(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ａ）５５〜９８．９重量％の、式（１）
Ｒ−Ｂ−Ａ−Ｂ−Ｒ  式（１）
の少なくとも１つのタイプのトリブロックコポリマー（Ａ）と、
ｂ）０．１〜１５重量％の少なくとも１つの、式（２）の界面活性剤（Ｂ）と、
Ｒｓ−Ｂｓ−Ａｓ−Ｂｓ−Ｒｓ  式（２）
ｃ）１〜３０重量％の水と
を含む組成物であって、
Ａが、１００〜１，０００Ｄａの数平均分子量（Ｍｎ）を有する親水性ブロックであり、かつ、Ａがポリエチレングリコールから作製され、
Ｂが、少なくともモノマーＢ１およびモノマーＢ２を含むモノマーから作製される疎水性ブロックであり、Ｂ１およびＢ２が前記疎水性ブロック中で最大の重量含量を有し、Ｂ１がε−カプロラクトンから作製され、Ｂ２が、ラクチドおよびｐ−ジオキサノンから選択される１つのモノマーから作製され、
Ｒが、ＨまたはＣ１〜Ｃ３０有機部分である末端基であり、
前記組成物が０℃〜３７℃の温度範囲で流体であり、
前記重量％がａ）、ｂ）およびｃ）の合計に対するものであり、成分ａ）、ｂ）およびｃ）の合計が前記組成物全体の少なくとも８０重量％であり、
Ａｓが、ポリエチレングリコールから作製された親水性ブロックであり、かつ、Ａｓが、少なくとも１，０００Ｄａの数平均分子量（Ｍｎ）を有し、
Ｂｓが、少なくとも２つの環状モノマーＢｓ１およびＢｓ２から作製された疎水性ブロックであり、Ｂｓ１およびＢｓ２が前記疎水性ブロック中で最大の重量含量を有し、Ｂｓ１がε−カプロラクトンから作製され、Ｂｓ２が、ラクチドおよびｐ−ジオキサノンから選択される１つのモノマーから作製され、モノマーＢ１およびモノマーＢｓ１は同じであり、かつ、モノマーＢ２およびモノマーＢｓ２は同じであり、
Ｒｓが、ＨまたはＣ１〜Ｃ３０有機部分である末端基である、組成物。
【請求項２】
せん断レオロジーによって測定された際、３０Ｐａ．ｓ未満、好ましくは２０Ｐａ．ｓ未満または１０Ｐａ．ｓ未満、最も好ましくは５Ｐａ．ｓ未満の値を有する、２０℃で測定される粘度を有する、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記コポリマー（Ａ）が−２０℃未満、好ましくは−３０℃未満、最も好ましくは−４０℃未満のＴｇ（中点）を有し、および／または前記コポリマー（Ａ）が２０℃未満、好ましくは１０℃未満、より好ましくは０℃未満のＴｍ（中点）を有し、ＴｇおよびＴｍがＤＳＣ、２ｃｅｌｃ／分の加熱による第２の加熱曲線で測定される、請求項１または２に記載の組成物。
【請求項４】
前記コポリマー（Ａ）が、サイズ排除クロマトグラフィーで測定された際、５００〜５，０００Ｄａ、より好ましくは６００〜３，０００Ｄａの範囲内、最も好ましくは７００〜２，５００Ｄａの範囲内の数平均分子量（Ｍｎ）を有する、請求項１〜３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５】
式（１）中のＡブロックが少なくとも１００Ｄａ、好ましくは少なくとも１２０Ｄａ、最も好ましくは少なくとも１５０Ｄａの数平均分子量（Ｍｎ）を有し、前記Ａブロックの前記数平均分子量が最大で１，０００Ｄａである、請求項１〜４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６】
Ｒが、アセチル基、プロピオニル基、ヘキサノイル基、２−ｎ−ヘキシルデカノイル基、ノナノイル基、ドデカノイル基、ペンタデカノイル基、ステアロイル基またはベンゾイル基からなる群から選択される、請求項１〜５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７】
式（１）中のＢブロックのそれぞれが２００〜１，５００Ｄａ、好ましくは２２５〜１，２５０Ｄａ、より好ましくは２５０〜１，０００Ｄａ、または３００〜８００Ｄａの数平均分子量範囲を有する、請求項１〜６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項８】
ＲｓがＨ、アセチル基、プロピオニル基、ブチリル基、ペンタノイル基、ヘキサノイル基、ノナノイル基、ドデカノイル基、ペンタデカノイル基、２−ｎ−ヘキシルデカノイル基、ステアロイル基またはベンゾイル基から選択される、請求項１〜７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項９】
Ａｓが、サイズ排除クロマトグラフィーで測定される１，０００〜３，０００Ｄａの数平均分子量（Ｍｎ）を有する直鎖状ポリエチレングリコールブロックであり、
各Ｂｓブロックが、サイズ排除クロマトグラフィーで測定される４００〜３，０００Ｄａの数平均分子量（Ｍｎ）を有し、
Ｒｓが、ＨまたはＣ１〜Ｃ２０脂肪酸残基である末端基である、請求項１〜８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１０】
前記ポリマーブロックＢを作製するためのモノマーがモノマーＢ１およびＢ２からなり、かつ前記ポリマーブロックＢｓを作製するためのモノマーがモノマーＢｓ１およびＢｓ２からなる、請求項１〜９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１１】
ＸとＸｓとの差が２０重量％未満であり、ここで、
Ｘが、前記モノマーＢ１および前記モノマーＢ２の総重量に対する前記モノマーＢ１の量であり、および
Ｘｓが、前記モノマーＢｓ１および前記モノマーＢｓ２の前記総重量に対する前記モノマーＢｓ１の量である、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１２】
０．０１〜１５重量％の医薬品有効成分を含む、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１３】
薬剤として使用するための、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１４】
治療、手術、またはインビボ診断に使用するための、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１５】
請求項１２に記載の組成物を調製するための方法であって、成分ａ）、ｂ）、ｃ）および治療活性物質を混合する工程を含む方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、生体吸収性界面活性剤および水と均質に混合され、全てが一緒になって安定した油中水型（ｗ／ｏ）エマルションを形成する、周囲条件で液体である少なくとも１つの生体吸収性トリブロックコポリマーを含有する組成物に関する。この組成物は、ヒトまたは動物の身体に注入するのに好適であり得る。前記身体への注入後、エマルションは、（半）固体の粘着性の塊を形成する。これらの液体組成物は、親水性医薬品有効成分（ＡＰＩ）の封入を可能にし、かつ身体への注入後、前記医薬品有効成分をゆっくりと放出する。これらの組成物はまた、生物活性物質と併用してまたは併用せずに、身体への注入後に医療機器として機能し得る。
【背景技術】
【０００２】
生物活性物質または治療活性物質とも呼ばれる医薬品有効成分の制御放出は、ヒトおよび動物の治療において必須になった。直接オンサイト治療または全身取り込みのいずれかのために、組織または器官内など、身体内で局所的に医薬品有効成分を制御放出することが特に関心を集めている。
【０００３】
近年、ミクロスフェア、ストランド、ロッドなどの製品形状に加工されたいくつかの生体吸収性ポリマーがこのために開発されている。医薬品有効成分は、ポリマー製品の内部に組み込まれ、ヒトまたは動物の身体への投与後、様々な機構によってゆっくりと放出される。これらの製品のマイナス面の１つは、それらの内部に有効成分を取り込む面倒なプロセスであり、このプロセスは、有機溶媒または高温のいずれかを必要とし得る。これらのプロセスは、プロセス中に有効成分の不活性化をもたらすことがある。
【０００４】
液体ＢＡＢブロックコポリマーの多くの例が文献に見出され得る。しかしながら、先行技術のブロックコポリマーの欠点は、それらが注入可能な医薬組成物を作製するために溶媒または液体ポリマー添加剤と組み合わせて使用されることである。ある場合には、ＢＡＢブロックコポリマーは、比較的高い分子量を有し、例えばポリエチレングリコールのような低分子量のポリマーが、組成物を注入可能にするために加えられる。他の場合、液体ＢＡＢブロックコポリマーは、注入可能な組成物を作製し、および／またはＡＰＩを液体ポリマーに溶解させるために、より高い分子量のブロックコポリマーのための可塑剤として使用される。これらの低分子量ポリマーの添加は、低分子量ポリマーの高いバースト放出および好ましくない急速な放出を生じ、これは、マイナスの生理学的副作用を生じ得る。これらの系への親水性ＡＰＩの組み込みも厄介である。ある例では、水が加えられ、液体ポリマーに通して混合されるが、これは、親水性ＡＰＩのバースト放出および比較的短い放出時間を示す。多くのさらに他の例では、熱可逆性ゲルを調製するために水が加えられるが、これは、親水性ＡＰＩのバースト放出および比較的短い放出時間を示す。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明の目的は、上記および／または他の欠点の１つ以上に対処し、安定した簡単なプロセスによって製造可能である、少なくとも１つの生体吸収性トリブロックコポリマー、生体吸収性界面活性剤および水の油中水型（ｗ／ｏ）エマルションである配合物を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
この目的は、
ａ）５５〜９８．９重量％の、式（１）
Ｒ−Ｂ−Ａ−Ｂ−Ｒ（１）
の少なくとも１つのタイプのトリブロックコポリマー（Ａ）と、
ｂ）０．１〜１５重量％の少なくとも１つの界面活性剤（Ｂ）と、
ｃ）１〜３０重量％の水と
を含む組成物であって、
Ａが、１００〜１，０００Ｄａの数平均分子量（Ｍｎ）を有する親水性ブロックであり、Ｂが、少なくともモノマーＢ１およびモノマーＢ２を含むモノマーから作製される疎水性ブロックであり、Ｂ１およびＢ２が疎水性ブロック中で最大の重量含量を有し、かつＢ１がＢ２より低い分子量を有し、Ｒが、ＨまたはＣ１〜Ｃ３０有機部分である末端基であり、組成物が０℃〜３７℃の温度範囲で流体であり、重量％がａ）、ｂ）およびｃ）の合計に対するものであり、成分ａ）、ｂ）およびｃ）の合計が組成物全体の少なくとも８０重量％、好ましくは少なくとも９０重量％である、組成物によって達成される。
【０００７】
トリブロックコポリマー（Ａ）のＡブロックの比較的低いＭｎは、比較的疎水性のコポリマー（Ａ）をもたらす。界面活性剤（Ｂ）を用いて、コポリマー（Ａ）の連続相に分散された水性相の液滴のエマルションが形成される。
【０００８】
本発明に係る組成物の利点は、比較的疎水性のトリブロックコポリマー（Ａ）および界面活性剤を水とともに含有する安定したエマルションが得られることである。このようなエマルションは、低分子薬剤、ペプチド、タンパク質および遺伝物質などの親水性医薬品有効成分の担体として使用され得る。これらの場合、親水性医薬品有効成分がエマルションの水性相に完全に溶解された医薬組成物を得ることができる。
【０００９】
本発明に係る組成物の利点は、粘度が、式１に従う「疎水性」トリブロックコポリマー自体よりもはるかに低く、それにより注入性（ｉｎｊｅｃｔａｂｉｌｉｔｙ）が著しく向上され得る配合物が得られることである。
【００１０】
別の利点は、本発明の組成物が、水溶液中でのみ利用可能なＡＰＩを組み込むのに使用され得ることである。
【００１１】
本発明に係る組成物のさらなる利点は、医薬品有効成分の放出が十分に制御され、投与の直後のバースト放出が先行技術の系と比較してかなり少ないか、またはほとんどないことである。
【００１２】
本発明に係る組成物の別の利点は、ヒトまたは動物の身体内に注入されると、エマルションが（半）固体を形成し、それにより組織充填、組織分離または他の医療目的のための使用を可能にすることである。このような使用は、医薬品有効成分なしでも十分にあり得るが、治療法が医薬品有効成分を必要とする場合、治療活性物質または生物活性物質との組合せであり得る。
【００１３】
ａ）ＲＢＡＢＲ疎水性トリブロックコポリマー（Ａ）
生体吸収性ポリマーは、本明細書において、身体によって代謝されかつ／または身体から分泌され得るポリマーとして定義される。
【００１４】
本発明に係る疎水性トリブロックコポリマー（Ａ）は、好ましくは、０℃〜３７℃の温度範囲全体で流体である。
【００１５】
上記にもかかわらず、コポリマーは、この温度範囲外の流体挙動も示し得る。流体という用語はまた、液体に置き換えられてもよいが、本発明では、両方とも溶媒または可塑剤を用いずに流体状態であるポリマーを指す。
【００１６】
本発明に係る疎水性トリブロックコポリマーの流体挙動は、せん断下でその動的粘度によって測定される。動的粘度は、コーンプレート型、タイプ４０ｍｍコーン、角度１：００：００度：分：秒のＴＡ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  ＡＲ２０００Ｅｘレオメータを用いて測定した。粘度測定時、温度は、３００秒間にわたり５ｓ-1のせん断速度で２０℃または３７℃のいずれかに一定に保った。平均粘度値を、ソフトウェア（Ｔｒｉｏｓ  ｓｏｆｔｗａｒｅ，ＴＡ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）を用いて計算した。このようにポリマーの平均動的（せん断）粘度が測定される。３７℃で測定される粘度は、好ましくは、３０Ｐａ．ｓ未満、より好ましくは２０Ｐａ．ｓ未満または１０Ｐａ．ｓ未満、５Ｐａ．ｓ未満、３Ｐａ．ｓ未満、２Ｐａ．ｓ未満、または最も好ましくは１Ｐａ．ｓ未満の値を有する。典型的に、３７℃における粘度は、０．１Ｐａ．ｓ超である。
【００１７】
２０℃で測定される粘度は、典型的に、０．１Ｐａ．ｓ超の値を有する。２０℃で測定される粘度は、好ましくは、３０Ｐａ．ｓ未満、より好ましくは２０Ｐａ．ｓ未満または１０Ｐａ．ｓ未満、最も好ましくは５Ｐａ．ｓ未満の値を有する。
【００１８】
本発明に係る疎水性トリブロックコポリマー（Ａ）の粘度は、２０℃の温度で０．１〜３０Ｐａ．ｓ、好ましくは０．２〜２０Ｐａ．ｓ、最も好ましくは０．３〜１０Ｐａ．ｓの範囲である。
【００１９】
本発明において使用される疎水性トリブロックコポリマー（Ａ）は、好ましくは、低い乃至非常に低いガラス転移温度を有する。ガラス転移温度（Ｔg）は、示差走査熱量測定（ＤＳＣ、２ｃｅｌｃ／分の加熱による第２の加熱曲線）によって測定され、温度遷移の中点として定義される。コポリマーは、好ましくは、−２０℃未満、より好ましくは−３０℃未満、最も好ましくは−４０℃未満のＴg（中点）を有する。
【００２０】
本発明のトリブロックコポリマーは、好ましくは、完全に非晶質であるか、または少なくとも好ましくは非常に低い溶融温度を有する。溶融温度（Ｔm）は、示差走査熱量測定（ＤＳＣ、２ｃｅｌｃ／分の加熱による第２の加熱曲線））によって測定され、温度遷移の中点として定義される。コポリマーは、好ましくは、検出可能な溶融ピークを有さないか、または２０℃未満、より好ましくは１０℃未満、最も好ましくは０℃未満のＴm（中点）を有する。
【００２１】
トリブロックコポリマー（Ａ）の数平均分子量（Ｍｎ）は、好ましくは、５００〜５，０００Ｄａ、より好ましくは６００〜３，０００Ｄａの範囲内、最も好ましくは７００〜２，５００Ｄａの範囲内である。本明細書において使用される数平均分子量（Ｍｎ）は、実験セクションにおいて規定されるように、サイズ排除クロマトグラフィーを用いて測定され得る。
【００２２】
本発明に関するブロック比は、末端基修飾を数に入れない両方の疎水性ブロックの数平均分子量（Ｍn）の合計（２つのＢブロックの合計）と、親水性Ａブロックとの間の比率である。所要のブロック比は、親水性Ａブロックの組成、疎水性ブロックの組成（すなわちＢブロック）、修飾度および有機末端基の性質に応じて決まる。
【００２３】
本発明の一実施形態において、Ｂブロックの数平均分子量の合計と、Ａブロックの数平均分子量との間の比率として定義されるブロック比は、０．３〜２０、好ましくは０．５〜１０の範囲である。
【００２４】
本発明において、有機末端基は、トリブロックコポリマーの粘度を低下させ、それによりトリブロックコポリマーの注入性を向上させる。有機末端基はまた、充填される医薬品有効成分の放出速度の制御に著しい影響を与える。より具体的には、有機末端基は、充填される医薬品有効成分の放出を遅らせる。
【００２５】
ＲＢＡＢＲブロックコポリマー（Ａ）の量は、組成物の総量に対して５５〜９８．９重量％の範囲である。典型的に、それは、組成物の少なくとも６０重量％、７０重量％、８０重量％、９０重量％であり得る。それは、９８重量％、９５重量％または９２重量％未満であり得る。
【００２６】
Ａ部分
疎水性トリブロックコポリマー（Ａ）中のＡブロックは、親水性ポリマーブロックである。好ましくは、Ａブロックは、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、プロピレンオキシド（ＰＰＯ）、ポリテトラメチレンオキシド（ＰＴＭＯ）、ＰＥＧおよびＰＰＯのコポリマー、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、ポリ［Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）−Ｌ−グルタミン］（ＰＨＥＧ）またはポリ（２−オキサゾリン）からなる群から選択される。ポリエチレングリコールは、ポリ（エチレンオキシド）（ＰＥＯ）としても知られているジオールであり、両方の名称は、本発明の趣旨で同義的に使用され得る。
【００２７】
より好ましくは、ＡブロックはＰＥＧであり、最も好ましくは、Ａブロックは直鎖状ＰＥＧである。
【００２８】
Ａブロックは、少なくとも１００Ｄａ、好ましくは少なくとも１２０Ｄａ、最も好ましくは少なくとも１５０Ｄａの数平均分子量（Ｍｎ）を有する。Ａブロックの数平均分子量は、好ましくは、最大で１，０００Ｄａである。例えば、Ａブロックの数平均分子量は、１８０〜７００Ｄａである。ＰＥＧなどのＡブロックの分子量は、本発明の疎水性トリブロックコポリマーの一部になると、結晶化しないかまたはゆっくりと結晶化するにとどまるように選択される。重要な態様は、ＰＥＧなどの特定のＡブロックが、それにより得られる疎水性トリブロックコポリマーの粘度に与える結果である。
【００２９】
Ｂ部分
疎水性トリブロックコポリマー（Ａ）は、Ａブロックに隣接する２つのＢブロックを含む。Ｂブロックは、疎水性である。Ｂは、少なくともモノマーＢ１およびモノマーＢ２を含むモノマーから作製される疎水性ブロックである。これは、Ｂが２つのモノマーから作製されるかまたは３つ以上のモノマーから作製され得ることを意味する。
【００３０】
Ｂ１およびＢ２は、疎水性ブロック中で最大の重量含量を有し、すなわち、最大の量で疎水性ブロック中に存在するモノマーがＢ１およびＢ２と呼ばれる。疎水性ブロック中で最大の重量含量を有するモノマーのうち、より低い分子量を有するものはＢ１と呼ばれ、より高い分子量を有するモノマーはＢ２と呼ばれる。
【００３１】
したがって、Ｂが２つのモノマーから作製される場合、これらの２つのモノマーは、Ｂ１およびＢ２と呼ばれる。例えば、Ｂがカプロラクトン（Ｍ＝１１４）およびラクチド（Ｍ＝１４４）から作製される場合、Ｂ１はカプロラクトンであり、Ｂ２はラクチドである。
【００３２】
Ｂが３つ以上のモノマーから作製される場合、最大の量で存在するモノマーがＢ１およびＢ２と呼ばれる。例えば、Ｂが５０重量％のカプロラクトン（Ｍ＝１１４）、３０重量％のラクチド（Ｍ＝１４４）および２０重量％のグリコリド（Ｍ＝１１６）から作製される場合、Ｂ１はカプロラクトンであり、Ｂ２はラクチドであり、Ｂが２０重量％のカプロラクトン、５０重量％のラクチドおよび３０重量％のグリコリドから作製される場合、Ｂ１はグリコリドであり、Ｂ２はラクチドである。
【００３３】
モノマーＢ１およびＢ２は、環状モノマーであり得、Ｂブロックのそれぞれは、２００〜１，５００Ｄａの数平均分子量範囲を有し得る。好ましくは、各Ｂブロックの数平均分子量は、２２５〜１，２５０Ｄａ、より好ましくは２５０〜１，０００Ｄａ、または３００〜８００Ｄａの範囲である。
【００３４】
両方のＢブロックは同じまたは異なる組成を有してもよく、好ましくは、両方のＢブロックは同じ組成を有する。
【００３５】
モノマーＢ１およびＢ２は、環状モノマーであり得、グリコリド、ラクチド、ε−カプロラクトン、ｐ−ジオキサノン（１，４−ジオキサン−２−オン）、炭酸トリメチレン（１，３−ジオキサン−２−オン）、１，４−ジオキセパン−２−オン（その二量体１，５，８，１２−テトラオキサシクロテトラデカン−７，１４−ジオンを含む）、１，５−ジオキセパン−２−オン、６，６−ジメチル−１，４−ジオキサン−２−オン、２，５−ジケトモルホリン、ピバロラクトン、χ−ジエチルプロピオラクトン、炭酸エチレン、シュウ酸エチレン、３−メチル−１，４−ジオキサン−２，５−ジオン、３，３−ジエチル−１，４−ジオキサン−２，５−ジオン、６，８−ジオキサビシクロオクタン−７−オン、β−プロピオラクトン、γ−ブチロラクトン、δ−バレロラクトン、ε−デカラクトン、３−メチル−１，４−ジオキサン−２，５−ジオン、１，４−ジオキサン−２，５−ジオン、２，５−ジケトモルホリン、α，α−ジエチルプロピオラクトン、γ−ブチロラクトン、１，４−ジオキセパン−２−オン、１，５−ジオキセパン−２−オン、６，６−ジメチル−ジオキセパン−２−オン、６，８−ジオキサビシクロオクタン−７−オン、５，５−ジメチル−１，３−ジオキサン−２−オンからなる群から、または好ましくはグリコリド、ラクチド、ε−カプロラクトン、δ−バレロラクトン、１，３−ジオキサン−２−オン（炭酸トリメチレンとしても知られている）、５，５−ジメチル−１，３−ジオキサン−２−オン、１，４−ジオキサン−２−オン、１，４−ジオキセパン−２−オンおよび１，５−ジオキセパン−２−オンからなる群から選択され得る。
【００３６】
モノマーＢ１およびＢ２は、最も好ましくは、グリコリド、ラクチド、ε−カプロラクトン、δ−バレロラクトン、１，３−ジオキサン−２−オン（炭酸トリメチレンとしても知られている）および１，４−ジオキサン−２−オン（ｐ−ジオキサノンとしても知られている）からなる群から選択される。
【００３７】
上述されるモノマー単位を含有する疎水性ブロックは、主にエステルおよび／またはカーボネート結合を含有し、それにより加水分解可能になる。それらは、ある範囲の明確な分子量で調製され得る。
【００３８】
モノマーＢ１およびＢ２の選択は、それらが、それにより得られる疎水性トリブロックコポリマーの粘度にどのように影響を与えるかに基づく。別の重要な態様は、それらが、インビボで疎水性トリブロックコポリマーを用いて達成しようとする生体吸収の速度およびプロファイルに与える影響である。上記のモノマーを組み合わせることによって作製されるポリエステルは、しばらくの間にわたって研究されており、組合せのいくつかは周知である。
【００３９】
ほとんどの場合、組合せは、２つのみのモノマーＢ１およびＢ２を含むが、Ｂブロック中に３つの異なるモノマーを用いた例が可能であり、有益であり得る。
【００４０】
好ましい実施形態において、各Ｂブロック（すなわちモノマーＢ１およびＢ２）は、ε−カプロラクトンと、ラクチド、グリコリド、δ−バレロラクトン、ｐ−ジオキサノンもしくは炭酸トリメチレンのいずれか１つとの組合せ；またはδ−バレロラクトンと、ラクチド、グリコリド、ｐ−ジオキサノンもしくは炭酸トリメチレンのいずれか１つとの組合せ；またはｐ−ジオキサノンと、ラクチド、グリコリドもしくは炭酸トリメチレンのいずれか１つとの組合せ；または炭酸トリメチレンと、ラクチドもしくはグリコリドのいずれか１つとの組合せ；またはラクチドと、δ−バレロラクトン、ｐ−ジオキサノンのいずれか１つとの組合せである。
【００４１】
本明細書において「Ｘ」によって示されることもある、モノマーＢ１およびモノマーＢ２の総重量に対するモノマーＢ１の量は、例えば、１０〜９０重量％、典型的に２０〜８０重量％、３０〜７０重量％、４０〜６０重量％または４５〜５５重量％であり得る。
【００４２】
Ｒ末端基
本発明に係る組成物において使用される疎水性トリブロックコポリマー（Ａ）は、２つのＲ末端基を含む。Ｂ−Ａ−Ｂトリブロックは、Ｂブロックの末端ヒドロキシル基を用いることによって修飾される。好ましくは、Ｒは、独立して、ＨまたはＣ１〜Ｃ３０有機部分であり、より好ましくは、Ｒは、Ｃ１〜Ｃ３０有機部分である。有機部分は、直鎖状、環状または分枝鎖状であり得る。有機部分は、例えばＯ、ＮおよびＩのようなヘテロ原子を含有し得る。有機部分の例は、脂肪酸残基、エーテル残基またはウレタン残基である。脂肪酸残基は、脂肪酸または活性化脂肪酸と、Ｂブロックの末端のヒドロキシル基との反応によって得られる。脂肪酸は、１〜３０個の炭素原子、好ましくは２〜２０個の炭素原子の飽和または不飽和脂肪酸の選択を含む。脂肪酸基は、例えばヨウ素のようなヘテロ原子を含有し得る。ヨウ素の存在は、動物またはヒト身体への注入中または注入後にデポーを可視化するのを補助し得る。
【００４３】
Ｃ１〜Ｃ３０脂肪酸は、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、酪酸、ペンタン酸、ヘキサン酸、ヘプタン酸、オクタン酸、ノナン酸、デカン酸、ウンデカン酸、ドデカン酸、トリデカン酸、テトラデカン酸、ペンタデカン酸、ヘキサデカン酸、ヘプタデカン酸、オクタデカン酸、ノナデカン酸、エイコサン酸、ヘンエイコサン酸、ドコサン酸、トリコサン酸、テトラコサン酸、ペンタコサン酸、ヘキサコサン酸、ヘプタコサン酸、オクタコサン酸、ノナコサン酸、トリアコンタン酸、カプロン酸、カプリル酸、カプリン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、ミリストレイン酸、パルミチン酸、パルミトレイン酸、ステアリン酸、オレイン酸、リノール酸、α−リノール酸、γ−リノール酸、ステアリドン酸、ルーメン酸、β−カレンド酸、エレオステアリン酸、プニカ酸、パリナリン酸、ピノレン酸、アラキジン酸、エイコセン酸、エイコサジエン酸、エイコサトリエン酸、ジホモ−γ−リノレン酸、ミード酸、エイコサテトラエン酸、アラキドン酸、またはエイコサペンタエン酸からなる群から選択され得る。
【００４４】
好ましくは、Ｒは、アセチル基、プロピオニル基、ブチリル基、ペンタノイル基、ヘキサノイル基、ノナノイル基、ドデカノイル基、ペンタデカノイル基、２−ｎ−ヘキシルデカノイル基、ステアロイル基またはベンゾイル基から選択され、ここで、各Ｒは、例えばヨウ素のようなヘテロ原子で任意選択的に置換され得る。Ｒは、直鎖状、分枝状または環状および飽和または不飽和であり得る。
【００４５】
天然の脂肪酸は、アセチル−補酵素Ａサイクルを通して容易に分解可能である。さらに、これらの酸は、本発明の範囲内で使用される量においてインビボで毒性を示すリスクがより低い。しかしながら、それらのいくつかは、有益または有害な生物学的活性を有し得る。当業者は、身体における適用および位置を考えて脂肪酸の選択を考慮する必要があるであろう。長鎖脂肪酸誘導体による修飾は、一般に、ポリマーの吸収時間を増加させる。
【００４６】
Ｂ−Ａ−Ｂトリブロックコポリマーへの脂肪酸のカップリングは、限定はされないが、イソシアネートのようなカップリング剤の使用または脂肪酸もしくはポリマー末端基のいずれかの誘導体化を含み得る。脂肪酸またはポリマーの官能基は、限定はされないが、カルボニルジイミダゾール、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、パラ−ニトロフェニルクロロホルメート、無水コハク酸のような活性化剤を用いることにより、カップリングを促進するように活性化され得る。限定はされないが、酸塩化物、無水物、イソシアネートのような脂肪酸の直接の誘導体も、特にそれらのいくつかが市販品として容易に入手可能であるために使用され得る。
【００４７】
これらのカップリング方法は、当業者に周知である。
【００４８】
ある用途では、特殊な部分が、末端基修飾に使用される脂肪酸誘導体に導入される必要があり得る。例えば、不飽和脂肪酸の使用は、不飽和脂肪酸鎖間で化学反応を起こさせて、ポリマー架橋を達成し得る。架橋は、通常、ポリマーの機械的特性および分解プロファイルを変更するために行われる。それらの架橋性部分間の活性化および分子間反応は、通常、放射線源、外部の化学反応または刺激、またはそれらの組合せによって引き起こされる。放射線の例としては、限定はされないが、熱、赤外線源、紫外線源、電子線源、マイクロ波源、Ｘ線源、可視光源［単色か否かにかかわらず］およびγ線が挙げられる。外部の反応または刺激としては、限定はされないが、ｐＨ、酸化／還元反応、インビボで存在する化学物質（ガス、タンパク質、酵素、抗体など）との反応、二重系（例えば、２つ以上の反応性基を含有する分子）として知られている、身体への導入時に組成物に加えられる化学物質との反応が挙げられる。
【００４９】
末端基はまた、例えば酸素、窒素またはヨウ素原子を含有するヘテロ原子アルキルの群から選択され得る。
【００５０】
末端基の選択は、それらが、それにより得られる疎水性トリブロックコポリマーの粘度に与える影響に基づく。別の重要な態様は、それらがインビボでの（半）固体の形成およびその柔軟性に与える影響である。別の重要な態様は、治療活性物質が形成される（半）固体に組み込まれる場合、それらがこのような物質の放出速度に与える影響である。
【００５１】
好ましいブロックコポリマー
一実施形態において、式１に従う疎水性トリブロックコポリマー（Ａ）は、Ａが、１５０〜１，０００Ｄａの数平均分子量（Ｍｎ）を有する直鎖状ポリエチレングリコール部分であり、Ｂが、ε−カプロラクトン、δ−バレロラクトン、グリコリド、ラクチド、１，４−ジオキサン−２−オン（ｐ−ジオキサノンとしても知られている）および１，３−ジオキサン−２−オン（炭酸トリメチレンとしても知られている）からなる群から、より好ましくはε−カプロラクトン、δ−バレロラクトン、グリコリド、ラクチドの群から選択される少なくとも２つのタイプのモノマーＢ１およびＢ２を含むポリエステル部分を表し、Ｒが、独立して、Ｈまたはヘテロ原子を任意選択的に含有するＣ１〜Ｃ３０脂肪酸残基であるコポリマーであり、トリブロックコポリマーの数平均分子量（Ｍｎ）は、５００〜５，０００Ｄａ、好ましくは６００〜３，０００Ｄａ、より好ましくは７００〜２，５００Ｄａの範囲内であり、２０℃で測定されるせん断粘度は、３０Ｐａ．ｓ未満、より好ましくは２０Ｐａ．ｓ未満または１０Ｐａ．ｓ未満、最も好ましくは５Ｐａ．ｓ未満の値を有し、このコポリマーは、−２０℃未満、より好ましくは−３０℃未満、最も好ましくは−４０℃未満のＴg（中点）を有する。
【００５２】
別の実施形態において、式１に従う疎水性トリブロックコポリマー（Ａ）は、Ｂブロックの数平均分子量の合計と、Ａブロックの数平均分子量との間の比率として定義されるブロック比が０．５〜１０の範囲であり、Ａブロックが直鎖状ポリエチレングリコールブロックであり、Ｒがアセチル基、プロピオニル基、ヘキサノイル基、ノナノイル基、ドデカノイル基、ペンタデカノイル基、ステアロイル基またはベンゾイル基から選択され、各Ｒが任意選択的に置換され得る、トリブロックコポリマーである。
【００５３】
さらなる実施形態において、式１に従う疎水性トリブロックコポリマー（Ａ）は、Ａが、１５０〜７００Ｄａの数平均分子量（Ｍｎ）を有するポリエチレングリコールであり、各Ｂブロックが、ε−カプロラクトンと、ラクチド、グリコリド、δ−バレロラクトン、ｐ−ジオキサノンもしくは炭酸トリメチレンのいずれか１つとの組合せ；またはδ−バレロラクトンと、ラクチド、グリコリド、ｐ−ジオキサノンもしくは炭酸トリメチレンのいずれか１つとの組合せ；またはｐ−ジオキサノンと、ラクチド、グリコリドもしくは炭酸トリメチレンとの組合せ；または炭酸トリメチレンと、ラクチドもしくはグリコリドとの組合せであり、Ｒがアセチル基、プロピオニル基、ヘキサノイル基、ノナノイル基、ドデカノイル基、ペンタデカノイル基、ステアロイル基またはベンゾイル基から選択され、各Ｒが任意選択的に置換され得る、コポリマーであり、ブロックコポリマー全体の数平均分子量（Ｍｎ）は、７５０〜３，０００Ｄａ、より好ましくは１，０００〜２，５００Ｄａの範囲内であり、２０℃で測定されるせん断粘度は、３０Ｐａ．ｓ未満、好ましくは２０Ｐａ．ｓ未満、より好ましくは１０Ｐａ．ｓ未満、最も好ましくは５Ｐａ．ｓ未満の値を有し、このコポリマーは、−２０℃未満、より好ましくは−３０℃未満、最も好ましくは−４０℃未満のＴg（中点）を有する。
【００５４】
界面活性剤（Ｂ）
本発明において適用される界面活性剤（Ｂ）は、好ましくは、生体吸収性界面活性剤である。界面活性剤は、非イオン性、アニオン性およびカチオン性界面活性剤などのいくつかの種類に分けられ得る。非イオン性界面活性剤の例は、ポロキサマー（商標Ｓｙｎｐｅｒｏｎｉｃｓ、ＰｌｕｒｏｎｉｃｓおよびＫｏｌｌｉｐｈｏｒによっても知られている）およびポリソルベート（Ｔｗｅｅｎ−２０およびＴｗｅｅｎ−８０のような）である。他の非イオン性界面活性剤は、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）およびポリビニルアルコール（ＰＶＡ）である。アニオン性界面活性剤の例は、ラウリル硫酸アンモニウム、ラウリル硫酸ナトリウム、ラウリルエーテル硫酸ナトリウム（ＳＬＥＳ）、およびミレス硫酸ナトリウムである。カチオン性界面活性剤の例は、塩化セチルピリジニウム、塩化ベンザルコニウムおよびジメチルジオクタデシルアンモニウムクロリドである。本発明は、両親媒性直鎖状、分枝鎖状、グラフト、くし形または星形ブロックコポリマー（ジブロック、トリブロックまたはマルチブロックコポリマー）から構成される生体吸収性非イオン性界面活性剤（以後、「ポリマー界面活性剤（Ｂ）」とも呼ばれる）を開示する。
【００５５】
組成物中に存在する界面活性剤の量は、少なくとも０．１重量％、０．２重量％または０．３重量％である。通常、界面活性剤の量は、全てａ）、ｂおよびｃ）の合計に対して１５重量％、１０重量％または５重量％未満である。好ましくは、界面活性剤の量は、０．２〜１５重量％、０．３〜１０重量％または０．３〜５重量％の範囲である。
【００５６】
好ましい生体吸収性界面活性剤（Ｂ）は、両親媒性分枝鎖状または直鎖状コポリマー（ジブロック、トリブロック、マルチブロック、グラフトおよび／または星形コポリマー）である。好ましい界面活性剤は、式２に従う分子（ポリマー界面活性剤（Ｂ）：
Ｒｓ−Ｂｓ−Ａｓ−Ｂｓ−Ｒｓ  式２
であり、式中、Ａｓが、少なくとも１，０００Ｄａの数平均分子量（Ｍｎ）を有する親水性ブロックであり、Ｂｓが、少なくともモノマーＢｓ１およびモノマーＢｓ２を含むモノマーから作製される疎水性ブロックであり、Ｂｓ１およびＢｓ２が疎水性ブロック中で最大の重量含量を有し、かつＢｓ１がＢｓ２より低い分子量を有し、およびＲｓが、ＨまたはＣ１〜Ｃ３０有機部分である末端基である。
【００５７】
ポリマー界面活性剤（Ｂ）（式２）は、ポリマー界面活性剤（Ｂ）のブロックＡｓの分子量が疎水性トリブロックコポリマー（Ａ）のブロックＡの分子量より高いことを除いて、疎水性トリブロックコポリマー（Ａ）（式１）と同じタイプのブロックからなり得る。
【００５８】
ポリマー界面活性剤（Ｂ）は、比較的高い分子量を有する親水性ブロックＡｓを有し、これは、比較的親水性の性質を有するトリブロックコポリマー（Ｂ）をもたらす。疎水性トリブロックコポリマー（Ａ）および水を含む組成物へのポリマー界面活性剤（Ｂ）の添加が、疎水性トリブロックコポリマー（Ａ）の連続相に分散された水性相の水滴のエマルションをもたらすことが意外にも分かった。したがって、理論に制約されることは意図しないが、親水性トリブロックコポリマー（Ｂ）が界面活性剤として作用するものと考えられる。
【００５９】
Ｒｓは、好ましくは、Ｈ、アセチル基、プロピオニル基、ブチリル基、ペンタノイル基、ヘキサノイル基、ノナノイル基、ドデカノイル基、ペンタデカノイル基、２−ｎ−ヘキシルデカノイル基、ステアロイル基またはベンゾイル基からなる群から選択される。
【００６０】
好ましくは、ポリマー界面活性剤（Ｂ）は、Ａｓが、サイズ排除クロマトグラフィーで測定される１，０００〜３，０００Ｄａの数平均分子量（Ｍｎ）を有する直鎖状ポリエチレングリコールブロックであり、Ｂｓが、ラクチド、ε−カプロラクトン、グリコリド、ｐ−ジオキサノン、炭酸トリメチレン、δ−バレロラクトンからなる群から選択される少なくとも２つの環状モノマーを含む疎水性ブロックであり、各Ｂｓブロックが、サイズ排除クロマトグラフィーで測定される４００〜３，０００Ｄａの数平均分子量（Ｍｎ）を有し、Ｒｓが、ＨまたはＣ１〜Ｃ２０脂肪酸残基の末端基である、両親媒性トリブロックコポリマー（Ｂ）である。
【００６１】
ポリマー界面活性剤（Ｂ）の別の好ましい実施形態は、室温で水溶性であり、３０℃以上の高温で生体吸収性ヒドロゲルを形成する特性を有する直鎖状両親媒性トリブロックコポリマー（Ｂ）である。
【００６２】
好ましくは、Ａｓは、ＰＥＧ部分である。好ましくは、Ａｓ部分の数平均分子量は、サイズ排除クロマトグラフィーで測定される１，０００〜３，０００Ｄａ、好ましくは少なくとも１，２５０Ｄａ、より好ましくは少なくとも１，５００Ｄａの範囲である。
【００６３】
好ましい実施形態において、ポリマーブロックＢおよびＢｓは、同じタイプのモノマーを含み、すなわち、モノマーＢ１およびモノマーＢｓ１は同じであり、かつモノマーＢ２およびモノマーＢｓ２は同じである。
【００６４】
本明細書において「Ｘ」によって示される、モノマーＢ１およびモノマーＢ２の総重量に対するモノマーＢ１の量は、例えば、１０〜９０重量％、典型的に２０〜８０重量％、３０〜７０重量％、４０〜６０重量％または４５〜５５重量％であり得る。
【００６５】
本明細書において「Ｘｓ」によって示される、モノマーＢｓ１およびモノマーＢｓ２の総重量に対するモノマーＢｓ１の量は、例えば、１０〜９０重量％、典型的に２０〜８０重量％、３０〜７０重量％、４０〜６０重量％または４５〜５５重量％であり得る。
【００６６】
好ましくは、ＸとＸｓとの差は、最大で４０重量％、より好ましくは最大で２０重量％、より好ましくは最大で１０重量％、より好ましくは最大で５重量％であり、最も好ましくは、ＸはＸｓと同じである。
【００６７】
ＢおよびＢｓブロック中に同じモノマー（すなわちＢ１＝Ｂｓ１およびＢ２＝Ｂｓ２）を有することの利点は、組成物からの親水性医薬品有効成分（ＡＰＩ）の放出速度が意外にもかなりの程度まで低下されることである。前記ＡＰＩの低いまたはさらに非常に低いバースト放出とともに、非常に長い放出時間が報告され得る。特に、実質的に同じ比率の各ＢおよびＢｓブロック中の同じモノマーの存在は、ＡＰＩのさらに増加した放出時間をもたらす。換言すると、ポリマー界面活性剤が、エマルションの連続相を形成するように疎水性トリブロックコポリマーに合わせて調整された化学組成である場合、前記ＡＰＩの放出は、意外にも十分に制御され得る。
【００６８】
ポリマー界面活性剤（Ｂ）の好ましい一実施形態は、Ａｓが、サイズ排除クロマトグラフィーで測定される１，２５０〜１，７５０Ｄａの数平均分子量（Ｍｎ）を有する直鎖状ポリエチレングリコールブロックであり、Ｂｓが、ラクチド、ε−カプロラクトンおよびグリコリドからなる群から選択される少なくとも２つの環状モノマーを含む疎水性ブロックであり、各Ｂｓブロックが、サイズ排除クロマトグラフィーで測定される１，１００〜１，８００Ｄａの数平均分子量（Ｍｎ）を有し、Ｒｓが、Ｈまたはアセチル、プロピオニル、ヘキサノイルまたはドデカノイル基の末端基である、直鎖状両親媒性トリブロックコポリマー（Ｂ）である。
【００６９】
ポリマー界面活性剤（Ｂ）の別の好ましい実施形態は、Ａｓが、サイズ排除クロマトグラフィーで測定される１，４５０〜１，５５０Ｄａの数平均分子量（Ｍｎ）を有する直鎖状ポリエチレングリコールブロックであり、Ｂｓが、ラクチド、ε−カプロラクトンからなる群から選択される少なくとも２つの環状モノマーを含む疎水性ブロックであり、各Ｂｓブロックが、サイズ排除クロマトグラフィーで測定される１，５００〜１，７５０Ｄａの数平均分子量（Ｍｎ）を有し、Ｒｓが、アセチルまたはプロピオニル基の末端基である、直鎖状両親媒性トリブロックコポリマー（Ｂ）である。
【００７０】
ポリマー界面活性剤（Ｂ）の別の好ましい実施形態は、Ａｓが、サイズ排除クロマトグラフィーで測定される１，４５０〜１，５５０Ｄａの数平均分子量（Ｍｎ）を有する直鎖状ポリエチレングリコールブロックであり、Ｂｓが、ラクチド、ε−カプロラクトンからなる群から選択される少なくとも２つの環状モノマーを含む疎水性ブロックであり、各Ｂｓブロックが、サイズ排除クロマトグラフィーで測定される１，３００〜１，４００Ｄａの数平均分子量（Ｍｎ）を有し、Ｒｓが、Ｈまたはアセチルまたはプロピオニル基の末端基である、直鎖状両親媒性トリブロックコポリマー（Ｂ）である。
【００７１】
ポリマー界面活性剤（Ｂ）の別の好ましい実施形態は、Ａｓが、サイズ排除クロマトグラフィーで測定される１，０００〜３，０００Ｄａの数平均分子量（Ｍｎ）を有する直鎖状メトキシポリエチレングリコールブロックであり、Ｂｓが、ラクチド、ε−カプロラクトンからなる群から選択される少なくとも２つの環状モノマーを含む疎水性ブロックであり、Ｂｓブロックが、サイズ排除クロマトグラフィーで測定される１，０００〜２，０００Ｄａの数平均分子量（Ｍｎ）を有し、Ｒｓが、Ｈまたはアセチルまたはプロピオニル基の末端基である、直鎖状両親媒性ジブロックコポリマー（Ｂ）である。
【００７２】
一実施形態において、少なくとも２つのポリマー界面活性剤（Ｂ）が組成物中に存在する。第２のポリマー界面活性剤（Ｂ）の添加は、特に１〜８℃のより低い温度で組成物の長期安定性をさらに向上させ得る。
【００７３】
含水量
本発明に係る組成物は、水を含む。水の量は、好ましくは、少なくとも１重量％、２重量％または４重量％である。一般に、水の量は、成分ａ）、ｂ）およびｃ）の合計に対して３０重量％、２０重量％または１０重量％未満である。水の量は、好ましくは１〜３０重量％、２〜２０重量％または４〜１０重量％の範囲である。
【００７４】
組成物の粘度
本発明に係る組成物は、０℃〜３７℃の温度範囲全体で流体である。
【００７５】
上記にもかかわらず、組成物は、この温度範囲外の流体挙動も示し得る。流体という用語はまた、液体に置き換えられてもよいが、本発明では、両方とも溶媒または可塑剤を用いずに流体状態である組成物を指す。
【００７６】
本発明に係る組成物の流体挙動は、せん断下でその動的粘度によって測定される。動的粘度は、コーンプレート型、タイプ４０ｍｍコーン、角度１：００：００度：分：秒のＴＡ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  ＡＲ２０００Ｅｘレオメータを用いて測定した。粘度測定時、温度は、３００秒間にわたり５ｓ-1のせん断速度で２０℃または３７℃のいずれかに一定に保った。平均粘度値を、ソフトウェア（Ｔｒｉｏｓ  ｓｏｆｔｗａｒｅ，ＴＡ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）を用いて計算した。このように組成物の平均動的（せん断）粘度が測定される。３７℃で測定される粘度は、好ましくは、３０Ｐａ．ｓ未満、より好ましくは２０Ｐａ．ｓ未満または１０Ｐａ．ｓ未満、５Ｐａ．ｓ未満、３Ｐａ．ｓ未満、２Ｐａ．ｓ未満、または最も好ましくは１Ｐａ．ｓ未満の値を有する。典型的に、３７℃における粘度は、０．１Ｐａ．ｓ超である。
【００７７】
２０℃で測定される粘度は、典型的に、０．１Ｐａ．ｓ超の値を有する。２０℃で測定される粘度は、好ましくは、３０Ｐａ．ｓ未満、より好ましくは２０Ｐａ．ｓ未満または１０Ｐａ．ｓ未満、最も好ましくは５Ｐａ．ｓ未満の値を有する。
【００７８】
本発明に係る組成物の粘度は、２０℃の温度で０．１〜３０Ｐａ．ｓ、好ましくは０．２〜２０Ｐａ．ｓ、最も好ましくは０．３〜１０Ｐａ．ｓの範囲である。
【００７９】
本発明の好ましい組成物
一実施形態において、本発明は、
ａ）７０〜９７．８重量％の、式（１）
Ｒ−Ｂ−Ａ−Ｂ−Ｒ（１）
の少なくとも１つのタイプの疎水性トリブロックコポリマー（Ａ）と、
ｂ）０．２〜１０重量％の、式（２）
Ｒｓ−Ｂｓ−Ａｓ−Ｂｓ−Ｒｓ（２）
に従う少なくとも１つのタイプのポリマー界面活性剤（Ｂ）と、
ｃ）２〜２０重量％の水と
を含む組成物であって、
Ａが、１００〜１，０００Ｄａの平均分子量（Ｍｎ）を有する親水性ブロックであり、Ｂが、少なくともモノマーＢ１およびモノマーＢ２を含むモノマーから作製される疎水性ブロックであり、Ｂ１およびＢ２が疎水性ブロック中で最大の重量含量を有し、かつＢ１がＢ２より低い分子量を有し、Ｒが、ＨまたはＣ１〜Ｃ３０有機部分である末端基であり、
Ａｓが、少なくとも１，０００Ｄａの数平均分子量（Ｍｎ）を有する親水性ブロックであり、Ｂｓが、少なくともモノマーＢｓ１およびモノマーＢｓ２を含むモノマーから作製される疎水性ブロックであり、Ｂｓ１およびＢｓ２が疎水性ブロック中で最大の重量含量を有し、かつＢｓ１がＢｓ２より低い分子量を有し、およびＲｓが、ＨまたはＣ１〜Ｃ３０有機部分である末端基であり、
Ｂ１、Ｂ２、Ｂｓ１およびＢｓ２が、ε−カプロラクトン、δ−バレロラクトン、グリコリド、ラクチド、１，４−ジオキサン−２−オン（ｐ−ジオキサノンとしても知られている）および１，３−ジオキサン−２−オン（炭酸トリメチレンとしても知られている）からなる群から選択され、
疎水性トリブロックコポリマー（Ａ）が０℃〜３７℃の温度範囲で流体であり、重量％がａ）、ｂ）およびｃ）の合計に対するものである、組成物に関する。好ましくは、ＲおよびＲｓが、独立して、Ｈ、アセチル、プロピオニル、ブチリル、ヘキサノイル、ドデカノイル、およびベンゾイルからなる群から選択される。
【００８０】
別の実施形態において、本発明は、
ａ）８５〜９５．７重量％の、式（１）
Ｒ−Ｂ−Ａ−Ｂ−Ｒ（１）
の少なくとも１つのタイプの疎水性トリブロックコポリマー（Ａ）と、
ｂ）０．３〜５重量％の、式（２）
Ｒｓ−Ｂｓ−Ａｓ−Ｂｓ−Ｒｓ（２）
に従う少なくとも１つのタイプのポリマー界面活性剤（Ｂ）と、
ｃ）４〜１０重量％の水と
を含む組成物であって、
Ａが、１００〜１，０００Ｄａの平均分子量（Ｍｎ）を有する親水性ブロックであり、Ｂが、少なくともモノマーＢ１およびモノマーＢ２を含むモノマーから作製される疎水性ブロックであり、Ｂ１およびＢ２が疎水性ブロック中で最大の重量含量を有し、かつＢ１がＢ２より低い分子量を有し、Ｒが、ＨまたはＣ１〜Ｃ３０有機部分である末端基であり、
Ａｓが、少なくとも１，０００Ｄａの数平均分子量（Ｍｎ）を有する親水性ブロックであり、Ｂｓが、少なくともモノマーＢｓ１およびモノマーＢｓ２を含むモノマーから作製される疎水性ブロックであり、Ｂｓ１およびＢｓ２が疎水性ブロック中で最大の重量含量を有し、かつＢｓ１がＢｓ２より低い分子量を有し、およびＲｓが、ＨまたはＣ１〜Ｃ３０有機部分である末端基であり、
Ｂ１、Ｂ２、Ｂｓ１およびＢｓ２が、ε−カプロラクトン、δ−バレロラクトン、グリコリド、ラクチド、１，４−ジオキサン−２−オン（ｐ−ジオキサノンとしても知られている）および１，３−ジオキサン−２−オン（炭酸トリメチレンとしても知られている）からなる群から選択され、
疎水性トリブロックコポリマー（Ａ）が０℃〜３７℃の温度範囲で流体であり、重量％がａ）、ｂ）およびｃ）の合計に対するものである、組成物に関する。
【００８１】
好ましくは、ＲおよびＲｓが、独立して、Ｈ、アセチル、プロピオニル、ブチリル、ヘキサノイル、ドデカノイル、およびベンゾイルからなる群から選択される。
【００８２】
医薬組成物
好ましくは、本発明に係る組成物は、少なくとも１つの医薬品有効成分（ＡＰＩ）をさらに含む。この場合、本発明に係る組成物は、医薬組成物として使用され得る。医薬品有効成分の量は、好ましくは、医薬組成物の総重量に対して０．０１〜１５重量％である。
【００８３】
好ましくは、医薬組成物は、上に定義される組成物のいずれか１つを含む。医薬組成物の粘度は、大部分がポリマーエマルションによって決定される一方、治療活性物質は、配合される組成物の注入性にわずかな影響を与えるに過ぎないことが意外にも分かった。これは、さらに、治療活性物質の分子量および医薬品有効成分の性質と無関係である。さらに、本発明の医薬組成物の利点は、例えばリゾチームのような親水性医薬品有効成分でさえ遅い乃至非常に遅い放出を示したことである。
【００８４】
１つもしくは複数の医薬品有効成分（ＡＰＩ）、または当業者により治療活性物質もしくは生物活性物質とも呼ばれるものは、処置されたヒトまたは動物において疾患を予防、減速、緩和もしくは治癒させることが可能であるか、または所望の治療効果をもたらすことが可能な任意の組の分子、細胞または細胞物質を指す。ヒト疾患も、世界保健機関（Ｗｏｒｌｄ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ）によってＷＨＯ  ＩＣＤ−１０（２００７）分類資料において定義されるように呼ばれる。
【００８５】
本発明の組成物中の医薬品有効成分は、任意の治療有効成分、および任意の診断剤、および任意の造影剤などの有効成分であり得、かつヒトを含む動物に予防効果のある医薬品有効成分、およびヒトを含む動物から疼痛、膨張もしくは炎症などの疾患の症状、もしくは原因、もしくは結果または疾患を緩和するか、抑制するか、またはさらに完全になくす効果を有する治療有効成分を含む。例えば、医薬品有効成分は、身体に通常送達される広い種類の化合物を含み得る。例えば、これらの医薬品有効成分としては、限定はされないが、抗感染薬（抗生物質、抗ウイルス薬、殺真菌剤、殺疥癬虫剤または殺シラミ剤を含む）；消毒剤（例えば、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、グルコン酸クロルヘキシジン、酢酸マフェニド、塩化メチルベンゼトニウム、ニトロフラゾン、ニトロメルゾールなど）；鎮痛薬および併用鎮痛薬；食欲抑制薬；駆虫薬、抗関節炎薬、抗ぜんそく薬；抗けいれん薬；抗鬱薬；抗糖尿病薬；止瀉薬；抗ヒスタミン薬；抗炎症薬、抗片頭痛薬；抗嘔吐薬；抗新生物薬；抗パーキンソン病薬；かゆみ止め薬；抗精神病薬；解熱薬、鎮痙薬；抗コリン作用薬；交感神経様作用薬；キサンチン誘導体；カリウムおよびカルシウムチャネル遮断薬を含む心臓血管薬；β遮断薬；α遮断薬および抗不整脈薬；抗高血圧薬；利尿薬および抗利尿薬；全身、冠状、末梢および脳血管拡張薬を含む血管拡張薬；中枢神経系刺激薬；血管収縮薬；鬱血除去薬を含む咳止めおよび風邪薬；ホルモンおよびステロイド（例えば、エストロゲン、プロゲスチン、アンドロゲン、アドレノコルチコイド、コルチコステロイドなど）；睡眠薬；免疫抑制剤；筋弛緩薬；副交感神経遮断薬；精神刺激薬；鎮静剤および精神安定剤、麻酔薬（例えば、モルヒネ、メペリジン、コデインなど）、局所麻酔薬（例えば、ブピバカイン、ジブカイン、メピバカイン、プロカイン、リドカイン、テトラカインなどのアミド型またはアニリド型局所麻酔薬）；制吐薬（例えば、オンダンセトロン、グラニセトロン、トロピセトロン、メトクロプラミド、ドンペリドン、スコポラミドなど）；抗血管新生薬（例えば、コンブレスタチン、コントルトロスタチン、抗ＶＥＧＦ薬など）、多糖類、免疫調節剤、抗血栓性化合物、跛行治療薬（ａｎｔｉ−ｃｌａｕｄｉｃａｔｉｎｇ  ｄｒｕｇ）、アテローム性動脈硬化症治療薬、抗ヒスタミン薬、抗癌剤（例えば、メクロレタミン、シクロホスファミド、フルオロウラシル、チオグアニン、カルムスチン、ロムスチン、メルファラン、クロラムブシル、ストレプトゾシン、メトトレキサート、ビンクリスチン、ブレオマイシン、ビンブラスチン、ビンデシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、タモキシフェン、パクリタキセル、エピルビシン、マイトマイシンＣ、シスプラチン、カルボプラチンなど、および光線力学的治療法に使用される光増感剤、血管治療薬、眼科用薬、アミノ酸、ビタミン、神経伝達物質、神経ホルモン、シグナル伝達分子、向精神薬、合成薬、半合成薬、天然薬およびこれらに由来する物質、または上記の組合せが挙げられる。医薬品有効成分はまた、限定はされないが、（組み換え）タンパク質、ＰＥＧ化タンパク質およびペプチド（例えば、インスリン、エリスロポエチン、エキセナチド、グルカゴン様ペプチド−１、形態形成タンパク質（例えば、骨形態形成タンパク質、形質転換増殖因子、線維芽細胞増殖因子、腫瘍壊死因子）、受容体拮抗薬（例えば、インターロイキン−１受容体拮抗薬）、抗癌タンパク質（例えば、ネオカルジノスタチン、Ｌ−アスパラギナーゼ、インターロイキン−２、ベバシズマブおよび他の抗ＶＥＧＦ薬）、予防用ワクチン、治療用ワクチン、遺伝物質（例えば、核酸配列、ポリヌクレオチド、（アンチセンス）オリゴヌクレオチド、プラスミド、ＤＮＡ、ＲＮＡ、ｓｉＲＮＡ、マイクロＲＮＡ）、アプタマー、酵素、抗原、抗体、抗体フラグメント、ウイルス、ウイルスベースの物質、細胞、細胞部分構造など）を含む生物学的製剤であってもよく、本明細書に記載される治療有効成分のプロドラッグ、代謝物、誘導体、インビボまたはインビトロ化学修飾産物、インビボまたはインビトロ酵素修飾産物および治療的に有効な分解産物が本発明の範囲に含まれる。
【００８６】
好ましくは、有効成分は、免疫調節薬、抗炎症薬または増殖因子の群から選択される治療有効成分である。
【００８７】
好ましくは、有効成分は、免疫調節薬、例えばシクロスポリン、タクロリムス（ＦＫ−５０６）、シロリムスまたはラパマイシンの群から選択される治療有効成分である。
【００８８】
好ましくは、有効成分は、ステロイド系抗炎症薬、例えばプレドニゾン、プレドニゾロン、トリアムシノロン、クロベタゾールまたはベタメタゾンの群から選択される治療有効成分である。
【００８９】
好ましくは、有効成分は、非ステロイド性抗炎症薬、例えばアスピリン、ジクロフェナク、ピロキシカム、メロキシカム、イブプロフェンまたは選択的ＣＯＸ−２阻害剤、例えばセレコキシブ、バルデコキシブ、エトリコキシブまたはロフェコキシブの群から選択される治療有効成分である。
【００９０】
好ましくは、有効成分は、抗癌剤、例えばベバシズマブ、タモキシフェンまたはインターロイキン−２の群から選択される治療有効成分である。
【００９１】
好ましくは、有効成分は、抗ウイルス剤、例えばアシクロビルまたはオセルタミビルの群から選択される治療有効成分である。
【００９２】
好ましくは、有効成分は、抗細菌剤、例えばアモキシシリンの群から選択される治療有効成分である。
【００９３】
好ましくは、有効成分は、抗糖尿病薬、例えばインスリン、グルカゴン様ペプチド−１、およびエキセナチドの群から選択される治療有効成分である。
【００９４】
好ましくは、有効成分は、ワクチンの群から選択される治療有効成分である。
【００９５】
好ましくは、有効成分は、眼科用薬、例えばトリアムシノロンおよびベバシズマブの群から選択される治療有効成分である。
【００９６】
好ましくは、有効成分は、アポモルヒネ、リバスチグミン、プラミペキソール、ピオグリタゾン、メマンチンおよびサフィナミドなど、神経変性疾患に対して有効な治療有効成分である。
【００９７】
好ましくは、有効成分は、限定はされないが、整形外科、特に椎間板、または軟骨、または骨の疾患の予防または治療に利用するのに非常に好適な増殖因子を含む生物学的製剤の群から選択される治療有効成分である。このような増殖因子の例としては、限定はされないが、形質転換増殖因子３、線維芽細胞増殖因子１８、骨形成タンパク質１、骨形態形成タンパク質２、骨形態形成タンパク質６、骨形態形成タンパク質７、インターロイキン−１受容体拮抗薬が挙げられる。
【００９８】
好ましくは、有効成分は、小児および成人の両方の成長障害、十分な筋肉組織の維持、および老化防止用途に適用され得る、ヒト成長ホルモンおよびそのバイオシミラー（ｂｉｏｓｉｍｉｌａｒ）誘導体の種類に属する。
【００９９】
好ましくは、有効成分は、内耳およびその結合組織の炎症または微生物感染（鼓膜内疾患）に対して有効な治療有効成分である。
【０１００】
好ましくは、有効成分は、各種の糖尿病に対して有効な治療有効成分、例えばインスリンおよびグルカゴン様ペプチド−１、およびそれらの誘導体、例えばエキセンジン−４およびリラグルチドである。
【０１０１】
水溶性の有効成分の場合、薬剤は、好ましくは、２０℃および大気圧（１バール）で測定される少なくとも２０μｇ／ｍｌ、例えば少なくとも１００μｇ／ｍｌ、例えば少なくとも５００μｇ／ｍｌ、例えば少なくとも１，０００μｇ／ｍｌ、例えば少なくとも５，０００μｇ／ｍｌの水への溶解度を有する。
【０１０２】
水溶性有効成分の例としては、（５，０００Ｄａまでの）低分子、（１０，０００Ｄａまでの）中程度のサイズの分子だけでなく、タンパク質などの（少なくとも１０，０００Ｄａの）高分子も挙げられる。これらの水溶性の活性薬剤は、化学的に合成され得るが、限定はされないが、（組み換え）タンパク質およびペプチド（例えば、インスリン、エリスロポエチン、エキセナチド、グルカゴン様ペプチド−１、形態形成タンパク質（例えば、骨形態形成タンパク質、形質転換増殖因子、線維芽細胞増殖因子、腫瘍壊死因子）、受容体拮抗薬（例えば、インターロイキン−１受容体拮抗薬）、抗癌タンパク質（例えば、ネオカルジノスタチン、Ｌ−アスパラギナーゼ、インターロイキン−２、ベバシズマブおよび他の抗ＶＥＧＦ薬）、予防用ワクチン、治療用ワクチン、遺伝物質（例えば、核酸配列、ポリヌクレオチド、（アンチセンス）オリゴヌクレオチド、プラスミド、ＤＮＡ、ＲＮＡ、ｓｉＲＮＡ、マイクロＲＮＡ）、アプタマー、酵素、抗原、抗体、抗体フラグメント、ウイルス、ウイルスベースの物質、細胞、細胞部分構造など）を含む生物学的製剤であってもよい。
【０１０３】
したがって、本発明は、有効成分が、水溶性薬剤、すなわち、本明細書に記載される方法を用いて測定した際に少なくとも２０μｇ／ｍｌの水への溶解度を有する薬剤の群から選択される治療有効成分である、本発明に係る組成物にも関する。
【０１０４】
本発明は、上述される医薬品有効成分のいずれかを収容したナノ粒子および／または微粒子（リポソームおよびミクロスフェアなど）をさらに含む組成物にも関する。
【０１０５】
医薬品有効成分としては、限定はされないが、栄養素、薬剤（低分子体）、タンパク質およびペプチド、ワクチン、遺伝物質（ポリヌクレオチド、オリゴヌクレオチド、プラスミド、ＤＮＡおよびＲＮＡなど）、診断剤、造影剤、酵素、核酸配列、抗原、抗体、抗体フラグメント、ウイルス、ウイルスベースの物質、細胞、細胞部分構造、増殖因子、抗生物質、抗炎症性化合物、免疫調節剤、抗血栓性化合物、跛行治療薬、抗不整脈薬、アテローム性動脈硬化症治療薬、抗ヒスタミン薬、抗癌剤、血管治療薬、眼科用薬、アミノ酸、ビタミン、ホルモン、神経伝達物質、神経ホルモン、酵素、シグナル伝達分子、向精神薬、合成薬、半合成薬、天然薬およびこれらに由来する物質または上記の組合せが挙げられる。
【０１０６】
医薬品有効成分（ＡＰＩ）は、目的の用途に応じてあらゆる種類の活性を示し得る。活性薬剤は、生物学的応答を刺激、遮断または抑制することが可能であり得る。
【０１０７】
医薬品有効成分は、ヒトおよび動物の多くの異なる疾患および病態において持続送達に使用され得る。
【０１０８】
さらに、デポー形成ポリマーは、その機能を完了した後、完全に吸収される。これは、代謝活性の少ない椎間板の領域への適用において特に重要である。
【０１０９】
さらに別の実施形態において、医薬品有効成分は、感染症を回避、防御、抑制するかまたはなくすための薬剤である。
【０１１０】
医薬品有効成分は、組成物またはエマルションの総重量に対して０．０１〜１５重量％の量でポリマー組成物またはエマルション中に存在し得る。好ましくは、医薬品有効成分は、０．０２〜１０重量％の量で、より好ましくは０．０５〜８重量％の量で存在する。
【０１１１】
本発明は、治療、手術またはインビボ診断に使用するための薬剤として使用するための組成物にも関する。
【０１１２】
本発明は、注入後に動物またはヒト身体内に軟物質を形成するための、本発明に係る組成物または本発明に係る医薬組成物の使用にも関する。
【０１１３】
本発明は、注入後に動物またはヒト身体内にデポーを形成するための、本発明に係る組成物または本発明に係る医薬組成物の使用にも関する。
【０１１４】
本発明は、医療機器としての、本発明に係る組成物または本発明に係る医薬組成物の使用にも関する。
【０１１５】
本発明は、医薬組成物を調製するための方法であって、成分ａ）、ｂ）、ｃおよび医薬品有効成分を混合する工程を含む方法にも関する。
【０１１６】
組織工学
本発明に係る組成物を含む組織工学デバイスの用途としては、限定はされないが、神経成長または修復、軟骨成長または修復、骨成長または修復、筋肉成長または修復、皮膚成長または修復、分泌腺修復、眼修復が挙げられる。軟物質は、そのまままたはより大きいインプラント、足場もしくは構造の一部として使用され得ることが強調されるべきである。
【０１１７】
本発明に係る組成物はまた、矯正および再建手術の待機中または非待機中、損傷組織の癒着および瘢痕組織形成を防ぐために、重大な外傷の場合の一時的な空隙充填剤として使用され得る。空隙充填は、本発明に係る組成物を注入することによって容易に実施され得る。本発明に係る前記組成物を空隙充填剤として使用することの他の利益としては、限定はされないが、外部からの汚染の予防、感染予防、周囲組織壊死または変性の予防、特定の組織形成の誘導（骨、軟骨、筋肉、神経、皮膚など）、単独または他の公知の足場もしくは構造との組合せによる周囲組織の構造的完全性の維持の補助、特定の天然または外部分子の捕捉が挙げられる。
【０１１８】
本発明に係る組成物はまた、生体吸収性皮膚充填剤として使用され得る。
【０１１９】
本発明が、例示目的で詳細に説明されてきたが、このような詳細は、この目的のためのものに過ぎず、特許請求の範囲に規定される本発明の趣旨および範囲から逸脱せずに当業者によって変更形態がなされ得ることが理解される。
【０１２０】
本発明は、本明細書に記載される特徴の全ての可能な組合せに関し、特許請求の範囲に存在する特徴の組合せが特に好ましいことがさらに留意される。
【０１２１】
「含む」という用語は、他の要素の存在を除外しないことがさらに留意される。しかしながら、特定の構成要素を含む生成物についての説明は、これらの構成要素からなる生成物も開示することも理解されるべきである。同様に、特定の工程を含む方法についての説明は、これらの工程からなる方法も開示することも理解されるべきである。
【０１２２】
以下では、本発明が以下の実施例によって説明されるが、これらに限定されない。
【図面の簡単な説明】
【０１２３】
【図１】直鎖状生体吸収性トリブロックコポリマーを含み、界面活性剤を含まないＩＶＲ配合物（実験４、比較例を参照されたい）からのリドカイン−ＨＣｌの放出を示す。
【図２】界面活性剤としてＰｌｕｒｏｎｉｃｓ  １０Ｒ５を用いて調製された配合物（実験６）からのリゾチーム放出の例を示す。
【図３】界面活性剤としてのＰｌｕｒｏｎｉｃｓ  １７Ｒ４の存在下におけるリドカイン−ＨＣＬの放出を示す。
【図４】疎水性トリブロックコポリマーＰＥＧ２００（ｃａｐ75−ｌａｃ25）4.0−Ｃ３をベースとするエマルションからのリドカイン−ＨＣｌの放出プロファイルを示す。
【図５】疎水性トリブロックコポリマーＰＥＧ２００（ｃａｐ50−ｌａｃ50）5.0−Ｃ３をベースとするエマルションからのリドカイン−ＨＣｌの放出プロファイルを示す。
【図６】疎水性トリブロックコポリマーＰＥＧ４００（ｃａｐ50−ｌａｃ50）3.0−Ｃ３をベースとするエマルションからのリドカイン−ＨＣｌの放出プロファイルを示す。
【図７】異なる界面活性剤とともに疎水性トリブロックコポリマーＰＥＧ６００（ｃａｐ50−ｌａｃ50）2.0−Ｃ３をベースとするエマルションからのリドカイン−ＨＣｌの放出プロファイルを示す。
【図８】市販の界面活性剤（Ｐｌｕｒｏｎｉｃｓ  １７Ｒ４）（６６）も使用するリドカイン−ＨＣｌの放出を示す。
【図９】ポリマー界面活性剤を用いるおよび用いないＰＥＧ６００（ｃａｐ50−ｌａｃ50）2.0−Ｃ３配合物からのリゾチームのインビトロ放出を示す。
【図１０】疎水性トリブロックコポリマーＰＥＧ２００（ｃａｐ50−ｌａｃ50）5.0−Ｃ３およびＰＥＧ４００（ｃａｐ50−ｌａｃ50）.3.0−Ｃ３をベースとする配合物についての界面活性剤の影響を示す。
【図１１】いくつかの異なる配合物からのリゾチームの放出プロファイルを示す。
【図１２】リゾチーム（配合物１１２、１１３および１１４）の放出に対する界面活性剤の影響を示す。
【図１３】配合物１０６および１１１のＩｇＧの放出を示す。
【図１４】実験８６および８８に従ってリゾチームの放出を示す。
【図１５】調製直後および２週間の貯蔵後の配合物１１５のＩＶＲを示す。
【図１６】２つの界面活性剤（Ｂ）を用いたＰＥＧ６００（ｃａｐ50−ｌａｃ50）2.0−Ｃ３配合物からのＩｇＧのＩＶＲを示す。
【図１７】２つの界面活性剤（Ｂ）を用いたＰＥＧ６００（ｃａｐ50−ｄｉｏｘ50）4.0−２−ｎ−ＨＤ配合物からのリゾチームのＩＶＲを示す。
【図１８】ＩｇＧが充填された疎水性トリブロックコポリマーブレンドのＩＶＲを示す。
【図１９】ラット死体における医薬組成物のデポーを示す（実験２１）。
【発明を実施するための形態】
【０１２４】
材料：
トルエン、ジエチルエーテルおよびｎ−ペンタンは、Ｂｏｏｍ（Ｍｅｐｐｅｌ，Ｔｈｅ  Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ）から購入した。ε−カプロラクトン、トリエチルアミン、無水酢酸および無水プロピオン酸は、Ａｃｒｏｓ  Ｏｒｇａｎｉｃｓ（Ｎｅｗ  Ｊｅｒｓｅｙ，ＵＳＡ）から購入し、ＰＥＧ２００、ＰＥＧ４００、ＰＥＧ６００、ＰＥＧ１０００、ＰＥＧ１５００、無水ヘキサン酸、Ｐｌｕｒｏｎｉｃｓ  １７Ｒ４、Ｐｌｕｒｏｎｉｃｓ  １０Ｒ５、Ｋｏｌｌｉｐｈｏｒ  Ｐ４０７、Ｋｏｌｌｉｐｈｏｒ  Ｐ１８８、ＰＶＰ（４０ｋ）および２−エチルヘキサン酸スズ（ＩＩ）は、Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＵＳＡ）から購入した。無水ラウリン酸は、ＡＢＣＲ（Ｋａｒｌｓｒｕｈｅ，Ｇｅｒｍａｎｙ）から購入した。ＡＰＩのリドカイン−ＨＣｌおよびリゾチームは、Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＵＳＡ）から購入した。モノマーＬ−ラクチド、Ｄ−ラクチドおよびグリコリドは、Ｐｕｒａｃ（Ｇｏｒｉｎｃｈｅｍ，Ｔｈｅ  Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ）から購入した。ｐ−ジオキサノンは、ＨＢＣＣｈｅｍ，Ｉｎｃ．（ＵＳＡ）から購入した。ＩｇＧは、Ｓａｎｑｕｉｎ（Ｔｈｅ  Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ）から購入した。
【０１２５】
試験方法
分子量は、ガードカラム（ＰＬｇｅｌ  ５μｍ、７．５×５０ｍｍ）および３つのＶａｒｉａｎカラム（ＰＬｇｅｌ、５μｍ、５００Å、３００×７．５ｍｍ）を備えたＡｇｉｌｅｎｔ  ｓｙｓｔｅｍ  Ｓｅｒｉｅｓ  １００を用いてＳＥＣによって測定した。検出は、屈折率検出器を用いて行った。様々な分子量のＰＥＧ標準を基準用に使用した。溶離剤はＴＨＦであり、溶離速度は１．０ｍｌ／分であった。カラム温度は３５℃であった。試料の濃度は、ＴＨＦ中約４ｍｇ／ｍｌであり、注入量は５０μｌであった。Ｍnポリマーは、ＰＥＧ標準に対して、ＴＨＦ中で測定したポリマーの数平均分子量である。
【０１２６】
ポリマーの熱特性は、ＤＳＣ（ＴＡ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  ＤＳＣ  Ｑ２０００装置）によって測定した。密閉されたアルミニウム容器中の約１０ｍｇの試料を室温から−９０℃に冷却し、５分間にわたって等温に保ち、その後、それらを１０℃／分（６０秒毎に±１℃調節）の加熱速度で７０℃に加熱した。次に、試料を５℃／分（６０秒毎に±１℃調節）の冷却速度で−９０℃に冷却した後、２℃／分（６０秒毎に±１℃調節）の加熱速度で７０℃までの２回目の加熱サイクルを行った。２回目の加熱実施を用いて、ガラス転移温度（Ｔg）を熱容量変化の中点として求め、溶融温度（Ｔm）を発熱領域の最高温度として求めた。
【０１２７】
粘度測定は、コーンプレート型、タイプ４０ｍｍコーン、角度１：００：００度：分：秒のＴＡ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  ＡＲ２０００Ｅｘにおいて行った。粘度測定時、温度は、３００秒間にわたって５ｓ-1のせん断速度で２０℃または３７℃のいずれかに一定に保った。平均粘度値を、ソフトウェア（Ｔｒｉｏｓ  ｓｏｆｔｗａｒｅ，ＴＡ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）を用いて計算した。このようにポリマーの平均動的（せん断）粘度を測定した。
【０１２８】
合成
疎水性トリブロックコポリマーの一般的合成手順：
Ｄｅａｎ  Ｓｔａｒｋトラップおよび冷却器を備えた三つ口丸底フラスコ（５００ｍｌ）中にＰＥＧ２００（２０．６ｇ；１０３ｍｍｏｌ）、Ｌ−ラクチド（５１．７ｇ；３５９ｍｍｏｌ）、ε−カプロラクトン（５１．５ｇ；４５２ｍｍｏｌ）および２５０ｍｌのトルエンを導入し、窒素雰囲気下で撹拌しながら加熱還流させた。溶液を、１１０ｍｌのトルエン／水を留去することによって共沸乾燥させた。次に、それを＜９０℃に冷却し、オクタン酸スズ（０．７４ｇ；１．８ｍｍｏｌ）を加えた。開環重合を、窒素雰囲気下で一晩にわたり混合物を還流させることによって行った。その後、溶液を室温に冷ました。
【０１２９】
修飾手順：
プロピオニル末端基による修飾；ＰＥＧ２００（ｃａｐ50−ｌａｃ50）5.0−Ｃ３
反応混合物にＥｔ3Ｎ（５２．５ｇ；５１５ｍｍｏｌ；５当量）および無水プロピオン酸（４０ｇ、３１０ｍｍｏｌ、３当量）を加えた。得られた混合物を１時間にわたって撹拌しながら還流させた。
【０１３０】
一般的な後処理手順：
反応混合物を、ｎ−ペンタン（６００ｍｌ）を含む分液漏斗に注いだ。混合物を振とうした後、ポリマーが漏斗の底に沈降し、それを収集することができた。得られたポリマーを６０℃で２時間にわたって減圧下で乾燥させた後、９０℃で少なくとも４８時間にわたってロータリーエバポレータ（＜０．２ｍＢａｒ）を用いてさらに乾燥させた。
【０１３１】
上述されるこの方法を用いて一連のポリマーを調製した。Ｂブロックに使用されるモノマーのタイプおよびＢブロックの長さを変更し、末端基を変更した様々なＰＥＧブロックを用いることによって変形例を作製した。結果が表１に列挙される。
【０１３２】
ポリマー界面活性剤（Ｂ）の一般的合成手順：
Ｄｅａｎ  Ｓｔａｒｋトラップおよび冷却器を備えた三つ口丸底フラスコ（５００ｍｌ）中にＰＥＧ１５００（１０ｇ；６．７ｍｍｏｌ）、Ｌ−ラクチド（１１ｇ；７６ｍｍｏｌ）、ε−カプロラクトン（１１ｇ；９６ｍｍｏｌ）および２１０ｍｌのトルエンを導入し、窒素雰囲気下で撹拌しながら加熱還流させた。溶液を、１１０ｍｌのトルエン／水を留去することによって共沸乾燥させた。次に、それを＜９０℃に冷却し、オクタン酸スズ（０．２ｇ；０．４９ｍｍｏｌ）を加えた。開環重合を、窒素雰囲気下で３６時間にわたり混合物を還流させることによって行った。その後、溶液を室温に冷ました。
【０１３３】
修飾手順：
アセチル末端基による修飾；ＰＥＧ１５００（ｃａｐ50−ｌａｃ50）2.2−Ｃ２
反応混合物にＥｔ3Ｎ（３．４ｇ；３３ｍｍｏｌ；５当量）および無水酢酸（２．０ｇ、２０ｍｍｏｌ、３当量）を加えた。得られた混合物を１時間にわたって撹拌しながら還流させた。
【０１３４】
一般的な後処理手順：
反応混合物を、ｎ−ペンタン／ジエチルエーテル（１５０／１５０ｍｌ）を含む分液漏斗に注いだ。混合物を振とうした後、ポリマーが漏斗の底に沈降し、それを収集することができた。得られたポリマーを６０℃で２時間にわたって減圧下で乾燥させた後、８０℃で少なくとも４８時間にわたってロータリーエバポレータ（ｒｏｔａｖａｐ）（＜０．２ｍＢａｒ）を用いてさらに乾燥させた。
【０１３５】
上述されるこの方法を用いて一連のポリマーを調製した。Ｂｓブロックに使用されるモノマーのタイプおよびＢｓブロックの長さを変更し、末端基を変更した様々なＰＥＧブロックを用いることによって変形例を作製した。結果が表６に列挙される。
【０１３６】
ポリマー界面活性剤としてのジブロックコポリマー（Ａｓ−Ｂｓ−Ｒｓ）の合成
ＭｅＯ−ＰＥＧ（分子量＝２０００ｇ／ｍｏｌ；６ｇ；３ｍｍｏｌ）、ε−カプロラクトン（４．８ｇ；４２ｍｍｏｌ）、Ｌ−ラクチド（１．２ｇ；８．３ｍｍｏｌ）およびトルエン（２５０ｍｌ）を三つ口丸底フラスコ（５００ｍｌ）に移した。フラスコは、Ｄｅａｎ−Ｓｔａｒｋ設備および水冷却器を備えていた。混合物を撹拌し、還流するまで加熱し、約１００ｍｌをＤｅａｎ−Ｓｔａｒｋで収集し、得られた混合物を室温に冷ました。オクタン酸スズ（０．０３３ｇ；０．０８ｍｍｏｌ）を加え、混合物を撹拌し、４８時間にわたって還流するまで加熱した後、無水酢酸（０．６ｍｌ；６．４ｍｍｏｌ）およびＥｔ3Ｎ（１．２ｍｌ；４．３ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を２時間にわたって還流させ、室温に冷まし、ｎ−ペンタン（７５０ｍｌ）中で沈殿させた。ポリマーを収集し、減圧下（＜１ｍＢａｒ）において８０℃で一晩乾燥させた。
【０１３７】
ポリマー界面活性剤およびＡＰＩを用いる／用いない疎水性生体吸収性トリブロックコポリマーによるエマルションの調製
配合物調製方法１
ＡＰＩを含む１０重量％の界面活性剤ストック溶液を、ポリマー界面活性剤（１００ｍｇ）およびＡＰＩ（１００ｍｇ）をＰＢＳ（８００μｌ、５０ｍＭ  ｐＨ７．４）に溶解させることによって調製した。スパチュラを用いて、疎水性生体吸収性トリブロックコポリマー（１．８ｇ）を界面活性剤／ＡＰＩストック溶液（２００μｌ）と混合することによってエマルションを調製した。２分間にわたって１２，０００ｒｐｍでＵｌｔｒａ−Ｔｕｒｒａｘミキサーを用いることにより、さらなる混合を行った。界面活性剤およびＡＰＩの最終濃度は両方とも１重量％であった。
【０１３８】
配合物調製方法２
疎水性生体吸収性トリブロックコポリマー（１．８ｇ）と、ポリマー界面活性剤（２０ｍｇ）との混合物を６０℃に加熱し、ローラーミキサーを用いて周囲温度で１時間撹拌させた。ＰＢＳ（濃度１１１ｍｇ／ｍｌ、５０ｍＭ、ｐＨ７．４）中のＡＰＩストック溶液（１８０μｌ）を加え、スパチュラを用いて混合した。２分間にわたって１２，０００ｒｐｍでＵｌｔｒａ−Ｔｕｒｒａｘを用いて混合することにより、最終的なエマルションを調製した。界面活性剤およびＡＰＩの最終濃度は両方とも１重量％であった。
【０１３９】
配合物調製方法３
ＡＰＩを含む１０重量％のポリマー界面活性剤ストック溶液を、界面活性剤（１００ｍｇ）およびＡＰＩ（１００ｍｇ）をＰＢＳ（８００μｌ、５０ｍＭ  ｐＨ７．４）に溶解させることによって調製した。最後に、スパチュラを用いて、疎水性生体吸収性トリブロックコポリマー（１．８ｇ）を界面活性剤／ＡＰＩストック溶液（２００μｌ）と混合することによってエマルションを調製した。周囲条件で一晩、ローラーミキサーを用いることによってさらなる混合を行った。界面活性剤およびＡＰＩの最終濃度は両方とも１重量％であった。
【０１４０】
配合物調製方法４
ＡＰＩを含む１０重量％のストック溶液を、ＡＰＩ（１００ｍｇ）をＰＢＳ（９００μｌ、５０ｍＭ  ｐＨ７．４）に溶解させることによって調製した。疎水性生体吸収性トリブロックコポリマー（１．８ｇ）を、スパチュラを用いてＡＰＩストック溶液（２００μｌ）と混合した。２分間にわたって１２，０００ｒｐｍでＵｌｔｒａ−Ｔｕｒｒａｘを用いることによって最終的なエマルションを調製した。ＡＰＩの最終濃度は１重量％であった。
【０１４１】
配合物調製方法５（ＩｇＧのみの場合）
２０重量％の界面活性剤ストック溶液、Ｎａｎｏｇａｍ（登録商標）（５０ｍｇ／ｍｌのＩｇＧ）および場合によりさらなる水を、ローラーミキサーを用いて４℃で２時間混合した。公知の量を疎水性生体吸収性トリブロックコポリマーに加え、スパチュラを用いて混合した。１分間にわたって１２，０００ｒｐｍでＵｌｔｒａ−Ｔｕｒｒａｘを用いることによってさらなる混合を行った。
【０１４２】
配合物調製方法６（市販の界面活性剤のみの場合）
１０重量％の界面活性剤溶液を、界面活性剤（１００ｍｇ）をＰＢＳ（９００μｌ、５０ｍＭ  ｐＨ７．４）に溶解させることによって調製した。スパチュラを用いて、疎水性生体吸収性トリブロックコポリマー（１．８ｇ）を界面活性剤溶液（２００μｌ）と混合することによってエマルションを調製した。ＡＰＩ（約２０ｍｇ）を加えた後、スパチュラを用いて再度混合した。２分間にわたって１２，０００ｒｐｍでＵｌｔｒａ−Ｔｕｒｒａｘを用いることによって最終的な混合を行った。界面活性剤およびＡＰＩの最終濃度は両方とも１重量％であった。
【０１４３】
配合物調製方法７
ＰＢＳ中の２０重量％のジブロック溶液をＰＢＳ中のリゾチーム溶液（４０ｍｇ／ｍｌ）と混合した。ストック溶液（０．２ｇ）を含有するこのリゾチーム／ジブロックを、１分間にわたって４，０００ｒｐｍでＵｌｔｒａ−Ｔｕｒｒａｘを用いて疎水性生体吸収性トリブロックコポリマー（１．８ｇ）と混合した。最終濃度は、０．２％のリゾチーム、１％のジブロックおよび９％のＰＢＳであった。
【０１４４】
配合物調製方法８
水性相：
まず、２０重量％のＡＣＥＭＩＸを、２つのポリマー界面活性剤（ＰＥＧ１５００（ｃａｐ80−ｌａｃ20）2.2−Ｃ２（０．７５ｇ）およびＰＥＧ１５００（ｃａｐ50−ｌａｃ50）2.2−Ｃ２（０．２５ｇ））をＰＢ（４ｍｌ）に溶解させることによって調製した。ＡＣＥＭＩＸ（１．０ｇ）にＮａｎｏｇａｍ（０．８ｇ；５０ｍｇ／ｍｌのＩｇＧ）およびＰＢ（０．２ｇ）を加えた。溶液を２〜８℃で１時間にわたってロックローラー（ｒｏｃｋ−ａｎｄ−ｒｏｌｌｅｒ）において混合して、最終的な水性相を得た。
【０１４５】
ブレンドエマルション配合物：
２つの疎水性トリブロックコポリマー（Ａ）をバイアル中で秤量し、周囲温度で数時間にわたってロックローラーにおいて混合した。次に、計算された量の調製された水性相を加え、スパチュラを用いて混合した後、１分間にわたっておよび周囲温度において４，０００ｒｐｍでＵｌｔｒａ  Ｔｕｒｒａｘを用いて、さらなる混合を行った。得られたブレンド配合物を冷蔵庫（２〜８℃）中で貯蔵した。
【０１４６】
インビトロ放出（ＩＶＲ）設備
公知の量の配合物（約２００ｍｇ）をガラス管（１５ｍｌ）中に移した後、２ｍｌのＰＢＳ（ｐＨ７．４；５２ｍＭ；２６０ｍＯｓｍ／ｋｇ；３７℃で予め温められた）を加えた。管を３７℃で振とう培養器に入れた。放出試料を様々な時点で取った。試料採取のために、１ｍｌの緩衝液を上清から除去し、予め温められたＰＢＳと取り替えた。逆相液体クロマトグラフィーを用いて試料のＡＰＩ含量について分析した。
【０１４７】
用語
実験セクションでは、疎水性生体吸収性トリブロックコポリマーおよびポリマー界面活性剤の略語を使用した。
【０１４８】
例えば、ＰＥＧ２００（ｃａｐ50−ｌａｃ50）5.0は、２００Ｄａの数平均分子量を有するＰＥＧで作製されたＡブロックと、Ａブロックの両側にＢブロックとを含むトリブロックコポリマーを意味し、２つのＢブロックの総重量がＡブロックの分子量の５倍であり、各Ｂブロックが５０／５０（重量）比でε−カプロラクトンおよびラクチドを含む。この場合、ＲＢＡＢＲトリブロックコポリマーは、平均してＭｎ２００Ｄａを有するＰＥＧからなるＡブロックと、それぞれ約５００ＤａのＭｎを有し、５０重量％のε−カプロラクトンおよび５０重量％のラクチドを含有する２つのＢブロックとを含む。この場合、末端基ＲはＨである。
【０１４９】
ＲがＨでない場合、炭素鎖長が式に加えられている。
【０１５０】
例えば、ＰＥＧ６００（ｃａｐ50−ｌａｃ50）2.0−Ｃ６は、６００Ｄａの数平均分子量（Ｍｎ）を有するＰＥＧからなるＡブロックと、それぞれ約６００Ｄａ（１２００／２）の数平均分子量（Ｍｎ）を有し、両側にＣ６Ｒ基を有する２つのＢブロックとを有するＲＢＡＢＲトリブロックコポリマーを示す。
【０１５１】
実験１；疎水性生体吸収性トリブロックコポリマーの調製
多数のＲＢＡＢＲ生体吸収性トリブロックコポリマーを一般的合成手順に従って調製した。熱特性および分子量を測定した。結果が表１に列挙される。
【０１５２】
【表１】
0006486563.tif 000002
【０１５３】
表１中、ＰＥＧ２００、ＰＥＧ４００、ＰＥＧ６００およびＰＥＧ１０００は、それぞれ２００Ｄａ、４００Ｄａ、６００Ｄａおよび１，０００Ｄａの数平均分子量を有するポリエチレングリコールポリマーである。
【０１５４】
Ｍn、PE：Ａブロックの分子量を基準にして計算した際の、両方のＢブロックを合わせた数平均分子量。
【０１５５】
Ｃａｐは、ε−カプロラクトンの略語である。
【０１５６】
Ｌａｃは、Ｌ−ラクチド、Ｄ−ラクチドまたはＤＬ−ラクチドの略語である。特に指定されない限り、Ｌ−ラクチドがデフォルトで選択される。
【０１５７】
Ｄｉｏｘは、ｐ−ジオキサノンの略語である。
Ｃ３、Ｃ６およびＣ１２は、Ｒ基がそれぞれ３個（プロピオニル）、６個（ヘキサノイル）または１２個（ラウロイル）の炭素原子を含むことを意味する。
【０１５８】
ＰＥ／ＰＥＧ：ＰＥＧ（Ｂ／Ａ）または（Ｂｓ／Ａｓ）に対するポリエステルの重量比。
ｍ1／ｍ2：Ｂブロック中の第２のモノマーに対する第１のモノマーの比率。
修飾度：ポリマー修飾後の脂肪族末端基（Ｒ）の数を表す。修飾度が−−と示される場合、それは、式ＲＢＡＢＲ中、Ｒ＝Ｈであることを意味する。修飾度が２である場合、それは、Ｒが、いくつかのＣ原子を含む脂肪酸残基であることを意味する。
【０１５９】
Ｍn、polymer：ＧＰＣにより測定されるポリマーの数平均分子量。
ＰＤＩ：ＧＰＣによる多分散指数。
Ｔg：ＤＳＣによるガラス転移温度（中点）。
Ｔm：ＤＳＣによる溶融温度。
Ｎ．Ａ．：分析せず。
【０１６０】
実験２；粘度測定ポリマー
表１に列挙されるポリマーの粘度を２０℃および３７℃で測定した。結果が表２に列挙される。
【０１６１】
【表２】
0006486563.tif 000003
【０１６２】
表２に示されるように、末端基（Ｃ３、Ｃ６またはＣ１２）は、粘度に著しい影響を与えた。一般に、末端基Ｒ＝Ｈを有するポリマーは、比較的高い粘度を示す。非修飾のポリマー（Ｒ＝Ｈである）と比較して、Ｃ３エンドキャップされたポリマーはより低い粘度を有し、Ｃ６修飾されたポリマーは最も低い粘度を有していた。
【０１６３】
Ｂブロックの組成も非常に重要である。例えば、ＰＥＧ２００（ｃａｐ25−ｌａｃ75）5.0−Ｃ３の組成を有するポリマーは、高い粘度を有するが、組成をＰＥＧ２００（ｃａｐ75−ｌａｃ25）5.0−Ｃ３に変更すると、ごく低い粘性のポリマーが得られた。最も低い粘度は、ε−カプロラクトンがＰＥブロックの主成分であるときに得られた。これは、より硬質のラクテートモノマー単位と比較して、ε−カプロラクトンモノマー単位のより低いＴgに関係するものと本発明者らは考えている。温度を３７℃に上昇させると、より粘性の低いポリマーが得られる。
【０１６４】
表１に示されるように、ＰＥＧ１０００で構成されたポリマーは、約２０℃の溶融温度を有する。これらのポリマーは、冷蔵庫（４℃）中でおよび周囲温度でさえ結晶化する。これらのポリマーをエンドキャッピングすると、溶融温度が低下されるが、結晶化を防ぐのに十分に低くない。しかしながら、コポリマーは、ＰＥＧの結晶性領域を「溶融する」ために注入前に３７℃まで温められ得る。好ましい場合、前記コポリマーは、急な結晶化の発生および粘度の急な増加を伴わずに、注入前に再度室温に冷却され得る。
【０１６５】
実験３（比較例）：水を用いた疎水性生体吸収性トリブロックコポリマーの配合物
親水性ＡＰＩは、単独の疎水性生体吸収性トリブロックコポリマーに溶解しにくい。溶解度を向上させるために水を疎水性トリブロックポリマーに加えた。調製方法４に従って、１０重量％の水を含むエマルションを調製した。
【０１６６】
【表３】
0006486563.tif 000004
【０１６７】
水の存在下において、ＡＰＩは、疎水性生体吸収性トリブロックコポリマーに容易に溶解し、白色の配合物が得られた。混合の直後、エマルションの一部をインビトロ放出（ＩＶＲ）試験に使用した。エマルションの別の部分を冷蔵庫（２〜８℃）中で貯蔵した。しかしながら、約２４時間後、冷蔵庫中で貯蔵された全てのエマルションは、水層（上部）とポリマー層とに相分離した。
【０１６８】
【表４】
0006486563.tif 000005
【０１６９】
全ての配合物は、単独の疎水性生体吸収性トリブロックコポリマー（Ａ）よりはるかに低い粘度を有していた。
【０１７０】
実験４（比較例）：水を用いた直鎖状疎水性トリブロックコポリマーの配合物のＩＶＲ
実験３（表３および４も参照）において調製された配合物をリドカイン−ＨＣｌの放出について試験した。図１に示されるように、リドカイン−ＨＣｌの放出は、最初の２４時間において６０％の高いバーストで非常に速かった。また、リゾチームの放出は、４日後に約４３％の累積放出率で速かった。
【０１７１】
結論：親水性ＡＰＩは、単独の直鎖状疎水性トリブロックコポリマーに溶解しにくい。これは、水の添加によって回避され得る。しかしながら、水のみが疎水性トリブロックコポリマーと混合される場合、不安定なエマルションが形成される。これは、エマルションを調製した後、２４時間以内に水層が配合物の上部に見られることを意味する。結果として、これらのエマルションからのＡＰＩの放出は比較的速い。
【０１７２】
実験５（比較例）：１重量％のリゾチームまたはリドカイン−ＨＣｌが充填された界面活性剤を用いた配合物の調製
エマルションを安定させ、水が配合物から層に分離するのを防ぐために市販の界面活性剤を使用した。疎水性トリブロックコポリマーとしてＰＥＧ６００（ｃａｐ50−ｌａｃ50）2.0−Ｃ３を用いて、調製方法６に従って配合物を調製した。様々な界面活性剤の概要が表５に示される。
【０１７３】
【表５】
0006486563.tif 000006
【０１７４】
水および界面活性剤の存在下において、ＡＰＩは、疎水性生体吸収性トリブロックコポリマーに完全に溶解し、白色の配合物が得られた。混合の直後、配合物をインビトロ放出（ＩＶＲ）試験に供した。
【０１７５】
実験６（比較例）：１重量％のリゾチームが充填された界面活性剤を用いた配合物のＩＶＲ
図２は、界面活性剤としてＰｌｕｒｏｎｉｃｓ  １０Ｒ５を用いて調製された配合物からのリゾチーム放出の例を示す。最初の３日間の放出は、５０〜６０％であり、界面活性剤としてこのＰｌｕｒｏｎｉｃｓ  １０Ｒ５を用いて、それほどの保持は観察されなかった。図に示されていないが、市販の界面活性剤を用いて調製された全ての他の配合物がほぼ同一の放出プロファイルを示した。全ての場合、４０〜７０％のリゾチームが最初の３日間に放出された。冷蔵庫（２〜８℃）中で貯蔵される場合、配合物は、少なくとも２４時間にわたって安定しているように見えた。
【０１７６】
実験７（比較例）：１重量％のリドカイン−ＨＣｌが充填された界面活性剤を用いた配合物のＩＶＲ
図１に既に示されるように、配合物６４は、最初の２４時間で非常に高いバーストを示す。界面活性剤としてのＰｌｕｒｏｎｉｃｓ  １７Ｒ４（配合物６６）の添加は、最初の２４時間でわずかに低いバースト放出をもたらした（図３）。
【０１７７】
結論において、市販の界面活性剤の使用は、表５に示されるようにリゾチームの持続放出をもたらさなかった。得られたエマルションは、少なくとも２４時間にわたって安定していたが、市販の界面活性剤の添加は、ＡＰＩの（それほど）高い保持をもたらさなかった。
【０１７８】
実験８：ポリマー界面活性剤の合成
調整された（ｔａｉｌｏｒ−ｍａｄｅ）界面活性剤（ポリマー界面活性剤として示される）を、表６に示されるように調製した。一連のポリマー界面活性剤を一般的合成手順に従って調製した。熱特性および分子量が測定され、表６に列挙される。
【０１７９】
【表６】
0006486563.tif 000007
【０１８０】
得られたポリマー界面活性剤（Ｂ）は、室温で高粘性の半固体ポリマーである。全ての界面活性剤は、低いＴｇ値を有し、これは、主に、存在する大量のカプロラクトンに起因する。また、これらの界面活性剤の全ては、ＰＥＧブロックの寄与である融点を有する。表に示されていないが、融点を有する全ての界面活性剤は、結晶化温度を示す。
【０１８１】
実験９：１重量％のリドカイン−ＨＣｌが充填された配合物の調製
【０１８２】
【表７】
0006486563.tif 000008
【０１８３】
一連の疎水性トリブロックコポリマーを水およびポリマー界面活性剤と混合した（表７）。Ｕｌｔｒａ−Ｔｕｒｒａｘを用いて混合した後、全ての配合物は完全に白色かつ不透明であった。数時間後、ＰＥＧ６００（配合物５２、５３、５８および５９）を用いた疎水性トリブロックコポリマーを含有する配合物は、無色透明になり、また、光学顕微鏡法によりリドカイン−ＨＣｌ粒子が観察されなかった。２４時間にわたる冷蔵庫（２〜８℃）中での貯蔵後、分離された水層は肉眼で見られなかった。
【０１８４】
実験１０：１重量％のリドカイン−ＨＣｌを用いた配合物の粘度測定
【０１８５】
【表８】
0006486563.tif 000009
【０１８６】
全ての調製された配合物は、単独の疎水性トリブロックコポリマーよりはるかに低い粘度を有していた。配合物の粘度は、５０％超低下され、それにより配合物は注入により好適になる。さらに、調製方法１または２によって調製された配合物間で有意な差はなかった。
【０１８７】
実験１１：１重量％のリドカイン−ＨＣｌが充填された配合物のインビトロ放出（表７および表８）
図４は、疎水性トリブロックコポリマーＰＥＧ２００（ｃａｐ75−ｌａｃ25）4.0−Ｃ３をベースとするエマルションからのリドカインの放出プロファイルを示す。図４に示されるように、３つの配合物のリドカイン放出プロファイルに有意な差はない。これらの結果によれば、配合物を調製するのにいずれの方法を使用するかで差は生じない。全ての３つの配合物が、１日後に３５〜４５％のバースト放出を示した後、より遅い放出を示した。１週間後、約５５％のリドカインが放出された。ポリマー界面活性剤（Ｂ）の選択も放出プロファイルに大きい影響を与えなかった。
【０１８８】
図５は、疎水性トリブロックコポリマーＰＥＧ２００（ｃａｐ50−ｌａｃ50）5.0−Ｃ３をベースとするエマルションからのリドカインの放出プロファイルを示す。ここでも、方法１または方法２によって調製された配合物間で放出プロファイルの有意な差はない。放出は、疎水性トリブロックコポリマーＰＥＧ２００（ｃａｐ75−ｌａｃ25）4.0−Ｃ３をベースとする配合物よりはるかに遅い。２４時間後に１０％のみが放出され、７日後に約２０％になるまでゆっくりと続いた。ポリマー界面活性剤（Ｂ）の添加は、長期放出に大きい影響を与えた。配合物６２は、界面活性剤を用いずに調製され、はるかに速い放出を示す。
【０１８９】
図６は、疎水性トリブロックコポリマーＰＥＧ４００（ｃａｐ50−ｌａｃ50）3.0−Ｃ３をベースとするエマルションからのリドカインの放出プロファイルを示す。図６に示されるように、４つの異なる配合物は、同様の放出パターンを有する。これらの結果によれば、配合物を調製するのにいずれの方法を使用したかで差は生じない。４つの配合物は、バースト放出をほとんど示さない。１日後に約１０％が放出され、これは、１週間後に２５〜３０％のリドカイン放出になるまでゆっくりと続いた。
【０１９０】
図７は、様々な界面活性剤を用いた疎水性トリブロックコポリマーＰＥＧ６００（ｃａｐ50−ｌａｃ50）2.0−Ｃ３をベースとするエマルションからのリドカインの放出プロファイルを示す。図７は、配合物を調製するのにいずれの方法（１または２）を使用するかで有意な差がないことを再度示す。配合物６４は、界面活性剤を有さず、これは、他の４つの配合物についての約３０％と比較して、１日後に６０％のはるかに高い放出をもたらす。
【０１９１】
図８は、市販の界面活性剤（Ｐｌｕｒｏｎｉｃｓ  １７Ｒ４）（６６）も使用するリドカイン−ＨＣｌの放出を示す。Ｐｌｕｒｏｎｉｃｓ  １７Ｒ４の使用は、最初の２４時間で５０％の高いバーストを示す。ポリマー界面活性剤は、最初の２４時間で３０％の放出までバーストを減少させる。
【０１９２】
実験１２：１重量％のリゾチームが充填された配合物の調製
一連の疎水性トリブロックコポリマーを水、ポリマー界面活性剤およびリゾチームと混合した。
【０１９３】
【表９】
0006486563.tif 000010
【０１９４】
全ての配合物を問題なく調製した。配合物８２は、リゾチームと混合された純粋なトリブロックコポリマーである。配合物８３は、緩衝液中の２０重量％のポリマー溶液を調製した熱応答性ヒドロゲルである。そのように得られた溶液は、冷蔵庫中で液体であるが、３０℃に加熱されるとヒドロゲルになる。リゾチームは、この配合物に容易に溶解することができる。
【０１９５】
実験１３：１重量％のリゾチームを用いた配合物の粘度測定
【０１９６】
【表１０】
0006486563.tif 000011
【０１９７】
実験１４：１重量％のリゾチームが充填された配合物のインビトロ放出（表９および表１０）
図９は、ポリマー界面活性剤を用いるおよび用いないＰＥＧ６００（ｃａｐ50−ｌａｃ50）2.0−Ｃ３配合物からのリゾチームのインビトロ放出を示す。ポリマー界面活性剤の存在は重要である。このようなポリマー界面活性剤（配合物７１）が配合物に組み込まれる場合、リゾチームの放出は、最初の２４時間においてごく少ないバーストではるかにゆっくりである。放出は、７日後に約５％になるまでゆっくりと続いた。一方、配合物７７（界面活性剤を用いない）は、７日後に５０％超の放出を示す。
【０１９８】
図１０は、疎水性トリブロックコポリマーＰＥＧ２００（ｃａｐ50−ｌａｃ50）5.0−Ｃ３およびＰＥＧ４００（ｃａｐ50−ｌａｃ50）.3.0−Ｃ３をベースとする配合物についての界面活性剤の影響を示す。界面活性剤を用いた配合物（６７および６９）は、界面活性剤を用いない２つの配合物（７５および７６）と比較してはるかに遅い放出を示す。
【０１９９】
図１１は、いくつかの異なる配合物からのリゾチームの放出プロファイルを示す。配合物８３は、例えば、わずか２日後に９０％の非常に速い放出を示す熱可逆性ヒドロゲルである。方法１を用いて、ＡＰＩを直接疎水性トリブロックコポリマーと溶解／混合すると（配合物８２）、保持のわずかな改善が得られたが、７日後に９０％超が放出された。界面活性剤（配合物７９、８０および８１）の添加は、特に最初の７日間にわたってさらに高い保持を示す。意外にも、配合物８０中のリゾチームの保持は著しく高い。２５日後に約１０％が放出された。配合物７９、８１と配合物８０との間の相違は、トリブロックコポリマー界面活性剤の組成である。ポリマー界面活性剤中のカプロラクトン／ラクチドの比率が疎水性トリブロックコポリマー中の比率と同じである場合、最も持続された保持および最も遅い放出が得られた。
【０２００】
【表１１】
0006486563.tif 000012
【０２０１】
この現象をさらに調べるために、様々な界面活性剤を用いた新たな一連の配合物を調製し（表１１）、続いてインビトロ放出試験を行った。図１２に示されるように、界面活性剤の組成は、リゾチームの放出に非常に大きい影響を与える。界面活性剤としてのＰｌｕｒｏｎｉｃｓ１７Ｒ４（配合物１１４）は、最初の２４時間でほぼ１００％の放出で、いかなる形態の保持も示さない。同じ構成単位で構成されるが、２つのモノマーの比率が異なるポリマー界面活性剤（配合物１１３）は、７日後に約８５％の最終的な放出で、より高い保持を示す。ポリマー界面活性剤の組成を疎水性トリブロックコポリマーの２つのモノマー間の同じ比率に変更すると、意外にも非常に高い保持を示す（配合物１１２）。７日後に２０％のみのリゾチームが放出された。
【０２０２】
実験１５：ＩｇＧが充填された配合物の調製
ＡＰＩとしてＩｇＧを用いた新たな一連の配合物を調製した。調製方法５を使用した。
【０２０３】
【表１２】
0006486563.tif 000013
【０２０４】
実験１６：ＩｇＧを用いた配合物の粘度測定およびＩＶＲ
【０２０５】
【表１３】
0006486563.tif 000014
【０２０６】
図１３は、配合物１０６および１１１のＩｇＧの放出が界面活性剤の著しい影響をやはり示すことを示す。速い放出が配合物１０６について観察され、１４日後に８０％超のＩｇＧが放出された。界面活性剤をＰＥＧ１５００（ｃａｐ50−ｌａｃ50）2.2−Ｃ２と取り替えると、リゾチーム放出に関しても見られるように保持（配合物１１１）が増加される一方、約１５％のみが１５日後に放出された。
【０２０７】
実験１７：１重量％のリゾチームが充填された配合物（モノマーｐ−ジオキサノン）の調製
【０２０８】
【表１４】
0006486563.tif 000015
【０２０９】
【表１５】
0006486563.tif 000016
【０２１０】
この作業のほとんどがモノマーε−カプロラクトンおよびラクチドを用いて行われる。また、いくつかの実験を、ε−カプロラクトンおよびｐ−ジオキサノンのモノマー組合せを用いて行った。
【０２１１】
疎水性トリブロックコポリマーＰＥＧ６００（ｃａｐ50−ｄｉｏｘ50）2.0−Ｃ３を用いた一連の配合物を調製した。このトリブロックコポリマーは、ジオキサノンのより低いガラス転移温度のため、カプロラクトン／ラクチドＢブロックで構成された疎水性トリブロックコポリマーと比較してはるかに低い粘度を有する。さらに、予測されるように、作製された配合物の粘度は、単独のトリブロックコポリマーより低かった。
【０２１２】
図１４に示されるように、界面活性剤の組成は、カプロラクトン／ジオキサノンベースのエマルションからのリゾチームの放出速度に大きい影響を与えた。リゾチームの比較的速い放出（約５０％）が、カプロラクトン／ラクチドベースの界面活性剤を用いた配合物について７日後に測定された。対照的に、２５％のみのリゾチームが、カプロラクトン／ジオキサノンブロックを用いた、界面活性剤を含有する配合物について７日後に放出された。
【０２１３】
結論：界面活性剤の使用は、リゾチームおよびＩｇＧの放出に驚くべき影響を示す。使用される疎水性トリブロックコポリマーと同じモノマーおよびモノマー比率を用いたトリブロックコポリマー界面活性剤の添加は、リゾチームおよびＩｇＧの遅いおよび持続放出にとって重要である。
【０２１４】
実験１８：ＩｇＧ（０．５ｍｇ／ｇ）が充填された配合物の安定性
【０２１５】
【表１６】
0006486563.tif 000017
【０２１６】
配合物の安定性を調べるために、新たに調製された配合物のＩＶＲ速度を、２週間にわたって冷蔵庫（２〜８℃）中で貯蔵された配合物と比較する。
【０２１７】
図１５に示されるように、約９０％のＩｇＧが、新たに調製された配合物１１５から１１日後に放出された。この実験では、配合物の半分を２週間にわたって冷蔵庫中で貯蔵した後、第２のＩＶＲ試験を行った。残念ながら、第２のＩＶＲ試験のＩＶＲ結果は、第１のＩＶＲデータと一致しなかった。２週間の貯蔵後にＩｇＧ放出がはるかに速い。配合物を調製した直後の６０％と比較して、３日後に既に５０％のＩｇＧが放出され、７日後に８６％であった。
【０２１８】
結論：ＩＶＲ結果は再現性がなかった。配合物は、冷蔵庫（２〜８℃）中で貯蔵した場合、２週間にわたって安定していなかった。
【０２１９】
実験１９：２つの界面活性剤を用いた、ＩｇＧ（２ｍｇ／ｇ）が充填された配合物の調製
【０２２０】
【表１７】
0006486563.tif 000018
【０２２１】
リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）の代わりにリン酸緩衝液（ＰＢ）を用いて一連の配合物を調製し、さらに２つのポリマー界面活性剤を使用した（ＡＣＥＭＩＸ）。ＡＣＥＭＩＸは、比率３：１のポリマー界面活性剤ＰＥＧ１５００（ｃａｐ80−ｌａｃ20）2.2−Ｃ２  ３７およびＰＥＧ１５００（ｃａｐ50−ｌａｃ50）2.2−Ｃ２  ３６の混合物である。これらの配合物の安定性を調べるために、第２のインビトロ放出試験を、２週間にわたって冷蔵庫（２〜８℃）中で貯蔵された同じ配合物を用いて行った。
【０２２２】
図１６および図１７に示されるように、新鮮な配合物と、２〜８℃において冷蔵庫中で貯蔵された２週間経過した配合物との間に完全な重複がある。２つのポリマー界面活性剤の使用は、配合物の安定性を大きく向上させた。
【０２２３】
結論：２つの界面活性剤を含有する配合物は、２〜８℃で少なくとも２週間にわたって安定していた。
【０２２４】
実験２０：ＩｇＧが充填されたＡＣＥＭＩＸとの疎水性トリブロックコポリマーブレンド
【０２２５】
【表１８】
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【０２２６】
【表１９】
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【０２２７】
同じモノマー比率を有するが、異なるブロック長さまたはエンドキャップにおける異なる長さを有する疎水性トリブロックコポリマーからブレンドを調製した。配合物１２２は、末端基のタイプのみが異なるブレンドである。ブロック長さのみの変化が配合物１２３に用いられた（表１８）。配合物１２４、１２５を比較データに使用した。
【０２２８】
試験された配合物のうち、配合物１２４に使用された疎水性トリブロックコポリマーは、最も短いポリエステルブロックを有し、これは、最も速い放出（１０日後に９０％、図１８）および最も低い粘度（表１９）をもたらした。ポリエステルブロック比を１．０から１．５に増加させることにより（配合物１２５）、粘度が増加し、ＩｇＧの放出がかなり遅かった（１０日後に８０％）。興味深いことに、１．０および２．０のポリエステル比を有する疎水性トリブロックコポリマーが一緒に混合されて、１．５の平均ポリエステルブロック比が得られる場合、異なる特性を有する配合物が得られた。このブレンド（配合物１２３）は、配合物１２５とほぼ一致した粘度を有していたが、完全に異なる放出パターンを有していた。さらに、異なるエンドキャップを有する同じ疎水性トリブロックコポリマー組成物のブレンド（１２２）は、粘度（１１６）の変化をもたらしたが、放出速度も著しく変化させた。
【０２２９】
実験２１：トリブロックコポリマーエマルションの生体外注入
ポリマーエマルション（２５０μｌ）を３７℃でラットの死体に注入した（ラットを注入の１分前に殺処分し、ラットは、別の試験から取り、注入試験の目的で殺処分しなかった）。注入の直後、ラットの皮膚を除去した。驚くべきことに、図１９に示されるように良好な「粘着性の」デポーが形成された。
【０２３０】
デポー配合物は、気泡がデポーの内部に閉じ込められたものでさえ意外にも速かった。
【０２３１】
全体的な結論
（親水性）ＡＰＩの放出プロファイルは、ごく少量の水の存在下において、ポリマー界面活性剤（Ｂ）と組み合わせて疎水性トリブロックコポリマー（Ａ）を用いて意外にも調整され得る。本明細書の好ましい態様は、ポリマー界面活性剤（Ｂ）と疎水性トリブロックコポリマー（Ａ）とが同じモノマーを用いて調製されることである。モノマーおよびＡＰＩに応じて、モノマー間の比率を変更することにより、持続された保持をこのように得ることができる。これは、市販の界面活性剤を用いて達成することができない。いくつかの配合物の低温安定性を持続させるために、ポリマー界面活性剤の混合物（ａｃｅｍｉｘ）を有利に適用することができる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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