(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
化合物１
【化５１】
0006499672.tif 000077
１−（（３Ｓ，４Ｒ）−４−（３−フルオロフェニル）−１−（２−メトキシエチル）ピロリジン−３−イル）−３−（４−メチル−３−（２−メチルピリミジン−５−イル）−１−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）尿素、または薬学上許容可能なその塩。
【請求項２】
前記化合物が、１−（（３Ｓ，４Ｒ）−４−（３−フルオロフェニル）−１−（２−メトキシエチル）ピロリジン−３−イル）−３−（４−メチル−３−（２−メチルピリミジン−５−イル）−１−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）尿素の二塩酸塩である請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
請求項１または２に記載の化合物または薬学上許容可能なその塩と薬学上許容可能な希釈剤またはキャリアとを含む医薬組成物。
【請求項４】
前記医薬組成物が経口投与用に製剤化される請求項３に記載の医薬組成物。
【請求項５】
前記医薬組成物が錠剤またはカプセル剤の形態である請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項６】
哺乳類における疾患または障害の治療のための組成物であって、前記疾患または障害が疼痛、癌、炎症または炎症性疾患、神経変性疾患、クルーズ・トリパノソーマ感染症、シェーグレン症候群、子宮内膜症、糖尿病性末梢神経障害、前立腺炎、骨盤痛症候群、骨リモデリングの調節の不均衡に関連する疾患、及び結合組織増殖因子の異常なシグナル伝達から生じる疾患から成る群から選択され、前記組成物は、治療上有効な量の請求項１または２に記載の化合物または薬学上許容可能なその塩を含む、組成物。
【請求項７】
前記組成物が疼痛を治療するためのものである請求項６に記載の組成物。
【請求項８】
前記疼痛が慢性疼痛である請求項７に記載の組成物。
【請求項９】
前記慢性疼痛が慢性背痛である請求項８に記載の組成物。
【請求項１０】
前記疼痛が急性疼痛である請求項７に記載の組成物。
【請求項１１】
前記疼痛が、神経障害性疼痛、炎症性疼痛、癌に関連する疼痛、骨折に関連する疼痛、及び外科手術に関連する疼痛から成る群から選択される請求項７に記載の組成物。
【請求項１２】
前記疼痛が神経障害性疼痛である請求項１１に記載の組成物。
【請求項１３】
前記神経障害性疼痛が糖尿病性末梢神経障害に関連する疼痛である請求項１２に記載の組成物。
【請求項１４】
前記疼痛が炎症性疼痛である請求項１１に記載の組成物。
【請求項１５】
前記炎症性疼痛が変形性関節炎に関連する疼痛である請求項１４に記載の組成物。
【請求項１６】
前記疼痛が癌に関連する疼痛である請求項１１に記載の組成物。
【請求項１７】
前記疼痛が骨折に関連する疼痛である請求項１１に記載の組成物。
【請求項１８】
前記疼痛が外科手術に関連する疼痛である請求項１１に記載の組成物。
【請求項１９】
抗炎症性化合物、ステロイド、鎮痛剤、オピオイド、カルシトニン遺伝子関連のペプチド受容体アンタゴニスト、亜型選択性イオンチャンネルモジュレータ、抗痙攣剤、二重セロトニン／ノルエピネフリン再摂取阻害剤、ＪＡＫファミリーキナーゼ阻害剤及び三環系抗うつ剤から成る群から選択される、有効量の少なくとも１つの追加の治療剤との併用で有効量の化合物１または薬学上許容可能なその塩が投与されることを特徴とする、請求項７〜１８のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項２０】
前記鎮痛剤がＮＳＡＩＤである請求項１９に記載の組成物。
【請求項２１】
前記疾患が炎症性疾患である請求項６に記載の組成物。
【請求項２２】
前記炎症性疾患が、炎症性肺疾患、間質性膀胱炎、疼痛性膀胱症候群、炎症性大腸疾患及び炎症性皮膚疾患から成る群から選択される請求項２１に記載の組成物。
【請求項２３】
前記炎症性疾患が間質性膀胱炎である請求項２２に記載の組成物。
【請求項２４】
前記炎症性疾患が疼痛性膀胱症候群である請求項２２に記載の組成物。
【請求項２５】
抗ＴＮＦ剤、代謝拮抗剤及び葉酸拮抗剤、及び標的化されたキナーゼ阻害剤から成る群から選択される有効量の１以上の追加の作用剤との併用で有効量の化合物１または薬学上許容可能なその塩が、それを必要とする前記哺乳類に投与されることを特徴とする、請求項２１〜２４のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項２６】
インフリキシマブ、アダリムマブ、セルトリズマブペゴール、ゴリムマブ、エタネルセプト、メソトレキセート、ルキソリチニブ、トファシチニブ、ＣＹＴ３８７、レスタウルチニブ、パクリチニブ及びＴＧ１０１３４８から成る群から選択される有効量の１以上の追加の作用剤との併用で有効量の化合物１または薬学上許容可能なその塩が、それを必要とする前記哺乳類に投与されることを特徴とする、請求項２５に記載の組成物。
【請求項２７】
前記疾患が、結合組織増殖因子の異常なシグナル伝達から生じる疾患である請求項６に記載の組成物。
【請求項２８】
前記疾患が、レイノー症候群、特発性肺線維症、瘢痕化（過形成、ケロイド等）、肝硬変、心内膜心筋線維症、心房線維症、骨髄線維症、進行性塊状線維症（肺）、腎性全身性線維症、強皮症、全身性硬化症、関節線維症及び眼線維症から成る群から選択される請求項２７に記載の組成物。
【請求項２９】
前記疾患が癌である請求項６に記載の組成物。
【請求項３０】
前記癌がＴｒｋＡの調節不全を有する癌である請求項２９に記載の組成物。
【請求項３１】
前記ＴｒｋＡの調節不全が、ＴｒｋＡ遺伝子の融合を生じる１以上の染色体の転座または逆位を含む請求項３０に記載の組成物。
【請求項３２】
前記ＴｒｋＡ遺伝子の融合が、ＬＭＮＡ−ＴｒｋＡ、ＴＦＧ−ＴｒｋＡ、ＴＰＭ３−ＴｒｋＡ、ＣＤ７４−ＴｒｋＡ、ＮＦＡＳＣ−ＴｒｋＡ、ＭＰＲＩＰ−ＴｒｋＡ、ＢＣＡＮ−ＴｒｋＡ、ＴＰ５３−ＴｒｋＡ、ＲＮＦ２１３−ＴｒｋＡ、ＲＡＢＧＡＰ１Ｌ−ＴｒｋＡ、ＩＲＦ２ＢＰ２−ＴｒｋＡ、ＳＱＳＴＭ１−ＴｒｋＡ、ＳＳＢＰ２−ＴｒｋＡ、またはＴＰＲ−ＴｒｋＡである請求項３１に記載の組成物。
【請求項３３】
前記癌が、非小細胞肺癌、甲状腺乳頭癌、多形性膠芽腫、結腸直腸癌、黒色腫、胆管癌または肉腫である請求項３２に記載の組成物。
【請求項３４】
前記ＴｒｋＡの調節不全がＴｒｋＡタンパク質における１以上の欠失、挿入または変異を含む請求項３０に記載の組成物。
【請求項３５】
前記癌が、急性骨髄性白血病、大細胞神経内分泌癌、または神経芽細胞腫である請求項３４に記載の組成物。
【請求項３６】
前記ＴｒｋＡの調節不全が野生型ＴｒｋＡの過剰発現（自己分泌の活性化）である請求項３０に記載の組成物。
【請求項３７】
前記癌が、前立腺癌、神経芽細胞腫、膵臓癌、黒色腫、頭頚部の扁平上皮癌または胃癌である請求項３６に記載の組成物。
【請求項３８】
１以上の追加の治療法または化学療法剤から選択される有効量の少なくとも１つの追加の治療剤との併用で有効量の化合物１または薬学上許容可能なその塩が投与されることを特徴とする、請求項２９〜３７のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項３９】
前記追加の治療法または化学療法剤が、放射線療法、細胞傷害性の化学療法剤、チロシンキナーゼを標的とする治療剤、アポトーシスのモジュレータ、シグナル伝達阻害剤、免疫標的療法、及び血管形成を標的とする治療法から選択される請求項３８に記載の組成物。
【請求項４０】
前記化学療法剤がチロシンキナーゼを標的とする治療剤から選択される請求項３９に記載の組成物。
【請求項４１】
疼痛、癌、炎症／炎症性疾患、神経変性疾患、特定の感染性疾患、シェーグレン症候群、子宮内膜症、糖尿病性末梢神経障害、前立腺炎、骨盤痛症候群、骨リモデリングの調節の不均衡に関連する疾患、または結合組織増殖因子の異常なシグナル伝達から生じる疾患を治療するための薬物の調製における請求項１または２に記載の化合物、または薬学上許容可能なその塩の使用。
【請求項４２】
治療上有効な量の化合物１
【化５２】
0006499672.tif 000078
１−（（３Ｓ，４Ｒ）−４−（３−フルオロフェニル）−１−（２−メトキシエチル）ピロリジン−３−イル）−３−（４−メチル−３−（２−メチルピリミジン−５−イル）−１−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）尿素、または薬学上許容可能なその塩を含む、それを必要とする哺乳類における癌の治療のための組成物であって、前記癌がＴｒｋＡキナーゼの調節不全に関連する、組成物。
【請求項４３】
前記化合物が、１−（（３Ｓ，４Ｒ）−４−（３−フルオロフェニル）−１−（２−メトキシエチル）ピロリジン−３−イル）−３−（４−メチル−３−（２−メチルピリミジン−５−イル）−１−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）尿素の二塩酸塩である請求項４２に記載の組成物。
【請求項４４】
前記ＴｒｋＡの調節不全がＴｒｋＡ遺伝子の融合を生じる１以上の染色体の転座または逆位を含む請求項４２または４３に記載の組成物。
【請求項４５】
前記ＴｒｋＡ遺伝子の融合が、ＬＭＮＡ−ＴｒｋＡ、ＴＦＧ−ＴｒｋＡ、ＴＰＭ３−ＴｒｋＡ、ＣＤ７４−ＴｒｋＡ、ＮＦＡＳＣ−ＴｒｋＡ、ＭＰＲＩＰ−ＴｒｋＡ、ＢＣＡＮ−ＴｒｋＡ、ＴＰ５３−ＴｒｋＡ、ＲＮＦ２１３−ＴｒｋＡ、ＲＡＢＧＡＰ１Ｌ−ＴｒｋＡ、ＩＲＦ２ＢＰ２−ＴｒｋＡ、ＳＱＳＴＭ１−ＴｒｋＡ、ＳＳＢＰ２−ＴｒｋＡ、またはＴＰＲ−ＴｒｋＡである請求項４４に記載の組成物。
【請求項４６】
前記癌が、非小細胞肺癌、甲状腺乳頭癌、多形性膠芽腫、結腸直腸癌、黒色腫、胆管癌または肉腫である請求項４５に記載の組成物。
【請求項４７】
前記ＴｒｋＡの調節不全が、ＴｒｋＡタンパク質における１以上の欠失、挿入または変異を含む請求項４２または４３に記載の組成物。
【請求項４８】
前記癌が、急性骨髄性白血病、大細胞神経内分泌癌、または神経芽細胞腫である請求項４７に記載の組成物。
【請求項４９】
前記ＴｒｋＡの調節不全が野生型ＴｒｋＡの過剰発現（自己分泌の活性化）である請求項４２または４３に記載の組成物。
【請求項５０】
前記癌が、前立腺癌、神経芽細胞腫、膵臓癌、黒色腫、頭頚部の扁平上皮癌または胃癌である請求項４９に記載の組成物。
【請求項５１】
１以上の追加の治療法または化学療法剤から選択される有効量の少なくとも１つの追加の治療剤との併用で有効量の化合物１または薬学上許容可能なその塩が投与されることを特徴とする、請求項４２〜５０のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項５２】
前記追加の治療法または化学療法剤が、放射線療法、細胞傷害性の化学療法剤、チロシンキナーゼを標的とする治療剤、アポトーシスのモジュレータ、シグナル伝達阻害剤、免疫標的療法、及び血管形成を標的とする治療法から選択される請求項５１に記載の組成物。
【請求項５３】
請求項１または２に記載の化合物または薬学上許容可能なその塩の調製のための方法であって、
（ａ）カルボニルジイミダゾールまたはトリホスゲン及び塩基の存在下で式ＩＩ−Ａ：
【化３５】
0006499672.tif 000079
を有する化合物を式ＩＩＩ
【化３６】
0006499672.tif 000080
を有する化合物と反応させること、または
（ｂ）塩基の存在下で、式ＩＩ−Ａ
【化３７】
0006499672.tif 000081
を有する化合物を、Ｌ１が脱離基である式ＩＶ
【化３８】
0006499672.tif 000082
を有する化合物と反応させること、または
（ｃ）塩基の存在下で、Ｌ２が脱離基である式Ｖ
【化３９】
0006499672.tif 000083
を有する化合物を式ＩＩＩ
【化４０】
0006499672.tif 000084
有する化合物と反応させること、または
（ｄ）式ＶＩ
【化４１】
0006499672.tif 000085
を有する化合物をアジ化ジフェニルホスホリルと反応させて中間体を形成し、その後、塩基の存在下で前記中間体を式ＩＩＩ
【化４２】
0006499672.tif 000086
を有する化合物と反応させること、または
（ｅ）塩基の存在下で、式ＩＩ−Ａ
【化４３】
0006499672.tif 000087
を有する化合物を式ＶＩＩ
【化４４】
0006499672.tif 000088
を有する化合物と反応させることと、
存在するならば保護基を取り外すことと、任意で薬学上許容可能なその塩を調製することとを含む、前記方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規の化合物、該化合物を含む医薬組成物、該化合物を作製するための方法及び中間体、ならびに治療法における該化合物の使用に関する。さらに詳しくは、それは、ＴｒｋＡキナーゼ阻害を示し、且つ、疼痛、癌、炎症／炎症性疾患、神経変性疾患、特定の感染性疾患、シェーグレン症候群、子宮内膜症、糖尿病性末梢神経障害、前立腺炎、骨盤痛症候群、骨リモデリングの調節の不均衡に関連する疾患、及び結合組織増殖因子の異常なシグナル伝達から生じる疾患の治療に有用である１−（（３Ｓ，４Ｒ）−４−（３−フルオロフェニル）−１−（２−メトキシエチル）ピロリジン−３−イル）−３−（４−メチル−３−（２−メチルピリミジン−５−イル）−１−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）尿素または薬学上許容可能なその塩に関する。
【背景技術】
【０００２】
疼痛の状態のための現在の治療投薬計画は幾つかのクラスの化合物を利用する。オピオイド（たとえば、モルヒネ）は、催吐作用、便秘作用及び呼吸への良くない効果を含む幾つかの欠点と同様に依存症の可能性を有する。非ステロイド系抗炎症性鎮痛薬（たとえば、ＣＯＸ−１型またはＣＯＸ−２型のようなＮＳＡＩＤ）も重度の疼痛を治療することにおける不十分な効能を含む欠点を有する。加えて、ＣＯＸ−１阻害剤は粘膜の潰瘍の原因となり得る。従って、疼痛、特に慢性疼痛の緩和のための新規の及びさらに効果的な治療についての継続するニーズがある。
【０００３】
Ｔｒｋは、ニューロトロフィン（ＮＴ）と呼ばれる可溶性増殖因子の群によって活性化される高親和性の受容体チロシンキナーゼである。Ｔｒｋ受容体ファミリーは３つのメンバー：ＴｒｋＡ、ＴｒｋＢ及びＴｒｋＣを有する。ニューロトロフィンの中では、（ｉ）ＴｒｋＡを活性化する神経増殖因子（ＮＧＦ）、（ｉｉ）ＴｒｋＢを活性化する脳に由来する神経栄養因子（ＢＤＮＦ）及びＮＴ−４／５ならびに（ｉｉｉ）ＴｒｋＣを活性化するＮＴ３がある。Ｔｒｋは神経組織にて広く発現され、神経細胞の維持、シグナル伝達及び生存に関与する（Ｐａｔａｐｏｕｔｉａｎ，Ａ．ら，Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎｉｏｎ  ｉｎ  Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，２００１，１１，２７２−２８０）。
【０００４】
Ｔｒｋ／ニューロトロフィン経路の阻害は疼痛の多数の前臨床動物モデルで有効であることが実証されている。たとえば、拮抗的なＮＧＦ及びＲＮ−６２４のようなＴｒｋＡ抗体は炎症及び神経障害性疼痛の動物モデルで（Ｗｏｏｌｆ，Ｃ．Ｊ．ら．（１９９４），Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ，６２，３２７−３３１；Ｚａｈｎ，Ｐ．Ｋ．ら．（２００４），Ｊ．Ｐａｉｎ，５，１５７−１６３；ＭｃＭａｈｏｎ，Ｓ．Ｂ．ら，（１９９５），Ｎａｔ．Ｍｅｄ．１，７７４−７８０；Ｍａ，Ｑ．Ｐ．及びＷｏｏｌｆ，Ｃ．Ｊ．（１９９７），ＮｅｕｒｏＲｅｐｏｒｔ，８，８０７−８１０；Ｓｈｅｌｔｏｎ，Ｄ．Ｌ．ら．（２００５），Ｐａｉｎ，１１６，８−１６；Ｄｅｌａｆｏｙ，Ｌ．ら．（２００３），Ｐａｉｎ，１０５，４８９−４９７；Ｌａｍｂ，Ｋ．ら．（２００３），Ｎｅｕｒｏｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ．Ｍｏｔｉｌ．１５，３５５−３６１；Ｊａｇｇａｒ，Ｓ．Ｉ．ら．（１９９９），Ｂｒ．Ｊ．Ａｎａｅｓｔｈ  ８３，４４２−４４８）及び神経障害性疼痛の動物モデルで（Ｒａｍｅｒ，Ｍ．Ｓ．及びＢｉｓｂｙ，Ｍ．Ａ．（１９９９），Ｅｕｒ．Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．１１，８３７−８４６；Ｒｏ，Ｌ．Ｓ．ら．（１９９９），Ｐａｉｎ，７９，２６５−２７４；Ｈｅｒｚｂｅｒｇ，Ｕ．ら，（１９９７），Ｎｅｕｒｏｒｅｐｏｒｔ，８，１６１３−１６１８；Ｔｈｅｏｄｏｓｉｏｕ，Ｍ．ら．（１９９９），Ｐａｉｎ，８１，２４５−２５５；Ｌｉ，Ｌ．ら．（２００３），Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．２３，２３２−２５０；Ｇｗａｋ，Ｙ．Ｓ．ら．（２００３），Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．Ｌｅｔｔ．３３６，１１７−１２０）有効であることが示されている。
【０００５】
腫瘍細胞及び腫瘍に浸潤するマクロファージによって分泌されるＮＧＦが末梢疼痛線維に位置するＴｒｋＡを直接刺激することも示されている。マウス及びラットの双方で種々の腫瘍モデルを用いて、モノクローナル抗体でＮＧＦを中和することは、モルヒネの最高忍容用量に類似するまたはそれより優れる程度に癌に関連する疼痛を抑えることが実証された。ＴｒｋＡキナーゼはＮＧＦが動かす生物反応のメディエータとして役立ってもよいので、ＴｒｋＡ及び／または他のＴｒｋキナーゼの阻害剤は慢性疼痛の状態及び癌に関連する疼痛の有効な治療を提供してもよい。
【０００６】
最近の文献はＴｒｋキナーゼの過剰発現、活性化、増幅及び／または変異が神経芽細胞腫（Ｂｒｏｄｅｕｒ，Ｇ．Ｍ．，Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｃａｎｃｅｒ，２００３，３，２０３−２１６）、卵巣癌（Ｄａｖｉｄｓｏｎ．Ｂ．ら，Ｃｌｉｎ．ＣａｎｃｅｒＲｅｓ．２００３，９，２２４８−２２５９）、結腸直腸癌（Ｂａｒｄｅｌｌｉ，Ａ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２００３，３００，９４９）、黒色腫（Ｔｒｕｚｚｉ，Ｆ．ら，Ｄｅｒｍａｔｏ−Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ，２０１１，３（１），ｐｐ．３２−３６）、頭頚部の癌（Ｙｉｌｍａｚ，Ｔ．ら，Ｃａｎｃｅｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｔｈｅｒａｐｙ，２０１０，１０（６），ｐｐ．６４４−６５３）、胃癌（Ｄｕ，Ｊ．ら，Ｗｏｒｌｄ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ，２００３，９（７），ｐｐ．１４３１−１４３４）、肺癌（Ｒｉｃｃｉ，Ａ．ら，Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ  Ｃｅｌｌ  ａｎｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，２５（４），ｐｐ．４３９−４４６）、乳癌（Ｊｉｎ，Ｗ．ら，Ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ，２０１０，３１（１１），ｐｐ．１９３９−１９４７）、分泌型乳癌（Ｅｕｔｈｕｓ，Ｄ．Ｍ．ら，Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｌｌ，２００２，２（５），ｐｐ．３４７−３４８）、膠芽細胞腫（Ｗａｄｈｗａ，Ｓ．ら，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ，２００３，２８（２），ｐｐ．１８１−１８８）、髄芽細胞腫（Ｇｒｕｂｅｒ−Ｏｌｉｐｉｔｚ，Ｍ．ら，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｏｍｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，２００８，７（５），ｐｐ．１９３２−１９４４）、唾液腺癌（Ｌｉ，Ｙ．−Ｇ．ら，Ｃｈｉｎｅｓｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ，２００９，１６（６），ｐｐ．４２８−４３０）、甲状腺乳頭癌（Ｇｒｅｃｏ，Ａ．ら，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ａｎｄ  Ｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ，２０１０，３２１（１），ｐｐ．４４−４９）ならびに成人骨髄性白血病（Ｅｇｕｃｈｉ，Ｍ．ら，Ｂｌｏｏｄ，１９９９，９３（４），ｐｐ．１３５５−１３６３）を含む多数の癌に関連することも示している。癌の前臨床モデルでは、ＴｒｋＡ、ＴｒｋＢ及びＴｒｋＣの非選択性小分子阻害剤が腫瘍増殖を阻害すること及び腫瘍の転移を止めることの双方で有効だった（Ｎａｋａｇａｗａｒａ，Ａ．（２００１），Ｃａｎｃｅｒ  Ｌｅｔｔｅｒｓ，１６９：１０７−１１４；Ｍｅｙｅｒ，Ｊ．ら．（２００７），Ｌｅｕｋｅｍｉａ，２１（１０）：２１７１−２１８０；Ｐｉｅｒｏｔｔｉａ，Ｍ．Ａ．及びＧｒｅｃｏ，Ａ．，（２００６），Ｃａｎｃｅｒ  Ｌｅｔｔｅｒｓ，２３２：９０−９８；Ｅｒｉｃ  Ａｄｒｉａｅｎｓｓｅｎｓ，Ｅ．，ら．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ，（２００８），６８：（２）３４６−３５１）。これらのデータは癌の治療にＴｒｋ阻害剤を使用することの理論的根拠を支えている。
【０００７】
加えて、ニューロトロフィン／Ｔｒｋ経路の阻害は、ＮＧＦ抗体またはＴｒｋＡの非選択性小分子阻害剤による炎症性疾患の前臨床モデルの治療で有効であることが示されている。たとえば、ニューロトロフィン／Ｔｒｋ経路の阻害は、喘息を含む炎症性肺疾患（Ｆｒｅｕｎｄ−Ｍｉｃｈｅｌ，Ｖ；Ｆｒｏｓｓａｒｄ，Ｎ．，Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ＆  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，（２００８），１１７（１），５２−７６）、間質性膀胱炎（Ｈｕ，Ｖｉｖｉａｎ，Ｙ；ら．Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｕｒｏｌｏｇｙ，（２００５），１７３（３），１０１６−２１）、膀胱痛症候群（Ｌｉｕ，Ｈ．−Ｔ．，ら，（２０１０），ＢＪＵ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，１０６（１１），ｐｐ．１６８１−１６８５）、潰瘍性大腸炎及びクローン病を含む炎症性大腸疾患（Ｄｉ  Ｍｏｌａ，Ｆ．Ｆ，ら，Ｇｕｔ，（２０００），４６（５），６７０−６７８）ならびにアトピー性皮膚炎（Ｄｏｕ，Ｙ．−Ｃ．，ら．Ａｒｃｈｉｖｅｓ  ｏｆ  Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，（２００６），２９８（１），３１−３７）、湿疹及び乾癬（Ｒａｙｃｈａｕｄｈｕｒｉ，Ｓ．Ｐ．，ら，Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｖｅ  Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｙ，（２００４），１２２（３），８１２−８１９）を含む炎症性皮膚疾患の前臨床モデルに関与している。これらのデータは炎症性疾患の治療にＴｒｋ阻害剤を使用する理論的根拠を支えている。
【０００８】
ＴｒｋＡ受容体は、ヒト宿主にてクルーズ・トリパノソーマの寄生虫感染（シャーガス病）の疾患経過に決定的であるも考えられている（ｄｅ  Ｍｅｌｏ−Ｊｏｒｇｅ，Ｍ．ら，Ｃｅｌｌ  Ｈｏｓｔ  ＆  Ｍｉｃｒｏｂｅ，（２００７），１（４），２５１−２６１）。
【０００９】
Ｔｒｋ阻害剤は、たとえば、骨粗鬆症、関節リウマチ及び骨転移のような骨リモデリングの調節の不均衡に関連する疾患を治療することにも使用されてもよい。骨転移は、進行した乳癌及び前立腺癌の患者の７０パーセントまで、肺、結腸、胃、膀胱、子宮、直腸、甲状腺または腎臓の癌の患者のおよそ１５〜３０パーセントで生じる癌の頻度の高い合併症である。溶骨型転移は、重度の疼痛、病理的骨折、命にかかわる高カルシウム血症、脊椎の圧迫、及び他の神経圧迫症候群を引き起し得る。これらの理由で、骨転移は癌の深刻で費用のかかる合併症である。従って、増殖している骨芽細胞のアポトーシスを誘導することができる作用剤は高度に有利であることになる。ＴｒｋＡ受容体の発現は骨折のマウスモデルで骨形成領域にて観察されている（Ｋ．Ａｓａｕｍｉ，ら，Ｂｏｎｅ，（２０００），２６（６）６２５−６３３）。加えて、ＮＧＦの局在は骨形成細胞のほとんどすべてで観察された（Ｋ．Ａｓａｕｍｉ，ら，Ｂｏｎｅ，（２０００），２６（６）６２５−６３３）。最近、Ｔｒｋ阻害剤が、ヒトｈＦＯＢ骨芽細胞におけるＴｒｋ受容体３つすべてに結合するニューロトロフィンによって活性化されたシグナル伝達を阻害することが明らかにされた（Ｊ．Ｐｉｎｓｋｉ，ら，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，（２００２），６２，９８６−９８９）。これらのデータは、癌患者における骨転移のような骨リモデリング疾患の治療にＴｒｋ阻害剤を使用する理論的根拠を支えている。
【００１０】
Ｔｒｋ阻害剤は、シェーグレン症候群（Ｆａｕｃｈａｉｓ，Ａ．Ｌ．，ら，（２００９），Ｓｃａｎｄｉｎａｖｉａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｒｈｅｕｍａｔｏｌｏｇｙ，３８（１），ｐｐ．５０−５７）、子宮内膜症（Ｂａｒｃｅｎａ  Ｄｅ  Ａｒｅｌｌａｎｏ，Ｍ．Ｌ．，ら，（２０１１），Ｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１８（１２），ｐｐ．１２０２−１２１０；Ｂａｒｃｅｎａ  Ｄｅ  Ａｒｅｌｌａｎｏ，ら，（２０１１），Ｆｅｒｔｉｌｉｔｙ  ａｎｄ  Ｓｔｅｒｉｌｉｔｙ，９５（３），ｐｐ．１１２３−１１２６；Ｃａｔｔａｎｅｏ，Ａ．，（２０１０），Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎｉｏｎ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，１２（１），ｐｐ．９４−１０６）、糖尿病性末梢神経障害（Ｋｉｍ，Ｈ．Ｃ．，ら，（２００９），Ｄｉａｂｅｔｉｃ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，２６，（１２），ｐｐ．１２２８−１２３４；Ｓｉｎｉｓｃａｌｃｏ，Ｄ．，ら，（２０１１），Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｎｅｕｒｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，９（４），ｐｐ．５２３−５２９；Ｏｓｓｉｐｏｖ，Ｍ．Ｈ．，（２０１１），Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐａｉｎ  ａｎｄ  Ｈｅａｄａｃｈｅ  Ｒｅｐｏｒｔｓ，１５（３），ｐｐ．１８５−１９２）、ならびに前立腺炎及び骨盤痛症候群（Ｗａｔａｎａｂｅ，Ｔ．，ら，（２０１１），ＢＪＵ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，１０８（２），ｐｐ．２４８−２５１；及びＭｉｌｌｅｒ，Ｌ．Ｊ．ら，（２００２），Ｕｒｏｌｏｇｙ，５９（４），ｐｐ．６０３−６０８）のような疾患及び障害を治療するのにも使用されてもよい。
【００１１】
ＴｒｋＡ阻害剤はまた、結合組織増殖因子（ＣＴＧＦ、ＣＣＮ２とも呼ばれる）の異常なシグナル伝達の結果生じる疾患、たとえば、組織のリモデリング及び線維症を含む疾患を治療するためにも有用であってもよい。ＣＴＧＦは組織のリモデリング及び線維症の中心的なメディエータであり（Ｌｉｐｓｏｎ，Ｋ．Ｅ．ら，（２０１２），Ｆｉｂｒｏｇｅｎｅｓｉｓ  ＆  Ｔｉｓｓｕｅ  Ｒｅｐａｉｒ，２０１２，５（Ｓｕｐｐｌ．１）：Ｓ２４）、ＣＴＧＦのシグナル伝達を低下させる治療法は線維症の治療として有効であることが判明している（Ｌｉ，Ｇ．ら，Ｊ．  Ｇｅｎｅ  Ｍｅｄ．，２００６，８：８８９−９００））。ＣＴＧＦはＴｒｋＡと相互作用し、それを活性化し（Ｗａｈａｂ，Ｎ．Ａ．，（２００５），Ｊ．Ａｍ．Ｓｏｃ．Ｎｅｐｈｒｏｌ．１６：３４０−３５１）、この経路のＴｒｋＡ阻害剤による阻害は、たとえば、レイノー症候群、特発性肺線維症、瘢痕化（過形成、ケロイド等）、肝硬変、心内膜心筋線維症、心房線維症、骨髄線維症、進行性塊状線維症（肺）、腎性全身性線維症、強皮症、全身性硬化症、関節線維症及び眼線維症のような種々の線維性疾患を治療するのに有用であることが判明してもよい。
【００１２】
疼痛または癌を治療するのに有用であると言われる幾つかのクラスのＴｒｋキナーゼの小分子阻害剤が知られている（Ｗａｎｇ，Ｔら，Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ．Ｔｈｅｒ．Ｐａｔｅｎｔｓ，（２００９），１９（３），３０５−３１９；ＭｃＣａｒｔｈｙ，Ｃ．及びＷａｌｋｅｒ，Ｅ．，Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ．Ｔｈｅｒ  Ｐａｔｅｎｔｓ，２０１４，２４（７）：７３１−７４４）。
【００１３】
国際出願公開番号ＷＯ２０１０／０３２８５６は式：
【化１】
0006499672.tif 000002
によって表される化合物を記載しており；
【００１４】
式中、環Ｂは芳香族環であり、環Ｄは芳香族環であり、ＬはＮＲ３、ＮＲ３Ｃ（Ｒ４ａＲ４ｂ）、ＯまたはＯＣ（Ｒ４ａＲ４ｂ）であり、それらはタキキニン受容体のアンタゴニストであると断定されている。
【００１５】
国際出願公開番号ＷＯ２０１２／１５８４１３は一般式：
【化２】
0006499672.tif 000003
を有するＴｒｋＡ阻害剤としてのピロリジニル尿素化合物のサブセットを開示しており、
【００１６】
式中、
【００１７】
Ｙは結合、−Ｏ−または−ＯＣＨ２−であり；
【００１８】
Ｘは、Ｏ、Ｓ、またはＮＨであり；
【００１９】
Ｒ１は、（１−３Ｃアルコキシ）（１−６Ｃ）アルキル、（トリフルオロメトキシ）（１−６Ｃ）アルキル、（１−３Ｃスルファニル）（１−６Ｃ）アルキル、モノフルオロ（１−６Ｃ）アルキル、ジフルオロ（１−６Ｃ）アルキル、トリフルオロ（１−６Ｃ）アルキル、テトラフルオロ（２−６Ｃ）アルキル、ペンタフルオロ（２−６Ｃ）アルキル、シアノ（１−６Ｃ）アルキル、アミノカルボニル（１−６Ｃ）アルキル、ヒドロキシ（１−６Ｃ）アルキル、ジヒドロキシ（２−６Ｃ）アルキル、（１−６Ｃ）アルキル、（１−３Ｃアルキルアミノ）（１−３Ｃ）アルキル、（１−４Ｃアルコキシカルボニル）（１−６Ｃ）アルキル、アミノ（１−６Ｃ）アルキル、ヒドロキシ（１−３Ｃアルコキシ）（１−６Ｃ）アルキル、ジ（１−３Ｃアルコキシ）（１−６Ｃ）アルキル、（１−３Ｃアルコキシ）トリフルオロ（１−６Ｃ）アルキル、ヒドロキシトリフルオロ（１−６Ｃ）アルキル、（１−４Ｃアルコキシカルボニル）（１−３Ｃアルコキシ）（１−６Ｃ）アルキル、ヒドロキシカルボニル（１−３Ｃアルコキシ）（１−６Ｃ）アルキル、ｈｅｔＡｒ５（ＣＨ２）０−１、またはＡｒ５（ＣＨ２）０−１であり；
【００２０】
ｈｅｔＡｒ５は、Ｎ、ＯまたはＳから独立して選択される１〜３の環ヘテロ原子を有する５〜６員環のヘテロアリール環であり、その際、環は、ハロゲン、（１−６Ｃ）アルキル、（１−６Ｃ）アルコキシ及びＣＦ３；から独立して選択される１以上の置換基によって任意で置換され；
【００２１】
Ａｒ５は、ハロゲン、（１−６Ｃ）アルキル、（１−６Ｃ）アルコキシ、ＣＦ３Ｏ−、（１−４Ｃ）アルコキシカルボニル及びアミノカルボニルから独立して選択される１以上の基によって任意で置換されるフェニルであり；
【００２２】
Ｂは、ハロゲン、ＣＦ３、ＣＦ３Ｏ−、（１−４Ｃ）アルコキシ、ヒドロキシ（１−４Ｃ）アルキル、（１−６Ｃ）アルキル及びＣＮから独立して選択される１以上の置換基によって任意で置換されるフェニル；Ｎ、Ｓ及びＯから独立して選択される１〜３の環ヘテロ原子を有し、（１−６Ｃ）アルキル、ハロゲン、ＯＨ、ＣＦ３、ＮＨ２及びヒドロキシ（１−２Ｃ）アルキルから独立して選択される１〜２の基によって任意で置換される５〜６員環のヘテロアリール；１−６Ｃアルキル；または（１−６Ｃ）アルコキシであり；
【００２３】
環Ｃは式Ｃ−１、Ｃ−２またはＣ−３である：
【化３】
0006499672.tif 000004
【００２４】
ＷＯ２０１２／１５８４１３におけるそのような化合物の例には、
【００２５】
１−（（３Ｓ，４Ｒ）−４−（３，４−ジフルオロフェニル）−１−（２−メトキシエチル）ピロリジン−３−イル）−３−（４−メチル−３−（２−メチルピリミジン−５−イル）−１−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）尿素（以後、「化合物２」）としても知られる構造：
【化４】
0006499672.tif 000005
を有する実施例５１１の化合物、及び
【００２６】
１−（１’，４−ジメチル１−フェニル−１Ｈ，１’Ｈ−［３，４’−ビピラゾール］−５−イル）−３−（（３Ｓ，４Ｒ）−４−（４−フルオロフェニル）−１−（２−メトキシエチル）ピロリジン−３−イル）尿素（以後「化合物３」）としても知られる構造：
【化５】
0006499672.tif 000006
を有する実施例４４１の化合物が挙げられる。
【００２７】
Ｒ４基として２−メチルピリミジン−５−イルを選択し、Ｂ基として３−フルオロフェニルを選択することによって予想外の特に望ましい特性を有する化合物が得られてもよいことが今や見いだされている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００２８】
【特許文献１】国際公開第２０１０／０３２８５６号
【特許文献２】国際公開第２０１２／１５８４１３号
【非特許文献】
【００２９】
【非特許文献１】Ｐａｔａｐｏｕｔｉａｎ，Ａ．ら，Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎｉｏｎ  ｉｎ  Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，２００１，１１，２７２−２８０
【非特許文献２】Ｗｏｏｌｆ，Ｃ．Ｊ．ら．（１９９４），Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ，６２，３２７−３３１
【非特許文献３】Ｚａｈｎ，Ｐ．Ｋ．ら．（２００４），Ｊ．Ｐａｉｎ，５，１５７−１６３
【非特許文献４】ＭｃＭａｈｏｎ，Ｓ．Ｂ．ら，（１９９５），Ｎａｔ．Ｍｅｄ．１，７７４−７８０
【非特許文献５】Ｍａ，Ｑ．Ｐ．及びＷｏｏｌｆ，Ｃ．Ｊ．（１９９７），ＮｅｕｒｏＲｅｐｏｒｔ，８，８０７−８１０
【非特許文献６】Ｓｈｅｌｔｏｎ，Ｄ．Ｌ．ら．（２００５），Ｐａｉｎ，１１６，８−１６
【非特許文献７】Ｄｅｌａｆｏｙ，Ｌ．ら．（２００３），Ｐａｉｎ，１０５，４８９−４９７
【非特許文献８】Ｌａｍｂ，Ｋ．ら．（２００３），Ｎｅｕｒｏｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ．Ｍｏｔｉｌ．１５，３５５−３６１
【非特許文献９】Ｊａｇｇａｒ，Ｓ．Ｉ．ら．（１９９９），Ｂｒ．Ｊ．Ａｎａｅｓｔｈ  ８３，４４２−４４８
【非特許文献１０】Ｒａｍｅｒ，Ｍ．Ｓ．及びＢｉｓｂｙ，Ｍ．Ａ．（１９９９），Ｅｕｒ．Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．１１，８３７−８４６
【非特許文献１１】Ｒｏ，Ｌ．Ｓ．ら．（１９９９），Ｐａｉｎ，７９，２６５−２７４
【非特許文献１２】Ｈｅｒｚｂｅｒｇ，Ｕ．ら，（１９９７），Ｎｅｕｒｏｒｅｐｏｒｔ，８，１６１３−１６１８
【非特許文献１３】Ｔｈｅｏｄｏｓｉｏｕ，Ｍ．ら．（１９９９），Ｐａｉｎ，８１，２４５−２５５
【非特許文献１４】Ｌｉ，Ｌ．ら．（２００３），Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．２３，２３２−２５０
【非特許文献１５】Ｇｗａｋ，Ｙ．Ｓ．ら．（２００３），Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．Ｌｅｔｔ．３３６，１１７−１２０
【非特許文献１６】Ｂｒｏｄｅｕｒ，Ｇ．Ｍ．，Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｃａｎｃｅｒ，２００３，３，２０３−２１６
【非特許文献１７】Ｄａｖｉｄｓｏｎ．Ｂ．ら，Ｃｌｉｎ．ＣａｎｃｅｒＲｅｓ．２００３，９，２２４８−２２５９
【非特許文献１８】Ｂａｒｄｅｌｌｉ，Ａ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２００３，３００，９４９
【非特許文献１９】Ｔｒｕｚｚｉ，Ｆ．ら，Ｄｅｒｍａｔｏ−Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ，２０１１，３（１），ｐｐ．３２−３６
【非特許文献２０】Ｙｉｌｍａｚ，Ｔ．ら，Ｃａｎｃｅｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｔｈｅｒａｐｙ，２０１０，１０（６），ｐｐ．６４４−６５３
【非特許文献２１】Ｄｕ，Ｊ．ら，Ｗｏｒｌｄ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ，２００３，９（７），ｐｐ．１４３１−１４３４
【非特許文献２２】Ｒｉｃｃｉ，Ａ．ら，Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ  Ｃｅｌｌ  ａｎｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，２５（４），ｐｐ．４３９−４４６
【非特許文献２３】Ｊｉｎ，Ｗ．ら，Ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ，２０１０，３１（１１），ｐｐ．１９３９−１９４７
【非特許文献２４】Ｅｕｔｈｕｓ，Ｄ．Ｍ．ら，Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｌｌ，２００２，２（５），ｐｐ．３４７−３４８
【非特許文献２５】Ｗａｄｈｗａ，Ｓ．ら，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ，２００３，２８（２），ｐｐ．１８１−１８８
【非特許文献２６】Ｇｒｕｂｅｒ−Ｏｌｉｐｉｔｚ，Ｍ．ら，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｏｍｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，２００８，７（５），ｐｐ．１９３２−１９４４
【非特許文献２７】Ｌｉ，Ｙ．−Ｇ．ら，Ｃｈｉｎｅｓｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ，２００９，１６（６），ｐｐ．４２８−４３０
【非特許文献２８】Ｇｒｅｃｏ，Ａ．ら，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ａｎｄ  Ｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ，２０１０，３２１（１），ｐｐ．４４−４９
【非特許文献２９】Ｅｇｕｃｈｉ，Ｍ．ら，Ｂｌｏｏｄ，１９９９，９３（４），ｐｐ．１３５５−１３６３
【非特許文献３０】Ｎａｋａｇａｗａｒａ，Ａ．（２００１），Ｃａｎｃｅｒ  Ｌｅｔｔｅｒｓ，１６９：１０７−１１４
【非特許文献３１】Ｍｅｙｅｒ，Ｊ．ら．（２００７），Ｌｅｕｋｅｍｉａ，２１（１０）：２１７１−２１８０
【非特許文献３２】Ｐｉｅｒｏｔｔｉａ，Ｍ．Ａ．及びＧｒｅｃｏ，Ａ．，（２００６），Ｃａｎｃｅｒ  Ｌｅｔｔｅｒｓ，２３２：９０−９８
【非特許文献３３】Ｅｒｉｃ  Ａｄｒｉａｅｎｓｓｅｎｓ，Ｅ．，ら．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ，（２００８），６８：（２）３４６−３５１
【非特許文献３４】Ｆｒｅｕｎｄ−Ｍｉｃｈｅｌ，Ｖ；Ｆｒｏｓｓａｒｄ，Ｎ．，Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ＆  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，（２００８），１１７（１），５２−７６
【非特許文献３５】Ｈｕ，Ｖｉｖｉａｎ，Ｙ；ら．Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｕｒｏｌｏｇｙ，（２００５），１７３（３），１０１６−２１
【非特許文献３６】Ｌｉｕ，Ｈ．−Ｔ．，ら，（２０１０），ＢＪＵ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，１０６（１１），ｐｐ．１６８１−１６８５
【非特許文献３７】Ｄｉ  Ｍｏｌａ，Ｆ．Ｆ，ら，Ｇｕｔ，（２０００），４６（５），６７０−６７８
【非特許文献３８】Ｄｏｕ，Ｙ．−Ｃ．，ら．Ａｒｃｈｉｖｅｓ  ｏｆ  Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，（２００６），２９８（１），３１−３７
【非特許文献３９】Ｒａｙｃｈａｕｄｈｕｒｉ，Ｓ．Ｐ．，ら，Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｖｅ  Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｙ，（２００４），１２２（３），８１２−８１９
【非特許文献４０】ｄｅ  Ｍｅｌｏ−Ｊｏｒｇｅ，Ｍ．ら，Ｃｅｌｌ  Ｈｏｓｔ  ＆  Ｍｉｃｒｏｂｅ，（２００７），１（４），２５１−２６１
【非特許文献４１】Ｋ．Ａｓａｕｍｉ，ら，Ｂｏｎｅ，（２０００），２６（６）６２５−６３３
【非特許文献４２】Ｊ．Ｐｉｎｓｋｉ，ら，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，（２００２），６２，９８６−９８９
【非特許文献４３】Ｆａｕｃｈａｉｓ，Ａ．Ｌ．，ら，（２００９），Ｓｃａｎｄｉｎａｖｉａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｒｈｅｕｍａｔｏｌｏｇｙ，３８（１），ｐｐ．５０−５７
【非特許文献４４】Ｂａｒｃｅｎａ  Ｄｅ  Ａｒｅｌｌａｎｏ，Ｍ．Ｌ．，ら，（２０１１），Ｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１８（１２），ｐｐ．１２０２−１２１０
【非特許文献４５】Ｂａｒｃｅｎａ  Ｄｅ  Ａｒｅｌｌａｎｏ，ら，（２０１１），Ｆｅｒｔｉｌｉｔｙ  ａｎｄ  Ｓｔｅｒｉｌｉｔｙ，９５（３），ｐｐ．１１２３−１１２６
【非特許文献４６】Ｃａｔｔａｎｅｏ，Ａ．，（２０１０），Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎｉｏｎ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，１２（１），ｐｐ．９４−１０６
【非特許文献４７】Ｋｉｍ，Ｈ．Ｃ．，ら，（２００９），Ｄｉａｂｅｔｉｃ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，２６，（１２），ｐｐ．１２２８−１２３４
【非特許文献４８】Ｓｉｎｉｓｃａｌｃｏ，Ｄ．，ら，（２０１１），Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｎｅｕｒｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，９（４），ｐｐ．５２３−５２９
【非特許文献４９】Ｏｓｓｉｐｏｖ，Ｍ．Ｈ．，（２０１１），Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐａｉｎ  ａｎｄ  Ｈｅａｄａｃｈｅ  Ｒｅｐｏｒｔｓ，１５（３），ｐｐ．１８５−１９２
【非特許文献５０】Ｗａｔａｎａｂｅ，Ｔ．，ら，（２０１１），ＢＪＵ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，１０８（２），ｐｐ．２４８−２５１
【非特許文献５１】Ｍｉｌｌｅｒ，Ｌ．Ｊ．ら，（２００２），Ｕｒｏｌｏｇｙ，５９（４），ｐｐ．６０３−６０８
【非特許文献５２】Ｌｉｐｓｏｎ，Ｋ．Ｅ．ら，（２０１２），Ｆｉｂｒｏｇｅｎｅｓｉｓ  ＆  Ｔｉｓｓｕｅ  Ｒｅｐａｉｒ，２０１２，５（Ｓｕｐｐｌ．１）：Ｓ２４
【非特許文献５３】Ｌｉ，Ｇ．ら，Ｊ．  Ｇｅｎｅ  Ｍｅｄ．，２００６，８：８８９−９００
【非特許文献５４】Ｗａｈａｂ，Ｎ．Ａ．，（２００５），Ｊ．Ａｍ．Ｓｏｃ．Ｎｅｐｈｒｏｌ．１６：３４０−３５１
【非特許文献５５】Ｗａｎｇ，Ｔら，Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ．Ｔｈｅｒ．Ｐａｔｅｎｔｓ，（２００９），１９（３），３０５−３１９
【非特許文献５６】ＭｃＣａｒｔｈｙ，Ｃ．及びＷａｌｋｅｒ，Ｅ．，Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ．Ｔｈｅｒ  Ｐａｔｅｎｔｓ，２０１４，２４（７）：７３１−７４４
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００３０】
本明細書で提供されるのは化合物１
【化６】
0006499672.tif 000007
【００３１】
または薬学上許容可能なその塩であり、それはＴｒｋＡの阻害剤である。該化合物は、化学名１−（（３Ｓ，４Ｒ）−４−（３−フルオロフェニル）−１−（２−メトキシエチル）ピロリジン−３−イル）−３−（４−メチル−３−（２−メチルピリミジン−５−イル）−１−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）尿素によっても記載されてもよい。
【００３２】
化合物１は、化合物２及び３に比べてラットにて実質的に低い予測されたヒトＩＶ（静脈内）クリアランスを有することが予想外に発見された。化合物１は、化合物２及び３に比べてラットにて１０ｍｇ／ｋｇの経口投与に続いて高い経口ＡＵＣ（血漿薬剤濃度−時間の曲線下面積）を達成することも予想外に発見された。化合物１は、化合物２及び３に比べてラットにて１０ｍｇ／ｋｇの経口投与に続いて高いＣｍａｘ（血漿薬剤濃度−時間曲線で達成される最高濃度）を達成することも予想外に発見された。化合物１は、化合物２及び３に比べてラットにて１０ｍｇ／ｋｇの経口投与に続いて高いトラフ濃度（血漿薬剤濃度−時間曲線で達成される最低濃度）を達成することも予想外に発見された。化合物１は、化合物２及び３に比べてＴｒｋＡの高い推定阻害を有することも予想外に発見された。ラットにおける経口投与に続く高い血漿対脳の比によって証拠付けられるように、化合物１は化合物２に比べて予想外に改善された末梢神経系−対−中枢神経系の分布も有する。化合物１はまた化合物２に比べてｈＥＲＧ（ヒト遅延整流性カリウムイオンチャンネル遺伝子）のチャンネルの阻害活性にて予想外の低下も有する。
【００３３】
本明細書で提供されるのはまた、そのような治療を必要とする哺乳類に有効量の化合物１または薬学上許容可能なその塩を投与することを含む、ＴｒｋＡによって調節される疾患または障害を治療する方法である。
【００３４】
本明細書で提供されるのはまた、そのような治療を必要とする哺乳類に有効量の化合物１または薬学上許容可能なその塩を投与することを含む、炎症性疼痛、神経障害性疼痛、及び癌、外科手術または骨折に関連する疼痛を含むが、これらに限定されない慢性及び急性の疼痛を治療する方法である。
【００３５】
本明細書で提供されるのはまた、そのような治療を必要とする哺乳類に有効量の化合物１または薬学上許容可能なその塩を投与することを含む、癌を治療する方法である。
【００３６】
本明細書で提供されるのはまた、そのような治療を必要とする哺乳類に有効量の化合物１または薬学上許容可能なその塩を投与することを含む、炎症または炎症性疾患を治療する方法である。
【００３７】
本明細書で提供されるのはまた、そのような治療を必要とする哺乳類に有効量の化合物１または薬学上許容可能なその塩を投与することを含む、神経変性疾患を治療する方法である。
【００３８】
本明細書で提供されるのはまた、そのような治療を必要とする哺乳類に有効量の化合物１または薬学上許容可能なその塩を投与することを含む、前立腺炎または骨盤痛症候群を治療する方法である。
【００３９】
本明細書で提供されるのはまた、そのような治療を必要とする哺乳類に有効量の化合物１または薬学上許容可能なその塩を投与することを含む、骨粗鬆症、関節リウマチ及び骨転移のような骨リモデリングの調節の不均衡に関連する疾患を治療する方法である。
【００４０】
本明細書で提供されるのはまた、そのような治療を必要とする哺乳類に有効量の化合物１または薬学上許容可能なその塩を投与することを含む、特定の感染性疾患、シェーグレン症候群、子宮内膜症、及び糖尿病性末梢神経障害から選択される疾患または障害を治療する方法である。
【００４１】
本明細書で提供されるのはまた、そのような治療を必要とする哺乳類に有効量の化合物１または薬学上許容可能なその塩を投与することを含む、結合組織増殖因子の異常なシグナル伝達から生じる疾患を治療する方法である。
【００４２】
一実施形態では、上記の治療のいずれかは、追加の治療剤との併用で、そのような治療を必要とする哺乳類に有効量の化合物１または薬学上許容可能なその塩を投与することを含む。
【００４３】
本明細書で提供されるのはまた、化合物１または薬学上許容可能なその塩を含む医薬組成物である。
【００４４】
本明細書で提供されるのはまた、治療法で使用するための化合物１または薬学上許容可能なその塩である。
【００４５】
本明細書で提供されるのはまた、炎症性疼痛、神経障害性疼痛、及び癌、外科手術または骨折に関連する疼痛を含むが、これらに限定されない慢性疼痛及び急性疼痛の治療で使用するための化合物１または薬学上許容可能なその塩である。
【００４６】
本明細書で提供されるのはまた、癌の治療で使用するための化合物１または薬学上許容可能なその塩である。
【００４７】
本明細書で提供されるのはまた、炎症または炎症性疾患の治療で使用するための化合物１または薬学上許容可能なその塩である。
【００４８】
本明細書で提供されるのはまた、神経変性疾患の治療で使用するための化合物１または薬学上許容可能なその塩である。
【００４９】
本明細書で提供されるのはまた、前立腺炎または骨盤痛症候群の治療で使用するための化合物１または薬学上許容可能なその塩である。
【００５０】
本明細書で提供されるのはまた、たとえば、骨粗鬆症、関節リウマチ及び骨転移のような骨リモデリングの調節の不均衡に関連する疾患の治療で使用するための化合物１または薬学上許容可能なその塩である。
【００５１】
本明細書で提供されるのはまた、特定の感染性疾患、シェーグレン症候群、子宮内膜症、及び糖尿病性末梢神経障害の治療で使用するための化合物１または薬学上許容可能なその塩である。
【００５２】
本明細書で提供されるのはまた、結合組織増殖因子の異常なシグナル伝達から生じる疾患の治療で使用するための化合物１または薬学上許容可能なその塩である。
【００５３】
本明細書で提供されるのはまた、炎症性疼痛、神経障害性疼痛、及び癌、外科手術または骨折に関連する疼痛を含むが、これらに限定されない慢性疼痛及び急性疼痛のような疾患及び障害の治療のための薬物の製造における化合物１または薬学上許容可能なその塩の使用である。
【００５４】
本明細書で提供されるのはまた、癌、炎症または炎症性疾患、神経変性疾患、特定の感染性疾患、シェーグレン症候群、子宮内膜症、糖尿病性末梢神経障害、前立腺炎、骨盤痛症候群、ならびにたとえば、骨粗鬆症、関節リウマチ及び骨転移のような骨リモデリングの調節の不均衡に関連する疾患から選択される疾患及び障害の治療のための薬物の製造における化合物１または薬学上許容可能なその塩の使用である。
【００５５】
本明細書で提供されるのはまた、結合組織増殖因子の異常なシグナル伝達から生じる疾患の治療のための薬物の製造における化合物１または薬学上許容可能なその塩の使用である。
【００５６】
本明細書で提供されるのはまた、化合物１のようなＴｒｋＡ阻害性化合物を調製するのに有用な中間体、及びそのような中間体を調製する方法である。
【００５７】
本明細書で提供されるのはまた、化合物１または薬学上許容可能なその塩の調製方法、分離方法及び精製方法である。
特定の実施形態では、例えば以下の項目が提供される。
（項目１）
化合物
【化３３】
0006499672.tif 000008
１−（（３Ｓ，４Ｒ）−４−（３−フルオロフェニル）−１−（２−メトキシエチル）ピロリジン−３−イル）−３−（４−メチル−３−（２−メチルピリミジン−５−イル）−１−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）尿素、または薬学上許容可能なその塩。
（項目２）
前記化合物が、１−（（３Ｓ，４Ｒ）−４−（３−フルオロフェニル）−１−（２−メトキシエチル）ピロリジン−３−イル）−３−（４−メチル−３−（２−メチルピリミジン−５−イル）−１−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）尿素の二塩酸塩である項目１に記載の化合物。
（項目３）
項目１または２に記載の化合物と薬学上許容可能な希釈剤またはキャリアとを含む医薬組成物。
（項目４）
前記医薬組成物が経口投与用に製剤化される項目３に記載の医薬組成物。
（項目５）
前記医薬組成物が錠剤またはカプセル剤の形態である項目４に記載の医薬組成物。
（項目６）
哺乳類における疾患または障害の治療方法であって、前記疾患または障害が疼痛、癌、炎症または炎症性疾患、神経変性疾患、特定の感染性疾患、シェーグレン症候群、子宮内膜症、糖尿病性末梢神経障害、前立腺炎、骨盤痛症候群、骨リモデリングの調節の不均衡に関連する疾患、及び結合組織増殖因子の異常なシグナル伝達から生じる疾患から成る群から選択され、それを必要とする前記哺乳類に治療上有効な量の項目１または２に記載の化合物を投与することを含む、前記治療方法。
（項目７）
前記方法が疼痛を治療するためのものである項目６に記載の方法。
（項目８）
前記疼痛が慢性疼痛である項目７に記載の方法。
（項目９）
前記慢性疼痛が慢性背痛である項目８に記載の方法。
（項目１０）
前記疼痛が急性疼痛である項目７に記載の方法。
（項目１１）
前記疼痛が、神経障害性疼痛、炎症性疼痛、癌に関連する疼痛、骨折に関連する疼痛、及び外科手術に関連する疼痛から成る群から選択される項目７に記載の方法。
（項目１２）
前記疼痛が神経障害性疼痛である項目１１に記載の方法。
（項目１３）
前記神経障害性疼痛が糖尿病性末梢神経障害に関連する疼痛である項目１２に記載の方法。
（項目１４）
前記疼痛が炎症性疼痛である項目１１に記載の方法。
（項目１５）
前記炎症性疼痛が変形性関節炎に関連する疼痛である項目１４に記載の方法。
（項目１６）
前記疼痛が癌に関連する疼痛である項目１１に記載の方法。
（項目１７）
前記疼痛が骨折に関連する疼痛である項目１１に記載の方法。
（項目１８）
前記疼痛が外科手術に関連する疼痛である項目１１に記載の方法。
（項目１９）
前記方法がさらに、抗炎症性化合物、ステロイド、鎮痛剤、オピオイド、カルシトニン遺伝子関連のペプチド受容体アンタゴニスト、亜型選択性イオンチャンネルモジュレータ、抗痙攣剤、二重セロトニン／ノルエピネフリン再摂取阻害剤、ＪＡＫファミリーキナーゼ阻害剤及び三環系抗うつ剤から成る群から選択される、有効量の少なくとも１つの追加の治療剤との併用で有効量の化合物１または薬学上許容可能なその塩を投与することを含む項目７〜１８のいずれか１項に記載の方法。
（項目２０）
前記鎮痛剤がＮＳＡＩＤである項目１９に記載の方法。
（項目２１）
前記疾患が炎症性疾患である項目６に記載の方法。
（項目２２）
前記炎症性疾患が、炎症性肺疾患、間質性膀胱炎、疼痛性膀胱症候群、炎症性大腸疾患及び炎症性皮膚疾患から成る群から選択される項目２１に記載の方法。
（項目２３）
前記炎症性疾患が間質性膀胱炎である項目２２に記載の方法。
（項目２４）
前記炎症性疾患が疼痛性膀胱症候群である項目２２に記載の方法。
（項目２５）
前記方法がさらに、抗ＴＮＦ剤、代謝拮抗剤及び葉酸拮抗剤、及び標的化されたキナーゼ阻害剤から成る群から選択される有効量の１以上の追加の作用剤との併用で有効量の化合物１または薬学上許容可能なその塩を、それを必要とする前記哺乳類に投与することを含む項目２１〜２４のいずれか１項に記載の方法。
（項目２６）
前記方法がさらに、インフリキシマブ、アダリムマブ、セルトリズマブペゴール、ゴリムマブ、エタネルセプト、メソトレキセート、ルキソリチニブ、トファシチニブ、ＣＹＴ３８７、レスタウルチニブ、パクリチニブ及びＴＧ１０１３４８から成る群から選択される有効量の１以上の追加の作用剤との併用で有効量の化合物１または薬学上許容可能なその塩を、それを必要とする前記哺乳類に投与することを含む項目２５に記載の方法。
（項目２７）
前記疾患が、結合組織増殖因子の異常なシグナル伝達から生じる疾患である項目６に記載の方法。
（項目２８）
前記疾患が、レイノー症候群、特発性肺線維症、瘢痕化（過形成、ケロイド等）、肝硬変、心内膜心筋線維症、心房線維症、骨髄線維症、進行性塊状線維症（肺）、腎性全身性線維症、強皮症、全身性硬化症、関節線維症及び眼線維症から成る群から選択される項目２７に記載の方法。
（項目２９）
前記疾患が癌である項目６に記載の方法。
（項目３０）
前記癌がＴｒｋＡの調節不全を有する癌である項目２９に記載の方法。
（項目３１）
前記ＴｒｋＡの調節不全が、ＴｒｋＡ遺伝子の融合を生じる１以上の染色体の転座または逆位を含む項目３０に記載の方法。
（項目３２）
前記ＴｒｋＡ遺伝子の融合が、ＬＭＮＡ−ＴｒｋＡ、ＴＦＧ−ＴｒｋＡ、ＴＰＭ３−ＴｒｋＡ、ＣＤ７４−ＴｒｋＡ、ＮＦＡＳＣ−ＴｒｋＡ、ＭＰＲＩＰ−ＴｒｋＡ、ＢＣＡＮ−ＴｒｋＡ、ＴＰ５３−ＴｒｋＡ、ＲＮＦ２１３−ＴｒｋＡ、ＲＡＢＧＡＰ１Ｌ−ＴｒｋＡ、ＩＲＦ２ＢＰ２−ＴｒｋＡ、ＳＱＳＴＭ１−ＴｒｋＡ、ＳＳＢＰ２−ＴｒｋＡ、またはＴＰＲ−ＴｒｋＡである項目３１に記載の方法。
（項目３３）
前記癌が、非小細胞肺癌、甲状腺乳頭癌、多形性膠芽腫、結腸直腸癌、黒色腫、胆管癌または肉腫である項目３２に記載の方法。
（項目３４）
前記ＴｒｋＡの調節不全がＴｒｋＡタンパク質における１以上の欠失、挿入または変異を含む項目３０に記載の方法。
（項目３５）
前記癌が、急性骨髄性白血病、大細胞神経内分泌癌、または神経芽細胞腫である項目３４に記載の方法。
（項目３６）
前記ＴｒｋＡの調節不全が野生型ＴｒｋＡの過剰発現（自己分泌の活性化）である項目３０に記載の方法。
（項目３７）
前記癌が、前立腺癌、神経芽細胞腫、膵臓癌、黒色腫、頭頚部の扁平上皮癌及び胃癌である項目３６に記載の方法。
（項目３８）
前記方法がさらに、１以上の追加の治療法または化学療法剤から選択される有効量の少なくとも１つの追加の治療剤との併用で有効量の化合物１または薬学上許容可能なその塩を投与することを含む項目２９〜３７のいずれか１項に記載の方法。
（項目３９）
前記追加の治療法または化学療法剤が、放射線療法、細胞傷害性の化学療法剤、チロシンキナーゼを標的とする治療剤、アポトーシスのモジュレータ、シグナル伝達阻害剤、免疫標的療法、及び血管形成を標的とする治療法から選択される項目３８に記載の方法。
（項目４０）
前記化学療法剤がチロシンキナーゼを標的とする治療剤から選択される項目３９に記載の方法。
（項目４１）
疼痛、癌、炎症／炎症性疾患、神経変性疾患、特定の感染性疾患、シェーグレン症候群、子宮内膜症、糖尿病性末梢神経障害、前立腺炎、骨盤痛症候群、骨リモデリングの調節の不均衡に関連する疾患、または結合組織増殖因子の異常なシグナル伝達から生じる疾患の治療における使用のための項目１または２に記載の化合物、または薬学上許容可能なその塩。
（項目４２）
疼痛、癌、炎症／炎症性疾患、神経変性疾患、特定の感染性疾患、シェーグレン症候群、子宮内膜症、糖尿病性末梢神経障害、前立腺炎、骨盤痛症候群、骨リモデリングの調節の不均衡に関連する疾患、または結合組織増殖因子の異常なシグナル伝達から生じる疾患を治療するための薬物の調製における項目１または２に記載の化合物、または薬学上許容可能なその塩の使用。
（項目４３）
それを必要とする哺乳類における癌の治療方法であって、前記方法が
（ａ）前記癌がＴｒｋＡキナーゼの調節不全に関連するかどうかを判定することと、
（ｂ）前記癌がＴｒｋＡキナーゼの調節不全に関連すると判定されるのであれば、治療上有効な量の化合物
【化３４】
0006499672.tif 000009
１−（（３Ｓ，４Ｒ）−４−（３−フルオロフェニル）−１−（２−メトキシエチル）ピロリジン−３−イル）−３−（４−メチル−３−（２−メチルピリミジン−５−イル）−１−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）尿素、または薬学上許容可能なその塩を前記哺乳類に投与することとを含む、前記治療方法。
（項目４４）
前記化合物が、１−（（３Ｓ，４Ｒ）−４−（３−フルオロフェニル）−１−（２−メトキシエチル）ピロリジン−３−イル）−３−（４−メチル−３−（２−メチルピリミジン−５−イル）−１−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）尿素の二塩酸塩である項目４３に記載の方法。
（項目４５）
前記ＴｒｋＡの調節不全がＴｒｋＡ遺伝子の融合を生じる１以上の染色体の転座または逆位を含む項目４３または４４に記載の方法。
（項目４６）
前記ＴｒｋＡ遺伝子の融合が、ＬＭＮＡ−ＴｒｋＡ、ＴＦＧ−ＴｒｋＡ、ＴＰＭ３−ＴｒｋＡ、ＣＤ７４−ＴｒｋＡ、ＮＦＡＳＣ−ＴｒｋＡ、ＭＰＲＩＰ−ＴｒｋＡ、ＢＣＡＮ−ＴｒｋＡ、ＴＰ５３−ＴｒｋＡ、ＲＮＦ２１３−ＴｒｋＡ、ＲＡＢＧＡＰ１Ｌ−ＴｒｋＡ、ＩＲＦ２ＢＰ２−ＴｒｋＡ、ＳＱＳＴＭ１−ＴｒｋＡ、ＳＳＢＰ２−ＴｒｋＡ、またはＴＰＲ−ＴｒｋＡである項目４５に記載の方法。
（項目４７）
前記癌が、非小細胞肺癌、甲状腺乳頭癌、多形性膠芽腫、結腸直腸癌、黒色腫、胆管癌または肉腫である項目４６に記載の方法。
（項目４８）
前記ＴｒｋＡの調節不全が、ＴｒｋＡタンパク質における１以上の欠失、挿入または変異を含む項目４３または４４に記載の方法。
（項目４９）
前記癌が、急性骨髄性白血病、大細胞神経内分泌癌、または神経芽細胞腫である項目４８に記載の方法。
（項目５０）
前記ＴｒｋＡの調節不全が野生型ＴｒｋＡの過剰発現（自己分泌の活性化）である項目４３または４４に記載の方法。
（項目５１）
前記癌が、前立腺癌、神経芽細胞腫、膵臓癌、黒色腫、頭頚部の扁平上皮癌及び胃癌である項目５０に記載の方法。
（項目５２）
前記方法がさらに、１以上の追加の治療法または化学療法剤から選択される有効量の少なくとも１つの追加の治療剤との併用で有効量の化合物１または薬学上許容可能なその塩を投与することを含む項目４３〜５１のいずれか１項に記載の方法。
（項目５３）
前記追加の治療法または化学療法剤が、放射線療法、細胞傷害性の化学療法剤、チロシンキナーゼを標的とする治療剤、アポトーシスのモジュレータ、シグナル伝達阻害剤、免疫標的療法、及び血管形成を標的とする治療法から選択される項目５２に記載の方法。
（項目５４）
項目１または２に記載の化合物の調製のための方法であって、
（ａ）カルボニルジイミダゾールまたはトリホスゲン及び塩基の存在下で式ＩＩ−Ａ：
【化３５】
0006499672.tif 000010
を有する化合物を式ＩＩＩ
【化３６】
0006499672.tif 000011
を有する化合物と反応させること、または
（ｂ）塩基の存在下で、式ＩＩ−Ａ
【化３７】
0006499672.tif 000012
を有する化合物を、Ｌ１が脱離基である式ＩＶ
【化３８】
0006499672.tif 000013
を有する化合物と反応させること、または
（ｃ）塩基の存在下で、Ｌ２が脱離基である式Ｖ
【化３９】
0006499672.tif 000014
を有する化合物を式ＩＩＩ
【化４０】
0006499672.tif 000015
有する化合物と反応させること、または
（ｄ）式ＶＩ
【化４１】
0006499672.tif 000016
を有する化合物をアジ化ジフェニルホスホリルと反応させて中間体を形成し、その後、塩基の存在下で前記中間体を式ＩＩＩ
【化４２】
0006499672.tif 000017
を有する化合物と反応させること、または
（ｅ）塩基の存在下で、式ＩＩ−Ａ
【化４３】
0006499672.tif 000018
を有する化合物を式ＶＩＩ
【化４４】
0006499672.tif 000019
を有する化合物と反応させることと、
存在するならば保護基を取り外すことと、任意で薬学上許容可能なその塩を調製すること
とを含む、前記方法。
（項目５５）
式ＩＩ
【化４５】
0006499672.tif 000020
の化合物のラセミ混合物の調製方法であって、
式中、
環ＢはＡｒ１またはｈｅｔＡｒ１であり；
Ａｒ１はハロゲン、ＣＦ３、ＣＦ３Ｏ−、（１−４Ｃ）アルコキシ、ヒドロキシ（１−４Ｃ）アルキル、（１−６Ｃ）アルキル及びＣＮから独立して選択される１以上の置換基によって任意で置換されるフェニルであり；
ｈｅｔＡｒ１は、Ｎ、Ｓ及びＯから独立して選択される１〜３の環ヘテロ原子を有し、且つ（１−６Ｃ）アルキル、ハロゲン、ＯＨ、ＣＦ３、ＮＨ２及びヒドロキシ（１−２Ｃ）アルキルから独立して選択される１〜２の基によって任意で置換される５〜６員環のヘテロアリールであり、前記方法が、
（ａ）触媒量の酸の存在下で、環Ｂが式ＩＩについて定義されたとおりである式（ａ）
【化４６】
0006499672.tif 000021
の化合物を式
【化４７】
0006499672.tif 000022
を有する２−メトキシ−Ｎ−（メトキシメチル）−Ｎ−（（トリメチルシリル）メチル）エタンアミンと反応させて環Ｂが式ＩＩについて定義されたとおりである式（ｂ）
【化４８】
0006499672.tif 000023
の化合物を提供することと、
（ｂ）触媒量のイミダゾール塩酸塩の存在下で式（ｂ）の前記化合物をカルボニルジイミダゾールと反応させ、その後、アンモニアで処理して環Ｂが式ＩＩについて定義されたとおりである式（ｃ）
【化４９】
0006499672.tif 000024
を有する化合物を提供することと、
（ｃ）式（ｃ）の前記化合物を塩酸ナトリウムと反応させ、その後ＫＯＨで処理し、その後ＨＣｌで処理してトランス型式ＩＩのラセミ混合物として式ＩＩの前記化合物を提供することとを含む、前記調製方法。
（項目５６）
ジ−ｐ−トルオイル−Ｄ−酒石酸塩として、または遊離の塩基としてトランス型式ＩＩのエナンチオマー１を単離することをさらに含み、
ジ−ｐ−トルオイル−Ｄ−酒石酸でラセミのトランス型式ＩＩを処理してラセミのトランス型式ＩＩのジ−ｐ−トルオイル−Ｄ−酒石酸塩を提供することと；
トランス型式ＩＩのジ−ｐ−トルオイル−Ｄ−酒石酸塩を再結晶化してトランス型式ＩＩのエナンチオマー１のジ−ｐ−トルオイル−Ｄ−酒石酸塩を提供することと、
任意で、トランス型式ＩＩのエナンチオマー１のジ−ｐ−トルオイル−Ｄ−酒石酸塩を無機塩基で処理して説明されるような絶対配置を有するトランス型ＩＩのエナンチオマー１の遊離の塩基を提供することとを含む
【化５０】
0006499672.tif 000025
項目５５に記載の方法。
【図面の簡単な説明】
【００５８】
【図１】ラットにおける１０ｍｇ／ｋｇの経口投与に続く化合物１（三角）及び化合物２（四角）についての時間（時間）に対して血漿薬剤濃度（μｇ／ｍＬ）を比べたグラフである。
【図２】ラットにおける１０ｍｇ／ｋｇの経口投与に続く化合物１（三角）及び化合物３（丸）についての時間（時間）に対して血漿薬剤濃度（μｇ／ｍＬ）を比べたグラフである。
【図３】ラットにおける１０ｍｇ／ｋｇの経口投与に続く化合物１（三角）及び化合物２（四角）についての時間（時間）に対する推定のパーセントＴｒｋＡ阻害の比較を示すグラフである。
【図４】ラットにおける１０ｍｇ／ｋｇの経口投与に続く化合物１（三角）及び化合物３（丸）についての時間（時間）に対する推定のパーセントＴｒｋＡ阻害の比較を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００５９】
本明細書で提供されるのは化合物１
【化７】
0006499672.tif 000026
【００６０】
または薬学上許容可能なその塩であり、それはＴｒｋＡの阻害剤である。化合物はまた化学名１−（（３Ｓ，４Ｒ）−４−（３−フルオロフェニル）−１−（２−メトキシエチル）ピロリジン−３−イル）−３−（４−メチル−３−（２−メチルピリミジン−５−イル）−１−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）尿素によって記載されてもよい。
【００６１】
化合物１は特定の予想外の且つ望ましい特性を有することが見いだされている。化合物１の特に有利な特性の１つは、その予測されたヒトＩＶクリアランスであり、それは表１で示すように、化合物２及び３双方についての予測されたヒトＩＶクリアランス比べて実質的に低い。
【表１】
0006499672.tif 000027
【００６２】
表１では、予測されたヒトＩＶクリアランス値は、１ｍｇ／ｋｇの静脈内（ＩＶ）投与に続く前臨床の種（マウス、ラット、イヌ及びサル）から集めた血漿における化合物濃度−対−時間のデータから算出した。血漿における化合物の濃度はＬＣ−ＭＳ（液体クロマトグラフィ−質量分光分析）によって測定した。個々のＣｐ/ｔ曲線（任意の時間ｔでの血漿における薬剤の濃度）についてのＡＵＣｉｎｆ値（外挿された０時間から無限までの投与間隔についての血漿濃度−時間の曲線下面積）は、線形−台形積分及びＣｐ/ｔ曲線の終点からの一次外挿を用いて決定し、クリアランスは用量／ＡＵＣｉｎｆを用いて算出した。
【００６３】
予測された肝クリアランス（ＣＬｈ）値は、表２に載せた固有のクリアランス（ＣＬｉｎｔ）及び肝クリアランス（ＣＬｈｅｐ）を予測するのに使用し、以下の方程式：
【数１】
0006499672.tif 000028
で採用された物理的な及び生理的なスケーリング因子を用いて肝ミクロソームにおける化合物（１ｍｇ／ｍＬ；２０分間）の安定性についての試験管内の半減期（ｔ１/２）を調整することによって算出した。
【００６４】
式中、Ｄは肝臓の質量当たりのチトクロームＰ４５０に関連するタンパク質の量であり、Ｗは動物の体重当たりに存在する肝臓の平均質量であり、Ｃは肝ミクロソームの濃度であり、Ｑは種依存性の肝臓の血流である。
【表２】
0006499672.tif 000029
【００６５】
次いで、ミクロソームのＣＬｈをＩＶのＣＬ値で割ることによって生体内／試験管内の補正因子を決定した。各化合物の前臨床補正因子の算術平均を用いて、測定されたヒトのミクロソームＣＬｈからヒトＩＶクリアランス（ＣＬｈ／補正因子）を予測した。
【００６６】
従って、図１及び図２に示され、表３で要約されたように、化合物２及び３に比べたラットの薬物動態曲線によって例示されるように、化合物１は経口投与（１０ｍｇ／ｋｇ）に続いて高い経口ＡＵＣ（血漿薬剤濃度−時間の曲線下面積）、高いＣｍａｘ（血漿薬剤濃度−時間の曲線で達成される最高濃度）及び高いトラフ濃度（血漿薬剤濃度−時間の曲線で達成される最低濃度）を予想外に達成する。
【表３】
0006499672.tif 000030
【００６７】
図３及び４はそれぞれ、ラットにおける１０ｍｇ／ｋｇの経口投与後の化合物２に比べた化合物１についての、及び化合物３に比べた化合物１についてのＴｒｋＡの推定阻害を説明する。図３及び４における曲線は以下の方程式：
【数２】
0006499672.tif 000031
を用いて算出した。
【００６８】
式中、Ｉｍｉｎ及びＩｍａｘはそれぞれ、標的の考えられる最小及び最大の阻害であり、ＩＣ５０は標的が５０％阻害される濃度であり、Ｃは阻害剤の濃度であり、ｎはヒル勾配である。図３及び４に示すように、ＴｒｋＡの推定阻害は化合物２及び化合物３よりも化合物１について高い。
【００６９】
化合物１のさらに低いクリアランス、高いＡＵＣ、高いＣｍａｘ及び高いトラフ濃度は、化合物２及び３に比べて患者への化合物１の投与に続いてその日全体にわたってＴｒｋＡ受容体の大きな阻害を生じる。このことは、化合物２及び３に比べて化合物１についてさらに大きな治療効果に変換できる。改善された治療有効性を達成する能力は、たとえば、中程度から重度の疼痛、特定の炎症状態または癌（異常なＴｒｋＡシグナル伝達による癌を含む）を患っている患者を治療することにおいて重要である。
【００７０】
加えて、化合物１の低いクリアランスが化合物２及び３に比べて投与後の化合物の長い半減期を生じるということは、化合物の経口投与、静脈内投与または皮下投与に続いてＴｒｋＡ受容体のさらに持続する阻害を生じる。増えた半減期は、さらに持続する有効性及び／または薬剤の投与回数の低下を提供するという点で利益を有する。さらに、化合物１の低いヒトのクリアランス及び高い経口ＡＵＣは、化合物２及び３に比べて低用量の化合物１がＴｒｋＡ受容体を効果的に阻害するのに必要とされ、所与の治療有効性を提供するという点で有利である。有効性に必要とされる化合物の用量を下げることは、薬剤の忍容性、治療のコスト、及び投薬計画への患者のコンプライアンスの改善に変換できる。
【００７１】
化合物１はまた、表４にて示されるように、ラットにて経口投与後の高い血漿対脳の比によって証拠付けられるように、化合物２に比べて予想外の改善された末梢神経系−対−中枢神経系の分布も有する。脳への低い曝露を維持することは、たとえば、認知損傷または運動損傷に関連する副作用のような中枢神経系に関連する副作用のリスクを下げる利益を有する。中枢神経系への曝露の低下は、所与の治療効果について患者にて少ないまたは低下した副作用しか起きない及び／または用量に限定された副作用が見られる前にさらに大きな治療効果が達成されるという点で有益である。
【００７２】
化合物１は表４で示されるように、化合物２と比べてｈＥＲＧ（ヒト遅延整流性カリウムイオンチャンネル遺伝子）チャンネルに対する予想外に低下した阻害活性も有する。ｈＥＲＧチャンネル機能の阻害は、深刻な薬剤誘導性の（獲得性の）長期ＱＴ症候群の副作用を生じることができ、それは突然死の付随するリスクを生み出すことができる。この副作用の深刻な性質のために、ｈＥＲＧに対する低下した阻害活性を有することは高度に望ましい。
【表４】
0006499672.tif 000032
【００７３】
化合物２に比べた化合物１の上述の予想外の特性は、これらの化合物間の軽微な構造的差異からは合理的に予測することはできなかった。化合物１と化合物２の間での唯一の構造的差異は単一のフッ素原子の取り外しである。しかしながら、化合物からの単一のフッ素原子の取り外しは一般に、化合物２に比べて化合物１について認められた予測されたヒトクリアランスにおける改善された変化を有する化合物を提供することはないことが当該技術では実証されている。実際、より多くのフッ素原子を有する類似体がより少ないフッ素原子を有する類似体に比べて生体内クリアランスで低下を有する傾向があることを明らかにしている他の薬剤モチーフを伴った多数の例が当該技術にはある（たとえば、Ｂａｒｋｅｒ，Ａ．Ｊ．ら，Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．１１，（２００１），１９１１−１９１４；Ｒｏｓｅｎｂｌｕｍ，Ｓ．Ｂ．ら，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，４１，（１９９８），９７３−９８０；Ｂｒｏｗｎ，Ｍ．Ｆ．ら，Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．１４（２００４），２１７５−２１７９を参照のこと）。対照的に、モノ−フルオロ化合物１は、ジ−フルオロ化合物２に比べて予測された低いヒトクリアランスを有する。同様に、前臨床ラットのＰＫデータによって明示されたように、化合物２に比べた化合物１についての高いＣｍａｘ、高いＡＵＣ、高いトラフ曝露及び高いＴｒｋＡ標的ノックダウンの薬物動態（ＰＫ）の利点はそのような小さな構造的変化について非常に顕著であり、予想外である。
【００７４】
さらに、化合物１と化合物３についてのＰＫパラメータの比較は、化合物１の改善された薬物動態がモノ−フルオロ類似体すべてについての一般的な現象ではないことを明らかにしている。実際、化合物３は、モノフルオロ置換されたフェニル基を有するにもかかわらず、化合物１に比べてＣｍａｘ、ＡＵＣ、トラフ曝露及びＴｒｋＡ標的のノックダウンという点で悪化した予想ヒトクリアランス及び劣るＰＫ値を明らかにした。化合物１におけるメチルピリミジニル部分とモノフルオロ置換されたフェニル部分の独特の組み合わせが上記で要点を述べた優れた特性を予想外に提供する。
【００７５】
本明細書で提供されるのはまた、化合物１の薬学上許容可能なその塩である。特定の塩は塩酸塩である。一実施形態では、本明細書で提供されるのは化合物１の一塩酸塩である。一実施形態では、本明細書で提供されるのは化合物１の二塩酸塩である。
【００７６】
一実施形態では、本明細書で提供されるのは化合物１の遊離塩基の形態である。
【００７７】
一実施形態では、化合物１またはその塩は、溶媒和物の形態で単離されてもよく、その結果、そのような溶媒和物は本発明の範囲内に含まれる。たとえば、化合物１またはその塩は、たとえば、水、エタノール等のような薬学上許容可能な溶媒との溶媒和されない形態と同様に溶媒和された形態で存在することができる。
【００７８】
用語「薬学上許容可能な」は、物質または組成物が製剤を含む他の成分及び／またはそれで治療される哺乳類と化学的に及び／または毒性学的に適合性であることを示す。
【００７９】
本明細書で提供されるのはまた、以下を含む化合物１または薬学上許容可能なその塩を調製する方法であって、
【００８０】
（ａ）式ＩＩ−Ａを有する化合物
【化８】
0006499672.tif 000033
を
【００８１】
式ＩＩＩ
【化９】
0006499672.tif 000034
を有する化合物と
【００８２】
カルボニルジイミダゾールもしくはトリホスゲン及び塩基の存在下で反応させること；または
【００８３】
（ｂ）式ＩＩ−Ａ
【化１０】
0006499672.tif 000035
を有する化合物を
【００８４】
Ｌ１が脱離基である式ＩＶ
【化１１】
0006499672.tif 000036
を有する化合物と塩基の存在下で反応させること；
【００８５】
または
【００８６】
（ｃ）Ｌ２が脱離基である式Ｖ
【化１２】
0006499672.tif 000037
を有する化合物を
【００８７】
式ＩＩＩ
【化１３】
0006499672.tif 000038
を有する化合物と
【００８８】
塩基の存在下で反応させること；または
【００８９】
（ｄ）式ＶＩ
【化１４】
0006499672.tif 000039
を有する化合物を
【００９０】
アジ化ジフェニルホスホリルと反応させて中間体を形成し、その後、式ＩＩＩ
【化１５】
0006499672.tif 000040
を有する化合物を該中間体と
【００９１】
塩基の存在下で反応させること；または
【００９２】
（ｅ）式ＩＩ−Ａ
【化１６】
0006499672.tif 000041
を有する化合物を
【００９３】
式ＶＩＩ
【化１７】
0006499672.tif 000042
を有する化合物と
【００９４】
塩基の存在下で反応させることと；
【００９５】
存在するならば、基を取り外し、保護することと、任意で薬学上許容可能なその塩を調製することとを含む。
【００９６】
方法（ａ）を参照して、塩基は、たとえば、トリエチルアミンまたはジイソプロピルアミンのようなアミン塩基であってもよい。好適な溶媒にはジクロロメタン、ジクロロエタン、ＴＨＦ、ＤＭＡ及びＤＭＦが挙げられる。反応は常温で好都合に行われる。
【００９７】
方法（ｂ）を参照して、脱離基は、たとえば、フェノキシまたは４−ニトロフェノキシであってもよい。塩基は、たとえば、トリエチルアミンまたはジイソプロピルアミンのようなアミン塩基であってもよい。好適な溶媒にはＤＭＡ、ＤＭＦ及びＤＣＥが挙げられる。反応は常温で好都合に行われる。
【００９８】
方法（ｃ）を参照して、脱離基は、たとえば、フェノキシまたは４−ニトロフェノキシであってもよい。塩基は、たとえば、トリエチルアミンまたはジイソプロピルアミンのようなアミン塩基であってもよい。好適な溶媒にはＤＣＥ、ＤＭＡ及びＤＭＦが挙げられる。反応は常温で好都合に行われる。
【００９９】
方法（ｄ）を参照して、塩基は、たとえば、トリエチルアミンまたはジイソプロピルアミンのようなアミン塩基であってもよい。好適な溶媒にはトルエン及びＤＭＦが挙げられる。反応は、高温にて、たとえば、溶媒の還流温度にて好都合に行われる。
【０１００】
方法（ｅ）を参照して、塩基は、たとえば、トリエチルアミンまたはジイソプロピルアミンのようなアミン塩基であってもよい。好適な溶媒にはＤＣＭ、ＤＣＥ、ＤＭＦ及びＴＨＦが挙げられる。反応は約０℃〜常温の間の温度にて好都合に行われる。
【０１０１】
本明細書で提供されるのはまた、式ＩＩ
【化１８】
0006499672.tif 000043
の化合物のラセミ混合物を調製する方法であって、
【０１０２】
式中、Ｂ環及びＮＨ２部分はトランス配置である。式ＩＩの化合物は（たとえば、式ＩＩ−Ａの化合物）は化合物１のようなＴｒｋＡ阻害性化合物のような化合物を調製するのに有用である。
【０１０３】
従って、本明細書で提供されるのは、式ＩＩ
【化１９】
0006499672.tif 000044
の化合物のラセミ混合物を調製する方法であって、
【０１０４】
式中、
【０１０５】
環ＢはＡｒ１またはｈｅｔＡｒ１であり；
【０１０６】
Ａｒ１はハロゲン、ＣＦ３、ＣＦ３Ｏ−、（１−４Ｃ）アルコキシ、ヒドロキシ（１−４Ｃ）アルキル、（１−６Ｃ）アルキル及びＣＮから独立して選択される１以上の置換基によって任意で置換されるフェニルであり；
【０１０７】
ｈｅｔＡｒ１は、Ｎ、Ｓ及びＯから独立して選択される１〜３の環ヘテロ原子を有し、且つ（１−６Ｃ）アルキル、ハロゲン、ＯＨ、ＣＦ３、ＮＨ２及びヒドロキシ（１−２Ｃ）アルキルから独立して選択される１〜２の基によって任意で置換される５〜６員環のヘテロアリールであり、前記方法は、
【０１０８】
（ａ）環Ｂが式ＩＩについて定義されたとおりである式（ａ）：
【化２０】
0006499672.tif 000045
の化合物を
【０１０９】
式
【化２１】
0006499672.tif 000046
を有する２−メトキシ−Ｎ−（メトキシメチル）−Ｎ−（（トリメチルシリル）メチル）エタンアミンと
【０１１０】
触媒量の酸の存在下で反応させて、
【０１１１】
環Ｂが式ＩＩについて定義されたとおりである式（ｂ）
【化２２】
0006499672.tif 000047
の化合物を提供することと；
【０１１２】
（ｂ）式（ｂ）の前記化合物を触媒量のイミダゾール塩酸塩の存在下でカルボニルジイミダゾールと反応させ、その後アンモニアによって処理して
【０１１３】
環Ｂが式ＩＩについて定義されたとおりである式（ｃ）
【化２３】
0006499672.tif 000048
を有する化合物を提供することと；
【０１１４】
（ｃ）式（ｃ）の前記化合物を塩酸ナトリウムと反応させ、その後ＫＯＨによって処理し、その後ＨＣｌによって処理してトランス式ＩＩのラセミ混合物としての式ＩＩの前記化合物を提供することとを含む。
【０１１５】
工程（ａ）を参照して、酸は、たとえば、トリフルオロ酢酸のような有機酸であってもよい。
【０１１６】
式ＩＩの化合物のラセミ混合物を調製する上記方法の一実施形態では、環Ｂは、ハロゲン、ＣＦ３、ＣＦ３Ｏ−、（１−４Ｃ）アルコキシ、ヒドロキシ（１−４Ｃ）アルキル、（１−６Ｃ）アルキル及びＣＮから独立して選択される１以上の置換基によって任意で置換されるフェニルである。
【０１１７】
式ＩＩの化合物のラセミ混合物を調製する上記方法の一実施形態では、環Ｂは、ハロゲンから独立して選択される１以上の置換基によって任意で置換されるフェニルである。
【０１１８】
式ＩＩの化合物のラセミ混合物を調製する上記方法の一実施形態では、環Ｂは、フルオロから独立して選択される１以上の置換基によって任意で置換されるフェニルである。
【０１１９】
式ＩＩの化合物のラセミ混合物を調製する上記方法の一実施形態では、環Ｂは３−フルオロフェニルである。
【０１２０】
式ＩＩの化合物のラセミ混合物を調製する上記方法の一実施形態では、環Ｂは３,４−ジフルオロフェニルである。
【０１２１】
式ＩＩの化合物のラセミ混合物を調製する上記方法の一実施形態では、環Ｂは、Ｎ、Ｓ及びＯから独立して選択される１〜３の環ヘテロ原子を有し、且つ（１−６Ｃ）アルキル、ハロゲン、ＯＨ、ＣＦ３、ＮＨ２及びヒドロキシ（１−２Ｃ）アルキルから独立して選択される１〜２の基によって任意で置換される５〜６員環のヘテロアリールである。
【０１２２】
上記方法の一実施形態では、環Ｂは、（１−６Ｃ）アルキル、ハロゲン、ＯＨ、ＣＦ３、ＮＨ２及びヒドロキシ（１−２Ｃ）アルキルから独立して選択される１〜２の基によって任意で置換されるピリジル環、チオフェニル環、チアゾリル環、オキサゾリル環またはイソオキサゾリル環である。
【０１２３】
式ＩＩの化合物のラセミ混合物を調製する上記方法の一実施形態では、環Ｂは、ハロゲン及び（１−６Ｃ）アルキルから独立して選択される１〜２の基によって任意で置換されるピリジル環、チオフェニル環、チアゾリル環、オキサゾリル環またはイソオキサゾリル環である。
【０１２４】
式ＩＩの化合物のラセミ混合物を調製する上記方法の一実施形態では、式
【化２４】
0006499672.tif 000049
を有する２−メトキシ−Ｎ−（メトキシメチル）−Ｎ−（（トリメチルシリル）メチル）エタンアミンは、
【０１２５】
以下を含む方法によって調製されてもよい：
【０１２６】
（ｉ）（クロロメチル）トリメチルシランを２−メトキシエタンアミンと反応させて構造
【化２５】
0006499672.tif 000050
及び
を有する（２−メトキシ−Ｎ−（（トリメチルシリル）メチル）エタンアミンを提供すること、及び
【０１２７】
（ｉｉ）メタノール中にて前記（２−メトキシ−Ｎ−（（トリメチルシリル）メチル）エタンアミンをホルムアルデヒドと反応させて前記２−メトキシ−Ｎ−（メトキシメチル）−Ｎ−（（トリメチルシリル）メチル）エタンアミンを提供すること。
【０１２８】
本明細書でさらに提供されるのは、遊離の塩としてまたはジ−ｐ−トルオイル−Ｄ−酒石酸塩としてトランス型式ＩＩのエナンチオマー１を単離する方法であり、それは、
【０１２９】
ラセミトランス型式ＩＩをジ−ｐ−トルオイル−Ｄ−酒石酸で処理してラセミトランス型ＩＩのジ−ｐ−トルオイル−Ｄ−酒石酸塩を提供することと、
【０１３０】
トランス型ＩＩのジ−ｐ−トルオイル−Ｄ−酒石酸塩を再結晶化してトランス型ＩＩのエナンチオマー１のジ−ｐ−トルオイル−Ｄ−酒石酸塩を提供することと、
【０１３１】
任意でトランス型ＩＩのエナンチオマー１のジ−ｐ−トルオイル−Ｄ−酒石酸塩を無機塩基で処理して
【化２６】
0006499672.tif 000051
で説明されるような絶対配置を有するトランス型式ＩＩのエナンチオマー１の遊離の塩基を提供することとを含む。
【０１３２】
一実施形態では、トランス型ＩＩのエナンチオマー１のジ−ｐ−トルオイル−Ｄ−酒石酸塩を用いて、たとえば、化合物１のようなＴｒｋＡ阻害剤化合物のような化合物を調製する。たとえば、一実施形態では、トランス型式ＩＩのエナンチオマー１のジ−ｐ−トルオイル−Ｄ−酒石酸塩を用いて、Ｓｈｏｔｔｅｎ−Ｂａｕｍａｎｎの条件下でたとえば、化合物１のようなＴｒｋＡ阻害剤化合物のような化合物を調製するが、その際、トランス型式ＩＩのエナンチオマー１のジ−ｐ−トルオイル−Ｄ−酒石酸塩の遊離の塩基は、水酸化ナトリウムのような塩基の存在下で水と有機溶媒（たとえば、ジクロロメタン）とから成る２相溶媒系のもとで生成され、式ＩＶを有する化合物と反応する。
【０１３３】
一実施形態では、トランス型式ＩＩのエナンチオマー１の遊離の塩基を用いて化合物１のようなＴｒｋＡ阻害剤化合物のような化合物を調製する。
【０１３４】
トランス型式ＩＩのエナンチオマー１を単離する上記方法の一実施形態では、環Ｂは、ハロゲン、ＣＦ３、ＣＦ３Ｏ−、（１−４Ｃ）アルコキシ、ヒドロキシ（１−４Ｃ）アルキル、（１−６Ｃ）アルキル及びＣＮから独立して選択される１以上の置換基によって任意で置換されるフェニルである。
【０１３５】
トランス型式ＩＩのエナンチオマー１を単離する上記方法の一実施形態では、環Ｂは、ハロゲンから独立して選択される１以上の置換基によって任意で置換されるフェニルである。
【０１３６】
トランス型式ＩＩのエナンチオマー１を単離する上記方法の一実施形態では、環Ｂは、１以上のフルオロによって任意置換されるフェニルである。
【０１３７】
トランス型式ＩＩのエナンチオマー１を単離する上記方法の一実施形態では、環Ｂは３−フルオロフェニルである。
【０１３８】
トランス型式ＩＩのエナンチオマー１を単離する上記方法の一実施形態では、環Ｂは３,４−ジフルオロフェニルである。
【０１３９】
一実施形態では、トランス型式ＩＩのエナンチオマー１を単離する上記方法は、（３Ｓ，４Ｒ）−４−（３，４−ジフルオロフェニル）−１−（２−メトキシエチル）ピロリジン−３−アミンを調製する方法を提供する。
【０１４０】
トランス型式ＩＩのエナンチオマー１を単離する上記方法の一実施形態では、環Ｂは、Ｎ、Ｓ及びＯから独立して選択される１〜３の環ヘテロ原子を有し、且つ（１−６Ｃ）アルキル、ハロゲン、ＯＨ、ＣＦ３、ＮＨ２及びヒドロキシ（１−２Ｃ）アルキルから独立して選択される１〜２の基によって任意で置換される５〜６員環のヘテロアリールである。
【０１４１】
トランス型式ＩＩのエナンチオマー１を単離する上記方法の一実施形態では、環Ｂは、（１−６Ｃ）アルキル、ハロゲン、ＯＨ、ＣＦ３、ＮＨ２及びヒドロキシ（１−２Ｃ）アルキルから独立して選択される１〜２の基によって任意で置換されるピリジル環、チオフェニル環、チアゾリル環、オキサゾリル環またはイソオキサゾリル環である。
【０１４２】
トランス型式ＩＩのエナンチオマー１を単離する上記方法の一実施形態では、環Ｂは、ハロゲン及び（１−６Ｃ）アルキルから独立して選択される１〜２の基によって任意で置換されるピリジル環、チオフェニル環、チアゾリル環、オキサゾリル環またはイソオキサゾリル環である。
【０１４３】
式ＩＩの化合物のラセミ混合物を調製する上記方法は、国際出願公開番号ＷＯ２０１２／１５８４１３にて記載された方法に比べて幾つかの利点を提供する。たとえば、ＷＯ２０１２／１５８４１３で記載された方法はベンズアルデヒド試薬とニトロメタンの間でのニトロ／アルドール反応を含む。次いで得られた２−ニトロビニルベンゼン中間体を高圧下で水素化によって還元する。ニトロ／アルドール反応及びそれに由来するニトロ中間体は不安定であり、危険であり得るので、これらの反応工程の双方は大規模には合成しにくい。対照的に、式ＩＩの化合物のラセミ混合物を調製する上記方法は、高度に有害な化学的性質は使用せず、ニトロを含有する中間体及び水素化を回避する。加えて、式ＩＩの化合物のラセミ混合物を調製する上記方法で使用される条件はすべて大規模合成のためのパイロットプラントで通常見られる標準の操作パラメータの範囲内にあり、たとえば、方法は極端な温度を使用せず、且つ高圧容器を必要としない。
【０１４４】
化合物１または薬学上許容可能なその塩のＴｒｋＡ阻害剤として作用する能力は実施例Ａ及びＢに記載されるアッセイによって明らかにされてもよい。
【０１４５】
化合物１または薬学上許容可能なその塩は、疼痛、癌、炎症／炎症性疾患、神経変性疾患、特定の感染性疾患、シェーグレン症候群、子宮内膜症、糖尿病性末梢神経障害、前立腺炎、骨盤痛症候群、骨リモデリングの調節の不均衡に関連する疾患、及び結合組織増殖因子の異常なシグナル伝達から生じる疾患を含むが、これらに限定されない疾患及び障害の治療に有用である。
【０１４６】
本明細書で使用されるとき、用語「治療する」または「治療」は治療手段または一時的な緩和手段を指す。有益なまたは所望の臨床成績には、障害または状態に関連する症状の全体的なまたは部分的な緩和、疾患の広がりの縮小、疾患の安定した（すなわち、悪化しない）状態、疾患の進行の遅延または遅れ、疾患状態の改善または緩和、及び検出可能であれまたは検出不能であれ、寛解（部分的であれ、または全体的であれ）が挙げられるが、これらに限定されない。「治療」はまた、治療を受けていなければ予想される生存に比べて延長された生存も意味することができる。
【０１４７】
特定の実施形態では、化合物１または薬学上許容可能なその塩は本明細書で定義されるような疾患または障害を予防するのに有用である。用語「予防すること」は本明細書で使用されるとき、本明細書で記載されるような疾患または状態、またはそれらの症状の全体的なまたは部分的な発症、再発または広がりの予防を意味し、症状の発症に先立つ化合物１または薬学上許容可能なその塩の投与を含む。
【０１４８】
化合物１または薬学上許容可能なその塩は、同一のまたは異なった作用機序で機能する１以上の追加の治療剤との併用で使用することができる。
【０１４９】
用語「組合せ医薬」は本明細書で使用されるとき、１を超える有効成分の混合または組合せから生じる薬物療法を指し、有効成分の固定された組合せ及び固定されない組合せの双方を含む。用語「固定された組合せ」は、化合物１または薬学上許容可能なその塩及び少なくとも１つの追加の治療剤が単一の実体または投与量の形態で同時に患者に双方とも投与されることを意味する。用語「固定されない組合せ」は、化合物１または薬学上許容可能なその塩及び少なくとも１つの追加の治療剤が、様々な介在する時間制限で同時にまたは順に別々の実体として患者に投与されることを意味し、その際、そのような投与は患者の体内にて２以上の化合物の有効なレベルを提供する。これらはまた、カクテル療法、たとえば、３以上の有効成分の投与にも適用される。
【０１５０】
本明細書で使用されるとき、用語「同時投与すること」は、単一の患者への選択された治療剤の投与を包含することにし、作用剤が同一のもしくは異なる投与経路によって、または同一のもしくは異なる時間に投与される治療投薬計画を含むように意図される。この用語は、双方の作用剤及び／またはその代謝産物が哺乳類にて同時に存在するように２以上の作用剤を哺乳類に投与することを包含する。それは、別々の組成物での同時投与、別々の組成物での異なる時間での投与、及び／または双方の作用剤が存在する組成物での投与を含む。一実施形態では、本発明の化合物及び他の治療剤は単一組成物で投与される。一実施形態では、化合物１または薬学上許容可能なその塩及び他の作用剤は組成物で混合される。
【０１５１】
一実施形態では、化合物１または薬学上許容可能なその塩は慢性疼痛及び急性疼痛を含む疼痛を治療することに有用である。たとえば、化合物１または薬学上許容可能なその塩は、炎症性疼痛、神経障害性疼痛、背痛、及び癌、外科手術または骨折に関連する疼痛を含む複数の種類の疼痛の治療に有用である。
【０１５２】
一実施形態では、化合物１または薬学上許容可能なその塩は急性疼痛を治療することに有用である。国際疼痛学会によって定義されたような急性疼痛は、疾患、炎症または組織への損傷の結果生じる。この種の疼痛は一般に、たとえば、外傷または手術の後突然生じ、不安またはストレスを伴ってもよく、所与の時間及び重症度に限定される。一部の例では、それは慢性になり得る。
【０１５３】
一実施形態では、化合物１または薬学上許容可能なその塩は慢性疼痛を治療するのに有用である。国際疼痛学会によって定義されたような慢性疼痛は、それ自体で疾患を表すと広く考えられている。それは環境因子及び心理的因子によってはるかに悪くなり得る。慢性疼痛は急性疼痛よりも長い時間にわたって持続し、一般に３ヵ月以上にわたるほとんどの薬物療法に耐性である。それは患者にとって重大な問題を起こし得るし、起こすことが多い。
【０１５４】
従って、本明細書で提供されるのは、それを必要とする哺乳類に疼痛を治療するのに有効な量で化合物１または薬学上許容可能なその塩を投与することを含む、前記哺乳類にて前記疼痛を治療する方法である。一実施形態では、疼痛は急性疼痛である。一実施形態では、疼痛は慢性疼痛である。一実施形態では、疼痛は慢性の背痛である。一実施形態では、疼痛は、糖尿病性末梢神経障害または非糖尿病性（化学療法によって誘導される）末梢神経障害のような神経障害性疼痛である。一実施形態では、疼痛は、変形性関節症に関連する疼痛のような炎症性疼痛である。一実施形態では、疼痛は癌に関連する疼痛である。一実施形態では、疼痛は外科手術に関連する疼痛である。一実施形態では、疼痛は骨折に関連する疼痛である。
【０１５５】
本明細書で提供されるのはまた、それを必要とする哺乳類に疼痛を予防するのに十分な量での化合物１または薬学上許容可能なその塩を投与することを含む、前記哺乳類において前記疼痛を予防する方法である。一実施形態では、疼痛は急性疼痛である。一実施形態では、疼痛は慢性疼痛である。一実施形態では、疼痛は慢性の背痛である。一実施形態では、疼痛は、糖尿病性末梢神経障害または非糖尿病性（化学療法によって誘導される）末梢神経障害のような神経障害性疼痛である。一実施形態では、疼痛は、変形性関節症に関連する疼痛のような炎症性疼痛である。一実施形態では、疼痛は癌に関連する疼痛である。一実施形態では、疼痛は外科手術に関連する疼痛である。一実施形態では、疼痛は骨折に関連する疼痛である。
【０１５６】
本明細書で提供されるのはまた、それを必要とする哺乳類に有効量での（ａ）化合物１または薬学上許容可能なその塩と、（ｂ）抗炎症性化合物、ステロイド（たとえば、デキサメタゾン、コルチゾン及びフルチカゾン）、たとえば、ＮＳＡＩＤのような鎮痛薬（たとえば、アスピリン、イブプロフェン、インドメタシン及びケトプロフェン）、オピオイド（たとえば、モルヒネ）、カルシトニン遺伝子関連のペプチド受容体アンタゴニスト、亜型選択性のイオンチャンネルモジュレータ、抗痙攣剤（たとえば、プレガバリン及びガバペンチン）二重セロトニン／ノルエピネフリン再摂取阻害剤（たとえば、デュロキセチン、ベンラファキシン及びミルナシプラン）、ＪＡＫファミリーキナーゼ阻害剤（たとえば、ルキソリチニブまたはトファシチニブ）及び三環系抗うつ剤（たとえば、アミトリプチリン、ノルトリプチリン及びデシプラミン）から選択される少なくとも１つの追加の治療剤とを投与することを含む、哺乳類にて疼痛を治療する方法である。これらの追加の治療剤は、当業者に既知の標準の薬務に従って、同一のまたは異なる投与経路を介して、同一のまたは異なる投与スケジュールで同一剤形の一部または別の剤形として化合物１または薬学上許容可能なその塩と共に投与されてもよい。
【０１５７】
従って、本明細書で提供されるのはまた、哺乳類における疼痛の治療のための、有効量の（ａ）化合物１または薬学上許容可能なその塩と、（ｂ）抗炎症性化合物、ステロイド（たとえば、デキサメタゾン、コルチゾン及びフルチカゾン）、たとえば、ＮＳＡＩＤのような鎮痛薬（たとえば、アスピリン、イブプロフェン、インドメタシン及びケトプロフェン）、及びオピオイド（たとえば、モルヒネ）から選択される少なくとも１つの追加の治療剤と含む組合せ医薬であり、その際、（ａ）及び（ｂ）は別々の剤形または同一の剤形に存在することができる。一実施形態では、本明細書で提供されるのは、（ａ）有効量の化合物１または薬学上許容可能なその塩と、（ｂ）有効量のＮＳＡＩＤのような鎮痛薬（たとえば、アスピリン、イブプロフェン、インドメタシン及びケトプロフェン）含む組合せ医薬である。
【０１５８】
化合物１または薬学上許容可能なその塩は癌を治療するのにも有用である。特定の例には、神経芽細胞腫、卵巣癌、膵臓癌、結腸直腸癌及び前立腺癌が挙げられる。
【０１５９】
従って、本明細書で提供されるのはまた、それを必要とする哺乳類に癌を治療するのに有効な量で化合物１または薬学上許容可能なその塩を投与することを含む、前記哺乳類にて前記癌を治療する方法である。
【０１６０】
化合物１または薬学上許容可能なその塩はＴｒｋＡの調節不全を有する癌を治療するのにも有用である。
【０１６１】
従って、本明細書で提供されるのはまた、治療上有効な量の化合物１または薬学上許容可能なその塩を患者に投与することを含む、ＴｒｋＡの調節不全を有する癌であると診断された患者を治療する方法である。
【０１６２】
一実施形態では、ＴｒｋＡの調節不全は野生型ＴｒｋＡの過剰発現（自己分泌／傍分泌の活性化）を含む。
【０１６３】
一実施形態では、ＴｒｋＡの調節不全は、遺伝子の増幅、またはＴｒｋＡ遺伝子の融合を生じる１以上の染色体の転座もしくは逆位を含む。一実施形態では、調節不全は、発現されるタンパク質が非ＴｒｋＡタンパク質やＴｒｋＡタンパク質に由来する残基及び最小でもＴｒｋＡのキナーゼドメインを含有する融合タンパク質である遺伝子転座の結果である。一実施形態では、ＴｒｋＡ融合タンパク質は、ＬＭＮＡ−ＴｒｋＡ、ＴＦＧ−ＴｒｋＡ、ＴＰＭ３−ＴｒｋＡ、ＣＤ７４−ＴｒｋＡ、ＮＦＡＳＣ−ＴｒｋＡ、ＭＰＲＩＰ−ＴｒｋＡ、ＢＣＡＮ−ＴｒｋＡ、またはＴＰＲ−ＴｒｋＡである。一実施形態では、ＴｒｋＡ融合タンパク質は、ＬＭＮＡ−ＴｒｋＡ、ＴＦＧ−ＴｒｋＡ、ＴＰＭ３−ＴｒｋＡ、ＣＤ７４−ＴｒｋＡ、ＮＦＡＳＣ−ＴｒｋＡ、ＭＰＲＩＰ−ＴｒｋＡ、ＢＣＡＮ−ＴｒｋＡ、ＴＰ５３−ＴｒｋＡ、ＲＮＦ２１３−ＴｒｋＡ、ＲＡＢＧＡＰ１Ｌ−ＴｒｋＡ、ＩＲＦ２ＢＰ２−ＴｒｋＡ、ＳＱＳＴＭ１−ＴｒｋＡ、ＳＳＢＰ２−ＴｒｋＡ、またはＴＰＲ−ＴｒｋＡであり、その際：
【表Ａ】
0006499672.tif 000052
【０１６４】
一実施形態では、ＴｒｋＡの調節不全はＴｒｋＡタンパク質にて１以上の欠失、挿入または変異を含む。一実施形態では、調節不全はＴｒｋＡタンパク質に由来する１以上の残基の欠失を含み、ＴｒｋＡキナーゼの構成的な活性を生じる。一実施形態では、欠失にはＴｒｋＡアイソフォーム２における残基３０３〜３７７の欠失が挙げられる。
【０１６５】
一実施形態では、ＴｒｋＡの調節不全は、発現されるタンパク質がＴｒｋＡキナーゼの構成的な活性を生じる１以上の欠失残基を有するＴｒｋＡの選択的にスプライスされた変異体であるスプライス変異を含む。一実施形態では、構成的な活性を持つＴｒｋＡの選択的にスプライスされた形態は、ＴｒｋＡアイソフォーム２に対して残基１９２〜２８４及び３９３〜３９８を失って発現されたタンパク質を生じるエクソン８、９及び１１の欠失を有する。
【０１６６】
ＴｒｋＡの調節不全を有すると特定された癌（以下の参考文献を参照、ｗｗｗ．ｃａｎｃｅｒ．ｇｏｖ及びｗｗｗ．ｎｃｃｎ．ｏｒｇも参照のこと）には以下が挙げられる：
【０１６７】
（Ａ）ＴｒｋＡの調節不全が、以下を含む、遺伝子増幅、またはＴｒｋＡ遺伝子融合を生じる１以上の染色体の転座もしくは逆位を含む癌
【表Ｂ−１】
0006499672.tif 000053
【表Ｂ−２】
0006499672.tif 000054
【０１６８】
（Ｂ）ＴｒｋＡの調節不全が以下を含む、ＴｒｋＡタンパク質における１以上の欠失、挿入または変異を含む癌
【表Ｃ】
0006499672.tif 000055
【０１６９】
（Ｃ）以下を含む、野生型ＴｒｋＡの過剰発現（自己分泌の活性化）によって引き起こされる癌
【表Ｄ−１】
0006499672.tif 000056
【表Ｄ−２】
0006499672.tif 000057
【０１７０】
一実施形態では、本明細書で提供されるのは、癌を治療するのに有効な量で化合物１または薬学上許容可能なその塩を患者に投与することを含む、ＴｒｋＡの調節不全を有する癌であると診断された患者を治療する方法であり、その際、癌は、非小細胞肺癌、甲状腺乳頭癌、多形性膠芽腫、急性骨髄性白血病、結腸直腸癌、大細胞神経内分泌癌、前立腺癌、神経芽細胞腫、膵臓癌、黒色腫、頭頚部の扁平上皮癌及び胃癌から選択される。一実施形態では、本明細書で提供されるのは、癌を治療するのに有効な量で化合物１または薬学上許容可能なその塩を患者に投与することを含む、ＴｒｋＡの調節不全を有する癌であると診断された患者を治療する方法であり、その際、癌は、非小細胞肺癌、甲状腺乳頭癌、多形性膠芽腫、急性骨髄性白血病、結腸直腸癌、大細胞神経内分泌癌、前立腺癌、神経芽細胞腫、膵臓癌、黒色腫、頭頚部の扁平上皮癌、胃癌、胆管癌及び肉腫から選択される。
【０１７１】
提供されるのはまた、それを必要とする哺乳類にて癌を治療する方法であり、該方法は、（ａ）癌がＴｒｋＡキナーゼの調節不全に関連するかどうかを判定することと、（ｂ）癌がＴｒｋＡキナーゼの調節不全に関連すると判定されれば、哺乳類に治療上有効な量の化合物１または薬学上許容可能なその塩を投与することとを含む。一実施形態では、化合物１は二塩酸塩である。
【０１７２】
一実施形態では、ＴｒｋＡの調節不全はＴｒｋＡ遺伝子の融合を生じる１以上の染色体の転座または逆位を含む。一実施形態では、ＴｒｋＡ遺伝子の融合はＬＭＮＡ−ＴｒｋＡ、ＴＦＧ−ＴｒｋＡ、ＴＰＭ３−ＴｒｋＡ、ＣＤ７４−ＴｒｋＡ、ＮＦＡＳＣ−ＴｒｋＡ、ＭＰＲＩＰ−ＴｒｋＡ、ＢＣＡＮ−ＴｒｋＡ、ＴＰ５３−ＴｒｋＡ、ＲＮＦ２１３−ＴｒｋＡ、ＲＡＢＧＡＰ１Ｌ−ＴｒｋＡ、ＩＲＦ２ＢＰ２−ＴｒｋＡ、ＳＱＳＴＭ１−ＴｒｋＡ、ＳＳＢＰ２−ＴｒｋＡ、またはＴＰＲ−ＴｒｋＡである。一実施形態では、癌は、非小細胞肺癌、甲状腺乳頭癌、多形性膠芽腫、結腸直腸癌、黒色腫、胆管癌または肉腫である。
【０１７３】
一実施形態では、ＴｒｋＡの調節不全はＴｒｋＡタンパク質における１以上の欠失、挿入または変異を含む。一実施形態では、癌は、急性骨髄性白血病、大細胞神経内分泌癌、または神経芽細胞腫である。
【０１７４】
一実施形態では、ＴｒｋＡの調節不全は、野生型ＴｒｋＡの過剰発現（自己分泌の活性化）である。一実施形態では、癌は、前立腺癌、神経芽細胞腫、膵臓癌、黒色腫、頭頚部の扁平上皮癌、または胃癌である。
【０１７５】
一実施形態では、それを必要とする哺乳類にて癌を治療する上記方法のいずれかはさらに、１以上の追加の治療法または化学療法剤から選択される有効量の少なくとも１つの追加の治療剤との併用で有効量の化合物１または薬学上許容可能なその塩を投与することを含む。
【０１７６】
一実施形態では、それを必要とする哺乳類にて癌を治療する上記方法のいずれかは、１以上の追加の化学療法剤との併用でそれを必要とする前記哺乳類に有効量の化合物１または薬学上許容可能なその塩を投与することを含む。
【０１７７】
一実施形態では、追加の化学療法剤は、カボザチニブ、クリゾチニブ、エルロチニブ、ゲフィチニブ、イマチニブ、ラパチニブ、ニロチニブ、パゾパニブ、ペルツズマブ、レゴラフェニブ、スニチニブ、及びトラスツズマブを含む、受容体チロシンキナーゼを標的とする治療剤から選択される。
【０１７８】
一実施形態では、追加の化学療法剤は、Ｒａｓ−Ｒａｆ−ＭＥＫ−ＥＲＫ経路阻害剤（たとえば、ビニメチニブ、セルメチニブ、エンコラフィニブ、ソラフェニブ、トラメチニブ、ベムラフェニブ）、ＰＩ３Ｋ−Ａｋｔ−ｍＴＯＲ−Ｓ６Ｋ経路阻害剤（たとえば、エベロリムス、ラパマイシン、ペリフォシン、テムシロリムス）及びアポトーシス経路のモジュレータ（たとえば、オバトクラックス）を含む、シグナル伝達経路阻害剤から選択される。
【０１７９】
一実施形態では、追加の化学療法剤は、亜ヒ酸、ブレオマイシン、カバジタキセル、カペシタビン、カルボプラチン、シスプラチン、サイクロホスファミド、シタラビン、ダカルバジン、ダウノルビシン、ドセタキセル、ドキソルビシン、エトポシド、フルオロウラシル、ゲムシタビン、イリノテカン、ロムスチン、メソトレキセート、マイトマイシンＣ、オキサリプラチン、パクリタキセル、ペメトレキセド、テモゾロミド、及びビンクリスチンを含む細胞傷害性の化学療法剤から選択される。
【０１８０】
一実施形態では、追加の化学療法剤は、アフリベルセプト及びベバシズマブを含む血管形成を標的とする治療剤から選択される。
【０１８１】
一実施形態では、追加の化学療法剤は、アルデスロイキン、イピリムマブ、ラムブロリズマブ、ニボルマブ、シプリューセル−Ｔを含む免疫標的剤から選択される。
【０１８２】
一実施形態では、追加の化学療法剤は、たとえば、ＮＧＦ抗体及び汎Ｔｒｋ阻害剤のようなＮＧＦを標的とするバイオ医薬品を含む、ＴｒｋＡ経路に対して活性のある作用剤から選択される。
【０１８３】
一実施形態では、追加の治療剤または治療法は、放射性ヨウ素療法、外照射及びラジウム２２３療法を含む放射線療法である。
【０１８４】
一実施形態では、追加の治療剤には、癌がＴｒｋＡの調節不全を有する癌における標準治療である上記でリストにした治療法または治療剤のいずれか１つが挙げられる。
【０１８５】
一実施形態では、本明細書で提供されるのは、放射線療法（たとえば、放射性ヨウ素療法、外照射、ラジウム２２３療法）、細胞傷害性の化学療法剤（たとえば、亜ヒ酸、ブレオマイシン、カバジタキセル、カペシタビン、カルボプラチン、シスプラチン、サイクロホスファミド、シタラビン、ダカルバジン、ダウノルビシン、ドセタキセル、ドキソルビシン、エトポシド、フルオロウラシル、ゲムシタビン、イリノテカン、ロムスチン、メソトレキセート、マイトマイシンＣ、オキサリプラチン、パクリタキセル、ペメトレキセド、テモゾロミド、ビンクリスチン）、チロシンキナーゼを標的とした治療剤（たとえば、アファチニブ、カボザチニブ、セツキシマブ、クリゾチニブ、ダブラフェニブ、エルロチニブ、ゲフィチニブ、イマチニブ、ラパチニブ、ニロチニブ、パゾパニブ、ペルツズマブ、レゴラフェニブ、スニチニブ、トラスツズマブ）、アポトーシスのモジュレータ及びシグナル伝達阻害剤（たとえば、エベロリムス、ペリフォシン、ラパマイシン、ビニメチニブ、セルメチニブ、エンコラフィニブ、ソラフェニブ、テムシロリムス、トラメチニブ、ベムラフェニブ）、免疫標的治療剤（たとえば、アルデスロイキン、インターフェロンアルファ−２ｂ、イピリムマブ、ラムブロリズマブ、ニボルマブ、プレドニゾン、シプリューセル−Ｔ）及び血管形成を標的とする治療剤（たとえば、アフリベルセプト、ベバシズマブ）から選択される少なくとも１つの追加の治療法または化学療法剤との併用で、化合物１または薬学上許容可能なその塩を患者に投与することを含む、それを必要とする前記患者にて癌を治療する方法であり、その際、化合物１または薬学上許容可能なその塩の量は、追加の治療法または治療剤との併用で、前記癌を治療することにおいて有効である。これらの追加の治療剤は、当業者に既知の標準の薬務に従って、同一のまたは異なる投与経路を介して同一のまたは異なる投与スケジュールにて同一の剤形の一部としてまたは別の剤形として化合物１または薬学上許容可能なその塩と共に投与されてもよい。
【０１８６】
本明細書で提供されるのはまた、（ｉ）（ａ）化合物１または薬学上許容可能なその塩と、（ｂ）追加の治療剤と、（ｃ）化合物１または薬学上許容可能なその塩の量が癌を治療するのに一緒に有効である、前記癌の治療について同時の、別々のまたは順次の使用のための任意での少なくとも１つの薬学上許容可能なキャリアとを含む、それを必要とする患者にて前記癌を治療するための組合せ医薬と、（ｉｉ）そのような組合せを含む医薬組成物と、（ｉｉｉ）癌の治療用の薬物の調製のためのそのような組合せの使用と、（ｉｖ）同時の、別々のまたは順次の使用のための組合せた調製物としてのそのような組合せを含む商業的な包装または製品であり；それを必要とする患者にて癌を治療する方法である。
【０１８７】
一実施形態では、併用療法は、非小細胞肺癌、甲状腺乳頭癌、多形性膠芽腫、急性骨髄性白血病、結腸直腸癌、大細胞神経内分泌癌、前立腺癌、神経芽細胞腫、膵臓癌、黒色腫、頭頚部の扁平上皮癌、及び胃癌から選択される癌を治療するためのものである。一実施形態では、併用療法は、非小細胞肺癌、甲状腺乳頭癌、多形性膠芽腫、急性骨髄性白血病、結腸直腸癌、大細胞神経内分泌癌、前立腺癌、神経芽細胞腫、膵臓癌、黒色腫、頭頚部の扁平上皮癌、胃癌、胆管癌及び肉腫から選択される癌を治療するためのものである。
【０１８８】
化合物１または薬学上許容可能なその塩は炎症または炎症性の疾患もしくは障害を治療するためにも有用である。
【０１８９】
従って、本明細書で提供されるのは、それを必要とする哺乳類に炎症を治療するのに有効量で化合物１または薬学上許容可能なその塩を投与することを含む、前記哺乳類にて前記炎症または炎症性の疾患もしくは障害を治療する方法である。一実施形態では、炎症性疾患は、炎症性肺疾患（たとえば、喘息）、間質性膀胱炎（ＩＣ）、疼痛性膀胱症候群（ＰＢＳ）、炎症性大腸疾患（潰瘍性大腸炎及びクローン病を含む）、ならびにたとえば、アトピー性皮膚炎及び乾癬のような炎症性皮膚疾患から選択される。
【０１９０】
一実施形態では、炎症または炎症性の疾患もしくは障害を治療する方法はそれを必要とする哺乳類に１以上の追加の作用剤と併用で化合物１または薬学上許容可能なその塩を投与することを含む。追加の作用剤の例には、抗−ＴＮＦ剤（たとえば、インフリキシマブ（レミカド）、アダリムマブ（フミラ）、セルトリズマブペゴール（シムジア）、及びゴリムマブ（シムポニ）のようなモノクローナル抗体、またエタネルセプト（エンブレル）のような循環受容体融合タンパク質）、代謝拮抗物質及び葉酸拮抗剤（たとえば、メソトレキセート）、または標的化されたキナーゼ阻害剤（たとえば、ルキソリチニブ、トファシチニブ、ＣＹＴ３８７、レスタウルチニブ、パクリチニブ及びＴＧ１０１３４８のようなＪＡＫファミリー阻害剤）が挙げられる。これらの追加の治療剤は、当業者に既知の標準の薬務に従って、同一のまたは異なる投与経路を介して同一のまたは異なる投与スケジュールにて同一の剤形の一部としてまたは別の剤形として化合物１または薬学上許容可能なその塩と共に投与されてもよい。
【０１９１】
化合物１または薬学上許容可能なその塩は哺乳類にて神経変性疾患を治療するのにも有用である。一実施形態では、化合物１または薬学上許容可能なその塩を用いて、Ｓ３５−ＴｒｋＡの相互作用を遮断することを介して髄鞘形成、ニューロンの生き残り、及び乏突起膠細胞の分化を促進することによって脱髄及び髄鞘形成不全を治療してもよい。
【０１９２】
従って、本明細書で提供されるのはまた、それを必要とする哺乳類に神経変性疾患を治療するのに有効な量で化合物１または薬学上許容可能なその塩を投与することを含む、前記哺乳類にて前記神経変性疾患を治療する方法である。一実施形態では、神経変性疾患は多発性硬化症である。一実施形態では、神経変性疾患はパーキンソン病である。一実施形態では、神経変性疾患はアルツハイマー病である。
【０１９３】
本明細書で提供されるのはまた、それを必要とする哺乳類にクルーズ・トリパノソーマ感染症を治療するのに有効な量で化合物１または薬学上許容可能なその塩を投与することを含む、前記哺乳類にて前記クルーズ・トリパノソーマ感染症のような特定の感染性疾患を治療する方法である。
【０１９４】
本明細書で提供されるのはまた、それを必要とする哺乳類にシェーグレン症候群を治療するのに有効な量で化合物１または薬学上許容可能なその塩を投与することを含む、前記哺乳類にて前記症候群を治療する方法である。
【０１９５】
本明細書で提供されるのはまた、それを必要とする哺乳類に子宮内膜症を治療するのに有効な量で化合物１または薬学上許容可能なその塩を投与することを含む、前記哺乳類にて前記子宮内膜症を治療する方法である。
【０１９６】
本明細書で提供されるのはまた、それを必要とする哺乳類に糖尿病性末梢神経障害を治療するのに有効な量で化合物１または薬学上許容可能なその塩を投与することを含む、前記哺乳類にて前記糖尿病性末梢神経障害を治療する方法である。
【０１９７】
本明細書で提供されるのはまた、それを必要とする哺乳類に前立腺炎を治療するのに有効な量で化合物１または薬学上許容可能なその塩を投与することを含む、前記哺乳類にて前記前立腺炎を治療する方法である。
【０１９８】
本明細書で提供されるのはまた、それを必要とする哺乳類に骨盤痛症候群を治療するのに有効な量で化合物１または薬学上許容可能なその塩を投与することを含む、前記哺乳類にて前記骨盤痛症候群を治療する方法である。
【０１９９】
本明細書で提供されるのはまた、それを必要とする哺乳類に骨リモデリングの調節の不均衡に関連する疾患を治療するのに有効な量で化合物１または薬学上許容可能なその塩を投与することを含む、前記哺乳類にて前記疾患を治療する方法である。一実施形態では、該疾患は骨粗鬆症、関節リウマチまたは骨転移である。
【０２００】
一実施形態では、それを必要とする哺乳類にて骨リモデリングの調節の不均衡に関連する疾患を治療する方法は、１以上の追加の治療剤または治療法との併用で化合物１または薬学上許容可能なその塩を投与することを含む。追加の治療剤または治療法の例には、抗−ＴＮＦ剤（たとえば、インフリキシマブ（レミカド）、アダリムマブ（フミラ）、セルトリズマブペゴール（シムジア）、及びゴリムマブ（シムポニ）のようなモノクローナル抗体、またエタネルセプト（エンブレル）のような循環受容体融合タンパク質）、代謝拮抗物質及び葉酸拮抗剤（たとえば、メソトレキセート）、または標的化されたキナーゼ阻害剤（たとえば、ルキソリチニブ、トファシチニブ、ＣＹＴ３８７、レスタウルチニブ、パクリチニブ及びＴＧ１０１３４８のようなＪＡＫファミリー阻害剤）が挙げられる。これらの追加の治療剤は、当業者に既知の標準の薬務に従って、同一のまたは異なる投与経路を介して同一のまたは異なる投与スケジュールにて同一の剤形の一部としてまたは別の剤形として化合物１または薬学上許容可能なその塩と共に投与されてもよい。
【０２０１】
本明細書で提供されるのはまた、それを必要とする哺乳類に結合組織増殖因子の異常なシグナル伝達から生じる疾患を治療するのに有効な量で化合物１または薬学上許容可能なその塩を投与することを含む、前記哺乳類にて前記疾患を治療する方法である。一実施形態では、結合組織増殖因子の異常なシグナル伝達から生じる疾患は、レイノー症候群、特発性肺線維症、瘢痕化（過形成、ケロイド等）、肝硬変、心内膜心筋線維症、心房線維症、骨髄線維症、進行性塊状線維症（肺）、腎性全身性線維症、強皮症、全身性硬化症、関節線維症または眼線維症である。
【０２０２】
本明細書で使用されるとき、「有効量」は、そのような治療を必要とする哺乳類に投与した場合、（ｉ）化合物１または薬学上許容可能なその塩によって治療することができる特定の疾患、状態もしくは障害を治療するのに、または（ｉｉ）本明細書で記載される特定の疾患、状態もしくは障害の１以上の症状を減衰させる、改善するまたは取り除くのに十分である化合物の量を意味する。そのような量に相当する化合物１の量は、たとえば、疾患の状態やその重症度、及び治療を必要とする哺乳類の独自性（たとえば、体重）のような因子に応じて変化するであろうが、それにもかかわらず、当業者が日常的に決定することができる。
【０２０３】
本明細書で使用されるとき、用語「哺乳類」は、本明細書で記載される疾患を有するまたはその発症のリスクがある温血動物を指し、それには、モルモット、イヌ、ネコ、ラット、マウス、ハムスター及びヒトを含む霊長類が挙げられるが、これらに限定されない。
【０２０４】
化合物１または薬学上許容可能なその塩は、好都合な経路によって、たとえば、消化管内に（たとえば、直腸内にまたは経口で）、鼻内に、肺内に、筋肉組織内にまたは血管構造内に、傷口の洗浄に、または経皮で、または皮膚に投与されてもよい。化合物１または薬学上許容可能なその塩は、好都合な投与形態、たとえば、錠剤、粉剤、カプセル剤、溶液、分散液、懸濁液、シロップ、スプレー、坐薬、ジェル、エマルジョン、貼付剤等にて投与されてもよい。そのような組成物は、医薬調製物における従来の成分、たとえば、希釈剤、キャリア、ｐＨ調整剤、甘味剤、増量剤及びさらなる添加剤を含有してもよい。非経口投与が所望であれば、組成物は無菌であり、注射または点滴に好適な溶液または懸濁液の形態である。そのような組成物は本発明のさらなる態様を形成する。
【０２０５】
化合物１または薬学上許容可能なその塩及びキャリアまたは賦形剤を混合することによって別の製剤を調製してもよい。好適なキャリア及び賦形剤は当業者に周知である。製剤は、１以上の緩衝液、安定剤、界面活性剤、湿潤剤、潤滑剤、乳化剤、懸濁剤、保存剤、抗酸化剤、不透明化剤、流動促進剤、加工助剤、着色剤、甘味剤、芳香剤、風味剤、希釈剤、及び薬剤の洗練された調製を提供するための他の既知の添加剤（すなわち、本明細書で記載される化合物またはその医薬組成物）、または医薬品（すなわち、薬剤）を製造することにおける助剤も含んでもよい。
【０２０６】
従って、本明細書で提供されるのはまた、薬学上許容可能な希釈剤またはキャリアと一緒に化合物１または薬学上許容可能なその塩を含む医薬組成物である。一実施形態では、化合物１または薬学上許容可能なその塩を含む医薬組成物は経口投与用に製剤化される。一実施形態では、経口投与用に製剤化される化合物１または薬学上許容可能なその塩を含む医薬組成物は錠剤またはカプセル剤の形態である。
【０２０７】
本明細書で提供されるのはまた、哺乳類における疼痛の治療で使用するための化合物１または薬学上許容可能なその塩である。一実施形態では、疼痛は慢性疼痛である。一実施形態では、疼痛は急性疼痛である。一実施形態では、疼痛は慢性の背痛、炎症性疼痛、神経障害性疼痛、または癌、外科手術または骨折に関連する疼痛である。
【０２０８】
本明細書で提供されるのはまた、哺乳類における癌の治療で使用するための化合物１または薬学上許容可能なその塩である。一実施形態では、癌は、非小細胞肺癌、甲状腺乳頭癌、多形性膠芽腫、急性骨髄性白血病、結腸直腸癌、大細胞神経内分泌癌、前立腺癌、神経芽細胞腫、膵臓癌、黒色腫、頭頚部の扁平上皮癌、胃癌、胆管癌及び肉腫から選択される。
【０２０９】
本明細書で提供されるのはまた、哺乳類における炎症または炎症性の疾患もしくは障害の治療で使用するための化合物１または薬学上許容可能なその塩である。一実施形態では、炎症性疾患は、炎症性肺疾患（たとえば、喘息）、間質性膀胱炎、疼痛性膀胱症候群、炎症性大腸疾患（潰瘍性大腸炎及びクローン病を含む）、ならびにたとえば、アトピー性皮膚炎のような炎症性皮膚疾患である。
【０２１０】
本明細書で提供されるのはまた、哺乳類における、たとえば、クルーズ・トリパノソーマ感染症のような感染性疾患の治療で使用するための化合物１または薬学上許容可能なその塩である。
【０２１１】
本明細書で提供されるのはまた、哺乳類におけるシェーグレン症候群の治療で使用するための化合物１または薬学上許容可能なその塩である。
【０２１２】
本明細書で提供されるのはまた、哺乳類における子宮内膜症の治療で使用するための化合物１または薬学上許容可能なその塩である。
【０２１３】
本明細書で提供されるのはまた、哺乳類における糖尿病性末梢神経障害の治療で使用するための化合物１または薬学上許容可能なその塩である。
【０２１４】
本明細書で提供されるのはまた、哺乳類における前立腺炎の治療で使用するための化合物１または薬学上許容可能なその塩である。
【０２１５】
本明細書で提供されるのはまた、哺乳類における骨盤痛症候群の治療で使用するための化合物１または薬学上許容可能なその塩である。
【０２１６】
本明細書で提供されるのはまた、哺乳類における神経変性疾患の治療で使用するための化合物１または薬学上許容可能なその塩である。
【０２１７】
本明細書で提供されるのはまた、骨リモデリングの調節の不均衡に関連する疾患の治療で使用するための化合物１または薬学上許容可能なその塩である。
【０２１８】
本明細書で提供されるのはまた、結合組織増殖因子の異常なシグナル伝達から生じる疾患の治療で使用するための化合物１または薬学上許容可能なその塩である。
【０２１９】
本明細書で提供されるのはまた、疼痛、癌、炎症、神経変性疾患、クルーズ・トリパノソーマ感染性、及び結合組織増殖因子の異常なシグナル伝達から生じる疾患から選択される状態の治療のための薬物の製造における化合物１または薬学上許容可能なその塩の使用である。一実施形態では、状態は慢性疼痛である。一実施形態では、状態は急性疼痛である。一実施形態では、疼痛は慢性の背痛である。一実施形態では、疼痛は炎症性疼痛、神経障害性疼痛、または癌、外科手術または骨折に関連する疼痛である。一実施形態では、状態は癌である。一実施形態では、状態は炎症である。一実施形態では、状態は神経変性疾患である。一実施形態では、状態はクルーズ・トリパノソーマ感染症である。一実施形態では、状態はシェーグレン症候群である。一実施形態では、状態は子宮内膜症である。一実施形態では、状態は糖尿病性末梢神経障害である。一実施形態では、状態は前立腺炎である。一実施形態では、状態は骨盤痛症候群である。一実施形態では、状態は骨リモデリングの調節の不均衡に関連する疾患である。一実施形態では、状態は結合組織増殖因子の異常なシグナル伝達から生じる疾患である。
【０２２０】
本明細書で提供されるのはまた、抗炎症性化合物、ステロイド（たとえば、デキサメタゾン、コルチゾン及びフルチカゾン）、たとえば、ＮＳＡＩＤのような鎮痛薬（たとえば、アスピリン、イブプロフェン、インドメタシン及びケトプロフェン）、オピオイド（たとえば、モルヒネ）、カルシトニン遺伝子関連のペプチド受容体アンタゴニスト、亜型選択性のイオンチャンネルモジュレータ、抗痙攣剤（たとえば、プレガバリン及びガバペンチン）二重セロトニン／ノルエピネフリン再摂取阻害剤（たとえば、デュロキセチン、ベンラファキシン及びミルナシプラン）、ＪＡＫファミリーキナーゼ阻害剤（たとえば、ルキソリチニブまたはトファシチニブ）及び三環系抗うつ剤（たとえば、アミトリプチリン、ノルトリプチリン及びデシプラミン）から選択される追加の治療剤との併用で哺乳類における疼痛の治療のための化合物１または薬学上許容可能なその塩を含む薬剤である。一実施形態では、本明細書で提供されるのは、ＮＳＡＩＤとの併用で哺乳類における疼痛の治療のための化合物１または薬学上許容可能なその塩を含む薬剤である。
【０２２１】
本明細書で提供されるのはまた、化合物１または薬学上許容可能なその塩との併用で哺乳類における疼痛の治療のための抗炎症性化合物、ステロイド（たとえば、デキサメタゾン、コルチゾン及びフルチカゾン）、たとえば、ＮＳＡＩＤのような鎮痛薬（たとえば、アスピリン、イブプロフェン、インドメタシン及びケトプロフェン）、オピオイド（たとえば、モルヒネ）から選択される治療剤を含む薬剤である。
【実施例】
【０２２２】
合成中間体の調製
調製物Ａ
【化２７】
0006499672.tif 000058
（３Ｓ，４Ｒ）−４−（３−フルオロフェニル）−１−（２−メトキシエチル）ピロリジン−３−アミン二塩酸塩
工程Ａ：ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ，４Ｒ）−４−（３−フルオロフェニル）−１−（２−メトキシエチル）ピロリジン−３−イルカルバメートの調製
ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ，４Ｒ）−４−（３−フルオロフェニル）ピロリジン−３−イルカルバメート（２５０ｍｇ，０．８９ミリモル，市販されている）と、ＤＩＥＡ（０．４８ｍＬ，２．６８ミリモル）と、１−ブロモ−２−メトキシエタン（１４９ｍｇ，１．０７ミリモル）のＤＭＦ（３ｍＬ）溶液を常温で２時間撹拌し、次いで６０℃に４時間加熱し、次いで１６時間かけて常温に冷却した。ＥｔＯＡｃと飽和ＮａＨＣＯ３（各１０ｍＬ）の間で区分した後、有機層を水及びブラインで洗浄し（各１０ｍＬで２回）、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、濃縮して粘性の橙色の油としてｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ，４Ｒ）−４−（３−フルオロフェニル）−１−（２−メトキシエチル）ピロリジン−３−イルカルバメート（２５０ｍｇ，収率８３％）を得た。ＬＣＭＳ（ａｐｃｉ）ｍ／ｚ＝３３９．１（Ｍ＋Ｈ）
【０２２３】
工程Ｂ：（３Ｓ，４Ｒ）−４−（３−フルオロフェニル）−１−（２−メトキシエチル）ピロリジン−３−アミン二塩酸塩の調製
５〜６ＮのＨＣｌ中のｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ，４Ｒ）−４−（３−フルオロフェニル）−１−（２−メトキシエチル）ピロリジン−３−イルカルバメート（２５０ｍｇ，０．７４ミリモル）のイソプロピルアルコール（１４．８ｍＬ，７３．９ミリモル）溶液を常温で１時間撹拌した。混合物を真空で濃縮し、Ｅｔ２Ｏで粉砕してベージュ色の固形物として表題の化合物（２３０ｍｇ、収率１００％）を得た。ＬＣＭＳ（ａｐｃｉ）ｍ／ｚ＝２３９．１（Ｍ＋Ｈ）
【０２２４】
調製物Ｂ
【化２８】
0006499672.tif 000059
４−メチル−３−（２−メチルピリミジン−５−イル）−１−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−５−アミン
工程Ａ：５−アミノ−４−メチル−１−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−３（２Ｈ）−オンの調製
ジオキサン（１００ｍＬ）における２−シアノプロパン酸エチル（５０．５ｇ，３９７．２ミリモル）とフェニルヒドラジン（３９ｍＬ，３９７．２ミリモル）の混合物を１１０℃で５日間加熱した。冷却した混合物を１／２容量に濃縮し、次いで氷で冷却し、冷Ｅｔ２Ｏで粉砕した。得られた固形物を濾過し、Ｅｔ２Ｏで何度も洗浄し、真空下で乾燥させてフワフワした白色の粉末として５−アミノ−４−メチル−１−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−３（２Ｈ）−オン（３４．６９ｇ，収率４６％）を得た。ＭＳ（ａｐｃｉ）ｍ／ｚ＝１９０．１（Ｍ＋Ｈ）
【０２２５】
工程Ｂ：５−アミノ−４−メチル−１−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルトリフルオロメタンスルホネートの調製
５−アミノ−４−メチル−１−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−３（２Ｈ）−オン（１３．７２ｇ，７２．５ミリモル）とＮ−フェニルビス（トリフルオロメチルスルホンアミド）（２７．２ｇ，７６．１ミリモル）とのＤＭＦ（１００ｍＬ）懸濁液をＤＩＥＡ（３７．９ｍＬ，２１７．５ミリモル）で処理し、混合物を常温で１６時間撹拌した。ＮａＨＣＯ３（４００ｍＬ）とＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）の間で混合物を区分し、水性層をＥｔＯＡｃで抽出した（２００ｍＬで２回）。合わせた有機相を水（５０ｍＬで５回）及びブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、次いでＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、真空下で濃縮した。４：１のヘキサン／ＥｔＯＡｃで溶出するシリカカラムクロマトグラフィによって残留物を精製して浅黄色の固形物として５−アミノ−４−メチル−１−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルトリフルオロメタンスルホネート（２３．１ｇ，収率９９％）を得た。ＭＳ（ａｐｃｉ）ｍ／ｚ＝３２２．０（Ｍ＋Ｈ）
【０２２６】
工程Ｃ：４−メチル−３−（２−メチルピリミジン−５−イル）−１−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−５−アミンの調製
５−アミノ−４−メチル−１−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルトリフルオロメタンスルホネート（９００ｍｇ，２．８ミリモル）と、２−メチル−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ピリミジン（９２５ｍｇ，４．２ミリモル）と、Ｋ２ＣＯ３（１．５５ｇ，１１．２ミリモル）と、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（３２４ｍｇ，０．２８ミリモル）とをトルエン（１０ｍＬ）と水（５ｍＬ）とＥｔＯＨ（２．５ｍＬ）にて混ぜ合わせ、密封チューブにて９５℃で１６時間温めた。冷却した混合物を濾過し、濾液を水（５０ｍＬ）とＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）の間で区分した。水性層をＥｔＯＡｃで抽出し（３０ｍＬで２回）、合わせた有機相をブライン（３０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、真空下で濃縮した。２％ＭｅＯＨ／ＤＣＭで溶出するシリカカラムクロマトグラフィによって残留物を精製してピンク色の固形物として表題の化合物（５３３ｍｇ、収率７２％）を得た。ＭＳ（ａｐｃｉ）ｍ／ｚ＝２６６．１（Ｍ＋Ｈ）
【０２２７】
調製物Ｃ
【化２９】
0006499672.tif 000060
２−メトキシ−Ｎ−（メトキシメチル）−Ｎ−（（トリメチルシリル）メチル）エタンアミン
工程Ａ：２−メトキシ−Ｎ−（（トリメチルシリル）メチル）エタンアミンの調製
２−メトキシエタンアミン（１４．２ｍＬ，１６３ミリモル）のＤＭＳＯ溶液（１５ｍＬ）に９０℃で（クロロメチル）トリメチルシラン（１１．４ｍＬ，８１．５ミリモル）のＤＭＳＯ溶液（１０ｍＬ）を添加漏斗によって４０分間かけて加えた。混合物を９０℃で３．５時間加熱し、次いで常温に冷却した。次いで混合物をＨ２Ｏ（１５０ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出した（１５０ｍＬで２回）。合わせた有機抽出物をブライン（１５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して黄色の油として２−メトキシ−Ｎ−（（トリメチルシリル）メチル）エタンアミン（８．１４ｇ，収率６２％）を得た。ＭＳ（ａｐｃｉ）ｍ／ｚ＝１６２．０（Ｍ＋Ｈ）
【０２２８】
工程Ｂ：２−メトキシ−Ｎ−（メトキシメチル）−Ｎ−（（トリメチルシリル）メチル）エタンアミンの調製
ホルムアルデヒド（３７％水溶液，４．９１ｇ，６０．６ミリモル）のＭｅＯＨ（２．４５ｍＬ）溶液を０℃に冷却し、２−メトキシ−Ｎ−（（トリメチルシリル）メチル）エタンアミン（８．１４ｇ，５０．５ミリモル）の一滴ずつの添加によって処理した。二相性の混合物を０℃で３時間撹拌し、次いでＫ２ＣＯ３（６．９７ｇ，５０．５ミリモル）を加え、混合物を０℃で１時間撹拌した。黄色の油をＫ２ＣＯ３（２．００ｇ，１４．４ミリモル）上に静かに注ぎ、混合物を常温で２時間撹拌した。黄色の油を静かに捨てた後、固形のＫ２ＣＯ３をＥｔ２Ｏ（１０ｍＬで２回）で洗浄し、Ｅｔ２Ｏ洗浄液を捨てた黄色の油と合わせ、回転エバポレータで濃縮して黄色の油として表題の化合物（９．９２ｇ、収率９６％）を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ４．００（ｓ，２Ｈ），３．３７−３．４３（ｍ，２Ｈ），３．２９（ｓ，３Ｈ），３．１９（ｓ，３Ｈ），２．７７−２．８２（ｍ，２Ｈ），２．１８（ｓ，２Ｈ），０．００（ｓ，９Ｈ）ｐｐｍ
【０２２９】
調製物Ｄ
【化３０】
0006499672.tif 000061
（３Ｓ，４Ｒ）−４−（３−フルオロフェニル）−１−（２−メトキシエチル）ピロリジン−３−アミン
工程Ａ：（トランス）−４−（３−フルオロフェニル）−１−（２−メトキシエチル）ピロリジン−３−カルボン酸の調製
（Ｅ）−３−（３−フルオロフェニル）アクリル酸（２５．２０ｇ，１５１．７ミリモル）をＥｔＯＡｃ（７５ｍＬ）及びヘプタン（７５ｍＬ）で順次処理し、その後、ＴＦＡ（１．１７ｍＬ，１５．１７ミリモル）で処理した。混合物を冷水槽（内部温度１５℃）に入れ、２−メトキシ−Ｎ−（メトキシメチル）−Ｎ−（（トリメチルシリル）メチル）エタンアミン［調製物Ｃ］を添加漏斗から２０分間かけて一滴ずつ加え、添加の間、水槽に氷を加えて１３〜１９℃の間の内部温度を維持した。氷槽を取り外し、混合物を常温で１８時間撹拌し、次いで冷却し（内部温度１３℃）、追加の２−メトキシ−Ｎ−（メトキシメチル）−Ｎ−（（トリメチルシリル）メチル）エタンアミン［調製物Ｃ、３４ｇ］を添加漏斗から６分間かけて一滴ずつ加えた。水槽を取り外し、常温でさらに４時間撹拌した後、混合物を半分の容量に濃縮した。ヘプタン（１００ｍＬ）を加え、混合物を部分的に濃縮し、約１５０ｍＬの溶媒を取り除いた。これを２回繰り返し、それぞれ１００ｍＬの溶媒を取り除いた。残留スラリーをフラスコの底でヘプタン（５０ｍＬ）によってすすぎ、次いで密封し、常温で６４時間撹拌した。固形物を濾過し、ヘプタンですすぎ（５０ｍＬで２回）、真空下で乾燥させて、そのまま次の工程で使用した、１００％収率と推測する浅黄色の固形物として（トランス）−４−（３−フルオロフェニル）−１−（２−メトキシエチル）ピロリジン−３−カルボン酸（４４．９９ｇ，収率１１１％）を得た。ＭＳ（ａｐｃｉ）ｍ／ｚ＝２６８．１（Ｍ＋Ｈ）
【０２３０】
工程Ｂ：（トランス）−４−（３−フルオロフェニル）−１−（２−メトキシエチル）ピロリジン−３−カルボキサミドの調製
（トランス）−４−（３−フルオロフェニル）−１−（２−メトキシエチル）ピロリジン−３−カルボン酸（４０．５４ｇ，１５１．７ミリモル）のＴＨＦ（４４０ｍＬ）懸濁液にＣＤＩ（３１．９７ｇ，１９７．２ミリモル）を加え、その後、イミダゾール塩酸塩（３．１７１ｇ，３０．３３ミリモル）を加えた。反応混合物を常温で１６時間撹拌し、次いで添加漏斗によって３０分間かけてアンモニア（１３５．０ｍＬ，ｉＰｒＯＨにて２Ｍ，２７０．０ミリモル）を加えた。さらに３時間撹拌した後、得られた固形物を濾過し、ＥｔＯＡｃで洗浄し、濾液を濃縮した。残留物をＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）に溶解し、２５／７５の水：ブライン（２００ｍＬで２回）で洗浄した。有機相をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、濃縮し、真空下で乾燥させて、１００％の収率を仮定して使用された黄色の固形物として（トランス）−４−（３−フルオロフェニル）−１−（２−メトキシエチル）ピロリジン−３−カルボキサミド（５４．９７ｇ，収率１３６％）を得た。ＭＳ（ａｐｃｉ）ｍ／ｚ＝２６７．２（Ｍ＋Ｈ）
【０２３１】
工程Ｃ：（トランス）−４−（３−フルオロフェニル）−１−（２−メトキシエチル）ピロリジン−３−アミンの調製
氷槽で冷却した温度プローブを備えた１リットルの３つ口丸底フラスコにおける（トランス）−４−（３−フルオロフェニル）−１−（２−メトキシエチル）ピロリジン−３−カルボキサミド（２９．３３ｇ，８５．９０ミリモル）のＭｅＯＨ（３４５ｍＬ）溶液に添加漏斗から２０分間かけてＮａＯＣｌ（１０〜１５％利用可能なＣｌ，水溶液）（１１６．３ｍＬ，１８９．０ミリモル）を加えた［内部温度は７〜１３℃の間だった］。氷槽を取り外し、不均質な混合物を常温で９０分間撹拌し、次いで５５℃で３時間撹拌した。ＫＯＨ（６７．４８ｇ，１２０３ミリモル）のＨ２Ｏ（２２５．９ｍＬ，１２，５４２ミリモル）溶液を加え、溶液を７５℃で１９時間撹拌した。混合物を０℃に冷却し、濃ＨＣｌ（１４７．１ｍＬ，４，８０２ミリモル）を３０分間かけてゆっくり加えた。Ｋ３ＰＯ４（３０ｗｔ％，１５５ｍＬ）水溶液の添加によってｐＨを６に合わせ、混合物を部分的に濃縮して有機溶媒を取り除いた。ｐＨ１０になるまでＫ３ＰＯ４（３０ｗｔ％，２８０ｍＬ）水溶液を加え、混合物をＥｔＯＡｃ（４５０ｍＬで２回）で抽出した。合わせた有機抽出物を真空下で乾燥させて暗琥珀色のシロップとして（トランス）−４−（３−フルオロフェニル）−１−（２−メトキシエチル）ピロリジン−３−アミン（２８．０８ｇ，収率９１％）を得た。ＭＳ（ａｐｃｉ）ｍ／ｚ＝２３９．２（Ｍ＋Ｈ）
【０２３２】
工程Ｄ：（３Ｓ，４Ｒ）−４−（３−フルオロフェニル）−１−（２−メトキシエチル）ピロリジン−３−アミン（２Ｓ，３Ｓ）−２，３−ビス（（４−メチルベンゾイル）オキシ）スクシネートの調製
（トランス）−４−（３−フルオロフェニル）−１−（２−メトキシエチル）ピロリジン−３−アミン（１２５ｍｇ，０．５２ミリモル）と（２Ｓ，３Ｓ）−２，３−ビス（（４−メチルベンゾイル）オキシ）コハク酸（２２２．９ｍｇ，０．５８ミリモル）を秤量して４ｍＬのバイアルに入れ、次いでＭｅＯＨ（１．５７ｍＬ）、その後、水（０．１７５ｍＬ）で処理した。バイアルにキャップをし、反応混合物を５０℃で５分間撹拌し、次いで１７時間かけてゆっくり常温に冷却した。得られた固形物を濾過し、Ｅｔ２Ｏ（０．２ｍＬで４回）で洗浄し、真空下で乾燥させて白色固形物として（３Ｓ，４Ｒ）−４−（３−フルオロフェニル）−１−（２−メトキシエチル）ピロリジン−３−アミン（２Ｓ，３Ｓ）−２，３−ビス（（４−メチルベンゾイル）オキシ）スクシネート（１３１．６ｍｇ，収率４０％）を得た。遊離系試料のキラルＳＦＣ解析は＞９５％ｅｅを示した。この物質を以下の工程での種結晶として使用した。
【０２３３】
（トランス）−４−（３−フルオロフェニル）−１−（２−メトキシエチル）ピロリジン−３−アミン（７．３９ｇ，１８．６１ミリモル）をＭｅＯＨ（５２．７ｍＬ）に溶解し、（２Ｓ，３Ｓ）−２，３−ビス（（４−メチルベンゾイル）オキシ）コハク酸（１０．７８ｇ，２７．９１ミリモル）で処理し、その後Ｈ２Ｏ（９．３ｍＬ）で処理した。混合物を５０℃で５分間撹拌した。種結晶（９０ｍｇ）を溶液に加え、１６時間かけて混合物をゆっくり常温に温めた。得られた固形物を濾過し、Ｅｔ２Ｏですすぎ（５ｍＬで４回）、真空下で乾燥させた。残留物をＭｅＯＨ（１５ｍＬ）及びＨ２Ｏ（２．７ｍＬ）でスラリーにし、５０℃で１５分間撹拌し、次いで１９時間かけてゆっくり常温に冷却した。固形物を濾過し、Ｅｔ２Ｏで洗浄し（５ｍＬで３回）、真空下で乾燥させて白色固形物として（３Ｓ，４Ｒ）−４−（３−フルオロフェニル）−１−（２−メトキシエチル）ピロリジン−３−アミン（２Ｓ，３Ｓ）−２，３−ビス（（４−メチルベンゾイル）オキシ）スクシネート（３．１２ｇ，収率２７％）を得た。遊離系試料におけるキラル分析は＞９９．７％ｅｅを示した。
【０２３４】
工程Ｅ：（３Ｓ，４Ｒ）−４−（３−フルオロフェニル）−１−（２−メトキシエチル）ピロリジン−３−アミンの調製
（３Ｓ，４Ｒ）−４−（３−フルオロフェニル）−１−（２−メトキシエチル）ピロリジン−３−アミン（２Ｓ，３Ｓ）−２，３−ビス（（４−メチルベンゾイル）オキシ）スクシネート（２．８９ｇ，４．６３ミリモル）のＤＣＭ（２５ｍＬ）懸濁液を１ＭのＮａＯＨ水溶液で（１５ｍＬで２回）洗浄した。合わせた水性相をＤＣＭ（２５ｍＬ）で抽出し、合わせた有機抽出物をブライン（３０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、真空下で乾燥させて淡ベージュ色の油として（３Ｓ，４Ｒ）−４−（３−フルオロフェニル）−１−（２−メトキシエチル）ピロリジン−３−アミン（９９８ｍｇ，収率９０％）を得た。ＭＳ（ａｐｃｉ）ｍ／ｚ＝２３９．２（Ｍ＋Ｈ）
【０２３５】
合成実施例
実施例１
１−（（３Ｓ，４Ｒ）−４−（３−フルオロフェニル）−１−（２−メトキシエチル）ピロリジン−３−イル）−３−（４−メチル−３−（２−メチルピリミジン−５−イル）−１−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）尿素二塩酸塩
【化３１】
0006499672.tif 000062
工程Ａ：１−（（３Ｓ，４Ｒ）−４−（３−フルオロフェニル）−１−（２−メトキシエチル）ピロリジン−３−イル）−３−（４−メチル−３−（２−メチルピリミジン−５−イル）−１−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）尿素の調製
４−メチル−３−（２−メチルピリミジン−５−イル）−１−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−５−アミン（調製物Ｂ；６１ｍｇ，０．１６ミリモル）のＤＣＭ（２ｍＬ）溶液にトリホスゲン（２４ｍｇ，０．０８ミリモル）を加え、その後ＤＩＥＡ（８４μＬ，０．４８ミリモル）を加えた。混合物を常温で１５分間撹拌し、次いで（３Ｓ，４Ｒ）−４−（３−フルオロフェニル）−１−（２−メトキシエチル）ピロリジン−３−アミン二塩酸塩（調製物Ａ；５０ｍｇ，０．１６ミリモル）とＤＩＥＡ（８４μＬ，０．４８ミリモル）で処理した。反応混合物を１６時間撹拌した。混合物を水（１０ｍＬ）とＤＣＭ（１０ｍＬ）の間で区分し、水性層をＤＣＭで抽出した（１０ｍＬで２回）。合わせた有機相をブライン（１０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、濃縮した。２．５〜５％ＭｅＯＨ／ＤＣＭで溶出するシリカカラムクロマトグラフィによって残留物を精製した。生成物を含有する分画をさらに逆相ＨＰＬＣ（５〜９５％ＡＣＮ／水／０．１％ＴＦＡ）によって精製し、塩基性水溶液による後処理の後、白色固形物として表題の化合物を得た（２８ｍｇ、収率３３％）。ＭＳ（ａｐｃｉ）ｍ／ｚ＝５３０．３（Ｍ＋Ｈ）
【０２３６】
工程Ｂ：１−（（３Ｓ，４Ｒ）−４−（３−フルオロフェニル）−１−（２−メトキシエチル）ピロリジン−３−イル）−３−（４−メチル−３−（２−メチルピリミジン−５−イル）−１−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）尿素二塩酸塩の調製
０℃に冷却した４−メチル−３−（２−メチルピリミジン−５−イル）−１−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−５−アミン（調製物Ｂ；２．５６ｇ，９．６４ミリモル）のＤＣＭ（９６ｍＬ）溶液にトリホスゲン（１．７２ｇ，５．７８ミリモル）を一気に加え、その後、ＤＩＥＡ（８．４０ｍＬ，４８．２０ミリモル）を一滴ずつ加えた。混合物を０℃で１時間撹拌した。混合物に（３Ｓ，４Ｒ）−４−（３−フルオロフェニル）−１−（２−メトキシエチル）ピロリジン−３−アミン二塩酸塩（調製物Ａ；３．０ｇ，９．６４ミリモル）を１０分間かけて少しずつ加えた。反応混合物を常温で４０分間撹拌し、次いで水（１００ｍＬ）に注いだ。相分離の後、水性層をＤＣＭで抽出した（１００ｍＬで２回）。合わせた有機相をブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、濾過し、濃縮した。残留物を逆相クロマトグラフィ（ＳＮＡＰ１２０ｇ、Ｃ１８、５〜７５％ＭｅＯＨ／０．１％ＨＣｌ水溶液）によって精製し、真空下で乾燥させてクリーム色の泡状物として表題の化合物を得た（３．３３ｇ、収率５７％）。ＭＳ（ａｐｃｉ）ｍ／ｚ＝５３０．３（Ｍ＋Ｈ）
【０２３７】
実施例２
【化３２】
0006499672.tif 000063
１−（（３Ｓ，４Ｒ）−４−（３−フルオロフェニル）−１−（２−メトキシエチル）ピロリジン−３−イル）−３−（４−メチル−３−（２−メチルピリミジン−５−イル）−１−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）尿素
４−メチル−３−（２−メチルピリミジン−５−イル）−１−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−５−アミン（調製物Ｂ；８００ｍｇ，３．０２ミリモル）のＤＣＭ（１５ｍＬ）懸濁液にトリエチルアミン（２．１ｍＬ，１５．１ミリモル）を加え、その後、ＣＤＩ（５８７ｍｇ，３．６２ミリモル）を加えた。混合物をＮ２のもとで密封し、常温で２２時間撹拌し、次いでＤＣＭ（４ｍＬ）中の（３Ｓ，４Ｒ）−４−（３−フルオロフェニル）−１−（２−メトキシエチル）ピロリジン−３−アミン（調製物Ｄ；８２６ｍｇ，３．４７ミリモル）で処理した。撹拌を１００分間継続した。ＤＣＭ（６０ｍＬ）と水（１００ｍＬ）の間で混合物を区分した。相分離の後、ＤＣＭ層を０．５ＮのＨＣｌ（５０ｍＬ）、次いで０．２ＮのＨＣｌ（２５ｍＬで２回）で抽出した。酸抽出物を合わせ、きれいなフラスコに静かに注ぎ、室温の水槽に入れ、撹拌しながら、６ＮのＮａＯＨ（水溶液）、次いで１ＮのＮａＯＨ（水溶液）でｐＨ９〜１０に塩基性化した。懸濁液を氷槽で５分間撹拌した。得られた固形物を濾過し、水及びエーテル（各２０ｍＬで３回）ですすぎ、真空下で乾燥させて白色固形物として表題の化合物（１．４４ｇ、収率９０％）を得た。ＭＳ（ａｐｃｉ）ｍ／ｚ＝５３０．３（Ｍ＋Ｈ）
【０２３８】
実施例３
（３Ｓ，４Ｒ）−４−（３，４−ジフルオロフェニル）−１−（２−メトキシエチル）ピロリジン−３−アミン（２Ｓ，３Ｓ）−２，３−ビス（（４−メチルベンゾイル）オキシ）スクシネートの調製
工程Ａ：（２−メトキシ−Ｎ−（（トリメチルシリル）メチル）エタンアミンの調製
フラスコに（クロロメチル）トリメチルシラン（３３００．０ｇ，１．０当量）と、アセトニトリル（５．２８Ｌ）と、２−メトキシエタンアミン（４０４１．０ｇ，２．０当量）とを充填した。反応混合物を７４℃で１６時間撹拌し、次いで反応物を２５℃に冷却した。ペンタン（１６Ｌ）を加え、反応混合物を１分間撹拌した。層が分離された。下の層（アセトニトリル層）を分液漏斗に加え戻し、分液漏斗にペンタン（１６Ｌ）を加えた。撹拌の後、層が分離された。ペンタン（１６Ｌ）による抽出を繰り返した。合わせたペンタン層を分液漏斗に加え、水（３．３Ｌ）を加えた。撹拌の後、層が分離された。蒸気、機械的撹拌、コンデンサ、Ｊ−Ｋｅｍ温度プローブ及び添加漏斗を装着した２２Ｌの反応器にＭｅＯＨ（３．０Ｌ）を加えた。２５〜４５℃で溶媒の常圧蒸留を行った。蒸留の間、ペンタン溶液がすべて蒸留タンクに存在するまで約６．６Ｌの容量を保持する速度で添加漏斗によってペンタン溶液を蒸留フラスコに加えた。フラスコの総容量が約６．６Ｌになるまで蒸留を続けた。反応混合物を２５℃に冷却し、窒素雰囲気下で常温にて撹拌して（２−メトキシ−Ｎ−（（トリメチルシリル）メチル）エタンアミン（収率７２％）を提供した。
【０２３９】
工程Ｂ：２−メトキシ−Ｎ−（メトキシメチル）−Ｎ−（（トリメチルシリル）メチル）エタンアミンの調製
フラスコに（２−メトキシ−Ｎ−（（トリメチルシリル）メチル）エタンアミン（３８０．０ｇ，１．０当量）と、メタノール（３３２ｍＬ）と、ペンタン（１９３ｍＬ）とを充填した。５℃を下回る氷水槽で反応混合物を撹拌した。１０℃を下回る内部温度を保持する速度で反応混合物にホルムアルデヒド（９７．９ｍＬ，１．２当量）３７％水溶液を加え、１０℃を下回る温度で反応混合物を２時間撹拌した。反応混合物にｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル（７００ｍＬ，５．２当量）と水（３００．０ｍＬ）を加え、混合物を常温で約１分間撹拌した。層が分離され、有機層を分液漏斗に加え戻した。ブライン（３００ｍＬ）を分液漏斗に加えた。混合物を撹拌し、層を分離した。有機層に炭酸カリウムＫ２ＣＯ３（１０．０ｇ）を加え、混合した後、濾紙上で有機層を濾過した。ケーキをｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテルですすいだ。合わせた有機層を濃縮し、油として２−メトキシ−Ｎ−（メトキシメチル）−Ｎ−（（トリメチルシリル）メチル）エタンアミン（収率７５％）を提供した。
【０２４０】
工程Ｃ：トランス−４−（３，４−ジフルオロフェニル）−１−（２−メトキシエチル）ピロリジン−３−カルボン酸の調製
フラスコに（Ｅ）−３−（３，４−ジフルオロフェニル）アクリル酸（５７．０ｇ，１．０当量）と、酢酸エチル（１４３ｍＬ）と、ヘプタン（１４３ｍＬ）とを充填し、混合物を撹拌した。トリフルオロ酢酸（２．４ｍＬ，０．１当量）を加え、反応混合物を２０℃未満に冷却した。２０℃〜２５℃の間での内部温度を保持する速度で添加漏斗によって２−メトキシ−Ｎ−（メトキシメチル）−Ｎ−（（トリメチルシリル）メチル）エタンアミンを加え、反応混合物を２０℃で２時間撹拌した。１０℃〜２７℃の間での温度にて減圧下で反応混合物を濃縮した。残留物に酢酸エチル（２００ｍＬ）を加え、混合物を減圧下で濃縮した。残留物を２０℃で一晩撹拌した。ヘプタンを少しずつ加える（総容量：１２００ｍＬ）ことによって真空蒸留により不純物の共沸除去を行った。得られたスラリーを２０℃で一晩静置し、次いで濾紙上で濾過した。ケーキをヘプタンですすぎ、４５℃にて約４時間真空オーブンで乾燥させてトランス−４−（３，４−ジフルオロフェニル）−１−（２−メトキシエチル）ピロリジン−３−カルボン酸（収率９０％）を提供した。
【０２４１】
工程Ｄ：トランス−４−（３，４−ジフルオロフェニル）−１−（２−メトキシエチル）ピロリジン−３−カルボキサミドの調製
フラスコにトランス−４−（３，４−ジフルオロフェニル）−１−（２−メトキシエチル）ピロリジン−３−カルボン酸（９８．３ｇ，１．０当量）と、カルボニルジイミダゾール（６９．８ｇ，１．３当量）と、ＨＣｌイミダゾール（７．２ｇ，０．２当量）と、テトラヒドロフラン（１０００ｍＬ）とを充填した。窒素のもとで反応混合物を２５℃で１時間撹拌し、次いで常温（約２０℃）で一晩撹拌した。アンモニア（イソプロピルアルコール中で２．０Ｍ）（３０７ｍＬ，１．８当量）を１５分間かけて反応混合物に加えた。反応混合物を２５℃で約３０分間撹拌した。反応混合物を濾紙上で濾過し、濾過した固形物をＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）ですすいだ。合わせた有機層を３７℃にて減圧下で濃縮した。得られた粗精製の油に酢酸エチル（２００ｍＬ）を加え、混合物を３７℃にて減圧下で濃縮した。酢酸エチル（２００ｍＬ）、水（５００ｍＬ）及びＮａＣｌ（８２．０ｇ，４．１当量）を残留物に加え、混合物を常温にて約２分間撹拌した。層が分離され、合わせた有機層を３７℃にて減圧下で濃縮し、トランス−４−（３，４−ジフルオロフェニル）−１−（２−メトキシエチル）ピロリジン−３−カルボキサミド（収率９９％）を提供した。
【０２４２】
工程Ｅ：トランス−４−（３，４−ジフルオロフェニル）−１−（２−メトキシエチル）ピロリジン−３−アミンの調製
フラスコにトランス−４−（３，４−ジフルオロフェニル）−１−（２−メトキシエチル）ピロリジン−３−カルボキサミド（９６．８ｇ，１．０当量）とメタノール（１４５０ｍＬ）とを充填し、反応混合物を５℃に冷却した。２０℃を下回る内部温度を保持する速度で添加漏斗によって塩酸ナトリウム（４６２．２ｍＬ，２．２当量）の１０％溶液を加えた。反応混合物を２０℃で１時間、次いで５５℃で１時間撹拌した。水（１００ｍＬ）溶液としての水酸化カリウム（３１４．６ｇ，１４．０当量）を５分間かけて反応混合物に加え、反応混合物を７２〜７５℃で１２時間撹拌した。反応混合物を５５℃に冷却し、３７重量％のＨＣｌ（５８３．８ｍＬ，５５．９当量）を１０分間かけて加え、ｐＨを２未満に合わせた。三塩基性Ｋ３ＰＯ４（３０ｗｔ％，１００．０ｍＬ）を加え反応混合物のｐＨを６〜７の間に合わせた。反応混合物を３７℃にて減圧下で濃縮した。得られた水性混合物を分液漏斗に移し、３０ｗｔ％の三塩基性Ｋ３ＰＯ４（５４０．０ｍＬ）及び３７ｗｔ％の三塩基性Ｋ３ＰＯ４（５０．０ｍＬ）を加えｐＨを≧１０に合わせた。ＥｔＯＡｃ（１０００ｍＬ）を加え、混合物を常温で約２分間撹拌した。層が分離され、水性層を分液漏斗に加え戻した。ＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ）を分液漏斗に加え、混合物を撹拌した。層が分離され、合わせた有機層を減圧下で濃縮してトランス−４−（３，４−ジフルオロフェニル）−１−（２−メトキシエチル）ピロリジン−３−アミン（収率９９％）を提供した。
【０２４３】
工程Ｆ：（３Ｓ，４Ｒ）−４−（３，４−ジフルオロフェニル）−１−（２−メトキシエチル）ピロリジン−３−アミン（２Ｓ，３Ｓ）−２，３−ビス（（４−メチルベンゾイル）オキシ）スクシネートの調製
フラスコにトランス−４−（３，４−ジフルオロフェニル）−１−（２−メトキシエチル）ピロリジン−３−アミン（１２３．３ｇ，１．０当量）とメタノール（１６０３ｍＬ）とを充填した。混合物を常温で撹拌した。（２Ｓ，３Ｓ）−２，３−ビス（（４−メチルベンゾイル）オキシ）コハク酸（１４５．０ｇ，１．５当量）と水（２９５ｍＬ）を加え、反応混合物を６５℃に加熱した。（３Ｓ，４Ｒ）−４−（３，４−ジフルオロフェニル）−１−（２−メトキシエチル）ピロリジン−３−アミン（２Ｓ，３Ｓ）−２，３−ビス（（４−メチルベンゾイル）オキシ）スクシネート（０．５ｇ，０．７当量）で反応混合物に播種し（小規模で反応を行うことにより種を調製し、それは固形物として生成物を提供した）、反応混合物を１６時間かけてゆっくり２５℃に冷却した。スラリーを濾紙上で濾過した。ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル（７００ｍＬ）でケーキをすすぎ、４５℃にて約４時間真空下で乾燥させて（３Ｓ，４Ｒ）−４−（３，４−ジフルオロフェニル）−１−（２−メトキシエチル）ピロリジン−３−アミン（２Ｓ，３Ｓ）−２，３−ビス（（４−メチルベンゾイル）オキシ）スクシネート（２工程にわたって収率３５％）を提供した。
【０２４４】
生物アッセイ
生物アッセイでは、化合物１は１−（（３Ｓ，４Ｒ）−４−（３−フルオロフェニル）−１−（２−メトキシエチル）ピロリジン−３−イル）−３−（４−メチル−３−（２−メチルピリミジン−５−イル）−１−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）尿素を指し；化合物２は１−（（３Ｓ，４Ｒ）−４−（３，４−ジフルオロフェニル）−１−（２−メトキシエチル）ピロリジン−３−イル）−３−（４−メチル−３−（２−メチルピリミジン−５−イル）−１−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）尿素（ＷＯ２０１２／１５８４１３にて開示された）を指し；及び化合物３は１−（１’，４−ジメチル１−フェニル−１Ｈ，１’Ｈ−［３，４’−ｂｉピラゾール］−５−イル）−３−（（３Ｓ，４Ｒ）−４−（４−フルオロフェニル）−１−（２−メトキシエチル）ピロリジン−３−イル）尿素（ＷＯ２０１２／１５８４１３にて開示された）を指す。
【０２４５】
実施例Ａ
ＴｒｋＡキナーゼ結合アッセイ
ＴｒｋＡ結合活性はＴｒｋＡ  ＬａｎｔｈａＳｃｒｅｅｎ（商標）Ｅｕキナーゼ結合アッセイにて測定した。５ｎＭのＨｉｓタグを付けた組換えヒトＴｒｋＡ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎのカタログ番号ＰＶ３１４４からの６ＨＩＳタグ付き細胞質ドメイン）を緩衝液（２５ｍＭのＭＯＰＳ、ｐＨ７．５、５ｍＭのＭｇＣｌ２、０．００５％のＴｒｉｔｏｎＸ−１００）における４ｎＭのＡｌｅｘａ−Ｆｌｕｏｒ（登録商標）トレーサー２３６（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎのカタログ番号ＰＶ５５９２）と、２ｎＭのビオチン化抗−Ｈｉｓ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎのカタログ番号ＰＶ６０９０）と、２ｎＭのユーロピウム標識したストレプトアビジン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎのカタログ番号ＰＶ５８９９）と共にインキュベートした。ＤＭＳＯ中の化合物１、化合物２及び化合物３の３倍連続希釈物を２％ＤＭＳＯの最終比率に加えた。２２℃で６０分間インキュベートした後、６１５ｎｍと６６５ｎｍでのＴＲ−ＦＲＥＴ二重波長検出を介したＥｎＶｉｓｉｏｎマルチモードプレートリーダー（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）を用いて反応を測定した。レシオメトリック放出係数を用いて対照百分率を算出した。４パラメータモデルを対照百分率のデータに適合させることによってＩＣ５０値を決定した。
【０２４６】
化合物１は実施例Ａのアッセイで調べた場合、１．１ｎＭの平均ＩＣ５０値を有した。化合物２は実施例Ａのアッセイで調べた場合、１．５ｎＭの平均ＩＣ５０値を有した。化合物３は実施例Ａのアッセイで調べた場合、１．７ｎＭの平均ＩＣ５０値を有した。
【０２４７】
実施例Ｂ
ＴｒｋＡの細胞アッセイ
ヒトの野生型ＴｒｋＡを形質移入したＣＨＯ−Ｋ１細胞を、１０％ＦＢＳを含有する完全ＤＭＥＭ培地にて３×１０５個／ウェルで９６穴平底プレートに入れ、３７℃、５％ＣＯ２にて２４時間接着させた。次いで培地を完全な無血清アッセイ培地で置き換え、３７℃、５％ＣＯ２にて１時間、細胞を血清飢餓にした。１μＭ〜１５２ｐＭの範囲の最終濃度で１：３の連続希釈を用いて化合物１、２または３で細胞を処理した。化合物を細胞にて３７℃、５％ＣＯ２にて１時間インキュベートした。次いで３７℃、５％ＣＯ２にて３０ｎｇ／ｍＬの最終濃度のヒトＮＧＦで細胞を刺激した。培地を取り出し、ホスファターゼ及びプロテイナーゼの阻害剤を含有する溶解緩衝液で細胞を溶解した。ＥＬＩＳＡ（Ｒ＆Ｄカタログ番号ＤＹＣ２５７８）によってホスホ−ＴｒｋＡを測定した。ＥＬＩＳＡは全ＴｒｋＡを捕捉し、リン−チロシンすべてを検出した。４５０ｎｍの波長でＶｅｒｓａｍａｘリーダーを用いて各ウェルについて光学密度を測定した。４パラメータモデルを対照百分率のデータに適合させることによってＩＣ５０値を決定した。
【０２４８】
化合物１は実施例Ｂのアッセイで調べた場合、１．９ｎＭの平均ＩＣ５０値を有した。化合物２は実施例Ｂのアッセイで調べた場合、１．３ｎＭの平均ＩＣ５０値を有した。化合物３は実施例Ｂのアッセイで調べた場合、６．１ｎＭの平均ＩＣ５０値を有した。
【０２４９】
実施例Ｃ
化合物１、２及び３のヒトミクロソーム及びヒト肝細胞でのクリアランス
肝ミクロソームのインキュベート
【０２５０】
１００ｍＭのリン酸カリウムアッセイ緩衝溶液（ＫＰＢ）を以下のように調製した。ＫＨ２ＰＯ４及びＫ２ＨＰＯ４の双方を試薬等級の水に溶解して最終濃度１００ｍＭを生じた。Ｋ２ＨＰＯ４：ＫＨ２ＰＯ４の７５：２５ｖ／ｖ混合物を調製し、溶液のｐＨを希釈ＨＣｌまたは希釈ＮａＯＨの溶液を用いて７．４に合わせた。化合物１、化合物２及び化合物３のストック溶液をＤＭＳＯにて１０ｍＭ（活性化合物）で調製した。ストック溶液は使用直前にＫＰＢ溶液を用いて２．５μＭに希釈して作業標準を作り出した。試験化合物はすべて室温にて視覚検査でＤＭＳＯに完全に可溶性だった。ＮＡＤＰＨ再生溶液（ＮＲＳ）は分析当日に１容量の１７ｍｇ／ｍＬのＮＡＤＰ＋を１容量の７８ｍｇ／ｍＬのグルコース−６−リン酸（双方ともＫＰＢ、ｐＨ７．４で調製した）と７．９容量の２０ｍＭのＭｇＣｌ２で希釈することによって調製した。ＮＡＤＰ＋及びグルコース−６−リン酸の最終濃度はそれぞれ１．７ｍｇ／ｍＬ及び７．８ｍｇ／ｍＬだった。使用直前に、ＮＲＳストック溶液のｍＬ当たり１０μＬのグルコース−６−リン酸脱水素酵素（ＫＰＢ、ｐＨ７．４にて１５０単位）を加えることによってＮＲＳを活性化した。肝ミクロソームはＫＰＢを用いて２．５ｍｇタンパク質／ｍＬに希釈した。
【０２５１】
化合物１、化合物２及び化合物３、及び各陽性対照（すなわち、デキストロメトルファン、ジアゼパム、ジルチアゼム、フェナセチン、トルブタミド、及びベラパミル）について、試験化合物の２．５μＭの作業標準溶液２０μＬとミクロソーム（２．５ｍｇタンパク質／ｍＬ）２０μＬを２つ組にて９６穴ポリプロピレンプレート（Ｃｏｓｔａｒ，ＶＷＲ，Ｗｅｓｔ  Ｃｈｅｓｔｅｒ，ＰＡ）の各ウェルに加えた。プレートを３７℃のインキュベータに５分間入れた後、出発溶液を加えた。ＮＲＳ溶液の１０μＬアリコートを各元々のウェルに加えて代謝を開始させた。試験化合物の濃度はインキュベートの開始時で１μＭだった。インキュベートプレートの１枚は各時点（すなわち、０及び２０分）のために用意した。インキュベートは３７℃及び１００％相対湿度で実施した。各時点で、適当なインキュベートプレートをインキュベータから取り出し、内部標準（６０％アセトニトリル中の０．２５μＭのラベタロール、１５０μＬ）を含有する溶液を各ウェルに加えた。Ａｌｌｅｇｒａ卓上遠心機（Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｃｏｕｌｔｅｒ，Ｆｕｌｌｅｒｔｏｎ，ＣＡ）を用いて室温で２，０９５×ｇにて７分間の遠心分離にて細胞を直ちに遠沈した。上清の２００μＬアリコートを各ウェルから９６穴シャロープレート（Ｃｏｓｔａｒ）に移した。再利用可能なプレートマットを用いてプレートを密封した。
【０２５２】
肝細胞のインキュベート
【０２５３】
化合物１、化合物２及び化合物３のストック溶液をＤＭＳＯにて１０ｍＭ（活性化合物）で調製した。化合物１、化合物２及び化合物３（１μＭ）の試験管内の安定性を肝細胞の存在下で以下のように評価した。供給業者の指針に従って、凍結保存された肝細胞を融解し、輸送培地から単離し、ダルベッコ改変イーグル培地、１×、高グルコース（ＤＭＥＭ，Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，Ｃａｒｌｓｂａｄ，ＣＡ）を用いて１×１０６個の生細胞／ｍＬの密度に希釈した。血球計算盤（３５００Ｈａｕｓｓｅｒ，ＶＷＲ，Ｗｅｓｔ  Ｃｈｅｓｔｅｒ，ＰＡ）を用いてトリパンブルー排除によって生存率を測定した。化合物１、化合物２及び化合物３の１０ｍＭストック溶液を補完されたＤＭＥＭを用いて２μＭに希釈して作業標準を作り出した。試験化合物または対照（すなわち、アンチピリン、ジアゼパム、ジルチアゼム、ロラゼパム、プロプラノロール、ベラパミル、及び７−エチル−１０−ヒドロキシカンプトテシン［ＳＮ−３８］）の２０μＬアリコートを９６穴ポリプロピレンプレート（Ｃｏｓｔａｒ，ＶＷＲ，Ｗｅｓｔ  Ｃｈｅｓｔｅｒ，ＰＡ）の各ウェルに加え、直後に肝細胞浮遊液２０μＬを加えた。インキュベートプレートの１枚は各時点（すなわち、０、６０及び１２０分）のために用意し、試料は２つ組で調製した。インキュベートは３７℃及び１００％相対湿度で実施した。各時点で、適当なインキュベートプレートをインキュベータから取り出し、ＩＳ（６０％アセトニトリル中の０．２５μＭのラベタロール、２００μＬ）を含有する溶液を各ウェルに加えた。プレート振盪器（ＩＫＡ  ＭＴＳ２／４デジタルマイクロタイター振盪器，ＶＷＲ）にて７００ｒｐｍで１分間、プレートを混合し、直ちにＡｌｌｅｇｒａ卓上遠心機（Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｃｏｕｌｔｅｒ，Ｆｕｌｌｅｒｔｏｎ，ＣＡ）を用いて室温で２，０９５×ｇにて７分間の遠心分離にて遠沈した。上清の２００μＬアリコートを各ウェルから９６穴シャロープレート（Ｃｏｓｔａｒ）に移した。再利用可能なプレートマットを用いてプレートを密封した。
【０２５４】
計算
【０２５５】
計算はすべてＢｉｏＡｓｓａｙ  Ｅｎｔｅｒｐｒｉｓｅを用いて行った。平均ピーク面積比は、化合物１、化合物２、化合物３、及び各試料についての内部標準のピーク面積比（ｎ＝２）を平均することによって算出した。残存百分率は、各時点でのピーク面積比の０時点での試料のピーク面積比に対する比を決定することによって算出した。試験化合物の喪失の速度（Ｋｍ）は−ｌｎ（ｆ（ｔ））対時間の線形回帰によって決定した。回帰は形式「ｙ＝ｍｘ」を使用したのでモデルは１００％残存の切片を強要し、代謝は一次速度論に従うと仮定した。ｔ１／２はｌｎ（２）をＫｍで割って決定した。予測される固有クリアランス（ＣＬｉｎｔ）は、表５でリストにし、以下の方程式：
【数３】
0006499672.tif 000064
で採用された物理的な及び生理的なスケーリング因子を用いて化合物１、化合物２及び化合物３それぞれの安定性についての試験管内での半減期を調整することによって算出した。
【０２５６】
式中、Ｄは特定の種についての肝臓の質量当たりの肝細胞の数である。Ｗは動物の体重当たりの存在する肝臓の平均質量であり、Ｃは単位容量当たりのインキュベートの間での存在する肝細胞の数である。予測される肝クリアランス（ＣＬｈ）は、表５でリストにされ、以下の方程式：
【数４】
0006499672.tif 000065
で採用された物理的な及び生理的なスケーリング因子を用いて算出した。
【０２５７】
式中、Ｑは種に依存した肝臓の血流である。試験化合物の未結合の分画（ｆｕ）については調整は行わなかった。予測される肝臓抽出比（ＥＲ）は予測されるＣＬｈの肝臓の血流に対する比を算出することによって決定した。
【数５】
0006499672.tif 000066
【表５】
0006499672.tif 000067
【０２５８】
実施例Ｄ
オスのスプラーグドーリー系ラットの薬物動態
化合物（乾燥）を２０％のＴｒａｐｐｓｏｌ（登録商標）（ヒドロキシプロピルベータシクロデキストリン；ＣＤＴ，Ｉｎｃ．）（水溶液）ｐＨ５．０に加え、均質な懸濁液（ＰＯ）または溶液（ＩＶ）が達成されるまでボルテックスで撹拌することによって化合物１、化合物２及び化合物３のそれぞれを製剤化した。
【０２５９】
静脈内投与のために、３％イソフルランとバランスのとれたＯ２によって動物を麻酔した。１ｍｇ／ｋｇの化合物１、化合物２及び化合物３を１ｍＬ／ｋｇの投与容量で外側尾静脈に投与した。以下の時点：１、５、１５、３０分、及び１、２、４、８及び２４時間にて動物を麻酔下（Ｏ２でバランスを取った３％イソフルラン、０．２ｍＬ／時点）に置きながら、反対側の外側尾静脈からＮａＥＤＴＡ入りチューブ（１．５％ｖ／ｖ）に採血し、十分に混合した。
【０２６０】
経口投与については、一晩の絶食に続いてラットは単回経口用量を服用した。以下の時点：５、１５及び３０分、及び１、２、４、８、２４及び２６時間にて動物を麻酔下（Ｏ２でバランスを取った３％イソフルラン、０．２ｍＬ／時点）に置きながら、外側尾静脈からＮａＥＤＴＡ入りチューブ（１．５％ｖ／ｖ）に採血し、十分に混合した。２４時間目の採血に続いて、動物に再び経口投与し、化合物の分析のために投与の２時間後、血漿及び脳を採取した。脳を生理食塩水で潅流した後、取り出し、秤量し、ＬＣＭＳ／ＭＳによる分析まで液体窒素で瞬間凍結した。血漿は１４，０００ｒｐｍにて１０分間の遠心分離によって分離し、血漿試料をゴムキャップ付きの９６穴プレートチューブに移し、分析されるまで−２０±５℃で保存した。
【０２６１】
血漿の分析
【０２６２】
先ず、４０μｇ／ｍＬの化合物１、化合物２及び化合物３のＤＭＳＯにおけるストック溶液を連続希釈（３倍）して標準溶液を提供することによって単一の１２点較正曲線を作成した。次いで血漿（２０μＬ）を抽出プレートに加え、２．５μＬの各標準溶液を無処理の血漿に加えた。内部標準のストック溶液（アセトニトリル中２．５μｇ／ｍＬを１０μＬ）をその後、各標準溶液及び試料溶液に加えた。総容量３５０μＬに対する３１７.５μＬのアセトニトリルの添加によって２０μＬの血漿からタンパク質物質が析出した。試料を５分間ボルテックスで混合し、４℃にておよそ１，５００×ｇで１５分間、Ａｌｌｅｇｒａ  Ｘ−１２Ｒ遠心分離（Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｃｏｕｌｔｅｒ，Ｆｕｌｌｅｒｔｏｎ，ＣＡ）にて遠沈した。各上清の１００μＬアリコートを５５０μＬのパーソナルピペッター（Ａｐｒｉｃｏｔ  Ｄｅｓｉｇｎｓ，Ｍｏｎｒｏｖｉａ，ＣＡ）を介して９６穴プレートに移し、ＨＰＬＣ等級の水で１：１に希釈した。得られたプレートをプレートマットで密封し、血漿における化合物の量をＬＣ−ＭＳ／ＭＳによって分析した。
【０２６３】
ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ方式は、ＨＴＣ−ＰＡＬ自動試料採取器（Ｌｅａｐ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｉｎｃ．，Ｃａｒｒｂｏｒｏ，ＮＣ）と、ＨＰ１１００ＨＰＬＣ（Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  Ｉｎｃ．，Ｓａｎｔａ  Ｃｌａｒａ，ＣＡ）と、ＡＰＩ４０００三連四重極質量分析計（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ，Ｆｏｓｔｅｒ  Ｃｉｔｙ，ＣＡ）で構成された。検体及び内部標準のクロマトグラフィ保持は、移動相Ａ（０．１％ギ酸と１％イソプロピルアルコールの水溶液中１０ｍＭの酢酸アンモニウム）及び移動相Ｂ（８９．９％アセトニトリル、１０％メタノール、０．１％ギ酸における１０ｍＭの酢酸アンモニウム）を用いた勾配条件と併せてＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標）Ｓｙｎｅｒｇｉ  ４μＨｙｄｒｏ−ＲＰ８０Ａカラム（２．１×３０ｍｍ，４μｍの粒度；Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ，Ｔｏｒｒａｎｃｅ，ＣＡ）を用いて達成した。単回注入についての再平衡化時間を含めた総実行時間は３．５分であり、流速は０．８ｍＬ／分だった。溶媒Ｂを１.０分間で５％から９５％に上昇させ。９５％で１.０分間保持し、次いで０．１分間で５％に低下させた。
【表Ｅ】
0006499672.tif 000068
【０２６４】
脳の分析
【０２６５】
先ず、ＤＭＳＯにおける化合物１、化合物２及び化合物３のそれぞれの４０μｇ／ｍＬのストック溶液を連続希釈（３倍）することによって単一の１２点較正曲線を作成した。脳を含有する５０ｍＬの円錐チューブに５．０ｍＬの水を加えることによって脳のホモジネートを調製した。Ｏｍｎｉ−Ｐｒｅｐマルチ試料ホモゲナイザー（Ｋｅｎｎｅｓａｗ，ＧＡ）を２２，０００ｒｐｍで１８０秒間用いてチューブの内容物をホモジネートした。ホモジネート（１００μＬ）を抽出プレートに加え、無処理の脳ホモジネートに２．５μＬの各標準溶液を加えた。内部標準のストック溶液（アセトニトリル中の０．２５μｇ／ｍＬを１００μＬ）を各標準溶液及び各試料溶液に加えた。総容量３５０μＬについて２３７．５μＬのアセトニトリルの添加によって１００μＬのマウス腫瘍ホモジネートからタンパク質様物質を析出させた。試料を５分間ボルテックスで混合し、Ａｌｌｅｇｒａ  Ｘ−１２Ｒ遠心機（Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｃｏｕｌｔｅｒ，Ｆｕｌｌｅｒｔｏｎ，ＣＡ）にて４℃でおよそ１，５００×ｇにて１５分間遠沈した。各上清の１００μＬアリコートを５５０μＬのパーソナルピペッター（Ａｐｒｉｃｏｔ  Ｄｅｓｉｇｎｓ，Ｍｏｎｒｏｖｉａ，ＣＡ）を介して９６穴プレートに移し、ＨＰＬＣ等級の水で１：１に希釈した。得られたプレートをプレートマットで密封し、脳における化合物の量をＬＣ−ＭＳ／ＭＳによって分析した。
【０２６６】
ＬＣ−ＭＳ／ＭＳシステムは、ＨＴＣ−ＰＡＬ自動試料採取器（Ｌｅａｐ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｉｎｃ．，Ｃａｒｒｂｏｒｏ，ＮＣ）と、ＨＰ１１００  ＨＰＬＣ（Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  Ｉｎｃ．，Ｓａｎｔａ  Ｃｌａｒａ，ＣＡ）と、ＡＰＩ４０００三連四重極質量分析計（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ，Ｆｏｓｔｅｒ  Ｃｉｔｙ，ＣＡ）で構成された。検体及び内部標準のクロマトグラフィ保持は、移動相Ａ（０．１％ギ酸と１％イソプロピルアルコールの水溶液中１０ｍＭの酢酸アンモニウム）及び移動相Ｂ（８９．９％アセトニトリル、１０％メタノール、０．１％ギ酸における１０ｍＭの酢酸アンモニウム）を用いた勾配条件と併せてＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標）Ｓｙｎｅｒｇｉ  ４μＨｙｄｒｏ−ＲＰ８０Ａカラム（２．１×３０ｍｍ，４μｍの粒度；Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ，Ｔｏｒｒａｎｃｅ，ＣＡ）を用いて達成した。
【表Ｆ】
0006499672.tif 000069
【０２６７】
単回注入についての再平衡化時間を含めた総実行時間は３．５分であり、流速は０．８ｍＬ／分だった。溶媒Ｂを１.０分間で５％から９５％に上昇させ、９５％で１.０分間保持し、次いで０．１分間で５％に低下させた。検体の質量分光測定の検出はＥＳＩ＋イオン化モードを用いて達成した。化合物１、化合物２及び化合物３のストック溶液の注入の間にイオン電流を最適化した。検体の応答は、各化合物に固有の遷移の多重反応モニタリング（ＭＲＭ）によって測定した。薬物動態パラメータは、自社所有のソフトウエア（Ｓｈｅｒｌｏｃｋ、バージョン２．１）を用いて確立された非コンパートメントモデル化によって算出した。ＡＵＣは線形台形積分を用いて算出した。
【０２６８】
実施例Ｅ
イヌの薬物動態
１ｍＬ／ｋｇ用量にて１ｍｇ／ｋｇを送達するためのＩＶ投与製剤を以下のように調製した。製剤用の賦形剤は２０％Ｔｒａｐｐｓｏｌ（登録商標）（ヒドロキシプロピルベータシクロデキストリン；ＣＤＴ，Ｉｎｃ．）（水性）の水溶液だった。最終容量の賦形剤を化合物１、化合物２及び化合物３（乾燥化合物として）のそれぞれに加え、均質な溶液が得られるまで混合物を撹拌した。最終溶液のｐＨは７だった。０．２μＭのフィルター用いて溶液を濾過した後、動物に送達した。
【０２６９】
オスのビーグル犬に、一晩の絶食に続いて単回静脈内投与を行った。投与後以下の時点：０、１、５、１５及び３０分、及び１、２、４、８、１２、２４及び４８時間でＫ２ＥＤＴＡ入りの採血チューブに血液／血漿を回収し（１．５ｍＬ／時点）、十分に混合した。意識のある動物の頸静脈、橈側皮静脈または伏在静脈から血液試料を採取した。血漿に加工するまで血液試料は氷上で保持した。およそ５℃にて３２００ｒｐｍで１０分間、血液試料を遠心分離した。血漿試料をそのまま９６穴プレートチューブ（ＭａｔｒｉｘＴｅｃｈ，０．７５ｍＬ）に移した。ゴム製の注入可能なキャップを９６穴プレートチューブに載せた。分析するまで血漿試料を−２０±５℃で保存した。
【０２７０】
血漿の分析
【０２７１】
先ず、４０μｇ／ｍＬの化合物１、化合物２及び化合物３のＤＭＳＯにおけるストック溶液を連続希釈（３倍）して標準溶液を提供することによって単一の１２点較正曲線を作成した。次いで血漿（２０μＬ）を抽出プレートに加え、２．５μＬの各標準溶液を無処理の血漿に加えた。内部標準のストック溶液（アセトニトリル中２．５μｇ／ｍＬを１０.０μＬ）をその後、各標準溶液及び試料溶液に加えた。総容量３５０μＬに対する３１７.５μＬのアセトニトリルの添加によって２０μＬの血漿からタンパク質物質を析出させた。試料を５分間ボルテックスで混合し、４℃にておよそ１，５００×ｇで１５分間、Ａｌｌｅｇｒａ  Ｘ−１２Ｒ遠心分離（Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｃｏｕｌｔｅｒ，Ｆｕｌｌｅｒｔｏｎ，ＣＡ）にて遠沈した。各上清の１００μＬアリコートを５５０μＬのパーソナルピペッター（Ａｐｒｉｃｏｔ  Ｄｅｓｉｇｎｓ，Ｍｏｎｒｏｖｉａ，ＣＡ）を介して９６穴プレートに移し、ＨＰＬＣ等級の水で１：１に希釈した。得られたプレートをプレートマットで密封し、血漿における化合物の量をＬＣ−ＭＳ／ＭＳによって分析した。
【０２７２】
ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ方式は、ＨＴＣ−ＰＡＬ自動試料採取器（Ｌｅａｐ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｉｎｃ．，Ｃａｒｒｂｏｒｏ，ＮＣ）と、ＨＰ１１００ＨＰＬＣ（Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  Ｉｎｃ．，Ｓａｎｔａ  Ｃｌａｒａ，ＣＡ）と、ＡＰＩ４０００三連四重極質量分析計（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ，Ｆｏｓｔｅｒ  Ｃｉｔｙ，ＣＡ）で構成された。検体及び内部標準のクロマトグラフィ保持は、移動相Ａ（０．１％ギ酸と１％イソプロピルアルコールの水溶液中１０ｍＭの酢酸アンモニウム）及び移動相Ｂ（８９．９％アセトニトリル、１０％メタノール、０．１％ギ酸における１０ｍＭの酢酸アンモニウム）を用いた勾配条件と併せてＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標）Ｓｙｎｅｒｇｉ  ４μＨｙｄｒｏ−ＲＰ８０Ａカラム（２．１×３０ｍｍ，４μｍの粒度；Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ，Ｔｏｒｒａｎｃｅ，ＣＡ）を用いて達成した。単回注入についての再平衡化時間を含めた総実行時間は３．５分であり、流速は０．８ｍＬ／分だった。溶媒Ｂを１.０分間で５％から９５％に上昇させ。９５％で１.０分間保持し、次いで０．１分間で５％に低下させた。
【表Ｇ】
0006499672.tif 000070
【０２７３】
検体の質量分光測定の検出はＥＳＩ＋イオン化モードを用いて達成した。化合物１、化合物２及び化合物３のストック溶液の注入の間にイオン電流を最適化した。検体の応答は、各化合物に固有の遷移の多重反応モニタリング（ＭＲＭ）によって測定した。薬物動態パラメータは、自社所有のソフトウエア（Ｓｈｅｒｌｏｃｋ、バージョン２．１）を用いて確立された非コンパートメントモデル化によって算出した。ＡＵＣは線形台形積分を用いて算出した。
【０２７４】
実施例Ｆ
ＦＡＳＴＰａｔｃｈ（登録商標）ｈＥＲＧアッセイ
このアッセイは、ヒト胚性腎細胞（ＨＲＫ２９３）にて発現されたクローニングされたｈＥＲＧカリウムチャンネルに対する化合物１、化合物２及び化合物３の効果を測定するのに使用された。哺乳類細胞で発現されたｈＥＧＲ（ヒト遅延整流性カリウムイオンチャネル遺伝子）カリウムチャンネルの電流（迅速活性化、遅延整流性心臓カリウム電流であるＩＫｒの代替）に対する化合物１、化合物２及び化合物３の試験管内の効果を、自動並行パッチクランプ方式であるＱＰａｔｃｈ  ＨＴ（登録商標）（Ｓｏｐｈｉｏｎ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ  Ａ／Ｓ，Ｄｅｎｍａｒｋ）を用いて室温で評価した。３以上の細胞（ｎ≧３）で調べた各濃度による０．３、１、３、１０、３０及び１００μＭにて被験物質を評価した。各被験物質の濃度への曝露の持続時間は３分だった。陽性対照はｈＥＲＧ阻害への試験系の感度を確認した。
【０２７５】
実施例Ｇ
ｐ３８キナーゼの結合アッセイ
化合物１のｐ３８α結合活性はｐ３８α  ＬａｎｔｈａＳｃｒｅｅｎ（商標）Ｅｕキナーゼ結合アッセイにて測定した。５ｎＭの不活性の、ＧＳＴタグを付けた組換えヒトｐ３８α（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，カタログ番号ＰＶ３３０５に由来するＧＳＴタグを付けた細胞質ドメイン）を、緩衝液（２５ｍＭ［Ｎａ＋］のＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．３，１０ｍＭのＭｇＣｌ２，１００μＭのＮａＶＯ４）中の５ｎＭのＡｌｅｘａ−Ｆｌｕｏｒ（登録商標）トレーサー１９９（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、カタログ番号ＰＶ５８３０）及び２ｎＭのユーロピウム標識した抗−ＧＳＴ抗体（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、カタログ番号ＰＶ５５９４）と共にインキュベートした。ＤＭＳＯ中の化合物１の３倍連続希釈を２％ＤＭＳＯも最終比率に加えた。２２℃での６０分のインキュベートの後、６１５ｎｍと６６５ｎｍでのＴＲ−ＦＲＥＴ二重波長検出を介したＥｎＶｉｓｉｏｎマルチモードプレートリーダー（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）を用いて反応を測定した。レシオメトリック放出係数を用いて対照百分率を算出した。４パラメータモデルを対照百分率のデータに適合させることによってＩＣ５０値を決定した。化合物１はｐ３８αよりもＴｒｋＡに対して１０００倍強力であることが見いだされた。
【０２７６】
実施例Ｈ
的外れのキナーゼのプロファイリング
その完全なキナーゼパネルで利用可能なキナーゼすべてに対する１０μＭの濃度での的外れのキナーゼ活性について、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ社によるＫｉｎａｓｅＰｒｏｆｉｌｅｒ（商標）サービスにて化合物１を調べた。Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅの仕様に従って、各個々のキナーゼについてＫｍの近傍のＡＴＰの濃度で化合物１を２つ組で実行させた。結果を以下の表に示す。データは対照百分率（ＰＯＣ）として報告し、２つの反復の平均である。
【０２７７】
ＫｉｎａｓｅＰｒｏｆｉｌｅｒ（商標）では、化合物１はパネルにおける他のキナーゼと対比してＴｒｋＡを阻害することについて顕著で且つ予想外の選択性を示した。実際、化合物１は１０μＭの濃度で的外れのキナーゼに対して大部分不活性だったので、哺乳類において治療用量にて的外れのキナーゼを阻害するとは予想されないであろう。化合物１の、他の的外れのキナーゼを阻害することなくＴｒｋ経路を選択的に阻害する能力は、的外れのキナーゼの阻害に関連する副作用を本質的に含まない薬剤プロファイルに変換でき得る。そのような薬剤プロファイルは、以前報告されてきたものよりも疼痛、炎症、癌及び特定の皮膚疾患を治療するさらに安全なアプローチを表すことになる。
【表Ｈ−１】
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【表Ｈ−２】
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【表Ｈ−３】
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【表Ｈ−４】
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【表Ｈ−５】
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【表Ｈ−６】
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【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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