(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）のリチウム塩、バリウム塩、コバルト塩、ニッケル塩およびアンモニウム塩からなる群より選択される少なくとも一つの塩を含む抗凝固剤を含有する血液試料を収容した容器が配置された試料配置部と、
前記試料配置部に配置された前記容器から前記血液試料を吸引するノズルと、
前記ノズルにより供給される前記血液試料を測定する測定部と、を備え、
前記測定部は、前記血液試料の血算を測定する血算測定器、および前記血液試料の電解質を測定する電解質測定器を含み、前記ノズルは同一の前記容器から吸引した前記血液試料を、前記血算測定器、および前記電解質測定器に供給する、血液検査装置。
【請求項２】
前記測定部は、前記血液試料における、Ｃ反応性タンパク（ＣＲＰ）、血清アミロイドタンパクＡ（ＳＡＡ）、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）、インターロイキン１（ＩＬ−１）、α１−アンチトリプシン、α１−アンチキモトリプシン、α１−酸性糖タンパク、ハプトグロビン、セルロプラスミン、トロポニンＩ、ＣＫ−ＭＢ、ミオグロビンおよび心筋型脂肪酸結合タンパク（Ｈ−ＦＡＢＰ）からなる群より選択される少なくとも一つの項目を測定する測定器を含む、請求項１に記載の血液検査装置。
【請求項３】
前記測定部は、前記血液試料のＣ反応性タンパク（ＣＲＰ）を測定する測定器を含む、請求項１または請求項２に記載の血液検査装置。
【請求項４】
エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）のリチウム塩、バリウム塩、コバルト塩、ニッケル塩およびアンモニウム塩からなる群より選択される少なくとも一つの塩を含む抗凝固剤を含有する血液試料を容器内に準備する準備工程と、
同一の前記容器内の前記血液試料を用いて、血算および電解質を測定する測定工程と、を含む血液検査方法。
【請求項５】
前記測定工程では、前記血液試料の血算および電解質を測定するとともに、前記血液試料における、Ｃ反応性タンパク（ＣＲＰ）、血清アミロイドタンパクＡ（ＳＡＡ）、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）、インターロイキン１（ＩＬ−１）、α１−アンチトリプシン、α１−アンチキモトリプシン、α１−酸性糖タンパク、ハプトグロビン、セルロプラスミン、トロポニンＩ、ＣＫ−ＭＢ、ミオグロビンおよび心筋型脂肪酸結合タンパク（Ｈ−ＦＡＢＰ）からなる群より選択される少なくとも一つの項目を更に測定する請求項４に記載の血液検査方法。
【請求項６】
前記測定工程では、前記血液試料の血算および電解質を測定するとともに、前記血液試料のＣ反応性タンパク（ＣＲＰ）を更に測定する請求項４または請求項５に記載の血液検査方法。
【請求項７】
前記ＥＤＴＡ塩が、ＥＤＴＡのリチウム塩である請求項４〜請求項６のいずれか１項に記載の血液検査方法。
【請求項８】
前記ＥＤＴＡ塩は、質量比でＥＤＴＡ：金属水酸化物＝１：０．１〜１：０．６となるようにＥＤＴＡと金属水酸化物（ナトリウム、カリウムおよびカルシウムの水酸化物を除く）とを混合して得られる請求項４〜請求項７のいずれか１項に記載の血液検査方法。
【請求項９】
前記血液試料における前記ＥＤＴＡ塩の濃度が、０．５ｍｇ／ｍＬ〜３．０ｍｇ／ｍＬである請求項４〜請求項８のいずれか１項に記載の血液検査方法。
【請求項１０】
前記血液試料における前記ＥＤＴＡ塩の濃度が、０．７５ｍｇ／ｍＬ〜１．５ｍｇ／ｍＬである請求項４〜請求項９のいずれか１項に記載の血液検査方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、血液試料の血算および電解質を測定することが可能である血液検査装置および血液検査方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
血液検査を行なう際、検体となる血液試料の凝固を阻害するために抗凝固剤が用いられる。抗凝固剤としては、クエン酸、クエン酸ナトリウム、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、ヘパリンなどが挙げられるが、通常、これらの抗凝固剤は用途に応じて使い分けがされている（例えば、特許文献１および非特許文献１を参照）。
例えば、ヘパリンは、白血球を凝集させやすい性質を有し、時間の経過とともに白血球凝集が大きくなる傾向を示す報告例があり、また、血小板についても採血直後から凝集が認められる血液が一部の検体に存在するといわれている（例えば、非特許文献２、３を参照）。そのため、ヘパリンを用いた血算検査では、白血球や血小板の正確な測定ができないと考えられている。
また、血液検査として電解質測定を行なう場合、抗凝固剤にＮａまたはＫが含まれていると測定ができないため、抗凝固剤としてＮａおよびＫが含まれていないもの、例えばヘパリンが使用される。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】特表２００８−５１０５７８号公報
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】ＥＤＴＡ・・・血液検査における抗凝固剤の選択.From Coulter No.18 Sept,1992
【非特許文献２】三輪史朗  他：諸種抗凝固剤の血算値に及ぼす影響. 臨床病理 15(5) 376-380,1967
【非特許文献３】嶋崎明美  他：ヘパリン採血における混和による血小板凝集 臨床血液 38(4) 323-330,1997
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
抗凝固剤を用途に応じて使い分ける場合、例えば、電解質の測定のためにヘパリンを用い、血算の測定のためにＥＤＴＡ−２Ｎａ、２Ｋ、３Ｋを用いることが考えられる。そのため、血算および電解質を測定しようとすると、異なる抗凝固剤が注入された採血管が複数必要となり、その結果、血液採取の手間がかかり、検査コストの増大につながり、また、血液を採取される患者の負担となる。
したがって、１本の採血管で血算および電解質をともに測定することが可能な血液検査装置および血液検査方法が望ましい。
【０００６】
本発明は、血液試料の血算および電解質を測定することが可能である血液検査装置および血液検査方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
上述した目的を達成するための具体的な手段は、以下の通りである。
＜１＞  本発明の一態様は、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）のナトリウム塩、カリウム塩およびカルシウム塩以外のＥＤＴＡ塩を含む抗凝固剤を含有する血液試料が配置された試料配置部と、前記試料配置部に配置された前記血液試料の血算および電解質を測定する測定部と、を備える血液検査装置である。
＜２＞  前記測定部は、前記血液試料の血算を測定可能な血算測定器および前記血液試料の電解質を測定可能な電解質測定器を備える＜１＞に記載の血液検査装置。
＜３＞  前記測定部は、前記血液試料の血算および電解質を測定するとともに、前記血液試料における、Ｃ反応性タンパク（ＣＲＰ）、血清アミロイドタンパクＡ（ＳＡＡ）、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）、インターロイキン１（ＩＬ−１）、α１−アンチトリプシン、α１−アンチキモトリプシン、α１−酸性糖タンパク、ハプトグロビン、セルロプラスミン、トロポニンＩ、ＣＫ−ＭＢ、ミオグロビンおよび心筋型脂肪酸結合タンパク（Ｈ−ＦＡＢＰ）からなる群より選択される少なくとも一つの項目を更に測定する＜１＞または＜２＞に記載の血液検査装置。
＜４＞  前記測定部は、前記血液試料の血算および電解質を測定するとともに、前記血液試料のＣ反応性タンパク（ＣＲＰ）を更に測定する＜１＞〜＜３＞のいずれか１つに記載の血液検査装置。
＜５＞  本発明の一態様は、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）のナトリウム塩、カリウム塩およびカルシウム塩以外のＥＤＴＡ塩を含む抗凝固剤を含有する血液試料を準備する準備工程と、前記血液試料の血算および電解質を測定する測定工程と、を含む血液検査方法である。
＜６＞  前記測定工程では、前記血液試料の血算および電解質を測定するとともに、前記血液試料における、Ｃ反応性タンパク（ＣＲＰ）、血清アミロイドタンパクＡ（ＳＡＡ）、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）、インターロイキン１（ＩＬ−１）、α１−アンチトリプシン、α１−アンチキモトリプシン、α１−酸性糖タンパク、ハプトグロビン、セルロプラスミン、トロポニンＩ、ＣＫ−ＭＢ、ミオグロビンおよび心筋型脂肪酸結合タンパク（Ｈ−ＦＡＢＰ）からなる群より選択される少なくとも一つの項目を更に測定する＜５＞に記載の血液検査方法。
＜７＞  前記測定工程では、前記血液試料の血算および電解質を測定するとともに、前記血液試料のＣ反応性タンパク（ＣＲＰ）を更に測定する＜５＞または＜６＞に記載の血液検査方法。
＜８＞  本発明の一態様は、前記ＥＤＴＡ塩が、ＥＤＴＡのリチウム塩、バリウム塩、コバルト塩、ニッケル塩およびアンモニウム塩からなる群より選択される少なくとも一つの塩である＜５＞〜＜７＞のいずれか１つに記載の血液検査方法である。
＜９＞  本発明の一態様は、前記ＥＤＴＡ塩が、ＥＤＴＡのリチウム塩である＜５＞〜＜８＞のいずれか１つに記載の血液検査方法である。
＜１０＞  本発明の一態様は、前記ＥＤＴＡ塩は、質量比でＥＤＴＡ：金属水酸化物＝１：０．１〜１：０．６となるようにＥＤＴＡと金属水酸化物（ナトリウム、カリウムおよびカルシウムの水酸化物を除く）とを混合して得られる＜５＞〜＜９＞のいずれか１つに記載の血液検査方法である。
＜１１＞  本発明の一態様は、前記血液試料における前記ＥＤＴＡ塩の濃度が、０．５ｍｇ／ｍＬ〜３．０ｍｇ／ｍＬである＜５＞〜＜１０＞のいずれか１つに記載の血液検査方法である。
＜１２＞  本発明の一態様は、前記血液試料における前記ＥＤＴＡ塩の濃度が、０．７５ｍｇ／ｍＬ〜１．５ｍｇ／ｍＬである＜５＞〜＜１１＞のいずれか１つに記載の血液検査方法である。
【発明の効果】
【０００８】
本発明の一態様によれば、血液試料の血算および電解質を測定することが可能である血液検査装置および血液検査方法を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【０００９】
【図１】（ａ）〜（ｃ）は、採血管１〜３（ＥＤＴＡ−４Ｈ＋ＬｉＯＨ）および採血管４（ＥＤＴＡ−２Ｋ）の白血球測定の結果を比較したグラフであり、（ｄ）は、採血管５（ヘパリンＬｉ）および採血管４（ＥＤＴＡ−２Ｋ）の白血球測定の結果を比較したグラフである。
【図２】（ａ）〜（ｃ）は、採血管１〜３（ＥＤＴＡ−４Ｈ＋ＬｉＯＨ）および採血管４（ＥＤＴＡ−２Ｋ）の赤血球測定の結果を比較したグラフであり、（ｄ）は、採血管５（ヘパリンＬｉ）および採血管４（ＥＤＴＡ−２Ｋ）の赤血球測定の結果を比較したグラフである。
【図３】（ａ）〜（ｃ）は、採血管１〜３（ＥＤＴＡ−４Ｈ＋ＬｉＯＨ）および採血管４（ＥＤＴＡ−２Ｋ）の血小板測定の結果を比較したグラフであり、（ｄ）は、採血管５（ヘパリンＬｉ）および採血管４（ＥＤＴＡ−２Ｋ）の血小板測定の結果を比較したグラフである。
【図４】（ａ）〜（ｃ）は、採血管１〜３（ＥＤＴＡ−４Ｈ＋ＬｉＯＨ）および採血管５（ヘパリンＬｉ）のＣＲＰ測定の結果を比較したグラフであり、（ｄ）は、採血管４（ＥＤＴＡ−２Ｋ）および採血管５（ヘパリンＬｉ）のＣＲＰ測定の結果を比較したグラフである。
【図５】（ａ）〜（ｃ）は、採血管１〜３（ＥＤＴＡ−４Ｈ＋ＬｉＯＨ）および採血管５（ヘパリンＬｉ）のＮａ濃度測定の結果を比較したグラフであり、（ｄ）は、採血管４（ＥＤＴＡ−２Ｋ）および採血管５（ヘパリンＬｉ）のＮａ濃度測定の結果を比較したグラフである。
【図６】（ａ）〜（ｃ）は、採血管１〜３（ＥＤＴＡ−４Ｈ＋ＬｉＯＨ）および採血管５（ヘパリンＬｉ）のＫ濃度測定の結果を比較したグラフであり、（ｄ）は、採血管４（ＥＤＴＡ−２Ｋ）および採血管５（ヘパリンＬｉ）のＫ濃度測定の結果を比較したグラフである。
【図７】（ａ）〜（ｃ）は、採血管１〜３（ＥＤＴＡ−４Ｈ＋ＬｉＯＨ）および採血管５（ヘパリンＬｉ）のＣｌ濃度測定の結果を比較したグラフであり、（ｄ）は、採血管４（ＥＤＴＡ−２Ｋ）および採血管５（ヘパリンＬｉ）のＣｌ濃度測定の結果を比較したグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
以下、本発明の一態様の血液検査装置および血液検査方法について説明する。
本明細書において、「〜」を用いて表される数値範囲は、「〜」の前後に記載される数値を下限値及び上限値として含む範囲を意味する。
【００１１】
〔血液検査装置〕
本発明の一態様の血液検査装置は、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）のナトリウム塩、カリウム塩およびカルシウム塩以外のＥＤＴＡ塩を含む抗凝固剤を含有する血液試料が配置された試料配置部と、前記試料配置部に配置された前記血液試料の血算および電解質を測定する測定部と、を備える。
【００１２】
従来、抗凝固剤を用途に応じて使い分けており、電解質の測定のためにヘパリンを用い、血算の測定のためにＥＤＴＡ−２Ｎａ、２Ｋ、３Ｋを用いている。そのため、血算および電解質を測定しようとすると、異なる抗凝固剤が注入された採血管（血液試料用容器）が複数必要となり、その結果、血液採取の手間がかかり、検査コストの増大につながり、また、血液を採取される患者の負担となる。
【００１３】
本態様の血液検査装置では、ＥＤＴＡのナトリウム塩、カリウム塩およびカルシウム塩以外のＥＤＴＡ塩を含む抗凝固剤を含有する血液試料を試料配置部に配置し、試料配置部に配置された血液試料の血算および電解質を測定部により測定する。これにより、抗凝固剤を用途に応じて使い分ける必要が無く、１種の抗凝固剤または１つの採血管を用いて血液試料の血算および電解質を測定することができる。
なお、本態様の血液検査装置で測定対象となる血液試料は、後述する本態様の血液検査方法で用いる血液試料と同様である。
【００１４】
本態様の血液検査装置は、ＥＤＴＡのナトリウム塩、カリウム塩およびカルシウム塩以外のＥＤＴＡ塩を含む抗凝固剤を含有する血液試料が配置された試料配置部を備える。試料配置部は、前記ＥＤＴＡ塩を含む抗凝固剤を含有する血液試料を配置でき、かつ、後述する測定部により、血液試料の血算および電解質を測定することが可能な構成であればよい。試料配置部としては、例えば、前記ＥＤＴＡ塩を含む抗凝固剤を含有する血液試料が注入された採血管（血液試料用容器）が配置される場所、あるいは、血液試料を注入可能な容器などが挙げられる。
【００１５】
本態様の血液検査装置は、試料配置部に配置された前記血液試料の血算および電解質を測定する測定部を備える。測定部は、例えば、血液試料を吸引するノズルと、ノズルにより吸引された血液試料が供給されることにより各項目を測定する測定器と、を備えていればよい。
【００１６】
測定器としては、血算を測定可能な装置（血算測定器）と電解質を測定可能な装置（電解質測定器）とが別々に存在し、これらを組み合わせたシステムであってもよく、血算および電解質をともに測定可能な１つの測定装置であってもよい。
【００１７】
血液試料の血算および電解質の測定を行なう場合、これらの項目を同時に測定してもよく、順番に測定してもよい。
【００１８】
なお、本態様の血液検査装置は、血算および電解質以外の後述する生化学的検査項目が測定可能であってもよい。例えば、測定器としては、血算を測定可能な装置（血算測定器）、電解質を測定可能な装置（電解質測定器）、およびＣ反応性タンパク（ＣＲＰ）を測定可能な装置（ＣＲＰ測定器）が別々に存在し、これらを組み合わせたシステムであってもよく、血算、電解質およびＣＲＰを測定可能な１つの測定装置であってもよい。
【００１９】
〔血液検査方法〕
本発明の一態様の血液検査方法は、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）のナトリウム塩、カリウム塩およびカルシウム塩以外のＥＤＴＡ塩を含む抗凝固剤を含有する血液試料を準備する準備工程と、前記血液試料の血算および電解質を測定する測定工程と、を含む。
なお、本態様の血液検査方法は、前述の血液検査装置を用いて行なってもよい。
【００２０】
本態様の血液検査方法により、１つの採血管を用いて血算および電解質を測定することが可能である。そのため、異なる抗凝固剤が注入された複数の採血管を使用し、血算および電解質を測定する場合と比べて、血液採取の手間および検査コストを低減することができ、また、血液を採取される患者の負担を軽減することができる。
【００２１】
本発明の一態様の血液検査装置および血液検査方法では、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）のナトリウム塩、カリウム塩およびカルシウム塩以外のＥＤＴＡ塩を含む抗凝固剤を使用する。
ＥＤＴＡは、カルシウムイオンをキレート化して可溶性の錯体を形成することによって、血液凝固を阻害する。ＥＤＴＡ塩は、水などの溶媒に容易に溶解するため、血液検査方法にて用いる抗凝固剤は、ＥＤＴＡ塩を水などの溶媒に溶解させた溶液であってもよい。また、血液検査方法にて用いる抗凝固剤は、ＥＤＴＡ塩を水などの溶媒に溶解させて溶液を調製した後、調製した溶液を乾燥させて得られた固形物であってもよい。
【００２２】
抗凝固剤に含まれるＥＤＴＡ塩は、ナトリウム塩、カリウム塩およびカルシウム塩以外のＥＤＴＡ塩であれば特に限定されないが、例えば、ＥＤＴＡのリチウム塩、バリウム塩、コバルト塩、ニッケル塩およびアンモニウム塩からなる群より選択される少なくとも一つの塩であることが好ましい。中でも、抗凝固剤に含まれるＥＤＴＡ塩は、ＥＤＴＡのリチウム塩であることが好ましい。
【００２３】
抗凝固剤に含まれるＥＤＴＡ塩は、ＥＤＴＡと金属水酸化物（ナトリウム、カリウムおよびカルシウムの水酸化物を除く）とを混合して得られる金属塩であることが好ましい。さらに、ＥＤＴＡ塩は、ＥＤＴＡと、水酸化リチウム、水酸化バリウム、水酸化コバルトおよび水酸化ニッケルからなる群より選択される少なくとも一つの金属水酸化物（更に好ましくは、水酸化リチウム）と、を混合して得られる金属塩であることがより好ましい。
【００２４】
さらに、抗凝固剤に含まれるＥＤＴＡ塩は、質量比でＥＤＴＡ：金属水酸化物＝１：０．１〜１：０．６となるようにＥＤＴＡと金属水酸化物（ナトリウム、カリウムおよびカルシウムの水酸化物を除く）とを混合して得られることが好ましい。前記質量比は、ＥＤＴＡ：金属水酸化物＝１：０．２〜１：０．６であることがより好ましく、１：０．３〜１：０．５であることがさらに好ましい。
【００２５】
本発明の一態様の血液検査方法では、前述の抗凝固剤を含有する血液試料を準備し、準備した血液試料を用いて、血算および電解質を測定する。
【００２６】
血算および電解質の測定に用いる血液試料は、ＥＤＴＡ塩の濃度が、０．５ｍｇ／ｍＬ〜３．０ｍｇ／ｍＬであることが好ましく、０．７５ｍｇ／ｍＬ〜１．５ｍｇ／ｍＬであることがより好ましく、０．７５ｍｇ／ｍＬ〜１．２５ｍｇ／ｍＬであることがさらに好ましい。
ＥＤＴＡ塩の濃度が、０．５ｍｇ／ｍＬ以上であることにより、血液の凝固を好適に阻害することが可能である。また、ＥＤＴＡ塩の濃度が、３．０ｍｇ／ｍＬ以下であることにより、溶血を好適に抑制することが可能である。
さらに、ＥＤＴＡ塩の濃度が、０．７５ｍｇ／ｍＬ以上であることにより、血液の凝固をより好適に阻害することが可能である。また、ＥＤＴＡ塩の濃度が、１．５ｍｇ／ｍＬ以下（好ましくは、１．２５ｍｇ／ｍＬ以下）であることにより、溶血をより好適に抑制でき、さらに、Ｎａ、Ｋ、Ｃｌなどの電解質の測定に対するＥＤＴＡ塩の影響をより低減することができ、高精度な測定が可能となる。特に、ＥＤＴＡ塩がリチウム塩である場合、Ｎａ、Ｋ、Ｃｌなどの電解質の測定に対するＥＤＴＡ塩の影響をより好適に低減することができる。
【００２７】
また、国際血液学標準化委員会（ＩＣＳＨ）は、血液試料１ミリリットル（ｍＬ）あたり１．５ミリグラム〜２．２ミリグラムのＥＤＴＡ塩を含むこと（ＥＤＴＡ塩の濃度が１．５ｍｇ／ｍＬ〜２．２ｍｇ／ｍＬ）を、凝固防止の観点から推奨している。さらに、特表２００８−５１０５７８号公報の段落［００１８］にも、血液１ミリリットル（ｍＬ）あたり約１．５ミリグラム（ｍｇ）のＥＤＴＡであるＥＤＴＡ濃度は、凝固の防止において有効であることが示されている。
【００２８】
一方、本発明の一態様では、ＥＤＴＡ塩（好ましくはＥＤＴＡのリチウム塩）の濃度が、０．７５ｍｇ／ｍＬ〜１．５ｍｇ／ｍＬであってもよく、この場合、従来と比較してより少量のＥＤＴＡで血液の凝固を抑制することができる。さらに、Ｎａ、Ｋ、Ｃｌなどの電解質の測定に対するＥＤＴＡ塩の影響をより低減することができ、高精度な測定が可能となる。
【００２９】
本発明の一態様の血液検査装置および血液検査方法の測定対象である血算は、血液の細胞成分についての情報を提供する。血算の測定により、例えば、白血球（ＷＢＣ）、赤血球（ＲＢＣ）、ヘマトクリット値（ＨＣＴ）、ヘモグロビン量（ＨＧＢ）、血小板（ＰＬＴ）、平均赤血球容積（ＭＣＶ）、平均赤血球血色素量（ＭＣＨ）、平均赤血球血色素濃度（ＭＣＨＣ）、赤血球分布幅（ＲＤＷ）、血小板分布幅（ＰＤＷ）、平均血小板容積（ＭＰＶ）、好中球数（ＮＥＵＴ）、リンパ球数（ＬＹＭＰＨ）、単球数（ＭＯＮＯ）、好酸球数（ＥＯ）、好塩基球数（ＢＡＳＯ）、網赤血球数（ＲＥＴ）、網赤血球比率（ＲＥＴ％）などが測定される。
血算の測定により、好ましくは白血球（ＷＢＣ）、赤血球（ＲＢＣ）および血小板（ＰＬＴ）の少なくともいずれか１つ、より好ましくは白血球（ＷＢＣ）、赤血球（ＲＢＣ）および血小板（ＰＬＴ）が測定される。
【００３０】
本発明の一態様の血液検査装置および血液検査方法の測定対象としては、前述の血算以外にナトリウム（Ｎａ）、カリウム（Ｋ）、クロール（Ｃｌ）などの電解質がある。
【００３１】
また、本発明の一態様の血液検査装置および血液検査方法は、血算および電解質以外の生化学的検査項目を測定対象（検査対象）としてもよい。血算および電解質の測定とともに、例えば、含窒素成分検査、金属検査、血漿タンパク関連検査、膠質反応、生体色素検査、酵素関連検査、脂質検査、糖代謝検査等のいわゆる血液の諸成分を生化学的方法により、定性、定量する検査を行なってもよい。
【００３２】
本発明の一態様の血液検査装置および血液検査方法では、例えば、血液試料における、Ｃ反応性タンパク（ＣＲＰ）、血清アミロイドタンパクＡ（ＳＡＡ）、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）、インターロイキン１（ＩＬ−１）、α１−アンチトリプシン、α１−アンチキモトリプシン、α１−酸性糖タンパク、ハプトグロビン、セルロプラスミン、トロポニンＩ、ＣＫ−ＭＢ、ミオグロビンおよび心筋型脂肪酸結合タンパク（Ｈ−ＦＡＢＰ）からなる群より選択される少なくとも一つの項目を更に測定してもよい。
【００３３】
さらに、本発明の一態様の血液検査装置および血液検査方法では、血液試料の血算および電解質を測定するとともに、血液試料のＣ反応性タンパク（ＣＲＰ）を更に測定することが好ましい。これにより、１種の抗凝固剤または１つの採血管を用いて血液試料の血算、ＣＲＰおよび電解質を全て測定することができる。
【００３４】
他にも、例えば、一般的な生化学的検査項目であるクレアチンホスホキナーゼ（ＣＰＫ）、血液尿素窒素（ＢＵＮ）、乳酸脱水素酵素（ＬＤＨ）、アルカリホスホターゼ（ＡＬＰ）、ＧＯＴ（グルタミン酸オキサロ酢酸トランスアミナーゼ）、ＧＰＴ（グルタミン酸ピルビン酸トランスアミナーゼ）、トリグリセライド（ＴＧ）、尿酸（ＵＡ）、総コレステロール（ＴＣＨＯ）、高比重リポタンパクコレステロール（ＨＤＬＣ)、総タンパク（ＴＰ）、アルブミン（ＡＬＢ）、アミラーゼ（ＡＭＹＬ）、γ-グルタミントランスペプチダーゼ（ＧＧＴ）、クレアチニン（ＣＲＥＡ）、総ビリルビン（ＴＢＩＬ）等の１種以上を測定する検査を行なってもよい。
【実施例】
【００３５】
次に、本発明の一態様を以下の実施例に基づき説明するが、本発明は実施例に限定されるものではない。
【００３６】
＜実験１−抗凝固能の確認＞
まず、本発明の一態様の血液検査方法に用いる抗凝固剤の抗凝固能を以下のようにして確認した。
〔水溶液１〜３の調製〕
ＥＤＴＡ−４Ｈ（株式会社同仁化学研究所製）およびＬｉＯＨ（和光純薬工業株式会社製）が含まれる３種類の水溶液（抗凝固剤）を以下のようにして調製した。
＜水溶液１＞  ＥＤＴＡ−４Ｈ３０ｍｇおよびＬｉＯＨ１１．９ｍｇを１ｍＬの蒸留水に溶解させ水溶液１を調製した。
＜水溶液２＞  ＥＤＴＡ−４Ｈ２０ｍｇおよびＬｉＯＨ７．９ｍｇを１ｍＬの蒸留水に溶解させ水溶液２を調製した。
＜水溶液３＞  ＥＤＴＡ−４Ｈ１０ｍｇおよびＬｉＯＨ４．０ｍｇを１ｍＬの蒸留水に溶解させ水溶液３を調製した。
〔検体〕
検体（Sample）としては、被験者より採取した全血を用いた。
検体数は４３であり、男性検体（Male）３１、女性検体（Female）１２であった。
〔実験方法〕
上記のように調製した水溶液１〜３を５０μＬ採取し、プラスチック容器に分注後に乾燥させる。次いで、プラスチック容器に全血を１ｍＬ添加し、全血におけるＥＤＴＡの濃度（Conc）をそれぞれ１．５ｍｇ／ｍＬ、１．０ｍｇ／ｍＬおよび０．５ｍｇ／ｍＬとした。全血を各容器に添加し、１．５、３．０、４．５時間（９０、１８０、２７０分）室温放置後に、凝固（Coagulation）および溶血（Hemolysis）が生じていないかを確認した。具体的には、１．５、３．０、４．５時間後の凝固状態を目視で確認し、また、１．５、３．０、４．５時間後の検体を遠心分離し、遠心分離後の溶血状態を目視で確認した。
結果を表１に示す。
【００３７】
【表１】
0006483593.tif 000002
【００３８】
表１に示すように、全血におけるＥＤＴＡの濃度が０．５ｍｇ／ｍＬまたは１．５ｍｇ／ｍＬの場合、ほとんどの検体において、凝固および溶血が観察されなかった。また、全血におけるＥＤＴＡの濃度が１．０ｍｇ／ｍＬの場合、すべての検体において、凝固および溶血が確認されなかった。
【００３９】
＜実験２−Ｎａ、Ｋ、Ｃｌの測定値に対する影響＞
次に、本発明の一態様の血液検査方法に用いる抗凝固剤がＮａ、Ｋ、Ｃｌの測定値に対して与える影響について検討した。
〔水溶液４〜１１の調製〕
ＥＤＴＡ−４Ｈ（株式会社同仁化学研究所製）およびＬｉＯＨ（和光純薬工業株式会社製）が含まれる２種類の水溶液（抗凝固剤）を以下のようにして調製した。
＜水溶液４〜７＞  ＥＤＴＡ−４Ｈ６０ｍｇおよびＬｉＯＨ２３．７ｍｇを１ｍＬの蒸留水に溶解させ水溶液４を調製した。また、水溶液４を２／３、１／２、１／３に希釈した水溶液を調製し、濃度の異なる４種類の水溶液４〜７を準備した。
＜水溶液８〜１１＞  ＥＤＴＡ−２ＮＨ４４８ｍｇを１ｍＬの蒸留水に溶解させ水溶液８を調製した。また、水溶液８を２／３、１／２、１／３に希釈した水溶液を調製し、濃度の異なる４種類の水溶液８〜１１を準備した。
〔検体〕
検体としては、市販のコントロール血清を用いた。
０．５７ｍＬの市販のコントロール血清に０．０３ｍＬの水溶液４〜１１をそれぞれ添加し、測定試料を調製した。また、市販のコントロール血清に蒸留水を添加し、比較用の測定試料を調製した。
〔実験方法〕
上記のようにして調製した測定試料を用いて、電極法によりＮａ、Ｋ、Ｃｌの濃度を５回ずつ測定し、有意差検定（有意水準５％、ｔ≧２．２６２２であれば有意差あり）を行なった。そして、蒸留水を添加した比較用の測定試料と測定値を比較した。
結果を表２〜４に示す。なお、表２はＮａの濃度、表３はＫの濃度、表４はＣｌの濃度にそれぞれ対応する。
【００４０】
【表２】
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【００４１】
【表３】
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【００４２】
【表４】
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【００４３】
表２〜４から、ＬｉＯＨおよび１．０ｍｇ／ｍＬのＥＤＴＡ−４Ｈを含む水溶液７を用いた場合には、Ｎａ、Ｋ、Ｃｌの測定値への影響が特に小さいことが推測される。
【００４４】
＜実験３−血算、ＣＲＰおよび電解質の測定＞
次に、本発明の一態様の血液検査方法により、血液試料（全血）の血算（白血球数、赤血球数および血小板数）、ＣＲＰおよび電解質を測定した。
〔採血管１〜３の準備〕
ＥＤＴＡ−４Ｈ（株式会社同仁化学研究所製）およびＬｉＯＨ（和光純薬工業株式会社製）が含まれる採血管１〜３を以下のようにして準備した。
＜採血管１＞  ＥＤＴＡ−４Ｈ３００ｍｇおよびＬｉＯＨ１１８．５ｍｇを蒸留水に溶解させた後、メスアップして５ｍＬ水溶液を調製し、調製した水溶液１０．４μＬを採血管に添加して乾燥させた。
＜採血管２＞  ＥＤＴＡ−４Ｈ３００ｍｇおよびＬｉＯＨ１１８．５ｍｇを蒸留水に溶解させた後、メスアップして５ｍＬ水溶液を調製し、調製した水溶液８．３μＬを採血管に添加して乾燥させた。
＜採血管３＞  ＥＤＴＡ−４Ｈ３００ｍｇおよびＬｉＯＨ１１８．５ｍｇを蒸留水に溶解させた後、メスアップして５ｍＬ水溶液を調製し、調製した水溶液６．３μＬを採血管に添加して乾燥させた。
〔実験方法〕
上記の採血管１〜３に、検体である全血を０．５ｍＬ投入し、全血におけるＥＤＴＡの濃度をそれぞれ１．２５ｍｇ／ｍＬ、１．０ｍｇ／ｍＬおよび０．７５ｍｇ／ｍＬとした。そして、全血が投入された採血管１〜３を用いて、血算、ＣＲＰおよび電解質を測定した。なお、血算、ＣＲＰおよび電解質の測定には、アークレイ株式会社製のＳＢ−１４２０およびアークレイ株式会社Ｄ−Ｃｏｎｃｅｐｔ  Ｄ−０１,Ｄ−０２を用いた。
〔比較対象〕
比較のため、ＥＤＴＡ−２Ｋが含まれる採血管４（品名：ＮＩＨＯＮ）およびヘパリンＬｉが含まれる採血管５（ヘパリンＬｉ３００ｍｇを蒸留水に溶解させた後、メスアップして５ｍＬ水溶液を調製し、調製した水溶液８．３μＬを採血管に添加して、乾燥させたもの）を準備し、採血管４を用いて血算を測定し、採血管５を用いてＣＲＰおよび電解質を測定した。
【００４５】
（血算）
まず、血算（白血球数、赤血球数および血小板数）の測定結果を図１〜３に示す。なお、図１〜３は、それぞれ、（ａ）〜（ｃ）にて採血管１〜３（ＥＤＴＡ−４Ｈ＋ＬｉＯＨ）および採血管４（ＥＤＴＡ−２Ｋ）の血算測定の結果を比較しており、（ｄ）にて採血管５（ヘパリンＬｉ）および採血管４（ＥＤＴＡ−２Ｋ）の血算測定の結果を比較している。
また、図１では白血球（ＷＢＣ）数の測定結果、図２では赤血球（ＲＢＣ）数の測定結果、図３では血小板（ＰＬＴ）数の測定結果を比較している。
【００４６】
図１（ａ）〜（ｃ）に示すように、採血管１〜３における白血球（ＷＢＣ）の測定数を縦軸とし、採血管４における白血球（ＷＢＣ）の測定数を横軸とした場合、回帰式の傾きはおおよそ１（０．９〜１．１を満たす）であり、かつ相関係数（Ｒ２）は０．９以上であった。
また、図２（ａ）〜（ｃ）に示すように、採血管１〜３における赤血球（ＲＢＣ）の測定数を縦軸とし、採血管４における赤血球（ＲＢＣ）の測定数を横軸とした場合、回帰式の傾きは０．９〜１．０の範囲にあり、かつ相関係数（Ｒ２）は０．９以上であった。
さらに、図３（ａ）〜（ｃ）に示すように、採血管１〜３における血小板（ＰＬＴ）の測定数を縦軸とし、採血管４における血小板（ＰＬＴ）の測定数を横軸とした場合、回帰式の傾きは０．９〜１．０の範囲にあり、かつ相関係数（Ｒ２）は０．９以上であった。
以上により、ＥＤＴＡ−４Ｈ＋ＬｉＯＨを含む採血管を用いることで、血算（白血球数、赤血球数および血小板数）の測定性能を確保することができた。
【００４７】
さらに、図１〜３に示すように、ＥＤＴＡ−４Ｈ＋ＬｉＯＨを含む採血管を用いることで、ヘパリンＬｉを含む採血管を用いた場合（図１（ｄ）〜３（ｄ））と比較して、血算（白血球数、赤血球数および血小板数）をより高精度に測定することができた。
【００４８】
（ＣＲＰ）
次に、ＣＲＰ（Ｃ反応性タンパク）の測定結果を図４に示す。なお、図４（ａ）〜（ｃ）では、採血管１〜３（ＥＤＴＡ−４Ｈ＋ＬｉＯＨ）および採血管５（ヘパリンＬｉ）のＣＲＰ測定の結果を比較しており、図４（ｄ）では、採血管４（ＥＤＴＡ−２Ｋ）および採血管５（ヘパリンＬｉ）のＣＲＰ測定の結果を比較している。
【００４９】
図４（ａ）〜（ｃ）に示すように、採血管１〜３におけるＣＲＰの測定数を縦軸とし、採血管５におけるＣＲＰの測定数を横軸とした場合、回帰式の傾きは０．９〜１．０であり、かつ相関係数（Ｒ２）は０．９以上であった。
これにより、ＥＤＴＡ−４Ｈ＋ＬｉＯＨを含む採血管を用いることで、ＣＲＰの測定性能を確保することができた。
【００５０】
（電解質）
次に、電解質（Ｎａ、Ｋ、Ｃｌ）の測定結果を図５〜７に示す。なお、図５〜７では、（ａ）〜（ｃ）にて採血管１〜３（ＥＤＴＡ−４Ｈ＋ＬｉＯＨ）および採血管５（ヘパリンＬｉ）の電解質測定の結果を比較しており、（ｄ）にて採血管４（ＥＤＴＡ−２Ｋ）および採血管５（ヘパリンＬｉ）の電解質測定の結果を比較している。
なお、図６（ｄ）に示すように、採血管４（ＥＤＴＡ−２Ｋ）を用いた場合、カリウム（Ｋ）は測定不可能（オーバーレンジ）であった。
図７では、採血管５（ヘパリンＬｉ）を用いた場合のクロール（Ｃｌ）の測定値を対照とし、それとの乖離幅（Ｂｉａｓ％）で判断した。
【００５１】
図５（ａ）〜（ｃ）に示すように、採血管１〜３におけるナトリウム（Ｎａ）の測定濃度を縦軸とし、採血管５におけるナトリウム（Ｎａ）の測定濃度を横軸とした場合、回帰式の傾きは０．８以上であり、かつ相関係数（Ｒ２）は０．９以上であった。
一方、図５（ｄ）に示すように、採血管４におけるナトリウム（Ｎａ）の測定濃度を縦軸とし、採血管５におけるナトリウム（Ｎａ）の測定濃度を横軸とした場合、回帰式の傾きは０．５８程度であり、かつ相関係数（Ｒ２）は０．９未満であった。
したがって、図５に示すように、ＥＤＴＡ−４Ｈ＋ＬｉＯＨを含む採血管を用いることで、ＥＤＴＡ−２Ｋを含む採血管を用いた場合（図５（ｄ））と比較して、ナトリウム（Ｎａ）濃度をより高精度に測定することができた。
【００５２】
図６に示すように、ＥＤＴＡ−２Ｋを含む採血管を用いた場合（図６（ｄ））にはカリウム（Ｋ）濃度を測定することができなかったが、ＥＤＴＡ−４Ｈ＋ＬｉＯＨを含む採血管を用いた場合にはカリウム（Ｋ）濃度を測定することが可能であった。
【００５３】
図７に示すように、ＥＤＴＡ−４Ｈ＋ＬｉＯＨを含む採血管を用いた場合にはヘパリンＬｉを含む採血管との乖離幅が概ね−１０〜＋１０％に収まっているが、ＥＤＴＡ−２Ｋを含む採血管を用いた場合（図７（ｄ））にはヘパリンＬｉを含む採血管との乖離幅が大きく、＋１５％を超えるデータもあった。
したがって、図７に示すように、ＥＤＴＡ−４Ｈ＋ＬｉＯＨを含む採血管を用いることで、ＥＤＴＡ−２Ｋを含む採血管を用いた場合（図７（ｄ））と比較して、クロール（Ｃｌ）濃度をより高精度に測定することができた。
【００５４】
以上により、本発明の一態様の血液検査方法により、血液試料（全血）の血算および電解質を測定することが可能であり、更に、血液試料のＣＲＰも測定することが可能であった。そのため、この血液検査方法により、１つの採血管で血算（白血球数、赤血球数および血小板数）、ＣＲＰおよび電解質の測定が可能であり、採血管の本数の減少を図ることができる。よって、採血の手間、コストの削減が可能であり、更に患者の負担を軽減することになる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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