(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
イムノクロマトグラフ用ストリップが備えるクロマトグラフィー媒体に用いるための基材であって、
親水性のポリオレフィン微多孔膜からなり、
前記親水性のポリオレフィン微多孔膜が、フィブリル状ポリオレフィンの三次元ネットワーク構造を備えた多孔質構造を有し、
少なくとも一方の面において滴下１秒後の水の接触角が０度〜６０度であり、
キャピラリーフロータイムが５秒／４ｃｍ〜３００秒／４ｃｍである、クロマトグラフィー媒体用基材。
【請求項２】
前記親水性のポリオレフィン微多孔膜は、ポリオレフィン微多孔膜がコロナ放電処理、プラズマ処理、ＵＶオゾン処理及び界面活性剤処理からなる群から選ばれる少なくとも一つの親水化処理によって親水化されたポリオレフィン微多孔膜である、請求項１に記載のクロマトグラフィー媒体用基材。
【請求項３】
前記親水性のポリオレフィン微多孔膜の膜厚が２０μｍ〜４５０μｍである、請求項１又は請求項２に記載のクロマトグラフィー媒体用基材。
【請求項４】
前記親水性のポリオレフィン微多孔膜の空孔率が７０％〜９５％である、請求項１〜請求項３のいずれか１項に記載のクロマトグラフィー媒体用基材。
【請求項５】
前記親水性のポリオレフィン微多孔膜のＢＥＴ比表面積が１ｍ２／ｇ〜３０ｍ２／ｇである、請求項１〜請求項４のいずれか１項に記載のクロマトグラフィー媒体用基材。
【請求項６】
前記親水性のポリオレフィン微多孔膜の平均流量孔径が０．０２μｍ〜５μｍである、請求項１〜請求項５のいずれか１項に記載のクロマトグラフィー媒体用基材。
【請求項７】
前記親水性のポリオレフィン微多孔膜のガーレ値が０．００２秒／１００ｍＬ／μｍ〜０．１秒／１００ｍＬ／μｍである、請求項１〜請求項６のいずれか１項に記載のクロマトグラフィー媒体用基材。
【請求項８】
前記親水性のポリオレフィン微多孔膜は、ポリオレフィン微多孔膜の表面及び空孔内表面の少なくとも一方に界面活性剤が付着した微多孔膜である、請求項１〜請求項７のいずれか１項に記載のクロマトグラフィー媒体用基材。
【請求項９】
前記親水性のポリオレフィン微多孔膜は、ポリオレフィン微多孔膜の表面及び空孔内表面の少なくとも一方にプラズマ処理が施された微多孔膜である、請求項１〜請求項８のいずれか１項に記載のクロマトグラフィー媒体用基材。
【請求項１０】
請求項１〜請求項９のいずれか１項に記載のクロマトグラフィー媒体用基材と、
前記クロマトグラフィー媒体用基材に設けられた検出部であって、被検出物質と特異的に結合する検出試薬が固定化された検出部と、
を備えたクロマトグラフィー媒体。
【請求項１１】
請求項１０に記載のクロマトグラフィー媒体を含む、イムノクロマトグラフ用ストリップ。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、クロマトグラフィー媒体用基材、クロマトグラフィー媒体及びイムノクロマトグラフ用ストリップに関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、検査時間を短縮する、医師の即時の判断と処置を可能にする、医師と患者との意思疎通を向上させる等の利点があることから、Point of Care Testing（ＰＯＣＴ、臨床現場即時検査）のニーズが増加している。イムノクロマトグラフ法はＰＯＣＴに有用であり、血液や尿などのサンプルを試験ストリップ上に直接滴下するなどの簡単な操作のみで、サンプル中の対象物質を簡便かつ迅速に検出することができる。【０００３】
イムノクロマトグラフ法では、一般的には、抗原とこれに対する抗体による特異的反応を利用することで、サンプル中の被検出物質を検出する。イムノクロマトグラフ用ストリップは、一般的に、サンプルパッド、コンジュゲートパッド、クロマトグラフィー媒体、吸収パッドから構成される。サンプルパッドにサンプルが付与されると、サンプル中の被検出物質がコンジュゲートパッドに含まれている標識抗体と特異的に結合して複合体を形成し、次いで、クロマトグラフィー媒体を下流に展開していく。複合体はクロマトグラフィー媒体に固定化された検出用抗体に捕捉され、呈色反応により検出が可能になる。【０００４】
従来、一般的に、クロマトグラフィー媒体用基材としては、ニトロセルロース膜が用いられている（例えば特許文献１〜５参照）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開２００８−２９２３２６号公報
【特許文献２】特開２００９−１５０８６９号公報
【特許文献３】特開２０１０−２６１９１２号公報
【特許文献４】特開２０１３−１７４６０７号公報
【特許文献５】特開２０１４−６２８２０号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
しかしながら、従来のニトロセルロース膜を用いたクロマトグラフィー媒体は、ニトロセルロースが天然繊維を加工した素材であるため、ニトロセルロース膜のキャピラリーフロータイムのばらつきが大きく、試薬によるキャピラリーフロータイムの調整などの煩雑な作業が必要であった。一方で、イムノクロマトグラフ法では検査の迅速性が求められる。【０００７】
本開示の実施形態は、上記状況のもとになされた。【０００８】
本開示は、イムノクロマトグラフ用ストリップが備えるクロマトグラフィー媒体に用いるための基材であって、キャピラリーフロータイムのばらつきが小さく、且つ、検査速度に優れたクロマトグラフィー媒体用基材を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
上記の課題を解決するための具体的手段には、以下の態様が含まれる。【００１０】
［１］  イムノクロマトグラフ用ストリップが備えるクロマトグラフィー媒体に用いるための基材であって、親水性のポリオレフィン微多孔膜からなり、少なくとも一方の面において滴下１秒後の水の接触角が０度〜６０度であり、キャピラリーフロータイムが５秒／４ｃｍ〜３００秒／４ｃｍである、クロマトグラフィー媒体用基材。
［２］  前記親水性のポリオレフィン微多孔膜の膜厚が２０μｍ〜４５０μｍである、上記［１］に記載のクロマトグラフィー媒体用基材。
［３］  前記親水性のポリオレフィン微多孔膜の空孔率が７０％〜９５％である、上記［１］又は［２］に記載のクロマトグラフィー媒体用基材。
［４］  前記親水性のポリオレフィン微多孔膜のＢＥＴ比表面積が１ｍ２／ｇ〜３０ｍ２／ｇである、上記［１］〜［３］のいずれかに記載のクロマトグラフィー媒体用基材。
［５］  前記親水性のポリオレフィン微多孔膜の平均流量孔径が０．０２μｍ〜５μｍである、上記［１］〜［４］のいずれかに記載のクロマトグラフィー媒体用基材。
［６］  前記親水性のポリオレフィン微多孔膜は、ポリオレフィン微多孔膜の表面及び空孔内表面の少なくとも一方に界面活性剤が付着した微多孔膜である、上記［１］〜［５］のいずれかに記載のクロマトグラフィー媒体用基材。
［７］  前記親水性のポリオレフィン微多孔膜は、ポリオレフィン微多孔膜の表面及び空孔内表面の少なくとも一方にプラズマ処理が施された微多孔膜である、上記［１］〜［６］のいずれかに記載のクロマトグラフィー媒体用基材。
［８］  上記［１］〜［７］のいずれかに記載のクロマトグラフィー媒体用基材と、前記クロマトグラフィー媒体用基材に設けられた検出部であって、被検出物質と特異的に結合する検出試薬が固定化された検出部と、を備えたクロマトグラフィー媒体。
［９］  上記［８］に記載のクロマトグラフィー媒体を含む、イムノクロマトグラフ用ストリップ。
【発明の効果】
【００１１】
本開示によれば、イムノクロマトグラフ用ストリップが備えるクロマトグラフィー媒体に用いるための基材であって、キャピラリーフロータイムのばらつきが小さく、且つ、検査速度に優れたクロマトグラフィー媒体用基材が提供される。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】一般的なイムノクロマトグラフ用ストリップの概略構成を示した模式図である。
【図２】一般的なイムノクロマトグラフ用ストリップの断面を模式的に示した図である。
【図３】一般的なイムノクロマトグラフ用ストリップの断面を模式的に示した図である。
【図４】クロマトグラフィー媒体用基材のキャピラリーフロータイムの測定方法を説明するための模式図である。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
以下に、発明の実施形態を説明する。これらの説明及び実施例は実施形態を例示するものであり、発明の範囲を制限するものではない。本開示において述べる作用機序は推定を含んでおり、その正否は発明の範囲を制限するものではない。
【００１４】
本開示において実施形態を図面を参照して説明する場合、当該実施形態の構成は図面に示された構成に限定されない。また、各図における部材の大きさは概念的なものであり、部材間の大きさの相対的な関係はこれに限定されない。
【００１５】
本開示において「〜」を用いて示された数値範囲は、「〜」の前後に記載される数値をそれぞれ下限値及び上限値として含む範囲を示す。
【００１６】
本開示中に段階的に記載されている数値範囲において、一つの数値範囲で記載された上限値又は下限値は、他の段階的な記載の数値範囲の上限値又は下限値に置き換えてもよい。また、本開示中に記載されている数値範囲において、その数値範囲の上限値又は下限値は、実施例に示されている値に置き換えてもよい。
【００１７】
本開示において「工程」との語は、独立した工程だけでなく、他の工程と明確に区別できない場合であってもその工程の所期の目的が達成されれば、本用語に含まれる。
【００１８】
本開示において組成物中の各成分の量について言及する場合、組成物中に各成分に該当する物質が複数種存在する場合には、特に断らない限り、組成物中に存在する当該複数種の物質の合計量を意味する。
【００１９】
本開示において、「機械方向」とは、長尺状に製造される基材において長尺方向を意味し、「幅方向」とは、「機械方向」に直交する方向を意味する。本開示において、「機械方向」を「ＭＤ方向」ともいい、「幅方向」を「ＴＤ方向」ともいう。
【００２０】
＜クロマトグラフィー媒体用基材＞
本開示は、イムノクロマトグラフ用ストリップ（immunochromatographic strip）が備えるクロマトグラフィー媒体（chromatography media）に用いるための基材（本開示において「クロマトグラフィー媒体用基材」という。）を提供する。
【００２１】
本開示のクロマトグラフィー媒体用基材は、親水性のポリオレフィン微多孔膜からなり、少なくとも一方の面において滴下１秒後の水の接触角が０度〜６０度であり、キャピラリーフロータイムが５秒／４ｃｍ〜３００秒／４ｃｍである。
【００２２】
本開示によれば、キャピラリーフロータイムのばらつきが小さく、且つ、検査速度に優れたクロマトグラフィー媒体用基材が提供される。
【００２３】
以下、本開示のクロマトグラフィー媒体用基材の構成要素について詳細に説明する。
【００２４】
［親水性のポリオレフィン微多孔膜］
本開示のクロマトグラフィー媒体用基材は、親水性のポリオレフィン微多孔膜からなる。親水性のポリオレフィン微多孔膜は、ポリオレフィンを含んで構成された親水性の微多孔膜である。本開示においてポリオレフィン微多孔膜とは、フィブリル状のポリオレフィンが三次元ネットワーク構造を形成し、内部に多数の微細孔を有し、これら微細孔が連結された構造となっており、一方の面から他方の面へと気体あるいは液体が通過可能となった膜を意味する。
【００２５】
ポリオレフィンは疎水性の樹脂であるので、ポリオレフィン微多孔膜そのものは疎水性である。本開示のクロマトグラフィー媒体用基材における親水性のポリオレフィン微多孔膜は、親水化処理により親水性を付与されたポリオレフィン微多孔膜である。ポリオレフィン微多孔膜の親水化処理の方法の詳細は後述する。
【００２６】
本開示においてポリオレフィン微多孔膜が親水性であるとは、少なくとも一方の面において、滴下１秒後の水の接触角が６０度以下であることを意味する。滴下１秒後の水の接触角は、後述する測定方法によって測定される値である。
【００２７】
［接触角］
本開示のクロマトグラフィー媒体用基材（すなわち、親水性のポリオレフィン微多孔膜）は、少なくとも一方の面において、滴下１秒後の水の接触角が０度〜６０度である。本開示のクロマトグラフィー媒体用基材がイムノクロマトグラフ用ストリップを構成する際、本開示のクロマトグラフィー媒体用基材における滴下１秒後の水の接触角が０度〜６０度である面が、被検出物質を含有する可能性のある液体状のサンプルを受容する側の面になる。本開示のクロマトグラフィー媒体用基材は、両面において、滴下１秒後の水の接触角が０度〜６０度であることが好ましい。
【００２８】
本開示のクロマトグラフィー媒体用基材（すなわち、親水性のポリオレフィン微多孔膜）の表面について、滴下１秒後の水の接触角は、下記の測定方法によって測定される値である。
【００２９】
クロマトグラフィー媒体用基材を温度２４℃且つ相対湿度６０％の雰囲気に２４時間以上放置して調湿した後、同じ温度及び湿度の雰囲気にて、クロマトグラフィー媒体用基材の表面に注射器で１μＬの水滴を落とし、滴下１秒後の水の静的接触角を、全自動接触角計を用いてθ／２法により測定する。
【００３０】
本開示のクロマトグラフィー媒体用基材（すなわち、親水性のポリオレフィン微多孔膜）は、少なくとも一方の面において、滴下１秒後の水の接触角が６０度以下である。これによって、検査速度が向上し且つキャピラリーフロータイムのばらつきが低減される。この観点からは、本開示のクロマトグラフィー媒体用基材の表面における滴下１秒後の水の接触角は５０度以下であることが好ましく、４０度以下であることがより好ましく、３０度以下であることが更に好ましい。検査精度の向上の観点からは、本開示のクロマトグラフィー媒体用基材の表面における滴下１秒後の水の接触角は１度以上であることが好ましく、５度以上であることがより好ましい。
【００３１】
［キャピラリーフロータイム］
本開示のクロマトグラフィー媒体用基材（すなわち、親水性のポリオレフィン微多孔膜）は、キャピラリーフロータイムが５秒／４ｃｍ〜３００秒／４ｃｍである。本開示のクロマトグラフィー媒体用基材について、キャピラリーフロータイムは、下記の吸水試験によって測定される値である。
【００３２】
吸水試験：クロマトグラフィー媒体用基材を、ＴＤ方向６ｃｍ且つＭＤ方向１ｃｍの長方形に切り出す。この切断片の長さ方向一端部に粘着テープを貼り付けて、ポリプロピレン製の板の上に切断片を固定する。切断片の長さ方向が鉛直方向に対して２０度となるように板を傾け、水が入ったビーカーに、切断片を上側に配置した状態で板を差し込み、切断片の長さ方向他端部を水に１ｃｍ浸漬させる。この状態を大気中常圧下、温度２４℃、相対湿度６０％において維持する。切断片を水に浸漬させた時点を起点として、毛細管現象により水が切断片上を移動し、切断片における水で濡れた部分と濡れていない部分との界面の全てが、ビーカー内の水面から切断片の長さ方向４ｃｍの位置に到達するまでの時間を測定する。この時間をキャピラリーフロータイムとする。
【００３３】
本開示のクロマトグラフィー媒体用基材は、キャピラリーフロータイムが５秒／４ｃｍ以上であることによって、検査精度が向上する。この観点からは、クロマトグラフィー媒体用基材のキャピラリーフロータイムは１０秒／４ｃｍ以上であることが好ましく、２０秒／４ｃｍ以上であることがより好ましい。本開示のクロマトグラフィー媒体用基材は、キャピラリーフロータイムが３００秒／４ｃｍ以下であることによって、検査速度に優れ且つキャピラリーフロータイムのばらつきが低減される。この観点からは、クロマトグラフィー媒体用基材のキャピラリーフロータイムは２５０秒／４ｃｍ以下であることが好ましく、２００秒／４ｃｍ以下であることがより好ましい。
【００３４】
本開示のクロマトグラフィー媒体用基材（すなわち、親水性のポリオレフィン微多孔膜）における水の接触角及びキャピラリーフロータイムを制御する方法としては、ポリオレフィン微多孔膜の多孔質構造、孔径及び空孔率の調整；ポリオレフィン微多孔膜の親水化処理の方法及び程度；ポリオレフィン微多孔膜に付着させる界面活性剤の種類及び付着量；などが挙げられる。
【００３５】
次に、本開示のクロマトグラフィー媒体用基材である親水性ポリオレフィン微多孔膜、及び親水化処理前のポリオレフィン微多孔膜の特性について説明する。親水性ポリオレフィン微多孔膜と親水化処理前のポリオレフィン微多孔膜とに共通する特性については、単に「ポリオレフィン微多孔膜」と記載して特性を説明する。
【００３６】
［平均流量孔径］
ポリオレフィン微多孔膜は、平均流量孔径が０．０２μｍ〜５μｍであることが好ましい。ポリオレフィン微多孔膜の平均流量孔径が０．０２μｍ以上であると、キャピラリーフロータイムがより好ましい範囲になり、検査速度がより向上し得る。この観点からは、ポリオレフィン微多孔膜の平均流量孔径は０．０５μｍ以上がより好ましく、０．１μｍ以上が更に好ましい。一方、ポリオレフィン微多孔膜の平均流量孔径が５μｍ以下であると、十分な検査精度を得やすい。この観点からは、ポリオレフィン微多孔膜の平均流量孔径は４μｍ以下がより好ましく、３μｍ以下が更に好ましい。
【００３７】
ポリオレフィン微多孔膜の平均流量孔径は、ＰＭＩ社のパームポロメーター（型式：ＣＦＰ−１２００−ＡＥＸＬ）を用い、浸液にＰＭＩ社製のガルウィック（表面張力１５．９ｄｙｎ／ｃｍ）を用いて、ＡＳＴＭ Ｅ１２９４−８９に規定するハーフドライ法に基づき求める。
【００３８】
［膜厚］
ポリオレフィン微多孔膜の膜厚は２０μｍ〜４５０μｍであることが好ましい。ポリオレフィン微多孔膜の膜厚が４５０μｍ以下であると、使用するサンプル量の低減又は検査精度の向上の観点から好ましい。この観点からは、ポリオレフィン微多孔膜の膜厚は３００μｍ以下がより好ましく、２００μｍ以下が更に好ましい。一方、ポリオレフィン微多孔膜の膜厚が２０μｍ以上であると、キャピラリーフロータイムがより好ましい範囲になり、検査速度が向上し得るため好ましい。この観点からは、ポリオレフィン微多孔膜の膜厚は２５μｍ以上がより好ましく、３０μｍ以上が更に好ましい。
【００３９】
［空孔率］
ポリオレフィン微多孔膜の空孔率は７０％〜９５％であることが好ましい。ポリオレフィン微多孔膜の空孔率が７０％以上であると、キャピラリーフロータイムがより好ましい範囲になり、検査速度が向上し得る点で好ましい。この観点からは、ポリオレフィン微多孔膜の空孔率は７５％以上がより好ましく、８０％以上が更に好ましい。一方、ポリオレフィン微多孔膜の空孔率が９５％以下であると、膜の力学強度が良好となりハンドリング性が向上する点で好ましい。この観点からは、ポリオレフィン微多孔膜の空孔率は９３％以下がより好ましい。
【００４０】
ポリオレフィン微多孔膜の空孔率（％）は、下記の式により求める。
空孔率（％）＝｛１−（Ｗａ／ｘａ＋Ｗｂ／ｘｂ＋Ｗｃ／ｘｃ＋…＋Ｗｎ／ｘｎ）／ｔ｝×１００
ここに、ポリオレフィン微多孔膜の構成材料がａ、ｂ、ｃ、…、ｎであり、前記構成材料の質量がそれぞれＷａ、Ｗｂ、Ｗｃ、…、Ｗｎ（ｇ／ｃｍ２）であり、前記構成材料の真密度がそれぞれｘａ、ｘｂ、ｘｃ、…、ｘｎ（ｇ／ｃｍ３）であり、ポリオレフィン微多孔膜の膜厚がｔ（ｃｍ）である。
【００４１】
［比表面積］
ポリオレフィン微多孔膜のＢＥＴ比表面積は１ｍ２／ｇ〜３０ｍ２／ｇであることが好ましい。ポリオレフィン微多孔膜のＢＥＴ比表面積が３０ｍ２／ｇ以下であると、キャピラリーフロータイムがより好ましい範囲になり、検査速度が向上し得る点で好ましい。この観点からは、ポリオレフィン微多孔膜のＢＥＴ比表面積は２５ｍ２／ｇ以下がより好ましく、２０ｍ２／ｇ以下が更に好ましい。一方、ポリオレフィン微多孔膜のＢＥＴ比表面積が１ｍ２／ｇ以上であると、膜の力学強度が良好となりハンドリング性が向上する点で好ましい。この観点からは、ポリオレフィン微多孔膜のＢＥＴ比表面積は２ｍ２／ｇ以上がより好ましい。
【００４２】
ポリオレフィン微多孔膜のＢＥＴ比表面積は、マイクロトラック・ベル株式会社の比表面積測定装置（型式：ＢＥＬＳＯＲＰ−ｍｉｎｉ）を用い、液体窒素温度下における窒素ガス吸着法にて、設定相対圧：１．０×１０−３〜０．３５の吸着等温線を測定し、ＢＥＴ法で解析して求めた値である。
【００４３】
［ポリオレフィン］
ポリオレフィン微多孔膜に含まれるポリオレフィンとしては、特に限定されないが、例えば、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリブチレン、ポリメチルペンテン、ポリプロピレンとポリエチレンとの共重合体等が挙げられる。これらの中でも、ポリエチレンが好ましく、高密度ポリエチレン、高密度ポリエチレンと超高分子量ポリエチレンの混合物等が好適である。ポリオレフィン微多孔膜としては、含まれるポリオレフィンがポリエチレンのみであるポリエチレン微多孔膜が好適である。
【００４４】
ポリオレフィン微多孔膜は、ポリオレフィン組成物（本開示において、２種以上のポリオレフィンを含む組成物を意味し、含まれるポリオレフィンがポリエチレンのみである場合はポリエチレン組成物という。）から構成されることが好ましい。ポリオレフィン組成物は、延伸時のフィブリル化に伴ってネットワーク構造を形成し、ポリオレフィン微多孔膜の空孔率を増加させる効用がある。
【００４５】
ポリオレフィン組成物としては、重量平均分子量が９×１０５以上である超高分子量ポリエチレンを５質量％〜３０質量％含むポリオレフィン組成物が好ましく、超高分子量ポリエチレンを５質量％〜２５質量％含むポリオレフィン組成物がより好ましく、超高分子量ポリエチレンを５質量％〜１５質量％含むポリオレフィン組成物が更に好ましい。
【００４６】
ポリオレフィン組成物は、ポリオレフィン全体の重量平均分子量が２×１０５〜２×１０６であることが好ましい。ポリオレフィン組成物は、重量平均分子量が９×１０５以上である超高分子量ポリエチレンと、重量平均分子量が２×１０５〜８×１０５で密度が０．９２ｇ／ｃｍ３〜０．９６ｇ／ｃｍ３である高密度ポリエチレンとが、質量比５：９５〜３０：７０で混合したポリオレフィン組成物であることが好ましい。
【００４７】
ポリオレフィン微多孔膜を構成するポリオレフィンの重量平均分子量は、ポリオレフィン微多孔膜をｏ−ジクロロベンゼン中に加熱溶解し、ゲル浸透クロマトグラフィー（システム：Ｗａｔｅｒｓ社製  Ａｌｌｉａｎｃｅ  ＧＰＣ  ２０００型、カラム：ＧＭＨ６−ＨＴ及びＧＭＨ６−ＨＴＬ）により、カラム温度１３５℃、流速１．０ｍＬ／分の条件にて測定を行うことで得られる。分子量の校正には分子量単分散ポリスチレン（東ソー社製）を用いる。
【００４８】
［ポリオレフィン微多孔膜の製造方法］
ポリオレフィン微多孔膜は、例えば、下記の工程（Ｉ）〜（ＩＶ）を含む製造方法で製造することができる。
【００４９】
工程（Ｉ）：ポリエチレンを含むポリオレフィン組成物と大気圧における沸点が２１０℃未満の揮発性の溶剤とを含む溶液を調製する工程。
工程（ＩＩ）：前記溶液を溶融混練し、得られた溶融混練物をダイより押し出し、冷却固化して第一のゲル状成形物を得る工程。
工程（ＩＩＩ）：前記第一のゲル状成形物を少なくとも一方向に延伸（一次延伸）し且つ溶剤の乾燥を行い第二のゲル状成形物を得る工程。
工程（ＩＶ）：前記第二のゲル状成形物を少なくとも一方向に延伸（二次延伸）する工程。
【００５０】
工程（Ｉ）は、ポリオレフィン組成物と大気圧における沸点が２１０℃未満の揮発性の溶剤とを含む溶液を調製する工程である。前記溶液は、好ましくは熱可逆的ゾルゲル溶液であり、ポリオレフィン組成物を溶剤に加熱溶解させることによりゾル化させ、熱可逆的ゾルゲル溶液を調製する。大気圧における沸点が２１０℃未満の揮発性の溶剤としてはポリオレフィンを十分に溶解できる溶剤であれば特に限定されない。前記揮発性の溶剤としては、例えば、テトラリン（２０６℃〜２０８℃）、エチレングリコール（１９７．３℃）、デカリン（デカヒドロナフタレン、１８７℃〜１９６℃）、トルエン（１１０．６℃）、キシレン（１３８℃〜１４４℃）、ジエチルトリアミン（１０７℃）、エチレンジアミン（１１６℃）、ジメチルスルホキシド（１８９℃）、ヘキサン（６９℃）等が挙げられ、デカリン又はキシレンが好ましい（括弧内の温度は、大気圧における沸点である。）。前記揮発性の溶剤は、単独で用いても２種以上を組み合わせて用いてもよい。
【００５１】
工程（Ｉ）において調製する溶液は、ポリオレフィン微多孔膜のキャピラリーフロータイムを制御する観点から、ポリオレフィン組成物の濃度が１０質量％〜４０質量％であることが好ましく、１５質量％〜３５質量％であることがより好ましい。ポリオレフィン組成物の濃度が１０質量％以上であると、ポリオレフィン微多孔膜の製膜工程において切断の発生を抑制することができ、また、ポリオレフィン微多孔膜の力学強度が高まりハンドリング性が向上する。ポリオレフィン組成物の濃度が４０質量％以下であると、ポリオレフィン微多孔膜の空孔が形成されやすい。
【００５２】
工程（ＩＩ）は、工程（Ｉ）で調製した溶液を溶融混練し、得られた溶融混練物をダイより押し出し、冷却固化して第一のゲル状成形物を得る工程である。工程（ＩＩ）は、例えば、ポリオレフィン組成物の融点乃至融点＋６５℃の温度範囲においてダイより押し出して押出物を得、次いで前記押出物を冷却して第一のゲル状成形物を得る。第一のゲル状成形物はシート状に賦形することが好ましい。冷却は、水又は有機溶媒への浸漬によって行ってもよいし、冷却された金属ロールへの接触によって行ってもよく、一般的には工程（Ｉ）に使用した揮発性の溶剤への浸漬によって行われる。
【００５３】
工程（ＩＩＩ）は、第一のゲル状成形物を少なくとも一方向に延伸（一次延伸）し且つ溶剤の乾燥を行い第二のゲル状成形物を得る工程である。工程（ＩＩＩ）の延伸工程は、二軸延伸が好ましく、縦延伸と横延伸とを別々に実施する逐次二軸延伸でもよく、縦延伸と横延伸とを同時に実施する同時二軸延伸でもよい。一次延伸の延伸倍率（縦延伸倍率と横延伸倍率の積）は、ポリオレフィン微多孔膜のキャピラリーフロータイムを制御する観点から、１．１倍乃至３倍が好ましく、延伸時の温度は７５℃以下が好ましい。工程（ＩＩＩ）の乾燥工程は第二のゲル状成形物が変形しない温度であれば特に制限なく実施されるが、６０℃以下で行われることが好ましい。
【００５４】
工程（ＩＩＩ）の延伸工程と乾燥工程とは、同時に行ってもよく、段階的に行ってもよい。例えば、予備乾燥しながら一次延伸し、次いで本乾燥を行ってもよいし、予備乾燥と本乾燥との間に一次延伸を行ってもよい。一次延伸は、乾燥を制御し、溶剤を好適な状態に残存させた状態でも行うことができる。
【００５５】
工程（ＩＶ）は、第二のゲル状成形物を少なくとも一方向に延伸（二次延伸）する工程である。工程（ＩＶ）の延伸工程は、二軸延伸が好ましい。工程（ＩＶ）の延伸工程は、縦延伸と横延伸とを別々に実施する逐次二軸延伸；縦延伸と横延伸とを同時に実施する同時二軸延伸；縦方向に複数回延伸した後に横方向に延伸する工程；縦方向に延伸し横方向に複数回延伸する工程；逐次二軸延伸した後にさらに縦方向及び／又は横方向に１回又は複数回延伸する工程；のいずれでもよい。
【００５６】
二次延伸の延伸倍率（縦延伸倍率と横延伸倍率の積）は、ポリオレフィン微多孔膜のキャピラリーフロータイムを制御する観点から、好ましくは５倍〜６５倍であり、より好ましくは８倍〜５５倍である。延伸倍率を大きくすると、ポリオレフィン微多孔膜の製膜において切断の発生頻度が増加する傾向がある。延伸倍率を低くすると厚み斑が大きくなる傾向がある。延伸は、溶剤が除去された後に行われるが、乾燥を制御して、溶剤を好適な状態に残存させた状態で行うこともできる。二次延伸の延伸温度は、ポリオレフィン微多孔膜のキャピラリーフロータイムを制御する観点から、９０℃〜１３５℃が好ましく、９０℃〜１２５℃がより好ましい。
【００５７】
工程（ＩＶ）に次いで熱固定処理を行ってもよい。熱固定温度は、ポリオレフィン微多孔膜のキャピラリーフロータイムを制御する観点から、１２０℃〜１６０℃が好ましく、１２５℃〜１５０℃がより好ましい。熱固定温度を高くすると、ポリオレフィン微多孔膜の製膜において切断の発生頻度が増加する。
【００５８】
上記の製造方法により、高度な多孔質構造を有するポリオレフィン微多孔膜を製造することが可能になる。
【００５９】
［ポリオレフィン微多孔膜の親水化処理］
ポリオレフィン微多孔膜の親水化処理方法としては、例えば、コロナ放電処理、プラズマ処理、ＵＶオゾン処理、界面活性剤又は親水性材料のコーティング、親水性モノマーのグラフト重合が挙げられる。
【００６０】
検出精度の向上の観点からは、ポリオレフィン微多孔膜の表面及び／又は空孔内表面にプラズマ処理を施すことが好ましい。ポリオレフィン微多孔膜のキャピラリーフロータイムのばらつきを低減する観点からは、ポリオレフィン微多孔膜を界面活性剤により処理して、親水化することが好ましい。すなわち、ポリオレフィン微多孔膜のキャピラリーフロータイムのばらつきを低減する観点からは、ポリオレフィン微多孔膜の表面及び／又は空孔内表面には界面活性剤が付着していることが好ましい。
【００６１】
親水性のポリオレフィン微多孔膜の一実施形態として、ポリオレフィン微多孔膜の表面及び空孔内表面の少なくとも一方にプラズマ処理が施され、且つ、前記ポリオレフィン微多孔膜の表面及び空孔内表面の少なくとも一方に界面活性剤が付着した微多孔膜が挙げられる。本実施形態は、検出精度の向上とキャピラリーフロータイムのばらつきの低減とを共に実現する観点から好ましい形態である。
【００６２】
ポリオレフィン微多孔膜を表面処理する界面活性剤としては、陽イオン系界面活性剤、陰イオン系界面活性剤、両性イオン系界面活性剤、非イオン系界面活性剤のいずれも使用することができる。
【００６３】
陽イオン系界面活性剤としては、高級アミンハロゲン酸塩、ハロゲン化アルキルピリジニウム、第四級アンモニウム塩等が挙げられる。
【００６４】
陰イオン系界面活性剤としては、高級脂肪酸アルカリ塩、ポリオキシエチレンアルキルエーテルスルホン酸エステル塩、ポリオキシエチレンアルキルエーテルホスホン酸塩、アルキル硫酸塩、アルキルベンゼン硫酸塩、アルキルスルホン酸塩、アルキルアリールスルホン酸塩、スルホコハク酸エステル塩等が挙げられる。中でもアルキルベンゼンスルホン酸塩が好ましく、特にドデシルベンゼンスルホン酸ナトリウム（ＳＤＢＳ）が好ましい。
【００６５】
両性イオン系界面活性剤としては、アルキルベタイン系化合物、イミダゾリン系化合物、アルキルアミンオキサイド、ビスオキシボレート系化合物等が挙げられる。
【００６６】
非イオン系界面活性剤としては、ポリオキシエチレンアルキルエーテル類、ポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテル類、ポリオキシエチレンアルキルアリルエーテル類、グリセリン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル等が挙げられる。
【００６７】
ポリオレフィン微多孔膜をコーティングする親水性材料としては、セルロース、ポリビニルアルコール、ポリエチレン−ポリビニルアルコール共重合体、ポリウレタン、ポリアクリルアミド等が挙げられる。
【００６８】
ポリオレフィン微多孔膜の表面にグラフト重合する親水性モノマーとしては、アクリル酸、メタクリル酸、ビニルアルコール、Ｎ−ビニル−２−ピロリドン、ビニルスルホン酸等が挙げられる。
【００６９】
＜イムノクロマトグラフ用ストリップ＞
本開示のイムノクロマトグラフ用ストリップは、被検出物質を含有する可能性のある液体状のサンプルを検査するためのイムノクロマトグラフ用ストリップである。
【００７０】
本開示のイムノクロマトグラフ用ストリップの好ましい実施形態は、
前記サンプルを受け入れるサンプルパッドと、
前記被検出物質と特異的に結合する標識物質を含有するコンジュゲートパッドと、
前記被検出物質と特異的に結合する検出試薬が固定化されたクロマトグラフィー媒体と、を備えたイムノクロマトグラフ用ストリップである。
【００７１】
本開示のイムノクロマトグラフ用ストリップの形状及び幅は、特に限定されず、操作しやすい形状及び幅であれば問題ない。
【００７２】
図１に、本開示のイムノクロマトグラフ用ストリップの形態例を示す。イムノクロマトグラフ用ストリップＡは、展開方向（図１において矢印Ｘで示す方向）の上流から下流に向かって、滴下されたサンプルを受け入れるサンプルパッド２、標識物質を含有するコンジュゲートパッド３、被検出物質と特異的に結合する検出試薬が固定化されたクロマトグラフィー媒体１、余分なサンプルを吸収する吸収パッド４がこの順に、プラスチック等からなる長尺状の支持体板５上に固定されて構成されている。
【００７３】
クロマトグラフィー媒体１は、本開示のクロマトグラフィー媒体用基材と、当該クロマトグラフィー媒体用基材に設けられた検出部１１とを備えている。検出部１１は、被検出物質と特異的に結合する検出試薬が固定化された領域である。クロマトグラフィー媒体用基材は、フィルムによる裏打ち加工が行われた上で、クロマトグラフィー媒体１に用いられることが好ましい。
【００７４】
クロマトグラフィー媒体１は、本開示のクロマトグラフィー媒体用基材を含む。クロマトグラフィー媒体１の一例においては、本開示のクロマトグラフィー媒体用基材のＴＤ方向と、サンプルの展開方向（図１において矢印Ｘで示す方向）とが一致する。クロマトグラフィー媒体１の別の一例においては、本開示のクロマトグラフィー媒体用基材のＭＤ方向と、サンプルの展開方向（図１において矢印Ｘで示す方向）とが一致する。
【００７５】
検出部１１は、図１に示すように、クロマトグラフィー媒体用基材の任意の位置において、展開方向に直交する方向に、直線状に形成されていることが好ましい。ただし、検出部１１の形状は直線状に限定されず、例えば、円形のスポット、数字、文字、記号（例えば、＋、−）等でもよい。
【００７６】
イムノクロマトグラフ用ストリップＡの使用方法について、図２〜図３を用いて説明する。図２〜図３はイムノクロマトグラフ用ストリップＡの厚さ方向の断面を模式的に示した図である。被検出物質１０１を含む可能性のあるサンプルをサンプルパッド２上に滴下すると、測定に不要な成分が適宜除去された上で、コンジュゲートパッド３へとサンプルが移動する。コンジュゲートパッド３にはサンプル中の被検出物質１０１と結合可能な結合部（例えば、抗体）を含む標識物質１０２が含まれており、コンジュゲートパッド３において被検出物質１０１と標識物質１０２が結合して複合体１０３が形成される。複合体１０３を含んだサンプルが、コンジュゲートパッド３からクロマトグラフィー媒体１に移動する（図３の（ａ）の状態）。クロマトグラフィー媒体１においてサンプルは、検出試薬１０４を含む検出部１１へ向かって移動する。サンプル中に被検出物質１０１が含まれている場合は、検出部１１において複合体１０３が検出試薬１０４に特異的に結合することにより、検出部１１に標識物質１０２が濃縮される（図３の（ｂ）の状態）。濃縮された標識物質１０２が目視又は機器を用いて検出され、これにより、サンプル中に被検出物質１０１が存在することを定性的に及び定量的に分析することができる。その後、吸収パッド４において、余分なサンプルが吸収される。
【００７７】
本開示のイムノクロマトグラフ用ストリップを用いたイムノクロマトグラフでは、必要であれば展開液を用いてもよい。展開液は、イムノクロマトグラフ法において移動相を構成する液体であり、クロマトグラフィー媒体を、被検出物質を含むサンプルと共に移動する。このような展開液であれば、どのような液体であってもよい。展開液は、サンプルが付与される経路と同じ経路でクロマトグラフィー媒体に付与されてもよく、サンプルが付与される経路とは別の経路でクロマトグラフィー媒体に付与されてもよい。
【００７８】
イムノクロマトグラフ用ストリップの用途としては、インフルエンザ、Ｂ型肝炎、食中毒などの感染症診断；妊娠診断；心筋梗塞などの各種の疾患ごとのバイオマーカー診断；等が挙げられる。
【００７９】
以下、イムノクロマトグラフで分析できるサンプル及びイムノクロマトグラフ用ストリップに含まれる部材について詳細に説明する。
【００８０】
［サンプル］
本開示のイムノクロマトグラフ用ストリップで分析できるサンプルは、被検出物質を含む可能性のあるサンプルである限り限定されない。サンプルとしては、例えば、動物（特にヒト）の体液（例えば、血液、血清、血漿、髄液、涙液、汗、尿、膿、鼻水、喀痰）；動物（特にヒト）の排泄物（例えば、糞便）；動物（特にヒト）の臓器、組織、粘膜、皮膚、それらを含むと考えられる搾過検体、スワブ又はうがい液；動物又は植物それ自体；動物又は植物の乾燥体；植物の抽出液；食品の抽出液；などの生物学的試料が挙げられる。
【００８１】
被検出物質としては、それに特異的に結合する物質が存在する被検出物質であれば特に限定されず、タンパク質、ペプチド、核酸、糖、糖タンパク質、糖脂質、複合糖質などが挙げられる。本開示において「特異的に結合する」とは、生体分子が持つ親和力に基づいて結合することを意味する。このような親和力に基づく結合としては、抗原と抗体との結合、糖とレクチンとの結合、ホルモンと受容体との結合、酵素と阻害剤との結合、相補的核酸同士の結合、核酸と核酸結合タンパク質との結合などが挙げられる。被検出物質が抗原性を有する場合、被検出物質に特異的に結合する物質としてはポリクローナル抗体又はモノクローナル抗体を例示することができる。被検出物質が糖又は糖タンパク質の場合、被検出物質に特異的に結合する物質としてはレクチンを例示することができる。具体的な被検出物質としては、例えば、癌胎児性抗原（ＣＥＡ）、ＨＥＲ２タンパク、前立腺特異抗原（ＰＳＡ）、ＣＡ１９−９、α−フェトプロテイン（ＡＦＰ）、免疫抑制酸性蛋白（ＩＡＰ）、ＣＡ１５−３、ＣＡ１２５、トロポニンＩ、トロポニンＴ、ＣＫ−ＭＢ、Ｃ反応性蛋白（ＣＲＰ）、エストロゲンレセプター、プロゲステロンレセプター、ヒト絨毛性ゴナドトロピン（ｈＣＧ）、黄体形成ホルモン（ＬＨ）、卵胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）、ヒトヘモグロビン、アルブミン、糖化アルブミン、便潜血、梅毒抗体、クラミジア抗原、Ａ群β溶連菌抗原、ＨＢｓ抗体、ＨＢｓ抗原、インフルエンザウイルス、ロタウイルス、アデノウイルス等が挙げられるが、これらに限定されない。
【００８２】
サンプルパッドに滴下するサンプルは、下記の（ｉ）〜（ｖ）のいずれでもよい。
【００８３】
（ｉ）生物学的試料それ自体。
（ｉｉ）生物学的試料から抽出用溶媒を用いて抽出した抽出液。
（ｉｉｉ）生物学的試料又は抽出液を希釈剤で希釈した希釈液。
（ｉｖ）生物学的試料又は抽出液を濃縮した濃縮液。
（ｖ）（ｉ）〜（ｉｖ）のいずれかに標識物質を混合し標識物質と被検出物質とを結合させてなる複合体を含む液体。
【００８４】
抽出用溶媒又は希釈剤としては、通常の免疫学的分析法で用いられる溶媒（例えば、水、生理食塩液、緩衝液等）を用いることができる。
【００８５】
［サンプルパッド］
サンプルパッドとしては、例えば、セルロース、ガラス、ポリウレタン、ポリアセテート、酢酸セルロース、ナイロン、ポリオレフィン、綿等の各種繊維の１種又は２種以上からなる、不織布、織布、紙状体、微多孔膜が挙げられる。サンプルパッドは、サンプルを受け入れるだけでなく、サンプル中の不溶物粒子等を濾過する機能をも兼ねる。検査の際、サンプル中の被検出物質がサンプルパッドに非特異的に吸着し検査精度が低下することを抑制するため、サンプルパッドに対して予め非特異的吸着防止処理を施してもよい。サンプルパッドは、上記の不織布など単独のシートのみならず、上記の不織布などと血球分離膜などとを積層した積層体でもよい。
【００８６】
［コンジュゲートパッド］
コンジュゲートパッドは、サンプル中の被検出物質と特異的に結合する標識物質を含む多孔質膜であることが好ましい。コンジュゲートパッドは、標識物質を含む懸濁液を多孔質膜に含浸させ、乾燥させて作製できる。コンジュゲートパッドを構成する多孔質膜としては、例えば、セルロース、ガラス、ポリウレタン、ポリアセテート、酢酸セルロース、ナイロン、ポリオレフィン、綿等の各種繊維の１種又は２種以上からなる、不織布、織布、紙状体、微多孔膜が挙げられる。
【００８７】
［標識物質］
標識物質は、被検出物質と特異的に結合する結合部と、目視又は機器により検出される標識部とを有する。
【００８８】
標識物質の結合部は、対象とする被検出物質に応じて適宜選定すればよい。被検出物質と標識物質の結合部との組合せ（被検出物質／標識物質の結合部）としては、例えば、抗原／抗体、糖／レクチン、糖タンパク質／レクチン、ホルモン／ホルモン受容体、酵素／酵素阻害剤、核酸／相補的核酸、核酸／核酸結合タンパク質などが挙げられる。
【００８９】
標識物質の標識部としては、不溶性担体、酵素等が挙げられ、目視で検出されやすい点で不溶性担体が好ましい。標識物質の標識部として不溶性担体を用いる場合は、結合部を不溶性担体に感作することにより標識物質を調製することができる。
【００９０】
不溶性担体としては、金、銀、白金等のコロイド状金属粒子、酸化鉄等のコロイド状金属酸化物粒子、硫黄等のコロイド状非金属粒子、合成高分子からなるラテックス粒子などが挙げられる。不溶性担体としては、検出が簡便な観点から、金コロイドが好ましい。
【００９１】
不溶性担体は、目視による検出を容易にする観点から、有色であることが好ましい。コロイド状金属粒子及びコロイド状金属酸化物粒子は、粒子自体が粒径に応じた特定の色を呈するので、その色彩を標識として利用することができる。
【００９２】
コロイド状金属粒子又はコロイド状金属酸化物粒子としては、例えば、コロイド状金粒子、コロイド状銀粒子、コロイド状白金粒子、コロイド状酸化鉄粒子、コロイド状酸化アルミニウム粒子等が挙げられる。コロイド状金属粒子又はコロイド状金属酸化物粒子の平均粒径は、強い色調が得られる観点から、１ｎｍ〜５００ｎｍが好ましく、１０ｎｍ〜１５０ｎｍがより好ましく、２０ｎｍ〜１００ｎｍが更に好ましい。コロイド状金粒子とコロイド状銀粒子が、それぞれの適当な粒径において、コロイド状金粒子は赤色、コロイド状銀粒子は黄色を呈する点で好ましい。コロイド状金粒子は、市販の粒子でもよく、常法（例えば、塩化金酸をクエン酸ナトリウムで還元する方法）により調製した粒子でもよい。
【００９３】
結合部をコロイド状金属粒子又はコロイド状金属酸化物粒子に感作する方法としては、物理吸着又は化学結合を応用した公知の方法が挙げられる。例えば、コロイド状金粒子に抗体を感作した標識物質は、金粒子がコロイド状に分散した分散液に抗体を加えて物理吸着させた後、牛血清アルブミン溶液を添加して抗体が未結合である粒子表面をブロッキングすることにより調製する。
【００９４】
［クロマトグラフィー媒体］
クロマトグラフィー媒体は、クロマトグラフィー媒体用基材と、クロマトグラフィー媒体用基材に設けられた検出部であって、被検出物質と特異的に結合する検出試薬が固定化された検出部と、を備えている。検出部は、被検出物質と特異的に結合する検出試薬が固定化された領域である。被検出物質が複数種ある場合は、それぞれに対応した検出試薬を固定化して、クロマトグラフィー媒体用基材に複数の検出部を形成してもよい。
【００９５】
検出試薬は、被検出物質と特異的に結合する物質である。被検出物質と、標識物質の結合部と、検出試薬との組合せ（被検出物質／標識物質の結合部／検出試薬）としては、例えば、抗原／抗原に対する第一の抗体／抗原に対する第二の抗体、糖／第一のレクチン／第二のレクチン、糖タンパク質／糖タンパク質に対する抗体／レクチン、糖タンパク質／レクチン／糖タンパク質に対する抗体、ホルモン／ホルモン受容体／ホルモンに対する抗体、ホルモン／ホルモンに対する抗体／ホルモン受容体、酵素／酵素阻害剤／酵素に対する抗体、酵素／酵素に対する抗体／酵素阻害剤、核酸／第一の相補的核酸／第二の相補的核酸、核酸／相補的核酸／核酸結合タンパク質、核酸／核酸結合タンパク質／相補的核酸などが挙げられる。
【００９６】
検出試薬をクロマトグラフィー媒体用基材に固定化する方法としては、検出試薬をクロマトグラフィー媒体用基材に物理的又は化学的に直接固定化する方法と、検出試薬をラテックス粒子などの微粒子に物理的又は化学的に結合し、この微粒子をクロマトグラフィー媒体用基材に固定化する方法（すなわち、間接的な固定化方法）のいずれを用いてもよい。感度調整の容易さの観点からは、直接固定化が好ましい。
【００９７】
検出試薬をクロマトグラフィー媒体用基材に直接固定化する方法としては、例えば、物理吸着、共有結合が挙げられる。共有結合によって検出試薬をクロマトグラフィー媒体用基材に固定化する場合、臭化シアン、グルタルアルデヒド、カルボジイミド等を結合剤として使用できる。
【００９８】
検出試薬をクロマトグラフィー媒体用基材に間接的に固定化する方法としては、例えば、検出試薬を結合した不溶性微粒子をクロマトグラフィー媒体用基材に固定化する方法がある。不溶性微粒子としては、クロマトグラフィー媒体用基材に捕捉され移動することのできない粒径（例えば、平均粒径５μｍ程度以上）の微粒子を選択する。不溶性微粒子として抗原抗体反応に使用される粒子が種々知られており、例えば、ポリスチレン、スチレン−ブタジエン共重合体、スチレン−メタクリル酸共重合体、ポリグリシジルメタクリレート、アクロレイン−エチレングリコールジメタクリレート共重合体等の有機高分子の微粒子；ゼラチン、ベントナイト、アガロース、架橋デキストラン等の微粒子；シリカ、シリカ−アルミナ、アルミナ等の無機酸化物粒子；無機酸化物粒子にシランカップリング剤等で官能基を導入した無機粒子；が挙げられる。
【００９９】
検出試薬又は検出試薬を結合した不溶性微粒子をクロマトグラフィー媒体用基材へ付与する手段としては、例えば、マイクロシリンジ、調節ポンプ付きペン、インキ噴射印刷等の手段が挙げられる。
【０１００】
検出試薬をクロマトグラフィー媒体用基材に固定化した後、非特異的な吸着により分析の精度が低下することを抑制するため、クロマトグラフィー媒体用基材に公知の方法でブロッキング処理を行ってもよい。一般的にブロッキング処理には、ウシ血清アルブミン、スキムミルク、カゼイン、ゼラチン等のタンパク質が好適に用いられる。ブロッキング処理後、必要に応じて、Ｔｗｅｅｎ２０、ＴｒｉｔｏｎＸ−１００、ＳＤＳ（ドデシル硫酸ナトリウム）、ＳＤＢＳ（ドデシルベンゼンスルホン酸ナトリウム）等の界面活性剤でクロマトグラフィー媒体用基材を洗浄してもよい。
【０１０１】
クロマトグラフィー媒体は、検出部の下流に、標識物質に特異的に結合するコントロール用物質を固定化した領域であるコントロール部をさらに備えていてもよい。クロマトグラフィー媒体が検出部の下流にコントロール部を有する場合、サンプルが検出部を通過した後にコントロール部へ移動すると、検出部に捕捉されない標識物質（つまり、被検出物質が結合していない標識物質）がコントロール用物質に特異的に結合することにより、コントロール部に標識物質が濃縮される。これにより、目視又は適当な機器を用いてコントロール部までサンプルが移動したことを確認でき、検査の完了を把握できる。コントロール用物質としては、例えば、標識物質の結合部に対する抗体が挙げられる。
【０１０２】
［吸収パッド］
吸収パッドは、展開方向の下流に流れ着いたサンプルを吸収する部材である。吸収パッドとしては、例えば、濾紙、不織布、布、セルロースアセテート膜等の吸水性材料が用いられる。クロマトグラフィー媒体を移動しているサンプルの最先端部が吸収パッドに届いてからの展開速度は、吸収パッドの材質及び大きさにより異なるので、吸収パッドの材質及び大きさの選定により被検出物質の検出に適した展開速度を設定することができる。
【実施例】
【０１０３】
以下に実施例を挙げて、本開示のクロマトグラフィー媒体用基材をさらに具体的に説明する。以下の実施例に示す材料、使用量、割合、処理手順等は、本開示の趣旨を逸脱しない限り適宜変更することができる。したがって、本開示のクロマトグラフィー媒体用基材の範囲は、以下に示す具体例により限定的に解釈されるべきではない。【０１０４】
＜クロマトグラフィー媒体用基材の物性の測定方法＞
クロマトグラフィー媒体用基材（以下「基材」ともいう。）に適用した測定方法は、以下のとおりである。【０１０５】
［膜厚］
基材の膜厚は、接触式の膜厚計（ミツトヨ社製）にて２０点測定し、これを平均することで求めた。接触端子は底面が直径０．５ｃｍの円柱状の端子を用いた。測定圧は０．１Ｎとした。【０１０６】
［目付］
基材の目付（１ｍ２当たりの質量、ｇ／ｍ２）は、基材を１０ｃｍ×１０ｃｍの正方形に切り出し、質量を測定し、質量を面積で除算して求めた。【０１０７】
［空孔率］
基材の空孔率ε（％）は下記の式により求めた。
ε＝｛１−（Ｗａ／ｘａ＋Ｗｂ／ｘｂ＋Ｗｃ／ｘｃ＋…＋Ｗｎ／ｘｎ）／ｔ｝×１００
ここに、構成材料がａ、ｂ、ｃ、…、ｎであり、構成材料の質量がそれぞれＷａ、Ｗｂ、Ｗｃ、…、Ｗｎ（ｇ／ｃｍ２）であり、構成材料の真密度がそれぞれｘａ、ｘｂ、ｘｃ、…、ｘｎ（ｇ／ｃｍ３）であり、膜厚がｔ（ｃｍ）である。【０１０８】
［ガーレ値］
ＪＩＳ  Ｐ８１１７：２００９に従って、面積６４２ｍｍ２の基材の空気透過時間Ｔ（秒／１００ｍＬ）を測定し、下記の式により、厚さ１μｍあたりの空気透過時間τ（秒／１００ｍＬ／μｍ）を求めた。
τ＝Ｔ／ｔ
Ｔ：ＪＩＳ  Ｐ８１１７：２００９に従い測定した空気透過時間（秒／１００ｍＬ）、ｔ：基材の膜厚（μｍ）。【０１０９】
［ＢＥＴ比表面積］
基材に対する前処理として、測定前にマイクロトラック・ベル株式会社の吸着測定用前処理装置（Ｂｅｌｐｒｅｐ  ｖａｃ−ＩＩ）にて室温での真空脱気を行った。測定装置としてマイクロトラック・ベル株式会社の比表面積測定装置（型式：ＢＥＬＳＯＲＰ−ｍｉｎｉ）を用い、液体窒素温度下における窒素ガス吸着法にて設定相対圧：１．０×１０−３〜０．３５の吸着等温線を測定し、ＢＥＴ法で解析することで、基材のＢＥＴ比表面積（ｍ２／ｇ）を求めた。【０１１０】
［平均流量孔径］
基材の平均流量孔径（μｍ）は、ＰＭＩ社のパームポロメーター（型式：ＣＦＰ−１２００−ＡＥＸＬ）を用い、浸液にＰＭＩ社製のガルウィック（表面張力１５．９ｄｙｎ／ｃｍ）を用いて、ＡＳＴＭ Ｅ１２９４−８９に規定するハーフドライ法により求めた。測定温度は２５℃であり、測定圧力は０〜１５０ｐｓｉの範囲で変化させた。【０１１１】
［接触角］
基材の表面における滴下１秒後の水の接触角を、協和界面科学株式会社製の全自動接触角計ＤＭｓ−４０１と解析ソフトウェアＦＡＭＡＳ（interFAce Measurement and Analysis System）とを用いて測定した。大気中常圧下、温度２４℃、相対湿度６０％の雰囲気において、１μＬの水（イオン交換水）を基材に滴下し、滴下１秒後の静的接触角を測定した。水滴の形成には、ＳＵＳ（ステンレス鋼）製の２２Ｇ針を備えたシリンジを用いた。実施例８及び実施例９の基材については、プラズマ処理を行った側の面において水の接触角を測定した。【０１１２】
［キャピラリーフロータイム］
以下の吸水試験により、基材のキャピラリーフロータイムを測定した。図４が、吸水試験の模式図である。【０１１３】
基材を、ＴＤ方向６ｃｍ且つＭＤ方向１ｃｍの長方形に切り出し、切断片（切断片６という。）を得た。切断片６の長さ方向一端部に粘着テープ８を貼り付けて、ポリプロピレン製の板７（長さ１２１ｍｍ、幅５２ｍｍ）の上に切断片６を固定した。切断片６の長さ方向が鉛直方向に対して２０度となるように板７を傾け、水１０（イオン交換水）が入ったビーカー９に、切断片６を上側に配置した状態で板７を差し込み、切断片６の長さ方向他端部を水１０に１ｃｍ浸漬させた。この状態を大気中常圧下、温度２４℃、相対湿度６０％において維持した。切断片６を水１０に浸漬させた時点を起点として、毛細管現象により水が切断片６上を矢印Ｙの方向に移動し、切断片６における水で濡れた部分と濡れていない部分との界面の全てが、水１０の水面から切断片６の長さ方向４ｃｍの位置に到達するまでの時間を測定した。この時間をキャピラリーフロータイムとした。切断片６を５個準備し、それぞれについて吸水試験を実施し、キャピラリーフロータイムの平均値を求めた。【０１１４】
［キャピラリーフロータイムのばらつき］
５個の切断片６の各キャピラリーフロータイムから、下記の式によりキャピラリーフロータイムのばらつきを求めた。【０１１５】
【数１】
0006572404.tif 000002
ｓ：キャピラリーフロータイムのばらつき、ｎ：キャピラリーフロータイムの測定点数、ｘｉ：キャピラリーフロータイムの各測定値、バーを上に付したｘ：キャピラリーフロータイムの平均値。【０１１６】
＜クロマトグラフィー媒体用基材の作製＞
［実施例１］
重量平均分子量４６０万の超高分子量ポリエチレン（以下「ＵＨＭＷＰＥ」という。）１．２５質量部と、重量平均分子量５６万且つ密度９５０ｋｇ／ｍ３の高密度ポリエチレン（以下「ＨＤＰＥ」という。）２３．７５質量部とを混合したポリエチレン組成物を用意した。ポリマー濃度が２５質量％となるようにポリエチレン組成物とデカリンとを混合しポリエチレン溶液を調製した。ポリエチレン溶液を温度１４８℃でダイよりシート状に押出し、次いで押出物を水温２０℃の水浴中で冷却し、第一のゲル状シートを得た。【０１１７】
第一のゲル状シートを７０℃の温度雰囲気下にて１０分間予備乾燥し、次いで、ＭＤ方向に１．４倍で一次延伸をし、次いで、本乾燥を５７℃の温度雰囲気下にて５分間行って、第二のゲル状シート（ベーステープ）を得た（第二のゲル状シート中の溶剤の残留量は１％未満とした。）。次いで二次延伸として、第二のゲル状シート（ベーステープ）をＭＤ方向に温度１００℃にて倍率３．０倍で延伸し引き続いてＴＤ方向に温度１２５℃にて倍率９．０倍で延伸し、その後直ちに１２７℃で熱処理（熱固定）を行って、二軸延伸ポリエチレン微多孔膜を得た。【０１１８】
上記のポリエチレン微多孔膜の両面に、プラズマ処理（Ｎｏｒｄｓｏｎ  ＭＡＲＣＨ社製ＡＰ−３００：出力１５０Ｗ、処理圧力４００ｍＴｏｒｒ、ガス流量１６０ｓｃｃｍ、処理時間１３５秒）を施した。【０１１９】
プラズマ処理後のポリエチレン微多孔膜にドデシルベンゼンスルホン酸ナトリウム（ＳＤＢＳ）１質量％の水溶液を含浸させ、常温で２４時間乾燥させて、ポリエチレン微多孔膜にＳＤＢＳをコーティングした。【０１２０】
上記のプラズマ処理及びＳＤＢＳコーティングを経て、親水性のポリエチレン微多孔膜、すなわちクロマトグラフィー媒体用基材を得た。【０１２１】
上記のクロマトグラフィー媒体用基材の片面に、粘着剤の付いたＰＥＴフィルムを貼り合わせ、積層体を得た。【０１２２】
［実施例２］
プラズマ処理後のポリエチレン微多孔膜にＳＤＢＳをコーティングしなかった以外は実施例１と同様にして、クロマトグラフィー媒体用基材及び積層体を作製した。【０１２３】
［実施例３］
一次延伸におけるＭＤ方向の延伸倍率を１．８倍、二次延伸におけるＭＤ方向の延伸倍率を２．０倍、ＴＤ方向の延伸温度を１２０℃、ＴＤ方向の延伸倍率を４．４倍とした以外は実施例１と同様にして、クロマトグラフィー媒体用基材及び積層体を作製した。【０１２４】
［実施例４］
一次延伸におけるＭＤ方向の延伸倍率を１．２倍、二次延伸におけるＭＤ方向の延伸温度を９０℃、熱処理（熱固定）の温度を１４５℃とした以外は実施例１と同様にして、クロマトグラフィー媒体用基材及び積層体を作製した。【０１２５】
［実施例５］
プラズマ処理後のポリエチレン微多孔膜にＳＤＢＳをコーティングしなかった以外は実施例４と同様にして、クロマトグラフィー媒体用基材及び積層体を作製した。【０１２６】
［実施例６］
ＵＨＭＷＰＥ３．７５質量部と、ＨＤＰＥ２１．２５質量部とを混合したポリエチレン組成物を用い、ダイの温度を１５２℃、一次延伸におけるＭＤ方向の延伸倍率を１．２倍、二次延伸におけるＭＤ方向の延伸温度を９０℃、ＭＤ方向の延伸倍率を４．０倍、熱処理（熱固定）の温度を１４４℃とした以外は実施例１と同様にして、クロマトグラフィー媒体用基材及び積層体を作製した。【０１２７】
［実施例７］
ＵＨＭＷＰＥ４．０５質量部とＨＤＰＥ２２．９５質量部とを混合したポリエチレン組成物を用意した。ポリマー濃度が２７質量％となるようにポリエチレン組成物とデカリンとを混合しポリエチレン溶液を調製した。このポリエチレン溶液を用い、二次延伸におけるＭＤ方向の延伸温度を９０℃、熱固定の温度を１４４℃とした以外は実施例１と同様にして、クロマトグラフィー媒体用基材及び積層体を作製した。【０１２８】
［実施例８］
ダイの温度を１５２℃、二次延伸におけるＭＤ方向の延伸温度を９０℃、熱固定の温度を１４５℃とし、プラズマ処理をポリエチレン微多孔膜の片面のみに施した以外は実施例１と同様にして、クロマトグラフィー媒体用基材を作製した。【０１２９】
上記のクロマトグラフィー媒体用基材のプラズマ処理を施していない側の面に、粘着剤の付いたＰＥＴフィルムを貼り合わせ、積層体を得た。【０１３０】
［実施例９］
プラズマ処理後のポリエチレン微多孔膜にＳＤＢＳをコーティングしなかった以外は実施例８と同様にして、クロマトグラフィー媒体用基材及び積層体を作製した。【０１３１】
［比較例１］
ＵＨＭＷＰＥ７．５質量部と、ＨＤＰＥ１７．５質量部とを混合したポリエチレン組成物を用い、一次延伸におけるＭＤ方向の延伸倍率を１．１倍、二次延伸におけるＭＤ方向の延伸温度を９０℃、ＭＤ方向の延伸倍率を６．５倍、ＴＤ方向の延伸温度を１３０℃、ＴＤ方向の延伸倍率を１３．５倍、熱固定の温度を１４２℃とした以外は実施例１と同様にして、クロマトグラフィー媒体用基材及び積層体を作製した。【０１３２】
［比較例２］
ＵＨＭＷＰＥ１０．２質量部とＨＤＰＥ６．８質量部とを混合したポリエチレン組成物を用意した。デカリン８質量部と流動パラフィン７５質量部とを混合した混合溶剤を用意した。ポリマー濃度が１７質量％となるようにポリエチレン組成物と混合溶剤とを混合しポリエチレン溶液を調製した。このポリエチレン溶液を温度１５３℃でダイよりシート状に押出し、ついで押出物を水温２０℃の水浴中で冷却し、ゲル状シートを作製した。【０１３３】
上記のゲル状シート（ベーステープ）をＭＤ方向に温度９０℃にて倍率３．０倍で延伸し、引き続いてＴＤ方向に温度１０５℃にて倍率９．０倍で延伸し、その後直ちに１４１℃で熱処理（熱固定）を行った。次いで、シートを、２槽に分かれた塩化メチレン浴にそれぞれ３０秒間ずつ連続して浸漬させながら、流動パラフィンを抽出した。シートを塩化メチレン浴から搬出した後、４０℃の温度雰囲気下で塩化メチレンを乾燥除去し、１２０℃に加熱したローラー上を搬送させながらアニール処理をすることで、二軸延伸ポリエチレン微多孔膜を得た。【０１３４】
上記のポリエチレン微多孔膜に、実施例１と同様にプラズマ処理及びＳＤＢＳコーティングを施し、クロマトグラフィー媒体用基材を得た。【０１３５】
上記のクロマトグラフィー媒体用基材の片面に、粘着剤の付いたＰＥＴフィルムを貼り合わせ、積層体を得た。【０１３６】
［比較例３］
ＵＨＭＷＰＥ３．４質量部とＨＤＰＥ１３．６質量部とを混合したポリエチレン組成物を用意した。デカリン４５質量部と流動パラフィン３８質量部とを混合した混合溶剤を用意した。ポリマー濃度が１７質量％となるようにポリエチレン組成物と混合溶剤とを混合しポリエチレン溶液を調製した。このポリエチレン溶液を温度１５７℃でダイよりシート状に押出し、ついで押出物を水温２０℃の水浴中で冷却し、ゲル状シートを作製した。【０１３７】
上記のゲル状シートを９５℃の温度雰囲気下にて１０分間予備乾燥を行って、ベーステープを得た（ベーステープ中の溶剤の残留量は１％未満とした。）。次いで、二次延伸としてベーステープをＭＤ方向に温度９０℃にて倍率５．５倍で延伸し、引き続いてＴＤ方向に温度１０５℃にて倍率１０倍で延伸し、その後直ちに１４０℃で熱処理（熱固定）を行った。次いで、比較例２と同様に塩化メチレン浴への浸漬、乾燥処理及びアニール処理を行い、二軸延伸ポリエチレン微多孔膜を得た。【０１３８】
上記のポリエチレン微多孔膜に、実施例１と同様にプラズマ処理及びＳＤＢＳコーティングを施し、クロマトグラフィー媒体用基材を得た。【０１３９】
上記のクロマトグラフィー媒体用基材の片面に、粘着剤の付いたＰＥＴフィルムを貼り合わせ、積層体を得た。【０１４０】
［比較例４］
実施例１において製造した親水化処理前のポリエチレン微多孔膜を、クロマトグラフィー媒体用基材とした。【０１４１】
上記のクロマトグラフィー媒体用基材の片面に、粘着剤の付いたＰＥＴフィルムを貼り合わせ、積層体を得た。【０１４２】
［比較例５］
市販されているイムノクロマトグラフ用ニトロセルロース膜（ＭＩＬＬＩＰＯＲＥ社製、ＳＨＦ１２００４２５）を、クロマトグラフィー媒体用基材とした。当該市販品は、ＰＥＴフィルムの片面にニトロセルロース膜が積層された積層体である。【０１４３】
表１に、実施例１〜９及び比較例１〜４の各ポリエチレン微多孔膜の組成及び製造条件を示す。【０１４４】
【表１】
0006572404.tif 000003
【０１４５】
＜イムノクロマトグラフ用ストリップの作製＞
実施例１〜９又は比較例１〜５のクロマトグラフィー媒体用基材を用いて、ｈＣＧ（ヒト絨毛性ゴナドトロピン）を被検出物質とするイムノクロマトグラフ用ストリップを以下の手順にしたがって作製した。【０１４６】
（１）クロマトグラフィー媒体の作製
クロマトグラフィー媒体用基材（以下「基材」という。）とＰＥＴフィルムとの積層体を、基材のＭＤ方向及びＴＤ方向にしたがって、ＭＤ方向１５０ｍｍ且つＴＤ方向２５ｍｍの長方形に切り出した。０．５ｍｇ／ｍＬの抗ｈＣＧ−αサブユニット抗体（マウスモノクローナル抗体）を含むリン酸緩衝液（ｐＨ７．２）を、切り出した積層体の基材側の面に、一方の長辺から８ｍｍの位置に長辺に対して平行に直線状に塗布し（塗布量は１μＬ／ｃｍ）、温度５０℃の雰囲気下で３０分間乾燥させて検出部を形成した。【０１４７】
（２）標識物質分散液の作製
粒子径４０ｎｍの金コロイド（標識部）を、５０ｍＭのＫＨ２ＰＯ４緩衝液（ｐＨ７．０）で６０μｇ／ｍＬの濃度に希釈した分散液１０ｍＬに、抗ｈＣＧ抗体（マウスモノクローナル抗体）（結合部）を１ｍＬ加え、室温で１０分間静置した。次いで、１質量％のポリエチレングリコール（ＰＥＧ、重量平均分子量２０，０００）の水溶液０．５ｍＬを金コロイド及び抗ｈＣＧ抗体を含む分散液に加えて攪拌した後、１０質量％のＢＳＡ（ウシ血清アルブミン）の水溶液１ｍＬを加えてさらに攪拌した。次いで、遠心加速度７，０００Ｇで１５分間遠心分離を行い、上清を除去した。次いで、沈殿物に、ＰＥＧ（重量平均分子量２０，０００）を０．０５質量％、ＮａＣｌを０．００９質量％、ＢＳＡを１質量％及びＮａＮ３を０．０９５質量％含む２０ｍＭのトリス塩酸緩衝液（Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ８．２）を加え、標識物質（金コロイドによって標識された抗ｈＣＧ抗体）を分散させた。以上の手順により、標識物質分散液を作製した。【０１４８】
（３）コンジュゲートパッドの作製
上記で作製した標識物質分散液０．７ｍＬに、ＰＥＧ（重量平均分子量２０，０００）を０．０５質量％及びスクロースを３．５質量％含むトリス塩酸緩衝液（Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ８．２）を２．１ｍＬ加えて攪拌し、塗布液を得た。次いで、塗布液を１５０ｍｍ×８ｍｍ×４００μｍのグラスファイバー製のパッド（Ａｈｌｓｔｒｏｍ製）に均等に塗布した後、真空乾燥機にて乾燥させ、コンジュゲートパッドを作製した。【０１４９】
（４）サンプルパッドの作製
１５０ｍｍ×１８ｍｍ×３４０μｍのセルロース製のパッド（Ａｈｌｓｔｒｏｍ製）に、トリス塩酸緩衝液（Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ８．２）０．６ｍＬを均等に塗布した後、温度５０℃で１時間乾燥させ、サンプルパッドを作製した。【０１５０】
（５）吸収パッドの用意
吸収パッドとして、１５０ｍｍ×２０ｍｍのろ紙（Ｌｏｈｍａｎｎ製）を用意した。【０１５１】
（６）イムノクロマトグラフ用ストリップの作製
片面に粘着剤が塗布されたバッキングシート（Ｌｏｈｍａｎｎ製、１５０ｍｍ×６０ｍｍ）に、上記で作製したクロマトグラフィー媒体、コンジュゲートパッド、サンプルパッド及び吸収パッドを、図１に示す重なり方で貼り合せ、複合シートを得た。その際、サンプルパッドとコンジュゲートパッドの重なり幅は４ｍｍ、コンジュゲートパッドとクロマトグラフィー媒体の重なり幅は２ｍｍ、クロマトグラフィー媒体と吸収パッドの重なり幅は５ｍｍとし、クロマトグラフィー媒体の検出部がコンジュゲートパッドよりも吸収パッドに近くなるようにした。複合シート全体を長さ方向に５ｍｍ幅ごとに切断して、図１に示す形態のストリップ（展開方向の全長６０ｍｍ、幅５ｍｍ。基材のＴＤ方向がサンプルの展開方向である。）を得た。【０１５２】
＜イムノクロマトグラフ用ストリップの性能評価＞
以下の性能評価試験は、温度２４℃且つ相対湿度６０％の雰囲気において行った。【０１５３】
［検査速度］
ｈＣＧ抗原（被検出物質）を１６．７ｎｋａｔになるように、ＢＳＡを１質量％及びＮａＮ３を０．０９５質量％含むリン酸緩衝液に希釈し、サンプルを作製した。サンプル１００μＬをイムノクロマトグラフ用ストリップのサンプルパッドに滴下して展開させ、検出部の発色を目視で確認した。サンプルをサンプルパッドに滴下した時点を起点として、検出部の発色（赤）を目視で確認した時点までの時間（検出時間という。）を測定し、下記の３段階に分類した。【０１５４】
Ａ：検出時間が６０秒未満。
Ｂ：検出時間が６０秒以上８０秒未満。
Ｃ：検出時間が８０秒以上。【０１５５】
［検査精度］
検出時間の測定と同時に、検出部の発色（赤）の明瞭さを目視により判定し、下記の３段階に分類した。【０１５６】
Ａ：検出部に赤い線を明瞭に確認できる。
Ｂ：検出部に赤い線を確認できる。
Ｃ：検出部に赤い線を確認できるが不明瞭。【０１５７】
表２に、実施例１〜９及び比較例１〜５の各ポリエチレン微多孔膜（ＰＥ微多孔膜）又はニトロセルロース膜（ＮＣ膜）の物性と、イムノクロマトグラフ用ストリップの評価結果を示す。【０１５８】
【表２】
0006572404.tif 000004
【０１５９】
２０１７年９月２０日に出願された日本国出願番号第２０１７−１８０１６９号の開示は、その全体が参照により本明細書に取り込まれる。【０１６０】
本明細書に記載された全ての文献、特許出願、及び技術規格は、個々の文献、特許出願、及び技術規格が参照により取り込まれることが具体的かつ個々に記された場合と同程度に、本明細書中に参照により取り込まれる。
【符号の説明】
【０１６１】
Ａ：イムノクロマトグラフ用ストリップ
Ｘ：展開方向
１：クロマトグラフィー媒体
２：サンプルパッド
３：コンジュゲートパッド
４：吸収パッド
５：支持体板
１１：検出部
１０１：被検出物質
１０２：標識物質
１０３：複合体
１０４：検出試薬【０１６２】
Ｙ：水の移動方向
６：クロマトグラフィー媒体用基材の切断片
７：ポリプロピレン製の板
８：粘着テープ
９：ビーカー
１０：水
【図１】
0006572404.tif 000005
【図２】
0006572404.tif 000006
【図３】
0006572404.tif 000007
【図４】
0006572404.tif 000008