(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
コラーゲンおよびハチミツの水性懸濁液を含んでなる組成物であって、
前記コラーゲンが、ウシのコラーゲンであり、前記ハチミツがユニークマヌカファクター＋１２以上のものであり、
前記水性懸濁液が、約０．１ｗｔ％〜約２．０ｗｔ％のコラーゲンおよび約０．０５ｗｔ％〜約５．０ｗｔ％のハチミツを含む組成物。
【請求項２】
医療で使用するための請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
創傷の治療で使用するための請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
前記創傷が、火傷で負った創傷である請求項３に記載の組成物。
【請求項５】
コラーゲン、ハチミツ、水を含み、他の材料を含まない、または他の材料を実質上含まない、請求項１から４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６】
コラーゲン、ハチミツ、水、および創傷の治療のための１種または複数種の追加の薬剤を含む、請求項１から４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７】
前記水性懸濁液を乾燥させてなるフィルム、多孔質のスポンジまたは膜の形態をしている、請求項１から４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項８】
前記フィルムが、約５μｍ〜約２００μｍの範囲の厚さを有する、請求項７に記載の組成物。
【請求項９】
前記フィルムが、透明または半透明である、請求項７または８に記載の組成物。
【請求項１０】
追加の支持用薄手フィルムで囲まれた、請求項１から９のいずれか一項に記載の組成物を含む島状包帯。
【請求項１１】
前記追加の支持用薄手フィルムが、透明または半透明である、請求項１０に記載の島状包帯。
【請求項１２】
前記追加の支持用薄手フィルムが、ポリウレタン（ＰＵ）フィルムである、請求項１０または１１に記載の島状包帯。
【請求項１３】
前記追加の支持用薄手フィルムは、身体側表面に接着剤が施されており、患者の皮膚に周辺で付着することができる、請求項１０から１２のいずれか一項に記載の島状包帯。
【請求項１４】
前記接着剤が、アクリル系またはシリコーン系である、請求項１３に記載の島状包帯。
【請求項１５】
前記接着剤が、前記フィルムが使用されるときまで、前記フィルムの身体側表面上の前記接着剤を覆う少なくとも１つの容易剥離性ライナーを備えている、請求項１３または１４に記載の島状包帯。
【請求項１６】
前記容易剥離性ライナーが、接着剤に付着していないタブを含む、請求項１５に記載の島状包帯。
【請求項１７】
コラーゲン懸濁液を調製するステップ、ハチミツ溶液を調製するステップ、前記ハチミツ溶液を前記コラーゲン懸濁液に添加して、コラーゲンおよびハチミツの懸濁液を供するステップを含む、請求項１から１６のいずれか一項に記載の組成物を生成する方法。
【請求項１８】
前記コラーゲンおよびハチミツの懸濁液に、脱気および乾燥のさらなるステップを施してフィルムを提供する、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記懸濁液をフリーズドライして、多孔質のスポンジまたは膜を形成する、請求項１７または１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記組成物に物理的または化学的な架橋を施す、請求項１７から１９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１】
創傷を治療するための薬剤の製造に用いる、請求項１から１６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２２】
前記組成物が前記創傷に約２〜約７日間あてがわれ、その後、前記創傷が治癒するまで前記創傷の重症度に応じて再度あてがわれるのに用いる、請求項２１に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、コラーゲンおよびハチミツを含む組成物に関する。この組成物は、医療で使用するためのものであり、特に、創傷、好ましくは火傷で負った創傷の治療で使用するためのものである。本発明は、患者の皮膚にこの組成物を局所的にあてがうことを含む、創傷を治療する方法を提供する。
【背景技術】
【０００２】
コラーゲンおよびハチミツはどちらも、創傷治癒の促進において長い歴史を個々に有し、認知されてきた天然由来の材料である。
【０００３】
コラーゲンは、とりわけ、皮膚の再生、軟骨修復、神経修復、および結膜修復に及ぶ用途において臨床的成果が見られている。これらの用途では、コラーゲンは、自然治癒過程に関与する細胞が創傷部位にわたって付着、遊走、増殖することができる物理的なフレームワークとして役立っている。コラーゲン含有包帯は（犠牲基質として）コラーゲン源を供するものであり、このコラーゲン源が、創傷部位に存在する高レベルのマトリックスメタロプロテアーゼ（ＭＭＰ）により分解され、内因性天然コラーゲンを残して、正常な創傷治癒過程を継続させることができる。
【０００４】
局所的にあてがわれたコラーゲンは、止血剤として働き、創傷床において新しい組織の増殖を刺激することが示されている。
【０００５】
コラーゲンは、細胞分化、血管形成、細胞遊走、コラゲナーゼの誘導、創傷収縮、血小板凝集、分解産物による増殖因子およびサイトカインの誘導、細胞表面受容体（インテグリン）の細胞シグナル伝達および誘導において役割を有する。
【０００６】
上で論じたコラーゲンの用途は組織の再生に焦点が当てられているのに対して対照的に、ハチミツの使用は感染症のリスク低減に用いられると同時に、ハチミツのいくつかの成分が治癒の促進に十分に役立つ。
【０００７】
ハチミツが創傷治癒の促進に利用されていることは既に知られている。特定の商業的に入手できるグレードのハチミツは、創傷治癒に寄与し得る特有の抗菌性および抗炎症性を示すことが確認されている。ハチミツの作用に関連する性質および機構を以下に説明する。
【０００８】
抗菌作用
・  高含糖量および低含水量は、水に対する親和性を高める。この結果、細菌増殖の維持に利用可能な水が不十分になる。
【０００９】
・  ハチミツは、酸であり、アミノ酸、有機酸、および芳香族酸を含有する。通常、ハチミツのｐＨは約４であり、これはハチミツの供給源の花と直接関係がある。一般的に微生物は中性ｐＨを好むので、この酸性ｐＨは、微生物の増殖を阻害する。低いｐＨはまた、酸素拡散を増大させ、プロテアーゼ活性を低減させることが示されている。プロテアーゼは病的な細胞外マトリックス（ＥＣＭ）を破壊する役割を有するが、長期にわたって高レベルにあるとそれらは健全なＥＣＭを破壊する場合があることが知られている。より低いｐＨ値はまた、コラーゲンの線維芽細胞遊走、増殖、および組織化のための条件の最適化に役立ち、これらはすべて創傷治癒に寄与する。
【００１０】
・  ハチによる花蜜の収集中に酵素グルコースオキシダーゼが花蜜と混合される。この酵素は、ハチが生成したハチミツ中では不活性であるが、創傷体液で希釈されると活性化される。これは、グルコースのグルコン酸（低ｐＨを有する）および過酸化水素への酸化を触媒する。これらの反応生成物は、いくつかのハチミツにおいて抗菌性を与えることがある。マヌカハチミツでは、抗菌性はメチルグリオキサール（ＭＧＯ）に起因しており、メチルグリオキサール（ＭＧＯ）はマヌカの花の花蜜中の高レベル化合物ジヒドロキシアセトンに由来する。
【００１１】
抗炎症作用
・  ハチミツの構成糖により生じる浸透圧は、細胞からリンパ液を引き出し、それによって、浮腫が低減される。これは抗炎症作用を有する。というのは、浮腫は組織中の圧力を増加させ、それによって、血流を制限し、細胞への酸素および栄養素の供給を制限することが分かっているからである。
【００１２】
悪臭の低減
・  低いｐＨは細菌増殖を阻害するが、それ以外に、分解された組織タンパク質からのアミノ酸の代謝によりアンモニア、アミン、および硫黄のような悪臭化合物を生じさせることが予想されるであろう。存在する微生物はいずれも代替エネルギー源（グルコース）を食し得る。
【００１３】
浸透圧活性および湿潤創傷環境
・  ハチミツの成分である糖の浸透圧は、深部組織から体液／リンパ液を引き寄せて、創傷部位を浸し、それと一緒に失活組織および脱落組織を表出させる。リンパ液の一定の流出は、創傷部位にプラスミノゲンを提供し、壊死性組織の分解を助ける（プラスミノゲンは、創傷面での壊死組織の癒着を破壊するプラスミンに転化される）。
【００１４】
創傷ケア製品は、コラーゲンだけをベースとして、および他の生物学的成分と組み合わせたコラーゲンをベースとして開発されている。同様に、製品は、ハチミツ（マヌカハチミツ）だけ、ならびにアルギン酸塩（アルギン酸カルシウムおよびアルギン酸ナトリウム）や天然ゲル化剤などの他の材料と組み合わせたハチミツを使用して開発されている。しかし、これまで、特に創傷治療に用いるための、コラーゲンおよびハチミツの両方を含む組成物ならびにその特定の変形物に関する既知の研究はなかった。
【００１５】
表１は、コラーゲンおよびハチミツの特徴を要約したものである。
【００１６】
【表１】
0006592106.tif 000002
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１７】
創傷治癒の促進に使用することができるさらなる組成物が必要とされている。
【００１８】
本発明は、創傷を治療するための組成物を提供しようとするものである。特に、本発明は、火傷で負った創傷を治療するための組成物を提供しようとするものである。
【課題を解決するための手段】
【００１９】
注目すべきことに、コラーゲンおよびハチミツを含む組成物を生成する新規な方法を見出した。これにより、コラーゲンおよびハチミツの両方を含む組成物を提供することが可能となった。有利なことに、組成物は天然成分を含み、これは、幾人かの患者にとって合成成分を含む医療品よりも許容でき、使用できる可能性が高まる。
【００２０】
本発明によれば、一態様では、コラーゲンおよびハチミツを含む組成物を提供する。
【００２１】
さらなる一態様では、本発明は、医療で使用するための、コラーゲンおよびハチミツを含む組成物を提供する。
【００２２】
さらなる一態様では、本発明は、創傷の治療で使用するための、コラーゲンおよびハチミツを含む組成物を提供する。
【００２３】
さらなる一態様では、本発明は、患者の皮膚に本発明による組成物を局所的に投与することを含む、創傷を治療する方法を提供する。
【００２４】
好ましくは、本発明の組成物を、創傷に約２〜約７日間あてがい、その後、創傷が治癒するまで創傷の重症度に応じて再度あてがう。
【００２５】
好ましくは、創傷は、火傷で負った創傷である。
【００２６】
好ましくは、コラーゲンは、ウシのコラーゲンである。有利なことに、ウシのコラーゲンは、ヒトのコラーゲンと化学的に類似している。これは、患者による宿主の免疫応答および拒絶のリスクを最小限にする。
【００２７】
好ましくは、ハチミツは、医療グレードのハチミツである。より好ましくは、ハチミツは、ユニークマヌカファクター（ＵＭＦ）＋１２以上のものである。より好ましくは、ハチミツは、ユニークマヌカファクター（ＵＭＦ）＋１６〜ＵＭＦ＋２０である。より好ましくは、ハチミツは、抗菌性および抗炎症性を有する。一例は、ニュージーランドに自生するマヌカブッシュ由来のＬｅｐｔｏｓｐｅｒｍｕｍ  Ｓｃｏｐａｒｉｕｍ種のものである。
【００２８】
一実施形態では、組成物は、水性懸濁液の形態をしている。
【００２９】
好ましくは、懸濁液は、水性コラーゲン懸濁液および水性ハチミツ溶液を含む。好ましくは、懸濁液は、コラーゲン、ハチミツ、水を含み、他の材料を含まない、または他の材料を実質上含まない。あるいは、懸濁液は、創傷の治療のための１種または複数種の追加の医療品を含む。これに関して、１種または複数種の追加の医療品は、好ましくは懸濁液または溶液の状態にある。
【００３０】
好ましくは、コラーゲン懸濁液は、蒸留水におけるコラーゲンの懸濁液である。
【００３１】
好ましくは、水性コラーゲン懸濁液は、懸濁液の約０．１ｗｔ％〜約２．０ｗｔ％のコラーゲンを含む。より好ましくは、水性コラーゲン懸濁液は、懸濁液の約０．５ｗｔ％〜約１ｗｔ％のコラーゲンを含む。
【００３２】
好ましくは、ハチミツ溶液は、蒸留水または希釈した酸にハチミツを溶かした液である。
【００３３】
好ましくは、水性コラーゲン懸濁液および水性ハチミツ溶液を含む懸濁液は、懸濁液の約０．０５ｗｔ％〜約５．０ｗｔ％のハチミツを含む。より好ましくは、水性コラーゲン懸濁液および水性ハチミツ溶液を含む懸濁液は、懸濁液の約０．１ｗｔ％のハチミツを含む。
【００３４】
代替実施形態では、組成物は、フィルムまたは足場の形態をしている。
【００３５】
好ましくは、フィルムまたは足場を、コラーゲンおよびハチミツを含む懸濁液を乾燥させることによって生成する。
【００３６】
好ましくは、フィルムは、コラーゲン、ハチミツ、水を含み、他の材料を含まない、または他の材料を実質上含まない。あるいは、フィルムは、創傷の治療のための１種または複数種の追加の医療品を含む。これに関して、１種または複数種の追加の医療品は、好ましくは、フィルムと一体になっている。
【００３７】
好ましくは、本発明による組成物は、薄手フィルムの形態で供される。有利なことに、フィルムは、包帯として創傷に使用することができる。
【００３８】
好ましくは、フィルム厚は、約５μｍ〜約２００μｍ、より好ましくは、約２０μｍ〜約１００μｍの範囲にある。
【００３９】
有利なことに、本発明によるフィルムが、丈夫であり、強力な取扱適性を有し、包帯として使用できることが分かった。さらに、患者は本発明によるフィルムを取り外す必要がない。それどころか、これは生分解性である。これらの利点は、使用者に快適さを増大させる。
【００４０】
好ましくは、本発明のフィルムは、患者の様々な身体部分に対する様々な形および大きさの創傷の治療に必要とされる多くの幾何形状および寸法で製造することができる。
【００４１】
好ましくは、フィルムは、透明または半透明である。これは、使用中に、フィルムが配置されている皮膚を検査することができるという利点をもたらす。
【００４２】
好ましくは、本発明の組成物は、好ましくは薄手フィルムである追加の支持体と一緒にフィルムの形態で供される。このようにして、本発明は、追加の支持用薄手フィルムで囲まれた本発明による組成物を有する島状物を含む島状包帯を提供する。
【００４３】
好ましくは、追加の支持用薄手フィルムは、透明または半透明である。これは、使用中に、フィルムが配置されている皮膚を検査することができるという利点をもたらす。
【００４４】
好ましい一実施形態では、追加の支持用薄手フィルムは、ポリウレタン（ＰＵ）フィルムである。
【００４５】
好ましくは、追加の支持用薄手フィルムは、患者の皮膚に付着する周辺を有することができる。これに関して、追加の支持用薄手フィルムは、好ましくは、身体側表面に接着剤が施されている。
【００４６】
好ましくは、接着剤は、アクリル系またはシリコーン系である。より好ましくは、接着剤はアクリル系である。
【００４７】
好ましくは、接着剤は、フィルムが使用されるときまで、フィルムの身体側表面上の接着剤を覆う少なくとも１つの容易剥離性ライナーを備えている。使用直前に、容易剥離性ライナーを身体側表面からはがして、接着剤を露出させる。これは、接着剤ならびにコラーゲンおよびハチミツを含む島状包帯を、使用されるときまで保護するという利点をもたらす。
【００４８】
好ましくは、容易剥離性ライナーは、接着剤に付着していないタブを含む。これは、タブを容易につかむことができ、容易剥離性ライナーの取り外しを促して、接着剤を露出させるという利点をもたらす。
【００４９】
好ましくは、本発明による組成物またはフィルムを、使用前に小袋に密閉する。好ましくは、組成物またはフィルムは、使用前は無菌であり、小袋は組成物またはフィルムを保護するという利点を有する。これは、使用者の感染症リスクを軽減する。
【００５０】
したがって、本発明は、密封された無菌フィルム包帯を含むパッケージを提供する。
【００５１】
さらなる一態様では、本発明は、コラーゲン懸濁液を調製するステップ、ハチミツ溶液を調製するステップ、ハチミツ溶液をコラーゲン懸濁液に添加して、コラーゲンおよびハチミツの懸濁液を供するステップを含む、本発明による組成物を生成する方法を提供する。
【００５２】
好ましくは、コラーゲンおよびハチミツの懸濁液に、任意選択の脱気、および低温（好ましくは約２０℃〜約３５℃）またはより高温（好ましくは約３５℃超）の乾燥のさらなるステップを施して、コラーゲンおよびハチミツのフィルムを提供する。
【００５３】
好ましい一実施形態では、懸濁液を凍結乾燥またはフリーズドライして、多孔質のスポンジまたは膜を形成する。
【００５４】
好ましい一実施形態では、組成物に物理的または化学的な架橋を施す。有利なことに、これは、必要に応じて、フィルムに強度および他の望ましい性質を与える。架橋方法として、グルタルアルデヒドおよび他の化学的架橋剤ならびに熱脱水処理が挙げられるが、それらだけに限らない。
【００５５】
好ましくは、コラーゲン懸濁液は、約０．５ｗｔ％懸濁液である。
【００５６】
好ましくは、それを、Ｉ型ウシアキレス腱コラーゲン約２．５ｇを約１ｍＭの酸（好ましくは塩酸（ＨＣｌ））約５００ｍｌ中において約２４時間水和させ、約５時間ブレンドすることによって調製する。水和させたらすぐに、コラーゲンを、好ましくは、ブレンダー容器へ移動させ、氷を充填したＰｙｒｅｘ皿に置き、ブレンドする。好ましくは、それを、最初にダブルブレードブレンダーを使用して約２時間ブレンドし、続いて、ホモジナイザーでさらに約３時間ブレンドして、白色コラーゲン懸濁液を生成する。
【００５７】
好ましくは、ハチミツ溶液は、約０．０１ｇ／ｍｌ〜約０．２ｇ／ｍｌの濃度を有する。好ましくは、濃度は、約０．２ｇ／ｍｌ、約０．１ｇ／ｍｌ、約０．０５ｇ／ｍｌ、約０．０２ｇ／ｍｌ、および約０．０１ｇ／ｍｌからなる群から選択される。
【００５８】
好ましくは、ハチミツ溶液を、ユニークマヌカファクター（ＵＭＦ）＋１６のハチミツを蒸留水に添加することによって調製する。ハチミツ溶液において最も高いハチミツ含有量は、好ましくは、約１．０ｇ／５ｍｌ＝約０．２ｇ／ｍｌである。
【００５９】
好ましくは、シリンジを使用して、好ましくは秤量天秤に配置したフラスコに好ましくは約５ｇのハチミツを移動させ、好ましくは約２５ｍｌの蒸留水を添加する。好ましくは、混合物を、好ましくはマグネティックスターラーを用いて、好ましくは少なくとも約１時間撹拌する。これにより、好ましくは、約０．２ｇ／ｍｌのハチミツを含む溶液が生じる。好ましくは、この溶液を使用して、ハチミツの濃度がより低い溶液を連続希釈で作製した。
【００６０】
好ましくは、ハチミツ溶液をコラーゲン懸濁液に添加、または逆に添加する。より好ましくは、ハチミツ溶液をコラーゲン懸濁液に添加する。
【００６１】
好ましくは、連続均質化しながらハチミツ溶液をコラーゲン懸濁液に液滴で添加またはバルクで添加し、次いで、ブレンドかつ／または均質化する。
【００６２】
好ましくは、得られたコラーゲン−ハチミツ懸濁液を均質化する。
【００６３】
好ましくは、コラーゲン−ハチミツ懸濁液を、任意選択で真空オーブン、チャンバー、または他の設備において脱気して、気泡を除去する。
【００６４】
好ましくは、次いで、懸濁液を、型、トレイの中へ、または紙の上に注ぐ。
【００６５】
好ましくは、次いで、注いだ懸濁液を脱気下に放置する。
【００６６】
好ましくは、懸濁液をオーブンまたはチャンバーにおいて低温（約２０℃〜約３５℃）またはより高温（約３５℃超）で乾燥させて、フィルムを生成する。
【００６７】
任意選択で、懸濁液を凍結乾燥またはフリーズドライして、多孔質のスポンジまたは膜を形成する。
【００６８】
好ましくは、フィルムに物理的または化学的な架橋を施して、フィルムに強度および他の望ましい性質を与える。
【００６９】
好ましくは、架橋方法として、グルタルアルデヒドおよび任意選択で他の化学的架橋剤ならびに熱脱水処理が挙げられるが、それらだけに限らない。
【００７０】
次に、本発明を、実施例により添付の図面を参照して説明する。
【図面の簡単な説明】
【００７１】
【図１】創傷治療の段階を説明する概略図である。
【図２】本発明による組成物を生成する方法の段階を示す概略図である。
【図３】本発明による組成物を有するフィルムの写真である。
【発明を実施するための形態】
【００７２】
本発明の態様、実施形態、および好ましい特徴が、明細書を明確かつ簡潔な方法で書くことを可能にする方法で本明細書に記載されていることが認識されるであろう。しかし、本発明の範囲が、記載の特徴のすべてまたはいくつかの組合せを有する実施形態を含み得ることが認識されるであろう。状況上そうでないとする明白な指示がない限り、態様、実施形態、および好ましい特徴は、本発明に従って様々に組み合わせるまたは分けることができる。好ましい一実施形態では、本発明による組成物は、本発明のすべての態様を含む。
【００７３】
単語「約」は、任意選択でプラスまたはマイナス２０％、より好ましくは任意選択でプラスまたはマイナス１０％、さらにより好ましくは任意選択でプラスまたはマイナス５％、さらにより好ましくは任意選択でプラスまたはマイナス２．５％、最も好ましくは任意選択でプラスまたはマイナス１％を意味する。
【００７４】
本明細書の文脈内で、単語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」は、「とりわけ、含む（ｉｎｃｌｕｄｅｓ，ａｍｏｎｇ  ｏｔｈｅｒ  ｔｈｉｎｇｓ）」を意味する。それは、「のみからなる（ｃｏｎｓｉｓｔｓ  ｏｆ  ｏｎｌｙ）」と解釈すべきものではない。
【００７５】
本明細書の文脈内で、単語「実質上」は、好ましくは少なくとも９０％、より好ましくは９５％、さらにより好ましくは９８％、最も好ましくは９９％を意味する。
【００７６】
本明細書の文脈内で、「治療」は、既存の病態もしくは疾患の治療および／または病態もしくは疾患の発生を防ぐための予防的治療を意味する。したがって、本発明の方法は、疾患の治療、予防、進行の阻止、または発症の遅延に使用することができる。「創傷の治療」は、創傷の大きさもしくは重症度の低減または創傷に対する感染症の予防もしくは低減を意味する。
【００７７】
用語「創傷」は、皮膚が損傷、裂傷、切断、もしくは穿刺されている負傷、または鈍器外傷が挫傷を引き起こす負傷を意味する。それには、皮膚の真皮を損傷する鋭傷、または皮膚を損傷する火傷が含まれる。
【００７８】
理論に拘泥するものではないが、創傷環境内のコラーゲンが、高レベルのＭＭＰ（マトリックスメタロプロテアーゼ）によって分解され得る代替コラーゲン源（犠牲基質）となり、内因性コラーゲンが正常な創傷治癒を継続できるようにすることが考えられる。コラーゲンはまた、治癒を助けるために細胞のシグナル伝達、分化、遊走、血管形成、および増殖因子の誘導において役割を有する。
【００７９】
さらに、ハチミツを含む諸実施形態では、組成物中のハチミツは、含水量を低減させるように作用して、潜在的な細菌増殖にさらに適さない環境を作り出すと考えられる。さらに、ハチミツの存在はｐＨの低下をもたらし、これは、酸素拡散の増大およびプロテアーゼ活性の低減と同時に微生物増殖の阻害に役立ち得る。
【００８０】
マトリックスメタロプロテイナーゼ（ＭＭＰ）は、創傷治癒過程において不可欠な部分を果たす。しかし、これらのＭＭＰのレベルが上昇すると、健全な組織が崩壊され、創傷が治癒しなくなる、または治癒が遅くなる。さらに、酸性ｐＨはプロテアーゼ活性の低減を示しており、これは、ハチミツをあてがうことにより促進されて、治癒中の創傷ｐＨレベルの低下を誘発し得る。より低いこのｐＨはまた、酸素拡散、創傷治癒での別の有力要因の増大を示しており、酸素利用能のこの増加はまた、ハチミツ中の糖によって誘発される浸透圧を潜在的に促進し、これは浮腫を低減させるように作用し得る。
【００８１】
表１に示すように、コラーゲンのみおよびハチミツのみのどちらも、創傷治癒に利益をもたらすことが以前から示されている。これに関して、表１は、コラーゲン、ハチミツ、ならびにコラーゲンとハチミツとの新規な組合せに関する材料性質および作用様態の要約を示している。
【００８２】
図１に示すように、創傷治療の段階は以下のとおりである：
１−  包帯を創傷域の上および周囲に配置する
２−  コラーゲンが分解し、ハチミツが創傷に出現する
３−  プロテアーゼおよびコラゲナーゼがコラーゲンを崩壊させ、ハチミツの、創傷へのさらなる曝露が起こる
４−  ハチミツの抗炎症および抗菌活性ならびにコラーゲンの生化学的な作用および刺激は創傷治癒を促進する
５−  再生上皮層は無毒な残渣または合成微粒子と共に形成する。
【００８３】
図は、創傷床を覆う包帯のあてがい、ならびに経時的な成分の創傷への段階的分解および放出を概略的に説明している。
【００８４】
Ａ：無菌包帯を創傷部位上に配置して、防護壁を形成する。これを二次包帯で覆い、適所にしっかり保持してもよく、または島状包帯を形成してもよい。
【００８５】
Ｂ：包帯が創傷部位と接触するにつれて、包帯成分、すなわち、コラーゲンおよびハチミツが、時間が経つにつれて創傷と相互作用し始める。ハチミツは、ｐＨをより低下させ、酸素拡散を増大させ、プロテアーゼ活性を低減させる働きをする。ハチミツはまた、浸透圧を生じさせる働きをし、それによって、抗炎症作用および湿潤創傷治癒が促進され得る。コラーゲンは、犠牲基質として働き、それと同時に、細胞分化、遊走、および血管形成に必要な刺激を含む、刺激も供する。
【００８６】
Ｃ：時間が経つにつれて、コラーゲンはマトリックスメタロプロテアーゼの作用により分解し始める。この生分解は、コラーゲン微粒子をより深い創傷部位で利用できるようにし、新組織が形成されて、コラーゲン基質に取って替わる。ハチミツはまた、治癒過程全体にわたって抗菌成分として働き続ける。
【００８７】
本発明による組成物を以下のように調製した。
【００８８】
材料および方法
コラーゲン懸濁液の調製
０．５ｗｔ％コラーゲン懸濁液を、Ｉ型ウシアキレス腱コラーゲン２．５ｇを１ｍＭの塩酸（ＨＣｌ）５００ｍｌ中において２４時間水和させ、５時間ブレンドすることによって調製した。水和させたらすぐに、コラーゲンをブレンダー容器へ移動させ、氷を充填したＰｙｒｅｘ皿に置き、最初にダブルブレードブレンダーを使用して２時間ブレンドし、続いて、ホモジナイザーでさらに３時間ブレンドして、白色コラーゲン懸濁液を生成した。
【００８９】
ハチミツ溶液の調製
ユニークマヌカファクター（ＵＭＦ）＋１６のハチミツを使用して、蒸留水において０．２、０．１、０．０５、０．０２、および０．０１ｇ／ｍｌのハチミツ濃度を調製した。最も高いハチミツ含有量は、１．０ｇ／５ｍｌ＝０．２ｇ／ｍｌであった（２５ｍｌを得るために、ハチミツ５ｇを使用した）。シリンジを使用して、秤量天秤（Ｄｅｎｖｅｒ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ）に配置した２５ｍｌ容のメスフラスコにハチミツ５ｇを移動させ、メスフラスコに蒸留水２５ｍｌを充填し、マグネティックスターラーを使用して、溶液を１時間混合した。これにより０．２ｇ／ｍｌのハチミツ溶液が得られ、これを使用して、濃度がより低い溶液を連続希釈で作製した。
【００９０】
図２に示すように、本発明による組成物を生成する方法ステップは、以下のとおりであった。
（１）凍結乾燥されたコラーゲンは、粉末、繊維、顆粒の形態、または他の形態をとり得る。コラーゲンは、Ｉ型、ＩＩ型、ＩＩＩ型、ＩＶ型、または他のものでもよい。それは、予め調製されたものを購入してもよく、または軟骨から抽出してもよい。コラーゲンはまた、ゼラチンなどの変性形態でもよい。
（２）コラーゲンは、塩酸、酢酸、または他の酸性溶液においてｐＨ＜７で水和され得る。水和の期間は、コラーゲンの量および溶質と溶媒との間の接触領域に応じて変化し得る。この水和には、通常、２時間〜２４時間を要し得る。水和しているコラーゲンは冷却下に置いておくべきである。
（３）ブレンダーおよび／またはホモジナイザーを使用して、前述のように水和コラーゲンを均質化した。ブレンド時間は、コラーゲンの重量分率および量に依存した。ブレンド溶液を冷却し続けた。これは、氷浴を使用して周りを取り囲むことで実現され得る。
（４）粘性または半粘性の液体または粉末の形態をとり得るハチミツを使用することができる。ハチミツはニュージーランドに自生するＬｅｐｔｏｓｐｅｒｍｕｍ  Ｓｃｏｐａｒｉｕｍブッシュから調達することができ、それは、特有の抗菌性および抗炎症性を示し、創傷治癒を促進させることが示されている。ハチミツはまた、様々な源由来でもよく、様々な程度の生物活性を示してもよい。
（５）特定のハチミツ量の正確な移動を助けるために、前述のように、蒸留水を使用してハチミツ溶液を作製した。
（６）ハチミツ溶液を、ブレンダーおよび／またはホモジナイザーを使用して均質化した。マグネティックスターラーを使用してもよい。振動による物理的な揺動を使用してもよい。
（７）ピペットを使用して、ハチミツ溶液を、均質化したコラーゲン懸濁液に添加した。連続均質化しながらハチミツ溶液を液滴で移動させるか、またはそれをバルクで添加し、次いで、ブレンドかつ／または均質化した。
（８）得られたコラーゲン−ハチミツ懸濁液を均質化してよい。
（９）得られたコラーゲン−ハチミツ懸濁液を、真空オーブン、チャンバー、または他の設備において脱気して、気泡を除去した。
（１０）コラーゲンおよびハチミツの懸濁液を、型、トレイの中へ、または紙の上にピペットを使用して注いだ。
（１１）注いだ懸濁液を脱気下に放置した。
（１２）懸濁液をオーブンまたはチャンバーにおいて低温（約２０℃〜約３５℃）またはより高温（約３５℃超）で乾燥させた。また、懸濁液を凍結乾燥またはフリーズドライして、多孔質のスポンジまたは膜を形成した。
（１３）得られたコラーゲンおよびハチミツを含む組成物をフィルム形態で供した。
（１４）物理的または化学的な架橋を使用して、必要に応じて、フィルムに強度および／または他の望ましい性質を与えることができる。架橋方法として、グルタルアルデヒドおよび／または他の化学的架橋剤を用いた処理ならびに任意選択で熱脱水処理を挙げることができるが、それらだけに限らない。
【００９１】
結果
本発明による組成物を前述のように調製した。同じ条件下で製造した６枚の薄手フィルムのコラーゲンおよびハチミツの重量パーセンテージおよび比を表２に示す。
【００９２】
表２において識別した各フィルムを、コラーゲンおよびハチミツの懸濁液２０ｍｌを使用して製造し、真空オーブンにおいて大気圧で３０℃の温度下で４日間乾燥させた。
【００９３】
【表２】
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【００９４】
表２において識別した様々な組成物を有するフィルムを、本発明に従って調製した。それらを図３に示す。これらのフィルムを比較した。比較試験データを以下に示す。
【００９５】
・  対照の足場は、同じ条件下で以前に製造されたフィルムと一致しているように見受けられた。
【００９６】
・  組成物の透過性は、ハチミツ含有量が増加するにつれて減少した。
【００９７】
・  ハチミツの添加に伴って、本発明による組成物を含むフィルムとテフロン（登録商標）型との粘着が増大し、それに関連して、組成物の、型からの取り外しが困難になった。
【００９８】
・  ハチミツを含むフィルムは、対照フィルムよりも丈夫であると思われた。
前述の実施形態は例としてのみ示しており、特許請求の範囲から逸脱することなく、多くの変形をそれに施し得ることを熟練した読者なら当然理解するであろう。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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