｉｘｙｌ（登録商標）［ＩＮＣＩ：パルミトイルペンタペプチド−４］、Ｍａｔｒｉｘｙｌ（登録商標）３０００（登録商標）［ＩＮＣＩ：パルミトイルテトラペプチド−７、パルミトイルオリゴペプチド］、Ｍａｔｒｉｘｙｌ（登録商標）Ｓｙｎｔｈｅ’６（商標）［ＩＮＣＩ：グリセリン、水、ヒドロキシプロピルシクロデキストリン、パルミトイルトリペプチド−３８］、Ｅｓｓｅｎｓｋｉｎ（商標）［ＩＮＣＩ：カルシウムヒドロキシメチオニン］、Ｒｅｎｏｖａｇｅ［ＩＮＣＩ：テプレノン］、Ｒｅｓｉｓｔｅｍ（商標）［ＩＮＣＩ：Ｇｌｏｂｕｌａｒｉａ  Ｃｏｒｄｉｆｏｌｉａ発酵物］もしくはＤｅｒｍａｘｙｌ（登録商標）［ＩＮＣＩ：パルミトイルオリゴペプチド］（Ｓｅｄｅｒｍａ／Ｃｒｏｄａによって販売）、Ｖｉａｌｏｘ（登録商標）［ＩＮＣＩ：ペンタペプチド−３］、Ｓｙｎ（登録商標）Ａｋｅ（登録商標）［ＩＮＣＩ：二酢酸ジペプチドジアミノブチロイルベンジルアミド］、Ｓｙｎ（登録商標）−Ｃｏｌｌ［ＩＮＣＩ：パルミトイルトリペプチド−５］、Ｐｈｙｔａｌｕｒｏｎａｔｅ［ＩＮＣＩ：ローカストビーン（Ｃｅｒａｔｏｎｉａ  ｓｉｌｉｑｕａ）ガム］もしくはＰｒｅｒｅｇｅｎ（登録商標）［ＩＮＣＩ：Ｇｌｙｃｉｎｅ  ｓｏｊａ（ダイズ）タンパク質、酸化還元酵素］（Ｐｅｎｔａｐｈａｒｍ／ＤＳＭによって販売）、Ｍｙｏｘｉｎｏｌ（商標）［ＩＮＣＩ：加水分解Ｈｉｂｉｓｃｕｓ  ｅｓｃｕｌｅｎｔｕｓエキス］、Ｓｙｎｉｏｒａｇｅ（商標）［ＩＮＣＩ：アセチルテトラペプチド−１１］、Ｄｅｒｍｉｃａｎ（商標）［ＩＮＣＩ：アセチルテトラペプチド−９］もしくはＤＮ  ＡＧＥ（商標）ＬＳ［ＩＮＣＩ：Ｃａｓｓｉａ  ａｌａｔａ葉エキス］（Ｌａｂｏｒａｔｏｉｒｅｓ  Ｓｅｒｏｂｉｏｌｏｇｉｑｕｅｓ／Ｃｏｇｎｉｓ／ＢＡＳＦによって販売）、Ａｌｇｉｓｕｍ  Ｃ（登録商標）［ＩＮＣＩ：マンヌロン酸メチルシラノール］もしくはＨｙｄｒｏｘｙｐｒｏｌｉｓｉｌａｎｅ  ＣＮ（登録商標）［ＩＮＣＩ：アスパラギン酸メチルシラノールヒドロキシプロリン］（Ｅｘｓｙｍｏｌによって販売）、Ａｒｇｉｒｅｌｉｎｅ（登録商標）［ＩＮＣＩ：アセチルヘキサペプチド−８］、ＳＮＡＰ−７［ＩＮＣＩ：アセチルヘプタペプチド−４］、ＳＮＡＰ−８［ＩＮＣＩ：アセチルオクタペプチド−３］、Ｌｅｕｐｈａｓｙｌ（登録商標）［ＩＮＣＩ：ペンタペプチド−１８］、Ｉｎｙｌｉｎｅ（商標）［ＩＮＣＩ：アセチルヘキサペプチド−３０］、Ａｌｄｅｎｉｎｅ（登録商標）［ＩＮＣＩ：加水分解コムギタンパク質、加水分解ダイズタンパク質、トリペプチド−１］、Ｐｒｅｖｅｎｔｈｅｌｉａ（商標）［ＩＮＣＩ：ジアミノプロピオノイルトリペプチド−３３］、Ｄｅｃｏｒｉｎｙｌ（登録商標）［ＩＮＣＩ：トリペプチド−１０シトルリン］、Ｄｅｃｏｒｉｎｏｌ（登録商���）［ＩＮＣＩ：トリペプチド−９シトルリン］、Ｔｒｙｌａｇｅｎ（登録商標）［ＩＮＣＩ：シュードアルテロモナス発酵エキス、加水分解コムギタンパク質、加水分解ダイズタンパク質、トリペプチド−１０シトルリン、トリペプチド−１］、Ｅｙｅｓｅｒｙｌ（登録商標）［ＩＮＣＩ：アセチルテトラペプチド−５］、Ｐｅｐｔｉｄｅ  ＡＣ２９［ＩＮＣＩ：アセチルトリペプチド−３０シトルリン］、Ｒｅｌｉｓｔａｓｅ（商標）［ＩＮＣＩ：アセチルアルギニルトリプトフィルジフェニルグリシン］、Ｔｈｅｒｍｏｓｔｒｅｓｓｉｎｅ（登録商標）［ＩＮＣＩ：アセチルテトラペプチド−２２］、Ｌｉｐｏｃｈｒｏｍａｎ（商標）［ＩＮＣＩ：ジメチルメトキシクロマノール］、Ｃｈｒｏｍａｂｒｉｇｈｔ（商標）［ＩＮＣＩ：パルミチン酸ジメチルメトキシクロマニル］、Ａｎｔａｒｃｔｉｃｉｎｅ（登録商標）［ＩＮＣＩ：シュードアルテロモナス発酵エキス］、ｄＧｌｙａｇｅ（商標）［ＩＮＣＩ：リシンＨＣｌ、レシチン、トリペプチド−９シトルリン］、Ｖｉｌａｓｔｅｎｅ（商標）［ＩＮＣＩ：リシンＨＣｌ、レシチン、トリペプチド−１０シトルリン］、Ｈｙａｄｉｓｉｎｅ（商標）［ＩＮＣＩ：シュードアルテロモナス発酵エキス］、Ｈｙａｎｉｆｙ（商標）［ＩＮＣＩ：異性化糖］、Ｄｉｆｆｕｐｏｒｉｎｅ（商標）［ＩＮＣＩ：アセチルヘキサペプチド−３７］、Ｓｉｌｕｓｙｎｅ（商標）［ＩＮＣＩ：ダイズ（Ｇｌｙｃｉｎｅ  ｓｏｊａ）油、セスキオレイン酸ソルビタン、イソヘキサデカン、ヒアルロン酸ナトリウム、ラウリルジモニウムヒドロキシプロピル加水分解ダイズタンパク質、アセチルヘキサペプチド−３９］、Ａｄｉｆｙｌｉｎｅ（商標）［ＩＮＣＩ：アセチルヘキサペプチド−３８］、Ｕｐｌｅｖｉｔｙ（商標）［ＩＮＣＩ：アセチルテトラペプチド−２］もしくはＪｕｖｅｆｏｘｏ（商標）［ＩＮＣＩ：アセチルヘキサペプチド−５１アミド］（Ｌｉｐｏｔｅｃ／Ｌｕｂｒｉｚｏｌによって販売）、Ｋｏｌｌａｒｅｎ（登録商標）［ＩＮＣＩ：トリペプチド−１、デキストラン］（Ｉｎｓｔｉｔｕｔ  Ｅｕｒｏｐｅｅｎ  ｄｅ  Ｂｉｏｌｏｇｉｅ  Ｃｅｌｌｕｌａｉｒｅによって販売）、Ｃｏｌｌａｘｙｌ（登録商標）ＩＳ［ＩＮＣＩ：ヘキサペプチド−９］、Ｌａｍｉｎｉｘｙｌ  ＩＳ（商標）［ＩＮＣＩ：ヘプタペプチド］、Ｏｒｓｉｒｔｉｎｅ（商標）ＧＬ［ＩＮＣＩ：Ｏｒｙｚａ  ｓａｔｉｖａ（コメ）エキス］、Ｄ’Ｏｒｉｅｎｔｉｎｅ（商標）ＩＳ［ＩＮＣＩ：Ｐｈｏｅｎｉｘ  ｄａｃｔｙｌｉｆｅｒａ（デーツ）種子エキス］、Ｐｈｙｔｏｑｕｉｎｔｅｓｃｉｎｅ（商標）［ＩＮＣＩ：ヒトツブコムギ（Ｔｒｉｔｉｃｕｍ  ｍｏｎｏｃｏｃｃｕｍ）エキス］もしくはＱｕｉｎｔｅｓｃｉｎｅ（商標）ＩＳ［ＩＮＣＩ：ジペプチド−４］（Ｖｉｎｃｉｅｎｃｅ／ＩＳＰ／Ａｓｈｌａｎｄによって販売）、ＢＯＮＴ−Ｌ−ペプチド［ＩＮＣＩ：パルミトイルヘキサペプチド−１９］（Ｉｎｆｉｎｉｔｅｃ  Ａｃｔｉｖｏｓによって販売）、Ｄｅｅｐａｌｉｎｅ（商標）ＰＶＢ［ＩＮＣＩ：パルミトイル加水分解コムギタンパク質］もしくはＳｅｐｉｌｉｆｔ（登録商標）ＤＰＨＰ［ＩＮＣＩ：ジパルミトイルヒドロキシプロリン］（Ｓｅｐｐｉｃによって販売）、Ｇａｔｕｌｉｎｅ（登録商標）Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ［ＩＮＣＩ：Ａｃｍｅｌｌａ  ｏｌｅｒａｃｅａエキス］、Ｇａｔｕｌｉｎｅ（登録商標）Ｉｎ−Ｔｅｎｓｅ［ＩＮＣＩ：Ｓｐｉｌａｎｔｈｅｓ  ａｃｍｅｌｌａ花エキス］もしくはＧａｔｕｌｉｎｅ（登録商標）Ａｇｅ  Ｄｅｆｅｎｓｅ  ２［ＩＮＣＩ：Ｊｕｇｌａｎｓ  ｒｅｇｉａ（クルミ）種子エキス］（Ｇａｔｔｅｆｏｓｓｅによって販売）、Ｔｈａｌａｓｓｉｎｅ（商標）［ＩＮＣＩ：藻類エキス］（Ｂｉｏｔｅｃｈｍａｒｉｎｅによって販売）、ＣｈｒｏＮＯｌｉｎｅ（商標）［ＩＮＣＩ：カプロオイルテトラペプチド−３］もしくはＴｈｙｍｕｌｅｎ−４［ＩＮＣＩ：アセチルテトラペプチド−２］（Ａｔｒｉｕｍ／Ｕｎｉｐｅｘ  Ｉｎｎｏｖａｔｉｏｎｓによって販売）、ＥｑｕｉＳｔａｔ［ＩＮＣＩ：Ｐｙｒｕｓ  ｍａｌｕｓ果実エキス、Ｇｌｙｃｉｎｅ  ｓｏｊａ種子エキス］もしくはＪｕｖｅｎｅｓｃｅ［ＩＮＣＩ：エトキシジグリコール（Ethoxydiglicol）およびカプリル酸トリグリセリル、レチノール、ウルソール酸、フィトナジオン、イロマスタット］（Ｃｏｌｅｔｉｃａ／Ｅｎｇｅｌｈａｒｄ／ＢＡＳＦによって販売）、Ａｍｅｌｉｏｘ［ＩＮＣＩ：カルノシン、トコフェロール、Ｓｉｌｙｂｕｍ  ｍａｒｉａｎｕｍ果実エキス］もしくはＰｈｙｔｏＣｅｌｌＴｅｃ  Ｍａｌｕｓ  Ｄｏｍｅｓｔｉｃａ［ＩＮＣＩ：Ｍａｌｕｓ  ｄｏｍｅｓｔｉｃａ果実細胞培養物］（Ｍｉｂｅｌｌｅ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙによって販売）、Ｂｉｏｘｉｌｉｆｔ［ＩＮＣＩ：Ｐｉｍｐｉｎｅｌｌａ  ａｎｉｓｕｍエキス］もしくはＳＭＳ  Ａｎｔｉ−Ｗｒｉｎｋｌｅ（登録商標）［ＩＮＣＩ：Ａｎｎｏｎａ  ｓｑｕａｍｏｓａ種子エキス］（Ｓｉｌａｂによって販売）、Ｃａ２＋チャネルのアンタゴニスト、例えば限定されるものではないが、アルベリン、マンガン塩もしくはマグネシウム塩、ある特定の第二級もしくは第三級アミン、レチノールおよびその誘導体、イデベノンおよびその誘導体、補酵素Ｑ１０およびその誘導体、ボスウェル酸およびその誘導体、ＧＨＫおよびその誘導体および／もしくは塩、カルノシンおよびその誘導体、ＤＮＡ修復酵素、例えば限定されるものではないが、中でもホトリアーゼもしくはＴ４エンドヌクレアーゼＶ、もしくは塩素チャネルアゴニスト、ならびに／またはそれらの混合物によって形成される群から選択される。
【００５１】
一実施形態では、治癒を刺激する薬剤、コアジュバント治癒剤、上皮再形成を刺激する薬剤、コアジュバント上皮再形成剤は、例えば限定されるものではないが、中でもＡｒｉｓｔｏｌｏｑｕｉａ  ｃｌｅｍａｔｉｓ、Ｃｅｎｔｅｌｌａ  ａｓｉａｔｉｃａ、Ｒｏｓａ  ｍｏｓｃｈａｔａ、Ｅｃｈｉｎａｃｅａ  ａｎｇｕｓｔｉｆｏｌｉａ、Ｓｙｍｐｈｙｔｕｍ  ｏｆｆｉｃｉｎａｌ、Ｅｑｕｉｓｅｔｕｍ  ａｒｖｅｎｓｅ、Ｈｙｐｅｒｉｃｕｍ  ｐｅｒｆｏｒａｔｕｍ、Ｍｉｍｏｓａ  ｔｅｎｕｉｆｌｏｒａ、Ｐｅｒｓｅａ  ｇｒａｔｉｓｉｍａ、Ｐｒｕｎｕｓ  ａｆｒｉｃａｎｕｍ、Ｔｏｒｍｅｎｔｉｌｌａ  ｅｒｅｃｔａ、Ａｌｏｅ  ｖｅｒａのエキスもしくは加水分解エキス、Ｐｏｌｙｐｌａｎｔ（登録商標）Ｅｐｉｔｈｅｌｉｚｉｎｇ［ＩＮＣＩ：Ｃａｌｅｎｄｕｌａ  ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ、Ｈｙｐｅｒｉｃｕｍ  ｐｅｒｆｏｒａｔｕｍ、Ｃｈａｍｏｍｉｌｌａ  ｒｅｃｕｔｉｔａ、Ｒｏｓｍａｒｉｎｕｓ  ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ］（Ｐｒｏｖｉｔａｌによって販売）、Ｃｙｔｏｋｉｎｏｌ（登録商標）ＬＳ  ９０２８［ＩＮＣＩ：加水分解カゼイン、加水分解酵母タンパク質、リシンＨＣｌ］（Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ  Ｓｅｒｏｂｉｏｌｏｇｉｑｕｅｓ／Ｃｏｇｎｉｓによって販売）、Ｄｅｌｉｎｅｒ（登録商標）［ＩＮＣＩ：Ｚｅａ  ｍａｙｓ（コーン）穀粒エキス］（Ｃｏｌｅｔｉｃａ／Ｅｎｇｅｌｈａｒｄによって販売）、アラントイン、カドヘリン、インテグリン、セレクチン、ヒアルロン酸受容体、免疫グロブリン、線維芽細胞成長因子、結合組織成長因子、血小板由来成長因子、血管内皮成長因子、上皮成長因子、インスリン様成長因子、ケラチノサイト成長因子、コロニー刺激因子、形質転換成長因子ベータ、腫瘍壊死因子−アルファ、インターフェロン、インターロイキン、マトリックスメタロプロテイナーゼ、タンパク質チロシンホスファターゼ受容体、Ａｎｔａｒｃｔｉｃｉｎｅ（登録商標）［ＩＮＣＩ：シュードアルテロモナス発酵エキス］、Ｂｏｄｙｆｅｎｓｉｎｅ（登録商標）［ＩＮＣＩ：アミノヘキサン酸アセチルジペプチド−３］もしくはＤｅｃｏｒｉｎｙｌ（商標）［ＩＮＣＩ：トリペプチド−１０シトルリン］、Ｔｒｙｌａｇｅｎ（登録商標）［ＩＮＣＩ：シュードアルテロモナス発酵エキス、加水分解コムギタンパク質、加水分解ダイズタンパク質、トリペプチド１０シトルリン、トリペプチド−１］、Ｘｐｅｒｔｍｏｉｓｔ（商標）［ＩＮＣＩ：グリセリン、シュードアルテロモナス発酵エキス、キサンタンガム、プロリン、アラニン、セリン、エチルヘキシルグリセリン、カプリリルグリコール］、Ｓｅｒｉｌｅｓｉｎｅ（登録商標）［ＩＮＣＩ：ヘキサペプチド−１０］、Ｄｅｌｉｓｅｎｓ（商標）［ＩＮＣＩ：アセチルヘキサペプチド−４９］もしくはＴｈｅｒｍｏｓｔｒｅｓｓｉｎｅ（商標）［ＩＮＣＩ：アセチルテトラペプチド−２２］（Ｌｉｐｏｔｅｃ／Ｌｕｂｒｉｚｏｌによって販売）、および／またはそれらの混合物によって形成される群から選択される。
【００５２】
適用
【００５３】
本発明の他の態様は、アディポネクチンレベルの増加、筋肉のミトコンドリア活性の増加、筋持久力の増加、創傷治癒の刺激および／もしくは皮膚の上皮再形成、コラーゲン合成および／もしくはヒアルロン酸の合成の刺激、皮膚老化の処置および／もしくは防止、皮膚皺の処置および／もしくは防止、皮膚硬化の処置、ならびに／または皮膚の張りの喪失の防止のための化粧品組成物または皮膚医薬組成物の調製における、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ種の株の発酵エキスの使用に言及する。一実施形態では、アディポネクチンレベルは、循環アディポネクチンのレベルである。別の実施形態では、アディポネクチンレベルは、脂肪細胞のアディポネクチンレベルである。一実施形態では、筋肉のミトコンドリア活性の増加は、筋肉のＡＴＰおよび／またはクエン酸シンターゼ活性のレベルの増加である。他の実施形態では、筋持久力の増加は、有酸素持久力の増加である。別の実施形態では、有酸素持久力の増加は、筋肉におけるＩ型線維の割合の増加である。一実施形態では、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ種の株は、寄託番号ＬＭＧ  Ｐ−２８２０２のＢａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ種の株である。
【００５４】
本発明の追加の一態様は、化粧品または皮膚医薬として有効な量のＢａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ種の株の発酵エキスを投与することを含む、アディポネクチンレベルを増加させる、筋肉のミトコンドリア活性を増加させる、筋持久力を増加させる、創傷治癒および／もしくは皮膚の上皮再形成を刺激する、コラーゲン合成および／もしくはヒアルロン酸の合成を刺激する、皮膚老化を処置および／もしくは防止する、皮膚皺を処置および／もしくは防止する、皮膚硬化を処置する、かつ／または皮膚の張りの喪失を防止する方法に言及する。一実施形態では、アディポネクチンレベルは、循環アディポネクチンのレベルである。他の実施形態では、アディポネクチンレベルは、脂肪細胞のアディポネクチンレベルである。一実施形態では、筋肉のミトコンドリア活性の増加は、筋肉のＡＴＰおよび／またはクエン酸シンターゼ活性のレベルの増加である。他の実施形態では、筋持久力の増加は、有酸素持久力の増加である。他の実施形態では、有酸素持久力の増加は、筋肉におけるＩ型線維の割合の増加である。一実施形態では、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ種の株は、寄託番号ＬＭＧ  Ｐ−２８２０２のＢａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ種の株である。別の実施形態では、筋肉のミトコンドリア活性の増加、筋持久力の増加、創傷治癒および／または皮膚の上皮再形成の刺激は、アディポネクチンレベルの増加の結果である。別の実施形態では、皮膚老化の処置および／もしくは防止、皮膚皺の処置および／もしくは防止、皮膚硬化の処置、ならびに／または皮膚の張りの喪失の防止は、コラーゲン合成刺激の結果である。
【００５５】
一実施形態では、アディポネクチンレベルの増加は、筋肉のミトコンドリア活性の増加、筋持久力の増加、創傷治癒の刺激および／もしくは皮膚の上皮再形成、コラーゲン合成および／もしくはヒアルロン酸の合成の刺激、皮膚老化の処置および／もしくは防止、皮膚皺の処置および／もしくは防止、皮膚硬化の処置、ならびに／または皮膚の張りの喪失の防止をもたらす。
【００５６】
別の態様では、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ種の株によって生成された発酵エキスは、ヒトの作用部位と接触させる任意の手段によって、しばしばその発酵エキスを含有する組成物の形態で投与される。Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ種の株によって生成された発酵エキスの投与は、局所または経皮によって行われる。一実施形態では、局所または経皮適用は、イオン導入、ソノフォレーシス、エレクトロポレーション、機械的圧力、浸透圧勾配、閉塞性硬化、マイクロインジェクション、圧力を用いる無針注射、微小電気パッチ、フェイスマスクまたはそれらの任意の組合せによって行われる。
【００５７】
適用または投与の頻度は、各被験体の必要に応じて広く変わり得るが、月１回から１日１０回、週１回から１日４回、週３回から１日３回、または１日１回の、様々な適用または投与が示唆される。
【００５８】
生物学的材料の寄託
【００５９】
Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ種の株は、Ｂｅｌｇｉａｎ  Ｃｏｏｒｄｉｎａｔｅｄ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｓ（ＢＣＣＭ）／Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｕｍ  ｖｏｏｒ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｉｅ−Ｂａｃｔｅｒｉｅｖｅｒｚａｍｅｌｉｎｇ（ＬＭＧ）（Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｇｈｅｎｔ、Ｋ．Ｌ．Ｌｅｄｅｇａｎｃｋｓｔｒａａｔ  ３５、９０００  Ｇｈｅｎｔ、Ｂｅｌｇｉｕｍ）において、ブダペスト条約の条件下で寄託された。寄託は、２０１４年３月１１日に行われ、寄託番号はＬＭＧ  Ｐ−２８２０２であった。
【００６０】
［実施例］
【００６１】
上に言及した文書のそれぞれは、上で具体的に列挙されていても列挙されていなくても、従来の任意の特許出願文書を含む参照によって本明細書に組み込まれ、それから優先権が特許請求される。いかなる文書への言及も、このような文書が従来技術とみなされ、または任意の管轄の当業者の一般知識を構成すると認めるものではない。実施例またはそれ以外で明確に示されている場合を除き、材料の量、反応条件、分子量、炭素原子数等を特定する本記載におけるすべての数量は、近似と理解されるべきであり、すなわち示した値の±５％、±３％、±１％、±０．１％、または±０．０１％で変動する。本明細書に記載の量、範囲および比の上限および下限は、独立に組み合わせることができると理解されたい。同様に、本明細書に記載の技術の要素ごとの範囲および量は、その他の要素のいずれかの範囲または量と一緒に使用することができる。
【００６２】
（実施例１）
寄託番号ＬＭＧ  Ｐ−２８２０２のＢａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ種の株の発酵エキスを得る。
【００６３】
Ａ）寄託番号ＬＭＧ  Ｐ−２８２０２のＢａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ株の培養プロセス
寄託番号ＬＭＧ  Ｐ−２８２０２のＢａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ株を、バイオリアクター中、２５℃およびｐＨ８．０で、水と、１ｇ／Ｌの酵母エキスと、炭素および窒素の供給源としての４ｇ／Ｌのペプトンと、追加の炭素供給源としての２０ｇ／Ｌのグルコースと、濃度３１ｇ／Ｌの海塩を含有する培養培地で培養する。それを、波長６００ｎｍの光学密度０．２ＡＵにおいて指数関数的に成長する前培養物から接種する。発酵を、培養の７２時間まで延長する。溶解酸素濃度を、３０％飽和空気において制御し、撹拌を約２００ｒｐｍの値で維持する。
【００６４】
Ｂ）寄託番号ＬＭＧ  Ｐ−２８２０２のＢａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ株から得られた発酵エキスの精製
【００６５】
細菌を、実施例１ａ）に記載の、発酵エキスを含有する得られた発酵ブロスから、Ｗｅｓｔｆａｌｉａ  ＣＳＡ−１遠心分離機を１０，０００ｒｐｍで稼働させて、連続的に遠心分離処理することによって分離する。細菌の除去を、最終的な細孔径０．２μｍの濾過によって完了する。その後、発酵エキスを含有する得られた上清を、凍結乾燥させる。
【００６６】
（実施例２）
寄託番号ＬＭＧ  Ｐ−２８２０２のＢａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ株の発酵エキスの物理化学的な特徴付け。
【００６７】
実施例１に従って得られた、寄託番号ＬＭＧ  Ｐ−２８２０２のＢａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ種の株の発酵エキスの物理化学的な特徴付けのために、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、第一級アミン（ニンヒドリン試験）、第二級アミン（クロラニル（Chloranyl）アッセイ）炭水化物（フェーリング）、およびフェノール（フォリン−チオカルト）アッセイを実施する。
【００６８】
クロマトグラフィー分析ＳＥ−ＨＰＬＣ−ＵＶ
【００６９】
実施例１に従って得られた発酵エキスの７ｍｇ／ｍＬの水：グリセリン（９：９５）溶液を調製し、ＨＰＬＣ−ＵＶによって分析する。予め水で１：５希釈し、０．２２μｍの酢酸セルロースフィルタを介して濾過する。１００μＬを、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）ＬＣ２０Ａ  ＳＨＩＭＡＤＺＵに注入する。使用されるクロマトグラフィーカラムは、ＴＳＫＧｅｌ  Ｇ２０００ＳＷＸＬ、５ｍ、１２５Å、７．８ｍｍ×３０ｍｍ（ＴＯＳＯＨ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）であり、溶出液として０．１Ｍの水、ｐＨ＝６．７０＋０．１Ｍリン酸緩衝液＋０．１Ｍ硫酸ナトリウムを使用する。
【００７０】
これらの条件下で、生成物のクロマトグラムは、１０〜１５分のピークを示し、標準であるアミノ安息香酸（ＭＷ＝１３７Ｄａ）の保持時間とウシ膵臓由来のリボヌクレアーゼＡ（ＭＷ＝１３７００Ｄａ）の保持時間との間で、平均ピークは１１分である。
【００７１】
第一級アミン（ニンヒドリンアッセイ）
【００７２】
試薬：ニンヒドリン試薬Ａ：フェノール４０ｇを、無水エタノール１０ｍＬに溶解する。並列して、ＫＣＮ６５ｍｇを、水１００ｍＬに溶解する。この溶液２ｍＬを、ニンヒドリンを介して蒸留したピリジン１００ｍＬに溶解する。両方の溶液を、４５分間、Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ  ＭＢ−３  ４ｇと混合する。最後に溶液を、濾紙を介して濾過し、次に混合する。ニンヒドリン試薬Ｂ：ニンヒドリン２．５ｍｇを、無水エタノール５０ｍＬに溶解する。
【００７３】
方法：１ｍｇ／ｍＬの実施例１に従って得られた発酵エキス水溶液０．５ｍＬを、２ｍＬ管に注ぐ。次に、３滴のニンヒドリン試薬Ａおよび１滴のニンヒドリン試薬Ｂを管に添加し、混合する。次に、それを１１０℃で２分間維持する。分析した生成物は黄色を示し、したがって第一級アミンは検出されないことを示している。４ＭのＴＦＡ溶液を用いて４時間、酸加水分解した後、ニンヒドリン試験を反復して陽性の結果を得て、それによって、発酵エキスが、ペプチド形態のアミノ酸を含有することが示された。
【００７４】
第二級アミン（クロラニルアッセイ）
【００７５】
試薬：アセトンおよびクロラニル反応試薬：飽和溶液を得るために、クロラニル（２，３，５，６−テトラクロロ−１，４−ベンゾキノン）０．７５ｇを、トルエン２５ｍＬに溶解する。
【００７６】
方法：４滴のアセトンを、実施例１に従って得られた、凍結乾燥させた発酵エキス２０ｍｇに添加する。次に、１滴のクロラニル反応試薬を添加する。この混合物を撹拌し、室温で５分間維持する。分析した生成物は、緑色から青色に発色せず、したがって、発酵エキスには第二級アミンが検出されないことを示している。
【００７７】
炭水化物分析（フェーリングアッセイ）
【００７８】
試薬：フェーリングＡ：水１Ｌと９６％硫酸１ｍＬ中、硫酸銅（ＩＩ）４８．３ｇ。フェーリングＢ：水１Ｌ中水酸化ナトリウム９０ｇと酒石酸カリウムナトリウム３００ｇ。
【００７９】
方法：試薬フェーリングＡ  １ｍＬおよび試薬フェーリングＢ  １ｍＬを、実施例１に従って得られた発酵エキス１０ｍｇに添加し、試料を６０℃で４５〜６０分間加熱する。赤色固体の沈殿物は、発酵エキスに還元性炭水化物が存在することを示している。
【００８０】
フェノールアッセイ（フォリン−チオカルトアッセイ）
【００８１】
試薬：フォリン−チオカルト試薬（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ製；Ｒｅｆ．４７６４１）；Ｎａ２ＣＯ３（Ｐａｎｒｅａｃ製）およびメタノール（Ｓｃｈａｒｌａｂ製）。
【００８２】
方法：１０ｍｌの管に、以下の試薬を添加する。１ｍｇ／ｍｌの実施例１に従って得られた発酵エキス水溶液０．５ｍｌ、フォリン−チオカルト試薬０．５ｍｌ、Ｎａ２ＣＯ３  ２０％  １．５ｍｌおよびメタノール：水（１：１）７ｍＬ。この溶液を、暗所で１時間維持する。同じ溶液を、発酵エキスなしのブランクとして調製する（水で置き換える）。陰性の結果である無色溶液は、発酵エキスにフェノールが検出されないことを示している。
【００８３】
（実施例３）
寄託番号ＬＭＧ  Ｐ−２８２０２のＢａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ種の株の発酵エキスを含む化粧品クリーム組成物の調製。
【００８４】
適切な容器内で、水［ＩＮＣＩ：水（アクア）］、ソルビン酸カリウム［ＩＮＣＩ：ソルビン酸カリウム］、およびＥＤＴＡ二ナトリウム［ＩＮＣＩ：ＥＤＴＡ二ナトリウム］を混合し、可溶化が達成するまで撹拌する。次に、Ｃａｒｂｏｐｏｌ  Ｕｌｔｒｅｚ  ２０［ＩＮＣＩ：カルボマー］を添加し、完全に分散するまで撹拌する。その後、キサンタンガム［ＩＮＣＩ：キサンタンガム］を添加し、やはり完全に分散するまで撹拌する。この成分の混合物は、相Ａを構成する。
【００８５】
Ｂ相の成分であるＨｙｄｒｏｌｉｔｅ−５  ２／０１６０２０［ＩＮＣＩ：ペンチレングリコール］、Ｚｅｍｅａ［ＩＮＣＩ：プロパンジオール］、およびフェノキシエタノール［ＩＮＣＩ：フェノキシエタノール］を、撹拌しながら１つずつ相Ａの混合物に添加する。
【００８６】
シクロヘキサシロキサンＢＲＢ  ＣＭ６０［ＩＮＣＩ：シクロヘキサシロキサン］を含む相Ｃを、相Ａおよび相Ｂの混合物に添加し、均質化するまで撹拌する。
【００８７】
相Ｄの成分であるＳｃｈｅｒｃｅｍｏｌ  １８１８［ＩＮＣＩ：イソステアリン酸イソステアリル］を、混合物に完全に組み込まれるまで、撹拌しながら先の混合物に添加する。
【００８８】
相Ｅは、実施例１に従って得られた寄託番号ＬＭＧ  Ｐ−２８２０２のＢａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ株の発酵エキス、グリセリン［ＩＮＣＩ：グリセリン］、水［ＩＮＣＩ：水（アクア）］を含む。この相を、各相Ａ、Ｂ、ＣおよびＤの成分の混合物に、可溶化するまで撹拌しながら添加する。
【００８９】
同様に、相Ｆ成分であるＤｉｆｆｕｐｏｒｉｎｅ［ＩＮＣＩ：アセチルヘキサペプチド−３７、ブチレングリコール、水（アクア）］を、可溶化するまで先の混合物に添加する。
【００９０】
相Ｇの成分であるエチルアルコール［ＩＮＣＩ：変性アルコール］を、撹拌しながら添加する。
【００９１】
その後、芳香剤ビタミンカクテル［ＩＮＣＩ：香料（FRAGANCE）（パルファム）］（相Ｈ）を、撹拌しながら添加する。
【００９２】
ｐＨを、撹拌しながら水酸化ナトリウム［ＩＮＣＩ：水酸化ナトリウム］（適量  ｐＨ６．０〜６．５に調整するのに十分な量）を添加することによって、６．０〜６．５に調整し（相Ｉ）、表１に示した割合の化粧品組成物を得る。
【表１】
0006619359.tif 000002
【００９３】
（実施例４）
寄託番号ＬＭＧ  Ｐ−２８２０２のＢａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ種の株の発酵エキスを含む化粧品クリーム組成物の調製。
【００９４】
適切な容器内で、水［ＩＮＣＩ：水（アクア）］、Ｈｙｄｒｏｌｉｔｅ−５［ＩＮＣＩ：ペンチレングリコール］、グリセリン［ＩＮＣＩ：グリセリン］、Ｂｅｔａｉｎ  ＢＰ［ＩＮＣＩ：ベタイン］、およびＭｉｃｒｏｃａｒｅ  ＢＮＡ［ＩＮＣＩ：ベンジルアルコール］を混合し、可溶化するまで撹拌する。その後、Ｃａｒｂｏｐｏｌ  Ｕｌｔｒｅｚ  １０［ＩＮＣＩ：カルボマー］を添加し、分散するまで撹拌する。次に、Ａｒｌａｔｏｎｅ  ＭＡＰ  １６０Ｋ［ＩＮＣＩ：セチルリン酸カリウム］を添加し、それが完全に分散するまで撹拌する。この成分混合物は、相Ａを構成する。
【００９５】
次に、相Ｂ成分であるセチルアルコール［ＩＮＣＩ：セチルアルコール］、Ｆｉｎｓｏｌｖ  ＴＮ［ＩＮＣＩ：安息香酸Ｃ１２〜Ｃ１５アルキル］、Ｍａｓｓｏｃａｒｅ  ＨＤ［ＩＮＣＩ：イソヘキサデカン］、Ｐｏｌｉｓｏｒｂａｔｅ  ２０［ＩＮＣＩ：ポリソルベート２０］、ステアリン酸［ＩＮＣＩ：ステアリン酸］およびフェノキシエタノール［ＩＮＣＩ：フェノキシエタノール］を混合し、７０℃に温める。
【００９６】
相ＡおよびＢを、７０℃で撹拌しながら混合する。
【００９７】
次に、ＡおよびＢの混合物を、４０℃に冷却し、相Ｃの成分であるＳｉｌｉｃｏｎｅ  ＤＣ  ３４５流体［ＩＮＣＩ：シクロメチコン］をこの温度で添加し、混合物が完全に均質化するまで撹拌する。
【００９８】
実施例１に従って得られた寄託番号ＬＭＧ  Ｐ−２８２０２のＢａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ種の株の発酵エキス、グリセリン［ＩＮＣＩ：グリセリン］および水［ＩＮＣＩ：水（アクア）］を含む相Ｄの成分を、均質化するまで撹拌しながら添加する。
【００９９】
その後、芳香剤［ＩＮＣＩ：香料（パルファム）］（相Ｅ）を、撹拌しながら添加する。ｐＨを、撹拌しながら水酸化ナトリウム［ＩＮＣＩ：水酸化ナトリウム］（適量  ｐＨ６．０〜６．５に調整するのに十分な量）を添加することによって、６．０〜６．５に調整し（相Ｆ）、表２に示した割合の化粧品組成物を得る。
【表２】
0006619359.tif 000003
【０１００】
（実施例５）
寄託番号ＬＭＧ  Ｐ−２８２０２のＢａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ種の株の発酵エキスを含むマイクロエマルションの調製。
【０１０１】
適切な容器内で、ドクサートナトリウムＵＳＰ［ＩＮＣＩ：スルホコハク酸ジエチルヘキシルナトリウム］およびイソステアリン酸［ＩＮＣＩ：イソステアリン酸］を混合する（相Ａ）。
【０１０２】
別の容器内で、実施例１に従って得られた寄託番号ＬＭＧ  Ｐ−２８２０２のＢａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ種の株の発酵エキス、グリセリン［ＩＮＣＩ：グリセリン］、および水［ＩＮＣＩ：水（アクア）］を含む混合物を、エタノール［ＩＮＣＩ：アルコール］に溶解する（相Ｂ）。相Ｂを、撹拌しながら相Ａにゆっくり添加する。表３参照。
【表３】
0006619359.tif 000004
【０１０３】
（実施例６）
実施例５のマイクロエマルションを含む脂質ナノ粒子組成物の調製
【０１０４】
水［ＩＮＣＩ：水（アクア）］、Ａｍｉｇｅｌ（登録商標）［ＩＮＣＩ：スクレロチウムガム］、Ｚｅｍｅａ（商標）［ＩＮＣＩ：プロパンジオール］、ＺＥＭＥＡ［ＩＮＣＩ：プロパンジオール］、およびフェノキシエタノール［ＩＮＣＩ：フェノキシエタノール］（相Ａの成分）を、この順序で適切な容器に添加し、均質性が達成されるまで撹拌する。
【０１０５】
実施例５のマイクロエマルション、精製ダイズ油ＩＰ  Ｐｈ．Ｅｕｒ．［ＩＮＣＩ：Ｇｌｙｃｉｎｅ  ｓｏｊａ（ダイズ）油］、Ａｒｌａｃｅｌ  ８３［ＩＮＣＩ：セスキオレイン酸ソルビタン］、およびＡｒｌａｍｏｌ  ＨＤ［ＩＮＣＩ：イソヘキサデカン］を含む混合物（相Ｂの成分）を、別の容器に添加する。
【０１０６】
次に、相Ｂの成分の混合物を、エマルションが形成されるまでタービンで撹拌しながら相Ａの成分の混合物に添加する。その後、混合物を、チタンプローブで１分間均質化する。
【０１０７】
次に、ＳＥＮＳＯＭＥＲ  ＣＴ−４００［ＩＮＣＩ：カッシアヒドロキシプロピルトリモニウムクロリド］の水［ＩＮＣＩ：水（アクア）］懸濁液を、撹拌しながら滴下添加する（相Ｃの成分）。表４を参照。
【表４】
0006619359.tif 000005
【０１０８】
（実施例７）
寄託番号ＬＭＧ  Ｐ−２８２０２のＢａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ種の株の発酵エキスを含むリポソームの調製
【０１０９】
適切な容器内で、水［ＩＮＣＩ：水（アクア）］、Ｚｅｍｅａ（商標）［ＩＮＣＩ：プロパンジオール］およびフェノキシエタノール［ＩＮＣＩ：フェノキシエタノール］（相Ｂ〜Ｄ）を、実施例１に従って得られた寄託番号ＬＭＧ  Ｐ−２８２０２のＢａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ種の株の発酵エキス、グリセリン［ＩＮＣＩ：グリセリン］、および水［ＩＮＣＩ：水（アクア）］含む相Ａの混合物に添加する。
【０１１０】
先の構成成分のすべてが溶解したら、Ｌｅｃｉｆｌｏｒ  １００  ＩＰ［ＩＮＣＩ：レシチン］（相Ｅ）を、完全に溶解するまで激しく撹拌しながら少しずつ添加する。次に、Ｌａｂｒａｓｏｌ［ＩＮＣＩ：ＰＥＧ−８カプリル酸／カプリン酸グリセリド］（相Ｆ）を添加し、１０〜１５分間撹拌して、エマルションを形成する。最後に得られた組成物を、表５に示す。
【表５】
0006619359.tif 000006
【０１１１】
試料を、チタンプローブで３０秒間均質化する。
【０１１２】
（実施例８）
カチオン性ポリマーに結合した実施例７のリポソームの調製
【０１１３】
実施例７で得られたリポソームを、ゆっくり撹拌しながら、ＳＥＮＳＯＭＥＲ（登録商標）ＣＴ−５０［ＩＮＣＩ：水（アクア）、塩化ヒドロキシプロピルトリモニウムデンプン、尿素、乳酸ナトリウム、塩化ナトリウム、安息香酸ナトリウム］に、リポソーム：カチオン性ポリマー９５：５比で添加する。
【０１１４】
（実施例９）
比色ＥＬＩＳＡアッセイ（酵素結合免疫吸着アッセイ）による、初代ヒト皮下前脂肪細胞由来のアディポネクチンタンパク質レベルの相対的な増加の研究
【０１１５】
アディポネクチンタンパク質レベルの相対的な増加を、初代ヒト脂肪細胞において、脂肪細胞分化培地中、実施例１に従って得られた寄託番号ＬＭＧ  Ｐ−２８２０２のＢａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ種の株の発酵エキスで処理した後に決定する。脂肪細胞分化培地だけで処理した細胞を、基礎対照として使用する。
【０１１６】
ヒト前脂肪細胞を、９６−クリアウェルプレート中、前脂肪細胞成長培地に播種し（１０，０００個の細胞／ウェル、条件１つ当たり３ウェル）、細胞を、９５％空気および５％ＣＯ２の水飽和雰囲気中、３７℃で２４時間インキュベートする。インキュベーション後に培地を除去し、前脂肪細胞から脂肪細胞への分化を誘導するために、細胞を、脂肪細胞分化培地中５μｇ／ｍｌの実施例１に従って得られた発酵エキスと共にインキュベートする（８日、３７℃および５％ＣＯ２）。次に、培養上清を回収し、放出されたアディポネクチンの量をＥＬＩＳＡによって決定し、１ウェル当たりの総細胞数を、クリスタルバイオレット染色アッセイによって定量する。ＥＬＩＳＡの結果を、処理条件に対する総細胞数で標準化し、アディポネクチンタンパク質レベルの相対的な増加を、基礎対照に対して算出する。
【０１１７】
ＥＬＩＳＡによるアディポネクチンレベルの定量
【０１１８】
アディポネクチンＥＬＩＳＡアッセイキットを、製造者の指示（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）に従って使用する。簡潔には、培養上清を、アディポネクチン捕捉抗体で予めコーティングしたマイクロタイタープレート内でインキュベートする。その後、ウェルを、別の特異的アディポネクチン検出ビオチン−コンジュゲート抗体と共にインキュベートする。次に、ストレプトアビジン−ＨＲＰ（ストレプトアビジンにコンジュゲートした酵素セイヨウワサビペルオキシダーゼ）を、プレートに添加する。最後に、基質ＴＭＢ（テトラメチルベンジジン）を添加すると、試験用量（tested  dose）において存在するアディポネクチンの量に正比例して、発色が生じる。反応を、硫酸溶液で停止させ、吸光度を、マイクロプレート吸光度リーダー（Ｍｕｌｔｉｓｋａｎ−Ｔｈｅｒｍｏ  Ｅｌｅｃｔｒｏ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）により４５０ｎｍで、波長補正５７０ｎｍで読み取る。
【０１１９】
クリスタルバイオレット染色アッセイによる総細胞数の決定
【０１２０】
細胞を含有するプレート（上清をＥＬＩＳＡアッセイのために回収した後）を、クリスタルバイオレット溶液と共にインキュベートする。細胞のＤＮＡを、クリスタルバイオレット色素溶液によって染色する。その後、クリスタルバイオレット溶液を除去し、ウェルをＭｉｌｌｉ−Ｑ水で洗浄する。細胞によって取り込まれたクリスタルバイオレット色素の量は、各ウェルにおける細胞数に正比例する。最後に、細胞が乾燥したら、ＨＣｌ溶液を添加し、吸光度をマイクロプレート吸光度リーダー（Ｍｕｌｔｉｓｋａｎ−Ｔｈｅｒｍｏ  Ｅｌｅｃｔｒｏ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）により６３０ｎｍで読み取る。ＥＬＩＳＡの結果を、試験用量に関する総細胞数で標準化し、アディポネクチンタンパク質レベルの相対的な増加を、基礎対照に対して算出する。表６。
【表６】
0006619359.tif 000007
【０１２１】
結果は、実施例１に従って得られた寄託番号ＬＭＧ  Ｐ−２８２０２のＢａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ種の株の発酵エキスが、試験用量においてヒト脂肪細胞の細胞培養物の相対的なアディポネクチンレベルを増加させることを示している。
【０１２２】
（実施例１０）
免疫蛍光によるヒト骨格筋細胞のミオシンタンパク質発現の相対的な増加の研究
【０１２３】
遅筋型骨格筋ミオシン重鎖７（ＭＹＨ７）の発現を、脂肪細胞分化培地において実施例１に従って得られた発酵エキスを用いて処理した後、脂肪細胞培養物の上清で処理したヒト骨格筋細胞で研究した。発酵エキスで処理していない脂肪細胞培養物の上清（supernatans）だけで処理したヒト骨格筋細胞を、基礎対照として使用する。
【０１２４】
ヒト骨格筋細胞を、筋細胞用成長培地（Muscle  Cellutions  Growth  Medium）中、コーティング用のマトリックスで予めコーティングしたカバースリップを入れた１２−クリアウェルプレートに播種し（１０，０００個の細胞／ウェル、試験用量ごとに２ウェル）、細胞を４８時間インキュベートする。２４時間後、分化プロセスを、筋細胞用分化培地を添加することによって開始する。
【０１２５】
１０日間分化させた後、培地を除去し、細胞を、実施例１に従って得られた発酵エキス（脂肪細胞分化培地中５μｇ／ｍｌ）で８日間処理した脂肪細胞培養物の上清で、５％ＣＯ２の雰囲気中、３７℃で４８時間処理する。脂肪細胞培養物の上清中のアディポネクチンの量を、ＥＬＩＳＡ試験によって、特異的な抗体を使用して決定する。
【０１２６】
ミオシンタンパク質の発現の決定
【０１２７】
処理後、細胞を、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で洗浄し、４％パラホルムアルデヒド（ＰＦＡ）で固定する。このステップの後、細胞を、抗遅筋型骨格筋ミオシン重鎖７（ＭＹＨ７）抗体に対する一次マウスモノクローナル抗体と共に終夜４℃でインキュベートする。翌日、細胞をＰＢＳで洗浄し、二次Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ（登録商標）５９４ヤギ抗−マウスＩｇＧ（Ｈ＋Ｌ）抗体（赤色蛍光発光色素）を、暗所中、それらの一次抗体と共に１時間インキュベートする。次に、細胞を、ＤＡＰＩ（４’，６−ジアミノ−２−フェニルインドール）で染色し、暗状態で顕微鏡標本を作製した。
【０１２８】
細胞を、Ｚｅｉｓｓ蛍光顕微鏡法を使用して観測し、画像を、Ｚｅｎソフトウェアを使用して捕捉する。すべての試験用量における細胞数が、重ね合わせることができることを検証するために、核をＤＡＰＩ染色で明らかにし、各試験用量からの代表的な１０枚の画像を収集する。ミオシンの各蛍光画像から、ＩＤ（積分密度）の値を定量する。ＩｍａｇｅＪソフトウェアを使用する。２つの独立なアッセイを、二重に実施する。ミオシンレベルの相対的な増加を、基礎対照に対して標準化する。表７。
【表７】
0006619359.tif 000008
【０１２９】
得られた結果は、５μｇ／ｍｌの実施例１に従って得られた発酵エキスで処理した後、高レベルのアディポネクチンを含有する脂肪細胞培養物の上清が、基礎対照に対して６９．７８％までタンパク質ミオシンの発現レベルを増強し得ることを示している。
【０１３０】
（実施例１１）
アディポネクチンを含有する脂肪細胞培養物の上清で処理した初代ヒト骨格筋細胞におけるクエン酸シンターゼ活性の相対的な増加の研究
【０１３１】
クエン酸シンターゼ活性の相対的な増加を、脂肪細胞分化培地において実施例１に従って得られた発酵エキスで処理した後、脂肪細胞培養物の上清で処理したヒト骨格筋細胞において決定する。発酵エキスで処理していない脂肪細胞培養物の上清で処理したヒト骨格筋細胞を、基礎対照として使用する。
【０１３２】
ヒト骨格筋細胞を、筋細胞用成長培地中、６−クリアウェルプレートに播種し（２００，０００個の細胞／ウェル、試験用量ごとに２ウェル）、細胞を、９５％空気および５％ＣＯ２の水飽和雰囲気中、３７℃で４８時間インキュベートする。次に、分化プロセスを、筋細胞用分化培地を添加することによって開始する。７２時間分化させた後、培地を除去し、細胞を、実施例１に従って得られた発酵エキス（脂肪細胞分化培地中５μｇ／ｍｌ）で８日間処理した後、ＥＬＩＳＡによって既に決定した高レベルのアディポネクチンを含有する脂肪細胞培養物の上清と共にインキュベートする。ＣＯ２インキュベーター中、３７℃で４８時間処置した後、ヒト骨格筋細胞を溶解させ、それらの総タンパク質含量を、ＢＣＡアッセイ（ビシンコニン酸）によって決定する。すべての溶解液を、ＢＣＡアッセイによって決定された最終的な総タンパク質濃度と同じ濃度まで希釈し、クエン酸シンターゼ活性の相対的な増加を、基礎対照に対して定量する。
【０１３３】
ＢＣＡアッセイによる総タンパク質の決定
【０１３４】
ＢＣＡアッセイキットを、製造者の指示（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）に従って使用する。ヒト骨格筋細胞溶解液の総タンパク質濃度を、比色反応によって、ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）の標準品を使用して決定する。簡潔には、標準品および試料を、９６−クリアウェルプレートに分注する。作業試薬と共にインキュベートした後、吸光度を、マイクロプレート吸光度リーダー（Ｍｕｌｔｉｓｋａｎ−Ｔｈｅｒｍｏ  Ｅｌｅｃｔｒｏ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）により５７０ｎｍで測定する。
【０１３５】
クエン酸シンターゼ活性の測定
【０１３６】
クエン酸シンターゼアッセイキットを、製造者の指示（Ｓｉｇｍａ）に従って使用する。簡潔には、細胞溶解液を、９６−クリアウェルプレート中、アセチル−補酵素ＡおよびＤＴＮＢ（５，５’−ジチオビス−（２−ニトロ安息香酸））を含有する反応混合物と共にインキュベートする。次に、クエン酸シンターゼ基質であるオキサロアセテートを添加すると、試験用量におけるクエン酸シンターゼ活性に正比例して発色が生じる。吸光度を、マイクロプレート吸光度リーダー（Ｍｕｌｔｉｓｋａｎ−Ｔｈｅｒｍｏ  Ｅｌｅｃｔｒｏ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）により４０５ｎｍで読み取る。クエン酸シンターゼ活性の相対的な増加を、基礎対照に対して標準化する。表８。
【表８】
0006619359.tif 000009
【０１３７】
結果は、実施例１に従って得られた寄託番号ＬＭＧ  Ｐ−２８２０２のＢａｃｉｌｌｕｓ  ｓｐ．株から得られた細菌の細胞外物質が、試験用量でヒト骨格筋細胞における相対的なクエン酸シンターゼ活性を増加させ得ることを示している。
【０１３８】
（実施例１２）
アディポネクチンを含有する脂肪細胞培養物の上清で処理した初代ヒト骨格筋細胞におけるＡＴＰ生成の相対的な増加の研究
【０１３９】
ＡＴＰ生成の相対的な増加を、脂肪細胞分化培地において実施例１に従って得られた発酵エキスで処理した後、脂肪細胞培養物の上清で処理したヒト骨格筋細胞において決定する。発酵エキスで処理していない脂肪細胞培養物の上清で処理したヒト骨格筋細胞を、基礎対照として使用する。
【０１４０】
ヒト骨格筋細胞を、筋細胞用成長培地中、６−クリアウェルプレートに播種し（２００，０００個の細胞／ウェル、試験用量ごとに２ウェル）、細胞を、９５％空気および５％ＣＯ２の水飽和雰囲気中、３７℃で４８時間インキュベートする。次に、分化プロセスを、筋細胞用分化培地を添加することによって開始する。７２時間分化させた後、培地を除去し、細胞を、実施例１に従って得られた発酵エキス（脂肪細胞分化培地中５μｇ／ｍｌ）で８日間処理した後、ＥＬＩＳＡによって既に決定した高レベルのアディポネクチンを含有する脂肪細胞培養物の上清と共にインキュベートする。ＣＯ２インキュベーター中、３７℃で４８時間処置した後、ヒト骨格筋細胞を溶解させ、生成されたＡＴＰを、特異的アッセイキットによって定量し、それらの総タンパク質含量を、ＢＣＡによって決定する。ＡＴＰの結果を、試験用量に関する総タンパク質濃度で標準化し、生成されたＡＴＰの相対的な増加を、基礎対照に対して定量する。
【０１４１】
ＡＴＰ生成の測定
【０１４２】
ＡＴＰアッセイキットを、製造者の指示（Ａｂｃａｍ）に従って使用する。簡潔には、細胞溶解液を、９６−クリアウェルプレート中、ＡＴＰプローブ、ＡＴＰコンバーター、展開剤ミックスおよびＡＴＰアッセイバッファーを含有する反応混合物と共にインキュベートして、生成物を産生し、それを励起５３０ｎｍおよび検出５９０ｎｍに設定した自動プレート蛍光リーダー（Ｃｌａｒｉｏｓｔａｒ−ＢＭＧ）を用いて蛍光によって定量する。
【０１４３】
ＢＣＡアッセイによる総タンパク質の決定
【０１４４】
ＢＣＡアッセイキットを、製造者の指示（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）に従って使用する。ヒト骨格筋細胞溶解液の総タンパク質濃度を、比色反応によって、ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）の標準品を使用して決定する。簡潔には、標準品および試料を、９６−クリアウェルプレートに分注する。作業試薬と共にインキュベートした後、吸光度を、マイクロプレート吸光度リーダー（Ｃｌａｒｉｏｓｔａｒ−ＢＭＧ）により５７０ｎｍで測定する。ＡＴＰの結果を、試験用量に関する総タンパク質濃度で標準化し、生成されたＡＴＰの相対的な増加を、基礎対照に対して定量する。表９。
【表９】
0006619359.tif 000010
【０１４５】
結果は、実施例１に従って得られた寄託番号ＬＭＧ  Ｐ−２８２０２のＢａｃｉｌｌｕｓ  ｓｐ．株から得られた細菌の細胞外物質が、試験用量でヒト骨格筋細胞における相対的なＡＴＰの生成を増加させ得ることを示している。
【０１４６】
（実施例１３）
初代ヒト皮下前脂肪細胞の遺伝子発現のプロファイルの研究
【０１４７】
ヒト皮下前脂肪細胞を、１２ウェルプレート中、ＰＧＭ−２（１０％ＦＢＳ、２ｍＭのＬ−グルタミンおよび１００単位／ｍＬのゲンタマイシン／アンホテリシン（anfotericine）を補充した基礎培地ＰＢＭ−２）に１３０，０００個の細胞／ウェルの密度で播種し、細胞を、９５％空気および５％ＣＯ２の水飽和雰囲気中、３７℃で２４時間インキュベートする。
【０１４８】
２４時間後、培地を除去し、細胞を、ＣＯ２インキュベーター中、分化培地ＰＤＭ−２（インスリン、デキサメタゾン、インドメタシンおよびＩＢＭＸを補充したＰＧＭ−２）においてまたはＰＤＭ−２のみ（基礎対照）において１４μｇ／ｍｌの実施例１に従って得られた発酵エキスと共に、３７℃で８日間インキュベートする。実施例１に従って得られた発酵エキスおよび基礎対照を、４つの生物学的複製物（複数のウェル）でアッセイする。
【０１４９】
次に、細胞を溶解させ、ＲＮＡを抽出し、各複製物および各試験用量から、ＱｉａｇｅｎによるＲＮｅａｓｙＰｌｕｓ  Ｍｉｎｉキットを用いることによって精製する。細胞溶解液を均質化し、ＲＮａｓｅｓを不活化する。ゲノムＤＮＡを、ＲＮｅａｓｙＰｌｕｓ  ＭｉｎｉキットのｇＤＮＡ  Ｅｌｉｍｉｎａｔｏｒスピンカラムを使用することによって、試料から除去する。次に、試料を、ＲＮｅａｓｙＰｌｕｓ  Ｍｉｎｉキットの特別なＲＮＡ結合カラムを通過させ、マイクロ遠心分離で数回洗浄した後、精製されたＲＮＡを、超純水５０μｌで溶出する。
【０１５０】
得られたＲＮＡの純度、完全性および濃度を、分光光度法（Ｎａｎｏｄｒｏｐ）によって、およびバイオアナライザ（Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｂｉｏａｎａｌｙｚｅｒ）を用いて評価する。後に、試料を標識し、ヒト遺伝子発現マイクロアレイ（ＡＳｕｒｅＰｒｉｎｔ  Ｇ３、Ａｇｉｌｅｎｔ）でハイブリッド形成させる。
【０１５１】
試験用量で得られた標準化値を、基礎対照で得られた標準化値と比較して、差次的発現を有する遺伝子を決定する。次に、データのパラメトリック分析を、Ｂｉｏｃｏｎｄｕｃｔｏｒソフトウェアを用いることによって行う。
【０１５２】
次に、得られた値を、ＧＳＥＡ（Ｇｅｎｅ  Ｓｅｔ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  Ｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔ）を用いることによって評価して、ジーンオントロジーおよび生物学的経路に関して、差次的発現を有する遺伝子をグループ化する。得られた結果を、表１０に示す。
【表１０−１】
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【表１０−２】
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【表１０−３】
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【０１５３】
本発明の要旨を例示する目的で、ある特定の代表的な実施形態および詳細を示してきたが、本発明の範囲から逸脱することなく、それらに様々な変更および改変を加え得ることを、当業者は理解されよう。これに関して、本発明の範囲は、以下の特許請求の範囲によってのみ制限されるべきである。