(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ａ．遊離形態にある、２５０ｍｇ〜１３００ｍｇのロイシンおよび／もしくは少なくとも２５ｍｇの１種以上のロイシン代謝産物であって、ケトイソカプロン酸（ＫＩＣ）、α−ヒドロキシイソカプロン酸、およびヒドロキシメチルブチレート（ＨＭＢ）からなる群より選択される、ロイシン代謝産物；ならびに
ｂ．２０〜５００ｍｇのニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物であって、ニコチニルＣｏＡ、ニコチン尿酸、ニコチン酸モノヌクレオチド、ニコチン酸アデニンジヌクレオチド、およびニコチンアミドアデニンジヌクレオチドからなる群より選択される、ニコチン酸代謝産物
を含む、高脂血症を処置するための組成物であって、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、スレオニン、トリプトファン、バリン、イソロイシンおよびチロシンを実質的に含まず、該組成物が、１日あたり２０〜５００ｍｇのニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物の用量で投与されることを特徴とする、組成物。
【請求項２】
前記組成物は、ニコチンアミドを実質的に含まない、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記組成物中の成分（ａ）は、ロイシンであり、前記組成物中の成分（ｂ）は、ニコチン酸である、請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物の量は、２０〜１００ｍｇの間である、請求項１に記載の組成物。
【請求項５】
前記組成物は、被験体においてトリグリセリドレベル、総コレステロールもしくはＬＤＬレベルを少なくとも５％低下させることにおいて有効であり、ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物の量は、前記ロイシンおよび／もしくは１種以上のロイシン代謝産物の非存在下で、そのような低下をもたらすには不十分である、請求項１に記載の組成物。
【請求項６】
前記組成物は、レスベラトロールをさらに含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項７】
前記組成物は、錠剤、カプセル、または丸剤である、請求項１に記載の組成物。
【請求項８】
ＨＭＧ−ＣｏＡインヒビター、フィブラート、胆汁酸封鎖剤、エゼチミブ、ロミタピド、フィトステロール、ＣＥＴＰアンタゴニスト、オルリスタット、およびこれらの任意の組み合わせからなる群より選択される１種以上の治療剤をさらに含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項９】
前記組成物は、単位投与形態で製剤化される、請求項１に記載の組成物。
【請求項１０】
請求項９に記載の組成物の単位投与の複数日供給物および複数日の期間にわたる該複数日供給物の投与を指示する説明書を含む、高脂血症を処置するためのキット。
【請求項１１】
総コレステロールレベルの低下を必要とする被験体において総コレステロールレベルを低下させるための、請求項１〜９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１２】
ａ．ロイシンおよび／もしくは１種以上のロイシン代謝産物であって、ケトイソカプロン酸（ＫＩＣ）、α−ヒドロキシイソカプロン酸、およびヒドロキシメチルブチレート（ＨＭＢ）からなる群より選択される、ロイシン代謝産物；ならびに
ｂ．２０〜５００ｍｇのニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物であって、ニコチニルＣｏＡ、ニコチン尿酸、ニコチン酸モノヌクレオチド、ニコチン酸アデニンジヌクレオチド、およびニコチンアミドアデニンジヌクレオチドからなる群より選択される、ニコチン酸代謝産物、
を含む、高脂血症を処置するための組成物であって、ここで該組成物中の成分（ｂ）に対する成分（ａ）のモル比は、５より大きく、
アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、スレオニン、トリプトファン、バリン、イソロイシンおよびチロシンを実質的に含まず、
１３００ｍｇ未満の、ロイシンおよび／もしくは１種以上のロイシン代謝産物の量を含み、該組成物が、１日あたり２０〜５００ｍｇのニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物の用量で投与されることを特徴とする、組成物。
【請求項１３】
成分（ｂ）に対する成分（ａ）の前記モル比は、１００未満である、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１４】
前記組成物は、ニコチンアミドを実質的に含まない、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１５】
前記組成物中の成分（ａ）は、ロイシンであり、前記組成物中の成分（ｂ）は、ニコチン酸である、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１６】
ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物の量は、２０〜１００ｍｇの間である、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１７】
前記組成物は、錠剤、カプセル、または丸剤である、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１８】
前記組成物は、単位投与形態で製剤化される、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１９】
請求項１２に記載の組成物の単位投与量の複数日供給物および複数日の期間にわたる該複数日供給物の投与を指示する説明書を含む、高脂血症を処置するためのキット。
【請求項２０】
総コレステロールレベルまたは総脂質含有量の低下を必要とする被験体において総コレステロールレベルまたは総脂質含有量を低下させるための、請求項１２〜１８のいずれか一項に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
相互参照
本出願は、２０１３年３月１５日に出願された米国仮特許出願第６１／８００，３６３号の優先権を主張し、その全体が参照によって本明細書に組み込まれる。
【背景技術】
【０００２】
（発明の背景）
代謝障害（例えば、高脂血症および肥満症）、ならびに健康および死亡率に関する影響は、公衆衛生に多大な負荷を与える。例えば、肥満症（臨床的には、３０ｋｇ／ｍ２を超えるボディーマスインデックスと定義される）は、米国の成人集団のうちの３５．７％が罹患していると概算される。米国において、肥満症は、年間およそ１１０，０００〜３６５，０００名の死亡を引き起こすと概算されている。肥満症は、血流中の脂質（コレステロール、コレステロールエステル、リン脂質およびトリグリセリドが挙げられる）の過剰によって特徴付けられる高脂血症を生じ得、糖尿病、血管病、癌、腎疾患、感染性疾患、外因による自傷行為（ｅｘｔｅｒｎａｌ  ｃａｕｓｅｓ，  ｉｎｔｅｎｔｉｏｎａｌ  ｓｅｌｆ−ｈａｒｍ）、神経系障害、および慢性肺疾患をさらに生じ得る（Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ  ２０１１；  ３６４：８２９−８４１）。メタボリックシンドローム（ここで被験体は、中枢性の肥満症および少なくとも２種の他の代謝障害（例えば、高コレステロール、高血圧症、もしくは肥満症）を提示する）は、米国の人口のうちの２５％が罹患していると概算される。
【０００３】
高脂血症は、肥満症および他の状態の症状のうちの１つであり、種々の医薬（ニコチン酸が挙げられる）で処置され得る。ニコチン酸は、ビタミンＢ３（ナイアシン）の形態である。高用量（１〜３ｇ／日）で摂取されると、ニコチン酸は、総脂質、ＬＤＬ、コレステロール、トリグリセリド、およびリポタンパク質を低下させ得るか、または血中のＨＤＬリポタンパク質を上昇させ得るので、高脂血症を処置し得る。それは、アテローム硬化プラークの進行、ならびに冠動脈心疾患の罹患率および死亡率も低下させ得る。
しかし、ニコチン酸は、重大な副作用を有し得るので、一般には寛容性が不十分であり得る。１つの重大な副作用は、重症の皮膚血管拡張および紅潮の応答であり得、結果として、安全性および効力が十分に証明されているにも拘わらず、まれにしか処方されない（Ｃａｒｌｓｏｎ  ＬＡ．  Ｎｉｃｏｔｉｎｉｃ  ａｃｉｄ：  ｔｈｅ  ｂｒｏａｄ−ｓｐｅｃｔｒｕｍ  ｌｉｐｉｄ  ｄｒｕｇ．  Ａ  ５０ｔｈ  ａｎｎｉｖｅｒｓａｒｙ  ｒｅｖｉｅｗ．  Ｊ  Ｉｎｔ  Ｍｅｄ  ２００５；  ２５８：９４−１１４）。副作用は、徐放性（ＳＲ）および長期放出（ＥＲ）の調製物において幾分弱められるとはいえ、その副作用は、十分に薬物使用を制限し続ける理由である。従って、ニコチン酸の治療効果を低減することなく、その副作用を低下させる必要性が依然としてある。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ  ２０１１；  ３６４：８２９−８４１
【非特許文献２】Ｃａｒｌｓｏｎ  ＬＡ．  Ｎｉｃｏｔｉｎｉｃ  ａｃｉｄ：  ｔｈｅ  ｂｒｏａｄ−ｓｐｅｃｔｒｕｍ  ｌｉｐｉｄ  ｄｒｕｇ．  Ａ  ５０ｔｈ  ａｎｎｉｖｅｒｓａｒｙ  ｒｅｖｉｅｗ．  Ｊ  Ｉｎｔ  Ｍｅｄ  ２００５；  ２５８：９４−１１４
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００５】
（発明の要旨）
本願は、被験体において高脂血症を処置するための組成物、方法およびキットを提供する。上記組成物、方法、およびキットは、ロイシンおよび／もしくはロイシン代謝産物を、ニコチン酸と組み合わせて含み得る。本発明は、高用量のニコチン酸で被験体を処置することの負の副作用に対処する。
【０００６】
本発明の組成物は、経口的にもしくは他の経路（例えば、静脈内投与）を通じて投与され得る。経口投与のための組成物としては、丸剤、錠剤、カプセルなどが挙げられ得る。
【０００７】
一局面において、本発明は、少なくとも約２５０ｍｇのロイシンおよび／もしくは約２５ｍｇの１種以上のロイシン代謝産物；ならびに少なくとも約１ｍｇのニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物を含む組成物を提供する。
【０００８】
本発明の別の局面において、少なくとも約２５０ｍｇのロイシンおよび／もしくは約２５ｍｇの１種以上のロイシン代謝産物；ならびにある量のニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物を含む組成物が提供され、ここで上記組成物は、アラニン、グリシン、グルタミン酸、およびプロリンの各々を実質的に含まない。
【０００９】
なお別の局面において、本発明はまた、少なくとも約２５０ｍｇのロイシンおよび／もしくは約２５ｍｇの１種以上のロイシン代謝産物；ならびにある量のニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物を含む組成物を提供し、ここでニコチン酸および／もしくはニコチン酸代謝産物の量は、成分（ａ）の非存在下で、脂質含有量を低下させるには不十分である。
【００１０】
本発明のさらになお別の局面において、ある量のロイシンおよび／もしくは１種以上のロイシン代謝産物；ならびにある量のニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物を含む組成物が提供され、ここで上記組成物は、それを必要とする被験体に投与され、さらにここで上記組成物は、上記被験体において脂質含有量を低下させることにおいて上記組成物と同じ有効性を有するニコチン酸のみのある用量と比較して、投与される上記被験体において皮膚血管拡張の程度の低下を引き起こす。
【００１１】
別の局面において、本発明は、ロイシンおよび／もしくは１種以上のロイシン代謝産物；ならびに少なくとも約１ｍｇのニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物を含む組成物をさらに提供し、ここで上記組成物中の成分（ｂ）に対する成分（ａ）のモル比は、約２０より大きい。
【００１２】
いくつかの実施形態において、本明細書で記載される組成物は、少なくとも約５００ｍｇのロイシンおよび／もしくは少なくとも約２００ｍｇの１種以上のロイシン代謝産物を含む。いくつかの実施形態において、上記組成物は、少なくとも約２５０ｍｇのロイシンおよび／もしくは約２５ｍｇの１種以上のロイシン代謝産物を含み得る。いくつかの実施形態において、ロイシンおよび／もしくは１種以上のロイシン代謝産物の量は、約１ｇ未満である。いくつかの実施形態において、ロイシンおよび／もしくは１種以上のロイシン代謝産物の量は、３ｇ未満である。
【００１３】
本明細書で開示されるとおりの組成物は、ニコチンアミドを実質的に含まない可能性がある。いくつかの実施形態において、上記組成物は、ニコチン酸代謝産物を実質的に含まない可能性がある。別の実施形態において、上記組成物は、ニコチニルＣｏＡ、ニコチン尿酸、ニコチン酸モノヌクレオチド、ニコチン酸アデニンジヌクレオチド、およびニコチンアミドアデニンジヌクレオチドの各々を実質的に含まない可能性がある。いくつかの実施形態において、上記ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物は、ニコチン酸である。
【００１４】
本明細書で開示されるとおりの組成物は、ロイシン代謝産物を実質的に含まない可能性がある。いくつかの実施形態において、上記ロイシンおよび／もしくは１種以上のロイシン代謝産物は、ロイシンである。
【００１５】
いくつかの場合、本明細書で記載される組成物は、約１ｇ未満であり得るニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物の量を含み得る。いくつかの場合、ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物の量は、約２５０ｍｇ未満であり得る。いくつかの実施形態において、ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物の量は、約１〜１００ｍｇの間であり得る。さらにいくつかの実施形態において、ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物の量は、少なくとも約１ｍｇであり得る。
【００１６】
いくつかの実施形態において、本明細書で記載される組成物は、約１００ｎＭ未満であるニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物の血清レベルを達成し得る、ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物の量を含み得る。本発明の別の局面において、ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物の量は、約１０ｎＭであるニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物の血清レベルを達成し得る。なお別の局面において、ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物の量は、約１〜１００ｎＭの間である、ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物の血清レベルを達成し得る。
【００１７】
いくつかの場合、本明細書で開示される組成物は、上記被験体においてトリグリセリドレベル、総コレステロールもしくはＬＤＬのレベルを少なくとも約５％程度低下させることにおいて有効であり得る。いくつかの場合、上記組成物中の成分（ａ）および成分（ｂ）の量は、上記被験体に投与される場合、上記被験体において脂質含有量を相乗的に低下させ得る。いくつかの実施形態において、上記組成物中の成分（ａ）および成分（ｂ）は、上記被験体の体重増加の低下、上記被験体の脂肪酸化の増大、もしくは上記被験体におけるＳｉｒｔ１の活性化の増大を相乗的に増強し得る。
【００１８】
いくつかの実施形態において、本明細書で記載される組成物中のニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物の量は、ロイシンおよび／もしくは１種以上のロイシン代謝産物の非存在下で、脂質含有量を低下させるには不十分であり得る。
【００１９】
いくつかの場合、本明細書で開示される組成物は、食料品中に含まれ得る。
【００２０】
いくつかの実施形態において、本発明の組成物は、遊離形態にある、上記ロイシンおよび／もしくは１種以上のロイシン代謝産物の一部を含み得る。いくつかの実施形態において、上記ロイシンおよび／もしくは１種以上のロイシン代謝産物の一部は、塩形態にあり得る。
【００２１】
本発明のいくつかの局面において、上記組成物は、レスベラトロールをさらに含み得る。
【００２２】
いくつかの場合、上記組成物は、経口投与のために製剤化され得る。いくつかの場合、上記組成物は、錠剤、カプセル、丸剤、顆粒、エマルジョン、ゲル、カプセル中に被包される複数のビーズ、粉末、懸濁物、液体、半液体、半固体、シロップ、スラリーもしくはチュアブル形態であり得る。
【００２３】
いくつかの場合、本明細書で記載されるとおりの組成物中に含まれる成分（ａ）および成分（ｂ）は、別個にパッケージされ得る。いくつかの実施形態において、上記成分（ａ）および成分（ｂ）は、混合され得る。
【００２４】
本明細書で記載されるとおりの組成物は、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、スレオニン、トリプトファン、バリン、イソロイシンおよびチロシンからなる群より選択される各アミノ酸を実質的に含まない可能性がある。いくつかの場合、上記組成物は、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、スレオニン、トリプトファン、バリン、イソロイシンおよびチロシンからなる群より選択される各遊離アミノ酸を実質的に含まない可能性がある。いくつかの場合、上記組成物は、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、スレオニン、トリプトファン、バリン、イソロイシンおよびチロシンからなる群より選択される、約０．１％未満の各遊離アミノ酸を含み得る。いくつかの実施形態において、上記組成物は、約１０％未満の非ロイシンアミノ酸を含み得る。
【００２５】
別の局面において、本明細書で記載されるとおりの組成物中に含まれ得る１種以上のロイシン代謝産物は、ケトイソカプロン酸（ＫＩＣ）、α−ヒドロキシイソカプロン酸、およびＨＭＢからなる群より選択され得る。いくつかの実施形態において、本明細書で開示される組成物は、ニコチンアミドは含まない可能性がある。
【００２６】
なお別の局面において、本明細書で開示される組成物は、脂質蓄積を低下させ得る１種以上の治療剤をさらに含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書で記載される組成物中に含まれ得る１種以上の治療剤は、ＨＭＧ−ＣｏＡインヒビター、フィブラート、胆汁酸封鎖剤、エゼチミブ、ロミタピド、フィトステロール、ＣＥＴＰアンタゴニスト、オルリスタット、およびこれらの任意の組み合わせからなる群より選択され得る。
【００２７】
いくつかの実施形態において、本明細書で記載される組成物中の成分（ｂ）に対する成分（ａ）のモル比は、約２０より大きい可能性がある。
【００２８】
いくつかの実施形態において、本明細書で記載される組成物は、単位投与形態で製剤化され得る。
【００２９】
別の局面において、本発明はまた、本明細書で記載される組成物の単位投与量の複数日供給物ならびに複数日の期間にわたる複数日供給物の投与を指示する説明書を含むキットを提供する。
【００３０】
なお別の局面において、本発明は、総コレステロールレベルの低下を必要とする被験体において総コレステロールレベルを低下させるための方法をさらに提供し、上記方法は、上記被験体に、本明細書で開示される組成物を投与して、上記被験体において総コレステロールレベルに変化をもたらす工程を包含する。いくつかの実施形態において、本発明はまた、総脂質含有量の低下を必要とする被験体において総脂質含有量を低下させるための方法を提供し、上記方法は、上記被験体に、本明細書で開示される組成物を投与して、上記被験体において総脂質含有量に変化をもたらす工程を包含する。
【００３１】
一局面において、本発明はまた、総コレステロールレベルの低下を必要とする被験体において総コレステロールレベルを低下させるための方法を提供し、上記方法は、上記被験体に、ロイシンおよび／もしくは１種以上のロイシン代謝産物ならびにある量のニコチン酸および／もしくはニコチン酸代謝産物を含むある用量の組成物を投与して、上記被験体において総コレステロールレベルに変化をもたらす工程を包含する。
【００３２】
いくつかの実施形態において、本明細書で開示される方法において使用され得るニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物の量は、約２５０ｍｇ未満であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書で開示される方法において使用され得るニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物の量は、約１００ｍｇ未満であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書で記載される方法において使用され得るニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物の量は、約２５ｍｇ未満であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書で記載される方法において使用され得るニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物の量は、約１０ｍｇ未満であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書で開示される方法において使用され得る組成物の用量は、単位用量であり得る。
【００３３】
本発明の別の局面において、ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物の副作用を低減するための方法が開示され、ここで上記副作用は、ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物を投与された被験体における皮膚血管拡張の増大によって特徴付けられ得、上記方法は、有効量のロイシンおよび／もしくは１種以上のロイシン代謝産物を含む組成物を、ニコチン酸および／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物を投与され得る上記被験体に投与する工程を包含する。
【００３４】
いくつかの実施形態において、本明細書で記載されるとおりの方法は、上記組成物を経口投与する工程を包含し得る。
【００３５】
いくつかの場合、本明細書で記載される方法において使用されるロイシンおよび／もしくはロイシン代謝産物の有効量は、少なくとも約５００ｍｇのロイシンおよび／もしくは少なくとも約２００ｍｇの１種以上のロイシン代謝産物を含み得る。いくつかの実施形態において、上記ロイシンおよび／もしくはロイシン代謝産物の有効量は、少なくとも約２５０ｍｇのロイシンおよび／もしくは少なくとも約２５ｍｇの１種以上のロイシン代謝産物を含み得る。
【００３６】
いくつかの実施形態において、本明細書で開示される方法は、単独で投与される場合、治療的な量未満にあるニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物を要し得る。いくつかの実施形態において、本明細書で記載される方法において使用され得るニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物は、約１ｇ未満の量にあり得る。いくつかの実施形態において、本明細書で開示される方法において使用されるニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物は、約２５０ｍｇ未満の量にあり得る。いくつかの実施形態において、本明細書で記載される方法において使用されるニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物の量は、約１〜１００ｍｇの間であり得る。
【００３７】
いくつかの場合、本明細書で記載される方法は、約１〜１００ｎＭの間であるニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物の血清レベルを達成し得る、ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物の量を使用し得る。
【００３８】
本発明のなお別の局面において、アテローム硬化プラークサイズの縮小を必要とする被験体においてアテローム硬化プラークサイズを縮小するための方法が提供される。上記方法は、上記被験体に、ロイシンおよび／もしくは１種以上のロイシン代謝産物ならびにある量のニコチン酸および／もしくはニコチン酸代謝産物を含むある用量の組成物を投与して、上記被験体において総アテローム硬化プラークサイズに変化をもたらす工程を包含する。
【００３９】
いくつかの実施形態において、本明細書で記載される方法において使用され得るニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物の量は、約２５０ｍｇ未満であり得る。いくつかの実施形態において、ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物の量は、約１〜１００ｍｇの間であり得る。いくつかの実施形態において、ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物の量は、約２５ｍｇ未満であり得る。
【００４０】
いくつかの場合、本明細書で記載される方法は、上記被験体に少なくとも約１年間にわたって上記組成物を投与する工程を包含し得る。
【００４１】
いくつかの実施形態において、本明細書で記載される方法において使用される組成物の用量は、単位用量であり得る。
本発明は、例えば、以下の項目を提供する。
（項目１）
組成物であって、
ａ．少なくとも約２５０ｍｇのロイシンおよび／もしくは少なくとも約２５ｍｇの１種以上のロイシン代謝産物；ならびに
ｂ．少なくとも約１ｍｇのニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物
を含む、組成物。
（項目２）
前記組成物は、ニコチンアミドを実質的に含まない、項目１に記載の組成物。
（項目３）
前記組成物は、ニコチン酸代謝産物を実質的に含まない、項目１に記載の組成物。
（項目４）
前記組成物は、ニコチニルＣｏＡ、ニコチン尿酸、ニコチン酸モノヌクレオチド、ニコチン酸アデニンジヌクレオチド、およびニコチンアミドアデニンジヌクレオチドのうちの各々を実質的に含まない、項目１に記載の組成物。
（項目５）
前記組成物中の成分（ｂ）は、ニコチン酸である、項目１に記載の組成物。
（項目６）
前記組成物中の成分（ａ）は、ロイシンである、項目１に記載の組成物。
（項目７）
ロイシンおよび／もしくは１種以上のロイシン代謝産物の量は、約１ｇ未満である、項目１に記載の組成物。
（項目８）
ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物の量は、約１ｇ未満である、項目１に記載の組成物。
（項目９）
ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物の量は、約２５０ｍｇ未満である。項目１に記載の組成物。
（項目１０）
ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物の量は、約１〜１００ｍｇの間である、項目１に記載の組成物。
（項目１１）
ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物の量は、約１００ｎＭ未満の、前記ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物の血清レベルを達成することが可能である、項目１に記載の組成物。
（項目１２）
ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物の量は、約１０ｎＭである、前記ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物の血清レベルを達成することが可能である、項目１に記載の組成物。
（項目１３）
ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物の量は、約１〜１００ｎＭの間である、前記ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物の血清レベルを達成することが可能である、項目１に記載の組成物。
（項目１４）
前記組成物は、被験体においてトリグリセリドレベル、総コレステロールもしくはＬＤＬレベルを少なくとも約５％低下させることにおいて有効である、項目１に記載の組成物。
（項目１５）
成分（ａ）および成分（ｂ）の量は、前記被験体に投与される場合に、該被験体における脂質含有量を相乗的に低減する、項目１に記載の組成物。
（項目１６）
成分（ａ）および成分（ｂ）は、前記被験体の体重増加の低下、前記被験体の脂肪酸化の増大、もしくは前記被験体におけるＳｉｒｔ１の活性化の増大を相乗的に増強する、項目１に記載の組成物。
（項目１７）
ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物の量は、前記ロイシンおよび／もしくは１種以上のロイシン代謝産物の非存在下で、脂質含有量を減少させるには不十分である、項目１に記載の組成物。
（項目１８）
前記組成物は、食料品中に含まれる、項目１に記載の組成物。
（項目１９）
前記ロイシンおよび／もしくは１種以上のロイシン代謝産物のうちの一部は、遊離形態である、項目１に記載の組成物。
（項目２０）
前記ロイシンおよび／もしくは１種以上のロイシン代謝産物のうちの一部は、塩形態である、項目１に記載の組成物。
（項目２１）
前記組成物は、レスベラトロールをさらに含む、項目１に記載の組成物。
（項目２２）
前記組成物は、経口投与のために製剤化される、項目１に記載の組成物。
（項目２３）
前記組成物は、錠剤、カプセル、丸剤、顆粒、エマルジョン、ゲル、カプセル中に被包される複数のビーズ、粉末、懸濁物、液体、半液体、半固体、シロップ、スラリーもしくはチュアブル形態である、項目１に記載の組成物。
（項目２４）
成分（ａ）および成分（ｂ）は、別個にパッケージされている、項目１に記載の組成物。
（項目２５）
成分（ａ）および成分（ｂ）は、混合されている、項目１に記載の組成物。
（項目２６）
前記組成物は、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、スレオニン、トリプトファン、バリン、イソロイシンおよびチロシンからなる群より選択される各アミノ酸を実質的に含まない、項目１に記載の組成物。
（項目２７）
前記組成物は、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、スレオニン、トリプトファン、バリン、イソロイシンおよびチロシンからなる群より選択される各遊離アミノ酸を実質的に含まない、項目１に記載の組成物。
（項目２８）
前記組成物は、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、スレオニン、トリプトファン、バリン、イソロイシンおよびチロシンからなる群より選択される、約０．１％未満の各遊離アミノ酸を含む、項目１に記載の組成物。
（項目２９）
前記組成物は、約１０％未満の非ロイシンアミノ酸を含む、項目１に記載の組成物。
（項目３０）
前記１種以上のロイシン代謝産物は、ケトイソカプロン酸（ＫＩＣ）、α−ヒドロキシイソカプロン酸、およびＨＭＢからなる群より選択される、項目１に記載の組成物。
（項目３１）
前記組成物は、ニコチンアミドを含まない、項目１に記載の組成物。
（項目３２）
脂質蓄積を低下させることが可能である１種以上の治療剤をさらに含む、項目１に記載の組成物。
（項目３３）
前記１種以上の治療剤は、ＨＭＧ−ＣｏＡインヒビター、フィブラート、胆汁酸封鎖剤、エゼチミブ、ロミタピド、フィトステロール、ＣＥＴＰアンタゴニスト、オルリスタット、およびこれらの任意の組み合わせからなる群より選択される、項目３２に記載の組成物。
（項目３４）
前記組成物中の成分（ｂ）に対する成分（ａ）のモル比は、約２０より高い、項目１に記載の組成物。
（項目３５）
前記組成物は、単位投与形態で製剤化される、項目１に記載の組成物。
（項目３６）
項目１〜３５のいずれかに記載の組成物の単位投与の複数日供給物および複数日の期間にわたる該複数日供給物の投与を指示する説明書を含む、キット。
（項目３７）
総コレステロールレベルの低下を必要とする被験体において総コレステロールレベルを低下させるための方法であって、該方法は、該被験体に、項目１に記載の組成物を投与して、該被験体における総コレステロールレベルに変化をもたらす工程、を包含する方法。
（項目３８）
総脂質含有量の低下を必要とする被験体において総脂質含有量を低下させるための方法であって、該方法は、該被験体に、項目１に記載の組成物を投与して、該被験体における総脂質含有量に変化をもたらす工程、を包含する方法。
（項目３９）
ａ．少なくとも約２５０ｍｇのロイシンおよび／もしくは少なくとも約２５ｍｇの１種以上のロイシン代謝産物；ならびに
ｂ．ある量のニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物、
を含む組成物であって、ここで該組成物は、アラニン、グリシン、グルタミン酸、およびプロリンの各々を実質的に含まない、組成物。
（項目４０）
ａ．少なくとも約２５０ｍｇのロイシンおよび／もしくは約少なくとも２５ｍｇの１種以上のロイシン代謝産物；ならびに
ｂ．ある量のニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物
を含む組成物であって、ここでニコチン酸および／もしくはニコチン酸代謝産物の量は、成分（ａ）の非存在下で、脂質含有量を低減させるには不十分である、組成物。
（項目４１）
ａ．ある量のロイシンおよび／もしくは１種以上のロイシン代謝産物；ならびに
ｂ．ある量のニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物、
を含む組成物であって、ここで該組成物は、それを必要とする被験体に投与され、さらにここで該組成物は、該被験体における脂質含有量を低下させることにおいて、該組成物と同じ有効性を有するニコチン酸のみの投薬と比較して、投与される該被験体において、皮膚血管拡張の程度の低減を引き起こす、組成物。
（項目４２）
ａ．ロイシンおよび／もしくは１種以上のロイシン代謝産物；ならびに
ｂ．少なくとも約１ｍｇのニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物、
を含む組成物であって、ここで該組成物中の成分（ｂ）に対する成分（ａ）のモル比は、約２０より大きい、組成物。
（項目４３）
前記組成物は、少なくとも約５００ｍｇのロイシンおよび／もしくは少なくとも約２００ｍｇの前記１種以上のロイシン代謝産物を含む、項目４１〜４２に記載の組成物。
（項目４４）
前記組成物は、少なくとも約２５０ｍｇのロイシンおよび／もしくは約２５ｍｇの１種以上のロイシン代謝産物を含む、項目４１〜４２に記載の組成物。
（項目４５）
前記組成物は、ニコチンアミドを実質的に含まない、項目３９〜４２に記載の組成物。
（項目４６）
前記組成物は、ニコチン酸代謝産物を実質的に含まない、項目３９〜４２に記載の組成物。
（項目４７）
前記組成物は、ニコチニルＣｏＡ、ニコチン尿酸、ニコチン酸モノヌクレオチド、ニコチン酸アデニンジヌクレオチド、およびニコチンアミドアデニンジヌクレオチドの各々を実質的に含まない、項目３９〜４２に記載の組成物。
（項目４８）
前記組成物中の成分（ｂ）は、ニコチン酸である、項目３９〜４２に記載の組成物。
（項目４９）
前記組成物中の成分（ａ）は、ロイシンである、項目３９〜４２に記載の組成物。
（項目５０）
ロイシンおよび／もしくは１種以上のロイシン代謝産物の量は、約１ｇ未満である、項目３９〜４２に記載の組成物。
（項目５１）
ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物の量は、約１ｇ未満である、項目３９〜４２に記載の組成物。
（項目５２）
ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物の量は、約２５０ｍｇ未満である、項目３９〜４２に記載の組成物。
（項目５３）
ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物の量は、約１〜１００ｍｇの間である、項目３９〜４２に記載の組成物。
（項目５４）
ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物の量は、少なくとも約１ｍｇである、項目３９〜４１に記載の組成物。
（項目５５）
ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物の量は、約１００ｎＭ未満の、ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物の血清レベルを達成することが可能である、項目３９〜４２に記載の組成物。
（項目５６）
ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物の量は、約１０ｎＭである、ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物の血清レベルを達成することが可能である、項目３９〜４２に記載の組成物。
（項目５７）
ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物の量は、約１〜１００ｎＭの間である、ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物の血清レベルを達成することが可能である、項目３９〜４２に記載の組成物。
（項目５８）
前記組成物は、前記被験体において、トリグリセリドレベル、総コレステロールもしくはＬＤＬのレベルの少なくとも約５％の低下において有効である、項目３９〜４２に記載の組成物。
（項目５９）
成分（ａ）および成分（ｂ）の量は、前記被験体に投与される場合に、該被験体において脂質含有量を相乗的に低下させる、項目３９〜４２に記載の組成物。
（項目６０）
成分（ａ）および成分（ｂ）は、前記被験体の体重増加の低下、前記被験体の脂肪酸化の増大、もしくは前記被験体におけるＳｉｒｔ１の活性化の増大を相乗的に増強する、項目３９〜４２に記載の組成物。
（項目６１）
ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物の量は、前記ロイシンおよび／もしくは１種以上のロイシン代謝産物の非存在下で、脂質含有量を低下させるには不十分である、項目３９〜４２に記載の組成物。
（項目６２）
前記組成物は、食料品中に含まれる、項目３９〜４２に記載の組成物。
（項目６３）
前記ロイシンおよび／もしくは１種以上のロイシン代謝産物のうちの一部は、遊離形態である、項目３９〜４２に記載の組成物。
（項目６４）
前記ロイシンおよび／もしくは１種以上のロイシン代謝産物のうちの一部は、塩形態である、項目３９〜４２に記載の組成物。
（項目６５）
前記組成物は、レスベラトロールをさらに含む、項目３９〜４２に記載の組成物。
（項目６６）
前記組成物は、経口投与のために製剤化される、項目３９〜４２に記載の組成物。
（項目６７）
前記組成物は、錠剤、カプセル、丸剤、顆粒、エマルジョン、ゲル、カプセル中に被包される複数のビーズ、粉末、懸濁物、液体、半液体、半固体、シロップ、スラリーもしくはチュアブル形態である、項目３９〜４２に記載の組成物。
（項目６８）
成分（ａ）および成分（ｂ）は、別個にパッケージされている、項目３９〜４２に記載の組成物。
（項目６９）
成分（ａ）および成分（ｂ）は、混合されている、項目３９〜４２に記載の組成物。
（項目７０）
前記組成物は、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、スレオニン、トリプトファン、バリン、イソロイシンおよびチロシンからなる群より選択される各アミノ酸を実質的に含まない、項目３９〜４２に記載の組成物。
（項目７１）
前記組成物は、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、スレオニン、トリプトファン、バリン、イソロイシンおよびチロシンからなる群より選択される各遊離アミノ酸を実質的に含まない、項目３９〜４２に記載の組成物。
（項目７２）
前記組成物は、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、スレオニン、トリプトファン、バリン、イソロイシンおよびチロシンからなる群より選択される、約０．１％未満の各遊離アミノ酸を含む、項目３９〜４２に記載の組成物。
（項目７３）
前記組成物は、約１０％未満の非ロイシンアミノ酸を含む、項目３９〜４２に記載の組成物。
（項目７４）
前記１種以上のロイシン代謝産物は、ケトイソカプロン酸（ＫＩＣ）、α−ヒドロキシイソカプロン酸、およびＨＭＢからなる群より選択される、項目３９〜４２に記載の組成物。
（項目７５）
前記組成物は、ニコチンアミドを含まない、項目３９〜４２に記載の組成物。
（項目７６）
脂質蓄積を低下させることが可能である１種以上の治療剤をさらに含む、項目３９〜４２に記載の組成物。
（項目７７）
前記１種以上の治療剤は、ＨＭＧ−ＣｏＡインヒビター、フィブラート、胆汁酸封鎖剤、エゼチミブ、ロミタピド、フィトステロール、ＣＥＴＰアンタゴニスト、オルリスタット、およびこれらの任意の組み合わせからなる群より選択される、項目７６に記載の組成物。
（項目７８）
前記組成物中の成分（ｂ）に対する成分（ａ）のモル比は、約２０より大きい、項目３９〜４２に記載の組成物。
（項目７９）
前記組成物は、単位投与形態で製剤化される、項目３９〜４２に記載の組成物。
（項目８０）
項目３９〜７９のいずれかに記載の組成物の単位投与量の複数日供給物および複数日の期間にわたる該複数日供給物の投与を指示する説明書を含む、キット。
（項目８１）
総コレステロールレベルの低下を必要とする被験体において総コレステロールレベルを低下させるための方法であって、該方法は、該被験体に、項目３９〜４２に記載の組成物を投与して、該被験体における総コレステロールレベルに変化をもたらす工程を包含する、方法。
（項目８２）
総脂質含有量の低下を必要とする被験体において総脂質含有量を低下させるための方法であって、該方法は、該被験体に、項目３９〜４２に記載の組成物を投与して、該被験体における総脂質含有量に変化をもたらす工程を包含する、方法。
（項目８３）
総コレステロールレベルの低下を必要とする被験体において総コレステロールレベルを低下させるための方法であって、該方法は、該被験体に、ロイシンおよび／もしくは１種以上のロイシン代謝産物、ならびにある量のニコチン酸および／もしくはニコチン酸代謝産物を含むある用量の組成物を投与して、該被験体における総コレステロールレベルに変化をもたらす工程を包含する、方法。
（項目８４）
ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物の量は、約２５０ｍｇ未満である、項目８３に記載の方法。
（項目８５）
ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物の量は、約１００ｍｇ未満である、項目８３に記載の方法。
（項目８６）
ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物の量は、約２５ｍｇ未満である、項目８３に記載の方法。
（項目８７）
ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物の量は、約１０ｍｇ未満である、項目８３に記載の方法。
（項目８８）
前記用量は、単位用量である、項目８３に記載の方法。
（項目８９）
ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物の副作用を低減するための方法であって、ここで該副作用は、ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物を投与された被験体における皮膚血管拡張の増大によって特徴付けられ、該方法は、ロイシンおよび／もしくは１種以上のロイシン代謝産物の有効量を含む組成物を、ニコチン酸および／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物を投与される該被験体に投与する工程を包含する、方法。
（項目９０）
前記組成物は、経口投与される、項目８９に記載の方法。
（項目９１）
前記有効量は、少なくとも約５００ｍｇのロイシンおよび／もしくは少なくとも約２００ｍｇの１種以上のロイシン代謝産物を含む、項目８９に記載の方法。
（項目９２）
前記有効量は、少なくとも約２５０ｍｇのロイシンおよび／もしくは少なくとも約２５ｍｇの１種以上のロイシン代謝産物を含む、項目８９に記載の方法。
（項目９３）
ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物は、単独で投与される場合には、治療量未満である、項目８９に記載の方法。
（項目９４）
ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物は、約１ｇ未満の量である、項目８９に記載の方法。
（項目９５）
ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物は、約２５０ｍｇ未満の量である、項目８９に記載の方法。
（項目９６）
ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物の量は、約１〜１００ｍｇの間である、項目８９に記載の方法。
（項目９７）
ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物の量は、約１〜１００ｎＭの間である、ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物の血清レベルを達成することが可能である、項目８９に記載の方法。
（項目９８）
アテローム硬化プラークサイズの縮小を必要とする被験体においてアテローム硬化プラークサイズを縮小するための方法であって、該方法は、該被験体に、ロイシンおよび／もしくは１種以上のロイシン代謝産物ならびにある量のニコチン酸および／もしくはニコチン酸代謝産物を含むある用量の組成物を投与して、該被験体において総アテローム硬化プラークサイズに変化をもたらす工程を包含する、方法。
（項目９９）
ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物の量は、約２５０ｍｇ未満である、項目９８に記載の方法。
（項目１００）
ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物の量は、約１〜１００ｍｇの間である、項目９８に記載の方法。
（項目１０１）
ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物の量は、約２５ｍｇ未満である、項目９８に記載の方法。
（項目１０２）
前記組成物は、前記被験体に少なくとも約１年間投与される、項目９８に記載の方法。
（項目１０３）
前記用量は、単位用量である、項目９８に記載の方法。
【００４２】
（援用の表示）
本明細書で言及される全ての刊行物、特許、および特許出願は、各個々の刊行物、特許もしくは特許出願が参考として援用されるのを具体的にかつ個々に示されるのと同程度に本明細書に参考として援用される。
【図面の簡単な説明】
【００４３】
本発明の新規な特徴は、添付の特許請求の範囲の中で特に示される。本発明の特徴および利点のよりよい理解は、本発明の原理が利用される例証となる実施形態を示す以下の詳細な説明を参照することによって得られる。その図面は、以下のとおりである：
【００４４】
【図１】図１は、ニコチン酸およびニコチンアミドリボシドの化学構造を示す。
【００４５】
【図２】図２は、Ｃ２Ｃ１２筋管におけるＳｉｒｔ１活性化に対するニコチン酸およびロイシン、ならびに／またはレスベラトロールの効果を図示する。ＮＡとは、ニコチン酸をいう；Ｌｅｕとは、ロイシンをいう；Ｒとは、レスベラトロールをいう。＊ｐ＜０．０５；＊＊ｐ＝０．０００１。データを、コントロール値からの％変化として表した。
【００４６】
【図３】図３は、３Ｔ３−Ｌ１脂肪細胞おけるＰ−ＡＭＰＫ／ＡＭＰＫ比に対するニコチン酸およびロイシン、ならびに／またはレスベラトロールの効果を図示する。ＮＡとは、ニコチン酸をいう；Ｌｅｕとは、ロイシンをいう；Ｒとは、レスベラトロールをいう。＊ｐ＜０．０１。データを、コントロール値からの％変化として表した。
【００４７】
【図４】図４は、Ｃ．ｅｌｅｇａｎｓにおける脂質レベルに対するロイシン（０．５ｍＭ）／ニコチン酸（１０ｎＭ）の効果を図示する（＊ｐ＝０．０１２）。ＮＡとは、ニコチン酸をいう；Ｌｅｕとは、ロイシンをいう。
【００４８】
【図５】図５は、ＬＤＬレセプターノックアウトマウスの血漿総コレステロールに対する、ロイシン（Ｌｅｕ，  ２４ｇ／ｋｇ  食餌）、Ｌｅｕ（２４ｇ／ｋｇ  食餌）＋ニコチン酸（ＮＡ，  ５０ｍｇ／ｋｇ  食餌）、Ｌｅｕ（２４ｇ／ｋｇ  食餌）＋ＮＡ（２５０ｍｇ／ｋｇ  食餌）、および西洋式の食餌（Ｗｅｓｔｅｒｎ  Ｄｉｅｔ）（ＷＤ）に添加したＮＡ（１，０００ｍｇ／ｋｇ  食餌）での４週間の処置の効果を図示する。
【００４９】
【図６】図６は、ＬＤＬレセプターノックアウトマウスの血漿コレステロールエステルに対する、ロイシン（Ｌｅｕ，  ２４ｇ／ｋｇ  食餌）、Ｌｅｕ（２４ｇ／ｋｇ  食餌）＋ニコチン酸（ＮＡ，  ５０ｍｇ／ｋｇ  食餌）、Ｌｅｕ（２４ｇ／ｋｇ  食餌）＋ＮＡ（２５０ｍｇ／ｋｇ  食餌）、および西洋式の食餌（ＷＤ）に添加したＮＡ（１，０００ｍｇ／ｋｇ  食餌）での４週間の処置の効果を図示する。
【００５０】
【図７】図７は、ＬＤＬレセプターノックアウトマウスの血漿トリグリセリドに対する、ロイシン（Ｌｅｕ，  ２４ｇ／ｋｇ  食餌）、Ｌｅｕ（２４ｇ／ｋｇ  食餌）＋ニコチン酸（ＮＡ，  ５０ｍｇ／ｋｇ  食餌）、Ｌｅｕ（２４ｇ／ｋｇ  食餌）＋ＮＡ（２５０ｍｇ／ｋｇ  食餌）、および西洋式の食餌（ＷＤ）に添加したＮＡ（１，０００ｍｇ／ｋｇ  食餌）での４週間の処置の効果を図示する。
【００５１】
【図８】図８は、Ｃ．ｅｌｅｇａｎｓの寿命に対する、ニコチン酸およびロイシンの効果を図示する。ＮＡとは、ニコチン酸をいう；Ｌｅｕとは、ロイシンをいう。＊ｐ＜０．０００１。データを、時間を経る毎の％生存として表した。
【発明を実施するための形態】
【００５２】
（発明の詳細な説明）
本明細書で使用される用語法は、特定の実施形態を記載する目的に過ぎず、本発明を限定するとは意図しない。本明細書で使用される場合、単数形「ａ（１つの、ある）」、「ａｎ（１つの、ある）」、および「ｔｈｅ（上記、この、その）」は、別段文脈が明示しなければ、複数形も同様に含むことが意図される。さらに、用語「ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ（含む、包含する）」、「ｉｎｃｌｕｄｅｓ（含む、包含する）」、「ｈａｖｉｎｇ（有する）」、「ｈａｓ（有する）」、「ｗｉｔｈ（伴う、有する）」、またはその変形が詳細な説明および／もしくは特許請求の範囲のいずれかにおいて使用される程度まで、このような用語は、用語「ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ（含む、包含する）」に類似の様式で包括的であることが意図される。
【００５３】
用語「約」もしくは「およそ」は」、当業者によって決定される場合に、特定の値についての受容可能な誤差範囲内を意味し、それは、その値がどのように測定もしくは決定されるか、すなわち、測定系の制限に一部依存する。例えば、「約」は、当該分野での慣例に拠れば、１標準偏差以内を意味し得る。あるいは、「約」とは、所定の値の最大２０％まで、最大１０％まで、最大５％まで、もしくは最大１％までの範囲を意味し得る。あるいは、特に生物学的系もしくはプロセスに関しては、この用語は、ある値の好ましくは、５倍以内、およびより好ましくは、２倍以内の規模内を意味し得る。特定の値が本願および特許請求の範囲の中で記載される場合、別段述べられなければ、その特定の値に関して受容可能な誤差範囲内を意味する用語「約」は、想定されるべきである。
【００５４】
本明細書で使用される場合、用語「被験体」もしくは「個体」とは、哺乳動物を含む。哺乳動物の非限定的例としては、ヒトおよびマウス（トランスジェニックおよび非トランスジェニックマウスが挙げられる）を含む。本明細書で記載される方法は、ヒト治療、前臨床適用および獣医適用のどれにも有用であり得る。いくつかの実施形態において、上記被験体は、哺乳動物であり、いくつかの実施形態において、上記被験体は、ヒトである。他の哺乳動物としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：無尾猿類（ａｐｅ）、チンパンジー、オランウータン、サル（ｍｏｎｋｅｙ）；飼い慣らされた動物（ペット）（例えば、イヌ、ネコ、モルモット、ハムスター、マウス、ラット、ウサギ、およびフェレット）；飼い慣らされた家畜（例えば、ウシ、スイギュウ、野牛、ウマ、ロバ、ブタ、ヒツジ、およびヤギ）；またはエキゾチックアニマル（代表的には、動物園で見出される（例えば、クマ、ライオン、トラ、ヒョウ、ゾウ、カバ、サイ、キリン、レイヨウ、ナマケモノ、ガゼル、シマウマ、ヌー、プレーリードッグ、コアラ、カンガルー、パンダ、ジャイアントパンダ、ハイエナ、アザラシ、アシカ、およびゾウアザラシ））。
【００５５】
用語「ａｄｍｉｎｉｓｔｅｒ（投与する）」、「ａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｅｄ（投与される、投与された）」、「ａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｓ（投与する）」および「ａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｉｎｇ（投与する）」とは、当該分野で公知の経路（静脈内、動脈内、経口、非経口、口内、局所、経皮、直腸、筋肉内、皮下、骨内、経粘膜、もしくは腹腔内の投与経路が挙げられるが、これらに限定されない）によって、被験体に組成物を提供することとして定義される。本願のある種の実施形態において、組成物の経口投与経路が好ましい。
【００５６】
本明細書で使用される場合、「薬剤」もしくは「生物学的に活性な薬剤」とは、生物学的、薬学的、もしくは化学的な化合物もしくは他の部分をいう。非限定的例としては、単純なもしくは複雑な、有機もしくは無機分子、ペプチド、タンパク質、ペプチド核酸（ＰＮＡ）、オリゴヌクレオチド（例えば、アプタマーおよびポリヌクレオチドを含む）、抗体、抗体誘導体、抗体フラグメント、ビタミン誘導体、炭水化物、毒素、もしくは化学療法化合物が挙げられる。種々の化合物が合成され得る（例えば、低分子およびオリゴマー（例えば、オリゴペプチドおよびオリゴヌクレオチド）、および種々のコア構造に基づく合成有機化合物）。さらに、種々の天然供給源が、スクリーニング用化合物を提供し得る（例えば、植物もしくは動物抽出物など）。当業者は、本発明の薬剤の構造的性質に関して限定はないことを容易に認識し得る。
【００５７】
用語「有効量」もしくは「治療上有効な量」とは、意図された適用（以下に定義されるように、疾患もしくは状態の処置が挙げられるが、これらに限定されない）に影響を及ぼすために十分な、本明細書で記載される化合物の量をいう。上記治療上有効な量は、意図された適用（インビトロもしくはインビボ）、または処置されている被験体もしくは疾患状態、例えば、上記被験体の体重および年齢、上記疾患状態の重症度、投与様式などに依存して変動し得、その量は、当業者によって容易に決定され得る。上記用語はまた、標的細胞における特定の応答（例えば、増殖の低下または標的タンパク質の活性のダウンレギュレーション）を誘発する用量に当てはまる。その具体的用量は、選択される特定の化合物、守られる投与レジメン、それが他の化合物と合わせて投与されるか否か、投与のタイミング、それが投与される組織、およびそれが運ばれる物理的送達系に依存して変動する。
【００５８】
用語「エネルギー代謝」とは、本明細書で使用される場合、身体における生化学的反応（細胞代謝およびミトコンドリア新生が挙げられる）に付随するエネルギー変換をいう。エネルギー代謝は、本明細書で記載される種々の測定値（例えば、体重減少、脂肪減少、インスリン感受性、脂肪酸酸化、グルコース利用、トリグリセリド含有量、Ｓｉｒｔ  １発現レベル、ＡＭＰＫ発現レベル、酸化ストレス、およびミトコンドリアバイオマスが挙げられるが、これらに限定されない）を使用して定量され得る。
【００５９】
用語「単離された」とは、本発明の成分（例えば、ＰＤＥ  ５インヒビター（ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物が挙げられるが、これらに限定されない）、ロイシンおよびロイシン代謝産物（例えば、ＨＭＢ）、ならびにレスベラトロール）に関して適用される場合、その物質もしくは類似の物質が天然に存在するかまたは最初に得られる場所に同様に存在し得る他の成分のうちの少なくともいくらかを欠いている物質の調製物に言及する。従って、例えば、単離された物質は、精製技術を使用して、それを他の供給源混合物から富化することによって調製され得る。富化は、絶対ベース（例えば、重量／溶液の容積）で測定され得るか、またはそれは、上記供給源混合物中に存在する第２の潜在的に妨害する物質に関連して測定され得る。本発明の実施形態の富化を増大させることは、ますますより好ましい。従って、例えば、２倍富化は好ましく、１０倍富化はより好ましく、１００倍富化はより好ましく、１０００倍富化はさらにより好ましい。物質はまた、人工アセンブリのプロセスによって、例えば、化学合成によって、単離された状態で提供され得る。
【００６０】
薬剤、アクチベーターもしくは治療の「治療未満の量」とは、意図された適用のためのその薬剤、アクチベーターもしくは治療の有効量より少ない量であるが、別の薬剤もしくは治療の有効量もしくは治療未満の量と合わされた場合、例えば、その得られた効果的な効果、および／もしくは低下した副作用における相乗効果に起因して、所望の結果を生じ得る。
【００６１】
「相乗的な（ｓｙｎｅｒｇｉｓｔｉｃ）」もしくは「相乗効果を奏する（ｓｙｎｅｒｇｉｚｉｎｇ）」効果とは、組み合わせ組成物の１以上の効果が、各成分単独の上記１以上の効果より大きいか、またはそれらが各成分単独の上記１以上の効果の合計より大きい可能性があるようにされるものであり得る。上記相乗的効果は、上記成分のうちの１つ単独での被験体に対する効果、または個々に投与される場合に上記成分の各々の相加的効果より、約１０％、２０％、３０％、５０％、７５％、１００％、１１０％、１２０％、１５０％、２００％、２５０％、３５０％、もしくは５００％であるか、またはこれら以上であり得る。その効果は、本明細書で記載される測定可能な効果のうちのいずれかであり得る。
【００６２】
用語「実質的に含まない」とは、本明細書で使用される場合、特定される成分の約１０％未満、約５％未満、約１％未満、約０．５％未満、０．１％未満、もしくはさらにより少ない％を有する組成物に言及する。例えば、非分枝鎖アミノ酸を実質的に含まない組成物は、非分子鎖アミノ酸リジンの約１％未満を有し得る。パーセンテージは、組成物全体の％として、または上記組成物の部分集合の％として決定され得る。例えば、非分子鎖アミノ酸を実質的に含まない組成物は、組成物全体のパーセントとして、もしくは上記組成物中のアミノ酸の％として、上記非分枝鎖アミノ酸の１％未満を有し得る。パーセンテージは、質量、モル、もしくは容積のパーセンテージであり得る。
【００６３】
用語「臨床的有意性」もしくは「臨床的に有意な」とは、正規範囲外にあると考えられ、毎日の機能の疲労および障害によって示される挙動および症状を示す。例えば、臨床的に有意な皮膚血管拡張は、急性血管拡張に二次的な不快感（紅潮、痒みおよび／もしくは刺痛が挙げられる）に関する患者の不定愁訴を誘発するために十分なレベルである。皮膚血管拡張のレベルはまた、医療分野で公知の任意の方法（例えば、Ｓａｕｍｅｔ  Ｊ．Ｌ．  ｅｔ  ａｌ．，  「Ｎｏｎ−ｉｎｖａｓｉｖｅ  ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ  ｏｆ  ｓｋｉｎ  ｂｌｏｏｄ  ｆｌｏｗ：  ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ  ｂｅｔｗｅｅｎ  ｐｌｅｔｈｙｓｍｏｇｒａｐｈｙ，  ｌａｓｅｒ−Ｄｏｐｐｌｅｒ  ｆｌｏｗｍｅｔｅｒ  ａｎｄ  ｈｅａｔ  ｔｈｅｒｍａｌ  ｃｌｅａｒａｎｃｅ  ｍｅｔｈｏｄ」  Ｉｎｔ．  Ｊ．  Ｍｉｃｒｏｃｉｒｃ．  Ｃｌｉｎ．  Ｅｘｐ．  １９８６；５：７３−８３で開示されるレーザードップラーフローメーターを含む方法）によって測定され得る。皮膚血管拡張の臨床的に有意なレベルはまた、統計的に有意なレベルであり得る。皮膚血管拡張の臨床的に有意なレベルはまた、統計的に有意でないレベルであり得る。
【００６４】
用語「脂質含有量」もしくは「脂質レベル」とは、被験体内部で測定される脂質もしくはリポタンパク質分子の含有量もしくはレベルをいう。それは、循環血流中の脂質分子の濃度、または体脂肪の総量であり得る。上記脂質もしくはリポタンパク質分子は、トリグリセリド、コレステロール、ＬＤＬ、もしくはＨＤＬを含み得る。
【００６５】
組成物
本発明の組成物は、（ｉ）ロイシンおよび／もしくは１種以上のロイシン代謝産物、ならびに（ｉｉ）ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物の組み合わせを含む。上記組成物は、高脂血症を処置するために使用され得る。上記組成物は、レスベラトロールもしくは脂質レベルを低下させ得る１種以上の治療剤をさらに含み得る。これら成分の組み合わせは、脂質含有量を低下させるか、総コレステロールレベルを低下させるか、ＬＤＬレベルを低下させるか、トリグリセリドレベルを低下させるか、またはＨＤＬレベルを上昇させるために有用であり得る。いくつかの実施形態において、上記成分は、相乗的効果（脂肪含有量のさらなる低下もしくは上記被験体に対する低下した副作用をもたらす投与量の低下が挙げられるが、これらに限定されない）を提供するように製剤化される。上記組み合わせは、脂質含有量を低下させると同時に、脂質含有量を低下させることにおいて上記組成物と同じ有効性を有するニコチン酸のみの用量と比較して、被験体において皮膚血管拡張の程度の低下を引き起こすことにおいて特に有用であり得る。上記組成物中のニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物の量は、上記ロイシンおよび／もしくは１種以上のロイシン代謝産物の非存在下で、治療未満の量であり得る。
【００６６】
一実施形態において、本発明の組成物は、ロイシンおよび／もしくは１種以上のロイシン代謝産物；ならびにニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物を含み、ここで上記組成物は、少なくとも約２５０ｍｇのロイシンおよび／もしくは少なくとも約２５ｍｇの１種以上のロイシン代謝産物を含み、さらにここで上記組成物は、少なくとも約１ｍｇのニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物を含む。
【００６７】
別の実施形態において、本発明の組成物は、ロイシンおよび／もしくは１種以上のロイシン代謝産物；ならびにニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物を含み、ここで上記組成物は、少なくとも約２５０ｍｇのロイシンおよび／もしくは少なくとも約１０ｍｇ、２０ｍｇ、２５ｍｇ、３０ｍｇ、３５ｍｇ、４０ｍｇ、４５ｍｇ、５０ｍｇ、５５ｍｇ、もしくは６０ｍｇの１種以上のロイシン代謝産物を含み、さらにここで上記組成物は、アラニン、グリシン、グルタミン酸およびプロリンが挙げられるが、これらに限定されないアミノ酸の各々を実質的に含まない。
【００６８】
なお別の実施形態において、本発明の組成物は、ロイシンおよび／もしくは１種以上のロイシン代謝産物；ならびにある量のニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物を含み、ここで上記組成物は、少なくとも約２５０ｍｇのロイシンおよび／もしくは少なくとも約２５ｍｇの１種以上のロイシン代謝産物を含み、さらにここでニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物の量は、上記ロイシンおよび／もしくは１種以上のロイシン代謝産物の非存在下で、脂質含有量を低下させるような治療効果を示すには不十分である。いくつかの実施形態において、上記ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物の量は、ロイシンおよび／もしくは１種以上のロイシン代謝産物なしで投与される場合には治療未満である。
【００６９】
さらになお別の実施形態において、本発明の組成物は、ロイシンおよび／もしくは１種以上のロイシン代謝産物；ならびにニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物を含み、ここで上記組成物は、脂質含有量の低下を必要とする被験体において脂質含有量を低下させることにおいて有効であると同時に、脂質含有量を低下させることにおいて上記組成物と同じ有効性を有するニコチン酸のみの投薬と比較して、上記被験体において皮膚血管拡張の程度の低下を引き起こす。いくつかの実施形態において、上記組成物は、顕著に有意な皮膚血管拡張を引き起こすことなく、脂質含有量の低下を必要とする被験体において脂質含有量を低下させることにおいて有用である。
【００７０】
別の実施形態において、本発明の組成物は、（ａ）ロイシンおよび／もしくは１種以上のロイシン代謝産物；ならびに（ｂ）ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物を含み、ここで（ｂ）に対する（ａ）の質量比は、少なくとも約１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、もしくは１００であり、ここで上記組成物は、少なくとも約１ｍｇの上記ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物を含む。本明細書で記載されるように、少なくとも約１ｍｇのニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物という用量は、ロイシンもしくはロイシン代謝産物の十分な質量比と組み合わされる場合に有効であり得る治療未満の投与を提供し得る。
【００７１】
いくつかの実施形態において、本発明の組成物は、（ａ）ロイシンおよび／もしくは１種以上のロイシン；ならびに（ｂ）ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物を含み、ここで成分（ａ）および成分（ｂ）は、相乗的効果を有する。上記相乗的効果は、上記被験体の体重増加の低下、脂質含有量の低下、ＬＤＬレベルの低下、ＨＤＬレベルの上昇、コレステロールレベルの低下、トリグリセリドレベルの低下、上記被験体の脂肪酸化の増大、もしくは上記被験体におけるＳｉｒｔ１の活性化の増大を相乗的に増強し得る。
【００７２】
本発明の一局面において、本発明の組成物は、（ａ）ロイシンおよび／もしくは１種以上のロイシン；ならびに（ｂ）ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくは１種以上のニコチン酸代謝産物を含む。上記組成物は、少なくとも約０．０１μｇ、０．０５μｇ、０．１μｇ、０．５μｇ、もしくは１μｇのレスベラトロールをさらに含み得る。
【００７３】
なお別の実施形態において、本発明の組成物は、（ａ）ロイシンおよび／もしくは１種以上のロイシン代謝産物；ならびに（ｂ）ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物を含み、ここで（ｂ）は、被験体においてニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物の約１〜１００ｎＭという循環レベルを達成するために有効な量で存在する。いくつかの実施形態において、ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物の循環レベルは、１０ｎＭである。これら目標とされる循環レベルは、被験体において、高脂血症状態に対して有益な効果を提供することが示された本明細書で記載される処置濃度（実施例を参照のこと）に相当する。
【００７４】
ニコチン酸、ニコチンアミドリボシドおよびニコチン酸代謝産物
本発明は、ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物を含む組成物を提供する。上記ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物は、遊離形態で使用され得る。用語「遊離の」とは、成分を参照して本明細書で使用される場合、上記成分がより大きな分子複合体へと組み込まれていないことを示す。いくつかの実施形態において、上記ニコチン酸は、ナイアシンの中に含まれ得る。上記ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物は、塩形態にあり得る。
【００７５】
いくつかの実施形態において、上記組成物は、ニコチンアミドおよび／もしくはニコチンアミド代謝産物を実質的に含まない可能性がある。上記ニコチンアミドおよび／もしくはニコチンアミド代謝産物は、ニコチン酸もしくはニコチンアミドリボシドの効果を打ち消し得る。ニコチンアミドは、高用量では肝臓に有害であり得る（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｌｉｖｅｓｔｒｏｎｇ．ｃｏｍ／ａｒｔｉｃｌｅ／４４８９０６−ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ−ｌｅｖｅｌｓ−ｏｆ−ｎｉａｃｉｎ−ｔｏ−ｌｏｗｅｒ−ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ−ｌｅｖｅｌｓ／＃ｉｘｚｚ２ＮＯ３ＫｈＤＺｕで開示されるとおり）。ニコチンアミドおよび／もしくはニコチンアミド代謝産物の質量もしくはモル量は、組成物全体のうちの約０．０１％、０．１％、０．５％、１％、２％、５％、もしくは１０％未満であり得る。ニコチンアミドおよび／もしくはニコチンアミド代謝産物の質量もしくはモル量は、組成物全体のうちの約０．０１％、０．１％、０．５％、１％、２％、５％、もしくは１０％未満であり得る。
【００７６】
理論に制限されないが、ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物の摂取は、脂質含有量を低下させ得るか、トリグリセリドレベルを低下させ得るか、ＬＤＬレベルを低下させ得るか、総コレステロールレベルを低下させ得るか、もしくはＨＤＬレベルを増大させ得る。ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物の摂取はまた、脂肪酸化を増大させ得るか、またはサーチュインシグナル伝達を刺激し得る（Ｓｉｒｔ１およびＳｉｒｔ３の活性化の増大が挙げられる）。いくつかの実施形態において、本明細書で記載される組成物のうちのいずれも、ニコチン酸の塩、誘導体、代謝産物、異化生成物、同化生成物、前駆体、およびアナログを含み得る。例えば、上記代謝産物は、ニコチニルＣｏＡ、ニコチン尿酸、ニコチン酸モノヌクレオチド、ニコチン酸アデニンジヌクレオチド、もしくはニコチンアミドアデニンジヌクレオチドを含み得る。いくつかの実施形態において、上記組成物は、ニコチンアミドを含むことはできない。いくつかの実施形態において、上記組成物は、ニコチンアミドを含む。いくつかの実施形態において、上記組成物は、ニコチン酸代謝産物を実質的に含まない可能性がある。
【００７７】
ロイシンおよびロイシン代謝産物
本発明は、ロイシンおよび／もしくはロイシン代謝産物を含む組成物を提供する。上記ロイシンおよび／もしくはロイシン代謝産物は、遊離形態で使用され得る。用語「遊離の」とは、成分を参照して本明細書で使用される場合、上記成分がより大きな分子複合体へと組み込まれないことを示す。例えば、組成物は、タンパク質もしくは遊離ヒドロキシメチルブチレートに組み込まれない遊離ロイシンを含み得る。上記ロイシンは、Ｌ−ロイシンであり得る。上記ロイシンおよび／もしくはロイシン代謝産物は、塩形態にあり得る。
【００７８】
理論に制限されないが、分枝鎖アミノ酸（例えば、ロイシン）の摂取は、サーチュインシグナル伝達（Ｓｉｒｔ１およびＳｉｒｔ３を含む）、ならびにＡＭＰＫシグナル伝達を刺激し得、そのうちの１以上が、炎症性サイトカインパターンを都合良く調節し得る。いくつかの実施形態において、本明細書で記載される組成物のうちのいずれかは、ロイシンの塩、誘導体、代謝産物、異化生成物、同化生成物、前駆体、およびアナログを含み得る。例えば、上記代謝産物は、ヒドロキシメチルブチレート（ＨＭＢ）、ケトイソカプロン酸（ＫＩＣ）、およびケトイソカプロエートを含み得る。上記ＨＭＢは、種々の形態（３−ヒドロキシ−３−メチル酪酸カルシウムが挙げられる）にあり得る。
【００７９】
本発明のある種の実施形態において、本明細書で開示される組成物のうちのいずれかは、それらがリジン、グルタミン酸塩、プロリン、アルギニン、バリン、イソロイシン、アスパラギン酸、アスパラギン、グリシン、スレオニン、セリン、フェニルアラニン、チロシン、ヒスチジン、アラニン、トリプトファン、メチオニン、グルタミン、タウリン、カルニチン、シスチンおよびシステインからなる群より選択される１種以上のアミノ酸を含まない（もしくは排除する）ように、製剤化され得る。
【００８０】
いくつかの実施形態において、上記組成物は、１種以上のもしくは全ての非ロイシンアミノ酸を実質的に含まない可能性がある。例えば、上記組成物は、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、スレオニン、トリプトファン、チロシン、および／もしくはバリンを含まない可能性がある。
【００８１】
上記組成物は、遊離の非ロイシンアミノ酸（例えば、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、スレオニン、トリプトファン、チロシン、および／もしくはバリン）を実質的に含まない可能性がある。
【００８２】
いくつかの実施形態において、上記組成物は、非分枝鎖もしくは非ロイシンアミノ酸のうちの１種以上もしくは全てを実質的に含まない可能性がある（例えば、上記組成物は、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、スレオニン、トリプトファン、および／もしくはチロシンを含まない可能性がある）。いくつかの実施形態において、上記組成物は、イソロイシンおよび／もしくはバリンを実質的に含まない可能性がある。本発明の組成物は、アラニン、グリシン、グルタミン酸、およびプロリン個々のアミノ酸を実質的に含まない可能性がある。本発明の組成物は、アラニン、グリシン、グルタミン酸、およびプロリンの個々のアミノ酸のうちの１種以上を実質的に含まない可能性がある。本発明の組成物は、アラニンを実質的に含まない可能性がある。本発明の組成物は、グリシンを実質的に含まない可能性がある。本発明の組成物は、バリンを実質的に含まない可能性がある。上記組成物は、いかなる非分枝鎖アミノ酸をも実質的に含まない可能性がある。非分枝鎖アミノ酸の質量もしくはモル量は、上記組成物全体のうちのもしくは上記組成物中の全アミノ酸のうちの約０．０１％、０．１％、０．５％、１％、２％、５％、もしくは１０％未満であり得る。非ロイシンアミノ酸の質量もしくはモル量は、上記組成物全体のうちのもしくは上記組成物中の全アミノ酸のうちの約０．０１％、０．１％、０．５％、１％、２％、５％、もしくは１０％未満であり得る。
【００８３】
明確さのために、本明細書で記載されるアミノ酸は、遊離形態、もしくはその塩形態で存在する無傷のアミノ酸であり得る。例えば、本発明の組成物は、遊離アミノ酸（例えば、アラニン、グリシン、グルタミン酸、およびプロリンを実質的に含まない可能性がある。非分枝鎖アミノ酸、任意のアミノ酸、もしくは任意の非ロイシンアミノ酸の質量もしくはモル量は、上記組成物全体のうちの、もしくは上記組成物中の全アミノ酸のうちの、もしくは上記組成物中の全遊離アミノ酸のうちの、約０．０１％、０．１％、０．５％、１％、２％、５％、もしくは１０％未満であり得る。
【００８４】
治療剤
本発明の組成物は、ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物以外の１種以上の薬学的に活性な薬剤もしくは治療剤をさらに含み得る。上記治療剤もしくは薬学的に活性な薬剤は、当該分野で公知の任意の薬剤であり得る。例えば、上記組み合わせ組成物は、薬学的に活性な抗高脂血症薬剤、または脂質含有量に対しても影響を有する栄養補助食品をさらに含み得る。上記抗高脂血症薬剤は、経口の薬剤もしくは注射用の薬剤であり得る。上記抗高脂血症薬剤は、総脂質含有量もしくはトリグリセリドのレベル、またはＬＤＬもしくはコレステロールレベルを低下するにあたって、またはＨＤＬレベルを上昇させるにあたって、治療未満の量にあり得る。当該分野で公知の抗高脂血症薬剤のタイプとしては、以下が挙げられ得るが、これらに限定されない：ＨＭＧ−ＣｏＡインヒビター（もしくはスタチン）、フィブラート、ニコチン酸、胆汁酸封鎖剤（レジン）、コレステロール吸収インヒビター（エゼチミブ）、ロミタピド、フィトステロール、オルリスタットなど。スタチンタイプの抗高脂血症薬剤としては、以下が挙げられ得るが、これらに限定されない：アトルバスタチン、フルバスタチン、プラバスタチン、ロバスタチン、シンバスタチン、ピタバスタチン、セリバスタチン、ロスバスタチン、もしくはロバスタチン／ナイアシンＥＲ。コレステロール吸収インヒビターとしては、エゼチミブ、およびエゼチミブとシンバスタチンとの組み合わせが挙げられ得るが、これらに限定されない。フィブラートタイプの抗高脂血症薬剤としては、ゲムフィブロジル、フェノフィブラート、フェノフィブリン酸、クロフィブラート、もしくは微粉化フェノフィブラートが挙げられ得るが、これらに限定されない。胆汁酸封鎖剤としては、コレスチポール、コレスチラミン、もしくはコレセベラムが挙げられ得るが、これらに限定されない。他のタイプの抗高脂血症薬剤としては、デキストロチロキシンナトリウムもしくはイコサペント酸（ｉｃｏｓａｐｅｎｔ）が挙げられ得る。これら例は、考察目的で提供されるに過ぎず、本発明の適用可能性の広い範囲を広く種々の薬物に示すことが意図される。それは、本発明の範囲を限定することは決して意味しない。
【００８５】
本発明の組成物は、薬用植物および／もしくは栄養補助食品である１種以上の治療剤をさらに含み得る。上記薬用植物および／もしくは栄養補助食品は、科学的に明らかにされていない治療効果を有し得る。上記薬用植物および／もしくは栄養補助食品の例は、以下であり得るが、これらに限定されない：アサイー、アルファルファ、アロエ、アロエベラ、アリストロキア酸、オタネニンジン、ゲンゲ属（Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ）、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｏａｇｕｌａｎｓ、ベラドンナ、β−カロテン、ビフィズス菌、ビルベリー、ビルベリー、ビオチン、ビターオレンジ、ブラックコホシュ、ブラックコホシュ、ブラックサイリウム、紅茶、ヒバマタ類の海草、オオアザミ、ブロンドサイリウム、ブルーベリー、藍藻類、ホウ素、ブロメライン、フキ（Ｂｕｔｔｅｒｂｕｒ）、カルシウム、カレンデュラ、Ｃａｎｃｅｌｌ／Ｃａｎｔｒｏｎ／Ｐｒｏｔｏｃｅｌ、軟骨（ウシおよびサメ）、肉桂、キャッツクロー、カモミール、セイヨウニンジンボク、コンドロイチン硫酸、クロム、シナモン、クローブ、コエンザイムＱ−１０、コロイド銀製品、クランベリー、クレアチン、タンポポ、タンポポ、デビルズクロー、ＤＨＥＡ、当帰、エキナセア、麻黄、Ｅｓｓｉａｃ／Ｆｌｏｒ−Ｅｓｓｅｎｃｅ、ユーカリ、セイヨウニワトコ（エルダーベリー）、セイヨウヤドリギ、マツヨイグサオイル、フェヌグリーク、フィーバーフュー、魚油、亜麻仁、亜麻仁油、フォレート、葉酸、大蒜、生姜、イチョウ、ニンジン、グルコサミンヒドロクロリド、グルコサミンスルフェート、ヒドラスチス、ブドウ種子抽出物、緑茶、サンザシ、フーディア、セイヨウトチノキ、スギナ、硫酸ヒドラジン、ヨウ素、鉄、カヴァ、硫酸桿菌、レアトリル／アミグダリン、Ｌ−アルギニン、ラベンダー、リコリス、枸杞、リコペン、マグネシウム、マンガン、メラトニン、マリアアザミ、ヤドリギ抽出物、ノニ、オーラルプロバイオティクス、パントテン酸（ビタミンＢ５）、パッションフラワー、ＰＣ−ＳＰＥＳ、ペニーロイヤルミント、ペパーミント、リン酸塩、ザクロ、プロポリス、ピクノジェノール、ピリドキシン（ビタミンＢ６）、レッドクローバー、紅麹（Ｒｅｄ  ｙｅａｓｔ）、リボフラビン（ビタミンＢ２）、ローマンカモミール、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｂｏｕｌａｒｄｉｉ、Ｓ−アデノシル−Ｌ−メチオニン（ＳＡＭｅ）、セージ、ノコギリヤシ、Ｓｅｌｅｃｔｅｄ  Ｖｅｇｅｔａｂｌｅｓ／Ｓｕｎ’ｓ  Ｓｏｕｐ、セレン、センナ、ダイズ、セントジョンズワート、スイートオレンジエッセンス、ティーツリーオイル、チアミン（ビタミンＢ１）、雷公藤、ターメリック、セイヨウカノコソウ、ビタミンＡ、ビタミンＢ１２、ビタミンＣ、ビタミンＤ、ビタミンＥ、ビタミンＫ、ワイルドヤム、ヨヒンベ、亜鉛もしくは５−ＨＴＰ。
【００８６】
本明細書で記載される組み合わせ組成物において使用される薬学的薬剤、もしくは任意の他の成分の量は、治療未満の量で使用され得る。いくつかの実施形態において、薬剤もしくは成分の治療未満の量を使用すると、上記薬剤の副作用が低減され得る。治療未満の量の使用は、特に、他の薬剤もしくは成分との相乗効果で使用される場合に、なお有効であり得る。
【００８７】
上記薬剤もしくは成分の治療未満の量は、治療的と考えられるものを下回る量であるようにされているものであり得る。例えば、ＦＤＡガイドラインは、特定の状態を処置するために特定された投与レベルを示唆し得、治療未満の量は、ＦＤＡが示唆した投与レベルを下回る任意のレベルである。上記治療未満の量は、治療的な量であると考えられる量より約１％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、５０％、７５％、９０％、もしくは９５％少ない可能性がある。上記治療的な量は、個々の被験体に関して、もしくは被験体の群に関して評価され得る。上記被験体の群は、全て潜在的な患者であり得るか、または年齢、体重、人種、性別、もしくは物理的活動レベルのような特定の特徴を有する被験体であり得る。
【００８８】
脂質含有量を低下させるためにニコチン酸が単独で投与される場合、医師が提案する出発用量は、毎日１０００〜３０００ｍｇであり、ロイシンおよび／もしくはロイシン代謝産物とともに投与される場合、本発明の具体的投与は、毎日１ｍｇ〜最大１０００ｍｇの範囲を有する。被験体に関する特定の投与は、上記用量を滴定し、治療応答を測定することによって、医師によって決定され得る。上記治療的投与レベルは、臨床的に有意な皮膚血管拡張を引き起こすことなく絶食時血漿コレステロールおよびＬＤＬレベルを測定することによって決定され得る。治療未満の量は、ニコチン酸の推奨される投与を下回る任意のレベルであり得る。例えば、被験体の治療的投与レベルが毎日７００ｍｇであると決定される場合、用量６００ｍｇは、治療未満の量である。あるいは、治療未満の量は、個々の被験体ではなく被験体の群に対して決定され得る。例えば、３００ポンドを超える体重を有する被験体のニコチン酸、ニコチンアミドリボシドもしくはニコチン酸代謝産物の平均治療的量が２０００ｍｇである場合、治療未満の量は、２０００ｍｇを下回る任意の量であり得る。いくつかの実施形態において、上記投与は、ヘルスケア提供者（患者の医師、看護師、栄養学者、薬剤師、もしくは他のヘルスケア専門家が挙げられるが、これらに限定されない）によって推奨され得る。ヘルスケア専門家は、ヘルスケアシステムと関連する個人もしくは実体を含み得る。ヘルスケア専門家の例としては、外科医、歯科医、聴覚科学者、言語聴覚士（ｓｐｅｅｃｈ  ｐａｔｈｏｌｏｇｉｓｔｓ）、医師（総合診療医および専門医を含む）、医師助手（ｐｈｙｓｉｃｉａｎ  ａｓｓｉｓｔａｎｔ）、看護師、助産師、調剤助手（ｐｈａｒｍａｃｏｎｏｍｉｓｔ）／薬剤師、栄養士、療法士、心理学者、理学療法士、瀉血専門家（ｐｈｌｅｂｏｔｏｍｉｓｔ）、作業療法士、検眼士、カイロプラクター、クリニカルオフィサー、救急救命士、医療補助者、臨床検査技師（ｍｅｄｉｃａｌ  ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  ｔｅｃｈｎｉｃｉａｎ）、放射線技師、義肢装具士（ｍｅｄｉｃａｌ  ｐｒｏｓｔｈｅｔｉｃ  ｔｅｃｈｎｉｃｉａｎ）、ソーシャルワーカー、およびあるタイプのヘルスケアサービスを提供するように訓練された、広く種々の他の人的資源が挙げられ得る。
【００８９】
ニコチン酸、ニコチンアミドリボシド、もしくはニコチン酸代謝産物の場合、上記ニコチン酸、ニコチンアミドリボシド、ニコチン酸代謝産物の治療上有効なレベルは、約１〜１００ｎＭの間の循環レベルであり得る。上記ニコチン酸、ニコチンアミドリボシド、もしくはニコチン酸代謝産物の治療未満のレベルは、それ自体もしくは組み合わせにおいて、少なくとも約１ｎＭ、２．５ｎＭ、５ｎＭ、１０ｎＭ、１５ｎＭ、２０ｎＭ、２５ｎＭ、３０ｎＭ、３５ｎＭ、４０ｎＭ、４５ｎＭ、５０ｎＭ、６０ｎＭ、７０ｎＭ、８０ｎＭ、９０ｎＭもしくは１００ｎＭの、これらより低いか、またはこれらより高い任意の循環レベルであり得る。上記ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物の治療未満のレベルは、投与のために製剤化された本発明の組成物において、約１ｍｇ、５ｍｇ、１０ｍｇ、２０ｍｇ、３０ｍｇ、５０ｍｇ、６０ｍｇ、７０ｍｇ、８０ｍｇ、９０ｍｇ、１００ｍｇ、１２５ｍｇ、１５０ｍｇ、１７５ｍｇ、２００ｍｇ、２５０ｍｇ、３００ｍｇ、３５０ｍｇ、４００ｍｇ、４５０ｍｇ、５００ｍｇ、６００ｍｇ、７００ｍｇ、７５０ｍｇ、８００ｍｇ、９００ｍｇ、もしくは１０００ｍｇより低い上記ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物であり得る。
【００９０】
ロイシン、ＨＭＢ、ＫＩＣ、ニコチン酸、ニコチンアミドリボシド、およびレスベラトロールを含め、本明細書で記載される成分のいずれも、遊離形態、単離された形態、天然供給源から精製された状態で、および／または合成供給源から精製もしくは調製された状態で、本発明の組成物中で使用され得る。上記天然の供給源は、動物供給源もしくは植物供給源であり得る。上記成分は、少なくとも約９５％、９７％、９９％、９９．５％、９９．９％、９９．９９％、もしくは９９．９９９％まで純粋であり得る。
投与量
【００９１】
本発明は、１種以上の供給源から単離された、ロイシン、ロイシンの代謝産物（例えば、ＨＭＢ）、ニコチン酸、ニコチンアミドリボシド、および／もしくはレスベラトロールのような単離された成分の組み合わせである組成物を提供する。本発明は、ロイシン、ロイシンの代謝産物（例えば、ＨＭＢ）、ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシド、および／もしくはレスベラトロールが富化された組成物を提供する。上記成分は、天然供給源から単離され得るか、または合成供給源から作り出され得、次いで、上記成分の純度を増大させるように富化され得る。さらに、ロイシンは、天然供給源から単離され得、次いで、１回以上の分離によって富化され得る。上記単離されかつ富化された成分（例えば、ロイシン）は、次いで、被験体への投与のために合わされて、製剤化され得る。
【００９２】
いくつかの実施形態において、組成物は、ある量のニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物を含む。ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物の上記量は、治療未満の量、および／あるいは上記組成物中の１種以上の他の化合物、または上記組成物と同時にもしくは時間的に近くに投与される化合物のうちの１種以上と相乗効果を示す量であり得る。いくつかの実施形態において、上記ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物は、低用量、中程度の用量、もしくは高用量で投与され、これらは、２用量間の関係を説明し、一般に、いかなる特定の用量範囲も定義しない。上記組成物は、被験体が上記組成物の選択された総１日用量を投与されるように、上記被験体に投与され得る。上記総１日用量は、２４時間の期間にわたって投与される用量の合計によって決定され得る。
【００９３】
用量（これは単位用量であり得る）は、約２００ｍｇ、２５０ｍｇ、４００ｍｇ、５００ｍｇ、５５０ｍｇ、６００ｍｇ、７００ｍｇ、８００ｍｇ、９００ｍｇ、１０００ｍｇ、１１００ｍｇ、１２５０ｍｇ、１３００ｍｇ以上のロイシンを含み得るか、これらより多くのロイシンを含み得るか、またはこれら未満のロイシンを含み得る。上記ロイシンは、遊離ロイシンであり得る。いくつかの実施形態において、単位用量は、少なくとも約１０００ｍｇの遊離ロイシンを含み得る。上記組成物は、約１０〜１２５０ｍｇの間、２００〜１２５０ｍｇの間、もしくは５００〜１２５０ｍｇの間のロイシンを含み得る。用量（これは単位用量であり得る）は、約１０ｍｇ、１５ｍｇ、２０ｍｇ、２５ｍｇ、３０ｍｇ、３５ｍｇ、４０ｍｇ、４５ｍｇ、５０ｍｇ、１００ｍｇ、２００ｍｇ、２５０ｍｇ、４００ｍｇ、５００ｍｇ、５５０ｍｇ、６００ｍｇ、７００ｍｇ、８００ｍｇ、９００ｍｇ、１０００ｍｇ、１２５０ｍｇ、１３００ｍｇ以上のロイシン代謝産物（例えば、ＨＭＢもしくはＫＩＣ）を含み得るか、これらより多くのロイシン代謝産物を含み得るか、またはこれらより少ないロイシン代謝産物を含み得る。上記ロイシン代謝産物は、遊離ロイシン代謝産物であり得る。上記組成物は、約１０〜９００ｍｇの間、５０〜７５０ｍｇの間、もしくは４００〜６５０ｍｇの間の上記ロイシン代謝産物（例えば、ＨＭＢもしくはＫＩＣ）を含み得る。いくつかの実施形態において、単位用量は、少なくとも約４００ｍｇの遊離ＨＭＢを含み得る。本明細書で記載されるとおりのロイシンおよびロイシン代謝産物の量は、毎日もしくは同時に投与され得る。本明細書で記載されるとおりの量は、１用量で、もしくは複数の用量で毎日別個に投与され得る。
【００９４】
いくつかの実施形態において、ロイシンの１日用量は、約０．２５〜３ｇ／日もしくは０．５〜３．０ｇ／日（例えば、０．５ｇ／日、０．７５ｇ／日、１ｇ／日、１．２５ｇ／日、１．５ｇ／日、１．７５ｇ／日、２ｇ／日、２．５ｇ／日、３ｇ／日、もしくはより多くのｇ／日）であり得るか、これらより少ないか、もしくはこれらより多い可能性がある。ＨＭＢの１日用量は、約０．２０〜３．０ｇ／日（例えば、０．２ｇ／日、０．４ｇ／日、０．５ｇ／日、０．７５ｇ／日、１ｇ／日、１．５ｇ／日、２ｇ／日、２．５ｇ／日、３ｇ／日、もしくはより多くのｇ／日）であり得るか、これらより少ないか、もしくはこれらより多い可能性がある。ＫＩＣの１日用量は、約０．２〜３．０ｇ／日（例えば、０．２ｇ／日、０．４ｇ／日、０．５ｇ／日、０．７５ｇ／日、１ｇ／日、１．２５ｇ／日、１．５ｇ／日、１．７５ｇ／日、２ｇ／日、２．５ｇ／日、３ｇ／日、もしくはより多くのｇ／日）であり得るか、これらより少ないか、もしくはこれらより多い可能性がある。
【００９５】
ロイシンもしくはその代謝産物の用量は、治療的用量であり得る。ロイシンもしくはその代謝産物の用量は、治療未満の用量であり得る。ロイシンの治療未満の用量は、約０．２５〜３．０ｇ（例えば、０．２５ｇ、０．５ｇ、０．７５ｇ、１ｇ、１．２５ｇ、１．５ｇ、１．７５ｇ、２ｇ、２．５ｇ、３ｇ、もしくはより多くのｇ）であり得るか、これらより少ないか、もしくはこれらより多い可能性がある。ロイシンの治療未満の用量は、約０．２５〜３．０ｇ／日（例えば、０．２５ｇ／日、０．５ｇ／日、０．７５ｇ／日、１ｇ／日、１．２５ｇ／日、１．５ｇ／日、１．７５ｇ／日、２ｇ／日、２．５ｇ／日、３ｇ／日、もしくはより多くのｇ／日）であり得るか、これらより少ないか、もしくはこれらより多い可能性がある。いくつかの実施形態において、上記組成物は、３．０ｇ未満の１日投与量のロイシンを含む。ＨＭＢの治療未満の用量は、約０．０５〜３．０ｇ（例えば、０．０５ｇ、０．１ｇ、０．２ｇ、０．４ｇ、０．５ｇ、０．７５ｇ、１ｇ、１．５ｇ、２ｇ、２．５ｇ、３ｇ、もしくはより多くのｇ）であり得るか、これらより少ないか、もしくはこれらより多い可能性がある。ＨＭＢの治療未満の用量は、約０．０５〜３．０ｇ／日（例えば、０．０５ｇ／日、０．１ｇ／日、０．２ｇ／日、０．４ｇ／日、０．５ｇ／日、０．７５ｇ／日、１ｇ／日、１．５ｇ／日、２ｇ／日、２．５ｇ／日、３ｇ／日、もしくはより多くのｇ／日）であり得るか、これらより少ないか、もしくはこれらより多い可能性がある。ＫＩＣの治療未満の用量は、約０．１〜３．０ｇ（例えば、０．１ｇ、０．２ｇ、０．４ｇ、０．５ｇ、０．７５ｇ、１ｇ、１．２５ｇ、１．５ｇ、１．７５ｇ、２ｇ、２．５ｇ、３ｇ、もしくはより多くのｇ）であり得るか、これらより少ないか、もしくはこれらより多い可能性がある。ＫＩＣの治療未満の用量は、約０．１〜３．０ｇ／日（例えば、０．１ｇ／日、０．２ｇ／日、０．４ｇ／日、０．５ｇ／日、０．７５ｇ／日、１ｇ／日、１．２５ｇ／日、１．５ｇ／日、１．７５ｇ／日、２ｇ／日、２．５ｇ／日、３ｇ／日、もしくはより多くのｇ／日）であり得るか、これらより少ないか、もしくはこれらより多い可能性がある。
【００９６】
用量（これは単位用量であり得る）は、約０．０１ｍｇ、０．０５ｍｇ、０．１ｍｇ、０．５ｍｇ、１ｍｇ、２ｍｇ、５ｍｇ、１０ｍｇ、２０ｍｇ、４０ｍｇ、６０ｍｇ、８０ｍｇ、１００ｍｇ、２００ｍｇ、２５０ｍｇ、４００ｍｇ、５００ｍｇ、８００ｍｇ、１０００ｍｇ、もしくは１５００ｍｇのニコチン酸、ニコチンアミドリボシド、もしくはニコチン酸代謝産物であり得るか、これらより多いか、もしくはこれらより少ない可能性がある。上記ニコチン酸、ニコチンアミドリボシドもしくはニコチン酸代謝産物を含み得る。上記組成物は、約１〜１００ｍｇの間、５〜５０ｍｇの間、もしくは１０〜２０ｍｇの間の上記ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物を含み得る。いくつかの実施形態において、単位用量は、少なくとも約１ｍｇのニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物を含み得る。いくつかの実施形態において、単位用量は、２５０ｍｇ未満のニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物を含み得る。上記投与量は、意図された投与される被験体に対して調節され得る。例えば、イヌに適した用量は、ヒトに適した用量未満であり得る。本明細書で記載されるとおりのニコチン酸、ニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物の量は、毎日にもしくは同時に投与され得る。本明細書で記載されるとおりの量は、１用量で、もしくは複数用量で毎日別個に投与され得る。
【００９７】
いくつかの実施形態において、上記組成物は、ニコチン酸およびニコチンアミドリボシドの両方を含み、ニコチン酸およびニコチンアミドリボシドの総量は、約０．０１ｍｇ、０．０５ｍｇ、０．１ｍｇ、０．５ｍｇ、１ｍｇ、２ｍｇ、５ｍｇ、１０ｍｇ、２０ｍｇ、４０ｍｇ、６０ｍｇ、８０ｍｇ、１００ｍｇ、２００ｍｇ、２５０ｍｇ、４００ｍｇ、５００ｍｇ、６００ｍｇ、８００ｍｇ、９００ｍｇ、１０００ｍｇ、もしくは１５００ｍｇであり得るか、これらより多いか、もしくはこれらより少ない可能性がある。
【００９８】
他の実施形態において、ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物の１日用量は、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ（ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物のｍｇ／上記用量を受ける被験体のｋｇ）、０．００５ｍｇ／ｋｇ、０．０１ｍｇ／ｋｇ、０．５ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、２．５ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ、７．５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、１２．５ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇ、２０ｍｇ／ｋｇ、２５ｍｇ／ｋｇ、５０ｍｇ／ｋｇ、７５ｍｇ／ｋｇ、１００ｍｇ／ｋｇ、もしくはより多くであり得るか、これらより多いか、もしくはこれらより少ない可能性がある。
【００９９】
用量（これは単位用量であり得る）は、約１ｍｇ、５ｍｇ、１０ｍｇ、２５ｍｇ、３５ｍｇ、５０ｍｇ、５１ｍｇ、７５ｍｇ、１００ｍｇ、１５０ｍｇ、２００ｍｇ、２５０ｍｇ、３００ｍｇ、３５０ｍｇ、４００ｍｇ、４５０ｍｇ、５００ｍｇ、もしくはより多くのｍｇのレスベラトロール、これらより多く、もしくはこれらより少ないレスベラトロールを含み得る。上記組成物は、約５〜５００ｍｇの間、３０〜２５０の間、もしくは３５〜１００ｍｇの間のレスベラトロールを含み得る。いくつかの実施形態において、単位用量は、少なくとも約３５ｍｇのレスベラトロールを含み得る。本明細書で記載されるとおりのレスベラトロールの量は、毎日もしくは同時に投与され得る。本明細書で記載されるとおりの量は、１用量で、もしくは複数用量で毎日別個に投与され得る。
【０１００】
レスベラトロールの１日の低用量は、約０．５ｍｇ／ｋｇ（レスベラトロールのｍｇ／上記用量を受ける被験体のｋｇ）、１ｍｇ／ｋｇ、２．５ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ、７．５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、１２．５ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇ、２０ｍｇ／ｋｇ、２５ｍｇ／ｋｇ、５０ｍｇ／ｋｇもしくはより多くを含み得るか、これらより少なく、またはこれらより多くを含み得る；レスベラトロールの１日の中程度の用量は、約２０ｍｇ／ｋｇ、２５ｍｇ／ｋｇ、５０ｍｇ／ｋｇ、７５ｍｇ／ｋｇ、１００ｍｇ／ｋｇ、１２５ｍｇ／ｋｇ、１５０ｍｇ／ｋｇ、１７５ｍｇ／ｋｇ、２００ｍｇ／ｋｇ、２５０ｍｇ／ｋｇもしくはより多くを含み得るか、これらより少なく、またはこれらより多くを含み得る；そしてレスベラトロールの１日の高用量は、約１５０ｍｇ／ｋｇ、１７５ｍｇ／ｋｇ、２００ｍｇ／ｋｇ、２２５ｍｇ／ｋｇ、２５０ｍｇ／ｋｇ、３００ｍｇ／ｋｇ、３５０ｍｇ／ｋｇ、４００ｍｇ／ｋｇもしくはより多くを含み得るか、これらより少なく、またはこれらより多くを含み得る。低、中程度もしくは高と定義されるとおりの投与範囲は、上記用量を受ける被験体に依存し得、被験体間で変化し得る。
【０１０１】
いくつかの実施形態において、組成物（これは単位用量として製剤化され得る）は、（ａ）少なくとも約２５０ｍｇのロイシンおよび／もしくは少なくとも約２５ｍｇの１種以上のロイシン代謝産物を含み得る。上記組成物は、少なくとも約３５ｍｇのレスベラトロールをさらに含み得る。
【０１０２】
本発明のいくつかの実施形態において、上記組み合わせ組成物は、ニコチン酸および／もしくはニコチンアミド代謝産物および／もしくはニコチン酸代謝産物に対するロイシンおよび／もしくはその代謝産物の特定の比を有し得る。上記特定の比は、高脂血症状態の有効および／もしくは相乗的な処置を提供し得、これは、例えば、総脂質含有量の低下、コレステロールレベルの低下、トリグリセリドレベルの低下、ＬＤＬレベルの低下、体重の減少、および／もしくはＨＤＬレベルの上昇として測定され得る。ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物に対するロイシンアミノ酸および／もしくはその代謝産物の比は、質量比、モル比、もしくは容積比であり得る。
【０１０３】
いくつかの実施形態において、組成物は、（ａ）ロイシンおよび／もしくはその代謝産物（ＨＭＢを含む）ならびに（ｂ）ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物を含み得、ここで（ｂ）に対する（ａ）の質量比は、約０．１、０．５、１、２、５、１０、１５、２０、２５、５０、７５、１００、２００、３００、３５０、４００、４５０、５００、５５０、６００、６５０、７００、７５０、もしくは８００であり得るか、これらより小さいか、またはこれらより大きい可能性がある。いくつかの実施形態において、（ｂ）に対する（ａ）の質量比は、少なくとも約２５である。いくつかの実施形態において、（ｂ）に対する（ａ）の質量比は、少なくとも約５０である。上記組成物はまた、最小量のニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物（例えば、５ｍｇ、１０ｍｇもしくは５０ｍｇの上記ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物）または５〜２５０ｍｇのニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物のような、ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物の量の範囲を含み得る。
【０１０４】
他の実施形態において、組成物は、（ａ）ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物、ならびに（ｂ）レスベラトロールを含み得、ここで（ｂ）に対する（ａ）の質量比は、約０．０１、０．０５、０．１、０．５、１、２、５、１０、２０、５０、１００、２００、３００、３５０、４００、４５０、５００、５５０、６００、もしくは６５０であり得るか、これらより小さいか、またはこれらより大きい可能性がある。
【０１０５】
いくつかの実施形態において、ロイシン、任意のロイシンの代謝産物、ニコチン酸、ニコチンアミドリボシド、任意のニコチン酸代謝産物、およびレスベラトロールの投与は、ロイシン、ロイシンの代謝産物、ニコチン酸、ニコチンアミドリボシド、ニコチン酸の代謝産物および／もしくはレスベラトロールの特定の生理学的濃度もしくは循環レベルを達成するように設計され得る。上記生理学的濃度は、被験体の血清もしくは血流において測定されるとおりの循環レベルであり得る。上記被験体は、ヒトもしくは動物であり得る。選択された投与は、上記被験体の特徴（例えば、体重、エネルギー代謝の速度、遺伝的性質、民族性、身長、もしくは任意の他の特徴）に基づいて変化させられ得る。
【０１０６】
いくつかの実施形態において、組成物の選択される用量は、上記被験体が上記組成物の所望の循環レベルを達成するように、被験体に投与され得る。ある成分の所望の循環レベルは、治療上有効なレベルもしくは治療未満のレベルのいずれかであり得る。
【０１０７】
単位用量中のロイシンの量は、被験体におけるロイシンの循環レベルが、約０．２５ｍＭ、０．５ｍＭ、０．７５ｍＭ、もしくは１ｍＭであるかまたはこれらより大きくなるようにされ得る。約１，１２５ｍｇ  ロイシン（例えば、遊離ロイシン）の投与は、約０．５ｍＭである、被験体におけるロイシンの循環レベルを達成し得る。約３００ｍｇ  ロイシン（例えば、遊離ロイシン）の投与は、約０．２５ｍＭである、被験体におけるロイシンの循環レベルを達成し得る。
【０１０８】
上記組成物の所望の循環レベルは、少なくとも約０．２５ｍＭ、０．５ｍＭ、０．７５ｍＭ、１ｍＭ以上のロイシンであり得る。上記組成物の所望の循環レベルは、少なくとも約０．１μＭ、０．２５μＭ、０．５μＭ、０．７５μＭ、１μＭ、１０μＭ、２０μＭ、４０μＭ、６０μＭ以上のロイシン代謝産物（例えば、ＨＭＢ）であり得るか、これらより少ないか、またはこれらより大きい可能性がある。上記組成物の所望の循環レベルは、少なくとも約０．２５ｍＭ、０．５ｍＭ、０．７５ｍＭ、１ｍＭ以上のＫＩＣであり得る。
【０１０９】
上記組成物の所望の循環レベルは、少なくとも約０．１ｎＭ、０．２５ｎＭ、０．５ｎＭ、０．７５ｎＭ、１ｎＭ、１０ｎＭ、２０ｎＭ、４０ｎＭ、６０ｎＭ、８０ｎＭ、１００ｎＭ、１２０ｎＭ、２００ｎＭ、４００ｎＭ、５００ｎＭ、１０００ｎＭ、１５００ｎＭ、２０００ｎＭ、２５００ｎＭ、もしくは３０００ｎＭ以上の上記ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物であり得るか、これらより少ないか、またはこれらより大きい可能性がある。ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物の治療上有効なレベルは、４４〜１１１μＭの間であり得、これは、約１０〜２０μｇ／ｍＬに相当する。
【０１１０】
上記組成物の所望の循環レベルは、約４０ｎＭ、６０ｎＭ、８０ｎＭ、１００ｎＭ、１２０ｎＭ、１５０ｎＭ、２００ｎＭ、３００ｎＭ、４００ｎＭ、８００ｎＭ、１６００ｎＭ、３０００ｎＭ、もしくは５０００ｎＭ以上のレスベラトロールであり得るか、これらより少ないか、またはこれらより大きい可能性がある。上記選択された用量は、上記被験体の特徴（例えば、体重、身長、民族性もしくは遺伝的性質）に基づいて選択され得る。
【０１１１】
いくつかの実施形態において、組成物は、被験体において約０．３〜１ｍＭ  ロイシンおよび約１〜１００ｎＭ  ニコチン酸の循環レベルを達成するために有効な量で、ロイシンおよびニコチン酸を含む。
【０１１２】
約１，１２５ｍｇ  ロイシンの経口投与は、約０．５ｍＭ  ロイシンである、被験体におけるロイシンの循環レベルを達成し得る。約３００ｍｇ  ロイシンの経口投与は、約０．２５ｍＭである、被験体におけるロイシンの循環レベルを達成し得る。
【０１１３】
約５００ｍｇのＨＭＢの経口投与は、約５μＭ  ＨＭＢである、被験体におけるＨＭＢの循環レベルを達成し得る。約１００ｍｇのＨＭＢの経口投与は、約０．８μＭ  ＨＭＢである、被験体におけるＨＭＢの循環レベルを達成し得る。
【０１１４】
約３，０００ｍｇ  ニコチン酸もしくはニコチンアミドリボシドの経口投与は、約１０μＭ  ニコチン酸もしくはニコチンアミドリボシドである、被験体におけるニコチン酸もしくはニコチンアミドリボシドの循環レベルを達成し得る。約５０ｍｇ  ニコチン酸もしくはニコチンアミドリボシドの経口投与は、約１０〜１００ｎＭ  ニコチン酸もしくはニコチンアミドリボシドである、被験体におけるニコチン酸もしくはニコチンアミドリボシドの循環レベルを達成し得る。
【０１１５】
約１１００ｍｇのレスベラトロールの経口投与は、約０．５ｍＭ  レスベラトロールである、被験体におけるレスベラトロールの循環レベルを達成し得る。約５０ｍｇのレスベラトロールの経口投与は、約２００ｎＭ  レスベラトロールである、被験体におけるレスベラトロールの循環レベルを達成し得る。
【０１１６】
いくつかの実施形態において、上記組成物は、１種以上の組成物を被験体に投与した後に達成される所望の循環モル比もしくは質量比を達成するように製剤化され得る。上記組成物は、本明細書で記載される組み合わせ組成物であり得る。上記モル比は、組み合わせ組成物のうちの１種以上の成分のバイオアベイラビリティー、取り込み、および代謝プロセスを考慮するために調節され得る。例えば、成分のバイオアベイラビリティーが低い場合、その成分のモル量は、上記組み合わせ組成物中の他の成分と比較して増大させられ得る。いくつかの実施形態において、上記循環モル比もしくは質量比は、投与後、約０．１時間以内、０．５時間以内、０．７５時間以内、１時間以内、３時間以内、５時間以内、もしくは１０時間以内、１２時間以内、２４時間以内、もしくは４８時間以内に達成される。上記循環モル比もしくは質量比は、約０．１時間、１時間、２時間、５時間、１０時間、１２時間、１８時間、２４時間、３６時間、４８時間、７２時間、もしくは９６時間、またはこれらより長い期間にわたって維持され得る。
【０１１７】
いくつかの実施形態において、ニコチン酸もしくはニコチンアミドリボシドに対するロイシンの循環モル比は、約１、５、１０、２０、５０、１００、５００、１０００、５０００、もしくは１００００であるか、これらより小さいか、またはこれらより大きい。いくつかの実施形態において、ニコチン酸もしくはニコチンアミドリボシドに対するＨＭＢの循環モル比は、約０．０１、０．０５、０．１、０．５、１、５、１０、２０、５０、もしくは１００であるか、これらより大きいか、またはこれらより小さい。いくつかの実施形態において、レスベラトロールに対するニコチン酸もしくはニコチンアミドリボシドの循環モル比は、約０．０１、０．０５、０．１、０．５、１、５、１０、２０、５０、もしくは１００であるか、これらより小さいか、またはこれらより大きい。
【０１１８】
投与形態
本明細書で記載される組成物は、種々の異なる投与形態へと調合され得る。それは、錠剤、カプセル、丸剤、顆粒、エマルジョン、ゲル、カプセル中に被包される複数のビーズ、粉末、懸濁物、液体、半液体、半固体、シロップ、スラリー、チュアブル形態、カプレット、軟質ゼラチンカプセル、ロゼンジもしくは溶液として経口的に使用され得る。あるいは、上記組成物は、吸入もしくは静脈内送達のために製剤化され得る。上記組成物はまた、液剤形態にある場合に、鼻スプレーもしくは注射用として製剤化され得る。いくつかの実施形態において、上記組成物は、経口摂取に適した液体組成物であり得る。
【０１１９】
吸入用に製剤化された組成物は、当該分野で公知の技術を使用して吸入器中にパッケージされ得る。吸入器は、吸入１回あたり０．２５単位用量、０．５単位用量、もしくは１単位用量を分与するように設計され得る。吸入器は、吸入用に製剤化された本発明の組成物を保持するキャニスター、上記製剤の計量された量が各作動とともに分与されるようにする計量バルブ、および上記デバイスを作動させ、本発明の組成物を被験体の肺へと指向するようにするアクチュエーターもしくはマウスピースを有し得る。上記製剤化された組成物は、液化ガスプロペラント、およびおそらく安定化賦形剤を含み得る。上記アクチュエーターは、上記キャニスターおよびダストカップに接続して、上記アクチュエーターの汚染を防止する嵌合吐き出しノズルを有し得る。作動の際に、本発明の組成物は、揮発させられ得、本発明の組成物の液滴の形成を生じる。上記液滴は、迅速に蒸発し得、マイクロメーターサイズの粒子を生じ、次いで、これは、上記被験体によって吸入され得る。吸入器および吸入用の組成物を製剤化するための方法は、米国特許第５，０６９，２０４号、同第７，８７０，８５６号および米国特許出願番号２０１０／０３２４００２（これらは、その全体において本明細書に参考として援用される）に記載される。
【０１２０】
経口投与に適した本発明の組成物は、不連続の投与形態（例えば、カプセル、カシェ、もしくは錠剤）、または液体もしくはエアロゾルスプレー（各々、粉末として、あるいは顆粒、溶液、もしくは水性もしくは非水性の液体、水中油型エマルジョン、または油中水型液体エマルジョン中の懸濁物の活性成分の所定の量を含む）として提示され得、これらとしては、液体投与形態（例えば、懸濁物もしくはスラリー）、および経口固体投与形態（例えば、錠剤もしくはバルク粉末）が挙げられる。経口投与形態は、錠剤、丸剤、糖衣錠、カプセル、エマルジョン、親油性および親水性の懸濁物、液体、ゲル、シロップ、スラリー、懸濁物などとして、処置される予定の固体もしくは患者による経口摂取のために製剤化され得る。このような投与形態は、製剤化の方法のうちのいずれかによって調製され得る。例えば、上記活性成分は、１種以上の必要な成分を構成するキャリアと会合した状態にされ得る。経口投与に適したカプセルとしては、ゼラチンから作られるプッシュフィットカプセル、ならびにゼラチンおよび可塑剤（例えば、グリセロールもしくはソルビトール）から作られる軟質の密閉カプセルが挙げられる。上記プッシュフィットカプセルは、充填剤（例えば、ラクトース）、結合剤（例えば、デンプン）および／もしくは滑沢剤（例えば、タルクもしくはステアリン酸マグネシウム）、ならびに必要に応じて、安定化剤と混合した状態で上記活性成分を含み得る。必要に応じて、経口使用のための本発明の組成物は、組成物を、固体賦形剤と混合し（必要に応じて、得られた混合物をすり潰し）、顆粒の混合物を、適切な補助物質を添加して、望ましい場合には、錠剤もしくは糖衣錠コアを得た後に加工処理することによって、得られ得る。適切な賦形剤は、特に、充填剤（例えば、糖（ラクトース、スクロース、マンニトール、もしくはソルビトールが挙げられる））；セルロース調製物（例えば、トウモロコシデンプン、コムギデンプン、コメデンプン、ジャガイモデンプン、ゼラチン、トラガカントガム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、および／もしくはポリビニルピロリドン（ＰＶＰ））である。一般に、上記組成物は、上記活性成分と液体キャリアもしくは微細に分割した固体キャリアもしくはその両方とを均一にかつ完全に混合し、次いで、必要であれば、上記生成物を所望の体裁へと形作ることによって調製される。例えば、錠剤は、必要に応じて、１種以上の補助成分と圧縮もしくは成形することによって調製され得る。圧縮された錠剤は、適切な機械中で自由に流動する形態（例えば、粉末もしくは顆粒）にある上記活性成分を、必要に応じて賦形剤（例えば、結合剤、滑沢剤、不活性希釈剤、および／または界面活性剤もしくは分散剤が挙げられるが、これらに限定されない）と混合して圧縮することによって、調製され得る。成形された錠剤は、適切な機械中で、不活性液体希釈剤で湿らせた上記粉末化化合物の混合物を成形することによって作製され得る。
【０１２１】
上記液体形態（ここで本明細書で開示される製剤は、経口的にもしくは注射によって投与するために組みこまれ得る）としては、水性溶液（適切には、風味付けされたシロップ）、水性もしくは油性の懸濁物、ならびに食用油（例えば、綿実油、胡麻油、ココナッツ油、もしくはラッカセイ油）、同様にエリキシルおよび類似の薬学的ビヒクルで風味付けされたエマルジョンが挙げられる。水性懸濁物に適した分散剤もしくは懸濁剤としては、合成の天然ガム、例えば、トラガカント、アカシア、アルギネート、デキストラン、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ポリビニルピロリドンもしくはゼラチンが挙げられる。
【０１２２】
被験体は、注射用組成物および経口摂取される組成物の併用によって処置され得る。
【０１２３】
経口投与のための液体調製物は、例えば、溶液、シロップもしくは懸濁物の形態をとり得るか、またはそれらは、使用前に水もしくは他の適切なビヒクルで再構成するための乾燥生成物として調製され得る。このような液体調製物は、薬学的に受容可能な添加剤（例えば、懸濁剤（例えば、ソルビトールシロップ、メチルセルロースもしくは水素化食用脂）；乳化剤（例えば、レシチンもしくはアカシア）；非水性ビヒクル（例えば、アーモンド油、油性エステルもしくはエチルアルコール）；保存剤（例えば、ｐ−ヒドロキシ安息香酸メチルもしくはプロピル、またはソルビン酸）；および人工着色料もしくは天然着色料ならびに／または甘味剤）とともに従来手段によって調製され得る。
【０１２４】
本発明の薬学的組成物（経口および吸入製剤が挙げられる）の調製は、薬学的調製物の準備のために一般に受容された手順に従って行われ得る。例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  １８ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ  （１９９０），  Ｅ．  Ｗ．  Ｍａｒｔｉｎ  ｅｄ．，  Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，  ＰＡを参照のこと。意図された使用および投与様式に依存して、薬学的組成物の調製においてさらにマグネシウム対イオン化合物を加工処理することは望ましいことであり得る。適切な加工処理は、適切な非毒性および非妨害成分と混合する工程、滅菌する工程、投与単位に分割する工程、ならびに送達デバイス中に収容する工程を包含し得る。
【０１２５】
本発明は、活性成分を含む無水組成物および投与形態をさらに包含する。なぜなら水は、いくらかの化合物の分解を促進し得るからである。例えば、水は、貯蔵寿命もしくは経時的な製剤の安定性のような特徴を決定するために、当該分野では長期保存を摸倣する手段として、添加され得る（例えば、５％）。本発明の無水組成物および投与形態は、無水もしくは低水分量含有成分、および停水分量もしくは低湿条件を使用して調製され得る。ラクトースを含む本発明の組成物および投与形態は、製造、パッケージングおよびもしくは貯蔵の間に水分および／もしくは湿気との実質的接触が予測される場合に無水にされ得る。無水組成物は、その無水の性質が維持されるように調製および貯蔵され得る。よって、無水組成物は、それらが適切な処方キット中に含まれ得るように、水への曝露を妨げることが公知の材料を使用してパッケージされ得る。適切なパッケージングの例としては、密閉ホイル、プラスチックなど、単位用量容器、ブリスターパック、およびストリップパックが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１２６】
本明細書で記載される成分は、従来の調剤技術に従って薬学的キャリアと完全に混合した状態で合わせられ得る。上記キャリアは、投与に望ましい調製物の携帯に依存して、広く種々の形態をとり得る。経口投与形態のための組成物を調製するにあたって、通常の薬学的媒体のうちのいずれかが、経口液体調製物（例えば、懸濁物、溶液、およびエリキシル）もしくはエアロゾルの場合に、水、グリセロール、油、アルコール、矯味矯臭剤、保存剤、着色剤などのようなキャリアとして使用され得る；またはデンプン、糖、微結晶性セルロース、希釈剤、造粒剤、滑沢剤、結合剤、および崩壊剤のようなキャリアは、経口固体調製物の場合に、いくつかの実施形態では、ラクトースを使用せずに、使用され得る。例えば、適切なキャリアは、固体経口調製物では、粉末、カプセルおよび錠剤を含む。望ましい場合、錠剤は、標準的な水性もしくは非水性の技術によって被覆され得る。
【０１２７】
薬学的に受容可能なキャリアとして働き得る材料のうちのいくつかの例としては、以下が挙げられる：（１）糖（例えば、ラクトース、グルコースおよびスクロース）；（２）デンプン（例えば、コーンスターチおよびジャガイモデンプン）；（３）セルロースおよびその誘導体（例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロースおよび酢酸セルロース）；（４）粉末化トラガカント；（５）モルト；（６）ゼラチン；（７）タルク；（８）賦形剤（例えば、カカオ脂および坐剤用ワックス）；（９）油（例えば、ラッカセイ油、綿実油、サフラワー油、胡麻油、オリーブ油、コーン油およびダイズ油）；（１０）グリコール（例えば、プロピレングリコール）；（１１）ポリオール（例えば、グリセリン、ソルビトール、マンニトールおよびポリエチレングリコール）；（１２）エステル（例えば、オレイン酸エチルおよびラウリン酸エチル）；（１３）アガー；（１４）緩衝化剤（例えば、水酸化マグネシウムおよび水酸化アルミニウム）；（１５）アルギン酸；（１６）発熱物質を含まない水；（１７）等張性生理食塩水；（１８）リンゲル液；（１９）エチルアルコール；（２０）リン酸緩衝液；ならびに（２１）製剤において使用される他の非毒性の適合性物質。
【０１２８】
投与形態における使用に適した結合剤としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：コーンスターチ、ジャガイモデンプン、もしくは他のデンプン、ゼラチン、天然および合成のガム、例えば、アカシア、アルギン酸ナトリウム、アルギン酸、他のアルギネート、粉末化トラガカント、グアールガム、セルロースおよびその誘導体（例えば、エチルセルロース、酢酸セルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム、カルボキシメチルセルロースナトリウム）、ポリビニルピロリドン、メチルセルロース、α化デンプン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、微結晶性セルロース、ならびにこれらの混合物。
【０１２９】
本発明の組成物および投与形態を形成するために使用され得る滑沢剤としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、ミネラルオイル、軽ミネラルオイル、グリセリン、ソルビトール、マンニトール、ポリエチレングリコール、他のグリコール、ステアリン酸、ラウリル硫酸ナトリウム、タルク、水素化植物性油（例えば、ラッカセイ油、綿実油、ひまわり油、胡麻油、オリーブ油、コーン油、およびダイズ油）、ステアリン酸亜鉛、オレイン酸エチル、ラウリン酸エチル（ｅｔｈｙｌａｕｒｅａｔｅ）、アガー、またはこれらの混合物。さらなる滑沢剤としては、例えば、ｓｙｌｏｉｄシリカゲル、合成シリカの凝集エアロゾル（ｃｏａｇｕｌａｔｅｄ  ａｅｒｏｓｏｌ  ｏｆ  ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ  ｓｉｌｉｃａ）、またはこれらの混合物が挙げられる。滑沢剤は、上記組成物のうちの約１重量％未満の量で、必要に応じて添加され得る。
【０１３０】
滑沢剤はまた、ポリサッカリド、ポリグリカン、セプラフィルム、インターシードおよびヒアルロン酸が挙げられるが、これらに限定されない組織バリアとともに使用され得る。
【０１３１】
崩壊剤は、水性環境に曝される場合に崩壊する錠剤を提供するために、本発明の組成物において使用され得る。崩壊剤が多すぎると、ボトル中で崩壊し得る錠剤が生じ得る。少なすぎると、崩壊が起こって、投与形態から活性成分を放出する速度および程度を変化させ得るには不十分であり得る。従って、上記活性成分の放出を有害に変化させるために少なすぎもせず多すぎもしない十分量の崩壊剤が、本明細書で開示される化合物の投与形態を形成するために使用され得る。使用され得る崩壊剤の量は、製剤のタイプおよび投与様式に基づいて変動し得、当業者に容易に識別可能であり得る。約０．５〜約１５重量％の崩壊剤、または約１〜約５重量％の崩壊剤が、薬学的組成物において使用され得る。本発明の組成物および投与形態を形成するために使用され得る崩壊剤としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：アガー−アガー、アルギン酸、炭酸カルシウム、微結晶性セルロース、クロスカルメロースナトリウム、クロスポビドン、ポラクリリンカリウム、デンプングリコール酸ナトリウム、ジャガイモデンプンもしくはタピオカデンプン、他のデンプン、α化デンプン、他のデンプン、クレイ、他のアルギン、他のセルロース、ガムまたはこれらの混合物。
【０１３２】
本明細書で開示される組成物および投与形態での使用に適した充填剤の例としては、タルク、炭酸カルシウム（例えば、顆粒もしくは粉末）、微結晶性セルロース、粉末化セルロース、デキストレート、カオリン、マンニトール、ケイ酸、ソルビトール、デンプン、α化デンプン、およびこれらの混合物が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１３３】
水性懸濁物および／もしくはエリキシル剤が経口投与に望ましい場合、その中の活性成分は、種々の甘味剤もしくは矯味矯臭剤、着色物質もしくは色素と、非常に望ましい場合には、乳化剤および／もしくは懸濁剤と一緒に、水、エタノール、プロピレングリコール、グリセリンおよびこれらの種々の組み合わせのような希釈剤と合わせられ得る。
【０１３４】
上記錠剤は、被覆されない可能性があるか、または消化管での崩壊および吸収を遅らせ、それによって、より長期間にわたる持続作用を提供するために公知の技術によって被覆される可能性がある。例えば、時間遅延物質（ｔｉｍｅ  ｄｅｌａｙ  ｍａｔｅｒｉａｌ）（例えば、グリセリルモノステアレートもしくはグリセリルジステアレート）が使用され得る。経口使用のための製剤はまた、活性成分が不活性固体希釈剤（例えば、炭酸カルシウム、リン酸カルシウムもしくはカオリン）と混合されている硬質ゼラチンカプセルとして、または活性成分が水もしくは油性媒体（例えば、ラッカセイ油、流動パラフィンもしくはオリーブ油）と混合されている軟質ゼラチンカプセルとして、提示され得る。
【０１３５】
一実施形態において、上記組成物は、本発明の化合物の良好な可溶化および／もしくは溶解を確実にし、本発明の化合物の沈殿を最小限にするために、安定化剤を含み得る。これは、非経口使用のための組成物、例えば、注射用組成物にとっては特に重要であり得る。可溶化剤はまた、親水性薬物および／もしくは他の成分（例えば、界面活性剤）の溶解性を増大させるために、または上記組成物を安定なもしくは均質な溶液もしくは懸濁物として維持するために、添加され得る。
【０１３６】
上記組成物は、１種以上の薬学的に受容可能な添加剤および賦形剤をさらに含み得る。このような添加剤および賦形剤としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：粘着性低下剤（ｄｅｔａｃｋｉｆｉｅｒ）、消泡剤、緩衝化剤、ポリマー、抗酸化剤、保存剤、キレート化剤、粘性調節剤、等張剤（ｔｏｎｉｃｉｆｉｅｒ）、矯味矯臭剤、着色剤、着臭剤、乳白剤（ｏｐａｃｉｆｉｅｒ）、懸濁剤、結合剤、充填剤、可塑剤、滑沢剤、およびこれらの混合物。賦形剤の例の非網羅的なリストとしては、モノグリセリド、ステアリン酸マグネシウム、食品用加工デンプン（ｍｏｄｉｆｉｅｄ  ｆｏｏｄ  ｓｔａｒｃｈ）、ゼラチン、微結晶性セルロース、グリセリン、ステアリン酸、シリカ、蜜蝋、レシチン、ヒドロキシプロピルセルロース、クロスカルメロースナトリウム、およびクロスポビドンが挙げられる。
【０１３７】
本明細書で記載される組成物はまた、１種以上の成分が経時的に放出されるように、長期放出の、徐放性の、もしくは時間放出（ｔｉｍｅ−ｒｅｌｅａｓｅ）のものとして製剤化され得る。放出遅延は、上記１種以上の成分を種々の物質のマトリクス中で製剤化することによって、または微小被包化によって達成され得る。上記組成物は、１種以上の成分を、１時間、４時間、６時間、８時間、１２時間、１６時間、２０時間、２４時間、３６時間、もしくは４８時間の期間にわたって放出するように製剤化され得る。１種以上の成分の放出は、一定速度もしくは変化する速度であり得る。
【０１３８】
いくつかの実施形態において、本明細書で記載される本発明の組成物は、本発明の組成物の粒子が水に不溶性のプラスチックのマトリクス中に埋め込まれ、ラクトースの埋没粒子を含む水に不溶性のプラスチックの膜によって閉じ込められるマトリクスペレット中に製剤化され得、本発明の組成物の血漿レベルを生じ、目標とした治療範囲内に維持する。他の実施形態において、本発明の組成物は、主に本発明の組成物から構成されるコア粒子を、疎水性物質およびプラスチック賦形剤から構成され必要に応じて腸溶性ポリマー物質を含む被覆フィルムの層で被覆して、被覆された粒子を形成することによって、および次いで、上記被覆された粒子を崩壊性の賦形剤と一緒に圧縮することによって得られる徐放性錠剤として製剤化され得る。徐放性製剤は、米国特許第４，８０３，０８０号および同第６，４２６，０９１号（これらは、その全体において本明細書に参考として援用される）に記載される。
【０１３９】
本明細書で提供される放出制御投与形態を使用すると、１種以上のコファクターは、その投与形態において、同じ量の成分の即時放出製剤について観察されるより遅い速度で放出され得る。いくつかの実施形態において、放出制御製剤に関して投与から最大濃度まで、規定された期間にわたって濃度変化として測定される生物学的サンプル中での変化の速度は、上記即時放出製剤に関する速度の約８０％、７０％、６０％、５０％、４０％、３０％、２０％、もしくは１０％より低い。さらに、いくつかの実施形態において、継時的な濃度変化の速度は、上記即時放出製剤に関する速度の約８０％、７０％、６０％、５０％、４０％、３０％、２０％、もしくは１０％より低い。
【０１４０】
いくつかの実施形態において、経時的な濃度変化の速度は、時間が増大するごとに比較的比例した様式で最大濃度へと減少する。例えば、最大濃度までの時間が２倍増大すると、濃度変化の速度が約２程度に低下し得る。結果として、１種以上のコファクターは、即時放出投与形態より有意に減少される速度で、その最大濃度に達するように提供され得る。本発明の組成物は、２４時間、１６時間、８時間、４時間、２時間、もしくは少なくとも１時間程度の最大濃度のずれを提供するように製剤化され得る。濃度変化の速度における関連する減少は、約０．０５、０．１０、０．２５、０．５もしくは少なくとも０．８程度の係数であり得る。ある種の実施形態において、これは、上記１種以上のコファクターのうちの約３０％、５０％、７５％、９０％、もしくは９５％未満を、このような投与の１時間以内に循環の中に放出することによって達成される。
【０１４１】
必要に応じて、上記放出制御製剤は、同じコファクターの同じ投与量の即時放出製剤に関するものの７５％、５０％、４０％、３０％、２０％もしくは１０％未満の初期の（例えば、投与後２時間から投与後４時間まで）傾きを有する血漿濃度曲線を示す。
【０１４２】
いくつかの実施形態において、溶解研究において測定される場合のコファクターの放出速度は、最初の１時間、２時間、４時間、６時間、８時間、１０時間、もしくは１２時間にわたって、同じコファクターの即時放出製剤に関する速度の約８０％、７０％、６０％、５０％、４０％、３０％、２０％、もしくは１０％未満である。
【０１４３】
本明細書で提供される放出制御製剤は、種々の形式を採用し得る。いくつかの実施形態において、上記製剤は、経口投与形態（液体投与形態（例えば、懸濁物もしくはスラリー）、および経口固体投与形態（例えば、錠剤もしくはバルク粉末）が挙げられる）、例えば、本明細書で記載されるものが挙げられるが、これらに限定されない形態にあり得る。
【０１４４】
本明細書で開示される製剤の放出制御錠剤は、マトリクス、レザバもしくは浸透圧システムのものであり得る。上記３つのシステムのうちのいずれも適切であるが、後者２つのシステムは、個体の遺伝的構成に依存して、比較的大きな塊を被包するために（例えば、多量の単一のコファクターを含めるために、もしくは複数のコファクターを含めるために）より最適な能力を有し得る。いくつかの実施形態において、ゆっくりと放出する錠剤は、レザバシステムに基づき、ここで１種以上のコファクターを含むコアは、水和の際に、上記１種以上のコファクターが全体に拡散することを可能にする、多孔性膜被覆によって被包される。上記有効成分の合わされた質量は、一般にグラム単位の量であるので、効率的な送達系は、最適な結果を提供し得る。
【０１４５】
従って、錠剤もしくは丸剤はまた、長時間作用の利点を提供する投与形態を提供するように被覆され得るかまたは別の方法で調剤され得る。例えば、上記錠剤もしくは丸剤は、内部調剤成分、外部調剤成分を含み得、後者は、前者の上を覆う形態にある。上記２つの成分は、胃の中での崩壊に耐えるように働き、その内部成分を無傷のまま十二指腸へと通過させるかまたは放出を遅らせる腸溶性の層によって分離され得る。種々の物質が、このような腸溶性の層もしくは被覆のために使用され得る。このような物質としては、多くのポリマー酸、およびポリマー酸と、シェラック、セチルアルコールおよび酢酸セルロースのような物質との混合物が挙げられる。いくつかの実施形態において、複数のコファクターを含む製剤は、種々の速度でもしくは種々の時間で放出される種々のコファクターを有し得る。例えば、腸溶性の層が散在するコファクターのさらなる層が存在し得る。
【０１４６】
徐放性錠剤を作製するための方法は、当該分野で公知である。例えば、米国特許公報２００６／０５１４１６および同２００７／００６５５１２、または本明細書で開示される他の参考文献を参照のこと。米国特許第４，６０６，９０９号、同第４，７６９，０２７号、同第４，８９７，２６８号、および同第５，３９５，６２６号に記載されるような方法は、個体の遺伝的構成によって決定される１種以上のコファクターの徐放性製剤を調製するために使用され得る。いくつかの実施形態において、上記製剤は、ｉｓ  ｐｒｅｐａｒｅｄ  ｕｓｉｎｇ  ＯＲＯＳ（登録商標）技術（例えば、米国特許第６，９１９，３７３号、同第６，９２３，８００号、同第６，９２９，８０３号、および同第６，９３９，５５６号に記載されるもの）を使用して調製される。他の方法（例えば、米国特許第６，７９７，２８３号、同第６，７６４，６９７号、および同第６，６３５，２６８号に記載されるもの）もまた、本明細書で開示される製剤を調製するために使用され得る。
【０１４７】
いくつかの実施形態において、上記組成物は、食品組成物中に製剤化され得る。例えば、上記組成物は、食用キャリアもしくはなしでの、飲料もしくは他の液体、固体食品、半固体食品であり得る。例えば、上記組成物は、本明細書で記載される組成物のうちのいずれかを補充した紅茶を含み得る。上記組成物は、本明細書で記載される組成物のうちのいずれかを補充した乳製品であり得る。いくつかの実施形態において、上記組成物は、食品組成物中に製剤化され得る。例えば、上記組成物は、飲料、固体食品、半固体食品、もしくは食用キャリアを含み得る。
【０１４８】
いくつかの実施形態において、液体食品キャリア（例えば、栄養補助（ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｅｄ）ジュース、コーヒー、茶、ソーダ、フレーバードウォーターなどのような飲料の形態にある）が使用され得る。例えば、上記飲料は、上記製剤および液体成分（例えば、従来の飲料に存在する種々の脱臭剤もしくは天然の炭水化物）を含み得る。天然の炭水化物の例としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：モノサッカリド（例えば、グルコースおよびフルクトース）；ジサッカリド（例えば、マルトースおよびスクロース）；従来の糖（例えば、デキストリンおよびシクロデキストリン）；および糖アルコール（例えば、キシリトールおよびエリスリトール）。天然の脱臭剤（例えば、タウマチン、ステビア抽出物、レバウジオシド（ｌｅｖａｕｄｉｏｓｉｄｅ）Ａ、グリチルリチン）、および合成脱臭剤（例えば、サッカリンおよびアスパルテーム）もまた、使用され得る。矯味矯臭剤、着色剤などのような薬剤もまた、使用され得る。例えば、ペクチン酸およびその塩、アルギン酸およびその塩、有機酸、保護性のコロイド接着剤（ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  ｃｏｌｌｏｉｄａｌ  ａｄｈｅｓｉｖｅ）、ｐＨ制御剤、安定化剤、保存剤、グリセリン、アルコール、もしくは炭化薬剤（ｃａｒｂｏｎｉｚｉｎｇ  ａｇｅｎｔ）もまた、使用され得る。果実および野菜もまた、本明細書で開示される製剤を含む食品もしくは飲料を調製するにあたって使用され得る。
【０１４９】
あるいは、上記組成物は、本明細書で記載される組成物のうちのいずれかを補充したスナックバーであり得る。例えば、上記スナックバーは、チョコレートバー、グラノーラバー、もしくはトレイルミックスバーであり得る。なお別の実施形態において、本発明の栄養補助食品もしくは食品組成物は、摂取するのに適切かつ所望の味、質感、および粘性を有するように処方される。任意の適切な食用キャリアが、本発明の食品組成物中で使用され得る。本発明の食用キャリアは、実際には任意の食料品を含む。このような食用キャリアの例としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：食品バー（グラノーラバー、プロテインバー、キャンディーバーなど）、シリアル製品（オートミール、朝食用シリアル、グラノーラなど）、ベーカリー製品（パン、ドーナッツ、クラッカー、ベーグル、ペストリー、ケーキなど）、飲料（ミルクベースの飲料、スポーツドリンク、フルーツジュース、アルコール飲料、瓶入りの水）、麺類、穀物（コメ、トウモロコシ、オーツ麦、ライ麦、小麦、小麦粉など）、卵製品、スナック（キャンディー、チップス、ガム、チョコレートなど）、食肉、フルーツ、および野菜。ある実施形態において、本明細書で使用される食用キャリアは、望ましくない味（苦味）をマスクし得る。望ましい場合、本明細書で提示される食品組成物は、本明細書で記載される成分のうちのいずれかのものより望ましい質感および香りを示す。例えば、液体の食用キャリアは、飲料（例えば、栄養補助ジュース、コーヒー、茶など）の形態にある本発明の食品組成物を得るために、本発明に従って使用され得る。他の実施形態において、固体の食用キャリアは、代替食（ｍｅａｌ  ｒｅｐｌａｃｅｍｅｎｔ）（例えば、栄養補助スナックバー、麺類、パンなど）の形態にある本発明の食品組成物を得るために、本発明に従って使用され得る。なお他の実施形態において、半固体の食用キャリアは、ガム、かみ応えのあるキャンディーもしくはスナックなどの形態にある本発明の食品組成物を得るために、本発明に従って使用され得る。
【０１５０】
組み合わせ組成物の投与は、１日に約１回、２回、３回、４回、５回、６回、７回、８回、９回、１０回以上か、これより少ないかもしくはこれより多く投与され得る。被験体は、約１日、２日、３日、４日、５日、６日、７日、８日、９日、１０日、１１日、１２日、１３日、１４日以上の日数、週数もしくは月数の期間にわたって、これらより少なく、またはこれらより多く投与を受け得る。単位用量は、１日用量の分割したもの（例えば、１日用量を１日あたりに投与される予定の単位用量の数で分割したもの）であり得る。単位用量は、１日用量の分割したもの、すなわち、１日用量を１日あたりに投与される予定の単位用量の数で割り、さらに１回の投与あたりの単位用量の数で割ったもの（例えば、錠剤）であり得る。１回の投与あたりの単位用量の数は、約１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０以上であり得るか、これらより少ないか、またはこれらより多い可能性がある。１日あたりの用量の数は、約１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０以上であり得るか、これらより少ないか、またはこれらより多い可能性がある。１日あたりの単位用量の数は、１日用量を単位用量で割ることによって決定され得、１日あたり約１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、６、１７、１８、１９、２０以上の単位用量であり得るか、これらより少ないか、またはこれらより多い可能性がある。例えば、単位用量は、約１／２、１／３、１／４、１／５、１／６、１／７、１／８、１／９、１／１０であり得る。単位用量は、１日の量の約１／３であり得、上記被験体に１日に３回投与され得る。単位用量は、１日の量の約１／２であり得、上記被験体に１日に２回投与され得る。単位用量は、１日の量の約１／４であり得、２単位用量が上記被験体に１日に２回投与され得る。いくつかの実施形態において、単位用量は、約５０ｍｇ  レスベラトロールを含むか、これより少なく、またはこれより多くを含む。いくつかの実施形態において、単位用量は、約５５０ｍｇ  ロイシンを含むか、これより少なく、またはこれより多くを含む。いくつかの実施形態において、単位用量は、約２００ｍｇの１種以上のロイシン代謝産物を含むか、これより少なく、またはこれより多くを含む。
【０１５１】
いくつかの実施形態において、単位用量（例えば、１種以上のロイシン代謝産物（例えば、ＨＭＢ）を含む単位用量）は、１単位用量として１日に２回投与される。単位用量は、１個より多くのカプセル、錠剤、バイアル、もしくは実体を含み得る。
【０１５２】
本明細書で開示される組成物は、香味剤（ｆｌａｖｏｒａｎｔ）をさらに含み得、固体、液体、ゲルもしくはエマルジョンであり得る。
【０１５３】
投与される本発明の組成物が１種以上の治療剤をさらに含み、上記治療剤がロイシンおよび／もしくはロイシン代謝産物、またはニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物より短い半減期を有する場合、上記治療剤および上記ロイシンおよび／もしくはロイシン代謝産物、またはニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物の単位用量形態は、応じて調節され得る。
【０１５４】
方法
本発明の組成物は、高脂血症状態を改善するために特に有用である。一実施形態において、本発明は、総脂質含有量を減少させるか、または総コレステロール、ＬＤＬ、もしくはトリグリセリドのレベルを低下させるか、ＨＤＬレベルを上昇させるか、あるいはアテローム硬化プラークサイズを縮小させるための方法を提供し、上記方法は、それを必要とする被験体に、本発明の組成物のうちのいずれかを投与する工程を包含する。本明細書で記載されるレベルもしくは含有量は、血清もしくは血流中の循環濃度、または上記被験体の身体中の総量であり得る。いくつかの実施形態において、本発明の組成物は、被験体の体重減少の増大、およびｓｉｒｔ１活性化もしくは上記被験体の脂肪酸化の増大において有用である。本発明の種々の実施形態において、組成物は、上記被験体の高脂血症状態を改善するために十分な、ロイシンおよび／もしくはその代謝産物、ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物、ならびに／またはレスベラトロールの相乗効果を奏する量を送達する量において、上記被験体に投与される。いくつかの実施形態において、ニコチン酸、ニコチンアミドリボシドもしくはニコチン酸代謝産物は、ロイシンもしくはロイシン代謝産物なしで、その治療用量で被験体に投与される場合、副作用（例えば、皮膚血管拡張）を誘発し得る。本明細書で記載される方法はまた、ニコチン酸、ニコチンアミドリボシドもしくはニコチン酸代謝産物の治療有効性を失うことなく、副作用を改善するために有用であり得る。種々の局面、特徴、実施形態、および例の説明は、本明細書で提供される。
【０１５５】
ロイシンおよび／もしくはロイシン代謝産物と、ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物との使用を含む本発明の方法は、高脂血症に罹患しつつあるか、高脂血症に罹患するリスクがあるか、そして／または高脂血症と関連する状態（例えば、心血管状態）に罹患しつつある被験体に投与するために適用可能であり得る。いくつかの場合、医療分野で公知である、さらなる治療剤もしくは薬学的に活性な薬剤（例えば、抗高脂血症薬剤）の有効量は、本発明の組成物のうちのいずれかとともに、被験体に投与され得る。
【０１５６】
高脂血症は、被験体における総脂質含有量もしくはレベルが高レベルであることによって特徴付けられ得る。高脂血症はまた、被験体の体重もしくはＢＭＩが高レベルであることによって特徴付けられ得る。脂質のタイプとしては、コレステロール、コレステロールエステル、リン脂質およびトリグリセリドが挙げられ得る。上記脂質の含有量もしくはレベルは、上記被験体の血流、血漿もしくは血清中で測定される循環レベルであり得る。上記脂質の含有量はまた、上記被験体の体重に相関させられ得る。これら脂質は、大きなリポタンパク質（それらの密度に基づいて、カイロミクロン、超低密度リポタンパク質（ＶＬＤＬ）、中間密度リポタンパク質（ＩＤＬ）、低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）および高密度リポタンパク質（ＨＤＬ）を含む）として血中に輸送され得る。大部分のトリグリセリドは、カイロミクロンもしくはＶＬＤＬの中で輸送され得、大部分のコレステロールは、ＬＤＬおよびＨＤＬの中で運ばれ得る。循環中の脂質が高レベルであると、動脈壁上に脂質蓄積を引き起こし得、アテローム硬化プラーク形成をさらに生じ、従って、動脈を狭窄する。高脂血症に罹患しつつある被験体は、心血管状態がもたらされるという高リスクがあり得る。高脂血症はまた、いくつかのリポタンパク質の高レベルもしくはＨＤＬの低レベルによって特徴付けられ得る。上記被験体罹患しつつあるかもしくは罹患するリスクがある状態は、上記被験体においてリポタンパク質もしくは脂質の異常なレベルと関連する状態であり得る。本発明の組成物は、上記被験体において１種以上の脂質もしくはリポタンパク質のレベルを変化させるために使用され得る。いくつかの実施形態において、本発明の組成物および方法によってそのレベルが影響を及ぼされ得る脂質もしくはリポタンパク質のタイプは、総コレステロール、トリグリセリド、ＨＤＬ、ＩＤＬ、ＶＬＤＬもしくはＬＤＬが挙げられるが、これらに限定されない１種以上のリポタンパク質および／または脂質であり得る。
【０１５７】
多くの方法は、被験体におけるリポタンパク質および／もしくは脂質のレベルを評価するために使用され得る。これら方法は、サンプルのタイプおよび使用される分析技術において互いに異なり得る。このようなレベルを測定するために使用され得るサンプルのタイプとしては、血清、血漿、全血、赤血球もしくは組織サンプルが挙げられるが、これらに限定されない。望ましい場合、リポタンパク質および／もしくは脂質のレベルは、絶食条件下で、例えば、少なくとも約８時間、１０時間、１２時間、１５時間、２４時間、もしくはさらにより長い時間にわたって食品を摂取せずに、測定され得る。
【０１５８】
アテローム硬化プラークもしくは病変のサイズは、当該分野で公知の任意の方法によって測定され得る。例えば、Ｐｈａｎ  ＢＡ  ｅｔ  ａｌ．，  「Ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  ｎｉａｃｉｎ  ｏｎ  ｇｌｕｃｏｓｅ  ｌｅｖｅｌｓ，  ｃｏｒｏｎａｒｙ  ｓｔｅｎｏｓｉｓ  ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ，  ａｎｄ  ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｅｖｅｎｔｓ  ｉｎ  ｓｕｂｊｅｃｔｓ  ｗｉｔｈ  ｎｏｒｍａｌ  ｂａｓｅｌｉｎｅ  ｇｌｕｃｏｓｅ  ｌｅｖｅｌｓ  （１００ｍｇ／ｄｌ）：  ａ  ｃｏｍｂｉｎｅｄ  ａｎａｌｙｓｉｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｆａｍｉｌｉａｌ  Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  Ｓｔｕｄｙ  （ＦＡＴＳ），  ＨＤＬ−Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  Ｓｔｕｄｙ  （ＨＡＴＳ），  Ａｒｍｅｄ  Ｆｏｒｃｅｓ  Ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎ  Ｓｔｕｄｙ  （ＡＦＲＥＧＳ），  ａｎｄ  Ｃａｒｏｔｉｄ  Ｐｌａｑｕｅ  Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ  ｂｙ  ＭＲＩ  ｄｕｒｉｎｇ  ｌｉｐｉｄ−ｌｏｗｅｒｉｎｇ  （ＣＰＣ）  ｓｔｕｄｙ」，  Ａｍ  Ｊ  Ｃａｒｄｉｏｌ．  ２０１３  Ｆｅｂ  １；１１１（３）：３５２−５、およびＬｅｈｍａｎ  ＳＪ  ｅｔ  ａｌ．，  「Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｃｏｒｏｎａｒｙ  Ｐｌａｑｕｅ  Ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ  ｉｎ  Ｃｏｒｏｎａｒｙ  ＣＴ  Ａｎｇｉｏｇｒａｐｈｙ  Ｕｓｉｎｇ  ａ  Ｓｅｍｉ−Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ  Ｓｃｏｒｅ」，  ＪＡＣＣ  Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ  Ｉｍａｇｉｎｇ．  ２００９  Ｎｏｖｅｍｂｅｒ；  ２（１１）：  １２６２−１２７０に記載される方法。アテローム硬化プラークもしくは病変のサイズを測定するための方法の非限定的例は、定量的冠動脈造影であり得る。
【０１５９】
いくつかの実施形態において、上記組成物中のニコチン酸、ニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物の量は、被験体に単独でかつロイシン、ロイシン代謝産物もしくはレスベラトロールなしで投与される場合、上記被験体において治療効果を引き起こさない可能性がある。さらに、ロイシン、ロイシン代謝産物、もしくはレスベラトロールの量は、上記被験体にニコチン酸、ニコチンアミドリボシドもしくはニコチン酸代謝産物なしで投与される場合、上記被験体に治療効果がない可能性があり得る。しかし、上記ニコチン酸、ニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物が、ロイシン、ロイシン代謝産物、もしくはレスベラトロールのいずれかとともに投与される場合、治療効果が観察され得る。本明細書で記載される「治療効果」は、投与される被験体における減少した総脂質含有量、低下した総コレステロールレベル、低下したトリグリセリドレベル、上昇したＨＤＬレベル、低下したＬＤＬレベル、または低減したアテローム硬化プラークである。よって、本発明は、（ａ）ロイシンおよび／もしくはその１種以上の代謝産物、ならびに（ｂ）治療未満の量で存在するニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物を含む組成物を投与するための方法を提供し、ここで上記組成物は、成分（ｂ）が単独で使用される場合の成分（ｂ）と比較して、高脂血症状態の処置を増大させるにあたって有効である。上記組成物中のロイシンの量はまた、治療未満の量であり得る。
【０１６０】
上記治療効果の定量は、（ａ）ロイシンもしくはロイシン代謝産物、ならびに（ｂ）治療未満の量のニコチン酸、ニコチンアミドリボシドもしくはニコチン酸代謝産物を含む組成物の効果が、（ａ）もしくは（ｂ）のみの投与の推定効果より大きく、従って、（ａ）および（ｂ）の単純な相加的効果を想定すれば、その効果は相乗的であることを示し得る。上記相乗的効果は、上記組成物の成分の推定される単純な相加的効果を上回る、実測効果として定量され得る。例えば、成分（ａ）のみの投与が、コントロールに対して１０％の効果を生じる場合、成分（ｂ）のみの投与は、コントロールに対して１５％の効果を生じ、（ａ）および（ｂ）両方を含む組成物の投与は、コントロールに対して６０％の効果を生じ、相乗的効果は、６０％−（１５％＋１０％）、すなわち３５％である。
【０１６１】
いくつかの実施形態において、ニコチン酸、ニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物の治療的量は、皮膚血管拡張の増大によって特徴付けられ得る副作用を引き起こし得る。皮膚血管拡張の増大は、臨床的に有意であり得る。治療未満の量のニコチン酸、ニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物は、治療的量のニコチン酸、ニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物と比較した場合に、投与される被験体において、臨床的に有意な皮膚血管拡張を引き起こすことができないか、または皮膚血管拡張の程度を低減し得る。本明細書で記載される本発明の組成物および方法は、ロイシンおよび／もしくはロイシン代謝産物とともに使用されて、ロイシンおよび／もしくはロイシン代謝産物なしで使用される場合に、治療的な量のニコチン酸、ニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物によって通常引き起こされ得る副作用の程度を引き起こさずに、ニコチン酸、ニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物の治療未満の量の効果の治療的程度を生じる、治療未満の量のニコチン酸、ニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物を含む。皮膚血管拡張のレベルは、医療分野で公知の任意の方法（例えば、レーザードップラーフローメーターを含む方法）によって測定され得る。治療効果（例えば、コレステロールレベルを少なくとも５％程度低下させる）の同じレベルにも関わらず、ロイシンおよび／もしくはロイシン代謝産物なしでのニコチン酸、ニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物と比較して、本発明の組成物によって引き起こされる皮膚血管拡張のレベルは、低い可能性がある。例えば、ニコチン酸、ニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物の治療的量によって引き起こされるレベルの約１％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、６０％、７０％、８０％もしくは９０％未満である。
【０１６２】
ロイシンおよび／もしくはロイシン代謝産物の量は、少なくとも約２５ｍｇ、５０ｍｇ、７５ｍｇ、１００ｍｇ、１５０ｍｇ、２００ｍｇ、２５０ｍｇ、３００ｍｇ、３５０ｍｇ、４００ｍｇ、４５０ｍｇ、５００ｍｇであり得る。ニコチン酸、ニコチンアミドリボシド、および／もしくはニコチン酸代謝産物の治療未満の量は、１ｇ、５００ｍｇ、２５０ｍｇ、１００ｍｇ、５０ｍｇもしくは１０ｍｇ未満であり得る。ニコチン酸、ニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物の量は、約１〜１００ｍｇの間であり得る。ニコチン酸、ニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物の量は、約１〜１００ｎＭであるか、約１００ｎＭより高いか、または少なくとも約１０ｎＭであるニコチン酸、ニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物の循環レベルを達成し得る。
【０１６３】
よって、本明細書で記載される他成分組成物（例えば、ニコチン酸／ロイシン、ニコチン酸／ロイシン／レスベラトロール、ニコチンアミドリボシド／ロイシン、およびニコチンアミドリボシド／ロイシン／レスベラトロール）は、総脂質含有量を減少させる、総コレステロールレベルを低下させる、トリグリセリドレベルを低下させる、ＨＤＬレベルを上昇させる、および／もしくはＬＤＬレベルを低下させることに対する有益なもしくは相乗的効果を有し得る。いくつかの実施形態において、本明細書で記載される組成物および方法は、被験体にそれを投与する前のリポタンパク質および／もしくは脂質の初期レベルと比較して、上記被験体においてリポタンパク質および／もしくは脂質のレベルを、少なくとも約１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１１％、１２％、１３％、１４％、１５％、１６％、１７％、１８％、１９％、２０％、２１％、２２％、２３％、２４％、２５％、２６％、２７％、２８％、２９％、３０％、３１％、３２％、３３％、３４％、３５％、３６％、３７％、３８％、３９％、４０％、４１％、４２％、４３％、４４％、４５％、４６％、４７％、４８％、４９％、５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、５６％、５７％、５８％、５９％、もしくは６０％以上変化させるために有効であり得る。上記レベルは、約１９％〜２４％、１４％〜２９％、１２％〜３５％、１０〜４０％、８％〜４５％、５％〜５０％、２％〜６０％、もしくは１％〜７０％程度低下させられ得る。上記レベルは、循環レベルであり得る。
【０１６４】
いくつかの実施形態において、本明細書で記載される組成物および方法は、被験体にそれを投与する前のアテローム硬化プラークの初期サイズと比較して、被験体においてアテローム硬化プラークサイズを、少なくとも約１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１１％、１２％、１３％、１４％、１５％、１６％、１７％、１８％、１９％、２０％、２１％、２２％、２３％、２４％、２５％、２６％、２７％、２８％、２９％、３０％、３１％、３２％、３３％、３４％、３５％、３６％、３７％、３８％、３９％、４０％、４１％、４２％、４３％、４４％、４５％、４６％、４７％、４８％、４９％、５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、５６％、５７％、５８％、５９％、もしくは６０％以上の程度縮小させるために有効であり得る。上記レベルは、約１９％〜２４％、１４％〜２９％、１２％〜３５％、１０〜４０％、８％〜４５％、５％〜５０％、２％〜６０％、もしくは１％〜７０％程度縮小させられ得る。
【０１６５】
ＳＩＲＴ１およびＳＩＲＴ３の活性を上昇させる本明細書で開示される組成物の投与は、肝細胞、脂肪細胞、あるいは彼らの筋肉、例えば、骨格筋、平滑筋もしくは心筋またはそれらの筋細胞のうちの１以上の代謝活性化が必要な任意の被験体において有用であり得る。被験体は、悪液質もしくは筋消耗を有する被験体であり得る。ＳＩＲＴ３活性の増大はまた、体温を、例えば、低体温の被験体において上昇もしくは維持するために使用され得、ＳＩＲＴ１活性の増大は、高脂血症、糖尿病（２型糖尿病）および耐糖能異常を処置し、被験体における炎症応答を低減するために有益である。肝細胞、脂肪細胞またはそれらの筋肉のうちの１以上の代謝的活性化の増大は、上記被験体の脂質含有量を減少させることおよび体重減少を増大させることにおいて有用であり得る。上記脂質およびリポタンパク質の含有量もしくはレベルは、低下させられ得る。
【０１６６】
ＳＩＲＴ３活性の増大はまた、高脂血症、心血管疾患を処置もしくは予防する、血管拡張によって血圧を下げる、心血管の健康状態を増大させる、および血管組織例えば、血管および動脈の収縮機能を（例えば、平滑筋に影響を及ぼすことによって）増大させるために使用され得る。一般に、ＳＩＲＴ３の活性化は、肝細胞、脂肪細胞または筋肉の任意のタイプ（例えば、消化管もしくは消化系、または尿路の筋肉）の代謝を刺激するために使用され得、それによって、消化管運動性、例えば、便秘、および失禁を制御するために使用され得る。ＳＩＲＴ３活性化はまた、勃起不全において有用であり得る。それは、精子運動性を刺激するためにも使用され得、例えば、不妊治療薬（ｆｅｒｔｉｌｉｔｙ  ｄｒｕｇ）として使用され得る。それがＳＩＲＴ３を増大させるために有用である他の実施形態としては、筋肉の修復（例えば、手術もしくは事故の後）、筋肉量の増大；および運動能力の増大が挙げられる。
【０１６７】
従って、本発明は、ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくはそれらの任意の代謝産物とともに、ＳＩＲＴ１もしくはＳＩＲＴ３のタンパク質もしくは活性レベルを増大させるロイシンおよび／もしくはロイシン代謝産物の摂取によって有益な効果が生じる方法を提供する。ＳＩＲＴ１およびＳＩＲＴ３の活性は、上記被験体における筋細胞および／もしくは肝細胞で増大させられ得る。これら方法は、以下のうちの１つ以上を有効に促進、増大もしくは刺激する：肝細胞もしくは筋細胞におけるカロリー制限もしくは運動の利益を摸倣する、ミトコンドリアの生物発生もしくは代謝を増大させる、肝細胞もしくは筋細胞におけるミトコンドリア活性および／もしくは耐久性を増大させる、筋細胞をインスリンに敏感にする、筋細胞において脂肪酸酸化を増大させる、筋細胞において反応性酸素種（ＲＯＳ）を減少させる、肝細胞もしくは筋細胞においてＰＧＣ−１αおよび／もしくはＵＣＰ３および／もしくはＧＬＵＴ４の発現を増大させる、ならびに肝細胞もしくは筋細胞においてＡＭＰ活性化プロテインキナーゼ（ＡＭＰＫ）を活性化する。筋細胞の種々のタイプが、本発明に従って接触させられ得る。いくつかの実施形態において、上記筋細胞は、骨格筋細胞である。ある種の実施形態において、上記筋細胞は、遅筋の細胞（例えば、ひらめ筋細胞）である。
【０１６８】
上記組成物は、経口的にもしくは任意の他の方法によって、被験体に投与され得る。経口投与の方法は、栄養補助食品もしくは食料品の形態で摂取され得る液体、固体、もしくは半固体として上記組成物を投与する工程を包含する。
【０１６９】
上記組成物は、周期的に投与され得る。例えば、上記組成物は、１日に１回、２回、３回、４回、またはさらにより頻繁に投与され得る。上記被験体は、１日、２日、３日、４日、５日、６日もしくは７日ごとに投与され得る。いくつかの実施形態において、上記組成物は、１日に３回投与される。上記投与は、被験体の食餌時間と同時であり得る。食餌もしくは栄養補助の期間は、約１日間、２日間、３日間、４日間、５日間、６日間、７日間、８日間、もしくは９日間、２週間、１〜１１か月、または１年間、２年間、３年間、４年間、５年間、もしくはさらにより長期間にわたり得る。本発明のいくつかの実施形態において、被験体に投与される投与量は、処置の期間にわたって変化し得るかまたは一定に保持され得る。例えば、上記１日の投与量は、投与期間にわたって増大もしくは減少し得る。
【０１７０】
投与期間の長さおよび／もしくは投与量は、内科医もしくは任意の他のタイプの臨床医によって決定され得る。上記内科医もしくは臨床医は、投与される組成物への上記被験体の応答を観察して上記被験体の能力に基づいて投与を調節し得る。例えば、エネルギー調節において低下した効果を示す被験体の投与は、所望の結果を達成するために増大させられ得る。
【０１７１】
いくつかの実施形態において、上記組成物中の成分は、同じ経路で同時に一緒に投与され得るか、または別個に投与され得る。上記組成物中の成分はまた、逐次的に投与され得る。いくつかの実施形態において、上記組成物中のロイシンおよび／もしくはロイシン代謝産物は、ニコチン酸、ニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物とともに被験体に投与され得る。いくつかの実施形態において、上記組成物中の成分は、同じ投与経路もしくは異なる投与経路で投与され得る。例えば、ロイシンおよび／もしくはロイシン代謝産物は、経口投与され得る一方で、ニコチン酸、ニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物は、静脈内注射によって投与され得る。上記代謝産物の各々は、同じ投与経路もしくは異なる投与経路によって投与され得る。
【０１７２】
いくつかの実施形態において、被験体に投与される上記組成物は、所定の被験体に対して最適化され得る。例えば、組み合わせ組成物において、ニコチン酸、ニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物または特定の成分に対するロイシンおよび／もしくはロイシン代謝産物の比は、調節され得る。上記比および／もしくは特定の成分は、ニコチン酸、ニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物に対するロイシンおよび／もしくはロイシン代謝産物の比を変動させるか、または組み合わせ組成物成分を変動させて、１種以上の組成物を投与した後に、上記被験体の評価後に選択され得る。
【０１７３】
本発明の別の局面は、特定の期間にわたる本明細書で記載される組み合わせ組成物の投与後に、１以上の被験体において所望の効果の達成を提供する。例えば、本明細書で記載される組成物の有益な効果は、１週間、２週間、３週間、４週間、６週間、８週間、１０週間、１２週間、２４週間、もしくは５２週間にわたる、上記被験体への上記組成物の投与後に観察され得る。
【０１７４】
本発明は、被験体を処置するための方法を提供し、上記方法は、処置に反応しやすい被験体のプールを同定する工程を包含する。上記同定する工程は、１以上のスクリーニング試験もしくはアッセイを含み得る。例えば、高脂血症と同定されているか、または平均を上回るかもしくは平均より有意に高いボディーマスインデックス（ＢＭＩ）および／もしくは体重を有する被験体は、処置のために選択され得る。上記被験体は、過体重もしくは肥満であり得る。これらは、上記被験体の理想体重を上回るか、または２５、３０、４０、もしくは５０より高いＢＭＩによって示され得る。上記被験体は、約５０ポンド、７５ポンド、１００ポンド、１２５ポンド、１５０ポンド、１６０ポンド、１７０ポンド、１８０ポンド、１９０ポンド、２００ポンド、２１０ポンド、２２０ポンド、２３０ポンド、２４０ポンド、２５０ポンド、２６０ポンド、２７０ポンド、２８０ポンド、２９０ポンド、３００ポンド、３１０ポンド、３２０ポンド、３３０ポンド、３４０ポンド、３５０ポンド、３６０ポンド、３７０ポンド、３８０ポンド、３９０ポンド、もしくは４００ポンドより重い可能性がある。高脂肪食を好んできた上記被験体は、同様に処置のために選択され得る。上記同定された被験体は、次いで、本明細書で記載される１以上の組成物で処置され得る。例えば、彼らは、ニコチン酸および分枝鎖アミノ酸を含む組み合わせ組成物で処置され得る。
【０１７５】
本発明はまた、本明細書で記載される組成物を製造するための方法を提供する。いくつかの実施形態において、本明細書で記載される組成物の製造は、２種以上の成分を混合もしくは合わせる工程を包含する。これら成分は、ニコチン酸、ニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物、ならびにロイシンもしくはその代謝産物（例えば、ＨＭＢ、もしくはＫＩＣ）を含み得る。成分の量もしくは比は、本明細書で記載されるとおりのものであり得る。例えば、レスベラトロールと比較されるロイシンの質量比は、約８０より高い可能性がある。
【０１７６】
いくつかの実施形態において、上記組成物は、薬学的に活性剤もしくは治療剤、キャリア、および／もしくは賦形剤と合わせられ得るか、もしくは混合され得る。このような成分の例は、本明細書で記載される。上記合わされた成分は、錠剤、カプセル、ゲルカプセル、徐放性錠剤などとして単位投与量へと形成され得る。
【０１７７】
いくつかの実施形態において、上記組成物は、上記１種以上の成分の実質的に均一な混合物を含む固体組成物が達成され、上記１種以上の成分が上記組成物の全体に一様に分散され、その結果、上記組成物が、等しく有効な単位投与形態（例えば、錠剤、丸剤およびカプセル）へと容易に再分割され得るように、調製される。
【０１７８】
キット
本発明はまた、キットを提供する。上記キットは、本明細書で記載される１種以上の組成物を適切なパッケージの中に含み、使用説明書、臨床研究の考察、副作用の列挙などを含み得る書面による資料をさらに含み得る。このようなキットはまた、科学文献参照、パッケージ挿入資料、臨床試験結果、および／もしくはこれらのまとめなどのような情報を含み得、これらは、上記組成物の活性および／もしくは利点を示すかもしくは確立し、そして／または投薬、投与、副作用、薬物相互作用、もしくはヘルスケア提供者に有用な他の情報を記載する。このような情報は、種々の研究、例えば、インビボモデルを含む実験動物を使用する研究およびヒト臨床試験に基づく研究の結果に基づき得る。キットは、本明細書で記載される１以上の単位用量を含み得る。いくつかの実施形態において、キットは、約１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、３０、３１、６０、９０、１２０、１５０、１８０、２１０以上、これらより少ない、またはこれらより多くの単位用量を含む。使用説明書は、投薬説明書（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０以上の単位用量を、１日あたり１回、２回、３回、４回、５回、６回、７回、８回、９回、１０回以上摂取するための説明書）を含み得る。例えば、錠剤として供給される単位用量を含み得、各錠剤は、別個にパッケージされるか、複数の錠剤が投与１回あたりの単位用量の数に従って別個にパッケージされる（例えば、錠剤の対）か、または全ての錠剤が一緒にパッケージされる（例えば、ボトル中に）。さらなる例として、キットは、瓶詰め飲料として供給される単位用量を含み得、上記キットは、１本、２本、３本、４本、５本、６本、７本、８本、９本、１０本、１１本、１２本、１３本、１４本、２４本、２８本、３６本、４８本、７２本以上の瓶を含む。
【０１７９】
上記キットは、別の薬剤をさらに含み得る。いくつかの実施形態において、本発明の化合物および上記薬剤は、上記キット内の別個の容器中に別個の組成物として提供もしくはパッケージされる。いくつかの実施形態において、本発明の化合物および上記薬剤は、キット中の容器の中に単一組成物として提供もしくはパッケージされる。適切なパッケージングおよびさらなる使用物品（例えば、液体調製物のための測定用カップ、空気への曝露を最小限にするためのホイルラッピングなど）は、当該分野で公知であり、上記キット中に含まれ得る。本明細書で記載されるキットは、ヘルスケア提供者（医師、看護師、薬剤師、処方職員（ｆｏｒｍｕｌａｒｙ  ｏｆｆｉｃｉａｌ）など）に提供、販売および／もしくは販売促進され得る。キットはまた、いくつかの実施形態において、消費者に直接販売され得る。
【０１８０】
いくつかの実施形態において、キットは、単位投与量の複数日供給物を含み得る。上記単位投与量は、本明細書で記載されるいずれかの単位投与量であり得る。上記キットは、複数美の期間にわたって単位投与量の複数日供給物の投与を指示する説明書を含み得る。上記複数日供給物は、１ヶ月供給物、３０日間供給物、もしくは複数週供給物であり得る。上記複数日供給物は、９０日間、１８０日間、３ヶ月間もしくは６ヶ月間の供給物であり得る。上記キットは、パッケージされた１日の単位投与量（例えば、１個、２個、３個、４個、もしくは５個の単位投与量のパッケージ）を含み得る。上記キットは、他の栄養補助食品、ビタミン、および代替食のバー、ミックス、および飲料とともにパッケージされ得る。
【実施例】
【０１８１】
実施例１：インビトロでの筋細胞におけるＳｉｒｔ１レベルに対するニコチン酸／ロイシンおよびニコチン酸／ロイシン／レスベラトロールの効果
本明細書で記載されるとおりのニコチン酸およびロイシンを含む組成物の使用を調査した。ここで上記組成物は、遊離ロイシンおよび治療未満の量のニコチン酸を含む。上記組成物は、筋細胞においてＳｉｒｔ１を活性化したので、高脂血症状態を改善するために使用され得る。レスベラトロールをさらに含む組成物もまた、調査した。
【０１８２】
Ｃ２Ｃ１２マウス筋芽細胞（アメリカンタイプカルチャーコレクション）を、８０００細胞／ｃｍ２（１０ｃｍ２ディッシュ）の密度でプレートし、１０％  ウシ胎仔血清（ＦＢＳ）、および抗生物質を含むダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ）（増殖培地）の中で、５％  ＣＯ２中３７℃において増殖させた。Ｃ２Ｃ１２細胞の分化のために、細胞を、１００％  コンフルエントになるまで増殖させ、分化培地（２％  ウマ血清および１％  ペニシリン−ストレプトマイシンを含むＤＭＥＭ）に移し、筋芽細胞が完全に形成されるまで（３日間）、新鮮な分化培地を毎日供給した。
【０１８３】
研究した変数に対して何ら効果を発揮しない治療未満の量のニコチン酸を見出すために、種々の濃度のニコチン酸を細胞に投与することによって、用量応答研究を行った。ニコチン酸の濃度＜１００ｎＭのみは、何ら効果を発揮しないことがわかったので、実験濃度を、このレベルより下に１０ｎＭで設定した。次いで、この治療未満のレベルのニコチン酸を、ロイシンおよびＨＭＢと組み合わせて試験した。上記ロイシンおよびＨＭＢは、食餌もしくは栄養補助食品中に達成可能であると同時に、各々単独で投与された場合にこれら変数に対して治療効果を何ら有しないことが以前に示された濃度であった（ロイシンに関しては０．５ｍＭおよびＨＭＢに関しては５μＭ）。
【０１８４】
Ｃ２Ｃ１２細胞筋管に、１０ｎＭ  ニコチン酸（ＮＡ）、１０ｎＭ  ニコチン酸と０．５ｍＭ  ロイシン（ＮＡ／Ｌｅｕ）、１０ｎＭ  ニコチン酸と０．５ｍＭ  ロイシンおよび２００ｎＭ  レスベラトロール（ＮＡ／Ｒ／Ｌｅｕ）、２００ｎＭ  レスベラトロールおよび０．５ｍＭ  ロイシン（Ｒ／Ｌｅｕ）、ならびに１０μＭ  ニコチン酸を、２４時間にわたって投与した。
【０１８５】
ウェスタンブロッティングを、Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ（Ｄａｎｖｅｒｓ，  ＭＡ）から得たＳＩＲＴ１抗体で行った。タンパク質を、ＢＣＡキット（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）によって測定した。細胞溶解物由来の全３５μｇのタンパク質を、１０％  Ｔｒｉｓ／ＨＣＬポリアクリルアミドゲル（Ｃｒｉｔｅｒｉｏｎ  ｐｒｅｃａｓｔ  ｇｅｌ，  Ｂｉｏ−Ｒａｄ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，  Ｈｅｒｃｕｌｅｓ，  ＣＡ）上で分離し、ＰＶＤＦ膜に転写し、ブロッキング緩衝液（ＴＢＳ中３％  ＢＳＡ）中でインキュベートし、一次抗体とともにインキュベートし、洗浄し、西洋ワサビペルオキシダーゼ結合体化二次抗体とともにインキュベートした。可視化およびケミルミネッセント検出を、ＢｉｏＲａｄ  ＣｈｅｍｉＤｏｃ機器およびソフトウェア（Ｂｉｏ−Ｒａｄ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，  Ｈｅｒｃｕｌｅｓ，  ＣＡ）を使用して行った。バンド強度を、バックグラウンドおよび負荷コントロールについて較正して、Ｉｍａｇｅ  Ｌａｂ  ４．０（Ｂｉｏ−Ｒａｄ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，  Ｈｅｒｃｕｌｅｓ，  ＣＡ）を使用して評価した。Ｓｉｒｔ１を、１０４〜１１５ｋＤＡで検出した。データを一元配置分散分析によって分析し、最小有意差検定を使用して、有意に異なる群平均を分離した。
【０１８６】
ニコチン酸−ロイシンは、Ｃ２Ｃ１２筋管におけるＳｉｒｔ１を相乗的に刺激し、効果は、レスベラトロール−ロイシンと匹敵することが見出された（図２，ｐ＜０．０５）。ニコチン酸のみは、Ｓｉｒｔ１レベルに対して有意な効果を有しなかった。ロイシン（１０ｎＭ）／レスベラトロール（２００ｎＭ）およびニコチン酸（１０ｎＭ）の３成分組み合わせは、顕著により大きな効果を発揮し、Ｓｉｒｔ１レベルが２００％増大した（ｐ＝０．０００１）。
【０１８７】
実施例２：インビトロでの脂肪細胞におけるＰ−ＡＭＰＫ／ＡＭＰＫレベルに対するニコチン酸／ロイシンおよびニコチン酸／ロイシン／レスベラトロールの効果
本明細書で記載されるとおりのニコチン酸およびロイシンを含む組成物の使用を調査した。ここで上記組成物は、遊離ロイシンおよび治療未満の量のニコチン酸を含む。上記組成物は、脂肪細胞におけるＡＭＰＫ（サーチュイン経路におけるシグナル伝達分子）を含むサーチュイン経路出力およびｐ−ＡＭＰＫ／ＡＭＰＫレベルを増大させたので、高脂血症状態を改善するために使用され得る。レスベラトロールをさらに含む組成物もまた、調査した。
【０１８８】
３Ｔ３−Ｌ１前駆脂肪細胞（アメリカンタイプカルチャーコレクション）を、８０００細胞／ｃｍ２（１０ｃｍ２ディッシュ）の密度でプレートし、１０％  ウシ胎仔血清（ＦＢＳ）および抗生物質を含むダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ）（増殖培地）中で、５％  ＣＯ２中３７℃において増殖させた。コンフルエントな３Ｔ３−Ｌ１前駆脂肪細胞を、標準的な分化培地（１０％  ＦＢＳ、２５０ｎＭ  デキサメタゾン、０．５ｍＭ  ３−イソブチル−１−メチルキサンチン（ＩＢＭＸ）および１％  ペニシリン−ストレプトマイシンを補充したＤＭＥＭ培地からなる）で脂肪細胞へと分化するように誘発した。前駆脂肪細胞をこの分化培地中で３日間維持し、その後、増殖培地中で培養した。培養物に、２〜３日ごとに培地を再供給して、化学処理を行う前に、＞９０％細胞が完全分化に達するようにした。
【０１８９】
研究した変数に対して何ら効果を発揮しない治療未満の量のニコチン酸を見出すために、種々の濃度のニコチン酸を細胞に投与することによって、用量応答研究を行った。ニコチン酸の濃度＜１００ｎＭのみは、何ら効果を発揮しないことがわかったので、実験濃度を、このレベルより下に１０ｎＭで設定した。次いで、この治療未満のレベルのニコチン酸を、ロイシンおよびＨＭＢと組み合わせて試験した。上記ロイシンおよびＨＭＢは、食餌もしくは栄養補助食品中に達成可能であると同時に、各々単独で投与された場合にこれら変数に対して治療効果を何ら有しないことが以前に示された濃度であった（ロイシンに関しては０．５ｍＭおよびＨＭＢに関しては５μＭ）。
【０１９０】
分化した３Ｔ３−Ｌ１細胞に、１０ｎＭ  ニコチン酸（ＮＡ）、１０ｎＭ  ニコチン酸と０．５ｍＭ  ロイシン（ＮＡ／Ｌｅｕ）、１０ｎＭ  ニコチン酸と０．５ｍＭ  ロイシンおよび２００ｎＭ  レスベラトロール（ＮＡ／Ｒ／Ｌｅｕ）、２００ｎＭ  レスベラトロールおよび０．５ｍＭ  ロイシン（Ｒ／Ｌｅｕ）、ならびに１０μＭ  ニコチン酸を、２４時間にわたって投与した。
【０１９１】
ウェスタンブロッティングを、Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ（Ｄａｎｖｅｒｓ，  ＭＡ）から得たＡＭＰＫおよびホスホ−ＡＭＰＫα（Ｔｈｒ１７２）に対する抗体で行った。タンパク質を、ＢＣＡキット（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）によって測定した。細胞溶解物由来の全３０μｇのタンパク質を、１０％  Ｔｒｉｓ／ＨＣＬポリアクリルアミドゲル（Ｃｒｉｔｅｒｉｏｎ  ｐｒｅｃａｓｔ  ｇｅｌ，  Ｂｉｏ−Ｒａｄ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，  Ｈｅｒｃｕｌｅｓ，  ＣＡ）で分離し、ＰＶＤＦ膜に転写し、ブロッキング緩衝液（ＴＢＳ中３％  ＢＳＡ）中でインキュベートし、一次抗体（Ｐ−ＡＭＰＫ）とともにインキュベートし、洗浄し、西洋ワサビペルオキシダーゼ結合体化二次抗体とともにインキュベートした。可視化およびケミルミネッセント検出を、ＢｉｏＲａｄ  ＣｈｅｍｉＤｏｃ機器およびソフトウェア（Ｂｉｏ−Ｒａｄ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，  Ｈｅｒｃｕｌｅｓ，  ＣＡ）を使用して行った。バンド強度を、バックグラウンドおよび負荷コントロールについて較正して、Ｉｍａｇｅ  Ｌａｂ  ４．０（Ｂｉｏ−Ｒａｄ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，  Ｈｅｒｃｕｌｅｓ，  ＣＡ）を使用して行った。ＡＭＰＫは６２ｋＤＡで検出され、Ｐ−ＡＭＰＫは６４〜６６ｋＤＡで検出された。データを一元配置分散分析によって分析し、最小有意差検定を使用して、有意に異なる群平均を分離した。
【０１９２】
１０ｎＭ  ニコチン酸は、単独で投与された場合、ＡＭＰＫ活性化に何ら有意な効果を有しないことがわかった（図３）。ニコチン酸−ロイシンの組み合わせは、Ｐ−ＡＭＰＫ／ＡＭＰＫにおける増大によって示されるように、ロイシン−レスベラトロールと匹敵する程度にＡＭＰＫ活性化を有意に刺激した（ｐ＜０．０１）。その一方で、ニコチン酸−ロイシン−レスベラトロールの３成分組み合わせは、２成分のロイシン組み合わせのうちのいずれからも有意差がなかった（図２）。
【０１９３】
実施例３：Ｃ．ｅｌｅｇａｎｓにおけるインビボでの脂肪含有量に対するニコチン酸／ロイシンおよびニコチン酸／ロイシン／レスベラトロールの効果
本明細書で記載されるとおりの（ａ）ニコチン酸および（ｂ）ロイシンを含む組成物の使用を調査した。ここで上記組成物は、遊離ロイシンおよび治療未満の量のニコチン酸を含む。上記組成物は、上記組成物を被験体に投与した後、被験体における脂質含有量を減少させた。
【０１９４】
Ｃａｅｎｏｒｈａｂｄｉｔｉｓ  ｅｌｅｇａｎｓ（Ｃ．ｅｌｅｇａｎｓ）蠕虫（Ｎ２  Ｂｒｉｓｔｏｌ野生型）を、Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  ＭｉｎｎｅｓｏｔａのＣａｅｎｏｒｈａｂｄｉｔｉｓ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  Ｃｅｎｔｅｒ（ＣＧＣ）から得、標準的なＮＧＭプレートで、２０℃において食糧としてＥ．Ｃｏｌｉ（ＯＰ５０）とともに増殖させた。処理のために、卵を、飢餓処理したプレート上で一晩で孵した。次いで、同期化したＬ１幼虫を、約３５時間にわたる示された処置を含め、Ｅ．ｃｏｌｉ供給ＮＧＭプレートに移して、Ｌ４／若年成体ステージに到達させた。全ての処理を、アガーに添加した。処置は、１０ｎＭのニコチン酸および０．５ｍＭのロイシンを含んだ。
【０１９５】
Ｃ．ｅｌｅｇａｎｓ蠕虫の脂肪含有量、タンパク質含有量、脂肪酸酸化を、本明細書で記載される方法を使用して測定した。
【０１９６】
脂肪含有量を定量するオイルレッド染色のために、処理したＬ４／若年成体蠕虫を、プレートからＰＢＳで３回洗い流し、１５ｍｌコニカルチューブ中に集め、続いて、１０００ｇで３０秒間遠心分離にかけた。その上清を廃棄し、そのペレットを１０ｍｌ  ＰＢＳで洗浄した。遠心分離後、その上清を、４００μｌを除いて廃棄し、その４００μｌを、新しい１．５ｍｌエッペンドルフチューブに移した。次いで、５００μｌの２×ＭＲＷＢ（１６０ｍＭ  ＫＣｌ、４０ｍＭ  ＮａＣｌ、１４ｍＭ  Ｎａ２ＥＧＴＡ、１ｍＭ  スペルミジンＨＣｌ、０．４ｍＭ  スペルミン、３０ｍＭ  ＮａＰＩＰＥＳ  ｐＨ７．４、０．２％  β−メルカプトエタノール）および１００μｌの２０％  パラホルムアルデヒドを添加し、上記サンプルを、室温で６０分間穏やかに振盪した。次いで、チューブを、１５００ｇで３０秒間遠心分離にかけ、次いで、吸引し、ＰＢＳで１回洗浄し、再び遠心分離にかけて、３００μｌになるまで吸引した。７００μｌのイソプロパノールを添加し、チューブを逆さにして混合し、室温で１５分間にわたって穏やかに振盪しながらインキュベートした。上記チューブを遠心分離にかけてイソプロパノールを除去した後、１ｍｌの６０％  濾過オイルレッドＯ色素溶液（１００ｍｌ  無水イソプロパノール中の０．５ｇ  オイルレッドＯを、室温で撹拌することによって２日間平衡化し、次いで、４容積ｄｄＨ２Ｏを６容積の色素溶液と混合し、１５分間室温で平衡化し、次いで、０．２Ｍ孔サイズで濾過した）を、蠕虫に添加し、振盪機で一晩回転差させた。蠕虫を１２００ｇで３０秒間遠心分離にかけ、続いて、ｄｄＨ２Ｏ洗浄を４回行って、いかなる結合していない染色液をも除去した。定量のために、上記オイルレッドＯを、１００％  イソプロパノールの添加によって細胞から溶離し、２００μｌアリコート（三連／サンプル）の光学密度を、Ｂｉｏｔｅｋ  Ｓｙｎｅｒｇｙ  ＨＴ  Ｍｉｃｒｏｐｌａｔｅ  Ｒｅａｄｅｒ（ＢｉｏＴｅｋ，  Ｗｉｎｏｏｓｋｉ，  ＶＴ，  ＵＳＡ）を使用して、波長５４０ｎｍで決定した。Ｐｉｅｒｃｅ  ＢＣＡタンパク質アッセイキットを使用して、タンパク質含有量に対してデータを正規化した。
【０１９７】
ウェスタンブロットによってタンパク質含有量を決定するために、処理したＬ４／若年成体蠕虫をプレートからＭ９緩衝液で洗い流し、微量遠心チューブの中に集めた。遠心分離（５００ｇで５分間）後、約１００μｌになるまで上清を除去した。次いで、２５０μｌ  ＲＩＰＡ緩衝液＋プロテアーゼおよびホスファターゼインヒビターミックスを添加した。サンプルをホモジナイズし、次いで、１６，０００ｇで１０分間、４０℃において遠心分離にかけた。清澄な上清をさらなる実験に使用した。タンパク質含有量を、Ｐｉｅｒｃｅ  ＢＣＡタンパク質アッセイキットを使用して決定した。
【０１９８】
脂肪酸酸化を、ＸＦ  ２４分析器（Ｓｅａｈｏｒｓｅ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ，  Ｂｉｌｌｅｒｉｃａ，  ＭＡ，  ＵＳＡ）で、僅かに改変して以前に（Ｂｒｕｃｋｂａｕｅｒ  Ａ，  Ｚｅｍｅｌ  ＭＢ．  Ｓｙｎｅｒｇｉｓｔｉｃ  ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  ｍｅｔｆｏｒｍｉｎ，  ｒｅｓｖｅｒａｔｒｏｌ，  ａｎｄ  ｈｙｄｒｏｘｙｍｅｔｈｙｌｂｕｔｙｒａｔｅ  ｏｎ  ｉｎｓｕｌｉｎ  ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ．  Ｄｉａｂｅｔｅｓ，  Ｍｅｔ  Ｓｙｎｄ  Ｏｂｅｓｉｔｙ  ２０１３；  ６：９３−１０２）記載されたように、パルミテート刺激酸素消費速度を測定することによって測定した。処理したＬ４／若年成体蠕虫を、Ｍ９緩衝液でプレートから洗い流し、１５ｍｌ  コニカルチューブの中に集めた。遠心分離（１０００ｇで１分間）の後、上清を除去し、蠕虫のペレットを、４０匹蠕虫／μｌの濃度へと希釈した。蠕虫を、プレートする間に氷水の中に維持して動きを制限し、その蠕虫溶液の５μｌを、２４ウェルＳｅａｈｏｒｓｅ  ｉｓｌｅｔプレートの各ウェルに添加した（約２００匹蠕虫／ウェル）。スクリーンを挿入し、５９５μｌのＭ９緩衝液と示された処理を各ウェルに添加した。各プレートを、測定を開始する前に１０分間冷却した。実験の間は、機器の温度設定を２９℃に維持した。
【０１９９】
データを、一元配置分散分析によって分析し、最小有意差検定を使用して、有意に異なる群平均を分離した。
【０２００】
本発明者らは、Ｃ．ｅｌｅｇａｎｓ中の脂質含有量を図４に示されるように測定した。Ｃ．ｅｌｅｇａｎｓをロイシン（０．５ｍＭ）−ニコチン酸（１０ｎＭ）組み合わせに２４時間曝すと、非処理コントロール群と比較して、総脂質含有量の３３％減少が生じることが見出された。
【０２０１】
実施例４：インビボでのトリグリセリド、ＬＤＬ、ＨＤＬおよびコレステロールレベル、ならびにアテローム硬化プラークサイズに対するニコチン酸／ロイシンおよびニコチン酸／ロイシン／レスベラトロールの効果
本発明の化合物の効力を評価するために、マウスに、本明細書で記載されるとおりの（ａ）ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物、ならびに（ｂ）ロイシンおよび／もしくはロイシン代謝産物を含む本発明の化合物を投与する。ここで上記組成物は、遊離ロイシンおよび治療未満の量のニコチン酸を含む。上記組成物は、マウスに上記組成物を投与した後に、上記マウスにおいて、トリグリセリド、ＬＤＬおよびコレステロールレベルを低下させ、ならびにアテローム硬化プラークのサイズを縮小させるために使用され得る。レスベラトロールをさらに含む組成物もまた、調査される。
【０２０２】
ＬＤＬレセプターノックアウト（ＬＤＬＲＫＯ）マウスを、Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（Ｂａｒ  Ｈａｒｂｏｒ，  ＭＥ）から得、湿度制御した環境において規則正しい明暗サイクルで、室温下で群れで収容する。上記マウスを、処置前の８週間にわたって、０．２％  コレステロール（重量で）および飽和脂肪（パーム油）由来の１０％  カロリーを含むアテローム発生性食餌と水に自由にアクセスできるようにする。処理のために、上記マウスに、（ａ）２５０ｍｇ  ニコチン酸／ｋｇ  食餌のみ、（ｂ）２５０ｍｇのニコチン酸／ｋｇ  食餌および２４ｇのロイシン／ｋｇ  食餌、（ｃ）５０ｍｇ  ニコチン酸／ｋｇ  食餌、２４ｇ  ロイシン／ｋｇ  食餌、および１２．５ｍｇ  レスベラトロール／ｋｇ  食餌、（ｄ）２４ｇ  ロイシン／ｋｇ  食餌および１２．５ｍｇ  レスベラトロール／ｋｇ  食餌、（ｅ）１０ｇ  ニコチン酸／ｋｇ  食餌のみを与える。上記処置を、６０日間連続して投与する。２つのコントロール群を比較のために含める：陰性コントロール群には、処置なしのアテローム発生性食餌を与え、二重陰性コントロール群には、処置なしで通常の食餌を与える。全ての化学物質は、Ｓｉｇｍａから購入する。
【０２０３】
全ての群のマウスの血液サンプルを、投与後の７日目、３０日目および６０日目に、上記マウスの尾部から得る。トリグリセリド、コレステロール、ＬＤＬおよびＨＤＬの血清／血漿レベルを測定する。皮膚血管拡張を、レーザードップラーフローメーターによって測定する。６０日目に、大動脈プラークを定量するためにマウスを屠殺する。簡潔には、切開および付着した脂肪組織の除去の後に、大動脈を、上記の緩衝液中に一晩浸漬する。外膜を除去した後に、大動脈を長軸方向に開き、切開用ワックス(ｄｉｓｓｅｃｔｉｎｇ  ｗａｘ）の上に平らになるようにピンで留め、顕微鏡画像分析のためにオイルレッドＯで染色する。全大動脈領域および染色された大動脈病変を、盲検様式で手動で輪郭を描き、Ａｄｏｂｅ  Ｐｈｏｔｏｓｈｏｐ  ＣＳ３を使用して分析し、全大動脈領域のパーセンテージとしてその病変サイズを決定する。
【０２０４】
結果
処置なしでアテローム発生性食餌のみを受けるマウスは、通常の食餌を受ける二重陰性コントロール群と比較して、血流中のトリグリセリド、ＬＤＬおよびコレステロールの有意により高いレベルを示し得る。上記処置群に関して、群（ａ）は、アテローム発生性食餌のみを受ける陰性コントロール群と類似ではあるが、統計的有意性はない、トリグリセリド、ＬＤＬ、コレステロールおよびＨＤＬのレベルを示し得る。群（ｂ）、（ｃ）および（ｅ）は、アテローム発生性食餌のみを受ける陰性コントロール群と比較して、血流において、有意に低いトリグリセリド、ＬＤＬおよびコレステロールレベル、ならびに有意により高いＨＤＬレベルを示し得、上記レベルは、経時的に低下し得る（ＨＤＬに関しては増大し得る）。群（ｄ）は、トリグリセリド、ＬＤＬおよびコレステロールレベルにおいて最小限の減少を示し得る。
【０２０５】
アテローム硬化プラークに関しては、群（ｂ）、（ｃ）および（ｅ）は、大動脈の全ての領域において有意に縮小したアテローム硬化病変サイズを示し得る。アテローム硬化病変サイズにおける有意な縮小は、群（ａ）および（ｂ）では予測されない。
【０２０６】
また、１０ｇのニコチン酸／ｋｇ  食餌のみを受けるマウスだけが、コントロール群を含む全ての他の群と比較して、有意により高い皮膚血管拡張を示すと予測される。上記皮膚血管拡張は、群（ｅ）と比較して、群（ａ）〜（ｄ）において低いことが見出され得る。
【０２０７】
全体的に、２４ｇ  ロイシン／ｋｇ  食餌とともに投与される２５０ｍｇ／ｋｇ  食餌である用量を有するニコチン酸は、皮膚血管拡張を有意に増大させることなく、１０ｇ  ニコチン酸／ｋｇ  食餌のみと比較して、マウスにおいてトリグリセリド、ＬＤＬ、およびコレステロールレベルを低下させること、ならびにＨＤＬレベルを増大させることに対して類似の効果を示し得る。ロイシンおよびレスベラトロールとともに投与されるニコチン酸の低用量は、類似の効果を示すと予測される。
【０２０８】
実施例５：ヒトにおけるトリグリセリド、ＬＤＬ、ＨＤＬおよびコレステロールレベルに対するニコチン酸／ロイシンおよびニコチン酸／ロイシン／レスベラトロールの効果
本発明の化合物の効力を評価するために、ヒトに、本明細書で記載されるとおりの（ａ）ニコチン酸および／もしくはニコチンアミドリボシドおよび／もしくはニコチン酸代謝産物、ならびに（ｂ）ロイシンおよび／もしくはロイシン代謝産物を含む本発明の化合物を投与する。ここで上記組成物は、遊離ロイシンおよび治療未満の量のニコチン酸を含む。上記組成物は、上記組成物をヒトに投与した後に、上記ヒトにおけるトリグリセリド、ＬＤＬおよびコレステロールレベルを低下させるために使用され得る。レスベラトロールをさらに含む組成物もまた、調査される。
【０２０９】
高脂血症を有すると以前に診断されている患者を、無作為化二重盲検研究に入れる。各患者に、（ａ）５０ｍｇ  ニコチン酸のみ、（ｂ）５０ｍｇのニコチン酸および１１３５ｍｇのロイシン、（ｃ）５０ｍｇ  ニコチン酸、１１３５ｍｇ  ロイシン、および５０ｍｇ  レスベラトロール、（ｄ）１１３５ｍｇ  ロイシンおよび５０ｍｇ  レスベラトロール、（ｅ）３０００ｍｇ  ニコチン酸のみ、および（ｆ）プラセボを経口投与する。上記処置を、１日に２回、６０日間連続して、経口投与する。
【０２１０】
全ての群において上記患者の血液サンプルを、上記投与後の０日目、３０日目および６０日目に得る。トリグリセリド、コレステロール、ＬＤＬおよびＨＤＬの血清／血漿レベルを、測定する。皮膚血管拡張を、レーザードップラーフローメーターおよび上記患者によって説明される不快レベルによって測定する。
【０２１１】
結果
上記処置群に関して、群（ａ）および（ｆ）は、０日目の値と比較して、類似ではあるが、統計的に有意さはない、トリグリセリド、ＬＤＬ、コレステロールおよびＨＤＬのレベルを示し得る。群（ｂ）、（ｃ）および（ｅ）は、それぞれの０日目の値と比較して、血流において、有意により低いトリグリセリド、ＬＤＬおよびコレステロールレベル、および有意により高いＨＤＬレベルを示し得る。群（ｄ）は、トリグリセリド、ＬＤＬおよびコレステロールレベルにおいて最小限の低下を示し得る。
【０２１２】
また、３０００ｍｇのニコチン酸のみを受ける患者だけが、プラセボを含む全ての他の群と比較して、上記患者から有意により高い皮膚血管拡張およびより多くの不定愁訴を示すと予測される。上記皮膚血管拡張は、群（ｅ）と比較して、群（ａ）〜（ｄ）においてより低い可能性がある。
【０２１３】
全体的に、１１３５ｍｇ  ロイシンとともに投与される５０ｍｇである用量を有するニコチン酸は、３ｇ  ニコチン酸のみと比較して、皮膚血管拡張を有意に増大させることなく、患者においてトリグリセリド、ＬＤＬ、およびコレステロールレベルを低下させる、ならびにＨＤＬレベルを増大させることに対して類似の効果を示し得る。５０ｍｇ  レスベラトロールとともに投与される５０ｍｇのニコチン酸＋１１３５ｍｇ  ロイシンは、類似の効果を示し得る。
【０２１４】
実施例６：ヒトにおけるアテローム硬化プラークサイズに対するニコチン酸／ロイシンおよびニコチン酸／ロイシン／レスベラトロールの効果
本発明の化合物の効力を評価するために、ヒトに、本明細書で記載されるとおりの本発明の化合物を投与し、ここで上記組成物は、遊離ロイシンおよび治療未満の量のニコチン酸を含む。上記組成物は、上記組成物をヒトに投与した後に、上記ヒトにおいてアテローム硬化プラークのサイズを縮小させるために使用され得る。レスベラトロールをさらに含む組成物もまた、調査される。
【０２１５】
急性胸痛を経験し、高脂血症を有すると以前に診断されている患者に、無作為化二重盲検研究に入れる。各患者に、（ａ）５０ｍｇ  ニコチン酸のみ、（ｂ）５０ｍｇのニコチン酸および１１３５ｍｇのロイシン、（ｃ）５０ｍｇ  ニコチン酸、１１３５ｍｇ  ロイシン、および５０ｍｇ  レスベラトロール、（ｄ）１１３５ｍｇ  ロイシンおよび５０ｍｇ  レスベラトロール、ならびに（ｅ）プラセボを経口投与する。上記処置を、１日に２回、３年間連続して経口投与する。アテローム硬化プラークのサイズを、定量的冠動脈造影法によって、０日目、６ヶ月目、１２ヶ月目、１８ヶ月目、２４ヶ月目、３０ヶ月目おようび３６ヶ月目に測定する。
【０２１６】
結果
処置群に関して、群（ａ）および（ｅ）は、０日目の値と比較して、類似ではあるが、統計的に有意差のない、アテローム硬化病変のサイズを示し得る。群（ｂ）および（ｃ）は、それぞれの０日目の値と比較して、有意に縮小したアテローム硬化プラークサイズを示し得る。群（ｄ）は、アテローム硬化プラークサイズにおいて最小限の縮小を示し得る。
【０２１７】
実施例７：インビボでのトリグリセリド、ＬＤＬ、ＨＤＬおよびコレステロールレベルに対するニコチン酸／ロイシンの効果
本発明の化合物の効力を評価するために、マウスに、本明細書で記載されるとおりの（ａ）ニコチン酸および（ｂ）ロイシンを含む本発明の化合物を、投与した。ここで上記組成物は、遊離ロイシンおよび治療未満の量のニコチン酸を含む。上記組成物は、上記組成物をマウスに投与した後に、上記マウスにおいてトリグリセリド、ＬＤＬおよびコレステロールレベルを低下させた。
【０２１８】
ＬＤＬレセプターノックアウト（ＬＤＬＲＫＯ）マウスを、Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（Ｂａｒ  Ｈａｒｂｏｒ，  ＭＥ）から得、湿度制御した環境において規則正しい明暗サイクルで、室温下で群れで収容した。上記マウスに、処置前の４週間にわたって、０．２１％  コレステロール（重量で）および脂肪由来の４０％  カロリーを含むアテローム発生性の西洋式の食餌（ＷＤ）と水に自由にアクセスできるようにした。処置に関しては、上記マウスに、（ａ）上記ＷＤ食餌のみ、（ｂ）ＷＤおよび２４ｇのロイシン／ｋｇ  食餌、（ｃ）ＷＤおよび２４ｇのロイシン／ｋｇ  食餌および５０ｍｇ  ニコチン酸／ｋｇ  食餌、（ｄ）ＷＤおよび２４ｇのロイシン／ｋｇ  食餌および２５０ｍｇ  ニコチン酸／ｋｇ  食餌、または（ｅ）ＷＤおよび１０００ｍｇ  ニコチン酸／ｋｇ  食餌、を与えた；これは、高コレステロール血症のヒトにおけるニコチン酸の低治療用量にほぼ等しい（約１，５００ｍｇ／日）。上記処置を、２８日間連続して投与した。
【０２１９】
全ての群の上記マウスの血液サンプルを、投与後２８日目に上記マウスの尾部から得た。トリグリセリド、総コレステロールおよびコレステロールエステルの血清／血漿レベルを測定した。
【０２２０】
結果
上記アテローム形成性の西洋式食餌は、血漿コレステロール（図５）、コレステロールエステル（図６）、およびトリグリセリド（図７）において顕著な上昇を生じた。治療用量のニコチン酸（１，０００ｍｇ／ｋｇ  食餌）を添加すると、総コレステロールにおいて２０％低下を生じた（ｐ＜０．０１，  図５）。ロイシンは、総コレステロールに対して独立した効果を発揮しなかったが、ロイシンを治療未満の用量のニコチン酸（５０ｍｇ／ｋｇ  食餌もしくは２５０ｍｇ／ｋｇ  食餌）に添加すると、上記治療用量で見出されたものに匹敵する総コレステロールの減少が生じた（ｐ＜０．０１，  図５）。同様に、治療用量のニコチン酸（１，０００ｍｇ／ｋｇ  食餌）を添加すると、コレステロールエステルにおいて２８％減少が生じ（ｐ＜０．００２，  図６）、統計的に匹敵する減少は、ロイシンを治療未満の用量のニコチン酸（５０ｍｇ／ｋｇ  食餌もしくは２５０ｍｇ／ｋｇ  食餌）に添加した場合に見出された（ｐ＜０．００２，  図６）。ロイシンは、コレステロールエステルに対して独立した効果を発揮しなかった。血漿トリグリセリドは、同様に影響を受けた。治療用量のニコチン酸（１，０００ｍｇ／ｋｇ  食餌）の添加は、血漿トリグリセリドにおいて３２％減少を生じ（ｐ＜０．０１，  図７）、トリグリセリドにおける統計的に匹敵する現象は、ロイシンを治療未満の用量のニコチン酸（５０ｍｇ／ｋｇ  食餌もしくは２５０ｍｇ／ｋｇ  食餌）に添加した場合に見出された（ｐ＜０．０１，  図７）。
【０２２１】
実施例８：Ｃ．ｅｌｅｇａｎｓにおける寿命に対するロイシン−ニコチン酸の効果
本明細書で記載されるとおりの（ａ）ニコチン酸および（ｂ）ロイシンを含む組成物の使用を、調査した。ここで上記組成物は、遊離ロイシンおよび治療未満の量のニコチン酸を含む。上記組成物は、上記組成物を被験体に投与した後に、上記被験体における寿命を相乗的に延ばした。
【０２２２】
蠕虫（Ｎ２  Ｂｒｉｓｔｏｌ野生型）を、Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  ＭｉｎｎｅｓｏｔａのＣａｅｎｏｒｈａｂｄｉｔｉｓ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  Ｃｅｎｔｅｒ（ＣＧＣ）から得、飢餓処理したＮＧＭプレートで食糧源としてＥ．ｃｏｌｉ（ＯＰ５０）とともに２０℃で増殖させた。卵を、飢餓処理したプレートで一晩で孵した。次いで、同期化したＬ１幼虫を、示された処理を含むＥ．ｃｏｌｉ供給ＮＧＭプレートに約３５時間にわたって移して、Ｌ４／若年成体ステージに到達させた。寿命を研究するために、５０匹の若年成体蠕虫を、Ｅ．ｃｏｌｉ株ＯＰ−５０を播種したＮＧＭアガープレートに配置した（＝研究の１日目）。全ての処理を、示された濃度で上記アガープレートに添加した。処理は、１０ｎＭのニコチン酸および０．５ｍＭのロイシンを含んだ。
【０２２３】
上記蠕虫を、研究の継続期間全体にわたって２１℃で維持した。蠕虫を毎日新しいプレートに移して、子孫を排除した。蠕虫を、それらが白金ピックでの反復接触に応答しなかった場合、死滅としてスコア付けした。上記研究を、最後の動物が死滅するまで継続した。データを、Ｐｒｉｓｍ  ６（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ）を使用してＫａｐｌａｎ−Ｍｅｉｅｒ生存曲線によって分析し、統計的有意性を、ログランク（Ｍａｎｔｅｌ−Ｃｏｘ）検定によって決定した。
【０２２４】
ロイシン（０．５ｍＭ）およびニコチン酸（１０ｎＭ）は各々、寿命に対して独立した効果を発揮しないが、組み合わされた場合に、基本条件下で最大寿命を延ばし、パラコート（０．２ｍＭ）の投与によって誘発される酸化ストレスの条件下でメジアン寿命を２８％程度延ばす（図８）ことが見出された。
【０２２５】
本発明の好ましい実施形態は、本明細書で示され、記載されてきたが、このような実施形態は、例示によって提供されるに過ぎないことは、当業者に明らかである。多くのバリエーション、変化、および置換は、本発明から逸脱することなく、当業者にいまや想起される。本明細書で記載される本発明の実施形態の種々の代替が本発明を実施するにあたって使用され得ることは、理解されるべきである。以下の特許請求の範囲は、本発明の範囲を定義し、これら特許請求の範囲内の方法および構造ならびにそれらの均等物は、特許請求の範囲によって網羅されることが意図される。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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