(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Iaの化合物、またはその塩、エステルもしくは溶媒和物:
0006469009.tif 000074
式中、
Ar1は置換もしくは非置換のC6〜C20アリールまたは5〜20員ヘテロアリールであり;
XはC(O)、C(S)またはS(O)2であり;
XがCOである場合、W1は単結合、O、CR50R51もしくはNR52であり、または、XがSO2である場合、W1は単結合、CR50R51もしくはNR52であり;
R50、R51、R52およびR53はそれぞれ独立して、水素、置換もしくは非置換のC1〜C6アルキル、置換もしくは非置換のC2〜C6アルケニル、置換もしくは非置換のC2〜C6アルキニル、置換もしくは非置換のC6〜C20アリール、置換もしくは非置換のC7〜C26アリールアルキル、置換もしくは非置換の5〜20員ヘテロアリール、および置換もしくは非置換の6〜26員ヘテロアリールアルキルからなる群より選択されるが、但し、Ar1が4-クロロフェニルである場合、R53はメチルまたは非置換フェニルではない。
【請求項２】
式IIaの化合物、またはその塩、エステルもしくは溶媒和物である、請求項1記載の化合物:
0006469009.tif 000075
式中、
Ar1およびAr2はそれぞれ独立して非置換C6〜C14アリール、非置換5〜14員ヘテロアリール、または、ハロ、CN、NO2、NO、N3、ORa、NRaRb、C(O)Ra、C(O)ORa、C(O)NRaRb、NRbC(O)Ra、-S(O)bRa、-S(O)bNRaRbおよびRS1からなる群より選択される1個もしくは複数の置換基でそれぞれ置換されたC6〜C14アリールもしくは5〜14員ヘテロアリールであり、RS1はC1〜C6アルキル、C2〜C6アルケニル、C2〜C6アルキニル、C3〜C8シクロアルキル、C6〜C10アリール、5員もしくは6員ヘテロアリール、または4〜12員ヘテロシクロアルキルであり、bは0、1または2であり、RaおよびRbはそれぞれ独立してHまたはRS2であり、RS2はC1〜C6アルキル、C2〜C6アルケニル、C2〜C6アルキニル、C3〜C8シクロアルキル、C6〜C10アリール、4〜12員ヘテロシクロアルキル、または5員もしくは6員ヘテロアリールであり; RS1およびRS2はそれぞれ、ハロ、OH、オキソ、C(O)OH、C(O)O-C1〜C6アルキル、CN、C1〜C6アルキル、C1〜C6アルコキシル、アミノ、モノ-C1〜C6アルキルアミノ、ジ-C1〜C6アルキルアミノ、C3〜C8シクロアルキル、C6〜C10アリール、4〜12員ヘテロシクロアルキル、および5員もしくは6員ヘテロアリールからなる群より選択される1個もしくは複数の置換基で置換されていてもよい。
【請求項３】
R53が非置換C1〜C6アルキル、または、ハロ、OH、CNおよびアミノより選択される1個もしくは複数の置換基で置換されたC1〜C6アルキルである、請求項1記載の化合物。
【請求項４】
XがS(O)2であり、W1がCR50R51である、請求項1記載の化合物。
【請求項５】
XがS(O)2であり、W1が単結合である、請求項1記載の化合物。
【請求項６】
XがC(O)であってW1がOであるか、または、XがC(S)であってW1がNR52である、請求項1記載の化合物。
【請求項７】
R50、R51およびR52がそれぞれ独立してH、非置換C1〜C6アルキル、または、ハロ、OH、CNおよびアミノより選択される1個もしくは複数の置換基で置換されたC1〜C6アルキルである、請求項1記載の化合物。
【請求項８】
Ar1およびAr2がそれぞれ独立して、ハロ、CN、NO2、NO、N3、ORa、NRaRb、C(O)Ra、C(O)ORa、C(O)NRaRb、NRbC(O)Ra、-S(O)bRa、-S(O)bNRaRbおよびRS1からなる群より選択される1個もしくは複数の置換基でそれぞれ置換されていてもよいフェニル、ナフチルまたは5〜10員ヘテロアリールであり、RS1がC1〜C6アルキル、C2〜C6アルケニル、C2〜C6アルキニル、C3〜C8シクロアルキル、C6〜C10アリール、5員もしくは6員ヘテロアリール、または4〜12員ヘテロシクロアルキルであり、bが0、1または2であり、RaおよびRbがそれぞれ独立してHまたはRS2であり、RS2がC1〜C6アルキル、C2〜C6アルケニル、C2〜C6アルキニル、C3〜C8シクロアルキル、C6〜C10アリール、4〜12員ヘテロシクロアルキル、または5員もしくは6員ヘテロアリールであり; RS1およびRS2がそれぞれ、ハロ、OH、オキソ、C(O)OH、C(O)O-C1〜C6アルキル、CN、C1〜C6アルキル、C1〜C6アルコキシル、アミノ、モノ-C1〜C6アルキルアミノ、ジ-C1〜C6アルキルアミノ、C3〜C8シクロアルキル、C6〜C10アリール、4〜12員ヘテロシクロアルキル、および5員もしくは6員ヘテロアリールからなる群より選択される1個もしくは複数の置換基で置換されていてもよい、請求項1記載の化合物。
【請求項９】
Ar1およびAr2がそれぞれ独立して、ハロ、CN、NO2、NO、N3、ORa、NRaRb、C(O)Ra、C(O)ORaおよびRS1からなる群より選択される1個もしくは複数の置換基でそれぞれ置換されていてもよいフェニル、ナフチルまたは5〜10員ヘテロアリールであり、RS1がC1〜C6アルキルであり、RaおよびRbがそれぞれ独立してHまたはRS2であり、RS2がC1〜C6アルキルであり; RS1およびRS2がそれぞれ、ハロ、OH、C1〜C6アルコキシル、アミノ、モノ-C1〜C6アルキルアミノおよびジ-C1〜C6アルキルアミノからなる群より選択される1個もしくは複数の置換基で置換されていてもよい、請求項8記載の化合物。
【請求項１０】
Ar1およびAr2がそれぞれ独立してフェニル、1-ナフチル、2-ナフチル、2-フラニル、2-チアゾリル、2-ピリジル、3-ピリジル、4-ピリジル、2-キノリニル、3-キノリニル、4-キノリニル、2-クロロフェニル、3-クロロフェニル、4-クロロフェニル、2-フルオロフェニル、3-フルオロフェニル、4-フルオロフェニル、2-トリフルオロメチルフェニル、3-トリフルオロメチルフェニル、4-トリフルオロメチルフェニル、2-シアノフェニル、3-シアノフェニル、4-シアノフェニル、3-カルボキシメチルフェニル、2-メトキシフェニル、3-メトキシフェニル、4-メトキシフェニル、2,3-ジクロロフェニル、2,4-ジクロロフェニル、2,5-ジクロロフェニル、3,4-ジクロロフェニル、3,5-ジクロロフェニル、2,3-ジフルオロフェニル、2,4-ジフルオロフェニル、2,5-ジフルオロフェニル、3,4-ジフルオロフェニル、3,5-ジフルオロフェニル、2,3-ジメトキシフェニル、2,4-ジメトキシフェニル、2,5-ジメトキシフェニル、3,4-ジメトキシフェニル、3,5-ジメトキシフェニル、2-クロロ-6-フルオロフェニル、3-クロロ-4-フルオロフェニル、2-クロロ-4-フルオロフェニル、4-クロロ-3-フルオロフェニル、3-クロロ-2-フルオロフェニル、2-クロロ-5-フルオロフェニル、4-クロロ-2-フルオロフェニルおよび5-クロロ-2-フルオロフェニルより選択される、請求項8記載の化合物。
【請求項１１】
0006469009.tif 000076
0006469009.tif 000077
0006469009.tif 000078
0006469009.tif 000079
0006469009.tif 000080
0006469009.tif 000081
より選択される、請求項1記載の化合物。
【請求項１２】
0006469009.tif 000082
である、請求項1記載の化合物。
【請求項１３】
薬学的に許容される担体と、請求項1記載の化合物、またはその塩、エステルもしくは溶媒和物とを含む、薬学的組成物。
【請求項１４】
式(IIIa)のアミン化合物:
0006469009.tif 000083
(IIIa)
と、式ClSO2(CR50R51)Ar2のスルホニルクロリドとを接触させる工程
を含む、請求項4記載の化合物を製造する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願
本出願は2012年9月21日出願の米国仮出願第61/704,014号の優先権および恩典を主張し、その内容全体が参照により本明細書に組み入れられる。
【０００２】
発明の分野
本発明は、がんなどの細胞増殖障害に関する。
【背景技術】
【０００３】
発明の背景
肝細胞がん(HCC)は、罹患率が第5位および致死率が第3位の種類のがんであり、このがんと診断されている人数は現在50万人を超え、世界的に増加中である（Fong et al. (1999) Ann Surg 229(6): 790-800（非特許文献1））。外科的切除、肝移植およびラジオ波焼灼療法を含む局所処置がHCCの処置の第一選択と考えられている。これらの技術の改善によってHCCの初期治療が進歩した。ラジオ波焼灼療法は、初期疾患に対する利点を示し、肝硬変によって肝機能が損なわれた患者において行うことができる。しかし、多くのHCC腫瘍は高度に悪性の表現型を有しており、これらの腫瘍は、初期に発見されたとしても局所焼灼療法後に侵攻性再発を起こし、予後が非常に不良である。ソラフェニブが、HCCの全身治療薬として中程度の臨床上の利点が証明されかつ承認された唯一の薬物である。したがって、アスパルチル(アスパラギニル)β-ヒドロキシラーゼ(ASPH)を発現するHCCおよび他の固形腫瘍に対する新規処置アプローチの開発が緊急に求められている。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】Fong et al. (1999) Ann Surg 229(6): 790-800
【発明の概要】
【０００５】
肝がん、膵がん、胃がん、結腸がん、乳がん、前立腺がん、肺がん、脳がんおよび多くの他の腫瘍型において高度に過剰発現されているASPHのβ-ヒドロキシラーゼ活性を阻害する化合物のファミリーが本明細書に記載される。ASPHは、インビトロとインビボとの両方での腫瘍細胞の遊走、浸潤、運動性および遠隔転移を促進する上で必要かつ十分である。これらの小分子β-ヒドロキシラーゼ酵素活性阻害剤の投与は、腫瘍の発達および成長ならびに肝臓への遠隔転移を減少させることから、ASPHを過剰発現する種々の致命的ヒト腫瘍を処置するための薬物として有用である。本発明は、ヒト対象および動物対象への投与用の、薬学的に許容される賦形剤を伴う、および伴わない前記小分子の組成物、ならびにヒト悪性腫瘍の処置における該小分子の使用を包含する。本化合物および方法は、定着腫瘍を予防しかつその成長速度を遅くし、正常細胞に対する毒性が低い。
【０００６】
一局面では、本開示は、腫瘍細胞とASPH阻害化合物とを接触させる段階を含む、細胞増殖性障害の処置における腫瘍細胞の増殖、遊走、浸潤または転移を減少させる方法における使用のためのASPH阻害化合物であって、式IaもしくはIbの化合物、またはその塩、エステル、代謝産物、プロドラッグもしくは溶媒和物である、ASPH阻害化合物を提供する:
0006469009.tif 000002
式中、
Ar1は置換もしくは非置換のC6〜C20アリールまたは5〜20員ヘテロアリールであり;
XはC(O)、C(S)またはS(O)2であり;
XがCOである場合、W1は単結合、O、CR50R51またはNR52であり、XがSO2である場合、W1は単結合、CR50R51またはNR52であり;
R50、R51、R52およびR53はそれぞれ独立して水素、置換もしくは非置換のC1〜C6アルキル、置換もしくは非置換のC2〜C6アルケニル、置換もしくは非置換のC2〜C6アルキニル、置換もしくは非置換のC6〜C20アリール、置換もしくは非置換のC7〜C26アリールアルキル、置換もしくは非置換の5〜20員ヘテロアリール、および置換もしくは非置換の6〜26員ヘテロアリールアルキルからなる群より選択される。
【０００７】
一態様では、前記使用のための化合物は、式Iaの化合物、またはその塩、エステル、代謝産物、プロドラッグもしくは溶媒和物である。式Iaの化合物は以下の1つもしくは複数の特徴を適宜有しうる。
【０００８】
例えば、本化合物は式IIaの化合物、またはその塩、エステル、代謝産物、プロドラッグもしくは溶媒和物である:
0006469009.tif 000003
式中、
Ar1およびAr2はそれぞれ独立して非置換C6〜C14アリール、非置換5〜14員ヘテロアリール、または、ハロ、CN、NO2、NO、N3、ORa、NRaRb、C(O)Ra、C(O)ORa、C(O)NRaRb、NRbC(O)Ra、-S(O)bRa、-S(O)bNRaRbまたはRS1からなる群より選択される1個もしくは複数の置換基でそれぞれ置換されたC6〜C14アリールもしくは5〜14員ヘテロアリールであり、RS1はC1〜C6アルキル、C2〜C6アルケニル、C2〜C6アルキニル、C3〜C8シクロアルキル、C6〜C10アリール、5員もしくは6員ヘテロアリール、または4〜12員ヘテロシクロアルキルであり、bは0、1または2であり、RaおよびRbはそれぞれ独立してHまたはRS2であり、RS2はC1〜C6アルキル、C2〜C6アルケニル、C2〜C6アルキニル、C3〜C8シクロアルキル、C6〜C10アリール、4〜12員ヘテロシクロアルキル、または5員もしくは6員ヘテロアリールであり; RS1およびRS2はそれぞれ、ハロ、OH、オキソ、C(O)OH、C(O)O-C1〜C6アルキル、CN、C1〜C6アルキル、C1〜C6アルコキシル、アミノ、モノ-C1〜C6アルキルアミノ、ジ-C1〜C6アルキルアミノ、C3〜C8シクロアルキル、C6〜C10アリール、4〜12員ヘテロシクロアルキル、および5員もしくは6員ヘテロアリールからなる群より選択される1個もしくは複数の置換基で置換されていてもよい。
【０００９】
例えば、R53は非置換C1〜C6アルキル、または、ハロ、OH、CNおよびアミノより選択される1個もしくは複数の置換基で置換されたC1〜C6アルキルである。
【００１０】
例えば、XはS(O)2であり、W1はCR50R51である。
【００１１】
例えば、XはS(O)2であり、W1は単結合である。
【００１２】
例えば、XはC(O)であり、W1はOであり、あるいは、XはC(S)であり、W1はNR52である。
【００１３】
例えば、R50、R51およびR52はそれぞれ独立してH、非置換C1〜C6アルキル、または、ハロ、OH、CNおよびアミノより選択される1個もしくは複数の置換基で置換されたC1〜C6アルキルである。
【００１４】
例えば、Ar1およびAr2はそれぞれ独立して、ハロ、CN、NO2、NO、N3、ORa、NRaRb、C(O)Ra、C(O)ORa、C(O)NRaRb、NRbC(O)Ra、-S(O)bRa、-S(O)bNRaRbまたはRS1からなる群より選択される1個もしくは複数の置換基でそれぞれ置換されていてもよいフェニル、ナフチルまたは5〜10員ヘテロアリールであり、RS1はC1〜C6アルキル、C2〜C6アルケニル、C2〜C6アルキニル、C3〜C8シクロアルキル、C6〜C10アリール、5員もしくは6員ヘテロアリール、または4〜12員ヘテロシクロアルキルであり、bは0、1または2であり、RaおよびRbはそれぞれ独立してHまたはRS2であり、RS2はC1〜C6アルキル、C2〜C6アルケニル、C2〜C6アルキニル、C3〜C8シクロアルキル、C6〜C10アリール、4〜12員ヘテロシクロアルキル、または5員もしくは6員ヘテロアリールであり; RS1およびRS2はそれぞれ、ハロ、OH、オキソ、C(O)OH、C(O)O-C1〜C6アルキル、CN、C1〜C6アルキル、C1〜C6アルコキシル、アミノ、モノ-C1〜C6アルキルアミノ、ジ-C1〜C6アルキルアミノ、C3〜C8シクロアルキル、C6〜C10アリール、4〜12員ヘテロシクロアルキル、および5員もしくは6員ヘテロアリールからなる群より選択される1個もしくは複数の置換基で置換されていてもよい。
【００１５】
例えば、Ar1およびAr2はそれぞれ独立して、ハロ、CN、NO2、NO、N3、ORa、NRaRb、C(O)Ra、C(O)ORaまたはRS1からなる群より選択される1個もしくは複数の置換基でそれぞれ置換されていてもよいフェニル、ナフチルまたは5〜10員ヘテロアリールであり、RS1はC1〜C6アルキルであり、RaおよびRbはそれぞれ独立してHまたはRS2であり、RS2はC1〜C6アルキルであり; RS1およびRS2はそれぞれ、ハロ、OH、C1〜C6アルコキシル、アミノ、モノ-C1〜C6アルキルアミノおよびジ-C1〜C6アルキルアミノからなる群より選択される1個もしくは複数の置換基で置換されていてもよい。
【００１６】
例えば、Ar1およびAr2はそれぞれ独立してフェニル、1-ナフチル、2-ナフチル、2-フラニル、2-チアゾリル、2-ピリジル、3-ピリジル、4-ピリジル、2-キノリニル、3-キノリニル、4-キノリニル、2-クロロフェニル、3-クロロフェニル、4-クロロフェニル、2-フルオロフェニル、3-フルオロフェニル、4-フルオロフェニル、2-トリフルオロメチルフェニル、3-トリフルオロメチルフェニル、4-トリフルオロメチルフェニル、2-シアノフェニル、3-シアノフェニル、4-シアノフェニル、3-カルボキシメチルフェニル、2-メトキシフェニル、3-メトキシフェニル、4-メトキシフェニル、2,3-ジクロロフェニル、2,4-ジクロロフェニル、2,5-ジクロロフェニル、3,4-ジクロロフェニル、3,5-ジクロロフェニル、2,3-ジフルオロフェニル、2,4-ジフルオロフェニル、2,5-ジフルオロフェニル、3,4-ジフルオロフェニル、3,5-ジフルオロフェニル、2,3-ジメトキシフェニル、2,4-ジメトキシフェニル、2,5-ジメトキシフェニル、3,4-ジメトキシフェニル、3,5-ジメトキシフェニル、2-クロロ-6-フルオロフェニル、3-クロロ-4-フルオロフェニル、2-クロロ-4-フルオロフェニル、4-クロロ-3-フルオロフェニル、3-クロロ-2-フルオロフェニル、2-クロロ-5-フルオロフェニル、4-クロロ-2-フルオロフェニルおよび5-クロロ-2-フルオロフェニルより選択される。
【００１７】
別の態様では、前記使用のための化合物は、式Ibの化合物、またはその塩、エステル、代謝産物、プロドラッグもしくは溶媒和物である。式Ibの化合物は以下の1つもしくは複数の特徴を適宜有しうる。
【００１８】
例えば、R53は非置換C1〜C6アルキル、または、ハロ、OH、CNおよびアミノより選択される1個もしくは複数の置換基で置換されたC1〜C6アルキルである。
【００１９】
例えば、R53は非置換のメチルまたはエチルである。
【００２０】
例えば、XはS(O)2であり、W1はCR50R51である。
【００２１】
例えば、XはS(O)2であり、W1は単結合である。
【００２２】
例えば、XはC(O)であり、W1はOであり、あるいは、XはC(S)であり、W1はNR52である。
【００２３】
例えば、R50、R51およびR52はそれぞれ独立してH、非置換C1〜C6アルキル、または、ハロ、OH、CNおよびアミノより選択される1個もしくは複数の置換基で置換されたC1〜C6アルキルである。
【００２４】
例えば、Ar1は、ハロ、CN、NO2、NO、N3、ORa、NRaRb、C(O)Ra、C(O)ORa、C(O)NRaRb、NRbC(O)Ra、-S(O)bRa、-S(O)bNRaRbまたはRS1からなる群より選択される1個もしくは複数の置換基でそれぞれ置換されていてもよいフェニル、ナフチルまたは5〜10員ヘテロアリールであり、RS1はC1〜C6アルキル、C2〜C6アルケニル、C2〜C6アルキニル、C3〜C8シクロアルキル、C6〜C10アリール、5員もしくは6員ヘテロアリール、または4〜12員ヘテロシクロアルキルであり、bは0、1または2であり、RaおよびRbはそれぞれ独立してHまたはRS2であり、RS2はC1〜C6アルキル、C2〜C6アルケニル、C2〜C6アルキニル、C3〜C8シクロアルキル、C6〜C10アリール、4〜12員ヘテロシクロアルキル、または5員もしくは6員ヘテロアリールであり; RS1およびRS2はそれぞれ、ハロ、OH、オキソ、C(O)OH、C(O)O-C1〜C6アルキル、CN、C1〜C6アルキル、C1〜C6アルコキシル、アミノ、モノ-C1〜C6アルキルアミノ、ジ-C1〜C6アルキルアミノ、C3〜C8シクロアルキル、C6〜C10アリール、4〜12員ヘテロシクロアルキル、および5員もしくは6員ヘテロアリールからなる群より選択される1個もしくは複数の置換基で置換されていてもよい。
【００２５】
例えば、Ar1は、ハロ、CN、NO2、NO、N3、ORa、NRaRb、C(O)Ra、C(O)ORaまたはRS1からなる群より選択される1個もしくは複数の置換基でそれぞれ置換されていてもよいフェニル、ナフチルまたは5〜10員ヘテロアリールであり、RS1はC1〜C6アルキルであり、RaおよびRbはそれぞれ独立してHまたはRS2であり、RS2はC1〜C6アルキルであり; RS1およびRS2はそれぞれ、ハロ、OH、C1〜C6アルコキシル、アミノ、モノ-C1〜C6アルキルアミノおよびジ-C1〜C6アルキルアミノからなる群より選択される1個もしくは複数の置換基で置換されていてもよい。
【００２６】
例えば、Ar1はフェニル、1-ナフチル、2-ナフチル、2-フラニル、2-チアゾリル、2-ピリジル、3-ピリジル、4-ピリジル、2-キノリニル、3-キノリニル、4-キノリニル、2-クロロフェニル、3-クロロフェニル、4-クロロフェニル、2-フルオロフェニル、3-フルオロフェニル、4-フルオロフェニル、2-トリフルオロメチルフェニル、3-トリフルオロメチルフェニル、4-トリフルオロメチルフェニル、2-シアノフェニル、3-シアノフェニル、4-シアノフェニル、3-カルボキシメチルフェニル、2-メトキシフェニル、3-メトキシフェニル、4-メトキシフェニル、2,3-ジクロロフェニル、2,4-ジクロロフェニル、2,5-ジクロロフェニル、3,4-ジクロロフェニル、3,5-ジクロロフェニル、2,3-ジフルオロフェニル、2,4-ジフルオロフェニル、2,5-ジフルオロフェニル、3,4-ジフルオロフェニル、3,5-ジフルオロフェニル、2,3-ジメトキシフェニル、2,4-ジメトキシフェニル、2,5-ジメトキシフェニル、3,4-ジメトキシフェニル、3,5-ジメトキシフェニル、2-クロロ-6-フルオロフェニル、3-クロロ-4-フルオロフェニル、2-クロロ-4-フルオロフェニル、4-クロロ-3-フルオロフェニル、3-クロロ-2-フルオロフェニル、2-クロロ-5-フルオロフェニル、4-クロロ-2-フルオロフェニルおよび5-クロロ-2-フルオロフェニルより選択される。
【００２７】
一態様では、前記腫瘍細胞はASPHを発現する。
【００２８】
特定の態様では、前記細胞増殖性障害は膵がん、肝細胞がん、胆管がん、肺がん、結腸がん、乳がん、前立腺がんおよび神経膠芽細胞腫を含む。
【００２９】
一態様では、前記化合物は静脈内投与、経口投与または皮下投与される。
【００３０】
一態様では、前記化合物は0.01〜50ミリグラム/体重1キログラムの用量で投与される。
【００３１】
別の局面では、本開示は、式Iaの化合物、またはその塩、エステル、代謝産物、プロドラッグもしくは溶媒和物を特徴とする:
0006469009.tif 000004
式中、
Ar1は置換もしくは非置換のC6〜C20アリールまたは5〜20員ヘテロアリールであり;
XはC(O)、C(S)またはS(O)2であり;
XがCOである場合、W1は単結合、O、CR50R51またはNR52であり、XがSO2である場合、W1は単結合、CR50R51またはNR52であり;
R50、R51、R52およびR53はそれぞれ独立して水素、置換もしくは非置換のC1〜C6アルキル、置換もしくは非置換のC2〜C6アルケニル、置換もしくは非置換のC2〜C6アルキニル、置換もしくは非置換のC6〜C20アリール、置換もしくは非置換のC7〜C26アリールアルキル、置換もしくは非置換の5〜20員ヘテロアリール、および置換もしくは非置換の6〜26員ヘテロアリールアルキルからなる群より選択されるが、但し、Ar1が4-クロロフェニルである場合、R53はメチルまたは非置換フェニルではない。
【００３２】
式Iaの化合物は以下の1つもしくは複数の特徴を適宜有しうる。
【００３３】
例えば、本化合物は式IIaの化合物、またはその塩、エステル、代謝産物、プロドラッグもしくは溶媒和物である:
0006469009.tif 000005
式中、
Ar1およびAr2はそれぞれ独立して非置換C6〜C14アリール、非置換5〜14員ヘテロアリール、または、ハロ、CN、NO2、NO、N3、ORa、NRaRb、C(O)Ra、C(O)ORa、C(O)NRaRb、NRbC(O)Ra、-S(O)bRa、-S(O)bNRaRbまたはRS1からなる群より選択される1個もしくは複数の置換基でそれぞれ置換されたC6〜C14アリールもしくは5〜14員ヘテロアリールであり、RS1はC1〜C6アルキル、C2〜C6アルケニル、C2〜C6アルキニル、C3〜C8シクロアルキル、C6〜C10アリール、5員もしくは6員ヘテロアリール、または4〜12員ヘテロシクロアルキルであり、bは0、1または2であり、RaおよびRbはそれぞれ独立してHまたはRS2であり、RS2はC1〜C6アルキル、C2〜C6アルケニル、C2〜C6アルキニル、C3〜C8シクロアルキル、C6〜C10アリール、4〜12員ヘテロシクロアルキル、または5員もしくは6員ヘテロアリールであり; RS1およびRS2はそれぞれ、ハロ、OH、オキソ、C(O)OH、C(O)O-C1〜C6アルキル、CN、C1〜C6アルキル、C1〜C6アルコキシル、アミノ、モノ-C1〜C6アルキルアミノ、ジ-C1〜C6アルキルアミノ、C3〜C8シクロアルキル、C6〜C10アリール、4〜12員ヘテロシクロアルキル、および5員もしくは6員ヘテロアリールからなる群より選択される1個もしくは複数の置換基で置換されていてもよい。
【００３４】
例えば、R53は非置換C1〜C6アルキル、または、ハロ、OH、CNおよびアミノより選択される1個もしくは複数の置換基で置換されたC1〜C6アルキルである。
【００３５】
例えば、XはS(O)2であり、W1はCR50R51である。
【００３６】
例えば、XはS(O)2であり、W1は単結合である。
【００３７】
例えば、XはC(O)であり、W1はOであり、あるいは、XはC(S)であり、W1はNR52である。
【００３８】
例えば、R50、R51およびR52はそれぞれ独立してH、非置換C1〜C6アルキル、または、ハロ、OH、CNおよびアミノより選択される1個もしくは複数の置換基で置換されたC1〜C6アルキルである。
【００３９】
例えば、Ar1およびAr2はそれぞれ独立して、ハロ、CN、NO2、NO、N3、ORa、NRaRb、C(O)Ra、C(O)ORa、C(O)NRaRb、NRbC(O)Ra、-S(O)bRa、-S(O)bNRaRbまたはRS1からなる群より選択される1個もしくは複数の置換基でそれぞれ置換されていてもよいフェニル、ナフチルまたは5〜10員ヘテロアリールであり、RS1はC1〜C6アルキル、C2〜C6アルケニル、C2〜C6アルキニル、C3〜C8シクロアルキル、C6〜C10アリール、5員もしくは6員ヘテロアリール、または4〜12員ヘテロシクロアルキルであり、bは0、1または2であり、RaおよびRbはそれぞれ独立してHまたはRS2であり、RS2はC1〜C6アルキル、C2〜C6アルケニル、C2〜C6アルキニル、C3〜C8シクロアルキル、C6〜C10アリール、4〜12員ヘテロシクロアルキル、または5員もしくは6員ヘテロアリールであり; RS1およびRS2はそれぞれ、ハロ、OH、オキソ、C(O)OH、C(O)O-C1〜C6アルキル、CN、C1〜C6アルキル、C1〜C6アルコキシル、アミノ、モノ-C1〜C6アルキルアミノ、ジ-C1〜C6アルキルアミノ、C3〜C8シクロアルキル、C6〜C10アリール、4〜12員ヘテロシクロアルキル、および5員もしくは6員ヘテロアリールからなる群より選択される1個もしくは複数の置換基で置換されていてもよい。
【００４０】
例えば、Ar1およびAr2はそれぞれ独立して、ハロ、CN、NO2、NO、N3、ORa、NRaRb、C(O)Ra、C(O)ORaまたはRS1からなる群より選択される1個もしくは複数の置換基でそれぞれ置換されていてもよいフェニル、ナフチルまたは5〜10員ヘテロアリールであり、RS1はC1〜C6アルキルであり、RaおよびRbはそれぞれ独立してHまたはRS2であり、RS2はC1〜C6アルキルであり; RS1およびRS2はそれぞれ、ハロ、OH、C1〜C6アルコキシル、アミノ、モノ-C1〜C6アルキルアミノおよびジ-C1〜C6アルキルアミノからなる群より選択される1個もしくは複数の置換基で置換されていてもよい。
【００４１】
例えば、Ar1およびAr2はそれぞれ独立してフェニル、1-ナフチル、2-ナフチル、2-フラニル、2-チアゾリル、2-ピリジル、3-ピリジル、4-ピリジル、2-キノリニル、3-キノリニル、4-キノリニル、2-クロロフェニル、3-クロロフェニル、4-クロロフェニル、2-フルオロフェニル、3-フルオロフェニル、4-フルオロフェニル、2-トリフルオロメチルフェニル、3-トリフルオロメチルフェニル、4-トリフルオロメチルフェニル、2-シアノフェニル、3-シアノフェニル、4-シアノフェニル、3-カルボキシメチルフェニル、2-メトキシフェニル、3-メトキシフェニル、4-メトキシフェニル、2,3-ジクロロフェニル、2,4-ジクロロフェニル、2,5-ジクロロフェニル、3,4-ジクロロフェニル、3,5-ジクロロフェニル、2,3-ジフルオロフェニル、2,4-ジフルオロフェニル、2,5-ジフルオロフェニル、3,4-ジフルオロフェニル、3,5-ジフルオロフェニル、2,3-ジメトキシフェニル、2,4-ジメトキシフェニル、2,5-ジメトキシフェニル、3,4-ジメトキシフェニル、3,5-ジメトキシフェニル、2-クロロ-6-フルオロフェニル、3-クロロ-4-フルオロフェニル、2-クロロ-4-フルオロフェニル、4-クロロ-3-フルオロフェニル、3-クロロ-2-フルオロフェニル、2-クロロ-5-フルオロフェニル、4-クロロ-2-フルオロフェニルおよび5-クロロ-2-フルオロフェニルより選択される。
【００４２】
本開示はまた、薬学的に許容される担体と、式IaもしくはIIaの化合物、またはその塩、エステル、代謝産物、プロドラッグもしくは溶媒和物とを含む、薬学的組成物を提供する。
【００４３】
さらに別の局面では、本発明は、XがS(O)2であり、W1がCR50R51である、式IIaの化合物を生成する方法を特徴とする。本方法は、式IIaの化合物を生成するために好適な条件下で、式(IIIa)のアミン化合物:
0006469009.tif 000006
(IIIa)
と、式ClSO2(CR50R51)Ar2のスルホニルクロリドとを接触させる工程を含む。
【００４４】
細胞増殖性障害を処置または予防するための方法であって、それを必要とする対象に治療上効率的な量の式IaもしくはIbの化合物などの本明細書に記載の化合物、または本明細書に記載のその塩、エステル、代謝産物、プロドラッグもしくは溶媒和物を投与する段階を含む方法も、本開示において提供される。一態様では、本化合物は、本明細書に記載の式IIaの化合物、またはその塩、エステル、代謝産物、プロドラッグもしくは溶媒和物である。別の態様では、本化合物は、本明細書に記載の式Ibの化合物、またはその塩、エステル、代謝産物、プロドラッグもしくは溶媒和物であり、R53は非置換C1〜C6アルキル、または、ハロ、OH、CNおよびアミノより選択される1個もしくは複数の置換基で置換されたC1〜C6アルキルである。
【００４５】
複数の態様では、本方法は、腫瘍量、腫瘍体積または腫瘍重量を未処置腫瘍または未処置患者に比べて少なくとも10%、20%、50%、2倍、5倍、10倍またはそれ以上減少させる。いくつかの場合では、腫瘍は完全に根絶される。同様に、本化合物は転移を、例えば腫瘍細胞の遊走または浸潤を阻害することで、例えば未処置腫瘍、または未処置患者における腫瘍細胞転移に比べて少なくとも10%、20%、50%、2倍、5倍、10倍阻害する。
【００４６】
小分子阻害剤は、がんなどの細胞増殖性疾患の処置を必要とする対象に、0.1〜100マイクロモルで変動する血中濃度に該化合物が到達するために十分な量で投与される。本化合物は標準的レジメンを使用して例えば毎日、隔日、3日ごと、5日ごとまたは7日ごとに投与される。本化合物は静脈内投与、経口投与または皮下投与される。上記の血中レベルに到達するために与えられる量は0.01〜50ミリグラム/体重1キログラムの範囲である。本組成物および方法は、別の形態のがん処置、例えば他の化学療法薬、放射線および手術を受け、かつ/または転移性疾患と診断されたかもしくは転移を発生させる危険性のある対象を含む、がんに罹患していると診断された対象の処置に好適である。哺乳動物は、任意の哺乳動物、例えばヒト、霊長類、マウス、ラット、イヌ、ネコ、ウマ、ならびに食物消費用に育てられる家畜または動物、例えばウシ、ヒツジ、ブタ、ニワトリおよびヤギでありうる。好ましい態様では、哺乳動物はヒトである。
【００４７】
がんの処置における腫瘍細胞の増殖、遊走、浸潤または転移の減少における使用のための医薬の製造のための、本発明のASPH阻害化合物の使用も記載される。
【００４８】
さらに別の局面では、本開示は、EGF様ドメインペプチドと検出可能に標識されたα-ケトグルタル酸およびASPH酵素とを接触させかつβ-ヒドロキシラーゼ活性を測定することによりASPH活性を決定する方法を提供する。一態様では、前記α-ケトグルタル酸は14C標識されており、β-ヒドロキシラーゼ活性は遊離14CO2を検出することで測定される。一態様では、前記遊離14CO2はフィルター上に捕捉され、放射能定量される。一態様では、本方法は、前記ASPH酵素と候補化合物とを接触させる段階をさらに含み、該化合物の存在下でのβ-ヒドロキシラーゼ活性が該化合物の非存在下に比べて減少していることが、該化合物がASPH酵素活性を阻害することを示す。一態様では、前記EGF様ドメインはSEQ ID NO: 1のアミノ酸配列を含む。
0006469009.tif 000007
【００４９】
一態様では、前記EGF様ドメインペプチドはSEQ ID NO: 2のコンセンサス配列を含む。
0006469009.tif 000008
【００５０】
[本発明1001]
腫瘍細胞とアスパルチル(アスパラギニル)β-ヒドロキシラーゼ(ASPH)阻害化合物とを接触させる段階を含む、細胞増殖性障害の処置における腫瘍細胞の増殖、遊走、浸潤または転移を減少させる方法における使用のためのASPH阻害化合物であって、式IaもしくはIbの化合物、またはその塩、エステル、代謝産物、プロドラッグもしくは溶媒和物である、ASPH阻害化合物:
0006469009.tif 000009
式中、
Ar1は置換もしくは非置換のC6〜C20アリールまたは5〜20員ヘテロアリールであり;
XはC(O)、C(S)またはS(O)2であり;
XがCOである場合、W1は単結合、O、CR50R51またはNR52であり、XがSO2である場合、W1は単結合、CR50R51またはNR52であり; かつ、
R50、R51、R52およびR53はそれぞれ独立して水素、置換もしくは非置換のC1〜C6アルキル、置換もしくは非置換のC2〜C6アルケニル、置換もしくは非置換のC2〜C6アルキニル、置換もしくは非置換のC6〜C20アリール、置換もしくは非置換のC7〜C26アリールアルキル、置換もしくは非置換の5〜20員ヘテロアリール、および置換もしくは非置換の6〜26員ヘテロアリールアルキルからなる群より選択される。
[本発明1002]
式Iaの化合物、またはその塩、エステル、代謝産物、プロドラッグもしくは溶媒和物である、本発明1001の使用のためのASPH阻害化合物。
[本発明1003]
式IIaの化合物、またはその塩、エステル、代謝産物、プロドラッグもしくは溶媒和物である、本発明1002の使用のためのASPH阻害化合物:
0006469009.tif 000010
式中、
Ar1およびAr2はそれぞれ独立して非置換C6〜C14アリール、非置換5〜14員ヘテロアリール、または、ハロ、CN、NO2、NO、N3、ORa、NRaRb、C(O)Ra、C(O)ORa、C(O)NRaRb、NRbC(O)Ra、-S(O)bRa、-S(O)bNRaRbまたはRS1からなる群より選択される1個もしくは複数の置換基でそれぞれ置換されたC6〜C14アリールもしくは5〜14員ヘテロアリールであり、RS1はC1〜C6アルキル、C2〜C6アルケニル、C2〜C6アルキニル、C3〜C8シクロアルキル、C6〜C10アリール、5員もしくは6員ヘテロアリール、または4〜12員ヘテロシクロアルキルであり、bは0、1または2であり、RaおよびRbはそれぞれ独立してHまたはRS2であり、RS2はC1〜C6アルキル、C2〜C6アルケニル、C2〜C6アルキニル、C3〜C8シクロアルキル、C6〜C10アリール、4〜12員ヘテロシクロアルキル、または5員もしくは6員ヘテロアリールであり; RS1およびRS2はそれぞれ、ハロ、OH、オキソ、C(O)OH、C(O)O-C1〜C6アルキル、CN、C1〜C6アルキル、C1〜C6アルコキシル、アミノ、モノ-C1〜C6アルキルアミノ、ジ-C1〜C6アルキルアミノ、C3〜C8シクロアルキル、C6〜C10アリール、4〜12員ヘテロシクロアルキル、および5員もしくは6員ヘテロアリールからなる群より選択される1個もしくは複数の置換基で置換されていてもよい。
[本発明1004]
R53が非置換C1〜C6アルキル、または、ハロ、OH、CNおよびアミノより選択される1個もしくは複数の置換基で置換されたC1〜C6アルキルである、本発明1002の使用のためのASPH阻害化合物。
[本発明1005]
XがS(O)2であり、W1がCR50R51である、本発明1002〜1004のいずれかの使用のためのASPH阻害化合物。
[本発明1006]
XがS(O)2であり、W1が単結合である、本発明1002〜1004のいずれかの使用のためのASPH阻害化合物。
[本発明1007]
XがC(O)であってW1がOであるか、または、XがC(S)であってW1がNR52である、本発明1002〜1004のいずれかの使用のためのASPH阻害化合物。
[本発明1008]
R50、R51およびR52がそれぞれ独立してH、非置換C1〜C6アルキル、または、ハロ、OH、CNおよびアミノより選択される1個もしくは複数の置換基で置換されたC1〜C6アルキルである、本発明1002〜1007のいずれかの使用のためのASPH阻害化合物。
[本発明1009]
Ar1およびAr2がそれぞれ独立して、ハロ、CN、NO2、NO、N3、ORa、NRaRb、C(O)Ra、C(O)ORa、C(O)NRaRb、NRbC(O)Ra、-S(O)bRa、-S(O)bNRaRbまたはRS1からなる群より選択される1個もしくは複数の置換基でそれぞれ置換されていてもよいフェニル、ナフチルまたは5〜10員ヘテロアリールであり、RS1がC1〜C6アルキル、C2〜C6アルケニル、C2〜C6アルキニル、C3〜C8シクロアルキル、C6〜C10アリール、5員もしくは6員ヘテロアリール、または4〜12員ヘテロシクロアルキルであり、bが0、1または2であり、RaおよびRbがそれぞれ独立してHまたはRS2であり、RS2がC1〜C6アルキル、C2〜C6アルケニル、C2〜C6アルキニル、C3〜C8シクロアルキル、C6〜C10アリール、4〜12員ヘテロシクロアルキル、または5員もしくは6員ヘテロアリールであり; RS1およびRS2がそれぞれ、ハロ、OH、オキソ、C(O)OH、C(O)O-C1〜C6アルキル、CN、C1〜C6アルキル、C1〜C6アルコキシル、アミノ、モノ-C1〜C6アルキルアミノ、ジ-C1〜C6アルキルアミノ、C3〜C8シクロアルキル、C6〜C10アリール、4〜12員ヘテロシクロアルキル、および5員もしくは6員ヘテロアリールからなる群より選択される1個もしくは複数の置換基で置換されていてもよい、本発明1002〜1008のいずれかの使用のためのASPH阻害化合物。
[本発明1010]
Ar1およびAr2がそれぞれ独立して、ハロ、CN、NO2、NO、N3、ORa、NRaRb、C(O)Ra、C(O)ORaまたはRS1からなる群より選択される1個もしくは複数の置換基でそれぞれ置換されていてもよいフェニル、ナフチルまたは5〜10員ヘテロアリールであり、RS1がC1〜C6アルキルであり、RaおよびRbがそれぞれ独立してHまたはRS2であり、RS2がC1〜C6アルキルであり; RS1およびRS2がそれぞれ、ハロ、OH、C1〜C6アルコキシル、アミノ、モノ-C1〜C6アルキルアミノおよびジ-C1〜C6アルキルアミノからなる群より選択される1個もしくは複数の置換基で置換されていてもよい、本発明1009の使用のためのASPH阻害化合物。
[本発明1011]
Ar1およびAr2がそれぞれ独立してフェニル、1-ナフチル、2-ナフチル、2-フラニル、2-チアゾリル、2-ピリジル、3-ピリジル、4-ピリジル、2-キノリニル、3-キノリニル、4-キノリニル、2-クロロフェニル、3-クロロフェニル、4-クロロフェニル、2-フルオロフェニル、3-フルオロフェニル、4-フルオロフェニル、2-トリフルオロメチルフェニル、3-トリフルオロメチルフェニル、4-トリフルオロメチルフェニル、2-シアノフェニル、3-シアノフェニル、4-シアノフェニル、3-カルボキシメチルフェニル、2-メトキシフェニル、3-メトキシフェニル、4-メトキシフェニル、2,3-ジクロロフェニル、2,4-ジクロロフェニル、2,5-ジクロロフェニル、3,4-ジクロロフェニル、3,5-ジクロロフェニル、2,3-ジフルオロフェニル、2,4-ジフルオロフェニル、2,5-ジフルオロフェニル、3,4-ジフルオロフェニル、3,5-ジフルオロフェニル、2,3-ジメトキシフェニル、2,4-ジメトキシフェニル、2,5-ジメトキシフェニル、3,4-ジメトキシフェニル、3,5-ジメトキシフェニル、2-クロロ-6-フルオロフェニル、3-クロロ-4-フルオロフェニル、2-クロロ-4-フルオロフェニル、4-クロロ-3-フルオロフェニル、3-クロロ-2-フルオロフェニル、2-クロロ-5-フルオロフェニル、4-クロロ-2-フルオロフェニルおよび5-クロロ-2-フルオロフェニルより選択される、本発明1009または1010の使用のためのASPH阻害化合物。
[本発明1012]
式Ibの化合物、またはその塩、エステル、代謝産物、プロドラッグもしくは溶媒和物である、本発明1001の使用のためのASPH阻害化合物。
[本発明1013]
R53が非置換C1〜C6アルキル、または、ハロ、OH、CNおよびアミノより選択される1個もしくは複数の置換基で置換されたC1〜C6アルキルである、本発明1012の使用のためのASPH阻害化合物。
[本発明1014]
R53が非置換のメチルまたはエチルである、本発明1012の使用のためのASPH阻害化合物。
[本発明1015]
XがS(O)2であり、W1がCR50R51である、本発明1012〜1014のいずれかの使用のためのASPH阻害化合物。
[本発明1016]
XがS(O)2であり、W1が単結合である、本発明1012〜1014のいずれかの使用のためのASPH阻害化合物。
[本発明1017]
XがC(O)であってW1がOであるか、または、XがC(S)であってW1がNR52である、本発明1012〜1014のいずれかの使用のためのASPH阻害化合物。
[本発明1018]
R50、R51およびR52がそれぞれ独立してH、非置換C1〜C6アルキル、または、ハロ、OH、CNおよびアミノより選択される1個もしくは複数の置換基で置換されたC1〜C6アルキルである、本発明1012〜1017のいずれかの使用のためのASPH阻害化合物。
[本発明1019]
Ar1が、ハロ、CN、NO2、NO、N3、ORa、NRaRb、C(O)Ra、C(O)ORa、C(O)NRaRb、NRbC(O)Ra、-S(O)bRa、-S(O)bNRaRbまたはRS1からなる群より選択される1個もしくは複数の置換基でそれぞれ置換されていてもよいフェニル、ナフチルまたは5〜10員ヘテロアリールであり、RS1がC1〜C6アルキル、C2〜C6アルケニル、C2〜C6アルキニル、C3〜C8シクロアルキル、C6〜C10アリール、5員もしくは6員ヘテロアリール、または4〜12員ヘテロシクロアルキルであり、bが0、1または2であり、RaおよびRbがそれぞれ独立してHまたはRS2であり、RS2がC1〜C6アルキル、C2〜C6アルケニル、C2〜C6アルキニル、C3〜C8シクロアルキル、C6〜C10アリール、4〜12員ヘテロシクロアルキル、または5員もしくは6員ヘテロアリールであり; RS1およびRS2がそれぞれ、ハロ、OH、オキソ、C(O)OH、C(O)O-C1〜C6アルキル、CN、C1〜C6アルキル、C1〜C6アルコキシル、アミノ、モノ-C1〜C6アルキルアミノ、ジ-C1〜C6アルキルアミノ、C3〜C8シクロアルキル、C6〜C10アリール、4〜12員ヘテロシクロアルキル、および5員もしくは6員ヘテロアリールからなる群より選択される1個もしくは複数の置換基で置換されていてもよい、本発明1012〜1018のいずれかの使用のためのASPH阻害化合物。
[本発明1020]
Ar1が、ハロ、CN、NO2、NO、N3、ORa、NRaRb、C(O)Ra、C(O)ORaまたはRS1からなる群より選択される1個もしくは複数の置換基でそれぞれ置換されていてもよいフェニル、ナフチルまたは5〜10員ヘテロアリールであり、RS1がC1〜C6アルキルであり、RaおよびRbがそれぞれ独立してHまたはRS2であり、RS2がC1〜C6アルキルであり; RS1およびRS2がそれぞれ、ハロ、OH、C1〜C6アルコキシル、アミノ、モノ-C1〜C6アルキルアミノおよびジ-C1〜C6アルキルアミノからなる群より選択される1個もしくは複数の置換基で置換されていてもよい、本発明1019の使用のためのASPH阻害化合物。
[本発明1021]
Ar1がフェニル、1-ナフチル、2-ナフチル、2-フラニル、2-チアゾリル、2-ピリジル、3-ピリジル、4-ピリジル、2-キノリニル、3-キノリニル、4-キノリニル、2-クロロフェニル、3-クロロフェニル、4-クロロフェニル、2-フルオロフェニル、3-フルオロフェニル、4-フルオロフェニル、2-トリフルオロメチルフェニル、3-トリフルオロメチルフェニル、4-トリフルオロメチルフェニル、2-シアノフェニル、3-シアノフェニル、4-シアノフェニル、3-カルボキシメチルフェニル、2-メトキシフェニル、3-メトキシフェニル、4-メトキシフェニル、2,3-ジクロロフェニル、2,4-ジクロロフェニル、2,5-ジクロロフェニル、3,4-ジクロロフェニル、3,5-ジクロロフェニル、2,3-ジフルオロフェニル、2,4-ジフルオロフェニル、2,5-ジフルオロフェニル、3,4-ジフルオロフェニル、3,5-ジフルオロフェニル、2,3-ジメトキシフェニル、2,4-ジメトキシフェニル、2,5-ジメトキシフェニル、3,4-ジメトキシフェニル、3,5-ジメトキシフェニル、2-クロロ-6-フルオロフェニル、3-クロロ-4-フルオロフェニル、2-クロロ-4-フルオロフェニル、4-クロロ-3-フルオロフェニル、3-クロロ-2-フルオロフェニル、2-クロロ-5-フルオロフェニル、4-クロロ-2-フルオロフェニルおよび5-クロロ-2-フルオロフェニルより選択される、本発明1019または1020の使用のためのASPH阻害化合物。
[本発明1022]
表1Aおよび表2に列挙される化合物より選択される、本発明1001の使用のためのASPH阻害化合物。
[本発明1023]
前記腫瘍細胞がASPHを発現する、本発明1001〜1022のいずれかの使用のためのASPH阻害化合物。
[本発明1024]
前記細胞増殖性障害が膵がん、肝細胞がん、胆管がん、肺がん、結腸がん、乳がん、前立腺がんおよび神経膠芽細胞腫を含む、本発明1001〜1023のいずれかの使用のためのASPH阻害化合物。
[本発明1025]
静脈内投与、経口投与または皮下投与される、本発明1001〜1024のいずれかの使用のためのASPH阻害化合物。
[本発明1026]
0.01〜50ミリグラム/体重1キログラムの用量で投与される、本発明1001〜1025のいずれかの使用のためのASPH阻害化合物。
[本発明1027]
式Iaの化合物、またはその塩、エステル、代謝産物、プロドラッグもしくは溶媒和物:
0006469009.tif 000011
式中、
Ar1は置換もしくは非置換のC6〜C20アリールまたは5〜20員ヘテロアリールであり;
XはC(O)、C(S)またはS(O)2であり;
XがCOである場合、W1は単結合、O、CR50R51もしくはNR52であり、または、XがSO2である場合、W1は単結合、CR50R51もしくはNR52であり;
R50、R51、R52およびR53はそれぞれ独立して、水素、置換もしくは非置換のC1〜C6アルキル、置換もしくは非置換のC2〜C6アルケニル、置換もしくは非置換のC2〜C6アルキニル、置換もしくは非置換のC6〜C20アリール、置換もしくは非置換のC7〜C26アリールアルキル、置換もしくは非置換の5〜20員ヘテロアリール、および置換もしくは非置換の6〜26員ヘテロアリールアルキルからなる群より選択されるが、但し、Ar1が4-クロロフェニルであり、XがC(O)であり、W1が単結合である場合、R53は非置換メチルまたは非置換フェニルではない。
[本発明1028]
式IIaの化合物、またはその塩、エステル、代謝産物、プロドラッグもしくは溶媒和物である、本発明1027の化合物:
0006469009.tif 000012
式中、
Ar1およびAr2はそれぞれ独立して非置換C6〜C14アリール、非置換5〜14員ヘテロアリール、または、ハロ、CN、NO2、NO、N3、ORa、NRaRb、C(O)Ra、C(O)ORa、C(O)NRaRb、NRbC(O)Ra、-S(O)bRa、-S(O)bNRaRbまたはRS1からなる群より選択される1個もしくは複数の置換基でそれぞれ置換されたC6〜C14アリールもしくは5〜14員ヘテロアリールであり、RS1はC1〜C6アルキル、C2〜C6アルケニル、C2〜C6アルキニル、C3〜C8シクロアルキル、C6〜C10アリール、5員もしくは6員ヘテロアリール、または4〜12員ヘテロシクロアルキルであり、bは0、1または2であり、RaおよびRbはそれぞれ独立してHまたはRS2であり、RS2はC1〜C6アルキル、C2〜C6アルケニル、C2〜C6アルキニル、C3〜C8シクロアルキル、C6〜C10アリール、4〜12員ヘテロシクロアルキル、または5員もしくは6員ヘテロアリールであり; RS1およびRS2はそれぞれ、ハロ、OH、オキソ、C(O)OH、C(O)O-C1〜C6アルキル、CN、C1〜C6アルキル、C1〜C6アルコキシル、アミノ、モノ-C1〜C6アルキルアミノ、ジ-C1〜C6アルキルアミノ、C3〜C8シクロアルキル、C6〜C10アリール、4〜12員ヘテロシクロアルキル、および5員もしくは6員ヘテロアリールからなる群より選択される1個もしくは複数の置換基で置換されていてもよい。
[本発明1029]
R53が非置換C1〜C6アルキル、または、ハロ、OH、CNおよびアミノより選択される1個もしくは複数の置換基で置換されたC1〜C6アルキルである、本発明1027の化合物。
[本発明1030]
XがS(O)2であり、W1がCR50R51である、本発明1027〜1029のいずれかの化合物。
[本発明1031]
XがS(O)2であり、W1が単結合である、本発明1027〜1029のいずれかの化合物。
[本発明1032]
XがC(O)であってW1がOであるか、または、XがC(S)であってW1がNR52である、本発明1027〜1029のいずれかの化合物。
[本発明1033]
R50、R51およびR52がそれぞれ独立してH、非置換C1〜C6アルキル、または、ハロ、OH、CNおよびアミノより選択される1個もしくは複数の置換基で置換されたC1〜C6アルキルである、本発明1027〜1032のいずれかの化合物。
[本発明1034]
Ar1およびAr2がそれぞれ独立して、ハロ、CN、NO2、NO、N3、ORa、NRaRb、C(O)Ra、C(O)ORa、C(O)NRaRb、NRbC(O)Ra、-S(O)bRa、-S(O)bNRaRbまたはRS1からなる群より選択される1個もしくは複数の置換基でそれぞれ置換されていてもよいフェニル、ナフチルまたは5〜10員ヘテロアリールであり、RS1がC1〜C6アルキル、C2〜C6アルケニル、C2〜C6アルキニル、C3〜C8シクロアルキル、C6〜C10アリール、5員もしくは6員ヘテロアリール、または4〜12員ヘテロシクロアルキルであり、bが0、1または2であり、RaおよびRbがそれぞれ独立してHまたはRS2であり、RS2がC1〜C6アルキル、C2〜C6アルケニル、C2〜C6アルキニル、C3〜C8シクロアルキル、C6〜C10アリール、4〜12員ヘテロシクロアルキル、または5員もしくは6員ヘテロアリールであり; RS1およびRS2がそれぞれ、ハロ、OH、オキソ、C(O)OH、C(O)O-C1〜C6アルキル、CN、C1〜C6アルキル、C1〜C6アルコキシル、アミノ、モノ-C1〜C6アルキルアミノ、ジ-C1〜C6アルキルアミノ、C3〜C8シクロアルキル、C6〜C10アリール、4〜12員ヘテロシクロアルキル、および5員もしくは6員ヘテロアリールからなる群より選択される1個もしくは複数の置換基で置換されていてもよい、本発明1027〜1033のいずれかの化合物。
[本発明1035]
Ar1およびAr2がそれぞれ独立して、ハロ、CN、NO2、NO、N3、ORa、NRaRb、C(O)Ra、C(O)ORaまたはRS1からなる群より選択される1個もしくは複数の置換基でそれぞれ置換されていてもよいフェニル、ナフチルまたは5〜10員ヘテロアリールであり、RS1がC1〜C6アルキルであり、RaおよびRbがそれぞれ独立してHまたはRS2であり、RS2がC1〜C6アルキルであり; RS1およびRS2がそれぞれ、ハロ、OH、C1〜C6アルコキシル、アミノ、モノ-C1〜C6アルキルアミノおよびジ-C1〜C6アルキルアミノからなる群より選択される1個もしくは複数の置換基で置換されていてもよい、本発明1034の化合物。
[本発明1036]
Ar1およびAr2がそれぞれ独立してフェニル、1-ナフチル、2-ナフチル、2-フラニル、2-チアゾリル、2-ピリジル、3-ピリジル、4-ピリジル、2-キノリニル、3-キノリニル、4-キノリニル、2-クロロフェニル、3-クロロフェニル、4-クロロフェニル、2-フルオロフェニル、3-フルオロフェニル、4-フルオロフェニル、2-トリフルオロメチルフェニル、3-トリフルオロメチルフェニル、4-トリフルオロメチルフェニル、2-シアノフェニル、3-シアノフェニル、4-シアノフェニル、3-カルボキシメチルフェニル、2-メトキシフェニル、3-メトキシフェニル、4-メトキシフェニル、2,3-ジクロロフェニル、2,4-ジクロロフェニル、2,5-ジクロロフェニル、3,4-ジクロロフェニル、3,5-ジクロロフェニル、2,3-ジフルオロフェニル、2,4-ジフルオロフェニル、2,5-ジフルオロフェニル、3,4-ジフルオロフェニル、3,5-ジフルオロフェニル、2,3-ジメトキシフェニル、2,4-ジメトキシフェニル、2,5-ジメトキシフェニル、3,4-ジメトキシフェニル、3,5-ジメトキシフェニル、2-クロロ-6-フルオロフェニル、3-クロロ-4-フルオロフェニル、2-クロロ-4-フルオロフェニル、4-クロロ-3-フルオロフェニル、3-クロロ-2-フルオロフェニル、2-クロロ-5-フルオロフェニル、4-クロロ-2-フルオロフェニルおよび5-クロロ-2-フルオロフェニルより選択される、本発明1034または1035の化合物。
[本発明1037]
表1Aより選択される、本発明1027の化合物。
[本発明1038]
薬学的に許容される担体と、本発明1027〜1037のいずれかの化合物、またはその塩、エステル、代謝産物、プロドラッグもしくは溶媒和物とを含む、薬学的組成物。
[本発明1039]
本発明1030の化合物の製造に好適な条件下で、式(IIIa)のアミン化合物:
0006469009.tif 000013
(IIIa)
と、式ClSO2(CR50R51)Ar2のスルホニルクロリドとを接触させる工程
を含む、本発明1030の化合物を製造する方法。
[本発明1040]
細胞増殖性障害を処置または予防するための方法であって、それを必要とする対象に治療上効率的な量の式IaもしくはIbの化合物、またはその塩、エステル、代謝産物、プロドラッグもしくは溶媒和物を投与する段階を含む方法:
0006469009.tif 000014
式中、
Ar1は置換もしくは非置換のC6〜C20アリールまたは5〜20員ヘテロアリールであり;
XはC(O)、C(S)またはS(O)2であり;
XがCOである場合、W1は単結合、O、CR50R51またはNR52であり、XがSO2である場合、W1は単結合、CR50R51またはNR52であり;
R50、R51、R52およびR53はそれぞれ独立して水素、置換もしくは非置換のC1〜C6アルキル、置換もしくは非置換のC2〜C6アルケニル、置換もしくは非置換のC2〜C6アルキニル、置換もしくは非置換のC6〜C20アリール、置換もしくは非置換のC7〜C26アリールアルキル、置換もしくは非置換の5〜20員ヘテロアリール、および置換もしくは非置換の6〜26員ヘテロアリールアルキルからなる群より選択される。
[本発明1041]
化合物が式IIaの化合物、またはその塩、エステル、代謝産物、プロドラッグもしくは溶媒和物である、本発明1040の方法:
0006469009.tif 000015
式中、
Ar1およびAr2はそれぞれ独立して非置換C6〜C14アリール、非置換5〜14員ヘテロアリール、または、ハロ、CN、NO2、NO、N3、ORa、NRaRb、C(O)Ra、C(O)ORa、C(O)NRaRb、NRbC(O)Ra、-S(O)bRa、-S(O)bNRaRbまたはRS1からなる群より選択される1個もしくは複数の置換基でそれぞれ置換されたC6〜C14アリールもしくは5〜14員ヘテロアリールであり、RS1はC1〜C6アルキル、C2〜C6アルケニル、C2〜C6アルキニル、C3〜C8シクロアルキル、C6〜C10アリール、5員もしくは6員ヘテロアリール、または4〜12員ヘテロシクロアルキルであり、bは0、1または2であり、RaおよびRbはそれぞれ独立してHまたはRS2であり、RS2はC1〜C6アルキル、C2〜C6アルケニル、C2〜C6アルキニル、C3〜C8シクロアルキル、C6〜C10アリール、4〜12員ヘテロシクロアルキル、または5員もしくは6員ヘテロアリールであり; RS1およびRS2はそれぞれ、ハロ、OH、オキソ、C(O)OH、C(O)O-C1〜C6アルキル、CN、C1〜C6アルキル、C1〜C6アルコキシル、アミノ、モノ-C1〜C6アルキルアミノ、ジ-C1〜C6アルキルアミノ、C3〜C8シクロアルキル、C6〜C10アリール、4〜12員ヘテロシクロアルキル、および5員もしくは6員ヘテロアリールからなる群より選択される1個もしくは複数の置換基で置換されていてもよい。
[本発明1042]
化合物が式Ibの化合物、またはその塩、エステル、代謝産物、プロドラッグもしくは溶媒和物である、本発明1040の方法。
[本発明1043]
R53が非置換C1〜C6アルキル、または、ハロ、OH、CNおよびアミノより選択される1個もしくは複数の置換基で置換されたC1〜C6アルキルである、本発明1042の方法。
[本発明1044]
ASPH活性を決定し、EGF様ドメインペプチドと検出可能に標識されたα-ケトグルタル酸およびASPH酵素とを接触させ、β-ヒドロキシラーゼ活性を測定する、方法。
[本発明1045]
前記α-ケトグルタル酸が14C標識されており、β-ヒドロキシラーゼ活性が遊離14CO2を検出することで測定される、本発明1044の方法。
[本発明1046]
前記遊離14CO2がフィルター上に捕捉され、放射能定量される、本発明1045の方法。
[本発明1047]
前記ASPH酵素と候補化合物とを接触させる段階をさらに含み、該化合物の存在下でのβ-ヒドロキシラーゼ活性が該化合物の非存在下に比べて減少していることが、該化合物がASPH酵素活性を阻害することを示す、本発明1044の方法。
[本発明1048]
前記EGF様ドメインがアミノ酸配列
0006469009.tif 000016
を含む、本発明1044の方法。
[本発明1049]
前記EGF様ドメインペプチドがコンセンサス配列
0006469009.tif 000017
を含む、本発明1044の方法。
本発明の他の特徴および利点は、その好ましい態様に関する下記の説明、および特許請求の範囲から明らかであろう。本明細書において引用されるすべての参考文献は参照により組み入れられる。
【図面の簡単な説明】
【００５１】
【図１】図1A〜Dは顕微鏡写真、図1Eは棒グラフであり、膵がん、正常膵臓および膵神経内分泌腫瘍におけるASPH発現を示す。(A)はmAb RC-50による40倍での、(B)は400倍でのPCにおけるASPH発現を表す。(C)は40倍、(D)は400倍での正常膵臓におけるASPH発現の欠如を示す。(E)はASPH免疫反応性を示す。
【図２】図2A〜Dは、RC-50 mAbを使用して免疫組織化学染色(HIS)によってヒトHCC腫瘍におけるASPH発現を示す顕微鏡写真である。すべてでなくとも大部分の腫瘍細胞がASPHタンパク質を高度に発現することに注目されたい。(A)正常肝臓 (B、CおよびD)ヒトHCC腫瘍。
【図３】図3Aは、PC細胞溶解液に由来するASPHが触媒する生化学反応の図である。図3Bは、PC細胞および腫瘍におけるASPH活性を定量するための読み取りを示す略画である。図3Cは、捕捉フィルターを蛍光面に16時間曝露した後に蛍光イメージャーによって得られた膜の画像である。図3Dは、Image Jソフトウェアによって計算されてDMSO対照と比較された強度を示す棒グラフである。縦棒は標準偏差を表す。これらの図は、ASPH触媒活性に関連する測定方法およびデータを示す。
【図４】図4Aは、腫瘍体積を示す線グラフであり、図4Bは腫瘍重量を示す棒グラフである。データは、化合物310｛8cまたはMO-I-1100｝の抗腫瘍効果、およびヒト膵HPAFII細胞系で開始したPC腫瘍成長を示す。各群はヌードマウス15匹とした。腹腔内注射(20mg/kg/マウス)。縦棒; 標準偏差。
【図５】図5A〜Bは、代謝活性(A)および増殖(B)に対する化合物310｛8cまたはMO-I-1100｝の効果を示す線グラフである。図5Cは、生存率(C)に対する前記阻害剤の効果を示す棒グラフである。ASPH発現を欠くNIH 3T3細胞が化合物310｛8cまたはMO-I-1100｝の抗腫瘍活性に耐性があったことに注目されたい。
【図６】図6Aは写真、図6Bは棒グラフであり、FOCUS HCC細胞によって生じたコロニー形成(悪性度の指標)が化合物310｛8cまたはMO-I-1100｝5μMでの処置によって著しく阻害されたことを示す。
【図７】図7Aは蛍光イメージャーによって得られた膜の画像、図7Bは棒グラフであり、図3A〜Dに記載のハイスループットアッセイを使用して化合物405｛5cまたはMO-I-500｝および化合物310｛8cまたはMO-I-1100｝がいずれもASPH酵素活性(β-ヒドロキシラーゼ)を阻害することを示す。
【図８】図8A〜Bは棒グラフ、図8Cは写真、図8Dは棒グラフであり、細胞の代謝(A)、増殖(B)およびコロニー形成(C、D)に対する化合物405｛5cまたはMO-I-500｝の効果を示す。FOCUS HCC細胞(ASPHを発現する)およびNIH-3T3細胞(ASPHを発現しない)の成長がいずれも阻害されたことに注目されたい。これにより、化合物405｛5cまたはMO-I-500｝が1.25μMでFOCUS細胞のコロニー形成を著しく阻害するがASPHに特異的ではないことが示される。
【図９】図9Aは写真、図9B〜Cは棒グラフであり、FOCUS HCC細胞の化合物310｛8cまたはMO-I-1100｝処理によって、軟寒天中のコロニー形成の数(A、B)およびサイズ(A、C)が減少し、したがって悪性形質転換の確実な指標としての足場非依存性細胞成長が減少することを示す。
【図１０】図10Aは写真、図10B〜Cは棒グラフであり、足場非依存性細胞成長に対する化合物405｛5cまたはMO-I-500｝のインビボ効果を示す。化合物405｛5cまたはMO-I-500｝0.5、1および5μMでの処理後のFOCUS細胞コロニーの数およびサイズの著しい減少に注目されたい。
【図１１】図11A〜Dは、FOCUS HCC細胞の細胞遊走および細胞浸潤に対する化合物310｛8cまたはMO-I-1100｝の効果を示す棒グラフである。この化合物がこのヒト肝がん細胞系の遊走性(A)および浸潤性(D)を著しく阻害したことに注目されたい。
【図１２】図12A〜Bは、ヒトHCC細胞系(FOCUS)における細胞運動性および細胞浸潤性に対するASPH阻害剤化合物405｛5cまたはMO-I-500｝および化合物310｛8cまたはMO-I-1100｝のインビトロ効果を示す棒グラフである。
【図１３】図13Aは写真、図13Bは線グラフであり、免疫不全マウス皮下異種移植モデルを使用して化合物310｛8cまたはMO-I-1100｝処置がインビボでヒト肝がんのサイズおよび成長を著しく減少させることを示す。
【発明を実施するための形態】
【００５２】
用語および定義
以下は、本明細書および特許請求の範囲を通じて使用される略語および用語ならびにそれらの定義のリストである。
【００５３】
一般的略語およびそれらの対応する意味としては以下が挙げられる: aaまたはAA=アミノ酸; mg=ミリグラム; mlまたはmL=ミリリットル; mm=ミリメートル; mM=ミリモル; nmol=ナノモル; pmol=ピコモル; ppm=百万分率; RT=室温; U=単位; ug、μg=マイクログラム; ul、μl=マイクロリットル; uM、μM=マイクロモル、TEA=トリエチルアミン、LDA=リチウムジイソプロピルアミン、THF=テトラヒドロフラン、DMAP=4-ジメチルアミノピリジン、DMF=N,N'-ジメチルホルムアミド。
【００５４】
包括的であるように意図されている「細胞」という用語は、細胞の均一もしくは不均一な集団を含む細胞系中で、または組織試料中で、または昆虫幼虫もしくはトランスジェニック哺乳動物などの生物の一部として、単離状態または培養状態で存在しうる、1個もしくは複数の細胞を意味する。
【００５５】
「アミノ酸」という用語は、別途指定されない限り、天然アミノ酸および非天然アミノ酸の両方を包含する。
【００５６】
「有効量」という用語は、統計的に有意な効果を生じる当該物質の量を意味する。例えば、治療用途での「有効量」とは、臨床的に有意な変化を測定可能に実現するために必要な、本明細書の有効化合物を含む組成物の量のことである。そのような有効量は日常的な最適化技術を使用して決定され、処置される特定の状態、患者の状況、投与経路に依存するものであり、本発明の化合物の必要投与量は、処置群と対照群との間の統計的に有意な差を誘導する投与量として示される。
【００５７】
「治療有効量」とは、所望の治療結果を実現するために必要な剤形および期間において有効な量を意味する。モジュレーターの治療有効量は、個人の疾患状態、年齢、性別および体重、ならびに個人において所望の応答を誘発するモジュレーターの能力などの要因に応じて変動しうる。最適な治療応答を与えるように投与レジメンを調整することができる。治療有効量は、モジュレーターの任意の毒性効果または有害効果を治療的に有利な効果が上回る量でもある。
【００５８】
「予防有効量」とは、所望の予防結果を実現するために必要な剤形および期間において有効な量を意味する。予防有効量は、治療有効量について先に記載したように決定することができる。通常、予防量が疾患初期の前または疾患初期に対象において使用されることから、予防有効量は治療有効量よりも少ない。
【００５９】
本明細書において使用される「細胞増殖性障害」という用語は、がん性であることもあればそうでないこともある望まれない状態または疾患の発生を、細胞の未制御成長もしくは異常成長またはその両方が導きうる状態を意味する。本発明の化合物で処置可能な細胞増殖性障害の例は、細胞分裂が調節解除される種々の状態を包含する。細胞増殖性障害の例としては新生物、良性腫瘍、悪性腫瘍、前がん状態、上皮内腫瘍、被包性腫瘍、転移性腫瘍、液性腫瘍、固形腫瘍、免疫腫瘍、血液腫瘍、がん、癌腫、白血病、リンパ腫、肉腫および急速に分裂する細胞が挙げられるがそれに限定されない。本明細書において使用される「急速に分裂する細胞」という用語は、同一組織中の隣接するまたは並置される細胞の間で予想または観察される速度を超えるまたは上回る速度で分裂する任意の細胞として定義される。細胞増殖性障害は前がんまたは前がん状態を含む。細胞増殖性障害はがんを含む。本明細書において提供される方法および使用は、がんの症状を処置もしくは軽減するために、またはそのような目的に好適な候補を同定するために使用することができるかまたは使用してもよい。「がん」という用語は固形腫瘍、ならびに血液腫瘍および/または悪性腫瘍を含む。「前がん細胞」または「前がん性細胞」とは、前がんまたは前がん状態である細胞増殖性障害を現す細胞のことである。「がん細胞」または「がん性細胞」とは、がんである細胞増殖性障害を現す細胞のことである。がん細胞または前がん性細胞を同定するために任意の再現可能な測定手段を使用することができる。がん細胞または前がん性細胞は組織試料(例えば生検試料)の組織学的な分類または類別によって同定することができる。がん細胞または前がん性細胞は適切な分子マーカーの使用を通じて同定することができる。
【００６０】
本明細書において使用される「処置する」または「処置」は、疾患、状態または障害と戦うための患者の管理およびケアを表すものであり、疾患、状態または障害の症状または合併症を軽減するための、あるいは疾患、状態または障害を除去するための、本発明の化合物、または薬学的に許容されるその塩、プロドラッグ、代謝産物、多形もしくは溶媒和物の投与を含む。また、「処置」という用語はインビトロでの細胞の処理、または動物モデルの処置を含みうる。
【００６１】
本発明の化合物、または薬学的に許容されるその塩、プロドラッグ、代謝産物、多形もしくは溶媒和物は、関連性のある疾患、状態もしくは障害を予防するために使用するかまたはそのような目的に好適な候補を同定するために使用することができるかまたはそうしてもよい。本明細書において使用される「予防する」、「予防」または「に対して保護する」は、そのような疾患、状態もしくは障害の症状または合併症の発症を減少させることまたは除去することを表す。
【００６２】
本明細書において使用される「軽減」という用語は、障害の徴候または症状の重症度がそれによって減少する過程を表すように意図される。重要なことに、徴候または症状は除去されることなく軽減されることがある。本発明の薬学的組成物の投与は徴候または症状の除去を導くことができるかまたは導くことがあるが、除去は必須ではない。有効投与量は、徴候または症状の重症度を減少させることが期待されるはずである。例えば、複数の場所において生じうるがんなどの障害は、がんの重症度が複数の場所のうち少なくとも1つの場所内で減少する際に、軽減される。
【００６３】
本明細書において使用される「対象」は「それを必要とする対象」と互換的であり、いずれも、細胞増殖障害を有する対象、または集団全体に比べてそのような障害を発生させる危険性が増大している対象を意味する。「対象」は哺乳動物を含む。哺乳動物は例えばヒトまたは適切な非ヒト哺乳動物、例えば霊長類、マウス、ラット、イヌ、ネコ、ウシ、ウマ、ヤギ、ラクダ、ヒツジまたはブタでありうる。また、対象はトリまたは家禽でありうる。一態様では、哺乳動物はヒトである。それを必要とする対象は、がんまたは前がん状態を有すると既に診断または同定された対象でありうる。また、それを必要とする対象は、がんまたは前がん状態を有する(例えばそれに罹患している)対象でありうる。あるいは、それを必要とする対象は、集団全体に比べてそのような障害を発生させる危険性が増大している対象(すなわち、集団全体に比べてそのような障害を発生させやすい対象)でありうる。それを必要とする対象は前がん状態を有しうる。「動物」という用語はヒトを含む。
【００６４】
「置換されていてもよい」部分という用語は、非置換の化学部分(例えばアルキル、アリール、ヘテロアリールなど)、または炭化水素骨格の1個もしくは複数の炭素上の1個もしくは複数の水素原子を置き換える指定の置換基を有する化学部分を意味する。そのような置換基としてはアルキル、アルケニル、アルキニル、ハロゲン、ヒドロキシル、アルキルカルボニルオキシ、アリールカルボニルオキシ、アルコキシカルボニルオキシ、アリールオキシカルボニルオキシ、カルボキシレート、アルキルカルボニル、アリールカルボニル、アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、アルキルアミノカルボニル、ジアルキルアミノカルボニル、アルキルチオカルボニル、アルコキシル、ホスフェート、ホスホナト、ホスフィナト、アミノ(アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノおよびアルキルアリールアミノを含む)、アシルアミノ(アルキルカルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノ、カルバモイルおよびウレイドを含む)、アミジノ、イミノ、スルフヒドリル、アルキルチオ、アリールチオ、チオカルボキシレート、スルフェート、アルキルスルフィニル、スルホナト、スルファモイル、スルホンアミド、ニトロ、トリフルオロメチル、シアノ、アジド、ヘテロシクリル、アルキルアリール、または芳香族部分もしくはヘテロ芳香族部分を例えば挙げることができる。
【００６５】
「置換アリールまたはヘテロアリール」という用語は、-OH、SH、-CN、-F、-Cl、-Br、-R、-NO2、-NO、-NH2、-NHR、-NRR、-C(O)R、-C(O)OH、-C(O)OR、-C(O)NH2、-C(O)NHR、-C(O)NRRなどの1個もしくは複数の置換基を含有しうる芳香環または芳香族複素環を意味し、各Rは独立して(C1〜C5)アルキル、置換(C1〜C6)アルキル、(C2〜C6)アルケニル、置換(C2〜C6)アルケニル、(C2〜C6)アルキニル、置換(C2〜C6)アルキニル、(C5〜C20)アリール、置換(C5〜C20)アリール、(C6〜C26)アリールアルキル、置換(C6〜C26)アリールアルキル、5〜20員ヘテロアリール、置換5〜20員ヘテロアリール、6〜26員ヘテロアリールアルキルまたは置換6〜26員ヘテロアリールアルキルである。
【００６６】
「アリールアルキル」または「アラルキル」部分とは、アリールで置換されたアルキル(例えばフェニルメチル(ベンジル))のことである。「アルキルアリール」部分とは、アルキルで置換されたアリール(例えばメチルフェニル)のことである。
【００６７】
化合物X(例えばペプチドまたはアミノ酸)の「誘導体」とは、該化合物上の1個もしくは複数の反応性基が置換基で誘導体化されたXの形態を意味する。ペプチド誘導体は、アミノ酸側鎖、ペプチド骨格、またはアミノ末端もしくはカルボキシ末端が誘導体化されたペプチド(例えば5個のメチル化アミド結合を有するペプチド化合物)を含む。
【００６８】
化合物Xの「類似体」とは、Xの機能活性に必要なXの化学構造を保持しているが、Xとは異なる特定の化学構造も含有する、化合物を意味する。天然ペプチドの類似体とは、1個もしくは複数の非天然アミノ酸を含むペプチドのことである。
【００６９】
「模倣体」という用語は、別の公知化合物またはその公知化合物の特定の断片と同様の機能特性および/または構造特性を有する化合物を意味する。化合物Xの「模倣体」とは、Xの機能活性に必要なXの化学構造が、Xの立体配座を模倣する他の化学構造で置き換えられた、化合物を意味する。模倣体、特にペプチド模倣体という用語はアイソスターを含むように意図されている。
【００７０】
本明細書において使用される「環状基」という用語は、約3〜10個、好ましくは約4〜8個、より好ましくは約5〜7個の炭素原子を有する環状飽和基または不飽和(すなわち芳香族)基を含むように意図されている。環状基の例としてはシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルおよびシクロオクチルが挙げられる。環状基は非置換でもよく、1つもしくは複数の環位置において置換されていてもよい。したがって、環状基はハロゲン、アルキル、シクロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、複素環、ヒドロキシル、アミノ、ニトロ、チオール、アミン、イミン、アミド、ホスホネート、ホスフィン、カルボニル、カルボキシル、シリル、エーテル、チオエーテル、スルホニル、スルホネート、セレノエーテル、ケトン、アルデヒド、エステル、'CF3、'CNなどで置換されていてもよい。
【００７１】
「複素環基」という用語は、約3〜10個、好ましくは約4〜8個、より好ましくは約5〜7個の炭素原子を有する環状飽和基または環状不飽和(すなわち芳香族)基であって、環構造が約1〜4個のヘテロ原子を含む基を含むように意図されている。複素環基としてはピロリジン、オキソラン、チオラン、イミダゾール、オキサゾール、ピペリジン、ピペラジン、モルホリンおよびピリジンが挙げられる。複素環は1つもしくは複数の位置において例えばハロゲン、アルキル、シクロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、他の複素環、ヒドロキシル、アミノ、ニトロ、チオール、アミン、イミン、アミド、ホスホネート、ホスフィン、カルボニル、カルボキシル、シリル、エーテル、チオエーテル、スルホニル、セレノエーテル、ケトン、アルデヒド、エステル、CF3、CNなどの置換基で置換されていてもよい。複素環は下記の他の環状基に架橋または縮合していてもよい。
【００７２】
「アリール」は、少なくとも1個の芳香環を有する「共役系」または多環系を含み、かつ環構造中にヘテロ原子を含有しない、芳香族性を有する基を含む。例としてはフェニル、ベンジル、1,2,3,4-テトラヒドロナフタレニルなどが挙げられる。
【００７３】
「ヘテロアリール」基は、環構造中に1〜4個のヘテロ原子を有することを除けば上記定義の通りであるアリール基であり、「アリール複素環」または「ヘテロ芳香族」と呼ばれることもある。本明細書において使用される「ヘテロアリール」という用語は、炭素原子と窒素、酸素および硫黄からなる群より独立して選択される1個もしくは複数のヘテロ原子、例えば1個または1〜2個または1〜3個または1〜4個または1〜5個または1〜6個のヘテロ原子、あるいは例えば1個、2個、3個、4個、5個または6個のヘテロ原子とからなる、安定な5員、6員または7員の単環式芳香族複素環、あるいは7員、8員、9員、10員、11員または12員の二環式芳香族複素環を含むように意図されている。窒素原子は置換されていても置換されていなくてもよい(すなわちNまたはNRであり、ここでRはHまたは定義される他の置換基である)。窒素および硫黄ヘテロ原子は酸化されていてもよい(すなわち、N→OおよびS(O)p、ここでp=1または2)。芳香族複素環中のSおよびO原子の総数が1を超えないことに注目すべきである。
【００７４】
ヘテロアリール基の例としてはピロール、フラン、チオフェン、チアゾール、イソチアゾール、イミダゾール、トリアゾール、テトラゾール、ピラゾール、オキサゾール、イソキサゾール、ピリジン、ピラジン、ピリダジン、ピリミジンなどが挙げられる。
【００７５】
さらに、「アリール」および「ヘテロアリール」という用語は、多環式アリール基およびヘテロアリール基、例えば三環式、二環式、例えばナフタレン、ベンゾオキサゾール、ベンゾジオキサゾール、ベンゾチアゾール、ベンゾイミダゾール、ベンゾチオフェン、メチレンジオキシフェニル、キノリン、イソキノリン、ナフチリジン、インドール、ベンゾフラン、プリン、ベンゾフラン、デアザプリン、インドリジンを含む。
【００７６】
多環式複素環の場合、1個の環だけ芳香族であればよいが(例えば2,3-ジヒドロインドール)、すべての環が芳香族であってもよい(例えばキノリン)。第2の環は縮合または架橋していてもよい。
【００７７】
シクロアルキル環、ヘテロシクロアルキル環、アリール環またはヘテロアリール環は1つもしくは複数の環位置(例えば環を形成する炭素原子またはNなどのヘテロ原子)において上記の置換基、例えばアルキル、アルケニル、アルキニル、ハロゲン、ヒドロキシル、アルコキシ、アルキルカルボニルオキシ、アリールカルボニルオキシ、アルコキシカルボニルオキシ、アリールオキシカルボニルオキシ、カルボキシレート、アルキルカルボニル、アルキルアミノカルボニル、アラルキルアミノカルボニル、アルケニルアミノカルボニル、アルキルカルボニル、アリールカルボニル、アラルキルカルボニル、アルケニルカルボニル、アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、アルキルチオカルボニル、ホスフェート、ホスホナト、ホスフィナト、アミノ(アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノおよびアルキルアリールアミノを含む)、アシルアミノ(アルキルカルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノ、カルバモイルおよびウレイドを含む)、アミジノ、イミノ、スルフヒドリル、アルキルチオ、アリールチオ、チオカルボキシレート、スルフェート、アルキルスルフィニル、スルホナト、スルファモイル、スルホンアミド、ニトロ、トリフルオロメチル、シアノ、アジド、ヘテロシクリル、アルキルアリール、または芳香族部分もしくはヘテロ芳香族部分で置換されていてもよい。多環式系(例えばテトラリン、メチレンジオキシフェニル)を形成するように、アリール基およびヘテロアリール基と芳香族ではない脂環式環または複素環とを縮合または架橋させてもよい。
【００７８】
本明細書において使用される「多環式基」という用語は、2個以上の炭素が2個の隣接する環に共通している、例えば環が「縮合環」である、2個以上の飽和または不飽和(すなわち芳香族)環式環を意味するように意図されている。非隣接原子を通じて連結している環を「架橋」環と呼ぶ。多環式基の各環は上記の置換基、例えばハロゲン、アルキル、シクロアルキル、アルケニル、アルキニル、ヒドロキシル、アミノ、ニトロ、チオール、アミン、イミン、アミド、ホスホネート、ホスフィン、カルボニル、カルボキシル、シリル、エーテル、チオエーテル、スルホニル、セレノエーテル、ケトン、アルデヒド、エステル、CF3、CNなどで置換されていてもよい。
【００７９】
本明細書において使用される「調節基」および「修飾基」という用語は、ペプチド構造に直接的または間接的に結合する化学基を表すように互換的に使用される。例えば、調節基は共有結合性カップリングによってペプチド構造に直接的に結合しうるし、あるいは、調節基は安定な非共有結合性会合によって間接的に結合しうる。
【００８０】
本明細書に記載の化合物は、該化合物それ自体、ならびにそれらの塩、それらの溶媒和物およびそれらのプロドラッグを適宜含む。例えば、塩は置換ベンゼン化合物上でアニオンと正に帯電した基(例えばアミノ)との間で形成されうる。好適なアニオンとしては塩化物イオン、臭化物イオン、ヨウ化物イオン、硫酸イオン、硫酸水素イオン、スルファミン酸イオン、硝酸イオン、リン酸イオン、クエン酸イオン、メタンスルホン酸イオン、トリフルオロ酢酸イオン、グルタミン酸イオン、グルクロン酸イオン、グルタル酸イオン、リンゴ酸イオン、マレイン酸イオン、コハク酸イオン、フマル酸イオン、酒石酸イオン、トシル酸イオン、サリチル酸イオン、乳酸イオン、ナフタレンスルホン酸イオンおよび酢酸イオン(例えばトリフルオロ酢酸イオン)が挙げられる。「薬学的に許容されるアニオン」という用語は、薬学的に許容される塩を形成するために好適なアニオンを意味する。同様に、塩は置換ベンゼン化合物上でカチオンと負に帯電した基(例えばカルボキシレート)との間でも形成されうる。好適なカチオンとしてはナトリウムイオン、カリウムイオン、マグネシウムイオン、カルシウムイオン、およびテトラメチルアンモニウムイオンなどのアンモニウムカチオンが挙げられる。また、置換ベンゼン化合物は、第四級窒素原子を含有する塩を含む。
【００８１】
プロドラッグの例としては、対象への投与時に有効置換ベンゼン化合物を提供可能なエステルおよび他の薬学的に許容される誘導体が挙げられる。
【００８２】
さらに、本発明の化合物、例えば本化合物の塩は、水和形態もしくは非水和(無水)形態で、または他の溶媒分子との溶媒和物として存在しうる。水和物の非限定的な例としては一水和物、二水和物などが挙げられる。溶媒和物の非限定的な例としてはエタノール溶媒和物、アセトン溶媒和物などが挙げられる。
【００８３】
「溶媒和物」とは、化学量論的量または非化学量論的量の溶媒を含有する溶媒付加体を意味する。いくつかの化合物は、固定されたモル比の溶媒分子を結晶性固体中に捕捉することで溶媒和物を形成する傾向を有する。溶媒が水である場合、形成される溶媒和物は水和物であり、溶媒がアルコールである場合、形成される溶媒和物はアルコール和物である。水和物は、1個もしくは複数の水分子と、水がその分子状態をH2Oとしてその中で保持する物質の1個の分子との組み合わせによって形成される。
【００８４】
本明細書においては、本化合物の構造式はいくつかの場合において便宜上特定の異性体を表すが、本発明は幾何異性体、不斉炭素に基づく光学異性体、立体異性体、互変異性体などのすべての異性体を含むものであり、すべての異性体が同一レベルの活性を有するわけではないことがあることが理解されよう。さらに、その式で表される化合物には結晶多形が存在しうる。あらゆる結晶形、結晶形混合物、またはその無水物もしくは水和物が本発明の範囲に含まれることに注目されたい。さらに、インビボでの本化合物の分解によって産生されるいわゆる代謝産物が本発明の範囲に含まれる。
【００８５】
「互変異性体」は、平衡状態で存在しかつ1つの異性体から別の異性体に容易に変換される、2つ以上の構造異性体のうちの1つである。この変換により、隣接する共役二重結合の切り替えを伴う水素原子のホルマール移動が生じる。互変異性体は溶液中の一組の互変異性体の混合物として存在する。互変異性化が可能な溶液中で、互変異性体の化学平衡に到達される。互変異性体の正確な比率は、温度、溶媒およびpHを含むいくつかの要因に依存する。互変異性化により相互変換可能な互変異性体の概念を互変異性と呼ぶ。
【００８６】
ありうる様々な種類の互変異性のうち2つが一般的に観察される。ケト-エノール互変異性では電子および水素原子の同時移動が生じる。グルコースが示すように、環鎖互変異性は、糖鎖分子中のアルデヒド基(-CHO)が同一分子中の1個のヒドロキシ基(-OH)と反応することで該分子が環状(環形)形態になる結果として生じる。
【００８７】
一般的な互変異性体の対は以下の通りである: 複素環中(例えばグアニン、チミンおよびシトシンなどの核酸塩基中)のケトン-エノール、アミド-ニトリル、ラクタム-ラクチム、アミド-イミド酸互変異性、イミン-エナミンならびにエナミン-エナミン。ケトン-エノール互変異性の一例は以下に示す通りである。
0006469009.tif 000018
【００８８】
小分子とは、質量が2000ダルトン未満の化合物のことである。小分子の分子量は好ましくは1000ダルトン未満、より好ましくは600ダルトン未満であり、例えば該化合物は500ダルトン、400ダルトン、300ダルトン、200ダルトンまたは100ダルトン未満である。
【００８９】
「含む(comprising)」という移行語は、「含む(including)」、「含有する」または「特徴とする」と同義であり、包括的または開放的であり、さらなる列挙されない要素または方法段階を排除しない。対照的に、「からなる」という移行句は、請求項において指定されない任意の要素、段階または成分を排除する。「から本質的になる」という移行句は、ある請求項の範囲を、指定される材料または段階、および特許請求される発明の「基本的でかつ新規の特徴に実質的に影響しない材料または段階」に限定する。
【００９０】
小分子阻害剤、ポリヌクレオチド、ポリペプチドまたは他の作用物質などの化合物は精製および/または単離される。精製化合物は対象となる化合物の少なくとも60重量%(乾燥重量)である。好ましくは、調製物は対象となる化合物の少なくとも75重量%、より好ましくは少なくとも90重量%、最も好ましくは少なくとも99重量%である。例えば、精製化合物は所望の化合物の少なくとも90重量%、91重量%、92重量%、93重量%、94重量%、95重量%、98重量%、99重量%または100重量%(w/w)である化合物である。純度は任意の適切な標準的方法、例えばカラムクロマトグラフィー、薄層クロマトグラフィーまたは高速液体クロマトグラフィー(HPLC)分析によって測定される。精製もしくは単離されたポリヌクレオチド(リボ核酸(RNA)またはデオキシリボ核酸(DNA))は、天然状態でそれに隣接する遺伝子または配列を含まない。「単離された」もしくは「精製された」核酸分子、ポリヌクレオチド、ポリペプチドまたはタンパク質は、他の細胞材料を実質的に含まず、あるいは、組換え技術によって生成された場合には培地を実質的に含まず、あるいは、化学合成された場合には化学前駆体または他の化学物質を実質的に含まない。また、「精製された」は、ヒト対象への投与に安全な無菌度、例えば感染因子または毒性因子が存在しない無菌度を規定する。
【００９１】
詳細な説明
ASPH(別名AAH)は、α-ケトグルタル酸依存性ジオキシゲナーゼファミリー酵素のメンバーである。ASPHは予測分子量約86kDを有し、Notchなどの特定の受容体タンパク質のEGF様ドメイン中での特定のAsp(アスパラギン酸)残基およびAsn(アスパラギン)残基のヒドロキシル化を触媒する。ASPHの過剰発現が、肝細胞がん、胆管細胞がん、膵がん、前立腺がん、乳がん、神経膠芽細胞腫、肺がんおよび結腸がんを含む広範な悪性新生物において観察された。
【００９２】
しかし、ASPHは、胎盤の栄養膜細胞を増殖させることを除けば、正常成人組織において低度のまたは無視できる発現を示す。ヒトHCC細胞系では、ASPHはNotchシグナル伝達カスケードの上方制御および活性化を通じて腫瘍細胞の運動性および浸潤性を促進する。実際、ASPHの過剰発現はHCC患者の予後不良因子となることが報告されており、早期疾患再発および生存率減少を予知するものである。特に結腸がんでは、手術成績不良と、この疾患の予後不良を示す独立した危険因子と考えられるASPH発現との間に著しい関連が存在する。高ASPH発現を伴う別の腫瘍は膵がん(PC)であり、PCは米国におけるがん死因の第4位であり、5年生存率は5〜6%である。PCは、大部分の治療法に対して抵抗性のある非常に侵攻性の腫瘍である。PCの病因分子を確定し、より有効な処置戦略を開発することが必要である。ASPHが媒介するシグナル伝達経路が、発がん中にPCの成長および転移に関与する。PC発病におけるASPH過剰発現の役割に関するこの驚くべき発見は、ASPHが治療上の分子標的であること、およびこの種類のがんにおけるASPHの阻害が臨床上の利点を導くことを示している。
【００９３】
したがって、一局面では、本発明は、腫瘍細胞とアスパルチル(アスパラギニル)β-ヒドロキシラーゼ(ASPH)阻害化合物とを接触させる段階を含む、細胞増殖性障害の処置における腫瘍細胞の増殖、遊走、浸潤または転移を減少させる方法における使用のためのASPH阻害化合物であって、式IaもしくはIbの化合物、またはその塩、エステル、代謝産物、プロドラッグもしくは溶媒和物である、ASPH阻害化合物を特徴とする:
0006469009.tif 000019
式中、
Ar1は置換もしくは非置換のC6〜C20アリールまたは5〜20員ヘテロアリールであり;
XはC(O)、C(S)またはS(O)2であり;
XがCOである場合、W1は単結合、O、CR50R51またはNR52であり、XがSO2である場合、W1は単結合、CR50R51またはNR52であり;
R50、R51、R52およびR53はそれぞれ独立して水素、置換もしくは非置換のC1〜C6アルキル、置換もしくは非置換のC2〜C6アルケニル、置換もしくは非置換のC2〜C6アルキニル、置換もしくは非置換のC6〜C20アリール、置換もしくは非置換のC7〜C26アリールアルキル、置換もしくは非置換の5〜20員ヘテロアリール、および置換もしくは非置換の6〜26員ヘテロアリールアルキルからなる群より選択される。
【００９４】
一態様では、前記使用のための化合物は、式Iaの化合物、またはその塩、エステル、代謝産物、プロドラッグもしくは溶媒和物である。式Iaの化合物は以下の1つもしくは複数の特徴を適宜有しうる。
【００９５】
例えば、本化合物は式IIaの化合物、またはその塩、エステル、代謝産物、プロドラッグもしくは溶媒和物である:
0006469009.tif 000020
式中、
Ar1およびAr2はそれぞれ独立して非置換C6〜C14アリール、非置換5〜14員ヘテロアリール、または、ハロ、CN、NO2、NO、N3、ORa、NRaRb、C(O)Ra、C(O)ORa、C(O)NRaRb、NRbC(O)Ra、-S(O)bRa、-S(O)bNRaRbまたはRS1からなる群より選択される1個もしくは複数の置換基でそれぞれ置換されたC6〜C14アリールもしくは5〜14員ヘテロアリールであり、RS1はC1〜C6アルキル、C2〜C6アルケニル、C2〜C6アルキニル、C3〜C8シクロアルキル、C6〜C10アリール、5員もしくは6員ヘテロアリール、または4〜12員ヘテロシクロアルキルであり、bは0、1または2であり、RaおよびRbはそれぞれ独立してHまたはRS2であり、RS2はC1〜C6アルキル、C2〜C6アルケニル、C2〜C6アルキニル、C3〜C8シクロアルキル、C6〜C10アリール、4〜12員ヘテロシクロアルキル、または5員もしくは6員ヘテロアリールであり; RS1およびRS2はそれぞれ、ハロ、OH、オキソ、C(O)OH、C(O)O-C1〜C6アルキル、CN、C1〜C6アルキル、C1〜C6アルコキシル、アミノ、モノ-C1〜C6アルキルアミノ、ジ-C1〜C6アルキルアミノ、C3〜C8シクロアルキル、C6〜C10アリール、4〜12員ヘテロシクロアルキル、および5員もしくは6員ヘテロアリールからなる群より選択される1個もしくは複数の置換基で置換されていてもよい。
【００９６】
例えば、R53は非置換C1〜C6アルキル、または、ハロ、OH、CNおよびアミノより選択される1個もしくは複数の置換基で置換されたC1〜C6アルキルである。
【００９７】
例えば、XはS(O)2であり、W1はCR50R51である。
【００９８】
例えば、XはS(O)2であり、W1は単結合である。
【００９９】
例えば、XはC(O)であり、W1はOであり、あるいは、XはC(S)であり、W1はNR52である。
【０１００】
例えば、R50、R51およびR52はそれぞれ独立してH、非置換C1〜C6アルキル、または、ハロ、OH、CNおよびアミノより選択される1個もしくは複数の置換基で置換されたC1〜C6アルキルである。
【０１０１】
例えば、Ar1およびAr2はそれぞれ独立して、ハロ、CN、NO2、NO、N3、ORa、NRaRb、C(O)Ra、C(O)ORa、C(O)NRaRb、NRbC(O)Ra、-S(O)bRa、-S(O)bNRaRbまたはRS1からなる群より選択される1個もしくは複数の置換基でそれぞれ置換されていてもよいフェニル、ナフチルまたは5〜10員ヘテロアリールであり、RS1はC1〜C6アルキル、C2〜C6アルケニル、C2〜C6アルキニル、C3〜C8シクロアルキル、C6〜C10アリール、5員もしくは6員ヘテロアリール、または4〜12員ヘテロシクロアルキルであり、bは0、1または2であり、RaおよびRbはそれぞれ独立してHまたはRS2であり、RS2はC1〜C6アルキル、C2〜C6アルケニル、C2〜C6アルキニル、C3〜C8シクロアルキル、C6〜C10アリール、4〜12員ヘテロシクロアルキル、または5員もしくは6員ヘテロアリールであり; RS1およびRS2はそれぞれ、ハロ、OH、オキソ、C(O)OH、C(O)O-C1〜C6アルキル、CN、C1〜C6アルキル、C1〜C6アルコキシル、アミノ、モノ-C1〜C6アルキルアミノ、ジ-C1〜C6アルキルアミノ、C3〜C8シクロアルキル、C6〜C10アリール、4〜12員ヘテロシクロアルキル、および5員もしくは6員ヘテロアリールからなる群より選択される1個もしくは複数の置換基で置換されていてもよい。
【０１０２】
例えば、Ar1およびAr2はそれぞれ独立して、ハロ、CN、NO2、NO、N3、ORa、NRaRb、C(O)Ra、C(O)ORaまたはRS1からなる群より選択される1個もしくは複数の置換基でそれぞれ置換されていてもよいフェニル、ナフチルまたは5〜10員ヘテロアリールであり、RS1はC1〜C6アルキルであり、RaおよびRbはそれぞれ独立してHまたはRS2であり、RS2はC1〜C6アルキルであり; RS1およびRS2はそれぞれ、ハロ、OH、C1〜C6アルコキシル、アミノ、モノ-C1〜C6アルキルアミノおよびジ-C1〜C6アルキルアミノからなる群より選択される1個もしくは複数の置換基で置換されていてもよい。
【０１０３】
例えば、Ar1およびAr2はそれぞれ独立してフェニル、1-ナフチル、2-ナフチル、2-フラニル、2-チアゾリル、2-ピリジル、3-ピリジル、4-ピリジル、2-キノリニル、3-キノリニル、4-キノリニル、2-クロロフェニル、3-クロロフェニル、4-クロロフェニル、2-フルオロフェニル、3-フルオロフェニル、4-フルオロフェニル、2-トリフルオロメチルフェニル、3-トリフルオロメチルフェニル、4-トリフルオロメチルフェニル、2-シアノフェニル、3-シアノフェニル、4-シアノフェニル、3-カルボキシメチルフェニル、2-メトキシフェニル、3-メトキシフェニル、4-メトキシフェニル、2,3-ジクロロフェニル、2,4-ジクロロフェニル、2,5-ジクロロフェニル、3,4-ジクロロフェニル、3,5-ジクロロフェニル、2,3-ジフルオロフェニル、2,4-ジフルオロフェニル、2,5-ジフルオロフェニル、3,4-ジフルオロフェニル、3,5-ジフルオロフェニル、2,3-ジメトキシフェニル、2,4-ジメトキシフェニル、2,5-ジメトキシフェニル、3,4-ジメトキシフェニル、3,5-ジメトキシフェニル、2-クロロ-6-フルオロフェニル、3-クロロ-4-フルオロフェニル、2-クロロ-4-フルオロフェニル、4-クロロ-3-フルオロフェニル、3-クロロ-2-フルオロフェニル、2-クロロ-5-フルオロフェニル、4-クロロ-2-フルオロフェニルおよび5-クロロ-2-フルオロフェニルより選択される。
【０１０４】
別の態様では、前記使用のための化合物は、式Ibの化合物、またはその塩、エステル、代謝産物、プロドラッグもしくは溶媒和物である。式Ibの化合物は以下の1つもしくは複数の特徴を適宜有しうる。
【０１０５】
例えば、R53は非置換C1〜C6アルキル、または、ハロ、OH、CNおよびアミノより選択される1個もしくは複数の置換基で置換されたC1〜C6アルキルである。
【０１０６】
例えば、R53は非置換のメチルまたはエチルである。
【０１０７】
例えば、XはS(O)2であり、W1はCR50R51である。
【０１０８】
例えば、XはS(O)2であり、W1は単結合である。
【０１０９】
例えば、XはC(O)であり、W1はOであり、あるいは、XはC(S)であり、W1はNR52である。
【０１１０】
例えば、R50、R51およびR52はそれぞれ独立してH、非置換C1〜C6アルキル、または、ハロ、OH、CNおよびアミノより選択される1個もしくは複数の置換基で置換されたC1〜C6アルキルである。
【０１１１】
例えば、Ar1は、ハロ、CN、NO2、NO、N3、ORa、NRaRb、C(O)Ra、C(O)ORa、C(O)NRaRb、NRbC(O)Ra、-S(O)bRa、-S(O)bNRaRbまたはRS1からなる群より選択される1個もしくは複数の置換基でそれぞれ置換されていてもよいフェニル、ナフチルまたは5〜10員ヘテロアリールであり、RS1はC1〜C6アルキル、C2〜C6アルケニル、C2〜C6アルキニル、C3〜C8シクロアルキル、C6〜C10アリール、5員もしくは6員ヘテロアリール、または4〜12員ヘテロシクロアルキルであり、bは0、1または2であり、RaおよびRbはそれぞれ独立してHまたはRS2であり、RS2はC1〜C6アルキル、C2〜C6アルケニル、C2〜C6アルキニル、C3〜C8シクロアルキル、C6〜C10アリール、4〜12員ヘテロシクロアルキル、または5員もしくは6員ヘテロアリールであり; RS1およびRS2はそれぞれ、ハロ、OH、オキソ、C(O)OH、C(O)O-C1〜C6アルキル、CN、C1〜C6アルキル、C1〜C6アルコキシル、アミノ、モノ-C1〜C6アルキルアミノ、ジ-C1〜C6アルキルアミノ、C3〜C8シクロアルキル、C6〜C10アリール、4〜12員ヘテロシクロアルキル、および5員もしくは6員ヘテロアリールからなる群より選択される1個もしくは複数の置換基で置換されていてもよい。
【０１１２】
例えば、Ar1は、ハロ、CN、NO2、NO、N3、ORa、NRaRb、C(O)Ra、C(O)ORaまたはRS1からなる群より選択される1個もしくは複数の置換基でそれぞれ置換されていてもよいフェニル、ナフチルまたは5〜10員ヘテロアリールであり、RS1はC1〜C6アルキルであり、RaおよびRbはそれぞれ独立してHまたはRS2であり、RS2はC1〜C6アルキルであり; RS1およびRS2はそれぞれ、ハロ、OH、C1〜C6アルコキシル、アミノ、モノ-C1〜C6アルキルアミノおよびジ-C1〜C6アルキルアミノからなる群より選択される1個もしくは複数の置換基で置換されていてもよい。
【０１１３】
例えば、Ar1はフェニル、1-ナフチル、2-ナフチル、2-フラニル、2-チアゾリル、2-ピリジル、3-ピリジル、4-ピリジル、2-キノリニル、3-キノリニル、4-キノリニル、2-クロロフェニル、3-クロロフェニル、4-クロロフェニル、2-フルオロフェニル、3-フルオロフェニル、4-フルオロフェニル、2-トリフルオロメチルフェニル、3-トリフルオロメチルフェニル、4-トリフルオロメチルフェニル、2-シアノフェニル、3-シアノフェニル、4-シアノフェニル、3-カルボキシメチルフェニル、2-メトキシフェニル、3-メトキシフェニル、4-メトキシフェニル、2,3-ジクロロフェニル、2,4-ジクロロフェニル、2,5-ジクロロフェニル、3,4-ジクロロフェニル、3,5-ジクロロフェニル、2,3-ジフルオロフェニル、2,4-ジフルオロフェニル、2,5-ジフルオロフェニル、3,4-ジフルオロフェニル、3,5-ジフルオロフェニル、2,3-ジメトキシフェニル、2,4-ジメトキシフェニル、2,5-ジメトキシフェニル、3,4-ジメトキシフェニル、3,5-ジメトキシフェニル、2-クロロ-6-フルオロフェニル、3-クロロ-4-フルオロフェニル、2-クロロ-4-フルオロフェニル、4-クロロ-3-フルオロフェニル、3-クロロ-2-フルオロフェニル、2-クロロ-5-フルオロフェニル、4-クロロ-2-フルオロフェニルおよび5-クロロ-2-フルオロフェニルより選択される。
【０１１４】
一態様では、前記腫瘍細胞はASPHを発現する。
【０１１５】
特定の態様では、前記細胞増殖性障害は膵がん、肝細胞がん、胆管がん、肺がん、結腸がん、乳がん、前立腺がんおよび神経膠芽細胞腫を含む。
【０１１６】
一態様では、前記化合物は静脈内投与、経口投与または皮下投与される。
【０１１７】
一態様では、前記化合物は0.01〜50ミリグラム/体重1キログラムの用量で投与される。
【０１１８】
ASPHは、肝細胞がん(HCC)中に高度に保存されている細胞表面タンパク質である。肝臓および膵臓はいずれも早期前駆細胞型に由来しており、ASPHは胎児組織中で発現されるが成人組織中では発現されない。図1A〜Eに示すように、ASPH再発現がヒトPC組織マイクロアレイ中で免疫組織化学染色(IHS)によって観察された。細胞表面でのASPHの高レベル局在が膵管腺がん104件中101件(97%)に存在し、正常膵臓および他の成人ヒト組織中での発現は無視できるものであった。ASPHはHCCおよびPCにおける細胞の遊走、浸潤および転移を強化する。ASPHによるNotchシグナル伝達の活性化は、この高度に侵攻性かつ悪性の表現型が発生する原因である最終エフェクター機構である。
【０１１９】
細胞標的としてのASPHの生物特性
ASPHの制御、発現および機能が多くの腫瘍において観察され(米国特許第6,835,370号; 第7,094,556号; 第6,812,206号; 第6,815,415号; 第6,797,696号; 第6,783,758号; および米国特許出願公開第2005-0123545号; 参照により本明細書に組み入れられる)、ASPHは膵管腺がん(PC)において過剰発現されることがわかっており、このことはASPHがPC処置の治療標的であることを示している。ASPHは、細胞成長、細胞分化、細胞遊走、細胞接着および細胞運動性に関与するNotchおよびJagged(JAG)などのタンパク質に存在する上皮成長因子(EGF)様ドメイン中の特定のアスパラギン酸残基およびアスパラギニル残基のβ-炭素の翻訳後ヒドロキシル化を触媒する。触媒活性はC末端に存在し、675His残基によって与えられるものであり、アラニンへの変異はASPHの酵素活性および形質転換活性を無効にする。ASPHは、肝臓、膵臓、結腸および肺などの内胚葉に由来する腫瘍中で過剰発現され、小胞体(ER)から、ASPHが細胞外環境に到達可能になる細胞膜まで転位置される。ASPHは正常ヒト組織中で無視できる〜非常に低い発現を示すが、浸潤性組織である胎盤が注目すべき例外であり、そこではASPHの発現は強固である。
【０１２０】
化合物は、ASPHヒドロキシラーゼ活性を阻害するために腫瘍部位に直接投与されるか、または全身投与される。
【０１２１】
ヒトASPHのcDNA配列（SEQ ID NO:3）
0006469009.tif 000021
(SEQ ID NO:3; GENBANKアクセッション番号S83325; 開始メチオニンをコードするコドンを強調)。
【０１２２】
ヒトASPHのアミノ酸配列（SEQ ID NO:4）
0006469009.tif 000022
(SEQ ID NO:4; GENBANKアクセッション番号S83325; Hisモチーフを強調; 触媒ドメイン内の保存配列を太字で明示)
【０１２３】
また、腫瘍成長を阻害する方法としては、NOTCHポリペプチドのHAAHヒドロキシル化を阻害する化合物を投与することが挙げられる。例えば、その化合物はNOTCHポリペプチド中のEGF様システインリッチ反復配列、例えば、コンセンサス配列
0006469009.tif 000023
を含む反復配列のヒドロキシル化を阻害する。EGF様システインリッチ反復配列を含むポリペプチドは、内在性NOTCHのヒドロキシル化を遮断するために投与される。
【０１２４】
ASPHは、おそらくは細胞パターン形成および臓器発達のために細胞の運動性および遊走を促進するよう、胚形成中に多くの臓器中で発現され、その発現は成人においては「遮断され」、悪性表現型の発生にその機能が必要であるのであろう発がん中のみに再出現する。ASPHは細胞増殖中には過剰発現されないようであるが、膵上皮内病変(PanIN)の異型腺管細胞中、ならびにB型肝炎(HBV)およびC型肝炎(HCV)に感染した肝臓中の異型肝細胞中では低レベルの発現が存在する。ASPHの転写制御は、IN/IGF1/IRS1/MAPK/ERK、IN/IGF1/IRS1/PI3K/AKT、およびWNT/β-カテニンの三つのシグナル伝達経路によって実現される。ASPHの転写後制御は、分子のN末端領域に位置するGSK-3β関連モチーフのリン酸化によって媒介される。ASPHがそのエフェクター機能をそれによって発揮する1つの機構は、細胞の遊走および浸潤を促進するために下流のNotchシグナル伝達を活性化することによる機構である。
【０１２５】
表1は、様々なヒト腫瘍中でそれぞれIHSおよびqRT-PCRによって決定されたタンパク質レベルおよびRNAレベルでのASPHの過剰発現を詳述するものであり、ASPHが予後不良を示す種々のヒト固形悪性腫瘍の治療標的であることを示している。図1および図2は、IHSによるASPHタンパク質発現の例を示す。
【０１２６】
（表１）ヒト腫瘍中でのASPH発現
IHSおよびqRT-PCRによるヒト腫瘍中のASPH発現の正常組織中との比較
0006469009.tif 000024
【０１２７】
ASPH β-ヒドロキシラーゼ活性の発がん性役割
ASPHのC末端は触媒部位のアミノ酸(AA)配列(M670HPGFH675)を含み、その配列はヒト、ラット、マウスおよびウシにおいて同一である。H675AAは、Fe2+配位に特異的に関与しており、ニワトリおよびハエにおいてやはり高度に保存されるASPHの酵素活性に決定的に重要である。H675R変異はβ-ヒドロキシラーゼ活性を野生型タンパク質の1%未満に減少させ、一方、H675Dはそれを20%に減少させる。これに関連して、H675R変異体タンパク質は、軟寒天中の細胞の増殖、運動性、遊走、浸潤、コロニー形成、ならびにヌードマウス中の転移および腫瘍形成を促進する能力を「野生型」配列に比べて損失させるものであり、内在性「野生型」タンパク質の機能を阻害するドミナントネガティブ変異体としても機能しうる。これらの発見は、β-ヒドロキシラーゼ活性の阻害が抗腫瘍効果を促進することを示す。触媒部位領域の結晶構造が解明されており、公共のデータベースにおいて入手可能である(RCSBタンパク質データベース; コード3RCQ)。抗腫瘍薬としての使用のための小分子阻害剤が、ASPHの触媒部位領域に適合しかつASPH酵素活性を阻害するそれらの能力によって同定された。
【０１２８】
ASPH酵素活性の小分子阻害剤(SMI)の生成
本発明の化合物は、市販の出発原料、文献公知の化合物を使用して、または容易に調製される中間体から、当業者に公知であるかまたは本明細書の教示に照らせば当業者に明らかであろう標準的な合成方法および合成手順を使用して、種々のやり方で調製することができる。有機分子の調製ならびに官能基の変換および操作のための標準的な合成方法および合成手順は、関連する科学文献、または当分野の標準的な教科書から得ることができる。任意の1つまたはいくつかの出典に限定されるものではないが、参照により本明細書に組み入れられるSmith, M. B., March, J., March's Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structure, 5th edition, John Wiley & Sons: New York, 2001; Greene, T.W., Wuts, P.G. M., Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd edition, John Wiley & Sons: New York, 1999; R. Larock, Comprehensive Organic Transformations, VCH Publishers (1989); L. Fieser and M. Fieser, Fieser and Fieser's Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1994); およびL. Paquette, ed., Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1995)などの古典的なテキストが、当業者に公知である有機合成の有用でかつ認められた参考教科書である。合成方法に関する以下の記載は、本発明の化合物の調製のための一般的手順を説明するように設計されているが、それを限定するようには設計されていない。
【０１２９】
本明細書に記載の反応スキームにおいては、複数の立体異性体を生成することができる。特定の立体異性体が指示されていない場合、反応により生成可能なすべてのありうる立体異性体を意味すると理解されよう。当業者は、1つの異性体を優先的に得るために反応を最適化することができること、または単一の異性体を生成するために新たなスキームを考案することができることを認識するであろう。混合物が生成される場合、分取薄層クロマトグラフィー、分取HPLC、分取キラルHPLCまたは分取SFCなどの技術を使用して異性体を分離することができる。
【０１３０】
スキーム1
0006469009.tif 000025
上記スキーム1は式Iaの化合物の合成戦略を示す。反応a〜fは以下の通りである: (a) KCN、グリオキサール、Na2CO3、H2O; (b) ClSO2R、TEA、THF; (c) ClSO2CH2Ph、TEA、THF; (d) ClSO2CH2Ar2、TEA、THF; (e) ClCO2Ar2、TEA、THF; (f) Ar2NCS、Na2CO3、H2O。
【０１３１】
ASPH用新規SMIの合成および特徴づけ
ASPH触媒部位の結晶構造に基づいて、触媒部位のポケットに適合しかつβ-ヒドロキシラーゼ活性を阻害する一連の親化合物および誘導体の合成を導くコンピュータ生成薬物設計を行った。親化合物(化合物307｛7cまたはMO-I-1000｝、および化合物310｛8cまたはMO-I-1100｝)を合成し、β-ヒドロキシラーゼ活性の阻害についてハイスループットスクリーニングアッセイを使用して検討した。ASPH阻害剤の合成を2工程で達成した。第1の工程はアリールヒドロキシテトロンイミドを得るための芳香族アルデヒド、グリオキサール硫酸水素塩付加生成物およびシアン化カリウムを含む3成分反応とした。
【０１３２】
第2の工程では、アリールヒドロキシテトロンイミドを乾燥テトラヒドロフラン中フェニルメタンスルホニルクロリドでスルホニル化して式Iaの化合物を得た（スキーム1）。化合物を1Hおよび13C核磁気共鳴、高分解能質量分析、高速液体クロマトグラフィー、赤外分光法、融点、元素分析、ならびに等温滴定熱量測定によるASPHへの結合によって特徴づけた。
【０１３３】
既存の構造活性関係(SAR)の調査
化合物403｛3cまたはMO-I-1000｝、化合物310｛8cまたはMO-I-1100｝、化合物404｛4cまたはMO-I-400｝、および化合物405｛5cまたはMO-I-500｝が、ヒットとして同定された。これにより、鏡像異性体の混合物がリード化合物2および3として同定され、さらに、化合物405｛5cまたはMO-I-500｝がASPH酵素活性に対するその作用を通じて生物活性を示すと認識された。
【０１３４】
ASPH活性に関するハイスループット酵素アッセイの特徴づけ
EGFおよびEGF様ドメインは当技術分野において周知であり、ジスルフィド結合に関与すると(EGF中で)示された6個のシステイン残基を一般に含む。主要構造は、短いC末端二本鎖シートへのループが後続する、二本鎖βシートである。保存されたシステインの間のサブドメインの長さは異なる。例としては、いずれも参照により本明細書に組み入れられるDavis, CG, 1990, New Biol. 2(5):410-9; Blomquist et al., 1984, Proc Natl Acad Sci U S A. 81(23):7363-7; Hommel et al., 1002, J Mol Biol. 227(1):271-82; Doolittle et al., 1984, Nature. 307(5951):558-60; Appella et al., 1988, FEBS Lett. 231(1):1-4; Sorkin A., 2001, Biochem Soc Trans. Aug;29(Pt 4):480-4に記載のものが挙げられる。
【０１３５】
図3A〜Cは、ASPH酵素活性を測定するためのアッセイの開発および性能の特徴づけのための戦略を表す。図3Aは、ASPHが触媒する生化学反応を表す。図3Bはアッセイの読み取りを示す。各親化合物1〜10μMで24時間処理したFOCUS細胞(細胞表面での高レベルのASPH発現)からタンパク質溶解液を抽出した。ASPHモノクローナル抗体(mAb)でコーティングした96ウェルプレート中に溶解液を加えることで、アッセイ設計に抗原(ASPH)特異的捕捉段階を追加した。インキュベーションおよび洗浄後、ASPHのみを各ウェル上に捕捉する。39AAペプチドを含むEGFドメイン60μMとの反応を行い、FeCl2 100μMおよび14C標識α-ケトグルタル酸40μMを各ウェル中に加えた。Ca(OH)2中に含浸させたガラス繊維膜上に14CO2を捕捉した。図3Cに示すように、捕捉放射能を蛍光イメージャーによって定量した。図3Dは、濃度1μMの化合物310｛8cまたはMO-I-1100｝がβ-ヒドロキシラーゼ活性を実質的に阻害することを示す。この化合物をPCおよびHCCならびに他のASPH発現腫瘍用の抗腫瘍薬としての臨床的使用についてさらに特徴づけた。
【０１３６】
前臨床マウスモデルにおけるPC成長阻害
ASPH特異的mAb捕捉酵素アッセイを使用して化合物310｛8cまたはMO-I-1100｝がβ-ヒドロキシラーゼ活性を阻害することを示した後、皮下(s.c.)腫瘍成長のヌードマウスモデルにおける抗腫瘍薬としてのその活性を評価した。高レベルのASPHを発現するHPAFII AsPC-1ヒトPC細胞系をヌードマウスの背中に移植した(細胞5x106個、皮下)。腫瘍を1週間後に約100mm3に成長させた後で、化合物310｛8cまたはMO-I-1100｝を濃度50mg/kgで腹腔内(i.p.)投与した。図4A〜Bに示す処置レジメンは、毎日5日間、続いて、DMSO媒体注射を受け取った対照群において大きなサイズの腫瘍が観察されたことにより実験が終了するまで隔日の、腹腔内注射を含んだ。図4A〜Bは、試験にわたるHPAFII腫瘍形成の成長速度および実質的阻害を示す。各群(対象vs.処置)はヌードマウス15匹とした。したがって、この試験は、化合物(化合物310｛8cまたはMO-I-1100｝)がインビトロで活性であってASPH β-ヒドロキシラーゼ活性を阻害し、インビボで抗腫瘍薬として十分に機能したことを示す。
【０１３７】
細胞の増殖および代謝に対するASPH阻害剤のインビトロ効果
化合物310｛8cまたはMO-I-1100｝を用いる試験
細胞増殖および細胞生存率に対する化合物310｛8cまたはMO-I-1100｝の効果を評価するためにMTTアッセイを行った。MTTは生細胞中で紫色ホルマザンに還元される。FOCUS細胞を高ASPH発現ヒトHCC細胞系として使用した。結果は、化合物310｛8cまたはMO-I-1100｝で24時間の処理がFOCUS細胞中のOD(光学濃度)値を用量依存的に減少させたことを示す(図5A〜B)。しかし、ASPHを発現しないマウス胚線維芽細胞細胞系であるNIH-3T3細胞では、化合物310｛8cまたはMO-I-1100｝はMTTのOD値に効果を示さなかった。このことは、化合物310｛8cまたはMO-I-1100｝がASPHのβ-ヒドロキシラーゼ活性に高度に特異的であり、ASPH発現を欠く細胞には影響しないことを示している。MTTアッセイでは、NAD(P)H依存的細胞オキシドレダクターゼ酵素を介して細胞代謝活性を測定する。しかし、図5Cに示すように、化合物310｛8cまたはMO-I-1100｝はやはり、ASPHを発現するヒトHCC細胞系(FOCUS、Hep3B、HepG2およびHuh7)における細胞生存率を5μMで減少させたが(阻害率はそれぞれ37.9%、60%、59%および50%)、ASPH発現を伴わないNIH 3T3細胞における細胞生存率は減少させなかった。化合物310｛8cまたはMO-I-1100｝の長期曝露の効果を評価するために、細胞を阻害剤で3週間処理するコロニー形成アッセイ(悪性度および悪性表現型のアッセイ)を行った。化合物310｛8cまたはMO-I-1100｝での処理によって、濃度5μMでコロニー形成が減少した(阻害率36.8%)(図6A〜B)。
【０１３８】
化合物405｛5cまたはMO-I-500｝に関する試験
本発明者らは化合物405｛5cまたはMO-I-500｝を使用して同様の試験を行った。化合物310｛8cまたはMO-I-1100｝における発見と同様に、本発明者らは、14CO2-ケトグルタル酸依存性捕捉アッセイによる測定の通り、5μMの化合物405｛5cまたはMO-I-500｝もASPH酵素活性を阻害することを観察した。化合物405｛5cまたはMO-I-500｝の構造は化合物310｛8cまたはMO-I-1100｝とまったく異なり、化合物405｛5cまたはMO-I-500｝の生物学的活性の結果は図7A〜Bに示されている。図8A〜Dに示すように、さらなる実験では細胞の増殖および代謝に対する化合物405｛5cまたはMO-I-500｝のインビトロ効果を測定した。化合物310｛8cまたはMO-I-1100｝の効果とは対照的に、化合物405｛5cまたはMO-I-500｝は、FOCUS細胞(細胞表面での高レベルのASPH発現を含む)およびそれを含まないNIH-3T3細胞の両方においてマイクロモル濃度で細胞増殖および細胞代謝活性に対する著しい効果を示した。これらの発見は、化合物405｛5cまたはMO-I-500｝が、ヒドロキシラーゼ阻害活性を示すだけでなく、ASPHを欠くNIH 3T3細胞がその阻害効果に感受性があったことから、細胞生存率および細胞成長に重要でありうる他のヒドロキシラーゼまたはタンパク質も同様におそらく阻害することを示す。より興味深いことに、コロニー形成アッセイは、1.25μM濃度の化合物405｛5cまたはMO-I-500｝がFOCUS HCC細胞のコロニー形成に対する実質的な阻害効果を示すことを示した。これは、この細胞形質転換アッセイにおける高い効力を示している。要約すると、図5A〜Cに示すように、化合物310｛8cまたはMO-I-1100｝および化合物405｛5cまたはMO-I-500｝はいずれも軟寒天中でASPH β-ヒドロキシラーゼ活性、細胞生存率および細胞代謝、ならびにコロニー形成を阻害するが、化合物310｛8cまたはMO-I-1100｝の方がASPHのβ-ヒドロキシラーゼに対してより高度に特異的である。
【０１３９】
足場非依存性細胞成長に対するASPH阻害剤のインビトロ効果
化合物310｛8cまたはMO-I-1100｝に関する試験
軟寒天中での足場非依存性成長に対する化合物310｛8cまたはMO-I-1100｝の効果を評価した。軟寒天中でコロノスフェアを形成する能力は、腫瘍形成能の確実な指標であると考えられる。ASPH発現により、軟寒天中でコロノスフェアを形成する能力を獲得した細胞が生じる。これらの結果は、ASPHがインビボで腫瘍の成長、浸潤および転移を確立する上で主要な役割を果たすことを示している。足場非依存性コロニー形成に対するASPH阻害剤の効果を評価するために、このASPH酵素阻害剤ありまたはなしでFOCUS細胞を軟寒天中でインキュベートした。3週間のインキュベーション後、化合物310｛8cまたはMO-I-1100｝はFOCUS細胞のコロノスフェア形成を減少させた(図9A)。図9B、Cに示すように、3週間の培養後に、化合物310｛8cまたはMO-I-1100｝での処理によってコロニーの数およびサイズの両方の用量依存的でかつ高度に有意な減少が生じた。このアッセイは、インビボで侵攻的に成長する腫瘍を形成する能力を反映する悪性成長をモニタリングする標準的方法である。これらの結果は、化合物310｛8cまたはMO-I-1100｝がインビトロで悪性表現型の発生を減少させることを確認する。
【０１４０】
化合物405｛5cまたはMO-I-500｝を用いる試験
図10A〜Bに示すように、足場非依存性細胞成長に対する化合物405｛5cまたはMO-I-500｝の効果を評価した。驚くべきことに、軟寒天中で成長したHCC細胞の1μM曝露によって、形成されるコロニーの数、およびコロニーのサイズが用量依存的に劇的に減少した。したがって、インビボでの腫瘍形成とよく相関しているこの細胞形質転換アッセイにおいて、化合物405｛5cまたはMO-I-500｝は、化合物310｛8cまたはMO-I-1100｝と非常に類似しているが化合物310｛8cまたはMO-I-1100｝よりも強力な足場非依存性細胞成長に対する効果を示した。
【０１４１】
ヒトHCC細胞中の細胞運動性および細胞浸潤性に対するASPH阻害剤のインビトロ効果
化合物310｛8cまたはMO-I-1100｝を用いる試験
β-ヒドロキシラーゼ活性は、ASPHが細胞運動性に対するその効果を媒介するために必要である。多孔質膜を備えたBoydenチャンバ型培養インサートを使用して定方向運動性を測定した。FOCUS細胞を化合物310｛8cまたはMO-I-1100｝および化合物405｛5cまたはMO-I-500｝β-ヒドロキシラーゼ阻害剤5μMで24時間前処理した後、上部チャンバに入れた。遊走を30分間進行させた。生細胞密度を定量するためにATPLiteを使用した。上部ウェルおよび膜上面における細胞は非遊走細胞の数を反映し、膜下面において測定された発光は遊走細胞および非接着細胞の数を反映し、下部ウェルにおいて測定された発光は遊走細胞および非接着細胞を反映した。図11A〜Cに示すように、化合物310｛8cまたはMO-I-1100｝処理後に総遊走細胞は減少したが、非接着細胞の集団は変化しなかった。遊走細胞および接着細胞は有意に減少した。細胞浸潤性を、マトリゲルコーティング膜を使用する浸潤アッセイによって評価し、このアッセイでは、細胞を6時間前進させ、膜下面に接着したことがわかった細胞を浸潤細胞と見なした。化合物310｛8cまたはMO-I-1100｝処理FOCUS細胞では、対照としてのDMSOと共にインキュベートした細胞に比べて、浸潤性が有意に減少した(図11D)。結果は、化合物310｛8cまたはMO-I-1100｝がヒトHCC細胞の細胞運動性、細胞遊走および細胞浸潤性を阻害したことを示した。
【０１４２】
化合物405｛5cまたはMO-I-500｝を用いる試験
細胞運動性および細胞浸潤性に対するASPH阻害剤のインビボ効果を、ヒトHCC FOCUS細胞系を使用して評価した。図12A〜Bに示すように、化合物405｛5cまたはMO-I-500｝も同様に細胞運動性および細胞浸潤に対する著明な効果を示した。化合物405｛5cまたはMO-I-500｝が化合物310｛8cまたはMO-I-1100｝よりもわずかに強力に細胞運動性および細胞浸潤を阻害したが、いずれも、悪性表現型を特徴づけるこれら2つのアッセイにおいて高度に活性であったことに注目されたい。したがって、ASPH-β-ヒドロキシラーゼのこれらの小分子阻害剤は、遊走および浸潤する腫瘍細胞の能力を減少させることで転移性表現型の機能に対する著明な効果を示し、したがって、それらの生物学的機能および転移能を実質的に改変する。
【０１４３】
ヒト肝細胞がんの皮下異種移植片の発達および成長に対するASPH阻害剤化合物310｛8cまたはMO-I-1100｝のインビボ効果
ヒトHCC細胞系FOCUSは、インビボで高度に侵攻的に腫瘍を形成する細胞系であることが知られている。ASPH阻害剤のインビボ抗腫瘍有効性を調査するために、1日当たり20mg/kgの化合物310｛8cまたはMO-I-1100｝を2週間にかけて5日連続、その後は隔日で投与した。図13A〜Bに示すように、化合物310｛8cまたはMO-I-1100｝の投与はHCC皮下異種移植片の成長を有意に減少させた。平均腫瘍体積は化合物310｛8cまたはMO-I-1100｝での処置によって、処置後12日目に実質的に減少し、処置マウスの腫瘍体積は対照マウスにおいて観察された腫瘍体積に比べて平均31.7%に減少した(図15B)。化合物310｛8cまたはMO-I-1100｝処置マウスはいずれも対照マウスに比べて消耗または他の有害作用の徴候を示さなかった。したがって、化合物310｛8cまたはMO-I-1100｝は、著しい抗腫瘍有効性が観察されたこの用量レベルで十分に耐容性を示した。したがって、化合物310｛8cまたはMO-I-1100｝などの特異的β-ヒドロキシラーゼ阻害剤は、図15A〜Bに示すようにHCCの腫瘍成長を実質的に減少させただけでなく、膵がんの発達および成長も、この腫瘍がやはり高レベルのASPH発現を示すことから同様に阻害した(図6A〜B)。このような発見は、あらゆるASPH発現ヒト腫瘍がこれらの特異的β-ヒドロキシラーゼ阻害剤に応答性があることを示す。これらのASPH阻害剤化合物は、予後不良を示すことが知られている多数のヒト固形腫瘍に対して実質的な抗腫瘍活性を示す抗腫瘍薬のクラスを表す。
【０１４４】
ASPHは、固形腫瘍内のヒト腫瘍細胞の細胞表面上で過剰発現され、正常ヒト組織中で低度のまたは無視できる発現を示す。ASPH発現はすべてではなくとも大部分の腫瘍細胞に存在する。また、ASPHは細胞外環境に曝露されることから、血液を通じて触媒活性の小分子阻害剤に容易に接触し、このことが、ASPHを優れた治療標的とする。本明細書に記載のデータは以下の結論を裏付けている: ASPH過剰発現は、HCC細胞および他のヒト腫瘍細胞系の運動性、遊走、浸潤および転移の増大を引き起こし; 膵がん、肝細胞がん、胆管がん、結腸がん、乳がん、前立腺がん、肺がんおよび神経膠芽細胞腫を含むがそれに限定されない、予後不良を示す多くのヒト固体腫瘍は、細胞表面上でASPHを過剰発現し; 触媒部位および酵素活性が、ASPH媒介性の悪性形質転換、ならびに引き続く浸潤性および転移性の腫瘍表現型の発生に決定的に重要であり; ASPHは、Notchシグナル伝達カスケードの活性化によって腫瘍細胞の遊走、浸潤および転移の増大に対するその生物学的効果を発揮し; β-ヒドロキシラーゼ活性の小分子阻害剤がASPHのC末端触媒部位の結晶構造に基づいて発見されており; 化合物310｛8cまたはMO-I-1100｝および化合物405｛5cまたはMO-I-500｝などのこれらの阻害剤に曝露された腫瘍細胞は、軟寒天中での増殖、遊走、浸潤およびコロニー形成の減少を示し、これにより、成長および転移するこれらの細胞の能力が損なわれ; ASPH酵素活性のこれらの小分子阻害剤は、ヒト膵がんおよび肝がんの成長および発達に関する動物モデルにおいてインビボで著しいかつ予想外の抗腫瘍効果を示す。したがって、これらの試験は、β-ヒドロキシラーゼ活性を特異的に阻害する化合物が、ASPH発現ヒト固形腫瘍、特に、臨床予後不良を示すことが知られている固形腫瘍、例えば膵がん、肝細胞がん、胆管がん、肺がん、結腸がん、乳がん、前立腺がんおよび神経膠芽細胞腫の成長を減少させ、かつ/またはそれらの転移を阻害するために有用であることを示す。
【０１４５】
別の局面では、本発明は、式Iaの化合物、またはその塩、エステル、代謝産物、プロドラッグもしくは溶媒和物を特徴とする:
0006469009.tif 000026
式中、
Ar1は置換もしくは非置換のC6〜C20アリールまたは5〜20員ヘテロアリールであり;
XはC(O)、C(S)またはS(O)2であり;
XがCOである場合、W1は単結合、O、CR50R51またはNR52であり、XがSO2である場合、W1は単結合、CR50R51またはNR52であり;
R50、R51、R52およびR53はそれぞれ独立して水素、置換もしくは非置換のC1〜C6アルキル、置換もしくは非置換のC2〜C6アルケニル、置換もしくは非置換のC2〜C6アルキニル、置換もしくは非置換のC6〜C20アリール、置換もしくは非置換のC7〜C26アリールアルキル、置換もしくは非置換の5〜20員ヘテロアリール、および置換もしくは非置換の6〜26員ヘテロアリールアルキルからなる群より選択されるが、但し、Ar1が4-クロロフェニルである場合、R53はメチルまたは非置換フェニルではない。
【０１４６】
式Iaの化合物は以下の1つもしくは複数の特徴を適宜有しうる。
【０１４７】
例えば、本化合物は式IIaの化合物、またはその塩、エステル、代謝産物、プロドラッグもしくは溶媒和物である:
0006469009.tif 000027
式中、
Ar1およびAr2はそれぞれ独立して非置換C6〜C14アリール、非置換5〜14員ヘテロアリール、または、ハロ、CN、NO2、NO、N3、ORa、NRaRb、C(O)Ra、C(O)ORa、C(O)NRaRb、NRbC(O)Ra、-S(O)bRa、-S(O)bNRaRbまたはRS1からなる群より選択される1個もしくは複数の置換基でそれぞれ置換されたC6〜C14アリールもしくは5〜14員ヘテロアリールであり、RS1はC1〜C6アルキル、C2〜C6アルケニル、C2〜C6アルキニル、C3〜C8シクロアルキル、C6〜C10アリール、5員もしくは6員ヘテロアリール、または4〜12員ヘテロシクロアルキルであり、bは0、1または2であり、RaおよびRbはそれぞれ独立してHまたはRS2であり、RS2はC1〜C6アルキル、C2〜C6アルケニル、C2〜C6アルキニル、C3〜C8シクロアルキル、C6〜C10アリール、4〜12員ヘテロシクロアルキル、または5員もしくは6員ヘテロアリールであり; RS1およびRS2はそれぞれ、ハロ、OH、オキソ、C(O)OH、C(O)O-C1〜C6アルキル、CN、C1〜C6アルキル、C1〜C6アルコキシル、アミノ、モノ-C1〜C6アルキルアミノ、ジ-C1〜C6アルキルアミノ、C3〜C8シクロアルキル、C6〜C10アリール、4〜12員ヘテロシクロアルキル、および5員もしくは6員ヘテロアリールからなる群より選択される1個もしくは複数の置換基で置換されていてもよい。
【０１４８】
例えば、R53は非置換C1〜C6アルキル、または、ハロ、OH、CNおよびアミノより選択される1個もしくは複数の置換基で置換されたC1〜C6アルキルである。
【０１４９】
例えば、XはS(O)2であり、W1はCR50R51である。
【０１５０】
例えば、XはS(O)2であり、W1は単結合である。
【０１５１】
例えば、XはC(O)であり、W1はOであり、あるいは、XはC(S)であり、W1はNR52である。
【０１５２】
例えば、R50、R51およびR52はそれぞれ独立してH、非置換C1〜C6アルキル、または、ハロ、OH、CNおよびアミノより選択される1個もしくは複数の置換基で置換されたC1〜C6アルキルである。
【０１５３】
例えば、Ar1およびAr2はそれぞれ独立して、ハロ、CN、NO2、NO、N3、ORa、NRaRb、C(O)Ra、C(O)ORa、C(O)NRaRb、NRbC(O)Ra、-S(O)bRa、-S(O)bNRaRbまたはRS1からなる群より選択される1個もしくは複数の置換基でそれぞれ置換されていてもよいフェニル、ナフチルまたは5〜10員ヘテロアリールであり、RS1はC1〜C6アルキル、C2〜C6アルケニル、C2〜C6アルキニル、C3〜C8シクロアルキル、C6〜C10アリール、5員もしくは6員ヘテロアリール、または4〜12員ヘテロシクロアルキルであり、bは0、1または2であり、RaおよびRbはそれぞれ独立してHまたはRS2であり、RS2はC1〜C6アルキル、C2〜C6アルケニル、C2〜C6アルキニル、C3〜C8シクロアルキル、C6〜C10アリール、4〜12員ヘテロシクロアルキル、または5員もしくは6員ヘテロアリールであり; RS1およびRS2はそれぞれ、ハロ、OH、オキソ、C(O)OH、C(O)O-C1〜C6アルキル、CN、C1〜C6アルキル、C1〜C6アルコキシル、アミノ、モノ-C1〜C6アルキルアミノ、ジ-C1〜C6アルキルアミノ、C3〜C8シクロアルキル、C6〜C10アリール、4〜12員ヘテロシクロアルキル、および5員もしくは6員ヘテロアリールからなる群より選択される1個もしくは複数の置換基で置換されていてもよい。
【０１５４】
例えば、Ar1およびAr2はそれぞれ独立して、ハロ、CN、NO2、NO、N3、ORa、NRaRb、C(O)Ra、C(O)ORaまたはRS1からなる群より選択される1個もしくは複数の置換基でそれぞれ置換されていてもよいフェニル、ナフチルまたは5〜10員ヘテロアリールであり、RS1はC1〜C6アルキルであり、RaおよびRbはそれぞれ独立してHまたはRS2であり、RS2はC1〜C6アルキルであり; RS1およびRS2はそれぞれ、ハロ、OH、C1〜C6アルコキシル、アミノ、モノ-C1〜C6アルキルアミノおよびジ-C1〜C6アルキルアミノからなる群より選択される1個もしくは複数の置換基で置換されていてもよい。
【０１５５】
例えば、Ar1およびAr2はそれぞれ独立してフェニル、1-ナフチル、2-ナフチル、2-フラニル、2-チアゾリル、2-ピリジル、3-ピリジル、4-ピリジル、2-キノリニル、3-キノリニル、4-キノリニル、2-クロロフェニル、3-クロロフェニル、4-クロロフェニル、2-フルオロフェニル、3-フルオロフェニル、4-フルオロフェニル、2-トリフルオロメチルフェニル、3-トリフルオロメチルフェニル、4-トリフルオロメチルフェニル、2-シアノフェニル、3-シアノフェニル、4-シアノフェニル、3-カルボキシメチルフェニル、2-メトキシフェニル、3-メトキシフェニル、4-メトキシフェニル、2,3-ジクロロフェニル、2,4-ジクロロフェニル、2,5-ジクロロフェニル、3,4-ジクロロフェニル、3,5-ジクロロフェニル、2,3-ジフルオロフェニル、2,4-ジフルオロフェニル、2,5-ジフルオロフェニル、3,4-ジフルオロフェニル、3,5-ジフルオロフェニル、2,3-ジメトキシフェニル、2,4-ジメトキシフェニル、2,5-ジメトキシフェニル、3,4-ジメトキシフェニル、3,5-ジメトキシフェニル、2-クロロ-6-フルオロフェニル、3-クロロ-4-フルオロフェニル、2-クロロ-4-フルオロフェニル、4-クロロ-3-フルオロフェニル、3-クロロ-2-フルオロフェニル、2-クロロ-5-フルオロフェニル、4-クロロ-2-フルオロフェニルおよび5-クロロ-2-フルオロフェニルより選択される。
【０１５６】
例えば、式IaまたはIIaの化合物はASPH阻害化合物である。
【０１５７】
本発明の化合物を含む組成物の治療用途
いくつかの局面では、本発明は、対象において細胞増殖障害の処置、抑制、予防、重症度減少、危険性減少または阻害を行うための、本明細書に記載の化合物、またはその異性体、代謝産物、互変異性体、薬学的に許容される塩、医薬品、多形、結晶、N-オキシド、水和物、あるいはその任意の組み合わせの使用を提供する。
【０１５８】
薬学的組成物
本発明の関連する局面は、上記の本発明の化合物を含む、薬学的組成物を含む組成物に関する。本発明の一局面は、少なくとも1つの薬学的に許容される賦形剤と治療有効量の上記で開示される化合物または塩とを含む、薬学的組成物に関する。本発明のさらに別の局面は、経口用途および静脈内用途における使用ならびに移植可能材料中での使用のための、前述の化合物の薬学的調剤のための方法に関する。
【０１５９】
本発明の別の局面は、上記で同定された本発明の1つもしくは複数の化合物を含有しうる薬学的組成物を含む、薬学的組成物に関する。
【０１６０】
通常、本発明の薬学的組成物は、本発明の化合物または薬学的に許容されるその塩と薬学的に許容される担体とを含む。「薬学的に許容される担体」という用語は、任意の好適な補助剤、担体、賦形剤または安定剤を意味し、錠剤、カプセル剤、散剤、溶液剤、懸濁液剤、乳剤または移植可能円板などの固体形態または液体形態で存在しうる。
【０１６１】
通常、本組成物は有効化合物約0.01〜99パーセント、好ましくは約20〜75パーセントを補助剤、担体および/または賦形剤と共に含有する。個々の必要性は異なりうるが、各成分の有効量の最適範囲の決定は当技術分野の技能の範囲内である。通常の投与量は約0.01〜約100mg/kg体重を含む。好ましい投与量は約0.1〜約100mg/kg体重を含む。最も好ましい投与量は約1〜約100mg/kg体重を含む。本発明の化合物の投与のための処置レジメンも、当業者は容易に決定することができる。すなわち、用量の投与頻度およびサイズを日常的な最適化によって、好ましくは任意の副作用を最小化しながら確立することができる。
【０１６２】
剤形
固体単位剤形は従来の種類の剤形でありうる。固体形態は、本発明の化合物ならびに担体、例えば潤滑剤、およびラクトース、スクロースまたはコーンスターチなどの不活性充填剤を含有する、普通のゼラチン型などのカプセル剤などでありうる。別の態様では、これらの化合物を、ラクトース、スクロースまたはコーンスターチなどの従来の錠剤基剤と、アラビアゴム、コーンスターチまたはゼラチンのような結合剤、コーンスターチ、ジャガイモデンプンまたはアルギン酸などの崩壊剤、およびステアリン酸またはステアリン酸マグネシウムのような潤滑剤との組み合わせによって錠剤化する。
【０１６３】
錠剤、カプセル剤などはトラガントゴム、アラビアゴム、コーンスターチまたはゼラチンなどの結合剤; リン酸二カルシウムなどの賦形剤; コーンスターチ、ジャガイモデンプン、アルギン酸などの崩壊剤; ステアリン酸マグネシウムなどの潤滑剤; およびスクロース、ラクトースまたはサッカリンなどの甘味料を含有してもよい。単位剤形がカプセル剤である場合、上記種類の材料に加えて、脂肪油などの液体担体を含有しうる。
【０１６４】
任意的なコーティング
各種の他の材料がコーティングとして、または単位剤形の物理的形態を変更するために存在しうる。例えば、錠剤をセラック、糖またはその両方でコーティングすることができる。シロップ剤は、有効成分以外にも、甘味料としてのスクロース、保存料としてのメチルパラベンおよびプロピルパラベン、色素、ならびにサクランボ味またはオレンジ味などの香味料を含有しうる。
【０１６５】
賦形剤
治療用経口投与では、これらの有効化合物を賦形剤と共に組み入れて、錠剤、カプセル剤、エリキシル剤、懸濁液剤、シロップ剤などの形態で使用することができる。そのような組成物および製剤は少なくとも0.1%の有効化合物を含有するはずである。当然、これらの組成物中の該化合物の割合は変動しうるものであり、好都合には単位の重量の約2%〜約60%でありうる。そのような治療上有用な組成物中の有効化合物の量は、好適な投与量が得られる量である。本発明の好ましい化合物は、経口投与単位が有効化合物約1mg〜800mgを含有するように調製される。
【０１６６】
投与様式
本発明の有効化合物は、例えば不活性希釈剤または同化可能な食用担体と共に経口投与されてもよく、硬シェルカプセル剤または軟シェルカプセル剤に封入されてもよく、錠剤として圧縮されてもよく、食事と共に直接取り込まれてもよい。
【０１６７】
注射用に好適な薬学的形態としては、滅菌水溶液剤または水性分散液剤、および滅菌注射用溶液剤または分散液剤の即時調製用の滅菌散剤が挙げられる。いずれの場合でも、形態は滅菌されているべきであり、容易なシリンジ注入可能性が存在する程度に流動的であるべきである。形態は製造条件および貯蔵条件下で安定であるべきであり、細菌および真菌などの微生物の汚染作用に抗するよう保存されるべきである。担体は、水、エタノール、ポリオール(例えばグリセリン、プロピレングリコールおよび液体ポリエチレングリコール)、その好適な混合物、ならびに植物油を例えば含有する溶媒または分散媒でありうる。
【０１６８】
本発明の化合物または薬学的組成物は、薬学的補助剤、担体または賦形剤を伴う生理学的に許容される希釈剤中のこれらの材料の溶液または懸濁液による注射用剤形として投与してもよい。そのような補助剤、担体および/または賦形剤としては、界面活性剤および他の薬学的かつ生理学的に許容される成分の添加を伴うかまたは伴わない、水および油などの滅菌液体が挙げられるがそれに限定されない。油の例としては、石油、動物、植物または合成起源の油、例えばピーナッツ油、大豆油または鉱油がある。一般に、水、生理食塩水、ブドウ糖および関連する糖の水溶液、ならびにプロピレングリコールまたはポリエチレングリコールなどのグリコールが、特に注射液剤用に好ましい液体担体である。
【０１６９】
移植用に好適な薬学的形態としてはポリカルボキシフェノキシプロパン-セバシン酸(pCPP:SA)ポリマー、ポリ(D,L-乳酸)、ポリヒドロキシ酪酸、リジンジイソシアネート(LDI)-グリセリンポリウレタン、およびポリ(D-Lラクチド-co-グリコリド)の滅菌ウェーハが挙げられる。いずれの場合でも、形態は無菌であるべきであり、脳内での外科移植に好適な寸法のウェーハまたは円板であるべきである。ポリマーは製造条件および貯蔵条件下で安定であるべきであり、細菌および真菌などの微生物の汚染作用に抗するよう保存されるべきである。ウェーハは24時間〜6ヶ月の範囲で生分解性であるべきである。
【０１７０】
一局面では、本発明は、本発明の方法のいずれかにおける使用のための、本明細書に記載の任意の局面を含む化合物および組成物を提供する。一局面では、当業者が理解するように、本発明の化合物またはそれを含む組成物の使用は、対象における所望の応答を阻害、抑制、増強または刺激する上で有用性を示す。別の態様では、本組成物は、本発明の化合物が投与される特定の用途にその活性が有用であるさらなる有効成分をさらに含みうる。
【０１７１】
本発明のモジュレーター化合物を含む薬学的組成物
通常、治療用組成物は製造および貯蔵条件下で無菌かつ安定でなければならない。組成物は、高薬物濃度に好適な溶液、マイクロエマルジョン、リポソームまたは他の規則構造として調剤することができる。担体は、水、エタノール、ポリオール(例えばグリセリン、プロピレングリコールおよび液体ポリエチレングリコールなど)、ならびにその好適な混合物を例えば含有する溶媒または分散媒でありうる。適当な流動性は、例えばレシチンなどのコーティングの使用、分散液剤の場合における必要な粒径の維持、および界面活性剤の使用により維持することができる。多くの場合、等張剤、例えば糖、マンニトール、ソルビトールなどの多価アルコール、または塩化ナトリウムを組成物中に含むことが好ましい。注射用組成物の長期吸収を、吸収を遅延させる薬剤、例えばモノステアリン酸塩およびゼラチンを組成物中に含むことでもたらすことができる。さらに、モジュレーターを時間放出製剤として、例えば緩徐放出ポリマーを含む組成物として投与することができる。有効化合物は、急速な放出に対して該化合物を保護する担体と共に、移植片およびマイクロカプセル化送達系を含む制御放出製剤として調製することができる。エチレン酢酸ビニル、ポリ酸無水物、ポリグリコール酸、コラーゲン、ポリオルトエステル、ポリ乳酸、およびポリ乳酸-ポリグリコール酸共重合体(PLG)などの生分解性、生体適合性ポリマーを使用することができる。そのような製剤の調製用の多くの方法は特許化されているか、または当業者に一般に公知である。
【０１７２】
投与様式は、経腸送達では経口でありうるし、経鼻送達では鼻腔内でありうるし、血液脳関門を通じた送達では静脈内でありうる。くも膜下腔内、筋肉内、気管支内、直腸内、眼内および膣内送達を含むがそれに限定されない、当技術分野において公知の他の投与様式を使用してもよい。
【０１７３】
モジュレーター化合物は小腸送達用の経口投与組成物として投与することができる。小腸送達用のそのような経口投与組成物は当技術分野において周知であり、耐胃液性の錠剤またはカプセル剤を一般に含む(Remington's Pharmaceutical Sciences, 16th Ed., Eds. Osol, Mack Publishing Co., Chapter 89 (1980); Digenis et al, J. Pharm. Sci., 83:915-921 (1994); Vantini et al, Clinica Terapeutica, 145:445-451 (1993); Yoshitomi et al, Chem. Pharm. Bull., 40:1902-1905 (1992); Thoma et al, Pharmazie, 46:331-336 (1991); Morishita et al, Drug Design and Delivery, 7:309-319 (1991); およびLin et al, Pharmaceutical Res., 8:919-924 (1991)); いずれもその全体が参照により本明細書に組み入れられる)。
【０１７４】
錠剤は、酢酸フタル酸セルロースまたは酢酸テレフタル酸セルロースなどの化合物の添加によって耐胃液性になる。
【０１７５】
カプセル剤は、密接結合モジュレーター化合物がゼラチンの硬いもしくは軟らかい可溶性の入れ物または殻に封入された固体剤形である。カプセル剤の製造において使用されるゼラチンはコラーゲン性材料から加水分解により得られる。ゼラチンには2種類存在する。A型は、ブタ皮膚から酸処理によって誘導され、B型は、骨および動物皮膚からアルカリ処理によって得られる。硬ゼラチンカプセルの使用によって、個々の対象に最善であると考えられる正確な投与量レベルで密着結合モジュレーター化合物またはその組み合わせを処方する選択が可能になる。硬ゼラチンカプセルは2つの部分からなり、一方が他方の上を滑るように進み、これにより密着結合モジュレーター化合物が完全に包囲される。これらのカプセルは、モジュレーター化合物、またはモジュレーター化合物を含有する耐胃液性ビーズをカプセルのより長い端部に導入した後、キャップ上を滑らせることで満たされる。硬ゼラチンカプセルの大部分はゼラチン、FD&C着色料、および時として二酸化チタンなどの乳白剤から作製される。USPは、この目的でのゼラチンが、製造中の分解を防止するために二酸化硫黄0.15%(w/v)を含有することを許可している。
【０１７６】
本発明において、小腸送達用の経口投与組成物は、水性緩衝剤を含有する液体組成物も含み、水性緩衝剤は、モジュレーター化合物が胃内の胃液によって著しく不活性化されることを防ぐことでモジュレーター化合物を小腸に活性形態で到達させる。本発明において使用可能であるそのような水性緩衝剤の例としては炭酸水素緩衝液(pH 5.5〜8.7、好ましくは約pH 7.4)が挙げられる。
【０１７７】
経口投与組成物が液体組成物である場合、安定性の問題を最小限にするために投与直前に組成物を調製することが好ましい。この場合、液体組成物は、凍結乾燥した密着結合モジュレーター化合物を水性緩衝剤に溶解させることで調製することができる。小腸送達用の経口投与組成物は、水性緩衝剤を含有してもよい液体組成物も含み、水性緩衝剤は、治療薬および密着結合モジュレーター化合物が胃内の胃液によって著しく不活性化されることを防ぐことで生物学的に有効な成分および密着結合モジュレーター化合物を小腸に活性形態で到達させる。本発明において使用可能であるそのような水性緩衝剤の例としては炭酸水素緩衝液(pH 5.5〜8.7、好ましくは約pH 7.4)が挙げられる。
【０１７８】
経口投与組成物が液体組成物である場合、安定性の問題を最小限にするために投与直前に組成物を調製することが好ましい。この場合、液体組成物は、凍結乾燥した治療薬および密着結合モジュレーター化合物を水性緩衝剤に溶解させることで調製することができる。
【０１７９】
滅菌注射用溶液剤は、所要量の有効化合物を適切な溶媒中に、必要に応じて先に列挙した成分の1つまたは組み合わせと共に組み入れた後、濾過滅菌を行うことで調製することができる。分散液剤は一般に、塩基性分散媒および上記で列挙した必要な他の成分を含有する滅菌媒体に有効化合物を組み入れることで調製される。滅菌注射用溶液剤の調製において使用される滅菌粉末について、好ましい調製方法は、有効成分と任意のさらなる所望の成分との粉末を、既に滅菌濾過したその溶液から得る、真空乾燥および凍結乾燥である。
【０１８０】
「経鼻」送達組成物と「経腸」送達組成物との違いは、後者が胃内の有効薬剤の酸性分解を防ぐために耐胃酸性を有さなければならない一方で、前者が粘液線毛クリアランスを減少させかつ経鼻投与薬剤の再現可能なバイオアベイラビリティーを実現するために直径約50 11mを有する水溶性ポリマーを一般に含むという点にある。
【０１８１】
「静脈内」送達組成物と「経鼻」送達組成物および「経腸」送達組成物の両方との違いは、「静脈内」送達組成物においては耐胃酸性または水溶性ポリマーが必要ないという点にある。
【０１８２】
経鼻送達用の経鼻投与組成物は当技術分野において周知である。一般に、そのような経鼻投与組成物は、経鼻投与用ペプチドの担体として役立ちうる(Davis, In: Delivery Systems for Peptide Drugs, 125:1-21 (1986))、薬学的剤形を調製するためにのみ使用されている水溶性ポリマー(Martin et al, In: Physical Chemical Principles of 20 Pharmaceutical Sciences, 3rd Ed., pages 592-638 (1983))を含む。ポリマーマトリックスに埋め込まれたペプチドの経鼻吸収は、鼻粘液線毛クリアランスの遅延を通じて増強されることが示されている(Illum et al, Int. J. Pharm., 46:261-265 (1988E)。他のありうる増強機構としては、ペプチド吸収の濃度勾配の増大または拡散経路の減少が挙げられる(Ting et al, Pharm. Res., 9:1330-1335 (1992)。しかし、粘液線毛クリアランス速度の減少は、経鼻投与される全身用薬の実現、または再現可能なバイオアベイラビリティーに向けての良好なアプローチであると予想された(Gonda et al, Pharm. Res., 7:69-75 (1990))。直径約50pmの微粒子は鼻腔内に沈着すると予想されており(Bjork et al, Int. J. Pharm., 62:187'192 (1990E); およびlllum et al, Int. J. Pharm., 39:189-199 (1987)、一方、直径10pm未満の微粒子は鼻の濾過系を逃れて下気道内に沈着しうる。直径が200pmよりも大きい微粒子は経鼻投与後に鼻内に保持されない(Lewis et aI, Proc. Int. Symp. Control ReI. Bioact. Mater., 17:280-290 (1990))。
【０１８３】
使用される特定の水溶性ポリマーは、本発明に決定的に重要であるということはなく、経鼻剤形に使用される周知の水溶性ポリマーのいずれかより選択することができる。経鼻送達に有用な水溶性ポリマーの典型例はポリビニルアルコール(pvA)である。この材料は膨潤性の親水性ポリマーであり、その物性は分子量、加水分解度、架橋密度および結晶性に依存する(Peppas et al, In: Hydrogels in Medicine and Pharmacy, 3:109-131 (1987）。PYAは相分離、噴霧乾燥、噴霧埋め込みおよび噴霧高密度化を通じた分散材料のコーティングにおいて使用することができる(Ting et al, supra)。
【０１８４】
本発明のモジュレーター化合物を含む「皮膚」送達組成物は、添加される成分が治療薬または免疫原性薬の経皮送達に有害な影響を与えない限り、治療薬または免疫原性薬以外にも、香料、クリーム、軟膏、着色料および他の化合物を含みうる。従来の薬学的に許容される乳化剤、界面活性剤、懸濁化剤、抗酸化剤、浸透圧改善剤、増量剤、希釈剤および保存料を加えてもよい。水溶性ポリマーを担体として使用してもよい。
【０１８５】
使用される特定の治療薬または免疫原性薬は、本発明に決定的に重要であるということはなく、例えば、サイズまたは電荷にかかわらず経細胞経路を通じる以外では吸収されない任意の薬物化合物、生物活性ペプチド、ワクチン、または任意の他の部分でありうる。
【０１８６】
組成物中の有効化合物の量は、個人の疾患状態、年齢、性別および体重などの要因に応じて異なりうる。最適な治療応答を与えるように投与レジメンを調整することができる。例えば、単一のボーラスを投与してもよく、いくつかの分割用量を経時的に投与してもよく、あるいは、治療状況の逼迫に従って用量を比例的に減少または増加させてもよい。投与を容易にしかつ投与量を均一にするために、単位剤形で非経口組成物を調剤することが特に有利である。本明細書で使用する単位剤形とは、処置される哺乳動物対象用の単位剤形として適した物理的に分離された単位を意味し、各単位は、所望の治療効果を生成するように計算される所定量の活性化合物を、所要の薬学的担体を伴って含む。本発明の単位剤形の規格は、(a) 有効化合物の独自の特性、および実現すべき特定の治療効果、ならびに(b) 個人における感受性の処置用にそのような有効化合物を調合する分野に内在的な限界、により決定づけられかつそれに直接依存する。
【０１８７】
本明細書において使用される「薬学的に許容される担体」は、生理学的に適合性のあるすべての溶媒、分散媒、コーティング、抗菌剤および抗真菌剤、等張剤および吸収遅延剤などを含む。一態様では、担体は非経口投与に好適である。担体は中枢神経系への投与(例えば脊髄内または脳内投与)に好適でありうる。あるいは、担体は静脈内、腹腔内または筋肉内投与に好適でありうる。別の態様では、担体は経口投与に好適である。薬学的に許容される担体としては、滅菌水溶液または水性分散液、および滅菌注射用溶液または分散液の即時調製用の滅菌粉末が挙げられる。薬学的に有効な物質用のそのような媒体および薬剤の使用は当技術分野において周知である。任意の従来の媒体または薬剤は、有効化合物と適合しない場合を除いて、本発明の薬学的組成物中でのその使用が想定される。補助的な有効化合物も本組成物に組み入れることができる。
【０１８８】
本発明の特定の局面を詳細に説明してきたが、当業者は、本開示の教示全体に照らして、これらの詳細の様々な修正および代替案を開発することができることを認識するであろう。したがって、開示される特定の取り決めは、単に例示的であると意図されており、本発明の範囲を限定するものではなく、本発明の範囲は、添付される特許請求の範囲の全体およびその任意の等価物によって示される。
【実施例】
【０１８９】
前述の説明は以下の代表的実施例との関連でよりよく理解することができる。これらの実施例は、本発明の原理的な方法および組成物を例示する目的で提示されるものであり、限定のために提示されるものではない。本開示を読んだ後の当業者には、様々な他の例が、本発明の真意および範囲を逸脱することなく明らかであろう。すべてのそのような他の例は、添付の特許請求の範囲の範囲内に含まれるように意図されている。
【０１９０】
一般的な材料および方法
別途指示がない限り、すべての部は重量比であり(例えば% w/w)、温度は摂氏度(℃)である。
【０１９１】
一般的化学手順
融点をHoover融点測定装置で決定し、未補正とした。化合物の赤外(IR)スペクトルをMattson Satellite FTIR上のKBrディスクにおいてcm-1単位で記録した。1Hおよび13CスペクトルをBruker Avance III DPX 300MHz機器上でDMSO-d6単位で記録した。19FスペクトルをBruker Avance III 600(564.6mHz)上でDMSO d6単位で記録した。化学シフトを、テトラメチルシランを内部標準として百万分率(δ)で表した。質量分析をUniversity of Cincinnati Mass Spectrometry facilityにおいてThermo Scientific LTQ-FT上で行った。化合物の純度を、Waters 2695分離モジュールおよび2487二重λ吸光度検出器をNovaPak C18 4μm 3.9x150mmカラムと共に使用してHPLCでモニタリングした。移動相は30分勾配を使用するアセトニトリル/H2Oからなるものとした。すべての化合物は≧95%であった。微量分析をAtlantic Microlab Inc.が行ったところ、すべての化合物が±0.4%にあることがわかった。すべての試薬はSigma-Aldrichの試薬とした。LogS、LogP、Log BBB、ヒト腸吸収、p-糖タンパク質分類、CYP 2C9 pKi、hERG pIC50、CYP 2D6親和性分類、経口CNSスコア、静脈内CNSスコア、分子量、屈曲性および総極性表面積を、StarDrop 5.1.1リリースビルド178を使用して計算した。
【０１９２】
スキーム1は、これらの反応の概要を表すために使用される合成反応を示す。表2は、式Ia、IbおよびIIaの「Ar1」または「Ar2」として組み込まれうるアリール官能基の非制限的リストである。表3および表4は、本出願において開示される種々の主要化合物の構造、名称および数字を示す。
【０１９３】
（表２）式Ia、IbおよびIIaの「Ar1」または「Ar2」として組み込まれうるアリール官能基の非制限的リスト
0006469009.tif 000028
0006469009.tif 000029
0006469009.tif 000030
0006469009.tif 000031
【０１９４】
（表３）実施例1に列挙する種々の主要化合物の構造、名称および番号
0006469009.tif 000032
0006469009.tif 000033
0006469009.tif 000034
0006469009.tif 000035
0006469009.tif 000036
0006469009.tif 000037
0006469009.tif 000038
0006469009.tif 000039
0006469009.tif 000040
0006469009.tif 000041
0006469009.tif 000042
0006469009.tif 000043
0006469009.tif 000044
【０１９５】
（表４）実施例2に列挙する種々の主要化合物の構造、名称および番号
0006469009.tif 000045
0006469009.tif 000046
0006469009.tif 000047
0006469009.tif 000048
0006469009.tif 000049
0006469009.tif 000050
0006469009.tif 000051
0006469009.tif 000052
0006469009.tif 000053
0006469009.tif 000054
【０１９６】
実施例1  表3の化合物の合成および特徴づけ
アリールテトロンイミドの調製の一般的手順
三つ口ガラス丸底フラスコ中の脱イオン水(30mL)中炭酸ナトリウム(1.7g)にシアン化カリウム(0.91g)を加え、氷浴に入れた。真空ポンプおよび窒素ガスを使用して系を繰り返しパージした。次にグリオキサール(3.72g)をO2の導入なしで系に加え、反応物を攪拌によって溶解させた。共栓付き管中で適切なアリールアルデヒド(7.11ミリモル)を1,4-ジオキサン(5mL)に加え、パージした後、系に滴下した。次に系を氷浴から外し、室温で1時間攪拌した。1時間後、酢酸(5mL)の滴下を、酢酸添加による気泡がもはや見えなくなるまで、または溶液がpH 6未満になるまで行った。溶液を減圧濾過し、氷冷水(5mL)、メタノール(5mL)およびエーテル(5mL)で洗浄した後、風乾させた。粗材料をメタノールで再結晶させ、減圧濾過によって収集し、ジエチルエーテルですすぎ、減圧乾燥させた。
【０１９７】
化合物301｛1c｝:
2-(4-クロロフェニル)-4-[[メチルスルホニル]オキシ]-5-アミノ-3(2H)-フラノン
5-アミノ-4-ヒドロキシ-2-(4-クロロフェニル)-フラン-3-オン5gの乾燥THF溶液にアルゴン下で乾燥THF中トリエチルアミンを加える。反応液を室温で30分間攪拌し、乾燥THF中塩化メタンスルホニル1当量を滴下する。反応液を16時間攪拌した後、飽和塩化アンモニウム溶液を加える。混合物をジエチルエーテル30mLで3回抽出する。一緒にしたエーテル抽出物を水およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧濃縮する。固体をメタノールで再結晶させる。
【０１９８】
化合物302｛2c｝:
2-(4-クロロフェニル)-4-[[エチルスルホニル]オキシ]-5-アミノ-3(2H)-フラノン
5-アミノ-4-ヒドロキシ-2-(4-クロロフェニル)-フラン-3-オン5gの乾燥THF溶液にアルゴン下で乾燥THF中トリエチルアミンを加える。反応液を室温で30分間攪拌し、乾燥THF中塩化エタンスルホニル1当量を滴下する。反応液を16時間攪拌した後、飽和塩化アンモニウム溶液を加える。混合物をジエチルエーテル30mLで3回抽出する。一緒にしたエーテル抽出物を水およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧濃縮する。固体をメタノールで再結晶させる。
【０１９９】
化合物303｛3c｝:
2-(4-クロロフェニル)-4-[[1-プロピルスルホニル]オキシ]-5-アミノ-3(2H)-フラノン
5-アミノ-4-ヒドロキシ-2-(4-クロロフェニル)-フラン-3-オン5gの乾燥THF溶液にアルゴン下で乾燥THF中トリエチルアミンを加える。反応液を室温で30分間攪拌し、乾燥THF中塩化n-プロパンスルホニル1当量を滴下する。反応液を16時間攪拌した後、飽和塩化アンモニウム溶液を加える。混合物をジエチルエーテル30mLで3回抽出し、一緒にしたエーテル抽出物を水およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧濃縮する。固体をメタノールで再結晶させる。
【０２００】
化合物304｛4c｝:
2-(4-クロロフェニル)-4-[[2-プロピルスルホニル]オキシ]-5-アミノ-3(2H)-フラノン
5-アミノ-4-ヒドロキシ-2-(4-クロロフェニル)-フラン-3-オン5gの乾燥THF溶液にアルゴン下で乾燥THF中トリエチルアミンを加える。反応液を室温で30分間攪拌し、乾燥THF中塩化i-プロパンスルホニル1当量を滴下する。反応液を16時間攪拌した後、飽和塩化アンモニウムを加える。混合物をジエチルエーテル30mLで3回抽出する。一緒にしたエーテル抽出物を水およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧濃縮する。固体をメタノールで再結晶させる。
【０２０１】
化合物305｛5c｝:
2-(4-クロロフェニル)-4-[[1-ブチルスルホニル]オキシ]-5-アミノ-3(2H)-フラノン
5-アミノ-4-ヒドロキシ-2-(4-クロロフェニル)-フラン-3-オン5gの乾燥THF溶液にアルゴン下で乾燥THF中トリエチルアミンを加える。反応液を室温で30分間攪拌し、乾燥THF中塩化n-ブタンスルホニル1当量を滴下する。反応液を16時間攪拌した後、飽和塩化アンモニウムを加える。混合物をジエチルエーテル30mLで3回抽出し、一緒にしたエーテル抽出物を水およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧濃縮する。固体をメタノールで再結晶させる。
【０２０２】
化合物306｛6c｝:
2-(4-クロロフェニル)-4-[[1-プロピル-2-メチル-スルホニル]オキシ]-5-アミノ-3(2H)-フラノン
5-アミノ-4-ヒドロキシ-2-(4-クロロフェニル)-フラン-3-オン5gの乾燥THF溶液にアルゴン下で乾燥THF中トリエチルアミンを加える。反応液を室温で30分間攪拌し、乾燥THF中塩化i-ブタンスルホニル1当量を滴下する。反応液を16時間攪拌した後、飽和塩化アンモニウム溶液を加える。混合物をジエチルエーテル30mLで3回抽出する。一緒にしたエーテル抽出物を水およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧濃縮する。固体をメタノールで再結晶させる。
【０２０３】
化合物307｛7cまたはMO-I-1000｝:
2-(4-クロロフェニル)-4-[[フェニルスルホニル]オキシ]-5-アミノ-3(2H)-フラノン
5-アミノ-4-ヒドロキシ-2-(4-クロロフェニル)-フラン-3-オン5gをK2CO3 4.7gおよび塩化ベンゼンスルホニル4.25mLと共にアルゴンガス下、乾燥THF 50mL中で16時間攪拌した。反応液を濾過し、濾液を1N HCl 24mLで酸性化し、ジエチルエーテル20mLで5回抽出した。一緒にしたエーテル抽出物をブラインで洗浄し、Na2SO4で乾燥させた。濾過後、ヘキサン100mLを溶液に加えて析出物を得て、これを減圧濾過によって収集し、MeOHで再結晶させた。収率 = 17%。融点190〜195℃; FTIR 3099、1630; 
0006469009.tif 000055
HPLC保持時間: 32.2分。
【０２０４】
化合物308｛8a｝:
2-(2-クロロフェニル)-4-[[フェニルメチルスルホニル]オキシ]-5-アミノ-3(2H)-フラノン
5-アミノ-4-ヒドロキシ-2-(2-クロロフェニル)-フラン-3-オン5gの乾燥THF溶液にアルゴン下で乾燥THF中トリエチルアミンを加える。反応液を室温で30分間攪拌し、乾燥THF中塩化フェニルメチルスルホニル1当量を滴下する。反応液を16時間攪拌した後、飽和塩化アンモニウム溶液を加える。混合物をジエチルエーテル30mLで3回抽出する。一緒にしたエーテル抽出物を水およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧濃縮する。固体をメタノールで再結晶させる。
【０２０５】
化合物309｛8b｝:
2-(3-クロロフェニル)-4-[[フェニルメチルスルホニル]オキシ]-5-アミノ-3(2H)-フラノン
5-アミノ-4-ヒドロキシ-2-(3-クロロフェニル)-フラン-3-オン5gの乾燥THF溶液にアルゴン下で乾燥THF中トリエチルアミンを加える。反応液を室温で30分間攪拌し、乾燥THF中塩化フェニルメチルスルホニル1当量を滴下する。反応液を16時間攪拌した後、飽和塩化アンモニウム溶液を加える。混合物をジエチルエーテル30mLで3回抽出し、一緒にしたエーテル抽出物を水およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧濃縮する。固体をメタノールで再結晶させる。
【０２０６】
化合物310｛8cまたはMO-I-1100｝:
2-(4-クロロフェニル)-4-[[フェニルメチルスルホニル]オキシ]-5-アミノ-3(2H)-フラノン
5-アミノ-4-ヒドロキシ-2-(4-クロロフェニル)-フラン-3-オン2.5gを乾燥THF 100mL中で攪拌した。TEA 1.31mLを加え、30分後、塩化フェニルメチルスルホニル2.11gを反応液に加えた。反応液を24時間攪拌した。反応液を濾過し、濾液を1N HCl 24mLで酸性化し、ジエチルエーテル20mLで5回抽出した。一緒にしたエーテル抽出物をブラインで洗浄し、Na2SO4で乾燥させた。濾過後、溶液を減圧濃縮し、得られた固体をメタノールから再結晶させた。収率 = 27%。FTIR 2957、1636; 
0006469009.tif 000056
HPLC保持時間: 32.2分。
【０２０７】
化合物311｛8d｝:
2-(2,3-ジクロロフェニル)-4-[[フェニルメチルスルホニル]オキシ]-5-アミノ-3(2H)-フラノン
5-アミノ-4-ヒドロキシ-2-(2,3-ジクロロフェニル)-フラン-3-オン5gの乾燥THF溶液にアルゴン下で乾燥THF中トリエチルアミンを加える。反応液を室温で30分間攪拌し、乾燥THF中塩化フェニルメチルスルホニル1当量を滴下する。反応液を16時間攪拌した後、飽和塩化アンモニウム溶液を加える。混合物をジエチルエーテル30mLで3回抽出する。一緒にしたエーテル抽出物を水およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧濃縮する。固体をメタノールで再結晶させる。
【０２０８】
化合物312｛8e｝:
2-(2,4-ジクロロフェニル)-4-[[フェニルメチルスルホニル]オキシ]-5-アミノ-3(2H)-フラノン
5-アミノ-4-ヒドロキシ-2-(2,4-ジクロロフェニル)-フラン-3-オン5gの乾燥THF溶液にアルゴン下で乾燥THF中トリエチルアミンを加える。反応液を室温で30分間攪拌し、乾燥THF中塩化フェニルメチルスルホニル1当量を滴下する。反応液を16時間攪拌した後、飽和塩化アンモニウム溶液を加える。混合物をジエチルエーテル30mLで3回抽出する。一緒にしたエーテル抽出物を水およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧濃縮する。固体をメタノールで再結晶させる。
【０２０９】
化合物313｛8f｝:
2-(2,5-ジクロロフェニル)-4-[[フェニルメチルスルホニル]オキシ]-5-アミノ-3(2H)-フラノン
5-アミノ-4-ヒドロキシ-2-(2,5-ジクロロフェニル)-フラン-3-オン5gの乾燥THF溶液にアルゴン下で乾燥THF中トリエチルアミンを加える。反応液を室温で30分間攪拌し、乾燥THF中塩化フェニルメチルスルホニル1当量を滴下する。反応液を16時間攪拌した後、飽和塩化アンモニウム溶液を加える。混合物をジエチルエーテル30mLで3回抽出する。一緒にしたエーテル抽出物を水およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧濃縮する。固体をメタノールで再結晶させる。
【０２１０】
化合物314｛8g｝:
2-(3-カルボキシメチルフェニル)-4-[[フェニルメチルスルホニル]オキシ]-5-アミノ-3(2H)-フラノン
5-アミノ-4-ヒドロキシ-2-(3-カルボキシメチルフェニル)-フラン-3-オン5gの乾燥THF溶液にアルゴン下で乾燥THF中トリエチルアミンを加える。反応液を室温で30分間攪拌し、乾燥THF中塩化フェニルメチルスルホニル1当量を滴下する。反応液を16時間攪拌した後、飽和塩化アンモニウムを加える。混合物をジエチルエーテル30mLで3回抽出する。一緒にしたエーテル抽出物を水およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧濃縮する。固体をメタノールで再結晶させる。
【０２１１】
化合物315｛8h｝:
2-(3,4-ジクロロフェニル)-4-[[フェニルメチルスルホニル]オキシ]-5-アミノ-3(2H)-フラノン
5-アミノ-4-ヒドロキシ-2-(3,4-ジクロロフェニル)-フラン-3-オン5gの乾燥THF溶液にアルゴン下で乾燥THF中トリエチルアミンを加える。反応液を室温で30分間攪拌し、乾燥THF中塩化フェニルメチルスルホニル1当量を滴下する。反応液を16時間攪拌した後、飽和塩化アンモニウムを加える。混合物をジエチルエーテル30mLで3回抽出する。一緒にしたエーテル抽出物を水およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧濃縮する。固体をメタノールで再結晶させる。
【０２１２】
化合物316｛8i｝:
2-(3,5-ジクロロフェニル)-4-[[フェニルメチルスルホニル]オキシ]-5-アミノ-3(2H)-フラノン
5-アミノ-4-ヒドロキシ-2-(3,5-ジクロロフェニル)-フラン-3-オン5gの乾燥THF溶液にアルゴン下で乾燥THF中トリエチルアミンを加える。反応液を室温で30分間攪拌し、乾燥THF中塩化フェニルメチルスルホニル1当量を滴下する。反応液を16時間攪拌した後、飽和塩化アンモニウム溶液を加える。混合物をジエチルエーテル30mLで3回抽出する。一緒にしたエーテル抽出物を水およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧濃縮する。固体をメタノールで再結晶させる。
【０２１３】
化合物317｛8j｝:
2-(2-フルオロフェニル)-4-[[フェニルメチルスルホニル]オキシ]-5-アミノ-3(2H)-フラノン
5-アミノ-4-ヒドロキシ-2-(2-フルオロフェニル)-フラン-3-オン5gの乾燥THF溶液にアルゴン下で乾燥THF中トリエチルアミンを加える。反応液を室温で30分間攪拌し、乾燥THF中塩化フェニルメチルスルホニル1当量を滴下する。反応液を16時間攪拌した後、飽和塩化アンモニウム溶液を加える。混合物をジエチルエーテル30mLで3回抽出する。一緒にしたエーテル抽出物を水およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧濃縮する。固体をメタノールで再結晶させる。
【０２１４】
化合物318｛8k｝:
2-(3-フルオロフェニル)-4-[[フェニルメチルスルホニル]オキシ]-5-アミノ-3(2H)-フラノン
5-アミノ-4-ヒドロキシ-2-(3-フルオロフェニル)-フラン-3-オン5gの乾燥THF溶液にアルゴン下で乾燥THF中トリエチルアミンを加える。反応液を室温で30分間攪拌し、乾燥THF中塩化フェニルメチルスルホニル1当量を滴下する。反応液を16時間攪拌した後、飽和塩化アンモニウム溶液を加える。混合物をジエチルエーテル30mLで3回抽出する。一緒にしたエーテル抽出物を水およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧濃縮する。固体をメタノールで再結晶させる。
【０２１５】
化合物319｛8l｝:
2-(4-フルオロフェニル)-4-[[フェニルメチルスルホニル]オキシ]-5-アミノ-3(2H)-フラノン
5-アミノ-4-ヒドロキシ-2-(4-フルオロフェニル)-フラン-3-オン5gの乾燥THF溶液にアルゴン下で乾燥THF中トリエチルアミンを加える。反応液を室温で30分間攪拌し、乾燥THF中塩化フェニルメチルスルホニル1当量を滴下する。反応液を16時間攪拌した後、飽和塩化アンモニウム溶液を加える。混合物をジエチルエーテル30mLで3回抽出する。一緒にしたエーテル抽出物を水およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧濃縮する。固体をメタノールで再結晶させる。
【０２１６】
化合物320｛8m｝:
2-(2,3-ジフルオロフェニル)-4-[[フェニルメチルスルホニル]オキシ]-5-アミノ-3(2H)-フラノン
5-アミノ-4-ヒドロキシ-2-(2,3-ジフルオロフェニル)-フラン-3-オン5gの乾燥THF溶液にアルゴン下で乾燥THF中トリエチルアミンを加える。反応液を室温で30分間攪拌し、乾燥THF中塩化フェニルメチルスルホニル1当量を滴下する。反応液を16時間攪拌した後、飽和塩化アンモニウム溶液を加える。混合物をジエチルエーテル30mLで3回抽出する。一緒にしたエーテル抽出物を水およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧濃縮する。固体をメタノールで再結晶させる。
【０２１７】
化合物321｛8n｝:
2-(2,4-ジフルオロフェニル)-4-[[フェニルメチルスルホニル]オキシ]-5-アミノ-3(2H)-フラノン
5-アミノ-4-ヒドロキシ-2-(2,4-ジフルオロフェニル)-フラン-3-オン5gの乾燥THF溶液にアルゴン下で乾燥THF中トリエチルアミンを加える。反応液を室温で30分間攪拌し、乾燥THF中塩化フェニルメチルスルホニル1当量を滴下する。反応液を16時間攪拌した後、飽和塩化アンモニウム溶液を加える。混合物をジエチルエーテル30mLで3回抽出する。一緒にしたエーテル抽出物を水およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧濃縮する。固体をメタノールで再結晶させる。
【０２１８】
化合物322｛8o｝:
2-(2,5-ジフルオロフェニル)-4-[[フェニルメチルスルホニル]オキシ]-5-アミノ-3(2H)-フラノン
5-アミノ-4-ヒドロキシ-2-(2,5-ジフルオロフェニル)-フラン-3-オン5gの乾燥THF溶液にアルゴン下で乾燥THF中トリエチルアミンを加える。反応液を室温で30分間攪拌し、乾燥THF中塩化フェニルメチルスルホニル1当量を滴下する。反応液を16時間攪拌した後、飽和塩化アンモニウム溶液を加える。混合物をジエチルエーテル30mLで3回抽出する。一緒にしたエーテル抽出物を水およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧濃縮する。固体をメタノールで再結晶させる。
【０２１９】
化合物323｛8p｝:
2-(2,6-ジフルオロフェニル)-4-[[フェニルメチルスルホニル]オキシ]-5-アミノ-3(2H)-フラノン
5-アミノ-4-ヒドロキシ-2-(2,6-ジフルオロフェニル)-フラン-3-オン5gの乾燥THF溶液にアルゴン下で乾燥THF中トリエチルアミンを加える。反応液を室温で30分間攪拌し、乾燥THF中塩化フェニルメチルスルホニル1当量を滴下する。反応液を16時間攪拌した後、飽和塩化アンモニウム溶液を加える。混合物をジエチルエーテル30mLで3回抽出する。一緒にしたエーテル抽出物を水およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧濃縮する。固体をメタノールで再結晶させる。
【０２２０】
化合物324｛8q｝:
2-(3,4-ジフルオロフェニル)-4-[[フェニルメチルスルホニル]オキシ]-5-アミノ-3(2H)-フラノン
5-アミノ-4-ヒドロキシ-2-(3,4-ジフルオロフェニル)-フラン-3-オン5gの乾燥THF溶液にアルゴン下で乾燥THF中トリエチルアミンを加える。反応液を室温で30分間攪拌し、乾燥THF中塩化フェニルメチルスルホニル1当量を滴下する。反応液を16時間攪拌した後、飽和塩化アンモニウム溶液を加える。混合物をジエチルエーテル30mLで3回抽出する。一緒にしたエーテル抽出物を水およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧濃縮する。固体をメタノールで再結晶させる。
【０２２１】
化合物325｛8r｝:
2-(3,5-ジフルオロフェニル)-4-[[フェニルメチルスルホニル]オキシ]-5-アミノ-3(2H)-フラノン
5-アミノ-4-ヒドロキシ-2-(3,5-ジフルオロフェニル)-フラン-3-オン5gの乾燥THF溶液にアルゴン下で乾燥THF中トリエチルアミンを加える。反応液を室温で30分間攪拌し、乾燥THF中塩化フェニルメチルスルホニル1当量を滴下する。反応液を16時間攪拌した後、飽和塩化アンモニウム溶液を加える。混合物をジエチルエーテル30mLで3回抽出する。一緒にしたエーテル抽出物を水およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧濃縮する。固体をメタノールで再結晶させる。
【０２２２】
化合物355｛8av｝
2-(4-トリフルオロメチルフェニル)-4-[[フェニルメチルスルホニル]オキシ]-5-アミノ-3(2H)-フラノン
5-アミノ-4-ヒドロキシ-2-(4-トリフルオロメチルフェニル)-フラン-3-オン5gの乾燥THF溶液にアルゴン下で乾燥THF中トリエチルアミンを加える。反応液を室温で30分間攪拌し、乾燥THF中塩化フェニルメチルスルホニル1当量を滴下する。反応液を16時間攪拌した後、飽和塩化アンモニウム溶液を加える。混合物をジエチルエーテル30mLで3回抽出する。一緒にしたエーテル抽出物を水およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧濃縮する。固体をメタノールで再結晶させる。
【０２２３】
化合物358｛8ay｝:
2-(4-ニトリルフェニル)-4-[[フェニルメチルスルホニル]オキシ]-5-アミノ-3(2H)-フラノン
5-アミノ-4-ヒドロキシ-2-(4-ニトリルフェニル)-フラン-3-オン5gの乾燥THF溶液にアルゴン下で乾燥THF中トリエチルアミンを加える。反応液を室温で30分間攪拌し、乾燥THF中塩化フェニルメチルスルホニル1当量を滴下する。反応液を16時間攪拌した後、飽和塩化アンモニウム溶液を加える。混合物をジエチルエーテル30mLで3回抽出する。一緒にしたエーテル抽出物を水およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧濃縮する。固体をメタノールで再結晶させる。
【０２２４】
化合物359｛8az｝:
2-(3-ニトリルフェニル)-4-[[フェニルメチルスルホニル]オキシ]-5-アミノ-3(2H)-フラノン
5-アミノ-4-ヒドロキシ-2-(3-ニトリルフェニル)-フラン-3-オン5gの乾燥THF溶液にアルゴン下で乾燥THF中トリエチルアミンを加える。反応液を室温で30分間攪拌し、乾燥THF中塩化フェニルメチルスルホニル1当量を滴下する。反応液を16時間攪拌した後、飽和塩化アンモニウム溶液を加える。混合物をジエチルエーテル30mLで3回抽出する。一緒にしたエーテル抽出物を水およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧濃縮する。固体をメタノールで再結晶させる。
【０２２５】
化合物368｛17c｝:
2-(4-クロロフェニル)-4-[[4-フルオロフェニルメチルスルホニル]オキシ]-5-アミノ-3(2H)-フラノン
5-アミノ-4-ヒドロキシ-2-(4-クロロフェニル)-フラン-3-オン5gの乾燥THF溶液にアルゴン下で乾燥THF中トリエチルアミンを加える。反応液を室温で30分間攪拌し、乾燥THF中塩化4-フルオロフェニルメチルスルホニル1当量を滴下する。反応液を16時間攪拌した後、飽和塩化アンモニウム溶液を加える。混合物をジエチルエーテル30mLで3回抽出する。一緒にしたエーテル抽出物を水およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧濃縮する。固体をメタノールで再結晶させる。
【０２２６】
化合物386｛35c｝:
2-(4-クロロフェニル)-4-[[フェノキシカルボニル]オキシ]-5-アミノ-3(2H)-フラノン
5-アミノ-4-ヒドロキシ-2-(4-クロロフェニル)-フラン-3-オン5gの乾燥THF溶液にアルゴン下で乾燥THF中トリエチルアミンを加える。反応液を室温で30分間攪拌し、乾燥THF中クロロギ酸フェニル1当量を滴下する。反応液を16時間攪拌した後、飽和塩化アンモニウム溶液を加える。混合物をジエチルエーテル30mLで3回抽出する。一緒にしたエーテル抽出物を水およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧濃縮する。固体をメタノールで再結晶させる。
【０２２７】
化合物388｛37c｝:
2-(4-クロロフェニル)-4-[[フェニルアミノチオカルボニル]オキシ]-5-アミノ-3(2H)-フラノン
5-アミノ-4-ヒドロキシ-2-(4-クロロフェニル)-フラン-3-オン5gおよび炭酸ナトリウム(1.7g)の脱イオン水(30mL)中攪拌溶液にフェニルイソチオシアネートを加える。反応液を室温で24時間攪拌する。飽和塩化アンモニウム溶液を加え、混合物をジエチルエーテル30mLで3回抽出する。一緒にしたエーテル抽出物を水およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧濃縮する。固体をメタノールで再結晶させる。
【０２２８】
実施例2
表4の化合物の合成および特徴づけ
一般的手順
三つ口ガラス丸底フラスコ中の脱イオン水(30mL)中炭酸ナトリウム(1.7g)にシアン化カリウム(0.91g)を加え、氷浴に入れた。真空ポンプおよび窒素ガスを使用して系を繰り返しパージした。次にグリオキサール(3.72g)をO2の導入なしで系に加え、反応物を攪拌によって溶解させた。共栓付き管中で適切なアリールアルデヒド(7.11ミリモル)を1,4-ジオキサン(5mL)に加え、パージした後、系に滴下した。次に系を氷浴から外し、室温で1時間攪拌した。1時間後、酢酸(5mL)の滴下を、酢酸添加による気泡がもはや見えなくなるまで、または溶液がpH 6未満になるまで行った。溶液を減圧濾過し、氷冷水(5mL)、メタノール(5mL)およびエーテル(5mL)で洗浄した後、風乾させた。粗材料をメタノールで再結晶させ、減圧濾過によって収集し、ジエチルエーテルですすぎ、減圧乾燥させた。
【０２２９】
化合物401｛1c｝:
5-アミノ-4-ヒドロキシ-2-(4-クロロフェニル)-フラン-3-オン
収率 = 70%。融点221〜2℃; FTIR 3079、1638; 
0006469009.tif 000057
HPLC保持時間: 16.7分。
【０２３０】
化合物455｛1j｝:
5-アミノ-4-ヒドロキシ-2-(2-フルオロフェニル)-フラン-3-オン
収率 = 84%。融点160〜3℃; FTIR 3079、1638; 
0006469009.tif 000058
HPLC保持時間: 11.42分。
【０２３１】
化合物456｛1k｝:
5-アミノ-4-ヒドロキシ-2-(3-フルオロフェニル)-フラン-3-オン
収率 = 60%。融点168℃; FTIR 3356、3129; 
0006469009.tif 000059
HPLC保持時間: 12.63分。
【０２３２】
化合物457｛1l｝:
5-アミノ-4-ヒドロキシ-2-(4-フルオロフェニル)-フラン-3-オン
収率 = 68%。融点160℃; FTIR 3351、3138; 
0006469009.tif 000060
HPLC保持時間: 11.88分。
【０２３３】
化合物458｛1m｝:
5-アミノ-4-ヒドロキシ-2-(2,3-ジフルオロフェニル)-フラン-3-オン
収率 = 76%。融点193℃; FTIR 3391、3277、1539; 
0006469009.tif 000061
HPLC保持時間: 13.02分。
【０２３４】
化合物459｛1n｝:
5-アミノ-4-ヒドロキシ-2-(2,4-ジフルオロフェニル)-フラン-3-オン
収率 = 67%。融点182〜3℃; FTIR 3252、1608; 
0006469009.tif 000062
HPLC保持時間: 12.63分。
【０２３５】
化合物460｛1o｝:
5-アミノ-4-ヒドロキシ-2-(2,5-ジフルオロフェニル)-フラン-3-オン
収率 = 80%。融点196℃; FTIR 3391、3267; 
0006469009.tif 000063
HPLC保持時間: 12.09分。
【０２３６】
化合物461｛1p｝:
5-アミノ-4-ヒドロキシ-2-(2,6-ジフルオロフェニル)-フラン-3-オン
収率 = 70%。融点159〜60℃; FTIR 3535、3406; 
0006469009.tif 000064
HPLC保持時間: 11.30分。
【０２３７】
化合物462｛1q｝:
5-アミノ-4-ヒドロキシ-2-(3,4-ジフルオロフェニル)-フラン-3-オン
収率 = 76%。融点190〜4℃; FTIR 3322、3124; 
0006469009.tif 000065
HPLC保持時間: 13.79分。
【０２３８】
化合物463｛1r｝:
5-アミノ-4-ヒドロキシ-2-(3,5-ジフルオロフェニル)-フラン-3-オン
収率 = 58%。融点190〜1℃; FTIR 3346、3143; 
0006469009.tif 000066
HPLC保持時間: 14.00分。
【０２３９】
化合物402｛40cまたは2c｝:
2-(4-クロロフェニル)-4-(アセトキシ)-5-アミノ-3(2H)-フラノン
5-アミノ-4-ヒドロキシ-2-(4-クロロフェニル)-フラン-3-オン1gを窒素ガス下、無水酢酸中で16時間攪拌した。反応液を-78℃に冷却し、凍結乾燥させた。乾燥塊をMeOHから再結晶させた。収率 = 44%。融点221〜2℃; FTIR 3030、1628; 
0006469009.tif 000067
HPLC保持時間: 19.7分。
【０２４０】
化合物307｛3c、7cと重複、同一｝
2-(4-クロロフェニル)-4-[[フェニルスルホニル]オキシ]-5-アミノ-3(2H)-フラノン
5-アミノ-4-ヒドロキシ-2-(4-クロロフェニル)-フラン-3-オン5gをK2CO3 4.7gおよび塩化ベンゼンスルホニル4.25mLと共に窒素ガス下、乾燥THF 50mL中で16時間攪拌した。反応液を濾過し、濾液を1N HCl 24mLで酸性化し、ジエチルエーテル20mLで5回抽出した。一緒にしたエーテル抽出物をブラインで洗浄し、Na2SO4で乾燥させた。濾過後、ヘキサン100mLを溶液に加えて析出物を得て、これを減圧濾過によって収集し、MeOHで再結晶させた。収率 = 17%。融点190〜195℃; FTIR 3034、1630; 
0006469009.tif 000068
HPLC保持時間: 32.2分。
【０２４１】
化合物404｛41cまたは4c｝:
N-(3,4-ジヒドロキシ-5-(4-クロロフェニル)-2-フラニル)メタンスルホンアミド
5-アミノ-4-ヒドロキシ-2-(4-クロロフェニル)-フラン-3-オン5gをK2CO3 4.6gおよび塩化メタンスルホニル1.5mLと共に窒素ガス下、乾燥THF 50mL中で16時間攪拌した。反応液を濾過し、濾液を1N HCl 24mLで酸性化し、ジエチルエーテル20mLで5回抽出した。一緒にしたエーテル抽出物をブラインで洗浄し、Na2SO4で乾燥させた。濾過後、ヘキサン100mLを溶液に加えて析出物を得て、これを減圧濾過によって収集し、MeOHで再結晶させた。材料をカラムクロマトグラフィーでさらに精製した。収率 = 18%。融点175℃; FTIR 3169、1616; 
0006469009.tif 000069
HPLC保持時間: 25.2分。
【０２４２】
化合物405｛42cまたは5c｝:
N-(3,4-ジヒドロキシ-5-(4-クロロフェニル)-2-フラニル)エタンスルホンアミド
5-アミノ-4-ヒドロキシ-2-(4-クロロフェニル)-フラン-3-オン5gをK2CO3 4.6gおよび塩化エタンスルホニル2.1mLと共に窒素ガス下、乾燥THF 50mL中で16時間攪拌した。反応液を濾過し、濾液を1N HCl 24mLで酸性化し、ジエチルエーテル20mLで5回抽出した。一緒にしたエーテル抽出物をブラインで洗浄し、Na2SO4で乾燥させた。濾過後、ヘキサン100mLを溶液に加えて析出物を得て、これを減圧濾過によって収集し、酢酸エチルで再結晶させた。収率 = 21%。融点183〜185℃; FTIR 3181、1616; 
0006469009.tif 000070
HPLC保持時間: 29.9分。
【０２４３】
化合物406｛43cまたは6c｝:
N-(3,4-ジヒドロキシ-5-(4-クロロフェニル)-2-フラニル)ベンゼンスルホンアミド
5-アミノ-4-ヒドロキシ-2-(4-フルオロフェニル)-フラン-3-オン5gを乾燥窒素下、乾燥THF 50mL中で攪拌する。反応液を氷浴中で冷却し、トリエチルアミン1当量を滴下する。反応液を室温に昇温させ、クロロトリメチルシランを滴下し、反応液を水浴で30分間緩やかに還流させる。塩化ベンゼンスルホニル1当量を滴下する。TEA 1当量を滴下し、反応液を水浴で1時間緩やかに還流させる。反応液を室温に冷却し、フッ化テトラブチルアンモニウム1当量を加え、30分間攪拌する。飽和硫酸アンモニウム溶液を加えて反応液を反応停止させ、反応液をジエチルエーテル20mLで3回抽出する。一緒にしたエーテル抽出物を水およびブラインで洗浄し、エーテルを硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させて固体を得て、これをメタノールで再結晶させる。
【０２４４】
化合物407｛44cまたは7c｝:
N-(3,4-ジヒドロキシ-5-(4-クロロフェニル)-2-フラニル)アセトアミド
5-アミノ-4-ヒドロキシ-2-(4-フルオロフェニル)-フラン-3-オン5gを乾燥窒素下、乾燥THF 50mL中で攪拌する。反応液を氷浴中で冷却し、トリエチルアミン1当量を滴下する。反応液を室温に昇温させ、クロロトリメチルシランを滴下し、反応液を水浴で30分間緩やかに還流させる。塩化アセチル1当量を滴下する。TEA 1当量を滴下し、反応液を水浴で1時間緩やかに還流させる。反応液を室温に冷却し、フッ化テトラブチルアンモニウム1当量を加え、30分間攪拌する。飽和硫酸アンモニウム溶液を加えて反応液を反応停止させ、反応液をジエチルエーテル20mLで3回抽出する。一緒にしたエーテル抽出物を水およびブラインで洗浄し、エーテルを硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させて固体を得て、これをメタノールで再結晶させる。
【０２４５】
化合物409｛46cまたは9c｝:
N-(3,4-ジヒドロキシ-5-(4-クロロフェニル)-2-フラニル)ベンズアミド
5-アミノ-4-ヒドロキシ-2-(4-フルオロフェニル)-フラン-3-オン5gを乾燥窒素下、乾燥THF 50mL中で攪拌する。反応液を氷浴中で冷却し、トリエチルアミン1当量を滴下する。反応液を室温に昇温させ、クロロトリメチルシランを滴下し、反応液を水浴で30分間緩やかに還流させる。塩化ベンゾイル1当量を滴下する。TEA 1当量を滴下し、反応液を水浴で1時間緩やかに還流させる。反応液を室温に冷却し、フッ化テトラブチルアンモニウム1当量を加え、30分間攪拌する。飽和硫酸アンモニウム溶液を加えて反応液を反応停止させ、反応液をジエチルエーテル20mLで3回抽出する。一緒にしたエーテル抽出物を水およびブラインで洗浄し、エーテルを硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させて固体を得て、これをメタノールで再結晶させる。
【０２４６】
化合物412｛48cまたは12c｝:
N-(3,4-ジヒドロキシ-5-(4-クロロフェニル)-2-フラニル)スクシンイミド
5-アミノ-4-ヒドロキシ-2-(4-フルオロフェニル)-フラン-3-オン5gを乾燥窒素下、ピリジン50mL中で攪拌する。無水コハク酸1当量を加え、反応液を水浴で1時間緩やかに還流させる。飽和硫酸アンモニウム溶液を加えて反応液を反応停止させ、反応液をジエチルエーテル20mLで3回抽出する。一緒にしたエーテル抽出物を飽和炭酸水素塩溶液およびブラインで洗浄し、エーテルを硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させて固体を得て、これをメタノールで再結晶させる。
【０２４７】
（表５）本明細書に基づくヌクレオチド配列およびアミノ酸配列の表
0006469009.tif 000071
【０２４８】
他の態様
本発明をその好適な態様を参照して特に示しかつ説明したが、当業者は、添付の特許請求の範囲に包含される本発明の範囲を逸脱することなく本発明の形態および詳細の様々な変更を行うことができることを理解するであろう。
【０２４９】
参考文献
本明細書において言及される特許文献および科学文献は、当業者が利用可能な知識を規定する。本明細書において引用されるすべての米国特許および公開または未公開の米国特許出願は参照により組み入れられる。本明細書において引用されるすべての公開の外国特許および特許出願は参照により本明細書に組み入れられる。本明細書において引用されるすべての他の公開の参考文献、文献、原稿および科学文献は参照により本明細書に組み入れられる。
特許文献
0006469009.tif 000072
学術論文
0006469009.tif 000073
【図１】
0006469009.tif 000084
【図２】
0006469009.tif 000085
【図３Ａ】
0006469009.tif 000086
【図３Ｂ】
0006469009.tif 000087
【図３Ｃ】
0006469009.tif 000088
【図３Ｄ】
0006469009.tif 000089
【図４】
0006469009.tif 000090
【図５】
0006469009.tif 000091
【図６】
0006469009.tif 000092
【図７】
0006469009.tif 000093
【図８】
0006469009.tif 000094
【図９】
0006469009.tif 000095
【図１０Ａ】
0006469009.tif 000096
【図１０Ｂ】
0006469009.tif 000097
【図１０Ｃ】
0006469009.tif 000098
【図１１Ａ】
0006469009.tif 000099
【図１１Ｂ】
0006469009.tif 000100
【図１１Ｃ】
0006469009.tif 000101
【図１１Ｄ】
0006469009.tif 000102
【図１２】
0006469009.tif 000103
【図１３】
0006469009.tif 000104