(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下でＮＭＯと呼ぶ視神経脊髄炎と診断された患者のＮＭＯの治療あるいは改善に用いられる、１以上の薬学的に利用可能な添加剤とともに２−クロロ−２’−デオキシアデノシン（クラドリビン）あるいは薬学的に利用可能なその塩を含む薬学的組成物。
【請求項２】
ＮＭＯ−ＩｇＧ血清陽性を有すると知られる患者のＮＭＯを治療、あるいは、改善するために用いられる、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
視神経炎、脊髄炎、及び、３以上の脊髄分節の長さの隣接する脊髄障害のＭＲＩ証拠、多発性硬化症の診察目的ではない開始脳ＭＲＩ（onset brain MRI）、あるいは、ＮＭＯ−ＩｇＧ血清陽性の少なくとも２つを有すると知られる患者におけるＮＭＯを治療、あるいは、改善するのに用いられる、請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
（ａ）単位服用量当たり、１ｍｇ〜２０ｍｇのクラドリビンあるいはその塩、または、（ｂ）好ましくは、単位服用量当たり２．５ｍｇ〜１５ｍｇ、もしくは（ｃ）単位服用量当たり２．５ｍｇ〜１５ｍｇを含む請求項１〜３のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項５】
（ａ）単位服用量当たり８ｍｇ〜１２ｍｇ、もしくは、（ｂ）単位服用量当たり１０ｍｇを含む、請求項４に記載の組成物。
【請求項６】
タブレット、カプセルあるいは液体製剤の形態である、請求項１〜５のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項７】
ＮＭＯと診断された患者のＮＭＯの治療あるいは改善のための薬剤を調製するための、以下にクラドリビンと呼ぶ、２−クロロ−２’−デオキシアデノシン、あるいは、薬学的に利用可能なその塩の使用。
【請求項８】
前記患者はＮＭＯ−ＩｇＧ血清陽性を有することが既知である、請求項７に記載の使用。
【請求項９】
前記患者は、視神経炎、脊髄炎、及び、３以上の脊髄分節の長さの隣接する脊髄障害のＭＲＩ証拠、多発性硬化症の診察目的ではない開始脳ＭＲＩ（onset brain MRI）、あるいは、ＮＭＯ−ＩｇＧ血清陽性の少なくとも２つを有することが既知である、請求項７に記載の使用。
【請求項１０】
前記薬剤が有効量のクラドリビンを含む請求項７に記載の使用。
【請求項１１】
クラドリビンの前記有効量は、１ｍｇ／ｋｇ〜６ｍｇ／ｋｇの、１あるいは２年にわたる、有効累積量である、請求項１０に記載の使用。
【請求項１２】
１あるいは２年にわたるクラドリビンの前記有効累積量は、１．５ｍｇ／ｋｇ〜３．５ｍｇ／ｋｇを含む、請求項１１に記載の使用。
【請求項１３】
前記薬剤は、単位服用量の形態で提示される、請求項７〜１２のいずれか１項に記載の使用。
【請求項１４】
前記単位服用量の形態は、タブレット、カプセル、あるいは、液体製剤である、請求項１３に記載の使用。
【請求項１５】
前記有効量は、治療前レベルに比べ、３０％〜８０％、好ましくは、４０％〜６０％のＣＤ３＋Ｔ細胞の減少となるように、１週〜１６週にわたって、好ましくは、５週〜１０週にわたって分散される、５日〜２０日の服用日に投与される、クラドリビンの前記累積量として、経験的に決定される、請求項１０に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、自己免疫性、炎症性障害、特には、以下に、ＮＭＯと呼び、デビック病あるいは、デビック症として知られる、自己免疫性、炎症性障害視神経脊髄炎を、治療し、あるいは、改善するための、以下で、クラドリビンと呼ばれる、２−クロロ−２’−デオキシアデノシン、あるいは、その薬学的に利用可能な塩の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
炎症性障害は、免疫系の要素の活動が、発熱、発疹、痛み、腫れ物、衰弱及び、内臓損傷の多くのタイプを含む、身体における、広範な兆候及び症状を引き起こす、障害の大きなファミリである。炎症性障害の部分集合は、また、自己免疫性障害として分類され、これは、これらの場合、免疫系の活動が、身体の自身の通常のタンパク質の幾つか、あるいは、他の構造に対する、異常な反応性に関連するという証拠による。自己免疫性炎症性障害は、穏やかな症状から、失明、車椅子が手放せない、あるいは、寝たきりである、あるいは、死亡するまでにいたるなどの重症の範囲の症状となり得る。障害発症が様々な度合いであることは、一般的であり、重症度は、同一の障害においても、患者間でかなり異なり得る。
【０００３】
ＮＭＯは、以下のように評価される有病率を有する、稀な自己免疫性炎症性障害である。
【０００４】
人口１００，０００人に対し１．５〜４．４人は、結果として、米国とヨーロッパを合わせて、１２，０００〜３５，０００人と計算される。発症年齢は、３０代後半を中央値として、思春期、あるいは、小児期から、壮年期後半と様々でありうる。患者は、女性が男性より著しく多く、９：１の値であると報告される。
【０００５】
ＮＭＯの臨床発症は、通常、突然であり、事例の３分の２において、インフルエンザ様症状の前駆症状が、神経の問題に先立ち得る。典型的には、症状は、数週間続く、発病（ぶり返し）において強く現れ、数ヶ月続く、緩和の期間から分けられる。しかし、障害が進行するにつれ、症状は、緩和期間においても徐々に存在するようになる。ＮＭＯの主な症状は、失明、及び、脊髄機能の喪失である。視神経炎は、罹患した視力の視力低下として、おそらく、色覚の喪失を伴って顕現し得る。ＮＭＯのぶり返しを有する患者の半数以上は、５年間で、片目あるいは両目の視力を失う。脊髄機能への影響は、通常、筋力の低下、感覚の低下、及び、膀胱及び腸の制御の喪失までになる。典型的なＮＭＯ罹患者は、足のあるいは、全四肢体における感覚的兆候を伴う激しく重篤な痙攣性衰弱を有し、しばしば、膀胱の制御の喪失を伴い得る。発症の間の呼吸の停止により、ある場合には、死亡にいたり得る。病理学研究は、炎症及び脱髄の証拠と共に、視神経及び脊髄における損傷を明らかにした。
【０００６】
ＮＭＯは、視神経及び脊髄における病的活動に関連した、神経系症状の繰り返す発症などの多発性硬化症（ＭＳ）と同様であり、様々な回復度と共に、様々な障害へと導く幾つかの症状を示すが、事実、臨床的に、放射線学的に、病理学的に、及び、治療のアプローチにおいて、ＭＳとは明らかに異なっている。この違いは、ＮＭＯの管理として非常に重要で、病気の予後は、基本的に、ＭＳとは異なる。
【０００７】
臨床症状については、ＮＭＯとＭＳ患者の両方の大半における病気のたどる経過は、古い症状が、悪化し、新しい症状が現れる間の数週間にわたって典型的に続く、発症（ぶり返し）を含む。ＭＳに比べ、ＮＭＯのぶり返しは、一般により頻繁であり、より重篤である。ＮＭＯにおいては、これらの発症は、前回のぶり返しにおいて現れた障害が、ある程度維持される間の安定期を伴って交互にやってくる。一方、初期のＭＳにおいては、以前のぶり返しの間に現れた症状は、完全に解消しうる。後期ＭＳの（そして、進行型ＭＳと呼ばれる事例の部分集合の）患者においては、ぶり返しの間に、徐々に重篤化する症状があり、そして、はっきりしたぶり返し活動の停止すらある。このパターンは、ＮＭＯでは稀である。
【０００８】
放射線学的発見については、磁気共鳴画像は、ＮＭＯ患者の脊髄障害は、３以上の脊髄分節を含む縦方向に伸びており、通常、対称的（同程度に脊髄の両側を含む）であることを示すが、ＭＳにおいては、脊髄の障害は、それほど長くなく、一般に、脊髄の一方のみ、あるいは、主に一方にある。ＮＭＯにおいては、障害は、診断において、脳においてはあまり見られず、一般に、脳障害は障害に対する重要な寄与要因ではないが、ＭＳでは、脳障害は一般的で、しばしば、ＭＳの兆候となる。視神経障害は、両病気において発生する。
【０００９】
免疫系の要素を含めると、ＭＳにおいては、発症は、免疫系のＴリンパ球の、局所ミクログリア細胞の活性化を伴う、中央神経系への侵入によって媒介されると考えられている。自己抗体が含まれていることが疑われ、関連する自己抗原は、主要なミエリン成分であると考えられている。ＮＭＯにおいて、病気は、部分的に、NMO-IgG と呼ばれる、血清自己抗体に起因すると考えられている。これらの抗体は、星状細胞の細胞膜におけるタンパク質アクアポリン４(AQP-4)を標的としている。アクアポリン４は、細胞膜を通って水を輸送するチャネルとして作用する。血液−脳バリアを囲む星状細胞のプロセスにおいて、血液中の物質が、脳内に入っていかないようにする原因となる系が見られる。ＮＭＯにおいて、血液−脳バリアは、弱体化されるが、しかし、現在において、NMO-IgG 免疫応答が、どのように、脱髄となるかは知られていない。しかし、ＮＭＯ脳における障害の分布は、AQP-4発現に相関することが知られている。Ｔ細胞とＢ細胞が関与していることは、アザチオプリンとリツキシマブが、治療において有効であるという考えから示唆され、病理解析すると、好酸球が、障害において見られる主な細胞タイプである。一方、ＭＳでは、Ｔ細胞病理が主に見られる。
【００１０】
Wingerchuk, D M. et al in 2006 in Neurology, Vol. 66 no. 10 pp 1485-1489は、視神経炎、脊髄炎、及び、特に、３以上の脊髄分節の長さを有する連続した脊髄障害のＭＲＩ証拠、多発性硬化症の診断目的外の開始脳ＭＲＩ（onset brain MRI）、あるいは、NMO - IgG血清陽性の、３つの補助的基準の少なくとも２つを要求するＮＭＯ画定のための改良された診断基準を提案した。視神経と脊髄を超えたＣＮＳの関与は、ＮＭＯと適合する。
【００１１】
現在、ＮＭＯの完治方法は無く、また、十分な無作為抽出、二重盲検、プラセボ対照の試験が無いために、この病気のＦＤＡに許可された、あるいは、ＥＭＡに許可された治療方法も存在しない。しかし、症状は、治療することが出来る。ＮＭＯの発症は、メチルプレドニゾンＩＶなどの静脈内副腎皮質ステロイド（intravenous corticosteroids）の短期投与により治療することが出来る。対照試験は、発症を防止するための治療法の有効性を確立していない。
【００１２】
多くの臨床医は、発症の頻度と重篤度を減少するためには、長期の免疫抑制が必要だと考えている。もっとも一般的に用いられる免疫抑制治療は、アザチオプリンとプレドニゾン、ミコフェノール酸モフェチルとプレドニゾン、リツキシマブ、ミトキサントロン、静注用免疫グロブリン、及び、シクロフォスファミドであり、リツキシマブは、ＮＭＯのぶり返しにもっとも希望の持てる治療法であると考えられている。リツキシマブは、細胞を表す表面抗原分類（ＣＤ）２０を目的とするモノクロナール抗体であるが、正確な作用の仕組みは不明確なままである。更に、リツキシマブでの治療は、進行性多巣性白質脳症（progressive multifocal leukoencephalopathy ）などの、副作用を引き起こすことが知られている。エクリズマブは、ＮＭＯの最近試験された実験的治療薬である。
【００１３】
自己免疫炎症性疾患において試験に用いることが出来る多くの潜在的な治療法が存在する。しかし、既知の病態におけるどの段階を扱う、どの治療法が、例えば、ＮＭＯなどの与えられた病気において成功するか、を予測することはが可能であるかは、わかっていない。これは、ぶり返すＭＳにおける病気の進行経過を変更するためのもっとも良く用いられる治療方針の２つにおいて十分に例示される。これらは、グラチラマー酢酸塩であり、サイトカインインターフェロンベータ（cytokine interferon beta ）の幾つかの市場展開された形態の一つである。両者の治療方法は、ＭＳ患者の脳と脊髄における、ぶり返し率と、障害活動を減少する。しかし、ＮＭＯにおいて、インターフェロンベータが試験されたとき、それまで、ＭＳと同様の病気と思われていたが、それは、予想外に、驚く事に、予測されたものと反対の効果を有し、ＮＭＯを悪化することが発見された。広い範囲にわたる脳障害を進行させること(Shimizu Y. et al, J. Neurol., 255; 305-307; (2008))及び、臨床的な悪化(Uzawa A. et al., Eur. J. Neurol, 7; 672-676; (2010)) が、ＩＦＮ-ベータで治療されたＮＭＯ患者において報告された。グラチラマー酢酸塩は、炎症促進性のＴｈ１タイプから調節性Ｔｈ２タイプの、Ｔ細胞表現形における有益な変化を生成することにより、機能すると考えられる。再び、ＭＳのこの良く確立された治療法は、有効とは見出されておらず、ＮＭＯには推奨されない(Awad A. and Stuve O., Current Neuropharmacology; 9; 417-428 (2011))。
【００１４】
クラドリビンあるいは、２−クロロ−２’−デオキシアデノシンは、リンパ球への顕著な効果を有するとして、腫瘍学の分野で、成功裏に用いられてきた。これは、有毛細胞白血病、慢性リンパ性白血病、及び、幾つかのＴ細胞悪性腫瘍の効果的な治療方法であることが見出されてきた。アデニン環の２位に、塩素原子を追加することは、アデノシンデアミナーゼによる、脱アミノ化への抵抗性を分子に与える。体内の細胞によって一度取り入れられると、クラドリビンは、クラドリビン三リン酸塩に、酵素によって変換される。細胞内部に一度形成されると、不自然な、塩素を担持するクラドリビン誘導ヌクレオチドは、簡単には細胞を離れず、これらは、細胞の自然なデオキシヌクレオチドに通常作用する細胞酵素と相互作用することが出来る。細胞内のクラドリビンヌクレオチドのレベルに影響を与える２つの重要な酵素は、シチジンキナーゼ（ＣＫ）とヌクレオチダーゼ（ＮＴ）である。ＣＫとＮＴ酵素表現形のレベルが、細胞の種類間で変化し、リンパ球が、ＣＫのＮＴ表現形に対する特に高い比を有することが示されている。クラドリビンのアデノシンデアミナーゼに対する耐性と、リンパ球の高いＣＫ：ＮＴ比の組み合わせは、人間のリンパ球内に、クラドリビンヌクレオチドの集中と保持を導く。このユニークな状況は、システマチックに投与されたとき、ＴとＢリンパ球に対するクラドリビンの選択性に影響がある。
【００１５】
クラドリビンヌクレオチドのリンパ球への集積は、リンパ球細胞の生存と機能に、幾つかの既知の劣化効果を有する。この効果の結果は、分裂及び非分裂リンパ球の両方の死亡である。結果として、クラドリビンは、多発性硬化症の治療に使うことが出来ることを示唆している（米国特許第５，５０６，２１４号を参照されたい）。
【００１６】
細胞内リン酸化に依存する機構によるリンパ球の死亡を引き起こすクラドリビンの前述の効果に加え、クラドリビンが免疫系機能に影響することが出来る他の手段がある。アンチ−ＣＤ３とアンチＣＤ２８の抗体による培養において刺激された人間のリンパ球による誘導サイトカインの生成は、ＣＫによるリン酸化をブロックし、リンパ球の死亡が発生しない条件で、クラドリビン治療により減少する(Laugel B. et al; J. Neuroimmunol; (2011); 240-241 ; 52-57)。
【００１７】
クラドリビンは、また、Ａ２Ａ（アデノシンリセプタクラス２ａ）と呼ばれる細胞表面リセプタのクラスに、高い親和力で結合する。Ａ２Ａリセプタは、脳及び脈管構造内の他の細胞種と共に、Ｔリンパ球に見られ、Ａ２Ａリセプタに結合する薬剤は、過活性な免疫応答を調整することが示されている(Ohta A, Sitkovsky M. Nature 414: 916-20 (2001))。
【００１８】
クラドリビンは、また、ＭＳ及びＮＭＯと違い、ぶり返さず、緩和しない病気である、ＩｇＭ関連炎症性周辺神経障害（inflammatory peripheral neuropathy ）を罹患する単一の患者を治療するために用いられたことが報告されている。薬剤は、点滴で投与され、ＩｇＭ抗体のあるレベルが更に追加された(Ghosh A. et al;Neurology; 59; 1290-1291 ; (2002)参照)。患者は、他の治療にもかかわらず、増加する症状と増加するＩｇＭレベルを伴って、２年の劣化経過をたどった。
【００１９】
クラドリビンによる２クールの治療の後、ＩｇＭレベルが１年以上の期間にわたって徐々に減った後、改善された症状と減少したＩｇＭレベルは、更なるクラドリビン治療なしに、数年の間、両方とも維持された。
【００２０】
クラドリビンは、幾つかの白血病と多発性硬化症を含む、他の病気の治療に用いられ、投与計画が記述された(欧州公開特許第２２６３６７８号参照)が、クラドリビンは、ＮＭＯを治療するのに有効だろうとは予測できなかった。本発明者は、クラドリビンは、自己免疫性炎症性障害視神経脊髄炎の治療あるいは改善に有効であることを、予期に反して発見した。本発明者は、更に、免疫系へのクラドリビンの効果の合計は、短期の治療（数週間）が、約年単位での再治療を必要とすることなく、１８ヶ月以上の長期の病気への有利な効果を提供することを、予期に反して、発見した。
【発明の概要】
【００２１】
本発明の一側面によると、視神経脊髄炎の治療あるいは改善に用いられる、クラドリビンとして知られる、２−クロロ−２’−デオキシアデノシン、あるいは、その薬学的に利用可能な塩が提供される。
【００２２】
クラドリビンは、ＮＭＯ−ＩｇＧ血清陽性であるとして知られる患者の治療に用いられることが出来る。
【００２３】
それは、また、視神経炎、脊髄炎、及び、３以上の脊髄分節長の隣接する脊髄障害のＭＲＩ証拠、多発性硬化症の診療目的ではない開始脳ＭＲＩ、あるいは、ＮＭＯ−ＩｇＧ血清陽性の少なくとも２つを有すると知られる患者の治療に用いることが出来る。
【００２４】
本発明の第２の側面によると、視神経脊髄炎の治療あるいは改善に用いられる、クラドリビンとして知られる、２−クロロ−２’−デオキシアデノシンを含む薬学的合成物が提供される。この合成物は、好ましくは、１以上の薬学的に利用可能な添加物を含む。
【００２５】
この合成物は、単位服用量当たり、クラドリビンを１ミリグラム（ｍｇ）から２０ｍｇ、好ましくは、２．５ｍｇから１５ｍｇ、もっとも好ましくは、単位服用量当たり８ｍｇから１２ｍｇを含む。
【００２６】
好ましくは、この合成物は、経口投与されるべきである。経口投与のために、この合成物は、タブレット、カプセル、あるいは、液体製剤として提示されることが出来る。それは、また、注射に適するように、液体製剤で提示されることが出来る。
【００２７】
好ましくは、この合成物は、クラドリビンあるいは、薬学的に利用可能なその塩からなる。
【００２８】
本発明の他の側面によると、視神経脊髄炎の治療あるいは改善のための薬剤の調製において、２−クロロ−２’−デオキシアデノシン（クラドリビン）あるいは、薬学的に利用可能なその塩を用いることが提供される。
【００２９】
好ましくは、この薬剤は、経口投与され、タブレット、カプセル、あるいは、液体製剤の形態で提示される。
【００３０】
薬剤内の、患者の体重のキログラム当たり１〜６ｍｇのクラドリビン（ｍｇ／ｋｇ）の有効累積服用量あるいは量が、１〜２年の期間取り込まれる。好ましくは、有効累積量は、クラドリビン１．５ｍｇ／ｋｇ〜３．５ｍｇ／ｋｇを含む。
【００３１】
本発明の更に別の側面によると、２−クロロ−２’−デオキシアデノシン（クラドリビン）あるいは、薬学的に利用可能なその塩の有効量を含む薬学的合成物を、検体あるいは患者に投与することを含む、病気を罹患した検体の、視神経脊髄炎を治療あるいは改善する方法を提供する。
【００３２】
この合成物は、経口投与のために、タブレット、カプセルあるいは液体製剤などの、単位服用量形態で提示される。
【００３３】
この薬学的合成物は、単一服用量として、毎日投与されることが出来る。
【００３４】
有効量は、５〜２０の服用日で、１〜１６週にわたって分散され、好ましくは、５〜１０週で、投与されたクラドリビンの有効累積量として、経験的に決定されることが出来、治療前レベルに比べ、３０％〜８０％の、好ましくは、４０％〜６０％のＣＤ３＋Ｔ細胞の減少となる。
【発明を実施するための形態】
【００３５】
定義
病気の「改善」は、治療を受ける患者を良くする、あるいは、患者がこうむる病気の症状を改善する、あるいは、病気に耐えられるようにする、薬学的合成物あるいは治療の能力を指す。
【００３６】
ここに用いられるように、「治療する」あるいは「治療」は、治療されない個人の症状に比べ、クラドリビンが投与された個人の症状を減少し、悪化を阻止し、制御し、軽くし、及び／あるいは、逆転することを意味する。
【００３７】
合成物の「有効量」は、治療の経過に渡って、治療的服用量を提供するのに十分な量のクラドリビンを含む合成物を指す。
【００３８】
語句「単位服用量」は、患者への投与のための単位服用量として適した物理的に離散的な単位を指し、各そのような単位は、薬学的に利用可能な成分に関し、望ましい治療効果を生成するように計算されたクラドリビンの所定の量を含む。
【００３９】
語句「有効累積量」及び「有効累積服用量」は、患者にある期間にわたって与えられたクラドリビンの全量、つまり、一連の治療において与えられたクラドリビンの全服用量を指す。    
【００４０】
図１は、ＮＭＯと診断され、皮下へのクラドリビンの１００ｍｇで治療された女性における病気の進行の模式的表現である。
【００４１】
クラドリビン及び／あるいは、その薬学的に利用可能な塩は、本発明の実施に用いられることが出来る。適した薬学的に利用可能な塩は、化合物を適切な有機あるいは無機酸と反応させることにより、一般に調製される、無毒性酸添加塩を指す。適切な塩の例は、塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、リン酸塩、クエン酸塩、酢酸塩、及び、マレイン酸塩を含む。
【００４２】
クラドリビンは、欧州特許公開第１７３，０５９号、米国特許５，２０８，３２７号、及び、Robins et al., J. Am. Chem.Soc, 106; 6379; (1984)に記述されるもののような、当分野で既知のプロセスによって調製されることが出来る。
【００４３】
クラドリビンは、静脈内に、あるいは、皮下に投与されることができるが、幾つかの理由により、経口投与が好ましく、その最も重要なものは、患者コンプライアンスである。非経口投与は、診療所、病院あるいは他の特別な施設において、医者あるいは看護師によって投与が実行される必要があるためコストが非常に高いので、経口投与には、一般に、費用の利点もある。
【００４４】
クラドリビンの経口投与は、カプセル、タブレット、経口懸濁剤あるいはシロップの形態とすることができ、カプセルあるいはタブレットが好適である。クラドリビンの経口製剤は、国際特許公開第２００４／０８７１００号に記述されている。
【００４５】
本発明に用いるクラドリビンの薬学的合成物は、更に、ミョウバン、安定剤、抗生物質、緩衝剤、着色料、香味料、香味料、免疫賦活剤などの１以上の薬学的に利用可能な添加剤を含むことが出来る。合成物が、経口投与のためのタブレットあるいはカプセルの形態である場合、結合剤、充填剤、潤滑剤、滑剤、崩壊剤、及び、湿潤剤などの従来の添加剤を含むことが出来る。
【００４６】
結合剤は、シロップ、アカシア、ジェラチン、ソルビトール、トラガント、でんぷんの粘液、及びポリビニルピロリドン（polyvinylpyrrolidone）を含むが、これらには限定されない。充填剤は、ラクトース、糖、微結晶セルロース、トウモロコシでんぷん、リン酸カルシウム、及び、ソルビトールを含むが、これらには限定されない。潤滑剤は、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、タルク、ポリエチレングリコール、及び、シリカを含むが、これらには限定されない。崩壊剤は、ジャガイモでんぷん、ナトリウムでんぷんグリコール酸塩（sodium starch glycollate）を含むが、これらには限定されない。湿潤剤は、ラウリル硫酸ナトリウム（sodium lauryl sulphate）を含むが、これには限定されない。滑剤は、二酸化ケイ素を含むが、これには限定されない。
【００４７】
タブレットあるいは錠剤は、胃の中で分解しないように、及び、活性成分が、十二指腸に完全なままで入る、あるいは、放出を遅らせるように、外皮の形態で、腸レイヤが提供されても良い。様々な材料が、腸レイヤあるいは、コーティングとして用いられることができ、ポリマー酸（polymeric acid）あるいは、そのような酸と、シェラック、シェラックとヘキサデシルアルコール、酢酸フタル酸セルロースなどの材料との混合物を含む。
【００４８】
本発明の合成物は、また、水性あるいは油性懸濁液、溶液、乳剤、シロップ、及び、エリキサー（elixers）を含むが、これらには限定されない、液体製剤とすることも出来る。合成物は、また、使用前に、水、あるいは、他の適切な媒体と構成するための乾燥製品として製剤化されてもよい。そのような液体調製は、懸濁剤、乳化剤、非水性媒体、及び、防腐剤を含むが、これらには限定されない添加剤を含んでもよい。懸濁剤は、ソルビトールシロップ、メチルセルロース、グルコース／糖シロップ、ジェラチン、ヒドロキシエチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、アルミニウムステアリン酸ジェル（aluminium stearate gel）、及び、水素化食用脂肪（hydrogenated edible fats ）を含むが、これらには限定されない。乳化剤は、レシチン、ソルビタモノオレイン酸塩（sorbitan monooleate ）、及び、アカシアを含むが、これらには限定されない。非水性媒体は、食用油、アーモンド油、ヤシ油、油性エステル、プロピレングリコール、及び、エチルアルコールを含むが、これらには限定されない。防腐剤は、メチルあるいはプロピルｐ−ヒドロキシ安息香酸及び、ソルビン酸を含むが、これらには限定されない。
【００４９】
治療は、複数のクールとすることができ、各クールは、例えば、１０ｍｇのクラドリビンを含む１つあるいは２つのタブレットあるいはカプセルの５日連続の投与、あるいは、５日のそれぞれにおいて、液体製剤の同様の量のクラドリビンを飲む、あるいは、注入することを含む。ＮＭＯを罹患する患者は、例えば、最初の治療の開始において、例えば、２１〜３０日など、数日あけた、治療の２つのそのようなクールを経ても良い。これは、治療の第２の年の初めに、同様に２１〜３０日あけた、２つの追加のクールが続いてもよいし、最初の２つのクールのみが、患者の治療に用いられても良い。
【００５０】
治療の１あるいは２年にわたるクラドリビンの全累積服用量は、単位服用量当たり、１〜６ｍｇ／ｋｇ体重、好ましくは、１．５〜４．０ｍｇ／ｋｇ、もっとも好ましくは、１．７５〜３．５ｍｇ／ｋｇとすることが出来る。従って、３．５ｍｇ／ｋｇの全服用量を服用する８０ｋｇの患者は、１０あるいは２０服用日に渡って分散された、各１０ｍｇのクラドリビンを含む２８個のタブレットからなる、約２８０ｍｇとすることができ、幾つかの日には、１個のタブレットを服用し、他の日には、２個あるいは３個のタブレットを服用する。注射により、液体製剤として投与されるときには、服用計画は、半分にすることが出来る。
【００５１】
あるいは、患者の血液サンプルにおける表面抗原分類（ＣＤ）３＋Ｔリンパ球の基本レベルは、０．５〜３．５ｍｇ／ｋｇの累積クラドリビン服用量での治療の、一回の５日のクールを患者が受ける前に、測定される。
【００５２】
３〜６週の治療なしの期間に続いて、リンパ球細胞の数が再測定される。更なる服用量が、ＣＤ３＋Ｔリンパ球の数の５０％±１０％の減少を得るために、投与されることが出来る。
【００５３】
クラドリビンは、自己免疫と炎症性機構への機能的効果のユニークなプロファイルに変換する、作用機構のユニークな組み合わせを有することが発見された。それは、他の免疫及び非免疫細胞タイプを使わずに、リンパ球を直接死亡させる機構を有し、それは、また、細胞毒性機構とは独立なリンパ球への影響を有し、樹状細胞の機能に影響を与えることが出来る。クラドリビンは、サイトカインと抗体の生成と、体内に長く存在する病気重篤度効果の減少、及び、そのＢリンパ球細胞への効果を誘導することが、予期に反して発見された。
【００５４】
本発明は、以下の実施例を参照して、更に記述されるだろう：
【００５５】
実施例１
[カプセル製剤におけるパウダー]
クラドリビン      １０ｍｇ
大結晶（Macrocrystalline）セルロース      １００ｍｇ
ラクトース      ７７．８ｍｇ
クロスカルメロースナトリウム      １０ｍｇ
二酸化ケイ素      ０．２ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム      ２ｍｇ
ハードジェラチンサイズ１カプセルシェル
【００５６】
実施例２
[注射用製剤]
クラドリビン      １ｍｇ／ｍｌ
塩化ナトリウム無菌水性溶液中、０．７ｍｇ塩化ナトリウム／ｍｌ
【００５７】
実施例３
[クラドリビンを用いた、ＮＭＯ患者の適応外治療のケースレポート]
【００５８】
３２歳の女性は、通常の頭部ＭＲＩを用いて、急性視覚症状と視神経炎を示した。一時的視覚症状は、次第に重篤度を増しながら、一方の目が全盲になり、他方が劣化するエピソードまで、再発した。メチルプレゾニゾロンへの幾つかの応答が記録された。NMO-IgG (ELISA)の診断的テストは陽性であり、脳ＭＲＩでは、限局性病変は見られなかった。
【００５９】
クラドリビン２０ｍｇが、５日間の服用日のそれぞれにおいて、服用日を１ヶ月以上あけて、患者に、皮下で投与された。服用日には、実施例２に示されるように、クラドリビンの溶液１０ｍｌをそれぞれ含む２つのバイアルが用いられた。８つの皮下の場所が用いられ、それぞれには、２．５ｍｌの注射が行われた。
【００６０】
９ヶ月の終わりには、視力喪失は完全に両側性になったが、運動及び感覚機能は通常であった。患者は、特記すべき劣化なしに、２年間、更なる免疫抑制治療をしないで、継続した。２年後、患者には、運動、感覚、自律神経症状を認めた。新規の症状、脊髄ＭＲＩ及び以前のＮＭＯ−ＩｇＧテストにおける異常に基づいて、診断は、視神経脊髄炎を確認した。３ヵ月後、部分的な改善があったが、弱い不全対麻痺が残っていた。ミトキサントロンを用いた治療が開始されたが、進行性劣化（歩行困難、過敏性膀胱、盲目）により、患者が家族のサポートをうけるために他に市に引っ越す事になり、彼女のフォローアップが出来なくなった。
【００６１】
ＮＭＯと診断され、クラドリビンが全量で１００ｍｇの治療を受けた女性の進行が図１の模式的に示されている。
【００６２】
ＮＭＯ患者に与えられた全部で１００ｍｇは、経口アベイラビリティ用に調整されたとき、約２５０ｍｇの累積経口服用に等しい。
【００６３】
クラドリビン治療の前に、この患者は、４年間の悪化の５つのエピソードを経験した（１．４６の予測年間ぶり返し率）。介在緩和期間は、１３ヶ月、１５ヶ月、６ヶ月及び６ヶ月であった。クラドリビン治療の８ヶ月経過の最初から、彼女は、ぶり返しの報告無く、安定した状態を３４ヶ月経験し、その後劣化と他の治療を経験した。クラドリビンに帰される悪いイベントは報告されなかった。
【００６４】
影響を受けた個人は、多くの新規にＮＭＯと診断された患者の代表と見える。特に、患者が女性であり、その年齢は、両方ともＮＭＯに典型的である（＞８０％女性、発症の中央値年齢は、４０年目）。更に、家族暦がないことは、既知の遺伝的病因の影響が少ないことと整合する。彼女のぶり返しは、典型的な場合の通り、ステロイドを用いて治療された。
【００６５】
従って、この場合には、ＮＭＯのクラドリビン治療（１００ｍｇｓ．ｃ．）の単一の経過は、２年以上にわたる、病気の経過の安定化に関連していた。このデータから、クラドリビンは、ステロイド治療に比べ、緩和の期間について、より効果的でありうる。
【００６６】
実施例４
[クラドリビンによるＮＭＯ患者から誘導されたリンパ球のインビトロ（In Vitro）治療]
【００６７】
Laugel B. et al., J. Neuroimmunol.; (2011); 240-241 ; 52-57に記述された方法を用いて、末梢血単核球（peripheral blood mononuclear cells）(PBMCs)が、最初、例えば、フィコル勾配遠心分離（ficoll gradient centrifugation ）によって、健康なドナーとＮＭＯ患者から得られた血液から分離された。Ｔ−リンパ球は、更に、例えば、ｐａｎ−Ｔ細胞試薬あるいは、ＣＤ４試薬を用いて、磁気ビーズ分離（magnetic bead separation）によって、これらのＰＢＭＣから精製される。精製されたリンパ球は、標準的な方法と、例えば、ＲＰＭＩ−１  ６４０成長媒体などの試薬を用いて、培養状態に維持される。
【００６８】
クラドリビンへの細胞の生存能力反応（viability response ）を判定するために、健康なドナーとＮＭＯ患者の両方から純化されたリンパ球の同数が、例えば、１ナノモーラーから１００マイクロモーラー（１×１０−９Ｍ〜１×１０−４Ｍ）の範囲の、クラドリビン濃度の数の一つで、あるいは、クラドリビンなしで、培養される。例えば、４日などの、数日の期間後、生存細胞の割合が、例えば、アネキシンＶ染色（annexin V staining ）あるいは、トリパンブルー染色（trypan blue staining ）によって、判定される。この実験は、刺激条件（つまり、以下のように、全ての培養に、アンチ−ＣＤ３及びアンチ−ＣＤ２８抗体を追加して）、あるいは、これらの刺激抗体なしの下のいずれかで、なされる。ＮＭＯ患者からのリンパ球は、クラドリビンの同様な濃度で、健康なドナーから純化されたリンパ球と同様な様子かつ同様な程度で、数日間で死亡する。
【００６９】
ＮＭＯ患者からのＴリンパ球による、刺激サイトカイン分泌（stimulated cytokine secretion ）へのクラドリビンの効果を判定するために、健康なドナーとＮＭＯ患者の両方から精製された、精製リンパ球の同数が、例えば、１ナノモーラー〜１００マイクロモーラー（１×１０−９Ｍ〜１×１０−４Ｍ）の範囲の、クラドリビン濃度の数の一つを含む、あるいは、追加クラドリビンなしの、媒体において、１時間未満で、プレインキュベートされる。細胞は、クラドリビン含有あるいは対照媒体を用いて、アンチ−ＣＤ３抗体でコーティングされた培養プレートの穴に移動され、可溶アンチ−ＣＤ２８抗体が追加される。例えば、２４時間後に収集される培養上清内の分泌されたサイトカインは、ビーズベースの血球計算サイトカインアッセイ（bead-based cytometric cytokine assay ）及び、酵素結合免疫吸着測定法（enzyme-linked immunosorbent assay ）を含む幾つかの標準的な方法の一つによって判定される。研究したサイトカインは、例えば、インターフェロン−ガンマ、腫瘍壊死因子（tumour necrosis factor）、あるいは、インターロイキン２（interleukin-2）を含むことが出来る。ＮＭＯ患者からのリンパ球によるサイトカインの分泌は、健康なドナーからのリンパ球に見られる阻害と同様に、同様の程度、クラドリビンによって阻害される。
【００７０】
議論
これは、ＮＭＯ患者からのＴリンパ球は、病気への有利な効果に導くと予測される、生存特性と機能における変化を伴って、クラドリビンへの暴露に応答し、ＮＭＯのユニークな病状は、クラドリビンへの暴露への無反応あるいは不適切な反応となる、リンパ球機能の変化を誘導しなかった。
【００７１】
[図１]
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【図１】
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