(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）の化合物
0006502374.tif 000031
又は式（ＩＩ）の化合物
0006502374.tif 000032
（式中、Ｚは、非置換であるか又は置換されたフェニルである）。
【請求項２】
Ｚが、置換されたフェニルである、請求項１に記載の式（Ｉ）又は（ＩＩ）の化合物。
【請求項３】
Ｚがｐ−メトキシフェニルである、請求項２に記載の式（Ｉ）又は（ＩＩ）の化合物。
【請求項４】
Ｚがｐ−メトキシフェニルである、請求項２に記載の式（Ｉ）の化合物。
【請求項５】
Ｚがｐ−メトキシフェニルである、請求項２に記載の式（ＩＩ）の化合物。
【請求項６】
Ｚがｐ−メトキシフェニル、４−（２−アミノエチル）フェニル又は４−（２−（４−メルカプト−ブタノイルアミノ）エチル）フェニルである、請求項２に記載の式（Ｉ）又は（ＩＩ）の化合物。
【請求項７】
式（Ｉ）及び／又は式（ＩＩ）の多数の置換基
0006502374.tif 000033
（式中、Ｚは前記置換基をポリマー骨格に連結しているリンカーであって、ここで、リンカーＺがアリール、ヘテロアリール、アリール−Ｃ１−７アルキル、アリールカルボニル又はヘテロアリールメチルであり、アリールはフェニルであり、ヘテロアリールは５又は６員の単環式ヘテロアリール基であり、アリール又はヘテロアリールがポリマーに連結している３から２５個の炭素原子を有するアルキレンで置換されており、任意選択的に
（ａ）アルキレンの１個又は複数の炭素原子が、水素原子を保持する窒素で置き換えられており、隣接する炭素原子のうちの１個がオキソで置換されており、アミド官能基−ＮＨ−ＣＯ−を表す、かつ／又は
（ｂ）アルキレンの１個又は複数の炭素原子が酸素で置き換えられている；
（ｃ）アルキレンの１個又は複数の炭素原子が硫黄で置き換えられている；かつ／又は
（ｄ１）ポリマーに連結している末端炭素原子がオキソで置換されている；又は
（ｄ２）ポリマーに連結している末端炭素原子が−ＮＨ−で置き換えられている）を含むポリマー。
【請求項８】
ポリマー骨格がα−アミノ酸ポリマー、アクリル酸又はメタクリル酸ポリマー若しくはコポリマー、又はＮ−ビニル−２−ピロリドン−ビニルアルコールコポリマーである、請求項７に記載のポリマー。
【請求項９】
ポリマー骨格がα−アミノ酸ポリマーであり、α−アミノ酸がリジン、グルタミン酸又はアスパラギン酸である、請求項７に記載のポリマー。
【請求項１０】
ポリマー骨格がポリ−リジンである、請求項７に記載のポリマー。
【請求項１１】
ポリマー骨格の分子量が１’０００Ｄ〜３００’０００Ｄである、請求項８に記載のポリマー。
【請求項１２】
リンカーＺが非置換であるか又は置換されたフェニルであり、ここで、前記フェニルは、ポリマーに連結している３から２５個の炭素原子を有するアルキレンで置換されており、任意選択的に
（ａ）アルキレンの１個又は複数の炭素原子が、水素原子を保持する窒素で置き換えられており、隣接する炭素原子のうちの１個がオキソで置換されており、アミド官能基−ＮＨ−ＣＯ−を表す、かつ／又は
（ｂ）アルキレンの１個又は複数の炭素原子が酸素で置き換えられている；
（ｃ）アルキレンの１個又は複数の炭素原子が硫黄で置き換えられている；かつ／又は
（ｄ１）ポリマーに連結している末端炭素原子がオキソで置換されている；又は
（ｄ２）ポリマーに連結している末端炭素原子が−ＮＨ−で置き換えられている、
請求項７から１１の何れか一項に記載のポリマー。
【請求項１３】
リンカーＺがアリール、ヘテロアリール、アリール−Ｃ１−７アルキル、アリールカルボニル又はヘテロアリールメチルであり、アリールはフェニルであり、ヘテロアリールは５又は６員の単環式ヘテロアリール基であり、アリール又はヘテロアリールは、Ｃ＝Ｏ官能基においてアミノアルキル側鎖でポリマーに連結している−（ＣＨ２）２ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）（ＣＨ２）３Ｓ−ＣＨ２−（Ｃ＝Ｏ）−で置換されている、請求項７から１１の何れか一項に記載のポリマー。
【請求項１４】
リンカーＺが、Ｃ＝Ｏ官能基においてアミノアルキル側鎖でポリマーに連結している−（ＣＨ２）２ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）（ＣＨ２）３Ｓ−ＣＨ２−（Ｃ＝Ｏ）−で置換されたフェニルである、請求項７から１１の何れか一項に記載のポリマー。
【請求項１５】
式（Ｉ）及び／又は（ＩＩ）の二糖に対するポリマー骨格の相対分子量が１０：１から１：１．５の間である、請求項７から１４の何れか一項に記載のポリマー。
【請求項１６】
請求項１から５の何れか一項に記載の式（Ｉ）若しくは（ＩＩ）の化合物又は請求項７から１５の何れか一項に記載のポリマーを含む、薬学的組成物。
【請求項１７】
請求項１から６の何れか一項に記載の式（Ｉ）若しくは（ＩＩ）の化合物又は請求項７から１５の何れか一項に記載のポリマーを含む、診断用キット。
【請求項１８】
請求項１から６の何れか一項に記載の式（Ｉ）若しくは（ＩＩ）の化合物又は請求項７から１５の何れか一項に記載のポリマーを含む、抗ＭＡＧニューロパシー診断剤。
【請求項１９】
抗ＭＡＧニューロパシーの治療のための医薬であって、前記治療に対して有効量の請求項１から６の何れか一項に記載の式（Ｉ）若しくは（ＩＩ）の化合物又は請求項７から１５の何れか一項に記載のポリマーを含む、医薬。
【請求項２０】
抗ＭＡＧニューロパシーの治療のための薬学的組成物であって、請求項１から６の何れか一項に記載の式（Ｉ）若しくは（ＩＩ）の化合物又は請求項７から１５の何れか一項に記載のポリマーを含む、薬学的組成物。
【請求項２１】
抗ＭＡＧニューロパシーの診断のための薬学的組成物であって、請求項１から６の何れか一項に記載の式（Ｉ）若しくは（ＩＩ）の化合物又は請求項７から１５の何れか一項に記載のポリマーを含む、薬学的組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はミエリン関連糖タンパク質（ＭＡＧ）に対するＩｇＭ抗体に結合する炭水化物リガンド、これらを含むポリマー、及び抗ＭＡＧニューロパシー（抗ＭＡＧ抗体陽性ニューロパシー、anti-MAG neuropathy）の診断及び療法におけるこれらの使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
抗ミエリン関連糖タンパク質ニューロパシーは、末梢神経系（ＰＮＳ）のミエリン関連糖タンパク質（ＭＡＧ）及び他の複合糖質に見出される抗原性ＨＮＫ−１炭水化物エピトープを認識する自己抗体により引き起こされる脱髄性末梢ニューロパシーである。その臨床像は、ゆっくりと進行する脱髄性、主に感覚性ニューロパシーにより特徴付けられる。高レベルの抗体及び脱髄の相関関係が確立されている。したがって、患者由来の神経生検に対する病理学的研究は、脱髄及びミエリンラメラの拡大、並びにミエリン上の抗ＭＡＧ  ＩｇＭの沈着を示す。さらに、ＩｇＭ抗体濃度の療法的削減は、神経障害性症状の臨床的改善をもたらす。（A.J. Steckら, Current Opinion in Neurology 2006, 19:p458-463; M.C. Dalakas, Current Treatment Options in Neurology 2010, 12:p71-83）。
【０００３】
ＨＮＫ−１エピトープを含有するミエリン複合糖質として、糖タンパク質ＭＡＧ、タンパク質ゼロ（Ｐ０）、末梢性ミエリンタンパク質−２２（ＰＭＰ２２）、並びに糖脂質スルホグルクロニルパラグロボシド（ＳＧＰＧ）及びスルホグルクロニルラクトサミニルパラグロボシド（ＳＧＬＰＧ）が挙げられる。いくつかの観察は、ＩｇＭ抗体に対する主要な標的としてＭＡＧを示唆しており：（ｉ）ＰＮＳ部位に対する患者の抗体の沈着物はＭＡＧと共局在下にあり、（ｉｉ）ＭＡＧはミエリンから選択的に喪失され、及び（ｉｉｉ）ヒト神経病態及びＭＡＧノックアウトマウスは特徴的類似点を示す（R.H. Quarles, Journal of Neurochemistry 2007, 100:p1431-1448）。
【０００４】
ＭＡＧは、シアル酸結合イムノグロブリン様レクチン（Ｓｉｇｌｅｃｓ）のファミリーに属する。ＭＡＧは、ＣＮＳのオリゴデンドログリア細胞及びＰＮＳのシュワン細胞の軸索周囲の膜に主に位置し、アクソン−グリアインターフェイスにおける接着及びシグナル伝達プロセスに関与している（R.H. Quarles, 2007, loc. cit.）。ＭＡＧは強くグリコシル化されている、すなわち、その分子量の３０％に、異種Ｎ連結しているオリゴ糖が寄与している。ＭＡＧの８つの潜在的Ｎ−グリコシル化部位のすべてが、ＨＮＫ−１エピトープを保持することができる。ＨＮＫ−１エピトープを保持する２つの糖脂質（ＳＧＰＧ、ＳＧＬＰＧ）は、特定の顕著な特徴として３−Ｏ−スルホ−グルクロン酸（ＳＯ３−３ＧｌｃＡ）を含有する（T. Arigaら, J Biol Chem 1987, 262:p848-853）。興味深いことに、ウシの糖タンパク質Ｐ０のＨＮＫ−１エピトープ構造もまたこの特徴的特性を含有する。明らかにされた３つの構造間の類似点は、末端三糖に限定される。結果的に、ＨＮＫ−１エピトープはＳＯ３−３−ＧｌｃＡ（β１−３）Ｇａｌ（β１−４）ＧｌｃＮＡｃ−ＯＨとして定義された。
【０００５】
ＩｇＭ抗体で認識される正確な炭水化物エピトープは不明確なままである。ＳＧＰＧ誘導体を用いた研究では、ＩｇＭ抗体は、カルボキシル及びスルフェート基について異なる重要な意味を付与することが示された。両方の負に帯電した基を含有する「インタクトな」ＳＧＰＧが、抗体結合に対して最適なエピトープとして報告された（A.A. Ilyasら, J Neurochemistry 1990, 55:p594-601）のに対して、他の研究は、抗体認識に対する炭水化物鎖の長さの重要性を強調している。さらに、ＳＯ３−３−ＧｌｃＡ（β１−３）Ｇａｌ二糖エピトープは、結合に対する最低限の必要条件であるようにみえる（A. Tokudaら, J. Carbohydrate Chemistry 1998, 17:p535-546）。
【発明の概要】
【０００６】
本発明は、抗ＭＡＧ  ＩｇＭ抗体と結合する炭水化物リガンド、並びに抗ＭＡＧニューロパシーの診断における、及び抗ＭＡＧニューロパシーの治療のためのこれらの使用に関する。
【０００７】
特に本発明は、式（Ｉ）
0006502374.tif 000002
及び式（ＩＩ）の二糖
0006502374.tif 000003
（式中、Ｚは、置換されていてもよいフェニル、ヘテロアリール、アリールカルボニル、又はヘテロアリールメチルである）に関する。
【０００８】
さらに本発明は、式（Ｉ）及び／又は式（ＩＩ）の多数の置換基（式中、Ｚは、前記置換基をポリマー骨格に連結しているリンカーである）を含む治療上許容されるポリマーに関する。
【０００９】
本発明はまた、これらの化合物を含む薬学的組成物、これらを含有する診断用キット、及び抗ＭＡＧニューロパシーの診断及び療法のためのこれらの化合物の使用に関する。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】競合的結合アッセイの概略的表示である。（ａ）抗ＭＡＧ  ＩｇＭ（患者血清）及びポリマー２５でのＭＡＧ−コーティングしたプレートのインキュベーション。（ｂ）洗浄工程。（ｃ）西洋わさびペルオキシダーゼにカップリングした抗ヒトＩｇＭ抗体とのインキュベーション。（ｄ）洗浄工程。（ｅ）テトラメチルベンジジン（ＴＭＢ）基質の添加。（ｆ）酸性の停止液の添加及び光学密度の測定。
【図２（ａ）−（ｃ）】化合物１、２及び２５に対する結合曲線である。２（ａ）ＭＡＧ−コーティングしたウェルを、化合物１（最大濃度５０ｍＭ）及び４種の患者血清ＭＫ、ＤＰ、ＫＨ及びＳＪ（％ａｂ＝％ＩｇＭ抗体結合対ＭＡＧ）と共にコインキュベートした。２（ｂ）患者血清ＭＫ及びＳＪと一緒に化合物２（最大濃度５０ｍＭ）でのＭＡＧ−コーティングしたウェルのコインキュベーション。２（ｃ）患者血清ＭＫ、ＫＨ及びＳＪとの化合物２５（最大濃度１５μＭ）のコインキュベーション。化合物２５は、最小ＨＮＫ−１エピトープ（１）にカップリングした、定義されたパーセンテージのリジン残基を有するポリリジンポリマーである。使用されている一般的な略語は以下の通り：ＰＬ（ｍｉｎＨＮＫ−１）ｘ（ｘは、エピトープ充填量のパーセンテージ（％）を定義している）。この場合ポリマーはＰＬ（ｍｉｎＨＮＫ−１）４４である。
【図２（ｄ）−（ｅ）】化合物１、２及び２５に対する結合曲線である。２（ｄ）ポリマーＰＬ（ｍｉｎＨＮＫ−１）ｘ（ｘは、１０、２５、３１及び４４％である（最大濃度０．５ｍＭ））との患者血清ＫＨのコインキュベーション。２（ｅ）マウスモノクローナル抗−ＨＮＫ−１  ＩｇＭ抗体、陽性コントロール抗体と、ポリマーＰＬ（ｍｉｎＨＮＫ−１）ｘ（ｘは、１０、２５、３１及び４４％（最大濃度０．５ｍＭ）である）とのコインキュベーション。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
抗ＭＡＧ  ＩｇＭ抗体により依然として確実に認識される最小ＨＮＫ−１炭水化物エピトープは、硫酸化（式Ｉ）及び非硫酸化形態（式ＩＩ）の両方で調製される特定された及び対応する二糖である。
【００１２】
本発明は、式（Ｉ）
0006502374.tif 000004
及び式（ＩＩ）のこれらの二糖
0006502374.tif 000005
（式中、Ｚは、置換されていてもよいフェニル、ヘテロアリール、アリールカルボニル、又はヘテロアリールメチルである）に関する。式（Ｉ）のスルフェート部分は、グルクロン酸の３位に位置する。
【００１３】
さらに本発明は、式（Ｉ）及び／又は式（ＩＩ）の多数の置換基（式中、Ｚは、前記置換基をポリマー骨格に連結しているリンカーである）を含むポリマーに関する。
【００１４】
特に、リンカーＺは、（二官能性）アリール、ヘテロアリール、アリール−低級アルキル、アリールカルボニル、又はヘテロアリールメチルであり、これらのアリール又はヘテロアリールはポリマーに連結している３−２５個の炭素原子を有するアルキレンで置換されており、任意選択的に
（ａ）アルキレンの１個又は複数の炭素原子が、水素原子を保持する窒素で置き換えられており、隣接する炭素原子のうちの１個がオキソで置換されており、アミド官能基−ＮＨ−ＣＯ−を表す；及び／又は
（ｂ）アルキレンの１個若しくは複数の炭素原子が酸素で置き換えられている；
（ｃ）アルキレンの１個若しくは複数の炭素原子が硫黄で置き換えられている；及び／又は
（ｄ１）ポリマーに連結している末端炭素原子がオキソで置換されている；又は
（ｄ２）ポリマーに連結している末端炭素原子が−ＮＨ−で置き換えられている。
【００１５】
式（Ｉ）及び／又は式（ＩＩ）の多数の置換基（式中、Ｚは、前記置換基をポリマー骨格に連結しているリンカーである）を含むポリマーは、好ましくは、α−アミノ酸ポリマー、アクリル酸若しくはメタクリル酸ポリマー若しくはコポリマー、又はＮ−ビニル−２−ピロリドン−ビニルアルコールコポリマーである。
【００１６】
本発明のポリマーの特定の例は、
（Ａ）ポリ−α−アミノ酸であり、このアミノ酸は、例えば、ポリ−リジン、特にポリ−Ｌ−リジン又はポリ−Ｄ−リジンなどの場合のように側鎖アミノアルキル官能基を担持し、このアミノ基は、二官能性リンカーＺの末端カルボニル基に連結している；
（Ｂ）ポリ−α−アミノ酸であり、このアミノ酸は、例えば、ポリ−アスパラギン酸又はポリ−グルタミン酸などの場合のように、側鎖カルボニルアルキル官能基を担持し、カルボニル基（アスパラギン酸及びグルタミン酸中の元のカルボキシ基にそれぞれ対応する）は、二官能性リンカーＺの末端−ＣＨ２−基に連結している；
（Ｃ）ポリ−アクリル酸、ポリ−メタクリル酸又はアクリル酸とメタクリル酸のコポリマーであり、このカルボキシ基は、二官能性リンカーＺの末端アミノ基でアミド化されている；及び
（Ｄ）Ｎ−ビニル−２−ピロリドン及びビニルアルコールのコポリマーであり、このコポリマーのビニルアルコール部分のヒドロキシ基は、二官能性リンカーＺの末端カルボニル基に連結している。
【００１７】
特定の実施態様では、ポリマー（Ａ）は、部分的な式（ＩＩＩ）
0006502374.tif 000006
（式中、
Ｒ１は、リンカーＺに連結しているアミノアルキル置換基であり、Ｚのアルキレン基は、Ｒ１のアミノ基に連結している末端位置においてオキソ基を担持しており、
Ｒ２は、２，３−ジヒドロキシプロピルチオアセチル−アミノアルキルである）を含み、
ここで、このポリマーの中のＲ１及びＲ２をそれぞれ有する２個の括弧でくくられた単位の関係は、二糖充填量の、キャッピングされたアミノ官能基に対する関係を示している。
【００１８】
例えば、Ｒ１は式（ＩＩＩａ）
0006502374.tif 000007
であり、
Ｒ２は式（ＩＩＩｂ）
0006502374.tif 000008
であり、ここで、ｏは１−６の間、好ましくは３又は４であり、ｐは１−６の間、好ましくは２−４の間、特に３であり、ｑは１−６の間、好ましくは１−４の間、特に２である。
【００１９】
ｏが３である場合、置換基Ｒ１は、ポリ−オルニチンの側鎖を表し、ｏが４である場合、置換基Ｒ１は、ポリ−リジンの側鎖を表し、自由原子価で式（Ｉ）又は（ＩＩ）の二糖を保持するリンカーＺに連結しており、Ｒ２は２，３−ジヒドロキシ−プロピルチオアセチル−アミノアルキル、すなわち可溶化された置換基を有するキャッピングされたアミノ官能基である。
【００２０】
ポリ−アミノ酸は、Ｚにより記載されているように、直鎖状、超分岐状又は樹状であることができる。ポリ−リジンに関するKadlecovaら, Biomacromolecules, 2012, 13:p3127-3137は以下の通りである：
0006502374.tif 000009
式（ＩＩＩ）のポリマー（Ａ）を調製するために使用されるポリ−リジンは好ましくは、１５’０００−３００’０００、特に３０’０００−７０’０００の間の分子量を有し、式（Ｉ）及び／又は（ＩＩ）の化合物にリンカーＺを介して、及びキャッピングの２，３−ジヒドロキシプロピルチオアセチル残基とさらに連結しているようなポリマーが好ましい。
【００２１】
特定の実施態様では、ポリマー（Ｂ）は、部分的な式（ＩＩＩ）
0006502374.tif 000010
（式中、
Ｒ１は、リンカーＺに連結しているカルボニルアルキル置換基であり、Ｚのアルキレン基は、Ｒ１のカルボニル基に連結している、末端位置において−ＣＨ２−基を担持しており、
Ｒ２は２，３−ジヒドロキシプロピルチオアセチル−カルボニルアルキルである）を含み、
ここで、このポリマーの中のＲ１及びＲ２をそれぞれ有する２個の括弧でくくられた単位の関係は、二糖充填量の、キャッピングされたカルボニル又はカルボキシ官能基に対する関係を示している。
【００２２】
例えば、Ｒ１は式（ＩＩＩｃ）
0006502374.tif 000011
であり、
Ｒ２は式（ＩＩＩｄ）
0006502374.tif 000012
であり、ここで、ｏは、１−６の間、好ましくは１又は２であり、ｐは１−６の間、好ましくは２−４の間、特に３であり、ｑは１−６の間、好ましくは１−４の間、特に２である。
【００２３】
ｏが１である場合、置換基Ｒ１はポリ−グルタミン酸の側鎖を表し、ｏが２である場合、置換基Ｒ１は、ポリ−アスパラギン酸の側鎖を表し、自由原子価で式（Ｉ）又は（ＩＩ）の二糖を保持するリンカーＺに連結しており、Ｒ２は、２，３−ジヒドロキシ−プロピルチオアセチル−カルボニルアルキル、すなわち可溶化置換基を有するキャッピングされたカルボキシ官能基である。
【００２４】
式（ＩＩＩ）のポリマー（Ｂ）を調製するために使用されるポリ−アスパラギン酸は好ましくは、１５’０００−３００’０００、特に３０’０００−７０’０００の間の分子量を有し、式（Ｉ）及び／又は（ＩＩ）の化合物に連結しているリンカーＺと、及びキャッピングする２，３−ジヒドロキシプロピルチオアルキル残基とさらに反応するようなポリマーが好ましい。
【００２５】
特定の実施態様では、ポリマー（Ｃ）は、部分的な式（ＩＶ）
0006502374.tif 000013
（式中、
Ｒ１はリンカーＺであり、Ｚのアルキレン基は、（ＩＶ）においてカルボニル基に連結している末端位置で−ＮＨ２−基を担持し、
Ｒ２は、２，３−ジヒドロキシプロピルチオアセチルアミノアルキルアミノ又は関連するアミノ置換基であり、
Ｒ３は水素又はメチルである）を含み、
ここで、このポリマーの中のＲ１及びＲ２をそれぞれ有する２個の括弧でくくられた単位の関係は、二糖充填量の、キャッピングされたカルボキシ官能基に対する関係を示している。
【００２６】
例えば、Ｒ１は式（ＩＶａ）
0006502374.tif 000014
であり、
Ｒ２は式（ＩＶｂ）
0006502374.tif 000015
であり、ここで、ｑは１−６の間、好ましくは４−６の間であり、ｒは１−６の間、好ましくは１−４の間、特に２である。
【００２７】
別の実施態様ではＲ１は式（ＩＶｄ）
0006502374.tif 000016
であり、
Ｒ２は式（ＩＶｅ）
0006502374.tif 000017
であり、ここで、ｐは１−１０の間、好ましくは１−４の間、ｑは１−６の間、好ましくは４−６の間であり、ｒは１−６の間、好ましくは１−４の間、特に２である。
【００２８】
別の実施態様ではＲ１は式（ＩＶｆ）
0006502374.tif 000018
であり、ここで、ｒは１−６の間、好ましくは１−４の間、特に２であり、
Ｒ２は式（ＩＶｃ）（上記）である。
【００２９】
式（ＩＶ）のポリマー（Ｃ）を調製するために使用されるポリ−アクリル酸は、好ましくは、３０’０００−４００’０００の間、特に３０’０００−１６０’０００の分子量を有し、式（Ｉ）及び／又は（ＩＩ）の化合物に連結しているリンカーＺと、及びキャッピングする２，３−ジヒドロキシプロピルチオアセチル残基とさらに反応するようなポリマーが好ましい。
【００３０】
特定の実施態様では、ポリマー（Ｄ）は、部分的な式（Ｖ）
0006502374.tif 000019
（式中、
Ｒ１はリンカーＺであり、Ｚのアルキレン基は、（Ｖ）においてヒドロキシル基に連結している末端位置においてアミノカルボニル基を担持し、
Ｒ２は、２，３−ジヒドロキシプロピルチオアセチルアミノアルキルアミノカルボニル又は関連するアミノカルボニル置換基である）を含み、
ここで、このポリマーの中のＲ１及びＲ２をそれぞれ有する２個の括弧でくくられた単位の関係は、二糖充填量の、キャッピングされたヒドロキシ官能基に対する関係を示している。
【００３１】
例えば、Ｒ１は、式（Ｖａ）
0006502374.tif 000020
であり、Ｒ２は、式（Ｖｂ）
0006502374.tif 000021
であり、ここで、ｑは、１−６の間、好ましくは４−６の間であり、ｒは１−６の間、好ましくは１−４の間、特に２である。
【００３２】
別の実施態様ではＲ１は、式（Ｖｃ）
0006502374.tif 000022
であり、Ｒ２は、式（Ｖｄ）
0006502374.tif 000023
であり、ここで、ｐは１−１０の間、好ましくは１−４の間であり、ｑは１−６の間、好ましくは４−６の間であり、ｒは１−６の間、好ましくは１−４の間、特に２である。
【００３３】
別の実施態様ではＲ１は式（Ｖｅ）
0006502374.tif 000024
であり、Ｒ２は式（Ｖｆ）
0006502374.tif 000025
であり、ここで、ｒは１−６の間、好ましくは１−４の間、特に２である。
【００３４】
式（Ｖ）のポリマー（Ｄ）を調製するために使用されるコポリマーは、好ましくは、３０’０００−４００’０００の間、特に３０’０００−１６０’０００の分子量を有し、式（Ｉ）及び／又は（ＩＩ）の化合物に連結しているリンカーＺと、及びキャッピングする２，３−ジヒドロキシプロピルチオアセチル残基とさらに反応するようなポリマーが好ましい。
【００３５】
本明細書で以前に及び本明細書で以後に使用される一般的な用語は、他に指摘されていない限り、好ましくは、本開示の文脈の中で以下の意味を有する：
【００３６】
「低級」という接頭語は、７個まで及び最大数の７個を含めた、特に４個まで及び最大数の４個を含めた、炭素原子を有する基を表し、問題になっている基は、直鎖又は単一若しくは複数の分枝を有する分枝の何れかである。
【００３７】
複数形が化合物、塩などに対して使用されている場合、これはまた、単一の化合物、塩なども意味するものとする。
【００３８】
原則として二重結合は、Ｅ配置又はＺ配置を有することができる。したがって、本発明の化合物は、異性体混合物又は単一の異性体として存在することができる。特定されていない場合、両方の異性体の形態が意図される。
【００３９】
任意の不斉炭素原子は、（Ｒ）−、（Ｓ）−又は（Ｒ，Ｓ）−配置で、好ましくは（Ｒ）−又は（Ｓ）−配置で存在することができる。したがって、化合物は、異性体の混合物として又は純粋な異性体として、好ましくはエナンチオマー−純粋ジアステレオマーとして存在することができる。
【００４０】
アルキル（又はリンカー内では二官能性アルキレン）は、１−２５個、例えば１−１２個、好ましくは１−７個の炭素原子を有し、直鎖又は分枝である。アルキルは、好ましくは低級アルキルである。好ましくは、（二官能性）アルキレンは、３−２５個、好ましくは４−１２個の炭素原子を有する。
【００４１】
低級アルキルは、１−７個、好ましくは１−４炭個の素原子を有し、例えば、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチルなどのブチル、例えば、ｎ−プロピル若しくはイソプロピルなどのプロピル、エチル又はメチルなどである。好ましくは、低級アルキルはメチル又はエチルである。
【００４２】
シクロアルキルは、好ましくは３−７個の環炭素原子を有し、非置換であるか、又は、例えば、低級アルキル若しくは低級アルコキシで置換されていてもよい。シクロアルキルは、例えば、シクロヘキシル、シクロペンチル、メチルシクロペンチル、又はシクロプロピル、特にシクロプロピルである。
【００４３】
アリールは、置換基を任意選択的に保持する、５−１０個の炭素原子を有する単環式若しくは二環式の縮合環芳香族基、例えば、フェニル、１−ナフチル若しくは２−ナフチルなど、又はフェニル基を含む部分的に飽和した二環式縮合環、例えば、インダニル、インドリニル、ジヒドロ−若しくはテトラヒドロナフチル（すべては置換されていてもよい）などを表す。好ましくは、アリールは、フェニル、インダニル、インドリニル又はテトラヒドロナフチル、特にフェニルである。
【００４４】
「置換基を保持するアリール」という用語は、低級アルキル、ハロ−低級アルキル、シクロアルキル−低級アルキル、カルボキシ−低級アルキル、低級アルコキシカルボニル−低級アルキル；アリールアルキル又はヘテロアリールアルキル（ここで、アリール又はヘテロアリールは、非置換であるか、又は低級アルキル、シクロプロピル、ハロ−低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシスルホニル、アミノスルホニル、テトラゾリル、カルボキシ、ハロゲン、アミノ、シアノ及びニトロから選択される３個までの置換基で置換されている）；ヒドロキシ−低級アルキル、低級アルコキシ−低級アルキル、アリールオキシ−低級アルキル、ヘテロアリールオキシ−低級アルキル、アリール−低級アルコキシ−低級アルキル、ヘテロアリール−低級アルコキシ−低級アルキル、低級アルコキシ−低級アルコキシ−低級アルキル；アミノアルキル（ここで、アミノは、非置換であるか、あるいは低級アルキル、ヒドロキシ−低級アルキル、アルコキシ−低級アルキル及びアミノ−低級アルキルから選択される１若しくは２個の置換基で、又は１個の置換基、アルキルカルボニル若しくはメルカプトアルキルカルボニル、アルコキシカルボニル、アミノ−低級アルコキシカルボニル、低級アルコキシ−低級アルコキシカルボニル及びアミノカルボニルで置換されている、あるいは窒素上の２個の置換基が、その窒素と一緒になってヘテロシクリルを形成する）；置換されていてもよいアルケニル、置換されていてもよいアルキニル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、ヒドロキシ、低級アルコキシ、ハロ−低級アルコキシ、低級アルコキシ−低級アルコキシ、シクロアルキル−低級アルコキシ、アリールオキシ、アリール−低級アルコキシ、アリールオキシ−低級アルコキシ、ヘテロアリールオキシ、ヘテロアリール−低級アルコキシ、ヘテロアリールオキシ−低級アルコキシ、置換されていてもよいアルケニルオキシ、置換されていてもよいアルキニルオキシ、シクロアルキルオキシ、ヘテロシクリルオキシ、ヒドロキシスルホニルオキシ；アルキルメルカプト、ヒドロキシスルフィニル、アルキルスルフィニル、ハロ−低級アルキルスルフィニル、ヒドロキシスルホニル、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、ヘテロアリールスルホニル；アミノスルホニル（ここで、アミノは、非置換であるか、又は低級アルキル、シクロアルキル−低級アルキル、ヒドロキシ−低級アルキル、低級アルコキシ−低級アルキル、シクロアルキル、置換されていてもよいフェニル、置換されていてもよいフェニル−低級アルキル、置換されていてもよいヘテロアリール及び置換されていてもよいヘテロアリール−低級アルキルから選択される１若しくは２個の置換基で置換されている、あるいは窒素上の２個の置換基が、その窒素と一緒になってヘテロシクリルを形成する）；低級アルキル、シクロアルキル−低級アルキル、ヒドロキシ−低級アルキル、低級アルコキシ−低級アルキル、ジ−低級アルキルアミノ−低級アルキル、シクロアルキル、置換されていてもよいフェニル−低級アルキル及び置換されていてもよいヘテロアリール−低級アルキルから選択される１若しくは２個の置換基で、又は１個の置換基、置換されていてもよいフェニル、置換されていてもよいヘテロアリール、アルキルカルボニル、置換されていてもよいフェニルカルボニル、置換されていてもよいピリジルカルボニル、アルコキシカルボニル若しくはアミノカルボニルで、置換されていてもよく、アルキル又は低級アルキルは、何れの場合も、ハロゲン、低級アルコキシ、アリール、ヘテロアリール若しくは置換されていてもよいアミノで置換されていてもよく、又は窒素上の２個の置換基が、その窒素と一緒になってヘテロシクリルを形成する、アミノ；得られた置換基が、２０種の天然の標準アミノ酸のうちの１種に対応するようにメチル基において置換されているカルボキシメチルアミノ又は低級アルコキシカルボニルメチルアミノ、得られたアシル基が２０種の天然の標準的アミノ酸のうちの１種に対応するようにメチル基において置換されているアミノメチルカルボニルアミノ；低級アルキルカルボニル、ハロ−低級アルキルカルボニル、置換されていてもよいフェニルカルボニル、置換されていてもよいヘテロアリールカルボニル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、低級アルコキシ−低級アルコキシカルボニル；アミノカルボニル（ここで、アミノは、非置換であるか、又は１個のヒドロキシ若しくはアミノ基、又は低級アルキル、シクロアルキル−低級アルキル、ヒドロキシ−低級アルキル、低級アルコキシ−低級アルキル、シクロアルキル、置換されていてもよいフェニル−低級アルキル及び置換されていてもよいヘテロアリール−低級アルキルから選択される１若しくは２個の置換基で置換されている、あるいは窒素上の２個の置換基が、その窒素と一緒になってヘテロシクリルを形成する）；シアノ、ハロゲン、及びニトロから独立して選択される４個までの置換基で置換されているアリールを表し、互いにオルト位にある２個の置換基は、５、６又は７員の炭素環式環あるいは１、２若しくは３個の酸素原子、１若しくは２個の窒素原子及び／又は１個の硫黄原子（ここで、窒素原子は、低級アルキル、低級アルコキシ−低級アルキル又は低級アルキルカルボニルで置換されていてもよい）を含有する複素環を形成することができる。
【００４５】
特に、置換基は、低級アルキル、ハロ−低級アルキル、ヒドロキシ−低級アルキル、低級アルコキシ−低級アルキル、置換されていてもよいアルケニル、置換されていてもよいアルキニル、シクロヘキシル、シクロプロピル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、ヒドロキシ、低級アルコキシ、ハロ−低級アルコキシ、低級アルコキシ−低級アルコキシ、シクロアルキルオキシ、フェノキシ、ヒドロキシスルホニルオキシ；アルキルメルカプト、ヒドロキシスルフィニル、アルキルスルフィニル、ハロ−低級アルキルスルフィニル、ヒドロキシスルホニル、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、ヘテロアリールスルホニル；アミノスルホニル（ここで、アミノは非置換であるか、又は低級アルキル、シクロアルキル−低級アルキル、ヒドロキシ−低級アルキル、低級アルコキシ−低級アルキル及び置換されていてもよいフェニル−低級アルキルから選択される１若しくは２個の置換基で置換されている、あるいは窒素上の２個の置換基が、その窒素と一緒になってヘテロシクリルを形成する）；低級アルキル、シクロアルキル−低級アルキル、ヒドロキシ−低級アルキル、低級アルコキシ−低級アルキル、ジ−低級アルキルアミノ−低級アルキル、シクロアルキルから選択される１若しくは２個の置換基で、又は１個の置換基、置換されていてもよいフェニル、置換されていてもよいヘテロアリール、アルキルカルボニル、置換されていてもよいフェニルカルボニル、置換されていてもよいピリジルカルボニル、アルコキシカルボニル若しくはアミノカルボニルで、置換されていてもよく、あるいは窒素上の２個の置換基が、その窒素と一緒になってヘテロシクリルを形成する、アミノ；得られた置換基が、２０種の天然の標準アミノ酸のうちの１種に対応するようにメチル基において置換されているカルボキシメチルアミノ又は低級アルコキシカルボニルメチルアミノ、得られたアシル基が２０種の天然の標準アミノ酸のうちの１種に対応するようにメチル基において置換されているアミノメチルカルボニルアミノ；低級アルキルカルボニル、ハロ−低級アルキルカルボニル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、低級アルコキシ−低級アルコキシカルボニル；アミノカルボニル（ここで、アミノは、非置換であるか、又は１個のヒドロキシ若しくはアミノ基、又は低級アルキル、ヒドロキシ−低級アルキル、低級アルコキシ−低級アルキル、置換されていてもよいフェニル−低級アルキル及び置換されていてもよいヘテロアリール−低級アルキルから選択される１若しくは２個の置換基で置換されている、あるいは窒素上の２個の置換基が、その窒素と一緒になってヘテロシクリルを形成する）；シアノ、ハロゲン、及びニトロから独立して選択されてよく、互いにオルト位にある２個の置換基は、１若しくは２個の酸素原子及び／又は１若しくは２個の窒素原子（ここで、この窒素原子は、低級アルキル、低級アルコキシ−低級アルキル若しくは低級アルキルカルボニルで置換されていてもよい）を含有する５又は６員の複素環を形成することができる。
【００４６】
置換されていてもよいフェニルにおいて、置換基は、好ましくは、低級アルキル、ハロ−低級アルキル、低級アルコキシ−低級アルキル、アミノ−低級アルキル、アシルアミノ−低級アルキル、シクロプロピル、ヒドロキシ、低級アルコキシ、ハロ−低級アルコキシ、低級アルコキシ−低級アルコキシ、メチレンジオキシ、ヒドロキシ−スルホニルオキシ、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、ヒドロキシルアミノカルボニル、テトラゾリル、ヒドロキシスルホニル、アミノスルホニル、ハロ、シアノ又はニトロ、特に低級アルコキシ、アミノ−低級アルキル、アシルアミノ−低級アルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、ヒドロキシルアミノカルボニル、テトラゾリル、又はアミノスルホニルである。
【００４７】
ヘテロアリールは、窒素、酸素及び硫黄から選択される少なくとも１個のヘテロ原子を含有する芳香族基を表し、置換基を任意選択的に保持する単環式又は二環式である。単環式ヘテロアリールは、窒素、硫黄及び酸素から選択される１、２、３又は４個のヘテロ原子を含有する５又は６員のヘテロアリール基を含む。二環式のヘテロアリールは、９又は１０員の縮合環ヘテロアリール基を含む。ヘテロアリールの例として、ピロリル、チエニル、フリル、ピラゾリル、イミダゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、オキサジアゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、チアジアゾリル、ピリジル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、及びこのような単環式ヘテロアリール基のベンゾ又はピリダゾ縮合誘導体、例えば、インドリル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾフリル、キノリニル、イソキノリニル、キナゾリニル、ピロロピリジン、イミダゾピリジン、又はプリニルなど（すべては置換されていてもよい）が挙げられる。好ましくは、ヘテロアリールは、ピリジル、ピリミジニル、ピラジニル、ピリダジニル、チエニル、ピラゾリル、イミダゾリル、チアゾリル、オキサジアゾリル、トリアゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、イソチアゾリル、ピロリル、インドリル、ピロロピリジン又はイミダゾピリジン；特にピリジル、ピリミジニル、ピラジニル、ピリダジニル、ピラゾリル、イミダゾリル、チアゾリル、オキサジアゾリル、トリアゾリル、インドリル、ピロロピリジン又はイミダゾピリジンである。
【００４８】
「置換基を保持するヘテロアリール」という用語は、低級アルキル、ハロ−低級アルキル、シクロアルキル−低級アルキル、ヒドロキシ−低級アルキル、低級アルコキシ−低級アルキル、アリールオキシ−低級アルキル、ヘテロアリールオキシ−低級アルキル、低級アルコキシ−低級アルコキシ−低級アルキル；アミノアルキル（ここで、アミノは、非置換であるか、又は低級アルキル、ヒドロキシ−低級アルキル、アルコキシ−低級アルキル、アミノ−低級アルキル、アルキルカルボニル、アルコキシカルボニル、アミノ−低級アルコキシカルボニル、低級アルコキシ−低級アルコキシカルボニル及びアミノカルボニルから選択される１若しくは２個の置換基で置換されている）；置換されていてもよいアルケニル、置換されていてもよいアルキニル、シクロアルキル；アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル又はヘテロアリールアルキル（ここで、アリール又はヘテロアリールは、非置換であるか、又は低級アルキル、ハロ−低級アルキル、低級アルコキシ、ハロゲン、アミノ、シアノ及びニトロから選択される３個までの置換基で置換されている）；ヒドロキシ、低級アルコキシ、ハロ−低級アルコキシ、低級アルコキシ−低級アルコキシ、シクロアルキルオキシ、シクロアルキル−低級アルコキシ、アリールオキシ、アリール−低級アルコキシ、ヘテロアリールオキシ、ヘテロアリール−低級アルコキシ、アルケニルオキシ、アルキニルオキシ、アルキルメルカプト、アルキルスルフィニル、ハロ−低級アルキルスルフィニル、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、ヘテロアリールスルホニル、アミノスルホニル（ここで、アミノは、非置換であるか、又は低級アルキル、シクロアルキル−低級アルキル、ヒドロキシ−低級アルキル、低級アルコキシ−低級アルキル、シクロアルキル、置換されていてもよいフェニル、置換されていてもよいフェニル−低級アルキル、置換されていてもよいヘテロアリール及び置換されていてもよいヘテロアリール−低級アルキルから選択される１若しくは２個の置換基で置換されている、あるいは窒素上の２個の置換基が、その窒素と一緒になってヘテロシクリルを形成する）；低級アルキル、シクロアルキル−低級アルキル、ヒドロキシ−低級アルキル、低級アルコキシ−低級アルキル、ジ−低級アルキルアミノ−低級アルキル、シクロアルキル、置換されていてもよいフェニル、置換されていてもよいフェニル−低級アルキル、置換されていてもよいヘテロアリール、置換されていてもよいヘテロアリール−低級アルキル、アルキルカルボニル、アルコキシカルボニル又はアミノカルボニルから選択される１若しくは２個の置換基で置換されていてもよく、アルキル又は低級アルキルは、何れの場合も、ハロゲン、低級アルコキシ、アリール、ヘテロアリール又は置換されていてもよいアミノで置換されていてもよく、又は窒素上の２個の置換基が、その窒素と一緒になってヘテロシクリルを形成する、アミノ；低級アルキルカルボニル、ハロ−低級アルキルカルボニル、置換されていてもよいフェニルカルボニル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、低級アルコキシ−低級アルコキシカルボニル；アミノカルボニル（ここで、アミノは、非置換であるか、又は１個のヒドロキシ若しくはアミノ基、又は低級アルキル、シクロアルキル−低級アルキル、ヒドロキシ−低級アルキル、低級アルコキシ−低級アルキル、シクロアルキル、置換されていてもよいフェニル、置換されていてもよいフェニル−低級アルキル、置換されていてもよいヘテロアリール及び置換されていてもよいヘテロアリール−低級アルキルから選択される１若しくは２個の置換基で置換されている、あるいは窒素上の２個の置換基が、その窒素と一緒になってヘテロシクリルを形成する）；シアノ、ハロゲン、及びニトロから独立して選択される３個までの置換基で置換されている、ヘテロアリールを表す。
【００４９】
特に、ヘテロアリール上の置換基は、低級アルキル、ハロ−低級アルキル、シクロアルキル−低級アルキル、低級アルコキシ−低級アルキル、低級アルコキシ−低級アルコキシ−低級アルキル、置換されていてもよいアルケニル、置換されていてもよいアルキニル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ヒドロキシ、低級アルコキシ、シクロアルキルオキシ、アルケニルオキシ、アルキニルオキシ、アルキル−メルカプト、アルキルスルフィニル、ハロ−低級アルキルスルフィニル、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、アミノスルホニル（ここで、アミノは、非置換であるか、又は低級アルキル、シクロアルキル−低級アルキル、ヒドロキシ−低級アルキル、低級アルコキシ−低級アルキル、シクロアルキル、置換されていてもよいフェニル、置換されていてもよいフェニル−低級アルキル、置換されていてもよいヘテロアリール及び置換されていてもよいヘテロアリール−低級アルキルから選択される１若しくは２個の置換基で置換されている、あるいは窒素上の２個の置換基が、その窒素と一緒になってヘテロシクリルを形成する）；低級アルキル、シクロアルキル−低級アルキル、ヒドロキシ−低級アルキル、低級アルコキシ−低級アルキル、ジ−低級アルキルアミノ−低級アルキル、シクロアルキル、アルキルカルボニル、アルコキシカルボニル又はアミノカルボニルから選択される１若しくは２個の置換基で置換されていてもよく、アルキル又は低級アルキルは、何れの場合も、低級アルコキシ又は置換されていてもよいアミノで置換されていてもよく、あるいは窒素上の２個の置換基が、その窒素と一緒になってヘテロシクリルを形成する、アミノ；低級アルキル−カルボニル、ハロ−低級アルキルカルボニル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、低級アルコキシ−低級アルコキシカルボニル；アミノカルボニル（ここで、アミノは、非置換であるか、又は１個のヒドロキシ若しくはアミノ基、又は低級アルキル、シクロアルキル−低級アルキル、ヒドロキシ−低級アルキル、低級アルコキシ−低級アルキル若しくはシクロアルキルから選択される１若しくは２個の置換基で置換されている、あるいは窒素上の２個の置換基が、その窒素と一緒になってヘテロシクリルを形成する）；シアノ、ハロゲン、及びニトロから独立して選択されてもよい。
【００５０】
置換されていてもよいヘテロアリールにおいて、置換基は、好ましくは、低級アルキル、ハロ−低級アルキル、低級アルコキシ−低級アルキル、ヒドロキシ、低級アルコキシ、ハロ−低級アルコキシ、低級アルコキシ−低級アルコキシ、メチレンジオキシ、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、ヒドロキシルアミノカルボニル、テトラゾリル、アミノスルホニル、ハロ、シアノ又はニトロである。
【００５１】
アルケニルは、１個又は複数の、例えば２個又は３個の二重結合を含有し、好ましくは、低級アルケニル、例えば、１−若しくは２−ブテニル、１−プロペニル、アリル又はビニルなどである。
【００５２】
アルキニルは、好ましくは低級アルキニル、例えば、プロパルギル又はアセチレニルなどである。
【００５３】
置換されていてもよいアルケニル又はアルキニルにおいて、置換基は、好ましくは、低級アルキル、低級アルコキシ、ハロ、置換されていてもよいアリール又は置換されていてもよいヘテロアリールであり、アルケニル又はアルキニルの飽和若しくは不飽和の炭素原子に連結している。
【００５４】
ヘテロシクリルとは、好ましくは、窒素、酸素及び硫黄から選択される１、２若しくは３個のヘテロ原子を含む４−１０個の原子を含有する飽和、部分的に飽和又は不飽和の、単環式若しくは二環式の環を意味し、これは、特に明記しない限り、炭素又は窒素連結であってもよい（ここで、環窒素原子は、低級アルキル、アミノ−低級アルキル、アリール、アリール−低級アルキル及びアシルから選択される基で置換されていてもよく、環炭素原子は、低級アルキル、アミノ−低級アルキル、アリール、アリール−低級アルキル、ヘテロアリール、低級アルコキシ、ヒドロキシ又はオキソで置換されていてもよい）、又は置換されていてもよいベンゾ環に縮合していてもよい。置換ベンゾに対して考慮される置換基は、置換されていてもよいアリールに対して上述されたものである。ヘテロシクリルの例は、ピロリジニル、オキサゾリジニル、チアゾリジニル、ピペリジニル、モルホリニル、ピペラジニル、ジオキソラニル、テトラヒドロ−フラニル及びテトラヒドロピラニル、並びにこのような単環式ヘテロシクリルの、置換されていてもよいベンゾ縮合誘導体、例えば、インドリニル、ベンゾオキサゾリジニル、ベンゾチアゾリジニル、テトラヒドロキノリニル、及びベンゾジヒドロフリルである。
【００５５】
アシルとは、例えば、アルキルカルボニル、シクロアルキルカルボニル、アリールカルボニル、アリール−低級アルキルカルボニル、又はヘテロアリールカルボニルを意味する。低級アシルは、好ましくは、低級アルキルカルボニル、特にプロピオニル又はアセチルである。
【００５６】
ヒドロキシアルキルは、特にヒドロキシ−低級アルキル、好ましくはヒドロキシメチル、２−ヒドロキシエチル又は２−ヒドロキシ−２−プロピルである。
【００５７】
シアノアルキルは、好ましくはシアノメチル及びシアノエチルを意味する。
【００５８】
ハロアルキルは、好ましくは、フルオロアルキル、特にトリフルオロメチル、３，３，３−トリフルオロエチル又はペンタフルオロエチルである。
【００５９】
ハロゲンは、フッ素、塩素、臭素、又はヨウ素である。
【００６０】
低級アルコキシは、特にメトキシ、エトキシ、イソプロピルオキシ、又はｔｅｒｔ−ブチルオキシである。
【００６１】
アリールアルキルは、本明細書で以前に定義されたようなアリール及びアルキルを含み、例えば、ベンジル、１−フェネチル又は２−フェネチルである。
【００６２】
ヘテロアリールアルキルは、本明細書で以前に定義されたようなヘテロアリール及びアルキルを含み、例えば、２−、３−又は４−ピリジルメチル、１−又は２−ピロリルメチル、１−ピラゾリルメチル、１−イミダゾリルメチル、２−（１−イミダゾリル）エチル又は３−（１−イミダゾリル）プロピルである。
【００６３】
置換アミノにおいて、置換基は、好ましくは、本明細書で以前に置換基として記述されているものである。特に、置換アミノは、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、置換されていてもよいアリールアミノ、置換されていてもよいアリールアルキルアミノ、低級アルキルカルボニルアミノ、ベンゾイルアミノ、ピリジルカルボニルアミノ、低級アルコキシカルボニルアミノ又は置換されていてもよいアミノカルボニルアミノである。
【００６４】
考慮される特定の塩は、スルフェート基及びカルボン酸官能基の水素原子を置き換えるものである。適切なカチオンは、例えば、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム若しくはアンモニウムのカチオン、又は、さらに、例えば、低級アルキル、ヒドロキシ−低級アルキル若しくはヒドロキシ−低級アルコキシ−低級アルキル基を含有する第１級、第２級又は第３級アミンによるプロトン付加によって得られるカチオン、例えば、２−ヒドロキシエチルアンモニウム、２−（２−ヒドロキシ−エトキシ）エチルジメチルアンモニウム、ジエチルアンモニウム、ジ（２−ヒドロキシエチル）アンモニウム、トリメチルアンモニウム、トリエチルアンモニウム、２−ヒドロキシエチルジメチルアンモニウム、又はジ（２−ヒドロキシエチル）メチルアンモニウム、さらに対応して置換されている環状の第２級及び第３級アミンによるプロトン付加によって得られるカチオン、例えば、Ｎ−メチルピロリジニウム、Ｎ−メチルピペリジニウム、Ｎ−メチル−モルホリニウム、Ｎ−２−ヒドロキシエチルピロリジニウム、Ｎ−２−ヒドロキシエチルピペリジニウム、又はＮ−２−ヒドロキシエチルモルホリニウムなどである。
【００６５】
遊離形態の新規の化合物と、これらの塩の形態のもの、例えば、新規の化合物の精製若しくは識別において中間体として使用することができるこれらの塩を含めたものなどとの間の密接な関係を考慮すると、本明細書で以前の及び本明細書で以後の遊離化合物についての任意の言及は、対応する塩も指し、適当及び適切な場合には、逆もまた同様であることを理解されたい。
【００６６】
好ましくは、Ｚは、非置換であるか、又は置換されたフェニルである。
【００６７】
特に、本発明は、式（Ｉ）又は（ＩＩ）の化合物（式中、Ｚは置換されていてもよいフェニルである）を指す。
【００６８】
記述されているアリール基、例えばフェニルの意味を有するＺに対して考慮される好ましい置換基は、低級アルキル、ハロ−低級アルキル、ヒドロキシ−低級アルキル、低級アルコキシ−低級アルキル、アミノ−低級アルキル、低級アルカンカルボニルアミノ−低級アルキル、メルカプト−低級アルカン−カルボニルアミノ−低級アルキル、置換されていてもよいアルケニル、置換されていてもよいアルキニル、シクロヘキシル、シクロプロピル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、ヒドロキシ、低級アルコキシ、ハロ−低級アルコキシ、低級アルコキシ−低級アルコキシ、シクロアルキルオキシ、ヒドロキシスルホニルオキシ；メルカプト、アルキルメルカプト、ヒドロキシスルフィニル、アルキルスルフィニル、ハロ−低級アルキルスルフィニル、ヒドロキシスルホニル、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、ヘテロアリールスルホニル、アミノスルホニル（ここで、アミノは、非置換であるか、又は低級アルキル、シクロアルキル−低級アルキル、ヒドロキシ−低級アルキル、低級アルコキシ−低級アルキル、置換されていてもよいフェニル−低級アルキル及び置換されていてもよいヘテロアリール−低級アルキルから選択される１若しくは２個の置換基で置換されている、あるいは窒素上の２個の置換基が、その窒素と一緒になってヘテロシクリルを形成する）；低級アルキル、シクロアルキル−低級アルキル、ヒドロキシ−低級アルキル、低級アルコキシ−低級アルキル及びジ−低級アルキルアミノ−低級アルキルから選択される１若しくは２個の置換基で、又は１個の置換基、シクロアルキル、置換されていてもよいフェニル、置換されていてもよいヘテロアリール、アルキルカルボニル、置換されていてもよいフェニルカルボニル、置換されていてもよいピリジルカルボニル、アルコキシカルボニル又はアミノカルボニルで、置換されていてもよく、あるいは窒素上の２個の置換基が、その窒素と一緒になってヘテロシクリルを形成する、アミノ；得られた置換基が２０種の天然の標準アミノ酸のうちの１種に対応するようにメチル基において置換されているカルボキシメチルアミノ又は低級アルコキシカルボニル−メチルアミノ、得られたアシル基が、２０種の天然の標準アミノ酸のうちの１種に対応するようにメチル基において置換されているアミノメチル−カルボニルアミノ；低級アルキルカルボニル、ハロ−低級アルキルカルボニル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、低級アルコキシ−低級アルコキシカルボニル；アミノカルボニル（ここで、アミノは、非置換であるか、又は１個のヒドロキシ若しくはアミノ基で、又は低級アルキル、ヒドロキシ−低級アルキル、低級アルコキシ−低級アルキル、置換されていてもよいフェニル−低級アルキル及び置換されていてもよいヘテロアリール−低級アルキルから選択される１若しくは２個の置換基で置換されている、あるいは窒素上の２個の置換基が、その窒素と一緒になってヘテロシクリルを形成する）；シアノ、ハロゲン、及びニトロであり、互いにオルト位にある２個の置換基は、１若しくは２個の酸素原子及び／又は１若しくは２個の窒素原子（ここで、窒素原子は、低級アルキル、低級アルコキシ−低級アルキル又は低級アルキルカルボニルで置換されていてもよい）を含有する５又は６員の複素環を形成することができる。
【００６９】
特に好ましいＺは、ｐ−メトキシフェニル、４−（２−アミノエチル）フェニル又は４−（２−（４−メルカプト−ブタノイルアミノ）エチル）フェニルである。
【００７０】
式（Ｉ）及び／又は式（ＩＩ）の多数の置換基を含むポリマーにおいて、特定のリンカーＺは（二官能性）アリール、ヘテロアリール、アリール−低級アルキル、アリールカルボニル、又はヘテロアリールメチルであり、ここで、アリール又はヘテロアリールは、Ｃ＝Ｏ官能基においてアミノアルキル側鎖でポリマーに連結している−（ＣＨ２）２ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）（ＣＨ２）３Ｓ−ＣＨ２−（Ｃ＝Ｏ）−で置換されている。
【００７１】
より具体的にはリンカーＺは、Ｃ＝Ｏ官能基においてアミノアルキル側鎖でポリマーに連結している−（ＣＨ２）２ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）（ＣＨ２）３Ｓ−ＣＨ２−（Ｃ＝Ｏ）−で置換されたフェニルである。
【００７２】
式（Ｉ）及び／又は式（ＩＩ）の多数の置換基を含むポリマーの中で好ましいポリマーは、ポリリジン、特にポリ−Ｌ−リジンである。
【００７３】
好ましくは、ポリリジンの分子量は、１’０００−３００’０００ｋＤ、好ましくは１０’０００−１００’０００ｋＤである。特に好ましいのは、約５０’０００ｋＤ、１２５’０００ｋＤ又は２００’０００ｋＤの分子量である。最も好ましいのは、約５０’０００ｋＤの分子量である。
【００７４】
特に本発明は、式（Ｉ）及び／又は（ＩＩ）の二糖を有するポリマー骨格の相対的充填量が１０−８０％であるようなポリマーに関し、これは、ポリマー中のすべてのリジン側鎖の１０−８０％が二糖を保持するリンカーに連結／反応し、残りのアミノ官能基がキャッピングされることを意味する。好ましくは、ポリマーの充填量は、３０−６０％、より好ましくは４０−５０％である。
【００７５】
特定の実施態様では、末端スルフヒドリル官能基を有するリンカーを保持する硫酸化した最小ＨＮＫ−１エピトープ２２を合成し、活性化した（クロロアセチル化）リジンポリマー２４と準化学量論的量で反応させた。炭水化物充填量（４０％）は１Ｈ  ＮＭＲで判定した。開始ポリマー２３は平均分子量（ＭＷ）５０ｋＤを有していたのに対して、４０％の最小ＨＮＫ−１エピトープ充填量を有する最終ポリマー（２５）は、計算した平均ＭＷが１２３ｋＤであった。
【００７６】
合成した炭水化物モノマー（１及び２）及びポリマー２５を、抗ＭＡＧニューロパシーの診断のため、及び病院でのセラピーコントロールのために適用される、確立されたＥＬＩＳＡアッセイ（Ｂｕｈｌｍａｎｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、Ｓｃｈｏｎｅｎｂｕｃｈ、Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）において試験した。このアッセイは、抗ＭＡＧ  ＩｇＭ自己抗体の血清中濃度を判定するために使用される。このアッセイは競合的結合アッセイに改変されたものであった。抗ＭＡＧ  ＩｇＭ抗体を含有する合成された化合物及び血清サンプルは、ヒト脳から精製されたＭＡＧでコーティングした９６ウェルプレートに付与する。固定化したＭＡＧ及び合成された化合物は、抗ＭＡＧ  ＩｇＭ抗体への結合に対して競合する。洗浄工程の後、ＭＡＧ−結合しているＩｇＭ抗体は、西洋わさびペルオキシダーゼ標識した抗体を用いて検出し、これに続いて比色反応を行う。化合物の、ＭＡＧとの成功的競合は、化合物がＩｇＭ抗体の結合部位を遮断し、これらがＭＡＧに結合するのを阻止するので、ＯＤ４５０ｎｍ（光学密度）の測定の低下をもたらす。アッセイの原理は図１に示されている。化合物の評価のため、報告された抗ＭＡＧ  ＩｇＭ抗体力価が高い、異なる患者（ＭＫ、ＤＰ、ＫＨ、ＳＪ）からの４種の血清を選択した。ＩｇＭ抗体濃度を、予備的実験において各血清に対して判定した。測定されたＯＤ４５０ｎｍ値が約１．０である血清希釈をアッセイに対して選択し、抗体濃度依存性である測定されたＩＣ５０値（最大半量の阻害濃度）を比較することができる。血清希釈：ＤＰ１：２’５００、ＫＨ１：３’０００、ＳＪ１：７’５００、ＭＫ１：２３’０００。陰性コントロール（希釈１：１０００）としての役目を果たしたこれらの２種の血清は、ＭＡＧへの結合を示さなかった。
【００７７】
すべての血清に対して、化合物１のＩＣ５０値を判定した。１に対して最大の抗体親和性を有する血清ＭＫに対して及び１に対して最も低い抗体親和性を有する血清ＳＪに対して化合物２のＩＣ５０値を判定した。結果が以下の表に示されている。このアッセイを４回繰り返した。各血清に対して得た結合曲線から、３つの最も良くフィットしたものを選択し、ＩＣ５０計算に対して標準化した。結合曲線が図２に示されている。２の最大濃度（５０ｍＭ）でさえも、抗体結合の阻害は１００％ではなかったので、化合物２の曲線を作るために、０％抗体結合である、５００ｍＭでの人為的に高濃度なポイントを追加した。したがって、化合物２に対するＩＣ５０値は概算値と考えられるが、ただし、これらの値は高濃度ポイントの追加によってもほんのわずかしか変化しなかった。同じアッセイ条件下で、血清ＫＨ、ＭＫ及びＳＪを用いて炭水化物ポリマーを試験した。測定を少なくとも３回繰り返した。各血清に対して最も良くフィットした３つの曲線をＩＣ５０計算のために選択した。標準化していない結合曲線が図２に示されている。
【００７８】
表: 4種の患者血清に対する化合物1、2及び最小HNK-1ポリマー(25)のIC50値(標準偏差を含む)。
0006502374.tif 000026
【００７９】
１及び２の生物学的評価からのデータは、各血清のＩｇＭ抗体の合成した二糖に対する異なる親和性を明確に示している。二糖１は、スルフェート部分を欠く二糖２と比較した場合、ＩｇＭ抗体に対して優れた結合親和性を示す。スルフェート基は、抗体結合のための合成した最小ＨＮＫ−１エピトープに必要不可欠であるようにみえる。それにもかかわらず、これは、すべての血清にとって同等に重要ではない。血清ＭＫは、非硫酸化二糖への約２３０倍弱い結合を有するスルフェートに対する高い要求を示した。その一方で血清ＳＪは、非硫酸化二糖に対してほんの１２．６倍だけ低い結合親和性を示した。ＧｌｃＡのカルボキシル基は、この血清に対してより重要であるようにみえる。
【００８０】
すべてのＩｇＭ抗体に対して、スルフェート部分は、μＭ領域での結合に必要とされる。驚いたことに、硫酸化した最小ＨＮＫ−１エピトープは、μＭ濃度の領域でＭＡＧへの抗体結合を阻害することが可能である。これは、ＨＮＫ−１エピトープの第３糖（ＧｌｃＮＡｃ）を模倣しているかのように、二糖の末端芳香族部分が結合に関与している可能性を示唆している。芳香族環は、カチオン−Π相互作用又はΠ−Πスタッキングの対象となることができた。
【００８１】
抗ＭＡＧニューロパシー患者における抗ＭＡＧ自己抗体とニューロパシー発症の偶発的な関係は現在広く一般に認められている（M.C. Dalakas, Current Treatment Options in Neurology 2010, 12:p71-83）。これらの抗体に対する抗原性決定因子は、ＨＮＫ−１炭水化物エピトープ、三糖ＳＯ４−３−ＧｌｃＡ（β１−３）Ｇａｌ（β１−４）ＧｌｃＮＡｃ−ＯＨであり、これもまたＨＮＫ−１抗体により認識される。
【００８２】
本発明によると、ＩｇＭ抗体結合部位を遮断する炭水化物リガンドは、ＭＡＧ及び他のミエリンターゲットへの抗体結合を阻止することが示されている。
【００８３】
式（Ｉ）及び（ＩＩ）の二糖リガンド、最小ＨＮＫ−１炭水化物エピトープは、より大きな炭水化物よりも調製がずっと簡単であるが、これらはＩｇＭ抗体への親和性を保持し、診断目的及び治療目的に対して有用であることが示されている。
【００８４】
物質１及び２に関係した化合物は最新技術において公知であるが、このようなアクリル酸アグリコンを含有する化合物は公知ではない。芳香族残基Ｚは、抗ＭＡＧ  ＩｇＭ抗体への結合プロセスに参加し、したがって、アクリル酸アグリコンを有する（Ｉ）及び／又は（ＩＩ）などの化合物にかなりの利益を与える。
【００８５】
硫酸化構造（Ｉ）の場合、五糖のエチルアミン置換誘導体が公開されている（A.V. Kornilov, Carbohydrate Research 2000, 329:p717-730）。構造（ＩＩ）の場合、非置換誘導体（Ｒ＝Ｈ）及び共通のアルキル残基を有する誘導体が公開されている。本発明で特許請求されているアリール置換、例えば、パラ−メトキシフェニルなどに加えて、このエピトープを適切なポリマー上の複数のコピーで提示する手法は新規である。
【００８６】
自然の炭水化物はこれらの結合パートナーに対して低い結合親和性を一般的に示す。生体系では、十分な親和性は、多くの場合、炭水化物の多価提示、並びに炭水化物結合タンパク質の炭水化物を認識するドメイン（ＣＲＤ）のオリゴ価提示（B. Ernst及び J. L. Magnani, Nature Reviews Drug Discovery 2009, 8:p661-677）により達成される。ＭＡＧへのＩｇＭ抗体の結合の場合もまたそうである：ＭＡＧは、その細胞外ドメインに８個までのＨＮＫ−１エピトープを提示する。
【００８７】
特に好ましい実施態様では、本発明は、式（Ｉ）及び／又は式（ＩＩ）の多数の置換基（ここで、ポリマーはポリ−Ｌ−リジンであり、Ｚは前記置換基をポリマー骨格に連結している二官能性リンカーである）を含むポリマーに関する。
【００８８】
ポリ−Ｌ−リジンは生分解性であり、したがって、治療用途に対して適切である。例示された最小ＨＮＫ−１ポリマーは、病原性ＩｇＭ抗体に対して結合親和性における大規模な増加を示す。現在低いｎＭ領域にある阻害活性は、モノマーと比較して少なくとも３４’０００倍は増加する（血清ＫＨ）。血清ＭＫ及びＳＪに対して得られた親和性の増加は約５０’０００倍であった（上記の表を参照されたい）。これらの知見は、抗原−抗体相互作用の多価の性質を明確に示している。
【００８９】
例示された最小ＨＮＫ−１ポリマーは、抗ＭＡＧ  ＩｇＭ抗体の検出のために診断用ＥＬＩＳＡアッセイにおいて現在使用されている精製されたヒト脳ＭＡＧに対する置換抗原としての機能を果たしている。
【００９０】
本発明の化合物は、価値のある薬理学的な特性を有する。本発明はまた、医薬としての使用に対して本明細書で前に定義されたような化合物にも関する。本発明による化合物は、特に抗ＭＡＧニューロパシーに対する予防効果及び治療効果を示す。
【００９１】
式（Ｉ）若しくは（ＩＩ）の化合物、又はこれらを含むポリマーは、単独で又は１種若しくは複数の他の治療剤と組み合わせて投与することができ、可能な組合せ療法は、固定の組合せの形態を取るか、又は本発明の化合物及び１種又は複数の他の治療剤の投与が互いに変更され（staggered）、若しくは互いに独立して付与されるか、又は固定の組合せ及び１種若しくは複数の他の治療剤が併用投与される。
【００９２】
可能な組合せのための治療剤は特に免疫抑制剤である。例は、プリン類似体、例えば、フルダラビン及び／又はクラドリビン、さらにキメラのモノクローナル抗体リツキシマブなどである（A.J. Steckら, Current Opinion in Neurology 2006, 19:p458-463）。
【００９３】
別の特定の実施態様では、本発明は、抗ＭＡＧニューロパシーに対する診断用アッセイにおける本発明の化合物の使用に関する。特に、本発明は、上で定義された通りである式（Ｉ）又は（ＩＩ）の化合物、さらにこのような化合物を置換基として含む本発明のポリマーを含むキットに関する。
【００９４】
本発明は、ＭＡＧに対するＩｇＭのレベルが、体液サンプル、例えば、血清中で判定され、高いレベルが抗ＭＡＧニューロパシーの発症及び重症度の指標である、抗ＭＡＧニューロパシーの診断の方法に関する。
【００９５】
ＭＡＧに対するＩｇＭの判定に対して有用な血清以外の他の体液は、例えば、全血、脳脊髄液又は固体組織からの抽出物である。
【００９６】
任意の公知の方法を、体液中での、ＭＡＧに対するＩｇＭのレベルの判定のために使用することができる。考えられる方法は、例えば、ＥＬＩＳＡ、ＲＩＡ、ＥＩＡ、又はマイクロアレイ解析である。
【００９７】
ヒト体液、例えば、血清中での、ＭＡＧに対するＩｇＭの判定のために好ましい方法はＥＬＩＳＡである。このような実施態様では、マイクロタイタープレートは、式（Ｉ）若しくは（ＩＩ）の化合物、又は好ましくはこのような化合物を置換基として含む本発明のポリマーでコーティングする。次いで、プレートをブロックし、サンプル又は標準液を充填する。インキュベーション後、抗−ＩｇＭ抗体、例えば、適切なラベル、例えば、発色性検出のための酵素を直接コンジュゲートした抗−ＩｇＭ抗体を適用する。代わりに、ポリクローナルウサギ（又はマウス）抗−ＩｇＭ抗体を加える。次いで、特定の型の抗−ＩｇＭ抗体、例えば、適切なラベル、例えば、上記のような発色性検出用酵素をコンジュゲートした抗−ウサギ（又は抗−マウス）抗体を検出する二次抗体を加える。最終的に、プレートは、ＭＡＧに対するＩｇＭの存在及び量に対する尺度であるラベルを検出及び定量化するために、ラベルに対する基質で発色させられる。ラベルが発色性検出用酵素である場合、基質は、コンジュゲートされた酵素の色生成基質である。次いで、マイクロプレートリーダーで発色反応を検出し、標準と比較する。
【００９８】
抗体断片を使用することもまた可能である。適切なラベルは、発色性ラベル、すなわち、基質を、検出可能な有色化合物若しくは蛍光化合物に変換するために使用することができる酵素、分光分析ラベル、例えば蛍光性ラベル若しくは目視可能な色を提示するラベル、ラベルに対して特異的なさらなる化合物により発色させることができ、簡単な検出及び定量化を可能にする親和性ラベル、又は標準的なＥＬＩＳＡに使用される任意の他のラベルである。
【００９９】
ＭＡＧ検出のためのＩｇＭの他の好ましい方法は、ラジオイムノアッセイ若しくは競合性イムノアッセイ及び自動化された商業ベースの分析用ロボット上での化学発光検出である。マイクロ粒子増強蛍光、蛍光偏光法、又は質量分析法もまた使用することができる。検出装置、例えばマイクロアレイなどはＭＡＧに対するＩｇＭのための読み取りシステムとして有用なコンポーネントである。
【０１００】
さらなる実施態様では、本発明は、式（Ｉ）若しくは（ＩＩ）の化合物、又はこのような化合物を置換基として含むポリマーを含む、上に記載されているようなアッセイ、特にＥＬＩＳＡに対して適切なキットに関する。キットは、適切なラベルを保持する抗−ＩｇＭ抗体（又は抗−ＩｇＭ抗体断片）、又はこのような適切なラベルを保持する抗−ＩｇＭ抗体及び第２の抗体、並びにラベルを検出する試薬又は装置、例えば、ラベルとして使用される酵素に反応し、色の形成又は蛍光によりこのようなラベルの存在を示す試薬、標準的装置、例えば、マイクロタイタープレート、ピペットなど、標準液並びに洗浄液をさらに含有する。
【０１０１】
ＥＬＩＳＡはまた、患者血液若しくは血清サンプルを、マイクロタイタープレートをコーティングするために使用し、その後、式（Ｉ）若しくは（ＩＩ）の標識された化合物、又はこのような化合物を置換基として含む標識されたポリマーで、抗ＭＡＧ抗体が検出されるように設計することもできる。ラベルは、抗体を介して直接検出可能であるか、又は間接的に検出可能である。
【０１０２】
本発明の式（Ｉ）又は（ＩＩ）の化合物を保持するポリマーは、病原性抗ＭＡＧ  ＩｇＭ抗体に結合し、抗ＭＡＧ  ＩｇＭ抗体の産生を潜在的にダウンレギュレートする。これは抗ＭＡＧニューロパシー患者に対する抗原−特異的な治療を可能にする。
【０１０３】
さらに本発明は、式（Ｉ）若しくは（ＩＩ）の化合物、又は本発明の式（Ｉ）若しくは（ＩＩ）の化合物を保持するポリマーを含む薬学的組成物に関する。
【０１０４】
温血動物、特にヒトへの非経口投与、例えば、皮下、静注用、肝臓内又は筋肉内投与などのための薬学的組成物が考慮される。組成物は、活性成分（複数可）を単独で、又は、好ましくは、薬学的に許容される担体と一緒に含む。活性成分（複数可）の用量は、患者の年齢、体重、及び個体の条件、個体の薬物動態学的データ、及び投与モードに依存する。
【０１０５】
非経口投与に対しては、本発明の炭水化物ポリマーの懸濁液又は分散液、特に、例えば、使用直前に作製することができる、等張性の水性分散液又は懸濁液を使用するのが好ましい。薬学的組成物は、無菌化することができ、及び／又は賦形剤、例えば保存剤、安定剤、湿潤剤及び／又は乳化剤、可溶化剤、増粘剤、浸透圧調節用の塩及び／又は緩衝液を含んでもよく、それ自体公知である、例えば、従来の溶解法及び凍結乾燥法の手段による方式で調製する。
【０１０６】
経腸投与、例えば、鼻腔用、頬側口腔、直腸又は経口投与などに対して適切な担体は、特にフィラー、例えば、糖、例えばラクトース、サッカロース、マンニトール若しくはソルビトール、セルロース調製物など、及び／又はリン酸カルシウム、例えばリン酸三カルシウム若しくはリン酸水素カルシウム、さらに結合剤、例えば、デンプン、例えばコーン、小麦、米若しくはジャガイモデンプン、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、及び／又はポリビニルピロリドン、並びに／あるいは、所望する場合、崩壊剤、例えば、上述されたデンプン、またカルボキシメチルデンプン、架橋ポリビニルピロリドン、アルギン酸若しくはその塩、例えば、アルギン酸ナトリウムなどである。さらなる賦形剤は、特にフローコンディショナー及び滑沢剤、例えば、ケイ酸、タルク、ステアリン酸若しくはその塩、例えば、ステアリン酸マグネシウム若しくはステアリン酸カルシウムなど、及び／又はポリエチレングリコール、若しくはその誘導体である。
【０１０７】
錠剤コアは、適切な、任意選択的に腸溶の、中でも、濃縮した糖溶液（アラビアガム、タルク、ポリビニル−ピロリドン、ポリエチレングリコール及び／若しくは二酸化チタンを含んでもよい）の使用を介したコーティング、又は適切な有機溶媒若しくは溶媒混合物中のコーティング溶液の使用を介したコーティング、あるいは、腸溶コーティングの調製のための、適切なセルロース調製物の溶液、例えば、フタル酸アセチルセルロース若しくはヒドロキシプロピル−メチルセルロースフタレートなどと共に提供することができる。色素又は顔料は、錠剤又は錠剤コーティングに、例えば、識別目的のため又は活性成分（複数可）の異なる投与量を示すために加えることもできる。
【０１０８】
経口投与のための薬学的組成物としてまた、ゼラチンからなる硬質カプセル剤、さらにゼラチン及び可塑剤、例えば、グリセロール又はソルビトールなどからなる軟質の、密閉カプセル剤も挙げられる。硬質カプセルは、例えば、トウモロコシデンプンなどのフィラー、結合剤、及び／又は、タルク若しくはステアリン酸マグネシウムなどの流動促進剤、及び任意選択的に安定剤、と混合した粒剤の形態で活性成分を含有することができる。軟質カプセル剤では、活性成分は好ましくは、適切な液体賦形剤、例えば、脂肪油、パラフィン油状物質又は液体ポリエチレングリコール又はエチレン若しくはプロピレングリコールの脂肪酸エステル中に溶解又は懸濁されており、これに、安定剤及び洗剤、例えば、ポリオキシ−エチレンソルビタン脂肪酸エステルタイプのものを加えてもよい。
【０１０９】
直腸投与に対して適切な薬学的組成物は、例えば、活性成分と坐剤基剤の組合せからなる坐剤である。適切な坐剤基剤は、例えば、自然若しくは合成のトリグリセリド、パラフィン炭化水素、ポリエチレングリコール又はより高級アルカノールである。
【０１１０】
記述されている本発明による薬学的組成物は、別々の錠剤、粒剤又は他の形態の、経口的に許容される、活性成分の製剤を含有してもよいし、又は上に記載されているような１つの適切な薬学的剤形に活性成分の混合物を含有してもよい。特に、別々の経口的に許容される製剤又は１つの適切な薬学的剤形中の混合物は、遅速放出及び制御放出性の薬学的組成物であってよい。
【０１１１】
薬学的組成物は、約１％−約９５％活性成分又は活性成分の混合物を含み、単回用量投与形態は、好ましい実施態様では、約２０％−約９０％の活性成分（複数可）を含み、単回用量タイプではない形態は、好ましい実施態様では、約５％−約２０％の活性成分（複数可）を含む。
【０１１２】
本発明はまた、抗ＭＡＧニューロパシーの治療における医薬としての記述されている薬学的組成物に関する。
【０１１３】
本発明は、抗ＭＡＧニューロパシーの治療の方法であって、このような治療を必要とする温血動物に対して、前記疾患に対して有効な量で本発明による組成物を投与することを含む方法にさらに関する。薬学的組成物は、このような治療を必要とする温血動物、例えば、ヒトに対して、予防的又は治療的に、好ましくは、前記疾患に対して有効な量を投与することができる。体重約７０ｋｇの個体の場合、投与される１日用量は、本発明の組成物中の約０．０１ｇ−約５ｇ、好ましくは約０．２５ｇ−約１．５ｇの活性成分である。
【０１１４】
以下の実施例は、本発明を制限することなく、その範囲内で本発明を例示する役目がある。
【実施例】
【０１１５】
一般的な方法
ＮＭＲスペクトルは、Ｂｒｕｋｅｒ  Ａｖａｎｃｅ  ＤＭＸ−５００（５００ＭＨｚ）分光器において得た。２Ｄ方法を使用して、１Ｈ及び１３Ｃ  ＮＭＲスペクトルの帰属が達成された（ＣＯＳＹ及びＨＳＱＣ）。化学シフトは、残存するＣＨＣｌ３、ＣＨＤ２ＯＤ又はＨＤＯを基準として使用して、ｐｐｍで表現する。旋光度は、Ｐｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒ旋光計３４１で測定した。Ｐｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒ  Ｓｐｅｃｔｒｕｍ  Ｏｎｅ  ＦＴ−ＩＲ分光器を使用してＩＲスペクトルを記録した。エレクトロスプレーイオン化質量スペクトル（ＥＳＩ−ＭＳ）は、Ｗａｔｅｒｓ  Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ  ＺＱで得た。フォトダイオードアレイ検出器を備えたＡｇｉｌｅｎｔ  １１００ＬＣ及び４ＧＨｚデジタル−タイムコンバーターを備えたＭｉｃｒｏｍａｓｓ  ＱＴＯＦ  Ｉを使用してＨＲＭＳ分析を行った。シリカゲル６０  Ｆ２５４（Ｍｅｒｃｋ）をコーティングしたガラスプレートを使用し、紫外光を使用することによって、及び／又はｍｏｓｔａｉｎ（アンモニウム硫酸セリウム二水和物及びモリブデン酸アンモニウム四水化物のａｑ１０％Ｈ２ＳＯ４中０．０２Ｍ溶液）での炭化により視覚化されたＴＬＣで反応をモニターした。カラムクロマトグラフィーをシリカゲル（Ｆｌｕｋａ  Ｃ６０  ４０／６０）又はＲＰ−１８（Ｍｅｒｃｋ  ＬｉＣｈｒｏｐｒｅｐ（登録商標）ＲＰ−１８  ４０／６０）上で実施した。ナトリウムメトキシドとの還流及び蒸留によりメタノール（ＭｅＯＨ）を乾燥させた。ピリジンを活性化したモレキュラーシーブ（４Å）上で乾燥させた。ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）をＡｃｒｏｓ（９９．８％、エクストラドライ、モレキュラーシーブ上）から購入した。Ａｌ２Ｏ３上でのろ過により（Ｆｌｕｋａ、タイプ５０１６Ａベーシック）、ジクロロメタン（ＤＣＭ）、トルエン及びヘキサンを乾燥させた。使用直前に、モレキュラーシーブ（４Å）を真空下、５００℃で１時間活性化した。Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ  Ｃｅｎｔｒｉｆｕｇｅ  ５８０４  Ｒを用いて遠心分離を行った。ｒｔ＝室温。
【０１１６】
生物学的評価（１、２及び２５）のために３種の化合物をスキーム１及び２に従い合成した。すべての試薬はＳＩＧＭＡ  Ａｌｄｒｉｃｈ又はＡｃｒｏｓから購入した。活性化したＧｌｃＡドナー３を反応させることによって、ＧｌｃＡ−Ｇａｌ二糖５（C. Coutant及びJ.-C. Jacquinet, J Chem Soc Perkin Trans I, 1995, p1573-1581）及びプロモーターとしてのトリメチルシリルトリフルオロメタンスルホネート（ＴＭＳＯＴｆ）で選択的に保護されたＧａｌアクセプター４（F. Belotら, Synlett 2003, p1315-1318）を得た。テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）／水（Ｈ２Ｏ）中のＬｉＯＨでのエステル基の脱保護により６を生成した。二糖２を触媒水素化で得た。３’−非保護の二糖７をＡ．Ｖ．Ｋｏｒｎｉｌｏｖ(Carbohydrate Research 2000, 329:p717-730）により公開されたラクトン化／メタノリシスの手順を介して合成した。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）中スルフェート−ピリジン複合体（ＳＯ３・Ｐｙ）を用いたその後の硫酸化により３−Ｏ−硫酸化二糖８（６５％）を得た。触媒水素化による最終的な脱保護、これに続く加水分解及びＮａ＋カチオン交換樹脂を用いた処理により所望の硫酸化二糖１を生成した。
【０１１７】
炭水化物ポリマー２５の合成のため、硫酸化モノマー２１を調製した（スキーム１）。これは、１の中に存在するパラ−メトキシフェニルの代わりに４−（２−アミノエチル）フェニルアグリコンを含有する。ポリリジンポリマーとのカップリングのためさらなる第１級アミノ基が必要とされた。その合成のため、４−（２−アジドエチル）フェノール（９）をトリクロロアセトイミデートドナー１０でガラクトシル化した（R. Burkowskiら, Eur J Org Chem 2001, p2697-2705)。アミン−アジド相互変換でアクセプター９をチロシンから得た（A. Titzら, Tet. Letters 2006, 47:p2383-2385）。Ｚｅｍｐｅｎ条件下での脱アセチル化（１２を得る）、これに続く３，４−イソプロピリデン誘導体１３の形成、ジベンジル化（結果として１４を生じる）、アセトニドの酸触媒による切断（１５を得る）及びモノベンゾイル化によりガラクトシド１６を生成した。モノ硫酸化した二糖２１に対する残りの工程には、５０％水性のＮａＯＨ／ＤＣＭ及び１８−クラウン−６エーテルを使用して相間移動触媒作用下で行ったベンジル化を除いては、二糖１の合成に対してすでに適用されたものと類似の反応順序を適用した。次いで、２１の遊離のアミノ基をＤＭＦ中でチオブチロラクトン及びトリエチルアミン（ＴＥＡ）と反応させることによって、収率５９％で化合物２２を得、ポリリジンポリマーへのカップリングの準備が整った。
【０１１８】
この目的のために、商業ベースのポリリジンポリマー２３をアシル化して、収率９６％で２４を得（G. Thomaら, J Am Chem Soc 1999, 121:p5919-5929）、その後これを準化学量論的量の最小ＨＮＫ−１エピトープ２２（０．４ｅｑ）とカップリングした。グリコシル化ポリリジンポリマーの水溶性を改善するために、残りのクロロアセトアミド基を過剰のチオグリセロールでキャッピングした。限外濾過法による精製（Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ  Ｓｔｅｄｉｍ  Ｖｉｖａｓｐｉｎ  ６、分子量カットオフ、５０００）により、グリコポリマー２５を収率７０％で生成した。
【０１１９】
スキーム1:硫酸化(1)及び非硫酸化形態(2)の最小HNK-1エピトープの合成
0006502374.tif 000027
試薬及び条件：ａ）ＴＭＳＯＴｆ、モレキュラーシーブ４Å、ＤＣＭ、０℃−ｒｔ、（８１％）ｂ）ＬｉＯＨ、ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（９７％）；ｃ）Ｐｄ（ＯＨ）２／Ｃ、Ｈ２、ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ（９６％）；ｄ）Ａｃ２Ｏ、８０℃、ｐｙｒ、ＤＭＡＰ；ＭｅＯＨ、ａｎｈｙｄ  ＡｃＯＮａ（５７％）；ｅ）ＳＯ３・Ｐｙ、ＤＭＦ（６５％）；ｆ）Ｐｄ（ＯＨ）２／Ｃ、Ｈ２、ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ、ＬｉＯＨ、ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ（８８％）。
【０１２０】
４−メトキシフェニル（メチル２，３，４−トリ−Ｏ−ベンゾイル−β−Ｄ−グルコピラヌロネート）−（１→３）−４−Ｏ−ベンゾイル−２，６−ジ−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（５）。
アルゴン下で、３（１．１２ｇ、１．６８ｍｍｏｌ）、４ａ（８００ｍｇ、１．４０ｍｍｏｌ）及び活性化した４Åモレキュラーシーブ（１．２ｇ）をＤＣＭ（３０ｍＬ）中に懸濁させた。混合物をｒｔで１時間撹拌し、次いで０℃に冷却した。ＴＭＳＯＴｆ（３８．１μＬ、０．２１ｍｍｏｌ）を滴下添加した。反応混合物をｒｔに一晩温め、次いでＴＥＡ（１００μＬ）で中和し、濃縮した。残留物をクロマトグラフィーで精製して（石油エーテル／ＥｔＯＡｃ、９：１−７：３）、白色の固体として５を生成した（１．２１ｇ、１．１３ｍｍｏｌ、８１％）。
[α]D20+28.4 (c 1.01, CHCl3); 1H NMR (500MHz, CDCl3): δ 3.59 (dd, J=7.2, 10.1Hz, 1H, H-6a), 3.65 (s, 3H, OMe), 3.69 (dd, J=4.8, 10.1Hz, 1H, H-6b), 3.74 (s, 3H, OMe), 3.93 (dd, J=7.8, 9.5Hz, 1H, H-2), 3.96 (dd, J=5.1, 6.9Hz, 1H, H-5), 4.12 (d, J=9.8Hz, 1H, H-5’), 4.20 (dd, J=3.5, 9.6Hz, 1H, H-3), 4.46 (ABのA、B, J=11.5Hz, 2H, CH2Ph), 4.51, 4.90 (ABのA、B, J=10.5Hz, 2H, CH2Ph), 4.94 (d, J=7.8Hz, 1H, H-1), 5.36 (d, J=7.5Hz, 1H, H-1’), 5.44 (dd, J=7.5, 9.2Hz, 1H, H-2’), 5.66 (t, J=9.6Hz, 1H, H-4), 5.72-5.79 (m, 2H, H-3’, H-4’), 6.76, 7.00 (AA’BB’のAA’、BB’, J=9.1Hz, 4H, C6H4), 7.19-7.44, 7.47-7.51, 7.54-7.61, 7.75-7.78, 7.87-7.91, 8.03-8.08 (m, 30H, 6 C6H5); 13C NMR (126MHz, CDCl3): δ 52.88, 55.64 (2 OMe), 69.07 (C-6), 70.01 (C-4), 70.05 (C-4’), 71.76 (C-2’), 72.17 (C-3’), 72.90 (C-5’), 73.54 (C-5), 73.72, 75.23 (2 CH2Ph), 76.16 (C-3), 79.86 (C-2), 100.29 (C-1’), 102.73 (C-1), 114.57, 118.19 (4C, C6H4), 127.69, 127.78, 128.00, 128.09, 128.30, 128.37, 128.43, 128.59, 128.71, 128.89, 129.05, 129.58, 129.77, 129.82, 129.92, 130.11, 132.91, 133.08, 133.27, 133.39, 137.88, 137.90 (36C, 6 C6H5), 151.33, 155.33 (2C, C6H4), 164.45, 165.00, 165.52, 165.63, 167.15 (5 CO); ESI-MS: m/z: C62H56NaO17の計算値 [M+Na]+: 1095.35, 実測値1095.48.
【０１２１】
４−メトキシフェニル（β−Ｄ−グルコピラヌロネート）−（１→３）−２，６−ジ−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（６）
化合物５（８１０ｍｇ、０．７６ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（７ｍＬ）中に懸濁させ、懸濁液を−１０℃に冷却した。次いで、２Ｍ  ａｑ  ＬｉＯＨ（５ｍＬ）を滴下添加した。反応混合物を一晩撹拌し、ｒｔに温めた。溶媒を蒸発させ、残留物をＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（２：３、８ｍＬ）中に入れ、ＴＦＡ（４ｍＬ）で３０分間処理した。混合物を蒸発乾固し、残留物を逆相のクロマトグラフィー（ＲＰ−１８、ＭｅＯＨ／水、０：１−２：１）で精製して、白色の固体として６を得た（０．４７ｇ、０．７３ｍｍｏｌ、９７％）。
[α]D20-43.2 (c 1.00, MeOH); 1H NMR (500MHz, CD3OD): δ 3.30-3.41 (m, 2H, H-2’, H-3’), 3.49 (t, J=8.9Hz, 1H, H-4’), 3.66 (s, 3H, OMe), 3.68 (d, J=5.9Hz, 2H, H-6a, H-6b), 3.72 (d, J=9.7Hz, 1H, H-5’), 3.76 (d, J=5.9Hz, 1H, H-5), 3.79 (dd, J=3.3, 9.9Hz, 1H, H-3), 3.87 (m, 1H, H-2), 4.00 (d, J=2.7Hz, 1H, H-4), 4.48 (s, 2H, CH2Ph), 4.70 (d, J=7.4Hz, 1H, H-1’), 4.84 (d, J=7.7Hz, 1H, H-1), 4.87 (s, 2H, CH2Ph), 6.73, 6.97 (AA’BB’のAA’、BB’, J=9.0Hz, 4H, C6H4), 7.17-7.28 (m, 8H, 2 C6H5), 7.38 (d, J=7.1Hz, 2H, 2 C6H5); 13C NMR (126MHz, CD3OD): δ 56.10 (OMe), 70.37 (C-4), 70.72 (C-6), 73.35 (C-4’), 74.37 (CH2Ph), 74.85 (C-2’), 75.00 (C-5), 76.22 (C-5’), 76.46 (CH2Ph), 77.35 (C-3’), 80.11 (C-2), 82.20 (C-3), 103.87 (C-1), 105.59 (C-1’), 115.58, 119.23 (4C, C6H4), 128.66, 128.76, 128.79, 129.31, 129.41, 129.77, 139.76, 139.96 (12C, 2 C6H5), 153.05, 156.67 (2C, C6H4), 173.01 (CO); ESI-MS: m/z: C33H38NaO13の計算値 [M+Na]+: 665.23, 実測値665.23.
【０１２２】
４−メトキシフェニル（ナトリウムβ−Ｄ−グルコピラヌロネート）−（１→３）−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（２）
化合物６（２０５ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）及びＰｄ（ＯＨ）２／Ｃ（４２ｍｇ、２０％）をアルゴン下でＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ（１０：１、５ｍＬ）中に懸濁させた。水素雰囲気下（１ａｔｍ）、混合物を一晩撹拌し、次いで触媒を、セライトのパッドを介して濾別した。セライトをＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ勾配（６×１０ｍＬ、１０：０、８：２、６：４、４：６、２：８、０：１０）で洗浄した。濾液を濃縮し、Ｄｏｗｅｘ（登録商標）５０Ｘ８（Ｎａ＋）イオン交換カラムに通した。濃縮後、残留物を逆相のクロマトグラフィー（ＲＰ−１８、水）、これに続くＰ２サイズ排除クロマトグラフィーにより精製することによって、白色の固体として、２を得た（１４８ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ、９６％）。
[α]D20-40.7 (c 1.00, H2O); 1H NMR (500MHz, D2O): δ 3.43 (t, J=8.3Hz, 1H, H-2’), 3.48-3.56 (m, 2H, H-3’, H-5’), 3.67-3.81 (m, 7H, H-5, H-6, H-4’, OMe), 3.83 (dd, J=2.9, 9.8Hz, 1H, H-3), 3.90 (dd, J=8.0Hz, 1H, H-2), 4.22 (d, J=2.5Hz, 1H, H-4), 4.68 (d, J=7.7Hz, 1H, H-1’), 4.95 (d, J=7.9Hz, 1H, H-1), 6.94, 7.09 (AA’BB’のAA’、BB’, J=9.0Hz, 4H, C6H4); 13C NMR (126MHz, D2O): δ 55.71 (OMe), 60.70 (C-6), 67.94 (C-4), 69.63 (C-2), 71.73 (C-3’), 73.09 (C-2’), 75.05 (C-5’), 75.25 (C-5), 76.18 (C-4’), 82.37 (C-3), 101.29 (C-1), 103.61 (C-1’), 114.96, 118.10, 150.84, 154.61 (6C, C6H4), 175.92 (CO); HRMS: m/z: C19H26NaO13の計算値 [M + H]+: 485.1271, 実測値485.1276.
【０１２３】
４−メトキシフェニル（メチル２，４−ジ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラヌロネート）−（１→３）−４−Ｏ−アセチル−２，６−ジ−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（７）
６（４７０ｍｇ、０．７３ｍｍｏｌ）のＡｃ２Ｏ（１０ｍＬ）中溶液を８０℃で９０分間撹拌し、次いでｒｔに冷却した。ピリジン（６ｍＬ）及びＤＭＡＰ（１５ｍｇ）を加え、反応混合物を３日間撹拌した。溶媒をトルエン（５×５ｍＬ）と共に同時蒸発させた。残留物をＤＣＭ（５０ｍＬ）中に溶解し、ブライン（５０ｍＬ）及び水（５０ｍＬ）で抽出した。有機相をＮａ２ＳＯ４で脱水し、コットンウールを介してろ過した。溶媒の蒸発後、残留物をドライＭｅＯＨ（１４ｍＬ）に溶解し、無水ＮａＯＡｃ（９０ｍｇ）を加えた。混合物を一晩撹拌し、Ａｍｂｅｒｌｙｓｔｅ（登録商標）１５（Ｈ＋）イオン交換樹脂で中和し、ろ過した。濾液を濃縮し、残留物をフラッシュクロマトグラフィー（石油エーテル／ＥｔＯＡｃ、２：１−１：１）で精製することによって、黄色がかった固体として７を生成した（３３４ｍｇ、０．４３ｍｍｏｌ、５７％）。
[α]D20+34.3 (c 1.00, CHCl3); 1H NMR (500MHz, CDCl3): δ 1.92, 2.01, 2.04 (3s, 9H, 3 OAc), 3.48 (dd, J=7.1, 10.1Hz, 1H, H-6a), 3.55 (dd, J=4.8, 10.1Hz, 1H, H-6b), 3.60 (m, 1H, H-3’), 3.66, 3.69 (2s, 6H, 2 OMe), 3.77 (dd, J=5.4, 7.0Hz, 1H, H-5), 3.80 (d, J=9.8Hz, 1H, H-5’), 3.83 (dd, J=7.6, 9.7Hz, 1H, H-2), 3.89 (dd, J=3.5, 9.7Hz, 1H, H-3), 4.43 (ABのA、B, J=11.6Hz, 2H, CH2Ph), 4.64 (ABのA, J=11.5Hz, 1H, CH2Ph), 4.81 (d, J=7.6Hz, 1H, H-1), 4.83-4.87 (m, H-1’, H-2’), 4.97 (ABのB, J=11.5Hz, 1H, CH2Ph), 5.06 (t, J=9.5Hz, 1H, H-4’), 5.36 (d, J=3.2Hz, 1H, H-4), 6.72, 6.96 (AA’BB’のAA’、BB’, J=9.1Hz, 4H, C6H4), 7.18-7.31 (m, 10H, 2 C6H5); 13C NMR (126MHz, CDCl3): δ 20.72, 20.76, 20.80 (3 COCH3), 52.81, 55.63 (2 OMe), 68.95 (C-6), 69.33 (C-4), 71.87 (C-4’), 72.54 (C-5), 73.04 (C-5’), 73.26 (C-3’), 73.70 (CH2Ph), 73.79 (C-2’), 75.31 (CH2Ph), 77.24 (C-3), 79.26 (C-2), 100.15 (C-1’), 102.65 (C-1), 114.56, 118.24 (4C, C6H4), 127.76, 127.83, 127.98, 128.04, 128.41, 128.53, 137.87, 138.00 (12C, 2 C6H5), 151.35, 155.35 (2C, C6H4), 167.46, 170.15, 170.36, 170.38 (4 CO); ESI-MS: m/z: C40H46NaO16の計算値 [M+Na]+: 805.28, 実測値805.34.
【０１２４】
４−メトキシフェニル（メチル２，４−ジ−Ｏ−アセチル−３−Ｏ−スルホ−β−Ｄ−グルコピラヌロネート）−（１→３）−４−Ｏ−アセチル−２，６−ジ−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド、ナトリウム塩（８）
化合物７（３３４ｍｇ、０．４３ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（５ｍＬ）に溶解し、ＳＯ３・Ｐｙ（３７０ｍｇ、２．３４ｍｍｏｌ）を加えた。混合物をｒｔで２時間撹拌し、次いで、ＮａＨＣＯ３（３２０ｍｇ、３．７７ｍｍｏｌ）と共に２時間撹拌することによって、反応をクエンチした。固体を濾別し、フィルターをＭｅＯＨで洗浄した。濾液をＤｏｗｅｘ（登録商標）５０Ｘ８（Ｎａ＋）イオン交換カラムに通し、濃縮し、残留物をフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ、１：０−９：１）で精製することによって、黄色がかった固体として８を得た（２３７ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ、６５％）。フラッシュクロマトグラフィー後の濃縮の間、数滴の０．１Ｍ  ａｑ  ＮａＯＨを加えた。
[α]D20-10.4 (c 1.01, MeOH); 1H NMR (500MHz, CD3OD): δ 1.89, 2.03, 2.06 (3s, 9H, 3 OAc), 3.48 (dd, J=7.4, 10.4Hz, 1H, H-6a), 3.59 (dd, J=4.4, 10.5Hz, 1H, H-6b), 3.69, 3.72 (2s, 6H, 2 OMe), 3.77 (dd, J=7.8, 9.6Hz, 1H, H-2), 3.98 (dd, J=4.5, 7.4Hz, 1H, H-5), 4.03 (m, 1H, H-3), 4.05 (d, J=10.2Hz, 1H, H-5’), 4.46, 4.49 (ABのA、B, J=11.6Hz, 2H, CH2Ph), 4.60 (t, J=9.3Hz, 1H, H-3’), 4.73, 4.92 (ABのA、B, J=11.8Hz, 2H, CH2Ph), 4.94 (d, J=7.5Hz, 1H, H-2’), 4.96 (d, J=7.9Hz, 1H, H-1’), 4.99 (d, J=8.0Hz, 1H, H-1), 5.06 (m, 1H, H-4’), 5.40 (d, J=3.6Hz, 1H, H-4), 6.77, 7.00 (AA’BB’のAA’、BB’, J=9.1Hz, 4H, C6H4), 7.23-7.35 (m, 8H, 2 C6H5), 7.39 (d, J=7.2Hz, 2H, 2 C6H5); 13C NMR (126MHz, CD3OD): δ 19.32, 19.23, 19.64 (3 COCH3), 51.68, 54.52 (2 OMe), 68.73 (C-6), 69.50 (C-4), 69.80 (C-4’), 71.36 (C-2’), 71.91 (C-5’), 72.52 (C-5), 72.83, 74.69 (2 CH2Ph), 77.50 (C-3’), 78.57 (C-3), 78.59 (C-2), 100.04 (C-1), 102.01 (C-1’), 114.03, 117.64 (4C, C6H4), 127.14, 127.23, 127.36, 127.57, 127.81, 127.89, 138.02, 138.23 (12C, 2 C6H5), 151.29, 155.26 (2C, C6H4), 167.77, 170.07, 170.17, 170.64 (4 CO); ESI-MS: m/z: C40H46O19Sの計算値 [M]+: 862.24, 実測値862.42.
【０１２５】
４−メトキシフェニル（二ナトリウム−３−Ｏ−スルホ−β−Ｄ−グルコピラヌロネート）−（１→３）−β−Ｄ−ガラクト−ピラノシド（１）
化合物８（２３７ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）及びＰｄ（ＯＨ）２／Ｃ（４８ｍｇ、２０％）をアルゴン下で、ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ（１０：１、５ｍＬ）中に懸濁させた。反応混合物を水素雰囲気下（１ａｔｍ）９時間撹拌した。触媒を、セライトのパッドを介して濾別し、パッドを、ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ勾配（６×１０ｍＬ、１０：０、８：２、６：４、４：６、２：８、０：１０）で洗浄した。濾液を濃縮し、残留物をＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ（１：１、８ｍＬ）に溶解した。次いで、１Ｍ  ａｑ  ＬｉＯＨ（６．５ｍＬ）を−１０℃で加え、反応混合物を３時間にわたりｒｔに温め、Ａｍｂｅｒｌｙｓｔｅ（登録商標）１５（Ｈ＋）イオン交換樹脂で中和し、ろ過し、濃縮させた。残留物を逆相クロマトグラフィー（ＲＰ−１８、水）で精製し、Ｄｏｗｅｘ（登録商標）５０×８（Ｎａ＋）イオン交換カラムに通した。Ｐ２サイズ排除クロマトグラフィーでの最終的な精製により、固体として１を生成した（１４２ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ、８８％）。
[α]D20-19.2 (c 1.00, H2O); 1H NMR (500MHz, D2O): δ 3.63 (dd, J=8.0, 9.2Hz, 1H, H-2’), 3.73 (m, 1H, H-4’), 3.75-3.81 (m, 6H, H-5, H-6, OMe), 3.85 (d, J=10.0Hz, 1H, H-5’), 3.89 (dd, J=3.2, 9.9Hz, 1H, H-3), 3.94 (dd, J=7.7, 9.8Hz, 1H, H-2), 4.24 (d, J=3.1Hz, 1H, H-4), 4.40 (t, J=9.2Hz, 1H, H-3’), 4.81 (d, J=7.9Hz, 1H, H-1’), 4.97 (d, J=7.7Hz, 1H, H-1), 6.96, 7.11 (AA’BB’のAA’、BB’, J=9.2Hz, 4H, C6H4); 13C NMR (126MHz, D2O): δ 55.82 (OMe), 60.62 (C-6), 67.95 (C-4), 69.55 (C-2), 70.42 (C-4’), 71.86 (C-2’), 74.92 (C-5), 75.82 (C-5’), 82.49 (C-3), 83.30 (C-3’), 101.43 (C-1), 103.17 (C-1’), 115.02, 118.14, 150.89, 154.59 (6C, C6H4), 175.48 (CO); HRMS: m/z: C19H25Na2O16Sの計算値 [M + H]+: 587.0659, 実測値587.0665.
【０１２６】
スキーム2:最小HNK-1ポリマー25の合成
0006502374.tif 000028
0006502374.tif 000029
試薬及び条件：ａ）ＴＭＳＯＴｆ、モレキュラーシーブ４Å、ＤＣＭ、０℃−ｒｔ（５３％）；ｂ）ＭｅＯＨ、ＮａＯＭｅ、ｒｔ、一晩（１２を得る、９５％）；ｃ）２，２−ジメトキシプロパン、ｐ−ＴｓＯＨ（Ｔｓ：トルイルスルホニル）、ＤＭＦ、ｒｔ、一晩（７５％）；ｄ）クラウンエーテル１５−クラウン−５、ＢｎＢｒ、５０％  ａｑ  ＮａＯＨ、ＤＣＭ、一晩、６０℃（８３％）；ｅ）ＡｃＯＨ、Ｈ２Ｏ、６０℃、一晩（ｑｕａｎｔ．）；ｆ）トリメチル−オルトベンゾエート、ｐ−ＴｓＯＨ、トルエン、４５℃、一晩；ＡｃＯＨ、Ｈ２Ｏ、６０℃、２時間（９３％）；ｇ）ＴＭＳＯＴｆ、モレキュラーシーブ４Å、ＤＣＭ、０℃−ｒｔ、８６％；ｈ）ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ中ＬｉＯＨ（８９％）；ｉ）Ａｃ２Ｏ、ＤＭＡＰ、ｐｙｒ；ＭｅＯＨ、ＮａＯＡｃ  ＭｅＯＨ（１８を得る、７３％）；ｊ）ＳＯ３・Ｐｙ、ＤＭＦ（９１％）；ｋ）ＬｉＯＨ、ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ；Ｐｄ（ＯＨ）２／Ｃ、Ｈ２、ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ（７８％）；ｌ）ジチオトレイトール、チオブチロラクトン、ＴＥＡ、ＤＭＦ、８５℃（５９％）；ｍ）クロロ酢酸無水物、２，６−ルチジン、ＤＭＦ（９６％）；ｎ）ＤＭＦ、Ｈ２Ｏ、ＤＢＵ；チオグリセロール、ＴＥＡ；超遠心分離（７０％）。
【０１２７】
４−（２−アジドエチル）フェノール（９）
チラミン（３．４３ｇ、２５．０ｍｍｏｌ）、ＮａＨＣＯ３（７．８０ｇ、９２．８ｍｍｏｌ）及びＣｕＳＯ４・５Ｈ２Ｏ（０．２２ｇ、０．９ｍｍｏｌ）を水（３０ｍＬ）に溶解した。Titz A.ら, Tstrahedron Letters 47:p2383-2385(2006)に従い調製したトリフリン酸アジドストック溶液（４０ｍＬ）、及びＭｅＯＨ（１９０ｍＬ）を加えて、均質な混合物を得た。混合物をｒｔで一晩撹拌し、次いで水（１５０ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（３×１５０ｍＬ）で抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、溶媒を蒸発させた。残留物をフラッシュクロマトグラフィー（石油エーテル／ＥｔＯＡｃ、１：０−４：１）で精製することによって、無色の油状物質として９を生成した（ｑｕａｎｔ．）。
1H NMR (500MHz, CDCl3): δ 2.81 (t, J=7.3Hz, 2H, CH2CH2N3), 3.44 (t, J=7.2Hz, 2H, CH2CH2N3), 6.77, 7.07 (AA’BB’のAA’、BB’, J=8.5Hz, 4H, C6H4); 13C NMR (126MHz, CDCl3): δ 34.50 (CH2CH2N3), 52.72 (CH2CH2N3), 115.53, 129.96, 130.22, 154.39 (6C, C6H4); IR (フィルム): 2105 cm-1 (N3).
【０１２８】
４−（２−アジドエチル）フェニル２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（１１）
１０の氷冷却した懸濁液（８．３０ｇ、１７．５ｍｍｏｌ）（Bukowski R ら, European Journal of Organic Chemistry 2001:p2697-2705）及びＤＣＭ（４０ｍＬ）中４Åモレキュラーシーブ（３ｇ）に、アルゴン下で、ＤＣＭ（４０ｍＬ）中９（４．００ｇ、２４．５ｍｍｏｌ）を加えた。ＴｆＯＨ（０．４５ｍＬ、２．５ｍｍｏｌ）を滴下添加し、反応混合物を一晩ｒｔに温めた。ＴＥＡ（０．８ｍＬ）でのクエンチ後、懸濁液をろ過し、濾液を濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー（石油エーテル／ＥｔＯＡｃ、９：１−３：２）で精製することによって、油状物質として１１を生成した（４．５８ｇ、９．２８ｍｍｏｌ、５３％）。
[α]D20+6.1 (c 1.10, CHCl3); 1H NMR (500MHz, CDCl3): δ 1.98, 2.02, 2.06, 2.15 (4s, 12H, 4 OAc), 2.82 (t, J=7.2Hz, 2H, CH2CH2N3), 3.45 (t, J=7.1Hz, 2H, CH2CH2N3), 4.02 (t, J=6.6Hz, 1H, H-5), 4.13 (dd, J=6.3, 11.3Hz, 1H, H-6a), 4.20 (dd, J=6.9, 11.2Hz, 1H, H-6b), 4.99 (d, J=8.0Hz, 1H, H-1), 5.08 (dd, J=3.4, 10.5Hz, 1H, H-3), 5.40-5.48 (m, 2H, H-2, H-4), 6.93, 7.12 (AA’BB’のAA’、BB’, J=8.6Hz, 4H, C6H4); 13C NMR (126MHz, CDCl3): δ 20.58, 20.65, 20.65, 20.73 (4 COCH3), 34.52 (CH2CH2N3), 52.51 (CH2CH2N3), 61.36 (C-6), 66.89 (C-4), 68.67 (C-2), 70.85 (C-3), 71.01 (C-5), 99.78 (C-1), 117.19, 129.87, 133.01, 155.85 (6C, C6H4), 169.40, 170.13, 170.26, 170.36 (4 CO); ESI-MS: m/z: C22H27N3NaO10の計算値 [M+Na]+: 516.17, 実測値516.19; IR (フィルム): 2101 cm-1 (N3).
【０１２９】
４−（２−アジドエチル）フェニルβ−Ｄ−ガラクトピラノシド（１２）
１１（４．５８ｇ、９．２８ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（４５ｍＬ）中溶液をアルゴン下で一晩、１Ｍ  ＮａＯＭｅ／ＭｅＯＨ（４．５ｍＬ）で処理した。Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ（登録商標）ＩＲ−１２０（Ｈ＋）イオン交換樹脂で中和後、溶媒を蒸発させた、残留物をフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ、１：０−４：１）で精製することによって、油状物質として、１２を得た（２．８６ｇ、８．７９ｍｍｏｌ、９５％）。
[α]D20-38.1 (c 1.00, MeOH); 1H NMR (500MHz, CD3OD): δ 2.85 (t, J=7.1Hz, 2H, CH2CH2N3), 3.49 (t, J=7.1Hz, 2H, CH2CH2N3), 3.60 (dd, J=3.4, 9.7Hz, 1H, H-3), 3.70 (m, 1H, H-5), 3.75-3.85 (m, 3H, H-2, H-6), 3.93 (d, J=3.2Hz, 1H, H-4), 4.86 (d, J=7.8Hz, 1H, H-1), 7.09, 7.20 (AA’BB’のAA’、BB’, J=8.6Hz, 4H, C6H4); 13C NMR (126MHz, CD3OD): δ 35.49 (CH2CH2N3), 53.75 (CH2CH2N3), 62.44 (C-6), 70.25 (C-4), 72.34 (C-2), 74.89 (C-3), 76.96 (C-5), 103.11 (C-1), 118.00, 130.82, 133.65, 158.08 (6C, C6H4); ESI-MS: m/z: C14H19N3NaO6の計算値 [M+Na]+: 348.13, 実測値348.04; IR (フィルム): 2112 cm-1 (N3).
【０１３０】
４−（２−アジドエチル）フェニル３，４−イソプロピリデン−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（１３）
１２（２．８６ｇ、８．７９ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３０ｍＬ）中溶液に、アルゴン下で２，２−ジメトキシ−プロパン（２．５０ｍＬ、１９．３ｍｍｏｌ）及びｐ−ＴｓＯＨ（３７ｍｇ）を加えた。８０℃で一晩撹拌後、反応混合物をＴＥＡ（０．５ｍＬ）で中和し、溶媒を蒸発させ、残留物をフラッシュクロマトグラフィー（石油エーテル＋０．５％ＴＥＡ／ＥｔＯＡｃ、１：２−０：１）で精製することによって、油状物質として１３を生成した（２．３９ｇ、６．５５ｍｍｏｌ、７５％）。
[α]D20-22.4 (c 1.10, CHCl3); 1H NMR (500MHz, CDCl3): δ 1.34, 1.53 (2s, 6H, Me2C), 2.42 (s, 2H, 2 OH), 2.81 (t, J=7.1Hz, 2H, CH2CH2N3), 3.44 (t, J=7.2Hz, 2H, CH2CH2N3), 3.78-3.85 (m, 2H, H-2, H-6a), 3.93-4.00 (m, 2H, H-6b, H-5), 4.14-4.21 (m, 2H, H-3, H-4), 4.78 (d, J=8.2Hz, 1H, H-1), 6.95, 7.12 (AA’BB’のAA’、BB’, J=8.5Hz, 4H, C6H4); 13C NMR (126MHz, CDCl3): δ 26.33, 28.10 (C(CH3)2), 34.54 (CH2CH2N3), 52.53 (CH2CH2N3), 62.29 (C-6), 73.31 (C-2), 73.69 (C-5), 73.87 (C-4), 78.89 (C-3), 100.33 (C-1), 110.69 (C(CH3)2), 116.89, 129.95, 132.63, 155.78 (6C, C6H4); ESI-MS: m/z: C17H23N3NaO6の計算値 [M+Na]+: 388.16, 実測値388.06; IR (フィルム): 2099 cm-1 (N3).
【０１３１】
４−（２−アジドエチル）フェニル２，６−ジ−Ｏ−ベンジル−３，４−イソプロピリデン−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（１４）
化合物１３（１．０２ｇ、２．７８ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１５ｍＬ）に溶解した。１５−クラウン−５（５５μＬ、０．２８ｍｍｏｌ）、５０％  ａｑ  ＮａＯＨ（３７．５ｍＬ）及び臭化ベンジル（３．３０ｍＬ、２７．８ｍｍｏｌ）を加え、二相性の混合物を還流下、６０℃で一晩撹拌した。反応混合物を４Ｍ  ａｑ  ＨＣｌで中和した。有機層を分離し、水相をＤＣＭ（２×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を濃縮し、残留物をフラッシュクロマトグラフィー（石油エーテル＋０．５％ＴＥＡ／ＥｔＯＡｃ、１：０−３：１）で精製することによって、白色の固体として１４を得た（１．２６ｇ、２．３１ｍｍｏｌ、８３％）。
[α]D20+8.4 (c 1.00, CHCl3); 1H NMR (500MHz, CDCl3): δ 1.28, 1.34 (2s, 6H, Me2C), 2.76 (t, J=7.3Hz, 2H, CH2CH2N3), 3.37 (t, J=7.3Hz, 2H, CH2CH2N3), 3.60 (dd, J=6.8, 7.9Hz, 1H, H-2), 3.69-3.80 (m, 2H, H-6), 3.97 (ddd, J=1.8, 4.7, 6.8Hz, 1H, H-5), 4.13 (dd, J=2.0, 5.7Hz, 1H, H-4), 4.18 (m, 1H, H-3), 4.46, 4.54 (ABのA、B, J=11.8Hz, 2H, CH2Ph), 4.78-4.85 (m, 3H, CH2Ph, H-1), 6.69, 7.03 (AA’BB’のAA’、BB’, J=8.6Hz, 4H, C6H4), 7.15-7.28 (m, 8H, 2 C6H5), 7.34 (d, J=7.4Hz, 2H, 2 C6H5); 13C NMR (126MHz, CDCl3): δ 26.41, 27.81 (C(CH3)2), 34.62 (CH2CH2N3), 52.62 (CH2CH2N3), 69.60 (C-6), 72.72 (C-5), 73.67 (C-4), 73.69 (2C, 2 CH2Ph), 79.08 (C-3), 79.26 (C-2), 101.09 (C-1), 110.27 (C(CH3)2), 117.23 (2C, C6H4), 127.63, 127.69, 127.72, 128.26, 128.32, 128.40 (8C, 2 C6H5), 129.80 (2C, C6H4), 132.19, 138.14 (2 C6H5), 138.29, 156.26 (C6H4); ESI-MS: m/z: C31H35N3NaO6の計算値 [M+Na]+: 568.25, 実測値568.21; IR (KBr): 2096 cm-1 (N3).δ
【０１３２】
４−（２−アジドエチル）フェニル２，６−ジ−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（１５）
１４（１．２６ｇ、２．３１ｍｍｏｌ）の９０％  ａｑ  ＡｃＯＨ（５０ｍＬ）中溶液を６０℃で撹拌し、一晩撹拌した。溶媒を蒸発させ、残留物をフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ、１：０−９：１）で精製することによって、油状物質として、１５を得た（１．１７ｇ、２．３１ｍｍｏｌ、ｑｕａｎｔ）。
[α]D20-9.9 (c 1.10, CHCl3); 1H NMR (500MHz, CDCl3): δ 2.76 (t, J=7.3Hz, 2H, CH2CH2N3), 3.38 (t, J=7.3Hz, 2H, CH2CH2N3), 3.59 (dd, J=3.3, 9.5Hz, 1H, H-3), 3.62-3.76 (m, 4H, H-2, H-5, H6), 3.92 (d, J=3.2Hz, 1H, H-4), 4.48 (s, 2H, CH2Ph), 4.69 (ABのA, J=11.5Hz, 1H, CH2Ph), 4.87 (d, J=7.7Hz, 1H, H-1), 4.96 (ABのB, J=11.5Hz, 1H, CH2Ph), 6.97, 7.05 (AA’BB’のAA’、BB’, J=8.5Hz, 4H, C6H4), 7.15-7.31 (m, 10H, 2 C6H5); 13C NMR (126MHz, CDCl3): δ 34.58 (CH2CH2N3), 52.59 (CH2CH2N3), 68.92 (C-4), 69.41 (C-6), 73.20 (C-3), 73.74 (C-5), 73.81, 74.91 (2 CH2Ph), 78.87 (C-2), 101.86 (C-1), 117.19 (2C, C6H4), 127.75, 127.83, 128.03, 128.27, 128.47, 128.60 (8C, 2 C6H5), 129.83 (2C, C6H4), 132.33, 137.87 (2 C6H5), 138.14, 156.13 (C6H4); ESI-MS: m/z: C28H31N3NaO6の計算値 [M+Na]+: 528.22, 実測値528.22; IR (フィルム): 2098 cm-1 (N3).
【０１３３】
４−（２−アジドエチル）フェニル４−Ｏ−ベンゾイル−２，６−ジ−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（１６）
１５（１．１７ｇ、２．３１ｍｍｏｌ）のトルエン（１５ｍＬ）中溶液に、トリメチルオルト−ベンゾエート（０．６４ｍＬ、３．７２ｍｍｏｌ）及びｐ−ＴｓＯＨ（１１８ｍｇ、０．６２ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を４５℃で一晩撹拌し、次いで濃縮し、残留物を９０％  ａｑ  ＡｃＯＨ（１５ｍＬ）に溶解した。溶液を６０℃で２時間撹拌し、濃縮させ、残留物をフラッシュクロマトグラフィー（石油エーテル／ＥｔＯＡｃ、９：１−７：３）で精製することによって、無色の油状物質として、１６を生成した（１．３０ｇ、２．１４ｍｍｏｌ、９３％）。
[α]D20-8.4 (c 1.00, CHCl3); 1H NMR (500MHz, CDCl3): δ 2.83 (t, J=7.3Hz, 2H, CH2CH2N3), 3.44 (t, J=7.3Hz, 2H, CH2CH2N3) 3.60-3.66 (m, 2H, H-6), 3.87 (dd, J=7.4, 9.6Hz, 1H, H-2), 3.92 (dd, J=3.5, 9.6Hz, 1H, H-3), 3.96 (t, J=6.2Hz, 1H, H-5), 4.41, 4.48 (ABのA、B, J=11.7Hz, 2H, CH2Ph), 4.78 (ABのA, J=11.2Hz, 1H, CH2Ph), 4.99-5.07 (m, 2H, H-1, CH2Ph), 5.63 (d, J=2.8Hz, 1H, H-4), 7.06, 7.12 (AA’BB’のAA’、BB’, J=8.5Hz, 4H, C6H4), 7.18-7.35 (m, 10H, 2 C6H5), 7.43 (t, J=7.8Hz, 2H, C6H5), 7.56 (t, J=7.4Hz, 1H, C6H5), 8.04-8.09 (m, 2H, C6H5); 13C NMR (126MHz, CDCl3): δ 34.62 (CH2CH2N3), 52.63 (CH2CH2N3), 68.61 (C-6), 70.25 (C-4), 72.21 (C-3), 73.28 (C-5), 73.71, 75.13 (2 CH2Ph), 79.15 (C-2), 101.89 (C-1), 117.07 (2C, C6H4), 127.76, 127.78, 128.04, 128.29, 128.39, 128.49, 128.58, 129.57 (12C, 3 C6H5), 129.93 (2C, C6H4), 130.10, 132.46, 133.38, 137.79 (6C, 3 C6H5), 138.06, 156.17 (C6H4), 166.38 (CO); ESI-MS: m/z: C35H35N3NaO7の計算値 [M+Na]+: 532.24, 実測値532.28; IR (フィルム): 2102 cm-1 (N3).
【０１３４】
４−（２−アジドエチル）フェニル（メチル２，３，４−トリ−Ｏ−ベンゾイル−β−Ｄ−グルコピラヌロネート）−（１→３）−４−Ｏ−ベンゾイル−２，６−ジ−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（１７）
アルゴン下でトリコロロアセトイミデート３（１．７５ｇ、２．６３ｍｍｏｌ）、１６（１．３０ｇ、２．１４ｍｍｏｌ）及び活性化した４Åモレキュラーシーブ（２ｇ）をＤＣＭ（２５ｍＬ）中に懸濁した。混合物をＲＴで１時間撹拌し、次いで０°Ｃに冷却した。ＴＭＳＯＴｆ（５８．４μＬ、０．３２ｍｍｏｌ）を滴下添加した。反応混合物を一晩ｒｔに温め、次いで、ＴＥＡ（１５０μＬ）で中和し、濃縮した。残留物をクロマトグラフィー（石油エーテル／ＥｔＯＡｃ、９：１−７：３）で精製することによって、白色の固体として、１７を生成した（２．０４ｇ、１．８４ｍｍｏｌ、８６％）。
[α]D20+25.2 (c 1.10, CHCl3); 1H NMR (500MHz, CDCl3): δ 2.84 (t, J=7.3Hz, 2H, CH2CH2N3), 3.46 (t, J=7.2Hz, 2H, CH2CH2N3), 3.61 (dd, J=7.3, 10.1Hz, 1H, H-6a), 3.67 (s, 3H, OMe), 3.72 (dd, J=4.7, 10.2Hz, 1H, H-6b), 3.98 (dd, J=7.9, 9.5Hz, 1H, H-2), 4.02 (dd, J=5.3, 6.5Hz, 1H, H-5), 4.15 (d, J=9.8Hz, 1H, H-5’), 4.24 (dd, J=3.4, 9.5Hz, 1H, H-3), 4.48 (ABのA、B, J=11.5Hz, 2H, CH2Ph), 4.55, 4.91 (ABのA、B, J=10.7Hz, 2H, CH2Ph), 5.02 (d, J=7.7Hz, 1H, H-1), 5.39 (d, J=7.4Hz, 1H, H-1’), 5.47 (dd, J=7.4, 9.1Hz, 1H, H-2’), 5.69 (t, J=9.5Hz, 1H, H-4’), 5.77 (t, J=9.3Hz, 1H, H-3’), 5.81 (d, J=3.3Hz, 1H, H-4), 7.02, 7.10 (AA’BB’のAA’、BB’, J=8.7Hz, 4H, C6H4), 7.22-7.46, 7.48-7.53, 7.56-7.66, 7.76-7.81, 7.88-7.93, 8.05-8.10 (m, 30H, 6 C6H5); 13C NMR (126MHz, CDCl3): δ 34.60 (CH2CH2N3), 52.59 (CH2CH2N3), 52.86 (OMe), 69.06 (C-6), 70.01 (C-4), 70.06 (C-4’), 71.83 (C-2’), 72.24 (C-3’), 72.94 (C-5’), 73.67 (C-5), 73.73, 75.25 (2 CH2Ph), 76.26 (C-3), 79.77 (C-2), 100.3 (C-1’), 101.81 (C-1), 117.02 (2C, C6H4), 127.69, 127.76, 127.98, 128.10, 128.30, 128.37, 128.43, 128.56, 128.75, 128.94, 129.09, 129.60, 129.77, 129.82, 129.87, 129.94, 130.10, 132.39, 132.92, 133.08, 133.26, 133.38, 137.85, 137.92, 156.09 (40C, 6 C6H5, C6H4), 164.47, 165.00, 165.51, 165.64, 167.16 (5 CO); ESI-MS: m/z: C63H57N3NaO16の計算値 [M+Na]+: 1134.36, 実測値1134.47; IR (KBr): 2099 cm-1 (N3).
【０１３５】
４−（２−アジドエチル）フェニル（β−Ｄ−グルコピラヌロネート）−（１→３）−２，６−ジ−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−ガラクト−ピラノシド（１８）
化合物１７（２．０４ｇ、１．８４ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１４ｍＬ）中に懸濁させ、懸濁液を−１０℃に冷却した。次いで２Ｍ  ａｑ  ＬｉＯＨ（１０ｍＬ）を滴下添加した。反応混合物を一晩撹拌し、ｒｔに温めた。Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ（登録商標）ＩＲ−１２０（Ｈ＋）イオン交換樹脂での中和及び濾過後、溶媒を蒸発させ、残留物をＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（２：３、１６ｍＬ）中に溶解し、ＴＦＡ（８ｍＬ）で３０分間処理した。混合物を蒸発乾固させ、残留物を逆相のクロマトグラフィー（ＲＰ−１８、ＭｅＯＨ／水、０：１−３：１）で精製することによって、固体として１８を得た（１．１２ｇ、１．６４ｍｍｏｌ、８９％）。
[α]D20-48.1 (c 1.00, MeOH); 1H NMR (500MHz, CD3OD): δ 2.79 (t, J=7.0Hz, 2H, CH2CH2N3), 3.35-3.47 (m, 4H, H-2’, H-3’, CH2CH2N3), 3.53 (t, J=9.1Hz, 1H, H-4’), 3.73 (m, 2H, H-6), 3.77 (d, J=9.8Hz, 1H, H-5’), 3.81-3.89 (m, 2H, H-3, H-5), 3.94 (m, 1H, H-2), 4.06 (d, J=2.5Hz, 1H, H-4), 4.53 (s, 2H, CH2Ph), 4.74 (d, J=7.3Hz, 1H, H-1’), 4.88-4.95 (m, 2H, CH2Ph), 4.99 (d, J=7.7Hz, 1H, H-1), 7.02, 7.12 (AA’BB’のAA’、BB’, J=8.5Hz, 4H, C6H4), 7.20-7.34 (m, 8H, 2 C6H5), 7.41 (d, J=7.1Hz, 2H, 2 C6H5); 13C NMR (126MHz, CD3OD): δ 33.97 (CH2CH2N3), 52.19 (CH2CH2N3), 68.85 (C-4), 69.18 (C-6), 71.78 (C-4’), 72.86 (CH2Ph), 73.32 (C-2’), 73.58 (C-5), 74.69 (CH2Ph), 74.93 (C-5’), 75.83 (C-3’), 78.50 (C-2), 80.64 (C-3), 101.39 (C-1), 104.07 (C-1’), 116.43 (2C, C6H4), 127.12, 127.21, 127.25, 127.75, 127.87, 128.23 (10C, 2 C6H5), 129.44, 132.31 (3C, C6H4), 138.22, 138.38 (2 C6H5), 156.25 (C6H4), 171.27 (CO); ESI-MS: m/z: C34H39N3NaO12の計算値 [M+Na]+: 704.24, 実測値704.30; IR (KBr): 2099 cm-1 (N3).
【０１３６】
４−（２−アジドエチル）フェニル（メチル２，４−ジ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラヌロネート）−（１→３）−４−Ｏ−アセチル−２，６−ジ−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（１９）
１８（９００ｍｇ、１．３２ｍｍｏｌ）のＡｃ２Ｏ（１５ｍＬ）中溶液を８０℃で１時間撹拌し、次いでｒｔに冷却した。ピリジン（９ｍＬ）及びＤＭＡＰ（２５ｍｇ）を加え、反応混合物を３日間撹拌した。溶媒をトルエン（５×５ｍＬ）と共に同時蒸発した。残留物をＤＣＭ（５０ｍＬ）に溶解し、ブライン（５０ｍＬ）及び水（５０ｍＬ）で抽出した。有機相をＮａ２ＳＯ４で脱水し、コットンウールを介してろ過した。溶媒の蒸発後、残留物をドライＭｅＯＨ（２０ｍＬ）に溶解し、無水ＮａＯＡｃ（１００ｍｇ）を加えた。混合物を一晩撹拌し、Ａｍｂｅｒｌｙｓｔｅ（登録商標）１５（Ｈ＋）イオン交換樹脂で中和し、ろ過した。濾液を濃縮し、残留物をフラッシュクロマトグラフィー（石油エーテル／ＥｔＯＡｃ、２：１−２：３）で精製することによって、黄色がかった固体として１９を生成した（７９４ｍｇ、０．９７ｍｍｏｌ、７３％）。
[α]D20-32.6 (c 1.00, CHCl3); 1H NMR (500MHz, CDCl3): δ 1.92, 2.01, 2.04 (3s, 9H, 3 OAc), 2.77 (t, J=7.2Hz, 2H, CH2CH2N3), 3.40 (t, J=7.2Hz, 2H, CH2CH2N3), 3.48 (dd, J-= 7.1, 10.1Hz, 1H, H-6a), 3.55 (dd, J=4.8, 10.2Hz, 1H, H-6b), 3.61 (m, 1H, H-3’), 3.67 (s, 3H, OMe), 3.78-3.83 (m, 2H, H-5, H-5’), 3.86 (dd, J=7.6, 9.7Hz, 1H, H-2), 3.91 (dd, J=3.3, 9.6Hz, 1H, H-3), 4.43 (ABのA、B, J=11.7Hz, 2H, CH2Ph), 4.64 (ABのA, J=11.6Hz, 1H, CH2Ph), 4.81-4.88 (m, 2H, H-1, H-2), 4.91 (d, J=7.6Hz, 1H, H-1’), 4.95 (ABのB, J=10.6Hz, 1H, CH2Ph), 5.07 (t, J=9.5Hz, 1H, H-4’), 5.38 (d, J=3.0Hz, 1H, H-4), 6.96, 7.04 (AA’BB’のAA’、BB’, J=8.5Hz, 4H, C6H4), 7.18-7.31 (m, 10H, 2 C6H5); 13C NMR (126MHz, CDCl3): δ 20.69, 20.72, 20.76 (3 COCH3), 34.59 (CH2CH2N3), 52.58 (CH2CH2N3), 52.79 (OCH3), 68.93 (C-6), 69.30 (C-4), 71.91 (C-4’), 72.53 (C-5), 73.10 (C-5’), 73.38 (C-3’), 73.70 (CH2Ph), 73.87 (C-2’), 75.31 (CH2Ph), 77.24 (C-3), 79.19 (C-2), 100.10 (C-1’), 101.71 (C-1), 117.04 (2C, C6H4), 127.76, 127.80, 127.96, 128.01, 128.40, 128.49 (10C, 2 C6H5), 129.85, 132.41 (3C, C6H4), 137.87, 137.96 (2 C6H5), 156.08 (C6H4), 167.42, 170.11, 170.29, 170.32 (4 CO); ESI-MS: m/z: C41H47N3NaO15の計算値 [M+Na]+: 844.29, 実測値844.39; IR (KBr): 2101 cm-1 (N3).
【０１３７】
４−（２−アジドエチル）フェニル（メチル２，４−ジ−Ｏ−アセチル−３−Ｏ−スルホ−β−Ｄ−グルコピラヌロネート）−（１→３）−４−Ｏ−アセチル−２，６−ジ−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド、ナトリウム塩（２０）
化合物１９（７９４ｍｇ、０．９７ｍｍｏｌ）をドライＤＭＦ（１０ｍＬ）に溶解し、ＳＯ３・Ｐｙ（８４６ｍｇ、５．３１ｍｍｏｌ）を加えた。混合物をｒｔで２時間撹拌し、ＮａＨＣＯ３（７１９ｍｇ、８．５６ｍｍｏｌ）と共に２時間撹拌することによって、クエンチした。固体を濾別し、フィルターをＭｅＯＨで洗浄した。濾液をＤｏｗｅｘ  ５０Ｘ８（Ｎａ＋）イオン交換カラムに通した。濾液を濃縮し、残留物をフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ、１：０−９：１）で精製することによって、黄色がかった固体として２０を得た（８０８ｍｇ、０．８８ｍｍｏｌ、９１％）。フラッシュクロマトグラフィー後の濃縮の間、数滴の０．１Ｍ  ａｑ  ＮａＯＨを加えた。
[α]D20-18.3 (c 1.00, MeOH); 1H NMR (500MHz, CD3OD): δ 1.97, 2.09, 2.11 (3s, 9H, 3 OAc), 2.86 (t, J=7.0Hz, 2H, CH2CH2N3), 3.50 (t, J=7.0Hz, 2H, CH2CH2N3), 3.54 (dd, J=7.4, 10.4Hz, 1H, H-6a), 3.65 (dd, J=4.4, 10.4Hz, 1H, H-6b), 3.75 (s, 3H, OMe), 3.86 (dd, J=7.9, 9.5Hz, 1H, H-2), 4.07 (dd, J=4.6, 7.1Hz, 1H, H-5), 4.09-4.14 (m, 2H, H-3, H-5’), 4.49-4.57 (m, 2H, CH2Ph), 4.66 (t, J=9.2Hz, 1H, H-3’), 4.80 (ABのA, J=10.7Hz, 1H, CH2Ph), 4.96-5.03 (m, 2H, CH2Ph, H-2’), 5.06 (d, J=7.9Hz, 1H, H-1’), 5.11-5.17 (m, 2H, J=8.2Hz, H-1, H-4’) 5.48 (d, J=3.6Hz, 1H, H-4), 7.07, 7.18 (AA’BB’のAA’、BB’, J=8.5Hz, 4H, C6H4), 7.29-7.44 (m, 10H, 2 C6H5); 13C NMR (126MHz, CD3OD): δ 20.87, 21.20 (3C, 3 COCH3), 35.50 (CH2CH2N3), 53.24 (CH2CH2N3), 53.71 (OMe), 70.27 (C-6), 71.08 (C-4), 71.37 (C-4’), 72.95 (C-2’), 73.50 (C-5’), 74.14 (C-5), 74.41, 76.26 (2 CH2Ph), 78.98 (C-3’), 80.02 (C-3), 80.11 (C-2), 101.62 (C-1’), 102.61 (C-1), 117.93 (2C, C6H4), 128.69, 128.79, 128.90, 129.17, 129.37, 129.43 (10C, 2 C6H5), 131.02, 134.06 (3C, C6H4), 139.56, 139.72 (2 C6H5), 157.58 (C6H4), 164.89, 169.39, 171.64, 171.75 (4 CO); ESI-MS: m/z: C41H46N3O18Sの計算値 [M-H]-: 900.25, 実測値900.42; IR (KBr): 2101 cm-1 (N3).
【０１３８】
４−（２−アミノエチル）フェニル（二ナトリウム３−Ｏ−スルホ−β−Ｄ−グルコピラヌロネート）−（１→３）−β−Ｄ−ガラクト−ピラノシド（２１）
２０（４７０ｍｇ、０．５１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（１０：１、１０ｍＬ）中溶液に、２Ｍ  ａｑ  ＬｉＯＨ（２ｍＬ）を−１０℃で加えた。反応混合物をｒｔに温め、一晩撹拌した。混合物をＡｍｂｅｒｌｙｓｔｅ  １５（Ｈ＋）イオン交換樹脂で中和し、ろ過した。ＭｅＯＨを有するＤｏｗｅｘ（登録商標）５０Ｘ８（Ｎａ＋）イオン交換カラムに濾液を通し、濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ、１０：３：０．３）で精製した。生成物の濃縮の間、数滴の０．１Ｍ  ａｑ  ＮａＯＨを加え、次いでこれをＭｅＯＨ（４．５ｍＬ）及びＨ２Ｏ（３．７５ｍＬ）に溶解した。ＡｃＯＨ（０．２ｍＬ）及びＰｄ（ＯＨ）２／Ｃ（９４ｍｇ、２０％）をアルゴン下で加え、反応混合物を一晩水素雰囲気下（１ａｔｍ）で撹拌した。触媒を、セライトのパッドを介して濾別し、パッドをＭｅＯＨ及び数滴のＨ２Ｏで洗浄した。濾液を濃縮し、Ｐ２サイズ排除クロマトグラフィーで残留物を精製することによって、凍結乾燥の後、無色の固体として２１を生成した（２３８ｍｇ、０．４０ｍｍｏｌ、７８％）。
[α]D20-25.6 (c 1.00, H2O); 1H NMR (500MHz, D2O): δ 2.99 (t, J=7.0Hz, 2H, CH2CH2NH2), 3.28 (t, J=7.1Hz, 2H, CH2CH2NH2), 3.66 (t, J=8.4Hz, 1H, H-2’), 3.71-3.88 (m, 5H, H5, H-6, H-4’, H-5’), 3.92 (dd, J=3.2, 9.9Hz, 1H, H-3), 3.99 (t, J=8.6Hz, 1H, H-2), 4.26 (d, J=3.1Hz, 1H, H-4), 4.39 (t, J=9.0Hz, 1H, H-3’), 4.82 (d, J=7.9Hz, 1H, H-1’), 5.12 (d, J=7.7Hz, 1H, H-1), 7.17, 7.32 (AA’BB’のAA’、BB’, J=8.0Hz, 4H, C6H4); 13C NMR (126MHz, D2O): δ 31.97 (CH2CH2NH2), 40.65 (CH2CH2NH2), 60.78 (C-6), 68.05 (C-4), 69.02 (C-2), 70.50 (C-4’), 72.03 (C-2’), 75.10 (2C, C-5, C-5’), 82.43 (C-3), 83.60 (C-3’), 100.46 (C-1), 103.24 (C-1’), 117.01, 130.30, 131.29, 155.75 (6C, C6H4), 175.45 (CO); ESI-MS: m/z: C20H27NNa2O15Sの計算値 [M-2Na+H]-: 554.12, 実測値554.07.
【０１３９】
４−（２−（４−メルカプトブタンアミド）エチル）フェニル（二ナトリウム−３−Ｏ−スルホβ−Ｄ−グルコピラヌロネート）−（１→３）−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（２２）
２１（２３８ｍｇ、０．４０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（８ｍＬ）中懸濁液に、ジチオトレイトール（１１２ｍｇ、０．７２ｍｍｏｌ）、チオブチロラクトン（３４３μＬ、４ｍｍｏｌ）、及びＴＥＡ（５５２μＬ、４ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を８５℃で１８時間撹拌した。溶媒をトルエン（３×５ｍＬ）と共に同時蒸発させ、残留物をフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ、１０：５：１）で精製した。生成物の濃縮の間、数滴の０．１Ｍ  ａｑ  ＮａＯＨを加えた。凍結乾燥により、無色の固体として２２を得た（１６４ｍｇ、０．２３４ｍｍｏｌ、５９％）。
[α]D20-20.2 (c 1.00, H2O); 1H NMR (500MHz, D2O): δ 1.72-1.85 (m, 2H, CH2CH2CH2SH), 2.28 (t, J=7.2Hz, 2H, CH2CH2CH2SH), 2.37 (t, J=7.2Hz, 2H, CH2CH2CH2SH), 2.83 (t, J=6.5Hz, 2H, CH2CH2NH), 3.49 (t, J=6.5Hz, 2H, CH2CH2NH), 3.67 (dd, J=8.1, 9.1Hz, 1H, H-2’), 3.73-3.91 (m, 5H, H-5, H6, H-4’, H-5’), 3.94-4.02 (m, 2H, H-2, H-3), 4.29 (d, J=2.7Hz, 1H, H-4), 4.39 (t, J=9.1Hz, 1H, H-3’), 4.84 (d, J=7.9Hz, 1H, H-1’), 5.13 (d, J=7.4Hz, 1H, H-1), 7.14, 7.27 (AA’BB’のAA’、BB’, J=8.5Hz, 4H, C6H4); 13C NMR (126MHz, D2O): δ 22.87 (CH2CH2CH2SH), 29.44 (CH2CH2CH2SH), 33.63 (CH2CH2NH), 34.34 (CH2CH2CH2SH), 40.25 (CH2CH2NH), 60.77 (C-6), 68.04 (C-4), 69.03 (C-2), 70.47 (C-4’), 72.02 (C-2’), 75.10 (C-5), 76.10 (C-5’), 82.48 (C-3), 83.62 (C-3’), 100.67 (C-1), 103.26 (C-1’), 116.72, 130.19, 133.93, 155.24 (6C, C6H4), 175.43, 175.79 (2 CO); HRMS: m/z: C24H33NNa2O16S2の計算値 [M+H]+: 702.1109, 実測値702.1104.
【０１４０】
クロロアセチル化ポリリジン（２４）
ポリリジン臭化水素酸塩（２３）（Ｓｉｇｍａ  Ｐ２６３６、ＭＷ３０−７０ｋＤ、０．５０ｇ、２．４ｍｍｏｌ）をアルゴン下でＤＭＦ（５ｍＬ）と２，６−ルチジン（１．２５ｍＬ）の混合物中に懸濁させた。懸濁液を０℃に冷却し、クロロ酢酸無水物（５１３ｍｇ、３．００ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１ｍＬ）中溶液をゆっくりと加えた。得られた透明な溶液を０℃で１６時間撹拌した。反応混合物をエタノール／エーテル撹拌溶液（１：１、４０ｍＬ）に滴下添加することによって、生成物を沈殿させた。沈殿物を濾別し、エタノール／エーテル（１：１、２０ｍＬ）で洗浄し、濃縮することによって、２４を得た（４４９ｍｇ、９６％）。１Ｈ  ＮＭＲデータは文献の値と合致した（G. Thomaら, J Am Chem Soc 1999, 121:p5919-5929）。
【０１４１】
最小ＨＮＫ−１ポリマー（２５）
２４（８０．２ｍｇ、０．３９ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（４ｍＬ）中溶液に、２２（１１０ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）、水（２００μＬ）及びＤＭＦ（０．８ｍＬ）中ＤＢＵ（８８μＬ、０．５９ｍｍｏｌ）を続いて加えた。１時間撹拌後、チオグリセロール（１０２μＬ、１．１８ｍｍｏｌ）及びＴＥＡ（１６４μＬ、１．１８ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を１８時間撹拌した。エタノール／エーテル撹拌溶液（１：１、３０ｍＬ）に反応混合物を滴下添加することによって、生成物を沈殿させた。沈殿物を濾別し、エタノール／エーテル（１：１、１５ｍＬ）で洗浄し、乾燥させた。限外濾過法の手段によりさらなる精製を行った。乾燥した生成物を水（１０ｍＬ）に溶解し、２つのＳａｒｔｏｒｉｕｓ  Ｓｔｅｄｉｍ  Ｖｉｖａｓｐｉｎ  ６チューブ（容量、６ｍＬ、直径、１７ｍｍ、分子量カットオフ５０００）を使用して、超遠心分離を実施した。毎回水を容量まで満たしながら、限外濾過法を１０ｍＬから３ｍＬまで４回繰り返した。凍結乾燥によりＨＮＫ−１ポリマー２５を得た（１３９ｍｇ、７０％）。１Ｈ  ＮＭＲによると、生成物は、ポリマーに連結している約４４％モノマー炭水化物単位を含有した。
【０１４２】
スキーム3:最小HNK-1ポリマー30の合成
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試薬及び条件：ａ）ＴＥＡ、ＣＨＣｌ３、４６％；ｂ）ＡＩＢＮ、ベンゼン、８４％；ｃ）ｉ．ＤＭＦ、ＤＭＳＯ、ＤＢＵ、ＴＥＡ；ｉｉ．ＭｅＮＨ２／ＭｅＯＨ、３９％。
【０１４３】
２，５−ジオキソピロリジン−１−イルアクリレート（２８）
Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（２７）（６．４１ｇ、５５．８ｍｍｏｌ）及びＮＥｔ３（８．５ｍＬ、６１．０ｍｍｏｌ）のＣＨＣｌ３（１００ｍＬ）中冷却（氷槽）溶液に、アルゴン下で塩化アクリロイル（２６）を滴下添加した。添加の間、混合物の温度を１２℃未満に保持した。２．５時間撹拌後、反応混合物を氷−水（１００ｍＬ）、水（１００ｍＬ）、及びブライン（１００ｍＬ）で続いて洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、真空下で１５ｍＬに濃縮し、セライトのパッドを介してろ過した。セライトをＣＨＣｌ３（１５ｍＬ）で洗浄し、濾液をＥｔＯＡｃ（２ｍＬ）及び石油エーテル（１１ｍＬ）で希釈し、−２０℃で一晩保存した。形成された沈殿物を濾別し、真空下で乾燥させることによって、白色の針状物質として２８を生成した（４．３０ｇ、２５．４ｍｍｏｌ、４６％）。
【０１４４】
活性化ポリアクリレート（２９）
２８（２．１０ｇ、１２．４ｍｍｏｌ）及びＡＩＢＮ（１３３ｍｇ、０．８１ｍｍｏｌ）のドライベンゼン（１００ｍＬ）中溶液を６０℃で１日加熱した。形成された沈殿物を濾別し、ドライＴＨＦで洗浄し、真空下で乾燥させることによって、白色の固体として２９を得た（１．７０ｇ、８１％）。標準物質として使用されるＶａｒｉａｎポリスチレン較正キットＳ−Ｍ２−１０を用いて、２９の分子量をゲル浸透クロマトグラフィー（ＧＰＣ）で判定した。Ｍｎ＝１３．９ｋＤ、Ｍｗ＝５５．３ｋＤ、Ｍｚ＝１２７．４ｋＤ、Ｍｐ＝３９．０ｋＤ、Ｍｗ／Ｍｎ＝３．９９。
【０１４５】
最小ＨＮＫ−１ポリマー（３０）
化合物２２（５１ｍｇ、０．０８５ｍｍｏｌ）、ＤＢＵ（１０．５ｍｇ、０．１８３ｍｍｏｌ）及びポリマー２９（２９ｍｇ）をＤＭＦ（０．５ｍＬ）及びＤＭＳＯ（１ｍＬ）に溶解した。反応混合物を１８時間撹拌した。次いで、ＭｅＮＨ２（０．５ｍＬ、ＭｅＯＨ中３３％溶液）を加え、撹拌を１９時間継続した。混合物を水（１Ｌ）中の１０ｋＤカットオフ膜、ａｑ．ギ酸アンモニウム（４０ｍＭ、１Ｌ）、ａｑ．ギ酸アンモニウム（６０ｍＭ、２×１Ｌ）、及び水（２×１Ｌ）で続いて透析した。最終的な凍結乾燥により、アンモニウム塩として最小ＨＮＫ−１ポリマー３０を得た（２７ｍｇ、３９％）。１Ｈ  ＮＭＲによると、生成物は、ポリマーに連結しているモノマー炭水化物単位の約５０％を含有した。
【０１４６】
患者血清
４名の患者（男性３名及び女性１名）の血清を調査した。患者はすべてモノクローナルＩｇＭ免疫グロブリン血症に対して試験で陽性と判定され、Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｈｏｓｐｉｔａｌ  ｏｆ  Ｂａｓｅｌ（Ｂａｓｅｌ、Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）で抗ＭＡＧニューロパシーと診断された。血清抗ＭＡＧ抗体力価をＥＬＩＳＡアッセイで判定した（Ｂｕｈｌｍａｎｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、Ｓｃｈｏｎｅｎｂｕｃｈ、Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）。モノクローナルＩｇＭ免疫グロブリン血症及び陰性の抗ＭＡＧ活性を有する２名の患者からの血清はコントロールとしての役目を果たした。血清の使用は、Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｈｏｓｐｉｔａｌ  ｏｆ  Ｂａｓｅｌの倫理委員会により認可された。
【０１４７】
競合的結合アッセイ
抗ＭＡＧＥＬＩＳＡキット（Ｂｕｈｌｍａｎｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、Ｓｃｈｏｎｅｎｂｕｃｈ、Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）を化合物１、２及び２５の生物学的評価に使用した。ヒト脳からの精製されたＭＡＧをコーティングした９６ウェルプレートを、洗浄緩衝液（３００μｌ／ウェル）で４回洗浄し、その後、７つの異なる濃度の炭水化物リガンド（モノマー１及び２に対して０．０５−５０ｍＭ並びにポリマー２５に対して０．０５−５’０００ｎＭ）、２５μｌ／ウェルを加えた。抗ＭＡＧ  ＩｇＭ抗体を含有する患者の血清を適当な希釈で、２５μｌ／ウェル加えた。測定を二重に行った。プレートをプレートシーラーで覆い、５℃で２時間インキュベートした。ウェルを洗浄緩衝液（３００μｌ／ウェル）で４回洗浄した後、酵素標識したＩｇＭ（保存剤を有するタンパク質ベースの緩衝液中の西洋わさびペルオキシダーゼにコンジュゲートした抗−ヒトＩｇＭ抗体）を加えた（１００μｌ／ウェル）。プレートを５℃で２時間インキュベートした。ウェル（４×３００μｌ／ウェル）を洗浄した後、テトラメチルベンジジン（過酸化水素を有するクエン酸塩緩衝剤中ＴＭＢ）の基質溶液を加え（１００μｌ／ウェル）、日光から保護したプレートを８００ｒｐｍ及び室温（ｒｔ）でさらに３０分間インキュベートした。最終的に、停止液（０．２５Ｍ硫酸）を加え（１００μｌ／ウェル）、マイクロプレートリーダー（Ｓｐｅｃｔｒａｍａｘ  １９０、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ、Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ、ＵＳＡ）を用いて、４５０ｎｍで吸収測定することにより、比色反応の度合を判定した。
【図１】
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【図２（ａ）−（ｃ）】
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【図２（ｄ）−（ｅ）】
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