(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ｉ）Ｒ−エナンチオマーからＳ−エナンチオマーを分離する工程であって、Ｓ−エナンチオマー及びＲ−エナンチオマーがラセミ混合物として用意され、Ｓ−エナンチオマー及びＲ−エナンチオマーの各々が式Ｉの化合物である
【化１】
0006506753.tif 000013
式中、
Ｒ１はＣ１−４アルキレン−ＬＧであって、ＬＧは脱離基としてのブロモ、クロロ、ヨード、トシレート、メシレート、ノシレート又はトリフレートであり、
Ｒ２は水素、ハロ、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−３アルコキシ、Ｃ１−３フルオロアルキル又はＣ１−３フルオロアルコキシであり、
Ｒ３及びＲ４は独立にＣ１−３アルキル、Ｃ７−１０アラルキルであるか、或いはＲ３及びＲ４は、それらが結合した窒素と一緒に、窒素、酸素及び硫黄から選択される１個の追加のヘテロ原子を含んでいてもよい含窒素４−６脂肪族環を形成し、
Ｙ１はＣＨ２であり、
Ｙ２はＣＨ２−ＣＨ２であり、
上記の可変的な結合は、それぞれ以下の式Ｉ−Ｓ及びＩ−Ｒに示すように、Ｓ−エナンチオマーについては平面の上側にあり、Ｒ−エナンチオマーについては平面の下側にある。
【化２】
0006506753.tif 000014
（ｉｉ）分離したエナンチオマーの一方を適当な有機溶媒に溶解する工程と、
（ｉｉｉ）溶解したエナンチオマーを、工程（ｉｉ）で得られた溶液から沈殿させる工程であって、水の添加を含む工程と、
（ｉｖ）工程（ｉｉｉ）で得られた沈殿物を単離する工程と
を含む、方法。
【請求項２】
Ｒ２が水素、ハロ、Ｃ１−３アルコキシ又はＣ１−３フルオロアルコキシである、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
Ｒ３及びＲ４が独立にメチル、エチル又はベンジルである、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
超臨界流体クロマトグラフィー（ＳＦＣ）によって分離を行う、請求項１乃至請求項３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５】
有機溶媒が、アルコール、１，４−ジオキサン、テトラヒドロフラン又はアセトニトリルである、請求項１乃至請求項４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
有機溶媒が、２−プロパノール、エタノール、メタノール及びアセトニトリルから選択される、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
式ＩＩの１８Ｆ標識ＰＥＴトレーサーを得る方法であって、請求項１乃至請求項６のいずれか１項に記載の方法と、次いで工程（ｉｖ）で得られた沈殿物の溶液を適当な１８Ｆ−フルオリド源と反応させる工程とを含む、方法。
【化３】
0006506753.tif 000015
式中、Ｒ１１はＣ１−３アルキレン−１８Ｆであり、Ｒ１２−Ｒ１４及びＹ１１−Ｙ１２はそれぞれ、請求項１でＲ２−Ｒ４及びＹ１−Ｙ２について定義した通りである。
【請求項８】
自動化された請求項７に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、特定のクラスの化合物の合成に使用される新規ワークアップ法に関する。化合物は、特定の18Ｆ標識陽電子放出断層撮影（ＰＥＴ）トレーサーの放射性合成における直接標識前駆体化合物として特に使用される縮合環式インドール化合物である。
【背景技術】
【０００２】
輸送タンパク質（ＴＳＰＯ）は、主として末梢組織及びグリア細胞に局在することが公知の１８ｋＤのタンパク質であるが、それの生理学的機能はまだ明確には解明されていない。細胞内では、ＴＳＰＯはミトコンドリア外膜上に局在することが公知であるが、これは、ミトコンドリア機能の調節及び免疫系において役割を果たす可能性を示している。さらに、ＴＳＰＯは、細胞増殖、ステロイド生成、カルシウム流れ及び細胞呼吸に関与すると仮定されている。
【０００３】
正常組織及び罹患組織におけるＴＳＰＯの発現を検査する研究では、Ｃｏｓｅｎｚａ−Ｎａｓｈａｔら（２００９  Ｎｅｕｒｏｐａｔｈｏｌ  Ａｐｐｌ  Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ；３５（３）：３０６−３２８）によって、正常な脳におけるＴＳＰＯ発現は最小限であることが確認された。この同論文において、疾患状態では、ＴＳＰＯの上昇が、実質ミクログリア、マクロファージ及びいくつかの肥大アストロサイトで見られたが、ＴＳＰＯの分布は、疾患、病期、及び病変との近さ、又は感染との関係に応じて異なっていたことが実証された。罹患脳では、ミクログリア及びマクロファージが、ＴＳＰＯを発現する主な細胞型であり、ヒトでは、アストロサイトもＴＳＰＯを発現し得る。
【０００４】
ＴＳＰＯに対して親和性を有するリガンドは、当技術分野で公知である。米国特許第６４５１７９５号には、ＴＳＰＯに対して親和性を有するインドール化合物のクラス（ほとんどの活性化合物のＩＣ50値は０．２ｎＭ〜５．０ｎＭである。）が、末梢神経障害の予防もしくは治療、又は中枢神経変性疾患の治療に有用であるとして開示されている。Ｏｋｕｂｕら（Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  ２００４；１２：３５６９−８０）には、ＴＳＰＯに対して親和性を有する四環式インドール化合物群（ＩＣ50値は約０．４ｎＭと同じくらいの低さである。）の設計、合成及び構造が記載されている。
【０００５】
Ａｒｓｔａｄら（国際公開第２００７／０５７７０５号）では、ＴＳＰＯに対してナノモル親和性を有する標識四環式インドール誘導体であって、したがって、例えばパーキンソン病、アルツハイマー病、多発性硬化症、神経因性疼痛、関節炎、喘息、アテローム性動脈硬化症及び癌などの症状におけるＴＳＰＯのインビボイメージングに適当な標識四環式インドール誘導体のクラスが報告された。Ｗａｄｓｗｏｒｔｈら（国際公開第２０１０／１０９００７号）には、放射性標識三環式インドール誘導体が開示されており、インビトロアッセイにおいてナノモル親和性を有するだけではなく、インビボの脳内において、これらの化合物が、中枢神経系（ＣＮＳ）におけるＴＳＰＯ発現のインビボイメージング用途に適合することを示すのに十分高い及び特異的な優れた代謝安定性及び取り込みを有すると報告された。Ｗａｄｓｗｏｒｔｈら（Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  Ｌｅｔｔｓ  ２０１２；２２：１３０８−１３１３）及びＡｃｈａｎａｔｈら（国際公開第２０１１／１１７４２１号）では、脳内のＴＳＰＯのインビボイメージングに有利なこれらの特性は、Ｓ−エナンチオマーでは、ラセミ体と比較してさらにより好ましいものであったことが続けて報告された。
【０００６】
特に、グラムサイズのバッチを処理する場合、固体形態の精製エナンチオマーを再現可能に得ようとして、本発明者らは、上記環式インドール誘導体の分離エナンチオマーの精製が問題となった。公知の回転蒸発法を使用して、良質な固体形態の分離エナンチオマーを得ようとすると、様々な溶媒並びに／又は様々な回転蒸発装置及び／もしくは回転蒸発条件を試行した場合でさえ、本発明者らは困難に直面した。したがって、これらの化合物を精製するための改善された方法が必要である。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】国際公開第２０１１／１１７４２１号
【発明の概要】
【０００８】
本発明は、環式インドール化合物を精製するための方法であって、現在使用されている方法に優る利点を提供する方法を提供する。本発明の方法を使用することにより、調剤するのが非常に容易で良質な粉末形態のこれらの化合物を容易に調製することが可能になる。本発明の方法は、現在の方法と比較して高速かつ再現可能である。
【０００９】
第１の態様では、本発明は、
（ｉ）Ｒ−エナンチオマーからＳ−エナンチオマーを分離する工程であって、Ｓ−エナンチオマー及びＲ−エナンチオマーがラセミ混合物として用意され、Ｓ−エナンチオマー及びＲ−エナンチオマの各々が式Ｉの化合物である工程と、
【００１０】
【化１】
0006506753.tif 000002
式中、
Ｒ1はＣ1-4アルキレン−ＬＧであって、ＬＧは脱離基であり、
Ｒ2は水素、ヒドロキシル、ハロ、シアノ、Ｃ1-3アルキル、Ｃ1-3アルコキシ、Ｃ1-3フルオロアルキル又はＣ1-3フルオロアルコキシであり、
Ｒ3及びＲ4は独立にＣ1-3アルキル、Ｃ7-10アラルキルであるか、或いはＲ3及びＲ4は、それらが結合した窒素と一緒に、窒素、酸素及び硫黄から選択される１個の追加のヘテロ原子を含んでいてもよい含窒素4-6脂肪族環を形成し、
Ｙ1はＯ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ2又はＣＨ2であり、
Ｙ2はＣＨ2、ＣＨ2−ＣＨ2、ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ2、ＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ2又はＣＨ−（ＣＨ−ＣＨ2−ＣＨ−ＣＨ2）−ＣＨであり、
上記の可変的な結合は、それぞれ以下の式Ｉ−Ｓ及びＩ−Ｒに示すように、Ｓ−エナンチオマーについては平面の上側にあり、Ｒ−エナンチオマーについては平面の下側にある。
【００１１】
【化２】
0006506753.tif 000003
（ｉｉ）分離したエナンチオマーの一方を適当な有機溶媒に溶解する工程と、
（ｉｉｉ）溶解したエナンチオマーを、工程（ｉｉ）で得られた溶液から沈殿させる工程であって、水の添加を含む工程と、
（ｉｖ）工程（ｉｉｉ）で得られた沈殿物を単離する工程と
を含む方法を提供する。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
本発明の方法に関して、「分離」という用語は、一般に、ラセミ混合物からＳ−エナンチオマー及びＲ−エナンチオマーを分離するのに適した方法をいい、当技術分野では一般に「キラル分割」、「キラル分離」又は「光学分割」とも呼ばれる。ラセミ体からエナンチオマーを分離するための様々な手段、例えば結晶化及びクロマトグラフィーが公知である。本発明の方法では、クロマトグラフィー、特に超臨界流体クロマトグラフィー（ＳＦＣ）が好ましい。「超臨界流体クロマトグラフィー」という用語は、移動相が、高圧液体又は超臨界二酸化炭素と、メタノール、エタノール、イソプロピルアルコール、アセトニトリル又はクロロホルムのような調整剤とからなる順相クロマトグラフィーの一形態をいう。
【００１３】
「Ｓ−エナンチオマー」の場合、式Ｉは以下の式Ｉ−Ｓである。
【００１４】
【化３】
0006506753.tif 000004
式中、Ｒ1-4及びＹ1-2はそれぞれ式Ｉで定義した通りである。
【００１５】
「Ｒ−エナンチオマー」の場合、式Ｉは以下の式Ｉ−Ｒである。
【００１６】
【化４】
0006506753.tif 000005
式中、Ｒ1-4及びＹ1-2はそれぞれ式Ｉで定義した通りであり、両者が同じラセミ体中に存在する場合には、式Ｉ−Ｓと同じである。
【００１７】
「ラセミ混合物」又は「ラセミ体」という用語は、キラル分子の等量のＳ−及びＲ−エナンチオマーを有する混合物である。本発明の方法におけるラセミ混合物は、等量のＳ−エナンチオマー及びＲ−エナンチオマーを含む。
【００１８】
「アルキレン」という用語は、二価基−（ＣＨ2）n−（ｎは好ましくは１〜４の整数である。）をいう。
【００１９】
「脱離基」という用語は、置換放射性フッ素化反応に際して安定な化学種として置換される原子又は原子団をいう。適当な脱離基の例は、ハロゲンであるクロロ、ブロモ及びヨード、並びにスルホン酸エステルであるメシレート、トシレート、ノシレート及びトリフレートである。好ましくは、脱離基は、メシレート、トシレート及びトリフレートから選択され、最も好ましくはメシレートである。
【００２０】
「ヒドロキシル」という用語は、−ＯＨ基をいう。
【００２１】
「ハロゲン」又は「ハロ−」という用語は、フッ素、塩素、臭素又はヨウ素から選択される置換基を意味する。
【００２２】
「シアノ」という用語は、−ＣＮ基をいう。
【００２３】
特記しない限り、独で又は別の基の一部として使用される「アルキル」という用語は、直鎖又は枝分れアルキル基であって、好ましくは、炭素原子数１〜３のものを意味する。かかる基の例としては、メチル、エチル及びプロピルが挙げられる。
【００２４】
特記しない限り、「アルコキシ」という用語は、上記で定義したアルキル基でエーテル結合を含むものを意味し、「エーテル結合」という用語は、−Ｃ−Ｏ−Ｃ−基をいう。適当なアルキルエーテル基の例としては、メトキシ、エトキシ及びプロポキシが挙げられる。
【００２５】
「フルオロアルキル」及び「フルオロアルコキシ」という用語はそれぞれ、上記で定義したアルキル基及びアルコキシ基が１個以上のフッ素原子で置換されたものである。好適には、フッ素は、基の末端の水素と置き換わる（すなわち、−アルキレン−フルオロ又は−アルコキシレンフルオロ）。
【００２６】
「アラルキル」という用語は、−アルキレン−フェニル基（ただし、アルキレンは上記で定義した通りである。）をいう。
【００２７】
「含窒素4-6脂肪族環」という用語は、窒素ヘテロ原子を含む飽和Ｃ4-6アルキル環である。例としては、ピロリジニル、ピペリジニル及びモルホリニル環が挙げられる。
【００２８】
「ヘテロ原子」という用語は、分子構造の主鎖炭素と置き換わる非炭素原子をいう。
【００２９】
以下の表は、各Ｙ2に関する式Ｉの構造を示す。
【００３０】
【表１】
0006506753.tif 000006
「適当な有機溶媒」という用語は、式Ｉのエナンチオマーを溶解することのできる有機溶媒をいう。適当なかかる有機溶媒としては、アルコール、１，４−ジオキサン、テトラヒドロフラン又はアセトニトリルが挙げられる。「アルコール」という用語は、エタノール、メタノール、イソプロパノール、ブタノール、プロパノールなどの周知のアルコール溶媒を含む。
【００３１】
「溶解」という用語は、物質が液体に取り込まれて溶液を形成する過程をいう。式Ｉの分離エナンチオマーの適当な有機溶媒溶液をもたらすための本発明の方法の溶解工程には、熱を加える必要があることがある。溶解を促進するため、好適には最大約６０℃の熱を加えてもよいが、典型的には、３０〜４０oＣの範囲内の熱で十分である。
【００３２】
「沈殿」という用語は、１種以上の固体の形態の溶質が溶液中で形成されることをいう。形成した固体は、当技術分野では「沈殿物」と呼ばれ、固体を形成するのに使用される試薬は、当技術分野では「沈殿剤」と呼ばれる。本発明の方法では、水が沈殿剤である。沈殿工程を完了させるため、溶液の撹拌及び／又は加熱及び／又は冷却が必要とされることもある。溶解工程と同様に、熱については、最大約６０℃の温度を適用し得る。冷却を適用する場合、典型的には、０〜１０oＣの範囲が適当である。
【００３３】
「単離」という用語は、沈殿物を含まない残りの溶液（当技術分野では「上清」と呼ばれることも多い。）から沈殿物を分離する過程をいう。これは、液体から固体を分離するための任意の周知の方法を使用して行われ得るが、濾過によって最も適当に行われる。
【００３４】
本発明の第１の態様の方法によるその他の利点は、工程（ｉｖ）で沈殿物を単離した後に、それ以上精製工程を行う必要がないことである。公知の回転蒸発法を用いて、本発明者らは、使用した試薬中に存在する不純物の最大濃度を観察した。したがって、許容可能な不純物プロファイルを有する式Ｉ−Ｓ又はＩ−Ｒの前駆体をもたらすためには、追加の精製工程が必要であった。公知の蒸発技術の後にかかる追加の精製を行った場合でさえ、残留不純物は依然として存在し、ＩＣＨガイドライン（http://www.ich.org/products/guidelines/quality/article/quality-guidelines.html）による報告及び品質認証が必要である。本発明の方法では、報告及び品質認証に関するこの要件は不要である。したがって、改善された不純物プロファイルを有する良質な固体形態の式Ｉ−Ｓ又はＩ−Ｒの化合物を得るための容易な手段が提供される。
【００３５】
式ＩのＲ1は、好ましくは、ブロモ、クロロ、ヨード、トシレート、メシレート又はトリフレート、最も好ましくはブロモ、トシレート、メシレート又はトリフレート、特に好ましくはメシレートである。
【００３６】
式ＩのＲ2は、好ましくは水素、ハロ、Ｃ1-3アルコキシ又はＣ1-3フルオロアルコキシ、最も好ましくは水素、ハロ又はＣ1-3アルコキシ、特に好ましくは水素、フルオロ又はメトキシである。Ｒ2が置換基である（すなわち、水素ではない）場合、それは、好ましくは５位又は６位にあり、最も好ましくは、５−メトキシ、６−メトキシ、５−フルオロ及び６−フルオロから選択される。
【００３７】
好ましくは、式ＩのＲ3及びＲ4は独立にメチル、エチル又はベンジルである。一実施形態では、Ｒ3はメチルであり、Ｒ4はベンジルである。別の実施形態では、Ｒ3及びＲ4は両方とも、エチルである。
【００３８】
一実施形態では、式ＩのＹ1は、好ましくは、Ｓである。Ｙ1がＳである場合、式ＩのＹ2は、好ましくは、−ＣＨ−（ＣＨ−ＣＨ2−ＣＨ−ＣＨ2）−ＣＨ−である。
【００３９】
別の実施形態では、式ＩのＹ1はＣＨ2である。式ＩのＹ1がＣＨ2である場合、式ＩのＹ2は、好ましくは、−ＣＨ2−ＣＨ2−である。
【００４０】
式Ｉの好ましい一実施形態では、
Ｒ1は、ブロモ、クロロ、ヨード、トシレート、メシレート又はトリフレート、好ましくはブロモ、トシレート、メシレート又はトリフレート、最も好ましくはメシレートであり、
Ｒ2は水素、ハロ、Ｃ1-3アルコキシ又はＣ1-3フルオロアルコキシ、好ましくは水素、ハロ又はＣ1-3アルコキシ、最も好ましくは水素、フルオロ又はメトキシであり、
Ｒ3及びＲ4は独立にメチル、エチル又はベンジルであり、最も好ましくは、Ｒ3はメチルであり、Ｒ4はベンジルであり、或いは最も好ましくは、Ｒ3及びＲ4はエチルであり、
式ＩのＹ1はＳであり、
式ＩのＹ2は−ＣＨ−（ＣＨ−ＣＨ2−ＣＨ−ＣＨ2）−ＣＨ−である。
【００４１】
式Ｉの別の実施形態では、
Ｒ1は、ブロモ、クロロ、ヨード、トシレート、メシレート又はトリフレート、好ましくはブロモ、トシレート、メシレート又はトリフレート、最も好ましくはメシレートであり、
Ｒ2は水素、ハロ、Ｃ1-3アルコキシ又はＣ1-3フルオロアルコキシ、好ましくは水素、ハロ又はＣ1-3アルコキシ、最も好ましくは水素、フルオロ又はメトキシであり、
Ｒ3及びＲ4は独立にメチル、エチル又はベンジルであり、最も好ましくは、Ｒ3はメチルであり、Ｒ4はベンジルであり、或いは最も好ましくは、Ｒ3及びＲ4はエチルであり、
Ｙ1はＣＨ2であり、
Ｙ2は、−ＣＨ2−ＣＨ2−である。
【００４２】
式Ｉの上記で定義した好ましい実施形態はそれぞれ式Ｉ−Ｓ及び式Ｉ−Ｒの化合物に等しく適用可能である。
【００４３】
式Ｉの好ましい化合物の例としては、以下のものが挙げられる。
【００４４】
【化５】
0006506753.tif 000007
式中、ＯＭｓは、メシレートを表す。
【００４５】
いずれの場合も、Ｓ−エナンチオマーが好ましい。以下の実験例は、式Ｉの化合物１に関する。
【００４６】
式Ｉの化合物は、当技術分野で公知の方法で得ることができる。
【００４７】
Ａｒｓｔａｄら（国際公開第２００７／０５７７０５号）には、Ｏｋｕｂｏら（Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  ２００４；１２：３５６９−８０）に記載された方法を適用することによって、式Ｉの縮合四環式インドール化合物を得ることができると報告されている。
【００４８】
Ｗａｄｓｗｏｒｔｈら（国際公開第２０１０／１０９００７号）には、以下のスキーム１又はスキーム２のいずれかを用いて、式Ｉの縮合三環式インドール化合物を得る方法が報告されている。
【００４９】
【化６】
0006506753.tif 000008
式中、Ｅｔ2Ｏ＝ジエチルエーテル；ＩＰＡ＝イソプロピルアルコール；ＯＴｓ＝トシレート。
【００５０】
或いは、式ＩのＲ2が環の上端の位置にある場合、以下のスキーム２に示す一般的な合成経路を使用し得る。
【００５１】
【化７】
0006506753.tif 000009
式中、ＰＧ＝保護基；ＴＨＦ＝テトラヒドロフラン；ＫＨＭＤＳ＝カリウムビス（トリメチルシリル）アミド；ＥｔＡｃ＝酢酸エチル；Ｐｅｔ＝石油エーテル。
【００５２】
上記スキーム１及びスキーム２では、Ｒ1-4、Ｙ1及びＹ2はそれぞれ式Ｉについて本明細書で定義した通りである。スキーム２では、「−Ｒ11a−ＰＧ」基は、保護Ｒ1基を表す。（ただし、Ｒ1は、本明細書で式Ｉについて定義した通りであり、ＰＧは保護基である。）。適当な保護基は当技術分野で周知であり、Ｔｈｅｏｄｏｒａ  Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ  ａｎｄ  Ｐｅｔｅｒ  Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ  ｉｎ「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」（Ｆｏｕｒｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，２００７）により詳細に記載されている。
【００５３】
Ａｃｈａｎａｔｈら（国際公開第２０１１／１１７４２１号）には、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、超臨界流体クロマトグラフィー（ＳＦＣ）、疑似床式クロマトグラフィー（ＳＢＣ）を始めとして、本発明の分離工程を行うのに適当な方法が記載されている。エナンチオマーの分離に適用され得る様々な技術の詳細な評価は、「Ｃｈｉｒａｌ  Ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ：ａ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ」（２００７  Ｗｉｌｅｙ；Ｓｕｂｒａｍａｎｉａｎ，Ｅｄ．）に記載されている。好ましい実施形態では、本発明の分離工程は、ＳＦＣを使用して行われる。
【００５４】
好ましくは、本発明の方法に使用される有機溶媒は、エタノール、メタノール、イソプロパノール、ブタノール、プロパノール、１，４−ジオキサン、テトラヒドロフラン又はアセトニトリル、好ましくはプロパノール、エタノール、メタノール又はアセトニトリルである。
【００５５】
第２の態様では、本発明は、式ＩＩの18Ｆ標識陽電子放出断層撮影（ＰＥＴ）トレーサーを得る方法であって、上記で定義した方法と、次いで工程（ｉｖ）で得られた沈殿物の溶液を適当な18Ｆ−フルオリド源と反応させる工程とを含む方法を提供する。
【００５６】
【化８】
0006506753.tif 000010
式中、Ｒ11はＣ1-3アルキレン−18Ｆであり、Ｒ12−Ｒ14及びＹ11−Ｙ12及び可変的な結合はそれぞれ本明細書で式ＩのＲ2−Ｒ4及びＹ1−Ｙ2について定義した通りである。
【００５７】
「ＰＥＴトレーサー」という用語は、陽電子放出同位体を含む化合物であって、生体系内の特定の生理機能又は病態生理機能をターゲティングするように設計された化合物である。陽電子放出同位体の存在は、生体系への投与後にＰＥＴトレーサーを検出することを可能にすることにより、特定の生理機能又は病態生理機能の検出を容易にする。式ＩＩのＰＥＴトレーサーは、Ｓ−又はＲ−エナンチオマーのいずれかである。
【００５８】
「適当な18Ｆフルオリド源」という用語は、求核置換反応で式ＩのＬＧを置換して、式ＩＩの化合物をもたらすのに適当な化学形態の18Ｆ−フルオリドを意味する。18Ｆ−フルオリドは、通常、核反応18Ｏ（ｐ，ｎ）18Ｆから水溶液として得られ、カチオン性対イオンを追加し、続いて水を除去することによって反応性になる。18Ｆ-の溶解性を維持するために、適当なカチオン性対イオンは、無水反応溶媒内で十分な溶解性を有しなければならない。適当な対イオンとしては、Ｋｒｙｐｔｏｆｉｘ（商標）２２２（Ｋ２２２）、又はテトラアルキルアンモニウム塩などのクリプタンドと錯体形成している大きいがソフトな金属イオン、例えばルビジウム又はセシウム、カリウムが挙げられる。好ましい対イオンは、Ｋ２２２などのクリプタンドと錯体形成しているカリウムであり、その理由は、無水溶媒におけるその溶解性が優れており、18Ｆ-反応性が高いためである。
【００５９】
周知の18Ｆ標識技術に関する詳細な議論は、「Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ」（２００３；Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ：Ｍ．Ｊ．Ｗｅｌｃｈ  ａｎｄ  Ｃ．Ｓ．Ｒｅｄｖａｎｌｙ，Ｅｄｓ．）の第６章に記載されている。
【００６０】
好ましい実施形態では、式ＩＩの化合物を調製するための方法は、自動化されている。好都合なことに、［18Ｆ］放射性トレーサーは、自動化放射性合成装置によって自動的に調製され得る。Ｔｒａｃｅｒｌａｂ（商標）及びＦａｓｔｌａｂ（商標）（両方ともＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  Ｌｔｄ．製）を含め、かかる装置のいくつかの市販例がある。かかる装置は、一般に、放射性合成を行うために装置に装着される使い捨ての「カセット」を含むことが多く、放射化学はその中で実施される。カセットは、通常、流体経路、反応容器、及び試薬バイアルの受け入れ口、並びに放射性合成後のクリーンアップ工程に使用される任意の固相抽出カートリッジを含む。
【００６１】
式ＩＩの好ましい化合物の例としては、以下の化合物のＳ−又はＲ−エナンチオマーのいずれかが挙げられる。
【００６２】
【化９】
0006506753.tif 000011
上記各化合物のＳ−エナンチオマーが特に好ましい。
【００６３】
本発明の第３の態様は、本発明の第１の態様にしたがって得られる式Ｉ−Ｓ又は式Ｉ−Ｒの化合物である。本発明の第１の態様の方法は、調剤するのが非常に容易で良質な粉末形態の式Ｉ−Ｓ又はＩ−Ｒのいずれかのエナンチオマーを容易に調製することを可能にする。
【００６４】
本発明の第４の態様は、本発明の第２の態様にしたがって得られる式ＩＩの化合物である。
【００６５】
次に、一連の非限定的な実施例の一連によって本発明を説明する。
【００６６】
実施例の簡単な説明
実施例１には、式Ｉの化合物１のＳ−エナンチオマー及びＲ−エナンチオマーのラセミ混合物の合成について記載する。
【００６７】
実施例２には、式Ｉの化合物１のＳ−エナンチオマー及びＲ−エナンチオマーの分離について記載する。
【００６８】
比較例３には、回転蒸発による式Ｉの化合物１のＳ−エナンチオマーの精製について記載する。得られた精製Ｓ−エナンチオマーは、様々な溶媒及び回転蒸発パラメータを試行することによって方法を適合化した場合であっても、回転蒸発によって固体形態で得ることが非常に困難であった。
【００６９】
実施例４には、本発明の方法の沈殿による、式Ｉの化合物１のＳ−エナンチオマーの精製について記載する。
【００７０】
実施例で使用した略語のリスト
ＤＭＦ  ジメチルホルムアミド
Ｈ  時間
ＨＰＬＣ  高速液体クロマトグラフィー
ＩＰＡ  イソプロピルアルコール
ＭｅＣＮ  アセトニトリル
ＭｅＯＨ  メタノール
ｍｉｎ  分
ＮＭＲ  核磁気共鳴
ＲＴ  室温
ＳＦＣ  超臨界流体クロマトグラフィー
ＴＨＦ  テトラヒドロフラン
【実施例】
【００７１】
実施例１
式Ｉの化合物１のＳ−エナンチオマー及びＲ−エナンチオマーのラセミ混合物の合成
実施例１（ａ）：ベンジルオキシアセチルクロリド
ジクロロメタン（５０ｍＬ）中のベンジルオキシ酢酸（１０．０ｇ、６０．０ｍｍｏｌ、８．６ｍＬ）に、塩化オキサリル（９．１ｇ、７２．０ｍｍｏｌ、６．０ｍＬ）及びＤＭＦ（３０．０ｍｇ、０．４ｍｍｏｌ、３２．０μＬ）を添加し、ＲＴで３時間撹拌した。最初、反応の進行に伴って急速なガス発生が起こったが、反応が完了すると発生は止まった。ジクロロメタン溶液を真空中で濃縮してガム状物質を得た。ガム状物質を追加の塩化オキサリル（４．５ｇ、３５．７ｍｍｏｌ、３．０ｍＬ）、ジクロロメタン（５０ｍＬ）及び１滴のＤＭＦで処理した。急速なガス発生が起こり、反応物をさらに２時間撹拌した。次いで、反応物を真空中で濃縮して、１１．０ｇ（定量的）のベンジルオキシアセチルクロリドをガム状物質として得た。構造は、13Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δC７３．６，７４．８，１２８．１，１２８．４，１２８．６，１３０．０，及び１７１．９によって確認された。
【００７２】
実施例１（ｂ）：２−ベンジルオキシ−Ｎ−（２−クロロ−５−メトキシ−フェニル）アセトアミド
０℃のジクロロメタン（１００ｍＬ）中のベンジルオキシアセチルクロリド（１１．０ｇ、６０．０ｍｍｏｌ）及び２−クロロ−５−メトキシアニリンクロリド（１１．７ｇ、６０．２ｍｍｏｌ）を撹拌し、トリエチルアミン（１３．０ｇ、１２６．０ｍｍｏｌ、１８．０ｍＬ）を１５分かけて徐々に添加した。撹拌反応物を１８時間かけてＲＴに加温した。トリエチルアミンクロリドの多量の沈殿が生じた。ジクロロメタン溶液を１０％炭酸カリウム水溶液（５０ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水し、真空中で濃縮して、１８．９ｇ（定量的）の２−ベンジルオキシ−Ｎ−（２−クロロ−５−メトキシ−フェニル）アセトアミドをガム状物質として得た。構造は、13Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δC５５．６，６９．６，７３．６，１０６．２，１１１．１，１１４．１，１２７．７，１２８．３，１２８．６，１２９．２，１３４．６，１３６．５，１５８．９，及び１６７．７によって確認された。
【００７３】
実施例１（ｃ）：（２−ベンジルオキシ−エチル）−（２−クロロ−５−メトキシフェニル）アミン
ＴＨＦ（１００ｍＬ）中の２−ベンジルオキシ−Ｎ−（２−クロロ−５−メトキシ−フェニル）アセトアミド（１８．９ｇ、６２．０ｍｍｏｌ）を撹拌し、水素化リチウムアルミニウム（４．９ｇ、１３０．０ｍｍｏｌ）を１５分かけて徐々に添加した。最初の水素化リチウムアルミニウムを添加すると、急速な水素ガス発生が起こった。次いで、反応物を４時間加熱還流し、ＲＴで週末中放置した。次いで、撹拌溶液に水（５０ｍＬ）を滴下して反応物をクエンチした。水素発生が起こって反応混合物を還流させた。次いで、反応物を真空中で濃縮してスラリーにした。水（２００ｍＬ）及び酢酸エチル（２００ｍＬ）を添加し、混合物を激しく振盪した。次いで、反応物をセライトで濾過して沈殿した水酸化アルミニウムを除去し、酢酸エチル溶液を分離し、硫酸マグネシウムで脱水し、真空中で濃縮して、１８．４ｇ（定量的）の（２−ベンジルオキシ−エチル）−（２−クロロ−５−メトキシフェニル）アミンをガム状物質として得た。構造は、13Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δC４３．３，５５．３，６８．２，７３．０，９８．１，１０１．８，１１１．６，１２７．６，１２７．７，１２８．４，１２９．３，１３７．９，１４４．８，及び１５９．５によって確認された。
【００７４】
実施例１（ｄ）：３−ブロモ−２−ヒドロキシ−シクロヘキシ−１−エンカルボン酸エチルエステル
２−オキソシクロヘキサンカルボン酸エチル（３０ｇ、１７６ｍｍｏｌ、２８ｍＬ）をジエチルエーテル（３０ｍＬ）に溶解し、窒素下で０℃に冷却した。臭素（２８ｇ、１７６ｍｍｏｌ、９．０ｍＬ）を１５分かけて滴下し、反応混合物を９０分かけてＲＴに加温した。混合物を氷冷飽和炭酸カリウム水溶液（２５０ｍＬ）中に徐々に注ぎ込み、酢酸エチル（３×２００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を硫酸マグネシウムで脱水し、濾過し、真空中で濃縮し、真空ラインで１８時間乾燥して、４１．４ｇ（９４％）の３−ブロモ−２−ヒドロキシ−１−エンカルボン酸エチルエステルを黄色油状物質として得た。構造は、13Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δC１４．１，１７．７，２１．８，３２．０，６０．０，６０．８，９９．７，１６６．３，及び１７２．８によって確認された。
【００７５】
実施例１（ｅ）：３−［（２−ベンジルオキシ−エチル）−（２−クロロ−５−メトキシ−フェニル）アミノ］−２−ヒドロキシ−シクロヘキシ−１−エンカルボン酸エチルエステル
（２−ベンジルオキシ−エチル）−（２−クロロ−５−メトキシフェニル）アミン（１０．０ｇ、３４．２ｍｍｏｌ）を無水ＴＨＦ（１００ｍＬ）中、窒素下、−４０℃で撹拌し、カリウムビス（トリメチルシリル）アミド（１４３．０ｍＬの０．５Ｍトルエン溶液、７２．０ｍｍｏｌ）を３０分かけて添加した。次いで、無水ＴＨＦ（１０ｍＬ）中の３−ブロモ−２−ヒドロキシシクロヘキシ−１−エンカルボン酸エチルエステル（８．５ｇ、３４．２ｍｍｏｌ）を添加し、１．５時間かけてＲＴに加温した。酢酸（１０．０ｇ、１６６ｍｍｏｌ、１０．０ｍＬ）を添加し、真空中で濃縮して、ＴＨＦを除去した。酢酸エチル（２００ｍＬ）及び１０％炭酸カリウム水溶液（１００ｍＬ）を添加し、混合物を激しく振盪した。酢酸エチル溶液を分離し、硫酸マグネシウムで脱水し、真空中で濃縮して、１６．５ｇ（定量的）の３−［（２−ベンジルオキシ−エチル）−（２−クロロ−５−メトキシ−フェニル）アミノ］−２−ヒドロキシ−シクロヘキシ−１−エンカルボン酸エチルエステルをガム状物質として得、これを精製せずに次の工程で使用した。粗反応混合物のＨＰＬＣ（Ｇｅｍｉｎｉ  １５０×４．６ｍｍ，２０分で５０〜９５％メタノール／水）、１８．９分（３８％）、１９．２分（２５％）、２３．１分（２８％）。
【００７６】
反応物の一成分を単離した。13Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δC１４．３，２０．６，２１．８，２６．４，３８．６，４３．０，５５．８，６０．５，６８．７，７３．３，９３，４，１０６．３，１０８．２，１１９．３，１２１．５，１２７．５，１２７．６，１２８．３，１３５．７，１３７．０，１３７．９，１５５．７，及び１７５．０。
【００７７】
実施例１（ｆ）：９−（２−ベンジルオキシ−エチル）−８−クロロ−５−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸エチルエステル
無水ジエチルエーテル（１５０ｍＬ）中の３−［（２−ベンジルオキシ−エチル）−（２−クロロ−５−メトキシ−フェニル）アミノ］−２−ヒドロキシ−シクロヘキシ−１−エンカルボン酸エチルエステル（８．０ｇ、１７．０ｍｍｏｌ）に、塩化亜鉛（７．１ｇ、５２．０ｍｍｏｌ）を窒素下で添加し、５．５時間加熱還流した。反応物を還流させると、反応物中に濃密な褐色油状物質が生じた。次いで、反応物を冷却し、上澄みのジエチルエーテルをデカントで除去し、酢酸エチル（１００ｍＬ）を添加し、２Ｎ  ＨＣｌ（５０ｍＬ）及び１０％炭酸カリウム水溶液（５０ｍＬ）で洗浄した。ジエチルエーテル層を分離し、硫酸マグネシウムで脱水し、真空中で濃縮して、油状物質（２．０ｇ）を得た。石油（Ａ）：酢酸エチル（Ｂ）で溶出するシリカゲルクロマトグラフィー（１０〜４０％（Ｂ）、３４０ｇ、２２ＣＶ、１５０ｍＬ／分）によって粗物質を精製して、１．８ｇの９−（２−ベンジルオキシ−エチル）−８−クロロ−５−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸エチルエステルを得た。濃密な褐色層を酢酸エチル（１００ｍＬ）及び２Ｎ  ＨＣｌ（５０ｍＬ）で処理した。酢酸エチル溶液を分離し、１０％炭酸カリウム水溶液（５０ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水し、真空中で濃縮して、油状物質（５．２ｇ）を得た。ジエチルエーテル（１００ｍＬ）及び無水塩化亜鉛（７．０ｇ）を添加した。混合物をさらに５日間加熱還流した。エーテル層を暗色のガム状物質からデカントで除去し、２Ｎ  ＨＣｌ（５０ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水し、真空中で濃縮して、ガム状物質（２．８ｇ）を得た。石油（Ａ）：酢酸エチル（Ｂ）で溶出するシリカゲルクロマトグラフィー（５〜３５％（Ｂ）、３４０ｇ、１５０ｍＬ／分）によってこのガム状物質を精製して、２．１ｇの９−（２−ベンジルオキシ−エチル）−８−クロロ−５−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸エチルエステルを得た。得られた全物質は、４．１ｇ（５０％）の９−（２−ベンジルオキシ−エチル）−８−クロロ−５−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸エチルエステルであった。構造は、13Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δC１４．４，２０．５，２２．３，２７．５，４０．２，４３．９，５５．０，６０．２，７０．７，７３．３，１００．２，１０７．５，１０８．４，１２０．１，１２２．８，１２７．４，１２７．５，１２８．２，１３２．０，１３７．４，１３８．１，１５２．６，及び１７５．８によって確認された。
【００７８】
実施例１（ｇ）：９−（２−ベンジルオキシ−エチル）−８−クロロ−５−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸
エタノール（５０ｍＬ）中の９−（２−ベンジルオキシ−エチル）−８−クロロ−５−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸エチルエステル（２．０ｇ、４．１ｍｍｏｌ）に、水酸化ナトリウム（１．１ｇ、２７．１ｍｍｏｌ）及び水（５ｍＬ）を添加し、８０℃で１８時間加熱した。次いで、真空中での蒸発によってエタノールを除去し、残留物をジエチルエーテル（５０ｍＬ）と水（５０ｍＬ）との間に分割した。ジエチルエーテル層を分離し、硫酸マグネシウムで脱水し、真空中で濃縮して、ガム状物質（７１．０ｍｇ）を得た。水層を２Ｎ  ＨＣｌ（２０ｍＬ）でｐＨ１に酸性化し、ジクロロメタン（２×１００ｍＬ）で抽出した。ジクロロメタン層を硫酸マグネシウムで脱水し、真空中で濃縮して、１．６ｇ（８７％）の９−（２−ベンジルオキシ−エチル）−８−クロロ−５−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸を泡状物質として得た。構造は、13Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ；ＣＤＣｌ3）：δC２０．２，２２．２，２７．１，３９．７，４４．０，５５．１，７０．７，７３．３，１００．６，１０６．３，１０８．９，１２３．０，１２７．４，１２７．５，１２８．３，１３２．０，１３８．０，及び１５２．０によって確認された。
【００７９】
実施例１（ｈ）：９−（２−ベンジルオキシ−エチル）−８−クロロ−５−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボニルクロリド
９−（２−ベンジルオキシ−エチル）−８−クロロ−５−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸（７）（１．５ｇ、３．７ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（５０ｍＬ）に溶解し、塩化オキサリル（７００ｍｇ、５．５ｍｍｏｌ、４７０μＬ）及びＤＭＦ（１滴）を添加し、反応物を２０℃で２時間撹拌した。反応の進行に伴って、約３０分間にわたって穏やかなガス発生が起こった。次いで、反応物を真空中で濃縮して、９−（２−ベンジルオキシ−エチル）−８−クロロ−５−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボニルクロリドをガム状物質として得、これを精製せずに次の工程で使用した。構造は、13Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ；ＣＤＣｌ3）：δC２０．８，２２．１，２６．４，４４．２，５１．８，５５．１，７０．７，７３．３，１００．７，１０６．０，１０８．６，１１９．５，１２３．４，１２７．３，１２７．７，１２８．３，１３１．９，１３８．０，１３８．２，１５２．０．及び１７６．３によって確認された。
【００８０】
実施例１（ｉ）：９−（２−ベンジルオキシ−エチル）−８−クロロ−５−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミド
次いで、９−（２−ベンジルオキシ−エチル）−８−クロロ−５−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボニルクロリド（１．６ｇ、３．７ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（５０ｍＬ）に溶解し、０℃に冷却し、撹拌し、ジエチルアミン（８１０ｍｇ、１１．０ｍｍｏｌ、１．１ｍＬ）を滴下した。反応物を１８時間かけて室温に加温した。次いで、反応混合物を１０％炭酸カリウム水溶液（５０ｍＬ）で洗浄し、分離し、硫酸マグネシウムで脱水し、真空中で濃縮して、ガム状物質を得た。粗物質をジエチルエーテルから結晶化して、１．２ｇ（７１％）の９−（２−ベンジルオキシ−エチル）−８−クロロ−５−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミドを白色結晶質固体として得た。構造は、13Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ；ＣＤＣｌ3）：δC１３．０，１４．５，１９．８，２２．２，２７．９，３６．４，４０．４，４１．９，４３．８，５５．０，７０．８，７３．３，１００．２，１０８．５，１０８．６，１１９．９，１２２．５，１２７．４，１２７．５，１２８．３，１３１．５，１３７．８，１３８．２，１５２．４，及び１７４．５によって確認された。
【００８１】
実施例１（ｊ）：９−（２−ベンジルオキシ−エチル）−５−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミン
メタノール（１００ｍｌ）中の９−（２−ベンジルオキシ−エチル）−８−クロロ−５−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミド（１．０ｇ、２．１ｍｍｏｌ）を、水素ガス雰囲気下、１０％パラジウム炭（１．０ｇ）、トリエチルアミン（２．９ｍｇ、２．９ｍｍｏｌ、４μＬ）と共に５５℃で１８時間振盪した。次いで、反応物をセライトパッドで濾過し、ろ液を真空中で濃縮して、ガム状物質（９０８ｍｇ）を得た。次いで、ガム状物質をジクロロメタン（１００ｍｌ）に溶解し、５％炭酸カリウム水溶液（５０ｍｌ）で洗浄した。次いで、ジクロロメタン溶液を分離し、硫酸マグネシウムで脱水し、真空中で濃縮して、ガム状物質を得た。次いで、ガム状物質をジエチルエーテル（５０ｍｌ）から結晶化し、結晶を濾過によって回収して、５２３ｍｇ（５７％）の９−（２−ベンジルオキシ−エチル）−５−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミンを得た。構造は、13Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ；ＣＤＣｌ3）：δC１３．１，１４．６，２０．１，２２．０，２８．１，３６．４，４０．５，４２．０，４３．０，５４．７，６８．８，７３．３，９９．４，１０２．４，１０７．８，１１６．４，１２１．２，１２７．６，１２７．６，１２８．３，１３５．６，１３７．８，１３８．０  １５３．６，及び１７５．０によって確認された。
【００８２】
実施例１（ｋ）：９−（２−ヒドロキシエチル）−５−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミン
メタノール（５０ｍｌ）中の９−（２−ベンジルオキシ−エチル）−５−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミン（１．０ｇ、２．１ｍｍｏｌ）を、１０％パラジウム炭（３００ｍｇ）及び過剰の水素ガスと共に５５℃で１８時間振盪した。次いで、反応物をセライトパッドで濾過し、ろ液を真空中で濃縮して、５７８ｍｇ（１００％）の９−（２−ヒドロキシエチル）−５−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミンを泡状物質として得た。構造は、13Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ；ＣＤＣｌ3）：δC１３．０，１４．４，２０．０，２２．０，２８．０，３６．４，４０．６，４２．０，５４．７，６０．６，９９．２，１０２．６，１０７．０，１１６．７，１２１．１，１３６．１，１３７．５，１３８．０  １５３．５，及び１７５．７によって確認された。
【００８３】
実施例１（ｌ）：メタンスルホン酸２−（４−ジエチルカルバミル−５−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロ−カルバゾール−９−イル）エチルエステル（式Ｉの化合物１のＳ−エナンチオマー及びＲ−エナンチオマーのラセミ混合物）
ジクロロメタン（３０ｍｌ）中の９−（２−ヒドロキシエチル）−５−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミン（４７８ｍｇ、１．４ｍｍｏｌ）を０℃に冷却し、塩化メタンスルホニル（４７７ｍｇ、４．２ｍｍｏｌ、３２４μＬ）及びトリエチルアミン（４２０ｍｇ、４．２ｍｍｏｌ、５７８μＬ）を添加し、一晩かけてＲＴに加温した。反応物を５％炭酸カリウム水溶液で洗浄した。層を分離した。合わせた有機物を硫酸マグネシウムで脱水し、真空中で濃縮して、ガム状物質（６９６ｍｇ）を得た。石油（Ａ）：酢酸エチル（Ｂ）で溶出するシリカゲルクロマトグラフィー（７５〜１００％Ｂ、２２ＣＶ、１２０ｇ、８５ｍＬ／分）によって粗物質を精製して、メタンスルホン酸２−（４−ジエチルカルバミル−５−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロ−カルバゾール−９−イル）エチルエステルをガム状物質として得、これをジエチルエーテルから結晶化して、３４６ｍｇ（５９％）の無色固体を得た。構造は、13Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ；ＣＤＣｌ3）：δC１３．１，１４．５，２０．０，２１．９，２８．０，３６．３，３６．７，４０．３，４１．８，４１．９，５４．７，６８．１，１００．０，１０２．０，１０９．０，１１６．４，１２２．０  １３５．１，１３７．３，１５３．８，及び１７４．６によって確認された。
【００８４】
実施例２
その別のエナンチオマーからの前駆体化合物１の分離
【００８５】
【化１０】
0006506753.tif 000012
４０℃の３０％ＩＰＡを１３ｍｌ／分、ラン時間６分で使用するＫｒｏｍａｓｉｌ  Ａｍｙｃｏａｔ，２５０×１０ｍｍ，５μｍ，１００Åカラムによるキラル超臨界流体（ＣＯ2）クロマトグラフィーを使用して、（実施例１に記載されているように得た）前駆体化合物１及び別のエナンチオマーのラセミ混合物をそのエナンチオマーに分離した。６０ｍｇのラセミ体を１，４−ジオキサン（２ｍｌ）に溶解し、各ランについて、最大２００μｌを一度に注入した。２つのエナンチオマー間のベースライン分離を達成した。Ｃｈｉｒａｌ  ＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓのＩＣによる分析ＨＰＬＣ（２５０×４．６ｍｍ、５μＭ、アイソクラチック溶出、０．５ｍｌ／分及び室温で８０：２０−ＭｅＯＨ：ＩＰＡ）によって、２つの分離したエナンチオマーのエナンチオマー純度を測定したところ、各エナンチオマーのエナンチオマー純度は９９．５％であることが示された。
【００８６】
比較例３：回転蒸発による前駆体化合物１の精製
実施例２に記載した方法にしたがって分離した前駆体化合物１及びその別のエナンチオマーを、３９℃±１℃の水浴温度の減圧（１０ｍＢａｒ未満）下で回転蒸発器（Ｈｅｉｄｏｌｐｈ）を使用して単離した。
【００８７】
ベンチトップ回転蒸発器及び小型回転蒸発器フラスコ（１〜２Ｌ）を使用する回転蒸発に、５ｇ未満のバッチを供した。固体は形成されず、油状物質のみであった。
【００８８】
固体生成物を得るために、油状物質を含むフラスコを３０℃の真空オーブン（Ｙａｍａｔｏ）内に一晩入れて存在していた可能性がある残留溶媒を除去しようとした。次いで、オーブンから両エナンチオマーを取り出し、イソプロパノール（４０ｍｌ）に再溶解し、０．２ミクロンフィルタとシリンジを使用してクリーンフラスコに濾過した。次いで、フラスコを回転蒸発器に戻して、３９℃で乾燥した。乾燥すると、両エナンチオマーは再び油状物質を形成した。
【００８９】
エナンチオマーを様々な溶媒（ＭｅＣＮ及びアルコール）及び溶媒混合物に溶解することによって、蒸発を試みた。加えて、回転蒸発器、フラスコサイズ及び回転蒸発のパラメータをスクリーニングした（真空、回転速度及び水浴温度）。これらの戦略はいずれも、固体生成物を生成しなかった。
【００９０】
実施例４：本発明の沈殿による前駆体化合物１の精製
１．６ｇの前駆体化合物１（実施例２に記載したように、ＳＦＣ中に最初に溶出するエナンチオマー）を１７ｍｌの２−プロパノールに３５℃で溶解した。得られた溶液をＵＳＰ水（３４ｍｌ）で徐々に希釈して、沈殿物を得た。混合物を室温で約１時間撹拌し、続いて０〜１０℃で約３０分間撹拌した。沈殿した固体を濾過によって回収し、漏斗上で吸引乾燥し、６０±５℃で真空乾燥して、１．４５ｇを得た（回収率９１％）。
【００９１】
エタノール／水、メタノール／水及びＭｅＣＮ／水を用いて同じ方法を行ったところ、結果は同様であった。