(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
目の血管系の可視化を必要としている対象における目の血管系を可視化するための薬剤を製造するための化合物またはその塩の使用であって、
前記化合物は、構造式Ｉを有し、
前記薬剤は、前記薬剤を投与された対象の目の血管系に対して非電離放射線を照射すると、前記化合物は蛍光発光し、
検出された前記蛍光発光に基づいて、前記対象の目の血管系を可視化可能とするための薬剤である、使用。
【化１】
0006560766.tif 000068
式中、
Ｘ１及びＸ２は、互いに独立して、-ＣＯ（ＡＡ）、-ＣＮ、-ＣＯ２Ｒ１、-ＣＯＮＲ２Ｒ３、-ＣＯＲ４、-ＮＯ２、-ＳＯＲ３５、-ＳＯ２Ｒ６、-ＳＯ２ＯＲ７、及び-ＰＯ３Ｒ８Ｒ９から選択され、Ｘ１及びＸ２の少なくとも１つは-ＣＯ（ＡＡ）であり、
Ｙ１及びＹ２は、互いに独立して、-ＯＲ１０、-ＳＲ１１、-ＮＲ１２Ｒ１３、-Ｎ（Ｒ１４）ＣＯＲ１５、-ＣＯＮＨ（ＰＳ）、-Ｐ（Ｒ１６）２、-Ｐ（ＯＲ１７）２、及び
【化２】
0006560766.tif 000069
から選択され、
各Ｚ１は、互いに独立して、単結合、−ＣＲ１８Ｒ１９−、−Ｏ−、−ＮＲ２０−、−ＮＣＯＲ２１−、−Ｓ−、−ＳＯ−、及び−ＳＯ２−から選択され、
各Ｒ１〜Ｒ２１は、互いに独立して、水素、任意選択でヒドロキシ及びカルボン酸により置換されたＣ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ３−Ｃ６ポリヒドロキシアルキル、Ｃ５−Ｃ１０アリール、Ｃ５−Ｃ１０ヘテロアリール、任意選択でＣ（Ｏ）により置換されたＣ３−Ｃ５ヘテロシクロアリール、任意選択でＣ５−Ｃ１０ヘテロアリールにより置換された−（ＣＨ２）ａＣＯ２Ｈ、-（ＣＨ２）ａＣＯＮＲ３０Ｒ３１、-（ＣＨ２）ａＮＨＳＯ３-、-（ＣＨ２）ａＮＨＳＯ３Ｈ、-（ＣＨ２）ａＯＨ、-（ＣＨ２）ａＯＰＯ３２−、-（ＣＨ２）ａＯＰＯ３Ｈ２、-（ＣＨ２）ａＯＰＯ３Ｈ-、-（ＣＨ２）ａＯＲ２２、-（ＣＨ２）ａＯＳＯ３-、-（ＣＨ２）ａＯＳＯ３Ｈ、-（ＣＨ２）ａＰＯ３２−、-（ＣＨ２）ａＰＯ３Ｈ２、-（ＣＨ２）ａＰＯ３Ｈ-、-（ＣＨ２）ａＳＯ３-、-（ＣＨ２）ａＳＯ３Ｈ、-（ＣＨ２）ｄＣＯ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｃＲ２３、-（ＣＨＣＯ２Ｈ）ａＣＯ２Ｈ、-ＣＨ２（ＣＨＮＨ２）ａＣＨ２ＮＲ２５Ｒ２６、-ＣＨ２（ＣＨＯＨ）ａＣＯ２Ｈ、-ＣＨ２（ＣＨＯＨ）ａＲ２７、-ＣＨ［（ＣＨ２）ｂＮＨ２］ａＣＨ２ＯＨ、-ＣＨ［（ＣＨ２）ｂＮＨ２］ａＣＯ２Ｈ、及び-（ＣＨ２）ａＮＲ２８Ｒ２９から選択され、
各Ｒ２２〜Ｒ３１は、互いに独立して、水素、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、及びＣ１−Ｃ５−ジカルボン酸から選択され、
Ｒ３５は、任意選択でヒドロキシ及びカルボン酸により置換されたＣ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ３−Ｃ６ポリヒドロキシアルキル、Ｃ５−Ｃ１０アリール、Ｃ５−Ｃ１０ヘテロアリール、任意選択でＣ（Ｏ）により置換されたＣ３−Ｃ５ヘテロシクロアリール、任意選択でＣ５−Ｃ１０ヘテロアリールにより置換された−（ＣＨ２）ａＣＯ２Ｈ、-（ＣＨ２）ａＣＯＮＲ３０Ｒ３１、-（ＣＨ２）ａＮＨＳＯ３−、-（ＣＨ２）ａＮＨＳＯ３Ｈ、-（ＣＨ２）ａＯＨ、-（ＣＨ２）ａＯＰＯ３２−、-（ＣＨ２）ａＯＰＯ３Ｈ２、-（ＣＨ２）ａＯＰＯ３Ｈ-、-（ＣＨ２）ａＯＲ２２、-（ＣＨ２）ａＯＳＯ３-
、-（ＣＨ２）ａＯＳＯ３Ｈ、-（ＣＨ２）ａＰＯ３２−、-（ＣＨ２）ａＰＯ３Ｈ２、-（ＣＨ２）ａＰＯ３Ｈ-、-（ＣＨ２）ａＳＯ３-、-（ＣＨ２）ａＳＯ３Ｈ、-（ＣＨ２）ｄＣＯ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｃＲ２３、-（ＣＨ２）ｄ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｃＲ２４、-（ＣＨＣＯ２Ｈ）ａＣＯ２Ｈ、-ＣＨ２（ＣＨＮＨ２）ａＣＨ２ＮＲ２５Ｒ２６、-ＣＨ２（ＣＨＯＨ）ａＣＯ２Ｈ、-ＣＨ２（ＣＨＯＨ）ａＲ２７、-ＣＨ［（ＣＨ２）ｂＮＨ２］ａＣＨ２ＯＨ、-ＣＨ［（ＣＨ２）ｂＮＨ２］ａＣＯ２Ｈ、及び-（ＣＨ２）ａＮＲ２８Ｒ２９から選択され、
（ＡＡ）は、ペプチド結合により互いに結合された１以上の天然または非天然のアミノ酸を含むポリペプチド鎖であり、
（ＰＳ）は、グリコシド結合により互いに結合された１以上の単糖単位を含む硫化または非硫化多糖鎖であり、
各ａ、ｂ、及びｄは、互いに独立して、０〜１０から選択され、
ｃは、１〜１００から選択され、
各ｍ及びｎは、互いに独立して、１〜３から選択される。
【請求項２】
前記薬剤は、静脈内投与されることを特徴とする請求項１に記載の使用。
【請求項３】
前記非電離放射線は、少なくとも３５０ｎｍの波長を有することを特徴とする請求項１に記載の使用。
【請求項４】
前記対象の目の血管系において検出された前記化合物の蛍光発光は、経時的に測定されることを特徴とする請求項１に記載の使用。
【請求項５】
前記対象の目の血管系の可視化によって、眼球異常が特定されることを特徴とする請求項１に記載の使用。
【請求項６】
前記眼球異常は、血管構築、虚血性斑点、脈絡膜梗塞、エルシュニッヒ斑点、滲出、出血、及びそれらの組み合わせから選択されることを特徴とする請求項５に記載の使用。
【請求項７】
前記眼球異常は、血管交叉、血管蛇行、滲出の痕跡、及びそれらの組み合わせから選択されることを特徴とする請求項５に記載の使用。
【請求項８】
前記対象の目の血管系の可視化は、前記対象の目の血管系において検出された前記化合物の蛍光発光を、同様の条件下の正常な目の血管系において検出された前記化合物の蛍光発光と比較することによって行われることを特徴とする請求項５に記載の使用。
【請求項９】
前記アミノ酸は、α−アミノ酸、β−アミノ酸、及びγ−アミノ酸から選択されることを特徴とする請求項１に記載の使用。
【請求項１０】
対象の目の血管系における疾患または損傷の位置を評価するための薬剤を製造するための化合物またはその塩の使用であって、
前記化合物は、構造式Ｉを有し、
前記薬剤は、前記薬剤を投与された対象の目の血管系に対して非電離放射線を照射すると、前記化合物は蛍光発光し、
検出された前記蛍光発光に基づいて、前記対象の目の血管系における疾患または損傷の位置を評価可能とするための薬剤である、使用。
【化１】
0006560766.tif 000070
式中、
Ｘ１及びＸ２は、互いに独立して、-ＣＯ（ＡＡ）、-ＣＮ、-ＣＯ２Ｒ１、-ＣＯＮＲ２Ｒ３、-ＣＯＲ４、-ＮＯ２、-ＳＯＲ３５、-ＳＯ２Ｒ６、-ＳＯ２ＯＲ７、及び-ＰＯ３Ｒ８Ｒ９から選択され、Ｘ１及びＸ２の少なくとも１つは-ＣＯ（ＡＡ）であり、
Ｙ１及びＹ２は、互いに独立して、-ＯＲ１０、-ＳＲ１１、-ＮＲ１２Ｒ１３、-Ｎ（Ｒ１４）ＣＯＲ１５、-ＣＯＮＨ（ＰＳ）、-Ｐ（Ｒ１６）２、-Ｐ（ＯＲ１７）２、及び
【化２】
0006560766.tif 000071
から選択され、
各Ｚ１は、互いに独立して、単結合、−ＣＲ１８Ｒ１９−、−Ｏ−、−ＮＲ２０−、−ＮＣＯＲ２１−、−Ｓ−、−ＳＯ−、及び−ＳＯ２−から選択され、
各Ｒ１〜Ｒ２１は、互いに独立して、水素、任意選択でヒドロキシ及びカルボン酸により置換されたＣ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ３−Ｃ６ポリヒドロキシアルキル、Ｃ５−Ｃ１０アリール、Ｃ５−Ｃ１０ヘテロアリール、任意選択でＣ（Ｏ）により置換されたＣ３−Ｃ５ヘテロシクロアリール、任意選択でＣ５−Ｃ１０ヘテロアリールにより置換された−（ＣＨ２）ａＣＯ２Ｈ、-（ＣＨ２）ａＣＯＮＲ３０Ｒ３１、-（ＣＨ２）ａＮＨＳＯ３-、-（ＣＨ２）ａＮＨＳＯ３Ｈ、-（ＣＨ２）ａＯＨ、-（ＣＨ２）ａＯＰＯ３２−、-（ＣＨ２）ａＯＰＯ３Ｈ２、-（ＣＨ２）ａＯＰＯ３Ｈ-、-（ＣＨ２）ａＯＲ２２、-（ＣＨ２）ａＯＳＯ３-、-（ＣＨ２）ａＯＳＯ３Ｈ、-（ＣＨ２）ａＰＯ３２−、-（ＣＨ２）ａＰＯ３Ｈ２、-（ＣＨ２）ａＰＯ３Ｈ-、-（ＣＨ２）ａＳＯ３-、-（ＣＨ２）ａＳＯ３Ｈ、-（ＣＨ２）ｄＣＯ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｃＲ２３、-（ＣＨＣＯ２Ｈ）ａＣＯ２Ｈ、-ＣＨ２（ＣＨＮＨ２）ａＣＨ２ＮＲ２５Ｒ２６、-ＣＨ２（ＣＨＯＨ）ａＣＯ２Ｈ、-ＣＨ２（ＣＨＯＨ）ａＲ２７、-ＣＨ［（ＣＨ２）ｂＮＨ２］ａＣＨ２ＯＨ、-ＣＨ［（ＣＨ２）ｂＮＨ２］ａＣＯ２Ｈ、及び-（ＣＨ２）ａＮＲ２８Ｒ２９から選択され、
各Ｒ２２〜Ｒ３１は、互いに独立して、水素、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、及びＣ１−Ｃ５−ジカルボン酸から選択され、
Ｒ３５は、任意選択でヒドロキシ及びカルボン酸により置換されたＣ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ３−Ｃ６ポリヒドロキシアルキル、Ｃ５−Ｃ１０アリール、Ｃ５−Ｃ１０ヘテロアリール、任意選択でＣ（Ｏ）により置換されたＣ３−Ｃ５ヘテロシクロアリール、任意選択でＣ５−Ｃ１０ヘテロアリールにより置換された−（ＣＨ２）ａＣＯ２Ｈ、-（ＣＨ２）ａＣＯＮＲ３０Ｒ３１、-（ＣＨ２）ａＮＨＳＯ３-、-（ＣＨ２）ａＮＨＳＯ３Ｈ、-（ＣＨ２）ａＯＨ、-（ＣＨ２）ａＯＰＯ３２−、-（ＣＨ２）ａＯＰＯ３Ｈ２、-（ＣＨ２）ａＯＰＯ３Ｈ-、-（ＣＨ２）ａＯＲ２２、-（ＣＨ２）ａＯＳＯ３-、-（ＣＨ２）ａＯＳＯ３Ｈ、-（ＣＨ２）ａＰＯ３２−、-（ＣＨ２）ａＰＯ３Ｈ２、-（ＣＨ２）ａＰＯ３Ｈ-、-（ＣＨ２）ａＳＯ３-、-（ＣＨ２）ａＳＯ３Ｈ、-（ＣＨ２）ｄＣＯ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｃＲ２３、-（ＣＨ２）ｄ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｃＲ２４、-（ＣＨＣＯ２Ｈ）ａＣＯ２Ｈ、-ＣＨ２（ＣＨＮＨ２）ａＣＨ２ＮＲ２５Ｒ２６、-ＣＨ２（ＣＨＯＨ）ａＣＯ２Ｈ、-ＣＨ２（ＣＨＯＨ）ａＲ２７、-ＣＨ［（ＣＨ２）ｂＮＨ２］ａＣＨ２ＯＨ、-ＣＨ［（ＣＨ２）ｂＮＨ２］ａＣＯ２Ｈ、及び-（ＣＨ２）ａＮＲ２８Ｒ２９から選択され、
（ＡＡ）は、ペプチド結合により互いに結合された１以上の天然または非天然のアミノ酸を含むポリペプチド鎖であり、
（ＰＳ）は、グリコシド結合により互いに結合された１以上の単糖単位を含む硫化または非硫化多糖鎖であり、
各ａ、ｂ、及びｄは、互いに独立して、０〜１０から選択され、
ｃは、１〜１００から選択され、
各ｍ及びｎは、互いに独立して、１〜３から選択される。
【請求項１１】
前記薬剤は、静脈内投与されることを特徴とする請求項１０に記載の使用。
【請求項１２】
前記非電離放射線は、少なくとも３５０ｎｍの波長を有することを特徴とする請求項１０に記載の使用。
【請求項１３】
前記対象の目の血管系において検出された前記化合物の蛍光発光は、経時的に測定されることを特徴とする請求項１０に記載の使用。
【請求項１４】
前記対象の目の血管系の評価によって、眼球異常が特定されることを特徴とする請求項１０に記載の使用。
【請求項１５】
前記眼球異常は、血管構築、虚血性斑点、脈絡膜梗塞、エルシュニッヒ斑点、滲出、出血、及びそれらの組み合わせから選択されることを特徴とする請求項１４に記載の使用。
【請求項１６】
前記眼球異常は、血管交叉、血管蛇行、滲出の痕跡、及びそれらの組み合わせから選択されることを特徴とする請求項１４に記載の使用。
【請求項１７】
前記評価に基づく前記対象の目の血管系の評価は、前記対象の目の血管系において検出された前記化合物の蛍光発光を、同様の条件下の正常な目の血管系において検出された前記化合物の蛍光発光と比較することによって行われることを特徴とする請求項１４に記載の使用。
【請求項１８】
前記アミノ酸は、α−アミノ酸、β−アミノ酸、及びγ−アミノ酸から選択されることを特徴とする請求項１０に記載の使用。
【請求項１９】
目の血管系の評価を必要としている対象における目の血管系を評価するためのキットであって、
（ａ）下記の構造式Ｉの化合物またはその塩と、
（ｂ）前記対象の目の血管系を評価するための方法が記載されている取扱説明書であって、
（ｉ）下記の構造式Ｉの化合物またはその塩の有効量を前記対象に投与するステップと、
（ｉｉ）前記対象の目の血管系に対して非電離放射線を照射して、前記化合物を蛍光発光させるステップと、
（ｉｉｉ）前記対象の目の血管系における前記化合物の蛍光発光を検出するステップと、
（ｉｖ）検出された前記蛍光発光に基づいて、前記対象の目の血管系を可視化するステップとを有する評価方法が記載されている、該取扱説明書とを含むキット。
【化１】
0006560766.tif 000072
式中、
Ｘ１及びＸ２は、互いに独立して、-ＣＯ（ＡＡ）、-ＣＮ、-ＣＯ２Ｒ１、-ＣＯＮＲ２Ｒ３、-ＣＯＲ４、-ＮＯ２、-ＳＯＲ３５、-ＳＯ２Ｒ６、-ＳＯ２ＯＲ７、及び-ＰＯ３Ｒ８Ｒ９から選択され、Ｘ１及びＸ２の少なくとも１つは-ＣＯ（ＡＡ）であり、
Ｙ１及びＹ２は、互いに独立して、-ＯＲ１０、-ＳＲ１１、-ＮＲ１２Ｒ１３、-Ｎ（Ｒ１４）ＣＯＲ１５、-ＣＯＮＨ（ＰＳ）、-Ｐ（Ｒ１６）２、-Ｐ（ＯＲ１７）２、及び
【化２】
0006560766.tif 000073
から選択され、
各Ｚ１は、互いに独立して、単結合、−ＣＲ１８Ｒ１９−、−Ｏ−、−ＮＲ２０−、−ＮＣＯＲ２１−、−Ｓ−、−ＳＯ−、及び−ＳＯ２−から選択され、
各Ｒ１〜Ｒ２１は、互いに独立して、水素、任意選択でヒドロキシ及びカルボン酸により置換されたＣ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ３−Ｃ６ポリヒドロキシアルキル、Ｃ５−Ｃ１０アリール、Ｃ５−Ｃ１０ヘテロアリール、任意選択でＣ（Ｏ）により置換されたＣ３−Ｃ５ヘテロシクロアリール、任意選択でＣ５−Ｃ１０ヘテロアリールにより置換された−（ＣＨ２）ａＣＯ２Ｈ、-（ＣＨ２）ａＣＯＮＲ３０Ｒ３１、-（ＣＨ２）ａＮＨＳＯ３-、-（ＣＨ２）ａＮＨＳＯ３Ｈ、-（ＣＨ２）ａＯＨ、-（ＣＨ２）ａＯＰＯ３２−、-（ＣＨ２）ａＯＰＯ３Ｈ２、-（ＣＨ２）ａＯＰＯ３Ｈ-、-（ＣＨ２）ａＯＲ２２、-（ＣＨ２）ａＯＳＯ３-、-（ＣＨ２）ａＯＳＯ３Ｈ、-（ＣＨ２）ａＰＯ３２−、-（ＣＨ２）ａＰＯ３Ｈ２、-（ＣＨ２）ａＰＯ３Ｈ-、-（ＣＨ２）ａＳＯ３-、-（ＣＨ２）ａＳＯ３Ｈ、-（ＣＨ２）ｄＣＯ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｃＲ２３、-（ＣＨＣＯ２Ｈ）ａＣＯ２Ｈ、-ＣＨ２（ＣＨＮＨ２）ａＣＨ２ＮＲ２５Ｒ２６、-ＣＨ２（ＣＨＯＨ）ａＣＯ２Ｈ、-ＣＨ２（ＣＨＯＨ）ａＲ２７、-ＣＨ［（ＣＨ２）ｂＮＨ２］ａＣＨ２ＯＨ、-ＣＨ［（ＣＨ２）ｂＮＨ２］ａＣＯ２Ｈ、及び-（ＣＨ２）ａＮＲ２８Ｒ２９から選択され、
各Ｒ２２〜Ｒ３１は、互いに独立して、水素、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、及びＣ１−Ｃ５−ジカルボン酸から選択され、
Ｒ３５は、任意選択でヒドロキシ及びカルボン酸により置換されたＣ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ３−Ｃ６ポリヒドロキシアルキル、Ｃ５−Ｃ１０アリール、Ｃ５−Ｃ１０ヘテロアリール、任意選択でＣ（Ｏ）により置換されたＣ３−Ｃ５ヘテロシクロアリール、任意選択でＣ５−Ｃ１０ヘテロアリールにより置換された−（ＣＨ２）ａＣＯ２Ｈ、-（ＣＨ２）ａＣＯＮＲ３０Ｒ３１、-（ＣＨ２）ａＮＨＳＯ３-、-（ＣＨ２）ａＮＨＳＯ３Ｈ、-（ＣＨ２）ａＯＨ、-（ＣＨ２）ａＯＰＯ３２−、-（ＣＨ２）ａＯＰＯ３Ｈ２、-（ＣＨ２）ａＯＰＯ３Ｈ-、-（ＣＨ２）ａＯＲ２２、-（ＣＨ２）ａＯＳＯ３-、-（ＣＨ２）ａＯＳＯ３Ｈ、-（ＣＨ２）ａＰＯ３２−、-（ＣＨ２）ａＰＯ３Ｈ２、-（ＣＨ２）ａＰＯ３Ｈ-、-（ＣＨ２）ａＳＯ３-、-（ＣＨ２）ａＳＯ３Ｈ、-（ＣＨ２）ｄＣＯ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｃＲ２３、-（ＣＨ２）ｄ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｃＲ２４、-（ＣＨＣＯ２Ｈ）ａＣＯ２Ｈ、-ＣＨ２（ＣＨＮＨ２）ａＣＨ２ＮＲ２５Ｒ２６、-ＣＨ２（ＣＨＯＨ）ａＣＯ２Ｈ、-ＣＨ２（ＣＨＯＨ）ａＲ２７、-ＣＨ［（ＣＨ２）ｂＮＨ２］ａＣＨ２ＯＨ、-ＣＨ［（ＣＨ２）ｂＮＨ２］ａＣＯ２Ｈ、及び-（ＣＨ２）ａＮＲ２８Ｒ２９から選択され、
（ＡＡ）は、ペプチド結合により互いに結合された１以上の天然または非天然のアミノ酸を含むポリペプチド鎖であり、
（ＰＳ）は、グリコシド結合により互いに結合された１以上の単糖単位を含む硫化または非硫化多糖鎖であり、
各ａ、ｂ、及びｄは、互いに独立して、０〜１０から選択され、
ｃは、１〜１００から選択され、
各ｍ及びｎは、互いに独立して、１〜３から選択される。
【請求項２０】
前記アミノ酸は、α−アミノ酸、β−アミノ酸、及びγ−アミノ酸から選択されることを特徴とする請求項１９に記載のキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（関連出願）
本出願は、米国特許仮出願第６２／１６０、３３８号（２０１５年５月１２日出願）に基づく優先権を主張する。上記出願は、その全文を引用することを以って本明細書の一部となす。
【０００２】
（技術分野）
本開示は、身体の血管及び器官を評価するための組成物及び方法に関し、より具体的には、目の血管系を評価するための組成物及び方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
血管造影または血管造影法は、動脈、静脈、及び心腔に特別の関心を持って、身体の血管及び器官の内部または管腔を可視化するのに用いられる医療用画像化技術である。
【０００４】
眼血管造影は、蛍光色素及び特殊カメラを使用して、網膜及び脈絡膜の血管系を検査するための技術である。眼血管造影法は、眼科医による網膜疾患の診断及び治療管理に役立つ。例えば、この検査により、血管の異常、閉塞血管または漏出血管の存在を発見したり、目の炎症及び腫瘍を特定したりすることができる。
【０００５】
目の循環系の撮像及び眼底の血管造影は、蛍光色素が目の血管系を流れるように、血液中に蛍光色素を導入することを必要とする。フルオレセインナトリウム（ＮａＦ）、カルボキシフルオレセイン（ＣＦ）、インドシアニングリーン（ＩＣＧ）、リサミングリーン、パテントブルー、エバンスブルー、及びアクリジンオレンジが、この技術で使用されている。しかしながら、フルオレセインナトリウムが、現在、臨床で通常使用されている唯一の蛍光色素である。フルオレセイン及びインドシアニングリーン血管造影が、様々な疾患における、出血中の血管、新生血管、腫瘍、及び虚血組織の研究で用いられている。
【０００６】
フルオレセインナトリウムは、４９０ｎｍ付近で吸光ピークを有し、５１４−５２０ｎｍで蛍光発光が最大になる。フルオレセインナトリウムの分子量は３７６であり、比較的高い脂質溶解度を有する。フルオレセインナトリウムは、フルオレセイングルクロニドに容易に代謝される。この代謝体は、その親化合物よりも蛍光性が著しく低く、フルオレセインとしての蛍光収率はわずか５％である。さらに、静脈注射するとすぐに、フルオレセインの大部分は、非蛍光性の血清タンパク質結合分子に変換される（９３％）。これらの要素を考えると、フルオレセインナトリウムを使用した血管造影は、網膜血管系での作用寿命が比較的短い。また、フルオレセインナトリウムを使用すると、硝子体漏出によって網膜及び脈絡膜構造体が見えにくくなる恐れがあり、その場合は、血管造影の前または後に実施される光凝固療法が妨げられる。また、フルオレセインの静脈内使用は、例えば吐き気、嘔吐、じんましん、急性低血圧、及びアナフィラキシーなどの副作用を引く起こす恐れがある。ある研究により、静脈内フルオレセイン血管造影の中度及び重度の合併症の性質及び頻度が報告されている。副作用は、その持続時間、医療介入の必要性、それを解消するのに要する時間、及び最終的な転帰に基づいて、軽度、中度、重度でスコア付けされている。中度の副作用の頻度率は６３分の１（１：６３）、重度の副作用の頻度率は１９００分の１（１：１９００）、死亡率は１：２２２、０００であった。いくつかの他の研究では、重度のアナフィラキシーショック並びに死亡のより多くの症例が報告されている。
【０００７】
このように、身体の血管及び器官を評価するための改良された組成物及び方法、より具体的には、目の血管系を評価するための組成物及び方法が依然として求められている。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００８】
したがって、本開示は、身体の血管及び器官を評価するための改良された組成物及び方法、より具体的には、目の血管系を評価するための組成物及び方法を提供する。
【０００９】
本開示によれば、血管系の可視化を必要としている対象における血管系を可視化する方法であって、
（ａ）下記の構造式Ｉの化合物またはその塩の有効量を前記対象に投与するステップと、
（ｂ）前記対象の血管系に対して非電離放射線を照射して、前記化合物を蛍光発光させるステップと、
（ｃ）前記対象の血管系における前記化合物の蛍光発光を検出するステップと、
（ｄ）検出された前記蛍光発光に基づいて、前記対象の血管系を可視化するステップとを有する方法が提供される。
【００１０】
【化１】
0006560766.tif 000002
【００１１】
式中、
Ｘ１及びＸ２は、互いに独立して、-ＣＯ（ＡＡ）、-ＣＮ、-ＣＯ２Ｒ１、-ＣＯＮＲ２Ｒ３、-ＣＯＲ４、-ＮＯ２、-ＳＯＲ３５、-ＳＯ２Ｒ６、-ＳＯ２ＯＲ７、及び-ＰＯ３Ｒ８Ｒ９から選択され、
Ｙ１及びＹ２は、互いに独立して、-ＯＲ１０、-ＳＲ１１、-ＮＲ１２Ｒ１３、-Ｎ（Ｒ１４）ＣＯＲ１５、-ＣＯＮＨ（ＰＳ）、-Ｐ（Ｒ１６）２、-Ｐ（ＯＲ１７）２、及び
【００１２】
【化２】
0006560766.tif 000003
【００１３】
から選択され、
各Ｚ１は、互いに独立して、単結合、−ＣＲ１８Ｒ１９−、−Ｏ−、−ＮＲ２０−、−ＮＣＯＲ２１−、−Ｓ−、−ＳＯ−、及び−ＳＯ２−から選択され、
各Ｒ１〜Ｒ２１は、互いに独立して、水素、任意選択でヒドロキシ及びカルボン酸により置換されたＣ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ３−Ｃ６ポリヒドロキシアルキル、Ｃ５−Ｃ１０アリール、Ｃ５−Ｃ１０ヘテロアリール、任意選択でＣ（Ｏ）により置換されたＣ３−Ｃ５ヘテロシクロアリール、任意選択でＣ５−Ｃ１０ヘテロアリールにより置換された−（ＣＨ２）ａＣＯ２Ｈ、-（ＣＨ２）ａＣＯＮＲ３０Ｒ３１、-（ＣＨ２）ａＮＨＳＯ３-、-（ＣＨ２）ａＮＨＳＯ３Ｈ、-（ＣＨ２）ａＯＨ、-（ＣＨ２）ａＯＰＯ３＝、-（ＣＨ２）ａＯＰＯ３Ｈ２、-（ＣＨ２）ａＯＰＯ３Ｈ-、-（ＣＨ２）ａＯＲ２２、-（ＣＨ２）ａＯＳＯ３-、-（ＣＨ２）ａＯＳＯ３Ｈ、-（ＣＨ２）ａＰＯ３＝、-（ＣＨ２）ａＰＯ３Ｈ２、-（ＣＨ２）ａＰＯ３Ｈ-、-（ＣＨ２）ａＳＯ３-、-（ＣＨ２）ａＳＯ３Ｈ、-（ＣＨ２）ｄＣＯ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｃＲ２３、-（ＣＨ２）ｄ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｃＲ２４、-（ＣＨＣＯ２Ｈ）ａＣＯ２Ｈ、-ＣＨ２（ＣＨＮＨ２）ａＣＨ２ＮＲ２５Ｒ２６、-ＣＨ２（ＣＨＯＨ）ａＣＯ２Ｈ、-ＣＨ２（ＣＨＯＨ）ａＲ２７、-ＣＨ［（ＣＨ２）ｂＮＨ２］ａＣＨ２ＯＨ、-ＣＨ［（ＣＨ２）ｂＮＨ２］ａＣＯ２Ｈ、及び-（ＣＨ２）ａＮＲ２８Ｒ２９から選択され、
各Ｒ２２〜Ｒ３１は、互いに独立して、水素、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、及びＣ１−Ｃ５−ジカルボン酸から選択され、
Ｒ３５は、任意選択でヒドロキシ及びカルボン酸により置換されたＣ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ３−Ｃ６ポリヒドロキシアルキル、Ｃ５−Ｃ１０アリール、Ｃ５−Ｃ１０ヘテロアリール、任意選択でＣ（Ｏ）により置換されたＣ３−Ｃ５ヘテロシクロアリール、任意選択でＣ５−Ｃ１０ヘテロアリールにより置換された−（ＣＨ２）ａＣＯ２Ｈ、-（ＣＨ２）ａＣＯＮＲ３０Ｒ３１、-（ＣＨ２）ａＮＨＳＯ３-、-（ＣＨ２）ａＮＨＳＯ３Ｈ、-（ＣＨ２）ａＯＨ、-（ＣＨ２）ａＯＰＯ３＝（以下、例えばこの化合物（-（ＣＨ２）ａＯＰＯ３２−）のような化合物のイオン価「２−」を「＝」と表現することがある。）、-（ＣＨ２）ａＯＰＯ３Ｈ２、-（ＣＨ２）ａＯＰＯ３Ｈ-、-（ＣＨ２）ａＯＲ２２、-（ＣＨ２）ａＯＳＯ３-、-（ＣＨ２）ａＯＳＯ３Ｈ、-（ＣＨ２）ａＰＯ３＝、-（ＣＨ２）ａＰＯ３Ｈ２、-（ＣＨ２）ａＰＯ３Ｈ-、-（ＣＨ２）ａＳＯ３-、-（ＣＨ２）ａＳＯ３Ｈ、-（ＣＨ２）ｄＣＯ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｃＲ２３、-（ＣＨ２）ｄ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｃＲ２４、-（ＣＨＣＯ２Ｈ）ａＣＯ２Ｈ、-ＣＨ２（ＣＨＮＨ２）ａＣＨ２ＮＲ２５Ｒ２６、-ＣＨ２（ＣＨＯＨ）ａＣＯ２Ｈ、-ＣＨ２（ＣＨＯＨ）ａＲ２７、-ＣＨ［（ＣＨ２）ｂＮＨ２］ａＣＨ２ＯＨ、-ＣＨ［（ＣＨ２）ｂＮＨ２］ａＣＯ２Ｈ、及び-（ＣＨ２）ａＮＲ２８Ｒ２９から選択され、
（ＡＡ）は、ペプチド結合により互いに結合された１以上の天然または非天然のアミノ酸を含むポリペプチド鎖であり、
（ＰＳ）は、グリコシド結合により互いに結合された１以上の単糖単位を含む硫化または非硫化多糖鎖であり、
各ａ、ｂ、及びｄは、互いに独立して、０〜１０から選択され、
ｃは、１〜１００から選択され、
各ｍ及びｎは、互いに独立して、１〜３から選択される。
【００１４】
また、本開示によれば、対象の血管系における疾患または損傷の位置を評価するための方法であって、
（ａ）下記の構造式Ｉの化合物またはその塩の有効量を前記対象に投与するステップと、
（ｂ）前記対象の血管系に対して非電離放射線を照射して、前記化合物を蛍光発光させるステップと、
（ｃ）前記対象の血管系における前記化合物の蛍光発光を検出するステップと、
（ｄ）検出された前記蛍光発光に基づいて、前記対象の血管系における疾患または損傷の位置を評価するステップとを有する方法が提供される。
【００１５】
【化１】
0006560766.tif 000004
【００１６】
式中、
Ｘ１及びＸ２は、互いに独立して、-ＣＯ（ＡＡ）、-ＣＮ、-ＣＯ２Ｒ１、-ＣＯＮＲ２Ｒ３、-ＣＯＲ４、-ＮＯ２、-ＳＯＲ３５、-ＳＯ２Ｒ６、-ＳＯ２ＯＲ７、及び-ＰＯ３Ｒ８Ｒ９から選択され、
Ｙ１及びＹ２は、互いに独立して、-ＯＲ１０、-ＳＲ１１、-ＮＲ１２Ｒ１３、-Ｎ（Ｒ１４）ＣＯＲ１５、-ＣＯＮＨ（ＰＳ）、-Ｐ（Ｒ１６）２、-Ｐ（ＯＲ１７）２、及び
【００１７】
【化２】
0006560766.tif 000005
【００１８】
から選択され、
各Ｚ１は、互いに独立して、単結合、−ＣＲ１８Ｒ１９−、−Ｏ−、−ＮＲ２０−、−ＮＣＯＲ２１−、−Ｓ−、−ＳＯ−、及び−ＳＯ２−から選択され、
各Ｒ１〜Ｒ２１は、互いに独立して、水素、任意選択でヒドロキシ及びカルボン酸により置換されたＣ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ３−Ｃ６ポリヒドロキシアルキル、Ｃ５−Ｃ１０アリール、Ｃ５−Ｃ１０ヘテロアリール、任意選択でＣ（Ｏ）により置換されたＣ３−Ｃ５ヘテロシクロアリール、任意選択でＣ５−Ｃ１０ヘテロアリールにより置換された−（ＣＨ２）ａＣＯ２Ｈ、-（ＣＨ２）ａＣＯＮＲ３０Ｒ３１、-（ＣＨ２）ａＮＨＳＯ３−、-（ＣＨ２）ａＮＨＳＯ３Ｈ、-（ＣＨ２）ａＯＨ、-（ＣＨ２）ａＯＰＯ３＝、-（ＣＨ２）ａＯＰＯ３Ｈ２、-（ＣＨ２）ａＯＰＯ３Ｈ−、-（ＣＨ２）ａＯＲ２２、-（ＣＨ２）ａＯＳＯ３−、-（ＣＨ２）ａＯＳＯ３Ｈ、-（ＣＨ２）ａＰＯ３＝、-（ＣＨ２）ａＰＯ３Ｈ２、-（ＣＨ２）ａＰＯ３Ｈ−、-（ＣＨ２）ａＳＯ３−、-（ＣＨ２）ａＳＯ３Ｈ、-（ＣＨ２）ｄＣＯ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｃＲ２３、-（ＣＨ２）ｄ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｃＲ２４、-（ＣＨＣＯ２Ｈ）ａＣＯ２Ｈ、-ＣＨ２（ＣＨＮＨ２）ａＣＨ２ＮＲ２５Ｒ２６、-ＣＨ２（ＣＨＯＨ）ａＣＯ２Ｈ、-ＣＨ２（ＣＨＯＨ）ａＲ２７、-ＣＨ［（ＣＨ２）ｂＮＨ２］ａＣＨ２ＯＨ、-ＣＨ［（ＣＨ２）ｂＮＨ２］ａＣＯ２Ｈ、及び-（ＣＨ２）ａＮＲ２８Ｒ２９から選択され、
各Ｒ２２〜Ｒ３１は、互いに独立して、水素、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、及びＣ１−Ｃ５−ジカルボン酸から選択され、
Ｒ３５は、任意選択でヒドロキシ及びカルボン酸により置換されたＣ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ３−Ｃ６ポリヒドロキシアルキル、Ｃ５−Ｃ１０アリール、Ｃ５−Ｃ１０ヘテロアリール、任意選択でＣ（Ｏ）により置換されたＣ３−Ｃ５ヘテロシクロアリール、任意選択でＣ５−Ｃ１０ヘテロアリールにより置換された−（ＣＨ２）ａＣＯ２Ｈ、-（ＣＨ２）ａＣＯＮＲ３０Ｒ３１、-（ＣＨ２）ａＮＨＳＯ３−、-（ＣＨ２）ａＮＨＳＯ３Ｈ、-（ＣＨ２）ａＯＨ、-（ＣＨ２）ａＯＰＯ３＝、-（ＣＨ２）ａＯＰＯ３Ｈ２、-（ＣＨ２）ａＯＰＯ３Ｈ−、-（ＣＨ２）ａＯＲ２２、-（ＣＨ２）ａＯＳＯ３−、-（ＣＨ２）ａＯＳＯ３Ｈ、-（ＣＨ２）ａＰＯ３＝、-（ＣＨ２）ａＰＯ３Ｈ２、-（ＣＨ２）ａＰＯ３Ｈ−、-（ＣＨ２）ａＳＯ３−、-（ＣＨ２）ａＳＯ３Ｈ、-（ＣＨ２）ｄＣＯ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｃＲ２３、-（ＣＨ２）ｄ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｃＲ２４、-（ＣＨＣＯ２Ｈ）ａＣＯ２Ｈ、-ＣＨ２（ＣＨＮＨ２）ａＣＨ２ＮＲ２５Ｒ２６、-ＣＨ２（ＣＨＯＨ）ａＣＯ２Ｈ、-ＣＨ２（ＣＨＯＨ）ａＲ２７、-ＣＨ［（ＣＨ２）ｂＮＨ２］ａＣＨ２ＯＨ、-ＣＨ［（ＣＨ２）ｂＮＨ２］ａＣＯ２Ｈ、及び-（ＣＨ２）ａＮＲ２８Ｒ２９から選択され、
（ＡＡ）は、ペプチド結合により互いに結合された１以上の天然または非天然アミノ酸を含むポリペプチド鎖であり、
（ＰＳ）は、グリコシド結合により互いに結合された１以上の単糖単位を含む硫化または非硫化多糖鎖であり、
各ａ、ｂ、及びｄは、互いに独立して、０〜１０から選択され、
ｃは、１〜１００から選択され、
各ｍ及びｎは、互いに独立して、１〜３から選択される。
【００１９】
また、本開示によれば、血管系の評価を必要としている対象における血管系を評価するためのキットであって、
（ａ）下記の構造式Ｉの化合物またはその塩と、
（ｂ）前記対象の血管系を評価するための方法が記載されている取扱説明書であって、
（ｉ）下記の構造式Ｉの化合物またはその塩の有効量を前記対象に投与するステップと、
（ｉｉ）前記対象の血管系に対して非電離放射線を照射して、前記化合物を蛍光発光させるステップと、
（ｉｉｉ）前記対象の血管系における前記化合物の蛍光発光を検出するステップと、
（ｉｖ）検出された前記蛍光発光に基づいて、前記対象の血管系を可視化するステップとを有する評価方法が記載されている、該取扱説明書とを含むキットが提供される。
【００２０】
【化１】
0006560766.tif 000006
【００２１】
式中、
Ｘ１及びＸ２は、互いに独立して、-ＣＯ（ＡＡ）、-ＣＮ、-ＣＯ２Ｒ１、-ＣＯＮＲ２Ｒ３、-ＣＯＲ４、-ＮＯ２、-ＳＯＲ３５、-ＳＯ２Ｒ６、-ＳＯ２ＯＲ７、及び-ＰＯ３Ｒ８Ｒ９から選択され、
Ｙ１及びＹ２は、互いに独立して、-ＯＲ１０、-ＳＲ１１、-ＮＲ１２Ｒ１３、-Ｎ（Ｒ１４）ＣＯＲ１５、-ＣＯＮＨ（ＰＳ）、-Ｐ（Ｒ１６）２、-Ｐ（ＯＲ１７）２、及び
【００２２】
【化２】
0006560766.tif 000007
【００２３】
から選択され、
各Ｚ１は、互いに独立して、単結合、−ＣＲ１８Ｒ１９−、−Ｏ−、−ＮＲ２０−、−ＮＣＯＲ２１−、−Ｓ−、−ＳＯ−、及び−ＳＯ２−から選択され、
各Ｒ１〜Ｒ２１は、互いに独立して、水素、任意選択でヒドロキシ及びカルボン酸により置換されたＣ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ３−Ｃ６ポリヒドロキシアルキル、Ｃ５−Ｃ１０アリール、Ｃ５−Ｃ１０ヘテロアリール、任意選択でＣ（Ｏ）により置換されたＣ３−Ｃ５ヘテロシクロアリール、任意選択でＣ５−Ｃ１０ヘテロアリールにより置換された−（ＣＨ２）ａＣＯ２Ｈ、-（ＣＨ２）ａＣＯＮＲ３０Ｒ３１、-（ＣＨ２）ａＮＨＳＯ３−、-（ＣＨ２）ａＮＨＳＯ３Ｈ、-（ＣＨ２）ａＯＨ、-（ＣＨ２）ａＯＰＯ３＝、-（ＣＨ２）ａＯＰＯ３Ｈ２、-（ＣＨ２）ａＯＰＯ３Ｈ−、-（ＣＨ２）ａＯＲ２２、-（ＣＨ２）ａＯＳＯ３−、-（ＣＨ２）ａＯＳＯ３Ｈ、-（ＣＨ２）ａＰＯ３＝、-（ＣＨ２）ａＰＯ３Ｈ２、-（ＣＨ２）ａＰＯ３Ｈ−、-（ＣＨ２）ａＳＯ３−、-（ＣＨ２）ａＳＯ３Ｈ、-（ＣＨ２）ｄＣＯ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｃＲ２３、-（ＣＨ２）ｄ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｃＲ２４、-（ＣＨＣＯ２Ｈ）ａＣＯ２Ｈ、-ＣＨ２（ＣＨＮＨ２）ａＣＨ２ＮＲ２５Ｒ２６、-ＣＨ２（ＣＨＯＨ）ａＣＯ２Ｈ、-ＣＨ２（ＣＨＯＨ）ａＲ２７、-ＣＨ［（ＣＨ２）ｂＮＨ２］ａＣＨ２ＯＨ、-ＣＨ［（ＣＨ２）ｂＮＨ２］ａＣＯ２Ｈ、及び-（ＣＨ２）ａＮＲ２８Ｒ２９から選択され、
各Ｒ２２〜Ｒ３１は、互いに独立して、水素、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、及びＣ１−Ｃ５−ジカルボン酸から選択され、
Ｒ３５は、任意選択でヒドロキシ及びカルボン酸により置換されたＣ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ３−Ｃ６ポリヒドロキシアルキル、Ｃ５−Ｃ１０アリール、Ｃ５−Ｃ１０ヘテロアリール、任意選択でＣ（Ｏ）により置換されたＣ３−Ｃ５ヘテロシクロアリール、任意選択でＣ５−Ｃ１０ヘテロアリールにより置換された−（ＣＨ２）ａＣＯ２Ｈ、-（ＣＨ２）ａＣＯＮＲ３０Ｒ３１、-（ＣＨ２）ａＮＨＳＯ３−、-（ＣＨ２）ａＮＨＳＯ３Ｈ、-（ＣＨ２）ａＯＨ、-（ＣＨ２）ａＯＰＯ３＝、-（ＣＨ２）ａＯＰＯ３Ｈ２、-（ＣＨ２）ａＯＰＯ３Ｈ−、-（ＣＨ２）ａＯＲ２２、-（ＣＨ２）ａＯＳＯ３−、-（ＣＨ２）ａＯＳＯ３Ｈ、-（ＣＨ２）ａＰＯ３＝、-（ＣＨ２）ａＰＯ３Ｈ２、-（ＣＨ２）ａＰＯ３Ｈ−、-（ＣＨ２）ａＳＯ３−、-（ＣＨ２）ａＳＯ３Ｈ、-（ＣＨ２）ｄＣＯ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｃＲ２３、-（ＣＨ２）ｄ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｃＲ２４、-（ＣＨＣＯ２Ｈ）ａＣＯ２Ｈ、-ＣＨ２（ＣＨＮＨ２）ａＣＨ２ＮＲ２５Ｒ２６、-ＣＨ２（ＣＨＯＨ）ａＣＯ２Ｈ、-ＣＨ２（ＣＨＯＨ）ａＲ２７、-ＣＨ［（ＣＨ２）ｂＮＨ２］ａＣＨ２ＯＨ、-ＣＨ［（ＣＨ２）ｂＮＨ２］ａＣＯ２Ｈ、及び-（ＣＨ２）ａＮＲ２８Ｒ２９から選択され、
（ＡＡ）は、ペプチド結合により互いに結合された１以上の天然または非天然アミノ酸を含むポリペプチド鎖であり、
（ＰＳ）は、グリコシド結合により互いに結合された１以上の単糖単位を含む硫化または非硫化多糖鎖であり、
各ａ、ｂ、及びｄは、互いに独立して、０〜１０から選択され、
ｃは、１〜１００から選択され、
各ｍ及びｎは、互いに独立して、１〜３から選択される。
【図面の簡単な説明】
【００２４】
【図１】（左）フルオレセインの投与の２分後の網膜の画像、（右）実施例２のマウスの網膜の画像
【発明を実施するための形態】
【００２５】
略語及び定義
【００２６】
本開示の理解を容易にするために、本明細書で使用されるいくつかの用語及び略語を以下に定義する。
【００２７】
本開示またはその実施形態（複数可）の要素を導入する場合、「ある（「a/an」）」、「その（the）」、及び「前記（said）」という語は、１つ以上の要素の存在を意味することが意図される。「含む、備える、有する（comprising、including、having）」という用語は包括的であり、列挙された要素以外の追加の要素が存在し得ることを意味する。
【００２８】
「及び／または（and/or）」という用語は、２つ以上の項目の列挙において使用される場合、列挙された項目の任意の１つが、単独で、または１つ以上の列挙された任意の項目との組み合わせで使用され得ることを意味する。例えば、「Ａ及び／またはＢ」という表現は、Ａ及びＢのどちらか、または両方、すなわち、Ａのみ、Ｂのみ、またはＡ及びＢの組み合わせ、を意味することを意図する。「Ａ、Ｂ及び／またはＣ」という表現は、Ａのみ、Ｂのみ、Ｃのみ、Ａ及びＢの組み合わせ、Ａ及びＣの組み合わせ、Ｂ及びＣの組み合わせ、またはＡ、Ｂ及びＣの組み合わせ、を意味することを意図する。
【００２９】
値の範囲が開示され、「ｎ１から・・・ｎ２まで」または「ｎ１と・・・ｎ２との間」という表記が使用される場合、ｎ１及びｎ２は数字であり、特に明記しない限り、この表記は数値そのものと、その間の範囲とを含むことを意図する。この範囲は、その数値を含む最小値と最大値との間で不可欠的、すなわち連続的であってもよい。例として、炭素は整数単位であるため、「２〜６個の炭素」の範囲は、２、３、４、５、及び６個の炭素を含むことを意図する。比較の例として、「１〜３μＭ（マイクロモル）」の範囲は、１μＭ、３μＭ、及び任意の有効数字（例えば、１．２５５μＭ、２．１μＭ、２．９９９９μＭなど）間の全ての値を含むことが意図される。
【００３０】
本明細書で使用される「約（about）」という用語は、その用語が限定する数値の意味を修飾することを意図しており、許容誤差内で可変の値を示す。チャートまたはデータテーブルに与えられた平均値に対して標準偏差などの特定の許容誤差が列挙されていない場合、「約」という用語は、列挙された値と、有効数字を考慮に入れてその値まで切り上げるかまたは切り捨てることによって含まれる範囲とを包含する範囲を意味するということが理解されよう。
【００３１】
本明細書で、単独または組み合わせで使用される「アシル」という用語は、アルケニル、アルキル、アリール、シクロアルキル、ヘテオアリール、ヘテロ環、またはカルボニルに結合した原子が炭素である任意の他の部分、に結合したカルボニルを指す。「アセチル」基は、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３基を指す。「アルキルカルボニル」または「アルカノイル」基は、カルボニル基を介して親分子部分に結合したアルキル基を指す。このような基の例には、メチルカルボニル及びエチルカルボニルが含まれる。アシル基の例には、ホルミル、アルカノイル及びアロイルが含まれる。
【００３２】
本明細書で、単独または組み合わせで使用される「アルケニル」という用語は、１以上の二重結合を有し、２〜２０の炭素原子を含む直鎖または分枝鎖の炭化水素基を指す。特定の実施形態では、アルケニルは２〜６の炭素原子を含む。「アルケニレン」という用語は、エテニレン［（−ＣＨ＝ＣＨ−）、（−Ｃ：：Ｃ−）］などの２以上の位置に結合した炭素−炭素二重結合系を指す。適切なアルケニル基の例には、エテニル、プロペニル、２−メチルプロペニル、１，４−ブタジエニルなどが含まれる。他に特定されない限り、「アルケニル」という用語は、「アルケニレン」基を含み得る。
【００３３】
本明細書で、単独または組み合わせで使用される「アルコキシ」という用語は、アルキルエーテル基を指し、アルキルという用語は以下に定義する通りである。適切なアルキルエーテル基の例には、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキシ、ｎ−ブトキシ、イソ−ブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシなどが含まれる。
【００３４】
本明細書で、単独または組み合わせで使用される「アルキル」という用語は、１〜２０の炭素原子を含む直鎖または分枝鎖のアルキル基を指す。特定の実施形態では、アルキルは１−１０の炭素原子を含む。更なる実施形態では、アルキルは１〜６の炭素原子を含む。アルキル基は、本明細書で定義されるように、場合によって置換されていてもよい。アルキル基の例には、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、イソアミル、ヘキシル、オクチル、ノニルなどが含まれる。本明細書で使用される「アルキレン」という用語は、単独または組み合わせで、メチレン（−ＣＨ２−）などの、２つ以上の位置で結合した直鎖または分枝鎖の飽和炭化水素から誘導される飽和脂肪族基を指す。他に特定しない限り、「アルキル」という用語は「アルキレン」基を含み得る。
【００３５】
本明細書で、単独または組み合わせで使用される「アルキルアミノ」という用語は、アミノ基を介して親分子部分に結合したアルキル基を指す。適切なアルキルアミノ基は、例えば、Ｎ−メチルアミノ、Ｎ−エチルアミノ、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ、Ｎ，Ｎ−エチルメチルアミノなどの生成基をモノまたはジアルキル化したものであってもよい。
【００３６】
本明細書で「アルキリデン」という用語は、炭素−炭素二重結合の１つの炭素原子が、アルケニル基の結合している部分に属するアルケニル基を指す。
【００３７】
本明細書で、単独または組み合わせで使用される「アルキルチオ」という用語は、アルキルチオエーテル（Ｒ−Ｓ−）基を指し、アルキルという用語は上記で定義した通りであり、硫黄は一酸化硫黄または二酸化硫黄であってもよい。適切なアルキルチオエーテル基の例には、メチルチオ、エチルチオ、ｎ−プロピルチオ、イソプロピルチオ、ｎ−ブチルチオ、イソブチルチオ、ｓｅｃ−ブチルチオ、ｔｅｒｔ−ブチルチオ、メタンスルホニル、エタンスルフィニルなどが含まれる。
【００３８】
本明細書で、単独または組み合わせで使用される「アルキニル」という用語は、１以上の三重結合を有し、かつ２〜２０の炭素原子を含む直鎖または分枝鎖の炭化水素基を指す。特定の実施形態では、アルキニルは２〜６の炭素原子を含む。更なる実施形態では、アルキニルは２〜４の炭素原子を含む。「アルキニレン」という用語は、エチニレン（−Ｃ：：：Ｃ−、−Ｃ≡Ｃ−）などの、２つの位置に結合した炭素−炭素三重結合を指す。アルキニル基の例には、エチニル、プロピニル、ヒドロキシプロピニル、ブチン−１−イル、ブチン−２−イル、ペンチン−１−イル、３−メチルブチン−１−イル、ヘキシン−２−イルなどが含まれる。他に特定しない限り、用語「アルキニル」は「アルキニレン」基を含み得る。
【００３９】
本明細書で、単独または組み合わせで使用される「アミド」及び「カルバモイル」という用語は、カルボニル基を介して親分子部分に結合した、またはその逆の、以下に記載するアミノ基を指す。本明細書で、単独または組み合わせで使用される「Ｃアミド」という用語は、本明細書中で定義される、または具体的に列挙される指定の「Ｒ」基によって定義されるＲ及びＲ'を有するＣ（Ｏ）Ｎ（ＲＲ'）基を指す。本明細書で、単独または組み合わせで使用される「Ｎアミド」という用語は、本明細書中で定義される、または具体的に列挙される指定の「Ｒ」基によって定義されるＲ及びＲ'を有するＲＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ'）−基を指す。本明細書で、単独または組み合わせで、使用される用語「アシルアミノ」はアミノ基を介して親部分に結合したアシル基を包含する。「アシルアミノ」基の例は、アセチルアミノ（ＣＨ３Ｃ（Ｏ）ＮＨ−）である。
【００４０】
本明細書で、単独または組み合わせで使用される「アミノ」という用語は、−ＮＲＲ'を指し、Ｒ及びＲ'は、水素、アルキル、アシル、ヘテロアルキル、アリール、シクロアルキル、ヘテロアリール及びヘテロシクロアルキルからなる基から独立して選択され、これらのいずれもが、任意に置換されていてもよい。さらに、Ｒ及びＲ'は、結合してヘテロシクロアルキルを形成してもよく、そのいずれもが、任意で置換されていてもよい。
【００４１】
本明細書で、単独または組み合わせで使用される「アリール」という用語は、１、２または３の環を含む炭素環式芳香族系を意味し、このような多環式環系は共に縮合される。「アリール」という用語は、フェニル、ナフチル、アントラセニル及びフェナントリルなどの芳香族基を包含する。
【００４２】
本明細書で、単独または組み合わせで使用される「アリールアルケニル」または「アルアルケニル」という用語は、アルケニル基を介して親分子部分に結合したアリール基を指す。
【００４３】
本明細書で、単独または組み合わせで使用される「アリールアルコキシ」または「アラルコキシ」という用語は、アルコキシ基を介して親分子部分に結合したアリール基を指す。
【００４４】
本明細書で、単独または組み合わせで使用される「アリールアルキル」または「アラルキル」という用語は、アルキル基を介して親分子部分に結合したアリール基を指す。
【００４５】
本明細書で、単独または組み合わせで使用される「アリールアルキニル」または「アラルキニル」という用語は、アルキニル基を介して親分子部分に結合したアリール基を指す。
【００４６】
本明細書で、単独または組み合わせで使用される「アリールアルカノイル」または「アラルカノイル」もしくは「アロイル」という用語は、ベンゾイル、ナフタイル、フェニルアセチル、３−フェニルプロピオニル（ヒドロシンナモイル）、４−フェニルブチリル、（２−ナフチル）アセチル、４−クロロヒドロシンナモイルまたはトリフェニルホスフィンなどのアリール置換アルカンカルボン酸から誘導されるアシル基を指す。
【００４７】
本明細書で、単独または組み合わせで使用される「アリールオキシ」という用語は、オキシを介して親分子部分に結合したアリール基を指す。
【００４８】
本明細書で、単独または組み合わせで使用される「ベンゾ」及び「ベンズ」という用語は、ベンゼンから誘導される２価基Ｃ６Ｈ４＝を指す。例として、ベンゾチオフェン及びベンズイミダゾールが含まれる。
【００４９】
本明細書で、単独または組み合わせで使用される「カルバメート」という用語は、窒素または酸末端のいずれかから親分子部分に結合していてもよく、任意で本明細書で定義されるように置換されていてもよい、カルバミン酸（−ＮＨＣＯＯ−）のエステルを指す。
【００５０】
本明細書で、単独または組み合わせで使用される「Ｏカルバミル」という用語は、本明細書で定義されるＲ及びＲ'を有するＯＣ（Ｏ）ＮＲＲ'基を指す。
【００５１】
本明細書で、単独または組み合わせで使用される「Ｎカルバミル」という用語は、本明細書で定義されるＲ及びＲ'を有するＲＯＣ（Ｏ）ＮＲ'−基を指す。
【００５２】
本明細書で使用される用語「カルボニル」は、単独の場合ホルミル［−Ｃ（Ｏ）Ｈ］を含み、組み合わせの場合、Ｃ（Ｏ）−基である。
【００５３】
本明細書で使用される「カルボキシル」または「カルボキシ」という用語は、カルボン酸塩中に存在するような、−Ｃ（Ｏ）ＯＨまたは対応する「カルボン酸塩」アニオンを指す。「Ｏカルボキシ」基は、ＲＣ（Ｏ）Ｏ−基を指し、Ｒは本明細書で定義される通りである。「Ｃカルボキシ」基は、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ基を指し、Ｒは本明細書で定義される通りである。
【００５４】
本明細書で、単独または組み合わせで使用される「シアノ」という用語は、−ＣＮを指す。
【００５５】
本明細書で、単独または組み合わせで使用される「シクロアルキル」、あるいは「炭素環」という用語は、飽和または部分飽和の単環式、二環式または三環式のアルキル基を指し、各環式部分は３〜１２個の炭素原子環員を含み、これは任意で本明細書で定義されるように置換されていてもよいベンゾ縮合環系であり得る。特定の実施形態では、シクロアルキルは５〜７の炭素原子を含む。このようなシクロアルキル基の例には、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、テトラヒドロナフチル、インダニル、オクタヒドロナフチル、２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデニル、アダマンチルなどが含まれる。本明細書で使用される「二環式」及び「三環式」は、デカヒドロナフタレン、オクタヒドロナフタレン、及び多環式（多中心）飽和または部分不飽和タイプの両方の縮合環系を含むことが意図される。後者のタイプの異性体は、一般に、ビシクロ［１，１，１］ペンタン、カンファー、アダマンタン、及びビシクロ［３，２，１］オクタンによって例示される。
【００５６】
本明細書で、単独または組み合わせで使用される「エステル」という用語は、炭素原子で連結された２つの部分を架橋するカルボキシ基を指す。
【００５７】
本明細書で、単独または組み合わせで使用される「エーテル」という用語は、炭素原子で連結された２つの部分を架橋するオキシ基を指す。
【００５８】
本明細書で、単独または組み合わせで使用される「ハロ」または「ハロゲン」という用語は、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素を指す。
【００５９】
本明細書で、単独または組み合わせで使用される「ハロアルコキシ」という用語は、酸素原子を介して親分子部分に結合したハロアルキル基を指す。
【００６０】
本明細書で、単独または組み合わせで使用される「ハロアルキル」という用語は、１以上の水素がハロゲンで置き換えられている上記定義の意味を有するアルキル基を指す。特に、モノハロアルキル基、ジハロアルキル基及びポリハロアルキル基が包含される。一例として、モノハロアルキル基は、その基内にヨード、ブロモ、クロロまたはフルオロ原子を有していてもよい。ジハロ及びポリハロアルキル基は、２以上の同じハロ原子または異なるハロ基の組み合わせを有していてもよい。ハロアルキル基の例には、フルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、クロロメチル、ジクロロメチル、トリクロロメチル、ペンタフルオロエチル、ヘプタフルオロプロピル、ジフルオロクロロメチル、ジフルオロエチル、ジフルオロプロピル、ジクロロエチル及びジクロロプロピルが含まれる。「ハロアルキレン」は、２以上の位置で結合したハロアルキル基を指す。例には、フルオロメチレン（−ＣＦＨ−）、ジフルオロメチレン（−ＣＦ２−）、クロロメチレン（−ＣＨＣｌ−）などが含まれる。
【００６１】
本明細書で、単独または組み合わせで使用される「ヘテロアルキル」という用語は、完全飽和または１〜３度の不飽和を含む、安定した直鎖または分枝鎖もしくは環状炭化水素基、またはそれらの組み合わせを指し、特定数の炭素原子と、Ｏ、Ｎ及びＳからなる基から選択される１〜３個のヘテロ原子とを含み、窒素原子及び硫黄原子は任意で酸化されていてもよく、窒素ヘテロ原子は任意で四級化されていてもよい。ヘテロ原子（複数可）Ｏ、Ｎ及びＳは、ヘテロアルキル基の任意の内部位置に配置され得る。例えば、−ＣＨ２−ＮＨ−ＯＣＨ３のように、２つまでのヘテロ原子が連続していてもよい。
【００６２】
本明細書で、単独または組み合わせで使用される「ヘテロアリール」という用語は、３〜１５員不飽和ヘテロ単環式環もしくは縮合単環式、二環式または三環式環系を指し、縮合環の少なくとも１つは芳香族であり、Ｏ、Ｓ及びＮからなる群から選択される少なくとも１つの原子を含む。特定の実施形態では、ヘテロアリールは５〜７の炭素原子を含む。この用語は、縮合多環式基も包含し、複素環がアリール環と縮合しているか、ヘテロアリール環が他のヘテロアリール環と縮合しているか、またはヘテロアリール環がシクロアルキル環と縮合している。ヘテロアリール基の例には、ピロリル、ピロリニル、イミダゾリル、ピラゾリル、ピリジル、ピリミジニル、ピラジニル、ピリダジニル、トリアゾリル、ピラニル、フリル、チエニル、オキサゾリル、イソキサゾリル、オキサジアゾリル、チアゾリル、チアジアゾリル、イソチアゾリル、インドリル、イソインドリル、インドリジニル、ベンゾイミダゾリル、キノリル、イソキノリル、キノキサリニル、キナゾリニル、インダゾリル、ベンゾトリアゾリル、ベンゾジオキソリル、ベンゾピラニル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾオキサジアゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾチアジアゾリル、ベンゾフリル、ベンゾチエニル、クロモニル、クマリニル、ベンゾピラニル、テトラヒドロキノリニル、テトラゾロピリダジニル、テトラヒドロイソキノリニル、チエノピリジニル、フロピリジニル、ピロロピリジニルなどが含まれる。例示的な三環式複素環基には、カルバゾリル、ベンジドリル、フェナントロリニル、ジベンゾフラニル、アクリジニル、フェナントリジニル、キサンテニルなどが含まれる。
【００６３】
本明細書で、単独でまたは組み合わせで使用される「ヘテロシクロアルキル」、及び同じ意味の「複素環」という用語は、環員として少なくとも１つのヘテロ原子を含む飽和、部分不飽和または完全不飽和の、単環式、二環式または三環式の複素環基をそれぞれ指し、各ヘテロ原子は、窒素、酸素及び硫黄からなる基から独立して選択され得る。特定の実施形態では、ヘテロシクロアルキルは、環員として１〜４のヘテロ原子を含む。更なる実施形態では、ヘテロシクロアルキルは、環員として１〜２のヘテロ原子を含む。特定の実施形態では、ヘテロシクロアルキルは、各環に３〜８の環員を含む。更なる実施形態では、ヘテロシクロアルキルは、各環に３〜７の環員を含む。さらに別の実施形態では、ヘテロシクロアルキルは、各環に５〜６の環員を含む。「ヘテロシクロアルキル」及び「複素環」は、スルホン、スルホキシド、三級窒素環員のＮ−オキシド及び炭素環縮合環系及びベンゾ縮合環系を含むことを意図する。さらに、両方の用語は、本明細書で定義されるアリール基または更なる複素環基に複素環が縮合される系も含む。複素環基の例には、アジリジニル、アゼチジニル、１，３−ベンゾジオキソリル、ジヒドロイソインドリル、ジヒドロイソキノリニル、ジヒドロシンノリニル、ジヒドロベンゾジオキシニル、ジヒドロ［１，３］オキサゾロ［４，５−ｂ］ピリジニル、ベンゾチアゾリル、ジヒドロインドリル、ジヒドロピリジニル、１，３−ジオキサニル、１，４−ジオキサニル、１，３−ジオキソラニル、イソインドリニル、モルホリニル、ピペラジニル、ピロリジニル、テトラヒドロピリジニル、ピペリジニル、チオモルホリニルなどが含まれる。複素環基は、特に禁止されていない限り、必要に応じて置換されていてもよい。
【００６４】
本明細書で、単独でまたは組み合わせで使用される「ヒドラジニル」という用語は、単結合によって結合した２つのアミノ基、すなわち−Ｎ−Ｎ−を指す。
【００６５】
本明細書で、単独または組み合わせで使用される「ヒドロキシ」という用語は、−ＯＨを指す。
【００６６】
本明細書で、単独でまたは組み合わせで使用される「ヒドロキシアルキル」という用語は、アルキル基を介して親分子部分に結合したヒドロキシ基を指す。
【００６７】
本明細書で、単独または組み合わせで使用される「イミノ」という用語は、＝Ｎ−を指す。
【００６８】
本明細書で、単独または組み合わせで使用される「イミノヒドロキシ」という用語は、＝Ｎ（ＯＨ）及び＝Ｎ−Ｏ−を指す。
【００６９】
「主鎖中で」という語句は、本明細書に開示された式のいずれか１つの化合物への基の結合点で始まる炭素原子の最も長い連続鎖または隣接鎖を指す。
【００７０】
「イソシアナト」という用語は、−ＮＣＯ基を指す。
【００７１】
「イソチオシアナート」という用語は、−ＮＣＳ基を指す。
【００７２】
「原子の直鎖」という語句は、炭素、窒素、酸素及び硫黄から独立して選択される原子の最長の直鎖を指す。
【００７３】
本明細書で、単独または組み合わせで使用される「低級」という用語は、特に定義されない限り、１〜６の炭素原子を含むことを意味する。
【００７４】
本明細書で、単独または組み合わせで使用される「低級アリール」という用語は、フェニルまたはナフチルを意味し、そのいずれかは、必要に応じて置換されていてもよい。
【００７５】
本明細書で、単独または組み合わせで使用される「低級ヘテロアリール」という用語は、（１）その１〜４員が、Ｏ、Ｓ及びＮからなる基から選択されるヘテロ原子であり得る、５または６の環員を含む単環式ヘテロアリールか、または、（２）各縮合環が５または６の環員を含み、Ｏ、Ｓ、及びＮからなる基から選択される１〜４個のヘテロ原子をそれらの間に含む二環式ヘテロアリール、のいずれかを意味する。
【００７６】
本明細書で、単独または組み合わせで使用される「低級シクロアルキル」という用語は、３〜６の環員を有する単環式シクロアルキルを意味する。低級シクロアルキルは不飽和であってもよい。低級シクロアルキルの例には、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル及びシクロヘキシルが含まれる。
【００７７】
本明細書で、単独または組み合わせで使用される「低級ヘテロシクロアルキル」という用語は、３〜６の環員を有する単環式ヘテロシクロアルキルを意味し、１〜４の環員は、Ｏ、Ｓ及びＮからなる基から選択されるヘテロ原子であり得る。低級ヘテロシクロアルキルの例には、ピロリジニル、イミダゾリジニル、ピラゾリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル及びモルホリニルが含まれる。低級ヘテロシクロアルキルは不飽和であってもよい。
【００７８】
本明細書で、単独または組み合わせで使用される「低級アミノ」という用語は、−ＮＲＲ'を指し、Ｒ及びＲ'は、水素、低級アルキル及び低級ヘテロアルキルからなる群から独立して選択され、そのいずれもが任意で置換されていてもよい。さらに、低級アミノ基のＲ及びＲ'は、結合して、５または６の環員のヘテロシクロアルキルを形成することができ、そのいずれもが任意で置換されていてもよい。
【００７９】
本明細書で、単独または組み合わせで使用される「メルカプチル」という用語は、ＲＳ−基を指し、Ｒは本明細書で定義される通りである。
【００８０】
本明細書で、単独または組み合わせで使用される「ニトロ」という用語は、−ＮＯ２を指す。
【００８１】
本明細書で、単独または組み合わせで使用される「オキシ」または「オキサ」という用語は、−Ｏ−を指す。
【００８２】
本明細書で、単独または組み合わせで使用される「オキソ」という用語は、＝Ｏを指す。
【００８３】
「ペルハロアルコキシ」という用語は、水素原子のすべてがハロゲン原子で置換されているアルコキシ基を指す。
【００８４】
本明細書で、単独または組み合わせで使用される「ペルハロアルキル」という用語は、水素原子のすべてがハロゲン原子で置換されているアルキル基を指す。
【００８５】
本明細書で使用される「スルホネート」、「スルホン酸」及び「スルホン酸」という用語は、塩形成においてスルホン酸が使用されるときの、−ＳＯ３Ｈ基及びそのアニオンを指す。
【００８６】
本明細書で、単独または組み合わせで使用される「スルファニル」という用語は、−Ｓ−を指す。
【００８７】
本明細書で、単独または組み合わせで使用される「スルフィニル」という用語は、−Ｓ（Ｏ）−を指す。
【００８８】
本明細書で、単独または組み合わせで使用される「スルホニル」という用語は、−Ｓ（Ｏ）２−を意味する。
【００８９】
「Ｎスルホンアミド」という用語は、本明細書で定義されるＲ及びＲ'を有するＲＳ（＝Ｏ）２ＮＲ'−基を指す。
【００９０】
「Ｓスルホンアミド」という用語は、本明細書で定義されるＲ及びＲ'を有する−Ｓ（＝Ｏ）２ＮＲＲ'基を指す。
【００９１】
本明細書で、単独または組み合わせで使用される「チア」及び「チオ」という用語は、酸素が硫黄で置き換えられた−Ｓ−基またはエーテルを指す。チオ基の酸化誘導体、すなわちスルフィニル及びスルホニルは、チア及びチオの定義に含まれる。
【００９２】
本明細書で、単独または組み合わせで使用される「チオール」という用語は、−ＳＨ基を指す。
【００９３】
本明細書中で使用される「チオカルボニル」という用語は、単独の場合チオホルミル−Ｃ（Ｓ）Ｈを含み、組み合わせでは−Ｃ（Ｓ）−基である。
【００９４】
「Ｎチオカルバミル」という用語は、本明細書で定義されるＲ及びＲ'を有するＲＯＣ（Ｓ）ＮＲ'−基を指す。
【００９５】
「Ｏチオカルバミル」という用語は、本明細書で定義されるＲ及びＲ'を有する−ＯＣ（Ｓ）ＮＲＲ'基を指す。
【００９６】
「チオシアナート」という用語は、−ＣＮＳ基を指す。
【００９７】
「トリハロメタンスルホンアミド」という用語は、ハロゲンであるＸと、本明細書で定義されるＲとを有するＸ３ＣＳ（Ｏ）２ＮＲ基を指す。
【００９８】
「トリハロメタンスルホニル」という用語は、ＸがハロゲンであるＸ３ＣＳ（Ｏ）２−基を指す。
【００９９】
「トリハロメトキシ」という用語は、ＸがハロゲンであるＸ３ＣＯ−基を指す。
【０１００】
本明細書で、単独または組み合わせで使用される「３置換シリル」という用語は、その３つの遊離原子価で、置換アミノの定義下において本明細書に列挙される基に置換されたシリコーン基を指す。例には、トリメチルシリル、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル、トリフェニルシリルなどが含まれる。
【０１０１】
本明細書中の任意の定義は、複合構造基を説明するために他の定義と組み合わせて使用されてもよい。通例では、任意のそのような定義の末尾の要素は、親部分に結合する。例えば、複合基アルキルアミドは、アミド基を介して親分子に結合したアルキル基を表し、アルコキシアルキルという用語は、アルキル基を介して親分子に結合したアルコキシ基を表す。
【０１０２】
基が「ゼロ（null）」と定義されている場合、基は存在しないことを意味する。
【０１０３】
「任意で置換される」という用語は、前述の基が置換または非置換であってもよいことを意味する。置換されている場合、「任意で置換される」基の置換基は、単独または組み合わせで、以下の基または指定された特定の基から独立して選択される１以上の置換基を含むが、これに制限されない。：低級アルキル、低級アルケニル、低級アルキニル、低級アルカノイル、低級ヘテロアルキル、低級ヘテロシクロアルキル、低級ハロアルキル、低級ハロアルケニル、低級ハロアルキニル、低級ペルハロアルキル、低級ペルハロアルコキシ、低級シクロアルキル、フェニル、アリール、アリールオキシ、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、オキソ、低級アシルオキシ、カルボニル、カルボキシル、低級アルキルカルボニル、低級カルボキシエステル、低級カルボキサミド、シアノ、水素、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、低級アルキルアミノ、アリールアミノ、アミド、ニトロ、チオール、低級アルキルチオ、低級ハロアルキルチオ、低級ペルハロアルキルチオ、アリールチオ、スルホネート、スルホン酸、３置換シリル、Ｎ３、ＳＨ、ＳＣＨ３、Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、ＣＯ２ＣＨ３、ＣＯ２Ｈ、ピリジニル、チオフェン、フラニル、低級カルバミン酸及び低級尿素。２つの置換基は、一緒に連結されて、０〜３のヘテロ原子からなり、例えばメチレンジオキシまたはエチレンジオキシを形成する、縮合した５員、６員または７員炭素環または複素環を形成し得る。任意に置換された基は、非置換（例えば、−ＣＨ２ＣＨ３）、完全置換（例えば、−ＣＦ２ＣＦ３）、１置換（例えば、−ＣＨ２ＣＨ２Ｆ）、または完全置換と１置換との間のいずれかのレベルで置換（例えば、−ＣＨ２ＣＦ３）されていてもよい。置換基が修飾について制限なしに列挙される場合、置換形態及び非置換形態の両方が包含される。置換基が「置換された」とみなされる場合、置換された形態が特に意図される。さらに、必要に応じて、特定の部分に対する任意の置換基の異なるセットを定義することができる。これらの場合、任意の置換基は定義された通りであり、多くの場合「任意で置換された」という語句の直後に続く。
【０１０４】
それ自体で現され、かつ番号表示のない用語Ｒまたは用語Ｒ'は、他に定義されない限り、水素、アルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、アリール、ヘテロアリール及びヘテロシクロアルキルからなる群から選択される部分を指し、そのいずれもが、任意で置換されていてもよい。このようなＲ及びＲ'基は、本明細書で定義されるように、任意で置換されると理解されよう。Ｒ基が番号表示を有するか否かにかかわらず、Ｒ、Ｒ'及びＲｎ（ｎ＝（１、２、３、・・・、ｎ））を含むすべてのＲ基、すべての置換、及びすべての用語は、基からの選択の点で、互いに独立していると理解されよう。任意の変数、置換または用語（例えば、アリール、複素環、Ｒなど）が、式または一般構造中に２回以上存在する場合、各存在におけるその定義は、他のすべての存在における定義とは独立している。当業者であれば、特定の基が親分子に結合していてもよく、または要素の鎖中の位置を記載されるようにいずれの末端から占めてもよいことをさらに認識するであろう。したがって、単なる一例として、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）などの非対称基は、炭素または窒素のいずれかで親部分に結合していてもよい。
【０１０５】
（ＡＡ）は、１以上のペプチド結合によって共に結合された天然または非天然のα−アミノ酸、またはペプチド結合によって共に結合された天然または非天然のβ−アミノ酸（複数可）、もしくはペプチド結合によって共に結合されたα−及びβ−アミノ酸（複数可）の組み合わせを含むポリペプチド鎖である。ポリペプチド鎖（ＡＡ）は、ホモポリペプチド鎖またはヘテロポリペプチド鎖であってもよく、任意の適切な長さであり得る。例えば、いくつかの実施形態では、ポリペプチド鎖は、１〜１００のα−アミノ酸、１〜９０のα−アミノ酸、１〜８０のα−アミノ酸、１〜７０のα−アミノ酸、１〜６０のα−アミノ酸、１〜５０のα−アミノ酸、１〜４０のα−アミノ酸、１〜３０のα−アミノ酸、１〜２０のα−アミノ酸、またさらには１〜１０のα−アミノ酸を含み得る。いくつかの実施形態では、ポリペプチド鎖（ＡＡ）のα−アミノ酸は、アスパラギン酸、アスパラギン、アルギニン、ヒスチジン、リシン、グルタミン酸、グルタミン、セリン及びホモセリンからなる基から選択される。いくつかの実施形態では、ポリペプチド鎖（ＡＡ）のα−アミノ酸は、アスパラギン酸、グルタミン酸、セリン及びホモセリンからなる基から選択される。いくつかの実施形態では、ポリペプチド鎖（ＡＡ）は、単一のアミノ（例えば、アスパラギン酸またはセリンのいずれか）を指す。いくつかの実施形態では、ポリペプチド鎖は、１〜１００のβ−アミノ酸、１〜９０のβ−アミノ酸、１〜８０のβ−アミノ酸、１〜７０のβ−アミノ酸、１〜６０のβ−アミノ酸、１〜５０のβ−アミノ酸、１〜４０のβ−アミノ酸、１〜３０のβ−アミノ酸、１〜２０のβ−アミノ酸、またさらには１〜１０のβ−アミノ酸を含み得る。いくつかの実施形態では、ポリペプチド鎖のα−アミノ酸及びβ−アミノ酸の組み合わせが含まれていてもよい。
【０１０６】
不斉中心は、本明細書に開示される化合物中に存在する。これらの中心は、キラル炭素原子の周りの置換基の構成に応じて、記号「Ｒ」または「Ｓ」によって示される。本開示は、ジアステレオマ、エナンチオマ、及びエピマ形態と、ｄ−異性体及び１−異性体と、それらの混合物とを含む、すべての立体化学的異性体形態を包含することを理解されたい。化合物の個々の立体異性体は、キラル中心を含む市販の出発物質の合成、またはエナンチオマ生成物の混合物の調製の後に、ジアステレオマの混合物への変換とそれに続く分離すなわち再結晶、クロマトグラフィー技術、キラルクロマトグラフィーカラムによるエナンチオマの直接分離、または当該分野で公知の任意の他の適切な方法などの分離を行うことによって調整可能である。特定の立体化学の出発化合物は、市販されているか、または当該分野で公知の技術によって製造及び分解することができる。さらに、本明細書に開示される化合物は、幾何異性体として存在し得る。本開示は、すべてのシス、トランス、シン、アンチ、反対側（Ｅ）及び同一側（Ｚ）異性体、並びにそれらの適切な混合物を含む。さらに、化合物は、互変異性体として存在することができ、すべての互変異性体は、本開示によって提供される。さらに、本明細書中に開示される化合物は、水、エタノールなどの薬学的に許容される溶媒を用いて、非溶媒和形態及び溶媒和状態で存在し得る。一般に、溶媒和形態は、非溶媒和形態と同等であるとみなされる。
【０１０７】
「結合」という用語は、結合によって接続された原子が、より大きな部分構造の一部であるとみなされる場合、２つの原子または２つの部分の間の共有結合を指す。結合は、特に指定がない限り、単結合、二重結合、または三重結合であってもよい。分子の図における２つの原子間の破線は、その位置に更なる結合が存在しても存在しなくてもよいことを示す。
【０１０８】
本明細書で使用される「疾患」という用語は、「障害」、「症候群」及び「状態」（医学的状態におけるような）という用語と一般的に同義であることが意図され、すべての用語が、人間または動物の身体もしくはその一部の正常な機能を損なう異常状態を反映し、一般的には、兆候と症状とを識別することによって表され、かつ人間または動物の寿命またはＱＯＬを低下させる、という点で互換的に使用される。
【０１０９】
「治療上有効な」という語句は、疾患または障害の治療において、もしくは臨床的エンドポイントの結果で使用される有効成分の量を修飾することを意図している。
【０１１０】
「血管造影」という用語は、血管、例えば動脈の内腔を視覚化するための医療用画像化技術を指す。
【０１１１】
「血管系」という用語は、身体内または器官すなわち身体部分内の、静脈及び動脈などの血管を指す。本開示の一部は静脈及び動脈を指すが、本開示は、「脈管系」内の任意のタイプの血管に適用可能である。
【０１１２】
本明細書で使用される「肺及び心臓の血管系」という用語は、肺及び／または心臓内のすべての血管と、心臓の部屋と、心臓の部屋間の通路と、肺と心臓との間の血管と、肺または心臓と他の組織及び／または器官との間の血管とを含む。肺及び心臓の血管系は、肺静脈及び動脈並びに関連付けられた毛細血管と、心臓の左心房及び右心房と、心臓の左心室及び右心室と、心筋と、大動脈及び大動脈弓と、冠状動脈と、冠状脈と、鎖骨下動脈と、頸動脈とを含むが、これらに限定されるものではない。
【０１１３】
「異常」という用語は、正常な活動もしくは特徴とは異なる活動または特徴の存在を指す。異常は、治療を必要とする疾患または障害を指していてもよい。
【０１１４】
「狭窄」という用語は、血管もしくは他の管状の器官または構造における狭小化、すなわち血管収縮状態であると定義される。この用語は、「再狭窄」及び「ステント内再狭窄」などの用語も包含する。「再狭窄」という用語は、狭窄の再発を指す。
【０１１５】
本明細書で使用される「閉塞」という用語は、通路すなわち血管の妨害すなわち閉鎖を指す。
【０１１６】
「動脈瘤」という用語は、血管、特に大動脈または末梢動脈の局所的な拡大を指す。動脈瘤は動脈硬化、嚢胞性中膜壊死、病原体感染、大動脈炎、及び外傷に関連しており、それぞれが血管壁の弱化に寄与する可能性がある。一般的な動脈瘤部位には、腹部大動脈と、胸部大動脈と、膝窩、腸骨、及び大腿動脈などの末梢動脈とが含まれる。
【０１１７】
本発明の文脈における「短波長染料」という語句は、電磁スペクトルの青色または緑色部分の光を吸収及び／または放出することができる染料を意味することを意図している。
【０１１８】
本発明の文脈における「長波長染料」という語句は、電磁スペクトルの赤色または赤外部分の光を吸収及び／または放出することができる染料を意味することを意図している。
【０１１９】
「低分子量染料」という用語は、約１，０００ｇ／ｍｏｌ未満の分子量を有する染料を指す。
【０１２０】
「高分子量染料」という用語は、約１，０００ｇ／ｍｏｌを超える分子量を有する染料を指す。
【０１２１】
「治療上許容される」という用語は、過度の毒性、刺激及びアレルギー反応を伴わずに対象の組織と接触させて使用するのに適した化合物（すなわち塩、プロドラッグ、互変異性体、双性イオン形態など）が、合理的な便益／リスク比であり、意図された使用に有効であることを指す。
【０１２２】
本明細書で使用される場合、対象の「治療」への言及は、予防を含むことが意図される。治療はまた、本質的に予防的であり得る。すなわち、疾患の予防を含み得る。疾患の予防は、例えば病原体による感染の予防の場合のように、疾患からの完全な保護を意味していてもよく、または疾患の進行の予防を意味していても良い。例えば、疾患の予防は、任意のレベルで疾患に関連するあらゆる影響を完全に排除することを意味するものではなく、その代わりに、疾患の症状を臨床的に有意、すなわち検出可能なレベルまで予防することを意味していても良い。疾患の予防はまた、疾患の後期ステージへの疾患の進行を予防することを意味し得る。
【０１２３】
「対象（患者：patient）」という用語は、一般に「対象（subject）」という用語と同義であり、人間を含むすべての哺乳動物を含む。対象の例には、人間と、ウシ、ヤギ、ヒツジ、ブタ及びウサギなどの家畜と、イヌ、ネコ、ウサギ及びウマなどのコンパニオンアニマルとが含まれる。
【０１２４】
「プロドラッグ」という用語は、インビボでより活性化される化合物を指す。本明細書に開示される特定の化合物はまた、薬物及びプロドラッグ代謝における加水分解、すなわち「Chemistry,Biochemistry,and Enzymology (Testa,Bernard and Mayer,Joachim M.Wiley-VHCA,Zurich,Switzerland 2003)」に記載されるように、プロドラッグとして存在し得る。本明細書に記載の化合物のプロドラッグは、構造的に修飾された形態の化合物であり、生理学的条件下で容易に化学変化を受けることにより化合物を提供する。さらに、プロドラッグは、エクスビボ環境において化学的、または生化学的方法によって化合物に変換され得る。例えば、適切な酵素または化学試薬と共に経皮パッチリザーバーに入れられた場合、プロドラッグは、徐々に化合物に変換される。プロドラッグは、いくつかの状況において、化合物または親薬物より容易に投与できるため、多くの場合有用である。例えば、プロドラッグは経口投与によって生物学的に利用可能であり得るが、親薬物はそうでない。プロドラッグはまた、医薬組成物において親薬物より向上した溶解性を有し得る。プロドラッグの加水分解または酸化活性化に依存するプロドラッグ誘導体など、多種多様なプロドラッグ誘導体が当該分野で公知である。プロドラッグの一例は、エステル（「プロドラッグ」）として投与されるが、その後代謝的に加水分解されてカルボン酸、すなわち活性を有する実体となる化合物であり、これに限定されない。更なる例には、化合物のペプチジル誘導体が含まれる。
【０１２５】
本明細書に開示される化合物は、治療上許容される塩として存在してもよい。本開示は、酸付加塩を含む塩の形態で上記に列挙された化合物を含む。適切な塩には、有機酸及び無機酸の両方で形成されるものが含まれる。このような酸付加塩は、通常薬学的に許容される。しかし、薬学的に許容されない塩は、当該化合物の調整及び精製において有用であり得る。塩基付加塩もまた形成され、薬学的に許容され得る。塩の調製及び選択のより完全な議論については、「Pharmaceutical Salts:Properties,Selection and Use (Stahl,P.Heinrich,Wiley-VCHA,Zurich,Switzerland,2002)」を参照されたい。
【０１２６】
本明細書で使用される「治療上許容される塩」という用語は、本明細書で定義されるように、水溶性または油溶性、もしくは分散性であり、かつ治療上許容される、本明細書に開示される化合物の塩または双性イオン形態を表す。塩は、化合物の最終的な単離及び精製の間に調製可能であり、また、遊離塩基の形態での適切な化合物を適切な酸と反応させることによって別個に調製可能である。代表的な酸付加塩には、アセテート、アジペート、アルギン酸塩、Ｌ−アスコルビン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩（ベシル酸塩）、重硫酸塩、酪酸塩、樟脳酸塩、カンファースルホン酸塩、クエン酸塩、ジグルコン酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、ゲンチザート、グルタル酸塩、グリセロリン酸、グリコール酸、ヘミ硫酸、ヘプタン酸、ヘキサン酸、馬尿酸、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩（イセチオン酸塩）、乳酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、ＤＬ−マンデル酸塩、メシチレンスルホン酸塩、メタンスルホン酸塩、ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、シュウ酸塩、パモ酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３−フェニルプロピオン酸塩、ホスホン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、ピログルタメート、コハク酸塩、スルホン酸塩、酒石酸塩、Ｌ−酒石酸塩、トリクロロ酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、リン酸塩、グルタミン酸塩、重炭酸塩、パラトルエンスルホン酸塩（ｐ−トシル酸塩）及びウンデカン酸塩が含まれる。治療上許容される付加塩を形成するために使用され得る酸の例には、塩酸、臭化水素酸、硫酸及びリン酸などの無機酸と、シュウ酸、マレイン酸、コハク酸、及びクエン酸などの有機酸とが含まれる。塩は、化合物とアルカリ金属またはアルカリ土類イオンとの配位によって形成可能である。したがって、本開示では、本明細書に開示される化合物のナトリウム塩、カリウム塩、マグネシウム塩及びカルシウム塩などが考慮される。
【０１２７】
塩基付加塩は、カルボキシ基を、金属カチオンの水酸化物、炭酸塩または重炭酸塩などの適切な塩基、もしくはアンモニアもしくは有機第一級、第二級または第三級アミンと反応させることによって、化合物の最終的な単離及び精製の間に調製可能である。治療上許容される塩のカチオンには、リチウム、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム及びアルミニウムと同様に、アンモニウム、テトラメチルアンモニウム、テトラエチルアンモニウム、メチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、トリエチルアミン、ジエチルアミン、エチルアミン、トリブチルアミン、ピリジン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアニリン、Ｎ−メチルピペリジン、Ｎ−メチルモルホリン、ジシクロヘキシルアミン、プロカイン、ジベンジルアミン、Ｎ，Ｎ−ジベンジルフェネチルアミン、１−エフェンアミン及びＮ，Ｎ'−ジベンジルエチレンジアミンなどの非毒性の第四級アミンカチオンも含まれる。塩基付加塩の形成に有用な他の代表的な有機アミンには、エチレンジアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、ピペリジン、及びピペラジンが含まれる。
【０１２８】
化合物の塩は、遊離塩基の形態での適切な化合物を適切な酸と反応させることによって製造可能である。
【０１２９】
組成物
【０１３０】
本開示は、目の血管系の評価を必要とする対象における目の血管系を評価するための組成物であって、蛍光色素を含む組成物を提供する。本開示に係る蛍光色素は、約３５０ｎｍまたはそれ以上の近赤外（ＮＩＲ）スペクトルまたは可視スペクトル内に含まれる全ての波長を吸収、励起、及び発光する傾向を有する。これは、診断処置に有益である。可視光及びＮＩＲ光は、組織を損傷する恐れがないからである。対照的に、３５０ｎｍ未満の波長を有する紫外（ＵＶ）光は、組織を損傷する恐れがある。約３５０ｎｍまたはそれ以上の波長を有する光は、組織内に浸透する傾向がある。したがって、約３５０ｎｍ未満のＵＶ波長を用いた場合には到達することができない関心のある組織に対して診断処置を実施することが可能となる。
【０１３１】
ピラジン誘導体の合成は、概して、以前から研究及び説明されている。上記の参考文献と同様の方法を使用した、本開示に係るいくつかのピラジン誘導体の作製方法は、実施例２、及び４−１８において後述する。
【０１３２】
本開示に係るピラジン色素は、可視領域における吸収、可視または近赤外領域における発光／蛍光発光、大きなストロークシフトを示す傾向、及び腎臓を介して体内から排出される傾向を実証することによって特徴付けることができる。これらの性質は、分子を所望の波長に調整すること、及び、薬物動態的特性（ＰＫ）及び薬理学的（ＰＤ）特性を向上させるために様々な置換基を導入することの両方におけるフレキシビリティを可能にする。本開示に係るピラジン誘導体は、親水性及び／またはリジットな機能性（rigid functionality）を有するようにデザインされ得る。したがって、本開示に係るピラジン誘導体は、概して血管造影、とりわけ眼血管造影に適した所望の薬物動態的特性を提供することができる。
【０１３３】
本開示は、下記の構造式Ｉの化合物またはその塩を含む組成物を提供する。
【０１３４】
【化１】
0006560766.tif 000008
【０１３５】
式中、
Ｘ１及びＸ２は、互いに独立して、-ＣＯ（ＡＡ）、-ＣＮ、-ＣＯ２Ｒ１、-ＣＯＮＲ２Ｒ３、-ＣＯＲ４、-ＮＯ２、-ＳＯＲ３５、-ＳＯ２Ｒ６、-ＳＯ２ＯＲ７、及び-ＰＯ３Ｒ８Ｒ９から選択され、
Ｙ１及びＹ２は、互いに独立して、-ＯＲ１０、-ＳＲ１１、-ＮＲ１２Ｒ１３、-Ｎ（Ｒ１４）ＣＯＲ１５、-ＣＯＮＨ（ＰＳ）、-Ｐ（Ｒ１６）２、-Ｐ（ＯＲ１７）２、及び
【０１３６】
【化２】
0006560766.tif 000009
【０１３７】
から選択され、
各Ｚ１は、互いに独立して、単結合、−ＣＲ１８Ｒ１９−、−Ｏ−、−ＮＲ２０−、−ＮＣＯＲ２１−、−Ｓ−、−ＳＯ−、及び−ＳＯ２−から選択され、
各Ｒ１〜Ｒ２１は、互いに独立して、水素、任意選択でヒドロキシ及びカルボン酸により置換されたＣ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ３−Ｃ６ポリヒドロキシアルキル、Ｃ５−Ｃ１０アリール、Ｃ５−Ｃ１０ヘテロアリール、任意選択でＣ（Ｏ）により置換されたＣ３−Ｃ５ヘテロシクロアリール、任意選択でＣ５−Ｃ１０ヘテロアリールにより置換された−（ＣＨ２）ａＣＯ２Ｈ、-（ＣＨ２）ａＣＯＮＲ３０Ｒ３１、-（ＣＨ２）ａＮＨＳＯ３−、-（ＣＨ２）ａＮＨＳＯ３Ｈ、-（ＣＨ２）ａＯＨ、-（ＣＨ２）ａＯＰＯ３＝、-（ＣＨ２）ａＯＰＯ３Ｈ２、-（ＣＨ２）ａＯＰＯ３Ｈ−、-（ＣＨ２）ａＯＲ２２、-（ＣＨ２）ａＯＳＯ３−、-（ＣＨ２）ａＯＳＯ３Ｈ、-（ＣＨ２）ａＰＯ３＝、-（ＣＨ２）ａＰＯ３Ｈ２、-（ＣＨ２）ａＰＯ３Ｈ−、-（ＣＨ２）ａＳＯ３−、-（ＣＨ２）ａＳＯ３Ｈ、-（ＣＨ２）ｄＣＯ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｃＲ２３、-（ＣＨ２）ｄ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｃＲ２４、-（ＣＨＣＯ２Ｈ）ａＣＯ２Ｈ、-ＣＨ２（ＣＨＮＨ２）ａＣＨ２ＮＲ２５Ｒ２６、-ＣＨ２（ＣＨＯＨ）ａＣＯ２Ｈ、-ＣＨ２（ＣＨＯＨ）ａＲ２７、-ＣＨ［（ＣＨ２）ｂＮＨ２］ａＣＨ２ＯＨ、-ＣＨ［（ＣＨ２）ｂＮＨ２］ａＣＯ２Ｈ、及び-（ＣＨ２）ａＮＲ２８Ｒ２９から選択され、
各Ｒ２２〜Ｒ３１は、互いに独立して、水素、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、及びＣ１−Ｃ５−ジカルボン酸から選択され、
Ｒ３５は、任意選択でヒドロキシ及びカルボン酸により置換されたＣ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ３−Ｃ６ポリヒドロキシアルキル、Ｃ５−Ｃ１０アリール、Ｃ５−Ｃ１０ヘテロアリール、任意選択でＣ（Ｏ）により置換されたＣ３−Ｃ５ヘテロシクロアリール、任意選択でＣ５−Ｃ１０ヘテロアリールにより置換された−（ＣＨ２）ａＣＯ２Ｈ、-（ＣＨ２）ａＣＯＮＲ３０Ｒ３１、-（ＣＨ２）ａＮＨＳＯ３−、-（ＣＨ２）ａＮＨＳＯ３Ｈ、-（ＣＨ２）ａＯＨ、-（ＣＨ２）ａＯＰＯ３＝、-（ＣＨ２）ａＯＰＯ３Ｈ２、-（ＣＨ２）ａＯＰＯ３Ｈ−、-（ＣＨ２）ａＯＲ２２、-（ＣＨ２）ａＯＳＯ３−、-（ＣＨ２）ａＯＳＯ３Ｈ、-（ＣＨ２）ａＰＯ３＝、-（ＣＨ２）ａＰＯ３Ｈ２、-（ＣＨ２）ａＰＯ３Ｈ−、-（ＣＨ２）ａＳＯ３−、-（ＣＨ２）ａＳＯ３Ｈ、-（ＣＨ２）ｄＣＯ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｃＲ２３、-（ＣＨ２）ｄ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｃＲ２４、-（ＣＨＣＯ２Ｈ）ａＣＯ２Ｈ、-ＣＨ２（ＣＨＮＨ２）ａＣＨ２ＮＲ２５Ｒ２６、-ＣＨ２（ＣＨＯＨ）ａＣＯ２Ｈ、-ＣＨ２（ＣＨＯＨ）ａＲ２７、-ＣＨ［（ＣＨ２）ｂＮＨ２］ａＣＨ２ＯＨ、-ＣＨ［（ＣＨ２）ｂＮＨ２］ａＣＯ２Ｈ、及び-（ＣＨ２）ａＮＲ２８Ｒ２９から選択され、
（ＡＡ）は、ペプチド結合により互いに結合された１以上の天然または非天然アミノ酸を含むポリペプチド鎖であり、
（ＰＳ）は、グリコシド結合により互いに結合された１以上の単糖単位を含む硫化または非硫化多糖鎖であり、
各ａ、ｂ、及びｄは、互いに独立して、０〜１０から選択され、
ｃは、１〜１００から選択され、
各ｍ及びｎは、互いに独立して、１〜３から選択される。
【０１３８】
一実施形態では、前記化合物は、少なくとも部分的に腎排泄可能である。
【０１３９】
一実施形態では、前記化合物は、完全に腎排泄可能である。
【０１４０】
方法
【０１４１】
本開示に係る方法では、ピラジン誘導体の有効量が、対象（例えば、人間または他の動物などの哺乳類）の身体に投与される。本明細書で使用される「有効量」という用語は、分析される血管造影機能（angiographic function）を可能にするのに十分なピラジン誘導体の量を指す。対象の体内のピラジン誘導体を、可視光及び近赤外光のうちの少なくとも一方に暴露する。ピラジン誘導体を可視光及び／または近赤外光に暴露すると、ピラジン誘導体は、適切な検出装置により検出可能なスペクトルエネルギーを放出する。ピラジン誘導体から放出されたスペクトルエネルギーは、例えば侵襲性または非侵襲性の光学プローブなどの適切な検出装置、または例えば眼底カメラなどの撮像装置を使用して検出することができる。本明細書で使用される「放出（emanating）」または同様の用語は、ピラジン誘導体から発光及び／または蛍光発光されるスペクトルエネルギーに関連する。血管造影機能は、検出されたスペクトルエネルギーに基づいて測定することができる。例えば、対象の体内に存在するピラジン誘導体の初期量が、（例えば、網膜において）検出されたピラジン誘導体から放出された光の大きさ／強度によって測定される。ピラジン誘導体は身体から排出されるので、通常は、検出された光の大きさ／強度は減少する。したがって、検出された光の大きさが減少する割合は、対象の血管系と相関し得る。この検出は、定期的に、または実質的にリアルタイムで行われ得る。
【０１４２】
本開示は、血管系の可視化を必要としている対象における血管系を可視化するための方法であって、
（ａ）下記の構造式Ｉの化合物またはその塩の有効量を前記対象に投与するステップと、
（ｂ）前記対象の血管系に対して非電離放射線を照射して、前記化合物を蛍光発光させるステップと、
（ｃ）前記対象の血管系における前記化合物の蛍光発光を検出するステップと、
（ｄ）検出された前記蛍光発光に基づいて、前記対象の血管系を可視化するステップとを有する方法を提供する。
【０１４３】
【化１】
0006560766.tif 000010
【０１４４】
式中、
Ｘ１及びＸ２は、互いに独立して、-ＣＯ（ＡＡ）、-ＣＮ、-ＣＯ２Ｒ１、-ＣＯＮＲ２Ｒ３、-ＣＯＲ４、-ＮＯ２、-ＳＯＲ３５、-ＳＯ２Ｒ６、-ＳＯ２ＯＲ７、及び-ＰＯ３Ｒ８Ｒ９から選択され、
Ｙ１及びＹ２は、互いに独立して、-ＯＲ１０、-ＳＲ１１、-ＮＲ１２Ｒ１３、-Ｎ（Ｒ１４）ＣＯＲ１５、-ＣＯＮＨ（ＰＳ）、-Ｐ（Ｒ１６）２、-Ｐ（ＯＲ１７）２、及び
【０１４５】
【化２】
0006560766.tif 000011
【０１４６】
から選択され、
各Ｚ１は、互いに独立して、単結合、−ＣＲ１８Ｒ１９−、−Ｏ−、−ＮＲ２０−、−ＮＣＯＲ２１−、−Ｓ−、−ＳＯ−、及び−ＳＯ２−から選択され、
各Ｒ１〜Ｒ２１は、互いに独立して、水素、任意選択でヒドロキシ及びカルボン酸により置換されたＣ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ３−Ｃ６ポリヒドロキシアルキル、Ｃ５−Ｃ１０アリール、Ｃ５−Ｃ１０ヘテロアリール、任意選択でＣ（Ｏ）により置換されたＣ３−Ｃ５ヘテロシクロアリール、任意選択でＣ５−Ｃ１０ヘテロアリールにより置換された−（ＣＨ２）ａＣＯ２Ｈ、-（ＣＨ２）ａＣＯＮＲ３０Ｒ３１、-（ＣＨ２）ａＮＨＳＯ３−、-（ＣＨ２）ａＮＨＳＯ３Ｈ、-（ＣＨ２）ａＯＨ、-（ＣＨ２）ａＯＰＯ３＝、-（ＣＨ２）ａＯＰＯ３Ｈ２、-（ＣＨ２）ａＯＰＯ３Ｈ−、-（ＣＨ２）ａＯＲ２２、-（ＣＨ２）ａＯＳＯ３−、-（ＣＨ２）ａＯＳＯ３Ｈ、-（ＣＨ２）ａＰＯ３＝、-（ＣＨ２）ａＰＯ３Ｈ２、-（ＣＨ２）ａＰＯ３Ｈ−、-（ＣＨ２）ａＳＯ３−、-（ＣＨ２）ａＳＯ３Ｈ、-（ＣＨ２）ｄＣＯ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｃＲ２３、-（ＣＨ２）ｄ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｃＲ２４、-（ＣＨＣＯ２Ｈ）ａＣＯ２Ｈ、-ＣＨ２（ＣＨＮＨ２）ａＣＨ２ＮＲ２５Ｒ２６、-ＣＨ２（ＣＨＯＨ）ａＣＯ２Ｈ、-ＣＨ２（ＣＨＯＨ）ａＲ２７、-ＣＨ［（ＣＨ２）ｂＮＨ２］ａＣＨ２ＯＨ、-ＣＨ［（ＣＨ２）ｂＮＨ２］ａＣＯ２Ｈ、及び-（ＣＨ２）ａＮＲ２８Ｒ２９から選択され、
各Ｒ２２〜Ｒ３１は、互いに独立して、水素、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、及びＣ１−Ｃ５−ジカルボン酸から選択され、
Ｒ３５は、任意選択でヒドロキシ及びカルボン酸により置換されたＣ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ３−Ｃ６ポリヒドロキシアルキル、Ｃ５−Ｃ１０アリール、Ｃ５−Ｃ１０ヘテロアリール、任意選択でＣ（Ｏ）により置換されたＣ３−Ｃ５ヘテロシクロアリール、任意選択でＣ５−Ｃ１０ヘテロアリールにより置換された−（ＣＨ２）ａＣＯ２Ｈ、-（ＣＨ２）ａＣＯＮＲ３０Ｒ３１、-（ＣＨ２）ａＮＨＳＯ３−、-（ＣＨ２）ａＮＨＳＯ３Ｈ、-（ＣＨ２）ａＯＨ、-（ＣＨ２）ａＯＰＯ３＝、-（ＣＨ２）ａＯＰＯ３Ｈ２、-（ＣＨ２）ａＯＰＯ３Ｈ−、-（ＣＨ２）ａＯＲ２２、-（ＣＨ２）ａＯＳＯ３−、-（ＣＨ２）ａＯＳＯ３Ｈ、-（ＣＨ２）ａＰＯ３＝、-（ＣＨ２）ａＰＯ３Ｈ２、-（ＣＨ２）ａＰＯ３Ｈ−、-（ＣＨ２）ａＳＯ３−、-（ＣＨ２）ａＳＯ３Ｈ、-（ＣＨ２）ｄＣＯ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｃＲ２３、-（ＣＨ２）ｄ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｃＲ２４、-（ＣＨＣＯ２Ｈ）ａＣＯ２Ｈ、-ＣＨ２（ＣＨＮＨ２）ａＣＨ２ＮＲ２５Ｒ２６、-ＣＨ２（ＣＨＯＨ）ａＣＯ２Ｈ、-ＣＨ２（ＣＨＯＨ）ａＲ２７、-ＣＨ［（ＣＨ２）ｂＮＨ２］ａＣＨ２ＯＨ、-ＣＨ［（ＣＨ２）ｂＮＨ２］ａＣＯ２Ｈ、及び-（ＣＨ２）ａＮＲ２８Ｒ２９から選択され、
（ＡＡ）は、ペプチド結合により互いに結合された１以上の天然または非天然アミノ酸を含むポリペプチド鎖であり、
（ＰＳ）は、グリコシド結合により互いに結合された１以上の単糖単位を含む硫化または非硫化多糖鎖であり、
各ａ、ｂ、及びｄは、互いに独立して、０〜１０から選択され、
ｃは、１〜１００から選択され、
各ｍ及びｎは、互いに独立して、１〜３から選択される。
【０１４７】
一実施形態では、前記アミノ酸は、α−アミノ酸、β−アミノ酸、及びγ−アミノ酸から選択される。
【０１４８】
特定の実施形態では、前記化合物は、静脈内投与される。
【０１４９】
特定の実施形態では、前記非電離放射線は、少なくとも３５０ｎｍの波長を有する。
【０１５０】
特定の実施形態では、前記対象の血管系において検出された前記化合物の蛍光発光は、経時的に測定される。
【０１５１】
特定の実施形態では、前記対象の肺及び心臓の血管系が可視化される。いくつかの実施形態では、前記対象の肺及び心臓の血管系の可視化は、狭窄、閉塞、動脈瘤、及びそれらの組み合わせから選択される異常の特定を含む。いくつかの実施形態では、前記対象の肺及び心臓の血管系の可視化は、前記対象の肺及び心臓の血管系において検出された前記化合物の蛍光発光を、同様の条件下の正常な肺及び心臓の血管系において検出された前記化合物の蛍光発光と比較するステップを含む。
【０１５２】
特定の実施形態では、前記対象の目の血管系が可視化される。いくつかの実施形態では、前記対象の目の血管系の可視化は、眼球異常の特定を含む。いくつかの実施形態では、前記眼球異常は、血管構築、虚血性斑点、脈絡膜梗塞、エルシュニッヒ斑点、滲出、出血、及びそれらの組み合わせから選択される。いくつかの実施形態では、前記眼球異常は、血管交叉、血管蛇行、滲出の痕跡、及びそれらの組み合わせから選択される。いくつかの実施形態では、前記対象の目の血管系の可視化は、前記対象の目の血管系において検出された前記化合物の蛍光発光を、同様の条件下の正常な目の血管系において検出された前記化合物の蛍光発光と比較するステップを含む。
【０１５３】
また、本開示は、対象の血管系における疾患または損傷の位置を評価するための方法であって、
（ａ）下記の構造式Ｉの化合物またはその塩の有効量を前記対象に投与するステップと、
（ｂ）前記対象の血管系に対して非電離放射線を照射して、前記化合物を蛍光発光させるステップと、
（ｃ）前記対象の血管系における前記化合物の蛍光発光を検出するステップと、
（ｄ）検出された前記蛍光発光に基づいて、前記対象の血管系における疾患または損傷の位置を評価するステップとを有する方法を提供する。
【０１５４】
【化１】
0006560766.tif 000012
【０１５５】
式中、
Ｘ１及びＸ２は、互いに独立して、-ＣＯ（ＡＡ）、-ＣＮ、-ＣＯ２Ｒ１、-ＣＯＮＲ２Ｒ３、-ＣＯＲ４、-ＮＯ２、-ＳＯＲ３５、-ＳＯ２Ｒ６、-ＳＯ２ＯＲ７、及び-ＰＯ３Ｒ８Ｒ９から選択され、
Ｙ１及びＹ２は、互いに独立して、-ＯＲ１０、-ＳＲ１１、-ＮＲ１２Ｒ１３、-Ｎ（Ｒ１４）ＣＯＲ１５、-ＣＯＮＨ（ＰＳ）、-Ｐ（Ｒ１６）２、-Ｐ（ＯＲ１７）２、及び
【０１５６】
【化２】
0006560766.tif 000013
【０１５７】
から選択され、
各Ｚ１は、互いに独立して、単結合、−ＣＲ１８Ｒ１９−、−Ｏ−、−ＮＲ２０−、−ＮＣＯＲ２１−、−Ｓ−、−ＳＯ−、及び−ＳＯ２−から選択され、
各Ｒ１〜Ｒ２１は、互いに独立して、水素、任意選択でヒドロキシ及びカルボン酸により置換されたＣ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ３−Ｃ６ポリヒドロキシアルキル、Ｃ５−Ｃ１０アリール、Ｃ５−Ｃ１０ヘテロアリール、任意選択でＣ（Ｏ）により置換されたＣ３−Ｃ５ヘテロシクロアリール、任意選択でＣ５−Ｃ１０ヘテロアリールにより置換された−（ＣＨ２）ａＣＯ２Ｈ、-（ＣＨ２）ａＣＯＮＲ３０Ｒ３１、-（ＣＨ２）ａＮＨＳＯ３−、-（ＣＨ２）ａＮＨＳＯ３Ｈ、-（ＣＨ２）ａＯＨ、-（ＣＨ２）ａＯＰＯ３＝、-（ＣＨ２）ａＯＰＯ３Ｈ２、-（ＣＨ２）ａＯＰＯ３Ｈ−、-（ＣＨ２）ａＯＲ２２、-（ＣＨ２）ａＯＳＯ３−、-（ＣＨ２）ａＯＳＯ３Ｈ、-（ＣＨ２）ａＰＯ３＝、-（ＣＨ２）ａＰＯ３Ｈ２、-（ＣＨ２）ａＰＯ３Ｈ−、-（ＣＨ２）ａＳＯ３−、-（ＣＨ２）ａＳＯ３Ｈ、-（ＣＨ２）ｄＣＯ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｃＲ２３、-（ＣＨ２）ｄ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｃＲ２４、-（ＣＨＣＯ２Ｈ）ａＣＯ２Ｈ、-ＣＨ２（ＣＨＮＨ２）ａＣＨ２ＮＲ２５Ｒ２６、-ＣＨ２（ＣＨＯＨ）ａＣＯ２Ｈ、-ＣＨ２（ＣＨＯＨ）ａＲ２７、-ＣＨ［（ＣＨ２）ｂＮＨ２］ａＣＨ２ＯＨ、-ＣＨ［（ＣＨ２）ｂＮＨ２］ａＣＯ２Ｈ、及び-（ＣＨ２）ａＮＲ２８Ｒ２９から選択され、
各Ｒ２２〜Ｒ３１は、互いに独立して、水素、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、及びＣ１−Ｃ５−ジカルボン酸から選択され、
Ｒ３５は、任意選択でヒドロキシ及びカルボン酸により置換されたＣ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ３−Ｃ６ポリヒドロキシアルキル、Ｃ５−Ｃ１０アリール、Ｃ５−Ｃ１０ヘテロアリール、任意選択でＣ（Ｏ）により置換されたＣ３−Ｃ５ヘテロシクロアリール、任意選択でＣ５−Ｃ１０ヘテロアリールにより置換された−（ＣＨ２）ａＣＯ２Ｈ、-（ＣＨ２）ａＣＯＮＲ３０Ｒ３１、-（ＣＨ２）ａＮＨＳＯ３−、-（ＣＨ２）ａＮＨＳＯ３Ｈ、-（ＣＨ２）ａＯＨ、-（ＣＨ２）ａＯＰＯ３＝、-（ＣＨ２）ａＯＰＯ３Ｈ２、-（ＣＨ２）ａＯＰＯ３Ｈ−、-（ＣＨ２）ａＯＲ２２、-（ＣＨ２）ａＯＳＯ３−、-（ＣＨ２）ａＯＳＯ３Ｈ、-（ＣＨ２）ａＰＯ３＝、-（ＣＨ２）ａＰＯ３Ｈ２、-（ＣＨ２）ａＰＯ３Ｈ−、-（ＣＨ２）ａＳＯ３−、-（ＣＨ２）ａＳＯ３Ｈ、-（ＣＨ２）ｄＣＯ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｃＲ２３、-（ＣＨ２）ｄ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｃＲ２４、-（ＣＨＣＯ２Ｈ）ａＣＯ２Ｈ、-ＣＨ２（ＣＨＮＨ２）ａＣＨ２ＮＲ２５Ｒ２６、-ＣＨ２（ＣＨＯＨ）ａＣＯ２Ｈ、-ＣＨ２（ＣＨＯＨ）ａＲ２７、-ＣＨ［（ＣＨ２）ｂＮＨ２］ａＣＨ２ＯＨ、-ＣＨ［（ＣＨ２）ｂＮＨ２］ａＣＯ２Ｈ、及び-（ＣＨ２）ａＮＲ２８Ｒ２９から選択され、
（ＡＡ）は、ペプチド結合により互いに結合された１以上の天然または非天然アミノ酸を含むポリペプチド鎖であり、
（ＰＳ）は、グリコシド結合により互いに結合された１以上の単糖単位を含む硫化または非硫化多糖鎖であり、
各ａ、ｂ、及びｄは、互いに独立して、０〜１０から選択され、
ｃは、１〜１００から選択され、
各ｍ及びｎは、互いに独立して、１〜３から選択される。
【０１５８】
一実施形態では、前記アミノ酸は、α−アミノ酸、β−アミノ酸、及びγ−アミノ酸から選択される。
【０１５９】
特定の実施形態では、前記化合物は、静脈内投与される。
【０１６０】
特定の実施形態では、前記非電離放射線は、少なくとも３５０ｎｍの波長を有する。
【０１６１】
特定の実施形態では、前記対象の血管系において検出された前記化合物の蛍光発光は、経時的に測定される。
【０１６２】
特定の実施形態では、前記対象の肺及び心臓の血管系が評価される。いくつかの実施形態では、前記対象の肺及び心臓の血管系の評価は、狭窄、閉塞、動脈瘤、及びそれらの組み合わせから選択される異常の特定を含む。いくつかの実施形態では、前記対象の肺及び心臓の血管系の評価は、前記対象の肺及び心臓の血管系において検出された前記化合物の蛍光発光を、同様の条件下の正常な肺及び心臓の血管系において検出された前記化合物の蛍光発光と比較するステップを含む。いくつかの実施形態では、前記対象の目の血管系が評価される。特定の実施形態では、前記対象の目の血管系の評価は、眼球異常の特定を含む。特定の実施形態では、前記眼球異常は、血管構築、虚血性斑点、脈絡膜梗塞、エルシュニッヒ斑点、滲出、出血、及びそれらの組み合わせから選択される。特定の実施形態では、前記眼球異常は、血管交叉、血管蛇行、滲出の痕跡、及びそれらの組み合わせから選択される。特定の実施形態では、前記対象の目の血管系の評価は、前記対象の目の血管系において検出された前記化合物の蛍光発光を、同様の条件下の正常な目の血管系において検出された前記化合物の蛍光発光と比較するステップを含む。
【０１６３】
本開示によれば、体細胞の生理学的機能を評価するための１つのプロトコールは、上記の構造式Ｉで表されるピラジン誘導体の有効量を対象の体内に投与するステップを含む。対象に投与されるピラジン誘導体の適切な用量は、当業者により容易に決定することができ、実施される臨床処置に応じて、一般的には１ナノモル〜１００マイクロモルの範囲で変更することができる。ピラジン誘導体の対象への投与は、これに限定しないが、下記のいくつかの適切な方法のうちのいずれかを用いて行うことができる。（１）静脈内、腹腔内、または皮下への注射または注入、（２）経口投与、（３）皮膚を通じた経皮吸収、及び（４）吸入。
【０１６４】
上記のプロトコールについて引き続き説明すると、ピラジン誘導体を、可視光及び／または近赤外光に暴露する。ピラジン誘導体の光への暴露は、任意の適切な時期に行うことができるが、ピラジン誘導体が対象の体内（例えば、血流内）に存在する間に行うことが好ましい。ピラジン誘導体を可視光及び／または近赤外光に暴露すると、適切な検出装置で検出可能なスペクトルエネルギー（例えば、可視光及び／または近赤外光）が放出される。ピラジン誘導体から放出されたスペクトルエネルギーは、ピラジン誘導体により吸収される波長範囲よりも大きい波長範囲を示す傾向がある。例えば、一実施形態に係る組成物が約７００ｎｍの光を吸収する場合、この組成物は、約７４５ｎｍの光を放出する。
【０１６５】
ピラジン誘導体（より具体的には、ピラジン誘導体から放出される光）の検出は、当分野で既知の光学的な蛍光発光、吸収、または散乱方法を用いて実現することができる。一実施形態では、放出されたスペクトルエネルギーの検出は、放出されたスペクトルエネルギーの収集、及び収集されたスペクトルエネルギーを示す電気信号の生成と特徴付けることができる。対象の体内に存在する組成物から放出されたスペクトルエネルギーを検出するのに使用される機構は、選択された波長（または波長範囲）のみを検出するようにデザインされるか、あるいは、１以上の適切なスペクトルフィルタを含み得る。様々なカテーテル、内視鏡、イヤークリップ、ハンドバンド、ヘッドバンド、表面コイル、フィンガープローブなどが、ピラジン誘導体を光に暴露するのに、及び／またはピラジン誘導体から放出された光を検出するのに使用され得る。スペクトルエネルギーのこの検出は、１回または断続的に複数回行われるか、または実質的に連続的に行われ得る。
【０１６６】
対象の腎機能は、この参照により本明細書に援用される米国特許第９、２１６、９６３号明細書に記載された方法を用いて、検出されたスペクトルエネルギーに基づいて測定（判定）することができる。これは、検出されたスペクトルエネルギーを示すデータを用いて、体内からのピラジン誘導体のクリアランス（排出）を示す強度／時間プロファイルを生成することにより実現することができる。このプロファイルは、生理学的または病理学的状態と相関し得る。例えば、対象のクリアランスプロファイル及び／またはクリアランス率を、既知のクリアランスプロファイル及び／またはクリアランス率と比較することにより、対象の腎機能（腎臓機能）の評価または対象の生理学的状態の診断を行うことができる。体液中のピラジン誘導体の存在を分析する場合、腎機能を診断するための適切なマイクロプロセッサを使用して濃度／時間曲線が生成され分析され得る（好ましくはリアルタイムで）。
【０１６７】
生理学的機能は、（１）正常細胞及び損傷細胞の、本開示に係る組成物を血流から除去する態様の差異の比較、（２）器官または組織における本開示に係る組成物の割合及び蓄積の測定、または、（３）本開示に係る組成物が存在する器官または組織のトモグラフィー画像の取得、によって評価することができる。例えば、血液プールクリアランスが、例えば耳たぶや指に存在する便利な毛細管表面から非侵襲的に測定されるか、または、例えば血管内カテーテルなどの適切な器具使用して侵襲的に測定され得る。関心のある細胞内の本開示に係る組成物の蓄積も、同様の方法を用いて評価することができる。
【０１６８】
また、とりわけ、本開示に係る組成物から放出されたスペクトルエネルギーの測定を好適に行うために、改変された肺動脈カテーテルを使用することができる。改変された肺動脈カテーテルの、本開示に係る組成物から放出されたスペクトルエネルギーを検出する能力は、血管内圧力、心拍出量、及び血流の他の派生的な測定値のみを測定する現行の肺動脈カテーテルに対する明らかな向上である。従来、重病の対象は、上記のパラメータのみを用いて治療され、その治療は、腎機能を評価するための断続的な血液サンプリング及び検査に依存する傾向がある。これらの従来のパラメータは、非連続的なデータを提供するため、しばしば、多くの対象に誤解を与える。
【０１６９】
標準的な肺動脈カテーテルの改変は、該カテーテルに波長特異的な光ファイバセンサを組み込むことのみを必要とする。混合静脈血酸素飽和度を測定するための光ファイバ技術が組み込まれたカテーテルは、現在存在する。ある特徴付けでは、改変された肺動脈カテーテルは、標準的な肺動脈カテーテルの先端に波長特異的な光ファイバセンサが組み込まれている。この波長特異的な光ファイバセンサは、本開示に係る組成物などの光学的に検出可能にデザインされた化学物質の腎機能特異的な排出をモニタするのに使用することができる。したがって、色素希釈曲線と類似した方法を用いて、光学的に検出される化合物の消失／クリアランスにより、腎機能をリアルタイムでモニタすることができる。
【０１７０】
本明細書に開示されるのは、対象の腎機能を光学的に診断する方法であって、ピラジン誘導体またはその薬学的に許容される塩を対象に投与するステップと、投与された前記ピラジン誘導体を可視光及び／または近赤外光に暴露するステップと、投与された前記ピラジン誘導体から放出されたスペクトルエネルギーを検出するステップと、前記ピラジン誘導体の前記対象の身体からのクリアランスを測定するステップとを有し、投与された前記ピラジン誘導体は、可視光及び／または近赤外光スペクトルのスペクトルエネルギーを吸収及び放出する、方法である。
【０１７１】
本開示の様々な態様のうちのいくつかは、外科医または他の医療従事者が、この参照により本明細書に援用される米国特許第９、２８３、２８８号明細書に記載された方法を用いて腎臓系の組織を区別することを可能にするために、外科処置において１以上の光学的色素を使用することである。有利なことに、これにより、外科医または他の医療従事者が、外科処置の前、間、及び／または後に、組織の完全性を標的にする及び／または評価するのを避けることができる。
【０１７２】
本開示の１つの態様は、外科処置において、光学的物質を使用する方法に関する。この方法では、光学的物質が対象の尿中に現れるようにするために、腎臓で排出可能な光学的物質が対象に投与される。さらに、対象の腎臓系の第１の組織に非電離放射線を照射し、第１の組織における光学的物質を光学的に検出することにより、第１の組織の位置（例えば、周囲及び／または隣接する組織に対する位置）を特定（区別）する。
【０１７３】
本開示の別の態様は、外科処置において、光学的物質を使用する方法に関する。この方法では、腎臓で排出可能な光学的物質が、対象の手術野内に位置する対象の腎臓系の第１の組織内に存在する間に、対象の手術野に非電離放射線を照射する。第１の組織内に存在する光学的物質を検出するために、第１の組織に非電離放射線が照射される。その後、対象の第２の組織が、第１の組織内に存在する光学的物質の光学的検出に少なくとも部分的に基づいて外科的に処置される。
【０１７４】
本開示の別の態様は、外科処置において、光学的物質を使用する方法に関する。この方法では、腎臓で排出可能な光学的物質が対象の腎臓系の少なくとも１つの組織に送達され、その組織に非電離放射線が照射される。対象の腎臓系の組織内に光学的物質が存在するか否かを判断するために、（組織への非電離放射線の照射に少なくとも部分的に基づいて）光学的物質の検出が行われる。
【０１７５】
また、本明細書に開示されるのは、腹部または骨盤の外科処置を受けている対象における尿管に対する不慮の傷害のリスクを減らすために、腹部または骨盤の外科処置において蛍光物質を使用する方法であって、蛍光物質を、腹部または骨盤の外科処置を受けている対象の尿管に送達するステップと、前記尿管内の前記蛍光物質を発光させるために、前記対象の腎臓系の前記尿管に非電離放射線を照射するステップと、前記尿管に対する不慮の傷害のリスクを減らすべく前記尿管をその周囲の組織から区別するために、前記尿管内の前記蛍光物質を光学的に検出するステップとを有する方法である。前記蛍光物質は、経静脈的、経腸的、経腹腔的、経皮的、または吸入により前記対象に送達される。前記蛍光物質の少なくとも一部が、前記対象の腎臓系から排出される。したがって、前記蛍光物質の少なくとも一部が前記対象の尿内に存在する。前記蛍光物質は、フェニルキサンテン、フェノチアジン、フェノセレナジン、シアニン、インドシアニン、スクアライン、ジピロロピリミドン、アントラキノン、テトラセン、キノリン、ピラジン、アクリジン、アクリドン、フェナントリジン、アゾ染料、ローダミン、フェノキサジン、アズレン、アザアズレン、トリフェニルメタン染料、インドール、ベンゾインドール、インドカルボシアニン、ベンゾインドカルボシアニン、４，４‐ジフロロ‐４‐ボラ‐３ａ，４ａ‐ジアザ‐ｓ‐インダセンの構造式を有する誘導体、並びにこれらの複合体及び誘導体から選択される。
【０１７６】
キット
【０１７７】
また、本開示は、対象における、血管系の評価、腎機能の診断、あるいは、腹部または骨盤の外科処置を必要とする対象における尿管に対する不慮の傷害のリスクを減らすための腹部または骨盤の外科的処置における蛍光物質の使用のためのキットであって、
（ａ）下記の構造式Ｉの化合物またはその塩と、
（ｂ）前記対象の血管系を評価するための方法が記載されている取扱説明書であって、
（ｉ）下記の構造式Ｉの化合物またはその塩の有効量を前記対象に投与するステップと、
（ｉｉ）前記対象の血管系に対して非電離放射線を照射して、前記化合物を蛍光発光させるステップと、
（ｉｉｉ）前記対象の血管系における前記化合物の蛍光発光を検出するステップと、
（ｉｖ）検出された前記蛍光発光に基づいて、前記対象の血管系を可視化するステップとを有する評価方法が記載されている、該取扱説明書とを含むキットを提供する。
【０１７８】
【化１】
0006560766.tif 000014
【０１７９】
式中、
Ｘ１及びＸ２は、互いに独立して、-ＣＯ（ＡＡ）、-ＣＮ、-ＣＯ２Ｒ１、-ＣＯＮＲ２Ｒ３、-ＣＯＲ４、-ＮＯ２、-ＳＯＲ３５、-ＳＯ２Ｒ６、-ＳＯ２ＯＲ７、及び-ＰＯ３Ｒ８Ｒ９から選択され、
Ｙ１及びＹ２は、互いに独立して、-ＯＲ１０、-ＳＲ１１、-ＮＲ１２Ｒ１３、-Ｎ（Ｒ１４）ＣＯＲ１５、-ＣＯＮＨ（ＰＳ）、-Ｐ（Ｒ１６）２、-Ｐ（ＯＲ１７）２、及び
【０１８０】
【化２】
0006560766.tif 000015
【０１８１】
から選択され、
各Ｚ１は、互いに独立して、単結合、−ＣＲ１８Ｒ１９−、−Ｏ−、−ＮＲ２０−、−ＮＣＯＲ２１−、−Ｓ−、−ＳＯ−、及び−ＳＯ２−から選択され、
各Ｒ１〜Ｒ２１は、互いに独立して、水素、任意選択でヒドロキシ及びカルボン酸により置換されたＣ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ３−Ｃ６ポリヒドロキシアルキル、Ｃ５−Ｃ１０アリール、Ｃ５−Ｃ１０ヘテロアリール、任意選択でＣ（Ｏ）により置換されたＣ３−Ｃ５ヘテロシクロアリール、任意選択でＣ５−Ｃ１０ヘテロアリールにより置換された−（ＣＨ２）ａＣＯ２Ｈ、-（ＣＨ２）ａＣＯＮＲ３０Ｒ３１、-（ＣＨ２）ａＮＨＳＯ３−、-（ＣＨ２）ａＮＨＳＯ３Ｈ、-（ＣＨ２）ａＯＨ、-（ＣＨ２）ａＯＰＯ３＝、-（ＣＨ２）ａＯＰＯ３Ｈ２、-（ＣＨ２）ａＯＰＯ３Ｈ−、-（ＣＨ２）ａＯＲ２２、-（ＣＨ２）ａＯＳＯ３−、-（ＣＨ２）ａＯＳＯ３Ｈ、-（ＣＨ２）ａＰＯ３＝、-（ＣＨ２）ａＰＯ３Ｈ２、-（ＣＨ２）ａＰＯ３Ｈ−、-（ＣＨ２）ａＳＯ３−、-（ＣＨ２）ａＳＯ３Ｈ、-（ＣＨ２）ｄＣＯ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｃＲ２３、-（ＣＨ２）ｄ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｃＲ２４、-（ＣＨＣＯ２Ｈ）ａＣＯ２Ｈ、-ＣＨ２（ＣＨＮＨ２）ａＣＨ２ＮＲ２５Ｒ２６、-ＣＨ２（ＣＨＯＨ）ａＣＯ２Ｈ、-ＣＨ２（ＣＨＯＨ）ａＲ２７、-ＣＨ［（ＣＨ２）ｂＮＨ２］ａＣＨ２ＯＨ、-ＣＨ［（ＣＨ２）ｂＮＨ２］ａＣＯ２Ｈ、及び-（ＣＨ２）ａＮＲ２８Ｒ２９から選択され、
各Ｒ２２〜Ｒ３１は、互いに独立して、水素、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、及びＣ１−Ｃ５−ジカルボン酸から選択され、
Ｒ３５は、任意選択でヒドロキシ及びカルボン酸により置換されたＣ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ３−Ｃ６ポリヒドロキシアルキル、Ｃ５−Ｃ１０アリール、Ｃ５−Ｃ１０ヘテロアリール、任意選択でＣ（Ｏ）により置換されたＣ３−Ｃ５ヘテロシクロアリール、任意選択でＣ５−Ｃ１０ヘテロアリールにより置換された−（ＣＨ２）ａＣＯ２Ｈ、-（ＣＨ２）ａＣＯＮＲ３０Ｒ３１、-（ＣＨ２）ａＮＨＳＯ３−、-（ＣＨ２）ａＮＨＳＯ３Ｈ、-（ＣＨ２）ａＯＨ、-（ＣＨ２）ａＯＰＯ３＝、-（ＣＨ２）ａＯＰＯ３Ｈ２、-（ＣＨ２）ａＯＰＯ３Ｈ−、-（ＣＨ２）ａＯＲ２２、-（ＣＨ２）ａＯＳＯ３−、-（ＣＨ２）ａＯＳＯ３Ｈ、-（ＣＨ２）ａＰＯ３＝、-（ＣＨ２）ａＰＯ３Ｈ２、-（ＣＨ２）ａＰＯ３Ｈ−、-（ＣＨ２）ａＳＯ３−、-（ＣＨ２）ａＳＯ３Ｈ、-（ＣＨ２）ｄＣＯ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｃＲ２３、-（ＣＨ２）ｄ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｃＲ２４、-（ＣＨＣＯ２Ｈ）ａＣＯ２Ｈ、-ＣＨ２（ＣＨＮＨ２）ａＣＨ２ＮＲ２５Ｒ２６、-ＣＨ２（ＣＨＯＨ）ａＣＯ２Ｈ、-ＣＨ２（ＣＨＯＨ）ａＲ２７、-ＣＨ［（ＣＨ２）ｂＮＨ２］ａＣＨ２ＯＨ、-ＣＨ［（ＣＨ２）ｂＮＨ２］ａＣＯ２Ｈ、及び-（ＣＨ２）ａＮＲ２８Ｒ２９から選択され、
（ＡＡ）は、ペプチド結合により互いに結合された１以上の天然または非天然アミノ酸を含むポリペプチド鎖であり、
（ＰＳ）は、グリコシド結合により互いに結合された１以上の単糖単位を含む硫化または非硫化多糖鎖であり、
各ａ、ｂ、及びｄは、互いに独立して、０〜１０から選択され、
ｃは、１〜１００から選択され、
各ｍ及びｎは、互いに独立して、１〜３から選択される。
【０１８２】
一実施形態では、前記アミノ酸は、α−アミノ酸、β−アミノ酸、及びγ−アミノ酸から選択される。
【０１８３】
特定の実施形態では、前記取扱説明書に記載されている評価方法は、前記化合物を静脈内投与するステップを含む。
【０１８４】
特定の実施形態では、前記取扱説明書に記載されている評価方法は、前記化合物に対して、少なくとも３５０ｎｍの波長を有する前記非電離放射線を照射するステップを含む。
【０１８５】
特定の実施形態では、前記取扱説明書に記載されている評価方法は、前記対象の肺及び心臓の血管系において検出された前記化合物の蛍光発光を経時的に測定するステップを含む。
【０１８６】
特定の実施形態では、前記対象の肺及び心臓の血管系が評価される。
【０１８７】
特定の実施形態では、前記取扱説明書に記載されている評価方法は、前記対象の肺及び心臓の血管系を評価するために、狭窄、閉塞、動脈瘤、及びそれらの組み合わせから選択される異常を特定するステップを含む。
【０１８８】
特定の実施形態では、前記取扱説明書に記載されている評価方法は、前記対象の肺及び心臓の血管系を評価するために、前記対象の肺及び心臓の血管系において検出された前記化合物の蛍光発光を、同様の条件下の正常な肺及び心臓の血管系において検出された前記化合物の蛍光発光と比較するステップを含む。
【０１８９】
特定の実施形態では、前記取扱説明書に記載されている評価方法は、前記対象の目の血管系を評価するステップを含む。
【０１９０】
特定の実施形態では、前記取扱説明書に記載されている評価方法は、前記対象の目の血管系を評価するために、眼球異常を特定するステップを含む。特定の実施形態では、前記眼球異常は、血管構築、虚血性斑点、脈絡膜梗塞、エルシュニッヒ斑点、滲出、出血、及びそれらの組み合わせから選択される。特定の実施形態では、前記眼球異常は、血管交叉、血管蛇行、滲出の痕跡、及びそれらの組み合わせから選択される。
【０１９１】
特定の実施形態では、前記取扱説明書に記載されている評価方法は、前記対象の目の血管系を評価するために、前記対象の目の血管系において検出された前記化合物の蛍光発光を、同様の条件下の正常な目の血管系において検出された前記化合物の蛍光発光と比較するステップを含む。
【０１９２】
製剤
【０１９３】
本開示に係る組成物は、該組成物が血流中に入るように、静脈内、腹腔内、または皮下に注射または注入することにより投与される。
【０１９４】
本開示に係るピラジン誘導体は、溶液として、大抵は、当分野で既知の薬学的に許容される静脈内担体と共に投与される。当分野で周知の薬学的に許容される担体としては、これに限定しないが、０．０１−０．１Ｍリン酸緩衝液、または０．８％生理食塩水が挙げられる。加えて、薬学的に許容される担体は、水性溶液、非水性溶液、懸濁液、乳濁液、またはそれらの適切な組み合わせであり得る。非水溶媒の例としては、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、植物油（例えば、オーリブ油）、及び注入可能な有機エステル（例えば、オレイン酸エチル）が挙げられる。水性担体の例としては、生理食塩水及び緩衝媒体を含めて、水、アルコール性／水性溶液、乳濁液、または懸濁液が挙げられる。非経口担体の例としては、塩化ナトリウム溶液、リンガーズデキストロース（Ringer's dextrose）、デキストロース及び塩化ナトリウム、乳酸リンガーズ、または不揮発性油が挙げられる。静脈内担体の例としては、体液及び栄養素補液や、電解質補液（例えば、リンガーデキストロースに基づくもの）などが挙げられる。また、防腐剤及び他の添加剤、例えば、抗菌剤、抗酸化剤、照合剤、不活性ガスなどを含むこともできる。
【０１９５】
用量
【０１９６】
本開示に係る組成物は、効果的な診断目的を達成するために、単一用量または複数回用量で投与される。投与後、組成物が目に到達するまで待つ。その後、医療提供者が（例えば、診断を下すのに）利用可能な情報を提供するために、選択された目標部位を、対象の体内に存在する組成物から放出される光を検出するのに十分な出力及び強度を有する光に暴露する。用量は、例えば、使用する光活性物質の種類、検査する領域（例えば、器官または組織）、臨床処置に使用する器具、達成される治療効果などに応じて大きく異なる。例えば、本開示に係る組成物の用量は、約０．１〜５００ｍｇ／ｋｇ体重の範囲であり得る。他の実施形態では、本開示に係る組成物の用量は、約０．５〜２ｍｇ／ｋｇ体重の範囲であり得る。
【０１９７】
検出及び測定
【０１９８】
血管系を検出するために、投与後、組成物が目に到達するまで待つ。その後、医療提供者が（例えば、診断を下すのに）利用可能な情報を提供するために、選択された目標部位を、対象の体内に存在する組成物から放出される光を検出するのに十分な出力及び強度を有する光に暴露する。組成物の検出は、光学的な蛍光発光、吸収、及び／または散乱方法を用いて実現することができる。スペクトルエネルギーの検出は、１回または断続的に複数回、または実質的に連続的に行われ得る。
【０１９９】
一実施形態では、本開示に係る方法は、外科医または他の医療従事者が、尿管、膀胱、及び／または尿道を傷つけないように避けるのを可能にするために使用することができる。健康な個体では、尿は、腎臓から尿管を通って流れ、膀胱に集まる。そして、尿道を介し体内から排出されるまで、膀胱に貯尿される。したがって、本開示に係る方法では、尿管及び膀胱内に存在する尿中に光学的物質が蓄積することにより、尿管及び膀胱内の光学的物質の検出が可能となる。尿道における光学的物質の検出は、例えば、光学的物質を含む尿の残渣が尿道の壁に存在する場合、または、泌尿器カテーテルによって尿道を通じた尿の継続的な流れが手助けされている場合に可能である。
【０２００】
また、本開示の別の態様は、外科処置のターゲットを区別するための、１以上の光学的物質の使用である。このような外科処置としては、これに限定しないが、例えば、腎摘出、腎移植、腫瘍除去中の尿管部分の切除、膀胱頸部吊り上げ術、及び腎結石の外科的除去が挙げられる。
【０２０１】
本開示のさらなる態様は、腎臓系の完全性を評価するための光学的物質の使用である。このような評価は、腎臓系、あるいは腹部及び／または骨盤領域の他の器官及び／または組織に対して実施される外科処置の前、間、及び／または後に行うことができる。光学的物質が腎臓系の組織にのみ存在する場合は、腎臓系の損傷（例えば、尿管狭窄）が生じなかったことを示す。腎臓系の組織に対する損傷または傷害が生じた場合、本開示に係る方法によって、外科医が損傷または傷害の生じた位置を迅速に特定することが可能となる（例えば、損傷部位からの色素の放出を観察することにより）。
【０２０２】
本開示のさらなる態様は、診断的腹腔鏡処置中に腎臓系の１以上の組織を検出するための光学的物質の使用である。
【０２０３】
用いる外科的手法に応じて、手術野の全体を照射することによって、第１の組織における光学的物質の存在を検出することがきる。このアプローチは、例えば、切開外科処置において使用することができる。あるいは、例えば腹腔鏡または他の内視鏡器具を使用して、手術野の一部またはモニタ対象の特定部位だけを照射するようにしてもよい。
【０２０４】
一般的に、所望の波長の非電離放射線を提供可能な任意の照射源を使用することができる。例えば、一実施形態では、手術室の照明器具（例えば、蛍光灯または白熱灯）が、所望の波長の光を放出する。別の実施態様では、照射源はレーザーである。さらに別の実施態様では、照射源は、手持ちの照明器具である。使用可能な他の照射源として、これに限定しないが、照明付きカテーテル、内視鏡、光ファイバプローブ、発光ダイオード（ＬＥＤ）、照明付きヘッドバンド（すなわち、ヘッドライト）などが挙げられる。また、照射システムを含む手術器具、または照射システムを備えて構成された手術器具を使用することができる。このような手術器具の例としては、バイオスペック社（BioSpec、ロシア、モスクワ）から入手可能な光ファイバ器具、及び間質性腫瘍を照射するための細い針先を有する光線力学治療法用のＴＣ−Ｉ光ファイバ器具（http://www.biospec.ru/_Fiber_Optics_e.html）が挙げられる。
【０２０５】
当分野で利用可能なあらゆる光学的検出方法を本発明で使用することができる。分光計測は、吸収、散乱／反射、及び放出の３つの広義のカテゴリに分類することができる。吸収アッセイは、サンプルにより吸収された入射光の量を、サンプル中の分子の種類及び数に関連付けることを含む。例えば、吸収測定の場合、使用される非電離放射線の波長は、光学的物質により吸収される波長であることが望ましい。通常、吸収は、サンプルから放出される入射光の一部を観察することにより、間接的に測定される。散乱アッセイは、サンプルまたは組織から放出または伝送された入射光の量に基づいて測定する点が、吸収アッセイと類似している。しかしながら、吸収アッセイの場合、信号は相互作用に反比例して増加するが、散乱アッセイの場合、信号は相互作用に比例して増加する。放出アッセイは、入射光ではなく、サンプルから放出される電磁気に基づいて測定する。上記のいずれの場合でも、測定は、特定のアッセイに応じて、幅広いスペクトルであってもよいし、周波数特異的であってもよい。通常は、放出アッセイは、発光の測定を含む。
【０２０６】
発光は、原子または分子の励起電子状態からの光の放出である。発光は、一般的に、白熱光以外の全ての種類の光の放出を指し、光ルミネセンス、化学ルミネセンス、及び電気化学ルミネセンスなどを含み得る。蛍光及びリン光を含む光ルミネセンスでは、励起電子状態は、電磁放射の吸収によって生じる。ルミネセンス（蛍光）アッセイは、蛍光発光またはそれに関連する蛍光発光プロセスの１以上の特性を検出及び解釈することを含む。検出及び解釈される特性には、強度、励起及び／または放出スペクトル、極性化、寿命、及びエネルギー移動などが含まれる。また、検出及び解釈される特性には、蛍光発光の時間非依存性（定常状態）特性、及び／または時間依存性（時間分解）特性も含まれる。代表的な蛍光アッセイとしては、蛍光強度法（ＦＬＩＮＴ）、蛍光分極化法（ＦＰ）、蛍光共鳴エネルギー転移法（ＦＲＥＴ）、蛍光寿命法（ＦＬＴ）、全反射照明蛍光法（ＴＩＲＦ）、蛍光相関分光法（ＦＣＳ）、光褪色後蛍光回復法（ＦＲＡＰ）、及び生物発光共鳴エネルギー転移法（ＢＲＥＴ）などが挙げられる。例えば、蛍光性の光学的物質を本発明で使用する場合、非電離放射線の波長は、蛍光性の光学的物質を励起する波長であることが望ましい。この励起により、分子は、吸収したエネルギーの一部を異なる波長で放出することができる。この放出は、上述した蛍光技術を用いて検出することができる。当業者であれば、投与された光学的物質の種類、検出すべき組織、及び外科処置の種類に少なくとも部分的に基づいて、最も適切な検出技術を容易に決定することができるであろう。例えば、いくつかの実施態様では、外科医は、手術野中の光学的物質を視認できるであろう。他の実施態様では、腹腔鏡装置を使用して検出可能な光学的物質が使用される。
【０２０７】
適切な波長の電磁放射線を照射すると、光学的物質は、視覚的にまたは他の光学的手段によって検出される。例えば、光学的検出は、肉眼、１以上の画像化または検出装置（例えば、カメラ、電荷結合素子（ＣＣＤ）、光電子増倍管（ＰＭＴ）、アバランシェダイオード、光ダイオード）、または、電子的処理ステップ（例えば、ソフトウエアまたは他の手段を使用して、信号を検出、増強、処理、分析、定量化、または他の方法で処理する）を含む検出技術を使用して実現することができる。
【０２０８】
本明細書で説明した本開示をより完全に理解するために、以下の実施例を説明する。以下の例は、説明目的だけのものであり、本開示を何ら制限するものではないことを理解されたい。
【０２０９】
実施例
【０２１０】
ピラジン色素を利用する方法の非限定的な例は、以下の化合物及びその薬学的に許容される塩を含む。
【０２１１】
実施例１：目の血管系の評価
【０２１２】
目の血管系を評価するための例示的な手順は以下の通りである。蛍光ピラジン分子を含有する組成物を対象の血流に投与した。血流中において、蛍光色素分子が非電離放射線で照射されると同時に、放射線によって組成物は蛍光発光した。任意の吸収された被験分子（challenge molecule）の蛍光は、血流内で検出可能であった。目の血管系は、検出された蛍光に基づいて評価可能であった。
【０２１３】
さらに別の例示的な手順が上記のように実行され得るが、加えて、蛍光ピラジン分子の発光は時間の経過と共に目で検出され得る。対象の目における疾患または損傷の位置は、各蛍光性被験分子の蛍光検出と、投与との間の時間に基づいて決定され得る。
【０２１４】
実施例２：３，６−ジアミノ−Ｎ２，Ｎ５−ビス（セリン）−ピラジン−２，５−ジカルボキサミド
【０２１５】
【化３】
0006560766.tif 000016
【０２１６】
この蛍光分子は、それぞれ４４５ｎｍ及び５６０ｎｍで最大の光吸収及び発光を示し、かつ、対象の血管系を評価及び／または可視化するために使用され得る蛍光ピラジン分子の例である。
【０２１７】
ステップ１．  ３，６−ジアミノ−Ｎ２，Ｎ５−ビス（Ｏ−ベンジル−（Ｄ）−セリンメチルエステル）−ピラジン−２，５−ジカルボキサミドの合成
【０２１８】
【化４】
0006560766.tif 000017
【０２１９】
３，６−ジアミノピラジン−２，５−ジカルボン酸ナトリウム（３００ｍｇ、１．２４ｍｍｏｌ）、（Ｄ）−Ｓｅｒ（ＯＢｎ）−ＯＭｅ−ＨＣｌ塩（６４７ｍｇ、２．６４ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ−Ｈ２Ｏ（５７０ｍｇ、３．７２ｍｍｏｌ）及びＥＤＣ−ＨＣｌ（６９０ｍｇ、３．６０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２５ｍｌ）中における混合物をＴＥＡ（２ｍＬ）で処理した。得られた混合物を１６時間撹拌し、濃縮した。混合物を濃縮乾固し、残渣を酢酸エチル及び水で分配した。層を分離し、酢酸エチル溶液を飽和ＮａＨＣＯ３及びブラインで洗浄した。溶液を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して、３７０ｍｇ（収率５１％）のビスアミドを明るい黄色の粉末として得た。：１ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ８．４７（ｄ、Ｊ＝８．７４Ｈｚ、２Ｈ）、７．２５−７．３７（ｍ、１０Ｈ）、５．９８（ｂｓ、４Ｈ）、４．８５（ｄｔ、Ｊ＝８．７，３．３Ｈｚ、２Ｈ）、４．５６（ＡＢｑ、Ｊ＝１２．６、Ｈｚ、Ａｖ=１１．９Ｈｚ、４Ｈ）、３．９９（ｄのＡＢｑの１／２、Ｊ＝  ８．７、３．３、Ａｖ不明瞭、２Ｈ）、３．７６−３．８０（不明瞭なＡＢｑの１／２、２Ｈ）、３．７８（ｓ、６Ｈ）。１３ＣＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１７０．５（ｓ），１６５．１（ｓ），１４６．８（ｓ），１３８．７（ｓ）１２８．６（ｄ），１２８．１（ｄ）、１２７．８（ｄ）、１２６．９（ｓ）、７３．５（ｔ）、６９．８（ｔ）、５３．０（ｑ）、５２．９（ｑ）。ＬＣＭＳ（１０分間、０．１％ＴＦＡ中で５−９５％の勾配アセトニトリル）、単一ピーク保持時間=３０ｍｍカラムで４．９３分、（Ｍ＋Ｈ）＋＝５８１。
【０２２０】
ステップ２  ３，６−ジアミノ−Ｎ２、Ｎ５−ビス（Ｏ−ベンジル−（Ｄ）−セリン）−ピラジン−２，５−ジカルボキサミドの合成
【０２２１】
【化５】
0006560766.tif 000018
【０２２２】
ＴＨＦ（１０ｍＬ）中のステップ１による生成物（３７０ｍｇ、０．６４ｍｍｏｌ）を１．０Ｎ水酸化ナトリウム（２．５ｍＬ）で処理した。室温で３０分間撹拌した後、反応はＴＬＣにより完了したと判断した。１．０Ｎ  ＨＣｌの添加によりｐＨを約２に調整し、得られた溶液を酢酸エチルで抽出した（３回）。層を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮して、３５３ｍｇ（収率１００％）の二酸を橙色（オレンジ色）の泡状物として得た。：ＬＣＭＳ（１０分以上、０．１％ＴＦＡ中で５−９５％の勾配アセトニトリル）、３０ｍｍカラムでの保持時間＝４．４１分、（Ｍ＋Ｈ）＋＝５５３。
【０２２３】
ステップ３  ３，６−ジアミノ−Ｎ２、Ｎ５−ビス（Ｄ−セリン）−ピラジン−２，５−ジカルボキサミドの合成
【０２２４】
メタノール（２０ｍＬ）中のステップ２からの生成物（３５３ｍｇ、０．６４ｍｍｏｌ）に、５％パラジウム／Ｃ（３００ｍｇ）及びギ酸アンモニウム（６００ｍｇ）を添加した。 得られた反応物を還流下で２時間加熱した。反応物を室温まで冷却し、セライトのプラグを通して濾過し、濃縮した。残渣をメタノール−エーテルから再結晶して、１９１ｍｇ（収率８０％）の標題化合物を黄色の泡状物として得た。：１ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．４８（ｄ、Ｊ＝６．９Ｈｚ、２Ｈ）、３．６０（見かけ上のカルテット、Ｊ＝５．１Ｈｚ、２Ｈ）、３．６０（見かけ上のＡＢｑのダブレット；３．７１を中心とするダウンフィールドグループ、Ｊ＝９．９、５．１Ｈｚ、２Ｈ；アップフィールドグループ３．４８、Ｊ＝２０．９９、６．３Ｈｚ、２Ｈ）。１３ＣＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１７２．９（ｓ）、１６４．９（ｓ）、１４７．０（ｓ）、１２７．０（ｓ）、６２．９（ｄ）、５５．７（ｔ）。ＬＣＭＳ（１０分間、０．１％ＴＦＡ中で５−９５％の勾配アセトニトリル）、単一ピーク保持時間＝３０ｍｍカラムで１．４５分、（Ｍ＋Ｈ）＋＝３７３。ＵＶ／ｖｉｓ（ＰＢＳ中１００μＭ）λａｂｓ＝４３４ｎｍ。蛍光λｅｘ＝４４９ｎｍ、λｅｍ＝５５９ｎｍ。
【０２２５】
実施例３：３，６−ジアミノ−Ｎ２、Ｎ５−ビス（Ｌ−セリン）−ピラジン−２，５−ジカルボキサミド
【０２２６】
【化６】
0006560766.tif 000019
【０２２７】
実施例２の手順を用い、ステップ１において（Ｄ）−Ｓｅｒ（ＯＢｎ）−ＯＭｅ−ＨＣｌ塩に代えて（Ｌ）−Ｓｅｒ（ＯＢｎ）−ＯＭｅ−ＨＣｌ塩を用いて表題化合物を調製した。ＲＰ−ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ３７３．２（Ｍ＋Ｈ）＋。Ｃ１２Ｈ１６Ｎ６Ｏ８の元素分析：Ｃ、３８．７１；Ｈ、４．３３；Ｎ、２２．５７。実測値：Ｃ、３８．４４；Ｈ、４．５１；Ｎ、２２．３３。
【０２２８】
この蛍光分子は、それぞれ４４５ｎｍ及び５６０ｎｍで最大の光吸収及び発光を示した。
【０２２９】
実施例４：３，６−ジアミノ−Ｎ２，Ｎ２，Ｎ５，Ｎ５−テトラキス（２−メトキシメチル）ピラジン−２，５−ジカルボキサミド
【０２３０】
【化７】
0006560766.tif 000020
【０２３１】
３，６−ジアミノピラジン−２，５−ジカルボン酸（２００ｍｇ、１．０１ｍｍｏｌ）、ビス−２−（メトキシエチル）アミン（３７２ｍＬ、３３５．５ｍｇ、２．５２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ−Ｈ２Ｏ（４５９ｍｇ、３．００ｍｍｏｌ）及びＥＤＣ−ＨＣｌ（５７５ｍｇ、３．００ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２０ｍＬ）中における混合物を、共に１時間室温で撹拌した。混合物を濃縮乾固し、残渣を酢酸エチル及び水で分配した。層を分離し、酢酸エチル溶液を飽和ＮａＨＣＯ３及びブラインで洗浄した。溶液を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮した。ラジアルフラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、１０／１ＣＨＣｌ３−メタノール）による精製により、２２８．７ｍｇ（収率５３％）の実施例４をオレンジ色の泡状物として得た。：１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）、δ４．９２（ｓ、４Ｈ）、３．７６（見かけ上のｔ、Ｊ＝５．４Ｈｚ、４Ｈ）、３．７０（見かけ上のｔ、Ｊ＝５．６Ｈｚ、４Ｈ）、３．６４（見かけ上のｔ、Ｊ＝５．４Ｈｚ、４Ｈ）、３．５６５（見かけ上のｔ、Ｊ＝５．４Ｈｚ）、３．６７（ｓ、６Ｈ）、３．２８（ｓ、６Ｈ）。１３ＣＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）１６７．６（ｓ）、１４５．６（ｓ）、１３１．０（ｓ）、７２．０（ｔ）、７０．８（ｔ）、５９．２（ｑ）、４９．７（ｔ）、４７．１（ｔ）。ＬＣＭＳ（１０分間、０．１％ＴＦＡ中で５−９５％の勾配アセトニトリル）、単一ピーク保持時間= ３０ｍｍカラムで３．１４分、（Ｍ＋Ｈ）＋＝４２９。ＵＶ／ｖｉｓ（ＰＢＳ中１００μＭ）λａｂｓ＝３９４ｎｍ。蛍光（１００μｍ）λｅｘ＝３９４ｎｍλｅｍ＝５５０ｎｍ。
【０２３２】
実施例５：３，６−ジアミノ−Ｎ２、Ｎ５−ビス（２，３−ジヒドロキシプロピル）ピラジン−２，５−ジカルボキサミド
【０２３３】
【化８】
0006560766.tif 000021
【０２３４】
ステップ１．  ３，６−ジアミノ−Ｎ２、Ｎ５−ビス（（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メチル）ピラジン−２，５−ジカルボキサミドの合成
【０２３５】
【化９】
0006560766.tif 000022
【０２３６】
３，６−ジアミノピラジン−２，５−ジカルボン酸（３５０ｍｇ、１．７７ｍｍｏｌ）、ラセミ（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メタンアミン（９３３μＬ、９４４ｍｇ、７．２０ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ−Ｈ２Ｏ（８１２ｍｇ、５．３ｍｍｏｌ）及びＥＤＣ−ＨＣｌ（１．０２ｇ、５．３２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２０ｍＬ）中における混合物を、共に１６時間室温で撹拌した。混合物を濃縮乾固し、残渣を酢酸エチル及び水で分配した。層を分離し、酢酸エチル溶液を飽和ＮａＨＣＯ３及びブラインで洗浄した。溶液を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して、６６５ｍｇ（収率８８％）のビス−アミドジアステレオマ対を黄色の固体として得た。：１ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ８．３８（ｔ、Ｊ＝５．８Ｈｚ、２Ｈ）、６．５５（ｓ、４Ｈ）、４．２１（クインテット、Ｊ＝５．８Ｈｚ、２Ｈ）、３．９８（ｄｄ、Ｊ＝８．４Ｈｚ、６．３Ｈｚ、２Ｈ）、３．６５（ｄｄ、Ｊ＝８．４Ｈｚ、Ｊ＝５．８Ｈｚ、２Ｈ）、３．３９（見かけ上のカルテット−ジアステレオ異性混合物、Ｊ＝５．９Ｈｚ、４Ｈ）、１．３５（ｓ、６Ｈ）、１．２６（ｓ、６Ｈ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１６５．７（ｓ）、１４６．８（ｓ）、１２６．８（ｓ）、１０９．２（ｓ）、７４．８（ｄ）、６７．２（ｔ）、４２．２、４１．１（ｔ−ジアステレオ異性体対）、２７．６（ｑ）、２６．１（ｑ）。
【０２３７】
ステップ２．  ３，６−ジアミノ−Ｎ２，Ｎ５−ビス（２，３−ジヒドロキシプロピル）ピラジン−２，５−ジカルボキサミドの合成
【０２３８】
ステップ１による生成物をＴＨＦ（１００ｍＬ）に溶解し、１．０Ｎ  ＨＣｌ（２ｍＬ）で処理した。加水分解が完了した後、混合物をＫ２ＣＯ３（１ｇ）で処理し、１時間撹拌し、メタノールを用いてＣ１８シリカのプラグを通して濾過した。濾過液を濃縮乾固し、残渣をメタノール（５０ｍＬ）で粉砕した。固体を濾過し、廃棄し、残渣をエーテル（５０ｍＬ）で処理した。沈殿物を濾過によって収集し、高真空下で乾燥させた。この物質を放射状フラッシュクロマトグラフィーにより精製して、橙色の固体として２２１ｍｇ（収率３６％）の実施例５を得た。：１ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．００（ｂｍ、６Ｈ）、５．３９（ｂｓ、２Ｈ）、４．８８（ｂｓ、２Ｈ）、３．６３−３．７１（複合体ｍ、２Ｈ）、３．４０（ｄｄ、Ｊ＝１１．１、５．１０Ｈｚ、２Ｈ）、３．２８（ｄｄ、Ｊ＝１１．１、６．６６Ｈｚ、２Ｈ）２．９２（ｄｄ、Ｊ＝１２．６、３．３Ｈｚ、２Ｈ）、２．６５（ｄｄ、Ｊ＝１２．６、８．４Ｈｚ、２Ｈ）。ＬＣＭＳ（１０分間、０．１％ＴＦＡ中で５−９５％の勾配アセトニトリル）、単一ピーク保持時間＝３０ｍｍカラムで４．１３分、（Ｍ＋Ｈ）＋＝３４５。ＵＶ／ｖｉｓ（Ｈ２Ｏ中１００ｍＭ）λａｂｓ＝４３２ｎｍ。蛍光λｅｘ＝４３２ｎｍ、λｅｍ＝５５８ｎｍ。
【０２３９】
実施例６：３，６−ビス（ビス（２−メトキシエチル）アミノ）−Ｎ２，Ｎ２，Ｎ５，Ｎ５−テトラキス（２−メトキシエチル）ピラジン−２，５−ジカルボキサミドビスＴＦＡ塩
【０２４０】
【化１０】
0006560766.tif 000023
【０２４１】
ステップ１．  ３，６−ジブロモピラジン−２，５−ジカルボン酸の合成
【０２４２】
【化１１】
0006560766.tif 000024
【０２４３】
３，６−ジアミノピラジン−２，５−ジカルボン酸（４９９ｍｇ、２．５２ｍｍｏｌ）を４８％臭化水素酸（１０ｍＬ）に溶解し、氷塩溶液中で０℃に冷却した。この攪拌混合物に、温度が５℃未満に保たれるように、亜硝酸ナトリウム（６９５ｍｇ、１０．１ｍｍｏｌ）の水（１０ｍＬ）溶液を滴下した。得られた混合物を５〜１５℃で３時間撹拌し、その間に赤色の混合物は黄色の溶液となった。黄色の溶液を水（１００ｍＬ）中の臭化第二銅（２．２３ｇ、１０．１ｍｍｏｌ）の溶液に注ぎ、得られた混合物を室温で撹拌した。さらに３時間後、水性混合物を酢酸エチルで抽出した（３回）。合わせた抽出物を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、濃縮して、４４０ｍｇ（収率５４％）の３，６−ジブロモピラジン−２，５−ジカルボン酸を淡黄色の固体として得た。：１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１６４．３（ｓ）、１４８．８（ｓ）、１３４．９（ｓ）。ＨＰＬＣ（１０分間、０．１％ＴＦＡ中で５−９５％の勾配アセトニトリル）、単一ピーク保持時間＝２５０ｍｍカラムで２．９５分。
【０２４４】
ステップ２．  ３−（ビス（２−メトキシエチル）アミノ）−６−ブロモ−Ｎ２，Ｎ２，Ｎ５，Ｎ５−テトラキス（２−メトキシエチル）ピラジン−２，５−ジカルボキサミドの合成
【０２４５】
【化１２】
0006560766.tif 000025
【０２４６】
ステップ１による生成物（４４０ｍｇ、１．３６ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（２５ｍＬ）に溶解し、ＨＯＢｔ−Ｈ２Ｏ（６２４ｍｇ、４．０８ｍｍｏｌ）及びＥＤＣ−ＨＣｌ（７８６ｍｇ，４．１０ｍｍｏｌ）で処理し、５つの室温で３０分間撹拌した。ビス（２−メトキシエチル）アミン（６２０ｍＬ、５５９ｍｇ、４．２０ｍｍｏｌ）を加え、得られた混合物を室温で１６時間撹拌し、濃縮した。残渣を水及び酢酸エチルで分配した。酢酸エチル層を分離し、水層を再び酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を０．５Ｎ  ＨＣｌ、飽和重炭酸ナトリウム、及びブラインで洗浄した。有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、濃縮して、３−（ビス（２−メトキシエチル）アミノ）−６−ブロモ−Ｎ２，Ｎ２，Ｎ５，Ｎ５−テトラキス（２−メトキシエチル）２，５−ジカルボキサミド（収率２６％）を褐色の油状物として得た。：ＬＣＭＳ（１０分間、０．１％ＴＦＡ中で５−９５％の勾配アセトニトリル）、単一ピーク保持時間＝３０ｍｍカラムで３．８５分、（Ｍ＋Ｈ）+＝６０８。
【０２４７】
ステップ３．  ３，６−ビス（ビス（２−メトキシエチル）アミノ）−Ｎ２、Ｎ２、Ｎ５、Ｎ５−テトラキス（２−メトキシエチル）ピラジン−２，５−ジカルボキサミドビスＴＦＡ塩の合成
【０２４８】
【化１３】
0006560766.tif 000026
【０２４９】
ステップ２による生成物（１１６ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ）に、ビス（２−メトキシエチル）アミン（３．０ｍＬ、２．７１ｇ、２０．３ｍｍｏｌ）及び「スパチュラチップ」１杯のＰｄ（ＰＰｈ３）４を加えた。得られた混合物を１４０℃で２時間加熱した。反応物を冷却し、濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、１０／１  ＣＨＣｌ３−メタノール）で精製した。得られた物質を中圧逆相クロマトグラフィー（Ｃ１８、０．１％ＴＦＡ中で１０−５０％の手動でのグラジエントアセトニトリル）で再度精製して、橙色−茶色のフィルムとして１２ｍｇ（収率１０％）の実施例６を得た。：ＬＣＭＳ（１０分間、０．１％ＴＦＡ中で１５−９５％の勾配アセトニトリル）、単一ピーク保持時間＝２５０ｍｍカラムで３．８５分、（Ｍ＋Ｈ）＋＝６６１．ＵＶ／ｖｉｓ（ＰＢＳ中１００μＭ）λａｂｓ＝４３４ｎｍ。蛍光λｅｘ＝４４９ｎｍ、λｅｍ＝５５９ｎｍ。
【０２５０】
実施例７：３，６−ジアミノ−Ｎ２，Ｎ５−ビス（２−アミノエチル）ピラジン−２，５−ジカルボキサミドビスＴＦＡ塩
【０２５１】
【化１４】
0006560766.tif 000027
【０２５２】
ステップ１．  ３，６−ジアミノ−Ｎ２，Ｎ５−ビス［２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノエチル］ピラジン−２，５−ジカルボキサミドの合成
【０２５３】
【化１５】
0006560766.tif 000028
【０２５４】
３，６−ジアミノピラジン−２，５−ジカルボン酸ナトリウム（５００ｍｇ、２．０７ｍｍｏｌ）、ｔｅｒｔ−ブチル２−アミノエチルカルバメート（６７３ｍｇ、４．２０ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ−Ｈ２Ｏ（８３６ｍｇ、５．４６ｍｍｏｌ）及びＨＣｌ（１．０５ｇ、５．４８ｍｍｏｌ）の混合物をＥＤＣ−ＤＭＦ（２５ｍＬ）中で１６時間撹拌し、濃縮した。実施例２のように後処理を行うと、７７０ｍｇ（収率７６％）のビスアミドが橙色の泡状物として得られた。：１ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）主要配座異性体、δ８．４４（ｔ、Ｊ＝５．７Ｈｚ、２Ｈ）、６．９０（ｔ、Ｊ＝５．７Ｈｚ、２Ｈ）、６．４８（ｂｓ、４Ｈ）、２．９３−３．１６（複合体ｍ、８Ｈ）、１．３７（ｓ、９Ｈ）、１．３６（ｓ、９Ｈ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）、配座異性体δ１６５．１（ｓ）、１５５．５（ｂｓ）、１５５．４（ｂｓ）、１４６．０（ｓ）、１２６．２（ｓ）、７７．7（ｂｓ）、７７．５（ｂｓ）、４５．２（ｂｔ）、４４．５（ｂｔ）、２８．２（ｑ）。
【０２５５】
ステップ２．  ３，６−ジアミノ−Ｎ２，Ｎ５−ビス（２−アミノエチル）ピラジン−２，５−ジカルボキサミドビスＴＦＡ塩の合成
【０２５６】
塩化メチレン（１００ｍＬ）中のステップ１による生成物（７７０ｍｇ、１．６０ｍｍｏｌ）にＴＦＡ（２５ｍＬ）を加え、反応物を室温で２時間撹拌した。混合物を濃縮し、残渣をメタノール（１５ｍＬ）に溶解した。エーテル（２００ｍＬ）を加え、橙色の固体沈殿物を濾過により単離し、高真空下で乾燥させ、橙色の粉末として６２７ｍｇ（収率７７％）の実施例７を得た。：１ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．７０（ｔ、Ｊ＝６Ｈｚ、２Ｈ）、７．８６（ｂｓ、６Ｈ）、６．５０（ｂｓ、４Ｈ）、３．４６−３．５８（ｍ、４Ｈ）、３．２６−３．４０（ｍ、４Ｈ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１６６．４（ｓ）、１４６．８（ｓ）、１２７．０（ｓ）、３９．４（ｔ）、３７．４（ｔ）。ＬＣＭＳ（１０分間、０．１％ＴＦＡ中で５−９５％の勾配アセトニトリル）、単一ピーク保持時間＝３０ｍｍカラムで３．６２分、（Ｍ＋Ｈ）＋＝２８３。ＵＶ／ｖｉｓ（ＰＢＳ中１００μＭ）λａｂｓ＝４３５ｎｍ。蛍光（１００ｎＭ）λｅｘ＝４４９ｎｍ、λｅｍ＝５６２ｎｍ。
【０２５７】
実施例８：３，６−ジアミノ−Ｎ２、Ｎ５−ビス（Ｄ−アスパラギン酸）−ピラジン−２，５−ジカルボキサミド
【０２５８】
【化１６】
0006560766.tif 000029
【０２５９】
ステップ１．  ３，６−ジアミノ−Ｎ２，Ｎ５−ビス（ベンジルＤ−Ｏ−ベンジル−アスパルテート）−ピラジン−２，５−ジカルボキサミドの合成
【０２６０】
【化１７】
0006560766.tif 000030
【０２６１】
３，６−ジアミノピラジン−２，５−ジカルボン酸ナトリウム（６００ｍｇ、２．４８ｍｍｏｌ）、Ａｓｐ（ＯＢｎ）−ＯＭｅ−ｐ−ＴｏｓＨ塩（２．４３ｇ、５．００ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ−Ｈ２Ｏ（９１９ｍｇ、６．００ｍｍｏｌ）、及びＥＤＣ−ＨＣｌ（１．１４ｇ、５．９５ｍｍｏｌ）の混合物をＤＭＦ（５０ｍＬ）中で、ＴＥＡ（４ｍＬ）で処理した。得られた混合物を室温で一晩攪拌した。反応混合物を濃縮し、残渣を水及び酢酸エチルで分配した。酢酸エチル層を分離し、飽和重炭酸ナトリウム、水及びブラインで連続的に洗浄した。酢酸エチル溶液を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、５０／１  ＣＨＣｌ３−メタノール〜１０／１  ＣＨＣｌ３−メタノール）により精製して、ビスアミド１．１５ｇ（収率５８％）を黄色の泡状物として得た。：１ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ８．６１（ｄ、Ｊ＝８．４Ｈｚ、２Ｈ）、７．２９−７．３９（ｍ、２０Ｈ）、５．８５（ｂｓ、４Ｈ）、５．２２（ＡＢｑ、Ｊ＝１０．０Ｈｚ、Ａｖ＝１７．３Ｈｚ、４Ｈ）、５．１０（ＡＢｑ、Ｊ＝１２．２Ｈｚ、Ａｖ＝３４．３Ｈｚ、４Ｈ）、５．０６−５．０９（ｏｂｓ  ｍ、２Ｈ）、３．１１（ｄのＡＢｑ、Ｊ＝１７．０、５５．１４Ｈｚ、Ａｖ＝７７．９Ｈｚ、４Ｈ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１７０．７（ｓ）、１７０．７（ｓ）、１６５．４（ｓ）、１４７．０（ｓ）、１３５．７（ｓ）、１３５．６（ｓ）、１２９．０（ｄ）、１２８．９（ｄ）、１２８．８（ｄ）、１２８．７５（ｄ）、１２８．７（ｄ）、１２６．９（ｓ）、６８．０（ｔ）、６７．３（ｔ）、４９．１（ｄ）、３７．０（ｔ）。ＬＣＭＳ（１０分間、０．１％ＴＦＡ中で５０−９５％の、１０の勾配アセトニトリル）、単一ピーク保持時間＝２５０ｍｍカラムで５．９７分、（Ｍ＋Ｈ）＋＝７８９。
【０２６２】
ステップ２  ３，６−ジアミノ−Ｎ２，Ｎ５−ビス（Ｄ−アスパラギン酸）−ピラジン−２，５−ジカルボキサミドの合成
【０２６３】
ステップ１による生成物（５１０ｍｇ、０．６５ｍｍｏｌ）にＴＨＦ（２０ｍＬ）及び水（１０ｍＬ）を添加した。この撹拌混合物に、１０％パラジウム／Ｃ（５００ｍｇ）及びギ酸アンモニウム（１ｇ）を添加した。 得られた混合物を６０℃で２時間加熱し、室温まで冷却した。混合物をセライトで濾過し、濃縮した。得られた物質を中圧逆相クロマトグラフィー（Ｃ１８、０．１８％ＴＦＡ中で１０−７０％の手動での勾配アセトニトリル）により再度精製して、１３７．８ｍｇ（収率５４％）の実施例８を橙色の固体として得た。：１ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．６２（ｄ、Ｊ＝８．４Ｈｚ、２Ｈ）、６．６７（ｂｓ、４Ｈ）、４．７２５（ｄｔ、Ｊ＝８．４、５．４Ｈｚ、２Ｈ）、２５  ２．７４−２．８８（複合体ｍ、４Ｈ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１７２．６（ｓ）、１６５．２（ｓ）、１４７．０（ｓ）、１２６．６（ｓ）、６０．８（ｔ）、４９．１（ｄ）。ＬＣＭＳ（１０分以上、０．１％ＴＦＡ中で５−９５％の勾配アセトニトリル）、単一ピーク保持時間＝２５０ｍｍカラムで４．０１分、（Ｍ＋Ｈ）＋＝４２９。ＵＶ／ｖｉｓ（ＰＢＳ中で１００μＭ）λａｂ＝４３３ｎｍ。蛍光（１００ｎＭ）λｅｘ＝４４９ｎｍ、λｅｍ＝５５８ｎｍ。
【０２６４】
実施例９：３，６−ジアミノ−Ｎ２，Ｎ５−ビス（１４−オキソ−２，５，８，１１−テトラオキサ−１５−アザヘプタデカン−１７−イル）ピラジン−２，５−ジカルボキサミド
【０２６５】
【化１８】
0006560766.tif 000031
【０２６６】
ＤＭＦ５０（５ｍＬ）中の実施例７（７７．４ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＥＡ（１５１ｍｇ，１．４９ｍｍｏｌ）及び２，５−ジオキソピロリジン−１−イル２，５，８，１１−テトラオキサテトラデカン（１１３ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）を加え、反応物を室温で１６時間撹拌した。反応物を濃縮し、残渣を中圧逆相クロマトグラフィー（ＬｉＣｈｒｏｐｒｅｐ（登録商標）ＲＰ−１８  Ｌｏｂａｒ（Ｂ）２５ｘ３１０ｍｍ−ＥＭＤ  ｃｈｅｍｉｃａｌｓ  ４０−６３μｍ、〜７０ｇ、９０／１０〜８０／２０  ０．１％ＴＦＡ−ＡＣＮ）により精製して、３７．４ｍｇ（収率３５％）の実施例９を橙色のフィルムとして得た。：１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．４７（ｔ、Ｊ＝５．７Ｈｚ、２Ｈ）、７．９６（ｔ、Ｊ＝５．４Ｈｚ、２Ｈ）、３．２０−３．６０（複合体ｍ、３６Ｈ）、３．４７（ｓ、３Ｈ）、６０  ３．４６（ｓ、３Ｈ）、２．３０（ｔ、Ｊ＝６．３Ｈｚ、４Ｈ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１７０．２（ｓ）、１６５．１（ｓ）、１４６．０（ｓ）、１２６．２（ｓ）、７１．２（ｔ）、６９．７（ｔ）、６９．６（ｔ）、６９．５（ｔ）、６９．４（ｔ）、６６．７（ｔ）、５８．０（ｑ）、３８．２（ｔ）、３６．２（ｔ）。ＬＣＭＳ（１０分間、０．１％ＴＦＡ中で５−９５％の勾配アセトニトリル）、単一ピーク保持時間＝２５０ｍｍカラムで４．０１分、（Ｍ＋Ｈ）＋＝７１９、（Ｍ＋Ｎａ）＋＝７４１。ＵＶ／ｖｉｓ（ＰＢＳ中で１００μＭ）。λａｂｓ＝４３７ｎｍ。蛍光（１００ｎＭ）λｅｘ＝４３７ｎｍ、λｅｍ＝５５９ｎｍ。
【０２６７】
実施例１０：３，６−ジアミノ−Ｎ２，Ｎ５−ビス（２６−オキソ−２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３−オクタオキサ−２７−アザノナコサン−２９−イル）ピラジン−２，５−ジカルボキサミド
【０２６８】
【化１９】
0006560766.tif 000032
【０２６９】
ＤＭＦ（５ｍＬ）中の実施例７（５０．３ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＥＡ（１０９ｍｇ、１．０８ｍｍｏｌ）及び２，５−ジオキソピロリジン−１−イル２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３−オクタオキサヘキサコサン−２６−オエート（１２８ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）を加え、反応物を室温で１６時間撹拌した。反応物を濃縮し、残渣を中圧逆相クロマトグラフィー（ＬｉＣｈｒｏｐｒｅｐ（登録商標）ＲＰ−１８  Ｌｏｂａｒ（Ｂ）２５×３１０ｍｍ−ＥＭＤ  ｃｈｅｍｉｃａｌｓ  ４０−６３μｍ、〜７０ｇ、９０／１０〜８０／２０  ０．１％ＴＦＡ−ＡＣＮ）により精製して、８７．９ｍｇ（収率８２％）の実施例１０を橙色のフィルムとして得た。：１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．４６（ｔ、Ｊ＝５．７Ｈｚ、２Ｈ）、７．９６（ｔ、Ｊ＝５．４Ｈｚ、２Ｈ）、３．１６−３．７３（複合体ｍ、７４Ｈ）、２．２８−２．３２（ｍ、２Ｈ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）多重立体配座、δ１７０．１（ｓ）、１６９．９（ｓ）１６９．８（ｓ）、１６５．１（ｓ）、１４６．０（ｓ）、１２６．２（ｓ）、７１．２（ｔ）、６９．７（ｔ）、６９．６（ｔ）、６９．５（ｔ）、６６．７（ｔ）、５８．０（ｑ）、３８．２（ｔ）、３６．２（ｔ）。ＬＣＭＳ（１０分間、０．１％ＴＦＡ中で１５−９５％の勾配アセトニトリル）、単一ピーク保持時間＝２５０ｍｍカラムで５．９０分、（Ｍ＋Ｈ）＋＝１０７１、（Ｍ＋２Ｈ）２＋＝５３６。ＵＶ／ｖｉｓ（ＰＢＳ中で１００μＭ）λａｂｓ＝４３８ｎｍ。蛍光（１００ｎＭ）λｅｘ＝４３８ｎｍ、λｅｍ＝５６０ｎｍ。
【０２７０】
実施例１１：３，６−ジアミノ−Ｎ２，Ｎ５−ビス（３８−オキソ−２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５−ドデカオキソ−３９−アザヘンテトカルスルン４１−ｙ）ピラジン−２，５−ジカルボキサミド
【０２７１】
【化２０】
0006560766.tif 000033
【０２７２】
ＤＭＦ（５ｍＬ）中の実施例７（５３．１ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＥＡ（１１４ｍｇ、１．１３ｍｍｏｌ）及び２，５−ジオキソピロリジン−１−イル２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５−ドデカ−オキサオクタトリアコンタン−３８−オアート（１４４ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２．０ｍＬ）溶液に加え、得られた混合物をその後１６時間撹拌した。反応物を濃縮し、残渣を中圧逆相クロマトグラフィー（ＬｉＣｈｒｏｐｒｅｐ（登録商標）ＲＰ−１８  Ｌｏｂａｒ（Ｂ）２５×３１０ｍｍ−ＥＭＤ  ｃｈｅｍｉｃａｌｓ  ４０−６３μｍｍ、〜７０ｇ、９０／１０〜８０／２０  ０．１％ＴＦＡ−ＡＣＮ）により精製して、８７．５ｍｇ（収率６１％）の実施例１１を橙色のフィルムとして得た。：１ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８.４８（ｔ、Ｊ＝５．７Ｈｚ、２Ｈ）、７．９６（ｔ、Ｊ＝５．４Ｈｚ、２Ｈ）、７．８０−７．８６（ｍ、２Ｈ）、５．９４（ｂｍ、２Ｈ）、３．３０−３．６０（複合体ｍ、１０６Ｈ）、２．２６−２．３３（ｍ、４Ｈ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１７０．２（ｓ）、１６５．１（ｓ）、１４６．０（ｓ）、１２６．２（ｓ）、７１．２（ｔ）、６９．７（ｔ）、６９．６（ｔ）、６９．５（ｔ）、６６．７（ｔ）、５８．０（ｑ）、３８．２（ｔ）、３６．２（ｔ）である。ＬＣＭＳ（１０分間、０．１％ＴＦＡ中で１５−９５％の勾配アセトニトリル）、単一ピーク保持時間＝２５０ｍｍカラムで５．９０分、（Ｍ＋２Ｈ）２＋＝７１２。ＵＶ／ｖｉｓ（ＰＢＳ中で１００μＭ）λａｂ＝４４９ｎｍ。蛍光（１００ｎＭ）λｅｘ＝４４９ｎｍ、λｅｍ＝５５９ｎｍ。
【０２７３】
実施例１２：３，６−ジアミノ−Ｎ２，Ｎ５−ビス（２−（ＰＥＧ−５０００）アミノエチル）ピラジン−２，５−ジカルボキサミド
【０２７４】
【化２１】
0006560766.tif 000034
【０２７５】
ＤＭＦ（３０ｍＬ）中の実施例７（２５ｍｇ、０．０４９ｍｍｏｌ）の溶液をＴＥＡ（１ｍＬ）及びｍ−ＰＥＧ５０００−ＮＨＳ（１ｇ、０．２ｍｍｏｌ）で処理し、得られた混合物を室温で４８時間撹拌した。混合物を濃縮し、残渣をゲル濾過クロマトグラフィー（Ｇ−２５樹脂、水）により部分的に精製した。生成物を濃縮し、中圧逆相クロマトグラフィー（Ｃ１８、０．１８％ＴＦＡ中で１０−７０％の手動勾配アセトニトリル）によりさらに精製して、１３７．８ｍｇ（収率５４％）の実施例１２を黄褐色固体として得た。：Ｍａｌｄｉ  ＭＳ  ｍ／ｚ＝１１３９３。
【０２７６】
実施例１３：（Ｒ）−２−（６−（ビス（２−メトキシエチル）アミノ）−５−シアノ−３−モルホリノピラジン−２−カルボキサミド）コハク酸
【０２７７】
【化２２】
0006560766.tif 000035
【０２７８】
ステップ１．  ２−アミノ−５−ブロモ−３，６−ジクロロピラジンの合成
【０２７９】
【化２３】
0006560766.tif 000036
【０２８０】
メタノール（５００ｍＬ）中の２−アミノ−６−クロロピラジン（２５ｇ、１９３．１ｍｍｏｌ）の溶液をＮＢＳ（３４．３ｇ、１９３．１ｍｍｏｌ）で１時間かけて少しずつ処理した。その後、得られた混合物を１６時間攪拌した。この時点でのＴＬＣ分析は少量の出発物質が残っていることを示していた。別の１．４ｇのＮＢＳを加え、反応物を５０℃まで、２時間加熱した。次いで、混合物を３８℃に冷却し、ＮＣＳ（２５．８ｇ、１９３．１ｍｍｏｌ）で処理した。その後、反応混合物を５０℃まで、１６時間加熱した。次いで、混合物を室温に冷却し、水（５００ｍＬ）で処理した。沈殿物を濾過によって集め、真空デシケータ中で乾燥させ、２−アミノ−５−ブロモ−３，６−ジクロロピラジン４５．４ｇ（収率９７％）を白色固体として得た。：１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１４９．９（ｓ）、１４５．６（ｓ）、１２９．６（ｓ）、１２１．５（ｓ）。ＬＣＭＳ（０．１％ＴＦＡ中で１５−９５％の勾配アセトニトリル）、単一ピーク保持時間＝３０ｍｍカラムで４．５１分、（Ｍ＋Ｈ）＋＝２４４、（Ｍ＋Ｈ＋ＡＣＮ）＋＝２８５。
【０２８１】
ステップ２．  ５−アミノ−３，６−ジクロロピラジン−２−カルボニトリルの合成
【０２８２】
【化２４】
0006560766.tif 000037
【０２８３】
ＣｕＣＮ（８．６２ｇ、９６．３ｍｍｏｌ）及びＮａＣＮ（４．７２ｇ、９６．３ｍｍｏｌ）の混合物を高真空下で９０℃まで加熱した。得られた混合物を３回のアルゴン／真空のサイクルに付し、アルゴンの最終正圧下に置いた。混合物を室温に冷却し、ＤＭＦ（１５０ｍＬ）を添加した。不均一混合物を１３０℃で２．５時間加熱した。得られたジシアノ銅（Ｉ）酸ナトリウムの均一混合物に、ＤＭＦ（１５０ｍＬ）に溶解したステップ１の生成物（１５．６ｇ、６４．２ｍｍｏｌ）の溶液を１時間かけて滴下した。温度を１５０℃まで徐々に上げ、得られた混合物をこの温度で１０時間攪拌した。次いで、反応物を室温まで冷却し、水（１Ｌ）に注いだ。得られた混合物を酢酸エチルで抽出し（３回）、合わせた抽出物を濾過して綿状の暗色固体を除去し、ブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、再度濾過し、濃縮した。フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、１０／１〜３／１ヘキサン−酢酸エチル）により精製して、６．７０ｇ（収率５５％）のニトリル生成物を黄褐色固体として得た。：１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１５３．９（ｓ）、１４９．１（ｓ）、１３１．７（ｓ）、１１５．４（ｓ）、１１１．０（ｓ）。ＧＣＭＳ注入口：温度＝２８０℃、１．０ｍＬ／分のヘリウム流速、温度プログラム：１００℃（２分保持）、３００℃まで勾配、＠１０℃／分（２分保持）、主要ピーク保持時間=６．５６分、ｍ／ｚ（ＥＩ）＝１８８，１９０。
【０２８４】
ステップ３．  ５−アミノ−３−（ビス（２−メトキシエチル）アミノ）−６−クロロピラジン−２−カルボニトリルの合成
【０２８５】
【化２５】
0006560766.tif 000038
【０２８６】
ＡＣＮ（２０ｍＬ）中のステップ２による生成物（１．００ｇ、５．２９ｍｍｏｌ）にビス（２−メトキシエチル）アミン（３．０ｍＬ、２．７１ｇ、２０．３ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を７０℃まで１６時間加熱した。反応物を冷却し、濃縮した。残渣を酢酸エチル及び水で分配した。有機層を分離し、水層を再び酢酸エチルで抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、濃縮した。フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２，１０／１〜１／１ヘキサン−酢酸エチル）により精製して、所望の付加物９５０ｍｇ（収率６３％）を黄色固体として得た。：１ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ７．４７（ｂｓ、２Ｈ）、３．７７（ｔ、Ｊ＝５．７Ｈｚ、４Ｈ）、３．５２（ｔ、Ｊ＝５．４Ｈｚ、４Ｈ）、３．２５（ｓ、６Ｈ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１５４．７（ｓ）、１５２．０（ｓ）、１２０．９（ｓ）、１１９．５（ｓ）、９５．８（ｓ）、７１．０（ｔ）、５９．１（ｑ）、５０．０（ｔ）。ＬＣＭＳ（１０分間、０．１％ＴＦＡ中で５０−９５％の勾配アセトニル）、単一ピーク保持時間＝２５０ｍｍカラムで４．９１分、（Ｍ＋Ｈ）＋＝２８６、（Ｍ＋Ｎａ）＋＝３０８、（Ｍ＋Ｎａ＋ＡＣＮ）＋＝３４９。
【０２８７】
ステップ４．  ３−（ビス（２−メトキシエチル）アミノ）−５−ブロモ−６−クロロピラジン−２−カルボニトリルの合成
【０２８８】
【化２６】
0006560766.tif 000039
【０２８９】
０℃（氷−塩浴）の４８％臭化水素酸（２０ｍＬ）中のステップ３による生成物（１．３９ｇ、４．８８ｍｍｏｌ）に、亜硝酸ナトリウム（６７３ｍｇ、９．７５ｍｍｏｌ）の水溶液（１０ｍＬ）を３０分かけて滴下した。得られた混合物を濃縮した。フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、５０／１ＣＨＣｌ３−メタノール）で精製して、１．００ｇ（収率５８％）の臭化物を橙褐色の固体として得た。：１ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ３．９９（ｔ、Ｊ＝５．４Ｈｚ、４Ｈ）、３．６４（ｔ、Ｊ＝５．４Ｈｚ、４Ｈ）、３．３５（ｓ、６Ｈ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１５２．８（ｓ）、１４０．８（Ｓ）、１３３．４（Ｓ）、１１７．２（Ｓ）、１０８．３（Ｓ）、７０．４（Ｔ）、５９．１（Ｔ）、５０．５（ｑ）。ＬＣＭＳ（１０分間、０．１％ＴＦＡ中で５０−９５％の勾配アセトニトリル）、単一ピーク保持時間＝２５０ｍｍカラムで４．５５分、（Ｍ＋Ｈ）＋＝３４９、３５１。混合物を０−５℃で１時間撹拌し、ＣｕＢｒ２（１．６４ｇ、７．３４ｍｍｏｌ）の撹拌水溶液（１０ｍＬ）に注いだ。得られた混合物４５をその後室温で１６時間撹拌した。混合物を酢酸エチルで抽出した（３回）。合わせた有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、濃縮した。フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、５０／１ＣＨＣｌ３−メタノール）による精製により、１．００ｇ（収率５８％）の臭化物を橙褐色の固体として得た。：１ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ３．９９（ｔ、Ｊ＝５．４Ｈｚ、４Ｈ）、３．６４（ｔ、Ｊ＝５．４Ｈｚ、４Ｈ）、３．３５（ｓ、６Ｈ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１５２．８（ｓ）、１４０．８（ｓ）、１３３．４（ｓ）、１１７．２（ｓ）、１０８．３（ｓ）、７０．４（ｔ）、５９．１（ｔ）、５０．５（ｑ）。ＬＣＭＳ（１０分間、０．１％ＴＦＡ中で５０−９５％の勾配アセトニトリル）、単一ピーク保持時間＝２５０ｍｍカラムで４．５５分、（Ｍ＋Ｈ）＋＝３４９、３５１。
【０２９０】
ステップ５．  ３−（ビス（２−メトキシエチル）アミノ）−６−クロロ−５−（フラン−２−イル）ピラジン−２−カルボニトリルの合成
【０２９１】
【化２７】
0006560766.tif 000040
【０２９２】
ステップ４からの生成物（１．０ｇ、２．８７ｍｍｏｌ）、２−フランボロン酸（６４３ｍｇ、５．７５ｍｍｏｌ）、Ｃｓ２ＣＯ３（３．３１ｇ、１０．２ｍｍｏｌ）、ＴＦＰ（３５ｍｏｌ％、２３６ｍｇ、１．０２ｍｍｏｌ）Ｐｄ２ｄｂａ３−ＣＨＣｌ３（５ｍｏｌ％、１０ｍｏｌ％パラジウム、１５０ｍｇ）の混合物を３回の真空／アルゴンサイクルにかけ、アルゴンの陽圧下に置いた。無水ジオキサン（５０ｍＬ）を加え、その後反応混合物を７５℃まで１６時間加熱した。反応混合物を室温まで冷却し、酢酸エチル（１００ｍＬ）で希釈し、ミディアム・フリット（medium frit）で濾過した。フラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、５０／１ＣＨＣｌ３−メタノール）による残渣の濃縮及び精製により、７５７ｍｇのフラン付加物（収率７８％）を黄褐色の粉末として得た。：ＬＣＭＳ（１０分間、０．１％ＴＦＡ中で５−９５％の勾配アセトニトリル）、単一ピーク保持時間＝２５０ｍｍカラムで６．４１分、（Ｍ＋Ｈ）＋＝３３７。
【０２９３】
ステップ６．  ６−（ビス（２−メトキシエチル）アミノ）−３−クロロ−５−シアノピラジン−２−カルボン酸の合成
【０２９４】
【化２８】
0006560766.tif 000041
【０２９５】
ＡＣＮ（１１ｍＬ）、ＣＣｌ４（７ｍＬ）及び水（１１ｍＬ）をよく攪拌した混合物に、過ヨウ素酸ナトリウム（１．０７ｇ、５．００ｍｍｏｌ）及びＲｕＯ２・Ｈ２Ｏ（１３．３ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）を順次加えた。得られた混合物を室温で３０分間激しく撹拌し、重炭酸ナトリウム（２．１０ｇ、２５．０ｍｍｏｌ）、続いて水（５ｍＬ）で処理した。さらに１５分間激しく撹拌した後、ＡＣＮ（１ｍＬ）に溶解したステップ５の生成物（２７６ｍｇ、０．８２ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。緑色の混合物を室温で５．５時間撹拌した。混合物を分液漏斗に移し、酢酸エチルで抽出した。水層をｐＨ約３．５に調整し、酢酸エチルで再度抽出した（２回）。合わせた抽出物を２０％亜硫酸水素ナトリウム及びブラインで洗浄し、乾燥させた（Ｎａ２ＳＯ４）。濾過し、濃縮して、１４０ｍｇ（収率５４％）のカルボン酸を淡黄色の固体として得た。：ＬＣＭＳ（１０分間、０．１％ＴＦＡ中で５−９５％の勾配アセトニトリル）、単一ピーク保持時間＝２５０ｍｍカラムで５．０５分、（Ｍ＋Ｈ）＋＝３１５。
【０２９６】
ステップ７．  （Ｒ）−ジベンジル２−（６−（ビス（２−メトキシ−エチル）アミノ）−３−クロロ−５−シアノピラジン−２−カルボキサミド）コハク酸の合成
【０２９７】
【化２９】
0006560766.tif 000042
【０２９８】
無水ＤＭＦ（２５ｍＬ）中のステップ１からの生成物（１４０ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ−ＨＣｌ（１２８ｍｇ、０．６７ｍｍｏｌ）、及びＨＯＢｔＨ２Ｏ（１０２ｍｇ、０．６７ｍｍｏｌ）の混合物を、３０分間室温で共に撹拌した。この撹拌混合物に、（Ｒ）−ジベンジル２−アミノコハク酸塩ＴｓＯＨ塩（２１３ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）、続いてＴＥＡ（１ｍＬ）を添加した。得られた混合物をその後１６時間撹拌した。反応混合物を濃縮し、酢酸エチル及び飽和重炭酸ナトリウム溶液で分配した。酢酸エチル層を分離し、飽和重炭酸ナトリウム及びブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、濃縮して５，２４０ｍｇのピラジンアミド（収率８８％）を橙色の泡状物として得た。：ＬＣＭＳ（１０分間、０．１％ＴＦＡ中で１５−９５％の勾配アセトニトリル）、単一ピーク保持時間＝２５０ｍｍカラムで８．７６分、（Ｍ＋Ｈ）＋＝６１０、（Ｍ＋Ｎａ）＋＝６３２。
【０２９９】
ステップ８．  （Ｒ）−ジベンジル２−（６−（ビス（２−メトキシエチル）アミノ）−５−シアノ−３−モルホリノピラジン−２−カルボキサミド）コハク酸塩の合成
【０３００】
【化３０】
0006560766.tif 000043
【０３０１】
ステップ７からの生成物（２４０ｍｇ、０．３９ｍｍｏｌ）にモルホリン（５ｍＬ）を添加した。反応混合物を７０℃まで２時間加熱した。混合物を冷却し、濃縮した。残渣を酢酸エチル及び水で分配した。酢酸エチル層を分離し、飽和重炭酸ナトリウム及びブラインで洗浄した。酢酸エチル層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、濃縮した。フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、３：１〜１：１ヘキサン−酢酸エチル）で精製して、１９９ｍｇ（収率７５％）のモルホリン付加物を橙色の泡状物として得た。：ＬＣＭＳ（１０分間、０．１％ＴＦＡ中で１５−９５％の勾配アセトニトリル）、単一ピーク保持時間＝２５０μＭカラムで８．７６分、（Ｍ＋Ｈ）＋＝６６１、（Ｍ＋Ｎａ）＋＝６８３。
【０３０２】
ステップ９．  （Ｒ）−２−（６−（ビス（２−メトキシエチル）アミノ）−５−シアノ−３−モルホリノピラジン−２−カルボキサミド）コハク酸の合成
【０３０３】
ＴＨＦ（１０ｍＬ）中のジベンジルエステル（１１５ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）に１．０Ｎ水酸化ナトリウム（４ｍＬ）を加えた。混合物を室温で１時間撹拌した。  １．０Ｎ  ＨＣｌでｐＨを約２に調整し、溶液を濃縮した。中圧逆相クロマトグラフィー（ＬｉＣｈｒｏｐｒｅｐ  ＲＰ−１８  Ｌｏｂａｒ（Ｂ）２５×３１０ｍｍ−ＥＭＤ  ｃｈｅｍｉｃａｌｓ  ４０−６３（μｍ、−７０ｇ、９０／１０〜５０／５００．１％ＴＦＡ−ＡＣＮ）による残渣の精製）により３２ｍｇ（収率２７％）の実施例１３を橙色の固体として得た。：ＬＣＭＳ（１０分間、０．１％ＴＦＡ中で１５−９５％の勾配アセトニトリル）、単一ピーク保持時間＝２５０ｍｍカラムで４．４７分、（Ｍ＋Ｈ）＝４８１。ＵＶ／ｖｉｓ（ＰＢＳ中で１００μＭ）λａｂｓ＝４３８ｎｍ。 蛍光（１００μＭ）λｅｘ＝４４９ｎｍ、λｅｍ＝５７０。
【０３０４】
実施例１４：３，６−ジアミノ−Ｎ２，Ｎ５−ビス（２−ヒドロキシ−β−セリン）−ピラジン−２，５−ジカルボキサミド
【０３０５】
【化３１】
0006560766.tif 000044
【０３０６】
ステップ１と等量の（Ｄ）−Ｓｅｒ（ＯＢｎ）−ＯＭｅ−ＨＣｌ塩を２−ＯＢｎ−Ｂ−セリン−ＯＭｅ−ＨＣｌ塩に代えて、実施例２の手順を実質的に用いることにより、標記化合物を製造してもよい。
【０３０７】
実施例１５：３，６−ジアミノピラジン−２，５−ジカルボン酸
【０３０８】
【化３２】
0006560766.tif 000045
【０３０９】
「Taylor et al., JACS、77：2243-2248（1955）」に記載されているように、水酸化カリウムの存在下で、５−アミノウラシルをフェリシアン化カリウムで処理することによって、カリウム２，４，６，８−テトラヒドロピリミド（４，５−ｇ）プテリジンを調製した。
【０３１０】
２つのテフロン（登録商標）反応容器の各々に、０．５ｇのジカリウム２，４，６，８−テトラヒドロキシピリミド［４，５ｇ］プテリジンと、約１０ｍＬの脱イオン水中の０．３〜０．４ｇの水酸化ナトリウムからなる溶液とを入れた。容器をマイクロウェーブ反応器に固定し、１７０℃で１時間反応させ、約６．９０ｋＰａ（１ｐｓｉｇ）の圧力を１時間発生させた。容器をマイクロウェーブ中で約５０℃まで冷却し、内容物を濾過して少量の固体残渣を除去した。透明な黄色の濾液を、大きな磁気攪拌子を備えた２５０ｍＬの丸底フラスコに移した。攪拌しながら、濃ＨＣｌでｐＨを約３に調整した。大量の赤色沈殿物が形成された。さらに少量の酸を加え、ガラスフリット上で濾過して固体を集め、冷温の１Ｎ  ＨＣｌ（１×１０ｍＬ）、アセトニトリル（２×３０ｍＬ）及びジエチルエーテル（１×３０ｍＬ）で洗浄し、吸引乾燥し、 真空オーブンに移して４５−５０℃で一晩真空乾燥させた。収量は０．４８ｇ（７９％）であった。Ｃ１３  ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ／ＮａＯＤ、外部ＴＭＳ基準）δ１３２．３５、１４７．３２、１７１．６８。
【０３１１】
実施例１６：３，６−ジアミノ−Ｎ２，Ｎ５−ジ（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５，３８，４１，４４，４７，５０，５３，５６，６２，６５，６８，７１−テトラコサオキサトリヘプタコサン−７３−イル）ピラジン−２，５−ジカルボキサミド
【０３１２】
【化３３】
0006560766.tif 000046
【０３１３】
磁気攪拌子を備えた丸底フラスコ（２Ｌ）内で、３，６−ジアミノピラジン−２，５−ジカルボン酸（３．５０ｇ、１７．７ｍｍｏｌ）、ｍ−ｄＰＥＧ２４−アミン（４５ｇ、４０．２ｍｍｏｌ）、及びＰｙＢＯＰ（２１．４ｇ、４１．１ｍｍｏｌ）を無水ＤＭＦ（１Ｌ）に溶解し、反応混合物をアルゴンでパージした。トリエチルアミン（５０ｍＬ）を懸濁液に徐々に加え、１時間以内に反応物を溶解させて暗赤色の溶液を得た。反応混合物を室温で一晩撹拌し、高真空下で濃縮して、粗生成物を暗赤色の油状物として得、この油状物を逆相分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ  ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｐｒｅｐ  Ｃ１８  ５ｍｍ  ＯＢＤ  ３０×１５０ｍｍ；λｍａｘ；ＰＤＡ（２００−８００ｎｍ）、流速：５０ｍＬ／分；勾配：Ａ：Ｂ  ９５：５／１分、５０：５０／８分、５：９５／８．１分、５：９５／１０分（Ａ：Ｈ２Ｏ／０．１％ＴＦＡ、Ｂ：ＣＨ３ＣＮ／０．１％ＴＦＡ）。分画を含む生成物を合わせ、真空中で濃縮し、残渣をＣＨＣｌ３（１５０ｍＬ）に溶解し、飽和ＮａＨＣＯ３（２×７５ｍＬ）及びブライン（７５ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、蒸発乾固させた。ガム状の残渣をエタノール（無水）で共蒸発させ、４０℃の高真空下で一晩乾燥させ、表題生成物を赤色の固体（２０．０ｇ、６１％）として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ８．１３（ｔ、Ｊ＝５．８Ｈｚ、２Ｈ）、６．０６（ｓ、４Ｈ）、３．６８−３．５４（ｍ、１９２Ｈ）、３．３８（ｓ、６Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ１６５．３，１４６．６，１２６．９，７１．９，７０．６３，７０．６，７０．５６，７０．５，７０．４，６９．８，５９．０，３９．０；ＲＰ−ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／Ｚ  １１７９．１（Ｍ＋Ｈ＋ＮＨ４）２＋（ｔｒ＝３．８８分）。Ｃ１０４Ｈ２０４Ｎ６Ｏ５０の元素分析：Ｃ，５３．４１；Ｈ，８．７９：Ｎ，３．６１。実測値：Ｃ，５３．１５：Ｈ、８．８１；Ｎ，３．６１。
【０３１４】
実施例１７：３，６−ビス（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５−ドデカオキサオクタトリアコンタン−３８−イルアミノ）−Ｎ２，Ｎ５−ジ（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５−ドデカオキサヘプタトリアコンタン−３７−イル）ピラジン−２，５−ジカルボキサミド
【０３１５】
【化３４】
0006560766.tif 000047
【０３１６】
磁気攪拌子を備えた丸底フラスコ（５００ｍＬ）に、実施例１１の生成物である３，６−ジアミノ−Ｎ２，Ｎ５−ビス（３８−オキソ−２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５−ドデカオキザ−３９−アザヘンテトカルコン−４１−ｙ）（６．２４ｇ、４．８７ｍｍｏｌ）を入れ、無水１，２−ジクロロエタン（ＤＣＥ、１００ｍＬ）中にアルゴン下で溶解した。得られた橙色の溶液に、ＤＣＥ（２５ｍＬ）及び氷酢酸（０．７３ｍＬ、１２．７ｍｍｏｌ）中のｍ−ｄＰＥＧ１２−プロピオンアルデヒド（７．３４ｇ、１２．８ｍｍｏｌ）の溶液を連続して添加した。これに、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（２．７１ｇ、１２．８ｍｍｏｌ）を少量ずつ（０．５０ｇ）毎回１．５時間かけて加え、ＤＣＥ（全部で７５ｍＬ）で移送バイアル（transfer vial）をすすいだ。得られた赤色の懸濁液をアルゴン下で室温で一晩撹拌し、飽和重炭酸ナトリウム（１００ｍＬ）を徐々に加えて反応を止めた。二相性混合物を３０分間撹拌し、層を分離し、水層をＣＨＣｌ３（５０ｍＬ）でさらに抽出した。合わせた有機抽出物をブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、次いでＮａ２ＳＯ４で乾燥させた。真空中で揮発性物質を除去すると、１２．８ｇの粗生成物が赤色の固体として得られ、これを逆相分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ  ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｐｒｅｐ  Ｃ１８  ５ｍｍ  ＯＢＤ  ３０×２５０ｍｍ；λｍａｘ；２８０ｎｍ、流速：５０ｍＬ／分、勾配：Ａ：Ｂ  ７５：２５／０分、７５：２５／５分、４５：５５／４０分、５：９５／８．１分、５：９５／４０分（Ａ：Ｈ２Ｏ／０．１％ＴＦＡ、Ｂ：ＣＨ３ＣＮ／０．１％ＴＦＡ）。分画を含む生成物を合わせ、真空中で濃縮し、残渣をＣＨＣｌ３（２００ｍＬ）に溶解し、飽和ＮａＨＣＯ３（２×１００ｍＬ）及びブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、蒸発乾固させた。赤色の粘性残渣をエタノール（無水）で共蒸発させ、４０℃の高真空下で一晩乾燥させて、標記生成物を赤色のレンガ状固体（７．４０ｇ、６３％）として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．４２（ｔ、Ｊ＝５．８Ｈｚ、２Ｈ）、７．８８（ｔ、ｊ＝５．５Ｈｚ、２Ｈ）、３．６４−３．３４（ｍ、１９２Ｈ）、３．２３（ｓ、１２Ｈ）１．７９−１．７５（クインテット、Ｊ＝６．４Ｈｚ、４Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１６５．９，１４５．９，１２６．３，７１．７，７０．２８，７０．２５，７０．２，７０．１２，７０．０９，７０．０５，６９．３，６８．８，５８．５，３９．０，３８．１，２９．８；ＲＰ−ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ  ２３９４．５（Ｍ＋Ｈ）＋、１１９７．７（Ｍ＋２Ｈ）２＋（ｔｒ＝４．０９分）。Ｃ１０８Ｈ２１２Ｎ６Ｏ５０の元素分析：Ｃ，５４．１６；Ｈ，８．９２：Ｎ，３．５１。実測値：Ｃ，５４．３１；Ｈ，８．９１；Ｎ，３．５２。
【０３１７】
実施例１８：３，３'−（（３，６−ジアミノピラジン−２，５−ジカルボニル）ビス（アザンジイル））ジプロピオン酸
【０３１８】
【化３５】
0006560766.tif 000048
【０３１９】
ステップ１．  ３，３'−（（３，６−ジアミノピラジン−２，５−ジカルボニル）ビス（アザンジイル））ジプロピオネートの合成
【０３２０】
【化３６】
0006560766.tif 000049
【０３２１】
火炎乾燥させた、磁気攪拌子を備えた丸底フラスコ（１００ｍＬ）に、３，６−ジアミノピラジン−２，５−ジカルボン酸（０．３０ｇ、１．５４ｍｍｏｌ）、ベンジル３−アミノプロパノエートｐ−トルエンスルホネート（１．０８ｇ、３．０８ｍｍｏｌ、分子量３５１．４２）、ＥＤＣ  ＨＣｌ（０．５９０ｇ、３．０８ｍｍｏｌ、１９１．７ｇ／ｍｏｌ）、ＨＯＢｔ３Ｈ２Ｏ（０．５８２ｇ、３．０８ｍｍｏｌ、１８９．１３ｇ／ｍｏｌ）、及びＥｔ３Ｎ（１．５０ｇ、１５ｍｍｏｌ、１０１．２ｇ／ｍｏｌ、２．０ｍＬ  ｄ  ０．７３ｇ／ｍＬ）を入れ、ＤＭＦ（無水、アルゴンを用いて４０ｍＬのカニューレで反応容器に移した）中に溶解した。アルゴン雰囲気を、実験中維持した。反応混合物が経時的に褐色になったものを室温で一晩撹拌し、真空中で濃縮して約１０ｍＬ（６０℃の水浴で８００Ｐａ）にした。残りのＤＭＦをトルエン共沸混合物（２×１０ｍＬトルエン）で除去した。暗色の反応混合物を、酢酸エチル（３×１２５ｍＬ）と飽和ＮａＨＣＯ３（３×１００ｍＬ）とで分配した。有機層を合わせ、クエン酸（１０％水性、１００ｍＬ）、続いてブラインで分配した。有機層を除去し、乾燥させ（無水Ｎａ２ＳＯ４）、真空中で濃縮し、赤色の結晶固体０．５８ｇを得た。ＴＬＣ（ガラス支持体上のＥＭＤシリカゲル６０、酢酸エチル）は、溶媒フロント近くに展開される１つの主要なスポット（青色ＬＥＤ光を用いた特徴的に高い蛍光性）を示し、原点にはほとんど残らなかった。ＴＬＣ（１：１酢酸エチル：ヘキサン）Ｒｆ  ０．２２。生成物を、シリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィー（Ｔｅｌｅｄｙｎｅ  ＩＳＣＯ  ＧＯＬＤカラム、２４ｇ、勾配：１００％ヘキサン対１００％酢酸エチルを３５ｍＬ／分で１２分、２５４ｎｍ及び４５０ｎｍの両方で検出）で精製し、得た（０．４９ｇ、単離収率６２％）。質量スペクトル（ＥＳ＋）５２１．３６（１００％）、５２２．４２（３０％）、５２３．３４（約６％）。ＮＭＲ、１Ｈ（ＤＭＳＯ−ｄ６）、４００ＭＨｚ：２．５５（４Ｈ、ｍ）、３．４１（４Ｈ、ｍ）５．０１（４Ｈ、ｓ）、６．４４（４Ｈ、ｓ）、７．２１（１０Ｈ、ｍ）、８．４１（２Ｈ、ｍ）；１３Ｃ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：３４．１８，３５．３３，６６．１９，１２６．７４，１２８．５２，１２８．９２，１３６．５６，１４６．７５，１６５．６３，１７１．９０。
【０３２２】
ステップ２．  ３，３'−（（３，６−ジアミノピラジン−２，５−ジカルボニル）ビス（アザンジイル））ジプロピオン酸の合成
【０３２３】
【化３７】
0006560766.tif 000050
【０３２４】
ステップ１で調製したピラジン−ジ−ベータ−アラニンのジベンジルエステル（ジベンジル３，３'−（（３，６−ジアミノピラジン−２，５−ジカルボニル）ビス（アザンジイル））ジプロピオネート）（０．９２ｇ）を、エタノール（無水、７５ｍＬ）と合わせ、入口及び出口バルブと、圧力計（０−約６８９．４８ｋＰａ）と、テフロン（登録商標）コーティングの磁気攪拌子とを備えたフィッシャー・ポーター圧力ボトル（Fischer-Porter pressure bottle）（約１７０ｇ）に移した。これに水（２５ｍＬ）及び１０％パラジウム／炭素（０．２ｇ、Ｄｅｇｕｓｓａ／Ａｌｄｒｉｃｈ  ｗｅｔ）を加え、反応容器を密封した。３回の真空／アルゴンサイクルの後、約６８．９５ｋＰａのレクチャーボトルから、激しく撹拌した溶液に水素を導入した。３．５時間後、サンプルを採取すると、ＴＬＣ分析（ガラス支持体上のＥＭＤシリカゲル６０、酢酸エチル）では、出発物質が、原点に、非常に黄色の蛍光スポット（青色ＬＥＤによる励起）のみの存在を示さないことを確認した。粗反応物をセライトパッドで濾過し、得られたセライト／触媒床を約５００ｍＬの１：１のエタノール：Ｈ２Ｏですすいで黄色の溶液を得、これをロータリー・エバポレーター（５０℃）によって固体に濃縮した。全部で０．４２４ｇの赤色の固体が単離された（単離収率７０．５％）。少量のサンプル（約１ｍｇ）をアセトニトリル：水（４：１）に溶解し、ＵＶ及び蛍光検出器（ＦＬＤ）の両方を使用するＷａｔｅｒｓ  Ａｃｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣを用いて調べた（溶出プログラム：０〜３分；９０％Ａ：１０％Ｂ：３〜２０分；１０％Ａ：９０％Ｂ：２０．１〜３０分；９０％Ａ：１０％Ｂ。Ａ＝水＋０．０１％ＴＦＡ。Ｂ＝ＡＣＮ＋０．０１％ＴＦＡ。ＵＶ：２６４ｎｍ。カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８、２５０ｍｍ×４．５ｍｍ）。９．３分で１つのピークのみが観察された。質量スペクトル（ＥＳ＋）３４１．３２（１００％）、３４２．３７（３０％）、３４４．２９（１８％）、２７０．３０（６２％）。ＮＭＲ、１Ｈ（ＤＭＳＯ−ｄ６）、４００ＭＨｚ：２．５４（２Ｈ、ｍ）、３．４２（２Ｈ、ｍ）、６．５２（２Ｈ、ｓ）、７．２１（４Ｈ、ｍ）、８．３８（２Ｈ、ｍ）、１１．９（２Ｈ、ｂｓ）；１３Ｃ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：３４．２０、３５．３３、１２６．７７、１４６．７５、１６５．５５、１７３．５７。
【０３２５】
実施例１９：３，６−ジアミノ−Ｎ２，Ｎ５−ビス（４−アミノ−酪酸）−ピラジン−２，５−ジカルボキサミド
【０３２６】
【化３８】
0006560766.tif 000051
【０３２７】
ステップ１．  ３，６−ジアミノ−Ｎ２，Ｎ５−ビス（エチル４−アミノ−ブチラート）−ピラジン−２，５−ジカルボキサミドジエチルエステルの合成
【０３２８】
【化３９】
0006560766.tif 000052
【０３２９】
３，６−ジアミノピラジン−２，５−ジカルボン酸ナトリウム（３００ｍｇ、１．２４ｍｍｏｌ）、４−アミノ酪酸エチルＨＣｌ塩（２．６４ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ−Ｈ２Ｏ（５７０ｍｇ、３．７２ｍｍｏｌ）及びＥＤＣ−ＨＣｌ（６９０ｍｇ、３．６０ｍｍｏｌ）の混合物をＤＭＦ（２５ｍＬ）中で、ＴＥＡ（２ｍＬ）で処理した。得られた混合物を１６時間撹拌し、濃縮した。得られた混合物を濃縮乾固し、残渣を酢酸エチルと水で分配した。層を分離し、酢酸エチル溶液をＮａＨＣＯ３（飽和）及びブラインで洗浄した。溶液をＮａ２ＳＯ４（無水）で乾燥させ、濾過し、濃縮した。ラジアルフラッシュクロマトグラフィーまたはＣ１８カラムを用いた逆相ＨＰＬＣにより精製することで所望のピラジン中間体を得、これを次のステップへ進めた。
【０３３０】
ステップ２  ３，６−ジアミノ−Ｎ２，Ｎ５−ビス（４−アミノ−酪酸）−ピラジン−２，５−ジカルボキサミドの合成
【０３３１】
【化４０】
0006560766.tif 000053
【０３３２】
ＴＨＦ中のステップ１からの生成物（約１０ｍＬのＴＨＦ中、約４００ｍｇあれば十分である）を水酸化ナトリウム水溶液（１．０Ｎ）で処理した。室温で約３０分間撹拌した後（またはＴＬＣで反応が完了したとみなされるまで）、水中のＨＣｌ（１．０Ｍ）を加えてｐＨを約２に調整し、得られた溶液を酢酸エチルで抽出した（３回）。有機層を合わせ、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４、無水）、濾過し、濃縮し、逆相ＨＰＬＣにより精製して、表題化合物である３，６−ジアミノ−Ｎ２，Ｎ５−ビス（４−アミノ−酪酸）−ピラジン−２，５−ジカルボキサミドを得た。
【０３３３】
実施例２０：３，６−ジアミノ−Ｎ２，Ｎ５−ビス（３−アミノ−５−オキソ−フラン）−ピラジン−２，５−ジカルボキサミド
【０３３４】
【化４１】
0006560766.tif 000054
【０３３５】
３，６−ジアミノピラジン−２，５−ジカルボキシラートナトリウム（３００ｍｇ、１．２４ｍｍｏｌ）、３−アミノ−５−オキソフランＨＣｌ塩（米国特許第６０３７３６５号明細書に記載のように合成）（２．６４ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ−Ｈ２Ｏ（５７０ｍｇ、３．７２ｍｍｏｌ）及びＥＤＣ−ＨＣｌ（６９０ｍｇ、３．６０ｍｍｏｌ）の混合物をＤＭＦ（２５ｍＬ）中で、トリエチルアミン（２ｍＬ）で処理した。得られた混合物を１６時間撹拌し、濃縮乾固し、残渣を最少量の水に溶解した。水性混合物をＴＦＡでｐＨ約２まで酸性化した。Ｃ１８カラム及び水：アセトニトリル勾配を用いる逆相ＨＰＬＣによって精製し、所望のピラジンビス−ラクトンを得た。
【０３３６】
実施例２１：３，６−ジアミノ−Ｎ２，Ｎ５−ビス（２，３−ジメチル−ベータ−アラニン）−ピラジン−２，５−ジカルボキサミド
【０３３７】
【化４２】
0006560766.tif 000055
【０３３８】
ステップ１．  ３，６−ジアミノ−Ｎ２，Ｎ５−ビス（エチル−２，３−ジメチル−ベータ−アラニン）−ピラジン−２，５−ジカルボキサミドの合成
【化４３】
0006560766.tif 000056
【０３３９】
３，６−ジアミノピラジン−２，５−ジカルボキシラートナトリウム（３００ｍｇ、１．２４ｍｍｏｌ）、２，３−ジメチル−ベータ−アラニンエチルエステルＨＣｌ塩（２．６４ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ−Ｈ２Ｏ（５７０ｍｇ、３．７２ｍｍｏｌ）及びＥＤＣ−ＨＣｌ（６９０ｍｇ、３．６０ｍｍｏｌ）の混合物をＤＭＦ（２５ｍＬ）中で、トリエチルアミン（２ｍＬ）で処理した。得られた混合物を室温で１６時間撹拌し、濃縮した。得られた混合物を濃縮乾固し、残渣を酢酸エチルと水で分配した。層を分離し、酢酸エチル溶液をＮａＨＣＯ３（飽和）及びブラインで洗浄した。得られた有機溶液をＮａ２ＳＯ４（無水）で乾燥させ、濾過し、濃縮した。ラジアルフラッシュクロマトグラフィー、通常の中圧フラッシュクロマトグラフィーまたはＣ１８カラムを用いた逆相ＨＰＬＣによって精製することにより、所望のピラジン中間体を得、これを次のステップに進めた。
【０３４０】
ステップ２  ．３，６−ジアミノ−Ｎ２，Ｎ５−ビス（２，３−ジメチル−ベータ−アラニン）−ピラジン−２，５−ジカルボキサミドの合成
【０３４１】
【化４４】
0006560766.tif 000057
【０３４２】
ＴＨＦ中のステップ１からの生成物であるジエチルエステル（約１０ｍＬ中に約４００ｍｇで十分である）を水酸化ナトリウム水溶液（１．０Ｎ）で処理した。室温で約３０分間撹拌した後（またはＴＬＣで反応が完了したとみなされるまで）、水中のＨＣｌ（１．０Ｍ）を加えてｐＨを約２まで調整し、得られた溶液を酢酸エチルで抽出した（３回）。有機層を合わせ、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４、無水）、濾過し、濃縮濾過することにより、０．１％ＴＦＡ中のアセトニトリルと０．１％ＴＦＡ中の水との適切な勾配を用いたＣ１８カラムを使用する逆相ＨＰＬＣによって精製可能な３，６−ジアミノ−Ｎ２，Ｎ５−ビス（２，３−ジメチル−ベータ−アラニン）−ピラジン−２，５−ジカルボキサミドを得た。
【０３４３】
実施例２２：３，６−ジアミノ−Ｎ２，Ｎ５−ビス（３−（３−ピリジル）−プロピオン酸）−ピラジン−２，５−ジカルボキサミド
【０３４４】
【化４５】
0006560766.tif 000058
【０３４５】
ステップ１．  ３，６−ジアミノ−Ｎ２，Ｎ５−ビス（エチル３−（３−ピリジル）−プロパノエート）−ピラジン−２，５−ジカルボキサミドの合成
【０３４６】
【化４６】
0006560766.tif 000059
【０３４７】
３，６−ジアミノピラジン−２，５−ジカルボン酸ナトリウム（３００ｍｇ、１．２４ｍｍｏｌ）、エチル３−（３−ピリジル）−プロパノエートＨＣｌ塩（２．６４ｍｍｏｌ）（J.G.Rico et. Al., J. Org.Chem.,1993,58,7948-7951）、ＨＯＢｔ−Ｈ２Ｏ（５７０ｍｇ、３．７２ｍｍｏｌ）及びＥＤＣ−ＨＣｌ（６９０ｍｇ、３．６０ｍｍｏｌ）の混合物をＤＭＦ（２５ｍＬ）中で、トリエチルアミン（２ｍＬ）で処理した。得られた混合物を室温で１６時間撹拌し、濃縮した。得られた混合物を最少量の水に溶解し、ＴＦＡの添加によりｐＨを約３に酸性化し、Ｃ１８カラムを用いた逆相ＨＰＬＣによって精製することにより、所望のピラジン中間体ジエチルエステルを得て、これを次のステップに進めた。
【０３４８】
ステップ２．  ３，６−ジアミノ−Ｎ２，Ｎ５−ビス（エチル３−（３−ピリジル）−プロパノエート）−ピラジン−２，５−ジカルボキサミドの合成
【０３４９】
ＴＨＦ中のステップ１からの生成物（約１０ｍＬのＴＨＦ中に約４００ｍｇ）を、水酸化ナトリウムまたは水酸化リチウムの水溶液（１．０Ｎ）で処理した。室温で約３０分間撹拌した後（またはＴＬＣで反応が完了したとみなされるまで）、ＴＦＡの添加によりｐＨを約２まで調整し、得られた溶液を逆相ＨＰＬＣ（Ｃ１８、アセトニトリル０．１％ＴＦＡ及び水０．１％ＴＦＡ勾配）によって精製して、表題化合物である３，６−ジアミノ−Ｎ２，Ｎ５−ビス（エチル３−（３−ピリジル）−プロパノエート）−ピラジン−２，５−ジカルボキサミドを得た。
【０３５０】
実施例２３：（２Ｒ，２'Ｒ）−２，２'−（（３，３'−（（３，６−ジアミノピラジン−２，５−ジカルボニル）ビス（アザンジイル））ビス（プロパノイル））ビス（アザンジイル））ジコハク酸
【０３５１】
【化４７】
0006560766.tif 000060
【０３５２】
ステップ１．  テトラベンジル２，２'−（（３，３'−（（３，６−ジアミノピラジン−２，５−ジカルボニル）ビス（アザンジイル））ビス（プロパノイル））ビス（アザンジイル））（２Ｒ，２'Ｒ）−ジスクシネートの合成
【０３５３】
【化４８】
0006560766.tif 000061
【０３５４】
実施例１８で生成した３，３'−（（３，６−ジアミノピラジン−２，５−ジカルボニル）ビス（アザンジイル））ジプロピオン酸（０．５０ｇ、１．４７ｍｍｏｌ）を、テフロン（登録商標）コーティングされた磁気撹拌子と、ガス注入口及び排出口（アルゴン、乾燥）を備えた三つ口丸底フラスコ（１００ｍＬ）内で、ＤＭＦ（３０ｍＬ）で処理した。この混合物に、Ａｓｐ（ＯＢｚ）２ｐ−ＴＳＡ（１．５７ｇ、３．２３ｍｍｏｌ、２．２当量）、ＤＩＰＥＡ（０．４５ｇ、３．５ｍｍｏｌ）及びＰｙＢｏｐ（１．６７ｇ、３．２ｍｍｏｌ）を加え、混合物を一晩攪拌した。反応混合物をロータリーエバポレーターで減圧濃縮し、Ｃｏｍｂｉ−Ｆｌａｓｈ  Ｒｆ  Ｕｎｉｔ（Ｔｅｌｅｄｙｎｅ  ＩＳＣＯ）及びヘキサン−酢酸エチル勾配を用いたシリカゲル上での順相クロマトグラフィーにより精製した。所望のテトラ−ベンジルエステルを含む分画を合わせ、濃縮して、固体の実質的に純粋なテトラベンジル２，２'−（（３，３'−（（３，６−ジアミノピラジン−２，５−ジカルボニル）ビス（アザンジイル））ビス（プロパノイル））ビス（アザンジイル））（２Ｒ、２'Ｒ）−ジスクシネートを得、次のステップで使用した。
【０３５５】
ステップ２．  （２Ｒ，２'Ｒ）−２，２'−（（３，３'−（（３，６−ジアミノピラジン−２，５−ジカルボニル）ビス（アザンジイル））ビス（プロパノイル））ビス（アザンジイル））ジコハク酸の合成
【０３５６】
【化４９】
0006560766.tif 000062
【０３５７】
テトラベンジル２，２'−（（３，３'−（（３，６−ジアミノピラジン−２，５−ジカルボニル）ビス（アザンジイル））ビス（プロパノイル））ビス（アザンジイル））（２Ｒ、２'Ｒ）−ジスクシネート（０．５ｇ、０．８８ｍｍｏｌ）を、テフロン（登録商標）コーティングされた磁気攪拌子を備えたフィッシャー−ポーター圧力ボトル（約１７０ｇ）に入れ、エタノール（２０ｍＬ）に溶解した。触媒（０．１ｇ５％パラジウム／炭素）を添加し、激しい撹拌を開始した。数回のアルゴン／真空サイクルの後、水素を加え、実施例１８と同様の方法で反応が発生し、所望の生成物である（２Ｒ、２'Ｒ）−２，２'−（（３，３'−（（３，６−ジアミノピラジン−２，５−ジカルボニル）ビス（アザンジイル））ビス（プロパノイル））ビス（アザンジイル））ジコハク酸を得た。
【０３５８】
実施例２４：ナトリウム３，３'−（（３，６−ジアミノピラジン−２，５−ジカルボニル）ビス（アザンジイル））ビス（４−ヒドロキシブタノエート）
【０３５９】
【化５０】
0006560766.tif 000063
【０３６０】
実施例２０で単離された生成物であるジ−ラクトンを水（脱イオン）に溶解し、２当量の塩基、例えば水酸化ナトリウムを撹拌しながら水に溶解して、所望のジヒドロキシ酸ナトリウム塩である３，３'−（（３，６−ジアミノピラジン−２，５−ジカルボニル）ビス（アザンジイル））ビス（４−ヒドロキシブタノエート）ナトリウムを形成した。固体生成物は、残留水を蒸留によって、または反応混合物をフリーズドライ（凍結乾燥）することによって得られた。
【０３６１】
実施例２５：（２Ｒ、２'Ｒ）−３，３'−（（３，６−ジアミノピラジン−２，５−ジカルボニル）ビス（アザンジイル））ビス（２−（ヒドロキシメチル）プロパン酸）
【０３６２】
【化５１】
0006560766.tif 000064
【０３６３】
ステップ１．  ジメチル３，３'−（（３，６−ジアミノピラジン−２，５−ジカルボニル）ビス（アザンジイル））（２Ｒ、２'Ｒ）−ビス（２−（（ベンジルオキシ）メチル）プロパノエート）の合成
【０３６４】
【化５２】
0006560766.tif 000065
【０３６５】
３，６−ジアミノピラジン−２，５−ジカルボキシラートナトリウム（３００ｍｇ、１．２４ｍｍｏｌ）、メチル−２−Ｏ−ベンジル−３−アミノ−プロピオネートＨＣｌ塩（２．６４ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ−Ｈ２Ｏ（５７０ｍｇ、３．７２ｍｍｏｌ）及びＥＤＣ−ＨＣｌ（６９０ｍｇ、３．６０ｍｍｏｌ）の混合物をＤＭＦ（２５ｍＬ）中で、トリエチルアミン（２ｍＬ）で処理した。得られた混合物を１６時間撹拌し、濃縮し、酢酸エチルと水で分配した。層を分離し、酢酸エチル層をＮａＨＣＯ３（飽和）及びブラインで洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４（無水）で乾燥させ、濾過し、濃縮した。ラジアルフラッシュクロマトグラフィー（シリカ）またはＣ１８カラムを用いた逆相ＨＰＬＣによる精製によって、所望のピラジン中間体を得、これを次のステップに進めた。
【０３６６】
ステップ２．  （２Ｒ、２'Ｒ）−３，３'−（（３，６−ジアミノピラジン−２，５−ジカルボニル）ビス（アザンジイル））ビス（２−（（ベンジルオキシ）メチル）プロパン酸）の合成
【０３６７】
【化５３】
0006560766.tif 000066
【０３６８】
ＴＨＦ中のステップ１からの生成物（約１０ｍＬのＴＨＦ中に約４００ｍｇ）を水酸化ナトリウム水溶液（１．０Ｎ）で処理した。室温で約３０分間撹拌した後（またはＴＬＣで反応が完了したとみなされるまで）、塩酸（１．０Ｍ）を加えてｐＨを約２に調整し、得られた溶液を酢酸エチルで抽出した（３回）。有機層を合わせ、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４、無水）、濾過し、濃縮して二酸を得た。
【０３６９】
ステップ３．  （２Ｒ、２'Ｒ）−３，３'−（（３，６−ジアミノピラジン−２，５−ジカルボニル）ビス（アザンジイル））ビス（２−（ヒドロキシメチル）プロパン酸）の合成
【０３７０】
メタノール中のステップ２の生成物に、５％パラジウム／炭素及びギ酸アンモニウム（二酸に対して約１０倍モル過剰）を加え、得られた溶液を約２時間加熱還流した。反応物を室温に冷却し、濾過し、濃縮した。適切な溶媒からの再結晶または逆相ＨＰＬＣ（例えば、Ｃ１８カラム、及び０．１％ＴＦＡ中の５〜９５％勾配アセトニトリルと０．１％ＴＦＡ中の水とを約１０〜３０分かけて使用）のいずれかによって残渣を精製し、実質的に純粋な形態の表題化合物を得た。
【０３７１】
実施例２６：  マウスの血管系の評価
【０３７２】
血管系を評価するための例示的な手順は以下の通りである。：すべての実験は麻酔をかけたマウスで行った。ＣＲｉによるマエストロ（登録商標）インビボイメージングシステムまたはその均等物が使用される。血管造影のための市販のフルオレセイン溶液を得て、そのまま使用した。生理学的に適合する溶液（リン酸緩衝溶液）中のピラジン色素が供給された。実験の間、直腸温度プローブによってマウスの体温をモニタしながら、温度調節された水ブランケット上にマウスを配置した。目的の血管のイメージングを容易にするために、マウスの胸部、腹部及び鼠径部を剃毛し、マウスを仰向けに配置し、大腿部の血管系の上方の皮膚を切除して目的の血管系を露出させた。頸静脈には、約８３３．３５ｎｋａｔ（５０Ｕ）ヘパリン／ｍＬを含む生理食塩水で満たされた、伸張したＰＥ１０チューブ片を使用してカニューレ挿入を行った。マウスを準備した後、色素のボーラス注射を行い、続いて静脈内に生理食塩水のボーラス注射を行った。頸静脈に設置したカニューレを介してすべての注射を行った。生理食塩水を使用してラインを洗い流し、ボーラスがそのまま大腿部の血管系を通過することを確実にし、はっきりとした波面を作り出した。
【０３７３】
眼の血管系を評価するための例示的な手順は以下の通りである。：すべての実験は麻酔をかけたマウスで行った。網膜画像は、Ｐｈｏｅｎｉｘ  Ｍｉｃｒｏｎ  ＩＩＩ  Ｒｅｔｉｎａｌ  Ｉｍａｇｉｎｇ  Ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅを使用して撮影した。眼血管造影のための市販のフルオレセイン溶液を得て、そのまま使用した。生理学的に適合する溶液（リン酸緩衝溶液）中のピラジン色素は、ＭｅｄｉＢｅａｃｏｎ、ＬＬＣによって供給された。各薬剤の投与を、典型的な尾静脈注射によって行った。
【０３７４】
１及び２と名付けた２匹のマウスを、最初にフルオレセイン溶液を用いて評価した。標準フルオレセイン溶液を投与する前に、投与前血管造影を行った。血管造影は投与直後、並びに投与後５、１０、３０、及び６０分に行った。
【０３７５】
３及び４と名付けた２匹のマウスを、最初にピラジン製剤を用いて評価した。標準フルオレセイン溶液を投与する前に、投与前血管造影を行った。血管造影は投与直後、並びに投与後５、１０、３０、及び６０分に行った。
【０３７６】
マウス１、２、３及び４での最初の実験の少なくとも２４時間後、ピラジン製剤を投与したマウス１及び２と、フルオレセイン溶液を投与したマウス３及び４とを用いて手順を繰り返した。すべての画像の比較を行った。
【０３７７】
実施例２７：実施例２を用いた蛍光血管造影及びフルオレセインのインビボ比較
【０３７８】
実施例２（３，６−ジアミノ−Ｎ２，Ｎ５−ビス（Ｄ−セリン）−ピラジン−２，５−ジカルボキサミド）を使用することにより眼の血管系を視覚化できることを立証する概念実証研究において、フルオレセイン及び実施例２を別々の個々のマウスに注射した後、Ｐｈｏｅｎｉｘ  Ｍｉｃｒｏｎ  ＩＩＩ  Ｒｅｔｉｎａｌ  Ｉｍａｇｉｎｇ  Ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅを用いて網膜蛍光を画像化した。６週齢の雄のＣ５７Ｂ１／６Ｊマウスの大腿静脈に実施例２及びフルオレセイン（いずれも１ｍｇ／マウスで投与）を注射し、注射後の様々な時間に網膜画像を得た。図１は、２分で得られた画像である。同様の構造的詳細が、フルオレセインと同様に実施例２で観察された。画像化に影響され白濁が発生したため、縦断的な観察及びフルオレセインと実施例２との動物比較は不可能であった。
【０３７９】
実施例２８：脳灌流を評価する術中の蛍光血管造影
【０３８０】
対象
【０３８１】
片側の大脳動脈閉塞疾患のＳＴＡ−ＭＣＡバイパス術を受けている対象を、この研究に登録した。脳灌流障害のＳＴＡ−ＭＣＡバイパス術の適応症を、試験基準に従って決定した。すべての外科手術において、ＳＴＡの前頭枝及び頭頂枝の両方を、ＭＣＡの枝に端側吻合した。対象には術前１ヶ月以内にＰＥＴプロトコルを完了させ、術中に、術中近赤外蛍光ＩＣＧビデオ血管撮影（ＩＣＧ−ＶＡ）または３，６−ジアミノ−Ｎ２，Ｎ５−ビス（Ｄ−セリン）−ピラジン−２，５−ジカルボキサミドプロトコルを完了させた。術後、収縮期血圧を１００〜１４０ｍｍＨｇの間で厳密に制御し、抗けいれん薬を静脈内投与した。テクネチウム−９９ｍヘキサメチルプロピレンアミンオキシム（９９ｍＴｃ−ＨＭ−ＰＡＯ  ＳＰＥＣＴ）による単一光子放射断層撮影を用いて、術後１日目及び７日目に脳血流量（ＣＢＦ）測定を行った。脳の術後状態及びバイパスの開存率を、術後１日目及び７日目に核磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）／磁気共鳴血管画像（ＭＲＡ）によって評価した。対象が過灌流に関連する症状を呈した疑いがある場合には、ＳＰＥＣＴ及びＭＲＩ／ＭＲＡによる評価を行った。
【０３８２】
未破裂脳動脈瘤に対する開頭術及びクリッピング術を受けている対象を対照群とした。頭蓋内ＭＲＡ及び頸部ＭＲＡ／頚部超音波検査によって評価したときに、狭窄−閉塞性疾患を示さなかったこれらの対象には、前頭側頭骨開頭術の直後にＩＣＧ−ＶＡまたは３，６−ジアミノ−Ｎ２，Ｎ５−ビス（Ｄ−セリン）−ピラジン−２，５−ジカルボキサミドプロトコルを完了させた。
【０３８３】
治験審査委員会は研究プロトコルを承認し、すべての対象は文書によるインフォームド・コンセントを提供した。
【０３８４】
ＩＣＧ−ＶＡ及び３，６−ジアミノ−Ｎ２，Ｎ５−ビス（Ｄ−セリン）−ピラジン−２，５−ジカルボキサミドプロトコル
【０３８５】
ＩＣＧ−ＶＡの推奨用量は０．１〜０．３ｍｇ／ｋｇであり、１日の用量は５ｍｇ／ｋｇを超えない。この一連の研究では、対象は前頭側頭骨開頭術の直後にＩＣＧ−ＶＡ研究プロトコルを完了し、バイパス術を受けた対象は、バイパス術直後に同じプロトコルを完了した。対象には、生理食塩水３．０ｍｌに溶解した１回の注射当たり７．５ｍｇの標準用量を投与した。記録を開始し、ＩＣＧの計算されたボーラスを、外科医の要求に応じて麻酔医が管理した。ＩＣＧ通過曲線の強度を、近赤外光を用いた自動顕微鏡統合アルゴリズムによって記録した（λ=８００ｎｍ；赤外蛍光検出ハードウェアを備えたＯＰＭＩ（登録商標）  Ｐｅｎｔｅｒｏ  ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ及びＦｌｏｗ  ８００ソフトウェア分析ツール；Ｃａｒｌ  Ｚｅｉｓｓ  Ｍｅｄｉｔｅｃ社，オーバーコッヘン，ドイツ）。このツールには、陰影及び脳の脈動を補正するアルゴリズムが備わっている。蛍光強度は、カメラによって検出された強度に対応する任意の強度単位（ＡＩｓ）で測定された。ＩＣＧ血管造影に必要な時間は約９０秒であった。正常な心機能（駆出率＞５５％）も、すべての患者において術前に確認された。
【０３８６】
この研究の３，６−ジアミノ−Ｎ２，Ｎ５−ビス（Ｄ−セリン）−ピラジン−２，５−ジカルボキサミド（実施例２）の対象群には、生理食塩水緩衝液中の適切な用量のピラジン色素を投与して、前頭側頭骨開頭術直後にピラジン色素プロトコルを完了させ、バイパス術を受けた対象には、バイパス術直後に同じプロトコルを完了させ、ピラジン色素について規定された標準用量を投与した。この群のデータを、ＩＣＧの前段落で概説したように得た。
【０３８７】
蛍光強度の推移を、自由に定義可能な関心領域（ＲＯＩｓ）によって測定した。ＲＯＩｓからのデータを術後の更なる処理のために出力し、ＩＣＧの結果を、ピラジン色素によって得られた結果と比較した。
【０３８８】
以下の化合物は、一般に上記の方法を用いて製造することができる。これらの化合物は、製造された場合に、調製されたものと同様の活性を有することが期待される。
【０３８９】
【化５４】
0006560766.tif 000067
【０３９０】
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【０４１３】
他の実施形態
【０４１４】
上述した詳細な説明は、当業者が本開示を実施するのを可能にするために提供された。しかしながら、本開示の範囲は、本明細書に開示された特定の実施形態によって限定されるものではない。上述した実施形態は、本開示のいくつかの態様を説明することを目的としているからである。あらゆる均等な実施形態が、本開示の範囲に含まれるものとする。実際、本明細書に示され記載された実施形態に加えて、本開示の精神または範囲から逸脱することなく、本開示の種々の変更形態が、上述した詳細な説明から当業者に明らかとなるであろう。このような変更形態も、添付の特許請求の範囲の範囲内に含まれるものとする。
【図１】
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