(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
肝臓水解物を有効成分とする高脂肪食及びアルコール摂取下の膵臓機能改善剤。
【請求項２】
インスリン分泌障害改善剤である請求項１記載の膵臓機能改善剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、肝臓機能改善剤及び／又は膵臓機能改善剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
膵臓は、多種類の消化酵素を生成分泌するとともに、血糖値をコントロールするインスリン及びグルカゴンを分泌する。このうち、インスリンは血糖値を低下させるホルモンであり、インスリンの分泌が低下すると糖尿病になる。
インスリンの分泌を促進する薬剤としては、スルホニルウレア薬、ＤＰＰIV阻害薬、ＧＬＰ−１アナログなどが知られているが、低血糖、体重増加等の副作用が報告されている。【０００３】
また、肝臓は、栄養素の代謝及び貯蔵の他、胆汁の生成、解毒、排泄等の機能を有する。肝臓疾患としては、ウイルス性肝炎、アルコール性肝炎、薬剤性肝炎、ＮＡＳＨ、肝臓癌、慢性肝炎、肝硬変等があるが、肝臓の機能が低下すると回復し難いという特徴がある。
肝臓疾患治療剤としては、インターフェロンやグルタチオン、グリチルリチン製剤等の肝保護剤が知られている。また、多くの肝臓疾患治療薬のスクリーニングには、四塩化炭素肝障害モデル等の薬物肝炎モデルが採用されているのが現状である。【０００４】
ところで、肝臓水解物が慢性肝疾患における肝機能の改善作用を有することは知られている（非特許文献１）。当該作用は、前述の四塩化炭素肝障害モデルによる効果に基づくものであると考えられる（特許文献１）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開２００２−８０３８８号公報
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】ゴスペールレバー腸溶錠パンフレット
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
しかしながら、従来の肝疾患治療薬のスクリーニング方法は、薬物肝障害モデルであり、実際の肝臓機能が低下した状態を反映したものではない。また、肝臓機能が低下した状態は、通常の食事を含めた生活習慣から生じるものが多く、このような状態を改善する医薬は存在しない。また、膵臓の機能低下、すなわち血糖値の上昇も、生活習慣から生じるものが多く、このような状態を改善する安全な薬剤も求められている。
従って、本発明の課題は、通常の生活習慣から生じる膵臓機能及び／又は肝臓機能を改善する薬剤を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
そこで本発明者は、四塩化炭素のような薬物により生じる肝臓や膵臓の機能低下ではなく、食習慣により生じる肝臓及び膵臓の機能低下を改善する薬物を探索すべく種々検討したところ、ラットに高脂肪食及びアルコールを摂取させることにより、短期間で肝臓機能及び膵臓機能が低下するモデルの作出に成功し、このモデルを用いることにより肝臓水解物が高脂肪食及びアルコール摂取下の肝臓機能及び／又は膵臓機能の改善剤として有用であることを見出し、本発明を完成した。【０００９】
すなわち、本発明は、次の〔１〕〜〔20〕を提供するものである。【００１０】
〔１〕肝臓水解物を有効成分とする高脂肪食及びアルコール摂取下の肝臓機能改善剤。
〔２〕肝臓水解物を有効成分とする膵臓機能改善剤。
〔３〕高脂肪食及びアルコール摂取下の膵臓機能改善剤である〔２〕記載の膵臓機能改善剤。
〔４〕インスリン分泌障害改善剤である〔２〕又は〔３〕記載の膵臓機能改善剤。
〔５〕肝臓水解物を有効成分とする高脂肪食及びアルコール摂取下の肝臓機能及び膵臓機能改善剤。
〔６〕高脂肪食及びアルコール摂取下の肝臓機能を改善するための肝臓水解物。
〔７〕膵臓機能を改善するための肝臓水解物。
〔８〕高脂肪食及びアルコール摂取下の膵臓機能を改善するためのものである〔７〕記載の肝臓水解物。
〔９〕インスリン分泌障害を改善するためのものである〔７〕又は〔８〕記載の肝臓水解物。
〔10〕高脂肪食及びアルコール摂取下の肝臓機能及び膵臓機能を改善するための肝臓水解物。
〔11〕高脂肪食及びアルコール摂取下の肝臓機能改善剤製造のための肝臓水解物の使用。
〔12〕膵臓機能改善剤製造のための肝臓水解物の使用。
〔13〕高脂肪食及びアルコール摂取下の膵臓機能改善剤製造のための使用である〔12〕記載の使用。
〔14〕インスリン分泌障害改善剤製造のための使用である〔12〕又は〔13〕記載の使用。
〔15〕高脂肪食及びアルコール摂取下の肝臓機能及び膵臓機能改善剤製造のための肝臓水解物の使用。
〔16〕肝臓水解物を投与することを特徴とする高脂肪食及びアルコール摂取下の肝臓機能の改善方法。
〔17〕肝臓水解物を投与することを特徴とする膵臓機能の改善方法。
〔18〕高脂肪食及びアルコール摂取下の膵臓機能の改善方法である〔17〕記載の方法。
〔19〕インスリン分泌障害の改善方法である〔17〕又は〔18〕記載の方法。
〔20〕肝臓水解物を投与することを特徴とする高脂肪食及びアルコール摂取下の肝臓機能及び膵臓機能の改善方法。
【発明の効果】
【００１１】
本発明の肝臓機能及び／又は膵臓機能改善剤は、通常の食生活である高脂肪食及びアルコール摂取によって生じる肝臓機能及び／又は膵臓機能を改善するとともに、安全性も高く長期間摂取可能である。また、肝臓水解物の高脂肪食及びアルコール摂取によって生じる肝臓機能及び／又は膵臓機能改善作用は、従来の四塩化炭素肝障害モデルに対する投与量よりも低用量で有効であり、その作用は明確に相違するものである。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】肝臓水解物の高脂肪食及びアルコール摂取下でのＡＳＴ活性及びＡＬＴ活性の上昇抑制効果を示す図である。
【図２】肝臓水解物の高脂肪食及びアルコール摂取下でのインスリン分泌障害改善効果を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
本発明の肝臓機能及び／又は膵臓機能改善剤の有効成分は、肝臓水解物である。肝臓水解物は、肝臓加水分解物、肝臓エキス、肝臓分解エキス、肝水解物とも呼ばれるが、肝臓を消化酵素等により加水分解して得られるものであり、肝機能の改善薬として用いられているものである。原料である肝臓としては、ウシ、ブタ、カツオ、クジラ等の新鮮な非ヒト動物の肝臓が用いられる。得られた加水分解物は、濃縮して用いるのが好ましい。好ましくは、前記医薬品として定められている肝臓水解物が挙げられる。
【００１４】
肝臓水解物には、低分子ペプチドを主成分として各種アミノ酸、ヌクレオチド、ビタミン、ミネラル等を含む。より詳細には、アミノ酸１９〜７８質量％、ペプチド及びタンパク１７〜７３質量％、糖類１．８〜１１質量％、脂質０.００５〜０．０４質量％、核酸０.７〜２．５質量％、無機物１．６〜５．４質量％、ビタミン０．０３〜０．２質量％、グルタチオン０.８質量％以下を含むものが好ましい。また、アミノ酸２３〜６５質量％、ペプチド及びタンパク２０〜６１質量％、糖類２．２〜８．６質量％、脂質０.００６〜０．０３５質量％、核酸０.９〜２．１質量％、無機物１．９〜４．５質量％、ビタミン０．０４〜０．１５質量％、グルタチオン０．７質量％以下を含むものがより好ましく、アミノ酸２９〜５２質量％、ペプチド及びタンパク２５〜４９質量％、糖類２．８〜６．９質量％、脂質０.００８〜０．０３質量％、核酸１．１〜１．７質量％、無機物２．４〜３．６質量％、ビタミン０．０５〜０．１２質量％、グルタチオン０．６質量％以下を含むものが更に好ましい。
【００１５】
これらの成分のうち、アミノ酸組成としては、Ａｌａ １７〜６８mg／ｇ、Ａｒｇ ０．６〜４．４mg／ｇ、Ａｓｐ ９〜４８mg／ｇ、Ｃｙｓｔｉｎｅ ５mg／ｇ以下、Ｇｌｕ １８〜６３mg／ｇ、Ｇｌy １０〜３９mg／ｇ、Ｈｉｓ ３〜１７mg／ｇ、Ｉｌｅ １４〜５６mg／ｇ、Ｌｅｕ ２６〜９８mg／ｇ、Ｌｙｓ １５〜６５mg／ｇ、Ｍｅｔ ０．３〜２０mg／ｇ、Ｐｈｅ １３〜４６mg／ｇ、Ｐｒｏ １０〜４８mg／ｇ、Ｓｅｒ １２〜４９mg／ｇ、Ｔｈｒ １２〜４５mg／ｇ、Ｔｒｐ ３〜１３mg／ｇ、Ｔｙｒ １．６〜４１mg／ｇ、Ｖａｌ １８〜７１mg／ｇが好ましい。また、Ａｌａ ２１〜５７mg／ｇ、Ａｒｇ ０．８〜３．６mg／ｇ、Ａｓｐ １１〜４０mg／ｇ、Ｃｙｓｔｉｎｅ ４mg／ｇ以下、Ｇｌｕ ２２〜５３mg／ｇ、Ｇｌｙ １３〜３２mg／ｇ、Ｈｉｓ ４〜１４mg／ｇ、Ｉｌｅ １７〜４７mg／ｇ、Ｌｅｕ ３２〜８２mg／ｇ、Ｌｙｓ １８〜５４mg／ｇ、Ｍｅｔ ０．４〜１７mg／ｇ、Ｐｈｅ １５〜３８mg／ｇ、Ｐｒｏ １２〜４０mg／ｇ、Ｓｅｒ １５〜４１mg／ｇ、Ｔｈｒ １４〜３８mg／ｇ、Ｔｒｐ ３．８〜１１mg／ｇ、Ｔｙｒ １．９〜３４mg／ｇ、Ｖａｌ ２１〜５９mg／ｇがより好ましく、Ａｌａ ２６〜４５mg／ｇ、Ａｒｇ １〜２．９mg／ｇ、Ａｓｐ １４〜３２mg／ｇ、Ｃｙｓｔｉｎｅ ３mg／ｇ以下、Ｇｌｕ ２７〜４２mg／ｇ、Ｇｌy １６〜２６mg／ｇ、Ｈｉｓ ５〜１１mg／ｇ、Ｉｌｅ ２１〜４０mg／ｇ、Ｌｅｕ ４０〜６６mg／ｇ、Ｌｙｓ ２２〜４３mg／ｇ、Ｍｅｔ ０．５〜１４mg／ｇ、Ｐｈｅ １９〜３１mg／ｇ、Ｐｒｏ １５〜３２mg／ｇ、Ｓｅｒ １８〜３３mg／ｇ、Ｔｈｒ １８〜３０mg／ｇ、Ｔｒｐ ４．８〜８．４mg／ｇ、Ｔｙｒ ２．４〜２７mg／ｇ、Ｖａｌ ２７〜４８mg／ｇが更に好ましい。
【００１６】
肝臓水解物は、慢性肝疾患における肝機能や四塩化炭素肝障害を改善することは知られているが、高脂肪食及びアルコール摂取下の肝臓機能や膵臓機能を改善することは知られていない。
【００１７】
後述の実施例に示すように、肝臓水解物は、高脂肪食とアルコール摂取という通常の食習慣によって生じる肝臓機能及び膵臓機能を改善する作用を有する。この肝臓水解物の効果は、例えば特許文献１の四塩化炭素肝障害に対する効果よりも、低用量で生じる。すなわち、特許文献１の四塩化炭素肝障害に対しては、食餌に２％添加して有効であったのに対し、高脂肪食及びアルコール摂取下の肝障害に対しては、食餌に低濃度の０．０３１％添加して有効であった。従って、肝臓水解物の高脂肪食及びアルコール摂取下の肝臓機能改善効果は、四塩化炭素肝障害モデルに対する効果とは、その作用機序が異なるものと考えられる。
【００１８】
本発明における肝臓機能としては、ＡＳＴ活性及びＡＬＴ活性上昇抑制作用が挙げられる。また、本発明における膵臓機能としては、インスリン分泌障害改善作用が挙げられる。
【００１９】
本発明の肝臓機能及び／又は膵臓機能改善剤は、経口投与、経皮投与、経腸投与、経静脈投与等によって投与できるが、経口投与がより好ましい。経口投与用の製剤としては、液剤、錠剤、散剤、細粒剤、顆粒剤、カプセル剤等が挙げられるが、液剤、錠剤が好ましく、液剤がより好ましい。
【００２０】
これらの経口投与製剤とするには、乳糖、マンニトール、トウモロコシデンプン、結晶セルロースなどの賦形剤、セルロース誘導体、アラビアゴム、ゼラチンなどの結合剤、カルボキシメチルセルロースカルシウム等の崩壊剤、タルク、ステアリン酸マグネシウムなどの滑沢剤、非イオン界面活性剤等の溶解補助剤、矯味剤、甘味剤、安定化剤、pH調整剤、水、エタノール、プロピレングリコール、グリセリン等を使用することができる。また、ヒドロキシメチルセルロースフタレート、ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートサクシネート、セルロースアセテートフタレート、メタクリレートコポリマーなどの被覆剤を用いてもよい。
【００２１】
また、本発明の肝臓機能及び/又は膵臓機能改善剤には、他の有効成分を配合することもできる。他の有効成分としては、ビタミンＢ1類； チアミン、硝酸チアミン、塩酸チアミン、フルスルチアミン、ビスベンチアミン、ベンホチアミン、チアミンジスルフィド、ジセチアミン、チアミンプロピルジスルフィド及びこれらの誘導体、ビタミンＢ2類； リボフラビン及び誘導体並びにそれらの塩、ビタミンＢ3類； ナイアシン、ニコチン酸、ニコチン酸アミド及び誘導体並びにそれらの塩、ビタミンＢ5類； パンテノール、パントテン酸及び誘導体並びにそれらの塩、ビタミンＢ6類； ピリドキシン及び誘導体並びにそれらの塩、ビタミンＢ12類； シアノコバラミン及び誘導体並びにそれらの塩、その他のビタミン類；ビタミンＡ、ビタミンＣ、ビタミンＥ、ビタミンＫ、ビタミンＰ、ジクロロ酢酸ジイソプロピルアミン、タウリン、コンドロイチン硫酸、ローヤルゼリー、カフェイン、ウコン、マリアアザミ、タンポポ、西洋タンポポ、ゴボウ、ニンニク、キク、西洋ノコギリソウ、クチナシ、ゴマ、田七ニンジン、アスパラガス、タマネギ、チコリ、薬用サルビア、朝鮮アザミ（アーティチョーク）、クコ、マメ科・アヤメ科の植物、ミヤマウズラ、エルバ・デ・パサリーニョ、セテサングリア、アガメガシワ、紅茶、レスベラトロール、カテキン類、ベルベリン、ローズマリー、豆エキス、メトホルミン等が挙げられる。
【００２２】
また、本発明の肝臓機能及び/又は膵臓機能改善剤は、医薬品の外、医薬部外品、特定保健用食品、スポーツ飲料、リハビリ用飲料、ペットフード等の機能性食品としても使用可能である。
【００２３】
本発明の肝臓機能及び/又は膵臓機能改善剤における肝臓水解物の含有量は、投与形態によっても異なるが、通常、乾燥重量として０．００１〜１０質量％が好ましく、０．００１〜５質量％がより好ましい。また、本発明の肝臓機能及び/又は膵臓機能改善剤における肝臓水解物の１日投与量は、乾燥重量として１００ｍｇ〜１０７６ｍｇが好ましく、３８３ｍｇ〜６２３ｍｇがより好ましく、３５１ｍｇ〜６８０ｍｇがさらに好ましい。
【実施例】
【００２４】
次に実施例を挙げて本発明を詳細に説明するが、本発明は何らこれに限定されるものではない。【００２５】
実施例１
（実験方法）
１）使用動物
７週齢のＷｉｓｔａｒ／Ｓｔｄ系の雌ラット２４匹を用いた（日本エス・エル・シー（株)）。昼夜１２時間ずつの明暗サイクル（明期：０８：００−２０：００）の動物室（温度２３±２℃，湿度５０±１０％ＲＨ）で個別飼育した。実験開始前に固型飼料で３日間馴化飼育し（船橋農場Ｆ−２）、その後二つの実験群に分けた。すなわち、対照として分離大豆タンパク質（Soy protein isolate＝ＳＰＩ）を含有したものと、ブタ肝臓水解物（ＰＬＨ）を含有したものを調製し、アルコール流動食に入れて１４日間与えた。
屠殺の１４時間前にアルコール流動食を取り除いて絶食させ、代わりに脱イオン水を与えた。ＥＤＴＡ−２Ｎａ処理した採血管に採血し、遠心分離して血漿を取り、種々の分析用の組織サンプルを−２５℃に保存した。肝臓は、一部を摘出後に急速に液体窒素で凍らせ、−７０℃に保存しその後の分析用試料とした。【００２６】
２）アルコール入り流動食による実験食の組成
液体飼料の作成は１９８９年に改善されたLieber-DeCarli formulaを基本として作成した（表１）。攪拌にはBraun社製のブレンダーを用いた。なお、添加によってアルコール性肝障害を助長することが報告されているビタミンＡに関しては、通常のビタミン混合よりも５倍量含んだものを調製し飼料に供した。【００２７】
【表１】
0006456833.tif 000002
【００２８】
３）実験群
・コントロール食（Con）
・コントロールアルコール食（Con-Alc）
・ブタ肝臓水解物アルコール食（PLH-Alc）【００２９】
【表２】
0006456833.tif 000003
【００３０】
使用した肝臓水解物に含まれる成分及びアミノ酸組成を表３に示した。【００３１】
【表３】
0006456833.tif 000004
【００３２】
４）飼育条件及び組織サンプリングの測定方法
Ｗｉｓｔａｒ系ラット（Ｗｉｓｔａｒ／Ｓｔｄ）、７週齢のメスを用い、以下の条件で１４日間の実験飼育を行った。実験群はアルコール群およびコントロール群の２群を設けペアフィーディングを行う。飼育期間中は尾静脈から血漿を採取し、肝障害マーカーである血漿ＧＰＴ（グルタミン酸ピルビン酸トランスアミナーゼ［＝ＡＬＴ「アラニントランスアミナーゼ」］）活性、ＧＯＴ（グルタミン酸オキザロ酢酸トランスアミナーゼ［＝ＡＳＴ「アスパラギン酸トランスアミナーゼ」］）活性及び血漿インスリンを測定した。エタノール投与条件はアルコールへの馴化を行う必要性から、３％濃度飼料から始め、４日目以降、５％含有食と上げた。測定項目を以下にまとめた。
・血漿中肝障害マーカーの測定（ＡＬＴ，ＡＳＴ）：
和光純薬工業(株)のTransaminase CII キットを用いて測定した。
・インスリンの測定：
(株)森永生科学研究所のインスリン測定キットを用いて測定した。【００３３】
（結果）
図１に示すように、肝臓水解物は、高脂肪及びアルコール摂取下での肝障害を予防した。
また、図２に示すように、肝臓水解物は、高脂肪及びアルコール摂取下でのインスリン分泌障害を予防した。
【図１】
0006456833.tif 000005
【図２】
0006456833.tif 000006