(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
シリビニン、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン、及び注射用有機溶媒を含有することを特徴とするシリビニン注射剤。
【請求項２】
シリビニン、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン、注射用有機溶媒、及び助溶剤を含有することを特徴とする請求項１に記載のシリビニン注射剤。
【請求項３】
下記成分で、重量体積比に基づいて調製されてなることを特徴とする請求項１乃至２のいずれか一項に記載のシリビニン注射剤。
シリビニン                                      ０．０５〜１．０％
スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン    ２〜５０％
注射用有機溶媒                                  ０．５〜１０％
助溶剤                                          ０〜１．０％
凍結乾燥支持剤                                  ０〜２０％
ｐＨ調整剤                                      ｐＨ値を２．０〜８．０に調整
注射用水                                        残量
【請求項４】
下記成分で、重量体積比に基づいて調製されてなることを特徴とする請求項３に記載のシリビニン注射剤。
シリビニン                                      ０．１〜０．８％
スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン    ２〜３０％
注射用有機溶媒                                  ０．５〜５％
助溶剤                                          ０．００１〜０．５％
凍結乾燥支持剤                                  ０〜１５％
ｐＨ調整剤                                      ｐＨ値を２．０〜７．０に調整
注射用水                                        残量
【請求項５】
下記成分で、重量体積比に基づいて調製されてなることを特徴とする請求項４に記載のシリビニン注射剤。
シリビニン                                      ０．１〜０．５％
スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン    ２〜１０％
注射用有機溶媒                                  １〜５％
助溶剤                                          ０．００５〜０．５％
凍結乾燥支持剤                                  ３〜１０％
ｐＨ調整剤                                      ｐＨ値を２．５〜６．０に調整
注射用水                                        残量
【請求項６】
前記注射用有機溶媒は、ポリエチレングリコール２００、ポリエチレングリコール３００、ポリエチレングリコール４００、ポリエチレングリコール６００、無水エタノール、プロピレングリコールのうちから選ばれる１種または複数種である請求項１乃至５のいずれか一項に記載のシリビニン注射剤。
【請求項７】
前記助溶剤は、ジステアロイルホスファチジルエタノールアミン−ポリエチレングリコール２０００、ジステアロイルホスファチジルエタノールアミン−ポリエチレングリコール５０００、ツイーン８０、ポリオキシエチレンヒマシ油、ポロキサマー１８８のうちから選ばれる１種または複数種である請求項２乃至５のいずれか一項に記載のシリビニン注射剤。
【請求項８】
前記凍結乾燥支持剤は、マンニトール、乳糖、デキストラン２０、デキストラン４０、デキストラン７０、スクロース、キシリトール、ソルビトール、トレハロースのうちから選ばれる１種または複数種である請求項３乃至５のいずれか一項に記載のシリビニン注射剤。
【請求項９】
前記ｐＨ調整剤は、クエン酸、塩酸、氷酢酸、リン酸、リン酸水素二ナトリウム、リン酸二水素ナトリウム、リン酸水素二カリウム、リン酸二水素カリウム、クエン酸二ナトリウム、クエン酸三ナトリウム、酢酸ナトリウムのうちから選ばれる１種または複数種である請求項３乃至５のいずれか一項に記載のシリビニン注射剤。
【請求項１０】
シリビニン注射溶液であることを特徴とする請求項１乃至９のいずれか一項に記載のシリビニン注射剤。
【請求項１１】
シリビニン注射溶液の調製方法であって、配合量のシリビニン、注射用有機溶媒を量り取り、必要に応じて助溶剤を加え、混合し、４０〜７０℃で加熱攪拌し、溶解させて、有機相を得、配合量のスルホブチルエーテル−β−シクロデキストリンを量り取り、適量の注射用水に入れ、攪拌して溶解させ、水相を得、有機相と水相を混合し、均一に混合してから、注射用水を用いて全量になるまで定容して、薬物溶液を得、ｐＨ調整剤を用いて薬物溶液のｐＨ値を２〜８に調整し、重量体積百分率で含有量が０．０５％〜０．５％である注射用活性炭を加え、１５〜６０分間吸着させてから、材料液を１μｍのチタン棒フィルタに通過させてろ過して炭素を除去し、０．２２μｍのフィルタエレメントを用いて除菌し、分けて包装、封止して、シリビニン注射溶液を得るステップを含むことを特徴とするシリビニン注射溶液の調整方法。
【請求項１２】
注射用シリビニン凍結乾燥粉末注射剤であることを特徴とする請求項１乃至９のいずれか一項に記載のシリビニン注射剤。
【請求項１３】
注射用シリビニン凍結乾燥粉末注射剤の調製方法であって、配合量のシリビニン、注射用有機溶媒を量り取り、必要に応じて助溶剤を加え、混合し、４０〜７０℃で加熱攪拌し、溶解させて、有機相を得、配合量のスルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン、凍結乾燥支持剤を量り取り、適量の注射用水に入れ、攪拌して溶解させ、水相を得、有機相と水相を混合し、均一に混合してから、注射用水を用いて全量になるまで定容して、薬物溶液を得、ｐＨ調整剤を用いて薬物溶液のｐＨ値を２〜８に調整し、重量体積百分率で含有量が０．０５％〜０．５％である注射用活性炭を加え、１５〜６０分間吸着させてから、材料液を１μｍのチタン棒フィルタに通過させてろ過して炭素を除去し、０．２２μｍのフィルタエレメントを用いて除菌し、分けて包装、凍結乾燥、封止して、シリビニン凍結乾燥粉末注射剤を得るステップを含むことを特徴とする注射用シリビニン凍結乾燥粉末注射剤の調製方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、医薬品技術分野に関し、具体的にはシリビニン注射剤及びその調製方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
シリビニン（Ｓｉｌｙｂｉｎ）は、キク科薬用植物のマリアアザミ種子の種皮から抽出して得られるフラボノイド化合物であり、フラボノイド類の化合物は、水溶性と脂溶性がいずれもより低い。その化学式は下記の通りである。
【化１】
0006592091.tif 000002
【０００３】
シリビニンは顕著な肝保護作用を有し、四塩化炭素、チオアセトアミド、ムスカリン、ファロイジン、モノクロタリン等の肝臓の毒物による種々のタイプの肝損傷に様々な程度の保護と治療作用を有し、さらに四塩化炭素によるアラニンアミノトランスフェラーゼの上昇に対しても一定の抑制作用を有する。シリビニンは理想的な肝損傷修復薬物として、急・慢性肝炎、肝線維化、並びに初期肝硬変などの肝臓病の治療に臨床的に幅広く用いられている。薬効が高く、毒性が低い（于楽成、顧長海、シリマリン薬理学の効果の研究進展［Ｊ］。中国医院薬学雑誌、２００１，２１（８）：４９３−４９４．）ため、シリビニンは発現されてから今まで注目を集め続けている。
【０００４】
現在、中国国内に市販されている製剤には、シリビニンメグルミン錠剤（承認番号：国薬準字Ｈ３２０２６２３３、メーカー：中国江蘇中興薬業有限会社；承認番号：国薬準字Ｈ３３０２２１８２、メーカー：中国浙江東日薬業有限会社）及びシリビニンカプセル（商品名：水林佳、承認番号：国薬準字Ｈ２００４０２９９、メーカー：中国天津天士力製薬株式有限会社．）があり、該製剤はいずれも経口製剤に属する。しかしながら、シリビニンは、水溶性と脂溶性がいずれも低い（王鴻辰、シリマリンの溶解性能の研究［Ｊ］．医学通報雑誌，１９８３，１９（１２）：２３−２５．）ため、経口のバイオアベイラビリティーが低く、初回通過効果がより大きい。レポートによれば、経口によりシリビニンを投与した後の絶対バイオアベイラビリティーが０．９５％にすぎず（Ｗｕ  ＪＷ，ｅｔ  ａｌ．Ａｎａｌｙｓｉｓ  ｏｆ  ｓｉｌｉｂｉｎｉｎ  ｉｎ  ｒａｔ  ｐｌａｓｍａ  ａｎｄ  ｂｉｌｅ  ｆｏｒ  ｈｅｐａｔｏｂｉｌｉａｒｙ  ｅｘｃｒｅｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｏｒａｌ  ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ  ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｊ  Ｐｈａｒｍ  Ｂｉｏｍｅｄ  Ａｎａｌ，２００７，４５（４）：６３５−６４１．）、シリビニンの経口製剤の薬効発現を顕著に低下させる。そのため、研究者らはシリビニンのバイオアベイラビリティーを向上させることで、薬効をさらに発現させようとするものである。
【０００５】
多くの医薬従事者は、塩化、可溶化、固体分散体等の技術を採用し、シリビニンの溶出度を向上させ、その経口吸収率を向上させようとしたが、いずれも良好な効果を得ることができなかった。なお、中国天津天士力製薬株式有限会社は、シリビニンのリン脂質複合物（共通名：シリビニンカプセル、商品名：水林佳、承認番号：国薬準字Ｈ２００４０２９９）を開発し、既に市場で販売されている。研究により、その溶出度及びバイオアベイラビリティーがいずれも一般のシリビニン経口製剤より顕著に向上し、バイオアベイラビリティーが３〜５倍向上したことが明らかであるが（Ｆｉｌｂｕｒｎ  ＣＲ，ｅｔ  ａｌ．Ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ  ｏｆ  ｓｉｌｙｂｉｎ−ｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｃｈｏｌｉｎｅ  ｃｏｍｐｌｅｘ  ｉｎ  ｄｏｇｓ［Ｊ］．Ｊ  Ｖｅｔ  Ｐｈａｒｍｃｃｏｌ  Ｔｈｅｒ，２００７，３０（２）：１３２−１３８．ｓｉｌｙｂｉｎ−ｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｃｈｏｌｉｎｅ  ｃｏｍｐｌｅｘ［Ｍ］．Ａｌｔｅｒｎ  Ｍｅｄ  Ｒｅｖ，ＩＤ：  Ｔｈｏｒｎｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，Ｉｎｃ．２００９，１４（４）：３８５−３９０．）、そのバイオアベイラビリティーは依然として十分に理想的ではない。そのため、研究者らはシリビニンの注射剤を開発して、経口のバイオアベイラビリティーの低い問題を根本から解決することを考えている。
【０００６】
宋贇梅等（宋贇梅等．シリビニンナノエマルジョンの調製及びカイウサギ体内の薬物動態学［Ｊ］．中国薬科大学学報、２００５，３６（５）：４２７．）は、シリビニンナノエマルジョンを研究開発し、シリビニンの溶解度が低いため、処方に多量のポリオキシエチレンヒマシ油（Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ  ＲＨ）を添加しているが、該材料は重度のアレルギー反応と溶血性を有し、安全性が低く、さらに、シリビニンはアルカリ性条件において、水に溶解するため、シリビニンメチルアンモニウム塩注射剤を研究開発した科学研究者がいるが、シリビニンはアルカリ性環境において非常に不安定で、該注射液の長期間貯蔵の安定性が低く、分解が発生しやすいため、シリビニンのメグルミン溶液を凍結乾燥粉末注射剤に調製した研究者もいるが、その放置の安定性の問題は解決できたが、シリビニンメチルアンモニウム塩水溶液のｐＨ値が１１程度で、注射の際に局所刺激性が大きく、不良反応が多い。近年、シリビニンの臨床的な使用により、シリビニンの治療効果が確実でかつそれ自身の毒性が極めて低く、さらにシリビニンの臨床的な応用が極めて幅広いことが明らかであり、安全、注射可能なシリビニン製剤を開発し、そのバイオアベイラビリティーを向上させ、その薬理作用を十分に発揮させ、薬効を大幅に向上させることができれば、必ず巨大な経済及び社会的な効果と利益を生じることが明らかである。
【０００７】
シクロデキストリン包接化合物は、薬物分子をシクロデキストリン分子の空孔構造中に包埋することにより、水難溶性薬物の溶解問題を解決する。しかしながら、β−シクロデキストリン、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン等のような従来のシクロデキストリン類材料が、顕著な溶血性または腎臓毒性を有することは公知である。中国特許出願ＣＮ２００４１００４１３６４．０は、発明の名称が「マリアアザミ抽出物のシクロデキストリン包接化合物の調製方法及びその薬物製剤」で、公開番号がＣＮ１５９３５１Ａであるものであり、その中核的な技術的特徴は、マリアアザミ抽出物とシクロデキストリン用エタノールまたはイソプロパノールを共に溶解し、次いで減圧蒸発してエタノールまたはイソプロパノールを除去し、その後、幾らかの賦形剤を添加し、経口製剤に作製するかまたはそのまま注射用の無菌粉末に分けて包装することである。その特許請求の範囲及び明細書に記載のシクロデキストリンの種類は、β−シクロデキストリン、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、ヒドロキシエチル−β−シクロデキストリン、メチル−β−シクロデキストリン、グルコシル基−β−シクロデキストリン、スルホ基−β−シクロデキストリンであり、これらのシクロデキストリンは依然として毒の副作用の大きい従来のシクロデキストリンであり、実質的に静脈注射に使用される製剤を得ることができないため、実施例全体は経口製剤を主とし、かつ上記シクロデキストリンに対するさらなるマッチング性研究は行われていない。試験により、該特許に開示されるシクロデキストリンの種類はいずれも安定なシクロデキストリン注射液を調製することができない（本発明の実施例１を参照）ことが明らかになり、中国特許出願ＣＮ０２１２５８２３．６は、発明の名称が「シクロデキストリンまたはその誘導体を含有するシリマリン注射液」で、公開番号がＣＮ１３９１８９４Ａであるものであり、その明細書に記載されている実施方案によると、その中核的な技術的特徴は、シリマリンをシクロデキストリン含有の水溶液に投入してから、水酸化ナトリウムを用いて溶液のｐＨをアルカリ性に調整し、シリビニンを溶解させ、次いで塩酸を用いてｐＨ値を６．０〜６．５に調整して、シリマリンのシクロデキストリン包接化合物を得ることであり、ここで、シクロデキストリン種類は上記特許（中国特許出願ＣＮ２００４１００４１３６４．０）出願と完全に同じである。試験の検証によって、シリビニンが水酸化ナトリウムのアルカリ性水溶液に溶解する過程において、溶液の色が徐々に濃くなり、最後には黄緑色の溶液になり、全波長スキャンよって、元の２８７．５ｎｍの箇所に大きい吸収を有する他、３２６．０ｎｍの箇所により一層大きい吸収ピークが出現することを見出し、これは水酸化ナトリウムがシリマリンの構造に対して顕著な破壊作用を有することを説明し、そのため、該特許出願で調製されるシリマリンシクロデキストリン包接化合物の品質には一定の問題が存在し、安全性と有効性に影響を与える可能性がある。それと同時に、該実施方案によって調製される凍結乾燥粉末注射剤は、凍結乾燥後に完全に再溶解できない（本発明の実施例３３を参照）。なお、その特許請求の範囲��び明細書に記載のシクロデキストリン種類は、依然として毒の副作用の大きい従来のシクロデキストリンであり、溶血性または腎臓毒性の隠れたリスクが存在する。
【０００８】
スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン（ＳＢＥ−β−ＣＤ）はアメリカのＣｙｄｅｘ会社により開発されたイオン化β−シクロデキストリン（β−ＣＤ）であり、上記従来のシクロデキストリン類材料に比べて、水溶性がよく、腎臓毒性がなく、溶血性がない長所を有する。そのため、本発明はシリビニンの物理的及び化学的特性と合わせて、最初にスルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン（ＳＢＥ−β−ＣＤ）を用いてシリビニンの溶解の問題を解決する。大量の試験研究を通じて、シリビニンのスルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン包接化合物であって、安全かつ安定なシリビニン注射剤の開発に成功し、シリビニンの経口バイオアベイラビリティーが低い欠陥を根本から解決し、臨床的な研究と応用に新規製剤を提供している。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明は、安全かつ安定なシリビニン注射剤の開発を目的とする。シリビニン固有の物理的かつ化学的特性及び従来の製剤に存在する欠陥について、それとマッチングする処方を好適に選出して、シリビニンの注射剤の開発に成功した。
【００１０】
本発明は、シリビニン、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン、注射用有機溶媒を含有することを特徴とするシリビニン注射剤を提供する。ここで、注射用有機溶媒はシリビニンの溶解に用いられ、シリビニンを分子型溶液に調製してから、該溶液とスルホブチルエーテル−β−シクロデキストリンの水溶液を混合すると、シリビニン分子をスルホブチルエーテル−β−シクロデキストリンの分子中に包埋することができ、それによって、シリビニンのスルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン包接化合物が形成される。処方の成分に注射用有機溶媒が含まれていない場合、通常のシクロデキストリン包接化合物の調製方法（薬物粉末をそのままシクロデキストリンの水溶液に投入し、清澄になるまで攪拌する）によっては、シリビニン包接化合物（本発明の実施例２を参照）が得られない。そのため、本発明で注射用有機溶媒とスルホブチルエーテル−β−シクロデキストリンとを併用することは、シリビニン包接化合物の調製に必要な条件の１つであり、本発明の中核的な特徴でもある。
【００１１】
本発明により提供されるシリビニン注射剤は、さらに助溶剤を含有してもよい。ここで、助溶剤は、シリビニンの包接率をさらに向上させることが可能であり、一方、凍結乾燥後のサンプルの迅速、良好な再溶解に寄与する。助溶剤により、本発明で調製されるシリビニン注射剤の品質をより一層確実にする。そのため、助溶剤は本発明の重要な技術的特徴の１項目でもある（本発明の実施例３を参照）。
【００１２】
本発明は、下記成分（重量体積比）で調製されてなることを特徴とするシリビニン注射剤を提供する。
シリビニン                                      ０．０５〜１．０％
スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン    ２〜５０％
注射用有機溶媒                                  ０．５〜１０％
助溶剤                                          ０〜１．０％
凍結乾燥支持剤                                  ０〜２０％
ｐＨ調整剤                                      ｐＨ値を２．０〜８．０に調整
注射用水                                        残量
【００１３】
本発明は、下記成分（重量体積比）で調製されてなることを特徴とするシリビニン注射剤を提供する。
シリビニン                                      ０．１〜０．８％
スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン    ２〜３０％
注射用有機溶媒                                  ０．５〜５％
助溶剤                                          ０．００１〜０．５％
凍結乾燥支持剤                                  ０〜１５％
ｐＨ調整剤                                      ｐＨ値を２．０〜７．０に調整
注射用水                                        残量
【００１４】
本発明は、下記成分（重量体積比）で調製されてなることを特徴とするシリビニン注射剤を提供する。
シリビニン                                      ０．１〜０．５％
スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン    ２〜１０％
注射用有機溶媒                                  １〜５％
助溶剤                                          ０．００５〜０．５％
凍結乾燥支持剤                                  ３〜１０％
ｐＨ調整剤                                      ｐＨ値を２．５〜６．０に調整
注射用水                                        残量
【００１５】
本発明のシリビニン注射剤は、その各種の成分の百分含有量はいずれも重量体積比であり、即ち、単位体積の液体に含まれている溶質の含有量であり、例えば、ｇ／ｍＬ、ｋｇ／Ｌ等を含むが、これらに限定されるものではなく、同率で拡大または縮小することができ、比率は変わらない。
【００１６】
前記シリビニン注射剤において、前記注射用有機溶媒は、ポリエチレングリコール２００、ポリエチレングリコール３００、ポリエチレングリコール４００、ポリエチレングリコール６００、無水エタノール、プロピレングリコールのうちから選ばれる１種または複数種であり、ポリエチレングリコール４００が好ましい。
【００１７】
前記助溶剤は、ジステアロイルホスファチジルエタノールアミン−ポリエチレングリコール２０００（ＤＳＰＥ−ＭＰＥＧ２０００）、ジステアロイルホスファチジルエタノールアミン−ポリエチレングリコール５０００（ＤＳＰＥ−ＭＰＥＧ５０００）、ツイーン８０、ポリオキシエチレンヒマシ油（ＥＬ３５）、ポロキサマー１８８のうちから選ばれる１種または複数種であり、ジステアロイルホスファチジルエタノールアミン−ポリエチレングリコール２０００（ＤＳＰＥ−ＭＰＥＧ２０００）が好ましい。
【００１８】
前記凍結乾燥支持剤は、マンニトール、乳糖、デキストラン２０、デキストラン４０、デキストラン７０、スクロース、キシリトール、ソルビトール、トレハロースのうちから選ばれる１種または複数種であり、マンニトール、乳糖、デキストラン４０が好ましい。
【００１９】
前記ｐＨ調整剤は、クエン酸、塩酸、氷酢酸、リン酸、リン酸水素二ナトリウム、リン酸二水素ナトリウム、リン酸水素二カリウム、リン酸二水素カリウム、クエン酸二ナトリウム、クエン酸三ナトリウム、酢酸ナトリウムのうちから選ばれる１種または複数種であり、ｐＨ値を２〜８に調整し、ｐＨ値を２〜７に調整することが好ましく、ｐＨ値を２．５〜６．０に調整することがより好ましい。
【００２０】
本発明のシリビニン注射剤は、シリビニン注射溶液であることを特徴とする。
【００２１】
本発明のシリビニン注射剤は、注射用シリビニン凍結乾燥粉末注射剤であることを特徴する。
【００２２】
本発明のシリビニン注射剤は、溶液タイプが無色の清澄液体であり、凍結乾燥粉末注射剤は白色固体である。
【００２３】
本発明のシリビニン注射溶液の調製方法は、配合量のシリビニン、注射用有機溶媒を量り取り、必要に応じて助溶剤を含み、混合し、４０〜７０℃で加熱攪拌し、溶解させて、有機相を得、配合量のスルホブチルエーテル−β−シクロデキストリンを量り取り、適量の注射用水に入れ、攪拌して溶解させ、水相を得、有機相と水相を混合し、均一に混合してから、注射用水を用いて全量になるまで定容して、薬物溶液を得、ｐＨ調整剤を用いて薬物溶液のｐＨ値を２〜８に調整し、重量体積百分率で含有量が０．０５％〜０．５％である注射用活性炭を加え、１５〜６０分間吸着させてから、材料液を１μｍのチタン棒フィルタに通過させてろ過して炭素を除去し、０．２２μｍのフィルタエレメントを用いて除菌し、分けて包装、封止して、シリビニン注射溶液を得るステップを含むことを特徴とする。
【００２４】
本発明のシリビニン注射溶液の調製方法は、配合量のシリビニン、注射用有機溶媒を量り取り、必要に応じて助溶剤を含み、混合し、５０〜６０℃で加熱攪拌し、溶解させて、有機相を得、配合量のスルホブチルエーテル−β−シクロデキストリンを量り取り、適量の注射用水に入れ、攪拌して溶解させ、水相を得、有機相と水相を混合し、均一に混合してから、注射用水を用いて全量になるまで定容して、薬物溶液を得、ｐＨ調整剤を用いて薬物溶液のｐＨ値を２．５〜６．０に調整し、重量体積百分率で含有量が０．１％〜０．３％である注射用活性炭を加え、３０〜４５分間吸着してから、材料液を１μｍのチタン棒フィルタに通過させてろ過して炭素を除去し、０．２２μｍのフィルタエレメントを用いて除菌し、分けて包装、封止して、シリビニン注射溶液を得るステップを含むことが好ましい。
【００２５】
本発明の注射用シリビニン凍結乾燥粉末注射剤の調製方法は、配合量のシリビニン、注射用有機溶媒を量り取り、必要に応じて助溶剤を含み、混合し、４０〜７０℃で加熱攪拌し、溶解させて、有機相を得、配合量のスルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン、凍結乾燥支持剤を量り取り、適量の注射用水に入れ、攪拌して溶解させて、水相を得、有機相と水相を混合し、均一に混合してから、注射用水を用いて全量になるまで定容して、薬物溶液を得、ｐＨ調整剤を用いて薬物溶液のｐＨ値を２〜８に調整し、重量体積百分率で含有量が０．０５％〜０．５％である注射用活性炭を加え、１５〜６０分間吸着させてから、材料液を１μｍのチタン棒フィルタに通過させてろ過して炭素を除去し、０．２２μｍのフィルタエレメントを用いて除菌し、分けて包装、凍結乾燥、封止して、シリビニン凍結乾燥粉末注射剤を得るステップを含むことを特徴とする。
【００２６】
本発明の注射用シリビニン凍結乾燥粉末注射剤の調製方法は、配合量のシリビニン、注射用有機溶媒を量り取り、必要に応じて助溶剤を含み、混合して、５０〜６０℃で加熱攪拌し、溶解させて、有機相を得、配合量のスルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン、凍結乾燥支持剤を量り取り、適量の注射用水に入れ、攪拌して溶解させて、水相を得、有機相と水相を混合し、均一に混合してから、注射用水を用いて全量になるまで定容して、薬物溶液を得、ｐＨ調整剤を用いて薬物溶液のｐＨ値を２．５〜６．０に調整し、重量体積百分率で含有量が０．１％〜０．３％である注射用活性炭を加え、３０〜４５分間吸着させてから、材料液を１μｍのチタン棒フィルタに通過させてろ過して炭素を除去し、０．２２μｍのフィルタエレメントを用いて除菌し、分けて包装、凍結乾燥、封止して、シリビニン凍結乾燥粉末注射剤を得るステップを含むことが好ましい。
【００２７】
本発明のシリビニン注射剤は、シリビニン固有の物理的かつ化学的性質と合わせて、それとマッチングする処方の組成と用量を好適に選出し、シリビニンの注射剤の開発に成功し、安全で、安定で、かつ薬物封入量が高い特性を有し、シリビニンの従来の経口製剤のバイオアベイラビリティーが低い欠陥を根本から克服し、シリビニンの薬理作用をさらに最大限に発揮することが期待でき、シリビニンの臨床的な応用と研究のために基盤を打ち立てることを特徴とする。
【図面の簡単な説明】
【００２８】
【図１】原料の対照溶液−紫外線走査による曲線図である。
【図２】原料の対照溶液−紫外線走査による吸光度リスト図である。
【図３】本発明の供試品溶液−紫外線走査による曲線図である。
【図４】本発明の供試品溶液−紫外線走査による吸光度リスト図である。
【図５】引用特許の供試品溶液−紫外線走査による曲線図である。
【図６】引用特許の供試品溶液−紫外線走査による吸光度リスト図である。
【発明を実施するための形態】
【００２９】
以下、実施例を用いて本発明を詳しく説明するが、本発明の実施はこれに限定されるものではない。
【００３０】
実施例１：シクロデキストリン種類の比較研究
中国特許出願ＣＮ２００４１００４１３６４．０に記載されているシクロデキストリン種類は、β−シクロデキストリン、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、ヒドロキシエチル−β−シクロデキストリン、メチル−β−シクロデキストリン、グルコシル基−β−シクロデキストリン、及びスルホ基−β−シクロデキストリンである。しかしながら、本発明で用いたシクロデキストリンはスルホブチルエーテル−β−シクロデキストリンであって、本発明の特定の包接材料である。比較試験を行う際、同じ処方の組成、処方の用量、及び調製プロセスにより、それぞれ異なるシクロデキストリン種類を含むシリビニン注射液を調製した。室温で１週間放置し、経時とともに注射液の包接安定性を観察し、即ち、薬物の沈殿を析出する時間を考察指標として、シクロデキストリン種類に対して選別を行う。
【００３１】
（１）試験方案
シリビニン２０ｇ、ジステアロイルホスファチジルエタノールアミン−ポリエチレングリコール２０００（ＤＳＰＥ−ＭＰＥＧ２０００）１ｇ、２００ｇのポリエチレングリコール４００を量り取り、混合し、５５℃で加熱攪拌し、溶解させて、有機相を得、それぞれ上記シクロデキストリン５０ｇを量り取り、１０００ｍｌの注射用水に入れ、攪拌して溶解させて、異なる種類のシクロデキストリンの水溶液を得、水相（該比率に基づいて調製する場合、β−シクロデキストリンは水に完全に溶解できないため、β−シクロデキストリンを放棄する）とし、有機相と水相とを攪拌混合して、約２ｍｇ／ｍｌの包接液とし、０．２２μｍのフィルタエレメントを用いて除菌、ろ過し、ろ液を５ｍｌ／瓶に分けて包装して、６種類の異なるシクロデキストリン種類のシリビニン注射液を得る。
該注射液を室温で１週間放置し、それぞれ経時とともにシリビニン注射液の包接安定性を観察し、即ち、異なるシクロデキストリン種類のシリビニンの包埋安定性に対する影響を考察する。
【００３２】
（２）実験結果
【表１】
0006592091.tif 000003
【００３３】
結果の分析：
同じ調製プロセス及び同じ処方の用量において、調製される異なるシクロデキストリン種類のシリビニン注射液は、室温における安定性が明らかに異なる。中国特許出願ＣＮ２００４１００４１３６４．０に記載のシクロデキストリン種類は、いずれも安定なシリビニン包接化合物溶液を調製することができず、安定時間は２〜４日しか維持できないが、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリンを用いて調製したシリビニン包接化合物溶液は、少なくとも１週間内に明らかな変化が見られず、実際に該溶液は室温において相当安定である。大量の試験によって検証されたように、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリンはシリビニンに対し、相対的に最適な包接材料であるため、本発明はスルホブチルエーテル−β−シクロデキストリンを用いてシリビニンに対してマッチング性包接を行い、これが最適な選択であることが分かる。
【００３４】
実施例２  注射用有機溶媒のシリビニン注射剤の品質に対する影響
（１）注射用有機溶媒を含有しない場合の、シリビニン注射剤の品質に対する影響
それぞれスルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン１００ｇ、２００ｇ、３００ｇ、４００ｇ、５００ｇを量り取り、それぞれ注射用水を用いて１０００ｍｌになるまで溶解して、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリンを１０％、２０％、３０％、４０％、５０％を含有する水溶液を得、その後、それぞれ１ｇのシリビニンを量り取り、上記シリーズの異なるスルホブチルエーテル−β−シクロデキストリンの含有量の水溶液に加え、攪拌し、経時とともに溶液の状態を観察する。外観、性状を指標として、注射用有機溶媒を含有しない場合の、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリンにおけるシリビニンの包接の情況を判断し、結果を表２に示す。
【００３５】
【表２】
0006592091.tif 000004
【００３６】
結果の分析：
通常の方法によって、シリビニンをそのままスルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン溶液に投入し、攪拌して溶解させる。結果から、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリンの濃度が１０％〜５０％の範囲内にあり、薬物封入量がわずか１ｍｇ／ｍｌである場合、２４時間攪拌しても、溶液は依然として混濁であり、如何なる溶解の形跡もないことが明らかである。これから分かるように、シリビニンの物理的かつ化学的性質は比較的特殊であり、直接添加法によってシクロデキストリン包接化合物を調製することができない。
【００３７】
（２）注射用有機溶媒を含有する場合の、シリビニン注射剤の品質に対する影響
それぞれスルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン１００ｇ、２００ｇ、３００ｇ、４００ｇ、５００ｇを量り取り、それぞれ注射用水を用いて１０００ｍｌになるまで溶解して、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリンを１０％、２０％、３０％、４０％、５０％を含有する水溶液を得、シリビニン６ｇ、１２０ｇのポリエチレングリコール４００を量り取って混合し、５５℃で加熱攪拌し、溶解させて、有機相を得、それぞれ２１ｇの有機相を取り、それぞれ上記シリーズの異なるスルホブチルエーテル−β−シクロデキストリンの含有量の水溶液に注入し、かつ攪拌し、経時とともに溶液の状態を観察する。外観、性状を指標として、注射用有機溶媒を含有する場合の、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリンにおけるシリビニンの包接の情況を判断し、結果を表３に示す。
【００３８】
【表３】
0006592091.tif 000005
【００３９】
結果の分析：
シリビニンを注射用有機溶媒に溶解させてから、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン溶液を注入して包接化合物を調製し、達成される材料液の状態は、注射用有機溶媒を含有しない場合での混濁が重度であった状況に比べて、清澄度が顕著に高まる。これから分かるように、処方における注射用有機溶媒はシリビニンをスルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン分子に良好に包埋させることができ、包埋効果を顕著に向上させる。材料液において極めて少量の薬物しか包埋されていないが、適量の助溶剤を添加することによって解決できる（実施例３を参照）。よって、処方における注射用有機溶媒はシリビニンの特定な物理的かつ化学的性質と合わせて必ずマッチングしなければいけないものであり、本発明の重要な技術的特徴の１つであり、さもなければ包埋を行うことができない。
【００４０】
実施例３：助溶剤のシリビニン注射剤の調製に対する影響
処方における助溶剤は、包接化合物を調製する際に完全に包埋できない問題、即ち、実施例２に言及された材料液に個別の細かな微粒子が浮遊する現象の出現を解決するために用いられ、一方、助溶剤の加入は凍結乾燥後のサンプルが良好な再溶解性を有するように確保可能である。よって、助溶剤は本発明によって調製されるシリビニン注射剤の品質をさらに確実にする。比較試験を行う場合、同じ処方の組成と用量において、助溶剤を加える場合と助溶剤を加えない場合にシリビニン注射剤の品質に対する影響を考察し、助溶剤のジステアロイルホスファチジルエタノールアミン−ポリエチレングリコール２０００（ＤＳＰＥ−ＭＰＥＧ２０００）を一例として、説明する。
【００４１】
（１）助溶剤を含有しないシリビニン注射剤の調製方法と結果
シリビニン２ｇ、２０ｇのポリエチレングリコール４００を量り取って混合し、５５℃で加熱攪拌し、溶解させて、有機相を得、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン５０ｇ、マンニトール５０ｇを量り取り、注射用水を加えて１０００ｍｌになるまで溶解し、攪拌して溶解させ、水相を得、有機相と水相を攪拌混合し、包接液を得、０．２２μｍのフィルタエレメントを用いて除菌、ろ過して、中間体の測定を行い、即ち、サンプリングしてろ過前後の溶液の状態と薬物の表示百分率含有量を観察し、ろ液を５ｍｌ／瓶に分けて包装し、凍結乾燥、封止する。凍結乾燥後に、注射用水を加えて再溶解を行い、光検出器で溶液状態を観察し、かつ再溶解液を０．２２μｍのろ過膜に通過させて、次のろ液における薬物の表示百分率含有量を測定し、結果を表４に示す。
【００４２】
【表４】
0006592091.tif 000006
【００４３】
結果の分析：
助溶剤を含有せず、調製過程において、一部の薬物を完全に包埋できず、除菌、ろ過が順調ではなく、抵抗が大きく、薬物の通過を阻止することがあり、量産に不利であり、かつ凍結乾燥後に完全に再溶解できない。
【００４４】
（２）助溶剤を含有する包接溶液の調製
シリビニン２ｇ、ジステアロイルホスファチジルエタノールアミン−ポリエチレングリコール２０００（ＤＳＰＥ−ＭＰＥＧ２０００）０．１ｇ、２０ｇのポリエチレングリコール４００を量り取って混合し、５５℃で加熱攪拌し、溶解させて、有機相を得、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン５０ｇ、マンニトール５０ｇを量り取り、注射用水を加えて１０００ｍｌになるまで溶解し、攪拌して溶解させ、水相を得、有機相と水相を攪拌、混合して、包接液を得、０．２２μｍのフィルタエレメントを用いて除菌、ろ過して、中間体の測定を行い、即ち、サンプリングしてろ過前後の溶液の状態と薬物の表示百分率含有量を観察し、ろ液を５ｍｌ／瓶に分けて包装し、凍結乾燥、封止する。凍結乾燥後に、注射用水を加えて再溶解を行い、光検出器で溶液状態を観察し、かつ再溶解液を０．２２μｍのろ過膜に通過させて、次のろ液における薬物の表示百分率含有量を測定し、結果を表５に示す。
【００４５】
【表５】
0006592091.tif 000007
【００４６】
結果の分析：
助溶剤を加えた後、調製過程において薬物を完全に包埋でき、除菌ろ過過程が順調であり、ろ過前後の薬物の含有量に顕著な変化がなく、かつ凍結乾燥後に完全に再溶解できる。よって、処方に助溶剤を添加することが本発明の重要な技術的特徴である。
【００４７】
実施例４  シリビニン注射剤
シリビニン２ｇ、ジステアロイルホスファチジルエタノールアミン−ポリエチレングリコール２０００（ＤＳＰＥ−ＭＰＥＧ２０００）０．１ｇ、２０ｇのポリエチレングリコール４００を量り取って混合し、５５℃で加熱攪拌し、溶解させて、有機相を得、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン４０ｇ、マンニトール６０ｇを量り取り、８００ｍｌの注射用水に入れ、攪拌して溶解させ、水相を得、有機相と水相を混合し、均一に混合してから、注射用水を用いて１０００ｍｌになるまで定容して、薬物溶液を得、クエン酸を用いて薬物溶液のｐＨ値を３．５０に調整し、注射用活性炭１ｇを加え、３０分間吸着させてから、材料液を１μｍのチタン棒フィルタに通過させてろ過して炭素を除去し、０．２２μｍのフィルタエレメントを用いて除菌し、分けて包装、凍結乾燥、封止して、シリビニン凍結乾燥粉末注射剤を得る。
【００４８】
実施例５  シリビニン注射剤
シリビニン２ｇ、ジステアロイルホスファチジルエタノールアミン−ポリエチレングリコール２０００（ＤＳＰＥ−ＭＰＥＧ２０００）０．１ｇ、２０ｇのポリエチレングリコール４００を量り取って混合し、５５℃で加熱攪拌し、溶解させて、有機相を得、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン４０ｇを量り取り、９００ｍｌの注射用水に入れ、攪拌して溶解させ、水相を得、有機相と水相を混合し、均一に混合してから、注射用水を用いて１０００ｍｌになるまで定容して、薬物溶液を得、クエン酸を用いて薬物溶液のｐＨ値を３．５０に調整し、注射用活性炭１ｇを加え、３０分間吸着させてから、材料液を１μｍのチタン棒フィルタに通過させて、ろ過して炭素を除去し、０．２２μｍのフィルタエレメントを用いて除菌し、分けて包装、封止してシリビニン注射液を得る。
【００４９】
実施例６  シリビニン注射剤
シリビニン１０ｇ、ジステアロイルホスファチジルエタノールアミン−ポリエチレングリコール２０００（ＤＳＰＥ−ＭＰＥＧ２０００）１０ｇ、１００ｇのポリエチレングリコール４００を量り取って混合し、６０℃で加熱攪拌し、溶解させて、有機相を得、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン３００ｇ、キシリトール５０ｇ、ソルビトール５０ｇ、マンニトール１００ｇを量り取り、３５０ｍｌの注射用水に入れ、攪拌して溶解させ、水相を得、有機相と水相を混合し、均一に混合してから、注射用水を用いて１０００ｍｌになるまで定容して、薬物溶液を得、リン酸二水素カリウム、リン酸水素二カリウムを用いて薬物溶液のｐＨ値を８．００に調整し、注射用活性炭５ｇを加え、１５分間吸着させてから、材料液を１μｍのチタン棒フィルタに通過させて、ろ過して炭素を除去し、０．２２μｍのフィルタエレメントを用いて除菌し、分けて包装、凍結乾燥、封止して、シリビニン凍結乾燥粉末注射剤を得る。
【００５０】
実施例７  シリビニン注射剤
シリビニン８ｇ、ジステアロイルホスファチジルエタノールアミン−ポリエチレングリコール２０００（ＤＳＰＥ−ＭＰＥＧ２０００）５ｇ、５０ｇのポリエチレングリコール５０を量り取って混合し、７０℃で加熱攪拌し、溶解させて、有機相を得、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン２００ｇ、スクロース５０ｇ、マンニトール１００ｇを量り取り、５５０ｍｌの注射用水に入れ、攪拌して溶解させ、水相を得、有機相と水相を混合し、均一に混合してから、注射用水を用いて１０００ｍｌになるまで定容して、薬物溶液を得、リン酸二水素ナトリウム、リン酸水素二ナトリウムを用いて薬物溶液のｐＨ値を７．００に調整し、注射用活性炭３ｇを加え、２０分間吸着させてから、材料液を１μｍのチタン棒フィルタに通過させて、ろ過して炭素を除去し、０．２２μｍのフィルタエレメントを用いて除菌し、分けて包装、凍結乾燥、封止して、シリビニン凍結乾燥粉末注射剤を得る。
【００５１】
実施例８  シリビニン注射剤
シリビニン５ｇ、ジステアロイルホスファチジルエタノールアミン−ポリエチレングリコール２０００（ＤＳＰＥ−ＭＰＥＧ２０００）３ｇ、２０ｇのポリエチレングリコール４００を量り取って混合し、５０℃で加熱攪拌し、溶解させて、有機相を得、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン１００ｇ、トレハロース４０ｇ、マンニトール６０ｇを量り取り、７００ｍｌの注射用水に入れ、攪拌して溶解させ、水相を得、有機相と水相を混合し、均一に混合してから、注射用水を用いて１０００ｍｌになるまで定容して、薬物溶液を得、塩酸、クエン酸を用いて薬物溶液のｐＨ値を２．００に調整し、注射用活性炭２ｇを加え、３０分間吸着させてから、材料液を１μｍのチタン棒フィルタに通過させて、ろ過して炭素を除去し、０．２２μｍのフィルタエレメントを用いて除菌し、分けて包装、凍結乾燥、封止して、シリビニン凍結乾燥粉末注射剤を得る。
【００５２】
実施例９  シリビニン注射剤
シリビニン０．５ｇ、ジステアロイルホスファチジルエタノールアミン−ポリエチレングリコール２０００（ＤＳＰＥ−ＭＰＥＧ２０００）０．０１ｇ、５ｇのポリエチレングリコール４００を量り取って混合し、４０℃で加熱攪拌し、溶解させて、有機相を得、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン２０ｇを量り取り、９５０ｍｌの注射用水に入れ、攪拌して溶解させ、水相を得、有機相と水相を混合し、均一に混合してから、注射用水を用いて１０００ｍｌになるまで定容して、薬物溶液を得、リン酸、リン酸水素二カリウムを用いて薬物溶液のｐＨ値を６．００に調整し、注射用活性炭０．５ｇを加え、６０分間吸着させてから、材料液を１μｍのチタン棒フィルタに通過させて、ろ過して炭素を除去し、０．２２μｍのフィルタエレメントを用いて除菌し、分けて包装、封止して、シリビニン注射液を得る。
【００５３】
実施例１０  シリビニン注射剤
シリビニン１ｇ、１０ｇのポリエチレングリコール４００を量り取って混合し、５０℃で加熱攪拌し、溶解させて、有機相を得、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン３０ｇ、マンニトール４０ｇを量り取り、９００ｍｌの注射用水に入れ、攪拌して溶解させ、水相を得、有機相と水相を混合し、均一に混合してから、注射用水を用いて１０００ｍｌになるまで定容して、薬物溶液を得、塩酸、クエン酸、クエン酸二ナトリウムを用いて薬物溶液のｐＨ値を２．５０に調整し、注射用活性炭１ｇを加え、４０分間吸着させてから、材料液を１μｍのチタン棒フィルタに通過させて、ろ過して炭素を除去し、０．２２μｍのフィルタエレメントを用いて除菌し、分けて包装、凍結乾燥、封止して、シリビニン凍結乾燥粉末注射剤を得る。
【００５４】
実施例１１  シリビニン注射剤
シリビニン１ｇ、ジステアロイルホスファチジルエタノールアミン−ポリエチレングリコール２０００（ＤＳＰＥ−ＭＰＥＧ２０００）０．０５ｇ、１０ｇのポリエチレングリコール４００を量り取って混合し、５５℃で加熱攪拌し、溶解させて、有機相を得、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン２０ｇ、乳糖２０ｇ、１０ｇのデキストラン７０を量り取り、９００ｍｌの注射用水に入れ、攪拌して溶解させ、水相を得、有機相と水相を混合し、均一に混合してから、注射用水を用いて１０００ｍｌになるまで定容して、薬物溶液を得、リン酸、リン酸二水素ナトリウムを用いて薬物溶液のｐＨ値を５．００に調整し、注射用活性炭１ｇを加え、３０分間吸着させてから、材料液を１μｍのチタン棒フィルタに通過させて、ろ過して炭素を除去し、０．２２μｍのフィルタエレメントを用いて除菌し、分けて包装、凍結乾燥、封止して、シリビニン凍結乾燥粉末注射剤を得る。
【００５５】
実施例１２  シリビニン注射剤
シリビニン１ｇ、ジステアロイルホスファチジルエタノールアミン−ポリエチレングリコール２０００（ＤＳＰＥ−ＭＰＥＧ２０００）０．２ｇ、１０ｇのポリエチレングリコール４００を量り取って混合し、５５℃で加熱攪拌し、溶解させて、有機相を得、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン２０ｇ、乳糖２０ｇ、１０ｇのデキストラン２０を量り取り、９００ｍｌの注射用水に入れ、攪拌して溶解させ、水相を得、有機相と水相を混合し、均一に混合してから、注射用水を用いて１０００ｍｌになるまで定容して、薬物溶液を得、氷酢酸、酢酸ナトリウムを用いて薬物溶液のｐＨ値を４．５０に調整し、注射用活性炭１ｇを加え、３０分間吸着させてから、材料液を１μｍのチタン棒フィルタに通過させて、ろ過して炭素を除去し、０．２２μｍのフィルタエレメントを用いて除菌し、分けて包装、凍結乾燥、封止して、シリビニン凍結乾燥粉末注射剤を得る。
【００５６】
実施例１３  シリビニン注射剤
シリビニン１ｇ、ジステアロイルホスファチジルエタノールアミン−ポリエチレングリコール２０００（ＤＳＰＥ−ＭＰＥＧ２０００）０．１ｇ、無水エタノール２０ｇを量り取って混合し、５５℃で加熱攪拌し、溶解させて、有機相を得、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン３０ｇ、マンニトール４０ｇを量り取り、９００ｍｌの注射用水に入れ、攪拌して溶解させ、水相を得、有機相と水相を混合し、均一に混合してから、注射用水を用いて１０００ｍｌになるまで定容して、薬物溶液を得、クエン酸、クエン酸三ナトリウムを用いて薬物溶液のｐＨ値を３．５０に調整し、注射用活性炭１ｇを加え、３０分間吸着させてから、材料液を１μｍのチタン棒フィルタに通過させて、ろ過して炭素を除去し、０．２２μｍのフィルタエレメントを用いて除菌し、分けて包装、凍結乾燥、封止して、シリビニン凍結乾燥粉末注射剤を得る。
【００５７】
実施例１４  シリビニン注射剤
シリビニン１ｇ、ジステアロイルホスファチジルエタノールアミン−ポリエチレングリコール２０００（ＤＳＰＥ−ＭＰＥＧ２０００）０．１ｇ、プロピレングリコール２０ｇを量り取って混合し、５５℃で加熱攪拌し、溶解させて、有機相を得、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン３０ｇ、マンニトール４０ｇを量り取り、９００ｍｌの注射用水に入れ、攪拌して溶解させ、水相を得、有機相と水相を混合し、均一に混合してから、注射用水を用いて１０００ｍｌになるまで定容して、薬物溶液を得、クエン酸、クエン酸三ナトリウムを用いて薬物溶液のｐＨ値を３．５０に調整し、注射用活性炭１ｇを加え、３０分間吸着させてから、材料液を１μｍのチタン棒フィルタに通過させて、ろ過して炭素を除去し、０．２２μｍのフィルタエレメントを用いて除菌し、分けて包装、凍結乾燥、封止して、シリビニン凍結乾燥粉末注射剤を得る。
【００５８】
実施例１５  シリビニン注射剤
シリビニン２ｇ、ジステアロイルホスファチジルエタノールアミン−ポリエチレングリコール２０００（ＤＳＰＥ−ＭＰＥＧ２０００）１ｇ、無水エタノール４０ｇを量り取って混合し、５５℃で加熱攪拌し、溶解させて、有機相を得、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン４０ｇ、乳糖６０ｇ量り取り、８００ｍｌの注射用水に入れ、攪拌して溶解させ、水相を得、有機相と水相を混合し、均一に混合してから、注射用水を用いて１０００ｍｌになるまで定容して、薬物溶液を得、クエン酸、リン酸水素二ナトリウムを用いて薬物溶液のｐＨ値を３．５０に調整し、注射用活性炭１ｇを加え、３０分間吸着させてから、材料液を１μｍのチタン棒フィルタに通過させて、ろ過して炭素を除去し、０．２２μｍのフィルタエレメントを用いて除菌し、分けて包装、凍結乾燥、封止して、シリビニン凍結乾燥粉末注射剤を得る。
【００５９】
実施例１６  シリビニン注射剤
シリビニン２ｇ、ジステアロイルホスファチジルエタノールアミン−ポリエチレングリコール２０００（ＤＳＰＥ−ＭＰＥＧ２０００）１ｇ、プロピレングリコール４０ｇを量り取って混合し、５５℃で加熱攪拌し、溶解させて、有機相を得、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン４０ｇ、乳糖６０ｇを量り取り、８００ｍｌの注射用水に入れ、攪拌して溶解させ、水相を得、有機相と水相を混合し、均一に混合してから、注射用水を用いて１０００ｍｌになるまで定容して、薬物溶液を得、クエン酸、リン酸水素二ナトリウムを用いて薬物溶液のｐＨ値を３．５０に調整し、注射用活性炭１ｇを加え、３０分間吸着させてから、材料液を１μｍのチタン棒フィルタに通過させて、ろ過して炭素を除去し、０．２２μｍのフィルタエレメントを用いて除菌し、分けて包装、凍結乾燥、封止して、シリビニン凍結乾燥粉末注射剤を得る。
【００６０】
実施例１７  シリビニン注射剤
シリビニン２ｇ、ジステアロイルホスファチジルエタノールアミン−ポリエチレングリコール２０００（ＤＳＰＥ−ＭＰＥＧ２０００）０．２ｇ、５０ｇのポリエチレングリコール４００を量り取って混合し、５５℃で加熱攪拌し、溶解させて、有機相を得、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン５０ｇ、６０ｇのデキストラン４０を量り取り、８００ｍｌの注射用水に入れ、攪拌して溶解させ、水相を得、有機相と水相を混合し、均一に混合してから、注射用水を用いて１０００ｍｌになるまで定容して、薬物溶液を得、クエン酸、クエン酸三ナトリウムを用いて薬物溶液のｐＨ値を３．５０に調整し、注射用活性炭１ｇを加え、３０分間吸着させてから、材料液を１μｍのチタン棒フィルタに通過させて、ろ過して炭素を除去し、０．２２μｍのフィルタエレメントを用いて除菌し、分けて包装、凍結乾燥、封止して、シリビニン凍結乾燥粉末注射剤を得る。
【００６１】
実施例１８  シリビニン注射剤
シリビニン２ｇ、ジステアロイルホスファチジルエタノールアミン−ポリエチレングリコール２０００（ＤＳＰＥ−ＭＰＥＧ２０００）０．４ｇ、２０ｇのポリエチレングリコール４００を量り取って混合し、５５℃で加熱攪拌し、溶解させて、有機相を得、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン３０ｇ、３０ｇのデキストラン４０、乳糖２０ｇを量り取り、８５０ｍｌの注射用水に入れ、攪拌して溶解させ、水相を得、有機相と水相を混合し、均一に混合してから、注射用水を用いて１０００ｍｌになるまで定容して、薬物溶液を得、クエン酸を用いて薬物溶液のｐＨ値を３．００に調整し、注射用活性炭１ｇを加え、３０分間吸着させてから、材料液を１μｍのチタン棒フィルタに通過させて、ろ過して炭素を除去し、０．２２μｍのフィルタエレメントを用いて除菌し、分けて包装、凍結乾燥、封止して、シリビニン凍結乾燥粉末注射剤を得る。
【００６２】
実施例１９  シリビニン注射剤
シリビニン２ｇ、ジステアロイルホスファチジルエタノールアミン−ポリエチレングリコール５０００（ＤＳＰＥ−ＭＰＥＧ５０００）０．１ｇ、３０ｇのポリエチレングリコール４００を量り取って混合し、５５℃で加熱攪拌し、溶解させて、有機相を得、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン４０ｇ、マンニトール６０ｇを量り取り、８５０ｍｌの注射用水に入れ、攪拌して溶解させ、水相を得、有機相と水相を混合し、均一に混合してから、注射用水を用いて１０００ｍｌになるまで定容して、薬物溶液を得、クエン酸、クエン酸三ナトリウムを用いて薬物溶液のｐＨ値を３．００に調整し、注射用活性炭１ｇを加え、３０分間吸着させてから、材料液を１μｍのチタン棒フィルタに通過させて、ろ過して炭素を除去し、０．２２μｍのフィルタエレメントを用いて除菌し、分けて包装、凍結乾燥、封止して、シリビニン凍結乾燥粉末注射剤を得る。
【００６３】
実施例２０  シリビニン注射剤
シリビニン２ｇ、ジステアロイルホスファチジルエタノールアミン−ポリエチレングリコール５０００（ＤＳＰＥ−ＭＰＥＧ５０００）０．５ｇ、２０ｇのポリエチレングリコール４００を量り取って混合し、５５℃で加熱攪拌し、溶解させて、有機相を得、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン４０ｇ、マンニトール５０ｇを量り取り、８５０ｍｌの注射用水に入れ、攪拌して溶解させ、水相を得、有機相と水相を混合し、均一に混合してから、注射用水を用いて１０００ｍｌになるまで定容して、薬物溶液を得、クエン酸、クエン酸三ナトリウムを用いて薬物溶液のｐＨ値を４．００に調整し、注射用活性炭１ｇを加え、３０分間吸着させてから、材料液を１μｍのチタン棒フィルタに通過させて、ろ過して炭素を除去し、０．２２μｍのフィルタエレメントを用いて除菌し、分けて包装、凍結乾燥、封止して、シリビニン凍結乾燥粉末注射剤を得る。
【００６４】
実施例２１  シリビニン注射剤
シリビニン２ｇ、１０ｇのツイーン８０、２０ｇのポリエチレングリコール４００を量り取って混合し、５５℃で加熱攪拌し、溶解させて、有機相を得、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン４０ｇ、マンニトール７０ｇを量り取り、８５０ｍｌの注射用水に入れ、攪拌して溶解させ、水相を得、有機相と水相を混合し、均一に混合してから、注射用水を用いて１０００ｍｌになるまで定容して、薬物溶液を得、クエン酸、クエン酸三ナトリウムを用いて薬物溶液のｐＨ値を４．００に調整し、注射用活性炭１ｇを加え、３０分間吸着させてから、材料液を１μｍのチタン棒フィルタに通過させて、ろ過して炭素を除去し、０．２２μｍのフィルタエレメントを用いて除菌し、分けて包装、凍結乾燥、封止して、シリビニン凍結乾燥粉末注射剤を得る。
【００６５】
実施例２２  シリビニン注射剤
シリビニン２ｇ、ポリオキシエチレンヒマシ油１０ｇ、２０ｇのポリエチレングリコール４００を量り取って混合し、５５℃で加熱攪拌し、溶解させて、有機相を得、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン１１０ｇを量り取り、８５０ｍｌの注射用水に入れ、攪拌して溶解させ、水相を得、有機相と水相を混合し、均一に混合してから、注射用水を用いて１０００ｍｌになるまで定容して、薬物溶液を得、クエン酸、クエン酸三ナトリウムを用いて薬物溶液のｐＨ値を４．００に調整し、注射用活性炭１ｇを加え、３０分間吸着させてから、材料液を１μｍのチタン棒フィルタに通過させて、ろ過して炭素を除去し、０．２２μｍのフィルタエレメントを用いて除菌し、分けて包装、封止して、シリビニン注射液を得る。
【００６６】
実施例２３  シリビニン注射剤
シリビニン２ｇ、１０ｇのポロキサマー１８８、２０ｇのポリエチレングリコール４００を量り取って混合し、５５℃で加熱攪拌し、溶解させて、有機相を得、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン４０ｇ、乳糖２０ｇ、マンニトール４０ｇを量り取り、８００ｍｌの注射用水に入れ、攪拌して溶解させ、水相を得、有機相と水相を混合し、均一に混合してから、注射用水を用いて１０００ｍｌになるまで定容して、薬物溶液を得、リン酸、リン酸二水素ナトリウムを用いて薬物溶液のｐＨ値を５．００に調整し、注射用活性炭１ｇを加え、３０分間吸着させてから、材料液を１μｍのチタン棒フィルタに通過させて、ろ過して炭素を除去し、０．２２μｍのフィルタエレメントを用いて除菌し、分けて包装、凍結乾燥、封止して、シリビニン凍結乾燥粉末注射剤を得る。
【００６７】
実施例２４  シリビニン注射剤
シリビニン２ｇ、５ｇのツイーン８０、２０ｇのポリエチレングリコール４００を量り取って混合し、５５℃で加熱攪拌し、溶解させて、有機相を得、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン４５０ｇを量り取り、４００ｍｌの注射用水に入れ、攪拌して溶解させ、水相を得、有機相と水相を混合し、均一に混合してから、注射用水を用いて１０００ｍｌになるまで定容して、薬物溶液を得、リン酸、リン酸水素二ナトリウムを用いて薬物溶液のｐＨ値を５．００に調整し、注射用活性炭１ｇを加え、３０分間吸着させてから、材料液を１μｍのチタン棒フィルタに通過させて、ろ過して炭素を除去し、０．２２μｍのフィルタエレメントを用いて除菌し、分けて包装、封止して、シリビニン注射液を得る。
【００６８】
実施例２５  シリビニン注射剤
シリビニン２ｇ、ポリオキシエチレンヒマシ油５ｇ、プロピレングリコール５ｇ、無水エタノール１５ｇを量り取って混合し、５５℃で加熱攪拌し、溶解させて、有機相を得、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン１００ｇを量り取り、８５０ｍｌの注射用水に入れ、攪拌して溶解させ、水相を得、有機相と水相を混合し、均一に混合してから、注射用水を用いて１０００ｍｌになるまで定容して、薬物溶液を得、クエン酸を用いて薬物溶液のｐＨ値を３．５０に調整し、注射用活性炭１ｇを加え、３０分間吸着させてから、材料液を１μｍのチタン棒フィルタに通過させて、ろ過して炭素を除去し、０．２２μｍのフィルタエレメントを用いて除菌し、分けて包装、封止して、シリビニン注射液を得る。
【００６９】
実施例２６  シリビニン注射剤
シリビニン２ｇ、ジステアロイルホスファチジルエタノールアミン−ポリエチレングリコール２０００（ＤＳＰＥ−ＭＰＥＧ２０００）０．２ｇ、２０ｇのポリエチレングリコール２００を量り取って混合し、５５℃で加熱攪拌し、溶解させて、有機相を得、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン４０ｇ、マンニトール６０ｇを量り取り、８５０ｍｌの注射用水に入れ、攪拌して溶解させ、水相を得、有機相と水相を混合し、均一に混合してから、注射用水を用いて１０００ｍｌになるまで定容して、薬物溶液を得、クエン酸を用いて薬物溶液のｐＨ値を３．００に調整し、注射用活性炭１ｇを加え、３０分間吸着させてから、材料液を１μｍのチタン棒フィルタに通過させて、ろ過して炭素を除去し、０．２２μｍのフィルタエレメントを用いて除菌し、分けて包装、凍結乾燥、封止して、シリビニン凍結乾燥粉末注射剤を得る。
【００７０】
実施例２７  シリビニン注射剤
シリビニン２ｇ、ジステアロイルホスファチジルエタノールアミン−ポリエチレングリコール２０００（ＤＳＰＥ−ＭＰＥＧ２０００）０．１ｇ、２０ｇのポリエチレングリコール３００を量り取って混合し、６０℃で加熱攪拌し、溶解させて、有機相を得、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン４０ｇ、マンニトール５０ｇを量り取り、８５０ｍｌの注射用水に入れ、攪拌して溶解させ、水相を得、有機相と水相を混合し、均一に混合してから、注射用水を用いて１０００ｍｌになるまで定容して、薬物溶液を得、クエン酸、クエン酸ナトリウムを用いて薬物溶液のｐＨ値を３．５０に調整し、注射用活性炭１ｇを加え、３０分間吸着させてから、材料液を１μｍのチタン棒フィルタに通過させて、ろ過して炭素を除去し、０．２２μｍのフィルタエレメントを用いて除菌し、分けて包装、凍結乾燥、封止して、シリビニン凍結乾燥粉末注射剤を得る。
【００７１】
実施例２８  シリビニン注射剤
シリビニン２ｇ、ジステアロイルホスファチジルエタノールアミン−ポリエチレングリコール２０００（ＤＳＰＥ−ＭＰＥＧ２０００）０．１ｇ、３０ｇのポリエチレングリコール６００を量り取って混合し、５５℃で加熱攪拌し、溶解させて、有機相を得、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン５０ｇ、マンニトール６０ｇを量り取り、８００ｍｌの注射用水に入れ、攪拌して溶解させ、水相を得、有機相と水相を混合し、均一に混合してから、注射用水を用いて１０００ｍｌになるまで定容して、薬物溶液を得、クエン酸を用いて薬物溶液のｐＨ値を３．５０に調整し、注射用活性炭１ｇを加え、３０分間吸着させてから、材料液を１μｍのチタン棒フィルタに通過させて、ろ過して炭素を除去し、０．２２μｍのフィルタエレメントを用いて除菌し、分けて包装、凍結乾燥、封止して、シリビニン凍結乾燥粉末注射剤を得る。
【００７２】
実施例２９  シリビニン注射剤
シリビニン２ｇ、ジステアロイルホスファチジルエタノールアミン−ポリエチレングリコール２０００（ＤＳＰＥ−ＭＰＥＧ２０００）０．０５ｇ、２０ｇのポリエチレングリコール４００を量り取って混合し、５５℃で加熱攪拌し、溶解させて、有機相を得、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン５０ｇ、乳糖３０ｇ、マンニトール３０ｇを量り取り、８５０ｍｌの注射用水に入れ、攪拌して溶解させ、水相を得、有機相と水相を混合し、均一に混合してから、注射用水を用いて１０００ｍｌになるまで定容して、薬物溶液を得、クエン酸、クエン酸三ナトリウムを用いて薬物溶液のｐＨ値を３．５０に調整し、注射用活性炭１ｇを加え、３０分間吸着させてから、材料液を１μｍのチタン棒フィルタに通過させて、ろ過して炭素を除去し、０．２２μｍのフィルタエレメントを用いて除菌し、分けて包装、凍結乾燥、封止して、シリビニン凍結乾燥粉末注射剤を得る。
【００７３】
実施例３０  シリビニン注射剤
シリビニン３ｇ、ジステアロイルホスファチジルエタノールアミン−ポリエチレングリコール２０００（ＤＳＰＥ−ＭＰＥＧ２０００）２ｇ、２０ｇのポリエチレングリコール４００を量り取って混合し、６０℃で加熱攪拌し、溶解させて、有機相を得、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン８０ｇ、４０ｇのデキストラン４０、マンニトール６０ｇを量り取り、７５０ｍｌの注射用水に入れ、攪拌して溶解させ、水相を得、有機相と水相を混合し、均一に混合してから、注射用水を用いて１０００ｍｌになるまで定容して、薬物溶液を得、クエン酸を用いて薬物溶液のｐＨ値を３．５０に調整し、注射用活性炭１ｇを加え、５０分間吸着させてから、材料液を１μｍのチタン棒フィルタに通過させて、ろ過して炭素を除去し、０．２２μｍのフィルタエレメントを用いて除菌し、分けて包装、凍結乾燥、封止して、シリビニン凍結乾燥粉末注射剤を得る。
【００７４】
実施例３１  シリビニン注射剤
シリビニン３ｇ、ジステアロイルホスファチジルエタノールアミン−ポリエチレングリコール２０００（ＤＳＰＥ−ＭＰＥＧ２０００）３ｇ、プロピレングリコール２５ｇ、５ｇのポリエチレングリコール４００を量り取って混合し、５５℃で加熱攪拌し、溶解させて、有機相を得、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン５０ｇ、マンニトール６０ｇを量り取り、８００ｍｌの注射用水に入れ、攪拌して溶解させ、水相を得、有機相と水相を混合し、均一に混合してから、注射用水を用いて１０００ｍｌになるまで定容して、薬物溶液を得、クエン酸を用いて薬物溶液のｐＨ値を３．５０に調整し、注射用活性炭１ｇを加え、４０分間吸着させてから、材料液を１μｍのチタン棒フィルタに通過させて、ろ過して炭素を除去し、０．２２μｍのフィルタエレメントを用いて除菌し、分けて包装、凍結乾燥、封止して、シリビニン凍結乾燥粉末注射剤を得る。
【００７５】
実施例３２  シリビニン注射剤
シリビニン３ｇ、ジステアロイルホスファチジルエタノールアミン−ポリエチレングリコール２０００（ＤＳＰＥ−ＭＰＥＧ２０００）１ｇ、３０ｇのポリエチレングリコール４００を量り取って混合し、５５℃で加熱攪拌し、溶解させて、有機相を得、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン６０ｇ、マンニトール６０ｇを量り取り、８００ｍｌの注射用水に入れ、攪拌して溶解させ、水相を得、有機相と水相を混合し、均一に混合してから、注射用水を用いて１０００ｍｌになるまで定容して、薬物溶液を得、クエン酸、クエン酸三ナトリウムを用いて薬物溶液のｐＨ値を３．５０に調整し、注射用活性炭１ｇを加え、３０分間吸着させてから、材料液を１μｍのチタン棒フィルタに通過させて、ろ過して炭素を除去し、０．２２μｍのフィルタエレメントを用いて除菌し、分けて包装、凍結乾燥、封止して、シリビニン凍結乾燥粉末注射剤を得る。
【００７６】
実施例３３  シリビニン注射剤
シリビニン４ｇ、ジステアロイルホスファチジルエタノールアミン−ポリエチレングリコール２０００（ＤＳＰＥ−ＭＰＥＧ２０００）１ｇ、無水エタノール１０ｇ、プロピレングリコール１０ｇ、２０ｇのポリエチレングリコール４００を量り取って混合し、５５℃で加熱攪拌し、溶解させて、有機相を得、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン８０ｇ、マンニトール１００ｇを量り取り、７５０ｍｌの注射用水に入れ、攪拌して溶解させ、水相を得、有機相と水相を混合し、均一に混合してから、注射用水を用いて１０００ｍｌになるまで定容して、薬物溶液を得、リン酸二水素ナトリウム、リン酸水素二カリウムを用いて薬物溶液のｐＨ値を６．００に調整し、注射用活性炭１ｇを加え、３０分間吸着させてから、材料液を１μｍのチタン棒フィルタに通過させて、ろ過して炭素を除去し、０．２２μｍのフィルタエレメントを用いて除菌し、分けて包装、凍結乾燥、封止して、シリビニン凍結乾燥粉末注射剤を得る。
【００７７】
実施例３４  シリビニン注射剤
シリビニン２ｇ、ジステアロイルホスファチジルエタノールアミン−ポリエチレングリコール２０００（ＤＳＰＥ−ＭＰＥＧ２０００）０．１ｇ、２０ｇのポリエチレングリコール４００を量り取って混合し、５５℃で加熱攪拌し、溶解させて、有機相を得、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン５００ｇを量り取り、４００ｍｌの注射用水に入れ、攪拌して溶解させ、水相を得、有機相と水相を混合し、均一に混合してから、注射用水を用いて１０００ｍｌになるまで定容して、薬物溶液を得、クエン酸を用いて薬物溶液のｐＨ値を３．５０に調整し、注射用活性炭１ｇを加え、３０分間吸着させてから、材料液を１μｍのチタン棒フィルタに通過させて、ろ過して炭素を除去し、０．２２μｍのフィルタエレメントを用いて除菌し、分けて包装、封止して、シリビニン注射液を得る。
【００７８】
実施例  ３５  シリビニン注射剤の希釈安定性の考察
実施例４、実施例６、実施例９、実施例１３、実施例１７、実施例３２で調製したシリビニン注射剤を取り、ここで、凍結乾燥粉末注射剤は生理食塩水を用いて凍結乾燥前の溶液の濃度に再溶解する。シリビニン注射液及び凍結乾燥粉末注射剤の再溶解液を、それぞれ生理食塩水を用いて１０倍希釈して、希釈液を得る。希釈液を室温環境に放置し、経時変化に従ってサンプリングし、かつ０．４５μｍのろ過膜に通過させ、次のろ液におけるシリビニン含有量の経時変化の状況を測定して、シリビニン注射剤の希釈安定性を考察する。
【００７９】
クロマトグラフィー条件  オクタデシルシラン結合シリカゲルを充填剤とし、メタノール−水−氷酢酸（４８：５２：１）を移動相とし、カラム温度は４０℃で、検出波長は２８８ｎｍである。
測定法  精密に量った希釈液１ｍｌを、移動相を用いて１０ｍｌまで希釈して、供試品とし、精密に１０μｌを量り取り、液相クロマトグラフに注入して、ピーク面積を記録し、０時間のピーク面積を１００％とし、経時的に変化するピーク面積の百分率の変化状況を算出し、結果を表６に示す。
【００８０】
【表６】
0006592091.tif 000008
【００８１】
結果から分かるように、本発明のシリビニン注射剤は、臨床的に投与される前、生理食塩水における希釈安定性が２４時間以上であり、臨床的な投与要求を完全に満たすことができる。
【００８２】
実施例３６  中国特許出願ＣＮ０２１２５８２３．６に記載の調製方法について行った検証
中国特許出願ＣＮ０２１２５８２３．６は、発明の名称が「シクロデキストリンまたはその誘導体を含有するシリマリン注射液」で、公開番号がＣＮ１３９１８９４Ａであり、その明細書に記載されている実施方案によると、その中核的な技術的特徴はシリマリンをシクロデキストリン含有の水溶液に投入し、その後、水酸化ナトリウムを用いて溶液のｐＨをアルカリ性に調整して、シリビニンを溶解させ、溶解後にさらに塩酸を用いてｐＨ値を６．０〜６．５に調整して、シリマリンのシクロデキストリン包接化合物を得ることである。検証する際に、前記シリマリンをシリビニンで置換し、かつ厳格に該特許の実施例１に記載の実施方案に従って検証を行った。
【００８３】
（１）調製方法（原特許の実施例１と同様）
ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン３ｇを１０ｍｌの注射用水に溶解し、３００ｍｇのシリビニンを加え、１Ｎ  ＮａＯＨ溶液を用いてｐＨを１０に調整し、攪拌してシリビニンを溶解させ、５時間継続して攪拌し、１Ｎ  ＨＣｌ溶液を用いてｐＨを６．５に調整し、ろ過して除菌し、分けて包装、凍結乾燥、封止して、引用特許のシリビニン凍結乾燥粉末注射剤を得る。
【００８４】
（２）試験現象と結果
１．変色
ＮａＯＨ溶液を用いてｐＨを１０に調整し、攪拌してシリビニンを溶解させる過程において、溶液の色が最初の類白色の懸濁液から、徐々に黄緑色に変化し、最後に濃い黄色の清澄溶液に変化する。しかしながら、本発明の調製方法では、調製過程全体において変色現象が現れていない。
２．ＮａＯＨのシリビニンに対する破壊性の検証
ＮａＯＨ溶液を用いてｐＨを１０に調整して、シリビニンを溶解させ、得られる溶液の色は顕著な変化が発生する。その原因を分析すると、強塩基としてのＮａＯＨは、シリビニン構造に対して破壊があり、それによって、溶液の色の変化を招いた可能性がある。よって、研究者らはアルカリ溶液に対して紫外線走査を行い、新たな吸収ピークが現れるか否かを考察して、ＮａＯＨがシリビニンを破壊するか否かを判断する。
【００８５】
原料の対照溶液：
適量のシリビニン生薬を取り、メタノールを用いて溶解かつ希釈して、原料の対照溶液を得る。
引用特許の供試品溶液：
上記ＮａＯＨ溶液を用いて調整してシリビニンを溶解させた後の薬物溶液を適量取って、水を用いて希釈して、引用特許の供試品溶液を得る。
【００８６】
本発明の供試品溶液：
本発明の実施例４の薬物溶液を取って、水を用いて希釈して、本発明の供試品溶液を得る。
上記溶液を、それぞれ１９０〜６００ｎｍの波長の範囲内で走査を行う。その結果、原料の対照溶液と本発明の供試品溶液は、いずれも２８７．５ｎｍの箇所に最大吸収を有し、その他の波長の箇所ではほとんど吸収がなく（図１〜図４を参照）、引用特許の供試品溶液は２８７．５ｎｍの箇所により大きな吸収を有する他、３２６．０ｎｍの箇所にさらに大きな吸収ピークが現れた（図５、図６を参照）ことが示されている。これは、ＮａＯＨの作用により、シリビニンの構造に顕著な変化が発生しているが、本発明により調製される薬物溶液の品質は安定であることを説明する。よって、その特許出願により調製されるシリマリンのシクロデキストリン包接化合物は品質に一定の問題が存在し、シリビニンの安全性と有効性に影響を与える可能性がある。
【００８７】
３．完全に再溶解できない
凍結乾燥後のサンプルを、それぞれ注射用水、０．９％塩化ナトリウム注射液、５％ブドウ糖注射液を用いて再溶解させる。その結果、再溶解液にいずれも顕著な混濁が現れ、放置後に混濁がより進み、沈殿が現れる。本発明のシリビニン注射剤は、凍結乾燥後の再溶解性が良好であり、顕著な違いがある。
【００８８】
以上から分かるように、中国特許出願ＣＮ０２１２５８２３．６は、発明の名称が「シクロデキストリンまたはその誘導体を含むシリマリン注射液」で、公開番号がＣＮ１３９１８９４Ａであり、その明細書に記載されている実施方案は、実現可能性がより低く、用いられたシクロデキストリン種類はシリビニンに対して最適なマッチングではないため（本発明の実施例１を参照）、安全かつ安定なシリビニン注射剤を得ることができない。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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