(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ジエチル−［６−（４−ヒドロキシカルバモイル−フェニルカルバモイルオキシメチル）−ナフタレン−２−イル−メチル］−アンモニウムクロリドまたは薬学的に許容されるその塩および／もしくは溶媒和物を含み、
０．５から１５ｍｇ／ｋｇ／日の範囲の量で小児患者に投与されることを特徴とするデュシェンヌ型筋ジストロフィー小児患者治療用医薬組成物。
【請求項２】
毎日ベースで小児患者に投与されることを特徴とする、請求項１に記載の筋ジストロフィー小児患者治療用医薬組成物。
【請求項３】
１から１０ｍｇ／ｋｇ／日の範囲の量で小児患者に投与されることを特徴とする、請求項１に記載の筋ジストロフィー小児患者治療用医薬組成物。
【請求項４】
少なくとも１種の生理学的に許容される添加剤と共にそれを含む医薬組成物の形態で小児患者に投与されることを特徴とする、請求項１から３のいずれか一項に記載の筋ジストロフィー小児患者治療用医薬組成物。
【請求項５】
前記医薬組成物は、経口、舌下、経直腸、血管内、静脈内、皮下経路によって、投与されることを特徴とする、請求項４に記載の筋ジストロフィー小児患者治療用医薬組成物。
【請求項６】
前記医薬組成物は、経口経路によって投与されることを特徴とする、請求項５に記載の筋ジストロフィー小児患者治療用医薬組成物。
【請求項７】
前記医薬組成物は、固体の形態または液体の形態であることを特徴とする、請求項４に記載の筋ジストロフィー小児患者治療用医薬組成物。
【請求項８】
前記固体の形態は、散剤、錠剤、顆粒剤、凝集体、圧縮またはコートされた丸剤、硬質またはゼラチンカプセル剤から選択されることを特徴とする、請求項７に記載の筋ジストロフィー小児患者治療用医薬組成物。
【請求項９】
前記液体の形態は、懸濁剤またはシロップ剤であることを特徴とする、請求項７に記載の筋ジストロフィー小児患者治療用医薬組成物。
【請求項１０】
少なくとも１種の抗炎症活性薬と共に小児患者に投与されることを特徴とする、請求項１から９のいずれか一項に記載の筋ジストロフィー小児患者治療用医薬組成物。
【請求項１１】
前記少なくとも１種の抗炎症活性薬は、ステロイド薬であることを特徴とする、請求項１０に記載の筋ジストロフィー小児患者治療用医薬組成物。
【請求項１２】
前記少なくとも１種の抗炎症活性薬は、グルココルチコイド副腎皮質ステロイド薬であることを特徴とする、請求項１１に記載の筋ジストロフィー小児患者治療用医薬組成物。
【請求項１３】
前記少なくとも１種のステロイド薬は、プレドニゾロン、プレドニゾン、デフラザコート、ヒドロコルチゾン、メチルプレドニゾロン、デキサメタゾン、ベタメタゾン、トリアムシノロン、ベクロメタゾン、フルドロコルチゾン酢酸エステル、デオキシコルチコステロン酢酸エステルからなる群から選択されることを特徴とする、請求項１１または１２に記載の筋ジストロフィー小児患者治療用医薬組成物。
【請求項１４】
少なくとも１種の抗炎症活性薬と共に、同時に、別々にまたは逐次に投与されることを特徴とする、請求項１０に記載の筋ジストロフィー小児患者治療用医薬組成物。
【請求項１５】
ジエチル−［６−（４−ヒドロキシカルバモイル−フェニルカルバモイルオキシメチル）−ナフタレン−２−イル−メチル］−アンモニウムクロリドは、一水和物の形態であることを特徴とする、請求項１から１４のいずれか一項に記載の筋ジストロフィー小児患者治療用医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ジエチル−［６−（４−ヒドロキシカルバモイル−フェニル−カルバモイルオキシ−メチル）−ナフタレン−２−イル−メチル］−アンモニウムクロリドまたは他の薬学的に許容されるその塩および／もしくは溶媒和物を、このような治療を必要とする患者に投与することを含む、筋ジストロフィーを治療する方法に関する。
【０００２】
本発明は、ジエチル−［６−（４−ヒドロキシカルバモイル−フェニル−カルバモイルオキシ−メチル）−ナフタレン−２−イル−メチル］−アンモニウムクロリドまたは他の薬学的に許容されるその塩および／もしくは溶媒和物を１または複数の追加の抗炎症活性薬と組み合わせて、このような治療を必要とする患者に投与することを含む、筋ジストロフィーを治療する方法にさらに関する。
【背景技術】
【０００３】
筋ジストロフィー（ＭＤｓ）には、常に筋変性および機能障害を引き起こす多様な一群の遺伝的疾患が含まれる。ほぼ３０個の遺伝子の突然変異は、様々な形態の筋ジストロフィーを引き起こし、これらは、発症年齢、重症度、および発症した筋肉群が異なる（非特許文献１参照）。
【０００４】
最も一般的なＭＤは、デュシェンヌ型筋ジストロフィー（ＤＭＤ）、最終的には歩行不能および１０歳代の内での死亡を引き起こす筋変性の急速な進行で特徴付けられる、３，５００名の男性中の１名に発症する重篤な劣性Ｘ連鎖疾患である。
【０００５】
遺伝子治療または細胞治療により、変異遺伝子を置き換えるまたは補正しようとする試みは、筋ジストロフィーに対する決定的な解決策となる可能性があるが、達成するのは容易ではない。筋変性を防止または遅延させ、炎症を減少させまたは筋代謝もしくは筋再生を促進する代替の戦略は、患者にたいへん恩恵をもたらし、将来、遺伝子治療または細胞治療と共同作用を与える可能性がある。炎症を低減させるステロイドは、現在、大多数のＤＭＤ患者に使用される唯一の治療ツールである（非特許文献２参照）。
【０００６】
ジエチル−［６−（４−ヒドロキシカルバモイル−フェニル−カルバモイルオキシ−メチル）−ナフタレン−２−イル−メチル］−アンモニウムクロリド、これについては、共に参照により本明細書に援用される特許文献１（無水形態）および特許文献２（一水和物結晶形態）に記載されているところであるが、大多数の炎症促進性サイトカインの合成を阻害し、一方、抗炎症性サイトカインを保持する抗炎症薬である。
【０００７】
ジエチル−［６−（４−ヒドロキシカルバモイル−フェニル−カルバモイルオキシ−メチル）−ナフタレン−２−イル−メチル］−アンモニウムクロリドは、ＩＴＦ２３５７としても知られている。
【０００８】
ジエチル−［６−（４−ヒドロキシカルバモイル−フェニル−カルバモイルオキシ−メチル）−ナフタレン−２−イル−メチル］−アンモニウムクロリドの一水和物結晶形態は、ギビノスタット（”Ｇｉｖｉｎｏｓｔａｔ”）として知られている。
【０００９】
ギビノスタットは、骨髄増殖性疾患、真性赤血球増加症、周期熱症候群、クローン病および全身型若年性特発性関節炎の治療に関する試験を含めて、いくつかの臨床試験において評価されている。オーファンドラッグの指定が、Ｅ．Ｕ．において、全身型若年性特発性関節炎の治療に対して、および真性赤血球増加症の治療に対して付与された。
【００１０】
ギビノスタットは、最近、ヒストンデアセチラーゼ阻害薬の作用をすることが見出されている（特許文献３参照）。
【００１１】
ヒストンデアセチラーゼ（ＨＤＡＣ）は、ヒストンまたは他のタンパク質のＮ−末端部において、リシン残基に結合しているアセチル基を除去することが可能な酵素の一群である。
【００１２】
ＨＤＡＣは、構造上の相同性に基づいて４つのクラスに細分することができる。クラスＩＨＤＡＣ（ＨＤＡＣ１、２、３および８）は、ＲＰＤ３酵母菌タンパク質に類似しており、細胞核中に位置している。クラスＩＩＨＤＡＣ（ＨＤＡＣ４、５、６、７、９および１０）は、ＨＤＡ１酵母菌タンパク質に類似しており、核中および細胞質中の両方に位置している。クラスＩＩＩＨＤＡＣは、構造的に明確な、ＳＩＲ２酵母菌タンパク質に関連付けられているＮＡＤ依存性酵素の形態である。クラスＩＶ（ＨＤＡＣ１１）は、今のところ、特定の構造上の特徴を有する単一酵素から構成されている。クラスＩ、ＩＩおよびＩＶのＨＤＡＣは、亜鉛酵素であり、様々なクラスの分子：ヒドロキサム酸誘導体、環状テトラペプチド、短鎖脂肪酸、アミノベンズアミド、求電子性ケトンの誘導体等によって阻害される可能性がある。クラスＩＩＩＨＤＡＣは、ヒドロキサム酸によって阻害されず、その阻害薬は、他のクラスのものとは異なる構造上の特徴を有する。
【００１３】
本発明に関して、「ヒストンデアセチラーゼ阻害薬」という表現は、クラスＩ、クラスＩＩまたはクラスＩＶのヒストンデアセチラーゼとして分類される少なくとも１種の酵素の活性を阻害することが可能な、天然起源、組換え起源は合成起源の任意の分子を意味するものと理解される。
【００１４】
ＨＤＡＣ阻害薬は、クラスとして、抗腫瘍薬として潜在的に有用であると考えられるが、現在まで、これらの２種（ボリノスタットおよびロミデプシン）のみが、単一腫瘍形態（皮膚Ｔ細胞リンパ腫）の治癒のための薬物として認可されていることに留意する価値がある。
【００１５】
各ＨＤＡＣ阻害薬の医薬特性は異なる可能性があり、多様なアイソエンザイムと関連した阻害能力の特定のプロファイルに、ならびに個々の薬物動態挙動および組織分布に依存することは明らかである。
【００１６】
いくつかのＨＤＡＣ阻害薬は、ＤＭＤの治療のために、他の薬剤との組合せで潜在的に有用であることが特許請求に記載されている（特許文献４および５、ならびに非特許文献３参照）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１７】
【特許文献１】国際公開第９７／４３２５１号
【特許文献２】国際公開第２００４／０６５３５５号
【特許文献３】国際公開第２０１１／０４８５１４号
【特許文献４】国際公開第２００３／０３３６７８号
【特許文献５】国際公開第２００４／０５００７６号
【非特許文献】
【００１８】
【非特許文献１】Ｄａｌｋｉｌｉｃ  Ｉ，Ｋｕｎｋｅｌ  ＬＭ．（２００３）Ｍｕｓｃｌａｒ  ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｅｓ：ｇｅｎｅｓ  ｔｏ  Ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ．Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｇｅｎｅｔ．Ｄｅｖ．１３：２３１−２３８
【非特許文献２】Ｃｏｓｓｕ  Ｇ，Ｓａｍｐａｏｌｅｓｉ  Ｍ．（２００７）  Ｎｅｗ  ｔｈｅｒａｐｉｅｓ  ｆｏｒ  Ｄｕｎｃｈｅｎｎｅ  ｍｕｓｃｕｌａｒ  ｄｙｓｔｒｏｐｈｙ：ｃｈａｌｌｅｎｇｅｓ，ｐｒｏｓｐｅｃｔｓ  ａｎｄ  ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｔｒｉａｌｓ．ＴＲＥＮＤＳ  Ｍｏｌ．Ｍｅｄ．１３：５２０−５２６
【非特許文献３】Ｃｏｎｓａｌｖｉ  Ｓ．ｅｔ  ａｌ．Ｈｉｓｔｏｎｅ  Ｄｅａｃｅｔｙｌａｓｅ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｍｕｓｃｕｌａｒ  Ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｅｓ：Ｅｐｉｇｅｎｉｔｉｃ  Ｄｒｕｇｓ  ｆｏｒ  Ｇｅｎｅｔｉｃ  Ｄｉｓｅａｓｅｓ．（２０１１）Ｍｏｌ．Ｍｅｄ．１７：４５７−４６５
【非特許文献４】Ｖｏｊｉｎｏｖｉｃ  Ｊ，Ｎｅｍａｎｊａ  Ｄ．（２０１１）ＨＤＡＣ  Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｉｎ  Ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ  Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  ａｎｄ  Ｊｕｖｅｎｉｌｅ  Ｉｄｉｏｐａｔｈｉｃ  Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ．Ｍｏｌ．Ｍｅｄ  １７：３９７−４０３
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１９】
しかし、ＤＭＤにおけるＨＤＡＣ阻害薬の潜在的な治療への使用は、特に小児科の患者で長期療法に使用される場合、これらの比較的有毒な薬剤の起こり得る有害な作用によって阻止され得る。
【００２０】
ギビノスタットは、抗炎症薬として、全身型若年性特発性関節炎を有する小児におけるフェーズＩＩ試験にすでに使用されている。１．５ｍｇ／ｋｇ／日で１２週投与されたギビノスタットは、ＡＣＲ  Ｐｅｄｉ  ３０、５０および７０の評価基準で、約７０％の改善が得られ（非特許文献４参照）、限られた数の軽度または中等度であるが持続時間の短い有害作用のみを示した。
【００２１】
現在のところ、５００名を超える患者（小児２９名を含めて）が、ギビノスタットで治療されている。
【００２２】
反復投与毒性試験をイヌ、ラットおよびサルで実施した。経口１日量の薬物を最大で連続９カ月投与した。この薬物は、高用量において、明白な毒性なしで良好な耐用性を示した。「最大無毒性量」（ＮＯＡＥＬ）は、動物種および治療の期間に応じて、１０から２５ｍｇ／ｋｇ／日の範囲である。
【００２３】
若年の動物において、６０ｍｇ／ｋｇ／日のギビノスタットは、行動的発育および身体的発育ならびに子の生殖能力に影響を及ぼさなかった。
【００２４】
ギビノスタットに対して、インビトロにおけるマウスリンパ腫アッセイおよび染色体異常アッセイ、ならびにインビボにおける小核試験およびＵＤＳ試験で遺伝毒性作用は検出されなかった。
【課題を解決するための手段】
【００２５】
我々は、ジエチル−［６−（４−ヒドロキシカルバモイル−フェニル−カルバモイルオキシ−メチル）−ナフタレン−２−イル−メチル］−アンモニウムクロリドの投与は、筋変性を阻害または遅延させ、炎症を軽減し、筋代謝または筋再生を促進することができることを見出している。
【００２６】
したがって、本発明の目的は、ジエチル−［６−（４−ヒドロキシカルバモイル−フェニルカルバモイルオキシメチル）−ナフタレン−２−イル−メチル］−アンモニウムクロリド、好ましくは一水和物の形態で、より好ましくは一水和物結晶の形態で、または他の薬学的に許容されるその塩および／もしくは溶媒和物を、このような治療を必要とする患者に投与することを含む筋ジストロフィーを治療する方法である。
【００２７】
筋ジストロフィーは、好ましくはデュシェンヌ型筋ジストロフィーである。
【００２８】
本発明の、ジエチル−［６−（４−ヒドロキシカルバモイル−フェニルカルバモイルオキシメチル）−ナフタレン−２−イル−メチル］−アンモニウムクロリド、好ましくは一水和物の形態で、より好ましくは一水和物結晶の形態で、または他の薬学的に許容されるその塩および／もしくは溶媒和物は、０．５から１５ｍｇ／ｋｇ／日、好ましくは１から１０ｍｇ／ｋｇ／日の範囲の量で投与される。より好ましくは、それは毎日投与される。
【００２９】
本発明の目的では、ジエチル−［６−（４−ヒドロキシカルバモイル−フェニルカルバモイルオキシメチル）−ナフタレン−２−イルメチル］−アンモニウムクロリド（または他の薬学的に許容されるその塩および／もしくは溶媒和物）は、それを少なくとも１種の生理学的に許容される添加剤と共に含む医薬組成物の形態で投与される。
【００３０】
医薬組成物は、好ましくは経腸および／または非経口経路によって、好ましくは経口、舌下、経直腸、血管内、静脈内、皮下経路によって、より好ましくは経口経路によって患者に投与される。
【００３１】
医薬組成物は、固体の形態または液体の形態に調合することができる。好ましくは、固体の形態は、錠剤、顆粒剤、凝集体、圧縮またはコートされた丸剤、硬質またはゼラチンカプセル剤から選択され、液体の形態は、懸濁剤またはシロップ剤から選択される。
【００３２】
本発明の医薬組成物は、単位剤形当たり、好ましくは７．５から２００ｍｇ、より好ましくは２５から１５０ｍｇのジエチル−［６−（４−ヒドロキシカルバモイル−フェニルカルバモイルオキシメチル）−ナフタレン−２−イル−メチル］−アンモニウムクロリドまたは他の薬学的に許容されるその塩および／もしくは溶媒和物を含有する。
【００３３】
本発明の目的では、ジエチル−［６−（４−ヒドロキシカルバモイル−フェニルカルバモイルオキシメチル）−ナフタレン−２−イル−メチル］−アンモニウムクロリドまたは他の薬学的に許容されるその塩および／もしくは溶媒和物は、単独で有効に投与することができ、または少なくとも１種の追加の抗炎症活性薬と組み合わせて投与することができる。
【００３４】
本発明の好ましい実施形態によれば、前記「少なくとも１種の追加の抗炎症活性薬」はステロイド薬である。
【００３５】
ステロイド薬は、好ましくはグルココルチコイド副腎皮質ステロイド薬、より好ましくは、これは、プレドニゾロン、プレドニゾン、デフラザコート、ヒドロコルチゾン、メチルプレドニゾロン、デキサメタゾン、ベタメタゾン、トリアムシノロン、ベクロメタゾン、フルドロコルチゾン酢酸エステル、デオキシコルチコステロン酢酸エステルからなる群から選択され、さらに好ましくは、これは、プレドニゾロンおよびデフラザコートから選択される。
【００３６】
本発明による併用療法には、ジエチル−［６−（４−ヒドロキシカルバモイル−フェニルカルバモイルオキシメチル）−ナフタレン−２−イルメチル］−アンモニウムクロリドまたは他の薬学的に許容されるその塩および／もしくは溶媒和物、および少なくとも１種の追加の抗炎症活性薬を含む単一医薬投与製剤の投与、ならびにジエチル−［６−（４−ヒドロキシカルバモイル−フェニルカルバモイルオキシメチル）−ナフタレン−２−イルメチル］−アンモニウムクロリドまたは他の薬学的に許容されるその塩および／もしくは溶媒和物、および少なくとも１種の追加の抗炎症活性薬（それぞれが、それら自体の分離された医薬投与製剤中で）の投与が含まれる。
【００３７】
単一投与製剤が使用される場合、これは、７．５から２００ｍｇ、好ましくは２５から１５０のジエチル−［６−（４−ヒドロキシカルバモイル−フェニルカルバモイルオキシメチル）−ナフタレン−２−イル−メチル］−アンモニウムクロリドまたは薬学的に許容されるその塩および／もしくは溶媒和物、ならびに０．２５から２．５ｍｇ／ｋｇ、好ましくは０．５から１ｍｇ／ｋｇの少なくとも１種の抗炎症活性薬を含んでいてもよい。
【００３８】
分離された投与製剤が使用される場合、ジエチル−［６−（４−ヒドロキシカルバモイル−フェニルカルバモイルオキシメチル）−ナフタレン−２−イルメチル］−アンモニウムクロリドまたは他の薬学的に許容されるその塩および／もしくは溶媒和物、ならびに少なくとも１種の追加の活性薬は、本質的に同じ時間で、即ち同時に、または別々の時差で、即ち逐次に投与され得る。本発明による併用療法は、すべてのこれらのレジメンを含むものと理解される。
【００３９】
本発明の一実施形態によれば、特許請求にかかる方法のレシピエントは小児である。
【００４０】
より詳細には、ジエチル−［６−（４−ヒドロキシカルバモイル−フェニルカルバモイルオキシメチル）−ナフタレン−２−イル−メチル］−アンモニウムクロリドまたは他の薬学的に許容されるその塩および／もしくは溶媒和物は、単独でまたは少なくとも１種の追加の活性薬もしくはその医薬組成物と組み合わせて、０．５から１５ｍｇ／ｋｇ／日、好ましくは１．０から１０ｍｇ／ｋｇ／日の範囲の量で、好ましくは毎日小児に投与される。
【００４１】
以下の実施例は、本発明の範囲を限定するものではなく、それを例示することが意図される。
【図面の簡単な説明】
【００４２】
【図１】ＩＴＦ処理された群は、ＣＲＴ群に対して、消耗までにより長時間を有していることを示す。
【図２】ＩＴＦ処理群は、ＣＴＲ群に対して、増大した筋肉サイズを有していることを示す（Ａは、むき出しの全身、Ｂは、ｍｄｘから分離した後肢である）。
【図３】ギビノスタットによる処理期間の最後に、マッソントリクローム染色による「前脛骨」（ＴＡ）の断面領域を解析した結果、ＩＴＦ処理群に対して、繊維化（青色）領域の大きな減少がみられることを示す。
【発明を実施するための形態】
【００４３】
序論
実験に選択された動物モデルは、Ｃ５７ＢＬ／１０ＳｃＳｎ−Ｄｍｄｍｄｘ／Ｊマウス（以降「ｍｄｘ」）であった。ｍｄｘマウス、Ｘ連鎖ミオパチー突然変異体は、ヒトのデュシェンヌ型筋ジストロフィーに関する前臨床研究のための最も扱いやすくかつ利用しやすい疾患モデルである。ｍｄｘマウスは、エクソン中に一塩基置換を有し、これは、ポリペプチド鎖の中途終止を引き起こす。この突然変異は、Ｘ染色体連鎖性であり、筋肉タンパク質ジストロフィンが欠乏した、生存可能なホモ接合動物を発生し、筋肉酵素の高血清濃度を有し、ヒト筋ジストロフィーに類似している組織病変を有する。ｍｄｘの組織学的な特徴、連鎖、およびマップポジションは、これらのマウスをデュシェンヌ型筋ジストロフィーのふさわしい動物モデルにしている。Ｍｄｘマウスは、約３週齢から開始する進行性筋変性を有する。８週において、ｍｄｘの前肢の力が低下するが、後肢は正常な力を示す。これらの知見は、若年ｍｄｘマウスにおける筋壊死の急性期の進行を反映している（Ｇｒｏｕｎｄｓら、２００８）。８週齢において、ｍｄｘマウス中には筋萎縮、炎症および線維症が存在する（非特許文献３参照）。
【００４４】
実験の記述
２月齢ｍｄｘマウスを１０匹ずつ３群に無作為化した。
−  対照群（ＣＴＲ）をメチルセルロースの溶液（０．５％、胃菅栄養法）で１日１回９０日間処理した。
−  試験群（ＩＴＦ）をジエチル−［６−（４−ヒドロキシカルバモイル−フェニル−カルバモイルオキシ−メチル）−ナフタレン−２−イル−メチル］−アンモニウムクロリド  （ＩＴＦ２３５７）溶液（１０ｍｇ／Ｋｇ、胃菅栄養法）で１日１回９０日間処理した。
−  トリコスタチンＡ群（ＴＳＡ）をＴＳＡ溶液（０．６ｍｇ／Ｋｇ、腹腔内）で１日１回９０日間処理した。
【実施例】
【００４５】
（実施例１）
ギビノスタットによる９０日処理後のｍｄｘマウスの疲労耐性の向上（トレッドミル試験）
処理による効果を以下のプロトコールによるトレッドミル試験によってインビボにより運動性能に関して調査した：
走行：８ｃｍ／秒、５分間
５分後−２ｃｍ／分の斬進的増加
麻痺（Ｎｕｍｂ）：０．２ｍＡ（持続性）
プレート上で５〜１０秒を超えて停止したら走行の終了。
【００４６】
図１に示されるように、ＩＴＦ処理された群は、ＣＲＴ群より消耗までにより長時間を有していた。
【００４７】
（実施例２）
ギビノスタット処理によるｍｄｘマウスにおける筋サイズの増大（肉眼の評価）
上記実験の最後に、マウスを肉眼の評価による骨格筋解析のために屠殺した。
【００４８】
図２Ａ（むき出しの全身）、および図２Ｂ（ｍｄｘから分離した後肢）に示すように、ＩＴＦ処理群は、ＣＴＲ群に比較して増大した筋肉サイズを有していた。
【００４９】
（実施例３）
ギビノスタットによる処理されたｍｄｘマウスにおける線維症領域の減少（マッソントリクローム染色）
処理期間の最後に、マッソントリクローム染色による「前脛骨」（ＴＡ）の断面領域を解析した結果、図３に示されているようにＩＴＦ処理群に対して繊維化（青色）領域の大きな減少が判明した。
【図１】
0006502876.tif 000002
【図２】
0006502876.tif 000003
【図３】
0006502876.tif 000004